(57)【要約】  本発明は、グレリン受容体（ＧＲＬＮ、成長ホルモン分泌促進物質受容体、ＧＨ−Ｒ１ａおよびサブタイプ、アイソフォームおよび／またはその変形）の選択的調節剤であると実証された、配座の定義された新規大環状化合物を提供する。新規化合物を合成する方法も本明細書において記載される。これらの化合物は、グレリン受容体のアンタゴニストまたはインバースアゴニストとして、また、代謝性および／または内分泌腺障害、肥満症また肥満症関連障害、食欲障害または摂食障害、中毒性障害、心血管障害、胃腸障害、遺伝性障害、過度増殖性障害、中枢神経系障害また炎症性障害を含むが、これらに限定されない一連の病状の治療および予防のための医薬として有用である。  【化１】2013509434.tif 000278【選択図】なし
2013509434.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
式（Ｉ）の化合物またはその薬学的に許容される塩。
【化１】
2013509434.tif 000262
［式中、Ｔは、
【化２】
2013509434.tif 000263
（式中、（ＮＡ）は、式（Ｉ）のＮＲ４ａとの結合部位を示し、また（ＮＢ）は、式（Ｉ）のＮＲ４ｃとの結合部位を示す。）から選択され、
Ｒ１は、−（ＣＨ２）ｓＣＨ３、−ＣＨ（ＣＨ３）（ＣＨ２）ｔＣＨ３、（ＣＨ２）ｕＣＨ（ＣＨ３）２、−Ｃ（ＣＨ３）３、−ＣＨ２−Ｃ（ＣＨ３）３、−ＣＨＲ１７ＯＲ１８、
【化３】
2013509434.tif 000264
からなる群から選択され、
ここで、ｓは、０、１、２、３または４であり、ｔは、０、１、２または３であり、ｕは、０、１または２であり、ｖは、０、１、２、３または４であり、ｗは、０、１、２、３または４であり、また、Ｒ１１およびＲ１２は、場合によって存在し、存在する場合、独立してＣ１〜Ｃ４アルキル、ヒドロキシルおよびアルコキシからなる群から選択され、Ｒ１７は、水素またはメチルであり、また、Ｒ１８は、水素、Ｃ１〜Ｃ４アルキルおよびアシルからなる群から選択され、
Ｒ２ａは、−ＣＨ３、−ＣＨ２ＣＨ３、−ＣＨ（ＣＨ３）２、−ＣＦ３、−ＣＦ２Ｈおよび−ＣＨ２Ｆからなる群から選択され、
Ｒ２ｂは、−Ｈおよび−ＣＨ３からなる群から選択され、
Ｒ３ａは、水素、Ｃ１〜Ｃ４アルキル、ヒドロキシルおよびアルコキシからなる群から選択され、
Ｒ３ｂは、水素およびＣ１〜Ｃ４アルキルからなる群から選択され、
Ｒ４ａ、Ｒ４ｂ、Ｒ４ｃおよびＲ４ｄは、水素およびＣ１〜Ｃ４アルキルからなる群から独立して選択され、
Ｒ５は、Ｙ１がＯまたはＮＲ１６である場合、水素、Ｃ１〜Ｃ４アルキルおよびアシルからなる群から選択され、または、Ｙ１がＣ（＝Ｏ）である場合、ヒドロキシル、アルコキシおよびアミンからなる群から選択され、
Ｒ６は、水素、Ｃ１〜Ｃ４アルキル、オキソおよびトリフルオロメチルからなる群から選択され、
Ｒ７は、水素、Ｃ１〜Ｃ４アルキル、ヒドロキシル、アルコキシおよびトリフルオロメチルからなる群から選択され、または、Ｒ７およびＸ１は、それらが結合している炭素と一緒になって五または六員環を形成し、
Ｒ１０は、水素、Ｃ１〜Ｃ４アルキル、１，１，１−トリフルオロエチル、ヒドロキシルおよびアルコキシからなる群から選択され、ただし、Ｌ６がＣＨである場合、Ｒ１０はトリフルオロメチルからも選択され、また、Ｌ６がＮである場合、Ｒ１０はスルホニル基からも選択され、またはＲ１０およびＲ８ａは、一緒になって五または六員環を形成し、
Ｒ２６、Ｒ２８およびＲ２９は、水素、Ｃ１〜Ｃ４アルキル、ヒドロキシル、アルコキシおよびトリフルオロメチルからなる群から独立して選択され、または、Ｒ２８およびＲ２９は、一緒になって三員環を形成し、
Ｒ２７は、水素、Ｃ１〜Ｃ４アルキル、ヒドロキシル、アルコキシおよびトリフルオロメチルからなる群から選択され、または、Ｒ２７およびＸ４３は、それらが結合している炭素と一緒になって五または六員環を形成し、
Ｒ３０は、水素、Ｃ１〜Ｃ４アルキル、ヒドロキシル、アルコキシおよびトリフルオロメチルからなる群から選択され、
Ａｒは、
【化４】
2013509434.tif 000265
からなる群から選択され、式中、Ｍ１、Ｍ２、Ｍ３、Ｍ４、Ｍ５、Ｍ６、Ｍ７、Ｍ９およびＭ１１は、Ｏ、ＳおよびＮＲ１３からなる群から独立して選択され、ここで、Ｒ１３は、水素、Ｃ１〜Ｃ４アルキル、ホルミル、アシルおよびスルホニルからなる群から選択され、Ｍ８、Ｍ１０およびＭ１２は、ＮおよびＣＲ１４からなる群から独立して選択され、ここで、Ｒ１４は、水素およびＣ１〜Ｃ４アルキルからなる群から選択され、Ｘ５、Ｘ６、Ｘ７、Ｘ１８、Ｘ１９、Ｘ２１、Ｘ２２、Ｘ２４、Ｘ２５、Ｘ２６、Ｘ２７、Ｘ２８、Ｘ２９、Ｘ３０およびＸ３１は、水素、ハロゲン、トリフルオロメチルおよびＣ１〜Ｃ４アルキルからなる群から独立して選択され、また、Ｘ８、Ｘ９、Ｘ１０、Ｘ１１、Ｘ１２、Ｘ１３、Ｘ１４、Ｘ１５、Ｘ１６、Ｘ１７、Ｘ２０、Ｘ２３、Ｘ３２、Ｘ３３、Ｘ３４、Ｘ３５、Ｘ３６、Ｘ３７、Ｘ３８、Ｘ３９、Ｘ４０、Ｘ４１およびＸ４２は、水素、ヒドロキシル、アルコキシ、アミノ、ハロゲン、シアノ、トリフルオロメチルおよびＣ１〜Ｃ４アルキルからなる群から独立して選択され、
Ｌ１、Ｌ２、Ｌ３、Ｌ４およびＬ６は、ＣＨおよびＮからなる群から独立して選択され、
Ｌ５は、ＣＲ１５ａＲ１５ｂ、ＯおよびＮＲ１５ｃからなる群から選択され、ここで、Ｒ１５ａおよびＲ１５ｂは、水素、Ｃ１〜Ｃ４アルキル、ヒドロキシルおよびアルコキシから独立して選択され、また、Ｒ１５ｃは、水素、Ｃ１〜Ｃ４アルキル、アシルおよびスルホニルからなる群から選択され、
Ｌ１０は、ＣＲ３５ａＲ３５ｂ、ＯおよびＯＣ（＝Ｏ）Ｏからなる群から選択され、ここで、Ｒ３５ａおよびＲ３５ｂは、水素、Ｃ１〜Ｃ４アルキル、ヒドロキシルおよびアルコキシから独立して選択され、
Ｘ１は、水素、ハロゲン、トリフルオロメチルおよびＣ１〜Ｃ４アルキルからなる群から選択され、または、Ｘ１およびＲ７は、一緒になって五または六員環を形成し、
Ｘ２、Ｘ３およびＸ４は、水素、ハロゲン、トリフルオロメチルおよびＣ１〜Ｃ４アルキルからなる群から独立して選択され、
Ｘ４３およびＸ４４は、場合によって存在し、存在する場合、独立してＣ１〜Ｃ４アルキル、ヒドロキシル、アルコキシおよびトリフルオロメチルからなる群から選択され、または、Ｘ４３およびＲ２７は、一緒になって五または六員環を形成し、および、
Ｙ１は、Ｃ（＝Ｏ）、ＯおよびＮＲ１６からなる群から選択され、ここで、Ｒ１６は、水素、Ｃ１〜Ｃ４アルキル、アシルおよびスルホニルからなる群から選択され、
ｚは、０、１、２または３であり、および
Ｚは、（Ａｒ）−ＣＨＲ８ａＣＨＲ９ａ−（Ｌ６）、（Ａｒ）−ＣＲ８ｂ＝ＣＲ９ｂ−（Ｌ６）および−（Ａｒ）−Ｃ≡Ｃ−（Ｌ６）からなる群から選択され、ここで、（Ａｒ）はフェニル環との結合部位、また（Ｌ６）はＬ６との結合部位を示し、Ｒ８ａおよびＲ９ａは、水素、Ｃ１〜Ｃ４アルキル、ヒドロキシル、アルコキシ、オキソおよびトリフルオロメチルからなる群から独立して選択され、Ｒ８ｂおよびＲ９ｂは、水素、Ｃ１〜Ｃ４アルキル、フルオロ、ヒドロキシル、アルコキシおよびトリフルオロメチルからなる群から独立して選択され、または、Ｒ８ａおよびＲ９ａは、一緒になって三員環を形成し、または、Ｒ８ａおよびＲ１０は、一緒になって五または六員環を形成し、または、Ｒ８ａおよびＸ４は、一緒になって五または六員環を形成し、または、Ｒ９ａおよびＸ４は、一緒になって五または六員環を形成し、または、Ｒ８ｂおよびＸ４は、一緒になって五または六員環を形成し、または、Ｒ９ｂおよびＸ４は、一緒になって五または六員環を形成する。］
【請求項２】
Ｒ１が、−ＣＨ（ＣＨ３）ＣＨ２ＣＨ３、−ＣＨ（ＣＨ３）２、
【化５】
2013509434.tif 000266
であり、
Ｒ２ａおよびＲ４ｂが、それぞれ−ＣＨ３であり、
Ｒ３ａが、水素または−ＣＨ３であり、
Ｒ２ｂ、Ｒ３ｂ、Ｒ４ｂ、Ｒ４ｃ、Ｒ４ｄ、Ｒ５、Ｒ６およびＲ７が、それぞれ水素であり、
Ｒ９が、水素またはヒドロキシルであり、
Ｒ１０が、−ＣＨ３または−ＣＨ２ＣＨ３であり、
Ａｒが、
【化６Ａ】
2013509434.tif 000267
【化６Ｂ】
2013509434.tif 000268
であり、
Ｌ１、Ｌ２、Ｌ３、Ｌ４、Ｌ５およびＬ６が、それぞれＣＨであり、
Ｘ１が、フルオロであり、かつＸ２、Ｘ３およびＸ４が、水素であり、または、Ｘ２が、フルオロであり、かつＸ１、Ｘ３およびＸ４が、水素であり、または、Ｘ３はフルオロであり、かつＸ１、Ｘ２およびＸ４が、水素であり、または、Ｘ４が、フルオロであり、かつＸ１、Ｘ２およびＸ３が、水素であり、または、Ｘ２およびＸ３が、フルオロであり、かつＸ１およびＸ４が、水素であり、
Ｙが、Ｏであり、また、
Ｚが、ＣＨ２ＣＨ２またはＣ≡Ｃである、請求項１に記載の式（Ｉ）の化合物またはその薬学的に許容される塩。
【請求項３】
Ｔが、
【化７Ａ】
2013509434.tif 000269
【化７Ｂ】
2013509434.tif 000270
【化７Ｃ】
2013509434.tif 000271
【化７Ｄ】
2013509434.tif 000272
【化７Ｅ】
2013509434.tif 000273
【化７Ｆ】
2013509434.tif 000274
からなる群から選択され、式中、（ＮＡ）は、式（Ｉ）のＮＲ４ａへの結合部位を示し、（ＮＢ）は、式（Ｉ）のＮＲ４ｃへの結合部位を示し、またＰｇは窒素保護基である、請求項１に記載の式（Ｉ）の化合物。
【請求項４】
以下の構造を有する請求項１に記載の化合物またはその薬学的に許容される塩。
【化８Ａ】
2013509434.tif 000275
【化８Ｂ】
2013509434.tif 000276
【請求項５】
（ａ）請求項１に記載の化合物、および
（ｂ）薬学的に許容される担体、賦形剤または希釈剤
を含む医薬品組成物。
【請求項６】
（ａ）請求項４に記載の化合物および
（ｂ）薬学的に許容される担体、賦形剤または希釈剤
を含む医薬品組成物。
【請求項７】
（ａ）請求項１に記載の化合物、
（ｂ）１種または複数の追加の治療剤、および
（ｃ）薬学的に許容される担体、賦形剤または希釈剤
を含む医薬品組成物。
【請求項８】
追加の治療剤が、ＧＬＰ−１アゴニスト、ＤＰＰ−ＩＶ阻害薬、アミリンアゴニスト、ＰＰＡＲ−αアゴニスト、ＰＰＡＲ−γアゴニスト、ＰＰＡＲ−α／γデュアルアゴニスト、ＧＤＩＲまたはＧＰＲ１１９アゴニスト、ＰＴＰ−１Ｂ阻害薬、ペプチドＹＹアゴニスト、１１β−ヒドロキシステロイドデヒドロゲナーゼ（１１β  −    ＨＳＤ）−１阻害薬、腎ナトリウムグルコース共輸送体２型（ＳＧＬＴ−２）阻害薬、グルカゴンアンタゴニスト、グルコキナーゼ活性剤、α−グルコシダーゼ阻害薬、グルココルチコイドアンタゴニスト、グリコーゲン合成酵素キナーゼ３β（ＧＳＫ−３β）阻害薬、グリコーゲンホスホリラーゼ阻害薬、ＡＭＰ活性化プロテインキナーゼ（ＡＭＰＫ）活性剤、フルクトース−１，６−ビスホスファターゼ阻害薬ｆｒｕｃｔｏｓｅ−１，６−ｂｉｐｈｏｓｐｈａｔａｓｅ、スルホニル尿素受容体アンタゴニスト、網膜様Ｘ受容体活性剤、５ＨＴ１ａアゴニスト、５ＨＴ２ｃアゴニスト、５ＨＴ６アンタゴニスト、カンナビノイドｃａｎｎａｂｉｏｉｄアンタゴニストまたはインバースアゴニスト、メラニン凝集ホルモン（ＭＣＨ−１）アンタゴニスト、メラノコルチン−４（ＭＣ４）アゴニスト、レプチンアゴニスト、レチノイン酸受容体アゴニスト、ステアロイルＣｏＡデサチュラーゼ−１（ＳＣＤ−１）阻害薬、ニューロペプチドＹ  Ｙ２受容体アゴニスト、ニューロペプチドＹ  Ｙ４受容体アゴニスト、ニューロペプチドＹ  Ｙ５受容体アンタゴニスト、神経細胞ニコチン受容体α４β２アゴニスト、ジアシルグリセロールアシル基転移酵素１（ＤＧＡＴ−１）阻害薬、甲状腺受容体アゴニスト、リパーゼ阻害薬、脂肪酸合成酵素阻害薬、グリセリン−３−ホスフェートアシル基転移酵素阻害薬、ＣＰＴ−１刺激薬、α１Ａ−アドレナリン受容体アゴニスト、α２Ａ−アドレナリン受容体アゴニスト、β３−アドレナリン受容体アゴニスト、ヒスタミンＨ３受容体アンタゴニスト、コレシストキニンＡ受容体アゴニストおよびＧＡＢＡ−Ａアゴニストからなる群から選択される、請求項7に記載の医薬品組成物。
【請求項９】
ＧＬＰ−１アゴニストが、ＧＬＰ−１、ＧＬＰ−１（７−３６）アミド、エキセナチド（エキセンジン−４）、リラグルチド（ＮＮ２２１１）、ギラチド、アルビグルチド（ＧＳＫ−７１６１５５、アルブゴン）、タスポグルチド、ＧＬＰ１−Ｉ．Ｎ．Ｔ．，ＧＬＰ−１ＤＵＲＯＳ，ＡＣ２５９２，ＡＣ２９９３ＬＡＲ，ＡＤＸ４（ＰＡＭ），ＡＲＩ−２２５５，ＡＲＩ−２６５１，ＢＲＸ−０５８５（ＧＬＰ−１−Ｔｆ），ＣＪＣ−１１３１，ＣＪＣ−１１３４−ＰＣ（ＰＣ−ＤＡＣ（商標）：エキセンジン−４），ＣＳ−８７２，ＡＶＥ−００１０（ＺＰ−１０），ＢＩＭ５１０７７（Ｒ−１５８３），ＢＩＭ−５１１８２，ＤＡ３０７１，ＧＴＰ−０１０，ＩＴＭ−０７７，ＳＵＮＥ７００１，ＴＨ−０３１８，ＴＨ−０３９６，ＴＴＰ−８５４，ＬＹ−３１５９０２およびＬＹ−３０７１６１からなる群から選択される、請求項８に記載の医薬品組成物。
【請求項１０】
ＤＰＰ−ＩＶ阻害薬が、シタグリプチン、ビダグリプチン、サキサグリプチン（ＢＭ−４７７１１８）、アログリプチン（ＳＹＲ３２２）、ＡＢＴ−２７９，ＡＬＳ−２０４２６，ＡＲＩ２２４３，ＡＭ６２２，ＡＳＰ８４９７，ＤＡ１２２９，ＤＢ２９５，Ｅ３０２４，ＦＥ９９９０１１，ＧＲＣ−８２００，ＫＲ−６２４３６，ＫＲＰ１０４，ＭＰ−５１３，ＰＨＸ１１４９，ＰＳＮ９３０１，ＳＫ−０４０３，ＳＹＲ６１９，ＴＡ−６６６６，ＴＡＫ１００およびＶＭＤ−７００からなる群から選択される、請求項８に記載の医薬品組成物。
【請求項１１】
アミリンアゴニストが、アミリン、プラムリンチド、ＭＢＰ−０２５０およびＰＸ８１１０１６からなる群から選択される、請求項８に記載の医薬品組成物。
【請求項１２】
ＰＰＡＲ−γアゴニストが、ピオグリタゾン、リボグリタゾン、ロシグリタゾンおよびトログリタゾンからなる群から選択される、請求項８に記載の医薬品組成物。
【請求項１３】
アゴニストは、ラガグリタザール、テサグリタザール、ムラグリタザール、アレグリタザール、セボグリタザール、Ｒ１４３９，ＰＬＸ２０４（ＰＰＭ−２０４）からなる群から選択されるＰＰＡＲ−α／γデュアルアゴニストである、請求項８に記載の医薬品組成物。
【請求項１４】
ＰＴＰ−１Ｂ阻害薬がＩＳＩＳ１１３７１５およびＫＲ６１６３９からなる群から選択される、請求項８に記載の医薬品組成物。
【請求項１５】
５−ＨＴ２ｃアゴニストは、ロルカセリン、バビカセリン（ＳＣＡ−１３６）、ＡＴＨＸ−１０５、ＢＶＴ９３３（ＧＷ８７６１６７），ＩＫ２６４，ＬＹ４４８１００，ＭＫ−２１２，ＯＲＧ−１２９６２，ＶＲ１０６５，ＷＡＹ−１６３９０９およびＹＭ３４８からなる群から選択される、請求項８に記載の医薬品組成物。
【請求項１６】
カンナビノイドｃａｎｎａｂｉｏｉｄアンタゴニストまたはインバースアゴニストが、リモナバント、タラナバント（ＭＫ−０３６４）、スリナバント、ＡＶＥ１６２５、ＡＶＮ３４２、ＣＰ−９４５，５９８、Ｅ−６７７６、ＧＲＣ１０３８９、ＳＬＶ−３１９、ＳＲ１４７７７８、ＴＭ３８８３７およびＶ２４３４３からなる群から選択される、請求項８に記載の医薬品組成物。
【請求項１７】
ペプチドＹＹアゴニストが、ペプチドＹＹおよびペプチドＹＹ３−３６（ＡＣ−１６２３５２）からなる群から選択される、請求項８に記載の医薬品組成物。
【請求項１８】
リパーゼ阻害薬がオルリスタットおよびセチリスタットからなる群から選択される、請求項８に記載の医薬品組成物。
【請求項１９】
α−グルコシダーゼ阻害薬が、アカルボース、ミグリトールおよびボグリボースからなる群から選択される、請求項８に記載の医薬品組成物。
【請求項２０】
ＳＧＬＴ−２阻害薬が、ダパグリフロジン、レモグリフロジン、セルグリフロジン、ＡＶＥ２２６８、ＧＳＫ１８９０７５からなる群から選択される、請求項８に記載の医薬品組成物。
【請求項２１】
１１β−ＨＳＤ−１阻害薬が、ＩＮＣＢ１３７３９，ＢＶＴ．３４９８，ＢＶＴ．２７３３，ＡＭＧ２２１，ＰＦ−９１５２７５からなる群から選択される、請求項８に記載の医薬品組成物。
【請求項２２】
グルコキナーゼ阻害薬が、Ｒ１４４０／ＧＫ３、ＲＯ−２８−１６７５、ＰＳＮ０１０およびＡＲＲＹ−４０３からなる群から選択される、請求項８に記載の医薬品組成物。
【請求項２３】
追加の治療剤が、メトホルミン、シブトラミン、フェンテルミン、ベタヒスチン、メタンフェタミン、ベンズフェタミン、フェンジメトラジン、ジエチルプロピオン、ブプロピオン、トピラマート、カルブタミド、クロルプロパミド、グリベンクラミド（グリブライド）、グリクラジド、グリメピリド、グリピジド、グリキドン、ミチグリニド、ナテグリニド、レパグリニド、トラザミド、トルブタミド、またその薬学的に許容される塩からなる群から選択される、請求項８に記載の医薬品組成物。
【請求項２４】
医薬品用量単位を含む１つまたは複数の容器を含むキットであって、請求項１に記載の１種または複数の化合物またはその薬学的に許容される塩の有効量をさらに含み、容器はその使用のための随意の説明書と共に包装されているキット。
【請求項２５】
哺乳動物においてＧＲＬＮ（ＧＨ−Ｒ１ａ）受容体活性を調節する方法であって、ＧＲＬＮ（ＧＨ−Ｒ１ａ）受容体活性を調節する、有効量の請求項１に記載の化合物を前記哺乳動物に投与すること含む方法。
【請求項２６】
請求項１に記載の有効量の化合物を、その必要性のある対象に投与することを含む、代謝および／または内分泌障害を治療する方法。
【請求項２７】
代謝性および／または内分泌障害が、肥満症または肥満症関連症状、糖尿病、メタボリック症候群、非アルコール性脂肪酸肝疾患（ＮＡＦＬＤ）、非アルコール性脂肪性肝炎（ＮＡＳＨ）および脂肪症からなる群から選択される、請求項２６に記載の方法。
【請求項２８】
請求項１に記載の有効量の化合物を、その必要性のある対象に投与することを含む、食欲障害または摂食障害を治療する方法。
【請求項２９】
食欲障害または摂食障害がプラーダー−ウィリー症候群または過食症である、請求項２８に記載の方法。
【請求項３０】
過食症が糖尿病の過食症である、請求項２９に記載の方法。
【請求項３１】
請求項１に記載の有効量の化合物を、その必要性のある対象に投与することを含む、中毒性障害を治療する方法。
【請求項３２】
中毒性障害が、アルコール依存症、薬物依存症および／または化学物質依存症を含む、請求項３１に記載の方法。
【請求項３３】
請求項１に記載の有効量の化合物を、その必要性のある対象に投与することを含む、心臓血管疾患を治療する方法。
【請求項３４】
請求項１に記載の有効量の化合物を、その必要性のある対象に投与することを含む、胃腸障害を治療する方法。
【請求項３５】
請求項１に記載の有効量の化合物を、その必要性のある対象に投与することを含む、遺伝性障害を治療する方法。
【請求項３６】
請求項１に記載の有効量の化合物を、その必要性のある対象に投与することを含む、過度増殖性障害を治療する方法。
【請求項３７】
請求項１に記載の有効量の化合物を、その必要性のある対象に投与することを含む、炎症性障害を治療する方法。
【請求項３８】
請求項１に記載の有効量の化合物を、その必要性のある対象に投与することを含む、中枢神経系（ＣＮＳ）障害を治療する方法。
【請求項３９】
【化９】
2013509434.tif 000277
からなる群から選択される大環状化合物、またはその薬学的に許容される塩。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
（関連出願の相互参照）
本出願は、２００９年１０月３０日に出願された米国特許仮出願第６１／２５６，７２７号の優先権を主張し、その開示全体は、ここに引用することによって本明細書の一部をなすものとする。
【０００２】
本発明は、グレリン（成長ホルモン分泌促進物質）受容体（ＧＲＬＮ、ＧＨ−Ｒ１ａ）のアンタゴニストまたはインバースアゴニストとして機能することが実証された、配座の定義された新規大環状化合物に関する。本発明はまた、これらの化合物の中間体、これらの化合物を含有する医薬組成物およびそれらの化合物の使用方法に関する。これらの新規大環状化合物は、代謝障害および／または内分泌障害、肥満症および肥満症関連障害、食欲障害または摂食障害、習慣性障害、心血管障害、胃腸障害、遺伝性障害、過度増殖性障害、中枢神経系障害および炎症性障害を含む一連の徴候の治療に有用である。
【背景技術】
【０００３】
ゲノミクスおよびプロテオミクスにおける研究努力によって可能となった様々な生理学的調節経路の理解の向上は、新規医薬品の発見に影響を与え始めている。特に、主要な受容体およびそれらの内因性リガンドの同定は、これらの受容体／リガンド対を治療標的として開拓する新しい機会を創出した。例えば、グレリンは、近年特性評価された２８アミノ酸ペプチドホルモンであり、様々な重要な生理学的機能を媒介することが示された（Ｋｏｊｉｍａ，  Ｍ．；  Ｈｏｓｏｄａ，  Ｈ．；  ｅｔ．ａｌ．  Ｎａｔｕｒｅ  １９９９，  ４０２，  ６５６−６６０．）。この構造の新規の特徴は、グレリンの活性に関連すると思われるＳｅｒ３のｎ−オクタノイル基の存在である。このペプチドは、１型成長ホルモン分泌促進物質受容体（ｈＧＨＳ−Ｒ１ａ）の、これまでオーファンＧタンパク質共役受容体（ＧＰＣＲ）の内因性リガンドであることが実証された（Ｈｏｗａｒｄ，Ａ．Ｄ．；Ｆｅｉｇｈｎｅｒ，Ｓ．Ｄ．；Ｃｕｌｌｙ，Ｄ．Ｆ．；ｅｔ．ａｌ．Ｓｃｉｅｎｃｅ  １９９６，２７３，９７４−９７７．）。ＧＨＳ−Ｒ１ａは、近年、その内因性リガンドが認識されてグレリン受容体（ＧＲＬＮ）として再分類された（Ｄａｖｅｎｐｏｒｔ，Ａ．Ｐ．；ｅｔ．ａｌ．Ｐｈａｒｍａｃｏｌ．Ｒｅｖ．２００５，５７，５４１−５４６）。
【０００４】
この受容体およびその内因性ペプチドリガンドの単離の前でさえ、相当な量の研究が成長ホルモン（ＧＨ）分泌を刺激できる物質の発見に向けられた。ヒトＧＨの適切な制御は、適切な身体の成長だけでなく、一連の他の重要な生理学的作用にも重要である。ＧＨおよび他のＧＨ刺激ペプチド、例えば成長ホルモン放出ホルモン（ＧＨＲＨ）および成長ホルモン放出因子（ＧＲＦ）、ならびにそれらの誘導体および類似体は、注射によって投与される。したがって、これらのプラス作用をよりうまく利用するため、ＧＨ分泌促進薬（ＧＨＳ）と称する、ＧＨ分泌を増加させる活性な経口治療薬の開発に焦点が絞られた。さらに、これらの物質の使用することにより、ＧＨの生理的パルス放出をよりそっくりに模倣できることが期待された。
【０００５】
１９７０年代後半の成長ホルモン放出ペプチド（ＧＨＲＰ）の同定を発端に（Ｂｏｗｅｒｓ，  Ｃ．Ｙ．  Ｃｕｒｒ．  Ｏｐｉｎ．  Ｅｎｄｏｃｒｉｎｏｌ．  Ｄｉａｂｅｔｅｓ  ２０００，  ７，  １６８−１７４；  Ｃａｍａｎｎｉ，  Ｆ．；  Ｇｈｉｇｏ，  Ｅ．；  Ａｒｖａｔ，  Ｅ．  Ｆｒｏｎｔ．  Ｎｅｕｒｏｓｃｉ．  １９９８，  １９，  ４７−７２；  Ｌｏｃａｔｅｌｌｉ，  Ｖ．；  Ｔｏｒｓｅｌｌｏ，  Ａ．  Ｐｈａｒｍａｃｏｌ．  Ｒｅｓ．  １９９７，  ３６，  ４１５−４２３）、多数の物質がそれらのＧＨＳとして働く可能性について研究されてきた。ＧＨ放出の刺激およびその関連で同時に起こるプラス作用に加えて、ＧＨＳは、ＨＩＶ患者および癌誘導性の食欲不振症に見られる消耗性疾病（悪液質）、高齢者の筋骨格の脆弱性、ならびに成長ホルモン欠損症を含む、様々な他の障害において有用性があると予想された。過去２５年間の多くの努力により、多数の効力のあるな、経口利用可能なＧＨＳが生み出された（Ｃｏｒｄｉｄｏ，  Ｆ．；  Ｉｓｉｄｒｏ，  Ｍ．Ｌ．；  Ｎｅｍｉｎａ，  Ｒ．；  Ｓａｎｇｉａｏ−Ａｌｖａｒｅｌｌｏｓ，  Ｓ．  Ｃｕｒｒ．  Ｄｒｕｇ  Ｄｉｓｃ．  Ｔｅｃｈ．  ２００９，  ６，  ３４−４２；  Ｉｓｉｄｒｏ，  Ｍ．Ｌ．；  Ｃｏｒｄｉｄｏ，  Ｆ．  Ｃｏｍｂ．  Ｃｈｅｍ．  Ｈｉｇｈ  Ｔｈｒｏｕｇｈｐｕｔ  Ｓｃｒｅｅｎ．  ２００６，  ９，  １７８−１８０；  Ｓｍｉｔｈ，  Ｒ．Ｇ．；  Ｓｕｎ，  Ｙ．Ｘ．；  Ｂｅａｔａｎｃｏｕｒｔ，  Ｌ．；  Ａｓｎｉｃａｒ，  Ｍ．  Ｂｅｓｔ  Ｐｒａｃｔ．  Ｒｅｓ．  Ｃｌｉｎ．  Ｅｎｄｏｃｒｉｎｏｌ．  Ｍｅｔａｂ．  ２００４，  １８，  ３３３−３４７；  Ｆｅｈｒｅｎｔｚ，  Ｊ．−Ａ．；  Ｍａｒｔｉｎｅｚ，  Ｊ．；  Ｂｏｅｇｌｉｎ，  Ｄ．；  Ｇｕｅｒｌａｖａｉｓ，  Ｖ．；  Ｄｅｇｈｅｎｇｈｉ，  Ｒ．  ＩＤｒｕｇｓ  ２００２，  ５，  ８０４−８１４；  Ｓｖｅｎｓｓｏｎ，  Ｊ．  Ｅｘｐ．  Ｏｐｉｎ．  Ｔｈｅｒ．  Ｐａｔｅｎｔｓ  ２０００，  １０，  １０７１−１０８０；  Ｎａｒｇｕｎｄ，  Ｒ．Ｐ．；  Ｐａｔｃｈｅｔｔ，  Ａ．Ａ．；  Ｂａｃｈ，  Ｍ．Ａ．；  Ｍｕｒｐｈｙ，  Ｍ．Ｇ．；  Ｓｍｉｔｈ，  Ｒ．Ｇ．  Ｊ．  Ｍｅｄ．  Ｃｈｅｍ．  １９９８，  ４１，  ３１０３−３１２７；  Ｇｈｉｇｏ，  Ｅ；  Ａｒｖａｔ，  Ｅ．；  Ｃａｍａｎｎｉ，  Ｆ．  Ａｎｎ．  Ｍｅｄ．  １９９８，  ３０，  １５９−１６８．）。これらには、ヘキサレリン（Ｚｅｎｔａｒｉｓ）およびイパモレリン（Ｎｏｖｏ  Ｎｏｒｄｉｓｋ）などの小型のペプチド、ならびにカプロモレリン（ｃａｐｒｏｍｏｒｅｌｉｎ）（Ｐｆｉｚｅｒ）、Ｌ−２５２，５６４（Ｍｅｒｃｋ）、ＭＫ−０６７７（Ｍｅｒｃｋ）、ＮＮ７０３（タビモレリン、Ｎｏｖｏ  Ｎｏｒｄｉｓｋ）、Ｇ−７２０３（Ｇｅｎｅｎｔｅｃｈ）、Ｓ−３７４３５（Ｋａｋｅｎ）およびＳＭ−１３０８６８（Ｓｕｍｉｔｏｍｏ）などの小分子が挙げられる。しかし、このような薬剤での臨床試験は、数ある中でも、長期治療での効力の欠乏、またはシトクロムＰ４５０酵素の不可逆的阻害を含む、望ましくない副作用が原因で期待外れの結果となっている（Ｚｄｒａｖｋｏｖｉｃ  Ｍ．；Ｏｌｓｅ，Ａ．Ｋ．；Ｃｈｒｉｓｔｉａｎｓｅｎ，Ｔ．；ｅｔ．ａｌ．Ｅｕｒ．���．Ｃｌｉｎ．Ｐｈａｒｍａｃｏｌ．２００３，５８，６８３−６８８．）。
【０００６】
合成ＧＨＳの使用によって実際に可能となったヒト受容体のクローニング、およびそれに続くグレリンの同定は、アゴニストとアンタゴニストの両方の研究のための様々な新規の化学分野を開いた（Ｃａｒｐｉｎｏ，Ｐ．Ａ．Ｅｘｐ．Ｏｐｉｎ．Ｔｈｅｒ  Ｐａｔｅｎｔｓ  ２００２，１２，１５９９−１６１８）。特に、グレリンペプチドは、ＧＨ放出の刺激以外に、食物摂取および食欲の調整、体重増加の促進、エネルギーバランスの制御、および胃腸（ＧＩ）の運動性および胃酸分泌およびグルコースホメオスタシスの調節を含む、他の複数の生理学的機能を有することが見出された。また、このホルモンは、日内周期および記憶の制御に関係付けられている。また、グレリンは、骨代謝および炎症過程に役割を果たすように思われる（Ｖａｎ  ｄｅｒ  Ｌｅｌｙ，  Ａ．Ｊ．；  Ｔｓｃｈｏｐ，  Ｍ．；  Ｈｅｉｍａｎ，  Ｍ．Ｌ．；  Ｇｈｉｇｏ，  Ｅ．  Ｅｎｄｏｃｒｉｎｅ  Ｒｅｖ．  ２００４，  ２５，  ４２６−４５７；  Ｉｎｕｉ，  Ａ．；  Ａｓａｋａｗａ，  Ａ．；  Ｂｏｗｅｒｓ，  Ｃ．Ｙ．；  Ｍａｎｔｏｖａｎｉ，  Ｇ．；  Ｌａｖｉａｎｏ，  Ａ．；  Ｍｅｇｕｉｄ，  Ｍ．Ｍ．；  Ｆｕｊｉｍｉｙａ，  Ｍ．  ＦＡＳＥＢ  Ｊ．  ２００４，  １８，  ４３９−４５６；  Ｄｉａｎｏ，  Ｓ．  Ｆａｒｒ，  Ｓ．Ａ．；  Ｂｅｎｏｉｔ，  Ｓ．Ｃ．；  ｅｔ  ａｌ．  Ｎａｔ．  Ｎｅｕｒｏｓｃｉｅｎｃｅ  ２００６，  ９，  ３８１−３８８；  Ｋｏｊｉｍａ，  Ｋ．；  Ｋａｎｇａｗａ，  Ｋ．  Ｎａｔ．  Ｃｌｉｎ．  Ｐｒａｃｔ．  Ｅｎｄｏｃｒｉｎｏｌ．  Ｍｅｔａｂ．  ２００６，  ２，  ８０−８８；  Ｋａｉｙａ，  Ｈ．；  Ｍｉｙａｚａｔｏ，  Ｍ．；  Ｋａｎｇａｗａ，  Ｋ．；  Ｐｅｔｅｒ，  Ｒ．Ｅ．；  Ｕｎｎｉａｐｐａｎ，  Ｓ．  Ｃｏｍｐ．  Ｂｉｏｃｈｅｍ．  Ｐｈｙｓｉｏｌ．  Ａ  ２００８，  １４９，  １０９−１２８．）。
【０００７】
これらの多彩なの生理学的作用によって、ＧＨ分泌機能に関連するものとは別の治療適応のための、グレリン受容体の調節の研究が増加している（Ｄｏｄｇｅ，  Ｊ．Ａ．；  Ｈｅｉｍａｎ，  Ｍ．Ｌ．  Ａｎｎ．  Ｒｅｐ．  Ｍｅｄ．  Ｃｈｅｍ．  ２００３，  ３８，  ８１−８８．）。例えば、国際特許出願公開ＷＯ２００６／００９６４５およびＷＯ２００６／００９６７４には、胃腸（ＧＩ）障害の治療に用いるグレリン調節剤としての大環状化合物の使用が記載されている。同様に、ＷＯ２００６／０２０９３０およびＷＯ２００６／０２３６０８には、そのようなＧＩ障害に用いられる構造上異なるグレリンアゴニスト（成長ホルモン分泌促進物質）が記載されている。その上、国際特許出願公開ＷＯ２００４／０９１２４およびＷＯ２００５／６８６３９には、肥満症の治療のためのワクチンとして用いることのできる、グレリンのＮ末端からの短いペプチド配列に由来する修飾されたウイルス粒子が記載されている。肥満症の別のワクチン法が、ＷＯ２００４／０２４１８３に記載されている。
【０００８】
驚くことではないが、食欲および摂食の制御におけるグレリンの役割によって、多数のペプチドホルモンおよびそれらの受容体の調節を実際に有するように、グレリンのアンタゴニストおよびインバースアゴニストの新規の抗肥満医薬品としての開発にも特別な関心  に拍車がかけられている（Ｃｒｏｗｌｅｙ，  Ｖ．Ｅ．Ｆ．；  Ｙｅｏ，  Ｇ．Ｓ．Ｈ．；  Ｏ−Ｒａｈｉｌｌｙ，  Ｓ．  Ｎａｔ．  Ｒｅｖ．  Ｄｒｕｇ  Ｄｉｓｃ．  ２００２，  １，  ２７６−２８６；  Ｓｐａｎｓｗｉｃｋ，  Ｄ．；  Ｌｅｅ，  Ｋ．  Ｅｘｐ．  Ｏｐｉｎ．  Ｅｍｅｒｇｉｎｇ  Ｄｒｕｇｓ  ２００３，  ８，  ２１７−２３７；  Ｈｏｒｖａｔｈ，  Ｔ．Ｌ．；  Ｃａｓｔａｎｅｄａ，  Ｔ．；  Ｔａｎｇ−Ｃｈｒｉｓｔｅｎｓｅｎ，  Ｍ．；  Ｐａｇｏｔｔｏ，  Ｕ．；  Ｔｓｃｈｏｐ，  Ｍ．Ｈ．  Ｃｕｒｒ．  Ｐｈａｒｍ．  Ｄｅｓｉｇｎ  ２００３，  ９，  １３８３−１３９５；  Ｈｉｇｇｉｎｓ，  Ｓ．Ｃ．；  Ｇｕｅｏｒｇｕｉｅｖ，  Ｍ．；  Ｋｏｒｂｏｎｉｔｓ，  Ｍ．  Ａｎｎ．  Ｍｅｄ．  ２００７，  ３９，  １１６−１３６；  Ｃａｒｐｉｎｏ，  Ｐ．Ａ．；  Ｈｏ，  Ｇ．  Ｅｘｐ．  Ｏｐｉｎ．  Ｔｈｅｒ．  Ｐａｔ．  ２００８，  １８，  １２５３−１２６３；  Ｓｏａｒｅｓ，  Ｊ．−Ｂ．；  Ｒｏｎｃｏｎ−Ａｌｂｕｑｕｅｒｑｕｅ，  Ｒ．，  Ｊｒ．；  Ｌｅｉｔｅ−Ｍｏｒｅｉｒａ，  Ａ．  Ｅｘｐ．  Ｏｐｉｎ．  Ｔｈｅｒ．  Ｔａｒｇｅｔｓ  ２００８，  １２，  １１７７−１１８９；  Ｕｋｋｏｌａ，  Ｏ．  Ｃｕｒｒ．  Ｐｒｏｔ．  Ｐｅｐｔ．  Ｓｃｉ．  ２００９，  １０，  ２−７；  Ｃｏｎｓｔａｎｔｉｎｏ，  Ｌ．；  Ｂａｒｌｏｃｃｏ，  Ｄ．  Ｆｕｔ．  Ｍｅｄ．  Ｃｈｅｍ．  ２００９，  １，  １５７−１７７；  Ｃｈｏｌｌｅｔ，  Ｃ．；  Ｍｅｙｅｒ，  Ｋ．；  Ｂｅｃｋ−Ｓｉｃｋｉｎｇｅｒ，  Ａ．Ｇ．  Ｊ．  Ｐｅｐｔ．  Ｓｃｉ．  ２００９，  １５，  ７１１−７３０．）。ＧＨＳの研究において優位なグレリンアゴニストとは対照的に、グレリンのアンタゴニストおよびインバースアゴニストに関する探索の研究の分野は、有意にそれほど成熟していない。米国特許出願公開第２００３／０２１１９６７号およびＷＯ０１／８７３３５は、肥満症および関連障害を含む様々な疾患状態の治療としてのグレリンアンタゴニストの使用に取り組んでいる。同様に、ＷＯ０１／５６５９２およびＵＳ２００１／０２００１２には、食物摂取の制御のためのグレリンアンタゴニストの使用が記載されている。同様に、ＷＯ２００４／００４７７２には、糖尿病、肥満症および食欲制御の治療としてのＧＨＳ−Ｒアンタゴニストの使用が記載されている。腸炎の治療のためのそれらの使用も記載されている（国際特許出願公開ＷＯ２００４／０８４９４３；米国特許出願公開第２００７／００２５９９１号）。しかし、これらの出願には、この目的のための具体的な化合物の例は、グレリンペプチドおよびその類似体以外には提示されていない。より最近、これも認知、記憶および他のＣＮＳ障害の改善に効果的であると主張されるオキサジアゾールグレリンアンタゴニストが報告されている（ＷＯ２００５／１１２９０３）。グレリン発現の減少による、体温調節、睡眠、食欲、食物摂取、肥満症および他のグレリン介在症状の��節が、米国特許出願公開第２０１０／０１９６３９６号に記載されている。
【０００９】
また、グレリンのアンタゴニストおよびインバースアゴニストは、糖尿病、網膜症などの糖尿病に起因する合併症、心血管疾患、高血圧症、異脂肪血症、骨関節炎および特定の種類の癌を含む、肥満症関連症状の罹患率の減少に役割を果たすと考えられている。実際、動物実験で見られる抗肥満効果に加えて、ＧＲＬＮ  （ＧＨＳ−Ｒ１ａ）受容体を有しないように操作された遺伝子組み換えラットは、食物摂取の低下、脂肪沈着の縮小、および体重の減少を示した。しかし、心血管機能の制御およびストレス応答ならびに成長ホルモンの放出を含む、多数の生理学的プロセスにおけるホルモンの関与は、この戦略の潜在的な欠点を示している可能性がある。したがって、グレリンの完全な欠損は望ましくないが、肥満症および他の代謝障害を制御するには抑制で十分であり得る。注目すべきは、グレリンノックアウトマウスでの最近の研究から、これらの動物が、他の生理学的特徴の中でも大きさと食物摂取の予想された改変を示さないことが明らかとなったことである。（Ｓｕｎ，Ｙ．；  Ａｈｍｅｄ，  Ｓ．；  Ｓｍｉｔｈ，  Ｒ．Ｇ．  Ｍｏｌ．  Ｃｅｌｌ  Ｂｉｏｌ．  ２００３，  ２３，  ７９７３−７９８１；  Ｗｏｒｔｌｅｙ，  Ｋ．Ｅ．；  Ａｎｄｅｒｓｏｎ，  Ｋ．Ｄ．；  Ｇａｒｃｉａ，  Ｋ．；  ｅｔ．ａｌ．  Ｐｒｏｃ．  Ｎａｔｌ．  Ａｃａｄ．  Ｓｃｉ．  ＵＳＡ  ２００４，  １０１，  ８２２７−８２３２．）
【００１０】
グレリンは、インスリン放出および血糖の調節の主要な役割を果たすため、グレリン受容体の修飾因子は、糖尿病およびメタボリック症候群の治療に用途がある（Ｙａｄａ，  Ｔ．；  Ｄｅｚａｋｉ，  Ｋ．  Ｓｏｎｅ，  Ｈ．；  ｅｔ．ａｌ．  Ｃｕｒｒ．  Ｄｉａｂ．  Ｒｅｖ．  ２００８，  ４，  １８−２３；  Ｐｕｌｋｋｉｎｅｎ，  Ｌ．；  Ｕｋｋｏｌａ，  Ｏ．；  Ｋｏｌｅｈｍａｉｎｅｎ，  Ｍ．；  Ｕｕｓｉｔｕｐａ，  Ｍ．  Ｉｎｔ．  Ｊ．  Ｐｅｐｔ．  ２０１０，  ｄｏｉ：  １０．１１５５／２０１０／２４８９４８．）。グレリンは、グルコース刺激インスリン分泌を減少させ、インスリン感受性を低下させ、安静時／空腹時血糖レベルを増加し、エネルギー代謝を脂肪からグルコースへ移し、食物摂取量およびグルコースホメオスタシスのインスリン依存性ＣＮＳ調節に、間接的に拮抗する（Ｓｕｎ，  Ｙ．；  Ａｓｎｉｃａｒ，  Ｍ．；  Ｓｍｉｔｈ，  Ｒ．Ｇ．  Ｎｅｕｒｏｅｎｄｏｃｒｉｎｏｌ．  ２００７，  ８６，  ２１５−２２８；  Ｄｅｚａｋｉ，  Ｋ．；  Ｓｏｎｅ，  Ｈ．；  Ｙａｄａ，  Ｔ．  Ｐｈａｒｍａｃｏｌ．  Ｔｈｅｒ．  ２００８，  １１８，  ２３９−２４９；  Ｔｏｎｇ，  Ｊ．；  Ｐｒｉｇｅｏｎ，  Ｒ．Ｌ．；  Ｄａｖｉｓ，  Ｈ．Ｗ．；  ｅｔ．ａｌ．  Ｄｉａｂｅｔｅｓ  ２０１０，  ５９，  ２１４５−２１５１．）。したがって、グレリンのアンタゴニストおよび／またはインバースアゴニストは、糖尿病およびメタボリック症候群などの関連症状の治療または予防に有益な効果があるであろう。
【００１１】
近年、ＢＩＭ−２８１６３がＧＨＳ−Ｒ１ａ受容体でアンタゴニストとして働き、天然のグレリンによる受容体活性化を阻害すると報告された。しかし、この同じ分子は体重増加および食物摂取を刺激する点に関して完全アゴニストである。これおよび関連するペプチド性グレリン類似体は、グレリンのＧＨ調節活性を、体重増加および食欲に関するペプチドの作用から効果的に分離する（Ｈａｌｅｍ，  Ｈ．Ａ．；  Ｔａｙｌｏｒ，  Ｊ．Ｅ．；  Ｄｏｎｇ，  Ｊ．Ｚ．；  ｅｔ．ａｌ．  Ｅｕｒ．  Ｊ．  Ｅｎｄｏｃｒｉｎｏｌ．  ２００４，  １５１，  Ｓ７１−Ｓ７５．）。同じように、ＷＯ２００６／００９６４５およびＷＯ２００６／００９６７４に記載される大環状グレリンアゴニストは動物モデルにおいてＧＨ放出作用からのＧＩ作用の分離を報告している。
【００１２】
グレリン受容体自体に加えて、グレリンの生物学的経路の別の要素である、酵素、グレリンＯ−アシル基転移酵素（ＧＯＡＴ）が、抗肥満症標的として示唆されている（Ｒｏｍｅｒｏ，  Ａ．；  Ｋｉｒｃｈｎｅｒ，  Ｈ．；  Ｈｅｐｐｎｅｒ，  Ｋ．；  ｅｔ．ａｌ．  Ｅｕｒ．  Ｊ．  Ｅｎｄｏｃｒｉｎｏｌ．  ２０１０，  １６３，  １−８；  国際特許出願公開ＷＯ２００８／０７９７０５；  Ｇｕｔｉｅｒｒｅｚ，  Ｊ．Ａ．；  Ｓｏｌｅｎｂｅｒｇ，  Ｐ．Ｊ．；  Ｐｅｒｋｉｎｓ，  Ｄ．Ｒ．；  ｅｔ．ａｌ．  Ｐｒｏｃ．  Ｎａｔｌ．  Ａｃａｄ．  Ｓｃｉ．  ２００８，  １０５，  ６３２０−６３２５．）。ＧＯＡＴは、グレリンのＳｅｒ３のｎ−オクタノイル部分を組み込む翻訳後修飾に関与する。上述のように、このアシル化された形態は、インビボでの活性種である。ペンタペプチド（Ｙａｎｇ，  Ｊ．；  Ｚｈａｏ，  Ｔ．Ｊ．；  Ｇｏｌｄｓｔｅｉｎ，  Ｊ．Ｌ．；  ｅｔ．ａｌ．  Ｐｒｏｃ．  Ｎａｔｌ．  Ａｃａｄ．  Ｓｃｉ．  ２００８，  １０５，  １０７５０−１０７５５）、小分子（ＢＫ１１１４、米国特許出願公開第２０１０／００８６９５５号）および二基質（国際特許出願公開ＷＯ２０１０／０３９４６１）のＧＯＡＴの阻害薬が報告されているが、この手法は、まだヒトには立証されていない。
【００１３】
ヒト症候性肥満症の最も一般的な形態であるプラダー・ウィリー症候群は、逆説的にも、ＧＨ欠乏症および摂食後も低下しない高いグレリンレベルを特徴とする。（Ｃｕｍｍｉｎｇｓ，  Ｄ．Ｅ．；  Ｃｌｅｍｅｎｔ，  Ｋ．；  Ｐｕｒｎｅｌｌ，  Ｊ．Ｑ．；  ｅｔ．ａｌ．  Ｎａｔ．  Ｍｅｄ．  ２００２，  ８，  ６４３−６４４．）グレリンのアンタゴニストは、この症候群の治療にも同様に役割を果たせるであろう。
【００１４】
非アルコール性脂肪肝疾患（ＮＡＦＬＤ）は、肝細胞での著しい脂質沈着の形成を特徴とする一連の病理学的症状である。ＮＡＦＬＤは、一般人口の２０〜４０％が罹患する与える、工業化西洋諸国において最も一般的な肝臓の問題である。ＩＩ型糖尿病にかかった患者のＮＡＦＬＤの罹患率は７０％にもなり得、肥満個人のＮＡＦＬＤ罹患率は５８〜７４％である。ＮＡＦＬＤは、非アルコール性脂肪性肝炎（ＮＡＳＨ）に進み、これは肝硬変の発症の可能性を増加させる。（Ａｎｇｕｌｏ，  Ｐ．  Ｎｅｗ  Ｅｎｇｌ．Ｊ．  Ｍｅｄ．  ２００２，  ３４６，  １２２１−１２３１；  Ｐｅｒｌｅｍｕｔｅｒ，  Ｇ．；  Ｂｉｇｏｒｇｎｅ，  Ａ．；  Ｃａｓｓａｒｄ−Ｄｏｕｌｃｉｅｒ，  Ａ．−Ｍ．；  Ｎａｖｅａｕ，  Ｓ．  Ｎａｔ．  Ｃｌｉｎ．  Ｐｒａｃｔ．  Ｅｎｄｏｃｒｉｎｏｌ．  Ｍｅｔａｂ．  ２００７，  ３，  ４５８−４６９；  Ｙｏｕｎｏｓｓｉ，  Ｚ．Ｍ．  Ａｌｉｍｅｎｔ．  Ｐｈａｒｍａｃｏｌ．  Ｔｈｅｒ．  ２００８，  ２８，  ２−１２；  Ａｌｉ，  Ｒ．；  Ｃｕｓｉ，  Ｋ．  Ａｎｎ．  Ｍｅｄ．  ２００９，  ４１，  ２６５−２７８；  Ｍａｌａｇｕａｒｎｅｒａ，  Ｍ．；  Ｄｉ  Ｒｏｓａ，  Ｍ．；  Ｎｉｃｏｌｅｔｔｉ，  Ｆ．；  Ｍａｌａｇｕａｒｎｅｒａ，  Ｌ．  Ｊ．  Ｍｏｌ．  Ｍｅｄ．  ２００９，  ８７，  ６７９−６９５．）
【００１５】
ＮＡＦＬＤには、肝臓の炎症または肝細胞の障害もしくは損傷を伴う場合と、伴わない場合もあり、過剰アルコール摂取の履歴なしで発症しうる。ＮＡＦＬＤは、メタボリック症候群の肝臓での現れであるが、またメタボリック症候群の発症も予想し得ると示唆されている。ＮＡＦＬＤは、危険因子のない患者に見られるが、糖尿病、肥満症、高血圧症および高トリグリセリド血症などの症状を有する個人は、症状を発症する危険性が最も高い。解決しがたい相関が、中心性肥満、脂肪症およびインスリン耐性の間に存在する。アディポカインおよびグレリンは、それらの代謝および／または抗炎症作用による非アルコール性脂肪肝疾患の病因と関係付けられている。新たなデータは、ＮＡＦＬＤ、グレリンおよびアディポカインの関係を示す。グレリンは、初めは正常体重の、ＮＡＦＬＤにかかった患者において高かった。末梢のグレリンは、特異的な腹部貯蔵部位、肝臓および骨格筋において脂質蓄積を誘発し、表面の皮下白色脂肪組織に影響を与えることはない。これらの作用は、自発的成長ホルモン（ＧＨ）分泌の抑制によって増大され得る。さらに、末梢のグレリンおよび脱アシルグレリンは、骨髄において脂質生成を誘発する。末梢のグレリンは、メタボリック症候群の発症に関連する腹部位置内の蓄積脂肪を保護する（Ｗｅｌｌｓ，  Ｔ．  Ｐｒｏｇ．  Ｌｉｐｉｄ  Ｒｅｓ．  ２００９，  ｄｏｉ：１０．１０１６／ｊ．ｐｌｉｐｒｅｓ．２００９．０４．００２）。ある研究は、グレリンが脂肪細胞代謝に影響を及ぼし脂質生成を刺激し得ることを示している（Ｄｅｐｏｏｒｔｅｒｅ，  Ｉ．  Ｒｅｇｕｌ．  Ｐｅｐｔ．  ２００９，  １５６，  １３−２３．）。したがって、グレリンアンタゴニストはＮＡＦＬＤおよびＮＡＳＨの治療または予防に有用であるであろう。
【００１６】
同様に、このような物質は、糖尿病性過食症に対して可能性があり得る。過食症および改変された燃料代謝は、ヒトにおける制御されていない真性糖尿病に起因する。このことは、ＮＰＹ／ＡＧＲＰ経路を通して上昇したグレリンレベルと低下したレプチンの組合せによって起こることが示唆されている。健康な対象と糖尿病の対象においてグレリンのレベルは基本的に同じであるが、糖尿病性過食症における異なるレベルのグレリンが食事療法を継続することを困難にし得、アンタゴニストが制御の補助に有用であり得る（Ｉｓｈｉｉ，  Ｓ．；  Ｋａｍｅｇａｉ，  Ｊ．；  Ｔａｍｕｒａ，  Ｈ．；  Ｓｈｉｍｉｚｕ，  Ｔ．；  Ｓｕｇｉｈａｒａ，  Ｈ．；  Ｏｉｋａｗａ，  Ｓ．  Ｅｎｄｏｃｒｉｎｏｌｏｇｙ  ２００２，  １４３，  ４９３４−４９３７；  Ｓｉｎｄｅｌａｒ，  Ｄ．  Ｋ．，  Ｍｙｓｔｋｏｗｓｋｉ，  Ｐ．，  Ｍａｒｓｈ，  Ｄ．  Ｊ．，  Ｐａｌｍｉｔｅｒ，  Ｒ．  Ｄ．；  Ｓｃｈｗａｒｔｚ，  Ｍ．  Ｗ  Ｄｉａｂｅｔｅｓ  ２００２，  ５１，  ７７８−７８３．）。
【００１７】
グレリンレベルは肝硬変において上昇し、慢性肝疾患からの合併症とともに上昇するが、インスリン様成長因子−１（ＩＧＦ−１）のレベルとは異なり、それらは肝臓機能と関連していない（Ｔａｃｋｅ，  Ｆ．；  Ｂｒａｂａｎｔ，  Ｇ．；  Ｋｒｕｃｋ，  Ｅ．；  Ｈｏｒｎ，  Ｒ．；  ｅｔ．ａｌ．  Ｊ．  Ｈｅｐａｔｏｌｏｇｙ  ２００３，  ３８，  ４４７−４５４．）。グレリンアンタゴニストは、これらの肝疾患の制御に有用であり得る。さらに、グレリンおよびその受容体は、多数の癌において過剰発現している。アンタゴニストは、癌の治療に対して可能性のある用途を有するであろう。国際特許出願公開ＷＯ０２／９０３８７には、生殖器官の癌の治療に対する手法としてＧＨＳ−Ｒ１ａを標的にする干渉戦略の使用が記載されている。
【００１８】
肥満症などの代謝障害に関して、組織の生存のための食物摂取プロセスの重要な性質により、  代替の、または冗長な経路が、影響を受けた経路を回避するために使用され得るので、単一標的に対する単一薬剤は、長期的な体重制御には不十分であり得ると推測されている。したがって、摂食／食欲制御プロセスに関与する異なる経路を標的にする複数の薬剤を同時に適用することが、最も良好な治療戦略となり得る（例えば、国際特許出願公開ＷＯ２００６／０５２６０８参照）。実際に、いくつかの成功した減量治療法は、薬物の組み合わせであった。
【００１９】
最近、グレリンの拮抗作用は、アルコール消費を減少させることが実証されている（Ｋａｕｒ，  Ｓ．；  Ｒｙａｂｉｎｉｎ，  Ａ．Ｅ．  Ａｌｃｏｈｏｌ．  Ｃｌｉｎ．  Ｅｘｐ．  Ｒｅｓ．  ２０１０，  ３４，  １５２５−１５３４．）。これは、アルコール中毒患者おける改変された血漿グレリンレベル（Ｗｕｒｓｔ，  Ｆ．Ｍ．；Ｇｒａｆ，  Ｉ．；  Ｅｈｒｅｎｔｈａｌ，  Ｈ．Ｄ．；  ｅｔ．ａｌ．  Ａｌｃｏｈｏｌ．  Ｃｌｉｎ．  Ｅｘｐ．  Ｒｅｓ．  ２００７，  ３１，  ２００６−２０２０；  Ｂａｄａｏｕｉ，  Ａ．；  Ｄｅ  Ｓａｅｇｅｒ，  Ｃ．；  Ｄｕｃｈｅｍｉｎ，  Ｊ．；  Ｇｉｈｏｕｓｓｅ，  Ｄ．；  ｄｅ  Ｔｉｍａｒｙ，  Ｐ．；  Ｓｔａｒｋｅｌ，  Ｐ．  Ｅｕｒ．  Ｊ．  Ｃｌｉｎ．  Ｉｎｖｅｓｔ．  ２００８，  ３８，  ３９７−４０３）およびグレインノックアウトマウスにおけるアルコール摂取量の低減（Ｊｅｒｌｈａｇ，  Ｅ．；  Ｅｇｅｃｉｏｇｌｕ，  Ｅ．；  Ｌａｎｄｇｒｅｎ，  Ｓ．；  ｅｔ．ａｌ．  Ｐｒｏｃ．  Ｎａｔｌ．  Ａｃａｄ．  Ｓｃｉ．  ＵＳＡ  ２００９，  １０６，  １１３１８−１１３２３）を示した研究と一致している。これに関連して、壊された遺伝子を有するマウス、またはグレリンアンタゴニストで処置されたマウスにおける食物摂取量の減少は、食物に関連した誘因および報酬系へのグレリンの関与を示唆する（Ｅｇｅｃｉｏｇｌｕ，  Ｅ．；  Ｊｅｒｌｈａｇ，  Ｅ．；  Ｓａｌｏｍｅ，  Ｎ．；  ｅｔ．ａｌ．  Ａｄｄｉｃｔ．  Ｂｉｏｌ．  ２０１０，  １５，  ３０４−３１１；  Ｐｅｒｅｌｌｏ，  Ｍ．；  Ｓａｋａｔａ，  Ｉ．；  Ｂｉｒｎｂａｕｍ，  Ｓ．；  ｅｔ．ａｌ．  Ｂｉｏｌ．  Ｐｓｙｃｈｉａｔｒｙ  ２０１０，  ６７，  ８８０−８８６．）。さらに、報酬食物が存在するときのドーパミン放出は、グレリンノックアウトマウスにおいて存在しなかった。さらに、グレリンシグナル伝達システムは、乱用薬物からの報酬に必要であると思われる（Ｊｅｒｌｈａｇ，  Ｅ．；  Ｅｇｅｃｉｏｇｌｕ，  Ｅ．；  Ｄｉｃｋｓｏｎ，  Ｓ．Ｌ．；  Ｅｎｇｅｌ，  Ｊ．Ａ．  Ｐｓｙｃｈｏｐｈａｒｍａｃｏｌ．  ２０１０，  ２１１，  ４１５−４２２．）。アンフェタミンまたはコカインで誘発された刺激およびドーパミン放出は、グレリンアンタゴニストでの処置で減少した。したがって、グレリンアンタゴニストは、アルコール関連障害（Ｌｅｇｇｉｏ，  Ｌ．  Ｄｒｕｇ  Ｎｅｗｓ  Ｐｅｒｓｐｅｃｔ．２０１０，  ２３，  １５７−１６６．）、および薬物依存症などの他の中毒性障害（国際特許出願公開ＷＯ２００９／０２０４１９）の治療に有用性がある。グレリンアンタゴニストについて治療に使用できる可能性があるにもかかわらず、ジアミノピリミジン、テトラリンカルボキサミド、イソオキサゾールカルボキサミド、β−カルボリン、オキサジアゾール、ピラゾール、ベンゾフラニルインドロンおよびベンゼンスルホンアミドを含む、まだ、限られた数の小分子グレリンアンタゴニストのみが、特許または科学文献において報告されている。（米国特許出願公開第２００５／０１７１１３１号；ＵＳ２００５／０１７１１３２；国際特許出願公開ＷＯ２００５／０３０７３４；ＷＯ２００５／１１２９０３；ＷＯ２００５／４８９１６；ＷＯ２００８／０��８２８６；ＷＯ２０１０／０９２２８８；ＷＯ２０１０／０９２２８９；Ｚｈａｏ，  Ｈ．；  Ｘｉｎ，  Ｚ．；  Ｌｉｕ，  Ｇ．；  ｅｔ．ａｌ．  Ｊ．  Ｍｅｄ．  Ｃｈｅｍ．  ２００４，  ４７，  ６６５５−６６５７；  Ｘｉｎ，  Ｚ．；  Ｚｈａｏ，  Ｈ．；  Ｓｅｒｂｙ，  Ｍ．Ｄ．；  ｅｔ．ａｌ．  Ｂｉｏｏｒｇ．  Ｍｅｄ．  Ｃｈｅｍ．  Ｌｅｔｔ．  ２００５，  １５，  １２０１−１２０４；  Ｚｈａｏ，  Ｈ．；  Ｘｉｎ，  Ｚ．；  Ｐａｔｅｌ，  Ｊ．Ｒ．；  ｅｔ．ａｌ．  Ｂｉｏｏｒｇ．  Ｍｅｄ．  Ｃｈｅｍ．  Ｌｅｔｔ．  ２００５，  １５，  １８２５−１８２８；  Ｌｉｕ，  Ｂ．；  Ｌｉｕ，  Ｇ．；  Ｘｉｎ，  Ｚ．；  ｅｔ．ａｌ．  Ｂｉｏｏｒｇ．  Ｍｅｄ．  Ｃｈｅｍ．  Ｌｅｔｔ．  ２００４，  １４，  ５２２３−５２２６；  Ｐａｓｔｅｒｎａｋ，  Ａ，；  Ｇｏｂｌｅ，  Ｓ．Ｄ．；  ｄｅＪｅｓｕｓ，  Ｒ．Ｋ．；  ｅｔ．ａｌ．  Ｂｉｏｏｒｇ．  Ｍｅｄ．  Ｃｈｅｍ．  Ｌｅｔｔ．  ２００９，  １９，  ６２３７−６２４０）。ＷＯ２００５／１１４１８０は、イソオキサゾール類（ｉｓｏａｚｏｌｅｓ）、１，２，４−オキサジアゾール類および１，２，４−トリアゾール類などのヘテロアリールコア構造を含む多くの個々の化合物を肥満症および糖尿病の治療の治療剤としての「機能性グレリンアンタゴニスト」、およびそれらの使用として記載している。いくつかのアンタゴニスト活性を示した他のヘテロ環式構造は、ＷＯ２００５／０３５４９８；ＷＯ２００５／０９７７８８およびＵＳ２００５／０１８７２３７に報告されている。
【００２０】
残りの既知のグレリンアンタゴニストは、本来は主にペプチド性であるが（ＷＯ２００４／０９６１６，  ＷＯ０２／０８２５０，  ＷＯ０３／０４５１８，ＵＳ２００２／０１８７９３８  ，Ｐｉｎｉｌｌａ，Ｌ．；Ｂａｒｒｅｉｒｏ，  Ｍ．Ｌ．；Ｔｅｎａ−Ｓｅｍｐｅｒｅ，  Ｍ．；  Ａｇｕｉｌａｒ  Ｅ．  Ｎｅｕｒｏｅｎｄｏｃｒｉｎｏｌｏｇｙ  ２００３，  ７７，  ８３−９０）、核酸に基づくアンタゴニストも開示されている  （ＷＯ２００４／０１３２７４；  ＷＯ２００５／４９８２８；  Ｈｅｌｍｌｉｎｇ，  Ｓ．；  Ｍａａｓｃｈ，  Ｃ．；  Ｅｕｌｂｅｒｇ，  Ｄ．；  ｅｔ．ａｌ．  Ｐｒｏｃ．  Ｎａｔｌ．  Ａｃａｄ．  Ｓｃｉ  ＵＳＡ  ２００４，  １０１，  １３１７４−１３１７９；  Ｓｈｅａｒｍａｎ，  Ｌ．Ｐ．；  Ｗａｎｇ，  Ｓ．Ｐ．；  Ｈｅｌｍｌｉｎｇ，  Ｓ．；  ｅｔ．ａｌ．  Ｅｎｄｏｃｒｉｎｏｌｏｇｙ  ２００６，  １４７，  １５１７−１５２６）。本発明の化合物は、構造上、これらの既に報告されたグレリンアンタゴニスト構造のすべてと異なる。小さいソマトスタチン模倣物である、１４アミノ酸化合物のバプレオチドは、グレリンアンタゴニストであると実証された（Ｄｅｇｈｅｎｇｈｉ  Ｒ，  Ｐａｐｏｔｔｉ  Ｍ，  Ｇｈｉｇｏ  Ｅ，  Ｍｕｃｃｉｏｌｉ  Ｇ，  Ｌｏｃａｔｅｌｌｉ  Ｖ．  Ｅｎｄｏｃｒｉｎｅ  ２００１，  １４，  ２９−３３．）。環状神経ペプチドコルチスタチンの類似体の成長ホルモン分泌促進物質受容体との結合活性が開示されている（ＷＯ０３／００４５１８）。これらの化合物は、２４〜３３ｎＭのＩＣ５０を示す。特に、これらの類似体のうちの１つであるＥＰ−０１４９２（コルチスタチン８）は、グレリンアンタゴニストとして肥満症の治療の前臨床試験に進んでいる（Ｄｅｇｈｅｎｇｈｉ  Ｒ，  Ｂｒｏｇｌｉｏ  Ｆ，  Ｐａｐｏｔｔｉ  Ｍ，  ｅｔ．ａｌ．  Ｅｎｄｏｃｒｉｎｅ  ２００３，  ２２，  １３−１８；  Ｓｉｂｉｌｉａ，  Ｖ．；  Ｍｕｃｃｉｏｌｉ，  Ｇ．；  Ｄｅｇｈｅｎｇｈｉ，  Ｒ．；  ｅｔ．ａｌ．  Ｊ．  Ｎｅｕｒｏｅｎｄｏｃｒｉｎｏｌ．  ２００６，  １８，  １２２−１２８．）。
【００２１】
限られた一連のペプチドが、ＧＨＳ−Ｒ１ａへの結合に極めて重要であることが知られている非常に特異的なオクタノイル化された短い配列を含有するグレリンアンタゴニストとして報告されている（米国特許出願第２００２／０１８７９３８号；国際特許出願公開ＷＯ０２／０８２５０）。［Ｄ−Ｌｙｓ３］−ＧＨＲＰ−６の作用がグレリンアンタゴニストとして記載されている（Ｐｉｎｉｌｌａ，  Ｌ．；  Ｂａｒｒｅｉｒｏ，  Ｍ．Ｌ．；  Ｔｅｎａ−Ｓｅｍｐｅｒｅ，  Ｍ．；  Ａｇｕｉｌａｒ  Ｅ．  Ｎｅｕｒｏｅｎｄｏｃｒｉｎｏｌｏｇｙ  ２００３，  ７７，  ８３−９０）。より最近、弱いグレリンアンタゴニストである、サブスタンスＰペプチド誘導体、Ｌ−７５６，８６７（ＥＰ−８０３１７，  ［Ｄ−Ａｒｇ１，Ｄ−Ｐｈｅ５，Ｄ−Ｔｒｐ７，９，Ｌｅｕ１１］−物質Ｐ）が、効力のあるインバースアゴニスト（Ｋｄ／ｉ＝４５ｎＭ）であることが実証され、グレリン受容体を標的とする肥満症の治療への別の可能性のある手法を開いた（Ｈｏｌｓｔ，  Ｂ．；  Ｓｃｈｗａｒｔｚ，  Ｔ．Ｗ．  Ｔｒｅｎｄｓ  Ｐｈａｒｍａｃｏｌ．  Ｓｃｉ．  ２００４，  ２５，  １１３−１１７；  Ｈｏｌｓｔ，  Ｂ．；  Ｃｙｇａｎｋｉｅｗｉｃｚ，  Ａ．；  Ｊｅｎｓｅｎ，  Ｔ．Ｈ．；  Ａｎｋｅｒｓｅｎ，  Ｍ．；  Ｓｃｈｗａｒｔｚ，  Ｔ．Ｗ．  Ｍｏｌ．  Ｅｎｄｏｃｒｉｎｏｌ．  ２００３，  １７，  ２２０１−２２１０；  Ｃｈｅｎｇ，  Ｋ．；  Ｗｅｉ，  Ｌ．；  Ｃｈａｕｎｇ，  Ｌ．−Ｙ．；  ｅｔ．ａｌ．  Ｊ．  Ｅｎｄｏｃｒｉｎｏｌ．  １９９７，  １５２，  １５５−１５８．）。しかし、この物質はニューロキニン−１およびボンベシン受容体でも相互作用するため、この特定の物質の使用は、その乏しい選択性のために恐らく限定されよう。
【００２２】
インバースアゴニストの使用は、グレリン受容体の高い構成的活性によって、食欲の制御により一層重要な使用であり得ることが示唆されている（Ｈｏｌｓｔ，  Ｂ．；  Ｈｏｌｌｉｄａｙ，  Ｎ．  Ｄ．；  Ｂａｃｈ，  Ａ．；  Ｅｌｌｉｎｇ，  Ｃ．Ｅ．；  Ｃｏｘ，  Ｈ．Ｍ．；  Ｓｃｈｗａｒｔｚ，  Ｔ．Ｗ．  Ｊ．  Ｂｉｏｌ．  Ｃｈｅｍ．  ２００４，  ２７９，  ５３８０６−５３８１７．）。しかし、Ｌ−７５６，８６７ペプチドおよび単一のピロール化合物、ＴＭ２７８１０（ＷＯ２００４／０５６８６９）のみが、現在のところ、インバースアゴニストとして報告されている。
【００２３】
実際に、摂食を最もよく制御するため、グレリン受容体アンタゴニストとしてもインバースアゴニストとしても作用する化合物を有することが実際に有益であることが論じられている（Ｈｏｌｓｔ，  Ｂ．  Ｓｃｈｗａｒｔｚ，  Ｔ．  Ｊ．  Ｃｌｉｎ．  Ｉｎｖｅｓｔ．  ２００６，  １１６，  ６３７−６４１）。構成的活性を損なうグレリン受容体の突然変異を保有するヒトは背が低いという最近の知見は、この受容体の正常なインビボ機能に対する、構成的活性の重要性を説明する（Ｐａｎｔｅｌ，  Ｊ．；  Ｌｅｇｅｎｄｒｅ，  Ｍ．  Ｃａｂｒｏｌ，  Ｓ．；  ｅｔ．ａｌ．  Ｊ．  Ｃｌｉｎ．  Ｉｎｖｅｓｔ．  ２００６，  １１６，  ７６０−７６８．）。実施例において示されるように、本発明のいくつかの化合物はグレリン受容体アンタゴニストとしてもインバースアゴニストとしても作用する。
【００２４】
限られた一連の大環状ペプチド模倣物が、グレリン受容体のアンタゴニストおよびインバースアゴニストとして以前に記載され、また様々な障害の治療のためのそれらの使用が要約された（国際特許出願公開ＷＯ２００６／０４６９７７；  ２００６／１３７９７４）が、本発明の化合物は、予期せざるさらに好都合な薬理学的性質を有することが示されている。
【００２５】
したがって、薬理学的介入に適したグレリンアンタゴニストまたはインバースアゴニストの例は極めて少数であるので、グレリン受容体を調節し、グレリン放出を抑制するさらなる化合物に需要がある。
【発明の概要】
【００２６】
本発明は、グレリン（成長ホルモン分泌促進物質）受容体（ＧＲＬＮ、ＧＨ−Ｒ１ａ）のアンタゴニストまたはインバースアゴニストとして働くことができる、配座の定義された新規大環状化合物を提供する。
【００２７】
本発明の態様によれば、本発明は、式（Ｉ）の化合物またはその薬学的に許容される塩に関する。
【化１】
2013509434.tif 000003
式中、Ｔは、
【化２】
2013509434.tif 000004
（式中、（ＮＡ）は、式（Ｉ）のＮＲ４ａとの結合部位を示し、また（ＮＢ）は、式（Ｉ）のＮＲ４ｃとの結合部位を示す。）から選択され、
Ｒ１は、−（ＣＨ２）ｓＣＨ３、−ＣＨ（ＣＨ３）（ＣＨ２）ｔＣＨ３、（ＣＨ２）ｕＣＨ（ＣＨ３）２、−Ｃ（ＣＨ３）３、−ＣＨ２−Ｃ（ＣＨ３）３、−ＣＨＲ１７ＯＲ１８、
【化３】
2013509434.tif 000005
からなる群から選択され、
ここで、ｓは、０、１、２、３または４であり、ｔは、０、１、２または３であり、ｕは、０、１または２であり、ｖは、０、１、２、３または４であり、ｗは、０、１、２、３または４であり、また、Ｒ１１およびＲ１２は、場合によって存在し、存在する場合、独立してＣ１〜Ｃ４アルキル、ヒドロキシルおよびアルコキシからなる群から選択され、Ｒ１７は、水素またはメチルであり、また、Ｒ１８は、水素、Ｃ１〜Ｃ４アルキルおよびアシルからなる群から選択され、
Ｒ２ａは、−ＣＨ３、−ＣＨ２ＣＨ３、−ＣＨ（ＣＨ３）２、−ＣＦ３、−ＣＦ２Ｈおよび−ＣＨ２Ｆからなる群から選択され、
Ｒ２ｂは、−Ｈおよび−ＣＨ３からなる群から選択され、
Ｒ３ａは、水素、Ｃ１〜Ｃ４アルキル、ヒドロキシルおよびアルコキシからなる群から選択され、
Ｒ３ｂは、水素およびＣ１〜Ｃ４アルキルからなる群から選択され、
Ｒ４ａ、Ｒ４ｂ、Ｒ４ｃおよびＲ４ｄは、水素およびＣ１〜Ｃ４アルキルからなる群から独立して選択され、
Ｒ５は、Ｙ１がＯまたはＮＲ１６である場合、水素、Ｃ１〜Ｃ４アルキルおよびアシルからなる群から選択され、または、Ｙ１がＣ（＝Ｏ）である場合、ヒドロキシル、アルコキシおよびアミンからなる群から選択され、
Ｒ６は、水素、Ｃ１〜Ｃ４アルキル、オキソおよびトリフルオロメチルからなる群から選択され、
Ｒ７は、水素、Ｃ１〜Ｃ４アルキル、ヒドロキシル、アルコキシおよびトリフルオロメチルからなる群から選択され、または、Ｒ７およびＸ１は、一緒になって五または六員環を形成し、
Ｒ１０は、水素、Ｃ１〜Ｃ４アルキル、１，１，１−トリフルオロエチル、ヒドロキシルおよびアルコキシからなる群から選択され、ただし、Ｌ６がＣＨである場合、Ｒ１０はトリフルオロメチルからも選択され、また、Ｌ６がＮである場合、Ｒ１０はスルホニル基からも選択され、またはＲ１０およびＲ８ａは、一緒になって五または六員環を形成し、
Ｒ２６、Ｒ２８およびＲ２９は、水素、Ｃ１〜Ｃ４アルキル、ヒドロキシル、アルコキシおよびトリフルオロメチルからなる群から独立して選択され、または、Ｒ２８およびＲ２９は、一緒になって三員環を形成し、
Ｒ２７は、水素、Ｃ１〜Ｃ４アルキル、ヒドロキシル、アルコキシおよびトリフルオロメチルからなる群から選択され、または、Ｒ２７およびＸ４３は、一緒になって五または六員環を形成し、
Ｒ３０は、水素、Ｃ１〜Ｃ４アルキル、ヒドロキシル、アルコキシおよびトリフルオロメチルからなる群から選択され、
Ａｒは、
【化４】
2013509434.tif 000006
からなる群から選択され、式中、Ｍ１、Ｍ２、Ｍ３、Ｍ４、Ｍ５、Ｍ６、Ｍ７、Ｍ９およびＭ１１は、Ｏ、ＳおよびＮＲ１３からなる群から独立して選択され、ここで、Ｒ１３は、水素、Ｃ１〜Ｃ４アルキル、ホルミル、アシルおよびスルホニルからなる群から選択され、Ｍ８、Ｍ１０およびＭ１２は、ＮおよびＣＲ１４からなる群から独立して選択され、ここで、Ｒ１４は、水素およびＣ１〜Ｃ４アルキルからなる群から選択され、Ｘ５、Ｘ６、Ｘ７、Ｘ１８、Ｘ１９、Ｘ２１、Ｘ２２、Ｘ２４、Ｘ２５、Ｘ２６、Ｘ２７、Ｘ２８、Ｘ２９、Ｘ３０およびＸ３１は、水素、ハロゲン、トリフルオロメチルおよびＣ１〜Ｃ４アルキルからなる群から独立して選択され、また、Ｘ８、Ｘ９、Ｘ１０、Ｘ１１、Ｘ１２、Ｘ１３、Ｘ１４、Ｘ１５、Ｘ１６、Ｘ１７、Ｘ２０、Ｘ２３、Ｘ３２、Ｘ３３、Ｘ３４、Ｘ３５、Ｘ３６、Ｘ３７、Ｘ３８、Ｘ３９、Ｘ４０、Ｘ４１およびＸ４２は、水素、ヒドロキシル、アルコキシ、アミノ、ハロゲン、シアノ、トリフルオロメチルおよびＣ１〜Ｃ４アルキルからなる群から独立して選択され、
Ｌ１、Ｌ２、Ｌ３、Ｌ４およびＬ６は、ＣＨおよびＮからなる群から独立して選択され、
Ｌ５は、ＣＲ１５ａＲ１５ｂ、ＯおよびＮＲ１５ｃからなる群から選択され、ここで、Ｒ１５ａおよびＲ１５ｂは、水素、Ｃ１〜Ｃ４アルキル、ヒドロキシルおよびアルコキシから独立して選択され、また、Ｒ１５ｃは、水素、Ｃ１〜Ｃ４アルキル、アシルおよびスルホニルからなる群から選択され、
Ｌ１０は、ＣＲ３５ａＲ３５ｂ、ＯおよびＯＣ（＝Ｏ）Ｏからなる群から選択され、ここで、Ｒ３５ａおよびＲ３５ｂは、水素、Ｃ１〜Ｃ４アルキル、ヒドロキシルおよびアルコキシから独立して選択され、
Ｘ１は、水素、ハロゲン、トリフルオロメチルおよびＣ１〜Ｃ４アルキルからなる群から選択され、または、Ｘ１およびＲ７は、一緒になって五または六員環を形成し、
Ｘ２、Ｘ３およびＸ４は、水素、ハロゲン、トリフルオロメチルおよびＣ１〜Ｃ４アルキルからなる群から独立して選択され、
Ｘ４３およびＸ４４は、場合によって存在し、存在する場合、独立してＣ１〜Ｃ４アルキル、ヒドロキシル、アルコキシおよびトリフルオロメチルからなる群から選択され、または、Ｘ４３およびＲ２７は、一緒になって五または六員環を形成し、また、
Ｙ１は、Ｃ（＝Ｏ）、ＯおよびＮＲ１６からなる群から選択され、ここで、Ｒ１６は、水素、Ｃ１〜Ｃ４アルキル、アシルおよびスルホニルからなる群から選択され、
ｚは、０、１、２または３であり、また
Ｚは、（Ａｒ）−ＣＨＲ８ａＣＨＲ９ａ−（Ｌ６）、（Ａｒ）−ＣＲ８ｂ＝ＣＲ９ｂ−（Ｌ６）および−（Ａｒ）−Ｃ≡Ｃ−（Ｌ６）からなる群から選択され、ここで、（Ａｒ）はフェニル環との結合部位、また（Ｌ６）はＬ６との結合部位を示し、Ｒ８ａおよびＲ９ａは、水素、Ｃ１〜Ｃ４アルキル、ヒドロキシル、アルコキシ、オキソおよびトリフルオロメチルからなる群から独立して選択され、Ｒ８ｂおよびＲ９ｂは、水素、Ｃ１〜Ｃ４アルキル、フルオロ、ヒドロキシル、アルコキシおよびトリフルオロメチルからなる群から独立して選択され、または、Ｒ８ａおよびＲ９ａは、一緒になって三員環を形成し、または、Ｒ８ａおよびＲ１０は、一緒になって五または六員環を形成し、または、Ｒ８ａおよびＸ４は、一緒になって五または六員環を形成し、または、Ｒ９ａおよびＸ４は、一緒になって五または六員環を形成し、または、Ｒ８ｂおよびＸ４は、一緒になって五または六員環を形成し、または、Ｒ９ｂおよびＸ４は、一緒になって五または六員環を形成する。
【００２８】
本発明の特定の実施形態は、下記構造を有する式（Ｉ）の化合物またはその薬学的に許容される塩を提供する。
【化５Ａ】
2013509434.tif 000007
【化５Ｂ】
2013509434.tif 000008
【００２９】
本発明のさらなる態様は、（ａ）本発明の化合物、および（ｂ）薬学的に許容される担体、賦形剤または希釈剤を含む医薬組成物を提供する。
【００３０】
本発明の他の態様において、（ａ）本発明の化合物、（ｂ）１種または複数の追加の治療剤、および（ｃ）薬学的に許容される担体、賦形剤または希釈剤を含む医薬組成物が提供される。
【００３１】
特定の実施形態のために、追加の治療剤は、ＧＬＰ−１アゴニスト、ＤＰＰ−ＩＶ阻害薬、アミリンアゴニスト、ＰＰＡＲ−αアゴニスト、ＰＰＡＲ−γアゴニスト、ＰＰＡＲ−α／γデュアルアゴニスト、ＧＤＩＲまたはＧＰＲ１１９アゴニスト、ＰＴＰ−１Ｂ阻害薬、ペプチドＹＹアゴニスト、１１β−ヒドロキシステロイドデヒドロゲナーゼ（１１β−ＨＳＤ）−１阻害薬、腎ナトリウムグルコース共輸送体２型（ＳＧＬＴ−２）阻害薬、グルカゴンアンタゴニスト、グルコキナーゼ活性剤、α−グルコシダーゼ阻害薬、グルココルチコイドアンタゴニスト、グリコーゲン合成酵素キナーゼ３β（ＧＳＫ−３β）阻害薬、グリコーゲンホスホリラーゼ阻害薬、ＡＭＰ活性化プロテインキナーゼ（ＡＭＰＫ）活性剤、フルクトース−１，６−ビスホスファターゼ阻害薬、スルホニル尿素受容体アンタゴニスト、網膜様Ｘ受容体活性剤、５ＨＴ１ａアゴニスト、５ＨＴ２ｃアゴニスト、５ＨＴ６アンタゴニスト、カンナビノイドアンタゴニストまたはインバースアゴニスト、メラニン凝集ホルモン（ＭＣＨ−１）アンタゴニスト、メラノコルチン−４（ＭＣ４）アゴニスト、レプチンアゴニスト、レチノイン酸受容体アゴニスト、ステアロイルＣｏＡデサチュラーゼ−１（ＳＣＤ−１）阻害薬、ニューロペプチドＹＹ２受容体アゴニスト、ニューロペプチドＹＹ４受容体アゴニスト、ニューロペプチドＹＹ５受容体アンタゴニスト、神経細胞ニコチン受容体α４β２アゴニスト、ジアシルグリセロールアシル基転移酵素１（ＤＧＡＴ−１）阻害薬、甲状腺受容体アゴニスト、リパーゼ阻害薬、脂肪酸合成酵素阻害薬、グリセリン−３−ホスフェートアシル基転移酵素阻害薬、ＣＰＴ−１刺激薬、α１Ａ−アドレナリン受容体アゴニスト、α２Ａ−アドレナリン受容体アゴニスト、β３−アドレナリン受容体アゴニスト、ヒスタミンＨ３受容体アンタゴニスト、コレシストキニンＡ受容体アゴニストおよびＧＡＢＡ−Ａアゴニストを含む群から選択される。
【００３２】
本発明の追加の態様は、その使用ための随意の説明書と共に包装された、本発明の有効量の１種または複数の化合物を含む医薬品用量単位を含有する１つまたは複数の容器を含むキットを提供する。
【００３３】
さらなる態様において、本発明は、ＧＲＬＮ受容体活性を調節する有効量の本発明の化合物の投与を含む、哺乳動物におけるＧＲＬＮ受容体活性を調節する方法を提供する。本発明のいくつかの態様によれば、化合物はグレリン受容体アンタゴニストまたはＧＲＬＮ受容体アンタゴニストである。さらに別の態様において、化合物は、グレリン受容体インバースアゴニストまたはＧＲＬＮ受容体インバースアゴニストである。本発明の別の態様によれば、化合物は、グレリン受容体アンタゴニストかつグレリン受容体インバースアゴニストであり、または、ＧＲＬＮ受容体アンタゴニストかつＧＲＬＮ受容体インバースアゴニストである。
【００３４】
本発明の態様は、さらに、代謝障害および／または内分泌障害、肥満症および肥満症関連障害、食欲障害または摂食障害、中毒性障害、心血管疾患、遺伝子疾患、過剰増殖性障害、遺伝性障害、中枢神経系障害および炎症性障害などの障害を予防および／または治療する方法に関する。
【００３５】
特定の実施形態において、代謝障害は、肥満症、糖尿病、メタボリック症候群、非アルコール性脂肪酸肝疾患（ＮＡＦＬＤ）、非アルコール性脂肪性肝炎（ＮＡＳＨ）または脂肪症である。
【００３６】
別の特定の実施形態において、食欲障害または摂食障害は、プラダー・ウィリー症候群または過食症である。
【００３７】
さらに別の特定の実施形態において、中毒性障害は、アルコール依存症、薬物依存症または化学物質依存症である。
【００３８】
本発明のさらなる態様は、式Ｉの化合物を製造する方法に関する。
【００３９】
本発明はまた、本明細書に記載される障害の治療および／または予防のための医薬の調製に有用な式Ｉの化合物に関する。
【００４０】
さらなる実施形態において、
【化６】
2013509434.tif 000009
からなる群から選択される大環状化合物またはその薬学的に許容される塩が提供される。
【００４１】
本発明の前述のおよび他の態様は、以下に述べる明細書において、さらに詳しく説明される。
【図面の簡単な説明】
【００４２】
【図１】本発明の例示の化合物、化合物１３１９の化学合成スキームである。
【図２】本発明の例示の化合物、化合物１３５０の化学合成スキームである。
【図３】本発明の例示の化合物、化合物１６３６の化学合成スキームである。
【図４】本発明の例示の化合物、化合物１３８３の化学合成スキームである。
【図５】本発明の例示の化合物、化合物１３９０の化学合成スキームである。
【図６】本発明の例示の化合物、化合物１４０１の化学合成スキームである。
【図７】本発明の例示の化合物、化合物１３００の化学合成スキームである。
【図８】本発明の例示の化合物、化合物１５０５の化学合成スキームである。
【図９】本発明の例示の化合物、化合物１５０５のインビボ活性度、具体的にはＺｕｃｋｅｒ肥満ラットモデルにおいて体重に対する作用を評価する試験の結果を提示するグラフである。
【図１０】本発明の例示の化合物、化合物１５０５のインビボ活性度、具体的にはＺｕｃｋｅｒ肥満ラットモデルにおいて累積摂餌量に対する作用を評価する試験の結果を提示するグラフである。
【図１１】本発明の例示の化合物、化合物１７１２のインビボ活性度、具体的にはｏｂ／ｏｂマウスモデルにおいて急性累積摂餌量に対する作用を評価する試験の結果を提示するグラフである。
【図１２】本発明の例示の化合物、化合物１８４８のインビボ活性度、具体的にはｏｂ／ｏｂマウスモデルにおいて急性累積摂餌量に対する作用を評価する試験の結果を提示するグラフである。
【図１３】本発明の例示の化合物、化合物１８４８のインビボ活性度、具体的には選択された代謝パラメーターに対する作用を評価する試験の結果を提示する一連のグラフである。
【発明を実施するための形態】
【００４３】
本発明の前述のおよび他の態様は、本明細書において記載される他の実施形態に関してさらに詳細に記載される。本発明は異なる形態で具現することができることが認識されるべきであり、また、本明細書に述べる実施形態に限定されると解釈されるべきでない。むしろ、本開示が完全で完結し、本発明の範囲を当業者に十分に伝達するように、これらの実施形態は提供される。
【００４４】
本明細書において本発明の説明に用いられる用語は、特定の実施形態を説明する目的のためだけのものであり、本発明を限定することを意図としているのではない。本発明および添付の請求項の説明に用いられる単数形の「ａ」、「ａｎ」および「ｔｈｅ」は、文脈に別に明示されない限り、同様に複数形も含むことを意図する。さらに、本明細書において、用語「および／または」には、１つまたは複数の関連する列挙項目の任意およびすべての組合せが含まれ、「／」と略され得る。  
【００４５】
別に定義されない限り、本明細書において用いられるすべての技術用語および科学用語は、本発明の属する当業者に一般に理解されるものと同じ意味を有する。
【００４６】
本明細書において引用されるすべての刊行物、米国特許出願、米国特許および他の参考文献は、参照により、それらの全体が本明細書に組み込まれる。
【００４７】
「アルキル」という用語は、１から２０個の炭素原子、および場合によっては１から８個の炭素原子を有する、直鎖または分枝鎖の飽和または部分的に不飽和の炭化水素基を指す。「低級アルキル」という用語とは、１から６個の炭素原子を含有するアルキル基を指す。アルキル基の例としては、メチル、エチル、イソプロピル、ｔｅｒｔ−ブチル、３−ヘキセニル、および２−ブチニルを含むが、これらに限定されない。「不飽和」は、１、２または３個の二重結合または三重結合、あるいはその２個の組合せの存在を意味する。このようなアルキル基も、場合によって以下に記載されるように置換されていてよい。
【００４８】
下付文字を、本明細書において定義されるアルキルまたは他の炭化水素基に関して用いる場合、下付文字はその基が含有し得る炭素原子の数を指す。例えば、Ｃ２−Ｃ４アルキルは、２、３または４個の炭素原子を含有するアルキル基を示す。  
【００４９】
「シクロアルキル」という用語は、環中に３から１５個、場合によっては、３から７個の炭素原子を有する飽和または部分的に不飽和の環状炭化水素基、および、前記環状炭化水素基を含有するアルキル基を指す。シクロアルキル基の例としては、シクロプロピル、シクロプロピルメチル、シクロペンチル、２−（シクロヘキシル）エチル、シクロヘプチル、およびシクロヘキセニルを含むが、これらに限定されない。また、本明細書に定義されるシクロアルキルには、複数の炭素環を有する基が含まれ、その各々は飽和または部分的に不飽和であり得、例えばデカリニル（ｄｅｃａｌｉｎｙｌ）、［２．２．１］−ビシクロヘプタニルまたはアダマンタニルであ。このようなシクロアルキル基はすべて、以下に記載されるように場合によって置換されていてもよい。
【００５０】
「芳香族」という用語は、４ｎ＋２個（ｎは１以上の整数）の電子を含む共役π電子系を有する不飽和の環状炭化水素基を指す。芳香族分子は一般に安定しており、交互の二重および一重結合からなる共鳴構造を有する原子の平面的な環として表され、例えばベンゼンまたはナフタレンである。
【００５１】
「アリール」という用語は、６から１５個、場合によっては、６から１０個の環原子を有する単一の炭素環式環系または縮合炭素環式環系の芳香族基、および、前記芳香族基を含有するアルキル基を指す。アリール基の例としては、フェニル、１−ナフチル、２−ナフチルおよびベンジルを含むが、これらに限定されない。また、本明細書に定義されるアリールには、複数のアリール環を有する基が含まれ、ナフチルおよびアントラセニルのように縮合していてもよく、またはビフェニルおよびテルフェニルのように縮合していなくてもよい。また、アリールは、その環のうちの１つが芳香族であり、他方が飽和、部分的に不飽和または芳香族であってもよい二環式または三環式の炭素環、例えば、インダニルまたはテトラヒドロナフチル（テトラリニル）も指す。このようなアリール基はすべて、場合によって下記のように置換されていてもよい。
【００５２】
「複素環」または「複素環式」という用語は、３から１５個、場合によっては、３から７個の原子を有する、飽和または部分的に不飽和の単環式、二環式または三環式の基であって、前記環のうちの少なくとも１個の環に少なくとも１個のヘテロ原子を含み、前記ヘテロ原子はＯ、ＳまたはＮから選択される。複素環式基の各環は、各環のヘテロ原子の合計数が４以下であり、各環が少なくとも１個の炭素原子を含むことを条件として、１または２個のＯ原子、１または２個のＳ原子、１から４個のＮ原子を含むことができる。二環式または三環式の複素環式基を完成する縮合環は、炭素原子だけを含んでよく、飽和または部分的に不飽和であってよい。Ｎ原子およびＳ原子は場合によって酸化されていてもよく、Ｎ原子は場合によって四級化されていてもよい。複素環式は、前記単環式、二環式または三環式の複素環式基を含有するアルキル基も指す。複素環の例としては、２−または３−ピペリジニル、２−または３−ピペラジニル、２−または３−モルホリニルを含むが、これらに限定されない。このような複素環基はすべて、場合によって下記のように置換されていてもよい。
【００５３】
「ヘテロアリール」という用語は、５から１５個、場合によっては、５から１０個の環原子を有する単一または縮合環系の芳香族基であって、環のうちの少なくとも１個の環に少なくとも１個のヘテロ原子を有し、前記ヘテロ原子はＯ、ＳまたはＮから選択される。ヘテロアリール基の各環は、各環のヘテロ原子の合計数が４以下であり、各環が少なくとも１個の炭素原子を含むことを条件として、１または２個のＯ原子、１または２個のＳ原子、１から４個のＮ原子を含むことができる。二環式または三環式の基を完成する縮合環は、炭素原子のみを含んでよく、飽和または部分的に不飽和または芳香族であってよい。窒素原子の孤立電子対が芳香族π電子系の完成に関与していない構造では、Ｎ原子は場合によって四級化される、またはＮ−オキシドに酸化されていてもよい。ヘテロアリールはまた、前記環状基を含有するアルキル基も指す。単環式ヘテロアリール基の例としては、ピロリル、ピラゾリル、ピラゾリニル、イミダゾリル、オキサゾリル、イソキサゾリル、チアゾリル、チアジアゾリル、イソチアゾリル、フラニル、チエニル、オキサジアゾリル、ピリジル、ピラジニル、ピリミジニル、ピリダジニル、およびトリアジニルを含むが、これらに限定されない。二環式ヘテロアリール基の例としては、インドリル、ベンゾチアゾリル、ベンゾキサゾリル、ベンゾチエニル、キノリニル、テトラヒドロイソキノリニル、イソキノリニル、ベンズイミダゾリル、ベンゾピラニル、インドリジニル、ベンゾフラニル、イソベンゾフラニル、クロモニル、クマリニル、ベンゾピラニル、シンノリニル、キノキサリニル、インダゾリル、プリニル、ピロロピリジニル、フロピリジニル、チエノピリジニル、ジヒドロイソインドリル、およびテトラヒドロキノリニルを含むが、これらに限定されない。三環式のヘテロアリール基の例としては、カルバゾリル、ベンゾインドリル、フェナントロリニル、アクリジニル、フェナントリジニル、およびキサンテニルを含むが、これらに限定されない。このようなヘテロアリール基はすべて、場合によって、下記のように置換されていてもよい。
【００５４】
「ヒドロキシル」という用語は、−ＯＨ基を指す。  
【００５５】
「アルコキシ」という用語は、Ｒａがアルキル、シクロアルキルまたは複素環である、−ＯＲａ基を指す。例としては、メトキシ、エトキシ、ｔｅｒｔ−ブトキシ、シクロヘキシルオキシおよびテトラヒドロピラニルオキシを含むが、これらに限定されない。  
【００５６】
「アリールオキシ」という用語は、Ｒｂがアリールまたはヘテロアリールである、−ＯＲｂ基を指す。例としては、フェノキシ、ベンジルオキシおよび２−ナフチルオキシを含むが、これらに限定されない。
【００５７】
「アシル」という用語は、Ｒｃがアルキル、シクロアルキル、複素環、アリールまたはヘテロアリールである、−Ｃ（＝Ｏ）−Ｒｃ基を指す。例としては、アセチル、ベンゾイルおよびフロイルを含むが、これらに限定されない。
【００５８】
「アミノアシル」という用語は、アミノ酸に由来するアシル基を表す。  
【００５９】
用「アミノ」という用語は、ＲｄおよびＲｅが独立に水素、アルキル、シクロアルキル、複素環、アリールおよびヘテロアリールからなる群から選択される、−ＮＲｄＲｅ基を指す。代替として、ＲｄおよびＲｅは一緒に、非置換アルキル、非置換シクロアルキル、非置換複素環、非置換アリール、非置換ヘテロアリール、ヒドロキシ、アルコキシ、アリールオキシ、アシル、アミノ、アミド、カルボキシ、カルボキシアルキル、カルボキシアリール、メルカプト、スルフィニル、スルホニル、スルホンアミド、アミジノ、カルバモイル、グアニジノまたはウレイドで、場合によって置換され、Ｏ、Ｓ、またはＮから選択される１から３個のさらなるヘテロ原子を場合によって含有する、３から８員の複素環を形成する。
【００６０】
「アミド」という用語は、ＲｆｆおよびＲｇが、独立に水素、アルキル、シクロアルキル、複素環、アリールおよびヘテロアリールからなる群から選択される、−Ｃ（＝Ｏ）−ＮＲｆＲｇ基を指す。代替として、ＲｆおよびＲｇは一緒に、非置換アルキル、非置換シクロアルキル、非置換複素環、非置換アリール、非置換ヘテロアリール、ヒドロキシ、アルコキシ、アリールオキシ、アシル、アミノ、アミド、カルボキシ、カルボキシアルキル、カルボキシアリール、メルカプト、スルフィニル、スルホニル、スルホンアミド、アミジノ、カルバモイル、グアニジノまたはウレイドで、場合によって置換され、Ｏ、Ｓ、またはＮから選択される１から３個のさらなるヘテロ原子を場合によって含有する、３から８員の複素環を形成する。
【００６１】
「アミジノ」という用語は、Ｒｈが水素、アルキル、シクロアルキル、複素環、アリールおよびヘテロアリールからなる群から選択され、かつ、ＲｉおよびＲｊが独立に水素、アルキル、シクロアルキル、複素環、アリールおよびヘテロアリールからなる群から選択される−Ｃ（＝ＮＲｈ）ＮＲｉＲｊ基を指す。代替として、ＲｉおよびＲｊは一緒に、非置換アルキル、非置換シクロアルキル、非置換複素環、非置換アリール、非置換ヘテロアリール、ヒドロキシ、アルコキシ、アリールオキシ、アシル、アミノ、アミド、カルボキシ、カルボキシアルキル、カルボキシアリール、メルカプト、スルフィニル、スルホニル、スルホンアミド、アミジノ、カルバモイル、グアニジノまたはウレイドで、場合によって置換され、Ｏ、Ｓ、またはＮから選択される１から３個のさらなるヘテロ原子を場合によって含有する、３から８員の複素環を形成する。
【００６２】
「カルボキシ」という用語は、−ＣＯ２Ｈ基を指す。  
【００６３】
「カルボキシアルキル」という用語は、Ｒｋがアルキル、シクロアルキルまたは複素環式である、−ＣＯ２Ｒｋ基を指す。  
【００６４】
「カルボキシアリール」という用語は、Ｒｍがアリールまたはヘテロアリールである、−ＣＯ２Ｒｍ基を指す。  
【００６５】
「シアノ」という用語は、−ＣＮ基を指す。  
【００６６】
「ホルミル」という用語は、−Ｃ（＝Ｏ）Ｈ基を指し、−ＣＨＯとも示される。  
【００６７】
「ハロ」、「ハロゲン」または「ハロゲン化物」という用語は、それぞれ、フルオロ、フッ素またはフッ化物、クロロ、塩素または塩化物、ブロモ、臭素または臭化物、およびヨード、ヨウ素またはヨウ化物を指す。  
【００６８】
「オキソ」という用語は、同じ炭素の２個の水素原子の代わりに置換されてカルボニル基を形成する、２価の＝Ｏ基を指す。  
【００６９】
「メルカプト」という用語は、Ｒｎが水素、アルキル、シクロアルキル、複素環、アリールまたはヘテロアリールである、−ＳＲｎ基を指す。  
【００７０】
「ニトロ」という用語は−ＮＯ２基を指す。
【００７１】
「トリフルオロメチル」という用語は、−ＣＦ３基を指す。
【００７２】
「スルフィニル」という用語は、Ｒｐがアルキル、シクロアルキル、複素環、アリールまたはヘテロアリールである、−Ｓ（＝Ｏ）Ｒｐ基を指す。
【００７３】
「スルホニル基」という用語は、Ｒｑ１がアルキル、シクロアルキル、複素環、アリールまたはヘテロアリールである、−Ｓ（＝Ｏ）２−Ｒｑ１基を指す。
【００７４】
「アミノスルホニル」という用語は、Ｒｑ２が，水素、であるアルキル、シクロアルキル、複素環、アリールまたはヘテロアリールであり、かつ、Ｒｑ３がアルキル、シクロアルキル、複素環、アリールまたはヘテロアリールである−ＮＲｑ２−Ｓ（＝Ｏ）２−Ｒｑ３基を指す。
【００７５】
「スルホンアミド」という用語は、ＲｒおよびＲｓが独立に水素、アルキル、シクロアルキル、複素環、アリールまたはヘテロアリールからなる群から選択される、−Ｓ（＝Ｏ）２を−ＮＲｒＲｓ基を指す。代替として、ＲｒおよびＲｓは一緒に、非置換アルキル、非置換シクロアルキル、非置換複素環、非置換アリール、非置換ヘテロアリール、ヒドロキシ、アルコキシ、アリールオキシ、アシル、アミノ、アミド、カルボキシ、カルボキシアルキル、カルボキシアリール、メルカプト、スルフィニル、スルホニル、スルホンアミド、アミジノ、カルバモイル、グアニジノまたはウレイドで、場合によって置換され、Ｏ、Ｓ、またはＮから選択される１から３個のさらなるヘテロ原子を場合によって含有する、３から８員の複素環を形成する。
【００７６】
「カルバモイル」という用語は、Ｒｔが水素、アルキル、シクロアルキル、複素環、アリールまたはヘテロアリールから選択され、かつＲｕがアルキル、シクロアルキル、複素環、アリールまたはヘテロアリールから選択される、式−Ｎ（Ｒｔ）−Ｃ（＝Ｏ）−ＯＲｕの基を指す。  
【００７７】
「グアニジノ」という用語は、Ｒｖ、Ｒｗ、ＲｘおよびＲｙが、独立して、水素、アルキル、シクロアルキル、複素環、アリールまたはヘテロアリールから選択される、式  −Ｎ（Ｒｖ）−Ｃ（＝ＮＲｗ）−ＮＲｘＲｙ  の基を指す。代替として、ＲｘおよびＲｙは一緒に、非置換アルキル、非置換シクロアルキル、非置換複素環、非置換アリール、非置換ヘテロアリール、ヒドロキシ、アルコキシ、アリールオキシ、アシル、アミノ、アミド、カルボキシ、カルボキシアルキル、カルボキシアリール、メルカプト、スルフィニル、スルホニル、スルホンアミド、アミジノ、カルバモイル、グアニジノまたはウレイドで、場合によって置換され、Ｏ、Ｓ、またはＮから選択される１から３個のさらなるヘテロ原子を場合によって含有する、３から８員の複素環を形成する。
【００７８】
「ウレイド」という用語は、Ｒｚ、ＲａａおよびＲｂｂが、独立して水素、アルキル、シクロアルキル、複素環、アリールまたはヘテロアリールから選択される、式−Ｎ（Ｒｚ）−Ｃ（＝Ｏ）−ＮＲａａＲｂｂの基を指す。代替として、ＲａａおよびＲｂｂは、それらがそれぞれ結合している窒素原子と一緒に、非置換アルキル、非置換シクロアルキル、非置換複素環、非置換アリール、非置換ヘテロアリール、ヒドロキシ、アルコキシ、アリールオキシ、アシル、アミノ、アミド、カルボキシ、カルボキシアルキル、カルボキシアリール、メルカプト、スルフィニル、スルホニル、スルホンアミド、アミジノ、カルバモイル、グアニジノまたはウレイドで、場合によって置換され、Ｏ、Ｓ、またはＮから選択される１から３個のさらなるヘテロ原子を場合によって含有する、３から８員の複素環を形成する。
【００７９】
「場合によって置換されている」という用語は、指定された基が、特定の基が、非置換であるか、または１個または複数の適切な置換基で置換されていることを明示的に示すことを意図するが、随意の置換基が明記されている場合は除かれ、その場合にはこの用語は、基が非置換であるか、または指定された置換基で置換されていることを示す。上に定義されるように、本明細書において（例えば、特定の基が非置換であることを示すことにより）別に示した場合を除いて、多様な基が非置換であるか、または置換されていてもよい（すなわち、それらは場合によって、置換されている）。
【００８０】
アルキル、シクロアルキル、複素環、アリールおよびヘテロアリールという用語とともに用いられる場合の「置換されている」という用語は、独立して、非置換アルキル、非置換シクロアルキル、非置換複素環、非置換アリール、非置換ヘテロアリール、ヒドロキシ、アルコキシ、アリールオキシ、アシル、アミノ、アミド、カルボキシ、カルボキシアルキル、カルボキシアリール、ハロ、オキソ、メルカプト、スルフィニル、スルホニル、スルホンアミド、アミジノ、カルバモイル、グアニジノ、ウレイドおよび式−ＮＲｃｃＣ（＝Ｏ）Ｒｄｄ，  −ＮＲｅｅＣ（＝ＮＲｆｆ）Ｒｇｇ，  −ＯＣ（＝Ｏ）ＮＲｈｈＲｉｉ，  −ＯＣ（＝Ｏ）Ｒｊｊ，  −ＯＣ（＝Ｏ）ＯＲｋｋ，  −ＮＲｍｍＳＯ２Ｒｎｎ，  ｏｒ  −ＮＲｐｐＳＯ２ＮＲｑｑＲｒｒの基［式中、Ｒｃｃ，  Ｒｄｄ，  Ｒｅｅ，  Ｒｆｆ，  Ｒｇｇ，Ｒｈｈ，  Ｒｉｉ，  Ｒｊｊ，  Ｒｍｍ，  Ｒｐｐ，  Ｒｑｑ  およびＲｒｒは、独立して水素、非置換アルキル、非置換シクロアルキル、非置換複素環、非置換アリールまたは非置換ヘテロアリールから選択され、かつＲｋｋおよびＲｎｎは、独立して非置換アルキル、非置換シクロアルキル、非置換複素環、非置換アリールまたは非置換ヘテロアリールから選択される。］から選択される置換基によって１個または複数の水素原子が置き換えられたアルキル、シクロアルキル、複素環、アリールまたはヘテロアリール基を指す。代替として、ＲｇｇとＲｈｈ，  ＲｊｊとＲｋｋ、またはＲｐｐとＲｑｑは、それらがそれぞれ結合している窒素原子と一緒に、非置換アルキル、非置換シクロアルキル、非置換複素環、非置換アリール、非置換ヘテロアリール、ヒドロキシ、アルコキシ、アリールオキシ、アシル、アミノ、アミド、カルボキシ、カルボキシアルキル、カルボキシアリール、メルカプト、スルフィニル、スルホニル、スルホンアミド、アミジノ、カルバモイル、グアニジノまたはウレイドで、場合によって置換され、Ｏ、Ｓ、またはＮから選択される１から３個のさらなるヘテロ原子を場合によって含有する、３から８員の複素環を形成する。さらに、アリールおよびヘテロアリール基についての「置換されている」用語とは、シアノ、ニトロまたはトリフルオロメチルによってその基の水素原子のうちの１個が置き換えられた選択肢として含まれる。
【００８１】
置換は、任意の原子の標準的な価数を超えず、置換の結果、安定な化合物となることを条件としてなされる。一般に、基の置換された形態が存在する場合、そのような置換された基はそれ以上置換され得ず、または置換されるとしても、その置換基は、置換された基をごく限られた数（例えばそのような置換基を１、２、３または４個）しか含まない。  
【００８２】
本明細書の任意の構成要素または任意の式の中に任意の変数が１回よりも多く出現する場合、各々の出現におけるその定義は他のすべての出現におけるその定義とは無関係である。また、置換基および／または変数の組み合わせは、そのような組み合わせの結果安定な化合物となる場合に限り許容される。
【００８３】
「安定な化合物」または「安定な構造」は、有用な程度の純度、および効果的な治療剤への調合に単離するのに十分に安定な化合物を意味する。  
【００８４】
「アミノ酸」という用語は、当業者に公知の、一般的な天然（遺伝子によってコードされた）アミノ酸または合成アミノ酸およびそれらの一般的な誘導体を指す。アミノ酸に用いられる場合、「標準」または「タンパク質構成」とは、遺伝子によってコードされた、それらの天然の立体配置の２０種類のアミノ酸を指す。同様に、アミノ酸に用いられる場合、「非天然」または「非通常」とは、天然でない、稀なアミノ酸または合成アミノ酸、例えば、Ｈｕｎｔ，Ｓ．によってＣｈｅｍｉｓｔｒｙ  ａｎｄ  Ｂｉｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ  ｏｆ  ｔｈｅ  Ａｍｉｎｏ  Ａｃｉｄｓ，  Ｂａｒｒｅｔｔ，  Ｇ．Ｃ．，  Ｅｄ．，  Ｃｈａｐｍａｎ  ａｎｄ  Ｈａｌｌ：  Ｎｅｗ  Ｙｏｒｋ，  １９８５に記載されているものなどの広い選択を指す。
【００８５】
アミノ酸またはアミノ酸誘導体に関する「残基」という用語は、式：  
【化７】
2013509434.tif 000010
［式中、ＲＡＡは、アミノ酸側鎖であり、この場合、ｎ＝０、１または２である。］の基を指す。
【００８６】
ジペプチド、トリペプチドまたは高次ペプチド誘導体に関する「断片」という用語は、それぞれ２個、または３個以上のアミノ酸残基を含む基を示す。
【００８７】
「アミノ酸側鎖」という用語は、標準または非天然アミノ酸の任意の側鎖を指し、ＲＡＡで示される。例えば、アラニンの側鎖はメチルであり、バリンの側鎖はイソプロピルであり、トリプトファンの側鎖は３−インドリルメチルである。
【００８８】
「アゴニスト」という用語は、タンパク質、受容体、酵素などの内因性リガンドの作用の少なくともいくらかを再現する化合物を指す。
【００８９】
「アンタゴニストという用語」は、タンパク質、受容体、酵素などの内因性リガンドの作用の少なくともいくらかを阻害する化合物を指す。
【００９０】
「インバースアゴニスト」という用語は、タンパク質、受容体、酵素などの基準線の機能活性度、例えばＧタンパク質共役受容体またはその変異体の構成性シグナル伝達活性度を少なくともある程度低下させる化合物を指す。インバースアゴニストはアンタゴニストでもあり得る。
【００９１】
「基準線機能活性度」という用語は、タンパク質、受容体、酵素などの活性度を指し、内因性リガンドの不在下の構成性シグナル伝達活性度が含まれる。
【００９２】
「成長ホルモン分泌促進物質（ＧＨＳ）」という用語は、動物、特にヒトにおいて成長ホルモン、成長ホルモン放出ホルモン、またはソマトスタチンの内因性放出を直接的または間接的に刺激または増加させる、体外から投与される化合物または薬剤を指す。ＧＨＳは、事実上ペプチド性であっても非ペプチド性であってもよく、経口的に投与できる薬剤であるのが好ましい。さらに、拍動性の応答を誘導する薬剤が好ましい。
【００９３】
「調節剤」という用語は、生物学的または化学的なプロセスまたは機構に作用を与える化合物を指す。例えば、調節剤は、生物学的または化学的なプロセスまたは機構を増加、促進、上方制御、活性化、阻害、低下、遮断、抑制、遅延、脱感作、不活性化、下方制御などを行い得る。したがって、調節剤は「アゴニスト」、「アンタゴニスト」または「インバースアゴニスト」であり得る。調節剤の影響を受ける例示的な生物学的プロセスまたは機構としては、受容体結合およびホルモン放出または分泌を含むが、これらに限定されない。調節剤の影響を受ける例示的な化学的プロセスまたは機構としては、触媒作用および加水分解を含むが、これらに限定されない。
【００９４】
受容体に用いられる場合の「変異体」という用語は、二量体、三量体、四量体、五量体および、複数成分を含有するその他の生物学的複合体を含む。これらの成分は同一であっても異なっていてもよい。
【００９５】
「ペプチド」という用語は、一緒に共有結合している２個以上のアミノ酸からなる化合物を指す。
【００９６】
「ペプチド模倣薬」という用語は、ペプチドを模倣するよう設計された化合物を指すが、活性度またはその他の特性、例えば溶解度、代謝安定性、経口生体利用率、親油性、透過性、などを調節するため、ペプチドの１個または複数の官能基の付加または置換による構造上の差異を含む。これには、ペプチド結合の置換、側鎖修飾、末端切断、官能基の付加などが含まれる。化学構造はペプチドに由来しないが、その活性を模倣する場合、それはしばしば「非ペプチド性ペプチド模倣薬」と呼ばれる。
【００９７】
「ペプチド結合」という用語は、一般にペプチドにおいて個々のアミノ酸を互いに共有結合させるアミド［−Ｃ（＝Ｏ）−ＮＨ−］官能基を指す。
【００９８】
「保護基」という用語は、分子の他の場所で化学変化が起っている間、アミン、ヒドロキシルまたはカルボキシルなど、反応性である可能性のある官能基が化学反応を受けることを防ぐために用い得る何らかの化合物を指す。多数のこのような保護基が当業者に既知であり、″Ｐｒｏｔｅｃｔｉｖｅ  Ｇｒｏｕｐｓ  ｉｎ  Ｏｒｇａｎｉｃ  Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ，″Ｔｈｅｏｄｏｒａ  Ｗ．  Ｇｒｅｅｎｅ  ａｎｄ  Ｐｅｔｅｒ  Ｇ．  Ｗｕｔｓ，  ｅｄｉｔｏｒｓ，  Ｊｏｈｎ  Ｗｉｌｅｙ  ＆  Ｓｏｎｓ，  Ｎｅｗ  Ｙｏｒｋ，  ３ｒｄ  ｅｄｉｔｉｏｎ，  １９９９  ［ＩＳＢＮ  ０４７１１６０１９９］に例を見出すことができる。アミノ保護基の例としては、フタルイミド、トリクロロアセチル、ベンジルオキシカルボニル、ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル、およびアダマンチルオキシカルボニルを含むが、これらに限定されない。好ましいアミノ保護基は、アミノ基と結合するとカルバメートを形成するアミノ保護基と定義される、カルバメートアミノ保護基である。好ましいアミノカルバメート保護基は、アリルオキシカルボニル（ＡｌｌｏｃまたはＡｌｏｃ）、ベンジルオキシカルボニル（Ｃｂｚ）、９−フルオレニルメトキシカルボニル（Ｆｍｏｃ）、ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル（Ｂｏｃ）およびα，α−ジメチル−３，５−ジメトキシベンジルオキシカルボニル（Ｄｄｚ）である。最新の窒素保護基の最近の考察には、Ｔｈｅｏｄｏｒｉｄｉｓ，Ｇ．Ｔｅｔｒａｈｅｄｒｏｎ  ２０００，５６，２３３９−２３５８を参照のこと。ヒドロキシル保護基の例としては、アセチル、ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリル（ＴＢＤＭＳ）、トリチル（Ｔｒｔ）、ｔｅｒｔ−ブチル、およびテトラヒドロピラニル（ＴＨＰ）を含むが、これらに限定されない。カルボキシル保護基の例としては、メチルエステル、ｔｅｒｔ−ブチルエステル、ベンジルエステル、トリメチルシリルエチルエステル、および２，２，２−トリクロロエチルエステルを含むが、これらに限定されない。
【００９９】
「固相化学」という用語は、化学反応のうちの１つの成分が、（下に定義される固相支持体として）ポリマー材料と共有結合している化学反応の振る舞いを指す。固相で化学を行うための反応方法がより広く知られてきており、ペプチドおよびオリゴヌクレオチド化学の伝統的な分野の外で確立されている。
【０１００】
「固相支持体」「固相」または「樹脂」という用語は、固相化学の実施に利用される、機械的に、かつ化学的に安定なポリマーマトリックスを指す。これは、「樹脂」「Ｐ−」または次の記号：
【化８】
2013509434.tif 000011
によって表示される。
【０１０１】
適切な高分子材料の例としては、ポリスチレン、ポリエチレン、ポリエチレングリコール、ポリスチレンにグラフトまたは共有結合されたポリエチレングリコール（ＰＥＧ−ポリスチレン、ＴｅｎｔａＧｅｌ（商標）とも呼ばれる、Ｒａｐｐ，Ｗ．；Ｚｈａｎｇ，Ｌ．；Ｂａｙｅｒ，Ｅ．Ｉｎ  Ｉｎｎｏｖａｔｉｏｎｓ  ａｎｄ  Ｐｅｒｓｅｐｃｔｉｖｅｓ  ｉｎ  Ｓｏｌｉｄ  Ｐｈａｓｅ  Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ．Ｐｅｐｔｉｄｅｓ，Ｐｏｌｙｐｅｐｔｉｄｅｓ  ａｎｄ  Ｏｌｉｇｏｎｕｃｌｅｏｔｉｄｅｓ；Ｅｐｔｏｎ，Ｒ．，Ｅｄ．；ＳＰＣＣ  Ｌｔｄ．：Ｂｉｒｍｉｎｇｈａｍ，ＵＫ；ｐ  ２０５）、ポリアクリレート（ＣＬＥＡＲ（商標））、ポリアクリルアミド、ポリウレタン、ＰＥＧＡ［ポリエチレングリコールポリ（Ｎ，Ｎ−ジメチルアクリルアミド）コポリマー、Ｍｅｌｄａｌ，Ｍ．Ｔｅｔｒａｈｅｄｒｏｎ  Ｌｅｔｔ．１９９２，３３，３０７７−３０８０］、セルロースなどを含むが、これらに限定されない。これらの材料には、場合によって、、構造を物理的に安定化させるために、さらなる化合物を含めて架橋結合を形成することができ、例えばジビニルベンゼンで架橋したポリスチレン（ＤＶＢ、通常０．１〜５％、または０．５〜２％）である。この固相支持体には、限定されない例として、アミノメチルポリスチレン、ヒドロキシメチルポリスチレン、ベンズヒドリルアミンポリスチレン（ＢＨＡ）、メチルベンズヒドリルアミン（ＭＢＨＡ）ポリスチレン、およびその他の遊離化学官能基、最も一般的には、さらなる誘導体化または反応のための−ＮＨ２または−ＯＨ、を含むポリマー骨格が含まれる。この用語は、ポリエチレンイミンおよび架橋分子から調製したものなど、これらの官能基を高い割合で含む（「装填」）「超樹脂」を含むものとする（Ｂａｒｔｈ，Ｍ．；Ｒａｄｅｍａｎｎ，Ｊ．Ｊ．Ｃｏｍｂ．Ｃｈｅｍ．２００４，６，３４０−３４９）。合成の終わりに、樹脂は一般に廃棄されるが、Ｆｒｅｃｈｅｔ，Ｊ．Ｍ．Ｊ．；Ｈａｑｕｅ，Ｋ．Ｅ．Ｔｅｔｒａｈｅｄｒｏｎ  Ｌｅｔｔ．１９７５，１６，３０５５には、再利用できることが示されている。
【０１０２】
概して、樹脂として用いられる材料は不溶性の高分子であるが、ある種の高分子は溶媒に応じて異なる溶解度を有し、固相化学にも用いることができる。例えば、ポリエチレングリコールは、化学反応を行うことのできる多くの有機溶媒に可溶性であるが、ジエチルエーテルなどの他の溶媒には不溶性であるため、この方法で利用することができる。そのため、反応を溶液中で均一に行うことができ、その後、ポリマー上の生成物はジエチルエーテルを添加することによって沈殿させ、固体として処理することができる。これは、「液相」化学と呼ばれている。
【０１０３】
固相化学に関して用いられる「リンカー」という用語は、一般に固相支持体から基質の放出（切断）を可能にするため、固相支持体と共有結合し、支持体と基質との間に結合する化学基を指す。しかし、リンカーは、固相支持体との結合の安定性を付与するために、または単にスペーサー分子として用いることもできる。多くの固相支持体が、リンカーが既に結合した状態で市販されている。
【０１０４】
アミノ酸に用いる略語およびペプチドの命名は、Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．１９７２，２４７，９７７−９８３のＩＵＰＡＣ−ＩＵＢ生化学命名法委員会の規則に従う。この文書は改正されている：Ｂｉｏｃｈｅｍ．Ｊ．，１９８４，２１９，３４５−３７３；Ｅｕｒ．Ｊ．Ｂｉｏｃｈｅｍ．，１９８４，１３８，９−３７；１９８５，１５２，１；Ｉｎｔ．Ｊ．Ｐｅｐｔ．Ｐｒｏｔ．Ｒｅｓ．，１９８４，２４，ｐ  ８４以下；Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．，１９８５，２６０，１４−４２；Ｐｕｒｅ  Ａｐｐｌ．Ｃｈｅｍ．，１９８４，５６，５９５−６２４；Ａｍｉｎｏ  Ａｃｉｄｓ  ａｎｄ  Ｐｅｐｔｉｄｅｓ，１９８５，１６，３８７−４１０；ａｎｄ  ｉｎ  Ｂｉｏｃｈｅｍｉｃａｌ  Ｎｏｍｅｎｃｌａｔｕｒｅ  ａｎｄ  Ｒｅｌａｔｅｄ  Ｄｏｃｕｍｅｎｔｓ，２ｎｄ  ｅｄｉｔｉｏｎ，Ｐｏｒｔｌａｎｄ  Ｐｒｅｓｓ，１９９２，ｐｐ  ３９−６７。この規則の拡張が、ＪＣＢＮ／ＮＣ−ＩＵＢ  Ｎｅｗｓｌｅｔｔｅｒ  １９８５，  １９８６，  １９８９に発表された；Ｂｉｏｃｈｅｍｉｃａｌ  Ｎｏｍｅｎｃｌａｔｕｒｅ  ａｎｄ  Ｒｅｌａｔｅｄ  Ｄｏｃｕｍｅｎｔｓ，２ｎｄ  ｅｄｉｔｉｏｎ，Ｐｏｒｔｌａｎｄ  Ｐｒｅｓｓ，１９９２，ｐｐ  ６８−６９参照。
【０１０５】
「有効量」または「有効な」という用語は、臨床試験および評価、患者の観察などから気付く疾患または障害の症候の軽減をもたらす用量、および／または、関連する機構またはプロセスに関して当業者によって検出される生物学的変化または化学活性度をもたらす用量を指定することを意図する。当分野で一般に理解されているように、投薬量は投与経路、症候および患者の体重に応じても変動するが、投与される化合物に応じても変動する。
【０１０６】
２種以上の化合物の「併用」投与は、２種の化合物が、一方の存在が他方の生物学的作用を変えるのに十分近い時間で投与されることを意味する。２種の化合物は、同時（一斉に）にまたは順次投与してよい。同時投与は、投与前に化合物を混合することによって行うか、または化合物を同じ時点で、しかし異なる解剖学的部位に、または異なる投与経路を用いて投与することによって行うことができる。本明細書において用いられる「併用投与」、「組み合わせ投与」、「同時投与」または「同時に投与される」という表現は、化合物が同じ時点で、または互いに直後に投与されることを意味する。後者の場合、２種の化合物は、それらの化合物が同じ時点で投与される場合に達成される結果と区別がつかないほど十分に近い時点で投与される。
【０１０７】
「薬学的に活性度な代謝物」という用語は、特定の化合物の、身体の代謝を経て生産された薬理学的に活性度のある生成物を意味することを意図する。
【０１０８】
「溶媒和物」という用語は、特定の化合物の、そのような化合物の生物学的有効性を保持する、薬学的に許容される溶媒和物形態を意味することを意図する。溶媒和物の限定されない例としては、水、イソプロパノール、エタノール、メタノール、ＤＭＳＯ、酢酸エチル、酢酸、またはエタノールアミンと組み合わせた本発明の化合物が挙げられる。
【０１０９】
本発明の大環状化合物は、グレリン調節活性を有することが示され、特定の実施形態においては、アゴニストまたはインバースアゴニストとして示されている。一連の大環状ペプチド模倣薬は、最近、グレリン受容体の修飾因子として記載され、代謝および／または内分泌腺障害、胃腸障害、心血管障害、肥満症および肥満症関連障害、中枢神経系障害、遺伝性障害、過度増殖性障害および炎症性障害  を包含する一連の病状の治療および予防のためのそれらの使用が概述されている。（米国特許第７，４５２，８６２号、第７，４７６，６５３号および第７，４９１，６９５号；国際特許出願公開ＷＯ２００６／００９６４５、ＷＯ２００６／００９６７４、ＷＯ２００６／０４６９７７、ＷＯ２００６／１３７９７４およびＷＯ２００８／１３０４６４；米国特許出願公開第２００６／０２５５６６号、第２００７／０２１３３１号、第２００８／０５１３８３号および第２００８／１９４６７２号）。グレリンアゴニストであるこれらの化合物の１つ、ＴＺＰ−１０１は、胃腸の運動異常障害の治療としての臨床に参入している（Ｌａｓｓｅｔｅｒ，Ｋ．Ｃ．；Ｓｈａｕｇｈｎｅｓｓｙ，Ｌ．；Ｃｕｍｍｉｎｇｓ，Ｄ．；ｅｔ  ａｌ．Ｊ．Ｃｌｉｎ．Ｐｈａｒｍａｃｏｌ．２００８，４８，１９３−２０２）。これらのアゴニストと比較した場合、本発明の化合物は、構造的な組成およびキラル構造が異なる。
【０１１０】
結合潜在力および標的親和性は、創薬および薬剤開発における要因であるが、薬物動態学（ＰＫ）および薬力学的（ＰＤ）パラメーターの最適化も、実現可能な医薬品の開発に重要である。医薬産業における研究に対して重点を置く領域は、しばしば、その「薬らしさ」と俗に称される、分子の適切性を判断する基礎的要因をより良く理解することである。（Ｌｉｐｉｎｓｋｉ，  Ｃ．Ａ．；  Ｌｏｍｂａｒｄｏ，  Ｆ．；  Ｄｏｍｉｎｙ，  Ｂ．Ｗ．；  Ｆｅｅｎｅｙ，  Ｐ．Ｊ．  Ａｄｖ．  Ｄｒｕｇ  Ｄｅｌｉｖｅｒｙ  Ｒｅｖ．  １９９７，  ２３，  ３−２５；  Ｍｕｅｇｇｅ，  Ｉ．  Ｍｅｄ．  Ｒｅｓ．  Ｒｅｖ．  ２００３，  ２３，  ３０２−３２１；  Ｖｅｂｅｒ，  Ｄ．Ｆ．；  Ｊｏｈｎｓｏｎ，  Ｓ．Ｒ．；  Ｃｈｅｎｇ，  Ｈ．−Ｙ．；  Ｓｍｉｔｈ，  Ｂ．Ｒ．；  Ｗａｒｄ，  Ｋ．Ｗ．；  Ｋｏｐｐｌｅ，  Ｋ．Ｄ．  Ｊ．  Ｍｅｄ．  Ｃｈｅｍ．  ２００２，  ４５，  ２６１５−２６２３．）例えば、分子量、ｌｏｇＰ、膜透過性、水素結合供与体および受容体の数、総極性表面積（ＴＰＳＡ）、および回転可能な結合の数は、すべて、薬物開発において成功した化合物と相関がある。加えて、血漿タンパク質結合、シトクロムＰ４５０酵素との相互作用、および薬物動態パラメーターの実験的測定は、新規薬物候補を選択および進展させるために、医薬産業において使用される。
【０１１１】
しかしながら、これらのパラメーターは、大環状構造的クラス内では広範囲に探索または報告されていない。このため、これらの分子のための薬剤開発において並はずれた課題が生じる。本発明の大環状化合物は、本明細書に提示される実施例に説明されるように、グレリン受容体に対して十分な結合親和性および選択性を維持しながら、望ましい薬理学的特徴を有することが発見されている。これらの組み合わせた特徴により、以前に記載された大環状グレリンアンタゴニスト化合物より優れていて、特に経口投与剤の使用または長期使用としての使用のための医薬品としての開発により適切になる。
１．  化合物
【０１１２】
本発明の新規の大環状化合物は、式（Ｉ）：
【化９】
2013509434.tif 000012
のものを含み、ここで、その構成要素Ｔは、
【化１０】
2013509434.tif 000013
［式中、（ＮＡ）は、式（Ｉ）のＮＲ４ａとの結合部位を示し、また（ＮＢ）は、式（Ｉ）のＮＲ４ｃとの結合部位を示す。］から選択される化合物、またはその薬学的に許容される塩を含む。
【０１１３】
特定の実施形態において、本化合物は、表１に定義する構造のいずれかを有することができる。これらの構造は構造式（Ａ）：
【化１１】
2013509434.tif 000014
に基づき、式中、（ＮＡ）は、式（Ａ）のＮＲａとの結合部位を示し、また（ＮＢ）は、式（Ａ）のＮＲｃとの結合部位を示し、Ｐｇは窒素保護基である。
【表１−１】
2013509434.tif 000015
【表１−２】
2013509434.tif 000016
【表１−３】
2013509434.tif 000017
【表１−４】
2013509434.tif 000018
【表１−５】
2013509434.tif 000019
【表１−６】
2013509434.tif 000020
【表１−７】
2013509434.tif 000021
【表１−８】
2013509434.tif 000022
【表１−９】
2013509434.tif 000023
【表１−１０】
2013509434.tif 000024
【表１−１１】
2013509434.tif 000025
【表１−１２】
2013509434.tif 000026
【表１−１３】
2013509434.tif 000027
【表１−１４】
2013509434.tif 000028
【表１−１５】
2013509434.tif 000029
【表１−１６】
2013509434.tif 000030
【表１−１７】
2013509434.tif 000031
【表１−１８】
2013509434.tif 000032
【表１−１９】
2013509434.tif 000033
【表１−２０】
2013509434.tif 000034
【表１−２１】
2013509434.tif 000035
【表１−２２】
2013509434.tif 000036
【表１−２３】
2013509434.tif 000037
【表１−２４】
2013509434.tif 000038
【表１−２５】
2013509434.tif 000039
【表１−２６】
2013509434.tif 000040
【表１−２７】
2013509434.tif 000041
【表１−２８】
2013509434.tif 000042
【表１−２９】
2013509434.tif 000043
【表１−３０】
2013509434.tif 000044
【表１−３１】
2013509434.tif 000045
【表１−３２】
2013509434.tif 000046
【表１−３３】
2013509434.tif 000047
【表１−３４】
2013509434.tif 000048
【表１−３５】
2013509434.tif 000049
【表１−３６】
2013509434.tif 000050
【表１−３７】
2013509434.tif 000051
【表１−３８】
2013509434.tif 000052
【表１−３９】
2013509434.tif 000053
【表１−４０】
2013509434.tif 000054
【表１−４１】
2013509434.tif 000055
【表１−４２】
2013509434.tif 000056
【表１−４３】
2013509434.tif 000057
【表１−４４】
2013509434.tif 000058
【表１−４５】
2013509434.tif 000059
【表１−４６】
2013509434.tif 000060
【表１−４７】
2013509434.tif 000061
【表１−４８】
2013509434.tif 000062
【表１−４９】
2013509434.tif 000063
【表１−５０】
2013509434.tif 000064
【表１−５１】
2013509434.tif 000065
【表１−５２】
2013509434.tif 000066
【表１−５３】
2013509434.tif 000067
【表１−５４】
2013509434.tif 000068
【表１−５５】
2013509434.tif 000069
【表１−５６】
2013509434.tif 000070
【表１−５７】
2013509434.tif 000071
【表１−５８】
2013509434.tif 000072
表１の化合物に関して、下記以外すべての化合物についてＲａ＝Ｈ、Ｒｂ＝Ｍｅ、Ｒｃ＝Ｈ、Ｒｄ＝Ｈである。Ｒａ＝Ｍｅ（化合物１３２３、１３５５、１３５６）；Ｒｂ＝Ｈ（化合物１３５３〜１３５７、１３８２）；Ｒｃ＝Ｍｅ（化合物１３５７、１３８２、１３８８、１３８９）；Ｒｄ＝Ｍｅ（化合物１３５３、１３５４）。
【０１１４】
表１の構成要素ＴＡは、以下のとおりである。
【化１２Ａ】
2013509434.tif 000073
【化１２Ｂ】
2013509434.tif 000074
【化１２Ｃ】
2013509434.tif 000075
【化１２Ｄ】
2013509434.tif 000076
【化１２Ｅ】
2013509434.tif 000077
【化１２Ｆ】
2013509434.tif 000078
ここで式中、（ＮＡ）は、式（Ａ）のＮＲａとの結合部位を示し、また（ＮＢ）は、式（Ａ）のＮＲｃとの結合部位を示し、Ｐｇは窒素保護基である。
【０１１５】
本発明には、単離した化合物が含まれる。単離した化合物とは、いくつかの実施形態において、混合物の化合物を少なくとも１０％、少なくとも２５％、少なくとも５０％または少なくとも７０％含む化合物を指す。いくつかの実施形態において、本化合物、その薬学的に許容される塩または化合物を含有する医薬組成物は、生物学的アッセイにおいてヒトグレリン受容体で試験した場合に、統計上有意な結合活性度および／またはアンタゴニスト活性度および／またはインバースアンタゴニスト活性度を示す。
【０１１６】
固体の化合物、塩または溶媒和物の場合、本発明の化合物、塩および溶媒和物が異なる結晶または多形相で存在し得ることは当業者に理解され、それらすべてが本発明および明記された式の範囲内にあるものと意図される。
【０１１７】
本明細書において開示される式（Ｉ）の化合物は、不斉中心を有する。本発明の化合物は、単一の立体異性体、ラセミ化合物、および／または鏡像異性体および／またはジアステレオマーの混合物として存在し得る。すべてのそのような単一の立体異性体、ラセミ化合物、およびそれらの混合物は、本発明の範囲内であることを意図する。しかし、本発明の化合物は、光学的に純粋な形態で使用される。本明細書において使用される「Ｓ」および「Ｒ」配置という用語は、ＩＵＰＡＣ  １９７４  Ｒｅｃｏｍｍｅｎｄａｔｉｏｎｓ  ｆｏｒ  Ｓｅｃｔｉｏｎ  Ｅ，Ｆｕｎｄａｍｅｎｔａｌｓ  ｏｆ  Ｓｔｅｒｅｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ（Ｐｕｒｅ  Ａｐｐｌ．Ｃｈｅｍ．１９７６，４５，１３−３０）によって定義される通りである。
【０１１８】
別途特定の配向で描かれない限り、本発明は、すべての立体異性体の形態を考慮に入れる。化合物は、単一の立体異性体、または立体異性体の混合物として調製することができる。非ラセミ形態は、合成または分割のいずれかによって得られ得る。例えば、本化合物は、標準的方法、例えば、塩形成を介するジアステレオマー対の形成によって、成分の鏡像異性体へ分割することができる。化合物は、キラル部分との共有結合によっても分割することができる。その後、ジアステレオマーは、クロマトグラフ分離および／または結晶学的分離によって分割することができる。キラル補助部分の場合、次いで、それを除去することができる。代替として、本化合物は、キラルクロマトグラフィーの使用によって分割することができる。化合物は、分割の酵素的方法も、場合によっては使用することができる。
【０１１９】
当業者によって一般に理解されるように、「光学的に純粋な」化合物は、単一の鏡像異性体のみを含有する化合物である。本明細書において使用される「光学活性な」という用語は、他方に対して一方の鏡像異性体の少なくとも十分な過剰率を含み、そのためその混合物が平面偏光を回転する化合物を意味することを意図する。鏡像体過剰率（ｅ．ｅ．）は、他方に対する一方の鏡像異性体の過剰率を示す。光学活性化合物は、偏光の平面を回転させる能力を有する。光学活性化合物を説明する際、ＤとＬまたはＲとＳの接頭辞が、キラル中心（複数可）の周囲の分子の絶対配置を意味するために使用される。「ｄ」と「ｌ」または（＋）と（−）の接頭辞は、化合物の旋光度を意味するために使用される（すなわち、偏光の平面が光学活性化合物によって回転する方向）。「ｌ」または（−）の接頭辞は、化合物が左旋性であることを示し（すなわち、左または反時計回りに偏光の平面を回転する）、「ｄ」または（＋）の接頭辞は、化合物が右旋性であることを意味する（すなわち、右または時計回りに偏光の平面を回転する）。旋光度の符号である（−）および（＋）は、分子の絶対配置であるＲおよびＳと関連しない。
【０１２０】
所望の薬理学的特性を有する本発明の化合物は、光学活性であり、単一の異性体の少なくとも９０％（８０％ｅ．ｅ．）、少なくとも９５％（９０％ｅ．ｅ．）、少なくとも９７．５％（９５％ｅ．ｅ．）または少なくとも９９％（９８％ｅ．ｅ．）から構成される。
【０１２１】
同様に、多数の二重結合の幾何異性体等も、本明細書において開示される化合物に存在することができ、すべてのそのような安定異性体は、特定されていない限り、本発明内に含まれる。式Ｉのの互変異性体および回転異性体も、本発明に含まれる。
【０１２２】
下記の記号の使用は、表示された環の１個または複数の水素原子の、定義された置換基Ｒでの置換を指す。
【化１３】
2013509434.tif 000079
【０１２３】
記号：−−−−の使用は、単結合または随意の二重結合を示す。
【０１２４】
本発明の実施形態は、式Ｉの化合物を提供するための、本明細書に記載される合成方法によって形成される中間体をさらに提供する。中間体は、治療剤、および／またはさらなる合成法および反応に対する試薬としての有用性を有し得る。
２．  合成法
【０１２５】
式（Ｉ）の化合物は、従来の溶液合成技術または固相化学法を使用して合成することができる。いずれの場合も、構築は、４つの段階を伴う。まず、主に、配座の制御および画定に対する、生物学的標的受容体のための認識要素、および１つのテザー部分を含む構成要素の合成である。これらの構成要素は、標準的な化学変換を使用する第２の段階において、典型的には、順次的様式で一緒に集成される。次いで、集成からの前駆体は、第３の段階で環化され、大環状構造を与える。最終的に、保護基の除去および随意の精製を伴う第４段階の環化後過程により、所望の最終化合物が形成される。この一般的な種類の大環状構造の合成方法は、国際特許出願公開ＷＯ２００４／１１１０７７およびＷＯ２００５／０１２３３１に記載される精製法を含み、国際特許出願公開ＷＯ０１／２５２５７、ＷＯ２００４／１１１０７７、ＷＯ２００５／０１２３３１、ＷＯ２００５／０１２３３２、ＷＯ２００６／００９６４５、ＷＯ２００６／００９６７４、ＷＯ２００８／０３３３２８、ＷＯ２００８／１３０４６４に記載されている。より大規模な製造に適用可能な方法を包含する溶液相合成経路が、米国特許出願公開第２００６／０２５５６６号およびＵＳ２００７／００２１３３１に記載されている。
【０１２６】
本発明のいくつかの実施形態において、式（Ｉ）の大環状化合物は、上記で定義される可溶性または不溶性ポリマーマトリックス上で固相化学を使用して合成することができる。固相化学に関して、「装填」とも称される、第１の構成要素の樹脂への結合を伴う予備段階を行わなければならない。本発明に対して使用される樹脂は、優先的に、リンカー部分であるＬに結合している。エステルまたはアミド結合の形成のために開発された、任意の多くの反応条件のなどの当業界で公知の標準的反応法によって、これらのリンカーは、基剤樹脂上の、適切な遊離の化学官能基、通常アルコールまたはアミン（他もまた可能であるが）に結合されている。本発明のためのいくつかのリンカー部分は、「環化放出」と一般に称されるプロセスにおける、大員環の形成を伴う、樹脂からの同時切断を可能にするように設計される（ｖａｎ  Ｍａａｒｓｅｖｅｅｎ，  Ｊ．Ｈ．  Ｃｏｍｂ．Ｃｈｅｍ．  Ｈｉｇｈ  Ｔｈｒｏｕｇｈｐｕｔ  Ｓｃｒｅｅｎ．  １９９８，  １，  １８５−２１４；  Ｊａｍｅｓ，  Ｉ．Ｗ．  Ｔｅｔｒａｈｅｄｒｏｎ  １９９９，  ５５，  ４８５５−４９４６；  Ｅｇｇｅｎｗｅｉｌｅｒ，  Ｈ．−Ｍ．  Ｄｒｕｇ  Ｄｉｓｃｏｖｅｒｙ  Ｔｏｄａｙ  １９９８，  ３，  ５５２−５６０；  Ｂａｃｋｅｓ，  Ｂ．Ｊ．；  Ｅｌｌｍａｎ，  Ｊ．Ａ．  Ｃｕｒｒ．  Ｏｐｉｎ．  Ｃｈｅｍ．  Ｂｉｏｌ．  １９９７，  １，  ８６−９３．）。この点に関して本発明の化合物にとって特に有益なのは、３−チオプロピオン酸リンカーである（Ｈｏｊｏ，  Ｈ．；Ａｉｍｏｔｏ，  Ｓ．  Ｂｕｌｌ．  Ｃｈｅｍ．  Ｓｏｃ．  Ｊｐｎ．  １９９１，  ６４，  １１１−１１７；  Ｚｈａｎｇ，  Ｌ．；  Ｔａｍ，  Ｊ．  Ｊ．  Ａｍ．  Ｃｈｅｍ．  Ｓｏｃ．  １９９９，  １２１，  ３３１１−３３２０．）。
【０１２７】
環状生成物のみが固体支持材から放出されるため、そのようなプロセスにより、通常より高純度の材料が提供され、溶液相において生じるような線状前駆体による汚染はほとんど発生しない。アミドまたはエステル結合の形成のための公知または標準的な反応化学を使用して、すべての構成要素およびテザーの線状前駆体への連続的集成の後、テザー構成要素の一部である適切な求核官能基によってこのリンカーに結合したカルボニルに対する塩基媒介の分子内攻撃により、スキーム１に示されるように、環状構造を完成するアミドまたはエステル結合の形成が結果として生じる。より大規模な適用に対して好ましいと考えられるように、溶液相に適合する類似の方法も、適用することができる。
スキーム１．環化放出法
【化１４】
2013509434.tif 000080
【０１２８】
この説明は、本発明の方法の１つであるチオエステル法のための経路を正確に表すが、本発明の他の方法である、閉環メタセシス（ＲＣＭ）の方法は、テザー成分が、環化ステップの間に実際に集成される修飾経路を介して進行する。しかし、ＲＣＭ法においても、構成要素の集成は、順次的に進行し、環化（および、固相である場合、樹脂からの放出）が後続する。追加の環化後処理ステップは、ＲＣＭ反応の特定の副生物を除去するために必要となるが、残りの次の処理は、チオエステルまたは類似した塩基媒介環化法と同じように行われる。
【０１２９】
さらに、本明細書において提供される方法を含むステップは、独立して行い得るか、または少なくとも２つのステップを組み合わせ得ることが理解されよう。加えて、本明細書において提供される方法を含むステップは、独立して、または組み合わせて行われる場合、本発明の教示から逸脱することなく同じ温度または異なる温度で実施することができる。
【０１３０】
したがって、本発明は、（ａ）構成要素構造を集成するステップと、（ｂ）構成要素構造を化学的に変換するステップと、（ｃ）テザー成分を含む構成要素構造を環化するステップと、（ｄ）構成要素構造から保護基を除去するステップと、（ｅ）場合によって、ステップ（ｄ）より得られた生成物を精製するステップとを含む、本発明の化合物を製造するための方法を提供する。いくつかの実施形態において、構成要素構造の集成は、順次的であってもよい。さらなる実施形態において、合成法は、従来の溶液合成技法または固相化学技法を使用して行われる。
【０１３１】
Ａ．  一般合成情報
試薬および溶媒は、試薬品位またはそれ以上のものであり、特に明記しない限り、Ｓｉｇｍａ−Ａｌｄｒｉｃｈ  （Ｍｉｌｗａｕｋｅｅ，  ＷＩ，  ＵＳＡ）、Ｌａｎｃａｓｔｅｒ（Ａｌｆａ  Ａｅｓａｒの一部、Ｊｏｈｎｓｏｎ  Ｍａｔｔｈｅｙ  Ｃｏｍｐａｎｙの１つ，  Ｗａｒｄ  Ｈｉｌｌ，  ＭＡ）、Ａｃｒｏｓ  Ｏｒｇａｎｉｃｓ  （Ｇｅｅｌ，  Ｂｅｌｇｉｕｍ）、Ａｌｆａ  Ａｅｓａｒ（Ｊｏｈｎｓｏｎ  Ｍａｔｔｈｅｙ  Ｃｏｍｐａｎｙの一部，  Ｗａｒｄ  Ｈｉｌｌ，  ＭＡ）、Ｆｉｓｈｅｒ  Ｃｈｅｍｉｃａｌ（Ｔｈｅｒｍｏ  Ｆｉｓｈｅｒの一部，  Ｆａｉｒｌａｗｎ，  ＮＪ）、ＴＣＩ  Ａｍｅｒｉｃａ  （Ｐｏｒｔｌａｎｄ，  ＯＲ）、Ｄｉｇｉｔａｌ  Ｓｐｅｃｉａｌｔｙ  Ｃｈｅｍｉｃａｌｓ  （Ｔｏｒｏｎｔｏ，  ＯＮ，  Ｃａｎａｄａ）を含む商業的供給元から得たままで使用した。使用するＤＭＦ、ＤＣＭ、ＤＭＥおよびＴＨＦは、（ｉ）脱保護、（ｉｉ）樹脂キャッピング反応および（ｉｉｉ）洗浄を除いて、ＤｒｉＳｏｌｖ（登録商標）（ＥＭ  Ｓｃｉｅｎｃｅ，  Ｅ．  Ｍｅｒｃｋ）または合成等級品位である。アミノ酸（ＡＡ）カップリング反応に使用するＮＭＰは、分析等級である。ＤＭＦは、使用する前に、最低３０分間真空下に置くことにより、十分に脱気した。分析ＴＬＣは、蛍光指示薬を含むシリカゲル６０Ｆ２５４（厚さ０．２５ｍｍ）の事前被覆プレートで実施した。
【０１３２】
「減圧／真空下で濃縮／蒸発／除去された」という用語は、溶媒を除去するのに適した、水流吸引器圧下、または機械式油真空ポンプにより提供される、より強力な真空下のいずれかで回転蒸発器を使用する蒸発を示す。「ドライパック」とは、溶媒で前処理されていず、Ｒｆの大きな差異が所望の生成物と何らかの不純物との間に存在する精製に対してより大規模に一般に適用される、シリカゲルのクロマトグラフィーを示す。「フラッシュクロマトグラフィー」は、文献  （Ｓｔｉｌｌ，  Ｗ．  Ｃ．；  Ｋａｈｎ，  Ｍ．；  Ｍｉｔｒａ，  Ａ．  Ｊ．  Ｏｒｇ．  Ｃｈｅｍ．  １９７８，  ４３，  ２９２３−２９２５）中に記載される方法を指し、その一部が所望の物質に近いＲｆを有し得る不純物を除去するために使用されるシリカゲルのクロマトグラフィー（２３０〜４００メッシュ、ＥＭ  Ｓｃｉｅｎｃｅ）に対し適用される。固相化学に特異的な方法は、別に詳述する。
Ｂ．  固相化学の一般法
【０１３３】
これらの方法は、単一の化合物、または少数の化合物の合成、ならびに本発明の化合物のライブラリーの合成のために、等しくうまく適用することができる。
【０１３４】
固相化学では、溶液化学におけるように反応成分を溶解させるだけでなく、樹脂を膨潤させるために、溶媒の選択が重要である。ある種の溶媒は、ポリマーマトリックスと、その性質に応じて異なる相互作用を行い、この膨潤特性に影響し得る。例として、ポリスチレン（ＤＶＢ架橋を有する）は無極性溶媒、例えばＤＣＭおよびトルエン中で、最も膨潤するが、アルコールのような極性溶媒に曝されると、収縮する。対照的に、ＴｅｎｔａＧｅｌのようなＰＥＧ−グラフト樹脂などの他の樹脂は、極性溶媒中ですら、その膨潤を維持する。本発明の反応のために、適切な選択を当業者は行うことができる。一般に、ポリスチレン−ＤＶＢ樹脂は、ＤＭＦおよびＤＣＭの一般的な溶媒と共に使用される。必要とされる反応溶媒の体積は、一般に、樹脂１００ｍｇ当り、１〜１．５ｍＬである。「適切な溶媒量」という用語が合成法で使用される場合、それは、この量を指す。溶媒の推奨量は、おおよそ、構成要素（リンカー、アミノ酸、ヒドロキシ酸およびテザー、最初の樹脂装填量に対して５当量で使用）の０．２Ｍ溶液に相当する。反応化学量論は、出発樹脂の「装填量（ｍｍｏｌ／ｇとして記される、活性官能部位の数を表す）」に基づいて決定された。
【０１３５】
反応は、任意の適切な容器、例えば、丸底フラスコ、フリットフィルターと活栓とを備えた固相反応容器、又はテフロン（登録商標）キャップ付きジャー中で行うことができる。容器の大きさは、溶媒用に適切なスペースがあり、かつ有機溶媒で処理されると、ある種の樹脂が著しく膨潤し得ることを考慮に入れて、樹脂を有効に揺動するのに十分な余地のあるものでなくてはならない。溶媒／樹脂混合物は、容器の約６０％を充たさねばならない。固相化学において、規模のため、緩かな機械的撹拌がより好適である場合を除くすべての揺動は、オービタルシェーカー（例えばＦｏｒｍａ  Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ，ｍｏｄｅｌ  ４３０，１６０〜１８０ｒｐｍ）で行うのが最良であり、反応成功のために重要であると一般に認られている適切な混合を確実に行うことに注目されたい。
【０１３６】
樹脂洗浄のために使用する溶媒の体積は、反応のために使用されるのと最低同じ体積であるが、過剰の試薬及び他の可溶性残留副生物を完全に除去するために、一般にそれより多くを使用する。実施例に明記された樹脂洗浄は、それぞれ（特に記載が無ければ）列挙の順序で揺動して少なくとも５分間継続して実行するべきである。洗浄回数は，溶媒又は溶液と一緒に「ｎｘ」で示され、ここでｎは整数である。混合溶媒洗浄系の場合には、両方が一緒に列挙され、溶媒１／溶媒２と示される。洗浄ステップで使用される溶媒混合物ＤＣＭ／ＭｅＯＨ及びＴＨＦ／ＭｅＯＨの割合は、すべての場合に、（３：１）である。他の混合溶媒は列挙された通りである。洗浄後、「標準方式」での乾燥は、樹脂を先ず空気中で乾燥させ（１時間）、引き続き真空下（通常油ポンプ）で完全に乾燥するまで（最低３０分、終夜まで）乾燥させることを意味する。
Ｃ．アミノ酸
【０１３７】
アミノ酸、Ｂｏｃ−およびＦｍｏｃ−保護アミノ酸、およびＮ−メチルおよび非天然アミノ酸のそれらを含む側鎖保護誘導体は、商業的供給者［例えば、Ａｄｖａｎｃｅｄ  ＣｈｅｍＴｅｃｈ  （Ｌｏｕｉｓｖｉｌｌｅ，  ＫＹ，  ＵＳＡ），  Ａｎａｓｐｅｃ  （Ｓａｎ  Ｊｏｓｅ，  ＣＡ，  ＵＳＡ），  Ａｓｔａｔｅｃｈ  （Ｐｒｉｎｃｅｔｏｎ，  ＮＪ，  ＵＳＡ），  Ｂａｃｈｅｍ  （Ｂｕｂｅｎｄｏｒｆ，  Ｓｗｉｔｚｅｒｌａｎｄ），  ＣｈｅｍＩｍｐｅｘ  （Ｗｏｏｄ  Ｄａｌｅ，  ＩＬ，  ＵＳＡ），  Ｎｏｖａｂｉｏｃｈｅｍ  （ｓｕｂｓｉｄｉａｒｙ  ｏｆ  Ｍｅｒｃｋ  ＫＧａＡ，Ｄａｒｍｓｔａｄｔ，  Ｇｅｒｍａｎｙ），  ＰｅｐＴｅｃｈ  （Ｂｕｒｌｉｎｇｔｏｎ，  ＭＡ，  ＵＳＡ），  Ｓｙｎｔｈｅｔｅｃｈ  （Ａｌｂａｎｙ，  ＯＲ，  ＵＳＡ）］から得たか、または当分野で公知の標準的方法により合成した。Ｄｄｚアミノ酸は、Ｏｒｐｅｇｅｎ（Ｈｅｉｄｅｌｂｅｒｇ，Ｇｅｒｍａｎｙ）またはＡｄｖａｎｃｅｄ  ＣｈｅｍＴｅｃｈ（Ｌｏｕｉｓｖｉｌｌｅ，ＫＹ，ＵＳＡ）より購入したか、または、Ｄｄｚ−ＯＰｈまたはＤｄｚ−Ｎ３（Ｂｉｒｒ，Ｃ．；Ｌｏｃｈｉｎｇｅｒ，Ｗ．；Ｓｔａｈｎｋｅ，Ｇ．；Ｌａｎｇ，Ｐ．Ｊｕｓｔｕｓ  Ｌｉｅｂｉｇｓ  Ａｎｎ．Ｃｈｅｍ．１９７２，７６３，１６２−１７２）を使用する標準的方法を使用して合成した。Ｂｔｓアミノ酸は、公知の方法（Ｖｅｄｅｊｓ，Ｅ．；Ｌｉｎ，Ｓ．；Ｋｌａｐａｒａ，Ａ．；Ｗａｎｇ，Ｊ．Ｊ．Ａｍ．Ｃｈｅｍ．Ｓｏｃ．１９９６，１１８，９７９６−９７９７。また、国際公開ＷＯ０１／２５２５７、ＷＯ２００４／１１１０７７）によって合成した。Ｎ−アルキルアミノ酸、特にＮ−メチルアミノ酸は、複数の販売者（Ｂａｃｈｅｍ，Ｎｏｖａｂｉｏｃｈｅｍ，Ａｄｖａｎｃｅｄ  ＣｈｅｍＴｅｃｈ，ＣｈｅｍＩｍｐｅｘ）より市販されている。さらに、Ｎ−アルキルアミノ酸誘導体は、文献の方法（Ｈａｎｓｅｎ，Ｄ．Ｗ．，Ｊｒ．；Ｐｉｌｉｐａｕｓｋａｓ，Ｄ．Ｊ．Ｏｒｇ．Ｃｈｅｍ．１９８５，５０，９４５−９５０）を介して入手した。Ｆｍｏｃ−Ｎ−ＭｅＳｅｒおよびＦｍｏｃ−Ｎ−ＭｅＴｈｒの改善された合成法が報告されている（Ｂａｈｅｋａｒ，Ｒ．Ｈ．；Ｊａｄａｖ，  Ｐ．Ａ．；  Ｐａｔｅｌ，  Ｄ．Ｎ．；  Ｐｒａｊａｐａｔｉ，  Ｖ．Ｍ．；  Ｇｕｐｔａ，  Ａ．Ａ．  Ｊａｉｎ，  Ｍ．Ｒ．；  Ｐａｔｅｌ，  Ｐ．Ｒ．  Ｔｅｔｒａｈｅｄｒｏｎ  Ｌｅｔｔ．２００７，  ４８，  ５００３−５００５．）。ａｌｌｏ−トレオニンおよびβ−ヒドロキシバリンは公知の手順によって合成することができる（Ｓｈａｏ，  Ｈ．；  Ｇｏｏｄｍａｎ，  Ｍ．  Ｊ．  Ｏｒｇ．  Ｃｈｅｍ．  １９９６，  ６１，  ２５８２；  Ｂｌａｓｋｏｖｉｃｈ，  Ｍ．  Ａ．；  Ｅｖｉｎｄａｒ，  Ｇ．；  Ｒｏｓｅ，  Ｎ．  Ｇ．  Ｗ．；  Ｗｉｌｋｉｎｓｏｎ，  Ｓ．；  Ｌｕｏ，  Ｙ．；  Ｌａｊｏｉｅ，  Ｇ．．  Ｊ．  Ｏｒｇ．  Ｃｈｅｍ．  １９９８，  ６３，  ３６３１；  Ｄｅｔｔｗｉｌｅｒ；  Ｊ．Ｅ．  Ｌｕｂｅｌｌ，  Ｗ．Ｄ．  Ｊ．  Ｏｒｇ．  Ｃｈｅｍ．  ２００３，  ６８，  １７７−１７９．）。β−メチルフェニルアラニンおよびβ−メチルチロシンのキラル異性体は、文献の方法を使用して入手することができる（Ｄｈａ���ａｎｉｐｒａｇａｄａ，  Ｒ．；  Ｖａｎ  Ｈｕｌｌｅ，  Ｋ．；  Ｂａｎｎｉｓｔｅｒ，  Ａ．；  Ｂｅａｒ，  Ｓ．；  Ｋｅｎｎｅｄｙ，  Ｌ．；  Ｈｒｕｂｙ，  Ｖ．  Ｊ．  Ｔｅｔｒａｈｅｄｒｏｎ  １９９２，  ４８，  ４７３３−４７４８；  Ｎｉｃｏｌａｓ，  Ｅ．；  Ｒｕｓｓｅｌｌ，  Ｋ．  Ｃ．；  Ｋｎｏｌｌｅｎｂｅｒｇ，  Ｊ．；  Ｈｒｕｂｙ，  Ｖ．  Ｊ．  Ｊ．  Ｏｒｇ．  Ｃｈｅｍ．  １９９３，  ５９，  ７５６５−７５７１．）。同様に、適切な保護基を有する４，４，４−トリフルオロトレオニンのキラル異性体は、文献に記載されるエナンチオ選択合成法によって調製することができる（Ｘｉａｏ，  Ｎ．；  Ｊｉｎａｇ，  Ｚ．−Ｈ．；  Ｙｕ，  Ｙ．Ｂ．  Ｂｉｏｐｏｌｙｍｅｒｓ  （Ｐｅｐｔ．  Ｓｃｉ．）２００７，  ８８，  ７８１−７９６．）。Ｌ−スレオニン（２、３Ｓ）のａｌｌｏ−異性体の組み込みは、天然物ウスチロキシンＤ（Ｗａｎｄｌｅｓｓ，  Ｔ．Ｊ．；  ｅｔ．ａｌ．  Ｊ．  Ａｍ．  Ｃｈｅｍ．  Ｓｏｃ．  ２００３，  １１５，  ６８６４−６８６５．）の合成において使用される相似変換に基づくｓｙｎ−Ｌ−ｉｓｍｏｅｒ（２Ｓ，３Ｒ）から達成することができる。
Ｄ．  テザー
【０１３８】
ある種のテザーは、先の国際特許出願公開ＷＯ０１／２５２５７、ＷＯ２００４／１１１０７７、ＷＯ２００５／０１２３３１、ＷＯ２００６／００９６４５、ＷＯ２００６／００９６７４および米国特許仮出願第６１／２５４，４３４号に記載された方法から得られた。
【０１３９】
本発明の化合物のための例示のテザー（Ｔ）は、下記を含むが、これらに限定されない。
【化１５Ａ】
2013509434.tif 000081
【化１５Ｂ】
2013509434.tif 000082
【化１５Ｃ】
2013509434.tif 000083
【化１５Ｄ】
2013509434.tif 000084
【化１５Ｅ】
2013509434.tif 000085
【化１５Ｆ】
2013509434.tif 000086
ここで式中、ＰｇおよびＰｇ２は、Ｂｏｃ、Ｆｍｏｃ、Ｃｂｚ、ＤｄｚおよびＡｌｌｏｃなどの、しかしこれらに限定されない窒素保護基である。
【０１４０】
本明細書に開示された新規のテザー部分の代表的な合成のために、実施例において提示された経路が使用される。記載された経路は、特定の保護戦略を典型的に説明するが、当業界で公知の他の適切な保護基も使用することができる。
Ｅ．固相および溶液相技法
【０１４１】
混合固相−溶液相手順を含む、本発明の大環状化合物の合成のための具体的な固相技法は、国際特許出願公開ＷＯ２００４／１１１０７７およびＷＯ２００５／０１２３３１に記載されている精製手順を含め、ＷＯ０１／２５２５７、ＷＯ２００４／１１１０７７、ＷＯ２００５／０１２３３１、ＷＯ２００５／０１２３３２、ＷＯ２００６／００９６４５、ＷＯ２００６／００９６７４、ＷＯ２００８／０３３３２８、ＷＯ２００８／１３０４６４  および米国特許仮出願第６１／２５４，４３４号に記載されている。より大規模な製造に適用可能な方法を含む、溶液相合成経路は、米国特許出願公開第２００６／０２５５６６号およびＵＳ２００７／００２１３３１に記載されている。
３．  分析法
【０１４２】
本発明の大環状化合物の特性評価のための特定の分析技法は、ＷＯ０１／２５２５７、ＷＯ２００４／１１１０７７、ＷＯ２００５／０１２３３１およびＷＯ２００５／０１２３３２に記載されている。
【０１４３】
１Ｈおよび１３ＣＮＭＲスペクトルは、Ｖａｒｉａｎ  Ｍｅｒｃｕｒｙ  ３００  ＭＨｚスペクトロメーター（Ｖａｒｉａｎ，  Ｉｎｃ．，  Ｐａｌｏ  Ａｌｔｏ，  ＣＡ）で記録し、特に明記しない限り、溶媒の残留プロトンシグナルに関して内標準とする。１Ｈ  ＮＭＲデータは、以下のような標準的略語を使用して提示される：ｐｐｍでの化学シフト（δ）（多重度、積分、結合定数（複数可））。以下の略語がシグナル多重度を示すために使用される：ｓ＝一重線、ｄ＝二重線、ｔ＝三重線、ｑ＝四重線、ｑｕｉｎｔ＝五重線、ｂまたはｂｒ＝幅の広い、およびｍ＝多重線。溶液中の分子の配座についての情報は、当業者に公知の適切な２次元ＮＭＲ法を利用して決定することができる（Ｍａｒｔｉｎ，  Ｇ．Ｅ．；  Ｚｅｋｔｚｅｒ，  Ａ．Ｓ．  Ｔｗｏ−Ｄｉｍｅｎｓｉｏｎａｌ  ＮＭＲ  Ｍｅｔｈｏｄｓ  ｆｏｒ  Ｅｓｔａｂｌｉｓｈｉｎｇ  Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｃｏｎｎｅｃｔｉｖｉｔｙ：  Ａ  Ｃｈｅｍｉｓｔ’ｓ  Ｇｕｉｄｅ  ｔｏ  Ｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔ  Ｓｅｌｅｃｔｉｏｎ，  Ｐｅｒｆｏｒｍａｎｃｅ，  ａｎｄ  Ｉｎｔｅｒｐｒｅｔａｔｉｏｎ，  Ｊｏｈｎ  Ｗｉｌｅｙ  ＆  Ｓｏｎｓ：  Ｎｅｗ  Ｙｏｒｋ，  １９８８，  ＩＳＢＮ  ０４７１１８７０７０．）。
【０１４４】
ＨＰＬＣ分析をＸｔｅｒｒａ（登録商標）ＭＳ  Ｃ１８カラム（または同等）４．６×５０ｍｍ（３．５μｍ）および指示された傾斜法を使用して、１ｍＬ／分で運転し、Ｗａｔｅｒｓ  Ａｌｌｉａｎｃｅ（登録商標）システム２６９５で実施した。Ｗａｔｅｒｓ  ９９６  ＰＤＡが、純度評価のためのＵＶデータを提供した（Ｗａｔｅｒｓ  Ｃｏｒｐｏｒａｔｉｏｎ，Ｍｉｌｆｏｒｄ，ＭＡ）。ある種の分析には、ＬＣＰａｃｋｉｎｇｓ（Ｄｉｏｎｅｘ  Ｃｏｒｐｏｒａｔｉｏｎ，Ｓｕｎｎｙｖａｌｅ，ＣＡ）スプリッター（５０：４０：１０）によって、流量が３つの部分に分離するようにした。第１の部分（５０％）は、同定確認のために質量分析計（ＡＰＣＩプローブを装備したＭｉｃｒｏｍａｓｓ（登録商標）Ｐｌａｔｆｏｒｍ  ＩＩ  ＭＳ  ）に転用した。第２の部分（４０％）は、純度評価のために蒸発式光散乱検出器（ＥＬＳＤ，Ｐｏｌｙｍｅｒ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓ，ｎｏｗ  ｐａｒｔ  ｏｆ  Ｖａｒｉａｎ，Ｉｎｃ．，Ｐａｌｏ  Ａｌｔｏ，ＣＡ，ＰＬ−ＥＬＳ−１０００（登録商標））に転用し、最後の部分（１０％）は、定量および純度評価のために化学発光窒素検出器（ＣＬＮＤ，Ａｎｔｅｋ（登録商標）Ｍｏｄｅｌ  ８０６０，Ａｎｔｅｋ  Ｉｎｓｔｒｕｍｅｎｔｓ，Ｈｏｕｓｔｏｎ，ＴＸ，ｐａｒｔ  ｏｆ  Ｒｏｐｅｒ  Ｉｎｄｕｓｔｒｉｅｓ，Ｉｎｃ．，Ｄｕｌｕｔｈ，ＧＡ）に送った。必要とされる分析の性質に別々に依存して、各検出器を使用することができよう。Ｗａｔｅｒｓ  Ｍｉｌｌｅｎｎｉｕｍ（登録商標）ソフトウェアパッケージの最新版を利用して、データを取り込み、処理した。
【０１４５】
本発明の化合物の分析のために使用した代表的な標準ＨＰＬＣ条件は、以下に提示される。
典型的なクロマトグラフィーの条件
カラム：ＸＴｅｒｒａ  ＲＰ１８、３．５μｍ、４．６×１００ｍｍ（または同等物）
検出（ＰＤＡ）：２２０〜３２０ｎｍ
カラム温度：３５±１０℃
注入体積：１０μＬ
流速：１ｍＬ／分
運転時間：２０．０分
データ収集時間：１７．０分
移動相Ａ：メタノール（またはアセトニトリル）
移動相Ｂ：水
移動相Ｃ：水中１０％ＴＦＡ
【表２】
2013509434.tif 000087
【表３】
2013509434.tif 000088
【０１４６】
分取用ＨＰＬＣ精製をＸＴｅｒｒａ（登録商標）ＭＳ  Ｃ１８カラム（または同等品）１９×１００ｍｍ（５μｍ）でＷａｔｅｒｓ  ＦｒａｃｔｉｏｎＬｙｎｘ（登録商標）システムを使用して、最終の脱保護大員環に対して実施した。その注入は、Ｗａｔｅｒｓ  ２７６７注射器／コレクターおよび２ｍＬ／分で運転するＷａｔｅｒｓ  ５１５ポンプを備えるＡｔ−Ｃｏｌｕｍｎ−Ｄｉｌｕｔｉｏｎ構成を使用して行った。質量分析計、ＨＰＬＣ、および質量分析用分画の収集（ｍａｓｓ−ｄｉｒｅｃｔｅｄ  ｆｒａｃｔｉｏｎ  ｃｏｌｌｅｃｔｉｏｎ）は、ＦｒａｃｔｉｏｎＬｙｎｘ（登録商標）を搭載するＭａｓｓＬｙｎｘ（登録商標）ソフトウェアバージョン３．５を介して制御する。ＭＳ分析で生成物を含むと示される分画（１３Ｘ１２５ｍｍ管）を減圧下で、最も典型的には、遠心蒸発器システム  （Ｇｅｎｅｖａｃ  ＨＴ−４，  ＴｈｅｒｍｏＳａｖａｎｔ  Ｄｉｓｃｏｖｅｒｙ，  ＳｐｅｅｄＶａｃ、または同等品）で蒸発させる、または別法として、凍結乾燥した。次いで、化合物は、同定確認、純度および定量評価についてＬＣ−ＭＳ−ＵＶ−ＥＬＳＤ−ＣＬＮＤ分析によって、十分に分析した。
【０１４７】
自動中圧のクロマトグラフィー精製を、使い捨てシリカを備えたＩｓｃｏ  ＣｏｍｂｉＦｌａｓｈ（登録商標）１６ｘシステム、または最大１６の試料を同時に運転できるＣ１８カートリッジで実施した。ＭＳスペクトルはＷａｔｅｒｓ  Ｍｉｃｒｏｍａｓｓ  Ｐｌａｔｆｏｒｍ  ＩＩまたはＺＱシステムで記録した。ＨＲＭＳスペクトルをＶＧ  Ｍｉｃｒｏｍａｓｓ  ＺＡＢ−ＺＦスペクトロメーターで記録した。化学および生物学的情報は、ＡｃｔｉｖｉｔｙＢａｓｅデータベースソフトウェア（ＩＤＢＳ，  Ｇｕｉｌｄｆｏｒｄ，  Ｓｕｒｒｅｙ，  ＵＫ）を利用して、保存し、分析した。
【０１４８】
本発明の代表的な化合物の分析データを表２に要約する。
【表４−１】
2013509434.tif 000089
【表４−２】
2013509434.tif 000090
【表４−３】
2013509434.tif 000091
【表４−４】
2013509434.tif 000092
【表４−５】
2013509434.tif 000093
【表４−６】
2013509434.tif 000094
【表４−７】
2013509434.tif 000095
【表４−８】
2013509434.tif 000096
【表４−９】
2013509434.tif 000097
【表４−１０】
2013509434.tif 000098
【表４−１１】
2013509434.tif 000099
【表４−１２】
2013509434.tif 000100
【表４−１３】
2013509434.tif 000101
【表４−１４】
2013509434.tif 000102
【表４−１５】
2013509434.tif 000103
【表４−１６】
2013509434.tif 000104
【表４−１７】
2013509434.tif 000105
【表４−１８】
2013509434.tif 000106
【表４−１９】
2013509434.tif 000107
【表４−２０】
2013509434.tif 000108
【０１４９】
本発明の化合物を、下の手順に記載の競合放射性リガンド結合アッセイ、蛍光アッセイまたはエクオリン機能アッセイまたはＩＰ３インバースアゴニストアッセイを利用してヒトグレリン受容体で相互作用するそれらの能力について評価した。このような方法は、所望であれば、多くの化合物の同時評価を可能にする高処理法で実施することができる。
【０１５０】
ヒト（ＧＨＳ−Ｒ１ａ）、ブタおよびラットＧＨＳ受容体（米国特許第６，２４２，１９９号、国際特許出願公開ＷＯ９７／２１７３０および同９７／２２００４）、さらにはイヌＧＨＳ受容体（米国特許第６，６４５，７２６号）のための具体的なアッセイ方法、ならびにそのアゴニストおよびアンタゴニストを一般に同定する際のそれらの使用は公知である。
【０１５１】
機能的グレリンアンタゴニストは、ＷＯ２００５／１１４１８０に記載される方法を利用して同定することができるが、受容体のインバースアゴニストは、ＷＯ２００４／０５６８６９の方法を用いてアッセイすることができる。
【０１５２】
ヒトグレリン受容体で相互作用する本発明の化合物の機能活性度を判定する適切な方法も、下の実施例に記載されている。
【０１５３】
本発明の化合物のインビボ有効性は、例えば、肥満症の動物モデル、例えば文献に記載されているもの（ＷＯ２００４／０５６８６９；Ｎａｋａｚａｔｏ，  Ｍ．；  Ｍｕｒａｋａｍｉ，  Ｎ．；  Ｄａｔｅ，  Ｙ．；  ｅｔ．ａｌ．  Ｎａｔｕｒｅ  ２００１，  ４０９，  １９４−１９８；Ｍｕｒａｋａｍｉ，  Ｎ．；Ｈａｙａｓｈｉｄａ，  Ｔ．；  Ｋｕｒｏｉｗａ，  Ｔ．；  ｅｔ．ａｌ．  Ｊ．  Ｅｎｄｏｃｒｉｎｏｌ．  ２００２，  １７４，  ２８３−２８８；  Ａｓａｋａｗａ，  Ａ．；  Ｉｎｕｉ，  Ａ．；  Ｋａｇａ，  Ｔ．；  ｅｔ．ａｌ．  Ｇｕｔ  ２００３，  ５２，  ９４７−９５２；Ｓｕｎ，Ｙ．；Ａｈｍｅｄ，  Ｓ．；  Ｓｍｉｔｈ，  Ｒ．Ｇ．  Ｍｏｌ．  Ｃｅｌｌ  Ｂｉｏｌ．  ２００３，  ２３，  ７９７３−７９８１；Ｗｏｒｔｌｅｙ，  Ｋ．Ｅ．；Ａｎｄｅｒｓｏｎ，  Ｋ．Ｄ．；  Ｇａｒｃｉａ，  Ｋ．；  ｅｔ．ａｌ．  Ｐｒｏｃ．  Ｎａｔｌ．  Ａｃａｄ．  Ｓｃｉ．  ＵＳＡ  ２００４，  １０１，  ８２２７−８２３２；Ｈａｌｅｍ，  Ｈ．Ａ．；Ｔａｙｌｏｒ，  Ｊ．Ｅ．；  Ｄｏｎｇ，  Ｊ．Ｚ．；  Ｓｈｅｎ，  Ｙ．；  Ｄａｔｔａ，  Ｒ．；  Ａｂｉｚａｉｄ，  Ａ．；  Ｄｉａｎｏ，  Ｓ．；  Ｈｏｒｖａｔｈ，  Ｔ．；  Ｚｉｚｚａｒｉ，  Ｐ．；  Ｂｌｕｅｔ−Ｐａｊｏｔ，  Ｍ．−Ｔ．；  Ｅｐｅｌｂａｕｍ，  Ｊ．；  Ｃｕｌｌｅｒ，  Ｍ．Ｄ．  Ｅｕｒ．  Ｊ．  Ｅｎｄｏｃｒｉｎｏｌ．  ２００４，  １５１，  Ｓ７１−Ｓ７５；Ｈｅｌｍｌｉｎｇ，  Ｓ．；Ｍａａｓｃｈ，  Ｃ．；  Ｅｕｌｂｅｒｇ，  Ｄ．；  ｅｔ．ａｌ．  Ｐｒｏｃ．  Ｎａｔｌ．  Ａｃａｄ．  Ｓｃｉ  ＵＳＡ  ２００４，  １０１，  １３１７４−１３１７９；Ｓｈｅａｒｍａｎ，  Ｌ．Ｐ．；Ｗａｎｇ，  Ｓ．Ｐ．；  Ｈｅｌｍｌｉｎｇ，  Ｓ．；  ｅｔ．ａｌ．  Ｅｎｄｏｃｒｉｎｏｌｏｇｙ  ２００６，  １４７，  １５１７−１５２６；Ｒｅｕｔｅｒ，  Ｔ．Ｙ．  Ｄｒｕｇ  Ｄｉｓｃ．Ｔｏｄａｙ：  Ｄｉｓ．  Ｍｏｄｅｌｓ  ２００７，  ４，  ３−８；  Ｓｈａｆｒｉｒ，  Ｅ．；  Ｚｉｖ，  Ｅ．  Ａｍ．  Ｊ．  Ｐｈｙｓｉｏｌ．  ２００９，  ２９６，  Ｅ１４５０−Ｅ１４５２．）を用いて説明することができる。同様に、多数の動物モデルが、糖尿病におけるこれらの化合物の作用の検討に入手可能である（Ｎａｎｄｉ，  Ａ．  ｅｔ．ａｌ．  Ｐｈｙｓｉｏｌ．  Ｒｅｖ．  ２００４，  ８４，  ６２３−６４７；  Ｆｒｅｕｄｅ，  Ｓ．；  Ｓｃｈｕｂｅｒｔ，  Ｍ．  Ｄｒｕｇ  Ｄｉｓｃ．  Ｔｏｄａｙ：  Ｄｉｓ．  Ｍｏｄｅｌｓ  ２００７，  ４，  ９−１６；  Ｍｕｎｉｙａｐｐａ，  Ｒ．；  Ｌｅｅ，  Ｓ．  Ｃｈｅｎ，  Ｈ．；  Ｑｕｏｎ，  Ｍ．Ｊ．  Ａｍ．  Ｊ．  Ｐｈｙｓｉｏｌ．  ２００８，  ２９４，  Ｅ１５−Ｅ２６．）。
Ｂ１．  競合放射性リガンド結合アッセイ（グレリン受容体）
【０１５４】
ヒトグレリン受容体（ＧＲＬＮ、成長ホルモン分泌促進物質受容体、ｈＧＨＳ−Ｒ１ａ）での競合結合アッセイを文献に記載されているアッセイと同じように実施した。（Ｂｅｄｎａｒｅｋ  ＭＡ  ｅｔ．ａｌ．  Ｊ．  Ｍｅｄ．  Ｃｈｅｍ．  ２０００，  ４３，  ４３７０−４３７６；  Ｐａｌｕｃｋｉ，  Ｂ．Ｌ．  ｅｔ．ａｌ．  Ｂｉｏｏｒｇ．  Ｍｅｄ．  Ｃｈｅｍ．  Ｌｅｔｔ．  ２００２，  １１，  １９５５−１９５７．）
【０１５５】
材料
ヒトグレリン受容体（ｈＧＨＳ−Ｒ１ａ）を安定に移入したＨＥＫ−２９３細胞から膜（ＧＨＳ−Ｒ／ＨＥＫ  ２９３）を調製した。これらの膜はＰｅｒｋｉｎＥｌｍｅｒ  ＢｉｏＳｉｇｎａｌ（＃ＲＢＨＧＨＳＭ、ロット番号１８８７）から提供され、０．７１μｇ／アッセイポイントの量で用いた。
１．［１２５Ｉ］グレリン（ＰｅｒｋｉｎＥｌｍｅｒ、＃ＮＥＸ−３８８）；最終濃度：０．００７０−０．００８５ｎＭ
２.グレリン（Ｂａｃｈｅｍ、＃Ｈ−４８６４）；最終濃度：１μＭ
３．マルチスクリーンハーベストプレート−ＧＦ／Ｃ（Ｍｉｌｌｉｐｏｒｅ、＃ＭＡＨＦＣ１Ｈ６０）
４．ディープウェルポリプロピレンタイタープレート（Ｂｅｃｋｍａｎ  Ｃｏｕｌｔｅｒ、＃２６７００６）
５．トップシールＡ（ＰｅｒｋｉｎＥｌｍｅｒ、＃６００５１８５）
６．ボトムシール（Ｍｉｌｌｉｐｏｒｅ、＃ＭＡＴＡＨ０Ｐ００）
７．ＭｉｃｒｏＳｃｉｎｔ−０（ＰｅｒｋｉｎＥｌｍｅｒ、＃６０１３６１１）
８．結合緩衝剤：２５  ｍＭ  Ｈｅｐｅｓ  （ｐＨ  ７．４），  １  ｍＭ  ＣａＣｌ２，  ５  ｍＭ  ＭｇＣｌ２，  ２．５  ｍＭ  ＥＤＴＡ，  ０．４％  ＢＳＡ
【０１５６】
アッセイ量
３００μｌの濾過アッセイフォーマットで競合実験を行った。
１．結合緩衝剤に希釈した２２０μＬの膜
２．結合緩衝剤に希釈した４０μＬの化合物
３．結合緩衝剤に希釈した４０μＬの放射性リガンド（［１２５Ｉ］グレリン）
本発明の化合物の典型的な最終試験濃度（Ｎ＝１）：１０、１、０．５、０．２、０．１、０．０５、０．０２、０．０１、０．００５、０．００２、０．００１μＭ。
【０１５７】
化合物の取り扱い
１００％ＤＭＳＯに希釈した保存濃度１０ｍＭの化合物を、ドライアイスで凍らせ、試験当日まで−８０℃で保存した。試験当日、化合物を室温で一晩置いて解凍した後、所望の試験濃度に従って、アッセイバッファーに希釈した。これらの条件下での、アッセイにおける最大限の最終ＤＭＳＯ濃度は０．１％であった。
【０１５８】
アッセイプロトコル
ディープウェルプレートにて、４０μＬの、結合緩衝剤（全結合、Ｎ＝５）、１μＭグレリン（非特異的結合、Ｎ＝３）、または適切な濃度の試験化合物（各試験濃度についてＮ＝２）のいずれかと２２０μＬの希釈細胞膜（終濃度：０．７１μｇ／ウェル）とを組み合わせた。４０μｌの［１２５Ｉ］−グレリン（終濃度０．００７０〜０．００８５ｎＭ）の各ウェルへの添加により反応を開始した。プレートをＴｏｐＳｅａｌ−Ａで密封し、穏やかにボルテックスし、室温で３０分間インキュベートした。Ｔｏｍｔｅｃ  Ｈａｒｖｅｓｔｅｒを用いて、試料をマルチスクリーンハーベストプレート（０．５％ポリエチレンイミンに予浸しておいたもの）で濾過することにより反応を停止し、５００μＬの冷５０ｍＭ  Ｔｒｉｓ−ＨＣｌ（ｐＨ７．４、４℃）で９回洗浄し、次にプレートを換気フード内で３０分間風乾した。ボトムシールをプレートに適用してから、２５μＬのＭｉｃｒｏＳｃｉｎｔ−０を各ウェルに添加した。次に、プレートをＴｏｐＳｅａｌ−Ａで密封し、ＴｏｐＣｏｕｎｔマイクロプレートシンチレーションおよびルミネッセンスカウンター（ＰｅｒｋｉｎＥｌｍｅｒ）で、６０秒の計数遅延を用いて、ウェルあたり３０秒間カウントした。結果を１分あたりのカウント数として表した（ｃｐｍ）。
【０１５９】
可変勾配非線形回帰分析を用いてＧｒａｐｈＰａｄ  Ｐｒｉｓｍ（ＧｒａｐｈＰａｄ  Ｓｏｆｔｗａｒｅ，Ｓａｎ  Ｄｉｅｇｏ，ＣＡ）によりデータを解析した。［１２５Ｉ］−グレリンに対する０．０１ｎＭのＫｄ値（既に膜の特性評価中にに求めた）を用いてＫｉ値を計算した。
Ｄｍａｘ値は下記式を使用して計算した。
【数１】
2013509434.tif 000109
ここで式中、全結合および非特異的結合は、それぞれ１μＭグレリンの存在下または不在下で得たｃｐｍを表す。
【０１６０】
この方法を使用する本発明の代表的な化合物の検査に対する結果は、実施例において提示される。
【０１６１】
Ｂ２．  蛍光機能アッセイ（グレリン受容体）
設備
１．ＩｍａｇｅＴｒａｋ  Ｅｐｉ−蛍光システム（Ｐｅｒｋｉｎ−Ｅｌｍｅｒ）
２．ＭｕｌｔｉＤｒｏｐ  ＴｉｔｅｒＴｅｋ
３．ＣＯ２インキュベーター：５％ＣＯ２、含湿、３７℃
【０１６２】
材料
１．フェノールレッドを含まないＨａｎｋｓ’  ＢＳＳ（Ｌｉｆｅ  Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ）
２．Ｈｅｐｅｓ緩衝剤
３．プロベネシッド（Ｓｉｇｍａ）
４．ＦＬＩＰＲカルシウム−３アッセイキット（Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｄｅｖｉｃｅｓ  ＃Ｒ−８０９１）
５．Ｆａｌｃｏｎ細胞培養９６ウェル黒色／透明底プレート
６．０．０５％トリプシン−ＥＤＴＡ
７．細胞：ＧＨＳ−Ｒ１ａ受容体を発現しているＨＥＫ２９３細胞（Ｐｅｒｋｉｎ−Ｅｌｍｅｒ  ＢｉｏＳｉｇｎａｌ）を１０％ＦＢＳ、１％ピルビン酸ナトリウム、１％ＮＥＡＡおよび４００μｇ／ｍＬジェネティシンを含むＤＭＥＭ（ダルベッコ改変イーグル培地）中で増殖させた。  
８．グレリン（参照アゴニスト；Ｂａｃｈｅｍ、＃Ｈ−４８６４）
９．［ＤＬｙｓ３］ＧＨＲＰ−６  （参照アンタゴニスト、Ｐｈｏｅｎｉｘ  ＃０３１−２２）
１０．アッセイ緩衝剤：２．５ｍＭプロベネシドおよび０．１％ＢＳＡ（ウシ血清アルブミン）を含有するＨＢＳＳ−２０ｍＭ  Ｈｅｐｅｓ；ｐＨ７．４
【０１６３】
化合物の取り扱い
化合物の保存溶液（１００％ＤＭＳＯ中１０ｍＭ）を、ドライアイスで凍らせ、使用するまで−８０℃で保存した。保存溶液から、２６％ＤＭＳＯに１００倍希釈した１００μＭの濃度の母溶液を作製した。次に、アッセイプレートをアッセイ緩衝剤へ適切に希釈して調製した。
試験化合物（アゴニスト）の典型的な最終試験濃度（Ｎ＝１０）：１、０．３、０．１、０．０３、０．０１、０．００３、０．００１、０．０００３、０．０００１、０．００００３μＭ。
試験化合物（アンタゴニスト）の最終試験濃度（Ｎ＝１０）：１０、３、１、０．３、０．１、０．０３、０．０１、０．００３、０．００１、０．０００３μＭ。
【０１６４】
細胞調製
細胞を、上に示したように培養液中で維持した。実験の前日、集密度７０〜９０％で細胞を収穫した。増殖培地を除去し、Ｃａ＋２およびＭｇ＋２を含まないＰＢＳで細胞を短時間すすいだ。０．０５％トリプシンを添加し、プレートを３７℃にて５分間インキュベートして細胞を剥離した。１０％ＦＢＳを補給したＤＭＥＭ培地を添加してトリプシンを不活化し、細胞濃度を測定した。接種材料を終濃度２００細胞／μＬに調整し、１ウェルに付き２００μＬを９６ウェル黒色プレートに分注した。プレートを３７℃で終夜インキュベートした。実験当日の細胞密集度は７０〜９５％でなければならない。
【０１６５】
アッセイプロトコル
プレートをインキュベーターから取り出し、プレートを反転させて培地を除去した。カルシウム−３色素、５０μＬを添加した後、３７℃で１時間インキュベートした。プレートを再び反転させ、次に２５μＬのアッセイ緩衝剤を添加した。次に、プレートを、分析のためＩｍａｇｅＴｒａｋシステムに移した。アゴニスト試験には、１０秒間読み取った後、２５μＬの２ｘ試験化合物または対照をアッセイプレートに注入した。蛍光をさらに５０秒間モニターした。１アッセイポイントに付き合計３０回の読み取りについて２秒毎に読み取った。
【０１６６】
アンタゴニスト試験には、１０秒間読み取った後、１２．５μＬの３ｘ試験化合物または対照をアッセイプレートに注入し、３分間反応させた。その時点で、４ｎＭグレリン（ＥＣ８０に相当）を注入し、蛍光をさらに６０秒間モニターした。読み取りは２秒ごとに行い、１データポイントに付き合計１２５回読み取った。１アッセイポイントに付き合計１２５回の読み取りについて２秒毎に読み取った。
【０１６７】
結果の分析および表示
アゴニストについて、各アッセイポイントで得た値は、Ｍａｘが３０回の読み取りの最大値を表し、Ｍｉｎが最初の５回の読み取りから化合物の注入までに観察された最小値を表す、Ｍａｘ−Ｍｉｎの蛍光読み取りを反映する。濃度反応曲線を、ＧｒａｐｈＰａｄ  Ｐｒｉｓｍ（ＧｒａｐｈＰａｄ  Ｓｏｆｔｗａｒｅ，Ｓａｎ  Ｄｉｅｇｏ，ＣＡ）を用いて、非線形回帰分析（シグモイド型用量反応）により解析した。ＥＣ５０値はＧｒａｐｈＰａｄを使用して計算する。次式を用いてＥｍａｘ値を計算した。
【数２】
2013509434.tif 000110
ここで式中、ＢａｓａｌおよびＡｇｏ（Ｅｍａｘ）は、それぞれ１μＭグレリンの不在下または存在下で得られた平均カウント数を表す。
【０１６８】
アンタゴニストについて、各アッセイポイントで得た値は、ＭａｘがＥＣ８０のグレリンの注入後に得られた最大値を表し、Ｍｉｎが最初の５回の読み取りから化合物の注射までに観察された最小値を表す、Ｍａｘ−Ｍｉｎの蛍光読み取りを反映する。濃度反応曲線を、ＧｒａｐｈＰａｄ  Ｐｒｉｓｍ（ＧｒａｐｈＰａｄ  Ｓｏｆｔｗａｒｅ，Ｓａｎ  Ｄｉｅｇｏ，ＣＡ）を用いて非線形回帰分析（シグモイド型用量反応）により解析した。ＩＣ５０値はＧｒａｐｈＰａｄを使用して計算する。
次式を用いてＩｍａｘ値を計算した。
【数３】
2013509434.tif 000111
ここで式中、ＢａｓａｌおよびＡｇｏ（ＥＣ８０）は、それぞれ２回目の添加ステップで５ｎＭグレリンの不在下または存在下で得られた平均カウント数を表す。
【０１６９】
Ｂ３．  エクオリン機能アッセイ（グレリン受容体）
ＧＲＬＮ（ＧＨ−Ｒ１ａ）受容体と結合することが見出された本発明の化合物の機能活性度は、下に記載される方法を用いて決定することができる。（ＬｅＰｏｕｌ，  Ｅ．；  ｅｔ．ａｌ．  Ｊ．  Ｂｉｏｍｏｌ．  Ｓｃｒｅｅｎ．  ２００２，  ７，  ５７−６５；  Ｂｅｄｎａｒｅｋ，  Ｍ．Ａ．；  ｅｔ．ａｌ．  Ｊ．  Ｍｅｄ．  Ｃｈｅｍ．  ２０００，  ４３，  ４３７０−４３７６；  Ｐａｌｕｃｋｉ，  Ｂ．Ｌ．；  ｅｔ．ａｌ．  Ｂｉｏｏｒｇ．  Ｍｅｄ．  Ｃｈｅｍ．  Ｌｅｔｔ．  ２００１，  １１，  １９５５−１９５７．）。
【０１７０】
材料
ヒトグレリン受容体（ＥＳ−４１０−Ａ細胞系統；受容体登録番号＃６０１７９）を発現している細胞系統ＡｅｑｕｏＳｃｒｅｅｎ（商標）（ＥＵＲＯＳＣＲＥＥＮ，Ｂｅｌｇｉｕｍ）を用いて膜を調製した。この細胞系統は、Ｇα１６およびミトコンドリア標的エクオリン（参照番号ＥＳ−ＷＴ−Ａ５）を共発現しているＣＨＯ−Ｋ１細胞へのヒトグレリン受容体の移入により構築された。
【０１７１】
１．グレリン（参照アゴニスト；  Ｂａｃｈｅｍ、＃Ｈ−４８６４）
２．アッセイ緩衝剤：０．１％ＢＳＡ（ウシ血清アルブミン；ｐＨ７．０）を含有するＤＭＥＭ（ダルベッコ改変イーグル培地）
３．セレンテラジン（Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｐｒｏｂｅｓ，Ｌｅｉｄｅｎ，Ｔｈｅ  Ｎｅｔｈｅｒｌａｎｄｓ）
二重反復試験した試験化合物の典型的な最終濃度：０．１、０．３、１、３、１０、３０、１００、３００、１０００、３０００ｎＭ。
【０１７２】
化合物の取り扱い
化合物の保存溶液（１００％ＤＭＳＯ中１０ｍＭ）を、典型的には、ドライアイスで凍らせ、使用するまで−２０℃で保存した。保存溶液から、３０％ＤＭＳＯの終濃度に希釈することによって１ｍＭの濃度の母溶液を作製した。次に、０．１％ＢＳＡを含有するＤＭＥＭ培地へ適切に希釈してアッセイプレートを調製した。これらの条件下、このアッセイにおける最大最終ＤＭＳＯ濃度は＜０．６％であった。
【０１７３】
細胞調製
ＡｅｑｕｏＳｃｒｅｅｎ（商標）細胞を、５ｍＭ  ＥＤＴＡを補給した、Ｃａ２＋およびＭｇ２＋を含まないリン酸緩衝生理食塩水（ＰＢＳ）を含む培養プレートから回収し、１０００Ｘｇにて２分間ペレット化し、０．１％ＢＳＡを含有するＤＭＥＭ−Ｈａｍ’ｓ  Ｆ１２に密度５ｘ１０６細胞／ｍｌで再懸濁し、５μＭセレンテラジンの存在下で室温で少なくとも４時間インキュベートした。装填後、細胞をアッセイ緩衝剤で濃度５ｘ１０５細胞／ｍｌに希釈した。
【０１７４】
アッセイプロトコル
アゴニスト試験には、５０μｌの細胞懸濁液を、５０μｌの適切な濃度の試験化合物またはグレリン（参照アゴニスト）と９６ウェルプレート中で混合した（二重反復試料）。実験を検証するため、グレリン（参照アゴニスト）をいくつかの濃度で試験化合物と同時に試験した。グレリンまたは試験化合物に応答した受容体活性化によってもたらされた発光を、Ｈａｍａｍａｔｓｕ  Ｆｕｎｃｔｉｏｎａｌ  Ｄｒｕｇ  Ｓｃｒｅｅｎｉｎｇ  Ｓｙｓｔｅｍ６０００読み取り装置（Ｈａｍａｍａｔｓｕ  Ｐｈｏｔｏｎｉｃｓ  Ｋ．Ｋ．，Ｊａｐａｎ）を用いて記録した。
【０１７５】
アンタゴニスト試験には、およそＥＣ８０濃度のグレリン（すなわち３．７ｎＭ；１００μＬ）を、アゴニスト試験の終了からおよそ１５分後に試験化合物を含有する細胞懸濁液（二重反復試料）に注入し、結果として生じる、受容体活性化によってもたらされた発光を、上の段落に記載のとおり測定した。［ＤＬｙｓ３］ＧＨＲＰ−６を参照アンタゴニストとして使用した。
【０１７６】
プレートにわたり、異なる実験にわたって記録される光（「１００％のシグナル」の測定）放射を標準化するために、ウェルのいくつかには、１００μＭジギトニン、飽和濃度のＡＴＰ（２０μＭ）、および試験検証中に得られたＥＣ５０と等しい濃度のグレリンが含まれていた。プレートにはまた、試験検証中に得られたＥＣ８０に等しい濃度の参照アゴニストおよび／またはアンタゴニストが含まれていた。
【０１７７】
結果の分析および表示
結果は、相対光単位（ＲＬＵ）として表される。濃度反応曲線を、ＧｒａｐｈＰａｄ  Ｐｒｉｓｍ（ＧｒａｐｈＰａｄ  Ｓｏｆｔｗａｒｅ，Ｓａｎ  Ｄｉｅｇｏ，ＣＡ）を用いて、非線形回帰分析（シグモイド型用量反応）により、式Ｅ＝Ｅｍａｘ／（１＋ＥＣ５０／Ｃ）ｎに基づいて解析した。式中、Ｅは所与のアゴニスト濃度で測定されたＲＬＵ値（Ｃ）であり、Ｅｍａｘは最大反応であり、ＥＣ５０は５０％刺激を生じる濃度であり、ｎは勾配指数である。アゴニスト試験については、各濃度の試験化合物の結果を、ＥＣ８０（すなわち３．７ｎＭ）に等しい濃度のグレリンに誘導されたシグナルと比較した活性化パーセントとして表した。ＥＣ５０、傾き（Ｈｉｌｌ  ｓｌｏｐｅ）および％Ｅｍａｘ値が報告される。
【０１７８】
アンタゴニスト試験については、各濃度の試験化合物の結果を、ＥＣ８０に等しい濃度のグレリンに誘導されたシグナルと比較した阻害パーセントとして表した。本発明の代表的な化合物の結果が、実施例において提示される。
【０１７９】
Ｂ４．  グレリン受容体インバースアゴニストアッセイ
本発明の化合物のグレリン受容体でのインバースアゴニスト活性度は、国際特許出願公開ＷＯ２００４／０５６８６９および  Ｈｏｌｓｔ，  Ｂ．；Ｃｙｇａｎｋｉｅｗｉｃｚ，  Ａ．；  Ｈａｌｋｊａｅｒ，  Ｔ．；  Ａｎｋｅｒｓｅｎ，  Ａ．；  Ｓｃｈｗａｒｔｚ，  Ｔ．Ｗ．  Ｍｏｌ．  Ｅｎｄｏｃｒｉｎｏｌ．  ２００３，  １７，  ２２０１−２２１０に記載される方法を用いて決定することができる。代替として、文献（Ｊｅｎｓｅｎ，  Ａ．Ａ．，  ｅｔ．ａｌ．  Ｊ．  Ｂｉｏｌ．  Ｃｈｅｍ．  ２０００，  ２７５，  ２９５４７−２９５５５）に報告されたホスファチジルイノシトール加水分解アッセイを本発明の化合物のインバースアゴニスト活性度を評価するために使用することができる。さらに、米国特許第５，７０７，７９８号；５，９１２，１３２；５，９５５，２８１および国際特許出願公開ＷＯ２００７／０７９２３９に記載されているような受容体選択Ｓｅｐｅｃｔｉｏｎ増幅技術（Ｒ−ＳＡＴ）と称される機能受容体アッセイが、これらの化合物を評価するために使用することができる。
【０１８０】
さらに、インバースアゴニスト活性度をアッセイするために下記方法を使用することができる（Ｔｈｏｍｓｅｎ，  Ｗ．；  ｅｔ．ａｌ．  Ｃｕｒｒ．  Ｏｐｉｎ．  Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌ．  ２００５，  １６，  ６５５−６６５；  Ｔｏｚａｗａ−Ｔａｋａｈａｓｈｉ  Ｆ；  ｅｔ．ａｌ．，  １１ｔｈ  ＳＢＳ  Ａｎｎｕａｌ  Ｃｏｎｆｅｒｅｎｃｅ．  Ｓｅｐｔｅｍｂｅｒ  ２００５，  Ｇｅｎｅｖａ；Ｔｒｉｎｑｕｅｔ，  Ｅ．；  Ｆｉｎｋ，  Ｍ．；  Ｂａｚｉｎ，  Ｈ．；  ｅｔ．ａｌ．  Ａｎａｌ．  Ｂｉｏｃｈｅｍ．  ２００６，  ３５８，  １２６−１３５；  Ｂｅｒｇｓｄｏｒｆ，  Ｃ．；  Ｋｒｏｐｐ−Ｇｏｅｒｋｉｓ，  Ｃ．；  Ｋａｅｈｌｅｒ，  Ｉ．；  Ｋｅｔｓｃｈｅｒ，  Ｌ．；  Ｂｏｅｍｅｒ，  Ｕ．；  Ｐａｒｃｚｙｋ，  Ｋ．；  Ｂａｄｅｒ，  Ｂ．  Ａｓｓａｙ  Ｄｒｕｇ  Ｄｅｖ．  Ｔｅｃｈｎｏｌ．  ２００８，  ６，  ３９−５３．）。
【０１８１】
細胞刺激：
１．  反転させてプレートから培地を除去する。
２．  ７０μｌ化合物／ウェルを添加する。
３．  ３７℃で３０分インキュベートする。
４．  １５μｌ溶解緩衝剤／ウェルの添加により反応を停止する。
５．  １５μｌｄ２／ウェルを添加する。
６．  １５μｌ抗ＩＰ１クリプタート／ウェルを添加する。
７．  １００ＲＰＭでオービタルシェーカーで室温で１時間インキュベートする。
８．  プレートリーダ（Ｔｅｃａｎ  ＧｅｎｉｏｓＰｒｏまたは類似品）で蛍光を読み取る。
【０１８２】
上記シーケンスをＨＴＲＦ  ＩＰ−ｏｎｅキット（ＣｉｓＢｉｏ  カタログ番号６２Ｐ１ＡＰＥＣ）を使用して実施した。複数の試験化合物の同時アッセイのために、９６ウェルプレートをこのアッセイに使用することができる（平底ウェルを有する白色プレート、Ｆａｌｃｏｎ  ＃３５３２９６）。これらに、１００  ０００のＨＥＫ−ＧＨＳＲ１の安定細胞／ウェルを終夜接種した。
【０１８３】
＊  各プレートのウェルＡ１およびＡ２は負の対照（ｄ２のないウェル）として使用する。化合物は、典型的には以下の濃度で繰り返し試験する：０，  １  ｎＭ，  １０  ｎＭ，  ３０  ｎＭ，  １００  ｎＭ，  ３００  ｎＭ，  １  μＭ，  １０  μＭ。
【０１８４】
化合物希釈：
化合物は１００％ＤＭＳＯ中の１０ｍＭで保存する。
１００％ＤＭＳＯ中１／１０の第１希釈（１ｍＭの最終濃度）。
Ｈ２Ｏ中１／１０の第２希釈（０．１ｍＭの最終濃度）。
他の希釈は、刺激緩衝剤中に９６ウェルプレートで行う。本発明の代表的な化合物の結果は、実施例において提供される。
【０１８５】
Ｂ５．  血漿タンパク質結合
薬物の薬物動態および薬力学的特性は、主として、アルブミンおよびα１酸糖タンパク質などの血漿または血清タンパク質との薬物の可逆的結合の関数である。一般に、非結合薬物のみが、細胞膜全体への拡散または輸送、および薬理学的標的での相互作用に利用可能である。一方、低血漿タンパク質結合を有する薬物は、非結合薬物のみが、糸球体濾過に利用可能であるため、一般に、大量の分布および急速なクリアランス、場合によっては、肝クリアランスを有する。そのため、血漿タンパク質結合の程度が、有効性、分布および排出に影響を与え得る。血漿タンパク質結合に対する理想的な範囲は、ほとんどの製剤に対して、８７〜９８％の範囲である。
【０１８６】
タンパク質結合試験を、ヒト血漿を使用して行った。手短に言えば、９６ウェルのマイクロプレートを使用して、様々な濃度の被験物質を３７℃で６０分インキュベートした。１０μＭの濃度はこの検討において使用する典型的な選択であった。結合および非結合分画は、平衡透析で分離し、非結合分画に残る濃度を、ＬＣ−ＭＳまたはＬＣ−ＭＳ−ＭＳ分析によって定量した。キニーネ（約３５％）、ワルファリン（約９８％）およびナプロキセン（約９９．７％）などの、公知の血漿タンパク質結合値を有する薬物を、基準対照として使用した。
【０１８７】
本発明の代表的な化合物の結果を表３に要約する。
【表５】
2013509434.tif 000112
【０１８８】
Ｂ６．  シトクロムＰ４５０阻害に対するアッセイ
シトクロムＰ４５０酵素は、薬物の第１相代謝に関係する。薬物−薬物相互作用の大部分は、代謝に基づき、さらに、これらの相互作用は、典型的には、シトクロムＰ４５０の阻害に関与する。６つのＣＹＰ４５０酵素（ＣＹＰ１Ａ２、ＣＹＰ２Ｃ８、ＣＹＰ２Ｃ９、ＣＹＰ２Ｃ１９、ＣＹＰ２Ｄ６およびＣＹＰ３Ａ４）は、ほとんどの薬物の代謝および関連する薬物−薬物相互作用に対する共通の原因であると考えられる。シトクロムＰ４５０代謝酵素の様々な代謝的に重要なイソ型との本発明の化合物の結合を判断するアッセイは、市販され、例えば、ＮｏＡｂ  ＢｉｏＤｉｓｃｏｖｅｒｉｅｓ（Ｍｉｓｓｉｓｓａｕｇｕａ，ＯＮ，Ｃａｎａｄａ）およびＡｂｓｏｒｐｔｉｏｎ  Ｓｙｓｔｅｍｓ（Ｅｘｔｏｎ，ＰＡ，ＵＳＡ）がある。なお、多数の適切な方法は、文献に記載または概説されている（Ｗｈｉｔｅ，  Ｒ．Ｅ．  Ａｎｎ．  Ｒｅｖ．  Ｐｈａｒｍａｃｏｌ．  Ｔｏｘｉｃｏｌ．  ２０００，  ４０，  １３３−１５７；  Ｌｉ，  Ａ．Ｐ．  Ｄｒｕｇ．  Ｄｉｓｃ．  Ｔｏｄａｙ  ２００１，  ６，  ３５７−３６６；  Ｔｕｒｐｅｉｎｅｎ，  Ｍ．；  Ｋｏｒｈｏｎｅｎ，  Ｌ．Ｅ．  Ｔｏｌｏｎｅｎ，  Ａ．；  ｅｔ．ａｌ．  Ｅｕｒ．  Ｊ．  Ｐｈａｒｍ．  Ｓｃｉ．  ２００６，  ２９，  １３０−１３８．）。
【０１８９】
実験方法の主要な態様は、以下の通りである。
１．  アッセイは、具体的に以下のような、個々のヒトＣＹＰ−４５０サブタイプを発現する昆虫細胞から調製されたミクロソーム（Ｓｕｐｅｒｓｏｍｅｓ（登録商標）、ＢＤ  Ｇｅｎｔｅｓｔ、Ｂｅｃｔｏｎ−Ｄｉｃｋｉｎｓｏｎ）で行った。  
−ＣＹＰサブタイプ：１Ａ２、２Ａ６、２Ｂ６、２Ｃ８、２Ｃ９、２Ｃ１９、２Ｄ６、２Ｅ１、３Ａ４  
−この酵素が錯体阻害動態を示すため、典型的には、２つの基質をＣＹＰ−３Ａ４に対して試験した。
２．  蛍光検出を用いるアッセイによって、蛍光代謝物の形成を、ミクロソームを特定のＣＹＰ基質とインキュベートした後、モニターした。
３．  本発明の化合物は、３倍連続希釈法（０．０４５７〜１００μＭの濃度範囲）を使用して、８つの試験濃度で二重サンプルにおいて試験した。
４．  各ＣＹＰ−４５０酵素に対して、特定の阻害剤を、正の対照として８つの濃度で二重反復して試験した。
５．  代謝物形成を５０％（ＩＣ５０）阻害した阻害剤または試験化合物の濃度は、％阻害対ｌｏｇ濃度（Ｍ）曲線の非線形回帰分析によって計算した。
【０１９０】
本発明の代表的な化合物に関する結果を以下の表４ａおよび４ｂに要約する。
【表６】
2013509434.tif 000113
試験した他のCYPサブタイプとの結合は、試験した最高濃度(100μM)まで、得られなかった。
【表７】
2013509434.tif 000114
【０１９１】
Ｂ７．  Ｃａｃｏ−２透過性の判定
ヒト結腸直腸癌から由来するＣａｃｏ−２細胞系統は、ヒト腸全体における薬物吸収を予測する確立されたインビトロモデルとなっている（Ｓｕｎ，  Ｄ．；  Ｙｕ，  Ｌ．Ｘ．；  Ｈｕｓｓａｉｎ，  Ｍ．Ａ．；  Ｗａｌｌ，  Ｄ．Ａ．；  Ｓｍｉｔｈ，  Ｒ．Ｌ．；  Ａｍｉｄｏｎ，  Ｇ．Ｌ．  Ｃｕｒｒ．  Ｏｐｉｎ．  Ｄｒｕｇ  Ｄｉｓｃｏｖ．  Ｄｅｖｅｌ．  ２００４，  ７，  ７５−８５；  Ｂｅｒｇｓｔｒｏｍ，  Ｃ．Ａ．  Ｂａｓｉｃ  Ｃｌｉｎ．  Ｐｈａｒｍａｃｏｌ．  Ｔｏｘｉｃｏｌ．  ２００５，  ９６，  １５６−６１；  Ｂａｌｉｍａｎｅ，  Ｐ．Ｖ．；  Ｈａｎ，  Ｙ．Ｈ．；  Ｃｈｏｎｇ，  Ｓ．  ＡＡＰＳ  Ｊ．  ２００６，  ８，  Ｅ１−１３；  Ｓｈａｈ，  Ｐ．；  Ｊｏｇａｎｉ，  Ｖ．；  Ｂａｇｃｈｉ，  Ｔ．；  Ｍｉｓｒａ，  Ａ．  Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌ．  Ｐｒｏｇ．  ２００６，  ２２，  １８６−１９８．）。半透膜上で培養されると、Ｃａｃｏ−２細胞は、小腸円柱上皮と顕著な形態学的および生化学的類似点を有する高度に官能化された上皮バリアに分化する。完全に分化した細胞単分子層を使用して、新規化合物の膜輸送特性を評価することができる。さらに、Ｃａｃｏ−２細胞輸送の研究から得られた見掛けの透過係数（Ｐａｐｐ）は、ヒト腸管吸収と理にかなって相関することが示されている。
【０１９２】
Ｃａｃｏ−２細胞を使用する、本発明の化合物の透過性を判定するアッセイは、市販され、例えば、ＮｏＡｂ  ＢｉｏＤｉｓｃｏｖｅｒｉｅｓ（Ｍｉｓｓｉｓｓａｕｇｕａ，ＯＮ，Ｃａｎａｄａ）およびＡｂｓｏｒｐｔｉｏｎ  Ｓｙｓｔｅｍｓ（Ｅｘｔｏｎ，ＰＡ，ＵＳＡ）がある。
【０１９３】
代替として、並列人工膜透過性アッセイ（ＰＡＭＰＡ）は、腸透過性を評価するために使用することができる（Ａｖｄｅｅｆ，Ａ．Ｅｘｐｅｒｔ  Ｏｐｉｎ．Ｄｒｕｇ．Ｍｅｔａｂ．Ｔｏｘｉｃｏｌ．２００５，１，３２５−４２）。
【０１９４】
方法
Ｃａｃｏ−２細胞層全体における透過性は、２つのチャンバー（供与体および受容体）の間に配置される膜上で細胞を増殖させることによって判定した。薬物候補は、典型的には、細胞層の頂点側（Ａ）に添加し、基底外側（Ｂ）のそれらの状態を培養時間にわたって測定する。この方向の透過性は、腸管吸収を示す。透過性は、Ｃａｃｏ−２細胞の基底外側から頂点側でも判定できる。基底外側から頂点側のＰａｐｐと比較して、より高い頂点側から基底外側のＰａｐｐは、担体媒介輸送を示す。頂点側から基底外側のＰａｐｐに対してより高い基底外側から頂点側のＰａｐｐが見られる場合は、Ｐ−ｇｐ媒介輸送が示唆される。
【０１９５】
頂点側から基底外側および基底外側から頂点側の方向において、本発明の化合物に関する透過性（１０μＭ）を、二重反復して試験した。試料は、３７℃での培養の開始時（０分）および６０分後に供与体および受容体チャンバーから収集し、生物分析まで−７０℃で冷凍保存する。Ｃａｃｏ−２透過性アッセイから生成した各試験化合物の試料は、さらにＬＣ−ＭＳ−ＭＳで分析した。［３Ｈ］−マンニトールおよび［３Ｈ］−プロプラノロールの透過性を、対照として、同時に決定した。
【０１９６】
各化合物の透過係数（Ｐａｐｐ）、および放射性標識基準は、以下の式を使用して判定した。
【数４】
2013509434.tif 000115
ここで式中、ｄＱ／ｄＴは、透過速度を示し、Ｃｉは、供与体部分における初期濃度を意味し、Ａは、濾過器の表面積を示す。Ｃｉは、供与体部分への添加前に取得された複製サンプルの平均濃度から決定した。透過速度は、経時的に受容体部分において測定された化合物の蓄積量をプロットし、直線回帰分析によって直線の傾斜を決定することによって計算した。二重および平均の頂点側から基底外側および基底外側から頂点側のＰａｐｐを、各化合物および標準物に関して報告した。
【０１９７】
Ｐｇｐの関与をさらに確認するために、Ｐｇｐの阻害薬、例えば、シクロスポリンＡの使用を、この評価に用いて、阻害薬のある場合、およびない場合の結果を比較することができる。本発明の代表的な化合物に関する結果を表５に要約する。
【表８】
2013509434.tif 000116
【０１９８】
Ｂ８．  ヒト肝臓ミクロソームにおける代謝安定性
肝臓は、異物代謝を担う相Ｉ（酸化）および相ＩＩ（グルクロン酸抱合）酵素活性のための主要な部位である。ヒト肝臓ミクロソームは、候補薬物の代謝活性のインビトロの選別として使用される。同様の試験を、安定性プロファイルの何らかの有意な種差を求めるために、インビボ試験のために使用されるものなどの他の種からのミクロソームを用いて実施することができる。この試験の目標は、本発明の代表的な化合物の広範囲の代謝安定性を測定することであった。実験計画の重要な態様は、下に要約される：
・ヒト肝臓ミクロソーム（１５の雄および雌の提供者の混合プール）をＩｎ  Ｖｉｔｒｏ  Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ（Ｂａｌｔｉｍｏｒｅ、ＭＤ）から購入した。
・ミクロソームは、相Ｉ（Ｃｙｐ２Ａ６、２Ｄ６、２Ｅ１、１Ａ２、２Ｃ１９、３Ａ４、４Ａ）および相ＩＩ（グルクロン酸抱合）酵素活性について特性評価する。
・アッセイは、１００ｍＭリン酸カリウム緩衝剤（１．５ｍＭ  ＮＡＤＰＨ、８ｍＭ  ＭｇＣｌ２、ｐＨ７．４、３７℃）中のミクロソームの最終濃度０．８ｍｇ／ｍＬを使用して行う。
・化合物を５μＭ（０．０５％のＤＭＳＯ）の単一濃度で二重反復試料にて試験する。
・被験物質をミクロソームと共に３７℃でインキュベートする。
・試料を０、１５および３０分で収集する。
・試験化合物およびプロプラノロール（正の対照）試料を、ＬＣ／ＭＳ／ＭＳによって内標準と比較して分析する。
・代謝半減期は、時間＝０、１５および３０分で残留する化合物の％によって得られた代謝分解曲線の非線形回帰分析によって求められる。
本発明の代表的な化合物に対して得られた結果を表６に提示する。
【表９Ａ】
2013509434.tif 000117
【表９Ｂ】
2013509434.tif 000118
【表９Ｃ】
2013509434.tif 000119
【０１９９】
Ｂ９．  薬物動態分析
本発明の化合物およびその医薬組成物に関する薬物動態（ＰＫ）挙動は、当業者に周知の方法で確認することができ、これらの物質の静脈内、皮下および経口投与に対する薬物動態パラメーター（排出半減期、合計血漿クリアランスなどの）を調べるために使用することができる（Ｗｉｌｋｉｎｓｏｎ，  Ｇ．  Ｒ．  ″Ｐｈａｒｍａｃｏｋｉｎｅｔｉｃｓ：  Ｔｈｅ  Ｄｙｎａｍｉｃｓ  ｏｆ  Ｄｒｕｇ  Ａｂｓｏｒｐｔｉｏｎ，  Ｄｉｓｔｒｉｂｕｔｉｏｎ，  ａｎｄ  Ｅｌｉｍｉｎａｔｉｏｎ″  ｉｎ  Ｇｏｏｄｍａｎ  ＆  Ｇｉｌｍａｎ’ｓ  Ｔｈｅ  Ｐｈａｒｍａｃｏｌｏｇｉｃａｌ  Ｂａｓｉｓ  ｏｆ  Ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃｓ，  Ｔｅｎｔｈ  Ｅｄｉｔｉｏｎ，  Ｈａｒｄｍａｎ，  Ｊ．Ｇ．；  Ｌｉｍｂｉｒｄ，  Ｌ．Ｅ．，  Ｅｄｓ．，  ＭｃＧｒａｗ  Ｈｉｌｌ，  Ｃｏｌｕｍｂｕｓ，  ＯＨ，  ２００１，  Ｃｈａｐｔｅｒ  １．）。また、米国特許第７，４７６，６５３号；７，４９１，６９５；国際特許出願公開ＷＯ２００８／０３３３２８および米国特許出願公開第２００８／０１９４６７２も参照のこと。例として、化合物１５０５は以下のＰＫプロファイルを有する。
【表１０】
2013509434.tif 000120
【０２００】
本発明の追加の代表的な化合物のＰＫパラメーターの測定は、実施例において提示される。
【０２０１】
Ｂ１０．  ラット胃底に関する体外能力評価
この方法は、電場刺激（ＥＦＳ）の存在または不在における、体外の器官槽でのラット胃底の細長い切片の治療によって、グレリンアンタゴニストとしての本発明の化合物の効力の追加の評価を提供するために使用する。グレリンペプチドは、組織の活性、および、次いで調べる試験化合物の種々の濃度の能力をシミュレートするために使用する。
【０２０２】
方法
底部の細長い切片（約０．４×１ｃｍ）を、輪筋繊維に平行して、成体雄ウィスターラットの胃から切断した。これらは、Ｏ２中の５％ＣＯ２で泡立て、３７℃に維持したクレブス溶液を含有する１０ｍｌの組織槽に、１ｃｍ間隔で、２つの白金リング電極（Ｒａｄｎｏｔｉ，ＡＤＩｎｓｔｒｕｍｅｎｔｓ，ＵＳＡ）の間に配置した。組織は、１．５ｇの静止張力の下で吊り下げた。張力の変化を、力変換器で等尺的に測定し、ＰｏｗｅｒＬａｂ８／３０データ収集システム（ＡＤＩｎｓｔｒｕｍｅｎｔｓ，ＵＳＡ）で記録した。組織は、６０分間平衡に保ち、その間、浴溶液を１５分ごとに交換した。
【０２０３】
ＥＦＳは、最大有効電圧７０Ｖで、０．５ｍｓパルス、５Ｈｚ周波数を印加することによって得た。ＥＦＳは、最初の３０分間は３分間隔で３０秒印加した。この最初の時間は、浴溶液の洗い出しにより、５分間隔で分離した。次いで、第２の期間の刺激を開始した。安定したＥＦＳで誘発された収縮（３回または４回の３０秒刺激）を得た後、ＥＦＳへの反応に対する、非累積的に適用された、正の対照としてのグレリン、様々な濃度（例えば、０．０１〜１０μＭ）での試験化合物とのグレリン、Ｌ−ＮＡＭＥ（３００μＭ、対照として）、またはそれらの各ビヒクルの作用を、３０分間にわたって調べた。薬剤に対する反応を、測定し、それをＥＦＳに対する３または４回の投薬前反応の平均の％として表した。すべての化合物は、保存溶液として、蒸留水またはＭｅＯＨ中に１ｍＭに溶解した。
【０２０４】
結果
本発明の代表的な化合物によるグレリンに誘発された収縮性の阻害に対するＩＣ５０値は、表７に提示される。
【表１１】
2013509434.tif 000121
【０２０５】
Ｂ１１．  ウィスターラットのグルコースホメオスタシスおよび代謝についての本発明の代表的な化合物の１４日間投与の作用
目的
試験の目的は、１４日間皮下または経口で投与された場合、雄のウィスターラットの体重、食物および水消費、グルコースホメオスタシスおよび耐性、ならびに血清脂質、血漿インスリンおよび肝臓中の選択された代謝パラメーター、脂肪組織および骨格筋への、本発明の代表的な化合物の作用を求めることであった。
【０２０６】
試験プロトコル
実験７日目、動物を、６匹の動物（主要試験動物）の適切な数の各群に体重によって階層化した。試験化合物は、溶液として皮下または経口的に投与した。服用量は２または３ｍＬ／ｋｇであった。暗期、特に、摂食がより密である暗期の初めに、最大の曝露を保証するために投薬のタイミングを図った。
【表１２】
2013509434.tif 000122
【０２０７】
ビヒクル（群１）ならびに２種の試験化合物（群２および群５）を、明期の終了１時間前（午後５：００）に、毎日１回投与し、他の試験化合物（群３および群４）は、午前１０：００および午後５：００に毎日２回投与した。他の用量レベルおよび濃度は、同様に調べることができる。
【０２０８】
生存中の観察
試験動物に関して、試験第７日から第１６日にかけて収集したデータを報告する。体重は、投薬開始前第７日に開始して、群割り当ての時間に、および試験時間を通して、ならびに検死前の終末に、すべての動物について毎日記録した。食物および水の摂取量は、投薬の開始前第１日に始め、処置期間の間中、３日毎に午前８：００に測定した。
【０２０９】
群１〜５のすべての動物（主要試験動物）から、実験第１６日午前０８：００に、心臓穿刺によって、グルコースの血漿濃度、ならびに遊離脂肪酸、トリアシルグリセロール、および総コレステロールの血清濃度の測定のために血液を収集した。１滴の血液（約２０μＬ）をＡｃｃｕ−Ｃｈｅｋ  Ａｖｉｖａ  グルコメーター（Ｒｏｃｈｅ  Ｄｉａｇｎｏｓｔｉｃｓ，  Ｉｎｄｉａｎａｐｏｌｉｓ，  ＩＮ）で血漿ブドウ糖のために使用した。他のパラメーターに関して、１ｍＬの血液を、予備冷却した血清分離凝固活性管（Ｓａｒｓｔｅｄｔ）に収集した。血液を２５００ｒｐｍ（４℃、１０分）で遠心分離機にかけ、血清は非被覆管へ移し、分析まで−８０℃で保存した。
【０２１０】
経口ブドウ糖負荷試験（ＯＧＴＴ）のための血液試料採取
経口ブドウ糖負荷試験を午前８：００ごろに群１〜５のすべての動物において行った。試験は、実験第３日に各群からの動物の半数に、および実験第４日に各群からの動物の残り半数に行った。同一の手順を実験第１４および１５日に反復した。動物は一晩絶食させた（前日午後５：００に食物を除去した）。実験第３、４、１３および１４日に、１．５ｇ／ｋｇのブドウ糖（デキストロース、Ｓｉｇｍａ  Ａｌｄｒｉｃｈ、４５０ｍｇ／ｍｌの投薬溶液）の経口投与後、０、１５、３０、６０、および１２０分に、血漿ブドウ糖およびインスリンの各測定につきおよそ２５０μＬの血液試料を、尾静脈からＥＤＴＡ被覆管（Ｋ２−ＥＤＴＡ  ｍｉｃｒｏｔａｉｎｅｒ  ｔｕｂｅｓ，  Ｂｅｃｔｏｎ  Ｄｉｃｋｉｎｓｏｎ）に収集した。ブドウ糖溶液を、ステンレス鋼製供給針  （１８  Ｘ  ２″，  Ｐｏｐｐｅｒ、Ｓｏｎｓ，カタログ番号２００６８−６４２，  ＶＷＲ）によって経口胃管栄養法によって投与した。ブドウ糖濃度は、この血液試料（Ａｃｃｕ−Ｃｈｅｋ  Ａｖｉｖａグルコメーター、Ｒｏｃｈｅ  Ｄｉａｇｎｏｓｔｉｃｓ）の一滴から求めたが、残りは４℃で１０分間４０００ｒｐｍで遠心分離機にかけ、結果として得られた血漿を、インスリン測定のために非被覆管へ移し、−８０℃で保存した。
【０２１１】
分析法
血漿インスリンを、ＨＴＲＦインスリン検出キット（カタログ番号６２ＩＮＳＰＥＢ，  ＣｉｓＢｉｏ，  ＵＳＡ）を用いて、各データ点および動物について二重反復で測定した。血漿ブドウ糖をＡＣＣＵ−ＣＨＥＫ  Ａｖｉｖａグルコメーター（Ｒｏｃｈｅ  Ｄｉａｇｎｏｓｔｉｃｓ）を使用して測定した。血清コレステロールおよびトリグリセリドを、標準酵素アッセイキット（ＴＧ：カタログ番号１１４８８８７２２１６，  Ｒｏｃｈｅ  Ｄｉａｇｎｏｓｔｉｃｓ；  Ｃｈｏｌ：  カタログ番号１１４８９２３２２１６，  Ｒｏｃｈｅ  Ｄｉａｇｎｏｓｔｉｃｓ）を使用して測定した。その測定はＨｉｔａｃｈｉ  ９１２アナライザーで行う。血清の遊離脂肪酸（ＦＦＡ）は、市販の比色定量酵素アッセイキット（ＨＲ  ｓｅｒｉｅｓ  ＮＥＦＡ−ＨＲ  （２）ｋｉｔ，  ＷＡＫＯ  Ｃｈｅｍｉｃａｌｓ）を使用して、二重反復で測定した。
【０２１２】
データ評価および統計
データはすべて、Ｅｘｃｅｌ  ２００３スプレッドシートに入力し、適切な統計的分析（ＧｒａｐｈＰａｄ  Ｐｒｉｓｍ，  ＧｒａｐｈＰａｄ  Ｓｏｆｔｗａｒｅ，  Ｓａｎ  Ｄｉｅｇｏ，  ＣＡ）に供した。他に明示しない限り、結果は平均±ＳＤ（標準偏差）として提示される。データの統計的評価は、一元分散分析（ＡＮＯＶＡ）を使用して行い、統計的有意性が確証された場合に、対照および処置群の間の適切な事後分析を用いて行う。
【０２１３】
Ｂ１２．  摂食反応の抑制
本発明の化合物のインビボ活性度を求める別の手法として、文献（Ｓａｒｔｏｒ，  Ｏ．；  ｅｔ．ａｌ．  Ｅｎｄｏｃｒｉｎｏｌｏｇｙ  １９８５，  １１７，  １４４１−１４４７）に記載されているように、絶食ラットでの摂食反応の抑制を行うことができる。
【０２１４】
Ｂ１３．  オスのＺｕｃｋｅｒ肥満ラットにおける、ブドウ糖ホメオスタシスおよび代謝に対する本発明の代表的な化合物の急性投与の作用
目的
この試験の目的は、オスＺｕｃｋｅｒ肥満ラットにおいて、投薬２４時間後の、および３日間の皮下投与後の、体重変化、食物および水消費、ブドウ糖ホメオスタシスへの試験化合物の急性作用を求めることである。同一パラメーターを、腹腔内経路による試験化合物の投薬２４時間後および３日間の投与後、評価した。オスＺｕｃｋｅｒ肥満ラットは、慢性状態だけでなく急性状態の相異なるインスリン抵抗性改善薬の作用に感受性のあるインスリン耐性および遺伝子的に規定された肥満症モデルとして選択した。
【０２１５】
動物
ラットは、底部に軟材寝具を有し水瓶を備えるげっ歯類ケージに個々に収容した。個々のケージはすべて、試験番号、群、動物番号および用量レベルを示すケージカードで明瞭に標識付けした。各動物は、動物番号によって一意的に識別された。動物番号は、動物が動物施設に到着した日に指定された。動物飼育室の環境を制御した。（目標範囲：温度２２±２℃；相対湿度５０±１０％；明／暗周期：１２時間明、１２時間暗、午前０６：００から午後０６：００まで明）標準的なげっ歯類食餌（Ｃｈａｒｌｅｓ  Ｒｉｖｅｒ５０７５げっ歯類飼料、Ｐｕｒｉｎａ  Ｍｉｌｌｓ，  Ｃａｎａｄａ）を、食物秤量後に随意動物に与えた。市の水道水を水瓶経由で動物に随意与えた。新鮮な水道水を水瓶秤量後に与えた。
【０２１６】
すべての群についておよそ４日の順応期間を、動物の受領と処置の開始との間に設け、実験室環境にラットを慣らした。実験第３日に、動物を、４匹の動物の適切な数の各群に体重によって階層化した。
【０２１７】
試験プロトコル
試験化合物を、溶液として、以下に示す、目標用量で、皮下または腹腔内に投与した。投薬量は３ｍＬ／ｋｇであった。群２、３および５に毎日１回午前７：００ごろ投薬し、一方、群１、４、６および７には毎日２回（ｂ．ｉ．ｄ）午前７：００および午後４：００ごろに投薬した。第１日に、動物の半数（サブセットＡ）、および第２日に他の半数（サブセットＢ）について、投薬２時間後（午前９：００頃）にＯＧＴＴを行った。ＯＧＴＴを、第３および４日に同様に反復した。
【表１３】
2013509434.tif 000123
【０２１８】
試験動物に関して、試験第３日から第４日にかけて収集したデータを報告した。すべての動物について体重を、投薬の開始前第３日、群割り当て時、および試験期間（第１〜４日）を通して毎日記録した。２４時間の食物および水の摂取量は、第２および４日（サブセットＡ）、第３および５日（サブセットＢ）（午後１２：００頃）に測定した。第１日に、群３、４および７からの動物は、投薬の１５分、３０分、１時間および２時間後（ＯＧＴＴ直前）、ＰＫ分析用に、血液（約１００μｌ）を採取した。血液を４℃で４０００ｒｐｍで１０分間遠心分離機にかけ、結果として得られた血漿は非被覆管へ移し、分析まで−８０℃で保存した。第３日に、投薬２時間後（ＯＧＴＴ直前）の血液試料のみを、ＰＫ分析用に得た。
【０２１９】
経口ブドウ糖負荷試験は、すべての群の動物に、第１および２日（動物の半数）、ならびに第３および４日（動物の他の半数）に行った。これは投薬２時間後に行った。動物は一晩絶食させた（前日午後５：００に食物を除去した）。このために、実験第３日および第４日（第１日および第２日のみインスリンはなく、ブドウ糖のための血液試料採取）に、１．５ｇ／ｋｇのブドウ糖（デキストロース、Ｓｉｇｍａ  Ａｌｄｒｉｃｈ、４５０ｍｇ／ｍｌの投薬溶液）の経口投与後、０（ブドウ糖前）、１５、３０、６０、および１２０分に、血漿ブドウ糖の測定におよそ各２０μＬおよび血漿インスリンの測定に２３０μＬの血液試料を、尾静脈からＥＤＴＡ被覆管（Ｋ２−ＥＤＴＡ  ｍｉｃｒｏｔａｉｎｅｒ  ｔｕｂｅｓ，  Ｂｅｃｔｏｎ  Ｄｉｃｋｉｎｓｏｎ）に収集した。ブドウ糖溶液を、ステンレス鋼製供給針（１８  Ｘ  ２″，  Ｐｏｐｐｅｒ  ＠  Ｓｏｎｓ，  カタログ番号２００６８−６４２，  ＶＷＲ）経由で経口胃管栄養法によって投与した。ブドウ糖濃度は、血液の１滴から求める（Ａｃｃｕ−Ｃｈｅｋ  Ａｖｉｖａグルコメーター、Ｒｏｃｈｅ  Ｄｉａｇｎｏｓｔｉｃｓ）が、  残りは４℃で１０分間４０００ｒｐｍで遠心分離機にかけ、結果として得られた血漿は、インスリン測定のために非被覆管へ移し、−８０℃で保存する。血漿インスリンは、ＨＴＲＦインスリン検査キット（６２ＩＮＳＰＥＢ，  ＣｉｓＢｉｏ，  ＵＳＡ）を用いて、各データ点および動物について二重反復で測定した。血漿ブドウ糖はＡＣＣＵ−ＣＨＥＫ  Ａｖｉｖａグルコメーター（Ｒｏｃｈｅ  Ｄｉａｇｎｏｓｔｉｃｓ）を使用して測定する。
【０２２０】
データ評価および統計
データはすべて、Ｅｘｃｅｌ  ２００３スプレッドシートに入力し、続いて適切な統計的分析（ＧｒａｐｈＰａｄ  Ｐｒｉｓｍ，  ＧｒａｐｈＰａｄ  Ｓｏｆｔｗａｒｅ，  Ｓａｎ  Ｄｉｅｇｏ，  ＣＡ）に供した。他に明示しない限り、結果は平均±ＳＤ（標準偏差）として提示される。データの統計的評価は、一元分散分析（ＡＮＯＶＡ）を使用して行い、統計的有意性が確証された場合に、対照および処置群の間の適切な事後分析を用いて行う。
【０２２１】
Ｂ１４．  オスＺｕｃｋｅｒ肥満ラットにおける本発明の代表的な化合物の亜慢性投与の作用
目的
この試験の目的は、経口投与して７日までのオスＺｕｃｋｅｒ肥満ラットにおいて、体重変化、食物および水消費、ならびにブドウ糖ホメオスタシス、およびインスリンレベルに対する試験化合物の亜慢性作用を求めることである。オスＺｕｃｋｅｒ肥満ラットは、急性だけでなく慢性状態の相異なるインスリン抵抗性改善薬の作用に感受性のあるインスリン耐性および遺伝子的に定義された肥満症モデルとして選択した。
【０２２２】
動物
ラットは、底部に軟材寝具を有し水瓶を備えるげっ歯類ケージに個々に収容した。個々のケージはすべて、試験番号、群、動物番号および用量レベルを示すケージカードで明瞭に標識付けした。各動物は、動物番号によって一意的に識別された。動物番号は、動物が動物施設に到着した日に指定された。動物飼育室の環境を制御した（目標範囲：温度２２±２℃；相対湿度５０±１０％；明／暗周期：１２時間明、１２時間暗、午前０６：００から午後０６：００まで明）。標準的なげっ歯類食餌（Ｃｈａｒｌｅｓ  Ｒｉｖｅｒ５０７５げっ歯類飼料、Ｐｕｒｉｎａ  Ｍｉｌｌｓ，  Ｃａｎａｄａ）を、食物秤量後に随意動物に与えた。市の水道水を水瓶経由で動物に随意与えた。新鮮な水道水を水瓶秤量後に与えた。
【０２２３】
すべての群についておよそ７日の順応期間を、動物の受領と処置の開始との間に設け、実験室環境にラットを慣らした。実験第７日に、動物を、４匹または８匹の動物の適切な数の各群に体重によって階層化した。
【０２２４】
試験プロトコル
試験化合物を、溶液として、示した用量で経口的に投与した。投薬量は５ｍＬ／ｋｇであった。群には、第３日に、動物の半数（サブセットＡ）、および第４日に他の半数（サブセットＢ）に１日１回午前８：００ごろ投薬し、投薬２時間後（午前１０：００頃）にＯＧＴＴを行った。ＯＧＴＴを、第３日（サブセットＡ）および第４日（サブセットＢ）に同様に反復した。
【表１４】
2013509434.tif 000124
【０２２５】
試験動物に関して、試験第７日から第８日にかけて収集したデータを報告する。体重は、投薬開始前第７日に、群割り当て時に、および試験期間（第１日〜第８日）を通して毎日、すべての動物について記録した。食物および水の摂取量は、処置期間（第１日〜第８日）の間中、毎日測定した。第１日１（サブセットＡ）、第２日（サブセットＢ）、第３日（サブセットＡ）、第４日（サブセットＢ）、第７日（サブセットＡ）および第８日（サブセットＢ）に、群２および３からの動物は、ＰＫ分析のために、投薬２時間後、尾静脈からＥＤＴＡ被覆管（Ｋ２−ＥＤＴＡ  ｍｉｃｒｏｔａｉｎｅｒ管、Ｂｅｃｔｏｎ  Ｄｉｃｋｉｎｓｏｎ）中へ血液試料採取した（約１００μｌ）。血液を４℃で４０００ｒｐｍで１０分間遠心分離機にかけ、結果として得られた血漿は非被覆管へ移し、分析まで−８０℃で保存した。
【０２２６】
経口ブドウ糖負荷試験を、すべての群の動物に、第３日（動物の半数）、ならびに第４日（動物の他の半数）に行った。これは投薬２時間後に行った。動物は一晩絶食させた（前日午後５：００に食物を除去した）。１．５ｇ／ｋｇのブドウ糖（デキストロース、Ｓｉｇｍａ  Ａｌｄｒｉｃｈ、４５０ｍｇ／ｍｌの投薬溶液）の経口投与後、０（ブドウ糖前）、１５、３０、６０、および１２０分に、血漿ブドウ糖の測定におよそ各２０μＬおよび血漿インスリンの測定に２３０μＬの血液試料を、尾静脈からＥＤＴＡ被覆管（Ｋ２−ＥＤＴＡ  ｍｉｃｒｏｔａｉｎｅｒ  ｔｕｂｅｓ，  Ｂｅｃｔｏｎ  Ｄｉｃｋｉｎｓｏｎ）に収集した。ブドウ糖溶液を、ステンレス鋼製供給針（１８  Ｘ  ２″，  Ｐｏｐｐｅｒ  ＠  Ｓｏｎｓ，  カタログ番号２００６８−６４２，  ＶＷＲ）経由で経口胃管栄養法によって投与した。ブドウ糖濃度は、血液の２０μＬ１滴から求めた（Ａｃｃｕ−Ｃｈｅｋ  Ａｖｉｖａグルコメーター、Ｒｏｃｈｅ  Ｄｉａｇｎｏｓｔｉｃｓ）が、残りの２３０μＬは、４℃で１０分間４０００ｒｐｍで遠心分離機にかけ、結果として得られた血漿は、非被覆管へ移し、インスリン測定のために−８０℃で保存した。これらの手順は第７日（サブセットＡ）および第８日（サブセットＢ）に行った。動物から抜き取る血液量を最小限に抑えるために、上に示したように、インスリン測定用の血液試料を、第３日および第４日の時間０（ブドウ糖前）のみに、およびさらに第７日および第８日の１５、３０、６０および１２０分に得たことは、特記に値する。
【０２２７】
すべての動物から、実験第７日（サブセットＡ）および第８日（サブセットＢ）に、心臓穿刺によって、遊離脂肪酸、トリグリセリド、および総コレステロールの血清濃度の測定のために血液を収集した。これはＯＧＴＴ直後に行った。このために、１ｍＬの血液を、予備冷却した血清分離凝固活性管（Ｓａｒｓｔｅｄｔ）に収集した。血液を２５００ｒｐｍ（４℃、１０分）で遠心分離機にかけ、血清は非被覆管へ移し、分析まで−８０℃で保存した。トリグリセリド、総コレステロールおよび遊離脂肪酸について血清試料（各２５０μＬ）を適切な方法を使用して分析した。
【０２２８】
血漿インスリンを、ＨＴＲＦインスリン検査キット（６２ＩＮＳＰＥＢ，  ＣｉｓＢｉｏ，  ＵＳＡ）を用いて、各データ点および動物について二重反復で測定した。血漿ブドウ糖をＡＣＣＵ−ＣＨＥＫ  Ａｖｉｖａグルコメーター（Ｒｏｃｈｅ診断法）を使用して測定した。血清コレステロールおよびトリグリセリドを、標準酵素アッセイキット（ＴＧｓ：  カタログ番号１１４８８８７２２１６，  Ｒｏｃｈｅ  Ｄｉａｇｎｏｓｔｉｃｓ；  Ｃｈｏｌ：  カタログ番号  １１４８９２３２２１６，  Ｒｏｃｈｅ  Ｄｉａｇｎｏｓｔｉｃｓ）を使用して、測定した。測定はＨｉｔａｃｈｉ  ９１２アナライザーで行った。血清の遊離脂肪酸（ＦＦＡ）は、市販の比色定量酵素アッセイキット（ＨＲ  ｓｅｒｉｅｓ  ＮＥＦＡ−ＨＲ  （２）ｋｉｔ，  ＷＡＫＯ  Ｃｈｅｍｉｃａｌｓ）を使用して、二重反復で測定した。吸光度はＧＥＮｉｏｓ  Ｐｒｏ  自動プレートリーダー（Ｔｅｃａｎ）を使用して得られた。
【０２２９】
データ評価および統計
データはすべて、Ｅｘｃｅｌ  ２００３スプレッドシートに入力し、続いて適切な統計的分析（ＧｒａｐｈＰａｄ  Ｐｒｉｓｍ，  ＧｒａｐｈＰａｄ  Ｓｏｆｔｗａｒｅ，  Ｓａｎ  Ｄｉｅｇｏ，  ＣＡ）に供した。他に明示しない限り、結果は平均±ＳＤ（標準偏差）として提示される。  データの統計的評価は、一元分散分析（ＡＮＯＶＡ）を使用して行い、統計的有意性が確証された場合に、対照および処置群の間の適切な事後分析を用いて行った。
【０２３０】
Ｂ１５．  オスｏｂ／ｏｂマウスにおける本発明の化合物の亜慢性投与の作用
目的
この試験の目的は、  最長７日間経口投与したオスｏｂ／ｏｂラットにおいて、体重変化、食物および水消費、ならびにブドウ糖ホメオスタシスおよびインスリンレベルへの試験化合物の亜慢性作用を求めることである。オスｏｂ／ｏｂラットは、急性ならびに慢性状態の相異なるインスリン抵抗性改善薬の作用に感受性のある２型糖尿病（Ｔ２ＤＭ）および遺伝子的に定義された肥満症モデルとして選択した。より正確には、このモデルはレプチン遺伝子の欠損を示す。
【０２３１】
このモデルにおける同様の試験を、最長２８日間オスｏｂ／ｏｂラットに経口投与して、体重変化、食物および水消費、ブドウ糖ホメオスタシス、インスリンおよびグルカゴンレベル、ならびに脂質プロファイルおよび脳浸透への試験化合物の急性および亜慢性作用を求めるために行った。
【０２３２】
動物
マウスは、底部に軟材寝具を有し水瓶を備えるげっ歯類ケージに個々に収容した。個々のケージはすべて、試験番号、群、動物番号および用量レベルを示すケージカードで明瞭に標識付けした。各動物は、それらの尾に安全インキで印される動物番号によって一意的に識別された。動物番号は、動物が動物施設に到着した日に指定された。動物飼育室環境は制御された。（目標範囲：温度２２±２℃；相対湿度５０±１０％；明／暗周期：１２時間明、１２時間暗、午前０６：００から午後０６：００まで明）。規則的なげっ歯類食餌（Ｃｈａｒｌｅｓ  Ｒｉｖｅｒ５０７５げっ歯類飼料、  Ｐｕｒｉｎａ  Ｍｉｌｌｓ，  Ｃａｎａｄａ）を、食物秤量後に適宜動物に与えた。市の水道水を水瓶経由で動物に適宜与えた。新鮮な水道水を水瓶秤量後に与えた。すべての群についておよそ７日の順応期間を、動物の受領と処置の開始との間に設け、実験室環境にラットを慣らした。実験第７日に、動物を、５匹または１０匹の動物の適切な数の群および５匹の動物の２つの群に体重および血糖によって階層化した。
【０２３３】
試験プロトコル（７日間の試験）
試験化合物を、溶液として、示した用量で経口的に投与した。投薬量は５ｍＬ／ｋｇ／日になる。群に毎日１回午後４：００ごろ投薬した。正の対照として、ｏｂ／ｏｂマウスモデルにおいて血糖を正常化すると特定的に報告されている（Ｌｉｕ  ｅｔ．ａｌ．，  Ｊ．  Ｍｅｄ．  Ｃｈｅｍ．．，  ４６：  ２０９３−２１０３，  ２００３）の認可された抗糖尿病薬である、チアゾリジンジオンファミリー（ｐｐａｒガンマアゴニスト）のロシグリタゾン（Ａｖａｎｄｉａ（登録商標）））を使用した。ＣＢ１受容体アンタゴニストであるリモナバント（Ａｃｃｏｍｐｌｉａ（登録商標））は、２型糖尿病および肥満症の異なるモデルにおいて、体重および食物摂取を減少させると報告され、また、使用された（Ｒａｓｍｕｓｓｅｎ  ａｎｄ  Ｈｕｓｋｉｎｓｏｎ  Ｂｅｈａｖｉｏｒａｌ  Ｐｈａｒｍａｃｏｌ．  ２００８，  １９，  ７３５−７４２，；  Ｂｏｂｏ，  Ｇ．；  ｅｔ．ａｌ．  Ｈｅｐａｔｈｏｌｏｇｙ  ２００７，  ４６，  １２２−１２９；  Ｄｉ  Ｍａｒｚｏ；  ｅｔ．ａｌ．，  Ｎａｔｕｒｅ  ２００１，  ４１０，  ８２２−８２５）。
【表１５】
2013509434.tif 000125
【０２３４】
試験動物に関して、試験第７日から第８日にかけて収集したデータを報告した。体重は、投薬開始前第７日に、群割り当て時に、および試験期間（第１日〜第８日）を通して毎日、すべての動物について記録した。食物および水の摂取量は、投薬４時間後、第１日および第７日（サブセットＡ）ならびに第２日および第８日（サブセットＢ）の暗期（午後８：００頃）の開始２時間後、次に、第３日から第８日まで２４時間間隔で毎日測定した。第１日１（サブセットＡ）、第２日（サブセットＢ）に、群２から４の３匹の動物から、ＰＫ分析のために、投薬４時間後、尾静脈からＥＤＴＡ被覆管（Ｋ２−ＥＤＴＡ  ｍｉｃｒｏｔａｉｎｅｒ管、Ｂｅｃｔｏｎ  Ｄｉｃｋｉｎｓｏｎ）中へ血液（約１００μｌ）を試料採取した。血液を４℃で４０００ｒｐｍで１０分間遠心分離機にかけ、結果として得られた血漿は非被覆管へ移し、分析まで−８０℃で保存した。同一の手順を第７日（サブセットＡ）および第８日（サブセットＢ）に投薬２４時間後に反復した。すべての動物から、実験第７日（サブセットＡ）および第８日（サブセットＢ）に、心臓穿刺によって、ブドウ糖およびインスリンの血漿濃度、ならびに遊離脂肪酸、トリアシルグリセロール、および総コレステロールの血清濃度の測定のために末端の血液試料（合計およそ５ｍＬ）を収集した。血漿インスリン測定用の血液試料（２５０μＬ）は、ＥＤＴＡ被覆管（Ｋ２−ＥＤＴＡ  ｍｉｃｒｏｔａｉｎｅｒ  ｔｕｂｅｓ，  Ｂｅｃｔｏｎ  Ｄｉｃｋｉｎｓｏｎ）に収集した。血液を４℃で４０００ｒｐｍで１０分間遠心分離機にかけ、結果として得られた血漿は非被覆管へ移し、分析まで−８０℃で保存した。さらに、１ｍｌの血液を予備冷却した血清分離凝固活性管（Ｓａｒｓｔｅｄｔ）に収集した。血液を４℃で４０００ｒｐｍで１０分間遠心分離機にかけ、結果として得られた血漿は非被覆管へ移し、分析まで−８０℃で保存した。トリグリセリド、総コレステロールおよび遊離脂肪酸のための血清試料（各２５０μＬ）は適切な方法を使用して分析した。
【０２３５】
群１〜４からの動物は、試験化合物の脳濃度測定のための末端の出血直後に、脳を摘出した。脳は氷上に保ち、分析まで−８０℃で置いた。
【０２３６】
血漿インスリンは、ＨＴＲＦインスリン検査キット（６２ＩＮＳＰＥＢ，  ＣｉｓＢｉｏ，  ＵＳＡ）を用いて、各データ点および動物について二重反復で測定した。血漿ブドウ糖（２０μＬ血液試料）はＡＣＣＵ−ＣＨＥＫ  Ａｖｉｖａグルコメーター（Ｒｏｃｈｅ診断法）を使用して測定した。血清コレステロールおよびトリグリセリドは標準酵素を使用して、測定されたＨｉｔａｃｈｉ  ９１２アナライザーにキット（ＴＧ：  カタログ番号１１４８８８７２２１６、Ｒｏｃｈｅ診断法；コレステロール：カタログ番号１１４８９２３２２１６、Ｒｏｃｈｅ診断法）をアッセイする。血清コレステロールおよびトリグリセリドを、標準酵素アッセイキット  （ＴＧｓ：  カタログ番号  １１４８８８７２２１６，  Ｒｏｃｈｅ  Ｄｉａｇｎｏｓｔｉｃｓ；  Ｃｈｏｌ：  カタログ番号１１４８９２３２２１６，  Ｒｏｃｈｅ  Ｄｉａｇｎｏｓｔｉｃｓ）を使用して、Ｈｉｔａｃｈｉ  ９１２アナライザーで測定した。血清の遊離脂肪酸（ＦＦＡ）は、市販の比色定量酵素アッセイキット（ＨＲ  ｓｅｒｉｅｓ  ＮＥＦＡ−ＨＲ（２）ｋｉｔ，  ＷＡＫＯ  Ｃｈｅｍｉｃａｌｓ）を使用して、二重反復で測定した。吸光度はＧＥＮｉｏｓ  Ｐｒｏ  自動プレートリーダー（Ｔｅｃａｎ）を使用して得られた。
【０２３７】
試験プロトコル（１５日間の試験）
試験化合物は、溶液として、示した用量で経口的に投与した。投薬量は５ｍＬ／ｋｇ／日であった。群１〜４（サブセットＡ）は、特に、第１日、第７日、第１４日および第１５日の午前９：００に投薬した。他の場合には、これらの群に、第２日から第６日、および第８日から第１３日まで午後３：００頃毎日１回投薬した。群５〜８（サブセットＢ）には、第１日から第１４日まで午後３：００頃、次いで第１５日午前９：００に毎日１回投薬した。
【表１６】
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【０２３８】
試験動物に関して、試験第７日から第１５日にかけて収集したデータを報告する。体重は、投薬開始前第７日に、群割り当て時に、および試験期間（第１日〜第１５日）を通して毎日、すべての動物について記録した。群１〜４（サブセットＡ）からの絶食ブドウ糖レベルを、第１日、第７日および第１４日にモニターした。群５〜８（サブセットＢ）からの非絶食ブドウ糖レベルを、第１日、第７日および第１４日にモニターした。食物および水摂取量を、動物（群１〜４、サブセットＡ）の１つのサブセットにおいて、第１日に投薬２０分、１時間、２時間および４時間後に急性的に、ならびにサブセットＢ動物（群５〜８）において第７日におよび第１日から第１４日まで２４時間間隔で毎日測定した。第１４日に、群１〜４（サブセットＡ）からのすべての動物において、経口ブドウ糖負荷試験ＯＧＴＴを行った。このために、動物は一晩絶食させた。血漿ブドウ糖濃度用の血液試料は、１．５ｇ／ｋｇのブドウ糖（デキストロース、Ｓｉｇｍａ  Ａｌｄｒｉｃｈ、４５０ｍｇ／ｍｌの投薬溶液）の経口投与後０（ブドウ糖前）、１５、３０、６０および１２０分に得た。ブドウ糖溶液を、ステンレス鋼製供給針（１８Ｘ２″，  Ｐｏｐｐｅｒ  ＠  Ｓｏｎｓ，  カタログ番号２００６８−６４２，  ＶＷＲ）経由で経口胃管栄養法によって投与した。ブドウ糖濃度を血液２０μＬ１滴から求め、Ａｃｃｕ−Ｃｈｅｋ  Ａｖｉｖａグルコメーター（Ｒｏｃｈｅ  Ｄｉａｇｎｏｓｔｉｃｓ）で測定を行った。
【０２３９】
第１５日に、群２および３（サブセットＡ）のすべての動物から、ＰＫ分析（ｎ＝２マウス／処置群／時点）のために、投薬０、１５分、３０分、１時間、２時間、４時間後、尾静脈からＥＤＴＡ被覆管（Ｋ２−ＥＤＴＡ  ｍｉｃｒｏｔａｉｎｅｒ管、Ｂｅｃｔｏｎ  Ｄｉｃｋｉｎｓｏｎ）中へ血液（約１００μｌ）を試料採取した。血液を４℃で４０００ｒｐｍで１０分間遠心分離機にかけ、結果として得られた血漿は非被覆管へ移し、分析まで−８０℃で保存した。群５〜８（サブセットＢ）のすべての動物から、実験第１５日に、心臓穿刺によって、インスリン、グルカゴン、遊離脂肪酸、トリグリセリド、総コレステロール、ＬＤＬ、ＨＤＬならびにＨＤＬ／総コレステロール比の血漿濃度の測定のために末端の血液試料（合計およそ１ｍＬ）を収集した。血液試料は、ＥＤＴＡ被覆管（Ｋ２−ＥＤＴＡ  ｍｉｃｒｏｔａｉｎｅｒ管、Ｂｅｃｔｏｎ  Ｄｉｃｋｉｎｓｏｎ）に収集した。血液を４℃で４０００ｒｐｍで１０分間遠心分離機にかけ、結果として得られた血漿は非被覆管へ移し、分析まで−８０℃で保存した。
【０２４０】
第１５日に、群１〜３（サブセットＡ）からならびに群６および７（サブセットＢ）からの動物の脳を、投薬３０分、１時間、２時間または４時間後、試験化合物の脳濃度測定（ｎ＝３マウス／処置群／時点）のために摘出した。脳を氷上に保ち、分析まで−８０℃で凍結した。
【０２４１】
血漿インスリンおよびグルカゴンは、ＨＴＲＦインスリン検査キット（６２ＩＮＳＰＥＢ，  ＣｉｓＢｉｏ，  ＵＳＡ）を用いて、各データ点および動物について測定した。血漿ブドウ糖（２０μＬ血液試料）はＡＣＣＵ−ＣＨＥＫ  Ａｖｉｖａグルコメーター（Ｒｏｃｈｅ  Ｄｉａｇｎｏｓｔｉｃｓ）を使用して測定する。臨床化学測定に関して、血漿３５μＬを、トリグリセリド、ＨＤＬコレステロール、非ＨＤＬコレステロール、ＬＤＬコレステロール、総コレステロール（ＴＣ）およびＴＣ／ＨＤＬ比について、Ｃｈｏｌｅｓｔｅｃｈ  ＬＤＸアナライザー  （ＭａｎｔｈａＭｅｄ，  Ｍｉｓｓｉｓｓａｕｇａ，  ＯＮ，  Ｃａｎａｄａ）で分析した。血清の遊離脂肪酸（ＦＦＡ）は、市販の比色定量酵素アッセイキット（ＨＲ  ｓｅｒｉｅｓ  ＮＥＦＡ−ＨＲ  （２）ｋｉｔ，  ＷＡＫＯ  Ｃｈｅｍｉｃａｌｓ）を使用して、二重反復で測定した。吸光度はＧＥＮｉｏｓ  Ｐｒｏ自動プレートリーダー（Ｔｅｃａｎ）で読み取った。
【０２４２】
試験プロトコル（２８日間の試験）
試験化合物は、溶液として、示した用量で経口的に投与した。投薬量は５ｍＬ／ｋｇ／日であった。群１〜４（サブセットＡ）は、特に、第１日、第７日、第１４日、第２１日および第２８日の午前９：００に投薬した。他の場合には、これらの群に、第２日から第６日、第８日から第１３日、第１５日から第２０日、および第２２日から第２８日まで午後３：００頃毎日１回投薬した。群５〜８（サブセットＢ）には、第１日から第２７日まで午後３：００頃、次いで第２８日午前９：００に毎日１回投薬した。
【表１７】
2013509434.tif 000127
【０２４３】
試験動物に関して、試験第７日から第２８日にかけて収集したデータを報告する。体重は、投薬開始前第７日に、群割り当て時に、および試験期間（第１日〜第２８日）を通して毎日、すべての動物について記録した。群１〜４（サブセットＡ）からの絶食（１６時間の絶食）ブドウ糖レベルを、第１日、第７日、第１４日および第２８日にモニターした。群５〜８（サブセットＢ）からの絶食しないブドウ糖レベルを、第１日、第７日、第１４日および第２８日にモニターした。食物および水摂取量を、動物（群１〜４、サブセットＡ）の１つのサブセットにおいて、第１日、第７日に投薬２０分、１時間、２時間および４時間後に急性的に、ならびにサブセットＢ動物（群５〜８）において第２１日におよび第１日から第２８日まで２４時間間隔で毎日測定した。第１日および第７日に、群１〜４（サブセットＡ）からのすべての動物において、経口ブドウ糖負荷試験ＯＧＴＴを行った。このために、動物は一晩絶食させた。血漿ブドウ糖濃度用の血液試料は、１．５ｇ／ｋｇのブドウ糖（デキストロース、Ｓｉｇｍａ  Ａｌｄｒｉｃｈ、４５０ｍｇ／ｍｌの投薬溶液）の経口投与後０（ブドウ糖前）、１５、３０、６０および１２０分に得た。ブドウ糖溶液を、ステンレス鋼製供給針（１８  Ｘ  ２″，  Ｐｏｐｐｅｒ  ＠  Ｓｏｎｓ，  カタログ番号  ２００６８−６４２，  ＶＷＲ）経由で経口胃管栄養法によって投与した。ブドウ糖濃度を血液２０μＬ１滴から求め、Ａｃｃｕ−Ｃｈｅｋ  Ａｖｉｖａグルコメーター（Ｒｏｃｈｅ  Ｄｉａｇｎｏｓｔｉｃｓ）で測定を行った。
【０２４４】
第２８／２９日に、  群２および３（サブセットＡ）のすべての動物から、ＰＫ分析（ｎ＝２マウス／処置群／時点）のために、投薬０、１５分、３０分、１時間、２時間、４時間後、尾静脈からＥＤＴＡ被覆管（Ｋ２−ＥＤＴＡ  ｍｉｃｒｏｔａｉｎｅｒ管、Ｂｅｃｔｏｎ  Ｄｉｃｋｉｎｓｏｎ）中へ血液（約１００μｌ）を試料採取した。血液を４℃で４０００ｒｐｍで１０分間遠心分離機にかけ、結果として得られた血漿は非被覆管へ移し、分析まで−８０℃で保存した。群２および３（サブセットＡ）、および群５〜８（サブセットＢ）から、実験第２８／２９日に、インスリン、グルカゴン、アシル化および非アシル化グレリン、成長ホルモン、ＧＬＰ−１、ＩＧＦ−１、遊離脂肪酸、トリグリセリド、および総コレステロールの血漿濃度の測定のために末端の血液試料（合計およそ１ｍＬ）を心臓穿刺によって収集した。血液試料は、ＥＤＴＡ被覆管（Ｋ２−ＥＤＴＡ  ｍｉｃｒｏｔａｉｎｅｒ管、Ｂｅｃｔｏｎ  Ｄｉｃｋｉｎｓｏｎ）に収集した。血液を４℃で４０００ｒｐｍで１０分間遠心分離機にかけ、結果として得られた血漿は非被覆管へ移し、分析まで−８０℃で保存した。
【０２４５】
第２８／２９日に、群１〜３（サブセットＡ）からならびに群６および７（サブセットＢ）からの動物の脳を、投薬３０分、１時間、２時間または４時間後、試験化合物の脳濃度測定（ｎ＝３マウス／処置群／時点）のために摘出した。脳を氷上に保ち、分析まで−８０℃で凍結した。
【０２４６】
第２８／２９日に、群１〜４（サブセットＡ）から、ならびに群５〜８（サブセットＢ）からのすべての動物は、遊離脂肪酸、トリグリセリドおよび総コレステロールレベルの測定のために、最後の出血後に、それらの肝臓を摘出した。肝臓は氷上に保ち、分析まで−８０℃で置いた。
【０２４７】
血漿インスリンは、ＨＴＲＦインスリン検査キット（６２ＩＮＳＰＥＢ，  ＣｉｓＢｉｏ，  ＵＳＡ）を用いて、各データ点および動物について二重反復で測定した。血漿ブドウ糖（２０μＬ血液試料）はＡＣＣＵ−ＣＨＥＫ  Ａｖｉｖａグルコメーター（Ｒｏｃｈｅ  Ｄｉａｇｎｏｓｔｉｃｓ）を使用して測定する。血漿中のアシル化および非アシル化グレリンならびに成長ホルモンを酵素免疫アッセイキット（Ａ０５１１７、Ａ０５１１８およびＡ０５１０４、それぞれＡｌｐｃｏ  Ｄｉａｇｎｏｓｔｉｃｓ，  ＵＳＡから）を使用して測定した。血漿中のＩＧＦ−１およびＧＬＰ−１は、Ａｌｐｃｏ  Ｄｉａｇｎｏｓｔｉｃｓ  （ＵＳＡ）からのＩＧＦ−１（マウス、ラット）ＥＬＩＳＡおよびＧＬＰ−１（ａｃ−ｔｉｖｅ  ７−３６）ＥＬＩＳＡキットを使用して測定した。臨床化学測定に関して、血漿３５μＬを、トリグリセリドおよび血清コレステロールについてＣｈｏｌｅｓｔｅｃｈ  ＬＤＸアナライザー  （ＭａｎｔｈａＭｅｄ，  Ｍｉｓｓｉｓｓａｕｇａ，  ＯＮ，  Ｃａｎａｄａ）で分析した。血清の遊離脂肪酸（ＦＦＡ）は、市販の比色定量酵素アッセイキット（ＨＲ  ｓｅｒｉｅｓ  ＮＥＦＡ−ＨＲ（２）ｋｉｔ，  ＷＡＫＯ  Ｃｈｅｍｉｃａｌｓ）を使用して、二重反復で測定した。吸光度はＧＥＮｉｏｓ  Ｐｒｏ自動プレートリーダー（Ｔｅｃａｎ）で読み取った。肝臓中の遊離脂肪酸、トリグリセリドおよび総コレステロールレベルを、市販の比色定量酵素アッセイキット（遊離脂肪酸定量キットＫ６１２−１００、トリグリセリド定量キットＫ６２２−１００およびコレステロール／コレステロールエステル定量キットＫ６０３−１００、Ｂｉｏｖｉｓｉｏｎ，  Ｍｏｕｎｔａｉｎ  Ｖｉｅｗ，  ＣＡ，  ＵＳＡ）を使用して測定した。
【０２４８】
データ評価および統計
データはすべて、Ｅｘｃｅｌ  ２００３または２００７スプレッドシートに入力し、続いて適切な統計的分析（ＧｒａｐｈＰａｄ  Ｐｒｉｓｍ，  ＧｒａｐｈＰａｄ  Ｓｏｆｔｗａｒｅ，  Ｓａｎ  Ｄｉｅｇｏ，  ＣＡ）に供した。他に明示しない限り、結果は平均±ＳＤ（標準偏差）として提示される。データの統計的評価は、一元分散分析  （ＡＮＯＶＡ）を使用して行い、統計的有意性が確証された場合に、対照および処置群の間の適切な事後分析を用いて行う。
【０２４９】
Ｂ１６．  ｈＥＲＧチャンネル阻害
ｈＥＲＧ（ヒトｅｔｈｅｒ−ａ−ｇｏ−ｇｏ）遺伝子の産生物は、ＩＫｒ再分極電流の原因であるイオンチャネルであり、この電流への変化が心筋活動電位を延ばし、早期後脱分極の出現を促進すると示されている。ｈＥＲＧチャンネルを含む化合物の直接相互作用は、心毒性の公知の事例の大半を説明する。
【０２５０】
方法
実験的方法の重要な態様は以下のとおりである：
・ｈＥＲＧ遺伝子は、ＨＥＫ２９３細胞において安定して発現した
・ホウケイ酸塩微小電極は、所定のパルスプロトコルにわたって全体細胞ＩＫｒ電流を記録するために使用される。
・対照電流は、阻害薬  （Ｅ−４０３１、正の対照）または試験化合物のない状態で記録される。
・化合物は１および１０μＭで試験する：
・化合物を５分間細胞に灌流するようにさせる。
・次いで、３つの電流を、対照条件と同一のパルスプロトコルの適用により記録する。
・正の対照（例えば、ＩＫｒの公知の阻害薬  であるＥ−４０３１）の単一濃度（０．５μＭ）も試験する。
【０２５１】
結果
化合物１７１２、１８４８および１９２９は、１００μＭまで、ビヒクル（０．１％のＤＭＳＯ）対照と比較してｈＥＲＧ経路機能に対する有意な作用を示さなかった。
【０２５２】
５．  医薬組成物
本発明の大環状化合物または本発明によるその薬理学的に許容される塩は、様々な剤形の医薬組成物へ製剤化することができる。本発明の医薬組成物を調製するため、活性成分として、光学異性体、鏡像異性体、ジアステレオマー、ラセミ体またはこれらの立体化学混合物を含む１種または複数の化合物、あるいはその薬学的に許容される塩を、医薬品調合物の当業者に公知の技法に従って、適切な担体および添加剤と密に混合する。
【０２５３】
製薬上  薬学的に許容される塩とは、本発明の化合物の医薬品としての使用または調合を可能にするための、本発明の化合物の塩形態を指し、この塩形態は、特定の化合物の遊離酸および塩基の生物学的有効性を保持し、生物学的にまたは他の点で望ましく有害ではない、。そのような塩の例は、Ｈａｎｄｂｏｏｋ  ｏｆ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｓａｌｔｓ：Ｐｒｏｐｅｒｔｉｅｓ，  Ｓｅｌｅｃｔｉｏｎ，  ａｎｄ  Ｕｓｅ，  Ｗｅｒｍｕｔｈ，  Ｃ．Ｇ．  ａｎｄ  Ｓｔａｈｌ，  Ｐ．Ｈ．  （ｅｄｓ．），  Ｗｉｌｅｙ−Ｖｅｒｌａｇ  Ｈｅｌｖｅｔｉｃａ  Ａｃｔａ，  Ｚｕｒｉｃｈ，  ２００２  ［ＩＳＢＮ  ３−９０６３９０−２６−８］に記載されている。そのような塩の例としては、アルカリ金属塩ならびに遊離酸および塩基の付加塩が挙げられる。薬学的に許容される塩の例としては、硫酸塩、ピロ硫酸塩、重硫酸塩、亜硫酸塩、亜硫酸水素塩、リン酸塩、リン酸一水素塩、リン酸二水素塩、メタリン酸塩、ピロリン酸塩、塩化物、臭化物、ヨウ化物、酢酸塩、プロピオン酸塩、デカン酸塩、カプリル酸塩、アクリル酸塩、ギ酸塩、イソ酪酸塩、カプロン酸塩、ヘプタン酸塩、プロピオル酸塩、シュウ酸塩、マロン酸塩、コハク酸塩、スベリン酸塩、セバシン酸塩、フマル酸塩、マレイン酸塩、ブチン−１，４−ジオエート、ヘキシン−１，６−ジオエート、安息香酸塩、クロロ安息香酸塩、メチル安息香酸塩、ジニトロ安息香酸塩、ヒドロキシ安息香酸塩、メトキシ安息香酸塩、フタル酸塩、キシレンスルホン酸塩、フェニル酢酸塩、フェニルプロピオン酸塩、フェニル酪酸塩、クエン酸塩、乳酸塩、γ−ヒドロキシ酪酸塩、グリコール酸塩、酒石酸塩、メタンスルホン酸塩、エタンスルホン酸塩、プロパンスルホン酸塩、トルエンスルホン酸塩、ナフタレン−１−スルホン酸塩、ナフタレン−２−スルホン酸塩、およびマンデル酸塩を含むが、これらに限定されない。
【０２５４】
本発明の化合物が塩基である場合、望ましい塩は、無機酸、例えば、限定されないが、塩酸、臭化水素酸、ヨウ化水素酸、炭酸、硫酸、硝酸、リン酸などでの遊離塩基の処理、または、限定されないが、ギ酸、酢酸、プロピオン酸、マレイン酸、コハク酸、マンデル酸、フマル酸、マロン酸、ピルビン酸、シュウ酸、ステアリン酸、アスコルビン酸、グリコール酸、サリチル酸、グルクロン酸もしくはガラクツロン酸などのピラノシジル酸、クエン酸または酒石酸などのα−ヒドロキシ酸、アスパラギン酸もしくはグルタミン酸などのアミノ酸、安息香酸または桂皮酸などの芳香族酸、ｐ−トルエンスルホン酸、メタンスルホン酸、エタンスルホン酸、２−ヒドロキシエタンスルホン酸、ベンゼンスルホン酸、シクロヘキシルアミノスルホン酸などのスルホン酸を含む有機酸での処理を含む、当業者に公知の任意の適した方法によって調製することができる。
【０２５５】
本発明の化合物が酸である場合、望ましい塩は、例えば、アミン（第一級、第二級、または第三級）；アルカリ金属水酸化物またはアルカリ土類金属水酸化物などの無機または有機塩基での遊離酸の処理を含む、当業界で公知の任意の適した方法によって調製することができる。適切な塩の説明となる例としては、グリシン、リシンおよびアルギニンなどのアミノ酸由来の有機塩；アンモニア；エチレンジアミン、Ｎ，Ｎ’−ジベンジルエチレンジアミン、ジエタノールアミン、コリン、およびプロカインなどの第一級、第二級、または第三級アミン、ならびにピペリジン、モルホリン、およびピペラジンなどの環状アミン；加えて、ナトリウム、カルシウム、カリウム、マグネシウム、マンガン、鉄、銅、亜鉛、アルミニウム、およびリチウム由来の無機塩が挙げられる。
【０２５６】
このような医薬組成物に用いられる担体および添加剤は、予測される投与様式に応じて様々な形態をとり得る。したがって経口投与用の組成物は、例えば、デンプン、糖、結合剤、希釈液、造粒剤、滑沢剤、崩壊剤などである、適切な担体および添加剤を含む、固体調合剤、例えば錠剤、糖衣錠、硬カプセル剤、軟カプセル剤、顆粒剤、粉剤などであってよい。錠剤およびカプセル剤は、それらの使いやすさと患者の服薬率の高さのため、多くの病状に最も有利な経口投薬形態を代表する。
【０２５７】
同様に、液体調合剤のための組成物としては、水、アルコール、オイル、グリコール、防腐剤、香味剤、着色剤、沈殿防止剤などである、適切な担体および添加剤を含む、溶液、エマルジョン、分散液、懸濁液、シロップ剤、エリキシル剤などが挙げられる。一般的な非経口投与用の調合剤は、活性成分を、滅菌水またはポリエチレングリコール、ポリビニルピロリドン、レシチン、落花生油またはゴマ油を含む、非経口的に許容されるオイルなどの担体とともに含み、溶解度または保存を助けるための他の添加剤も含めてもよい。溶液の場合、それを凍結乾燥して粉末とした後、使用直前に再構成することができる。分散液および懸濁液には、適切な担体および添加剤としては、水性ゴム、セルロース、ケイ酸塩またはオイルが挙げられる。
【０２５８】
本発明の実施形態による医薬組成物としては、経口、直腸、局所、吸入（例えば、エアゾールにより）、口内（例えば、舌下）、膣、局所（すなわち、気道表面を含む、皮膚および粘膜表面の両方）、経皮投与、および非経口（例えば、皮下、筋肉内、皮内、関節内の、胸膜内、腹腔内、くも膜下腔内、大脳内、頭蓋内、動脈内、または静脈内）投与に適したものが挙げられるが、いずれの所与の場合にも最も適した経路は治療される症状の性質および重篤度、および用いられる特定の活性剤の性質に依存する。
【０２５９】
注射用組成物には、活性成分が、プロピレングリコール−アルコール−水、等張水、注射用滅菌水（ＵＳＰ）、ｅｍｕｌＰｈｏｒ（商標）−アルコール−水、ｃｒｅｍｏｐｈｏｒ−ＥＬ（商標）または当業者に公知の他の適した担体を含む適した担体とともに含まれる。これらの担体は単独で用いても、または、他の従来型の可溶化剤、例えばエタノール、プロピレングリコール、もしくは当業者に公知の他の薬剤などと組み合わせてもよい。
【０２６０】
本発明の大環状化合物が溶液または注射の形態で適用される場合、化合物は、任意の従来型の希釈液に溶解または懸濁することによって用いることができる。希釈液としては、例えば、生理食塩水、リンゲル液、グルコース水溶液、デキストロース水溶液、アルコール、脂肪酸エステル、グリセリン、グリコール、植物または動物起源に由来する油、パラフィンなどが挙げられる。これらの調合剤は、当業者に公知の任意の従来法に従って調製してよい。
【０２６１】
鼻腔投与用の組成物は、エアゾール、液滴、粉末およびゲルとして製剤化することができる。エアゾール調合物は、一般に、活性成分の生理的に許容される水性もしくは非水性溶媒中の溶液または微細な懸濁液を含む。このような調合物は、一般に密封容器中の滅菌形態の単回または複数回用量で提示される。この密封容器は噴霧装置と使用するためのカートリッジまたは詰め替えであってよい。代替として、この密封容器は、単一回使用の鼻腔吸入器、ポンプ噴霧器または中身を完全に使ってしまうと廃棄するように意図される、治療上有効量を送達するよう設定された絞り弁のついたエアゾールディスペンサーなどの単位分注器であってよい。投薬形態剤形にエアゾールディスペンサーが含まれる場合、それには例として圧縮ガス、空気などの噴射剤、またはフルオロクロロ炭化水素またはフルオロ炭化水素を含む有機噴射剤が含まれる。
【０２６２】
口内または舌下投与に適した組成物としては、活性成分が、糖およびアラビアガム、トラガカントガムまたはゼラチンおよびグリセリンなどの担体と製剤化される、錠剤、ロゼンジおよびパステル剤が挙げられる。
【０２６３】
直腸投与用の組成物としては、カカオバターなどの従来の坐剤基剤を含有する坐剤が挙げられる。
【０２６４】
経皮投与に適した組成物としては、軟膏、ゲルおよびパッチが挙げられる。
【０２６５】
硬膏剤などの、当業者に公知の他の組成物も経皮投与または皮下に適用することができる。
【０２６６】
さらに、組成物の処方に必要な成分と混合した活性成分を含む医薬組成物の調製には、その他の従来の薬理学的に許容される添加剤、例えば、賦形剤、安定剤、防腐剤、湿潤剤、乳化剤、滑沢剤、甘味剤、着色剤、香味剤、等張剤、緩衝剤、酸化防止剤などを組み込んでもよい。添加剤として、例えば、デンプン、スクロース、フルクトース、ラクトース、ブドウ糖、デキストロース、マンニトール、ソルビトール、沈降炭酸カルシウム、結晶性セルロース、カルボキシメチルセルロース、デキストリン、ゼラチン、アラビアガム、ＥＤＴＡ、ステアリン酸マグネシウム、タルク、ヒドロキシプロピルメチルセルロース、メタ重亜硫酸ナトリウムなどが言及され得る。
【０２６７】
いくつかの実施形態において、組成物は、錠剤またはカプセル剤などの単位剤形で提供される。
【０２６８】
さらなる実施形態において、本発明は、１種または複数の本発明の化合物の有効量を含む医薬品用量単位を含む１つまたは複数の容器を含むキットを提供する。
【０２６９】
本発明は、本明細書に記載される化合物を含むプロドラッグをさらに提供する。「プロドラッグ」という用語とは、生理的条件下で、または可溶媒分解により、または代謝して、薬学的に活性のある特定の化合物へと変換される化合物を意味することを意図する。「プロドラッグ」は、（ｉ）親薬物化合物の生物活性の一部、全部を保持するかまたは全く保持しない、かつ（ｉｉ）対象内で代謝されて親薬物化合物を生じるように化学的に誘導体化された、本発明の化合物であってよい。また、本発明のプロドラッグは、（ｉ）親薬物化合物の生物活性の一部、全部を保持するかまたは全く保持しない、かつ（ｉｉ）対象内で代謝されて化合物の生物活性誘導体を生じるように化合物が化学的に誘導体化されているという点で「部分的プロドラッグ」であってもよい。化合物を誘導体化してプロドラッグをもたらすための公知の技法を用いてよい。そのような方法を化合物との加水分解可能なカップリングの形成に利用してもよい。
【０２７０】
本発明がさらに提供するのは、代謝障害および／または内分泌障害、肥満症および肥満症関連障害、食欲障害または摂食障害、中毒性障害、心血管障害、胃腸障害、遺伝性障害、過度増殖性障害および炎症性障害を予防および／または治療するために用いられる治療薬と組み合わせて、本発明の化合物を投与し得ることである。薬剤の例としては、オピオイド鎮痛薬を含む鎮痛薬、麻酔薬、抗真菌薬、抗生物質、非ステロイド性抗炎症薬を含む抗炎症薬、駆虫薬、制吐薬、抗ヒスタミン薬、抗高血圧薬、抗精神病薬、抗関節炎薬、鎮咳薬、抗ウイルス薬、心臓作用薬、下剤、ＤＮＡ相互作用物質などの化学療法剤、代謝拮抗薬、チューブリン相互作用剤、ホルモン剤、およびアスパラギナーゼまたはヒドロキシ尿素などの薬剤、コルチコイド（ステロイド）、抗鬱薬、抑制薬、利尿薬、催眠薬、ミネラル、栄養補給剤、副交感神経興奮薬、コルチコトロピン放出ホルモン、アドレノコルチコトロピン、成長ホルモン放出ホルモン、成長ホルモン、甲状腺刺激放出ホルモンおよび甲状腺刺激ホルモンなどのホルモン、鎮静薬、スルホンアミド、興奮剤、交感神経興奮薬、トランキライザー、血管収縮薬、血管拡張薬、ビタミンおよびキサンチン誘導体が挙げられる。
【０２７１】
本発明の化合物と組み合わせて使用することができる他の治療剤は、ＧＬＰ−１アゴニスト、ＤＰＰ−ＩＶ阻害薬、アミリンアゴニスト、ＰＰＡＲ−αアゴニスト、ＰＰＡＲ−γアゴニスト、ＰＰＡＲ−α／γデュアルアゴニスト、ＧＤＩＲまたはＧＰＲ１１９アゴニスト、ＰＴＰ−１Ｂ阻害薬、ペプチドＹＹアゴニスト、１１β−ヒドロキシステロイドデヒドロゲナーゼ（１１β−ＨＳＤ）−１阻害薬、腎ナトリウムグルコース共輸送体２型（ＳＧＬＴ−２）阻害薬、グルカゴンアンタゴニスト、グルコキナーゼ活性剤、α−グルコシダーゼ阻害薬、グルココルチコイドアンタゴニスト、グリコーゲン合成酵素キナーゼ３β（ＧＳＫ−３β）阻害薬、グリコーゲンホスホリラーゼ阻害薬、ＡＭＰ活性化プロテインキナーゼ（ＡＭＰＫ）活性剤、フルクトース−１，６−ビスホスファターゼ阻害薬ｆｒｕｃｔｏｓｅ−１，６−ｂｉｐｈｏｓｐｈａｔａｓｅ、スルホニル尿素受容体アンタゴニスト、網膜様Ｘ受容体活性剤、５ＨＴ１ａアゴニスト、５ＨＴ２ｃアゴニスト、５ＨＴ６アンタゴニスト、カンナビノイドｃａｎｎａｂｉｏｉｄアンタゴニストまたはインバースアゴニスト、メラニン凝集ホルモン（ＭＣＨ−１）アンタゴニスト、メラノコルチン−４（ＭＣ４）アゴニスト、レプチンアゴニスト、レチノイン酸受容体アゴニスト、ステアロイルＣｏＡデサチュラーゼ−１（ＳＣＤ−１）阻害薬、ニューロペプチドＹＹ２受容体アゴニスト、ニューロペプチドＹＹ４受容体アゴニスト、ニューロペプチドＹＹ５受容体アンタゴニスト、神経細胞ニコチン受容体α４β２アゴニスト、ジアシルグリセロールアシル基転移酵素１（ＤＧＡＴ−１）阻害薬、甲状腺受容体アゴニスト、リパーゼ阻害薬、脂肪酸合成酵素阻害薬、グリセリン−３−ホスフェートアシル基転移酵素阻害薬、ＣＰＴ−１刺激薬、α１Ａ−アドレナリン受容体アゴニスト、α２Ａ−アドレナリン受容体アゴニスト、β３−アドレナリン受容体アゴニスト、ヒスタミンＨ３受容体アンタゴニスト、コレシストキニンＡ受容体アゴニストおよびＧＡＢＡ−Ａアゴニストを含む。
【０２７２】
本発明による治療に適した対象としては、鳥類および哺乳類対象を含むが、これらに限定されず、好ましくは、哺乳類である。本発明の哺乳類としては、イヌ、ネコ、ウシ、ヤギ、ウマ、ヒツジ、ブタ、げっ歯類（例えばラットおよびマウス）、ウサギ目、霊長類、ヒトなど、ならびに子宮内の哺乳類を含むが、これらに限定されない。本発明に従って治療される必要のある哺乳類の対象はいずれも適している。ヒト対象が好ましい。男女および任意の成長段階（すなわち新生児、乳児、少年期、青年期、成人）のヒト対象が、本発明に従って治療することができる。
【０２７３】
本発明による例示の鳥は、ニワトリ、アヒル、シチメンチョウ、ガチョウ、ウズラ、キジ、走鳥類（例えば、ダチョウ）および飼育されている鳥類（例えば、オウムおよびカナリア）、ならびに卵内の鳥が挙げられる。
【０２７４】
本発明は、主にヒト対象の治療に関するが、本発明はまた、獣医学目的および薬物スクリーニングおよび薬物開発目的のために、動物対象、特に哺乳類対象、例えばマウス、ラット、イヌ、ネコ、家畜およびウマで実施することもできる。
【０２７５】
グレリン受容体のアンタゴニストまたはインバースアゴニストが効果的である、哺乳類（すなわちヒトまたは動物）における症状の治療のための治療のための使用において、本発明の化合物またはその適切な医薬組成物を有効量投与することができる。化合物の活性度および治療効果の程度が異なるため、実際に投与される用量は、対象の年齢、症状、送達の経路および対象の体重などの一般に認識されている因子に基づいて決定される。用量は、約０．１〜約１００ｍｇ／ｋｇであり、１日に１〜４回経口投与される。さらに、化合物は、１日に１〜４回の投与で１用量あたり約０．０１〜２０ｍｇ／ｋｇで注射によって投与してよい。治療は数週、または数ヶ月以上継続し得る。特定の状況に最適な投与量の決定は、当業者の能力の範囲内である。
【０２７６】
６．  使用の方法
本発明の化合物は、限定されるものではないが、代謝障害および／または内分泌障害、肥満症および肥満症関連障害、食欲障害または摂食障害、中毒性障害、心血管障害、胃腸障害、遺伝性障害、過度増殖性障害、中枢神経系障害および炎症性障害、ならびに、その障害が、根底にある複数の疾病の結果である、それらの組合せを含む、一連の病状の予防および治療に用いることができる。
【０２７７】
代謝障害および／または内分泌障害としては、肥満症、糖尿病、特に、ＩＩ型糖尿病、メタボリック症候群、非アルコール性脂肪肝疾患（ＮＡＦＬＤ）、非アルコール性脂肪性肝炎（ＮＡＳＨ）および脂肪症を含むが、これらに限定されない。肥満症および肥満症関連障害しては、代謝障害および／または内分泌障害として特徴づけられる肥満症に加えて、網膜症、過食症および食物摂取の調節および食欲制御に関与する障害を含むが、これらに限定されない。食欲障害または摂食障害は、プラーダー−ウィリー症候群および過食症を含むが、これらに限定されない。中毒性障害は、アルコール依存症または乱用、違法薬依存症または乱用、処方薬依存症または乱用、および化学物質依存症または乱用（非限定的な例は、アルコール中毒、麻薬中毒、興奮剤中毒、うつ薬依存およびニコチン中毒を含む）を含むが、これらに限定されない。心血管障害は、高血圧症および異脂肪血症を含むが、これらに限定されない。胃腸障害は、過敏性腸症候群、消化不良、オピオイドに誘発された腸管機能不全および胃不全麻痺を含むが、これらに限定されない。過剰増殖性障害としては、限定されるものではないが、腫瘍、癌、および新生物組織が挙げられ、それにはさらに、乳癌、骨肉腫、血管肉腫、線維肉腫およびその他の肉腫などの疾患、白血病、リンパ腫、洞の（ｓｉｎｕｓ）腫瘍、卵巣癌、尿管癌、膀胱癌、前立腺癌および他の尿生殖器癌、結腸癌、食道癌および胃癌ならびに他の胃腸癌、肺癌、骨髄腫、膵癌、肝癌、腎癌、内分泌癌、皮膚癌、ならびに神経膠腫および神経芽腫を含む、悪性または良性の、脳または中枢および末梢神経（ＣＮＳ）系腫瘍が含まれる。中枢神経系障害は、発作、発作障害、癲癇、癲癇重積症、片頭痛、皮質拡延性抑制、頭痛、頭蓋内圧亢進、中枢神経系浮腫、神経精神障害、神経毒性、頭部外傷、卒中、虚血、低酸素、不安、鬱病、アルツハイマー病、肥満症、パーキンソン病、禁煙、アルコール中毒などの中毒性障害、麻薬依存症（例えば、コカイン中毒、ヘロイン中毒、麻薬中毒など）、不安、および神経保護（例えば、卒中に引き続いて起こる損傷の低減）、アルツハイマー病のような神経変性疾患による損傷の低減、エタノールからの毒性損傷に対する防御）を含むが、これらに限定されない。炎症性疾患としては、一般的な炎症、関節炎、例えば、慢性関節リウマチおよび骨関節炎、ならびに炎症性腸疾患を含むが、これらに限定されない。本発明の化合物は、さらに肝硬変および慢性肝疾患の予防および／または治療に用いることができる。本明細書において使用される場合、「治療」とは、治療に関連する障害または症候の治癒または完全な消滅という意味を必ずしも含むものではない。
【０２７８】
本発明の化合物は、代謝障害および／もしくは内分泌障害、肥満症および肥満症関連障害、食欲または摂食障害、心血管障害、胃腸障害、遺伝性障害、過度増殖性障害、および炎症性障害を含むが、これらに限定されない、一連の病状の治療のための医薬品の調製に、さらに利用することができる。
【０２７９】
本発明のさらなる実施形態を、これから以下の実施例を参照して説明する。これらの実施例は、本発明の実施形態を説明する目的のためであって、本発明の範囲を限定するものではないことが認識されるべきである。
【０２８０】
実施例１
アミノ酸構成要素
実施例ＡＡ１
Ｈ−（３Ｍｅ）Ｃｐｇ−ＯＨの合成の標準手順
【化１６】
2013509434.tif 000128
【０２８１】
ステップＡＡ１−１：シクロプロパン化
アルゴン雰囲気下で−２０℃のＤＣＭ（３５０ｍＬ）中の３−メチル−３−ブテン−１−オール（ＡＡ１−Ａ，３．５２ｍＬ，３４．８ｍｍｏｌ，１．０当量）の溶液に、無希釈ジエチル亜鉛（１７．９ｍＬ，１７４ｍｍｏｌ，５．０当量）およびジヨードメタン（２８．１ｍＬ、３４８ｍｍｏｌ、１０．０当量）を注意深く添加し、温度を０℃に迅速に上げた。（注意：温度制御は非常に重要である。ジヨードメタン（融点：５−８℃）およびジエチル亜鉛（融点：−２８℃）は、凍結し揺動を突然停止させ、融解時に爆発の危険があり得る。）この反応物を室温にゆっくり暖め終夜撹拌した。混合物に飽和ＮＨ４Ｃｌ水溶液を添加し、水相をＥｔ２Ｏ（３ｘ）で抽出した。合わせた有機相を、ＮａＨＣＯ３飽和水溶液（２ｘ）、ブライン（１ｘ）で洗浄し、ＭｇＳＯ４で乾燥し、濾過して、次いで、生成物が低沸点であるので低温および圧力下で回転蒸発装置によって濾液を濃縮し、２−（１−メチルシクロプロピル）エタノール（ＡＡ１−Ｂ，１２．４ｇ，＞１００％，オレンジ色の液体）を得た。これはさらに精製をしないで次のステップに使用した。
【０２８２】
ステップＡＡ１−２  酸化
アセトン（３５０ｍＬ）中のＡＡ１−Ｂ（３４．８ｍｍｏｌ、１．０当量）の溶液を０℃で冷却した。ジョーンズ試薬を溶液の色がオレンジ色で残るまで添加し、０℃でさらに１０分間撹拌した。水を添加し、結果として得られた水相をＥｔ２Ｏ（３ｘ）で抽出した。次いで、合わせた有機相を１Ｍ炭酸ナトリウム（３ｘ）で抽出した。合わせた水相をＥｔ２Ｏ（３ｘ）で洗浄し、次いで、０℃で６ＮのＨＣｌでｐＨ＝２に酸性化し、Ｅｔ２Ｏ（３ｘ）で抽出した。合わせた有機相を、水（１ｘ）、ブライン（１ｘ）で洗浄し、ＭｇＳＯ４で乾燥し、濾過し、次いで、濾液を真空内で濃縮して、不快な臭気を有する無色の液体として、２−（１−メチルシクロプロピル）酢酸（ＡＡ１−Ｃ、２．０３ｇ、２ステップで５１％）を得た。
【０２８３】
ステップＡＡ１−３  キラル助剤取付け
−７８℃のＴＨＦ（２００ｍＬ）中のＡＡ１−Ｃ（２．０３ｇ，１７．８ｍｍｏｌ，１．０当量）に、Ｅｔ３Ｎ（２．９８ｍＬ，２１．４ｍｍｏｌ，１．２当量）およびＰｉｖＣｌ（２．４１ｍＬ，１９．６ｍｍｏｌ，１．１当量）を添加し、混合無水物を形成した。この混合物を−７８℃で１５分および０℃で４５分撹拌し、次いで、−７８℃に冷却した。別に、−７８℃のＴＨＦ（８０ｍＬ）中のキラル助剤（ＡＡ１−Ｄ，２．６１ｇ，１６．０ｍｍｏｌ，０．９当量）に、ヘキサン中の１．６Ｍｎ−ＢｕＬｉ（１０ｍＬ，１６．０ｍｍｏｌ，０．９当量）を添加し、この混合物を−７８℃で２０分撹拌した。次いで無水物溶液をカニューレ経由で、−７８℃のキラル助剤を含有する混合物に添加し、室温で２時間反応物を撹拌し、次いで、ＮＨ４Ｃｌ飽和水溶液を添加した。水相をＥｔＯＡｃ（３ｘ）で抽出した。合わせた有機相をブライン（１ｘ）で洗浄し、ＭｇＳＯ４で乾燥し、濾過し、次いで濾液を真空内で濃縮した。残渣を、フラッシュカラムクロマトグラフィー（傾斜、１：４：から２：３、Ｅｔ２Ｏ：ヘキサン）によって精製し、ＡＡ１−Ｅ（３．１５ｇ、６８％、白色固形物）を得た。
【０２８４】
ステップＡＡ１−４  ハロゲン化
−７８℃のＤＣＭ（９４ｍＬ）中のＡＡ１−Ｅ（３．１５ｇ，１２．２ｍｍｏｌ，１．０当量）に、ＤＩＰＥＡ（２．５５ｍＬ，１９．６ｍｍｏｌ，１．２当量）およびＢｕ２ＢＯＴｆ（３．４４ｍＬ，１２．８ｍｍｏｌ，１．０５当量）を添加した。反応物を−７８℃で１０分撹拌し、次いで、−７８℃のＤＣＭ（４２ｍＬ）中のＮＢＳ（２．３９ｇ，１３．４ｍｍｏｌ，１．１当量）の懸濁液に挿入した。結果として得られた混合物を、−７８℃で２時間および０℃で２時間撹拌した。これに１Ｍチオ硫酸ナトリウムを添加し、１０分間撹拌した。水相をＤＣＭ（３ｘ）で抽出した。合わせた有機相をブライン（ｘ１）で洗浄し、ＭｇＳＯ４で乾燥し、次いで濾過し、濾液を真空内で濃縮した。残渣を、直ちに（粗の状態での潜在的な分解を抑えるために）フラッシュカラムクロマトグラフィー（１００％のＤＣＭ）によって精製し、ＡＡ１−Ｆ（６６７ｍｇ，１７％、白色固形物）を得た。
【０２８５】
ステップＡＡ１−５  アジド形成
室温のＤＭＳＯ（２０ｍＬ）中のＡＡ１−Ｆ（６６７ｍｇ，１．９７ｍｍｏｌ，１．０当量）に、ＮａＮ３（６４２ｍｇ，９．８７ｍｍｏｌ，５．０当量）を添加した。反応物を室温で１時間撹拌し、次いで、水を添加した。水相をＥｔ２Ｏ（３ｘ）で抽出した。合わせた有機相をブライン（１ｘ）で抽出し、ＭｇＳＯ４で乾燥し、次いで、濾過し、真空内で濾液を濃縮し、ＡＡ１Ｇ（５５２ｍｇ、９３％）を白色固形物として得た。
【０２８６】
ステップＡＡ１−６  助剤の切断
室温のＴＨＦ／Ｈ２Ｏ（３：１，１００ｍＬ）中のＡＡ１−Ｇ（１．４５ｇ，４．８３ｍｍｏｌ，１．０当量）に、ＬｉＯＨ（６０８ｍｇ，１４．５ｍｍｏｌ，３．０当量）およびＨ２Ｏ２（３０％，１．３８ｍＬ，２４．２ｍｍｏｌ，５．０当量）を添加した。反応物を室温で２時間撹拌し、次いでＴＨＦを蒸発させ、Ｈ２Ｏを添加した。水溶液をＤＣＭ（３ｘ）で洗浄し、次いで、３ＮのＨＣｌでｐＨ＝２に酸性化した。酸性の水相をＥｔ２Ｏ（３ｘ）で抽出した。合わせた有機相を１ＭのＮａ２Ｓ２Ｏ３（３ｘ）で洗浄し、ＭｇＳＯ４で乾燥し、濾過し、次いで、真空内で濃縮して、無色の油としてＡＡ１−Ｈ（８３０ｍｇ，１００％）を得た。
【０２８７】
ステップＡＡ１−７  アジド還元
室温のＴＨＦ／Ｈ２Ｏ（２：１，１０５ｍＬ）中のＡＡ１−Ｈ（８３０ｍｇ，５．３５ｍｍｏｌ，１．０当量）に、５０％含湿１０％Ｐｄ／Ｃ（２５０ｍｇ，２０％ｗ／ｗ）を添加した。水素ガスを３０分間この溶液へ直接泡立たせ、次いで、水素雰囲気下で終夜撹拌した。反応がＴＬＣによって未完結と示された場合、触媒は濾過によって取り除き、新鮮な量の触媒を添加し、水素ガス２０ｐｓｉで１時間Ｐａｒｒ装置中で処理した。反応が完了したら、セライト（登録商標）パッドに通して濾過し、注意深くＴＨＦ／Ｈ２Ｏですすぎ、次いで真空内で濾液を蒸発させ、ＴＨＦを除去した。（生成物が水素化中に時には沈殿することに注意すること。）結果として得られた水相をＤＣＭ（３ｘ）で洗浄し、次いで真空内で濃縮し（または代替として凍結乾燥し）、灰色がかった固体としてＨ−（３Ｍｅ）Ｃｐｇ−ＯＨ（３５５ｍｇ，５１％）を得た。
【０２８８】
実施例ＡＡ２  Ｈ−ａｎｔｉ−（３Ｈ，４Ｍｅ）Ｃｐｇ−ＯＨの合成の標準手順
【化１７】
2013509434.tif 000129
【０２８９】
ステップＡＡ２−１：シクロプロパン化
−２０℃のＤＣＭ（３９０ｍＬ）中の（Ｚ）−ペンタ−３−エン−１−オール（ＡＡ２−Ａ，３．３４ｇ，３８．９ｍｍｏｌ，１．０当量）の溶液に、無希釈ジエチル亜鉛（２０．０ｍＬ，１９４ｍｍｏｌ，５．０当量）、およびジヨードメタン（３１．４ｍＬ，３９８ｍｍｏｌ，１０．０当量）を注意深く添加し、温度を０℃に迅速に上げた。（注意：温度制御は非常に重要である。ジヨードメタン（融点：５−８℃）およびジエチル亜鉛（融点：−２８℃）は、凍結し揺動を突然停止させ、融解時に爆発の危険があり得る。）。この反応物を室温にゆっくり暖め、終夜撹拌した。ＮＨ４Ｃｌ飽和水溶液を添加し、水相をＥｔ２Ｏ（３ｘ）で抽出した。合わせた有機相を、ＮａＨＣＯ３（２ｘ）飽和水溶液、ブライン（１ｘ）で洗浄し、ＭｇＳＯ４で乾燥し、濾過し、次いで生成物が低沸点であるので低温および圧力下で回転蒸発装置によって濾液を濃縮し、２−（２−メチルシクロプロピル）エタノール（ＡＡ２−Ｂ、２９．５ｇ、＞１００％、暗色液体）を得た。これは、得られたままで次のステップに使用した。
【０２９０】
ステップＡＡ２−２  酸化
アセトン（３９０ｍＬ）中のＡＡ２−Ｂ（３８．９ｍｍｏｌ，１．０当量）の溶液を０℃に冷却した。ジョーンズ試薬を溶液の色がオレンジ色で残るまで添加し、次いで、０℃でさらに１０分間撹拌した。水を添加し、水相をＥｔ２Ｏ（３ｘ）で抽出した。合わせた有機相を１Ｍ炭酸ナトリウム（３ｘ）で抽出した。次いで結果として得られた合わせた水相をＥｔ２Ｏ（３ｘ）で洗浄し、０℃で６ＮのＨＣｌでｐＨ＝２に酸性化し、Ｅｔ２Ｏ（３ｘ）で抽出した。合わせた有機相を水（１ｘ）、ブライン（１ｘ）で洗浄し、ＭｇＳＯ４で乾燥し、濾過し、次いで真空内で濾液を濃縮して、不快臭を有する無色の液体として２−（１−メチルシクロプロピル）酢酸（ＡＡ２−Ｃ、１．７ｇ、２ステップで３８％）を得た。
【０２９１】
ステップＡＡ２−３  キラル助剤取付け
−７８℃のＴＨＦ（７５ｍＬ）中のキラル助剤（ＡＡ２−Ｄ，２．１９ｇ，１３．４ｍｍｏｌ，０．９当量）に、ヘキサン（８．４ｍＬ，１３．４ｍｍｏｌ，０．９当量）中の１．６Ｍｎ−ＢｕＬｉを添加し、−７８℃で２０分溶液を撹拌した。混合無水物を形成するために−７８℃のＴＨＦ（１６６ｍＬ）中のＡＡ２−Ｃ（１．７ｇ，１４．９ｍｍｏｌ，１．０当量）に、Ｅｔ３Ｎ（２．５ｍＬ，１７．９ｍｍｏｌ，１．２当量）およびＰｉｖＣｌ（２．０２ｍＬ，１６．４ｍｍｏｌ，１．１当量）を添加し、反応物を−７８℃で１５分および０℃で４５分撹拌し、次いで、−７８℃に冷却した。無水物溶液を−７８℃で助剤混合物にカニューレ経由で添加し、次いで、室温で２時間撹拌した。ＮＨ４Ｃｌ飽和水溶液を添加し、水相をＥｔＯＡｃ（３ｘ）で抽出した。合わせた有機相をブライン（１ｘ）で洗浄し、ＭｇＳＯ４で乾燥し、濾過し、次いで、濾液は真空内で濃縮した。残渣をフラッシュカラムクロマトグラフィー（傾斜、１：４から２：３、Ｅｔ２Ｏ／ヘキサン）によって精製し、無色の油としてＡＡ２−Ｅ（２．８ｇ、７３％）を得た。
【０２９２】
ステップＡＡ２−４  ハロゲン化
−７８℃のＤＣＭ（８３ｍＬ）中のＡＡ２−Ｅ（２．８ｇ，１０．８ｍｍｏｌ，１．０当量）に、ＤＩＰＥＡ（２．２５ｍＬ，１３．０ｍｍｏｌ，１．２当量）およびＢｕ２ＢＯＴｆ（３．０５ｍＬ，１１．４ｍｍｏｌ，１．０５当量）を添加し、次いで混合物を−７８℃で１０分撹拌した。この溶液を、−７８℃でＤＣＭ（３７ｍＬ）中のカニューレ経由でＮＢＳ（２．１１ｇ，１１．９ｍｍｏｌ，１．１当量）の懸濁液に移動させ、次いで、−７８℃で２時間および０℃で２時間撹拌した。１Ｍチオ硫酸ナトリウムを添加し、混合物を１０分間撹拌した。結果として得られた水相をＤＣＭ（３ｘ）で洗浄した。合わせた有機相をブライン（１ｘ）で洗浄し、ＭｇＳＯ４で乾燥し、濾過し、次いで、濾液を真空内で濃縮した。残渣を、粗の状態での組成を避けるために直ちにフラッシュカラムクロマトグラフィー（１００％のＤＣＭ）によって精製し、ＡＡ２−Ｆ（２．９８ｇ、８２％）をオレンジ色の油として得た。
【０２９３】
ステップＡＡ２−５  アジド形成
室温のＤＭＳＯ（８８ｍＬ）中のＡＡ２−Ｆ（２．９８ｇ，８．８２ｍｍｏｌ，１．０当量）に、ＮａＮ３（２．８７ｇ，４４．１ｍｍｏｌ，５．０当量）を添加した。混合物を室温で１時間撹拌し、次いで、水を添加した。水相をＥｔ２Ｏ（３ｘ）で洗浄した。合わせた有機相をブライン（１ｘ）で洗浄し、ＭｇＳＯ４で乾燥し、濾過し、次いで、濾液を真空内で濃縮して、オレンジ色の油としてＡＡ２Ｇ（２．５４ｇ、９６％）を得た。
【０２９４】
ステップＡＡ２−６  キラル助剤切断
室温のＴＨＦ／Ｈ２Ｏ（３：１，１８０ｍＬ）中のＡＡ２−Ｇ（２．５４ｇ，８．４７ｍｍｏｌ，１．０当量）に、ＬｉＯＨ（１．０７ｇ，２５．４ｍｍｏｌ，３．０当量）および３０％Ｈ２Ｏ２（２．４２ｍＬ，４２．４ｍｍｏｌ，５．０当量）を添加し、次いで反応物を室温で２時間撹拌した。ＴＨＦは反応混合物から真空内で蒸発させ、次いでＨ２Ｏを添加した。水相をＤＣＭ（３ｘ）で洗浄し、３ＮのＨＣｌでｐＨ＝２に酸性化した。酸性水相をＥｔ２Ｏ（３ｘ）で洗浄した。合わせた有機相を１ＭのＮａ２Ｓ２Ｏ３（３ｘ）で洗浄し、ＭｇＳＯ４で乾燥し、濾過し、次いで濾液を真空内で濃縮して、無色の油としてＡＡ２−Ｈ（１．０５ｇ，８０％）を得た。
【０２９５】
ステップＡＡ２−７  アジド還元
室温のＴＨＦ／Ｈ２Ｏ（２：１，１３５ｍＬ）中のＡＡ２−Ｈ（１．０５ｇ，６．７７ｍｍｏｌ，１．０当量）に、５０％含湿１０％Ｐｄ／Ｃ１（３００ｍｇ，２０％ｗ／ｗ）を添加した。水素ガスを３０分間この溶液へ直接泡立たせ、水素雰囲気下で終夜撹拌した。反応がＴＬＣによって未完結と示された場合、触媒を濾過によって取り除き、新鮮な量の触媒を添加し、水素ガス２０ｐｓｉで１時間Ｐａｒｒ装置中で反応物を処理した。反応が完了したら、セライト（登録商標）パッドに通して濾過し、注意深くＴＨＦ／Ｈ２Ｏですすぎ、次いで真空内で濃縮し、ＴＨＦを除去した。（生成物が水素化中に時には沈殿することに注意すること。）結果として得られた水相をＤＣＭ（３ｘ）で洗浄し、次いで真空内で濃縮し（または代替として凍結乾燥し）、ベージュ色の固体としてＨ−ａｎｔｉ−（３Ｈ，４Ｍｅ）Ｃｐｇ−ＯＨ（７９４ｍｇ，９１％）を得た。
【０２９６】
実施例ＡＡ３  Ｈ−ｓｙｎ−（３Ｈ，４Ｍｅ）Ｃｐｇ−ＯＨの合成の標準手順
【化１８】
2013509434.tif 000130
【０２９７】
ステップＡＡ３−１：シクロプロパン化
−２０℃のＤＣＭ（３９０ｍＬ）中の（Ｅ）−ペンタ−３−エン−１−オール（ＡＡ３−Ａ，４．７７ｍＬ，３８．９ｍｍｏｌ，１．０当量）の溶液に、無希釈ジエチル亜鉛（２０．０ｍＬ，１９４ｍｍｏｌ，５．０当量）、およびジヨードメタン（３１．４ｍＬ，３９８ｍｍｏｌ，１０．０当量）を注意深く添加し、温度を０℃に迅速に上げた（注意：温度制御は非常に重要である。ジヨードメタン（融点：５〜８℃）およびジエチル亜鉛（融点：−２８℃）は、凍結し揺動を突然停止させ、融解時に爆発の危険があり得る。）。反応物を室温にゆっくり暖め、終夜撹拌した。ＮＨ４Ｃｌ飽和水溶液を添加し、水相をＥｔ２Ｏ（３ｘ）で抽出した。合わせた有機相を、ＭｇＳＯ４飽和水溶液、ブライン（１ｘ）で洗浄し、ＭｇＳＯ４で乾燥し、濾過し、次いで、生成物が低沸点であるので低温（浴温度１５℃未満）および圧力下で回転蒸発装置によって濾液を濃縮し、２−（２−メチルシクロプロピル）酢酸メチル（ＡＡ３−Ｂ，１９ｇ，＞１００％，暗色液体）を得た。これは得られたまま次のステップに使用した。
【０２９８】
ステップＡＡ３−２  エステル加水分解
ＴＨＦ／Ｈ２Ｏ（１：１，２００ｍＬ）中のＡＡ３−Ｂ（３８．９ｍｍｏｌ，１．０当量）に、ＬｉＯＨ（８．１７ｇ，１９４．５ｍｍｏｌ，５．０当量）を添加し、反応物を終夜撹拌した。ＴＨＦを真空内で蒸発させ、残りの水相をＥｔ２Ｏ（３ｘ）で洗浄した。水相を３ＮのＨＣｌでｐＨ２に酸性化し、次いで、Ｅｔ２Ｏ（３ｘ）で抽出した。合わせた有機相をブライン（１ｘ）で洗浄し、ＭｇＳＯ４で乾燥し、濾過し、次いで、濾液を減圧下で濃縮して、不快臭を有するオレンジ色の液体として２−（２−メチルシクロプロピル）酢酸（ＡＡ３−Ｃ，３．９６ｇ，２ステップで８９％）を得た。
【０２９９】
ステップＡＡ３−３  キラル助剤取付け
−７８℃のＴＨＦ（１７３ｍＬ）中のキラル助剤（ＡＡ２−Ｄ，５．０９ｇ，３１．２ｍｍｏｌ，０．９当量）に、ヘキサン中の１．６Ｍｎ−ＢｕＬｉ（１９．５ｍＬ，３１．２ｍｍｏｌ，０．９当量）を添加し、−７８℃で２０分溶液を撹拌した。混合無水物を形成するために、−７８℃のＴＨＦ（３８６ｍＬ）中のＡＡ３−Ｃ（３．９６ｇ，３４．７ｍｍｏｌ，１．０当量）に、Ｅｔ３Ｎ（５．８ｍＬ，４１．６ｍｍｏｌ，１．２当量）およびＰｉｖＣｌ（４．７１ｍＬ，３８．２ｍｍｏｌ，１．１当量）を添加し、−７８℃で１５分および０℃で４５分反応物を撹拌し、次いで、冷却して−７８℃に戻した。無水物溶液を−７８℃で助剤混合物にカニューレ経由で添加し、次いで室温で２時間撹拌した。ＮＨ４Ｃｌ飽和水溶液を添加し、水相をＥｔＯＡｃ（３ｘ）で抽出した。合わせた有機相をブライン（１ｘ）で洗浄し、ＭｇＳＯ４で乾燥し、濾過し、次いで濾液を真空内で濃縮した。残渣をフラッシュカラムクロマトグラフィー（傾斜、１：４から２：３，Ｅｔ２Ｏ／ヘキサン）によって精製し、白色固形物としてＡＡ３−Ｄ（６．１８ｇ、６９％）を得た。
【０３００】
ステップＡＡ３−４  ハロゲン化
−７８℃のＤＣＭ（１８４ｍＬ）中のＡＡ３−Ｄ（６．１８ｇ，２３．９ｍｍｏｌ，１．０当量）に、ＤＩＰＥＡ（４．９９ｍＬ，２８．７ｍｍｏｌ，１．２当量）およびＢｕ２ＢＯＴｆ（６．７３ｍＬ，２５．１ｍｍｏｌ，１．０５当量）を添加し、次いで混合物を−７８℃で１０分撹拌した。この溶液を、−７８℃でカニューレ経由でＤＣＭ（８２ｍＬ）中のＮＢＳ（４．６８ｇ，２６．３ｍｍｏｌ，１．１当量）の懸濁液に移動させ、次いで、−７８℃で２時間、および０℃で２時間撹拌した。１Ｍのチオ硫酸ナトリウムを添加し、混合物を１０分間撹拌した。結果として得られた水相をＤＣＭ（３ｘ）で洗浄した。合わせた有機相をブライン（１ｘ）で洗浄し、ＭｇＳＯ４で乾燥し、濾過し、次いで、濾液を真空内で濃縮した。残渣を、粗の状態での組成を避けるために直ちにフラッシュカラムクロマトグラフィー（１００％のＤＣＭ）によって精製し、黄色の油としてＡＡ３−Ｅ（５．４１ｇ、６７％）を得た。
【０３０１】
ステップＡＡ３−５  アジド形成
室温のＤＭＳＯ（８０ｍＬ）中のＡＡ３−Ｅ（２．７０ｇ，７．９９ｍｍｏｌ，１．０当量）に、ＮａＮ３（２．６０ｇ，４０．０ｍｍｏｌ，５．０当量）を添加した。混合物を室温で１時間撹拌し、次いで、水を添加した。水相をＥｔ２Ｏ（３ｘ）で洗浄した。合わせた有機相をブライン（１ｘ）で洗浄し、ＭｇＳＯ４で乾燥し、濾過し、次いで濾液を真空内で濃縮して、白色固形物としてＡＡ３−Ｆ（２．５３ｇ，１００％）を得た。
【０３０２】
ステップＡＡ３−６  キラル助剤切断
室温のＴＨＦ／Ｈ２Ｏ（３：１，１６８ｍＬ）中のＡＡ３−Ｆ（２．５３ｇ，８．４３ｍｍｏｌ，１．０当量）に、ＬｉＯＨ（１．０６ｇ，２５．３ｍｍｏｌ，３．０当量）および３０％Ｈ２Ｏ２（２．６６ｍＬ，４２．１ｍｍｏｌ，５．０当量）を添加し、次いで反応物を室温で２時間撹拌した。ＴＨＦを反応混合物から真空内で蒸発させ、次いでＨ２Ｏを添加した。水相をＤＣＭ（３ｘ）で洗浄し、３ＮのＨＣｌでｐＨ＝２に酸性化した。酸性の水相をＥｔ２Ｏ（３ｘ）で洗浄した。合わせた有機相を１ＭのＮａ２Ｓ２Ｏ３（３ｘ）で洗浄し、ＭｇＳＯ４で乾燥し、濾過し、次いで濾液を真空内で濃縮して、オレンジ色の油としてＡＡ３−Ｇ（１．１５ｇ、８０％）を得た。
【０３０３】
ステップＡＡ３−７  アジド還元
室温のＴＨＦ／Ｈ２Ｏ（２：１，１８ｍＬ）中のＡＡ３−Ｇ（１．１５ｇ，７．４２ｍｍｏｌ，１．０当量）に、５０％含湿１０％Ｐｄ／Ｃ１（２３０ｍｇ，２０％ｗ／ｗ）を添加した。水素ガスを３０分間この溶液へ直接泡立たせ、次いで、水素雰囲気下で終夜撹拌した。反応がＴＬＣによって未完結と示された場合、触媒を濾過によって取り除き、新鮮な量の触媒を添加し、水素ガス２０ｐｓｉで１時間Ｐａｒｒ装置中で反応物を処理した。反応が完了したら、セライト（登録商標）パッドに通して濾過し、注意深くＴＨＦ／Ｈ２Ｏですすぎ、次いで真空内で濃縮し、ＴＨＦを除去した。（生成物が水素化中に時には沈殿することに注意すること。）結果として得られた水相をＤＣＭ（３ｘ）で洗浄し、次いで真空内で濃縮（または代替として凍結乾燥し）、褐色の固体としてＨ−ｓｙｎ−（３Ｈ，４Ｍｅ）Ｃｐｇ−ＯＨ（４７２ｍｇ，４９％）を得た。
【０３０４】
実施例ＡＡ４  Ｈ−β−（Ｓ）Ｍｅ−Ｐｈｅ−ＯＨの合成の標準手順
【化１９】
2013509434.tif 000131
【０３０５】
この合成は、キラルアミノ酸の合成についてＥｖａｎｓによって記載された反応方法に基づいた（Ｅｖａｎｓ，  Ｄ．  Ａ．；  Ｅｌｌｍａｎ，  Ｊ．  Ａ．；  Ｄｏｒｏｗ，  Ｒ．  Ｌ．  Ｔｅｔｒａｈｅｄｒｏｎ  Ｌｅｔｔ．  １９８７，  ２８，  １１２３−１１２６）。不斉助剤を標準方法を使用してキラル酸ＡＡ４−Ａ（１．８３ｇ）を添加し、ＡＡ４−Ｂ（２．９ｇ、８５％）を得た。ＡＡ４−Ｃ（２．６ｇ、７２％、１０〜１５％の未反応ＡＡ４−Ｂを含む）を与える不斉臭素化の後、続いてアジドＳＮ２置換し、ＡＡ４−Ｄ（２．３ｇ、１００％）を得た。助剤の切断によりＡＡ４−Ｅが得られ、次いで、ベンジルエステルの形成によりＡＡ４−Ｆが得られた。トリフェニルホスフィンとの反応でイミノホスホランを形成し、次いで、水を用いる加水分解でアジドをアミンに変換して、５００ｍｇの保護アミノ酸、Ｈ−β−（Ｓ）Ｍｅ−Ｐｈｅ−ＯＢｎ（２８％、３ステップ）が得られた。
【０３０６】
実施例ＡＡ５  ｏ−Ｔｙｒラクトン（ＡＡ５−３）の合成の標準手順
【化２０】
2013509434.tif 000132
【０３０７】
ＤＣＭ（４９ｍＬ）中のＢｏｃ−（ＤＬ）ｏＴｙｒ−ＯＨ（ＡＡ５−１，２．７６ｇ，９．８２ｍｍｏｌ，１．０当量）の溶液に、ＤＩＰＥＡ（３．４ｍＬ，１９．６ｍｍｏｌ，２．０当量）、続いてＡｃ２Ｏ（１．０２ｍＬ，１０．８ｍｍｏｌ，１．１当量）を添加した。混合物を室温で３時間撹拌した。溶媒を真空内で蒸発させ、ＥｔＯＡｃに残渣を溶解した。この有機相を、クエン酸塩緩衝剤（１Ｍ、ｐＨ３．５、３ｘ）、ブライン（１ｘ）で洗浄し、ＭｇＳＯ４で乾燥し、濾過し、濾液を減圧下で濃縮した。残渣を、フラッシュクロマトグラフィー［傾斜、ＥｔＯＡｃ／ヘキサン（１：１）から１００％ＥｔＯＡｃ］によって精製し、白色固形物としてラクトンＡＡ５−３（１．０６ｇ、４１％）を得た。さらに、ＡＡ５−１およびアセチル化ｏ−チロシン（ＡＡ５−２）の混合物を含有する１．０６ｇの分画が得られた。
【０３０８】
実施例２  テザーの合成
Ａ．テザーＴ５９の合成の標準手順
【化２１】
2013509434.tif 000133
【０３０９】
ステップＴ５９−１：
ＴＨＦ（５００ｍＬ）中のＢｏｃ−Ｔ８（３２．３ｇ，１１０．２ｍｍｏｌ，１．０当量）の溶液に、イミダゾール（１５．０ｇ，２２０．４ｍｍｏｌ，２．０当量）およびＴＢＤＭＳＣｌ（２１．６ｇ，１４３．３ｍｍｏｌ，１．３当量）を添加し、ＴＬＣによってモニターしながら混合物を２時間撹拌した。次いで、その溶液をＮＨ４Ｃｌ飽和水溶液で処理し、水相をＥｔＯＡｃで抽出した。合わせた有機相をＭｇＳＯ４で乾燥し、濾過し、濾液を減圧下で濃縮した。結果として得られた残渣をシリカゲルパッド（１０％のＥｔＯＡｃ／９０％ヘキサン）に通して濾過し、無色の油（１００％）として５９−１を得た。
ＴＬＣ：Ｒｆ＝０．６０（３０％ＥｔＯＡｃ／７０％ヘキサン；検出：ＵＶ，Ｍｏ／Ｃｅ）
【０３１０】
ステップＴ５９−２：
Ｈ２Ｏ：ｔ−ＢｕＯＨ（１：１，５００ｍＬ）の混合液中の５９−１（２０．１ｇ，４９．３ｍｍｏｌ，１．０当量）の溶液にＡＤ−ｍｉｘβ（６０ｇ）およびメタンスルホンアミド（４．７ｇ、４９．３ｍｍｏｌ、１．０当量）を添加し、結果として得られたオレンジ色の混合物を４℃で３６〜４８時間撹拌した。その間に色は黄色に変化する。反応の完了をＴＬＣが示したら、亜硫酸ナトリウム（７５ｇ、１２．０当量）を添加し、混合物を室温で１時間撹拌した。混合物をＥｔＯＡｃで抽出し、次いで合わせた有機相を水およびブラインで抽出した。有機相をＭｇＳＯ４で乾燥し、濾過し、濾液を減圧下で濃縮した。残渣をフラッシュクロマトグラフィー（５０％ＥｔＯＡｃ／５０％ヘキサン）によって精製して、黄色の油（９６％）として５９−２を得た。
ＴＬＣ：Ｒｆ＝０．４１（５０％ＥｔＯＡｃ／５０％ヘキサン；検出：ＵＶ，ＫＭｎＯ４）．
【０３１１】
ステップＴ５９−３：
０℃のＤＣＭ（３００ｍＬ）中の５９−２（２０．９ｇ，４７．４ｍｍｏｌ，１．０当量）の溶液に、ピリジン（１５ｍＬ）およびＤＭＡＰ（２９３ｍｇ，２．４ｍｍｏｌ，０．０５当量）を添加した。次いで、ＤＣＭ（５０ｍＬ）中のトリホスゲン（１４．１ｇ、４７．４ｍｍｏｌ、１．０当量）をこの混合物にゆっくり添加した。反応物を０℃で４５分間撹拌し、その時にＴＬＣは反応の完了を示した。溶液をＮＨ４Ｃｌ飽和水溶液で処理し、有機相を分離した。水相をＥｔ２Ｏで抽出し、合わせた有機相をＮＨ４Ｃｌ飽和水溶液で抽出した。有機相をＭｇＳＯ４で乾燥し、濾過し、濾液を減圧下で濃縮した。結果として得られた残渣を、シリカゲルパッド（３０％ＥｔＯＡｃ／７０％ヘキサン）に通して濾過し、黄色の油（９１％）として５９−３を得た。
ＴＬＣ：Ｒｆ＝０．５６（５０％ＥｔＯＡｃ／５０％ヘキサン；検出：ＵＶ、Ｍｏ／Ｃｅ）．
【０３１２】
ステップＴ５９−４：
９５％ＥｔＯＨ：アセトン（３：１、４００ｍＬ）の混合液中の５９−３（２０．２ｇ，４３．３ｍｍｏｌ，１．０当量）の溶液に、ラネーＮｉ（水中５０％，５１ｍＬ，４３３ｍｍｏｌ，１０．０当量）を添加した。ＴＬＣによってモニターしながら水素をこの溶液へ６時間泡立たせた。反応が完了したら、Ｎ２を混合物に通して泡立たせ、過剰水素を除去し、次いで混合物をセライトパッドに通して濾過し、ＥｔＯＡｃですすいだ。濾液を減圧下で濃縮して、次のステップに使用するのに十分に純粋な無色の油として５９−４が得られた。
ＴＬＣ：Ｒｆ＝０．２９（３０％ＥｔＯＡｃ／７０％ヘキサン；検出：ＵＶ、Ｍｏ／Ｃｅ）．
【０３１３】
ステップＴ５９−５：
アルコール５９−４（１７．０ｇ，４０．０ｍｍｏｌ，１．０当量）のＣＨ２Ｃｌ２（２５０ｍＬ）中溶液に、ＤＨＰ（４．４ｍＬ，４８．０ｍｍｏｌ，１．２当量）およびＰＴＳＡ（３８０ｍｇ，２．０ｍｍｏｌ，０．０５当量）を添加した。混合物を室温で１時間撹拌した。ＴＬＣ（３０％ＥｔＯＡｃ／７０％ヘキサン；検出：ＵＶ、Ｍｏ／Ｃｅ；Ｒｆ＝０．５１）によって示される完了の時点で、溶液をＮａＨＣＯ３飽和水溶液で処理し、次いで水相をＣＨ２Ｃｌ２で抽出した。合わせた有機相をＭｇＳＯ４で乾燥し、濾過し、濾液を減圧下で濃縮した。残渣をＴＨＦ（２５０ｍＬ）に溶解し、ＴＨＦ中のＴＢＡＦ１Ｍ溶液（８０．０ｍＬ、８０．０ｍｍｏｌ、２．０当量）を添加した。混合物を室温で１時間撹拌した。反応の完了をＴＬＣが示したら、混合物をブラインで処理し、層を分離し、水相をＥｔＯＡｃで抽出した。合わせた有機相をＭｇＳＯ４で乾燥し、濾過し、濾液を減圧下で濃縮して乾固させた。残渣をフラッシュクロマトグラフィー（５０％ＥｔＯＡｃ／５０％ヘキサン）によって精製し、黄色の油としてＢｏｃ−Ｔ５９ｂ（ＴＨＰ）（７６％、３ステップ）を得た。
ＴＬＣ：Ｒｆ＝０．１２（３０％ＥｔＯＡｃ／７０％ヘキサン；検出：ＵＶ、Ｍｏ／Ｃｅ）；
１３ＣＮＭＲ（ＣＤＣｌ３、ｐｐｍ）：δ１９．５，２５．５，２５．６，２８．６，３０．８，３１．１，３３．５，４４．５，６１．５，６２．６，６９．９，７５．０，９６．７，１１１．０，１２０．９，１２１．０，１２８．１，１３１．８，１５６．９．
【０３１４】
Ｂｏｃ−Ｔ５９ａおよびそのＴＨＰに保護誘導体を得るために、上記と同一の手順に従ったが、ＡＤ−ｍｉｘαを使用して、同等のシーケンス収率を示した。ＴＨＰの代わりに他の適切な保護基を、最後のステップに同様に導入することができる。
【０３１５】
Ｂ．テザーＴ１０４ｂの合成の標準手順
【化２２】
2013509434.tif 000134
【０３１６】
ステップＴ１０４−１
（１Ｒ，２Ｓ）−シス−２−ヒドロキシ−シクロヘキサン酸エチル１０４−１（Ｊｕｌｉｃｈ、現在のＣｏｄｅｘｉｓから入手、製品番号１５．６０、５０ｇ、２９０ｍｍｏｌ）のＴＨＦ（５００ｍＬ）中溶液に、イミダゾール（２９．６ｇ、４３５ｍｍｏｌ）およびＴＢＤＭＳＣｌ（４９．８ｇ、３３１ｍｍｏｌ）を添加した。反応物を室温で７２時間撹拌し、次いで、ＮＨ４Ｃｌ飽和水溶液でクエンチした。混合物をＥｔ２Ｏ（３ｘ）で抽出した。有機相を合わせ、ＭｇＳＯ４で乾燥し、濾過し、濾液を減圧下で濃縮して、中間体の保護エステル（１０４−２、９３ｇ）を得た。これは次のステップに直接使用した。
【０３１７】
ステップＴ１０４−２
先のステップから得られた１０４−２（２１５ｇ、０．７５モル）をＤＣＭ（２Ｌ）に溶解し、溶液を−３０℃に冷却した。この溶液に、ＤＩＢＡＬ−Ｈ（ＤＣＭ中１Ｍ溶液、２２５０ｍＬ，２．２５ｍｏｌ）を１．５時間にわたって添加した。反応混合物を０℃で１時間撹拌し、次いで、０℃でロッシェル塩の水溶液（２Ｍ、４Ｌ）に注いだ。この混合物を室温で激しく終夜撹拌し、次いで、ＤＣＭ（３ｘ）で抽出した。合わせた有機相をブラインで洗浄し、ＭｇＳＯ４で乾燥し、濾過し、濾液を減圧下で濃縮し、１５５ｇの１０４−３（８５％）を得た。
【０３１８】
ステップＴ１０４−３
０℃のＣＨ２Ｃｌ２（２Ｌ）中の１０４−３（１９６ｇ、０．８モル）の溶液に、ＴＥＭＰＯ（１２．５ｇ、８０ｍｍｏｌ）、続いてＫＨＣＯ３の水溶液（１．６Ｍ、８６２ｇ）およびＫＢｒの水溶液（２．７Ｍ、１９６ｇ）を添加した。混合物を激しく撹拌し、１１％ＮａＯＣｌ水溶液（５７３ｍＬ、１．０４ｍｏｌ、１．３当量）を４５分にわたり添加した。添加が完了したら、混合物を０℃でさらに１５分間撹拌し、次いで、１ＭのＮａ２Ｓ２Ｏ３（１Ｌ）の水溶液でクエンチした。混合物を抽出し、水相をＣＨ２Ｃｌ２（２×５００ｍＬ）で洗浄した。合わせた有機相をＭｇＳＯ４で乾燥し、濾過し、濾液を減圧下で濃縮し、中間体アルデヒド（１０４−４、１９０ｇ）を得た。これはさらに精製をしないで次のステップに使用した。
【０３１９】
ステップＴ１０４−４
１０４−４（１１６ｇ、４８０ｍｍｏｌ）およびトリフェニルホスホラニリデン炭酸エチル（２５０ｇ、７２０ｍｍｏｌ）をベンゼン（２Ｌ）に溶解し、反応物を加熱して終夜還流した。混合物を室温に冷却し、５０％の体積に蒸発させた。ヘキサンを添加し、混合物を１５分間撹拌するとＰｈ３Ｐ＝Ｏ副生物の沈澱を伴い、次いで、シリカゲルのパッドに通して濾過し、１０％ＥｔＯＡｃ／ヘキサンですすいだ。濾液は減圧下で濃縮乾固し、１０４−５（１２５ｇ、５０％）を得た。
【０３２０】
ステップＴ１０４−５
ＥｔＯＡｃ（３Ｌ）に溶解した１０４−５（２００ｇ、６４０ｍｍｏｌ）に、１０％Ｐｄ／Ｃ（５０％含湿、６８ｇ）を添加し、Ｈ２を混合物へ１６時間泡立たせた。混合物をセライトのパッドに通して濾過し、濾過ケーキをＥｔＯＡｃ（１Ｌ）ですすいだ。合わせた濾液および洗浄液を減圧下で濃縮し、次いで残渣（１０４−６、１８０ｇ）をＥｔ２Ｏに溶解した。溶液を０℃に冷却し、ＬｉＡｌＨ４（１６．３ｇ、４３０ｍｍｏｌ）を分割して添加し、混合物を０℃で１時間撹拌した。反応物を、ゆっくり水（１７ｍＬ）、続いて、１５％ＮａＯＨ水溶液（１７ｍＬ）、および最後に水（５１ｍＬ）を添加することによりクエンチした。この混合物を０℃で１時間撹拌し、次いで濾過した。濾液は真空内で濃縮し、中間体アルコール（１０４−７、１５２．６ｇ）を得た。このアルコールをＴＨＦ（３Ｌ）に溶解し、トリフェニルホスフィン（２２０．６ｇ、８４１ｍｍｏｌ）、フタルイミド（１２３．７ｇ、８４１ｍｍｏｌ）、およびＤＩＡＤ（１５４．５ｍＬ，７８５ｍｍｏｌ）を添加した。混合物を室温で５時間撹拌し、次いで溶媒を減圧下で蒸発させた。残渣をＭＴＢＥに溶解し、室温で１時間撹拌し、その間にＰｈ３Ｐ＝Ｏ副生物を沈澱させ、次いで、濾過した。濾液は減圧下で蒸発させ、残渣およびフラッシュクロマトグラフィー（傾斜、５％Ｅｔ２Ｏ／ヘキサンから２０％Ｅｔ２Ｏ／ヘキサン）によって精製し、１０４−８（１９４ｇ，７５％）を得た。
【０３２１】
ステップＴ１０４−６
１０４−８（１９４ｇ、４８３ｍｍｏｌ）を１％ＨＣｌ／ＭｅＯＨ（３Ｌ）の溶液に溶解した。この溶液を室温で終夜撹拌し、次いで、水（１．５Ｌ）でクエンチした。混合物をＤＣＭ（２×１．５Ｌ）で抽出し、合わせた有機分画をＭｇＳＯ４で乾燥し、濾過し、濾液を減圧下で濃縮した。残渣をシリカゲルのパッドに通し、１０％Ｅｔ２Ｏ／ヘキサンでシラノール副生物を除去し、次いでＴＬＣによって明示される追加の化合物が溶出しなくなるまで、Ｅｔ２Ｏですすいだ。溶媒を減圧下で除去し、白色固形物として１０４−９（１３８．５ｇ、９８％）を得た。
【０３２２】
ステップＴ１０４−７
ＭｅＯＨ（３Ｌ）中の１０４−９（１３５ｇ、４７０ｍｍｏｌ）の溶液に、ヒドラジン（８８ｍＬ、１．４１ｍｏｌ）を添加した。この混合物を室温で６４時間撹拌し、次いで、濾過し、濾過ケーキをＥｔＯＨ（５００ｍＬ）ですすいだ。濾液および洗浄液を合わせて、減圧下で蒸発させた。残渣をＥｔＯＨ（１Ｌ）に溶解し、再び濾過し、フィルターはＥｔＯＨ（２５０ｍＬ）ですすいだ。濾液および洗浄液を合わせ、減圧下で蒸発乾固させた。残渣をＥｔＯＨ（１Ｌ）で再溶解し、再び真空内で蒸発乾固させた。次いで、残渣をＤＣＭに溶解し、濾過し、フィルターをＤＣＭですすいだ。合わせた濾液および洗浄は、減圧下で蒸発乾固させ、中間体のアミノアルコール１０４−１０を得た。これはＴＨＦ／水（３Ｌ）の１：１混合物に溶解した。この混合物に、Ｎａ２ＣＯ３（１５０ｇ、１．４１ｍｏｌ）、続いて（Ｂｏｃ）２Ｏ（１５３．８ｇ、７０５ｍｍｏｌ）を添加した。その反応物を室温で終夜撹拌し、水でクエンチした。混合物をＥｔ２Ｏ（３ｘ）で抽出した。合わせた有機相をブラインで洗浄し、ＭｇＳＯ４で乾燥し、濾過し、濾液を減圧下で濃縮した。結果として得られた残渣を、フラッシュクロマトグラフィー（傾斜、１５％Ｅｔ２Ｏ／ヘキサンから５０％Ｅｔ２Ｏ／ヘキサン）によって精製し、油として１０４−１１（７３ｇ、６０％）を得た。
【０３２３】
ステップＴ１０４−８
エチルビニルエーテル（５００ｍＬ）中の１０４−１１（１３．８ｇ、５３．７ｍｍｏｌ）の溶液に、酢酸水銀（ＩＩ）（５．１３ｇ、１６．１ｍｍｏｌ）を添加し、溶液を加熱し２４時間還流した。次いで、酢酸水銀（ＩＩ）０．３当量をさらに添加し、溶液を再び加熱しさらに２４時間還流した。溶液を室温に冷却し、Ｎａ２ＣＯ３の飽和水溶液でクエンチし、Ｅｔ２Ｏ（３ｘ）で抽出した。合わせた有機相をブラインで洗浄し、ＭｇＳＯ４で乾燥し、濾過し、濾液を減圧下で濃縮乾固した。残渣を、フラッシュクロマトグラフィー（２％Ｅｔ３Ｎを含む１０％Ｅｔ２Ｏ／ヘキサン）によって精製し、無色の油として１０４−１２（８．６ｇ、９４％）を得た。
【０３２４】
ステップＴ１０４−９
０℃のＴＨＦ（４００ｍＬ）中の１０４−１２（１３．２ｇ、４６．６ｍｍｏｌ）の溶液にＢＨ３・ＴＨＦ（６９．９ｍＬ、６９．９ｍｍｏｌ）の１Ｍ溶液をゆっくり１５分間にわたって添加した。その混合物を、０℃で１時間、次いで室温で２時間撹拌した。溶液を０℃に冷却し、ＮａＯＨ（９０ｍＬ）の５Ｎ溶液、続いてＨ２Ｏ２の３０％水溶液（２００ｍＬ）を添加した。混合物を０℃で１５分、次いで室温で２時間撹拌した。溶液をＥｔ２Ｏ（３ｘ）で抽出した。合わせた有機相をブラインで洗浄し、ＭｇＳＯ４で乾燥し、濾過し、濾液を減圧下で濃縮乾固した。結果として得られた残渣をフラッシュクロマトグラフィー（３０％ＥｔＯＡｃ／ヘキサン）によって精製し、Ｂｏｃ−Ｔ１０４ｂ（１１．４ｇ、８１％）を得た。
ＨＰＬＣ／ＭＳ：傾斜Ａ４、ｔＲ＝７．０５分、［Ｍ＋Ｈ］＋３０２．
【０３２５】
鏡像異性体テザーＢｏｃ−Ｔ１０４ａは、同様に（１Ｓ，２Ｒ）−シス−２−ヒドロキシ−シクロヘキサン酸エチル１０４−１３を使用して入手することができる。
【化２３】
2013509434.tif 000135
【０３２６】
Ｃ．テザーＴ１０４ｂの合成の代替手順
【化２４】
2013509434.tif 000136
【０３２７】
Ｔ１０４ｂへの代替合成経路は、重要なステップとして、キラル助剤としての（Ｓ）−１−アミノ−２−メトキシメチルピロリジン（ＳＡＭＰ）ヒドラゾンで誘導されるシクロヘキサノンの不斉アルキル化（Ｅｎｄｅｒｓ，  Ｄ．  Ａｌｋｙｌａｔｉｏｎ  ｏｆ  Ｃｈｉｒａｌ  Ｈｙｄｒａｚｏｎｅｓ．  Ｉｎ  Ａｓｙｍｍｅｔｒｉｃ  Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ；  Ｍｏｒｒｉｓｏｎ，  Ｊ．Ｄ．，  Ｅｄ．；  Ａｃａｄｅｍｉｃ  Ｐｒｅｓｓ：  Ｏｒｌａｎｄｏ，  ＦＬ，  １９８４；  Ｖｏｌ．  ３，  ｐｐ  ２７５−３３９．）および求電子試薬としての１０４Ｃを含む。このようにして得られた１０４−１６を順次ヒドラゾン切断およびＬ−Ｓｅｌｅｃｔｒｉｄｅ還元に供し、アルコール１０４−１８を得た。ブロモ酢酸でのＯアルキル化、ボラン還元、次いで、ベンジル保護基の水素化分解によってＢｏｃ−Ｔ１０４ｂが得られた。
【化２５】
2013509434.tif 000137
【０３２８】
キラル助剤として（Ｒ）−１−アミノ−２−メトキシメチルピロリジン（ＲＡＭＰ）ヒドラゾンを使用すること以外、同様のシーケンスを用いて、同等の収率でＢｏｃ−Ｔ１０４ａを得た。
【化２６】
2013509434.tif 000138
【０３２９】
Ｄ．  テザーＴ１３４の合成の標準手順
【化２７】
2013509434.tif 000139
【０３３０】
ステップＴ１３４−１
ＴＨＦ／水（１：１、２．８Ｌ）中の（Ｒ）−（−）−２−アミノ−１−ブタノールの溶液（１３４−０，５０ｇ，５６１ｍｍｏｌ，１．０当量）に、（Ｂｏｃ）２Ｏ（１２９ｇ，５８９ｍｍｏｌ，１．０５当量）およびＮａ２ＣＯ３（７１．３ｇ，６７３ｍｍｏｌ，１．２当量）を添加し、溶液を終夜撹拌した。ＴＨＦは真空内で除去し、水相をエーテル（３×５００ｍＬ）で抽出した。合わせた有機相を１Ｍクエン酸塩緩衝剤（２００ｍＬ）およびブライン（２００ｍＬ）で洗浄し、ＭｇＳＯ４で乾燥し、濾過し真空下で濃縮した。粗物質はシリカゲル（ドライパック、５０％ＥｔＯＡｃ／ヘキサン）で精製し、無色の油として１３４−１（１０４．９ｇ、５５４ｍｍｏｌ、９９％）を得た。
【０３３１】
ステップＴ１３４−２：
０℃のＣＨ２Ｃｌ２（１．２４Ｌ）中の１３４−１の溶液（９３．８ｇ，４９６ｍｍｏｌ，１．０当量）に、ＴＥＭＰＯ（７．７５ｇ，４９．６ｍｍｏｌ，０．１当量）、続いてＫＢｒ（１３０ｇ）の２．７５Ｍ水溶液およびＫＨＣＯ３（５７０ｇ）の１．６Ｍ溶液を添加した。次いで、ＮａＯＣｌ（１１．５％／水、４２０ｍＬ，６４５ｍｍｏｌ，１．３当量）を激しく撹拌しながら約３０分にわたって滴下して添加した。反応物を０℃で１０分撹拌し、次いで、Ｎａ２Ｓ２Ｏ３（水溶液、４００ｍＬ）の１Ｍ溶液を添加し、過剰の酸化剤をクエンチした。混合物を０℃で５分撹拌し、９０分にわたって室温に暖めた。相を分離し、ＣＨ２Ｃｌ２（２×１Ｌ）で水相を抽出した。合わせた有機相を水（１Ｌ）およびブライン（５００ｍＬ）で洗浄し、次いでＭｇＳＯ４で乾燥し、濾過し、濾液を真空下で濃縮して、オレンジ色の油として１３４−２（９５ｇ、５０８ｍｍｏｌ、＞１００％）を得た。これはさらなる精製をしないで次のステップに使用した。
【０３３２】
ステップＴ１３４−３：
０℃のＭｅＣＮ（７．４Ｌ）中のトシルアジドの溶液（１１７．３ｇ，５９５ｍｍｏｌ，１．２当量，Ｏｒｇ．Ｓｙｎｔｈ．Ｃｏｌｌ．Ｖｏｌ．５，ｐ．１７９（１９７３）；Ｖｏｌ．４８，ｐ３６（１９６８））に、Ｋ２ＣＯ３（２０６ｇ，１．４９ｍｏｌ，３当量）、続いて１３４−Ａ（９８．８ｇ，５９５ｍｍｏｌ，１．２当量）を添加した。反応物を室温に暖め、３時間撹拌した。次いで、ＭｅＯＨ（１．５Ｌ）中の先のステップからの粗の１３４−２を添加し、反応物を終夜撹拌した。溶媒を真空内で蒸発させ、残渣に水（１．５Ｌ）およびＥｔ２Ｏ（１Ｌ）を添加した。相は分離し、水相をＥｔ２Ｏ（２×１Ｌ）で抽出した。合わせた有機相を水（２００ｍＬ）およびブライン（２００ｍＬ）で洗浄し、ＭｇＳＯ４で乾燥し、濾過し、次いで真空下で濾液を濃縮した。残渣をペンタン（５×５００ｍＬ）で摩砕し、次いで摩砕からの溶媒を真空下で濃縮した。結果として得られた残渣をフラッシュクロマトグラフィー（傾斜、５〜１０％ＥｔＯＡｃ／ヘキサン）によって精製し、１３４−３（３３．７ｇ、１８４ｍｍｏｌ、２ステップで３７％）を得た。
【０３３３】
ステップＴ１３４−４：
ＭｅＣＮ（３２５ｍＬ）中の１３４−３（２０．２ｇ，１１０ｍｍｏｌ，１．７当量）およびブロモアルコール１３４−Ｂ（２２．６ｇ，６４．８ｍｍｏｌ，１．０当量）の溶液に、アルゴンを２０分泡立たせた。次いで、再結晶したＣｕＩ（２４８ｍｇ，１．３０ｍｍｏｌ，０．０２当量）、ＰｄＣｌ２（ＰｈＣＮ）２（７４４ｍｇ，１．９４ｍｍｏｌ，０．０３当量）、ｔ−Ｂｕ３ＰＨＢＦ４（１．２２ｇ，４．２１ｍｍｏｌ，０．０６５当量）およびｉＰｒ２ＮＨ（１６ｍＬ，１１０ｍｍｏｌ，１．７当量）を添加した。反応物を室温でアルゴン雰囲気下で４０時間撹拌した。その反応物をシリカゲルパッドに通して濾過し、パッドをＥｔＯＡｃですすいだ。揮発分を真空内で除去し、残渣をフラッシュクロマトグラフィー（傾斜、５〜１０〜２０％のＥｔＯＡｃ／ヘキサン）によって精製し、出発ブロミド、アルキンおよび他の未知不純物の混合物として１３４−４（１８．３ｇ，４０．５ｍｍｏｌ，６２％）を得た。
【０３３４】
ステップＴ１３４−５：
無水ＥｔＯＨ（３００ｍＬ）中のアルキン１３４−４（１８．２ｇ，４０．５ｍｍｏｌ，１．０当量）に、１０％Ｐｄ／Ｃ（５０％含湿，４．２９ｇ，０．０２当量）を添加した。混合物を水素の４００ｐｓｉの圧力下でＰａｒｒ反応器に７２時間置いた。反応はＨＰＬＣによってモニターすることができる。混合物をセライト（登録商標）パッドに通して濾過し、次いで真空下で濃縮した。残渣をＴＨＦに溶解し、ＴＨＦ中の１ＭＴＢＡＦ（４８ｍＬ、４８ｍｍｏｌ）を添加した。反応物を、室温で２時間撹拌し、次いで溶媒を真空内で蒸発させた。結果として得られた残渣をフラッシュクロマトグラフィー（傾斜、１０〜１５〜２０〜３０〜４０〜５０％のアセトン／ヘキサン）によって精製し、完全還元生成物（１３４−５）および部分還元生成物の混合物（７．８ｇ、２２．９ｍｍｏｌ、５７％）を得た。次いで、この混合物を、無水ＥｔＯＨ（１１５ｍＬ）に溶解し、１０％Ｐｄ／Ｃ（５０％含湿、２ｇ、０．０４当量）を添加した。その反応物をＰａｒｒ反応器中でＨ２（４００ｐｓｉ）の下で終夜撹拌した。その溶液をセライトパッドに通して濾過し、濾液を真空下で蒸発させた。残渣をフラッシュクロマトグラフィー（傾斜、１０〜２０％アセトン／ヘキサン）によって精製し、Ｔ１３４（５．５１ｇ、１５．１ｍｍｏｌ）を得た。２−（３−フルオロフェノキシ）エタノールが、しばしばこの生成物に不純物として存在したことに注意すること。この物質を除去するために、不純な生成物をＨＣｌ／ＭｅＯＨ（１０％ｗ／ｗ）に溶解し、２４時間揺動し、次いで揮発分を真空内で除去した。残渣を水（１００ｍＬ）に溶解した。次いで、２−（３−フルオロフェノキシ）エタノール不純物の除去がＴＬＣによって確証されるまでＭＴＢＥ（４×２５ｍＬ）で洗浄した。ＴＨＦ（１００ｍＬ）、続いてＮａ２ＣＯ３を添加し、ｐＨを１０に調節した。過剰のＢｏｃ２Ｏを添加し、溶液を終夜撹拌した。ＴＨＦは真空下で蒸発させ、ＭＴＢＥ（３×１００ｍＬ）で水相を抽出した。合わせた有機相を、ＭｇＳＯ４で乾燥し、濾過し、次いで濾液を真空下で濃縮して残渣を得た。これは、フラッシュクロマトグラフィー（傾斜、２０〜４０％のアセトン／ヘキサン）によって精製して、クリーンなＢｏｃ−Ｔ１３４ａ（３．８７ｇ、１１．３ｍｍｏｌ、２８％、２ステップ）を油として得た。
ＨＰＬＣ／ＭＳ：傾斜Ａ４、ｔＲ＝７．３９分、Ｍ＋３４１；
１ＨＮＭＲ（ＤＭＳＯ，３００ＭＨｚ）：δ７．１３−７．０６（ｍ，１Ｈ），６．８２（ｄｄ，１Ｈ，Ｊ＝２．５，１１．５Ｈｚ），６．６８−６．５６（ｍ，２Ｈ），４．８３（ｔ，１Ｈ，Ｊ＝５．５Ｈｚ），３．９８（ｔ，２Ｈ，Ｊ＝５．１Ｈｚ），３．７２（ｄｄ，２Ｈ，Ｊ＝５．５，１０．３Ｈｚ），３．３２−３．２０（ｍ，１Ｈ），２．６０−２．４０（ｍ，２Ｈ），１．６６−１．２２（ｍ，４Ｈ），１．３９（ｓ，９Ｈ），０．７９（ｔ，３Ｈ，Ｊ＝７．４Ｈｚ）．
【０３３５】
鏡像異性体テザーＴ１３５ｂは１３４−０の鏡像異性体から出発して構築する。
【０３３６】
ＥテザーＴ１３５の合成の標準手順
【化２８】
2013509434.tif 000140
【０３３７】
ステップＴ１３５−１
ＤＭＦ（Ｄｒｉｓｏｌｖ、２２５ｍＬ）中の２−ブロモ−５−フルオロフェノール（１３５−０，１５．０ｇ，７８．５ｍｍｏｌ，１．０当量）および１３５−Ａ（３０．２ｇ，１２６．４ｍｍｏｌ，１．６当量）の溶液に、炭酸カリウム（１３．０ｇ、９３．５ｍｍｏｌ、１．２当量）、ヨウ化カリウム（２．５ｇ、１５．１ｍｍｏｌ、０．１９当量）を添加した。溶液を５５℃に加熱し、窒素下で終夜撹拌した。溶液を減圧下で濃縮乾固し、次いで、残油を水（２００ｍＬ）で希釈し、Ｅｔ２Ｏ（３Ｘ１５０ｍＬ）で抽出した。有機相を合わせて、１Ｍクエン酸塩緩衝剤（２ｘ）、ブライン（１ｘ）で洗浄し、硫酸マグネシウムで乾燥し、濾過し、濾液を真空下で蒸発させた。粗生成物をフラッシュクロマトグラフィー（１０％ＥｔＯＡｃ／ペンタン）によって精製し、帯黄色の固体として１３５−１を得た。（２０．０ｇ、７３％）
ＴＬＣ：Ｒｆ＝０．６８（２５％ＥｔＯＡｃ／ヘキサン；検出：ＵＶ、ＣＭＡ）．
【０３３８】
ステップＴ１３５−２
ＭｅＯＨ（Ｄｒｉｓｏｌｖ、１６２ｍＬ）中の１３５−１（１７．０ｇ、４８．７ｍｍｏｌ、１．０当量）の溶液にＨＣｌ（１２．１のＭ、２５μＬ、０．４８６ｍｍｏｌ、１ｍｏｌ％）を添加し、反応物を室温で２．５時間撹拌した。次いで、Ｈ２Ｏを添加し、水層をＥｔ２Ｏ（２×３００ｍＬ）で洗浄した。有機層を合わせ、ＮＨ４Ｃｌ飽和水溶液（３００ｍＬ）、ブライン（３００ｍＬ）で洗浄し、ＭｇＳＯ４で乾燥し、濾過し、濾液を減圧下で濃縮すると、オレンジ色の油が残った。フラッシュクロマトグラフィー（４０％ＥｔＯＡｃ／ヘキサン）によって精製すると、無色の油として１０．７ｇの１３５−２（９４％）が得られた。
ＴＬＣ：Ｒｆ＝０．５７（３０％ＥｔＯＡｃ／ヘキサン；検出：ＵＶ、ＫＭｎＯ４）；
１ＨＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）：δ７．４８（ｄｄ，Ｊ＝６．３，８．７Ｈｚ，１Ｈ），６．５８−６．６８（ｍ，２Ｈ），４．１２（ｍ，２Ｈ），４．０１（ｍ，２Ｈ），２．１７（ｂｒ，１Ｈ）．
【０３３９】
ステップＴ１３５−３
火炎で乾燥したフラスコ内に、ＭｅＣＮ（２６ｍＬ）を導入し、３０分間複数回のアルゴン／真空サイクルで脱気した。次いで、Ｐｄ（ＯＡｃ）２（１４３ｍｇ，０．６４０ｍｍｏｌ，０．０５当量）、Ｐ（ｏ−ｔｏｌ）３（３８８ｍｇ，１．２７ｍｍｏｌ，０．１０当量）、ジＢｏｃ−アリルアミン（１３５−Ｂ、以下の手順参照、３．６ｇ、１４．０ｍｍｏｌ、１．１当量）、Ｅｔ３Ｎ（３．６ｍＬ、２５．５ｍｍｏｌ、２当量）およびアルコール１３５−２（３．０ｇ、１２．８ｍｍｏｌ、１．０当量）を添加した。溶液を室温で撹拌し、迅速に脱気し、次いで、アルゴン雰囲気下で加熱し１１０℃で２０時間還流した。室温に反応混合物を冷却し、Ｈ２Ｏ（２０ｍＬ）、でクエンチし、層を分離した。水層をＥｔ２Ｏ（２×６０ｍＬ）で洗浄した。有機層を合わせ、ＮＨ４Ｃｌ飽和水溶液（７０ｍＬ）、ブライン（７０ｍＬ）で洗浄し、ＭｇＳＯ４で乾燥し、濾過し、濾液を真空下で濃縮して、粗生成物を得た。フラッシュクロマトグラフィー（傾斜、３０％から４０％のＥｔ２Ｏ／ヘキサン）による精製によって、薄黄色の固体として４．２５ｇ（８１％）の１３５−３が得られた。
ＴＬＣ：Ｒｆ＝０．３９（３０％Ｅｔ２Ｏ／ヘキサン；検出：ＵＶ、ＫＭｎＯ４）；
ＨＰＬＣ／ＭＳ：傾斜Ａ４、ｔＲ＝８．５５分、［Ｍ＋Ｎａ］＋４３４；
１ＨＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）：δ７．３５（ｄｄ，Ｊ＝６．９，８．７Ｈｚ，１Ｈ），６．７９（ｄ，Ｊ＝１５．９Ｈｚ，１Ｈ），６．５６−６．６８（ｍ，２Ｈ），６．１７（ｄｔ，Ｊ＝未測定、１５．９Ｈｚ，１Ｈ），４．３１（ｄｄ，Ｊ＝１．２，６．３Ｈｚ，２Ｈ），４．０５−４．０９（ｍ，２Ｈ），３．９４−３．９８（ｍ，２Ｈ），２．２６（ｂｒｍ，１Ｈ），１．５１（ｓ，１８Ｈ）．
【０３４０】
ステップＴ１３５−４
窒素下で、ＤＣＭ（Ｄｒｉｓｏｌｖ、５２ｍＬ）中の１３５−３（４．２５ｇ、１０．３ｍｍｏｌ、１．０当量）の溶液に、ＴＦＡ（１．１５ｍＬ、１５．５ｍｍｏｌ、２．０当量）を添加し、ＴＬＣでモニターしながら溶液を１．７５時間室温で撹拌した。反応物が未完結の場合、ＴＦＡ（０．５、１当量）をさらに添加した。溶液を減圧下で蒸発させた、結果として得られた油をシリカ（傾斜、４０％から５０％のＥｔ２Ｏ／ヘキサン）に予備吸着したフラッシュクロマトグラフィーによって精製し、白色固形物として２．２ｇのＢｏｃ−Ｔ１３５（７０％）を得た。
ＴＬＣ：Ｒｆ＝０．４６（４０％Ｅｔ２Ｏ／ヘキサン；検出：ＵＶ、ＫＭｎＯ４）；
ＨＰＬＣ／ＭＳ：傾斜Ａ４、ｔＲ＝６．６３分、［Ｍ＋Ｎａ］＋３３４；
１ＨＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）：δ７．１５−７．０８７（ｍ，１Ｈ），６．７４−６．５２（ｍ，４Ｈ），４．７４（ｓ（ｂｒ），１Ｈ），４．１３−４．０９（ｍ，２Ｈ），４．００−３．９７（ｍ，２Ｈ），３．９２（ｔ（ｂｒ），Ｊ＝５Ｈｚ，２Ｈ），１．９３（ｓ（ｂｒ），１Ｈ），１．４６（ｓ，９Ｈ）．
【０３４１】
Ｆ．試薬１３５−Ｂの合成の標準手順
【化２９】
2013509434.tif 000141
【０３４２】
ステップＴ１３５−５
（Ｂｏｃ）２Ｏ（１１２ｇ、０．５３１ｍｏｌ）を、０℃でＤＣＭ（９００ｍＬ）中のアリルアミン（３０ｇ、０．５２６ｍｏｌ）およびトリエチルアミン（９５ｍＬ、０．６８４ｍｏｌ）の溶液に２時間にわたり分割して添加し、次いで溶液を終夜撹拌した。反応混合物を、クエン酸塩緩衝剤（ｐＨ３．５、３ｘ）、ＮａＨＣＯ３（２ｘ）およびブライン（２ｘ）で連続的に洗浄し、無水ＭｇＳＯ４で乾燥し、濾過し、濾液を真空下で蒸発させ、８０．５ｇ（９７％）の１３５−Ｂ１を得た。
ＴＬＣ：Ｒｆ：０．３５（３０／７０ＥｔＯＡｃ／ヘキサン；検出：ＵＶ、ＫＭｎＯ４）．
【０３４３】
ステップＴ１３５−６
ＣＨ３ＣＮ（１．８Ｌ）中の１３５−Ｂ１（８０．５ｇ、０．５１３ｍｏｌ）の溶液に、（Ｂｏｃ）２Ｏ（１３４．２ｇ、０．６１５ｍｏｌ）およびＤＭＡＰ（４．３９ｇ、０．０３６ｍｏｌ）を添加した。混合物を６０℃で終夜加熱した。溶媒を除去し、粗化合物はドライパック（１０％ＥｔＯＡｃ／ヘキサン）によって精製し、白色固形物（１０５ｇ、８０％）として１３５−Ｂが得られた。
ＴＬＣ：Ｒｆ：０．２７（３０／７０ＥｔＯＡｃ／ヘキサン；検出：ＵＶ、ＫｍｎＯ４）；
１ＨＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）：δ５．７８−５．９０（１Ｈ，ｍ）；５．０９−５．２０（２Ｈ，ｍ）；４．１７（２Ｈ，ｄｔ，Ｊ＝５．５ａｎｄ１．５Ｈｚ）；１．５（９Ｈ，ｓ）
【０３４４】
Ｇ．テザーＴ１３６の合成の標準手順
【化３０】
2013509434.tif 000142
【０３４５】
ステップ１３６−１
ＤＭＦ（Ｄｒｉｓｏｌｖ、３２０ｍＬ）中の２−ブロモ−４−フルオロフェノール（１３６−０，３０．０ｇ，１５８ｍｍｏｌ，１．０当量）および保護ブロモエタノール（１３６−Ａ、４１．４ｇ、１７３．８ｍｍｏｌ、１．１当量）の溶液に、室温で炭酸カリウム（２８．０ｇ、２０５．４ｍｍｏｌ、１．３当量）、ヨウ化カリウム（５．２４ｇ、３１．６ｍｍｏｌ、０．２当量）を添加した。溶液を５５℃に加熱し、窒素下で終夜撹拌した。混合物を室温に冷却し、Ｈ２Ｏ（４００ｍＬ）を添加した。結果として得られた溶液をＥｔ２Ｏ（３×３００ｍＬ）で洗浄した。合わせた有機層を、Ｈ２Ｏ（２×３００ｍＬ）、ＮＨ４Ｃｌ飽和水溶液（３００ｍＬ）、ブライン（３００ｍＬ）で順次洗浄し、ＭｇＳＯ４で乾燥し、濾過し、濾液を真空下で蒸発させて乾固した。このようにして得られた粗生成物は、さらに精製をしないで次のステップに使用したが、フラッシュクロマトグラフィー（１０％Ｅｔ２Ｏ／ヘキサン）によって精製することができ、無色の固体（７９ｍｍｏｌ規模、２７．３ｇ、９９％）としてアルキル化フェノールを得た。
ＴＬＣ：Ｒｆ＝０．６９（１０％Ｅｔ２Ｏ／ヘキサン；検出：ＵＶ、ＣＭＡ）．
【０３４６】
ステップ１３６−２
ＴＨＦ（３２０ｍＬ）中のステップ１３６−１からの粗生成物（５５．１ｇ、１５８ｍｍｏｌ、１．０当量）の溶液に、ＴＢＡＦ（ＴＨＦ中の１Ｍ溶液、２３７ｍＬ、２３７ｍｍｏｌ、１．５当量）を添加した。反応物を室温で終夜撹拌し、次いでＨ２Ｏ（３００ｍＬ）を添加し、層を分離した。水相をＥｔＯＡｃ（２×３００ｍＬ）で洗浄した。合わせた有機層を、ＮＨ４Ｃｌ（３００ｍＬ）飽和水溶液、ブライン（３００ｍＬ）で洗浄し、ＭｇＳＯ４で乾燥し、濾過し、濾液を減圧下で濃縮乾固した。粗生成物をフラッシュクロマトグラフィー（４０％ＥｔＯＡｃ／ヘキサン）によって精製し、薄いオレンジ色の固体として２６．０ｇの１３６−１（７０％、２ステップ）を得た（他のバッチでは、１３６−１が無色の固体として得られた。）。
ＴＬＣ：Ｒｆ＝０．３４（４０％ＥｔＯＡｃ／ヘキサン；検出：ＵＶ、ＫＭｎＯ４）．
【０３４７】
ステップ１３６−３
火炎で乾燥したフラスコに、ＭｅＣＮ（１３０ｍＬ）を、３０分間複数回のアルゴン−真空サイクルで導入し脱気した。次いで、Ｐｄ（ＯＡｃ）２（７１５ｍｇ、３．１９ｍｍｏｌ、０．０５当量）、Ｐ（ｏ−ｔｏｌ）３（１．９４ｇ、６．３８ｍｍｏｌ、０．１０当量）、ジＢｏｃ−アリルアミン（１３５−Ｂ、１８．０ｇ、７０．２ｍｍｏｌ、１．１当量）、Ｅｔ３Ｎ（１８ｍＬ、１２７ｍｍｏｌ、２当量）および１３６−１（１５．０ｇ、６３．８ｍｍｏｌ、１．０当量）を添加した。溶液を室温で撹拌し、迅速に脱気し、次いでアルゴン下で２０時間１１０℃で加熱した。反応混合物を室温に冷却し、Ｈ２Ｏ（１００ｍＬ）でクエンチし、層を分離して、水層をＥｔ２Ｏ（２×９０ｍＬ）で洗浄した。合わせた有機層を飽和水溶液で洗浄した。ＮＨ４Ｃｌ（１００ｍＬ）、ブライン（１００ｍＬ）、ＭｇＳＯ４で乾燥し、濾過し、濾液真空下で濃縮乾固して、粗生成物を得た。これは、それ以上精製しないで次のステップに使用し、しかし、フラッシュクロマトグラフィーによって精製することができる。（傾斜、３０％から４０％のＥｔ２Ｏ／ヘキサン）薄黄色の固体として１１．６ｇの１３６−２（８０％、３５ｍｍｏｌ規模）を得た。
ＴＬＣ：Ｒｆ＝０．３７（３０％ＥｔＯＡｃ／ヘキサン；検出：ＵＶ、ＫＭｎＯ４）．
【０３４８】
ステップ１３６−４
窒素下のＤＣＭ（Ｄｒｉｓｏｌｖ、３２０ｍＬ）中の粗の１３６−２（２６．２ｇ、６３．８ｍｍｏｌ、１．０当量）の溶液に、ＴＦＡ（９．５ｍＬ、１２７．６ｍＬ、２．０当量）を添加した。溶液をＴＬＣでモニターしながら１．７５時間室温で撹拌した。完了したら、溶液を減圧下で蒸発させ、結果として得られた油をシリカ（４０％Ｅｔ２Ｏ／ヘキサン）の予備吸着したフラッシュクロマトグラフィーによって精製して、１０．２ｇのＢｏｃ−Ｔ１３６（２ステップで５１％）を得た。別の実験において、６．１ｇのＢｏｃ−Ｔ１３６（７０％、２８．２ｍｍｏｌ規模）が、薄黄色の固体として得られた。
ＴＬＣ：Ｒｆ＝０．２９（４０％Ｅｔ２Ｏ／ヘキサン；検出：ＵＶ、ＫＭｎＯ４）；
ＨＰＬＣ／ＭＳ：傾斜Ａ４、ｔＲ＝６．６２分、［Ｍ＋Ｎａ］＋３３４；
１ＨＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）：δ７．０８（ｄｄ，Ｊ＝３，９Ｈｚ，１Ｈ），６．８９−６．７６（ｍ，３Ｈ），６．１７（ｄｔ，Ｊ＝６，１６Ｈｚ，１Ｈ），４．８１（ｓ（ｂｒ），１Ｈ），４．０６−４．０２（ｍ，２Ｈ），３．９６−３．９３（ｍ，２Ｈ），３．８８（ｍ（ｂｒ），２Ｈ），２．７１（ｓ（ｂｒ），１Ｈ），１．４５（ｓ，９Ｈ）．
【０３４９】
Ｈ．テザーＴ１３７の合成の標準手順
【化３１】
2013509434.tif 000143
【０３５０】
ステップＴ１３７−１
ＴＨＦ（乾燥、Ｎａ−ベンゾフェノンケチルから新たに蒸留した、４５０ｍＬ）中のｎ−ＢｕＬｉ（ヘキサン中の１．６Ｍ、８２．０ｍＬ、１３０．８ｍｍｏｌ、１．１当量）の溶液に、ＴＨＦ（乾燥、４５ｍＬ）中の３−フルオロアニソール（１３７−０、１５．０ｇ、１１８．９ｍｍｏｌ、１．０当量）の溶液をＮ２下で−７８℃で（約２５分にわたり）滴下して添加した。溶液を−７８℃で３０分間撹拌した。次いでＴＨＦ（乾燥、１００ｍＬ）中のＩ２（３６．１ｇ，１４２．７ｍｍｏｌ．１．２当量）の溶液を−７８℃で滴下して添加した（添加時間：３０分、添加の終了時、添加漏斗をＴＨＦですすいだ。）。反応の進行をＴＬＣでモニターしながら、溶液を−６０℃に暖め４５分撹拌した。反応が完了したら、−６０℃で、Ｈ２Ｏ（１００ｍＬ）、続いて、Ｎａ２ＳＯ３（１０％ｗ／ｖ；１００ｍＬ）を注意深く添加し、５分間混合物を撹拌した。水相をヘキサン（３ｘ）で洗浄した。合わせた有機相をＮａＨＳＯ３（１０％ｗ／ｖ；２ｘ）、Ｈ２Ｏ（２ｘ）で洗浄し、無水ＭｇＳＯ４で乾燥し、濾過し、濾液を減圧下で濃縮し、黄色の残渣を得た。フラッシュクロマトグラフィー（１０％ＥｔＯＡｃ／ヘキサン）による精製によって、無色の油として２５．３ｇの１３７−１（８４％）が得られた。粗生成物をシーケンスの次のステップに直接使用することができ得る。
ＴＬＣ：Ｒｆ＝０．３４（５％ＥｔＯＡｃ／ヘキサン；検出：ＵＶ、Ｍｏ／Ｃｅ）；
ＨＰＬＣ／ＭＳ：傾斜Ａ４、ｔＲ＝６．６４分、Ｍ＋２５２．
【０３５１】
ステップＴ１３７−２
ＤＣＭ（Ｄｒｉｓｏｌｖ、１００ｍＬ）中の１３７−１（２５．０ｇ，９９．２ｍｍｏｌ，１．０当量）の溶液に、−３０℃でＮ２下で（約３０分にわたり）ＤＣＭ中のＢＢｒ３（１．０Ｍ，２４８ｍＬ，２４８ｍｍｏｌ，２．５当量）の溶液を滴下して添加した。その溶液を−３０℃で３時間撹拌し、次いで、室温に終夜暖めた。混合物を０℃に冷却し、ＭｅＯＨを注意深く滴下して添加し（ガス発生）、続いてＨ２Ｏを添加した。冷却浴を取り除き、混合物を室温で１０分間撹拌した。水層を分離し、ＤＣＭで洗浄した。有機層を合わせ、ブライン（３００ｍＬ）で洗浄し、無水ＭｇＳＯ４で乾燥し、濾過し、濾液を減圧下で濃縮して、黒色の残渣を得た。フラッシュクロマトグラフィー（２０％ＥｔＯＡｃ／ヘキサン）による精製によって、褐色の油として２１．５ｇの１３７−２（９１％）が得られた。粗油をシーケンスの次のステップに直接使用することができよう。
ＴＬＣ：Ｒｆ＝０．３５（２０％ＥｔＯＡｃ／ヘキサン；検出：ＵＶ、ＫＭｎＯ４）；
ＨＰＬＣ：傾斜Ｂ４、ｔＲ＝７．０２分
【０３５２】
ステップＴ１３７−３
ＤＭＦ（Ｄｒｉｓｏｌｖ、３２０ｍＬ）中の１３７−２（１８．８ｇ，７９．０７ｍｍｏｌ，１．０当量）および保護ブロモエタノール（１３６−Ａ，２０．８ｇ，８７．０ｍｍｏｌ，１．１当量）の溶液に、炭酸カリウム（１４．２ｇ，１０２．８ｍｍｏｌ，１．３当量）、ヨウ化カリウム（２．６２ｇ，１５．８ｍｍｏｌ，０．２当量）を室温で添加した。溶液を５５℃に加熱し、Ｎ２下で終夜撹拌した。混合物を室温に冷却し、Ｈ２Ｏ（５００ｍＬ）を添加した。層を分離し、水層をＥｔ２Ｏ（３×３００ｍＬ）で洗浄した。有機層を合わせ、Ｈ２Ｏ（２×３００ｍＬ）、ＭｇＳＯ４飽和水溶液、ブライン（３００ｍＬ）で洗浄し、ＭｇＳＯ４で乾燥し、濾過し、濾液を減圧下で濃縮した。このようにして得られた粗油を、さらに精製せずに次のステップに使用した。
【０３５３】
ステップＴ１３７−４
ＭｅＯＨ（２６３ｍＬ）中のステップＴ１３７−３（３１．０ｇ、７９．０７ｍｍｏｌ、１．０当量）からの粗油の溶液にＨＣｌ（１２．１Ｍ、６５μＬ、０．７９ｍｍｏｌ、０．０１当量）を添加した。反応物を室温で２．５時間撹拌し、次いでＨ２Ｏを添加し層を分離した。水層をＥｔ２Ｏ（２×３００ｍＬ）で洗浄した。有機層を合わせ、ＮＨ４Ｃｌ（３００ｍＬ）飽和水溶液、ブライン（３００ｍＬ）で洗浄し、ＭｇＳＯ４で乾燥し、濾過し、濾液を減圧下で濃縮し、オレンジ色の油を得た。フラッシュクロマトグラフィー（４０％ＥｔＯＡｃ／ヘキサン）による精製によって、白色固形物として２６．０ｇの１３７−３（７０％、２ステップ）が得られた。
ＴＬＣ：Ｒｆ＝０．３８（５０％ＭＴＢＥ／ヘキサン；検出：ＵＶ、ＣＡＭ）．
【０３５４】
ステップＴ１３７−５
火炎で乾燥したフラスコに、ＭｅＣＮ（９２ｍＬ）を導入し、複数回のアルゴン−真空サイクルで３０分間脱気した。次いで、Ｐｄ（ＯＡｃ）２（５１６ｍｇ、２．３０ｍｍｏｌ、０．０５当量）、Ｐ（ｏ−ｔｏｌ）３（１．４０ｇ、４．６１ｍｍｏｌ、０．１０当量）、ジＢｏｃ−アリルアミン（１３５−Ｂ、１３．０ｇ、５０．７ｍｍｏｌ、１．１当量）、Ｅｔ３Ｎ（１３．０ｍＬ、９２．１８ｍｍｏｌ、２当量）およびアルコール１３７−３（１３．０ｇ、４６．１ｍｍｏｌ、１．０当量）を添加した。溶液を室温で撹拌し、迅速に脱気し、次いでアルゴン下で１１０℃に２０時間加熱した。反応混合物を室温に冷却し、Ｈ２Ｏ（１５０ｍＬ）でクエンチし、層を分離した。水層をＥｔ２Ｏ（２×９０ｍＬ）で洗浄した。有機層を合わせ、ＮＨ４Ｃｌ（１００ｍＬ）飽和水溶液、ブライン（１００ｍＬ）で洗浄し、ＭｇＳＯ４で乾燥し、濾過し、濾液を真空下で濃縮して、粗の１３７−４を得た。これをさらに精製をしないで次のステップに使用したが、フラッシュクロマトグラフィー（傾斜、３０％から４０％Ｅｔ２Ｏ／ヘキサン）によって精製することができよう。
ＴＬＣ：Ｒｆ＝０．３５（３０％Ｅｔ２Ｏ／ヘキサン；検出：ＵＶ、ＫＭｎＯ４）；
ＨＰＬＣ：傾斜Ａ４、ｔＲ＝８．５４分
【０３５５】
ステップＴ１３７−６
窒素下のＤＣＭ（Ｄｒｉｓｏｌｖ、９０ｍＬ）中の粗の１３７−４（７．０ｇ、１７．０ｍｍｏｌ、１．０当量）の溶液に、ＴＦＡ（１．９０ｍＬ、１２７．６ｍＬ、２．０当量）を添加し、ＴＬＣでモニターしながら溶液を室温で１．７５時間撹拌した。もし反応が完了しなければ、さらなるＴＦＡ（０．５当量）を添加することができるであろう。完了したら、溶液を減圧下で蒸発させ、結果として得られた油をシリカに予備吸着したフラッシュクロマトグラフィー（傾斜、４０％から５０％のＥｔ２Ｏ／ヘキサン）によって精製して、ヘキサンでの摩砕後、白色固形物として３．７１ｇのＢｏｃ−Ｔ１３７（７０％）を得た。
ＴＬＣ：Ｒｆ＝０．３０（４０％Ｅｔ２Ｏ／ヘキサン；検出：ＵＶ、ＫＭｎＯ４）；
ＨＰＬＣ／ＭＳ：傾斜Ａ４、ｔＲ＝６．７１分、［Ｍ＋Ｎａ］＋３３４；
１ＨＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）：δ７．１５−７．０８７（ｍ，１Ｈ），６．７４−６．５２（ｍ，４Ｈ），４．７４（ｓ（ｂｒ），１Ｈ），４．１３−４．０９（ｍ，２Ｈ），４．００−３．９７（ｍ，２Ｈ），３．９２（ｔ（ｂｒ），Ｊ＝５Ｈｚ，２Ｈ），１．９３（ｓ（ｂｒ），１Ｈ），１．４６（ｓ，９Ｈ）．
【０３５６】
Ｉ．テザーＴ１３８の合成の標準手順
【化３２】
2013509434.tif 000144
【０３５７】
ステップＴ１３８−１
無水ＤＭＦ（５３５ｍＬ）中の２，３−ジフルオロ−６−ブロモフェノール（１３８−０、２５ｇ、１２０ｍｍｏｌ、１．０当量）および１３５−Ａ（４８．６ｇ、２３９ｍｍｏｌ、１．７当量）の溶液に、炭酸カリウム（１９．８ｇ、１４４ｍｍｏｌ、１．２当量）およびヨウ化カリウム（４．０ｇ、２４ｍｍｏｌ、０．２当量）を添加した。溶液を５５℃に加熱し、窒素下で終夜撹拌した。溶液を乾固するまで減圧下で除去し、次いで、残油を水で希釈し、ジエチルエーテル（３ｘ）で抽出した。有機相を合わせ、クエン酸塩緩衝剤（２ｘ）およびブライン（１ｘ）で洗浄した。有機相を無水ＭｇＳＯ４で乾燥し、濾過し、濾液を真空下で濃縮して、褐色の固体として１３８−１（３２ｇ）を得た。これはさらに精製をしないで次のステップに使用した。
ＴＬＣ：Ｒｆ：０．８３（３０％／７０％ＥｔＯＡｃ／ヘキサン）；検出：ＵＶ、ＫＭｎＯ４；
ＨＰＬＣ／ＭＳ：傾斜Ａ４、ｔＲ＝１３．８７分、［Ｍ（＋、Ｈ、＋）２］＋３６９．
【０３５８】
ステップＴ１３８−２
ＴＨＦ（６００ｍＬ）中の１３８−１（３０．２ｇ、１２０ｍｍｏｌ、１．０当量）の溶液に、ＴＢＡＦ（ＴＨＦ中の１．０Ｍ溶液、２４０ｍＬ、２４０ｍｍｏｌ、２．０当量）を添加した。反応物を室温で１時間撹拌した。混合物をジエチルエーテルで希釈し、塩化アンモニウム飽和水溶液（１ｘ）およびブライン（１ｘ）で洗浄した。有機相を無水ＭｇＳＯ４で乾燥し、濾過し、濾液を真空下で濃縮した。残渣をフラッシュクロマトグラフィー（２５％ＥｔＯＡｃ／ヘキサン）によって精製し、無色の油として１３８−２（２７．２ｇ、９０％、２ステップ）を得た。
ＴＬＣ：Ｒｆ：０．２７（３０％／７０％ＥｔＯＡｃ／ヘキサン）；検出：ＵＶ、ＫＭｎＯ４；
ＨＰＬＣ：傾斜Ａ４、ｔＲ＝５．７３分
【０３５９】
ステップＴ１３８−３
アセトニトリル（８４ｍＬ）中の１３８−２（１０．６３ｇ、４０．０ｍｍｏｌ、１．０当量）の溶液を以下のサイクルを使用して脱気した：真空、窒素、真空、窒素。これに酢酸パラジウム（４７２ｍｇ、０．０５当量）およびＰ（ｏ−ｔｏｌ）３（１．３８ｇ、０．１当量）を添加した。混合物をもう一度脱気し、次いでトリエチルアミン（１１．８ｍＬ、７９ｍｍｏｌ、２．０当量）および１３５−Ｂ（１１．８ｇ、４３ｍｍｏｌ、１．１当量）を添加した。溶液を１１０℃で終夜撹拌した。次いで、水を添加し、水相を酢酸エチル（４ｘ）で抽出した。合わせた有機相を、水およびブラインで洗浄し、ＭｇＳＯ４で乾燥し、濾過し、濾液を減圧下で濃縮した。このようにして得られた残渣を、フラッシュクロマトグラフィー（３０％ＥｔＯＡｃ／ヘキサン）によって精製し、金色のシロップとして１３８−３（１２．４ｇ、７３％）を得た。
ＴＬＣ：Ｒｆ：０．２８（４０％／６０％ＥｔＯＡｃ／ヘキサン）；検出：ＵＶ、ＫＭｎＯ４；ＨＰＬＣ／ＭＳ：傾斜Ａ４、ｔＲ＝９．０６分、［Ｍ＋Ｎａ］＋４５２．
【０３６０】
ステップＴ１３８−４
窒素下のＤＣＭ（１３５ｍＬ）中の１３８−３（１１．５３ｇ，２７．０ｍｍｏｌ，１．０当量）の溶液に、ＴＦＡ（３．０ｍＬ、４０ｍｍｏｌ、１．５当量）を添加した。反応が完了するまで室温で撹拌し、次いで溶媒を減圧下で蒸発乾固させた。残渣をフラッシュクロマトグラフィー（３０％ＥｔＯＡｃ／ヘキサン）によって精製し、
黄色の固体としてＢｏｃ−Ｔ１３８を得た。
ＴＬＣ：Ｒｆ：０．２５（４０％／６０％ＥｔＯＡｃ／ヘキサン）；検出：ＵＶ、ＫＭｎＯ４；ＨＰＬＣ／ＭＳ：傾斜Ａ４、ｔＲ＝６．８３分、［Ｍ］＋３２９、［２Ｍ＋Ｈ］＋５５９；
１ＨＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）：δ７．２（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝１１．２ａｎｄ８．９Ｈｚ）；６．７７ｔｏ６．６６（２Ｈ，ｍ）；６．１３（１Ｈ，ｄｔ，Ｊ＝１５．９，６．２Ｈｚ）；４．７１（１Ｈ，ｂｓ）；４．０６ｔｏ４．０１（２Ｈ，ｍ）；４．０１ｔｏ３．９３（２Ｈ，ｍ）；３．９２ｔｏ３．８５（２Ｈ，ｍ）；２．２１（１ｈ，ｂｓ）；１．４６（９Ｈ，ｓ）．
【０３６１】
Ｊ．テザーＴ１３９の合成の標準手順
【化３３】
2013509434.tif 000145
【０３６２】
ステップＴ１３９−１：
乾燥したＤＭＦ（５３５ｍＬ）中のブロミド１３９−０（２５ｇ、１２０ｍｍｏｌ、１．０当量）および保護ブロモエタノール１３９−Ａ（４８．６ｇ、２３９ｍｍｏｌ、１．７当量）の溶液に、炭酸カリウム（１９．８ｇ、１４４ｍｍｏｌ、１．２当量）およびヨウ化カリウム（４．０ｇ、２４ｍｍｏｌ、０．２当量）を添加した。溶液を５５℃に加熱し、次いで窒素下で終夜撹拌した。溶液を減圧下で除去し、次いで残油を水で希釈し、Ｅｔ２Ｏ（３ｘ）で抽出した。有機相を合わせ、クエン酸塩緩衝剤（２ｘ）およびブライン（１ｘ）で洗浄した。有機相を無水ＭｇＳＯ４で乾燥し、濾過し、次いで濾液を真空下で濃縮した。粗生成物１３９−１（３２ｇ）が、このようにして褐色の固体として得られ、さらに精製をしないで次のステップに使用した。
ＴＬＣ：Ｒｆ：０．８３（３０／７０ＥｔＯＡｃ／ヘキサン；検出：ＵＶ、ＫＭｎＯ４）；ＨＰＬＣ／ＭＳ：傾斜Ａ４、ｔＲ＝１３．８７分、［Ｍ（＋）２］＋３６８．
【０３６３】
ステップＴ１３９−２：
ＴＨＦ（６００ｍＬ）中の１３９−１（３０．２ｇ、１２０ｍｍｏｌ、１．０当量）の溶液に、ＴＢＡＦ（ＴＨＦ中の１．０Ｍ溶液、２４０ｍＬ、２４０ｍｍｏｌ、２．０当量）を添加した。反応物を室温で１時間撹拌した。次いで、混合物をＥｔ２Ｏで希釈し、塩化アンモニウム飽和水溶液（２ｘ）およびブライン（１ｘ）で洗浄した。有機相を無水ＭｇＳＯ４で乾燥し、濾過し、次いで濾液を真空下で濃縮した。粗の残渣をフラッシュクロマトグラフィー（２５％ＥｔＯＡｃ／ヘキサン）によって精製して、無色の油としてアルコール１３９−２（２７．２ｇ、９０％、２ステップ）を得た。
ＴＬＣ：Ｒｆ：０．２７（３０／７０ＥｔＯＡｃ／ヘキサン；検出：ＵＶ、ＫＭｎＯ４）．
【０３６４】
ステップＴ１３９−３：
ジオキサン（ＡＣＳ等級、４０ｍＬ）中のアルコール１３９−２（１０ｇ，４０ｍｍｏｌ，１．０当量）、Ｂｏｃ−プロパルギルアミン１３９−Ｂ（１０．４ｇ，６８ｍｍｏｌ，１．７当量）の溶液に、アルゴンを１５〜２０分泡立たせた。次いで、ｔＢｕ３ＰＨＢＦ４（４５４ｍｇ、０．０３当量）、再結晶ヨウ化銅（Ｉ）（１５０ｍｇ、０．０２当量）、ジクロロビス（ベンゾニトリルパラジウム（ＩＩ）（１５０ｍｇ、０．０２当量）およびジイソプロピルアミン（９．５ｍＬ、６７ｍｍｏｌ、１．７当量）を添加し、反応混合物をアルゴン下で室温で終夜撹拌した。溶液をＥｔＯＡｃで希釈し、シリカゲルパッドに通して濾過し、物質が何も溶出しなくなるまで酢酸エチルで洗浄した。濾液は減圧下で濃縮し、次いで粗の残渣をフラッシュクロマトグラフィー（３０％ＥｔＯＡｃ／ヘキサン）によって精製して、金色のシロップとしてアルキン１３９−３（８．３ｇ、７０％）を得た。
ＴＬＣ：Ｒｆ：０．２８（３０／７０ＥｔＯＡｃ／ヘキサン；検出：ＵＶ、ＫＭｎＯ４）；ＨＰＬＣ／ＭＳ：傾斜Ａ４、ｔＲ＝６．７１分、Ｍ＋３２７．
【０３６５】
ステップＴ１３９−４：
９５％エタノール（２４１ｍＬ）中のアルキン１３９−３（８．３ｇ，２５ｍｍｏｌ，１．０当量）の溶液に、窒素下でパラジウム炭素（５．７ｇ、５０％水）を添加し、次いで水素を混合物へ終夜泡立たせた。１ＨＮＭＲによって反応の完了が示された場合、窒素を１０分間混合物に通して泡立たせ、過剰水素を取り除いた。溶媒をセライトパッドに通して濾過し、それ以上、物質が溶出しなくなるまで、酢酸エチルで洗浄した。濾液を減圧下で濃縮した。結果として得られた粗の残渣をフラッシュクロマトグラフィー（３０％ＥｔＯＡｃ／ヘキサン）によって精製し、帯黄色の油としてＢｏｃ−Ｔ１３９（７．６５ｇ、９０％）を得た。
ＴＬＣ：Ｒｆ：０．１３（２５／７５ＥｔＯＡｃ／ヘキサン；検出：ＵＶ、ニンヒドリン）；ＨＰＬＣ／ＭＳ：傾斜Ａ４、ｔＲ＝６．９１分、Ｍ＋３３１；
１ＨＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）：δ６．８５−７．０（ｍ，１Ｈ，），６．６−６．７（ｍ，１Ｈ，），４．９−５．０（ｍ，１Ｈ），３．９５−４．１（ｍ，４Ｈ），３．１５−３．２（ｍ，２Ｈ），２．９−３．０（ｍ，１Ｈ），２．５５−２．６５（ｍ，２Ｈ），１．７５−１．９５（ｍ，２Ｈ），１．４５（ｓ，９Ｈ）．
【０３６６】
Ｋ．テザーＴ１４０の合成の標準手順
【化３４】
2013509434.tif 000146
【０３６７】
ステップＴ１４０−１
無水ＤＭＦ（５３５ｍＬ）中のブロミド１４０−０（２５ｇ、１２０ｍｍｏｌ、１．０当量）および保護ブロモエタノール１４０−Ａ（４８．６ｇ、２３９ｍｍｏｌ、１．７当量）の溶液に炭酸カリウム（１９．８ｇ、１４４ｍｍｏｌ、１．２当量）およびヨウ化カリウム（４．０ｇ、２４ｍｍｏｌ、０．２当量）を添加した。溶液を５５℃に加熱し、窒素下で終夜撹拌した。溶媒を減圧下で乾固するまで除去し、次いで残油を水で希釈し、Ｅｔ２Ｏ（３ｘ）で抽出した。有機相を合わせ、１Ｍクエン酸塩緩衝剤（２ｘ）およびブライン（１ｘ）で洗浄し、無水ＭｇＳＯ４で乾燥し、濾過し、次いで濾液を真空下で濃縮した。このようにして得られた粗生成物１４０−１（３２ｇ）は褐色の固体であり、さらにる精製をしないで次のステップに使用した。
ＴＬＣ：Ｒｆ：０．８３（３０／７０ＥｔＯＡｃ／ヘキサン；検出：ＵＶ、ＫＭｎＯ４）；ＨＰＬＣ／ＭＳ：傾斜Ａ４、ｔＲ＝１３．８７分、［Ｍ（＋）２］＋３６８．
【０３６８】
ステップＴ１４０−２
ＴＨＦ（６００ｍＬ）中の粗の保護アルコール１４０−１（３０．２ｇ，１２０ｍｍｏｌ，１．０当量）の溶液に、ＴＢＡＦ（ＴＨＦ中の１．０Ｍ溶液、２４０ｍｌ、２４０ｍｍｏｌ、２．０当量）を添加した。反応物を室温で１時間撹拌した。反応混合物をＥｔ２Ｏで希釈し、塩化アンモニウム飽和溶液（２ｘ）およびブライン（１ｘ）で洗浄した。有機相を無水ＭｇＳＯ４で乾燥し、濾過し、次いで濾液を真空下で濃縮した。粗の残渣をフラッシュクロマトグラフィー（２５％ＥｔＯＡｃ／ヘキサン）によって精製し、無色の油としてアルコール１４０−２（２７．２ｇ、２ステップで９０％）を得た。
ＴＬＣ：Ｒｆ：０．２７（３０／７０ＥｔＯＡｃ／ヘキサン；検出：ＵＶ、ＫＭｎＯ４）．
【０３６９】
ステップＴ１４０−３
ジオキサン（ＡＣＳ等級、３８ｍＬ）中のアルコール１４０−２（９．５ｇ、３８ｍｍｏｌ、１．０当量）および１４０−Ｂ（１０．８２ｇ、６４ｍｍｏｌ、１．７当量）の溶液にアルゴンを１５〜２０分泡立たせた。次いで、ｔＢｕ３ＰＨＢＦ４（７０７ｍｇ、０．０７当量）、再結晶ヨウ化銅（Ｉ）（１４３ｍｇ、０．０２当量）、ジクロロビス（ベンゾニトリルパラジウム（ＩＩ）（４３１ｍｇ、０．０３当量）およびジイソプロピルアミン（９．５ｍＬ、６７ｍｍｏｌ、１．７当量）を添加し、反応混合物をアルゴン下で室温で終夜撹拌した。溶液をＥｔＯＡｃで希釈し、シリカゲルパッドに通して濾過し、物質が何も溶出しなくなるまで酢酸エチルで洗浄した。濾液は減圧下で濃縮し、次いで粗の残渣をフラッシュクロマトグラフィー（３０％ＥｔＯＡｃ／ヘキサン）によって精製して、金色のシロップとしてアルキン１４０−３（６．５ｇ、５４％）を得た。
ＴＬＣ：Ｒｆ：０．２８（３０／７０ＥｔＯＡｃ／ヘキサン；検出：ＵＶ、ＫＭｎＯ４）；
ＨＰＬＣ／ＭＳ：傾斜Ａ４、ｔＲ＝７．０１分、Ｍ＋３４１．
【０３７０】
ステップＴ１４０−４
窒素下の９５％エタノール（１７１ｍＬ）中のアルキン１４０−３（６．２ｇ，１８ｍｍｏｌ，１．０当量）の溶液に、パラジウム炭素（４．０４ｇ、５０％水）を添加し、次いで水素ガスをそれへ終夜泡立たせた。１ＨＮＭＲによって示されるように、反応が完了したら、窒素を１０分間反応物に通して泡立たせ、過剰水素を取り除いた。溶液をセライトパッドに通して濾過し、物質が何も溶出しなくなるまで、酢酸エチルで洗浄した。濾液を減圧下で濃縮し、粗生成物をフラッシュクロマトグラフィー（３０％ＥｔＯＡｃ／ヘキサン）によって精製して、帯黄色の油としてＢｏｃ−Ｔ１４０ａ（４．６３ｇ、７５％）を得た。
ＴＬＣ：Ｒｆ：０．１３（２５／７５ＥｔＯＡｃ／ヘキサン；検出ＵＶ、ニンヒドリン）；ＨＰＬＣ／ＭＳ：傾斜Ａ４、ｔＲ＝７．８１分、Ｍ＋３４５；
１ＨＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ）：δ６．８−７．０（ｍ，１Ｈ，），６．０−６．７（ｍ，１Ｈ，），４．５−４．６５（ｍ，１Ｈ），３．８５−４．１（ｍ，４Ｈ），３．５５−３．７５（ｍ，１Ｈ），３．２−３．３５（ｍ，１Ｈ），２．６−２．７（ｍ，１Ｈ），２．４−２．６（ｍ，１Ｈ），１．８−２．０（ｍ，１Ｈ）１．４５（ｓ，９Ｈ），１．１５（ｄ，３Ｈ，Ｊ＝６．６Ｈｚ）．
【０３７１】
鏡像異性体テザーＢｏｃ−Ｔ１４０ｂを得るために、同一のシーケンスにおいて１４０−Ｂの鏡像異性体である１４０−Ｃを使用することができる。
【化３５】
2013509434.tif 000147
【０３７２】
Ｌ．テザーＴ１４１の合成の標準手順
【化３６】
2013509434.tif 000148
【０３７３】
ステップＴ１４１−１
ＴＨＦ（９３．５ｍＬ）中のニトリル１４１−１（６．０ｇ，１８．７ｍｍｏｌ，１．０当量）の溶液に、１０ＭＢＨ３・ＤＭＳ（２．８ｍＬ、２８．１ｍｍｏｌ、１．５当量）の溶液を添加し、結果として得られた混合物を還流しながら終夜撹拌した。反応の進行は、ＴＬＣ（２０％ＥｔＯＡｃ／ヘキサン；検出：ＵＶ、ニンヒドリン；生成物アミンは基準線にあった。）によってモニターした。完了したら、溶液を０℃に冷却し、ＭｅＯＨをゆっくり添加し、過剰ＢＨ３をクエンチした。混合物を室温で１時間撹拌し、次いで、Ｅｔ３Ｎ（３．９ｍＬ、２８．１ｍｍｏｌ、１．５当量）および（Ｂｏｃ）２Ｏ（５．１ｇ、２２．４ｍｍｏｌ、１．２当量）を添加した。結果として得られた混合物を、ＴＬＣ（２０％ＥｔＯＡｃ／ヘキサン；検出：ＵＶ、ニンヒドリン；Ｒｆ＝０．１５）によって反応をモニターしながら室温で３日撹拌した。次いで、ＮＨ４Ｃｌ飽和水溶液をゆっくり添加し、層を分離した。水相をＥｔＯＡｃで抽出し、合わせた有機相をＭｇＳＯ４で乾燥し、濾過し、濾液を真空内で濃縮した。残渣をフラッシュクロマトグラフィー（傾斜、２０％から４０％のＥｔＯＡｃ／ヘキサン）よって精製し、黄色の油として１４１−２（４．８ｇ、５３％）を得た。
ＨＰＬＣ／ＭＳ：傾斜Ａ４、ｔＲ＝１１．８６分、［Ｍ＋Ｈ］＋４２６．
【０３７４】
ステップＴ１４１−２
ＤＣＭ（２０ｍＬ）中の１４１−２（１．７ｇ、４．００ｍｍｏｌ、１．０当量）の溶液に、Ｈ２Ｏ（８１のμＬ、４．５０ｍｍｏｌ、１．１２５当量）およびデス・マーチン・ペルヨージナン（２．１ｇ、５．０ｍｍｏｌ、１．２５当量）を添加した。結果として得られた混合物を、室温で２５分撹拌した。反応の進行を、ＴＬＣ（１５％ＥｔＯＡｃ／ヘキサン；検出：ＵＶ、Ｍｏ／Ｃｅ；Ｒｆ＝０．４８．）によってモニターした。チオ硫酸ナトリウム水溶液（１０％、２５ｍＬ）をゆっくり添加した。水相を分離し、有機相を水性チオ硫酸ナトリウム（１０％、２×２５ｍＬ）で洗浄し、ＭｇＳＯ４で乾燥し、濾過し、濾液を減圧下で濃縮した。残渣を、フラッシュクロマトグラフィー（傾斜、５％から１５％ＥｔＯＡｃ／ヘキサン）によって精製し、無色の油として１４１−３（１．４ｇ、８２％）を得た。
ＨＰＬＣ／ＭＳ：傾斜Ａ４、ｔＲ＝１２．３８分、［Ｍ＋Ｎａ］＋４４６．
【０３７５】
ステップＴ１４１−３
ＤＣＭ（２６ｍＬ）中の１４１−３（１．４ｇ、３．３０ｍｍｏｌ、１．０当量）の溶液に、オルソギ酸トリメチル（１．１ｍＬ、９．９０ｍｍｏｌ、３当量）、エチレングリコール（１．８ｍＬ、３３．０ｍｍｏｌ、１０当量）およびＡＰＴＳ（６２ｍｇ、０．３３ｍｍｏｌ、０．１当量）を添加した。結果として得られた混合物を室温で２０時間撹拌した。反応の進行を、ＴＬＣ（４０％ＥｔＯＡｃ／ヘキサン；検出：ＵＶ、Ｍｏ／Ｃｅ；Ｒｆ＝０．１４．）およびＨＰＬＣによってモニターした。ＮａＨＣＯ３飽和水溶液（３０ｍＬ）を添加し、結果として得られた水相をＤＣＭ（３×３０ｍＬ）で抽出した。合わせた有機相をＭｇＳＯ４で乾燥し、濾過し、濾液を真空内で濃縮した。残渣を、フラッシュクロマトグラフィー（傾斜、４０％から６０％のＥｔＯＡｃ／ヘキサン）によって精製し、無色の油としてＢｏｃ−Ｔ１４１（１．１ｇ、９２％）を得た。
ＨＰＬＣ／ＭＳ：傾斜Ａ４、ｔＲ＝６．４５分、Ｍ＋３５３；
１ＨＭＲ（ＣＤＣｌ３，ｐｐｍ）：δ７．４２（ｄｄ，Ｊ＝７．６１，１．７６Ｈｚ，１Ｈ），７．２７（ｄｔ，Ｊ＝７．７９，７．７６，１．８０Ｈｚ，１Ｈ），７．００−６．８５（ｍ，２Ｈ），４．９７（ｂｒ，１Ｈ），４．２０−３．６５（ｍ，９Ｈ），３．１７（ｄｄ，Ｊ＝１２．０４，５．９８Ｈｚ，２Ｈ），２．３４（ｔ，Ｊ＝６．４３，６．４３Ｈｚ，２Ｈ），１．４２（ｓ，９Ｈ）．
【０３７６】
Ｍ．テザーＴ１４２の合成の標準手順
【化３７】
2013509434.tif 000149
【０３７７】
ステップ１４２−１
ＤＣＭ（４９．５ｍＬ）中の１４２−１（４．２ｇ，９．９ｍｍｏｌ，１．０当量）の溶液にＨ２Ｏ（２００μＬ、１１．１ｍｍｏｌ１．１３当量）およびデス・マーチン・ペルヨージナン（６．２８ｇ、１４．８ｍｍｏｌ、１．５当量）を添加した。反応物を室温で２時間撹拌した。デス・マーチン・ペルヨージナンの第２の部分（１．０５ｇ、２．５ｍｍｏｌ、０．２５当量）を添加し、反応物をさらに２時間撹拌した。結果として得られた白色沈殿物は濾過によって取り除きＤＣＭですすいだ。濾液およびすすぎ液を合わせ、１０％チオ硫酸ナトリウム水溶液で洗浄し、ＭｇＳＯ４で乾燥し、濾過し、濾液が乾固するまで真空内で濃縮した。残渣を、フラッシュクロマトグラフィー（傾斜、１０％から１５％から２０％のＥｔＯＡｃ／ヘキサン）によって精製し、白色固形物として１４２−２（３．４ｇ、８２．８％）を得た。
ＨＰＬＣ／ＭＳ：傾斜Ａ４、ｔＲ＝１２．１７分、［Ｍ＋Ｎａ］＋４４６．
【０３７８】
ステップ１４２−２
ＤＣＭ（４１ｍＬ）中の１４２−２（３．４６ｇ，８．２ｍｍｏｌ，１．０当量）、オルソギ酸トリメチル（２．７ｍＬ，２４．５ｍｍｏｌ，３．０当量）およびエチレングリコール（４．８ｍＬ、８１．８ｍｍｏｌ、１０．０当量）の溶液に、ＰＴＳＡ（１５４ｍｇ、０．８１ｍｍｏｌ、０．１当量）を添加し、反応物を室温で４時間撹拌した。ＮａＨＣＯ３（飽和）の水溶液を添加し、有機相を分離した。水相をＤＣＭ（２ｘ）で抽出し、合わせた有機相をＭｇＳＯ４で乾燥し、濾過し、濾液は真空内で除去した。残渣を、フラッシュクロマトグラフィー（傾斜、４０％、５０％、６０％、７５％のＥｔＯＡｃ／ヘキサン）によって精製し、白色固形物としてＢｏｃ−Ｔ１４２（２．１８ｇ、７５．６％）を得た。
ＨＰＬＣ／ＭＳ：傾斜Ａ４、ｔＲ＝６．３９分、［Ｍ＋Ｈ］＋３５４；
１ＨＮＭＲ（ＣＤＣｌ３，ｐｐｍ）：δ７．２９−７．１７（２Ｈ，ｍ），６．９３−６．８４（２Ｈ，ｍ），５．００（１Ｈ，ｂｓ），４．１５−４．０８（３Ｈ，ｂｍ），３．９８−３．８５（５Ｈ，ｍ），３．６４（１Ｈ，ｂｓ），３．２８（１Ｈ，ｂｄ），３，１０（２Ｈ，ｍ），１．４５（９Ｈ，ｓ）．
【０３７９】
Ｎ．テザーＴ１４３の合成の標準手順
【化３８】
2013509434.tif 000150
【０３８０】
ステップＴ１４３−１
窒素雰囲気下で０℃で、ＮａＨ（鉱油中の６０％、２．３２ｇ、５８ｍｍｏｌ、１．０当量）を、ＤＭＦ（２００ｍＬ）中の２−ヒドロキシフェネチルアルコール（１４３−０、Ａｌｄｒｉｃｈ、８．０ｇ、５８ｍｍｏｌ、１．０当量）の十分撹拌した溶液に分割して添加した。撹拌を０℃で１０分間継続し、次いでブロモアルカン（１４３−Ａ、２０．８ｇ。８７ｍｍｏｌ、１．５当量）、続いてＫＩ（１．９ｇ、１１．６ｍｍｏｌ、０．２当量）を添加し、反応物を終夜撹拌し室温に徐々に温めた。ＨＰＬＣは、アルコール出発物質の消失をモニターするために使用することができる。溶液を、真空内で濃縮し（真空ポンプ、浴温約５０℃）、次いでＥｔＯＡｃ（３００ｍＬ）を添加した。有機相を、ＮａＨＣＯ３飽和水溶液（２×１００ｍＬ）、水（１×１００ｍＬ）、ブライン（１×１００ｍＬ）で洗浄し、次いで乾燥（ＭｇＳＯ４）し、濾過し、濾液を減圧下で濃縮した。結果として得られた液体残渣をフラッシュクロマトグラフィー（２０％ＥｔＯＡｃ／ヘキサン）によって精製し、わずかに黄色の液体として１０．２ｇの１４３−１（５９％）を得た。この反応は８６３μＬのアルコールからでも行い、１．７０ｇの生成物（８３％）を得た。アルキル化はまた、塩基としてのＫ２ＣＯ３および７０℃での加熱を用いて行い、５７％の収率で１４３−Ｂ１を得た。
ＴＬＣ：Ｒｆ＝０．２９（２０％ＥｔＯＡｃ／ヘキサン；検出：ＵＶ、ＫＭｎＯ４）；ＨＰＬＣ／ＭＳ：傾斜Ａ４、ｔＲ＝９．５０分、［Ｍ＋Ｈ］＋２９７．
【０３８１】
ステップＴ１４３−２
０℃で窒素雰囲気下でトシルクロリド（７．６１ｇ、３９．９ｍｍｏｌ、１．０５当量）をジクロロメタン（１２７ｍＬ）中の１４３−１（１１．３ｇ、３８．０ｍｍｏｌ、１．０当量）、ＤＭＡＰ（４６４ｍｇ、３．８ｍｍｏｌ、０．１当量）およびトリエチルアミン（５．８１ｍＬ、４１．８ｍｍｏｌ、１．１当量）の撹拌した溶液に分割して添加した。撹拌は、０℃で２時間（その間、いくらかの塩が沈殿した）、次いで室温で１時間継続した。ＴＬＣモニターが１４３−１がすべて使い尽くされたことを示すとき、ジクロロメタン１００ｍＬを添加し、溶液をＮａＨＣＯ３飽和水溶液（２×１００ｍＬ）、水（１×１００ｍＬ）、ブライン（１×１００ｍＬ）で洗浄し、次いで乾燥（ＭｇＳＯ４）し、濾過し、濾液を減圧下で濃縮した。液体残渣を、フラッシュクロマトグラフィー（２０％ＥｔＯＡｃ／ヘキサン）によって精製し、黄色のシロップとして１４．６ｇ（８５％）の１４３−２を得た。この反応物はまた、１００ｍｇのアルコールからも行い、１３８ｍｇの生成物（９１％）を得た。
ＴＬＣ：Ｒｆ＝０．３５（２０％ＥｔＯＡｃ／ヘキサン；検出：ＵＶ、ＫＭｎＯ４）；
１Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３，３００ＭＨｚ）：δ０．０６（６Ｈ，ｓ），０．８９（９Ｈ，ｓ），２．４２（３Ｈ，ｓ），２．９７（３Ｈ，ｔ，Ｊ＝７．０），３．８５−３．９５（４Ｈ，重なり），４．１２（２Ｈ，ｔ，Ｊ＝７．０），６．７５−６．８７（２Ｈ，ｍ），７．０４−７．０９（１Ｈ，ｍ），７．１４−７．２５（３Ｈ，ｍ），７．６３−７．６９（２Ｈ，ｍ）．
【０３８２】
ステップＴ１４３−３
１４３−Ｂ（以下の合成を参照、６．８２ｇ、４６．７ｍｍｏｌ、１．４４当量）を、ＤＭＦ（６５ｍＬ）中の１４３−２（１４．６ｇ、３２．４ｍｍｏｌ、１．０当量）、ＫＩ（１３．５ｇ、８１ｍｍｏｌ、２．５当量）およびジイソプロピルエチルアミン（８．４６ｍＬ、４８．６ｍｍｏｌ、１．５当量）の溶液に一度に添加した。結果として得られた懸濁液をＡｃｅ  Ｔｕｂｅ（Ａｃｅ  Ｇｌａｓｓ，Ｉｎｃ．，１５０ｍＬ容量）中で室温で３０分間真空下で撹拌し、ＤＭＦを脱気した。ねじ蓋（テフロン（登録商標）被覆）を交換し、撹拌しながら（加熱すると、懸濁液は溶液になる。）、反応物を１００℃に終夜加熱した。その後、ＨＰＬＣはトシラートの消失を示した。溶液を冷却（室温でいくらかの塩が沈殿した。）し、ＮａＨＣＯ３飽和水溶液（３００ｍＬ）を添加した。これをＥｔＯＡｃ（３×１００ｍＬ）で抽出し、合わせた有機層をブライン（５０ｍＬ）で洗浄し、乾燥（ＭｇＳＯ４）し、濾過し、濾液を真空内（残留のＤＭＦを除去する真空ポンプ）で濃縮した。フラッシュクロマトグラフィー（２０％ＥｔＯＡｃ／ヘキサン）による精製によって、黄色の油として２．７０ｇの１４３−３（２０％）が得られた。この反応物はまた、１３８ｍｇの１４３−２からでも行い、８９ｍｇの生成物（６８％）を得た。
ＴＬＣ：Ｒｆ＝０．３５（２０％ＥｔＯＡｃ／ヘキサン；検出：ＵＶ、ＫＭｎＯ４）；
ＨＰＬＣ／ＭＳ：傾斜Ａ４、ｔＲ＝８．０９、１１．０５分（可能な回転異性体）、［Ｍ＋Ｈ］＋４２５；
１ＨＮＭＲ（ＣＤＣｌ３，３００ＭＨｚ）：δ０．１０（６Ｈ，ｓ），０．９１（９Ｈ，ｓ），１．４６（９Ｈ，ｓ），２．１７（２Ｈ，ｓ），２．６０（２Ｈ，ｓ），２．８５（３Ｈ，ｓ），３．９８−４．０５（４Ｈ，重なり），５．６０−５．７５（１Ｈ，ｂｒｓ），６．８０−６．９０（２Ｈ，ｍ），７．１３−７．１９（２Ｈ，ｍ）．
【０３８３】
ステップＴ１４３−４
ＴＢＡＦ（ＴＨＦ中１Ｍ，７．０ｍＬ，７．０ｍｍｏｌ，１．１当量）を、０℃のＴＨＦ（３２ｍＬ）中の１４３−３（２．７０ｇ，６．３６ｍｍｏｌ，１．０当量）の撹拌した溶液に滴下して添加した。撹拌は０℃で２時間継続し、そのときＴＬＣは出発物質が残っていないことを示した。溶液を、真空内で（浴温、室温）濃縮し、結果として得られた黄色の油をフラッシュクロマトグラフィー（傾斜、１０％、５０％、７０％のＥｔＯＡｃ／ヘキサン）によって精製して、わずかに黄色の油として１４３−４を得た。これは冷蔵すると固化する（１．７２ｇ、８７％）。この反応はまた、８９ｍｇの１４３−３から行い、６１ｍｇの生成物（９４％）を得た。
ＴＬＣ：Ｒｆ＝０．１０（２０％ＥｔＯＡｃ／ヘキサン；検出：ＵＶ、ＫＭｎＯ４）；ＨＰＬＣ／ＭＳ：傾斜Ａ４、ｔＲ＝５．７２分、［Ｍ＋Ｈ］＋３１１；
１Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３，３００ＭＨｚ）：δ１．４７（９Ｈ，ｓ），２．６３（３Ｈ，ｂｒｓ），２．８０−２．９５（４Ｈ，重なり），３．０９−３．２５（１Ｈ，ｂｒｓ），３．９５−４．０３（２Ｈ，ｂｒｓ），４．６４−４．１０（２Ｈ，ｍ），５．７５−５．７９（１Ｈ，ｂｒｓ），６．８１−６．９２（２Ｈ，ｍ），７．１２−７．２１（２Ｈ，ｍ）．
【０３８４】
Ｏ．試薬１４３−Ｂの合成の標準手順
【化３９】
2013509434.tif 000151
【０３８５】
ステップＴ１４３−５
多水和ヒドラジン（１４３−Ｂ１，Ａｌｄｒｉｃｈ，未知量の水を含む；４７ｇ、およそ７３４ｍｍｏｌ、１．０当量）を０℃で１５分間イソプロパノール（１８８ｍＬ）中で撹拌した。次いで、イソプロパノール（９４ｍＬ）中のＢｏｃ２Ｏ（８０ｇ、３６７ｍｍｏｌ、０．５当量）を０℃で第１の溶液に滴下して添加した。この第２の溶液の添加で溶液は濁り、ガス発生が観察された。これを０℃で２０分撹拌し、次いで真空内で濃縮し（浴温、４５℃）、溶液は加熱すると透明になった。ジクロロメタン（２００ｍＬ）を残渣に添加し、溶液をＭｇＳＯ４で乾燥し、濾過し、濾液は真空内で濃縮して、無色のシロップとして４６．７ｇの１４３−Ｂ２を得た。これは冷蔵庫内で保管すると凝固した。これは次のステップに使用するのに、通常、十分に純粋であった（ＴＬＣ、１ＨＮＭＲ）。フラッシュクロマトグラフィー（ＭｅＯＨ／ジクロロメタン）はまた、高純度の試料を得るために実施し得る。
１Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３，３００ＭＨｚ）：δ１．４１（９Ｈ，ｓ），３．６９（２Ｈ，ｂｒｓ），５．８０（１Ｈ，ｂｒｓ）．
【０３８６】
ステップＴ１４３−６
ゴムセプタムをはめた丸底フラスコを使用して、ベンズアルデヒド（３５．７ｍＬ、３５３ｍｍｏｌ、１．０当量）を、ジクロロメタン（１Ｌ）中の１４３−Ｂ２（４６．７ｇ、３５３ｍｍｏｌ、１．０当量）および粉末状４Ａモレキュラーシーブ（Ａｌｄｒｉｃｈで活性化、受領のまま使用、９．３ｇ、２０重量％）の撹拌した懸濁液に滴下して添加した。反応は取り出したアリコートの１ＨＮＭＲによってモニターし、５時間後に完了を示した。モレキュラーシーブを濾過によって除去し、濾液を真空内で濃縮し、蒸発する間に生成物は沈殿し、白色固形物として１４３−Ｂ３（７８．１ｇ、定量的）を得た。
これは、次の反応にそのままで使用するのに十分に純粋であった。
ＴＬＣ：Ｒｆ＝０．７０（５％ＭｅＯＨ／ＣＨ２Ｃｌ２；検出：ＫＭｎＯ４、ＵＶ）．
【０３８７】
ステップＴ１４３−７
シアノ水素化ホウ素ナトリウム（４４．４ｇ、７０６ｍｍｏｌ、２．０当量）を、室温のＭｅＯＨ／ＡｃＯＨ（９／１、１Ｌ）中の１４３−Ｂ３（７８．１ｇ、３５３ｍｍｏｌ、１．０当量）の撹拌した溶液に分割して添加した。濁った溶液を、１４３−Ｂ３の添加でゆっくり透明化し、Ｈ２発生を伴った。反応物を室温で終夜撹拌した（ＴＬＣおよび１ＨＮＭＲは完了を示した。）。これを真空内で濃縮乾固し（トルエンとの少なくとも１つの共蒸発でＡｃＯＨを除去した）、残渣を飽和水溶液ＮａＨＣＯ３（９００ｍＬ）に溶解した。水層をＣＨ２Ｃｌ２（３×３００ｍＬ）で抽出し、合わせた抽出物を、乾燥（ＭｇＳＯ４）し、濾過し、濾液を真空内で濃縮し、無色のシロップとして１４３−Ｂ４（６０．４ｇ、７６％）を得た。これは、次の反応にそのままで使用するのに十分に純粋であった。
ＴＬＣ：Ｒｆ＝０．４５（２％ＭｅＯＨ／ＣＨ２Ｃｌ２；検出：ＫＭｎＯ４、ＵＶ）；
１Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３，３００ＭＨｚ）：δ１．４２（９Ｈ，ｓ），３．９８（２Ｈ，ｓ），６．０１（１Ｈ，ｂｒｓ），７．２４−７．４１（５Ｈ，重なり）．
【０３８８】
ステップＴ１４３−８
パラホルムアルデヒド（２７ｇ、２７０ｍｍｏｌ、２．０当量）、シアノ水素化ホウ素ナトリウム（２１ｇ、３３７ｍｍｏｌ、２．５当量）およびＡｃＯＨ（７．７３ｍＬ、１３５ｍｍｏｌ、１．０当量）を、室温でゴムセプタムをはめた丸底フラスコ内のＭｅＯＨ（４５０ｍＬ）中の１４３−Ｂ４（３０ｇ、１３５ｍｍｏｌ、１．０当量）の撹拌した溶液に連続して添加した。反応物を室温で終夜撹拌し、そのとき取り出したアリコートの１ＨＮＭＲは、反応の完了を示した（ＴＬＣによって追跡するのは困難であった）。これを、真空内で濃縮し（浴温約３０℃）、白色ゴム状物を得た。これをＮａＨＣＯ３飽和水溶液（１Ｌ）に溶解した。水層を、ＣＨ２Ｃｌ２（３×５００ｍＬ）で抽出し、乾燥（ＭｇＳＯ４）し、濾過し、濾液を減圧下で濃縮して、白色固形物として１２．１ｇの１４３−Ｂ５（３８％）を得た。これは、次の反応にそのままで使用するのに十分に純粋であることがＮＭＲおよびＴＬＣによって示された。
ＴＬＣ：Ｒｆ＝０．３５（２％ＭｅＯＨ／ＣＨ２Ｃｌ２；検出：ＫＭｎＯ４、ＵＶ）；
１ＨＮＭＲ（ＣＤＣｌ３，３００ＭＨｚ）：δ１．４０（９Ｈ，ｓ），２．６１（３Ｈ，ｓ），３．９２（２Ｈ，ｂｒｓ），４．０２（１Ｈ，ｂｒｓ），５．４２（１Ｈ，ｂｒｓ），７．２６−７．４０（５Ｈ，重なり）。
【０３８９】
ステップＴ１４３−９
アルゴンを、室温で３０分間無水アルコール（２５６ｍＬ）中の１４３−Ｂ５（１２．１ｇ，５１．３ｍｍｏｌ，１．０当量）の溶液に通して泡立たせた。次いで、１０％Ｐｄ／Ｃ（２．７２ｇ、２．５６ｍｍｏｌ、０．０５当量）を、撹拌した溶液に注意深く添加し、水素を３０分間混合物に通して泡立たせた。この後、Ｈ２の風船をゴムセプタムで密封した丸底フラスコにはめ、反応物を室温で終夜撹拌した。セライトのパッドに通す濾過、ＣＨ２Ｃｌ２中の１０％ＭｅＯＨでの洗浄、続いて真空内で濾液の濃縮によって、無色の油として１４３−Ｂ（７．４９ｇ、９１％）が得られ、ｌこれは静置すると凝固した。１ＨＮＭＲおよびＴＬＣは、この物質が、得られたまま使用するのに十分に純粋であることを示した。
ＴＬＣ：Ｒｆ＝０．６０（２％ＭｅＯＨ／ＣＨ２Ｃｌ２；検出：ＫＭｎＯ４、ＵＶ）；
１Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３，３００ＭＨｚ）：δ１．４１（９Ｈ，ｓ），２．６１（３Ｈ，ｓ），６．０１（１Ｈ，ｂｒｓ）．
【０３９０】
Ｐ．テザーＴ１４４の合成の標準手順
【化４０】
2013509434.tif 000152
【０３９１】
ステップＴ１４４−１
ＭｅＩ（３７．６ｍＬ）中の５９−４（Ｔ５９の標準手順に記載されたように合成した、４．０ｇ、９．４ｍｍｏｌ、１．０当量）の溶液に、Ａｇ２Ｏ（２１．８ｇ、９４ｍｍｏｌ、１０当量）を添加し、反応物を室温で２日撹拌した。固体を濾過によって除去し、ＭｅＩですすいだ。濾液に第２の部分のＡｇ２Ｏ（２１．８ｇ、９４ｍｍｏｌ、１０当量）を添加し、反応物をさらに２日撹拌した。反応のモニタリングは、ＴＬＣ（３／７、ＥｔＯＡｃ／ヘキサン）によって行った。溶液を濾過し、残渣をＤＣＭですすいだ。濾液は真空内で濃縮し、粗の残渣をフラッシュクロマトグラフィー（傾斜、２０％から２５％のＥｔＯＡｃ／ヘキサン）によって精製し、保護メチルエーテル中間体（２．２ｇ、５３．３％）を得た。さらに、いくらかの出発物質を回収した（１．６ｇ）。
ＨＰＬＣ／ＭＳ：傾斜Ａ４、ｔＲ＝１３．５４分、［Ｍ＋Ｈ］＋４４０．
【０３９２】
ステップＴ１４４−２
ＴＨＦ（２０ｍＬ）中の保護メチルエーテル中間体（２．２ｇ，５．０ｍｍｏｌ，１．０当量）の溶液に、ＴＨＦ中の１．０ＭＴＢＡＦ溶液（７．５ｍＬ、７．５ｍｍｏｌ、１．５当量）を添加し、反応物を室温で１．５時間撹拌した。ブラインを添加し、水相をＭＴＢＥ（３ｘ）で抽出した。合わせた有機相をＭｇＳＯ４で乾燥し、濾過し、濾液を真空内で濃縮乾固した。残渣を、フラッシュクロマトグラフィー（傾斜、１／１から３／２ＥｔＯＡｃ／ヘキサン）によって精製し、Ｂｏｃ−Ｔ１４４ｂ（１．６ｇ、１００％）を得た。
ＨＰＬＣ／ＭＳ：傾斜Ａ４、ｔＲ＝６．４３分、［Ｍ＋Ｈ］＋３２６；
１ＨＮＭＲ（ＣＤＣｌ３，ｐｐｍ）：δ７．２２−７．１６（２Ｈ，ｍ），６．９３−６．８３（２Ｈ，ｍ），５．０５（１Ｈ，ｂｓ），４．１６−４．０７（３Ｈ，ｍ），４．００−３．９８（２Ｈ，ｍ），３．５９（１Ｈ，ｂｓ），３．３３（３Ｈ，ｓ），３．０６−２．９（１Ｈ，ｍ），２．９０−２．７９（２Ｈ，ｍ），１．４４（９Ｈ，ｓ）．
【０３９３】
鏡像異性体テザー、Ｂｏｃ−Ｔ１４４ａは、鏡像異性体前駆体５９−５から入手することができる。先に示したように、次にはこの化合物は、ＡＤ−ｍｉｘαを使用すること以外、５９−４について記載されたように合成する。
【化４１】
2013509434.tif 000153
【０３９４】
Ｑ．テザーＴ１４５の合成の標準手順
【化４２】
2013509434.tif 000154
【０３９５】
ステップＴ１４５−１
ＤＭＦ（Ｄｒｉｓｏｌｖ、５０ｍＬ）中の７−ヒドロキシインダノン（１４５−０、２．０ｇ、１３．５ｍｍｏｌ、１．０当量）およびベンジル２−ブロモエチルエーテル（１４５−Ａ、３．１６ｍＬ、２０．３ｍｍｏｌ、１．５当量）の溶液に、炭酸カリウム（２．３３ｇ、１６．９ｍｍｏｌ、１．２５当量）およびヨウ化カリウム（４４８ｍｇ、２．７０ｍｍｏｌ、０．２０当量）を添加した。溶液を５５℃に加熱し、窒素下で終夜撹拌した。反応物を水（２００ｍＬ）で希釈し、混合物を酢酸エチル（３×５０ｍＬ）で抽出した。有機相を合わせ、硫酸マグネシウムで乾燥し、濾過し、濾液を減圧下で蒸発乾固させた。残渣を、フラッシュクロマトグラフィー（３０％ＥｔＯＡｃ／ヘキサン）によって精製し、白色固形物として１４５−１（３．０８、８１％）を得た。
【０３９６】
ステップＴ１４５−２
ジベンジルアミン（２．６ｍＬ、１３．６ｍｍｏｌ、１．２５当量）をメタノール（３０ｍＬ）に溶解し、次いで塩酸（ジオキサン中の４Ｍ、５ｍＬ、２０ｍｍｏｌ、１６当量）を添加した。混合物を減圧下で濃縮し、ジベンジルアミン塩酸塩を得た。この物質を酢酸（４０ｍＬ）に溶解し、１４５−１（３．０８ｇ、１０．９ｍｍｏｌ、１．０当量）およびパラホルムアルデヒド（４２５ｍｇ、１４．２ｍｍｏｌ、１．３当量）を添加し、混合物を６０℃で５時間撹拌した。反応物を減圧下で濃縮し、次いでＤＣＭ（５０ｍＬ）を添加し、混合物をｐＨが９になるまで重炭酸ナトリウム飽和水溶液で処理した。水層を廃棄し、有機層を硫酸マグネシウムで乾燥し、濾過し、濾液を減圧下で濃縮した。残渣をフラッシュクロマトグラフィー（１０％ＭＴＢＥ／トルエン）によって精製し、帯黄色の油として１４５−２を得た。この物質はジベンジルアミンを含むが、次のステップに使用するのに適切であった。
ＨＰＬＣ／ＭＳ：特別条件、ｔＲ＝５．６３分、［Ｍ＋Ｈ］＋４９２。
【０３９７】
ステップＴ１４５−３
１４５−２（４．４７ｇ、９．１０ｍｍｏｌ、１．０当量）をＴＨＦ（７５ｍＬ）に溶解し、−７８℃に冷却し、次いで、ＬＡＨ（０．１７５ｇ、４．５５ｍｍｏｌ、０．５当量）で２時間処理した。その時に、水酸化カリウムの２０％水溶液（５０ｍＬ）を添加し、混合物を酢酸エチル（３ｘ）で抽出した。合わせた有機相を、硫酸マグネシウムで乾燥し、濾過し、濾液を減圧下で濃縮し、１４５−３を得た。生成物および出発物質がＴＬＣまたはＨＰＬＣ分析によって区別できないので、ＭＳ分析を反応の完了について点検しなければならない。
ＨＰＬＣ／ＭＳ：特別条件、ｔＲ＝５．７０分、［Ｍ＋Ｈ］＋４９４。
【０３９８】
ステップＴ１４５−４
先のステップからの１４５−３（３．７８ｇ）を、９５％エタノールおよび酢酸（１００ｍＬ、９：１）の混合物に溶解した。パラジウム炭（３．７８ｇ、１０％ｗ／ｗ、５０％含湿）、および混合物を水素ガスの１気圧（大気圧）に曝露した。３日後、混合物を、セライトに通して濾過し、濾過ケーキを酢酸および９５％エタノールで洗浄した。溶液を低い熱（浴温≦４０℃）で減圧下で除去し、１４５−４を得た。
ＨＰＬＣ／ＭＳ：特別条件、ｔＲ＝２．３４分、［Ｍ＋Ｈ］＋２２４。
【０３９９】
ステップＴ１４５−５
先のステップから得られた１４５−４をＤＣＭ（８０ｍＬ）に溶解し、パラジウム炭（５００ｍｇ、１０％ｗ／ｗ、５０％含湿）およびｐ−トルエンスルホン酸（２．９ｇ、１５．３４ｍｍｏｌ、２当量）を添加し、混合物を１気圧（大気圧）の水素ガスに曝露した。
２時間後、混合物をセライトに通して濾過し、濾過ケーキをＴＨＦおよび水（２００ｍＬ、１：１）の混合物で洗浄した。炭酸ナトリウム（４．３ｇ、４０．１ｍｍｏｌ、５．３当量）を添加し、有機溶液を減圧下で除去して、アミノ酸１４５−５の水溶液を残した。
出発物質の消失はＨＰＬＣ分析によって判断した。
ＨＰＬＣ／ＭＳ：特別条件、ｔＲ＝２．９５分、［Ｍ＋Ｈ］＋２０８。
【０４００】
ステップＴ１４５−６
１４５−４の水溶液にＴＨＦ（１００ｍＬ）およびＢｏｃ２Ｏ（２．５ｇ、１１．５ｍｍｏｌ、１．５当量）を添加した。混合物を３時間撹拌し、次いで、塩化アンモニウム飽和水溶液（４００ｍＬ）で希釈した。水相を酢酸エチル（３×１００ｍＬ）で抽出した。
合わせた有機層をブライン（５０ｍＬ）で洗浄し、硫酸マグネシウムで乾燥し、濾過し、濾液を減圧下で濃縮乾固した。残渣をフラッシュクロマトグラフィー（４０％ＥｔＯＡｃ／ヘキサン）によって精製し、対応するテザーアルコールのアセタート（１４５−６、６００ｍｇ、５ステップで１７％の全収率）と共に、無色の油としてＢｏｃ−Ｔ１４５（１．０３ｇ、５ステップで３４％の全収率）を得た。
ＨＰＬＣ／ＭＳ：特別条件、ｔＲ＝５．５７分、［Ｍ＋Ｈ］＋３０８。
１ＨＮＭＲ（ＣＤＣｌ３，３００ＭＨｚ）：δ７．１１（ｔ，１Ｈ，Ｊ＝８．０Ｈｚ，ＣＨａｒｙｌ），６．８３（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝７．０Ｈｚ，ＣＨａｒｙｌ），６．６６（ｄ，１Ｈ，ｄ＝８．０Ｈｚ，ＣＨａｒｙｌ），４．６７（ｂｓ，１Ｈ，ＮＨＢｏｃ），４．１２−４．０８（ｍ，２Ｈ，ＣＨ２Ｏ），３．９８−３．９３（ｍ，２Ｈ，ＣＨ２Ｏ），３．２３−３．１８（ｍ，１Ｈ，ＣＨＮＨＢｏｃ），３．１１−２．９９（ｍ，２Ｈ，ａｒｙｌＣＨ２），２．７５−２．５８（ｍ，３Ｈ，ＣＨ２ＣＨＣＨ２），１．４５（ｓ，９Ｈ，Ｃ（ＣＨ３）３）
【０４０１】
Ｒ．テザーＴ１４６の合成の標準手順
【化４３】
2013509434.tif 000155
【０４０２】
ステップＴ１４６−１：
ＴＨＦ（５０ｍＬ）中のＢｏｃ−Ｔ１３５（３．５ｇ、１１．０ｍｍｏｌ、１．０当量）の溶液にイミダゾール（１．５ｇ、２２．０ｍｍｏｌ、２．０当量）およびＴＢＤＭＳＣｌ（２．２１ｇ、１５．０ｍｍｏｌ、１．３当量）を添加し、ＴＬＣによってモニターしながら混合物を２時間撹拌した。次いで、溶液を、ＮＨ４Ｃｌ飽和水溶液で処理し、水相をＥｔＯＡｃ（２ｘ）で抽出した。合わせた有機相をＭｇＳＯ４で乾燥し、濾過し、濾液を減圧下で濃縮した。結果として得られた残渣を、シリカゲルパッド（１０％ＥｔＯＡｃ／９０％ヘキサン）に通して濾過し、白色固形物（１００％）として１４６−１を得た。
ＴＬＣ：Ｒｆ＝０．６０（３０％ＥｔＯＡｃ／７０％ヘキサン；検出：ＵＶ、Ｍｏ／Ｃｅ）
ＨＰＬＣ／ＭＳ：傾斜Ａ４、ｔＲ＝１３．５１分、［Ｍ］＋４２５
【０４０３】
ステップＴ１４６−２：
Ｈ２Ｏ：ｔ−ＢｕＯＨ（１：１、１０４ｍＬ）の混合液中の１４６−１（４．４６ｇ、１０．５ｍｍｏｌ、１．０当量）の溶液にＡＤ−ｍｉｘβ（１２．８ｇ）およびメタンスルホンアミド（９９８ｍｇ、１０．５ｍｍｏｌ、１．０当量）を添加し、結果として得られたオレンジ色の混合物を４℃で３６〜４８時間撹拌した。その間、色は黄色に変化する。反応の完了をＴＬＣが示したら、亜硫酸ナトリウム（１５ｇ、１２．０当量）を添加し、混合物を室温で１時間撹拌した。混合物をＥｔＯＡｃ（３ｘ）で抽出し、次いで、合わせた有機相を水およびブラインで抽出した。有機相をＭｇＳＯ４で乾燥し、濾過し、濾液を減圧下で濃縮した。残渣を、フラッシュクロマトグラフィー（５０％ＥｔＯＡｃ／５０％ヘキサン）によって精製し、黄色の油（９６％）として１４６−２を得た。
ＴＬＣ：Ｒｆ＝０．４１（５０％ＥｔＯＡｃ／５０％ヘキサン；検出：ＵＶ、ＫＭｎＯ４）
ＨＰＬＣ／ＭＳ：傾斜Ａ４、ｔＲ＝１０．６３分、［Ｍ］＋４５９、［Ｍ＋Ｎａ］＋４８２
【０４０４】
ステップＴ１４６−３：
０℃のＤＣＭ（６２ｍＬ）中の１４６−２（４．５ｇ、９．７９ｍｍｏｌ、１．０当量）の溶液にピリジン（３．１ｍＬ）およびＤＭＡＰ（６０ｍｇ、０．４９ｍｍｏｌ、０．０５当量）を添加した。次いで、ＤＣＭ（１０ｍＬ）中のトリホスゲン（２．９ｇ、９．７９ｍｍｏｌ、１．０当量）をこの混合物にゆっくり添加した。その反応物を０℃で４５分間撹拌し、そのときＴＬＣは反応の完了を示した。溶液をＮＨ４Ｃｌ飽和水溶液で処理し、有機相を分離した。水相をＥｔ２Ｏ（２ｘ）で抽出し、合わせた有機相をＮＨ４Ｃｌ飽和水溶液で抽出した。有機相をＭｇＳＯ４で乾燥し、濾過し、濾液を減圧下で濃縮した。結果として得られた残渣を、シリカゲルパッド（３０％ＥｔＯＡｃ／７０％ヘキサン）に通して濾過し、黄色の油として１４６−３（９１％）を得た。
ＴＬＣ：Ｒｆ＝０．５６（５０％ＥｔＯＡｃ／５０％ヘキサン；検出：ＵＶ、Ｍｏ／Ｃｅ）
ＨＰＬＣ／ＭＳ：傾斜Ａ４、ｔＲ＝１１．９６分、［Ｍ］＋４８５
【０４０５】
ステップＴ１４６−４：
９５％ＥｔＯＨ：アセトン（３：１、６０ｍＬ）の混合液中の１４６−３（２．４９ｇ、４．９ｍｍｏｌ、１．０当量）の溶液に、ラネーＮｉ（水中の５０％、１６ｍＬ、４９ｍｍｏｌ、１０．０当量）を添加した。反応物をＰａｒｒ水素化装置内で５００ｐｓｉの水素下に１週間撹拌した。その時に、Ｎ２を混合物に通して泡立たせて過剰水素を除去し、次いで混合物をセライトパッドに通して濾過し、ＥｔＯＡｃですすいだ。濾液の減圧下での濃縮および残渣のフラッシュクロマトグラフィー（２０％ＥｔＯＡｃ／８０％ヘキサ）によって、無色の油として１４６−４（１．１ｇ、５６％）が得られた。
ＴＬＣ：Ｒｆ＝０．２９（３０％ＥｔＯＡｃ／７０％ヘキサン；検出：ＵＶ、Ｍｏ／Ｃｅ）
ＨＰＬＣ／ＭＳ：傾斜Ａ４、ｔＲ＝１２．３５分、［Ｍ＋Ｈ］＋４４４
【０４０６】
ステップＴ１４６−５：
ＣＨ２Ｃｌ２（１６ｍＬ）中のアルコール１４６−４（１．１ｇ、２．４８ｍｍｏｌ、１．０当量）の溶液に、ＤＨＰ（２７２μＬ、２．９７ｍｍｏｌ、１．２当量）およびＰＴＳＡ（２４ｍｇ、０．１２４ｍｍｏｌ、０．０５当量）を添加した。混合物をＴＬＣでモニターしながら室温で１時間撹拌した（３０％ＥｔＯＡｃ／７０％ヘキサン；検出：ＵＶ、Ｍｏ／Ｃｅ；Ｒｆ＝０．５１）。追加のＤＨＰ（２×０．３当量）を添加して反応を完了させた。その時に、溶液をＮａＨＣＯ３飽和水溶液で処理し、次いで水相をＣＨ２Ｃｌ２で抽出した。合わせた有機相をＭｇＳＯ４で乾燥し、濾過し、濾液を減圧下で濃縮した。粗の残渣を、フラッシュクロマトグラフィー（２０％ＥｔＯＡｃ／８０％ヘキサ）によって精製し、１．２ｇの中間体二保護ジオールを得た。
【０４０７】
残渣をＴＨＦ（１６ｍＬ）に溶解し、ＴＨＦ中のＴＢＡＦの１Ｍ溶液（４．９６ｍＬ、４．９６ｍｍｏｌ、２．０当量）を添加した。混合物を室温で１時間撹拌した。反応の完了をＴＬＣが示したら、混合物をブラインで処理し、層を分離し、水相をＥｔＯＡｃで抽出した。合わせた有機相をＭｇＳＯ４で乾燥し、濾過し、濾液を減圧下で濃縮乾固した。残渣を、フラッシュクロマトグラフィー（５０％ＥｔＯＡｃ／５０％ヘキサン）よって精製し、黄色の油としてＢｏｃ−Ｔ１４６ｂ（ＴＨＰ）（７６％、３ステップ）を得た。
ＴＬＣ：Ｒｆ＝０．１２（３０％ＥｔＯＡｃ／７０％ヘキサン；検出：ＵＶ、Ｍｏ／Ｃｅ）
ＨＰＬＣ／ＭＳ：傾斜Ａ４、ｔＲ＝７．４９分、［Ｍ］＋４１３、［Ｍ＋Ｎａ］＋４３６
【０４０８】
Ｂｏｃ−Ｔ１４６ａおよびそのＴＨＰ保護誘導体を得るために、ＡＤ−ｍｉｘαを使用すること以外、上記と同一の手順に従うことができる。ＴＨＰの代わりの他の適切な保護基も、最後のステップで導入することができる。
【０４０９】
Ｓ．テザーＴ１４７の合成の標準手順
【化４４】
2013509434.tif 000156
【０４１０】
ステップＴ１４７−１
ジヒドロピラン（１３．４ｍＬ、１４６ｍｍｏｌ、１．５当量）を、２−ブロモエタノール（１０．３ｍＬ、１４６ｍｍｏｌ、１．５当量）に０℃で滴下して添加した。混合物を、０℃で３０分、次いで室温で２時間撹拌した。サルチルアルデヒド（１４７−０、１０．２ｍＬ、９７．０ｍｍｏｌ、１．０当量）、続いて炭酸カリウム（１４．６ｇ、１０６ｍｍｏｌ、１．１当量）、ヨウ化カリウム（３．１５ｇ、１９ｍｍｏｌ、０．２当量）および無水ＤＭＦ（５０ｍＬ）を、この混合物に添加した。反応物を７０℃で終夜撹拌した。溶液を室温に冷却し、エチルエーテル（２００ｍＬ）で希釈した。無機塩を濾過によって除去し、濾液をヘキサン（２００ｍＬ）で希釈した。有機層を水（３ｘ）で洗浄し、次いで減圧下で濃縮乾固した。このようにして得られた化合物１４７−１は、さらに精製をしないで次のステップに直接還元した。
ＴＬＣ：Ｒｆ＝０．１８（ＭＴＢＥ／ヘキサン、１／４；検出：ＵＶ、バニリン）
ＨＰＬＣ／ＭＳ：傾斜Ａ４、ｔＲ＝６．２７分、［Ｍ］＋２５０、［Ｍ＋Ｎａ］＋２７３
【０４１１】
ステップＴ１４７−２
粗の化合物１４７−１をＴＨＦ（２００ｍＬ）および水（２００ｍＬ）に溶解し、０℃に冷却した。この混合物に、水素化ホウ素ナトリウム（３．６７ｇ、９７ｍｍｏｌ）を添加し、反応をＴＬＣ（２０％ＥｔＯＡｃ／ヘキサン）で追跡した。１４７−１がもはや存在しなくなったら、水（４００ｍＬ）を添加し、混合物を酢酸エチル（３×１００ｍＬ）で抽出した。合わせた有機層をブラインで洗浄し、硫酸マグネシウムで乾燥し、濾過し、濾液を減圧下で濃縮した。得られた物質を、フラッシュクロマトグラフィー（４０％ＥｔＯＡｃ／ヘキサン）によって精製し、無色の油として１４７−２（１９．７ｇ、２ステップで８１％）を得た。
ＴＬＣ：Ｒｆ＝０．０８（２０％ＥｔＯＡｃ／ヘキサン；検出：ＵＶ、バニリン）
ＨＰＬＣ／ＭＳ：傾斜Ａ４、ｔＲ＝５．７９分、［Ｍ］＋２５２、［Ｍ＋Ｎａ］＋２７５
【０４１２】
ステップＴ１４７−３
１４７−２（１７．９ｇ、７１ｍｍｏｌ、１．０当量）および４臭化炭素（２３．６ｇ、７１ｍｍｏｌ、１．０当量）をＤＣＭ（５００ｍＬ）に溶解し、溶液をエチレングリコール／水／ドライアイス浴を使用して、−４５℃に冷却した。これに、トリフェニルホスフィン（１８．６ｇ、７１ｍｍｏｌ、１．０当量）を分割して、次の各添加までにすべてのトリフェニルホスフィンが溶解するのを待って、添加した。混合物を４５分撹拌し、減圧下で濃縮した。残渣をフラッシュクロマトグラフィー（ＭＴＢＥ／ＤＣＭ、１／１９）によって精製し、帯黄色の油として１４７−３（２１．９ｇ、９８％）を得た。
ＴＬＣ：Ｒｆ＝０．６８（ＭＴＢＥ／ＤＣＭ、１／９；検出：ＵＶ、バニリン）
ＨＰＬＣ／ＭＳ：傾斜Ａ４、ｔＲ＝７．５１分、［Ｍ＋Ｈ］＋３１５、［Ｍ＋Ｎａ］＋３３７、３３９
【０４１３】
ステップＴ１４７−４
トリフェニルホスフィン（１３．０ｇ、４９．４ｍｍｏｌ、１．０当量）を、トルエン（３００ｍＬ）中の１４７−３（１５．６ｇ、４９．４ｍｍｏｌ、１．０当量）の溶液に添加した。混合物を４時間還流し、次いで室温に冷却した。沈澱した固体を、微細なフリットガラス濾過器に通して濾過によって除去し、真空下で（油ポンプ）１時間乾燥して固体が得られた。ホスホニウム塩１４７−４が白色固形物（１８．７ｇ、７７％）として得られた。ＣＤＣｌ３中の１ＨＮＭＲおよびＨＰＬＣの両方によって明示されるように、このプロセスでＴＨＰ部分が除去されたことに注意のこと。これは、次のステップに記載のように、次の転換の前に置き換えなければならなかった。
ＨＰＬＣ／ＭＳ：傾斜Ａ４、ｔＲ＝５．７２分、［Ｍ］＋４１３
【０４１４】
ステップＴ１４７−５
ＡＰＴＳ（８ｍｇ，０．０２ｍｍｏｌ，０．００１当量）を、ＤＣＭ（２００ｍＬ）中の１４７−４（１８．６ｇ、３７．６ｍｍｏｌ、１．０当量）およびＤＨＰ（１７．２ｍＬ、１８８ｍｍｏｌ、５．０当量）の溶液に添加した。混合物を室温で１時間撹拌し、次いで溶媒を減圧下に除去した。残渣を真空下（油ポンプ）に置き、発泡体を得た。乾燥ＴＨＦ（Ｄｒｉｓｏｌｖ、新品瓶、４００ｍＬ）を添加し、室温で懸濁液を撹拌した。ＢｕＬｉ（ヘキサン中の１．６Ｍ、２５．１ｍＬ、３７．６ｍｍｏｌ、１．０当量）を添加し混合物を３０分間撹拌した。次いで、トリフルオロピルビン酸エチル（５．００ｍＬ、３７．６ｍｍｏｌ、１．０当量）を添加し反応物を１０分間撹拌した。混合物を水（１．４Ｌ）へ注ぎ、ＭＴＢＥ（４×２００ｍＬ）で抽出した。合わせた有機層を硫酸マグネシウムで乾燥し、濾過し、濾液を減圧下で濃縮した。残渣をフラッシュクロマトグラフィー（３０％ＥｔＯａｃ／ヘキサン）によって精製し、無色の油として１４７−５（７．４７ｇ、５１％）を得た。
ＴＬＣ：Ｒｆ＝０．５３（４０％ＥｔＯＡｃ／ヘキサン；検出：ＵＶ、バニリン）
ＨＰＬＣ：傾斜Ａ４、ｔＲ＝６．５８分（ＴＨＰ保護基の切断がいくらか観察されたことに注意のこと。）
【０４１５】
ステップＴ１４７−６
エステル１４７−５（７．４７ｇ、１９．３ｍｍｏｌ、１．０当量）をＤＣＭ（Ｄｒｉｓｏｌｖ、２００ｍＬ）に溶解し、エチレングリコール／水／ドライアイス浴を使用して、溶液を−４５℃に冷却した。ＤＩＢＡＬ−Ｈ（ＤＣＭ中１Ｍ，５８ｍＬ，５８ｍｍｏｌ，３．０当量）を溶液に添加した。反応をＴＬＣ（３０％ＭＴＢＥ／ヘキサン）によってモニターし、反応の完了が観察されるまで反応温度をゆっくり上げた。水酸化カリウム（２０％ｗ／ｖ水性、３００ｍＬ）を添加し、混合物をＤＣＭ（３×１００ｍＬ）で抽出した。合わせた有機層を硫酸マグネシウムで乾燥し、濾過し、濾液を減圧下で濃縮した。粗生成物はフラッシュクロマトグラフィー（ＭＴＢＥ／ヘキサン、３／７）によって精製し、無色の油として１４７−６（４．３３ｇ、６５％）を得た。
ＴＬＣ：Ｒｆ＝０．１１（ＭＴＢＥ／ヘキサン、１／４；検出：ＵＶ、バニリン）
ＨＰＬＣ／ＭＳ：傾斜Ａ４、ｔＲ＝７．０１分、［Ｍ］＋３４６、［Ｍ＋Ｎａ］＋３６９
ステップＴ１４７−７
【０４１６】
塩化リチウム（５８３ｍｇ、１３．８ｍｍｏｌ、１．１当量）を室温で無水ＤＭＦ（３０ｍＬ）に溶解し、次いで、１４７−６（４．３３ｇ、１２．５ｍｍｏｌ、１．０当量）および２，４，６−コリジン（１．９１ｍＬ、１４．４ｍｍｏｌ、１．１５当量）を添加し、混合物を０℃に冷却した。メタンスルホニルクロリド（新たに蒸留したものは収率を改善する、１．１２ｍＬ、１４．４ｍｍｏｌ、１．１５当量）を添加し、混合物を室温に暖め、２時間撹拌した。アジ化ナトリウム（４．０７ｇ、６２．６ｍｍｏｌ、５．０当量）を添加し、混合物を終夜撹拌した。反応物を水（４００ｍＬ）で希釈し、ＭＴＢＥ（３ｘ）で抽出した。合わせた有機層を、飽和重炭酸ナトリウム、水およびブラインで洗浄し、硫酸マグネシウムで乾燥し、濾過し、濾液を減圧下で濃縮した。残渣をフラッシュクロマトグラフィー（３０％ＭＴＢＥ／ヘキサン）によって精製した。１４７−７が無色の油（２．７０ｇ、５８％）として得られた。
ＴＬＣ：Ｒｆ＝０．３４（ＭＴＢＥ／ヘキサン、３／７；検出：ＵＶ、バニリン）
ＨＰＬＣ／ＭＳ：傾斜Ａ４、ｔＲ＝１０．２２分、［ＭＮ２］＋３４３
【０４１７】
ステップＴ１４７−８
アジド１４７−７（８３４ｍｇ、２．２５ｍｍｏｌ、１．０当量）をメタノール（２５ｍＬ）に溶解した。濃ＨＣｌ（０．２５ｍＬ）を添加し、反応物をＴＬＣ（３０％ＭＴＢＥ／ヘキサン）によってモニターした。反応がＴＬＣによって完了したら、反応物を減圧下で濃縮し、次いで真空下で（油ポンプ）乾燥した。脱保護物質（６３５ｍｇ、９８％）を、酢酸エチル（１０ｍＬ）に溶解し、次いでＢｏｃ２Ｏ（７２５ｍｇ、３．３２ｍｍｏｌ、１．５当量）およびＰｄ／Ｃ（１０％ｗ／ｗ、５０％含湿、６５ｍｇ）を添加し、混合物を５０ｐｓｉの水素下で２４時間水素化した。反応物をセライトに通して濾過し、酢酸エチルで洗浄し、合わせた濾液および洗浄液を減圧下で濃縮した。残渣をフラッシュクロマトグラフィー（４０％ＥｔＯＡｃ／ヘキサン）によって精製した。Ｂｏｃ−Ｔ１４７が無色の油（６６８ｍｇ、８３％）として得られた。
ＴＬＣ：Ｒｆ＝０．４１（ＭＴＢＥ／ヘキサン、２／３；検出：ＵＶ、ニンヒドリン）
ＨＰＬＣ／ＭＳ：傾斜Ａ４、ｔＲ＝７．１６分、［Ｍ＋Ｎａ］＋３８６
１ＨＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）：δ７．２１−７．１７（ｍ，２Ｈ，Ａｒ），６．９０−６．８０（ｍ，３Ｈ，Ａｒ＋ＮＨＢｏｃ），４．８２（ｔ，１Ｈ，Ｊ＝５．４Ｈｚ，ＯＨ），４．００（ｔ，２Ｈ，Ｊ＝５．１Ｈｚ，ＡｒＯＣＨ２），３．７３（ｑ，２Ｈ，Ｊ＝５．４Ｈｚ，ＣＨ２ＯＨ），３．２２−３．００（ｍ，２Ｈ，ＣＨ２ＮＨＢｏｃ），２．８５−２．６２（ｍ，３Ｈ，ＣＨ２Ａｒ＋ＣＨＣＦ３），１．３５（ｓ，９Ｈ，Ｃ（ＣＨ３）３）．
【０４１８】
Ｔ．テザーＴ１４８の合成の標準手順
【化４５】
2013509434.tif 000157
【０４１９】
ステップＴ１４８−１：
ＴＨＦ（４２ｍＬ）中のＢｏｃ−Ｔ１５６ａ（２．５７ｇ、８．３６ｍｍｏｌ、１．０当量）の溶液に、イミダゾール（１．１４ｇ、１６．７ｍｍｏｌ、２．０当量）およびＴＢＤＭＳＣｌ（１．６４ｇ、１０．９ｍｍｏｌ、１．３当量）を添加し、混合物をＴＬＣによってモニターしながら２時間撹拌した。次いで、溶液をＮＨ４Ｃｌ飽和水溶液で処理し、水相をＥｔＯＡｃ（３ｘ）で抽出した。合わせた有機相をＭｇＳＯ４で乾燥し、濾過し、濾液を減圧下で濃縮した。結果として得られた残渣をフラッシュクロマトグラフィー（１５％ＥｔＯＡｃ／８５％ヘキサン）によって精製し、無色の油として１４８−１（１００％）を得た。
ＴＬＣ：Ｒｆ＝０．５４（２５％ＥｔＯＡｃ／７５％ヘキサン；検出：ＵＶ、バニリン）
ＨＰＬＣ／ＭＳ：傾斜Ａ４、ｔＲ＝１３．７２分、［Ｍ］＋４２１、［Ｍ＋Ｎａ］＋４４４
【０４２０】
ステップＴ１４８−２：
Ｈ２Ｏ：ｔ−ＢｕＯＨ（１：１、６６ｍＬ）の混合液中の１４８−１（２．８０ｇ、６．６０ｍｍｏｌ、１．０当量）の溶液にＡＤ−ｍｉｘβ（８．１ｇ）およびメタンスルホンアミド（６３２ｍｇ、６．６０ｍｍｏｌ、１．０当量）を添加し、結果として得られたオレンジ色の混合物を４℃で４日間撹拌した。反応の完了をＴＬＣが示したら、亜硫酸ナトリウム（１５．８ｇ、１２５．４ｍｍｏｌ、１９．０当量）を添加し、混合物を室温で１時間撹拌した。水を添加し、混合物をＥｔＯＡｃ（３ｘ）で抽出し、次いで、合わせた有機相を水およびブラインで抽出した。有機相をＭｇＳＯ４で乾燥し、濾過し、濾液を減圧下で濃縮した。残渣を、フラッシュクロマトグラフィー（傾斜、３０％から５０％のＥｔＯＡｃ／ヘキサン）によって精製し、無色の油として１４８−２（２．６０ｇ、８７％）を得た。
ＴＬＣ：Ｒｆ＝０．３２（３０％ＥｔＯＡｃ／７０％ヘキサン；検出：ＵＶ、バニリン）
ＨＰＬＣ／ＭＳ：傾斜Ａ４、ｔＲ＝１１．２５分、［Ｍ＋Ｈ］＋４５６
【０４２１】
ステップＴ１４８−３：
０℃のＤＣＭ（３０ｍＬ）中の１４８−２（２．６ｇ、５．７ｍｍｏｌ、１．０当量）の溶液にピリジン（２．０ｍＬ）およびＤＭＡＰ（３５ｍｇ、０．２９ｍｍｏｌ、０．０５当量）を添加した。次いで、ＤＣＭ（５ｍＬ）中のトリホスゲン（１．７ｇ、５．７ｍｍｏｌ、１．０当量）をこの混合物にゆっくり添加した。反応物を０℃で１時間撹拌し、このとき、ＴＬＣは反応の完了を示した。溶液をＮＨ４Ｃｌ飽和水溶液で処理し、有機相を分離した。水相をＤＣＭ（３ｘ）で抽出した。合わせた有機相をＭｇＳＯ４で乾燥し、濾過し、濾液を減圧下で濃縮した。結果として得られた残渣を、シリカゲルパッド（３０％ＥｔＯＡｃ／７０％ヘキサン）に通して濾過し、黄色の油として１４８−３（２．７ｇ、１００％）を得た。
ＴＬＣ：Ｒｆ＝０．５３（３０％ＥｔＯＡｃ／７０％ヘキサン；検出：ＵＶ、バニリン）
ＨＰＬＣ／ＭＳ：傾斜Ａ４、ｔＲ＝１２．００分、［Ｍ］＋４８１
【０４２２】
ステップＴ１４８−４：
９５％ＥｔＯＨ：アセトン（３：１，８０ｍＬ）の混合液中の１４８−３（３．１ｇ、６．４ｍｍｏｌ、１．０当量）の溶液にラネーＮｉ（水中５０％、７．５ｍＬ、６４．０ｍｍｏｌ、１０．０当量）を添加した。水素を２日間溶液へ泡立たせた。その時、Ｎ２を混合物に通して泡立たせ過剰水素を除去し、次いで混合物をセライトパッドに通して濾過し、ＥｔＯＡｃですすいだ。濾液の減圧下での濃縮および残渣のフラッシュクロマトグラフィー（傾斜、２０％から２５％のＥｔＯＡｃ／ヘキサン）によって、無色の油として１４８−４（１．４ｇ、５０％）が得られた。
ＴＬＣ：Ｒｆ＝０．４４（３０％ＥｔＯＡｃ／７０％ヘキサン；検出：ＵＶ、バニリン）
ＨＰＬＣ／ＭＳ：傾斜Ａ４、ｔＲ＝１２．６９分、［Ｍ＋Ｈ］＋４４０
【０４２３】
ステップＴ１４８−５：
ＣＨ２Ｃｌ２（３０ｍＬ）中のアルコール１４８−４（１．４ｇ，３．２ｍｍｏｌ，１．０当量）の溶液に、ＤＨＰ（０．３５ｍＬ、３．８ｍｍｏｌ、１．２当量）およびＰＴＳＡ（３０ｍｇ、０．１６ｍｍｏｌ、０．０５当量）を添加した。混合物を、ＴＬＣでモニターしながら２時間室温で撹拌した（３０％ＥｔＯＡｃ／７０％ヘキサン；検出：ＵＶ、バニリン；Ｒｆ＝０．５４）。その時に、溶液をＮａＨＣＯ３飽和水溶液で処理し、次いで水相をＣＨ２Ｃｌ２（３ｘ）で抽出した。合わせた有機相をＭｇＳＯ４で乾燥し、濾過し、濾液を減圧下で濃縮した。残渣を次のステップで継続するのに十分に純粋であった。
【０４２４】
残渣をＴＨＦ（３０ｍＬ）に溶解し、ＴＨＦ中のＴＢＡＦの１Ｍ溶液（４．８ｍＬ、４．８ｍｍｏｌ、２．０当量）を添加した。その混合物を室温で１時間撹拌された。反応の完了をＴＬＣが示したら、混合物をブラインで処理し、層を分離し、水相をＥｔＯＡｃ（３ｘ）で抽出した。合わせた有機相をＭｇＳＯ４で乾燥し、濾過し、濾液を減圧下で濃縮乾固した。残渣をフラッシュクロマトグラフィー（傾斜、３０％から５０％のＥｔＯＡｃ／ヘキサン）によって精製し、黄色の油としてＢｏｃ−Ｔ１４８ｃ（ＴＨＰ）（７３％、２ステップ）を得た。
ＴＬＣ：Ｒｆ＝０．１６（３０％ＥｔＯＡｃ／７０％ヘキサン；検出：ＵＶ、バニリン）
ＨＰＬＣ／ＭＳ：傾斜Ａ４、ｔＲ＝８．１１分、［Ｍ］＋４０９、［Ｍ＋Ｎａ］＋４３２
【０４２５】
Ｂｏｃ−Ｔ１４８ａおよびそのＴＨＰ保護誘導体を得るために、ＡＤ−ｍｉｘαを使用すること以外、上記と同一の手順に従うことができる。ＴＨＰの代わりの他の適切な保護基を、最後のステップで同様に導入することができる。同様に、Ｔ１５６ｂから出発し、上記と同一の手順を用い、ＡＤ−ｍｉｘ−βおよびＡＤ−ｍｉｘ−αの使用によって、ジアステレオマーテザーＢｏｃ−Ｔ１４８ｄおよびＢｏｃ−Ｔ１４８ｂがそれぞれ得られる。ＴＨＰを包含する、これらのテザーのためのヒドロキシル部分の適切な保護は、標準技法の使用によって可能である。
【０４２６】
Ｕ．テザーＴ１４９の合成の標準手順
【化４６】
2013509434.tif 000158
【０４２７】
Ｂｏｃ−Ｔ１４９ｂは、対応するシクロヘキシル誘導体、Ｂｏｃ−Ｔ１０４ｂについて既に記載したものとほぼ同一の手順を使用して合成した。しかしながら出発キラルのβ−ヒドロキシエステル、Ｔ１４９−１は、下記のパン酵母を使用して、β−ケトエステル、１４９−０の不斉還元によって得られた。
【０４２８】
ステップ１４９−１
（Ｃｒｉｓｐ，  Ｇ．Ｔ．；  Ｍｅｙｅｒ，  Ａ．Ｇ．  Ｔｅｔｒａｈｅｄｒｏｎ  １９９５，  ５１，  ５８３１−５８４５．）中の手順から改変した。）ＭｇＳＯ４（２ｇ）、ＫＨ２ＰＯ４（８ｇ）ＣａＣＯ３（１０ｇ）およびデキストロース（３０４ｇ）を、３６℃で水（２Ｌ）に添加した。パン酵母（２４ｇ）を添加し、溶液の粘度により、混合物を機械的撹拌機を使用して３６℃で４５分間撹拌した。β−ケトエステル１４９−０（２０．３ｇ、１３０ｍｍｏｌ）を、およそ５分にわたり混合物にゆっくり添加し、反応物を３６℃で７２時間撹拌した。混合物をセライトパッドに通して濾過し、水（２×３００ｍＬ）ですすいだ。合わせた濾液および洗浄液は、Ｅｔ２Ｏ（５×５００ｍＬ）で抽出し、合わせた有機相をブラインで洗浄し、ＭｇＳＯ４で乾燥し、濾過し、濾液を減圧下で濃縮した。残渣を真空分別蒸留（ｂ．ｐ  ４０℃、油ポンプ）によって精製し、無色の油として１４９−１（１３．３ｇ、６５％）を得た。化合物１４９−１はまた、市販されている（Ｊｕｌｉｃｈ、現在Ｃｏｄｅｘｉｓ、製品番号３１．６０）。
ＨＰＬＣ／ＭＳ：傾斜Ａ４、ｔＲ＝４．１１分、［Ｍ＋Ｈ］＋１５９．
【０４２９】
Ｖ．テザーＴ１５０ａおよびＴ１５０ｂの合成の標準手順
【化４７】
2013509434.tif 000159
【０４３０】
ステップＴ１５０−１
ＴＨＦ／Ｅｔ２Ｏ（１：１、１５０ｍＬ）中の（Ｅ）−ブロモプロペン（１５ｇ，１２４ｍｍｏｌ）の溶液に、ヘキサン中のｔ−ＢｕＬｉの１．７Ｍ溶液（１４６ｍＬ、２４８ｍｍｏｌ）を、Ｎ２下で−１００℃で添加した。次いで、反応物を−７８℃で１時間撹拌した。反応物を−１００℃に戻し、ＴＨＦ／Ｅｔ２Ｏ（１：１、１００ｍＬ）中の１０４−４（１５ｇ、６２ｍｍｏｌ）の溶液を３０分間にわたり添加した。添加後、反応物を−７８℃で１時間撹拌し、次いでＮａＨＣＯ３飽和水溶液でクエンチした。混合物をＥｔ２Ｏ（３ｘ）で抽出した。合わせた有機相をブラインで洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥し、濾過し、濾液を減圧下で濃縮した。粗生成物はフラッシュクロマトグラフィー（５％Ｅｔ２Ｏ／ヘキサン）によって精製し、遊離ヒドロキシル炭素原子で異なる配置を有するジアステレオマーの１．２：１混合物、６．９５ｇの（Ｒ）−異性体、１５０−１、および８．３７ｇの（Ｓ）−異性体、１５０−２（８７％の全収率）を得た。
【０４３１】
ステップＴ１５０−２
ヘキサン（１ｍＬ）中のＫＨ（鉱油中の３０％、５６０ｍｇ、４．２ｍｍｏｌ）の懸濁液を、０℃でＴＨＦ（１８ｍＬ）中の１５０−１（６．０ｇ、２１．１ｍｍｏｌ）の溶液に添加した。その混合物を室温で１０分撹拌し、次いで０℃のＴＨＦ（１８ｍＬ）中のトリクロロアセトニトリル（３．２ｍＬ、３１．６ｍｍｏｌ）の溶液にカニューレ経由で添加した。反応物を０℃で１時間撹拌し、次いで、ＮａＨＣＯ３飽和水溶液でクエンチした。混合物をＥｔ２Ｏ（３ｘ）で抽出し、合わせた有機相をＮａ２ＳＯ４で乾燥し、濾過し、濾液を減圧下で濃縮した。フラッシュクロマトグラフィー（５％Ｅｔ２Ｏ／ヘキサン＋１％Ｅｔ３Ｎ）による残渣の精製によって、いくつかの小量の不純物を含む１５０−３（６．４２ｇ、７１％）が得られた。
【０４３２】
ステップＴ１５０−３
トルエン（１５０ｍＬ）中の１５０−３（６．４ｇ、１５ｍｍｏｌ）の溶液を封管内で１４０℃で１８時間加熱した。反応を停止し、減圧下で蒸発させ、残渣をフラッシュクロマトグラフィー（５％Ｅｔ２Ｏ／ヘキサン）によって精製して、無色の油として１５０−４（４．２ｇ、６６％）を得た。
【０４３３】
ステップＴ１５０−４
１５０−４（４．２ｇ、９．８ｍｍｏｌ）をＭｅＯＨ中の１％ＨＣｌ溶液（１００ｍＬ）に溶解した。反応物を室温で１時間撹拌し、次いで、真空内で蒸発乾固させた。残渣をＥｔＯＨ（１００ｍＬ）に溶解し、ＮａＯＨ（１００ｍＬ）の５Ｎ水溶液を０℃で添加した。混合物を室温で４時間撹拌し、次いでＥｔＯＨを減圧下で蒸発させた。残留する水相に、ＴＨＦ（１００ｍＬ）、続いて（Ｂｏｃ）２Ｏ（５．３６ｇ、２４．６ｍｍｏｌ）を添加した。二相混合物を室温で終夜撹拌し、次いで、水で希釈し、Ｅｔ２Ｏ（３ｘ）で抽出した。合わせた有機相をブラインで洗浄し、ＭｇＳＯ４で乾燥し、濾過し、濾液を減圧下で濃縮した。このようにして得られた残渣の精製は、フラッシュクロマトグラフィー（傾斜、５％ＥｔＯＡｃ／ヘキサンから３０％ＥｔＯＡｃ／ヘキサン）によって行い、無色の油として１５０−５（１．６９ｇ、６４％）を得た。
【０４３４】
ステップＴ１５０−５
ＥｔＯＨ（５０ｍＬ）中の１５０−５（１．３０ｇ、４．８ｍｍｏｌ）の溶液に、５％Ｒｈ／アルミナ（４９０ｍｇ）を添加した。水素を反応物に通して５分間泡立たせ、次いで、反応物を水素雰囲気下で終夜撹拌した。反応物をセライトパッドに通して濾過し、Ｅｔ２Ｏですすぎ、合わせた濾液およびすすぎ液を減圧下で蒸発乾固させ、１５０−６（１．３ｇ、１００％）を得た。
【０４３５】
ステップＴ１５０−６
エチルビニルエーテル（５０ｍＬ）中の１５０−６（１．３ｇ、４．８ｍｍｏｌ）の溶液に、酢酸水銀（ＩＩ）（４６０ｍｇ、１．４４ｍｍｏｌ）を添加し、溶液を加熱して２４時間還流した。その時に、酢酸水銀（ＩＩ）のさらに０．３当量を添加し、溶液を加熱しさらに２４時間還流した。次いで、溶液を室温に冷却し、Ｎａ２ＣＯ３の飽和水溶液でクエンチし、Ｅｔ２Ｏ（３ｘ）で抽出した。合わせた有機相をブラインで洗浄し、ＭｇＳＯ４で乾燥し、濾過し、濾液を減圧下で濃縮した。残渣を、フラッシュクロマトグラフィー（２％Ｅｔ３Ｎを含む５％Ｅｔ２Ｏ／ヘキサン）によって精製し、無色の油として１５０−７（１．３８ｇ，９７％）を得た。
【０４３６】
ステップＴ１５０−７
ＴＨＦ（４５ｍＬ）中の１５０−７（１．３５ｇ、４．５ｍｍｏｌ）の溶液に、０℃で１５分間にわたって、ＢＨ３・ＴＨＦ（６．９ｍＬ、６．９ｍｍｏｌ）の１Ｍ溶液をゆっくり添加した。混合物を０℃で１時間、次いで室温で２時間撹拌した。次いで、溶液を０℃に冷却し、ＮａＯＨ（１０ｍＬ）の５Ｎ溶液、続いてＨ２Ｏ２（２０ｍＬ）の３０％水溶液を添加した。反応物を、０℃で１５分、次いで室温で２時間撹拌した。混合物をＥｔ２Ｏ（３ｘ）で抽出した。合わせた有機相をブラインで洗浄し、ＭｇＳＯ４で乾燥し、濾過し、濾液を減圧下で濃縮した。残渣をフラッシュクロマトグラフィー（２０％ＥｔＯＡｃ／ヘキサン）によって精製し、Ｂｏｃ−Ｔ１５０ａ（１．２７ｇ、９０％）を得た。
【０４３７】
他のジアステレオマーテザー、Ｂｏｃ−Ｔ１５０ｂを、同一のシーケンスを使用し１５０−２から出発して入手した。
【化４８】
2013509434.tif 000160
【０４３８】
Ｗ．テザーＴ１５１の合成の標準手順
【化４９】
2013509434.tif 000161
【０４３９】
ステップＴ１５１−１
ジクロロメタン（８０ｍＬ）中のヨードフェノール誘導体１５１−０（５．１０ｇ、１９．３ｍｍｏｌ、１．０当量）に、ｔ−ブチルクロロジメチルシラン（３．１９ｇ、２１．３ｍｍｏｌ、１．１当量）、および最後に、イミダゾール（１．４５ｇ、２１．３ｍｍｏｌ、１．１当量）を添加した。乳様の溶液を室温で２．５時間撹拌した。塩化アンモニウム飽和水溶液（１００ｍＬ）を添加し、混合物を５分間激しく撹拌した。相を分離し、水相をジクロロメタン（２ｘ）で抽出した。有機相を合わせ、ブラインで洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥し、濾過し、濾液を減圧下で濃縮した。結果として得られた黄色の液体は、短いシリカゲルカラム（傾斜、４％から１０％のＥｔＯＡｃ：ヘキサン）で精製し、無色の液体として１５１−１（７．２５ｇ、９９％）を得た。
ＴＬＣ：Ｒｆ＝０．４０（１５％ＥｔＯＡｃ：ヘキサン；検出：ＫＭｎＯ４）
【０４４０】
ステップＴ１５１−２
１５１−2（５４１ｍｇ、１．４３ｍｍｏｌ、１．０当量）、１５１−Ａ（以下の合成を参照、４０３ｍｇ、１．７９ｍｍｏｌ、１．２５当量）、トリ（ｏ−トリル）ホスフィン（４４ｍｇ、０．１４３ｍｍｏｌ、０．１当量）および酢酸パラジウム（ＩＩ）（１６ｍｇ、０．０７２ｍｍｏｌ、０．０５当量）を乾燥窒素下で無水アセトニトリル（１０ｍＬ）に溶解／懸濁した。次いで、トリエチルアミン（４０２μＬ、２．８６４ｍｍｏｌ、２．０当量）を添加した。結果として得られた薄黄色の混合物を加熱して還流した。混合物は、加熱の３時間後、急速に暗色になり、黒色になった。２３時間後、加熱を停止し、混合物を室温に冷却し、溶媒を減圧下でに蒸発乾固させた。残渣を１０％ＥｔＯＡｃ：ヘキサン（８−１０ｍＬ）に溶解し、短いシリカパッドに通して濾過し、１０％ＥｔＯＡｃ：ヘキサンの追加の４０ｍＬで洗浄した。合わせた濾液および洗浄液を減圧下で蒸発させた後、結果として得られた黄色の油をフラッシュクロマトグラフィー（５％ＥｔＯＡｃ：ヘキサン）によってさらに精製して、鮮黄色油として１５１−２（６２７ｍｇ）を得た。１ＨＮＭＲおよびＬＣ−ＭＳ分析はこの物質中にいくらか１５１−Ａがあることを示したが、さらなる精製をしないで次のステップに使用した。
ＴＬＣ：Ｒｆ＝０．２５（５％ＥｔＯＡｃ：ヘキサン；検出：バニリン、ＣＡＭ、ＫＭｎＯ４）。
【０４４１】
ステップＴ１５１−３
１５１−3（６２７ｍｇ、１．３２ｍｍｏｌ、１．０当量）をＴＨＦ（１３．２ｍＬ）に溶解した。ＴＨＦ（１．５８ｍＬ、１．５８ｍｍｏｌ、１．２当量）中のフッ化テトラＮ−ブチルアンモニウムの１Ｍ溶液を、１分間にわたって滴下して添加した。溶液は直ちに深い黄色になった。反応物を室温で２時間撹拌し、その後、ＴＬＣ（３０％ＥｔＯＡｃ：ヘキサン）はクリーンな変換を示した。混合物をＮａＣｌ飽和水溶液（２５ｍＬ）でクエンチし、５分間激しく撹拌した。相を分離し、酢酸エチル（２ｘ）で水相を抽出した。有機相を合わせ、ブラインで洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥し、濾過し、濾液を減圧下で濃縮した。結果として得られた黄色の油をフラッシュクロマトグラフィー（３０％ＥｔＯＡｃ：ヘキサン）によって精製した。わずかにより極性の不純物を所望の生成物から分離するのが困難であったので、最も純粋な分画のみを収集した。Ｂｏｃ−Ｔ１５１ａを白色結晶として３００ｍｇ（２ステップにわたって５８％）単離した。
ＴＬＣ：Ｒｆ＝０．３０（３０％ＥｔＯＡｃ：ヘキサン；検出：ＣＡＭ）；
ＨＰＬＣ／ＭＳ：傾斜Ａ４、ｔＲ＝７．００分、［Ｍ＋Ｎａ］＋３８４；
キラルのＨＰＬＣ分析：８８％ｅｅ；
１ＨＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）：δ７．４０（ｄｄ，１Ｈ，Ｊ１＝７．６，Ｊ２＝１．６），７．２５（ｔｄ，１Ｈ，Ｊ１＝８．８，Ｊ２＝１．６），７．０８（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝１６．０），６．９５（ｔ，１Ｈ，Ｊ＝７．０），６．８７（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝８．２），６．１６（ｄｄ，１Ｈ，Ｊ１＝１６．０，Ｊ２＝６．５），５．１７（ｂｓ，１Ｈ）．４．９７（ｂｓ，１Ｈ），４．１１（ｔ，２Ｈ，Ｊ＝５．０），３．９９（ｔ，２Ｈ，Ｊ＝５．０），２．４８（ｂｓ，１Ｈ），１．４７（ｓ，９Ｈ）．
【０４４２】
（Ｓ）−配置を有する鏡像異性体テザー、Ｂｏｃ−Ｔ１５１ｂを、鏡像異性体アミノ酸、１５１−Ｂから出発する以外、同一の手順によって入手する。
【０４４３】
Ｙ．試薬１５１−Ａの合成の標準手順
【化５０】
2013509434.tif 000162
【０４４４】
ステップＴ１５１−Ａ
（Ｓ）−（−）−２−メチル−２−プロパンスルフィンアミド１５１−Ａ１（１．８４ｇ、１５．２ｍｍｏｌ、１．１当量）を、トリフルオロアセトアルデヒドａｃｅｔａｌｄｈｙｄｅエチルヘミアセタール（１５１−Ａ２、１．９９ｇ、１３．８ｍｍｏｌ、１．０当量）と混合した。チタンテトラエトキシド（４．３ｍＬ、２０．７ｍｍｏｌ、１．５当量）を添加し、透明な高粘度の溶液を形成した。これは還流凝縮器を用いて窒素下で７０℃で３日間加熱した。その時までに、溶液を徐々に黄色になっていた。室温に反応混合物を冷却し、酢酸エチル１００ｍＬで希釈し、次いで、激しく撹拌しながらＮａＣｌ飽和水溶液１００ｍＬに注いだ。二相混合物をセライトに通して濾過し、濾過ケーキは酢酸エチルですすいだ。相を分離し、水相を酢酸エチル（１ｘ）で抽出した。有機相を合わせ、ブラインで洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥し、濾過し、濾液を減圧下で濃縮し、黄色の油が残った。ＴＬＣ（５０％ＥｔＯＡｃ：ヘキサン）は、２つの生成物ジアステレオマーがそれぞれ有意差のあるＲｆ（０．２対０．４）を有することを示した。フラッシュクロマトグラフィー（傾斜、４０％から６０％ＥｔＯＡｃ：ヘキサン）によって、１５１−Ａ３ａが白色粉末（１．８４ｇ、５４％）として、および１５１−Ａ３ｂが白色結晶（８３０ｍｇ、２４％）として得られた。両化合物とも、１ＨＮＭＲスペクトロスコピーおよびＴＬＣによって純粋と思われた。
１５１−Ａ３ａ、ＴＬＣ：Ｒｆ＝０．１５（５０％ＥｔＯＡｃ：ヘキサン；検出：バニリン（青緑色のアンチスポット（ａｎｔｉｓｐｏｔｓ））；
１５１−Ａ３ｂ、ＴＬＣ：Ｒｆ＝０．３５（５０％ＥｔＯＡｃ：ヘキサン；検出：バニリン（青緑色のアンチスポット）。
【０４４５】
ステップＴ１５１−Ｂ
１５１−Ａ３ａ（８３０ｍｇ、３．３６ｍｍｏｌ、１．０当量）を窒素下にジクロロメタン（２６ｍＬ）に溶解し、溶液を−６０℃に冷却した。ＴＨＦ（８．４ｍＬ、８．４ｍｍｏｌ、２．５当量）中のビニルマグネシウムブロミドの１．０Ｍ溶液を、１０分間にわたって滴下して添加した。その後、反応物を−６０℃でさらに４５分間撹拌した。温度を７５分間にわたって−２０℃に徐々に上昇させた。その時に、ＮＨ４Ｃｌ飽和水溶液およそ５０ｍＬを混合物に添加し、室温に温めながら１５分間激しく撹拌した。相を分離し、水相をジクロロメタン（３ｘ）で抽出した。有機相を合わせ、ブラインで洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥し、濾過し、濾液を減圧下で濃縮した。結果として得られた黄色の油をフラッシュクロマトグラフィー（５０％ＥｔＯＡｃ：ヘキサン）によって精製した。１５１−Ａ４ａは、薄黄色の油７１５ｍｇ（９３％）として得られた。１９ＦＮＭＲによって観察されたジアステレオマーの比率は１９：１であった。
ＴＬＣ：Ｒｆ＝０．３０（５０％ＥｔＯＡｃ：ヘキサン；検出：ＫＭｎＯ４）．
【０４４６】
１５１−Ａ３ｂは、ビニルマグネシウムブロミド（−６０℃の代わりに４０℃）の添加に使用した温度を除いて、正確に同一の手順を使用して、１５１−Ａ４ａに変換した。
【０４４７】
ステップＴ１５１−Ｃ
１５１−Ａ４ａ（７１５ｍｇ、３．１１９ｍｍｏｌ、１．０当量）をメタノール（１．５ｍＬ）に溶解した。１，４−ジオキサン中の塩化水素の４Ｍ溶液（１．５ｍＬ、６．２４ｍｍｏｌ、２．０当量）を、１分間にわたって滴下して添加した。溶液を室温で７５分間撹拌し、その後、ＴＬＣは反応の完了を示した。溶液を減圧下で蒸発させ、粘着性油を得た。約４００μＬのメタノールを添加して油を溶解し、次いで冷エーテル１５〜２０ｍＬを撹拌しながら添加した。それによって、塩酸塩が沈澱した。この固体を真空下で濾過し、５〜１０ｍＬの冷エーテルですすいだ。１５１−Ａ５ａが、白色の粉末として、３６１ｍｇ（７２％）得られた。
ＴＬＣ：Ｒｆ＝基準線（５０％ＥｔＯＡｃ：ヘキサン；検出：ＫＭｎＯ４）。
【０４４８】
ステップＴ１５１−Ｄ
１５１−Ａ５ａ（３６１ｍｇ、２．２４ｍｍｏｌ、１．０当量）をＴＨＦ（７ｍＬ）および水（７ｍＬ）に溶解した。炭酸ナトリウム（３２１ｍｇ、３．０２ｍｍｏｌ、１．１当量）および二炭酸ジｔ−ブチル（６６０ｍｇ、３．０２ｍｍｏｌ、１．１当量）を、二相混合物に連続的に添加した。結果として得られた溶液を、室温で終夜撹拌した。蒸留水（約３０ｍＬ）を混合物に添加した。相を分離し、水相をＥｔＯＡｃ（３ｘ）で抽出した。有機相を合わせ、ブラインで洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥し、濾過し、濾液を減圧下で濃縮した。結果として得られた帯黄色の油をフラッシュクロマトグラフィー（３０％ＥｔＯＡｃ：ヘキサン）によって精製し、白色の針状物として１５１−Ａ４０３ｍｇ（８０％）を得た。
ＴＬＣ：Ｒｆ＝０．５５（３０％ＥｔＯＡｃ：ヘキサン；検出：ＫＭｎＯ４）．
１ＨＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）：δ５．８９−５．８２（ｍ，１Ｈ），５．５０−５．４０（ｍ，２Ｈ），４．８３（ｂｒｓ，２Ｈ），１．４６（ｓ，９Ｈ）．
【０４４９】
鏡像異性体アミノ酸、１５１−Ｂを、鏡像異性体（Ｒ）−（−）−２−メチル−２−プロパンスルフィンアミド、１５１−Ｂ１から出発すること以外、同一の手順によって入手する。これは、次に鏡像異性体テザー、Ｔ１５１ｂを調製するために使用する。
【化５１】
2013509434.tif 000163
【０４５０】
Ｚ．テザーＴ１５２およびＴ１５７の合成の標準手順
【化５２】
2013509434.tif 000164
【０４５１】
ステップＴ１５２−１
ＤＭＦ（乾燥、８５ｍＬ）中の７−ヒドロキシ−インダノン（１５２−０、４．１５ｇ、２８ｍｍｏｌ、１．０ｅｑ、Ｍｉｎｕｔｉ，Ｌ．ｅｔ．ａｌ．ＴｅｔｒａｈｅｄｒｏｎＡｓｙｍｍ．２００３，１４，４８１−４８７）の溶液に、１５６−Ａ（Ｔ１５６の合成にならって記載した合成、１０ｇ、４２ｍｍｏｌ、１．５当量）、Ｋ２ＣＯ３（４．８４ｇ、３５ｍｍｏｌ、１．２５当量）およびＫＩ（０．９３ｇ、５．６ｍｍｏｌ、０．２当量）を添加した。混合物を、Ｎ２下で５５℃（油浴）で終夜（約１６時間）撹拌した。反応物を、ＴＬＣ（ヘキサン／ＥｔＯＡｃ、４／１；検出：ＵＶ、ＫＭｎＯ４）によってモニターした。混合物を室温に冷却し、Ｈ２Ｏ（２００ｍＬ）を添加し、層を分離し、次いで水層をＥｔＯＡｃ（３×２５０ｍＬ）で抽出した。合わせた有機相をブライン（１００ｍＬ）で洗浄し、無水Ｎａ２ＳＯ４で乾燥し、濾過し、次いで、濾液を減圧下で濃縮し、真空下で（油ポンプ）乾燥した。残渣をフラッシュクロマトグラフィー（ヘキサン／ＥｔＯＡｃ、５／１）によって精製し、無色の油として８．６ｇの１５２−１（１００％）を得た。
１ＨＮＭＲ（ＣＤＣｌ３，３００ＭＨｚ）：δ７．４７（ｍ，１Ｈ），６．９９（ｄ，Ｊ＝７．６，１Ｈ），６．８４（ｄ，Ｊ＝８．２，１Ｈ），４．１９（ｔ，Ｊ＝５．８，２Ｈ），４．０４（ｔ，Ｊ＝５．６，２Ｈ），３．０６（ｔ，Ｊ＝５．６，２Ｈ），２．６４（ｍ，２Ｈ），０．８９（ｓ，９Ｈ），０．１０（ｓ，６Ｈ）
【０４５２】
ステップＴ１５２−２
ＮａＨ（１．１８ｇ、油中の６０重量％、２９．４ｍｍｏｌ、１．５当量）を、ペンタン（１５ｍＬ）で洗浄し、ペンタンを注射器によって除去し、ＴＨＦ（乾燥、Ｎａ−ベンゾフェノンケチルから新たに蒸留した、６０ｍＬ）を添加した。シアノメチルホスホン酸ジエチル（３．７ｍＬ、２３．５ｍｍｏｌ、１．２当量）を、Ｎ２下で０℃で注射器によって懸濁液に注意深く（水素ガス発生により）滴下して添加した。混合物を室温で１．０時間撹拌し、０℃に冷却し、次いでＴＨＦ（乾燥、２０ｍＬ）中の１５６−１（６．０ｇ、１９．６ｍｍｏｌ、１．０当量）の溶液に滴下して添加した。室温にその混合物を暖め、次いでＴＬＣでモニターしながら終夜撹拌した。溶液を減圧下で濃縮して、黒色の残渣を得た。これをＨ２Ｏ（５０ｍＬ）およびＮａＨＣＯ３飽和水溶液（５０ｍＬ）に溶解した。この水溶液をＥｔＯＡｃ（３×１５０ｍＬ）で抽出した。合わせた有機相を、ブライン（５０ｍＬ）で洗浄し、無水Ｎａ２ＳＯ４で乾燥し、濾過し、濾液を減圧下で濃縮し、真空下で（油ポンプ）乾燥して、黒色の液体を得た。これをフラッシュクロマトグラフィー（ヘキサン／ＥｔＯＡｃ、６／１）によって精製し、白色固形物として５．７ｇの１５２−２（８８％）を得た。ＴＬＣおよび１ＨＮＭＲ分析から、単一の幾何異性体が単離されたように思われた。
１ＨＮＭＲ（ＣＤＣｌ３，３００ＭＨｚ）：δ７．２９（ｔ，Ｊ＝７．９，１Ｈ），６．９２（ｄ，Ｊ＝７．６，１Ｈ），６．７５（ｄ，Ｊ＝８．２，１Ｈ），６．２８，６．２７（ｓ，１Ｈ），４．１５（ｔ，Ｊ＝５．０，２Ｈ），４．００（ｔ，Ｊ＝５．２，２Ｈ），３．０８（ｓ，２Ｈ），３．０７（ｓ，２Ｈ），０．９１（ｓ，９Ｈ），０．１０（ｓ，６Ｈ）．
【０４５３】
ステップＴ１５２−３
ＥｔＯＨ中のＮＨ３の溶液（２．０Ｍ、１００ｍＬ）に１５２−２（５．７ｇ、１７．３ｍｍｏｌ、１．０当量）およびラネー２８００Ｎｉ（５．７ｇ、Ｈ２Ｏ中のスラリー；１００重量％）を添加した。混合物を室温でＨ２（７０ｐｓｉ）下で終夜（約２０時間）撹拌した。混合物をセライトのパッドに通して、次いで、ＭｅＯＨ：Ｅｔ３Ｎ（５：１、２４０ｍＬ）で洗浄した。合わせた溶液を減圧下で濃縮し、真空下で（油ポンプ）乾燥し、５．７７ｇの黄色の油を得た。これはさらなる精製をしないで次のステップに供した。ＬＣ−ＭＳは二重結合が部分的に残っていることを示したが、シグナルの重複により、比率を判断することが容易にできなかった。１５２−３をほぼ独占的に得るためには、水素化時間の延長またはより高い水素圧力下での実施が期待されよう。
【０４５４】
ステップＴ１５２−４
黄色の油をＴＨＦ／Ｈ２Ｏ（１／１、１２０ｍＬ）に溶解し、Ｎａ２ＣＯ３（２．７５ｇ、２６ｍｍｏｌ、１．５当量）を添加した。その混合物を０℃に冷却し、Ｂｏｃ２Ｏ（４．５４ｇ、２０．８ｍｍｏｌ、１．２当量）を一度に添加した。反応物を、反応の進行をＴＬＣでモニターしながら０℃で３０分間、次いで室温で終夜撹拌した。層を分離した。水相をエーテル（３×１２０ｍＬ）で抽出した。合わせた有機相を、ブライン（８０ｍＬ）で洗浄し、無水Ｎａ２ＳＯ４で乾燥し、濾過し、次いで、濾液を減圧下で濃縮し、真空下で（油ポンプ）乾燥した。結果として得られた残渣を、フラッシュクロマトグラフィー（傾斜、ヘキサン／ＥｔＯＡｃ、２０／１から１５／１）によって精製して、無色の油として２．４２ｇの１５２−３、１．３９ｇの１５２−４および２．６ｇの１５２−３と１５２−４の混合物を得た［２ステップで８５％の全収率（１５２−３＋１５２−４）］。
１５２−３
１ＨＮＭＲ（ＣＤＣｌ３，３００ＭＨｚ）：δ７．１０（ｔ，Ｊ＝７．９，１Ｈ），６．８２（ｄ，Ｊ＝７．３，１Ｈ），６．６６（ｄ，Ｊ＝７．９，１Ｈ），４．８５（ｓ，ｂｒ，１Ｈ），４．００（ｍ，４Ｈ），３．５０（ｍ，５Ｈ），２．２１（ｍ，１Ｈ），１．８７（ｍ，２Ｈ），１．６５（ｍ，１Ｈ），１．４４（ｓ，９Ｈ），０．９１（ｓ，９Ｈ），０．０９（ｓ，６Ｈ）
ＭＳ：３３６（Ｍ＋＋１−Ｂｏｃ）
１５２−４
ＭＳ：３３４（Ｍ＋＋１−Ｂｏｃ）
【０４５５】
ステップＴ１５２−５
ＴＨＦ（２．０ｍＬ）中の１５２−３（２．４２ｇ、５．５５ｍｍｏｌ、１．０当量）の溶液にＴＢＡＦ（ＴＨＦ中の１．０Ｍ、２０ｍＬ、３．６当量）の溶液を添加した。溶液の色は直ちに緑黒色に変化した。反応溶液を、ＴＬＣによってモニターしながら３０分間室温で撹拌した（ヘキサン／ＥｔＯＡｃ、２／１；検出：ＵＶ、ＣＭＡ）。完了したら、溶液をシリカゲルのパッドに通して、ＥｔＯＡｃ（１００ｍＬ）で溶出した。合わせた有機溶液を減圧下で濃縮し、真空下で（油ポンプ）乾燥した。残渣を、フラッシュクロマトグラフィー（傾斜、ヘキサン／ＥｔＯＡｃ、５／１から３／１から２／１）によって精製し、無色の粘着性の油として１．４ｇのＢｏｃ−Ｔ１５２（７８％）を得た。
１ＨＮＭＲ（ＣＤＣｌ３，３００ＭＨｚ）：δ７．１１（ｔ，Ｊ＝７．９，１Ｈ），６．８４（ｄ，Ｊ＝７．６，１Ｈ），６．６６（ｄ，Ｊ＝８．２，１Ｈ），４．９８（ｓ，ｂｒ，１Ｈ），４．０８（ｍ，４Ｈ），３．３５（ｍ，１Ｈ），３．１８（ｍ，２Ｈ），３．００（ｍ，１Ｈ），２．８０（ｍ，１Ｈ），２．２３（ｍ，１Ｈ），１．９９（ｍ，１Ｈ），１．７８（ｍ，２Ｈ），１．４５（ｓ，９Ｈ）．
１３ＣＮＭＲ（ＣＤＣｌ３，７５ＭＨｚ）：δ１５５．３８，１４５．９０，１３４．２４，１２７．９８，１１７．３６，１０８．８６，７９．３４，６９．３８，６１．３９，３９．９０，３９．５７，３３．９９，３１．７４，３１．４８，２８．４３
ＭＳ：２２２（Ｍ＋＋１−Ｂｏｃ）
【０４５６】
上記と同様の方式で、Ｂｏｃ−Ｔ１５７が１５２−４から得られた。
１ＨＮＭＲ（ＣＤＣｌ３，３００ＭＨｚ）：δ７．１３（ｔ，Ｊ＝７．９，１Ｈ），６．８８（ｄ，Ｊ＝７．３，１Ｈ），６．７０（ｄ，Ｊ＝８．２，１Ｈ），６．４７（ｓ，１Ｈ），４．６６（ｓ，ｂｒ，１Ｈ），４．１７（ｍ，２Ｈ），４．０２（ｍ，２Ｈ），３．８８（ｔ，Ｊ＝６．７，２Ｈ），２．９９（ｍ，２Ｈ），２．７８（ｍ，２Ｈ），２．２３（ｓ，ｂｒ，１Ｈ），１．４６（ｓ，９Ｈ）
ＭＳ：２６４（Ｍ＋＋２Ｈ＋−ｔ−Ｂｕ）
【０４５７】
ＡＡ．テザーＴ１５３の合成の標準手順
【化５３】
2013509434.tif 000165
【０４５８】
ステップＴ１５３−１
文献（Ｕｃｈｉｋａｗａ，  Ｏ．  ｅｔ．  ａｌ．  Ｊ．  Ｍｅｄ．  Ｃｈｅｍ．  ２００２，  ４５，  ４２１２−４２２１；  Ｕｃｈｉｋａｗａ，  Ｏ．  ｅｔ．  ａｌ．  Ｊ．  Ｍｅｄ．  Ｃｈｅｍ．  ２００２，  ４５，  ４２２２−４２３９）に記載されたように、ＮａＨ（３．４ｇ、油中の６０重量％、８５ｍｍｏｌ、１．５当量）を、ペンタン（２５ｍＬ）で洗浄し、ペンタンを注射器によって除去し、次いでＴＨＦ（無水、Ｎａ−ベンゾフェノンケチルから新たに蒸留した、３００ｍＬ）を添加した。この懸濁液に、ホスホノ酢酸トリメチル（１１ｍＬ、６８．１ｍｍｏｌ、１．２０当量）をＮ２下で０℃で注射器によって注意深く（水素発生により）滴下して（約３０分）添加した。混合物を室温で１．０時間撹拌し、０℃に冷却し、次いで８−メトキシ−２−テトラロン（１５３−０、９．０ｇ、５１ｍｍｏｌ、１．０当量）を一度に添加した。混合物を室温に暖め、次いで、終夜撹拌した。反応の進行を、ＴＬＣ（ヘキサン／ＥｔＯＡｃ、４／１；検出：ＵＶ、ＫＭｎＯ４）によってモニターした。褐色の溶液を真空内で濃縮し、黒色の残渣を得た。この残渣をＨ２Ｏ（１５０ｍＬ）およびＥｔＯＡｃ（２００ｍＬ）に溶解した。層を分離し、水相をＥｔＯＡｃ（３×２５０ｍＬ）で抽出した。合わせた有機相をブライン（１５０ｍＬ）で洗浄し、無水Ｎａ２ＳＯ４で乾燥し、濾過し、次いで濾液を減圧下で濃縮し、真空下で（油ポンプ）乾燥した。結果として得られた黒色の残渣をフラッシュクロマトグラフィー（ヘキサン／ＥｔＯＡｃ、５／１）によって精製し、無色の油として１．０８ｇの１５３−１Ａ、および１０．５２ｇの１５３−１Ｂ（全収率９８％）を得た。１５３−１Ａと１５３−１Ｂの構造はＮＭＲスペクトルデータから推定した。
【化５４】
2013509434.tif 000166
１５３−１Ａ
１ＨＮＭＲ（ＣＤＣｌ３，３００ＭＨｚ）：δ７．１３（ｔ，Ｊ＝７．９，１Ｈ），６．７７（ｄ，Ｊ＝７．６，１Ｈ），６．７２（ｄ，Ｊ＝８．２，１Ｈ），５．８９（ｑｕ，Ｊ＝１．５，１Ｈ），３．８３，（ｓ，３Ｈ），３．７１（ｓ，３Ｈ），３．５２（ｓ，２Ｈ），３．１２（ｍ，２Ｈ），２．８６（ｔ，Ｊ＝７．０，２Ｈ）；
１３ＣＮＭＲ（ＣＤＣｌ３，７５ＭＨｚ）：δ１６７．０５，１６０．１３，１５６．４６，１３８．６２，１２６．５３，１２３．３８，１２０．２２，１１４．０７，１０７．６１，５５．２９，５０．８５，３３．１７，２９．８７，２７．５２．
１５３−１Ｂ：
１ＨＮＭＲ（ＣＤＣｌ３，３００ＭＨｚ）：δ７．０８（ｔ，Ｊ＝７．９，１Ｈ），６．７３（ｄ，Ｊ＝６．５，１Ｈ），６．７１（ｄ，Ｊ＝７．９，１Ｈ），３．８２（ｓ，３Ｈ），３．７０（ｓ，３Ｈ），３．２５（ｓ，２Ｈ），２．８２（ｔ，Ｊ＝７．９，２Ｈ），２．３２（ｔ，Ｊ＝７．９，２Ｈ）；
１３ＣＮＭＲ（ＣＤＣｌ３，７５ＭＨｚ）：δ１７１．８０，１５４．５３，１３５．９９，１３２．７４，１２７．２８，１２２．８１，１２０．０４，１１９．９０，１０８．６７，５５．４４，５１．８３，４２．９６，２８．２４，２６．７４．
【０４５９】
ステップＴ１５３−２
９５％ＥｔＯＨ（１２０ｍＬ）中の１５３−１Ｂ（６．０ｇ、２５．８ｍｍｏｌ）の溶液に、ＰｔＯ２（６００ｍｇ、１０重量％）を添加した。混合物を、Ｈ２で充填した風船の下で室温で終夜（約１６時間）撹拌した。溶液をセライトのパッドに通して、ＥｔＯＡｃで溶出し、結果として得られた有機溶液を減圧下で濃縮し、真空下で（油ポンプ）乾燥して、無色の油として６．０５ｇの１５３−２（１００％）を得た。同様に１５３−１Ａの処理によって、１５３−２が得られ、これは、１ＨＮＭＲおよびＬＣ−ＭＳの共注入によって検証された。
１ＨＮＭＲ（ＣＤＣｌ３，３００ＭＨｚ）：δ７．０８（ｔ，Ｊ＝７．９，１Ｈ），６．７１（ｄ，Ｊ＝７．３，１Ｈ），６．６５，Ｊ＝７．９，１Ｈ），３．８１（ｓ，３Ｈ），３．７１（ｓ，３Ｈ），２．９４（ｍ，１Ｈ），２．８２（ｍ，２Ｈ），２．４１（ｍ，２Ｈ），２．２０（ｍ，２Ｈ），１．９３（ｍ，１Ｈ），１．４６（ｍ，１Ｈ）；
ＭＳ：２３５［Ｍ＋Ｈ］＋．
【０４６０】
ステップＴ１５３−３
１５２−２（７．０２ｇ、３０ｍｍｏｌ、１．０当量）をＤＣＭ（乾燥、１５０ｍＬ）に溶解した。溶液を−３０℃（ジクロロエタン−ドライアイス浴）に冷却し、次いでＤＣＭ中のＢＢｒ３の溶液（１．０Ｍ、７５ｍＬ、２．５当量）を滴下して添加した。添加後、黒色の溶液を、常にＮ２下で、ＴＬＣによってモニターしながら（ヘキサン／ＥｔＯＡｃ、４／１；検出：ＵＶ、ＫＭｎＯ４）、−３０℃で４０分間、次いで０℃で３．０時間、撹拌した。完了したら、激しく撹拌し低温を維持しながら、ＭｅＯＨ（無水、２０ｍＬ）を混合物に滴下して（しかしゆっくりではなく）添加し、続いてＨ２Ｏ（１５０ｍＬ）を添加した。混合物を２〜３分間０℃に保った。層を分離し、水相をＤＣＭ（３×１５０ｍＬ）で抽出した。合わせた有機相を無水Ｎａ２ＳＯ４で乾燥し、濾過し、次いで濾液を減圧下で濃縮し、真空下で（油ポンプ）乾燥して、黒色の残渣を得た。これはフラッシュクロマトグラフィー（ヘキサン／ＥｔＯＡｃ、５／１）によって精製して、薄い黄色の固体として５．０１ｇの１５３−３（７６％）を得た。
１ＨＮＭＲ（ＣＤＣｌ３，３００ＭＨｚ）：δ６．９８（ｔ，Ｊ＝７．９，１Ｈ），６．６８（ｄ，Ｊ＝７．６，１Ｈ），６．６０（ｄｄ，Ｊ＝７．９，０．９，１Ｈ），３．７２（ｓ，３Ｈ），２．９２（ｍ，１Ｈ），２．８２（ｍ，２Ｈ），２．４３（ｍ，２Ｈ），２．２４（ｍ，２Ｈ），１．９３（ｍ，１Ｈ），１．４４（ｍ，１Ｈ）；
１３ＣＮＭＲ（ＣＤＣｌ３，７５ＭＨｚ）：δ１７３．５０，１５３．４３，１３８．０１，１２６．１５，１２２．４０，１２１．１１，１１１．８６，５１．６３，４１．０３，３１．０９，２９．１４，２８．９７，２８．７２．
【０４６１】
ステップＴ１５３−４
ＴＨＦ（乾燥、１２０ｍＬ）中の、１５３−３（５．０ｇ、２２．７ｍｍｏｌ、１．０当量）、ベンジルオキシエタノール（１５３−Ａ、４．４ｍＬ、３０．６ｍｍｏｌ、１．３５当量）およびトリフェニルホスフィン（８．０ｇ、３０．６ｍｍｏｌ、１．３５当量）の溶液に、Ｎ２下で０℃で注射器を使用して、ＤＩＡＤ（６．０ｍＬ、３０．６ｍｍｏｌ、１．３５当量）を滴下して添加した。溶液を０℃で３０分間撹拌し、次いで室温に暖め、終夜撹拌した。溶液を減圧下で濃縮し、真空下で（油ポンプ）乾燥し、薄黄色の油を得た。これをフラッシュクロマトグラフィー（ヘキサン／ＥｔＯＡｃ、５／１）によって精製し、無色の油として５．９８ｇの１５３−４（７５％）を得た。
１ＨＮＭＲ（ＣＤＣｌ３，３００ＭＨｚ）：δ７．３１（ｍ，５Ｈ），７．０６（ｔ，Ｊ＝７．９，１Ｈ），６．７１（ｄ，Ｊ＝７．６，１Ｈ），６．６４（ｄ，Ｊ＝７．９，１Ｈ），４．６５（ｓ，２Ｈ），４．１４（ｍ，２Ｈ），３．８５（ｍ，２Ｈ），３．６８（ｓ，３Ｈ），３．００（ｍ，１Ｈ），２．８２（ｍ，２Ｈ），２．４０（ｍ，２Ｈ），２．２４（ｍ，２Ｈ），１．９３（ｍ，１Ｈ），１．４２（ｍ，１Ｈ）．
【０４６２】
ステップＴ１５３−５
ＴＨＦ（３５ｍＬ）中の１５３−４（４．９８ｇ、１４ｍｍｏｌ、１．０当量）の溶液に、０℃でＨ２Ｏ（３５ｍＬ）中のＬｉＯＨ・Ｈ２Ｏ（２．９ｇ，７０ｍｍｏｌ，５．０当量）の溶液を添加した。混合物を０℃で３０分間撹拌し、次いで室温に暖め、２４時間撹拌した。ＴＨＦは真空内で除去し、次いで、ＨＣｌ（２０重量％）の水溶液を滴下して添加し、１．０にｐＨを調節した。酸性化した溶液を、ＥｔＯＡｃ（３×８０ｍＬ）で抽出した。合わせた有機相を無水Ｎａ２ＳＯ４で乾燥し、濾過し、次いで濾液を減圧下で濃縮し、真空下で（油ポンプ）乾燥した。結果として得られた残渣をトルエン（２×２５ｍＬ）、に溶解し、減圧下で再び濃縮し、真空下で（油ポンプ）乾燥して、白色固形物として４．８ｇの１５３−５（１００％）を得た。
１ＨＮＭＲ（ＣＤＣｌ３，３００ＭＨｚ）：δ７．３２（ｍ，５Ｈ），７．０１（ｔ，Ｊ＝７．９，１Ｈ），６．６７（ｍ，２Ｈ），４．６２（ｓ，２Ｈ），４．１１（ｍ，２Ｈ），３．８３（ｍ，２Ｈ），３．０１（ｍ，１Ｈ），２．７９（ｍ，２Ｈ），２．３６（ｍ，２Ｈ），２．１３（ｍ，２Ｈ），１．９５（ｍ，１Ｈ），１．４０（ｍ，１Ｈ）；
１３ＣＮＭＲ（ＣＤＣｌ３，７５ＭＨｚ）：δ１７７．５７，１５８．７２，１４０．５１，１３９．５５，１３０．２８，１２９．６６，１２９．５４，１２７．９４，１２６．８４，１２３．２０，１１０．１６，７５．０７，７０．７５，６９．６４，４２．９５，３３．４２，３１．５２，３１．００，３０．８４．
【０４６３】
ステップＴ１５３−６
ｔ−ＢｕＯＨ（新たに窒素でＮａから蒸留した、８５ｍＬ）中の１５３−５（４．７６ｇ、１４ｍｍｏｌ、１．０当量）の溶液に、Ｎ２下で、トリエチルアミン（新たにＣａＨ２から蒸留した、２．２ｍＬ、１５．４ｍｍｏｌ、１．１当量）およびジフェニルホスホリルアジド（ＤＰＰＡ、３．３３ｍＬ、１５．４ｍｍｏｌ、１．１当量）を添加した。溶液をＮ２下で２４時間還流した。室温に溶液を戻した後、減圧下で濃縮し、真空下で（油ポンプ）乾燥して、薄黄色の固体を得た。この黄色の固体をＤＣＭ（４００ｍＬ）に溶解し、ＮａＯＨの溶液（１．０Ｍ、２×８０ｍＬ）、Ｈ２Ｏ（８０ｍＬ）およびブライン（８０ｍＬ）で連続的に洗浄し、無水Ｎａ２ＳＯ４で乾燥し、濾過し、次いで濾液を減圧下で濃縮し、真空下で（油ポンプ）乾燥して、薄黄色の固体を得た。これをフラッシュクロマトグラフィー（ヘキサン／ＥｔＯＡｃ、５／１）によって精製し、白色固形物として２．７ｇの１５３−６（４７％）を得た。さらに、無色の油として１５３−５のｔ−ブチルエステルである１．３９ｇの１５３−７、および構造決定していない１．１９ｇの１５３−８が、クロマトグラフィーから単離された。
１５３−６
１ＨＮＭＲ（ＣＤＣｌ３，３００ＭＨｚ）：δ７．３１（ｍ，５Ｈ），７．０５（ｔ，Ｊ＝７．９，１Ｈ），６．７１（ｄ，Ｊ＝７．６，１Ｈ），６．６４（ｄ，Ｊ＝７．９，１Ｈ），４．６２（ｓ，２Ｈ），４．１３（ｍ，２Ｈ），３．８４（ｔ，Ｊ＝５．０，２Ｈ），２．９９（ｍ，１Ｈ），２．８２（ｍ，２Ｈ），２．２７（ｍ，４Ｈ），１．９３（ｍ，１Ｈ），１．４６（ｓ，９Ｈ），１．４３（ｍ，１Ｈ）；
１３ＣＮＭＲ（ＣＤＣｌ３，７５ＭＨｚ）：δ１７２．３０，１５６．４９，１３８．２０，１３７．８６，１２８．４０，１２７．６５，１２５．８４，１２５．２２，１２１．２８，１０７．９１，８０．１３，７３．３５，６８．７１，６７．５１，４２．６６，３１．３７，２９．４６，２９．１３，２８．６５，２８．１４；
ＭＳ：４１９［Ｍ＋Ｎａ］＋．
１５３−７
１ＨＮＭＲ（ＣＤＣｌ３，３００ＭＨｚ）：δ７．３３（ｍ，５Ｈ），７．０５（ｔ，Ｊ＝７．９，１Ｈ），６．７１（ｄ，Ｊ＝７．６，１Ｈ），６．６４（ｄ，Ｊ＝８．２，１Ｈ），４．６５（ｓ，２Ｈ），４．１５（ｄｔ，Ｊ＝２．０，４．７，２Ｈ），３．８５（ｔ，Ｊ＝５．０，２Ｈ），３．１６（ｍ，２Ｈ），２．９５（ｄｄ，Ｊ＝１６．７，５．０，１Ｈ），２．８１（ｍ，２Ｈ），２．１９（ｍ，１Ｈ），１．９０（ｍ，２Ｈ），１．４５（ｓ，９Ｈ），１．３７（ｍ，１Ｈ）；
１３ＣＮＭＲ（ＣＤＣｌ３，７５ＭＨｚ）：δ１５６．５２，１３８．１６，１３８．０６，１２８．４２，１２７．６６，１２５．８９，１２４．９３，１２１．２９，１０７．９９，７３．２９，６８．５９，６７．４９，４６．２８，３４．８２，２９．０６，２８．４２，２７．４１，２６．６０；
ＭＳ：３１２［Ｍ＋Ｈ−Ｂｏｃ］＋．
１５３−８
１ＨＮＭＲ（ＣＤＣｌ３，３００ＭＨｚ）：δ７．３１（ｍ，５Ｈ），７．０６（ｔ，Ｊ＝７．６，１Ｈ），６．７１（ｄ，Ｊ＝７．０，１Ｈ），６．６５（ｄ，Ｊ＝７．９，１Ｈ），４．６５（ｓ，２Ｈ），４．１５（ｍ，２Ｈ），３．８５（ｔ，Ｊ＝５．３，２Ｈ），３．２７（ｍ，２Ｈ），２．９４（ｍ，１Ｈ），２．８１（ｍ，２Ｈ），２．２２（ｍ，１Ｈ），１．９０（ｍ，２Ｈ），１．３０（ｍ，２Ｈ）；
ＭＳ：３８１［Ｍ＋Ｈ］＋．
【０４６４】
ステップＴ１５３−７
９５％ＥｔＯＨ／ＥｔＯＡｃ／ＤＣＭ（４／２／１、７０ｍＬ）中の１５３−６（２．７ｇ、６．５６ｍｍｏｌ）の溶液に、Ｐｄ−Ｃ（Ｄｅｇｕｓｓａ、約５４％Ｈ２Ｏ、６７５ｍｇ、２５重量％）を添加した。反応をＴＬＣ（ヘキサン／ＥｔＯＡｃ、２／１；検出：ＵＶ、ＣＭＡ）によってモニターしながら、混合物をＨ２（Ｐａｒｒ，６０ｐｓｉ）下で室温で４．０時間振盪した。混合物をセライトのパッドに通して、触媒を取り除き、ＥｔＯＡｃで溶出した。合わせた有機相を減圧下で濃縮し、真空下で（油ポンプ）乾燥し、薄黄色の固体を得た。これをフラッシュクロマトグラフィー（傾斜、ヘキサン／ＥｔＯＡｃ、１／１、次いでＤＣＭ／ＥｔＯＡｃ、１／１）によって精製して、白色固形物として２．１１ｇのＢｏｃ−Ｔ１５３（１００％）を得た。
１ＨＮＭＲ（ＣＤＣｌ３，３００ＭＨｚ）：δ７．０６（ｔ，Ｊ＝７．９，１Ｈ），６．７３（ｄ，Ｊ＝７．６，１Ｈ），６．６５（ｄ，Ｊ＝７．９，１Ｈ），４．７３（ｓ，１Ｈ），４．０８（ｍ，２Ｈ），３．９７（ｍ，２Ｈ），３．２０（ｔ，Ｊ＝６．１，２Ｈ），２．９２（ｄｄ，Ｊ＝１６．７，４．４，１Ｈ），２．７９（ｍ，２Ｈ），２．２０（ｍ，２Ｈ），１．８９（ｍ，２Ｈ），１．４６（ｓ，９Ｈ），１．３６（ｍ，１Ｈ）；
１３ＣＮＭＲ（ＣＤＣｌ３，７５ＭＨｚ）：δ１５６．２３，１３８．１８，１２５．９８，１２４．８４，１２１．５３，１０８．０３，７９．１８，６９．１６，６１．５９，４６．２１，３４．９２，２９．０３，２８．４０，２７．３１，２６．５６；
ＭＳ：２２２［Ｍ＋Ｈ−Ｂｏｃ］＋
【０４６５】
ＢＢ．テザーＴ１５４の合成の標準手順
【化５５】
2013509434.tif 000167
【０４６６】
ステップＴ１５４−１
０℃のＴＨＦ（７０ｍＬ）中の２−ヨードアニリン（１５４−０、１３．１ｇ、６０．０ｍｍｏｌ、１．０当量）の溶液に、ＮａＨＭＤＳ（ＴＨＦ中の１Ｍ、１３２ｍＬ、１３２ｍｍｏｌ、２．２当量）の溶液を添加し、結果として得られた混合物を室温で２５分間撹拌した。Ｂｏｃ２Ｏ（１４．５ｇ、６６．０ｍｍｏｌ、１．１当量）を添加し、混合物を室温で２．５時間撹拌した。０．５ＭのＨＣｌを添加し、水相をＥｔＯＡｃで抽出した。合わせた有機相をＭｇＳＯ４で乾燥し、濾過し、濾液を減圧下で濃縮乾固した。結果として得られた残渣をフラッシュクロマトグラフィー（７％ＥｔＯＡｃ、９３％ヘキサン）によって精製し、１５４−１（１９．０ｇ、１００％）を得た。
【０４６７】
ステップＴ１５４−２
ＤＭＦ（１５０ｍＬ）中の１５４−１（１２．６ｇ、３９．６ｍｍｏｌ、１．０当量）の溶液に、ＮａＨ（油中の６０％、２．１ｇ、５３．５ｍｍｏｌ、１．３５当量）、ＫＩ（３２．９ｇ、１９８ｍｍｏｌ、５．０当量）および１３５−Ａ（１２．８ｇ、５３．５ｍｍｏｌ、１．３５当量）を添加し、結果として得られた混合物を８０℃で終夜撹拌した。混合物を室温に冷却し、水を添加した。水相をＭＴＢＥで抽出し、合わせた有機相をブラインで抽出した。有機相をＭｇＳＯ４で乾燥し、濾過し、濾液を減圧下で濃縮乾固し、白色固形物として１５４−２（１８ｇ、９５％）を得た。
【０４６８】
ステップＴ１５４−３
ＤＭＦ（１００ｍＬ）中の１５４−２（１７．３ｇ、３６．０ｍｍｏｌ、１．０当量）の溶液に、１３５−Ｂ（１３．９ｇ、５４．０ｍｍｏｌ、１．５当量）、Ｐ（ｏ−Ｔｏｌ）３（１．１ｇ、３．６ｍｍｏｌ、０．１当量）、Ｋ２ＣＯ３（９．９ｇ、７２．０ｍｍｏｌ、２．０当量）およびＢｕ４ＮＢｒ（１．１６ｇ、３．６ｍｍｏｌ、０．１当量）を添加し、結果として得られた混合物をＡｒで脱気した。Ｐｄ（ＯＡｃ）２（０．８ｇ、３．６ｍｍｏｌ、０．１当量）を添加し、混合物をまたＡｒで再び脱気した。結果として得られた混合物を９０℃で２０時間撹拌した。水を添加し、水相をエーテルで抽出した。合わせた有機相をブラインで抽出し、ＭｇＳＯ４で乾燥し、濾過し、濾液を減圧下で濃縮乾固した。残渣をフラッシュクロマトグラフィー（１１％ＥｔＯＡｃ、８９％ヘキサン）によって精製し、化合物１５４−３（１３．０ｇ、６０％）を得、いくらかの出発物質（７．８ｇ）を回収した。
【０４６９】
ステップＴ１５４−４
ＴＨＦ（６０ｍＬ）中の１５４−３（１１．９ｇ、１９．６ｍｍｏｌ、１．０当量）の溶液に、ＴＢＡＦの溶液（ＴＨＦ中の１Ｍ、３９．２ｍＬ、３９．２ｍｍｏｌ、２．０当量）を添加し、結果として得られた混合物を室温で終夜撹拌した。水を添加し、水相をＥｔＯＡｃで抽出した。合わせた有機相を、ブラインで抽出し、ＭｇＳＯ４で乾燥し、濾過し、濾液を減圧下で濃縮乾固した。残渣をフラッシュクロマトグラフィー（４０％ＥｔＯＡｃ、６０％ヘキサン）によって精製し、固体として１５４−４（９．２ｇ、９５％）を得た。
ＨＰＬＣ／ＭＳ：傾斜Ａ４、ｔＲ＝９．８１分、［Ｍ］＋４９２、［Ｍ＋Ｎａ］＋５１５
【０４７０】
ステップＴ１５４−５
９５％ＥｔＯＨ（２０ｍＬ）中の１５４−４（３．３ｇ、６．７ｍｍｏｌ、１．０当量）の溶液に、５％Ｐｄ／Ｃ（３００ｍｇ）を添加した。水素を混合物に通して泡立たせ、次いで、これを水素雰囲気下で終夜撹拌した。窒素を混合物に通して泡立たせ過剰水素を除去し、次いで混合物をセライトパッドに通して濾過し、フィルターをＥｔＯＡｃですすいだ。合わせた濾液を減圧下で濃縮し、定量的収率で１５４−５を得た。
ＨＰＬＣ／ＭＳ：傾斜Ａ４、ｔＲ＝１０．４１分、［Ｍ］＋４９４、［Ｍ＋Ｎａ］＋５１７
【０４７１】
ステップＴ１５４−６
Ｂｏｃ−Ｔ１５４を合成するために、Ｔ１３５（ステップ１３５−４）、Ｔ１３６（ステップ１３６−４）およびＴ１３７（１３７−６）について記載された手順を使用し、他のＢｏｃ基の消失がないことを保証するために、ＴＬＣによってモニターしながら、室温のＤＣＭ中のＴＦＡでの１５４−５の処理によって、Ｂｏｃ基の１つを１５４−５から選択的に除去する。
【０４７２】
ＣＣ．テザーＴ１５６の合成の標準手順
【化５６】
2013509434.tif 000168
【０４７３】
ステップＴ１５６−１
ＴＨＦ（１６００ｍＬ）中の２−ブロモエタノール（５０ｇ，４００ｍｍｏｌ，１当量）およびイミダゾール（５４．５ｇ、８００ｍｍｏｌ、２当量）の溶液に、ＴＢＤＭＳＣｌ（６３．３ｇ、４２０ｍｍｏｌ、１．０５当量）を添加し、溶液反応物は乳様になった。終夜揺動後、Ｅｔ２Ｏを添加し（１６００ｍＬ）、混合物をＮＨ４Ｃｌ飽和水溶液（２×２５０ｍＬ）およびブライン（２５０ｍＬ）で洗浄した。有機相を、ＭｇＳＯ４で乾燥し、濾過し、濾液を減圧下で蒸発させて、油として１５６−Ａ（９７ｇ、４０５ｍｍｏｌ、＞１００％）を得た。イミダゾールがこの物質中に残っているのがわかったさい、それは、Ｅｔ２Ｏに溶解し、１Ｍクエン酸塩緩衝剤で洗浄し、次いで有機物を減圧下で蒸発させることによって除去することができる。代替として、１５６−Ａは市販品で入手可能であった（Ａｌｄｒｉｃｈ、カタログ番号４２８４２６）。
【０４７４】
ステップＴ１５６−２
ＤＭＦ（１１５ｍＬ）中の２−ヨードフェノールの溶液（１５６−０，７．６６ｇ，３４．８ｍｍｏｌ，１．０当量）を高真空下で１０分間脱気した。窒素を、フラスコに導入し、１５６−Ａ（１０ｇ，４１．８ｍｍｏｌ，１．２当量）、ＫＩ（１．１６ｇ、６．９６ｍｍｏｌ、０．２当量）、および、Ｋ２ＣＯ３（６．０１ｇ、４３．５ｍｍｏｌ、１．２５当量）を添加した。混合物を、窒素下で５５℃で終夜撹拌した。溶液を真空下で（油ポンプ）除去し、水（１５０ｍＬ）を添加し、水相をＥｔ２Ｏ（３×１５０ｍＬ）で抽出した。合わせた有機相を、１ＭのＮａ２ＣＯ３（５０ｍＬ）およびブライン（２００ｍＬ）で洗浄し、ＭｇＳＯ４で乾燥し、濾過し、濾液を減圧下で濃縮して、１５６−１を得た。これは次のステップに直接使用するのに十分に純粋であった。
【０４７５】
ステップＴ１５６−３
ＴＨＦ（３５０ｍＬ）中の１５６−１（先の反応から）の溶液にＴＢＡＦ（ＴＨＦ中の１Ｍ溶液、６３ｍＬ、６３ｍｍｏｌ、１．５当量）を添加した。反応物を２時間撹拌した。Ｅｔ２Ｏ（６００ｍＬ）を添加し、有機相をＮＨ４Ｃｌ飽和水溶液（２×１００ｍＬ）およびブライン（１００ｍＬ）で洗浄し、ＭｇＳＯ４で乾燥し、濾過し、濾液を減圧下で濃縮した。残渣をフラッシュクロマトグラフィー（４０％ＥｔＯＡｃ／ヘキサン）によって精製し、９．１ｇの１５６−２（９９％、２ステップ）を得た。
【０４７６】
ステップＴ１５６−４
ＭｅＣＮ（１１０ｍＬ）中の１５６−２（４．５５ｇ、１７．２ｍｍｏｌ、１．０当量）および１５６−Ｂ３（３．２４ｇ，１８．９ｍｍｏｌ，１．１当量）の溶液を、４５分間アルゴンで脱気した。脱気した溶液に、Ｅｔ３Ｎ（４．８ｍＬ、３４．４ｍｍｏｌ、２．０当量）、Ｐ（ｏ−ｔｏｌ）３（５２４ｍｇ、１．７２ｍｍｏｌ、０．１当量）およびＰｄ（ＯＡｃ）２（１９３ｍｇ、０．８６ｍｍｏｌ、０．０５当量）を添加した。反応物をアルゴン下で揺動しながら加熱して２時間還流した。室温に冷却した後、溶液を真空内で除去し、ＣＨ２Ｃｌ２（１００ｍＬ）および水（１００ｍＬ）に残渣を溶解した。相は分離し、ＣＨ２Ｃｌ２（２×１００ｍＬ）で水相を抽出した。有機相をＭｇＳＯ４で乾燥し、濾過し、濾液を減圧下で蒸発させた。残渣をフラッシュクロマトグラフィー（３０％ＥｔＯＡｃ／ヘキサン）を使用して精製し、褐色の固体としてＢｏｃ−Ｔ１５６ａ（２．９８ｇ、９．７ｍｍｏｌ、５６％）を得た。Ｎ−保護をしないと、この化合物はいくらか不安定性を示すことに注意すること。
ＨＰＬＣ／ＭＳ：傾斜Ａ４、ｔＲ＝６．７７分、［Ｍ＋Ｎａ］＋３３０
【０４７７】
鏡像異性体テザー、Ｂｏｃ−Ｔ１５６ｂは、鏡像異性体アミノアルコール（Ｒ）−（−）−２−アミノ−１−プロパノール、１５６−Ｃ１から出発する以外、同一の手順によって入手する。
【化５７】
2013509434.tif 000169
【０４７８】
ＤＤ．試薬１５６のＢ３の合成の標準手順
【化５８】
2013509434.tif 000170
【０４７９】
ステップＴ１５６−５
ＣＨ２Ｃｌ２（１８０ｍＬ）中の１５６−Ｂ１（７．０１ｇ，４０ｍｍｏｌ，１．０当量）の溶液に、ＤＭＰ（２３．８ｇ、５６ｍｍｏｌ、１．４当量）を添加した。次いで、ＣＨ２Ｃｌ２（０．１％Ｈ２Ｏを含有する、８２０ｍＬ、４５ｍｍｏｌ、１．１２５当量）を、３０分にわたって添加した。溶液を真空内で蒸発乾固させ、残渣をエーテル（５００ｍＬ）、および、ＮａＨＣＯ３飽和水溶液と１０％Ｎａ２Ｓ２Ｏ３（１：１）（４００ｍＬ）との混合物に溶解した。この混合物を１時間揺動し、相を分離し、有機相を水（１００ｍＬ）およびブライン（５００ｍＬ）で洗浄した。有機相を、ＭｇＳＯ４で乾燥し、濾過し、濾液を減圧下で蒸発させて、１５６−Ｂ２（６．２ｇ）を得た。これは次のステップに直接使用した。
【０４８０】
ステップＴ１５６−６
ＴＨＦ（２５０ｍＬ）中のＭｅＰＰｈ３Ｂｒ（３１．４ｇ、８８ｍｍｏｌ、２．２当量）の溶液にｔ−ＢｕＯＫ（８．９８ｇ、８０ｍｍｏｌ、２．０当量）を添加した。溶液を９０分揺動し、−７８℃に冷却し、カニューレによってＴＨＦ（１５０ｍＬ）中の１５６−Ｂ２を添加した。氷浴を取り除き、反応物を室温で終夜揺動した。ＮＨ４Ｃｌ飽和水溶液（１００ｍＬ）を添加し、沈澱した塩を溶解し、混合物を５分揺動し、相を分離した。水相をエーテル（２×２００ｍＬ）で抽出した。合わせた有機相を、ブライン（５０ｍＬ）で洗浄し、ＭｇＳＯ４で乾燥し、濾過し、濾液を減圧下で蒸発させて、残渣を得た。これをフラッシュクロマトグラフィー（１０％ＥｔＯＡｃ／ヘキサン）によって精製して、白色固形物として１５６−Ｂ３（７０％，２ステップ）を得た。
【０４８１】
鏡像異性体アミノアルケン、Ｂｏｃ−１５６Ｃ−３は、鏡像異性体アミノアルコール（Ｒ）−（−）−２−アミノ−１−プロパノール、１５６−Ｃ１から出発すること以外、同一の手順によって入手する。
【０４８２】
ＥＥ．テザーＴ１５８の合成の標準手順
【化５９】
2013509434.tif 000171
【０４８３】
ステップＴ１５８−１
ＣＨ３ＣＮ（３００ｍＬ）中の２−ブロモベンズアルデヒド（１５８−０、９．６ｇ、５１．９ｍｍｏｌ、１．０当量）の溶液に、１３５−Ｂ（１４．７ｇ、５７．１ｍｍｏｌ、１．１当量）、（ｏ−ｔｏｌ）３Ｐ（１．６ｇ、５．２ｍｍｏｌ、０．１当量）、Ｐｄ（ＯＡｃ）２（５８４ｍｇ、２．６ｍｍｏｌ、０．０５当量）およびＥｔ３Ｎ（１４．６ｍＬ、１０３．８ｍｍｏｌ、２．０当量）添加した。結果として得られた混合物を、終夜撹拌し還流した。混合物を室温に冷却し、溶媒を減圧下で蒸発させた。水を添加し、水相をＣＨ２Ｃｌ２で抽出した。有機相をブライン（２ｘ）で抽出した。合わせた有機相をＭｇＳＯ４で乾燥し、濾過し、濾液を減圧下で濃縮乾固した。残渣をフラッシュクロマトグラフィー（１５％ＥｔＯＡｃ、８５％ヘキサン）によって精製して、黄色の油性半固体として１５８−１（１７．５ｇ、９４％）を得た。
ＴＬＣ：Ｒｆ＝０．４９（３０％ＥｔＯＡｃ、７０％ヘキサン；検出：ＵＶ、Ｍｏ／Ｃｅ）．
【０４８４】
ステップＴ１５８−２
ＥｔＯＨ（２００ｍＬ）中の１５８−１（９．３ｇ、２５．８ｍｍｏｌ、１．０ｅｑ．）の溶液に、水（３ｍＬ）中のラネー／Ｎｉの懸濁液を添加し、水素を不均質混合物へ泡立たせた。反応物を水素雰囲気下で７時間撹拌した。次いで、窒素を反応溶液に通して泡立たせ、過剰水素を除去し、混合物をシリカゲルパッドに通して濾過した。シリカは５０％ＥｔＯＡｃ／ヘキサンですすぎ、合わせた濾液および洗浄液を減圧下で蒸発させた。１５８−２が黄色の油として（８．８ｇ、９４％）得られた。
ＴＬＣ：Ｒｆ＝０．２９（３０％ＥｔＯＡｃ、７０％ヘキサン；検出：ＵＶ、Ｍｏ／Ｃｅ）．
【０４８５】
ステップＴ１５８−３
ＣＨ２Ｃｌ２（２００ｍＬ）中の１５８−２（８．８ｇ、２４．１ｍｍｏｌ、１．０ｅｑ．）の溶液に、デス・マーチン・ペルヨージナン（１４．３ｇ、３３．７ｍｍｏｌ、１．４当量）を添加した。結果として得られた混合物を室温で１．５時間撹拌した。ＮａＨＣＯ３飽和水溶液を添加し、水相をＣＨ２Ｃｌ２で抽出した。合わせた有機相をＭｇＳＯ４で乾燥し、濾過し、濾液を減圧下で濃縮した。結果として得られた残渣を、フラッシュクロマトグラフィー（２０％ＥｔＯＡｃ、８０％ヘキサン）によって精製し、白色固形物として１５８−３（６．８ｇ、７７％）を得た。
ＴＬＣ：Ｒｆ＝０．４３（３０％ＥｔＯＡｃ、７０％ヘキサン；検出：ＵＶ、Ｍｏ／Ｃｅ）．
【０４８６】
ステップＴ１５８−４
０℃のＴＨＦ（１５０ｍＬ）中のＮａＨ（油中の６０％、１．１２ｇ、２８．１ｍｍｏｌ、１．５当量）の懸濁液に、ホスホナート（４．１ｍＬ、２８．１ｍｍｏｌ、１．５当量）をゆっくり添加した。注意：水素がこの反応物から発生した。混合物を１５分撹拌し、次いでＴＨＦ（５０ｍＬ）中の１５８−３（６．８ｇ、１８．７ｍｍｏｌ、１．０当量）を添加した。結果として得られた混合物を室温で２時間撹拌した。ＮＨ４Ｃｌ飽和水溶液を添加し、水相をＥｔＯＡｃで抽出した。合わせた有機相をＭｇＳＯ４で乾燥し、濾過し、濾液を減圧下で濃縮した。残渣をフラッシュクロマトグラフィー（２０％ＥｔＯＡｃ、８０％ヘキサン）によって精製し、薄黄色の油として１５８−４（７．３ｇ、９４％）を得た。
ＴＬＣ：Ｒｆ＝０．４２（２０％ＥｔＯＡｃ、８０％ヘキサン；検出：ＵＶ、Ｍｏ／Ｃｅ）．
【０４８７】
ステップＴ１５８−５
ＣＨ２Ｃｌ２（２００ｍＬ）中の１５８−４（７．３ｇ、１７．４ｍｍｏｌ、１．０ｅｑ．）の溶液に、ＴＦＡ（１．９ｍＬ、２６．１ｍｍｏｌ、１．５当量）を添加した。結果として得られた混合物を室温で４時間撹拌した。ＮａＨＣＯ３飽和水溶液を添加し、水相をＣＨ２Ｃｌ２で抽出した。合わせた有機相をＭｇＳＯ４で乾燥し、濾過し、濾液を減圧下で濃縮した。残渣をフラッシュクロマトグラフィー（３０％ＥｔＯＡｃ、７０％ヘキサン）によって精製し、薄黄色の油として１５８−５（５．４ｇ、９６％）を得た。
ＴＬＣ：Ｒｆ＝０．４０（３０％ＥｔＯＡｃ、７０％ヘキサン；検出：ＵＶ、Ｍｏ／Ｃｅ）．
【０４８８】
ステップＴ１５８−６
−７８℃のＣＨ２Ｃｌ２（１００ｍＬ）中の１５８−５（５．４ｇ、１６．９ｍｍｏｌ、１．０当量）の溶液にＤＩＢＡＬ（ＣＨ２Ｃｌ２中の１Ｍ、４２．３ｍＬ、４２．３ｍｍｏｌ、２．５当量）を添加した。結果として得られた混合物を−７８℃で３０分、次いで０℃で１時間撹拌した。ＴＬＣが反応の完了を示さなかったら、ＤＩＢＡＬの追加の１当量を添加した。ロッシェル塩の１Ｍ溶液を添加し、混合物を１時間撹拌した。追加の物質が抽出されなくなることをＴＬＣが示すまで、水相をＣＨ２Ｃｌ２で抽出した。合わせた有機相をＭｇＳＯ４で乾燥し、濾過し、濾液を減圧下で濃縮した。残渣をフラッシュクロマトグラフィー（６０％ＥｔＯＡｃ、４０％ヘキサン）によって精製し、無色の油としてＢｏｃ−Ｔ１５８（４．６ｇ、９４％）を得た。
ＴＬＣ：Ｒｆ＝０．１７（５０％ＥｔＯＡｃ、５０％ヘキサン；検出：ＵＶ、Ｍｏ／Ｃｅ）；
ＨＰＬＣ／ＭＳ：傾斜Ａ４、ｔＲ＝６．８３分、［Ｍ］＋２９１、［Ｍ＋Ｎａ］＋３１４。
【０４８９】
ＦＦ．テザーＴ１５９の合成の標準手順
【化６０】
2013509434.tif 000172
【０４９０】
ステップＴ１５９−１
アセトン（１．３Ｌ）中の２−ブロモフェノール（１５９−０，４５ｇ，２６０ｍｍｏｌ，１．０当量）の溶液に、無水炭酸カリウム（７１．９ｇ、５２０ｍｍｏｌ、２．０当量）および臭化アリル（３４．６ｇ、２４．２ｍＬ、２８６ｍｍｏｌ、１．１当量）を添加した。懸濁液をアルゴン下で６時間撹拌し還流した。反応物を室温に冷却し、次いで溶媒を真空下で除去し、冷水（５００ｍＬ）を添加し、水相をエーテル（３×５００ｍＬ）で抽出した。合わせた有機相を水（２００ｍＬ）およびブライン（１００ｍＬ）で洗浄し、硫酸マグネシウムで乾燥し、濾過し、濾液を真空下で濃縮して、油として１５９−１（５５．６ｇ、２１３ｍｍｏｌ、１００％）を得た。これはさらに精製をしないで次のステップに使用した。
ＴＬＣ：Ｒｆ＝０．３２（２５％ＣＨ２Ｃｌ２／ヘキサン）．
【０４９１】
ステップＴ１５９−２
Ｎ，Ｎ−ジエチルアニリン（３６ｍＬ，１：１ｖ／ｖ）中の１５９−１（５１．０ｇ、２３９ｍｍｏｌ、１．０の当量）の溶液を、４時間撹拌して還流した。反応は１ＨＮＭＲで追跡でき得る。室温に溶液を冷却し、希ＨＣｌを添加した（３００ｍＬ）。水相をエーテル（３×３００ｍＬ）で抽出した。合わせた有機相を、硫酸マグネシウムで乾燥し、濾過し、濾液を真空下で濃縮した。残渣をエーテル（５００ｍＬ）に溶解し、１ＮのＮａＯＨ（４×２５０ｍＬ）で抽出した。水相を６ＮのＨＣｌでｐＨ２〜３に酸性化し、次いで、エーテル（３×２５０ｍＬ）で抽出した。合わせた有機相を、硫酸マグネシウムで乾燥し、濾過し、濾液を真空下で濃縮して、いくらかジエチルアニリンで汚染された油として１５９−２（４６ｇ）を得た。これは次のステップに得られたままで使用した。
【０４９２】
ステップＴ１５９−３
ＣＨＣｌ３（２．４Ｌ）中の１５９−２（４６ｇ）の溶液にｍ−ＣＰＢＡ（８０．５ｇ、３５９ｍｍｏｌ、１．５当量）およびＴＦＡ（１．８ｍＬ、２４ｍｍｏｌ、０．１当量）を添加した。反応物を、終夜撹拌して還流した。ＴＦＡ（１．８ｍＬ）を添加し、反応物を３時間撹拌した。ＴＦＡ（１４．４ｍＬ）の別の部分を添加し、反応物を追加の３時間撹拌した。反応物を室温に冷却し、次いで重炭酸ナトリウム飽和溶液（２×５００ｍＬ）およびブライン（５００ｍＬ）で洗浄した。有機相を、硫酸マグネシウムで乾燥し、濾過し、濾液を真空下で濃縮して、オレンジ色の固体を得た。これはフラッシュクロマトグラフィー（傾斜、２０％〜３０％〜４０％のＥｔＯＡｃ／ヘキサン）によって精製した。生成物を含有する２つの分画が得られた。第１の分画（２０ｇ）を、上記と同一条件でフラッシュクロマトグラフィーによって再精製して、１２．０ｇの１５９−３（５２．４ｍｍｏｌ、２１．９％、２ステップ）を得た。第２の分画（１４．９ｇ、６５．０ｍｍｏｌ、２７．２％、２ステップ）は純粋な１５９−３を含んでいた。
【０４９３】
ステップＴ１５９−４
ＭｅＣＮ（好ましくは脱気した、７２．５ｍＬ）中の１５９−３（２．６７ｇ、１１．６ｍｍｏｌ、１．０当量）、１３５−Ｂ（３．２９ｇ、１２．８ｍｍｏｌ、１．１当量）、およびＥｔ３Ｎ（３．２ｍＬ、２３．２ｍｍｏｌ、２．０当量）の溶液に、Ｐ（ｏ−ｔｏｌ）３（７０６ｍｇ、２．３２ｍｍｏｌ、０．２当量）およびＰｄ（ＯＡｃ）２（２６０ｍｇ、１．１６ｍｍｏｌ、０．１当量）を添加した。混合物を、アルゴン下で終夜撹拌して還流した。溶液を真空下で濃縮し、水（２５０ｍＬ）およびＣＨ２Ｃｌ２（２５０ｍＬ）を添加し、相を分離した。水相をＣＨ２Ｃｌ２（２×２５０ｍＬ）で抽出した。合わせた有機相を、硫酸マグネシウムで乾燥し、濾過し、濾液を真空下で濃縮して、油を得た。これはフラッシュクロマトグラフィー（３０％ＥｔＯＡｃ／ヘキサン）によって精製し、５ｇの生成物（１５９−４）および出発物質（１５９−３）の２：１混合物（＞１００％）を得た。
【０４９４】
ステップＴ１５９−５
ＣＨ２Ｃｌ２（６０ｍＬ）中の１５９−４（５ｇ、１２．３ｍｍｏｌ）の溶液に、ＴＦＡ（１．１ｍＬ、１５ｍｍｏｌ、１．２２当量）を添加した。混合物を室温で３時間撹拌した。次いで、エーテル（２５０ｍＬ）を添加し、有機相を重炭酸ナトリウム飽和溶液（５０ｍＬ）およびブライン（５０ｍＬ）で洗浄した。有機相を、硫酸マグネシウムで乾燥し、濾過し、濾液を真空下で濃縮して、黄色の残渣を得た。これはフラッシュクロマトグラフィー（傾斜、３０％〜４０％〜５０％のＥｔＯＡｃ／ヘキサン−）によって精製して、黄色の油として１．６９ｇのＢｏｃ−Ｔ１５９（４８％、２ステップ）を得た。
ＴＬＣ：Ｒｆ＝０．３５（５０％ＥｔＯＡｃ／ヘキサン）
【０４９５】
ＧＧテザーＴ１６０の合成の標準手順
【化６１】
2013509434.tif 000173
【０４９６】
ステップＴ１６０−１
ＤＭＦ（２０ｍＬ）中の２−オキシベンズアルデヒド（１６０−０、１．２ｇ、４．８ｍｍｏｌ、１．０当量）の溶液に、炭酸カリウム（１．５ｇ、１０．８ｍｍｏｌ、１．１当量）、ヨウ化カリウム（３３２ｍｇ、２．０ｍｍｏｌ、０．２当量）および１３６−Ａ（４．２ｍＬ、１９．６ｍｍｏｌ、２．０当量）を添加した。結果として得られた混合物を７０℃で４時間撹拌した。その溶液を室温に冷却し、ブラインを添加した。水相をエーテルで抽出し、合わせた有機相を、ブライン（２ｘ）で抽出した。有機相をＭｇＳＯ４で乾燥し、濾過し、濾液を減圧下で濃縮した。残渣をフラッシュクロマトグラフィー（１５％ＥｔＯＡｃ、８５％ヘキサン）によって精製して、１６０−１（３．０ｇ、＞１００％、１ＨＮＭＲによって検出して、微量の１３６−Ａを含む。）を得た。
ＴＬＣ：Ｒｆ＝０．５５（２０％ＥｔＯＡｃ、８０％ヘキサン；検出：ＵＶ、Ｍｏ／Ｃｅ）．
【０４９７】
ステップＴ１６０−２
−７８℃のＴＨＦ（１５０ｍＬ）中のホスホナート１６０−Ａ（３．６ｇ、１５．０ｍｍｏｌ、１．５ｅｑ、Ａｌａｇａｐｐａｎ  Ｔｈｅｎａｐｐａｎ  ａｎｄ  Ｄｏｎａｌｄ  Ｊ．  Ｂｕｒｔｏｎ  Ｊ．  Ｏｒｇ．  Ｃｈｅｍ  １９９０，  ４６３９）の溶液に、ｎ−ＢｕＬｉ（ペンタン中２Ｍ、７．５ｍＬ、１５．０ｍｍｏｌ、１．５当量）の溶液を添加した。結果として得られた混合物を−７８℃で１０分間維持し、次いでＴＨＦ（５０ｍＬ）中の１６０−１（２．８ｇ、１０．０ｍｍｏｌ、１．０当量）を添加し、結果として得られた混合物を−７８℃で４５分間撹拌した。ＮＨ４Ｃｌ飽和水溶液を添加し、水相をＥｔＯＡｃで抽出した。合わせた有機相をＭｇＳＯ４で乾燥し、濾過し、濾液を減圧下で濃縮した。残渣をフラッシュクロマトグラフィー（１０％ＥｔＯＡｃ、９０％ヘキサン）によって精製し、１６０−２（３．９ｇ、１０５％、１ＨＮＭＲによって検出して微量の１３６−Ａを含む。）を得た。
ＴＬＣ：Ｒｆ＝０．５８（２０％ＥｔＯＡｃ、８０％ヘキサン；検出：ＵＶ、Ｍｏ／Ｃｅ）．
【０４９８】
ステップＴ１６０−３
−７８℃のＣＨ２Ｃｌ２（１００ｍＬ）中のエステル１６０−２（３．７ｇ、１０．０ｍｍｏｌ、１．０当量）の溶液に、ＤＩＢＡＬ（ＣＨ２Ｃｌ２中の１Ｍ、２５．０ｍＬ、２．５当量、より過剰のＤＩＢＡＬを用いるとＴＢＤＭＳ保護の消失が観察されたので、量は非常に重要である。）の溶液を添加した。結果として得られた混合物を−７８℃で３０分間、次いで０℃で１時間撹拌した。アセトンおよびＮａ２ＳＯ４・１０Ｈ２Ｏを添加し、結果として得られた混合物を室温で２時間撹拌した。沈殿物を濾過し、ＥｔＯＡｃおよびＣＨ２Ｃｌ２ですすいだ。溶液を、減圧下で蒸発させ、残渣をフラッシュクロマトグラフィー（３０％ＥｔＯＡｃ、７０％ヘキサン）によって精製し、１６０−３（２．８ｇ、８５％３、ステップ）を得た。
ＴＬＣ：Ｒｆ＝０．４６（３０％ＥｔＯＡｃ、７０％ヘキサン；検出：ＵＶ、Ｍｏ／Ｃｅ）．
【０４９９】
ステップＴ１６０−４
０℃のＣＨ２Ｃｌ２（５０ｍＬ）中の１６０−３（２．６ｇ、８．０ｍｍｏｌ、１．０当量）の溶液に、Ｅｔ３Ｎ（５．６ｍＬ、４０．０ｍｍｏｌ、５．０当量）およびＭｓＣｌ（１．２ｍＬ、１６．０ｍｍｏｌ、２．０当量）を添加した。結果として得られた混合物を０℃で１時間撹拌した。水を添加し、水相をＣＨ２Ｃｌ２で抽出した。合わせた有機相をＭｇＳＯ４で乾燥し、濾過し、濾液を減圧下で濃縮して、粗のメシラート１６０−４（微量のＭｓＣｌを含む。）を得た。これは次のステップに得られたままで使用した。
ＴＬＣ：Ｒｆ＝０．２４（２０％ＥｔＯＡｃ、８０％ヘキサン；検出：ＵＶ、Ｍｏ／Ｃｅ）．
【０５００】
ステップＴ１６０−５
ＤＭＦ（３０ｍＬ）中の１６０−４（３．２ｇ、８．０ｍｍｏｌ、１．０当量）の溶液に、ＮａＮ３（２．６ｇ、４０．０ｍｍｏｌ、５．０当量）を添加した。結果として得られた混合物を室温で２時間撹拌した。水を添加し、水相をエーテルで抽出した。合わせた有機相を、ブラインで抽出し、有機相をＭｇＳＯ４で乾燥し、濾過し、濾液を減圧下で濃縮して、粗のアジド１６０−５（１．９ｇ、６８％、２ステップ）を得た。これは、得られたままで次のステップに使用するのに十分純粋であった。
ＴＬＣ：Ｒｆ＝０．６８（２０％ＥｔＯＡｃ、８０％ヘキサン；検出：ＵＶ、Ｍｏ／Ｃｅ）．
【０５０１】
ステップＴ１６０−６
ＴＨＦ（５０ｍＬ）中の１６０−５（１．９ｇ、５．４ｍｍｏｌ、１．０当量）の溶液に、ＰＰｈ３（２．１ｇ、８．１ｍｍｏｌ、１．５当量）および水（５ｍＬ）を添加した。結果として得られた混合物を、５０℃で終夜加熱した。（ＴＬＣ：Ｒｆ＝基準線（２０％ＥｔＯＡｃ、８０％ヘキサン；検出：ＵＶ、Ｍｏ／Ｃｅ）。溶液を室温に冷却し、次いで水（５０ｍＬ）、Ｎａ２ＣＯ３（５７２ｍｇ、５．４ｍｍｏｌ、１．０当量）および（Ｂｏｃ）２Ｏ（１．２ｇ、５．４ｍｍｏｌ、１．０当量）を添加した。結果として得られた混合物を室温で２時間撹拌した。（ＴＬＣ：Ｒｆ＝０．３６（２０％ＥｔＯＡｃ、８０％ヘキサン；検出：ＵＶ、Ｍｏ／Ｃｅ）．水を添加し、水相をＥｔＯＡｃで抽出した。合わせた有機相をＭｇＳＯ４で乾燥し、濾過し、濾液を減圧下で濃縮乾固した。ＴＨＦ（３０ｍＬ）中の残渣に、ＴＢＡＦ（ＴＨＦ中の１Ｍ、８．１ｍＬ、８．１ｍｍｏｌ、１．５当量）の溶液を添加した。結果として得られた混合物を室温で１時間撹拌した。水を添加し、水相をＥｔＯＡｃで抽出した。合わせた有機相をＭｇＳＯ４で乾燥し、濾過し、濾液を減圧下で濃縮した。残渣を、フラッシュクロマトグラフィー（６０％ＥｔＯＡｃ、４０％ヘキサン）によって精製して、Ｂｏｃ−Ｔ１６０（１．３ｇ、７６％、３ステップ）を得た。
ＴＬＣ：Ｒｆ＝０．１０（２０％ＥｔＯＡｃ、８０％ヘキサン；検出：ＵＶ、Ｍｏ／Ｃｅ）；
ＨＰＬＣ／ＭＳ：傾斜Ａ４、ｔＲ＝６．５１分、［Ｍ］＋３１１、［Ｍ＋Ｎａ］＋３３４。
【０５０２】
ＨＨテザーＴ１６１およびＴ１７７の合成の標準手順
【化６２】
2013509434.tif 000174
【０５０３】
ステップＴ１６１−１
ＴＨＦ／水（１／１）中の１３４−０［（Ｒ）−（−）−２−アミノ−１−ブタノール，５ｇ，５６ｍｍｏｌ，１．０ｅｑ］の溶液に、（Ｂｏｃ）２Ｏ（１２．９ｇ、５９ｍｍｏｌ、１．０５当量）および炭酸ナトリウム（７．１２ｇ、６７ｍｍｏｌ、１．２当量）を添加した。その溶液を室温で終夜撹拌した。溶液を減圧下で除去し、残渣をエーテルに溶解し、クエン酸緩衝溶液を添加した。水相をエーテル（３ｘ）で抽出した。合わせた有機相をＭｇＳＯ４で乾燥し、濾過し、濾液を減圧下で濃縮した。残渣を、シリカゲル（５０％ＥｔＯＡｃ／ヘキサン）のパッドに通すことにより精製し、着色した油として１０ｇの１６１−１（９４％）を得た。
【０５０４】
ステップＴ１６１−２
（Ｍｅｙｅｒ，Ｓ．Ｄ．ａｎｄ  Ｓ．Ｌ．Ｓｃｈｒｅｉｂｅｒ  Ｊ．Ｏｒｇ．Ｃｈｅｍ  １９９４，５９，７５４９−７５５２の手順に基づく）ＤＣＭ（２３０ｍＬ）中の１６１−１（７．５５ｇ、４０ｍｍｏｌ、１．０当量）の溶液に、デス・マーチン・ペルヨージナン（ＤＭＰ、２４ｇ、５６ｍｍｏｌ、１．４当量）を添加した。激しく撹拌しながら０．５時間にわたりこの溶液に滴下漏斗でＨ２Ｏ（１．５ｍＬ、１．４当量）を添加した。０．５時間後、Ｅｔ２Ｏを添加し、溶液を濾過し、濾液を減圧下で濃縮した。残渣を、Ｅｔ２Ｏに溶解し、溶液を飽和ＮａＨＣＯ３／１０％チオ硫酸ナトリウム（１：１）、水およびブラインで連続的に洗浄した。重炭酸塩−チオ硫酸塩での更なるな洗浄が、ＤＭＰ試薬によって形成された酢酸を除去するために時には必要である。合わせた水相をＥｔ２Ｏ（１ｘ）で逆抽出し、合わせた有機相をＭｇＳＯ４で乾燥し、濾過し、濾液を減圧下で濃縮した。残渣からシリカゲルのパッド（２０％ＥｔＯＡｃ／ヘキサン）に通して精製し、白色固形物として５．４ｇの１６１−２（７５％）を得た。これは、トルエン（３ｘ、浴温度＝３０℃、油ポンプ）を穏やかに共沸させ、次のステップに直ちに使用した。
ＴＬＣ：Ｒｆ＝０．３（ヘキサン／ＥｔＯＡｃ、１／４；検出：ＫＭｎＯ４、ＵＶ）．
【０５０５】
ステップＴ１６１−３
０℃のＤＣＭ（１７３ｍＬ）中のＺｎ粉末［以下のシーケンスによって活性化した：０．５ＮのＨＣｌ（３ｘ）、Ｈ２Ｏ（３ｘ）、ＭｅＯＨ（３ｘ）、Ｅｔ２Ｏ（３ｘ）で順次洗浄し、真空下で（油ポンプ）乾燥した、３．８ｇ、５３ｍｍｏｌ、２．０当量］、および、ＣＢｒ４（１９．２ｇの５３ｍｍｏｌ、２．０当量）に、ＰＰｈ３（１５．２ｇ、５８ｍｍｏｌ、２．０当量）を３分割して５分にわたって添加し、発熱反応が観察された。溶液を室温で２４時間撹拌した。溶液は、黄色からピンク色の懸濁液に変化した。新たに準備したアルデヒド１６１−２（５．０ｇ、２６ｍｍｏｌ、１．０当量）を、ＤＣＭ（３０ｍＬ）に添加した。その溶液を次の２４時間にわたって暗いスミレ色になる。溶液を減圧下で濃縮し、次いでフラッシュクロマトグラフィー（ヘキサン／ＥｔＯＡｃ、１０／１）によって精製し、白色固形物として１６１−３（４．１ｇ、４６％）を得た。
ＴＬＣ：Ｒｆ＝０．６７（ＥｔＯＡｃ／ヘキサン、３／７；検出：ＫＭｎＯ４）．
【０５０６】
ステップＴ１６１−４
−７８℃のＴＨＦ（Ｎａ−ベンゾフェノンケチルから蒸留した、９５ｍＬ）中の１６１−３（２．０ｇ、５．８３ｍｍｏｌ、１．０当量）の溶液に、新たに滴定したヘキサン中のｎ−ＢｕＬｉ溶液（１．８Ｍ、１０．５ｍＬ、１７．５ｍｍｏｌ、３．０当量）を滴下して添加した。その溶液を−７８℃で１．０時間撹拌した。０．０１ＮのＮａＯＨ（１００ｍＬ）の溶液を添加し、室温に混合物を暖めた。水相をＥｔ２Ｏ（２×１２０ｍＬ）で抽出した。合わせた有機相をブライン（２×３００ｍＬ）で洗浄し、８８０ｍｇ（８８％）、ＭｇＳＯ４で乾燥し、濾過し、減圧下で濃縮し、次いで、フラッシュクロマトグラフィー（ヘキサン／ＥｔＯＡｃ、４／１）によって精製して、白色固形物として８８０ｍｇの１６１−４（８８％）を得た。
ＴＬＣ：Ｒｆ＝０．５７（Ｅｔ２Ｏ／ヘキサン、２／３；検出：ＫＭｎＯ４）．
【０５０７】
ステップＴ１６１−５
ＣＨ３ＣＮ（３８ｍＬ）中の１６１−４（８８０ｍｇ，４．８１ｍｍｏｌ，１．０当量）および１６１−Ａ（Ｃｂｚ−Ｔ３３ａの手順を参照、１．６５ｇ、６．２５ｍｍｏｌ、１．３当量）の溶液にアルゴンを２０分泡立たせた。Ｅｔ３Ｎ（新たにＣａＨ２から蒸留した、２．４ｍＬ、２２４ｍｍｏｌ、３．６当量）を添加し、アルゴンは１０分間泡立たせた。次いで、再結晶したＣｕＩ（２８ｍｇ、０．１４４ｍｍｏｌ、０．０３当量）およびＰｄＣｌ２（ＰＰｈ３）２（１０２ｍｇ、０．１４４ｍｍｏｌ、０．０３当量）を、溶液に添加した。反応物を、室温でアルゴン雰囲気下で終夜撹拌した。揮発分を減圧下で除去し、残渣をフラッシュクロマトグラフィー（ＤＣＭ／ＥｔＯＡｃ、４／１）によって精製し、オレンジ色の固体として１．４ｇの１６１−５（９２％）を得た。後に分離することが非常に困難であるとわかるので、未反応の１６１−Ａをすべて除去するように注意しなければならない。
ＴＬＣ：Ｒｆ＝０．１３（Ｅｔ２Ｏ／ヘキサン、１／４：検出：ＫＭｎＯ４）．
【０５０８】
ステップＴ１６１−６
１６１−５（１．４ｇ、４．３９ｍｍｏｌ、１．０当量）に、１０％Ｐｄ／Ｃ（２１０ｍｇ、１５重量％）および９５％ＥｔＯＨ（１２８ｍＬ）を添加した。混合物を、４００ｐｓｉの水素の圧力下のＰａｒｒ水素化装置に２４時間置いた。反応物をセライトパッドに通して濾過し、次いで濾液を減圧下で濃縮し、無色の油として１．１２ｇのＢｏｃ−Ｔ１６１（８０％）を得た。同様に、２９．７ｇのＢｏｃ−Ｔ１６１ａは、この手順を使用して５０．０ｇの１３４−０から１６％の全収率で合成した。
ＨＰＬＣ／ＭＳ（傾斜Ａ４）：ｔＲ：７．３分、［Ｍ］＋３２３．
【０５０９】
鏡像異性体テザー、Ｂｏｃ−Ｔ１６１ｂおよびＢｏｃ−Ｔ１７７ｂを、１３４−０の鏡像異性体であるアミノアルコール（Ｓ）−（−）−２−アミノ−１−ブタノール、１６１−６から出発する以外、同一の手順によって入手する。
【化６３】
2013509434.tif 000175
【０５１０】
ＩＩ．テザーＴ１６２の合成の標準手順
【化６４】
2013509434.tif 000176
【０５１１】
ステップＴ１６２−１
乾燥トルエン（１７０ｍＬ）中のｔ−ブチルアミン（４３．６ｇ、６２．９ｍＬ、６００ｍｍｏｌ、３．０当量）の溶液に、Ｎ２下で−３０℃（約１０分）でＢｒ２（３５．１ｇ、１１．３ｍＬ、２２０ｍｍｏｌ、１．１当量）を滴下して添加した。混合物を−７８℃に冷却し、ＤＣＭ（１１０ｍＬ）中の２−フルオロフェノール（１６２−０、２２．５ｇ、２００ｍｍｏｌ、１．０当量）の溶液を、Ｎ２下で（約３０分）滴下して添加した。混合物を室温に徐々に暖め、終夜撹拌した。反応物をジエチルエーテルで希釈し、有機相を１．０ＭのＨＣｌ（２ｘ）およびブライン（１ｘ）で洗浄した。有機相を無水ＭｇＳＯ４で乾燥し、濾過し、濾液を減圧下で蒸発させた。残渣をフラッシュクロマトグラフィー（１０％ＥｔＯＡｃ／ヘキサン）によって精製し、褐色の固体として１６２−１（２６ｇ、６８％）を得た。
ＴＬＣ：Ｒｆ：０．４５（ＥｔＯＡｃ／ヘキサン、２５／７５；検出：ＵＶ、ＫＭｎＯ４）．
【０５１２】
ステップＴ１６２−２
無水ＤＭＦ（５００ｍＬ）中の１６２−１（２６．０ｇ、１３６ｍｍｏｌ、１．０当量）および１３６−Ａ（５２．１ｇ，２１８ｍｍｏｌ，１．６当量）の溶液に、炭酸カリウム（２２．６ｇ、１６３．２ｍｍｏｌ、１．２当量）およびヨウ化カリウム（４．５ｇ、２７．２ｍｍｏｌ、０．２当量）を添加した。溶液を、窒素下に５５℃で終夜加熱し撹拌した。混合物を、水（５００ｍＬ）およびジエチルエーテル（５００ｍＬ）で希釈し、水相およびＥｔ２Ｏ（２×３００ｍＬ）で抽出した。有機相を合わせて、クエン酸塩緩衝剤（４００ｍＬ）およびブライン（２×３００ｍＬ）で洗浄する。有機相を無水ＭｇＳＯ４で乾燥し、濾過し、濾液を減圧下で蒸発させた。帯黄色の油の残渣をフラッシュクロマトグラフィー（５％酢酸エチル／ヘキサン）によって精製し、無色の油として１６２−２（３７．０ｇ、７８％）を得た。
ＴＬＣ：Ｒｆ：０．７７（ＥｔＯＡｃ／ヘキサン、２５／７５；検出：ＵＶ、ＫＭｎＯ４）．
【０５１３】
ステップＴ１６２−３
ＴＨＦ（１０ｍＬ）中の１６２−２（１．０５ｇ、３．０ｍｍｏｌ、１．０当量）、１６２−Ａ（１．０２ｇ，６．０ｍｍｏｌ，２．０当量）、ＰＰｈ３（７９ｍｇ、０．３ｍｍｏｌ、０．１当量）およびＴＢＡＦ（ＴＨＦ中の１Ｍ、９ｍＬ、９．０ｍｍｏｌ、３．０当量）の溶液を脱気し、アルゴンで２度補充した。次いでＰｄ２（ｄｂａ）３（１３７ｍｇ、０．１５ｍｍｏｌ、０．０５当量）を添加し、混合物を脱気し、アルゴンで補充し、反応物をアルゴン下で６０℃で終夜撹拌した。溶液を減圧下で蒸発させ、混合物を酢酸エチルで希釈し、シリカゲルパッドに通して濾過し、ＴＬＣによって示される溶出物質がなくなるまで、ＥｔＯＡｃで洗浄した。溶液を乾固するまで減圧下で除去し、次いで残渣をフラッシュクロマトグラフィー（４０％ＥｔＯＡｃ／ヘキサン、２回反復）によって精製し、オレンジ色の油として１６２−３（７００ｍｇ、７２％）を得た。
ＴＬＣ：Ｒｆ：０．５６（ＥｔＯＡｃ／ＤＣＭ、２０／８０；検出：ＵＶ、ニンヒドリン）；ＨＰＬＣ／ＭＳ（傾斜Ａ４）：ｔＲ：６．６６分、［Ｍ］＋３２３．
【０５１４】
ステップＴ１６２−４
窒素下で９５％エタノール（３０ｍＬ）中の１６２−３（７００ｍｇ、２．２ｍｍｏｌ、１．０当量）の溶液に、パラジウム炭素（１０重量％、５０％含水、２００ｍｇ、３０％重量当量）を添加し、次いで、６０ｐｓｉに維持した水素ガスで４〜６時間処理した。反応物をセライトパッドに通して濾過し、追加の物質が溶出しなくなるまで、エタノールで洗浄した。合わせた濾液および洗浄液を乾固するまで減圧下で蒸発させた。残渣をフラッシュクロマトグラフィー（２０％ＥｔＯＡｃ／ＤＣＭ）によって精製し、帯黄色の油としてＢｏｃ−Ｔ１６２ａ（６９０ｍｇ、９７％）を得た。
ＴＬＣ：Ｒｆ＝０．４６（２０／８０、ＥｔＯＡｃ／ＤＣＭ；検出：ＵＶ、ニンヒドリン）；ＨＰＬＣ／ＭＳ（傾斜Ａ４）：ｔＲ：６．９２分、［Ｍ＋Ｈ］＋３２８；
１ＨＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）：δ６．９０（ｍ，３Ｈ，Ａｒ），４．６９（ｂｒ，１Ｈ，ＮＨ），４．１５（ｍ，２Ｈ），３．９３（ｍ，２Ｈ），３．６７（ｍ，１Ｈ），３．０７（ｍ，１Ｈ，ＯＨ），２．７９（ｍ，１Ｈ），２．５９（ｍ，１Ｈ），１．８２−１．５９（ｍ，２Ｈ），１．４３（ｓ，９Ｈ），１．１４（ｄ，Ｊ＝６．５Ｈｚ，３Ｈ）．
【０５１５】
鏡像異性体テザー、Ｂｏｃ−Ｔ１６２ｂを、鏡像異性体アミノアルキン、１６２−Ｂから出発する以外、同一の手順によって入手する。
【化６５】
2013509434.tif 000177
【０５１６】
ＪＪ．テザーＴ１６３の合成の標準手順
【化６６】
2013509434.tif 000178
【０５１７】
ステップＴ１６３−１
ＤＭＦ（Ｄｒｉｓｏｌｖ、２３０ｍＬ）中の２−ブロモ−４−フルオロフェノール（１６３−０、１４ｇ、７３ｍｍｏｌ、１．０当量）および保護１３６−Ａ（２９．８ｇ、１２５．０ｍｍｏｌ、１．７当量）の溶液に、炭酸カリウム（１２．７ｇ、９２ｍｍｏｌ、１．２５当量）およびヨウ化カリウム（２．４２ｇ、１４．８ｍｍｏｌ、０．２当量）を添加した。反応物を５５℃に加熱し、窒素下で終夜撹拌した。溶液を乾固するまで減圧下で除去し、次いで残油を水（２００ｍＬ）で希釈し、エーテル（３×１５０ｍＬ）で抽出した。有機相を合わせ、クエン酸塩緩衝剤（２ｘ）、ブライン（１ｘ）で洗浄し、硫酸マグネシウムで乾燥し、濾過し、濾液を減圧下で蒸発乾固させた。残渣をフラッシュクロマトグラフィー（１０％ＥｔＯＡｃ／ヘキサン）によって精製し、帯黄色の固体として１６３−１（２４．６ｇ、９６％）を得た。
ＴＬＣ：Ｒｆ：０．６８（ＥｔＯＡｃ／ヘキサン、２５／７５；検出：ＵＶ、ＣＭＡ）；ＨＰＬＣ／ＭＳ（傾斜Ａ４）：ｔＲ：１３．９３分、［Ｍ＋Ｈ］＋３４９、３５１．
【０５１８】
ステップＴ１６３−２
１６３−１（３．５ｇ、１０ｍｍｏｌ、１．０当量）の溶液に、ジイソプロピルアミン（ＡＣＳ等級、５８ｍＬ）中の１６２−Ａ（３．０ｇ，１７ｍｍｏｌ，１．７当量）およびトリフェニルホスフィン（１６１ｍｇ、０．０６当量）にアルゴンを１５〜２０分泡立たせた。次いで、再結晶したヨウ化銅（Ｉ）（３９ｍｇ、０．０２当量）およびジクロロビス（トリフェニルホスフィンｔｒｉｐｈｅｎｙｐｈｏｓｐｈｉｎｅパラジウム（ＩＩ）（２１０ｍｇ、０．０３当量）を添加し、反応混合物をアルゴン下で６０℃で終夜撹拌した。溶液をシリカゲルパッドに通して濾過し、さらに物質が溶出するまで、酢酸エチルで洗浄した。溶液を減圧下で乾固するまで除去し、次いで残油をフラッシュクロマトグラフィー（１０％ＥｔＯＡｃ／ヘキサン）によって精製して、帯黄色の油として１６３−２（４．０ｇ、９１％）を得た。
ＴＬＣ：Ｒｆ：０．６０（ＥｔＯＡｃ／ヘキサン、２５／７５；検出：ＵＶ、ニンヒドリン）；ＨＰＬＣ／ＭＳ（傾斜Ａ４）：ｔＲ：１３．６５分、［Ｍ］＋４３７、［Ｍ＋Ｎａ］＋４６０。
【０５１９】
ステップＴ１６３−３
窒素下で９５％エタノール（２４１ｍＬ）中の１６３−２（４．０５ｇ、９．４１ｍｍｏｌ、１．０当量）の溶液に、パラジウム炭素（４３４ｍｇ、１０重量％／５０％水）を添加した。（より高濃度の反応条件（＞０．０４Ｍ）はいくらかの二量体を形成することに注意）。溶液を、４００ｐｓｉの水素ガス下で終夜撹拌した。反応が完了したら、窒素を１０分間混合物に通して泡立たせ、過剰水素を除去した。溶媒をセライトパッドに通して濾過し、さらに物質の溶出がなくなるまで、酢酸エチルで洗浄した。合わせた濾液および洗浄液は、減圧下で乾固するまで濃縮した。結果として得られた残渣を、フラッシュクロマトグラフィー（傾斜、３０％ＥｔＯＡｃ／ヘキサンから７５％ＥｔＯＡｃ／ヘキサン）によって精製し、帯黄色の油としてＢｏｃ−Ｔ１６３ａ（２．８ｇ、９１％）を得た。ＴＢＤＭＳ基は水素化中に除去した。
ＴＬＣ：Ｒｆ：０．３０（ＥｔＯＡｃ／ヘキサン、４０／６０；検出：ＵＶ、ニンヒドリン）；ＨＰＬＣ／ＭＳ（傾斜Ａ４）：ｔＲ：７．００分、［Ｍ＋Ｎａ］＋３５０；
１ＨＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）：d６．８４−６．７５（ｍ，３Ｈ），４．６（ｍ，１Ｈ），４．０１（ｍ，２Ｈ），４．０（ｍ，４Ｈ），３．６５（ｍ，１Ｈ），２．７ｍ，１Ｈ），２．５５（ｍ，１Ｈ），１．８５（ｍ，１Ｈ），１．６５（ｍ，１Ｈ），１．４５（ｓ，６Ｈ），１．１５（ｄ，７Ｈｚ，３Ｈ）．
【０５２０】
鏡像異性体テザー、Ｂｏｃ−Ｔ１６３ｂを、鏡像異性体アミノアルキン、１６２−Ｂから出発する以外、同一の手順によって入手する。
【化６７】
2013509434.tif 000179
【０５２１】
ＫＫ．テザーＴ１６４の合成の標準手順
【化６８】
2013509434.tif 000180
【０５２２】
ステップＴ１６４−１
ＴＨＦ（無水、Ｎａ−ベンゾフェノンケチルから蒸留した、、２００ｍＬ）中のｎ−ＢｕＬｉ（３６．１ｍＬ、ヘキサン中の１．６Ｍ、５７．８ｍｍｏｌ、１．１当量）の溶液に、ＴＨＦ（乾燥、２０ｍＬ）中の３−フルオロアニソール（１６４−０、６．０ｍＬ、５２．５ｍｍｏｌ、１．０当量）の溶液をＮ２の下で−７８℃で（約１５分）滴下して添加した。反応物を−７８℃で１０分間撹拌し、次いで、ＴＨＦ（無水、１００ｍＬ）中のＩ２（１６．０ｇ、６３ｍｍｏｌ、１．２当量）の溶液を、−６０〜７８℃（約３０分）で滴下して添加した。混合物を−６０℃に暖め、３０分間撹拌した。Ｈ２Ｏ（５０ｍＬ）を注意深く、続いてＮａ２ＳＯ３（１０％ｗ／ｖ；５０ｍＬ）を添加し、溶液５分間撹拌した。層は分離し、水相をヘキサン（３ｘ）で抽出した。合わせた有機相を、Ｎａ２ＳＯ３（１０％ｗ／ｖ；２ｘ）およびＨ２Ｏ（２ｘ）で洗浄し、無水ＭｇＳＯ４で乾燥し、濾過し、濾液を減圧下で濃縮して、黄色の残渣を残した。これを、フラッシュクロマトグラフィー（５％ＥｔＯＡｃ／ヘキサン）によって精製して、無色の油として９．３ｇの１６４−１（７０％）を得た。
ＴＬＣ：Ｒｆ＝０．３４（５％ＥｔＯＡｃ／９５％ヘキサン；検出：ＵＶ、Ｍｏ／Ｃｅ）．
【０５２３】
ステップＴ１６４−２
ＤＣＭ（乾燥、１００ｍＬ）中の１６４−１（９．３ｇ、３６．９ｍｍｏｌ、１．０当量）の溶液に、Ｎ２下で−３０℃で（約３０分）、ＤＣＭ（１．０Ｍ、９２．３ｍＬ、９２．３ｍｍｏｌ、２．５当量）中のＢＢｒ３の溶液を滴下して添加した。溶液を３時間にわたり０℃に暖め、次いで、０℃でさらに３時間撹拌した。ＭｅＯＨを注意深く（ガス発生）滴下して添加し、続いてＨ２Ｏを添加した。冷却浴を取り除き、混合物を１０分間撹拌した。層は分離し、水相をＤＣＭで抽出した。合わせた有機相を無水ＭｇＳＯ４で乾燥し、濾過し、濾液を減圧下で濃縮して、黒色の残渣を残した。これはフラッシュクロマトグラフィー（２０％ＥｔＯＡｃ／ヘキサン）によって精製し、褐色の油として７．５ｇの１６４−２（８６％）を得た。
ＴＬＣ：Ｒｆ＝０．０９（５％ＥｔＯＡｃ／９５％ヘキサン；検出：ＵＶ、Ｍｏ／Ｃｅ）．
【０５２４】
ステップＴ１６４−３
ＤＭＦ（乾燥、１００ｍＬ）中の１６４−２（７．５ｇ、３１．５ｍｍｏｌ、１．０当量）および１３６−Ａ（１１．３ｇ，４７．３ｍｍｏｌ，１．５当量）の溶液に、Ｋ２ＣＯ３（５．６ｇ、４１．０ｍｍｏｌ、１．３当量）およびＫＩ（１．０ｇ、６．３ｍｍｏｌ、０．２当量）を添加した。混合物を５５℃で終夜撹拌した。水を添加し、水相をエーテルで抽出した。有機相をブラインで洗浄し、ＭｇＳＯ４で乾燥し、濾過し、濾液を減圧下で濃縮した。結果として得られた残渣をフラッシュクロマトグラフィー（５％ＥｔＯＡｃ／ヘキサン）によって精製し、予想される生成物１６４−３および１３６−Ａ（１ＨＮＭＲによると１５％）の１３．７ｇの混合物を得た。これはさらに精製をしないで次のステップに使用した。
ＴＬＣ：Ｒｆ＝０．５７（１０％ＥｔＯＡｃ／９０％ヘキサン；検出：ＵＶ、Ｍｏ／Ｃｅ）．
【０５２５】
ステップＴ１６４−４
ＴＨＦ（２００ｍＬ）中の１６４−３（１２．８ｇ、３２．３ｍｍｏｌ、１．０当量）の溶液にＴＢＡＦ（ＴＨＦ中の１Ｍ、４８．５ｍＬ、４８．５ｍｍｏｌ、１．５当量）の溶液を添加し、混合物を室温で３０分間撹拌した。ブラインを添加し、水相をＥｔＯＡｃで抽出した。合わせた有機相をＭｇＳＯ４で乾燥し、濾過し、濾液を減圧下で濃縮した。残渣をフラッシュクロマトグラフィー（５０％ＥｔＯＡｃ、５０％ヘキサン）によって精製し、白色固形物として１６４−４（７．３ｇ、８０％、２ステップ）を得た。
ＴＬＣ：Ｒｆ＝０．２２（５０％ＥｔＯＡｃ／５０％ヘキサン；検出：ＵＶ、Ｍｏ／Ｃｅ）．
【０５２６】
ステップＴ１６４−５
ＴＨＦ（５２ｍＬ）中の１６４−４（７．３ｇ、１．０ｅｑ、２５．９ｍｍｏｌ）の溶液に、１６４−Ａリンゴ酸塩（５．８ｇ、２８．５ｍｍｏｌ、１．１当量）を添加し、混合物をＡｒで３０分間脱気した。ＣｕＩ（再結晶した、２４８ｍｇ、１．３ｍｍｏｌ、０．０５当量）、ＰｄＣｌ２（ＰＰｈ３）２（９１２ｍｇ、１．３ｍｍｏｌ、０．０５当量）およびＨ２Ｏ中の２ＭＮＨ４ＯＨ（５２．０ｍＬ、１０３．６ｍｍｏｌ、４．０当量）を添加し、混合物をＡｒで再び３０分間脱気した。反応物をＨＰＬＣによってモニターしながら室温で終夜撹拌した。ＴＨＦを蒸発させ、水相を２ＮのＨＣｌでｐＨ２に酸性化し、褐色の不溶性ゴムの形成を伴った。水相をセライトの小パッドに通して濾過し、０．０１ＭのＨＣｌですすいだ。水相を、６ＮのＮａＯＨで塩基性化してｐＨ１３〜１４に調節し、ＥｔＯＡｃで抽出した。合わせた有機相をＭｇＳＯ４で乾燥し、濾過し、濾液を減圧下で濃縮して、オレンジ色の固体として１６５−５（５．０ｇ、８６％）を得た。
ステップＴ１６４−６
【０５２７】
９５％ＥｔＯＨ（１００ｍＬ）中の１６４−５（５．０ｇ、２２．４ｍｍｏｌ、１．０当量）の溶液に、１０％含湿Ｐｄ／Ｃ（４．７ｇ、２．２４ｍｍｏｌ、０．１当量）を添加した。混合物を、ＨＰＬＣによって反応をモニターしながら、Ｐａｒｒ水素化装置内で６０ｐｓｉのＨ２下で５時間撹拌した。完了したら、窒素を通して泡立たせ、過剰水素を取り除き、次いで、混合物をセライトのパッドに通し、９５％ＥｔＯＨですすいだ。合わせた濾液および洗浄液は減圧下で濃縮して、オレンジ色の油として１６５−６（５．０ｇ、１００％）を得た。
【０５２８】
ステップＴ１６４−７
ＴＨＦ：Ｈ２Ｏ（１：１、１００ｍＬ）中の１６５−６（５．０ｇ、２２．０ｍｍｏｌ、１．０当量）の溶液に、Ｎａ２ＣＯ３（２．６ｇ、２４．２ｍｍｏｌ、１．１当量）および（Ｂｏｃ）２Ｏ（５．３ｇ、２４．２ｍｍｏｌ、１．１当量）を添加した。混合物を室温で終夜撹拌し、次いで水を添加した。水相をＥｔＯＡｃで抽出し、合わせた有機相をＭｇＳＯ４で乾燥し、濾過し、濾液を減圧下で濃縮した。残渣をフラッシュクロマトグラフィー（４０％ＥｔＯＡｃ、６０％ヘキサン）によって精製し、薄黄色の油としてＢｏｃ−Ｔ１６４ａ（６．４ｇ、８６％）を得た。
ＴＬＣ：Ｒｆ＝０．４７（５０％ＥｔＯＡｃ／５０％ヘキサン；検出：ＵＶ、Ｍｏ／Ｃｅ）；ＨＰＬＣ／ＭＳ（傾斜Ａ４）：ｔＲ：７．１６分、［Ｍ＋Ｎａ］＋３５０；
１ＨＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）：δ７．１０（１Ｈ，ｑ），６．６４（２Ｈ，ｄｄ），４．６３（１Ｈｂｒｏａｄ），４１３−３９２（４Ｈ，ｍ），３．６４（１Ｈ，ｂｒｏａｄ），２．７０（２Ｈ，ｔ），１．８０ａｎｄ１．５９（２Ｈ，２ｂｒｏａｄ），１．４５（９Ｈ，ｓ），１．１５（３Ｈ，ｄ）．
【０５２９】
鏡像異性体テザー、Ｂｏｃ−Ｔ１６４ｂを、鏡像異性体アミノアルキン、１６４−Ｂから出発する以外、同一の手順によって入手する。
【化６９】
2013509434.tif 000181
【０５３０】
ＬＬ．テザーＴ１６５の合成の標準手順
【化７０】
2013509434.tif 000182
【０５３１】
Ｔ１６５ａに関して、保護フェノール１６５−１は、Ｍｉｔｓｕｎｏｂｕ条件下で（Ｓ）−１，２−プロパンジオールに由来する、キラルアルコール１６５−Ｂとカップリングさせて、１６５−２を得た。エステルのアルコールへの還元、続いて、メシラートへの変換、アジド置換、トリフェニルホスフィンを用いるアミンへのアジドの還元、アミンの保護およびシリルエーテルの脱保護を包含するステップ毎の標準変換によって、Ｂｏｃ−Ｔ１６５ａを得た。
【化７１】
2013509434.tif 000183
【０５３２】
（Ｒ）−１，２−プロパンジオールに由来するキラルアルコール１６５−ＤをＭｉｔｓｕｎｏｂｕ反応（１６５−５を形成する）に使用したという点を除いて、同等の収率の同一のシーケンスを、１６５−１をＢｏｃ−Ｔ１６５ｂに変換するために使用する。
【０５３３】
ＭＭ．テザーＴ１６６の合成の標準手順
【化７２】
2013509434.tif 000184
【０５３４】
テザーＴ１６６の合成はテザーＴ８から出発して実現した。そのＴＨＰエーテルとしてのアルコールの保護の後、塩基として水素化ナトリウム、および求電子試薬としてヨウ化メチルでカーバマート窒素をアルキル化した。ＴＨＰエーテルの酸性切断はより高温で行ったが、Ｂｏｃ基は無傷で残し、Ｂｏｃ−Ｔ１６６を得た。
ＮＮテザーＴ１６７の合成の標準手順
【０５３５】
テザーＴ１６７の合成への代替の２つの手法が上記に提供される。第１は、Ｂｏｃ−Ｔ１６６の単純な還元による。
【化７３】
2013509434.tif 000185
【０５３６】
さらに、テザーＴ９から出発すること以外、Ｂｏｃ−Ｔ１６６について記載される同様のシーケンスを使用することができる。
【化７４】
2013509434.tif 000186
【０５３７】
ＯＯ．テザーＴ１６８の合成の標準手順
【化７５】
2013509434.tif 000187
【０５３８】
テザーＴ１６８の合成は、（１Ｒ，２Ｓ）−シス−２−ヒドロキシ−シクロヘキサノン酸エチル１０４−１（Ｊｕｌｉｃｈ、現在Ｃｏｄｅｘｉｓから得られた）から開始した。ｔ−ブチルジメチルシリル（ＴＢＤＭＳ）エーテルとしてのアルコールの保護に続いて、対応するアルデヒド（１６８−１）へのエステルの制御された低温還元を行った。続くウィッティヒ反応は不飽和エステル１６８−２を得た。二重結合の還元、エステルのリチウムアルミニウム水素化物還元、Ｍｉｔｓｕｎｏｂｕ反応を経由する対応するフタルイミド誘導体へのアルコールの変換を伴う一連の転換は、非常に良好な収率で中間化合物１６８−３を生成した。酸性条件下でのＴＢＤＭＳエーテルの脱保護、続いて炭酸アリルのパラジウム触媒反応結合によって、１６８−５を得た。ヒドラジンを用いるフタルイミド基の切断、そのＢｏｃ誘導体としての結果として得られたアミンの続く保護によって、１６８−６を得た。この中間体は、還元条件下でオゾン分解によってＢｏｃ−Ｔ１６８に変換した。さらに、オゾン分解還元条件の修飾によって、１６８−６を、対応するアルデヒド１６８−７に変換することができよう。１６８−７は還元アミノ化によるテザーの結合に有用であった。
【化７６】
2013509434.tif 000188
【０５３９】
ＰＰ．テザーＴ１６９の合成の標準手順
【化７７】
2013509434.tif 000189
【０５４０】
レソルシノールモノベンゾアート（１６９−０）の遊離フェノールを、標準方法を使用して、そのベンジルエーテルとして保護した。エステルの鹸化は１６９−２を与え、トリフルオロ酢酸銀ｔｒｉｆｌｕｒｏａｃｅｔａｔｅの存在下でヨード化し、１６９−３を得た。保護ブロミド１６９−Ａでのフェノールのアルキル化は１６９−４を得た。重要なステップにおいて、これを、キラルアルキニルアミン１６９−ＢでのＰｄ（ＩＩ）カップリングに供し、テザーの全骨組みを有する１６９−５を得た。三重結合の続く連続的触媒水素化、アミンのＢｏｃ保護およびＴＢＤＭＳエーテルの切断を標準方法で行い、Ｂｏｃ−Ｔ１６９ａ（Ｂｎ）を残した。１６９−Ｂの鏡像異性体アミンの使用により、鏡像異性体テザーＢｏｃ−Ｔ１６９ｂ（Ｂｎ）への合成経路を提供した。
【化７８】
2013509434.tif 000190
【０５４１】
ＱＱ．テザーＴ１７０の合成の標準手順
【化７９】
2013509434.tif 000191
【０５４２】
３０ｇ（０．１４ｍｏｌ）のレゾルシノールモノベンゾアート（１６９−０）から出発して、遊離のフェノールを、標準方法を使用して、ベンジルエーテルとして保護した。塩基中のエステルの切断に続いて、ＮＢＳを用いる臭素化により、４−ブロモ誘導体（１７０−４）を得た。（Ｓ）−乳酸エチル（１７０−Ａ）とのＭｉｔｓｕｎｏｂｕカップリングにより１７０−５を得た。エステルは水素化ホウ素リチウムで還元し、結果として得られたブロモアルコール（１７０−６）をＢｏｃ−プロパルギルアミン（１７０−Ｂ）とのＰｄ（ＩＩ）媒介カップリングにかけた。アルキンを１７０−７に還元し、ベンジルエーテルの切断を伴ったが、この保護は、次に、標準条件下に回復しなければならず、保護テザー誘導体を得た。代替として、１７０−６を、Ｂｏｃ−アリルアミン（１７０−Ｃ）との異なるＰｄ（ＩＩ）媒介カップリング反応に供することができ、保護テザーを直接得た。この手順で、（Ｒ）−乳酸エチル（または（Ｒ）−乳酸の他の適切なアルキルエステル）の使用により、対応する保護鏡像異性体テザーＢｏｃ−Ｔ１７０ｂ（Ｂｎ）を得る。
【化８０】
2013509434.tif 000192
【０５４３】
ＲＲ．テザーＴ１７１の合成の標準手順
【化８１】
2013509434.tif 000193
【０５４４】
テザーＴ１７１ａの合成を、上記に提示されるように、レゾルシノールのモノベンゾアート（１６９−０）から出発して進めた。保護基の操作、それに続くヨウ素化は、１７１−３を得た。１７１−Ａ（１３４−０と同等、Ｔ１６１で記載された合成を参照）を用いるアルキル化、それに続く１７１−ＢとのＳｏｎｏｇａｓｈｉｒａカップリングにより、中間体１７１−７を得た。還元によってＢｏｃ−Ｔ１７１ａを得た。鏡像異性体テザーＴ１７１ｂにより、１７１Ｃ（１６１−６に由来するアルキンと同等、Ｔ１６１で記載された合成を参照）、１７１−Ｂの鏡像異性体試薬を使用すること以外、同一のシーケンスを使用して、入手する。
【化８２】
2013509434.tif 000194
【０５４５】
ＳＳテザーＴ１７２の合成の標準手順
【化８３】
2013509434.tif 000195
【０５４６】
テザーＴ１７２ａの合成を、保護ヨードフェノール１７２−０および保護アミノアルキン、１７２−ＡとのＰｄ（０）媒介Ｓｏｎａｇａｓｈｉｒａカップリングから出発して進め１７２−１を得た。アルキンの還元によりＢｏｃ−Ｔ１７２ａを得た。
【０５４７】
キラル試薬１７２−Ａは、図示されるように、（Ｒ）−２−アミノ−１−ペンタノール（１７２−２）から始めて入手する。
【化８４】
2013509434.tif 000196
【０５４８】
鏡像異性体テザー、Ｔ１７２ｂは同様に構築される。ただし、試薬１７２−Ｂを使用し、これは、（Ｓ）−２−アミノ−１−ペンタノールから始まる１７２−Ａについて略述されるように合成する。
【化８５】
2013509434.tif 000197
【０５４９】
ＴＴ．テザーＴ１７３の合成の標準手順
【化８６】
2013509434.tif 000198
【０５５０】
Ｔ１７２について記載されたのとちょうど同様の方式で、テザーＴ１７３ｂの調製は、保護ヨードフェノール１７２−０、および保護アミノアルキン、１７３−ＡとのＰｄ（０）媒介Ｓｏｎａｇａｓｈｉｒａカップリングから出発し、１７３−１を得、続いてアルキンの完全な還元でＢｏｃ−Ｔ１７３ｂが得られた。１７３−Ａ試薬は、示されるように、キラルアミノアルコール、１７３−０から入手する。
【化８７】
2013509434.tif 000199
【０５５１】
鏡像異性体テザーＢｏｃ−Ｔ１７３ａは、１７３−Ａについて記載される鏡像異性体アミノアルコール１７３−４から合成することができる試薬１７３−Ｂを使用する同一のプロセスを使用して構築される。
【化８８】
2013509434.tif 000200
【０５５２】
ＵＵ．テザーＴ１７４およびＴ１７５の合成の標準手順
【化８９】
2013509434.tif 000201
【０５５３】
テザーＴ１７４およびＴ１７５は、既に記載したシントンと同様の方式で調製したアルキル化フェノール（１７５−０）から出発する同一のシーケンスから入手する。脱保護、続いてキラルアルキン、１６１−４とのＳｏｎｏｇａｓｈｉｒａカップリングは、１７５−２を高収率で与え、これはＢｏｃ−Ｔ１７４ａと同等である。次いで、１７５−２の還元もまた、優れた収率でＢｏｃ−Ｔ１７５ａを得た。
【化９０】
2013509434.tif 000202
【０５５４】
鏡像異性体テザーＴ１７４ｂおよびＴ１７５ｂは、１６１−４に対する鏡像異性体試薬である１７５−３を使用して、同一のシーケンスを用いて調製する。
【０５５５】
ＶＶ．テザーＴ１７６の合成の標準手順
【化９１】
2013509434.tif 000203
【０５５６】
簡単な方式で、Ｂｏｃ保護プロパルギルアミン（１７６−Ａ）とのアルコール１７６−０のＳｏｎｏｇａｓｈｉｒａカップリングから、Ｂｏｃ−Ｔ１７６が得られた。１７６−０は、保護２−ハロアルコールでのアルキル化、続いて脱保護を伴う２ステップシーケンスによって、対応するフェノールから入手することができる。
【０５５７】
ＷＷ．テザーＴ１７８およびＴ１７９の合成の標準手順
【化９２】
2013509434.tif 000204
【０５５８】
テザーＴ１７８およびＴ１７９はどちらも、上に図示した単一シーケンスから生成する。（Ｓ）−乳酸エチルとのハロゲン化フェノール（１７９−０）のＭｉｔｓｕｎｏｂｕ反応は１７９−１を得た。１７９−２の加水分解、続いてボラン還元により、Ｐｄ（０）カップリング反応に対する前駆体としてのブロミド１７９−３を得た。キラルアルキニルアミン（１７９−Ａ）を使用するこの中間体のＳｏｎｏｇａｓｈｉｒａにより、Ｂｏｃ−Ｔ１７８ａと同等である１７９−４を得た。次いで、三重結合の完全な還元によりＢｏｃ−Ｔ１７９ａを生成した。
【０５５９】
鏡像異性体アルキン、１７９−Ｂを使用する以外、類似の方法により、保護テザー、Ｂｏｃ−Ｔ１７８ｂおよびＢｏｃ−Ｔ１７９ｂを得る。（Ｒ）−乳酸エチルまたは他の適切な（Ｒ）−乳酸エステルを使用すること以外、同様の方法を使用して、ジアステレオマーテザーＢｏｃ−Ｔ１７８ｃ、Ｂｏｃ−Ｔ１７８ｄ、Ｂｏｃ−Ｔ１７９ｃおよびＢｏｃ−Ｔ１７９ｄを得た。
【化９３】
2013509434.tif 000205
【０５６０】
ＹＹ．テザーＴ１８０およびＴ１８１の合成の標準手順
【化９４】
2013509434.tif 000206
【０５６１】
中間体１７９−３から始めて、テザーＴ１８０およびＴ１８１は、保護アルキニルアミン１６１−４とのＳｏｎｏｇａｓｈｉｒａカップリング、続いてカップリング生成物１８１−１（Ｂｏｃ−Ｔ１８０ａと同等）の還元によって調製し、Ｂｏｃ−Ｔ１８１ａを得る。
【０５６２】
ジアステレオマーテザー、Ｂｏｃ−Ｔ１８０ｂおよびＢｏｃ−Ｔ１８１ｂは、１６１−４に対する鏡像異性体試薬である１７５−３を使用すること以外、同一の手順によって入手する。１６１−４または１７５−３と共に、１７９−３の鏡像異性体である１７９−６を使用して、Ｂｏｃ−Ｔ１８０ｃとＢｏｃ−Ｔ１８１ｃ、または、Ｂｏｃ−Ｔ１８０ｄとＢｏｃ−Ｔ１８１ｄを、それぞれ合成することができる。
【化９５】
2013509434.tif 000207
【０５６３】
ＺＺ．テザーＴ１８２およびＴ１８３の合成の標準手順
【化９６】
2013509434.tif 000208
【０５６４】
Ｍｉｔｓｕｎｏｂｕ条件下での（Ｓ）−乳酸エチルを用いるブロモフェノール１８３−０のアルキル化は、１８３−１を合成するために用いる。塩基加水分解、続いてボラン還元により、中間体アルコール１８３−３を得る。アルキニルアミン１６１−４とのＳｏｎｏｇａｓｈｉｒａカップリングにより、Ｂｏｃ−Ｔ１８２ａと同等の１８３−４を得る。次いで、三重結合の完全な還元によりＢｏｃ−Ｔ１８３ａを得る。
【０５６５】
ジアステレオマーテザー、Ｂｏｃ−Ｔ１８２ｂおよびＢｏｃ−Ｔ１８３ｂは、１６１−４に対する鏡像異性体試薬である１７５−３を使用すること以外、同様の手順によって入手する。１６１−４または１７５−３と共に、１８３−３の鏡像異性体である１８３−５を使用して、Ｂｏｃ−Ｔ１８２ｃとＢｏｃ−Ｔ１８３ｃ、または、Ｂｏｃ−Ｔ１８２ｄとＢｏｃ−Ｔ１８３ｄを、それぞれ合成することができる。１８３−５は、（Ｒ）−乳酸エチルまたは別の適切なエステルから調製することができる。
【化９７】
2013509434.tif 000209
【０５６６】
ＡＡＡテザーＴ１８４およびテザーＴ１８５の合成の標準手順
【化９８】
2013509434.tif 000210
【０５６７】
中間体１７６−０から出発する簡単な方式で、１６１−４とのＳｏｎｏｇａｓｈｉｒａカップリングにより、１８５−１（Ｂｏｃ−Ｔ１８４ａと同等）を得る。次いで、アルキンの還元によりＢｏｃ−Ｔ１８５ａを得る。
【０５６８】
鏡像異性体テザー、Ｂｏｃ−Ｔ１８４ｂおよびＢｏｃ−Ｔ１８５ｂを、１６１−４に対する鏡像異性体試薬である１７５−３を使用すること以外、同一の手順によって入手することができる。
【化９９】
2013509434.tif 000211
【０５６９】
ＢＢＢ．テザーＴ１８６の合成の標準手順
【化１００】
2013509434.tif 000212
【０５７０】
標準条件下での中間体１３４−４の脱保護は、Ｂｏｃ−Ｔ１８６ａを得るために用いる。１３４−４の鏡像異性体は、鏡像異性体テザーＢｏｃ−Ｔ１８６ｂをもたらす。
【０５７１】
ＣＣＣテザーＴ１８７の合成の標準手順
【化１０１】
2013509434.tif 000213
【０５７２】
保護ブロモアルコール、１８７−Ａを用いてジハロゲン化フェノール、１８７−０をアルキル化し、次いでＰｄ（０）カップリング条件に供して、中間体１８７−２を非常に良好な収率で調製した。標準方法を使用する脱保護で、Ｂｏｃ−Ｔ１８７を得た。
【０５７３】
ＤＤＤ．テザーＴ１８８の合成の標準手順
【化１０２】
2013509434.tif 000214
【０５７４】
ヨードフェノール、１８８−１は、ジアゾ化−置換シーケンスによって調製した。保護ブロモアルコール１８８−Ａを用いるアルキル化、続いてシリルエーテル保護基の加水分解除去は、１８８−２を残した。キラルアルキニルアミン１６１−４とのＳｏｎｏｇａｓｈｉｒａカップリングにより、穏当な収率でＢｏｃ−Ｔ１８８ａを得た。代替の１ステップシーケンスはまた、１８８−０から１８８−２を直接得るのに有効であった。
【化１０３】
2013509434.tif 000215
【０５７５】
鏡像異性体テザー、Ｂｏｃ−Ｔ１８８ｂは、１６１−４に対する鏡像異性体試薬である１７５−３を使用すること以外、同一の手順によって合成することができる。
【０５７６】
ＥＥＥ．テザーＴ１８９の合成の標準手順
【化１０４】
2013509434.tif 000216
【０５７７】
アルケン１８９−１との中間体ヨードアルコール１８８−２のＢ−アルキルＳｕｚｕｋｉ−Ｍｉｙａｕｒａカップリングを、保護テザーＢｏｃ−Ｔ１８９ａを調製するために用いた。試薬１８９−１は、アルキン、１６１−４の部分還元によって得られた。
【化１０５】
2013509434.tif 000217
【０５７８】
１６１−４の鏡像異性体である１７５−３を、同様に、１８９−２を得るために用いた。これは、ちょうど記載されたＰｄ（０）条件に供すると、鏡像異性体テザーＢｏｃ−Ｔ１８９ｂをもたらす。
【化１０６】
2013509434.tif 000218
【０５７９】
ＦＦＦ．テザーＴ１９０の合成の標準手順
【化１０７】
2013509434.tif 000219
【０５８０】
１９０−０のヨウ素化、続いて塩素化およびエチレングリコールからのアルコキシドとの置換により、１９０−３を得る。保護アリルアミン１９０−Ａを使用するＢ−アルキルＳｕｚｕｋｉ−Ｍｉｙａｕｒａカップリングにより、Ｂｏｃ−Ｔ１９０をもたらす。
【０５８１】
ＧＧＧ．テザーＴ１９１の合成の標準手順
【化１０８】
2013509434.tif 000220
【０５８２】
テザーＴ１９０について記載されたプロセスのアルケン成分の変更が、テザーＴ１９１を入手するために使用される。Ｂ−アルキルＳｕｚｕｋｉ−Ｍｉｙａｕｒａ反応における保護キラル不飽和アミン１８９−１の置換により、Ｂｏｃ−Ｔ１９１ａを得る。同様に、１８９−１の鏡像異性体である１８９−２を、鏡像異性体テザーＢｏｃ−Ｔ１９１ｂを調製するために使用することができる。
【０５８３】
ＨＨＨ．テザーＴ１９２の合成の標準手順
【化１０９】
2013509434.tif 000221
【０５８４】
ボロン酸、１９２−１は、金属ハロゲン交換、トリイソプロピルボラートでの処理および加水分解を伴う多段プロセスによって、ヨージド、１９２−０から合成される。キラルヨージドとのＳｕｚｕｋｉカップリングにより１９２−２を得、次いで、これは脱保護されてＢｏｃ−Ｔ１９２ａを残す。１９２−Ａの鏡像異性体を使用して、鏡像異性体テザー、Ｔ１９２ｂを得ることができる。
【０５８５】
ＩＩＩ．テザーＴ１９３の合成の標準手順
【化１１０】
2013509434.tif 000222
3時間
【０５８６】
示されたキラルロジウム錯体の存在下でシクロペンテノン（１９３−０）をボロン酸１９３−Ａと反応させ、良好な光学純度（＞９６％ｅｅ）の１９３−１を得る。還元アミノ化、芳香族メチルエーテルの切断およびアミンの保護は、１９３−４を得る。保護シントン１９３−Ｂを用いるフェノールのアルキル化およびシリルエーテルの脱保護により、Ｂｏｃ−Ｔ１９３ａを得る。Ｓ−ＢＩＮＡＰルテニウム錯体の使用により、１９３−１に対する鏡像異性体シクロペンタノンである１９３−５を生成し、これは次にはＢｏｃ−Ｔ１９３ｂを得る。
【化１１１】
2013509434.tif 000223
【０５８７】
ＪＪＪ．テザーＴ１９４の合成の標準手順
【化１１２】
2013509434.tif 000224
【０５８８】
Ｂｏｃ−Ｔ１９４は、Ｔ１４２の構築における中間体であるケトン誘導体１４２−２から、ＤＡＳＴでの処理、続いてＴＢＤＭＳエーテルの完全な脱保護を確実にするＴＢＡＦでの処理によって合成される。
【０５８９】
ＫＫＫ．テザーＴ１９５の合成の標準手順
【化１１３】
2013509434.tif 000225
【０５９０】
１９５−０からのアルケニルトリフラート１９５−１の形成は、標準方式で行われる。パラジウム触媒カルボニル化、続いてメチルエーテル脱保護によって１９５−３が得られる。エチレングリコールのモノ−ｔ−ブチルジメチルシリルエーテル（１９５−Ｂ）とのフェノールのＭｉｔｓｕｎｏｂｕ反応により、１９５−４を得る。アルコールへのエステルの還元は１９５−５をもたらし、次いで、これは再びＭｉｔｓｕｎｏｂｕプロセスを使用して、二保護アミン１９５−６に変換される。Ｂｏｃ−Ｔ１９５の合成は、フッ化物を用いるシリル保護基の脱保護によって完了する。
【０５９１】
ＬＬＬ．テザーＴ１９７の合成の標準手順
【化１１４】
2013509434.tif 000226
【０５９２】
１９７−０のアルキル化は、良好に進行してケトン、１９７−１が得られる。同時に起きるアミノメチル化およびカルボニルの還元は、１９７−２を調製するために示された還元条件下で生じる。アミンの保護、脱水およびアセタート加水分解は、Ｂｏｃ−Ｔ１９７をもたらす。
【０５９３】
ＭＭＭ．テザーＴ１９８の合成の標準手順
【化１１５】
2013509434.tif 000227
【０５９４】
このテザーは、アリルエーテルとしての２−ベンジルオキシフェノール（１９８−０）の保護から始まって、続いてクライゼン転位によって構築され１９８−２を得る。（Ｓ）−乳酸エチル（１９９−Ａ）とのＭｉｔｓｕｎｏｂｕ反応で１９８−３が得られた。二重結合のハイドロボレーションおよび続く酸化によって１９８−４が得られた。別のＭｉｔｓｕｎｏｂｕ反応、この場合ジ−ｔ−ブチルイミノジカルボキシラートでは、１９８−５が得られた。水素化ホウ素リチウムを用いるエステルの還元およびＢｏｃの１つの基の塩基切断、Ｂｏｃ−Ｔ１９８ａ（Ｂｎ）を得るのに成功した。この手順における（Ｒ）−乳酸エチル（または他の適切な（Ｒ）−乳酸のアルキルエステル）の使用により、対応する保護鏡像異性体テザーＢｏｃ−Ｔ１９８ｂ（Ｂｎ）を得る。
【０５９５】
ＮＮＮ．テザーＴ１９９Ｂｏｃ−（２ＲＭｅ，５ＯＨ）ｏ１８ｒの合成の標準手順
【化１１６】
2013509434.tif 000228
【０５９６】
Ｔ１７０について既に記載されたのと類似した方式で、このテザーは、市販の４−（ベンジルオキシ）フェノール（１９９−０）から出発して構築した。これを臭素化して２−ブロモ誘導体（１９９−１）を得た。これをＭｉｔｓｕｎｏｂｕ条件下で（Ｓ）−乳酸エチル（１９９−Ａ）とカップリングして１９９−２が得られた。エステルをＤＩＢＡＬ−Ｈでアルコールに還元して、１９９−３が得られた。１７０−Ａの９−ＢＢＮ誘導体へのＳｕｚｕｋｉカップリングにより、保護テザー、Ｂｏｃ−Ｔ１９９ａ（Ｂｎ）を得た。この手順における（Ｒ）−乳酸エチル（または（Ｒ）−乳酸の他の適切なアルキルエステル）の使用により、対応する保護鏡像異性体テザーＢｏｃ−Ｔ１９９ｂ（Ｂｎ）を得る。
【化１１７】
2013509434.tif 000229
【０５９７】
ＯＯＯ．テザーＴ２００の合成の標準手順
【化１１８】
2013509434.tif 000230
【０５９８】
テザー１９２について記載されたプロセスと同様に、ヨージド２００−０のハロゲン金属交換、トリイソプロピルボラートとの反応および加水分解は、ボロン酸、２００−１をもたらす。キラルヨウ化アルケニル１９２−ＡとのＳｕｚｕｋｉカップリングおよびシリル脱保護により、Ｂｏｃ−Ｔ２００ａを得る。代替として、スズ試薬１９２−Ｂまたは、その鏡像異性体を、このテザーへの経路で使用することができる。
【化１１９】
2013509434.tif 000231
【０５９９】
１９２−Ａの鏡像異性体である１９２−Ｃの使用により、鏡像異性体テザー、Ｂｏｃ−Ｔ２００ｂを得る。
【化１２０】
2013509434.tif 000232
【０６００】
ＰＰＰ．テザーＴ２１０の合成の標準手順
【化１２１】
2013509434.tif 000233
【０６０１】
３−トリフルオロメチルフェノール（２１０−０）のヨウ素化、フェノールのアルキル化およびシリルエーテルの脱保護を伴う逐次的転換により、中間体２１０−２を得た。アルキン１３４−３とのＳｏｎｏｇａｓｈｉｒａカップリング、続いて三重結合の還元により、保護テザーＢｏｃ−Ｔ２１０ａを得た。鏡像異性体テザー、Ｂｏｃ−Ｔ２１０ｂは、１６１−４に対する鏡像異性体試薬である１７５−３を使用すること以外、同一の手順によって合成することができる。
【０６０２】
ＱＱＱ．テザーＴ２１１の合成の標準手順
【化１２２】
2013509434.tif 000234
【０６０３】
アニリン２１１−１のジアゾ化およびヨージドとの置換により、２１１−２を得る。標準方法でのアミドへのカルボン酸の変換、続いて芳香族メチルエーテルの切断により、２１１−３を得る。遊離フェノールのアルキル化およびシリルエーテルの脱保護は、Ｐｄ（０）カップリングの前駆体を調製するために使用し、これは、既に記載された他のそのような転換と同様の方式で行う。アルキンの還元は、それ自体がテザー成分として有用であり得る中間体である２１１−６をもたらす。ニトリルへのアミドの脱水、次いで結果として得られたトリフルオロアセチル基の除去により、標的テザー、Ｂｏｃ−Ｔ２１１ａを得る。鏡像異性体テザー、Ｂｏｃ−Ｔ２１１ｂは、１６１−４に対する鏡像異性体試薬である１７５−３を使用すること以外、同一の手順によって合成することができる。
【０６０４】
ＲＲＲ．テザーＴ２１２の合成の標準手順
【化１２３】
2013509434.tif 000235
【０６０５】
アミノ酸２１２−１から出発する一般に高収率のシーケンスを、保護テザーＢｏｃ−Ｔ２１２を調製するために使用した。ヨージドへのアミンの変換は、ジアゾ化およびヨージドでの処理によって達成された。アシルクロリドの媒介を使用するアミドへの酸の転換に、メチルエーテルの三臭化ホウ素切断が続いた。フェノールのアルキル化、シリル保護基の加水分解除去およびＳｏｎｏｇａｓｈｉｒａカップリングにより、２１２−５を得た。次いで、三重結合の完全な還元によりＢｏｃ−２１２ａを得た。鏡像異性体テザー、Ｂｏｃ−Ｔ２１２ｂは、１６１−４に対する鏡像異性体試薬である１７５−３を使用すること以外、同一の手順によって合成することができる。
【０６０６】
ＳＳＳ．テザーＴ２１３の合成の標準手順
【化１２４】
2013509434.tif 000236
【０６０７】
先に記載された手法を使用して、ヨージド２１３−１により、対応するアニリン、２１３−０から良好な収率で入手した。アルキル化、Ｓｏｎｏｇａｓｈｉｒａ反応および還元によって、２１３−４が得られた。芳香族アミンの直交的保護（ｏｒｔｈｏｇｏｎａｌ  ｐｒｏｔｅｃｔｉｏｎ）を有するこの中間体は、テザー成分として使用することができよう。この事例において、アミンは標準条件下でメタンスルホンアミドに変換した。ＴＢＤＭＳ部分の脱保護によって、Ｂｏｃ−Ｔ２１３ａの合成が完了した。鏡像異性体テザー、Ｂｏｃ−Ｔ１８８ｂは、１６１−４に対する鏡像異性体試薬１７５−３を使用すること以外、同一の手順によって合成することができる。
【０６０８】
ＴＴＴ．テザーＴ２１４の合成の標準手順
【化１２５】
2013509434.tif 000237
【０６０９】
このテザーの構築は、ケトン２１４−０のウィッティヒ反応によって開始した。結果として得られた不飽和生成物を還元し、次いでエステルを鹸化して、２１４−２を得た。アミンの保護を用いる一ポットクルチウス転位は、２１４−３を生成した。メチルエーテルの切断は、結果としてＢｏｃ基の消失も生じるので、標準条件下で再設置を必要とした。（Ｓ）−乳酸エチルは、フェノールのＭｉｔｓｕｎｏｂｕ反応に使用され、続いて、エステルを還元して、Ｂｏｃ−Ｔ２１４ａの合成が完了した。上記手順のＭｉｔｓｕｎｏｂｕにおいて、（Ｒ）−乳酸エチル、または他の単純なエステルの使用によって、鏡像異性体テザーＢｏｃ−Ｔ２１４ｂを入手した。
【０６１０】
ＵＵＵ．テザーＴ２１５の合成の標準手順
【化１２６】
2013509434.tif 000238
【０６１１】
２−ブロモ−５−フルオロフェノールは、複数の他のテザーについて既に使用された類似の手順を用いてアルキル化した。ラセミのアルキニルアミン２１５−Ａを使用する、Ｐｄ（０）触媒Ｓｏｎｏｇａｓｈｉｒａカップリング（以下に述べるように合成した）は、良好な収率で２１５−１をもたらした。合成を完了する最も効率的なプロセスは、シリル基を脱保護し、続いて還元してＢｏｃ−Ｔ２１５を与えることであった。
【０６１２】
重要な試薬２１５−Ａは、図示されるアミノ酸２１５−０から調製した。アルコールへの酸の還元およびアミンの保護により、２１５−１を得た。デス・マーチン・ペルヨージナン（ＤＭＰ）を用いる酸化はアルデヒドを与え、これは全工程で良好な収率でアルキン（２１５−Ａ）に変換された。
【化１２７】
2013509434.tif 000239
【０６１３】
ＶＶＶ．テザーＴ２１６の合成の標準手順
【化１２８】
2013509434.tif 000240
【０６１４】
ジハロゲン化ピリジン２１６−０は、エチレングリコールの陰イオンとの置換、続いて、アルキン相手として１６１−４を使用するＳｏｎｏｇａｓｈｉｒａ反応および三重結合の水素化に供し、Ｂｏｃ−Ｔ２１６ａを生成した。鏡像異性体テザー、Ｂｏｃ−Ｔ２１６ｂは、１６１−４に対する鏡像異性体試薬である１７５−３を使用すること以外、同一の手順によって合成することができる。
【０６１５】
ＷＷＷ．テザーＴ２１７の合成の標準手順
【化１２９】
2013509434.tif 000241
【０６１６】
必要なアニリン２１７−１は、文献（Ｐｅｗｓ，  Ｒ．Ｇ．  Ｊ．  Ｆｌｕｏｒｉｎｅ  Ｃｈｅｍ．  １９９８，  ８７，  ６５−６７）に記載された手順を使用して、３−トリフルオロメチルアニソールから調製した。アミンからヨージドへの転換は、先に記載された化学を使用して、ジアゾ化合物経由で進めた。シアニドでのメチルエーテルの求核的除去は、続くアルキル化のためにフェノールを解放した。アルコールシリル基の脱保護によりカップリング前駆体２１７−３を得た。Ｓｏｎｏｇａｓｈｉｒａ反応に続くアルキンの還元により、Ｂｏｃ−Ｔ２１７ａを得た。鏡像異性体テザー、Ｂｏｃ−Ｔ２１７ｂは、１６１−４に対する鏡像異性体試薬である１７５−３を使用すること以外、同一の手順によって合成することができる。
【０６１７】
ＸＸＸ．テザーＴ２１８の合成の標準手順
【化１３０】
2013509434.tif 000242
【０６１８】
１，３−ジヒドロキシベンゼン、２１８−０のモノベンゾアートは、保護−脱保護シーケンスによって高収率でモノベンジル化誘導体、２１８−１に変換した。銀（Ｉ）の存在下でのヨウ素化、続いてアルキル化および選択的シリルエーテル除去は、２１８−３をもたらした。次いで、Ｓｏｎｏｇａｓｈｉｒａ条件下でのアルキン１６１−４とのカップリング、続いて還元は、非常に良好な収率でテザーＢｏｃ−Ｔ２１８ａを得た。鏡像異性体テザー、Ｂｏｃ−Ｔ２１８ｂは、１６１−４に対する鏡像異性体試薬である１７５−３を使用すること以外、同一の手順を使用して、合成することができる。
【０６１９】
ＹＹＹ．テザーＴ２１９の合成の標準手順
【化１３１】
2013509434.tif 000243
【０６２０】
Ｔ２１６について先に記載されたのと同一の中間体を、同様にこのテザーを構築するために使用した。アルキン１６４−Ａとの２１６−１のＳｏｎｏｇａｓｈｉｒａ反応により２１９−１を得る。続く三重結合の還元およびアミンのＢｏｃ−保護により、Ｂｏｃ−Ｔ２１９ａを得た。鏡像異性体テザー、Ｂｏｃ−Ｔ２１９ｂは、鏡像異性体アミノアルキン、１６４−Ｂから出発すること以外、同一の手順によって入手することができる。
【０６２１】
ＺＺＺ．テザーＴ２２０の合成の標準手順
【化１３２】
2013509434.tif 000244
【０６２２】
保護テザーＴ２１２ａを、このテザーの調製にも同様に使用した。トリフルオロ酢酸無水物と共に加熱することによるアミドからニトリルへの脱水で、２２０−１が得られた。穏やかな塩基性加水分解を用いる、アミンおよびアルコール上のトリフルオロアセチルｔｒｉｆｌｕｏｒｏａｃｔｅｙｌ基の除去は、本質的に定量的収率でＢｏｃ−Ｔ２２０ａをもたらした。鏡像異性体テザー、Ｂｏｃ−Ｔ２２０ｂは、前駆体アミド、Ｂｏｃ−Ｔ２１２ｂの調製において、１６１−４に対する鏡像異性体試薬である１７５−３を使用すること以外、同一の手順によって合成することができる。
【化１３３】
2013509434.tif 000245
【０６２３】
実施例３  本発明の大環状化合物
本発明の大環状化合物の構築において、アミノ酸は、ペプチド配列の標準と同じ番号付け、すなわち、Ｎ末端からＣ末端を使用して、ＡＡ１、ＡＡ２およびＡＡ３と呼ぶ。
【０６２４】
実施例Ｍ１  化合物１３１９の合成の標準手順
化合物１３１９の合成は図１に略述される。
【０６２５】
ステップＭ１−１：ジペプチド形成。
ＴＨＦ／ＤＣＭ（１：１、１．１５Ｌ）中のＣｂｚ−ＮＭｅＴｈｒ−ＯＨ（Ｍ１Ａ、１３６ｍｍｏｌ、１．０当量）の溶液に、Ｈ−（Ｄ）Ｐｈｅ−ＯｔＢｕ・ＨＣｌ（Ｍ１−Ｂ，１５０ｍｍｏｌ，１．１当量）およびＨＡＴＵ（１４３ｍｍｏｌ，１．０５当量）を添加した。混合物を０℃に冷却し、ＤＩＰＥＡを添加した。反応物を室温で窒素下で２〜３日間撹拌し、ＨＰＬＣ分析がＭ１−Ａの完全な消失を示した時、終了した。次いで、混合物を減圧下で濃縮し、黄色の油を得た。この残渣をＤＣＭに溶解し、ドライパック（５０％ＥｔＯＡｃ／ヘキサン）によって精製し、黄色の固体として５４ｇのジペプチドＭ１−Ｃ（８５％）を得た。
【０６２６】
ステップＭ１−２  Ｃｂｚ脱保護。
Ｍ１−Ｃ（５４ｇ、１１５ｍｍｏｌ、１．０当量）を、窒素下で９５％ＥｔＯＨ（１．６Ｌ）に溶解した。１０％Ｐｄ（Ｃ担持）（５０％含湿）を添加し、Ｈ２（ｇ）を混合物に終夜泡立たせた。混合物をセライトパッドに通して濾過し、濾液を減圧下で濃縮して、黄色の油として３８ｇのＭ１−Ｄ（１００％）を得た。
【０６２７】
ステップＭ１−３  トシラート形成
Ｂｏｃ−Ｔ８（８０ｇ、０．２７３ｍｏｌ、１．０当量）の溶液に、０℃で窒素下で、トリエチルアミン（７６ｍＬ、０．５４６ｍｏｌ、２．０当量）およびＤＣＭ（３５９ｍＬ）中のＤＭＡＰ（６．７２ｇ、０．０５５ｍｏｌ、０．２当量）を、３０ｍＬ分割で（完了するまで５分毎に）、ＤＣＭ（９１０ｍＬ）中のトシルクロリド（５４．６ｇ、０．２８７ｍｏｌ、１．０５当量）の溶液を添加した。反応物を、ＴＬＣによって反応をモニターしながら室温で終夜撹拌した。塩化アンモニウム飽和水溶液（１Ｌ）を添加し、ＤＣＭ（２×６００ｍＬ）で抽出した。有機相を合わせ、０．１ＮのＨＣｌ（３×６００ｍＬ）およびブライン（６００ｍＬ）で洗浄した。有機相をＭｇＳＯ４で乾燥し、濾過し、濾液を減圧下で濃縮して、オレンジ色の油として１１６ｇのＭ１−Ｅを得た。これは得られたままで、さらに精製をしないで次のステップに使用した。
ＴＬＣ：Ｒｆ＝０．３０（２５％ＥｔＯＡｃ／ヘキサン；検出：ＵＶ、Ｍｏ／Ｃｅ）；ＨＰＬＣ／ＭＳ：傾斜Ａ４、ｔＲ＝８．２２分、［Ｍ］＋４４７．
【０６２８】
ステップＭ１−４  ＡＡ１アルキル化
ＤＭＦ（１３９ｍＬ）中のＭ１−Ｅ（１２２ｇ、０．２７３ｍｏｌ、１．０当量）の溶液を、減圧下で３０分脱気した。次いで、ヨウ化カリウム（１４０℃で真空下で終夜乾燥した、１１３．４ｇ、０．６８３ｍｏｌ、２．５当量）、炭酸カリウム（１１３．４ｇ、０．８１９ｍｏｌ、３．０当量）、Ｈ−Ｖａｌ−ＯＭｅ（Ｍ１−Ｆ，６８．７ｇ，０．４１０ｍｏｌ，１．５当量）およびプロピオニトリル（ＥｔＣＮ、４１７ｍＬ）を、窒素雰囲気下で添加した。溶液を、ＴＬＣでモニターしながら１００℃で終夜加熱した。水（２．２Ｌ）を添加し、混合物をＥｔＯＡｃ（３×１Ｌ）で抽出した。有機相を合わせて、クエン酸塩緩衝剤（２×１Ｌ）、重炭酸ナトリウム飽和水溶液（２×１Ｌ）およびブライン（２×１Ｌ）で順次洗浄した。有機相をＭｇＳＯ４で乾燥し、濾過し、濾液を減圧下で濃縮し、黄色の油を得た。この残渣を、ドライパック（傾斜、１５％から２５％のＥｔＯＡｃ／ヘキサン）によって精製し、オレンジ色の油として８７ｇのＭ１Ｇ（８０％）を得た。
ＴＬＣ：Ｒｆ＝０．３８（４０％ＥｔＯＡｃ／ヘキサン；検出：ＵＶ、Ｍｏ／Ｃｅ）．
【０６２９】
ステップＭ１−５  エステル切断。
ＴＨＦ：ＭｅＯＨ（１：１、１２００ｍＬ）中のＭ１Ｇ（８０．０ｇ、１９０ｍｍｏｌ、１．０当量）の溶液に、４ＭＬｉＯＨ（６７４ｍＬ）を添加し、混合物を終夜揺動した（機械的撹拌）。溶液を真空内で蒸発させ、黄色のゲルを残した。水を添加し、不均質混合物を０℃に冷却した。次いで、３ＭのＨＣｌを添加してｐＨ＝３〜４を得、揺動（機械的撹拌）を継続した。このｐＨ範囲が早すぎるＢｏｃ脱保護を回避するのに重要であることに注意すること。白色沈殿物を形成し、これは、濾過によって収集し、水、次いでエーテルですすいだ。沈殿物をＴＨＦに溶解し、減圧下で濃縮した。固体残渣をトルエン（２ｘ）およびＴＨＦ（１ｘ）と共沸させ、次いで、１ＨＮＭＲ（ＤＭＳＯｄ６）が、残留水分が極微量になるのを示すまで真空下で（油ポンプ）乾燥した。Ｍ１−Ｈ（８２．２ｇ、１００％）が、このようにして白色固形物として得られた。
【０６３０】
ステップＭ１−６  カップリング
ＴＨＦ：ＣＨ２Ｃｌ２（１：１、１．５Ｌ）中のＭ１−Ｈ（７８．８ｇ，１８４ｍｍｏｌ，１．５当量）およびＭ１−Ｄ（３８．６ｇ、１１５ｍｍｏｌ、１．０当量）の懸濁液に、ＨＡＴＵ（７０ｇ、１８４ｍｍｏｌ、１．５当量）およびＤＩＰＥＡ（１２０ｍＬ、６９０ｍｍｏｌ、６．０当量）をゆっくり添加した。この添加の間にゲルを形成し、撹拌が非常に困難な混合物になった。不均質混合物を、ＴＬＣでモニターしながら終夜揺動した（機械的撹拌）。溶液を真空内で蒸発させ、残渣をＥｔＯＡｃに溶解した。有機溶液を、クエン酸塩緩衝剤（２ｘ）、ＮａＨＣＯ３飽和水溶液（２ｘ）およびＮａＣｌ飽和水溶液（１ｘ）で連続的に洗浄した。有機相をＭｇＳＯ４で乾燥し、濾過し、次いで濾液を減圧下で濃縮し、黄色の油を残した。この残渣をドライパック（３０％ＥｔＯＡｃ／ヘキサン）によって精製し、ベージュ色の発泡体として６８．２ｇのＭ１−Ｉ（５８％）を得た。
ＴＬＣ：Ｒｆ＝０．３１（６０％ＥｔＯＡｃ／ヘキサン；検出：ＵＶ、Ｍｏ／Ｃｅ）．
【０６３１】
ステップＭ１−７  脱保護。
Ｍ１−Ｉ（７４．８ｇ、１０５ｍｍｏｌ、１．０当量）を、５０％ＴＦＡ，３％ＴＩＰＳ／ＣＨ２Ｃｌ２（８４０ｍＬ）の溶液中で５時間撹拌した。溶液を真空下で蒸発させ、トルエンを添加し、、混合物を再び真空内で蒸発させた。残渣を終夜真空下で（油ポンプ）乾燥して、黄〜オレンジ色の固体としてＭ１−Ｊを得た。これはさらに精製をしないで次のステップに使用した。
【０６３２】
ステップＭ１−８  大員環形成
ＴＨＦ（１０．５Ｌ）中のＭ１−Ｊ（１０５ｍｍｏｌ、１．０当量）の溶液に、ＤＥＰＢＴ（４７．１ｇ、１５８．０ｍｍｏｌ、１．３当量）およびＤＩＰＥＡ（１１０ｍＬ、６３０．０ｍｍｏｌ、６．０当量）を添加した。結果として得られた混合物を終夜揺動した（機械的撹拌）。反応はＨＰＬＣによってモニターすることができる。完了したら、ＴＨＦは真空内で蒸発させ、１ＭのＮａ２ＣＯ３（水性）を添加した。水相をＥｔＯＡｃ（３ｘ）で抽出した。次いで合わせた有機相を、１ＭのＮａ２ＣＯ３（水性、１ｘ）および飽和ＮａＣｌ（水性、１ｘ）で洗浄し、ＭｇＳＯ４で乾燥し、濾過し、濾液を減圧下で濃縮し、オレンジ色の残渣を残した。このオレンジ色の残渣を、ドライパック（傾斜、３％から５％のＭｅＯＨ）によって精製し、次いで生成物を含有する分画をＣＨ３ＣＮ中に沈澱させて、化合物１３１９、８．２ｇ（５０％、２ステップ）を得た。
【０６３３】
ステップＭ１−９  ＨＣｌ塩形成
およそ１ｇの１３１９を４０ｍＬバイアルに入れ、アセトニトリル１０ｍＬを添加した。懸濁液に、１ＭのＨＣｌ（３．４ｍＬ）２当量を添加し、結果として得られた混合物を水で希釈して、合計２０ｍＬの溶媒を得た。５０ｍｇ／ｍＬの溶媒濃度が得られ、大員環は完全に可溶性であった。溶液を液体窒素中で１５分間凍結し、次いで、３日間凍結乾燥して、１３１９のＨＣｌ塩を得た。この方法を使用して、１１．１ｇの１３１９・ＨＣｌが得られた。
【０６３４】
実施例Ｍ２  化合物１３４６の合成の標準手順
【化１３４】
2013509434.tif 000246
【０６３５】
化合物１３１９に使用したものとわずかに異なるが、それでもなお近い手順を、化合物１３４６の構築のために使用した。テザー、Ｂｏｃ−Ｔ１５８は、Ｍｉｔｓｕｎｏｂｕ反応を使用して、ＡＡ１、Ｂｔｓ−Ｉｌｅ−ＯＭｅに結合させ、Ｍ２−１を得た。ＡＡ１の窒素を活性化しかつ保護するＢｔｓ基の最初の除去は、チオプロピオン酸および塩基を用いる標準条件を使用して達成され、Ｍ２−２を得、次いでエステルをＴＨＦ／ＭｅＯＨ中で水酸化リチウムで切断し、Ｍ２−３を調製した。ＡＡ２−ＡＡ３ジペプチド、Ｈ−ＮＭｅＴｈｒ−（Ｄ）Ｐｈｅ−Ｏｔ−Ｂｕ（Ｍ２−Ａ）を、標準方法を使用して別々に合成し、カップリング剤としてＨＡＴＵを使用してＡＡ１テザー成分に結合させ、Ｍ２−４を低収率で得た。Ｂｏｃおよびｔ−Ｂｕ保護基は、通常の方法によって同時に取り除き、大員環化前駆体、Ｍ２−５を得た。希薄条件（約１０ｎＭ）下でＤＥＰＢＴを用いる環化により、フラッシュクロマトグラフィー精製後、７．２％の全収率で生成物、１３４６を得た。さらに、化合物Ｍ２−１、Ｍ２−２およびＭ２−４は、フラッシュクロマトグラフィーで精製したが、Ｍ２−３およびＭ２−５は粗で用いた。
【０６３６】
実施例Ｍ３  化合物１３５０の合成の標準手順
化合物１３４６に使用されたのと本質的に同一の手順を、図２に提示される化合物１３５０の構築に使用した。テザー、Ｂｏｃ−Ｔ８は、Ｍｉｔｓｕｎｏｂｕ反応を使用して、ＡＡ１、Ｂｔｓ−Ｖａｌ−ＯＭｅ（１．０ｇ）に結合して、Ｍ３−１（１．８４、１００％）を得た。Ｂｔｓ基の最初の除去は、チオプロピオン酸および塩基を用いる標準条件を使用して行い、Ｍ３−２（１．５ｇ、１００％）を得、次いでエステルをＴＨＦ／ＭｅＯＨ中の水酸化リチウム（または水酸化トリメチルスズ）で切断して、Ｍ３−３（７８％）を調製した。ＡＡ２−ＡＡ３ジペプチド、Ｈ−ＮＭｅＴｈｒ−（Ｄ）ｍＴｙｒ−ＯＭｅ（Ｍ３−Ａ）を、保護アミノ酸Ｍ３−７およびＭ３−８から、示した標準方法を使用して、２ｇの規模で７０％の収率で別々に合成した。Ｍ３−Ａは、ＤＭＦ（またはＮＭＰ）中でカップリング剤としてのＨＡＴＵを使用してＡＡ１テザー成分に結合させて、低収率でＭ３−４を得た。最初にメチルエステル部分、次いでＢｏｃ基を、通常の方法によって除去し、大員環化前駆体、Ｍ３−６を得た。ＤＥＰＢＴを用いる環化により、ＨＰＬＣ精製後、生成物、１３５０（６．２ｍｇ）を得た。
【０６３７】
実施例Ｍ４  化合物１３５１の合成の標準手順
Ｂｔｓ−Ｉｌｅ−ＯＭｅから出発すること以外、化合物１３５０（図２）のために上で使用されたのと同一の手順を、化合物１３５１（３０．９ｍｇ）の構築のために使用した。Ｍ３−Ａジペプチドへのカップリングは、５５％の収率で生じた。
【０６３８】
実施例Ｍ５  化合物１３５２の合成の標準手順
テザーＴ１２５ａから出発すること以外、化合物１３５０（図２）のために上で使用されたのと同一の手順を、化合物１３５２（５．０ｍｇ）の構築のために使用した。１ｇのＢｔｓ−Ｖａｌ−ＯＭｅから出発するシーケンスによって得られた具体的な収率は次のとおりであった：ＡＡ１−テザー形成（１００％）、Ｂｔｓ脱保護（８９％）、およびエステル切断（１００％）。
【０６３９】
実施例Ｍ６  化合物１６３６の合成の標準手順
図３に略述されるように、テザーＴ１０４から出発すること以外、化合物１３５０のために上記に使用されたものと同一の手順を化合物１６３６（０．２ｍｇ）の構築のために使用した。特に、ジペプチドＭ３−ＡへのＡＡ１テザー成分のカップリング収率は低かった（８％）。
【０６４０】
実施例Ｍ７  化合物１３８３の合成の標準手順
既に記載されたものを改変した反応手順を、化合物１３８３の構築のために使用し、これは図４に示される。Ｍ７−１は、Ｂｔｓ−Ｖａｌ−ＯＭｅおよびＢｏｃ−Ｔ１２５ａからＭｉｔｓｕｎｏｂｕ反応を使用して、先に記載されたように合成した。ＡＡ２−ＡＡ３ジペプチド、Ｈ−ＮＭｅＴｈｒ−（Ｄ）Ｔｙｒ（３−Ｃｌ）−ＯＭｅ（Ｍ７−Ｂ）を、示されるように、保護アミノ酸Ｂｏｃ−ＮＭｅＴｈｒ−ＯＨおよびＨ−（Ｄ）Ｔｙｒ（３−Ｃｌ）−ＯＭｅ（Ｍ７−Ａ）からフラッシュクロマトグラフィー（傾斜８０％から９５％ＥｔＯＡｃ／ヘキサン）後、８０％の収率で別々に合成した。Ｍ７−ＢおよびＭ７−１はＮＭＰ中でカップリング剤としてのＨＡＴＵを使用して結合して、フラッシュクロマトグラフィー（傾斜８０％から９５％ＥｔＯＡｃ／ヘキサン）後、３０％の収率でＭ７−２を得た。次に、メチルエステル部分は水酸化トリメチルスズを使用して切断し、次いで、Ｂｏｃ基をＥｔＯＡｃ中のＨＣｌで除去して、大員環化前駆体、Ｍ７−４を得た。ＤＥＰＢＴを用いる環化は、フラッシュクロマトグラフィー（５％ＭｅＯＨ／ＥｔＯＡｃ）、次いでＨＰＬＣ精製後、生成物、化合物１３８３（２５％収率、全体として４．７％）を得た。
【０６４１】
実施例Ｍ８  化合物１３９０の合成の標準手順
化合物１３９０の構築のために使用する、既に記載されたものを改変した反応手順を、図５に示す。ジペプチドＭ８−１を、Ｂｏｃ−ＮＭｅＴｈｒ−ＯＨ  およびＡＡ４（Ｂｎ）から標準方法を使用して合成した。ＥｔＯＡｃ中の２．１ＭのＨＣｌを用いるＢｏｃ基の脱保護により、Ｍ８−２を得た。これを、ＤＣＭ／ＴＨＦ中でカップリング剤としてＨＡＴＵを使用して、Ｍ７−１にカップリングさせ、６４％の収率のＭ８−３を得た。次に、ベンジルエステル部分は水素化分解を使用して切断し、次いでＢｏｃ基はＴＦＡで除去して、大員環化前駆体、Ｍ８−４を得た。ＤＥＰＢＴを用いる環化により、ＨＰＬＣ精製後、生成物、化合物１３９０（１３５ｍｇ、６３％の収率）を得た。
【０６４２】
実施例Ｍ９  化合物１４０１の合成の標準手順
既に記載されたものと異なる反応手順を、図６に要約される大員環の骨組みへｏ−Ｔｙｒアミノ酸を組み込むために使用した。Ｍ９−１は、Ｂｔｓ−Ｖａｌ−ＯＭｅおよびＢｏｃ−Ｔ１２５ａからＭｉｔｓｕｎｏｂｕ反応を使用して、先に記載されたように合成した。３−メルカプトプロピオン酸および塩基を用いるこの物質からのＢｔｓ部分の脱保護はＭ９−２を与え、次いで、ＥｔＯＡｃ中の２．１ＭのＨＣｌを用いるＢｏｃ基の切断により、Ｍ９−３を得た。これに続いて、塩基としてのＤＩＰＥＡの存在下でＢｏｃ−ｏ−Ｔｙｒラクトン（ＡＡ５−３）との反応によって、Ｍ９−４が得られた。Ｍ９−４のＢｏｃ基を除去し、Ｂｏｃ−ＮＭｅＴｈｒ−ＯＨを、ＨＡＴＵを使用して、結果として得られた脱保護中間体とカップリングさせ、８５％の収率でＭ９−５を得た。次に、ベンジルエステル保護を水素化分解によって除去し、Ｍ９−６を得た。Ｍ９−６からのＢｏｃ基の脱保護、次いで、ＤＩＰＥＡ塩基の存在下でＨＡＴＵを用いる環化によって、ＨＰＬＣ精製後、生成物、化合物１４０１を得た。
【０６４３】
実施例Ｍ１０  化合物１３００の合成の標準手順
既に記載されたものを改変した反応手順を、化合物１３００（ＷＯ２００６／１３７９７４を参照）の構築について図示されるように、アミノ酸Ｈ−ＮＭｅ−（β−ＯＨ）Ｖａｌ−ＯＨを組み込むために使用し、これは図７に示される。Ｍ１０−１は、先に記載されたようにＭｉｔｓｕｎｏｂｕ反応を使用して、Ｂｔｓ−Ｉｌｅ−ＯＭｅおよびＢｏｃ−Ｔ８から、フラッシュクロマトグラフィー後、９４％の収率で合成した。最初にＢｔｓ基、次いで、メチルエステルの脱保護を、標準方法を使用して行い、Ｍ１０−３を得た。ＡＡ２−ＡＡ３ジペプチド、Ｈ−ＮＭｅ（β−ＯＨ）Ｖａｌ−（Ｄ）ＰｈｅＯＭｅ（Ｍ１０−Ｅ）を、保護アミノ酸Ｈ−ＮＭｅ（β−ＯＴＨＰ）Ｖａｌ−ＯＢｎ（Ｍ１０−Ａ）およびＨ−（Ｄ）Ｐｈｅ−ＯＭｅから別々に合成した。保護基修飾によって、フラッシュクロマトグラフィー後、６３％の収率でＢｏｃ−ＮＭｅ（β−ＯＨ）Ｖａｌ−ＯＢｎ（Ｍ１０−Ｂ）を得た。ベンジルエステル保護は水素化分解によって除去し、Ｍ１０−Ｃを得た。これを、ＮＭＰ中でカップリング剤としてＨＡＴＵを使用して、Ｈ−（Ｄ）Ｐｈｅ−ＯＭｅ・ＨＣｌと結合させ、フラッシュクロマトグラフィー後、Ｍ１０−Ｄを定量的収率で得た。Ｍ１０−Ｅを、Ｂｏｃ基の標準的切断によってＭ１０−Ｄから調製した。この誘導体、Ｍ１０−Ｅを、次に、塩基としてＤＩＰＥＡを用いてＮＭＰ中で再びＨＡＴＵを使用して、Ｍ１０−３にカップリングさせたが、Ｍ１０−４の収率は低かった（１５％）。次に、メチルエステル部分を水酸化トリメチルスズを使用して切断し、次いで、Ｂｏｃ基はＴＦＡ／ＴＥＳで除去して、大員環化前駆体、Ｍ１０−６を得た。希薄条件（０．０１Ｍ）中でＤＥＰＢＴを用いて環化することによって、フラッシュクロマトグラフィー精製後、生成物、化合物１３００（１７％の収率）を得た。
【０６４４】
実施例Ｍ１１  化合物１５０５の合成の標準手順
実施例Ｍ１に記載されたのと本質的に同じ反応手順を、図８に略述されるように化合物１５０５を入手するために使用した。ジペプチド成分、Ｍ１１−Ｃを、保護アミノ酸誘導体Ｃｂｚ−ＮＭｅＴｈｒ−ＯＨ（Ｍ１１−Ａ）およびＨ−（Ｄ）Ｔｒｐ（Ｂｏｃ）−ＯｔＢｕ（Ｍ１１−Ｂ）から構築した。Ｍ１１−Ａはそのシクロヘキシルアミン（ＣＨＡ）塩として得られ、したがって、当業者に公知のように、使用前に対応する遊離塩基に変換しなければならなかった。例として、３３ｇのＭ１１−Ａ（１４０ｍｍｏｌ、１．０当量）を５０ｇのＣＨＡ塩から調製した。これに５１ｇのＭ１１−Ｂ（１４０ｍｍｏｌ、１．０当量）をカップリングさせ、続いて標準水素化分解条件下でＣｂｚ保護を除去し、７５ｇのジペプチドＭ１１−Ｃ（１２６ｍｍｏｌ、９０％）を得た。別々に、テザーＴ１３４ａは対応するトシラートに変換し、次いで、ＥｔＣＮ−ＤＭＦ溶媒中で求核試薬としてＨ−Ｖａｌ−ＯＭｅと反応させて、８５％の収率でＭ１１−１を得た。ＬｉＯＨを用いるメチルエステルの脱保護は定量的収率で進み、Ｍ１１−２を得た。この中間体（１０５ｍｍｏｌ）を、ＨＡＴＵを使用してＭ１１−Ｃ（７５ｇ、１２６ｍｍｏｌ、１．２当量）にカップリングさせ、７０〜８０％の収率でＭ１１−３を得た。ＢｏｃおよびｔＢｕの保護基の同時の酸性切断は、大員環化前駆体Ｍ１１−４を本質的に定量的に与えた。環化は、ＴＨＦ中、約１０ｎＭの希薄濃度でＤＥＰＢＴ／ＤＩＰＥＡを使用して達成された。大員環１５０５は、このようにして精製後５０％の収率（２３ｇ、３７ｍｍｏｌ）で得られた。
【０６４５】
実施例４
生物学的な結果
本発明の代表的な化合物は、グレリン受容体との結合活性度について方法Ｂ１、グレリン受容体でのアンタゴニストとしての機能活性度について、方法Ｂ２およびＢ３、ならびにグレリン受容体でのインバースアゴニストとしての機能活性度について方法Ｂ４に詳述した方法を使用して評価した。結果は、表７、８および９にそれぞれ示される。
【表１８−１】
2013509434.tif 000247
【表１８−２】
2013509434.tif 000248
【表１８−３】
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【表１８−４】
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【表１８−５】
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【表１８−６】
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【表１８−７】
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【表１９−１】
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【表１９−２】
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【表２０−１】
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【表２０−２】
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【表２０−３】
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【表２０−４】
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【０６４６】
実施例５
本発明の代表的な化合物の薬物動態プロファイルの詳細な分析を、方法Ｂ９に略述した手順を使用して行った。静脈内および経口投与の両方の結果を表１０ａおよび１０ｂに示す。
【表２１】
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【０６４７】
本発明の追加の代表的な化合物の薬物動態データを表１０ｂに示す。典型的には、静脈内投与のために２ｍｇ／ｍＬおよび経口投与のために８ｍｇ／ｍＬの用量レベルを使用した。
【表２２】
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【０６４８】
実施例６
代謝病の動物モデルにおけるインビボ評価
方法Ｂ１４を使用して、抗肥満症または抗糖尿病治療の試験のための標準モデルである、Ｚｕｃｋｅｒ肥満ラットにおける代謝パラメーターに対する化合物１５０５の作用の試験を行った。図９において示されたように、この化合物３０ｍｇ／ｋｇで７日の試験期間の経過にわたり正味体重の著しい減少を実証した。さらにこの用量レベルで、累積的な食物消費量の著しい減少もまた観察された（図１０）。毎日、１０ｍｇ／ｋｇおよび３０ｍｇ／ｋｇ用量の両方が、２日の時点のビヒクル対照と比較した場合、著しい減少を示した。高用量では、６日の時点まで顕著であった。
【０６４９】
体重に対する作用に加えて、化合物１５０５（３０ｍｇ／ｋｇ）を用いたＯＧＴＴの結果は、第３日および第７日の両方で、未処置対照と比べて血中グルコースの低下を示した。曲線下面積（ＡＵＣ）によって示されるようなインスリンレベルに対する引き下げ作用もこの試験において得られた。インスリン感性指数が高いほど、高用量で顕著であった。
【０６５０】
最終的に、遊離脂肪酸および総コレステロールを包含する他の代謝パラメーターも、両処置群において著しく減少した。ＰＫ分析は、化合物１５０５の十分な血漿レベルが、経口投与でこの分子の有効性を確証して達成されることを実証した。
【０６５１】
実施例７
代謝病のＡさらなる動物モデルにおいてインビボ評価
方法Ｂ１５を使用して、代謝障害治療の試験のための標準モデルである、ｏｂ／ｏｂマウスにおける代謝パラメーターに対する化合物１７１２および１８４８の作用の試験を行った。ｏｂ／ｏｂマウスモデルにおいて予想された通り、動物は肥満であり、メタボリック症候群（例えば、高インスリン血症ｈｙｐｅｒｉｎｕｓｌｉｎｅｍｉａ、耐糖能異常、異脂肪血症）の態様を示した（Ｌｅｉｔｅｒ，  Ｅ．Ｈ．  ＦＡＳＥＢ  Ｊ．  １９８９，  ３，  ２２３１−２２４１．）。図１１に示されるように、絶食させた動物において２時間にわたり急性の累積的食物摂取量は、ビヒクル対照動物と比較して、化合物１７１２での処置によって著しく減少した。
【０６５２】
別の１４日試験において、用量７５ｍｇ／ｋｇでの累積的食物摂取量の有意な減少（１１．９％）が、ビヒクル対照と比較して、化合物１８４８で治療した動物に観察された（図１２）。さらに、化合物１８４８（７５ｍｇ／ｋｇ）で処置したマウスにおいて、経口ブドウ糖負荷試験の間の血中ブドウ糖レベルの著しい減少が、ビヒクル対照と比較して見られ、治療での糖耐性の改善を示唆する。他の代謝パラメーターについては、化合物１８４８での処置は、ビヒクル対照マウスと比較して、非絶食ブドウ糖、インスリン、グルカゴン、遊離脂肪酸（ＦＦＡ）を著しく減少させ、総コレステロールまたはトリグリセリドレベルを減少させなかった（図１３）。これらのデータは、化合物１８４８で処置したｏｂ／ｏｂマウスにおいてインスリン感受性の改善を示す。
【０６５３】
上記は本発明の例証であり、それを限定すると解釈するべきではない。本発明は、以下の特許請求の範囲によって定義され、特許請求の範囲の等価物はその中に含まれる。
【図１】
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【図２】
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【図３】
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【図４】
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【図５】
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【図６】
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【図７】
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【図８】
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【図９】
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【図１０】
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【図１１】
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【図１２】
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【図１３】
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【国際調査報告】
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