(57)【要約】  3-(4-アミノ-1-オキソ-1,3-ジヒドロ-イソインドール-2-イル)-ピペリジン-2,6-ジオンの投与による、非ホジキンリンパ腫を含む特定の癌を治療又は管理する方法を明らかにする。3-(4-アミノ-1-オキソ-1,3-ジヒドロ-イソインドール-2-イル)-ピペリジン-2,6-ジオンによる治療に対する非ホジキンリンパ腫の反応の予測因子として遺伝子及びタンパク質バイオマーカーを使用する方法も明らかにする。【選択図】図１
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【特許請求の範囲】
【請求項１】
(i)3-(4-アミノ-1-オキソ-1,3-ジヒドロ-イソインドール-2-イル)-ピペリジン-2,6-ジオンによる治療に対し感受性がある非ホジキンリンパ腫を有する患者を確定する工程；及び
(ii)下記構造を有する
【化１】
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3-(4-アミノ-1-オキソ-1,3-ジヒドロ-イソインドール-2-イル)-ピペリジン-2,6-ジオン、又はその医薬として許容し得る塩、溶媒和物若しくは水和物の治療的有効量を該患者に投与する工程：
を含む、非ホジキンリンパ腫を治療又は管理する方法。
【請求項２】
前記非ホジキンリンパ腫が、びまん性大細胞型B細胞性リンパ腫である、請求項1記載の方法。
【請求項３】
前記非ホジキンリンパ腫が、活性化B細胞表現型のものである、請求項1記載の方法。
【請求項４】
前記びまん性大細胞型B細胞性リンパ腫が、活性化B細胞表現型のものである、請求項2記載の方法。
【請求項５】
前記びまん性大細胞型B細胞性リンパ腫が、RIVA、U2932、TMD8又はOCI-Ly10細胞株において過剰発現された1種以上のバイオマーカーの発現により特徴付けられる、請求項4記載の方法。
【請求項６】
3-(4-アミノ-1-オキソ-1,3-ジヒドロ-イソインドール-2-イル)-ピペリジン-2,6-ジオンによる治療に対し感受性がある非ホジキンリンパ腫を有する患者の確定が、活性化B細胞亜型としての患者の非ホジキンリンパ腫の型の特徴決定を含む、請求項1記載の方法。
【請求項７】
前記非ホジキンリンパ腫の表現型が、びまん性大細胞型B細胞性リンパ腫の活性化B細胞亜型として特徴付けられる、請求項6記載の方法。
【請求項８】
前記非ホジキンリンパ腫の表現型が、RIVA、U2932、TMD8又はOCI-Ly10細胞株において過剰発現された1種以上のバイオマーカーの発現により特徴付けられる、請求項6記載の方法。
【請求項９】
前記非ホジキンリンパ腫の表現型の同定が、リンパ腫を有する患者から生体試料を入手することを含む、請求項1記載の方法。
【請求項１０】
前記生体試料が、リンパ節生検、骨髄生検、又は末梢血腫瘍細胞の試料である、請求項9記載の方法。
【請求項１１】
3-(4-アミノ-1-オキソ-1,3-ジヒドロ-イソインドール-2-イル)-ピペリジン-2,6-ジオンによる治療に対し感受性がある非ホジキンリンパ腫を有する患者の確定が、活性化B細胞表現型に関連した遺伝子の同定を含む、請求項1記載の方法。
【請求項１２】
前記活性化B細胞表現型に関連した遺伝子が、IRF4/MUM1、FOXP1、SPIB、CARD11及びBLIMP/PDRM1からなる群から選択される、請求項11記載の方法。
【請求項１３】
3-(4-アミノ-1-オキソ-1,3-ジヒドロ-イソインドール-2-イル)-ピペリジン-2,6-ジオンによる治療に対し感受性がある非ホジキンリンパ腫を有する患者の確定が、患者から入手した生体試料中のNF-κB活性のレベルを測定することを含む、請求項1記載の方法。
【請求項１４】
前記生体試料が、リンパ節生検、骨髄生検、又は末梢血腫瘍細胞の試料である、請求項13記載の方法。
【請求項１５】
前記活性化B細胞亜型としての患者の非ホジキンリンパ腫の表現型の特徴決定が：
(i)活性化B細胞亜型細胞の生存に必須のSPIBという造血器特異的Etsファミリー転写因子の過剰発現；
(ii)GCB亜型細胞よりもより高い構成性IRF4/MUM1発現；
(iii)3-トリソミーによりアップレギュレートされたより高い構成性FOXP1発現；
(iv)より高い構成性Blimp1、すなわちPRDM1の発現；
(v)より高い構成性CARD11遺伝子発現；及び
(vi)非活性化B細胞亜型DLBCL細胞に比べ増加したレベルのNF-κB活性：
の1つ以上の測定を含む、請求項6記載の方法。
【請求項１６】
治療的有効量の1種以上の追加の活性薬の投与を更に含む、請求項1〜15のいずれか一項記載の方法。
【請求項１７】
前記追加の活性薬が、アルキル化剤、アデノシン類似体、糖質コルチコイド、キナーゼ阻害薬、SYK阻害薬、PDE3阻害薬、PDE7阻害薬、ドキソルビシン、クロラムブシル、ビンクリスチン、ベンダムスチン、フォルスコリン及びリツキシマブからなる群から選択される、請求項16記載の方法。
【請求項１８】
前記追加の活性薬が、リツキシマブである、請求項17記載の方法。
【請求項１９】
前記化合物が、1日当たり約10〜約50mgの量で投与される、請求項1〜15のいずれか一項記載の方法。
【請求項２０】
前記化合物が、1日当たり約10、15、20、25又は50mgの量で投与される、請求項19記載の方法。
【請求項２１】
前記化合物が経口投与される、請求項19記載の方法。
【請求項２２】
前記化合物が、カプセル剤又は錠剤で投与される、請求項21記載の方法。
【請求項２３】
前記化合物が、10mg又は25mgのカプセル剤で投与される、請求項22記載の方法。
【請求項２４】
前記びまん性大細胞型B細胞性リンパ腫が、従来型療法に対し再発性、難治性又は抵抗性である、請求項1〜15のいずれか一項記載の方法。
【請求項２５】
前記化合物が、21日間の投薬、それに続く7日間の休薬の28日周期で投与される、請求項1〜15のいずれか一項記載の方法。
【請求項２６】
(i)患者から生体試料を入手する工程；
(ii)この生体試料中のNF-κB活性のレベルを測定する工程；及び
(iii)該生体試料中のNF-κB活性のレベルを、非活性化B細胞性リンパ腫亜型の生体試料のそれと比較する工程：
を含む、非ホジキンリンパ腫患者の治療に対する腫瘍反応を予測する方法であって：
ここで、非活性化B細胞亜型リンパ腫細胞に比べ増加したNF-κB活性のレベルが、3-(4-アミノ-1-オキソ-1,3-ジヒドロ-イソインドール-2-イル)-ピペリジン-2,6-ジオン治療に対する効果的患者腫瘍反応の可能性を示す、前記方法。
【請求項２７】
(i)患者から生体試料を入手する工程；
(ii)この生体試料中のNF-κB活性のレベルを測定する工程；
(iii)3-(4-アミノ-1-オキソ-1,3-ジヒドロ-イソインドール-2-イル)-ピペリジン-2,6-ジオン、又はその塩、溶媒和物若しくは水和物の治療的有効量を該患者へ投与する工程；
(iv)該患者から第二の生体試料を入手する工程；
(v)この第二の生体試料中のNF-κB活性のレベルを測定する工程；及び
(vi)第一の生体試料中のNF-κB活性のレベルを、第二の生体試料中のそれと比較する工程：
を含む、非ホジキンリンパ腫患者の治療に対する腫瘍反応をモニタリングする方法であって：
ここで、第一の生体試料に比べ減少した第二の生体試料中のNF-κB活性のレベルが、
効果的患者腫瘍反応の可能性を示す、前記方法。
【請求項２８】
(i)患者から生体試料を入手する工程；
(ii)この生体試料中のNF-κB活性のレベルを測定する工程；及び
(iii)該生体試料中のNF-κB活性のレベルを、対照未治療試料と比較する工程：
を含む、非ホジキンリンパ腫患者における薬物治療プロトコールの患者服薬遵守をモニタリングする方法であって：
ここで、対照に比べ減少した生体試料中のNF-κB活性のレベルが、薬物治療プロトコールの患者服薬遵守を示す、前記方法。
【請求項２９】
前記非ホジキンリンパ腫が、びまん性大細胞型B細胞性リンパ腫である、請求項26〜28のいずれか一項記載の方法。
【請求項３０】
前記NF-κB活性のレベルが、酵素結合免疫吸着アッセイにより測定される、請求項26〜28のいずれか一項記載の方法。
【請求項３１】
(i)患者から生体試料を入手する工程；
(ii)この試料からタンパク質又はRNAを精製する工程；及び
(iii)非ホジキンリンパ腫の活性化B細胞表現型に関連した遺伝子の、対照の非ホジキンリンパ腫の非活性化B細胞表現型と比べ増加した発現を同定する工程：
を含む、非ホジキンリンパ腫患者における治療に対する腫瘍反応を予測する方法であって、
ここで、非ホジキンリンパ腫の活性化B細胞表現型に関連した遺伝子の増加した発現が、3-(4-アミノ-1-オキソ-1,3-ジヒドロ-イソインドール-2-イル)-ピペリジン-2,6-ジオン治療に対する効果的な患者腫瘍反応の可能性を示す、前記方法。
【請求項３２】
前記生体試料が、腫瘍組織である、請求項31記載の方法。
【請求項３３】
増加した発現が、約1.5×、2.0×、3×、5×又はそれ以上の増加である、請求項31記載の方法。
【請求項３４】
前記活性化B細胞表現型に関連した遺伝子が、IRF4/MUM1、FOXP1、SPIB、CARD11及びBLIMP/PDRM1からなる群から選択される、請求項31〜33のいずれか一項記載の方法。
【請求項３５】
前記非ホジキンリンパ腫の活性化B細胞表現型に関連した遺伝子の発現の同定が、定量的リアル-タイムPCRにより実行される、請求項31〜33のいずれか一項記載の方法。
【請求項３６】
(i)固形支持体；及び
(ii)生体試料中の非ホジキンリンパ腫の活性化B細胞表現型のバイオマーカーの発現を検出する手段：
を含む、非ホジキンリンパ腫患者における3-(4-アミノ-1-オキソ-1,3-ジヒドロ-イソインドール-2-イル)-ピペリジン-2,6-ジオンによる治療に対する腫瘍反応を予測するキット。
【請求項３７】
前記バイオマーカーが、NF-κBである、請求項36記載のキット。
【請求項３８】
前記バイオマーカーが、活性化B細胞表現型に関連した遺伝子であり、且つIRF4/MUM1、FOXP1、SPIB、CARD11及びBLIMP/PDRM1からなる群から選択される、請求項36記載のキット。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
2010年3月12日に出願された米国特許仮出願第61/313,670号に対する優先権を本明細書において主張する。先に言及した出願は、その全体が引用により本明細書中に組み込まれている。
【０００２】
(1.  発明の分野)
本発明は、レナリドミド又はRevimid(登録商標)としても公知である、3-(4-アミノ-1-オキソ-1,3-ジヒドロ-イソインドール-2-イル)-ピペリジン-2,6-ジオンによる治療に対する非ホジキンリンパ腫及び患者の反応に対する臨床的感度の予測因子としての、遺伝子及びタンパク質バイオマーカーの使用に関する。特に本発明は、予後因子を使用する、非限定的にびまん性大細胞型B細胞性リンパ腫(DLBCL)を含む非ホジキンリンパ腫を治療又は管理する方法を包含している。
【背景技術】
【０００３】
(2.  発明の背景)
(2.1  癌の病理生物学)
癌は、主として、ある正常組織に由来する異常細胞の数の増加、これらの異常細胞による隣接組織の浸潤、又は悪性腫瘍細胞の所属リンパ節及び離れた部位へのリンパ若しくは血液が媒介する拡散(転移)によって特徴づけられる。癌は、特定の条件下で新生物形成に発展し得る小さな前新生物形成性変化から始まる多段階プロセスであることが臨床データ及び分子生物学的研究によって示されている。新生物形成性病変は、クローン性に発展し、特に新生物形成性細胞が宿主の免疫監視を逃れる条件下で浸潤、増殖、転移及び異質性の能力の増大を発達させ得る。Roitt,I.、Brostoff,J及びKale,D.の文献、Immunology、17.1-17.12(第3版、Mosby、セントルイス、MO、1993)。
【０００４】
医学文献に詳細に記載されている膨大な種類の癌が存在する。例としては、肺癌、結腸癌、直腸癌、前立腺癌、乳癌、脳腫瘍及び腸癌が挙げられる。
【０００５】
リンパ腫は、リンパ系に原発する癌をいう。リンパ腫は、リンパ球−Bリンパ球及びTリンパ球(すなわち、B細胞及びT細胞)の悪性新生物により特徴付けられる。リンパ腫は一般に、リンパ節又は非限定的に胃若しくは腸を含む臓器内のリンパ組織の集合部において始まる。リンパ腫は、一部の症例においては骨髄及び血液が関与し得る。リンパ腫は、体の一部位から他の部位へ拡散し得る。
【０００６】
リンパ腫の様々な型の治療は、例えば、その全体が引用により本明細書中に組み込まれている、米国特許第7,468,363号に開示されている。そのようなリンパ腫は、ホジキンリンパ腫、非ホジキンリンパ腫、皮膚B細胞性リンパ腫、活性化B細胞性リンパ腫、びまん性大細胞型B細胞性リンパ腫(DLBCL)、マントル細胞リンパ腫(MCL)、濾胞中心細胞リンパ腫、形質転換性リンパ腫、中分化型のリンパ球性リンパ腫、中間体リンパ球性リンパ腫(ILL)、びまん性分化不良リンパ球性リンパ腫(PDL)、中心細胞性リンパ腫、びまん性小開裂細胞リンパ腫(DSCCL)、末梢T細胞性リンパ腫(PTCL)、皮膚T細胞性リンパ腫及びマントル層状リンパ腫及び低悪性度濾胞性リンパ腫を含むが、これらに限定されるものではない。
【０００７】
非ホジキンリンパ腫(NHL)は、米国において男女双方について5番目に多い癌であり、2007年には新規症例63,190、死亡症例18,660と推定された。Jemal Aらの文献、CA Cancer J Clin 2007； 57(1):43-66。NHL発症の確率は年齢と共に増大し、高齢者におけるNHL発生率は、過去10年間に確実に増大しており、その原因は米国人口の高齢化にあると考えられる。同上、Clarke C Aらの文献、Cancer 2002； 94(7): 2015-2023。
【０００８】
びまん性大細胞型B細胞性リンパ腫(DLBCL)は、非ホジキンリンパ腫のほぼ3分の1を占める。一部のDLBCL患者は、従来の化学療法で治癒するが、残りは本疾患により死亡する。抗癌剤は、恐らく成熟T細胞及びB細胞の直接のアポトーシス誘導のために、迅速且つ持続性のリンパ球枯渇を引き起こす。K. Stahnke.らの文献、Blood 2001, 98:3066-3073を参照されたい。リンパ球絶対数(ALC)は、濾胞性非ホジキンリンパ腫の予後因子であることが示されており、最近の結果は、診断時のALCはびまん性大細胞型B細胞性リンパ腫の重要な予後因子であることを示唆している。D. Kimらの文献、Journal of Clinical Oncology, 2007 ASCO Annual Meeting Proceedings Part I. Vol 25, No. 18S (June 20 Supplement), 2007: 8082を参照されたい。DLBCLは、活性化B細胞様(ABC)型(phenotype)、胚中心B細胞様(GCB)型、又は原発性縦隔B細胞性リンパ腫(PMBL)型を含む、様々な小集団に分けられる。Lenz & Staudtの文献、NEJM, 2010, 362:1417-29を参照されたい。
【０００９】
初回治療後に完全寛解に到達した患者は、良好な治癒の見込みを有するのに対し、反応しないか又は再発した患者はその10％未満が、治癒を達成するか又は3年より長く反応を持続する。Cerny Tらの文献、Ann Oncol 2002； 13 Suppl 4:211-216を参照されたい。
【００１０】
更に、リツキシマブは、正常な宿主B細胞を枯渇することがわかっている。M. Akliluらの文献、Annals of Oncology 15:1109-1114, 2004。リツキシマブ療法が広範に使用されるにも拘わらず、リツキシマブによるB細胞枯渇の長期の免疫学的作用、及びリンパ腫患者におけるB細胞再構成不良の特徴は、良く定義されていない。Jennifer H. Anolikらの文献、Clinical Immunology、122巻2号、2007年2月、139-145頁を参照されたい。
【００１１】
再発したか又は難治性の疾患を持つ患者に関する対処方法は、経験的治療、それに続く幹細胞移植に大きく頼っているが、これは全身状態(PS)の悪い患者又は高齢の患者にとっては適していない。従って、NHL患者を治療するために使用することができる新規方法に対する非常に大きな要求が存在する。
【００１２】
全般的な人口が高齢化するにつれて、新しい癌が発生するにつれて、及び罹患し易い人口(例えば、AIDSに感染した人又は日光に過剰に曝される人)が増加するにつれて、癌の発生率が上昇し続ける。従って、NHLを含む癌の患者を治療するのに用いることができる新しい方法及び組成物に対する非常に大きな要求が存在する。
【００１３】
(2.2.  治療方法)
現行の癌治療は、患者における新生物形成性細胞を根絶するための外科手術、化学療法、ホルモン療法及び/又は放射線療法を含むことができる(例えば、Stockdaleの文献、1998、Medicine、第3巻、Rubenstein及びFederman編、第12章、セクションIV参照)。最近、癌治療は、また、生物学的療法又は免疫療法を含むことが可能である。これらの手法はいずれも患者にとって大きな欠点を与える。例えば外科手術は、患者の健康によっては禁忌であるか、或いは患者にとって許容不可能であることがある。加えて、外科手術では、新生物形成性組織を完全に除去できないことがある。放射線療法は、新生物形成性組織が正常組織より放射線に対して高い感度を示す場合にのみ有効である。放射線療法は、また、深刻な副作用をしばしば誘発し得る。ホルモン療法は、単一薬剤として施されることは希である。ホルモン療法は有効であり得るが、他の治療によって癌細胞の大多数を除去した後に癌の再発を防止するか、又は遅らせるのにしばしば用いられる。生物学的療法及び免疫療法は、数が限られており、発疹若しくは膨潤、熱、悪寒及び疲労を含むインフルエンザ様症状、消化管障害又はアレルギー反応などの副作用をもたらし得る。
【００１４】
化学療法に関しては、癌の治療に利用可能な様々な化学療法薬が存在する。癌化学療法の大多数は、DNA合成を、直接阻害するか、又はデオキシリボヌクレオチド三リン酸前駆体の生合成を阻害することによって間接的に阻害するかのいずれかで、DNA複製及び同時に細胞分裂を防止することによって作用する。Gilmanらの文献、「グッドマン及びギルマンの治療の薬理学的基礎(Goodman and Gilman's:The Pharmacological Basis of Therapeutics)」、第10版(McGraw Hill社、ニューヨーク)。
【００１５】
様々な化学療法薬が利用可能であるにもかかわらず、化学療法には多くの欠点がある。Stockdaleの文献、Medicine、第3巻、Rubenstein及びFederman編、第12章、セクション10、1998。ほぼすべての化学療法薬が毒性を有し、且つ化学療法は、重い副作用、しばしば酷い吐き気、骨髄抑制及び免疫抑制を含む危険な副作用を引き起こす。また、化学療法薬の組み合わせを投与しても、多くの腫瘍細胞は、それらの化学療法薬に対して抵抗性を有するか、又は抵抗性を強める。実際、治療プロトコールに使用される特定の化学療法薬に対して抵抗性を有する細胞は、それらの薬剤が特定の治療に使用される薬物のメカニズムと異なるメカニズムによって作用する場合であっても、他の薬物に対して抵抗性を有することがしばしば証明される。この現象は、多剤耐性又は多剤抵抗と呼ばれる。薬物抵抗性を有するため、多くの癌は、標準的な化学療法治療プロトコールに対して難治性であることが証明される。
【００１６】
依然として、外科手術、放射線療法、化学療法及びホルモン療法などの標準的な治療に対して難治性である癌、特に腫瘍を治療、予防及び管理する一方、従来の治療に伴う毒性及び/又は副作用を軽減又は回避する安全で有効な方法に対する大きな必要性が存在する。
【００１７】
更に、癌患者の看護の質を向上し、不要な治療を避け、且つ臨床実践における癌療法の成功率を増大するために、癌療法に対する反応を予測し且つモニタリングする能力が必要とされ続けている。
【発明の概要】
【００１８】
(3.  発明の概要)
本明細書において、3-(4-アミノ-1-オキソ-1,3-ジヒドロ-イソインドール-2-イル)-ピペリジン-2,6-ジオンによる治療に対する非ホジキンリンパ腫及び患者の反応に対する臨床的感度の予測因子としての、遺伝子及びタンパク質バイオマーカーの使用方法を提供する。
【００１９】
また本明細書において、予後因子を使用する、非限定的にびまん性大細胞型B細胞性リンパ腫(DLBCL)を含む非ホジキンリンパ腫を治療又は管理する方法を提供する。
【００２０】
本明細書において提供する方法は、3-(4-アミノ-1-オキソ-1,3-ジヒドロ-イソインドール-2-イル)-ピペリジン-2,6-ジオンによる治療に関して、癌患者、例えば非ホジキンリンパ腫患者をスクリーニングするか又は確定する方法を包含している。特に、3-(4-アミノ-1-オキソ-1,3-ジヒドロ-イソインドール-2-イル)-ピペリジン-2,6-ジオンによる療法に対し高い反応率を有する患者を選択する方法を本明細書において提供する。
【００２１】
一実施態様において、本明細書において、患者から腫瘍組織を入手する工程、その腫瘍からタンパク質又はRNAを精製する工程、及び例えばタンパク質又は遺伝子発現分析により、バイオマーカーの存在又は非存在を測定する工程を含む、非ホジキンリンパ腫患者における治療に対する腫瘍反応を予測する方法を提供する。モニタリングされる発現は、例えば、mRNA発現又はタンパク質発現であることができる。いくつかの実施態様において、バイオマーカーは、DLBCLの活性化B細胞表現型に関連した遺伝子である。これらの遺伝子は、IRF4/MUM1、FOXP1、SPIB、CARD11及びBLIMP/PDRM1からなる群から選択される。一実施態様において、バイオマーカーはNF-κBである。
【００２２】
一実施態様において、mRNA又はタンパク質は腫瘍から精製され、且つバイオマーカーの存在又は非存在は、遺伝子又はタンパク質発現分析により測定される。いくつかの実施態様において、バイオマーカーの存在又は非存在は、定量的リアル-タイムPCR(QRT-PCR)、マイクロアレイ、フローサイトメトリー、又は免疫蛍光法により測定される。他の実施態様において、バイオマーカーの存在又は非存在は、酵素結合免疫吸着アッセイをベースにした方法(ELISA)又は他の当該技術分野において公知の類似方法により測定される。
【００２３】
別の実施態様において、患者から腫瘍細胞を入手する工程、細胞を3-(4-アミノ-1-オキソ-1,3-ジヒドロ-イソインドール-2-イル)-ピペリジン-2,6-ジオンの存在又は非存在下で培養する工程、培養された細胞からタンパク質又はRNAを精製する工程、及び例えばタンパク質又は遺伝子発現分析により、バイオマーカーの存在又は非存在を測定する工程を含む、非ホジキンリンパ腫患者における治療に対する腫瘍反応を予測する方法を本明細書で提供する。モニタリングされる発現は、例えば、mRNA発現又はタンパク質発現であることができる。
【００２４】
別の実施態様において、非ホジキンリンパ腫患者における3-(4-アミノ-1-オキソ-1,3-ジヒドロ-イソインドール-2-イル)-ピペリジン-2,6-ジオン治療に対する腫瘍反応をモニタリングする方法を本明細書において提供する。本方法は、患者から生体試料を入手する工程、生体試料中のバイオマーカー発現を測定する工程、患者へ3-(4-アミノ-1-オキソ-1,3-ジヒドロ-イソインドール-2-イル)-ピペリジン-2,6-ジオンを投与する工程、その後その患者から第二の生体試料を入手する工程、第二の生体試料中のバイオマーカーの発現を測定する工程、及び発現のレベルを比較する工程を含み、ここで治療後の増加したバイオマーカー発現レベルは、効果的な腫瘍反応の可能性を指摘している。一実施態様において、治療後の低下したバイオマーカー発現レベルは、効果的な腫瘍反応の可能性を指摘している。モニタリングされるバイオマーカー発現は、例えば、mRNA発現又はタンパク質発現であることができる。治療された試料中の発現は、約1.5×、2.0×、3×、5×又はそれ以上増加することができる。
【００２５】
更に別の実施態様において、薬物治療プロトコールの患者服薬遵守をモニタリングする方法を提供する。本方法は、患者から生体試料を入手する工程、試料中の少なくとも1種のバイオマーカーの発現レベルを測定する工程、及びその発現レベルが対照未治療試料中の発現レベルと比べ患者試料中で増加又は減少しているかどうかを決定する工程を含み、ここで増加又は減少した発現は、薬物治療プロトコールの患者服薬遵守を指摘している。一実施態様において、1種以上のバイオマーカーの発現が増加される。モニタリングされるバイオマーカー発現は、例えば、mRNA発現又はタンパク質発現であることができる。治療された試料中の発現は、約1.5×、2.0×、3×、5×又はそれ以上増加することができる。
【００２６】
別の実施態様において、非ホジキンリンパ腫患者、具体的にはDLBCL患者における3-(4-アミノ-1-オキソ-1,3-ジヒドロ-イソインドール-2-イル)-ピペリジン-2,6-ジオン治療に対する感受性を予測する方法を本明細書において提供する。本方法は、患者から生体試料を入手する工程、任意に生体試料からmRNAを単離又は精製する工程、例えばRT-PCRにより、mRNA転写物を増幅する工程を含み、ここで特異的バイオマーカーのより高いベースラインレベルは、その癌が3-(4-アミノ-1-オキソ-1,3-ジヒドロ-イソインドール-2-イル)-ピペリジン-2,6-ジオンによる治療に対し感受性があることのより高い可能性を指摘している。いくつかの実施態様において、バイオマーカーは、活性化B細胞表現型に関連した遺伝子である。これらの遺伝子は、IRF4/MUM1、FOXP1、SPIB、CARD11及びBLIMP/PDRM1からなる群から選択される。
【００２７】
一実施態様において、(i)3-(4-アミノ-1-オキソ-1,3-ジヒドロ-イソインドール-2-イル)-ピペリジン-2,6-ジオンによる治療に対し感受性がある非ホジキンリンパ腫を有する患者を確定する工程；及び
(ii)下記構造を有する
【化１】
2013522236.tif 000003
3-(4-アミノ-1-オキソ-1,3-ジヒドロ-イソインドール-2-イル)-ピペリジン-2,6-ジオン、又はその医薬として許容し得る塩若しくは溶媒和物(例えば水和物)の治療的有効量を該患者に投与する工程：を含む、非ホジキンリンパ腫を治療又は管理する方法を、本明細書において提供する。
【００２８】
一実施態様において、この非ホジキンリンパ腫は、びまん性大細胞型B細胞性リンパ腫である。
別の実施態様において、この非ホジキンリンパ腫は、活性化B細胞表現型である。
一実施態様において、3-(4-アミノ-1-オキソ-1,3-ジヒドロ-イソインドール-2-イル)-ピペリジン-2,6-ジオンによる治療に対し感受性がある非ホジキンリンパ腫を有する患者を確定することは、活性化B細胞表現型に関連した遺伝子の同定を含む。一実施態様において、活性化B細胞表現型に関連した遺伝子は、IRF4/MUM1、FOXP1、SPIB、CARD11及びBLIMP/PDRM1からなる群から選択される。
【００２９】
一実施態様において、3-(4-アミノ-1-オキソ-1,3-ジヒドロ-イソインドール-2-イル)-ピペリジン-2,6-ジオンによる治療に対し感受性がある非ホジキンリンパ腫を有する患者の確定は、患者におけるNF-κB活性レベルの測定を含む。別の実施態様において、患者におけるNF-κB活性レベルの測定は、患者から入手した腫瘍細胞におけるベースラインNF-κB活性レベルの測定を含む。
【００３０】
また3-(4-アミノ-1-オキソ-1,3-ジヒドロ-イソインドール-2-イル)-ピペリジン-2,6-ジオンによる効果的なNHL治療の可能性を予測するか、又は治療の有効性をモニタリングするために有用なキットも本明細書において提供する。このキットは、固形支持体、及び生体試料中の少なくとも1種のバイオマーカーのタンパク質発現を検出する手段を備えている。そのようなキットは、例えば、ディップスティック、メンブレン、チップ、ディスク、試験小片、フィルター、ミクロスフェア、スライド、マルチウェルプレート、又は光ファイバーを利用することができる。本キットの固形支持体は、例えば、プラスチック、シリコン、金属、樹脂、ガラス、メンブレン、粒子、沈殿物、ゲル、ポリマー、シート、球体、多糖、キャピラリー、フィルム、プレート、又はスライドであることができる。本生体試料は、例えば、細胞培養物、細胞株、組織、口腔組織、胃腸組織、臓器、細胞小器官、生体液、血液試料、尿試料、又は皮膚試料であることができる。生体試料は、例えば、リンパ節生検、骨髄生検、又は末梢血腫瘍細胞の試料であることができる。
【００３１】
追加の実施態様において、3-(4-アミノ-1-オキソ-1,3-ジヒドロ-イソインドール-2-イル)-ピペリジン-2,6-ジオンによる効果的なNHL治療の可能性の予測又は治療の有効性のモニタリングに有用なキットを本明細書において提供する。このキットは、固形支持体、核酸がmRNAの少なくとも20、50、100、200、350又はそれ以上の塩基に相補的であるような該支持体に接触している核酸、及び生体試料中のmRNAの発現を検出する手段を備えている。
【００３２】
別の実施態様において、3-(4-アミノ-1-オキソ-1,3-ジヒドロ-イソインドール-2-イル)-ピペリジン-2,6-ジオンによる効果的なNHL治療の可能性の予測又は治療の有効性のモニタリングに有用なキットを本明細書において提供する。このキットは、固形支持体、核酸がmRNAの少なくとも20、50、100、200、350、500又はそれ以上の塩基に相補的であるような該支持体に接触している少なくとも1種の核酸、及び生体試料中のmRNAの発現を検出する手段を備えている。
【００３３】
いくつかの実施態様において、本明細書に提供するキットは、定量的リアル-タイムPCR(QRT-PCR)、マイクロアレイ、フローサイトメトリー又は免疫蛍光法による、バイオマーカーの発現を検出する手段を利用する。他の実施態様において、バイオマーカーの発現は、ELISA-ベースの方法又は他の当該技術分野において公知の類似方法により測定される。
【００３４】
本発明の特定の方法において、3-(4-アミノ-1-オキソ-1,3-ジヒドロ-イソインドール-2-イル)-ピペリジン-2,6-ジオンは、癌の治療、予防又は管理に通常使用される療法と組み合わせて投与される。そのような通常の療法の例には、外科手術、化学療法、放射線療法、ホルモン療法、生物学的療法及び免疫療法が挙げられるが、これらに限定されるものではない。
【００３５】
また3-(4-アミノ-1-オキソ-1,3-ジヒドロ-イソインドール-2-イル)-ピペリジン-2,6-ジオン、又はその医薬として許容し得る塩、溶媒和物、水和物、立体異性体、包接化合物若しくはプロドラッグ、及び第2の又は追加の活性薬を含む医薬組成物、単一単位剤形、投薬計画及びキットも本明細書で提供する。第二の活性薬は、薬物の特定の組み合わせ、又は「カクテル」を含む。
【図面の簡単な説明】
【００３６】
(4.  図面の簡単な説明)
【図１】レナリドミドは、様々な細胞遺伝学的特徴の細胞株のパネルにおいて、活性化B細胞表現型のDLBCL細胞株間でより大きい抗増殖活性を示す。
【図２Ａ−Ｄ】遺伝子発現分析は、レナリドミド感受性RIVA、U2932、及びOCI-Ly3細胞において、いくつかの典型的活性化B細胞表現型DLBCL特徴を示す。
【図３Ａ】レナリドミド感受性活性化B細胞表現型DLBCL細胞は、DLBCL細胞の他の型よりもより高いNF-κB p65活性を示す。
【図３Ｂ】レナリドミド感受性活性化B細胞表現型DLBCL細胞は、DLBCL細胞の他の型よりもより高いNF-κB p50活性を示す。
【図４】レナリドミド1μMでのDLBCL細胞に対する抗増殖作用とベースラインNF-κB p50活性の間には、有意な相関関係が認められた。
【図５Ａ】レナリドミドの臨床的に達成可能な濃度(1μM)は、U2932細胞におけるNF-κB p65活性を有意に阻害する。
【図５Ｂ】レナリドミドの臨床的に達成可能な濃度(1μM)は、U2932細胞におけるNF-κB p50活性を有意に阻害する。
【図６Ａ】レナリドミドは、U2932亜型の活性化B細胞表現型DLBCL細胞におけるNF-κB p65活性を有意に阻害する。
【図６Ｂ】レナリドミドは、U2932亜型の活性化B細胞表現型DLBCL細胞におけるNF-κB p50活性を有意に阻害する。
【発明を実施するための形態】
【００３７】
(5.  発明の詳細な説明)
本明細書に提供する方法は、非ホジキンリンパ腫細胞における活性化B細胞表現型に関連したいくつかの遺伝子又はタンパク質の発現は、疾患治療の有効性又は進行を示すためのバイオマーカーとして利用することができるという発見に一部基づいている。特に、これらのバイオマーカーは、3-(4-アミノ-1-オキソ-1,3-ジヒドロ-イソインドール-2-イル)-ピペリジン-2,6-ジオンによる患者治療の有効性を予測し、判定し、且つ追跡するために使用することができる。
【００３８】
特定の理論に限定するものではないが、3-(4-アミノ-1-オキソ-1,3-ジヒドロ-イソインドール-2-イル)-ピペリジン-2,6-ジオンなどの免疫調節化合物は、非ホジキンリンパ腫などのいくつかの癌型において、増殖阻害、アポトーシス及び血管新生因子の阻害を媒介することができる。3-(4-アミノ-1-オキソ-1,3-ジヒドロ-イソインドール-2-イル)-ピペリジン-2,6-ジオンによる治療の前及び後に、いくつかの細胞型においていくつかの癌に関連した遺伝子の発現を試験する際に、いくつかの癌に関連した遺伝子又はタンパク質の発現レベルは、癌治療の予測及びモニタリングのためのバイオマーカーとして使用することができることが発見された。
【００３９】
NF-κB活性のレベルは、非ホジキンリンパ腫の活性化B細胞表現型の細胞において、他の型のリンパ腫細胞と比べ上昇すること、並びにそのような細胞は、3-(4-アミノ-1-オキソ-1,3-ジヒドロ-イソインドール-2-イル)-ピペリジン-2,6-ジオン治療に対し感受性があり得ることも発見された。このことは、リンパ腫細胞におけるNF-κB活性のベースライン活性は、非ホジキンリンパ腫患者における3-(4-アミノ-1-オキソ-1,3-ジヒドロ-イソインドール-2-イル)-ピペリジン-2,6-ジオン治療の予測バイオマーカーであり得ることを示唆している。
【００４０】
従っていくつかの実施態様において、非ホジキンリンパ腫患者における治療に対する腫瘍反応を予測する方法を、本明細書において提供する。一実施態様において、患者から腫瘍組織を入手する工程、この腫瘍からタンパク質又はRNAを精製する工程、及び例えばタンパク質又は遺伝子発現分析により、バイオマーカーの存在又は非存在を測定する工程を含む、非ホジキンリンパ腫患者における治療に対する腫瘍反応を予測する方法を、本明細書において提供する。モニタリングされる発現は、例えば、mRNA発現又はタンパク質発現であることができる。いくつかの実施態様において、バイオマーカーは、DLBCLの活性化B細胞表現型に関連した遺伝子である。これらの遺伝子は、IRF4/MUM1、FOXP1、CARD11及びBLIMP/PDRM1からなる群から選択される。一実施態様において、バイオマーカーはNF-κBである。
【００４１】
別の実施態様において、本方法は、患者から腫瘍細胞を入手する工程、この細胞を3-(4-アミノ-1-オキソ-1,3-ジヒドロ-イソインドール-2-イル)-ピペリジン-2,6-ジオンの存在又は非存在下で培養する工程、培養された細胞からRNA又はタンパク質を精製する工程、及び例えば遺伝子又はタンパク質発現分析により、バイオマーカーの存在又は非存在を測定する工程を含む。
【００４２】
いくつかの実施態様において、バイオマーカーの存在又は非存在は、定量的リアル-タイムPCR(QRT-PCR)、マイクロアレイ、フローサイトメトリー又は免疫蛍光法により測定される。他の実施態様において、バイオマーカーの存在又は非存在は、ELISA-ベースの方法又は他の当該技術分野において公知の類似方法により測定される。
【００４３】
本明細書に提供する方法は、3-(4-アミノ-1-オキソ-1,3-ジヒドロ-イソインドール-2-イル)-ピペリジン-2,6-ジオンによる治療に関して、癌患者、例えば非ホジキンリンパ腫患者をスクリーニング又は確定する方法を包含している。特に、3-(4-アミノ-1-オキソ-1,3-ジヒドロ-イソインドール-2-イル)-ピペリジン-2,6-ジオンによる療法に対しより高い反応率を有する患者を選択する方法を、本明細書において提供する。
【００４４】
一実施態様において、本方法は、患者から腫瘍細胞を入手する工程、この細胞を3-(4-アミノ-1-オキソ-1,3-ジヒドロ-イソインドール-2-イル)-ピペリジン-2,6-ジオンの存在又は非存在下で培養する工程、培養された細胞からRNA又はタンパク質を精製する工程、及び特異的バイオマーカーの存在又は非存在を測定する工程を含む。モニタリングされる発現は、例えば、mRNA発現又はタンパク質発現であることができる。治療された試料中の発現は、約1.5×、2.0×、3×、5×又はそれ以上増加することができる。いくつかの実施態様において、バイオマーカーは、活性化B細胞表現型に関連した遺伝子である。これらの遺伝子は、IRF4/MUM1、FOXP1、CARD11及びBLIMP/PDRM1からなる群から選択される。一実施態様において、バイオマーカーはNF-κBである。
【００４５】
別の実施態様において、非ホジキンリンパ腫患者における3-(4-アミノ-1-オキソ-1,3-ジヒドロ-イソインドール-2-イル)-ピペリジン-2,6-ジオンによる治療に対する腫瘍反応をモニタリングする方法を、本明細書において提供する。この方法は、患者から生体試料を入手する工程、この生体試料中の1種以上のバイオマーカー発現を測定する工程、該患者へ3-(4-アミノ-1-オキソ-1,3-ジヒドロ-イソインドール-2-イル)-ピペリジン-2,6-ジオンを投与する工程、その後該患者から第二の生体試料を入手する工程、第二の生体試料中のバイオマーカーの発現を測定する工程、及びバイオマーカー発現のレベルを比較する工程を含み、ここで治療後の増加したバイオマーカー発現レベルは、効果的な腫瘍反応の可能性を指摘している。一実施態様において、治療後の減少したバイオマーカー発現レベルは、効果的な腫瘍反応の可能性を指摘している。いくつかの実施態様において、バイオマーカーは、活性化B細胞表現型に関連した遺伝子である。この遺伝子は、IRF4/MUM1、FOXP1、CARD11及びBLIMP/PDRM1からなる群から選択される。一実施態様において、バイオマーカーはNF-κBである。
【００４６】
いくつかの実施態様において、本方法は、活性化B細胞表現型に関連した1種以上のバイオマーカー遺伝子の発現を測定する工程を含む。この遺伝子は、IRF4/MUM1、FOXP1、CARD11及びBLIMP/PDRM1からなる群から選択される。モニタリングされる発現は、例えば、mRNA発現又はタンパク質発現であることができる。治療された試料における発現は、約1.5×、2.0×、3×、5×又はそれ以上増加することができる。
【００４７】
更に別の実施態様において、薬物治療プロトコールの患者服薬遵守をモニタリングする方法を提供する。この方法は、患者から生体試料を入手する工程、この試料中の少なくとも1種のバイオマーカーの発現レベルを測定する工程、及び発現レベルが、対照未治療試料中の発現レベルと比べ患者試料中で増加又は減少しているかどうかを決定する工程を含み、ここで増加又は減少した発現は、薬物治療プロトコールの患者服薬遵守を示す。一実施態様において、1種以上のバイオマーカーの発現が増加される。モニタリングされる発現は、例えば、mRNA発現又はタンパク質発現であることができる。治療した試料中の発現は、例えば約1.5×、2.0×、3×、5×又はそれ以上増加することができる。いくつかの実施態様において、バイオマーカーは、活性化B細胞表現型に関連した遺伝子である。この遺伝子は、IRF4/MUM1、FOXP1、CARD11及びBLIMP/PDRM1からなる群から選択される。一実施態様において、バイオマーカーはNF-κBである。
【００４８】
別の実施態様において、NHL患者、具体的にはDLBCL患者における3-(4-アミノ-1-オキソ-1,3-ジヒドロ-イソインドール-2-イル)-ピペリジン-2,6-ジオン治療に対する感受性を予測する方法を本明細書において提供する。この方法は、患者から生体試料を入手する工程、任意に生体試料からmRNAを単離又は精製する工程、例えばRT-PCRにより、mRNA転写物を増幅する工程を含み、ここで1種以上の特異的バイオマーカーのより高いベースラインレベルは、その癌が3-(4-アミノ-1-オキソ-1,3-ジヒドロ-イソインドール-2-イル)-ピペリジン-2,6-ジオンによる治療に対し感受性があることのより高い可能性を指摘している。一実施態様において、バイオマーカーは、IRF4/MUM1、FOXP1、CARD11及びBLIMP/PDRM1からなる群から選択される、活性化B細胞表現型に関連した遺伝子である。
【００４９】
別の実施態様において、NHL患者、例えばDLBCL患者における3-(4-アミノ-1-オキソ-1,3-ジヒドロ-イソインドール-2-イル)-ピペリジン-2,6-ジオンによる治療に対する感受性を予測する方法は、その全体が引用により本明細書中に組み込まれているHansらの文献、Blood, 2004, 103: 275-282に説明されたように、患者から腫瘍試料を入手する工程、この腫瘍試料を、パラフィン-包埋されたホルマリン固定されたブロックへと包埋する工程、及びこの試料を、CD20、CD10、bcl-6、IRF4/MUM1、bcl-2、サイクリンD2、及び/又はFOXP1に対する抗体で染色する工程を含む。一実施態様において、CD10、bcl-6、及びIRF4/MUM-1染色は、転帰を予測するために、DLBCLをGCB及び非GCB亜群へ分割するために使用する。
【００５０】
一実施態様において：
(i)患者から生体試料を入手する工程；
(ii)この生体試料中のNF-κB経路の活性を測定する工程；及び
(iii)生体試料中のNF-κB活性のレベルを、非活性化B細胞性リンパ腫亜型の生体試料のレベルと比較する工程：を含み、
ここで、非活性化B細胞亜型リンパ腫細胞に比べ増加したNF-κB活性のレベルが、3-(4-アミノ-1-オキソ-1,3-ジヒドロ-イソインドール-2-イル)-ピペリジン-2,6-ジオン治療に対する効果的患者腫瘍反応の可能性を示す、非ホジキンリンパ腫患者の治療に対する腫瘍反応を予測する方法を、本明細書において提供する。
【００５１】
一実施態様において、生体試料中のNF-κB経路の活性の測定は、生体試料中のNF-κBのレベルの測定を含む。
【００５２】
一実施態様において：
(i)患者から生体試料を入手する工程；
(ii)この生体試料中のNF-κB活性のレベルを測定する工程；
(iii)3-(4-アミノ-1-オキソ-1,3-ジヒドロ-イソインドール-2-イル)-ピペリジン-2,6-ジオン、又はその塩、溶媒和物若しくは水和物の治療的有効量を該患者へ投与する工程；
(iv)該患者から第二の生体試料を入手する工程；
(v)この第二の生体試料中のNF-κB活性のレベルを測定する工程；及び
(vi)第一の生体試料中のNF-κB活性のレベルを、第二の生体試料中のそれと比較する工程：を含み、
ここで、第一の生体試料に比べ減少した第二の生体試料中のNF-κB活性のレベルが、
効果的な患者腫瘍反応の可能性を示す、非ホジキンリンパ腫患者における治療に対する腫瘍反応をモニタリングする方法を、本明細書において提供する。
【００５３】
一実施態様において：
(i)患者から生体試料を入手する工程；
(ii)この生体試料中のNF-κB活性のレベルを測定する工程；及び
(iii)生体試料中のNF-κB活性のレベルを、対照未治療試料と比較する工程：を含み、
ここで、対照に比べ減少した生体試料中のNF-κB活性のレベルが、薬物治療プロトコールの患者服薬遵守を示す、非ホジキンリンパ腫患者における薬物治療プロトコールの患者服薬遵守をモニタリングする方法を、本明細書において提供する。
【００５４】
一実施態様において、この非ホジキンリンパ腫は、びまん性大細胞型B細胞性リンパ腫である。
別の実施態様において、NF-κB活性のレベルは、酵素結合免疫吸着アッセイにより測定される。
【００５５】
一実施態様において：
(i)患者から生体試料を入手する工程；
(ii)この生体試料由来の細胞を培養する工程；
(iii)培養された細胞からRNAを精製する工程；及び
(iv)非ホジキンリンパ腫の活性化B細胞表現型に関連した遺伝子の、対照の非ホジキンリンパ腫の非活性化B細胞表現型と比べ増加した発現を同定する工程：を含み、
ここで、非ホジキンリンパ腫の活性化B細胞表現型に関連した遺伝子の増加した発現が、3-(4-アミノ-1-オキソ-1,3-ジヒドロ-イソインドール-2-イル)-ピペリジン-2,6-ジオン治療に対する効果的な患者腫瘍反応の可能性を示す、非ホジキンリンパ腫患者における治療に対する腫瘍反応を予測する方法を、本明細書において提供する。
【００５６】
一実施態様において、増加した発現は、約1.5×、2.0×、3×、5×又はそれ以上の増加である。
一実施態様において、活性化B細胞表現型に関連した遺伝子は、IRF4/MUM1、FOXP1、CARD11及びBLIMP/PDRM1からなる群から選択される。
一実施態様において、非ホジキンリンパ腫の活性化B細胞表現型に関連した遺伝子の発現の同定は、定量的リアル-タイムPCRにより実行される。
【００５７】
また、(i)3-(4-アミノ-1-オキソ-1,3-ジヒドロ-イソインドール-2-イル)-ピペリジン-2,6-ジオンによる治療に対し感受性がある非ホジキンリンパ腫を有する患者を確定する工程；及び
(ii)下記構造を有する：
【化２】
2013522236.tif 000004
3-(4-アミノ-1-オキソ-1,3-ジヒドロ-イソインドール-2-イル)-ピペリジン-2,6-ジオン、又はその医薬として許容し得る塩、溶媒和物若しくは水和物の治療的有効量を該患者に投与する工程：
を含む、非ホジキンリンパ腫を治療又は管理する方法も、本明細書において提供する。
【００５８】
一実施態様において、この非ホジキンリンパ腫は、びまん性大細胞型B細胞性リンパ腫である。
別の実施態様において、この非ホジキンリンパ腫は、活性化B細胞表現型のものである。
別の実施態様において、びまん性大細胞型B細胞性リンパ腫は、RIVA、U2932、TMD8又はOCI-Ly10細胞株において過剰発現された1種以上のバイオマーカーの発現により特徴付けられる。
【００５９】
一実施態様において、3-(4-アミノ-1-オキソ-1,3-ジヒドロ-イソインドール-2-イル)-ピペリジン-2,6-ジオンによる治療に対し感受性があるリンパ腫を有する患者を確定することは、患者のリンパ腫の型の特徴決定を含む。
【００６０】
一実施態様において、このリンパ腫の型は、活性化B細胞亜型として特徴付けられる。
一実施態様において、このリンパ腫の型は、びまん性大細胞型B細胞性リンパ腫の活性化B細胞亜型として特徴付けられる。
【００６１】
いくつかの実施態様において、リンパ腫の型の同定は、リンパ腫を有する患者から生体試料を入手することを含む。一実施態様において、生体試料は、細胞培養物又は組織試料である。一実施態様において、生体試料は、腫瘍細胞の試料である。別の実施態様において、生体試料は、リンパ節生検、骨髄生検、又は末梢血腫瘍細胞の試料である。一実施態様において、生体試料は血液試料である。
【００６２】
一実施態様において、3-(4-アミノ-1-オキソ-1,3-ジヒドロ-イソインドール-2-イル)-ピペリジン-2,6-ジオンによる治療に対し感受性がある非ホジキンリンパ腫を有する患者を確定することは、活性化B細胞表現型に関連した遺伝子の同定を含む。一実施態様において、活性化B細胞表現型に関連した遺伝子は、IRF4/MUM1、FOXP1、CARD11及びBLIMP/PDRM1からなる群から選択される。
【００６３】
一実施態様において、3-(4-アミノ-1-オキソ-1,3-ジヒドロ-イソインドール-2-イル)-ピペリジン-2,6-ジオンによる治療に対し感受性がある非ホジキンリンパ腫を有する患者の確定は、患者におけるNF-κB活性レベルの測定を含む。別の実施態様において、患者におけるNF-κB活性レベルの測定は、患者から入手した腫瘍細胞におけるベースラインNF-κB活性レベルの測定を含む。
【００６４】
別の実施態様において、びまん性大細胞型B細胞性リンパ腫は：
(i)活性化B細胞亜型細胞の生存に必須の造血器特異的Etsファミリー転写因子の過剰発現；
(ii)GCB亜型細胞よりもより高い構成性IRF4/MUM1発現；
(iii)3-トリソミーによりアップレギュレートされたより高い構成性FOXP1発現；
(iv)より高い構成性Blimp1、すなわちPRDM1の発現；及び
(v)より高い構成性CARD11遺伝子発現；及び
(vi)非活性化B細胞亜型DLBCL細胞に比べ増加したレベルのNF-κB活性：
の1つ以上により特徴付けられる。
【００６５】
本明細書に提供するものと同時に使用することができる追加の予後因子は、疾患(腫瘍)組織量、リンパ球絶対数(ALC)、リンパ腫のための最後のリツキシマブ療法からの時間の予後因子、又は前述のもの全てである。
【００６６】
また3-(4-アミノ-1-オキソ-1,3-ジヒドロ-イソインドール-2-イル)-ピペリジン-2,6-ジオンによる効果的なNHL治療の可能性を予測するか、又は治療の有効性をモニタリングするために有用なキットも本明細書において提供する。このキットは、固形支持体、及び生体試料中の少なくとも1種のバイオマーカーのタンパク質発現を検出する手段を備える。そのようなキットは、例えば、ディップスティック、メンブレン、チップ、ディスク、試験小片、フィルター、ミクロスフェア、スライド、マルチウェルプレート、又は光ファイバーを利用することができる。本キットの固形支持体は、例えば、プラスチック、シリコン、金属、樹脂、ガラス、メンブレン、粒子、沈殿物、ゲル、ポリマー、シート、球体、多糖、キャピラリー、フィルム、プレート、又はスライドであることができる。本生体試料は、例えば、細胞培養物、細胞株、組織、口腔組織、胃腸組織、臓器、細胞小器官、生体液、血液試料、尿試料、又は皮膚試料であることができる。生体試料は、例えば、リンパ節生検、骨髄生検、又は末梢血腫瘍細胞の試料であることができる。
【００６７】
一実施態様において、このキットは、固形支持体、核酸がNHLにおける活性化B細胞表現型に関連した遺伝子のmRNAの少なくとも20、50、100、200、350又はそれ以上の塩基に相補的であるような該支持体に接触している核酸、及び生体試料中のmRNAの発現を検出する手段を備えている。一実施態様において、活性化B細胞表現型に関連した遺伝子は、IRF4/MUM1、FOXP1、CARD11及びBLIMP/PDRM1からなる群から選択される。
【００６８】
一実施態様において、3-(4-アミノ-1-オキソ-1,3-ジヒドロ-イソインドール-2-イル)-ピペリジン-2,6-ジオンによる効果的なNHL治療の可能性の予測又は治療の有効性のモニタリングに有用なキットを提供する。このキットは、固形支持体、及び生体試料中のNF-κBの発現を検出する手段を備えている。一実施態様において、生体試料は、細胞培養物又は組織試料である。一実施態様において、生体試料は、腫瘍細胞の試料である。別の実施態様において、生体試料は、リンパ節生検、骨髄生検、又は末梢血腫瘍細胞の試料である。一実施態様において、生体試料は血液試料である。一実施態様において、NHLはDLBCLである。
【００６９】
いくつかの実施態様において、本明細書に提供するキットは、定量的リアル-タイムPCR(QRT-PCR)、マイクロアレイ、フローサイトメトリー又は免疫蛍光法による、バイオマーカーの発現の検出の手段を利用する。他の実施態様において、バイオマーカーの発現は、ELISA-ベースの方法又は他の当該技術分野において公知の類似方法により測定される。
【００７０】
追加のmRNA及びタンパク質の発現技術、例えばCDNAハイブリダイゼーション及びサイトメトリックビーズアレイ法などを、本明細書に提供する方法及びキットと組み合わせて使用することができる。
【００７１】
一実施態様において、
(i)固形支持体；及び
(ii)生体試料中の非ホジキンリンパ腫の活性化B細胞表現型のバイオマーカーの発現を検出する手段：
を備える、非ホジキンリンパ腫患者における3-(4-アミノ-1-オキソ-1,3-ジヒドロ-イソインドール-2-イル)-ピペリジン-2,6-ジオンによる治療に対する腫瘍反応を予測するキットを本明細書に提供する。
【００７２】
一実施態様において、このバイオマーカーは、NF-κBである。
一実施態様において、このバイオマーカーは、活性化B細胞表現型に関連した遺伝子であり、且つIRF4/MUM1、FOXP1、CARD11及びBLIMP/PDRM1からなる群から選択される。
【００７３】
本発明の特定の方法において、3-(4-アミノ-1-オキソ-1,3-ジヒドロ-イソインドール-2-イル)-ピペリジン-2,6-ジオンは、癌の治療、予防又は管理に通常使用される療法と組み合わせて投与される。そのような通常の療法の例は、外科手術、化学療法、放射線療法、ホルモン療法、生物学的療法及び免疫療法を含むが、これらに限定されるものではない。
【００７４】
また3-(4-アミノ-1-オキソ-1,3-ジヒドロ-イソインドール-2-イル)-ピペリジン-2,6-ジオン、又はその医薬として許容し得る塩、溶媒和物、水和物、立体異性体、包接化合物若しくはプロドラッグ、及び第2の又は追加の活性薬を含む医薬組成物、単一単位剤形、投薬計画及びキットを本明細書で提供する。第二の活性薬は、薬物の特定の組み合わせ、又は「カクテル」を含む。
【００７５】
一部の実施態様において、本明細書に提供するリンパ腫を治療、予防及び/又は管理する方法は、標準治療に反応しない患者において使用することができる。一実施態様において、リンパ腫は、従来型療法に対し再発性、難治性又は抵抗性である。
【００７６】
他の実施態様において、本明細書に提供するリンパ腫を治療、予防及び/又は管理する方法は、ナイーブ(naive)患者、すなわち未だ治療を受けたことがない患者の治療において使用することができる。
【００７７】
一部の実施態様において、3-(4-アミノ-1-オキソ-1,3-ジヒドロ-イソインドール-2-イル)-ピペリジン-2,6-ジオン、又はその医薬として許容し得る塩、溶媒和物若しくは水和物は、治療的有効量の1種以上の追加の活性薬と組み合わせて又は交互に投与される。一実施態様において、追加の活性薬は、アルキル化剤、アデノシン類似体、糖質コルチコイド、キナーゼ阻害薬、SYK阻害薬、PDE3阻害薬、PDE7阻害薬、ドキソルビシン、クロラムブシル、ビンクリスチン、ベンダムスチン、フォルスコリン、リツキシマブ、又はそれらの組み合わせからなる群から選択される。
【００７８】
一実施態様において、追加の活性薬はリツキシマブである。
一実施態様において、糖質コルチコイドは、ヒドロコルチゾン又はデキサメタゾンである。
一実施態様において、3-(4-アミノ-1-オキソ-1,3-ジヒドロ-イソインドール-2-イル)-ピペリジン-2,6-ジオンは、1日当たり約5〜約50mgの量で投与される。
【００７９】
一実施態様において、3-(4-アミノ-1-オキソ-1,3-ジヒドロ-イソインドール-2-イル)-ピペリジン-2,6-ジオンは、1日当たり約5〜約25mgの量で投与される。
別の実施態様において、3-(4-アミノ-1-オキソ-1,3-ジヒドロ-イソインドール-2-イル)-ピペリジン-2,6-ジオンは、1日当たり約5、10、15、25、30又は50mgの量で投与される。
【００８０】
別の実施態様において、3-(4-アミノ-1-オキソ-1,3-ジヒドロ-イソインドール-2-イル)-ピペリジン-2,6-ジオンの10又は25mgが、1日当たり投与される。
一実施態様において、3-(4-アミノ-1-オキソ-1,3-ジヒドロ-イソインドール-2-イル)-ピペリジン-2,6-ジオンは、1日2回投与される。
【００８１】
一実施態様において、3-(4-アミノ-1-オキソ-1,3-ジヒドロ-イソインドール-2-イル)-ピペリジン-2,6-ジオンは、経口投与される。
一実施態様において、3-(4-アミノ-1-オキソ-1,3-ジヒドロ-イソインドール-2-イル)-ピペリジン-2,6-ジオンは、カプセル剤又は錠剤で投与される。
一実施態様において、3-(4-アミノ-1-オキソ-1,3-ジヒドロ-イソインドール-2-イル)-ピペリジン-2,6-ジオンは、21日間投与され、その後7日間休薬する、28日周期で投与される。
【００８２】
また本明細書に開示する方法において使用することができる医薬組成物(例えば、単一単位剤形)も本明細書に提供する。特定の医薬組成物は、3-(4-アミノ-1-オキソ-1,3-ジヒドロ-イソインドール-2-イル)-ピペリジン-2,6-ジオン、又はその医薬として許容し得る塩、溶媒和物若しくは水和物、及び第二の活性薬を含有している。
【００８３】
(5.1  定義)
本明細書に用いるように、及び特に指定する場合を除いて、「治療する」、「治療している」及び「治療」という用語は、癌の重症度を低下するか、又は癌の進行を妨害若しくは遅延する、患者が特定された癌に罹患している間に生じる作用を指す。
【００８４】
化合物による治療に関して使用される用語「感受性」及び「感受性がある」とは、治療されている腫瘍又は疾患の進行を少なく若しくは減少する化合物の有効性の程度を指す関連用語である。例えば「増加した感受性」という用語は、化合物と関連して細胞又は腫瘍の治療に関して使用される場合、腫瘍治療の有効性が少なくとも5％、又はそれ以上増加することを指す。
【００８５】
本明細書に用いるように、及び特に指定する場合を除いて、化合物の「治療的有効量」という用語は、癌の治療又は管理における治療有益性を与える、或いは癌の存在に伴う1つ以上の症状を遅らせる若しくは最小化するのに十分な量である。化合物の治療的有効量は、癌の治療又は管理における治療有益性を与える治療薬の単独の、又は他の治療と組み合わせた量を指す。「治療的有効量」という用語は、全体的治療を向上させ、癌の症状又は原因を軽減又は回避し、或いは別の治療薬の治療効力を向上させる量を包含することができる。
【００８６】
本明細書に用いるように、「効果的な患者腫瘍反応」とは、患者への治療有益性の何らかの増加を指す。「効果的な患者腫瘍反応」は、腫瘍の進行速度の、例えば5％、10％、25％、50％、又は100％の減少であることができる。「効果的な患者腫瘍反応」は、癌の生理的症状の、例えば5％、10％、25％、50％、又は100％の減少であることができる。同じく「効果的な患者腫瘍反応」は、遺伝子発現、細胞カウント、アッセイ結果などのいずれか適切な手段により測定されるような、患者の反応の、例えば5％、10％、25％、50％、100％、200％、又はそれ以上の増加であることもできる。
【００８７】
用語「可能性」とは一般に、事象の確率の増加を指す。患者腫瘍反応の有効性に関して使用される場合、用語「可能性」は一般に、腫瘍進行又は腫瘍細胞増殖の速度が減少する確率の増大を意図している。患者腫瘍反応の有効性に関して使用される場合、用語「可能性」は同じく一般に、腫瘍治療における進行の増大を証拠付けることができる、mRNA又はタンパク質の発現などの指標の増加も意味することができる。
【００８８】
用語「予測する」とは一般に、進展を決定又は告知することを意味する。例えば癌治療の有効性を「予測する」ために使用する場合、用語「予測する」は、癌治療の転帰の可能性を、治療開始前、又は治療期間が実質的に進行する前の、発生(outset)時に決定することができることを意味することができる。
【００８９】
本明細書に用いるように、用語「モニタリングする」とは一般に、活性の監視、監督、調節、観察、追跡、又は調査を指す。例えば用語「化合物の有効性のモニタリング」とは、患者又は腫瘍細胞培養物における癌治療の有効性を追跡することを指す。同様に、単独で、又は臨床試験において、患者の服薬遵守に結びつけて使用される場合「モニタリング」とは、患者が処方されたように被験免疫調節化合物を実際に服用したことを追跡又は確認することを指す。モニタリングは、例えば、mRNA又はタンパク質のバイオマーカーの発現を追跡することにより実行することができる。
【００９０】
癌又は癌-関連疾患の改善は、完全反応又は部分的反応として特徴付けることができる。「完全反応」とは、何らかの先の異常なX線検査、骨髄、及び脳脊髄液(CSF)又は異常なモノクローナルタンパク質の測定値の正常化による、臨床的に検出可能な疾患の非存在を指す。「部分的反応」とは、新規病巣の存在しない、全ての測定可能な腫瘍組織量(すなわち、対象に存在する悪性細胞の数、又は腫瘍塊の測定された嵩又は異常なモノクローナルタンパク質の量)の少なくとも約10％、20％、30％、40％、50％、60％、70％、80％、又は90％の減少を指す。用語「治療」は、完全反応及び部分的反応の両方を意図している。
【００９１】
本明細書に用いるように、「腫瘍」とは、悪性又は良性にかかわらず全ての新規形成性細胞成長及び増殖、並びに全ての前癌性及び癌性の細胞及び組織を指す。本明細書に用いるように、「新規形成性」とは、異常な組織成長を生じる、悪性又は良性にかかわらず調節不能な又は調節されない細胞成長のあらゆる形を指す。従って「新規形成性細胞」は、調節不能な又は調節されない細胞成長を有する、悪性細胞又は良性細胞を含む。
【００９２】
用語「癌」及び「癌性」とは、典型的には調節されない細胞増殖により特徴付けられる哺乳動物における生理的状態を指すか又は説明している。癌の例は、血液媒介性腫瘍(例えば、多発性骨髄腫、リンパ腫及び白血病)、並びに固形腫瘍を含むが、これらに限定されるものではない。
【００９３】
用語「難治性又は抵抗性」とは、患者が、例え集中治療後であっても、それらのリンパ系、血液及び/又は造血組織(例えば骨髄)において、残存する癌細胞(例えば、白血病又はリンパ腫の細胞)を有する状況を指す。
【００９４】
本明細書に用いるように、用語「ポリペプチド」及び「タンパク質」は、本明細書において互換的に使用されるが、これらは、ペプチド結合を介して連結された、連続する列中の3つ以上のアミノ酸のアミノ酸ポリマーを指す。用語「ポリペプチド」は、タンパク質、タンパク質断片、タンパク質類似体、オリゴペプチドなどを含む。本明細書に用いる用語ポリペプチドは、ペプチドも指すことができる。ポリペプチドを形成するアミノ酸は、天然由来であるか、又は合成であってよい。ポリペプチドは、生体試料から精製することができる。
【００９５】
用語「抗体」は、最も広範な意味で、本明細書において使用され、且つ完全に集成された抗体、抗原に特異的に結合する能力を保持している抗体断片(例えば、Fab、F(ab')2、Fv、及び他の断片)、一本鎖抗体、ダイアボディ、キメラ抗体、ハイブリッド抗体、二重特異性抗体、ヒト化抗体などを対象としている。用語「抗体」は、ポリクローナル抗体及びモノクローナル抗体の両方を対象としている。
【００９６】
本明細書に用いるように、用語「発現された」又は「発現」とは、遺伝子の二本の核酸鎖の一方の領域と少なくとも一部分相補的である、RNA核酸分子を作製するための、遺伝子からの転写を指す。また本明細書に用いるように、用語「発現された」又は「発現」とは、タンパク質、ポリペプチド又はそれらの一部を作製するための、RNA分子からの翻訳を指す。
【００９７】
「アップレギュレートされた」mRNAは一般に、所定の処理又は条件下で増加される。「ダウンレギュレートされた」mRNAとは一般に、所定の処理又は条件に反応したmRNAの発現レベルの減少を指す。状況によっては、mRNAレベルは、所定の処理又は条件下で無変化であり続けることができる。
【００９８】
患者試料由来のmRNAは、免疫調節化合物により処理された場合に、未処理の対照と比べ、「アップレギュレートされる」ことができる。このアップレギュレーションは、例えば、同等の対照mRNAレベルの約5％、10％、20％、30％、40％、50％、60％、70％、90％、100％、200％、300％、500％、1,000％、5,000％又はそれ以上の増加であることができる。
【００９９】
あるいは、mRNAは、いくつかの免疫調節化合物又は他の物質の投与に反応して、「ダウンレギュレートされるか」又はより低いレベルで発現されることができる。ダウンレギュレートされたmRNAは、例えば、同等の対照mRNAレベルの、約99％、95％、90％、80％、70％、60％、50％、40％、30％、20％、10％、1％又はそれ未満のレベルで存在することができる。
【０１００】
同様に、患者試料由来のポリペプチド又はタンパク質バイオマーカーのレベルは、免疫調節化合物で処理した場合に、未処理の対照と比べ、増加することができる。この増加は、同等の対照タンパク質レベルの約5％、10％、20％、30％、40％、50％、60％、70％、90％、100％、200％、300％、500％、1,000％、5,000％又はそれ以上であることができる。
【０１０１】
あるいは、タンパク質バイオマーカーのレベルは、いくつかの免疫調節化合物又は他の物質の投与に反応して減少することができる。この減少は、例えば、同等の対照タンパク質レベルの約99％、95％、90％、80％、70％、60％、50％、40％、30％、20％、10％、1％又はそれ未満のレベルで存在することができる。
【０１０２】
本明細書に用いるように、用語「決定する」、「測定する」、「評価する」、「判定する」、及び「アッセイする」とは一般に、測定のいずれかの形を指し、且つ要素が存在するかどうかを決定することを含む。これらの用語は、定量的決定及び/又は定性的決定の両方を含む。判定は、相対的又は絶対的であってよい。「存在を判定する」とは、存在する何かの量を決定することに加え、それが存在するかどうかを決定することを含む。
【０１０３】
用語「核酸」及び「ポリヌクレオチド」は、例えばデオキシリボヌクレオチド又はリボヌクレオチドなどのヌクレオチド、又は合成により生成された化合物で構成された任意の長さのポリマーを説明するために、本明細書において互換的に使用され、これらは2つの天然の核酸の配列に類似した配列特異的様式で天然の核酸とハイブリダイズすることができ、例えばワトソン-クリック型塩基対合相互作用に参加することができる。ポリヌクレオチド配列の文脈において本明細書に用いるように、用語「塩基類」(又は「塩基」)は、「ヌクレオチド類」(又は「ヌクレオチド」)、すなわちポリヌクレオチドのモノマーサブユニットと同義語である。用語「ヌクレオシド」及び「ヌクレオチド」は、公知のプリン塩基及びピリミジン塩基のみではなく、他の修飾されている複素環式塩基も含む、それらの部分を含むことが意図されている。そのような修飾は、メチル化されたプリン又はピリミジン、アシル化されたプリン又はピリミジン、アルキル化されたリボース又は他のヘテロ環を含む。加えて用語「ヌクレオシド」及び「ヌクレオチド」は、通常のリボース糖及びデオキシリボース糖のみではなく、他の糖類も含むそれらの部分を含む。修飾されたヌクレオシド又はヌクレオチドは、糖残基上の修飾、例えば1個以上のヒドロキシル基のハロゲン原子若しくは脂肪族基との置換、又はエーテル、アミンなどとしての官能基化も含む。「類似体」とは、類似構造を有する模倣体、誘導体であるとして文献において認められる構造上の特徴を有する分子か、又は他の同様の用語を指し、且つ例えば非天然のヌクレオチドを組み込んでいるポリヌクレオチド、2'-修飾されたヌクレオシドなどのヌクレオチド模倣体、ペプチド核酸、オリゴマーヌクレオシドリン酸、及び保護基若しくは連結部分などの置換基を追加した任意のポリヌクレオチドを含む。
【０１０４】
用語「相補的」とは、ポリヌクレオチドの配列を基にしたポリヌクレオチド間の特異的結合を指す。本明細書に用いるように、第一のポリヌクレオチドと第二のポリヌクレオチドが、ハイブリダイゼーションアッセイにおいて、ストリンジェント条件下で互いに結合する場合、例えばそれらがハイブリダイゼーションアッセイにおいて所定のシグナル又は検出可能なレベルのシグナルを発生する場合、それらは相補的である。ポリヌクレオチドの一部が通常の塩基対合則に従う場合、例えばAはT(又はU)と対合し、且つGはCと対合する場合、小さい領域(例えば約3塩基未満)の配列のミスマッチ、挿入又は欠失が存在したとしても、これらは互いに相補的である。
【０１０５】
2つの核酸配列の文脈で「配列同一性」又は「同一性」とは、特定された比較ウィンドウにわたって最大の対応となるよう並置される場合に同じであり、且つ付加、欠失及び置換を考慮することができる2つの配列における残基を指す。
【０１０６】
ポリヌクレオチドの文脈でそれらの様々な文法上の形において、用語「実質的同一性」又は「相同」とは一般に、ポリヌクレオチドが、参照配列と比較して、所望の同一性、例えば、少なくとも60％の同一性、好ましくは少なくとも70％の配列同一性、より好ましくは少なくとも80％、更により好ましくは少なくとも90％、及びなお更に好ましくは少なくとも95％を有する配列を含むことを意味する。ヌクレオチド配列が実質的に同一であることの別の指標は、2つの分子がストリンジェント条件下で互いにハイブリダイズすることである。
【０１０７】
用語「単離された」及び「精製された」とは、物質が、その中に物質が存在する試料のかなりの部分を、すなわち、その天然の状態又は単離されていない状態で典型的に認められる物質よりもより多くを構成するようにする、物質(mRNA又はタンパク質など)の単離を指す。典型的には、試料のかなりの部分とは、例えば試料の1％より多く、2％より多く、5％より多く、10％より多く、20％より多く、50％より多く、又はそれ以上、通常最大約90％〜100％までを含む。例えば、単離されたmRNAの試料は、典型的には総mRNAの少なくとも約1％を含むことができる。ポリヌクレオチドを精製する技術は、当該技術分野において周知であり、且つ例えば、ゲル電気泳動、イオン交換クロマトグラフィー、アフィニティクロマトグラフィー、フローソーティング、及び密度別沈降を含む。
【０１０８】
本明細書に用いるように、用語「試料」は、必ずしもではないが、典型的には、1種以上の関心対象の成分を含有する、液体形状の、物質又は物質の混合物に関する。
【０１０９】
本明細書に用いるように、「生物学的試料」とは、インビボ又はインサイチュにおいて入手、到達、又は収集された生物学的組織又は液体起源の試料を含む、生物学的対象から入手された試料を指す。生体試料は、前癌性又は癌性の細胞又は組織を含む生物学的対象の領域由来の試料も含む。そのような試料は、哺乳動物から単離された臓器、組織、画分及び細胞であることができるが、これらに限定されるものではない。例証的生体試料は、細胞溶解液、細胞培養物、細胞株、組織、口腔組織、胃腸組織、臓器、細胞小器官、生体液、血液試料、尿試料、又は皮膚試料などが挙げられるが、これらに限定されるものではない。好ましい生体試料は、血液、部分的に精製された血液、PBMC、組織生検などが挙げられるが、これらに限定されるものではない。
【０１１０】
本明細書に用いるように、用語「捕獲物質(capture agent)」とは、物質が均質な混合物からmRNA又はタンパク質を結合し且つ濃縮することを可能にするのに十分な相互作用を介して、mRNA又はタンパク質に結合する物質を指す。
【０１１１】
本明細書に用いるように、用語「プローブ」とは、特異的標的mRNAバイオマーカー配列に指向されている捕獲物質を指す。従って、プローブセットの各プローブは、それぞれの標的mRNAバイオマーカーを有する。プローブ/標的mRNA二本鎖(duplex)は、プローブのその標的mRNAバイオマーカーとのハイブリダイズにより形成された構造である。
【０１１２】
用語「核酸」又は「オリゴヌクレオチドプローブ」とは、1つ以上の種類の化学結合を介して、通常水素結合形成を介した、相補的塩基対合を通常介して、本明細書に提供するmRNAバイオマーカーなどの相補配列の標的核酸に結合することが可能な核酸を指す。本明細書に用いるように、プローブは、天然の塩基(例えば、A、G、C、又はT)又は修飾された塩基(7-デアザグアノシン、イノシンなど)を含むことができる。加えて、プローブの塩基は、ハイブリダイゼーションを妨害しない限りは、ホスホジエステル結合以外の連結により結合されることができる。プローブは、ハイブリダイゼーション条件のストリンジェンシーに応じて、プローブ配列との完全な相補性を欠く標的配列に結合することができることは、当業者により理解されるであろう。プローブは、同位体、例えば発色団、発光団(lumiphore)、色素原により直接標識、又はそれにストレプトアビジン複合体が後に結合され得るビオチンにより間接標識されることが好ましい。プローブの存在又は非存在をアッセイすることにより、関心対象の標的mRNAバイオマーカーの存在又は非存在を検出することができる。
【０１１３】
用語「ストリンジェントなアッセイ条件」とは、所望の特異性を供するには不充分な相補性の結合構成員の間で結合対を形成するには一般には不適合であるが、アッセイにおいて所望のレベルの特異性を供するのに十分な相補性の核酸、例えばプローブと標的mRNAの結合対を作製するために適性がある条件を指す。用語ストリンジェントなアッセイ条件とは一般に、ハイブリダイゼーション条件と洗浄条件の組み合わせを指す。
【０１１４】
核酸の文脈で「標識」又は「検出可能な部分」とは、核酸と連結した場合に、例えば、分光学的手段、光化学的手段、生化学的手段、免疫化学的手段、又は化学的手段により、核酸を検出可能にする組成物を指す。例証的標識は、放射性同位体、磁気ビーズ、金属ビーズ、コロイド粒子、蛍光色素、酵素、ビオチン、ジゴキシゲニン、ハプテンなどを含むが、これらに限定されるものではない。「標識された核酸又はオリゴヌクレオチドプローブ」は一般に、核酸又はプローブに結合した標識の存在を検出することにより核酸又はプローブの存在を検出することができるように標識するために、リンカー若しくは化学結合を介して共有的に、又はイオン結合、ファンデルワールス力、静電引力、疎水性相互作用、若しくは水素結合を介して非共有的にのいずれかで結合されるものである。
【０１１５】
本明細書に用いるように、用語「ポリメラーゼ連鎖反応」又は「PCR」とは一般に、例えば、Mullisの米国特許第4,683,195号に開示されたように、少量の核酸、RNA及び/又はDNAが増幅される手順を指す。一般に関心対象の領域の末端からの又はこれを超える配列情報が利用可能であることが必要であり、その結果オリゴヌクレオチドプライマーをデザインすることができ；これらのプライマーは、増幅されるべき鋳型の反対鎖に対し同一又は類似の配列であろう。2つのプライマーの5'末端ヌクレオチドは、増幅される物質の末端と合致することができる。PCRを使用し、総ゲノムDNAから特異的RNA配列、特異的DNA配列を、及び総細胞RNA、バクテリオファージ又はプラスミド配列などから転写されたcDNAを増幅することができる。全般的には、Mullisらの文献、Cold Spring Harbor Symp. Quant. Biol., 51: 263 (1987)；Erlich編集、「PCR技術(PCR Technology)」、(Stockton Press, NY, 1989)を参照のこと。
【０１１６】
PCR法の文脈で本明細書において使用される場合用語「サイクル数」又は「CT」は、蛍光レベルが所定のセット閾値レベルを超えるPCRサイクル数を指す。CT測定は、例えば、当初の試料中のmRNAレベルを概算するために使用することができる。CT測定は、1つの核酸のCTを別の核酸のCTから減算する場合に、用語「dCT」又は「CTの差異」スコアに関して使用されることが多い。
【０１１７】
本明細書に用いるように、及び特に指定する場合を除いて、用語「光学的に純粋」とは、化合物の1つの光学異性体を含有し、且つその化合物の他の異性体を実質的に含まない組成物を意味する。例えば、1つのキラル中心を有する化合物の光学的に純粋な組成物は、その化合物の反対のエナンチオマーを実質的に含まないことになる。2つのキラル中心を有する化合物の光学的に純粋な組成物は、その化合物の他のジアステレオマーを実質的に含まないことになる。典型的な光学的に純粋な化合物は、該化合物の約80重量％を超える1つのエナンチオマーと該化合物の約20重量％未満の他方のエナンチオマー、より好ましくは該化合物の約90重量％を超える1つのエナンチオマーと該化合物の約10重量％未満の他方のエナンチオマー、更により好ましくは該化合物の約95重量％を超える1つのエナンチオマーと該化合物の約5重量％未満の他方のエナンチオマー、より好ましくは該化合物の約97重量％を超える1つのエナンチオマーと該化合物の約3重量％未満の他方のエナンチオマー、並びに最も好ましくは該化合物の約99重量％を超える1つのエナンチオマーと該化合物の約1重量％未満の他方のエナンチオマーを含有する。
【０１１８】
本明細書に用いるように、及び特に指定する場合を除いて、用語「医薬として許容し得る塩」とは、その用語が言及する化合物の無毒の酸及び塩基付加塩を包含している。許容し得る無毒の酸付加塩は、当該技術分野において公知の有機及び無機の酸又は塩基から誘導されるものを含み、これは例えば、塩酸、臭化水素酸、リン酸、硫酸、メタンスルホン酸、酢酸、酒石酸、乳酸、コハク酸、クエン酸、リンゴ酸、マレイン酸、ソルビン酸、アコニット酸、サリチル酸、フタル酸、エンボン酸、エナント酸などを含む。
【０１１９】
性質が酸性である化合物は、様々な医薬として許容し得る塩基と塩を形成することが可能である。そのような酸性化合物の医薬として許容し得る塩基付加塩を調製するために使用することができる塩基は、無毒の塩基付加塩を形成するもの、すなわち、非限定的にアルカリ金属塩又はアルカリ土類金属塩などの医薬として許容し得る陽イオンを含む塩、及び特にカルシウム塩、マグネシウム塩、ナトリウム塩又はカリウム塩などである。好適な有機塩基は、N,N-ジベンジルエチレンジアミン、クロロプロカイン、コリン、ジエタノールアミン、エチレンジアミン、メグルマイン(N-メチルグルカミン)、リジン、及びプロカインを含むが、これらに限定されるものではない。
【０１２０】
本明細書に用いるように、及び特に指定する場合を除いて、「溶媒和物」という用語は、非共有結合分子間力によって結合された化学量論量又は非化学量論量の溶媒を更に含む本明細書に提供する化合物又はそれらの塩を意味する。溶媒が水の場合は、溶媒和物は、水和物である。
【０１２１】
本明細書に用いるように、及び特に指定する場合を除いて、「立体異性体として純粋である」という用語は、化合物の1つの立体異性体を含み、且つその化合物の他の立体異性体を実質的に含まない組成物を意味する。例えば、1つのキラル中心を有する化合物の立体異性体として純粋である組成物は、該化合物の反対のエナンチオマーを実質的に含まないことになる。2つのキラル中心を有する化合物の立体異性体として純粋である組成物は、該化合物の他のジアステレオマーを実質的に含まないことになる。典型的な立体異性体として純粋である化合物は、該化合物の約80重量％を超える1つの立体異性体と該化合物の約20重量％未満の他の立体異性体、より好ましくは該化合物の約90重量％を超える1つの立体異性体と該化合物の約10重量％未満の他の立体異性体、更により好ましくは該化合物の約95重量％を超える1つの立体異性体と該化合物の約5重量％未満の他の立体異性体、及び最も好ましくは該化合物の約97重量％を超える1つの立体異性体と該化合物の約3重量％未満の他の立体異性体を含む。本明細書に用いるように、及び特に指定する場合を除いて、「立体異性的に富化された」という用語は、化合物の約60重量％を超える1つの立体異性体、好ましくは化合物の約70重量％を超える、又はより好ましくは化合物の約80重量％を超える1つの立体異性体を含む組成物を意味する。本明細書に用いるように、及び特に指定する場合を除いて、「鏡像異性的に純粋」とは、1つのキラル中心を有する化合物の立体異性的に純粋な組成物を意味する。同様に、「立体異性的に富化された」という用語は、1つのキラル中心を有する化合物の立体異性的に富化された組成物を意味する。
【０１２２】
示された構造とその構造に与えられた名称との間に不一致がある場合は、示された構造により大きな重みを与えるべきであることに留意すべきである。加えて、構造又は構造の一部の立体化学が、例えば、太線又は点線で示されていない場合は、該構造又は該構造の一部は、そのすべての立体異性体を包含するものと解釈すべきである。
【０１２３】
本明細書に提供する実施態様の実践は、特に指定する場合を除いて、当業者の技術の範囲内である、分子生物学、微生物学、及び免疫学の従来の技術を使用するものである。そのような技術は、文献に十分に説明されている。特に参考に適したテキストの例は：Sambrookらの文献、(1989)「分子クローニング；実験マニュアル(Molecular Cloning；A Laboratory Manual)」(第2版)；D.N Glover編集、(1985)「DNAクローニング(DNA Cloning)」、第I及びII巻；M.J. Gait編集、(1984)「オリゴヌクレオチド合成(Oligonucleotide Synthesis)」；B.D. Hames及びSJ. Higgins編集、(1984)「核酸ハイブリダイゼーション(Nucleic Acid Hybridization)」；B.D. Hames及びS.J. Higgins編集、(1984)「転写及び翻訳(Transcription and Translation)」；R.I. Freshney編集、(1986)「動物細胞培養：固定された細胞及び酵素(Animal Cell Culture；Immobilized Cells and Enzymes)」(IRL Press社, 1986)；「細胞及び分子生物学における免疫化学法(Immunochemical Methods in Cell and Molecular Biology)」(Academic Press社, ロンドン)；Scopesの文献、(1987)「タンパク質精製：原理と実践(Protein Purification : Principles and Practice)」、(第2版；Springer Verlag社, ニューヨーク)；並びに、D.M. Weir及びC. C. Blackwell編集、(1986)「実験免疫学ハンドブック(Handbook of Experimental Immunology)」第I-IV巻が挙げられる。
【０１２４】
(5.2  バイオマーカー)
癌療法の有効性を確かめるための、mRNA又はタンパク質のバイオマーカーとしての使用に関連する方法が、本明細書に提供される。mRNA又はタンパク質のレベルは、特定の物質が、特定の型の癌、例えば非ホジキンリンパ腫の治療において成功の見込みがあるかどうかを決定するために使用することができる。
【０１２５】
生物学的マーカー又は「バイオマーカー」は、その検出が、例えば癌の存在などの、特定の生物学的状態を示す物質である。いくつかの実施態様において、バイオマーカーは、個別に、又はいくつかのバイオマーカーを同時に測定することができるかのいずれかであることができる。
【０１２６】
一部の実施態様において、「バイオマーカー」は、疾患のリスク若しくは進行と、又は所定の治療に対する疾患の易感受性と相関し得る、mRNA発現レベルの変化を示す。一部の実施態様において、バイオマーカーは、mRNA又はcDNAなどの核酸である。
【０１２７】
追加の実施態様において、「バイオマーカー」は、リスク、治療に対する易感受性、又は疾患の進行と相関し得る、ポリペプチド又はタンパク質発現レベルの変化を示す。一部の実施態様において、バイオマーカーは、ポリペプチド若しくはタンパク質、又はそれらの断片であることができる。特異的タンパク質の相対レベルは、当該技術分野において公知の方法により決定することができる。例えば、免疫ブロット法、酵素結合免疫吸着アッセイ(ELISA)法、又は他の方法などの抗体ベースの方法を使用することができる。
【０１２８】
(5.3  第二の活性薬)
3-(4-アミノ-1-オキソ-1,3-ジヒドロ-イソインドール-2-イル)-ピペリジン-2,6-ジオンは、本明細書で提供する方法及び組成物において、他の薬理活性化合物(「第二の活性薬」)と組み合わせることができる。特定の組み合わせは、特定の型の癌の治療において相乗作用的に機能できると考えられる。第二の活性薬は、大型分子(例えば、タンパク質)又は小型分子(例えば、合成無機分子、有機金属分子又は有機分子)であり得る。
【０１２９】
大型分子活性薬の例としては、造血成長因子、サイトカイン並びにモノクローナル抗体及びポリクローナル抗体が挙げられるが、それらに限定されない。典型的大型分子活性薬は、天然の又は人工的に製造されたタンパク質などの、生物学的分子である。本発明において特に有用であるタンパク質は、インビトロ又はインビボにおける造血前駆細胞及び免疫学的活性前駆細胞(active poietic cell)の生存及び/又は増殖を刺激するタンパク質を含む。他のものは、インビトロ又はインビボにおける細胞内の拘束された赤芽球前駆細胞(committed erythroid progenitor)の分裂及び分化を刺激する。特定のタンパク質は、IL-2(組み換えIL-II(「rIL2」)及びカナリア痘IL-2を含む)、IL-10、IL-12、及びIL-18などのインターロイキン；インターフェロンα-2a、インターフェロンα-2b、インターフェロンα-n1、インターフェロンα-n3、インターフェロンβ-Ia、及びインターフェロンγ-Ibなどのインターフェロン；GM-CF及びGM-CSF；並びに、EPOが挙げられるが、これらに限定されるものではない。
【０１３０】
本明細書に提供する方法及び組成物において使用することができる特定のタンパク質は、米国ではNeupogen(登録商標)(Amgen社、サウザンドオーク、CA)の商標名で販売されているフィルグラスチム；米国ではLeukine(登録商標)(Immunex社、シアトル、WA)の商標名で販売されているサルグラモスチム；及び、米国ではEpogen(登録商標)(Amgen社、サウザンドオーク、CA)の商標名で販売されている組換えEPOが挙げられるが、これらに限定されるものではない。
【０１３１】
GM-CSFの組換え型及び変異型は、米国特許第5,391,485号；第5,393,870号；及び、第5,229,496号に開示されているように調製することができ、これらの特許は全て引用により本明細書中に組み込まれている。G-CSFの組換え型及び変異型は、米国特許第4,810,643号；第4,999,291号；第5,528,823号；及び、第5,580,755号に開示されているように調製することができ、これらの特許は全て引用により本明細書中に組み込まれている。
【０１３２】
3-(4-アミノ-1-オキソ-1,3-ジヒドロ-イソインドール-2-イル)-ピペリジン-2,6-ジオンと組み合わせて使用することができる抗体は、モノクローナル抗体及びポリクローナル抗体を含む。抗体の例は、トラスツズマブ(Herceptin(登録商標))、リツキシマブ(Rituxan(登録商標))、ベバシズマブ(Avastin(商標))、ペルツズマブ(Omnitarg(商標))、トシツモマブ(Bexxar(登録商標))、エドレコロマブ(Panorex(登録商標))、及びG250が挙げられるが、これらに限定されるものではない。本発明の化合物は、抗-TNF-α抗体と組み合わせるか、又はそれとの組み合わせ中で使用することもできる。
【０１３３】
大型分子活性薬は、抗癌ワクチンの形で投与することができる。例えば、IL-2、G-CSF、及びGM-CSFなどのサイトカインを分泌するか、又は分泌を引き起こすワクチンを、本明細書に提供する方法、医薬組成物、及びキットにおいて使用することができる。例えば、Emens, L.A.らの文献、Curr. Opinion Mol. Ther. 3(1): 77-84 (2001)を参照されたい。
【０１３４】
小型分子である第二の活性薬も、本明細書に提供する3-(4-アミノ-1-オキソ-1,3-ジヒドロ-イソインドール-2-イル)-ピペリジン-2,6-ジオンと組み合わせて使用することができる。小型分子の第二の活性薬の例は、抗癌剤、抗生物質、免疫抑制薬、及びステロイドが挙げられるが、これらに限定されるものではない。
【０１３５】
抗癌剤の例としては、アシビシン；アクラルビシン；塩酸アコダゾール；アクロニン；アドゼレシン；アルデスロイキン；アルトレタミン；アンボマイシン；酢酸アメタントロン；アムサクリン；アナストロゾール；アントラマイシン；アスパラギナーゼ；アスペルリン；アザシチジン；アゼテパ；アゾトマイシン；バチマスタット；ベンゾデパ；ビカルタミド；塩酸ビサントレン；ジメシル酸ビスナフィド；ビゼレシン；硫酸ブレオマイシン；ブレキナールナトリウム；ブロピリミン；ブスルファン；カクチノマイシン；カルステロン；カラセミド；カルベチマー；カルボプラチン；カルムスチン；塩酸カルビシン；カルゼレシン；セデフィンゴル；セレコキシブ(COX-2阻害薬)；クロラムブシル；シロレマイシン；シスプラチン；クラドリビン；メシル酸クリスナトール；シクロホスファミド；シタラビン；ダカルバジン；ダクチノマイシン；塩酸ダウノルビシン；デシタビン；デキソルマプラチン；デザグアニン；メシル酸デザグアニン；ジアジクオン；ドセタキセル；ドキソルビシン；塩酸ドキソルビシン；ドロロキシフェン；クエン酸ドロロキシフェン；プロピオン酸ドロモスタノロン；デュアゾマイシン；エダトレキサート；塩酸エフロルニチン；エルサミツルシン；エンロプラチン；エンプロメート；エピプロピジン；塩酸エピルビシン；エルブロゾール；塩化エソルビシン；エストラムスチン；リン酸エストラムスチンナトリウム；エタニダゾール；エトポシド；リン酸エトポシド；エトプリン；塩酸ファドロゾール；ファザラビン；フェンレチニド；フロキシウリジン；リン酸フルダラビン；フルオロウラシル；フルロシタビン；ホスキドン；ホストリエシンナトリウム；ゲムシタビン；塩酸ゲムシタビン；ヒドロキシ尿素；塩酸イダルビシン；イホスファミド；イルモホシン；イプロプラチン；イリノテカン；塩酸イリノテカン；酢酸ランレオチド；レトロゾール；酢酸ロイプロリド；塩酸リアロゾール；ロメトレキソールナトリウム；ロムスチン；塩酸ロソキサントロン；マソプロコル；マイタンシン；塩酸メクロレタミン；酢酸メゲストロール；酢酸メレンゲストロール；メルファラン；メノガリル；メルカプトプリン；メトトレキセート；メトトレキセートナトリウム；メトプリン；メツレデパ；ミチンドミド；ミトカルシン；ミトクロミン；ミトギリン；ミトマルシン；ミトマイシン；ミトスペル；ミトタン；塩酸ミトキサントロン；ミコフェノール酸；ノコダゾール；ノガラマイシン；オルマプラチン；オキシスラン；パクリタキセル；ペガスパルガーゼ；ペリオマイシン；ペンタムスチン；硫酸ペプロマイシン；ペルホスファミド；ピポブロマン；ピポスルファン；塩酸ピロキサントロン；プリカマイシン；プロメスタン；ポルフィメルナトリウム；ポルフィロマイシン；プレドニムスチン；塩酸プロカルバジン；ピューロマイシン；塩酸ピューロマイシン；ピラゾフリン；リボプリン；サフィンゴール；塩酸サフィンゴール；セムスチン；シムトラゼン；スパルフォセートナトリウム；スパルソマイシン；塩酸スピロゲルマニウム；スピロムスチン；スピロプラチン；ストレプトニグリン；ストレプトゾシン；スロフェヌル；タリソマイシン；テコガランナトリウム；タキソテレ；テガファー；塩酸��ロキサントロン；テモポルフィン；テニポシド；テロキシロン；テストラクトン；チアミプリン；チオグアニン；チオテパ；チアゾフリン；チラパザミン；クエン酸トレミフェン；酢酸トレストロン；リン酸トリシリビン；トリメトレキセート；グルクロン酸トリメトレキセート；トリプトレリン；塩酸ツブロゾール；ウラシルマスタード；ウレデパ；バプレオチド；ベルテポルフィン；硫酸ビンブラスチン；硫酸ビンクリスチン；ビンデシン；硫酸ビンデシン；硫酸ビネピジン；硫酸ビングリシナート；硫酸ビンロイロシン；酒石酸ビノレルビン；硫酸ビンロシジン；硫酸ビンゾリジン；ボロゾール；ゼニプラチン；ジノスタチン及び塩酸ゾルビシンが挙げられるが、それらに限定されない。
【０１３６】
他の抗癌剤としては、20-エピ-1,25ジヒドロキシビタミンD3；5-エチニルウラシル；アビラテロン；アクラルビシン；アシルフルベン；アデシペノール；アドゼレシン；アルデスロイキン；ALL-TKアンタゴニスト；アルトレタミン；アンバムスチン；アミドクス；アミホスチン；アミノレブリン酸；アムルビシン；アムサクリン；アナグレリド；アナストロゾール；アンドログラホリド；血管形成阻害薬；アンタゴニストD；アンタゴニストG；アンタレリックス；抗背方化形態形成タンパク質-1；抗アンドロゲン、前立腺癌薬；抗エストロゲン；アンチネオプラストン；アンチセンスオリゴヌクレオチド；グリシン酸アフィディコリン；アポトーシス遺伝子修飾物質；アポトーシス調節薬；アプリン酸；ara-CDP-DL-PTBA；アルギニンデアミナーゼ；アスラクリン；アタメスタン；アトリムスチン；アキシナスタチン1；アキシナスタチン2；アキシナスタチン3；アザセトロン；アザトキシン；アザチロシン；バッカチンIII誘導体；バラノール；バチマスタット；BCR/ABLアンタゴニスト；ベンゾクロリン；ベンゾイルスタウロスポリン；ベータラクタム誘導体；ベータ-アレチン；ベータクラマイシンB；ベツリニン酸；bFGF阻害薬；ビカルタミド；ビサントレン；ビサジリジニルスペルミン；ビスナフィド；ビストラテンA；ビゼレシン；ブレフレート；ブロピリミン；ブドチタン；ブチオニンスルホキシミン；カルシポトリオール；カルホスチンC；カンプトテシン誘導体；カペシタビン；カルボキサミド-アミノ-トリアゾール；カルボキシアミドトリアゾール；CaRest M3；CARN700；軟骨由来阻害薬；カルゼレシン；カゼインキナーゼ阻害薬(ICOS)；カスタノスペルミン；セクロピンB；セトロレリクス；クロリン類(chlorlns)；クロロキノキサリンスルホンアミド；シカプロスト；cis-ポルフィリン；クラドリビン；クロミフェン類似体；クロトリマゾール；コリスマイシンA；コリスマイシンB；コンブレタスタチンA4；コンブレタスタチン類似体；コナゲニン；クラムベシジン816；クリスナトール；クリプトフィシン8；クリプトフィシンA誘導体；クラシンA；シクロペンタントラキノン；シクロプラタム；シクロスポリンA；シペマイシン；シタラビンオクホスファート；細胞溶解因子；サイトスタチン；ダクリキシマブ；デシタビン；デヒドロジデムニンB；デスロレリン；デキサメタソン；デキシホスファミド；デクスラゾキサン；デクスベラパミル；ジアジクオン；ジデムニンB；ジドックス；ジエチルノルスペルミン；ジヒドロ-5-アザシチジン；ジヒドロタキソール、9-；ジオキサマイシン；ジフェニルスピロムスチン；ドセタキセル；ドコサノール；ドラセトロン；ドキシフルリジン；ドキソルビシン；ドロロキシフェン；ドロナビノール；デュオカルマイシンSA；エブセレン；エコムスチン；エデルホシン；エドレコロマブ；エフロールニチン；エレメン；エミテフール；エピルビシン；エプリステリド；エストラムスチン類似体；エストロゲンアゴニスト；エストロゲンアンタゴニスト；エタニダゾール；リン酸エトポシド；エキセメスタン；ファドロゾール；ファザラビン；フェンレチニド；フィルグラスチム；フィナステリド；フラボピリドール；フレゼラスチン；フルアステロン；フルダラビン；塩酸フルオロダウノルニシン；ホルフェニメクス；ホルメスタン；ホストリエシン；ホテムスチン；ガドリニウムテキサフィリン；硝酸ガリウム；ガロシタビン；ガニレリクス；ゼラチナーゼ阻害薬；ゲムシタビン；グルタチオン阻害薬；ヘプスルファム；ヘレグリン；ヘキサメチレンビスアセトアミド；ヒペリシン；イバンドロン酸；イダルビシン；イドキシフェン；イドラマントン；イルモホシン；イロマスタット；イマチニブ(例えばGleevec(登録商標))、イミキモド；免疫賦活ペプチド；インシュリン様成長因子-1受容体阻害薬；インターフェロンアゴニスト；インターフェロン；インターロイキン；イオベングアン；ヨードドキソルビシン；イポメアノール、4-；イロプラクト；イルソグラジン；イソベンガゾール；イソホモハリコンドリンB；イタセトロン；ジャスプラキノリド；カハラリドF；三酢酸ラメラリン-N；ランレオチド；レイナマイシン；レノグラスチム；硫酸レンチナン；レプトールスタチン；レトロゾール；白血病阻害因子；白血球アルファインターフェロン；ロイプロリド＋エストロゲン＋プロゲステロン；ロイプロレリン；レバミソール；リアロゾール；直鎖状ポリアミン類似体；親油性二糖ペプチド；親油性白金化合物；リソクリンアミド7；ロバプラチン；ロムブリシン；ロメトレキソール；ロニダミン；ロソキサントロン；ロキソリビン；ルルトテカン；ルテチウムテキサフィリン；リソフィリン；細胞溶解性ペプチド；マイタンシン；マンノスタチンA；マリマスタット；マソプロコール；マスピン；マトリリシン阻害薬；マトリックスメタロプロテイナーゼ阻害薬；メノガリル；メルバロン；メテレリン；メチオニナーゼ；メトクロプラミド；MIF阻害薬；ミフェプリストーン；ミルテホシン；ミリモスチム；ミトグアゾン；ミトラクトール；ミトマイシン類似体；ミトナフィド；ミトトキシン線維芽成長因子−サポリン；ミトキサントロン；モファロテン；モルグラモスチム；エルビタックス；ヒト絨毛膜ゴナドトロピン；モノホスホリルリピドA＋マイコバクテリア細胞壁sk；モピダモール；マスタード抗癌薬；マイカペルオキシドB；マイコバクテリア細胞壁抽出物；ミリアポロン；N-アセチルジナリン；N-置換ベンズアミド；ナファレリン；ナグレスチプ；ナロキソン＋ペンタゾシン；ナパビン；ナフテルピン；ナルトグラスチム；ネダプラチン；ネモルビシン；ネリドロン酸；ニルタミド；ニサマイシン；一酸化窒素モジュレーター；ニトロキシド酸化防止剤；ニトルリン；オブリメルセン(Genasense(登録商標))；O6-ベンジルグアニン；オクトレオチド；オキセノン；オリゴヌクレオチド；オナプリストン；オンダンセトロン；オンダンセトロン；オラシン；経口サイトカイン誘導物質；オルマプラチン；オサテロン；オキサリプラチン；オキサウノマイシン；パクリタキセル；パクリタキセル類似体；パクリタキセル誘導体；パラウアミン；パルミトイルリゾキシン；パミドロン酸；パナキシトリオール；パノミフェン；パラバクチン；パゼリプチン；ペガスパルガーゼ；ペルデシン；ポリ硫酸ペントサンナトリウム；ペントスタチン；ペントロゾール；ペルフルブロン；ペルホスファミド；ペリリルアルコール；フェナジノマイシン；酢酸フェニル；ホスファターゼ阻害薬；ピシバニル；塩酸ピロカルピン；ピラルビシン；ピリトレキシム；プラセチンA；プラセチンB；プラスミノーゲン活性化因子阻害薬；白金錯体；白金化合物；白金-トリアミン錯体；ポルフィメルナトリウム；ポルフィロマイシン；プレドニソン；プロピルビスアクリドン；プロスタグランジンJ2；プロテアソーム阻害薬；プロテインA系免疫調節薬；プロテインキナーゼC阻害薬；プロテインキナーゼC阻害薬、微細藻類；タンパク質チロシンホスファターゼ阻害薬；プリンヌクレオシドホスホリラーゼ阻害薬；プルプリン；ピラゾロアクリジン；ピリドキシル化ヘモグロビンポリオキシエチレン結合体；rafアンタゴニスト；ラルチトレキセド；ラモセトロン；rasファルネシルタンパク質トランスフェラーゼ阻害薬；ras阻害薬；ras-GAP阻害薬；脱メチル化レテリプチン；レニウムRe186エチドロネート；リゾキシン；リボザイム；RIIレチナミド；ロヒツキン；ロムルチド；ロキニメックス；ルビギノンB1；ルボキシル；サフィンゴール；サイントピン；SarCNU；サルコフィトールA；サルグラモスチム；Sdi 1模倣体；セムスチン；セネセン誘導阻害薬1；センスオリゴヌクレオチド；シグナル伝達阻害薬；シゾフィラン、ソブゾキサン；ボロカプタートナトリウム；フェニル酢酸ナトリウム；ソルベロール；ソマトメジン結合タンパク質；ソネルミン；スパルフォス酸；スピカマイシンD；スピロムスチン；スプレノペンチン；スポンギスタチン1；スクアラミン；スチピアミド；ストロメリシン阻害薬；スルフィノシン；超活性血管作動性腸ペプチドアンタゴニスト；スラジスタ；スラミン；スワインソニン；タリムスチン；タモキシフェンメチオジド；タウロムスチン；タザロテン；テコガランナトリウム；テガファー；テルラピリリウム；テロメラーゼ阻害薬；テモポルフィン；テニポシド；テトラクロロデカオキシド；テトラゾミン；タリブラスチン；チオコラリン；トロンボポイエチン；トロンボポイエチン模倣体；チマルファシン；チモポイエチン受容体アゴニスト；チモトリナン；甲状腺刺激ホルモン；錫エチルエチオプルプリン；チラパザミン；二塩化チタノセン；トプセンチン；トレミフェン；翻訳阻害薬；トレチノイン；トリアセチルウリジン；トリシリビン；トリメトレキセート；トリプトレリン；トロピセトロン；ツロステリド；チロシンキナーゼ阻害薬；チルホスチン；UBC阻害薬；ウベニメクス；尿生殖洞由来成長阻害因子；ウロキナーゼ受容体アンタゴニスト；バプレオチド；バリオリンB；ベラレソル；ベラミン；ベルジンス；ベルテポルフィン；ビノレルビン；ビンキサルチン；ビタキシン；ボロゾール；ザノテロン；ゼニプラチン；ジラスコルブ及びジノスタチンスチマラマーが挙げられるが、それらに限定されない。
【０１３７】
具体的な第二の活性薬としては、クロラムブシル、フルダラビン、デキサメタソン(Decadron(登録商標))、ヒドロコルチゾン、メチルプレドニソロン、シロスタミド、ドキソルビシン(Doxil(登録商標))、フォルスコリン、リツキシマブ、シクロスポリンA、シスプラチン、ビンクリスチン、BRL-50481及びIR-202などのPDE7阻害薬、IR-284、シロスタゾール、メリベンダン、ミルリノン、ベスナリノン、エノキシモン及びピモベンダンなどのPDE4/7二重阻害薬、フォスタマチニブ二ナトリウム(R406/R788)、R343、R-112及びExcellair(登録商標)(ZaBeCor Pharmaceuticals社、Bala Cynwyd、PA)などのSyk阻害薬が挙げられるが、それらに限定されない。
【０１３８】
(5.4  治療方法)
リンパ腫、特に非ホジキンリンパ腫を治療又は管理する方法を、本明細書に提供する。いくつかの実施態様において、予後因子を使用する、非限定的にびまん性大細胞型B細胞性リンパ腫(DLBCL)を含む非ホジキンリンパ腫(NHL)の治療又は管理の方法を、本明細書に提供する。
【０１３９】
また、過去に治療を受けていない患者に加え、過去に癌治療を受けたが、標準療法に反応しない患者を治療する方法も本明細書に提供する。一部の疾患又は障害は、特定の年齢集団においてより一般的であるが、本発明は、患者の年齢に無関係に患者を治療する方法も包含している。本発明は更に、問題の疾患又は状態を治療することを企図した外科手術を受けていない患者に加え、手術を受けた患者をも治療する方法を包含している。癌患者は、均一でない臨床の症状発現及び様々な臨床転帰を有するので、患者に与えられる治療は、その患者の予後に応じて、変動してよい。熟練した臨床医は、過度の試験を行うことなく、個々の癌患者を治療するために有効に使用することができる、具体的な第二の薬剤、外科手術のタイプ、及び薬剤ベースでない標準療法のタイプを容易に決定することができるであろう。
【０１４０】
一実施態様において、本明細書に記載の状態に関して3-(4-アミノ-1-オキソ-1,3-ジヒドロ-イソインドール-2-イル)-ピペリジン-2,6-ジオンの推奨される1日投与量の範囲は、好ましくは1日1回投与量として、又は1日を通じて分割量で投与される、1日当たり約1mg〜約50mgの範囲内に収まる。具体的な1日当たりの投与量は、1日当たり1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、39、40、41、42、43、44、45、46、47、48、49又は50mgを含む。
【０１４１】
具体的な実施態様において、3-(4-アミノ-1-オキソ-1,3-ジヒドロ-イソインドール-2-イル)-ピペリジン-2,6-ジオンの推奨される初回量は、1日当たり10mg又は25mgであってよい。この投与量は、15、20、25、30、35、40、45及び50mg/日まで増量することができる。具体的な実施態様において、本化合物は、NHL(例えばDLBCL)患者へ約25mg/日の量で投与することができる。特定の実施態様において、本化合物は、NHL(例えばDLBCL)患者へ約10mg/日の量で投与することができる。
【０１４２】
(5.5  第二の活性薬との併用療法)
本発明の具体的な方法は、3-(4-アミノ-1-オキソ-1,3-ジヒドロ-イソインドール-2-イル)-ピペリジン-2,6-ジオン、又はその医薬として許容し得る塩若しくは溶媒和物(例えば水和物)を、1種以上の第二の活性薬と組み合わせて、及び/又は放射線療法、輸血、若しくは外科手術と組み合わせて投与することを含む。第二の活性薬の例が、本明細書に記載されている。
【０１４３】
3-(4-アミノ-1-オキソ-1,3-ジヒドロ-イソインドール-2-イル)-ピペリジン-2,6-ジオン及び第二の活性薬の患者への投与は、同一又は異なる投与経路によって同時に又は順次に起こり得る。特定の活性薬に採用される特定の投与経路の適性は、活性薬そのもの(例えば、血流に入る前に分解することなく経口投与できるかどうか)及び治療されている癌に依存することになる。3-(4-アミノ-1-オキソ-1,3-ジヒドロ-イソインドール-2-イル)-ピペリジン-2,6-ジオンの好ましい投与経路は、経口である。本発明の第二の活性薬又は成分の好ましい投与経路は、当業者に公知である。例えば、米医師用医薬便覧(Physician's Desk Reference)、1755-1760(第56版、2002)を参照。
【０１４４】
一実施態様において、第二の活性薬を約1〜約1000mg、約5〜約500mg、約10〜約350mg、或いは約50〜約200mgの量で1日に1回又は2回、経口、静脈内又は皮下投与する。第二の活性薬の具体的な量は、使用される具体的な薬剤、治療又は管理されている癌のタイプ、癌の重度及び病期、並びに3-(4-アミノ-1-オキソ-1,3-ジヒドロ-イソインドール-2-イル)-ピペリジン-2,6-ジオン及び現在患者に投与されている任意の追加的な活性薬の量に依存することになる。
【０１４５】
一実施態様において、3-(4-アミノ-1-オキソ-1,3-ジヒドロ-イソインドール-2-イル)-ピペリジン-2,6-ジオンは、NHL(例えばDLBCL)患者へ、自家末梢血前駆細胞の移植前、移植時又は移植後に、投与される。
【０１４６】
別の実施態様において、3-(4-アミノ-1-オキソ-1,3-ジヒドロ-イソインドール-2-イル)-ピペリジン-2,6-ジオンは、NHL(例えばDLBCL)患者へ、幹細胞移植後に、投与される。
【０１４７】
(5.6  周期的治療)
いくつかの実施態様において、本発明の治療薬をNHL(例えばDLBCL)患者に周期的に投与する。周期的治療は、活性薬を一定期間にわたって投与した後に、一定期間にわたって休薬し、この順次的な投与を繰り返すことを含む。周期的治療は、1種以上の療法に対する抵抗の発生を抑えること、療法の1つの副作用を回避若しくは軽減すること、及び/又は治療の効力を向上させることができる。
【０１４８】
結果として、本発明の一つの具体的実施態様において、3-(4-アミノ-1-オキソ-1,3-ジヒドロ-イソインドール-2-イル)-ピペリジン-2,6-ジオンを、約1週間又は2週間の休薬期間を含む4〜6週周期で、単回投与量又は分割投与量で毎日投与する。本発明は、更に、投与周期の頻度、回数及び長さを増加させることが可能である。従って、本発明の別の具体的実施態様は、単独で投与される場合に典型的な周期より多くの周期にわたって3-(4-アミノ-1-オキソ-1,3-ジヒドロ-イソインドール-2-イル)-ピペリジン-2,6-ジオンを投与することを含む。更に別の本発明の具体的実施態様において、3-(4-アミノ-1-オキソ-1,3-ジヒドロ-イソインドール-2-イル)-ピペリジン-2,6-ジオンを、同じく第二の活性成分が投与されていない患者において投与量を制限する毒性を典型的に引き起こすことになる周期よりも、より多数の周期にわたって投与する。
【０１４９】
一実施態様において、本発明の3-(4-アミノ-1-オキソ-1,3-ジヒドロ-イソインドール-2-イル)-ピペリジン-2,6-ジオンを、約5〜約50mg/日の投与量で3又は4週間にわたって毎日及び継続的に投与した後に、1又は2週間休薬して、NHL(例えばDLBCL)患者へ投与する。一実施態様において、3-(4-アミノ-1-オキソ-1,3-ジヒドロ-イソインドール-2-イル)-ピペリジン-2,6-ジオンを、約5、10、15、20、25、30、50mg/日の量で、NHL(例えばDLBCL)患者へ投与する。3-(4-アミノ-1-オキソ-1,3-ジヒドロ-イソインドール-2-イル)-ピペリジン-2,6-ジオンは、初回量5mg/日で、療法が忍容される限りは最大量50mg/日まで増加して、NHL(例えばDLBCL)患者へ投与することが好ましい。特定の実施態様において、本化合物は、約10、又は25mg/日の量で、好ましくは約25mg/日の量で、3又は4週間投与し、それに続き1又は2週間休薬する、4又は6週周期でNHL(例えばDLBCL)患者へ投与する。
【０１５０】
本発明の一実施態様において、3-(4-アミノ-1-オキソ-1,3-ジヒドロ-イソインドール-2-イル)-ピペリジン-2,6-ジオン及び第二の活性成分を、経口により、4〜6週間の周期を通じてNHL(例えばDLBCL)患者へ投与する。本発明の別の実施態様において、3-(4-アミノ-1-オキソ-1,3-ジヒドロ-イソインドール-2-イル)-ピペリジン-2,6-ジオンを経口的にNHL(例えばDLBCL)患者へ投与し、且つ第二の活性成分を周期毎に約90分間にわたる静脈内注入によって投与する。
【０１５１】
具体的実施態様において、一周期は、3-(4-アミノ-1-オキソ-1,3-ジヒドロ-イソインドール-2-イル)-ピペリジン-2,6-ジオンの約25mg/日から、及び第二の活性成分の約50から約200mg/m2/日までの、毎日3〜4週間のNHL(例えばDLBCL)患者への投与、その後の1又は2週間の休薬を含む。別の具体的実施態様において、各周期は、3-(4-アミノ-1-オキソ-1,3-ジヒドロ-イソインドール-2-イル)-ピペリジン-2,6-ジオンの約5から約50mg/日まで、及び第二の活性成分の約50から約200mg/m2/日までを3〜4週間、NHL(例えばDLBCL)患者への投与、それに続く1又は2週間の休薬を含む。典型的には、併用治療を患者に投与する期間の周期の数は、約1〜約24周期、より典型的には約2〜約16周期、及び更により典型的には約4〜約8周期になる。
【０１５２】
一実施態様において、3-(4-アミノ-オキソ-1,3-ジヒドロ-イソインドール-2-イル)-ピペリジン-2,6-ジオンは、疾患(腫瘍)組織量値が50cm2未満であり、リンパ球絶対数が0.6×109/Lよりも大きく、最後のリツキシマブ療法から少なくとも230日経過した、様々な型のリンパ腫(例えばNHL又はDLBCL)の患者へ、1日当たり約10mg、15mg、20mg、25mg又は30mgの量で21日間投薬、それに続く7日間の休薬という28日周期で、投与する。
【０１５３】
一実施態様において、3-(4-アミノ-オキソ-1,3-ジヒドロ-イソインドール-2-イル)-ピペリジン-2,6-ジオンは、予後因子の値が好ましい、難治性又は再発性の侵襲性のNHL(例えばDLBCL)患者へ、1日当たり約25mgの量で21日間投薬、それに続く7日間の休薬という28日周期で、投与する。
【０１５４】
(5.7  医薬組成物)
医薬組成物を個々の単一単位剤形の調製に使用することができる。本明細書で提供する医薬組成物及び剤形は、化合物、又はその医薬として許容し得る塩、溶媒和物、水和物、立体異性体、包接化合物又はプロドラッグを含有する。本明細書に提供する医薬組成物及び剤形は、1種以上の賦形剤を更に含有することができる。
【０１５５】
本明細書で提供する医薬組成物及び剤形は、1つ以上の追加的な活性成分を含有することもできる。結果として、本明細書に提供する医薬組成物及び剤形は、本明細書に記載された活性成分(例えば、3-(4-アミノ-1-オキソ-1,3-ジヒドロ-イソインドール-2-イル)-ピペリジン-2,6-ジオン及び第二の活性薬)を含有する。任意の第二の活性成分又は追加的な活性成分の例が、本明細書に記載されている。
【０１５６】
単一単位剤形は、患者に対する経口投与、粘膜投与(例えば、鼻投与、舌下投与、膣投与、口腔内投与又は直腸投与)、非経口投与(例えば、皮下投与、静脈内投与、ボーラス注射、筋肉内投与又は動脈内投与)、局所投与(例えば、点眼薬又は他の眼科製剤)、経真皮(transdermal)又は経皮(transcutaneous)投与に好適である。剤形の例としては、錠剤；カプレット剤；軟弾性ゼラチンカプセル剤などのカプセル剤；カシェ剤；トローチ剤；舐剤；分散剤；坐剤；散剤；エアロゾル剤(例えば、鼻スプレー剤又は吸入剤)；ゲル剤；懸濁剤(例えば、水性若しくは非水性液体懸濁剤、水中油型エマルジョン剤又は油中水液体型エマルジョン剤)、液剤及びエリキシル剤を含む、患者に対する経口又は粘膜投与に好適な液体剤形；患者に対する非経口投与に好適な液体剤形；局所投与に好適な点眼薬又は他の眼科製剤；並びに、患者に対する非経口投与に好適な液体剤形を提供するために再構成することができる無菌固体(例えば、結晶又は非晶質の固体)が挙げられるが、それらに限定されない。
【０１５７】
本明細書に提供する剤形の組成、形状及び種類は、典型的には、それらの用途に応じて異なることになる。例えば、疾患の急性治療に使用される剤形は、同じ疾患の慢性治療に使用される剤形より多くの量の1種以上の活性成分を含むことができる。同様に、非経口剤形は、同じ疾患を治療するのに使用される経口剤形より少ない量の1種以上の活性成分を含むことができる。具体的な剤形が本明細書に提供されるこれら及び他の様式がそれぞれ異なることは、当業者に容易に理解されるであろう。例えば、「レミントンの薬科学(Remington's Pharmaceutical Sciences)」、第18版、Mack Publishing社、イーストン、PA、(1990)参照。
【０１５８】
典型的医薬組成物及び剤形は、1つ以上の賦形剤を含む。好適な賦形剤は、製薬分野の業者によく知られており、好適な賦形剤の非限定的な例を本明細書に提示する。特定の賦形剤が医薬組成物又は剤形への導入に好適であるかどうかは、剤形が患者に投与されることになる様式を含むが、それに限定されない、当該技術分野において周知の様々な要因に依存する。例えば、錠剤などの経口剤形は、非経口剤形に使用するのに適さない賦形剤を含むことができる。特定の賦形剤の適性は、剤形における具体的な活性成分にも依存し得る。例えば、いくつかの活性成分の分解を乳糖などのいくつかの賦形剤によって、又は水に曝したときに加速させることができる。第一級又は第二級アミンを含む活性成分は、そのような加速的分解を特に生じやすい。結果として、存在していても非常に少量の乳糖及び他の単糖類又は二糖類を含む医薬組成物及び剤形を本明細書に提供する。本明細書に用いるように、「乳糖非含有」という用語は、存在していても、存在する乳糖の量が、活性成分の分解速度を実質的に上昇させるのに不十分であることを意味する。
【０１５９】
本明細書に提供する乳糖非含有組成物は、当該技術分野でよく知られており、例えば、米国薬局方(USP)(25-NF20(2002))に収載されている賦形剤を含むことができる。概して、乳糖非含有組成物は、活性成分、結合剤/充填剤、及び滑沢剤を医薬として適合し得る量及び医薬として許容し得る量で含む。一実施態様において、乳糖非含有剤形は、活性成分、微晶質セルロース、α化デンプン及びステアリン酸マグネシウムを含む。
【０１６０】
水は、いくつかの化合物の分解を促進し得るため、活性成分を含む無水医薬組成物及び剤形も本明細書に提供する。例えば、水の添加(例えば5％)は、経時的な製剤の保存寿命又は安定性などの特性を決定するために、長期貯蔵をシミュレートする手段として医薬技術分野で広く許容されている。例えば、Jens T. Carstensenの文献、「薬物安定性:原理と実践(Drug Stability:Principles & Practice)」、第2版、Marcel Dekker社、ニューヨーク、NY、1995、379〜380頁を参照。実際、水及び熱は、いくつかの化合物の分解を加速させる。従って、水分及び/又は湿分は、製剤の製造時、取り扱い時、梱包時、保管時、出荷時及び使用時に広く発生するので、製剤に対する水の影響は、甚大であり得る。
【０１６１】
無水又は低水分含有成分及び低水分又は低湿条件を用いて、無水医薬組成物及び剤形を調製することができる。乳糖及び第一級アミン又は第二級アミンを含む少なくとも1つの活性成分を含む医薬組成物及び剤形は、製造時、梱包時及び/又は保管時における水分及び/又は湿分との実質的な接触が想定される場合は、無水であることが好ましい。
【０１６２】
無水医薬組成物は、その無水性が維持されるように調製、保管されるべきである。よって、好ましくは、無水組成物を好適な処方キットに含めることができるように、水への曝露を防止することが知られている材料を使用して、無水組成物を梱包する。好適な梱包材料の例としては、気密密閉箔、プラスチック、単位投与容器(例えば、バイアル)、ブリスターパック及びストリップパックが挙げられるが、それらに限定されない。
【０１６３】
活性成分が分解することになる速度を低下させる1つ以上の化合物を含む医薬組成物及び剤形を更に本明細書に提供する。本明細書で「安定剤」と称する当該化合物としては、アスコルビン酸などの酸化防止剤、pH緩衝剤又は塩緩衝剤が挙げられるが、それらに限定されない。
【０１６４】
賦形剤の量及び種類のように、剤形における活性成分の量及び具体的な種類は、それが患者に投与される経路などの(但し、それに限定されない)要因に応じて異なり得る。しかし、本発明の典型的剤形は、化合物、又はその医薬として許容し得る塩、溶媒和物、水和物、立体異性体、包接化合物、若しくはプロドラッグを、約0.10〜約150mgの量で含む。典型的剤形は、化合物、又はその医薬として許容し得る塩、溶媒和物、水和物、立体異性体、包接化合物、若しくはプロドラッグを、約5、7.5、10、12.5、15、17.5、20、25、又は50mgの量で含む。特定の実施態様において、好ましい剤形は、3-(4-アミノ-1-オキソ-1,3-ジヒドロ-イソインドール-2-イル)-ピペリジン-2,6-ジオンを、約5、10、20、25又は50mgの量で含む。具体的な実施態様において、好ましい剤形は、3-(4-アミノ-1-オキソ-1,3-ジヒドロ-イソインドール-2-イル)-ピペリジン-2,6-ジオンを、約5、10、又は25mgの量で含む。典型的剤形は、第二の活性成分を、1〜約1000mg、約5〜約500mg、約10〜約350mg、又は約50〜約200mgの量で含む。当然、該抗癌剤の具体的量は、使用される具体的な薬剤、治療又は管理される癌の型、並びに3-(4-アミノ-1-オキソ-1,3-ジヒドロ-イソインドール-2-イル)-ピペリジン-2,6-ジオン及び患者に同時に投与される任意の追加的な活性薬の量に依存することになる。
【０１６５】
(5.8  経口剤形)
経口投与に好適な医薬組成物を、錠剤(例えば、咀嚼錠剤)、カプレット剤、カプセル剤及び液剤(例えば、香味シロップ)などの(但し、それらに限定されない)個別的剤形として提供することができる。当該剤形は、所定量の活性成分を含み、当業者に周知の製薬方法によって調製され得る。全般的に、「レミントンの薬科学(Remington's Pharmaceutical Sciences)」、第18版、Mack Publishing社、イーストン、PA、(1990)参照。
【０１６６】
典型的経口剤形は、従来の医薬配合技術に従って、活性成分を少なくとも1つの賦形剤と十分に混合し組み合わせることによって調製される。賦形剤は、投与に望ましい形の製剤に応じて広範な形をとることができる。例えば、経口液剤又はエアロゾル剤形における使用に好適な賦形剤としては、水、グリコール、油、アルコール、香味料、防腐剤及び着色剤が挙げられるが、それらに限定されない。固体の経口剤形(例えば、散剤、錠剤、カプセル剤及びカプレット剤)における使用に好適な賦形剤の例としては、デンプン、糖、微晶質セルロース、希釈剤、造粒剤、滑沢剤、結合剤及び崩壊剤が挙げられるが、それらに限定されない。
【０１６７】
錠剤及びカプセル剤の投与の容易さのために、これらは最も利点のある経口単位剤形を表し、その場合は固体賦形剤が採用される。望ましいならば、標準的な水性又は非水性技術によって錠剤にコーティングすることができる。当該剤形を製薬方法のいずれかによって調製することができる。概して、活性成分を液体担体、微細固体担体又はその両方と均一且つ十分に混合し、次いで必要に応じて生成物を所望の外形(presentation)に成形することによって医薬組成物及び剤形を調製する。
【０１６８】
例えば、錠剤を圧縮又は成形によって調製することができる。賦形剤と任意に混合された、粉末又は顆粒などの自由流動形の活性成分を好適な装置で圧縮することによって圧縮錠剤を調製することができる。不活性液体希釈剤で加湿された粉末化化合物の混合物を好適な装置で成形することによって成形錠剤を製造することができる。
【０１６９】
本明細書で提供する経口剤形に使用できる賦形剤の例としては、結合剤、充填剤、崩壊剤及び滑沢剤が挙げられるが、それらに限定されない。医薬組成物及び剤形における使用に好適な結合剤としては、トウモロコシデンプン、ジャガイモデンプン、又は他のデンプン、ゼラチン、アカシア、アルギン酸ナトリウム、アルギン酸、他のアルギン酸塩、トラガカント末、グアーゴムなどの天然及び合成ゴム、セルロース及びその誘導体(例えば、エチルセルロース、酢酸セルロース、カルボキシメチルセルロースカルシウム、カルボキシメチルセルロースナトリウム)、ポリビニルピロリドン、メチルセルロース、アルファ化デンプン、ヒドロキシプロピルメチルセルロース(例えば、2208、2906、2910番)、微晶質セルロース及びそれらの混合物が挙げられるが、それらに限定されない。
【０１７０】
微晶質セルロースの好適な形としては、AVICEL-PH-101、AVICEL-PH-103 AVICEL RC-581、A VICEL-PH-105(FMC社、American Viscose Division、Avicel Sales、Marcus Hook、PAから入手可能)として販売されている材料及びそれらの混合物が挙げられるが、それらに限定されない。具体的な結合剤は、AVICEL RC-581として販売されている微晶質セルロースとカルボキシメチルセルロースナトリウムの混合物である。好適な無水又は低水分賦形剤又は添加剤としては、AVICEL-PH-103(商標)及びデンプン1500LMが挙げられる。
【０１７１】
本明細書に記載の医薬組成物及び剤形における使用に好適な充填剤の例としては、タルク、炭酸カルシウム(例えば、顆粒又は粉末)、微晶質セルロース、粉末化セルロース、デキストレート、カオリン、マンニトール、珪酸、ソルビトール、デンプン、アルファ化デンプン及びそれらの混合物が挙げられるが、それらに限定されない。本発明の医薬組成物における結合剤又は充填剤は、典型的には、医薬組成物又は剤形の約50〜約99重量％で存在する。
【０１７２】
水性環境に曝されると崩壊する錠剤を提供するために、組成物に崩壊剤を使用することができる。多すぎる崩壊剤を含む錠剤は、保管中に崩壊する恐れがあり、少なすぎる崩壊剤を含む錠剤は、所望の速度又は所望の条件下で崩壊しないことがある。従って、活性成分の放出に悪影響を与えるほど多すぎることもなく、少なすぎることもない十分量の崩壊剤を使用して、固体経口剤形を形成することができる。使用される崩壊剤の量は、製剤のタイプに応じて異なり、当業者にとって容易に区別可能である。典型的医薬組成物は、約0.5〜約15重量％の崩壊剤、好ましくは約1〜約5重量％の崩壊剤を含む。
【０１７３】
医薬組成物及び剤形に使用できる崩壊剤としては、アガーアガー、アルギン酸、炭酸カルシウム、微晶質セルロース、クロスカルメロースナトリウム、クロスポビドン、ポラクリリンカリウム、グリコール酸ナトリウムデンプン、ジャガイモ又はタピオカデンプン、他のデンプン、アルファ化デンプン、他のデンプン、クレー、他のアルギン、他のセルロース、ゴム及びそれらの混合物が挙げられるが、それらに限定されない。
【０１７４】
医薬組成物及び剤形に使用できる滑沢剤としては、ステアリン酸カルシウム、ステアリン酸マグネシウム、鉱油、軽質鉱油、グリセリン、ソルビトール、マンニトール、ポリエチレングリコール、他のグリコール、ステアリン酸、ラウリル硫酸ナトリウム、タルク、硬化植物油(例えば、ピーナッツ油、綿実油、ヒマワリ油、ゴマ油、オリーブ油、トウモロコシ油及び大豆油)、ステアリン酸亜鉛、オレイン酸エチル、ラウリル酸エチル、寒天、及びそれらの混合物が挙げられるが、それらに限定されない。追加の滑沢剤としては、例えば、サイロイドシリカゲル(W.R.Grace社(ボルチモア、MD)製AEROSIL200)、合成シリカの凝集エアロゾル(Degussa社(プラノ、TX)が販売)、CAB-O-SIL(Cabot社(ボストン、MA)が販売するパイロジェン性二酸化珪素の製品)及びそれらの混合物が挙げられる。仮にも滑沢剤を使用するのであれば、滑沢剤は典型的には、それらが組み込まれる医薬組成物又は剤形の約1重量％未満の量で使用される。
【０１７５】
一実施態様において、本発明の固体経口剤形は、3-(4-アミノ-1-オキソ-1,3-ジヒドロ-イソインドール-2-イル)-ピペリジン-2,6-ジオン、無水乳糖、微晶質セルロース、ポリビニルピロリドン、ステアリン酸、コロイド無水シリカ及びゼラチンを含む。
【０１７６】
(5.9  制御放出剤形)
活性成分を制御放出手段によって、又は当業者に周知の送達デバイスによって投与することができる。例としては、それぞれ引用により本明細書中に組み込まれている、米国特許第3,845,770号；第3,916,899号；第3,536,809号；第3,598,123号；及び、第4,008,719号、第5,674,533号、第5,059,595号、第5,591,767号、第5,120,548号、第5,073,543号、第5,639,476号、第5,354,556号、及び第5,733,566号に記載されているものが挙げられるが、それらに限定されない。例えば、異なる割合で所望の放出プロファイルを与えるために、ヒドロプロピルメチルセルロース、他のポリマーマトリックス、ゲル、浸透膜、浸透圧システム、多層コーティング、微粒子、リポソーム、ミクロスフェア又はそれらの組み合わせを使用して、1つ以上の活性成分を遅延放出又は制御放出するために当該剤形を使用することができる。本明細書に記載されているものを含む、当業者に知られている好適な制御放出製剤を本明細書で提供する活性薬との使用に向けて容易に選択することができる。従って、制御放出に適合された錠剤、カプセル剤、ゲルカップ剤及びカプレット剤などの(但し、それらに限定されない)経口投与に好適な単一単位剤形を本明細書に提供する。
【０１７７】
全ての制御放出医薬品は、それらの非制御医薬品によって達成されるものよりも薬物治療を向上させるという共通の目標がある。理想的には、医薬治療における最適に設計された制御放出製剤の使用は、最小限の医薬物質を使用して、最小限の時間で状態を治癒又は制御することを特徴とする。制御放出製剤の利点としては、薬物の活性の拡大、投与頻度の減少、及び患者服薬遵守の向上が挙げられる。加えて、制御放出製剤を使用して、作用の発生時間、又は薬物の血液レベルなどの他の特性に影響を与えることができ、結果として副作用(例えば、有害作用)の発生に影響を与えることができる。
【０１７８】
ほとんどの制御放出製剤は、所望の治療効果を即座にもたらす量の薬物(活性成分)を最初に放出し、且つ長時間にわたってこのレベルの治療又は予防効果を維持するための他の量の薬物を徐々に且つ連続的に放出するように設計される。一定レベルの薬物を身体内に維持するためには、代謝して、身体から排泄される量の薬物に取って代わる速度で薬物を剤形から放出しなければならない。活性成分の制御放出を、pH、温度、酵素、水若しくは他の生理的条件又は化合物を含むが、それらに限定されない様々な条件によって刺激することができる。
【０１７９】
(5.10  非経口剤形)
非経口剤形を、皮下、静脈内(ボーラス注射を含む)、筋肉内及び動脈内を含むが、それらに限定されない様々な経路によって患者に投与することができる。非経口剤形の投与は典型的には、夾雑物に対する患者の自然防御を回避するので、非経口剤形は、無菌であるか、又は患者に投与する前に滅菌が可能であることが好ましい。非経口剤形の例としては、注射にそのまま利用可能な溶液、注射のための医薬として許容し得る媒体にすぐ溶解又は懸濁することができる乾燥品、注射にそのまま利用可能な懸濁液、及びエマルジョンが挙げられるが、それらに限定されない。
【０１８０】
非経口剤形を提供するのに使用できる好適な媒体は、当業者に周知である。例としては、注射用水USP；塩化ナトリウム注射液、リンゲル注射液、デキストロース注射液、デキストロース及び塩化ナトリウム注射液、並びに乳酸加リンゲル注射液などの(但し、それらに限定されない)水性媒体；エチルアルコール、ポリエチレングリコール及びポリプロピレングリコールなどの(但し、それらに限定されない)水混和性媒体；並びに、トウモロコシ油、綿実油、ピーナッツ油、ゴマ油、オレイン酸エチル、ミリスチン酸イソプロピル及び安息香酸ベンジルなどの(但し、それらに限定されない)非水性媒体が挙げられるが、それらに限定されない。
【０１８１】
本明細書に開示されている活性成分の1種以上の溶解性を向上させる化合物を、本明細書に提供する非経口剤形に組み込むこともできる。例えば、シクロデキストリン及びその誘導体を使用して、化合物及びその誘導体の溶解性を向上させることができる。例えば、引用により本明細書中に組み込まれている、米国特許第5,134,127号参照。
【０１８２】
(5.11  局所及び粘膜剤形)
本明細書で提供する局所剤形及び粘膜剤形としては、スプレー剤、エアロゾル剤、液剤、エマルジョン剤、懸濁剤、点眼薬若しくは他の眼科製剤、又は当業者に公知の他の形が挙げられるが、それらに限定されない。例えば、「レミントンの薬科学(Remington's Pharmaceutical Sciences)」、第16版及び第18版、Mack Publishing社、イーストン、PA (1980及び1990)；及び「医薬剤形入門(Introduction to Pharmaceutical Dosage Forms)」、第4版、Lea & Febiger社、フィラデルフィア(1985)を参照。口腔内の粘膜組織を治療するのに好適な剤形を含嗽剤又は経口ゲルとして処方することができる。
【０１８３】
局所剤形及び粘膜剤形を提供するのに使用できる好適な賦形剤(例えば、担体及び希釈剤)並びに他の材料は、製薬技術分野の業者に周知であり、所定の医薬組成物又は剤形が適用されることになる特定の組織に依存する。その事実を考慮し、典型的賦形剤としては、無毒であり、且つ医薬として許容し得る液剤、エマルジョン剤又はゲル剤を形成するための水、アセトン、エタノール、エチレングリコール、プロピレングリコール、ブタン-1,3-ジオール、ミリスチン酸イソプロピル、パルミチン酸イソプロピル、鉱油及びそれらの混合物が挙げられるが、それらに限定されない。望ましい場合は、加湿剤又は湿潤剤を医薬組成物及び剤形に添加することもできる。そのような追加成分の例は当技術分野において周知である。例えば、「レミントンの薬科学(Remington's Pharmaceutical Sciences)」、第16版及び第18版、Mack Publishing社、イーストン、PA(1980及び1990)を参照。
【０１８４】
医薬組成物又は剤形のpHを調整して、1つ以上の活性成分の送達を向上させることもできる。同様に、溶媒担体の極性、そのイオン強度又は等張性を調整して、送達を向上させることもできる。ステアリル酸塩などの化合物を医薬組成物又は剤形に添加して、送達を向上させるのに有利に1つ以上の活性成分の親水性又は親油性を変えることもできる。これに関して、ステアリン酸塩は、製剤の脂質媒体として、乳化剤又は界面活性剤として、及び送達向上剤又は浸透向上剤として機能することができる。活性成分の異なる塩、水和物又は溶媒和物を使用して、得られる組成物の特性を更に調整することができる。
【０１８５】
(5.12  キット)
本明細書に提供する一部の実施態様において、活性成分は、同時に又は同じ投与経路で患者に投与されないことが好ましい。従って、医療実践者が使用する場合に、患者への適切な量の活性成分の投与を簡単にすることができるキットを本明細書に提供する。
【０１８６】
一実施態様において、本明細書に提供するキットは、3-(4-アミノ-1-オキソ-1,3-ジヒドロ-イソインドール-2-イル)-ピペリジン-2,6-ジオン、又はその医薬として許容し得る塩、溶媒和物若しくは水和物の剤形を含む。キットは、非限定的に、本明細書に開示されたものを含む、追加の活性薬を更に含んでよい。
【０１８７】
本明細書に提供するキットは、活性成分を投与するのに使用するデバイスを更に含んでよい。当該デバイスの例としては、シリンジ、点滴バッグ、パッチ及び吸入器が挙げられるが、それらに限定されない。
【０１８８】
キットは、移植用の細胞又は血液、並びに1つ以上の活性成分を投与するのに使用できる医薬として許容し得る媒体を更に含むことができる。例えば、非経口投与のために再構成しなければならない固体の形で活性成分を供給する場合は、キットは、その活性成分を溶解させて、非経口投与に好適な無粒子無菌溶液を形成することができる好適な媒体の密封容器を含むことができる。医薬として許容し得る媒体の例としては、注射用水USP；塩化ナトリウム注射液、リンゲル注射液、デキストロース注射液、デキストロース及び塩化ナトリウム注射液、並びに乳酸加リンゲル注射液などの(但し、それらに限定されない)水性媒体；エチルアルコール、ポリエチレングリコール及びポリプロピレングリコールなどの(但し、それらに限定されない)水混和性媒体；並びに、トウモロコシ油、綿実油、ピーナッツ油、ゴマ油、オレイン酸エチル、ミリスチン酸イソプロピル及び安息香酸ベンジルなどの(但し、それらに限定されない)非水性媒体が挙げられるが、それらに限定されない。
【実施例】
【０１８９】
(6.  実施例)
本発明のいくつかの実施態様が、以下の非限定的実施例により例証される。
(6.1  3-(4-アミノ-1-オキソ-1,3-ジヒドロ-イソインドール-2-イル)-ピペリジン-2,6-ジオンの調製)
【化３】
2013522236.tif 000005
(6.1.1  2-ブロモメチル-3-ニトロ安息香酸メチル)
四塩化炭素(200mL)中の2-メチル-3-ニトロ安息香酸メチル(14.0g, 71.7mmol)及びN-ブロモスクシンイミド(15.3g, 86.1mmol)の攪拌混合物を、2cm離して配置した100W電球でフラスコを照らしながら、15時間ゆるやかな還流下で加熱した。この混合物を濾過し、固形物を塩化メチレン(50mL)で洗浄した。濾液を、水(2×100mL)、ブライン(100mL)で洗浄し、且つ乾燥した。溶媒を真空中で除去し、残渣を、フラッシュクロマトグラフィーにより精製し(ヘキサン/酢酸エチル、8/2)、生成物19g(96％)を黄色固形物として得た：
【化４】
2013522236.tif 000006
HPLC、Water Nove-Pak/C18、3.9×150mm、4μ、1mL/分、240nm、CH3CN/0.1％H3PO4(aq)の40/60、7.27分(98.92％)；C9H8NO4Br分析の理論値：C, 39.44； H, 2.94； N, 5.11 ； Br, 29.15。実測値：C, 39.46； H, 3.00； N, 5.00； Br, 29.11。
【０１９０】
(6.1.2  N-(1-オキソ-4-ニトロイソインドリン-2-イル)-L-グルタミンt-ブチル)
トリエチルアミン(2.9g, 28.6mmol)を、テトラヒドロフラン(90mL)中の2-ブロモメチル-3-ニトロ安息香酸メチル(3.5g, 13.0mmol)及びL-グルタミンt-ブチルエステル塩酸塩(3.1g, 13.0mmol)の攪拌混合物へ滴加した。この混合物を24時間還流加熱した。この冷却した混合物へ、塩化メチレン(150mL)を添加し、混合物を水(2×40mL)、ブライン(40mL)で洗浄し、且つ乾燥した。溶媒を真空中で除去し、残渣を、フラッシュクロマトグラフィーにより精製し(塩化メチレン中3％CH3OH)、粗生成物2.84g(60％)を得、これを直接次反応で使用した：
【化５】
2013522236.tif 000007
HPLC、Waters Nova-Pak C18、3.9×150mm、4μ、1mL/分、240nm、CH3CN/0.1％H3PO4(aq)の25/75、6.75分(99.94％)。
【０１９１】
(6.1.3  N-(1-オキソ-4-ニトロイソインドリン-2-イル)-L-グルタミン)
塩化水素ガスを、塩化メチレン(60mL)中のN-(1-オキソ-4-ニトロ-イソインドリン-2-イル)-L-グルタミンt-ブチル(3.6g, 9.9mmol)の攪拌している5℃溶液中で1時間泡立てた。次にこの混合物を室温でもう1時間攪拌した。エーテル(40mL)を添加し、得られた混合物を30分間攪拌した。スラリーを濾過し、エーテルで洗浄し、乾燥し、生成物3.3gを得た：
【化６】
2013522236.tif 000008
C13H13N3O6分析の理論値： C, 50.82； H, 4.26； N, 13.68。実測値：C, 50.53； H. 4.37； N, 13.22。
【０１９２】
(6.1.4  (S)-3-(1-オキソ-4-ニトロイソインドリン-2-イル)ピペリジン-2,6-ジオン)
無水塩化メチレン(150mL)中のN-(1-オキソ-4-ニトロイソインドリン-2-イル)-L-グルタミン(3.2g, 10.5mmol)の攪拌懸濁混合物を、イソプロパノール/ドライアイス浴により-40℃まで冷却した。この冷却した混合物へ、塩化チオニル(0.82mL, 11.3mmol)、引き続きピリジン(0.9g. 11.3mmol)を滴加した。30分後、トリエチルアミン(1.2g, 11.5mmol)を添加し、この混合物を-30〜-40℃で3時間攪拌した。この混合物を氷水(200mL)へ注ぎ、水層を塩化メチレン(40mL)により抽出した。塩化メチレン溶液を、水(2×60mL)、ブライン(60mL)で洗浄し、且つ乾燥した。溶媒を真空中で除去し、固形残渣を酢酸エチル(20mL)でスラリーとし、生成物2.2g(75％)を白色固形物として得た：
【化７】
2013522236.tif 000009
HPLC、Waters Nove-Pak/C18、3.9×150mm、4μ、1mL/分、240nm、CH3CN/0.1％H3PO4(aq)の20/80、3.67分(100％)；C13HnN3O5分析の理論値：C, 53.98； H, 3.83； N, 14.53。実測値：C, 53.92； H, 3.70； N, 14.10。
【０１９３】
(6.1.5  3-(4-アミノ-1-オキソ-1,3-ジヒドロ-イソインドール-2-イル)-ピペリジン-2,6-ジオン)
メタノール(600mL)中の(S)-3-(1-オキソ-4-ニトロイソインドリン-2-イル)ピペリジン-2,6-ジオン(1.0g, 3.5mmol)及び10％Pd/C(0.3g)の混合物を、Parr-Shaker装置内で、水素50psiで5時間水素化した。この混合物をセライトを通して濾過し、濾液を真空において濃縮した。この固形物を、温酢酸エチル中で30分間かけてスラリー化し、濾過し、且つ乾燥し、生成物0.46g(51％)を白色固形物として得た：
【化８】
2013522236.tif 000010
HPLC、Waters Nova-Pak/C18、3.9×150mm、4μ、1mL/分、240nm、CH3CN/0.1％H3PO4(aq)の10/90、0.96分(100％)；キラル分析、Daicel Chiral Pak AD、ヘキサン/IPAの40/60、6.60分(99.42％)；C13H13N3O3分析の理論値：C, 60.23； H, 5.05；N, 16.21。実測値：C, 59.96； H. 4.98； N, 15.84。
【０１９４】
3-(4-アミノ-1-オキソ-1,3-ジヒドロ-イソインドール-2-イル)-ピペリジン-2,6-ジオンは、例えば、その全体が引用により本明細書中に組み込まれている文献「薬物の未来(Drugs of the Future)」、2003, 28(5): 425-431において供されるような、当該技術分野において公知の方法によっても調製することができる。
【０１９５】
(6.2  レナリドミドのインビトロにおけるDLBCL細胞増殖に対する作用)
様々な細胞遺伝学的特徴のDLBCL細胞株のパネルを、それらのレナリドミド抗増殖活性に対する感受性について試験した。図1参照。細胞を、レナリドミドにより、37℃で5日間処理し；細胞の増殖を、3H-チミジン取り込み法を用いて測定した。3回の独立した実験の結果を示している(平均±SD)。0.1〜1μMで開始するレナリドミドは、DLBCL細胞のいくつかの系列、特にRiva細胞、U2932細胞、TMD8細胞及びOCI-Ly10細胞などのABC亜型細胞の増殖を有意に阻害した(p＜0.05)。ABC亜型細胞は、GCB-DLBCL細胞及びPMBL細胞を含む他の亜型細胞よりも、抗増殖作用に対しより感受性があるように見える。
【０１９６】
(6.3  DLBCL細胞におけるベースライン癌遺伝子発現レベルのリアル-タイム定量的逆転写-ポリメラーゼ連鎖反応分析)
遺伝子発現分析を、DLBCL細胞株のパネルについて行った。図2A〜2D参照。自動化されたQiaCube(商標)システム(Qiagen社、バレンシア、CA)においてRNeasy(登録商標)ミニキットにより、総RNAを、対数期で成長しているDLBCL細胞から精製した。25〜100ngの総RNAで、リアル-タイム定量的逆転写-ポリメラーゼ連鎖反応(RT-PCR)を、標準方法に従い逆転写キット及び関心対象の遺伝子に特異的なTaqman(登録商標)PCRプローブ(Applied Biosystems社、フォスターシティー、CA)を用いて行った。生成物の量は、標準曲線を用いて計算し、グリセルアルデヒド-3-リン酸デヒドロゲナーゼに対して正規化した。2回の独立した実験の結果を、図2に示す(平均±SD)。
【０１９７】
これらの結果は、レナリドミド感受性Riva細胞、U2932細胞、及びOCI-Ly3細胞は、SPIB(ABC亜型細胞の生存に必須の造血特異性Etsファミリー転写因子)の過剰発現、GCB亜型細胞よりもより高い構成性IRF4/MUM1発現、3-トリソミーによりアップレギュレートされたより高い構成性FOXP1発現、及びより高い構成性Blimp1(PRDM1としても公知)の発現などの、いくつかの典型的ABC亜型DLBCLの特徴を示すことを明らかにしている。これらの結果は、レナリドミドは、ABC亜型のDLBCL患者においてより大きい可能性の効力を有し得ることを示唆している。従って、ABC-DLBCL細胞のこれらのマーカーの遺伝子発現分析は、レナリドミドに対するDLBCLの感受性を予測することができる。
【０１９８】
(6.4  DLBCLにおけるレナリドミド療法前及び療法時のNF-κB活性)
NF-κB活性を、対数期で増殖している細胞からの核抽出物を用い、Active Motif転写因子アッセイにより、DLBCL細胞株のパネルにおいて試験した。3回の独立した実験の結果を示している(平均±SD)。図3参照。これらの結果は、レナリドミド感受性ABC-DLBCL細胞(Riva、U2932、及びOCI-Ly10)は、非ABC型のDLBCL細胞(DB、OCI-Ly19、SUDHL4及びWSU-DLCL2など)よりも、はるかに高い活性を示すことを示唆している。
【０１９９】
臨床的に達成可能な濃度であるレナリドミド1μMでのDLBCL細胞への抗増殖作用と、ベースラインNF-κB p50活性の間の相関は、ピアソンの両側相関分析法により決定した。有意な(p＜0.001)相関が、これらのDLBCL細胞株におけるレナリドミドの抗増殖活性と、NF-κB活性、特にp50サブユニットのベースラインレベルの間で認められた。図4参照。
【０２００】
(6.5  レナリドミドのDLBCL細胞におけるNF-κB活性に対する阻害作用)
DLBCL細胞を、レナリドミド又はIKK1/2二重阻害薬(陽性阻害薬対照として使用)により、2日間処理した。処理後、NF-κB活性を、細胞からの核抽出物を用い、Active Motif転写因子アッセイにより、試験した。3〜4回の独立した実験の結果を、図5に示す(平均±SD)。臨床的に達成可能な濃度であるレナリドミド1μMは、NF-κBのp65活性(p＜0.001)及びp50活性(p＜0.05)を有意に阻害する。レナリドミドは、U2932細胞などの、一部のDLBCL系列のABC亜型において、NF-κB活性を阻害することがわかった。
【０２０１】
前記結果は、NF-κBシグナル伝達に対する作用は、ABC-DLBCL細胞に対するレナリドミドの抗増殖活性に関与し得ること、及びベースラインNF-κB活性は、レナリドミド療法におけるリンパ腫腫瘍反応の予測的バイオマーカーであり得ることを示唆している。
【０２０２】
表1は、レナリドミドは、いくつかのABC細胞株(例えば、U2392、RIVA、TMD8及びOCI-Ly10)においてNF-κB活性及び増殖を有意に阻害するが、OCI-Ly3又はPBML(KARPS-1160p)においては阻害しないことを明らかにするデータを示している。
【０２０３】
【表１】
2013522236.tif 000011
【０２０４】
表2は、DLBCL細胞亜型におけるレナリドミド効力に関する可能性のある予測因子を示している。
【０２０５】
【表２】
2013522236.tif 000012
【０２０６】
(6.6  OCI-Ly10細胞亜型に関するインビボマウス異種移植片モデル)
OCI0Ly10細胞亜型に対するレナリドミドの有効性を、インビボマウス異種移植片モデルにおいて調べた。6〜12週齢の雌のCB.17 SCIDマウスに、100％Matrigel中の1×107個OCI-Ly10腫瘍細胞の約0.2mL/マウスを、脇腹に皮下注射した。一旦腫瘍が平均サイズ100〜150mgに達したならば、レナリドミド処置を開始した。体重を5/2、その後試験の終了時まで隔週(biweekly)に測定した。腫瘍のキャリーパー測定を、隔週で行った。本試験のエンドポイントは、腫瘍増殖遅延(TGD)であった。TGD率(％TGD)を計算した。動物は、個別にモニタリングした。本試験のエンドポイントは、腫瘍容積約1000m3、又は60日間の、いずれか先に生じたものであった。療法に対する反応は、より長期に追跡することができる。この処置計画を下記表3に示す。
【０２０７】
腫瘍の収集：RNAse非存在環境中に腫瘍を収集する(3部分に分割して)。第1部分は、その後のタンパク質解析のために、粉末として瞬間凍結することにより保存し、-80℃の条件で発送した。第2部分は、後にRNA中に保存し、瞬間凍結し、-80℃の条件で発送した。第3部分は、ホルマリン中に24時間、その後70％エタノール中に保存し、パラフィン包埋のために室温でPAIへ発送した。
【０２０８】
【表３】
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【０２０９】
前述のことより、具体的実施態様が例証を目的として本明細書において説明されているが、本明細書に提供するものの精神及び範囲から逸脱することなく、様々な変更を行ってよいことは、理解されるであろう。先に引用された参考文献は全て、それらの全体が引用により本明細書中に組み込まれている。
【図１】
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【図２Ａ】
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【図２Ｂ】
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【図２Ｃ】
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【図２Ｄ】
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【図３Ａ】
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【図３Ｂ】
2013522236.tif 000021
【図４】
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【図５Ａ】
2013522236.tif 000023
【図５Ｂ】
2013522236.tif 000024
【図６】
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【国際調査報告】
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2013522236.tif 000027
2013522236.tif 000028
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