(57)【要約】  本発明は、シトクロムＰ４５０  ３Ａ４／３Ａ５（ＣＹＰ３Ａ４／３Ａ５）酵素により代謝される治療用化合物の薬物動態を改善するためのＣＹＰ３Ａ４／５インヒビターとしてのボセプレビルの使用を用いる方法、医薬組成物、医薬および医薬キットを提供する。【選択図】図１Ａ
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【特許請求の範囲】
【請求項１】
シトクロムＰ４５０  ３Ａ４／３Ａ５（ＣＹＰ３Ａ４／３Ａ５）により代謝される治療用化合物の薬物動態を改善するための方法であって、該治療用化合物での治療を要するヒト患者に該治療用化合物とボセプレビル関連化合物とを共投与することを含む方法。
【請求項２】
該共投与工程後の２以上の時点で該治療用化合物に関する少なくとも１つの薬物動態学的パラメータを測定し、測定されたパラメータを該パラメータの目標値と比較することを更に含む、請求項１記載の方法。
【請求項３】
該治療用化合物が、表Ａ、表Ｂ１、表Ｂ２、表Ｂ３、表Ｂ４または表Ｂ５に記載されている化合物のいずれか１つである、請求項１記載の方法。
【請求項４】
該ボセプレビル関連化合物が式１ａまたは式１ｂの化合物である、請求項１記載の方法。
【化１】
2013535469.tif 000024
【請求項５】
該患者が慢性Ｃ型肝炎ウイルス（ＨＣＶ）感染を有し、該ボセプレビル関連化合物が式１ａの化合物であり、該治療用化合物がナルラプレビル（ｎａｒｌａｐｒｅｖｉｒ）、テラプレビル（ｔｅｌａｐｒｅｖｉｒ）またはフィリブビル（ｆｉｌｉｂｕｖｉｒ）である、請求項１記載の方法。
【請求項６】
該患者がＨＩＶに感染しており、該ボセプレビル関連化合物が式１ａの化合物であり、該治療用化合物がアプラビロック（ａｐｌａｖｉｒｏｃ）、マラビロック（ｍａｒａｖｉｒｏｃ）またはビクリビロック（ｖｉｃｒｉｖｉｒｏｃ）である、請求項１記載の方法。
【請求項７】
シトクロムＰ４５０  ３Ａ４／３Ａ５（ＣＹＰ３Ａ４／３Ａ５）により代謝される治療用化合物の薬物動態を改善する方法において使用するための、ボセプレビル関連化合物を含む医薬組成物であって、該方法が、該治療用化合物での治療を要するヒト患者に該治療用化合物とボセプレビル関連化合物とを共投与することを含む、医薬組成物。
【請求項８】
該ボセプレビル関連化合物が式１ａの化合物である、請求項７記載の医薬組成物。
【請求項９】
シトクロムＰ４５０  ３Ａ４／３Ａ５（ＣＹＰ３Ａ４／３Ａ５）により代謝される治療用化合物での患者の治療において使用するための医薬組成物であって、治療的有効量の該治療用化合物と、該治療用化合物と共投与された場合に該治療用化合物の薬物動態を改善するのに有効な量のボセプレビル関連化合物とを含む医薬組成物。
【請求項１０】
該治療用化合物が、表Ａ、表Ｂ１、表Ｂ２、表Ｂ３、表Ｂ４または表Ｂ５に記載されている抗ウイルス化合物のいずれか１つである、請求項９記載の医薬組成物。
【請求項１１】
該ボセプレビル関連化合物が式１ａの化合物である、請求項９記載の医薬組成物。
【請求項１２】
該患者が慢性Ｃ型肝炎ウイルス（ＨＣＶ）感染を有し、該ボセプレビル関連化合物が式１ａの化合物であり、該治療用化合物がナルラプレビル（ｎａｒｌａｐｒｅｖｉｒ）、テラプレビル（ｔｅｌａｐｒｅｖｉｒ）またはフィリブビル（ｆｉｌｉｂｕｖｉｒ）である、請求項９記載の医薬組成物。
【請求項１３】
シトクロムＰ４５０  ３Ａ４／３Ａ５（ＣＹＰ３Ａ４／３Ａ５）により代謝される治療用化合物で患者を治療するための医薬キットであって、治療的有効量の該治療用化合物を含む第１医薬組成物と、該治療用化合物と共投与された場合に該治療用化合物の薬物動態を改善するのに有効な量のボセプレビル関連化合物を含む第２医薬組成物とを含む医薬キット。
【請求項１４】
該治療用化合物での療法に感受性である疾患または状態を有する患者を治療するために該第１および第２医薬組成物を投与するための説明を更に含む、請求項１３記載の医薬キット。
【請求項１５】
該治療用化合物が、ナルラプレビル（ｎａｒｌａｐｒｅｖｉｒ）、テラプレビル（ｔｅｌａｐｒｅｖｉｒ）、フィリブビル（ｆｉｌｉｂｕｖｉｒ）、ビクリビロック（ｖｉｃｒｉｖｉｒｏｃ）、マラビロック（ｍａｒａｖｉｒｏｃ）およびアプラビロック（ａｐｌａｖｉｒｏｃ）からなる群から選択され、該ボセプレビル関連化合物が式１ａの化合物である、請求項１４記載の医薬キット。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本出願は、全般的には、ＣＹＰ３Ａ酵素を阻害する化合物の共投与による、シトクロムＰ４５０  ３Ａ（ＣＹＰ３Ａ）酵素により代謝される薬物の薬物動態の改善に関する。
【背景技術】
【０００２】
ＣＹＰ３Ａ酵素サブファミリーのＣＹＰ３Ａ４およびＣＹＰ３Ａ５メンバーによる酸化的代謝は多数の薬物の消失において主要な役割を果たしており、これらの酵素により迅速に代謝される薬物の治療的に有効な血漿レベルを維持することは困難でありうる。また、幾つかの薬物では、ＣＹＰ３Ａによる代謝の代謝副産物は高毒性であり、重篤な副作用を引き起こしうる。
【０００３】
ヒトにおいては、ＣＹＰ３Ａ４は、典型的に、成人の肝臓および腸における、最も豊富に存在するＣＹＰ３Ａアイソフォームであるが、多形的に発現されるＣＹＰ３Ａ５は、ＣＹＰ３Ａ５を発現する個体における全肝ＣＹＰ３Ａの５０％以上に相当しうる。例えば、Ｇｒａｎｆｏｒｓ，Ｍ．Ｔ．ら，Ｂａｓｉｃ  ＆  Ｃｌｉｎｉｃａｌ  Ｐｈａｒｍａｃｏｌｏｇｙ  ＆  Ｔｏｘｉｃｏｌｏｇｙ  ９８：７９−８５（２００６）；ｖｏｎ  Ｒｉｃｈｔｅｒ，Ｏ．ら，Ｃｌｉｎ．Ｐｈａｒｍａｃｏｌ．Ｔｈｅｒａｐ．７５：１７２−１８３（２００４）；およびＬｉｎ，Ｙ．Ｓ．ら，Ｍｏｌ．Ｐｈａｒｍａｃｏｌ．６２：１６２−１７２（２００２）を参照されたい。しかし、現在、ＣＹＰ３Ａ５に特異的な公知基質は存在しないため、臨床的な薬物代謝の研究は、典型的には、３Ａ４および３Ａ５アイソフォームの両方により代謝されることが知られている化合物（例えば、ミダゾラム）をＣＹＰ３Ａ４の基質として使用しており、その結果を、ＣＹＰ３Ａ４／５代謝によるものとして報告している。
【０００４】
ＣＹＰ３Ａ４／５により迅速に代謝される薬物の薬物動態を改善するための１つのアプローチはＣＹＰ３Ａ４／５のインヒビターを共投与することである。例えば、元々はＨＩＶプロテアーゼインヒビターとして使用するために開発されたリトナビル（ｒｉｔｏｎａｖｉｒ）はＣＹＰ３Ａ４／５の強力な不可逆的インヒビターでもあり、現在では、ＣＹＰ３Ａ４／５により代謝される他のより有効なＨＩＶプロテアーゼインヒビターの薬効増強（「ブースティング」）のためにほぼ専用に使用されている。また、リトナビルは、慢性Ｃ型肝炎ウイルス（ＨＣＶ）感染を含む他の疾患に使用される薬物のブースティング（すなわち、バイオアベイラビリティの増強ならびに／または血漿中濃度の増加および維持の達成）に使用されることが提示されている。例えば、ＵＳ  ６０３７１５７、ＵＳ  ６７０３４０３、ＵＳ  ２００７／０２８７６６４、ＷＯ  ２００７１０３９３４およびＷＯ  ２００９／０３８６６３を参照されたい。しかし、リトナビルは、他の薬物代謝ＣＹＰ酵素、例えばＣＹＰ２Ｄ６（デクストロメトルファン−Ｏ−デメチラーゼに関してはＩＣ５０＝２．５μＭ）およびＣＹＰ２Ｃ９／１０（トルブタミドメチルヒドロキシラーゼに関してはＩＣ５０＝８．０μＭ）の強力なインヒビターでもあり（Ｋｕｍａｒ，Ｇ．Ｎ．ら，Ｊ．Ｐｈａｒｍａｃｏｌ  Ｅｘｐ．Ｔｈｅｒ．２７７：４２３−４３１（１９９６））、このことは、望ましくない薬物−薬物相互作用のリスクを増大させる。したがって、ＣＹＰ３Ａ４／３Ａ５により代謝される薬物の薬物動態を改善するために使用されうる他のより特異的なＣＹＰ３Ａ４／３Ａ５インヒビターを特定することが必要とされている。
【発明の概要】
【０００５】
発明の概括
驚くべきことに、ＨＣＶ  ＮＳ３セリンプロテアーゼの遅結合性可逆的α−ケトミドインヒビターであるボセプレビル（ｂｏｃｅｐｒｅｖｉｒ）（ＢＯＣ）がシトクロムＰ４５０  ３Ａ４／３Ａ５（ＣＹＰ３Ａ４／３Ａ５）の強力な可逆的インヒビターでもあることが本発明において見出された。
【０００６】
したがって、１つの実施形態においては、本発明は、ＣＹＰ３Ａ４／３Ａ５により代謝される治療用化合物（後記で更に詳しく説明される）の薬物動態を改善するための方法を提供する。該方法は、該治療用化合物での治療を要するヒトに該治療用化合物とボセプレビルまたはボセプレビル関連化合物（後記で更に詳しく説明される）とを共投与することを含む。幾つかの実施形態においては、該方法は更に、該共投与後の１以上の時点で少なくとも１つの薬物動態学的パラメータを測定し、測定されたパラメータを該薬物動態学的パラメータの目標範囲と比較することを含む。他の実施形態においては、該方法は更に、該測定値が該目標範囲内に含まれない場合、該治療用化合物と共投与されるボセプレビル関連化合物の用量を調節することを含む。
【０００７】
もう１つの実施形態においては、本発明は、前記方法および本明細書に記載のその種々の実施形態いずれかにおいて使用するための、ボセプレビル関連化合物を含む医薬組成物を提供する。
【０００８】
本発明はまた、シトクロムＰ４５０  ３Ａ４／３Ａ５（ＣＹＰ３Ａ４／３Ａ５）により代謝される治療用化合物（後記で詳しく説明される）の薬物動態を改善するための医薬の製造のための、ボセプレビル関連化合物（後記で更に詳しく説明される）の使用を提供し、ここで、該医薬は、治療用化合物と共に共投与された場合に該治療用化合物の薬物動態を改善するのに有効な量の該ボセプレビル関連化合物を含む。
【０００９】
更にもう１つの実施形態においては、本発明は、シトクロムＰ４５０  ３Ａ４／３Ａ５（ＣＹＰ３Ａ４／３Ａ５）により代謝される治療用化合物（後記で詳しく説明される）での疾患の治療に使用するための医薬組成物を提供し、該組成物は、治療的有効量の該治療用化合物と、該化合物の薬物動態を改善するのに有効な量のボセプレビルまたはボセプレビル関連化合物（後記で更に詳しく説明される）とを含む。
【００１０】
本発明はまた、シトクロムＰ４５０  ３Ａ４／３Ａ５（ＣＹＰ３Ａ４／３Ａ５）により代謝される治療用化合物（後記で更に詳しく説明される）を含む第１医薬組成物の投与単位の少なくとも１つと、ボセプレビル関連化合物（後記で更に詳しく説明される）を含む第２医薬組成物の投与単位の少なくとも１つとを含む医薬キットを提供し、ここで、それらの投与単位は容器内に一緒に包装（パッケージング）されている。
【００１１】
本発明の前記実施形態の全てにおいては、ＣＹＰ３Ａ４／３Ａ５により代謝される治療用化合物は、好ましくは、抗ウイルス剤、より好ましくは、ＨＩＶまたはＨＣＶの複製を阻害する化合物である。
【００１２】
発明の詳細な説明
Ｉ．定義
本発明がより容易に理解されるように、ある科学技術用語を以下に具体的に定義する。本明細書中に特に示されていない限り、本明細書中で用いられている全ての他の科学技術用語は、本明細書中で用いられているのに類似した文脈で用いられている場合の、本発明が属する技術分野の当業者により一般に理解されている意味を有する。
【００１３】
添付の特許請求の範囲を含む本明細書において用いる単数形表現は、文脈に明らかに矛盾しない限り、それらの対応する複数形対象物を含む。
【００１４】
「ボセプレビル関連化合物」は式１ａ（ボセプレビル）の化合物の全ての単離および精製形態ならびにプロドラッグ形態を意味する。したがって、ボセプレビル関連化合物なる語は式１ａの化合物のあらゆる互変異性体または立体異性体（例えば、式１ｂおよび式１ｃのジアステレオマー）、エステルおよび前記のいずれかのあらゆる医薬上許容される塩、溶媒和物または水和物を含む。
【００１５】
【化１】
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式１ａの化学名は（１Ｒ，２Ｓ，５Ｓ）−Ｎ［（２Ξ）−４−アミノ−１−シクロブチル−３，４−ジオキソブタン−２−イル）］−３−｛（２Ｓ）−２−［（ｔｅｒｔ−ブチルカルバモイル）アミノ］−３，３−ジメチルブタノイル｝−６，６−ジメチル］−３−アザビシクロ［３．１．０］ヘキサン−２−カルボキサミドである。
【００１６】
式１ｂの化学名は（１Ｒ，２Ｓ，５Ｓ）−Ｎ［（１Ｓ）−３−アミノ−１−（シクロブチルメチル）−２，３−ジオキソプロピル］−３−［（２Ｓ）−２−［［［（１，１−ジメチルエチル）アミノ］カルボニル］アミノ］−３，３−ジメチル−１−オキソブチル］−６，６−ジメチル−３−アザビシクロ［３．１．０］ヘキサン−２−カルボキサミドである。ＷＯ２００５／０１５５７９に記載されているとおり、式１ｂの化合物は、式１ｃの化合物より有意に高いインビトロＨＣＶ  ＮＳ３セリンプロテアーゼ阻害活性を示す。
【００１７】
「共投与される」または「共投与」は、少なくとも２つの物質を、それらが共にインビボで有効な量で存在するように供与することを意味する（例えば、治療用化合物およびボセプレビル関連化合物は別々の組成物において同時に又は異なる時点で投与され、あるいはそれらは単一組成物中に共配合され、投与されうる）。「有効量」は、治療用化合物に関しては、例えば感染、疾患または障害の１以上の症状の軽減のような有益な効果をもたらすのに十分な量であり、ボセプレビル関連化合物に関しては、有効量は、後記で更に詳しく説明するとおり、治療用化合物の薬物動態を改善するのに十分な量である。
【００１８】
「組成物」は、示されている量の示されている成分を含む産物、および示されている量の示されている成分の組合せから直接的または間接的に生じる任意の産物を含むと意図される。
【００１９】
本明細書および特許請求の範囲の全体において用いられている「から実質的になる」およびその変形表現、例えば「から実質的になり」は、挙げられている要素または要素群の包含、および示されている投与計画、方法または組成物の基本的または新規特性を実質的に変化させない、挙げられている要素に類似した又は異なる性質の他の要素の随意的包含（すなわち、包含されても包含されなくてもよいこと）を示す。
【００２０】
「個体」または「動物」または「患者」または「哺乳動物（哺乳類）」は、特許請求されている組成物および方法のいずれかを必要とする又は該組成物および方法が有益である任意の対象、特に哺乳動物対象を意味する。好ましい実施形態においては、該個体はヒトである。より好ましい実施形態においては、該個体は成人、すなわち、少なくとも１８歳のヒトである。
【００２１】
「ＩＦＮ−α治療にナイーブ」は、本明細書に記載の実施形態のいずれかにより治療または試験される個体または患者がいずれのＩＦＮ−αでも未だ治療されていないことを意味する。
【００２２】
「医薬上許容される」は、ヒトに投与された場合、「安全であると一般にみなされている」（ＧＲＡＳ）、例えば、生理的に許容され、典型的にはアレルギーまたは類似の望ましくない反応（例えば、胃の異常など）を引き起こさない分子および組成物に関するものである。もう１つの実施形態においては、この用語は、動物における使用、より詳しくはヒトにおける使用に関して、連邦もしくは州政府の規制機関により承認された又は米国薬局方もしくは他の一般に認められている薬局方に収載されている分子および組成物に関するものである。
【００２３】
「医薬組成物」は、１以上の有効成分と、不活性成分を含む随意的担体（すなわち、使用されても使用されなくてもよい担体）とを含む産物、およびいずれかの２以上の該成分の組合せ、複合体化または集合から、あるいは１以上の該成分の解離から、あるいは１以上の該成分の他のタイプの反応または相互作用から、直接的または間接的に生じる任意の産物を意味する。一般に、医薬組成物は、該有効成分を液体担体または微細化固体担体またはそれらの両方と均一かつ密接に会合させ、ついで、必要に応じて、該産物を所望の製剤に成形することにより製造される。該医薬組成物においては、各有効成分の量は、本明細書に記載の方法のいずれかにおいて使用された場合に所望の効果をもたらすのに十分な量で存在する。
【００２４】
「医薬組成物」なる語はまた、いずれかの医薬上不活性な賦形剤と共に２以上（例えば、２つ）の医薬上活性な物質（例えばボセプレビル関連化合物、およびＣＹＰ３Ａ４／５により代謝される治療用化合物）を含む個々の投与単位およびバルク組成物の両方を包含すると意図される。該バルク組成物および個々の各投与単位は一定量の前記の「２以上の医薬上活性な物質」を含有しうる。該バルク組成物は、個々の投与単位へと未だ形成されていない物質である。例示的な投与単位としては、経口投与単位、例えば錠剤、丸剤などが挙げられる。同様に、本発明の医薬組成物を投与することによる、本明細書に記載の、患者の治療方法はまた、前記のバルク組成物および個々の投与単位の投与を含むと意図される。
【００２５】
「プロドラッグ」は、所望の化合物（例えば、ボセプレビルまたは関心のある治療用化合物）を生成するようにインビボで変換される化合物（例えば、薬物前駆体）を意味する。該変換は、種々のメカニズム（例えば、代謝的または化学的過程）、例えば血中の加水分解により生じうる。プロドラッグの使用の考察はＴ．ＨｉｇｕｃｈｉおよびＷ．Ｓｔｅｌｌａ，“Ｐｒｏ−ｄｒｕｇｓ  ａｓ  Ｎｏｖｅｌ  Ｄｅｌｉｖｅｒｙ  Ｓｙｓｔｅｍｓ”，Ｖｏｌ．１４  ｏｆ  ｔｈｅ  Ａ．Ｃ．Ｓ．Ｓｙｍｐｏｓｉｕｍ  Ｓｅｒｉｅｓ、ならびにＢｉｏｒｅｖｅｒｓｉｂｌｅ  Ｃａｒｒｉｅｒｓ  ｉｎ  Ｄｒｕｇ  Ｄｅｓｉｇｎ，Ｅｄｗａｒｄ  Ｂ．Ｒｏｃｈｅ編，Ａｍｅｒｉｃａｎ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ａｓｓｏｃｉａｔｉｏｎ  ａｎｄ  Ｐｅｒｇａｍｏｎ  Ｐｒｅｓｓ，１９８７に記載されている。
【００２６】
例えば、化合物がカルボキシル酸官能基を含有する場合、プロドラッグは、例えば（Ｃ１−Ｃ８）アルキル、（Ｃ２−Ｃ１２）アルカノイルオキシメチル、４〜９個の炭素原子を有する１−（アルカノイルオキシ）エチル、５〜１０個の炭素原子を有する１−メチル−１−（アルカノイルオキシ）−エチル、３〜６個の炭素原子を有するアルコキシカルボニルオキシメチル、４〜７個の炭素原子を有する１−（アルコキシカルボニルオキシ）エチル、５〜８個の炭素原子を有する１−メチル−１−（アルコキシカルボニルオキシ）エチル、３〜９個の炭素原子を有するＮ−（アルコキシカルボニル）アミノメチル、４〜１０個の炭素原子を有する１−（Ｎ−（アルコキシカルボニル）アミノ）エチル、３−フタリジル、４−クロトノラクトニル、ガンマ−ブチロラクトン−４−イル、ジ−Ｎ，Ｎ−（Ｃ１−Ｃ２）アルキルアミノ（Ｃ２−Ｃ３）アルキル（例えば、β−ジメチルアミノエチル）、カルバモイル−（Ｃ１−Ｃ２）アルキル、Ｎ，Ｎ−ジ（Ｃ１−Ｃ２）アルキルカルバモイル−（Ｃ１−Ｃ２）アルキルおよびピペリジノ−、ピロリジノ−またはモルホリノ（Ｃ２−Ｃ３）アルキルなどのような基での該酸基の水素原子の置換により形成されるエステルを含みうる。
【００２７】
同様に、化合物がアルコール官能基を含有する場合、プロドラッグは、例えば（Ｃ１−Ｃ６）アルカノイルオキシメチル、１−（（Ｃ１−Ｃ６）アルカノイルオキシ）エチル、１−メチル−１−（（Ｃ１−Ｃ６）アルカノイルオキシ）エチル、（Ｃ１−Ｃ６）アルコキシカルボニルオキシメチル、Ｎ−（Ｃ１−Ｃ６）アルコキシカルボニルアミノメチル、スクシノイル、（Ｃ１−Ｃ６）アルカノイル、α−アミノ（Ｃ１−Ｃ４）アルカニル、アリールアシルおよびα−アミノアシル、またはα−アミノアシル−α−アミノアシル［ここで、それぞれのα−アミノアシル基は、独立して、天然に存在するＬ−アミノ酸、Ｐ（Ｏ）（ＯＨ）２、−Ｐ（Ｏ）（Ｏ（Ｃ１−Ｃ６）アルキル）２またはグリコシル（カルボヒドラートのヘミアセタール形態のヒドロキシル基の除去から生じる基）など］のような基でのアルコール基の水素原子の置換により形成されうる。
【００２８】
化合物がアミン官能基を含む場合、プロドラッグは、例えばＲ−カルボニル、ＲＯ−カルボニル、ＮＲＲ’−カルボニル（ここで、ＲおよびＲ’は、それぞれ独立して、（Ｃ１−Ｃ１０）アルキル、（Ｃ３−Ｃ７）シクロアルキル、ベンジルであり、またはＲ−カルボニルは天然α−アミノアシルまたは天然α−アミノアシルである）、−Ｃ（ＯＨ）Ｃ（Ｏ）ＯＹ１（ここで、Ｙ１はＨ、（Ｃ１−Ｃ６）アルキルまたはベンジルである）、−Ｃ（ＯＹ２）Ｙ３（ここで、Ｙ２は（Ｃ１−Ｃ４）アルキルであり、Ｙ３は（Ｃ１−Ｃ６）アルキル、カルボキシ（Ｃ１−Ｃ６）アルキル、アミノ（Ｃ１−Ｃ４）アルキルまたはモノ−Ｎ−もしくはジ−Ｎ，Ｎ−（Ｃ１−Ｃ６）アルキルアミノアルキルである）、−Ｃ（Ｙ４）Ｙ５（ここで、Ｙ４はＨまたはメチルであり、Ｙ５はモノ−Ｎ−またはジ−Ｎ，Ｎ−（Ｃ１−Ｃ６）アルキルアミノモルホリノ、ピペリジン−１−イルまたはピロリジン−１−イルである）などのような基での該アミン基における水素原子の置換により形成されうる。
【００２９】
「塩」は、無機酸および／または有機酸により形成された酸塩、ならびに無機塩基および／有機塩基により形成された塩基塩、ならびに形成可能ないずれかの両性イオン（「内部塩」）を示す。医薬上許容される（すなわち、無毒性の生理的に許容される）塩が好ましいが、他の塩も有用である。本発明において使用されるボセプレビル関連化合物または治療用化合物の塩は、例えば、該化合物を媒体（例えば、塩が沈殿するもの）中または水性媒体中で或る量（例えば、同等量）の酸または塩基と反応させ、ついで凍結乾燥させることにより形成されうる。
【００３０】
典型的な酸付加塩には、酢酸塩、アスコルビン酸塩、安息香酸塩、ベンゼンスルホン酸塩、硫酸水素塩、ホウ酸塩、酪酸塩、クエン酸塩、ショウノウ酸塩、ショウノウスルホン酸塩、フマル酸塩、塩酸塩、臭化水素酸塩、ヨウ化水素酸塩、乳酸塩、マレイン酸塩、メタンスルホン酸塩、ナフタレンスルホン酸塩、硝酸塩、シュウ酸塩、リン酸塩、プロピオン酸塩、サリチル酸塩、コハク酸塩、硫酸塩、酒石酸塩、チオシアン酸塩、トルエンスルホン酸塩（トシル酸塩としても公知である）などが含まれる。また、塩基性医薬化合物からの医薬上有用な塩の形成に適していると一般にみなされている酸は、例えば、Ｐ．Ｓｔａｈｌら，Ｃａｍｉｌｌｅ  Ｇ．（編）  Ｈａｎｄｂｏｏｋ  ｏｆ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｓａｌｔｓ．Ｐｒｏｐｅｒｔｉｅｓ，Ｓｅｌｅｃｔｉｏｎ  ａｎｄ  Ｕｓｅ．（２００２）Ｚｕｒｉｃｈ：Ｗｉｌｅｙ−ＶＣＨ；Ｓ．Ｂｅｒｇｅら，Ｊｏｕｒｎａｌ  ｏｆ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｓｃｉｅｎｃｅｓ（１９７７）６６（１）１−１９；Ｐ．Ｇｏｕｌｄ，Ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ  Ｊ．ｏｆ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃｓ（１９８６）３３  ２０１−２１７；Ａｎｄｅｒｓｏｎら，Ｔｈｅ  Ｐｒａｃｔｉｃｅ  ｏｆ  Ｍｅｄｉｃｉｎａｌ  Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ（１９９６），Ａｃａｄｅｍｉｃ  Ｐｒｅｓｓ，Ｎｅｗ  Ｙｏｒｋ、およびＴｈｅ  Ｏｒａｎｇｅ  Ｂｏｏｋ（Ｆｏｏｄ  ＆  Ｄｒｕｇ  Ａｄｍｉｎｉｓｔｒａｔｉｏｎ，Ｗａｓｈｉｎｇｔｏｎ，Ｄ．Ｃ．のウェブサイト上）に記載されている。これらの開示を参照により本明細書に組み入れることとする。
【００３１】
典型的な塩基性塩には、アンモニウム塩、アルカリ金属塩、例えばナトリウム、リチウムおよびカリウム塩、アルカリ土類金属塩、例えばカルシウムおよびマグネシウム塩、有機塩基（例えば、有機アミン）、例えばジシクロヘキシルアミン、ｔ−ブチルアミンとの塩、ならびにアミノ酸、例えばアルギニン、リシンとの塩などが含まれる。塩基性窒素含有基は、ハロゲン化低級アルキル物質（例えば、塩化、臭化およびヨウ化メチル、エチルおよびブチル）、硫酸ジアルキル（例えば、硫酸ジメチル、ジエチルおよびジブチル）、長鎖ハロゲン化物（例えば、塩化、臭化およびヨウ化デシル、ラウリルおよびステアリル）、ハロゲン化アルアルキル（例えば、臭化ベンジルおよびフェネチル）などにより第四級化されうる。
【００３２】
全てのそのような酸塩および塩基塩は本発明の範囲内の医薬上許容される塩であると意図され、全ての酸および塩基塩は、本発明の目的においては、対応化合物の遊離形態と同等であるとみなされる。
【００３３】
「溶媒和（物）」は、本発明の組成物および方法において使用される化合物（すなわち、ボセプレビル関連化合物または治療用化合物）の、１以上の溶媒分子での物理的会合（物）を意味する。この物理的会合は種々の度合のイオン結合および共有結合（水素結合を含む）を含む。ある場合には、例えば１以上の溶媒分子が結晶固体の結晶格子内に含まれる場合には、溶媒和は単離を可能にするであろう。「溶媒和物」は、溶液相溶媒和物および分離可能な溶媒物の両方を含む。適当な溶媒和物の非限定的な例には、エタノラート、メタノラートなどが含まれる。「水和物」は、溶媒分子がＨ２Ｏである溶媒和物である。溶媒和物の製造は一般に公知である。したがって、例えば、Ｍ．Ｃａｉｒａら，Ｊ．Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｓｃｉ．，９３（３），６０１−６１１（２００４）は酢酸エチルにおける及び水からの抗真菌剤フルコナゾールの溶媒和物の製造を記載している。溶媒和物、半溶媒和物、水和物などの同様の製造がＥ．Ｃ．ｖａｎ  Ｔｏｎｄｅｒら，ＡＡＰＳ  ＰｈａｒｍＳｃｉＴｅｃｈ．，５（１），ａｒｔｉｃｌｅ  １２（２００４）およびＡ．Ｌ．Ｂｉｎｇｈａｍら，Ｃｈｅｍ．Ｃｏｍｍｕｎ．，６０３−６０４（２００１）に記載されている。典型的な非限定的な方法は、本発明化合物を室温より高い温度で所望量の所望溶媒（有機物または水またはそれらの混合物）に溶解させ、後に標準的な方法により単離される結晶を形成させるのに十分な速度で該溶液を冷却することを含む。分析技術、例えばＩＲ分光法は、溶媒和物（または水和物）としての結晶における溶媒（または水）の存在を示す
慢性ＨＣＶ感染の治療の場合の「ウイルス応答」は抗ウイルス療法の開始後の血清ＨＣＶ  ＲＮＡのレベルの減少を意味する。
【００３４】
慢性ＨＣＶ感染に対する現在の治療方式はインターフェロンアルファの使用を含み、これは、典型的に、リバビリンの毎日の投与と共に投与される。インターフェロンアルファとリバビリンとを含む併用療法は、しばしば、当技術分野においては間接的抗ウイルス併用療法と称され、臨床家は、典型的に、以下のウイルス応答表現型の１以上を決定することにより、そのような療法の有効性を評価する：急速ウイルス応答（ＲＶＲ）、早期ウイルス応答（ＥＶＲ）、治療応答の終了（ＥＴＲ）、持続的ウイルス応答（ＳＶＲ）、遅応答、ヌル応答、無応答（ＮＲ）および再発。
【００３５】
間接抗ウイルス併用療法［例えば、ＰＥＧ化（ｐｅｇｙｌａｔｅｄ）インターフェロン−アルファおよびリバビリンを含むもの］の場合の「急速ウイルス応答」または「ＲＶＲ」は、４週間の治療の終了時に血清ＨＣＶ  ＲＮＡが検出不可能であることを意味する。
【００３６】
「早期ウイルス応答」または「ＥＶＲ」は、１２週間の抗ウイルス療法の終了時に血清ＨＣＶ  ＲＮＡにおける＞２  ｌｏｇの減少を意味し、「完全ＥＶＲ」は、１２週間の抗ウイルス療法の終了時に血清ＨＣＶ  ＲＮＡが検出不可能であることを意味する。
【００３７】
「治療応答の終了」または「ＥＴＲ」は、抗ウイルス療法の終了時、好ましくは、本明細書に記載の治療方式のいずれかの終了時または規制機関により承認されている処方情報において推奨されているいずれかの治療方式の終了時に、血清ＨＣＶ  ＲＮＡが検出不可能であることを意味する。ＥＴＲ時点の非限定的な例としては、１２、１６、２４、３６および４８週間が挙げられる。
【００３８】
「持続的ウイルス応答」または「ＳＶＲ」は、抗ウイルス療法の終了時、および抗ウイルス療法の終了の最大２４週間後、血清ＨＣＶ  ＲＮＡが検出不可能であることを意味する。幾つかの実施形態においては、ＳＶＲは抗ウイルス療法の終了後の１２週間の時点で測定される。ＳＶＲは、Ｄｒ．Ｓｔｅｖｅｎ  Ｌ．Ｆｌａｍｒｎ，Ｊｏｕｒｎａｌ  ｏｆ  ｔｈｅ  Ａｍｅｒｉｃａｎ  Ｍｅｄｉｃａｌ  Ａｓｓｏｃｉａｔｉｏｎ，Ｖｏｌ．２８９，Ｎｏ．１８，ｐｐ．２４１３−２４１７（２００３）にも記載されている。
【００３９】
ＰＥＧ化（ｐｅｇｙｌａｔｅｄ）インターフェロン−アルファ／リバビリン併用療法の場合の「遅応答」は、１２週間の抗ウイルス療法の終了時に血清ＨＣＶ  ＲＮＡが＞２  ｌｏｇの減少を示すが尚も検出可能であり、かつ、２４週間の抗ウイルス療法の終了時に血清ＨＣＶ  ＲＮＡが検出不可能であることを意味する。
【００４０】
「ヌル応答」は、それぞれ４週間および１２週間の抗ウイルス療法の終了時における血清ＨＣＶ  ＲＮＡの＜１  ｌｏｇの減少および／または血清ＨＣＶ  ＲＮＡの＜２  ｌｏｇの減少を意味する。
【００４１】
「無応答」または「ＮＲ」は、少なくとも１２週間の抗ウイルス療法の全体にわたってＨＣＶ  ＲＮＡの存在が検出可能であることを意味する。典型的に、４週間の抗ウイルス療法の終了時および１２週間の抗ウイルス療法の終了時に血清ＨＣＶ  ＲＮＡが検出可能である場合、無応答表現型が割り当てられる。
【００４２】
「再発」は、治療応答の終了（ＥＴＲ）後の任意の時点（限定的なものではないが、ＥＴＲ後の１２週間または２４週間の時点を含む）における、検出可能なＨＣＶ  ＲＮＡの存在を意味する。
【００４３】
「持続的ウイルス応答」または「ＳＶＲ」は、１以上の抗ウイルス剤での治療（限定的なものではないが、直接作用性抗ウイルス剤ならびにＰＥＧ化インターフェロンアルファおよびリバビリンでの併用療法を含む）の終了後の２４週間の時点における、検出可能なＨＣＶ  ＲＮＡの非存在を意味する。ＳＶＲは、Ｄｒ．Ｓｔｅｖｅｎ  Ｌ．Ｆｌａｍｍ，Ｊｏｕｒｎａｌ  ｏｆ  ｔｈｅ  Ａｍｅｒｉｃａｎ  Ｍｅｄｉｃａｌ  Ａｓｓｏｃｉａｔｉｏｎ，Ｖｏｌ．２８９，Ｎｏ．１８，ｐｐ．２４１３−２４１７に詳細に記載されている。検出可能なＨＣＶ  ＲＮＡの非存在は、好ましくは、２９国際単位／ｍＬ（ＩＵ／ｍＬ）の、より低い検出限界を有する定量的ＲＴ−ＰＣＲアッセイを用いて決定される。
【００４４】
「治療する」または「治療」は、本明細書に記載のＣＹＰ３Ａ４／５により代謝される治療用化合物のいずれかを含有する組成物のような治療用物質または化合物を、該治療用化合物を要する個体に内的または外的に投与することを意味する。該化合物を要する個体には、該化合物での治療に感受性である状態もしくは障害を有する又は該状態もしくは障害を発現するリスクを有すると診断された個体、および第２治療用化合物での軽減に感受性である第１治療用化合物での治療の副作用の１以上を有する又は該副作用を発現するリスクを有する個体が含まれる。典型的には、該治療用化合物は、１以上の有益な結果をもたらすのに有効な量を意味する治療的有効量で投与される。個々の化合物の治療的有効量は、治療される患者の病態、年齢および体重ならびに該治療用化合物に対する該患者の感受性、例えば応答能のような要因によって変動しうる。有益または臨床的な結果が達成されたかどうかは、標的疾患、症状または副作用の存在、重症度または進行状態を評価するために医師または他の熟練した医療提供者により典型的に用いられるいずれかの臨床測定により評価されうる。典型的には、化合物の治療的有効量は、ベースライン状態または治療されなかった場合の予想状態と比較して、関連臨床測定値における、少なくとも５％、通常は少なくとも１０％、より通常は少なくとも２０％、最も通常は少なくとも３０％、好ましくは少なくとも４０％、より好ましくは少なくとも５０％、最も好ましくは少なくとも６０％、理想的には好ましくは７０％、より理想的には少なくとも８０％、最も理想的には少なくとも９０％の改善をもたらす。本発明の実施形態（例えば、治療方法または製造品）は所望の臨床利益または結果を必ずしも全ての患者において達成しないこともありうるが、当技術分野で公知のいずれかの統計検定（スチューデントｔ検定、カイ２検定、ＭａｎｎおよびＷｈｉｔｎｅｙによるＵ検定、Ｋｒｕｓｋａｌ−Ｗａｌｌｉｓ検定（Ｈ−検定）、Ｊｏｎｃｋｈｅｅｒｅ−Ｔｅｒｐｓｔｒａ検定およびＷｉｌｃｏｘｏｎ検定）により決定される統計的に有意な数の患者において該実施形態はそれを達成する。
【００４５】
ＩＩ．ＣＹＰ３Ａ４／５により代謝される化合物の薬物動態を改善するための方法、組成物、医薬およびキット
本発明は、ボセプレビル関連化合物との共投与による、ＣＹＰ３Ａ４／５により代謝される治療用化合物（後記で更に詳しく説明される）の薬物動態（後記で更に詳しく説明される）の改善に関する。ＣＹＰ３Ａ４／５による急速な代謝により効力が損なわれる薬物の場合、本発明の組成物および方法により達成される改善された薬物動態は治療効果の増強をもたらす。ＣＹＰ３Ａ４／５代謝により毒性代謝産物に変換される薬物の場合、改善された薬物動態はそのような代謝産物の形成の速度および／またはレベルを低下させる。多種多様な治療薬クラスにおける非常に多数の薬物がＣＹＰ３Ａ４／５により代謝されるため、本明細書に記載の種々の実施形態は、例えば種々の生物（例えば、ＨＩＶ、ＨＣＶ、細菌、真菌および他の寄生生物）による感染症、心血管疾患および状態（例えば、高ＨＤＬコレステロール、心不整脈）、中枢神経病態（例えば、うつ状態、精神病および慢性疼痛）、癌および女性の健康上の懸念（例えば、産児制限および閉経）を含む種々の疾患および状態の治療に有用である。
【００４６】
本明細書中で用いる「薬物動態の改善（薬物動態を改善する）」なる語は、有効量のボセプレビル関連化合物の共投与の際の治療用化合物の薬物動態的パラメータの少なくとも１つが、該ボセプレビル関連化合物を伴うことなく該治療用化合物が同一投与方式で投与された場合の該パラメータの値と比較して改善することを意味する。薬物動態（ｐＫ）パラメータの改善の非限定的な例としては、半減期（ｔ１／２）の増加、最高濃度（Ｃｍａｘ）の増加、平均滞留時間（ＭＲＴ）の増加、用量間のＡＵＣの増加、クリアランス（ＣＬ）速度の減少および全血、血漿または血清中の潜在的毒性代謝産物のレベルの減少が挙げられる。哺乳動物においては、これらのパラメータは、通常、通常の分析技術を用いて、適用可能な場合には或る時間にわたって採取された複数の全血、血漿または血清サンプルにおいて、該治療用化合物またはその毒性代謝産物の濃度を測定することにより決定される。該血液は該化合物に関する治療活性の最適部位ではないかもしれないが、治療活性の部位における濃度は、通常、該治療用化合物の、与えられた用量に関する、特定の時点における血中濃度に比例する。本発明により達成される薬物動態の改善は、通常、ボセプレビル関連化合物を伴うことなく投与された治療用化合物の血漿レベルと比較して、与えられた時点における該治療用化合物の血漿レベルの上昇、またはより長い時間にわたる該化合物の治療的に有効な血漿レベルの維持をもたらす。
【００４７】
本明細書に記載の本発明の種々の実施形態は、ＣＹＰ３Ａ４／ＣＹＰ３Ａ５により代謝されるいずれかの治療用化合物の薬物動態パラメータの１以上を改善するために用いられうる。化合物がＣＹＰ３Ａ４／５により代謝されるかどうかの評価は、当技術分野で公知のインビトロまたはインビボ法を用いて行われうる。インビトロ法は、典型的には、反応表現型決定（Ｒｅａｃｔｉｏｎ  Ｐｈｅｎｏｔｙｐｉｎｇ）を用い、これは、ｃＤＮＡ発現Ｐ４５０酵素でＣＹＰ選択的インヒビター（例えば、ＣＹＰ３Ａ４／５に対するケトコナゾールでの阻害）をスクリーニングすること、および少なくとも１０個のドナーからのミクロソームを使用する相関研究を含む。インビボ法は、典型的には、モデルＣＹＰ３Ａ４／５インヒビター、例えばケトコナゾールまたはミダゾラムを使用する薬物相互作用研究を用いる。
【００４８】
多種多様な治療用化合物がＣＹＰ３Ａ４／５により代謝されることが公知であり、これらには以下の薬物クラスの化合物が含まれる：Ｃ型肝炎ウイルス（ＨＣＶ）プロテアーゼインヒビター、ＨＣＶポリメラーゼインヒビター、ＨＣＶ−ＩＲＥＳインヒビター、ヒト免疫不全ウイルス（ＨＩＶ）プロテアーゼインヒビター、ＨＩＶインテグラーゼインヒビター、ＨＩＶ  ＣＣＲ５インヒビター、免疫モジュレーター、抗ヒスタミン薬、ＨＭＧ  ＣｏＡレダクターゼインヒビター、チャネルブロッカー、抗生物質、ステロイド、抗癌薬および抗精神病薬。本発明の種々の実施形態において有用な治療用化合物の非限定的な一覧を以下の表Ａおよび表Ｂ１〜Ｂ５に示す。
【００４９】
【表１】
2013535469.tif 000004
【００５０】
【表２】
2013535469.tif 000005
【００５１】
【表３】
2013535469.tif 000006
【００５２】
【表４】
2013535469.tif 000007
【００５３】
【表５】
2013535469.tif 000008
【００５４】
【表６】
2013535469.tif 000009
【００５５】
【表７】
2013535469.tif 000010
【００５６】
【表８】
2013535469.tif 000011
また、本発明の組成物および方法によりｐＫ特性が改善されうる治療用化合物は、表ＡおよびＢの化合物（そのような化合物のいずれかの任意の医薬上許容される塩、溶媒和物または水和物を含む）の全ての単離および精製形態（例えば、互変異性体および立体異性体）ならびにプロドラッグを含むと想定される。
【００５７】
本明細書に記載の方法のいずれかにより治療される患者は、該治療用化合物での治療を要するヒト患者である。幾つかの実施形態においては、該個体は、該治療用化合物での治療に感受性である疾患を有すると診断されており、または該疾患の症状を示す。他の実施形態においては、使用される治療用化合物は、該個体が診断された適応症の治療における使用に関して承認されている。更に他の実施形態においては、使用される治療用化合物は、診断された疾患または示されている症状の治療に関して承認されていないが、処方医は、該治療用化合物が該個体の治療に役立ちうると考えている。
【００５８】
幾つかの実施形態においては、該治療用化合物は抗ウイルス化合物であり、好ましくは、表Ａに挙げられている化合物のいずれかである。他の実施形態においては、該患者はＨＣＶに感染しており、ＣＹＰ３Ａ４／５により代謝される治療用化合物は直接作用性抗ウイルス（ＤＡＡ）化合物、例えばプロテアーゼインヒビター、ＨＣＶポリメラーゼインヒビター、ＨＣＶ  ＮＳ３ヘリカーゼインヒビター、ＨＣＶ  ＮＳ５Ａインヒビター、ＨＣＶ  ＩＲＥＳインヒビター、ＮＳ４Ｂインヒビター、ＨＣＶ侵入インヒビターまたはＨＣＶビリオン産生インヒビターである。他の好ましい実施形態においては、該患者はＨＩＶに感染しており、該治療用化合物はＨＩＶプロテアーゼインヒビター、ＮＮＲＴＩ、ＣＣＲ５インヒビターまたはＨＩＶインテグラーゼインヒビターである。幾つかの実施形態においては、該治療用化合物はＨＩＶおよび／またはＨＣＶ阻害化合物ではない。
【００５９】
幾つかの実施形態においては、治療される患者は慢性ＨＣＶに感染しており、該治療用化合物は、以下のものからなる群から選択される但し書きのもとで、ＣＹＰ３Ａ４／５により代謝されるＤＡＡである：該抗ウイルス化合物はＨＣＶプロテアーゼインヒビターではない；該抗ウイルス化合物はＨＣＶプロテアーゼインヒビターではない；該抗ウイルス化合物はＨＣＶポリメラーゼインヒビターではない；該抗ウイルス化合物はＨＣＶ  ＮＳ３ヘリカーゼインヒビターではない；該抗ウイルス化合物はＨＣＶ侵入インヒビターではない；該抗ウイルス化合物はＮＳ４Ｂインヒビターではない；該抗ウイルス化合物はＨＣＶ侵入インヒビターではない；および該抗ウイルス化合物はＨＣＶビリオン産生インヒビターではない。
【００６０】
他の実施形態においては、治療される患者はＨＩＶに感染しており、該治療用化合物は、以下のものからなる群から選択される但し書きのもとで、ＣＹＰ３Ａ４／５により代謝される抗レトロウイルス（ＡＲＶ）化合物である：該ＡＲＶ化合物はＨＩＶプロテアーゼインヒビターではない；該ＡＲＶ化合物はＮＮＲＴＩではない；該ＡＲＶ抗ウイルス化合物はＣＣＲ５インヒビターではない；および該ＡＲＶ抗ウイルス化合物はＨＩＶインテグラーゼインヒビターではない。
【００６１】
本発明の場合、治療用化合物は、該化合物のＫｉ（直接阻害またはプレインキュベーションのいずれかにより測定された場合）が約１マイクロモル濃度（μＭ）を超える場合には、挙げられているＨＣＶまたはＨＩＶ標的のインヒビターではないとみなされる。
【００６２】
幾つかの好ましい実施形態においては、治療される患者はＨＩＶおよびＨＣＶに同時感染しており、少なくとも２つの治療用化合物（それらのうちの一方はＨＩＶ感染の治療のためのＡＲＶであり、それらのうちのもう一方はＨＣＶ感染の治療のためのＤＡＡであり、それらのうちの一方または両方はＣＹＰ３Ａ４／５により代謝される）と共に該ボセプレビル関連化合物が使用される。該同時感染患者は、ＨＩＶおよびＨＣＶの一方または両方に対する活性を有しＣＹＰ３Ａ４／５基質である又はではない１以上の追加的治療用物質で治療されうる。
【００６３】
本発明の方法は、治療される疾患または状態に対する治療用化合物の治療的有効量と、ｐＫ増強に有効な量の該ボセプレビル関連化合物との共投与により行われる。該ボセプレビル関連化合物のｐＫ増強に有効な量は、関心のある治療用化合物の薬物動態パラメータの１以上を改善するのに有効な量である。好ましくは、ボセプレビルの有効量は、２以上の対象の試験群において少なくとも５０％、１００％、１５０％、２００％、２５０％、３００％、３５０％、４００％、４５０％、５００％もしくはそれ以上または５０％〜５００％の任意の割合の平均値だけ該治療用化合物の所望のｐＫパラメータを改善するのに十分であると示されている量である。好ましくは、対象の該試験群は少なくとも１０、１５、２０、２５または３０の個体を有し、より好ましくは、該対象のそれぞれは、該治療用化合物で治療されるべき疾患または状態を有する。
【００６４】
関心のある任意の治療用化合物に関して、該ボセプレビル関連化合物の有効量は、まず、細胞培養アッセイまたは関連動物モデル（例えば、サル）において評価されうる。該動物モデルは、ヒトにおける更なる評価のために、該ボセプレビル関連化合物および治療用化合物のそれぞれに関する投与計画を作るためにも使用されうる。
【００６５】
本明細書に記載の種々の実施形態において使用されるボセプレビル関連化合物および治療用化合物の投与量は、典型的に、年齢、体重、全身健康状態、性別、食事、投与間隔、投与経路、排泄速度、薬物の組合せ、および治療される疾患の状態に左右される。一般に、約１０マイクログラム（ｍｃｇ）／日〜約５０００ミリグラム（ｍｇ）／日、好ましくは、約２５ｍｇ／日〜約２４００ｍｇ／日、または約２５ｍｇ／日〜約１０００ｍｇ／日の、該ボセプレビル関連化合物の投与量レベルが、該治療用化合物のＣＹＰ３Ａ４／５代謝を阻害するのに有用である。
【００６６】
幾つかの実施形態においては、該治療用化合物の薬物動態を改善するために使用されるボセプレビル関連化合物の量は亜治療的（例えば、患者において慢性ＨＣＶ感染を治療するために通常使用されるボセプレビルの量より低い投与量）であるが、該共投与治療用化合物の薬物動態学的改善の所望のレベルを達成するのに十分に高い量である。ボセプレビル関連化合物がＨＣＶ抗ウイルス投薬と共にＣＹＰ３Ａ４／５インヒビターとして投与される場合、該投薬における全ての他のＨＣＶ抗ウイルス物質は、該投薬における各物質に対する曝露が治療的だとみなされるように投与されるべきである。ＨＣＶに感染していない又はＨＣＶに感染しているとは考えにくい患者には、ボセプレビル関連化合物の亜治療的用量が最も適切であろう。したがって、該患者は、好ましくは、該ボセプレビル関連化合物の潜在的に亜治療的な量の投与の前にＨＣＶ感染に関して試験されるであろう。
【００６７】
患者がＨＣＶに感染している又はＨＩＶおよびＨＣＶに同時感染している他の実施形態においては、該治療用化合物およびボセプレビル関連化合物のそれぞれは、例えば以下のウイルス応答表現型のいずれかを達成するために、ＨＣＶに対して治療的に有効である用量で投与されうる：急速ウイルス応答（ＲＶＲ）、早期ウイルス応答（ＥＶＲ）、治療応答の終了（ＥＴＲ）、持続的ウイルス応答（ＳＶＲ）。そのような実施形態においては、該ボセプレビル関連化合物はＨＣＶ複製の阻害および該治療用化合物の薬物動態の改善という二重の役割を果たす。該ボセプレビル関連化合物は、好ましくは、式１ａの化合物であり、２００〜１０００ミリグラム（ｍｇ）の用量で１日３回（ＴＩＤ）、好ましくは３００〜９００ｍｇ  ＴＩＤ、より好ましくは４００〜８００ｍｇ  ＴＩＤ、より好ましくは５００〜７００ｍｇ  ＴＩＤで投与される。該治療用化合物は、ボセプレビルのようなＨＣＶプロテアーゼインヒビターでありうるが、好ましくは、異なるＨＣＶ薬物クラス、例えばＨＣＶポリメラーゼインヒビター、ＨＣＶインテグラーゼインヒビター、ＨＣＶ  ＮＳ３ヘリカーゼインヒビター、ＨＣＶ侵入インヒビター、ＨＣＶ  ＮＳ４ＢインヒビターおよびＨＣＶビリオン産生インヒビターからのものである。本発明はまた、治療的有効量の該ボセプレビル関連化合物が、ＣＹＰ３Ａ４／５により代謝される２以上の抗ＨＣＶ治療用化合物と共に共投与され、該抗ＨＣＶ治療用化合物の薬物動態を改善することを想定している。
【００６８】
本明細書に記載の方法の幾つかの実施形態においては、該ボセプレビル関連化合物は、該治療用化合物の投与の前、例えば、該治療用化合物の初回投与の３０分、１時間、２時間、４時間、８時間、１２時間または２４時間前に投与される。治療が開始されたら、該ボセプレビル関連化合物は該治療用化合物より低い頻度で投与されうるが、特別な状況（例えば、ＣＹＰ３Ａ４／５発現を誘導する別の薬物で患者が治療されている場合）においては、異なる投与計画が必要とされうる、と当業者は認識するであろう。あるいは、該ボセプレビル関連化合物および該治療用化合物は単一製剤として投与されることが可能であり、この場合、それらの２つの化合物は該製剤から同時または別々に放出される。
【００６９】
本発明の方法の幾つかの好ましい実施形態においては、患者からの血液、血漿および／または血清のサンプルにおける治療用化合物のレベルは、所望の薬物動態学的改善が達成されているかどうかを評価するために、該ボセプレビル関連化合物とのその共投与後の２以上の時点で測定される。この評価は、好ましくは、該治療用化合物の測定量を、該治療用化合物に関する薬理学的に推奨されている治療的有効範囲または目標レベルもしくは範囲と比較することにより行われる。測定の回数および頻度は、該ボセプレビル関連化合物の非存在下で対象において観察される該治療用化合物の典型的な薬物動態学的プロファイルを含む種々のパラメータによって変動するであろう。例えば、血液サンプルは、初回投与後に２、４、８、１２もしくは２４時間ごとに、または初回投与後の第２、３、４、５、６もしくは７日に、または初回投与後に１、２、３もしくは４週間ごとに、薬物レベルの測定のために採取されうる。幾つかの実施形態においては、初回投与後の初回測定は、該治療用化合物の通常の「未増加（ｕｎｂｏｏｓｔｅｄ）」半減期に基づいて該治療用化合物の定常レベルが予想された後の時点で行われる。該血液、血漿および／または血清における該ボセプレビル関連化合物のレベルも同様にしてモニターされうる。そのような薬物モニターの結果を用いて、該ボセプレビル関連化合物および該治療用化合物の一方または両方の投与量または頻度を調節して、所望の薬物動態学的改善をもたらす該患者に関する最適な投与計画を確立することが可能である。幾つかの実施形態においては、適当な投与計画が確立された後、医師は、該化合物が治療範囲内にあることを保証するために、患者の状態の変化に対応する（例えば、該ボセプレビル関連化合物または該治療用化合物の代謝に影響を及ぼしうる１以上の他の薬物を追加または除去する）ために必要に応じて、決められた間隔で該治療用化合物のレベルをモニターすることが可能である。
【００７０】
本発明はまた、本明細書に記載の治療方法のいずれかにおいて使用するボセプレビル関連化合物を含む医薬組成物を提供する。本発明の医薬組成物は、関心のある治療用化合物に関する少なくとも１つの薬物動態学的パラメータを改善するのに有効な量の該ボセプレビル関連化合物を含む。典型的には、該ボセプレビル関連化合物は、経口医薬組成物として製剤化され、１日１〜約３回、患者に投与される。あるいは、該ボセプレビル関連化合物は、連続的注入剤として、または徐放製剤、例えば経皮またはイオン導入パッチ、浸透装置、または膨張性もしくは浸蝕性重合体組成物を一般に使用する徐放錠剤もしくは坐剤（これらに限定されるものではない）として投与されうる。そのような投与は慢性または急性療法として用いられうる。単一剤形を製造するために担体物質と組合されうる該ボセプレビル関連化合物の量は、治療される被投与体および個々の投与方法によって変動する。典型的な製剤は約５％〜約９５％（ｗ／ｗ）の該ボセプレビル関連化合物を含有する。幾つかの実施形態においては、そのような製剤は約２０％〜約８０％の該ボセプレビル関連化合物を含有する。本発明はまた、ｐＫ増強に有効な量の該ボセプレビル関連化合物が該治療用化合物の治療的有効量と共に製剤化される、一定の投与の組合せを想定している。そのような一定の投与用組成物においては、該ボセプレビル関連化合物および治療用化合物は共に有効成分であるとみなされる。
【００７１】
経口的使用が意図される、該治療用化合物の存在下または非存在下で製剤化された該ボセプレビル関連化合物を含む本発明の医薬組成物は、医薬組成物の製造のための当技術分野で公知のいずれかの方法により製造されることが可能であり、そのような組成物は、医薬上優美かつ美味な製剤を得るために、甘味剤、香味剤、着色剤および保存剤からなる群から選択される１以上の物質を含有しうる。錠剤は、錠剤の製造に適した無毒性の医薬上許容される賦形剤と混合された有効成分を含有する。これらの賦形剤は、例えば不活性な希釈剤、例えば炭酸カルシウム、炭酸ナトリウム、ラクトース、リン酸カルシウムまたはリン酸ナトリウム；顆粒化および崩壊剤、例えばコーンスターチまたはアルギン酸；結合剤、例えばデンプン、ゼラチンまたはアカシア；ならびに滑沢剤、例えばステアリン酸マグネシウム、ステアリン酸またはタルクでありうる。該錠剤はコーティングされていないことが可能であり、あるいはそれは、胃腸管における崩壊および吸収を遅延させて長期にわたる持続的作用をもたらすための公知技術によりコーティングされうる。
【００７２】
錠剤は、所望により１以上の補助成分またはアジュバントと共に、圧縮またはすりこみにより製造されうる。圧縮錠剤は、所望により結合剤、滑沢剤、不活性希釈剤、界面活性剤または分散剤と混合された、例えば粉末または顆粒のような自由流動形態の有効成分を適当な装置内で圧縮することにより製造されうる。すりこみ錠剤は、不活性液体希釈剤で湿らされた粉末化合物の混合物を適当な装置内ですりこみに付すことにより製造されうる。各錠剤は、好ましくは、約０．１ｍｇ〜約５００ｍｇの各有効成分を含有し、各カシェ剤またはカプセル剤は、好ましくは、約０．１ｍｇ〜約５００ｍｇの各有効成分を含有する。
【００７３】
経口用組成物は、硬ゼラチンカプセル剤（この場合、各有効成分は不活性固体希釈剤、例えば炭酸カルシウム、リン酸カルシウムまたはカオリンと混合される）または軟ゼラチンカプセル剤（この場合、有効成分は水または油媒体、例えばラッカセイ油、液体パラフィンまたはオリーブ油と混合される）としても提供されうる。
【００７４】
他の医薬組成物には水性懸濁剤が含まれ、これは、水性懸濁剤の製造に適した賦形剤と混合された有効成分を含有する。また、油性懸濁剤は、有効成分を、植物油、例えばラッカセイ油、オリーブ油、ゴマ油またはヤシ油、あるいは鉱油、例えば流動パラフィンに懸濁させることにより製剤化されうる。油性懸濁剤は種々の賦形剤をも含有しうる。本発明の医薬組成物はまた、甘味剤および香味剤のような賦形剤をも含有しうる水中油型エマルションの形態でありうる。
【００７５】
該医薬組成物は無菌の注射可能な水性または油性懸濁剤の形態、あるいはそのような無菌の注射可能溶液または分散液の用時調製のための無菌粉末の形態でありうる。全ての場合において、最終的な注射可能形態は無菌でなければならず、容易に注入可能となるように有効に流動性でなければならない。該医薬組成物は製造および貯蔵の条件下で安定でなければならず、したがって、好ましくは、細菌および真菌のような微生物の汚染作用に対して保護されるべきである。
【００７６】
本発明の医薬組成物は、局所的使用に適した形態、例えばエアゾール剤、クリーム剤、軟膏剤、ローション剤、散布剤などでありうる。更に、該組成物は、経皮装置における使用に適した形態でありうる。これらの製剤は通常の加工方法により製造されうる。一例としては、クリーム剤または軟膏剤は、親水性物質および水を約５重量％〜約１０重量％の有効成分と混合して、所望の粘稠度を有するクリーム剤または軟膏剤を得ることにより製造される。
【００７７】
本発明の医薬組成物はまた、担体が固体である、直腸投与に適した形態でありうる。該混合物は単位投与坐剤を形成することが好ましい。適当な担体には、カカオバター、および当技術分野で一般に使用される他の物質が含まれる。
【００７８】
本発明はまた、ＣＹＰ３Ａ４／５により代謝される治療用化合物での療法に適した疾患または状態を治療するための医薬キットを提供する。本発明のキットは、該治療用化合物を含む第１医薬組成物の投与単位の少なくとも１つと、ボセプレビル関連化合物を含む第２医薬組成物の投与単位の少なくとも１つとを含む。該第１および第２組成物の投与単位は容器（例えば、ブリスター包装）内に一緒に包装（パッケージング）される。幾つかの実施形態においては、該キットはまた、該疾患または状態を有する患者を治療するために該キット内の医薬組成物を投与するための説明を含む。該説明は例えば以下のものの１以上を含む：該治療用化合物に関する１以上の薬物動態学的パラメータの目標値または範囲、該目標値／範囲を達成することを意図された投与計画および個々の患者における該治療用化合物の薬物レベルをモニターするための及び必要に応じて該投与計画を調節するための方法。他の実施形態においては、該キットは、該疾患を治療するのに有用である１以上の追加的な医薬組成物を更に含む。幾つかの好ましい実施形態においては、該キットは、１週間、２週間、４週間、１カ月、２か月、３カ月、４カ月、５カ月および６カ月からなる群から選択される処方された治療期間の長さに十分である各医薬組成物の幾つかの投与単位を含む。
【００７９】
また、本発明の方法、化合物、組成物、医薬およびキットは併用療法において使用されうる、すなわち、該化合物、組成物および医薬は１以上の他の所望の治療用物質または医学的処置と同時、その前または後に投与されうる、と理解されるであろう。併用療法において用いる療法（治療用物質または処置）の個々の組合せにおいては、所望の治療用物質および／または処置の適合性ならびに達成される所望の治療効果が考慮されるであろう。また、用いられる療法は、同じ障害に対して所望の効果を達成しうる（例えば、本発明化合物は、同じ障害を治療するために使用される別の物質と同時に投与されうる）、あるいはそれらは、異なる効果（例えば、いずれかの副作用の抑制）を達成しうる、と理解されるであろう。
【００８０】
例えば、治療される患者が慢性ＨＣＶ感染を有する場合、本発明の組成物および医薬は、慢性ＨＣＶ適応症に関して規制機関により承認された併用療法治療計画に加えられることが可能であり、特に好ましい実施形態においては、以下の製品のいずれかに関する添付文書に記載されている慢性Ｃ型肝炎に対する投与および併用療法計画のいずれかと共に加えられうる：Ｒｏｆｅｒｏｎ（登録商標）−Ａ（インターフェロン−アルファ２Ａ，組換え体）、ＰＥＧＡＳＹＳ（登録商標）（ペグインターフェロン（ｐｅｇｉｎｔｅｒｆｅｒｏｎ）アルファ−２ａ）、ＩＮＴＲＯＮ（登録商標）Ａ（インターフェロンアルファ−２ｂ，組換え体）、ＰｅｇＩｎｔｒｏｎ（登録商標）（ペグインターフェロンアルファ−２ｂ）。
【００８１】
本発明の種々の実施形態で患者の治療に使用するための特に好ましいＩＦＮ−α組成物は、以下のもののいずれかを含む政府規制機関により承認されているインターフェロンアルファ−２製品である：Ｒｏｆｅｒｏｎ（登録商標）−Ａ（インターフェロン−アルファ２Ａ，組換え体）およびそのＰＥＧ化（ｐｅｇｙｌａｔｅｄ）形態、例えばＰＥＧＡＳＹＳ（登録商標）（ペグインターフェロンアルファ−２ａ）、ＩＮＴＲＯＮ（登録商標）Ａ（インターフェロンアルファ−２ｂ，組換え体）およびそのＰＥＧ化形態、例えばＰｅｇＩｎｔｒｏｎ（登録商標）（ペグインターフェロンアルファ−２ｂ）、ＩＮＦＥＲＧＥＮ（登録商標）（インターフェロンアルファコン−１，コンセンサスＩＦＮ−α）。
【００８２】
本発明での使用が想定される他のインターフェロンには、インターフェロンアルファと非インターフェロンタンパク質との融合体、例えばＡｌｂｕｆｅｒｏｎ（登録商標）（アルブインターフェロンアルファ−２ｂ）；研究用コントロールリリースインターフェロンアルファ製剤であるロクテロン（Ｌｏｃｔｅｒｏｎ）（Ｂｉｏｌｅｘ／ＯｃｔｏＰｌｕｓ）；および天然アルファインターフェロンの単一アミノ酸変異体であるＢｅｌｅｒｏｆｏｎ（登録商標）が含まれる。前記ＩＦＮ−α組成物はいずれかは、例えば、ＰｅｇＩｎｔｒｏｎ（登録商標）ペグインターフェロンアルファ−２ｂと同じ組成物であるＶＩＲＡＦＥＲＯＮＰＥＧ（登録商標）ペグインターフェロンアルファ−２ｂのように、異なる商標名で販売されているかもしれない。
【００８３】
慢性ＨＣＶ感染に対するケア併用療法計画の現在の標準は、ＰＥＧＡＳＹＳ（登録商標）ペグインターフェロンアルファ−２ａまたはＰｅｇＩｎｔｒｏｎ（登録商標）ペグインターフェロン−アルファ２ｂの週１回の投与に加えて、ヌクレオシド類似体であるリバビリンの複数の１日量を用いる。また、ＰＥＧＡＳＹＳ（登録商標）（ペグインターフェロンアルファ−２ａ）およびＰｅｇＩｎｔｒｏｎ（登録商標）（ペグインターフェロンアルファ−２ｂ）の承認に関して規制機関に既に提出されている前臨床および／または臨床データに対する信頼性に少なくとも部分的に基づいて規制機関により承認されるいずれかのＰＥＧ化（ｐｅｇｙｌａｔｅｄ）インターフェロンアルファ２ａまたはＰＥＧ化インターフェロンアルファ２ｂ医薬組成物も、本発明で使用されると想定される。そのような後に承認される製品は、既に承認されている製品のジェネリック、生物同等体、生物類似体または代替物のような種々の用語（該用語は規制機関により明示的に定義されることもされないこともある）で規制機関により記載されうる。
【００８４】
リバビリン以外のヌクレオシド類似体を含むインターフェロンアルファに基づく併用療法も、慢性ＨＣＶ感染を治療するために、本発明の組成物、医薬およびキットと共に使用されると想定される。そのようなヌクレオシド類似体の例には、リバビリン誘導体、例えば、Ｖａｌｅａｎｔ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｓ  Ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ（Ａｌｉｓｏ  Ｖｉｅｊｏ，ＣＡ）により開発中であるタリバビリン（ｔａｒｉｂａｖｉｒｉｎ）［ビラミジン（ｖｉｒａｍｉｄｉｎｅ）およびＩＣＮ３１４２としても公知である］、ならびに米国特許第６，４０３，５６４号および第６，９２４，２７０号に記載されている化合物が含まれる。
【００８５】
本発明の方法、組成物、医薬およびキットと共に使用される、インターフェロンアルファに基づく併用療法は、ＣＹＰ３Ａ４／５により代謝される治療用化合物の標的と同じ又は異なるＨＣＶタンパク質を標的化する１以上の追加的なＨＣＶ阻害物質を使用しうる。そのような追加的物質には、ＨＣＶプロテアーゼインヒビター、ＮＳ３プロテアーゼインヒビター、ＨＣＶポリメラーゼインヒビター、ＨＣＶ  ＮＳ５Ａインヒビター、ＩＲＥＳインヒビター、ＮＳ４Ｂインヒビター、ＨＣＶヘリカーゼインヒビター、ＨＣＶ侵入インヒビターおよびＨＣＶビリオン産生インヒビターが含まれる。好ましくは、ＣＹＰ３Ａ４／５は該追加的ＨＣＶ阻害性物質の代謝において主要な役割を果たさない。
【００８６】
ＨＣＶに慢性的に感染している患者の肝臓は不可逆的に損傷していることがあり、そのような患者は肝臓移植を受け、ついで、該移植の拒絶を防ぐために免疫抑制療法を受ける。幾つかの一般に使用される免疫抑制剤はＣＹＰ３Ａ４／５により代謝されるため、本発明は、ＨＣＶに感染しているために肝移植を受けた患者の治療において、ＣＹＰ３Ａ４／５により代謝される免疫抑制物質の薬物動態を増強するための、ボセプレビル関連化合物の使用をも想定している。そのような患者においては、該ボセプレビル関連化合物は、移植された肝臓におけるＨＣＶ感染の再発を予防するのに有効な用量で投与されうる。
【００８７】
治療される患者がヒト免疫不全ウイルス（ＨＩＶ）、特にＨＩＶ−１またはＨＩＶ−２に感染している実施形態においては、本発明の医薬組成物、医薬およびキットにおける治療用化合物は、表Ａに挙げられているＨＩＶ阻害性物質のいずれかであることが可能であり、そのような組成物、医薬およびキットは、ＣＹＰ３Ａ４／５により代謝される治療用化合物の標的と同じ又は異なるＨＩＶ標的に対する１以上の追加的治療用物質をも使用する併用療法計画の一部として使用されうる。そのような追加的物質には、ＨＩＶ侵入インヒビター、ＨＩＶプロテアーゼインヒビター、ＨＩＶ逆転写酵素インヒビター、ＨＩＶ融合インヒビターおよびＨＩＶインテグラーゼインヒビターが含まれる。好ましくは、ＣＹＰ３Ａ４／５は、該追加的ＨＩＶ阻害性物質の代謝において主要な役割を果たさない。
【００８８】
本発明は、ＨＩＶに感染した患者の、日和見感染および癌のような付随的状態に対する治療をも想定している。そのような付随的状態に対する薬物の多数はＣＹＰ３Ａ４／５により代謝され（例えば、表Ｂ１〜Ｂ５を参照されたい）、したがって、それらの薬物動態はボセプレビル関連化合物との共投与により改善されうるであろう。
【００８９】
ＩＩＩ．本発明の典型的な特定の実施形態
１．シトクロムＰ４５０  ３Ａ４／３Ａ５（ＣＹＰ３Ａ４／３Ａ５）により代謝される治療用化合物の薬物動態を改善するための方法であって、該治療用化合物での治療を要するヒト患者に該治療用化合物とボセプレビル関連化合物とを共投与することを含む方法。
【００９０】
２．該共投与工程後の２以上の時点で該治療用化合物に関する少なくとも１つの薬物動態学的パラメータを測定し、測定されたパラメータを該パラメータの目標値と比較することを更に含む、実施形態１記載の方法。
【００９１】
３．該目標値が該治療用化合物に関する治療的に有効な範囲である、実施形態２記載の方法。
【００９２】
４．少なくとも１つの該薬物動態学的パラメータが、半減期（ｔ１／２）の増加、最高濃度（Ｃｍａｘ）の増加、平均滞留時間（ＭＲＴ）の増加、用量間のＡＵＣの増加、およびクリアランス（ＣＬ）速度の減少からなる群から選択される、実施形態２または３記載の方法。
【００９３】
５．該治療用化合物が、表Ａまたは表Ｂ１〜Ｂ５に記載されている化合物のいずれか１つである、実施形態１〜４のいずれか１項記載の方法。
【００９４】
６．該ボセプレビル関連化合物が式１ａまたは式１ｂの化合物である、実施形態１〜５のいずれか１項記載の方法。
【００９５】
７．該患者が慢性Ｃ型肝炎ウイルス（ＨＣＶ）感染を有し、該ボセプレビル関連化合物が式１ａの化合物であり、該治療用化合物がナルラプレビル（ｎａｒｌａｐｒｅｖｉｒ）、テラプレビル（ｔｅｌａｐｒｅｖｉｒ）またはフィリブビル（ｆｉｌｉｂｕｖｉｒ）である、実施形態１〜６のいずれか１項記載の方法。
【００９６】
８．該ボセプレビル関連化合物および該治療用化合物を間接的抗ウイルス併用療法と共に共投与する、実施形態７記載の方法。
【００９７】
９．該患者が慢性Ｃ型肝炎ウイルス（ＨＣＶ）感染を有し、該ボセプレビル関連化合物が式１ａの化合物であり、該治療用化合物がＨＣＶポリメラーゼインヒビター、ＨＣＶ  ＮＳ４ＢインヒビターまたはＨＣＶ−ＩＲＥＳインヒビターである、実施形態１〜６のいずれか１項記載の方法。
【００９８】
１０．該患者がＨＩＶに感染しており、該ボセプレビル関連化合物が式１ａの化合物であり、該治療用化合物がアプラビロック（ａｐｌａｖｉｒｏｃ）、マラビロック（ｍａｒａｖｉｒｏｃ）またはビクリビロック（ｖｉｃｒｉｖｉｒｏｃ）である、実施形態１〜６のいずれか１項記載の方法。
【００９９】
１１．該患者がＨＣＶおよびＨＩＶ−１に同時感染しており、該ボセプレビル関連化合物が式１ａの化合物である、実施形態１〜６のいずれか１項記載の方法。
【０１００】
１２．該ボセプレビル関連化合物が式１ａの化合物である、該治療用化合物が表Ｂ１〜Ｂ５に記載の化合物のいずれか１つである、実施形態１〜６のいずれか１項記載の方法。
【０１０１】
１３．実施形態１〜１２のいずれか１項記載の方法を含むシトクロムＰ４５０  ３Ａ４／３Ａ５（ＣＹＰ３Ａ４／３Ａ５）により代謝される治療用化合物の薬物動態を改善する方法において使用するための、ボセプレビル関連化合物を含む医薬組成物。
【０１０２】
１４．該ボセプレビル関連化合物が式１ａの化合物である、実施形態１３記載の医薬組成物。
【０１０３】
１５．シトクロムＰ４５０  ３Ａ４／３Ａ５（ＣＹＰ３Ａ４／３Ａ５）により代謝される治療用化合物の薬物動態を改善するための医薬の製造のための、ボセプレビル関連化合物の使用であって、該医薬が、該治療用化合物と共に共投与された場合に該治療用化合物の薬物動態を改善するのに有効な量の該ボセプレビル関連化合物を含む、使用。
【０１０４】
１６．該治療用化合物が表Ａまたは表Ｂ１〜Ｂ５における化合物のいずれかである、実施形態１５記載の使用。
【０１０５】
１７．該ボセプレビル関連化合物が式１ａの化合物であり、該治療用化合物がナルラプレビル（ｎａｒｌａｐｒｅｖｉｒ）、テラプレビル（ｔｅｌａｐｒｅｖｉｒ）またはフィリブビル（ｆｉｌｉｂｕｖｉｒ）である、実施形態１６の使用。
【０１０６】
１８．該ボセプレビル関連化合物が式１ａの化合物であり、該治療用化合物がアプラビロック（ａｐｌａｖｉｒｏｃ）、マラビロック（ｍａｒａｖｉｒｏｃ）またはビクリビロック（ｖｉｃｒｉｖｉｒｏｃ）である、実施形態１６記載の使用。
【０１０７】
１９．シトクロムＰ４５０  ３Ａ４／３Ａ５（ＣＹＰ３Ａ４／３Ａ５）により代謝される治療用化合物での患者の治療において使用するための医薬組成物であって、治療的有効量の該治療用化合物と、該治療用化合物と共投与された場合に該治療用化合物の薬物動態を改善するのに有効な量のボセプレビル関連化合物とを含む医薬組成物。
【０１０８】
２０．該治療用化合物が表Ａまたは表Ｂ１〜Ｂ５に記載の抗ウイルス化合物のいずれか１つである、実施形態１９記載の医薬組成物。
【０１０９】
２１．該ボセプレビル関連化合物が式１ａまたは式１ｂの化合物である、実施形態１９〜２０のいずれか１項記載の医薬組成物。
【０１１０】
２２．該患者が慢性Ｃ型肝炎ウイルス（ＨＣＶ）感染を有し、該ボセプレビル関連化合物が式１ａの化合物であり、該治療用化合物がナルラプレビル（ｎａｒｌａｐｒｅｖｉｒ）、テラプレビル（ｔｅｌａｐｒｅｖｉｒ）またはフィリブビル（ｆｉｌｉｂｕｖｉｒ）である、実施形態１９〜２１のいずれか１項記載の医薬組成物。
【０１１１】
２３．該患者がＨＩＶに感染しており、該ボセプレビル関連化合物が式１ａの化合物であり、該治療用化合物がビクリビロック（ｖｉｃｒｉｖｉｒｏｃ）、マラビロック（ｍａｒａｖｉｒｏｃ）またはアプラビロック（ａｐｌａｖｉｒｏｃ）である、実施形態１９〜２１のいずれか１項記載の医薬組成物。
【０１１２】
２４．該患者がＨＣＶおよびＨＩＶ−１に同時感染しており、該ボセプレビル関連化合物が式１ａの化合物である、実施形態１９〜２１のいずれか１項記載の医薬組成物。
【０１１３】
２５．シトクロムＰ４５０  ３Ａ４／３Ａ５（ＣＹＰ３Ａ４／３Ａ５）により代謝される治療用化合物で患者を治療するための医薬キットであって、治療的有効量の該治療用化合物を含む第１医薬組成物と、該治療用化合物と共投与された場合に該治療用化合物の薬物動態を改善するのに有効な量のボセプレビル関連化合物を含む第２医薬組成物とを含む医薬キット。
【０１１４】
２６．該治療用化合物での療法に感受性である疾患または状態を有する患者を治療するために該第１および第２医薬組成物を投与するための説明を更に含む、実施形態２５記載の医薬キット。
【０１１５】
２７．該治療用化合物が表１、表Ｂ１、表Ｂ２、表Ｂ３、表Ｂ４または表Ｂ５における化合物のいずれかであり、該ボセプレビル関連化合物が式１ａの化合物である、請求項２６記載の医薬キット。
【０１１６】
２８．該治療用化合物が表１、表Ｂ１、表Ｂ２、表Ｂ３、表Ｂ４または表Ｂ５における化合物のいずれかであり、該ボセプレビル関連化合物が式１ａの化合物である、実施形態２５〜２７のいずれか１項記載の医薬キット。
【０１１７】
２９．該治療用化合物が、ナルラプレビル（ｎａｒｌａｐｒｅｖｉｒ）、テラプレビル（ｔｅｌａｐｒｅｖｉｒ）、フィリブビル（ｆｉｌｉｂｕｖｉｒ）、ビクリビロック（ｖｉｃｒｉｖｉｒｏｃ）、マラビロック（ｍａｒａｖｉｒｏｃ）およびアプラビロック（ａｐｌａｖｉｒｏｃ）からなる群から選択される、実施形態２５〜２８のいずれか１項記載の医薬キット。
【０１１８】
３０．第１および第２医薬組成物のそれぞれの投与単位の少なくとも１つが一緒にブリスター包装内に包装されている、実施形態２５〜２９のいずれか１項記載の医薬キット。
【図面の簡単な説明】
【０１１９】
【図１Ａ】図１Ａ〜１Ｃは、ボセプレビル（ＢＯＣ）によるＣＹＰ３Ａ４／５の阻害（テストステロン６β−ヒドロキシル化）に関する［ＩＣ５０］の決定を例示する。
【図１Ｂ】図１Ａ〜１Ｃは、ボセプレビル（ＢＯＣ）によるＣＹＰ３Ａ４／５の阻害（テストステロン６β−ヒドロキシル化）に関する［ＩＣ５０］の決定を例示する。
【図１Ｃ】図１Ａ〜１Ｃは、ボセプレビル（ＢＯＣ）によるＣＹＰ３Ａ４／５の阻害（テストステロン６β−ヒドロキシル化）に関する［ＩＣ５０］の決定を例示する。
【図２Ａ】図２Ａ〜２Ｃは、ボセプレビル（ＢＯＣ）によるＣＹＰ３Ａ４／５の阻害（テストステロン６β−ヒドロキシル化）のＮＡＰＤＨ依存性を例示する。ＮＡＤＰＨの存在下でプレインキュベーションを行って（ＡおよびＢ）または行わないで（Ｃ）、実験を行った。
【図２Ｂ】図２Ａ〜２Ｃは、ボセプレビル（ＢＯＣ）によるＣＹＰ３Ａ４／５の阻害（テストステロン６β−ヒドロキシル化）のＮＡＰＤＨ依存性を例示する。ＮＡＤＰＨの存在下でプレインキュベーションを行って（ＡおよびＢ）または行わないで（Ｃ）、実験を行った。
【図２Ｃ】図２Ａ〜２Ｃは、ボセプレビル（ＢＯＣ）によるＣＹＰ３Ａ４／５の阻害（テストステロン６β−ヒドロキシル化）のＮＡＰＤＨ依存性を例示する。ＮＡＤＰＨの存在下でプレインキュベーションを行って（ＡおよびＢ）または行わないで（Ｃ）、実験を行った。
【図３Ａ】図３Ａ〜３Ｃは、ボセプレビル（ＢＯＣ）によるＣＹＰ３Ａ４／５の阻害（ミダゾラム１’−ヒドロキシル化）に関する［ＩＣ５０］の決定を例示する。
【図３Ｂ】図３Ａ〜３Ｃは、ボセプレビル（ＢＯＣ）によるＣＹＰ３Ａ４／５の阻害（ミダゾラム１’−ヒドロキシル化）に関する［ＩＣ５０］の決定を例示する。
【図３Ｃ】図３Ａ〜３Ｃは、ボセプレビル（ＢＯＣ）によるＣＹＰ３Ａ４／５の阻害（ミダゾラム１’−ヒドロキシル化）に関する［ＩＣ５０］の決定を例示する。
【図４Ａ】図４Ａ〜４Ｃは、ボセプレビル（ＢＯＣ）によるＣＹＰ３Ａ４／５の阻害（ミダゾラム１’−ヒドロキシル化）に関する［Ｋｉ］の決定を例示する。
【図４Ｂ】図４Ａ〜４Ｃは、ボセプレビル（ＢＯＣ）によるＣＹＰ３Ａ４／５の阻害（ミダゾラム１’−ヒドロキシル化）に関する［Ｋｉ］の決定を例示する。
【図４Ｃ】図４Ａ〜４Ｃは、ボセプレビル（ＢＯＣ）によるＣＹＰ３Ａ４／５の阻害（ミダゾラム１’−ヒドロキシル化）に関する［Ｋｉ］の決定を例示する。
【図５Ａ】図５Ａ〜５Ｃは、ボセプレビル（ＢＯＣ）によるＣＹＰ３Ａ４／５の阻害（ミダゾラム１’−ヒドロキシル化）のＮＡＰＤＨ依存性を例示する。ＮＡＤＰＨの存在下でプレインキュベーションを行って（ＡおよびＢ）または行わないで（Ｃ）、実験を行った。
【図５Ｂ】図５Ａ〜５Ｃは、ボセプレビル（ＢＯＣ）によるＣＹＰ３Ａ４／５の阻害（ミダゾラム１’−ヒドロキシル化）のＮＡＰＤＨ依存性を例示する。ＮＡＤＰＨの存在下でプレインキュベーションを行って（ＡおよびＢ）または行わないで（Ｃ）、実験を行った。
【図５Ｃ】図５Ａ〜５Ｃは、ボセプレビル（ＢＯＣ）によるＣＹＰ３Ａ４／５の阻害（ミダゾラム１’−ヒドロキシル化）のＮＡＰＤＨ依存性を例示する。ＮＡＤＰＨの存在下でプレインキュベーションを行って（ＡおよびＢ）または行わないで（Ｃ）、実験を行った。  実施例  以下の実施例は、本発明をより明らかに説明するために記載されており、本発明の範囲を限定すると解釈されるべきではない。
【０１２０】
実施例１：ヒトシトクロムＰ４５０酵素のインヒビターとしてのボセプレビルのインビトロ評価
１．１  序論および目的
この研究は、ボセプレビルが他の薬物の代謝を阻害する可能性を確認することを目的として、ヒト肝ミクロソームにおける主要ＣＹＰ酵素を阻害するボセプレビルの能力を評価するために計画した。ボセプレビルの存在下または非存在下でヒト肝ミクロソームにおける各ＣＹＰ酵素の活性を測定することにより、ボセプレビルの阻害効力をインビトロで決定した。これらのインビトロ実験は、調べた各ヒトＣＹＰ酵素の直接阻害に関するボセプレビルの阻害定数（ＩＣ５０値）を測定するために、およびボセプレビルが同じ酵素の時間依存的インヒビターであるか否かを判定するために計画した。ＣＹＰ３Ａ４／５の直接阻害（ミダゾラム１’−ヒドロキシル化により測定した場合）に関して、Ｋｉ値および阻害メカニズムを決定した。また、時間依存的阻害の観察された証拠がＮＡＤＰＨ依存的であるかどうか、およびＣＹＰ３Ａ４／５に関する希釈に抵抗性であるかどうかを判定するために、実験を行った。また、代謝産物阻害性複合体（ＭＩＣ）を形成するボセプレビル能力を決定するための実験を行った。
【０１２１】
１．２  実験計画
１．２．１  ヒトＣＹＰ酵素の直接および時間依存的阻害としてのボセプレビルの評価：［ＩＣ５０］値の決定
以下のヒトＣＹＰ酵素を直接阻害するボセプレビルの能力に関して、ボセプレビルを評価した。また、以下のＣＹＰ酵素を時間依存的に阻害するボセプレビルの能力に関して、ボセプレビルを評価した。
【０１２２】
【表９】
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１．２．２  ヒトＣＹＰ酵素の直接インヒビターとしてのボセプレビルの評価：［Ki］値の決定
Ｋｉ値および阻害メカニズムを決定することにより、ヒトＣＹＰ３Ａ４／５を直接阻害するボセプレビルの能力（ミダゾラム１’−ヒドロキシル化により測定した場合）に関して、ボセプレビルを更に評価した。
【０１２３】
１．２．３  ヒトＣＹＰ酵素の時間依存的インヒビターとしてのボセプレビルの評価：ＮＡＤＰＨ依存性および希釈効果の決定
３０分間のプレインキュベーションの後で観察される阻害の増強がＮＡＤＰＨを要し希釈に抵抗性であるかどうかを決定することにより、時間依存的にヒトＣＹＰ３Ａ４／５を阻害するボセプレビルの能力（テストステロン６β−ヒドロキシル化およびミダゾラム１’−ヒドロキシル化により測定した場合）に関して、ボセプレビルを評価した。
【０１２４】
１．２．４  代謝産物阻害性複合体を形成するボセプレビルの能力の評価
高レベルのＣＹＰ３Ａ４／５活性を有する個体からのヒト肝ミクロソームと代謝産物阻害性複合体を形成するボセプレビルの能力に関して、ボセプレビルを評価した。
【０１２５】
１．３  材料および方法
１．３．１  材料
１．３．１．１  化学物質
アセトアミノフェン、３−アミノ−１，２，４−トリアゾール、酢酸アンモニウム、ブプロピオンＨＣｌ、β−ＮＡＤＰ、クロルゾキサゾン、クマリン、デクストロメトルファン、ジクロフェナック、ジメチルスルホキシド（ＤＭＳＯ）、フラフィリン、グルコース−６−リン酸、グルコース−６−リン酸デヒドロゲナーゼ、６−ヒドロキシクロルゾキサゾン、７−ヒドロキシクマリン（ウンベリフェロン）、４’−ヒドロキシジクロフェナック、６β−ヒドロキシテストステロン、ケトコナゾール、塩化マグネシウム、８−メトキシプソラレン、４−メチルピラゾール、メトクロプラミド、ミダゾラム、α−ナフトフラボン、ＮＡＤＰ、ニコチン、オルフェナドリン、フェナセチン、フェンシクリジン、キニジン、スクロース、スルファフェナゾール、テストステロン、チクロピジン、Ｔｒｉｚｍａ（登録商標）ベースおよびトロレアンドマイシンは、Ｓｉｇｍａ  Ｃｈｅｍｉｃａｌ  Ｃｏ．（Ｓｔ．Ｌｏｕｉｓ，ＭＯ）から購入した。リン酸水素二カリウムおよびリン酸二水素カリウムは、Ｊ．Ｔ．Ｂａｋｅｒ，  Ｉｎｃ．  （Ｐｈｉｌｌｉｐｓｂｕｒｇ，  ＮＪ）から購入した。アセトニトリル、メタノール、水酸化カリウムおよび水酸化ナトリウムは、Ｆｉｓｈｅｒ  Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ（Ｐｉｔｔｓｂｕｒｇｈ，ＰＡ）から購入した。ギ酸は、ＥＭ  Ｓｃｉｅｎｃｅ（Ｇｉｂｂｓｔｏｗｎ，ＮＪ）から購入した。ＥＤＴＡは、Ａｌｄｒｉｃｈ  Ｃｈｅｍｉｃａｌ  Ｃｏ．（Ｍｉｌｗａｕｋｅｅ，ＷＩ）から購入した。ヒドロキシブプロピオンは、ＢＤ  Ｇｅｎｔｅｓｔ  Ｃｏｒｐ．（Ｗｏｂｕｒｎ，ＭＡ）から購入した。デクストロファンおよび（±）−４’−ヒドロキシメフェニトインは、Ｓｉｇｍａ  Ｃｈｅｍｉｃａｌ  Ｃｏ．（Ｓｔ．Ｌｏｕｉｓ，ＭＯ）の一部門であるＵｌｔｒａｆｉｎｅから購入した。アモジアクインおよびＮ−デスメチルアモジアクインは、ＬＧＣ  Ｐｒｏｍｏｃｈｅｍ（Ｔｅｄｄｉｎｇｔｏｎ，ＵＫ）から購入した。Ｓ−メフェニトインは、Ｔｏｒｏｎｔｏ  Ｒｅｓｅａｒｃｈ  Ｃｈｅｍｉｃａｌｓ  Ｉｎｃ．（Ｎｅｗ  Ｙｏｒｋ，Ｏｎ．，Ｃａｎａｄａ）から購入した。Ｍｏｎｔｅｌｕｋａｓｔは、Ｓｅｑｕｏｉａ  Ｒｅｓｅａｒｃｈ  Ｐｒｏｄｕｃｔｓ（Ｐａｎｇｂｏｕｒｎｅ，ＵＫ）から購入した。１’−ヒドロキシミダゾラムは、Ｃｅｒｉｌｌｉａｎｔ  Ｃｏｒｐｏｒａｔｉｏｎ（Ｒｏｕｎｄ  Ｒｏｃｋ，ＴＸ）から購入した。高純度水およびゲミフィブロジルグルクロニドは、ＸＥＮＯＴＥＣＨ，ＬＬＣ（Ｌｅｎｅｘａ，ＫＳ）から購入した。１７β−Ｎ，Ｎ−ジエチルカルバモイル−４−メチル−３−オト−４−アザ−５α−アンドロスタン−１７α−カルボキサミド（４−ＭＡ）はＧ．Ｈ．Ｒａｓｍｕｓｓｏｎ博士（Ｍｅｒｃｋ，Ｓｈａｒｐ  ＆  Ｄｏｈｍｅ，Ｒａｈｗａｙ，ＮＪ）からの気前のよい贈呈品であった。チエニル酸は、Ｃｙｐｅｘ  Ｌｔｄ．（Ｄｕｎｄｅｅ，Ｓｃｏｔｌａｎｄ）から購入した。使用した内部標準は、ｄ４−アセトアミノフェンｄ５−Ｎ−デスエチルアミノジアクイン、ｄ３−デクストロルファン、ｄ６−ヒドロキシブプロピオン、ｄ２−６−ヒドロキシ−クロルゾキサゾン、ｄ５−７−ヒドロキシクマリン、ｄ４−４’−ヒドロキシジクロフェナック、ｄ３−４’��ヒドロキシ−メフェニトイン、ｄ３−１’−ヒドロキシミダゾラムおよびｄ３−６β−ヒドロキシテストステロンであった。これらの標準物の起源はこの情報の所有権上の理由により記載されていない。
【０１２６】
１．３．１．２  試験系：ヒト肝ミクロソーム
寄贈された肝臓からのヒト肝ミクロソームがＴｅｓｔｉｎｇ  Ｆａｃｉｌｉｔｙ（ＸｅｎｏＴｅｃｈ，ＬＬＣ，Ｌｅｎｅｘａ，ＫＳ  ＵＳＡ）により調製され、特徴づけられた。１６個の男女混合のヒト肝ミクロソームサンプルのプールをこの研究に使用した。マーカー基質濃度およびインキュベーション条件を選択するために用いた反応速度定数（ＫｍおよびＶｍａｘ）は既に決定されている（データ非表示）。また、該プールにおけるヒト個体の１つからのヒト肝ミクロソーム（高レベルのＣＹＰ３Ａ４／５を発現する）を、ＣＹＰ３Ａ４／５と代謝阻害性複合体を形成させるために、ボセプレビルの評価において使用した。
【０１２７】
１．３．１．３  試験品：ボセプレビル
メタノール中のボセプレビル（１０ｍＭの標的濃度）のストック溶液を調製し、該試験系におけるボセプレビルの溶解度を定量的に評価するために溶解度試験を行った。最高のストックボセプレビル溶液（メタノール中の１０ｍＭ）のアリコート（１０μＬ）を、挙げられている最終濃度（１０００μＬの合計体積）で、高純度水、リン酸カリウムバッファー（５０ｍＭ）、ＭｇＣｌ２（３ｍＭ）、ＥＤＴＡ（１ｍＭ）およびヒト肝ミクロソーム（０．０１２５および０．１ｍｇ／ｍＬ）を含有する９９０μＬの混合物（目標ｐＨ７．４）に加えた。ボセプレビルが加えられたチューブを、ボセプレビルを伴わずに同じ成分を含有する対照チューブと定量的に視覚的に比較することにより、ボセプレビルが該試験系において溶解性であることが示された。該ストック溶液（ＩＣ５０の決定の場合は１０ｍＭ  ボセプレビル）を、実施溶液（０．０１〜３．０ｍＭの範囲のボセプレビル）への希釈と共に、実験を行った日に毎日、新たに調製した。Ｋｉの決定の場合には、該ストック溶液の濃度は１０ｍＭであり、該実施溶液は０．２５ｍＭ〜６ｍＭの範囲であった。これらの溶液は、該Ｋｉ決定実験を行った日に新たに調製した。また、０．３ｍＭのストック濃度をＮＡＤＰＨ依存性／希釈効果およびＭＩＣ形成実験において使用した。
【０１２８】
１．３．２  ヒトＣＹＰ酵素のインヒビターのボセプレビルの評価
１．３．２．１  一般的なインキュベーション条件
以下のインキュベーション条件の多くに関する基礎は以下の参考文献に記載されている：Ｍａｄａｎら，２００２，（１）  Ｈｕａｎｇ，２００４，（３）  Ｏｇｉｌｖｉｅら，２００６，（６）  Ｐｅａｒｃｅら，１９９６，（７）  Ｔｕｃｋｅｒら，２００１，（４）ならびにＷａｌｓｋｙおよびＯｂａｃｈ，２００４（５）。一般に、高純度水、リン酸カリウム（５０ｍＭ）、ＭｇＣｌ２（３ｍＭ）、ＥＤＴＡ（１ｍＭ）、ＮＡＤＰＨ生成系［常に以下の混合物：ＮＡＤＰ（１ｍＭ）、グルコース−６−リン酸（５ｍＭ）、グルコース−６−リン酸デヒドロゲナーゼ（１単位／ｍＬ）］およびマーカー基質（示されている最終濃度のもの）を含有する４００μＬのインキュベーション混合物（目標ｐＨ７．４）中、約３７℃でインキュベーションを行った。プール化ヒト肝ミクロソーム（１６個からのもの）を酵素源（第１．３．１．２節）として使用した。他のインキュベーション条件は、表１に示されているとおりであった。マーカー基質の濃度は、既に決定されているＫｍおよびＶｍａｘデータ（データ非表示）に基づくものであった。
【０１２９】
ボセプレビルがミクロソームタンパク質または脂質に結合しうるという可能性のため、可能な限り多数の場合に、該ミクロソームタンパク質、インキュベーション時間およびリン酸バッファー濃度が、ヒト肝ミクロソームで行ったアッセイで、それぞれ０．１ｍｇ／ｍＬ、５分および５０ｍＭとなるように、これらの実験を計画する試みを行った（表１）。ただし、クマリン６−ヒドロキシル化およびミダゾラム１’−ヒドロキシル化アッセイに関しては、初期速度条件下で反応速度が測定されることを可能にするために、若干異なるタンパク質濃度を用いた（表１）。すなわち、該産物生成はタンパク質濃度およびインキュベーション時間の増加と共に増加し、この場合、該マーカー基質の代謝率は２０％を超えなかった。マーカー基質の濃度がＫｍと全く同等であることは重要ではないため、実験計画を簡単にするために、適用可能な場合にはマーカー基質濃度を切り上げ又は切り捨てた（データ非表示）。例えば、フェナセチンＯ−脱エチル化活性に関するＫｍは６３μＭであると決定され、これは６０μＭに切り捨てられた。したがって、フェナセチンの最終インキュベーション濃度は６０μＭであった（表１）。
【０１３０】
１．３．２．２  ヒトＣＹＰ酵素の直接および時間依存的インヒビターとしてのボセプレビルの評価：［ＩＣ５０］値の決定
第１．２．１節に挙げられているＣＹＰ酵素を阻害するボセプレビルの能力を、表１に示されている濃度の１６個のヒト肝ミクロソームサンプルのプールで調べた。ボセプレビルのストックおよび／または実施溶液のアリコートを、第１．３．２１節に記載されている成分を含有するバッファー混合物に手動で加えた。非常に小さな容量（すなわち、１μＬ以下）を直接的にピペッティングする必要性を回避するために、インキュベーション混合物をバルクにおいて調製した。ボセプレビルを含有しない（０μＭ）インキュベーション物は、ボセプレビルを溶解するために使用したビヒクル（すなわち、１％  メタノール）を含有していた。
【０１３１】
Ｔｅｃａｎ液取扱い系が、遠心分離を除く全ての残りのインキュベーション工程を行った。ついで該バッファー混合物のアリコートを９６ウェルプレートの適当な位置に二重に自動的に加えた。基質実施溶液のアリコートを、表１に示されている最終濃度が得られるように、反応開始前に該９６ウェルプレートに加えた。ＮＡＤＰＨ生成系のアリコートの添加により反応を開始させた。約５分の時点で、適当な内部標準（表５）および終結試薬（アセトニトリル）の添加により、反応を自動的に終結させた。沈殿タンパク質を遠心分離（９２０ｇ、１０℃で１０分間）により除去した。標準物および品質対照サンプルを、真正代謝産物標準物の添加により、同様にして調製した。
【０１３２】
時間依存的インヒビターとしてのその能力を調べるために、ボセプレビル（直接阻害を評価するために用いたのと同じ濃度）を、ヒト肝ミクロソームおよびＮＡＤＰＨ生成系と共に、３７±１℃で約３０分間、二重にプレインキュベートした。このプレインキュベーションは、ヒトＣＹＰ酵素を阻害しうる中間体の生成を可能にした。該プレインキュベーションは、ＮＡＤＰＨ生成系のアリコートの添加により開始させた。該プレインキュベーション後、該マーカー基質（そのＫｍとほぼ同等の濃度のもの）を自動的に加え、残留マーカーＣＹＰ活性を測定するために該インキュベーションを５分間継続した。約５分の時点で、適当な内部標準（表５）および終結試薬（アセトニトリル）の添加により、反応を自動的に終結させた。沈殿タンパク質を遠心分離（９２０ｇ、１０℃で１０分間）により除去した。ボセプレビルを含有しない（０μＭ）インキュベーション物、およびボセプレビルを含有するがプレインキュベーションされていないインキュベーション物を、陰性対照として使用した。
【０１３３】
１．３．２．３  ヒトＣＹＰ酵素の直接インヒビターとしてのボセプレビルの評価：［Ｋｉ］値の決定
第１．２．２節に挙げられているＣＹＰ酵素を直接阻害するボセプレビルの能力を、表２に示されている濃度の１６個のヒト肝ミクロソームサンプルのプールに関して調べた。ボセプレビルのストックおよび／または実施溶液のアリコートを、第１．３．２．１節に記載されている成分を含有するバッファー混合物に手動で加えた。非常に小さな容量（すなわち、１μＬ以下）を直接的にピペッティングする必要性を回避するために、インキュベーション混合物をバルクにおいて調製した。ボセプレビルを含有しない（０μＭ）インキュベーション物は、ボセプレビルを溶解するために使用したビヒクル（すなわち、１％  メタノール）を含有していた。
【０１３４】
Ｔｅｃａｎ液取扱い系が、遠心分離を除く全ての残りのインキュベーション工程を行った。ついで該バッファー混合物のアリコートを９６ウェルプレートの適当な位置に二重に自動的に加えた。基質実施溶液（５つの異なる濃度のもの）のアリコートを、表２に示されている最終濃度が得られるように、反応開始前に該９６ウェルプレートに加えた。ＮＡＤＰＨ生成系のアリコートの添加により反応を開始させ、二重に反応を行った。約５分の時点で、適当な内部標準（表５）および終結試薬（アセトニトリル）の添加により、反応を自動的に終結させた。沈殿タンパク質を遠心分離（９２０ｇ、１０℃で１０分間）により除去した。標準物および品質対照サンプルを、真正代謝産物標準物の添加により、同様にして調製した。
【０１３５】
１．３．２．４  ヒトＣＹＰ酵素の時間依存的インヒビターとしてのボセプレビルの評価：ＮＡＤＰＨ依存性および希釈効果の決定
ボセプレビルをヒト肝ミクロソームと共に３０分間プレインキュベートした後、第１．２．３節に挙げられているＣＹＰ酵素の阻害の増強を更に調べるために、実験を計画した。ＣＹＰ３Ａ４／５の阻害の増強（テストステロン６β−ヒドロキシル化およびミダゾラム１’−ヒドロキシル化により測定されたもの）がＮＡＤＰＨを要するかどうかを確認するためのサンプルを含めた。第１に、表３に挙げられている濃度のボセプレビルの二重サンプルを、プール化ヒト肝ミクロソーム（ミダゾラムでは０．０５ｍｇ／ｍＬおよびテストステロンでは０．１ｍｇ／ｍＬ）と共に、希釈工程を伴くことなく、ＮＡＤＰＨ生成系の存在下および非存在下、０、１５および３０分間プレインキュベートした。ついで基質（Ｋｍとほぼ同等の濃度のもの）を加え、該インキュベーションを、示されているインキュベーション時間（５分間）にわたって行った。これは、ボセプレビルをヒト肝ミクロソームと共に３０分間プレインキュベートした後で阻害の増強が観察された元のＩＣ５０実験を模擬するものであった。第２に、ボセプレビルの二重サンプル（０および３μＭ）を、ヒト肝ミクロソーム（ミダゾラムでは１．２５ｍｇ／ｍＬおよびテストステロンでは２．５ｍｇ／ｍＬ；これは典型的なインキュベーション濃度の約２５倍である）と共に、ＮＡＤＰＨ生成系の存在下、０、１５および３０分間プレインキュベートした。ついで該サンプルを２５倍希釈した後、マーカー基質（テストステロン６β−ヒドロキシル化では２Ｋｍと、そしてミダゾラム１’−ヒドロキシル化では１０Ｋｍとほぼ同等の濃度のもの）と共にインキュベートした。ついで該インキュベーション（ボセプレビルおよびミクロソームタンパク質のプレインキュベーション濃度の１／２５のもの）を（該マーカー基質のいずれかの代謝産物の形成を可能にするために）５分間継続し、適当な内部標準（表５）および終結試薬（アセトニトリル）の添加により終結させた。残留ＣＹＰ３Ａ４／５活性を決定した。
【０１３６】
１．３．２．５  ヒトＣＹＰ３Ａ４／５の代謝産物依存的インヒビターとしてのボセプレビルの評価：代謝産物阻害性複合体（ＭＩＣ）生成の調査
ボセプレビルがＣＹＰ３Ａ４／５を不活性化するメカニズムを決定する試みにおいて、分光光度的に検出可能な、シトクロムＰ４５０（すなわち、約４５２ｎｍでピークになる）との代謝産物阻害性複合体を、ボセプレビルが生成するかどうかを決定するための実験を行った。
【０１３７】
この実験においては（表４に要約されている）、高レベルのＣＹＰ３Ａ４／５活性を含有する個々のヒト肝ミクロソームサンプル（１ｍｇ／ｍＬの最終タンパク質濃度、１．７ｎｍｏｌ  Ｐ４５０／ｍｇタンパク質）を、９８０μＬの最終体積まで、リン酸カリウム（５０ｍＭ）およびＭｇＣｌ２（３ｍＭ）からなるバッファー混合物中の該サンプルおよび参照キュベットに加えた。３８０ｎｍから５２０ｎｍまでのベースラインスキャンをＶａｒｉａｎ  Ｃａｒｙ  １００  ＢＩＯ  ＵＶ／Ｖｉｓ二重ビーム分光光度計で記録した。ついでボセプレビルを、３μＭの最終インキュベーション濃度となるように、１０μＬのメタノール中のサンプルキュベットに加えた。ボセプレビルを溶解するために使用した対応容量の該溶媒（１０μＬのメタノール）を該参照体に加えた。１０μＬのβ−ＮＡＤＰＨを１ｍＬの最終容量まで両方のキュベットに加えて、該反応を開始させた。β−ＮＡＤＰＨの添加後、毎分、１５分間にわたって連続的スキャンを行った。約３７℃で全スキャンを行った。
【０１３８】
該参照キュベットにアセトニトリルの１０μＬアリコートを加えたこと以外は同じ方法を用いて、最終濃度２５μＭのトロランドマイシンを陽性対照として使用した。
【０１３９】
１．３．３  ［ＩＣ５０］決定、［Ｋｉ］決定ならびにＮＡＤＰＨ依存性および希釈効果実験のための分析方法
全ての分析は、妥当性が確認されたＨＰＬＣ／ＭＳ／ＭＳ法で行った。各代謝産物の分析に用いた方法は、適用可能なＬＣ／ＭＳ／ＭＳ分析方法ＳＯＰに従うものであり、表５に要約されている。該ＭＳ装置は、Ｓｈｉｍａｄｚｕ  ＨＰＬＣポンプおよび自動サンプラー系を伴うＡＢＩ  Ｓｃｉｅｘ（Ａｐｐｌｉｅｄ  Ｂｉｏｓｙｓｔｅｍｓ，Ｆｏｓｔｅｒ  Ｃｉｔｙ，ＣＡ）ＡＰＩ  ３０００またはＡＰＩ  ２０００装置であった。クロルゾキサゾン６−ヒドロキシル化のＩＣ５０、ミダゾラム１’−ヒドロキシル化のＫｉならびにミダゾラム１’−ヒドロキシル化に関するＮＡＤＰＨ依存性および希釈効果のアッセイを除く全ての場合において、使用したＨＰＬＣカラムは、室温におけるＰｈｅｎｏｍｅｎｅｘ  Ｌｕｎａ  Ｃ−８ガードカラム（４．０ｍｍ×２．０ｍｍ）（Ｐｈｅｎｏｍｅｎｅｘ，Ｔｏｒｒａｎｃｅ，ＣＡ）に続くＷａｔｅｒｓ  Ａｔｌａｎｔｉｓ（５−μΜ  粒径、５０ｍｍ×２．０ｍｍ；Ｍｉｌｆｏｒｄ，ＭＡ）であった。クロルゾキサゾン６−ヒドロキシル化のＩＣ５０、ミダゾラム１’−ヒドロキシル化のＫｉならびにミダゾラム１’−ヒドロキシル化に関するＮＡＤＰＨ依存性および希釈効果のアッセイの場合には、使用したＨＰＬＣカラムは、室温におけるＰｈｅｎｏｍｅｎｅｘ  Ｌｕｎａ  Ｃ−８ガードカラム（４．０ｍｍ×２．０ｍｍ）（Ｐｈｅｎｏｍｅｎｅｘ，Ｔｏｒｒａｎｃｅ，ＣＡ）に続くＰｈｅｎｏｍｅｎｅｘ  Ｄｅｖｅｉｏｓｉｌ  ＲＰ−Ａｑｕｅｏｕｓ（５−μｍ粒径、５０ｍｍ×２．０ｍｍ）であった。加重（１／ｘ）線形最小二乗回帰の逆算により代謝産物を定量した。該回帰フィットは、真正代謝産物標準物から調製された校正標準サンプルから計算されたアナライト／内部標準ピーク面積比に基づくものであった。ピーク面積は、Ａｐｐｌｉｅｄ  Ｂｉｏｓｙｓｔｅｍｓ／ＭＤＳ  Ｂｉｏｓｙｓｔｅｍｓ（Ｆｏｓｔｅｒ  Ｃｉｔｙ，ＣＡ）Ａｎａｌｙｓｔ（商標）データシステム，Ｖｅｒｓｉｏｎ  １．４で積分された。
【０１４０】
１．３．４  統計的検定およびデータ処理
コンピュータプログラムＭｉｃｒｏｓｏｆｔ  Ｅｘｃｅｌ（Ｏｆｆｉｃｅ  ２０００  Ｖｅｒｓｉｏｎ  ９．０；Ｍｉｃｒｏｓｏｆｔ  Ｉｎｃ．，Ｒｅｄｍｏｎｄ，ＷＡ）用の妥当性確認された特製アドイン（ＤＩ  ＩＣ５０  ＬＣＭＳ  Ｔｅｍｐｌａｔｅ  Ｖｅｒｓｉｏｎ  ２．０．３）を使用して、ＩＣ５０を処理した。該ＩＣ５０決定実験中にＣＹＰ酵素活性の阻害が観察された場合、該データを、ＸＬｆｉｔ（Ｖｅｒｓｉｏｎ  ３．０，ＩＤＢＳ，Ｌｉｍｉｔｅｄ，Ｓｕｒｒｅｙ，ＵＫ）での非線形回帰により、ＩＣ５０値の決定のために処理し、適当なプロット上に表示した。ＸＬｆｉｔは、妥当性確認されたＤＩ  ＩＣ５０  ＬＣＭＳ  Ｔｅｍｐｌａｔｅ  Ｖｅｒｓｉｏｎ  ２．０．３の成分であるＥｘｅｌアドインである。このソフトウェアは、以下の４−パラメータＳ字状ロジスティックＩＣ５０式への該データの非線形回帰フィッティングを行うためにＬｅｖｅｎｂｅｒｇ−Ｍａｒｑｕａｒｄｔアルゴリズムを利用する。
【０１４１】
【数１】
2013535469.tif 000013
対照値に対する百分率が用いられた場合、バックグラウンドは０に、範囲は１００（または他の適当な値）に設定された。このソフトウェアは、ＩＣ５０値が被検インヒビターの濃度範囲内にある場合にのみ、ＩＣ５０値を計算するその能力に関して妥当性が確認されている。したがって、ＩＣ５０値が被検濃度範囲外である場合には、該ＩＣ５０値は、評価したボセプレビルの最高濃度（１００μＭ）より高く表示される。この研究からのデータをコンピュータ生成させ、これに含まれるように適切に丸めた。したがって、後続パラメータを計算するための表示値の利用は、場合によっては、表に挙げられているものからの若干の変動をもたらすであろう。
【０１４２】
Ｋｉ値の決定のために、Ｗｉｎｄｏｗｓ（Ｍｉｃｒｏｓｏｆｔ，Ｉｎｃ．，Ｒｅｄｍｏｎｄ，ＷＡ）用のスプレッドシート・コンピュータ・プログラムＭｉｃｒｏｓｏｆｔ  Ｅｘｃｅｌ，Ｖｅｒｓｉｏｎ  ９．０でデータを処理した。ＨＰＬＣ／ＭＳ／ＭＳにより得られたデータを、コンピュータプログラムＭｉｃｒｏｓｏｆｔ  Ｅｘｃｅｌ（Ｏｆｆｉｃｅ  ２０００  Ｖｅｒｓｉｏｎ  ９．０；Ｍｉｃｒｏｓｏｆｔ  Ｉｎｃ．，Ｒｅｄｍｏｎｄ，ＷＡ）用の特製アドイン（ＤＩ  Ｋｉ  ＬＣＭＳ  Ｔｅｍｐｌａｔｅ  Ｖｅｒｓｉｏｎ  ２．０．０）で処理した。全てのアッセイに関して、全データセット（すなわち、ボセプレビルの全濃度における、全マーカー基質濃度における反応速度）を、ＧｒａＦｉｔ（Ｖｅｒｓｉｏｎ  ４．０  Ｅｒｉｔｈａｃｕｓ  Ｓｏｆｔｗａｒｅ  Ｌｉｍｉｔｅｄ，Ｌｏｎｄｏｎ，ＵＫ）を使用する非線形回帰分析により、競合、非競合、不競合および混合（競合−非競合）阻害（データ非表示）に関するミカエリス−メンテン式にフィットさせた。競合、非競合、不競合および混合阻害に関する各式に対するフィットの度合（適合度）はより低い修正（ｒｅｄｕｃｅｄ）カイ二乗値により示され、これは阻害のタイプの選択のための初期の基礎を与える。ついで該データをイーディー−ホフステープロットとしてプロットした。時には、非線形回帰線は、該イーディー−ホフステープロット上に示されたデータ点に相関していないようであり、阻害の性質を確認するためには該イーディー−ホフステープロットの目視検査が必要かもしれないことに注目すべきである（データ非表示）。ＧｒａＦｉｔソフトウェアは、Ｋｉ値が被検インヒビターの試験濃度範囲内にある場合にのみ、Ｋｉ値を計算するその能力に関して妥当性が確認されている。該データをコンピュータ生成させ、これに含まれるように適切に丸めた。したがって、後続パラメータを計算するための表示値の利用は、場合によっては、表に挙げられているものからの若干の変動をもたらすであろう。
【０１４３】
ボセプレビルをヒト肝ミクロソームと共にプレインキュベートした後の阻害の増強を更に特徴づけるために行ったアッセイからのデータを、コンピュータプログラムＭｉｃｒｏｓｏｆｔ  Ｅｘｃｅｌ（Ｏｆｆｉｃｅ  ２０００  Ｖｅｒｓｉｏｎ  ９．０；Ｍｉｃｒｏｓｏｆｔ  Ｉｎｃ．，Ｒｅｄｍｏｎｄ，ＷＡ）用の特製アドインで処理して、反応速度および対照値に対する百分率を決定した。ついでこれらのデータを、Ｍｉｃｒｏｓｏｆｔ  Ｅｘｃｅｌ（Ｏｆｆｉｃｅ  ２０００  Ｖｅｒｓｉｏｎ  ９．０；Ｍｉｃｒｏｓｏｆｔ  Ｉｎｃ．，Ｒｅｄｍｏｎｄ，ＷＡ）を使用して、棒グラフ上に表示した。
【０１４４】
ＵＶ／Ｖｉｓ分光光度計により代謝産物阻害性複合体生成の決定から得られたデータをＭｉｃｒｏｓｏｆｔ  Ｅｘｃｅｌ（Ｏｆｆｉｃｅ  ２０００  Ｖｅｒｓｉｏｎ  ９．０またはより最近のバージョン；Ｍｉｃｒｏｓｏｆｔ  Ｉｎｃ．，Ｒｅｄｍｏｎｄ，ＷＡ）で処理した。ついで該データをインポートし、グラフ化した（Ｄｅｌｔａ  Ｇｒａｐｈ  Ｐｒｏ  Ｖｅｒｓｉｏｎ  ４．０  ｆｏｒ  Ｗｉｎｄｏｗｓ；ＳＰＳＳ  Ｉｎｃ．，Ｃｈｉｃａｇｏ，ＩＬ）。
【０１４５】
１．３．５  追加的対照
１．３．５．１  インキュベーション時間およびタンパク質濃度に対する線形性
それぞれのＩＣ５０、ＫｉおよびＮＡＤＰＨ依存性／希釈効果の実験に関して、通常のタンパク質濃度の約半分および２倍で、および通常のインキュベーション時間の約半分および２倍でインキュベーションを行って、代謝産物生成がタンパク質濃度およびインキュベーション時間に正比例するかどうかを確認した。これらの対照に関するマーカー基質の濃度はＫｍとほぼ同等であった。全ての場合において、代謝産物生成はタンパク質濃度およびインキュベーション時間に正比例した（データ非表示）。
【０１４６】
１．３．５．２  ［ＩＣ５０］および［Ｋｉ］決定のための陽性対照（適用可能な場合）
以下の直接阻害アッセイでは、該マーカー基質（Ｋｍとほぼ同等）および挙げられている濃度の以下のインヒビターの存在下、通常のインキュベーション時間およびミクロソームタンパク質濃度で追加的なインキュベーションを行った。
【０１４７】
【表１０】
2013535469.tif 000014
全ての場合において、該陽性対照は該酵素活性を阻害した（データ非表示）。以下の時間依存的アッセイでは、（以下のインヒビターの存在下）通常のプレインキュベーション時間およびミクロソームタンパク質濃度で、追加的な０分間および３０分間のプレインキュベーションを行った。第１．３．２．２節に記載されているとおりに該インキュベーションを行った。
【０１４８】
【表１１】
2013535469.tif 000015
全ての場合において、該陽性対照は該酵素活性を代謝依存的に阻害した（データ非表示）。
【０１４９】
１．３．５．３  時間依存的阻害実験（ＮＡＤＰＨ依存性および希釈効果の決定）のための陽性対照
トロレアンドマイシンを含有する追加的なインキュベーション物をＣＹＰ３Ａ４／５に関する陽性対照インヒビターとして使用した（データ非表示）。これらのプレインキュベーションでは、トロレアンドマイシン（テストステロン６β−ヒドロキシル化では２５μＭ、ミダゾラム１’−ヒドロキシル化では７．５μＭ）の二重サンプルを、ＮＡＤＰＨ生成系の存在下および非存在下で０分間および３０分間プレインキュベートした（第１．３．２．３節に記載されている希釈工程を伴う及び伴わない）。ついでマーカー基質（テストステロンβ−ヒドロキシル化では約２Ｋｍおよびミダゾラム１’−ヒドロキシル化では１０Ｋｍ）を加え、該インキュベーションを５分間継続して、該マーカー基質の代謝産物を生成させた。ついで残留ＣＹＰ３Ａ４／５活性を決定した。
【０１５０】
１．３．５．４  ＭＩＣ陽性対照
該ＭＩＣ生成実験のために、アセトニトリルに溶解されたトロレアンドマイシン（２５μＭ）の存在下でスキャンを行った。
【０１５１】
１．４  結果および考察
１．４．１  ヒトＣＹＰ酵素の直接および時間依存的インヒビターとしてのボセプレビルの評価
１．４．１．１  ［ＩＣ５０］値の決定
調べた実験条件下、ボセプレビルは（ミダゾラム１’−ヒドロキシル化により測定された場合に）１１μＭのＩＣ５０値でＣＹＰ３Ａ４／５の直接阻害を引き起こした。ボセプレビルによる（テストステロン６β−ヒドロキシル化により測定された場合の）ＣＹＰ１Ａ２、ＣＹＰ２Ａ６、ＣＹＰ２Ｃ８、ＣＹＰ２Ｃ１９、ＣＹＰ２Ｄ６およびＣＹＰ３Ａ４／５の直接阻害の証拠も存在した。なぜなら、１００μＭまでのボセプレビル濃度で２２％、２０％、２５％、２５％、４５％および４１％の阻害が観察されたが、これらの酵素に関するＩＣ５０値は１００μＭより大きなものとして示されたからである。更に、ボセプレビルはＣＹＰ２Ｂ６、ＣＹＰ２Ｃ９またはＣＹＰ２Ｅ１の直接阻害をほとんど又は全く引き起こさず、これらの酵素に関して決定されたＩＣ５０値は被検ボセプレビルの最高濃度より大きなもの（＞１００μＭ）として示された（表６）。
【０１５２】
調べた実験条件下、ボセプレビルは、ＣＹＰ１Ａ２、ＣＹＰ２Ａ６、ＣＹＰ２Ｂ６、ＣＹＰ２Ｃ８、ＣＹＰ２Ｃ９、ＣＹＰ２Ｃ１９、ＣＹＰ２Ｄ６またはＣＹＰ２Ｅ１の認識可能な時間依存的阻害を引き起こさなかった。なぜなら、プレインキュベーションに際して阻害における顕著な増強は観察されなかったからである。しかし、調べた実験条件下、（テストステロンおよびミダゾラムの両方をマーカー基質として使用した場合に）ボセプレビルはＣＹＰ３Ａ４／５の時間依存的阻害を引き起こした。なぜなら、ボセプレビルをヒト肝ミクロソームと共に３０分間プレインキュベートした後、阻害の増強が観察されたからである（表６、図１および３）。
【０１５３】
第１．３．２節（ヒトＣＹＰ酵素のインヒビターとしてのボセプレビルの評価）に記載されている実験は、ＮＡＤＰＨ生成系の存在下かつマーカー基質の非存在下でヒト肝ミクロソームをプレインキュベートすることを含んでいたことに注目すべきである。幾つかの場合には、そのようなインキュベーションを行った場合、ボセプレビルの存在には無関係に、該被検酵素の活性の何らかの低下が観察された（データ非表示）。酵素活性のこの低下は（例えば、反応性酸素種による；Ｚａｎｇｅｒら，（２００４）（８））ＣＹＰ酵素の不活性化によるものだと考えられる。
【０１５４】
１．４．１．２  ［Ｋｉ］値の決定
調べた実験条件下、Ｋｉの決定は、ボセプレビルが（ミダゾラム１’−ヒドロキシル化により決定された場合に）７．７μＭのＫｉ値を有するＣＹＰ３Ａ４／５の競合インヒビターであることを示した（表６、図４）。
【０１５５】
１．４．１．３  ボセプレビルに関するＮＡＤＰＨ依存性および希釈効果の決定
ＣＹＰ３Ａ４／５の時間依存的阻害の更なる評価（テストステロン６β−ヒドロキシル化およびミダゾラム１’−ヒドロキシル化により測定された場合）は、該阻害の増強がＮＡＤＰＨを要するが、希釈に抵抗性でないらしいことを示した（図６、図２および５）。
【０１５６】
１．４．１．４  代謝産物阻害性複合体（ＭＩＣ）生成の調査
ボセプレビルは、高レベルのＣＹＰ３Ａ４／５を含有するヒト肝ミクロソームサンプルでは、分光学的に視認可能なＭＩＣを生成しないようであった（データ非表示）。
【０１５７】
１．５  結論
ボセプレビルはＣＹＰ２Ｂ６、ＣＹＰ２Ｃ９またはＣＹＰ２Ｅ１の直接阻害をほとんど又は全く引き起こさず、これらの酵素に関して決定されたＩＣ５０値は被検ボセプレビルの最高濃度より大きなもの（＞１００μＭ）として示された。
【０１５８】
ボセプレビルは、（ミダゾラム１’−ヒドロキシル化により測定された場合に）１１μＭのＩＣ５０値でＣＹＰ３Ａ４／５の直接阻害を引き起こした。ボセプレビルによる（テストステロン６β−ヒドロキシル化により測定された場合の）ＣＹＰ１Ａ２、ＣＹＰ２Ａ６、ＣＹＰ２Ｃ８、ＣＹＰ２Ｃ１９、ＣＹＰ２Ｄ６およびＣＹＰ３Ａ４／５の直接阻害の証拠が存在した。なぜなら、１００μＭまでのＢＯＣ濃度で２２％、２０％、２５％、２５％、４５％および４１％の阻害が観察され、これらの酵素に関するＩＣ５０値は１００μＭより大きなものとして示されたからである。
【０１５９】
ボセプレビルは、（ミダゾラム１’−ヒドロキシル化により測定された場合に）７．７μＭのＫｉ値を有するＣＹＰ３Ａ４／５の競合インヒビターであることが判明した。
【０１６０】
ＣＹＰ３Ａ４／５の時間依存的阻害（テストステロン６β−ヒドロキシル化およびミダゾラム１’−ヒドロキシル化により測定された場合）は、該阻害の増強がＮＡＤＰＨを要するが、希釈に抵抗性でないらしいことを示した。
【０１６１】
ボセプレビルは、高レベルのＣＹＰ３Ａ４／５を含有するヒト肝ミクロソームサンプルでは、分光学的に視認可能なＭＩＣを生成しないようであった。
【０１６２】
１．６  参考文献一覧表
【０１６３】
【表１２】
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【０１６４】
【表１３】
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【０１６５】
【表１４】
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【０１６６】
【表１５】
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【０１６７】
【表１６】
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【０１６８】
【表１７】
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実施例２：ヒトシトクロムＰ４５０酵素のインヒビターとしてのボセプレビル（ＢＯＣ）の臨床評価
感受性ＣＹＰ３Ａ４／５基質であるミダゾラム（ＭＤＺ）の代謝に対するボセプレビルの効果をモニターすることにより、ＣＹＰ３Ａ４／５を阻害するボセプレビルの能力を評価するために、ＭＤＺの薬物動態（ＰＫ）プロファイルに対するボセプレビルの効果を決定するための臨床研究を行った。
【０１６９】
２．１  一般的方法
この研究は、医薬品の臨床試験の実施に関する基準に従い、単一施設にて、健常成人被験者（７名の男性および５名の女性被験者）において行った。該研究は、一定の順序の計画（ボセプレビル単独およびそれに続くＭＤＺ＋ボセプレビル）に従った。ＭＤＺおよびその代謝産物（１−ヒドロキシミダゾラム［１−ＯＨ−ＭＤＺ］）のＰＫプロファイルを、ＭＤＺを単独で投与した場合に決定し、ボセプレビルの共投与の後およびボセプレビル投与後の７日間の洗出し期間の後のＰＫプロファイルと比較した。
【０１７０】
２．２  試験物、用量、投与方法
ボセプレビル（ＢＯＣ）８００ｍｇを４×２００ｍｇのカプセルとして投与した。ＭＤＺ  ４ｍｇを経口溶液の単一用量として投与した。
【０１７１】
２．３  投与治療
・第１日：ＭＤＺ  ４ｍｇ（経口溶液、単一用量）。
【０１７２】
・第１日〜第５日：ボセプレビル８００ｍｇ（４×２００ｍｇカプセル）ＴＩＤ。
【０１７３】
・第６日：ＭＤＺ  ４ｍｇ（経口溶液、単一用量）およびボセプレビル８００ｍｇ（４×２００ｍｇカプセル）ＴＩＤ。
【０１７４】
・第８日および第１３日：ＭＤＺ  ４ｍｇ（経口溶液、単一用量）。
【０１７５】
ＰＫ分析のための血液サンプルを集めた。
【０１７６】
・ＭＤＺおよび１−ＯＨ−ＭＤＺの場合：第−１、６、８および１３日：投与前（０時間）ならびに投与後０．５、１、２、３、４、８、１２および２４時間。
【０１７７】
ボセプレビルの場合：第４日および第５日および第６日に投与前（０時間）：投与前（０時間）ならびに投与後０．５、１、２、３、４、６および８時間。該８時間サンプルは、ボセプレビルの次の用量の投与の前に集めることになっていた。
【０１７８】
２．４  結果および考察
この臨床ｐＫ研究の結果を以下の表７および８に示す。
【０１７９】
【表１８】
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【０１８０】
【表１９】
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平均ＭＤＺ  ＣｍａｘおよびＡＵＣ（０−２４時間）値は、ＭＤＺ単独の場合（第１日）と比較してＭＤＺとボセプレビルとの共投与の後（第６日）では顕著に高かった。ＭＤＺ  Ｃｍａｘの相乗平均比率に関する点推定値は２７７％であり、ＡＵＣ（０−２４時間）に関しては５３０％であった。ＭＤＺの血漿濃度は第８日（ボセプレビルの最終投与の４８時間後）までにベースライン値に戻った。
【０１８１】
平均１−ＯＨ−ＭＤＺ  ＣｍａｘおよびＡＵＣ（０−２４時間）はＭＤＺとボセプレビルとの共投与の後で減少し、第１３日までにベースライン値に完全に戻った。１−ＯＨ  ＭＤＺ  ＣｍａｘおよびＡＵＣ（０−２４時間）の相乗平均比率に関する点推定値は、ＭＤＺ単独の場合（第−１日）と比較してＭＤＺとボセプレビルとの共投与の後（第６日）では、それぞれ２９％および５６％であった。
【０１８２】
２．５  結論
ＭＤＺとボセプレビルとの共投与はＭＤＺ曝露における３〜５倍の増加をもたらした。ボセプレビルはＣＹＰ３Ａ４／５の強力な時間依存的可逆的インヒビターである。したがって、ＣＹＰ３Ａ４／５基質である他の薬物の薬物動態学的曝露を強化または増強するためにボセプレビルを利用することが可能である。
【図１Ａ】
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【図１Ｂ】
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【図１Ｃ】
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【図２Ａ】
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【図２Ｂ】
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【図２Ｃ】
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【図３Ａ】
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【図３Ｂ】
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【図３Ｃ】
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【図４Ａ】
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【図４Ｂ】
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【図４Ｃ】
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【図５Ａ】
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【図５Ｂ】
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【図５Ｃ】
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【国際調査報告】
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