(57)【要約】  本発明は、エルロチニブおよびゲフィチニブのようなチロシンキナーゼ阻害剤に治療抵抗性であるか、治療抵抗性であったことのあるＥＧＦＲ発動性がんに罹患している患者に、一般式（Ｉ）で示される化合物を投与することにより、該患者を治療する方法に関する。本発明はまた、明細書に記載したＥＧＦＲ突然変異を有するＥＧＦＲ発動性がんの治療または処置にも関する。【特許請求の範囲】
【請求項１】
患者におけるＥＧＦＲ発動性がんを処置する方法であって、該患者に治療有効量の下記一般式（Ｉ）で示される化合物またはその薬学的に許容される塩を投与することを含む方法。
【化２３】
2013539795.tif 000024
上記式中、
Ｒdは、Ｈ、Ｃ1-4アルキル、Ｃ1-4アルコキシ、もしくはハロゲンであり；そしてＲeはＨもしくはＮＨ2であるか；またはＲdとＲeが、それらが結合しているピリミジン環原子と一緒に、Ｎ、ＳおよびＯから独立して選ばれた１、２もしくは３個のヘテロ原子を含有する５もしくは６員環を形成し、ここで該５もしくは６員環はＲhで置換されており；
ＲhはＨ、Ｃ1-4アルキルまたはハロゲンであり；
Ｒa2はＨ、Ｃ1-6アルコキシ、Ｃ3-6アルケニルオキシまたはＣ3-6シクロアルキルオキシであり；
Ｒgは−Ｐ(Ｏ)(Ｒ3A)(Ｒ3B)、−Ｓ(Ｏ)Ｎ(Ｒ3C)(Ｒ3D)、−Ｓ(Ｏ)2Ｒ3E、−ＯＣ(Ｏ)Ｎ(Ｒ3F)(Ｒ3G)、−ＮＲ3HＣ(Ｏ)ＯＲ3I、１、２、３もしくは４個のＮ原子を含む５もしくは６員複素環であるか、またはＲg2と組み合わさって５〜７員複素環を形成し、ここでＲ3A、Ｒ3B、Ｒ3C、Ｒ3D、Ｒ3E、Ｒ3F、Ｒ3G、Ｒ3H、およびＲ3Iのそれぞれは、独立して、Ｈ、アルキル、アルケニル、アルキニル、シクロアルキル、シクロアルケニル、シクロアルキニル、およびヘテロアルキルから選ばれるか、またはＲ3AとＲ3B、もしくはＲ3CとＲ3D、もしくはＲ3FとＲ3Gは、それらが結合している原子と一緒に組み合わさって、非置換もしくは置換の５もしくは６員複素環を形成し；
Ｒg2はＨ、Ｆ、Ｃ1-4アルキルであるか、またはＲg2とＲgはそれらが結合している原子と一緒に、Ｐ、Ｎ、ＯおよびＳから独立して選ばれた１〜３個のヘテロ原子を含む５〜７員複素環を形成し、該複素環は非置換もしくは置換であり；
Ｒg1はＨ、Ｆ、または１もしくは２個のＮ原子を含有する５もしくは６員複素環であり、該複素環は非置換もしくは置換であり；
Ｒb2はＨ、Ｆ、または１、２もしくは３個のＮもしくはＯ原子を含有する５もしくは６員複素環であり、該複素環は非置換もしくは置換であり；
Ｒb4はＨ、Ｆ、Ｃ1-6アルコキシ、Ｃ3-6アルケニルオキシ、Ｃ3-6シクロアルキルオキシ、−ＯＣ(Ｏ)Ｎ(Ｒ5A)(Ｒ5B)、−ＮＲ5CＣ(Ｏ)ＯＲ5D、１、２もしくは３個のＮもしくはＯ原子を含む５もしくは６員複素環であり、該複素環は非置換もしくは置換であり、またはＲb4とＲa1は、それらが結合している原子と一緒に１、２もしくは３個のＮもしくはＯ原子を含有する非置換もしくは置換の６員複素環を形成し；
Ｒ5A、Ｒ5B、Ｒ5C、およびＲ5Dのそれぞれは、独立して、Ｈ、アルキル、アルケニル、アルキニル、およびヘテロアルキルから選ばれるか、またはＲ5AとＲ5Bは、それらが結合している原子と一緒に組み合わさって、非置換もしくは置換の５もしくは６員複素環を形成し；
Ｒa1は、Ｒb4と組み合わさって６員複素環を形成するか、またはＲa1は、Ｈ、ハロゲン、−ＣＮ、−ＮＯ2、−Ｒ1、−ＯＲ2、−Ｏ−ＮＲ1Ｒ2、−ＮＲ1Ｒ2、−ＮＲ1−ＮＲ1Ｒ2、−ＮＲ1−ＯＲ2、−Ｃ(Ｏ)ＹＲ2、−ＯＣ(Ｏ)ＹＲ2、−ＮＲ1Ｃ(Ｏ)ＹＲ2、−ＳＣ(Ｏ)ＹＲ2、−ＮＲ1Ｃ(＝Ｓ)ＹＲ2、−ＯＣ(＝Ｓ)ＹＲ2、−Ｃ(＝Ｓ)ＹＲ2、−ＹＣ(＝ＮＲ1)ＹＲ2、−ＹＣ(＝Ｎ−ＯＲ1)ＹＲ2、−ＹＣ(＝Ｎ−ＮＲ1Ｒ2)ＹＲ2、−ＹＰ(＝Ｏ)(ＹＲ1)(ＹＲ2)、−ＮＲ1ＳＯ2Ｒ2、−Ｓ(Ｏ)rＲ2、−ＳＯ2ＮＲ1Ｒ2、−ＮＲ1ＳＯ2ＮＲ1Ｒ2、または次式で示される基であり；
【化２４】
2013539795.tif 000025
各Ｙは、独立して、単結合、−Ｏ−、−Ｓ−また−ＮＲ1−であり；
Ｒ1およびＲ2は、出てくるごとに独立して、Ｈ、アルキル、アルケニル、アルキニル、シクロアルキル、シクロアルケニル、シクロアルキニル、アリール、ヘテロアルキル、複素環基、またはヘテロアリールであり；
Ｘ1およびＸ2はそれぞれ独立して、ＣＨまたはＮであり；そして
Ｒ4は、アルキル、アルケニル、アルキニル、シクロアルキル、シクロアルケニル、シクロアルキニル、アリール、ヘテロアルキル、複素環基、またはヘテロアリールである。
【請求項２】
下記工程を含む、患者におけるＥＧＦＲ発動性がんの処置方法：
ａ）上皮成長因子受容体キナーゼ（ＥＧＦＲ）における変異の存在を特徴とするがんに罹患した患者を提供し、そして
ｂ）該患者に治療有効量の一般式（Ｉ）で示される化合物またはその薬学的に許容される塩を投与する。
【化２５】
2013539795.tif 000026
上記式中、
Ｒdは、Ｈ、Ｃ1-4アルキル、Ｃ1-4アルコキシ、もしくはハロゲンであり；そしてＲeはＨもしくはＮＨ2であるか；またはＲdとＲeが、それらが結合しているピリミジン環原子と一緒に、Ｎ、ＳおよびＯから独立して選ばれた１、２もしくは３個のヘテロ原子を含有する５もしくは６員環を形成し、ここで該５もしくは６員環はＲhで置換されており；
ＲhはＨ、Ｃ1-4アルキルまたはハロゲンであり；
Ｒa2はＨ、Ｃ1-6アルコキシ、Ｃ3-6アルケニルオキシまたはＣ3-6シクロアルキルオキシであり；
Ｒgは−Ｐ(Ｏ)(Ｒ3A)(Ｒ3B)、−Ｓ(Ｏ)Ｎ(Ｒ3C)(Ｒ3D)、−Ｓ(Ｏ)2Ｒ3E、−ＯＣ(Ｏ)Ｎ(Ｒ3F)(Ｒ3G)、−ＮＲ3HＣ(Ｏ)ＯＲ3I、１、２、３もしくは４個のＮ原子を含む５もしくは６員複素環であるか、またはＲg2と組み合わさって５〜７員複素環を形成し、ここでＲ3A、Ｒ3B、Ｒ3C、Ｒ3D、Ｒ3E、Ｒ3F、Ｒ3G、Ｒ3H、およびＲ3Iのそれぞれは、独立して、Ｈ、アルキル、アルケニル、アルキニル、シクロアルキル、シクロアルケニル、シクロアルキニル、およびヘテロアルキルから選ばれるか、またはＲ3AとＲ3B、もしくはＲ3CとＲ3D、もしくはＲ3FとＲ3Gは、それらが結合している原子と一緒に組み合わさって、非置換もしくは置換の５もしくは６員複素環を形成し；
Ｒg2はＨ、Ｆ、Ｃ1-4アルキルであるか、またはＲg2とＲgはそれらが結合している原子と一緒に、Ｐ、Ｎ、ＯおよびＳから独立して選ばれた１〜３個のヘテロ原子を含む５〜７員複素環を形成し、該複素環は非置換もしくは置換であり；
Ｒg1はＨ、Ｆ、または１もしくは２個のＮ原子を含有する５もしくは６員複素環であり、該複素環は非置換もしくは置換であり；
Ｒb2はＨ、Ｆ、または１、２もしくは３個のＮもしくはＯ原子を含有する５もしくは６員複素環であり、該複素環は非置換もしくは置換であり；
Ｒb4はＨ、Ｆ、Ｃ1-6アルコキシ、Ｃ3-6アルケニルオキシ、Ｃ3-6シクロアルキルオキシ、−ＯＣ(Ｏ)Ｎ(Ｒ5A)(Ｒ5B)、−ＮＲ5CＣ(Ｏ)ＯＲ5D、１、２もしくは３個のＮもしくはＯ原子を含む５もしくは６員複素環であり、該複素環は非置換もしくは置換であり、またはＲb4とＲa1は、それらが結合している原子と一緒に１、２もしくは３個のＮもしくはＯ原子を含有する非置換もしくは置換の６員複素環を形成し；
Ｒ5A、Ｒ5B、Ｒ5C、およびＲ5Dのそれぞれは、独立して、Ｈ、アルキル、アルケニル、アルキニル、もしくはヘテロアルキルであるか、またはＲ5AとＲ5Bは、それらが結合している原子と一緒に組み合わさって、非置換もしくは置換の５もしくは６員複素環を形成し；
Ｒa1は、Ｒb4と組み合わさって６員複素環を形成するか、またはＲa1は、Ｈ、ハロゲン、−ＣＮ、−ＮＯ2、−Ｒ1、−ＯＲ2、−Ｏ−ＮＲ1Ｒ2、−ＮＲ1Ｒ2、−ＮＲ1−ＮＲ1Ｒ2、−ＮＲ1−ＯＲ2、−Ｃ(Ｏ)ＹＲ2、−ＯＣ(Ｏ)ＹＲ2、−ＮＲ1Ｃ(Ｏ)ＹＲ2、−ＳＣ(Ｏ)ＹＲ2、−ＮＲ1Ｃ(＝Ｓ)ＹＲ2、−ＯＣ(＝Ｓ)ＹＲ2、−Ｃ(＝Ｓ)ＹＲ2、−ＹＣ(＝ＮＲ1)ＹＲ2、−ＹＣ(＝Ｎ−ＯＲ1)ＹＲ2、−ＹＣ(＝Ｎ−ＮＲ1Ｒ2)ＹＲ2、−ＹＰ(＝Ｏ)(ＹＲ1)(ＹＲ2)、−ＮＲ1ＳＯ2Ｒ2、−Ｓ(Ｏ)rＲ2、−ＳＯ2ＮＲ1Ｒ2、−ＮＲ1ＳＯ2ＮＲ1Ｒ2、または次式で示される基であり；
【化２６】
2013539795.tif 000027
各Ｙは、独立して、単結合、−Ｏ−、−Ｓ−また−ＮＲ1−であり；
Ｒ1およびＲ2は、出てくるごとに独立して、Ｈ、アルキル、アルケニル、アルキニル、シクロアルキル、シクロアルケニル、シクロアルキニル、アリール、ヘテロアルキル、複素環基、またはヘテロアリールであり；
Ｘ1およびＸ2はそれぞれ独立して、ＣＨまたはＮであり；そして
Ｒ4は、アルキル、アルケニル、アルキニル、シクロアルキル、シクロアルケニル、シクロアルキニル、アリール、ヘテロアルキル、複素環基、またはヘテロアリールである。
【請求項３】
前記ＥＧＦＲ発動性がんが、（ｉ）Ｌ８５８Ｒ、（ii）Ｔ７９０Ｍ、（iii）Ｌ８５８ＲとＴ７９０Ｍの両方、（iv）ｄｅｌＥ７４６＿Ａ７５０、および（ｖ）ｄｅｌＥ７４６＿Ａ７５０とＴ７９０Ｍの両方から選ばれた１または２以上の変異の存在を特徴とするものである、請求項２に記載の方法。
【請求項４】
前記ＥＧＦＲ発動性がんが、非小細胞肺がん（ＮＳＣＬＣ）、神経膠芽腫、膵臓がん、頭頚部がん（例、扁平上皮細胞がん）、乳がん、大腸がん、上皮がん、卵巣がん、前立腺がん、または腺がんである、請求項１〜３のいずれかに記載の方法。
【請求項５】
ＥＧＦＲ変異体を発現する細胞の増殖を阻害する方法であって、前記細胞をその増殖を阻害するのに十分な量の一般式（Ｉ）で示される化合物またはその薬学的に許容される塩と接触させることを含む方法。
【化２７】
2013539795.tif 000028
上記式中、
Ｒdは、Ｈ、Ｃ1-4アルキル、Ｃ1-4アルコキシ、もしくはハロゲンであり；そしてＲeはＨもしくはＮＨ2であるか；またはＲdとＲeが、それらが結合しているピリミジン環原子と一緒に、Ｎ、ＳおよびＯから独立して選ばれた１もしくは２個のヘテロ原子を含有する５もしくは６員環を形成し、ここで該５もしくは６員環はＲhで置換されており；
ＲhはＨ、Ｃ1-4アルキルまたはハロゲンであり；
Ｒa2はＨ、Ｃ1-6アルコキシ、Ｃ3-6アルケニルオキシまたはＣ3-6シクロアルキルオキシであり；
Ｒgは−Ｐ(Ｏ)(Ｒ3A)(Ｒ3B)、−Ｓ(Ｏ)Ｎ(Ｒ3C)(Ｒ3D)、−Ｓ(Ｏ)2Ｒ3E、−ＯＣ(Ｏ)Ｎ(Ｒ3F)(Ｒ3G)、−ＮＲ3HＣ(Ｏ)ＯＲ3I、１、２、３もしくは４個のＮ原子を含む５もしくは６員複素環であるか、またはＲg2と組み合わさって５〜７員複素環を形成し、ここでＲ3A、Ｒ3B、Ｒ3C、Ｒ3D、Ｒ3E、Ｒ3F、Ｒ3G、Ｒ3H、およびＲ3Iのそれぞれは、独立して、Ｈ、アルキル、アルケニル、アルキニル、シクロアルキル、シクロアルケニル、シクロアルキニル、およびヘテロアルキルから選ばれるか、またはＲ3AとＲ3B、もしくはＲ3CとＲ3D、もしくはＲ3FとＲ3Gは、それらが結合している原子と一緒に組み合わさって、非置換もしくは置換の５もしくは６員複素環を形成し；
Ｒg2はＨ、Ｆ、Ｃ1-4アルキルであるか、またはＲg2とＲgはそれらが結合している原子と一緒に、Ｐ、Ｎ、ＯおよびＳから独立して選ばれた１〜３個のヘテロ原子を含む５〜７員複素環を形成し、該複素環は非置換もしくは置換であり；
Ｒg1はＨ、Ｆ、または１もしくは２個のＮ原子を含有する５もしくは６員複素環であり、該複素環は非置換もしくは置換であり；
Ｒb2はＨ、Ｆ、または１、２もしくは３個のＮもしくはＯ原子を含有する５もしくは６員複素環であり、該複素環は非置換もしくは置換であり；
Ｒb4はＨ、Ｆ、Ｃ1-6アルコキシ、Ｃ3-6アルケニルオキシ、Ｃ3-6シクロアルキルオキシ、−ＯＣ(Ｏ)Ｎ(Ｒ5A)(Ｒ5B)、−ＮＲ5CＣ(Ｏ)ＯＲ5D、１、２もしくは３個のＮもしくはＯ原子を含む５もしくは６員複素環であり、該複素環は非置換もしくは置換であり、またはＲb4とＲa1は、それらが結合している原子と一緒に１、２もしくは３個のＮもしくはＯ原子を含有する非置換もしくは置換の６員複素環を形成し；
Ｒ5A、Ｒ5B、Ｒ5C、およびＲ5Dのそれぞれは、独立して、Ｈ、アルキル、アルケニル、アルキニル、およびヘテロアルキルから選ばれるか、またはＲ5AとＲ5Bは、それらが結合している原子と一緒に組み合わさって、非置換もしくは置換の５もしくは６員複素環を形成し；
Ｒa1は、Ｒb4と組み合わさって６員複素環を形成するか、またはＲa1は、Ｈ、ハロゲン、−ＣＮ、−ＮＯ2、−Ｒ1、−ＯＲ2、−Ｏ−ＮＲ1Ｒ2、−ＮＲ1Ｒ2、−ＮＲ1−ＮＲ1Ｒ2、−ＮＲ1−ＯＲ2、−Ｃ(Ｏ)ＹＲ2、−ＯＣ(Ｏ)ＹＲ2、−ＮＲ1Ｃ(Ｏ)ＹＲ2、−ＳＣ(Ｏ)ＹＲ2、−ＮＲ1Ｃ(＝Ｓ)ＹＲ2、−ＯＣ(＝Ｓ)ＹＲ2、−Ｃ(＝Ｓ)ＹＲ2、−ＹＣ(＝ＮＲ1)ＹＲ2、−ＹＣ(＝Ｎ−ＯＲ1)ＹＲ2、−ＹＣ(＝Ｎ−ＮＲ1Ｒ2)ＹＲ2、−ＹＰ(＝Ｏ)(ＹＲ1)(ＹＲ2)、−ＮＲ1ＳＯ2Ｒ2、−Ｓ(Ｏ)rＲ2、−ＳＯ2ＮＲ1Ｒ2、−ＮＲ1ＳＯ2ＮＲ1Ｒ2、または次式で示される基であり；
【化２８】
2013539795.tif 000029
各Ｙは、独立して、単結合、−Ｏ−、−Ｓ−また−ＮＲ1−であり；
Ｒ1およびＲ2は、出てくるごとに独立して、Ｈ、アルキル、アルケニル、アルキニル、シクロアルキル、シクロアルケニル、シクロアルキニル、アリール、ヘテロアルキル、複素環基、またはヘテロアリールであり；
Ｘ1およびＸ2はそれぞれ独立して、ＣＨまたはＮであり；そして
Ｒ4は、アルキル、アルケニル、アルキニル、シクロアルキル、シクロアルケニル、シクロアルキニル、アリール、ヘテロアルキル、複素環基、またはヘテロアリールである。
【請求項６】
前記ＥＧＦＲ変異が、上皮成長因子受容体キナーゼ（ＥＧＦＲ）における、（ｉ）Ｌ８５８Ｒ、（ii）Ｔ７９０Ｍ、（iii）Ｌ８５８ＲとＴ７９０Ｍの両方、（iv）ｄｅｌＥ７４６＿Ａ７５０、および（ｖ）ｄｅｌＥ７４６＿Ａ７５０とＴ７９０Ｍの両方から選ばれた１または２以上の変異の存在を特徴とするものである、請求項５に記載の方法。
【請求項７】
前記細胞ががん細胞である、請求項５または６に記載の方法。
【請求項８】
前記がん細胞が、非小細胞肺がん（ＮＳＣＬＣ）、神経膠芽腫、膵臓がん、頭頚部がん（例、扁平上皮細胞がん）、乳がん、大腸がん、上皮がん、卵巣がん、前立腺がん、または腺がん由来の細胞である、請求項１〜３のいずれかに記載の方法。
【請求項９】
患者におけるエルロチニブもしくはゲフィチニブ、またはそのいずれかの薬学的に許容される塩に治療抵抗性のＥＧＦＲ発動性がんを処置する方法であって、前記がんを処置するのに十分な量の一般式（Ｉ）で示される化合物またはその薬学的に許容される塩を前記患者に投与することを含む方法。
【化２９】
2013539795.tif 000030
上記式中、
Ｒdは、Ｈ、Ｃ1-4アルキル、Ｃ1-4アルコキシ、もしくはハロゲンであり；そしてＲeはＨもしくはＮＨ2であるか；またはＲdとＲeが、それらが結合しているピリミジン環原子と一緒に、Ｎ、ＳおよびＯから独立して選ばれた１、２もしくは３個のヘテロ原子を含有する５もしくは６員環を形成し、ここで該５もしくは６員環はＲhで置換されており；
ＲhはＨ、Ｃ1-4アルキルまたはハロゲンであり；
Ｒa2はＨ、Ｃ1-6アルコキシ、Ｃ3-6アルケニルオキシまたはＣ3-6シクロアルキルオキシであり；
Ｒgは−Ｐ(Ｏ)(Ｒ3A)(Ｒ3B)、−Ｓ(Ｏ)Ｎ(Ｒ3C)(Ｒ3D)、−Ｓ(Ｏ)2Ｒ3E、−ＯＣ(Ｏ)Ｎ(Ｒ3F)(Ｒ3G)、−ＮＲ3HＣ(Ｏ)ＯＲ3I、１、２、３もしくは４個のＮ原子を含む５もしくは６員複素環であるか、またはＲg2と組み合わさって５〜７員複素環を形成し、ここでＲ3A、Ｒ3B、Ｒ3C、Ｒ3D、Ｒ3E、Ｒ3F、Ｒ3G、Ｒ3H、およびＲ3Iのそれぞれは、独立して、Ｈ、アルキル、アルケニル、アルキニル、シクロアルキル、シクロアルケニル、シクロアルキニル、およびヘテロアルキルから選ばれるか、またはＲ3AとＲ3B、もしくはＲ3CとＲ3D、もしくはＲ3FとＲ3Gは、それらが結合している原子と一緒に組み合わさって、非置換もしくは置換の５もしくは６員複素環を形成し；
Ｒg2はＨ、Ｆ、Ｃ1-4アルキルであるか、またはＲg2とＲgはそれらが結合している原子と一緒に、Ｐ、Ｎ、ＯおよびＳから独立して選ばれた１〜３個のヘテロ原子を含む５〜７員複素環を形成し、該複素環は非置換もしくは置換であり；
Ｒg1はＨ、Ｆ、または１もしくは２個のＮ原子を含有する５もしくは６員複素環であり、該複素環は非置換もしくは置換であり；
Ｒb2はＨ、Ｆ、または１、２もしくは３個のＮもしくはＯ原子を含有する５もしくは６員複素環であり、該複素環は非置換もしくは置換であり；
Ｒb4はＨ、Ｆ、Ｃ1-6アルコキシ、Ｃ3-6アルケニルオキシ、Ｃ3-6シクロアルキルオキシ、−ＯＣ(Ｏ)Ｎ(Ｒ5A)(Ｒ5B)、−ＮＲ5CＣ(Ｏ)ＯＲ5D、１、２もしくは３個のＮもしくはＯ原子を含む５もしくは６員複素環であり、該複素環は非置換もしくは置換であり、またはＲb4とＲa1は、それらが結合している原子と一緒に１、２もしくは３個のＮもしくはＯ原子を含有する非置換もしくは置換の６員複素環を形成し；
Ｒ5A、Ｒ5B、Ｒ5C、およびＲ5Dのそれぞれは、独立して、Ｈ、アルキル、アルケニル、アルキニル、およびヘテロアルキルから選ばれるか、またはＲ5AとＲ5Bは、それらが結合している原子と一緒に組み合わさって、非置換もしくは置換の５もしくは６員複素環を形成し；
Ｒa1は、Ｒb4と組み合わさって６員複素環を形成するか、またはＲa1は、Ｈ、ハロゲン、−ＣＮ、−ＮＯ2、−Ｒ1、−ＯＲ2、−Ｏ−ＮＲ1Ｒ2、−ＮＲ1Ｒ2、−ＮＲ1−ＮＲ1Ｒ2、−ＮＲ1−ＯＲ2、−Ｃ(Ｏ)ＹＲ2、−ＯＣ(Ｏ)ＹＲ2、−ＮＲ1Ｃ(Ｏ)ＹＲ2、−ＳＣ(Ｏ)ＹＲ2、−ＮＲ1Ｃ(＝Ｓ)ＹＲ2、−ＯＣ(＝Ｓ)ＹＲ2、−Ｃ(＝Ｓ)ＹＲ2、−ＹＣ(＝ＮＲ1)ＹＲ2、−ＹＣ(＝Ｎ−ＯＲ1)ＹＲ2、−ＹＣ(＝Ｎ−ＮＲ1Ｒ2)ＹＲ2、−ＹＰ(＝Ｏ)(ＹＲ1)(ＹＲ2)、−ＮＲ1ＳＯ2Ｒ2、−Ｓ(Ｏ)rＲ2、−ＳＯ2ＮＲ1Ｒ2、−ＮＲ1ＳＯ2ＮＲ1Ｒ2、または次式で示される基であり；
【化３０】
2013539795.tif 000031
各Ｙは、独立して、単結合、−Ｏ−、−Ｓ−また−ＮＲ1−であり；
Ｒ1およびＲ2は、出てくるごとに独立して、Ｈ、アルキル、アルケニル、アルキニル、シクロアルキル、シクロアルケニル、シクロアルキニル、アリール、ヘテロアルキル、複素環基、またはヘテロアリールであり；
Ｘ1およびＸ2はそれぞれ独立して、ＣＨまたはＮであり；そして
Ｒ4は、アルキル、アルケニル、アルキニル、シクロアルキル、シクロアルケニル、シクロアルキニル、アリール、ヘテロアルキル、複素環基、またはヘテロアリールである。
【請求項１０】
前記一般式（Ｉ）で示される化合物が、下記一般式（IIａ）もしくは一般式（IIｂ）により示される化合物であか、またはその薬学的に許容される塩である請求項１〜９のいずれかに記載の方法。
【化３１】
2013539795.tif 000032
式中、Ｒa1、Ｒa2、Ｒb2、Ｒb4、Ｒg、Ｒg1、Ｒg2、Ｒd、およびＲhは一般式（Ｉ）において定義した通りである。
【請求項１１】
Ｒg1、Ｒg2、Ｒb2およびＲb4がＨまたはＦである請求項１０に記載の方法。
【請求項１２】
ＲdがＣｌ、ＦまたはＣＦ3である、請求項１０に記載の方法。
【請求項１３】
Ｒa1がメトキシである請求項１０に記載の方法。
【請求項１４】
Ｒgが−Ｐ(Ｏ)(Ｒ3A)(Ｒ3B)または−Ｓ(Ｏ)2Ｒ3Eであり、ここで、Ｒ3A、Ｒ3B、およびＲ3Eは一般式（Ｉ）において定義した通りである、請求項１０に記載の方法。
【請求項１５】
Ｒa1が１または２個のＮもしくはＯ原子を含む５または６員複素環であり、この環は非置換であるか、またはアルキル基で置換されている、請求項１０に記載の方法。
【請求項１６】
前記一般式（Ｉ）で示される化合物が、下記一般式（III）により示される化合物であか、またはその薬学的に許容される塩である請求項１〜９のいずれかに記載の方法。
【化３２】
2013539795.tif 000033
式中、
Ｒa2はアルコキシであり；
Ｒgは−Ｐ(Ｏ)(Ｒ3A)(Ｒ3B)、−Ｓ(Ｏ)Ｎ(Ｒ3C)(Ｒ3D)、または−Ｓ(Ｏ)2Ｒ3Eであり；
Ｒ3A、Ｒ3B、Ｒ3C、Ｒ3D、およびＲ3Eのそれぞれは、独立して、ＨおよびＣ1-7アルキルから選ばれるか、またはＲ3AとＲ3B、もしくはＲ3CとＲ3Dは、それらが結合している原子と一緒に組み合わさって、非置換もしくは置換の５もしくは６員複素環を形成し；
ＲdはＨ、Ｃ1-4アルキル、Ｃ1-4アルコキシ、もしくはハロゲンであり；そしてＲeはＨもしくはＮＨ2であるか；またはＲdとＲeが、それらが結合しているピリミジン環原子と一緒に、Ｎ、ＳおよびＯから独立して選ばれた１もしくは２個のヘテロ原子を含有する５もしくは６員環を形成し、ここで該５もしくは６員環はＲhで置換されており；
ＲhはＨ、Ｃ1-4アルキルまたはハロゲンであり；
Ｒa1はハロゲン、−ＣＮ、−ＮＯ2、−Ｒ1、−ＯＲ2、−Ｏ−ＮＲ1Ｒ2、−ＮＲ1Ｒ2、−ＮＲ1−ＮＲ1Ｒ2、−ＮＲ1−ＯＲ2、−Ｃ(Ｏ)ＹＲ2、−ＯＣ(Ｏ)ＹＲ2、−ＮＲ1Ｃ(Ｏ)ＹＲ2、−ＳＣ(Ｏ)ＹＲ2、−ＮＲ1Ｃ(＝Ｓ)ＹＲ2、−ＯＣ(＝Ｓ)ＹＲ2、−Ｃ(＝Ｓ)ＹＲ2、−ＹＣ(＝ＮＲ1)ＹＲ2、−ＹＣ(＝Ｎ−ＯＲ1)ＹＲ2、−ＹＣ(＝Ｎ−ＮＲ1Ｒ2)ＹＲ2、−ＹＰ(＝Ｏ)(ＹＲ1)(ＹＲ2)、−ＮＲ1ＳＯ2Ｒ2、−Ｓ(Ｏ)rＲ2、−ＳＯ2ＮＲ1Ｒ2、−ＮＲ1ＳＯ2ＮＲ1Ｒ2、または次式で示される基であり；
【化３３】
2013539795.tif 000034
各Ｙは、独立して、単結合、−Ｏ−、−Ｓ−また−ＮＲ1−であり；
Ｒ1およびＲ2は、出てくるごとに独立して、Ｈ、アルキル、アルケニル、アルキニル、シクロアルキル、シクロアルケニル、シクロアルキニル、アリール、ヘテロアルキル、複素環基、およびヘテロアリールから選ばれ；
Ｘ1およびＸ2はそれぞれ独立して、ＣＨおよびＮから選ばれ；そして
Ｒ4は、アルキル、アルケニル、アルキニル、シクロアルキル、シクロアルケニル、シクロアルキニル、アリール、ヘテロアルキル、複素環基、およびヘテロアリールから選ばれる。
【請求項１７】
前記一般式（III）で示される化合物が下記一般式（IVａ）または一般式（IVｂ）で示される化合物またはその薬学的に許容される塩である、請求項１６に記載の方法。
【化３４】
2013539795.tif 000035
式中、Ｒa2、Ｒg、Ｒd、ＲhおよびＲa1は一般式（III）において定義した通りである。
【請求項１８】
Ｒa2がメトキシ、エトキシ、またはプロポキシ基である、請求項１６に記載の方法。
【請求項１９】
ＲdがＣｌ、Ｆ、ＣＦ3またはシクロプロピルである、請求項１７に記載の方法。
【請求項２０】
前記一般式（III）で示される化合物が下記一般式（Ｖａ）〜（Ｖｄ）のいずれかにより示される化合物またはその薬学的に許容される塩である、請求項１６に記載の方法。
【化３５】
2013539795.tif 000036
式中、Ｒg、Ｒd、ＲhおよびＲa1は一般式（III）おいて定義した通りである。
【請求項２１】
Ｒgが−Ｐ(Ｏ)(ＣＨ3)2または−Ｓ(Ｏ)2(ＣＨ(ＣＨ3)2)である請求項２０に記載の方法。
【請求項２２】
Ｒa1が下記の基である請求項２０に記載の方法。
【化３６】
2013539795.tif 000037
式中、Ｘ1、Ｘ2およびＲ4は一般式（III）において定義した通りである。
【請求項２３】
Ｒa1基は下記の基のいずれかから選ばれる、請求項２２に記載の方法。
【化３７】
2013539795.tif 000038
【請求項２４】
前記一般式（III）で示される化合物が下記一般式（VIａ）〜（VIｆ）のいずれかにより示される化合物またはその薬学的に許容される塩である、請求項１６に記載の方法。
【化３８】
2013539795.tif 000039
式中、
Ｒa2はメトキシ、エトキシ、またはプロポキシ基であり；
Ｒgは−Ｐ(Ｏ)(ＣＨ3)2、−Ｐ(Ｏ)(ＣＨ2ＣＨ3)2または−Ｓ(Ｏ)2(ＣＨ(ＣＨ3)2)であり、そして、
ＲTはＨ、アシルまたはＣ1〜Ｃ4アルキルであり、これは置換でも非置換でもよい。
【発明の詳細な説明】
【背景技術】
【０００１】
本発明は細胞増殖の阻害および或る種のがんの治療のための薬剤組成物および方法に関する。
【０００２】
がん細胞の増殖を発動する特定の遺伝的病変、例えば、或る種のチロシンキナーゼの活性化を引き起こすようなものは、一部のがんを、該キナーゼを阻害する治療薬に対して非常に高感度にする。しかし、このような薬剤の効力は、阻害剤結合の減少により耐性を付与する標的キナーゼドメインにおける突然変異の発現により往々にして制限される。
【０００３】
例えば、ＡＢＬキナーゼ阻害剤であるイマチニブは、活性化ＢＣＲ−ＡＢＬ融合オンコプロテインにより発動される疾患である慢性骨髄性白血病（ＣＭＬ）の患者の治療を革命的に変えた。しかし、時間の経過につれ、ＡＢＬキナーゼドメインにおける突然変異の発現によりかなりの割合の患者に耐性が生じてきた。第二世代のＡＢＬ阻害剤であるダサチニブおよびニロチニブは、より強力なＡＢＬ阻害剤であるため、より優れた効力を示し、イマチニブが示す突然変異に基づく耐性（変異系耐性）の多くを克服することができる。
【０００４】
上皮成長因子受容体（ＥＧＦＲ）におけるより最近の遺伝的病変は、第一世代阻害剤に類似の感度パターンと変異系耐性に対する感受性とを示すことが同定された。ＥＧＦＲにおける活性化突然変異はＮＳＣＬＣ患者の１０〜２０％において同定され、ＥＧＦＲキナーゼ阻害剤であるゲフィチニブおよびエルロチニブはこれらの患者における活性が実証された。
【０００５】
ＥＧＦＲの活性化変異は、キナーゼドメインにおける小欠失または点変異の形態をとることがあり、この変異は科学文献において詳細に分類かつ記述されてきた。例えば、Sharma, Nat. Rev. Cancer 7:169 (2007) (アミノ酸７４７のフレーム内 (in-frame) 欠失を特徴とするｅｘｏｎ１９変異が変異の４５％を占め、Ｌ８５８Ｒ置換を生ずるｅｘｏｎ２１変異が変異の４０〜４５％を占め、残り１０％の変異はｅｘｏｎ１８および２０に関連する); Sordella et al., Science 305:1163 (2004); および Mulloy et al., Cancer Res. 67:2325 (2007)を参照。
【０００６】
しかし、ゲフィチニブおよびエルロチニブの臨床学的効力は、患者の５０％において起こるＥＧＦＲキナーゼドメイン・ゲートキーパー残基（Ｔ７９０Ｍ）における変異のような耐性の発現により結局は制限されてしまう。
【０００７】
現状のＥＧＦＲチロシンキナーゼ阻害剤（ＴＫＩ）製品に対して耐性を付与するＴ７９０ＭのようなＥＧＦＲ突然変異をもつ細胞を阻害する新たな方法については、明らかな必要性がある。このような突然変異に関連するがんを処置するための新規な治療法は、きわめて大きな利益となろう。
【発明の概要】
【０００８】
本発明は、下記一般式（Ｉ）で示される構造を有するある種の化合物に関係する。
【０００９】
【化１】
2013539795.tif 000002
【００１０】
上記式中、
Ｒdは、Ｈ、Ｃ1-4アルキル、Ｃ1-4アルコキシ、もしくはハロゲンであり；そしてＲeはＨもしくはＮＨ2であるか；またはＲdとＲeが、それらが結合しているピリミジン環原子と一緒に、Ｎ、ＳおよびＯから独立して選ばれた１、２もしくは３個のヘテロ原子を含有する５もしくは６員環を形成し、ここで該５もしくは６員環はＲhで置換されており；
ＲhはＨ、Ｃ1-4アルキルまたはハロゲンであり；
Ｒa2はＨ、Ｃ1-6アルコキシ、Ｃ3-6アルケニルオキシまたはＣ3-6シクロアルキルオキシであり；
Ｒgは−Ｐ(Ｏ)(Ｒ3A)(Ｒ3B)、−Ｓ(Ｏ)Ｎ(Ｒ3C)(Ｒ3D)、−Ｓ(Ｏ)2Ｒ3E、−ＯＣ(Ｏ)Ｎ(Ｒ3F)(Ｒ3G)、−ＮＲ3HＣ(Ｏ)ＯＲ3I、１、２、３もしくは４個のＮ原子を含む５もしくは６員複素環であるか、またはＲg2と組み合わさって５〜７員複素環を形成し、ここでＲ3A、Ｒ3B、Ｒ3C、Ｒ3D、Ｒ3E、Ｒ3F、Ｒ3G、Ｒ3H、およびＲ3Iのそれぞれは、独立して、Ｈ、アルキル、アルケニル、アルキニル、シクロアルキル、シクロアルケニル、シクロアルキニル、およびヘテロアルキルから選ばれるか、またはＲ3AとＲ3B、もしくはＲ3CとＲ3D、もしくはＲ3FとＲ3Gは、それらが結合している原子と一緒に組み合わさって、非置換もしくは置換の５もしくは６員複素環を形成し；
Ｒg2はＨ、Ｆ、Ｃ1-4アルキルであるか、またはＲg2とＲgはそれらが結合している原子と一緒に、Ｐ、Ｎ、ＯおよびＳから独立して選ばれた１〜３個のヘテロ原子を含む５〜７員複素環を形成し、該複素環は非置換もしくは置換であり；
Ｒg1はＨ、Ｆ、または１もしくは２個のＮ原子を含有する５もしくは６員複素環であり、該複素環は非置換もしくは置換であり；
Ｒb2はＨ、Ｆ、または１、２もしくは３個のＮもしくはＯ原子を含有する５もしくは６員複素環であり、該複素環は非置換もしくは置換であり；
Ｒb4はＨ、Ｆ、Ｃ1-6アルコキシ、Ｃ3-6アルケニルオキシ、Ｃ3-6シクロアルキルオキシ、−ＯＣ(Ｏ)Ｎ(Ｒ5A)(Ｒ5B)、−ＮＲ5CＣ(Ｏ)ＯＲ5D、もしくは１、２もしくは３個のＮもしくはＯ原子を含む５もしくは６員複素環であり、該複素環は非置換もしくは置換であり、またはＲb4とＲa1は、それらが結合している原子と一緒に１、２もしくは３個のＮもしくはＯ原子を含有する非置換もしくは置換の６員複素環を形成し；
Ｒ5A、Ｒ5B、Ｒ5C、およびＲ5Dのそれぞれは、独立して、Ｈ、アルキル、アルケニル、アルキニル、およびヘテロアルキルから選ばれるか、またはＲ5AとＲ5Bは、それらが結合している原子と一緒に組み合わさって、非置換もしくは置換の５もしくは６員複素環を形成し；
Ｒa1は、Ｒb4と組み合わさって６員複素環を形成するか、またはＲa1は、Ｈ、ハロゲン、−ＣＮ、−ＮＯ2、−Ｒ1、−ＯＲ2、−Ｏ−ＮＲ1Ｒ2、−ＮＲ1Ｒ2、−ＮＲ1−ＮＲ1Ｒ2、−ＮＲ1−ＯＲ2、−Ｃ(Ｏ)ＹＲ2、−ＯＣ(Ｏ)ＹＲ2、−ＮＲ1Ｃ(Ｏ)ＹＲ2、−ＳＣ(Ｏ)ＹＲ2、−ＮＲ1Ｃ(＝Ｓ)ＹＲ2、−ＯＣ(＝Ｓ)ＹＲ2、−Ｃ(＝Ｓ)ＹＲ2、−ＹＣ(＝ＮＲ1)ＹＲ2、−ＹＣ(＝Ｎ−ＯＲ1)ＹＲ2、−ＹＣ(＝Ｎ−ＮＲ1Ｒ2)ＹＲ2、−ＹＰ(＝Ｏ)(ＹＲ1)(ＹＲ2)、−ＮＲ1ＳＯ2Ｒ2、−Ｓ(Ｏ)rＲ2、−ＳＯ2ＮＲ1Ｒ2、−ＮＲ1ＳＯ2ＮＲ1Ｒ2、または次式で示される基であり；
【００１１】
【化２】
2013539795.tif 000003
【００１２】
各Ｙは、独立して、単結合、−Ｏ−、−Ｓ−また−ＮＲ1−であり；
Ｒ1およびＲ2は、出てくるごとに独立して、Ｈ、アルキル、アルケニル、アルキニル、シクロアルキル、シクロアルケニル、シクロアルキニル、アリール、ヘテロアルキル、複素環基、およびヘテロアリールから選ばれ；
Ｘ1およびＸ2はそれぞれ独立して、ＣＨおよびＮから選ばれ；そして
Ｒ4は、アルキル、アルケニル、アルキニル、シクロアルキル、シクロアルケニル、シクロアルキニル、アリール、ヘテロアルキル、複素環基、およびヘテロアリールから選ばれる。一部の態様では、Ｒ4基は、後でさらに述べるように１または２以上の置換基を含有する。
【００１３】
一部の態様では、Ｒdは、さらにシクロプロピルであってもよい。
本発明の方法を実施するのに使用するのに現在特に興味ある化合物の下位種は、一般式（Ｉ）において、Ｒa2がＣ1-6アルコキシ、Ｃ3-6アルケニルオキシ、またはＣ3-6シクロアルキルオキシであり、そしてＲgが−Ｐ(Ｏ)(Ｒ3A)(Ｒ3B)、−Ｓ(Ｏ)Ｎ(Ｒ3C)(Ｒ3D)、または−Ｓ(Ｏ)2Ｒ3Eである化合物ならびにかかる化合物の薬学的に許容される塩である。
【００１４】
一般式（Ｉ）で示される化合物、その下位種、およびその各種の態様（後でさらに詳述する）はいずれもＥＧＦＲ突然変異体の有効な阻害剤であり、そのような変異体としては、(ａ)Ｌ８５８ＲもしくはｄｅｌＥ７４６＿Ａ７５０のような活性化変異、(ｂ)Ｔ７９０Ｍのような耐性付与変異、(ｃ)前記両方の種類の変異、をもつＥＧＦＲタンパク質を包含する。それが意義あるのは、ＥＧＦＲにおける活性化変異を特徴とするがんは、エルロチニブまたはゲフィチニブで治療可能であるかもしれないが、ＥＧＦＲが耐性付与変異を単独で、または（そうではなく）活性化変異と複合して保有する場合には、そうではないからである。エルロチニブまたはゲフィチニブのような既存のＥＧＦＲ阻害剤が耐性ＥＧＦＲ変異体またはそれが関係するがんを効果的に阻害することができないことは、患者を、治療オプションがひどく欠けた状態にする。ここに開示する化合物は、従来のＴＫＩでは不可能な症例をも阻害するので、本化合物は、新たな治療オプションとして有利である。
【００１５】
さらに、野生型ＥＧＦＲに比べて変異型ＥＧＦＲを優先的に阻害する一般式（Ｉ）で示される化合物は、特に優先性が少なくとも１０倍、より一層好ましくは１００倍以上、最も好ましくは５００倍以上であると、特に有利である。この優先的阻害は、野生型と変異型のＥＧＦＲに対する本化合物の相対的なＩＣ５０値の生化学的決定（それぞれの型のＥＧＦＲで形質転換した細胞に対するその相対的増殖阻害の測定などによる）のような慣用の方法により容易に測定することができ、野生型ＥＧＦＲに対する変異型ＥＧＦＲの優先的阻害はリスク軽減に役立つ。
【００１６】
従って、本発明は、患者におけるＥＧＦＲ発動性がんの処置方法であって、該患者に治療有効量の一般式（Ｉ）で示される化合物またはその薬学的に許容される塩を投与することによる方法を提供する。本方法は、そのがんがエルロチニブまたはゲフィチニブに治療抵抗性（不応性）である患者、またはそのがんが、Ｔ７９０Ｍ ＥＧＦＲ変異もしくはエルロチニブまたはゲフィチニブに対する耐性に関連する他の変異が単独もしくは活性化変異と複合して存在することを特徴とする患者に特に意義がある。
【００１７】
本発明はさらに、下記工程を含む、患者におけるＥＧＦＲ発動性がんの処置方法を提供する：(ａ)上皮成長因子受容体キナーゼ（ＥＧＦＲ）における変異の存在を特徴とするＥＧＦＲ発動性がんに罹患した患者を提供し、そして(ｂ)該患者に治療有効量の一般式（Ｉ）で示される化合物またはその薬学的に許容される塩を投与する。例えば、前記ＥＧＦＲ発動性がんは、（ｉ）Ｌ８５８Ｒ、（ii）Ｔ７９０Ｍ、（iii）Ｌ８５８ＲとＴ７９０Ｍの両方、（iv）ｄｅｌＥ７４６＿Ａ７５０、（ｖ）ｄｅｌＥ７４６＿Ａ７５０とＴ７９０Ｍの両方、ならびに本書に記載する他のあらゆるＥＧＦＲ突然変異から選ばれた１または２以上の突然変異の存在により特徴づけることができる。
【００１８】
上記方法において、ＥＧＦＲ発動性がんは、非小細胞肺がん（ＮＳＣＬＣ）、神経膠芽腫、膵臓がん、頭頚部がん（例、扁平上皮細胞がん）、乳がん、大腸がん（結腸直腸がん）、上皮がん、卵巣がん、前立腺がん、腺がん、またはあらゆるＥＧＦＲ発動性がんでありうる。
【００１９】
関連する態様において、本発明は、ＥＧＦＲ変異体を発現する細胞の増殖を阻害する方法に関し、この方法は、前記細胞をその増殖を阻害するのに十分な量の一般式（Ｉ）で示される化合物またはその薬学的に許容される塩と接触させることを含む。例えば、前記細胞は、（ｉ）Ｌ８５８Ｒ、（ii）Ｔ７９０Ｍ、（iii）Ｌ８５８ＲとＴ７９０Ｍの両方、（iv）ｄｅｌＥ７４６＿Ａ７５０、（ｖ）ｄｅｌＥ７４６＿Ａ７５０とＴ７９０Ｍの両方、ならびに本書に記載する他のあらゆるＥＧＦＲ突然変異から選ばれた１または２以上のＥＦＧＲ突然変異の存在により特徴づけることができる。一部の態様では、前記細胞はがん細胞、例えば、非小細胞肺がん（ＮＳＣＬＣ）、神経膠芽腫、膵臓がん、頭頚部がん（例、扁平上皮細胞がん）、乳がん、大腸がん、上皮がん、卵巣がん、前立腺がん、腺がん、または本書に記載するあらゆるＥＧＦＲ発現性がんに由来する細胞、である。
【００２０】
本発明はさらに、患者におけるエルロチニブ、ゲフィチニブ、およびそれらの薬学的に許容される塩から選ばれた第１のキナーゼ阻害剤に治療抵抗性のＥＧＦＲ発動性がんの処置方法であって、前記がんを治療するのに十分な量の一般式（Ｉ）で示される化合物またはその薬学的に許容される塩を前記患者に投与することによる方法に関する。
【００２１】
上述した細胞増殖の阻害方法およびＥＧＦＲ発動性がん患者の処置方法のいずれにおいても、一般式（Ｉ）で示される化合物は次式により記述される。
【００２２】
【化３】
2013539795.tif 000004
【００２３】
一般式（Ｉ）において、Ｒdは、Ｈ、Ｃ1-4アルキル、Ｃ1-4アルコキシ、もしくはハロゲンであり；そしてＲeはＨもしくはＮＨ2であるか；またはＲdとＲeが、それらが結合しているピリミジン環原子と一緒に、Ｎ、ＳおよびＯから独立して選ばれた１、２もしくは３個のヘテロ原子を含有する５もしくは６員環を形成し、ここで該５もしくは６員環はＲhで置換されており；ＲhはＨ、Ｃ1-4アルキルまたはハロゲンであり；Ｒa2はＨ、Ｃ1-6アルコキシ、Ｃ3-6アルケニルオキシまたはＣ3-6シクロアルキルオキシであり；Ｒgは−Ｐ(Ｏ)(Ｒ3A)(Ｒ3B)、−Ｓ(Ｏ)Ｎ(Ｒ3C)(Ｒ3D)、−Ｓ(Ｏ)2Ｒ3E、−ＯＣ(Ｏ)Ｎ(Ｒ3F)(Ｒ3G)、−ＮＲ3HＣ(Ｏ)ＯＲ3I、１、２、３もしくは４個のＮ原子を含む５もしくは６員複素環であるか、またはＲg2と組み合わさって５〜７員複素環を形成し、ここでＲ3A、Ｒ3B、Ｒ3C、Ｒ3D、Ｒ3E、Ｒ3F、Ｒ3G、Ｒ3H、およびＲ3Iのそれぞれは、独立して、Ｈ、アルキル、アルケニル、アルキニル、シクロアルキル、シクロアルケニル、シクロアルキニル、およびヘテロアルキルから選ばれるか、またはＲ3AとＲ3B、もしくはＲ3CとＲ3D、もしくはＲ3FとＲ3Gは、それらが結合している原子と一緒に組み合わさって、非置換もしくは置換の５もしくは６員複素環を形成し；Ｒg2はＨ、Ｆ、Ｃ1-4アルキルであるか、またはＲg2とＲgはそれらが結合している原子と一緒に、Ｐ、Ｎ、ＯおよびＳから独立して選ばれた１〜３個のヘテロ原子を含む５〜７員複素環を形成し、該複素環は非置換もしくは置換であり；Ｒg1はＨ、Ｆ、または１もしくは２個のＮ原子を含有する５もしくは６員複素環であり、該複素環は非置換もしくは置換であり；Ｒb2はＨ、Ｆ、または１、２もしくは３個のＮもしくはＯ原子を含有する５もしくは６員複素環であり、該複素環は非置換もしくは置換であり；Ｒb4はＨ、Ｆ、Ｃ1-6アルコキシ、Ｃ3-6アルケニルオキシ、Ｃ3-6シクロアルキルオキシ、−ＯＣ(Ｏ)Ｎ(Ｒ5A)(Ｒ5B)、−ＮＲ5CＣ(Ｏ)ＯＲ5D、１、２もしくは３個のＮもしくはＯ原子を含む５もしくは６員複素環であり、該複素環は非置換もしくは置換であり、またはＲb4とＲa1は、それらが結合している原子と一緒に１、２もしくは３個のＮもしくはＯ原子を含有する非置換もしくは置換の６員複素環を形成し；Ｒ5A、Ｒ5B、Ｒ5C、およびＲ5Dのそれぞれは、独立して、Ｈ、アルキル、アルケニル、アルキニル、およびヘテロアルキルから選ばれるか、またはＲ5AとＲ5Bは、それらが結合している原子と一緒に組み合わさって、非置換もしくは置換の５もしくは６員複素環を形成し；Ｒa1は、Ｒb4と組み合わさって６員複素環を形成するか、またはＲa1は、Ｈ、ハロゲン、−ＣＮ、−ＮＯ2、−Ｒ1、−ＯＲ2、−Ｏ−ＮＲ1Ｒ2、−ＮＲ1Ｒ2、−ＮＲ1−ＮＲ1Ｒ2、−ＮＲ1−ＯＲ2、−Ｃ(Ｏ)ＹＲ2、−ＯＣ(Ｏ)ＹＲ2、−ＮＲ1Ｃ(Ｏ)ＹＲ2、−ＳＣ(Ｏ)ＹＲ2、−ＮＲ1Ｃ(＝Ｓ)ＹＲ2、−ＯＣ(＝Ｓ)ＹＲ2、−Ｃ(＝Ｓ)ＹＲ2、−ＹＣ(＝ＮＲ1)ＹＲ2、−ＹＣ(＝Ｎ−ＯＲ1)ＹＲ2、−ＹＣ(＝Ｎ−ＮＲ1Ｒ2)ＹＲ2、−ＹＰ(＝Ｏ)(ＹＲ1)(ＹＲ2)、−ＮＲ1ＳＯ2Ｒ2、−Ｓ(Ｏ)rＲ2、−ＳＯ2ＮＲ1Ｒ2、−ＮＲ1ＳＯ2ＮＲ1Ｒ2、または次式で示される基であり；
【００２４】
【化４】
2013539795.tif 000005
【００２５】
各Ｙは、独立して、単結合、−Ｏ−、−Ｓ−また−ＮＲ1−であり；Ｒ1およびＲ2は、出てくるごとに独立して、Ｈ、アルキル、アルケニル、アルキニル、シクロアルキル、シクロアルケニル、シクロアルキニル、アリール、ヘテロアルキル、複素環基、およびヘテロアリールから選ばれ；Ｘ1およびＸ2はそれぞれ独立して、ＣＨおよびＮから選ばれ；そしてＲ4は、アルキル、アルケニル、アルキニル、シクロアルキル、シクロアルケニル、シクロアルキニル、アリール、ヘテロアルキル、複素環基、およびヘテロアリールから選ばれる。
【００２６】
一般式（Ｉ）において、置換基Ｒa2、Ｒd、Ｒh、Ｒ1、Ｒ2、Ｒ4、Ｒ3A、Ｒ3B、Ｒ3C、Ｒ3D、Ｒ3E、Ｒ3F、Ｒ3G、Ｒ3H、およびＲ3Iが、Ｃ1-6アルコキシ、Ｃ3-6アルケニルオキシ、Ｃ3-6シクロアルキルオキシ、アルキル、アルケニル、アルキニル、シクロアルキル、シクロアルケニル、シクロアルキニル、アリール、ヘテロアルキル、複素環基およびヘテロアリールから選ばれた基である場合、これらの基は置換または非置換である。
【００２７】
特定の態様において、本発明の方法を実施するのに使用する一般式（Ｉ）で示される化合物は、さらに下記一般式（IIａ）または一般式（IIｂ）で記述される。
【００２８】
【化５】
2013539795.tif 000006
【００２９】
一般式（IIａ）および（IIｂ）において、Ｒa1、Ｒa2、Ｒb2、Ｒb4、Ｒg、Ｒg1、Ｒg2、Ｒd、およびＲhは上に定義した通りである。
【００３０】
或る種の態様において、本発明の方法を実施するのに使用する化合物は、一般式（Ｉ）、（IIａ）または（IIｂ）において、Ｒg1、Ｒg2、Ｒb2およびＲb4がＨまたはＦである化合物である。
【００３１】
別の態様において、前記使用する化合物は、一般式（IIａ）において、ＲdがＣｌ、ＦまたはＣＦ3である化合物である。
【００３２】
別の態様において、前記使用する化合物は、一般式（Ｉ）、（IIａ）または（IIｂ）において、Ｒa1が−ＯＭｅである化合物である。別の態様では、Ｒa1は、−ＹＰ(＝Ｏ)(ＹＲ1)(ＹＲ2)、−ＮＲ1ＳＯ2Ｒ2、−Ｓ(Ｏ)rＲ2、−ＳＯ2ＮＲ1Ｒ2、または−ＮＲ1ＳＯ2ＮＲ1Ｒ2である。
【００３３】
別の態様において、前記使用する化合物は、一般式（Ｉ）、（IIａ）または（IIｂ）において、Ｒa2がＣ1-6アルコキシ、Ｃ3-6アルケニルオキシ、またはＣ3-6シクロアルキルオキシである化合物であり、その特定の態様ではＲa2はメトキシである。
【００３４】
別の態様では、前記化合物は一般式（Ｉ）、（IIａ）または（IIｂ）の化合物であり、Ｒgが−Ｐ(Ｏ)(Ｒ3A)(Ｒ3B)または−Ｓ(Ｏ)2Ｒ3Eである。このような化合物の１態様において、Ｒa2はＣ1-6アルコキシ、Ｃ3-6アルケニルオキシ、またはＣ3-6シクロアルキルオキシである。
【００３５】
別の態様において、前記化合物は一般式（Ｉ）、（IIａ）または（IIｂ）の化合物であり、Ｒa1はＮおよびＯから選ばれた１または２個のヘテロ原子を含む５または６員複素環であり、この環は非置換であるか、またはアルキル基で置換されている。
【００３６】
一部の態様において、本方法は、さらに下記一般式（III）で記述できる一般式（Ｉ）で示される化合物を使用する。
【００３７】
【化６】
2013539795.tif 000007
【００３８】
一般式（III）において、Ｒa2はアルコキシであり；Ｒgは−Ｐ(Ｏ)(Ｒ3A)(Ｒ3B)、−Ｓ(Ｏ)Ｎ(Ｒ3C)(Ｒ3D)、または−Ｓ(Ｏ)2Ｒ3Eであり；Ｒ3A、Ｒ3B、Ｒ3C、Ｒ3D、およびＲ3Eのそれぞれは、独立して、ＨもしくはＣ1-7アルキルであるか、またはＲ3AとＲ3B、もしくはＲ3CとＲ3Dは、それらが結合している原子と一緒に組み合わさって、非置換もしくは置換の５もしくは６員複素環を形成し；Ｒdは、Ｈ、Ｃ1-4アルキル、Ｃ1-4アルコキシ、もしくはハロゲンであり；そしてＲeはＨもしくはＮＨ2であるか；またはＲdとＲeが、それらが結合しているピリミジン環原子と一緒に、Ｎ、ＳおよびＯから独立して選ばれた１もしくは２個のヘテロ原子を含有する５もしくは６員環を形成し、ここで該５もしくは６員環はＲhで置換されており；ＲhはＨ、Ｃ1-4アルキルまたはハロゲンであり；Ｒa1はハロゲン、−ＣＮ、−ＮＯ2、−Ｒ1、−ＯＲ2、−Ｏ−ＮＲ1Ｒ2、−ＮＲ1Ｒ2、−ＮＲ1−ＮＲ1Ｒ2、−ＮＲ1−ＯＲ2、−Ｃ(Ｏ)ＹＲ2、−ＯＣ(Ｏ)ＹＲ2、−ＮＲ1Ｃ(Ｏ)ＹＲ2、−ＳＣ(Ｏ)ＹＲ2、−ＮＲ1Ｃ(＝Ｓ)ＹＲ2、−ＯＣ(＝Ｓ)ＹＲ2、−Ｃ(＝Ｓ)ＹＲ2、−ＹＣ(＝ＮＲ1)ＹＲ2、−ＹＣ(＝Ｎ−ＯＲ1)ＹＲ2、−ＹＣ(＝Ｎ−ＮＲ1Ｒ2)ＹＲ2、−ＹＰ(＝Ｏ)(ＹＲ1)(ＹＲ2)、−ＮＲ1ＳＯ2Ｒ2、−Ｓ(Ｏ)rＲ2、−ＳＯ2ＮＲ1Ｒ2、−ＮＲ1ＳＯ2ＮＲ1Ｒ2、または次式で示される基であり；
【００３９】
【化７】
2013539795.tif 000008
【００４０】
各Ｙは、独立して、単結合、−Ｏ−、−Ｓ−また−ＮＲ1−であり；Ｒ1およびＲ2は、出てくるごとに独立して、Ｈ、アルキル、アルケニル、アルキニル、シクロアルキル、シクロアルケニル、シクロアルキニル、アリール、ヘテロアルキル、複素環基、およびヘテロアリールから選ばれ；Ｘ1およびＸ2はそれぞれ独立して、ＣＨおよびＮから選ばれ；そしてＲ4は、アルキル、アルケニル、アルキニル、シクロアルキル、シクロアルケニル、シクロアルキニル、アリール、ヘテロアルキル、複素環基、およびヘテロアリールから選ばれる。
【００４１】
或る種の態様は、下記一般式（IVａ）または一般式（IVｂ）でさらに記述される一般式（III）の化合物を使用する。
【００４２】
【化８】
2013539795.tif 000009
【００４３】
一般式（IVａ）および一般式（IVｂ）において、Ｒa2、Ｒg、Ｒd、ＲhおよびＲa1は一般式（III）に対して上に定義した通りである。
【００４４】
或る種の態様において、前記使用する化合物は、一般式（III）、（IVａ）および（IVｂ）のいずれかのものであり、Ｒa2はメトキシ、エトキシ、またはプロポキシ基である。
【００４５】
一部の態様では、前記使用する化合物は、一般式（III）および（IVａ）のものであり、ＲdがＣｌ、Ｆ、ＣＦ3およびシクロプロピルから選ばれる。
【００４６】
さらに別の態様において、一般式（III）の化合物は下記一般式（Ｖａ）〜（Ｖｄ）のいずれかによりさらに記述される。
【００４７】
【化９】
2013539795.tif 000010
【００４８】
一般式（Ｖａ）〜（Ｖｄ）において、Ｒg、Ｒd、ＲhおよびＲa1は一般式（III）に対して上に定義した通りである。
【００４９】
特定の１態様において、前記使用する化合物は上記一般式のものであり、Ｒgは−Ｐ(Ｏ)(ＣＨ3)2、−Ｐ(Ｏ)(ＣＨ2ＣＨ3)2または−Ｓ(Ｏ)2(ＣＨ(ＣＨ3)2)である。
【００５０】
特定の態様において、上記一般式のいずれの化合物についても、Ｒa1基として下記の基を有する。
【００５１】
【化１０】
2013539795.tif 000011
【００５２】
式中、Ｘ1、Ｘ2およびＲ4は一般式（III）に対して上に定義した通りである。例えば、Ｒa1基は下記の群のいずれから選んでもよい。
【００５３】
【化１１】
2013539795.tif 000012
【００５４】
Ｒa1基はまた、下記の追加の例示的なＲa1の選択肢、およびより広範囲のＲa1基の選択肢を示す本書の多くの他の例によって示されるように、追加の置換を有するか、または置換がより少ない群から選ぶこともできる。
【００５５】
【化１２】
2013539795.tif 000013
【００５６】
特定の１態様において、一般式（Ｉ）で示される化合物は、下記一般式（VIａ）〜（VIｆ）のいずれかによりさらに記述される。
【００５７】
【化１３】
2013539795.tif 000014
【００５８】
一般式（VIａ）〜（VIｆ）において、Ｒa2はメトキシ、エトキシ、またはプロポキシ基であり、Ｒgは−Ｐ(Ｏ)(ＣＨ3)2、−Ｐ(Ｏ)(ＣＨ2ＣＨ3)2または−Ｓ(Ｏ)2(ＣＨ(ＣＨ3)2)であり、そして、一部の態様では、ＲTはメチルである。一般式（VIａ）〜（VIｆ）の他のこのような態様では、ＲTはＨ、アシルまたはＣ1〜Ｃ4アルキルであり、これは置換でも非置換でもよく、例えば、ＣＨ3、−ＣＨ2ＣＨ3、または−ＣＨ2ＣＨ2ＯＨである。
【００５９】
上記一般式のいずれにおいても、本化合物は遊離塩基またはその薬学的に許容される塩の形態でよい。
【００６０】
一般式（Ｉ）で示される化合物は、ＰＣＴ公開番号ＷＯ２００９／１４３３８９、ＷＯ２００６／０２１４５４、ＷＯ２００６／０２１４５７、およびＷＯ２００９／１２６５１５（これら各公報をここに参考のために援用する）に記載されているものを包含する。
【００６１】
定義
本発明の方法に対する臨床学的応答は、充実性腫瘍の応答評価基準（ＲＥＣＩＳＴ，the response evaluation criteria in solid tumors）ガイドライン(Eur. J. Cancer 45:228 (2009)参照) に従って格付けすることができる。この基準は次のように規定する：治療中にがん患者が改善（「応答」）、同じ状態にとどまる（「安定化」）、または悪化（「進行」）。完全応答は、（ｉ）標的病変の消失；および（ii）病的リンパ節（標的または非標的にかかわらず）が短軸で１０ｍｍ未満に縮小していなければならないことで特徴づけられる。部分的応答は、（ｉ）ベースラインの総直径を基準として、標的病変の直径の総和の少なくとも３０％の縮小で特徴づけられる。進行性疾患は、（ｉ）検討中の最小総和（これは、ベースライン総直径が検討中の最小であるならそれを包含する）を基準として、標的病変の直径の総和の少なくとも５％、１０％または２０％の増大、または（ii）１または２以上の新たな病変の出現で特徴づけられる。
【００６２】
「投与」または「投与する」とは、ある量の薬剤組成物を哺乳動物に与える方法を意味する。該方法は、例えば、経口、静脈内、腹腔内、動脈内、または筋肉内である。好ましい投与方法は、例えば、当該薬剤組成物の成分、潜在的もしくは実際の疾患の部位、および疾患の重篤度といった多様な因子に応じて変動しうる。一般式（Ｉ）の化合物は一般に経口投与されるが、他の投与経路も本発明の方法を実施するのに有用でありうる。
【００６３】
「ＥＧＦＲ発動性がん」とは、ＥＧＦＲ核酸分子またはポリペプチドの生物学的活性を変質させるＥＧＦＲ遺伝子の突然変異（本書に記載した特定の突然変異を包含する）を特徴とするがんを意味する。ＥＧＦＲ発動性がんは、脳、血液、結合組織、肝臓、口腔、筋肉、脾臓、胃、精巣、および気管を包含するあらゆる組織に生じうる。扁平上皮がん、腺がん、細気管支−肺胞がん（ＢＡＣ）、局所侵襲を伴うＢＡＣ、ＢＡＣの様相を伴う腺がん、および大細胞がんの１または２以上を包含する非小細胞肺がん（ＮＳＣＬＣ）；神経膠芽腫のような神経腫瘍；膵臓がん；頭頚部がん（例、扁平上皮細胞がん）；乳がん；大腸がん；扁平上皮細胞がんを始めとする上皮がん；卵巣がん；前立腺がん；腺がんを包含し、そしてＥＧＦＲが媒介するがんを包含する。
【００６４】
「ＥＧＦＲ変異体」または「変異体」は、ＥＧＦＲタンパク質のアミノ酸もしくはヌクレオチド配列、またはＥＧＦＲコーディング配列における１または２以上の欠失、置換または付加を包含する。ＥＧＦＲ変異体はまた、その変異体が野生型ＥＧＦＲに比べてチロシンキナーゼ活性を保持しているか、増大している限り、１または２以上の欠失、置換、付加またはそれらの断片も包含しうる。特にＥＧＦＲ突然変異、キナーゼまたはリン酸化活性は、野生型ＥＧＦＲに比べて、増大されうる（例、少なくとも５％、１０％、１５％、２０％、３０％、４０％、５０％、６０％、７０％、８０％、９０％、さらには１００％の比率で）。具体的なＥＧＦＲ変異体は本明細書に記載されており、ここで突然変異は、NCBI GenBank Reference Sequence: NP_005219.2に提供されている配列に記載されているように、ヒトＥＧＦＲにおけるアミノ酸の位置に対して提供される。
【００６５】
本明細書で用いた「ＥＧＦＲ変異体を発現する細胞の増殖を阻害する」なる表現は、in vitroまたはin vivoでＥＧＦＲ発現性細胞の増殖速度を測定可能に遅延させ、停止させ、または逆転させることを意味する。望ましくは、増殖速度の遅延率は、細胞増殖速度を測定するための適当なアッセイ（例、本明細書に記載した細胞増殖アッセイ）を用いて測定して、少なくとも１０％、２０％、３０％、５０％、またはさらには７０％である。ＥＧＦＲ変異体は、本書に記載した任意のＥＧＦＲ変異体でよい。
【００６６】
本明細書で用いた「治療抵抗性」なる用語は、特定の治療法の適用にもかかわらず進行性であるがんを意味する。そのようながんは、その治療法の最初の適用時から治療抵抗性であるか、或いはその治療法に応答して時間の経過につれて治療抵抗性になる場合がある。ある薬剤に対する「耐性」とは、任意の科学的に有効な比較分析により測定して、その薬剤に対する感受性の低下を意味する。
【００６７】
「配列同一性」なる用語は、配列間の同一性に関して表現された、２以上の核酸配列または２以上のアミノ酸配列の間の共有する同一性を意味する。配列同一性は同一率により測定することができ、この同一率が高いほど配列はより多く同一である。核酸またはアミノ酸配列のホモログまたはオルソログ（ortholog）は、標準的な方法を用いてアライメントした時に比較的高度の配列同一性を有する。比較のための配列のアライメント法は本技術分野で周知である。各種のプログラムおよびアライメントアルゴリズムが下記文献に記載されている：Smith and Watermann, Adv. Appl. Math. 2:482 (1981); Needleman and Wuncsh, J. Mol. Biol. 48:443 (1970); Pearson and Lipman, Proc. Natl. Acad. Sci. U.S.A. 85:2444 (1988); Corpet et al. Nuc. Acid. Res. 16:10881 (1988); Huang et al., Computer Appls. in the Biosciences 8:155 (1992); およびPearson et al., Meth. Mol. Biol. 24:307 (1994)。Altschul et al., (J. Mol. Biol. 215:403 (1990)) は、配列アライメント法およびホモロジー計算についての詳細な考察を提示する。配列解析プログラムのｂｌａｓｔｐ、ｂｌａｓｔｎ、ｂｌａｓｔｘ、ｔｂｌａｓｔｎおよびｔｂｌａｓｔｘに関して使用するための、The NCBI Basic Local Alignment Search Tool (BLAST) (Altschul et al., J. Mol. Biol. 215:403 (1990)) は、米国国立生物工学情報センター(the National Center for Biological Information) (ＮＣＢＩ) ウェブサイトをはじめとするいくつかのソースから入手可能である。ＢＬＡＳＴＮは核酸配列を比較するために使用され、ＢＬＡＳＴＰはアミノ酸配列を比較するために使用される。
【００６８】
２つの核酸配列を比較するためのオプションは次のように設定することができる：−ｉを比較すべき第１の核酸配列を含むファイルに設定し；−ｊを比較すべき第２の核酸配列を含むファイルに設定する；−ｐをｂｌａｓｔｎに設定し；−ｏを任意の所望のファイル名に設定し；−ｑを−１に設定し；−ｒを２に設定し；そしてその他のすべての選択肢はデフォルトの設定のままとする。アライメントがすんだら、両方の配列に同一のヌクレオチドまたはアミノ酸残基が存在する位置の数を計数することにより整合数（マッチした数）を求める。配列の同一率は、整合数を、同定した配列に記載された配列の長さ、または区切りのよい長さ（例えば、同定された配列に記載された配列由来の３０、３５、４０、４５、５０、６０、７０、８０、９０、１００、１５０、２００、２５０、３００、３５０、または４００の連続したヌクレオチドまたはアミノ酸残基）で除した後、得られた値に１００を乗ずることにより求められる。２つの核酸分子が密接に関連することの１つの表示は、２つの分子がストリンジェント条件下で互いにハイブリダイズすることである。ストリンジェント条件は配列依存性であり、異なる環境パラメータの下では異なる。ＥＧＦＲ遺伝子配列にストリンジェント条件下でハイブリダイズする核酸分子は、典型的にはＥＧＦＲ遺伝全体または該遺伝子の特定の部分（例、当該キナーゼドメインまたは本明細書に述べる変異コドンを含む該遺伝子のセグメント）のいずれかに基づくプローブに上述した条件下でハイブリダイズする。
【００６９】
本明細書で用いた「処置」なる用語は、予防および／または治療目的で薬剤組成物を投与することを意味する。「病気の予防」とは、まだ病的状態ではないが、特定の疾患に感受性であるか、そうではなくても危険性のある患者の予防的な処置を意味する。
【００７０】
「病気の治療」または「治療処置」への使用とは、ある疾患にすでに罹患している患者に、該患者の症状の改善または安定化のために処置を施すことを意味する。従って、特許請求の範囲および実施態様において、処置とは治療または予防のいずれかの目的での患者への投与または施与を意味する。
【００７１】
「アルキル」なる用語は、直鎖、分岐、環式および多環式の非芳香族炭化水素基を意味し、これは置換でも非置換でもよい。特に指定しない限り、アルキル基は、１〜８個、好ましくは１〜６個の炭素原子を含有する。低級アルキルとは炭素数１〜６のアルキルを意味する。アルキルの例としては、それらに制限されないが、メチル、エチル、ｎ−プロピル、イソプロピル、シクロプロピル、ブチル、イソブチル、sec−ブチル、tert−ブチル、シクロブチル、ペンチル、イソペンチル、tert−ペンチル、シクロペンチル、ヘキシル、イソヘキシル、シクロヘキシル、およびｎ−ヘプチルなどが挙げられる。置換アルキル基の例としては、それらに制限されないが、ハロアルキル基（例、フルオロメチル、ジフルオロメチル、トリフルオロメチル、２−フルオロエチル、３−フルオロプロピル）、ヒドロキシメチル、２−ヒドロキシエチル、３−ヒドロキシプロピル、ベンジル、置換ベンジル、およびフェネチルなどが挙げられる。
【００７２】
「アルコキシ」なる用語は、上に定義した通りの指定炭素数のアルキル基が酸素架橋を介して結合しているアルキルの下位群、すなわち、−Ｏ−アルキル基を意味し、ここでアルキル基は１〜８個の炭素原子を含有し、置換または非置換である。アルコキシ基の例としては、それらに制限されないが、メトキシ、エトキシ、ｎ−プロポキシ、ｉ−プロポキシ、ｔ−ブトキシ、ｎ−ブトキシ、ｓ−ペントキシ、−ＯＣＦ3および−Ｏ−シクロプロピルが挙げられる。
【００７３】
「ハロアルキル」なる用語は、上に定義した通りのアルキル基の１または２以上の水素原子がハロゲン原子で置換されているアルキルの下位群である。ハロアルキルの例としては、それらに制限されないが、トリフルオロメチル、トリクロロメチル、ペンタフルオロエチルなどが挙げられる。
【００７４】
「アルケニル」なる用語は、１または２以上の二重結合を含む、炭素数２〜８の分岐または非分岐炭化水素基を意味する。アルケニルは場合により、単環型または多環型のものを含んでいてもよく、その場合、各環は望ましくは３〜６員環である。アルケニル基は置換または非置換でよい。アルケニル基としては、それらに制限されないが、ビニル、アリル、２−シクロプロピル−１−エテニル、１−プロペニル、１−ブテニル、２−ブテニル、３−ブテニル、２−メチル−１−プロペニル、および２−メチル−２−プロペニルが挙げられる。
【００７５】
「アルキニル」なる用語は、１または２以上の三重結合を含む、炭素数２〜８の分岐または非分岐炭化水素基を意味する。アルキニル基は置換または非置換でよい。アルキニルとしては、それらに制限されないが、エチニル、１−プロピニル、２−プロピニル、１−ブチニル、２−ブチニル、および３−ブチニルが挙げられる。
【００７６】
「シクロアルキル」なる用語は、いずれも飽和である３〜１３の炭素原子からなる環式または多環式炭化水素基を意味する。シクロアルキル基は置換でも非置換でもよい。シクロアルキル基の例としては、これらに限られないが、シクロプロピル、ノルボルニル、[２.２.２]ビシクロオクタン、[４.４.０]ビシクロデカンなどが挙げられ、これらは他のアルキル基の場合と同様に場合により置換されていてもよい。
【００７７】
「シクロアルケニル」なる用語は、１または２以上の二重結合を含有する炭素数３〜１３、好ましくは５〜８の環式または多環式炭化水素基を意味する。シクロアルケニキル基は置換でも非置換でもよい。シクロアルケニル基の例としては、これらに限られないが、シクロペンテニル、シクロヘキセニル、およびシクロオクテニルが挙げられる。
【００７８】
「シクロアルキニル」なる用語は、１または２以上の三重結合を含有する炭素数５〜１３の環式または多環式炭化水素基を包含する。シクロアルキニル基は置換でも非置換でもよい。
【００７９】
「ヘテロアルキル」なる用語は、Ｎ、Ｏ、ＳおよびＰよりなる群から独立して選ばれた１、２、３または４個のヘテロ原子に加えて、１〜１４個の炭素原子を有する分岐または非分岐のアルキル、アルケニル、またはアルキニル基を意味する。ヘテロアルキルとしては、それらに制限されないが、第３級アミン、第２級アミン、エーテル、チオエーテル、アミド、チオアミド、カルバメート、チオカルバメート、ヒドラゾン、イミン、ホスホジエステル、ホスホルアミデート、スルホンアミド、およびジスルフィドが挙げられる。ヘテロアルキルは場合により単環式、二環式または三環式の環を有していてもよく、その場合には各環は望ましくは３〜６員環である。ヘテロアルキル基は置換でも非置換でもよい。ヘテロアルキルの例としては、制限されないが、メトキシメチルおよびエトキシエチルのようなポリエーテルが挙げられる。
【００８０】
本明細書で用いた「複素環」(または「ヘテロ環」)および「ヘテロサイクリル」とは、１個以上、好ましくは１〜４個の環炭素原子がＮ、Ｏ、Ｓ、またはＰのようなヘテロ原子によりそれぞれ置換されている、環原子数が５〜１４の非芳香族環系を意味し、それは単独で使用されてもよく、またはヘテロサイクリル−アルキル（ヘテロサイクリル置換Ｃ1-6アルキル）、ヘテロサイクリル−アルコキシ（ヘテロサイクリル置換Ｃ1-6アルコキシ）、またはヘテロサイクロキシ−アルキル（ヘテロサイクロキシ置換Ｃ1-6アルキル）におけるように、より大きな部位の一部として使用してもよく、そして、アラルキル、アラルコキシ、およびアリールオキシアルキル基を包含する。複素環は置換でも非置換でもよく、１、２または３個の縮合または非縮合環系を含みうる。望ましくは、複素環は、２〜６個の炭素原子と、Ｎ、ＯおよびＳから独立して選ばれた１、２、３または４個のヘテロ原子とからなる５〜７員環単環式または７〜１４員環二環式の複素環であり、上記複素環のいずれかがベンゼン環に縮合したあらゆる二環式基を包含する。
【００８１】
複素環基の例示としては、これらに制限されないが、３−１Ｈ−ベンゾイミダゾール−２−オン、(１−置換)−２−オキソ−ベンゾイミダゾール−３−イル、２−テトラヒドロフラニル、３−テトラヒドロフラニル、２−テトラヒドロチオフェニル、３−テトラヒドロチオフェニル、２−モルホリニル、３−モルホリニル、４−モルホリニル、２−チオモロホリニル、３−チオモルホリニル、４−チオモルホリニル、１−ピロリジニル、２−ピロリジニル、３−ピロリジニル、１−ピペラジニル、２−ピペラジニル、１−ピペリジニル、２−ピペリジニル、３−ピペリジニル、４−ピペリジニル、4-チアゾリジニル、ジアゾロニル、Ｎ−置換ジアゾロニル、１−フタルイミジニル、ベンゾオキサニル、ベンゾピロリジニル、ベンゾピペリジニル、ベンゾオキソラニル、ベンゾチオラニルおよびベンゾチアニルが挙げられる。複素環基は上述した２以上の環系を含みうる。複素環系はまた、インドリニル、クロマニル、フェナントリジニルまたはテトラヒドロキノリニルのように、非芳香族ヘテロ原子含有環が１または２以上の芳香族または非芳香族環に縮合している基であって、基部すなわち結合位置が非芳香族ヘテロ原子含有環上にある基も包含する。
【００８２】
「アリール」なる用語は、単独で使用されるか、或いは「アラルキル」（アリール置換Ｃ1-6アルキル）、「アラルコキシ」（アリール置換Ｃ1-6アルコキシ）、または「アリールオキシアルキル」（アリールオキシ置換Ｃ1-6アルキル）のように、より大きな部位の一部として使用される場合のいずれであっても、フェニル、１−ナフチル、２−ナフチル、１−アントラシルおよび２−アントラシルのように、６〜１４の環原子を有する芳香族単環式または多環式の環基を意味する。「アリール」環は置換または非置換でよい。「アリール」なる用語は、芳香環が１または２以上の環に縮合している縮合多環芳香環系も包含する。アリール基の制限しない例としては、フェニル、ヒドロキシフェニル、ハロフェニル、アルコキシフェニル、ジアルコキシフェニル、トリアルコキシフェニル、アルキレンジオキシフェニル、ナフチル、フェナントリル、アントリル、フェナントロ、１−ナフチル、２−ナフチル、１−アントラシルおよび２−アントラシルが挙げられる。ここで用いた用語「アリール」の範囲内にやはり包含されるのは、インダニル、フェナントリジニルまたはテトラヒドロナフチルのように、芳香環が１または２以上の非芳香環に縮合している基であって、基部すなわち結合位置が芳香環上にあるものである。
【００８３】
ここで用いた用語「ヘテロアリール」は、５〜１４の環原子を有する安定な複素環式および多複素環式の芳香族基を意味する。ヘテロアリール基は置換でも非置換でもよく、単環式および多環式の両方の環系を含む。典型的なヘテロアリール環基の例としては、チエニル、ピロリル、イミダゾリル、ピラゾリル、フリル、イソチアゾリル、フラザニル、イソオキサゾリル、およびチアゾリル等の５員単環基；ピリジル、ピラジニル、ピリミジニル、ピリダジニル、およびトリアジニル等の６員単環基；並びにベンゾ[ｂ]チエニル、ナフト[２,３−ｂ]チエニル、チアントレニル、イソベンゾフラニル、クロメニル、キサンテニル、フェノキサチエニル、インドリジニル、イソインドリル、インドリル、インダゾリル、プリニル、イソキノリル、キノリル、フタラジニル、ナフチリジニル、キノキサリニル、キナゾリニル、ベンゾチアゾール、ベンゾイミダゾール、テトラヒドロキノリン、シンノリニル、プテリジニル、カルバゾリル、β−カルボリニル、フェナントリジニル、アクリジニル、ペリミジニル、フェナントロリニル、フェナジニル、イソチアゾリル、フェノチアジニル、およびフェノキサジニルなどの多環複素環基が挙げられる（例えば、Katritzky 複素環化学ハンドブック (Handbook of Heterocyclic Chemistry)を参照）。
【００８４】
ヘテロアリール環基の具体例としては、それらに制限されないが、２−フラニル、３−フラニル、Ｎ−イミダゾリル、２−イミダゾリル、４−イミダゾリル、５−イミダゾリル、３−イソオキサゾリル、４−イソオキサゾリル、５−イソオキサゾリル、２−オキサジアゾリル、５−オキサジアゾリル、２−オキサゾリル、４−オキサゾリル、５−オキサゾリル、１−ピロリル、２−ピロリル、３−ピロリル、２−ピリジル、３−ピリジル、４−ピリジル、２−ピリミジル、４−ピリミジル、５−ピリミジル、３−ピリダジニル、２−チアゾリル、４−チアゾリル、５−チアゾリル、５−テトラゾリル、２−トリアゾリル、５−トリアゾリル、２−チエニル、３−チエニル、カルバゾリル、ベンゾイミダゾリル、ベンゾチエニル、ベンゾフラニル、インドリル、キノリニル、ベンゾトリアゾリル、ベンゾチアゾリル、ベンゾオキサゾリル、ベンゾイミダゾリル、イソキノリニル、インドリル、イソインドリル、アクリジニルおよびベンゾイソオキサゾリルが挙げられる。
【００８５】
ヘテロアリール基はさらに、ヘテロ芳香族環が１または２以上の芳香族または非芳香族環に縮合している基であって、基部すなわち結合位置がヘテロ芳香族環上にある基も包含する。例としては、テトラヒドロキノリン、テトラヒドロイソキノリン、並びにピリド[３,４−ｄ]ピリミジニル、イミダゾ[１,２−ａ]ピリミジル、イミダゾ[１,２−ａ]ピラジニル、イミダゾ[１,２−ａ]ピリジニル、イミダゾ[１,２−ｃ]ピリミジル、ピラゾロ[１,５−ａ] [１,３,５]トリアジニル、ピラゾロ[１,５−ｃ]ピリミジル、イミダゾ[１,２−ｂ]ピリダジニル、イミダゾ[１,５−ａ]ピリミジル、ピラゾロ[１,５−ｂ] [１,２,４]トリアジン、キノリル、イソキノリル、キノキサリル、イミダゾトリアジニル、ピロロ[２,３−ｄ]ピリミジル、トリアゾロピリミジル、およびピリドピラジニルが挙げられる。
【００８６】
アリール基またはヘテロアリール基は、１または２以上の置換基を含んでいてもよい。アリールまたはヘテロアリール基の置換基の例としては、ハロゲン（Ｆ、Ｃｌ、ＢｒまたはＩ）、アルキル、アルケニル、アルキニル、ヘテロアルキル、−ＮＯ2、−ＣＮ、−ＲA、−ＯＲB、−Ｓ(Ｏ)rＲB、（ここでｒは０、１または２）、−ＳＯ2ＮＲAＲB、−ＮＲAＲB、−Ｏ−ＮＲAＲB、−ＮＲA−ＮＲAＲB、−(ＣＯ)ＹＲB、−Ｏ(ＣＯ)ＹＲB、−ＮＲA(ＣＯ)ＹＲB、−Ｓ(ＣＯ)ＹＲB、−ＮＲAＣ(＝Ｓ)ＹＲB、−ＯＣ(＝Ｓ)ＹＲB、−Ｃ(＝Ｓ)ＹＲB、−ＹＣ(＝ＮＲA)ＹＲB、−ＹＣ(＝Ｎ−ＯＲA)ＹＲB、−ＹＣ(＝Ｎ−ＮＲAＲB)ＹＲB、−ＣＯＣＯＲB、−ＣＯＭＣＯＲB（式中、ＭはＣ1-6アルキル基）、−ＹＰ(Ｏ)(ＹＲC)(ＹＲC)、−Ｐ(Ｏ)(ＲC)2、−Ｓｉ(ＲC)3、−ＮＲAＳＯ2ＲB、および−ＮＲAＳＯ2ＮＲAＲBが挙げられる。ここで、各Ｙは、出てくるごとに独立して−Ｏ−、−Ｓ−、−ＮＲA−または化学的単結合である（すなわち、−(ＣＯ)ＹＲBは、−Ｃ(＝Ｏ)ＲB、−Ｃ(＝Ｏ)ＯＲBおよび−Ｃ(＝Ｏ)ＮＲAＲBを包含する。
【００８７】
ＲCは、アルキル、アルケニル、アルキニル、シクロアルキル、シクロアルケニル、シクロアルキニル、アリール、ヘテロアリール、複素環基から選ばれる。ＲAおよびＲBは、出てくる毎にそれぞれ独立して、水素、アルキル、アルケニル、アルキニル、シクロアルキル、シクロアルケニル、シクロアルキニル、アリール、ヘテロアリールおよび複素環基から選ばれる。
【００８８】
ＲA、ＲBおよびＲCのそれぞれは、場合により、アミノ、アルキルアミノ、ジアルキルアミノ、アミノカルボニル、ハロゲン、アルキル、アリール、ヘテロアルキル、ヘテロアリール、炭素環基、複素環基、アルキルアミノカルボニル、ジアルキルアミノカルボニル、アルキルアミノカルボニルオキシ、ジアルキルアミノカルボニルオキシ、ニトロ、シアノ、カルボキシ、アルコキシカルボニル、アルキルカルボニル、アルコキシ、ハロアルコキシ基、ヒドロキシ、保護されたヒドロキシ(例、−Ｏ−Ｘ、ここでＸは、アシル、フェニル、置換フェニル、ベンジル、置換ベンジル、フェネチルまたは置換フェネチルである)、−Ｍ−ヘテロアリール、−Ｍ−複素環基、−Ｍ−アリール、−Ｍ−ＯＲB、−Ｍ−ＳＲB、−Ｍ−ＮＲAＲB、−Ｍ−ＯＣ(Ｏ)ＮＲAＲB、-Ｍ−Ｃ(＝ＮＲB)ＮＲAＲB、−Ｍ−Ｃ(＝ＮＲA)ＯＲB、−Ｍ−Ｐ(＝Ｏ)(ＲC)2、−Ｓｉ(ＲC)3、−Ｍ−ＮＲAＣ(Ｏ)ＲB、−Ｍ−ＮＲAＣ(Ｏ)ＯＲB、−Ｍ−Ｃ(Ｏ)ＲB、−Ｍ−Ｃ(＝Ｓ)ＲB、−Ｍ−Ｃ(＝Ｓ)ＮＲAＲB、−Ｍ−Ｃ(Ｏ)ＮＲAＲB、−Ｍ−Ｃ(Ｏ)ＮＲB−Ｍ−ＮＲAＲB、−Ｍ−ＮＲBＣ(ＮＲA)ＮＲAＲB、−Ｍ−ＮＲAＣ(Ｓ)ＮＲAＲB、−Ｍ−Ｓ(Ｏ)2ＲA、−Ｍ−Ｃ(Ｏ)ＲA、−Ｍ−ＯＣ(Ｏ)ＲA、−ＭＣ(Ｏ)ＳＲB、−Ｍ−Ｓ(Ｏ)2ＮＲAＲB、−Ｃ(Ｏ)−Ｍ−Ｃ(Ｏ)ＲB、−ＭＣＯ2ＲB、−ＭＣ(=Ｏ)ＮＲAＲB、−Ｍ−Ｃ(＝ＮＨ)ＮＲAＲBおよび−Ｍ−ＯＣ(＝ＮＨ)ＮＲAＲB（式中、ＭはＣ1-6アルキル基である）から選ばれた１または２以上の置換基を有していてもよい。
【００８９】
置換基を有するＲA、ＲBおよびＲC基の制限を意図しない例示としては、ハロアルキルおよびトリハロアルキル、アルコキシアルキル、ハロフェニル、クロロメチル、トリクロロメチル、トリフルオロメチル、メトキシエチル、アルコキシフェニル、ハロフェニル、−ＣＨ2−アリール、−ＣＨ2−複素環、−ＣＨ2Ｃ(Ｏ)ＮＨ2、−Ｃ(Ｏ)ＣＨ2Ｎ(ＣＨ3)2、−ＣＨ2ＣＨ2ＯＨ、−ＣＨ2ＯＣ(Ｏ)ＮＨ2、−ＣＨ2ＣＨ2ＮＨ2、−ＣＨ2ＣＨ2ＣＨ2ＮＥｔ2、−ＣＨ2ＯＣＨ3、−Ｃ(Ｏ)ＮＨ2、−ＣＨ2ＣＨ2−複素環、−Ｃ(＝Ｓ)ＣＨ3、−Ｃ(＝Ｓ)ＮＨ2、−Ｃ(＝ＮＨ)ＮＨ2、−Ｃ(＝ＮＨ)ＯＥｔ、−Ｃ(Ｏ)ＮＨ−シクロプロピル、−Ｃ(Ｏ)ＮＨＣＨ2ＣＨ2−複素環、−Ｃ(Ｏ)ＮＨＣＨ2ＣＨ2ＯＣＨ3、−Ｃ(Ｏ)ＣＨ2ＣＨ2ＮＨＣＨ3、−ＣＨ2ＣＨ2Ｆ、−Ｃ(Ｏ)ＣＨ2−複素環、−ＣＨ2Ｃ(Ｏ)ＮＨＣＨ3、−ＣＨ2ＣＨ2Ｐ(＝Ｏ)(ＣＨ3)2、およびＳｉ(ＣＨ3)3が挙げられる。
【００９０】
アルキル、アルケニル、アルキニル、アルコキシ、ハロアルキル、ヘテロアルキル、シクロアルキル、シクロアルケニル、シクロアルキニルまたは複素環基も、アリールおよびヘテロアリール基について上に列挙したものから選ばれた１または２以上の置換基を含んでいてもよい。この場合の置換基は、以上に加えて、＝Ｏ、＝Ｓ、＝ＮＨ、＝ＮＮＲAＲB、＝ＮＮＨＣ(Ｏ)ＲB、＝ＮＮＨＣＯ2ＲB、または＝ＮＮＨＳＯ2ＲBから選ぶこともできる。ここで、ＲAおよびＲBは上に定義した通りである。例えば、複素環または他の部位の内部における窒素上の置換基の制限しない例としては、アルキル（置換もしくは非置換）、アシル、アミノアシルおよびスルホニル基が挙げられる。
【００９１】
本発明の他の特徴および利点は、以下の詳細な説明および特許請求の範囲から明らかとなろう。
【発明を実施するための形態】
【００９２】
本発明は、エルロチニブまたはゲフィチニブに現在治療抵抗性であるか、かって治療抵抗性であったか、或いは本明細書に示したＥＧＦＲ変異を保有するＥＧＦＲ発動性がんに罹患している患者に一般式（Ｉ）で示される化合物を投与することによる、該患者の処置方法に関する。
【００９３】
［ＥＧＦＲ変異体］
ＥＧＦＲ変異体としては、ＥＧＦＲのアミノ酸または核酸配列における１または２以上の欠失、置換または付加があるもの、或いはそれらの断片が挙げられる。
【００９４】
ＥＧＦＲの突然変異はＥＧＦＲ配列のあらゆる部分に起こりうる。一般に、ＥＧＦＲ変異体は、そのキナーゼドメイン（すなわち、ＥＧＦＲ配列のｅｘｏｎ１８〜２４）または細胞外ドメイン（すなわち、ＥＧＦＲ配列のｅｘｏｎ２〜１６）における突然変異から生ずる。例えば、突然変異は、典型的には下記の変異を包含するキナーゼドメインにおいて起こる：ｅｘｏｎ１８での１または２以上の点変異（例、Ｌ６８８Ｐ、Ｖ６８９Ｍ、Ｐ６９４ｌ／ｓ、Ｎ７００Ｄ、Ｌ７０３Ｖ、Ｅ７０９Ｋ／Ｑ・Ａ／Ｇ／Ｖ、Ｉ７１５Ｓ、Ｌ７１８Ｐ、Ｇ７１９Ｃ／Ａ／Ｓ／Ｒ、またはＳ７２０Ｐ／Ｆ）、ｅｘｏｎ１９での挿入を含み、もしくは含まない欠失（例、ｄｅｌＧ７１９、ｄｅｌＥ７４６＿Ｅ７４９、ｄｅｌＥ７４６＿Ａ７５０、ｄｅｌＥ７４６＿Ａ７５０ｉｎｓＲＰ、ｄｅｌＥ７４６＿Ａ７５０ｉｎｓＱＰ、ｄｅｌＥ７４６＿Ｔ７５１、ｄｅｌＥ７４６＿Ｔ７５１ｉｎｓＶＡ、ｄｅｌＥ７４６＿Ｓ７５２、ｄｅｌＥ７４６＿Ｓ７５２ｉｎｓＡ／Ｖ／Ｄ、ｄｅｌＥ７４６＿Ｐ５３ｉｎｓＬＳ、ｄｅｌＥ７４７＿Ｅ７４９、ｄｅｌＥ７４７＿Ａ７５０、ｄｅｌＥ７４７＿Ａ７５０ｉｎｓｐ、ｄｅｌＥ７４７＿Ｔ７５１、ｄｅｌＥ７４７＿Ｔ７５１ｉｎｓＰ／Ｓ／Ｑ、ｄｅｌＥ７４７＿Ｔ７５１ｉｎｓＰＩ、ｄｅｌＥ７４７＿Ｓ７５２、ｄｅｌＥ７４７＿Ｓ７５２ｉｎｓＱ、ｄｅｌＥ７４７＿Ｐ７５３、ｄｅｌＥ７４７＿Ｐ７５３ｉｎｓＳ／Ｑ、ｄｅｌＥ７４７＿Ｌ７５４ｉｎｓＳＲ、ｄｅｌＥ７４９＿Ａ７５０、ｄｅｌＥ７４９＿Ａ７５０ｉｎｓＲＰ、ｄｅｌＥ７４９＿Ｔ７５１、ｄｅｌＥ７５１＿Ｉ７５９、ｄｅｌＥ７５１＿Ｉ７５９ｉｎｓＳ／Ｎ、もしくはｄｅｌＳ７５２＿Ｉ７５９）、ｅｘｏｎ１９での重複（例、Ｋ７３９＿Ｉ４４ｄｕｐＫＩＰＶＡＩ）、ｅｘｏｎ１９での点変異（例、Ｌ７３０Ｆ、Ｗ７３１Ｓｔｏｐ、Ｐ７３３、Ｇ７３５Ｓ、Ｖ７４２Ａ、Ａ７５０Ｐ、Ｔ７５１Ｉ、Ｓ７５２Ｙ、Ｐ７５３Ｓ、Ａ７５４Ｐ、もしくはＤ７６１Ｙ）、ｅｘｏｎ２０でのフレーム内挿入（例、Ｄ７６１＿Ｅ７６２ｉｎｓＥＡＦＱ、Ａ７６７＿Ｓ７６８ｉｎｓＴＬＡ、Ｖ７６９＿Ｄ７７０ｉｎｓＹ、Ｖ７６９＿Ｄ７７０ｉｎｓＣＶ、Ｖ７６９＿Ｄ７７０ｉｎｓＡＳＶ、Ｄ７７０＿Ｎ７７１ｉｎｓＤ／Ｇ、Ｄ７７０＿Ｎ７７１ｉｎｓＮＰＧ、Ｄ７７０＿Ｎ７７１ｉｎｓＳＶＱ、Ｐ７７２＿Ｈ７７３ｉｎｓＮ／Ｖ、Ｐ７７２＿Ｈ７７３ｉｎｓＹＮＰ、もしくはＶ７７４＿Ｃ７７５ｉｎｓＨＶ）、ｅｘｏｎ２０での挿入を含み、もしくは含まない欠失（例、ｄｅｌＭ７６６＿Ａ７６７、ｄｅｌＭ７６６＿Ａ７６７ｉｎｓＡＩ、ｄｅｌＡ７６７＿Ｖ７６９、ｄｅｌＤ７７０、もしくはｄｅｌＰ７７２＿Ｈ７７３ｉｎｓＮＰ）、ｅｘｏｎ２０での重複（例、Ｓ７６８＿Ｄ７７０ｄｕｐＳＶＤ、Ａ７６７＿Ｖ７６９ｄｕｐＡＳＶ、もしくはＨ７７３ｄｕｐＨ）、ｅｘｏｎ２０での点変異（例、Ｄ７６１Ｎ、Ａ７６３Ｖ、Ｖ７６５Ａ／Ｍ、Ｓ７６８Ｉ、Ｖ７６９Ｌ／Ｍ、Ｓ７６８Ｉ、Ｐ７７２Ｒ、７１Ｔ、Ｈ７７３Ｒ／Ｙ／Ｌ、７７４Ｍ、Ｒ７７６Ｇ／Ｈ／Ｃ、Ｇ７７９Ｓ／Ｆ、Ｔ７８３Ｓ、Ｔ８４Ｆ、Ｌ７９２Ｐ、Ｌ７９４Ｈ／Ｆ、Ｔ７９０Ｍ、Ｒ８０３Ｗ、Ｋ８０６Ｅ、もしくはＬ８１４Ｐ）、またはｅｘｏｎ２１での点変異（例、Ｇ８１０Ｓ、Ｎ８２６Ｓ、Ｌ８３３Ｖ、Ｈ８３５Ｌ、Ｌ８３８Ｖ、Ａ８３９Ｔ、Ｋ８４６Ｒ、Ｔ８７４Ｉ、Ｈ８５０Ｎ、Ｖ８５１Ｉ／Ａ、Ｉ８５３Ｔ、Ｌ８５８Ｍ／Ｒ、Ａ８５９Ｔ、Ｌ８６１Ｑ／Ｒ、Ｇ８６３Ｄ、Ａ８６４Ｔ、Ｅ８６６Ｋ、もしくはＧ８７３Ｅ）。肺がんでは、活性化変異が典型的であり、７４６−７５０（ＥＬＲＥＡ）の９０％欠失およびＬ８５８Ｒがリガンド刺激を伴わないＥＧＦＲの持続したリン酸化を生ずる。肺がんの５０％における薬剤耐性はＴ７９０Ｍ点変異から生ずると言われている。
【００９５】
例えば、神経膠芽腫では、突然変異は典型的には（ただし、それのみではないが）下記を包含する細胞外ドメインで起こる変異である：細胞外ドメインが欠失し、ｖ−ｅｒｂＢオンコプロテインに類似しているＥＧＦＲ variant Ｉ；ドメインＩＶから８３アミノ酸が欠失しているＥＧＦＲｖＩＩ；およびドメインＩおよびＩＩからアミノ酸３０−２９７が欠失しているＥＧＦＲｖＩＩＩ（これは最も一般的な増幅であって、神経膠芽腫の３０〜５０％および扁平上皮がんの５％において報告されている。神経膠芽腫の他の突然変異としては、下記位置でのでの１もしくは２以上の点変異が挙げられる：ｅｘｏｎ２（例、Ｄ４６ＮもしくはＧ６３Ｒ）、ｅｘｏｎ３（例、ドメインＩでのＲ１０８Ｋ）、ｅｘｏｎ７（例、ドメインＩＩでのＴ２６３ＰまたはＡ２８９Ｄ／Ｔ／Ｖ）、ｅｘｏｎ８（例、Ｒ３２４ＬもしくはＥ３３０Ｋ）、ｅｘｏｎ１５（例、ドメインＩＶでのＰ５９６ＬもしくはＧ５９８Ｖ）、またはｅｘｏｎ２１（例、キナーゼドメインでのＬ８６１Ｑ）。
【００９６】
ＥＧＦＲ変異体はまた、上述したような２以上の突然変異の組み合わせを有するものも含む。例示的な組み合わせとしては、Ｓ７６８ＩとＧ７１９Ａ；Ｓ７６８ＩとＶ７６９Ｌ；Ｈ７７３ＲとＷ７３１Ｓｔｏｐ；Ｒ７７６ＧとＬ８５８Ｒ；Ｒ７７６ＨとＬ８６１Ｑ；Ｔ７９０ＭとＬ８５８Ｒ；Ｔ７９０ＭとｄｅｌＥ７４６＿Ａ７５０；Ｒ８０３ＷとｄｅｌＥ７４６＿Ｔ７５１ｉｎｓＶＡ；ｄｅｌ７４７＿Ｅ７４９とＡ７５０Ｐ；ｄｅｌＬ７４７＿Ｓ７５２とＥ７４６Ｖ；ｄｅｌＬ７４７＿Ｓ７５２とＰ７５３Ｓ；Ｐ７７２＿Ｈ７７３ｉｎｓＹＮＰとＨ７７３Ｙ；Ｐ７７２＿Ｈ７７３ｉｎｓＮＰとＨ７７３Ｙ；およびＤ７７０＿Ｎ７７１ｉｎｓＧと７７１Ｔが挙げられる。特に現在興味ある組み合わせとしては、Ｔ７９０Ｍと他の突然変異との組み合わせ（例、Ｔ７９０ＭとＬ８５８ＲまたはＴ７９０ＭとｄｅｌＥ７４６＿Ａ７５０）が挙げられる。
【００９７】
或る種の突然変異は、ＥＧＦＲリガンドの不存在下で活発にシグナリングするが、ゲフィチニブやエルロチニブといったＥＧＦＲ阻害剤への感受性により特徴づけられる変異ＥＧＦＲタンパク質をコード化する。Ｇ７１９Ｃ／Ｓ／Ａ、ｄｅｌＥ７４６＿Ａ７５０およびＬ８５８Ｒがそのような突然変異の例である。他のＥＧＦＲ突然変異は、上に述べた活性化突然変異のいずれかとの組み合わせで存在していても、かかる薬剤に対する耐性を付与する。Ｔ７９０Ｍは、上記薬剤に対する耐性を付与する突然変異の１例である。
【００９８】
ＥＧＦＲ発動性がんは、野生型ＥＧＦＲにより、または本明細書に述べたいずれかの変異ＥＧＦＲにより発動されうる。例えば、ＥＧＦＲｖｉｉｉは、神経膠芽腫に普通にみられ、乳がん、卵巣がん、前立腺がん、および肺がんにおいても報告されている。ＥＧＦＲ発動性がんの例としては下記のものがある：神経膠芽腫、肺がん（扁平上皮がん、非小細胞肺がん、腺がん、細気管支−肺胞がん（ＢＡＣ）、局所侵襲を伴うＢＡＣ、ＢＡＣの様相を伴う腺がん、および大細胞がん）；膵臓がん；頭頚部がん（例、扁平上皮細胞がん）；乳がん；大腸がん（結腸直腸がん）；上皮がん（例、扁平上皮細胞がん）；卵巣がん；および前立腺がん。
【００９９】
特に、本明細書に記載した発明は、ＴＫＩ耐性ＥＧＦＲ突然変異を有するか、その危険性の高い患者に興味あるものである。非小細胞肺がんの発病数（米国内で約１６０,０００例）、全人口中のエルロチニブに対する応答性の割合（約１０％、従って感受性人口は１６,０００という結果になる）、活性化突然変異の存在率（白人で１０〜２０％、アジア系人口では３０〜４０％、従って、感受性人口は１６,０００〜３２,０００という結果になる）、二次耐性の獲得率（すべてではないにしてもほとんどの患者、従って、感受性人口は１６,０００〜３２,０００という結果になる）、およびＴ７９０Ｍ点変異を保有する患者の割合（約５０％、従って、感受性人口は８,０００〜１６,０００という結果になる）に基づいて、（米国内での）年間の新たな症例数は約８,０００〜１６,０００と推測される。ＴＫＩ耐性突然変異を有する患者としては、下記の１種または２種以上に耐性のがんに罹患した患者が挙げられる：エルロチニブ、ゲフィチニブ、ＣＬ−３８７、７８５、ＢＩＢＷ２９９２（ＣＡＳ登録番号４３９０８１−１８−２）、ＣＩ−１０３３、ネラチニブ（ＨＫＩ−２７２）、ＭＰ−４１２（ＡＶ−４１２）、ＰＦ−２９９８０４、ＡＥＥ７８、およびＸＬ６４。
【０１００】
特に、本発明は、Ｔ７９０Ｍ点変異を有するＥＧＦＲ発動性がんの処置に関する。一般に、可逆性阻害剤（例、ＣＩ−１０３３、ネラチニブ（ＨＫＩ−２７２）およびＰＦ−２９９８０４）は、Ｔ７９０Ｍ変異を有する細胞系では効力がさほど高くなく、臨床で達成しうる濃度ではＴ７９０Ｍを阻害しない。Ｔ７９０Ｍと  ＷＴｎｏＡＴＰ Ｋｍは似ているので、Ｔ７９０Ｍを阻害する濃度はＷＴも阻害し、胃腸および皮膚のイベントを生ずる。
【０１０１】
ＥＧＦＲ変異体はまた、チロシンキナーゼまたはリン酸化活性を保持または増大させる点変異のような１種または２種以上欠失、置換、または付加を有するＥＧＦＲの他のアミノ酸およびヌクレオチド配列も包含する。変異体がタンパク質またはポリペプチドである場合、好ましい置換は、構造、電気的特性、極性、または疎水性といった性質が似ているアミノ酸の間での置換である保存的置換である。例えば、置換は、塩基性アミノ酸（例、Ｌｙｓ、Ａｒｇ、およびＨｉｓ）の間で、または酸性アミノ酸（例、ＡｓｐおよびＧｌｕ）の間で、または電荷を持たない極性側鎖を有するアミノ酸（例、Ｇｌｙ、Ａｓｎ、Ｇｌｎ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、およびＣｙｓ）の間で、または疎水性側鎖を有するアミノ酸（例、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ、およびＭｅｔ）の間で、または分岐側鎖を有するアミノ酸（例、Ｔｈｒ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、およびＩｌｅ）の間で、または芳香族側鎖を有するアミノ酸（例、Ｔｙｒ、Ｔｒｐ、Ｐｈｅ、およびＨｉｓ）の間で、それぞれ行うことができる。
【０１０２】
変異体が核酸である場合、ＥＧＦＲ変異体タンパク質をコードするＤＮＡは、本書に定義したようにストリンジェント条件下で、ＥＧＦＲ変異体をコードする当該ヌクレオチド配列の相補的配列にハイブリダイズすることができるヌクレオチド配列を含む。ここで用いたストリンジェント条件は、低、中または高ストリンジェント条件を包含する。ストリンジェント条件の１例は、約２〜６×ＳＳＣ中約４２〜５５℃でのハイブリダイゼーションの後、約０.１〜０.２％のＳＤＳを含む約０.１〜１×ＳＳＣ中約５０〜６５℃での洗浄を含む。ここで１×ＳＳＣは０.１５ＭのＮａＣｌおよび０.０１５Ｍのクエン酸Ｎａを含有するｐＨ７.０の溶液である。洗浄は１回またはそれ以上行うことができる。一般に、ストリンジェント条件は、規定のイオン強度およびｐＨでその特定のヌクレオチド配列の融点（Ｔｍ）より約５℃低い温度に設定しうる。
【０１０３】
ＥＧＦＲのアミノ酸およびヌクレオチド配列およびそれらをコードするＤＮＡは、ＮＣＢＩ ＧｅｎＢａｎｋ（ＵＳＡ）、ＥＭＢＬ（欧州）などの周知のデータベースから入手可能である。例えば、ＥＧＦＲ［ホモサピエンス］についてのＧｅｎＢａｎｋ受託番号としては、ＭＩＭ１３１５５０、ＡＡ１２８４２０、ＮＭ＿００５２２８、ＮＰ＿００５２１９.２、およびＧｅｎｅＩＤ：１９５６が挙げられる。
【０１０４】
ＥＧＦＲ発動性がんの特性決定（キャラクタライゼーション）
ＥＧＦＲヘテロアリールの発現または過剰発現は、生物学的検体中、または細胞により分泌されたＥＧＦＲ変異体のレベルを評価することにより診断的または予知的もしくは予後的アッセイ（例、抗ＥＧＦＲ抗体もしくは抗−ｐ−ＥＧＦＲ抗体を用いた免疫組織化学アッセイ；またはＦＡＣＳ分析など）により測定することができる。それに代えて、または加えて、細胞中のＥＧＦＲ変異体をコードする核酸またはｍＲＮＡのレベルを、例えば、ＥＧＦＲ変異体コード化核酸またはその相補物に対応する核酸系プローブを用いた蛍光in situハイブリダイゼーション（ＦＩＳＨ；ＷＯ９８／４５４７９，１９９８年１０月発行を参照）、サザンブロット法、ノーザンブロット法、またはポリメラーゼ連鎖反応（ＰＣＲ）法、例えば、リアルタイム定量ＰＣＲ（ＲＴ−ＰＣＲ）により測定することができる。また、血清のような生物学的検体中のシェッド（shed）抗原を、例えば、抗体系のアッセイ（例、１９９０年６月１２日発行の米国特許第４,９３３,２９４号、１９９１年４月１８日発行のＷＯ９１／０５２６４；１９９５年３月２８日発行の米国特許第５,４０１,６３８号、およびSias et al., J. Immunol. Methods 132:73 (1990)も参照）を用いて測定することによりＥＧＦＲ変異体発現を検討することができる。上記アッセイとは別に、各種のin vivoアッセイも当業者には利用可能である。例えば、哺乳動物の体内の細胞を、場合により検出可能な標識（例、放射性同位体）で標識されている抗体に露出し、哺乳動物内での該抗体の細胞との結合を、例えば、放射能の体外スキャンまたは該抗体に予め露出した哺乳動物から採取した生体組織を分析することにより評価することができる。
【０１０５】
単離された細胞中で測定することができる生物学的特性の例としては、ｍＲＮＡ発現、タンパク質発現、およびＤＮＡ定量化が挙げられる。また、本発明の方法により単離された細胞のＤＮＡを配列決定することができ、或いは、ある種の配列特性（例、多形性および染色体異常）を、ＦＩＳＨまたはＰＣＲといった標準的な方法を用いて同定することができる。細胞および他の分析物の化学組成も単離後にアッセイしてもよい。細胞はまた、例えば、細胞外もしくは細胞内染色または他の観察（例、各種培地中での形態もしくは成長特性）を用いて細胞溶解をせずにアッセイすることもできる。
【０１０６】
任意のハイブリダイゼーション法を、遺伝子再配列を検出するのに使用することができるが、一つの好ましい方法は、蛍光in situハイブリダイゼーション（ＦＩＳＨ）である。ＦＩＳＨは、染色体上の特定のＤＮＡまたはＲＮＡの有無の検出および位置確認を行うために使用することができる。ＦＩＳＨは、高度の配列類似性を示す染色体の部分だけに結合する蛍光で標識された核酸プローブを併用する。蛍光顕微鏡を使用して、蛍光プローブが染色体のどこに結合したかを見つけることができる。ＦＩＳＨの基本工程は以下に概説する。例示のＦＩＳＨプローブとしては、バンド７ｐ１２にハイブリダイズするVysis EGFR SpectrumOrange/ CEP SpectrumGreen Probe (Abbott, Downers Grove, IL)；および染色体７の動原体（セントロメア）のα−サテライト配列にハイブリダイズするZytoLight SPEC EGFR/CEN 7 Dual Color Probe (ZytoVision)が挙げられる。
【０１０７】
ＦＩＳＨに対して、使用するプローブは、その標的に特異的にハイブリダイズする（ただし、該ゲノム中の類似の配列にはハイブリダイズしない）のに十分長いが、ハイブリダイゼーション法を妨げるほどは長くないように構成する。プローブは一般に、蛍光体で、抗体の標的で、ビオチンで、またはそれらの任意の組み合わせで標識される。この標識は、例えば、ランダムプライミング、ニックトランスレーション、および標識ヌクレオチドを用いたＰＣＲなどの各種方法で実施することができる。
【０１０８】
一般に、ＦＩＳＨ分析には検体またはある量の細胞集団を用いる。例えば、一つの調製方法では、細胞をトリプシン処理して、単個細胞に分散させ、ガラススライド上にサイトスピンした後、パラホルムアルデヒドで固定してから７０％エタノール中で保管する。ＦＩＳＨ用の染色体の調製については、染色体を基体（通常はガラス）にしっかり付着させる。調製後、プローブを染色体ＲＮＡに適用し、ハイブリダイズを開始させる。数回の洗浄工程によりハイブリダイズしていないかまたは不完全にハイブリダイズしたプローブをすべて洗浄除去する。顕微鏡の検出閾値（これはプローブ標識効率、プローブの種類、および蛍光色素などの多くの因子に依存する）を超えるのにシグナル増幅が必要なら、当該標識分子に蛍光標識抗体またはストレプトアビジンを結合させることにより、蛍光を増幅させる。
【０１０９】
落射蛍光顕微鏡をハイブリダイズした配列の観察に使用することができる。光源ランプの白色光をフィルターに通して蛍光性分子の励起用の関連波長のみが検体上に到達するようにする。一般により長波長側で蛍光色素の発光が起こり、それにより別の光学フィルターによって励起光と発光した光とを識別することができる。より精密なフィルターのセットを使用すれば、いくつかの励起バンドと発光バンドとを、従って、いくつかの蛍光色素を識別することが可能となり、こうして同一ストランド上で多くの異なるプローブを観察することが可能となる。
【０１１０】
使用するプローブに応じて、ＦＩＳＨは、巨大染色体から小さな（約１００キロ塩基）配列までに及ぶ解像度を有する。プローブは、ドットを計数するか、または色を比較することだけで定量化することができる。
【０１１１】
アレル（対立遺伝子）特異的定量リアルタイムＰＣＲを使用して、変異ＥＧＦＲタンパク質をコードする核酸を同定することもできる（例、Diagnostic Innovations DxS BCR-ABL T3151 変異試験キット、およびSinger et al., Methods in Molec. Biol. 181:145 (2001) を参照）。この方法はＴａｑ ＤＮＡポリメラーゼを利用する。これは、プライマーの３’末端でのマッチとミスマッチとの識別に極めて効果的である（３’末端がミスマッチであると、効率的な増幅は起こらない）。この方法を用いて、本明細書に述べるようにＥＧＦＲ変異体中の変異アミノ酸をコードするコドンに対応する核酸配列に特異的にハイブリダイズするようにプライマーの３’末端を設計してもよい。このようにして、患者の検体中で特異的な変異配列を選択的に増幅することができる。この方法はさらに、ＰＣＲプライマー、蛍光体、および発光抑制物質を含む二官能性分子であるScorpionプローブ分子をさらに利用する。このプローブ中の蛍光体は蛍光を低減させる発光抑制物質と相互作用する。ＰＣＲ反応中、Scorpionプローブがアンプリコンに結合すると、Scorpionプローブ中の蛍光体と発光抑制物質とが分離するようになり、反応管からの蛍光の増大を生ずる。アレル特異的定量リアルタイムＰＣＲには本明細書に述べたプライマーのいずれも使用しうる。
【０１１２】
生物学的検体を本技術分野で公知の方法により分析してＥＧＦＲ遺伝子またはＥＧＦＲ遺伝子の発現レベルを検出することができる。ＥＧＦＲ遺伝子中の突然変異を検出するには、患者検体に由来するＰＣＲ産物の、例えば、直接核酸配列決定、改変ハイブリダイゼーション、異常型（異所性）電気泳動ゲル移動、ミスマッチ結合性タンパク質により媒介される結合もしくは開裂、一本鎖配座多形（ＳＳＣＰ）分析、または制限酵素断片長多型（ＲＦＬＰ）分析といった方法を使用することができる。ＥＧＦＲポリペプチドのレベルの測定にはＥＬＩＳＡを使用することができる。そして、ＥＧＦＲ核酸分子のレベルを測定するにはＰＣＲを使用することができる。
【０１１３】
これらの方法のいずれも、候補遺伝子における突然変異の検出を容易にするために使用でき、いずれも本技術分野では周知であり、具体的方法の例は、制限なしに、Orita et al., (Proc. Natl. Acad. Sci. USA 86:2766 (1989))およびSheffield et al., (Proc. Natl. Acad. Sci. USA 86:232 (1989))に記載されている。さらに、生物学的検体（例、生検）中の候補遺伝子の発現は、標準的なノーザンブロット分析により監視してもよく、またはＰＣＲにより補助してもよい（例、Ausubel et al., Current Protocols in Molecular Biology, John Wilen & Sons, New York, NY (1995); PCR Technology: Principles and Applications for DNA Amplification, H.A. Ehrlich, Ed., Stockton Press, NY; Yap et al., Nucl. Acids Res. 19:4294 (1991)を参照）。
【０１１４】
当業者であれば、多くの配列アライメントソフトウェアプログラム（例、ＮＣＢＩ ＢＬＡＳＴウェブサイト）を用いて、核酸またはタンパク質配列中で野生型ＥＧＦＲまたはＥＧＦＲ変異体なかの残基またはコドンに対応する残基（例、アミノ酸もしくはヌクレオチド）またはコドンを同定することができる。このようなソフトウェアプログラムは比較する配列のアライメントにおけるギャップを考慮に入れることができる。このようなソフトウェアを用いて、当業者は、野生型ＥＧＦＲまたはＥＧＦＲ変異体中の特定のヌクレオチド、アミノ酸、またはコドンに対応するヌクレオチド、アミノ酸またはコドンを同定してもよい。
【０１１５】
生物学的検体におけるＥＧＦＲ発現（例、ＤＮＡ、ｍＲＮＡまたはタンパク質）のレベルは、本技術分野で周知または本明細書に記載した標準的な多くの方法のいずれかを用いて求めることができる。生物学的検体の例としては、血漿、血液、痰、胸水、気管支肺胞洗浄液、または肺生検およびリンパ節生検のような生検が挙げられる。例えば、患者からの生物学的検体（例、血液または組織検体）中のＥＧＦＲ発現は、標準的なノーザンブロット分析または定量的ＰＣＲ（例、Ausubel et al., 同上; PCR Technology: Principles and Applications for DNA Amplification, H.A. Ehrlich, Ed., Stockton Press, NY; Yap et al., Nucl. Acids Res. 19:4294 (1991)を参照）。
【０１１６】
化合物の合成
一般式（Ｉ）で示される化合物は、例えば、ＷＯ２００４／０８０９８０、ＷＯ２００５／０１６８９４、ＷＯ２００６／０２１４５４、ＷＯ２００６／０２１４５７、ＷＯ２００９／１４３３８９、およびＷＯ２００９／１２６５１５に詳細に開示されているように、公知の方法および材料を用いて調製することができる。例えば、ＰＣＴ公開番号ＷＯ２００９／１４３３８９に記載されているように、ＲeがＨで、ＲdがＨ、Ｃｌ、ＣＦ3またはＣＨ3である一般式（Ｉ）の化合物は、それぞれ２,４−ジクロロピリミジン、２,４,５−トリクロロピリミジン、２,４−ジクロロ−５−(トリフルオロメチル)ピリミジン、または２,４−ジクロロ−５−メチルピリミジンから合成することができる（例えば、下記のスキーム１Ａおよび１Ｂを参照）。
【０１１７】
【化１４】
2013539795.tif 000015
【０１１８】
ＲdとＲeが、これらが結合しているピリミジン環原子と一緒に１または２個のヘテロ原子を含む５または６員環を形成している一般式（Ｉ）で示される化合物は、ＰＣＴ公開番号ＷＯ２００９／１２６５１５に記載されているようにして合成できる。例えば、一般式（Ｉ）の化合物を合成することができる出発物質の合成を説明する下記スキーム２を参照されたい。スキーム２において、ＸはＣＨ3またはＨである。
【０１１９】
【化１５】
2013539795.tif 000016
【０１２０】
処方組成物
一般式（Ｉ）で示される化合物は、本発明の方法の使用に有効な任意の投与経路（例、経口、経直腸、非経口、槽内、膣内もしくは鞘膜内、腹腔内、局所（経皮パッチ、散剤、軟膏または滴下剤などにより）、舌下、バッカル、口腔または鼻スプレイ剤）に対して処方または製剤することができる。本発明の方法における使用のために、一般式（Ｉ）の化合物は、投与を容易にし投与量を均一にするために剤形単位に処方することが好ましい。例えば、一般式（Ｉ）で示される化合物は、公称で１０ｍｇ、５０ｍｇ、１００ｍｇ、１５０ｍｇ、２５０ｍｇ、５００ｍｇまたは本明細書に記載した任意の他の用量を当該化合物の遊離塩基または酸付加塩（例、塩酸塩）として含有する経口投与用のカプセル剤として処方することができる。本発明の単位剤形は、本化合物またはその塩を、必要に応じて賦形剤、流動性向上剤、滑剤、および／または崩壊剤とともに製剤化して含有しうる。例えば、単位剤形は、コロイド状二酸化ケイ素（流動性向上剤）、無水乳糖（賦形剤）、ステアリン酸マグネシウム（滑剤）、微結晶性セルロース（賦形剤）および／またはデンプングリコール酸ナトリウム（崩壊剤）を含有しうる。本化合物および不活性成分は、例えば、慣用のブレンド法およびカプセル化法を利用して処方または製剤化することができる。或いは、一般式（Ｉ）の化合物は、ＰＣＴ公開番号ＷＯ２００９／１４３３８９およびＷＯ２００９／１２６５１５に記載のように製剤化してもよい。
【０１２１】
治療
一般式（Ｉ）で示される化合物は、ＥＧＦＲ発動性のがんの処置または治療に有用でありうる。特に、本化合物は、ＥＧＦＲ変異体を発現するＥＧＦＲ発動性がんの処置およびＴＫＩ療法（例、エルロチニブまたはゲフィチニブ）に治療抵抗性のＥＧＦＲ発動性がんの処置に有用でありうる。
【０１２２】
このようながんとしては、とりわけ、扁平上皮がん、腺がん、細気管支−肺胞がん（ＢＡＣ）、局所侵襲を伴うＢＡＣ、ＢＡＣの様相を伴う腺がん、および大細胞がんの１または２以上を包含する非小細胞肺がん（ＮＳＣＬＣ）；神経膠芽腫のような神経腫瘍；膵臓がん；頭頚部がん（例、扁平上皮細胞がん）；乳がん；大腸がん（結腸直腸がん）；扁平上皮細胞がんを始めとする上皮がん；卵巣がん；前立腺がん；腺がんを包含し、そしてＥＧＦＲが媒介するがんを包含する。
【０１２３】
本発明は、一般式（Ｉ）で示される化合物を、ＥＧＦＲ発動性がん、ＥＧＦＲ変異体を発現するＥＧＦＲ発動性がん、およびエルロチニブまたはゲフィチニブのようなＴＫＩに治療抵抗性のＥＧＦＲ発動性がんを処置するのに使用することができるという発見に基づくものである。一般式（Ｉ）の化合物は、そのような処置を必要とする患者におけるがんの再発を防止するための維持的役割にも使用することができる。
【０１２４】
一般式（Ｉ）で示される化合物の治療有効量は成人患者に対して５ｍｇ〜２０００ｍｇの化合物という平均日用量の範囲内であることが多く、これを１回または多数回に分けて好ましくは経口で投与する。典型的な平均日用量範囲としては、１０〜５００ｍｇ、２０〜５５０ｍｇ、３０〜６００ｍｇ、４０〜６５０ｍｇ、５０〜７００ｍｇが挙げられる。
【０１２５】
投与は、１日または１週間に１回または複数回（または他の何らかの複数日間隔で）、或いは間欠的スケジュールで行うことができる。例えば、本化合物を、毎週基準（例、月曜ごとに）で１日に１回または複数回、無期限にまたは何週かにわたって（例、４〜１０週間）投与してもよい。或いは、本化合物を何日かにわたって（例、２〜１０日間）毎日投与した後、本化合物を投与しない何日かの期間（例、１〜３０日）をとり、このサイクルを無期限にまたは所定の反復回数（例、２〜１０サイクル）繰り返すことより投与してもよい。１例として、本発明の化合物を５日間毎日投与し、次いで２日間投与を中止し、その後の５日間毎日投与し、その後２日間投与を中止するといったサイクルを無期限にまたは全部で４〜１０回反復することができる。
【０１２６】
下記の実施例は、本発明に係る化合物および方法をどのように実施し、作成し、および評価するかについての完全な開示および記述を当業者に提供するように述べるものであり、純粋に本発明の例示を目的とし、本発明の範囲を制限する意図はない。
【０１２７】
試薬：スクリーニングのために下記化合物を合成するか、または購入した：ＷＺ４００３（Zhou et al., Nature, 462:1070 (2009)）、ＨＫＩ−２７２、およびＣＩ−３８７、７８５。
【０１２８】
実施例１：キナーゼアッセイ
ＷＴ ＥＧＦＲ、Ｌ８５８Ｒ、Ｔ７９０Ｍ、およびＬ８５８Ｒ／Ｔ７９０Ｍを有するin vitroキナーゼパネルについてアッセイを実施した。さらに、ｄｅｌＥ７４６＿Ａ７５０およびｄｅｌＥ７４６＿Ａ７５０／Ｔ７９０Ｍを含むパネルで追加のアッセイを実施することができる。アッセイ条件は、３μＭトップ濃度（一回実施＜singlicates＞）および１０μＭ ＡＴＰでの１０ｐｔ曲線を含んでいた。
【０１２９】
一般式（Ｉ）の化合物はキナーゼアッセイで強力なＥＧＦＲ阻害剤を含んでいた。例えば、Ｌ８５８ＲおよびＴ７９０Ｍ突然変異を有するＨ１９７５細胞系では、既知阻害剤であるゲフィチニブ、ＣＬ−３８７、７８５およびＨＫＩ−２７２は１５３ｎＭから３.３μＭ未満までのＩＣ５０値を示したが、一般式（Ｉ）の多くの化合物は０.５〜９ｎＭの範囲内のＩＣ５０値を示した。従って、一般式（Ｉ）の化合物はＥＧＦＲ発動性がんに必要な阻害剤を提供することができた。
【０１３０】
実施例２：細胞およびin vivoアッセイ
ＮＳＣＬＣ細胞系ならびに遺伝子工学処理したＢａ／Ｆ３およびＮＩＨ３Ｔ３細胞系を使用して、３種類の一般的形態のＥＧＦＲ、すなわち、天然ＥＧＦＲ（自然に存在する形態）、活性化変異を有するＥＧＦＲ（ｄｅｌＥ７４６＿Ａ７５０［Ｄｅｌ］またはＬ８５８Ｒ、この形態は第一世代ＥＧＦＲ阻害剤に感受性である）、および活性化変異とＴ７９０Ｍ耐性変異の両方をもつＥＧＦＲ（Ｌ８５８Ｒ／Ｔ７９０ＭまたはＤｅｌ／Ｔ７９０Ｍ；Ｔ７９０Ｍの付加によりこの形態は第一世代のＥＧＦＲ阻害剤に耐性となる）に対する一般式（Ｉ）で示される化合物の活性を検査した。試験化合物のＥＧＦＲシグナリングに対する効果はリン酸化ＥＧＦＲのレベルを測定することにより評価し、in vitro増殖に対する効果は成長または生存率アッセイにより測定し、in vivo腫瘍成長に対する効果は毎日の経口投与後のマウスにおいて測定した。
【０１３１】
最も興味ある試験化合物は細胞アッセイにおいて天然ＥＧＦＲには本質的に不活性であった。すなわち、ＥＧＦＲの活性化変異を欠くＮＳＣＬＣ細胞系および天然ＥＧＦＲを導入されたＮＩＨ３Ｔ３細胞におけるリン酸化阻害率はＩＣ５０＞１０００ｎＭであった。
【０１３２】
これに対して、試験化合物はin vitroとin vivoの両方の細胞アッセイにおいて活性化形態のＥＧＦＲに対して強力な活性を示した。ＥＧＦＲリン酸化は場合によっては下記の３種類の細胞系：ＥＧＦＲ−Ｄｅｌを発現するＮＳＣＬＣ系、ならびにＥＧＦＲ−ＤｅｌもしくはＥＧＦＲ−Ｌ８５８Ｒを発現するＮＩＨ３Ｔ３細胞のすべてに対して約６５ｎＭ以下のＩＣＣ５０で阻害した。ＮＳＣＬＣ細胞［Ｄｅｌ］では、細胞増殖は約２００ｎＭのＧＩ５０で阻害された。そのＮＳＣＬＣ細胞系［Ｄｅｌ］を用いた異種移植実験は、場合によって、２５ｍｇ／ｋｇ以上の用量が＞３３％の腫瘍退縮（縮小）を誘起し、投与から１０時間および２４時間後にそれそれ＞８５％および＞４０％のＥＧＦＲシグナリングを阻害するという結果を示した。
【０１３３】
興味ある試験化合物はまた、in vitro細胞アッセイにおいてＥＧＦＲのＴ７９０Ｍ変異形態に対する強力な活性を示した。１セットの試験において、下記の６種類の細胞系：ＥＧＦＲ−Ｌ８５８Ｒ／Ｔ７９０Ｍ（Ｈ１９７５）もしくはＥＧＦＲ−ｄｅｌ／Ｔ７９０Ｍ（遺伝子工学処理されたＨＣＣ８２７細胞）、ならびにＥＧＦＲ−ｄｅｌ／Ｔ７９０ＭもしくはＥＧＦＲ−Ｌ８５８Ｒ／Ｔ７９０Ｍのいずれかを発現するＮＩＨ３Ｔ３細胞とＢａ／Ｆ３細胞の対、のすべてに対してＥＧＦＲシグナリングが約６５ｎＭ以下のＩＣ５０値で阻害された。２つのＢａ／Ｆ３細胞系の生存率は１４１および５０１ｎＭのＩＣ５０値で阻害された。ＥＧＦＲ−ｄｅｌ／Ｔ７９０Ｍを発現するように遺伝子工学処理されたＨＣＣ８２７［Ｄｅｌ］の増殖は、ＥＧＦＲ−Ｄｅｌを発現する親のＨＣＣ８２７細胞と同様のＧＩ５０値（２４５ｎＭ）で阻害された。これに対して、エルロチニブの効力は、ＥＧＦＲ−Ｄｅｌを発現する細胞に対してＥＧＦＲ−ｄｅｌ／Ｔ７９０Ｍを発現する細胞では＞１００倍も低減した。
【０１３４】
最後に、代表的な試験化合物は、in vivoアッセイにおいて、ＥＧＦＲのＴ７９０Ｍ変異形態に対する強力な活性を示した。ＥＧＦＲ−ｄｅｌ／Ｔ７９０Ｍを発現するＢａ／３Ｆ細胞を用いた腫瘍モデルでは、５０ｍｇ／ｋｇのＡＰ２６１１３の毎日経口投与は、＞９０％の増殖阻害を示し、用量を７５ｍｇ／ｋｇに増やすと退縮を引き起こした。５０ｍｇ／ｋｇの１回投与は、投与２４時間後に腫瘍中のリン酸化ＥＧＦＲのレベルを＞８０％の割合で阻害することを示した。ＥＧＦＲ−ｄｅｌ／Ｔ７９０Ｍを発現するＮＩＨ３Ｔ３細胞を用いた腫瘍モデルでは抗腫瘍および抗ＥＧＦＲ活性も認められた。
【０１３５】
実施例３：細胞阻害アッセイ
肺がん細胞系を各種タンパク質のリン酸化および発現レベルを求めることにより分析した。異なるＥＧＦＲ変異体を有する肺がん細胞系について、肺がん細胞中のＥＧＦＲおよび他のタンパク質のリン酸化および発現レベルの免疫ブロット分析を実施した。Ｈ３５８はＷＴ ＥＧＦＲを発現し、ＨＣＣ８２７はｄｅｌＥ７４６＿Ａ７５０変異を有し、Ｈ８２０はｄｅｌＥ７４６＿Ｅ７４９／Ｔ７９０Ｍ変異を有し、そしてＨ１９７５はＬ８５８Ｒ／Ｔ７９０Ｍ変異を有する。
【０１３６】
エルロチニブ、ゲフィチニブ、ＢＩＢＷ２９９２、ＷＺ４００３、およびいくつかの一般式（Ｉ）の化合物を含む多様な化合物に対して免疫ブロット分析を実施した。
【０１３７】
この免疫ブロット分析は、一般式（Ｉ）の試験化合物は、ＥＧＦＲ変異を有するがん細胞系の強力な阻害を示す。特に、これらの化合物は、Ｔ７９０ＭおよびＬ８５８ＲとＴ７９０Ｍとの組み合わせのような薬剤耐性に一般に関連する突然変異に対して効果的であった。
【０１３８】
実施例４：一般式（Ｉ）で示される化合物の例示
以下に構造式で示す化合物をin vitroキナーゼアッセイにより試験して、天然ＥＧＦＲ、活性化Ｌ８５８Ｒ変異を有するＥＧＦＲ、（耐性付与性の）Ｔ７９０Ｍ変異を有するＥＧＦＲ、およびＬ８５８ＲとＴ７９０Ｍの両方の変異を有するＥＧＦＲに対する相対的な阻害活性を求めた。観察されたＩＣ５０値は次の通りであった。
【０１３９】
ＩＣ５０（ナノモル濃度）
ＥＧＦＲ                              一桁から＞１０００
Ｌ８５８Ｒ                          ０.５から２００〜３００
Ｔ７９０Ｍ                            一桁から＞１０００
Ｌ８５８Ｒ＋Ｔ７９０Ｍ                一桁から＞１０００
【０１４０】
場合によって、本化合物は、天然ＥＧＦＲに比べてＬ８５８Ｒ変異体に対して１００倍大きな効力を、また天然ＥＧＦＲに比べて上記二重変異体に対しては１０倍大きな効力をそれぞれ示した。
【０１４１】
【化１６】
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【０１４２】
【化１７】
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【０１４３】
【化１８】
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【０１４４】
【化１９】
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【０１４５】
【化２０】
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【０１４６】
【化２１】
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【０１４７】
【化２２】
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【０１４８】
実施例５：ＥＧＦＲ−Ｔ７９０Ｍに対するＮＳＣＬＣモデル
一般式（Ｉ）で示される化合物はさらに、ＨＣＣ８２７（ＥＧＦＲ Ｄｅｌ Ｅ７４６＿Ａ７５０）またはＨ１９７５（ＥＧＦＲ Ｌ８５８Ｒ／Ｔ７９０Ｍ）細胞系を用いて、ＮＳＣＬＣのモデルを使用して試験することができる。これらの細胞系は、第二世代ＥＧＦＲ−Ｉ開発においてモデルとして使用されたものである。薬物動態学／薬力学（ＰＫ／ＰＤ）および効力の試験も、例えば、ＢＩＢＷ２９９２を参照化合物として用いて実施することもできる。
【０１４９】
実施例６：臨床投与
一般式（Ｉ）で示される化合物を、慣用の方法および材料（慣用の賦形剤を使用し、または使用せずに本化合物をカプセルに充填することを含む）を用いて経口投与用に処方または製剤することができる。
【０１５０】
最初のヒトへの臨床試験は、賦形剤なして一般式（Ｉ）の化合物を含有するカプセル剤を用いて１日当たり３０ｍｇの経口用量レベルで始まった。この開始時の用量は、ＡＤＭＥ、本化合物の薬物動態学および毒性検討結果に基づいて選択されたものであるが、今後は６０ｍｇ、９０ｍｇ、１２０ｍｇ、さらにはより多量の日用量で試験されると考えられる。
【０１５１】
他の態様
本明細書に記載したすべての刊行物、特許および特許出願は、それぞれ独立した刊行物、特許または特許文献が個々に具体的に参考文献として本明細書に組み込まれるように表示されたと仮定した場合と同程度に参考文献としてここに援用する。
【０１５２】
本発明を以上にその特定の態様に関して説明したが、らなる変更も可能であり、本出願は、一般に本発明の原理に従い、本開示からの逸脱が、当業者にとって公知で日常的に実施する範囲内であり、かつ以下の特許請求の範囲に従う、以上二述べた必須の特徴に適用されうる限り、すべての変更、使用および応用を包含するものである。
【０１５３】
特許請求の範囲の範囲内で他の態様も可能である。
【国際調査報告】
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