(57)【要約】  本発明の目的は、ホスホネート含有液体洗剤または清浄剤が有益なタンパク質分解活性を示し、さらに改善された貯蔵安定性を有するようにすることである。該目的は、配列番号１に示されるアミノ酸配列と少なくとも８０％同一であって、配列番号１の９９位に、アミノ酸グルタミン酸（Ｅ）またはアスパラギン酸（Ｄ）、あるいはアミノ酸アスパラギン（Ｎ）またはグルタミン（Ｑ）、あるいはアミノ酸アラニン（Ａ）またはグリシン（Ｇ）またはセリン（Ｓ）を含有するアミノ酸配列を含むプロテアーゼを用いることによって達成される。【特許請求の範囲】
【請求項１】
（ａ１）配列番号１に示されるアミノ酸配列に対して少なくとも８０％同一であって、配列番号１の番号付けにおいて９９位にアミノ酸グルタミン酸（Ｅ）またはアスパラギン酸（Ｄ）を含むアミノ酸配列を含むプロテアーゼ、または
（ａ２）配列番号１に示されるアミノ酸配列に対して少なくとも８０％同一であって、配列番号１の番号付けにおいて９９位にアミノ酸アスパラギン（Ｎ）またはグルタミン（Ｑ）を含むアミノ酸配列を含むプロテアーゼ、または
（ａ３）配列番号１に示されるアミノ酸配列に対して少なくとも８０％同一であって、配列番号１の番号付けにおいて９９位にアミノ酸アラニン（Ａ）またはグリシン（Ｇ）またはセリン（Ｓ）を含むアミノ酸配列を含むプロテアーゼ、および
（ｂ）ホスホネート
を含む、液体洗剤または清浄剤。
【請求項２】
配列番号１の番号付けにおいて、プロテアーゼがさらに、下記のアミノ酸：
（ａ）３位にスレオニン（３Ｔ）、
（ｂ）４位にイソロイシン（４Ｉ）、
（ｃ）６１位にアラニン、スレオニンまたはアルギニン（６１Ａ、６１Ｔまたは６１Ｒ）、
（ｄ）１５４位にアスパラギン酸またはグルタミン酸（１５４Ｄまたは１５４Ｅ）、
（ｅ）１８８位にプロリン（１８８Ｐ）、
（ｆ）１９３位にメチオニン（１９３Ｍ）、
（ｇ）１９９位にイソロイシン（１９９Ｉ）、
（ｈ）２１１位にアスパラギン酸、グルタミン酸またはグリシン（２１１Ｄ、２１１Ｅまたは２１１Ｇ）、
（ｉ）アミノ酸（ａ）〜（ｈ）の組み合わせ
のうち少なくとも１つを含む、請求項１記載の洗剤または清浄剤。
【請求項３】
（ｂ）ａ．配列番号２または配列番号３または配列番号４または配列番号５または配列番号６または配列番号７または配列番号８のアミノ酸配列を含むプロテアーゼ；
ｂ．配列番号２または配列番号３または配列番号４または配列番号５または配列番号６または配列番号７または配列番号８に対して、少なくとも１つの位置において修飾されたアミノ酸配列を含むプロテアーゼであって、該修飾が配列番号１の番号付けにおいて、
ｉ．３位のスレオニン（３Ｔ）、
ｉｉ．４位のイソロイシン（４Ｉ）、
ｉｉｉ．６１位のアラニン、スレオニンまたはアルギニン（６１Ａ、６１Ｔまたは６１Ｒ）、
ｉｖ．１５４位のアスパラギン酸またはグルタミン酸（１５４Ｄまたは１５４Ｅ）、
ｖ．１８８位のプロリン（１８８Ｐ）、
ｖｉ．１９３位のメチオニン（１９３Ｍ）、
ｖｉｉ．１９９位のイソロイシン（１９９Ｉ）、
ｖｉｉｉ．２１１位のアスパラギン酸、グルタミン酸またはグリシン（２１１Ｄ、２１１Ｅまたは２１１Ｇ）、
ｉｘ．アミノ酸（ｉ）〜（ｖｉｉｉ）の組み合わせ
からなる群から選択される、プロテアーゼ、
（ｃ）ホスホネート
を含む、液体洗剤または清浄剤。
【請求項４】
ホスホネートが、１−ヒドロキシエタン−１，１−ジホスホン酸（ＨＥＤＰ）、アミノトリ（メチレンホスホン酸）（ＡＴＭＰ）、ジエチレントリアミンペンタ（メチレンホスホン酸）（ＤＴＰＭＰまたはＤＥＴＰＭＰまたはＤＴＰＮＴ）、エチレンジアミンテトラ（メチレンホスホン酸）（ＥＤＴＭＰ）、２−ホスホノブタン−１，２，４−トリカルボン酸（ＰＢＳ−ＡＭ）およびその組み合わせからなる群から選択される、請求項１〜３のいずれか１項記載の洗剤または清浄剤。
【請求項５】
活性タンパク質に対して、ホスホネートが０．０１〜４重量％の量で存在し、および／またはプロテアーゼが１×１０−８〜５重量％の量で存在する、請求項１〜４のいずれか１項記載の洗剤または清浄剤。
【請求項６】
さらに、
ｉ．アニオンおよび／またはポリアニオン物質、および／または
ｉｉ．カチオンおよび／またはポリカチオン物質、および／または
ｉｉｉ．ヒドロキシルおよび／またはポリヒドロキシル基を含む物質
から選択される成分を含む、請求項１〜５のいずれか１項記載の洗剤または清浄剤。
【請求項７】
少なくとも１つのさらなる成分、特に、界面活性剤、ビルダー、ペルオキシ化合物、漂白活性化剤、アルコール、酸、灰色化阻害剤、光学的光沢剤、発泡阻害剤、水溶性塩、増粘剤、揮発性アルカリおよび／または塩基、親水性化剤およびその組み合わせからなる群から選択される１つを含む、請求項１〜６のいずれか１項記載の洗剤または清浄剤。
【請求項８】
少なくとも１つのさらなる酵素、特に、プロテアーゼ、アミラーゼ、セルラーゼ、ヘミセルラーゼ、マンナナーゼ、タンナーゼ、キシラーゼ、キサンタナーゼ、β−グルコシダーゼ、カラギナーゼ、ペルヒドロラーゼ、オキシダーゼ、オキシドレダクターゼまたはリパーゼ、好ましくはその混合物を含有する、請求項１〜７のいずれか１項記載の洗剤または清浄剤。
【請求項９】
織物または硬表面からプロテアーゼ感受性の汚れを除去するための、請求項１〜８のいずれか１項記載の洗剤または清浄剤の使用。
【請求項１０】
請求項１〜８のいずれか１項記載の洗剤または清浄剤を少なくとも１方法工程において使用する、織物または硬表面を清浄する方法。
【請求項１１】
ホスホネートが洗浄液中、０．０００７５〜０．０５重量％の濃度で存在し、および／またはプロテアーゼが洗浄液中、０．０００５〜０．０３重量％の濃度で存在する、請求項１０記載の方法。
【請求項１２】
１０℃〜６０℃の温度で実施される、請求項１０または請求項１１記載の方法。
【請求項１３】
ホスホネートをさらに含む液体洗浄剤または清浄剤においてタンパク質分解活性を提供するための、
（ａ１）配列番号１に示されるアミノ酸配列と少なくとも８０％同一であって、配列番号１の番号付けにおいて９９位に、アミノ酸グルタミン酸（Ｅ）またはアスパラギン酸（Ｄ）を含むアミノ酸配列を含み、または
（ａ２）配列番号１に示されるアミノ酸配列と少なくとも８０％同一であって、配列番号１の番号付けにおいて９９位に、アミノ酸アスパラギン（Ｎ）またはグルタミン（Ｑ）を含むアミノ酸配列を含み、または
（ａ３）配列番号１に示されるアミノ酸配列と少なくとも８０％同一であって、配列番号１の番号付けにおいて９９位に、アミノ酸アラニン（Ａ）またはグリシン（Ｇ）またはセリン（Ｓ）を含むアミノ酸配列を含む
プロテアーゼの使用。
【請求項１４】
配列番号１の番号付けにおいて、プロテアーゼがさらに、下記のアミノ酸：
（ａ）３位にスレオニン（３Ｔ）、
（ｂ）４位にイソロイシン（４Ｉ）、
（ｃ）６１位にアラニン、スレオニンまたはアルギニン（６１Ａ、６１Ｔまたは６１Ｒ）、
（ｄ）１５４位にアスパラギン酸またはグルタミン酸（１５４Ｄまたは１５４Ｅ）、
（ｅ）１８８位にプロリン（１８８Ｐ）、
（ｆ）１９３位にメチオニン（１９３Ｍ）、
（ｇ）１９９位にイソロイシン（１９９Ｉ）、
（ｈ）２１１位にアスパラギン酸、グルタミン酸またはグリシン（２１１Ｄ、２１１Ｅまたは２１１Ｇ）、
（ｉ）アミノ酸（ａ）〜（ｈ）の組み合わせ
のうち少なくとも１つを含む、請求項１３記載の使用。
【請求項１５】
ホスホネートをさらに含む液体洗浄剤または清浄剤においてタンパク質分解活性を提供するための、
ａ．配列番号２または配列番号３または配列番号４または配列番号５または配列番号６または配列番号７または配列番号８のアミノ酸配列を含むプロテアーゼ；
ｂ．配列番号２または配列番号３または配列番号４または配列番号５または配列番号６または配列番号７または配列番号８に対して、少なくとも１つの位置において修飾されたアミノ酸配列を含むプロテアーゼであって、該修飾が配列番号１の番号付けにおいて、
ｉ．３位のスレオニン（３Ｔ）、
ｉｉ．４位のイソロイシン（４Ｉ）、
ｉｉｉ．６１位のアラニン、スレオニンまたはアルギニン（６１Ａ、６１Ｔまたは６１Ｒ）、
ｉｖ．１５４位のアスパラギン酸またはグルタミン酸（１５４Ｄまたは１５４Ｅ）、
ｖ．１８８位のプロリン（１８８Ｐ）、
ｖｉ．１９３位のメチオニン（１９３Ｍ）、
ｖｉｉ．１９９位のイソロイシン（１９９Ｉ）、
ｖｉｉｉ．２１１位のアスパラギン酸、グルタミン酸またはグリシン（２１１Ｄ、２１１Ｅまたは２１１Ｇ）、
ｉｘ．アミノ酸（ｉ）〜（ｖｉｉｉ）の組み合わせ
からなる群から選択されるプロテアーゼ
からなる群から選択されるプロテアーゼの使用。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、液体洗浄剤および清浄剤の分野に関する。本発明は、特に、規定のプロテアーゼをホスホネートと共に含有する酵素含有洗浄（washing）剤および清浄（cleaning）剤に関し、さらに、かかる剤の使用およびかかる剤が使用される方法を提供する。本発明は、さらに、ホスホネートを含有する液体洗浄剤または清浄剤における規定のプロテアーゼの使用に関する。
【背景技術】
【０００２】
従来、スブチリシン（ｓｕｂｔｉｌｉｓｉｎ）型のプロテアーゼの使用は、洗浄剤および清浄剤に好まれていた。先行技術において知られている洗浄剤または清浄剤において使用されるプロテアーゼは、微生物、例えば、バチルス（Ｂａｃｉｌｌｕｓ）属、ストレプトマイセス（Ｓｔｒｅｐｔｏｍｙｃｅｓ）属、ヒュミコラ（Ｈｕｍｉｃｏｌａ）属、またはシュードモナス（Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ）属に由来するか、および／または自体公知のバイオテクノロジー的方法を用いて、適当な微生物によって、例えば、バチルス属または糸状菌由来のトランスジェニック発現宿主によって産生される。
【０００３】
ホスホネートは、近代の液体洗浄剤、特に、清浄剤に配合されている。それらは、例えば、沈澱を防ぐための錯化剤として、または漂白剤安定化剤として使用される。錯化剤として配合される場合、それらは例えば、軟水化に役立つ。それらは、溶液中のＣａ２＋などのカチオンを包囲することができ、かくして、該カチオンの化学的作用を修飾することができる。カルシウムの場合、水の硬化を形成する特性が消失する。他のカチオンもまた錯化され得、かくして、化学的反応から保護され得る。それらはさらに、特に漂白剤において、腐食阻害剤として、または過酸化物の安定化剤として作用し得る。
【０００４】
国際特許出願第ＷＯ  ９５／２３２２１号は、洗浄剤または清浄剤における使用に適当なバチルス・レンタス（Ｂａｃｉｌｌｕｓ  ｌｅｎｔｕｓ）ＤＳＭ  ５４８３由来のスブチリシン型のプロテアーゼまたはプロテアーゼ変種を開示する。これらのプロテアーゼは、また、アミノ酸置換Ｒ９９Ｅ、Ａ、ＳまたはＧを含み得るものを包含する。さらに、該洗浄剤がホスホネート、特に、ポリホスホネートを含有し得ることが開示される。該洗浄剤は、固体であってもよく、または液体であってもよい。しかしながら、該公報は、かかるプロテーゼと共にホスホネートを必ず含有するいずれの特定の洗浄および／または清浄剤も開示しない。
【０００５】
先行技術のプロテアーゼ含有液体洗浄剤および清浄剤の１つの欠点は、それらがしばしば、特に低温ではなく、例えば１０℃〜５０℃で、特に１０℃〜４０℃または２０℃〜４０℃で、満足のいくタンパク質分解活性を示さないこと、したがって、該洗浄剤または清浄剤が最適な清浄性能を示さないことである。先行技術のプロテアーゼ含有液体洗浄剤および清浄剤のさらなる欠点は、それらが不十分な貯蔵安定性を有し、したがって、ほんの短時間の後に相当な程度のタンパク質分解活性を喪失することである。
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００６】
本発明の１の目的は、上記の欠点を克服し、特に上記のような温度で、有益なタンパク質分解活性を示し、さらに改善された貯蔵安定性を示す液体洗浄剤および清浄剤を提供することにある。
【課題を解決するための手段】
【０００７】
したがって、本発明は、
（ａ１）配列番号１に示されるアミノ酸配列に対して少なくとも８０％同一であって、配列番号１の番号付けにおいて９９位にアミノ酸グルタミン酸（Ｅ）またはアスパラギン酸（Ｄ）を含むアミノ酸配列を含むプロテアーゼ、または
（ａ２）配列番号１に示されるアミノ酸配列に対して少なくとも８０％同一であって、配列番号１の番号付けにおいて９９位にアミノ酸アスパラギン（Ｎ）またはグルタミン（Ｑ）を含むアミノ酸配列を含むプロテアーゼ、または
（ａ３）配列番号１に示されるアミノ酸配列に対して少なくとも８０％同一であって、配列番号１の番号付けにおいて９９位にアミノ酸アラニン（Ａ）またはグリシン（Ｇ）またはセリン（Ｓ）を含むアミノ酸配列を含むプロテアーゼ、および
（ｂ）ホスホネート
を含む、液体洗剤または清浄剤を提供する。
【発明を実施するための形態】
【０００８】
驚くべきことに、かかるプロテアーゼとホスホネートの組み合わせを含有する液体洗浄剤および清浄剤がプロテアーゼ感受性の汚れに関して有益な清浄性能を示し、さらに有利なことに貯蔵中安定であることが示された。本発明の剤の好ましい具体例は、１０℃〜６０℃の温度、好ましくは低温でも、例えば１０℃〜５０℃、１０℃〜４０℃または２０℃〜４０℃にて、少なくとも１つのプロテアーゼ感受性型の汚れに関して、有利な清浄性能を示す。したがって、本発明の剤は、織物および／または硬表面、例えば皿上の少なくとも１つの、好ましくは複数のプロテアーゼ感受性型の汚れの改善された除去を可能にする。したがって、上記の国際特許出願第ＷＯ  ９５／２３２２１号について、本発明は、高性能の貯蔵安定な液体洗浄剤または液体清浄剤の達成を導く特に有益な選択に関する。
【０００９】
本発明の目的のために、清浄性能は、プロテアーゼによる分解に感受性の１以上の型の汚れ、特に洗濯物の汚れまたは瀬戸物の汚れに関してライトニング（lightening）性能を意味すると理解される。かかる洗濯物の汚れの例は、特にさらに下記するような、綿上の血液−ミルク／インク、綿上の全卵／色素、綿上のチョコレート−ミルク／インク、ポリエステル／綿上の落花生油−色素／インク、綿上の草または綿上のココアである。かかる瀬戸物の汚れの例は、ミルク、ミンチ肉または卵黄である。本発明の目的のために、プロテアーゼを含む洗浄または清浄剤あるいは該剤によって形成された洗浄または清浄液および該プロテアーゼ自体の両方が各洗浄性能を示す。かくして、加水分解酵素の清浄性能は、該剤あるいは該剤によって形成された洗浄または清浄液の清浄性能に寄与する。清浄性能は、好ましくは、さらに下記のように決定される。
【００１０】
洗浄または清浄液は、洗浄または清浄剤を含有する作業（working）溶液であると理解され、該溶液は、織物またはファブリック（洗浄液）あるいは硬表面（清浄液）に作用し、かくして、織物またはファブリックあるいは硬表面上に存在する汚れと接触する。洗浄または清浄液は、通常、洗浄または清浄プロセスが始まり、洗浄または清浄剤が例えば洗濯機、食器洗浄機または別の適当な容器中、水で希釈されるときに生じる。
【００１１】
本発明の洗浄または清浄剤に含有される洗浄または清浄剤は、配列番号１に示されるアミノ酸配列に対して少なくとも８０％同一であって、配列番号１の番号付けにおいて９９位にアミノ酸グルタミン酸（Ｅ）またはアスパラギン酸（Ｄ）あるいはアミノ酸アスパラギン（Ｎ）またはグルタミン（Ｑ）あるいはアミノ酸アラニン（Ａ）またはグリシン（Ｇ）またはセリン（Ｓ）を含むアミノ酸配列を含む。より好ましくは、該アミノ酸配列は、配列番号１に示されるアミノ酸配列に対し少なくとも８１％、８２％、８３％、８４％、８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、非常に特に好ましくは９９％同一である。配列番号１は、バチルス・レンタスＤＳＭ５４８３由来の成熟アルカリ性プロテアーゼの配列であり、国際特許出願第ＷＯ９２／２１７６０号（その開示は明白に引用される）に開示される。
【００１２】
本発明によれば、ホスホネートを含有する液体洗浄または清浄剤へのかかるプロテアーゼの添加により、特に１〜５週、１〜４週、１．５〜３週、特に好ましくは２週間の貯蔵期間後、特にその貯蔵後の残留タンパク質分解活性に関して、特に貯蔵安定性の液体洗浄剤が得られる。
【００１３】
本発明の洗浄または清浄剤に含有されるプロテアーゼは、タンパク質分解活性を示し、すなわち、ポリペプチドまたはタンパク質のペプチド結合を加水分解することができる。したがって、それは、ペプチド結合の加水分解を触媒し、かくしてペプチドまたはタンパク質を切断することができる酵素、特にスブチリシンである。
【００１４】
本発明のさらなる具体例において、洗浄または清浄剤は、プロテアーゼがさらに、配列番号１の番号付けにおいて、下記のアミノ酸：
（ａ）３位にスレオニン（３Ｔ）、
（ｂ）４位にイソロイシン（４Ｉ）、
（ｃ）６１位にアラニン、スレオニンまたはアルギニン（６１Ａ、６１Ｔまたは６１Ｒ）、
（ｄ）１５４位にアスパラギン酸またはグルタミン酸（１５４Ｄまたは１５４Ｅ）、
（ｅ）１８８位にプロリン（１８８Ｐ）、
（ｆ）１９３位にメチオニン（１９３Ｍ）、
（ｇ）１９９位にイソロイシン（１９９Ｉ）、
（ｈ）２１１位にアスパラギン酸、グルタミン酸またはグリシン（２１１Ｄ、２１１Ｅまたは２１１Ｇ）、
（ｉ）アミノ酸（ａ）〜（ｈ）の組み合わせ
のうち少なくとも１つを含むことを特徴とする。
【００１５】
したがって、プロテアーゼは、９９位において示されるアミノ酸の１つの他に、上記アミノ酸の１以上を各位置に含む。これらのアミノ酸は、さらに有益な特性をもたらすことがあり、および／またはさらに既存の特性を増強しうる。特に、上記アミノ酸は、液体洗浄または清浄剤あるいは該洗浄または清浄剤によって形成された洗浄液中のプロテアーゼのタンパク質分解活性および／または安定性の増加をもたらす。かくして、ホスホネートを含有する液体洗浄または清浄剤へのかかるプロテアーゼの添加により、特に１〜５週、１〜４週、１．５〜３週、特に好ましくは２週間の貯蔵期間後、特にその貯蔵後の残留タンパク質分解活性に関して、特に貯蔵安定性の液体洗浄剤が同様に得られる。
【００１６】
ここに、アミノ酸位置は、配列番号１において示されるようなバチルス・レンタス由来のプロテアーゼのアミノ酸配列を用いる、使用されるべきプロテアーゼのアミノ酸配列のアラインメントによって定義付けられる。先行技術におけるバチルス・レンタス由来のプロテアーゼは、プロテアーゼおよびアミノ酸変化を記述するために重要な参照分子を構成するので、アミノ酸位置割り当てにおいてバチルス・レンタス由来のプロテアーゼの番号付け（配列番号１）に言及することは有益である。さらに、該番号付けは、成熟タンパク質に基づく。該割り当ては、また、使用されるべきプロテアーゼのアミノ酸配列が、配列番号１にしたがうバチルス・レンタス由来のプロテアーゼよりも多数のアミノ酸残基を含む場合にも使用されるべきである。バチルス・レンタス由来のプロテアーゼのアミノ酸配列における示される位置に基づいて、本発明にしたがって使用されるべきプロテアーゼ中のアミノ酸位置は、アラインメントにおいて正確にこれらの位置に割り当てられるものである。
【００１７】
したがって、９９位を除けば、特に有益な位置は、配列番号１とのアラインメントにおいて、かくして配列番号１にしたがう番号付けにおいて割り当てられるべき３、４、６１、１５４、１８８、１９３、１９９および２１１位である。下記のアミノ酸残基は、バチルス・レンタス由来のプロテアーゼの野生型分子における示される位置にある：Ｓ３、Ｖ４、Ｇ６１、Ｓ１５４、Ａ１８８、Ｖ１９３、Ｖ１９９、およびＬ２１１。アミノ酸３Ｔ、４Ｉ、６１Ａ、１５４Ｄ、１５４Ｅ、２１１Ｄ、２１１Ｇおよび２１１Ｅは、特に好ましく、但し、本発明にしたがって使用されるべきプロテアーゼ中の対応する位置は、これらの好ましいアミノ酸の１つによってまだ天然には採用されていない。３Ｔおよび４Ｉ置換は、例えば、該分子に対する安定化効果によって、該プロテアーゼの貯蔵安定性および清浄性能における改善をもたらし、かくして、該プロテアーゼを含有するホスホネート含有液体洗浄または清浄剤の改善された清浄性能をもたらす。
【００１８】
各位置に提供される上記のアミノ酸のために、配列番号１が各位置に別のアミノ酸を含む場合、配列番号１からのさらなる配列のずれが生じうる。したがって、存在する配列番号１からの配列のずれの数に依存して、他の全てのアミノ酸に関して配列番号１と合致していたとしても、配列番号１において本発明にしたがって使用されるべきプロテアーゼが示しうる種々の最大同一性値が生じる。該因子は、個々のケースにおいて提案されるアミノ酸のあらゆる可能な組み合わせについて考慮されるべきであり、さらに、プロテアーゼのアミノ酸配列の長さにも依存する。例えば、１、２、３、４、５、６、７、８または９個の配列変化で、最大同一性は、各々、２６９アミノ酸長のアミノ酸配列について、９９．６３％、９９．２６％、９８．８８％、９８．５１％、９８．１４％、９７．７７％、９７．４０％、９７．０３％または９６．６５％、２７５アミノ酸長のアミノ酸配列について、９９．６４％、９９．２７％、９８．９１％、９８．５５％、９８．１８％、９７．８２％、９７．４５％、９７．０９％または９６．７３％に達する。
【００１９】
核酸またはアミノ酸配列の同一性は、配列比較によって決定される。かかる比較は、ヌクレオチド配列またはアミノ酸配列において、互いに類似の配列を割り当てることによって行う。該配列比較は、好ましくは、先行技術Ａｌｔｓｃｈｕｌ，  Ｓ．Ｆ．，  Ｇｉｓｈ，  Ｗ．，  Ｍｉｌｌｅｒ，  Ｗ．，  Ｍｙｅｒｓ，  Ｅ．Ｗ．  ＆  Ｌｉｐｍａｎ，  Ｄ．Ｊ．  （１９９０）”Ｂａｓｉｃ  ｌｏｃａｌ  ａｌｉｇｎｍｅｎｔ  ｓｅａｒｃｈ  ｔｏｏｌ．”  Ｊ．  Ｍｏｌ．  Ｂｉｏｌ．  ２１５：４０３−４１０、およびＡｌｔｓｃｈｕｌ，  Ｓｔｅｐｈａｎ  Ｆ．，  Ｔｈｏｍａｓ  Ｌ．  Ｍａｄｄｅｎ，  Ａｌｅｊａｎｄｒｏ  Ａ．  Ｓｃｈａｆｆｅｒ，  Ｊｉｎｇｈｕｉ  Ｚｈａｎｇ，  Ｈｈｅｎｇ  Ｚｈａｎｇ，  Ｗｅｂｂ  Ｍｉｌｌｅｒ，およびＤａｖｉｄ  Ｊ．  Ｌｉｐｍａｎ  （１９９７）：”Ｇａｐｐｅｄ  ＢＬＡＳＴ  ａｎｄ  ＰＳＩ−ＢＬＡＳＴ：  ａ  ｎｅｗ  ｇｅｎｅｒａｔｉｏｎ  ｏｆ  ｐｒｏｔｅｉｎ  ｄａｔａｂａｓｅ  ｓｅａｒｃｈ  ｐｒｏｇｒａｍｓ”；  Ｎｕｃｌｅｉｃ  Ａｃｉｄｓ  Ｒｅｓ．，  ２５，  Ｓ．３３８９−３４０２）において確立された従来使用されるＢＬＡＳＴアルゴリズムに基づいて行われ、原則として、核酸またはアミノ酸配列においてヌクレオチドまたはアミノ酸の互いに類似の配列を割り当てることによって行う。問題の位置の表による割り当て（tabular assignment）がアラインメントとして知られている。先行技術において利用可能なさらなるアルゴリズムは、ＦＡＳＴＡアルゴリズムである。配列比較（アラインメント）、特に複数の配列比較は、通常、コンピューターソフトウェアを用いて作製される。しばしば、例えばＣｌｕｓｔａｌシリーズ（例えば、Ｃｈｅｎｎａら、（２００３）：  Ｍｕｌｔｉｐｌｅ  ｓｅｑｕｅｎｃｅ  ａｌｉｇｎｍｅｎｔ  ｗｉｔｈ  ｔｈｅ  Ｃｌｕｓｔａｌ  ｓｅｒｉｅｓ  ｏｆ  ｐｒｏｇｒａｍｓ．  Ｎｕｃｌｅｉｃ  Ａｃｉｄ  Ｒｅｓｅａｒｃｈ  ３１，  ３４９７−３５００参照）、Ｔ−Ｃｏｆｆｅｅ（例えば、Ｎｏｔｒｅｄａｍｅら、（２０００）：  Ｔ−Ｃｏｆｆｅｅ：  Ａ  ｎｏｖｅｌ  ｍｅｔｈｏｄ  ｆｏｒ  ｍｕｌｔｉｐｌｅ  ｓｅｑｕｅｎｃｅ  ａｌｉｇｎｍｅｎｔ．  Ｊ．  Ｍｏｌ．  Ｂｉｏｌ．  ３０２，  ２０５−２１７参照）またはこれらのプログラムもしくはアルゴリズムに基づくプログラムが使用される。しばしば、例えば、Ｃｌｕｓｔａｌ（例えば、Ｃｈｅｎｎａら、（２００３）：  Ｍｕｌｔｉｐｌｅ  ｓｅｑｕｅｎｃｅ  ａｌｉｇｎｍｅｎｔ  ｗｉｔｈ  ｔｈｅ  Ｃｌｕｓｔａｌ  ｓｅｒｉｅｓ  ｏｆ  ｐｒｏｇｒａｍｓ．  Ｎｕｃｌｅｉｃ  Ａｃｉｄ  Ｒｅｓｅａｒｃｈ  ３１，  ３４９７−３５００参照）、Ｔ−Ｃｏｆｆｅｅ（例えば、Ｎｏｔｒｅｄａｍｅら、（２０００）：  Ｔ−Ｃｏｆｆｅｅ：  Ａ  ｎｏｖｅｌ  ｍｅｔｈｏｄ  ｆｏｒ  ｍｕｌｔｉｐｌｅ  ｓｅｑｕｅｎｃｅ  ａｌｉｇｎｍｅｎｔ．  Ｊ．  Ｍｏｌ．  Ｂｉｏｌ．  ３０２，  ２０５−２１７参照）およびデータベース検索のためのＢＬＡＳＴまたはＦＡＳＴＡ、またはこれらのプログラムもしくはアルゴリズムに基づくプログラムが使用される。本発明の目的のために、配列比較およびアラインメントは、好ましくは、コンピュータープログラムＶｅｃｔｏｒ  ＮＴＩＲ（登録商標��Ｓｕｉｔｅ  １０．３（Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ  Ｃｏｒｐｏｒａｔｉｏｎ，  １６００  Ｆａｒａｄａｙ  Ａｖｅｎｕｅ，  Ｃａｒｌｓｂａｄ，  Ｃａｌｉｆｏｒｎｉａ，  ＵＳＡ）を用いて、プレセットデフォルトパラメーターを用いて行われる。
【００２０】
かかる比較は、比較した配列の類似性について記述することを可能とする。それは、通常、パーセント同一性、すなわち、配列または相互に対応する位置のアラインメントにおける同一のヌクレオチドまたはアミノ酸残基の割合で示される。より広い用語「相同性」はまた、アミノ酸配列中に保存されるアミノ酸置換（かくして、それらは、一般に、タンパク質内で類似の化学的活性を及ぼすので、類似する化学的活性を有するアミノ酸）の考察を包含する。したがって、比較した配列の類似性は、また、パーセント相同性またはパーセント類似性で示されうる。同一性および／または相同性に関する記述は、ポリペプチドまたは遺伝子全体にわたってもよく、または個々のドメインのみにわたってもよい。したがって、種々の核酸またはアミノ酸配列の相同性または同一性ドメインは、配列中の合致によって定義付けられる。かかるドメインは、しばしば、同一の機能を示す。それらは、小さい場合もあり、２、３個のヌクレオチドまたはアミノ酸のみを含む場合もある。しばしば、かかる小さなドメインは、タンパク質の全体的な活性に必須の機能を発揮する。したがって、配列合致を個々の、所望により小さなドメインにのみ関連づけることは意味がある。しかしながら、別記しないかぎり、本願における同一性または相同性に関する記述は、各ケースにおいて示される核酸またはアミノ酸配列の全長に関する。
【００２１】
本発明の該主題のさらなる具体例において、洗浄または清浄剤は、プロテアーゼが上記のように、配列番号１に示されるアミノ酸配列と同一であって、配列番号１にしたがうプロテアーゼから、保存的アミノ酸モノまたはポリ置換によって得られる、または得られうるアミノ酸配列を含むことを特徴とする。「保存的アミノ酸置換」なる語は、１のアミノ酸残基の別のアミノ酸残基での置換（交換）であって、該置換が置換されたアミノ酸の位置において極性または電荷の変化をもたらさない置換（交換）、例えば、非極性アミノ酸残基の別の非極性アミノ酸残基での置換を意味する。本発明の目的のために保存的アミノ酸置換は、例えば、Ｇ＝Ａ＝Ｓ、Ｉ＝Ｖ＝Ｌ＝Ｍ、Ｄ＝Ｅ、Ｎ＝Ｑ、Ｋ＝Ｒ、Ｙ＝Ｆ、Ｓ＝Ｔ、Ｇ＝Ａ＝Ｉ＝Ｖ＝Ｌ＝Ｍ＝Ｙ＝Ｆ＝Ｗ＝Ｐ＝Ｓ＝Ｔを含む。
【００２２】
本発明のさらなる具体例において、本発明の洗浄または清浄剤は、さらに、その清浄性能が少なくとも、配列番号２または配列番号３または配列番号４または配列番号５または配列番号６または配列番号７または配列番号８に示されるアミノ酸配列に対応するアミノ酸配列を含むプロテアーゼを含有する洗浄または清浄剤の性能に対応することを特徴とし、該清浄性能は、洗浄液１リットルあたり４．０〜８．０グラムの添加割合での洗浄剤およびプロテアーゼを含有する洗浄系において決定され、比較されるべきプロテアーゼは同一の活性で使用され、清浄性能は、１以上の汚れの型  綿上の血液−ミルク／インク、綿上の全卵／色素（全卵／煤煙）、ポリエステル／綿上の落花生油−色素／インクおよび綿上の草に対して、特に１以上の下記の汚れの型：
綿上の血液−ミルク／インク：ＣＦＴ（Ｃｅｎｔｅｒ  Ｆｏｒ  Ｔｅｓｔｍａｔｅｒｉａｌｓ）  Ｂ．Ｖ．  Ｖｌａａｒｄｉｎｇｅｎ，  Ｎｅｔｈｅｒｌａｎｄｓから入手可能なプロダクト番号Ｃ−０５、
綿上の全卵／色素（全卵／煤煙）：ｗｆｋ  Ｔｅｓｔｇｅｗｅｂｅ  ＧｍｂＨ；  Ｂｒｕｅｇｇｅｎ−Ｂｒａｃｈｔ，  Ｇｅｒｍａｎｙから入手可能なプロダクト番号１０Ｎ、またはＣＦＴ  （Ｃｅｎｔｒｅ  Ｆｏｒ  Ｔｅｓｔｍａｔｅｒｉａｌｓ）  Ｂ．Ｖ．  Ｖｌａａｒｄｉｎｇｅｎ，  Ｎｅｔｈｅｒｌａｎｄｓから入手可能なプロダクト番号Ｃ−Ｓ−３７、
ポリエステル／綿上の落花生油−色素／インク：ＣＦＴ  （Ｃｅｎｔｅｒ  Ｆｏｒ  Ｔｅｓｔｍａｔｅｒｉａｌｓ）  Ｂ．Ｖ．  Ｖｌａａｒｄｉｎｇｅｎ，  Ｎｅｔｈｅｒｌａｎｄｓから入手可能なプロダクト番号ＰＣ−１０、
綿上の草：Ｅｉｄｇｅｎｏｅｓｓｉｓｃｈｅ  Ｍａｔｅｒｉａｌ−  ｕｎｄ  Ｐｒｕｅｆａｎｓｔａｌｔ  （ＥＭＰＡ）  Ｔｅｓｔｍａｔｅｒｉａｌｉｅｎ  ＡＧ，  Ｓｔ．  Ｇａｌｌｅｎ，  Ｓｗｉｔｚｅｒｌａｎｄから入手可能なプロダクト番号１６４
に対して、洗浄した織物の白さの度合いを測定することによって決定され、該洗浄工程は、少なくとも３０分、所望により６０分間、２０℃の温度で行い、水は、１５．５〜１６．５°ｄＨの硬度（ドイツ硬度）を示す。
【００２３】
洗浄系のための洗浄剤は、液体洗浄剤であり、好ましくは、表１に示される組成（全ての値は重量パーセントで示される）のものである。
【００２４】
【表１】
2013504676.tif 000002
【００２５】
該液体洗浄剤の好ましい添加割合は、洗浄液１リットルあたり７．０〜７．５グラム、特に洗浄液１リットルあたり７．４グラムに達する。この点において、該液体洗浄剤の重量は、その重量に詳細に関連するように決定される。洗浄は、好ましくは、ｐＨ８〜ｐＨ１０．５、好ましくはｐＨ８〜ｐＨ９のｐＨ値で行われる。
【００２６】
白さの度合い、すなわち、汚れのライトニングは、清浄性能の測定値として、好ましくは、光学的測定法を用いて、好ましくは光度計により決定される。該目的に適当な１の装置は、例えば、Ｍｉｎｏｌｔａ  ＣＭ５０８ｄ分光光度計である。測定に使用される装置は、通常、白色標準、好ましくは供給される白色標準を用いて事前に較正される。
【００２７】
同一の活性で各プロテアーゼを用いることによって、全タンパク質に対する活性物質の比率（比活性の値）が相違する可能性のある事象においても、各酵素特性、すなわち、例えば、特定の型の汚れに対する清浄性能の比較を確実にする。一般的な法則として、低い比活性は、より多くのタンパク質の添加によってバランスを取り得る。プロテアーゼ活性を決定する方法は、酵素技術の分野における当業者によく知られており、当業者によってルーチンに使用される。例えば、かかる方法は、Ｔｅｎｓｉｄｅ  ［Ｓｕｒｆａｃｔａｎｔｓ］，  ｖｏｌｕｍｅ  ７  （１９７０），  ｐｐ．  １２５−１３２に開示される。プロテアーゼ活性は、好ましくは、ＰＵ（プロテアーゼ単位）で示される。適当なプロテアーゼ活性は、例えば、洗浄液１ｍｌあたり２．２５、５または１０ＰＵ（プロテアーゼ単位）に達する。しかしながら、プロテアーゼ活性は０に等しくならない。
【００２８】
多くのプロテアーゼおよび特にスブチリシンは、「プレタンパク質」として形成され、すなわち、プロペプチドおよびシグナルペプチドを伴う。シグナルペプチドの機能は、通常、それを産生する細胞から該細胞の周囲のペリプラズムまたは培地中へプロテアーゼを輸送することを確実にすることにあり、プロペプチドは、通常、プロテアーゼの正しいホールディングに必要である。シグナルペプチドおよびプロペプチドは、概して、プレタンパク質のＮ末端部分である。シグナルペプチドは、シグナルペプチドによってプロテアーゼの残りの部分から自然条件下で切断される。次いで、プロテアーゼの正しい最終的なプロペプチドに補助されるホールディングが起こる。次いで、プロテアーゼは、その活性形態にあり、それ自体、プロペプチドを切断する。いったんプロペプチドが切断されれば、次いで成熟プロテアーゼ、特にスブチリシンが、もともと存在するＮ末端アミノ酸を用いることなくその触媒活性を発揮する。一般に工業的応用のために、特に、本発明の目的のために、成熟プロテアーゼ、すなわち、その産生後にプロセッシングを受けた酵素は、プレタンパク質よりも好ましい。プロテアーゼは、さらに、ポリペプチド鎖の産生後、それを産生する細胞によって、例えば、糖分子の結合、ホルミル化、アミノ化などによって修飾されてもよい。かかる修飾は、翻訳後修飾であり、必須ではないが、プロテアーゼの機能に対して影響を発揮しうる。
【００２９】
さらに、成熟プロテアーゼは、また、そのＮ末端および／またはＣ末端で切断されていてもよく、その結果、配列番号１または配列番号２または配列番号３または配列番号４または配列番号５または配列番号６または配列番号７または配列番号８に対して末端切断型のプロテアーゼ、すなわち、フラグメントが本発明の洗浄または清浄剤中に存在する。この場合、同一性の全ての記述は、各フラグメントがアラインメント配列番号１において割り当てられるドメインに関する。しかしながら、各ケースにおいて、各フラグメントは、配列番号１とのアラインメントにおける９９位に割り当てられた位置を包含し、該位置において対応するアミノ酸を有する。それは、また、有利なことに、さらに上記の位置の１以上を含有し、そこに１以上の対応するアミノ酸を含む。さらに、かかるフラグメントは、タンパク質分解的に活性である。この点に関してさらに好ましいフラグメントは、９９位に関して、および所望により３位および／または４位および／または６１位および／または１５４位および／または１８８位および／または１９３位および／または１９９位および／または２１１位に関して上記のアミノ酸を考慮して、少なくとも５０または少なくとも６０、７０、８０、９０、１００、１１０、１２０、１３０、１４０、１５０、１６０、１７０、１８０、１９０、２００、２１０、２２０、２３０、２４０、２５０、２６０、２６５、２６６、２６７または２６８個の隣接するアミノ酸位置の長さにわたって配列番号１または配列番号２または配列番号３または配列番号４または配列番号５または配列番号６または配列番号７または配列番号８に合致するアミノ酸配列を含む。かかるフラグメントを含む本発明の液体洗浄または清浄剤の清浄性能は、特に好ましくは、少なくとも、上記のように決定された配列番号２または配列番号３または配列番号４または配列番号５または配列番号６または配列番号７または配列番号８に示されるアミノ酸配列に対応するアミノ酸配列を含むプロテアーゼを含有する洗浄または清浄剤の清浄性能に対応する。
【００３０】
さらに、本発明の剤に含有されるプロテアーゼは、時期尚早な不活性化から保護するために、担体物質上に吸着されていてもよく、および／またはカプセル被包物質中に埋め込まれていてもよい。洗浄液中、すなわち、使用条件下、次いでプロテアーゼは遊離され、そのタンパク質分解作用を発揮することができる。
【００３１】
本発明は、また、
（ａ）ａ．配列番号２または配列番号３または配列番号４または配列番号５または配列番号６または配列番号７または配列番号８のアミノ酸配列を含むプロテアーゼ；
ｂ．配列番号２または配列番号３または配列番号４または配列番号５または配列番号６または配列番号７または配列番号８に対して、少なくとも１つの位置において修飾されたアミノ酸配列を含むプロテアーゼであって、該修飾が配列番号１の番号付けにおいて、
ｉ．３位のスレオニン（３Ｔ）、
ｉｉ．４位のイソロイシン（４Ｉ）、
ｉｉｉ．６１位のアラニン、スレオニンまたはアルギニン（６１Ａ、６１Ｔまたは６１Ｒ）、
ｉｖ．１５４位のアスパラギン酸またはグルタミン酸（１５４Ｄまたは１５４Ｅ）、
ｖ．１８８位のプロリン（１８８Ｐ）、
ｖｉ．１９３位のメチオニン（１９３Ｍ）、
ｖｉｉ．１９９位のイソロイシン（１９９Ｉ）、
ｖｉｉｉ．２１１位のアスパラギン酸、グルタミン酸またはグリシン（２１１Ｄ、２１１Ｅまたは２１１Ｇ）、
ｉｘ．アミノ酸（ｉ）〜（ｖｉｉｉ）の組み合わせ
からなる群から選択されるプロテアーゼ、
（ｂ）ホスホネート
を含む液体洗浄または清浄剤を提供する。
【００３２】
これらのプロテアーゼは、本発明の液体洗浄または清浄剤中で非常に特に好ましく使用される。それらは、配列番号１に基づいて、配列番号１にしたがう番号付けにおいて、９９位のアミノ酸アルギニンのアミノ酸グルタミン酸（Ｅ）またはアスパラギン酸（Ｄ）あるいはアミノ酸アスパラギン（Ｎ）またはグルタミン（Ｑ）あるいはアミノ酸アラニン（Ａ）またはグリシン（Ｇ）またはセリン（Ｓ）による置換によって得られる。これらのアミノ酸配列は、配列番号２、配列番号３、配列番号４、配列番号５、配列番号６、配列番号７および配列番号８として配列表に示される。さらに、９９位に提供されるアミノ酸の他に、これらのプロテアーゼは、配列番号１とのアラインメントにおいて割り当てられるべき（かくして、配列番号１にしたがう番号付けにおいて）３、４、６１、１５４、１８８、１９３、１９９および２１１位に１以上の上記のアミノ酸を含んでいてもよい。これらのプロテアーゼの場合、これらの位置について示されるアミノ酸は、さらなる有利な特性をもたらし、および／または既存の特性をさらに増強する。特に、それらは、液体洗浄または清浄剤あるいは該洗浄または清浄剤によって形成される洗浄液中におけるプロテアーゼのタンパク質分解活性および／または安定性の増加をもたらす。したがって、上記の説明の全ては、適用可能な限りにおいて、これらの特に好ましいプロテアーゼに適用する。
【００３３】
ホスホネートは、ホスホン酸の塩および有機化合物、特に、エステルである。第１（Ｍ’Ｈ２ＰＯ３またはＨＰ（Ｏ）（ＯＨ）（ＯＭ’））および第２（Ｍ’２ＨＰＯ３またはＨＰ（Ｏ）（ＯＭ’）２）ホスホネートが塩として存在し、Ｍ’は一価の金属を示す。これらの無機ホスホネートはまた、第１または第２亜リン酸塩としても知られる。無機ホスホネートは、例えば、ホスホン酸ＨＰ（Ｏ）（ＯＨ）２、特に、亜リン酸の安定な互変形態を１当量（第１）または２当量（第２）の塩基、例えば、水酸化アルカリ金属と反応させることによって生じる。
【００３４】
本発明の目的のために、リン−炭素結合を含む有機Ｐ−置換ホスホネートが好ましい（有機リン化合物）。それらの一般構造は、Ｒ１Ｐ（Ｏ）（ＯＲ２）２であり、Ｒ１および／またはＲ２＝アルキル、アリールまたはＨ、該アルキルまたはアリール残基は、さらに置換基を含むか、またはさらなる化学基を有することができる。有機Ｐ−置換ホスホネートは、例えば、Ｍｉｃｈａｅｌｉｓ−Ａｒｂｕｓｏｖ反応の結果として生じる。これらのホスホネートの多くは水溶性である。いくつかの産業上重要なホスホネートは、さらに、ＮＲ−（ＣＨ２）ｘ−ＰＯ（ＯＨ）２（Ｒ＝アルキル、アリール、またはＨ）型のアミノ基を有する。これらのアミノホスホネートのいくつかは、ＥＤＴＡ、ＮＴＡまたはＤＴＰＡなどの錯化剤と構造類似性を有し、類似の機能を有する。
【００３５】
本発明の目的のために特に好ましいホスホネートは、特に、有機ホスホネート、例えば、１−ヒドロキシエタン−１，１−ジホスホン酸（ＨＥＤＰ）、アミノトリ（メチレンホスホン酸）（ＡＴＭＰ、アミノ−トリス（メチレンホスホン酸）またはニトロロトリス（メチレンホスホン酸）（ＮＴＭＰ）としても知られる）、ジエチレントリアミンペンタ（メチレンホスホン酸）（ＤＴＰＭＰまたはＤＥＴＰＭＰまたはＤＴＰＮＴ）、エチレンジアミンテトラ（メチレンホスホン酸）（ＥＤＴＭＰ、エチレンジアミンテトラ（メチレンホスホン酸）としても知られる）および２−ホスホノブタン−１，２，４−トリカルボン酸（ＰＢＳ−ＡＭ、２−ホスホノブタン−１，２，４−トリカルボン酸または３−カルボキシ−３−ホスホノアジピン酸としても知られる）を包含し、それらは主に、そのアンモニウムまたはアルカリ金属塩の形態で使用される。特に好ましくは、特に本発明の洗浄剤の場合、ジエチレントリアミンペンタ（メチレンホスホン酸）ナトリウムであり、および／または特に本発明の食器洗浄剤、特に自動食器洗浄剤の場合、１−ヒドロキシエタン−１，１−ジホスホン酸（ＨＥＤＰ）である。かかるホスホネートは、例えば、商品名ＤｅｑｕｅｓｔＲ２０６６およびＤｅｑｕｅｓｔＲ２０１０（各々、Ｔｈｅｒｍｐｈｏｓ製）のもとで入手可能である。
【００３６】
本発明の好ましい具体例において、洗浄または清浄剤は、ホスホネートが０．０１〜  ４重量％の量で存在することを特徴とする。該洗浄または清浄剤中に含有されるホスホネートのさらに好ましい量は、０．０１〜３重量％、０．０１〜２．５重量％、０．０２〜２．４重量％、０．０２〜２重量％、０．０３〜１．５重量％または０．０５〜１重量％である。
【００３７】
プロテアーゼは、本発明の洗浄または清浄剤中、活性タンパク質に対し、好ましくは１×１０−８〜５重量％の量で存在する。更に好ましくは、プロテアーゼは、該剤中、０．００１〜５重量％、より好ましくは０．０１〜５重量％、またより好ましくは０．０５〜４重量％、特に好ましくは０．０７５〜３．５重量％の量で含有される。タンパク質濃度は、既知の方法、例えば、ＢＣＡ法（ビシンコニン酸；２，２’−ビキノリル−４，４’−ジカルボン酸）またはビュレット法（Ａ．Ｇ．  Ｇｏｒｎａｕ，  Ｃ．Ｓ．  Ｂａｒｄａｗｉｌｌ  ｕｎｄ  Ｍ．Ｍ．  Ｄａｖｉｄ，  Ｊ．  Ｂｉｏｌ．  Ｃｈｅｍ．，  １７７  （１９４８），  ｐｐ．  ７５１−７６６）の助けで決定されうる。
【００３８】
本発明のさらなる具体例において、洗浄または清浄剤は、さらに、
ｉ．アニオンおよび／またはポリアニオン物質、および／または
ｉｉ．カチオンおよび／またはポリカチオン物質、および／または
ｉｉｉ．ヒドロキシルおよび／またはポリヒドロキシル基を含む物質
から選択される成分を含むことを特徴とする。
【００３９】
かかる物質の添加が、特に上記のようなプロテアーゼを含有する洗浄または清浄剤、特に液体洗浄または清浄剤の、比較的低温、特に１０℃〜５０℃、１０℃〜４０℃、１０℃〜３０℃および／または２０℃〜４０℃における清浄性能をさらに改善することが注目される。
【００４０】
上記ｉの物質は、アニオンまたはポリアニオン物質であり、すなわち、これらの物質は、少なくとも１個、好ましくはいくつかの陰性電荷を有する。該物質は、好ましくは、少なくとも１個の陰性に荷電したモノマー、好ましくは複数の陰性に荷電したモノマーとのポリマーである。本発明によると、該ポリマーは、したがって、好ましくは、陰性に荷電したポリマーである。好ましくは、例えば、有機酸またはその塩のポリマーであり、特に、ポリアクリレートおよび／またはポリサッカリド酸および／またはポリアクリレートコポリマーおよび／またはポリサッカリドコポリマーである。この点において、さらに好ましい化合物は、ポリアクリル酸スルホネートまたはポリカルボキシレートおよびその塩、コポリマーまたは該コポリマーの塩である。
【００４１】
特に好ましい物質の例は、Ａｃｕｓｏｌ  ５８７Ｄ（ポリアクリル酸スルホネート；Ｒｏｈｍ  ＆  Ｈａａｓ／Ｄｏｗ  Ｃｈｅｍｉｃａｌ）、Ａｃｕｓｏｌ  ４４５Ｎ（ポリカルボキシレートナトリウム塩；Ｒｏｈｍ  ＆  Ｈａａｓ／Ｄｏｗ  Ｃｈｅｍｉｃａｌ）、Ａｃｕｓｏｌ  ５９０（ポリアクリレートコポリマー；Ｒｏｈｍ  ＆  Ｈａａｓ／Ｄｏｗ  Ｃｈｅｍｉｃａｌ）、Ａｃｕｓｏｌ  ９１６（ポリアクリレートナトリウム塩；Ｒｏｈｍ  ＆  Ｈａａｓ／Ｄｏｗ  Ｃｈｅｍｉｃａｌ）、Ｓｏｋａｌａｎ  ＣＰ４２（修飾されたポリカルボキシレートナトリウム塩；ＢＡＳＦ）、Ｓｏｋａｌａｎ  ＰＡ  ３０ＣＬ（ポリカルボキシレートナトリウム塩；ＢＡＳＦ）、Ｄｅｑｕｅｓｔ  Ｐ  ９０００（ポリマレイン酸；Ｔｈｅｒｍｐｈｏｓ）、アルギン酸、ポリ−２−アクリルアミド−２−メチル−１−プロパンスルホン酸、ポリ−４−スチレンスルホン酸−コ−マレイン酸ナトリウム塩、ポリアクリルアミド−コ−アクリル酸ナトリウム塩、ポリメタクリル酸ナトリウム塩、ポリメチルビニルエーテル−ａｌｔ−マレイン酸またはポリビニルスルホン酸ナトリウム塩である。
【００４２】
上記ｉｉに示される物質は、カチオンまたはポリカチオン物質であり、すなわち、これらの物質は、少なくとも１個、好ましくはいくつかの陽性電荷を有する。該物質は、好ましくは、少なくとも１個の陽性に荷電したモノマー、好ましくは複数の陽性に荷電したモノマーとのポリマーである。本発明によると、該ポリマーは、したがって、好ましくは、陽性に荷電したポリマーである。この点において好ましい化合物の例は、ポリアミンの塩、ポリエチレンイミンまたはそのコポリマー、ポリアリルアミンの塩、ポリジアリルジメチルアンモニウム化合物の塩またはポリ（アクリルアミド−コ−ジアリルジメチルアンモニウム塩化合物）である。
【００４３】
上記ｉｉｉに示される物質は、少なくとも１個のヒドロキシルおよび／またはポリヒドロキシル基、好ましくは、複数のヒドロキシルおよび／またはポリヒドロキシル基を含む物質である。この点において、好ましくは、例えば、ポリビニルアルコール、例えば、商品名Ｍｏｗｉｏｌ（Ｋｒｅｍｅｒ  Ｐｉｇｍｅｎｔｅ  ＧｍｂＨ  ＆  Ｃｏ．  ＫＧ）のもとで入手可能なものである。
【００４４】
この点、特定の物質が１以上の上記ｉ〜ｉｉｉ群に属することが明示される。例えば、それは、１以上のヒドロキシルおよび／またはポリヒドロキシル基を含むアニオン性ポリマーであってもよい。次いで、かかる物質はｉ群およびｉｉｉ群に属する。１以上のヒドロキシルおよび／またはポリヒドロキシル基を含むカチオン性ポリマーも同様に、ｉｉ群およびｉｉｉ群に関連する。
【００４５】
同様に、本発明の目的のために、ｉ、ｉｉまたはｉｉｉ群として上記に示された物質の誘導体を使用することができる。本発明の目的のために、誘導体は、上記の物質の１つに基づいて、例えば、側鎖の変換によって、または別の化合物と該物質との共有結合によって、化学的に修飾された物質であると理解される。かかる化合物は、例えば、低分子化合物、例えば、脂質またはモノ−、オリゴ−もしくはポリサッカライドまたはアミンまたはアミン化合物であってもよい。さらに、該物質は、グリコシル化、加水分解、酸化、Ｎ−メチル化、Ｎ−ホルミル化またはＮ−アセチル化されていてもよく、またはメチル、ホルミル、エチル、アセチル、ｔ−ブチル、アニシル、ベンジル、トリフルオロアセチル、Ｎ−ヒドロキシスクシンイミド、ｔ−ブチルオキシカルボニル、ベンゾイル、４−メチルベンジル、チオアニジル、チオクレシル、ベンジルオキシメチル、４−ニトロフェニル、ベンジルオキシカルボニル、２−ニトロベンゾイル、２−ニトロフェニルスルフェニル、４−トルエンスルホニル、ペンタフルオロフェニル、ジフェニルメチル、２−クロロベンジルオキシカルボニル、２，４，５−トリクロロフェニル、２−ブロモベンジルオキシカルボニル、９−フルオレニルメチルオキシカルボニル、トリフェニルメチル、または２，２，５，７，８−ペンタメチルクロマン−６−スルホニルを含有していてもよい。誘導体は、同様に、該物質の高分子物質への共有または非共有結合、あるいは等しく、適当な高分子ケージ構造中における非共有性の抱合を意味すると理解される。他の高分子化合物、例えば、ポリエチレングリコールとのカップリング反応もまた行われうる。さらに好ましい化学修飾は、化学基−ＣＯＯＨ、−ＯＨ、＝ＮＨ、−ＮＨ２、−ＳＨないし−ＣＯＯＲ、−ＯＲ、−ＮＨＲ、−ＮＲ２、−ＮＨＲ、−ＮＲ、−ＳＲの１以上の修飾であり、
ここに、Ｒは、−ＣＨ＝ＣＨ−Ｒ２、−Ｃ＝Ｃ−Ｒ２、−Ｃ（Ｒ２）＝ＣＨ２、−Ｃ（Ｒ２）＝Ｃ（Ｒ３）、−ＣＨ＝ＮＲ２、−Ｃ（Ｒ２）＝Ｎ−Ｒ３、置換または非置換の４−７Ｃ環系、置換または非置換の４−７窒素ヘテロ環、またはＲ１、Ｒ２またはＲ３から選択される置換基を有する１〜５個の二重または三重結合を有するＣ２ないしＣ８鎖であり、
ここに、−Ｒ１は、Ｈ、−Ｒ、−ＮＯ２、−ＣＮ、ハライド置換基、−Ｎ３、−Ｃ１−８アルキル、−（ＣＨ２）ＮＣＯ２Ｒ２、−Ｃ２−８アルケニル−ＣＯ２Ｒ２、−Ｏ（ＣＨ２）ＮＣＯ２Ｒ２、−Ｃ（Ｏ）ＮＲ２Ｒ３、−Ｐ（Ｏ）（ＯＲ２）２、アルキル−置換されたテトラゾール−５−イル、−（ＣＨ２）ｎＯ（ＣＨ２）ｎ−アリール、−ＮＲ２Ｒ３、−（ＣＨ２）ｎ−ＯＲ２、−（ＣＨ２）ｎ−ＳＲ２、−Ｎ（Ｒ２）Ｃ（Ｏ）Ｒ３、−Ｓ（Ｏ２）ＮＲ２Ｒ３、−Ｎ（Ｒ２）Ｓ（Ｏ）２）Ｒ３、−（ＣＨＲ２）ｎ−ＮＲ２Ｒ３、−Ｃ（Ｏ）Ｒ３、（ＣＨ２）ｎ−Ｎ（Ｒ３）Ｃ（Ｏ）Ｒ３、−Ｎ（Ｒ２）ＣＲ２Ｒ３、置換または非置換の（ＣＨ２）ｎ−シクロアルキル、置換または非置換の（ＣＨ２）Ｎ−フェニル、または−環であり、ここに、ｎは１より大きい数字であり、
−Ｒ２は、Ｈ、ハライド置換基、アルキル、ハロアルキル、−（ＣＨ２）Ｎ−フェニル、−（ＣＨ２）１−３−ビフェニル、−（ＣＨ２）１−４−Ｐｈ−Ｎ（ＳＯ２−Ｃ１−２−アルキル）２、−ＣＯ（ＣＨＲ１）ｎ−ＯＲ１、−（ＣＨＲ１）ｎ−複素環、−（ＣＨＲ１）ｎ−ＮＨ−ＣＯ−Ｒ１、−（ＣＨＲ１）ｎ−ＮＨ−ＳＯ２Ｒ１、−（ＣＨＲ１）ｎ−Ｐｈ−Ｎ（ＳＯ２−Ｃ１−２−アルキル）２、−（ＣＨＲ１）ｎ−Ｃ（Ｏ）（ＣＨＲ１）−ＮＨＲ１、−（ＣＨＲ１）ｎ−Ｃ（Ｓ）（ＣＨＲ１）−ＮＨＲ１、−（ＣＨ２）ｎＯ（ＣＨ２）ｎＣＨ３、−ＣＦ３、−Ｃ２−Ｃ５アシル、−（ＣＨＲ１）ｎＯＨ、−（ＣＨＲ１）ｎＣＯ２Ｒ１、−（ＣＨＲ１）ｎ−Ｏ−アルキル、−（ＣＨＲ１）ｎ−Ｏ−（ＣＨ２）ｎ−Ｏ−アルキル、−（ＣＨＲ１）ｎ−Ｓ−アルキル、−（ＣＨＲ１）ｎ−Ｓ（Ｏ）−アルキル、−（ＣＨＲ１）ｎ−Ｓ（Ｏ）２）−アルキル、−（ＣＨＲ１）ｎ−Ｓ（Ｏ２）−ＮＨＲ３、−（ＣＨＲ３）ｎ−Ｎ３、−（ＣＨＲ３）ｎＮＨＲ４、１〜５個の二重結合を有するＣ２ないしＣ８鎖状アルケン鎖、１〜５個の三重結合を有するＣ２ないしＣ８鎖状アルキン鎖、置換または非置換の−（ＣＨＲ３）ｎ複素環、置換または非置換の飽和または不飽和−（ＣＨＲ３）ｎシクロアルキルであり、ここに、ｎは１より大きい数字であり、Ｒ１およびＲ３は、同一であっても異なっていてもよく、
−Ｒ３は、Ｈ、−ＯＨ、−ＣＮ、置換アルキル、−Ｃ２ないしＣ８アルケニル、置換または非置換のシクロアルキル、−Ｎ（Ｒ１）Ｒ２、４ないし７Ｃ原子の飽和または不飽和Ｃ５ないしＣ７複素環または複素二環、４ないし７Ｃ原子の飽和または不飽和複素環または複素二環からなる−ＮＲ１、−ＮＲ２、−ＮＲ１Ｒ２であり、
−Ｒ４は、Ｈ、−（ＣＨ２）ｎＯＨ、−Ｃ（Ｏ）ＯＲ５、−Ｃ（Ｏ）ＳＲ５、−（ＣＨ２）ｎ−Ｃ（Ｏ）ＮＲ６Ｒ７、−Ｏ−Ｃ（Ｏ）−Ｏ−Ｒ６、アミノ酸またはペプチドであり、ここに、ｎは０〜４の数字であり、
−Ｒ５はＨであり、
−Ｒ６は、−Ｃ（Ｒ７）−（ＣＨ２）ｎ−Ｏ−Ｃ（Ｏ）−Ｒ８、−（ＣＨ２）ｎ−Ｃ（Ｒ７）−Ｏ−Ｃ（Ｏ）Ｒ８、−（ＣＨ２）ｎ−Ｃ（Ｒ７）−Ｏ−Ｃ（Ｏ）−Ｏ−Ｒ８、または−Ｃ（Ｒ７）−（ＣＨ２）ｎ−Ｏ−Ｃ（Ｏ）−Ｏ−Ｒ８であり、ここに、ｎは、０〜４の数字であり、
−Ｒ７およびＲ８は、各ケースにおいて、Ｈ、アルキル、置換アルキル、アリール、置換アリール、アルケニル、置換アルケニル、アルキニル、置換アルキニル、複素環、置換複素環、アルキルアリール、置換アルキルアリール、シクロアルキル、置換シクロアルキル、またはＣＨ２ＣＯ２−アルキルであり、ここに、Ｒ７およびＲ８は同一であっても異なっていてもよい。
【００４６】
本発明によると、さらに、ｉ、ｉｉまたはｉｉｉに属すると上記で示された物質および／またはその誘導体のあらゆる可能な組み合わせを使用することができる。
【００４７】
本発明の液体洗浄または清浄剤は、そのまま、または水で希釈後に、織物および／または硬表面を清浄するために使用されうる。かかる希釈溶液は、剤：水の特定の重量比率でさらなる量の水中に該剤の部分を希釈することによって容易に調製することができ、所望により、該剤の水中での均一な分散を確実にするために該希釈物を振盪する。該希釈の可能な重量または容量比率は、１：０  剤：水〜１：１００００または１：２００００  剤：水であり、好ましくは、１：１０〜１：２０００  剤：水である。
【００４８】
ここに、全ての液体またはフロワブル形態が液体洗浄または清浄剤として作用しうる。「フロワブル」なる語は、本願の目的の場合、注ぎ入れることができ、また、数万ｍＰａ・ｓまでの粘度を示しうる剤を意味する。粘度は、通常の標準的な方法（例えば、２０ｒｐｍおよび２０℃、スピンドル３にてＢｒｏｏｋｆｉｅｌｄ  ＬＶＴ−ＩＩ粘度計）を用いて測定され得、好ましくは、５〜１００００ｍＰａ・ｓの範囲である。好ましい剤は、１０〜８０００ｍＰａ・ｓの粘度を有し、１２０〜３０００ｍＰａ・ｓの値が特に好ましい。したがって、本発明の目的のために、液体洗浄または清浄剤は、ゲルまたはペーストの形態を取ってもよく、均一な溶液または懸濁液として存在していてもよく、例えば、スプレー可能な形態または他の通常の形態として処方されてもよい。洗浄剤は、考えられる全ての型の洗浄剤を包含し、特に、織物、カーペットまたは天然繊維用の洗浄剤を包含する。それらは、手洗いおよび／または機械洗いに使用するために提供されうる。洗浄剤は、さらに、織物の手洗いまたは機械洗いのために実際の洗浄剤に添加さしてさらなる効果を達成する洗浄補助剤を包含する。清浄剤は、同様に記載される全ての形態において生じる全ての剤、例えば、硬表面を清浄および／または消毒するためのもの、手洗いおよび自動食器洗浄剤、カーペットクリーナー、研磨剤、ガラスクリーナー、ＷＣリムブロック（rimblock）などを包含する。最終的に、織物の前処理および後処理剤は、一方で、例えば頑固な汚れを部分的に溶解するために、実際の洗浄前に洗濯物と接触させる剤であり、他方で、実際の洗浄工程の下流において、洗浄したものに、気持ちのよい手触り、折り目がないこと、または低静電気などのさらに望ましい特性を与える剤である。後者の剤は、特に、リンスコンディショナーを包含する。消毒剤は、例えば、ハンド消毒剤、表面用消毒剤および道具用消毒剤があり、同様に、上記の形態で生じうる。
【００４９】
本発明のさらなる好ましい具体例において、洗浄または清浄剤は、少なくとも１つのさらなる成分、特に、界面活性剤、ビルダー（builder）、ペルオキシ化合物、漂白活性化剤、アルコール、酸、灰色化（graying）阻害剤、光学的光沢剤、発泡阻害剤、水溶性塩、増粘剤、揮発性アルカリおよび／または塩基、親水性化（hydrophilizing）剤およびその組み合わせからなる群から選択される１つを含むことを特徴とする。
【００５０】
アニオン性、非イオン性、双極性イオン性および／または両性界面活性剤を界面活性剤として用いてもよい。応用の見地から、アニオン性および非イオン性界面活性剤の混合物が好ましい。液体洗浄または清浄剤液中の総界面活性剤含量は、液体洗浄または清浄剤全体に対して、好ましくは、６０重量％未満、特に好ましくは４５重量％未満である。
【００５１】
適当な非イオン性界面活性剤は、アルコキシル化脂肪アルコール、アルコキシル化脂肪酸アルキルエステル、脂肪酸アミド、アルコキシル化脂肪酸アミド、ポリヒドロキシ脂肪酸アミド、アルキルフェノールポリグリコールエーテル、酸化アミン、アルキルポリグルコシドおよびその混合物を包含する。
【００５２】
アルコキシル化された、有利にはエトキシル化された、好ましくは８〜１８個のＣ原子を有し、アルコール１ｍｏｌあたり平均１〜１２ｍｏｌのエチレンオキシド（Ｅ）の、特に第１級アルコール（ここに、該アルコール残基は、通常、オキソアルコール残基中に存在するように、直鎖であってもよく、または好ましくは２位にメチル側鎖があるか、あるいは直鎖およびメチル側鎖残基を混合して含有していてもよい）が非イオン性界面活性剤として好ましく用いられる。しかしながら、特に、１２〜１８個のＣ原子を有する天然起源のアルコール、例えば、ココナツ、ヤシ、獣脂またはオレイルアルコールから調製された直鎖残基を有する、アルコール１ｍｏｌあたり平均２〜８ＥＯのアルコールエトキシレートが好ましい。好ましいエトキシル化アルコールは、例えば、３ＥＯ、４ＥＯまたは７ＥＯを有するＣ１２−１４アルコール、７ＥＯを有するＣ９−１１アルコール、３ＥＯ、５ＥＯ、７ＥＯまたは８ＥＯを有するＣ１３−１５アルコール、３ＥＯ、５ＥＯまたは７ＥＯを有するＣ１２−１８アルコール、およびこれらの混合物、例えば、３ＥＯを有するＣ１２−１４アルコールと７ＥＯを有するＣ１２−１８アルコールの混合物を包含する。示されるエトキシル化度は、整数または分数であってもよい特定の生産物に対する統計学的平均である。好ましいアルコールエトキシレートは、狭い同族体分布（狭い範囲のエトキシレート、ＮＲＥ）を有する。これらの非イオン性界面活性剤のほかに、１２ＥＯより高いＥＯを有する脂肪アルコールも使用されうる。これらの例は、１４ＥＯ、２５ＥＯ、３０ＥＯまたは４０ＥＯを有する獣脂肪アルコールである。ＥＯおよびＰＯ基を１分子中に一緒に含有する非イオン性界面活性剤もまた、本発明にしたがって使用されうる。（より高級な）分枝エトキシル化脂肪アルコールおよび非分枝エトキシル化脂肪アルコールの混合物、例えば、７ＥＯを有するＣ１６−１８脂肪アルコールおよび７ＥＯを有する２−プロピルヘプタノールの混合物もまた、さらに適当である。特に好ましくは、洗浄、清浄または後処理剤あるいは洗浄補助剤は、７ＥＯを有するＣ１２−１８脂肪アルコールまたは７ＥＯを有するＣ１３−１５オキソアルコールを非イオン性界面活性剤として含有する。
【００５３】
洗浄または清浄剤中の非イオン性界面活性剤の含量は、各々、洗浄または清浄剤全体に対し、好ましくは、３〜４０重量％、好ましくは５〜３０重量％、特に７〜２０重量％に達する。
【００５４】
非イオン性界面活性剤のほかに、洗浄または清浄剤は、また、アニオン性界面活性剤を含有してもよい。スルホネート、サルフェート、石鹸、リン酸アルキル、アニオン性シリコン界面活性剤およびその混合物がアニオン性界面活性剤として好ましく使用される。
【００５５】
本明細書中で好ましいと考えられるスルホネート型の界面活性剤は、Ｃ９−１３アルキルベンゼンスルホネート、オレフィンスルホネート、すなわち、アルケンおよびヒドロキシアルカンスルホネートおよびジスルホネートの混合物であり、例えば、末端または内部二重結合を有するＣ１２−１８モノオレフィンから、三酸化硫黄ガスを用いるスルホン化、次いでスルホン化産物のアルカリ性または酸性加水分解によって得られる。Ｃ１２−１８アルカンスルホネートおよびα−スルホ脂肪酸のエステル（エステルのスルホネート）、例えば、水素添加ココナツ、パーム核または獣脂肪酸のα−スルホン化メチルエステルもまた、適当である。
【００５６】
好ましい硫酸アルキル（アルケニル）は、アルカリ金属であり、特に、例えば、ココナツ脂肪アルコール、獣脂肪アルコール、ラウリル、ミリスチル、セチルまたはステアリルアルコールあるいはＣ１０−Ｃ２０オキソアルコールから調製された、Ｃ１２−Ｃ１８脂肪アルコールの硫酸セミエステルのナトリウム塩、およびこれらの鎖長の第２級アルコールのセミエステルである。硫酸Ｃ１２−Ｃ１６アルキルおよび硫酸Ｃ１２−Ｃ１５アルキルおよび硫酸Ｃ１４−Ｃ１５アルキルが、その洗浄特性から好ましい。硫酸２，３−アルキルもまた、アニオン性界面活性剤として適当である。
【００５７】
１〜６ｍｏｌのエチレンオキシドでエトキシル化された直鎖または分枝鎖Ｃ７−２１アルコールの硫酸モノエステル、例えば、平均３．５ｍｏｌのエチレンオキシド（ＥＯ）を有する２−メチル分枝鎖Ｃ９−１１アルコールまたは１〜４ＥＯを有するＣ１２−１８脂肪アルコールもまた、適当である。
【００５８】
石鹸もまた、アニオン性界面活性剤として好ましい。飽和および不飽和脂肪酸石鹸、例えば、ラウリン酸、ミリスチン酸、パルミチン酸、ステアリン酸、（水素添加）エルカ酸およびベヘン酸の塩、特に、天然脂肪酸、例えば、ココナツ、パーム核、オリーブ油または獣脂肪酸由来の石鹸混合物が特に適当である。
【００５９】
石鹸を包含するアニオン性界面活性剤は、ナトリウム、カリウム、マグネシウムまたはアンモニウム塩の形態で存在しうる。アニオン性界面活性剤は、好ましくは、ナトリウム塩の形態で存在しうる。アニオン性界面活性剤のさらに好ましい対イオンは、また、プロトン化形態のコリン、トリエチルアミンまたはメチルエチルアミンである。
【００６０】
洗浄または清浄剤のアニオン性界面活性剤含量は、各々、洗浄または清浄剤全体に対して、１〜４０重量％、好ましくは５〜３０重量％、非常に特に好ましくは１０〜２５重量％に達しうる。
【００６１】
洗浄または清浄剤中に含有されうる可能なビルダー（builder）は、特に、ケイ酸塩、ケイ酸アルミニウム（特に、ゼオライト）、カルボネート、有機ジ−およびポリカルボン酸の塩およびこれらの物質の混合物である。
【００６２】
洗浄または清浄剤中に存在しうる有機ビルダーは、例えば、ナトリウム塩の形態で使用可能なポリカルボン酸、１以上の酸機能を有するカルボン酸を意味すると解釈されるポリカルボン酸である。これらは、例えば、クエン酸、アジピン酸、コハク酸、グルタル酸、リンゴ酸、酒石酸、マレイン酸、フマル酸、糖酸、アミノカルボン酸、ニトリロトリ酢酸（ＮＴＡ）、メチルグリシンジ酢酸（ＭＧＤＡ）ならびにその誘導体および混合物である。好ましい塩は、ポリカルボン酸、例えば、クエン酸、アジピン酸、コハク酸、グルタル酸、酒石酸、糖酸およびこれらの混合物の塩である。
【００６３】
さらに、ポリマーポリカルボキシレートがビルダーとして適当である。これらは、例えば、ポリアクリル酸またはポリメタクリル酸のアルカリ金属塩、例えば、相対分子量６００〜７５００００ｇ／ｍｏｌのものである。
【００６４】
適当なポリマーは、特にポリアクリレートであり、好ましくは、分子量１０００〜１５０００ｇ／ｍｏｌを有するポリアクリレートである。その優秀な溶解性のために、該基由来の単鎖ポリアクリレートが次いで好ましく、これらは、モル質量１０００〜１００００ｇ／ｍｏｌ、特に好ましくは１０００〜５０００ｇ／ｍｏｌを有する。
【００６５】
また、コポリマーポリカルボキシレート、特に、アクリル酸とメタクリル酸およびアクリル酸またはメタクリル酸とマレイン酸のコポリマーも適当である。水溶性を改善するために、該ポリマーは、アリルスルホン酸、例えば、アリルオキシベンゼンスルホン酸およびメタリルスルホン酸をモノマーとして含有していてもよい。
【００６６】
しかしながら、好ましくは、可溶性ビルダー、例えば、クエン酸、または分子量１０００〜５０００ｇ／ｍｏｌのアクリル酸ポリマーが、液体洗浄または清浄剤に好ましく使用される。
【００６７】
かかる有機ビルダー物質は、所望により、４０重量％まで、特に２５重量％まで、好ましくは１重量％〜８重量％の量で存在していてもよい。上記の上限に近い量が糊状または液体の特に水含有性の剤に好ましく使用される。
【００６８】
特に考えられうる本発明の剤における使用に適当なペルオキシ化合物は、有機性過酸または有機酸の過酸塩、例えば、フタルイミド過カプロン酸、過安息香酸またはジペルドデカン二酸の塩、過酸化水素および洗浄条件下で過酸化水素を放出する無機塩であり、後者は、過ホウ酸塩、過炭酸塩、過ケイ酸塩および／または過硫酸塩、例えば、カロエート（ｃａｒｏａｔｅ）を包含する。剤がペルオキシ化合物を含有する場合、これらは、好ましくは、５０重量％まで、特に５重量％〜３０重量％の量で存在する。少量の既知の漂白剤安定化剤、例えば、ホスホン酸塩、ホウ酸塩またはメタホウ酸塩およびメタケイ酸塩およびマグネシウム塩、例えば、硫酸マグネシウムを添加することが適当でありうる。
【００６９】
使用されうる漂白活性化剤は、過加水分解条件下で、好ましくは１〜１０個のＣ原子、特に２〜４個のＣ原子を有する脂肪族ペルオキシカルボン酸、および／または置換されていてもよい過安息香酸を生じる化合物である。適当な物質は、記載の数のＣ原子を有するＯ−および／またはＮ−アシル基および／または置換されていてもよいベンゾイル基を有するものである。好ましくは、ポリアシル化アルキレンジアミンであり、特に、テトラアセチルエチレンジアミン（ＴＡＥＤ）、アシル化トリアジン誘導体、特に、１，５−ジアセチル−２，４−ジオキソヘキサヒドロ−１，３，５−トリアジン（ＤＡＤＨＴ）、アシル化グリコルリル（ｇｌｙｃｏｌｕｒｉｌ）、特に、テトラアセチルグリコルリル（ＴＡＧＵ）、Ｎ−アシルイミド、特に、Ｎ−ノナノニルスクシンイミド（ＮＯＳＩ）、アシル化フェノールスルホネート、特に、ｎ−ノナノニルまたはイソノナノニルオキシベンゼンスルホネート（ｎ−またはｉｓｏ−ＮＯＢＳ）、カルボン酸無水物、特にフタル酸無水物、アシル化多価アルコール、特にトリアセチン、エチレングリコールジアセテート、２，５−ジアセトキシ−２，５−ジヒドロフランおよびエノールエステルならびにアセチル化ソルビトールおよびマンニトールおよび／またはその記載の混合物（ＳＯＲＭＡＮ）、アシル化糖誘導体、特にペンタアセチルグルコース（ＰＡＧ）、ペンタアセチルフルクトース、テトラアセチルキシロースおよびオクタアセチルラクトースおよびアセチル化された、Ｎ−アルキル化されていてもよいグルカミンおよびグルコノラクトン、および／またはＮ−アシル化ラクタム、例えば、Ｎ−ベンゾイルカプロラクタムである。親水性置換アシルアセタールおよびアシルラクタムも同様に好ましく使用される。従来の漂白活性化剤の組み合わせもまた使用されうる。かかる漂白活性化剤は、特に上記過酸化水素放出漂白剤の存在下で、従来の量範囲で、剤全体に対して、好ましくは０．５重量％〜１０重量％、特に１重量％〜８重量％の量で存在していてもよいが、過カルボン酸が単独の漂白剤として用いられる場合は、好ましくは全体として存在しない。
【００７０】
従来の漂白活性化剤のほかに、または代わりに、スルホンイミンおよび／または漂白促進性遷移金属塩または遷移金属錯体もまた、「漂白触媒」として存在していてもよい。
【００７１】
本発明の洗浄または清浄剤は、液体であり、好ましくは主要触媒として水を含有する。さらに、非水性溶媒を洗浄または清浄剤に加えてもよい。適当な非水性溶媒は、記載の濃度範囲において水混和性であるかぎり、一価または多価アルコール、アルカノールアミンまたはグリコールエーテルを包含する。溶媒は、好ましくは、エタノール、ｎ−プロパノール、ｉ−プロパノール、ブタノール、グリコール、プロパンジオール、ブタンジオール、グリセロール、ジグリコール、ジエチレングリコールプロピルエーテル、ジエチレングリコールモノブチルエーテル、ヘキシレングリコール、エチレングリコールメチルエーテル、エチレングリコールエチルエーテル、エチレングリコールプロピルエーテル、エチレングリコールモノ−ｎ−ブチルエーテル、ジエチレングリコールメチルエーテル、ジエチレングリコールエチルエーテル、プロピレングリコールメチルエーテル、プロピレングリコールエチルエーテル、プロピレングリコールプロピルエーテル、ジプロピレングリコールモノメチルエーテル、ジプロピレングリコールモノエチルエーテル、ジイソプロピレングリコールモノメチルエーテル、ジイソプロピレングリコールモノエチルエーテル、メトキシトリグリコール、エトキシトリグリコール、ブトキシトリグリコール、１−ブトキシエトキシ−２−プロパノール、３−メチル−３−メトキシブタノール、プロピレングリコール−ｔ−ブチルエーテル、ジ−ｎ−オクチルエーテルおよびこれらの溶媒の混合物から選択される。しかしながら、洗浄または清浄剤は、非水性溶媒としてポリオールを含有するのが好ましい。ポリオールは、特に、グリセロール、１，２−プロパンジオール、１，３−プロパンジオール、エチレングリコール、ジエチレングリコールおよび／またはジプロピレングリコールを含みうる。特に好ましくは、洗浄または清浄剤は、ポリオールおよび一価アルコールの混合物を含有する。非水性溶媒は、洗浄または清浄剤中、０．５〜１５重量％、好ましくは１２重量％未満の量で使用されうる。
【００７２】
残りの成分を混合することによって自動的に得られない所望のｐＨ値を確立するために、該剤は、該系に相溶性であって、環境的に適合性の酸、特に、クエン酸、酢酸、酒石酸、リンゴ酸、乳酸、グリコール酸、コハク酸、グルタル酸および／またはアジピン酸、ならびに無機酸、特に硫酸、または塩基、特に水酸化アンモニウムまたはアルカリ金属を含有していてもよい。かかるｐＨ調節剤は、該剤中に、好ましくは２０重量％以下、特に１．２重量％〜１７重量％の量で存在する。
【００７３】
灰色化阻害剤は、織物繊維から分解された汚れを液中に維持する働きを有する。主に有機性の水溶性コロイドが該目的に適当であり、例えば、デンプン、サイズ（ｓｉｚｅ）、ゼラチン、デンプンまたはセルロースのエーテルカルボン酸またはエーテルスルホン酸の塩あるいはセルロースまたはデンプンの酸性硫酸エステルの塩が適当である。酸性基を含有する水溶性ポリアミドもまた、該目的に適当である。さらに、上記以外のデンプン誘導体、例えば、アルデヒドデンプンを用いてもよい。セルロースエーテル、例えば、カルボキシメチルセルロース（Ｎａ塩）、メチルセルロース、ヒドロキシアルキルセルロースおよび混合エーテル、例えば、メチルヒドロキシエチルセルロース、メチルヒドロキシプロピルセルロース、メチルカルボキシメチルセルロースおよびその混合物は、例えば、該剤に対して０．１〜５重量％の量で好ましく使用される。
【００７４】
織物洗浄剤は、例えば、ジアミノスチルベンジスルホン酸の誘導体またはそのアルカリ金属塩を光学的光沢剤として含有していてもよいが、好ましくは色物用洗浄製品として使用するために、光学的光沢剤を含有しない。適当な化合物は、例えば、４，４’−ビス（２−アニリノ−４−モルホリノ−１，３，５−トリアジニル−６−アミノ）スチルベン２，２’−ジスルホン酸、またはモルホリノ基の代わりに、ジエタノールアミノ基、メチルアミノ基、アニリノ基または２−メトキシエチルアミノ基を有する類似の構造の化合物の塩である。さらに、置換されたジフェニルスチリル型の光沢剤、例えば、４，４’−ビス（２−スルホスチリル）−ジフェニル、４，４’−ビス（４−クロロ−３−スルホスチリル）−ジフェニル、または４−（４−クロロスチリル）−４’−（２−スルホスチリル）−ジフェニルのアルカリ金属塩が存在していてもよい。上記の光学的光沢剤の混合物もまた、使用されうる。
【００７５】
特に機械洗浄法において使用するために、発泡阻害剤を該剤に加えることが有益でありうる。適当な発泡阻害剤は、例えば、高い割合でＣ１８−Ｃ２４脂肪酸を含む天然または合成起源の石鹸である。適当な非界面活性発泡阻害剤は、例えば、オルガノポリシロキサン、および超微粒の、シラン化（silanized）されていてもよいシリカとのその混合物、ならびにパラフィン、ワックス、微結晶性ワックスおよびシラン化シリカまたはビス−脂肪酸アルキレンジアミドとのその混合物である。異なる発泡阻害剤の混合物、例えば、シリコン、パラフィンまたはワックスの混合物もまた、有益に使用される。発泡阻害剤、特に、シリコンおよび／またはパラフィンを含有する発泡阻害剤は、好ましくは、水溶性または水分散性の顆粒担体物質に結合される。ここでは、パラフィンおよびビステアリルエチレンジアミドの混合物が特に好ましい。
【００７６】
本発明の剤は、さらに、例えば粘度を調整するように働く１以上の水溶性塩を含有していてもよい。該塩は、無機および／または有機性であってもよい。使用されうる無機塩は、好ましくは、アルカリ金属、アルカリ土類金属の、アルミニウムおよび／または遷移金属の無色水溶性ハロゲン化物、硫酸塩、亜硫酸塩、炭酸塩、炭酸水素塩、硝酸塩、亜硝酸塩、リン酸塩および／または酸化物を含む群から選択され、さらにアンモニウム塩が使用されうる。アルカリ金属のハロゲン化物および硫酸塩が特に好ましく、したがって、無機塩は好ましくは、塩化ナトリウム、塩化カリウム、硫酸ナトリウム、硫酸カリウムおよびその混合物を含む群から選択される。使用されうる有機塩の例は、カルボン酸の無色水溶性アルカリ金属、アルカリ土類金属、アンモニウム、アルミニウムおよび／または遷移金属塩である。該塩は、好ましくは、ギ酸塩、酢酸塩、プロピオン酸塩、クエン酸塩、リンゴ酸塩、酒石酸塩、コハク酸塩、マロン酸塩、シュウ酸塩、乳酸塩およびその混合物を含む群から選択される。
【００７７】
増粘目的のために、本発明の剤は、１以上の増粘剤を含有していてもよい。増粘剤は、好ましくは、キサンタンガム、グアーガム、カラギーナン、アガー−アガー（ａｇａｒ−ａｇａｒ）、ゼラチン、ペクチン、ローカストビーン粉およびその混合物を含む群から選択される。これらの化合物は、無機塩の存在下でも、有効な増粘剤である。キサンタンガムは、高い塩濃度下でも有効に増粘し、連続的相の巨視的分離を防ぐので、特に好ましい具体例において、洗浄または清浄剤は、増粘剤としてキサンタンガムを含有する。さらに、増粘剤は、連続的な低界面活性相を安定化し、巨視的相分離を防ぐ。
【００７８】
別法として、またはさらに、（メタ）アクリル酸（コ）ポリマーを増粘剤として用いてもよい。適当なアクリルおよびメタクリル（コ）ポリマーは、例えば、ポリアルケニルポリエーテル、特に、シュークロース、ペンタエリトリトールまたはプロピレンのアリルエーテルと架橋した、アクリル酸の高分子量ホモポリマー（”Ｔｈｅ  Ｃｏｓｍｅｔｉｃ，  Ｔｏｉｌｅｔｒｙ，  ａｎｄ  Ｆｒａｇｒａｎｃｅ  Ａｓｓｏｃｉａｔｉｏｎ  （ＣＴＦＡ）”の”Ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ  Ｄｉｃｔｉｏｎａｒｙ  ｏｆ  Ｃｏｓｍｅｔｉｃ  Ｉｎｇｒｅｄｉｅｎｔｓ”にしたがうＩＮＣＩ名称：カルボマー（Ｃａｒｂｏｍｅｒ））（カルボキシビニルポリマーとしても知られる）を包含する。かかるポリアクリル酸は、特に商品名ＰｏｌｙｇｅｌＲおよびＣａｒｂｏｐｏｌＲのもと、入手可能である。下記のアクリル酸コポリマー、例えば、（ｉ）例えば、商品名ＡｃｕｌｙｎＲ、ＡｃｕｓｏｌＲまたはＴｅｇｏＲポリマーのもとで入手可能な、アクリル酸、メタクリル酸、および好ましくはＣ１−４アルカノールと形成された、その単純エステルを含む群由来の２以上のモノマーからなるコポリマー（ＩＮＣＩ  アクリレートコポリマー）；（ｉｉ）例えば、商品名ＣａｒｂｏｐｏｌＲのもとで入手可能な、例えば、シュークロースまたはペンタエリトリトールのアリルエーテルと架橋された、Ｃ１０−３０アルキルアクリレートと、アクリル酸、メタクリル酸および、好ましくはＣ１−４アルカノールと形成された、その単純エステルを含む群由来の１以上のモノマーとのコポリマー（ＩＮＣＩ  アクリレート／Ｃ１０−３０アルキルアクリレートクロスポリマー）を包含する架橋高分子量アクリル酸コポリマーが適当である。さらに適当なポリマーは、ＳｏｋａｌａｎＲ型の（メタ）アクリル酸（コ）ポリマーである。
【００７９】
本発明の洗浄または清浄剤は、（メタ）アクリル酸（コ）ポリマーをさらなる増粘剤、好ましくはキサンタンガムと組み合わせて含有することが好ましい場合がある。洗浄または清浄剤は、各々、洗浄または清浄剤全体に対して、０．０５〜１．５重量％、好ましくは０．１〜１重量％の増粘剤を含有していてもよい。ここで、使用される増粘剤の量は、増粘剤の種類および所望の増粘の程度に依存する。
【００８０】
さらに、対応する剤は、揮発性アルカリを含有しうる。アンモニアおよび／またはアルカノールアミンは、１分子あたり９個までのＣ原子を含有していてもよく、それ自体使用される。
【００８１】
アルカノールアミンのなかでも、エタノールアミンが好ましく、これらのなかでも、次に、モノエタノールアミンが好ましい。アンモニアおよび／またはアルカノールアミンの含有量は、好ましくは、０．０１〜２重量％に達し、アンモニアが特に好ましく使用される。さらに、少量の塩基もまた含まれうる。好ましい塩基は、水酸化および炭酸アルカリ金属およびアルカリ土類金属の群、特に水酸化アルカリ金属の群由来であり、なかでも、水酸化カリウムおよび、とりわけ、水酸化ナトリウムが特に好ましい。
【００８２】
対応する剤は、また、親水性化剤を含有しうる。本発明の目的の場合、これは、表面を親水性化するための剤を意味する。二酸化ケイ素が好ましくはナノ粒子形態で存在するコロイド状シリカゾルは、親水性化に適当である。本発明の目的のためのコロイド状ナノ粒子シリカゾルは、粒子サイズ１〜１００ｎｍを有するアモルファス粒子状二酸化ケイ素ＳｉＯ２の安定な分散物である。ここに、粒子サイズは、３〜５０ｎｍ、特に好ましくは４〜４０ｎｍである。本発明の目的のための使用に適当なシリカゾルの一例は、Ａｋｚｏ由来の商品名ＢｉｎｄｚｉｌＲ３０／３６０のもとに入手可能な粒子サイズ９ｎｍのシリカゾルである。さらに適当なシリカゾルは、ＢｉｎｄｚｉｌＲ１５／５００、３０／２２０、４０／２００（Ａｋｚｏ）、ＮｙａｃｏｌＲ２１５、８３０、１４３０、２０３４ＤＩおよびＮｙａｃｏｌＲＤＰ５８２０、ＤＰ５４８０、ＤＰ５５４０など（Ｎｙａｃｏｌ  Ｐｒｏｄｕｃｔｓ）、ＬｅｖａｓｉｌＲ１００／３０、１００Ｆ／３０、１００Ｓ／３０、２００／３０、２００Ｆ／３０、３００Ｆ／３０、ＶＰ  ４０３８、ＶＰ  ４０５５（Ｈ．Ｃ．  Ｓｔａｒｃｋ／Ｂａｙｅｒ）または実際、ＣＡＢ−Ｏ−ＳＰＥＲＳＥＲ  ＰＧ  ００１、ＰＧ  ００２（ＣＡＢ−Ｏ−ＳＩＬＲの水性分散，Ｃａｂｏｔ）、Ｑｕａｒｔｒｏｎ  ＰＬ−１、ＰＬ−３（ＦｕｓｏＣｈｅｍｉｃａｌ  Ｃｏ．）、Ｋｏｅｓｔｒｏｓｏｌ  ０８３０、１０３０、１４３０（Ｃｈｅｍｉｅｗｅｒｋ  Ｂａｄ  Ｋｏｅｓｔｒｉｔｚ）である。使用されるシリカゾルは、また、アルミン酸ナトリウム（アルミナ修飾シリカ）で処理された表面修飾シリカであってもよい。
【００８３】
さらに、ある種のポリマーもまた、表面の親水性化に使用されうる。適当な親水性化ポリマーは、特に、両性ポリマー、例えば、アクリル酸またはメタクリル酸およびＭＡＰＴＡＣ、ＤＡＤＭＡＣまたは別のポリマー化可能な第４級アンモニウム化合物から調製されたコポリマーである。さらに、ＡＭＰＳ（２−アクリルアミド−２−メチルプロパンスルホン酸）とのコポリマーもまた使用されうる。ポリエーテルシロキサン、すなわち、ポリメチルシロキサンとエチレンオキシドまたはプロピレンオキシドセグメントとのコポリマーは、さらに適当なポリマーである。アクリルポリマー、マレイン酸コポリマーおよびＰＥＧ（ポリエチレングリコール）単位を有するポリウレタンも同様に使用可能である。適当なポリマーは、例えば、商品名Ｍｉｒａｐｏｌ  Ｓｕｒｆ−Ｓ  １００、１１０、２００、２１０、４００、４１０、Ａ  ３００、Ａ  ４００（Ｒｈｏｄｉａ）、Ｔｅｇｏｐｒｅｎ  ５８４３（Ｇｏｌｄｓｃｈｍｉｄｔ）、Ｓｏｋａｌａｎ  ＣＰ  ９（ＢＡＳＦ）またはＰｏｌｙｑｕａｒｔ  Ａｍｐｈｏ  １４９（Ｃｏｇｎｉｓ）のもと、商業上入手可能である。
【００８４】
選択されるべき該剤の成分ならびに本発明にしたがって適用される条件、例えば、温度、ｐＨ値、イオン強度、酸化還元比率または機械的影響は、適用する各分野について常法により最適化される。
【００８５】
従来の溶媒を含有する溶液の形態の本発明の液体またはペースト状剤は、一般に、溶解されていない物質または溶液として自動混合機中に導入されうる成分を単純に混合することによって製造される。
【００８６】
本発明の洗浄または清浄剤は、記載されるプロテアーゼだけを含有していてもよい。別法では、それらは、また、該剤の効力に都合のよい濃度において、さらなる加水分解酵素または他の酵素を含有しうる。かくして、本発明は、さらに、１以上のさらなる酵素（原則として、先行技術において該目的のために確立された全ての酵素が使用されうる）をさらに含む剤を提供する。好ましく使用されうるさらなる酵素は、本発明の剤において触媒活性を示しうる全ての酵素であり、特に、プロテアーゼ、アミラーゼ、セルラーゼ、ヘミセルラーゼ、マンナナーゼ、タンナーゼ、キシラナーゼ、キサンタナーゼ、β−グルコシダーゼ、カラギナーゼ、ペルヒドロラーゼ、オキシダーゼ、オキシドレダクターゼ、またはリパーゼ、好ましくはその混合物である。これらの酵素は、原則として、天然起源であり、天然分子から出発し、改善された変種が洗浄および清浄剤中で使用するために入手可能であり、したがって、該変種が好ましく使用される。
【００８７】
本発明の剤は、好ましくは、活性タンパク質に対し、全量で１×１０−８〜５重量％の酵素を含有する。該酵素は、好ましくは、本発明の剤中、０．００１〜５重量％、より好ましくは０．０１〜５重量％、まだより好ましくは０．０５〜４重量％、特に好ましくは０．０７５〜３．５重量％の量で含有され、含まれる各酵素は、おそらく、記載の量比率で存在する。該酵素は、早期の不活性化から保護するために、担体物質上に吸着されていてもよく、および／またはカプセル物質中に埋め込まれていてもよい。タンパク質濃度は、既知の方法、例えば、ＢＣＡ法（ビシンコニン酸；２，２’−ビキノリル−４，４’−ジカルボン酸）またはビュレット法（Ａ．Ｇ．  Ｇｏｒｎａｕ，  Ｃ．Ｓ．  Ｂａｒｄａｗｉｌｌ  ｕｎｄ  Ｍ．Ｍ．  Ｄａｖｉｄ，  Ｊ．  Ｂｉｏｌ．  Ｃｈｅｍ．，  １７７  （１９４８），  ｐｐ．  ７５１−７６６）の助けによって決定されうる。
【００８８】
特に好ましくは、該酵素は、特定の汚れまたは染みに対する活性に関して相乗効果を示す。すなわち、該剤組成中に含有される酵素は、互いの清浄性能を助ける。非常に特に好ましくは、かかる相乗作用は、特に、記載のプロテアーゼとアミラーゼおよび／またはマンナーゼおよび／またはリパーゼ間を包含する本発明のプロテアーゼと本発明の剤のさらなる酵素との間に存在する。相乗効果は、異なる酵素間だけでなく、１以上の酵素と本発明の剤のさらなる成分との間にも起こりうる。
【００８９】
プロテアーゼのなかでも、スブチリシン型のものが好ましい。これらの例は、スブチリシンＢＰＮ’およびＣａｒｌｓｂｅｒｇ、プロテアーゼＰＢ９２、スブチリシン１４７および３０９、バチルス・レンタス由来のアルカリ性プロテアーゼ、スブチリシンＤＹおよび酵素テルミターゼ、プロテイナーゼＫ、およびプロテアーゼＴＷ３およびＴＷ７であり、それらは、スブチラーゼのなかに分類されるが、より狭く定義され他場合はスブチリシンのなかに分類されない。スブチリシンＣａｒｌｓｂｅｒｇは、さらに開発された形態において、Ｎｏｖｏｚｙｍｅｓ  Ａ／Ｓ，  Ｂａｇｓｖａｅｒｄ，  Ｄｅｎｍａｒｋから商品名ＡｌｃａｌａｓｅＲのもとで入手可能である。スブチリシン１４７および３０９は、Ｎｏｖｏｚｙｍｅｓによって、商品名ＥｓｐｅｒａｓｅＲまたはＳａｖｉｎａｓｅＲのもとで流通されている。商品名ＢＬＡＰＲのもとで販売されるプロテアーゼ変種は、バチルス・レンタスＤＳＭ  ５４８３由来のプロテアーゼから由来する。さらに使用可能なプロテアーゼは、例えば、商品名ＤｕｒａｚｙｍＲ、ＲｅｌａｓｅＲ、ＥｖｅｒｌａｓｅＲ、Ｎａｆｉｚｙｍ、ＮａｔａｌａｓｅＲ、ＫａｎｎａｓｅＲおよびＯｖｏｚｙｍｅｓＲのもとでＮｏｖｏｚｙｍｅｓから入手可能な酵素、商品名ＰｕｒａｆｅｃｔＲ、ＰｕｒａｆｅｃｔＲ  ＯｘＰ、ＰｕｒａｆｅｃｔＲ  Ｐｒｉｍｅ、ＥｘｃｅｌｌａｓｅＲおよびＰｒｏｐｅｒａｓｅＲのもとでＧｅｎｅｎｃｏｒから入手可能な酵素、商品名ＰｒｏｔｏｓｏｌＲのもとでＡｄｖａｎｃｅｄ  Ｂｉｏｃｈｅｍｉｃａｌｓ  Ｌｔｄ．，  Ｔｈａｎｅ，  Ｉｎｄｉａから入手可能な酵素、商品名ＷｕｘｉＲのもとでＷｕｘｉ  Ｓｎｙｄｅｒ  Ｂｉｏｐｒｏｄｕｃｔｓ  Ｌｔｄ．，  Ｃｈｉｎａから入手可能な酵素、商品名ＰｒｏｌｅａｔｈｅｒＲおよびＰｒｏｔｅａｓｅ  ＰＲのもとでＡｍａｎｏ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｓ  Ｌｔｄ．，  Ｎａｇｏｙａ，  Ｊａｐａｎから入手可能な酵素、および商品名プロテイナーゼＫ−１６のもとでＫａｏ  Ｃｏｒｐ．，  Ｔｏｋｙｏ，  Ｊａｐａｎから入手可能な酵素である。バチルス・ジブソニイ（Ｂａｃｉｌｌｕｓ  ｇｉｂｓｏｎｉｉ）およびバチルス・プミルス（Ｂａｃｉｌｌｕｓ  ｐｕｍｉｌｕｓ）由来のプロテアーゼもまた、特に好ましく使用され、これらは、国際特許出願第ＷＯ２００８／０８６９１６号および第ＷＯ２００７／１３１６５６号に開示されている。
【００９０】
本発明にしたがって処方可能なアミラーゼの例は、バチルス・リケミフォルミス（Ｂａｃｉｌｌｕｓ  ｌｉｃｈｅｎｉｆｏｒｍｉｓ）、バチルス・アミロリケファシエンス（Ｂ．  ａｍｙｌｏｌｉｑｕｅｆａｃｉｅｎｓ）またはバチルス・ステアロテルモフィルス（Ｂ．  ｓｔｅａｒｏｔｈｅｒｍｏｐｈｉｌｕｓ）由来のα−アミラーゼ、および洗浄または清浄剤における使用のために向上されたそのさらなる開発品である。バチルス・リケニフォルミス由来の酵素は、Ｎｏｖｏｚｙｍｅｓから、商品名ＴｅｒｍａｍｙｌＲのもとで、およびＧｅｎｅｎｃｏｒから、商品名ＰｕｒａｓｔａｒＲＳＴのもとで入手可能である。該α−アミラーゼのさらなる開発品は、Ｎｏｖｏｚｙｍｅｓから、商品名ＤｕｒａｍｙｌＲおよびＴｅｒｍａｍｙｌＲｕｌｔｒａのもとで、Ｇｅｎｅｎｃｏｒから、商品名ＰｕｒａｓｔａｒＲＯｘＡｍのもとで、およびＤａｉｗａ  Ｓｅｉｋｏ  Ｉｎｃ．，  Ｔｏｋｙｏ，  Ｊａｐａｎから、ＫｅｉｓｔａｓｅＲとして入手可能である。バチルス・アミロリケファシエンス由来のα−アミラーゼは、Ｎｏｖｏｚｙｍｅｓによって、商品名ＢＡＮＲの下で流通されており、バチルス・ステアロテルモフィルス由来のα−アミラーゼ由来の変種は、商品名ＢＳＧＲおよびＮｏｖａｍｙｌＲのもとで、同様にＮｏｖｏｚｙｍｅｓによって流通されている。
【００９１】
特に注目すべきは、さらに、該目的のために、バチルス種Ａ  ７−７（ＤＳＭ  １２３６８）由来のα−アミラーゼおよびバチルス・アガラドヘレンス（Ｂ．ａｇａｒａｄｈｅｒｅｎｓ）（ＤＳＭ  ９９４８）由来のシクロデキストリングルカノトランスフェラーゼ（ＣＧＴａｓｅ）である。さらに、国際特許出願第ＷＯ０３／００２７１１（Ａ２）号に定義されるα−アミラーゼの配列スペースに属するデンプン分解性酵素を使用してもよく、出願第ＷＯ０３／０５４１７７  Ａ２号に記載される。記載の分子の融合産物も同様に使用されうる。
【００９２】
さらに、商品名ＦｕｎｇａｍｙｌＲのもとでＮｏｖｏｚｙｍｅｓから入手可能なアスペルギルス・ニガー（Ａｓｐｅｒｇｉｌｌｕｓ  ｎｉｇｅｒ）およびアスペルギルス・オリザエ（Ａ．  ｏｒｙｚａｅ）由来のα−アミラーゼのさらなる開発品もまた、適当である。使用されうるさらなる市販品は、例えば、Ａｍｙｌａｓｅ−ＬＴＲおよびＳｔａｉｎｚｙｍｅＲまたはＳｔａｉｎｚｙｍｅ  ｕｌｔｒａＲまたはＳｔａｉｎｚｙｍｅ  ｐｌｕｓＲであり、後者は同様にＮｏｖｏｚｙｍｅｓから入手可能である。点変異によって得られうるこれらの酵素の変種もまた、本発明にしたがって使用されうる。
【００９３】
特に、トリグリセリド切断活性のためだけでなく、適当な前駆体からｉｎ ｓｉｔｕで過酸を生産するために含まれる本発明にしたがって処方可能なリパーゼまたはクチナーゼの例は、ヒュミコラ・ラヌギノサ（Ｈｕｍｉｃｏｌａ  ｌａｎｕｇｉｎｏｓａ）（テルモマイセス・ラヌギノサス（Ｔｈｅｒｍｏｍｙｃｅｓ  ｌａｎｕｇｉｎｏｓｕｓ））から入手可能またはさらに開発されたリパーゼであり、特に、アミノ酸置換Ｄ９６Ｌを有するリパーゼである。それらは、例えば、Ｎｏｖｏｚｙｍｅｓにより、商品名ＬｉｐｏｌａｓｅＲ、ＬｉｐｏｌａｓｅＲＵｌｔｒａ、ＬｉｐｏＰｒｉｍｅＲ、ＬｉｐｏｚｙｍｅＲおよびＬｉｐｅｘＲのもとで流通されている。さらに、フサリウム・ソラニ・ピシ（Ｆｕｓａｒｉｕｍ  ｓｏｌａｎｉ  ｐｉｓｉ）およびヒュミコラ・インソレンス（Ｈｕｍｉｃｏｌａ  ｉｎｓｏｌｅｎｓ）から当初単離されたクチナーゼもまた、例えば、使用可能である。同様に使用可能なリパーゼは、Ａｍａｎｏから、商品名Ｌｉｐａｓｅ  ＣＥＲ、Ｌｉｐａｓｅ  ＰＲ、Ｌｉｐａｓｅ  ＢＲ、またはＬｉｐａｓｅ  ＣＥＳＲ、Ｌｉｐａｓｅ  ＡＫＧＲ、Ｂａｃｉｌｌｕｓ  ｓｐ．  ＬｉｐａｓｅＲ、Ｌｉｐａｓｅ  ＡＰＲ、Ｌｉｐａｓｅ  Ｍ−ＡＰＲおよびＬｉｐａｓｅ  ＡＭＬＲのもとで入手可能である。例えば、使用されうるＧｅｎｅｎｃｏｒ由来のリパーゼまたはクチナーゼは、その最初の酵素がもともと、シュードモナス・メンドシナ（Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ  ｍｅｎｄｏｃｉｎａ）およびフサリウム・ソラニイ（Ｆｕｓａｒｉｕｍ  ｓｏｌａｎｉｉ）から単離されたものである。挙げられうるさらに重要な市販品は、もともとＧｉｓｔ−Ｂｒｏｃａｄｅｓによって流通された調製物Ｍ１  ＬｉｐａｓｅＲおよびＬｉｐｏｍａｘＲ、およびＭｅｉｔｏ  Ｓａｎｇｙｏ  ＫＫ，  Ｊａｐａｎによって商品名Ｌｉｐａｓｅ  ＭＹ−３０Ｒ、Ｌｉｐａｓｅ  ＯＦＲおよびＬｉｐａｓｅ  ＰＬＲのもとで流通された酵素であり、Ｇｅｎｅｎｃｏｒ由来の製品ＬｕｍａｆａｓｔＲであってもよい。
【００９４】
洗浄または清浄剤は、さらに、意図される目的によって、純粋な酵素として、酵素調製物として、または個々の成分がその種々の性能に関して互いに有益に補足する混合物の形態で、セルラーゼを含有していてもよい。これらの性能は、特に、該剤の一次または二次的洗浄性能（再付着防止作用または灰色化阻害）に対する寄与、仕上がり（ファブリック作用）に対する寄与、および「ストーン・ウォッシュ」効果の提供に対する寄与さえも包含する。
【００９５】
高いエンドグルカナーゼ（ＥＧ）含量を有する１の使用可能な真菌セルラーゼ調製物またはそのさらなる開発品は、Ｎｏｖｏｚｙｍｅｓにより、商品名ＣｅｌｌｕｚｙｍｅＲのもとで販売に供される。同様にＮｏｖｏｚｙｍｅｓから入手可能な製品ＥｎｄｏｌａｓｅＲおよびＣａｒｅｚｙｍｅＲは、ヒュミコラ・インソレンス（Ｈ．ｉｎｓｏｌｅｎｓ）ＤＳＭ  １８００由来の５０ｋＤ  ＥＧまたは４３ｋＤ  ＥＧに基づく。該会社由来のさらに可能な市販品は、ＣｅｌｌｕｓｏｆｔＲ、ＲｅｎｏｚｙｍｅＲおよびＣｅｌｌｕｃｌｅａｎＲである。ＡＢ  Ｅｎｚｙｍｅｓ，  Ｆｉｎｌａｎｄから、商品名ＥｃｏｓｔｏｎｅＲおよびＢｉｏｔｏｕｃｈＲのもとで入手可能であるメラノカルプス（Ｍｅｌａｎｏｃａｒｐｕｓ）由来の２０ｋＤ  ＥＧセルラーゼもまた、使用されうる。ＡＢ  Ｅｎｚｙｍｅｓ由来のさらなる市販品は、ＥｃｏｎａｓｅＲおよびＥｃｏｐｕｌｐＲである。さらに適当なセルラーゼは、バチルス種ＣＢＳ  ６７０．９３およびＣＢＳ  ６６９．９３から入手可能であり、バチルス種ＣＢＳ  ６７０．９３由来の１つは、Ｇｅｎｅｎｃｏｒから、商品名ＰｕｒａｄａｘＲのもとで入手可能である。Ｇｅｎｅｎｃｏｒ由来のさらなる市販品
は、「Ｇｅｎｅｎｃｏｒ  ｄｅｔｅｒｇｅｎｔ  ｃｅｌｌｕｌａｓｅ  Ｌ」およびＩｎｄｉＡｇｅＲＮｅｕｔｒａである。
【００９６】
ヘミセルラーゼなる用語によって包含されるさらなる酵素は、さらに、特に問題となる汚れを除去するために使用されうる。これらは、例えば、マンナナーゼ、キサンタンリアーゼ、ペクチンリアーゼ（＝ペクチナーゼ）、ペクチンエステラーゼ、ペクテートリアーゼ、キシログルカナーゼ（＝キシラナーゼ）、プルラナーゼおよびβ−グルカナーゼを包含する。この点において適当なマンナナーゼは、例えば、商品名ＧａｍａｎａｓｅＲおよびＰｅｋｔｉｎｅｘ  ＡＲＲのもとでＮｏｖｏｚｙｍｅｓから、商品名ＲｏｈａｐｅｃＲＢ１ＬのもとでＡＢ  Ｅｎｚｙｍｅｓから、商品名ＰｙｒｏｌａｓｅＲのもとでＤｉｖｅｒｓａ  Ｃｏｒｐ．，  Ｓａｎ  Ｄｉｅｇｏ，  ＣＡ，  ＵＳＡから入手可能である。バチルス・スブチリス（Ｂａｃｉｌｌｕｓ  ｓｕｂｔｉｌｉｓ）から単離されたβ−グルカナーゼは、商品名ＣｅｒｅｆｌｏＲのもとでＮｏｖｏｚｙｍｅｓから入手可能である。本発明にしたがって特に好ましいヘミセルラーゼは、マンナナーゼであり、例えば、商品名Ｍａｎｎａｗａｙ（Ｒ）のもとでＮｏｖｏｚｙｍｅｓによって、またはＰｕｒａｂｒｉｔｅＲのもとでＧｅｎｅｎｃｏｒによって流通されている。
【００９７】
漂白作用を増加させるために、本発明の剤は、また、オキシドレダクターゼ、例えば、オキシダーゼ、オキシゲナーゼ、カタラーゼ（低Ｈ２Ｏ２濃度でペルオキシダーゼとして反応する）、ペルオキシダーゼ、例えば、ハロ−、クロロ−、ブロモ−、リグニン、グルコースまたはマンガンペルオキシダーゼ、ジオキシゲナーゼまたはラッカーゼ（フェノールオキシダーゼ、ポリフェノールオキシダーゼ）を含有していてもよい。挙げられうる適当な市販品は、Ｎｏｖｏｚｙｍｅｓ由来のＤｅｎｉｌｉｔｅＲ１および２であってもよい。例えば、酵素的過加水分解のために有益に使用されうる系について、出願ＷＯ  ９８／４５３９８  Ａ１、ＷＯ  ２００５／０５６７８２  Ａ２およびＷＯ  ２００４／０５８９６１  Ａ１を参照のこと。オキシダーゼおよびペルヒドロラーゼを含む合わせた酵素的漂白系は、出願ＷＯ  ２００５／１２４０１２に記載される。また、該オキシドレダクターゼの活性を増強するために（増強剤）、または酸化酵素と汚れとの間の酸化還元電位における大きな差の事象において、電子流を確保するために（メディエーター）、有利には、化合物、好ましくは有機化合物、特に好ましくは該酵素と相互作用する芳香族化合物が添加される。
【００９８】
本発明にしたがって使用される酵素は、もともと、微生物、例えば、バチルス属、ストレプトマイセス属、ヒュミコラ属またはシュードモナス属由来であり、および／または適当な微生物によって、自体公知のバイオテクノロジー法、例えば、バチルス属由来のトランスジェニック発現宿主によって、または糸状菌によって生産される。該酵素は、好ましくは、自体確立された方法、例えば、沈澱、沈降、濃縮、液体相の濾過、ミクロ濾過、限外濾過、化学的作用、脱臭またはこれらの工程の適当な組み合わせによって精製される。該酵素は、さらに、例えば発酵に由来する、付随の物質、または安定化剤と一緒に処方されてもよい。
【００９９】
本発明はまた、織物または硬表面から汚れ、特にプロテアーゼ感受性の汚れを除去するための、すなわち、織物または硬表面を清浄するための、本発明の洗浄または清浄剤の使用を独立して提供する。
【０１００】
これは、本発明の剤が、特に、含有されるプロテアーゼとホスホネートの組み合わせのおかげで、対応する汚れを織物または硬表面から除去するために有利に使用されうるためである。本発明の該態様の具体例は、例えば、織物または硬表面からの染みの手洗いによる手仕事での除去、または機械方法に関連する使用を包含する。
【０１０１】
本発明の洗浄または清浄剤に関して記載された全ての因子、態様および具体例は、また、本発明の該態様に適用可能である。したがって、この点において、対応する点における開示が明らかに参照され、それは、該開示がまた、本発明の上記の使用に適用されることを指摘している。
【０１０２】
本発明は、また、さらに、本発明の洗浄または清浄剤が方法の少なくとも１工程において使用される織物または硬表面を清浄するための方法を提供する。織物または硬表面を清浄するための方法は、したがって、少なくとも１つの方法工程において本発明の洗浄または清浄剤が使用されることを特徴とする。
【０１０３】
これらは、手仕事および機械を用いる方法の両方を包含し、例えば、使用量および曝露時間に関してより正確に調節可能なので、機械方法が好ましい。
【０１０４】
織物を清浄する方法は、一般に、２以上の方法工程において、清浄作用を有する種々の物質が清浄されるべき物質上に塗布され、曝露時間後、洗い去られることにおいて、または清浄されるべき物質がいくつかの他の方法で洗浄剤または該剤の溶液もしくは希釈液で処理されることにおいて区別される。同じことが、織物以外の全ての物質、特に硬表面を清浄する方法に当てはまる。いずれの考えられうる洗浄または清浄方法が、方法工程の少なくとも１つにおいて、本発明の洗浄または清浄剤の適用によって増強され得、次いで、本発明の具体例を構成する。
【０１０５】
本発明の洗浄または清浄剤のために記載された全ての因子、態様および具体例は、また、本発明の該態様に適用できる。したがって、この点において、対応する点における開示が明らかに参照され、それは、該開示がまた、本発明の上記の方法に適用されることを指摘している。
【０１０６】
１の好ましい具体例において、該方法は、ホスホネートが洗浄液中、０．０００７５〜０．０５重量％の濃度で存在し、および／またはプロテアーゼが洗浄液中、０．０００５〜０．０３重量％の濃度で存在することを特徴とする。洗浄液中に存在するホスホネートのさらに好ましい濃度は、０．０００７５〜０．０１１２５重量％、０．００１〜０．０３５重量％、０．００２〜０．０１１２５重量％または０．００３７５〜０．００７５重量％である。洗浄液中に存在するプロテアーゼのさらに好ましい濃度は、０．０００７５〜０．０３重量％または０．０００７７〜０．０２８重量％である。
【０１０７】
さらに好ましい具体例において、該方法は、１０℃〜６０℃、１０℃〜５５℃、１０℃〜５０℃、１０℃〜４０℃または２０℃〜４０℃の温度で実施されることを特徴とする。
【０１０８】
本発明の剤において使用されるプロテアーゼは、上記の説明にしたがって、本発明の洗浄および清浄剤ならびに方法、特に洗浄および清浄方法において有益に使用されうる。かくして、それらは、対応する剤においてタンパク質分解活性を提供するために有益に使用されうる。
【０１０９】
したがって、本発明は、さらに、ホスホネートをさらに含む液体洗浄または清浄剤においてタンパク質分解活性を提供するための、
（ａ１）配列番号１に示されるアミノ酸配列と少なくとも８０％同一であって、配列番号１の番号付けにおいて９９位に、アミノ酸グルタミン酸（Ｅ）またはアスパラギン酸（Ｄ）を含むアミノ酸配列を含み、または
（ａ２）配列番号１に示されるアミノ酸配列と少なくとも８０％同一であって、配列番号１の番号付けにおいて９９位に、アミノ酸アスパラギン（Ｎ）またはグルタミン（Ｑ）を含むアミノ酸配列を含み、または
（ａ３）配列番号１に示されるアミノ酸配列と少なくとも８０％同一であって、配列番号１の番号付けにおいて９９位に、アミノ酸アラニン（Ａ）またはグリシン（Ｇ）またはセリン（Ｓ）を含むアミノ酸配列を含む
プロテアーゼの使用を提供する。
【０１１０】
本発明のさらなる具体例において、該使用は、配列番号１にしたがう番号付けにおいて、プロテアーゼがさらに、下記のアミノ酸：
（ａ）３位にスレオニン（３Ｔ）、
（ｂ）４位にイソロイシン（４Ｉ）、
（ｃ）６１位にアラニン、スレオニンまたはアルギニン（６１Ａ、６１Ｔまたは６１Ｒ）、
（ｄ）１５４位にアスパラギン酸またはグルタミン酸（１５４Ｄまたは１５４Ｅ）、
（ｅ）１８８位にプロリン（１８８Ｐ）、
（ｆ）１９３位にメチオニン（１９３Ｍ）、
（ｇ）１９９位にイソロイシン（１９９Ｉ）、
（ｈ）２１１位にアスパラギン酸、グルタミン酸またはグリシン（２１１Ｄ、２１１Ｅまたは２１１Ｇ）、
（ｉ）アミノ酸（ａ）〜（ｈ）の組み合わせ
のうち少なくとも１つを含むことを特徴とする。
【０１１１】
本発明は、さらに、ホスホネートをさらに含む液体洗浄または清浄剤においてタンパク質分解活性を提供するための、
ａ．配列番号２または配列番号３または配列番号４または配列番号５または配列番号６または配列番号７または配列番号８のアミノ酸配列を含むプロテアーゼ；
ｂ．配列番号２または配列番号３または配列番号４または配列番号５または配列番号６または配列番号７または配列番号８に対して、少なくとも１つの位置において修飾されたアミノ酸配列を含むプロテアーゼであって、該修飾が配列番号１の番号付けにおいて、
ｉ．３位のスレオニン（３Ｔ）、
ｉｉ．４位のイソロイシン（４Ｉ）、
ｉｉｉ．６１位のアラニン、スレオニンまたはアルギニン（６１Ａ、６１Ｔまたは６１Ｒ）、
ｉｖ．１５４位のアスパラギン酸またはグルタミン酸（１５４Ｄまたは１５４Ｅ）、
ｖ．１８８位のプロリン（１８８Ｐ）、
ｖｉ．１９３位のメチオニン（１９３Ｍ）、
ｖｉｉ．１９９位のイソロイシン（１９９Ｉ）、
ｖｉｉｉ．２１１位のアスパラギン酸、グルタミン酸またはグリシン（２１１Ｄ、２１１Ｅまたは２１１Ｇ）、
ｉｘ．アミノ酸（ｉ）〜（ｖｉｉｉ）の組み合わせ
からなる群から選択されるプロテアーゼ
からなる群から選択されるプロテアーゼの使用を提供する。
【０１１２】
本発明の洗浄または清浄剤に関して記載された全ての因子、態様および具体例は、また、記載される使用に適用可能である。したがって、この点において、対応する点における開示が明らかに参照され、それは、該開示がまた、本発明の上記の使用に適用されることを指摘している。
【実施例】
【０１１３】
分子生物学的手法は全て、例えば、Ｆｒｉｔｓｃｈ，  ＳａｍｂｒｏｏｋおよびＭａｎｉａｔｉｓ  ”Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  ｃｌｏｎｉｎｇ：  ａ  ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ  ｍａｎｕａｌ”，  Ｃｏｌｄ  Ｓｐｒｉｎｇ  Ｈａｒｂｏｒ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ  Ｐｒｅｓｓ，  Ｎｅｗ  Ｙｏｒｋ，  １９８９によるマニュアルまたは比較関連研究において示されるような標準方法にしたがう。酵素およびキットは、各製造者によって示されるように使用された。
【０１１４】
実施例１
本発明の液体洗浄剤の清浄性能の決定
該実施例の場合、ＥＭＰＡ  Ｔｅｓｔｍａｔｅｒｉａｌｉｅｎ  ＡＧ（Ｓｔ．  Ｇａｌｌｅｎ，  Ｓｗｉｔｚｅｒｌａｎｄ）、ｗｆｋ  Ｔｅｓｔｇｅｗｅｂｅ  ＧｍｂＨ（Ｂｒｕｅｇｇｅｎ−Ｂｒａｃｈｔ，  Ｇｅｒｍａｎｙ）またはＣｅｎｔｅｒ  Ｆｏｒ  Ｔｅｓｔｍａｔｅｒｉａｌｓ（ＣＦＴ，  Ｖｌａａｒｄｉｎｇｅｎ，  Ｎｅｔｈｅｒｌａｎｄｓ）から入手された標準的汚れを有する織物を用いた。下記の汚れおよび織物を用いた。
Ａ：綿上の草：Ｅｉｄｇｅｎｏｅｓｓｉｓｃｈｅ  Ｍａｔｅｒｉａｌ−  ｕｎｄ  Ｐｒｕｅｆａｎｓｔａｌｔ（ＥＭＰＡ）  Ｔｅｓｔｍａｔｅｒｉａｌｉｅｎ  ＡＧ，  Ｓｔ．  Ｇａｌｌｅｎ，  Ｓｗｉｔｚｅｒｌａｎｄ由来のプロダクト番号１６４。
Ｂ：ポリエステル／綿上の落花生油−染料／インク：ＣＦＴ（Ｃｅｎｔｅｒ  Ｆｏｒ  Ｔｅｓｔｍａｔｅｒｉａｌｓ）  Ｂ．Ｖ．  Ｖｌａａｒｄｉｎｇｅｎ，  Ｎｅｔｈｅｒｌａｎｄｓ由来のプロダクト番号ＰＣ−１０。
Ｃ：ｗｆｋ  Ｔｅｓｔｇｅｗｅｂｅ  ＧｍｂＨ；  Ｂｒｕｅｇｇｅｎ−Ｂｒａｃｈｔ，  Ｇｅｒｍａｎｙ由来の綿上の全卵／染料（全卵／煤煙）：プロダクト番号１０Ｎ。
Ｄ：ＣＦＴ（Ｃｅｎｔｅｒ  Ｆｏｒ  Ｔｅｓｔｍａｔｅｒｉａｌｓ）  Ｂ．Ｖ．  Ｖｌａａｒｄｉｎｇｅｎ，  Ｎｅｔｈｅｒｌａｎｄｓから入手可能な綿上の血液−ミルク／インク：プロダクト番号Ｃ−０５。
【０１１５】
該試験材料を用いて、種々の洗浄剤をその清浄性能について調べた。該目的のために、該処方は、４０℃または２０℃にて６０分間洗浄された。添加率は、洗浄液１リットル当たり洗浄剤７．４グラムであった。硬度が約１６°ｄＨ（ドイツ硬度）の主要水（main water）を用いて洗浄を行った。上記表１に示される洗浄剤ベース処方を洗浄剤として用いた。
【０１１６】
該洗浄剤ベース処方は、種々の一連の試験のために、同一活性にて、下記のプロテアーゼ、すなわち、配列番号２のアミノ酸配列を含むプロテアーゼ（処方１）、ＷＯ  ９５／２３２２１にしたがうバチルス・レンタス由来のプロテアーゼの性能増強変種Ｆ４９（処方２）および国際公開特許出願ＷＯ０３／０５７７１３の図２または配列番号３に開示されるプロテアーゼ（処方３）と組み合わされた（最終濃度５ＰＵ／ｍｌ）。
【０１１７】
洗浄後、洗浄された織物の白さの度合いを測定した。測定は、Ｍｉｎｏｌｔａ  ＣＭ５０８ｄ分光光度計（ｉｌｌｕｍｉｎａｎｔ  Ｄ６５，  １０°）を用いて実施した。該装置は、供給された白さ標準を用いて予め較正された。得られた結果は、プロテアーゼを含有する洗浄剤を用いる洗浄工程と、プロテアーゼを含有しない洗浄剤を用いて実施されたパラレルな対照洗浄操作との間の差次的な反射値である。結果を下記の表２に示し、該結果により、各場合における含有される酵素の、使用される剤の清浄性能への寄与に関して、直接的な結論が引き出される。
【表２】
2013504676.tif 000003
【０１１８】
本発明の洗浄剤が非常に良好な清浄性能を示すことが明らかであり、実際に、ほとんどの種類の汚れに対して、処方２および３の洗浄剤よりも良好な清浄性能を示す。
【０１１９】
実施例２
本発明の液体自動食器洗浄剤の清浄性能の決定
硬い滑らかな表面を有する容器に、標準化された方法において、各汚れを供し、従来の市販の家庭用食器洗浄機を用いて４０℃および５０℃で洗浄した。各洗浄サイクルは、液体またはゲル形態の従来の市販の２．４重量％ホスホネート（ＨＥＤＰ）を含有する自動食器洗浄剤３０ｍｌを用いて行った。洗浄は、硬度が約２１°  ｄＨ（ドイツ硬度）である主要水を用いて行った。使用されたプロテアーゼは、Ｓａｖｉｎａｓｅ  ｕｌｔｒａ  １６Ｌ（Ｎｏｖｏｚｙｍｅｓ，処方１）および配列番号２のアミノ酸配列を含む本発明のプロテアーゼ（処方２）であった。該プロテアーゼは、酵素タンパク質に対して同一の重量で使用された（清浄剤３０ｍｌあたり、０．６８ｇ  Ｓａｖｉｎａｓｅ  ｕｌｔｒａ  １６Ｌまたは同一重量の本発明のプロテアーゼの酵素タンパク質）。
【０１２０】
洗浄後、汚れの除去は、重量測定によって（卵黄）または視覚によって（さらに、表３の汚れ）決定された。重量測定による決定は、汚れた容器の重量と洗浄した容器（卵黄を除去した）の重量との間の差を決定することによって行い、該差は、下記の式にしたがって、もともと塗られた卵黄の量に関連する：％清浄性能＝（除去された卵黄ｍｇ／塗られた卵黄ｍｇ）×１００。視覚的決定は、経験のある査定者がパーセンテージスケールに対して、汚れ除去を視覚的にランク付けすることによって行われた。結果を下記の表３に示し、該結果により、各場合における含有される酵素の、使用される剤の清浄性能への寄与に関して、直接的な結論が引き出される。
【表３】
2013504676.tif 000004
【０１２１】
本発明の液体自動食器洗浄剤が非常に良好な清浄性能を示すことは明らかであり、実際、特に卵黄の汚れに対して、処方１の食器洗浄剤よりも明確に良好である。
【０１２２】
実施例３
本発明の液体洗浄剤の貯蔵安定性の決定
実施例１の処方１および２の洗浄剤を貯蔵安定性について試験した。この目的を達成するために、該洗浄剤を各ケースにおいて、３０℃で記載の期間保管し、基質からのクロモフォアパラ−ニトロアニリン（ＰＮＡ）の遊離に基づいて、各々の残留タンパク質分解活性を決定した。該基質は、ｓｕｃ−Ｌ−Ａｌａ−Ｌ−Ａｌａ−Ｌ−Ｐｒｏ−Ｌ−Ｐｈｅ−ｐ−ニトロアニリド（ｓｕｃ−ＡＡＰＦ−ｐＮＡ）である。プロテアーゼは、基質を分解し、ｐＮＡを遊離する。ＰＮＡの遊離は、４１０ｎｍの吸光度の増加をもたらし、その時間プロフィールは、酵素活性の測定値である（Ｄｅｌ  Ｍａｒら、１９７９参照）。該測定は、２５℃の温度にて、ｐＨ８．６および波長４１０ｎｍにて行われた。測定時間は、測定間隔２０秒〜６０秒にて５分であった。得られた残留活性値を下記の表４に示す。
【表４】
2013504676.tif 000005
【０１２３】
処方２の洗浄剤と比べて、本発明の洗浄剤が明確に改善された貯蔵安定性を示すことは明らかである。本発明の洗浄剤は、１週間後に１５１％高い、２週間後に２１１％高いタンパク質分解活性を示す。
【配列表】
2013504676000001.app
【手続補正書】
【提出日】平成24年5月8日(2012.5.8)
【手続補正１】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】配列表
【補正方法】変更
【補正の内容】
【配列表】
2013504676000001.app
【国際調査報告】
2013504676.tif 000006
2013504676.tif 000007
2013504676.tif 000008
2013504676.tif 000009
2013504676.tif 000010