(57)【要約】  ３-ベータ-ヒドロキシ-５-アルファ-プレグナン-２０-オン、少なくとも一のそのステロール又はエステルと、２５℃で約５％未満、３７℃で約０％の固形脂肪含有量を有するアシルグリセロール類の混合物とを含有する薬学的組成物を提供する。さらに、薬学的組成物を調製するための方法を提供する。【特許請求の範囲】
【請求項１】
３-ベータ-ヒドロキシ-５-アルファ-プレグナン-２０-オン、少なくとも一のそのステロール又はエステルと、２５℃で約５％未満、３７℃で約０％の固形脂肪含有量を有するアシルグリセロール類の混合物を含有する薬学的組成物。
【請求項２】
ステロールが、コレステロール、ベータ-シトステロール、スチグマステロール、ブラシカステロール及びアベナステロールからなる群から選択される、請求項１に記載の薬学的組成物。
【請求項３】
ステロールがコレステロールである、請求項２に記載の薬学的組成物。
【請求項４】
アシルグリセロール類の混合物が植物性油である、請求項１から３のいずれか一項に記載の薬学的組成物。
【請求項５】
植物性油が、ゴマ油、ピーナッツ油、オリーブ油、及びヒマシ油からなる群から選択される、請求項４に記載の薬学的組成物。
【請求項６】
アシルグリセロール類の混合物が中鎖アシルグリセロールである、請求項１から３のいずれか一項に記載の薬学的組成物。
【請求項７】
３-ベータ-ヒドロキシ-５-アルファ-プレグナン-２０-オンが本質的に溶解している、請求項１から６のいずれか一項に記載の薬学的組成物。
【請求項８】
３-ベータ-ヒドロキシ-５-アルファ-プレグナン-２０-オンの懸濁液を含む、請求項１から６のいずれか一項に記載の薬学的組成物。
【請求項９】
非経口投与のための、請求項１から８のいずれか一項に記載の薬学的組成物。
【請求項１０】
経口投与のための、請求項１から８のいずれか一項に記載の薬学的組成物。
【請求項１１】
経膣投与のための、請求項１から８のいずれか一項に記載の薬学的組成物。
【請求項１２】
経鼻投与のための、請求項１から８のいずれか一項に記載の薬学的組成物。
【請求項１３】
ａ）エタノールに３-ベータ-ヒドロキシ-５-アルファ-プレグナン-２０-オンを溶解させ、
ｂ）２５℃で約５％未満、３７℃で約０％の固形脂肪含有量を有するアシルグリセロール類の混合物と、ステロール又はそのエステルを添加し、
ｃ）均質な液体が得られるまで混合し、
ｄ）エタノールを蒸発させることを含む、
請求項７に記載の薬学的組成物を調製する方法。
【請求項１４】
請求項１３に記載の方法により得ることができる薬学的組成物。
【請求項１５】
中枢神経系の病状を治療又は予防するための、請求項１から１２又は１４のいずれか一項に記載の薬学的組成物の使用。
【請求項１６】
中枢神経系の病状が、てんかん、月経周期依存性てんかん、鬱、ストレス関連性鬱、片頭痛、疲労、特にストレス関連性疲労、月経前症候群、月経前不快気分障害、月経周期関連性気分変動、ストレス関連性記憶変化、月経周期関連性記憶変化、アルツハイマー型認知症、月経周期関連性の集中困難、月経周期関連性睡眠障害及び疲労、物質乱用、月経周期関連性アルコール依存症、経口避妊薬及び閉経後治療の副作用、又はその合併症からなる群から選択される、請求項１５に記載の使用。
【請求項１７】
ステロイド誘発性感覚消失の治療のための、請求項１から１２又は１４のいずれか一項に記載の薬学的組成物の使用。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、一般的に、３-ベータ-ヒドロキシ-５-アルファ-プレグナン-２０-オンの改善された製剤に関する。
【背景技術】
【０００２】
３-ベータ-ヒドロキシ-５-アルファ-プレグナン-２０-オンは、プレグナンファミリーのステロイドであり、性／ストレスステロイド誘発疾患状態の治療に適応することが示されているＧＡＢＡＡ-レセプター活性のモジュレーターである（国際公開第９９／４５９３１号）。３-ベータ-ヒドロキシ-５-アルファ-プレグナン-２０-オンは、多くの治療的に許容可能な溶媒に難溶性であり、これが患者への化合物の投与を難しくしている。
【０００３】
動物実験で、３-ベータ-ヒドロキシ-５-アルファ-プレグナン-２０-オンは、シクロデキストリンを含む製剤でラットに静脈内的に投与されている（国際公開第９９／４５９３１号）。
【０００４】
Grantら（JPET 326:354-362, 2008）は、ヒドロキシプロピルβ−シクロデキストリンを含有する製剤を使用することにより、サルに３-ベータ-ヒドロキシ-５-アルファ-プレグナン-２０-オンを投与した。
【０００５】
シクロデキストリンを含有する製剤は、ヒト患者への投与には適していない。この理由の一つは、３-ベータ-ヒドロキシ-５-アルファ-プレグナン-２０-オンの難溶性であり、製剤が、静脈的にのみ投与可能な多量の治療容量になってしまうからである。
【０００６】
３-ベータ-ヒドロキシ-５-アルファ-プレグナン-２０-オンは、水に対して難溶性であるため、この化合物の薬学的に許容可能な製剤は未だ存在していない。
【０００７】
(定義)
本出願で使用される場合、以下の用語は、他に特定されないならば、以下に特定される意味を有する。
【０００８】
「アシルグリセロール」とは、グリセロールにエステル化される全ての種類の脂肪酸及びその組合せを意味する。
【０００９】
「中鎖アシルグリセロール」とは、オクタン酸(カプリル酸)及びデカン酸(カプリン酸)の全組合せパーセンテージが少なくとも９５％であるアシルグリセロール類の混合物を意味する。
【００１０】
「固形脂肪含有量」とは、パルスＮＭＲ(核磁気共鳴)により測定される固形物のパーセンテージを意味する。
【００１１】
「室温」は、１８℃〜２５℃の温度を示す。
【００１２】
「ＵＣ１０１０」は、３-ベータ-ヒドロキシ-５-アルファ-プレグナン-２０-オンを示す。
【００１３】
「そのステロール又はエステル」は、少なくとも一のヒドロキシル基を有するステロイド類と、少なくとも一のヒドロキシル基がエステルの合成に使用されている該ステロイド類のエステルを示す。
【００１４】
ステロイド類、例えばステロール類は、通常、化合物中の炭素原子の数により記述される。よって、例えば、コレステロールはＣ２７ステロールであり、これは化合物が２７の炭素原子からなることを示している。
【００１５】
他に記載されなければ、濃度は、薬学的組成物１グラム当たりのｍｇである、ｍｇ／ｇとして記載される。
【図面の簡単な説明】
【００１６】
【図１】図１は、２通りの投与量：１ｍｇ／ｋｇ（矩形）及び５ｍｇ／ｋｇ（丸）で、コレステロールを含有するゴマ油（１：１）中の３-ベータ-ヒドロキシ-５-アルファ-プレグナン-２０-オンを皮下投与した後の、ウサギにおける３-ベータ-ヒドロキシ-５-アルファ-プレグナン-２０-オンの平均血漿中濃度(ｎｇ／ｍＬ)を示す。
【図２】図２は、コレステロール：３-ベータ-ヒドロキシ-５-アルファ-プレグナン-２０-オンの比に対する、３-ベータ-ヒドロキシ-５-アルファ-プレグナン-２０-オン懸濁液からの濾液(０．２μｍ)中の３-ベータ-ヒドロキシ-５-アルファ-プレグナン-２０-オンの濃度を示す。
【図３ａ】図３ａは、３-ベータ-ヒドロキシ-５-アルファ-プレグナン-２０-オンの懸濁液の写真を示す。
【図３ｂ】図３ｂは、３-ベータ-ヒドロキシ-５-アルファ-プレグナン-２０-オンの懸濁液の写真を示す。
【図４ａ】図４ａは、３-ベータ-ヒドロキシ-５-アルファ-プレグナン-２０-オンの懸濁液の写真を示す。
【図４ｂ】図４ｂは、３-ベータ-ヒドロキシ-５-アルファ-プレグナン-２０-オンの懸濁液の写真を示す。
【発明の概要】
【００１７】
本発明の目的は、薬学的に許容可能な担体中の３-ベータ-ヒドロキシ-５-アルファ-プレグナン-２０-オンの、改善された製剤を提供することである。
【００１８】
本発明の他の目的は、保存特性が高められた３-ベータ-ヒドロキシ-５-アルファ-プレグナン-２０-オン製剤を提供することである。
【００１９】
さらなる他の目的は、改善された薬物動態を有する３-ベータ-ヒドロキシ-５-アルファ-プレグナン-２０-オン製剤を提供することである。
【００２０】
本発明のさらなる他の目的は、薬理学的に許容可能な担体に、増大した溶解度での３-ベータ-ヒドロキシ-５-アルファ-プレグナン-２０-オンの製剤を提供することである。
【００２１】
これらの目的及び他の目的は、３-ベータ-ヒドロキシ-５-アルファ-プレグナン-２０-オン、少なくとも一のそのステロール又はエステルと、２５℃で約５％未満、３７℃で約０％の固形脂肪含有量を有するアシルグリセロール類の混合物を含有する薬学的組成物を提供する本発明の第１の一般的態様により達成される。
【００２２】
本発明の第２の一般的態様では、薬学的組成物を調製する方法が提供される。
【００２３】
本発明の第３の一般的態様では、本発明の方法で得ることができる薬学的組成物が提供される。
【００２４】
本発明の第４の一般的態様では、中枢神経系の病状を治療する薬学的組成物の使用が提供される。
【発明を実施するための形態】
【００２５】
（詳細な説明）
本発明者は、ステロールの添加により、驚くべきことに、アシルグリセロール類における３-ベータ-ヒドロキシ-５-アルファ-プレグナン-２０-オンの溶解度が増加し、薬物動態が改善されることを見出した。
【００２６】
一般的に、薬学的組成物は、３-ベータ-ヒドロキシ-５-アルファ-プレグナン-２０-オン、少なくとも一のそのステロール又はエステルと、２５℃で約５％未満、３７℃で約０％の固形脂肪含有量を有するアシルグリセロール類の混合物を含有する。
【００２７】
特に、ステロール構造の第３の炭素原子に結合したヒドロキシル基を有するステロールが本発明において有用である。ステロールはコレステロールでもベータ-シトステロールでもよいが、他のステロール類、例えばスチグマステロール、ブラシカステロール又はアベナステロール(avenasterol)を使用することもできる。特に、コレステロールが使用され得る。
【００２８】
さらに、コレステリルエステルを使用することができる。このようなエステルの例は、硫酸コレステリルナトリウム、安息香酸コレステリル、酢酸コレステリル、カプリル酸コレステリル、デカン酸コレステリル、パルミチン酸コレステリル、オレイン酸コレステリル、及びステアリン酸コレステリルである。
【００２９】
そのステロール又はエステルは、そのＣ１８-Ｃ３０ステロール又はエステル、そのＣ２１-Ｃ２７ステロール又はエステル、又はそのＣ２７-Ｃ２９ステロール又はエステルとすることができる。
【００３０】
第１の実施態様では、薬学的組成物は、３-ベータ-ヒドロキシ-５-アルファ-プレグナン-２０-オンが組成物中に本質的に溶解しているものとすることができる。よって、３-ベータ-ヒドロキシ-５-アルファ-プレグナン-２０-オンは、本発明のこの実施態様によれば、溶解又は本質的に溶解可能である。
【００３１】
この実施態様では、３-ベータ-ヒドロキシ-５-アルファ-プレグナン-２０-オンに対するステロール（又はそのエステル）の重量比は、約１：１０〜１０：１の範囲とすることができる。そのステロール又はエステルは、重量で、３-ベータ-ヒドロキシ-５-アルファ-プレグナン-２０-オンの量と同様の量、添加することができる。３-ベータ-ヒドロキシ-５-アルファ-プレグナン-２０-オンとステロールは同様の分子量を有しているため、これにより、ステロールに対し、３-ベータ-ヒドロキシ-５-アルファ-プレグナン-２０-オンがほぼ等モル量になる。
【００３２】
よって、３-ベータ-ヒドロキシ-５-アルファ-プレグナン-２０-オンに対するステロールの重量比は、１：５〜５：１の範囲にすることができる。特に、３-ベータ-ヒドロキシ-５-アルファ プレグナン-２０-オンに対するステロールの重量比は、１：３〜３：１にすることができる。
【００３３】
３-ベータ-ヒドロキシ-５ アルファ-プレグナン-２０-オンの適切な濃度は、０．１ｍｇ／ｇ〜７５ｍｇ／ｇである。また、３-ベータ-ヒドロキシ-５-アルファ プレグナン-２０-オンの濃度は、１ｍｇ／ｇ〜５０ｍｇ／ｇ、５ｍｇ／ｇ〜３０ｍｇ／ｇ、又は１０ｍｇ／ｇ〜２５ｍｇ／ｇとすることができる。
【００３４】
また、第２の実施態様では、薬学的組成物は３-ベータ-ヒドロキシ-５-アルファ-プレグナン-２０-オンの懸濁液を含む。この場合、薬学的組成物は、粒子の３-ベータ-ヒドロキシ-５-アルファ-プレグナン-２０-オンと、また組成物に溶解した３-ベータ-ヒドロキシ-５-アルファ-プレグナン-２０-オンを含有するであろう。ステロールは、ステロールを含まない懸濁液と比較して、このような懸濁液中における３-ベータ-ヒドロキシ-５-アルファ-プレグナン-２０-オンの可溶性画分を増加させる。懸濁液での一つの利点は、製剤が高濃度の３-ベータ-ヒドロキシ-５-アルファ-プレグナン-２０-オンを含むことができることである。懸濁液を含む組成物のさらなる利点は、３-ベータ-ヒドロキシ-５-アルファ-プレグナン-２０-オンのゆっくりとした放出を生じることである。
【００３５】
薬学的組成物が懸濁液を含む場合、粒子は、好ましくはマクロファージに貪食されない範囲の大きさである。マクロファージは、２−３マイクロメーターの大きさの粒子を主として貪食する（Championら, Pharm Res 2008; 25(8):1815-1821）。
【００３６】
この第２の実施態様では、３-ベータ-ヒドロキシ-５-アルファ プレグナン-２０-オンに対するステロール（又はそのエステル）の重量比は、約１：１０〜１０：１の範囲にとすることができる。３-ベータ-ヒドロキシ-５アルファ プレグナン-２０-オンに対するステロールの重量比は、１：５〜５：１の範囲とすることができる。特に、３-ベータ-ヒドロキシ-５-アルファ-プレグナン-２０-オンに対するステロールの重量比は、１：４〜３：１、又は１：３〜３：１とすることができる。
【００３７】
この第２の実施態様では、３-ベータ-ヒドロキシ-５-アルファ-プレグナン-２０-オンの適切な濃度は、０．１ｍｇ／ｇ〜７５０ｍｇ／ｇである。また、３-ベータ-ヒドロキシ-５-アルファ-プレグナン-２０-オンの濃度は、１ｍｇ／ｇ〜３００ｍｇ／ｇ、１ｍｇ／ｇ〜１００ｍｇ／ｇ、１ｍｇ／ｇ〜５０ｍｇ／ｇ、５ｍｇ／ｇ〜３０ｍｇ／ｇ、又は１０ｍｇ／ｇ〜２５ｍｇ／ｇとすることもできる。
【００３８】
以下の事項は、本発明に一般的に適用される。
一般的に、アシルグリセロール類の混合物は、２５℃で約５％未満、３７℃で約０％の固形脂肪含有量を有することを特徴とする。よって、固形脂肪含有量は、実際的な目的によっては、３７℃で０％である。固形脂肪含有量は、３７℃で最大０．０１％である。
【００３９】
アシルグリセロール類の混合物は、植物性油とすることができる。よって、ゴマ油、ピーナッツ油、オリーブ油、及びヒマシ油、及びその混合物からなる群から選択される植物性油とすることができる。
【００４０】
特に、アシルグリセロール類の混合物は、中鎖アシルグリセロール、つまり、８の炭素原子（オクタン酸）及び１０の炭素原子（デカン酸）を有する脂肪酸の組合せた全パーセンテージが少なくとも９５％であるアシルグリセロール類の混合物とすることができる。中鎖アシルグリセロールは、モノアシルグリセロール類、ジアシルグリセロール類及びトリアシルグリセロール類の様々な混合物でありうる。
【００４１】
中鎖アシルグリセロールは、約５０％〜約６５％のモノアシルグリセロール類、約２５％〜約３５％のジアシルグリセロール類、約５％未満のトリアシルグリセロール類、及び約２．５％未満のグリセロールからなりうる。このような中鎖アシルグリセロールはＡｋｏｌｉｎｅ ＭＣＭである。
【００４２】
中鎖アシルグリセロールは、少なくとも約９５％のトリアシルグリセロール類を含有するようなものとすることができる。Ａｋｏｍｅｄ Ｒ ＭＣＴは、このような中鎖アシルグリセロールの例である。
【００４３】
アシルグリセロール類の混合物は、植物性油と中鎖アシルグリセロールの混合物を含むことができる。アシルグリセロール類の混合物は、ヒマシ油と中鎖アシルグリセロールの混合物を含むことができ、ここでヒマシ油は４０重量％〜６０重量％の量で存在する。アシルグリセロール類の混合物は、約４８重量％のヒマシ油と約５２重量％の中鎖アシルグリセロールからなりうる。特に、アシルグリセロール類の混合物は、約４８重量％のヒマシ油と約５２重量％の中鎖アシルグリセロールからなりうる。
【００４４】
薬学的組成物は、当業者に知られているさらなる賦形剤、例えば酸化防止剤、保存料、界面活性剤、着色剤、香料、又は増粘剤を含有しうる。
【００４５】
薬学的組成物は、種々の手段により、患者に投与することができる。例えば、経口的、非経口的、又は局所的に投与されうる。よって、薬学的組成物は、皮下的、筋内的、静脈内的、経鼻的、経皮的又は経膣的に投与されうる。
【００４６】
本発明の第２の一般的態様では、３-ベータ-ヒドロキシ-５-アルファ-プレグナン-２０-オンの薬学的組成物を調製する方法が提供される。
【００４７】
３-ベータ-ヒドロキシ-５-アルファ-プレグナン-２０-オンが組成物に溶解又は本質的に溶解される一方法は、ａ）エタノールに３-ベータ-ヒドロキシ-５-アルファ-プレグナン-２０-オンを溶解させ、ｂ）２５℃で約５％未満、３７℃で約０％の固形脂肪含有量を有するアシルグリセロール類の混合物と、そのステロール又はエステルを添加し、ｃ）均質な液体が得られるまで混合し、ｄ）エタノールを蒸発させることを含む。
【００４８】
アシルグリセロールの混合物が、例えば中鎖アシルグリセロールのように、室温で固体又は半固体である場合、本方法は、中鎖アシルグリセロールを溶解させた後に、エタノール-薬剤調製物とそれを混合物するさらなる工程を含みうる。溶解工程により、この種のアシルグリセロールと他の成分の均質な混合が可能になる。ひとたび溶解し、他の成分と混合されると直ぐに、調製物は、少なくとも表１に示した期間に対して、液状のままである。
【００４９】
製剤が懸濁液を含む場合、製剤は、次の工程：１）アシルグリセロール類の混合物に、ステロール又はそのエステルを溶解又は懸濁させ、２）アシルグリセロール-ステロールの混合物中に３-ベータ-ヒドロキシ-５-アルファ-プレグナン-２０-オンを懸濁させ、３）穏やかに混合することを含む方法により、有利には調製される。驚くべきことに、この手順により、より小さなサイズの３-ベータ-ヒドロキシ-５-アルファ-プレグナン-２０-オンを含む懸濁粒子を生じる。
【００５０】
本発明の第３の一般的態様では、本発明の第２の態様の方法に従って得ることができる薬学的組成物が提供される。
【００５１】
本発明の第４の一般的態様では、中枢神経系の病状を治療又は予防するための、本発明の薬学的組成物の使用が提供される。
【００５２】
薬学的組成物は、中枢神経系の病状を治療又は予防するのに使用可能である。治療することができるこのような病状の例は、てんかん、月経周期依存性てんかん、鬱、ストレス関連性鬱、片頭痛、疲労、特にストレス関連性疲労、月経前症候群、月経前不快気分障害、月経周期関連性気分変動、ストレス関連性記憶変化、月経周期関連性記憶変化、アルツハイマー型認知症、月経周期関連性の集中困難、月経周期関連性睡眠障害及び疲労、物質乱用、月経周期関連性アルコール依存症、又はそれらの合併症である。
【００５３】
特に、薬学的組成物は、ステロイド誘発性気分障害、特に月経前不快気分障害の処置に使用可能である。
【００５４】
また薬学的組成物は、経口避妊薬及び閉経後治療の副作用を治療又は予防するのに使用可能である。
【００５５】
さらに薬学的組成物は、ステロイド誘発性感覚消失のコントロール又は終了に使用することもできる。
【実施例】
【００５６】
本発明を以下に非限定的実施例を用いて記載する。
３-ベータ-ヒドロキシ-５-アルファ-プレグナン-２０-オンを含有する薬学的組成物を見出すために、幾つかの異なったビヒクル及びビヒクルの組合せを評価した。３-ベータ-ヒドロキシ-５-アルファ-プレグナン-２０-オンを様々なビヒクルに溶解させ、室温での経時的な物理的安定性を目視評価した。外観に如何なる可視的変化もなく、３０日以内で、濁り(haziness)、沈殿、沈降、２以上の液状相への相分離、又は色調変化の兆候がなく、室温での保存で透明性を維持している製剤を、「安定」と考えた。
【００５７】
さらに、３-ベータ-ヒドロキシ-５-アルファ-プレグナン-２０-オンの懸濁液を含む製剤における３-ベータ-ヒドロキシ-５-アルファ-プレグナン-２０-オンの粒子サイズ及び溶解度を評価した。
【００５８】
実施例１−４９の一般的手順
次の手順を、３-ベータ-ヒドロキシ-５-アルファ-プレグナン-２０-オン-含有製剤の調製に適合させた。
【００５９】
所望の量の３-ベータ-ヒドロキシ-５-アルファ-プレグナン-２０-オンとステロール(例えばコレステロール)を、１００ｍｌ又は２５０ｍｌの丸底フラスコにおいて計量した。３-ベータ-ヒドロキシ-５-アルファ-プレグナン-２０-オンとステロールの混合物のグラム当たり約３０ｍｌの容量の無水エタノールを添加した。透明な液体が得られるまで、混合物を超音波浴(５０℃を超えない)で処理した。これは通常１０分以内に達成された。ついで、表１の「ビヒクル」の欄に示したさらなる脂質成分を２０ｇまで添加した。得られた混合物を、透明で均質な液体が得られるまで、手で穏やかに振揺した。脂質が室温で固体である場合、添加前に液体形態になるまで、超音波温浴で溶解させた。
【００６０】
以下の供給者からの化合物を使用した（括弧内に製品番号）：Sigmaのコレステロール（Ｃ８５０３）、Ａｐｏｔｅｋｅｔ、Swedenのオリーブ油及びピーナッツ油（それぞれ２６  ３６  １６及び２６  ６６  ０１）、Flukaのゴマ油（８５０６７）、及びSigmaのヒマシ油（２５９８５３）。アコメッドＲ中鎖トリアシルグリセロール（ＭＣＴ）及びアコリン中鎖モノアシルグリセロール（ＭＣＭ）は、双方とも、AarhusKarlshamns Sweden AB, Karlshamn, Swedenからのものである。
【００６１】
アルコールを、約２５ｍｂａｒの圧力、約４０℃の温度で、フラスコの重量が本質的に一定になるまで、ロータリーエバポレーターにおいて、液体から蒸発させた。残存したエタノール含有量は、本質的に１％未満であった。目的は、室温で透明な油の外観を有する液体を得ることである。ついで、油性の液体を透明なガラスバイアルに移し、評価するまで室温で保存した。
【００６２】
サンプルを、ガラスバイアル中のサンプルを観察することによって評価し、調製の１又は２日後、及び調製の３０日後に、濁り、沈殿、沈降、２又はそれ以上の液状相への相分離、又は色調変化の兆候を記録した。いくつかの場合では、他の間隔を使用した(表１に示す)。示した場合、沈殿を誘発させるために、全サンプルを冷蔵庫(２−８℃)に配した。
【００６３】
実施例１
３-ベータ-ヒドロキシ-５-アルファ-プレグナン-２０-オン(ＵＣ１０１０)(５ｍｇ／ｇ)及びピーナッツ油を、表１に示す濃度で、上述したようなエタノールを含有するエマルションに混合し、エタノールを蒸発させた。調製物の最終重量は２０ｇであった。混合物は油性液体の形態をしていた。１日後、サンプルを評価した時に、沈殿の兆候があった。３０日後、沈殿物が、底部沈降物を形成した。よって、製剤は安定しなかった。
【００６４】
実施例２
実施例２は、コレステロール(５．５ｍｇ／ｇ)を添加した以外は、本質的に実施例１のように実施した。１日後、サンプルを評価したところ、サンプルの外観は変化していなかった。３０日後、４ヶ月後までは、変化はなかった。５ヶ月後、わずかな沈殿があった。実施例１と比較して、実施例２では、ピーナッツ油中の５ｍｇ／ｇの３-ベータ-ヒドロキシ-５-アルファ-プレグナン-２０-オンの溶液への５．５ｍｇ／ｇのコレステロールの添加が、沈殿の代わりに、実質的溶解度を増加させ、沈殿が生じることなく、サンプルは４ヶ月安定していたことが示された。しかしながら、５ヶ月後には、わずかな沈降が生じた。
【００６５】
実施例３から４９
実施例３から４９を、３-ベータ-ヒドロキシ-５-アルファ-プレグナン-２０-オン濃度に関して変動させて、本質的に上述したようにして実施し、使用したアシルグリセロール混合物、使用したステロール及びステロール濃度を表１に示す。
【００６６】
実施例１から４９のデータを表１にまとめる。例えば、コレステロール添加の効果は、実施例８から１２において明白であり、コレステロール(１０ｍｇ／ｇ)の添加により実質的に溶解度が増加し、サンプルは沈殿することなく、１２ヶ月間、安定していた。
【００６７】
表１において、「ＵＣ１０１０(ｍｇ／ｇ)の計量した量」とは、ステロールを含む（ステロールが存在する場合）最終的な全組成物のグラム当たりの３-ベータ-ヒドロキシ-５-アルファ-プレグナン-２０-オンの量である。「ビヒクル」とは、試験されている担体を示す。ステロールの量は「ｍｇ／ｇ」、つまり、３-ベータ-ヒドロキシ-５-アルファ-プレグナン-２０-オンを含む最終的な全組成物の重量当たりのステロールの重量として記載される。「調製時の外観」は、調製中の混合物の外観の変化を記述する；通常、調製物は、最初はエマルション又は溶液であるが、エタノールの蒸発後は油性の外観になる；「変化なし」は、サンプルが安定しており、よって、３-ベータ-ヒドロキシ-５-アルファ-プレグナン-２０-オンが、濁り、沈殿、沈降、２以上の液状相への相分離、又は色調変化の可視的兆候なしに、溶液中に残存していることを示す。また、このことは、表中の星印(＊)によっても示される。
【００６８】
2013517269.tif 000002
2013517269.tif 000003
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【００６９】
実施例５０−７５
実施例５０から７５を、実施例１−４９と本質的に同様にして実施した。Ａｋｏｌｉｎｅ中鎖モノグリセリド（ＭＣＭ）（バッチ８１９２２７０及び８２１８９４０）及びアコメッドＲ中鎖トリグリセリド（ＭＣＴ）（バッチ４７６５）を、AarhusKarlshamns Sweden AB, Karlshamn, Swedenから得た。無水エタノール(＞９９％)をVWR Internationalから得た。
【００７０】
脂質ベース製剤の作製及び評価の手順は以下の通りである：バッチサイズは、２０ｇ又は１００ｇの最終製剤のいずれかとした。所望量の３-ベータ-ヒドロキシ-５-アルファ-プレグナン-２０-オンとコレステロールを、バッチサイズに応じて、丸底フラスコ、２５０又は１０００ｍｌにおいて計量した。
【００７１】
３-ベータ-ヒドロキシ-５-アルファ-プレグナン-２０-オンとコレステロールの混合物のグラム当たり、約１５〜３０ｍｌの容量の無水エタノールを添加した。最も大きさなバッチサイズである１００ｇの最終製剤を調製する場合は、溶質のグラム当たり、さらに少量のアルコールを使用した。透明な溶液が得られるまで、混合物を超音波浴(５５℃を超えない)において処理した。これは、通常、数分内で達成された。ついで、グリセリド類を添加し、得られた混合物を、透明で均質な液体が得られるまで、数秒、超音波浴で処理した。フラスコの重量がおおよそ一定になるまで、約２０ｍｂａｒの圧力、約４０℃の温度で、ロータリーエバポレーターによって、アルコールを液体から蒸発させた。通常、残存するエタノール含有量は０．５％(ｗ／ｗ)又はそれ以下であった。蒸発時間は、バッチサイズに応じて、０．５−１．５時間とした。目的は、室温で透明な油の外観を有する、ほとんど無色の液体を得ることであった。液体を透明なガラスバイアルに移し、評価まで室温で保存した。いくつかの選択した製剤を分割し、限定された期間、２−８℃で保存した。
【００７２】
評価には、室温での経時的な物理的安定性の観察が含まれる。サンプルを、濁り、粒子の沈殿、凝集又は結晶、及び後続する沈降、及び／又は２又はそれ以上の液状相への相分離、及び／又は色調変化について観察した。
【００７３】
室温で１ヶ月以上保存する場合、５０％のＭＣＴ及び５０％のＭＣＭ（実施例６８及び６９）をベースにした最終製剤のグラム当たり、２５ｍｇまでの３-ベータ-ヒドロキシ-５-アルファ-プレグナン-２０-オンが、外観に何らの顕著な変化なしに溶解可能であった。また、サンプルの一つ（実施例６９）は２−８℃及び繰り返しの温度サイクルでの保存に耐えた。
【００７４】
製剤及びその調製手順のロバスト性及び再現性をチェックするために、最終製剤のバッチサイズを２０ｇから１００ｇにスケールアップして実施した。実施例６０及び６９の組成物を、この手順のために選択した。調製中の性状、及び得られた製剤（実施例７４及び７５）の当初の観察から、適用した手順が１００ｇまでの製剤を作製するためにロバスト性がありまた再現性があると、結論付けることができる。
【００７５】
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【００７６】
実施例７６
該研究の目的は、ニュージーランドホワイトウサギに皮下投与した後の、ゴマ油とコレステロールを含有する３-ベータ-ヒドロキシ-５-アルファ-プレグナン-２０-オン製剤の、血漿中における相対的薬物動態を調査することである。３匹のメスウサギの２つのグループは、それぞれ１ｍｇ／ｋｇ(実施例７の製剤)又は５ｍｇ／ｋｇ(実施例１０の製剤)の単一投与を受けた。動物の背部頸部領域に皮下注射した後、投与の０．２５、０．５、１、２、４、６、８、１２及び２４時間後に、血液サンプルを取り出した。血漿中の３-ベータ-ヒドロキシ-５-アルファ-プレグナン-２０-オン濃度を、有効ＬＣ-ＭＳ／ＭＳ法により測定した。データを図１に提示し、２つの投与量：１ｍｇ／ｋｇ(矩形)及び５ｍｇ／ｋｇ(丸)についての３-ベータ-ヒドロキシ-５-アルファ-プレグナン-２０-オンの平均血漿中濃度(ｎｇ／ｍＬ)を示す。
【００７７】
実施例７７
３-ベータ-ヒドロキシ-５-アルファ-プレグナン-２０-オンの懸濁液を、以下のようにして、溶解度の研究のために調製した：まず、コレステロールを室温で、ゴマ油にそれぞれ１０及び２０ｍｇ／ｍｌ溶解させた。異なるコレステロール量を有するゴマ油に、３-ベータ-ヒドロキシ-５-アルファ-プレグナン-２０-オンが入った懸濁液を、室温で、数日間、２−８℃の偶発的サイクルにて、一般的なテフロンコーティング攪拌棒を使用し、約５００ｒｐｍで、磁石式攪拌器において調製した。この時点で、粒子はかなり小さくなった。その後、それぞれの懸濁液のサンプルを０．２μｍのフィルターで濾過し、３-ベータ-ヒドロキシ-５-アルファ-プレグナン-２０-オン濃度に関して分析した。結果を表３と図２に提示するが、コレステロールの量を増加させると、３-ベータ-ヒドロキシ-５-アルファ-プレグナン-２０-オンの可溶性画分も増加することが分かった。図２には、１０ｍｇ／ｇの３-ベータ-ヒドロキシ-５-アルファ-プレグナン-２０-オン濃度についてのデータが示されている。図３ａ及び３ｂには、１０ｍｇ／ｇの３-ベータ-ヒドロキシ-５-アルファ-プレグナン-２０-オン濃度、１：１のコレステロール：３-ベータ-ヒドロキシ-５-アルファ-プレグナン-２０-オン比率を有する懸濁液の、混合してすぐ(３ａ)及び攪拌して数日後(３ｂ)の、５×拡大で撮られた顕微鏡写真が示されている。
【００７８】
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【００７９】
実施例７８
平均粒子経６マイクロメーターを有する微細化された３-ベータ-ヒドロキシ-５-アルファ-プレグナン-２０-オン(１０ｍｇ／ｇ)を、コレステロール(２０ｍｇ／ｇ) を含有するゴマ油に懸濁させ、実施例７７のようにして攪拌した。懸濁してすぐ(図４ａ)及び攪拌して１９時間後(図４ｂ)の写真を撮った。
【００８０】
結果
ステロール、例えばコレステロールが存在することで、油性溶液又は油性懸濁液のいずれにおいても、アシルグリセロール類を含有する薬学的組成物に３-ベータ-ヒドロキシ-５-アルファ-プレグナン-２０-オンを処方する可能性が改善されることが分かった。
【図１】
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【図２】
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【図３ａ】
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【図３ｂ】
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【図４ａ】
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【図４ｂ】
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【国際調査報告】
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