(57)【要約】  本発明は、ヒトカンナビノイド受容体に対する活性化増強型抗体を含む医薬組成物、並びに肥満及び関連する代謝障害の治療における使用を提供する。本発明は更に、精神活性物質に対する依存の治療において使用するための、ヒトカンナビノイド受容体に対する活性化増強型抗体と、タンパク質Ｓ−１００に対する活性化増強型抗体とを含む医薬組成物も提供する。  本発明は、肥満及び関連する代謝障害並びに物質乱用を治療するための方法を提供する。【選択図】図１
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【特許請求の範囲】
【請求項１】
ヒトカンナビノイド受容体に対する活性化増強型抗体を含むことを特徴とする医薬組成物。
【請求項２】
ヒトカンナビノイド受容体が、カンナビノイド受容体１（ＣＢ１）である請求項１に記載の医薬組成物。
【請求項３】
活性化増強型抗体が、ヒトカンナビノイド受容体１全体に対するものである請求項２に記載の医薬組成物。
【請求項４】
ヒトカンナビノイド受容体１全体が、配列番号１で提供される配列からなる請求項３に記載の医薬組成物。
【請求項５】
活性化増強型抗体が、ヒトカンナビノイド受容体１のポリペプチド断片に対するものである請求項２に記載の医薬組成物。
【請求項６】
ヒトカンナビノイド受容体１のポリペプチド断片が、配列番号３〜１６で提供される配列からなる群から選択される請求項５に記載の医薬組成物。
【請求項７】
活性化増強型抗体が、Ｃ１２、Ｃ３０、及びＣ２００のホメオパシー希釈物の混合物の形態である請求項１に記載の医薬組成物。
【請求項８】
活性化増強型抗体が、固体担体に浸透させたＣ１２、Ｃ３０、及びＣ２００のホメオパシー希釈物の混合物の形態である請求項１に記載の医薬組成物。
【請求項９】
ヒトカンナビノイド受容体に対する活性化増強型抗体が、モノクローナル抗体、ポリクローナル抗体、又は天然の抗体である請求項１に記載の医薬組成物。
【請求項１０】
ヒトカンナビノイド受容体に対する活性化増強型抗体が、ポリクローナル抗体である請求項９に記載の医薬組成物。
【請求項１１】
ヒトカンナビノイド受容体に対する抗体が、希釈するごとに振とうしながら連続的に１００倍希釈することにより調製される請求項１に記載の医薬組成物。
【請求項１２】
請求項１又は２に記載の医薬組成物を投与することを含むことを特徴とする肥満及び関連する代謝障害を治療する方法。
【請求項１３】
医薬組成物が、１つ又は２つの単位剤形として１日１回から１日４回、患者に投与される請求項１２に記載の方法。
【請求項１４】
剤形が、１日２回投与される請求項１３に記載の方法。
【請求項１５】
請求項１又は２に記載の医薬組成物を投与することを含むことを特徴とする、変更から利益を受けることが予想される哺乳動物の身体計測パラメータを変更する方法。
【請求項１６】
身体計測パラメータが、ウエスト周囲径である請求項１５に記載の方法。
【請求項１７】
身体計測パラメータが、ウエスト対身長比である請求項１５に記載の方法。
【請求項１８】
身体計測パラメータが、ウエスト対ヒップ比である請求項１５に記載の方法。
【請求項１９】
ウエスト周囲径が、少なくとも１％減少する請求項１６に記載の方法。
【請求項２０】
ウエスト周囲径が、少なくとも２％減少する請求項１６に記載の方法。
【請求項２１】
ウエスト周囲径が、少なくとも３％減少する請求項１６に記載の方法。
【請求項２２】
ウエスト周囲径が、少なくとも１ｃｍ減少する請求項１６に記載の方法。
【請求項２３】
ウエスト周囲径が、少なくとも３ｃｍ減少する請求項１６に記載の方法。
【請求項２４】
請求項１又は２に記載の医薬組成物を投与することを含むことを特徴とする哺乳動物の体重を減少させる方法。
【請求項２５】
体重が、少なくとも５％減少する請求項２４に記載の方法。
【請求項２６】
体重が、少なくとも１０％減少する請求項２４に記載の方法。
【請求項２７】
体重が、少なくとも１５％減少する請求項２４に記載の方法。
【請求項２８】
体重が、１５％未満減少する請求項２４に記載の方法。
【請求項２９】
請求項１又は２に記載の医薬組成物を投与することを含むことを特徴とする哺乳動物の体重増加を減少させる方法。
【請求項３０】
体重増加が、少なくとも１０％減少する請求項２９に記載の方法。
【請求項３１】
体重増加が少なくとも３０％減少する請求項２９に記載の方法。
【請求項３２】
請求項１に記載の医薬組成物を投与することを含むことを特徴とする、摂食量の減少から利益を受けることが予想される哺乳動物の摂食量の減少を促進する方法。
【請求項３３】
Ｓ−１００タンパク質に対する活性化増強型抗体を更に含む請求項１又は２に記載の医薬組成物。
【請求項３４】
Ｓ−１００タンパク質に対する抗体が、Ｓ−１００タンパク質全体に対する抗体である請求項３３に記載の医薬組成物。
【請求項３５】
Ｓ−１００タンパク質全体が、配列番号１７で提供される配列からなる請求項３４に記載の医薬組成物。
【請求項３６】
Ｓ−１００タンパク質に対する抗体が、固体担体に浸透させたＣ１２、Ｃ３０、及びＣ２００のホメオパシー希釈物の混合物の形態である請求項３３に記載の医薬組成物。
【請求項３７】
Ｓ−１００タンパク質に対する抗体が、モノクローナル抗体、ポリクローナル抗体、又は天然の抗体である請求項３３に記載の医薬組成物。
【請求項３８】
Ｓ−１００タンパク質に対する抗体がポリクローナル抗体である請求項３７に記載の医薬組成物。
【請求項３９】
Ｓ−１００タンパク質に対する抗体が、希釈するごとに振とうしながら連続的に１００倍希釈することにより調製される請求項３６に記載の医薬組成物。
【請求項４０】
請求項３３に記載の医薬組成物を投与することを含むことを特徴とする、精神活性物質依存に苦しんでいる患者を治療する方法。
【請求項４１】
精神活性物質が、ニコチンである請求項３７に記載の方法。
【請求項４２】
組み合わせの投与が、ＭＰＳＳ試験のデータの分析によって測定される、禁煙に耐える能力の統計的に有意な改善をもたらす請求項３８に記載の方法。
【請求項４３】
組み合わせの投与が、ニコチン依存度試験のためのファガストローム試験によって測定される、中等度ニコチン依存患者における喫煙の統計的に有意な減少をもたらす請求項４１に記載の方法。
【請求項４４】
組み合わせの投与が、ニコチン依存度試験のためのファガストローム試験によって測定される、重度ニコチン依存患者における喫煙の統計的に有意な減少をもたらす請求項４１に記載の方法。
【請求項４５】
請求項３３に記載の医薬組成物を投与することを含むことを特徴とする精神活性物質依存の方法。
【請求項４６】
精神活性物質依存に苦しんでいる患者の治療に使用するための医薬組成物であって、ホメオパシーの技術に従って、連続して繰り返し希釈し、得られた溶液をそれぞれ多数回垂直方向に振とうすることによってそれぞれ調製される、ａ）ヒトカンナビノイド受容体に対する抗体の増強溶液、及びｂ）Ｓ−１００タンパク質に対する活性化増強型抗体の増強溶液を提供し、次いで、前記増強溶液を混合することによって組み合わせるか、或いは、担体塊に組み合わせた前記溶液を浸透させる又は別々に前記溶液を浸透させることによって得られたことを特徴とする医薬組成物。
【請求項４７】
肥満及び関連する代謝障害の治療に使用するための医薬組成物であって、ホメオパシーの技術に従って、連続して繰り返し希釈し、得られた溶液を多数回垂直方向に振とうすることによって調製される、ヒトカンナビノイド受容体に対する抗体の増強溶液を提供し、次いで、場合によっては担体塊に前記溶液を浸透させることによって得られたことを特徴とする医薬組成物。
【請求項４８】
精神活性物質依存が、ニコチンである請求項４０記載の方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、肥満及び関連する代謝障害の治療のため、並びに精神活性物質、特にニコチンへの依存を治療するために使用することができる医薬組成物に関する。
【背景技術】
【０００２】
現在、肥満は、関連する健康リスクを低下させるための治療を必要とする慢性疾患と認識されている。冠動脈心疾患、脳卒中、高血圧、２型糖尿病、異脂肪血症、睡眠時無呼吸、変形性関節症、胆嚢疾患、うつ病、及びいくつかの形態の癌（例えば、子宮内膜、乳房、前立腺、及び結腸）を含めて、肥満に関連する健康リスクがあるため、肥満の増加が懸念されている。肥満が健康に悪い結果をもたらすため、肥満は米国において予防可能な死亡の原因の第２位となっている。非特許文献１を参照されたい。
【０００３】
５〜１０％の体重減少により、血中グルコース、血圧、及び脂質濃度などの代謝数値が実質的に改善され得ると考えられている。
【０００４】
肥満管理のために現在入手可能な処方薬は、通常、満腹を誘導すること、又は食事性脂肪の吸収を減少させることによって体重を減少させる。満腹は、ノルエピネフリン、セロトニン、又は両方のシナプスレベルを上昇させることによって実現される。例えば、セロトニン受容体亜型の１Ｂ、１Ｄ、及び２Ｃ並びに１−アドレナリン受容体及び２−アドレナリン受容体を刺激すると、満腹が調節されて食物摂取量が減少する。非特許文献２を参照されたい。アドレナリン作用薬（例えば、ジエチルプロピオン、ベンズフェタミン、フェンジメトラジン、マジンドール、及びフェンテルミン）は、カテコールアミン放出の促進を通じて中枢神経のノルエピネフリン受容体及びドーパミン受容体を調整することによって作用する。以前の減量用アドレナリン作用薬物（例えば、アンフェタミン、メタンフェタミン、及びフェンメトラジン）は、ドーパミン経路に強く関与し、乱用リスクがあるためもはや推奨されていない。フェンフルラミン及びデクスフェンフルラミンはどちらも、食欲を調節するのに使用されたセロトニン作用薬であり、もはや使用可能ではない。
【０００５】
副作用が出現すること、及びこれらの精神活性物質の使用の結果、依存が生じることが理由となって、中枢神経に作用する（ｏｆ  ｃｅｎｔｒａｌ  ｅｆｆｅｃｔ）有効かつ安全な医薬品は、いまだに入手不可能である。したがって、肥満及び関連する代謝障害を軽減又は予防するための、より有効かつ安全な治療的処置が引き続き必要とされている。
【０００６】
肥満に加えて、物質依存の治療に対するニーズも、まだ満たされていない。
【０００７】
タバコ依存は、我々の社会における疾病及び死亡の最も重大で予防可能な原因であり、毎年何千件もの死亡を招いている。全喫煙者の半数は、タバコの使用に直接関係した疾患で死亡し、多くの喫煙者は著しい病的状態に苦しむ。毎年、約１５００万人の喫煙者が禁煙を試みるが、喫煙に成功するのはその内の１００万人に過ぎない。
【０００８】
紙巻きタバコの煙は、多数の非常に複雑な物質を含有し、その内で最も重要であるのがニコチンであり、これが、紙巻きタバコ喫煙者が依存を生じる対象の物質である。いくつかの薬物療法が、タバコ依存の治療に有効であることが判明している。これらには、ガム、パッチ、点鼻薬、及び吸入器の形態のニコチン置換療法が含まれる。ニコチンを用いない薬理学的療法が、ニコチン依存を治療する方法として開発されている。見込みのある試薬（ｒｅａｇｅｎｔ）には、ニコチン遮断療法、セロトニン作動性神経伝達に影響を及ぼす薬物、抗うつ剤、抗不安薬、クロニジン、及び気道感覚の置換が含まれる（非特許文献３）。ニコチン遮断療法（ニコチン受容体アンタゴニストとも呼ばれる）は、ニコチン受容体を占有する化合物を利用し、それによって、タバコの使用によって受ける報いを軽くする（非特許文献４）。しかし、タバコ依存のより有効な治療が必要とされている。
【０００９】
カンナビノイド受容体は、Ｇタンパク質共役型受容体スーパーファミリーに属する細胞膜受容体クラスである。カンナビノイド受容体は、３つの主要なリガンドグループ、すなわち（ａ）内在性カンナビノイド（哺乳動物の身体によって産生される）、（ｂ）植物カンナビノイド（大麻植物によって産生されるＴＨＣなど）、及び（ｃ）合成カンナビノイド（１９８８年に（１Ｒ，５Ｓ）−ミルテノールから初めて合成されたＨＵ−２１０など）によって活性化される。これらのカンナバノイド（ｃａｎｎａｂａｎｏｉｄ）は、細胞膜に位置するカンナビノイド受容体に結合することによって効果を発揮する。内在性カンナビノイドは、多種多様の生理学的プロセス及び病態生理学的プロセスに関係があるとされている。今日まで、内在性カンナビノイド系と相互作用するために使用される大半の薬物は、大麻に由来する。大麻は、マリファナ及びハシシュなどの製品の原材料として最も人気を集めており、習慣的に使用すると、依存症の発症をもたらす場合がある。
【００１０】
２種のカンナビノイド受容体の特徴が明らかにされている。すなわち、カンナビノイド受容体１（ＣＢ１）は、哺乳動物の脳及び末梢組織中に存在する中枢性受容体であり、カンナビノイド受容体２（ＣＢ２）は、末梢組織中にのみ存在する末梢性受容体である。ＣＢ１受容体は、辺縁系（扁桃体、海馬）、視床下部、大脳皮質、小脳、及び大脳基底核を含めて、いくつかの脳領域において主に発現される。これらの受容体の一方又は両方に対するアゴニスト又はアンタゴニストである化合物は、様々な薬理学的効果を提供することが示されている。例えば、非特許文献５及び非特許文献６を参照されたい。
【００１１】
ホメオパシーの技術によって増強された極端に希釈された（又は超低）型の抗体（活性化増強型）の治療効果は、本特許出願の発明者であるＯｌｅｇ  Ｉ．Ｅｐｓｈｔｅｉｎ博士によって発見された。米国特許第７，５８２，２９４号は、ホメオパシーによって活性化された型の、前立腺特異的抗原（ＰＳＡ）に対する抗体を投与することにより良性前立腺肥大症又は前立腺炎を治療するための医薬を開示している。
【００１２】
Ｓ−１００タンパク質は、神経系で発現される酸性細胞質内タンパク質である。Ｓ−１００タンパク質は不安において役割を果たすことが示唆されている。非特許文献７及び非特許文献８を参照されたい。これらの文献は全て、参照により本明細書に組み込まれる。
【００１３】
Ｓ−１００タンパク質に対する超低用量の抗体は、抗不安、強壮、抗攻撃、ストレス防御、抗低酸素、抗虚血、神経保護、及び向知性の活性を有することが示されている。非特許文献９、非特許文献１０、非特許文献１１、及び非特許文献１２を参照されたい。これらの文献は全て、参照により本明細書に組み込まれる。
【先行技術文献】
【非特許文献】
【００１４】
【非特許文献１】ＭｃＧｉｎｎｉｓ  Ｍ、Ｆｏｅｇｅ  Ｗ  Ｈ．、「Ａｃｔｕａｌ  Ｃａｕｓｅｓ  ｏｆ  Ｄｅａｔｈ  ｉｎ  ｔｈｅ  Ｕｎｉｔｅｄ  Ｓｔａｔｅｓ」、ＪＡＭＡ、２７０、２２０７  １２（１９９３）
【非特許文献２】Ｂｒａｙ  Ｇ  Ａ、「Ｔｈｅ  Ｎｅｗ  Ｅｒａ  ｏｆ  Ｄｒｕｇ  Ｔｒｅａｔｍｅｎｔ．  Ｐｈａｒｍａｃｏｌｏｇｉｃ  Ｔｒｅａｔｍｅｎｔ  ｏｆ  Ｏｂｅｓｉｔｙ：Ｓｙｍｐｏｓｉｕｍ  Ｏｖｅｒｖｉｅｗ」、Ｏｂｅｓ．Ｒｅｓ．、３（補遺４）、（１９９５）
【非特許文献３】Ｒｏｓｅ、１９９６、及びＣｉｎｃｉｒｉｐｉｎｉら、１９９８  Ｏｎｃｏｌｏｇｙ  １２：２４９〜２５６
【非特許文献４】Ｃｌａｒｋｅ、１９９１  Ｂｒ．Ｊ．Ａｄｄｉｃｔ．８６：５０１〜５０５
【非特許文献５】Ｐｅｒｔｗｅｅ，Ｒ．Ｇ．、Ｐｈａｒｍａｃｏｌｏｇｙ  ｏｆ  ｃａｎｎａｂｉｎｏｉｄ  ＣＢ１  ａｎｄ  ＣＢ２  ｒｅｃｅｐｔｏｒｓ、Ｐｈａｒｍａｃｏｌ．Ｔｈｅｒ．、（１９９７）７４：１２９〜１８０
【非特許文献６】Ｄｉ  Ｍａｒｚｏ，Ｖ．、Ｍｅｌｃｋ，Ｄ．、Ｂｉｓｏｇｎｏ，Ｔ．、ＤｅＰｅｔｒｏｃｅｌｌｉｓ，Ｌ．、Ｅｎｄｏｃａｎｎａｂｉｎｏｉｄｓ：ｅｎｄｏｇｅｎｏｕｓ  ｃａｎｎａｂｉｎｏｉｄ  ｒｅｃｅｐｔｏｒ  ｌｉｇａｎｄｓ  ｗｉｔｈ  ｎｅｕｒｏｍｏｄｕｌａｔｏｒｙ  ａｃｔｉｏｎ、Ｔｒｅｎｄｓ  Ｎｅｕｒｏｓｃｉ．（１９９８）２１：５２１〜５２８
【非特許文献７】Ａｃｋｅｒｍａｎｎら、Ｓ１００Ａ１−ｄｅｆｉｃｉｅｎｔ  ｍａｌｅ  ｍｉｃｅ  ｅｘｈｉｂｉｔ  ｉｎｃｒｅａｓｅｄ  ｅｘｐｌｏｒａｔｏｒｙ  ａｃｔｉｖｉｔｙ  ａｎｄ  ｒｅｄｕｃｅｄ  ａｎｘｉｅｔｙ−ｒｅｌａｔｅｄ  ｒｅｓｐｏｎｓｅ、Ｂｉｏｃｈｉｍ．Ｂｉｏｐｈｙｓ．Ａｃｔａ．２００６、６３（１１）：１３０７〜１９
【非特許文献８】Ｄｉｅｈｌら、Ｌｏｎｇ  ｌａｓｔｉｎｇ  ｓｅｘ−ｓｐｅｃｉｆｉｃ  ｅｆｆｅｃｔｓ  ｕｐｏｎ  ｂｅｈａｖｉｏｒ  ａｎｄ  Ｓ１００ｂ  ｌｅｖｅｌｓ  ａｆｔｅｒ  ｍａｔｅｒｎａｌ  ｓｅｐａｒａｔｉｏｎ  ａｎｄ  ｅｘｐｏｓｕｒｅ  ｔｏ  ａ  ｍｏｄｅｌ  ｏｆ  ｐｏｓｔ−ｔｒａｕｍａｔｉｃ  ｓｔｒｅｓｓ  ｄｉｓｏｒｄｅｒ  ｉｎ  ｒａｔｓ、Ｂｒａｉｎ  Ｒｅｓ．、２００７、１４４：１０７〜１６
【非特許文献９】Ｃａｓｔａｇｎｅ  Ｖ．ら、Ａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ  ｔｏ  Ｓ１００  ｐｒｏｔｅｉｎｓ  ｈａｖｅ  ａｎｘｉｏｌｙｔｉｃ−ｌｉｋｅ  ａｃｔｉｖｉｔｙ  ａｔ  ｕｌｔｒａ−ｌｏｗ  ｄｏｓｅｓ  ｉｎ  ｔｈｅ  ａｄｕｌｔ  ｒａｔ、Ｊ．Ｐｈａｒｍ．Ｐｈａｒｍａｃｏｌ．２００８、６０（３）：３０９〜１６
【非特許文献１０】Ｅｐｓｈｔｅｉｎ  Ｏ．Ｉ．、Ａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ  ｔｏ  ｃａｌｃｉｕｍ−ｂｉｎｄｉｎｇ  Ｓ１００Ｂ  ｐｒｏｔｅｉｎ  ｂｌｏｃｋ  ｔｈｅ  ｃｏｎｄｉｔｉｏｎｉｎｇ  ｏｆ  ｌｏｎｇ−ｔｅｒｍ  ｓｅｎｓｉｔｉｚａｔｉｏｎ  ｉｎ  ｔｈｅ  ｔｅｒｒｅｓｔｒｉａｌ  ｓｎａｉｌ、Ｐｈａｒｍａｃｏｌ．Ｂｉｏｃｈｅｍ．Ｂｅｈａｖ．、２００９、９４（１）：３７〜４２
【非特許文献１１】Ｖｏｒｏｎｉｎａ  Ｔ．Ａ．ら、８章  Ａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ  ｔｏ  Ｓ−１００  ｐｒｏｔｅｉｎ  ｉｎ  ａｎｘｉｅｔｙ−ｄｅｐｒｅｓｓｉｖｅ  ｄｉｓｏｒｄｅｒｓ  ｉｎ  ｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔａｌ  ａｎｄ  ｃｌｉｎｉｃａｌ  ｃｏｎｄｉｔｉｏｎｓ．  「Ａｎｉｍａｌ  ｍｏｄｅｌｓ  ｉｎ  ｂｉｏｌｏｇｉｃａｌ  ｐｓｙｃｈｉａｔｒｙ」
【非特許文献１２】Ｅｄ．Ｋａｌｕｅｆｆ  Ａ．Ｖ．編、Ｎ−Ｙ、「Ｎｏｖａ  Ｓｃｉｅｎｃｅ  Ｐｕｂｌｉｓｈｅｒｓ，Ｉｎｃ．」、２００６年、１３７〜１５２ページ
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【００１５】
過剰な体重又は肥満及び物質依存を治療するための、所望の治療有効性を有する新しい製剤が継続して必要とされている。
【課題を解決するための手段】
【００１６】
一態様では、本発明は、ヒトカンナビノイド受容体に対する活性化増強型抗体を含む医薬組成物を提供する。好ましくは、ヒトカンナビノイド受容体はカンナビノイド受容体１（ＣＢ１）である。本発明のこの態様の活性化増強型抗体は、ヒトカンナビノイド受容体１全体に対するものであることが意図されている。本発明の詳細な説明において提供される個々の配列が、特に意図されている。活性化増強型抗体は、ヒトカンナビノイド受容体１のポリペプチド断片に対するものであることが意図されている。好ましくは、活性化増強型抗体は、Ｃ１２、Ｃ３０、及びＣ２００のホメオパシー希釈物の混合物の形態である。特に好ましい変形では、活性化増強型抗体は、固体担体に浸透させたＣ１２、Ｃ３０、及びＣ２００のホメオパシー希釈物の混合物の形態である。ヒトカンナビノイド受容体に対する活性化増強型抗体は、モノクローナル抗体、ポリクローナル抗体、又は天然の抗体であることが意図されている。好ましくは、ヒトカンナビノイド受容体に対する活性化増強型抗体はポリクローナル抗体である。ヒトカンナビノイド受容体に対する抗体は、希釈するごとに振とうしながら連続的に１００倍希釈することにより調製することができる。
【００１７】
別の態様では、本発明は、本発明の医薬組成物の態様の任意の変形又は実施形態の医薬組成物を投与することを含む、肥満及び関連する代謝障害を治療する方法を提供する。医薬組成物は、１つ又は２つの単位剤形として、１日１回から１日４回、患者に投与することができる。１日２回の投与が特に意図されている。
【００１８】
別の態様では、本発明は、発明の医薬組成物の態様の任意の変形又は実施形態の医薬組成物を投与することを含む、ニコチン依存の方法を提供する。医薬組成物は、１つ又は２つの単位剤形として、１日１回から１日４回、患者に投与することができる。１日２回の投与が特に意図されている。
【００１９】
別の態様では、本発明は、本発明の医薬組成物の態様の任意の変形又は実施形態の医薬組成物を投与することを含む、変更から利益を受けることが予想される哺乳動物の身体計測パラメータを変更する方法を提供する。一実施形態では、身体計測パラメータはウエスト周囲径である。一実施形態では、身体計測パラメータはウエスト対身長比である。別の実施形態では、身体計測パラメータはウエスト対ヒップ比である。様々な変形が提供される。
【００２０】
別の態様では、本発明は、本発明の医薬組成物の態様の任意の変形又は実施形態の医薬組成物を投与することを含む、哺乳動物の体重を減少させる方法を提供する。１つの変形では、体重は少なくとも５％減少する。別の変形では、体重は少なくとも１０％減少する。体重は少なくとも１５％減少する。別の変形では、体重は１５％未満減少する。
【００２１】
別の態様では、本発明は、本発明の医薬組成物の態様の任意の変形又は実施形態の医薬組成物を投与することを含む、哺乳動物の体重増加を減少させる方法を提供する。１つの変形では、体重増加は少なくとも１０％減少する。別の変形では、体重増加は少なくとも３０％減少する。
【００２２】
別の態様では、本発明は、本発明の医薬組成物の態様の任意の変形又は実施形態の医薬組成物を投与することを含む、減少から利益を受けることが予想される哺乳動物の摂食量の減少を促進する方法を提供する。
【００２３】
別の態様では、本発明は、ヒトカンナビノイド受容体に対する活性化増強型抗体と、Ｓ−１００タンパク質に対する活性化増強型抗体とを含む医薬組成物を提供する。１つの変形では、Ｓ−１００タンパク質に対する抗体は、Ｓ−１００タンパク質全体に対する抗体である。Ｓ−１００タンパク質の配列は、本明細書において提供される。好ましくは、Ｓ−１００タンパク質に対する抗体は、固体担体に浸透させたＣ１２、Ｃ３０、及びＣ２００のホメオパシー希釈物の混合物の形態である。本発明のこの態様の医薬組成物は、モノクローナル抗体、ポリクローナル抗体、又は天然の抗体である、Ｓ−１００タンパク質に対する抗体を含有してよい。好ましくは、Ｓ−１００タンパク質に対する抗体はポリクローナル抗体である。Ｓ−１００タンパク質に対する抗体は、希釈するごとに振とうしながら連続的に１００倍希釈することにより調製することができる。
【００２４】
別の態様では、本発明は、ヒトカンナビノイド受容体に対する活性化増強型抗体と、Ｓ−１００タンパク質に対する活性化増強型抗体とを含む医薬組成物を投与することを含む、精神活性物質依存に苦しんでいる患者を治療する方法を提供する。好ましくは、精神活性物質はニコチンである。好ましくは、前記組み合わせの投与は、ＭＰＳＳ試験のデータの分析によって測定される、禁煙に耐える能力の統計的に有意な改善をもたらす。好ましくは、前記組み合わせの投与は、ニコチン依存度試験のためのファガストローム試験によって測定される、中等度ニコチン依存患者における喫煙の統計的に有意な減少をもたらす。好ましくは、前記組み合わせの投与は、ニコチン依存度試験のためのファガストローム試験によって測定される、重度ニコチン依存患者における喫煙の統計的に有意な減少をもたらす。
【００２５】
別の態様では、本発明は、精神活性物質依存に苦しんでいる患者を治療する際に使用するための医薬組成物であって、ホメオパシーの技術に従って、連続して繰り返し希釈し、得られた溶液をそれぞれ多数回垂直方向に振とうすることによってそれぞれ調製される、ａ）ヒトカンナビノイド受容体に対する抗体の増強溶液、及びｂ）Ｓ−１００タンパク質に対する活性化増強型抗体の増強溶液を提供し、次いで、それらを混合することによって増強溶液を組み合わせるか、あるいは、担体塊に前記組み合わせた溶液を又は別々に溶液を浸透させることによって得られた医薬組成物を提供する。
【００２６】
別の態様では、本発明は、肥満及び関連する代謝障害を治療する際に使用するための医薬組成物であって、ホメオパシーの技術に従って、連続して繰り返し希釈し、得られた溶液をそれぞれ多数回垂直方向に振とうすることによって調製される、ヒトカンナビノイド受容体に対する抗体の増強溶液を提供し、次いで、場合によっては担体塊に前記溶液を浸透させることによって得られた医薬組成物を提供する。
【図面の簡単な説明】
【００２７】
【図１】体重の増加及び飼料消費量に対する、ＵＬＤ抗ＣＢ１及びスブトラミンの影響を示すグラフである。
【図２】ＵＬＤ抗ＣＢ１の投与後の体重減少を示すグラフである。
【図３】患者における５％以上の体重減少を示すグラフである。
【発明を実施するための形態】
【００２８】
本発明は、添付の特許請求の範囲と関連して定義される。特許請求の範囲に関して、以下の用語解説によって関連する定義がもたらされる。
【００２９】
「抗体」という用語は、本明細書で使用される場合、別の分子の特定の空間的な極性の構成に特異的に結合し、それにより、それと相補的であると定義される免疫グロブリンを意味するものとする。特許請求の範囲において列挙されている抗体は、天然、ポリクローナル又はモノクローナルであってよい完全な免疫グロブリン又はその断片を含んでよく、それらとしては、例えば、ＩｇＡ、ＩｇＤ、ＩｇＥ、ＩｇＧ１、ＩｇＧ２ａ、ＩｇＧ２ｂ及びＩｇＧ３、ＩｇＭなどの種々のクラス及びアイソタイプを挙げることができる。その断片としては、Ｆａｂ、Ｆｖ及びＦ（ａｂ’）２、Ｆａｂ’などを挙げることができる。単数形の「抗体（ａｎｔｉｂｏｄｙ）」は、複数形の「抗体（ａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ）」を含む。
【００３０】
「活性化増強型」又は「増強型」という用語はそれぞれ、本明細書において列挙されている抗体に関しては、任意の抗体の最初の溶液のホメオパシーポテンタイゼーション（ｐｏｔｅｎｔｉｚａｔｉｏｎ）の生成物を示すために使用される。「ホメオパシーポテンタイゼーション」とは、ホメオパシーの方法を用いて最初の関連物質の溶液にホメオパシーポーテンシーを付与することを示す。そのように限定するものではないが、「ホメオパシーポテンタイゼーション」は、例えば、連続した希釈を、外部からの処理、特に（機械的な）振とうと組み合わせて繰り返すことを伴ってよい。言い換えれば、ホメオパシーの技術に従って、抗体の最初の溶液を連続して繰り返し希釈し、得られた溶液をそれぞれ多数回、垂直方向に振とうする。溶媒、好ましくは水又は水とエチルアルコールの混合物中の抗体の最初の溶液の好ましい濃度は、約０．５ｍｇ／ｍＬから約５．０ｍｇ／ｍＬまでにわたる。各成分、すなわち、抗体溶液を調製するための好ましい手順は、それぞれ１００倍単位ホメオパシー希釈物Ｃ１２、Ｃ３０、及びＣ２００に相当する、抗体の一次マトリックス溶液（母液）を１００１２倍希釈、１００３０倍希釈及び１００２００倍希釈した３種の水希釈物若しくは水−アルコール希釈物の混合物を使用することである。ホメオパシーポテンタイゼーションの例は、その全体が参照により明示された目的で本明細書に組み込まれる、米国特許第７，５７２，４４１号及び同第７，５８２，２９４号に記載されている。特許請求の範囲では「活性化増強型」という用語が使用され、実施例では「超低用量」という用語が使用される。「超低用量」という用語は、ホメオパシーにより希釈され、増強された型の物質の研究及び使用によって創出された技術分野における専門用語になった。「超低用量（ｕｌｔｒａ−ｌｏｗ  ｄｏｓｅ）」又は「超低用量（ｕｌｔｒａ−ｌｏｗ  ｄｏｓｅｓ）」という用語は、特許請求の範囲において使用される「活性化増強」型という用語を完全に支持し、それと主に同義であるものとする。
【００３１】
言い換えれば、抗体は、３つの因子が存在すれば、「活性化増強」型又は「増強」型である。第１に、「活性化増強」型抗体は、ホメオパシーの技術分野では広く受け入れられている調製プロセスの生成物である。第２に、「活性化増強」型抗体は、現代薬理学において広く受け入れられている方法によって決定される生物活性を有さなければならない。第３に、「活性化増強」型抗体により示される生物活性は、ホメオパシーのプロセスの最終生成物に分子型抗体が存在することによっては説明することができない。
【００３２】
例えば、活性化増強型抗体は、最初の、単離された分子型抗体を、機械的な振とうなどの外部からの衝撃と併せて連続して多数回希釈することによって調製することができる。濃度低下の過程における外部からの処理は、例えば、超音波、電磁気、又は他の物理的因子に曝露させることによって実現することもできる。その全体が参照により明示された目的で本明細書に組み込まれるＶ．  Ｓｃｈｗａｂｅ  「Ｈｏｍｅｏｐａｔｈｉｃ  ｍｅｄｉｃｉｎｅｓ」、Ｍ．、１９６７年、米国特許第７，２２９，６４８号及び同第４，３１１，８９７号には、ホメオパシーの技術分野において広く受け入れられているホメオパシー増強の方法であるそのようなプロセスが記載されている。この手順により、最初の分子型抗体の分子濃度が均一に低下する。所望のホメオパシーポーテンシーが得られるまでこの手順を繰り返す。個々の抗体について、所要のホメオパシーポーテンシーは、中間希釈物を所望の薬理学的モデルにおいて生物学的試験に供することによって決定することができる。そのように限定するものではないが、「ホメオパシーポテンタイゼーション」は、例えば、外部からの処理、特に垂直方向の（機械的な）振とうと組み合わせて連続した希釈を繰り返すことを伴ってよい。言い換えれば、ホメオパシーの技術に従って、抗体の最初の溶液を連続して繰り返し希釈し、得られた溶液をそれぞれ多数回、垂直方向に振とうする。溶媒、好ましくは水又は水とエチルアルコールの混合物中の抗体の最初の溶液の好ましい濃度は、約０．５ｍｇ／ｍＬから約５．０ｍｇ／ｍＬにわたる。各成分、すなわち、抗体溶液を調製するための好ましい手順は、それぞれ１００倍単位ホメオパシー希釈物Ｃ１２、Ｃ３０及びＣ２００に相当する、抗体の一次マトリックス溶液（母液）を１００１２倍希釈、１００３０倍希釈及び１００２００倍希釈した３種の水希釈物若しくは水−アルコール希釈物の混合物を使用することである。所望のポーテンシーをどのように得るかの例も、例えば、明示された目的で参照により組み込まれる、米国特許第７，２２９，６４８号及び同第４，３１１，８９７号において提供される。本明細書に記載の「活性化増強」型抗体に適用可能な手順は、下に詳しく記載されている。
【００３３】
ヒト対象のホメオパシー治療に関してはかなりの量の議論がなされてきた。本発明は、「活性化増強」型抗体を得るために、受け入れられているホメオパシーのプロセスに依拠するが、本発明は、活性を証明するためにはヒト対象におけるホメオパシー単独に依拠するのではない。驚くべきことに、本願の発明者は、認められている薬理学的モデルにおいて、出発分子型抗体を連続して多数回希釈することから最終的に得られた溶媒が、標的希釈物中に分子型抗体の痕跡が存在することとは無関係の決定的な活性を有することを発見し、十分に実証した。本明細書で提供される「活性化増強」型抗体を、生物活性について、広く受け入れられている活性の薬理学的モデルにおいて、適切なｉｎ  ｖｉｔｒｏ実験において、又は適切な動物モデルにおいてｉｎ  ｖｉｖｏで試験した。該実験により、更に以下に提供される、そのようなモデルにおける生物活性の証拠がもたらされた。同様に以下に本明細書で提供される、ヒトの臨床研究は、動物モデルにおいて観察された活性が、ヒトの療法によく翻訳されるという証拠を特に提供する。ヒト研究によって、医科学において病的状態として広く認められている特定のヒト疾患又は障害を治療するための、本明細書に記載の「活性化増強」型の利用可能性の証拠ももたらされる。
【００３４】
また、特許請求された「活性化増強」型抗体は、その生物活性が、最初の出発溶液から残っている分子型抗体が存在することによっては説明することができない溶液又は固体調製物のみを包含する。言い換えれば、「活性化増強」型抗体は、最初の分子型抗体の痕跡を含有してよいことが意図されているが、連続して希釈した後に残った分子型抗体は非常に低濃度であるので、当業者は、認められている薬理学的モデルにおいて観察される生物活性が、いかなる程度の妥当性でも残りの分子型抗体に起因すると考えることができない。本発明は特定の理論に限定されるものではないが、本発明の「活性化増強」型抗体の生物活性は、最初の分子型抗体には起因しない。その中に含まれる分子型抗体の濃度が、認められている分析的な技法、例えば、キャピラリー電気泳動及び高速液体クロマトグラフィーなどの検出限界を下回る、液体又は固体の形態の「活性化増強」型抗体が好ましい。その中に含まれる分子型抗体の濃度がアボガトロ数未満である液体又は固体の形態の「活性化増強」型抗体が特に好ましい。分子型の治療用物質の薬理学において、薬理学的反応のレベルが、対象に投与される、又はｉｎ  ｖｉｔｒｏで試験される活性薬物の濃度に対してプロットされた用量反応曲線を作成することは一般的である。任意の検出可能な反応を生じる薬物の最小レベルは、閾値用量として公知である。「活性化増強」型抗体は、もしあれば、分子抗体を、所与の生物学的モデルにおける分子型抗体の閾値用量を下回る濃度で含有することが具体的に意図されており、それが好ましい。
【００３５】
「ＣＢ１受容体」という用語は、当技術分野における通常の意味を有し、天然に存在するＣＢ１受容体並びにその変異体及び改変形態を含んでよい。ＣＢ１受容体は、任意の供給源に由来してよいが、典型的には哺乳動物に由来する。
【００３６】
「肥満」という用語は、所与の身長に対して健康であると通常みなされる体重よりも重い体重範囲を意味する。肥満範囲は、体重及び身長を用いて「ボディマス指数」（ＢＭＩ）と呼ばれる数値を算出することによって決定される。ＢＭＩが２５から２９．９の間である成人は、過体重とみなされる。ＢＭＩが３０以上である成人は肥満とみなされる。ＢＭＩの公式は以下の通りである：
体重−（インチ単位の身長）２×７０３＝ＢＭＩ
【００３７】
ＢＭＩは、常に正確に肥満の程度を示すとは限らない。ＢＭＩよりも中心性脂肪（中心性肥満）分布の程度の方が、代謝リスクにより密接に結びついている可能性があることを示す論文の数が増えている。中心性脂肪分布の程度の測定は、正常体重の個体においてさえ、その後の健康リスクを早期に検出するために重要であると思われるようである。Ｓ  Ｄ  Ｈｓｉｅｈ、Ｈ  Ｙｏｓｈｉｎａｇａ、及びＴ  Ｍｕｔｏ、Ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ  Ｊｏｕｒｎａｌ  ｏｆ  Ｏｂｅｓｉｔｙ（２００３）２７、６１０〜６１６。Ｐｒｉｃｅ  ＧＭ、Ｕａｕｙ  Ｒ、Ｂｒｅｅｚｅ  Ｅ、Ｂｕｌｐｉｔｔ  ＣＪ、Ｆｌｅｔｃｈｅｒ  ＡＥ（２００６年８月）  「Ｗｅｉｇｈｔ，ｓｈａｐｅ，ａｎｄ  ｍｏｒｔａｌｉｔｙ  ｒｉｓｋ  ｉｎ  ｏｌｄｅｒ  ｐｅｒｓｏｎｓ：ｅｌｅｖａｔｅｄ  ｗａｉｓｔ−ｈｉｐ  ｒａｔｉｏ，ｎｏｔ  ｈｉｇｈ  ｂｏｄｙ  ｍａｓｓ  ｉｎｄｅｘ，ｉｓ  ａｓｓｏｃｉａｔｅｄ  ｗｉｔｈ  ａ  ｇｒｅａｔｅｒ  ｒｉｓｋ  ｏｆ  ｄｅａｔｈ」Ａｍ．Ｊ．Ｃｌｉｎ．Ｎｕｔｒ．８４（２）：４４９〜６０も参照されたい。ウエスト周囲径及びウエスト周囲径から導き出された指数、例えば、ウエスト対ヒップ比及びウエスト対身長比が、中心性肥満の代理尺度として使用されている。Ｓｕｎｇら、Ｗａｉｓｔ  ｃｉｒｃｕｍｆｅｒｅｎｃｅ  ａｎｄ  ｗａｉｓｔ−ｔｏ−ｈｅｉｇｈｔ  ｒａｔｉｏ  ｏｆ  Ｈｏｎｇ  Ｋｏｎｇ  Ｃｈｉｎｅｓｅ  ｃｈｉｌｄｒｅｎ、ＢＭＣ  Ｐｕｂｌｉｃ  Ｈｅａｌｔｈ  ２００８、８：３２４。したがって、身体計測パラメータ、例えば、ウエスト周囲径、ウエスト対ヒップ比、及びウエスト対身長比の測定値は、肥満の程度の指標であると考えられている。
【００３８】
「ウエスト対ヒップ比」という用語は、ウエストの外周とヒップの外周の比である。ウエスト−ヒップ比は、ウエスト外周をヒップ外周で割った値に等しい。女性の場合は０．９より大きいウエスト対ヒップ比、男性の場合は１．０より大きいウエスト対ヒップ比が、心血管疾患のリスク増大に関連付けられており、肥満治療の指標である。理想的には、女性のウエスト対ヒップ比は０．８以下であることが望ましく、男性のウエスト対ヒップ比は０．９５以下であることが望ましい。
【００３９】
ある人物の「ウエスト対身長比」という用語は、その人物のウエスト外周をその人物の身長で割った値と定義される。４０歳未満の人の場合、０．５を超えるウエスト対身長比は危険である。４０歳から５０歳の間の年齢群の人の場合は、危険値は０．５から０．６の間であり、５０歳を超える人の場合、危険値は０．６から始まる。
【００４０】
「肥満に関連する代謝障害」という用語は、肥満に関連した過大な健康リスクを低下させるために治療を必要とする慢性疾患を意味し、例示的な障害としては、２型糖尿病、心血管障害及び高血圧、高脂血症、並びにフィブリン溶解異常が挙げられる。
【００４１】
「ファガストローム試験」という用語は、ニコチン依存の強さを評価するための検査である、ニコチン依存に関する標準的試験を意味する。Ｈｅａｔｈｅｒｔｏｎ，Ｔ．Ｆ．、Ｋｏｚｌｏｗｓｋｉ，Ｌ．Ｔ．、Ｆｒｅｃｋｅｒ，Ｒ．Ｃ．、Ｆａｇｅｒｓｔｒｏｍ，Ｋ．Ｏ．  Ｔｈｅ  Ｆａｇｅｒｓｔｒｏｍ  ｔｅｓｔ  ｆｏｒ  Ｎｉｃｏｔｉｎｅ  Ｄｅｐｅｎｄｅｎｃｅ：Ａ  ｒｅｖｉｓｉｏｎ  ｏｆ  ｔｈｅ  Ｆａｇｅｒｓｔｒｏｍ  Ｔｏｌｅｒａｎｃｅ  Ｑｕｅｓｔｉｏｎｎａｉｒｅ．  Ｂｒ  Ｊ  Ａｄｄｉｃｔ  １９９１；８６：１１１９〜２７を参照されたい。この試験は、０〜１０の尺度でニコチン依存を測定する簡潔な自己申告性調査からなり、最も高レベルの依存が１０である。
【００４２】
「気分と身体症状の評価尺度」（ＭＰＳＳ）という用語は、紙巻きタバコの禁断症状を評価するために使用される、１９８０年代初期に開発された尺度を意味する。（Ｗｅｓｔ  Ｒ、Ｈａｊｅｋ  Ｐ：Ｅｖａｌｕａｔｉｏｎ  ｏｆ  ｔｈｅ  ｍｏｏｄ  ａｎｄ  ｐｈｙｓｉｃａｌ  ｓｙｍｐｔｏｍｓ  ｓｃａｌｅ（ＭＰＳＳ）ｔｏ  ａｓｓｅｓｓ  ｃｉｇａｒｅｔｔｅ  ｗｉｔｈｄｒａｗａｌ．  Ｐｓｙｃｈｏｐｈａｒｍａｃｏｌｏｇｙ  ２００４、１７７（１〜２）：１９５〜１９９）。ＭＰＳＳの中心的原理は、抑うつ気分、短気、落ち着きのなさ、集中することが困難な状態、及び空腹感の５点制評価並びに喫煙衝動の強さ及びこれらの衝動を感じながら過ごす時間の６点制評価を含む。
【００４３】
「不安及び抑うつの病院評価尺度」（ＨＡＤＳ）という用語は、入院患者及び外来患者における不安及び抑うつの徴候をスクリーニングするための主観的尺度を意味する。Ｚｉｇｍｏｎｄ，Ａ．Ｓ．、Ｓｎａｉｔｈ，Ｒ．Ｐ．、Ｔｈｅ  Ｈｏｓｐｉｔａｌ  Ａｎｘｉｅｔｙ  ａｎｄ  Ｄｅｐｒｅｓｓｉｏｎ  ｓｃａｌｅ、Ａｃｔａ  Ｐｓｙｃｈｉａｔｒ．Ｓｃａｎｄ．、１９８３、第６７巻、３６１〜３７０ページを参照されたい。
【００４４】
本発明は、ヒトカンナビノイド受容体に対する活性化増強型抗体を含む、それを必要とする患者に投与するための医薬組成物を提供する。
【００４５】
本発明は更に、ヒトカンナビノイド受容体に対する活性化増強型抗体及びｂ）タンパク質Ｓ−１００に対する活性化増強型抗体を含む、それを必要とする患者に投与するための医薬組成物も提供する。
【００４６】
本発明のこの態様による医薬組成物は、液状形態であっても固体形態であってもよい。医薬組成物に含まれる活性化増強型の抗体はそれぞれ、ホメオパシー技術分野で受け入れられているプロセスによって、その最初の分子形態の抗体から調製される。出発抗体は、例えば、どちらも参照により本明細書に組み込まれるＩｍｍｕｎｏｔｅｃｈｎｉｑｕｅｓ、Ｇ．Ｆｒｉｍｅｌ，Ｍ．、「Ｍｅｄｉｔｓｙｎａ」、１９８７、９〜３３ページ；「Ｈｕｍ．Ａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ．Ｍｏｎｏｃｌｏｎａｌ  ａｎｄ  ｒｅｃｏｍｂｉｎａｎｔ  ａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ，３０  ｙｅａｒｓ  ａｆｔｅｒ」  Ｌａｆｆｌｙ  Ｅ．、Ｓｏｄｏｙｅｒ  Ｒ．著  ２００５  第１４巻  Ｎ１〜２、３３〜５５頁に記載されている公知のプロセスに従って調製されたモノクローナル抗体又はポリクローナル抗体であってよい。
【００４７】
肥満及びニコチン依存を治療するための薬学的組み合わせが、１日当たり錠剤６〜８個の量で投与されることが意図されている。１つの変形では、投与様式は、錠剤２個、１日３回を含む。別の変形では、投与様式は、錠剤３個、１日２回を含む。別の変形では、投与様式は、錠剤４個、１日２回を含む。別の変形では、投与様式は、錠剤１個、１日６回を含む。別の変形では、投与様式は、錠剤２個、１日４回を含む。
【００４８】
モノクローナル抗体は、例えば、ハイブリドーマ技術によって得ることができる。このプロセスの最初の段階は、ポリクローナル抗血清の調製の過程においてすでに開発されている原理に基づいた免疫化を含む。研究のさらなる段階は、同一の特異性を有する抗体のクローンを生成するハイブリッド細胞の作製を伴う。それらの別々の単離は、ポリクローナル抗血清を調製する場合と同じ方法を使用して実施する。
【００４９】
ポリクローナル抗体は、動物の能動免疫化によって得ることができる。この目的で、例えば、適切な動物（例えばウサギ）に、適切な抗原であるヒトカンナビノイド受容体又はタンパク質Ｓ−１００のいずれかの一連の注射を受けさせる。動物の免疫系により、対応する抗体が生成し、それを公知の様式で動物から採取する。この手順により、単一特異性の抗体が豊富な血清を調製することが可能になる。
【００５０】
所望であれば、抗体を含有する血清は、例えば、アフィニティークロマトグラフィー、塩析による分画、又はイオン交換クロマトグラフィーを用いて精製することができる。得られた、精製された抗体濃縮富化血清を、活性化増強型の抗体を調製するための出発材料として使用することができる。生じた得られた、溶媒、好ましくは水又は水とエチルアルコールの混合物中の抗体の最初の溶液最初の、溶媒中抗体溶液、好ましくは水中抗体溶液又は水とエチルアルコールの混合物中抗体溶液の好ましい濃度は、約０．５ｍｇ／ｍＬから約５．０ｍｇ／ｍＬまでにわたる。
【００５１】
本発明の活性化増強型抗体又は本発明による組み合わせ抗体を調製するための好ましい手順は、それぞれ１００倍単位ホメオパシー希釈物Ｃ１２、Ｃ３０及びＣ２００に相当する、抗体の一次マトリックス溶液を１００１２倍希釈、１００３０倍希釈及び１００２００倍希釈した３種の水−アルコール希釈物の混合物を使用することである。固体剤形を調製するために、固体担体を、ホメオパシーのプロセスによって得られた所望の希釈物で処理する。本発明の組み合わせの固体単位剤形を得るために、担体塊に各希釈物を浸透させる。どちらの浸透の階数も、所望の組み合わせ剤形を調製するために適している。
【００５２】
好ましい実施形態では、本発明を含む活性化増強型を調製するための出発材料は、動物に産生させた、対応する抗原、すなわち、ヒトカンナビノイド受容体及び／又はタンパク質Ｓ−１００に対するポリクローナル抗体である。
【００５３】
ヒトカンナビノイド受容体に対する活性化増強型のポリクローナル抗体を得るために、所望の抗原を免疫原として実験動物、好ましくは、ウサギに注射することができる。ヒトカンナビノイド受容体に対するポリクローナル抗体を得るために、ヒトカンナビノイド受容体の分子全体を使用することが可能である。ヒトカンナビノイド受容体の以下の配列（配列番号１）が、適切な抗原として特に意図されている：
配列番号１  ヒトＣＢ１受容体
2013535436.tif 000003
2013535436.tif 000004
2013535436.tif 000005
配列番号２  ヒトＣＢ２受容体
2013535436.tif 000006
2013535436.tif 000007
【００５４】
好ましくは、ヒトカンナビノイド受容体のポリペプチド断片が、ウサギの免疫化のための免疫原（抗原）として使用される。ヒトカンナビノイド受容体のポリペプチド断片を得るためのポリクローナル抗体を得るために、ヒトカンナビノイド受容体の合成ペプチドを免疫原（抗原）として使用することが可能である。そのような抗原に適した配列（ヒトＣＢ１受容体）は以下の通りである：
配列番号３
2013535436.tif 000008
配列番号４
2013535436.tif 000009
配列番号５
2013535436.tif 000010
配列番号６
2013535436.tif 000011
配列番号７
2013535436.tif 000012
配列番号８
2013535436.tif 000013
配列番号９
2013535436.tif 000014
配列番号１０
2013535436.tif 000015
配列番号１１
2013535436.tif 000016
配列番号１２
2013535436.tif 000017
配列番号１３
2013535436.tif 000018
配列番号１４
2013535436.tif 000019
配列番号１５
2013535436.tif 000020
配列番号１６
2013535436.tif 000021
【００５５】
ヒトカンナビノイド受容体に対する出発ポリクローナル抗体を調製するための例示的な手順は、以下の通り説明することができる。血液試料を採取する７〜９日前に、所望の抗原を、ウサギに１〜３回静脈内注射して、ウサギの血流中のポリクローナル抗体のレベルを上昇させる。免疫化したら、抗体レベルを検査するために血液試料を取得する。一般には、可溶性抗原の免疫応答の最大レベルは、抗原を最初に注射した後４０〜６０日以内に実現される。第１の免疫化サイクルが達成されたら、ウサギを３０日のリハビリテーション期間におき、その後、更に１〜３回静脈内注射して再免疫化を実施する。
【００５６】
所望の抗体を含有する抗血清を得るために、ウサギから、免疫化されたウサギの血液を採取し、５０ｍＬの遠心管に入れる。管の側面に形成された生成物である血餅を木べらで除去し、管の中心の血餅にロッドを入れる。次いで、血液を冷蔵庫に約４０℃の温度で一晩置く。次の日に、へらの上の血餅を除去し、残りの液体を１分当たり１３，０００回転で１０分間遠心分離する。上清の流体が標的抗血清である。得られた抗血清は一般には黄色である。抗血清に、２０％のＮａＮ３（重量濃度）を最終濃度が０．０２％になるまで加え、使用する前に、−２０℃の温度で凍結した状態で保管する、又は、ＮａＮ３なしで−７０℃の温度で保管する。カンナビノイド受容体に対する標的抗体を抗血清から分離するためには、以下の固相吸収の連続が適している：
【００５７】
ウサギの抗血清１０ｍＬを０．１５ＭのＮａＣｌで２倍希釈し、その後、６．２６ｇのＮａ２ＳＯ４を加え、混合し、４℃で１２〜１６時間インキュベートする。沈渣を遠心分離によって除去し、リン酸緩衝液１０ｍＬ中に希釈し、同じ緩衝液に対して室温で一晩にわたって透析する。沈渣を除去した後、溶液をリン酸緩衝液によって平衡させたＤＥＡＥ−セルロースカラムに適用する。溶出液の２８０ｎｍにおける光学濃度を測定することによって抗体画分を決定する。
【００５８】
単離された粗製の抗体を、アフィニティークロマトグラフィー法を使用し、得られた抗体を、クロマトグラフィー媒体の不溶性マトリックス上にあるカンナビノイド受容体に付着させることによって精製し、その後濃縮した水性塩類溶液により溶出させる。
【００５９】
得られた緩衝溶液を、活性化増強型の抗体を調製するために用いるホメオパシー希釈プロセスの最初の溶液として使用する。カンナビノイド受容体に対する抗原精製ポリクローナルウサギ抗体の最初のマトリックス溶液の好ましい濃度は０．５〜５．０ｍｇ／ｍＬ、好ましくは、２．０〜３．０ｍｇ／ｍＬである。
【００６０】
神経細胞並びにグリア細胞（星状細胞及び乏突起膠細胞）によって発現される脳特異的Ｓ１００タンパク質は、直接的に、又は他のタンパク質との相互作用を通じて、正常な脳機能を維持するためのいくつかの機能をＣＮＳにおいて果たし、これらの機能には、神経細胞の学習プロセス及び記憶プロセス、成長、並びに生存能力に影響を及ぼすことや神経組織における代謝プロセスの調節などが含まれる。脳特異的タンパク質Ｓ１００に対するポリクローナル抗体を得るために、脳特異的タンパク質Ｓ１００が使用され、その物理的特性及び化学的特性は、論文Ｍ．Ｖ．Ｓｔａｒｏｓｔｉｎ、Ｓ．Ｍ．Ｓｖｉｒｉｄｏｖ、Ｎｅｕｒｏｓｐｅｃｉｆｉｃ  Ｐｒｏｔｅｉｎ  Ｓ−１００、Ｐｒｏｇｒｅｓｓ  ｏｆ  Ｍｏｄｅｒｎ  Ｂｉｏｌｏｇｙ、１９７７、第５巻、１７０〜１７８ページにおいて説明され、書籍Ｍ．Ｂ．Ｓｈｔａｒｋ、Ｂｒａｉｎ−Ｓｐｅｃｉｆｉｃ  Ｐｒｏｔｅｉｎ  Ａｎｔｉｇｅｎｅｓ  ａｎｄ  Ｆｕｎｃｔｉｏｎｓ  ｏｆ  Ｎｅｕｒｏｎ、「Ｍｅｄｉｃｉｎｅ」、１９８５；１２〜１４ページにおいて見出される。脳特異的タンパク質Ｓ１００は、以下の技術によって、雄ウシ脳組織から割り当てられる（ａｌｌｏｃａｔｅｄ）。
−特殊な粉砕機を用いて、液体窒素中で凍結させた雄ウシ脳組織を粉末に変化させる；
−抽出用緩衝液を用いてホモジナイゼーションして、タンパク質を１：３の比（重量／体積）で抽出する；
−ホモジネートを６０℃で１０分間加熱し、次いで、氷浴中で４℃まで冷却する；
−遠心分離によって、熱不安定性タンパク質を除去する；
−硫安分画を段階的に実施し、沈降したタンパク質を続いて除去する；
−ｐＨを４．０に落とすことによって達成される１００％飽和硫酸アンモニウムを用いて、Ｓ−１００タンパク質を含有する画分を沈殿させる。遠心分離によって、所望の画分を回収する；
−ＥＤＴＡ及びメルカプトエタノールを含有する最小限の体積の緩衝液に沈殿物を溶解し、脱イオン水を用いて沈殿物を透析し、凍結乾燥する；
−酸性タンパク質を分画した後に、イオン交換媒体、ＤＥＡＥ−セルロースＤＥ−５２、次いでＤＥＡＥ−セファデックスＡ−５０中でのクロマトグラフィーを続ける；
−セファデックスＧ−１００を用いたゲル濾過により、分子量に基づいて、Ｓ−１００タンパク質を含有する回収し透析した画分を分割する；
−精製されたＳ−１００タンパク質を透析し、凍結乾燥する。
【００６１】
精製された脳特異的タンパク質Ｓ−１００の分子量は２１，０００Ｄである。
【００６２】
アスパラギン酸及びグルタミン酸が高濃度であるため、脳特異的タンパク質Ｓ−１００は酸性度が高く、同定を容易にするポリアクリルアミドの不連続緩衝液系における電気浸透の間、極端な陽極位置を占める。
【００６３】
Ｓ−１００タンパク質に対するポリクローナル抗体は、アジュバントを使用して、カンナビノイド受容体抗体に関して記載されている方法と同様の方法によって得ることもできる。Ｓ−１００タンパク質の分子全体を、ウサギの免疫化のための免疫原（抗原）として使用することができる：
配列番号１７−ウシＳ１００Ｂ
2013535436.tif 000022
配列番号１８−ヒトＳ１００Ｂ
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配列番号１９−ヒトＳ１００Ａ１
2013535436.tif 000024
配列番号２０−ウシＳ１００Ａ１
2013535436.tif 000025
【００６４】
抗血清を得るために、フロイント完全アジュバントを入れた、運搬剤としてのメチル化雄ウシ血清アルブミンと複合体をなした脳特異的Ｓ−１００タンパク質又はＳ−１００タンパク質の混合物（抗原）を調製し、割り当てられた脳特異的タンパク質Ｓ−１００に添加し、実験動物の真皮下に注射する。すなわち、ウサギの背中領域に１〜２ｍＬの量を注射する。８日目、１５日目に免疫化を反復して行う。２６日目及び２８日目に（例えば、耳の静脈から）血液試料を採取する。
【００６５】
得られる抗血清の力価は１：５００〜１：１，０００であり、神経組織の抽出物とは単一の沈降素バンドを形成するが、ヘテロロジカルボディ（ｈｅｔｅｒｏｌｏｇｉｃａｌ  ｂｏｄｉｅｓ）の抽出物とは反応せず、純粋なタンパク質Ｓ−１００及び神経組織の抽出物のどちらとも単一の沈降素ピークを形成することから、得られた抗血清が単一特異性であることが示唆される。
【００６６】
本発明の活性化増強型の抗体は、最初の溶液から、ホメオパシーポテンタイゼーションによって、好ましくは、約０．５ｍｇ／ｍＬから約５．０ｍｇ／ｍＬまでの、溶媒、好ましくは水又は水とエチルアルコールの混合物中の抗体の最初の溶液の濃度から出発して、（最初の溶液から開始する）前の溶液のそれぞれ（最初の溶液から開始する）１部を９部（１０倍希釈（ｄｅｃｉｍａｌ  ｄｉｌｕｔｉｏｎ））、又は９９部（１００倍希釈）、又は９９９部（１，０００倍希釈（ｍｉｌｌｅｓｉｍａｌ  ｄｉｌｕｔｉｏｎ））の中性の溶媒中に、入れて最初の、溶媒中抗体溶液、好ましくは水中抗体溶液又は水とエチルアルコールの混合物中抗体溶液の濃度を約０．５ｍｇ／ｍＬから約５．０ｍｇ／ｍＬまでから開始して段階希釈することによる比例的な濃度低下の方法を外部からの衝撃方法と併せて用いて調製することができる。外部からの衝撃は、各希釈物を多数回垂直方向に振とうすること（ダイナマイゼーション）を伴うことが好ましい。その後の、所要のポーテンシーレベル、又は希釈因子に至るまでの希釈のそれぞれには別々の容器を使用することが好ましい。この方法は、ホメオパシーの技術分野では広く受け入れられている。例えば、明示された目的で参照により本明細書に組み込まれるＶ．  Ｓｃｈｗａｂｅ  「Ｈｏｍｅｏｐａｔｈｉｃ  ｍｅｄｉｃｉｎｅｓ」、Ｍ．、１９６７年、１４〜２９頁を参照されたい。
【００６７】
例えば、１２−１００倍希釈物（Ｃ１２と示される）を調製するために、３．０ｍｇ／ｍＬの濃度のヒトカンナビノイド受容体に対する抗体の最初のマトリックス溶液１部を、中性の、水を含む又は水−アルコールを含む溶媒（好ましくは、１５％エチルアルコール）９９部中に希釈し、次いで何回も（１０回以上）垂直方向に振とうして、第１の１００倍単位希釈物（Ｃ１と示される）を創出する。第１の１００倍希釈物Ｃ１から第２の１００倍単位希釈物（Ｃ２）を調製する。この手順を１１回繰り返して第１２の１００倍単位希釈物Ｃ１２を調製する。したがって、第１２の１００倍単位希釈物Ｃ１２は、異なる容器内で、３．０ｍｇ／ｍＬの濃度の抗体の最初のマトリックス溶液１部を中性の溶媒９９部中に１２回段階希釈することによって得られる溶液を表し、１００倍単位ホメオパシー希釈物Ｃ１２に相当する。関連する希釈因子を用いて同様の手順を実施して希釈物Ｃ３０及びＣ２００を得る。中間希釈物を所望の生物学的モデルにおいて試験して活性を確認することができる。本発明を含む抗体の好ましい活性化増強型は、各活性化増強型のＣ１２、Ｃ３０、及びＣ２００希釈物の混合物である。活性な物質の種々のホメオパシー希釈物（主に１００倍単位希釈物）の混合物を生物活性のある液体成分として使用する場合、組成物（例えば、Ｃ１２、Ｃ３０、Ｃ５０、Ｃ２００）の各成分は、上記の手順に従って、最後から二番目の希釈物が得られるまで（例えば、それぞれＣ１１、Ｃ２９、及びＣ１９９まで）別々に調製し、次いで各成分１部を、混合物の組成に従って１つの容器に加え、所要量（例えば、１００倍希釈するためには９７部）の溶媒と混合する。
【００６８】
活性な物質を種々のホメオパシー希釈物、例えば、１０倍希釈物及び／又は１００倍希釈物（Ｄ２０、Ｃ３０、Ｃ１００又はＣ１２、Ｃ３０、Ｃ５０など）の混合物として使用することが可能であり、その効率は、希釈物を適切な生物学的モデル、例えば、本明細書の実施例に記載のモデルにおいて試験することによって実験的に決定される。
【００６９】
増強及び濃度低下の過程では、垂直方向の振とうを、超音波、電磁場への外部からの曝露又はホメオパシーの技術分野で受け入れられている任意の同様の外部からの衝撃手順と置き換えることができる。
【００７０】
好ましくは、本発明の医薬組成物は、液体の形態又は固体単位剤形とすることができる。医薬組成物が２つの抗体を含む場合、液体形態の医薬組成物は、好ましくは、ヒトカンナビノイド受容体に対する活性化増強型抗体及びタンパク質Ｓ−１００に対する活性化増強型抗体が１：１の比率である、２つの抗体の混合物を含む。好ましい液体担体は水又は水−エチルアルコール混合物である。
【００７１】
本発明の医薬組成物の固体単位剤形は、薬学的に許容される固体担体に、活性化増強型、活性成分の水溶液又は水−アルコール溶液の混合物を浸透させることを用いることによって調製することができる。医薬組成物が２つの抗体を含む場合、活性成分は、主に１：１の比率で混合し、液体剤形で用いる。あるいは、必要な希釈物のそれぞれを継続的に担体に浸透させることができる。どちらの浸透の階数も受け入れられる。
【００７２】
好ましくは、固体単位剤形の医薬組成物は、活性化増強型抗体の水希釈物又は水−アルコール希釈物を予め染み込ませた薬学的に許容される担体の顆粒剤から調製する。固体剤形は、錠剤、カプセル剤、ロゼンジ、及びその他を含めた製薬技術分野で公知の任意の形態であってよい。不活性な医薬成分として、医薬品の製造において使用されるグルコース、スクロース、マルトース、デンプン、イソマルトース、イソマルト及び他の単糖、オリゴ糖及び多糖、並びに上記の不活性な医薬成分と、潤滑剤、崩壊剤、結合剤及び着色料を含めた他の薬学的に許容される賦形剤、例えば、イソマルト、クロスポビドン、シクラミン酸ナトリウム、サッカリンナトリウム、無水クエン酸など）との技術的混合物を使用することができる。好ましい担体は、ラクトース及びイソマルトである。薬剤剤形は、標準の製薬用賦形剤、例えば、結晶セルロース及びステアリン酸マグネシウムを更に含んでよい。
【００７３】
固体単位剤形の調製物の例は下に記載されている。経口用の固体形態を調製するために、ラクトースの顆粒１００〜３００μｍを、ヒトカンナビノイド受容体に対する活性化増強型抗体及び／又はＳ−１００に対する活性化増強型抗体の水溶液又は水−アルコール溶液に、ラクトース５ｋｇ又は１０ｋｇに対して抗体溶液１ｋｇ（１：５〜１：１０）の比率で浸透させる。浸透に影響を及ぼすために、ラクトース顆粒を、煮沸ベッドプラント（例えばＨｕｔｔｌｉｎ  ＧｍｂＨの「Ｈｕｔｔｌｉｎ  Ｐｉｌｏｔｌａｂ」）中の流動煮沸ベッド中で染み込ませるための注水に曝露させ、その後、４０℃未満の加熱した空気の流れによって乾燥する。活性化増強型抗体を染み込ませた乾燥顆粒（１０〜３４重量部）の推定量をミキサーに入れ、２５〜４５重量部の「染み込ませていない」純粋なラクトース（処理効率を低下させることなく科学技術的なプロセスの費用を縮小し、それを単純化及び加速するために使用する）と、０．１〜１重量部のステアリン酸マグネシウム、及び３〜１０重量部の結晶セルロースと一緒に混合する。得られた錠剤集団を均一に混合し、（例えば、Ｋｏｒｓｃｈ−ＸＬ４００打錠機において）直接乾式プレスすること（例えば、Ｋｏｒｓｃｈ−ＸＬ４００打錠機において）によって錠剤化して、１５０〜５００ｍｇ、好ましくは、３００ｍｇの丸剤を形成する。錠剤化した後、活性化増強型抗体の組み合わせの水−アルコール溶液（丸剤１粒当たり３．０〜６．０ｍｇ）を染み込ませた丸剤３００ｍｇを得る。担体に浸透させるために使用する組み合わせの各成分は、１００倍単位ホメオパシー希釈物、好ましくは、Ｃ１２、Ｃ３０及びＣ２００の混合物の形態である。
【００７４】
本発明はいかなる特定の理論にも限定されるものではないが、本明細書に記載の活性化増強型抗体は、分子型抗体を、そのような分子型に帰する生物活性を有するのに十分な量では含有しないと考えられている。本発明の医薬組成物及び本発明の医薬組成物の組み合わせの生物活性は、添付の実施例において十分に実証されている。
【００７５】
ヒトカンナビノイド受容体に対する活性化増強型抗体を含む医薬組成物は、肥満及び関連する代謝障害に苦しんでいる患者に投与するために使用することができる。
【００７６】
添付の実施例において示すように、本発明の活性化増強型抗体を投与すると、体重が減少し、体重増加が減少し、中心性肥満が減少し、かつ摂食量の減少が促進される。
【００７７】
一実施形態では、本発明は、ヒトカンナビノイド受容体、好ましくはカンナビノイド受容体１に対する活性化増強型抗体を含む医薬組成物を投与することによって、肥満及び関連する代謝障害を治療する方法を提供する。
【００７８】
別の実施形態では、本発明は、ヒトカンナビノイド受容体、好ましくはカンナビノイド受容体１に対する活性化増強型抗体を含む医薬組成物を投与することによって、摂食量の減少から利益を受けると予想される対象において摂食量の減少を促進する方法を提供する。
【００７９】
一実施形態では、身体計測パラメータ、例えば、ウエスト周囲径、ウエスト対ヒップ比、及びウエスト対身長比を変更するための方法が提供される。一実施形態では、対象のウエスト周囲径を減少させるための方法が提供され、この方法は、ヒトカンナビノイド受容体に対する活性化増強型抗体を含む医薬組成物を、それを必要とする対象に、対象のウエスト周囲径を減少させるのに有効な量で投与することを含む。一実施形態では、ヒトカンナビノイド受容体は、ヒトカンナビノイド受容体１である。一実施形態では、対象のウエスト周囲径は、少なくとも約１％減少する。他の実施形態では、対象のウエスト周囲径は、ヒトカンナビノイド受容体に対する活性化増強型抗体を含む医薬組成物の投与前の対象と比べて、少なくとも約１．５％、２％、２．５％、３％、又は３．５％減少する。一実施形態では、対象のウエスト周囲径は、少なくとも約１ｃｍ減少する。他の実施形態では、対象のウエスト周囲径は、ヒトカンナビノイド受容体に対する活性化増強型抗体を含む医薬組成物の投与前の対象と比べて、少なくとも約２ｃｍ、３ｃｍ、又は４ｃｍ減少する。
【００８０】
別の実施形態では、対象の体重を減少させるための方法が提供され、この方法は、ヒトカンナビノイド受容体に対する活性化増強型抗体を含む医薬組成物を、それを必要とする対象に、対象の体重を減少させるのに有効な量で投与することを含む。一実施形態では、ヒトカンナビノイド受容体は、ヒトカンナビノイド受容体１である。一実施形態では、対象の体重は、少なくとも約１５％減少する。他の実施形態では、対象の体重は、ヒトカンナビノイド受容体に対する活性化増強型抗体を含む医薬組成物の投与前の対象と比べて、少なくとも約５％、１０％、又は１５％減少する。
【００８１】
別の実施形態では、対象の体重増加を減少させるための方法が提供され、この方法は、ヒトカンナビノイド受容体に対する活性化増強型抗体を含む医薬組成物を、それを必要とする対象に、対象の体重増加を減少させるのに有効な量で投与することを含む。一実施形態では、ヒトカンナビノイド受容体は、ヒトカンナビノイド受容体１である。一実施形態では、対象の体重増加は、少なくとも約６０％減少する。他の実施形態では、対象の体重増加は、ヒトカンナビノイド受容体に対する活性化増強型抗体を含む医薬組成物の投与前の対象と比べて、少なくとも約１０％、２５％、３０％、５０％、又は６０％減少する。
【００８２】
ヒトカンナビノイド受容体に対する活性化増強型抗体と、Ｓ−１００タンパク質に対する活性化増強型抗体とを含む医薬組成物は、精神活性物質への依存、好ましくはニコチン依存に苦しんでいる患者に投与するために使用することができる。
【００８３】
驚くべきことに、出願人は、ヒトカンナビノイド受容体に対する活性化増強型抗体とＳ−１００タンパク質に対する活性化増強型抗体の組み合わせが、物質乱用の治療において有用であることを発見した。
【００８４】
一実施形態では、ヒトカンナビノイド受容体に対する活性化増強型抗体とＳ−１００タンパク質に対する活性化増強型抗体の組み合わせは、ニコチン依存の治療において有用である。
【００８５】
ヒトカンナビノイド受容体１に対する活性化増強型抗体と、Ｓ−１００タンパク質に対する活性化増強型抗体とを含む医薬組成物をニコチン依存患者の治療のために投与すると、抑うつ及び不安などの基準に基づいて評価される生活の質のパラメータが改善される。
【００８６】
ヒトカンナビノイド受容体１に対する活性化増強型抗体と、Ｓ−１００タンパク質に対する活性化増強型抗体とを含む医薬組成物をニコチン依存患者の治療のために投与すると、ＭＰＳＳ試験のデータの分析によって測定されるように、より簡単かつ苦しまずに禁煙に耐える能力が向上することが実験で実証されている。
【００８７】
ニコチン依存度に関するファガストローム試験によって測定される値が４より大きい、ニコチン依存が重度ではない患者にこの組み合わせを投与すると、４週間で少なくとも２３％、８週間で少なくとも３６％、１２週間で少なくとも４１％の喫煙減少がもたらされることが実験で実証されている。また、ニコチン依存が重度ではない患者にこの組み合わせを投与すると、ファガストローム試験の最初の平均点数値に少なくとも１．３４±０．１４という統計的に有意な減少がもたらされることも実験で実証されている。
【００８８】
ニコチン依存度に関するファガストローム試験によって測定される値が７以上である、重度のニコチン依存患者にこの組み合わせを投与すると、４週間で少なくとも１１％、８週間で少なくとも２２％、１２週間で少なくとも３０％の喫煙減少がもたらされることが実験で実証されている。また、ニコチン依存が重度ではない患者にこの組み合わせを投与すると、ファガストローム試験の最初の平均点数値に少なくとも４．４２±０．３０という統計的に有意な減少がもたらされることも実験で実証されている。
【００８９】
一実施形態では、それぞれが組み合わせの活性化増強型抗体の１つを含有する、２つの独立して調製された単位剤形の別々の投与も意図されている。
【実施例】
【００９０】
添付の非限定的な実施例を参照して本発明を更に例示する。
【００９１】
実施例１
最初のマトリックス溶液を１００１２倍、１００３０倍、１００２００倍に高希釈することによって得られる、超低用量の、抗原に対して精製したヒトカンナビノイド受容体１型に対するポリクローナルウサギ抗体（ＵＬＤ抗ＣＢ１）（１００倍単位ホメオパシー希釈物Ｃ１２、Ｃ３０、及びＣ２００の混合物）がカンナビノイド受容体１型の機能に与える影響を、２種類のレジメ、すなわちアゴニストレジメ及びアンタゴニストレジメにおいてｉｎ  ｖｉｔｒｏで試験した。
【００９２】
アゴニストレジメ：
プレートのウェル（９６ウェルプレート、ウェル体積２５０μｌ）に入れる前に、２０ｍＭ  ＨＥＰＥＳを含有するＨＢＳＳ緩衝液（Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ）（ｐＨ＝７．４）に細胞を懸濁させた。これらの細胞は、ＵＬＤ抗ＣＢ１調製物２０μｌを添加して室温で１０分間、一緒にプレインキュベートした。プレインキュベーション後、アデニル酸シクラーゼ活性化因子ＮＫＨ４７７を添加した。これらの細胞を３７℃で１０分間インキュベートし、溶解させた。蛍光性アクセプター（ｃＡＭＦ、Ｄ２によってマークされている）及び蛍光性ドナー（ｃＡＭＦ抗体、ユーロピウムクリプタートによってマークされている）をウェルに導入した。
【００９３】
基礎対照として、ＵＬＤ抗ＣＢ１の代わりにＨＢＳＳ緩衝液（２０μｌ）の存在下で細胞懸濁液をプレインキュベートした。刺激を受ける場合の対照として、ＵＬＤ抗ＣＢ１の代わりに参照ＣＰ５５９４０アゴニスト（２０μｌ）の存在下で細胞懸濁液をプレインキュベートした。
【００９４】
ホモジニアス時間分解蛍光法（ＨＴＲＦ）によって、機能活性（ｃＡＭＦ濃度）を評価した。基礎対照の蛍光強度をバックグラウンドとみなし、実験データ（ＵＬＤ抗ＣＢ１）及び対照（ＣＰ５５９４０）の蛍光強度からその値を差し引いた。
【００９５】
ＵＬＤ抗ＣＢ１の導入に対する細胞の特異的応答の測定値は、次の式に従って算出した：実験の蛍光強度（ＵＬＤ抗ＣＢ１）−基礎対照の蛍光強度。
【００９６】
参照アゴニスト（ＣＰ５５９４０）の導入に対する細胞の特異的応答の測定値は、次の式に従って算出した：対照（ＣＰ５５９４０）の蛍光強度−基礎対照の蛍光強度。
【００９７】
結果は、刺激を受ける場合の対照における参照アゴニストの導入に対して起こった細胞の特異的応答に対するパーセンテージで表した：
参照アゴニストの応答に対する比率（％）＝（（特異的応答の測定値／参照アゴニストの導入に対する対照の特異的応答）×１００％）。
【００９８】
アンタゴニストレジメ：
プレートのウェル（９６ウェルプレート、ウェル体積２５０μｌ）に入れる前に、２０ｍＭ  ＨＥＰＥＳを含有するＨＢＳＳ緩衝液（Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ）（ｐＨ＝７．４）に細胞を懸濁させた。これらの細胞は、ＵＬＤ抗ＣＢ１  ２０μｌと共に室温で５分間、一緒にプレインキュベートした。参照ＣＰ５５９４０アゴニストをウェルに添加した後、細胞を室温で１０分間インキュベートした。アデニル酸シクラーゼ活性化因子ＮＫＨ４７７をウェルに添加した。これらの細胞を３７℃で１０分間インキュベートし、溶解させた。蛍光性アクセプター（ｃＡＭＦ、Ｄ２によってマークされている）及び蛍光性ドナー（ｃＡＭＦ抗体、ユーロピウムクリプタートによってマークされている）をウェルに導入した。
【００９９】
基礎対照として、ＵＬＤ抗ＣＢ１の代わりに参照アンタゴニストＡＭ２８１（２０μｌ）の存在下で細胞懸濁液をプレインキュベートした。参照ＣＰ５５９４０アゴニストは、基礎対照と一緒にはウェルに添加しなかった。刺激を受ける場合の対照として、２０ｍＭ  ＨＥＰＥＳを含有するＨＢＳＳ緩衝液（ｐＨ＝７．４）及び参照ＣＰ５５９４０アゴニスト（２０μｌ）の存在下で細胞懸濁液をプレインキュベートした。
【０１００】
ホモジニアス時間分解蛍光法（ＨＴＲＦ）によって、機能活性（ｃＡＭＦ濃度）を評価した。基礎対照の蛍光強度をバックグラウンドとみなし、実験（ＵＬＤ抗Ｃｂ１）及び対照（ＣＰ５５９４０）の蛍光強度からその値を差し引いた。
【０１０１】
ＵＬＤ抗ＣＢ１の導入に対する細胞の特異的応答の測定値は、次の式に従って算出した：実験の蛍光強度（ＵＬＤ抗ＣＢ１）−基礎対照の蛍光強度。
【０１０２】
参照アゴニスト（ＣＰ５５９４０）の導入に対する細胞の特異的応答の測定値は、次の式に従って算出した：対照（ＣＰ５５９４０）の蛍光強度−基礎対照の蛍光強度。
【０１０３】
結果は、対照における参照アゴニストの導入に対して起こった細胞の特異的応答の阻害率（パーセンテージ）で表した：
参照アゴニストの応答の阻害率（％）＝１００％−（（特異的応答の測定値／参照アゴニストの導入に対する対照の特異的応答）×１００％）。
【０１０４】
調査の結果として、ｃＡＭＦの細胞内濃度に基づいて測定されるように、ＵＬＤ抗ＣＢ１がカンナビノイド受容体１型の機能活性を変更することが示された（表１を参照されたい）。
【０１０５】
試験物質（カンナビノイド受容体１型に対する超低用量の抗体（ホメオパシー希釈物Ｃ１２、Ｃ３０、及びＣ２００の混合物）は、カンナビノイド受容体１型アゴニスト活性を示した。アゴニスト作用の大きさは、標準のＣＰ５５９４０アゴニストの作用を基準として２１％であった（標準アゴニストの作用を１００％とみなす）。
【０１０６】
【表１】
2013535436.tif 000026
【０１０７】
実施例２
試験物質は、最初のマトリックス溶液を１００１２倍、１００３０倍、１００２００倍に高希釈することによって得られる、超低用量の、抗原に対して精製したヒトカンナビノイド受容体１型に対するポリクローナルウサギ抗体（ＵＬＤ抗ＣＢ１）（１００倍単位ホメオパシー希釈物Ｃ１２、Ｃ３０、及びＣ２００の混合物）の水溶液の形態であった。
【０１０８】
Ｃ５７Ｂ１系統の雄マウス４０匹を試験で使用した（試験開始時の体重：１３．５〜１５．５ｇ）。マウス１０匹に、通常の標準飼料を与え（標準食）、マウス３０匹に、高カロリーの添加物を加えた標準飼料を与え（高カロリー食）、同時に、蒸留水（対照、０．４ｍＬ／マウス）又はスブトラミン（Ｓｕｂｕｔｒａｍｉｎｅ）（Ｍｅｒｉｄｉａ  １０ｍｇカプセル剤、Ａｂｂｏｔｔ  ＧｍｂＨ、ドイツ）（１０ｍｇ／Ｋｇ）又はＵＬＤ抗ＣＢ１（０．４ｍＬ／マウス）のいずれかを与えた。全調製物を５ヶ月間、１日１回、胃内に与えた。試験物質を導入する前に、マウスの飼料消費量を測定した。また、その後、マウスの飼料消費量を毎週測定した。飼料消費量は、試験の１ヶ月後及び２ヶ月後のマウスによって消費された食物の平均量（単位：グラム）として、並びにマウス体重１０ｇ当たりの飼料平均量として評価した。
【０１０９】
観察期間の全体を通して、低カロリー食を与えられたマウスは、高カロリー食を与えられたマウスより平均で１５％少ない飼料を消費した（表２）。スブトラミン及びＵＬＤ抗ＣＢ１のどちらも、飼料消費量を減少させた。スブトラミンの効果がいくらか高く現れた。すなわち、飼料消費量が１週間に１９．３％減少した（ｐ＜０．０５）のに対し、ＵＬＤ抗ＣＢ１の場合は、対照を基準として飼料消費量が９．３％減少した（ｐ＞０．０５）。表２は、試験の結果、具体的には、Ｃ５７Ｂ１マウスの飼料消費量に対するＵＬＤ抗ＣＢ１及びスブトラミンの影響を示す（５ヶ月の観察期間を通しての平均値）、Ｍ±ｍ。
【０１１０】
【表２】
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＊＊−対照との差が統計的に有意であり、ｐ＜０．０１である。
＃−標準食の場合との差が統計的に有意であり、ｐ＜０．０５である。
【０１１１】
実験の２０週目に、高脂肪食を与えられＵＬＤ抗ＣＢ１を与えられたマウスは、実験の１週目と比べて、より多くの飼料を消費した。これを図１に示す。図１は、実験の最終２０週目の後の、Ｃ５７Ｂ１マウスの体重の増加及び体重１０ｇ当たりの食物消費量に対する、ＵＬＤ抗ＣＢ１及びスブトラミンの効果を示す。
【０１１２】
ＵＬＤ抗ＣＢ１を与えられたマウスにおいて、対照と比べて５１．２％の体重増加の減少が観察された。スブトラミンにより、実験の最終２０週目に、対照群と比べて体重が５１．５％減少した。
【０１１３】
実施例３
試験物質は、最初のマトリックス溶液を１００１２倍、１００３０倍、１００２００倍に高希釈することによって得られる、超低用量の、抗原に対して精製したヒトカンナビノイド受容体１型に対するポリクローナルウサギ抗体（ＵＬＤ抗ＣＢ１）（１００倍単位ホメオパシー希釈物Ｃ１２、Ｃ３０、及びＣ２００の混合物）の水溶液の形態であった。
【０１１４】
Ｃ５７Ｂ１系統の雄マウス３３匹を試験で使用した（試験開始時の体重：１３．０９±０．７３８ｇ）。これらのマウスに、脂肪含有量の高い（４５％）改変食、及び同時に蒸留水（対照、０．２ｍＬ／マウス）又はスブトラミン（１０ｍｇ／Ｋｇ）若しくはＵＬＤ抗ＣＢ１（０．２ｍＬ／マウス）のいずれかを与えた。ＵＬＤ抗ＣＢ１調製物は全て、２ヶ月間、１日１回、胃内に与えた。調製物を（最初に）導入し始めるまで、更に、それらの導入開始後毎週、電子秤Ｐｈｉｌｉｐｓ  Ｃｕｃｉｎａ  ＨＲ  ２３９０１６（ハンガリー）でマウスの体重を測定した。マウスの体重増加は、最初の体重に対する比率として評価した。
【０１１５】
導入後の６週目から、ＵＬＤ抗ＣＢ１は、高脂肪食で維持されたマウスの体重増加を低く抑えた。表３は、高脂肪食及びＵＬＤ抗ＣＢ１（０．２ｍＬ／マウス）又はスブトラミン（１０ｍｇ／Ｋｇ）を与えられたＣ５７Ｂ１６マウスの毎週の平均体重（グラム）を示す（Ｍ±ｍ）。表３は、マウスの体重増加を示す。
【０１１６】
【表３】
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注：＊−対照群と比べてｐ＜０．０５；
＊＊−対照群と比べてｐ＜０．００１
【０１１７】
先に示したように、ＵＬＤ抗ＣＢ１は、高脂肪食を与えられたマウスの体重増加を低く抑えて、食物消費量を減少させ、その有効性は、体重減少のために広く使用されている公知の化合物であるスブトラミンに劣らない。
【０１１８】
実施例４
最初のマトリックス溶液を１００１２倍、１００３０倍、１００２００倍に高希釈することによって得られる、超低用量の、抗原に対して精製したヒトカンナビノイド受容体１型に対する活性化増強型のポリクローナルウサギ抗体（１００倍単位ホメオパシー希釈物Ｃ１２、Ｃ３０、及びＣ２００の混合物（ＵＬＤ抗ＣＢ１）の水−アルコール溶液を染み込ませた３００ｍｇ錠剤（６ｍｇ／錠）。
【０１１９】
年齢２０歳から６９歳まで（平均年齢は４０．２±１．２６歳であった）の対象８０名が試験に参加した（男性２０名及び女性６０名）。このうちの６８．７％は、過剰な体重又は肥満（グレードＩ〜ＩＩＩ）に苦しんでいた。これらの対象に１日２回、錠剤１錠を与えた。表４は、この試験に含まれた患者の人口統計学的指標及び身体計測指標を示す。この試験に参加した対象全員のデータ（ｎ＝８０）を、安全性分析に含めた。対象観察期間全体を通じて、調製物の良好な許容性が認められた。有害作用はなかった。試験群の対象全員が、試験プロトコルによって定められた期限において治療を完了し、早くに離脱した患者は１人もいなかった。対象の体重変化に対するＵＬＤ抗ＣＢ１の影響を評価する間に、調製物の使用により、５６名（７０％）の患者の体重が減少したことが明らかになった。２４名（３０％）の患者において、体重は不変のままであるか、又はほんのわずかに増加した。しかし、そのような患者のうちの１４名（１７．５％）が、当初、正常な体重であった（ＢＭＩ＜２５Ｋｇ／ｍ２）ことに留意すべきである。
【０１２０】
【表４】
2013535436.tif 000029
【０１２１】
治療に反応した患者において、統計的に有意な体重減少（ｐ＜０．００１）が観察された。ＵＬＤ抗ＣＢ１をわずか１５日間投与した後で、体重減少は１．１Ｋｇ（１．３％）であり、１ヶ月経つと、体重減少は１．９Ｋｇ、元の値の（２．２％）に達した（図２）。
【０１２２】
治療に反応した患者において、ＵＬＤ抗ＣＢ１の投与開始後わずか一（１）週間後に、統計的に有意な（ｐ＜０．００１）ウエスト周囲径減少及び大腿周径減少が観察され、治療の終了時には、減少はそれぞれ２．３％及び２．７％に達した。表５は、ウエスト周囲径及び大腿周径の変化のダイナミクスを表す。
【０１２３】
【表５】
2013535436.tif 000030
＊＊−最初の値を基準としてｐ＜０．０１；＊＊＊−最初の値を基準としてｐ＜０．００１。
【０１２４】
視覚的アナログ尺度（ＶＡＳ）を用いて患者の空腹感を評価した際、最も強度の高い空腹感は夕方の時間帯に認められた。ＵＬＤ抗ＣＢ１投与開始後１ヶ月の終わりの時点で、夕方の時間帯の空腹レベルは、４９．４±３．７５点から４２．０±４．３２点まで有意に減少していた（ｐ＜０．００１）。また、午前及び昼間に、空腹感が低下するという注目すべき傾向もあった（午前の時間帯では２０．５±３．２３点から１３．６±１．７８点まで、昼間では４４．７±３．４５点から２７．３±３．７２点まで）。午前の空腹に関連したデータは、治療の最後の時点で統計的に有意な値に達しなかったものの（この観察結果は、最初の値が中程度であることに関連している可能性がある）、ダイナミクスは無視することができなかった。
【０１２５】
したがって、実施したＵＬＤ抗ＣＢ１の臨床試験により、試験調製物の高い許容性が確認された。この試験調製物を摂取した際に有害作用はなかった。
【０１２６】
実施例５
ニコチン依存に関するファガストローム試験
本実施例は、試験それ自体を提供する。関連するデータは、本明細書において下記に別々に更に提供する。ニコチン依存に関するファガストローム試験は、ニコチン依存の強さを評価するための試験である。参照により本明細書に組み込まれるＨｅａｔｈｅｒｔｏｎ，Ｔ．Ｆ．、Ｋｏｚｌｏｗｓｋｉ，Ｌ．Ｔ．、Ｆｒｅｃｋｅｒ，Ｒ．Ｃ．、Ｆａｇｅｒｓｔｒｏｍ，Ｋ．Ｏ．  Ｔｈｅ  Ｆａｇｅｒｓｔｒｏｍ  ｔｅｓｔ  ｆｏｒ  Ｎｉｃｏｔｉｎｅ  Ｄｅｐｅｎｄｅｎｃｅ：Ａ  ｒｅｖｉｓｉｏｎ  ｏｆ  ｔｈｅ  Ｆａｇｅｒｓｔｒｏｍ  Ｔｏｌｅｒａｎｃｅ  Ｑｕｅｓｔｉｏｎｎａｉｒｅ．  Ｂｒ  Ｊ  Ａｄｄｉｃｔ  １９９１；８６：１１１９〜２７を参照されたい。本明細書において下記に更に説明する試験において、患者は全質問に回答した。合計スコアが、ニコチン依存の程度を示す。ニコチン依存の程度は、次のように、スコアの合計に基づいて評価される。すなわち、４未満は、弱い依存、４〜６は並の程度の依存、７〜１０は強い依存である。
【０１２７】
【表６】
2013535436.tif 000031
【０１２８】
実施例６
気分と身体症状の評価尺度試験（ＭＰＳＳ）
本実施例は、試験それ自体を提供する。関連するデータは、本明細書において下記に別々に更に提供する。本明細書において下記に説明する試験において、禁煙した患者が１２個の質問に回答して（スコアは、各質問について１点から５点まで評価した）、直近２４時間の間の感情（質問１〜７）、喫煙の誘惑（質問８〜９）、及び身体症状の発現（質問１０〜１２）を評価した。患者は各質問について番号を１つだけ丸で囲んだ。結果の概要は、３つの分野に（Ｍ−質問１〜７、Ｃ−質問８〜９、及びＰ−質問１０〜１２）分けるか、又はニコチン禁断症状のレベルを反映する総合スコア（最小値（１２点）から最大値（６０点）まで変動し得る）に基づいて分けることができる。
【０１２９】
【表７】
2013535436.tif 000032
参照により本明細書に組み込まれるＷｅｓｔ，Ｒ．、Ｈａｊｅｋ，Ｐ．  Ｅｖａｌｕａｔｉｏｎ  ｏｆ  ｔｈｅ  ｍｏｏｄ  ａｎｄ  ｐｈｙｓｉｃａｌ  ｓｙｍｐｔｏｍｓ  ｓｃａｌｅ（ＭＰＳＳ）ｔｏ  ａｓｓｅｓｓ  ｃｉｇａｒｅｔｔｅ  ｗｉｔｈｄｒａｗａｌ．  Ｐｓｙｃｈｏｐｈａｒｍａｃｏｌｏｇｙ、２００４；１７７巻、１〜２号、１９５〜１９９。
【０１３０】
実施例７
不安及び抑うつの病院評価尺度（ＨＡＤＳ）
本実施例は、試験それ自体を提供する。関連するデータは、本明細書において下記に別々に更に提供する。不安及び抑うつの病院評価尺度（ＨＡＤＳ）は、主観的尺度であり、病院の入院患者及び外来患者における不安及び抑うつの徴候をスクリーニングするためのものである。参照により本明細書に組み込まれるＺｉｇｍｏｎｄ，Ａ．Ｓ．、Ｓｎａｉｔｈ，Ｒ．Ｐ．  Ｔｈｅ  Ｈｏｓｐｉｔａｌ  Ａｎｘｉｅｔｙ  ａｎｄ  Ｄｅｐｒｅｓｓｉｏｎ  ｓｃａｌｅ／／Ａｃｔａ  Ｐｓｙｃｈｉａｔｒ．Ｓｃａｎｄ．１９８３．第６７巻、３６１〜３７０ページを参照されたい。
【０１３１】
適用方法：この尺度の用紙は、患者に与えて記入してもらい、以下の指示が添えられている：
「科学研究者は、大多数の疾患の発生には感情が重要な役割を果たすと考えています。担当医師があなたの経験についてより多くのことを知れば、医師は、より効果的にあなたを手助けできます。この質問表は、あなたがどのように感じているかを担当医師が理解するのを助けるために作られたものです。質問表の左部分の番号及び文字は気にしないで下さい。各設問（ｓｔａｔｅｍｅｎｔ）を注意深く読み、先週あなたがどのように感じたかに最も良く合致する回答の隣に、左側の空いたスペースに「×」を書いて下さい。各設問についてあまり考えすぎないようにしてください。最初の印象がいつも一番良いものです。」
【０１３２】
この尺度は２つの下位尺度に分けられた１４個の設問を含む：「不安」（奇数番号の質問−１、３、５、７、９、１１、１３）及び「抑うつ」（偶数番号の質問−２、４、６、８、１０、１２、１４）。各設問には４つの考え得る回答があり、これらは心情又は感情の大きさを反映し、症状の重篤性を０（無し）から３（最大）まで漸増的に特徴付けている。
【０１３３】
結果を解釈する際、各下位尺度の指標全体が考慮に入れられ、次の３つの値範囲に分けられる。０〜７は「正常」（不安及び抑うつの信頼性が高い発現症状はない）を示し、８〜１０は、「無症状性の不安／抑うつ」を示し、１１以上は「臨床的な不安／抑うつ」を示す。
【０１３４】
【表８】
2013535436.tif 000033
参照により本明細書に組み込まれるＺｉｇｍｏｎｄ，Ａ．Ｓ．、Ｓｎａｉｔｈ，Ｒ．Ｐ．  Ｔｈｅ  Ｈｏｓｐｉｔａｌ  Ａｎｘｉｅｔｙ  ａｎｄ  Ｄｅｐｒｅｓｓｉｏｎ  ｓｃａｌｅ／／Ａｃｔａ  Ｐｓｙｃｈｉａｔｒ．Ｓｃａｎｄ．１９８３、第６７巻、３６１〜３７０ページ。
【０１３５】
実施例８
中等度のニコチン依存及び肥満を治療するためのＳ−１００タンパク質に対する超低用量の抗体とＣＢ１受容体に対する超低用量の抗体の組み合わせ及びＣＢ１受容体に対する超低用量の抗体を評価するための、二重盲検プラセボ対照比較臨床試験
最初のマトリックス溶液を１００１２倍、１００３０倍、１００２００倍に高希釈することによってそれぞれ得られる、脳特異的タンパク質Ｓ−１００に対する超低用量のポリクローナルウサギ抗体（ＵＬＤ抗Ｓ１００）及びカンナビノイド受容体１型に対する超低用量のポリクローナルウサギ抗体（ＵＬＤ抗ＣＢ１）（１００倍単位ホメオパシー希釈物Ｃ１２、Ｃ３０、及びＣ２００の混合物）の水−アルコール溶液を染み込ませた３００ｍｇ錠剤（６ｍｇ／錠）を試験で使用した（ＵＬＤ抗Ｓ１００＋ＵＬＤ抗ＣＢ１）。また、最初のマトリックス溶液を１００１２倍、１００３０倍、１００２００倍に高希釈することによって得られる、カンナビノイド受容体１型に対する超低用量のポリクローナルウサギ抗体（ＵＬＤ抗ＣＢ１）（１００倍単位ホメオパシー希釈物Ｃ１２、Ｃ３０、及びＣ２００の混合物）の水−アルコール溶液を染み込ませた３００ｍｇ錠剤（６ｍｇ／錠）も、試験で使用した。
【０１３６】
禁煙したいと望む患者５９名を二重盲検プラセボ対照比較試験に含めて、ニコチン依存を治療するにあたってのＵＬＤ抗Ｓ１００＋ＵＬＤ抗ＣＢ１組み合わせ及び抗ＣＢ１の有効性を評価した。患者２２名を活性調製物群に含め、ＵＬＤ抗Ｓ１００＋ＵＬＤ抗ＣＢ１の錠剤１個を１日３回与えた。患者１７名を比較調製物群に含め、ＵＬＤ抗Ｃｂ１の錠剤１個を１日３回与えた。患者２０名をプラセボ群に含め、錠剤１個を１日３回与えた（顆粒状のラクトース及び賦形剤からなり、活性成分を全く含まない錠剤）。治療を１２週間続けた。３つの患者群全ての最初の人口統計学的指標、身体計測的指標、及び臨床検査指標は同等であった。患者は全員、ファガストローム試験を基準として軽度（４点未満）のニコチン依存であり、１年以上の喫煙歴があり、程度一（１）の肥満であった（ボディマス指数［ＢＭＩ］＝３０．０〜３４．９ｋｇ／ｍ２）。試験に含まれた患者全員が、試験プロトコルによって必要とされた期間で治療を完了し、早くに離脱した患者は１人もいなかった。
【０１３７】
データの分析により、ＵＬＤ抗Ｓ１００＋ＵＬＤ抗ＣＢ１を与えられた患者及びＵＬＤ抗ＣＢ１を与えられた患者において、喫煙をやめた患者の数が増加することが示された（表９）。ＵＬＤ抗Ｓ１００＋ＵＬＤ群において、禁煙した患者の比率は４週間の治療後に２３％であり、８週後に３６％、１２週の最後の時点で４１％に達した。ＵＬＤ抗ＣＢ１群では、対応する指標は、（それぞれプラセボ群の５％、５％、及び１０％に対して）１２％、２４％、及び２９％であった。プラセボ治療と比べた主な有効性パラメータに基づく治療有効性の差は、３１％（ＵＬＤ抗Ｓ１００＋ＵＬＤ群の場合）及び１９％（ＵＬＤ抗ＣＢ１群の場合）であり、これは統計的に有意であった。
【０１３８】
ＵＬＤ抗Ｓ１００＋ＵＬＤ抗ＣＢ１の効果を評価したところ、全体としての群と喫煙をやめることができなかった患者の亜群の両方において、ニコチン依存の実質的な低下が示された。ファガストローム試験の最初の平均合計スコアは２．６７±０．１４であった。１２週間の治療後に、スコアは１．３３±０．１４まで減少した。更に、この減少は、最初の指標と比べてだけでなく、プラセボ群と比べても統計的に有意であった。ＵＬＤ抗ＣＢ１を与えられ、かつ禁煙しなかった患者も、ニコチン依存の症状に関して好ましいダイナミクスを示し、ニコチン依存の症状は、３ヶ月の治療の終了時に、最初のレベル及びプラセボと比べて有意に軽かった。
【０１３９】
気分と身体症状の評価尺度（ＭＰＳＳ）のデータの分析により、喫煙をやめた患者のニコチンの禁断症状が徐々に弱くなり、ＵＬＤ抗Ｓ１００＋ＵＬＤ抗ＣＢ１とＵＬＤ抗ＣＢ１のどちらの場合も治療開始後１２週目に最小値に達することが示された（表９）。最も低い合計スコアがＵＬＤ抗Ｓ１００＋ＵＬＤ抗ＣＢ１群で記録されたことから、ＵＬＤ抗Ｓ１００＋ＵＬＤ抗ＣＢ１及びＵＬＤ抗ＣＢ１の組み合わせの投与により、ＵＬＤ抗ＣＢ１単独と比べた場合を含めて、より簡単かつ苦しまずに禁煙に耐えることが可能になることが示された。
【０１４０】
【表９】
2013535436.tif 000034
注意：＊  プラセボ群との差の統計的有意性、ｐ＜０．０５；
＊＊  ＵＬＤ抗Ｓ１００＋ＵＬＤ抗ＣＢ１群とＵＬＤ抗ＣＢ１群の差の統計的有意性、ｐ＜０．０５；
＃  最初の値との差の統計的有意性
表９．治療の形態による基本的指標のダイナミクス
【０１４１】
この試験に含まれた患者群は全て、程度１の肥満患者を含んでいた。試験において、全群の患者のボディマス指数（ＢＭＩ）を規則的な間隔で測定した。試験の結果を表１０に示す。
【０１４２】
【表１０】
2013535436.tif 000035
注：変化の統計的有意性を評価するために、ダネット法の変法におけるスチューデントの両側基準を用いて、対照来診（来診０）の体重をその後の全訪問と比較した。有意な差（ｐ＜０．０５）にはアスタリスクで注釈を付けている。
表１０：最初の体重と各来診時の最新体重（単位ｋｇ）の差の平均
【０１４３】
１２週間の治療クールの治療の結果、両方の試験群の体重は、プラセボと比べて有意に減少した。治療の３ヶ月後に、２つの試験群の患者の約半数（５２％及び４７％）において、最初の状態と比べて５％以上体重が減少した（プラセボ群の患者の１５％と比べて；ｐ＜０．０５）（図３）。
【０１４４】
治療期間中の有害事象の記録及び検査指標のフォローアップ調査に基づいて行った治療法の安全性の評価により、ＵＬＤ抗Ｓ１００＋ＵＬＤ抗ＣＢ１とＵＬＤ抗ＣＢ１の両方に対する良好な許容性が示された。安全性分析は、この試験に参加した患者全員のデータ（ｎ＝５９）を含んだ。中枢神経系に対する治療の不利な影響は明らかにならなかった；精神的な転帰の指標はなかった。この結論は、不安及び抑うつの病院評価尺度（ＨＡＤＳ）を用いて指標を観察することによって確認した（表９）。ＵＬＤ抗Ｓ１００＋ＵＬＤ抗ＣＢ１は、不安及び抑うつの症状に対して良い効果を示し、症状は、最初の値及びプラセボの両方と比べて、治療法の終わりに近づくにつれて顕著に低減した。有害事象はなかった。血液の全般的分析及び生化学的分析並びに尿の臨床的分析を含めて、臨床指標は、正常値からの顕著な逸脱をまったく示さなかった。
【０１４５】
したがって、この試験により、ニコチン依存の治療におけるＵＬＤ抗Ｓ１００＋ＵＬＤ抗ＣＢ１の組み合わせ及びＵＬＤ抗ＣＢ１の有効性及び安全性が実証された。治療の効果は、喫煙をやめた患者が高比率であったこと、治療の最中に禁断症状が軽減したこと、及び喫煙できなかった患者においてニコチン依存が軽減したことから明らかであった。観察された効果は全て、プラセボ群と比べて統計的に有意であった。ＵＬＤ抗Ｓ１００＋ＵＬＤ抗ＣＢ１の組み合わせの有効性は、ＵＬＤ抗ＣＢ１単独の有効性を上回った。安全性プロファイルは、ＵＬＤ抗Ｓ１００＋ＵＬＤ抗ＣＢ１の組み合わせとＵＬＤ抗ＣＢ１の両方とも優れていた。ＵＬＤ抗Ｓ１００＋ＵＬＤ抗ＣＢ１の組み合わせとＵＬＤ抗ＣＢ１の両方とも、臨床的に顕在化する不安及び／又は抑うつの出現を招かなかった。また、程度１の肥満患者の体重減少が実証された。
【０１４６】
実施例９
重度のニコチン依存を治療するためのＳ−１００タンパク質に対する超低用量の抗体とＣＢ１受容体に対する超低用量の抗体の組み合わせ及びＣＢ１受容体に対する超低用量の抗体を評価するための、二重盲検プラセボ対照比較臨床試験
最初のマトリックス溶液を１００１２倍、１００３０倍、１００２００倍に高希釈することによってそれぞれ得られる、脳特異的タンパク質Ｓ−１００に対する超低用量のポリクローナルウサギ抗体（ＵＬＤ抗Ｓ１００）及びカンナビノイド受容体１型に対する超低用量のポリクローナルウサギ抗体（ＵＬＤ抗ＣＢ１）（１００倍単位ホメオパシー希釈物Ｃ１２、Ｃ３０、Ｃ２００の混合物）の水−アルコール溶液を染み込ませた３００ｍｇ錠剤（６ｍｇ／錠）を試験で使用した（ＵＬＤ抗Ｓ１００＋ＵＬＤ抗ＣＢ１）。また、最初のマトリックス溶液を１００１２倍、１００３０倍、１００２００倍に高希釈することによって得られる、カンナビノイド受容体１型に対する超低用量のポリクローナルウサギ抗体（ＵＬＤ抗ＣＢ１）（１００倍単位ホメオパシー希釈物Ｃ１２、Ｃ３０、Ｃ２００の混合物）の水−アルコール溶液を染み込ませた３００ｍｇ錠剤（６ｍｇ／錠）も、試験で使用した。
【０１４７】
重度のニコチン依存を治療するにあたってのＵＬＤ抗Ｓ１００＋ＵＬＤ抗ＣＢ１の有効性を評価するために、二重盲検プラセボ対照比較試験を、次のように３群に無作為化された患者６１名に参加してもらって実施した：第１の群の患者１８名（ＵＬＤ抗Ｓ１００＋ＵＬＤ抗ＣＢ１、１錠、１日４回）、第２の群の患者２２名（ＵＬＤ抗ＣＢ１、１錠、１日４回）、及びプラセボ群の患者２１名（１錠、１日４回）（顆粒状のラクトース及び賦形剤からなり、活性成分を全く含まない錠剤）。治療を１２週間続けた。３群の患者は、人口統計学的指標、身体的指標、及び検査指標を含む最初の指標に基づいて、同等であった。ファガストローム試験の最初の結果によると、参加者は全て重度のニコチン依存であり（７点以上）、喫煙歴は３年を超えていた。毎月の来診の過程で、患者を観察し、身体的及び研究室的な検査及び試験を行った（ファガストローム試験、不安及び抑うつの病院評価尺度［ＨＡＤＳ］）。喫煙をやめた患者においては、禁断症状を測定した（気分と身体症状の評価尺度［ＭＰＳＳ］）。患者全員が、試験プロトコルによって定められた期間で治療を完了し、早くに離脱した患者は１人もいなかった。
【０１４８】
試験の結果を表１１に示す。
【０１４９】
【表１１】
2013535436.tif 000036
注意：＊  プラセボ群との差が統計的に有意であり、ｐ＜０．０５である。
＊＊  ＵＬＤ抗Ｓ１００＋ＵＬＤ抗ＣＢ１群とＵＬＤ抗ＣＢ１群の差は統計的に有意であり、ｐ＜０．０５である；
＃  最初のパラメータとの差が統計的に有意であり、ｐ＜０．０５である。
表１１．治療の形態による、基本的指標のダイナミクス
【０１５０】
ＵＬＤ抗Ｓ１００＋ＵＬＤ抗ＣＢ１群において、禁煙した患者の比率は治療４週目で１１％であり、８週目で２２％、１２週目の最後の時点で３０％に達した。ＵＬＤ抗ＣＢ１群では、対応する指標は、（それぞれプラセボ群の５％、５％、及び１０％に対して）９％、１４％及び２３％であった。
【０１５１】
ニコチン依存の徴候は、全体としての群と喫煙をやめることができなかった患者の亜群の両方において、ＵＬＤ抗Ｓ１００＋ＵＬＤ抗ＣＢ１を投与すると実質的に低減した（表１１を参照されたい）。ファガストローム試験の最初の平均合計点は８．９２±０．３４であった。これは、１２週間の治療後にほぼ２分の１の４．５０±０．２６になった。更に、この減少は、最初の値と比べてだけでなく、ＵＬＤ抗ＣＢ１群及びプラセボと比べても統計的に有意であった。
【０１５２】
また、ＵＬＤ抗Ｓ１００＋ＵＬＤ抗ＣＢ１の組み合わせを投与した場合、患者は、ＭＰＳＳ尺度のデータに基づいてＵＬＤ抗ＣＢ１（ｐ＜０．０５）とプラセボ（ｐ＜０．００５）の両方と比べると、禁断症状の統計的に有意な軽減を示し、治療開始後１２週目に最小値に到達した。
【０１５３】
また、安全性評価も実施した。安全性分析は、試験に参加した患者全員（ｎ＝６１）のデータを含め、有害事象の記録及び検査指標のフォローアップ調査に基づいて行った。この調査の結果から、ＵＬＤ抗Ｓ１００＋ＵＬＤ抗ＣＢ１の組み合わせ及びＵＬＤ抗ＣＢ１単独の許容性が優れていることだけでなく、これらの医薬品の摂取と関連するいかなる有害事象もないことが示された。中枢神経系に対する治療の不利な影響は明らかにならなかった；精神的な転帰の指標はなかった。この結論は、不安及び抑うつの病院評価尺度（ＨＡＤＳ）を用いて指標を観察することによって確認した（表１１）。ＵＬＤ抗Ｓ１００＋ＵＬＤ抗ＣＢ１は、不安及び抑うつの症状に対して良い効果を示し、症状は、最初の値及びプラセボの両方と比べて、治療の終わりに近づくにつれて顕著に低減した。有害事象はなかった。血液の全般的分析及び生化学的分析並びに尿の臨床的分析を含めて、臨床指標は、正常値からの顕著な逸脱をまったく示さなかった。
【０１５４】
したがって、この試験の結果により、重度のニコチン依存の治療におけるＵＬＤ抗Ｓ１００＋ＵＬＤ抗ＣＢ１の有効性及び安全性が実証された。１２週間の治療クールの治療の間に、ほぼ３分の１の喫煙者が、ニコチンに対する依存から脱することができた。表１１に示したように、ＵＬＤ抗Ｓ１００＋ＵＬＤ抗ＣＢ１の有効性は、統計的に有意に、プラセボの有効性を超えていた。ＵＬＤ抗Ｓ１００＋ＵＬＤ抗ＣＢ１により、患者がより簡単かつ苦しまずに禁煙に耐え抜く能力が大きく向上した。観察過程で禁煙をやめられなかった患者において、ＵＬＤ抗Ｓ１００＋ＵＬＤ抗ＣＢ１を投与すると、ニコチン依存の徴候はＵＬＤ抗ＣＢ１とプラセボの両方の場合と比べて有意に低減した。
【０１５５】
ＵＬＤ抗Ｓ１００＋ＵＬＤ抗ＣＢ１とＵＬＤ抗ＣＢ１の両方とも、優れた安全性プロファイル及び中枢神経系への有害作用がないことを特徴とした。
【０１５６】
実施例１０
Ｉ）最初のマトリックス溶液を１００１２倍、１００３０倍、１００２００倍に高希釈することによってそれぞれ得られる、脳特異的タンパク質Ｓ−１００に対する超低用量のポリクローナルウサギ抗体（ＵＬＤ抗Ｓ１００）とカンナビノイド受容体１型に対する超低用量の抗体（ＵＬＤ抗ＣＢ１）の組み合わせ（１００倍単位ホメオパシー希釈物Ｃ１２、Ｃ３０、Ｃ２００の混合物）（ＵＬＤ抗Ｓ１００＋ＵＬＤ抗ＣＢ１）、ｉｉ）ＵＬＤ抗ＣＢ１単独、並びにｉｉｉ）ＵＬＤ抗Ｓ１００単独がマウスの運動活性に与える影響を試験して、それらの抗ニコチン特性を評価した。
【０１５７】
４０匹の非近交系白色雄マウス（２２〜２５ｇ、１．５ヶ月齢）を使用した。１０匹のマウスは無処置とした。残りのマウスに、４日間にわたって０．３ｍｇ／ｋｇの用量でニコチンを皮下投与した。ニコチン投与は、蒸留水（対照、０．４ｍＬ／マウス）、又はＵＬＤ抗Ｓ１００（０．４ｍＬ／マウス）、若しくはＵＬＤ抗ＣＢ１（０．４ｍＬ／マウス）、若しくはＵＬＤ抗Ｓ１００＋ＵＬＤ抗ＣＢ１（０．４ｍＬ／マウス）のいずれかを胃内投与する前（１時間前）に行った。ニコチンの最終投与後３０分目に、「オープンフィールド」試験を行った。動物をＴｒｕＳｃａｎ光感受性装置（Ｃｏｕｌｂｏｕｒｎ、ＵＳＡ）の中央に置き、これらの動物の垂直方向及び水平方向の自発運動活性を２分間、自動的に記録した。この「オープンフィールド」モデルにより、化合物が動物の自発運動活性に与える影響を評価することが可能になる（その全体が参照により明示した目的で本明細書に組み込まれるＧｅｒｓｈｅｎｆｉｅｌｄ  Ｈ．Ｋ．、Ｎｅｕｍａｎｎ  Ｐ．Ｅ．、Ｍａｔｈｉｓ  Ｃ．、Ｃｒａｗｌｅｙ  Ｊ．Ｎ．、Ｌｉ  Ｘ．、Ｐａｕｌ  Ｓ．Ｍ．  Ｍａｐｐｉｎｇ  ｑｕｎｔａｔｉｖｅ  Ｔｒａｉｔ  Ｌｏｃｉ  ｆｏｒ  Ｏｐｅｎ−Ｆｉｅｌｄ  Ｂｅｈａｖｉｏｒ  ｉｎ  Ｍｉｃｅ．  Ｂｅｈａｖｉｏｒａｌ  Ｇｅｎｅｔｉｃｓ．  １９９７、第２７巻、３号、２０１〜２０９ページ）。装置のパラメータ：サイズ  ２７０×２７０×３６０ｍｍ、２．５×２．５の６４の正方形に分割されている、一団高いプラットフォームの床に２５ｍｍの穴が空いており、１５０ワットのランプで照らされている。
【０１５８】
ニコチンは、ナス科の植物、主にタバコに存在し、向精神活性を有するアルカロイドである。ニコチンの作用は、末梢及び中枢のＮ−コリン受容体を介した間接的なものであると考えられている。用量に応じて、このアルカロイドの体内への導入は、不安−抑うつの総体的症状、多幸感、興奮、また逆に、平穏の発生を引き起こし得る。更に、ニコチンを長期間使用すると、依存が生じる。禁煙を簡単にするために使用される調製物は、とりわけ、精神感情的領域における病理学的変化をなくすことに狙いを定めており、これにより、患者をタバコの病的愛好から解放することが容易になる。
【０１５９】
本試験において、ニコチンの投与により、マウスの運動活性が増大した。すなわち、活動時間は８．２％（ｐ＜０．０５）、移動距離は５．１％、マウスが調べた穴の量は７８．２％（ｐ＜０．０５）、調査反応時間は７６．９％増えたのに対し、不動状態の時間は逆に、無処置の動物と比べて１３．５％（ｐ＜０．０５）短くなった。
【０１６０】
ＵＬＤ抗Ｓ１００単独では、調査した個々のパラメータに関して、対照を基準として有意な影響はなかった。ＵＬＤ抗ＣＢ１の場合、試験群のマウスの活動時間及び移動距離は、無処置マウスのレベルまで減少した。しかし、ＵＬＤ抗ＣＢ１は、不動状態の期間、穴の量、及び反応期間には影響を与えなかった。同時に、ＵＬＤ抗ＣＢ１とＵＬＤ抗Ｓ１００を組み合わせて投与すると、活動時間が短くなり、それに対応して、不動状態の時間が無処置動物のレベルまで長くなり、移動距離はかなり減少し（対照と比べて２９．２％、無処置動物と比べて２５．５％）、活動はいくらか低下した（穴の量は１５．３％減少し、反応時間は１７．４％短くなった）。
【０１６１】
したがって、ＵＬＤ抗ＣＢ１の投与並びにＵＬＤ抗ＣＢ１とＵＬＤ抗Ｓ１００の組み合わせ投与は、ニコチン投与によって引き起こされる動物の挙動の変化をなくすのに寄与する。ＵＬＤ抗ＣＢ１＋ＵＬＤ抗Ｓ１００の組み合わせの使用の方が、ＵＬＤ抗ＣＢ１単独の投与と比べて有効であった。
【０１６２】
【表１２】
2013535436.tif 000037
無処置との差が統計的に有意であるもの：＊はｐ＜０．０５であり、＊＊はｐ＜０．０１である。
対照との差が統計的に有意であるもの：＃はｐ＜０．０５であり、＃＃はｐ＜０．０１である。
表１２．マウスの運動活性に対する調製物の影響（オープンフィールド試験）、Ｍ±ｍ
【図１】
2013535436.tif 000038
【図２】
2013535436.tif 000039
【図３】
2013535436.tif 000040
2013535436.tif 000041
2013535436.tif 000042
2013535436.tif 000043
【配列表】
2013535436000001.app
【国際調査報告】
2013535436.tif 000044
2013535436.tif 000045
2013535436.tif 000046
2013535436.tif 000047