(57)【要約】本発明は、全血や体液を遠心分離するとき使用する遠心分離キット及びこれを用いた遠心分離方法に関するものであって、さらに詳しくは、全血や体液を採取した後、遠心分離チューブに注射器を装着して、遠心分離を通じて分離される標的物質（多血小板血漿や幹細胞）を注射器に直接採集することで、標的物質を容易に抽出することができる遠心分離キット及びこれを用いた遠心分離方法に関する。【選択図】図１０
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【特許請求の範囲】
【請求項１】
遠心分離機に搭載されて、全血を下から順次、赤血球層からなる血球成分と、多血小板血漿（ＰＲＰ）層及び乏血小板血漿（ＰＰＰ）層からなる血漿成分とに分離する遠心分離キットであって、
下部が密閉され上部に開放部が形成されて、開放された上部を開閉するキャップが形成され、内部には集積管が形成された集積部が設けられ、内部に細胞分離ゲルが一定量充填される遠心分離チューブを含み、
上記集積部は、遠心分離された全血の赤血球と細胞分離ゲルとの合算体積に該当する空間がその下部に形成されるように設けられたことを特徴とする遠心分離キット。
【請求項２】
遠心分離機に搭載されて、全血を下から順次、赤血球層からなる血球成分と、多血小板血漿（ＰＲＰ）層及び乏血小板血漿（ＰＰＰ）層からなる血漿成分とに分離する遠心分離キットであって、
内部には集積管が形成された集積部が設けられ、下部には内部と連通するチューブ引込部が形成された結合部が設けられ、上部が開放された遠心分離チューブと、
上記遠心分離チューブの結合部に装着され、上記チューブ引込部を密封するように締結部が上部に突出して形成され、内部に細胞分離ゲルが一定量充填される下部キャップとを含み、
上記集積部は、遠心分離された全血の赤血球と細胞分離ゲルとの合算体積に該当する空間がその下部に形成されるように設けられたことを特徴とする遠心分離キット。
【請求項３】
上部に開口部が形成され、開口された上部にゴムパッキングが設けられたピストンが移動可能に挿入され、下部には注射針が装着される引込部が形成され、内部に全血を採血するようになった注射器をさらに含むことを特徴とする請求項１または請求項２に記載の遠心分離キット。
【請求項４】
上記ゴムパッキングが注射器に残存するようにピストン及び注射針が除去された注射器が、上部が開放された遠心分離チューブの内部に挿入され遠心分離機に搭載されるように集積部の上部に装着されることを特徴とする請求項３に記載の遠心分離キット。
【請求項５】
上記遠心分離チューブの内部直径は、注射器の外部直径よりも大きく形成され、
上記注射器の外周面が遠心分離チューブの内周面に密着するようになったことを特徴とする請求項３に記載の遠心分離キット。
【請求項６】
上記集積部の上部は、上記注射器の接触面と対応する形状になっており、上記注射器の引込部が集積管に挿入されて密着するように設けられることを特徴とする請求項３に記載の遠心分離キット。
【請求項７】
上記集積部の長さは、注射器引込部の長さよりも長く形成されたことを特徴とする請求項６に記載の遠心分離キット。
【請求項８】
上記全血から遠心分離機によって分離された血漿成分が集積部を基準にして採集されるように、上記血球成分が生成される集積部の下部に位置した空間の体積容量（Ａ）と、注射器から採血された全血（Ｗｂ）と、赤血球の容積（Ｖｂ）と、上記遠心分離された赤血球の容積比率（α）と、細胞分離ゲルの容積（Ｖｆ）との間には、次のような関係が成立することを特徴とする請求項１または請求項２に記載の遠心分離キット。
2013504755.tif 000005
及び
（０≦Ｖｆ≦Ｗｂ）
【請求項９】
上記集積部には、遠心分離チューブに全血が流入する場合遠心分離チューブの内部の空気が抜け出すように通気孔が形成され、
上記通気孔は、注射器が集積部に密着されて装着されることで塞がれるようになることを特徴とする請求項１または請求項２に記載の遠心分離キット。
【請求項１０】
上記遠心分離チューブの内側面には、遠心分離チューブの長手方向に沿って一定の間隔で傾斜した係止突起が形成され、上記集積部が注射器から加えられた加圧力によって上記係止突起の間隔だけ下側に移動し、上側には移動できないようになったことを特徴とする請求項３に記載の遠心分離キット。
【請求項１１】
上記遠心分離チューブは、透明な材質から製造され、その外周面には各係止突起が形成された間隔に位置した空間の体積量を表すように目盛が表示されて、採血された全血の赤血球の容積及び充填される細胞分離ゲルの容積の合算体積に従って、集積部の位置が調節されることを特徴とする請求項１０に記載の遠心分離キット。
【請求項１２】
上記下部キャップは、遠心分離チューブの下部に密着されて結合される程度に従って血漿成分が生成される位置の高さが調節されることを特徴とする請求項２に記載の遠心分離キット。
【請求項１３】
上記下部キャップは、注射器の引込部を密封しながら注射器に装着されるようになったことを特徴とする請求項２に記載の遠心分離キット。
【請求項１４】
請求項１に記載の遠心分離キットを用いた遠心分離方法において、
（ａ１）遠心分離チューブと注射器とを用意するステップと、
（ｂ１）上記注射器で全血を採取するステップと、
（ｃ１）全血を採血した注射器を遠心分離チューブに装着するステップと、
（ｄ１）注射器が装着された遠心分離チューブを遠心分離機に搭載するステップと、
（ｅ１）遠心分離機を作動させて血漿成分を注射器に採集するステップとを含むことを特徴とする遠心分離キットを用いた遠心分離方法。
【請求項１５】
上記（ｃ１）ステップにおいて、全血を採血した注射器のゴムパッキングが注射器に残存するようにピストン及び注射針を除去した後、キャップが除去された遠心分離チューブに上記注射器を挿入して集積部に接続させることを特徴とする請求項１４に記載の遠心分離キットを用いた遠心分離方法。
【請求項１６】
上記遠心分離チューブの内側面には、遠心分離チューブの長手方向に沿って一定の間隔で傾斜した係止突起が形成され、上記集積部が注射器から加えられた加圧力によって上記係止突起の間隔だけ下側に移動し、上側には移動できないようになったことを特徴とする請求項１４に記載の遠心分離キットを用いた遠心分離方法。
【請求項１７】
上記遠心分離チューブの外周面に各係止突起が形成された間隔に位置した空間の体積量を表す目盛が表示され、
上記（ａ１）ステップ以前または（ｂ１）ステップ以前に、
採血された全血の赤血球の容積及び充填される細胞分離ゲルの容積の合算体積に従って、注射器に血漿成分が採集されるように、集積部の位置を調節することを特徴とする請求項１６に記載の遠心分離キットを用いた遠心分離方法。
【請求項１８】
請求項２に記載の遠心分離キットを用いた遠心分離方法において、
（ａ２）遠心分離チューブと注射器とを用意するステップと、
（ｂ２）上記注射器で全血を採取するステップと、
（ｃ２）遠心分離チューブの下側に下部キャップを装着するステップと、
（ｄ２）全血を採血した注射器を遠心分離チューブに装着するステップと、
（ｅ２）注射器が装着された遠心分離チューブを遠心分離機に搭載するステップと、
（ｆ２）遠心分離機を作動させて血漿成分を注射器に採集するステップとを含むことを特徴とする遠心分離キットを用いた遠心分離方法。
【請求項１９】
上記（ｄ２）ステップにおいて、全血を採血した注射器のゴムパッキングが注射器に残存するようにピストン及び注射針を除去した後、キャップが除去された遠心分離チューブに上記注射器を挿入して集積部に接続させることを特徴とする請求項１８に記載の遠心分離キットを用いた遠心分離方法。
【請求項２０】
上記集積部の上部は、上記注射器の接触面と対応する形状になっており、上記注射器の引込部が集積管に挿入されて密着するように設けられることを特徴とする請求項１４または請求項１８に記載の遠心分離キットを用いた遠心分離方法。
【請求項２１】
上記遠心分離チューブの内部直径は、注射器の外部直径よりも大きく形成され、
上記注射器の外周面が遠心分離チューブの内周面に密着するようになったことを特徴とする請求項１４または請求項１８に記載の遠心分離キットを用いた遠心分離方法。
【請求項２２】
上記集積部の長さは、注射器の引込部の長さよりも長く形成されたことを特徴とする請求項２１に記載の遠心分離キットを用いた遠心分離方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本出願は、２００９年１０月２８日出願の韓国特許出願第１０‐２００９‐０１０２７６２号に基づく優先権を主張し、該当出願の明細書および図面に開示された内容は、すべて本出願に参照として取り込まれている。本発明は、血液や体液を遠心分離するとき使われる遠心分離キット及びこれを用いた遠心分離方法に関するものであって、さらに詳しくは、遠心分離チューブに注射器を設置して、遠心分離を通じて分離される標的物質を注射器に採集することで、標的物質を容易に抽出することができる遠心分離キット及びこれを用いた遠心分離方法に関する。
【背景技術】
【０００２】
医療技術が発達するにつれて幹細胞（ｓｔｅｍ ｃｅｌｌ）や血小板（ｐｌａｔｅｌｅｔ）など身体組織に存在する有益な成分を利用して疾病を治療するか、これを応用して施術している。
【０００３】
上記幹細胞は、すでに知られているように、胚芽幹細胞と成体幹細胞とに分けられ、成体幹細胞は、骨髄、臍帯血、脂肪組織などに分化すると知られている。
【０００４】
このような幹細胞は、細胞を繰り返し分裂する自己再生（ｓｅｌｆ ｒｅｎｅｗａｌ）、多くの組織に分化する多分化能（ｍｕｌｔｉｐｏｔｅｎｃｙ）、すべての種類の細胞に分化する多能性（ｐｌｕｒｉｐｏｔｅｎｃｙ）を有する細胞と定義される。
【０００５】
また、血小板は傷ついたとき、特に止血する過程で一連の連鎖過程（ｃａｓｃａｄｅ ｐｒｏｃｅｓｓ）を通じて成長因子を分泌する。より具体的には、上記血小板は、全血（ｗｈｏｌｅ ｂｌｏｏｄ）に含まれた多血小板血漿（ＰＲＰ：ｐｌａｔｅｌｅｔ‐ｒｉｃｈ ｐｌａｓｍａ）であって、全血を遠心分離して得られる。このような多血小板血漿（ＰＲＰ）は、血小板由来成長因子（ＰＤＧＦ）、形質組み換え成長因子（ＴＧＦ）、上皮成長因子（ＥＧＦ）などを含んでいる。このような成長因子は、治癒過程で、組織の再生に必須である新生血管の促進、細胞の化学走性及び分裂促進、幹細胞の刺激及び増殖、基質合成などを調節する因子として関与することが知られている。
【０００６】
そこで、上記幹細胞及び多血小板血漿を利用した臨床での活用が各分野ごとに増えつつある。
【０００７】
現在、幹細胞からターゲット細胞を抽出するか、全血から血小板そのものや多血小板血漿を効率的に獲得するために、多様な方法が実施されている。
【０００８】
臨床的にターゲット細胞（成体幹細胞）を抽出する時は、脂肪組織や骨髄から抽出し、骨髄から幹細胞を抽出する過程は、全血から多血小板血漿（ＰＲＰ）を抽出する過程とほとんど似ている。従って、以下では全血から多血小板血漿を抽出することに関して説明する。
【０００９】
まず、血液を採取するための注射器と遠心分離のための遠心分離チューブとを用意する。このとき、上記注射器は注射針が設けられたシリンダーとピストンとからなった通常の注射器を使用し、遠心分離チューブは所定物質を受容し上部がキャップによって密閉されるようになった通常の容器である。
【００１０】
上記血液採取用注射器で血液（全血）を採取する。ここで上記注射器は１０ｃｃ用採血注射器を使う。例えば、抗凝固剤であるＡＣＤ溶液（Ａｃｉｄ Ｃｉｔｒａｔ Ｄｅｘｔｒｏｓｅ ｓｏｌｕｔｉｏｎｓ）１．５ｃｃを含む１０ｃｃ注射器で８．５ｃｃの血液を採取し、１０ｃｃ用遠心分離チューブに入れた後、遠心分離機へ入れて遠心分離する。
【００１１】
上記血液を遠心分離すれば、図１に示すように、比重によって遠心分離チューブ２の下から赤血球（ＲＢＣ：ｒｅｄ ｂｌｏｏｄ ｃｅｌｌ）層、血小板を多量に含んだ多血小板血漿（ＰＲＰ）層、乏血小板血漿（ＰＰＰ：ｐｌａｔｅｌｅｔ‐ｐｏｏｒ ｐｌａｓｍａ）層の３層に分離される。このとき、上記多血小板血漿（ＰＲＰ）は、軟膜（ｂｕｆｆｙ ｃｏａｔ）ともいう。すなわち、血液は、赤血球（ＲＢＣ）層からなった血球成分と、多血小板血漿（ＰＲＰ）及び乏血小板血漿（ＰＰＰ）からなった血漿成分とに分けられる。このとき、上記赤血球（ＲＢＣ）層と乏血小板血漿（ＰＰＰ）を除いた中間層（ＰＲＰ）から、長いスパイナルニードル（ｓｐｉｎａｌ ｎｅｅｄｌｅ）が装着された新たな５ｃｃ用注射器を利用して多血小板血漿を採取することになる。
【００１２】
一方、血小板の濃縮のために、もう一回遠心分離過程及び濃縮された多血小板血漿（ＰＲＰ）を採取する過程を繰り返すことになる。
【００１３】
この過程において、上記多血小板血漿（ＰＲＰ）の採取時、赤血球（ＲＢＣ）層が共に採取されないように注意しなければならない。すなわち、多血小板血漿（血漿成分）のみを採取することが重要である。このため、上記多血小板血漿（ＰＲＰ）層と赤血球（ＲＢＣ）層とを分離するために、細胞分離ゲルを投入して遠心分離する方法を使用する。
【００１４】
上記細胞分離ゲルとは、赤血球の比重と血小板の比重との間の濃度を有する分離溶液であって、フィコール（Ｆｉｃｏｌｌ、登録商標名）やパーコール（Ｐｅｒｃｏｌｌ、登録商標名）やスクロース誘導体などが使われる。すなわち、図２に示すように、細胞分離ゲル（Ｖｆ）が内蔵された遠心分離チューブ２に血液を投入して遠心分離機（図示せず）で処理すれば、チューブ２内の血液は細胞分離ゲル（Ｖｆ）を境界層にして、上部の血漿成分と下部の血球成分とに分離される。
【００１５】
したがって、上記赤血球（ＲＢＣ）層と多血小板血漿（ＰＲＰ）層が細胞分離ゲル（Ｖｆ）によって分離されることで、長いスパイナルニードルが装着された新たな５ｃｃ用注射器１を利用して、多血小板血漿（ＰＲＰ）層から赤血球（ＲＢＣ）層が共に抽出されないように安全に多血小板血漿（ＰＲＰ）を採取するようになる（図３を参照）。
【００１６】
上記のように遠心分離チューブと注射器とを利用して血液から多血小板血漿を抽出するための多様な種類の遠心分離チューブと注射器とが開示されている。例えば、特許文献１は、注射器を利用して血液を採取した後、これを遠心分離チューブとして使うようになった血清分離用注射器を開示しており、特許文献２は、採血管内にゲルコンテナーを形成し、その内部に血液を採血してコンテナーロッドを切断し、密封キャップで密封して遠心分離するようになった、血清分離ゲルを入れた遠心分離チューブと採血注射器とを開示している。
【００１７】
しかし、このような方法は、長時間かかり、血小板層（血漿成分）の採取が一定ではないことは勿論、赤血球層が共に採取される恐れがある。従って、臨床的応用に正確性を付与し難いという問題がある。また、全血を採血して血漿成分を抽出するために使われる注射器及び遠心分離チューブの消耗コストが増加するという問題がある。
【００１８】
これを解決するために、自動で分類する技術、多血小板血漿の分離キット、細胞分離ゲルが開発されてきた。
【００１９】
しかし、自動で分類する自動化機器は、一般の小規模な病院で使うにはそのコスト及び効率を考慮すれば、備え難いという問題がある。
【００２０】
また、多様な価格と性能を持つキットが各小規模な病院の実情に合わせて備えられているが、このようなキットも高い価格と消耗品の増加によって使うには負担になるのが実情である。
【００２１】
さらに、施術時においては、必要な多血小板血漿を抽出して直ちに使わなければならないので、多血小板血漿を抽出するとき、待ち時間が増加して作業の効率性が低下する問題がある。
【先行技術文献】
【特許文献】
【００２２】
【特許文献１】韓国特許登録第１０‐０４３０８９３号公報
【特許文献２】韓国実用新案登録第２０‐０２６９４６５号公報
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【００２３】
本発明は、上記のような問題を解決するために達成されたものであって、遠心分離を通じて標的物質を簡便且つ安定的に抽出することができる遠心分離キット及びこれを用いた遠心分離方法を提供することにその目的がある。
【００２４】
本発明の他の目的は、安価な消耗品を使うことはもちろん、消耗品の使用を減少させることができ、標的物質が注射器に採集されるようにすることで、施術者及び被施術者の待ち時間を減らして作業の効率性を向上させることができる遠心分離キット及びこれを用いた遠心分離方法を提供することにある。
【課題を解決するための手段】
【００２５】
上記目的を達成するために、本発明の遠心分離キットは、遠心分離機に搭載されて、全血を下から順次、赤血球層からなる血球成分と、多血小板血漿（ＰＲＰ）層及び乏血小板血漿（ＰＰＰ）層からなる血漿成分とに分離する遠心分離キットであって、下部が密閉され上部に開放部が形成されて、開放された上部を開閉するキャップが形成され、内部には集積管が形成された集積部が設けられ、内部に細胞分離ゲルが一定量充填される遠心分離チューブを含み、上記集積部は、遠心分離された全血の赤血球と細胞分離ゲルとの合算体積に該当する空間がその下部に形成されるように設けられたことを特徴とする。
【００２６】
上記目的を達成するための本発明もしくは、他の遠心分離キットは、遠心分離機に搭載されて、全血を下から順次、赤血球層からなる血球成分と、多血小板血漿（ＰＲＰ）層及び乏血小板血漿（ＰＰＰ）層からなる血漿成分とに分離する遠心分離キットであって、内部には集積管が形成された集積部が設けられ、下部には内部と連通するチューブ引込部が形成された結合部が設けられ、上部が開放された遠心分離チューブと、上記遠心分離チューブの結合部に装着され、上記チューブ引込部を密封するように締結部が上部に突出して形成され、内部に細胞分離ゲルが一定量充填される下部キャップと、を含み、上記集積部は、遠心分離された全血の赤血球と細胞分離ゲルとの合算体積に該当する空間がその下部に形成されるように設けられたことを特徴とする。
【００２７】
望ましくは、上部に開口部が形成され開口された上部にゴムパッキングが設けられたピストンが移動可能に挿入され、下部には注射針が装着される引込部が形成され、内部に全血を採血するようになった注射器をさらに含む。
【００２８】
望ましくは、上記ゴムパッキングが注射器に残存するようにピストン及び注射針が除去された注射器が、上部が開放された遠心分離チューブの内部に挿入されて遠心分離機に搭載されるように集積部の上部に装着される。
【００２９】
望ましくは、上記遠心分離チューブの内部直径は、注射器の外部直径よりも大きく形成され、上記注射器の外周面が遠心分離チューブの内周面に密着するようになされる。
【００３０】
望ましくは、上記集積部の上部は、上記注射器の接触面と対応する形状になっており、上記注射器の引込部が集積管に挿入され密着するように設けられる。
【００３１】
望ましくは、上記集積部の長さは、注射器引込部の長さよりも長く形成される。
【００３２】
望ましくは、上記全血から遠心分離機によって分離された血漿成分が集積部を基準にして採集されるように、上記血球成分が生成される集積部の下部に位置した空間の体積容量（Ａ）と、上記注射器から採血された全血（Ｗｂ）と、赤血球の容積（Ｖｂ）と、上記遠心分離された赤血球の容積比率（α）と、細胞分離ゲルの容積（Ｖｆ）との間には、次のような関係が成立する。
Ａ＝（α×Ｗｂ）＋Ｖｆ＝Ｖｂ＋Ｖｆ及び
０≦Ｖｆ≦Ｗｂ
【００３３】
望ましくは、上記集積部には、遠心分離チューブに全血が流入する場合、遠心分離チューブ内部の空気が抜け出すように通気孔が形成され、上記通気孔は、注射器が集積部に密着されて装着されることによって塞がれるようになる。
【００３４】
望ましくは、上記遠心分離チューブの内側面には遠心分離チューブの長手方向に沿って一定の間隔で傾斜した係止突起が形成され、上記集積部が注射器から加えられた加圧力によって上記係止突起の間隔だけ下側に移動し、上側には移動できないようになっている。
【００３５】
望ましくは、上記遠心分離チューブは、透明な材質から製造され、その外周面には各係止突起が形成された間隔に位置した空間の体積量を表すように目盛が表示されて、採血された全血の赤血球の容積及び充填される細胞分離ゲルの容積の合算体積に従って集積部の位置が調節される。
【００３６】
望ましくは、上記下部キャップは、遠心分離チューブの下部に密着されて結合される程度に従って、血漿成分が生成される位置の高さが調節される。
【００３７】
望ましくは、上記下部キャップは、上記注射器の引込部を密封しながら注射器に装着可能になっている。
【００３８】
上記目的を達成するための遠心分離キットを用いた遠心分離方法は、（ａ１）遠心分離チューブと注射器とを用意するステップと、（ｂ１）上記注射器で全血を採取するステップと、（ｃ１）全血を採血した注射器を遠心分離チューブに装着するステップと、（ｄ１）注射器が装着された遠心分離チューブを遠心分離機に搭載するステップと、（ｅ１）遠心分離機を作動させて血漿成分を注射器に採集するステップとを含む。
【００３９】
望ましくは、上記（ｃ１）ステップにおいて、全血を採血した注射器のゴムパッキングが注射器に残存するようにピストン及び注射針を除去した後、キャップが除去された遠心分離チューブに注射器を挿入して集積部に接続させることを特徴とする遠心分離キットを用いた遠心分離方法。
【００４０】
望ましくは、上記遠心分離チューブの内側面には、遠心分離チューブの長手方向に沿って一定の間隔で傾斜した係止突起が形成され、上記集積部が注射器から加えられた加圧力によって上記係止突起の間隔だけ下側に移動し、上側には移動できないようになっている。
【００４１】
望ましくは、上記遠心分離チューブの外周面に各係止突起が形成された間隔に位置した空間の体積量を表す目盛が表示され、上記（ａ１）ステップの以前または（ｂ１）ステップの以前に、採血された全血の赤血球の容積及び充填される細胞分離ゲルの容積の合算体積に従って、注射器に血漿成分が採集されるように、集積部の位置を調節する。
【００４２】
上記目的を達成するためのまたは他の遠心分離キットを用いた遠心分離方法は、（ａ２）遠心分離チューブと注射器とを用意するステップと、（ｂ２）遠心分離チューブの下側に下部キャップを装着するステップと、（ｃ２）上記注射器で全血を採取するステップと、（ｄ２）全血を採血した注射器を遠心分離チューブに装着するステップと、（ｅ２）注射器が装着された遠心分離チューブを遠心分離機に搭載するステップと、（ｆ２）遠心分離機を作動させて血漿成分を注射器に採集するステップとを含む。
【００４３】
望ましくは、上記（ｄ２）ステップにおいて、全血を採血した注射器のゴムパッキングが注射器に残存するようにピストン及び注射針を除去した後、キャップが除去された遠心分離チューブに注射器を挿入して集積部に接続させる。
【００４４】
望ましくは、上記集積部の上部は、上記注射器の接触面と対応するようにテーパー状になり、上記注射器の引込部が集積管に挿入されて密着するように設けられる。
【００４５】
望ましくは、上記遠心分離チューブの内部直径は、注射器の外部直径よりも大きく形成され、上記注射器の外周面が遠心分離チューブの内周面に密着するようになっている。
【００４６】
望ましくは、上記集積部の長さは、注射器引込部の長さよりも長く形成される。
【図面の簡単な説明】
【００４７】
本明細書に添付される下記の図面は本発明の望ましい実施例を例示するものであって、発明の詳細な説明とともに本発明の技術的思想をさらに理解させる役割を果たすものであるため、本発明はそのような図面に記載された事項にのみ限定されて解釈されてはいけない。
【図１】従来技術による遠心分離チューブに全血が遠心分離された状態を示す断面図である。
【図２】従来技術による細胞分離ゲルが受容された遠心分離チューブに全血が遠心分離された状態を示す写真である。
【図３】図２の遠心分離された血液から多血小板血漿を抽出する様子を示す写真である。
【図４】本発明の望ましい実施例による遠心分離キットに備えられた注射器を示す分解斜視図である。
【図５】本発明の望ましい実施例による遠心分離キットに備えられた遠心分離チューブを示す分解斜視図である。
【図６】図４の注射器を利用して採血された状態を示す断面図である。
【図７】図５の遠心分離チューブに細胞分離ゲルが充填された状態を示す断面図である。
【図８】本発明の望ましい実施例による遠心分離キットを示す分解断面図である。
【図９】図８の組立断面図である。
【図１０】本発明の望ましい実施例による遠心分離キットを用いた遠心分離方法を説明するためのフローチャートである。
【図１１】本発明の望ましい実施例による遠心分離キットを用いて遠心分離された状態を示す断面図である。
【図１２】図１１の遠心分離された遠心分離キットに本発明の仮定に従って決められた数値を示した図面である。
【図１３】本発明の望ましい実施例による遠心分離キットに備えられた他の遠心分離チューブを示す断面図である。
【図１４】図１３の遠心分離チューブに注射器が装着された状態を示す断面図である。
【図１５】本発明の望ましい実施例による遠心分離キットに備えられたまた他の遠心分離チューブを示す断面図である。
【図１６】図１５の遠心分離チューブを示す斜視図である。
【図１７】本発明の望ましい実施例による他の遠心分離キットを示す分解断面図である。
【図１８】図１７の組立断面図である。
【図１９】本発明の望ましい実施例による他の遠心分離キットを用いた遠心分離方法を説明するためのフローチャートである。
【図２０】本発明の望ましい実施例による他の遠心分離キットに備えられた下部キャップが注射器に装着された状態を示す断面図である。
【発明を実施するための形態】
【００４８】
以下、添付した図面を参照しながら本発明の望ましい実施例を詳しく説明する。これに先立って、本明細書及び請求範囲に使われた用語や単語は日常的もしくは辞書的な意味に限定して解釈されるものではなく、発明者は自らの発明を最善の方法で説明するために用語の概念を適切に定義することができるという意味において、本発明の技術的思想に符合する意味と概念とに解釈されなければならない。従って、本明細書に記載された実施例は本発明の最も望ましい一実施例に過ぎず、本発明の技術的思想の全てを代弁するものではないため、本出願時点においてこれらに代替できる多様な均等物と変形例があり得ることを理解しなければならない。
【００４９】
図４は本発明の望ましい実施例による遠心分離キットに備えられた注射器を示す分解斜視図であり、図５は本発明の望ましい実施例による遠心分離キットに備えられた遠心分離チューブを示す分解斜視図である。
【００５０】
図面を参照すれば、上記遠心分離キット（図８の「１００」を参照）は、注射器１１０と上記注射器１１０を装着可能な遠心分離チューブ１２０とを備える。
【００５１】
上記注射器１１０は、その下部に引込部１１２が形成され上部に開口部１１３が形成されたシリンダー１１１と、上記シリンダー１１１の開口された上部から挿入されシリンダー１１１の長手方向に移動できるピストン１１５と、上記シリンダー１１１の下部に装着された注射針１１４とを備える。
【００５２】
上記のような注射器１１０は通常使われるものであって、シリンダー１１１の内部に血液を採血するようになっている。このとき、上記ピストン１１５に設けられたゴムパッキング１１６は、ピストン１１５から分離できるようになっている。すなわち、ピストン１１５とゴムパッキング１１６との分離時、注射器１１０の内部にゴムパッキング１１６が残るようにしてピストン１１５を除去する。
【００５３】
このような注射器１１０を利用して全血（Ｗｂ）を採血する（図６を参照）。
【００５４】
上記遠心分離チューブ１２０は、所定物質を受容するように上部に開放部１２３が形成され、下部が詰まったチューブボディー１２１と、上記チューブボディー１２１の内部に設けられた集積部１２５と、上記上部を開閉するようになったキャップ１２６とを備える。
【００５５】
上記チューブボディー１２１は、透明な材質からなることが望ましく、その上部にキャップ１２６と結合するためのネジ１２１’が形成されキャップ１２６とねじ結合される。このとき、上記キャップ１２６が結合された上部、すなわち集積部１２５を基準にして上側部分は支持部１２２である。上記支持部１２２は、注射器１１０が遠心分離チューブ１２０に挿入されるとき、注射器１１０を支持する役割を果たす。上記支持部１２２に関しては、後述する。
【００５６】
上記集積部１２５は、その中心部に集積部１２５を基準にして上側と下側とを連通する集積管１２４が形成される。上記集積管１２４は、注射器１１０の引込部１１２と対応する形状及びサイズを有する。すなわち、上記集積部１２５の上部は、上記注射器１１０の引込部１１２が接続して、結果的に上記注射器１１０が遠心分離チューブ１２０に密着するように、注射器１１０の接触する面と対応する形状を有することが望ましい。これによって、上記集積部１２５に注射器１１０が接続するとき、集積管１２４には注射器１１０の引込部１１２が挿入される。ここで、上記集積管１２４の長さは注射器１１０の引込部１１２の長さよりも長く形成することが望ましい。上記集積管１２４は、標的物質を容易に集めることができ、精度よく採取ができるようにする。
【００５７】
一方、上記遠心分離チューブ１２０の内部直径は注射器１１０、すなわちシリンダー１１１の外部直径よりも大きいかまたは同一に形成する。一例として、上記注射器１１０の外周面が遠心分離チューブ１２０の内周面に密着するように、上記遠心分離チューブ１２０の内部直径が設定される。
【００５８】
このような遠心分離チューブ１２０には細胞分離ゲル（Ｖｆ）が充填されて使うことができる（図７を参照）。上記細胞分離ゲル（Ｖｆ）は図１１に示すように、全血（Ｗｂ）を遠心分離するとき、血球成分（Ｖｂ）と血漿成分（Ｖｐ）とを分離するために使われるものである。このような細胞分離ゲル（Ｖｆ）は、標的物質の採集者によって最大１:１の容積率まで全血（Ｗｂ）と混合して使うことができ、場合によっては使われないこともある。
【００５９】
本発明の実施例においては、全血（Ｗｂ）を遠心分離するとき、細胞分離ゲル（Ｖｆ）を使うと仮定して説明する。
【００６０】
一方、本発明は、遠心分離時、集積部１２５に装着された注射器１１０に血漿成分（Ｖｐ）が採集されるようになったことにその特徴がある。従って、上記遠心分離チューブ１２０に、集積部１２５の位置を設定することが重要である。以下では、集積部１２５の位置を設定するための実施例と共に遠心分離方法に関して説明する。
【００６１】
図８は本発明の望ましい実施例による遠心分離キットの分解断面図であり、図９は図８の組立断面図であり、図１０は本発明の望ましい実施例による遠心分離キットを用いた遠心分離方法を説明するためのフローチャートである。
【００６２】
図面に従うと、まず、遠心分離チューブ１２０と注射器１１０とを用意する（Ｓ１１）。このとき、上記遠心分離チューブ１２０には図７に示すように、細胞分離ゲル（Ｖｆ）が充填された状態である。
【００６３】
次いで、図６に示すように、注射器１１０で全血（Ｗｂ）を採取する（Ｓ１２）。
【００６４】
続いて、全血（Ｗｂ）を採血した注射器１１０を遠心分離チューブ１２０に装着する（Ｓ１３）。このとき、上記注射器１１０は図８及び図９に示すように、注射針１１４及びピストン１１５が除去された状態である。ここで、ピストン１１５を除去するとき、ゴムパッキング１１６が注射器１１０に残存するようにピストン１１５を除去しなければならない。場合によっては、別個のゴムパッキング（図示せず）で注射器１１０の上部をパッキングすることもできる。上記注射針１１４及びピストン１１５が除去された注射器１１０はキャップ１２６が除去された遠心分離チューブ１２０の開放された上部から挿入されて装着される。ここで、上記注射針１１４を除去することは、遠心分離チューブ１２０に注射器１１０を容易に装着するためであり、上記ゴムパッキング１１６を除いたピストン１１５を除去することは、この後に遠心分離機（図示せず）に遠心分離キット１００を容易に搭載するためである。
【００６５】
上記注射器１１０は遠心分離チューブ１２０の上部に形成された支持部１２２によって緊密に装着される。すなわち、上記注射器１１０の外周面が遠心分離チューブ１２０の内周面に密着すると共に、支持部１２２の長さだけ注射器１１０を支持することになる。ここで、上記注射器１１０の引込部１１２は集積管１２４に挿入される。
【００６６】
次いで、注射器１１０が装着された遠心分離チューブ１２０を遠心分離機に搭載させる（Ｓ１４）。
【００６７】
それから、図１１に示すように、遠心分離機を作動させて全血（Ｗｂ）を血球成分（Ｖｂ）と血漿成分（Ｖｐ）とに分離する（Ｓ１５）。上記遠心分離によって比重の大きい物質は下部に位置し、比重の小さい物質は上部に位置することになる。すなわち、上記集積部１２５の下端を基準にして、下側には血球成分（Ｖｂ）が形成され、上側には血漿成分（Ｖｐ）が形成される。これは、集積部１２５の位置を、遠心分離された全血（Ｗｂ）の赤血球（Ｖｂ）と細胞分離ゲル（Ｖｆ）との合算体積に該当する空間がその下部に形成されるようにしたからである。
【００６８】
上記のようなステップを経て遠心分離と同時に注射器１１０に血漿成分（Ｖｐ）が採集されれば、直ちに血漿成分（Ｖｐ）が使用可能になるので、血漿成分（Ｖｐ）を利用した医療施術及び生命工学的活用に所要される作業時間を減少させて作業の効率性を向上させることはもちろん、血漿成分（Ｖｐ）を抽出するための別の注射器を使わないことで消耗品の浪費を防止できる。
【００６９】
図１１は図１０の方法に従って遠心分離された状態を示す断面図であり、図１２は図１１の遠心分離された遠心分離キットに本発明の仮定に従って決められた数値を示した図面であって、図１１及び図１２を参照しながら集積部の位置調節について説明する。
【００７０】
以下、遠心分離機、注射器、及び遠心分離チューブの使用制限条件を考慮し、使われる物質の容積及び容積による高さを具体的に設定して本発明をより具体的に説明する。
【００７１】
遠心分離チューブと注射器との高さは、通常、遠心分離機（図示せず）に搭載可能な高さを考慮して決定する。例えば、従来の一般的な１０ｃｃ容積の遠心分離チューブは１３ｃｍ程度であり、搭載可能な最大長さは１４ｃｍであるので、これを考慮して遠心分離チューブと注射器との高さを決定する。
【００７２】
従って、本発明の実施例においては、１４ｃｍの長さを搭載可能な遠心分離機で使用できる遠心分離チューブと注射器とを例として挙げる。勿論、遠心分離機はその種類によって搭載可能な長さの制限が異なる。従って、遠心分離機の種類によって本発明による遠心分離チューブと注射器との設計条件は適切に選択できることは当業者には自明である。
【００７３】
本発明の実施例において、上記注射器１１０は通常使われる１０ｃｃ用注射器を例として挙げて記述する。上記注射器１１０には、血液の凝固を防止するために抗凝固剤であるＡＣＤ溶液１．５ｃｃを入れた後、患者の血液８．５ｃｃを採血して遠心分離チューブ１２０に装着する。
【００７４】
上記遠心分離チューブ１２０には、赤血球の排除及び正確な多血小板血漿（ＰＲＰ）の獲得のために、細胞分離ゲル（Ｖｆ）を使用する。上記細胞分離ゲル（Ｖｆ）は、最大で、全血（Ｗｂ）と１:１の比率まで混合されて使うことができ、または使われないこともある。ここで、上記細胞分離ゲル（Ｖｆ）は２．５ｃｃの容積を有し２ｃｍの長さを有することにする。すなわち、上記細胞分離ゲル（Ｖｆ）が遠心分離チューブ１２０の内部に２．５ｃｃ充填されれば、細胞分離ゲル（Ｖｆ）の高さは２ｃｍになる。
【００７５】
一方、全血（Ｗｂ）を遠心分離したとき、血漿成分はＶｐ、血球成分はＶｂとする。ここで、血球成分（Ｖｂ）の比重は血漿成分（Ｖｐ）の比重よりも大きいので、遠心分離時、血球成分（Ｖｂ）が下側に採集される。
【００７６】
通常、全血（Ｗｂ）を遠心分離したとき、血球成分、すなわち赤血球（Ｖｂ）の容積率（α）は、採血者によって差はあるが、たいてい４５％である。従って、全血（Ｗｂ）１０ｃｃに対する赤血球の容積（Ｖｂ）は４．５ｃｃの体積容積を有し、遠心分離チューブ１２０の下側に３ｃｍの高さにわたって採集されることになる。
【００７７】
これをまとめると、Ｗｂ＝Ｖｐ＋Ｖｂであり、１０ｃｃ＝５．５ｃｃ＋４．５ｃｃであることが分かる。また、細胞分離ゲル（Ｖｆ）の２．５ｃｃと赤血球の容積（Ｖｂ）４．５ｃｃとの和が７ｃｃであるので、上記７ｃｃの容積高さに軟膜、すなわち多血小板血漿層が形成されることが分かる。すなわち、７ｃｃの容積高さの上側に血漿成分（Ｖｐ）が形成される。
【００７８】
したがって、一定に製作された遠心分離チューブ１２０である場合、細胞分離ゲルの容積高さが２ｃｍであり、血球容積量の容積高さが３ｃｍであれば、集積部１２５を設ける高さ（ｈ）は５ｃｍになる。すなわち、集積部１２５の下側が５ｃｍ高さに位置されるべきである。
【００７９】
以上をまとめると、下記数１のような関係式が導出される。
【数１】
2013504755.tif 000003
（但し、０≦Ｖｆ≦Ｗｂ）
Ａ：血球成分と細胞分離ゲルとを足した体積容量
Ｗｂ：全血の容積
Ｖｂ：赤血球の容積
α：遠心分離された赤血球の容積率
Ｖｆ：細胞分離ゲルの容積
【００８０】
このような数１のように、集積部１２５が形成された下側空間の体積容量は、血球成分（Ｖｂ）と細胞分離ゲル（Ｖｆ）との容積を足した体積容量であることが分かる。すなわち、集積部１２５の下側にＡの体積容量が受容可能に集積部１２５の下側位置を調節することが望ましい。
【００８１】
また、数１を利用すれば、集積部１２５を設ける高さをｈ、赤血球（Ｖｂ）の容積高さをｈ（Ｖｂ）、細胞分離ゲル（Ｖｆ）の容積高さをｈ（Ｖｆ）として、次のような関係が成立する下記の数式を導出できる。
【数２】
2013504755.tif 000004
ｈ：集積部を設ける高さ
【００８２】
すなわち、上記集積部１２５を設ける高さ（ｈ）はｈ（Ｖｆ）＋０．４５×ｈ（Ｗｂ）である。従って、上記数２に基づいて上記集積部１２５の高さを設定できる。
【００８３】
一方、集積部１２５の長さをｄとし、注射器１１０が装着される上記集積部１２５の上限の高さをｈ１とすれば、ｈ１＝ｈ＋ｄになり、これは、注射器が装着される高さになるのである。
【００８４】
また、装着される注射器１１０の長さはｌ１とし、上記注射器１１０が遠心分離チューブ１２０に装着された全体長さ、すなわちキット１００の長さをｌとする。このとき、上記集積部１２５の長さ（ｄ）は、遠心分離機に搭載可能な高さと空間範囲とを考慮して１．５ｃｍに設定し、ｌ１を７ｃｍに設定すれば、キット１００の全体長さｌ＝ｌ１＋ｄ＋ｈである。すなわち、キット１００の全体長さｌは１３．５ｃｍである。従って、遠心分離機に搭載可能な最大長さである１４ｃｍよりも短い長さを有するようになるので、遠心分離機に搭載できる。
【００８５】
また、上記注射器１１０を支持する遠心分離チューブ１２０の支持部１２２をｓとし、注射器１１０の引込部１１２の長さをｌ2とする。
【００８６】
ここで、遠心分離チューブ１２０の長さをＨとすれば、Ｈ＝ｈ＋ｄ＋ｓ＝ｈ１＋ｓになるのである。
【００８７】
上記支持部（ｓ）は、注射器１１０を支持するためのものであって、約１ｃｍないし２ｃｍであることが望ましい。このような支持部（ｓ）の長さが全体長さ（ ｌ ）に含まれないことは自明である。
【００８８】
上記集積部１２５の長さｄは引込部１１２の長さｌ２よりも長く形成される。ここで、上記引込部１１２の長さｌ２を１．２ｃｍと設定すれば、ｌ2＝１．２ｃｍ＜ｄになる。
【００８９】
また、集積部１２５の集積管１２４の長さｄと、注射器１１０の引込部１１２の長さｌ２との差によって集積管１２４には余裕空間が存在することになる。このような余裕空間を含んで集積管１２４及び注射器１１０に血漿成分（Ｖｐ）が採集されるようにすることができる。代案としては、細胞分離ゲル（Ｖｆ）の容積を調節することで、注射器１１０の引込部１１２から血漿成分（Ｖｐ）が採集されるようにすることもできる。これは、上記余裕空間だけの容積と同一の容積の細胞分離ゲル（Ｖｆ）をさらに使えば実現できる。
【００９０】
一方、図１２に示した数値は本発明の仮定に従って決められた任意の数値であって、使われる注射器と遠心分離チューブの種類、及び使われる容積量によって変更できることは自明である。
【００９１】
結果的に、上記のように設定された条件及び数式を通じて集積部１２５が設けられる位置を設定することで、注射器１１０に血漿成分（Ｖｐ）が採集されるようにすることができる。従って、目的とする血漿成分（Ｖｐ）が注射器１１０に採集されることで、２次的に即時使用しやすいことは勿論、施術者及び被施術者の待ち時間が減少して作業の効率性を向上させる。
【００９２】
図１３は本発明の望ましい実施例による遠心分離キットに備えられた他の遠心分離チューブを示す断面図であり、図１４は図１３の遠心分離チューブに注射器が装着された状態を示す断面図である。
【００９３】
図面を参照すれば、遠心分離キット２００は、注射器１１０と、通気孔２２７が形成された集積部２２５が内部に形成された遠心分離チューブ１２０とを備える。上記遠心分離キット２００の構成要素のうち、注射器１１０は図９に示した注射器１１０と同一であるのでここでの説明は省略する。また、図１３及び図１４の部材番号の中で図９の部材番号と同一であるのは同一の構成要素を示す。すなわち、集積部２２５に通気孔２２７が形成されたことを除いては、前述の実施例と構成が同一である。
【００９４】
上記集積部２２５には通気孔２２７が形成される。上記通気孔２２７は、注射器１１０を遠心分離チューブ１２０に容易に装着するために形成されたものである。すなわち、注射器１１０から全血が滴下されるにつれて遠心分離チューブ１２０内の空気が外部に排出されて全血（Ｗｂ）が容易に滴下されるようにする。このような通気孔２２７は、注射器１１０が集積部２２５の上部に密着され接続されることによって塞がれるようになるので、全血（Ｗｂ）が通気孔２２７を通じては抜け出すことができなくなる。
【００９５】
一方、上記通気孔２２７の代案として、注射器１１０にホール（図示せず）を形成できる。すなわち、注射器１１０の上側部分にホールを形成することによって、遠心分離チューブ１２０への全血（Ｗｂ）の流入が容易になる。
【００９６】
このような通気孔２２７が形成された集積部２２５は、予め指定された位置に設けられて、前述の遠心分離方法を使用して注射器１１０に血漿成分（Ｖｐ）を採集できることは自明である。
【００９７】
一方、本発明では、上記集積部１２５・２２５の高さが設定条件に従って決められたと説明したが、これに限定されず、集積部１２５・２２５の高さを調節可能にすることができる。
【００９８】
例えば、図１５に示すように、遠心分離チューブ３２０の内部に係止突起３２８が形成される。ここで、上記図１５に示した遠心分離キット３００は、遠心分離チューブ３２０が変形されたまた他の実施例であって、図１５の部材番号の中で図９の部材番号と同一であるのは同一の構成要素を示す。
【００９９】
上記遠心分離チューブ３２０に形成された係止突起３２８は、上記遠心分離チューブ３２０の長手方向に沿って一定の間隔で傾斜して形成される。すなわち、上記集積部３２５は、注射器１１０から加圧されて係止突起３２８の間隔だけ下側に移動する。このとき、下側に移動する集積部３２５は上側には移動できないようになっている。これは、注射器１１０を排出する方向に引っ張ったとき、集積管３２４と結合された注射器１１０の引込部１１２の間に採集された多血小板血漿（ＰＲＰ）が、集積部３２５の移動によって他の層と混じらない状態を維持させるためである。
【０１００】
より具体的に、上記係止突起３２８が形成された遠心分離チューブ３２０は、透明な材質からなり、その外周面に目盛（Ｐ）が表示される（図１６を参照）。上記目盛（Ｐ）は、採血された全血の赤血球層の容積（Ｖｂ）及び充填される細胞分離ゲルの容積（Ｖｆ）の合算体積に従って、位置を調節するように表示されたものである。すなわち、上記目盛（Ｐ）を係止突起３２８が形成された間隔ごとに表示することで、赤血球の容積（Ｖｂ）及び細胞分離ゲルの容積（Ｖｆ）の合算体積に従って集積部３２５の位置を調節することになる。
【０１０１】
例えば、前述のように、全血１０ｃｃと細胞分離ゲル２．５ｃｃ（２ｃｍ）とを基本にするとき、全血９ｃｃを採血すれば、赤血球の容積は４ｃｃであり、それによる容積高さが２．５ｃｍであれば、チューブの下側から４．５ｃｍになる部分に「９」（図示せず）と目盛（Ｐ）を表示する。すなわち、「９」と表示された目盛（Ｐ）は、９ｃｃ採血されたときの高さを意味する。従って、施術者は、採血された容積及び細胞分離ゲルの合算容積によって集積部３２５をその位置だけ押して装着した後、遠心分離を行う。
【０１０２】
図１７は本発明の望ましい実施例による他の遠心分離キットを示す分解断面図であり、図１８は図１７の組立断面図である。
【０１０３】
図１７及び図１８においては、上記遠心分離キット４００は、注射器１１０と、上記注射器１１０が装着可能な遠心分離チューブ４２０と、上記遠心分離チューブ４２０の下側に装着される下部キャップ４３０とを備える。上記遠心分離キット４００の構成要素のうち、注射器１１０は図９に示した注射器１１０と同一であるのでここでの説明は省略する。また、図１７及び図１８の部材番号の中で図９の部材番号と同一であるのは同一の構成要素を示す。
【０１０４】
上記遠心分離チューブ４２０は、上部に開放部が形成され下部にチューブ引込部４２９’が形成されたチューブボディー４２１と、上記チューブボディー４２１の内部に設けられた集積部４２５とを備える。
【０１０５】
上記チューブボディー４２１の上部の開放された部分から注射器１１０が挿入されて集積部４２５に接続される。このとき、注射器１１０は、その外周面がチューブボディー４２１の内周面と密着することで緊密に装着される。
【０１０６】
上記チューブボディー４２１の下部には、チューブ引込部４２９’が形成された結合部４２９が設けられる。上記チューブ引込部４２９’は、チューブボディー４２１の内部と外部とを連通するように形成される。
【０１０７】
上記下部キャップ４３０は、上記チューブ引込部４２９’を密封させるように締結部４３９’が上部に突出して形成され、上記結合部４２９に装着されるチューブ結合部４３９を備える。このとき、下部キャップ４３０には細胞分離ゲルを一定量充填できる。従って、チューブボディー４２１の上部を通じて細胞分離ゲルを充填せず、下部キャップ４３０の結合によってチューブ引込部４２９’が密封されるようになる。すなわち、上記チューブボディー４２１に下部キャップ４３０を装着することで、下部が密閉された遠心分離チューブとして使えるようになる。
【０１０８】
このような構造の遠心分離キット４００を使用して遠心分離する方法に対して図１９を参照しながら説明する。
【０１０９】
本発明による遠心分離方法は６ステップからなる。すなわち、遠心分離チューブ４２０と注射器１１０とを用意するステップ（Ｓ２１）と、上記注射器１１０で全血を採取するステップ（Ｓ２２）と、遠心分離チューブ４２０の下側に下部キャップ４３０を装着するステップ（Ｓ２３）と、全血を採血した注射器１１０を遠心分離チューブ４２０に装着するステップ（Ｓ２４）と、注射器１１０が装着された遠心分離チューブ４２０を遠心分離機（図示せず）に搭載するステップ（Ｓ２５）と、遠心分離機を作動させて血漿成分を注射器に採集するステップ（Ｓ２６）とで行える。
【０１１０】
この過程において、（Ｓ２３）ステップを除いた他のステップは、前述の（Ｓ１１）ステップないし（Ｓ１５）ステップと同一である。すなわち、（Ｓ２３）ステップを含んだ遠心分離方法は、この技術に属する当業者であれば、前述の遠心分離方法から理解できることから、詳細な説明は省略する。
【０１１１】
上記（Ｓ２３）ステップにおいて、上記遠心分離チューブ４２０に下部キャップ４３０を装着する。このとき、下部キャップ４３０には、細胞分離ゲルが一定量充填される。ここで、細胞分離ゲルは２ｃｃないし２．５ｃｃ充填することが望ましい。
【０１１２】
上記下部キャップ４３０は、変化する多血小板血漿の高さを調節できるようになっている。例えば、多血小板血漿が集積部４２５の下方に位置すれば、下部キャップ４３０をチューブボディー４２１にさらに密着して結合し、逆の場合、下部キャップ４３０をチューブボディー４２１に密着されないように結合して装着する。
【０１１３】
付加的に、上記下部キャップ４３０は、注射器１１０の引込部１１２を密封するように注射器１１０と結合できる。すなわち、図２０に示すように、下部キャップ４３０は注射器１１０と結合するようになされる。すなわち、上記注射器１１０の引込部１１２が下部キャップ４３０の締結部４３９’と結合され、下部キャップ４３０が注射器の下部を包むように結合される。
【０１１４】
このように、下部キャップ４３０と注射器１１０との結合は、２次的に血小板を濃縮するために使われる。すなわち、２次的に多血小板血漿を濃縮するとき、既に多血小板血漿が抽出された注射器１１０に、下部キャップ４３０を装着して遠心分離させる。２次遠心分離されれば、下部キャップ４３０に多血小板血漿が集積され、注射器１１０に乏血小板血漿が集積される。
【０１１５】
結果的に、上記のような遠心分離キット１００・２００・３００・４００を使用することで、容易且つ安定した血漿成分の抽出が可能になる。一方、前述の各実施例はそれぞれ独立的に使うこともでき、各実施例を選択的に組み合わせて使うこともできることは自明である。
【０１１６】
以上のように、本発明は、例示として実施例と図面とによって説明されたが、本発明はこれによって限定されず、本発明が属する技術分野において通常の知識を持つ者により本発明の技術的思想と特許請求範囲の均等範囲内で多様な修正及び変形が可能なのは言うまでもない。
【産業上の利用可能性】
【０１１７】
本発明による遠心分離キット及びこれを用いた遠心分離方法は、以下のような効果を有する。
【０１１８】
第一に、血液から多血小板血漿（ＰＲＰ）を抽出するか、骨髄から幹細胞を抽出する遠心分離過程及び採集過程を簡略化することで、作業に所要される時間を減らすことができる。従って、施術者と被施術者の無駄な待ち時間を減らすことができる。
【０１１９】
第二に、所望の標的物質を注射器に安定的に採集可能になることで、実験の信頼性及び手術時の安定性を確保できる。すなわち、標的物質を抽出するための別の注射器を使わないことで、消耗品のコストを削減できる。
【図１】
2013504755.tif 000006
【図２】
2013504755.tif 000007
【図３】
2013504755.tif 000008
【図４】
2013504755.tif 000009
【図５】
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【図６】
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【図７】
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【図８】
2013504755.tif 000013
【図９】
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【図１０】
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【図１１】
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【図１２】
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【図１３】
2013504755.tif 000018
【図１４】
2013504755.tif 000019
【図１５】
2013504755.tif 000020
【図１６】
2013504755.tif 000021
【図１７】
2013504755.tif 000022
【図１８】
2013504755.tif 000023
【図１９】
2013504755.tif 000024
【図２０】
2013504755.tif 000025
【手続補正書】
【提出日】平成24年3月12日(2012.3.12)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
遠心分離機に搭載されて、全血を下から順次、赤血球層からなる血球成分と、多血小板血漿（ＰＲＰ）層及び乏血小板血漿（ＰＰＰ）層からなる血漿成分とに分離する遠心分離キットであって、
下部が密閉され上部に開放部が形成されて、開放された上部を開閉するキャップが形成され、内部には集積管が形成された集積部が設けられ、内部に細胞分離ゲルが一定量充填される遠心分離チューブを含み、
上記集積部は、遠心分離された全血の赤血球と細胞分離ゲルとの合算体積に該当する空間がその下部に形成されるように設けられたことを特徴とする遠心分離キット。
【請求項２】
遠心分離機に搭載されて、全血を下から順次、赤血球層からなる血球成分と、多血小板血漿（ＰＲＰ）層及び乏血小板血漿（ＰＰＰ）層からなる血漿成分とに分離する遠心分離キットであって、
内部には集積管が形成された集積部が設けられ、下部には内部と連通するチューブ引込部が形成された結合部が設けられ、上部が開放された遠心分離チューブと、
上記遠心分離チューブの結合部に装着され、上記チューブ引込部を密封するように締結部が上部に突出して形成され、内部に細胞分離ゲルが一定量充填される下部キャップとを含み、
上記集積部は、遠心分離された全血の赤血球と細胞分離ゲルとの合算体積に該当する空間がその下部に形成されるように設けられたことを特徴とする遠心分離キット。
【請求項３】
上部に開口部が形成され、開口された上部にゴムパッキングが設けられたピストンが移動可能に挿入され、下部には注射針が装着される引込部が形成され、内部に全血を採血するようになった注射器をさらに含むことを特徴とする請求項１または請求項２に記載の遠心分離キット。
【請求項４】
上記ゴムパッキングが注射器に残存するようにピストン及び注射針が除去された注射器が、上部が開放された遠心分離チューブの内部に挿入され遠心分離機に搭載されるように集積部の上部に装着されることを特徴とする請求項３に記載の遠心分離キット。
【請求項５】
上記遠心分離チューブの内部直径は、注射器の外部直径よりも大きく形成され、
上記注射器の外周面が遠心分離チューブの内周面に密着するようになったことを特徴とする請求項３もしくは４に記載の遠心分離キット。
【請求項６】
上記集積部の上部は、上記注射器の接触面と対応する形状になっており、上記注射器の引込部が集積管に挿入されて密着するように設けられることを特徴とする請求項３〜５のいずれか一項に記載の遠心分離キット。
【請求項７】
上記集積部の長さは、注射器引込部の長さよりも長く形成されたことを特徴とする請求項３〜６のいずれか一項に記載の遠心分離キット。
【請求項８】
上記全血から遠心分離機によって分離された血漿成分が集積部を基準にして採集されるように、上記血球成分が生成される集積部の下部に位置した空間の体積容量（Ａ）と、注射器から採血された全血（Ｗｂ）と、赤血球の容積（Ｖｂ）と、上記遠心分離された赤血球の容積比率（α）と、細胞分離ゲルの容積（Ｖｆ）との間には、次のような関係が成立することを特徴とする請求項１〜７のいずれか一項に記載の遠心分離キット。
2013504755.tif 000026
及び
（０≦Ｖｆ≦Ｗｂ）
【請求項９】
上記集積部には、遠心分離チューブに全血が流入する場合遠心分離チューブの内部の空気が抜け出すように通気孔が形成され、
上記通気孔は、注射器が集積部に密着されて装着されることで塞がれるようになることを特徴とする請求項１〜８のいずれか一項に記載の遠心分離キット。
【請求項１０】
上記遠心分離チューブの内側面には、遠心分離チューブの長手方向に沿って一定の間隔で傾斜した係止突起が形成され、上記集積部が注射器から加えられた加圧力によって上記係止突起の間隔だけ下側に移動し、上側には移動できないようになったことを特徴とする請求項３〜８のいずれか一項に記載の遠心分離キット。
【請求項１１】
上記遠心分離チューブは、透明な材質から製造され、その外周面には各係止突起が形成された間隔に位置した空間の体積量を表すように目盛が表示されて、採血された全血の赤血球の容積及び充填される細胞分離ゲルの容積の合算体積に従って、集積部の位置が調節されることを特徴とする請求項１〜１０のいずれか一項に記載の遠心分離キット。
【請求項１２】
上記下部キャップは、遠心分離チューブの下部に密着されて結合される程度に従って血漿成分が生成される位置の高さが調節されることを特徴とする請求項２〜１１のいずれか一項に記載の遠心分離キット。
【請求項１３】
上記下部キャップは、注射器の引込部を密封しながら注射器に装着されるようになったことを特徴とする請求項２〜１２のいずれか一項に記載の遠心分離キット。
【請求項１４】
請求項１に記載の遠心分離キットを用いた遠心分離方法において、
（ａ１）遠心分離チューブと注射器とを用意するステップと、
（ｂ１）上記注射器で全血を採取するステップと、
（ｃ１）全血を採血した注射器を遠心分離チューブに装着するステップと、
（ｄ１）注射器が装着された遠心分離チューブを遠心分離機に搭載するステップと、
（ｅ１）遠心分離機を作動させて血漿成分を注射器に採集するステップとを含むことを特徴とする遠心分離キットを用いた遠心分離方法。
【請求項１５】
上記（ｃ１）ステップにおいて、全血を採血した注射器のゴムパッキングが注射器に残存するようにピストン及び注射針を除去した後、キャップが除去された遠心分離チューブに上記注射器を挿入して集積部に接続させることを特徴とする請求項１４に記載の遠心分離キットを用いた遠心分離方法。
【請求項１６】
上記遠心分離チューブの内側面には、遠心分離チューブの長手方向に沿って一定の間隔で傾斜した係止突起が形成され、上記集積部が注射器から加えられた加圧力によって上記係止突起の間隔だけ下側に移動し、上側には移動できないようになったことを特徴とする請求項１４に記載の遠心分離キットを用いた遠心分離方法。
【請求項１７】
上記遠心分離チューブの外周面に各係止突起が形成された間隔に位置した空間の体積量を表す目盛が表示され、
上記（ａ１）ステップ以前または（ｂ１）ステップ以前に、
採血された全血の赤血球の容積及び充填される細胞分離ゲルの容積の合算体積に従って、注射器に血漿成分が採集されるように、集積部の位置を調節することを特徴とする請求項１６に記載の遠心分離キットを用いた遠心分離方法。
【請求項１８】
請求項２に記載の遠心分離キットを用いた遠心分離方法において、
（ａ２）遠心分離チューブと注射器とを用意するステップと、
（ｂ２）上記注射器で全血を採取するステップと、
（ｃ２）遠心分離チューブの下側に下部キャップを装着するステップと、
（ｄ２）全血を採血した注射器を遠心分離チューブに装着するステップと、
（ｅ２）注射器が装着された遠心分離チューブを遠心分離機に搭載するステップと、
（ｆ２）遠心分離機を作動させて血漿成分を注射器に採集するステップとを含むことを特徴とする遠心分離キットを用いた遠心分離方法。
【請求項１９】
上記（ｄ２）ステップにおいて、全血を採血した注射器のゴムパッキングが注射器に残存するようにピストン及び注射針を除去した後、キャップが除去された遠心分離チューブに上記注射器を挿入して集積部に安着させることを特徴とする請求項１８に記載の遠心分離キットを用いた遠心分離方法。
【請求項２０】
上記集積部の上部は、上記注射器の接触面と対応する形状になっており、上記注射器の引込部が集積管に挿入されて密着するように設けられることを特徴とする請求項１４または請求項１８に記載の遠心分離キットを用いた遠心分離方法。
【請求項２１】
上記遠心分離チューブの内部直径は、注射器の外部直径よりも大きく形成され、
上記注射器の外周面が遠心分離チューブの内周面に密着するようになったことを特徴とする請求項１４または請求項１８に記載の遠心分離キットを用いた遠心分離方法。
【請求項２２】
上記集積部の長さは、注射器の引込部の長さよりも長く形成されたことを特徴とする請求項２１に記載の遠心分離キットを用いた遠心分離方法。
【国際調査報告】
2013504755.tif 000027
2013504755.tif 000028
2013504755.tif 000029
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