(57)【要約】  本発明は、脳特異的タンパク質Ｓ−１００に対する活性化増強型抗体と内皮ＮＯ合成酵素に対する活性化増強型抗体とを投与することによって、アルツハイマー病を治療する方法に関する。【特許請求の範囲】
【請求項１】
アルツハイマー病を治療する方法であって、ａ）脳特異的タンパク質Ｓ−１００に対する活性化増強型抗体とｂ）内皮ＮＯ合成酵素に対する活性化増強型抗体とを含む組み合わせ医薬組成物を投与することを含むことを特徴とする方法。
【請求項２】
脳特異的タンパク質Ｓ−１００に対する活性化増強型抗体が、ウシの脳特異的タンパク質Ｓ−１００全体に対する活性化増強型抗体である請求項１に記載の方法。
【請求項３】
脳特異的タンパク質Ｓ−１００に対する活性化増強型抗体が、配列番号９、配列番号１０、配列番号１１、又は配列番号１２を有する脳特異的タンパク質Ｓ−１００に対する活性化増強型抗体である請求項１に記載の方法。
【請求項４】
内皮ＮＯ合成酵素に対する活性化増強型抗体が、ウシＮＯ合成酵素全体に対する活性化増強型抗体である請求項１に記載の方法。
【請求項５】
内皮ＮＯ合成酵素に対する活性化増強型抗体が、ヒトＮＯ合成酵素全体に対する活性化増強型抗体である請求項１に記載の方法。
【請求項６】
脳特異的タンパク質Ｓ−１００に対する活性化増強型抗体が、固体担体に浸透させたＣ１２、Ｃ３０、及びＣ５０ホメオパシー希釈物の混合物の形態であり、且つ内皮ＮＯ合成酵素に対する活性化増強型抗体が、前記固体担体に浸透させたＣ１２、Ｃ３０、及びＣ５０ホメオパシー希釈物の混合物の形態である請求項１に記載の方法。
【請求項７】
脳特異的タンパク質Ｓ−１００に対する活性化増強型抗体が、固体担体に浸透させたＣ１２、Ｃ３０、及びＣ２００ホメオパシー希釈物の混合物の形態であり、且つ内皮ＮＯ合成酵素に対する活性化増強型抗体が、前記固体担体に浸透させたＣ１２、Ｃ３０、及びＣ２００ホメオパシー希釈物の混合物の形態である請求項１に記載の方法。
【請求項８】
内皮ＮＯ合成酵素に対する活性化増強型抗体が、固体担体に浸透させたＣ１２、Ｃ３０、及びＣ５０ホメオパシー希釈物の混合物の形態であり、且つ脳特異的タンパク質Ｓ−１００に対する活性化増強型抗体が、前記固体担体に浸透させたＣ１２、Ｃ３０、及びＣ５０ホメオパシー希釈物の混合物の形態である請求項１に記載の方法。
【請求項９】
内皮ＮＯ合成酵素に対する活性化増強型抗体が、固体担体に浸透させたＣ１２、Ｃ３０、及びＣ２００ホメオパシー希釈物の混合物の形態であり、且つ脳特異的タンパク質Ｓ−１００に対する活性化増強型抗体が、前記固体担体に浸透させたＣ１２、Ｃ３０、及びＣ２００ホメオパシー希釈物の混合物の形態である請求項１に記載の方法。
【請求項１０】
脳特異的タンパク質Ｓ−１００に対する活性化増強型抗体が、モノクローナル抗体、ポリクローナル抗体、又は天然抗体である請求項１に記載の方法。
【請求項１１】
脳特異的タンパク質Ｓ−１００に対する活性化増強型抗体が、ポリクローナル抗体である請求項１０に記載の方法。
【請求項１２】
脳特異的タンパク質Ｓ−１００に対する活性化増強型抗体が、希釈するごとに振盪しながら連続的に１００倍希釈することにより調製される請求項１に記載の方法。
【請求項１３】
内皮ＮＯ合成酵素に対する活性化増強型抗体が、モノクローナル抗体、ポリクローナル抗体、又は天然抗体である請求項１に記載の方法。
【請求項１４】
内皮ＮＯ合成酵素に対する活性化増強型抗体が、ポリクローナル抗体である請求項１３に記載の方法。
【請求項１５】
内皮ＮＯ合成酵素に対する活性化増強型抗体が、希釈するごとに振盪しながら連続的に１００倍希釈することにより調製される請求項１に記載の方法。
【請求項１６】
組み合わせ医薬組成物が、１つから２つの単位剤形で投与され、前記剤形のそれぞれが１日間に１回から１日間に６回投与される請求項１に記載の方法。
【請求項１７】
組み合わせ医薬組成物が、１つから２つの単位剤形で投与され、前記剤形のそれぞれが１日間に２回投与される請求項１６に記載の方法。
【請求項１８】
請求項１に記載の組み合わせ医薬組成物を投与することによって、ＭＭＳＥスコアの上昇によって示される認知機能を改善することを特徴とする方法。
【請求項１９】
アルツハイマー病に罹っている患者の治療に使用するための医薬組成物であって、ホメオパシーの技術に従って、連続して繰り返し希釈し、得られた溶液をそれぞれ多数回振盪することによってそれぞれ調製されるａ）脳特異的タンパク質Ｓ−１００に対する活性化増強型抗体及びｂ）内皮ＮＯ合成酵素に対する活性化増強型抗体の増強溶液を提供し、次いで、混合することによって前記増強溶液を組み合わせるか、あるいは、担体塊に組み合わせた前記増強溶液を浸透させるか又は前記増強溶液を別々に浸透させることによって得られることを特徴とする医薬組成物。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、医学分野に関し、アルツハイマー病を治療するために用いることができる。
【背景技術】
【０００２】
アルツハイマー病（ＡＤ）は、神経変性疾患であり、認知機能の障害、記憶喪失、精神錯乱、感情制御の低下、及び認知症（過去に知っていた情報を覚えておくことができない又は新たな情報を覚えることができないという進行性の記憶力低下）を特徴とする。ＡＤの発現の主要な原因は、脳組織におけるベータ−アミロイドプラーク及び神経原線維球の形成を導くベータアミロイドの蓄積であると考えられている。また、ＡＤは、コリン作動系の欠陥も伴う。学習及び記憶の障害は、アセチルコリンの伝達に干渉することが知られているコリン作動性アンタゴニストであるスコポラミンによって、実験動物において化学的に誘導することができる。スコポラミン誘導性記憶喪失の実験動物モデルは、潜在的な認知症治療効果を有する化合物をスクリーニングするために広く用いられている。
【０００３】
脳特異的タンパク質Ｓ−１００に対する抗血清に基づく向神経薬が当技術分野において公知である（特許文献１）。
【０００４】
ホメオパシー技術によって増強された極度に希釈された型（又は超低型）（活性化増強型）の抗体の治療効果は、本特許出願の発明者、Ｄｒ．Ｏｌｅｇ  Ｉ．Ｅｐｓｈｔｅｉｎによって発見された。特許文献２は、ホメオパシーによって活性化された型の、前立腺特異的抗原（ＰＳＡ）に対する抗体の投与によって、良性前立腺肥大症又は前立腺炎を治療するための医薬を開示している。特許文献３は、ホメオパシーによって増強された型の、内皮ＮＯ合成酵素に対する抗体を開示する。
【０００５】
Ｓ−１００タンパク質は、主に脳の灰白質、特にグリア及びシュワン細胞でみられる細胞質酸性カルシウム結合タンパク質である。このタンパク質は、２つの免疫学的に異なるサブユニットα及びβからなる幾つかのホモ二量体又はヘテロ二量体のアイソフォームで存在する。Ｓ−１００タンパク質は、脳卒中等の脳の傷害による脳病変及び神経損傷の診断及び評価における支援手段としての用途が提唱されている（非特許文献１、参照することにより本願に援用される）。
【０００６】
超低用量のＳ−１００タンパク質に対する抗体は、抗不安、抗無力、抗攻撃、ストレス保護、抗低酸素、抗虚血、神経保護、及び向知性の活性を有することが示されている（非特許文献２〜４、全て参照することにより本願に援用される）。
【０００７】
一酸化窒素（ＮＯ）は、種々の生物学的プロセスのシグナル伝達において作用することが示されている気体分子である。内皮由来のＮＯは、血管緊張の調節において重要な分子であり、それと血管疾患との関連性は長く認識されてきた。ＮＯは、単球接着、血小板凝集及び血管平滑筋細胞の増殖を含めた、動脈硬化巣の形成に関与することが知られている多くのプロセスを阻害する。内皮ＮＯの別の重要な役割は、血管壁を、それ自体の代謝生成物、及び脂質及びリポタンパク質の酸化生成物によって誘導される酸化ストレスから防御することである。アテローム性動脈硬化症の非常に早い段階で内皮の機能不全が生じる。したがって、局所的なＮＯの利用ができないことが、ヒトにおけるアテローム発生を加速する最終的な一般的な経路になり得る可能性がある。血管内皮におけるその役割に加えて、ＮＯの利用可能性によってリポタンパク質の代謝が調節されることが示されている。ＮＯ代謝生成物の血漿中濃度と、血漿中の総コレステロールレベル及び低密度リポタンパク質［ＬＤＬ］コレステロールレベルとの間には負の相関が報告されているが、高密度リポタンパク質［ＨＤＬ］は高コレステロール血症の被験体における血管の機能を改善する。ＮＯの損失は、疾患の発生にかなりの影響を及ぼす。糖尿病は、主にアテローム動脈硬化性疾患の発生が加速することによって引き起こされる罹患率及び死亡率の上昇を伴う。更に、報告により、糖尿病患者の肺機能が損なわれることが示されている。インスリン抵抗性により気道炎症が導かれることが提唱されている（非特許文献５）。
【０００８】
一酸化窒素は、内皮でＬ−アルギニンから一酸化窒素合成酵素（ＮＯ合成酵素）によって合成される。ＮＯ合成酵素は、構成型（ｃＮＯＳ）及び誘導型（ｉＮＯＳ）を含めた種々のアイソフォームで生じる。構成型は、正常な内皮細胞、ニューロン及びいくつかの他の組織に存在する。
【０００９】
アルツハイマー病等の神経変性疾患を治療するための望ましい治療効果を有する新規医薬品が継続して必要とされている。
【先行技術文献】
【特許文献】
【００１０】
【特許文献１】露国特許第２１５６６２１号明細書
【特許文献２】米国特許第７，５８２，２９４号明細書
【特許文献３】米国特許第７，７００，０９６号明細書
【非特許文献】
【００１１】
【非特許文献１】Ｙａｒｄａｎ  ｅｔ  ａｌ．，Ｕｓｅｆｕｌｎｅｓｓ  ｏｆ  Ｓ１００Ｂ  Ｐｒｏｔｅｉｎ  ｉｎ  Ｎｅｕｒｏｌｏｇｉｃａｌ  Ｄｉｓｏｒｄｅｒｓ，Ｊ  Ｐａｋ  Ｍｅｄ  Ａｓｓｏｃ  Ｖｏｌ．６１，Ｎｏ．３，Ｍａｒｃｈ  ２０１１
【非特許文献２】Ｃａｓｔａｇｎｅ  Ｖ．ｅｔ  ａｌ．，Ａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ  ｔｏ  Ｓ１００  ｐｒｏｔｅｉｎｓ  ｈａｖｅ  ａｎｘｉｏｌｙｔｉｃ−ｌｉｋｅ  ａｃｔｉｖｉｔｙ  ａｔ  ｕｌｔｒａ−ｌｏｗ  ｄｏｓｅｓ  ｉｎ  ｔｈｅ  ａｄｕｌｔ  ｒａｔ，Ｊ  Ｐｈａｒｍ  Ｐｈａｒｍａｃｏｌ．２００８，６０（３）：３０９−１６
【非特許文献３】Ｅｐｓｈｔｅｉｎ  Ｏ．Ｉ．，Ａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ  ｔｏ  ｃａｌｃｉｕｍ−ｂｉｎｄｉｎｇ  Ｓ１００Ｂ  ｐｒｏｔｅｉｎ  ｂｌｏｃｋ  ｔｈｅ  ｃｏｎｄｉｔｉｏｎｉｎｇ  ｏｆ  ｌｏｎｇ−ｔｅｒｍ  ｓｅｎｓｉｔｉｚａｔｉｏｎ  ｉｎ  ｔｈｅ  ｔｅｒｒｅｓｔｒｉａｌ  ｓｎａｉｌ，Ｐｈａｒｍａｃｏｌ  Ｂｉｏｃｈｅｍ  Ｂｅｈａｖ．，２００９，９４（１）：３７−４２
【非特許文献４】Ｖｏｒｏｎｉｎａ  Ｔ．Ａ．ｅｔ  ａｌ．，Ｃｈａｐｔｅｒ  ８．Ａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ  ｔｏ  Ｓ−１００  ｐｒｏｔｅｉｎ  ｉｎ  ａｎｘｉｅｔｙ−ｄｅｐｒｅｓｓｉｖｅ  ｄｉｓｏｒｄｅｒｓ  ｉｎ  ｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔａｌ  ａｎｄ  ｃｌｉｎｉｃａｌ  ｃｏｎｄｉｔｉｏｎｓ．Ｉｎ  “Ａｎｉｍａｌ  ｍｏｄｅｌｓ  ｉｎ  ｂｉｏｌｏｇｉｃａｌ  ｐｓｙｃｈｉａｔｒｙ”，Ｅｄ．Ｋａｌｕｅｆｆ  Ａ．Ｖ．ＮＹ，“Ｎｏｖａ  Ｓｃｉｅｎｃｅ  Ｐｕｂｌｉｓｈｅｒｓ，Ｉｎｃ．”，２００６，ｐｐ．１３７−１５２
【非特許文献５】Ｈａｂｉｂ  ｅｔ  ａｌ．，Ｎｉｔｒｉｃ  Ｏｘｉｄｅ  Ｍｅａｓｕｒｅｍｅｎｔ  Ｆｒｏｍ  Ｂｌｏｏｄ  Ｔｏ  Ｌｕｎｇｓ，Ｉｓ  Ｔｈｅｒｅ  Ａ  Ｌｉｎｋ？  Ｐａｋ  Ｊ  Ｐｈｙｓｉｏｌ  ２００７；３（１）
【発明の概要】
【００１２】
本発明は、アルツハイマー病を治療するためのより有効なレメディーを提供する。
【００１３】
本発明は、アルツハイマー病を治療する方法であって、脳特異的Ｓ−１００タンパク質に対する活性化増強型抗体と、更なる強化成分として内皮ＮＯ合成酵素に対する活性化増強型抗体とを含む医薬組成物を投与することを含む方法を提供する。
【００１４】
１つの変形例では、本発明は、脳特異的タンパク質Ｓ−１００に対する活性化増強型抗体と、内皮ＮＯ合成酵素に対する活性化増強型抗体とを含む組み合わせ医薬組成物であって、前記抗体が、Ｓ−１００タンパク質全体又はその断片に対する抗体である組み合わせ医薬組成物を提供する。
【００１５】
１つの変形例では、本発明は、脳特異的タンパク質Ｓ−１００に対する活性化増強型抗体と、内皮ＮＯ合成酵素に対する活性化増強型抗体とを含む組み合わせ医薬組成物であって、前記抗体が、内皮ＮＯ合成酵素全体又はその断片に対する抗体である組み合わせ医薬組成物を提供する。
【００１６】
１つの変形例では、本発明のこの態様の組み合わせ医薬組成物は、固体担体に浸透させた（Ｃ１２、Ｃ３０、及びＣ５０）又は（Ｃ１２、Ｃ３０、及びＣ２００）ホメオパシー希釈物の混合物の形態のＳ−１００タンパク質に対する活性化増強型抗体を含む。次いで、（Ｃ１２、Ｃ３０、及びＣ５０）又は（Ｃ１２、Ｃ３０、及びＣ２００）ホメオパシー希釈物の混合物の形態のＮＯ合成酵素に対する活性化増強型抗体を、前記固体担体に浸透させてよい。
【００１７】
１つの変形例では、本発明のこの態様の組み合わせ医薬組成物は、固体担体に浸透させた（Ｃ１２、Ｃ３０、及びＣ５０）又は（Ｃ１２、Ｃ３０、及びＣ２００）ホメオパシー希釈物の混合物の形態の内皮ＮＯ合成酵素に対する活性化増強型抗体を含む。次いで、（Ｃ１２、Ｃ３０、及びＣ５０）又は（Ｃ１２、Ｃ３０、及びＣ２００）ホメオパシー希釈物の混合物の形態のＳ−１００タンパク質に対する活性化増強型抗体を、前記固体担体に浸透させてよい。
【００１８】
好ましくは、Ｓ−１００タンパク質に対する活性化増強型抗体は、モノクローナル抗体、ポリクローナル抗体、又は天然抗体であり、より好ましくは、ポリクローナル抗体である。本発明のこの態様の１つの変形例では、Ｓ−１００タンパク質に対する活性化増強型抗体は、希釈するごとに振盪しながら連続的に１００倍希釈することにより調製される。垂直方向の振盪が特に意図されている。
【００１９】
好ましくは、内皮ＮＯ合成酵素に対する活性化増強型抗体は、モノクローナル抗体、ポリクローナル抗体、又は天然抗体であり、より好ましくは、ポリクローナル抗体である。本発明のこの態様の１つの変形例では、ＮＯ合成酵素に対する活性化増強型抗体は、希釈するごとに振盪しながら連続的に１００倍希釈することにより調製される。垂直方向の振盪が特に意図されている。
【００２０】
本発明の１つの変形例では、Ｓ−１００タンパク質に対する活性化増強型抗体の１つから２つの単位剤形と、内皮ＮＯ合成酵素に対する活性化増強型抗体の１つから２つの単位剤形とが投与され、前記剤形は、それぞれ１日間に１回から１日間に６回投与される。好ましくは、前記活性化増強型抗体のそれぞれの１つから２つの単位剤形は、１日間に２回投与される。
【発明を実施するための形態】
【００２１】
本発明は、添付の特許請求の範囲と関連して定義される。特許請求の範囲に関して、以下の用語解説によって関連する定義がもたらされる。
【００２２】
「抗体」という用語は、本明細書で使用される場合、別の分子の特定の空間的な極性の構成に特異的に結合し、それにより、それと相補的であると定義される免疫グロブリンを意味するものとする。特許請求の範囲において列挙されている抗体は、完全な免疫グロブリン又はその断片を含んでよく、天然、ポリクローナル又はモノクローナルであってよく、例えば、ＩｇＡ、ＩｇＤ、ＩｇＥ、ＩｇＧ１、ＩｇＧ２ａ、ＩｇＧ２ｂ及びＩｇＧ３、ＩｇＭ等の種々のクラス及びアイソタイプを挙げることができる。その断片としては、Ｆａｂ、Ｆｖ及びＦ（ａｂ’）２、Ｆａｂ’等を挙げることができる。単数形の「抗体（ａｎｔｉｂｏｄｙ）」は、複数形の「抗体（ａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ）」を含む。
【００２３】
「活性化増強型」又は「増強型」という用語はそれぞれ、本明細書において列挙されている抗体に関しては、任意の抗体の最初の溶液のホメオパシーポテンタイゼーション（ｐｏｔｅｎｔｉｚａｔｉｏｎ）の生成物を示すために使用される。「ホメオパシーポテンタイゼーション」とは、ホメオパシーの方法を用いて最初の関連物質の溶液にホメオパシーポーテンシーを付与することを示す。そのように限定するものではないが、「ホメオパシーポテンタイゼーション」は、例えば、連続した希釈を、外部からの処理、特に（機械的な）振盪と組み合わせて繰り返すことを伴ってよい。言い換えれば、ホメオパシーの技術に従って、抗体の最初の溶液を連続して繰り返し希釈し、得られた溶液をそれぞれ多数回、垂直方向に振盪する。溶媒、好ましくは水又は水とエチルアルコールとの混合物中の抗体の最初の溶液の好ましい濃度は、約０．５ｍｇ／ｍＬから約５．０ｍｇ／ｍＬまでにわたる。各成分、すなわち、抗体溶液を調製するための好ましい手順は、それぞれ１００倍単位ホメオパシー希釈物（Ｃ１２、Ｃ３０、及びＣ２００）に相当する、抗体の一次マトリックス溶液（母液）を１００１２倍希釈、１００３０倍希釈及び１００２００倍希釈した３種の水希釈物若しくは水−アルコール希釈物の混合物を使用することであるか、或いは、それぞれ１００倍単位ホメオパシー希釈物（Ｃ１２、Ｃ３０、及びＣ５０）に相当する、抗体の一次マトリックス溶液を１００１２倍希釈、１００３０倍希釈及び１００５０倍希釈した３種の水希釈物若しくは水−アルコール希釈物の混合物を使用することである。ホメオパシーポテンタイゼーションの例は、その全体が参照により明示された目的で本明細書に組み込まれる、米国特許第７，５７２，４４１号及び同第７，５８２，２９４号に記載されている。特許請求の範囲では「活性化増強型」という用語が使用され、実施例では「超低用量」という用語が使用される。「超低用量」という用語は、ホメオパシーにより希釈され、増強された型の物質の研究及び使用によって創出された技術分野における専門用語になった。「超低用量（ｕｌｔｒａ−ｌｏｗ  ｄｏｓｅ）」又は「超低用量（ｕｌｔｒａ−ｌｏｗ  ｄｏｓｅｓ）」という用語は、特許請求の範囲において使用される「活性化増強」型という用語を完全に支持し、それと主に同義であるものとする。
【００２４】
言い換えれば、抗体は、３つの因子が存在すれば、「活性化増強」型又は「増強」型である。第１に、「活性化増強」型抗体は、ホメオパシーの技術分野では広く受け入れられている調製プロセスの生成物である。第２に、「活性化増強」型抗体は、現代薬理学において広く受け入れられている方法によって決定される生物活性を有さなければならない。第３に、「活性化増強」型抗体により示される生物活性は、ホメオパシーのプロセスの最終生成物に分子型抗体が存在することによっては説明することができない。
【００２５】
例えば、活性化増強型抗体は、最初の、単離された分子型抗体を、機械的な振盪等の外部からの衝撃と併せて連続して多数回希釈することによって調製することができる。濃度低下の過程における外部からの処理は、例えば、超音波、電磁気、又は他の物理的因子に曝露させることによって実現することもできる。その全体が参照により明示された目的で本明細書に組み込まれるＶ．Ｓｃｈｗａｂｅ“Ｈｏｍｅｏｐａｔｈｉｃ  ｍｅｄｉｃｉｎｅｓ”Ｍ．，１９６７、米国特許第７，２２９，６４８号及び同第４，３１１，８９７号には、ホメオパシーの技術分野において広く受け入れられているホメオパシー増強の方法であるそのようなプロセスが記載されている。この手順により、最初の分子型抗体の分子濃度が均一に低下する。所望のホメオパシーポーテンシーが得られるまでこの手順を繰り返す。個々の抗体について、所要のホメオパシーポーテンシーは、中間希釈物を所望の薬理学的モデルにおいて生物学的試験に供することによって決定することができる。そのように限定するものではないが、「ホメオパシーポテンタイゼーション」は、例えば、外部からの処理、特に（機械的な）振盪と組み合わせて連続した希釈を繰り返すことを伴ってよい。言い換えれば、ホメオパシーの技術に従って、抗体の最初の溶液を連続して繰り返し希釈し、得られた溶液をそれぞれ多数回、垂直方向に振盪する。溶媒、好ましくは水又は水とエチルアルコールとの混合物中の抗体の最初の溶液の好ましい濃度は、約０．５ｍｇ／ｍＬから約５．０ｍｇ／ｍＬにわたる。各成分、すなわち、抗体溶液を調製するための好ましい手順は、それぞれ１００倍単位ホメオパシー希釈物Ｃ１２、Ｃ３０及びＣ２００に相当する、抗体の一次マトリックス溶液（母液）を１００１２倍希釈、１００３０倍希釈及び１００２００倍希釈した３種の水希釈物若しくは水−アルコール希釈物の混合物を使用すること、又は、それぞれ１００倍単位ホメオパシー希釈物Ｃ１２、Ｃ３０及びＣ５０に相当する、抗体の一次マトリックス溶液（母液）を１００１２倍希釈、１００３０倍希釈及び１００５０倍希釈した３種の水希釈物若しくは水−アルコール希釈物の混合物を使用することである。所望のポーテンシーをどのように得るかの例も、例えば、明示された目的で参照により組み込まれる、米国特許第７，２２９，６４８号及び同第４，３１１，８９７号において提供される。本明細書に記載の「活性化増強」型抗体に適用可能な手順は、下に詳しく記載されている。
【００２６】
ヒト対象のホメオパシー治療に関してはかなりの量の議論がなされてきた。本発明は、「活性化増強」型抗体を得るために、受け入れられているホメオパシーのプロセスに依拠するが、本発明は、活性を証明するためにはヒト対象におけるホメオパシー単独に依拠するのではない。驚いたことに、本出願の発明者は、認められている薬理学的モデルにおいて、出発分子型抗体を連続して多数回希釈することから最終的に得られた溶媒が、標的希釈物中に分子型抗体の痕跡が存在することとは無関係の決定的な活性を有することを発見し、十分に実証した。本明細書で提供される「活性化増強」型抗体を、生物活性について、広く受け入れられている活性の薬理学的モデルにおいて、適切なインビトロ実験において、又は適切な動物モデルにおいてインビボで試験した。更に以下に提供される実験により、そのようなモデルにおける生物活性の証拠がもたらされた。同様に以下に本明細書で提供されるヒトの臨床研究は、動物モデルにおいて観察された活性が、ヒトの療法によく翻訳されるという証拠を提供する。ヒト研究によって、医科学において病的状態として広く認められている特定のヒトの疾患又は障害を治療するための、本明細書に記載の「活性化増強」型の利用可能性の証拠ももたらされる。
【００２７】
また、特許請求された「活性化増強」型抗体は、その生物活性が、最初の出発溶液から残っている分子型抗体が存在することによっては説明することができない溶液又は固体調製物のみを包含する。言い換えれば、「活性化増強」型抗体は、最初の分子型抗体の痕跡を含有してよいことが意図されているが、連続して希釈した後に残った分子型抗体は非常に低濃度であるので、当業者は、認められている薬理学的モデルにおいて観察される生物活性が、いかなる程度の妥当性でも残りの分子型抗体に起因すると考えることができない。本発明は特定の理論に限定されるものではないが、本発明の「活性化増強」型抗体の生物活性は、最初の分子型抗体には起因しない。その中に含まれる最初の分子型抗体の濃度が、認められている分析的な技法、例えば、キャピラリー電気泳動及び高速液体クロマトグラフィー等の検出限界を下回る、液体又は固体の形態の「活性化増強」型抗体が好ましい。その中に含まれる最初の分子型抗体の濃度がアボガトロ数未満である液体又は固体の形態の「活性化増強」型抗体が特に好ましい。分子型の治療用物質の薬理学において、薬理学的反応のレベルが、対象に投与される、又はインビトロで試験される活性薬物の濃度に対してプロットされた用量反応曲線を作成することは一般的である。任意の検出可能な反応を生じる薬物の最小レベルは、閾値用量として公知である。「活性化増強」型抗体は、もしあれば、所与の生物学的モデルにおける分子型抗体の閾値用量を下回る濃度で分子抗体を含有することが具体的に意図されており、それが好ましい。
【００２８】
１つの態様では、本発明は、ａ）内皮ＮＯ合成酵素に対する活性化増強型抗体と、ｂ）脳特異的タンパク質Ｓ−１００に対する活性化増強型抗体とを含む組み合わせ医薬組成物を提供する。本明細書で上記で説明したように、組み合わせ物の個々の成分のそれぞれは、それ独自の個々の医学的使用で一般的に知られている。しかしながら、本特許出願の発明者らは、驚いたことに、組み合わせ物の投与が、アルツハイマー病の治療に顕著に有用であることを見出した。
【００２９】
別の態様では、本発明は、内皮ＮＯ合成酵素に対する活性化増強型抗体と同時に脳特異的タンパク質Ｓ−１００に対する活性化増強型抗体を超低用量のアフィニティー精製した抗体で生物に挿入することによってアルツハイマー病を治療する方法を提供する。
【００３０】
好ましくは、治療する目的で、組み合わせ医薬組成物は、１日間に１回から１日間に４回投与され、各投与は、１つ又は２つの組み合わせ物の単位剤形を含む。
【００３１】
アルツハイマー病を治療する目的のために、本願の医薬組成物は、主に１：１の容積比で活性成分を含有する。
【００３２】
アルツハイマー病を治療する目的のために、医薬組成物の成分を別々に投与してもよい。しかし、脳特異的タンパク質Ｓ−１００に対する活性化増強型抗体と、適宜、内皮ＮＯ合成酵素に対する活性化増強型抗体とを含有する溶液及び／又は固体剤形（錠剤）のうちの１つの形態で組み合わせ成分を同時に投与することが好ましい。
【００３３】
更に、アルツハイマー病の治療中、それぞれ内皮ＮＯ合成酵素又はＳ−１００タンパク質に対する活性化増強型抗体を含有する溶液及び固体剤形（錠剤）の形態の２つの別個に調製された医薬の形態で本医薬組成物を別々に及び同時に適用（生物に投与）することも可能である。
【００３４】
医薬品は、主に以下の通り調製される。
【００３５】
本発明に従った組み合わせ医薬組成物は、液体形又は固体形とすることができる。医薬組成物に含まれる活性化増強型の抗体のそれぞれは、ホメオパシー分野において受け入れられているプロセスを通して、抗体の最初の分子形態から調製する。開始抗体は、例えば、どちらも参照により本明細書に組み込まれている、Ｉｍｍｕｎｏｔｅｃｈｎｉｑｕｅｓ，Ｇ．Ｆｒｉｍｅｌ，Ｍ．，“Ｍｅｄｉｔｓｙｎａ”，１９８７，ｐ．９−３３；“Ｈｕｍ．Ａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ．Ｍｏｎｏｃｌｏｎａｌ  ａｎｄ  ｒｅｃｏｍｂｉｎａｎｔ  ａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ，３０ｙｅａｒｓ  ａｆｔｅｒ”ｂｙ  Ｌａｆｆｌｙ  Ｅ．，Ｓｏｄｏｙｅｒ  Ｒ．−２００５−Ｖｏｌ．１４．−Ｎ１−２．Ｐ．３３−５５において記載されている、既知のプロセスに従って調製されるモノクローナル抗体又はポリクローナル抗体とすることができる。
【００３６】
モノクローナル抗体は、例えば、ハイブリドーマ技術を用いて得ることができる。プロセスの最初の段階は、ポリクローナル抗血清の調製の過程で既に開発された原理に基づく免疫化を含む。作業の別の段階は、同一の特異性を有する抗体のクローンを生み出すハイブリッド細胞の作製を伴う。それらの別々の単離は、ポリクローナル抗血清の調製の場合と同じ方法を使用して行う。
【００３７】
ポリクローナル抗体は、動物の能動免疫化を通して得ることができる。この目的で、例えば、適切な動物（例えばウサギ）に、適切な抗原：脳特異的タンパク質Ｓ−１００及び内皮ＮＯ合成酵素の一連の注入を与える。動物の免疫系は、既知の様式で動物から採取される、対応する抗体を生み出す。この手順は、単一特異性の抗体を多量に含んだ血清の調製を可能にする。
【００３８】
所望であれば、抗体を含有する血清は、例えば、アフィニティークロマトグラフィー、塩析による分画、又はイオン交換クロマトグラフィーを使用して精製することができる。得られた精製抗体濃縮血清を、活性化増強型の抗体を調製するための出発材料として使用することができる。得られた、溶媒、好ましくは水又は水とエチルアルコールとの混合物中の抗体の最初の溶液の好ましい濃度は、約０．５ｍｇ／ｍＬから約５．０ｍｇ／ｍＬまでにわたる。
【００３９】
各成分を調製するための好ましい手順は、それぞれ１００倍単位ホメオパシー希釈物Ｃ１２、Ｃ３０及びＣ２００に相当する、抗体の一次マトリックス溶液を１００１２、１００３０及び１００２００倍に希釈した３種の水−アルコール希釈物の混合物を使用することである。固体剤形を調製するために、固体担体を、ホメオパシーのプロセスによって得られた所望の希釈物で処理する。本発明の組み合わせの固体単位剤形を得るために、担体塊に各希釈物を浸透させる。どちらの浸透の階数も、所望の組み合わせ剤形を調製するために適している。
【００４０】
好ましい実施形態では、本発明の組み合わせ物を含む活性化増強型を調製するための出発材料は、脳特異的タンパク質Ｓ−１００及び内皮ＮＯ合成酵素に対するポリクローナル抗体である。０．５ｍｇ／ｍＬ〜５．０ｍｇ／ｍＬの濃度の最初の（マトリクス）溶液を、後続の活性化増強型調製に用いる。
【００４１】
医薬組成物を調製するために、好ましくは、脳特異的タンパク質Ｓ−１００及び内皮ＮＯ合成酵素に対するポリクローナル抗体を用いる。
【００４２】
内皮ＮＯ合成酵素に対するポリクローナル抗体は、ウサギを免疫化するための免疫原（抗原）としてのアジュバントと、以下の配列を有するウシ内皮ＮＯ合成酵素の分子全体とを用いて得られる。
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【００４３】
内皮ＮＯ合成酵素に対するポリクローナル抗体は、以下の配列のヒト内皮ＮＯ合成酵素の分子全体を使用して得ることができる：
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【００４４】
ＮＯ合成酵素に対するポリクローナル抗体を得るために、例えば、以下の配列から選択される内皮ＮＯ合成酵素の断片を使用することも可能である：
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【００４５】
ＮＯ合成酵素に対する出発ポリクローナル抗体を調製するための例示的な手順は、以下の通り説明することができる。血液試料を採取する７日間〜９日間前に、所望の抗原を、ウサギに１回〜３回静脈内注射して、ウサギの血流中のポリクローナル抗体のレベルを上昇させる。免疫化したら、抗体レベルを検査するために血液試料を取得する。一般には、可溶性抗原の免疫応答の最大レベルは、抗原を最初に注射した後４０日間〜６０日間で実現される。第１の免疫化サイクルが達成されたら、ウサギを３０日間のリハビリテーション期間におき、その後、更に１回〜３回静脈内注射して再免疫化を実施する。
【００４６】
所望の抗体を含有する抗血清を得るために、ウサギから、免疫化されたウサギの血液を採取し、５０ｍＬの遠心管に入れる。管の側面に形成された生成物である血餅を木べらで除去し、管の中心の血餅にロッドを入れる。次いで、血液を冷蔵庫に約４℃の温度で一晩置く。次の日に、へらの上の血餅を除去し、残りの液体を１分間当たり１３，０００回転で１０分間遠心分離する。上清の流体が標的抗血清である。得られた抗血清は一般には黄色である。抗血清に、２０％のＮａＮ３（重量濃度）を最終濃度が０．０２％になるまで加え、使用する前に、−２０℃の温度で凍結した状態で保管する（又は、ＮａＮ３を添加せずに−７０℃の温度で保管する）。内皮ＮＯ合成酵素に対する標的抗体を抗血清から分離するためには、以下の固相吸収の連続が適している：
ａ）ウサギの抗血清１０ｍＬを０．１５ＭのＮａＣｌで２倍希釈し、その後、６．２６ｇのＮａ２ＳＯ４を加え、混合し、４℃で約１２時間〜１６時間インキュベートする；
ｂ）沈渣を遠心分離によって除去し、リン酸緩衝液１０ｍＬ中に溶解させ、同じ緩衝液に対して室温で一晩透析する；
ｃ）沈渣を遠心分離によって除去した後、溶液をリン酸緩衝液によって平衡させたＤＥＡＥ−セルロースカラムに入れる；
ｄ）溶出液の２８０ナノメートルにおける光学濃度を測定することによって抗体画分を決定する。
【００４７】
単離された粗製の抗体を、アフィニティークロマトグラフィー法を使用し、得られた抗体を、クロマトグラフィー媒体の不溶性マトリックス上にある内皮ＮＯ合成酵素に付着させることによって精製し、その後濃縮した水性塩類溶液により溶出させる。
【００４８】
得られた緩衝溶液を、活性化増強型抗体を調製するために用いるホメオパシー希釈プロセスの最初の溶液として使用する。内皮ＮＯ合成酵素に対する抗原精製ポリクローナルウサギ抗体の最初のマトリックス溶液の好ましい濃度は０．５ｍｇ／ｍＬ〜５．０ｍｇ／ｍＬ、好ましくは、２．０ｍｇ／ｍＬ〜３．０ｍｇ／ｍＬである。
【００４９】
神経細胞及びグリア細胞（星状細胞及び乏突起膠細胞）で発現する脳特異的タンパク質Ｓ−１００は、直接的に、又は他のタンパク質との相互作用を通じて、学習及び記憶のプロセス、神経の成長及び生存、神経組織における代謝プロセスの制御等を含む正常な脳機能を維持する目的で、ＣＮＳにおいて多数の機能を果たしている。脳特異的タンパク質Ｓ−１００に対するポリクローナル抗体を得るために、脳特異的タンパク質Ｓ１００が使用され、その物理的特性及び化学的特性は、論文Ｍ．Ｖ．Ｓｔａｒｏｓｔｉｎ，Ｓ．Ｍ．Ｓｖｉｒｉｄｏｖ，Ｎｅｕｒｏｓｐｅｃｉｆｉｃ  Ｐｒｏｔｅｉｎ  Ｓ−１００，Ｐｒｏｇｒｅｓｓ  ｏｆ  Ｍｏｄｅｒｎ  Ｂｉｏｌｏｇｙ，１９７７，Ｖｏｌ．５，Ｐ．１７０−１７８；において説明され、書籍Ｍ．Ｂ．Ｓｈｔａｒｋ，Ｂｒａｉｎ−Ｓｐｅｃｉｆｉｃ  Ｐｒｏｔｅｉｎ  Ａｎｔｉｇｅｎｅｓ  ａｎｄ  Ｆｕｎｃｔｉｏｎｓ  ｏｆ  Ｎｅｕｒｏｎ，“Ｍｅｄｉｃｉｎｅ”，１９８５；Ｐ．１２−１４において見出される。脳特異的タンパク質Ｓ１００は、以下の技術によって、雄ウシ脳組織から割り当てられる（ａｌｌｏｃａｔｅｄ）：
−  液体窒素中で凍結させた雄ウシの脳組織を、特殊な粉砕機を用いて粉末化する；
−  抽出用緩衝液を用いてホモジナイズして、１：３（重量／容積）の比率でタンパク質を抽出する；
−  ホモジネートを６０℃で１０分間加熱し、次いで、氷浴中で４℃に冷却する；
−  熱不安定性タンパク質を遠心分離によって除去する；
−  硫安分画を段階的に実施して、次いで、沈殿したタンパク質を除去する；
−  ｐＨを４．０に低下させることにより、１００％飽和硫酸アンモニウムを用いてＳ−１００タンパク質を含有する画分を沈殿させ、所望の画分を遠心分離によって回収する；
−  ＥＤＴＡ及びメルカプトエタノールを含有する最小容積の緩衝液に沈殿物を溶解させ、前記沈殿物を脱イオン水で透析し、凍結乾燥させる；
−  酸性タンパク質を分画した後に、イオン交換媒体、ＤＥＡＥ−セルロースＤＥ−５２、次いでＤＥＡＥ−セファデックスＡ−５０中でのクロマトグラフィーを続ける；
−  セファデックスＧ−１００を用いたゲル濾過により、分子量に基づいて、Ｓ−１００タンパク質を含有する回収し透析した画分を分離する；
−  精製されたＳ−１００タンパク質を透析し、凍結乾燥させる。
【００５０】
精製された脳特異的タンパク質Ｓ−１００の分子量は、２１，０００Ｄである。
【００５１】
アスパラギン酸及びグルタミン酸が高濃度であるため、脳特異的タンパク質Ｓ−１００は酸性度が高く、ポリアクリルアミドの不連続緩衝液系における電気浸透の間、極端な陽極位置を占めるので、同定が容易である。
【００５２】
また、Ｓ−１００タンパク質に対するポリクローナル抗体は、アジュバントを使用して、内皮ＮＯ合成酵素抗体について記載した方法と同様の方法によって得ることができる。ウサギを免疫化するための免疫原（抗原）として、Ｓ−１００タンパク質の分子全体を使用することができる：
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【００５３】
抗血清を得るために、フロイント完全アジュバントを入れた、運搬剤としてのメチル化雄ウシ血清アルブミンと複合体をなした脳特異的Ｓ−１００タンパク質又はＳ−１００タンパク質の混合物（抗原）を調製し、割り当てられた脳特異的タンパク質Ｓ−１００に添加し、実験動物の真皮下に注射する。すなわち、ウサギの背中領域に１ｍＬ〜２ｍＬの量を注射する。８日目、１５日目に免疫化を反復して行う。２６日目及び２８日目に（例えば、耳の静脈から）血液試料を採取する。
【００５４】
得られる抗血清の力価は、１：５００〜１：１，０００であり、神経組織の抽出物とは単一の沈降素バンドを形成するが、ヘテロロジカルボディ（ｈｅｔｅｒｏｌｏｇｉｃａｌ  ｂｏｄｉｅｓ）の抽出物とは反応せず、純粋なタンパク質Ｓ−１００及び神経組織の抽出物のどちらとも単一の沈降素ピークを形成することから、得られた抗血清が単一特異性であることが示唆される。
【００５５】
組み合わせの各成分の活性化増強型は、最初の溶液からホメオパシーポテンタイゼーションによって、好ましくは、約０．５ｍｇ／ｍＬから約５．０ｍｇ／ｍＬまでにわたる、溶媒、好ましくは水又は水とエチルアルコールとの混合物中の抗体の最初の溶液の濃度から出発して、（最初の溶液から開始する）前の溶液のそれぞれの１部を９部（１０倍希釈）、又は９９部（１００倍希釈）、又は９９９部（１，０００倍希釈−希釈Ｍ）の中性の溶媒で段階希釈することによる比例的な濃度低下の方法を外部からの衝撃方法と併せて用いて調製することができる。外部からの衝撃は、各希釈物を多数回垂直方向に振盪すること（ダイナマイゼーション）を伴うことが好ましい。その後の、所要のポーテンシーレベル、又は希釈因子に至るまでの希釈のそれぞれには別々の容器を使用することが好ましい。この方法は、ホメオパシーの技術分野では広く受け入れられている。例えば、明示された目的で参照により本明細書に組み込まれるＶ．Ｓｃｈｗａｂｅ“Ｈｏｍｅｏｐａｔｈｉｃ  ｍｅｄｉｃｉｎｅｓ”，Ｍ．，１９６７，ｐ．１４−２９を参照されたい。
【００５６】
例えば、１２−１００倍単位希釈物（Ｃ１２と示される）を調製するために、例えば、２．５ｍｇ／ｍＬの濃度の脳特異的タンパク質Ｓ−１００（又は内皮ＮＯ合成酵素）に対する抗体の最初のマトリックス溶液１部を、中性の、水を含む又は水−アルコールを含む溶媒（好ましくは、１５％エチルアルコール）９９部中に希釈し、次いで何回も（１０回以上）垂直方向に振盪して、第１の１００倍単位希釈物（Ｃ１と示される）を創出する。第１の１００倍単位希釈物Ｃ１から第２の１００倍単位希釈物（Ｃ２）を調製する。この手順を１１回繰り返して第１２の１００倍単位希釈物Ｃ１２を調製する。したがって、第１２の１００倍単位希釈物Ｃ１２は、異なる容器内で、２．５ｍｇ／ｍＬの濃度の脳特異的タンパク質Ｓ−１００に対する抗体の最初のマトリックス溶液１部を中性の溶媒９９部中に１２回段階希釈することによって得られる溶液を表し、１００倍単位ホメオパシー希釈物Ｃ１２に相当する。関連する希釈因子を用いて同様の手順を実施して希釈物Ｃ３０、Ｃ５０及びＣ２００を得る。中間希釈物を所望の生物学的モデルにおいて試験して活性を確認することができる。本発明の組み合わせを含む両方の抗体の好ましい活性化増強型は、Ｃ１２、Ｃ３０、及びＣ２００希釈物の混合物、又はＣ１２、Ｃ３０及びＣ５０希釈物の混合物である。活性な物質の種々のホメオパシー希釈物（主に１００倍単位希釈物）の混合物を生物活性のある液体成分として使用する場合、組成物の各成分（例えば、Ｃ１２、Ｃ３０、Ｃ５０、Ｃ２００）は、上記の手順に従って、最後から二番目の希釈物が得られるまで（例えば、それぞれＣ１１、Ｃ２９、Ｃ４９及びＣ１９９まで）別々に調製し、次いで各成分１部を、混合物の組成に従って１つの容器に加え、所要量（例えば、１００倍希釈するためには９７部）の溶媒と混合する。
【００５７】
したがって、超低用量の脳特異的タンパク質Ｓ−１００に対する活性化増強型抗体は、マトリクス溶液を、適宜１００１２倍、１００３０倍、及び１００２００倍（１００倍単位Ｃ１２、Ｃ３０、及びＣ２００溶液に相当する）、又は１００１２倍、１００３０倍、及び１００５０倍（１００倍単位Ｃ１２、Ｃ３０、及びＣ５０溶液に相当する）に極度に希釈することによって得られ、ホメオパシー技術によって調製される。
【００５８】
例えば、１０倍単位及び／又は１００倍単位（Ｃ１２、Ｃ３０、Ｃ１００；Ｃ１２、Ｃ３０、Ｃ５０；Ｄ２０、Ｃ３０、Ｃ１００；又はＤ１０、Ｃ３０、Ｍ１００等）等ホメオパシー技術に基づく他の種々の溶液の混合物の形態で活性な物質を使用することが可能である。その効率は、実験的に決定される。
【００５９】
増強及び濃度低下の過程では、超音波、電磁気又はホメオパシーの技術分野で受け入れられている任意の他の物理的影響を用いて外部からの処理を実施してよい。
【００６０】
好ましくは、本発明の組み合わせ医薬組成物は、液体の形態又は固体単位剤形とすることができる。医薬組成物の好ましい液体形は、好ましくは内皮ＮＯ合成酵素に対する活性化増強型抗体及びＳ−１００タンパク質に対する活性化増強型抗体の１：１の比率での混合物である。好ましい液体担体は、水又は水−エチルアルコール混合物である。
【００６１】
本発明の医薬組成物の固体単位剤形は、主に１：１の比率で混合され、液体剤形で用いられる活性化増強型の活性成分の水溶液又は水−アルコール溶液の混合物を、薬学的に許容される固体担体に浸透させることによって調製することができる。あるいは、必要な希釈物のそれぞれを継続的に担体に浸透させることができる。どちらの浸透の階数も受け入れられる。
【００６２】
好ましくは、固体単位剤形での医薬組成物は、活性化増強型抗体の水希釈物又は水−アルコール希釈物を予め染み込ませた薬学的に許容される担体の顆粒剤から調製する。固体剤形は、錠剤、カプセル剤、ロゼンジ、及びその他を含めた製薬技術分野で公知の任意の形態であってよい。不活性な医薬成分として、医薬品の製造において使用されるグルコース、スクロース、マルトース、デンプン、イソマルトース、イソマルト及び他の単糖、オリゴ糖及び多糖、並びに上記の不活性な医薬成分と、潤滑剤、崩壊剤、結合剤及び着色料を含めた他の薬学的に許容される賦形剤、例えばイソマルト、クロスポビドン、シクラミン酸ナトリウム、サッカリンナトリウム、無水クエン酸等）との技術的混合物を使用することができる。好ましい担体は、ラクトース及びイソマルトである。医薬剤形は、標準の製薬用賦形剤、例えば、結晶セルロース、ステアリン酸マグネシウム、及びクエン酸を更に含んでよい。
【００６３】
固体単位剤形の調製の例を、以下に説明する。固体経口形態を調製するために、ラクトースの１００μｍ〜３００μｍの顆粒を、内皮ＮＯ合成酵素に対する活性化増強型抗体及びＳ−１００タンパク質に対する活性化増強型抗体の水溶液又は水−アルコール溶液に、ラクトース５ｋｇ又は１０ｋｇに対して抗体溶液１ｋｇ（１：５〜１：１０）の比率で浸透させる。浸透を行うために、ラクトース顆粒を、煮沸ベッドプラント（例えば、Ｈｕｔｔｌｉｎ  ＧｍｂＨの「Ｈｕｔｔｌｉｎ  Ｐｉｌｏｔｌａｂ」）中の流動煮沸ベッド中で染み込ませるための注水に曝露させ、その後、４０℃未満の加熱した空気の流れによって乾燥する。活性化増強型抗体を染み込ませた乾燥顆粒（１０重量部〜３４重量部）の推定量をミキサーに入れ、２５重量部〜４５重量部の「染み込ませていない」純粋なラクトース（処理効率を低下させることなく科学技術的なプロセスの費用を縮小し、それを単純化及び加速するために使用する）と、０．１重量部〜１重量部のステアリン酸マグネシウム、及び３重量部〜１０重量部の結晶セルロースと一緒に混合する。得られた錠剤集団を均一に混合し、（例えば、Ｋｏｒｓｃｈ−ＸＬ４００打錠機において）直接乾式プレスすることによって錠剤化して、１５０ｍｇ〜５００ｍｇ、好ましくは、３００ｍｇの丸剤を形成する。錠剤化した後、活性化増強型抗体の組み合わせの水−アルコール溶液（丸剤１粒当たり３．０ｍｇ〜６．０ｍｇ）を染み込ませた丸剤３００ｍｇを得る。担体に浸透させるために使用する組み合わせの各成分は、１００倍単位ホメオパシー希釈物、好ましくはＣ１２、Ｃ３０及びＣ２００の混合物の形態である。
【００６４】
好ましくは、請求する医薬組成物１錠〜２錠を１日間に２回〜４回投与する。
【００６５】
更に、公表された薬物は、アルツハイマー病を治療するために設計される医薬の選択肢を広げる。
【００６６】
更に、本発明の組み合わせ医薬組成物は、アルツハイマー病を治療するために用いることができる。前記障害の治療のために、前記組み合わせ医薬組成物は、１：１の容積比で活性成分を含有してよく、したがって、各成分は、１００倍単位ホメオパシー希釈物（Ｃ１２、Ｃ３０、及びＣ２００）に相当する、それぞれ１００１２倍、１００３０倍及び１００２００倍希釈された抗体の３種のマトリックス溶液（母液）の混合物、或いは、１００倍単位ホメオパシー希釈物（Ｃ１２、Ｃ３０、及びＣ５０）に相当する、それぞれ１００１２倍、１００３０倍及び１００５０倍希釈された抗体の３種のマトリックス溶液の混合物として用いられる。請求する医薬組成物は、好ましくは、１日間に１錠〜２錠を２回〜６回（好ましくは２回〜４回）投与することが推奨される。
【００６７】
請求する医薬組成物及びその成分は、鎮静効果及び骨格筋弛緩効果を有しないので、嗜癖及び習慣化を引き起こさない。
【実施例】
【００６８】
実施例１
最初のマトリックス溶液（濃度：２．５ｍｇ／ｍＬ）を超希釈（ｓｕｐｅｒ−ｄｉｌｕｔｉｏｎ）（１００１２倍、１００３０倍、１００２００倍）することによって得られ、１００倍単位ホメオパシー希釈物Ｃ１２、Ｃ３０、Ｃ２００の混和物に相当する、超低用量（ＵＬＤ）の脳特異的タンパク質Ｓ−１００に対するポリクローナルアフィニティー精製ウサギ抗体（抗Ｓ１００）及び内皮ＮＯ合成酵素に対するポリクローナルアフィニティー精製ウサギ抗体（抗ｅＮＯＳ）を含有する複合調製物（比率：１：１）（ＵＬＤ抗Ｓ１００＋抗ｅＮＯＳ）並びにその成分、最初のマトリックス溶液を超希釈（１００１２倍、１００３０倍、１００２００倍）することによって得られ、１００倍単位ホメオパシー希釈物Ｃ１２、Ｃ３０、Ｃ２００の混和物に相当する、超低用量（ＵＬＤ）の抗原に対して精製した脳特異的タンパク質Ｓ−１００に対するポリクローナルアフィニティー精製ウサギ抗体（抗Ｓ１００）、並びに、最初のマトリックス溶液を超希釈（１００１２倍、１００３０倍、１００２００倍）することによって得られ、１００倍単位ホメオパシー希釈物Ｃ１２、Ｃ３０、Ｃ２００の混和物に相当する、超低用量の内皮ＮＯ合成酵素に対するポリクローナルウサギ抗体（ＵＬＤ抗ｅＮＯＳ）の、標準のリガンドである［３Ｈ］ペンタゾシンとヒト組換え型σ１受容体との結合に対するインビトロにおける効果を、放射性リガンド法を用いて評価した。増強蒸留水（ホメオパシー希釈物Ｃ１２＋Ｃ３０＋Ｃ２００の混和物）を試験調製物の対照として使用した。
【００６９】
シグマ−１（σ１）受容体は、中枢神経系の細胞、末梢組織の大部分の細胞及び免疫成分細胞に局在する細胞内受容体である。この受容体は、移行を受ける独特の能力を示し、この能力は、多くの向精神薬によって引き起こされる。シグマ−１受容体のダイナミクスは、シグマ−１受容体に作用する調製物によってなされる種々の影響と直接関連づけられる。これら影響としては、活性チャネルの調節、エキソサイトーシス、シグナル伝達、原形質膜のリモデリング（ラフトの形成）及び脂質輸送／代謝が挙げられる。この全てが脳におけるニューロンの可塑性に寄与する可能性がある。シグマ−１受容体が、主要な神経メディエーター系：ノルアドレナリン作動系、セロトニン作動系、ドーパミン作動系、コリン作動系及びＮＭＤＡにより調整可能なグルタミン酸効果の全てに対する調節効果を有するというエビデンスがある。シグマ−１受容体は、神経変性疾患（例えば、アルツハイマー病、パーキンソン）、精神障害及び情動障害、並びに脳卒中の病態生理において重要な役割を果たし、また、学習及び記憶のプロセスにも関与する。この点について、リガンドとシグマ−１受容体との相互作用の効率に影響を及ぼす薬物の能力は、その薬理活性のスペクトルにおける神経保護成分、抗虚血成分、抗不安成分、抗うつ成分及び抗無力成分の存在を示しており、これら薬物を、特に脳血管疾患を治療するための有効な調製物として考えることを可能にする。
【００７０】
（総結合を測定するための）試験の間、ＵＬＤの抗Ｓ１００＋抗ｅＮＯＳ複合調製物２０μＬ又はＵＬＤのＳ１００に対するＡＢ１０μＬ又はＵＬＤのＮＯＳに対するＡＢ１０μＬをインキュベーション培地に移した。したがって、複合調製物を試験する際に試験ウェルに移したＵＬＤの抗Ｓ１００＋抗ｅＮＯＳの量は、単一調製物として試験したＵＬＤのＳ１００に対するＡＢ及びＵＬＤのＮＯＳに対するＡＢの量と同一であり、それにより、調製物の効率を、その別々の成分と比較することが可能になる。増強水２０μＬ及び１０μＬをインキュベーション培地に移した。
【００７１】
更に、Ｊｕｒｋａｔ細胞株の膜のホモジネート（ヒト白血病Ｔリンパ球株）１６０μＬ（タンパク質約２００μｇ）、及び最後に、トリチウムで標識した放射性リガンド［３Ｈ］ペンタゾシン（１５ｎｍ）２０μＬを移した。
【００７２】
非特異的な結合を測定するために、標識されていないリガンド−ハロペリドール（１０μＭ）２０μＬを調製物又は増強水の代わりにインキュベーション培地に移した。
【００７３】
５０ｍＭのトリス−ＨＣｌ緩衝液（ｐＨ＝７．４）中２２℃で１２０分間以内インキュベートし、ガラス繊維フィルター（ＧＦ／Ｂ、Ｐａｃｋａｒｄ）を使用して濾過した後、シンチロメーター（Ｔｏｐｃｏｕｎｔ、Ｐａｃｋａｒｄ）及びシンチレーションブレンド（Ｍｉｃｒｏｓｃｉｎｔ  ０、Ｐａｃｋａｒｄ）を使用して放射活性を測定した。特異的な結合（試験中又は対照）を総結合（試験中又は対照）と非特異的な結合との差異として算出した。
【００７４】
結果は、対照（蒸留水を対照として使用した）における特異的結合の阻害の百分率（％）として示されている（表１）。
【００７５】
【表１】
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表１：調製物及び増強水の、標準のリガンドである［３Ｈ］ペンタゾシンとヒト組換え型σ１受容体との結合に対する効果
注：対照における特異的な結合の百分率（％）＝（試験中の特異的な結合／対照における特異的な結合）＊１００％；
対照における特異的な結合の阻害の百分率（％）＝１００％−（試験中の特異的な結合／対照における特異的な結合）＊１００％）
【００７６】
５０％を超える阻害を反映する結果により被試験化合物の有意な効果が示され、２５％から５０％までの阻害により、軽度〜中程度の効果が確認され、２５％未満の阻害は、被試験化合物の効果は有意でなく、バックグラウンドレベルの範囲内であると考えられる。
【００７７】
したがって、この試験モデルの条件により、ＵＬＤ抗Ｓ１００＋抗ｅＮＯＳ複合調製物が、標準の放射性リガンドである［３Ｈ］ペンタゾシンとヒト組換え型σ１受容体との結合を阻害することにおいて、その別々の成分（ＵＬＤ抗Ｓ１００及びＵＬＤ抗ｅＮＯＳ）よりも効率的であることが示された。試験ウェルに移した、すなわち１０μＬのＵＬＤ抗Ｓ１００により、標準の放射性リガンドである［３Ｈ］ペンタゾシンとヒト組換え型σ１受容体との結合が阻害されたが、効果の強さは、ＵＬＤ抗Ｓ１００＋抗ｅＮＯＳ複合調製物の効果の強さよりも劣る。試験ウェルに移した、すなわち１０μＬのＵＬＤ抗ｅＮＯＳは、標準の放射性リガンドである［３Ｈ］ペンタゾシンとヒト組換え型σ１受容体との結合に対する効果を有さなかった。試験ウェルに移した、すなわち、１０μＬ又は２０μＬの増強水は、標準の放射性リガンドである［３Ｈ］ペンタゾシンとヒト組換え型σ１受容体との結合に対する効果を有さなかった。
【００７８】
実施例２
アルツハイマー病を治療するための本願の組み合わせ医薬組成物の性質を試験するために、重量３００ｍｇの錠剤を使用した。最初の溶液（濃度２．５ｍｇ／ｍＬ）を１００１２倍、１００３０倍、１００２００倍に超希釈することによって得られ、１００倍単位ホメオパシー希釈物Ｃ１２、Ｃ３０、Ｃ２００の混合物（比率：１：１）の等価混合物である、超低用量（ＵＬＤ）の脳特異的タンパク質Ｓ−１００に対する活性化増強型のポリクローナルアフィニティー精製ウサギ抗体（抗Ｓ１００）及び内皮ＮＯ合成酵素に対する活性化増強型のポリクローナルアフィニティー精製ウサギ抗体（抗ｅＮＯＳ）（「ＵＬＤ抗Ｓ１００＋抗ｅＮＯＳ」）の水−アルコール溶液を含有する医薬組成物（錠剤１錠当たり６ｍｇ）を錠剤に浸透させた。
【００７９】
対照群の患者には、最初の溶液（濃度２．５ｍｇ／ｍＬ）を１００１２倍、１００３０倍、１００２００倍に超希釈することによって得られ、１００倍単位ホメオパシー希釈物Ｃ１２、Ｃ３０、Ｃ２００の等価混合物である、超低用量（ＵＬＤ）の脳特異的タンパク質Ｓ−１００に対する活性化増強型のポリクローナルアフィニティー精製ウサギ抗体（抗Ｓ１００）の水−アルコール溶液を含有する医薬組成物（錠剤１錠当たり３ｍｇ）を浸透させた錠剤３００ｍｇを与えた。
【００８０】
試験には、アルツハイマー病と診断された患者を組み入れた。アルツハイマー病は、認知症（後天性認知症、以前獲得した知識及び実技の特定の損失を伴う認知活動の安定的な欠陥、新しい知識を得るのが困難又は不可能であること）を特徴とする。
【００８１】
この試験は、軽度〜中程度のアルツハイマー病の患者の治療における、２つの並行群（ＵＬＤ抗Ｓ１００調製物及びＵＬＤ抗Ｓ１００＋抗ｅＮＯＳ調製物）での療法の効率及び安全性に関する非盲検無作為化比較臨床試験であった。
【００８２】
この試験には、軽度〜中程度のアルツハイマー病と診断された５５〜６４歳（平均５９．０±３．５８歳）の患者６人を組み入れた。
【００８３】
以下の組み入れ基準及び除外基準に対する患者のコンプライアンスを確認した：
組み入れ基準は、以下の通りである：
１．病歴、神経学的検査及び医療記録によって確認された、軽度〜中程度のアルツハイマー病の患者。
２．来診１の前少なくとも１ヶ月間以内に併用療法を変更していない患者。
３．観察期間全体にわたって併用療法を変更する必要がないこと。
４．今後６ヶ月間にわたって免疫調節性薬を処方する必要がないこと。
５．研究者及び試験コーディネーターと適切に意思疎通するために十分な教育レベルを有する患者。
６．研究者により、信頼でき、プロトコールにおいて規定された予定されている臨床的な来診、試験及び手順の全てを実施する用意ができていると評価された患者。
７．有効な自宅住所を有する患者。
【００８４】
除外基準は、以下の通りである：
１．病歴に任意の脳外科手術があること。
２．急性心筋梗塞。
３．出血性卒中。
４．病歴に精神病、双極性障害又は統合失調感情性障害の診断があること。
５．精神疾患簡易構造化面接法（ＭＩＮＩ）のうつ病モジュールの基準による大うつ病性障害。
６．研究者の見解では試験において患者の試験結果に影響を及ぼす可能性がある医学的特性又は別の特性の因子／状態。
７．Ｂｅｃｋうつ病質問表の節「Ｉ」における回答が「２Ａ」、「２Ｂ」、「２Ｃ」又は「３」であること（行動する意図がいくらかあるが具体的な計画はない積極的な自殺念慮、又は具体的な計画及び意図がある積極的な自殺念慮）。
８．病歴に自己免疫疾患があること。
９．肝臓の急性損傷又は重篤な硬変症（Ｃｈｉｌｄ−ＰｕｇｈによるクラスＣ）。
１０．未矯正の甲状腺機能の障害。
１１．病歴に非代償性動脈性高血圧症があること。
１２．研究者の見解では患者が当該試験に参加することに影響を及ぼす可能性がある、又は試験期間中に入院の延長又は再入院に至る恐れがある重篤又は非代償性の心臓血管疾患、肝疾患、腎疾患、代謝疾患、呼吸器疾患又は血液疾患、症候性の末梢血管疾患、或いは別の医学的状態又は精神医学的状態。
１３．研究者の見解では患者が当該試験に参加することを妨げる可能性がある疾患及び状態。
１４．当該試験に含まれる前の、ＵＬＤ抗ｅＮＯＳを含有する薬物又はＵＬＤ抗Ｓ１００を含有する薬物の摂取。
１５．植物調製物及びホメオパシー調製物を含む任意の群の抗うつ薬の摂取。
１６．植物調製物及びホメオパシー調製物を含む任意の群の抗不安薬の摂取。
１７．植物調製物及びホメオパシー調製物を含む免疫調節物質の摂取。
１８．来診０の前１ヶ月間以内の全身性ステロイド薬を用いた治療。
１９．患者が少なくとも単回用量の調製物を服用した場合、ＵＬＤ抗ｅＮＯＳを含有する薬物又はＵＬＤ抗Ｓ１００を含有する薬物の試験への参加。
２０．当該試験に登録される前１ヶ月間以内の他の臨床試験への参加。
２１．試験期間中及び被試験薬物を最後に摂取した後１ヶ月間以内の妊娠、授乳、適切な避妊を行うことが不可能であること。
２２．乳糖不耐性を含めた薬物の任意の成分に対するアレルギー／不耐性が存在すること。
２３．麻薬及び神経遮断薬を服用している患者、患者にアルコール依存、精神疾患があること。
２４．患者が、行われる試験に直接関連するセンターのスタッフであること、及び／又は進行中の試験に直接関係する研究センターのスタッフの家族の一員であること。「家族の一員」とは、夫（妻）、親、子、兄弟（姉妹）である。
２５．研究者の見解では補償を受けている試験への参加若しくは補償を受けていることが推定されること又は司法手続きへの参加。
【００８５】
組み入れ基準及び除外基準に合致する患者を決定した後、患者を無作為に２つの試験群に分けた：ＵＬＤ抗Ｓ１００を投与する患者群（患者３人、女性−１００％、男性−０％、平均年齢−５９．０±３．６歳）、ＵＬＤ抗Ｓ１００＋抗ｅＮＯＳを投与する患者群（患者３人、女性−６６．６６％、男性−３３．３３％、平均年齢−５９．０±４．３６歳）。
【００８６】
この試験の間に５回の来診を行った。治療期は、来診１から来診４まで、平均で８４±５日間にわたった。来診４（８４±５日目）が試験の第１のエンドポイントであり、その後に経過観察を行った。経過観察期は来診４から来診５（平均で１６８±５日目）まで継続した。
【００８７】
安全性分析には、この試験に参加した患者全員のデータ（ｎ＝６）を含めた。試験期間中、良好な薬物耐容性が記録された。有害事象は登録されなかった。試験群の患者全員がプロトコールによる治療を完了した；初期の離脱者はいなかった。
【００８８】
アルツハイマー病の主要な臨床的徴候及び症状（ＮＰＩ、神経精神症状評価、強さの項）、患者の世話をしている人に付随する苦痛の強さ（ＮＰＩ、神経精神症状評価、苦痛の項）並びに患者の認知機能（ミニメンタルステート検査、ＭＭＳＥ）に対するＵＬＤ抗Ｓ１００＋抗ｅＮＯＳ調製物の効果を評価した。来診４の際に、アルツハイマー病の重要な症状の改善、例えば、ＮＰＩ、神経精神症状評価の強さの項の統計的に有意な低下（２４．３３±４．７３から１２．０±３．４６へ、ｐ＜０．０５）などが見いだされた（表２）。
【００８９】
療法の最後において、患者の世話をしている人の苦痛が軽減される傾向並びに患者の日常生活の活動性が低下する傾向も見いだされた（しかし、おそらく、この試験に含めた患者数が少なかったために、いかなる統計的有意差もなかった）。
【００９０】
更に、ＭＭＳＥスコアが２３．６６±３．２１点から２６．６６±１．５３点まで増加したことにより顕在化したように認知機能が改善される傾向が見いだされたが、同様に療法の最後の時点で差異は統計的に有意な値には到達せず、これもサンプル数が少ないことに関連する可能性がある。
【００９１】
ＵＬＤ抗Ｓ１００を受けている患者の群における同じエンドポイントでは、ＭＭＳＥスコアの２２．６６±０．５８点から２３．３３±０．５８点への統計的に有意でない改善を除いて、改善の傾向は示されなかった。
【００９２】
更に、療法の最後の時点の総ＭＭＳＥスコアの患者の群間の差異は、ｐ＜０．０５で統計的に有意であった。
【００９３】
【表２】
2013535445.tif 000021
＊−ベースラインからのｐ＜０．０５；＃−対照からのｐ＜０．０５
【００９４】
したがって、実施した臨床研究における、ＵＬＤ抗Ｓ１００＋抗ｅＮＯＳ組み合わせ医薬組成物の、アルツハイマー病の主要な臨床的徴候及び症状に対する正の効果並びにアルツハイマー病の認知機能に影響を及ぼす傾向。更に、良好な薬物耐容性が確認された。薬物に関連する有害事象は記録されなかった。
【００９５】
実施例３
スコポラミンにより記憶喪失させたラット（アルツハイマー病のモデル）における調製物の効果
アルツハイマー病（ＡＤ）は、認知機能の低下、記憶力低下、意識の混乱、及び感情の変化を特徴とする神経変性疾患である。この病態の主要な原因は、今日では、脳組織におけるベータ−アミロイドプラーク及び神経原線維変化の形成を導く脳におけるベータアミロイドの蓄積であると考えられている；ＡＤは、コリン作動系の欠陥も伴う。これは、コリン作動系のアンタゴニストであるスコポラミンを利用する、最も一般的な動物におけるＡＤのモデリング法である。スコポラミンを実験動物（通常、げっ歯類、ラット又はマウス）に注射することにより、学習する能力が妨害され、記憶力が低下する。
【００９６】
ラット及びマウスの認知機能を評価するために、モリス水迷路を含めた種々の方法を使用することができる。この試験の核心は、濁った水が入った容器内に異なるポイントから放した動物に、隠れている固定されたプラットフォームを探させることである。この方法の利点は、記憶力の強度を評価するために（このためにはプラットフォームを取り除いた時に試験を行う）、動物の訓練の過程（動物がどこで水中に入れられたかを問わず、プラットフォームの空間的な配置に関する観念が形成されること）をモニターすることが可能になることである。
【００９７】
以下の実施例３では、スコポラミンにより記憶喪失させたラットにおける、貯蔵原液（濃度２．５ｍｇ／ｍＬ）を１００１２倍、１００３０倍、１００２００倍に超希釈することによって得られ、１００倍単位ホメオパシー希釈物Ｃ１２、Ｃ３０、Ｃ２００に相当する、超低用量（ＵＬＤ）の脳特異的タンパク質Ｓ−１００に対する活性化増強型のポリクローナルアフィニティー精製ウサギ抗体（抗Ｓ１００）及び内皮ＮＯ合成酵素に対する活性化増強型のポリクローナルアフィニティー精製ウサギ抗体（抗ｅＮＯＳ）を含有する組成物（ＵＬＤ抗Ｓ１００＋抗ｅＮＯＳ）の形態の請求する医薬調製物の有効性を試験する。
【００９８】
スコポラミンにより記憶喪失させたラット（アルツハイマー病のモデル）におけるＵＬＤ抗Ｓ１００＋抗ｅＮＯＳ薬の有効性の試験では、Ｒｊ：Ｗｉｓｔａｒ（Ｈａｎ）系統の雄のラット４８匹（体重１８０ｇ〜２８０ｇ）を用いた。４日間、ラットに、通常の生理食塩水を皮下注射したか（ｎ＝１２、インタクト）、又はスコポラミンを０．５ｍｇ／ｋｇの用量で皮下注射した（ｎ＝３６）（スコポラミン誘導性記憶喪失）。スコポラミン誘導性記憶喪失のラットを３群に分け、それぞれ蒸留水（７．５ｍＬ／ｋｇ、ｎ＝１２、対照第１群）、ＵＬＤ抗Ｓ１００（７．５ｍＬ／ｋｇ、ｎ＝１２、第２群）及びＵＬＤ抗Ｓ１００＋抗ｅＮＯＳ（７．５ｍＬ／ｋｇ、ｎ＝１２、第３群）を、胃内に９日間にわたって（スコポラミンを注射する前４日間、スコポラミンのバックグラウンドに対して４日間、及び最後にスコポラミンを注射した後１日間）投与した。
【００９９】
モリス水迷路における訓練セッションを、スコポラミンを注射してから４日以内に、被試験薬物を投与した後６０分間及びスコポラミンを投与した後３０分間にわたって行った（６０秒間の間隔で４回の逐次的な試験）。モリス迷路は、水（２６℃〜２８℃）を３０ｃｍ満たした丸い貯蔵器（直径１５０ｃｍ、高さ４５ｃｍ）である。容器の縁から１８ｃｍのところに、隠れたプラットフォーム（直径１５ｃｍ）が１．５ｃｍ下の水位に埋もれている。無毒性の色素（例えば、粉乳）を加えることによって濁らせた水により、プラットフォームが見えなくなる。それぞれの試験について、動物を、迷路内の、隠れたプラットフォームからの距離が等しい最初のポイントのうちの１つに置き、動物にプラットフォームを見つけさせる。動物が１２０秒間以内にプラットフォームを見つけられなかった場合は、動物をプラットフォーム上に置いて６０秒間放置してから試験を再開した。順不同の４回の試験中、動物は、各開始ポイントから２回迷路内を泳ぎ始めた。試験をビデオテープに記録し、次いで、各試験におけるプラットフォームの探索を克服する距離及びプラットフォームを探索する潜伏期間について分析した。５日目に試験を実施した：プラットフォームを迷路から取り除き、ラットを６０秒間自由に浮遊させた。プラットフォームがあった場所で費やされた時間を記録した。
【０１００】
スコポラミンを投与することにより、動物の学習能力が有意に悪化した。対照群１では、動物がプラットフォームを探索するために費やした時間及び動物がプラットフォームを探索するために泳いだ距離が有意に増加した（表３、４）。この試験は、対照群１の動物の記憶力が大きく悪化したことを示している：この群の動物が、プラットフォームが位置していた場所において費やした時間は、インタクトなラットがそこで費やした時間よりも短かった（表５）。第２群においてＵＬＤ抗Ｓ１００を投与することによっては、試験されたパラメータは改善されなかった（表３、４、５）。第３群においてＵＬＤ抗Ｓ１００＋抗ｅＮＯＳを投与することにより、訓練の４日間以内にプラットフォーム探索時間の潜伏時間が短縮され（表３）、踏破距離が短縮された（表４）ことに反映される通り、学習がいくらか改善し、プラットフォームが位置していた場所で費やされた時間が増えたことに反映される通り、記憶力が改善された（表５）。
【０１０１】
【表３】
2013535445.tif 000022
＊＊＊−インタクトとの差異は有意である、ｐ＜０．０５
表３．プラットフォーム探索の潜伏期間（秒）
【０１０２】
【表４】
2013535445.tif 000023
＊＊＊−インタクトとの差異は有意である、ｐ＜０．０５
表４．プラットフォームの探索を克服する距離（ｃｍ）
【０１０３】
【表５】
2013535445.tif 000024
＊＊＊−インタクトとの差異は有意である、ｐ＜０．０５
表５．プラットフォームが位置していた場所で費やされた時間（秒）
【０１０４】
したがって、アルツハイマー病のモデルにおいて、ＵＬＤ抗Ｓ１００＋抗ｅＮＯＳ複合医薬組成物の使用は、ＵＬＤ抗Ｓ１００の単独投与と比較するとより有効であった。
【配列表】
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【国際調査報告】
2013535445.tif 000025
2013535445.tif 000026
2013535445.tif 000027
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