(57)【要約】  フルベストラントナノスフェア／ミクロスフェア並びにその調製方法及び使用が本発明において提供される。フルベストラントナノスフェア／ミクロスフェアの担体材料はメトキシ末端ポリエチレングリコール−ポリ乳酸ブロック共重合体である。ナノスフェア／ミクロスフェアは溶媒−非溶媒法、液中乾燥法及び／又は噴霧乾燥法により調製され、高い薬剤添加率及び高いカプセル化効率、医薬の制御可能な放出、適用部位又は血管に対して刺激作用が一切ないという特徴を有する。フルベストラントナノスフェア／ミクロスフェアは閉経後の女性における転移性進行性乳癌を治療するために用いられ得る。【特許請求の範囲】
【請求項１】
１）フルベストラント又はその薬学的に許容可能な塩又はその溶媒和物、及び
２）メトキシ末端ポリエチレングリコール−ポリ乳酸ブロック共重合体
を含む、フルベストラントナノスフェア又はミクロスフェア。
【請求項２】
フルベストラントの量に基づいて０．０１％〜５０％重量、好ましくは５％〜５０％重量、より好ましくは１０％〜３０％重量、最も好ましくは２０％〜３０％重量のフルベストラント又はその薬学的に許容可能な塩又はその溶媒和物を含む、請求項１に記載のフルベストラントナノスフェア又はミクロスフェア。
【請求項３】
メトキシ末端ポリエチレングリコール−ポリ乳酸ブロック共重合体が、親水性断片ポリエチレングリコール及び親油性断片ポリ乳酸からなり；
好ましくは、前記メトキシ末端ポリエチレングリコール−ポリ乳酸ブロック共重合体の構造式が
【化１】
2013503113.tif 000019
であり、
前記式中ｍ＝４〜４５４、ｎ＝４〜２７７８；好ましくは、ｍ＝１１〜２２７、ｎ＝７０〜２０８３、より好ましくは、ｍ＝２２〜１１３、ｎ＝１３９〜１１１１であり；
より好ましくは、前記メトキシ末端ポリエチレングリコール−ポリ乳酸ブロック共重合体の親水性−親油性バランス（ＨＬＢ）の価が０．０１〜１９．８４であり；好ましくは、ＨＬＢ価が０．４〜１２．０、より好ましくは、ＨＬＢ価が１．４７〜１５．０である、
請求項１又は２に記載のフルベストラントナノスフェア又はミクロスフェア。
【請求項４】
フルベストラントナノスフェアの粒径が０．１μｍ〜１μｍ、好ましくは０．３μｍ〜０．８μｍであり；フルベストラントミクロスフェアの粒径が１０μｍ〜１ｍｍ、好ましくは１０〜５００μｍである、請求項１〜３のいずれかに記載のフルベストラントナノスフェア又はミクロスフェア。
【請求項５】
溶媒−非溶媒法、液中乾燥法及び噴霧乾燥法からなる群から選択される、請求項１〜４のいずれかに記載のフルベストラントナノスフェア又はミクロスフェアの調製方法。
【請求項６】
溶媒−非溶媒法が
ａ．溶解したメトキシ末端ポリエチレングリコール−ポリ乳酸ブロック共重合体を含む溶媒系中にフルベストラントを分散又は溶解させること；
ｂ．非溶媒系中に添加し、ナノスフェア又はミクロスフェアを形成すること；
ｃ．凝固させ、回収し、洗浄し、且つ乾燥させること；
というステップを含み、
好ましくは、前記メトキシ末端ポリエチレングリコール−ポリ乳酸ブロック共重合体の溶媒がジクロロメタン、トリクロロメタン、メチルヒドロフラン、エタノール及びエチルアセテートの１又は２以上であり；
好ましくは、前記溶媒系中のメトキシ末端ポリエチレングリコール−ポリ乳酸ブロック共重合体の濃度が０．１％〜５０％（ｇ／ｍｌ）であり；
好ましくは、溶解したメトキシ末端ポリエチレングリコール−ポリ乳酸ブロック共重合体を含む前記溶媒系中のフルベストラントの濃度が０．０１％〜８０％（ｇ／ｍｌ）であり；
好ましくは、前記非溶媒系がエーテル、石油エーテル、ｎ−ヘキサン、シクロヘキサン、アセトンであり；
好ましくは、前記溶媒系の前記非溶媒系に対する体積比が１０：１〜１：１０であり； 且つ／或いは
好ましくは、前記非溶媒系がさらに固着防止剤を含み；より好ましくは、前記固着防止剤がポリイソブチルエステル、ポリエチレン及びブチルゴムの１又は２以上であり；さらに好ましくは、前記固着防止剤の前記メトキシ末端ポリエチレングリコール−ポリ乳酸ブロック共重合体に対する質量比が０：１０〜２：１０である、
請求項５に記載の方法。
【請求項７】
液中乾燥法が
ａ．フルベストラント及びメトキシ末端ポリエチレングリコール−ポリ乳酸ブロック共重合体を有機溶媒中に溶解させて油相を作製すること；
ｂ．水相中に前記油相を添加し、乳化させて水中油Ｏ／Ｗ型エマルションを得ること；
ｃ．前記Ｏ／Ｗ型エマルションを攪拌及び加熱し、前記Ｏ／Ｗ型エマルション中の前記有機溶媒を完全に揮発させること；
ｄ．濾過し、洗浄し、回収し、且つ乾燥させること；
というステップを含み、
好ましくは、前記メトキシ末端ポリエチレングリコール−ポリ乳酸ブロック共重合体の溶媒がジクロロメタン、トリクロロメタン、メチルヒドロフラン、エタノール及びエチルアセテートの１又は２以上であり；
好ましくは、前記フルベストラントの前記メトキシ末端ポリエチレングリコール−ポリ乳酸ブロック共重合体に対する質量比が１：５０〜１：３であり；前記油相中のメトキシ末端ポリエチレングリコール−ポリ乳酸ブロック共重合体の好ましい濃度が１％〜５０％（ｇ／ｍｌ）であり；好ましくは、前記水相が界面活性剤溶液、単糖又は多糖溶液、ポリオール溶液、セルロース溶液及びコロイド溶液の１又は２以上の混合溶液であり、前記水相において溶質の濃度が０．０１％〜５０％（ｇ／ｍｌ）であり、且つ前記水相のｐＨ値が３．０〜１０．５の範囲であり；
好ましくは、前記水相中に使用されるｐＨ調整剤が無機酸、有機酸、無機塩基、有機塩基及び緩衝塩からなる群から選択され；且つ／或いは
好ましくは、前記油相の前記水相に対する体積比が１：３００〜１：５である、
請求項５に記載の方法。
【請求項８】
噴霧乾燥法が
ａ．溶解したメトキシ末端ポリエチレングリコール−ポリ乳酸ブロック共重合体を含む溶媒系中にフルベストラントを溶解又は分散させること；
ｂ．噴霧の形で噴霧乾燥器の乾燥塔内へと噴霧し、且つ乾燥させ、単離し、回収すること；
というステップを含み、
好ましくは、前記メトキシ末端ポリエチレングリコール−ポリ乳酸ブロック共重合体の溶媒がジクロロメタン、トリクロロメタン、メチルヒドロフラン、エタノール及びエチルアセテートの１又は２以上であり；
好ましくは、前記溶媒系中のメトキシ末端ポリエチレングリコール−ポリ乳酸ブロック共重合体の濃度が０．１％〜５０％（ｇ／ｍｌ）であり；
好ましくは、溶解したメトキシ末端ポリエチレングリコール−ポリ乳酸ブロック共重合体を含む前記溶媒系中の前記溶解又は分散したフルベストラントの濃度が０．０１％〜５０％（ｇ／ｍｌ）であり；
好ましくは、前記乾燥塔の吸気温が３０℃〜８０℃であり；
好ましくは、前記溶媒系がさらに可塑剤を含み、より好ましくは、前記可塑剤がジメチルベンゾエート、ジエチルベンゾエート、ジブチルベンゾエート、セバシン酸ジブチル、クエン酸トリブチル、クエン酸アセチルトリブチル及びグリセリルトリアセテートの１又は２以上であり；さらに好ましくは、前記可塑剤の前記メトキシ末端ポリエチレングリコール−ポリ乳酸ブロック共重合体に対する質量パーセントが０〜５０％であり；且つ／或いは
好ましくは、前記溶媒系がさらに固着防止剤を含み、前記固着防止剤がコレステロール、グリセロールモノステアレート、タルク粉末、シリカゲル及びステアリン酸マグネシウムの１又は２以上であり、より好ましくは、前記固着防止剤の前記メトキシ末端ポリエチレングリコール−ポリ乳酸ブロック共重合体に対する質量パーセントが０〜１００％である、
請求項５に記載の方法。
【請求項９】
乳癌治療のための薬剤の調製における請求項１〜４のいずれかに記載のフルベストラントナノスフェア又はミクロスフェアの使用であって；好ましくは、前記乳癌が進行性乳癌であり、より好ましくは、前記乳癌が抗エストロゲン療法での治療後に効果のない、進行している、或いはホルモン受容体陽性である閉経後の女性における転移性進行性乳癌である使用。
【請求項１０】
請求項１〜４のいずれかに記載のフルベストラントナノスフェア又はミクロスフェアを含む、乳癌治療のための医薬組成物。
【請求項１１】
乳癌の治療における請求項１〜４のいずれかに記載のフルベストラントナノスフェア若しくはミクロスフェア又は請求項１０に記載の医薬組成物の使用であって；好ましくは、前記乳癌が進行性乳癌であり、より好ましくは、前記乳癌が抗エストロゲン療法での治療後に効果のない、進行している、或いはホルモン受容体陽性である閉経後の女性における転移性進行性乳癌である使用。
【請求項１２】
薬学的に許容可能な有効量の請求項１〜４のいずれかに記載のフルベストラントナノスフェア若しくはミクロスフェア又は請求項１０に記載の医薬組成物を、それを必要とする患者に投与する乳癌（特に進行性乳癌）の治療方法であって；好ましくは、前記フルベストラントナノスフェア若しくはミクロスフェア又は前記医薬組成物が１〜３ヶ月毎に投与され；より好ましくは、投与経路が皮下又は静脈注射である方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は医療技術分野に関する。具体的には、本発明はある種のフルベストラントナノスフェア又はミクロスフェア、並びに、かかるフルベストラントナノスフェア又はミクロスフェア製剤の調製方法及び使用に関する。
【背景技術】
【０００２】
世界保健機関は乳癌を女性の健康を脅かす「主要な死因」として位置付けており、乳癌で死ぬ女性が世界で毎年約百万人いる。中国では成人女性の約８０％がある程度の乳癌を有しており、その罹患率は依然として増加しており、現在では、５年前の百万人当たり１７０人から昨年は３倍以上高い百万人当たり５２０人まで増加したことを臨床データは示す。最近２０年間で、上海では乳癌の罹患率が約１８０％上昇した。一方で、癌病変の増加と共に、乳癌で死亡する女性の数は毎年２０万人に上っており、女性の健康に悲惨な混乱をもたらしている。
【０００３】
現在では、乳癌の治療のための薬剤は主に以下のものを含む：(１)化学療法薬：カペシタビン、ドセタキセル、５−フルオロウラシル、ドキソルビシン、シクロホスファミド、パクリタキセル、ビノレルビン等；(２)Ｉトラスツズマブ及び他のシグナル伝達阻害剤：トラスツズマブ、クロドロネート、パミドロネート、イバンドロネート、及びゾレドロネート等；(３)内分泌阻害剤：タモキシフェン、アナストロゾール、レトロゾール、エキセメスタン、ブセレリン又はゴセレリン、フルベストラント等。これらのうち、ほとんどの化学療法薬が高い毒性及び副作用、小さい生存率向上効果、長期的毒性の増加、及び併用化学療法の高い費用等の欠点を有する；Ｉトラスツズマブ及び他のシグナル伝達阻害剤は化学療法薬の合併療法に最も多く使用される。化学療法薬と比較して、内分泌阻害剤療法における新たな進展はより一層重要な意義を有する：タモキシフェンはこの３０年間、乳癌の内分泌療法のためのほぼ絶対的な基準であり、アナストロゾールは乳癌に対する潜在的予防効果を有する。フルベストラントは抗エストロゲン剤である。タモキシフェンと異なり、フルベストラントは部分アゴニスト活性なしにエストロゲン受容体を下方制御することができる。フルベストラントはタモキシフェンで治療できなかった患者で臨床治療効果を有する。したがって、乳癌を治療するための多くの薬剤の中で、タモキシフェンでの失敗後に臨床治療に広範に用いられる得る唯一の抗エストロゲン剤がフルベストラントであり、これはホルモン感受性乳癌の新規治療方法をもたらした。
【０００４】
フルベストラントの化学名は７−アルファ−［９−（４，４，５，５，５−ペンタフルオロペンチルスルフィニル）ノニル］−エストラ−１，３，５−（１０）−トリエン−３，１７−ベータ−ジオール（7-alpha-[9-(4,4,5,5,5-pentafluoropentylsulphinyl)nonyl]estra-1,3,5-(10)-triene-3,17-beta-diol）である。フルベストラントは白色又は灰白色の粉末であり、水に不溶性で６０６．７７の相対分子量を有する。
【０００５】
フルベストラントはエストロゲン受容体下方制御因子である新規エストロゲン受容体アンタゴニスト−抗乳癌薬剤である。現在のところ、乳癌の主要な治療法はエストロゲンの濃度を減少させることである。なぜなら、エストロゲン受容体（estrogen receptors、ＥＲ)が多くの乳癌患者に見出され、腫瘍の成長がエストロゲンにより刺激されるからである。フルベストラントはエストラジオールと類似した親和性を有し、エストロゲン受容体と競合的に結合し得る；フルベストラントはまた、この受容体を遮断し、そのエストロゲンとの結合を阻害し、形態学的変化がもたらされるようこの受容体を刺激し、ＥＲ濃度を減少させて腫瘍細胞にダメージを与え得るのであり、ＥＲ経路を介するかかる効果は細胞増殖マーカーであるＫｉ６７の減少と関連する。フルベストラントはヒト乳癌細胞のＥＲタンパク質を下方制御し得るのであり、ＥＲは腫瘍細胞内で下方制御されて腫瘍の成長を最少化する。フルベストラントは既存の腫瘍ＥＲの状態を変化させず、新たなＥＲの産生に影響を及ぼさないので、腫瘍はＥＲ陽性として「プログラムされた」ままであり続け、結果としてフルベストラントは継続的な治療効果を有し得る。フルベストラントはエストロゲン効果又はタモキシフェンの有する抗エストロゲン効果又は子宮内膜に対する部分アゴニスト活性を一切有さず、それゆえその悪影響はタモキシフェンより低いことが動物実験により見出された。特に子宮内膜に対する部分アゴニスト活性は、子宮内膜癌の罹患率を増加させる危険性を有する。
【０００６】
フルベストラントは水に不溶性であるがゆえに、経口バイオアベイラビリティが十分でなく、また、静脈注射後すぐに排せつされる。したがって、経口調製物及び一般的な注射用水溶液をこの薬剤に適用することはできない。フルベストラントは、他のステロイド性化合物と同様に、特定の物理的特性を示し、このことがこれら化合物の製剤を困難にする。フルベストラントは他のステロイド性化合物と比較しても特に親油性の分子であり、その水溶解度は約１０ｎｇ／ｍｌと極めて低い。
【０００７】
現在まで、多数の徐放性注射用ステロイド製剤が市販されてきた。一般にこれら製剤は油を溶媒として用い、さらなる賦形剤が存在していてもよい。例えば、中国特許出願ＣＮ１５５３８１５Ａは筋内投与用フルベストラント医薬製剤を２００４年１２月８日に開示している。これはスウェーデンのAstraZeneca UK Ltd社製フルベストラントの油性注射製剤であり、Faslodex（登録商標）という商標名で２００２年４月にＦＤＡにより認可された。この製品の溶媒系はエタノール、ベンジルアルコール、安息香酸ベンジル、及びヒマシ油からなり、臀部筋内注射に適し、エタノールの含有量は１０％〜２０％、ベンジルアルコールの含有量は１０％〜２０％、安息香酸ベンジルの含有量は１５％〜５０％、ヒマシ油の含有量は５％〜６０％である。これらすべての化学成分が強力な刺激作用を有し、多くの副作用が報告されている：マウスへのエタノール皮下注射のＬＤ５０は８．２８５ｇ／ｋｇであり、筋内注射の濃度が１０％より高い際には痛みが感じられる。ベンジルアルコールは弱い芳香性のにおい及び刺激性の味を有する無色透明の油性液体であり、ラットへの経口投与のＬＤ５０は１．２３ｇ／ｋｇである。安息香酸ベンジルはかすかな芳香性のにおいを有し、舌に接触した際に激しい焼けるような感覚を引き起こす無色透明の油性液体であり、ラットへの経口投与のＬＤ５０は０．５ｇ／ｋｇである。ヒマシ油はわずかなにおいを有し、最初は無味だが、後になって刺激性の味を有する、透明で無色又は黄色がかった粘着性で油性の液体であり、臨床的には主に刺激性下剤として用いられる。２００４年１２月２０日にChinese Medicine Information Newsは「『蛙足病（frog foot disease）』を根絶するため、ベンジルアルコールは慎重に用いられるべきである」と題された報告を「医薬品安全性監視（Pharmacovigilance）」コラムに掲載した。これは、湖北省の鶴峰県中営村でペニシリンの溶媒としてのベンジルアルコールの使用の結果として、３１１人の子どもが殿筋拘縮に罹患したことを報告している。２００５年１１月１日に、Chinese Medicine Information Newsは「医薬補助剤により引き起こされる副作用について」と題された報告を「最近の関心（Hot Concern）」コラムに掲載した。これは、エタノールが溶媒として多くの不溶性薬剤注射に適用され、その筋内又は皮下注射がかなりの刺激作用を引き起こすことを示している。まず、焼けるような感覚が注射部位に引き起こされ、その後、激しい痛み、局所麻痺が生じる。それが不注意に神経付近に注射される際には、神経変性損傷が引き起こされ得る。この記事はまた、薬剤の溶媒、保存剤(０．５％〜１．０％)、及び局所鎮痛薬（１％〜４％）としてのベンジルアルコールの副作用が、溶血、低血圧、局所刺激等を含むことを示している。ベンジルアルコールは赤血球膜表面と結合し、溶血をもたらし得る。ある患者が、非ホジキンリンパ腫の治療のためにベンジルアルコールを含む高用量のエトポシドを服用した後に、呼吸抑制及び急速な溶血を発症したことも報告されている。また別の報告は、アミオダロン注射中の溶媒ベンジルアルコールが血管の活性を有し、低血圧を生み出すと述べている。ベンジルアルコールはまた、殿筋拘縮を引き起こす主要な原因である。２００５年６月１０日��、中国国家食品薬品監督管理局は「ベンジルアルコール注射の管理の強化に関する通知」（No. [2005] 263 of the State Food and Drug Administration）を出し、ベンジルアルコールを子どもの筋内注射に使用することを禁止した。
【０００８】
したがって、フルベストラント注射（Faslodex（登録商標）)は、強力な刺激作用を有する上記非水性化学溶媒からなり、これは注射部位にダメージを与え得る。臨床試験で１０％超の患者が注射部位に痛みを発し、投与量の増加と共にダメージ度が高まる。Faslodex（登録商標）の注射後、非水性化学溶媒がヒト筋組織内へと吸収され、その後薬剤が筋組織内へと沈殿し、緩徐な吸収が続く。筋組織による非水性化学溶媒の急速な吸収ゆえに、薬剤放出プロセスは制御できず、急速な吸収はまた薬剤の吸収速度の制御不能性をもたらす。より一層重要なことに、薬剤を有効にする程度の、より高い濃度及びより多くの非水性溶媒と共にフルベストラント油性注射を用いなければならず、このことは、より長期間の薬剤作用を達成するためにフルベストラント油性注射が臨床治療に用いられる際、注射部位により大きなダメージをもたらす。
【０００９】
したがって、有望な薬剤であるフルベストラントのため、投与部位又は血管を一切刺激せず、副作用が少なく、静脈注射に利用可能な新規製剤を開発する必要がある。
【先行技術文献】
【特許文献】
【００１０】
【特許文献１】中国特許出願ＣＮ１５５３８１５Ａ
【非特許文献】
【００１１】
【非特許文献１】“Benzyl alcohol should be used cautiously for eradicating ‘frog foot disease’”, Chinese Medicine Information News, December 20, 2004.
【非特許文献２】“Concerning the adverse effects caused by pharmaceutical adjuvant”, Chinese Medicine Information News, November 1, 2005.
【非特許文献３】“Notice on Strengthening Management of Benzyl Alcohol Injection”, No. [2005] 263 of the State Food and Drug Administration.
【発明の概要】
【００１２】
親水性断片ポリエチレングリコール及び親油性断片ポリ乳酸からなるがゆえに、ポリエチレングリコール−ポリ乳酸ブロック共重合体が、ナノスフェア又はミクロスフェアの調製に適した担体材料であり、これは十分な熱可塑性及び熱硬化性を有し、生分解性及び生体適合性をも有し、注射部位及び血管への刺激作用を一切有さない。米国食品医薬品局(ＦＤＡ)は、薬剤制御放出及び持続放出用担体のために用いられるかかる材料を認可した。薬剤担体としてかかる材料を用いることにより、痛み及び炎症を注射部位に引き起こす油性溶媒を避けることができる。一方でこの薬剤担体は、インビボでの担体材料の分解と共に薬剤を放出し、薬剤の放出速度はブロックの分子量及び担体材料のＨＬＢ価を制御することにより制御され得る。
【００１３】
本発明者は驚くべきことに、注射部位にダメージを引き起こし、制御されない薬剤放出、吸収をもたらす既存のフルベストラント油性注射製品の問題を、メトキシ末端ポリエチレングリコール−ポリ乳酸ブロック共重合体を担体材料として用いることにより調製されるフルベストラントナノスフェア又はミクロスフェアが本質的に解決し得ることを研究活動において見出した。ナノスフェア又はミクロスフェアは静脈注射で投与され得るのであり、静脈注射で投与され得ない薬剤の問題を解決する。
【００１４】
したがって、本発明の目的の１つは、ある種のフルベストラントナノスフェア又はミクロスフェアを提供することであり、これはより高い薬剤添加率及び封入率並びに制御された薬剤放出速度を有するが、投与部位又は血管への刺激作用を有さない；本発明のまた別の目的は、上のフルベストラントナノスフェア又はミクロスフェアの調製方法を提供することである；本発明のさらなる目的は、上のフルベストラントナノスフェア又はミクロスフェアの使用を提供することである。
【００１５】
上の発明目的を目指す、本発明の技術的解決策は以下の通りである：
態様の１つにおいて、本発明はフルベストラントナノスフェア又はミクロスフェアの薬剤担体を提供し、この担体は生分解性メトキシ末端ポリエチレングリコール−ポリ乳酸ブロック共重合体を含み、これは以下の式（Ｉ）として記述される：
【００１６】
【化１】
2013503113.tif 000002
【００１７】
式中：ｍ＝４〜４５４、ｎ＝４〜２７７８。
【００１８】
上述のフルベストラント薬剤担体において、メトキシ末端ポリエチレングリコール−ポリ乳酸ブロック共重合体は、親水性断片ポリエチレングリコール及び親油性断片ポリ乳酸からなり、０．０１〜１９．８４のＨＬＢ価を有する。
【００１９】
上述のフルベストラント薬剤担体において、カプセル化された薬剤は７−アルファ−［９−（４，４，５，５，５−ペンタフルオロペンチルスルフィニル）ノニル］エストラ−１，３，５−（１０）−トリエン−３，１７−ベータ−ジオールであり、その国際一般的名称はフルベストラントであって、本明細書において用いられる。フルベストラントに関して言えば、その薬学的に許容可能な塩又はそのあらゆる可能な溶媒和物が含まれるべきであり、例えばフルベストラントの構造式中の１７ヒドロキシルは、アセトキシ又はベンゾイルオキシで置換され得る。
【００２０】
また別の態様において、本発明は、フルベストラント又はその薬学的に許容可能な塩又はそのあらゆる可能な溶媒和物及び担体材料であるメトキシ末端ポリエチレングリコール−ポリ乳酸ブロック共重合体を含む、ある種のフルベストラントナノスフェア又はミクロスフェアを提供する。
【００２１】
好ましくは、フルベストラントナノスフェア又はミクロスフェアは、フルベストラントの量に基づいて、０．０１％〜５０％重量、好ましくは５％〜５０％重量、より好ましくは１０％〜３０％重量、最も好ましくは２０％〜３０％重量のフルベストラント又はその薬学的に許容可能な塩又はそのあらゆる可能な溶媒和物を含む。つまり、フルベストラントナノスフェア又はミクロスフェアの薬剤添加率は０．０１％〜５０％重量、好ましくは５％〜５０％重量、より好ましくは１０％〜３０％重量、最も好ましくは２０％〜３０％重量である。
【００２２】
好ましくは、フルベストラントナノスフェア又はミクロスフェア中、メトキシ末端ポリエチレングリコール−ポリ乳酸ブロック共重合体は親水性断片ポリエチレングリコール及び親油性断片ポリ乳酸からなる；好ましくは、メトキシ末端ポリエチレングリコール−ポリ乳酸ブロック共重合体の構造式は以下の通りである：
【００２３】
【化２】
2013503113.tif 000003
【００２４】
式中：ｍ＝４〜４５４、ｎ＝４〜２７７８；好ましくは、ｍ＝１１〜２２７、ｎ＝７０〜２０８３、より好ましくは、ｍ＝２２〜１１３、ｎ＝１３９〜１１１１である。メトキシ末端ポリエチレングリコール−ポリ乳酸ブロック共重合体の親水性−親油性バランス（hydrophile-lipophile balance、ＨＬＢ）の価は、０．０１〜１９．８４である；好ましくは、ＨＬＢは０．４〜１２．０、より好ましくは、ＨＬＢは１．４７〜１５．０である。
【００２５】
好ましくは、フルベストラントナノスフェアの粒径は０．１μｍ〜１μｍ、好ましくは、０．３μｍ〜０．８μｍである；フルベストラントミクロスフェアの粒径は１０μｍ〜１ｍｍ、好ましくは、１０μｍ〜５００μｍである。
【００２６】
さらなる態様において本発明は、上述のフルベストラントナノスフェア又はミクロスフェアの調製方法を提供し、この方法は溶媒−非溶媒法、液中乾燥法及び噴霧乾燥法を含む。
【００２７】
好ましい実施形態の１つにおいて、溶媒−非溶媒法は以下のステップを含む：
ａ．溶解した上述の担体材料を含む溶媒系中にフルベストラントを分散又は溶解させること；
ｂ．非溶媒系へと添加し、ナノスフェア又はミクロスフェアを形成すること；
ｃ．凝固させ、回収し、洗浄し、且つ乾燥させること；
好ましくは、担体材料の溶媒は１又は２以上のジクロロメタン、トリクロロメタン、メチルヒドロフラン、エタノール、及びエチルアセテートである；
好ましくは、溶媒系中の担体材料の濃度は０．１％〜５０％（ｇ／ｍｌ）である；
好ましくは、溶解した担体材料を含む溶媒系中のフルベストラントの濃度は０．０１％〜８０％（ｇ／ｍｌ）である；
好ましくは、非溶媒系はエーテル、石油エーテル、ｎ−ヘキサン、シクロヘキサン、アセトンである；
好ましくは、溶媒系の非溶媒系に対する体積比は１０：１〜１：１０である；且つ／或いは
好ましくは、１又は２以上のポリイソブチルエステル、ポリエチレン、及びブチルゴムを固着防止剤として非溶媒系へと添加する；より好ましくは、固着防止剤の担体材料に対する質量比は０：１０〜２：１０である。
【００２８】
また別の好ましい実施形態において、液中乾燥法は以下のステップを含む：
ａ．フルベストラント及び上述の担体材料を有機溶媒中に溶解させ、油相を作製すること；
ｂ．水相中に油相を添加し、乳化させて水中油Ｏ／Ｗ型エマルションを得ること；
ｃ．Ｏ／Ｗ型エマルションを攪拌及び加熱し、Ｏ／Ｗ型エマルション中の有機溶媒を完全に揮発させること；
ｄ．濾過し、洗浄し、回収し、且つ乾燥させること；
好ましくは、担体材料の溶媒は１又は２以上のジクロロメタン、トリクロロメタン、メチルヒドロフラン、エタノール、及びエチルアセテートである；
好ましくは、フルベストラントの担体材料に対する質量比は１：５０〜１：３である；油相中の担体材料の好ましい濃度は１％〜５０％(ｇ／ｍｌ)である；
好ましくは、水相は、界面活性剤溶液、単糖又は多糖溶液、ポリオール溶液、セルロース溶液、及びコロイド溶液の１又は２以上の混合溶液であり、水相中の溶質の濃度は０．０１％〜５０％(ｇ／ｍｌ)であり、水相のｐＨ値は３．０〜１０．５の範囲である；
好ましくは、水相中で用いられるｐＨ調整剤は無機酸、有機酸、無機塩基、有機塩基及び緩衝塩からなる群から選択される；且つ／或いは
好ましくは、油相の水相に対する体積比は１：３００〜１：５である。
【００２９】
さらなる好ましい実施形態において、噴霧乾燥法は以下のステップを含む：
ａ．上述の溶解した担体材料を含む溶媒系中にフルベストラントを溶解又は分散させること；
ｂ．噴霧の形で噴霧乾燥器の乾燥塔内へと噴霧し、且つ乾燥させ、単離し、回収すること；
好ましくは、担体材料の溶媒は、１又は２以上のジクロロメタン、トリクロロメタン、メチルヒドロフラン、エタノール、及びエチルアセテートである；
好ましくは、溶媒系中の担体材料の濃度は０．１％〜５０％(ｇ／ｍｌ)である；
好ましくは、担体材料の溶媒系中の溶解又は分散したフルベストラントの濃度は０．０１％〜５０％(ｇ／ｍｌ)である；
好ましくは、乾燥塔の吸気温は３０℃〜８０℃である；
好ましくは、担体材料はさらに可塑剤を含む；より好ましくは、可塑剤は１又は２以上のジメチルベンゾエート、ジエチルベンゾエート、ジブチルベンゾエート、セバシン酸ジブチル、クエン酸トリブチル、クエン酸アセチルトリブチル、及びグリセリルトリアセテートである；さらに好ましくは、可塑剤の担体材料に対する質量パーセントは０％〜５０％である；且つ／或いは
好ましくは、溶媒系はさらに固着防止剤を含み、固着防止剤は１又は２以上のコレステロール、グリセロールモノステアレート、タルク粉末、シリカゲル、及びステアリン酸マグネシウムであり、固着防止剤の担体材料に対する質量パーセントは０％〜１００％である。
【００３０】
また別の態様において、本発明は、乳癌治療のための薬剤の調製における上述のフルベストラントナノスフェア又はミクロスフェアの使用を提供する；好ましくは、乳癌は進行性乳癌、より好ましくは、乳癌は抗エストロゲン療法での治療後に効果のない、進行している、或いはホルモン受容体陽性である閉経後の女性における転移性進行性乳癌である。さらに、本発明はまた乳癌治療のための医薬組成物を提供し、これは上述のフルベストラントナノスフェア又はミクロスフェアを含む。
【００３１】
さらにまた別の態様において、本発明はまた、上述のフルベストラントナノスフェア又はミクロスフェア及び上述の乳癌治療のための医薬組成物の使用を提供する；好ましくは、乳癌は進行性乳癌、より好ましくは、乳癌は抗エストロゲン療法での治療後に効果のない、進行している、或いはホルモン受容体陽性である閉経後の女性における転移性進行性乳癌である。
【００３２】
さらにまた別の態様において、本発明は乳癌の治療方法、特に、抗エストロゲン療法での治療後に効果のない、進行している、或いはホルモン受容体陽性である閉経後の女性における転移性進行性乳癌の治療方法を提供し、これは、薬学的に許容可能な有効量の上述のフルベストラントナノスフェア若しくはミクロスフェア又は上述の医薬組成物を、それを必要とする患者に投与することを含み、フルベストラントナノスフェア若しくはミクロスフェア又は医薬組成物は、１〜３ヶ月毎に投与され得る；好ましくは、投与経路は皮下又は静脈注射である。
【００３３】
したがって、本発明がある種のフルベストラントナノスフェア又はミクロスフェアを提供し、ここでカプセル化された活性物質がフルベストラントであり、その担体材料がメトキシ末端ポリエチレングリコール−ポリ乳酸ブロック共重合体であることが理解され得る。フルベストラントナノスフェア又はミクロスフェア及びその医薬組成物は、非水性溶媒により引き起こされる注射部位への刺激作用等の臨床使用におけるダメージを回避する。フルベストラントナノスフェア若しくはミクロスフェア又はその医薬組成物は、皮下又は静脈内に注射され得る。フルベストラントは注射後に担体材料の分解と共に徐放され、その放出速度は担体材料中の親水性断片ポリエチレングリコール及び親油性断片ポリ乳酸の分子量を制御することにより制御され得るのであり、すなわち、薬剤の放出速度及び吸収速度は、様々な臨床的必要性を満たすため、担体材料のメトキシ末端ポリエチレングリコール−ポリ乳酸ブロック共重合体のＨＬＢ価を制御することにより制御され得る。フルベストラントナノスフェア若しくはミクロスフェア又はその医薬組成物は、抗エストロゲン療法での治療後に効果のない、進行している、或いはホルモン受容体陽性である閉経後の女性における転移性進行性乳癌の治療のために用いられ得る。
【００３４】
本発明において提供されるフルベストラントナノスフェア又はミクロスフェア及びその医薬組成物において、本発明者は驚くべきことに、フルベストラントナノスフェア又はミクロスフェアに最も適した薬剤担体が、ヒトの身体に対してより強力な生体適合性を有するメトキシ末端ポリエチレングリコール−ポリ乳酸ブロック共重合体であることを見出した。かかる担体を用いることで、ナノスフェア又はミクロスフェア製剤は所望の薬剤放出及び薬物動態性能を有し、多数の刺激性非水性化学溶媒の使用が回避される。その結果、フルベストラントナノスフェア又はミクロスフェア及びその組成物はヒト血管及び皮膚組織に対する刺激性ダメージを一切有さず、注射後に担体材料の分解と共にフルベストラントを安定的で制御可能な放出速度で放出する。本発明において提供されるフルベストラントナノスフェア又はミクロスフェアはまた、静脈注射のために用いられ得るのであり、このことはかかる薬剤が静脈内に投与され得ないという状況を打破し、臨床使用のための新規投与経路を提供した。したがって、もし本発明により提供されるフルベストラントナノスフェア又はミクロスフェア及びその組成物が製品化され得るなら、臨床現場において油性注射用製剤に取って代わり、また臨床使用におけるフルベストラントの新たな見通しをも切り開くはずであり、広範な適用が見込まれるだろう。
【図面の簡単な説明】
【００３５】
【図１】図１はインビトロでのフルベストラントミクロスフェア試料１の放出曲線である。
【図２】図２はインビトロでのフルベストラントミクロスフェア試料２の放出曲線である。
【図３】図３はフルベストラントミクロスフェア試料１の皮下投与後のラットにおける平均薬剤血漿濃度−時間曲線である。
【図４】図４はフルベストラントミクロスフェア試料２の皮下投与後のラットにおける平均薬剤血漿濃度−時間曲線である。
【図５】図５は様々な放出培地におけるフルベストラントミクロスフェアの薬剤放出曲線である。
【発明を実施するための形態】
【００３６】
本発明はさらに、以下の実施例又は実施形態を参照することで詳細に例証されるが、以下の実施例は本発明を例証及び説明するのみであり、本発明の範囲を限定しないことが理解されるべきである。
【００３７】
参照されるが詳細には記述されない方法、ステップ、装置、器具、材料等に関して、よく知られている対応する方法、ステップ、装置、器具、材料等を用いることにより、或いは、当技術分野の従来の知識及び技術により、当業者がそれを得ることができることが理解されるべきである。
【００３８】
別様であることが示されない限り、以下の実施例のそれぞれにおいて使用されるＨＰＬＣ法の具体的なクロマトグラフ条件は以下の通りである：オクタデシルシラン化学結合型シリカゲルが充填剤として、水−アセトニトリル−メタノール(１５：１５：７０)が移動相として用いられ、検出波長は２８５ｎｍ、流速は０．８ｍｌ／分、フルベストラントピークに関して計算される理論段数は３０００超であるべきである。
【実施例１】
【００３９】
実施例１：フルベストラントミクロスフェア及びその調製
本実施例はフルベストラントミクロスフェアの組成及びその調製方法に関する。
【００４０】
処方：
油相：フルベストラント  ０．５ｇ
メトキシ末端ポリエチレングリコール−ポリ乳酸ブロック共重合体  ５．０ｇ
ジクロロメタン  ５０ｍｌ
水相：１．０％ポリビニルアルコール＋０．１％Tween-80溶液  ３０００ｍｌ
注：メトキシ末端ポリエチレングリコール−ポリ乳酸ブロック共重合体の重量平均分子量（Ｍｗ）は２０００／２００００でありその構造式は以下の通りである：
【００４１】
【化３】
2013503113.tif 000004
【００４２】
調製方法：液中乾燥法が用いられる。フルベストラント及びメトキシ末端ポリエチレングリコール−ポリ乳酸ブロック共重合体がジクロロメタン中に添加され、超音波処理されて溶解する。結果として生じた溶液は３０００ｒｐｍの高速剪断下で水相に徐々に添加され、さらに３分間剪断される。結果として生じた混合物はその後３０℃の水浴中に置かれて３００ｒｐｍの攪拌速度で２時間攪拌され、さらに３５℃まで加熱されて０．５時間攪拌され、その後４０℃まで加熱されて０．５時間攪拌され、続いて１５０μｍの篩目で濾過される（篩上に１５０μｍより大きいミクロスフェアはほとんどない）。濾液が回収されて１０μｍの篩目で濾過される（濾液中に１０μｍより小さいミクロスフェアは少ない）。ミクロスフェアが回収されて５００ｍｌの水で５回洗浄される。濡れたミクロスフェアを４０℃で乾燥させ、総量４．０５ｇの乾燥産物を約７３．６％の収率で得る。
【００４３】
適応症：主に乳癌の治療のために用いられ、皮下注射され得る。
【００４４】
主成分：フルベストラント、メトキシ末端ポリエチレングリコール−ポリ乳酸ブロック共重合体（Ｍｗ＝２０００／２００００）。
【００４５】
粒径の範囲及び粒子の形状：１０〜１５０μｍ、主に２０〜３０μｍ。
【００４６】
薬剤添加率：薬剤添加率は９．０％であり、これはＨＰＬＣ法により測定される。
【００４７】
カプセル化効率：７２．９％。
【実施例２】
【００４８】
実施例２：フルベストラントミクロスフェア及びその調製
本実施例はまた別のフルベストラントミクロスフェアの組成及びその調製方法に関する。
【００４９】
処方：
油相：フルベストラント  ０．５ｇ
メトキシ末端ポリエチレングリコール−ポリ乳酸ブロック共重合体  ５．０ｇ
ジクロロメタン  ５０ｍｌ
水相：１．０％ポリビニルアルコール＋０．１％Tween-80溶液  ７５０ｍｌ
注：メトキシ末端ポリエチレングリコール−ポリ乳酸ブロック共重合体の重量平均分子量（Ｍｗ）は２０００／４００００であり、その構造式は以下の通りである：
【００５０】
【化４】
2013503113.tif 000005
【００５１】
調製方法：液中乾燥法が用いられる。フルベストラント及びメトキシ末端ポリエチレングリコール−ポリ乳酸ブロック共重合体がジクロロメタン中に添加され、超音波処理されて溶解する。結果として生じた溶液は３０００ｒｐｍの高速剪断下で水相に徐々に添加され、さらに３分間剪断される。結果として生じた混合物はその後３０℃の水浴中に置かれ、３００ｒｐｍの攪拌速度で２時間攪拌され、さらに３５℃まで加熱されて０．５時間攪拌され、その後４０℃まで加熱されて０．５時間攪拌され、続いて１５０μｍの篩目で濾過される（篩上に１５０μｍより大きいミクロスフェアはほとんどない）。濾液が回収されて１０μｍの篩目で濾過される（濾液中に１０μｍより小さいミクロスフェアは少ない）。ミクロスフェアが回収されて５００mlの水で５回洗浄される。濡れたミクロスフェアを４０℃で乾燥させ、総量４．４１ｇの乾燥産物を約８０％の収率で得る。
【００５２】
適応症：主に乳癌の治療のために用いられ、皮下注射され得る。
【００５３】
主成分：フルベストラント、メトキシ末端ポリエチレングリコール−ポリ乳酸ブロック共重合体（Ｍｗ＝２０００／４００００）。
【００５４】
粒径の範囲及び粒子の形状：１０〜１５０μｍ、主に２０〜３０μｍ；粒子の形状は丸い。
【００５５】
薬剤添加率：薬剤添加率は１１．０％であり、これはＨＰＬＣ法により測定される。
【００５６】
カプセル化効率：８７．７％。
【実施例３】
【００５７】
実施例３：フルベストラントミクロスフェア及びその調製
本実施例はまた別のフルベストラントミクロスフェアの組成及びその調製方法に関する。
【００５８】
処方：
油相：フルベストラント  ０．５ｇ
メトキシ末端ポリエチレングリコール−ポリ乳酸ブロック共重合体  ５．０ｇ
ジクロロメタン  ５０ｍｌ
水相：０．５％ポリビニルアルコール溶液  ７５０ｍｌ
注：メトキシ末端ポリエチレングリコール−ポリ乳酸ブロック共重合体の重量平均分子量（Ｍｗ）は２０００／２００００であり、その構造式は以下の通りである：
【００５９】
【化５】
2013503113.tif 000006
【００６０】
調製方法：液中乾燥法が用いられる。フルベストラント及びメトキシ末端ポリエチレングリコール−ポリ乳酸ブロック共重合体がジクロロメタン中に添加され、超音波処理されて溶解する。結果として生じた溶液が２８００ｒｐｍの高速剪断下で水相に徐々に添加され、さらに５分間剪断される。結果として生じた混合物がその後３５℃の水浴中に置かれて３００ｒｐｍの攪拌速度で４時間攪拌され、さらに４０℃まで加熱されて０．５時間攪拌され、その後１５０μｍの篩目で濾過される。濾液は回収されて１０μｍの篩目で濾過される。ミクロスフェアは回収されて５００ｍｌの水で５回洗浄される。濡れたミクロスフェアを４０℃で乾燥させ、総量５．０７ｇの乾燥産物を約９２％の収率で得る。
【００６１】
粒径の範囲及び粒子の形状：１０〜１５０μｍ、主に２０〜３０μｍであり、次に６０〜３０μｍである；粒子の形状は丸い。
【００６２】
薬剤添加率：薬剤添加率は８．３％であり、これはＨＰＬＣ法により測定される。
【００６３】
カプセル化効率：８４．２％。
【実施例４】
【００６４】
実施例４：インビトロでのフルベストラントミクロスフェア放出に関する研究
本実施例は、実施例１及び２において試験試料として調製されたフルベストラントミクロスフェアを用い、インビトロでのフルベストラントミクロスフェア放出について研究する。
【００６５】
１)実験器具及び試薬
器具：SHA-A水槽恒温振盪器、及び日本のJASCO, Inc.社から取得した高性能液体クロマトグラフ（UV-2075ＵＶ検出器、PU-2089送液ポンプ、AS-2055オートサンプラー）。
【００６６】
試験薬剤：中国のXi'an Libang Pharmaceutical Co., Ltd.社から取得した１００．０％の純度を有するフルベストラント。
【００６７】
試薬：米国のTEDIA Company社から取得したクロマトグラフグレードのアセトニトリル及びメタノール；中国のTianjin Kermel Chemical Reagent Co., Ltd.社から取得した分析的に純粋なジクロロメタン；英国のCRODA Company社から取得したTween-80。
【００６８】
試験試料：共にXi'an Libang Pharmaceutical Co., Ltd.社から取得した、フルベストラント試料１（実施例１において調製されたフルベストラントミクロスフェア)、フルベストラント試料２（実施例２において調製されたフルベストラントミクロスフェア)。
【００６９】
クロマトグラフ条件：ＨＰＬＣ法が用いられる。オクタデシルシラン化学結合シリカゲルが充填剤として、水−アセトニトリル−メタノール（１５：１５：７０)が移動相として用いられ、検出波長は２８５ｎｍ、流速は０．８ｍｌ／分であり、フルベストラントピークに関して計算される理論段数は３０００超であるべきである。
【００７０】
２）実験方法：
それぞれ２５ｍｇのフルベストラントを有する６つの試料がそれぞれ正確に重量測定され、６つのガラス製注入ボトル中にそれぞれ置かれる。３７℃まで予熱された５０ｍｌの０．３％Tween-80溶液が正確にガラス製注入ボトルのそれぞれに添加される。ガラス製注入ボトルはゴム栓で密封されてアルミニウムキャップでキャップされ、３７℃±２℃の水浴中に水平状態で迅速に固定され、水平方向に約４ｃｍの振幅、１分間に１００回の頻度ですぐに震盪される。震盪の１、２、４、８、２４、２８、及び４０時間後にそれぞれのボトルからゴム栓を介して１ｍｌの懸濁液が抽出され（もし懸濁液中の内容物が沈殿していたなら、均等な分布のため、震盪後に抽出されるべきである）、その後１ｍｌの０．３％Tween-80溶液がそれぞれのボトルに補充される。懸濁液は試験試料溶液として０．２μｍのフィルター膜上で濾過される。加えて、適切な量のフルベストラントが正確に重量測定され、これにジクロロメタンを添加し、溶液１ｍｌ当たり２．０ｍｇのフルベストラントを含むよう溶解させ希釈する。１ｍｌの溶液が正確に取り出され、２５ｍｌ容量フラスコに入れられる。アセトニトリルを添加することにより総体積を２５ｍｌに定める。溶液は十分に震盪され、対照溶液として用いられる。２０μｌの試験溶液及び２０μｌの対照溶液が正確に取り出され、クロマトグラフ内へと注入される。クロマトグラムが記録され、累積放出量が外部標準法によりピーク面積で計算される。
【００７１】
３）実験結果及び結論
２つのタイプのフルベストラントミクロスフェア試料のインビトロでの薬剤放出の結果が図１及び２に示される。これら２つのタイプのフルベストラントミクロスフェア試料の放出速度は安定的であり、バースト効果は一切ないが、試料１の放出速度は試料２の放出速度より有意に大きいことが結果から分かる。これは、インビトロでの薬剤放出速度が担体材料の分子量の増加と共に減少したことを示し、フルベストラントミクロスフェアの放出速度が分子量のサイズにより調節され得ることを示唆する。
【実施例５】
【００７２】
実施例５：ラットにおけるフルベストラントミクロスフェアの薬物動態に関する研究
本実施例は、試験試料として実施例１及び２において調製されたフルベストラントミクロスフェアを用い、ラットにおけるフルベストラントミクロスフェアの薬物動態について研究する。
【００７３】
１）実験器具及び試薬
器具：オートサンプラー、カラムオーブン、エレクトロスプレーイオン化インターフェース、2695液体クロマトグラフ及びMasslynx 4.0 MSワークステーションを含む、Micromass社製Quattroマイクロ液体クロマトグラフ−質量スペクトル（ＬＣ−ＭＳ）；METTLER社製１０万分の１電子天秤（one hundred-thousandth of electronic balance）；Milli-Q浄水器；MICROMAX 3591遠心分離卓高速遠心分離器（Thermo Electron社製）；Turbine混合器（Huxi analytical instrument factory社製、中国、上海）。
【００７４】
試薬：米国のTEDIA Company社から取得したクロマトグラフグレードのメタノール；他の試薬は分析的に純粋なものを市販で入手可能である；自家調製されMilli-Q浄水器により浄化された再蒸留水。
【００７５】
試験薬剤：活性医薬成分であるフルベストラント：９９％。
【００７６】
試験試料：９．０％の含有量を有するフルベストラントミクロスフェア試料１（実施例１において調製されたフルベストラントミクロスフェア）；１１．０％の含有量を有するフルベストラントミクロスフェア試料２（実施例２において調製されたフルベストラントミクロスフェア）。
【００７７】
ミクロスフェア試料の溶媒（１ｍｌの試料溶媒それぞれが以下のものを含む：５０ｍｇのマンニトール、５ｍｇのカルボキシメチルセルロースナトリウム、１ｍｇのTween-80及び注射に適した量の水）：５０ｍｌ／ボトルで２つのボトル。
【００７８】
すべての上述の製品が中国のXi'an Libang Pharmaceutical Co., Ltd.社により提供される。
【００７９】
すべてのフルベストラントミクロスフェア試料がミクロスフェア試料の溶媒を用いて１０ｍｇ／ｍｌに調製される。
【００８０】
エモジン：内部標準、中国葯品生物制品検定所により提供、バッチ番号：０７５６−２００１１０；含有量定量のために用いられる。
【００８１】
ＨＰＬＣ条件：
移動相：メタノール：水＝８５：１５（ｖ：ｖ）；
クロマトグラフカラム：１００×２．０ｍｍ、shim-pack；プレカラムphenomenex C18 (ＯＤＳオクタデシル)、４ｍｍ×２．０  ＩＤ  １０／ｐｋ；カラム温度：３５℃；注入体積：５μＬ；流速：０．２ｍｌ／分；
ＬＣ−ＭＳ−ＭＳ条件：
キャピラリー電圧：３．００ｋＶ；コーン電圧：３０Ｖ；エクストラクタ電圧：３．００Ｖ；ＲＦレンズ電圧：０．３Ｖ；源温度：１２０℃；脱溶媒和温度：４００℃；コーンガス流（Cone Gas Flow）：３０Ｌ／時間；脱溶媒和ガス流（Desolvation gas flow）：５００Ｌ／時間；ＬＭ１分解能：１３．０；ＨＭ１分解能：１３．０；イオンエネルギー：１０．５；入口（entrance）：−２；コリジョン（collision）：２０；出口（exit）：２；ＬＭ２分解能：１３．０；ＨＭ２分解能：１３．０；イオンエネルギー：１０．５；ガスセルピラニ圧（Gas cell pirani pressure）：４．０ｅ−３ミリバール；
フルベストラント：［Ｍ−Ｈ＋］ｍ／ｚ  ６０５．６→４２７．４；
エモジン：［Ｍ−Ｈ＋］ｍ／ｚ  ２６９．４→２２５．１。
【００８２】
２）実験方法：
１２匹のSprague-Dawleyラット（中国、江蘇の南通大学実験動物センターより購入）はすべてメスであり、１８０〜２２０ｇの体重を有する。ＳＤラットは６匹のラットからなる２つの群に分けられ、それぞれが試料１及び２の群となる。異なる処方の５０ｍｇ／ｋｇ（すなわち１ｍｌ／２００ｇ）のフルベストラント製剤がラットに皮下投与される。投与前並びに投与の０．５、１、３、６、１０、２４時間後、２、４、７、１０、１４、２１、２８日後及び５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３週間後にそれぞれ、０．３ｍｌの血液がヘパリン化チューブで眼窩静脈から回収され、３５００ｒｐｍで１０分間遠心分離される。血液血漿（０．１ｍｌ）が定量可能な形で回収され、分析のための準備が整う。
【００８３】
３）データ分析：
ＡＵＣ、Ｔｍａｘ及びＣｍａｘ並びに他のパラメータが各動物の血漿濃度−時間のデータを用いて計算される。結果は表１に示される。
【００８４】
【表１】
2013503113.tif 000007
【００８５】
フルベストラントミクロスフェアの皮下注射後のラットにおける平均薬剤血漿濃度−時間曲線が図３及び４に示される。さらに、病理学検査の際に投与部位での刺激性反応は一切観察されない。
【００８６】
４）実験結果の分析：
試料１において２０００〜２００００のＭｗを有するメトキシ末端ポリエチレングリコール−ポリ乳酸ブロック共重合体がミクロスフェア担体材料として用いられ、一方で試料２において２０００〜４００００のＭｗを有するメトキシ末端ポリエチレングリコール−ポリ乳酸ブロック共重合体がミクロスフェア担体材料として用いられる。実験データは、試料２と比較して試料１がより大きい放出速度、より大きい放出量、より短いピーク時間を有するが、試料２より短い半減期を有することを示し、フルベストラントミクロスフェアの分子量増加と共に放出速度が緩徐になり、半減期が延長されることを示しており、このことはインビトロでの薬剤放出の結果と一致する。したがって、所望の薬剤放出曲線が分子量サイズの制御により得られる。
【００８７】
さらに、病理学検査の際に投与部位に刺激性反応は一切観察されず、フルベストラントミクロスフェアがより良い生体適合性を有することを示している。
【実施例６】
【００８８】
実施例６：様々な放出培地におけるフルベストラントミクロスフェアのインビトロ放出に関する研究
本実施例は、実施例３において調製されたフルベストラントミクロスフェアを試験試料として用い、様々な放出培地におけるフルベストラントミクロスフェアのインビトロ放出について研究する。
【００８９】
１)実験器具及び試薬
器具：SHA-A水槽恒温振盪器、及び日本のJASCO, Inc.社から取得した高性能液体クロマトグラフ（UV-2075ＵＶ検出器、PU-2089送液ポンプ、AS-2055オートサンプラ）。
【００９０】
試験薬剤：中国のXi'an Libang Pharmaceutical Co., Ltd.社から取得した１００．０％の純度を有するフルベストラント。
【００９１】
試薬：米国のTEDIA Company社から取得したクロマトグラフグレードのアセトニトリル及びメタノール；中国のTianjin Kermel Chemical Reagent Co., Ltd.社から取得した分析的に純粋なジクロロメタン；英国のCRODA Company社から取得したTween-80。
【００９２】
試験試料：中国のXi'an Libang Pharmaceutical Co., Ltd.社から取得したフルベストラントミクロスフェア（実施例３において調製されたフルベストラントミクロスフェア)。
【００９３】
クロマトグラフ条件：ＨＰＬＣ法が用いられる。オクタデシルシラン化学結合シリカゲルが充填剤として、水−アセトニトリル−メタノール（１５：１５：７０)が移動相として用いられ、検出波長は２８５ｎｍ、流速は０．８ｍｌ／分であり、フルベストラントピークに関して計算される理論段数は３０００超であるべきである。
【００９４】
３）実験方法
それぞれ２５ｍｇのフルベストラントミクロスフェアを有する１２の試料がそれぞれ正確に重量測定され、１２のガラス製注入ボトル中にそれぞれ置かれて４つの群に同数ずつ分けられる。３７℃まで予熱された５０ｍｌの放出培地がそれぞれのガラス製注入ボトルに正確に添加される。放出培地は群１で０．３％のTween-80溶液、群２で０．５％のTween-80溶液、群３で０．０５％の臭化セチルトリメチルアンモニウム（Cetyltrimethyl Ammonium Bromide、ＣＴＡＢ）溶液、群４で０．１％の臭化セチルトリメチルアンモニウム溶液である。ガラス製注入ボトルはゴム栓で密封されてアルミニウムキャップでキャップされ、その後３７℃±２℃の水浴中に水平状態で迅速に固定され、続けてすぐに約４ｃｍの振幅で水平方向に１分間当たり１００回の頻度で震盪される。震盪の１、２、４、２０、２７及び４４時間後にゴム栓を介してそれぞれのボトルから１ｍｌの懸濁液が抽出され（もし懸濁液中の内容物が沈殿していたなら、均等な分布のため、震盪後に抽出されるべきである）、その後１ｍｌの対応する放出培地がそれぞれのボトルに補充される。懸濁液は試験試料溶液として０．２μｍのフィルター膜上で濾過される。加えて、適切な量のフルベストラントが正確に重量測定され、これにジクロロメタンが添加され、溶液１ｍｌ当たり２．０ｍｇのフルベストラントを含むよう溶解して希釈する。１ｍｌ溶液が正確に取り出され、２５ｍｌ容量フラスコに入れられる。アセトニトリルを添加することにより総体積を２５ｍｌに定める。溶液は十分に震盪されて対照溶液として用いられる。２０μｌの試験溶液及び２０μｌの対照溶液が正確に取り出され、クロマトグラフへと注入される。クロマトグラムが記録される。累積放出量が外部標準法によりピーク面積で計算される。
【００９５】
３）実験結果及び結論
様々な培地におけるフルベストラントミクロスフェア放出の結果が図５に示される。放出培地の４つの群におけるフルベストラントミクロスフェア試料の放出速度は安定的であり、バースト効果が一切ないということがこの結果から理解され得る。表面活性剤の濃度の増加と共に薬剤放出速度はより大きくなるが、Tween-80群における薬剤放出速度の増加は臭化セチルトリメチルアンモニウム（ＣＴＡＢ）溶液群ほど顕著ではない。
【００９６】
実施例７〜９はフルベストラントミクロスフェアを調製するために溶媒−非溶媒法を用いた実施例である。
【実施例７】
【００９７】
実施例７：フルベストラントミクロスフェアを調製するための溶媒−非溶媒法の使用−１
【００９８】
処方：
溶媒相：フルベストラント  ０．０５ｇ
メトキシ末端ポリエチレングリコール−ポリ乳酸ブロック共重合体  １．０ｇ
トリクロロメタン  １０ｍｌ
非溶媒相：ポリイソブチルエステル  ０．０５ｇ
シクロヘキサン  １００ｍｌ
注：メトキシ末端ポリエチレングリコール−ポリ乳酸ブロック共重合体の重量平均分子量（Ｍｗ）は５０００／１００００であり、その構造式は以下の通りである：
【００９９】
【化６】
2013503113.tif 000008
【０１００】
調製方法：溶媒−非溶媒法が調製のために用いられる。ポリイソブチルエステルがシクロヘキサンに添加され、超音波処理されて溶解し、結果として生じた溶液が非溶媒相として用いられ、使用のための準備が整う。フルベストラント及びメトキシ末端ポリエチレングリコール−ポリ乳酸ブロック共重合体がトリクロロメタンに添加され、超音波処理されて溶解し、結果として生じた溶液が溶媒相として用いられる。溶媒相は６０００ｒｐｍの高速剪断下で非溶媒相に徐々に添加され、さらに５分間剪断され、その後３００ｒｐｍの攪拌速度で３０分間攪拌され、０．５ｍｍの篩目で濾過される。濾液は回収されて２０μｍの篩目で濾過される。ミクロスフェアを回収して４０℃で２時間乾燥させ、フルベストラントミクロスフェアを得る。
【０１０１】
粒径の範囲及び粒子の形状：２０μｍ〜１ｍｍ、主に５０〜２００μｍ；粒子の形状は丸い。
【０１０２】
薬剤添加率：薬剤添加率は４．６％であり、これはＨＰＬＣ法により測定される。
【０１０３】
カプセル化効率：６７．６％。
【実施例８】
【０１０４】
実施例８：フルベストラントミクロスフェアを調製するための溶媒−非溶媒法の使用−２
【０１０５】
処方：
溶媒相：フルベストラント  ０．２ｇ
メトキシ末端ポリエチレングリコール−ポリ乳酸ブロック共重合体  １．０ｇ
Span-85  ０．０５ｇ
ジクロロメタン  １０ｍｌ
シリコン油  ３０ｍｌ
非溶媒相：石油エーテル  ｑ．ｓ．
注：メトキシ末端ポリエチレングリコール−ポリ乳酸ブロック共重合体の重量平均分子量（Ｍｗ）は２０００／２００００であり、その構造式は以下の通りである：
【０１０６】
【化７】
2013503113.tif 000009
【０１０７】
調製方法：溶媒−非溶媒法が調製のために用いられる。フルベストラント、メトキシ末端ポリエチレングリコール−ポリ乳酸ブロック共重合体及びSpan-85がジクロロメタンに添加され、超音波処理されて溶解し、その後６００ｒｐｍの攪拌速度下でシリコン油に添加され、攪拌されて乳化する。ミクロスフェアがもはや生み出されなくなるまで、石油エーテルが溶液に徐々に添加される。その後溶液は３００ｒｐｍの攪拌速度で３０分間攪拌され、１ｍｍの篩目で濾過される。濾液が回収されて２０μｍの篩目で濾過される。ミクロスフェアを回収し、１００ｍｌの水で５回洗浄して４０℃で２時間乾燥させ、フルベストラントミクロスフェアを得る。
【０１０８】
粒径の範囲及び粒子の形状：２０μｍ〜１ｍｍ、主に５０〜５００μｍ；粒子の形状は丸い。
【０１０９】
薬剤添加率：薬剤添加率は１６．８％であり、これはＨＰＬＣ法により測定される。
【０１１０】
カプセル化効率：６５．５％。
【実施例９】
【０１１１】
実施例９：フルベストラントミクロスフェアを調製するための溶媒−非溶媒法の使用−３
【０１１２】
処方：
溶媒相：フルベストラント  ０．５ｇ
メトキシ末端ポリエチレングリコール−ポリ乳酸ブロック共重合体  １．０ｇ
Span-85  ０．０５ｇ
ジクロロメタン  ２０ｍｌ
流動パラフィン  ５０ｍｌ
非溶媒相：純水  q．ｓ．
注：メトキシ末端ポリエチレングリコール−ポリ乳酸ブロック共重合体の重量平均分子量（Ｍｗ）は２０００／４００００であり、その構造式は以下の通りである：
【０１１３】
【化８】
2013503113.tif 000010
【０１１４】
調製方法：溶媒−非溶媒法が調製のために用いられる。フルベストラント、メトキシ末端ポリエチレングリコール−ポリ乳酸ブロック共重合体及びSpan-85がジクロロメタンに添加され、超音波処理されて溶解し、その後３０００ｒｐｍの攪拌速度下で流動パラフィンに添加され、攪拌されて乳化する。ミクロスフェアがもはや生み出されなくなるまで、純水が３００ｒｐｍの攪拌速度下で溶液に徐々に添加される。その後溶液は３０分間攪拌されて６００μｍの篩目で濾過される。濾液が回収されて１０μｍの篩目で濾過される。ミクロスフェアを回収し、１００ｍｌの水で５回洗浄して４０℃で２時間乾燥させ、フルベストラントミクロスフェアを得る。
【０１１５】
粒径の範囲及び粒子の形状：１０μｍ〜６００μｍ、主に４０〜２５０μｍ；粒子の形状は丸い。
【０１１６】
薬剤添加率：薬剤添加率は４６．１％であり、これはＨＰＬＣ法により測定される。
【０１１７】
カプセル化効率：７８．８％。
【０１１８】
実施例１０〜１４はフルベストラントミクロスフェアを調製するために液中乾燥法を用いた実施例である
【実施例１０】
【０１１９】
実施例１０：フルベストラントミクロスフェアを調製するための液中乾燥法の使用−１
【０１２０】
処方：
油相：フルベストラント  ０．０５ｇ
メトキシ末端ポリエチレングリコール−ポリ乳酸ブロック共重合体  ０．５ｇ
ジクロロメタン  ５ｍｌ
水相：１．０％ポリビニルアルコール＋０．１％Tween-80溶液  １００ｍｌ
注：メトキシ末端ポリエチレングリコール−ポリ乳酸ブロック共重合体の重量平均分子量（Ｍｗ）は５０００／１００００であり、その構造式は以下の通りである：
【０１２１】
【化９】
2013503113.tif 000011
【０１２２】
調製方法：液中乾燥法が用いられる。フルベストラント及びメトキシ末端ポリエチレングリコール−ポリ乳酸ブロック共重合体がジクロロメタンに添加され、超音波処理されて溶解する。結果として生じた溶液は５０００ｒｐｍの高速剪断下で水相に徐々に添加され、さらに３分間剪断される。結果として生じた混合物はその後３０℃の水浴中に置かれて３００ｒｐｍの攪拌速度で２時間攪拌され、さらに３５℃まで加熱されて０．５時間攪拌され、その後４０℃まで加熱されて０．５時間攪拌され、続けて１５０μｍの篩目で濾過される。濾液が回収されて１０μｍの篩目で濾過される。ミクロスフェアが回収されて１００ｍｌの水で５回洗浄される。濡れたミクロスフェアを４０℃で乾燥させ、フルベストラントミクロスフェアを得る。
【０１２３】
粒径の範囲及び粒子の形状：１０〜１５０μｍ、主に２０〜３０μｍ；粒子の形状は丸い。
【０１２４】
薬剤添加率：薬剤添加率は９．１％であり、これはＨＰＬＣ法により測定される。
【０１２５】
カプセル化効率：６４．５％。
【実施例１１】
【０１２６】
実施例１１：フルベストラントミクロスフェアを調製するための液中乾燥法の使用−２
【０１２７】
処方：
油相：フルベストラント  ０．０５g
メトキシ末端ポリエチレングリコール−ポリ乳酸ブロック共重合体  ０．５g
ジクロロメタン  ５ｍｌ
水相：１．０％ポリビニルアルコール＋０．１％Tween-80溶液  ３００ｍｌ
注：メトキシ末端ポリエチレングリコール−ポリ乳酸ブロック共重合体の重量 平均分子量（Ｍｗ）は２０００／２００００であり、その構造式は以下の通りである：
【０１２８】
【化１０】
2013503113.tif 000012
【０１２９】
調製方法：液中乾燥法が用いられる。フルベストラント及びメトキシ末端ポリエチレングリコール−ポリ乳酸ブロック共重合体がジクロロメタンに添加され、超音波処理されて溶解する。結果として生じた溶液は３０００ｒｐｍの高速剪断下で水相に徐々に添加され、さらに３分間剪断される。結果として生じた混合物はその後３０℃の水浴中に置かれて３００ｒｐｍの攪拌速度で２時間攪拌され、さらに３５℃まで加熱されて０．５時間攪拌され、その後４０℃まで加熱されて０．５時間攪拌され、続けて１５０μｍの篩目で濾過される。濾液が回収されて１０μｍの篩目で濾過される。ミクロスフェアが回収されて２００ｍｌの水で５回洗浄される。濡れたミクロスフェアを４０℃で乾燥させ、フルベストラントミクロスフェアを得る。
【０１３０】
粒径の範囲及び粒子の形状：１０〜１５０μｍ、主に２０〜５０μｍ；粒子の形状は丸い。
【０１３１】
薬剤添加率：薬剤添加率は９．５％であり、これはＨＰＬＣ法により測定される。
【０１３２】
カプセル化効率：６８．０％。
【実施例１２】
【０１３３】
実施例１２：フルベストラントミクロスフェアを調製するための液中乾燥法の使用−３
【０１３４】
処方：
油相：フルベストラント  ０．１ｇ
メトキシ末端ポリエチレングリコール−ポリ乳酸ブロック共重合体  ０．５ｇ
ジクロロメタン  ５ｍｌ
水相：０．１％ヒドロキシプロピルメチルセルロース （Hydroxypropyl methylcellulose、ＨＰＭＣ）  ７５ｍｌ
注：メトキシ末端ポリエチレングリコール−ポリ乳酸ブロック共重合体の重量平均分子量（Ｍｗ）は２０００／４００００であり、その構造式は以下の通りである：
【０１３５】
【化１１】
2013503113.tif 000013
【０１３６】
調製方法：液中乾燥法が用いられる。フルベストラント及びメトキシ末端ポリエチレングリコール−ポリ乳酸ブロック共重合体がジクロロメタンに添加され、超音波処理されて溶解する。結果として生じた溶液は３０００ｒｐｍの高速剪断下で水相に徐々に添加され、さらに３分間剪断される。結果として生じた混合物はその後３０℃の水浴中に置かれて３００ｒｐｍの攪拌速度で３時間攪拌され、さらに４０℃まで加熱されて１時間攪拌され、続けて１５０μｍの篩目で濾過される。濾液が回収されて１０μｍの篩目で濾過される。ミクロスフェアが回収されて２００ｍｌの水で５回洗浄される。濡れたミクロスフェアを凍結乾燥し（前凍結温度は−４５℃であり、初乾温度は２５℃である）、フルベストラントミクロスフェアを得る。
【０１３７】
粒径の範囲及び粒子の形状：１０〜１５０μｍ、主に２０〜５０μｍ；粒子の形状は丸い。
【０１３８】
薬剤添加率：薬剤添加率は１６．５％であり、これはＨＰＬＣ法により測定される。
【０１３９】
カプセル化効率：６９．７％。
【実施例１３】
【０１４０】
実施例１３：フルベストラントミクロスフェアを調製するための液中乾燥法の使用−４
【０１４１】
処方：
油相：フルベストラント  ０．２ｇ
メトキシ末端ポリエチレングリコール−ポリ乳酸ブロック共重合体  ２．０ｇ
ジクロロメタン  ２０ｍｌ
水相：２０％グルセロール、０．２％Tween-80溶液  ３００ｍｌ
注：メトキシ末端ポリエチレングリコール−ポリ乳酸ブロック共重合体の重量平均分子量（Ｍｗ）は２０００／２００００であり、その構造式は以下の通りである：
【０１４２】
【化１２】
2013503113.tif 000014
【０１４３】
調製方法：液中乾燥法が用いられる。フルベストラント及びメトキシ末端ポリエチレングリコール−ポリ乳酸ブロック共重合体がジクロロメタンに添加され、超音波処理されて溶解する。結果として生じた溶液は３０００ｒｐｍの高速剪断下で水相に徐々に添加され、さらに３分間剪断され、その後高圧ホモジナイザーを用いて８００バールの圧力及び室温で３回均質化される。エマルションは３５℃の水浴中に置かれて３００ｒｐｍの攪拌速度で２時間攪拌され、さらに４０℃まで加熱されて１時間攪拌され、続けて１μｍの篩目で濾過される。濾液が回収されて０．１μｍの篩目で濾過される。ミクロスフェアが回収されて１００ｍｌの水で５回洗浄される。濡れたミクロスフェアを凍結乾燥し（前凍結温度は−４５℃であり、初乾温度は２５℃である）、フルベストラントミクロスフェアを得る。
【０１４４】
粒径の範囲及び粒子の形状：０．１〜１μｍ、主に０．５〜０．８μｍ；粒子の形状は丸い。
【０１４５】
薬剤添加率：薬剤添加率は８．５％であり、これはＨＰＬＣ法により測定される。
【０１４６】
カプセル化効率：５６．５％。
【実施例１４】
【０１４７】
実施例１４：フルベストラントミクロスフェアを調製するための液中乾燥法の使用−５
【０１４８】
処方：
油相：フルベストラント  ０．１ｇ
メトキシ末端ポリエチレングリコール−ポリ乳酸ブロック共重合体  １．０ｇ
ジクロロメタン  １０ｍｌ
水相：０．０５ｍｏｌ／Ｌホウ砂溶液（０．１％ＨＰＭＣを含む）  ２００ｍｌ
注：メトキシ末端ポリエチレングリコール−ポリ乳酸ブロック共重合体の重量平均分子量（Ｍｗ）は２０００／４００００であり、その構造式は以下の通りである：
【０１４９】
【化１３】
2013503113.tif 000015
【０１５０】
調製方法：液中乾燥法が用いられる。フルベストラント及びメトキシ末端ポリエチレングリコール−ポリ乳酸ブロック共重合体がジクロロメタンに添加され、超音波処理されて溶解する。結果として生じた溶液は３０００ｒｐｍの高速剪断下で水相に徐々に添加され、さらに３分間剪断され、その後ミニタイプジェットポンプ（minitype jet pump）を用いて５００バールの圧力及び室温で５回乳化される。エマルションは３５℃の水浴中に置かれて３００ｒｐｍの攪拌速度で２時間攪拌され、さらに４０℃まで加熱されて１時間攪拌され、続けて１μｍの篩目で濾過される。濾液が回収されて０．１μｍの篩目で濾過される。ミクロスフェアが回収されて１００ｍｌの水で５回洗浄される。濡れたミクロスフェアを凍結乾燥し（前凍結温度は−４５℃であり、初乾温度は２５℃である）、フルベストラントミクロスフェアを得る。
【０１５１】
粒径の範囲及び粒子の形状：０．１〜１μｍ、主に０．３〜０．７μｍ；粒子の形状は丸い。
【０１５２】
薬剤添加率：薬剤添加率は９．１％であり、これはＨＰＬＣ法により測定される。
【０１５３】
カプセル化効率：６０．０％。
【０１５４】
実施例１５〜１７はフルベストラントミクロスフェアを調製するために噴霧乾燥法を用いた実施例である
【実施例１５】
【０１５５】
実施例１５：フルベストラントミクロスフェアを調製するための噴霧乾燥法の使用−１
【０１５６】
処方：
フルベストラント  ０．２ｇ
メトキシ末端ポリエチレングリコール−ポリ乳酸ブロック共重合体  ２．０ｇ
グリセロールモノステアレート  ０．０５ｇ
テトラヒドロフラン  ５０ｍｌ
注：メトキシ末端ポリエチレングリコール−ポリ乳酸ブロック共重合体の重量平均分子量（Ｍｗ）は５０００／１００００であり、その構造式は以下の通りである：
【０１５７】
【化１４】
2013503113.tif 000016
【０１５８】
調製方法：メトキシ末端ポリエチレングリコール−ポリ乳酸ブロック共重合体がテトラヒドロフランに添加され、超音波処理されて溶解し、その後グリセロールモノステアレート及びフルベストラントが添加され、超音波処理されて溶解し、続けて９０％のリングファン送風速度、最大に制御された圧力、８０℃の吸気温、１０％の蠕動ポンプの送り速度で噴霧乾燥される。乾燥終了後、結果として生じた産物は篩過され、その後１０〜３００μｍのミクロスフェアが回収され、フルベストラントミクロスフェアがもたらされる。
【０１５９】
粒径の範囲及び粒子の形状：１０μｍ〜３００μｍ、主に５０〜１５０μｍ；粒子の形状は丸い。
【０１６０】
薬剤添加率：薬剤添加率は９．９％であり、これはＨＰＬＣ法により測定される。
【０１６１】
カプセル化効率：６７．７％。
【実施例１６】
【０１６２】
実施例１６：フルベストラントミクロスフェアを調製するための噴霧乾燥法の使用−２
【０１６３】
処方：
フルベストラント  ０．６ｇ
メトキシ末端ポリエチレングリコール−ポリ乳酸ブロック共重合体  ３．０ｇ
コレステロール  ０．１ｇ
セバシン酸ジブチル  ０．１５ｇ
ジクロロメタン  ３０ｍｌ
注：メトキシ末端ポリエチレングリコール−ポリ乳酸ブロック共重合体の重量平均分子量（Ｍｗ）は２０００／２００００であり、その構造式は以下の通りである：
【０１６４】
【化１５】
2013503113.tif 000017
【０１６５】
調製方法：メトキシ末端ポリエチレングリコール−ポリ乳酸ブロック共重合体がジクロロメタンに添加され、攪拌されて溶解し、その後セバシン酸ジブチル、コレステロール及びフルベストラントが順に添加されて攪拌されて溶解し、続けて９０％のリングファン送風速度、最大に制御された圧力、４０℃の吸気温、１０％の蠕動ポンプの送り速度で噴霧乾燥される。乾燥終了後、結果として生じた産物は篩過され、その後１０〜３００μｍのミクロスフェアが回収され、フルベストラントミクロスフェアがもたらされる。
【０１６６】
粒径の範囲及び粒子の形状：１０μｍ〜３００μｍ、主に５０〜１５０μｍ；粒子の形状は丸い。
【０１６７】
薬剤添加率：薬剤添加率は１９．４％であり、これはＨＰＬＣ法により測定される。
【０１６８】
カプセル化効率：６２．１％。
【実施例１７】
【０１６９】
実施例１７：フルベストラントミクロスフェアを調製するための噴霧乾燥法の使用−３
【０１７０】
処方：
フルベストラント  １．０ｇ
メトキシ末端ポリエチレングリコール−ポリ乳酸ブロック共重合体  ２．０ｇ
ジクロロメタン  ４０ｍｌ
注：メトキシ末端ポリエチレングリコール−ポリ乳酸ブロック共重合体の重量平均分子量（Ｍｗ）は２０００／４００００であり、その構造式は以下の通りである：
【０１７１】
【化１６】
2013503113.tif 000018
【０１７２】
調製方法：フルベストラント及びメトキシ末端ポリエチレングリコール−ポリ乳酸ブロック共重合体がジクロロメタンに添加され、超音波処理されて溶解し、その後９０％のリングファン送風速度、最大に制御された圧力、４０℃の吸気温、１０％の蠕動ポンプの送り速度で噴霧乾燥される。乾燥終了後、結果として生じた産物は篩過され、その後１０〜３００μｍのミクロスフェアが回収され、フルベストラントミクロスフェアを得る。
【０１７３】
粒径の範囲及び粒子の形状：１０〜３００μｍ、主に８０〜１５０μｍ；粒子の形状は丸い。
【０１７４】
薬剤添加率：薬剤添加率は４８．７％であり、これはＨＰＬＣ法により測定される。
【０１７５】
カプセル化効率：５６．５％。
【図１】
2013503113.tif 000020
【図２】
2013503113.tif 000021
【図３】
2013503113.tif 000022
【図４】
2013503113.tif 000023
【図５】
2013503113.tif 000024
【手続補正書】
【提出日】平成24年4月27日(2012.4.27)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
１）フルベストラント又はその薬学的に許容可能な塩又はその溶媒和物、及び
２）メトキシ末端ポリエチレングリコール−ポリ乳酸ブロック共重合体
を含む、フルベストラントナノスフェア又はミクロスフェア。
【請求項２】
フルベストラントの量に基づいて０．０１％〜５０％重量のフルベストラント又はその薬学的に許容可能な塩又はその溶媒和物を含む、請求項１に記載のフルベストラントナノスフェア又はミクロスフェア。
【請求項３】
フルベストラントの量に基づいて５％〜５０％重量のフルベストラント又はその薬学的に許容可能な塩又はその溶媒和物を含む、請求項１に記載のフルベストラントナノスフェア又はミクロスフェア。
【請求項４】
フルベストラントの量に基づいて１０％〜３０％重量のフルベストラント又はその薬学的に許容可能な塩又はその溶媒和物を含む、請求項１に記載のフルベストラントナノスフェア又はミクロスフェア。
【請求項５】
フルベストラントの量に基づいて２０％〜３０％重量のフルベストラント又はその薬学的に許容可能な塩又はその溶媒和物を含む、請求項１に記載のフルベストラントナノスフェア又はミクロスフェア。
【請求項６】
メトキシ末端ポリエチレングリコール−ポリ乳酸ブロック共重合体が、親水性断片ポリエチレングリコール及び親油性断片ポリ乳酸からなる、請求項１〜５のいずれかに記載のフルベストラントナノスフェア又はミクロスフェア。
【請求項７】
メトキシ末端ポリエチレングリコール−ポリ乳酸ブロック共重合体の構造式が、
【化１】
2013503113.tif 000025
であり、
前記式中ｍ＝４〜４５４、ｎ＝４〜２７７８である、
請求項１〜５のいずれかに記載のフルベストラントナノスフェア又はミクロスフェア。
【請求項８】
ｍ＝１１〜２２７、ｎ＝７０〜２０８３である、
請求項７に記載のフルベストラントナノスフェア又はミクロスフェア。
【請求項９】
ｍ＝２２〜１１３、ｎ＝１３９〜１１１１である、
請求項７に記載のフルベストラントナノスフェア又はミクロスフェア。
【請求項１０】
メトキシ末端ポリエチレングリコール−ポリ乳酸ブロック共重合体の親水性−親油性バランス（ＨＬＢ）の価が０．０１〜１９．８４である、
請求項１〜９のいずれかに記載のフルベストラントナノスフェア又はミクロスフェア。
【請求項１１】
ＨＬＢの価が０．４〜１２．０である、
請求項１０に記載のフルベストラントナノスフェア又はミクロスフェア。
【請求項１２】
ＨＬＢの価が１．４７〜１５．０である、
請求項１０に記載のフルベストラントナノスフェア又はミクロスフェア。
【請求項１３】
フルベストラントナノスフェアの粒径が０．１μｍ〜１μｍである、請求項１〜１２のいずれかに記載のフルベストラントナノスフェア又はミクロスフェア。
【請求項１４】
フルベストラントナノスフェアの粒径が０．３μｍ〜０．８μｍである、
請求項１３に記載のフルベストラントナノスフェア又はミクロスフェア。
【請求項１５】
フルベストラントミクロスフェアの粒径が１０μｍ〜１ｍｍである、
請求項１〜１２のいずれかに記載のフルベストラントナノスフェア又はミクロスフェア。
【請求項１６】
フルベストラントミクロスフェアの粒径が１０μｍ〜５００μｍである、
請求項１５に記載のフルベストラントナノスフェア又はミクロスフェア。
【請求項１７】
溶媒−非溶媒法、液中乾燥法及び噴霧乾燥法からなる群から選択される、請求項１〜１６のいずれかに記載のフルベストラントナノスフェア又はミクロスフェアの調製方法。
【請求項１８】
溶媒−非溶媒法が
ａ．溶解したメトキシ末端ポリエチレングリコール−ポリ乳酸ブロック共重合体を含む溶媒系中にフルベストラントを分散又は溶解させること；
ｂ．非溶媒系中に添加し、ナノスフェア又はミクロスフェアを形成すること；
ｃ．凝固させ、回収し、洗浄し、且つ乾燥させること；
というステップを含む、請求項１７に記載の方法。
【請求項１９】
メトキシ末端ポリエチレングリコール−ポリ乳酸ブロック共重合体の溶媒がジクロロメタン、トリクロロメタン、メチルヒドロフラン、エタノール及びエチルアセテートの１又は２以上である、請求項１８に記載の方法。
【請求項２０】
溶媒系中のメトキシ末端ポリエチレングリコール−ポリ乳酸ブロック共重合体の濃度が０．１％〜５０％（ｇ／ｍｌ）である、請求項１８に記載の方法。
【請求項２１】
溶解したメトキシ末端ポリエチレングリコール−ポリ乳酸ブロック共重合体を含む溶媒系中のフルベストラントの濃度が０．０１％〜８０％（ｇ／ｍｌ）である、請求項１８に記載の方法。
【請求項２２】
非溶媒系がエーテル、石油エーテル、ｎ−ヘキサン、シクロヘキサン、又はアセトンである、請求項１８に記載の方法。
【請求項２３】
溶媒系の非溶媒系に対する体積比が１０：１〜１：１０である、請求項１８に記載の方法。
【請求項２４】
非溶媒系がさらに固着防止剤を含む、請求項１８に記載の方法。
【請求項２５】
固着防止剤がポリイソブチルエステル、ポリエチレン及びブチルゴムの１又は２以上である、請求項２４に記載の方法。
【請求項２６】
固着防止剤のメトキシ末端ポリエチレングリコール−ポリ乳酸ブロック共重合体に対する質量比が０：１０〜２：１０である、請求項２４に記載の方法。
【請求項２７】
液中乾燥法が
ａ．フルベストラント及びメトキシ末端ポリエチレングリコール−ポリ乳酸ブロック共重合体を有機溶媒中に溶解させて油相を作製すること；
ｂ．水相中に前記油相を添加し、乳化させて水中油Ｏ／Ｗ型エマルションを得ること；
ｃ．前記Ｏ／Ｗ型エマルションを攪拌及び加熱し、前記Ｏ／Ｗ型エマルション中の前記有機溶媒を完全に揮発させること；
ｄ．濾過し、洗浄し、回収し、且つ乾燥させること；
というステップを含む、請求項１７に記載の方法。
【請求項２８】
メトキシ末端ポリエチレングリコール−ポリ乳酸ブロック共重合体の溶媒がジクロロメタン、トリクロロメタン、メチルヒドロフラン、エタノール及びエチルアセテートの１又は２以上である、請求項２７に記載の方法。
【請求項２９】
フルベストラントのメトキシ末端ポリエチレングリコール−ポリ乳酸ブロック共重合体に対する質量比が１：５０〜１：３である、請求項２７に記載の方法。
【請求項３０】
油相中のメトキシ末端ポリエチレングリコール−ポリ乳酸ブロック共重合体の濃度が１％〜５０％（ｇ／ｍｌ）である、請求項２７に記載の方法。
【請求項３１】
水相が界面活性剤溶液、単糖又は多糖溶液、ポリオール溶液、セルロース溶液及びコロイド溶液の１又は２以上の混合溶液であり、前記水相において溶質の濃度が０．０１％〜５０％（ｇ／ｍｌ）であり、且つ前記水相のｐＨ値が３．０〜１０．５の範囲である、請求項２７に記載の方法。
【請求項３２】
水相中に使用されるｐＨ調整剤が無機酸、有機酸、無機塩基、有機塩基及び緩衝塩からなる群から選択される、請求項２７に記載の方法。
【請求項３３】
油相の水相に対する体積比が１：３００〜１：５である、請求項２７に記載の方法。
【請求項３４】
噴霧乾燥法が
ａ．溶解したメトキシ末端ポリエチレングリコール−ポリ乳酸ブロック共重合体を含む溶媒系中にフルベストラントを溶解又は分散させること；
ｂ．噴霧の形で噴霧乾燥器の乾燥塔内へと噴霧し、且つ乾燥させ、単離し、回収すること；
というステップを含む、請求項１７に記載の方法。
【請求項３５】
メトキシ末端ポリエチレングリコール−ポリ乳酸ブロック共重合体の溶媒がジクロロメタン、トリクロロメタン、メチルヒドロフラン、エタノール及びエチルアセテートの１又は２以上である、請求項３４に記載の方法。
【請求項３６】
溶媒系中のメトキシ末端ポリエチレングリコール−ポリ乳酸ブロック共重合体の濃度が０．１％〜５０％（ｇ／ｍｌ）である、請求項３４に記載の方法。
【請求項３７】
溶解したメトキシ末端ポリエチレングリコール−ポリ乳酸ブロック共重合体を含む溶媒系中の溶解又は分散したフルベストラントの濃度が０．０１％〜５０％（ｇ／ｍｌ）である、請求項３４に記載の方法。
【請求項３８】
乾燥塔の吸気温が３０℃〜８０℃である、請求項３４に記載の方法。
【請求項３９】
溶媒系がさらに可塑剤を含む、請求項３４に記載の方法。
【請求項４０】
可塑剤がジメチルベンゾエート、ジエチルベンゾエート、ジブチルベンゾエート、セバシン酸ジブチル、クエン酸トリブチル、クエン酸アセチルトリブチル及びグリセリルトリアセテートの１又は２以上である、請求項３９に記載の方法。
【請求項４１】
可塑剤のメトキシ末端ポリエチレングリコール−ポリ乳酸ブロック共重合体に対する質量パーセントが０〜５０％である、請求項３９に記載の方法。
【請求項４２】
溶媒系がさらに固着防止剤を含む、請求項３４に記載の方法。
【請求項４３】
固着防止剤がコレステロール、グリセロールモノステアレート、タルク粉末、シリカゲル及びステアリン酸マグネシウムの１又は２以上である、請求項４２に記載の方法。
【請求項４４】
固着防止剤のメトキシ末端ポリエチレングリコール−ポリ乳酸ブロック共重合体に対する質量パーセントが０〜１００％である、請求項４２に記載の方法。
【請求項４５】
乳癌治療のための薬剤の調製における請求項１〜１６のいずれかに記載のフルベストラントナノスフェア又はミクロスフェアの使用。
【請求項４６】
乳癌が進行性乳癌である、請求項４５に記載の使用。
【請求項４７】
乳癌が抗エストロゲン療法での治療後に効果のない、進行している、或いはホルモン受容体陽性である閉経後の女性における転移性進行性乳癌である、請求項４５に記載の使用。
【請求項４８】
請求項１〜１６のいずれかに記載のフルベストラントナノスフェア又はミクロスフェアを含む、乳癌治療のための医薬組成物。
【国際調査報告】
2013503113.tif 000026
2013503113.tif 000027
2013503113.tif 000028
2013503113.tif 000029
2013503113.tif 000030
2013503113.tif 000031
2013503113.tif 000032
2013503113.tif 000033
2013503113.tif 000034
2013503113.tif 000035