(57)【要約】  本発明は、免疫関連障害、具体的には、皮膚関連の炎症性障害、例として、乾癬、呼吸器の炎症状態、例として、喘息、及び自己免疫疾患、例として、糖尿病、並びに任意の免疫関連障害を、防止し、治療し、緩和し又は阻害するための、ＤＦＯ金属錯体、具体的には、亜鉛−デスフェリオキサミン（Ｚｎ−ＤＦＯ）錯体、ガリウム−デスフェリオキサミン（Ｇａ−ＤＦＯ）錯体、及びそれらの任意の組合せを使用する方法、キット及び組合せ組成物に関する。【特許請求の範囲】
【請求項１】
免疫関連障害を、防止し、治療し、緩和し又は阻害する方法であって、治療有効量の少なくとも１つのデスフェリオキサミン金属錯体（ＤＦＯ金属錯体）若しくはそれらの任意の組合せ、又は前記を含む任意の医薬組成物を、それを必要とする対象に投与するステップを含む上記方法。
【請求項２】
金属が、亜鉛、ガリウム、マンガン、インジウム、銀、コバルト、金及びランタニド、並びにそれらの任意の組合せのうちのいずれか１つから選択される、請求項１に記載の方法。
【請求項３】
亜鉛−デスフェリオキサミン錯体（Ｚｎ−ＤＦＯ）、ガリウム−デスフェリオキサミン錯体（Ｇａ−ＤＦＯ）、それらの任意の組合せのうちの少なくとも１つの治療有効量、又は前記を含む任意の組成物を、それを必要とする対象に投与するステップを含む、請求項２に記載の方法。
【請求項４】
免疫関連障害が、炎症性疾患、全身性炎症及び自己免疫疾患のうちのいずれか１つである、請求項１に記載の方法。
【請求項５】
炎症性疾患が、慢性又は急性の炎症に関連する皮膚の病的状態、呼吸器疾患のうちのいずれか１つであり、全身性炎症及び自己免疫疾患が、ＩＩ型糖尿病、Ｉ型糖尿病、又は任意の糖尿病関連状態である、請求項４に記載の方法。
【請求項６】
慢性又は急性の炎症に関連する皮膚の病的状態が乾癬である、請求項５に記載の方法。
【請求項７】
呼吸器疾患が喘息である、請求項５に記載の方法。
【請求項８】
障害が、ＩＩ型糖尿病、Ｉ型糖尿病、又は任意の糖尿病関連状態である、請求項５に記載の方法。
【請求項９】
障害が白内障である、請求項４に記載の方法。
【請求項１０】
免疫関連障害を、予防し、治療し、緩和し又は阻害するための組成物の調製における、治療有効量の少なくとも１つのデスフェリオキサミン金属錯体（ＤＦＯ金属錯体）又はそれらの任意の組合せの使用。
【請求項１１】
金属が、亜鉛、ガリウム、マンガン、インジウム、銀、コバルト、金、ランタニド及びそれらの任意の組合せのうちのいずれか１つから選択される、請求項１０に記載の使用。
【請求項１２】
デスフェリオキサミン金属錯体が、亜鉛−デスフェリオキサミン錯体（Ｚｎ−ＤＦＯ）、ガリウム−デスフェリオキサミン錯体（Ｇａ−ＤＦＯ）又はそれらの任意の組合せのうちの少なくとも１つである、請求項１１に記載の使用。
【請求項１３】
免疫関連障害が、炎症性疾患、全身性炎症及び自己免疫疾患のうちのいずれか１つである、請求項１０に記載の使用。
【請求項１４】
炎症性疾患が、慢性又は急性の炎症に関連する皮膚の病的状態、呼吸器疾患のうちのいずれか１つであり、自己免疫疾患が、糖尿病又は任意の糖尿病関連状態である、請求項１３に記載の使用。
【請求項１５】
慢性又は急性の炎症に関連する皮膚の病的状態が乾癬である、請求項１４に記載の使用。
【請求項１６】
呼吸器疾患が喘息である、請求項１３に記載の使用。
【請求項１７】
障害が、ＩＩ型糖尿病、Ｉ型糖尿病、又は任意の糖尿病関連状態のうちのいずれか１つである、請求項１３に記載の使用。
【請求項１８】
障害が白内障である、請求項１３に記載の使用。
【請求項１９】
治療有効量の少なくとも２つのデスフェリオキサミン金属錯体（ＤＦＯ金属錯体）の組合せを含む組成物であって、場合により、少なくとも１つの薬学的に許容できる担体、希釈剤、賦形剤及び／又は添加剤をさらに含む上記組成物。
【請求項２０】
金属が、亜鉛、ガリウム、マンガン、インジウム、銀、コバルト、金、ランタニド及びそれらの任意の組合せのうちのいずれか１つから選択される、請求項１９に記載の組成物。
【請求項２１】
亜鉛−デスフェリオキサミン錯体（Ｚｎ−ＤＦＯ）とガリウム−デスフェリオキサミン錯体（Ｇａ−ＤＦＯ）との組合せを含む、請求項２０に記載の組成物。
【請求項２２】
亜鉛−デスフェリオキサミン錯体（Ｚｎ−ＤＦＯ）及びガリウム−デスフェリオキサミン錯体（Ｇａ−ＤＦＯ）を、１：０．０１〜１：１００の間の定量比で含有する、請求項２１に記載の組成物。
【請求項２３】
少なくとも１つの追加のデスフェリオキサミン金属錯体を含む、請求項２１に記載の組成物。
【請求項２４】
少なくとも１つの追加の治療剤をさらに含む、請求項２１に記載の組成物。
【請求項２５】
免疫関連障害を、防止し、治療し、緩和し又は阻害するための、請求項２１に記載の医薬組成物。
【請求項２６】
免疫関連障害が、炎症性疾患、全身性炎症及び自己免疫疾患のうちのいずれか１つである、請求項２５に記載の医薬組成物。
【請求項２７】
炎症性疾患が、慢性又は急性の炎症に関連する皮膚の病的状態、呼吸器疾患のうちのいずれか１つであり、全身性炎症又は自己免疫疾患が、糖尿病又は任意の糖尿病関連状態である、請求項２６に記載の医薬組成物。
【請求項２８】
慢性又は急性の炎症に関連する皮膚の病的状態が乾癬である、請求項２７に記載の医薬組成物。
【請求項２９】
呼吸器疾患が喘息である、請求項２７に記載の医薬組成物。
【請求項３０】
全身性炎症又は自己免疫疾患が、ＩＩ型糖尿病、Ｉ型糖尿病、又は任意の糖尿病関連状態である、請求項２７に記載の医薬組成物。
【請求項３１】
障害が白内障である、請求項２５に記載の医薬組成物。
【請求項３２】
治療効果を、それを必要とする対象において達成するためのキットであって、
（Ｉ）
（ｉ）場合により第１の単位投与剤型中の、亜鉛イオン（Ｚｎ（ＩＩ））であって、それらの塩、エステル及びアミドのうちの任意の形態をとる上記亜鉛イオン（Ｚｎ（ＩＩ））、又は薬学的に許容できるそれらの誘導体、及び薬学的に許容できる担体又は希釈剤；
（ｉｉ）場合により第２の単位投与剤型中の、ＤＦＯ又は薬学的に許容できるその誘導体、及び薬学的に許容できる担体又は希釈剤；並びに
（ｉｉｉ）場合により、錯体を生成するのに適切な条件をもたらす溶液、バッファー及び構成成分
を含むＺｎ−ＤＦＯ錯体を生成するための化合物；
（ＩＩ）
（ｉ）場合により第３の単位投与剤型中の、ガリウムイオン（Ｇａ（ＩＩＩ））であって、それらの塩、エステル及びアミドのうちの任意の形態をとる上記ガリウムイオン（Ｇａ（ＩＩＩ））、又は薬学的に許容できるそれらの誘導体、及び薬学的に許容できる担体又は希釈剤；
（ｉｉ）場合により第４の単位投与剤型中の、ＤＦＯ又は薬学的に許容できるその誘導体、及び薬学的に許容できる担体又は希釈剤；並びに
（ｉｉｉ）場合により、錯体を生成するのに適切な条件をもたらす溶液、バッファー及び構成成分
を含むＧａ−ＤＦＯ錯体を生成するための化合物；
（ＩＩＩ）
（ｉ）場合により第５の単位投与剤型中の、これらに限定されないが、Ｍｎ（ＩＩ）、Ｍｎ（ＩＩＩ）及びＭｎ（ＩＶ）を包含する、任意のイオン価状態をとるマンガンイオンであって、それらの塩、エステル及びアミドのうちの任意の形態をとる上記マンガンイオン、又は薬学的に許容できるそれらの誘導体、及び薬学的に許容できる担体又は希釈剤；
（ｉｉ）場合により第６の単位投与剤型中の、ＤＦＯ又は薬学的に許容できるその誘導体、及び薬学的に許容できる担体又は希釈剤；並びに
（ｉｉｉ）場合により、錯体を生成するのに適切な条件をもたらす溶液、バッファー及び構成成分
を含むＭｎ−ＤＦＯ錯体を生成するための化合物；
（ＩＶ）前記単位投与剤型を含有させるための容器手段
のうちの少なくとも１つを含む上記キット。
【請求項３３】
（Ｉ）
（ｉ）場合により第１の単位投与剤型中の、亜鉛イオン（Ｚｎ（ＩＩ））であって、それらの塩、エステル及びアミドのうちの任意の形態をとる上記亜鉛イオン（Ｚｎ（ＩＩ））、又は薬学的に許容できるそれらの誘導体、及び薬学的に許容できる担体又は希釈剤；
（ｉｉ）場合により第２の単位投与剤型中の、ＤＦＯ又は薬学的に許容できるその誘導体、及び薬学的に許容できる担体又は希釈剤；並びに
（ｉｉｉ）場合により、錯体を生成するのに適切な条件をもたらす溶液、バッファー及び構成成分
を含むＺｎ−ＤＦＯ錯体を生成するための化合物；
（ＩＩ）
（ｉ）場合により第３の単位投与剤型中の、ガリウムイオン（Ｇａ（ＩＩＩ））であって、それらの塩、エステル及びアミドのうちの任意の形態をとる上記ガリウムイオン（Ｇａ（ＩＩＩ））、又は薬学的に許容できるそれらの誘導体、及び薬学的に許容できる担体又は希釈剤；
（ｉｉ）場合により第４の単位投与剤型中の、ＤＦＯ又は薬学的に許容できるその誘導体、及び薬学的に許容できる担体又は希釈剤；並びに
（ｉｉｉ）場合により、錯体を生成するのに適切な条件をもたらす溶液、バッファー及び構成成分
を含むＧａ−ＤＦＯ錯体を生成するための化合物；
（ＩＩＩ）前記単位投与剤型を含有させるための容器手段
を含む、請求項３２に記載のキット。
【請求項３４】
対象が、免疫関連障害に罹患している、請求項３１に記載のキット。
【請求項３５】
治療有効量の少なくとも１つのデスフェリオキサミン金属錯体（ＤＦＯ金属錯体）を含む組成物であって、約５．０〜６．５の間のｐＨを有しており、場合により、少なくとも１つの薬学的に許容できる担体、希釈剤、賦形剤及び／又は添加剤をさらに含む上記組成物。
【請求項３６】
ＤＦＯ金属錯体が、亜鉛−デスフェリオキサミン錯体（Ｚｎ−ＤＦＯ）である、請求項３５に記載の組成物。
【請求項３７】
ＤＦＯ金属錯体が、ガリウム−デスフェリオキサミン錯体（Ｇａ−ＤＦＯ）である、請求項３５に記載の組成物。
【請求項３８】
免疫関連障害を、防止し、治療し、緩和し又は阻害するための、請求項３５に記載の医薬組成物。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、免疫関連障害を治療又は防止する方法、及び免疫関連障害の治療又は防止におけるＤＦＯ金属錯体の使用に関する。より具体的には、本発明は、慢性又は急性の炎症に関連する皮膚の病的状態、呼吸器疾患、及び糖尿病を治療するための亜鉛−デスフェリオキサミン（Ｚｎ−ＤＦＯ）錯体、ガリウム−デスフェリオキサミン（Ｇａ−ＤＦＯ）錯体、及びそれらの任意の組合せに関する。
【０００２】
本発明の背景
本明細書に引用する参考文献全てを包含する、本出願全体を通して言及する刊行物は全て、全体が参照により本明細書に組み込まれている。
【０００３】
亜鉛−デスフェリオキサミン（Ｚｎ−ＤＦＯ）及びガリウム−デスフェリオキサミン（Ｇａ−ＤＦＯ）は、金属錯体であり、本発明者らは、これらの金属錯体がフリーラジカルの生成における鉄（及び銅）の触媒作用を阻害することを以前に示した。それらの防御活性は、ヒドロキシルラジカルの産生に関与する、利用可能な且つ酸化還元活性を示す鉄を、ＤＦＯ構成成分によるキレート化を介して「引き（ｐｕｌｌ）」抜くことを通して可視化することができる。同時に、比較的不活性な亜鉛（又はガリウム）イオンが、錯体内部における鉄の交換の間に遊離し、結合部位から追加の鉄イオンを「押し（ｐｕｓｈ）」出すことによって、二次的な抗酸化剤としてさらに作用する［Ｃｈｅｖｉｏｎ，Ｍ．（１９８８）Ｆｒｅｅ  Ｒａｄｉｃ  Ｂｉｏｌ  Ｍｅｄ  ５、２７−３７；Ｃｈｅｖｉｏｎ，Ｍ．（１９９１）Ｆｒｅｅ  Ｒａｄｉｃ  Ｒｅｓ  Ｃｏｍｍｕｎ  １２−１３、６９１−６］。これらの錯体の空間的構造は、ＤＦＯ単独とは著しく異なり、細胞及び組織中への浸潤の増強を可能にする［Ｃｈｅｖｉｏｎ  ｅｔ  ａｌ．（１９９１）、前記］。高い用量のＤＦＯが、ＢＮラットにおけるＨｇＣｌ２により誘発した自己免疫において、リンパ球増殖、ＩｇＥ産生及びＩＬ−４遺伝子発現を阻害することができることが報告されている［Ｚｕ  ｅｔ  ａｌ（２００４）、Ｃｌｉｎ．Ｅｘｐ．Ｉｍｍｕｎｏｌ  １３５、１９４−１９９］。さらに、ＤＦＯが外科的急性肝不全に続く肺の軽傷を減弱させることも報告された［Ｋｏｓｔｏｐａｎａｇｉｏｔｏｕ  ｅｔ  ａｌ（２００９）Ｅｕｒ．Ｒｅｓｐｉｒ．Ｊ．３３：１４２９−１４３６］。本発明者らは、以前の研究では、Ｚｎ−ＤＦＯ及びＧａ−ＤＦＯを用いた全身的治療が、血液網膜関門を通るそれらの浸潤の増強と合致して、虚血及び再灌流に付された網膜に対する損傷を低下させたことを示している［Ｏｐｈｉｒ，Ａ．ｅｔ  ａｌ．（１９９４）Ｉｎｖｅｓｔ．Ｏｐｈｔｈａｌｍｏｌ．Ｖｉｓ．Ｓｃｉ．３５、１２１２−２２；Ｂａｎｉｎ，Ｅ．ｅｔ  ａｌ．（２０００）Ｆｒｅｅ  Ｒａｄｉｃ  Ｂｉｏｌ．Ｍｅｄ．２８、３１５−２３］。同様に、Ｚｎ−ＤＦＯの局所適用も、アルカリによる熱傷に続く角膜損傷を低下させた［Ｓｉｇａｎｏｓ，Ｃ．ｅｔ  ａｌ．（１９９８）Ｃｏｒｎｅａ  １７、１９１−５］。本発明者らの以前の刊行物ＷＯ２００４／０６０４９０は、窒素及びその他のマスタードガス、並びに異なる機構を通して傷害を与えるその他の化学兵器、例えば、サリンに対する曝露に続く眼損傷を低下させる場合に、Ｚｎ−ＤＦＯ及びＧａ−ＤＦＯの局所適用を使用することに関する。本発明においては、本発明者らは驚くべきことに、喘息、ＩＩ型及びＩ型の糖尿病並びに乾癬を包含する、異なる免疫関連障害の治療において、Ｚｎ−ＤＦＯ及びＧａ−ＤＦＯがもたらす有益な効果を実証している。
【０００４】
喘息
喘息は、気道（気管支）が可逆的に狭まる肺の慢性炎症である。喘息には、人口の７％、及び世界全体では３億人が罹患している。発作（増悪）の間には、気管支中の平滑筋細胞が収縮し、気道が炎症を起こし、腫れ、呼吸困難に至る。急性喘息発作の頻度は、喘息の重症度によって異なる。急性喘息増悪により、米国内で年間４，０００人が死亡する。発作は、誘発因子を回避すること及び薬物治療により防止することができる。薬物は、急性発作のために使用し、一般に、ベータ−２アゴニストを吸入する。より重大な場合には、薬物を、長期の防止のために使用し、副腎皮質ステロイドの吸入から出発し、次いで、必要であれば、長時間作用型のβ２−アゴニストを用いる。ロイコトリエンのアンタゴニストは、副腎皮質ステロイドよりも有効性が低いが、副作用はない。モノクローナル抗体、例として、メポリズマブ及びオマリズマブが時には有効である。
【０００５】
いくつかの報告によれば、喘息発作は、反応性酸素に由来する種（ｒｅａｃｔｉｖｅ  ｏｘｙｇｅｎ−ｄｅｒｉｖｅｄ  ｓｐｅｃｉｅｓ）（ＲＯＳ）の産生の顕著な増加、及び炎症状態の悪化と関連がある。現時点では、喘息治療は、副腎皮質ステロイド又はロイコトリエン改変物質のような医薬品による、長期の制御に基づいており、これらの医薬品はしばしば、重大な副作用を引き起こし、相当な犠牲を伴う。
【０００６】
本発明はここに至り、本発明の金属錯体及びそれらの組合せを用いた治療が、喘息に関連して炎症を起こしている組織中の、フェリチンに結合している不安定な鉄の集積、組織フェリチンの蓄積、及びフェリチン結合鉄の総量を低下させることを実証している。本発明はさらに、気管支周囲領域及び肺胞領域中の好酸球数及びリンパ球数の低下、気道上皮に対する損傷及び粘液の過剰産生の減弱、気管支肺胞液中の好中球の低下、粘液含量スコア（ｍｕｃｏｕｓ  ｃｏｎｔｅｎｔ  ｓｃｏｒｅ）の低下、気管支周囲の浸潤値の低下、上皮細胞の異形成の低下、線維状結合組織の低下、肺のフェリチン含有量（ｌｕｎｇｓ−ｆｅｒｒｉｔｉｎ  ｃｏｎｔｅｎｔ）及び鉄によるその飽和の下方制御も実証している。
【０００７】
糖尿病
糖尿病は、インスリンのフィードバック及び膵臓のランゲルハンス島のベータ細胞における分泌の不全により特徴付けられる疾患であり、全ての年齢群及び集団にわたり最も一般的な内分泌疾患のうちの１つである。糖尿病における最も明らかな代謝作用は、血中グルコースレベルの慢性の一定しない上昇であり、これは、血管に対する進行性の損傷と関連がある。糖尿病は、心臓発作、脳卒中、失明、抹消神経の機能障害及び腎臓不全に至る恐れがある。
【０００８】
現在、糖尿病患者は、米国単独でも１８２０万人、世界全体では１億７１００万人にのぼる。臨床における罹患率及び死亡率に加えて、糖尿病の経済的な費用は莫大であり、米国単独でも１年当たり９００億米ドルを上回り、糖尿病の有病率は、２０３０年までに２倍超に増加することが予想されている。
【０００９】
２つの主要な形態の糖尿病、すなわち、全症例の５〜１０％を占めるインスリン依存性（Ｉ型）糖尿病、及び症例のおよそ９０〜９５％を含むインスリン非依存性（ＩＩ型）糖尿病がある。Ｉ型糖尿病は、膵臓のベータ細胞の進行性の破壊により特徴付けられる自己免疫疾患であり、小児及び若年成人において発症することが最も多い。この疾患は、高い率の重度の不可逆的な合併症と関連があり、これらの合併症は、インスリンの補充が通常１日１〜４回投与する注射剤を通して利用できるにもかかわらず発症する。
【００１０】
Ｉ型糖尿病を治療又は防止するためのほとんどの治療戦略は、ベータ細胞の破壊を防止するために、自己免疫応答の抑制を対象とする。したがって、種々の免疫抑制剤が、膵臓のベータ細胞の破壊を防止するために検討され、糖質コルチコイド、シクロホスファミド、シクロスポリンＡ、ラパマイシン、ＦＫＳ０６及びプロジギオシン等が試みられている。しかし、そのような免疫抑制剤の使用は、重度の副作用、例として、肝臓又は腎臓に対する薬物関連毒性を引き起こし、感染性合併症の発生率を、特に、糖尿病の一環としてすでに感染しやすい状態にある糖尿病患者において増加させる恐れがある。
【００１１】
ＩＩ型糖尿病は、インスリン産生の障害とインスリン抵抗性とが組み合わさった結果生じ、インスリン抵抗性は、インスリンを適切に使用することができないことを示す。ＩＩ型はしばしば加齢と関連がある。これらの糖尿病患者は典型的には、食餌を最適化し、体重を低下させ、運動するレジメンに従うことによる療法から始める。薬物療法を、これらの方策が、最早代謝を適切に制御しない場合に開始する。最初の薬物療法は、スルホニル尿素（例えば、トルブタミド、クロロプロパミド及びグリベンクラミド）、ビグアナイド（例えば、メトホルミン及びブホルミン）、ペルオキシソーム増殖因子活性化受容体（ＰＰＡＲ）活性化薬（例えば、ピオグリタゾン及びロシグリタゾン）、並びにアルファ−グルコシダーゼ阻害剤（例えば、アカルボース及びボグリボース）を包含する。しかし、現在利用可能な薬物による治療を受けている全糖尿病患者の５０％超が芳しくない血糖の制御を示し、６年以内に最後の手段としてインスリン補充療法が必要となる。
【００１２】
糖尿病の症状うちの多くは、インスリン療法により制御することができるが、Ｉ型糖尿病及びＩＩ型糖尿病の両方の長期の合併症は重度であり、平均余命が３分の１も低下する恐れがある。長い期間をかけて、血中グルコースレベルの上昇により、血管、心臓、眼、腎臓、神経系、皮膚、結合組織及び白血球機能が損傷を受ける。
【００１３】
さらに、インスリン療法により、インスリンアレルギー、インスリン抵抗性、インスリン注射部位における皮下脂肪の萎縮（すなわち、脂肪萎縮）、インスリンの高い局所濃度による脂質生成作用に起因する皮下脂肪沈着物の拡大（すなわち、脂肪肥大）、及びインスリン浮腫が生じる恐れもある。
【００１４】
本発明は、驚くべきことに、本発明の金属錯体を用いる治療が、高血糖、タンパク質の酸化及び分解の増加、タンパク質の活性の減少、並びに白内障生成を包含する、主要なＩＩ型糖尿病の病態の発生を防止することを示している。さらに、本発明の金属錯体は、Ｉ型糖尿病に起因して破壊され、失われた膵臓のベータ細胞を修復することはできないが、これらの錯体は、疾患の生理学的所見を緩和するようにも見える。
【００１５】
乾癬
ＵＳ  Ｎａｔｉｏｎａｌ  Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅｓ  ｏｆ  Ｈｅａｌｔｈ  Ｍｅｄｉｃａｌ  Ｅｎｃｙｃｌｏｐｅｄｉａのウェブサイト、ｈｔｔｐ：／／ｗｗｗ．ｎｌｍ．ｎｉｈ．ｇｏｖ／ｍｅｄｌｉｎｅｐｌｕｓ／ｅｎｃｙ／ａｒｔｉｃｌｅ／０００４３４．ｈｔｍによれば、世界全体で人口の約２．７％が乾癬に罹患している。米国内では、常に、約３００万人が乾癬の症状を示す。乾癬は、皮膚のいずれか若しくは全ての部分を冒す恐れがあるが、より一般に、体幹、肘、膝の皮膚及び／若しくは頭皮に、皮膚のひだに、又は手指の爪及び／若しくは足指の爪の中に見られる。乾癬は、傷害又は過敏、例として、切り傷、熱傷、発疹又は昆虫の咬傷により悪化する場合がある。乾癬は、ＡＩＤＳを有する又はがんのための化学療法を受けている人々のような免疫が抑制されている人々、及びその他の自己免疫障害、例として、関節リウマチを有する人々において特に重度である。乾癬性関節炎においては、関節及び皮膚の両方が冒される。
【００１６】
皮膚が健常である場合、新しい皮膚細胞がより低い層から上方へ移動して皮膚表面に達するのに約１ヵ月を要する。乾癬においては、このプロセスにはわずか数日を要するに過ぎず、その結果、死んだ皮膚細胞が集積し、厚い鱗屑が生成される。
【００１７】
角化細胞の増殖が、乾癬の特徴である。乾癬の症状は、（ａ）乾燥しており且つ／若しくは赤色であることがある皮膚の斑点；並びに／又は（ｂ）銀色の鱗屑で覆われていることがある皮膚の斑点；並びに／又は（ｃ）盛り上がっていることがある皮膚の斑点；並びに／又は（ｄ）赤色の境界を有することがある皮膚の斑点；並びに／又は（ｅ）ひび割れており且つ／若しくは痛みを伴うようになることがある皮膚の斑点；並びに／又は（ｆ）個別であり且つ／若しくは境界を有することがある皮膚の斑点を包含する。追加の症状は、例えば、（ａ）皮膚の病変、例として、膿疱；並びに／又は（ｂ）皮膚の亀裂；並びに／又は（ｃ）皮膚の発赤及び／若しくは炎症；並びに／又は（ｄ）痒み；並びに／又は（ｅ）とりわけ、小児における皮膚上の小さな鱗屑のドット；並びに／又は（ｆ）乾癬性関節炎に伴う場合がある関節の疼痛若しくは痛みを包含し得る。さらに、乾癬における異常は、例えば、爪の異常；男性の生殖器の病変；及び眼の灼熱感、痒み、排泄物又は流涙の増加も包含し得る。
【００１８】
乾癬は、免疫疾患であるとみなされている。乾癬は、多くの最近の刊行物では、自己免疫疾患、すなわち、免疫系が身体自体の細胞を標的にする疾患のクラスとして分類されている。刊行物は、乾癬が、例えば、インターフェロン（ＩＦＮ）ガンマ及び／若しくはその他の炎症性サイトカイン並びに／又はＴリンパ球により媒介されるＩ型自己免疫疾患であることを示唆している。例えば、ＩＦＮ−ガンマ産生型ＣＤ４＋Ｔｈ１リンパ球は、抗原提示細胞、肥満細胞、好中球及び内皮細胞の分化及び機能に影響することから、乾癬の病変形成において重要であるとみなされている。炎症カスケードが、真皮における血管新生及び角化細胞の増殖を引き起こす。Ｌｏｗｅｓらは最近になって、樹状細胞のマーカーを有するＣＤ１１ｃ＋細胞が、乾癬の皮膚病変における主要な細胞型であることを報告した。これらのＣＤ１１ｃ＋細胞は、表皮及び真皮の両方において明らかであり、病的な皮膚における、２つの炎症メディエーター、すなわち、誘導性一酸化窒素シンターゼ（ｉＮＯＳ）及びＴＮＦ−アルファが発現する部位である。また、これらの細胞は、ＨＬＡ−ＤＲ、ＣＤ４０及びＣＤ８６、並びに樹状細胞の成熟マーカーであるＤＣＬＡＭＰ及びＣＤ８３も発現する。
【００１９】
軽度の乾癬は現時点では、非ステロイド性抗炎症性薬（ＮＳＡＩＤ）、例えば、局所適用サリチル酸及びその経口服用誘導体、アスピリン（ＮＦ−κＢを阻害することが公知である）；局所適用コールタール；カルシポトリオールのような経口服用ビタミンＤ誘導体；ＵＶ−Ｂ光線療法；並びにＣＣＬ２７を下方制御することが公知であるベタメタゾンのような局所適用糖質コルチコステロイドを用いて治療する。これらの組合せをしばしば使用する。重度の乾癬の伝統的な治療は、メトトレキサート、シクロスポリン、ソラレンとＵＶＡ（ＰＵＶＡ）、経口レチノイド、及びフマル酸のエステル、金塩、及びレフルノミドのような、全身性、経口服用の疾患修飾性抗リウマチ免疫抑制薬（ＤＭＡＲＤ）を包含する。より最近になって、生物学的薬物が、重度の乾癬を治療するために導入された。これらは、（ａ）Ｔ細胞数を低下させるＡＭＥＭＩＶＥ（登録商標）（アレファセプト）を包含し、この薬物は、記憶−エフェクターＴリンパ球上のＣＤ２に結合する組換えタンパク質であり、そうしたＴリンパ球の活性化を阻害し、これらの細胞数を低下させる。この薬物は、白血球機能関連抗原３型（ＬＦＡ−３）タンパク質及びヒトＩｇＧ１のＦｃドメインから構成される融合タンパク質であり、筋肉内注射により全身投与する。（ｂ）白血球機能関連抗原−１（ＬＦＡ−１）のＣＤ１１ａサブユニットに対するヒト化モノクローナル抗体であるＲＡＰＴＩＶＡ（登録商標）（エファリズマブ）。ＣＤ１１ａは、Ｔ細胞の表面分子であり、Ｔ細胞の活性化、Ｔ細胞の皮膚中への遊走、及び細胞傷害性Ｔ細胞の機能において重要である。ＲＡＰＴＩＶＡ（登録商標）（エファリズマブ）は、Ｔ細胞上のＣＤ１１ａに結合し、ＬＦＡ−１とその接着パートナー分子ＩＣＡＭ−１との間の相互作用を可逆的に遮断する。ＲＡＰＴＩＶＡ（登録商標）（エファリズマブ）の週１回の全身注射を、改善を維持するためには無期限に継続しなければならない。（ｃ）ヒトＴＮＦ−アルファ受容体であり、２つの天然のＴＮＦ受容体を融合させることによって作製したＥＮＢＲＥＬ（登録商標）（エタネルセプト）。ＴＮＦ−アルファに対するその親和性は、免疫系の天然の単量体ＴＮＦ−アルファ受容体の親和性よりも高い。ＥＮＢＲＥＬ（登録商標）（エタネルセプト）を全身投与し、ＴＮＦ−アルファに結合させてそれを非活性化させる。（ｄ）ＨＵＭＩＲＡ（登録商標）（アダリムマブ）は、ＴＮＦ−アルファに結合しそれを不活性化するヒトＩｇＧ１モノクローナル抗体であり、乾癬性関節炎を治療するために使用する。この薬物は、その他のＴＮＦ−アルファ阻害剤とは異なり、局所注射する。（ｅ）ＲＥＭＩＣＡＤＥ（登録商標）（インフリキシマブ）は、キメラ（マウス−ヒト）のＩｇＧ１モノクローナル抗体であり、ＴＮＦ−αに結合し、それを不活性化する。この薬物は、全身注射により投与する。
【００２０】
乾癬を管理するための安全で、より安価な局所適用薬が求められている。生物学的薬物は、乾癬の症状を緩和するが、乾癬を治癒しない。上記に列挙した５つの生物学的薬物は全て注射され、注射は無期限に継続しなければならない。局所適用組成物が求められている。これは、これらが、注射により、又は別の方法、例えば、経口により全身に投与する薬物よりも安全であり得るであろうからである。注射により及び別の方法により全身投与する薬物は、標的とされる乾癬性の皮膚以外の臓器に影響を及ぼす可能性もまた高い。また、乾癬の治療に伴う重い経済的負担を低下させる必要性もある。米国では、５つの生物学的薬物のうちのいずれかを用いる乾癬の治療の年間費用は、約＄１５，０００と約＄２０，０００〜＄３０，０００との間であり、多くの米国賃金労働者の年間所得の約半分の金額に相当する。また、シクロスポリンの価格も高く、薬物費用は年間約＄１０，０００である。
【００２１】
非生物学的薬物であるシクロスポリン、及び生物学的薬物は一般に、それらの皮膚科学的投与量においては安全であるが、副作用が報告されている。シクロスポリンは、皮膚の扁平上皮癌のリスクを増加させる。アダリムマブは、重大な感染の発生率を２倍に増加させ、その最も注目に値する合併症には、結核の再活性化があり、また、うつ病症候群もある。インフリキシマブ治療患者のうち、低いパーセントが、肺炎、結核、リンパ腫、薬物誘発性ループス及び肝毒性を報告した。エファリズマブを用いて治療した対象のおよそ５％において、抗エファリズマブ抗体が生じた。免疫媒介型血小板減少による、５２，０００細胞／マイクロリットル以下の血小板数が、エファリズマブ治療患者の０．３％において観察されており、４人の患者が溶血性貧血を発症した。感染のための入院の全体的な発生率は、プラセボ治療患者についての患者１００人当たり１．２人／年と比較して、エファリズマブ治療患者についての患者１００人当たり１．６人／年であった。
【００２２】
本発明は、本発明の金属錯体を用いる治療が、皮膚毒性（ｄｅｒｍａｔｏｘｉｃ）を示さず、乾癬の症状及びその他の皮膚炎症障害を顕著に低下させることを実証している。
【００２３】
したがって、本発明の１つの目的は、免疫関連障害、例えば、慢性又は急性の炎症に関連する皮膚の病的状態、呼吸器疾患、及び糖尿病を防止及び治療するための、異なるデスフェリオキサミン金属錯体、具体的には、Ｚｎ−ＤＦＯ及びＧａ−ＤＦＯのうちの少なくとも１つを使用する方法を提供することである。
【００２４】
本発明の別の目的は、免疫関連障害を治療するための、Ｚｎ−ＤＦＯ錯体及びＧａ−ＤＦＯ錯体を含む組合せ組成物に関する。
【００２５】
別の目的では、本発明は、慢性又は急性の炎症に関連する皮膚の病的状態、呼吸器疾患、及び糖尿病を治療するための、ＤＦＯと、金属、具体的には、Ｚｎ及びＧａのうちの少なくとも１つとを組み合わせるキットを提供する。
【００２６】
本発明のこれら及びその他の目的は、記載が進むにつれ、明らかになるであろう。
【００２７】
発明の概要
第１の側面では、本発明は、免疫関連障害、具体的には、炎症性障害、特に、乾癬、喘息、糖尿病、及び任意の免疫関連障害を、防止し、治療し、緩和し又は阻害する方法に関する。本発明の方法は、治療有効量の少なくとも１つのデスフェリオキサミン金属錯体（ＤＦＯ金属錯体）若しくはそれらの任意の組合せ、又は前記を含む任意の医薬組成物を、それを必要とする対象に投与するステップを含む。
【００２８】
第２の側面では、本発明は、免疫関連障害、具体的には、乾癬、喘息、糖尿病、及び任意の免疫関連障害を、予防し、治療し、緩和し又は阻害するための組成物の調製における、治療有効量の少なくとも１つのデスフェリオキサミン金属錯体（ＤＦＯ金属錯体）又はそれらの任意の組合せの使用を企図する。
【００２９】
第３の側面では、本発明は、治療有効量の少なくとも２つのデスフェリオキサミン金属錯体（ＤＦＯ金属錯体）の組合せを含む組成物を対象とし、この組成物は場合により、少なくとも１つの薬学的に許容できる担体、希釈剤、賦形剤及び／又は添加剤をさらに含む。本発明の特定の態様は、Ｚｎ−ＤＦＯ錯体とＧａ−ＤＦＯ錯体との組合せを含む組合せ組成物に関する。
【００３０】
別の側面では、本発明は、治療効果を、それを必要とする対象、具体的には、免疫関連障害、例えば、乾癬、喘息、糖尿病、及び任意の免疫関連障害に罹患している対象において達成するためのキットを提供する。本発明のキットは、
（Ｉ）
（ｉ）場合により第１の単位投与剤型中の、亜鉛イオン（Ｚｎ（ＩＩ））であって、それらの塩、アミド若しくはエステルのうちの任意の形態をとる上記亜鉛イオン（Ｚｎ（ＩＩ））、又は薬学的に許容できるそれらの誘導体、及び薬学的に許容できる担体又は希釈剤；
（ｉｉ）場合により第２の単位投与剤型中の、ＤＦＯ又は薬学的に許容できるその誘導体、及び薬学的に許容できる担体又は希釈剤；並びに、
（ｉｉｉ）場合により、錯体を生成するのに適切な条件をもたらす溶液、バッファー及び構成成分、並びに／又は調製物の有効期間を延長させるのに必要な化合物
を含むＺｎ−ＤＦＯ錯体を生成するための化合物；
（ＩＩ）
（ｉ）場合により第３の単位投与剤型中の、ガリウムイオン（Ｇａ（ＩＩＩ））であって、それらの塩、アミド若しくはエステルのうちの任意の形態をとる上記ガリウムイオン（Ｇａ（ＩＩＩ））、又は薬学的に許容できるそれらの誘導体、及び薬学的に許容できる担体又は希釈剤；
（ｉｉ）場合により第４の単位投与剤型中の、ＤＦＯ又は薬学的に許容できるその誘導体、及び薬学的に許容できる担体又は希釈剤；並びに
（ｉｉｉ）場合により、錯体を生成し、且つ／又は調製物の有効期間を延長させるのに適切な条件をもたらす溶液、バッファー及び構成成分
を含むＧａ−ＤＦＯ錯体を生成するための化合物；
（ＩＩＩ）
（ｉ）場合により第５の単位投与剤型中の、これらに限定されないが、Ｍｎ（ＩＩ）、Ｍｎ（ＩＩＩ）及びＭｎ（ＩＶ）を包含する、任意のイオン価状態をとるマンガンイオンであって、それらの塩、アミド若しくはエステルのうちの任意の形態をとる上記マンガンイオン、又は薬学的に許容できるそれらの誘導体、及び薬学的に許容できる担体又は希釈剤；
（ｉｉ）場合により第６の単位投与剤型中の、ＤＦＯ又は薬学的に許容できるその誘導体、及び薬学的に許容できる担体又は希釈剤；並びに
（ｉｉｉ）場合により、錯体を生成し、且つ／又は調製物の有効期間を延長させるのに適切な条件をもたらす溶液、バッファー及び構成成分
を含むＭｎ−ＤＦＯ錯体を生成するための化合物；
（ＩＶ）単位投与剤型を含有させるための容器手段
のうちの少なくとも１つを含む。
【００３１】
本発明のこれら及びその他の側面は、以下の図を頼りにすれば明らかになるであろう。
【図面の簡単な説明】
【００３２】
【図１Ａ】ヒト対象から得られた鼻のポリープ及び鼻甲介中のフェリチン濃度及び総フェリチン結合鉄を示すグラフである。対照群患者（ｎ＝１１）から得られた下鼻甲介及び非喘息患者（ｎ＝１５）又は喘息患者（ｎ＝１０）から得られた鼻のポリープの組織試料を収集し、フェリチン濃度をＥＬＩＳＡにより定量化した。平均±Ｓ．Ｅ．Ｍ値を示す；＊−対照と比べて、ｐ≦０．０５を意味する；＃−ポリープ亜群間で、ｐ≦０．０５を意味する。略語：Ａｓｔｈ．ＮＰ．（鼻のポリープを伴う喘息）；ＮＰ（鼻のポリープ）；ｐｒｏｔ．（タンパク質）；Ｃｏｎｔ．（対照）。
【図１Ｂ】ヒト対象から得られた鼻のポリープ及び鼻甲介中のフェリチン濃度及び総フェリチン結合鉄を示すグラフである。フェリチンの鉄による飽和を、溶解している免疫沈降フェリチンの分光光度法による分析により測定した。平均±Ｓ．Ｅ．Ｍ値を示す；＊−対照と比べて、ｐ≦０．０５を意味する；＃−ポリープ亜群間で、ｐ≦０．０５を意味する。略語：Ａｓｔｈ．ＮＰ．（鼻のポリープを伴う喘息）；ＮＰ（鼻のポリープ）；Ｃｏｎｔ．（対照）。
【図２】Ｚｎ−ＤＦＯ／Ｇａ−ＤＦＯの混合物（３：１）を用いた喘息性マウスの治療は、ＢＡＬの好中球の浸潤を低下させることを示すグラフである。気管支肺胞の洗浄液（ＢＡＬ）の好中球の密度を計算した。平均±Ｓ．Ｅ．Ｍ値を示す。＊は、対照と比べて、ｐ＜０．０５を意味する；＃は、喘息性の未治療群と比べて、ｐ＜０．０５を意味する。略語：Ａｓｔｈ．（喘息）；Ｃｏｎｔ．（対照）；ｎｅｕｔ．（好中球）。
【図３Ａ】Ｚｎ−ＤＦＯ／Ｇａ−ＤＦＯの混合物（３：１）を用いた喘息性マウスの治療は、組織炎症のスコアを向上させることを示すグラフである。ヘマトキシリン−エオシン染色組織切片により評価した、気管支周囲の浸潤物の平均スコアを示す。平均±Ｓ．Ｅ．Ｍ値を示す。＊は、対照と比べて、ｐ＜０．０５を意味する；＃は、喘息性の未治療群と比べて、ｐ＜０．０５を意味する。略語：Ａｓｔｈ．（喘息）；Ｃｏｎｔ．（対照）；ＰＩ．Ｉｎｄ．（気管支周囲の浸潤物指数）。
【図３Ｂ】Ｚｎ−ＤＦＯ／Ｇａ−ＤＦＯの混合物（３：１）を用いた喘息性マウスの治療は、組織炎症のスコアを向上させることを示すグラフである。気管支上皮細胞の異形成についてのＰＡＳ染色の平均スコアを示す。平均±Ｓ．Ｅ．Ｍ値を示す。＊は、対照と比べて、ｐ＜０．０５を意味する；＃は、喘息性の未治療群と比べて、ｐ＜０．０５を意味する。略語：Ａｓｔｈ．（喘息）；Ｃｏｎｔ．（対照）；ＰＡＳ  Ｓｃ．（過ヨウ素酸−シッフスコア）。
【図３Ｃ】Ｚｎ−ＤＦＯ／Ｇａ−ＤＦＯの混合物（３：１）を用いた喘息性マウスの治療は、組織炎症のスコアを向上させることを示すグラフである。線維状結合組織についてのマッソントリクローム染色スコアを示す。平均±Ｓ．Ｅ．Ｍ値を示す。＊は、対照と比べて、ｐ＜０．０５を意味する；＃は、喘息性の未治療群と比べて、ｐ＜０．０５を意味する。略語：Ａｓｔｈ．（喘息）；Ｃｏｎｔ．（対照）；Ｍａ．Ｔｒ．Ｓｃ．（マッソントリクローム染色スコア）。
【図４Ａ】Ｚｎ−ＤＦＯ／Ｇａ−ＤＦＯの混合物（３：１）を用いた喘息性マウスの治療は、肺におけるフェリチンの蓄積及び鉄の蓄積を阻害することを示すグラフである。組織フェリチン濃度を示す。平均±Ｓ．Ｅ．Ｍ値を示す。＃は、喘息性の未治療群と比べて、ｐ＜０．０５を意味する。略語：Ａｓｔｈ．（喘息）；Ｃｏｎｔ．（対照）；ｐｒｏｔ．（タンパク質）。
【図４Ｂ】Ｚｎ−ＤＦＯ／Ｇａ−ＤＦＯの混合物（３：１）を用いた喘息性マウスの治療は、肺におけるフェリチンの蓄積及び鉄の蓄積を阻害することを示すグラフである。フェリチン結合鉄を示す。平均±Ｓ．Ｅ．Ｍ値を示す。略語：Ａｓｔｈ．（喘息）；Ｃｏｎｔ．（対照）。
【図５Ａ】Ｚｎ−ＤＦＯ／Ｇａ−ＤＦＯの混合物（３：１）を用いた喘息性マウスの、鼻腔内投与による治療は、肺におけるＢＡＬの好中球及び好酸球の浸潤を低下させることを示すグラフである。ＢＡＬの好酸球の密度を計算した。平均±ＳＥの値を示す。＊は、対照と比べて、ｐ＜０．０５を意味する；＃は、喘息性の未治療群と比べて、ｐ＜０．０５を意味する。略語：Ａｓｔｈ．（喘息）；Ｃｏｎｔ．（対照）；Ｅｏｓｉｎ．（好酸球）。
【図５Ｂ】Ｚｎ−ＤＦＯ／Ｇａ−ＤＦＯの混合物（３：１）を用いた喘息性マウスの、鼻腔内投与による治療は、肺におけるＢＡＬの好中球及び好酸球の浸潤を低下させることを示すグラフである。ＢＡＬの好中球の密度を計算した。平均±ＳＥの値を示す。＊は、対照と比べて、ｐ＜０．０５を意味する；＃は、喘息性の未治療群と比べて、ｐ＜０．０５を意味する。略語：Ａｓｔｈ．（喘息）；Ｃｏｎｔ．（対照）；Ｎｅｕｔ．（好中球）。
【図６Ａ】Ｚｎ−ＤＦＯ／Ｇａ−ＤＦＯの混合物（３：１）を用いた喘息性マウスの、鼻腔内投与による治療は、肺の炎症スコアを向上させることを示すグラフである。気管支周囲の浸潤物の平均スコアを示す。平均±ＳＥを示す。＊は、対照と比べて、ｐ＜０．０５を意味する；＃は、喘息性の未治療群と比べて、ｐ＜０．０５を意味する。略語：Ａｓｔｈ．（喘息）；Ｃｏｎｔ．（対照）；ＰＩ  Ｉｎｄ．（気管支周囲の浸潤物の指数）；。
【図６Ｂ】Ｚｎ−ＤＦＯ／Ｇａ−ＤＦＯの混合物（３：１）を用いた喘息性マウスの、鼻腔内投与による治療は、肺の炎症スコアを向上させることを示すグラフである。上皮細胞の異形成についてのＰＡＳ染色の平均スコアを示す。平均±ＳＥを示す。＊は、対照と比べて、ｐ＜０．０５を意味する；＃は、喘息性の未治療群と比べて、ｐ＜０．０５を意味する。略語：Ａｓｔｈ．（喘息）；Ｃｏｎｔ．（対照）；ＰＡＳ  Ｓｃ．（過ヨウ素酸−シッフのスコア）。
【図６Ｃ】Ｚｎ−ＤＦＯ／Ｇａ−ＤＦＯの混合物（３：１）を用いた喘息性マウスの、鼻腔内投与による治療は、肺の炎症スコアを向上させることを示すグラフである。線維状結合組織についてのマッソントリクローム染色の平均スコアを示す。平均±ＳＥを示す。＊は、対照と比べて、ｐ＜０．０５を意味する；＃は、喘息性の未治療群と比べて、ｐ＜０．０５を意味する。略語：Ａｓｔｈ．（喘息）；Ｃｏｎｔ．（対照）；Ｍａ．Ｔｒ．Ｓｃ．（マッソントリクローム染色スコア）。
【図７Ａ】Ｚｎ−ＤＦＯ／Ｇａ−ＤＦＯの混合物（３：１）を用いた喘息性マウスの、鼻腔内投与による治療は、肺におけるフェリチンの蓄積及び鉄の蓄積を阻害することを示すグラフである。組織フェリチン濃度を示す。平均±ＳＥの値を示す。＊は、対照と比べて、ｐ＜０．０５を意味する；＃は、喘息性の未治療群と比べて、ｐ＜０．０５を意味する。略語：Ａｓｔｈ．（喘息）；Ｃｏｎｔ．（対照）；ｐｒｏｔ．（タンパク質）。
【図７Ｂ】Ｚｎ−ＤＦＯ／Ｇａ−ＤＦＯの混合物（３：１）を用いた喘息性マウスの、鼻腔内投与による治療は、肺におけるフェリチンの蓄積及び鉄の蓄積を阻害することを示すグラフである。フェリチン結合鉄の濃度を示す。略語：Ａｓｔｈ．（喘息）；Ｃｏｎｔ．（対照）；Ａｔｏ．（原子）；ｍｏｌｅｃ．（分子）。
【図８】糖尿病性のスナネズミの、Ｚｎ２＋、Ｇａ３＋又はそれらのそれぞれのＤＦＯ錯体のいずれかを用いた治療は、それらの血中グルコースレベルの増加を防止することを示すグラフである。経口投与した２００ｍｇグルコース／１００ｇ体重の用量に対する３時間の、累積（積分した）応答を示す。標準食群Ｉ（対照；非糖尿病性）の結果を、ベースライン（ゼロ）値とみなす。略語：Ｄｉａｂ．（糖尿病）；ＧＴＴ（耐糖能試験）。
【図９】Ｚｎ−ＤＦＯ／Ｇａ−ＤＦＯの混合物（３：１）を用いた治療は、高エネルギー食を与えたスナネズミにおいて、体重増加を減弱させることを示すグラフである。Ｚｎ−ＤＦＯ／Ｇａ−ＤＦＯにより治療した及び未治療の、高エネルギー食を与えたスナネズミの体重を示す。平均±Ｓ．Ｅ．Ｍ値を示す。略語：Ｂｏｄ．Ｗｅｉ．（体重）；Ｄ．Ｅｘｐ．（実験日）；Ｄｉａｂ．（糖尿病）；Ｃｏｎｔ．（対照）；ｇ（グラム）。
【図１０Ａ】Ｚｎ−ＤＦＯ／Ｇａ−ＤＦＯの混合物（３：１の比）を用いた、高エネルギー食を与えたスナネズミの治療は、血中グルコースレベルの上昇を減弱させ、それらの耐糖能を改善することを示すグラフである。Ｚｎ−ＤＦＯ／Ｇａ−ＤＦＯにより治療した及び未治療の、高エネルギー食を与えたスナネズミの血中グルコースレベルを示す。平均値を示す。略語：Ｄ．Ｅｘｐ．（実験日）；Ｄｉａｂ．（糖尿病）；Ｃｏｎｔ．（対照）；Ｂｌ．Ｇｌ．Ｌｅｖ．（血中グルコースレベル）。
【図１０Ｂ】Ｚｎ−ＤＦＯ／Ｇａ−ＤＦＯの混合物（３：１の比）を用いた、高エネルギー食を与えたスナネズミの治療は、血中グルコースレベルの上昇を減弱させ、それらの耐糖能を改善することを示すグラフである。３時間の耐糖能試験の間の、積分した（累積）総血中グルコースレベルを示す。平均±Ｓ．Ｅ．Ｍ値を示す。＊−差が、対照（正常な食餌；非糖尿病性）と比較して有意である；†−差が、糖尿病（高エネルギー食；錯体を用いずに、ビヒクルを用いて治療した）と比較して有意である。略語：Ｄｉａｂ．（糖尿病）；Ｃｏｎｔ．（対照）；Ｉｎｔ．Ｔｏｔ．Ｇｌ．（積分した総グルコース）。
【図１１】Ｚｎ−ＤＦＯは、高エネルギー食を与えたスナネズミにおいて、２，３−ＤＨＢＡの蓄積を阻害することを示すグラフである。Ｚｎ−ＤＦＯにより治療した又は未治療の、高エネルギー食を与えたスナネズミから得られた血中２，３−ＤＨＢＡレベルを示す。平均±Ｓ．Ｅ．Ｍ値を示す。＊−差が、対照（正常な食餌；非糖尿病性）と比較して有意である；†−差が、糖尿病（高脂肪の食餌；ビヒクルを用いて治療）と比較して有意である。略語：Ｄｉａｂ．（糖尿病）；Ｃｏｎｔ．（対照）。
【図１２】Ｚｎ−ＤＦＯは、高エネルギー食を与えたスナネズミにおいて、白内障の生成を阻害することを示すグラフである。治療した又は未治療の、高エネルギー食を与えたスナネズミについての平均白内障スコアを示す。平均±Ｓ．Ｅ．Ｍ値を示す。＊−差が、対照（正常な食餌；非糖尿病性）と比較して有意である；†−差が、糖尿病（高エネルギー食；錯体を用いずに、ビヒクルを用いて治療した）と比較して有意である。略語：Ｄｉａｂ．（糖尿病）；Ｃｏｎｔ．（対照）；Ｃａｔ．Ｓｃ．（白内障スコア）；Ｓｃ．（スコア）。
【図１３】Ｚｎ−ＤＦＯは、高エネルギー食を与えたスナネズミにおいて、水晶体タンパク質の分解を抑えることを示すグラフである。治療した及び未治療の、高エネルギー食を与えたスナネズミにおける、平均水晶体総タンパク質レベルを示す。平均±Ｓ．Ｅ．Ｍ値を示す。＊−差が、対照（正常な食餌；非糖尿病性）と比較して有意である；†−差が、糖尿病（高エネルギー食；ビヒクルを用いて治療した）と比較して有意である。略語：Ｄｉａｂ．（糖尿病）；Ｃｏｎｔ．（対照）；Ｔｏｔ．Ｌｅｎ．ｐｒｏｔ．（総水晶体タンパク質）。
【図１４Ａ】Ｚｎ−ＤＦＯは、高エネルギー食を与えたスナネズミにおいて、チオレドキシンレダクターゼに関する減少を防止することを示すグラフである。治療した及び未治療の、高エネルギー食を与えたスナネズミにおける、平均水晶体チオレドキシンレダクターゼレベルを示す。平均±Ｓ．Ｅ．Ｍ値を示す。＊−差が、対照（正常な食餌；非糖尿病性）と比較して有意である；†−差が、糖尿病（高エネルギー食；ビヒクルを用いて治療した）と比較して有意である。略語：Ｄｉａｂ．（糖尿病）；Ｃｏｎｔ．（対照）；Ｌｅｎ．Ｔｈｉｏ．Ｒｅｄ．Ｃｏｎｔ．（水晶体チオレドキシンレダクターゼ含有量）；ＯＤ（光学密度）。
【図１４Ｂ】Ｚｎ−ＤＦＯは、高エネルギー食を与えたスナネズミにおいて、チオレドキシンレダクターゼに関する減少を防止することを示すグラフである。治療した及び未治療の、高エネルギー食を与えたスナネズミにおける、平均水晶体チオレドキシン濃度を示す。平均±Ｓ．Ｅ．Ｍ値を示す。＊−差が、対照（正常な食餌；非糖尿病性）と比較して有意である；†−差が、糖尿病（高エネルギー食；ビヒクルを用いて治療した）と比較して有意である。略語：Ｄｉａｂ．（糖尿病）；Ｃｏｎｔ．（対照）；Ｌｅｎ．Ｔｈｉｏ．Ｃｏｎｔ．（水晶体チオレドキシン含有量）；ＯＤ（光学密度）。
【図１５Ａ】Ｚｎ−ＤＦＯは、高エネルギー食を与えたラットにおいて、アクチンの分解を防止し、Ｍｓｒ活性を維持することを示すグラフである。治療した及び未治療の、高エネルギー食を与えたスナネズミにおける、平均水晶体アクチン濃度を示す。平均±Ｓ．Ｅ．Ｍ値を示す。＊−差が、対照（正常な食餌；非糖尿病性）と比較して有意である；†−差が、糖尿病（高エネルギー食；ビヒクルを用いて治療した）と比較して有意である。略語：Ｄｉａｂ．（糖尿病）；Ｃｏｎｔ．（対照）；Ｌｅｎ．Ａｃｔ．Ｃｏｎｔ．（水晶体のアクチン含有量）。
【図１５Ｂ】Ｚｎ−ＤＦＯは、高エネルギー食を与えたラットにおいて、アクチンの分解を防止し、Ｍｓｒ活性を維持することを示すグラフである。治療した及び未治療の、高エネルギー食を与えたスナネズミにおける、平均水晶体メチオニンスルホキシドレダクターゼＡ（Ｍｓｒ）活性を示す。平均±Ｓ．Ｅ．Ｍ値を示す。＊−差が、対照（正常な食餌；非糖尿病性）と比較して有意である；†−差が、糖尿病（高エネルギー食；ビヒクルを用いて治療した）と比較して有意である。略語：Ｄｉａｂ．（糖尿病）；Ｃｏｎｔ．（対照）；ｐｒｏｔ．（タンパク質）。
【図１６】Ｚｎ−ＤＦＯは、高エネルギー食を与えたスナネズミにおいて、フェリチンの蓄積を阻害することを示すグラフである。治療した及び未治療の、高エネルギー食を与えたスナネズミにおける、平均水晶体フェリチン濃度を示す。平均±Ｓ．Ｅ．Ｍ値を示す。＊−差が、対照（正常な食餌；非糖尿病性）と比較して有意である；†−差が、糖尿病（高エネルギー食；ビヒクルを用いて治療した）と比較して有意である。略語：Ｄｉａｂ．（糖尿病）；Ｃｏｎｔ．（対照）；Ｌｅｎ．Ｆｅｒ．Ｃｏｎｃ．（水晶体フェリチン濃度）；ｔｏｔ．ｐｒｏｔ．（総タンパク質）。
【００３３】
発明の詳細な説明
本発明者らは以前に、腐食熱傷により引き起こされた損傷、及びＺｎ／ＤＦＯを角膜に局所適用することによってもらされる防御について研究したことがある［Ｓｉｇａｎｏｓ，Ｃ．  ｅｔ  ａｌ．（１９９８）Ｃｏｒｎｅａ  １７、１９１−５］。さらに、本発明者らは以前に、そのようなＤＦＯ金属錯体を、マスタード及びその他の化学兵器、例として、塩素、ホスゲン、オキシミン（ｏｘｉｍｉｎｅ）、ルイサイト、タブン、サリン又はソマンに対する曝露の症状を軽減する局所薬として使用することも確立した。これらの化学兵器は、マスタードの機構に類似する機構により作用する。
【００３４】
本発明者らは、いずれの理論にも縛られることなく、本発明において使用する錯体の防御効果は、ＲＯＳ（反応性の酸素種）の生成が抑制された結果であると想定するに至った。ＤＦＯ金属錯体の、「プッシュ−プル（ｐｕｓｈ−ｐｕｌｌ）」が組み合わさった機構を介して作用して、フリーラジカル生成のそのような低下を達成する能力は、理論的考察及びこれまでに報告された実験的知見の両方により支持されている。フェントン反応又は金属媒介型ハーバー−ワイス機構においては、反応性の低い種が反応性の高いヒドロキシルラジカルに変換されるのは、微量の、酸化還元活性を示し且つ不安定な鉄イオン又は銅イオンが利用できることに明らかに依存する。これらのイオンは、必須の触媒として働く［Ｃｈｅｖｉｏｎ，Ｍ．（１９８８）、前記；Ｃｈｅｖｉｏｎ，Ｍ．ｅｔ  ａｌ．（１９９３）Ｐｒｏｃ  Ｎａｔｌ  Ａｃａｄ  Ｓｃｉ  ＵＳＡ  ９０、１１０２−６；Ｃｈｅｖｉｏｎ，Ｍ．ｅｔ  ａｌ．Ｉｎ：Ｒｅａｃｔｉｖｅ  Ｏｘｙｇｅｎ  Ｓｐｅｃｉｅｓ  ｉｎ  Ｂｉｏｌｏｇｉｃａｌ  Ｓｙｓｔｅｍｓ、Ｃｏｌｔｏｎ，Ｇ．Ａ．（ｅｄ．）（１９９８）Ｐｌｅｎｕｍ  Ｐｒｅｓｓ、Ｎｅｗ  Ｙｏｒｋ、ｐｐ．１０３−１３１］。錯体、特に、Ｚｎ−ＤＦＯ又はＧａ−ＤＦＯは、その防御効果を、ヒドロキシルラジカルの生成のこの重要な意味をもつステップに介入することによって発揮すると仮定されている。これらの錯体の、及びおそらくまたＭｎ−ＤＦＯの、それぞれの２つの構成成分が、傷害部位又はその付近に存在する場合には、酸化還元活性を示す金属イオンの可用性及び触媒活性を、「プッシュ−プル」機構を介して低下させる［Ｃｈｅｖｉｏｎ，Ｍ．（１９９１）前記］。
【００３５】
本発明はここに至り、Ｚｎ−ＤＦＯ及びＧａ−ＤＦＯを用いた治療の、免疫関連病態の寛解又は予防に有益な効果を実証している。より具体的には、本発明は、本発明の金属錯体を用いた治療により、乾癬の症状、及びその他の皮膚炎症障害が顕著に低下することを実証している。本発明が実証している炎症性障害についての別の例は、喘息である。本発明は、本発明のＤＦＯ金属錯体及びそれらの組合せを用いた治療により、喘息に関連して炎症を起こしている組織中のフェリチンの組織レベル及びフェリチン結合鉄の総量が低下することを示している。本発明はさらに、気管支周囲領域及び肺胞領域中の好酸球数及びリンパ球数の低下、気道上皮に対する損傷及び粘液の過剰産生の減弱、気管支肺胞液中の好中球の低下、粘液含量スコアの低下、気管支周囲の浸潤値の低下、上皮細胞の異形成の低下、線維状結合組織の低下も実証している。本発明はさらに、免疫関連障害、具体的には、自己免疫の背景の可能性がある炎症性障害の例としての糖尿病の治療における、ＤＦＯ金属錯体及びそれらの組合せの有益な効果も実証している。より具体的には、本発明は、本発明のＤＦＯ金属錯体及び組合せを用いた治療は、高血糖、タンパク質の酸化及び分解の増加、タンパク質の活性の減少、並びに白内障の生成を包含する、主要なＩＩ型糖尿病の病態の発生を防止することを示している。さらに、本発明の金属錯体は、Ｉ型糖尿病に起因して破壊され、失われた膵臓のベータ細胞を修復することはできないが、これらの錯体は、疾患の生理学的所見を緩和するようにも見える。
【００３６】
したがって、第１の側面では、本発明は、免疫関連障害、具体的には、炎症性障害を、防止し、治療し、緩和し又は阻害する方法に関する。本発明の方法は、治療有効量の少なくとも１つのデスフェリオキサミン金属錯体（ＤＦＯ金属錯体）若しくはそれらの任意の組合せ、又は前記を含む任意の医薬組成物を、それを必要とする対象に投与するステップを含む。
【００３７】
ＤＦＯがＲＯＳ生成の阻害の状況で発揮する有用な効果のうちのいくつかは、ＤＦＯのキレート剤としての作用を通して達成されることを理解すべきである。キレート化は、多座の（複数に結合する）配位子と単一の中心原子との間に、２つ以上の別個の結合が生成又は存在することである。これらの配位子を、キレート、キレート剤、キレート化剤又は捕捉剤と呼ぶ。配位子は、基質とキレート錯体を生成する。キレート錯体は、中心原子と１つの結合のみを生成する、単座の配位子を有する配位錯体と対比される。キレートは、特定の金属イオンと可溶性の錯体分子を生成して、イオンを不活性化する化学薬品であり、その結果、それらの金属イオンは通常、その他の元素ともイオンとも反応することができない。
【００３８】
これらのキレートはしばしば、キレート剤単独及び金属イオン単独の特性とは著しく異なる化学的特性及び生物学的特性を示す。デスフェリオキサミンは、麺類様構造をとり、細胞中にわずかに浸潤することができる分子である。対照的に、ガリウム又は鉄又は亜鉛のようなそのキレートは、球状構造をとり、細胞中に浸潤し、例えば、血液網膜関門を横断する［Ｂａｎｉｎ  ａｎｄ  Ｃｈｅｖｉｏｎ、２０００、ＦＲＢＭ］。また、第二鉄キレート（フェリオキサミン）は、不活性な錯体であり、鉄が、酸化還元循環することができない。
【００３９】
用語「ＤＦＯ」、「デスフェリオキサミン」、「Ｄｅｓｆｅｒａｌ」、「デフェロキサミンＢ」、「デスフェロキサミンＢ」、「ＤＦＯ−Ｂ」、「ＤＦＯＡ」又は「ＤＦＢ」は、本明細書で使用する場合、式Ｎ’−｛５−［アセチル（ヒドロキシ）アミノ］ペンチル｝−Ｎ−［５−（｛４−［（５−アミノペンチル）（ヒドロキシ）アミノ］−４−オキソブタノイル｝アミノ）ペンチル］−Ｎ−ヒドロキシ−スクシンアミドの鉄キレート化化合物を指す。デスフェリオキサミン（また、デフェロキサミンＢ、デスフェロキサミンＢ、ＤＦＯ−Ｂ、ＤＦＯＡ、ＤＦＢ又はｄｅｓｆｅｒａｌとしても公知である）は、アクチノバクター（ａｃｔｉｎｏｂａｃｔｅｒ）ストレプトマイセス・ピロサス（Ｓｔｒｅｐｔｏｍｙｃｅｓ  ｐｉｌｏｓｕｓ）が産生する細菌のシデロホアである。これは、身体から過剰な鉄を除去するために使用するキレート化剤としての医学的適用例を有する。ＤＦＯ−Ｂのメシレート塩が市販されている。より具体的には、デスフェリオキサミン分子は、６つの基礎単位から構成される。この分子は、金属に結合していない場合のこの形態では、直鎖分子であり、ほとんどの細胞中に容易には浸透することができない。金属に結合する（例として、フェリオキサミンとして）と、この分子は、球状の錯体を生成する。鉄に加えて、デスフェリオキサミンは、亜鉛とも堅固な錯体を生成する。一方では鉄又は銅と、他方では亜鉛との間の配位子の化学的性質の類似性に基づくと、亜鉛−デスフェリオキサミンの構造もまた、（直鎖ではなく）球形であると推測するのが合理的である。さらに、金属が、負に荷電しているデスフェリオキサミンに結合することによって、分子の極性も低下する。これらの考察により、これらの錯体が、細胞膜及び生物学的バリアを通ってより容易に浸透し、酸化還元活性を示し、組織の損傷を媒介する細胞内の金属により有効に結合する理由を説明することができるであろう。このプロセスでは、２つのステップ、すなわち、ａ）酸化還元活性を示す鉄及び銅を、それらをキレート化することによって除去するステップ、並びにｂ）それ自体が抗酸化活性を示す「遊離の」亜鉛を制御放出するステップにより、抗酸化剤による防御がもたらされる。
【００４０】
デスフェリオキサミンのＦｅ（ＩＩＩ）、Ｃｕ（ＩＩ）、Ｚｎ（ＩＩ）及びＧａ（ＩＩＩ）との錯体についての相対的安定性の定数はそれぞれ、１０３１、１０１４、１０１１及び１０２８である。したがって、これらの熱力学的考察に基づくと、Ｚｎ−デスフェリオキサミン錯体が細胞中に浸透すると、鉄又は銅の、低分子量の且つ酸化還元活性を示す錯体が多く存在する場合、Ｚｎ−デスフェリオキサミン錯体は、Ｚｎを鉄又は銅と交換する。亜鉛の鉄又は銅による交換に加えて、新たに放出された亜鉛が、追加の有益な抗酸化作用を示すこともできるであろう。
【００４１】
企図するＤＦＯ金属錯体は、亜鉛、ガリウム、マンガン、銀、金、コバルト、インジウム及びランタニドとの錯体、具体的には、ユーロピウム（Ｅｕ）−ＤＦＯ錯体、並びに／又はそれらの組合せ、好ましくは、亜鉛−ＤＦＯ及びガリウム−ＤＦＯを含む。
【００４２】
したがって、本発明のいくつかの態様は、金属が、亜鉛、ガリウム、マンガン、インジウム、銀、金、コバルト及びランタニド、並びにそれらの任意の組合せのうちのいずれか１つから選択される本発明による方法に関する。
【００４３】
特定のＤＦＯ金属錯体として、例えば、ＤＦＯ−Ｚｎ、ＤＦＯ−Ｇａ、ＤＦＯ−Ｍｎ等が挙げられる。
【００４４】
本発明の金属錯体、具体的には、ＤＦＯ金属錯体は、金属元素として、ランタニドを使用することができることに留意すべきである。ランタニド又はランタノイド系列は、本明細書で使用する場合、ランタン、セリウム、プラセオジム、ネオジウム、プロメチウム、サマリウム、ユーロピウム、ガドリニウム、テルビウム、ジスプロシウム、ホルミウム、エルビウム、ツリウム、イッテルビウム及びルテチウムを包含する、原子番号５８〜７１を有する元素１４個を含む。１つの特定の態様では、本発明が使用する錯体は、ユーロピウム−ＤＦＯ及びその任意の組合せであり得る。
【００４５】
より具体的には、いくつかの特定の態様では、本発明は、亜鉛−デスフェリオキサミン錯体（Ｚｎ−ＤＦＯ）、ガリウム−デスフェリオキサミン錯体（Ｇａ−ＤＦＯ）、それらの任意の組合せのうちの少なくとも１つの治療有効量、又は前記を含む任意の組成物若しくは組合せ組成物を、それを必要とする対象に投与するステップを含む治療方法に関する。
【００４６】
本発明の方法が使用する金属−ＤＦＯ錯体、並びに以下に記載する本発明の組合せ組成物及びキット中の金属−ＤＦＯ錯体は、ＤＦＯに対する任意の比、具体的には、化学量論比の、任意のＤＦＯ−金属、具体的には、Ｚｎ又はＧａであり得ることを理解すべきである。より具体的には、１：１〜０．０１：１００、より具体的には、０．１：１０、さらにより具体的には、０．１：１の間。
【００４７】
金属、具体的には、Ｚｎ又はＧａの、ＤＦＯ錯体に対する異なる比についての、いくつかの例示的且つ非限定的な例を、本明細書下記に示す。より具体的には、特定の態様によれば、本発明の方法が使用する錯体、並びに（以下に記載する）本発明の組合せ組成物及びキット中の錯体は、実験手順の記載に従って調製することができる。代わりに、そのような錯体は、ＤＦＯの１０ｍＭ溶液と等しい体積のＺｎＣｌ２の１０ｍＭ溶液とを混合し、ｐＨを増減させて、約５．３〜５．５の間であるが、６．１を超えないｐＨとすることによって調製することもできる。混合物を、４５℃まで３０分かけて加熱し、冷却して、１．０：１．０のＺｎ：ＤＦＯの比を有するＺｎ−ＤＦＯ錯体を生成する。
【００４８】
代わりに、本発明の方法、組合せ組成物及びキットの使用のためのそのような１．０：１．０のＺｎ−ＤＦＯ錯体は、Ｄｅｓｆｅｒａｌ（登録商標）の１つのバイアル（５００ｍｇ、０．７６ミリモル）の内容物を乾燥させ、１６８ｍｇの乾燥無水酢酸亜鉛（０．７６ミリモル）を添加することによって調製することもできる。二重に蒸留した水を、内容物が完全に溶解するまで添加する（約１０ｍｌ）。溶液を、４０℃まで４５分かけて温め、冷却して冷せば、錯体Ｚｎ−ＤＦＯ（１．０：１．０）は、使用の準備が整っている。
【００４９】
いくつかの態様によれば、本発明の方法、組合せ組成物及びキットが使用する錯体は、ＤＦＯの１０ｍＭ溶液と等しい体積の６ｍＭのＺｎＣｌ２溶液とを混合し、ｐＨを増減させて、約５．３〜５．５の間であるが、６．１を超えないｐＨとすることによって調製することができる。混合物を、４５℃まで３０分かけて加熱し、冷却して、０．６：１．０のＺｎ：ＤＦＯの化学量論比を有するＺｎ−ＤＦＯ錯体を生成する。
【００５０】
また、本発明の方法、組合せ組成物及びキットが使用する錯体は、１０ｍＭのＤＦＯ溶液と、等しい体積の１２．５ｍＭのＺｎＣｌ２溶液及び１０ｍｌの５．５ｍＭヒスチジンとを混合し、ｐＨを増減させて、約５．３〜５．５の間であるが、６．１を超えないｐＨとすることによって調製することもできる。混合物を、４５℃まで３０分かけて加熱し、冷却して、１．２５：１．０のＺｎ：ＤＦＯの比を有するＺｎ−ＤＦＯ錯体を生成する。
【００５１】
その他のそのような態様が、本発明の方法、組合せ組成物及びキットが使用する錯体を企図し、この錯体は、５０ｍＭのＤＦＯ溶液と１／５の体積のＺｎＳＯ４の５０ｍＭ溶液とを混合することによって調製することができる。混合物を、４０℃まで４５分かけて加熱し、冷却して、結果として、０．２：１．０のＺｎ：ＤＦＯの比を有するＺｎ／ＤＦＯ（５ｎＭ）の錯体を生成する。
【００５２】
その他のＺｎ：ＤＦＯの比を有する錯体を、本発明の方法、組合せ組成物及びキットのために使用することができることを認識すべきである。
【００５３】
いくつかの態様では、本発明の方法、組合せ組成物及びキットが使用する錯体は、ＤＦＯの１０ｍＭ溶液と等しい体積の１０ｍＭのＧａＣｌ３溶液とを混合し、ＨＣｌを用いてｐＨ５．０に、次いで、ＮａＯＨ（１Ｍ）を用いて約５．４〜５．６の間であるが、５．６を超えないｐＨに増減させることによって調製することができ、１．０：１．０のＧａ：ＤＦＯの比を有するＧａ−ＤＦＯ錯体を生成する。
【００５４】
その他の態様が、本発明の方法、組合せ組成物及びキットが使用する錯体を検討し、この錯体は、ＤＦＯの５ｍＭ溶液と等しい体積のＧａＣｌ３の３ｍＭ溶液とを混合し、ｐＨを増減させて、約５．４〜５．６の間であるが、５．６を超えないｐＨにすることによって調製することができ、０．６：１．０のＧａ：ＤＦＯを有するＧａ−ＤＦＯ錯体を生成する。
【００５５】
任意のその他のＧａ：ＤＦＯの比を有する錯体を、本発明の方法、組合せ組成物及びキットのために使用することができることを理解すべきである。
【００５６】
より特定の態様では、本発明の方法は、場合により、現時点で使用している薬物の低下させた用量、吸収増強剤、及び本明細書で詳述するその他の治療剤を包含する、少なくとも１つの追加の治療剤を投与するステップをさらに含むことができる。
【００５７】
これらの追加の治療剤、具体的には、任意の免疫調節剤又は公知の医薬は、本発明が使用する金属−ＤＦＯ錯体のうちの少なくとも１つと組み合わせてもよく、又は任意選択の異なる投与様式を有する追加の別個のステップにおいて別個に投与してもよい。
【００５８】
より特定の態様では、この方法は、場合により、少なくとも１つの追加の治療剤を投与するステップをさらに含む。追加の治療剤として、現時点で入手可能な医薬、例えば、モンテルカスト並びに／又は類似の作用機序を有する任意のその他の治療剤、オマリズマブ（ｏｍａｌｉｚｕｍａｂ）並びに／又は類似の作用機序を有する任意のその他の治療剤、サルメテロール並びに／又は類似の作用機序を有する任意のその他の治療剤、フルチカゾン並びに／又は類似の作用機序を有する任意のその他の治療剤、ネドクロミル並びに／又は類似の作用機序を有する任意のその他の治療剤、エピネフリン並びに／又は類似の作用機序を有する任意のその他の治療剤、イプラトロピウム並びに／又は類似の作用機序を有する任意のその他の治療剤、トルブタミド並びに／又は類似の作用機序を有する任意のその他の治療剤、グリピジド並びに／又は類似の作用機序を有する任意のその他の治療剤、メグリチニド（ｍｅｇｌｉｔｉｎｉｄｅ）並びに／又は類似の作用機序を有する任意のその他の治療剤、ロシグリタゾン並びに／又は類似の作用機序を有する任意のその他の治療剤、メトホルミン並びに／又は類似の作用機序を有する任意のその他の治療剤、ミグリトール並びに／又は類似の作用機序を有する任意のその他の治療剤、エクセナチド並びに／又は類似の作用機序を有する任意のその他の治療剤、ビルダグリプチン並びに／又は類似の作用機序を有する任意のその他の治療剤、プラムリンチド並びに／又は類似の作用機序を有する任意のその他の治療剤、アレグリタザール（ａｌｅｇｌｉｔａｚａｒ）並びに／又は類似の作用機序を有する任意のその他の治療剤、イメグリミン（ｉｍｅｇｌｉｍｉｎ）並びに／又は類似の作用機序を有する任意のその他の治療剤、インスリン及び／若しくはインスリン類似体並びに／又は類似の作用機序を有する任意のその他の治療剤、アナルプラム（ａｎａｌｐｒａｍ）並びに／又は類似の作用機序を有する任意のその他の治療剤、クロベックス（ｃｌｏｂｅｘ）並びに／又は類似の作用機序を有する任意のその他の治療剤、デルタゾン（ｄｅｌｔａｓｏｎｅ）並びに／又は類似の作用機序を有する任意のその他の治療剤、ドボネックス並びに／又は類似の作用機序を有する任意のその他の治療剤、エンブレル並びに／又は類似の作用機序を有する任意のその他の治療剤、ヒュミラ並びに／又は類似の作用機序を有する任意のその他の治療剤、ネオーラル並びに／又は類似の作用機序を有する任意のその他の治療剤、さらに／或いは任意のその他の薬剤、医薬活性を改善するもの、例えば、サリチレート、アスピリン、ビタミンＣ、リポ酸、ビタミンＢ１２、さらに／或いは経皮浸透増強剤、例えば、アゾン（ａｚｏｎｅ）並びに／又は類似の作用機序を有する任意のその他の治療剤、塩化ベンザルコニウム並びに／又は類似の作用機序を有する任意のその他の治療剤、ポリエチレングリコール並びに／又は類似の作用機序を有する任意のその他の治療剤、メントール並びに／又は類似の作用機序を有する任意のその他の治療剤、ケトプロフェン並びに／又は類似の作用機序を有する任意のその他の治療剤、４−デシルオキサゾリジン−２−オン並びに／又は類似の作用機序を有する任意のその他の治療剤、Ｓ，Ｓ−ジメチル−Ｎ−（５−ニトロ−２−ピリジル）イミノスルフラン並びに／又は類似の作用機序を有する任意のその他の治療剤が挙げられる。
【００５９】
本発明の方法は、ＤＦＯ金属錯体、具体的には、Ｚｎ−ＤＦＯ、Ｇａ−ＤＦＯ、それらの任意の組合せ、又は免疫関連障害を、防止し、治療し、緩和し若しくは阻害するための、以上に記載した任意のＤＦＯ金属錯体の使用を開示する。さらにより特定の態様では、本発明の治療方法に従う免疫関連障害は、炎症性疾患及び自己免疫疾患のうちのいずれか１つである。本明細書に提示する知見は、乾癬、喘息、糖尿病、及び任意の免疫関連障害の治療における、Ｚｎ−ＤＦＯ及びＧａ−ＤＦＯの低い毒性と同時に得られるそれらの明確な利点を示している。
【００６０】
特定の特異的な態様では、本発明の方法は、免疫関連障害、例として、炎症性疾患、例えば、慢性若しくは急性の炎症に関連する皮膚の病的状態又は呼吸器疾患、及び自己免疫の背景を有する免疫関連障害、例として、糖尿病を治療するために特に適用可能である。具体的には、ＩＩ型糖尿病、Ｉ型糖尿病又は任意の糖尿病関連状態。より具体的には、本発明は、そのような免疫関連障害を治療するための、Ｚｎ−ＤＦＯ、Ｇａ−ＤＦＯ及びそれらの任意の組合せの使用に関する。
【００６１】
例９〜１２により示すように、本発明の錯体は、乾癬患者の皮膚に対して局所適用する場合に有益な効果を示す。乾癬においては、免疫系のシグナル伝達分子のうちの１つ又は２つ以上が、局所の過剰なフリーラジカル並びにその他の反応性の酸素及び窒素に由来する種をもたらす事象を引き起こす。過剰な反応性の種、特に、非常に有害なヒドロキシルラジカルの産生は、酸化還元活性を示し且つ不安定な鉄により触媒される。皮膚細胞により放出され、これらの反応性の細胞傷害性の種により変化又は損傷したシグナル伝達分子が、乾癬をもたらす原因物質である。したがって、乾癬においては、皮膚細胞を変化又は損傷させるフィードバックループの増幅が生じ得る。乾癬においては、増殖しつつある乾癬性の角化細胞が、鉄を必要とする。利用できる不安定な鉄を制限することによって、皮膚細胞の迅速な増殖が停止し、乾癬性の炎症が制限されるであろう。
【００６２】
したがって、特に特異的な態様では、本発明は、慢性又は急性の炎症に関連する皮膚の病的状態、具体的には、乾癬を、金属−ＤＦＯ錯体、並びにそれらの任意の組合せ、組成物、組合せ組成物及びキットを使用して治療するための方法を提供する。
【００６３】
より具体的には、乾癬は、鱗屑を伴う、皮膚の炎症の斑状の、盛り上がった、赤色領域を特徴とする一般的な皮膚の状態である。乾癬はしばしば、肘及び膝の先端、頭皮、へそ、並びに生殖器又は肛門を囲む領域を冒す。免疫系が、皮膚細胞の成長のサイクルのスピードを上げる誤ったシグナルを送り出す場合に、乾癬が発生する。乾癬により一般に引き起こされた鱗状の斑点は、乾癬プラークと呼ばれ、炎症及び過剰な皮膚産生の領域である。皮膚が、これらの部位では迅速に蓄積し、銀白色の外観を帯びるようになる。プラークは頻繁に、肘及び膝の皮膚上で発生するが、頭皮、手のひら及び足底、並びに生殖器を包含する、任意の領域を冒し得る。湿疹とは対照的に、乾癬は、関節の外側に見出される可能性が高い。この障害は、慢性、再発性の状態であり、小さな局部的な斑点から、身体が完全に覆われる場合まで、重症度が多様である。手指の爪及び足指の爪が頻繁に冒され（乾癬性爪ジストロフィー）、単発症状として見られる場合がある。また、乾癬は、関節の炎症を引き起こす場合もあり、これは、乾癬性関節炎として公知である。乾癬を有する人々の１０〜１５パーセントが、乾癬性関節炎を発症する。利用可能な多くの治療があるが、乾癬は、その慢性、再発性の性質のために、治療するのが難しい。乾癬の症状は、多様な形態で現れ得る。変型は、プラーク乾癬、膿疱性乾癬、滴状乾癬及び屈側性乾癬を包含する。乾癬は、非膿疱性及び膿疱性のタイプに分類することができる。本発明の方法は、非膿疱性乾癬及び膿疱性乾癬を治療することを企図することに留意すべきである。
【００６４】
より具体的には、非膿疱性乾癬は、尋常性乾癬及び乾癬性紅皮症を包含する。尋常性乾癬（また、慢性、定常性乾癬（ｓｔａｔｉｏｎａｒｙ  ｐｓｏｒｉａｓｉｓ）又はプラーク様乾癬としても公知である）は、乾癬の最も一般的な形態である。乾癬を有する人々の８０〜９０％が、尋常性乾癬に罹患する。尋常性乾癬は典型的には、銀白色の鱗状の皮膚で覆われている、炎症を起こしている皮膚の盛り上がった領域として出現する。これらの領域は、プラークと呼ばれる。
【００６５】
乾癬性紅皮症（Ｐｓｏｒｉａｔｉｃ  ｅｒｙｔｈｒｏｄｅｒｍａ）（乾癬性紅皮症（Ｅｒｙｔｈｒｏｄｅｒｍｉｃ  ｐｓｏｒｉａｓｉｓ））には、身体表面のうちのほとんどにわたる皮膚の広範な炎症及び剥脱が関与する。乾癬性紅皮症には、重度の痒み、腫大及び疼痛が伴う場合がある。乾癬性紅皮症はしばしば、不安定な尋常性乾癬の増悪の結果であり、特に、全身的治療の突然の中止に続いて生じる。乾癬のこの形態は、極度の炎症及び剥脱が、体温を調節する身体の能力、及び皮膚がバリアとして機能するのを破壊するので、致命的となる場合がある。
【００６６】
さらに別の特定の態様では、本発明の方法を、膿疱性乾癬を治療するために使用することができる。膿疱性乾癬は、非感染性の膿汁（膿疱）で満たされている、盛り上がった隆起として出現する。膿疱の下の皮膚及び膿疱を囲む皮膚は、赤色であり、圧痛がある。膿疱性乾癬は、局部的であり、一般に手及び足に生じる場合（掌蹠膿疱症（ｐａｌｍｏｐｌａｎｔａｒ  ｐｕｓｔｕｌｏｓｉｓ））、又は全身的であり、身体の任意の部分上に無作為に発生する広範な斑点を伴う場合がある。膿疱性乾癬のサブタイプは、全身性膿疱性乾癬（ツンブッシュ膿疱性乾癬（ｐｕｓｔｕｌａｒ  ｐｓｏｒｉａｓｉｓ  ｏｆ  ｖｏｎ  Ｚｕｍｂｕｓｃｈ））、掌蹠膿疱症（ｐｕｓｔｕｌｏｓｉｓ  ｐａｌｍａｒｉｓ  ｅｔ  ｐｌａｎｔａｒｉｓ）（持続性の掌蹠膿疱症、バーバー型の膿疱性乾癬、四肢の膿疱性乾癬）、環状型膿疱性乾癬、稽留性肢端皮膚炎、及び疱疹状膿痂疹を包含する。
【００６７】
本発明の方法はまた、乾癬の任意の追加のタイプ、例えば、薬物誘発性乾癬、逆位乾癬又は屈側性乾癬を治療するのにも適用可能であり得ることを理解すべきである。このタイプは、皮膚の平滑な炎症性の斑点として出現する。このタイプは、皮膚のひだにおいて、特に、生殖器の周囲（大腿と鼠径部との間）、腋窩、過体重者の胃の下（パンヌス）、及び乳房の下（乳房下部のひだ）に発生する。このタイプは、摩擦及び汗により悪化し、真菌感染にかかりやすい。
【００６８】
その上さらに、本発明の方法は、滴状乾癬を治療するために使用することもできる。このタイプの乾癬は、多数の小さな鱗状の赤色又はピンク色の涙滴形状の病変により特徴付けられる。乾癬のこれらの多数のスポットは、身体の大きな領域、主として、体幹にわたり出現するが、また、肢及び頭皮にも出現する。滴状乾癬はしばしば、連鎖球菌感染、典型的には、連鎖球菌性咽頭炎に続く。
【００６９】
本発明の方法によってもまた、治療することができる爪乾癬は、手指及び足指の爪の外観に多様な変化をもたらす。これらの変化は、爪甲下の変色、爪に穴が開くこと、爪を横切る線が生じること、爪の下の皮膚の肥厚、及び爪が緩み（爪甲離床症）、崩れることを包含する。
【００７０】
さらに別の態様では、本発明の方法は、乾癬性関節炎を治療するために使用することができる。乾癬性関節炎には、関節及び結合組織の炎症が関与する。乾癬性関節炎は、任意の関節を冒し得るが、最も一般的には、手指及び足指の関節を冒す。これにより、指炎として公知である、手指及び足指のソーセージ形状の腫大が生じる場合がある。また、乾癬性関節炎は、腰、膝及び脊椎（脊椎炎）も冒す場合がある。また、乾癬に罹患している人々の約１０〜１５％が、乾癬性関節炎にも罹患する。
【００７１】
いくつかの態様では、乾癬に罹患している対象を治療することにより、対象の生理学的状態を改善することができ、例えば、疾患に起因して粗くなっていた皮膚を平滑にする。好ましい態様では、本発明の金属錯体の局所適用は、皮膚を刺激することも、炎症を促すこともない。
【００７２】
特定の態様では、乾癬及びその他の企図する炎症性皮膚障害を治療するのに有効な、水中の錯体（単数又は複数）の例示的な濃度、例として、例示的なＧａ−ＤＦＯ又はＺｎ−ＤＦＯの濃度は、典型的には、約０．０１％重量／体積と約５．０％重量／体積との間、より具体的には、約０．１０％重量／体積と約２．５％との間、約０．１０％重量／体積と約１．０％重量／体積との間の範囲に及ぶことができ、より具体的には、０．１、０．２、０．３、０．４、０．５、０．６、０．７、０．８、０．９及び１．０％である。１つの特定の態様では、そのような濃度は、約０．２％重量／体積と約０．６％重量／体積との間の範囲に及ぶことができる。有機マトリックス中では、錯体（単数又は複数）の濃度は典型的には、例９に示すように、約０．０３％重量／体積超且つ約５．０％重量／体積未満であり、好ましい濃度は、約０．０５重量％超、より具体的には、０．０９重量％超且つ０．４５重量％未満である。
【００７３】
その他の慢性又は急性の炎症に関連する皮膚の病的状態を、本発明の方法により治療することができることを理解すべきである。そのような追加の状態は、皮膚炎、挫瘡、しもやけ、機械的な傷害、昆虫の咬傷、炎症性の皮膚の傷害、皮膚の色素沈着が炎症に関連して混乱している状態、例えば、白斑、及び湿疹を包含する。
【００７４】
より具体的には、本発明の特定の態様は、皮膚炎を治療する方法に関する。用語「皮膚炎」は一般に、皮膚の炎症を指す。異なる種類が通常、共通して、特定のアレルゲンに対してアレルギー性反応を示す。この用語を使用して、湿疹（ｅｃｚｅｍａ）を指すことができ、また、湿疹は、湿疹皮膚炎（ｄｅｒｍａｔｉｔｉｓ  ｅｃｚｅｍａ）又は湿疹性皮膚炎（ｅｃｚｅｍａｔｏｕｓ  ｄｅｒｍａｔｉｔｉｓ）としても公知である。湿疹の診断はしばしば、アトピー性皮膚炎（小児湿疹）を暗示するが、適切な文脈がなければ、湿疹は、「発疹」、すなわち、一過性の皮膚の炎症を意味するに過ぎない。「皮膚炎」と湿疹とが同義語である言語もあれば、「皮膚炎」は急性状態を暗示し、「湿疹」は慢性状態を暗示する言語もある。これらの２つの状態はしばしば、一緒に分類される。
【００７５】
挫瘡は、本発明の方法により治療することができる皮膚の炎症性障害についての別の非限定的な例である。挫瘡は、皮膚の発疹性疾患について使用する一般的な用語である。挫瘡は時には、尋常性挫瘡についての同義語として使用される。しかし、挫瘡には、いくつかの異なるタイプがある。これらは、尋常性挫瘡、集簇性挫瘡、粟粒状壊死性挫瘡、局所的挫瘡、乳児性挫瘡／新生児性挫瘡、剥皮性挫瘡、閃光状挫瘡、薬物誘発性挫瘡／薬物性挫瘡（ステロイド挫瘡）、ハロゲン挫瘡（ヨウ素疹、臭素疹、塩素疹）、油性挫瘡、タール挫瘡、化粧剤性挫瘡、職業性挫瘡、夏季挫瘡、項部ケロイド挫瘡（ａｃｎｅ  ｋｅｌｏｉｄａｌｉｓ  ｎｕｃｈａｅ）、機械的挫瘡、顔面の浮腫を伴う挫瘡、ポマード挫瘡、壊死性挫瘡、黒色面皰、及び顔面播種状粟粒性狼瘡を包含する。
【００７６】
また、本発明の方法により治療することができる炎症関連皮膚障害は、昆虫の咬傷及び刺傷も包含することができる。昆虫の咬傷は、昆虫が、動揺し、自体をその天然の防御機構を通して守ろうとする場合、又は昆虫が、人に咬傷を与えて栄養を得ようとする場合に発生する。昆虫はギ酸を注入し、ギ酸は、即時の皮膚反応引き起こすことができ、しばしば、結果として、傷害領域において発赤及び腫大が生じる。アカヒアリ、ミツバチ、カリバチ及びスズメバチからの刺傷は通常、痛みを伴い、アナフィラキシーと呼ばれる、リスクがある患者にとって危険なアレルギー性反応刺激する恐れがある。また、いくつかのカリバチは、強力な咬傷も、刺傷と併せてもたらす場合がある。蚊、ノミ及びダニからの咬傷は、疼痛よりも痒みを引き起こす可能性が高い。昆虫の咬傷及び刺傷に対する皮膚反応は通常、最長数日間続く。しかし、場合によっては、局所反応が、最長２年間続く場合もある。刺傷に対する反応には、３つのタイプがある。通常の反応は、咬傷の周囲の領域に生じ、発赤、痒み及び疼痛が伴う。腫大の領域が５ｃｍ超である場合には、大きな局所反応が発生する。全身性反応は、症状が咬傷の領域以外の領域において発生する場合である。
【００７７】
さらに別の態様では、本発明の方法は、白斑を治療するのに適用可能であり得る。白斑は、本明細書で使用する場合、皮膚の色素脱失の斑点を引き起こす慢性障害である。メラニン形成細胞が、死んだ又は機能することができない場合に、白斑が発生する。白斑の原因は不明であるが、研究により、白斑は、自己免疫性の原因、遺伝的な原因、酸化ストレスによる原因、神経性の原因又はウイルス性の原因から発生する場合があることが示唆されている。発生率は、世界全体で１％未満であり、最も一般的な形態は、非区域性白斑である。症状は、通常１０歳から３０歳の間に始まり、体毛の白化又は灰色化、口腔内部の皮膚色の喪失、及び眼色の喪失を包含する。白斑の最も注目に値する症状は、皮膚の色素脱失の斑点であり、これは、四肢上に発生する。非区域性白斑（ＮＳＶ）では通常、色素脱失の斑点の場所において、何らかの形態の対称性がある。また、新しい斑点も、経時的に出現し、身体の大きな部分にわたり全身性となる場合も、又は特定の領域に局在する場合もある。皮膚にほとんど色がない状態である白斑を、尋常性白斑と呼ぶ。十代の年齢における有病率がはるかにより高い区域性白斑とは異なり、ＮＳＶは、いかなる年齢でも発症し得る。非区域性白斑のクラスは、全身性白斑、広汎性白斑、限局性白斑、四肢末端顔面型白斑、及び粘膜性白斑を包含する。区域性白斑（ＳＶ）は、関連の疾病とは、外観、病因及び有病率が異なる。その治療は、ＮＳＶの治療とは異なる。区域性白斑は、脊椎からの後根につながる皮膚の領域を冒す傾向がある。区域性白斑は、ＮＳＶよりもはるかに迅速に広がり、治療しなくても、経過は、はるかにより安定であり／変化がなく、自己免疫疾患と関連がなく、局所治療に応答する、非常に治療可能な状態である。
【００７８】
特定の態様では、本発明の方法、組成物、組合せ組成物及びキットは、任意の炎症性皮膚障害を治療するのに適用可能であり得るが、ただし、そのような障害は、窒素及びその他のマスタードガス、並びにその他の化学兵器、例えば、サリンに対する曝露に続いて誘発されるものではないことに留意すべきである。
【００７９】
上記に示したように、本発明の方法は、炎症性皮膚障害を治療するのに適切であり得る。本発明はさらに、炎症性呼吸器疾患を治療及び防止するのにもまた適用可能であり得る方法を実証するに至った。より具体的には、例１〜４が、本発明の金属−ＤＦＯ錯体の、喘息の治療における有益な効果を明らかに開示している。したがって、特定の態様では、本発明の方法を、呼吸器障害、具体的には、喘息を予防し、治療し、且つ／又は緩和するために使用することができる。
【００８０】
喘息は、変動性且つ再発性の症状、気流の閉塞、及び気管支けいれんにより特徴付けられる、気道の一般的な慢性炎症性疾患である。症状は、喘鳴、咳、胸苦しさ、及び息切れを包含する。
【００８１】
喘息は、症状の頻度、１秒量（ＦＥＶ１）、及び最大呼気流量に従って臨床的に分類される。また、喘息は、症状が、アレルゲンにより引き起こされる（アトピー性）か、又はそうでない（非アトピー性）かどうかに基づいて、アトピー性（外因性）又は非アトピー性（内因性）に分類することもできる。
【００８２】
喘息は、環境因子及び遺伝因子により制御される。これらの因子は、どれほど喘息が重症であるか、及びどれほど十分に喘息が医薬品に応答するかに影響する。相互作用は、複雑であり、完全には理解されていない。
【００８３】
喘息の発症の防止は、喘息のエピソードの防止とは異なる。軽度のアレルギーの、免疫療法を用いた積極的治療が、喘息の発症の可能性を低下させることが示されている。症状の制御においては、第１のステップは、喘息のエピソードを、誘因及びアレルゲンを回避することによって防止するための行動計画を確立し、肺機能について定期的に試験し、防止のための医薬品を使用することである。
【００８４】
喘息を治療するために使用する医薬品は、２つの一般的なクラス、すなわち、急性症状を治療するために使用する即緩和型医薬品、及びさらなる増悪を防止するために使用する長期制御型医薬品に分けられる。
【００８５】
即効性医薬品は、短時間作用型の、選択的ベータ２−アドレナリン受容体アゴニスト、例として、サルブタモール（アルブテロール  ＵＳＡＮ）、レバルブテロール（ｌｅｖａｌｂｕｔｅｒｏｌ）、テルブタリン、及びビトルテロールを包含する。また、より古い、選択性がより低いアドレナリン作動性アゴニスト、例として、吸入型のエピネフリン及びエフェドリンの錠剤、例えば、商標Ｐｒｉｍａｔｅｎｅ  Ｍｉｓｔも使用されている。緩和型医薬品としてもっぱら使用する場合、吸入型のエピネフリンは、急性の喘息の増悪を止めるのに有効な薬剤であることが示されている。代わりに、抗コリン性の医薬品、例として、臭化イプラトロピウムを使用することもできる。
【００８６】
長期制御型医薬品は、吸入型の糖質コルチコイドを包含し、これは主として、防止のための医薬品とみなされている。一方、経口の糖質コルチコイドはしばしば、緊急の中等度から重度の発作の治療を補うために使用する。長時間作用型のβ２−アゴニスト（ＬＡＢＤ）は、構造が短時間作用型の選択的ベータ２−アドレナリン受容体アゴニストに類似するが、はるかにより長い側鎖を有し、その結果、１２時間作用を示す。
【００８７】
重要なことには、金属−キレート剤、具体的には、本発明の金属−ＤＦＯ錯体は、現在利用可能な医薬品に対する追加の治療の次元を提供する。これは、こうした錯体が、記載の呼吸器障害病態の発生に対する防止のための方策として働くのみならず、また、続いて起きる組織の損傷も減少させるからである。
【００８８】
喘息及びその他の呼吸器関連障害のための医薬品は典型的には、喘息スペーサーと組み合わせた用量計量型吸入器（ＭＤＩ）、又は乾燥散剤吸入器として提供されることに留意すべきである。スペーサーは、医薬品と空気とを混合して、薬物の完全な用量を投与するのをより容易にするプラスチック製シリンダーである。また、ネブライザーも使用することができる。したがって、本発明の金属−ＤＦＯ錯体は、そのようなＭＤＩを使用して投与することができ、また、任意のその他の喘息の医薬品、具体的には、上記に示したものと組み合わせることもできる。
【００８９】
上記に示したように、本発明は、異なる免疫関連呼吸器疾患を治療するための方法を企図する。喘息に加えて、そのような呼吸器疾患は、気道における任意のその他の急性アレルギー所見、慢性副鼻腔炎（ＣＲＳ）、アレルギー性鼻炎、ＣＯＰＤ、鼻ポリープ症（ＮＰ）、血管運動性鼻炎、気道の応答性亢進、嚢胞性線維症及び肺線維症、又はアレルギー性副鼻腔炎を包含することができる。したがって、本発明は、上記の呼吸器疾患のうちのいずれかを、防止し、治療し、緩和し又は阻害するための方法、組合せ組成物及びキットを提供する。
【００９０】
したがって、特定の態様では、本発明は、副鼻腔炎を治療するための方法、組合せ組成物及びキットを提供する。副鼻腔炎は、副鼻腔の炎症であり、感染、アレルギー又は自己免疫の問題に起因し得る。ほとんどの症例が、ウイルス性感染に起因し、１０日の間に消散する。副鼻腔炎は、一般的な状態であり、米国内では年間２４００万を上回る症例が発生する。
【００９１】
慢性副鼻腔炎は、定義によれば、３ヵ月超続き、鼻腔の慢性の炎症を共通の症状として共有する、多くの異なる疾患により引き起こされ得る。慢性副鼻腔炎の症例は、ポリープを伴う症例及びポリープを伴わない症例に細分される。ポリープが存在する場合、この状態は、慢性過形成性副鼻腔炎と呼ばれる。しかし、原因は、十分には理解されておらず、アレルギー、ほこり若しくは汚染等の環境因子、細菌感染又は真菌を包含し得る（アレルギー性、感染性若しくは反応性のいずれか）。また、非アレルギー性の因子、例として、血管運動性鼻炎も、慢性の鼻腔の問題を引き起こす場合がある。
【００９２】
本発明の方法により治療することができるアレルギー性鼻炎、花粉症又は季節性鼻アレルギーは、鼻腔（ｎａｓａｌ  ａｉｒｗａｙ）のアレルギー性の炎症である。これは、アレルゲン、例として、花粉又はほこりを、感作された免疫系を有する個体が吸入し、アレルゲンが、抗体産生を引き起こす場合に発症する。これらの抗体は大部分が、肥満細胞に結合し、肥満細胞は、ヒスタミンを含有する。肥満細胞が花粉及びほこりにより刺激されると、ヒスタミン（及びその他の化学物質）を放出する。こうして、痒み、腫大及び粘液産生が引き起こされる。症状の重症度は、個体間で変化する。非常に感受性の個体は、蕁麻疹又はその他の発疹を経験する恐れがある。
【００９３】
慢性閉塞性肺疾患（ｃｈｒｏｎｉｃ  ｏｂｓｔｒｕｃｔｉｖｅ  ｐｕｌｍｏｎａｒｙ  ｄｉｓｅａｓｅ）（ＣＯＰＤ）は、慢性閉塞性肺疾患（ｃｈｒｏｎｉｃ  ｏｂｓｔｒｕｃｔｉｖｅ  ｌｕｎｇ  ｄｉｓｅａｓｅ）（ＣＯＬＤ）、慢性閉塞性気道疾患（ＣＯＡＤ）、慢性気流制限（ＣＡＬ）、及び慢性閉塞性呼吸器疾患（ＣＯＲＤ）としてもまた公知であり、慢性の気管支炎及び肺気腫を指す。慢性の気管支炎及び肺気腫は、気道を狭める、一対の一般的に共存する肺疾患である。これにより、肺へ及び肺からの空気の流れが制限されるようになり、息切れが生じる。喘息とは対照的に、気流制限の可逆性に乏しく、気流制限は通常、経時的に進行性に悪化する。ＣＯＰＤは、肺の異常な炎症応答を引き起こす有害な粒子又は気体、最も一般には、タバコの喫煙からの粒子又は気体により引き起こされる。より大きな気道における炎症応答は、慢性気管支炎として公知であり、人々が痰を定期的に喀出する場合に、慢性気管支炎と臨床的に診断される。肺胞において、炎症応答が、肺組織の破壊を引き起こし、これは、肺気腫として公知のプロセスである。ＣＯＰＤの自然の経過は、急性増悪と呼ばれる、時折症状が突然悪化することにより特徴付けられ、急性増悪のうちのほとんどが、感染又は大気汚染により引き起こされる。
【００９４】
本発明の方法、組合せ組成物及びキットは、ＣＯＡＤ及びＣＯＰＤを治療するのに適用可能である。
【００９５】
その上さらに、本発明の方法は、鼻のポリープを治療するためにも使用することができる。鼻のポリープは、主として鼻及び副鼻腔の粘膜から生じるポリープ状の塊である。鼻のポリープは、粘膜の異常増殖であり、アレルギー性鼻炎を頻繁に伴う。鼻のポリープは、自由に動き、非圧痛性である。鼻のポリープは通常、上顎洞後鼻孔性ポリープ及び篩骨性ポリープに分類される。上顎洞後鼻孔性ポリープは、上顎洞から生じ、はるかに稀であり、篩骨性ポリープは、篩骨洞から生じる。上顎洞後鼻孔性ポリープは、通常、単一且つ一側性であり、一方、篩骨性ポリープは、複数且つ両側性である。
【００９６】
非アレルギー性鼻炎は、アレルギーに起因しない鼻水を指す。非アレルギー性鼻炎は、非炎症性鼻炎又は炎症性鼻炎のいずれかに分類することができる。時にはアレルギーと混同される、非炎症性、非アレルギー性鼻炎の１つの非常に一般的なタイプが、血管運動性鼻炎と呼ばれ、この場合、特定の非アレルギー性の誘因、例として、匂い、噴煙、煙、ほこり及び温度変化が、鼻炎を引き起こす。これらの非アレルギー性の誘因が、鼻の内壁の血管の拡張を引き起こし、その結果、腫大及び排出が生じると考えられている。血管運動性鼻炎は、アレルギー性鼻炎と共存する場合があり、これは、「混合性鼻炎」と呼ばれる。血管運動性鼻炎は、男性よりも女性において、顕著に一般的であるように見え、その結果、研究者の中にはホルモンが関与すると考えている者もいる。あらゆる年齢で発症し得るアレルギー性鼻炎とは対照的に、一般に、発症年齢は２０歳を過ぎてからである。血管運動性鼻炎に罹患している個体は典型的には、年間を通して症状を経験するが、症状は、急な気候の変化がより一般的な春及び秋に増悪する場合がある。推定１７００万人の米国市民が、血管運動性鼻炎に罹患している。抗ヒスタミン剤のアゼラスチンが、アレルギー性鼻炎、混合性鼻炎及び血管運動性鼻炎に有効であることが示されている。
【００９７】
気道の反応性亢進（又は気管支の反応性亢進若しくは過敏性とのその他の組合せ）は、容易に誘発される気管支けいれん（気管支梢又は小さな気道の収縮）により特徴付けられる状態である。気道の反応性亢進を、気管支の誘発試験を用いて評価することができる。この試験は、メタコリン又はヒスタミンのような製品を使用することが最も多い。これらの化学薬品は、気管支けいれんを通常の個体においても引き起こすが、気管支の反応性亢進を伴う人々は、より低い閾値を有する。気管支の反応性亢進は、喘息の顕著な特色であるが、また、慢性閉塞性肺疾患（ＣＯＰＤ）に罹患している人々においても頻繁に発生する。Ｌｕｎｇ  Ｈｅａｒｔ  Ｓｔｕｄｙでは、気管支の反応性亢進が、非重度のＣＯＰＤを有する患者のおよそ３分の２に存在し、このことから、肺機能の減退が、その他の因子とは独立に予測された。喘息においては、肺機能の減退は、気管支拡張剤療法により可逆性となる傾向があるが、一方、ＣＯＰＤにおいては、そうではない。
【００９８】
嚢胞性線維症（また、ＣＦとしても公知である）は、本発明の方法により治療することができる状態の別の例であり、身体全体を冒して、進行性の身体障害及びしばしば早期の死亡を引き起こす一般的な疾患である。嚢胞性線維症という名前は、特徴的な瘢痕化（線維症）及び膵臓内部における嚢胞の生成を指す。呼吸困難が、最も重大な症状であり、抗生物質及びその他の医薬品により治療するが、治癒しない頻繁な肺の感染の結果生じる。鼻腔感染、芳しくない成長、下痢及び不妊を包含する、多数のその他の症状は、ＣＦの、身体のその他の部分に対する作用の結果生じる。ＣＦは、タンパク質である嚢胞性線維症膜コンダクタンス制御因子（ＣＦＴＲ）についての遺伝子中の突然変異により引き起こされ、常染色体性劣性疾患とみなされている。
【００９９】
肺線維症は、肺における過剰な線維状結合組織（線維症）の生成又は発達である。これは、「肺の瘢痕化」であると説明することができる。肺線維症では、正常な肺の実質が、線維性組織で徐々に置き換わる。瘢痕組織の肥厚が、酸素の拡散能力の不可逆的な減少を引き起こす。さらに、服薬遵守の減少も、肺線維症を拘束性肺疾患にする。肺線維症は、肺の実質に固有の拘束性肺疾患の主要な原因である。
【０１００】
特定の態様では、呼吸器の免疫関連障害を本発明の方法により治療することによって、多くのパラメータにおいて有益な効果が得られ、病的な対象の症状が改善される。特定の態様では、そのような改善を、呼吸器疾患、具体的には、喘息に罹患している対象における、組織フェリチン濃度の低下、鼻のポリープ及び／又は肺中の総フェリチン結合鉄の低下、気管支周囲領域及び肺胞領域中の好酸球数及びリンパ球数の低下、気道上皮に対する損傷及び粘液の過剰産生の減弱、気管支肺胞液中の好中球の低下、粘液含量スコアの低下、気管支周囲の浸潤値の低下、上皮細胞の異形成の低下、線維状結合組織の低下のうちの少なくとも１つにより実証することができる。
【０１０１】
本発明のいくつかの態様は、呼吸器疾患、具体的には、喘息に罹患している対象を、本発明の金属−ＤＦＯ錯体、具体的には、Ｚｎ−ＤＦＯ及び／又はＧａ−ＤＦＯを用いて治療することを企図し、治療の結果、例４により示すように、約５％〜約９９．９％、具体的には、約５％〜約１０％、約１０％〜約１５％、約１５％〜約２０％、約２０％〜約２５％、約２５％〜約３０％、約３５％〜約４０％、約４０％〜約４５％、約４５％〜約５０％、約５０％〜約５５％、約５５％〜約６０％、約６５％〜約７０％、約７５％〜約８０％、約８０％〜約８５％、約８５％〜約９０％、約９０％〜約９５％、約９５％〜約９９．９％、具体的には、約３０％〜約５０％、より具体的には、約３５％〜約４５％、例えば、３５、３６、３７、３８、３９、４０、４１、４２、４３、４４及び４５％のうちのいずれか１つの、組織フェリチンの呼吸器疾患が誘発する増加の阻害が生じる。
【０１０２】
本発明の特定の態様は、呼吸器疾患、例として、喘息に罹患している対象を、本発明の金属−ＤＦＯ錯体を用いて治療することを企図し、治療の結果、例４により示すように、約５％〜約１００％、具体的には、約５％〜約１０％、約１０％〜約１５％、約１５％〜約２０％、約２０％〜約２５％、約２５％〜約３０％、約３５％〜約４０％、約４０％〜約４５％、約４５％〜約５０％、約５０％〜約５５％、約５５％〜約６０％、約６５％〜約７０％、約７５％〜約８０％、約８０％〜約８５％、約８５％〜約９０％、約９０％〜約９５％、約９５％〜約９９．９％、より具体的には、約９８％〜約１００％の、鼻のポリープ及び／又は肺中の総フェリチン結合鉄の呼吸器疾患が誘発する増加の阻害が生じる。
【０１０３】
本発明のその他の態様は、呼吸器疾患、具体的には、喘息に罹患している対象を、本発明の金属−ＤＦＯ錯体を用いて治療することを検討し、治療の結果、例４により示すように、約５％〜約１００％、具体的には、約５％〜約１０％、約１０％〜約１５％、約１５％〜約２０％、約２０％〜約２５％、約２５％〜約３０％、約３５％〜約４０％、約４０％〜約４５％、約４５％〜約５０％、約５０％〜約５５％、約５５％〜約６０％、約６５％〜約７０％、約７５％〜約８０％、約８０％〜約８５％、約８５％〜約９０％、約９０％〜約９５％、約９５％〜約９９．９％、より具体的には、約９８％〜約１００％の、気管支周囲領域及び肺胞領域中の好酸球数及びリンパ球数並びに気管支肺胞液中の好中球の呼吸器疾患が誘発する増加の阻害が生じる。
【０１０４】
本発明のいくつかの態様は、呼吸器疾患、具体的には、喘息に罹患している対象を、本発明の金属−ＤＦＯ錯体を用いて治療することを検討し、治療の結果、整数により段階付けた組織切片を評価することによって判断する場合、約５％〜約９９．９％、具体的には、約５％〜約１０％、約１０％〜約１５％、約１５％〜約２０％、約２０％〜約２５％、約２５％〜約３０％、約３５％〜約４０％、約４０％〜約４５％、約４５％〜約５０％、約５０％〜約５５％、約５５％〜約６０％、約６５％〜約７０％、約７５％〜約８０％、約８０％〜約８５％、約８５％〜約９０％、約９０％〜約９５％、又は約９５％〜約９９．９％の、炎症細胞の肺への浸潤の低下が生じる。
【０１０５】
本発明のいくつかの態様は、呼吸器疾患、具体的には、喘息に罹患している対象を、本発明の金属−ＤＦＯ錯体を用いて治療することを企図し、治療の結果、整数により段階付けた組織切片を評価することによって判断する場合、約５％〜約９９．９％、具体的には、約５％〜約１０％、約１０％〜約１５％、約１５％〜約２０％、約２０％〜約２５％、約２５％〜約３０％、約３５％〜約４０％、約４０％〜約４５％、約４５％〜約５０％、約５０％〜約５５％、約５５％〜約６０％、約６５％〜約７０％、約７５％〜約８０％、約８０％〜約８５％、約８５％〜約９０％、約９０％〜約９５％、又は約９５％〜約９９．９％の、気道上皮に対する構造上の損傷並びに杯細胞の異形成及び過形成の低下が生じる。
【０１０６】
本発明のいくつかの態様は、呼吸器疾患、具体的には、喘息に罹患している対象を、本発明の金属−ＤＦＯ錯体を用いて治療することを検討し、治療の結果、整数により段階付けた組織切片を評価することによって判断する場合、約５％〜約９９．９％、具体的には、約５％〜約１０％、約１０％〜約１５％、約１５％〜約２０％、約２０％〜約２５％、約２５％〜約３０％、約３５％〜約４０％、約４０％〜約４５％、約４５％〜約５０％、約５０％〜約５５％、約５５％〜約６０％、約６５％〜約７０％、約７５％〜約８０％、約８０％〜約８５％、約８５％〜約９０％、約９０％〜約９５％、又は約９５％〜約９９．９％の、粘液の過剰産生の低下が生じる。
【０１０７】
本発明のいくつかの態様は、呼吸器疾患、具体的には、全身性又は肺のパラコート中毒に罹患している対象を、本発明の金属−ＤＦＯ錯体を用いて治療することを検討し、治療の結果、約５％〜約９９．９％、具体的には、約５％〜約１０％、約１０％〜約１５％、約１５％〜約２０％、約２０％〜約２５％、約２５％〜約３０％、約３５％〜約４０％、約４０％〜約４５％、約４５％〜約５０％、約５０％〜約５５％、約５５％〜約６０％、約６５％〜約７０％、約７５％〜約８０％、約８０％〜約８５％、約８５％〜約９０％、約９０％〜約９５％、又は約９５％〜約９９．９％の、気道の瘢痕化の低下が生じる。
【０１０８】
本発明のいくつかの態様は、呼吸器疾患、具体的には、喘息に罹患している対象を、本発明の金属−ＤＦＯ錯体を用いて治療することを検討し、治療の結果、約５％〜約９９．９％、具体的には、約５％〜約１０％、約１０％〜約１５％、約１５％〜約２０％、約２０％〜約２５％、約２５％〜約３０％、約３５％〜約４０％、約４０％〜約４５％、約４５％〜約５０％、約５０％〜約５５％、約５５％〜約６０％、約６５％〜約７０％、約７５％〜約８０％、約８０％〜約８５％、約８５％〜約９０％、約９０％〜約９５％、又は約９５％〜約９９．９％の、気道の瘢痕化の低下が生じる。
【０１０９】
特定の態様では、本発明の方法、組成物、組合せ組成物及びキットは、任意の炎症性呼吸器障害を治療するのに適用可能であり得るが、ただし、そのような障害は、窒素及びその他のマスタードガス、並びにその他の化学兵器、例えば、サリンに対する曝露に続いて誘発されるものではないことに留意すべきである。
【０１１０】
本発明の作用機構は、広い範囲の病的状態に影響を及ぼす。これは、本発明の作用機構が、一般に、免疫関連障害において重要な役割を果たすＲＯＳの産生を阻害するからである。本発明は初めて、例５〜８において、本発明のＤＦＯ金属錯体はまた、別の免疫関連状態、例えば、糖尿病等の自己免疫障害を治療するのにも適用可能であることを明らかに示している。
【０１１１】
したがって、特定の態様ではまた、本発明の方法は、ＩＩ型糖尿病、Ｉ型糖尿病、又は任意の糖尿病関連状態を、予防し、治療し且つ／又は緩和することにも関する。
【０１１２】
糖尿病は、代謝の障害及び不適切に高い血糖（高血糖）により特徴付けられる症候群である。糖尿病は、低いレベルのホルモンのインスリン、又は補償するためのインスリン分泌の不十分なレベルと連動する、インスリンの作用に対する異常な耐性のいずれかにより生じる。特徴的な症状は、過剰な尿産生（多尿）、過剰な口渇及び水分摂取の増加（他飲）、並びにかすみ目であり、これらの症状は、血糖が軽度に上昇しているに過ぎない場合には存在しないと思われる。
【０１１３】
糖尿病には、３つの主要な形態、すなわち、Ｉ型糖尿病、ＩＩ型糖尿病、及び（妊娠の間に発生する）妊娠糖尿病がある。Ｉ型糖尿病は、インスリンの欠乏をもたらす、膵臓におけるインスリンを産生するランゲルハンス島のベータ細胞の喪失により特徴付けられる。このベータ細胞の喪失の主要な原因は、Ｔ細胞媒介型の自己免疫性の攻撃である。Ｉ型糖尿病に対して行うことができる公知の防止のための方策はない。ほとんどの罹患者は、これ以外には健常であり、発症時には健常な体重を有する。インスリンに対する感受性及び応答性は通常、とりわけ、早期においては、正常である。Ｉ型糖尿病は、小児又は成人を冒し得、伝統的には、「若年性糖尿病」と呼ばれ、これは、大半の糖尿病の症例が小児を冒すことを示す。
【０１１４】
Ｉ型糖尿病の主要な治療は、最早期からも行う、血中グルコースレベルの、血液検査モニターを使用する注意深いモニタリングと組み合わせたインスリンの補充である。インスリンがないと、糖尿病性ケトアシドーシスを発症する恐れがあり、これにより、昏睡又は死亡が生じる場合がある。また、ライフスタイルの調節（食餌及び運動）にも重点が置かれるが、これらにより、喪失を逆転させることはできない。一般的な皮下注射とは別に、また、インスリンをポンプにより送達することも可能であり、ポンプにより、インスリンを、事前にセットされたレベルで１日２４時間連続的に注入することが可能になり、必要に応じて、食事時間のインスリンの投与（ボーラス）をプログラムすることもできる。
【０１１５】
例８に示すように、Ｉ型糖尿病に罹患している動物を、本発明の金属−ＤＦＯ錯体及びそれらの組合せを用いて治療することにより、治療した対象の一般的な健康状態が改善された。したがって、一態様によれば、本発明の方法は、Ｉ型糖尿病を、防止し、治療し、緩和し又は阻害するのに適用可能である。いくつかの態様では、Ｉ型糖尿病に罹患している対象を、本発明の金属−ＤＦＯ錯体を用いて治療することにより、皮膚の染みの外観、及び局部的な色素沈着の変化を阻害する。その他の態様では、前記治療により、Ｉ型糖尿病に典型的な頻繁な排尿、発汗の増加及びケトン臭気のうちの少なくとも１つが寛解する。
【０１１６】
本明細書で呼ぶ「阻害」、「緩和」又は「減弱」という用語は、約１％〜９９．９％、具体的には、約１％〜約５％、約５％〜１０％、約１０％〜１５％、約１５％〜２０％、約２０％〜２５％、約２５％〜３０％、約３０％〜３５％、約３５％〜４０％、約４０％〜４５％、約４５％〜５０％、約５０％〜５５％、約５５％〜６０％、約６０％〜６５％、約６５％〜７０％、約７５％〜８０％、約８０％〜８５％、約８５％〜９０％、約９０％〜９５％、約９５％〜９９％、又は約９９％〜９９．９％のうちのいずれか１つの、プロセスの遅滞、拘束又は低下に関する。
【０１１７】
上記に関しては、パーセントの値を示す場合、それら、例えば、１０％、５０％、１２０％、５００％等は、「倍率変化」の値、すなわち、それぞれ、０．１、０．５、１．２、５等と互換性があることを理解されたい。
【０１１８】
ＩＩ型糖尿病は、かつてのインスリン非依存性糖尿病（ＮＩＤＤＭ）又は成人発症性糖尿病であり、インスリン抵抗性及び相対的なインスリンの欠乏の状況における高い血中グルコースにより特徴付けられる代謝障害である。
【０１１９】
インスリン抵抗性は、身体の細胞が、インスリンの存在に適切に応答しないことを意味する。Ｉ型糖尿病とは異なり、インスリン抵抗性は一般に、「受容体後」であり、このことは、Ｉ型糖尿病が、インスリンの産生に関する問題ではなく、インスリンに応答する細胞に関する問題であることを意味する。このことは、Ｉ型よりも複雑な問題であるが、時には、とりわけ、インスリンがしばしば依然として内部的に産生される早期の時期においては、治療するのがより容易である。重度の合併症が、ＩＩ型糖尿病の不適切な管理の結果生じる恐れがあり、それらの合併症として、腎不全、勃起不全、失明、緩慢な創傷の治癒（外科的切開を包含する）、及び冠状動脈疾患を包含する、動脈疾患が挙げられる。ＩＩ型の発症は、人生の中年及びそれ以降において最も一般的であるが、小児の肥満及び不活動の増加に起因して、青年及び若年成人において、より頻繁に見られている。
【０１２０】
糖尿病はしばしば、最初に、運動を増加させ、食餌を改変することによって管理する。状態が進行するにつれ、医薬品が必要になる場合がある。Ｉ型糖尿病とは異なり、全くないわけではないが、ケトアシドーシスに向かう傾向が非常に少ない。発生する恐れがある１つの作用が、非ケトーシス型高血糖である。高い血糖に由来する長期の合併症は、心臓発作、脳卒中、切断及び腎臓不全のリスクの増加を包含する。
【０１２１】
ＩＩ型糖尿病を潜在的に発症又は増悪させ得る多くの因子がある。これらは、肥満、高血圧、（高脂血症と組み合わさった）コレステロールの上昇を包含し、こうした状態は、メタボリックシンドローム（また、シンドロームＸ、Ｒｅａｖｅｎ症候群又はＣＨＡＯＳとしても公知である）としばしば呼ばれる。その他の原因は、先端巨大症、クッシング症候群、甲状腺中毒、褐色細胞腫、慢性膵炎、がん及び薬物を包含する。ＩＩ型糖尿病のリスクを増加させることが見出されている追加の因子は、加齢、高脂肪の食餌、及び活動の少ないライフスタイルを包含する。また、ＩＩ型糖尿病では、遺伝性の遺伝子の関連も強い。
【０１２２】
米国内では、推定２３６０万人（人口の７．８％）が、糖尿病に罹患しており、１７９０万が糖尿病と診断されており、そのうち、９０％はＩＩ型である。１９９０年から２００５年までの間に有病率が倍増し、ＣＤＣは、この増加を異常発生と特徴付けている。ＩＩ型糖尿病は、伝統的には成人の疾患とみなされていたが、小児における診断が、小児期の間の食餌パターン及びライフスタイルの変化に起因して上昇する肥満率と平行して増加している。北米における糖尿病の全症例の約９０〜９５％がＩＩ型であり、６５歳超の人口の約２０％がＩＩ型糖尿病に罹患している。世界のその他の地域におけるＩＩ型糖尿病患者の割合は、ほとんど確実に環境及びライフスタイルの理由で相当に異なるが、これらの詳細は不明である。世界全体で１億５０００万人超が糖尿病に罹患しており、この数は２０２５年までに２倍になると予想される。
【０１２３】
ＩＩ型糖尿病患者のために利用可能な薬物がいくつかあり、これらは、いくつかのクラスに分類されるが、同等でもあり得ず、相互に単に置き換えることもできない。全てが処方薬である。ＩＩ型糖尿病のために現在使用され、最も広く使用されている薬物のうちの１つが、ビグアナイドのメトホルミンである。この薬物は、主として、肝臓による貯蔵グリコーゲンからの血中グルコースの放出を低下させることによって、且つ二次的に、身体の組織における細胞によるグルコースの取込みの何らかの増加を誘発することによって働く。
【０１２４】
例５〜７により示すように、本発明のＤＦＯ金属錯体、具体的には、Ｚｎ−ＤＦＯ錯体及びＧａ−ＤＦＯ錯体、並びにそれらの組合せは、ＩＩ型糖尿病モデル動物中で調べた異なるパラメータにおいて実証されたように、明らかに有益な効果を示す。したがって、特定の態様によれば、本発明の方法は、ＩＩ型糖尿病を、防止し、治療し、緩和し又は阻害するのに適切である。本発明の方法により、ＩＩ型糖尿病に罹患している対象において、本発明のＺｎ−ＤＦＯ錯体及びＧａ−ＤＦＯ錯体の投与後に、水晶体フェリチン濃度の低下、糖尿病誘発型白内障の生成の低下、血中グルコースレベルの低下、２，３−ＤＨＢＡ及びカテコールの血中レベルの低下のうちの少なくとも１つが生じることを理解されたい。
【０１２５】
したがって、特定の態様では、ＩＩ型糖尿病に罹患している対象を、本発明の金属−ＤＦＯ錯体を用いて治療することにより、（正常を上回る）血中グルコースレベルの増加を、例６に実証するように、少なくとも約５％〜約９９．９％、具体的には、少なくとも約５％、少なくとも約１０％、少なくとも約１５％、少なくとも約２０％、少なくとも約２５％、少なくとも約３０％、少なくとも約３５％、少なくとも約４０％、少なくとも約４５％、少なくとも約５０％、少なくとも約５５％、少なくとも約６０％、少なくとも約６５％、少なくとも約７０％、少なくとも約７５％、少なくとも約８０％、少なくとも約８５％、少なくとも約９０％、又は少なくとも約９５％、最も好ましくは、約９８％阻害することに留意すべきである。
【０１２６】
さらに、その他の態様では、ＩＩ型糖尿病に罹患している対象を、本発明の金属−ＤＦＯ錯体を用いて治療することにより、耐糖能試験後の血中グルコースレベル、すなわち、経口投与による、１００ｇ体重当たり２００ｍｇのグルコースの投与に対する３時間の応答の増加を、少なくとも約５％〜約９９．９％、より具体的には、少なくとも約５％、少なくとも約１０％、少なくとも約１５％、少なくとも約２０％、少なくとも約２５％、少なくとも約３０％、少なくとも約３５％、少なくとも約４０％、少なくとも約４５％、少なくとも約５０％、少なくとも約５５％、少なくとも約６０％、少なくとも約６５％、少なくとも約７０％、少なくとも約７５％、少なくとも約８０％、少なくとも約８５％、少なくとも約９０％、少なくとも約９５％、少なくとも約９５、９７、９８、９９及び１００％阻害する。より具体的には、本発明の金属−ＤＦＯ錯体は、耐糖能後の血中グルコースレベルの増加を、例７、図１０Ａにより示すように、少なくとも約７５％、少なくとも約７６％、少なくとも約７７％、具体的には、約７８％阻害する。その他の態様では、本発明の金属−ＤＦＯ錯体は、耐糖能後の血中グルコースレベルの増加を、少なくとも約８０％〜９５％阻害する。より具体的には、例６、図８により示すように、８０、８１、８２、８３、８４、８５、８６、８７、８８、８９、９０、９１、９２、９３、９４及び９５％。
【０１２７】
その他の態様では、ＩＩ型糖尿病の完全な発症に至る前のインスリン抵抗性に罹患している対象を、本発明の金属−ＤＦＯ錯体を用いて治療することにより、正常な栄養下における血中グルコースレベルの増加を、体重の増加にもかかわらず、例５−表４により示すように、少なくとも約５％、少なくとも約１０％、少なくとも約１５％、少なくとも約２０％、少なくとも約２５％、少なくとも約３０％、少なくとも約３５％、少なくとも約４０％、少なくとも約４５％、少なくとも約５０％、少なくとも約５５％、少なくとも約６０％、少なくとも約６５％、少なくとも約７０％、少なくとも約７５％、少なくとも約８０％、少なくとも約８５％、最も好ましくは、約８０％阻害する。
【０１２８】
本発明の方法、キット及び組合せ錯体は、糖尿病関連状態を治療するのに適用可能であり得ることをさらに理解すべきである。本明細書において病態を指す場合に互換的に使用する用語「関連の（ａｓｓｏｃｉａｔｅｄ）」及び「関連の（ｒｅｌａｔｅｄ）」は、因果関係を共有する、偶然の頻度を超えて共存する、又は少なくとも１つの疾患、障害、状態若しくは病態が、第２の疾患、障害、状態若しくは病態を引き起こすのうちの少なくとも１つである疾患、障害、状態又は任意の病態を意味することを理解されたい。そのような状態は、例えば、眼に関連がある合併症（白内障、緑内障、網膜症）、ニューロパシー、腎障害、心筋症、脳卒中、高血圧、末梢動脈疾患、及び傷を包含することができる。本発明によれば、治療又は防止される望まれない副作用は、好ましくは、眼及び／又は視力に関連がある望まれない副作用、例として、白内障である。
【０１２９】
より具体的には、ＩＩ型糖尿病に罹患している対象を、本発明の金属−ＤＦＯ錯体及び特定の組合せを用いて治療することにより防止される、１つのそのような糖尿病誘発型の組織の損傷を、特定の態様では企図し、治療により、対象が糖尿病誘発型白内障を発症する確率を、例６により示すように、少なくとも約５％〜約９９．９％、具体的には、少なくとも約５％〜約１０％、少なくとも約１０％〜約１５％、少なくとも約１５％〜約２０％、少なくとも約２０％〜約２５％、少なくとも約２５％〜約３０％、少なくとも約３５％〜約４０％、少なくとも約４０％〜約４５％、少なくとも約４５％〜約５０％、少なくとも約５０％〜約５５％、少なくとも約５５％〜約６０％、少なくとも約６５％〜約７０％、少なくとも約７５％〜約８０％、少なくとも約８０％〜約８５％、少なくとも約８５％〜約９０％、少なくとも約９０％〜約９５％、少なくとも約９５％〜約９９％、好ましくは、約６７％〜約８３％減少させる。
【０１３０】
いくつかの態様によれば、例７に実証するように、組織の損傷のその他の指標が、本発明の金属−ＤＦＯ錯体及びそれらの組合せを用いて治療すると改善する。そのようなパラメータはとりわけ、チオレドキシンレダクターゼ、チオレドキシン及びアクチンを含む組織のタンパク質の分解の減少又は増加、組織の酵素の活性、例として、Ｍｓｒ活性の減少、及び特異的なタンパク質、例として、フェリチンの組織の濃度の増加を包含する。
【０１３１】
したがって、特定の態様では、ＩＩ型糖尿病に罹患している対象を、本発明の金属−ＤＦＯ錯体を用いて治療することにより、組織のチオレドキシンレダクターゼの糖尿病誘発型の減少を、例７、図１４Ａにより実証するように、少なくとも約５％〜約９９．９％、具体的には、少なくとも約５％〜約１０％、少なくとも約１０％〜約１５％、少なくとも約１５％〜約２０％、少なくとも約２０％〜約２５％、少なくとも約２５％〜約３０％、少なくとも約３５％〜約４０％、少なくとも約４０％〜約４５％、少なくとも約４５％〜約５０％、少なくとも約５０％〜約５５％、少なくとも約５５％〜約６０％、少なくとも約６５％〜約７０％、少なくとも約７５％〜約８０％、少なくとも約８０％〜約８５％、少なくとも約８５％〜約９０％、少なくとも約９０％〜約９５％、少なくとも約９５％〜約９９．９％、好ましくは、約７５％〜８０％、最も好ましくは、約７５％〜７７％阻害する。
【０１３２】
代替の態様では、ＩＩ型糖尿病に罹患している対象を、本発明の金属−ＤＦＯ錯体を用いて治療することにより、組織のチオレドキシンの糖尿病誘発型の減少を、例７、図１４Ｂにより示すように、少なくとも約５％〜約９９．９％、具体的には、少なくとも約５％〜約１０％、少なくとも約１０％〜約１５％、少なくとも約１５％〜約２０％、少なくとも約２０％〜約２５％、少なくとも約２５％〜約３０％、少なくとも約３５％〜約４０％、少なくとも約４０％〜約４５％、少なくとも約４５％〜約５０％、少なくとも約５０％〜約５５％、少なくとも約５５％〜約６０％、少なくとも約６５％〜約７０％、少なくとも約７５％〜約８０％、少なくとも約８０％〜約８５％、少なくとも約８５％〜約９０％、少なくとも約９０％〜約９５％、少なくとも約９５％〜約９９．９％、好ましくは、約９５％〜９９．９％、最も好ましくは、約９８％〜９９．９％阻害する。
【０１３３】
いくつかの態様では、ＩＩ型糖尿病に罹患している対象を、本発明の金属−ＤＦＯ錯体を用いて治療することにより、サリチレートの、そのフリーラジカル代謝物への変換の糖尿病誘発型の増加を、血中２，３−ＤＨＢＡにより示す場合、例７（図１１）により実証するように、約５％〜約９９．９％、具体的には、少なくとも約５％〜約１０％、約１０％〜約１５％、約１５％〜約２０％、約２０％〜約２５％、約２５％〜約３０％、約３５％〜約４０％、約４０％〜約４５％、約４５％〜約５０％、約５０％〜約５５％、約５５％〜約６０％、約６５％〜約７０％、約７５％〜約８０％、約８０％〜約８５％、約８５％〜約９０％、約９０％〜約９５％、約９５％〜約９９．９％、好ましくは、約９５％〜約９．９％、最も好ましくは、約９７％〜約９９．９％阻害する。
【０１３４】
その他の態様では、ＩＩ型糖尿病に罹患している対象を、本発明の金属−ＤＦＯ錯体を用いて治療することにより、組織のメチオニン−スルホキシドレダクターゼ（Ｍｓｒ）活性の糖尿病誘発型の減少を、例７、図１５Ｂに見られるように、約５％〜約９９．９％、具体的には、少なくとも約５％〜約１０％、約１０％〜約１５％、約１５％〜約２０％、約２０％〜約２５％、約２５％〜約３０％、約３５％〜約４０％、約４０％〜約４５％、約４５％〜約５０％、約５０％〜約５５％、約５５％〜約６０％、約６５％〜約７０％、約７５％〜約８０％、約８０％〜約８５％、約８５％〜約９０％、約９０％〜約９５％、約９５％〜約９９．９％、好ましくは、約９０％〜約９５％、最も好ましくは、約９１％〜約９３％阻害する。
【０１３５】
本発明のいくつかの態様は、ＩＩ型糖尿病に罹患している対象を、本発明の金属−ＤＦＯ錯体を用いて治療することを企図し、治療の結果、例７、図１６により示すように、約５％〜約９９．９％、具体的には、少なくとも約５％〜約１０％、約１０％〜約１５％、約１５％〜約２０％、約２０％〜約２５％、約２５％〜約３０％、約３５％〜約４０％、約４０％〜約４５％、約４５％〜約５０％、約５０％〜約５５％、約５５％〜約６０％、約６５％〜約７０％、約７５％〜約８０％、約８０％〜約８５％、約８５％〜約９０％、約９０％〜約９５％、約９５％〜約９９．９％、好ましくは、約７５％〜約８０％、最も好ましくは、約７６％〜約７８％の、組織フェリチンの糖尿病誘発型の増加の阻害が生じる。
【０１３６】
また、本発明の治療方法及び使用は、高インスリン血症、脂質異常症、高コレステロール血症、損なわれた耐糖能、高血圧、心血管疾患、糖尿病性心筋症、糖尿病性の心臓のリズム障害、アテローム動脈硬化、糖尿病性腎障害、糸球体腎炎、糸球体硬化、ネフローゼ症候群、高血圧性腎硬化症、末期腎臓疾患、微量アルブミン尿及びアルブミン尿を含む糖尿病関連の（ｄｉａｂｅｔｅｓ−ｒｅｌａｔｅｄ  ｏｒ  ａｓｓｏｃｉａｔｅｄ）疾患又は障害に罹患している対象の利益のために活用することもできる。
【０１３７】
高インスリン血症（ｈｙｐｅｒｉｎｓｕｌｉｎｅｍｉａ）又は高インスリン血症（ｈｙｐｅｒｉｎｓｕｌｉｎａｅｍｉａ）は、本明細書で使用する場合、過剰なレベルのインスリンが血中を循環している状態である。糖尿病前症としてもまた公知である、インスリン抵抗性及びシンドロームＸは一般的に、女性のＰＣＯＳ（多嚢胞性卵巣症候群）と関連がある。高インスリン血症はしばしば、糖尿病又は低血糖と誤解される。これらはいずれも、別個の状態である。高インスリン血症は、モニタリングも治療もされない場合、糖尿病に発達する恐れがあり、糖尿病の発症時に依然として存在する場合がある。高インスリン血症は、一般に考えられているように、糖尿病により引き起こされるわけではない。高インスリン血症は、一部の患者において低血糖を引き起こす場合がある。
【０１３８】
脂質異常症は、本明細書で使用する場合、血中の脂質の量の混乱である。先進国の社会では、ほとんどの脂質異常症が高脂血症であり、すなわち、しばしば食餌及びライフスタイルに起因して、血中の脂質が上昇する。インスリンレベルの長期の上昇は、脂質異常症に至る恐れがある。Ｏ−ＧｌｃＮＡｃトランスフェラーゼ（ＯＧＴ）のレベルの増加が脂質異常症を引き起こすことは公知である。
【０１３９】
高コレステロール血症は、本発明によれば、高いレベルのコレステロールが血中に存在することである。高コレステロール血症は、疾患ではないが、代謝の乱れであり、これは、多くの疾患に続発する場合があり、多くの形態の疾患、最も顕著には、心血管疾患に寄与する恐れがある。高コレステロール血症は、用語「高脂血症」（脂質レベルの上昇）及び「高リポタンパク血症」（リポタンパク質レベルの上昇）に密接に関連がある。血中のコレステロールの上昇は、リポタンパク質、すなわち、血流中でコレステロールを運ぶ粒子のレベルの異常に起因する。高コレステロール血症は、食餌、遺伝的な因子（例として、家族性高コレステロール血症におけるＬＤＬ受容体の突然変異）、並びに糖尿病等のその他の疾患の存在及び不活発な甲状腺に関連がある場合がある。高コレステロール血症のタイプは、どのタイプの粒子（例として、低密度リポタンパク質）が過剰に存在するかによって異なる。
【０１４０】
損なわれた耐糖能（ＩＧＴ）は、血糖調節障害の前糖尿病性の状態であり、インスリン抵抗性、及び心血管系の病態リスクの増加と関連がある。ＩＧＴは、ＩＩ型糖尿病に長年先行する場合がある。
【０１４１】
高血圧（ＨＴＮ）又は高い血圧は、本明細書で使用する場合、動脈の血圧が上昇する慢性の医学的状態である。高血圧は、低血圧の反対である。高血圧は、原発性（本態性）又は続発性のいずれかに分類される。症例の約９０〜９５％が、「原発性高血圧」であるといわれ、原発性高血圧は、医学的な原因を見出すことができない高い血圧を指す。残りの５〜１０％の症例（続発性高血圧）は、腎臓、動脈、心臓又は内分泌系に影響を及ぼすその他の状態により引き起こされる。持続性の高血圧は、脳卒中、心臓発作、心不全及び動脈瘤についてのリスク因子のうちの１つであり、慢性腎臓不全の主要な原因である。
【０１４２】
心筋症は、本明細書で使用する場合、心室の機能障害が、糖尿病を有する患者において、冠状動脈アテローム動脈硬化及び高血圧の非存在下で発症している場合に診断される心筋機能の悪化、例えば、臨床的な状態又は無症候性の状態である。心筋症は、心室の拡張、筋肥大、間質線維症、及び拡張期の機能障害の存在下において収縮期の機能が減少している又は保存されている状態により機能的に特徴付けられる。
【０１４３】
アテローム動脈硬化（また、動脈硬化性の血管疾患又はＡＳＶＤとしても公知である）は、動脈壁が、脂肪性の物質、例として、コレステロールの集積の結果として肥厚する状態である。アテローム動脈硬化は、動脈血管を冒す症候群、すなわち、動脈壁における慢性炎症応答であり、マクロファージ白血球の蓄積に主に起因し、低密度リポタンパク質（コレステロール及びトリグリセリドを運ぶ血漿タンパク質）により促され、マクロファージから脂肪及びコレステロールが、機能性の高密度リポタンパク質（ＨＤＬ）により適切に除去されない状態にある。アテローム動脈硬化は一般に、動脈の硬化又は下地付け（ｆｕｒｒｉｎｇ）と呼ばれる。アテローム動脈硬化は、動脈内部における複数のプラークの生成により引き起こされる。
【０１４４】
糖尿病性腎障害（糖尿病性腎症（ｎｅｐｈｒｏｐａｔｉａ  ｄｉａｂｅｔｉｃａ））は、キンメルスチール−ウィルソン症候群又は結節性糖尿病性糸球体硬化症及び毛細管内糸球体腎炎としてもまた公知であり、腎臓糸球体中の毛細血管の血管障害により引き起こされる進行性の腎臓疾患である。糖尿病性腎障害は、ネフローゼ症候群及びびまん性糸球体硬化により特徴付けられる。糖尿病性腎障害は、長期にわたる糖尿病に起因し、多くの西洋諸国では、透析の最も重要な適応症である。
【０１４５】
糸球体腎炎（ｇｌｏｍｅｒｕｌｏｎｅｐｈｒｉｔｉｓ）は、糸球体腎炎（ｇｌｏｍｅｒｕｌａｒ  ｎｅｐｈｒｉｔｉｓ）（ＧＮ）としてもまた公知であり、糸球体、又は腎臓中の小さな血管の炎症により特徴付けられる腎臓疾患である。糸球体腎炎は、単独の血尿及び／若しくはタンパク尿（尿中の血液及び／若しくはタンパク質の存在）と共にか、又はネフローゼ症候群、腎炎症候群、急性腎不全若しくは慢性腎不全として存在する場合がある。それらは、いくつかの異なる病理学的パターンのカテゴリーに分けられ、それらのパターンは、非増殖性タイプ又は増殖性タイプに広くグループ分けされる。原発性の原因は、腎臓に内因性のものであり、一方、続発性の原因は、特定の感染（細菌性、ウイルス性若しくは寄生性の病原体）、薬物、全身性障害（ＳＬＥ、血管炎）又は糖尿病と関連がある。
【０１４６】
糸球体硬化は、腎臓中の糸球体の硬化を指す。糸球体硬化は、腎臓糸球体の瘢痕化を記載するための一般的な用語である。タンパク尿（尿中の大量のタンパク質）は、糸球体硬化の徴候のうちの１つである。糖尿病が頻繁に、糸球体硬化の原因となる。
【０１４７】
ネフローゼ症候群は、腎臓が損傷を受け、大量のタンパク質（少なくとも１日当たり３．５グラム／１．７３ｍ２体表面積のタンパク尿）が血中から尿中へ漏れるようになる非特異的な障害である。
【０１４８】
ネフローゼ症候群により冒されている腎臓は、有足細胞中に小さな孔を有し、これらの孔は、タンパク尿（及びそれに続いて、タンパク質のアルブミンのうちのいくらかは、血中から尿に移行していることから、低アルブミン血症）を生じさせるには十分な大きさであるが、細胞が通るのを可能にするのに十分な大きさではない（したがって、血尿は生じない）。それに反して、腎炎症候群においては、ＲＢＣが、孔を通って通過して、血尿を引き起こす。糖尿病はしばしば、ネフローゼ症候群の根底にある原因となる。
【０１４９】
高血圧性腎障害又は高血圧性腎硬化症又は高血圧性腎臓疾患は、慢性の高い血圧に起因する腎臓に対する損傷を指す医学的状態である。腎臓において、良性の動脈性高血圧の結果として、ヒアリン（ピンク色の非結晶性の均一な物質）が、小動脈及び細動脈の壁中に蓄積して、それらの壁の肥厚及び管腔の狭小化、すなわち、硝子様細動脈硬化を起こす。結果として生じる虚血が、尿細管萎縮、間質線維症、糸球体の変化（より小さな糸球体に、異なる程度の、すなわち、軽度から糸球体の硬化までのヒアリン化が伴う）、及び傍糸球体の線維症を起こす。進行期においては、腎不全が発症する。機能性のネフロンが、拡張した尿細菅を有し、しばしば、管腔中に硝子様円柱を伴う。高血圧性腎障害としばしば関連がある追加の合併症は、糸球体の損傷を包含し、こうした損傷の結果として、タンパク尿及び血尿が生じる。
【０１５０】
末期の腎臓疾患は、慢性腎臓疾患（ｃｈｒｏｎｉｃ  ｒｅｎａｌ  ｄｉｓｅａｓｅ）としてもまた公知である慢性腎臓疾患（ｃｈｒｏｎｉｃ  ｋｉｄｎｅｙ  ｄｉｓｅａｓｅ）（ＣＫＤ）の進行期である。ＣＫＤは、数ヵ月又は数年の期間にわたり腎臓機能の進行性の喪失として出現する。腎臓機能の悪化の症状は非特異的であり、一般に体調が優れないと感じること及び食欲の低下を経験することを包含することができるであろう。最近の専門的な指針は、慢性腎臓疾患の重症度を、５つの段階に分類し、段階１は、最も軽度であり、通常、症状をほとんど引き起こさず、段階５は、重度の疾病であり、治療しない場合、平均余命は長くない。また、段階５のＣＫＤは、確立した慢性腎臓疾患とも呼ばれ、今では旧式の用語となった末期腎臓疾患（ＥＳＲＤ）、慢性腎臓不全（ＣＫＦ）又は慢性腎不全（ＣＲＦ）と同義である。
【０１５１】
例により明らかに示すように、本発明の金属錯体及び組合せは、白内障を低下させるのに有効である。したがって、別の特定の態様によれば、本発明は、糖尿病と関連がない白内障を包含する、白内障を、防止し、治療し、緩和し又は阻害するための方法、使用、組合せ組成物及びキットを提供する。白内障は、本明細書で使用する場合、混濁の程度が若干から完全まで変化し、光の通過を妨害する、眼の結晶性の水晶体中又はその膜中に発生する濁りである。加齢性白内障の発症の早期には、水晶体の度数が増加して、近視（ｎｅａｒ−ｓｉｇｈｔｅｄｎｅｓｓ）（近視（ｍｙｏｐｉａ））を引き起こす場合があり、水晶体が徐々に黄変及び不透明化し、青系の色の感受を低下させる場合がある。白内障は典型的には、緩慢に進行して、視力の喪失を引き起こし、潜在的には、治療しない場合、失明に至る。この状態は通常、両方の眼を冒すが、ほとんど常に、一方の眼が、他方の眼よりも早期に冒される。
【０１５２】
老人性白内障は、高齢者に発生し、最初に、水晶体が混濁し、水晶体が、それに続き腫大し、最終的には縮み、透明性が完全に喪失することによって特徴付けられる。さらに、モルガーニ白内障においては、時間と共に、白内障の皮質が液化して、乳状の白色液体を生成し、この場合、水晶体包被膜が、破裂し、漏れた場合には、重度の炎症を引き起こす恐れもある。治療しないと、白内障は、水晶体形態性緑内障を引き起こす恐れがある。
【０１５３】
加齢性白内障は、世界の失明の４８％に関与し、これは、世界保健機関（ＷＨＯ）によれば、約１８００万人に相当する。
【０１５４】
白内障は、紫外光に対する長期の曝露、放射線に対する曝露、糖尿病、高血圧等の疾患の二次的な作用、及び高齢又は外傷（おそらく、はるかにより早期のもの）を包含する、多様な理由で発症する。白内障は通常、水晶体タンパク質の変性の結果である。遺伝的な因子がしばしば、先天性白内障の原因であり、また、陽性の家族歴も、より若い年齢における白内障に罹患しやすくなる点、すなわち、初老期白内障の「表現促進」現象に関与する。白内障は、部分的又は完全に、無変化又は進行性、硬質又は軟質である場合がある。いくつかの薬物、例として、副腎皮質ステロイド及びセロクエルが、白内障の発症を引き起こす恐れがある。種々のタイプの白内障、例えば、核性白内障、皮質白内障、成熟白内障及び過熟白内障がある。また、白内障は、それらの場所、例えば、後側（古典的に、ステロイドの使用に起因する）、及び前側（加齢に関連がある一般的な（老人性の）白内障）によっても分類される。したがって、本発明の金属−ＤＦＯ錯体は、本明細書上記で示した全ての白内障のタイプに適用可能であり得ることを理解すべきである。
【０１５５】
特定の態様では、本発明の方法、組成物、組合せ組成物及びキットは、眼中の任意の炎症状態を治療するのに適用可能であり得るが、ただし、そのような障害は、窒素及びその他のマスタードガス、並びにその他の化学兵器、例えば、サリンに対する曝露に続いて誘発されるものではないことに留意すべきである。
【０１５６】
一態様によれば、本発明の方法は、免疫の炎症及び免疫関連障害、好ましくは、乾癬、喘息及び糖尿病のうちの少なくとも１つを治療し、緩和するのに特に適用可能であり得る。
【０１５７】
「免疫関連障害」は、対象の免疫系と、免疫系の活性化若しくは阻害のいずれかを通して関連がある状態、又は対象中の免疫応答の特定の構成成分、例として、適応免疫応答又は自然免疫応答を標的とすることによって治療、防止若しくは診断することができる状態であることに留意すべきである。そのような障害は、炎症性疾患又は自己免疫疾患のうちのいずれか１つであり得る。
【０１５８】
１つの特定の態様によれば、本発明の方法は、炎症性疾患又は炎症関連状態を治療するのにとりわけ適切であり得る。用語「炎症性疾患」又は「炎症関連状態」は、少なくとも１つの炎症性パラメータ、例えば、炎症性サイトカイン、例として、ＩＦＮ−ガンマ及びＩＬ−２の誘発を低下させることから利益をもたらすことができる任意の疾患又は病的状態を指す。この状態は、（主として）炎症により引き起こされ得、又は炎症は、別の生理学的原因により引き起こされた疾患の所見のうちの１つであり得る。
【０１５９】
本発明の方法、組合せ組成物及びキットにより治療することができるその他の免疫関連障害の例として、これらに限定されないが、潰瘍性大腸炎、クローン病、過敏性腸疾患（ＩＢＤ）、円形脱毛症、狼瘡、強直性脊椎炎、メニエル病、抗リン脂質症候群、混合性の結合組織疾患、自己免疫性のアジソン病、多発性硬化症、自己免疫性の溶血性貧血、重症筋無力症、自己免疫性の肝炎、尋常性天疱瘡、ベーチェット病、悪性貧血、水疱性類天疱瘡、結節性多発動脈炎、心筋症、多発性軟骨炎、セリアックスプルー皮膚炎、多腺性症候群、慢性疲労症候群（ＣＦＩＤＳ）、リウマチ性多発筋痛症、慢性、炎症性、脱髄性の多発性筋炎及び皮膚筋炎、慢性、炎症性多発ニューロパシー、原発性無ガンマグロブリン血症、チャーグ−ストラウス症候群、原発性胆汁性肝硬変、瘢痕性類天疱瘡、乾癬、クレスト症候群、レイノー現象、寒冷凝集素病、ライター症候群、リウマチ熱、円板状狼瘡、関節リウマチ、本態性、混合性クリオグロブリン血症サルコイドーシス、線維筋痛症、強皮症、グレーブス病、シェーグレン症候群、ギラン−バレー、全身硬直症候群、橋本甲状腺炎、高安動脈炎、特発性肺線維症、一時的な動脈炎／巨細胞動脈炎、特発性血小板減少性紫斑病（ＩＴＰ）、ＩｇＡ腎障害、ブドウ膜炎、血管炎、扁平苔癬、及び白斑が挙げられる。本明細書に記載するＤＦＯ金属錯体を対象に投与して、上記の疾患と関連がある異常な又は望まれない免疫応答と関連する障害を治療又は防止することができる。
【０１６０】
互換的に使用する用語「関連の（ａｓｓｏｃｉａｔｅｄ）」、「関連の（ｌｉｎｋｅｄ）」及び「関連の（ｒｅｌａｔｅｄ）」は、本明細書において病態を指す場合、因果関係を共有する、偶然の頻度を超えて共存する、又は少なくとも１つの疾患、障害、状態若しくは病態が、第２の疾患、障害、状態若しくは病態を引き起こすのうちの少なくとも１つである疾患、障害、状態又は任意の病態を意味することを理解されたい。
【０１６１】
本発明の方法には、治療有効量の本発明のＤＦＯ金属錯体を投与するステップが関与する。用語「有効量」は、本明細書で使用する場合、当業者に公知である等の考察により決定する量である。この量は、治療する免疫、炎症及び自己免疫と関連がある障害、具体的には、乾癬、喘息及び糖尿病により引き起こされた組織の損傷を防止する又は緩和するのに十分でなければならない。投与量は、症状の重症度、及び対象の、活性な薬物に対する応答性によって異なる。医学的に訓練を受けた専門家であれば、最適な投与量、投与方法及び繰り返し率を容易に決定することができる。いずれにしても、主治医が、治療しようとする対象の年齢、性別、体重及び疾患状態を考慮に入れて、用量を決定する。
【０１６２】
より具体的には、本発明の金属−ＤＦＯ錯体、又はそれらの任意の組合せ、混合物若しくはカクテルを含有する組成物を、予防的及び／又は治療的処置のために投与することができる。治療的適用では、組成物を、免疫、炎症又は免疫と関連がある障害（例えば、喘息、糖尿病及び乾癬）にすでに罹患している患者に、状態及びその合併症を治癒させる又は少なくとも部分的に停止させるのに十分な量で投与する。このことを達成するのに適切な量を、「治療有効用量」と定義する。こうして使用するのに有効な量は、状態の重症度及び患者自身の免疫系の一般的な状態によって異なるが、一般に、約０．０１〜約１００ｍｇ／Ｋｇ、とりわけ、約０．０１〜約１００、９０、８０、７０、６０、５０、４０、３０、２０及び１０ｍｇ／Ｋｇ、より具体的には、約２０ｍｇ／Ｋｇの本発明の金属−ＤＦＯ錯体／用量の範囲に及び、投与量は、０．１〜５０、より具体的には、５０、４０、３０、２０、１０、９．５、９、８．５、８、７．５、７、６．５、６、５．５、５、４．５、４、３．５、３、２．５、２、１．５及び１ｍｇ／Ｋｇ体重である。とりわけ、約０．０１〜約３．５ｍｇ／Ｋｇ体重が、より一般的に使用される。日、週又は月に、単回又は複数回投与するスケジュールを実施することができ、用量レベル及びパターンは、担当医により選択される。より特定の態様は、典型的には、０．２５ｍｇ／Ｋｇ体重を含有するが、２．５ｍｇ／Ｋｇ体重の１日用量を超えない、２〜３用量／週の使用に関する。
【０１６３】
本発明は、免疫関連障害、例として、皮膚炎症性障害、呼吸器障害及び糖尿病関連障害、好ましくは、乾癬、喘息及び糖尿病の発症を防止する、又はそれらの発症のリスクを低下させるための方法をさらに提供する。そのような方法は、予防有効量の本発明による金属錯体若しくは２つ以上の金属錯体の組合せ、又はそれらの医薬組成物を、免疫関連障害、例として、皮膚炎症性障害、呼吸器障害及び糖尿病関連障害、好ましくは、乾癬、喘息及び糖尿病の発症のリスクがある人に投与するステップを含む。用語「予防」は、研究者、獣医師、医師若しくはその他の臨床医が、組織、系、動物若しくはヒトにおいて、防止することを探求する生物学的若しくは医学的な事象の出現を防止する、又はそうしたリスクを低下させることを指し、用語「予防有効量」は、この目標を達成する医薬組成物の量を意味することを意図する。
【０１６４】
用語「予防有効量」は、研究者、獣医師、医師若しくはその他の臨床医が、組織、系、動物若しくはヒトにおいて、防止することを探求する生物学的若しくは医学的な事象の出現若しくは再発を防止する、又はそうしたリスクを低下させる組合せ医薬組成物の量を意味することを意図する。
【０１６５】
予防的適用では、本発明の金属錯体又はそれらの任意の組合せ、混合物若しくはカクテルを含有する組成物を、疾患状態を発症するリスクがある患者に投与して、患者の抵抗力を増強する。そのような量を、「予防的有効用量」であると定義する。こうした使用では、正確な量はここでも、患者の健康状態及び免疫の一般的なレベルによって異なるが、一般に、０．１〜１００ｍｇ／用量、とりわけ、１用量当たり０．１〜１０ｍｇ／Ｋｇ体重、とりわけ、１用量当たり０．１、０．２、０．３、０．４、０．５、０．６、０．７、０．８、０．９、１、２、３、４、５、６、７、８、９及び１０ｍｇ／Ｋｇ体重の範囲に及ぶ。
【０１６６】
さらに、本発明の金属錯体又はそれらの医薬組成物の投与は、本発明によれば、周期的であり得、例えば、周期的な投与を、１日２回、１日３回又は少なくとも１日１回、少なくとも約３日〜３ヵ月にわたり行うことができる。より低い用量の利点は、当業者には明らかである。これらは、とりわけ、副作用、とりわけ、長期の使用における副作用のより低いリスク、及び患者の、治療に対する脱感作のより低いリスクを包含する。
【０１６７】
別の態様では、本発明の金属錯体又はそれらの医薬組成物を使用する治療は、少なくとも１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１４、３０、６０、９０日間の治療の後に効果が生じ得、治療を生涯続行する。
【０１６８】
異なる状態の治療は、異なる用量又は異なる期間を使用することを示す場合があることに留意すべきであり、これらは、熟練の開業医には明らかであろう。
【０１６９】
本発明において提供する治療及び防止の方法については、前記治療に有効な量又は投与量は、治療しようとする疾患状態の重症度、及び患者の応答性によって異なり、治療コースは、数日〜数ヵ月、又は治癒する若しくは疾患状態の減少を達成するまで続くことにさらに留意すべきである。最適な投与スケジュールを、患者の体内の薬物の蓄積の測定値から計算することができる。当業者であれば、最適な投与量、投与方法及び繰り返し率を容易に決定することができる。一般に、投与量は、体重に従って計算し、日、週、月若しくは年に１回若しくは２回以上投与することができ、又は投与は、２〜２０年に１回であってもよい。当業者であれば、投与の繰り返し率を、体液又は組織中の本発明の組合せ組成物の滞留時間及び濃度の測定に基づいて容易に推定することができる。治療の成功に続いて、患者に疾患状態の再発を防止するための維持療法を受けさせるのが望ましい場合があり、本発明の組合せ組成物を、維持用量で、１日に１回又は２回以上投与する。
【０１７０】
本明細書で使用する場合、「疾患」、「障害」、「状態」等は、それらが対象の健康に関する場合、互換的に使用し、そのような用語のそれぞれ及び全てに帰属する意味を有する。
【０１７１】
本発明は、治療を必要とする対象又は患者の治療に関する。「患者」又は「必要とする対象」により、上記に言及した状態に罹患する恐れがあり、本明細書に記載する治療及び診断の方法が望まれる任意の生物体を意味し、それらは、ヒト、家畜哺乳動物及び非家畜哺乳動物、例として、イヌ及びネコの対象、ウシ、サル、ウマ及びマウスの対象、げっ歯類、家禽、水産養殖魚及び珍しい鑑賞魚を包含する。治療する対象はまた、任意の爬虫類又は動物園の動物であってもよいことを理解すべきである。より具体的には、本発明の組成物は、哺乳動物のためのものであることを意図する。「哺乳動物の対象」により、提案する療法が望まれる任意の哺乳動物を意味し、これらは、ヒト、ウマ、イヌ及びネコの対象、最も具体的には、ヒトを包含する。とりわけ、非ヒト対象の場合には、本発明の方法を、注射、飲料水、餌、スプレー又は経口胃管栄養を介する投与、及びそれを必要とする対象の消化管中への直接的な投与を使用して実施することができることに留意すべきである。特に、ヒト対象の場合には、薬物の組合せの患者への投与は、自己投与及び別の人による患者への投与の両方を包含することにさらに留意すべきである。
【０１７２】
用語「治療又は防止」は、対象への投与の、治療的に正の効果の完全な範囲を指し、乾癬、喘息若しくは糖尿病及び疾病、乾癬、喘息若しくは糖尿病の症状、又は乾癬、喘息若しくは糖尿病と関連がある障害の望まれない副作用の阻害、低下、軽減及び緩和を包含する。より具体的には、治療又は防止は、疾患の発症の阻止若しくは延期、症状の発症の阻止若しくは延期、及び／又は発症することが予想されるであろう若しくは予想されている、そのような症状の重症度の低下を包含する。これらは、現存する症状の寛解、追加の症状の阻止、及び症状の根底にある代謝の原因の寛解又は阻止をさらに含む。用語「阻害」、「緩和」、「低下」又は「減弱」は、本明細書で呼ぶ場合、約１％〜９９．９％、具体的には、約１％〜約５％、約５％〜１０％、約１０％〜１５％、約１５％〜２０％、約２０％〜２５％、約２５％〜３０％、約３０％〜３５％、約３５％〜４０％、約４０％〜４５％、約４５％〜５０％、約５０％〜５５％、約５５％〜６０％、約６０％〜６５％、約６５％〜７０％、約７５％〜８０％、約８０％〜８５％、約８５％〜９０％、約９０％〜９５％、約９５％〜９９％、又は約９９％〜９９．９％のうちのいずれか１つのプロセスの遅滞、拘束又は低下に関することを理解すべきである。
【０１７３】
上記に関しては、パーセントの値を示す場合、それら、例えば、１０％、５０％、１２０％、５００％等は、「倍率変化」の値、すなわち、それぞれ、０．１、０．５、１．２、５等と互換性があることを理解されたい。
【０１７４】
第２の側面では、本発明は、免疫関連障害を、予防し、治療し、緩和し又は阻害するための組成物の調製において、治療有効量の少なくとも１つのデスフェリオキサミン金属錯体（ＤＦＯ金属錯体）又はそれらの任意の組合せを使用することを企図する。
【０１７５】
２つ以上の金属のタイプを、本発明に従って使用することができる。実際に、本発明の使用のいくつかの態様では、金属は、亜鉛、ガリウム、マンガン、インジウム、銀、金、コバルト及びランタニド、具体的には、ユーロピウム（Ｅｕ）、並びに／又はそれらの組合せのうちのいずれか１つから選択され、好ましくは、亜鉛及びガリウムである。
【０１７６】
本発明の使用のより好ましい態様では、デスフェリオキサミン金属錯体は、亜鉛−デスフェリオキサミン錯体（Ｚｎ−ＤＦＯ）、ガリウム−デスフェリオキサミン錯体（Ｇａ−ＤＦＯ）、又はそれらの任意の組合せのうちの少なくとも１つであり、本発明の使用のさらなる態様では、この組成物は、少なくとも１つの追加の治療剤をさらに含む。
【０１７７】
種々の態様では、本発明は、免疫関連障害、具体的には、炎症性疾患及び自己免疫疾患を、防止し、治療し、緩和し又は阻害するための、ＤＦＯ金属錯体、具体的には、ＤＦＯ−Ｚｎ、ＤＦＯ−Ｇａ及びそれらの任意の組合せの使用を提供することに留意されたい。
【０１７８】
いくつかの特定の態様は、炎症性疾患が、慢性又は急性の炎症に関連する皮膚の病的状態、呼吸器疾患のうちのいずれか１つであり得、前記炎症性の全身性障害又は自己免疫疾患が、糖尿病又は任意の糖尿病関連状態である本発明の使用を企図する。
【０１７９】
より特定の態様では、慢性又は急性の炎症に関連する皮膚の病的状態が乾癬である本発明の使用を企図する。
【０１８０】
その他の特定の態様では、呼吸器疾患が喘息である本発明の使用を企図する。
【０１８１】
さらにその他の特定の態様では、障害がＩＩ型糖尿病、Ｉ型糖尿病、又は任意の糖尿病関連状態のうちのいずれか１つである本発明の使用を企図する。
【０１８２】
本発明は、免疫関連障害、具体的には、乾癬、喘息及び糖尿病のうちのいずれか１つを、防止し、治療し、緩和し又は阻害する場合に使用するための、少なくとも１つのデスフェリオキサミン金属錯体（ＤＦＯ金属錯体）若しくはそれらの任意の組合せ、又は前記を含む任意の医薬組成物をさらに提供する。
【０１８３】
第３の側面では、本発明は、治療有効量の少なくとも２つのデスフェリオキサミン金属錯体（ＤＦＯ金属錯体）の組合せを含む組成物を対象とし、この組成物は場合により、少なくとも１つの薬学的に許容できる担体、希釈剤、賦形剤及び／又は添加剤をさらに含む。
【０１８４】
いくつかの態様では、本発明の組成物の金属は、亜鉛、ガリウム、マンガン、インジウム、銀、金、コバルト及びランタニド、具体的には、ユーロピウム（Ｅｕ）、並びにそれらの任意の組合せのうちのいずれか１つから選択することができる。
【０１８５】
その他の特定の態様では、本発明の組成物は、亜鉛−デスフェリオキサミン錯体（Ｚｎ−ＤＦＯ）とガリウム−デスフェリオキサミン錯体（Ｇａ−ＤＦＯ）との組合せを含む。
【０１８６】
特定の態様は、亜鉛−デスフェリオキサミン錯体（Ｚｎ−ＤＦＯ）及び前記ガリウム−デスフェリオキサミン錯体（Ｇａ−ＤＦＯ）を１：０．０１〜１：１００の間の定量比で含有させる本発明の組成物を記載する。
【０１８７】
本発明による２つ以上の金属錯体を組み合わせて、免疫関連呼吸器疾患を治療することができることを理解されたい。一態様によれば、本発明による２つ以上の金属−ＤＦＯ錯体の組合せの使用は、少なくともそれぞれ約１００：１〜１：１００の間の任意の定量比でＧａ−ＤＦＯと組み合わせたＺｎ−ＤＦＯを含むことができる。任意の定量比の化合物の組合せを使用することができることを理解すべきである。非限定的な例として、化合物のうちのいずれかの間で使用する定量比は、１００：１、９０：１、８０：１、７０：１、６０：１、５０：１、４０：１、３０：１、２０：１、１０：１、９：１、８：１、７：１、６：１、５：１、４：１、３：１、２：１、１：１、１：２、１：３、１：４、１：５、１：６、１：７、１：８、１：９、１：１０、１：２０、１：３０、１：４０、１：５０、１：６０、１：７０、１：８０、１：９０、１：１００であり得る。典型的には、Ｚｎ−ＤＦＯ：Ｇａ−ＤＦＯの比は、２０：１〜１：２０、具体的には、４：１〜１：４の比、より具体的には、それぞれ、例２に示すように、１：１又は３：１のいずれかの比、好ましくは、１：１の比の範囲に及ぶことができる。さらに別の態様では、本発明の組合せ組成物のために使用する特定のＤＦＯ−金属の比は、１：１、３：１、４：１及び１：２（それぞれ、Ｚｎ−ＤＦＯ対Ｇａ−ＤＦＯの比）であり得る。本発明の組合せが３つ以上の錯体を含む場合、使用する定量比は、例えば、１：１：１、１：２：３、１：１０：５０、１：２０：１００、５０：１０、又は５：５０：１２等であり得ることにさらに留意すべきである。
【０１８８】
いくつかの態様は、少なくとも１つの追加のデスフェリオキサミン金属錯体を含む本発明の組合せ組成物を企図する。
【０１８９】
その他の態様は、少なくとも１つの追加の治療剤をさらに含む本発明の組合せ組成物を企図する。
【０１９０】
したがって、本発明は、免疫関連障害を、防止し、治療し、緩和し又は阻害するための組合せ組成物を提供する。いくつかの態様によれば、上記の免疫関連障害は、炎症性疾患及び自己免疫疾患のうちのいずれか１つである。
【０１９１】
いくつかの態様では、本発明による医薬組成物は、炎症性疾患及び自己免疫疾患のうちのいずれか１つを治療するのに特に有効であり、これらの疾患は、慢性又は急性の炎症に関連する皮膚の病的状態、呼吸器疾患のうちのいずれか１つであり、自己免疫疾患は、糖尿病又は任意の糖尿病関連状態である。
【０１９２】
より特定の態様は、慢性又は急性の炎症に関連する皮膚の病的状態、例えば、乾癬を、防止し、治療し、緩和し又は阻害するために、本発明の組合せ組成物を検討する。したがって、１つの特定の態様では、本発明の組合せ組成物は、乾癬を治療するために使用する。
【０１９３】
本発明の組成物は、特に、炎症性皮膚障害、例として、乾癬を治療するために使用する場合に、以下に、より詳細に記載するように、許容できる局所適用組成物であり得ることを見落としてはならない。代わりに、投与は、全身投与、例として、舌下、直腸、膣、頬側、非経口、静脈内、筋肉内、皮下の機序の経皮、腹腔内又は鼻腔内の投与様式による投与であってもよい。しかし、経口送達、経粘膜送達、腸からの送達、若しくは筋肉内注射、皮下注射及び髄内注射、並びに直腸注射、くも膜下腔内注射、直接的な側脳室内への注射、静脈内注射、眼内注射を包含する、非経口送達、又は任意のその他の医学的に許容できる投与方法も検討することができる。
【０１９４】
いくつかの態様は、特に、呼吸器疾患、例として、喘息を治療するために、本発明による組合せ組成物を検討する。一態様によれば、そのような組合せ組成物を、特に、経口又は鼻からの吸入による肺への送達に適応させることができる。より具体的には、肺への送達には、液体ネブライザー、エアロゾルに基づいた用量計量型吸入器（ＭＤＩ）、又は乾燥散剤を分散させるデバイスの使用が必要となる場合がある。代わりに、投与は、全身投与、例として、舌下送達、膣送達、頬側送達、非経口送達、静脈内送達、筋肉内送達、皮下の機序の経皮送達、腹腔内送達又は鼻腔内送達による投与であってもよい。しかし、経口送達、経粘膜送達、腸からの送達、若しくは筋肉内注射、皮下注射及び髄内注射、並びに直腸注射、くも膜下腔内注射、直接的な側脳室内への注射、静脈内注射、眼内注射を包含する、非経口送達、又は任意のその他の医学的に許容できる投与方法も検討することができる。
【０１９５】
いくつかの態様によれば、本発明の組合せ医薬組成物は、自己免疫障害、具体的には、糖尿病を治療するのに有効である。より具体的には、本発明の組合せ組成物を、ＩＩ型糖尿病、Ｉ型糖尿病又は任意の糖尿病関連状態を治療するために使用することができる。そのような態様によれば、本発明の組合せ組成物を、具体的には、経皮送達、腹腔内送達又は鼻腔内送達に適応させることができる。しかし、経口送達、経粘膜送達、腸送達、又は筋肉内注射、皮下注射及び髄内注射、並びに直腸注射、くも膜下腔内注射、直接的な側脳室内への注射、静脈内注射若しくは眼内注射を包含する、非経口送達も検討する。或いは、任意のその他の医学的に許容できる投与方法を検討することもできる。
【０１９６】
本発明の組合せ組成物の単回又は複数回の投与を、患者が必要とし、忍容する投与量及び頻度に応じて行う。いずれにしても、組成物は、患者を有効に治療するのに十分な分量の本発明の金属−ＤＦＯ錯体を提供すべきである。好ましくは、投与量を１回投与するが、治療結果を達成する又は副作用が療法の中断を正当化するのいずれかに至るまで周期的に適用することができる。一般に、用量は、患者にとって容認できない毒性を発生させることなく、疾患の症状又は徴候を治療する又は緩和するのに十分である。
【０１９７】
本発明の金属−ＤＦＯ錯体の制御放出性の非経口製剤を、インプラント、油性注射剤、又は粒子系若しくは任意のその他の医学的に許容できる方法として作製することができる。
【０１９８】
粒子系は、マイクロスフェア、微小粒子、マイクロカプセル、ナノカプセル、ナノ球体及びナノ粒子を包含する。マイクロカプセルは、治療のためのＤＦＯ金属錯体、具体的には、Ｚｎ−ＤＦＯ、Ｇａ−ＤＦＯ又はそれらの任意の組合せを中心コアとして含有する。マイクロスフェアでは、治療剤が、粒子全体を通して分散する。約１μｍ未満の粒子、マイクロスフェア及びマイクロカプセルを一般に、それぞれ、ナノ粒子、ナノ球体及びナノカプセルと呼ぶ。毛細血管は、およそ５μｍの直径を有し、したがって、ナノ粒子のみが、静脈内から投与される。微小粒子は典型的には、直径がおよそ１００μｍであり、皮下又は筋肉内に投与される。
【０１９９】
ポリマーを、本発明の金属−ＤＦＯ錯体又はそれらの任意の組合せ組成物のイオン制御放出のために使用することができる。薬物送達の制御において使用するための種々の分解性及び非分解性のポリマーマトリックスが、当技術分野で公知である。
【０２００】
さらに別の態様では、リポソームを、制御放出及び脂質カプセル化薬の薬物標的化のために使用する。
【０２０１】
「リポソーム」は、ベシクルとして理解されたい。その壁は、内部の水性の空洞を封入する、両親媒性の分子の１つ又は２つ以上の二重層から生成され、前記両親媒性の分子は、極性の頭部、及び一般に、アルキル鎖又は「疎水性の尾部」である疎水性の残基を含む。二重層（単数又は複数）は、好ましくは、リン脂質を含む。リン脂質の例として、ホスファチジルコリン（ＰＣ）及びそれらの誘導体：卵ホスファチジルコリン（卵ＰＣ）、ジミリストイル−ホスファチジル−コリン（ＤＭＰＣ）、ジパルミトイルホスファチジルコリン（ＤＰＰＣ）、ジオレオイルホスファチジルコリン（ＤＯＰＣ）、ジラウロイルホスファチジルコリン（ＤＬＰＣ）、ジステアロイルホスファチジルコリン（ＤＳＰＣ）、ジアラキドイルホスファチジルコリン（ＤＡＰＣ）、及びジリノレオイルホスファチジル−コリン（ＤＬＰＣ）が挙げられる。
【０２０２】
また、例えば、脂肪酸の２つの鎖に結合しており、極性の頭部がホスファチジルコリンとは異なるグリセロール基を包含するその他のリン脂質も、本発明のプロセスに従って使用することができる。また、その他の両親媒性の分子も、リポソーム二重層の組成の一部を生成することができる（コレステロール、親水性基により改変された極性の頭部を有する脂質、カチオン性脂質、蛍光脂質等）。リポソームは、好ましくは、主にリン脂質から構成される。リポソームを、超音波照射、相反転、押出成型、透析、脂質−洗剤の混合ミセルの樹脂による吸収又はゲルろ過、及び凍結融解法を包含する、従来の技法に従って調製することができる。例えば、リポソームを、リン脂質のフィルムを水和させ、続いて、ベシクルのサイズを決めるために段階的に行う押出成型プロセスを実施することによって調製することができる。
【０２０３】
上記に示したように、本発明の特定の態様は、免疫関連障害、例として、炎症性の皮膚の状態、具体的には、乾癬を、防止し、治療し、緩和し又は阻害する場合に使用するための、本発明のＤＦＯ金属錯体の組合せを含む組合せ組成物に関する。ＤＦＯ金属錯体、好ましくは、Ｚｎ−ＤＦＯ、Ｇａ−ＤＦＯ及びそれらの任意の組合せを、場合により医薬組成物の形態で、それを必要とする対象に投与することができ、医薬組成物は、活性な化合物を遊離の形態で含み、治療しようとする対象に直接投与することができることに留意すべきである。代わりに、活性な分子のサイズに応じて、そうした分子を担体にコンジュゲートさせてから投与するのが望ましい場合もある。治療用製剤は、任意の従来の投与剤型として投与することができる。製剤は典型的には、上記で定義した少なくとも１つの活性成分を、１つ又は２つ以上のそれらの許容できる担体と一緒に含む。
【０２０４】
用語「有効量」は、本明細書で使用する場合、当業者に公知である等の考察により決定する量である。この量は、治療する免疫、炎症及び自己免疫と関連がある障害、具体的には、乾癬、喘息及び糖尿病により引き起こされた組織の損傷を防止する又は緩和するのに十分でなければならない。投与量は、症状の重症度、及び対象の、活性な薬物に対する応答性によって異なる。医学的に訓練を受けた専門家であれば、最適な投与量、投与方法及び繰り返し率を容易に決定することができる。いずれにしても、主治医が、治療しようとする対象の年齢、性別、体重及び疾患状態を考慮に入れて、用量を決定する。
【０２０５】
各担体は、その他の成分に適合し、患者を傷つけないという意味において、薬学的にも生理学的にも許容できるべきである。製剤は、経口投与、直腸投与、経鼻投与、若しくは非経口（皮下、筋肉内、腹腔内（ｉ．ｐ．）、静脈内（ｉ．ｖ．）及び皮内を包含する）投与、又は任意のその他の医学的に許容できる方法に適している製剤を包含する。好ましい態様では、製剤は、経口投与、経鼻投与又は腹腔内（ｉ．ｐ．）投与に適している。
【０２０６】
対象に望ましい効果をもたらすのに必要な有効量を包含する全てのそのような錯体の性質、可用性及び供給源、並びに投与については、当技術分野で周知であり、本明細書においてさらに記載する必要はない。医薬組成物の調製については、当業者に周知であり、多くの論文及び教科書に記載されている。例えば、Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ’ｓ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｓｃｉｅｎｃｅｓ、Ｇｅｎｎａｒｏ  Ａ．Ｒ．ｅｄ．、Ｍａｃｋ  Ｐｕｂｌｉｓｈｉｎｇ  Ｃｏ．、Ｅａｓｔｏｎ、ＰＡ、１９９０、とりわけ、そのｐｐ．１５２１−１７１２を参照されたい。
【０２０７】
特定の態様は、皮膚の炎症状態、具体的には、乾癬を、罹患している皮膚領域に、軟膏剤、クリーム剤、懸濁剤、ペースト剤、ローション剤、散剤、液剤、油剤、カプセル化ジェル剤、錯体を含有するリポソーム、任意の、本発明の錯体を含有するナノ粒子、又はこれらの錯体の組合せを含有する、スプレー可能なエアロゾル若しくは蒸気を局所投与することによって治療することを企図する。従来の薬学的担体、水性、粉末又は油性の基剤、増粘剤等が、必要となる又は望ましい場合がある。用語「局所適用」又は「局所投与」は、軟膏剤（ｏｉｎｔｍｅｎｔ）、クリーム剤、エモリエント剤、バーム剤、ローション剤、液剤、軟膏剤（ｓａｌｖｅ）、膏薬又は任意のその他の医薬剤型を、乾癬に罹患している若しくは罹患した状態が続いている、又は１つ若しくは２つ以上の乾癬の症状を示している若しくは示す状態が続いている患者の皮膚の一部又は全部の皮膚部分に適用することを意味する。
【０２０８】
特に、皮膚の炎症性障害の治療におけるＤＦＯ金属錯体及び組合せの本発明の方法による局所適用のためには、いずれの経皮送達を使用してもよいことに留意すべきである。本明細書で使用する場合、用語「経皮」は、薬物を、組織、例として、皮膚又は粘膜との直接的な接触により、送達、投与又は適用することを指す。また、そのような送達、投与又は適用は、経皮（ｐｅｒｃｕｔａｎｅｏｕｓ）、経皮（ｄｅｒｍａｌ）、経粘膜及び頬側としても公知である。
【０２０９】
経皮投与のための治療用組成物又は「経皮組成物」は、それらの中に可溶化した１つ又は２つ以上の薬物、具体的には、本発明によるＤＦＯ金属錯体又はそれらの組合せのうちのいずれかを含有する組成物である。組成物を皮膚領域に適用して、薬物の経皮投与又は局所適用を行う。そのような経皮組成物は、その中に１つ又は２つ以上の薬物を含有させたポリマーマトリックス含むことができる。ポリマーマトリックスは、感圧接着性であって、使用者（例えば、患者）の皮膚に直接付着させることができる。代わりに、ポリマーマトリックスは、非接着性であってもよく、このマトリックスに、組成物を使用者の皮膚に接着させるための別個の接着手段（例として、別個の接着性の層）を提供することもできる。
【０２１０】
本明細書で使用する場合、用語「可溶化」は、経皮組成物中に、活性を示す物質（例えば、薬物）の、結晶、分子又はイオンのレベルでの細部にわたる分散又は溶解があること意味することを意図する。したがって本明細書では、可溶化した、活性を示す物質は、本発明の組成物中にある場合には、「非結晶化」の形態をとっているとみなす。
【０２１１】
本明細書で使用する場合、「マトリックス」を、その中に治療有効量の薬物を組み込むポリマー組成物と定義する。マトリックスは、一体型であり、感圧接着剤を含むことができ、使用者の皮膚に接着又は保持するための別個の付着手段、例として、別個の接着性の層を使用することができる。マトリックスを含む経皮薬物送達システムは場合により、マトリックス中に薬物の供給を連続的に補充するための追加の薬物供給手段を包含することができる。「一体型」を、接着性、例えば、感圧接着性、生体付着性又はその他であるマトリックス組成物を含むデバイスと定義する。
【０２１２】
本明細書で使用する場合、ポリマー自体が、接着特性を示す場合、又はポリマーが、粘着付与剤、可塑剤、架橋剤若しくはその他の添加剤の添加により接着剤として機能する場合、ポリマーは「接着性」である。
【０２１３】
一態様では、本明細書に記載する方法、キット及び組合せ組成物を実行するために企図する経皮システムは、柔軟な有限のシステムの形態をとる。句「柔軟な有限のシステム」は、実質的に非水性の、固体の形態であって、それが接触するようになる表面に適合することが可能であり、そのような固体の形態をとって接触を維持することが可能であり、結果として、有害な生理学的応答を示すことも、患者に局所適用する間に水との接触により明らかに分解することもなく、局所適用を促進する形態を意味することを意図する。多くのそのようなデバイス、例として、経皮薬物送達パッチが、当技術分野で公知であり、市販されている。適切な柔軟な有限のシステムの例として、薬物を、接着性マトリックス、例として、感圧接着剤中に直接可溶化し、また、システムを患者の皮膚又は粘膜に付着させるための手段としても働くシステムが挙げられる。
【０２１４】
また、柔軟な有限のシステムは、薬物不浸透性の裏材の層又はフィルムを、接着性の層の一方の側面上に、及び放出ライナーを、他方の側面上に包含することもできる。裏材の層は、存在する場合には、柔軟な有限のシステム又は経皮パッチの接着性の層を、環境から保護し、薬物の喪失及び／又は接着性の層のその他の構成成分の環境への放出を防止する。放出ライナーは、存在する場合には、システムの接着性の層が局所適用の前に曝露しないように働く。放出ライナー及び裏材の層として使用するのに適している材料は、当技術分野で周知である。
【０２１５】
用語「皮膚」は、本明細書で使用する場合、空気界面から約７ｍｍの深さまでのヒト身体の空気と接触する部分を意味することに留意すべきである。したがってまた、この用語は、爪も包含する。
【０２１６】
好ましい態様では、皮膚障害、具体的には、乾癬を治療するための、本発明の金属錯体の投与は、局所ドレッシング剤により行う。用語「ドレッシング剤」は、典型的には、布、織物、合成膜、ガーゼ等から構成される創傷又は手術の部位のための覆いを意味する。局所ドレッシング剤は通常、皮膚の領域を覆うポリマー含有マトリックスである。局所ドレッシング剤は、皮膚と密接に接触しても、又はしなくてもよい。局所ドレッシング剤は、例えば、布若しくはガーゼであってもよく、又は皮膚上に塗る若しくはスプレーするポリマー溶液、すなわち、溶媒が蒸発して、且つ／又はポリマーが架橋結合して皮膚上に凝固するポリマーであってもよい。また、ドレッシング剤は、主に、創傷、手術部位等を覆い、保護することを意図する、ジェル剤、典型的には、架橋結合性のヒドロゲルも包含する。
【０２１７】
さらに好ましい態様では、油性基剤、好ましくは、ワセリン基剤の軟膏剤中の活性な金属−ＤＦＯ錯体及びそれらの任意の組合せの濃度は、本明細書の例に示すように、０．０５％ｗ／ｖ〜５％ｗ／ｖ、より好ましくは、０．１％ｗ／ｖ〜１．０％ｗ／ｖ、具体的には、０．１、０．２、０．３、０．４、０．５、０．６、０．７、０．８、０．９及び１．０％ｗ／ｖ、特に、０．１％ｗ／ｖ〜０．４％ｗ／ｖの範囲に及ぶことができる。
【０２１８】
本明細書で使用する場合、「薬学的に許容できる担体」は、あらゆる溶媒、分散媒体、コーティング、抗菌性及び抗真菌性の薬剤等を包含する。そのような媒体及び薬剤の、薬学的に活性な物質のための使用については、当技術分野で周知である。活性成分と不和合性である従来の媒体又は薬剤はいずれも除くが、治療用組成物中での従来の媒体又は薬剤の使用を企図する。
【０２１９】
外部の組織、例えば、口腔及び皮膚に適用するためには、製剤を、好ましくは、外用（ｔｏｐｉｃａｌ）軟膏剤又はクリーム剤として塗布する。軟膏剤中に製剤化する場合、活性成分を、パラフィン又は水混和性軟膏基剤のいずれかを用いて利用することができる。代わりに、活性成分を、クリーム剤の水中油型基剤又は油中水型基剤を用いて、クリーム剤中に製剤化することもできる。
【０２２０】
皮膚の傷害を治療するためには、ＤＦＯ金属錯体、好ましくは、Ｚｎ−ＤＦＯ、Ｇａ−ＤＦＯ、それらの任意の組合せ、それらの組合せ組成物又は組成物を、クリーム剤、軟膏剤、液体として、又は持続放出性パッチとしも適用することができ、それらの全てにおいて、前記ＤＦＯ−金属又は前記組成物が、それらの構成成分であるものとする。
【０２２１】
経皮投与に適応する医薬製剤を、レシピエントの表皮との密接な接触を長期にわたり維持することを意図する、個別のパッチとして提示することができる。
【０２２２】
皮膚損傷の局所治療は、全身的治療、例えば、ＤＦＯ金属錯体及びそれらの組合せの注射と組み合わせることができることに留意すべきである。注射は、腹腔内、皮下、病巣内、骨内、及びその他の適切な投与様式、好ましくは、腹腔内であり得る。
【０２２３】
一般に、全身的治療又は局所治療（記載するｉ．ｐ．注射及びｉ．ｎ．滴下注入、又は脂肪性担体中のガリウムＤＦＯ（０．１％）と亜鉛ＤＦＯ（０．４％）との組合せ０．５％（ｗ／ｖ）を含有する軟膏剤の塗布）のいずれかの使用は、防御を証明した。
【０２２４】
口腔中への局所投与に適応する医薬製剤は、ドロップ剤、トローチ剤及び口腔洗浄剤を包含する。
【０２２５】
本発明による金属−ＤＦＯ錯体及びそれらの組合せの、乾癬を、治療し、緩和し又は予防するための投与は、舌下、頬側、直腸、膣、非経口、静脈内、筋肉内、腹腔内、皮下、髄内、経皮、経口又は鼻からの吸入を介してのうちのいずれか１つであり得るが、局所適用及び経皮適用が好ましい。本発明の金属−ＤＦＯ錯体を、少なくとも年１回、より好ましくは、少なくとも６ヵ月に１回、より好ましくは、少なくとも３ヵ月に１回、より好ましくは、少なくとも２ヵ月に１回、より好ましくは、少なくとも１ヵ月に１回、より好ましくは、少なくとも２週間に１回、より好ましくは、少なくとも週１回、より好ましくは、少なくとも週２回、より好ましくは、少なくとも２日に１回、最も好ましくは、少なくとも２日毎に２回、乾癬に罹患している対象に投与することができる。一態様によれば、本発明の金属−ＤＦＯ錯体を、１日２回、より具体的には、１日１回、２日に１回、週１回、２週間に１回、１ヵ月間に１回、数日〜数ヵ月にわたり投与することができる。典型的には、週３回、２週間にわたる。
【０２２６】
本発明の特定の態様は、免疫関連障害、例として、呼吸器の炎症状態、具体的には、喘息を、防止し、治療し、緩和し又は阻害する場合に使用するための、本発明のＤＦＯ金属錯体の組合せを含む組合せ組成物に関する。したがって、本発明の金属錯体は、免疫関連障害に適用することができ、これらの障害はまた、いくつかの呼吸器障害も含む。呼吸器障害に関しては、用語「寛解」又は「治療」は、以下のうちのいずれかを指す。疾患を治癒させることを包含する、現存する疾患の治療；病的な個体の状態の改善（疾患所見の軽減）；急性の疾患の発作（例として、急性の喘息又はアレルギー性の発作）の数、持続期間又は重症度の減少。用語「防止」は、急性の疾患の発作の出現又は再出現の阻止（例として、喘息発作若しくはアレルギー性発作の阻止、又は鼻のポリープのそれらの除去後の再増殖の阻止）を指す。本発明の方法はまた、とりわけ、喘息の治療については、予防的であり、喘息発作を定期的に又は必要に応じて防止するための、デスフェリオキサミン金属錯体の投与も包含することを重視すべきである。
【０２２７】
いくつかの態様によれば、肺への投与が、呼吸器障害を治療するための好ましい投与方法であるとみなされる。
【０２２８】
用語「投与」は、呼吸器障害の治療に関連する場合、好ましくは、経口吸入、例として、液体のネブライザー、エアロゾルに基づいた用量計量型吸入器（ＭＤＩ）、若しくは乾燥散剤を分散させるデバイスを使用することによるものによって、又は腹腔内注射によっての肺への送達である。代わりに、投与は、舌下、頬側、非経口、静脈内、筋肉内、皮下、髄内又は経皮のうちのいずれか１つであってもよい。
【０２２９】
具体的には、本発明の金属錯体の、例えば、ネブライザーを包含する、散剤又はエアロゾルの吸入又は送気による；気管内、鼻腔内、上皮及び経皮による、肺への投与によって、喘息を治療することができる。
【０２３０】
さらに、本発明の金属−ＤＦＯ錯体を、呼吸器障害に罹患している対象に、少なくとも２ヵ月に１回、より好ましくは、少なくとも１ヵ月に１回、より好ましくは、少なくとも２週間に１回、より好ましくは、少なくとも週１回、最も好ましくは、少なくとも週に２回又は３回投与することもできる。
【０２３１】
いくつかの態様によれば、喘息又はその他の呼吸器障害に罹患しているヒト対象を治療するのに特に適切な用量は、０．００１ｍｇ／ｋｇ体重〜約２．５ｍｇ／ｋｇ体重の間、より具体的には、０．００３ｍｇ／ｋｇ体重〜約１．０ｍｇ／ｋｇ体重の間、より具体的には、０．００６ｍｇ／ｋｇ体重〜約０．６ｍｇ／ｋｇ体重の間、より具体的には、０．００９ｍｇ／ｋｇ体重〜約０．５ｍｇ／ｋｇ体重の間、より具体的には、０．０１２ｍｇ／ｋｇ体重〜約０．４ｍｇ／ｋｇ体重の間、より具体的には、０．０１５ｍｇ／ｋｇ体重〜約０．３ｍｇ／ｋｇ体重の間、より具体的には、０．０１８ｍｇ／ｋｇ体重〜約０．２ｍｇ／ｋｇ体重の間、最も具体的には、０．０２ｍｇ／ｋｇ体重〜約０．２ｍｇ／ｋｇ体重の間の範囲に及ぶことができる。
【０２３２】
特定の態様では、本発明の活性な金属−ＤＦＯ錯体は、約０．０３〜１０ｍｇ／ｋｇ治療する対象の体重、より具体的には、約０．０３〜１０ｍｇ／ｋｇ治療する対象の体重、より具体的には、約０．０６〜９ｍｇ／ｋｇ治療する対象の体重、より具体的には、約０．０９〜８ｍｇ／ｋｇ治療する対象の体重、より具体的には、約０．１２〜７ｍｇ／ｋｇ治療する対象の体重、より具体的には、約０．１５〜６ｍｇ／ｋｇ治療する対象の体重、より具体的には、約０．１８〜５ｍｇ／ｋｇ治療する対象の体重、より具体的には、約０．２１〜４ｍｇ／ｋｇ治療する対象の体重、より具体的には、約０．２４〜３ｍｇ／ｋｇ治療する対象の体重、より具体的には、約０．２７〜２ｍｇ／ｋｇ治療する対象の体重、最も具体的には、約０．３〜１ｍｇ／ｋｇ治療する対象の体重に対応する用量で、喘息に罹患している対象に投与する場合に、特に有効である。
【０２３３】
鼻からの吸入による投与のためには、本発明のＤＦＯ−金属錯体及びそれらの組合せである、本発明に従って使用するための活性成分は、好都合には、加圧されたパックから、又は適切な噴霧剤、例えば、ジクロロジフルオロメタン、トリクロロフルオロメタン、ジクロロ−テトラフルオロエタン若しくは二酸化炭素を使用するネブライザーからエアロゾルスプレーとして提示される形態で送達することができる。加圧されたエアロゾルの場合には、投与量単位を、計量した量を送達するためにバルブを提供することによって決定することができる。ディスペンサー中で使用するための、例えば、ゼラチンのカプセル剤及びカートリッジを、化合物と、適切な粉末基剤、例として、ラクトース又はデンプンとの粉末のミックスを含有させて製剤化することができる。
【０２３４】
担体が固体である、鼻への投与に適応する医薬製剤は、例えば、２０〜５００ミクロンの範囲に及ぶ粒子サイズを有する粗い粉末を包含し、これらの粉末を、鼻から吸い込んで、すなわち、鼻に近づけて保持する粉末の容器から鼻孔を通して迅速に吸入することによって投与する。鼻からのスプレー又は点鼻剤として投与するための、担体が液体である適切な製剤は、活性成分の水性又は油性の液剤を包含する。いくつかの態様によれば、本発明によるＤＦＯ金属錯体を、点鼻剤、眼科用ジェル剤、眼科用軟膏剤、スプレー又はパッチとして、必要とする対象に適用することができる。
【０２３５】
例により示すように、呼吸器障害、好ましくは、喘息を治療するためには、前条件付け（潜在的な曝露の直前に治療を開始すること）が、さらなる利益をもたらす場合がある。
【０２３６】
上記に示したように、本発明の特定の態様は、免疫関連障害、具体的には、自己免疫障害、例として、糖尿病、具体的には、Ｉ型糖尿病、ＩＩ型糖尿病、又は任意の関連がある障害を、防止し、治療し、緩和し又は阻害する場合に使用するための、本発明のＤＦＯ金属錯体の組合せを含む組合せ組成物に関する。用語「治療」又は「防止」は、糖尿病の状況においては、疾患の発症の阻止若しくは延期、症状、例えば、高血糖若しくは糖尿等の発症の阻止若しくは延期、及び／又は発症することが予想されるであろう若しくは予想されているそのような症状の重症度の低下を包含する。これらは、現存する症状の寛解、追加の症状の阻止、及び症状の根底にある代謝の原因の寛解又は阻止をさらに含む。
【０２３７】
望まれない副作用及び糖尿病関連障害の例として、眼に関連がある合併症（白内障、緑内障、網膜症）、ニューロパシー、アテローム動脈硬化、心筋症、心臓のリズム障害、腎障害、脳卒中、高血圧、末梢動脈疾患及び傷が挙げられる。本発明によれば、治療又は防止する望まれない副作用は、好ましくは、眼及び／又は視力に関連がある望まれない副作用、例として、白内障である。
【０２３８】
脳卒中（時には、脳血管発作（ＣＶＡ）と呼ばれる）では、脳への血液の供給の混乱に起因して、脳の機能（単数又は複数）の喪失が迅速に進む。これは、封鎖（血栓、動脈塞栓）、又は出血（血液の漏出）により引き起こされた虚血（血流の欠如）に起因し得る。脳卒中は、医学的な緊急事態であり、永久的な神経学的損傷、合併症を、及び死さえ引き起こす恐れがある。
【０２３９】
本発明による金属−ＤＦＯ錯体及びそれらの組合せの、糖尿病を、治療し、緩和し又は予防するための投与は、舌下、頬側、直腸、膣、非経口、静脈内、筋肉内、腹腔内、皮下、髄内、経皮、経口又は鼻からの吸入を介してのうちのいずれか１つ、好ましくは、腹腔内であり得る。経口送達、経粘膜送達、腸からの送達、若しくは筋肉内注射、皮下注射及び髄内注射、並びに直腸注射、くも膜下腔内注射、直接的な側脳室内への注射、静脈内注射、眼内注射を包含する、非経口送達、又は任意のその他の医学的に許容できる投与方法も検討することができることに留意すべきである。
【０２４０】
さらに、本発明の金属−ＤＦＯ錯体及び組合せを、少なくとも年１回、より好ましくは、少なくとも６ヵ月に１回、より好ましくは、少なくとも３ヵ月に１回、より好ましくは、少なくとも２ヵ月に１回、より好ましくは、少なくとも１ヵ月に１回、より好ましくは、少なくとも２週間に１回、より好ましくは、少なくとも週１回、最も好ましくは、少なくとも週に２回又は３回、糖尿病に罹患している対象に投与することもできる。
【０２４１】
いくつかの態様によれば、糖尿病に罹患しているヒト対象を治療するのに特に適切な用量は、０．０４ｍｇ／ｋｇ体重〜約４ｍｇ／ｋｇ体重の間、より具体的には、０．０８ｍｇ／ｋｇ体重〜約３．５ｍｇ／ｋｇ体重の間、より具体的には、０．１２ｍｇ／ｋｇ体重〜約３ｍｇ／ｋｇ体重の間、より具体的には、０．１６ｍｇ／ｋｇ体重〜約２．５ｍｇ／ｋｇ体重の間、より具体的には、０．２ｍｇ／ｋｇ体重〜約２ｍｇ／ｋｇ体重の間、より具体的には、０．２４ｍｇ／ｋｇ体重〜約１．５ｍｇ／ｋｇ体重の間、より具体的には、０．２８ｍｇ／ｋｇ体重〜約１ｍｇ／ｋｇ体重の間、より具体的には、０．３２ｍｇ／ｋｇ体重〜約０．８ｍｇ／ｋｇ体重の間、最も具体的には、０．３６ｍｇ／ｋｇ体重〜約０．６ｍｇ／ｋｇ体重の間である。
【０２４２】
注射剤として使用するのに適している医薬剤型は、無菌の水性の液剤又は分散剤、及び無菌の注射用の液剤又は分散剤を即時調製するための無菌の粉末を包含する。いずれの場合も、この剤型は、無菌でなければならず、容易なシリンジへの充填性が存在する程度に流動性を示さなければならない。この剤型は、製造及び保存の条件下で安定でなければならず、微生物、例として、細菌及び真菌の汚染作用に対して保存されなければならない。
【０２４３】
微生物作用の阻止は、種々の抗菌性及び抗真菌性の薬剤、例えば、パラベン、クロロブタノール、フェノール、ソルビン酸、チメロサール等によりもたらすことができる。多くの場合、等張化剤、例えば、糖又は塩化ナトリウムを包含させるのが好ましい。注射用組成物の吸収の延長を、組成物中で、吸収を遅延させる薬剤、例えば、モノステアリン酸アルミニウム及びゼラチンを使用することによってもたらすことができる。
【０２４４】
必要量の活性な化合物を、適切な溶媒中に、上記に列挙したその他の成分のうちのいくつかと共に組み込み、必要に応じて、続いて、ろ過滅菌を行うことによって、無菌注射用液剤を調製する。一般に、種々の滅菌した活性成分を、基剤としての分散媒体、及び上記に列挙した成分からの必要とするその他の成分を含有する無菌のビヒクル中に組み込むことによって、分散剤を調製する。
【０２４５】
無菌注射用液剤を調製するための無菌の散剤の場合には、好ましい調製方法は、活性成分と任意の追加の所望の成分の溶液をあらかじめ無菌ろ過した溶液から、活性成分と任意の追加の所望の成分からなる粉末を得る真空乾燥及び凍結乾燥の技法である。
【０２４６】
本発明に従って治療を必要とする対象を治療するために使用する医薬組成物は一般に、緩衝剤、すなわち、それらの容積モル浸透圧濃度を調節する薬剤を含み、場合により、当技術分野で公知の薬学的に許容できる担体、賦形剤及び／又は添加剤も１つ又は２つ以上含む。また、補助的な活性成分も、組成物中に組み込むことができる。担体は、例えば、水、エタノール、ポリオール（例えば、グリセロール、プロピレングリコール及び液体ポリエチレングリコール等）、それらの適切な混合物、並びに植物油を含有する溶媒又は分散媒体であり得る。適切な流動性を、例えば、コーティング、例として、レシチンを使用すること、分散剤の場合には、必要な粒子サイズを維持すること、及び界面活性剤を使用することによって維持することができる。
【０２４７】
種々の態様では、ｐＨが、約４と約９との間、約５と約７との間、約５．５と約６．５との間、又は約６となるように、最終的な溶液を調節することができる。組成物のｐＨを、薬理学的に許容できる酸、塩基又はバッファーを用いて調節することができる。
【０２４８】
上記に示したように、腹腔内経路、鼻腔内経路及び経皮経路に加えて、本発明の使用、方法及びキットにおいて使用する組成物は、任意のその他の適切な経路、例えば、非経口経路、（頬側又は舌下を包含する）経口経路、直腸経路、（頬側又は舌下を包含する）局所経路又は膣経路による投与に適応させることもできる。そのような製剤は、製剤学の技術分野で公知の任意の方法、例えば、活性成分と、担体（単数又は複数）又は賦形剤（単数又は複数）とを一緒にすることによって調製することができる。
【０２４９】
直腸投与に適応する医薬製剤は、坐剤又は浣腸剤として提示することができる。
【０２５０】
膣投与に適応する医薬製剤は、膣座剤、タンポン、クリーム剤、ジェル剤、ペースト剤、泡剤又はスプレー製剤として提示することができる。
【０２５１】
経口投与のための組成物及び製剤は、散剤若しくは顆粒剤、懸濁剤又は水若しくは非水性媒体中の液剤、カプセル剤、サシェ剤、（液体が充填されているものを包含する）ドロップ剤、チュー（ｃｈｅｗ）、多粒子及びナノ粒子、ジェル剤、固体の液剤、リポソーム、フィルム、オビュール（ｏｖｕｌｅ）、スプレー、或いは錠剤を包含する。増粘剤、矯味剤、希釈剤、乳化剤、分散助剤又は結合剤が望まれる場合がある。
【０２５２】
本発明に従って治療を必要とする対象を治療するために使用する医薬組成物は、好都合には、単位投与剤型として提示することができ、医薬品業界で周知の従来の技法に従って調製することができる。そのような技法は、活性成分と、薬学的担体（単数又は複数）又は賦形剤（単数又は複数）とを一緒にするステップを包含する。一般に、活性成分と、液体の担体又は微粉末化した固体の担体又は両方とを一様且つ密接に一緒にし、次いで、必要であれば、製品を成形することによって、製剤を調製する。組成物は、製剤化して、多くの可能な投与剤型、例として、これらに限定されないが、錠剤、カプセル剤、液体のシロップ剤、軟質ジェル剤、坐剤及び浣腸剤のうちのいずれかになすことができる。また、本発明の組成物は、水性、非水性又は混合性の媒体中の懸濁剤として製剤化することもできる。水性懸濁剤は、例えば、カルボキシメチルセルロースナトリウム、ソルビトール及び／又はデキストランを包含する、懸濁剤の粘度を増加させる物質をさらに含有することができる。また、懸濁剤は、安定化剤も含有することができる。また、本発明の医薬組成物は、これらに限定されないが、乳剤及びリポソーム含有製剤も包含する。
【０２５３】
上記で特に言及した成分に加えて、製剤はまた、検討中の製剤のタイプを考慮して、当技術分野に従来からあるその他の薬剤も包含することができ、例えば、経口投与に適している製剤は、矯味剤を包含することができることを理解すべきである。
【０２５４】
また、本発明の化合物を、眼又は耳に、典型的には、等張の、ｐＨを調節した、無菌の生理食塩水中の微粉化懸濁剤又は液剤の滴下剤の形態で直接投与することもできる。眼投与及び経耳投与に適しているその他の製剤は、軟膏剤、生分解性インプラント（例えば、吸収性ゲルのスポンジ、コラーゲン）及び非生分解性インプラント（例えば、シリコーン）、オブラート、レンズ、並びに粒子系又は小胞系、例として、ニオソーム又はリポソームを包含する。ポリマー、例として、架橋結合したポリアクリル酸、ポリビニルアルコール、ヒアルロン酸、セルロース由来のポリマー、例えば、ヒドロキシプロピルメチルセルロース、ヒドロキシエチルセルロース若しくはメチルセルロース、又はヘテロ多糖高分子、例えば、ゲランガムを、保存剤、例として、塩化ベンザルコニウムと一緒に組み込むことができる。また、そのような製剤を、イオン泳動により送達することもできる。
【０２５５】
眼投与及び経耳投与のための製剤を、即時に放出するように、且つ／又は放出を改変させて製剤化することができる。改変させた放出は、遅延性放出、持続性放出、パルス性放出、制御性放出、標的化放出、プログラム化放出を包含する。
【０２５６】
好ましい単位投与製剤は、活性成分の本明細書上記で列挙した１日用量若しくは１日用量を下回る用量、又はそれらの適切な一部分を含有する製剤である。
【０２５７】
その上さらに、本発明の使用、方法及びキットにおいて使用する組成物は、１用量当たり、治療有効量である所定の量の各活性成分を含有する単位用量剤型として提示することもできる。そのような単位を、０．１〜１００ｍｇ／Ｋｇ体重の本発明の金属−ＤＦＯ錯体又はそれらの任意の組合せを提供するようになすことができる。具体的には、０．０１〜１００ｍｇ／Ｋｇの間で、具体的には、０．０１、０．０２、０．０３、０．０４、０．０５、０．０６、０．０７、０．０８、０．０９、０．１、０．２、０．３、０．４、０．５、０．６、０．７、０．８、０．９、１．０、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、２０、３０、４０、５０、６０、７０、８０、９０及び１００ｍｇ／Ｋｇを使用することができる。より具体的には、０．０５〜３．０ｍｇ／Ｋｇ、０．１〜５ｍｇ／Ｋｇ、１．０〜８ｍｇ／Ｋｇ、２．５〜１０ｍｇ／Ｋｇ、４０〜８０ｍｇ／Ｋｇ、又は６０〜１００ｍｇ／Ｋｇのいずれか。そのような用量は、単回用量として、又はいくつかの個別の用量として提供することができる。もちろん、最終的な用量は、治療される状態、投与経路、並びに患者の年齢、体重及び状態よって異なり、医師の裁量に委ねられる。
【０２５８】
用語「有効量」は、本明細書で使用する場合、当業者に公知である等の考察により決定する量である。この量は、治療する、免疫、炎症及び酸化ストレスに関連がある障害、具体的には、乾癬、喘息及び糖尿病により引き起こされた、組織の損傷を防止する又は緩和するのに十分でなければならない。投与量は、症状の重症度及び対象の、活性な薬物に対する応答性によって異なる。医学的に訓練を受けた専門家であれば、最適な投与量、投与方法及び繰り返し率を容易に決定することができる。いずれにしても、主治医が、治療しようとする対象の年齢、性別、体重及び疾患状態を考慮に入れて、用量を決定する。
【０２５９】
本明細書に記載するヒトへの投与量は、例に記載のマウス又はラットへの投与量を、［Ｒｅａｇａｎ−Ｓｈａｗ  Ｓ  ｅｔ  ａｌ．、（２００７）ＦＡＳＥＢ  Ｊ、Ｖｏｌ．２２  Ｍａｒｃｈ］により記載されている変換規則を使用して変換することによって推定されることが理解されるであろう。
【０２６０】
本発明には、異なる経路、投与量及び組合せを通して投与することができる異なる金属錯体が関与する。より具体的には、疾患及び状態を、活性成分の組合せを用いて治療する場合、各活性成分を別個に投与することができる。したがって、錯体の異なる構成要素及び治療に必要な関連がある構成成分からなる好都合なモジュール式フォーマットを提供するキットであれば、上記のパラメータに必要な柔軟性をもたらすであろう。
【０２６１】
したがって、別の側面では、本発明は、キットを提供する。いくつかの態様では、本発明のキットは、少なくとも１つの金属−ＤＦＯ錯体を生成するのに必要である、少なくとも２つの別個の医薬組成物を包含することができる。例えば、Ｚｎ−ＤＦＯ錯体を生成するための化合物は、（ｉ）場合により第１の投与剤型中の、デスフェリオキサミン；（ｉｉ）第２の投与剤型中の、亜鉛若しくはガリウムであり得る金属イオン、又はそれらの任意の亜鉛若しくはガリウムの塩、エステル若しくはアミドを包含することができる。例えば、塩化亜鉛（ＺｎＣｌ２）、塩化ガリウム（ＧａＣｌ３）、酢酸亜鉛、グルコン酸ガリウム、クエン酸ガリウム及びヒスチジン酸亜鉛。場合により、本発明のキットは、（ｉｉｉ）錯体を生成するのに、調製物の有効期間を延長させるのに適切な条件をもたらす溶液、バッファー及び構成成分をさらに含むことができる。例えば、酸性化させる化合物、ＣＯ２又は炭酸水素若しくは炭酸との接触を回避し、低いｐＨ値を維持し、ｐＨの増減に用いる溶液、例として、ＨＣｌ又はＮａＯＨ。特定の態様では、本発明のキットは、１つのＤＦＯ金属錯体を生成するのに必要な別個の成分を含むことができる。その他の態様では、本発明のキットは、異なるＤＦＯ金属錯体に必要な化合物、例えば、Ｚｎ−ＤＦＯ錯体を生成するのに必要な化合物、及びまた、Ｇａ−ＤＦＯ錯体又は任意のその他の金属−ＤＦＯ錯体を生成するのに必要な化合物を含むことができる。
【０２６２】
特定の態様によれば、本発明は、治療効果を、それを必要とする対象において達成するためのキットを提供し、このキットは、
（Ｉ）
（ｉ）場合により第１の単位投与剤型中の、亜鉛イオン（Ｚｎ（ＩＩ））であって、それらの塩、エステル及びアミドのうちの任意の形態をとる亜鉛イオン（Ｚｎ（ＩＩ））、又は薬学的に許容できるそれらの誘導体、及び薬学的に許容できる担体又は希釈剤；
（ｉｉ）場合により第２の単位投与剤型中の、ＤＦＯ又は薬学的に許容できるその誘導体、及び薬学的に許容できる担体又は希釈剤；並びに
（ｉｉｉ）場合により、錯体を生成するのに適切な条件をもたらす溶液、バッファー及び構成成分、並びに／又は調製物の有効期間を延長させるのに必要な化合物
を含むＺｎ−ＤＦＯ錯体を生成するための化合物；
（ＩＩ）
（ｉ）場合により第３の単位投与剤型中の、ガリウムイオン（Ｇａ（ＩＩＩ））であって、それらの塩、エステル及びアミドのうちの任意の形態をとるガリウムイオン（Ｇａ（ＩＩＩ））、又は薬学的に許容できるそれらの誘導体、及び薬学的に許容できる担体又は希釈剤；
（ｉｉ）場合により第４の単位投与剤型中の、ＤＦＯ又は薬学的に許容できるその誘導体、及び薬学的に許容できる担体又は希釈剤；並びに
（ｉｉｉ）場合により、錯体を生成し、且つ／又は調製物の有効期間を延長させるのに適切な条件をもたらす溶液、バッファー及び構成成分
を含むＧａ−ＤＦＯ錯体を生成するための化合物；
（ＩＩＩ）
（ｉ）場合により第５の単位投与剤型中の、これらに限定されないが、Ｍｎ（ＩＩ）、Ｍｎ（ＩＩＩ）及びＭｎ（ＩＶ）を包含する、任意のイオン価状態をとるマンガンイオンであって、それらの塩、エステル及びアミドのうちの任意の形態をとるマンガンイオン、又は薬学的に許容できるそれらの誘導体、及び薬学的に許容できる担体又は希釈剤；
（ｉｉ）場合により第６の単位投与剤型中の、ＤＦＯ又は薬学的に許容できるその誘導体、及び薬学的に許容できる担体又は希釈剤；並びに
（ｉｉｉ）場合により、錯体を生成し、且つ／又は調製物の有効期間を延長させるのに適切な条件をもたらす溶液、バッファー及び構成成分
を含むＭｎ−ＤＦＯ錯体を生成するための化合物；
（ＩＶ）単位投与剤型を含有させるための容器手段
のうちの少なくとも１つを含む。
【０２６３】
特定の態様によれば、本発明のキットは、
（Ｉ）
（ｉ）場合により第１の単位投与剤型中の、亜鉛イオン（Ｚｎ（ＩＩ））であって、それらの塩、エステル及びアミドのうちの任意の形態をとる亜鉛イオン（Ｚｎ（ＩＩ））、例えば、ＺｎＣｌ２、又は薬学的に許容できるそれらの誘導体、及び薬学的に許容できる担体又は希釈剤；
（ｉｉ）場合により第２の単位投与剤型中の、ＤＦＯ又は薬学的に許容できるその誘導体、及び薬学的に許容できる担体又は希釈剤；並びに
（ｉｉｉ）場合により、錯体を生成し、且つ／又は調製物の有効期間を延長させるのに適切な条件をもたらす溶液、バッファー及び構成成分
を含むＺｎ−ＤＦＯ錯体を生成するための化合物；
（ＩＩ）
（ｉ）場合により第３の単位投与剤型中の、ガリウムイオン（Ｇａ（ＩＩＩ））であって、それらの塩、エステル及びアミドのうちの任意の形態をとるガリウムイオン（Ｇａ（ＩＩＩ））、例えば、ＧａＣｌ３、又は薬学的に許容できるそれらの誘導体、及び薬学的に許容できる担体又は希釈剤；
（ｉｉ）場合により第４の単位投与剤型中の、ＤＦＯ又は薬学的に許容できるその誘導体、及び薬学的に許容できる担体又は希釈剤；並びに
（ｉｉｉ）場合により、錯体を生成するのに適切な条件をもたらす溶液、バッファー及び構成成分
を含むＧａ−ＤＦＯ錯体を生成するための化合物；さらに、
（ＩＩＩ）前記単位投与剤型を含有させるための容器手段
を含む。
【０２６４】
塩化亜鉛及び塩化ガリウムは、非常に酸性であり、中性のｐＨでは溶液中に留まらないことに留意すべきである。したがって、酢酸亜鉛、グルコン酸ガリウム、クエン酸ガリウム、ヒスチジン酸亜鉛を包含する、その他の塩、並びに亜鉛及びガリウムのエステル及びアミドを、本発明は使用することができる。
【０２６５】
より具体的には、キットは、別個の組成物を含有するための容器手段を包含し、例として、ボトルに分割するか、又はフォイル製の包みに分割するが、また、別個の組成物を、単一の分割されていない容器内部に含有させてもよい。典型的には、キットは、別個の構成成分を投与するための指示を包含する。キットの形態は、別個の構成成分を、異なる投与剤型（例えば、経口と非経口）をとって、異なる投与間隔で投与するのが好ましい場合、又は組合せの個々の構成成分の増減を処方医師が望む場合に、特に好都合である。
【０２６６】
一態様によれば、本発明のキットは、免疫関連障害に罹患している対象において治療効果を達成することを意図する。
【０２６７】
治療効果を達成するとは、例えば、キットが、特定の障害、例として、乾癬、喘息及び糖尿病を治療することを意図する場合、治療効果は、例えば、治療する状態の進行の緩慢化であり得ることを意味する。
【０２６８】
本発明は、免疫関連障害の発症を、治療を必要とする対象において、治療し、緩和し、防止し又は遅延させる方法をさらに提供し、この方法は、本発明によるキット中に含ませた、治療有効量の単位投与剤型を前記対象に投与するステップを含む。特定の態様では、免疫関連障害は、炎症性疾患及び自己免疫疾患のうちのいずれか１つである。より特定の態様によれば、そのような炎症性疾患は、慢性又は急性の炎症に関連する皮膚の病的状態、呼吸器疾患のうちのいずれか１つであり、前記自己免疫疾患は、ＩＩ型糖尿病、Ｉ型糖尿病、又は任意の糖尿病関連状態である。
【０２６９】
キットの複数の構成成分のそれぞれを、同時に投与することができることを理解すべきである。
【０２７０】
代わりに、前記複数の投与剤型をそれぞれ、いずれかの順番で順次に投与してもよい。
【０２７１】
より具体的には、本明細書に記載するキットは、記載する組成物又は別個の複数の投与単位剤型を、すでに調製され、投与の準備が整っている液体の局所投与剤型、経鼻投与剤型又は経口投与剤型として包含してもよく、又はそれに代わって、記載する組成物を、溶媒を用いて再構成して、液体の経口投与剤型をもたらすことができる固体の医薬組成物として包含してもよい。キットが、溶媒を用いて再構成して、（例えば、経口投与のための）液体の投与剤型をもたらすことができる固体の医薬組成物を包含する場合、キットは場合により、再構成用の溶媒を包含することができる。この場合には、構成用又は再構成用の溶媒を活性成分と組み合わせて、それぞれの活性成分又はそれらの組合せの液体の経口投与剤型をもたらす。典型的には、活性成分は、そのような溶媒中で可溶性であり、液剤を生成する。溶媒は、例えば、水、非水性の液体、又は非水性の構成成分と水性の構成成分との組合せであり得る。適切な非水性の構成成分として、これらに限定されないが、油、アルコール、例として、エタノール、グリセリン、並びにグリコール、例として、ポリエチレングリコール及びプロピレングリコールが挙げられる。いくつかの態様では、溶媒は、リン酸緩衝生理食塩水（ＰＢＳ）である。
【０２７２】
以上で言及したように、本発明者らは、金属−ＤＦＯ錯体、具体的には、Ｚｎ−ＤＦＯ及びＧａ−ＤＦＯを、窒素及びその他のマスタードガスに対する曝露に続く眼及び皮膚の損傷を低下させる場合に、これまでに使用したことがある。溶液のｐＨを増減させて、炭酸水素又は炭酸、例えば、ＮａＨＣＯ３を使用してｐＨ５とし、次いで、ＮａＯＨ（１Ｍ）を用いてｐＨ７．４にすることによって、これらの錯体を調製した。驚くべきことに、本発明者らはここに至り、６．１超のｐＨ値においては、溶液がＣＯ２を含有する空気と反応し、本発明の方法、組成物、キット及び組合せが使用する錯体の生物学的活性の著しい喪失が生じることを見出すに至った。したがって、ＣＯ２及び酸素に対する曝露を回避するためには、ＨＣｌをｐＨの増減のために使用し、炭酸水素又は炭酸の使用は除外した。さらに、本発明のＤＦＯ金属錯体を含む組成物は現在、約５．０〜６．５の間のｐＨ範囲を有している。したがって、本発明は、治療有効量の少なくとも１つのデスフェリオキサミン金属錯体（ＤＦＯ金属錯体）を含む組成物をさらに提供し、前記組成物は、約５．０〜６．５の間、具体的には、５、５．１、５．２、５．３、５．４、５．５、５．６、５．７、５．８、５．９、６．０、６．１、６．２、６．３、６．４及び６．５のうちのいずれか１つのｐＨを有している。本発明の組成物は場合により、少なくとも１つの薬学的に許容できる担体、希釈剤、賦形剤及び／又は添加剤をさらに含むことができる。
【０２７３】
一態様によれば、ＤＦＯ金属錯体は、亜鉛−デスフェリオキサミン錯体（Ｚｎ−ＤＦＯ）であり得る。別の態様では、ＤＦＯ金属錯体は、ガリウム−デスフェリオキサミン錯体（Ｇａ−ＤＦＯ）であり得る。
【０２７４】
特定の態様では、本発明の組成物を、免疫関連障害を、防止し、治療し、緩和し又は阻害するために使用することができる。
【０２７５】
これらの組成物を、本発明が記載する方法及びキットのうちのいずれかにより使用することができることを認識すべきである。
【０２７６】
本発明を開示及び記載してきたが、本発明は、本明細書に開示する特定の例、プロセスのステップ及び材料に制限されず、したがって、プロセスのステップ及び材料は、若干変化することができることを理解されたい。また、本明細書において使用する用語法は、特定の態様を記載するためのみに使用し、本発明の範囲は、添付の特許請求の範囲及びその均等物によってのみ制限されることから、こうした用語法に、本発明を制限する意図はないことも理解されたい。
【０２７７】
本出願全体を通して、種々の刊行物を括弧内に参照している。これらの刊行物及びそれらの中で参照されている刊行物は全て、参照により本明細書に完全に組み込まれている。参考文献のリストを、本記載の終わり、すなわち、特許請求の範囲の直前に示す。
【０２７８】
単数形「１つ（ａ）」、「１つ（ａｎ）」及び「その（ｔｈｅ）」は、本明細書及び添付の特許請求の範囲において使用する場合、内容からそうでないことが明らかに示されない限り、複数形の指示対象を包含することに留意しなければならない。
【０２７９】
本明細書及び続く特許請求の範囲全体を通して、文脈からそれ以外の用法が必要とならない限り、単語「含む（ｃｏｍｐｒｉｓｅ）」、並びに変更形態、例として、「含む（ｃｏｍｐｒｉｓｅｓ）」及び「含む（ｃｏｍｐｒｉｓｉｎｇ）」は、記述する整数若しくはステップ又は整数若しくはステップの群を包含するが、その他の整数若しくはステップ又は整数若しくはステップの群はいずれも排除されないことを示すことが理解されるであろう。
【０２８０】
以下の例は、本発明者らが本発明の側面を実施する場合に利用した代表的な技法である。これらの技法は、本発明を実行するための好ましい態様を例示するものであるが、当業者であれば、本開示に照らして、多数の改変を、本発明の精神及び意図する範囲から逸脱することなく作製することができることを認識するであろうことを理解すべきである。
【０２８１】
例
材料
＊デスフェリオキサミンＢ−Ｄｅｓｆｅｒａｌ（登録商標）（ＤＦＯ）、ＵＳＰグレードを、Ｎｏｖａｒｔｉｓ  ＡＧ、スイスから購入した。
＊亜鉛及びガリウム−塩化亜鉛（カタログ番号４２９４３０）及び塩化ガリウム（ＩＩＩ）（カタログ番号４２７１２８）を、Ａｌｄｒｉｃｈ  Ｃｈｅｍｉｃａｌ、Ｓｔ．Ｌｏｕｉｓ、Ｍｏ．、米国から購入した。
＊卵白アルブミン（カタログ番号９００６−５９−１）を、Ｓｉｇｍａ  Ｓｔ．Ｌｏｕｉｓ、ＭＯ．、米国から購入した。
＊Ｎ−フルラン（カタログ番号Ｌ１７３１５）を、Ａｌｆａ  Ａｅｓａｒ、Ｗａｒｄ  Ｈｉｌｌ、ＭＡ、米国から購入した。
＊リポ酸、ＵＳＰグレード。
【０２８２】
抗体
＊ヤギ抗ヒトＬ−フェリチン抗体（Ｐｒｏｆ．Ａ．Ｋｏｎｉｊｎ、Ｔｈｅ  Ｈｅｂｒｅｗ  Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ−Ｈａｄａｓｓａｈ  Ｍｅｄｉｃａｌ  Ｓｃｈｏｏｌから好意に基づいて譲り受けた）。
＊二次ウサギ抗ヒトＨ−フェリチン抗体を、ラット心臓フェリチンから調製した。
【０２８３】
患者
喘息患者
２００７年６月と２００８年１０月との間に、Ｄｅｐａｒｔｍｅｎｔ  ｏｆ  Ｏｔｏｌａｒｙｎｇｏｌｏｇｙ／Ｈｅａｄ  ＆  Ｎｅｃｋ  Ｓｕｒｇｅｒｙ、Ｈａｄａｓｓａｈ−Ｈｅｂｒｅｗ  Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ  Ｈｏｓｐｉｔａｌ、Ｊｅｒｕｓａｌｅｍにおいて、鼻又は鼻腔の手術を受ける３４人の患者を遡及的に募集した。全ての患者が、アレルギー診療所で（患者の病歴、皮膚の皮刺試験及びＲＡＳＴ試験により）以前に診断された、通年性アレルギーに罹患していた。非アレルギー性の患者又は季節性アレルギーに罹患している患者を、研究から除外した。任意のその他の全身性疾患に罹患している患者も、（患者の病歴及びアレルギー診療所からのデータによれば）アスピリンに対して過敏性の患者も、喫煙者である患者もおらず、手術前の６週間の間に、抗ヒスタミン剤又は全身性ステロイドにより治療されたことがある患者もいなかった。各患者が、綿密な医学的問診、前側の鼻鏡検査及び鼻の内視鏡検査、並びにＣＴスキャンを包含する身体検査を受けた。２３人の患者が、Ａｍｅｒｉｃａｎ  Ａｃａｄｅｍｙ  ｏｆ  Ａｌｌｅｒｇｙ，Ａｓｔｈｍａ  ａｎｄ  Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｙ  ａｎｄ  ｔｈｅ  Ｔａｓｋ  Ｆｏｒｃｅ  ｏｎ  Ｒｈｉｎｏｓｉｎｕｓｉｔｉｓ；及びＥｕｒｏｐｅａｎ  Ｐｏｓｉｔｉｏｎ  Ｐａｐｅｒ  ｏｎ  Ｒｈｉｎｏｓｉｎｕｓｉｔｉｓ  ａｎｄ  Ｎａｓａｌ  Ｐｏｌｙｐｓ（Ｍｅｌｔｚｅｒ  ＥＯ  ｅｔ  ａｌ．（２００４）Ｏｔｏｌａｒｙｎｇｏｌ  Ｈｅａｄ  Ｎｅｃｋ  Ｓｕｒｇ；１３１：Ｓ１−６２）により確立された判断基準によれば、ＮＰを伴うＣＲＳに罹患していた。
【０２８４】
これらのＮＰ患者は、（局所性ステロイド及び全身性ステロイドを包含する）医学的治療の不成功に起因して手術を受けた。全てのＮＰ患者が、両方の鼻孔の、中鼻道及び上鼻道を起源とし、全鼻腔にわたるポリープによる完全又はほとんど完全な閉塞に罹患しており、したがって、最大の内視鏡スコア及びＬｕｎｄ−Ｍａｃｋａｙスコアが与えられた（Ｋｅｎｎｅｄｙ  ＤＷ（２０００）Ｌａｒｙｎｇｏｓｃｏｐｅ  １１０：２９−３１；Ｌｕｎｄ  ＶＪ  ｅｔ  ａｌ（１９９３）３１：１８３−４）。全てのＮＰ患者において、下鼻甲介、下鼻道、鼻孔底及び鼻中隔は、疾患により冒されていなかった。１０人のＮＰ患者が、（呼吸器診療所で患者の病歴、身体検査及び肺機能試験により以前に診断された）随伴性の気管支喘息に罹患していた。
【０２８５】
１１人の患者は、非鼻科学的疾患に起因して手術を受けた（脳脊髄液漏出の内視鏡的修復及び内視鏡的頭蓋底手術）。以前の研究と同様に、彼らの下鼻甲介を対照として利用した（Ｍｕｌｕｋ  ＮＢ  ｅｔ  ａｌ（２００７）．Ｊ  Ｏｔｏｌａｒｙｎｇｏｌ  ３６：３５７−６６）。患者の病歴に基づくと、喘息に罹患している者はいない。鼻及び鼻腔が正常であることから、全ての対照に、最小の内視鏡スコア及びＬｕｎｄ−Ｍａｃｋａｙスコアが与えられた。
【０２８６】
動物
＊１２週齢のＢａｌｂ／ｃマウス及び３週齢のＢＡＬＢ／ｃマウスを、Ｈａｒｌａｎ−Ｉｓｒａｅｌ施設から購入し、喘息モデルのために使用した。
＊スナネズミ（デブスナネズミ（Ｐｓａｍｍｏｎｙｓ  ｏｂｅｓｕｓ））を、Ｈａｒｌａｎ−Ｉｓｒａｅｌ施設から購入し、ＩＩ型糖尿病についてのモデルとして使用した。
＊Ｓｐｒａｇｕｅ−Ｄａｗｌｅｙ（ＳＤ）雄ラットを、Ｈａｒｌａｎ−Ｉｓｒａｅｌ施設から購入し、ストレプトゾトシン（７０ｍｇ／ｋｇ）を用いて処置し、Ｉ型糖尿病モデルとして使用した。
【０２８７】
実験手順
Ｚｎ−ＤＦＯ錯体及びＧａ−ＤＦＯ錯体の合成、並びに固体の錯体の収率及び純度の分析
Ｚｎ−ＤＦＯ：１リットルの二重に蒸留した水（ＤＤＷ）を、高い純度のＮ２ガスを用いてパージし、続いて、徹底的に脱気し、ＣＯ２及び酸素に対する曝露を回避するために、しっかり閉じた状態を維持する。３（３．００）グラムのＤｅｓｆｅｒａｌ（登録商標）を、１００ｍｌの脱気したＤＤＷ中に溶解させ、空気を含有しない状態を維持する。入手可能な最も高い純度のＺｎＣｌ２、無水（６２３．２ｍｇ）（＞９８％純粋、Ａｌｄｒｉｃｈ  Ｃｈｅｍｉｃａｌ  Ｃｏ．，Ｉｎｃ．；ＷＩ、米国、カタログ番号２１，１２７−３）を、１００ｍｌの脱気したＤＤＷ中に溶解させる。
【０２８８】
２つの溶液を混合し、ｐＨをモニターし、ＨＣｌ（１Ｍ）を用いてｐＨ＝２．５まで下げる。全ての構成成分を含有する溶液を、混合しながら、３５℃まで１５分かけて加熱する。ｐＨを、１Ｍ  ＮａＯＨ溶液を使用して、５．３〜５．５とし、次いで、０．１Ｍ  ＮａＯＨ溶液を使用して、ｐＨ＝６．０〜６．１とする。ｐＨを、６．１を上回らせてはならない。より高いｐＨ値では、溶液が、ＣＯ２を含有する空気と反応し、錯体の生物学的活性の著しい喪失を引き起こす。
【０２８９】
溶液を、凍結し、凍結して乾燥する（ｆｒｅｅｚｅ−ｄｒｙ）（凍結乾燥する（ｌｉｏｐｈｉｌｉｚｅ））。残余の堆積物を、収集し、粉砕して、均一な白色粉末を生成し、この粉末を、使用するまで、フリーザー（−１８℃）中の暗所に密封して保つ。
【０２９０】
粉末は、Ｚｎ−ＤＦＯ錯体（亜鉛：ＤＦＯ＝１．００：１．００）を、追加の塩化ナトリウムを伴って含有する。この塩化ナトリウムは、ＨＣｌのＮａＯＨを用いたｐＨの増減から生じる。塩化ナトリウムの濃度は変動する。調製した粉末の純度を分析するために、約１５ｍｇの重量の試料を、ＤＤＷ中の脱気したＴｒｉｓバッファー（２００ｍＭ、ｐＨ６／０）中に溶解させて、（純度が１００．０％であると考えると）０．４ｍＭの溶液を作製する。この溶液を、４μｌの一定分量の（標準化した）塩化第二鉄の１０ｍＭ溶液を用いて、分光光学的に（４３５ｎｍで）、６００μＭの、溶液中の第二鉄濃度に至るまで段階的に滴定する。滴定曲線をプロットする。滴定曲線は、２つの相を含む。２つの真直ぐな線が引かれ、交差点から、錯体の正確な濃度、及び計算されるその純度の程度が求められる。典型的には、純度の程度は、７８〜８５％である。
【０２９１】
Ｇａ−ＤＦＯ：１リットルの二重に蒸留した水（ＤＤＷ）を、高い純度のＮ２ガスを用いてパージし、続いて、徹底的に脱気し、ＣＯ２及び酸素に対する曝露を回避するために、しっかり閉じた状態を維持する。３（３．００）グラムのＤｅｓｆｅｒａｌ（登録商標）を、１００ｍｌの脱気したＤＤＷ中に溶解させ、空気を含有しない状態を維持する。ＧａＣｌ３、無水（５ｇのアンプル）を５００ｍｌの脱気したＤＤＷ中に溶解させ、８０．５ｍｌの溶液をＤＦＯ溶液に添加して、Ｇａ−ＤＦＯ錯体を生成した（８０５ｍｇ、入手可能な最も高い純度、９９．９９９＋％純粋、Ａｌｄｒｉｃｈ  Ｃｈｅｍｉｃａｌ  Ｃｏ．，Ｉｎｃ．；ＷＩ、米国、カタログ番号４２，７１２−８）。
【０２９２】
混合溶液のｐＨ（ｐＨ＝約２．５）をモニターする。混合溶液を、混合しながら、３５℃まで１５分かけて加熱する。ｐＨを、１Ｍ  ＮａＯＨ溶液を使用して、４．９〜５．０とし、次いで、０．１Ｍ  ＮａＯＨ溶液を使用して、ｐＨ＝５．４〜５．６とする。ｐＨを、５．６を上回らせてはならないことに留意すべきである。より高いｐＨ値では、溶液が、ＣＯ２を含有する空気と反応し、錯体の生物学的活性の著しい喪失を引き起こす。
【０２９３】
溶液を、凍結し、凍結して乾燥する（ｆｒｅｅｚｅ−ｄｒｙ）（凍結乾燥する（ｌｉｏｐｈｉｌｉｚｅ））。残余の堆積物を、収集し、粉砕して、均一な白色粉末を生成し、この粉末を、使用するまで、フリーザー（−１８℃）中の暗所に密封して保つ。
【０２９４】
粉末は、Ｇａ−ＤＦＯ錯体（ガリウム：ＤＦＯ＝１．００：１．００）を、追加の塩化ナトリウムを伴って含有する。この塩化ナトリウムは、酸のＮａＯＨを用いたｐＨの増減から生じる。調製した粉末の純度を分析するために、約１７ｍｇの重量の試料を、ＤＤＷ中の脱気したＴｒｉｓ緩衝液、ｐＨ＝５．６中に溶解させて、（純度が１００．０％であると考えると）０．４ｍＭの溶液を作製した。この溶液を、４μｌの一定分量の（標準化した）塩化第二鉄の１０ｍＭ溶液を用いて、分光光学的に（４３５ｎｍで）、６００μＭの第二鉄濃度に至るまで段階的に滴定する。錯体中のガリウムイオンが第二鉄イオンにより全て交換されることを可能にするために、それぞれの滴定のステップは、＞５分を要する。滴定曲線をプロットする。滴定曲線は、２つの相を含む。２つの真直ぐな線が引かれ、交差点は、錯体の正確な濃度を示し、錯体の純度の程度が計算される。典型的には、純度の程度は、７６〜８３％である。
【０２９５】
ヒトの鼻のポリープ及び下鼻甲介の試料の収集
２００７年６月と２００８年１０月との間に、Ｄｅｐａｒｔｍｅｎｔ  ｏｆ  Ｏｔｏｌａｒｙｎｇｏｌｏｇｙ／Ｈｅａｄ  ＆  Ｎｅｃｋ  Ｓｕｒｇｅｒｙ、Ｈａｄａｓｓａｈ−Ｈｅｂｒｅｗ  Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ  Ｈｏｓｐｉｔａｌ、Ｊｅｒｕｓａｌｅｍにおいて、鼻又は鼻腔の手術を受ける３４人の患者を遡及的に募集した。全ての患者が、アレルギー診療所で（患者の病歴、皮膚の皮刺試験及びＲＡＳＴ試験により）以前に診断された、通年性アレルギーに罹患していた。非アレルギー性の患者又は季節性アレルギーに罹患している患者を、研究から除外した。任意のその他の全身性疾患に罹患している患者も、（患者の病歴及びアレルギー診療所からのデータによれば）アスピリンに対して過敏性の患者も、喫煙者である患者もおらず、手術前の６週間の間に、抗ヒスタミン剤又は全身性ステロイドにより治療されたことがある患者もいなかった。各患者が、綿密な医学的問診、前側の鼻鏡検査及び鼻の内視鏡検査、並びにＣＴスキャンを包含する身体検査を受けた。２３人の患者が、米国アレルギー喘息免疫学会（Ａｍｅｒｉｃａｎ  Ａｃａｄｅｍｙ  ｏｆ  Ａｌｌｅｒｇｙ，Ａｓｔｈｍａ  ａｎｄ  Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｙ）及び鼻副鼻腔炎タスクフォース（ｔｈｅ  Ｔａｓｋ  Ｆｏｒｃｅ  ｏｎ  Ｒｈｉｎｏｓｉｎｕｓｉｔｉｓ）；並びに欧州の鼻副鼻腔炎及び鼻ポリープの診療意見書（Ｅｕｒｏｐｅａｎ  Ｐｏｓｉｔｉｏｎ  Ｐａｐｅｒ  ｏｎ  Ｒｈｉｎｏｓｉｎｕｓｉｔｉｓ  ａｎｄ  Ｎａｓａｌ  Ｐｏｌｙｐｓ）［Ｍｅｌｔｚｅｒ  ＥＯ  ｅｔ  ａｌ．（２００４）Ｏｔｏｌａｒｙｎｇｏｌ  Ｈｅａｄ  Ｎｅｃｋ  Ｓｕｒｇ；１３１：Ｓ１−６２］により確立された判断基準によれば、鼻のポリープ（ＮＰ）を伴う慢性副鼻腔炎（ＣＲＳ）に罹患していた。
【０２９６】
ＮＰ患者は、（局所性ステロイド及び全身性ステロイドを包含する）医学的治療の不成功に起因して手術を受けた。全てのＮＰ患者が、両方の鼻孔の、中鼻道及び上鼻道を起源とし、全鼻腔にわたるポリープによる完全又はほとんど完全な閉塞に罹患しており、したがって、最大の内視鏡スコア及びＬｕｎｄ−Ｍａｃｋａｙスコアが与えられた［Ｋｅｎｎｅｄｙ  ＤＷ（２０００）Ｌａｒｙｎｇｏｓｃｏｐｅ  １１０：２９−３１；Ｌｕｎｄ  ＶＪ  ｅｔ  ａｌ（１９９３）３１：１８３−４］。全てのＮＰ患者において、下鼻甲介、下鼻道、鼻孔底及び鼻中隔は、疾患により冒されていなかった。
【０２９７】
１０人のＮＰ患者が、呼吸器診療所で患者の病歴、身体検査及び肺機能試験により以前に診断された、随伴性の気管支喘息に罹患していた。
【０２９８】
１１人の患者は、非鼻科学的疾患に起因して手術を受けた（脳脊髄液漏出の内視鏡的修復及び内視鏡的頭蓋底手術）。彼らの下鼻甲介を対照として利用した［Ｍｕｌｕｋ  ＮＢ  ｅｔ  ａｌ（２００７）．Ｊ  Ｏｔｏｌａｒｙｎｇｏｌ  ３６：３５７−６６］。患者の病歴に基づくと、喘息に罹患している者はいない。鼻及び鼻腔が正常であることから、全ての対照に、最小の内視鏡スコア及びＬｕｎｄ−Ｍａｃｋａｙスコアが与えられた。
【０２９９】
組織試料を、手術の間に取り出し、次いで、分析した。全てのアッセイを、盲検法の様式で実施した。対照群（ｎ＝１１）からの下鼻甲介、非喘息患者（ｎ＝１５）及び喘息患者（ｎ＝１０）からの鼻のポリープを、取り出し、使用するまで、−８０℃で直ちに保存した。各試料を、Ｃｏｌｅ  Ｐａｒｍｅｒのテフロン製ホモジナイザーを使用して、溶解用緩衝液中でホモジナイズした。可溶化液中のタンパク質濃度を、Ｂｉｃｉｎｃｈｏｎｉｎｉｃ  Ａｃｉｄ  Ｋｉｔ（Ｐｉｅｒｃｅ、米国）を使用して、製造元の指示に従って決定した。
【０３００】
フェリチン濃度の決定
フェリチン濃度を、間接的な「サンドイッチ」ＥＬＩＳＡアッセイを使用して、我々の実験室で以前に開発した手順に従って定量化した。手短に述べると、ＥＬＩＳＡ用９６ウエルマイクロプレートを、ヤギ抗ヒトＬ−フェリチン抗体を用いてあらかじめコートした。ウサギ抗ヒトＨ−フェリチンを、二次抗体として使用した。プレートを、β−ガラクトシダーゼとコンジュゲートさせたヤギ抗ウサギＩｇＧを用いて処理した。次いで、クロロフェノールレッド−β−Ｄ−ガラクトピラノシドを添加し、プレートを、マイクロプレートリーダーを使用して、試験用（５７０ｎｍ）フィルター及び参照用（６３０ｎｍ）フィルターを用いて分析した。
【０３０１】
フェリチン結合鉄の決定
フェリチン結合鉄を測定するために、等しい体積の試料と、抗Ｈフェリチン抗体及び抗Ｌフェリチン抗体（溶解用緩衝液を用いて希釈）とを混合し、涼しい部屋で７２時間にわたりインキュベートした。次いで、試料を２０，０００×ｇで２０分間遠心分離し、上清を処分し、ペレットを、３２％ＨＮＯ３を用いて溶解させた。鉄の総量を、ｂａｔｈｏ−フェナンスロリンｂｉ−スルホネートを用いて、５３５ｎｍのフィルターを使用するＺｅｅｍａｎ原子吸光分析計を使用して分光光学的に測定した。フェリチンの鉄による飽和のレベルを計算した。
【０３０２】
マウスにおける喘息の誘発
＊１２週齢のＢＡＬＢ／ｃマウスに、第０、７及び１４日に、０．９％生理食塩水中に、３ｍｇのＡｌ（ＯＨ）３と共に溶解させた１０μｇ（１００μｌ）の卵白アルブミン（ＯＶＡ）を腹腔内（ｉ．ｐ．）投与し、第２０、２３、２５、２７、２９、３１、３４、３６、３７、４１、４３及び４５日に１０μｇ（５０μｌ）のＯＶＡを鼻腔内（ｉ．ｎ．）投与した。鼻腔内投与の場合、マウスに、Ｎ−フルランを吸入させて麻酔を施し、ＯＶＡを、マイクロピペットを用いてｉ．ｎ．滴下注入した。
【０３０３】
＊３週齢のＢＡＬＢ／ｃマウスを、第０、７及び１４日に、腹腔内（ｉ／ｐ）注射（１ｍｌのＰＢＳ中に０．３ｍｇのＯＶＡ及び６．７ｍｇのＡｌ（ＯＨ）３を含有するＯＶＡ溶液１００μｌ）を用いて感作した（×３）。第１４、１５、１７、２１及び２３日には、マウスを、以下に従って、２ｍｇ／ｍｌ  ＯＶＡを含有するＰＢＳ溶液中のＯＶＡの鼻腔内散布（各５０μｌ）を用いてさらに感作した。マウスに、Ｎ−フルランを吸入させて麻酔を施し、ＯＶＡを、マイクロピペットを使用して鼻腔内に滴下注入した。ＯＶＡの最後の投与の２４時間後に、マウスを屠殺した。
【０３０４】
メタコリンによる誘発、並びに組織切片及び生化学的試料の収集
動物に、ケタミン／キシラジンの混合物の単回注射により麻酔を施した。３分間の安定化の後に、１０μｌの０．５ｍｇ／ｍｌメタコリンの５分毎の３回の当然の鼻腔内散布において、メタコリンを投与した［Ｒｅｎｓｔｒｏｍ  Ａ  ｅｔ  ａｌ．（１９９５）Ｅｕｒ．Ｒｅｓｐｉｒ．Ｊ．Ｓｅｐ；８（９）：１５１４−９］。次いで、動物を、ケタミン／キシラジンの混合物の追加の注射により屠殺した。気管支肺胞の洗浄（ＢＡＬ）を、１ｍｌの緩衝生理食塩水を用いて、最後のメタコリンによる誘発の直後に実施した。ＢＡＬ液中の好酸球及び好中球の量を計算した。次いで、肺を、切除し、気管支周囲の浸潤測定、上皮細胞の異形成についての過ヨウ素酸シッフ（ＰＡＳ）染色、及び線維状結合組織についてのマッソントリクローム染色を使用して組織学的にアッセイした。生化学的分析のために、肺を、溶解用緩衝液中で、Ｃｏｌｅ  Ｐａｒｍｅｒテフロン製ホモジナイザーを使用してホモジナイズした。
【０３０５】
スナネズミの２型糖尿病モデル
スナネズミ（デブスナネズミ）を、２型糖尿病についてのモデルとして使用した。スナネズミを、高い血中グルコースレベル、体重の増加及び白内障の発症（眼水晶体の不透明化）を包含する、２型糖尿病の重度の形態を発症するように高エネルギー食に移した。
【０３０６】
スナネズミを、群に分けた。群Ｉに属する動物には、標準食を与え、それらを対照として利用し、一方、その他の指定した群に属する動物には、高エネルギー食を与え、糖尿病を発症させた。高エネルギー食を与えたマウスは、治療しない、又は２．５ｍｇ／ｋｇ体重のＧａ−ＤＦＯ、Ｚｎ−ＤＦＯ、ＤＦＯ単独、Ｚｎ、Ｇａ又はリポ酸（ＬＡ）の腹腔内注射を用いて、指定に従って、実験の持続期間にわたり週２回又は週３回治療するのいずれかとした。動物の血中グルコース及び体重を、実験全体を通してモニターした。
【０３０７】
Ｓｐｒａｇｕｅ−Ｄａｗｌｅｙの１型糖尿病モデル
Ｉ型糖尿病についてのモデルとしてのＳｐｒａｇｕｅ−Ｄａｗｌｅｙラット。ラットを、ストレプトゾトシン（ＳＴＺ）の注射により糖尿病とし、Ｇａ−ＤＦＯ／Ｚｎ−ＤＦＯの１：３の混合物を用いて治療した。
【０３０８】
２４匹のＳｐｒａｇｕｅ−Ｄａｗｌｅｙ（ＳＤ）雄ラットを、それぞれ１２匹の動物からなる２つの群に分けた。第１の群を、ストレプトゾトシン７０ｍｇ／ｋｇ  ｉ．ｐ．の単回注射により糖尿病性とした（ＳＤ群）。第２の群を対照群とみなし、０．２５ｍｌの生理食塩水ｉ．ｐ．の単回注射を与えた。血中グルコースレベルを週２回測定した。注射の３日間後に、第２の群に属する動物が、糖尿病の発症を示す、高いレベルの血中グルコースを示すようになった。第２週に、Ｇａ／Ｚｎ−ＤＦＯを用いる治療を開始した。各群を、それぞれが６匹のラットからなる２つの亜群に分けた。１つの糖尿病性亜群及び１つの対照亜群に属する動物に、それらの血中グルコース及び体重をモニターしながら、Ｇａ−ＤＦＯ／Ｚｎ−ＤＦＯの混合物０．２５ｍｇ／ｋｇ  ｉ．ｐを週２回注射した。未治療亜群には、生理食塩水を同じパターンに従って与えた。
【０３０９】
２，３−ＤＨＢＡアッセイ
２，３−ＤＨＢＡを測定するために、動物に、緩衝生理食塩水中の１００ｍｇ／ｋｇサリチレートｉ．ｐ．を注射した。サリチレートのヒドロキシル化の産物として、２，３−ＤＨＢＡを、Ｒｈｅｏｄｙｎｅ７１２５試料注入器（２０μｌのループ；Ｒｈｅｏｄｙｎｅ  Ｌ．Ｐ．、Ｒｏｈｎｅｒｔ  Ｐａｒｋ、ＣＡ、米国）が装備されているＶａｒｉａｎ５０００液体クロマトグラフ（Ｖａｒｉａｎ  Ａｎａｌｙｔｉｃａｌ  Ｉｎｓｔｒｕｍｅｎｔｓ、Ｗａｌｎｕｔ  Ｃｒｅｅｋ、ＣＡ、米国）を使用する、電気化学検出器付きＨＰＬＣ（ＨＰＬＣ−ＥＣＤ）を使用して定量化した。サリチレートとＤＨＢＡとの分離のために使用したカラムは、２５０×４ｍｍのＬｉＣｈｒｏｓｐｈｅｒ  １００ＲＰ−１８、５μｍ（Ｍｅｒｃｋ、Ｄａｒｍｓｔａｄｔ、ドイツ）であった。クロマトグラムを、ＰＣに基づいたデータの獲得及び処理のシステム（ＥＺＣｈｒｏｍ  Ｅｌｉｔｅ、Ｓａｎ−Ｒａｍｏｎ、ＣＡ、米国）を使用して記録した。
【０３１０】
Ｍｓｒ活性アッセイ
メチオニン−スルホキシドレダクターゼ（Ｍｓｒ）活性の定量化を、組織可溶化液をダブシル−メチオニンスルホキシドと３７℃で３０分間インキュベートし、続いて、還元された産物（ダブシルメチオニン）を４３６ｎｍにおけるＨＰＬＣ−分光光度的検出により分析することによって実施した。アッセイ：２００μＭダブシル−ｍｅｔ（Ｏ）を（基質として）包含する、総体積１００μｌ。また、反応混合物は、２０ｍＭ  ＤＴＴ、緩衝液、約１００μｇのタンパク質も含有した。インキュベーション（反応）を、１００μｌのアセトニトリルを添加することによって停止し、タンパク質画分を、回転沈殿させ、廃棄した。クロマトグラフィーを、１５０ｍｍ、３μｍのＣ−１８カラム上で、勾配（Ａ〜Ｂ）を使用して行った。Ａ＝１リットルの溶液中の０．５ｍｌのトリエチルアミンを足した１９ｇの酢酸ナトリウム、ｐＨ６．０；Ｂ＝（純粋な）アセトニトリル。基質ダブシル−ｍｅｔ（Ｏ）を、記載に従って調製した［Ｍｏｓｋｏｖｉｔｚ，Ｊ．ｅｔ  ａｌ．（２００１）Ｐｒｏｃ  Ｎａｔｌ  Ａｃａｄ  Ｓｃｉ  ＵＳＡ、９８（２３）：ｐ．１２９２０−５；Ｍｏｓｋｏｗｉｔｚ  ｅｔ  ａｌ．（１９９７）Ｐｒｏｃ  Ｎａｔｌ  Ａｃａｄ  Ｓｃｉ  ＵＳＡ、９４（１８）：ｐ．９５８５−９３］。
【０３１１】
（例１）
喘息性及び非喘息性の鼻ポリープ症患者のフェリチン及びフェリチン結合鉄の含有量
最初の実験の目的は、気道の炎症を起こしている組織中の、とりわけ、鼻ポリープ症及び喘息における鉄の蓄積、並びに喘息患者の鼻のポリープ中のフェリチンの蓄積を、調べ、支持することであった。
【０３１２】
通年性アレルギーに罹患している３４人の患者を遡及的に募集した。季節性アレルギーに罹患している患者を、任意のその他の全身性疾患に罹患している患者と同様に、研究から除外した。２３人の患者が、鼻ポリープ症（ＮＰ）を伴うＣＲＳに罹患しており、これらのＮＰ患者のうち１０人が、随伴性の気管支喘息に罹患していた。非鼻科学的疾患に罹患している１１人の患者を対照として利用した。患者を、３つの群、すなわち、（ｉ）ＮＰ喘息患者（ｎ＝１０）；（ｉｉ）ＮＰ非喘息患者（ｎ＝１３）、及び（ｉｉｉ）非鼻科学的疾患に罹患している患者（対照患者、ｎ＝１１）に分けた。下鼻甲介の試料を、（非鼻科学的疾患に罹患している）対照患者から収集し、鼻のポリープを、喘息性及び非喘息性の鼻ポリープ症患者から収集した。１ｍｇのタンパク質当たりのフェリチン及びフェリチン結合鉄の組織レベルをアッセイした。
【０３１３】
図１Ａにより示すように、本発明者らは、ＮＰ喘息患者から得られたフェリチンの組織レベルは、アッセイした対照のレベルよりも１．９倍高い（それぞれ、１．３４±０．３６μｇフェリチン／ｍｇタンパク質対０．６９±０．２４μｇフェリチン／ｍｇタンパク質）ことを見出した。非喘息性の鼻のポリープと対照との間では、組織フェリチンの有意な差は見出されなかった。図１Ｂは、対照、非喘息性ＮＰ患者及び喘息性ＮＰ患者から得られたＮＰ中のフェリチン結合鉄（ＦＢＩ）の量を描写する。ＦＢＩは、対照においてよりも、非喘息性ＮＰ患者においては１．６倍高く、喘息性ＮＰ患者においては４．０倍高かった。
【０３１４】
（例２）
動物モデルにおける、金属−ＤＦＯ錯体による喘息の治療
本発明者らは、本発明の組成物が、反応性の酸素種（ＲＯＳ）に関連する障害を治療するのに有益であり得ると想定した。これは、亜鉛デスフェリオキサミン及びガリウムデスフェリオキサミン並びにそれらの組合せ（本明細書における金属−ＤＦＯ錯体）が、前記ラジカルの、不安定な鉄が触媒する産生を阻害するからである。喘息は、ＲＯＳ産生の顕著な増加及び炎症状態の悪化と関連があることが公知である。本発明者らは、亜鉛デスフェリオキサミン及びガリウムデスフェリオキサミン並びにそれらの組合せの、喘息に対する潜在的な、有益な効果の研究に取りかかった。
【０３１５】
慢性喘息状態の予防的処置又は治療のいずれかをシミュレートする、卵白アルブミンにより誘発した喘息の２つの動物モデルを使用した［Ｋｕｎｇ  ＴＴ  ｅｔ  ａｌ（１９９４）Ｉｎｔ  Ａｒｃｈ  Ａｌｌｅｒｇｙ  Ｉｍｍｕｎｏｌ．１９９４  Ｓｅｐ；１０５（１）：８３−９０］。
【０３１６】
予防的処置のモデルについては、１２週齢のＢＡＬＢ／ｃマウスを、それぞれ４匹の動物からなる３つの治療群に分けた。動物を、実験手順の記載に従って、卵白アルブミン（ＯＶＡ）に対して感作させた。
【０３１７】
Ｚｎ−ＤＦＯ、Ｇａ−ＤＦＯ、Ｚｎ−ＤＦＯとＧａ−ＤＦＯとの１：１の組合せ（本明細書における金属錯体）又は生理食塩水のいずれかを、以下に従って投与した。第−５、−１、７及び１４日に、１ｍｇ／ｋｇ体重の金属錯体又は生理食塩水を、腹腔内（ｉ．ｐ．）投与した。第０、６、８、１３及び１５日に、０．３ｍｇ／ｋｇ体重の金属錯体又は生理食塩水を、ｉ．ｐ．投与した。第２０、２３、２５、２７、２９、３１、３４、３６、３７、４１、４３及び４５日に、０．３ｍｇ／ｋｇ体重の金属錯体又は生理食塩水を、鼻腔内（ｉ．ｎ．）投与した。最後の感作の２４時間後に、マウスに、ウレタンを用いて麻酔を施し、肺を、０．５ｍｌの無菌のＰＢＳを用いて４回洗浄した。「対照」群（非喘息性、生理食塩水を用いて治療したが、非感作）の動物（ｎ＝６）には、喘息性の、治療した動物と同じ形態を使用して、生理食塩水の注射及び滴下注入を与えた。「喘息」群の（感作させ、錯体を用いて治療するのではなく、生理食塩水を用いて治療した）動物（ｎ＝６）には、同じ形態下で、それぞれの錯体の代わりに生理食塩水を与えた。
【０３１８】
慢性喘息のモデルの治療については、以下の改変を有する類似の実験プロトコールに従った。１ｍｇ／ｋｇ体重の金属錯体又は生理食塩水を、（第−５及び−１日の代わりに）第０日にｉ．ｐ．投与し、さらに、０．３ｍｇ／ｋｇの錯体又は生理食塩水を、第１日にも投与した。このモデルでは、錯体の作用を、ヘマトキシリン−エオシン又はＰＡＳ／ＡＢ（過ヨウ素酸−シッフ／アルシアンブルー）のいずれかを用いて染色した肺切片の組織学的検査によりさらに検討した。
【０３１９】
錯体の抗喘息作用を推定するために、以下のパラメータを測定した。肺におけるフェリチンの濃度、炎症細胞の肺中への浸潤の存在、並びに気管支肺胞の洗浄液（ＢＡＬ）中のマクロファージ、好酸球、リンパ球及び好中球の量。
【０３２０】
予防的処置のモデルでは、正常な未治療ＢＡＬＢ／ｃマウスから得られた肺のフェリチンの濃度は、０．４±０．１μｇフェリチン／ｍｇタンパク質であった。ＯＶＡによる喘息の誘発及び生理食塩水を用いた処置によって、３．５倍の増加が引き起こされ、１．４±０．４μｇフェリチン／ｍｇタンパク質に達した。Ｚｎ−ＤＦＯ、Ｇａ−ＤＦＯ又はそれらの（１：１の）組合せを用いて処置した喘息性マウスの肺においては、フェリチンレベルのかなりの減少を観察し、それぞれ、０．６±０．２、０．５±０／３及び０．５±０．２μｇ／ｍｇに達した。
【０３２１】
同様に、慢性喘息の炎症モデルの治療においても、炎症細胞の浸潤の存在を、治療する場合又はしない場合にモニターした。表１により提示するように、ヘマトキシリン−エオシン染色した肺切片は、対照動物の肺と比較した場合、ＯＶＡに対する感作が肺組織切片中の好酸球及びリンパ球の数を増加させていることを示した。さらに、ＰＡＳ／ＡＢを用いて染色した場合、粘液の過剰産生を伴う、気道上皮に対する構造上の損傷並びに杯細胞の異形成及び過形成も、感作した肺において観察した。ＯＶＡ感作マウスの錯体を用いた治療は、気管支周囲領域及び肺胞領域中の好酸球及びリンパ球の数を顕著に低下させ、気道上皮に対する損傷及び粘液の過剰産生を減弱させた。生理食塩水を用いた治療は、肺組織における好酸球及びリンパ球の出現に対しても、気道上皮に対する損傷に対しても、粘液の分泌過多に対しても効果を示さなかった。
【０３２２】
また、表１は、慢性喘息をシミュレートするマウス（感作させ、錯体を用いて治療するのではなく、生理食塩水を用いて治療したマウス）の気管支肺胞の洗浄液（ＢＡＬ）中の総細胞数が、生理食塩水の滴下注入（非感作マウス）と比較して、最後の感作の２４時間後に顕著に増加したことも示す。総細胞数の増加は、マクロファージ、好酸球、リンパ球及び好中球と関連があった。対照群と比較した場合、ＯＶＡ感作マウスの錯体を用いた治療は、ＢＡＬ中の総細胞数の増加を顕著に阻害した。好酸球及びリンパ球が、錯体を用いた治療後に減少し、一方、生理食塩水を用いた治療は、ＢＡＬの好酸球増加に対して効果を示さなかった。
【表１】
2013502407.tif 000002
【０３２３】
（例３）
Ｚｎ−ＤＦＯとＧａ−ＤＦＯとの組合せの喘息に対する効果
次に、本発明者らは、Ｚｎ−ＤＦＯとＧａ−ＤＦＯとの組合せが喘息に対して発揮する有益な効果を特徴付けることに着手した。その目的で、３週齢のＢＡＬＢ／ｃマウスを、実験手順の記載に従って、卵白アルブミン（ＯＶＡ）に対して感作させ、未治療（群１）又はＺｎ−ＤＦＯ／Ｇａ−ＤＦＯの１：１の比の組合せを用いる治療（群２）のいずれかを行った。ｉ．ｐ．投与及びｉ．ｎ．投与の両方を行った。ＯＶＡ最後の投与の２４時間後に、マウスを屠殺した。
【０３２４】
治療マウス（群２）には、第−５、−１日及び第０、７、１４日に、１ｍｇ／ｋｇ体重のＺｎ−ＤＦＯ／Ｇａ−ＤＦＯ  ｉ．ｐ．を３回与えた。マウスを、第１、６、８及び１３日に、０．３ｍｇ／ｋｇ体重のＺｎ−ＤＦＯ／Ｇａ−ＤＦＯ  ｉ．ｐ．を用いてさらに治療した。第１５、１７、２１及び２３日に、マウスを、１ｍｇ／ｋｇ体重のＺｎ−ＤＦＯ／Ｇａ−ＤＦＯを用いてｉ．ｎ．により治療し、第１６、１８、２０、２２及び２４日に、マウスに、０．３ｍｇ／ｋｇ体重のＺｎ−ＤＦＯ／Ｇａ−ＤＦＯをｉ．ｎ．により与えた。
【０３２５】
群２に属するマウスには、それらの最初のＯＶＡ感作の５日及び１日前に、ＰＢＳ中に体重１ｋｇ当たり１ｍｇのＺｎ／Ｇａ−ＤＦＯを含有するｉ．ｐ．注射（各１００μｌ）による予防的処置を２回与えた。それに続いて、１／３の用量（ＰＢＳ中の体重１ｋｇ当たり０．３ｍｇのＺｎ−ＤＦＯ／Ｇａ−ＤＦＯ）のみを含有させたｉ．ｐ．注射を、ＯＶＡ感作の１日前及び１日後に実施し、一方、生理食塩水中の体重１ｋｇ当たり１ｍｇの用量のＺｎ−ＤＦＯ／Ｇａ−ＤＦＯを、ＯＶＡ感作の日に与えた。第１５日から開始して、Ｚｎ−ＤＦＯ／Ｇａ−ＤＦＯを鼻腔内に与えた。
【０３２６】
「対照」群（非喘息性、生理食塩水を用いて治療したが、非感作）の動物には、治療した喘息性の動物と同じ形態を使用して、生理食塩水の注射及び滴下注入を与えた。
【０３２７】
ＯＶＡの最後の投与の２４時間後に、動物に麻酔を施し、動物を、実験手順の記載に従って、メタコリンによる急性の誘発に曝し、その後、動物を屠殺した。気管支肺胞の洗浄を直ちに実施し、肺切片を組織学的分析のために採取した。フェリチン濃度及び鉄によるその飽和についての生化学的分析を、以前の記載に従って実施した。
【０３２８】
非感作及び未治療の対照マウスの肺のＢＡＬ液中の測定した好酸球の密度は、２．０±０．６×１０４細胞／ｍｌであった。喘息（ＯＶＡを用いた感作）は、このパラメータの約５．５倍の増加を引き起こし、１１．０±０．２×１０４細胞／ｍｌに達した。喘息性マウス（ＯＶＡ感作したが未治療のマウス）の肺と、Ｚｎ／Ｇａ−ＤＦＯのｉ．ｐ．及びｉ．ｎ．により治療した群の肺との間では、差は見出されなかった。
【０３２９】
図２により示すように、対照マウスのＢＡＬ中の測定した好中球の密度は、９．０±３．２×１０４細胞／ｍｌであった。喘息性マウスの肺においては、７．６倍の増加を検出し、６８．０±１１．０×１０４細胞／ｍｌに達した。ｉ．ｐ．及びｉ．ｎ．の両方を介してのＺｎ／Ｇａ−ＤＦＯによる治療についての値は、２．３分の１に減少し、３０．０±５．１×１０４細胞／ｍｌに達した。
【０３３０】
図３は、整数値スケール０〜３に基づく肺の組織学的スコアを示す。一般に、気管支周囲の浸潤物（ＰＩ）の分析（図３Ａ）、上皮細胞の異形成についてのＰＡＳ染色（図３Ｂ）、及び線維状結合組織についてのマッソントリクローム染色（図３Ｃ）において、同じパターンを観察した。喘息性の未治療群では、およそ２．５の最も高い平均値を示し、一方、対照群では、そのレベルは０であった。Ｚｎ／Ｇａ−ＤＦＯのｉ．ｐ．及びｉ．ｎ．により治療した群では、３つのパラメータ全ての値が１．５未満であり、錯体の効率的な抗喘息作用を実証している。
【０３３１】
図４Ａは、実験群から得られたマウスの肺中の測定したフェリチン濃度を提示する。対照群において見出されたベースラインの量は、０．１８±０．０５μｇフェリチン／ｍｇタンパク質であった。喘息性の肺では、このレベルは、有意に増加し、０．５０±０．１３μｇ／ｍｇタンパク質に達し、Ｚｎ／Ｇａ−ＤＦＯをｉ．ｐ．及びｉ．ｎ．を介して用いて治療した喘息性マウスから得られた肺では、観察した値は、０．１９±０．０６μｇフェリチン／ｍｇタンパク質であった。
【０３３２】
同じ群から得られた、肺におけるフェリチンの鉄による飽和のレベルを、測定し、図４Ｂにより提示する。治療した肺では、フェリチン結合鉄（ＦＢＩ値）の値は減少し、対照のレベルを下回った。
【０３３３】
（例４）
Ｚｎ−ＤＦＯとＧａ−ＤＦＯとの組合せの、鼻腔内投与と、順次的な腹腔内投与及び鼻腔内投与との比較
本発明の組合せ金属錯体のｉ．ｎ．投与又は順次的なｉ．ｎ．−ｉ．ｐ．の投与のいずれが、より良好な結果をもたらすかを決定するために、３週齢のＢＡＬＢ／ｃマウスを、実験手順の記載に従って、卵白アルブミン（ＯＶＡ）に対して感作させた。喘息性マウスを、３つの群、すなわち、（１）未治療群、（２）Ｚｎ−ＤＦＯ／Ｇａ−ＤＦＯ（３：１）の組合せを用いて、ｉ．ｐ．（２週間）及びｉ．ｎ．（２週間）により順次に治療する群；並びに（３）Ｚｎ−ＤＦＯ／Ｇａ−ＤＦＯの組合せのｉ．ｎ．のみを用いて治療する群に分けた。
【０３３４】
群２に属するマウスには、第−５、−１日及び第０、７、１４日に、１ｍｇ／ｋｇ体重のＺｎ−ＤＦＯ／Ｇａ−ＤＦＯ  ｉ．ｐ．を３回与えた。これらのマウスを、第１、６、８及び１３日に、０．３ｍｇ／ｋｇ体重のＺｎ−ＤＦＯ／Ｇａ−ＤＦＯ  ｉ．ｐ．を用いてさらに治療した。第１５、１７、２１及び２３日に、マウスを、１ｍｇ／ｋｇ体重のＺｎ−ＤＦＯ／Ｇａ−ＤＦＯを用いてｉ．ｎ．により治療し、第１６、１８、２０、２２及び２４日に、マウスに、０．３ｍｇ／ｋｇ体重のＺｎ−ＤＦＯ／Ｇａ−ＤＦＯをｉ．ｎ．により与えた。
【０３３５】
群３には、緩衝生理食塩水中の体重１ｋｇ当たり５ｍｇのＺｎ／Ｇａ−ＤＦＯを、鼻腔内にのみ、同じパターンに従って与えた。
【０３３６】
鼻腔内滴下注入により治療したマウス（群３）には、第−５、−１日及び第０、７、１４日に、５ｍｇ／ｋｇ体重のＺｎ−ＤＦＯ／Ｇａ−ＤＦＯ  ｉ．ｐ．を３回与えた。マウスを、第１、６、８及び１３日に、１．６６ｍｇ／ｋｇ体重のＺｎ−ＤＦＯ／Ｇａ−ＤＦＯ  ｉ．ｐ．を用いてさらに治療した。第１５、１７、２１及び２３日に、マウスを、５ｍｇ／ｋｇ体重のＺｎ−ＤＦＯ／Ｇａ−ＤＦＯを用いてｉ．ｎ．により治療し、第１６、１８、２０、２２及び２４日に、マウスに、１．６６ｍｇ／ｋｇ体重のＺｎ−ＤＦＯ／Ｇａ−ＤＦＯをｉ．ｎ．により与えた。
【０３３７】
対照群の動物（非喘息性、生理食塩水を用いて治療したが、非感作）には、生理食塩水の注射及び滴下注入を、喘息性の、治療した動物と同じ形態を使用して与えた。
【０３３８】
ＯＶＡの最後の投与の２４時間後に、動物に麻酔を施し、動物を、上記の記載に従って、メタコリンによる急性の誘発に曝し、その後、動物を屠殺した。気管支肺胞の洗浄を直ちに実施し、肺切片を、組織学的分析のために採取した。フェリチン濃度及び鉄によるその飽和についての生化学的分析を、以前の記載に従って実施した。
【０３３９】
図５は、ＢＡＬ液中の好酸球及び好中球の密度を示す。図５Ａは、対照群から得られたＢＡＬ液中で観察された好酸球の密度が、最も低い密度であり、２．０±０．６×１０４細胞／ｍｌであったことを示す。喘息が、このパラメータの約５．５倍の増加を引き起こした。これまでの実験で示された傾向が続き、喘息性マウスの肺と、Ｚｎ−ＤＦＯ／Ｇａ−ＤＦＯの組合せのｉ．ｐ．及びｉ．ｎ．を与えた群（群２）から得られた肺との間では差は見出されなかった。しかし、Ｚｎ−ＤＦＯ／Ｇａ−ＤＦＯの組合せの鼻腔内散布のみ（群３）では、減少が生じ、ベースラインのレベルに達した。
【０３４０】
図５Ｂは、ＢＡＬ中の好中球の密度を示す。対照マウスの肺におけるレベルは、６．８±２．６×１０４細胞／ｍｌであった。未治療であるが喘息性のマウスの肺では、６．３倍の増加を検出した。喘息性の治療群（Ｚｎ−ＤＦＯ／Ｇａ−ＤＦＯの組合せのｉ．ｐ．及びｉ．ｎ．を与えた；群２）では、値が減少し、２９．８±４．３×１０４細胞／ｍｌに達し、これは、対照を上回る値であり、一方、ｉ．ｎ．のみにより治療したマウス（群３）では、ＢＡＬ中の好中球の量が減少し、ベースラインを下回る値、すなわち、２．０±０．６×１０４細胞／ｍｌに達した。
【０３４１】
表２に提示する粘液含量の値の比較では、本発明者らは、両方の治療方法が粘液含量をベースラインまで低下させることができることを見出した。
【表２】
2013502407.tif 000003
【０３４２】
気管支周囲の浸潤物の組織学的分析、ＰＡＳ染色及びマッソントリクローム染色を、整数値スケール０〜３上でスコア化し、得られた平均を、図６に提示する。
【０３４３】
一般に、気管支周囲の浸潤物（ＰＩ）（図６Ａ）、上皮細胞の異形成についてのＰＡＳ染色（図６Ｂ）、及び線維状結合組織についてのマッソントリクローム染色（図６Ｃ）の、種々の実験群についての結果のパターンは、相互に類似した。これまでの実験ですでに示したように、喘息群には、最も高い平均スコアの値（およそ２．５）が与えられ、一方、対照のレベルは０であった。両方の治療様式が、喘息関連のパラメータを少なくとも１．５分の１に減少させるのに成功し、一方、ｉ．ｎ．治療単独は、ｉ．ｎ．散布と組み合わせたｉ．ｐ．注射よりも目覚しい効果を示している。
【０３４４】
４つの実験群から得られたマウスの肺中のフェリチンの濃度を測定し、図７Ａに提示する。対照の肺において観察されたベースラインのフェリチン濃度は、０．１７±０．０２μｇフェリチン／ｍｇタンパク質であった。喘息性（未治療）の肺において、顕著な増加、すなわち、０．４５±０．０６μｇ／ｍｇタンパク質が見出された。ｉ．ｎ．治療の肺においては、０．２８±０．０４μｇフェリチン／ｍｇタンパク質の値を観察した。ｉ．ｐ．及びｉ．ｎ．の両方により治療した肺においては、治療が非常に成功したように見え、フェリチン濃度は、ほとんど対照のレベルまで下方制御され、０．２１±０．０４μｇフェリチン／ｍｇタンパク質に達した。
【０３４５】
図７Ｂに見ることができるように、喘息性マウス及び対照マウスの肺におけるフェリチンの鉄飽和のレベルは類似するが、喘息性マウスの肺中のフェリチン結合鉄の総量（ＦＢＩ）は、より高いフェリチンの濃度に起因して２．７倍高かった。Ｚｎ／Ｇａ−ＤＦＯを用いた、ｉ．ｐ．及びｉ．ｎ．、又はｉ．ｎ．のみのいずれかによる治療は、フェリチンの全般的な量のみならず、また、鉄によるその飽和のレベルも減少させることができた。しかし、両方の治療群の間のＦＢＩの有意な差は見出されなかった。
【０３４６】
（例５）
Ｇａ−ＤＦＯを用いる治療は、糖尿病性のスナネズミにおいて、正常な血中グルコースレベルをもたらす
本発明者らは、喘息モデルを使用して実証した、本発明の錯体の炎症状態に対する有益な効果に鼓舞されて、次に、本発明の錯体の別の免疫関連障害に対する潜在的な、有益な効果を、ＩＩ型糖尿病モデルを使用して調べた。したがって、次に、Ｇａ−ＤＦＯの、ＩＩ型糖尿病の予防及び／又は寛解における使用の可能性を調べた。実験を、スナネズミ（デブスナネズミ）を、ＩＩ型糖尿病についてのモデルとして使用して実施した。
【０３４７】
スナネズミを、（それぞれ６匹の動物からなる）４つの群に分けた。群Ｉに属する動物には、標準食を与え、対照として利用した。群ＩＩ、群ＩＩＩ及び群ＩＶに属する動物には、高エネルギー食を与えて、糖尿病を発症させ、且つ群ＩＩＩ及び群ＩＶはそれぞれ、Ｇａ−ＤＦＯ及びリポ酸（ＬＡ）を用いて治療した。体重１ｋｇ当たり２．５ｍｇのＧａ−ＤＦＯ又はＬＡの腹腔内注射を、週２回、６１日間実施した。動物の血中グルコース及び体重を、実験全体の間モニターした。
【０３４８】
表３は、４つの群全ての、最初の血中グルコースの値が、ほとんど等しかったことを示す。１ヵ月間の高エネルギー食の後に、群ＩＩに属する動物は、糖尿病の重度の形態を発症し、血中グルコースレベルの増加を示し、９６±４ｍｇ／ｄｌから最高２８４±２７ｍｇ／ｄｌまで増加した。このレベルは、次の週には、２２１±３６ｍｇ／ｄｌにやや減少し、実験終了まで高い状態（２５２±２２ｍｇ／ｄｌ）を維持した。ＬＡを用いて治療した群ＩＶに属する動物の血中グルコースレベルは、第３週の後には、最高２５９±４９ｍｇ／ｄｌまで増加したが、後に、１６８±３３ｍｇ／ｄｌに減少した。Ｇａ−ＤＦＯを与えた群ＩＩＩの動物は、より中程度の増加を示し、第２１日に、１７６±４６ｍｇ／ｄｌに達した。さらに、後に、血中グルコースの正常レベル（９８±２９ｍｇ／ｄｌ）に戻った。
【表３】
2013502407.tif 000004
【０３４９】
表４は、治療動物と未治療動物との体重の比較を提示する。見られ得るように、全ての群の動物が体重を増加させたが、糖尿病群ＩＩの増加は、対照においてよりもはるかに大きかった。しかし、Ｇａ−ＤＦＯを用いて治療した動物は、血中グルコースの顕著な改善を示し、未治療の糖尿病性の動物と同様に体重を増加させた。
【表４】
2013502407.tif 000005
【０３５０】
（例６）
Ｇａ−ＤＦＯ及びＺｎ−ＤＦＯは、高エネルギー食により誘発したＩＩ型糖尿病モデルにおいて、高い血中グルコースレベルを緩和し、白内障の発症を防止する
次に、本発明者らは、Ｚｎ−ＤＦＯ及びＧａ−ＤＦＯが、ＩＩ型糖尿病モデルにおいても類似の有益な効果をもたらすかどうか、並びに公知の糖尿病合併症である白内障の発症を防御するかどうかを試験した。
【０３５１】
４２匹のスナネズミを、それぞれ６匹の動物からなる７つの群に分けた。群Ｉに属する動物には標準食を与え、これらを対照として使用した。群ＩＩ、群ＩＩＩ、群ＩＶ、群Ｖ、群ＶＩ及び群ＶＩＩに属する動物には、高エネルギー食を与え、糖尿病を発症させ、且つ群ＩＩＩ、群ＩＶ及び群ＶＩＩをそれぞれ、Ｚｎ−ＤＦＯ、Ｇａ−ＤＦＯ及びＤＦＯ単独を用いて治療した。群Ｖ及び群ＶＩには、塩化物塩の形態のＺｎ及びＧａをそれぞれ単独で与えた。異なる治療を記載に従って投与し、実験を５３日間続けた。耐糖能試験を、実験の終わりに実施した。白内障の生成も試験した。
【０３５２】
図８は、２００ｍｇグルコース／１００ｇ体重の経口投与用量に対する３時間の応答を提示する。標準食群Ｉの結果を、ゼロ（ベースライン）値とみなした。高エネルギー食群ＩＩは、１０５ｍｇ／ｄｌの値を示し、ゼロ値を上回った。Ｚｎ−ＤＦＯにより治療した動物は、ゼロを上回る２０ｍｇ／ｄｌの値を示し、Ｇａ−ＤＦＯによる治療は、さらにより成功し、ゼロを上回る５ｍｇ／ｄｌの値を示した。Ｚｎ単独及びＧａ単独も有用であり、それぞれ、ゼロを上回る３８ｍｇ／ｄｌ及び２５ｍｇ／ｄｌの値を示した。対照的に、ＤＦＯ単独により、有害な作用が発生し、血中グルコースレベルが増加し、３時間応答において、群ＩＩの値さえ上回り、１５０ｍｇ／ｄｌに達した。
【０３５３】
表５は、全ての実験群における白内障の生成の比較を提示する。対照群Ｉでは白内障眼を観察しなかった。群ＩＩの動物の６７％において、白内障を観察した。Ｚｎ−ＤＦＯ及びＧａ−ＤＦＯによる治療は、白内障生成の発生率を、それぞれ２２％及び１１％に減少させている。Ｚｎのみ及びＧａのみによる治療群は、白内障を、それぞれ、動物の２２％及び３６％において発症した。群ＶＩＩ（ＤＦＯ単独）においては、動物の２５％が白内障を発症した。
【表５】
2013502407.tif 000006
【０３５４】
（例７）
Ｚｎ−ＤＦＯは、高エネルギー食により誘発したＩＩ型糖尿病において、スナネズミの水晶体タンパク質を酸化及び分解から防御する
糖尿病は、酸化の増加を誘発するので、糖尿病性白内障の発症は、タンパク質の酸化、活性の減少及び分解と関連がある。本発明の金属−ＤＦＯ錯体が発揮する抗酸化効果及び防御効果についてのさらなる指標として、本発明者らは、未治療の及び治療した糖尿病性のスナネズミの水晶体中のタンパク質の含有量及び活性を検討した。したがって、糖尿病が誘発する視力疾患に関連がある特定のパラメータをモニターした。
【０３５５】
１９匹のスナネズミを、３つの群に分けた。群Ｉ（ｎ＝４）には、標準食を与え、この群を対照として使用した。群ＩＩ（ｎ＝７）及び群ＩＩＩ（ｎ＝８）には、高エネルギー食を与え、糖尿病を発症させた。群ＩＩＩは、体重１ｋｇ当たり２．５ｍｇのＺｎ−ＤＦＯ  ｉ．ｐ．を用いて週３回治療し、一方、群ＩＩには、同じパターンに従って、生理食塩水を注射した。血中グルコース及び体重を６３日間モニターした後に、耐糖能試験を実施し、また、２，３−ＤＨＢＡ及びカテコールの血中レベルも測定した。以前に行ったように、白内障の生成も試験した。網膜及び水晶体を、収集して、フェリチン、チオレドキシン−１（Ｔｒｘ）及びチオレドキシンレダクターゼ−１（ＴｒｘＲ）の濃度、総水晶体タンパク質、並びにメチオニンスルホキシドレダクターゼ（Ｍｓｒ）活性の生化学的分析を行った。記載に従って、アクチン、Ｔｒｘ及びＴｒｘＲの濃度を、ウエスタンブロッティングにより測定し、Ｍｓｒ活性を、ＨＰＬＣにより分析した。
【０３５６】
図９は、これまでの結果と一致して、糖尿病性の動物は、対照動物よりも多くの体重を増加させ、一方、治療群は、中等度に体重を増加させたことを示す。
【０３５７】
図１０Ａにより示すように、最初の血中グルコースレベルは、全ての群においておよそ７０ｍｇ／ｄｌであった。血中グルコースレベルは、対照動物（群Ｉ）においては、実験全体を通して安定な状態を維持した。高エネルギー食を与えられた動物（群ＩＩ）は、血中グルコースレベルの連続的な増加を示し、第５６日には３００ｍｇ／ｄｌに達し、実験終了に向けて２５０ｍｇ／ｄｌに減少した。（Ｚｎ−ＤＦＯにより治療した）群ＩＩＩに属する動物の血中グルコースの値は、第２８日には２００ｍｇ／ｄｌに達し、次いで、実験終了に向けて１１０ｍｇ／ｄｌに減少した。
【０３５８】
図１０Ｂは、（グルコース投与後の総グルコースレベルを積分した形態での）耐糖能試験の結果を提示する。Ｚｎ−ＤＦＯにより治療した動物は、群Ｉよりもわずかに高い値を示し、一方、糖尿病性の動物の値（群ＩＩ）は、著しくより高かった。
【０３５９】
図１１は、測定した２，３−ＤＨＢＡの血中濃度を描写する。糖尿病の発症が、対照値と比較して、このパラメータの３．２倍の増加を引き起こしたが、Ｚｎ−ＤＦＯにより治療した動物は、ほとんどベースラインの値を維持した。
【０３６０】
次に、糖尿病誘発型白内障の生成を調べた。図１２により示すように、対照動物（群Ｉ）は、白内障を発症しなかった。群ＩＩでは、総数７匹の動物のうち５匹が、重度（グレード３）の白内障を提示した。２匹のその他の動物は、グレード１〜２の白内障を発症した。治療群（群ＩＩＩ）に属する動物のうち、４匹は、白内障を発症しなかった。重度（グレード３）の白内障が、高い血中グルコースレベルを示した１匹の動物においても発症した。２匹のその他の動物は、両眼においてグレード１〜２の白内障を示した。
【０３６１】
本発明者らは、総水晶体タンパク質を、ブラッドフォードアッセイを使用して測定して、図１３により示すように、糖尿病により、対照値と比較して、水晶体タンパク質の濃度が４．５分の１未満に減少することを見出した。Ｚｎ−ＤＦＯによる治療が、この減少を部分的に防止した。図１４及び１５により示すように、同じ傾向が、メチオニン中心の酸化還元サイクル（ＭＣＲＣ）及びアクチンのパラメータにおいても示された。糖尿病は、対照動物と比較して、水晶体中のＴｒｘ（図１４Ａ）、ＴｒｘＲ（図１４Ｂ）及びアクチン（図１５Ａ）の濃度、並びにＭｓｒ（図１５Ｂ）活性の顕著な減少を引き起こした。Ｚｎ−ＤＦＯによる治療により、水晶体は、部分的ではあるが、統計学的に有意に修復されるに至った。白内障の生成が、タンパク質の酸化のかなりの増加、それに続くその活性の減少及び最終的な分解と関連があることから、これらの知見は、ＲＯＳに対する防御の増加を実証している。
【０３６２】
他方、図１６は、糖尿病性の動物においては、対照動物と比較して、フェリチン含有量の１０倍というかなりの増加を観察したことを示す。このことは、イヌ及びヒトにおけるフェリチンの蓄積と白内障の生成との間の関連性を示す証明の道筋と合致している。これまでに実証した傾向に従って、Ｚｎ−ＤＦＯによる治療は、フェリチンレベルを３．８分の１に減少させた。
【０３６３】
（例８）
Ｇａ−ＤＦＯ／Ｚｎ−ＤＦＯの組合せは、ストレプトゾトシン誘発型のＩ型糖尿病において、正常な血中グルコースレベルを修復することはできないが、一般的な健康状態は改善する
これまでに、本発明者らは、インスリン産生膵臓細胞が未変化であり、インスリン産生が存在するＩＩ型糖尿病モデルにおいて、本発明の金属錯体及び組合せ錯体がもたらす有益な効果を検討した。次に、本発明者らは、インスリン分泌膵臓細胞が排除され、したがって、インスリンが利用できないＩ型糖尿病に対して、錯体が示す効果を探索した。実験を、Ｓｐｒａｇｕｅ−Ｄａｗｌｅｙラットをモデルとして使用して、実験手順の記載に従って実施した。ラットを、ストレプトゾトシン（ＳＴＺ）の注射により糖尿病とし、Ｇａ−ＤＦＯ／Ｚｎ−ＤＦＯを１：３の比の混合物として用いて治療した。錯体の、（Ｉ型糖尿病に類似する）ＳＴＺ誘発型の糖尿病モデルに対する影響を調べた。
【０３６４】
Ｓｐｒａｇｕｅ−Ｄａｗｌｅｙ（ＳＤ）雄ラットを、２つの群に分けた。糖尿病を、第１の群（ＳＤ群）において、ストレプトゾトシンにより誘発した。血中グルコースレベルを、実験全体を通して週２回測定した。注射の３日間後に、第２の群に属する動物が、糖尿病の発症を示す、高いレベルの血中グルコースを示すようになった。第２週に、Ｇａ−ＤＦＯ／Ｚｎ−ＤＦＯを用いる治療を開始した。各群を、２つの亜群に分け、１つの糖尿病亜群及び１つの対照亜群に属する動物には、それらの血中グルコース及び体重をモニターしながら、Ｇａ−ＤＦＯ／Ｚｎ−ＤＦＯの混合物０．２５ｍｇ／ｋｇ  ｉ．ｐの注射を週２回与えた。未治療亜群には、生理食塩水を同じパターンに従って与えた。
【０３６５】
治療した非糖尿病性動物と、未治療の非糖尿病性動物との外観を比較したが、差は見出されなかった。他方、未治療の糖尿病性ラットとは対照的に、錯体を用いて治療した動物は、実験の持続期間の全体を通して、身体的により良好に見え、頭部、頚部及び肩部上にピンク色のスポットを示さなかった。治療したラットは、排尿のより少ない頻度、発汗の減少を示し、糖尿病性の動物に特徴的なケトン臭気を発する程度が低下し、死亡率の著しい減少を示した。表６は、体重減少は、治療した動物においては生じることなく、さらに、両方の群に属する動物が、重度の糖尿病の場合には稀な事象である体重増加さえ示したことを示す。
【０３６６】
しかし、表７が示すように、錯体の治療は、血中グルコースレベルに対しては影響を示さなかった。これは、ＳＴＺが、膵臓細胞を破壊し、インスリンを分泌し、したがって、血中グルコースレベルを減少させる膵臓細胞の能力を物理的に排除するからである。依然として、本発明者らは、ＳＴＺの動物の膵臓に対する不可逆的な細胞傷害作用にもかかわらず、Ｇａ−ＤＦＯ／Ｚｎ−ＤＦＯは、動物の正常な血中グルコースレベルを修復することはないが、動物の状態を著しく改善したという全体的な印象を抱いた。
【０３６７】
【表６】
2013502407.tif 000007
【表７】
2013502407.tif 000008
【０３６８】
１７〜４８％の死亡率を観察した以前に公開されているデータとは対照的に、治療した糖尿病性の動物のうち、実験の間に死んだ動物はいなかった［Ｂａｒ−Ｏｎ  Ｈ  ｅｔ  ａｌ．Ｄｉａｂｅｔｅｓ  １９７６；２５（６）：５０９−５１５；Ｗｅｉ  Ｍ  ｅｔ  ａｌ．Ｈｅａｒｔ  Ｌｕｎｇ  Ｃｉｒｃ．２００３；１２（１）：４４−５０］。さらに、白内障の発症もなく、アセトンの匂いは、著しくより弱く、このことはおそらく、より低いケトンの生成を示している。
【０３６９】
（例９）
亜鉛−デスフェリオキサミン（Ｚｎ−ＤＦＯ）及び経皮適用のためのワセリン基剤のＺｎ−ＤＦＯ／Ｇａ−ＤＦＯ軟膏剤の調製
亜鉛−ＤＦＯを、Ａｌｄｒｉｃｈ  Ｃｈｅｍｉｃａｌ、Ｓｔ．Ｌｏｕｉｓ、Ｍｏ．から購入した、入手可能な最も高い純度の塩化亜鉛の固体粉末から調製した。Ｄｅｓｆｅｒａｌ（登録商標）（ＤＦＯ）、ＵＳＰグレードを、Ｎｏｖａｒｔｉｓ  ＡＧ、スイスから購入し、ＤＤＷ中に溶解させた。錯体を、実験手順の記載に従って調製した。ガリウムＤＦＯ（０．１％）と亜鉛ＤＦＯ（０．４％）との組合せ０．５％（ｗ／ｖ）を含有する、ワセリン基剤の軟膏剤を、錯体の濃縮水溶液とＴｗｅｅｎ８０とを混合し、それに続いて、この混合物と（６０℃に）あらかじめ加熱したワセリンとを混合することによって調製した。
【０３７０】
（例１０）
ガリウムＤＦＯと亜鉛ＤＦＯとの組合せは、皮膚毒性を示さない
また、本発明者らは、金属−ＤＦＯ錯体の、乾癬の治療における使用の可能性の探索にも関心を抱いた。乾癬は、局所の過剰なフリーラジカル並びにその他の反応性の酸素及び窒素に由来する種が関与する、有害な皮膚の炎症であることから、錯体による皮膚の罹患部位からの不安定な鉄の除去により、局所性のフリーラジカルの産生を阻害し、疾患症状を軽減することができるであろう。これらの効果を評価するために、ガリウムＤＦＯ及び亜鉛ＤＦＯを含有する皮膚浸透性の軟膏剤を生産した。
【０３７１】
ガリウムＤＦＯと亜鉛ＤＦＯとの組合せを含有するワセリン基剤の軟膏剤を、例９の記載に従って調製した。軟膏剤の薄い層を、３人の健常な男性ボランティア及び１人の女性ボランティアの５０ｃｍ２の３つの領域それぞれに、１日２回、３日間塗布した。治療した領域を、いかなる特別な遮蔽物もない状態で、空気に曝した。皮膚の色は、正常な状態を持続的に維持した。皮膚は、洗浄してきれいにすることはなく、擦ってきれいにすることも許されなかった。皮膚の自然の色が、実験の間及び皮膚を観察したそれに続く７日の間、未変化の状態を維持した。瘢痕化も、体毛の喪失も、皮膚の外観のその他の変化も生じなかった。治療した対象は、３日間の試験の間も、試験後のいずれの時期においても、腕の皮膚及び任意の部分に、痒み及び疼痛を経験しなかった。したがって、本発明者らは、Ｚｎ−ＤＦＯとＧａ−ＤＦＯとの組合せは、皮膚を刺激したり、皮膚のその他の毒性作用を引き起こしたりしないと推量した。
【０３７２】
（例１１）
持続性の乾癬の症状のクリアランス
本発明者らは、Ｚｎ−ＤＦＯ及びＧａ−ＤＦＯは、皮膚毒性を示さないことを検証してから、これらの錯体の、乾癬の治療に有益な特性を検討した。
【０３７３】
第１の試験では、肘及び膝の周囲の皮膚の重度の乾癬に５年超にわたり罹患している、４５歳の男性対象（ＤＣ）を治療した。この男性のインフォームドコンセントを得た。この男性の左の腕及び膝を、０．５％Ｚｎ−ＤＦＯ錯体を含有する軟膏剤を用いて治療し、一方、他方の肘及び膝を、一般的な副腎皮質ステロイドを含有するクリーム剤（Ｄｏｖｏｎｅｘ  ０．００５％、Ｌｅｏ（登録商標）Ｌａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓ  Ｉｎｃ．、Ｄｕｂｌｉｎ、アイルランド）を用いて治療した。Ｚｎ−ＤＦＯを、第１、３、６及び９日に、１日１回塗布した。副腎皮質ステロイド軟膏剤を、１日１回塗布した。第１１日に、両側を調べた。（Ｚｎ−ＤＦＯ錯体により治療した）左の肘及び膝の皮膚は、正常に見え、明るい健常なピンク色を呈していた。右側の皮膚は、病変を欠いたが、平滑ではないように見え、若干炎症を起こしていた。
【０３７４】
しかし、治療の約２ヵ月後に、対象は、軟膏剤の散発的な使用に起因して、乾癬の症状を再び発症した。患者には、完全な回復を達成するために、通常の治療が提供された。
【０３７５】
第２の試験では、肘の周囲及び手掌の甲の皮膚の重度の乾癬に２５年超にわたり罹患している、６６歳の男性対象（ＤＧ）を治療した。この男性のインフォームドコンセントを得た。肘及び手掌の甲の両方を、０．４％のＺｎ−ＤＦＯ錯体を、０．１％のＧａ−ＤＦＯと一緒に含有する軟膏剤を用いて治療した。患者に、罹患した領域を、温かい石けん水を用いて洗浄し、次いで、以下に従って、軟膏剤の薄い層を塗布するように指示した。第１日に２回、第２日に２回、第４、６及び８日に１回。第４日に、患者は治療を停止した。これは、患者によれば、手は正常に見え、皮膚の色がピンク色に変化したからである。治療しなかった１週間の間に、罹患した領域が平滑ではなくなった。第９日から、患者は、追加の毎日の治療を３回継続し、全ての症状が姿を消した。
【０３７６】
第３の試験では、６３歳の女性対象（ＬＶ）が、顔に、脂漏性皮膚炎の直径０．７×０．３ｃｍの病変２つに罹患していた。この女性を、Ｚｎ−ＤＦＯ／Ｇａ−ＤＦＯ（０．５％；４：１の比）を含有する軟膏剤の薄い層を塗布することによって、週２回、２週間にわたり治療した。この女性のインフォームドコンセントを得た。病変のうちの１つは、完全に治癒し、次の１０週間再発しなかった。一方、第２の病変は、その赤味を帯びた色を失ったが、持続した。
【０３７７】
（例１２）
Ｚｎ−ＤＦＯ、Ｇａ−ＤＦＯ及びそれらの組合せの、創傷治癒、やけど及び日焼けに対する効果
次に発明者は、Ｚｎ−ＤＦＯ、Ｇａ−ＤＦＯ及びそれらの組合せが、創傷、日焼け及びやけどが治癒するプロセスに対して正の効果をもたらすかどうかを究明することを望む。傷害を受けると、創傷及び熱傷は、最初に局所性炎症のプロセスを経験し、後に修復のプロセスを経験する。炎症相には、ＲＯＳの産生の増加が関与し、これにより、傷害した組織の消散が緩慢化する場合があり、又は場合によっては、傷害した組織の消散が阻止され得る。
【０３７８】
実験的治療についてのインフォームドコンセントを、手の表面（皮相）の創傷、全ての熱傷の程度を包含する、日焼け及びやけどに罹患している患者から得る。表面の創傷及び第一度熱傷の場合には、患者を、３つの群に分ける。群１は、未治療とし、群２は、ワセリンビヒクル（活性を示す錯体を有さない）を用いて治療し、群３は、ワセリン基剤の軟膏剤（０．５％、４：１の比のＺｎ−ＤＦＯ及びＧａ−ＤＦＯ）を用いて治療する。軟膏剤の薄い層を、１日１回塗布した。創傷又は熱傷の直径を、ノギスを使用して測定する。皮膚の生検を、治療に入った２日及び５日後に収集する。生検を、切片化し、線維状結合組織についてのマッソントリクローム染色、又はヘマトキシリン−エオシンを用いて染色する。瘢痕組織中の炎症性の浸潤細胞の存在及びタンパク質線維の堆積を評価する。
【０３７９】
水疱が伴う、熱誘発型の皮膚の熱傷の治療を、Ｚｎ−ＤＦＯ／Ｇａ−ＤＦＯ（４：１；０．５％）を含有する軟膏剤を用いて、薄い層を１日２回塗布することによって実施する。水疱及び瘢痕化が、治癒し、姿を消す速度をモニターする。
【０３８０】
日光誘発型の皮膚の熱傷の治療を、Ｚｎ−ＤＦＯ／Ｇａ−ＤＦＯ（４：１；０．５％）を含有する軟膏剤を用いて、薄い層を１日２回塗布することによって実施する。皮膚が治癒し、皮膚の自然の色が回復する速度をモニターする。
【図２】
2013502407.tif 000009
【図３Ａ】
2013502407.tif 000010
【図３Ｂ】
2013502407.tif 000011
【図３Ｃ】
2013502407.tif 000012
【図５Ａ】
2013502407.tif 000013
【図５Ｂ】
2013502407.tif 000014
【図６Ａ】
2013502407.tif 000015
【図６Ｂ】
2013502407.tif 000016
【図６Ｃ】
2013502407.tif 000017
【図８】
2013502407.tif 000018
【図９】
2013502407.tif 000019
【図１０Ａ】
2013502407.tif 000020
【図１０Ｂ】
2013502407.tif 000021
【図１２】
2013502407.tif 000022
【図１３】
2013502407.tif 000023
【図１４Ａ】
2013502407.tif 000024
【図１４Ｂ】
2013502407.tif 000025
【図１５Ａ】
2013502407.tif 000026
【図１Ａ】
2013502407.tif 000027
【図１Ｂ】
2013502407.tif 000028
【図４Ａ】
2013502407.tif 000029
【図４Ｂ】
2013502407.tif 000030
【図７Ａ】
2013502407.tif 000031
【図７Ｂ】
2013502407.tif 000032
【図１１】
2013502407.tif 000033
【図１５Ｂ】
2013502407.tif 000034
【図１６】
2013502407.tif 000035
【国際調査報告】
2013502407.tif 000036
2013502407.tif 000037
2013502407.tif 000038
2013502407.tif 000039
2013502407.tif 000040
2013502407.tif 000041
2013502407.tif 000042