(57)【要約】  本発明は、5-((E)-2-ピロリジン-3-イルビニル)ピリミジン又はその薬学的に許容される塩を投与することにより、便秘を治療する及び大腸運動を増強する方法に関する。【選択図】図１
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【特許請求の範囲】
【請求項１】
(R)-5-((E)-2-ピロリジン-3-イルビニル)ピリミジン又はその薬学的に許容される塩の投与を含む、便秘を緩和する方法。
【請求項２】
便秘が、胃腸的なもの、内分泌学的なもの、神経学的なもの、医原性のもの、摂食障害に関連するもの又は損傷に関係するものである、請求項1に記載の方法。
【請求項３】
(R)-5-((E)-2-ピロリジン-3-イルビニル)ピリミジン又はその薬学的に許容される塩の投与を含む、胃腸障害に関連する便秘を治療する方法。
【請求項４】
胃腸障害が、過敏性腸管症候群、便秘優位型過敏性腸管症候群、交代性の過敏性腸管症候群、慢性の特発性便秘、急性便秘、薬物誘発性便秘、大腸障害、大腸癌又は麻痺性イレウスである、請求項3に記載の方法。
【請求項５】
薬物誘発性便秘が、オピオイド誘発性便秘、抗うつ薬誘発性便秘、制酸薬誘発性便秘又は鉄分補給剤誘発性便秘である、請求項4に記載の方法。
【請求項６】
(R)-5-((E)-2-ピロリジン-3-イルビニル)ピリミジン又はその薬学的に許容される塩の投与を含む、内分泌学的な原因による便秘を治療する方法。
【請求項７】
内分泌学的な原因が、妊娠又は甲状腺機能低下症である、請求項6に記載の方法。
【請求項８】
(R)-5-((E)-2-ピロリジン-3-イルビニル)ピリミジン又はその薬学的に許容される塩の投与を含む、神経学的な状態に関連する便秘を治療する方法。
【請求項９】
神経学的な状態が、パーキンソン病、多発性硬化症又はうつ病である、請求項8に記載の方法。
【請求項１０】
(R)-5-((E)-2-ピロリジン-3-イルビニル)ピリミジン又はその薬学的に許容される塩の投与を含む、摂食障害に関連する便秘を治療する方法。
【請求項１１】
(R)-5-((E)-2-ピロリジン-3-イルビニル)ピリミジン又はその薬学的に許容される塩の投与を含む、手術、脊髄損傷、自律神経機能障害、対麻痺、加齢又は長期間の患者介護に関連する便秘を治療する方法。
【請求項１２】
一つ以上の追加の治療剤を投与することを更に含む、請求項1〜11に記載の方法。
【請求項１３】
(R)-5-((E)-2-ピロリジン-3-イルビニル)ピリミジン又はその薬学的に許容される塩の投与を含む、大腸運動を増強する方法。
【請求項１４】
便秘を緩和するために(R)-5-((E)-2-ピロリジン-3-イルビニル)ピリミジン又はその薬学的に許容される塩により、治療を必要とする哺乳動物を治療する方法。
【請求項１５】
哺乳動物が動物である、請求項14に記載の方法。
【請求項１６】
動物が、ウサギ、ネコ、イヌ、ウシ又はウマである、請求項15に記載の方法。
【請求項１７】
便秘を緩和する医薬品の製造における、(R)-5-((E)-2-ピロリジン-3-イルビニル)ピリミジン又はその薬学的に許容される塩の使用。
【請求項１８】
便秘が、胃腸的なもの、内分泌的なもの、神経学的なもの、医原性のもの、摂食障害に関連するもの又は損傷に関係するものである、請求項17に記載の使用。
【請求項１９】
胃腸障害に関連する便秘を治療する医薬品の製造における、(R)-5-((E)-2-ピロリジン-3-イルビニル)ピリミジン又はその薬学的に許容される塩の使用。
【請求項２０】
胃腸障害が、過敏性腸管症候群、便秘優位型過敏性腸管症候群、交代性の過敏性腸管症候群、慢性の特発性便秘、急性便秘、薬物誘発性便秘、大腸障害、大腸癌又は麻痺性イレウスである、請求項19に記載の使用。
【請求項２１】
薬物誘発性便秘が、オピオイド誘発性便秘、抗うつ薬誘発性便秘、制酸薬誘発性便秘又は鉄分補給剤誘発性便秘である、請求項20に記載の使用。
【請求項２２】
内分泌学的な原因による便秘を治療する医薬品の製造における、(R)-5-((E)-2-ピロリジン-3-イルビニル)ピリミジン又はその薬学的に許容される塩の使用。
【請求項２３】
内分泌学的な原因が、妊娠又は甲状腺機能低下症である、請求項22に記載の使用。
【請求項２４】
神経学的な状態に関連する便秘を治療する医薬品の製造における、(R)-5-((E)-2-ピロリジン-3-イルビニル)ピリミジン又はその薬学的に許容される塩の使用。
【請求項２５】
神経学的な状態が、パーキンソン病、多発性硬化症又はうつ病である、請求項24に記載の使用。
【請求項２６】
摂食障害に関連する便秘を治療する医薬品の製造における、(R)-5-((E)-2-ピロリジン-3-イルビニル)ピリミジン又はその薬学的に許容される塩の使用。
【請求項２７】
手術、脊髄損傷、自律神経機能障害、対麻痺、加齢又は長期間の患者介護に関連する便秘を治療する医薬品の製造における、(R)-5-((E)-2-ピロリジン-3-イルビニル)ピリミジン又はその薬学的に許容される塩の使用。
【請求項２８】
一つ以上の追加の治療剤を投与することを更に含む、請求項17〜27に記載の使用。
【請求項２９】
大腸運動を増強する医薬品の製造における、(R)-5-((E)-2-ピロリジン-3-イルビニル)ピリミジン又はその薬学的に許容される塩の使用。
【請求項３０】
(R)-5-((E)-2-ピロリジン-3-イルビニル)ピリミジン又はその薬学的に許容される塩により治療を必要とする哺乳動物を治療するための医薬品の製造における、(R)-5-((E)-2-ピロリジン-3-イルビニル)ピリミジン又はその薬学的に許容される塩の使用。
【請求項３１】
哺乳動物が動物である、請求項30に記載の使用。
【請求項３２】
動物が、ウサギ、ネコ、イヌ、ウシ又はウマである、請求項31に記載の使用。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、5-((E)-2-ピロリジン-3-イルビニル)ピリミジン又はその薬学的に許容される塩を投与することにより、便秘を治療する及び大腸運動を増強する方法に関する。
【背景技術】
【０００２】
秘結、排便困難及び協調運動障害性排便(dyssynergic defaecation)としても知られる便秘は、便通の回数が少なく、及び/又は便の通過が困難であることを意味する。便秘は、疼痛性排便の一般的な原因である。重篤な便秘には、頑固な便秘(糞便又はガスの通過不全)及び糞便充塞(腸閉塞)が含まれる。便秘は、一般的であり、一般集団における便秘の発生率は2から30%まで様々である。
【０００３】
ローマIII診断基準は、慢性便秘の診断に広く使用されており、慢性的な機能的便秘の症例を重篤性の低い場合から分けるのに役立つ。また、ブリストル大便スケール(Bristol Stool Scale)又はブリストル大便チャート(Bristol Stool Chart)は、ヒト糞便の形態を七つの種類に分類するために設計された医療補助である。時々、「マイヤースケール」("Meyers Scale")と呼ばれ、ブリストル大学(University of Bristol)で開発され、最初に1997年にScandinavian Journal of Gastroenterologyに発表された。ブリストル大便チャートの一型及び二型は便秘を示す。Lewis, S., Heaton, K. (1997), Stool Form Scale as a Useful Guide to Intestinal Transit Time. Scand. J. Gastroenterol. 32 (9): 920-4を参照のこと。
【０００４】
便秘の原因には二種類ある:閉塞性排便及び緩徐性結腸通過(colonic slow transit)(又は低移動性(hypomobility))。三次紹介病院において便秘を調べた患者の約50%が、閉塞性排便を有する。この種類の便秘は、機械的及び機能的な原因を有する。緩徐性結腸通過の原因には、食事、ホルモン、投薬の副作用及び重金属毒性が含まれる。便秘の定義には以下が含まれる:典型的には一週間あたり三回以下のまれな便通;排便時の困難(便通の25%を越える時間にわたる力み若しくは固形便の主観的感覚);又は不完全腸排泄の感覚。
【０００５】
便秘の原因を、先天的、一次的及び二次的に更に分けることができる。最も一般的な原因は、一次的なものであり、生命を脅かすものではない。原因には、不十分な食物繊維摂取、不適切な水分摂取、身体活動の減少、投薬の副作用、甲状腺機能低下症及び結腸直腸癌による閉塞が含まれる。一次的又は機能的便秘は、投薬の副作用などの基礎原因又は基礎的な医学的状態に起因しないで六か月を超えて症状が続いていることである、と定義される。この便秘は、腹痛と関連しないので、過敏性腸管症候群と区別される。この便秘は、便秘の最も一般的な原因である。便秘は、低繊維食、低水分摂取又は減量により引き起こされうる又は悪化しうる。多くの投薬は、副作用として便秘を有する。幾つかの例には、オピオイド、利尿剤、抗うつ薬、抗ヒスタミン薬、鎮痙薬、抗痙攣薬及びアルミニウム制酸薬が含まれる。便秘をもたらしうる代謝及び内分泌の問題には、高カルシウム血症、甲状腺機能低下症、真性糖尿病、嚢胞性線維症及び小児脂肪便症が含まれる。便秘は、筋及び筋緊張性ジストロフィーを有する個人においても一般的である。最後に、幾つかの報告が禁煙と便秘の発症との間の関連性に注目している。例えば、Lagrue et al., Stopping Smoking and Constipation, as translated from the original French, Addiction, November 2003, 98(11): 1563-7を参照のこと。
【０００６】
便秘は、脊髄障害、パーキンソン病、大腸癌(colon cancer)、肛門裂傷、直腸炎及び骨盤底機能不全を含む多数の構造的(機械的、形態学的、解剖学的)な原因を有する。
【０００７】
便秘は、アニスムス、会陰下行症候群(descending perineum syndrome)及びヒルシュスプルング病を含む機能的(神経学的)な原因も有する。幼児では、ヒルシュスプルング病が、便秘と関連する最も一般的な医学的障害である。アニスムスは、慢性便秘又は閉塞性排便を有するごく少数の人々において生じる。
【０００８】
慢性便秘は、米国の人口の12%〜20%に生じる。慢性便秘の一つの定義は、一年間のうち三か月以上、一週間あたり三回以下の排便である。推定250万人の医師の診察及びほぼ市販薬に限定されている限定された治療選択肢に基づいた関連する医療費は、一年あたり70億ドルを越えると考えられる。
【０００９】
過敏性腸管症候群(IBS)は、現在利用可能な治療選択肢によってまだ対処されていない医療上の需要がある治療領域を表す。過去の研究は、セロトニン、並びに胃運動及び胃液分泌の調節におけるその役割を標的にすることに焦点を合わせていた。進展は、利用可能な治療選択肢の心血管性用量制限副作用によって遅れている。
【００１０】
IBSは、昼間腹痛、腹部膨満(bloating)及び不快感、並びに以下:便秘(IBS-C);下痢(IBS-D);及び両方の交代(IBS-A又は交代性IBS)のうちの一つが優位であることを特徴とする排便習慣の変化を伴う。IBSは、米国において成人の12%に罹患しており、女性において男性の二倍の発生率を有する。Mertz, H. Irritable bowel syndrome. N. Engl. J. Med. 349, 2136-2146 (2003)を参照のこと。現在の薬物開発パラダイムは、大腸におけるセロトニンの作用を変える投薬に焦点を合わせている。研究は、セロトニン(5-HT)が腸運動の仲介、GI管における腸分泌の制御及び腸における感覚の調整に関与していることを明らかにした。現在まで、この手法における関心は、5-HT3及び5-HT4レセプターに集中している。有害な心血管性副作用を含む有害な5-HTの薬理学的な懸念は、5-HT療法への関心を抑制する。
【００１１】
慢性の特発性便秘(CIC)は、健康な腸を持ち、慢性の便秘を患っているが、症状が標準的な治療によって緩和しない個人に下される診断である。CICは、一次症状として疼痛を欠いていることにより、便秘優位型過敏性腸管症候群(constipation predominant irritable bowel syndrome)(IBS-C)と区別される。
【００１２】
多様なメタニコチン類似体が、IBSを含む多様な障害の治療における使用に提案されてきた。例えば、米国特許第7,098,331号及び公開PCT WO 2010/065443(これらの内容は参照として本明細書に組み込まれる)を参照すること。これらの化合物のうちの幾つかから、上部GI管における薬物曝露の結果として投与時に有害作用、例えば嘔吐及び嘔気を被る。
【先行技術文献】
【特許文献】
【００１３】
【特許文献１】米国特許第7,098,331号
【特許文献２】WO 2010/065443
【非特許文献】
【００１４】
【非特許文献１】Lewis, S., Heaton, K. (1997), Stool Form Scale as a Useful Guide to Intestinal Transit Time. Scand. J. Gastroenterol. 32 (9): 920-4
【非特許文献２】Lagrue et al., Stopping Smoking and Constipation, as translated from the original French, Addiction, November 2003, 98(11): 1563-7
【非特許文献３】Mertz, H. Irritable bowel syndrome. N. Engl. J. Med. 349, 2136-2146 (2003)
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【００１５】
多様な症状を発現する便秘に対する新たな治療、特に5-HT手法の代替案としてニコチンレセプターを標的にする治療を提供することが有利である。本発明は、そのような組成物及び方法を提供する。
【課題を解決するための手段】
【００１６】
本発明の一つの態様は、5-((E)-2-ピロリジン-3-イルビニル)ピリミジン又はその薬学的に許容される塩を使用する方法、使用及び組成物を含む。
【００１７】
本発明の一つの態様は、(R)-5-((E)-2-ピロリジン-3-イルビニル)ピリミジン又はその薬学的に許容される塩の投与を含む、便秘を緩和する方法を含む。本発明の一つの実施態様は、便秘の原因が、IBS-A及びIBS-Cを含む過敏性腸管症候群、急性若しくは慢性の特発性便秘、大腸癌又は麻痺性イレウス(ileus paralyticus)が含まれるが、これらに限定されない胃腸的なもの;妊娠又は甲状腺機能低下症が含まれるが、これらに限定されない内分泌学的なもの;パーキンソン病、多発性硬化症又はうつ病が含まれるが、これらに限定されない神経学的なもの;アヘン剤、抗うつ薬、制酸薬又は鉄分補給剤が含まれるが、これらに限定されない医原性のもの;食欲不振又は過食などの摂食障害に関連するもの、並びにストレス、旅行及び食事の変化に関連する摂食障害;或いは手術、脊髄損傷、自律神経機能障害、対麻痺、加齢又は長期間の患者介護が含まれる損傷に関係するものである、便秘を治療することを含む。
【００１８】
本発明の別の態様は、(R)-5-((E)-2-ピロリジン-3-イルビニル)ピリミジン又はその薬学的に許容される塩の投与を含む、胃腸障害に関連する便秘を治療する方法を含む。一つの実施態様において、胃腸障害は、過敏性腸管症候群、便秘優位型過敏性腸管症候群、交代性の過敏性腸管症候群、慢性の特発性便秘、急性便秘、薬物誘発性便秘、大腸障害(colonic disorder)、大腸癌又は麻痺性イレウスである。更なる実施態様としては、薬物誘発性便秘は、好ましくは、オピオイド誘発性便秘、抗うつ薬誘発性便秘、制酸薬誘発性便秘又は鉄分補給剤誘発性便秘である。
【００１９】
本発明の別の態様は、(R)-5-((E)-2-ピロリジン-3-イルビニル)ピリミジン又はその薬学的に許容される塩の投与を含む、内分泌学的な原因による便秘を治療する方法を含む。一つの実施態様において、内分泌学的な原因は、妊娠又は甲状腺機能低下症である。
【００２０】
本発明の別の態様は、(R)-5-((E)-2-ピロリジン-3-イルビニル)ピリミジン又はその薬学的に許容される塩の投与を含む、神経学的な状態に関連する便秘を治療する方法を含む。一つの実施態様において、神経学的な状態は、パーキンソン病、多発性硬化症又はうつ病である。
【００２１】
本発明の別の態様は、(R)-5-((E)-2-ピロリジン-3-イルビニル)ピリミジン又はその薬学的に許容される塩の投与を含む、摂食障害に関連する便秘を治療する方法を含む。
【００２２】
本発明の別の態様は、(R)-5-((E)-2-ピロリジン-3-イルビニル)ピリミジン又はその薬学的に許容される塩の投与を含む、手術、脊髄損傷、自律神経機能障害、対麻痺、加齢又は長期間の患者介護に関連する便秘を治療する方法を含む。
【００２３】
本発明の別の態様としては、本発明を使用する方法、使用又は組成物は、一つ以上の追加の治療剤の投与を更に含む。
【００２４】
本発明の別の態様は、(R)-5-((E)-2-ピロリジン-3-イルビニル)ピリミジン又はその薬学的に許容される塩の投与を含む、大腸運動(colonic motility)を増強する方法を含む。
【００２５】
本発明の別の態様は、便秘を緩和するために(R)-5-((E)-2-ピロリジン-3-イルビニル)ピリミジン又はその薬学的に許容される塩により、それを必要とする哺乳動物を治療する方法を含む。そのような治療には、ヒトへの薬学的使用、並びにウサギ、ネコ、イヌ、ウシ、ウマ又は他の動物の治療が含まれるが、これらに限定されない獣医学的使用が含まれる。
【００２６】
本発明は、腸溶性の提示を含む、5-((E)-2-ピロリジン-3-イルビニル)ピリミジン又はその薬学的に許容される塩の医薬提示を含む。本発明の一つの態様は、(R)-5-((E)-2-ピロリジン-3-イルビニル)ピリミジン又はその薬学的に許容される塩を含む腸溶性経口医薬品を含む。一つの実施態様において、製品は錠剤である。一つの実施態様において、製品は、カプセル剤又は環状体に収められているコアである。一つの実施態様において、製品は、活性成分を含むコアを胃の環境で実質的に溶解しない腸溶性被覆を含む。一つの実施態様において、製品は、前記(R)-5-((E)-2-ピロリジン-3-イルビニル)ピリミジン又はその薬学的に許容される塩を唯一の活性成分として含有する。一つの実施態様において、製品は、(a)(R)-5-((E)-2-ピロリジン-3-イルビニル)ピリミジン又はその薬学的に許容される塩及び一つ以上の医薬賦形剤からなる、単一又は多粒子状で提示されているコア;(b)任意の分離層;(c)ポリメタクリレート及び薬学的に許容される賦形剤を含む腸溶層;並びに(d)任意の仕上層を含む。多粒子状提示の一つの実施態様において、コアは不活性ビーズを含み、それには(R)-5-((E)-2-ピロリジン-3-イルビニル)ピリミジン又はその薬学的に許容される塩が前記一つ以上の医薬賦形剤を含む層として付着している。一つの実施態様において、製品は、約0.5〜50ミリグラムの(R)-5-((E)-2-ピロリジン-3-イルビニル)ピリミジン又はその薬学的に許容される塩を含有する。
【００２７】
本発明の一つの態様は、(R)-5-((E)-2-ピロリジン-3-イルビニル)ピリミジン又はその薬学的に許容される塩を含み、胃における(R)-5-((E)-2-ピロリジン-3-イルビニル)ピリミジン又はその薬学的に許容される塩の放出を遅らせる又は抑えるように適合された経口医薬投与形態を含む。一つの実施態様において、経口医薬投与形態は、錠剤、カプセル剤又は環状体に収められているコアである。一つの実施態様において、医薬投与形態は錠剤である。一つの実施態様において、医薬投与形態はカプセル剤である。一つの実施態様において、医薬投与形態は腸溶性被覆を含む。
【００２８】
本発明の一つの態様は、(R)-5-((E)-2-ピロリジン-3-イルビニル)ピリミジン又はその薬学的に許容される塩の腸溶性被覆医薬投与形態の投与を含む、過敏性腸管症候群を治療する方法を含む。一つの実施態様において、過敏性腸管症候群は、便秘優位型過敏性腸管症候群である。一つの実施態様において、医薬投与形態の(R)-5-((E)-2-ピロリジン-3-イルビニル)ピリミジン又はその薬学的に許容される塩は、カプセル化多粒子状ペレット剤を含む。一つの態様において、投与は、約0.5〜50ミリグラムの(R)-5-((E)-2-ピロリジン-3-イルビニル)ピリミジン又はその薬学的に許容される塩である。一つの実施態様において、腸溶性被覆はポリメタクリレートを含む。一つの実施態様において、(R)-5-((E)-2-ピロリジン-3-イルビニル)ピリミジン又はその薬学的に許容される塩は、下部GI管に送達される。
【００２９】
本発明の一つの態様は、腸溶性被覆を有する医薬投与形態を含む、(R)-5-((E)-2-ピロリジン-3-イルビニル)ピリミジン又はその薬学的に許容される塩を、下部GI管に選択的に送達する方法を含む。
【００３０】
本発明の範囲は、本明細書において更に詳細に記載され、態様及び実施態様の全ての組合せを含む。
【図面の簡単な説明】
【００３１】
【図１】IBS-Cの対象において観察されるSBMを表す棒グラフである。図の左側部分は、一週間に一度のSBMの客観的な計数を示す。図の右側部分は、4週間の治療期間の全てにわたってプラセボと比較した化合物Aの効能を示す。
【図２】幾つかの治療薬によるSBMの相対的な比較を表す棒グラフである。化合物Aを、現存及び提案されている療法、すなわちテガセロッド(Tegaserod)(以前は商品名Zelnorm(登録商標)で販売されており、現在は回収されている)、ルビプロストン(Lubiprostone)(商品名Amitiza(登録商標)で販売されている)及びリナクロチド(Linaclotide)(現在、第III相臨床試験の段階)、並びにプラセボとそれぞれの場合において比較した。図示されているように、化合物AはIBS-Cの対象において4週目のSBMでは良好に比較される。
【発明を実施するための形態】
【００３２】
本明細書において提供されるものは、投与の後の、例えばおよそ1時間、1.25時間、1.5時間、1.75時間又は2時間を超える遅延放出時間で小腸の中部から下部において薬物放出を開始するように操作された製剤である。そのような医薬製剤は、製品が患者の胃の中を変化しないで通過し、胃を離れ、小腸の中部及び下部に入ったときに溶解し、活性成分を放出するように製造される。そのような製剤は、錠剤又はペレット剤形であることができ、活性成分は錠剤又はペレット剤の内部にあり、フィルム又はエンベロープである「腸溶性被覆」で包まれており、これは、胃などの酸性環境では不溶性であるが、小腸などの中性に近い環境では可溶性である。
【００３３】
本明細書で使用されるとき、率、比、割合などの全ての表現は、特に記述のない限り重量単位である。腸溶性製品の割合の表現は、成分の多くが溶解又は分散している水を除去した後の乾燥形態の製品を意味する。用語「糖」は、還元糖以外の糖を意味する。還元糖は、フェーリング(若しくはベネディクト)又はトレンス試薬を還元する炭化水素である。全ての単糖類は、スクロースを除いた大部分の二糖類と同様に還元糖である。一つの一般的な結合又は充填剤はラクトースである。この賦形剤は、良好に圧縮され、希釈剤と結合剤の両方であり、安価であるので、錠剤にとって特に有用である。しかし、これは還元糖であり、活性成分は室温及び促進安定性条件(熱)の両方でラクトースと相互作用することがある。したがって、活性成分を含む製剤からラクトース及び他の還元糖を避けることは、重要でありうる。下記で考察するように、スクロースが特定の糖である。
【００３４】
特定の腸溶性製品において、活性物質のコアを腸溶性被覆で囲み、ペレット剤に形成する。次に、ペレット剤をゼラチンカプセルに入れることができる。ペレット剤の多様な成分及び層が、以下において、異なる成分を添加してペレット剤を作る方法と一緒に個別に考察される。
【００３５】
I.化合物
本明細書で使用されるとき、用語「薬学的に許容される」は、製剤の他の成分と適合し、医薬組成物の受容者に有害ではない担体、希釈剤、賦形剤又は本発明の化合物の塩形態を意味する。
【００３６】
本明細書で使用されるとき、用語「医薬組成物」は、一つ以上の薬学的に許容される担体、希釈剤又は賦形剤と場合により混合される本発明の化合物を意味する。医薬組成物は、好ましくは、製造及び市販の目的に適するように環境条件においてある程度の安定性を示す。
【００３７】
本明細書で使用されるとき、用語「有効量」、「治療量」又は「有効用量」は、所望の薬学的又は治療効果を発揮し、したがって障害の予防又は治療に効果をもたらすのに十分な本発明の化合物の量を意味する。障害の予防は、障害の進行、並びに障害に関連する症状の発症を遅延又は防止することにより表すことができる。障害の治療は、症状の減少又は排除、障害の進行の阻害又は逆転、並びに患者の福祉に寄与するあらゆることにより表すことができる。
【００３８】
有効用量は、患者の状態、障害の症状の重篤度及び医薬組成物が投与される方法などの要因に応じて変わりうる。典型的には、有効用量を投与するには、化合物は、患者の体重の5mg/kg未満の量で投与される必要がある。多くの場合、化合物を、患者の体重の約1mg/kg未満から患者の体重の約100μg/kg未満、場合によっては、患者の体重の約10μg/kgから患者の体重の約100μg/kg未満の量で投与することができる。前述の有効用量は、典型的には、単回用量として投与される量又は24時間の間に一回以上投与される用量を表す。ヒトの患者では、化合物の有効用量は、少なくとも約1mg/24時間/患者であるが、1000mg/24時間/患者以下、多くの場合では500mg/24時間/患者以下の量で化合物を投与することが必要でありうる。下記の更なる詳細において示されるように、総用量の5mg(又は<100μg/kg)が効能を実証している。本発明の一つのありそうな効果的な用量は、おそらく約10μg/kg〜100μg/kgである。
【００３９】
本発明の化合物は、周知の標準的合成方法を含む多様な方法により作製することができる。例示的な一般的合成方法が下記に記載され、次に本発明の特定の化合物が実施例において調製される。
【００４０】
下記に記載される全ての例において、感受性又は反応性基の保護基が、合成化学の一般的原則に従って必要な場合に用いられる。保護基は、有機合成の標準的方法に従って操作される(T. W. Green and P. G. M. Wuts (1999) Protecting Groups in Organic Synthesis, 3rd Edition, John Wiley & Sons)。これらの基は、当業者に容易に明らかな方法を使用して、化合物合成の都合の良い段階で除去される。方法と反応条件の選択及びこれらの実施の順番の選択は、本発明の化合物の調製と一致している。
【００４１】
本発明は、本発明の化合物の調製において中間体として有用な化合物の合成方法も、本発明の化合物の調製方法と共に提供する。
【００４２】
化合物は、容易に利用可能な出発材料及び試薬を使用して、下記に記載されている方法に従って調製することができる。これらの反応において、それら自体当業者に既知である変形例を用いることができるが、より詳細には記述しない。
【００４３】
特に記述のない限り、本明細書に記載される構造は、一つ以上の同位体濃縮原子の存在でのみ異なる化合物を含むことも意図される。例えば、水素原子を重水素若しくは三重水素に代えた、或いは炭素原子を13C-若しくは14C-濃縮炭素に代えた以外は本発明の構造を有する化合物は、本発明の範囲内である。
【００４４】
本発明の化合物は、多形として知られている特徴である、二つ以上の形態で結晶化されていてもよく、そのような多形相(「多形体」)は、本発明の範囲内である。多形は、一般に温度、圧力又はその両方の変化に対する反応として生じる可能性がある。多形は、結晶化過程における変動によってもたらされる可能性もある。多形体は、X線回析パターン、溶解性及び融点などの当該技術において既知の多様な物理的特性によって区別することができる。
【００４５】
本明細書に記載される特定の化合物は、一つ以上のキラル中心を含有するか、そうでなければ多数の立体異性体として存在する能力がありうる。本発明の範囲は、立体異性体の混合物、並びに精製鏡像異性体又は鏡像異性的/ジアステレオ選択的に豊富化した混合物を含む。また、本発明の範囲内に含まれるものは、本発明の式により表される化合物の個別の異性体、並びにそれらの全体的又は部分的に平衡した混合物である。本発明は、また、上記の式により表される化合物の個別の異性体を、一つ以上のキラル中心が逆転されている異性体との混合物として含む。一つの非局在化共鳴構造しか描かれていない場合があるが、そのような形態の全てが本発明の範囲内であることが考慮される。
【００４６】
化合物が単一鏡像異性体として望ましい場合、それは、立体特異的合成により、最終生成物若しくは任意の都合の良い中間体の分割により又は当該技術において既知のキラルクロマトグラフィー法により得ることができる。最終生成物、中間体又は出発材料の分割は、当該技術において既知の任意の適切な方法により実施することができる。例えば、Stereochemistry of Organic Compounds (Wiley-Interscience, 1994)を参照すること。
【００４７】
本発明は、塩の溶媒和物などの組合せを含む、本明細書に記載される化合物の塩又は溶媒和物を含む。本発明の化合物は、溶媒和、例えば水和の形態、同様に非溶媒和の形態で存在することができ、本発明は、そのような形態の全てを包含する。
【００４８】
典型的には、本発明の塩は薬学的に許容される塩であるが、このことは絶対的ではない。用語「薬学的に許容される塩」に包含される塩とは、本発明の化合物の非毒性塩を意味する。
【００４９】
適切な薬学的に許容される塩の例には、塩化物、臭化物、硫酸塩、リン酸塩及び硝酸塩などの無機酸付加塩;酢酸塩、ガラクタル酸塩(galactarate)、プロピオン酸塩、コハク酸塩、乳酸塩、グリコール酸塩、リンゴ酸塩、酒石酸塩、クエン酸塩、マレイン酸塩、フマル酸塩、メタンスルホン酸塩、p-トルエンスルホン酸塩及びアルコルビン酸塩などの有機酸付加塩;アスパラギン酸塩及びグルタミン酸塩などの酸性アミノ酸との塩;ナトリウム塩及びカリウム塩などのアルカリ金属塩;マグネシウム塩及びカルシウム塩などのアルカリ土類金属塩;アンモニウム塩;トリメチルアミン塩、トリエチルアミン塩、ピリジン塩、ピコリン塩、ジシクロヘキシルアミン塩及びN,N'-ジベンジルエチレンジアミン塩などの有機塩基性塩;並びにリシン塩及びアルギニン塩などの塩基性アミノ酸との塩が含まれる。塩は、幾つかの場合において、水和物又はエタノール溶媒和物でありうる。
【００５０】
II.一般的合成方法
(R)-5-((E)-2-ピロリジン-3-イルビニル)ピリミジン又はその薬学的に許容される塩は、当業者には明白である多様な合成戦略により調製することができる。一つの態様において、(R)-5-((E)-2-ピロリジン-3-イルビニル)ピリミジン又はその薬学的に許容される塩は、ハロゲン化アリールとビニルピロリドン化合物とのパラジウム触媒カップリング反応を使用して得ることができる(例えば、米国特許第7,098,331号及び公開PCT出願WO 10/065443を参照すること)。したがって、適切にN保護された3-ビニルピロリドンと5-ブロモピリミジンとの、酢酸パラジウム(II)、トリフェニルホスフィン及びトリエチルアミンの存在下での反応は、N保護(E)-(2-ピロリジン-3-イルビニル)ピリミジンを生じる。続く保護基の除去は、(R)-5-((E)-2-ピロリジン-3-イルビニル)ピリミジン又はその薬学的に許容される塩を生じる。
【００５１】
ピロリジン窒素の保護及び脱保護の方法は、合成化学の当業者には良く知られており、T. W. Greene及びP. G. M. Wutsによる"Protective Groups in Organic Synthesis (2nd ed.)"(Wiley-Interscience (1991))などの編集物において見出すことができる。カップリング反応に必要な出発材料(ハロゲン化ヘテロアリール及び3-ビニルピロリジン)は、多数の方法により得ることができる。N保護3-ビニルピロリジンは、メチレントリフェニルホスホランを使用するウィッティヒオレフィン化(Wittig olefination)により、対応するN保護3-ホルミルピロリジンから作製することができる。アルデヒドからビニル基への他の変換は、当業者に知られている。3-ホルミルピロリジンは、水素化ジイソブチルアルミニウムによる還元又は水素化アルミニウムリチウムによる還元、続くアルコールをアルデヒドに酸化するのに使用される多様な方法のいずれかによる酸化によって、対応するエステル(例えば、N保護アルキルピロリジン-3-カルボキシレート)から一又は二工程で作製することができる。このシーケンスの際には、窒素の保護基を変える必要がありうる。次に、N保護アルキルピロリジン-3-カルボキシレートをアゾメチン付加環化して、対応するアクリレートエステルにすることができる。
【００５２】
或いは、N保護3-ホルミルピロリジンは、N保護3-ピロリジノンをメトキシメチレントリフェニルホスホランで処理することにより又は当業者に既知の他の同様のカルボニル同族体化反応により形成することができる。必要なN保護3-ピロリジノンは、市販の3-ピロリジノールを、適切な窒素保護剤及びアルコールを対応するケトンに変換するのに使用される多様な酸化物のいずれかにより連続的に処理することによって作製される。
【００５３】
或いは、N保護3-ビニルピロリジンは、ラセミ的又は鏡像異性的に豊富なN保護3-ピロリジノールから作製することができる。この転換を達成する一つの方法は、(3-ピロリジノールの)ヒドロキシル基を対応するメシレート又はトシレートに変換し、メシレート又はトシレートをマロネートイオンで置換することである。続いて、マロネートの(マロン酸への)加水分解、脱カルボキシル化及び水素化アルミニウムリチウム還元は、ラセミ的又は鏡像異性体的に豊富な(出発材料の立体化学に対応する)N保護3-(ヒドロキシエチル)ピロリジンをもたらす。次にこの材料を対応するN保護3-(ハロエチル)ピロリジンに変換することができ、これを脱ハロゲン化水素化(dehydrohalogenated)して、(ラセミ的又は鏡像異性体的に豊富であり、出発材料の立体化学に対応する)N保護3-ビニルピロリジンを得る。
【００５４】
III.処理方法
本明細書に記載されている化合物は、他の種類のニコチン化合物が治療薬として提案されている種類の状態及び障害の治療に有用である。例えば、Williams et al., DN&P 7(4):205-227 (1994)、Arneric et al., CNS Drug Rev. 1(1):1-26 (1995)、Arneric et al., Exp. Opin. Invest. Drugs 5(1):79-100 (1996)、Bencherif et al., J. Pharmacol. Exp. Ther. 279:1413 (1996)、Lippiello et al., J. Pharmacol. Exp. Ther. 279:1422 (1996)、Damaj et al., Neuroscience (1997)、Holladay et al., J. Med. Chem. 40(28): 4169-4194 (1997)、Bannon et al., Science 279: 77-80 (1998)、PCT WO 94/08992、PCT WO 96/31475及びBencherif et al.の米国特許第5,583,140号、Dull et al.の同第5,597,919号及びSmith et al.の同第5,604,231号を参照すること。
【００５５】
化合物を、前述の種類の疾患及び障害の管理における現存する療法と組み合わせた補助療法として使用することもできる。そのような場合において、筋肉及び神経節と関連するものなどのnAChRサブタイプへの効果が最小限である方法で活性成分を投与することが好ましい。このことは、標的化薬物送達により及び/又は有意な副作用を得るのに要する閾値投与量を満たすことなく所望の効果が得られるように投与量を調整することにより達成できる。医薬組成物を使用して、これらの状態、疾患又は障害と関連する症状のいずれかを軽減することができる。
【００５６】
主に迷走神経を介した神経系は、マクロファージの腫瘍壊死因子(TNF)の放出を阻害することにより、先天性免疫反応の大きさを調節することが知られている。この生理学的機構は、「コリン作動性抗炎症経路」として知られている(例えば、Tracey, "The Inflammatory Reflex," Nature 420: 853-9 (2002)を参照すること)。過剰炎症及び腫瘍壊死因子合成は、多様な疾患において病的状態、更には死を引き起こす。これらの疾患には、内毒素血症、関節リウマチ、骨関節症、乾癬、喘息、アテローム性動脈硬化症、特発性肺線維症及び炎症性腸疾患が含まれるが、これらに限定されない。
【００５７】
本明細書に記載されている化合物を投与することにより治療又は予防することができる炎症状態には、慢性及び急性炎症、乾癬、内毒素血症、痛風、急性偽痛風、急性痛風性関節炎、関節炎、関節リウマチ、骨関節症、同種移植片拒絶、慢性移植拒否反応、喘息、アテローム性動脈硬化症、単核食細胞依存性肺傷害、特発性肺線維症、アトピー性皮膚炎、慢性閉塞性肺疾患、成人呼吸窮迫症候群、鎌状赤血球症における急性胸部症候群、炎症性腸疾患、過敏性腸管症候群、クローン病、潰瘍、潰瘍性大腸炎、急性胆管炎、アフタ性口内炎、悪液質、回腸嚢炎、糸球体腎炎、ループス腎炎、血栓症及び移植片対宿主反応が含まれるが、これらに限定されない。
【００５８】
本発明の一つの態様は、便秘を緩和する方法を含む。本発明の一つの実施態様は、便秘の原因が、IBS-A及びIBS-Cを含む過敏性腸管症候群、急性若しくは慢性の特発性便秘、大腸癌を含む大腸障害又は麻痺性イレウス(ileus paralyticus)が含まれるが、これらに限定されない胃腸的なもの;妊娠又は甲状腺機能低下症が含まれるが、これらに限定されない内分泌学的なもの;パーキンソン病、多発性硬化症又はうつ病が含まれるが、これらに限定されない神経学的なもの;アヘン剤、抗うつ薬、制酸薬又は鉄分補給剤が含まれるが、これらに限定されない医原性のもの;食欲不振又は過食などの摂食障害に関連するもの、並びにストレス、旅行及び食事の変化に関連する摂食障害に関連するもの;或いは術後の問題などの手術、脊髄損傷を含む損傷、自律神経機能障害又は対麻痺又は腫瘍学、CNS、発作、対麻痺及び高齢の患者を含む長期間の患者介護に関係するものであることを含む。
【００５９】
本発明の別の態様は、(R)-5-((E)-2-ピロリジン-3-イルビニル)ピリミジン又はその薬学的に許容される塩の投与を含む、胃腸障害に関連する便秘を治療する方法を含む。一つの実施態様において、胃腸障害は、過敏性腸管症候群、便秘優位型過敏性腸管症候群、交代性の過敏性腸管症候群、慢性の特発性便秘、急性便秘、薬物誘発性便秘、大腸障害、大腸癌又は麻痺性イレウスである。
【００６０】
化合物の適切な用量は、障害の症状の発生を予防する又は患者が罹患している障害の幾つかの症状を治療するのに有効な量である。「有効量」、「治療量」又は「有効用量」とは、所望の薬学的又は治療効果を発揮し、したがって障害の有効な予防又は治療をもたらすのに十分な量を意味する。したがって、CNS障害を治療する場合、化合物の有効量は、対象の血液脳関門を通過する、対象の脳の関連するレセプター部位に結合する及び関連するニコチンレセプターサブタイプを活性化する(例えば、神経伝達物質の分泌をもたらし、したがって障害の有効な予防又は治療をもたらす)のに十分な量である。障害の予防は、障害の症状の発症を遅延することにより表される。障害の治療は、障害に関連する症状を減少すること又は障害の症状の再発を軽減することにより表される。
【００６１】
有効用量は、患者の状態、障害の症状の重篤度及び医薬組成物が投与される方法などの要因に応じて変わりうる。ヒトの患者では、典型的な化合物の有効用量は、一般に、関連するレセプターを活性化して神経伝達物質(例えば、ドーパミン)を放出させるのに十分な量で化合物投与することを必要とするが、量は、任意の有意な程度で骨格筋及び神経節に効果を誘発するには不十分であるべきである。化合物の有効用量は、当然のことながら患者毎に異なるが、一般に、CNS効果又は他の所望の治療効果が生じるが、筋肉効果が観察される量よりも少ない出発量を含む。
【００６２】
IV.医薬組成物
本発明の化合物をバルク活性化学種の形態で投与することも可能であるが、化合物を医薬組成物又は製剤の形態で投与することが好ましい。したがって、本発明の一つの態様は、本発明の化合物と、一つ以上の薬学的に許容される担体、希釈剤又は賦形剤とを含む医薬組成物を含む。本発明の別の態様は、本発明の化合物を一つ以上の薬学的に許容される担体、希釈剤又は賦形剤と混合することを含む、医薬組成物の調製方法を提供する。
【００６３】
本発明の化合物を投与する方法は、様々にすることができる。本発明の化合物は、好ましくは経口投与される。経口投与に好ましい医薬組成物には、錠剤、カプセル剤、カプレット剤、シロップ剤、液剤及び懸濁剤が含まれる。本発明の医薬組成物を、徐放性錠剤及びカプセル剤の製剤などの放出調節投与形態で提供することができる。
【００６４】
医薬組成物を、単位用量形態又は多回若しくはサブユニット用量で配合することができる。本明細書に記載されている医薬組成物の投与は、断続的又は漸進的、連続的、一定又は管理された度合いでありうる。加えて、医薬組成物が投与される時刻及び一日あたりの回数は、変わることができる。
【００６５】
医薬組成物を、急性又は慢性にかかわらず、便秘の緩和の必要な任意の温血動物に投与することができる。例えば、そのような治療における哺乳動物にはヒトが含まれる。しかし、同様に、ネズミ、ラット、ネコ、ウサギ、イヌ、ブタ、ウシ、ウマ又はサルなどの哺乳動物を治療することができる。ヒトの医薬又は獣医用製品としての本発明の使用に関して、本発明を使用して、多様な基礎原因による便秘を緩和することができる。
【００６６】
本発明の化合物を、多様な障害及び状態の治療に使用することができ、それについては、これらの障害又は状態の治療又は予防に有用な多様な他の適切な治療剤と組み合わせて使用することができる。したがって、本発明の一つの実施態様は、本発明の化合物を他の治療化合物と組み合わせて投与することを含む。
【００６７】
特に本発明の化合物を、オピオイド、利尿剤、抗うつ薬、抗ヒスタミン薬、鎮痙薬、抗痙攣薬及びアルミニウム制酸薬が含まれる、主な副作用として便秘を有することが知られている特定の他の治療剤と共に使用することができる。
【００６８】
同様に、本発明の化合物を、鎮痛薬、抗生物質又は分泌促進薬が含まれるが、これらに限定されない、既知又はIBSの治療に使用される特定の他の治療剤と共に使用することができる。この点について、本発明は、障害の便秘部分を緩和し、したがって、他の症状を緩和する他の作用物質と組み合わせることができる。
【００６９】
更なる例として、本発明の化合物を、他のNNRリガンド(例えば、バレニクリン)、酸化防止剤(例えば、フリーラジカル除去剤)、抗菌剤(例えば、ペニシリン抗生物質)、抗ウイルス剤(例えば、ジドブジン及びアシクロビルのようなヌクレオシド類似体)、抗凝血薬(例えば、ワルファリン)、抗炎症剤(例えば、NSAID)、解熱薬、鎮痛薬、麻酔薬(例えば、手術に使用されるもの)、アセチルコリンエステラーゼインヒビター(例えば、ドネペジル及びガランタミン)、抗神経病薬(例えば、ハロペリドール、クロザピン、オランザピン及びクエチアピン)、免疫抑制薬(例えば、シクロスポリン及びメトトレキセート)、神経保護剤、ステロイド(例えば、ステロイドホルモン)、コルチコステロイド(例えば、デキサメタゾン、プレジソン(predisone)及びヒドロコルチゾン)、ビタミン、ミネラル、栄養補助食品、抗うつ薬(例えば、イミプラミン、フルオキセチン、パロキセチン、エスシタロプラム、セルトラリン、ベンラファキシン及びデュロキセチン)、抗不安薬(例えば、アルプラゾラム及びブスピロン)、抗痙攣薬(例えば、フェニトイン及びガバペンチン)、血管拡張薬(例えば、プラゾシン及びシルデナフィル)、気分安定剤(例えば、バルプロ酸塩及びアリピプラゾール)、抗癌薬(例えば、抗増殖薬)、抗高血圧剤(例えば、アテノロール、クロニジン、アムロピジン(amlopidine)、ベラパミル及びオルメサルタン)、緩下剤、便軟化剤、利尿剤(例えば、フロセミド)、鎮痙薬(例えば、ジサイクロミン)、抗ジスキネジー剤(anti-dyskinetic agents)、並びに抗潰瘍薬(例えば、エソメプラゾール)と組み合わせて使用することができる。医薬活性剤のそのような組合せを一緒に又は別々に投与することができ、別々に投与する場合、投与は、同時に又は任意の順番で連続的に起こりうる。化合物又は作用物質の量及び相対的な投与タイミングは、所望の治療効果を達成するために選択される。本発明の化合物と他の治療剤との組合せ投与は、(1)両方の化合物を含む単一医薬組成物又は(2)それぞれ一方の化合物を含む別々の医薬組成物の同時投与による組合せでありうる。或いは、組み合わせを、一方の治療剤が最初に投与され、他方が二番目に投与される連続方式で別々に投与することができる。そのような連続投与は、時間的に近い又は時間的に離れていることができる。
【００７０】
本発明の別の態様は、治療又は予防有効量の本発明の化合物と、化学療法、放射線療法、遺伝子療法又は免疫療法を含む一つ以上の他の療法とを対象に施すことを含む、併用療法を含む。
【００７１】
本発明の腸溶性製剤は、単一又は多粒子状のコア及び一つ以上の被覆を含むことができる。一つ以上の被覆は、審美的なもの又はpH依存性及びpH非依存性機能が含まれるが、これらに限定されない機能的なものでありうる。
【００７２】
A.コア
ペレット剤の特定の多粒子状コアは、典型的には、活性成分含有層を不活性コアに適用することにより調製される。そのような不活性コアは、薬学において慣用的に使用されており、容易に入手可能である。粒子状コアは、菓子類はもとより製薬に使用されるデンプン及びスクロースから調製されるものである。しかし、例えば微晶質セルロース、植物ガム、ロウなどが含まれる任意の薬学的に許容される賦形剤のコアを使用することができる。不活性コアの主な特性は、ペレット剤の活性成分と他の賦形剤の両方に関して及びペレット剤を最終的に摂取する対象に関して不活性であることである。
【００７３】
コアのサイズは、製造されるペレット剤の所望のサイズによって左右される。一般に、ペレット剤は、0.1mmの小ささ又は4mmの大きさであることができる。特定のコアは、直径が約1.0〜約3.0mmの範囲のサイズの最終ペレット剤を提供するために、約0.5〜約3.0mmである。
【００７４】
コアは、添加される多様な被覆の均一性及び最終製品の均質性を改善するために、適度に狭い粒径分布のものでありうる。例えば、コアは、多様な絶対サイズの許容可能なサイズ分布を得るために、18〜20USメッシュ、20〜25USメッシュ、25〜30USメッシュ又は30〜35USメッシュなどの粒径範囲であるように規定することができる。
【００７５】
使用されるコアの量は、添加される層の重量及び厚さによって変わることができる。一般に、コアは製品の約10〜約70パーセントを含む。より詳細には、コアの装填量は、製品の約15〜約45パーセントを表す。
【００７６】
ペレット剤の製造が不活性コアから始める場合、活性成分をコアに被覆して、一般に製品の約10〜約25パーセントの最終薬物濃度を生じることができる。活性成分の量は、薬物の所望の用量及び投与されるペレット剤の量に応じて左右される。活性成分の用量は、約0.5〜100mg、とりわけ約1〜10mgの範囲であり、ペレット剤の通常量は、ゼラチンカプセルに都合良く保持される量である。ゼラチンカプセルの容積は、本発明の製品における活性物質の約15%〜約25%の範囲でありうる。
【００７７】
活性成分でコアを被覆する都合の良い方法は、コアを粘着性液体又は結合剤で濡らし、活性成分を粉末として添加し、混合物を乾燥する、「粉末被覆」法である。そのような方法は、工業的薬学の業務において日常的に実施されており、適した装置は当該技術において知られている。
【００７８】
そのような装置を、本発明の方法の幾つかの工程に使用することができる。この方法を、糖衣過程に用いられるものと同様の慣用のコーティングパンにより実施することができる。この方法を使用して、ペレット剤を調製することができる。
【００７９】
或いは、本発明の製品を(ロータリープロセッサーを使用する)流動床装置により又はFreund CF-Granulator (Vector Corporation, Marion, Iowa)などの回転板装置により作製することができる。回転板装置は、典型的にはシリンダーから構成され、その底部は回転可能板である。被覆される粒子の塊の動きは、シリンダーの固定壁と回転底部との間の塊の摩擦により提供される。温風を適用して、塊を乾燥することができ、液体を塊に噴霧し、流動床の場合のように乾燥速度との釣り合いを保つことができる。
【００８０】
幾つかの実施態様において、粉末被覆が適用される。そのような実施態様において、ペレット剤の塊を粘着状態に維持することができ、それらに付着される粉末(この場合は活性成分)を連続的又は周期的に添加して、粘着性ペレット剤に付着することができる。そのような活性物質が全て適用されると、噴霧を停止し、塊を空気流で乾燥させることができる。いくらかの不活性粉末を活性成分に加えることが、適切又は好都合でありうる。
【００８１】
追加の固体を、活性成分を有する層に添加することができる。これらの固体を、必要であれば流動性を助けるため、静電荷を低減するため、嵩高堆積を助けるため及び平滑面を形成するために加えて、被覆過程を促進することができる。タルク、カオリン及び二酸化チタンなどの不活性物質、ステアリン酸マグネシウム、微粉化二酸化ケイ素、クロスポビドン及び非還元糖、例えばスクロースなどの潤滑剤を使用することができる。そのような物質の量は、製品のおよそ0.数%から製品の約20%までの範囲である。そのような固体は、平滑面を生じるために、典型的には微細粒径、例えば50マイクロメートル未満である。
【００８２】
活性成分は、湿潤のときには粘質性及び付着性があり、乾燥すると強力な凝集被膜になる医薬賦形剤を噴霧することにより、コアに付着させることができる。当業者は、そのような物質の多くを認識し、慣用的に使用しており、これらの大部分はポリマーである。特定のそのようなポリマーには、ヒドロキシプロピルメチルセルロース、ヒドロキシプロピルセルロース及びポリビニルピロリドンが含まれる。追加的なそのような物質には、例えば、メチルセルロース、カルボキシメチルセルロース、アカシア及びゼラチンが含まれる。付着賦形剤の量は、製品の約4%〜約12%の範囲であることができ、コアに付着される活性物質の量に大きく依存している。
【００８３】
スラリーを噴霧可能にするために、活性成分を、活性層の賦形剤の溶液に懸濁するか、十分な水に溶解又は懸濁した活性物質を含むスラリーを噴霧することによりコアに堆積することもできる。そのようなスラリーを、活性物質の粒径を低減するため、懸濁液を粉砕するように適合された機械により摩砕することができる。懸濁形態での粉砕は、乾燥粉末薬物を粉砕したときに生じる塵の発生及び汚染問題が回避されるので望ましい可能性がある。この懸濁液を適用する特定の方法は、通気性底部及び底部の上方近くの上向き噴霧ノズル又は生成物塊の上方に取り付けられている下向き噴霧ノズルを有する垂直シリンダーから構成される、ウルスターカラムなどの医薬流動床被覆装置である。シリンダーには、被覆される粒子が投入され、十分な量の空気がシリンダーの底部を通って引き出されて、粒子の塊を懸濁し、適用される液体が塊に噴霧される。流動化空気の温度が噴霧速度と釣り合って、被覆が堆積している間に、ペレット剤又は錠剤の塊を所望のレベルの水分及び粘着性に維持する。
【００８４】
他方、コアは、活性成分が組み込まれている一体化粒子を含むことができる。このようなコアは、薬学において、特に圧縮錠剤用の顆粒材料の調製において広く普及している造粒技術により調製することができる。コアは、活性物質を医薬賦形剤の塊に混合し、塊を水又は溶媒で湿潤し、乾燥し、塊を、不活性コアについて上記に記載されたものと同じサイズ範囲にした粒子に砕くことにより調製できる。これは、押出法及びマルメライズ法(marumerization)を介して達成することができる。
【００８５】
ペレット剤のコアも、活性物質を従来の医薬成分と混合して所望の濃度を得て、混合物を、R. E. Sparks et al.、米国特許第5,019,302号及び同第5,100,592号の方法(そのような方法に関して本明細書に参照として組み込まれる)が含まれるが、これらに限定されない従来の手順により所望のサイズの単一コアに形成することにより調製できる。
【００８６】
腸溶性医薬品の特定の保護コアは、以下の式(I):
【化１】
2013522201.tif 000003
【００８７】
の(R)-5-((E)-2-ピロリジン-3-イルビニル)ピリミジン(本明細書において化合物Aとも呼ばれる)を活性成分として含む。
【００８８】
(R)-5-((E)-2-ピロリジン-3-イルビニル)ピリミジンの調製方法は、米国特許第7,098,331号(その全体が参照として本明細書に組み込まれる)に例示されているように、当該技術において知られている。
【００８９】
また、本明細書に提供されるものは、一日あたり一回又は二回の投与が可能であるように低い装填量の賦形剤を有する前記活性成分を含有する錠剤又はカプセル剤などの経口組成物であり、好ましくは、そのような組成物の一つ又は二つがそれぞれの投薬時に投与される。本明細書において提供される腸溶性製品は、任意の物理的形態の活性成分を利用することができる。
【００９０】
B.分離層
活性物質含有コアと腸溶層との間の分離層は、必要ではないが、製剤の特定の特徴である。望ましい場合、分離層の機能は、腸溶層の適用のために平滑な基礎を提供すること、酸性条件に対するペレット剤の耐性を延長すること及び/又は腸溶層における薬物と腸溶性ポリマーの相互作用を阻害することにより安定性を改善することである。
【００９１】
分離層の平滑機能は、純粋に機械的なものであり、その目的は、腸溶層の被覆を改善すること及びコアの出っ張り及び凸凹により生じるかすれを回避することである。したがって、平滑で凸凹のないコアを作製できるほど、分離層に必要な材料が少なくなり、活性物質が極めて微細な粒径であり、コアが可能な限り真の球形に近づいて作製される場合は、分離層の平滑特性の必要性が完全に回避される。
【００９２】
薬学的に許容される非還元性糖が分離層に添加される場合、酸性条件に対するペレット剤の耐性を大きく増やすことができる。したがって、そのような糖を粉末混合物として又は噴霧液の一部として溶解して、コアに適用される分離層に含めることができる。糖含有分離層は、所定のレベルの酸耐性を得るために必要な腸溶性ポリマーの量を低減することができる。少ない量の腸溶性ポリマーを使用することは、材料費と加工時間の両方を低減することができ、活性物質との反応に利用されるポリマーの量を低減することもできる。あらゆるコア/腸溶層相互作用の阻害は、機械的なものである。分離層は、コアと腸溶層の成分が互いに直接接触することを物理的に避ける。幾つかの場合において、分離層は、製品の水分に溶解したコア又は腸溶層の成分の移動に対する拡散障壁としても作用することができる。分離層を、二酸化チタン、酸化鉄などの作用物質で不透明化することにより、光遮断層として使用することもできる。
【００９３】
一般に、分離層は、凝集又はポリマー材料及び充填剤を構成する微粉末化固体賦形剤を含むことができる。糖が分離層に使用される場合、水溶液の形態で適用され、分離層を互いに粘着させる凝集材料の一部又は全体を構成する。糖に加えて又は糖の代わりに、ポリマー材料を分離層に使用することもできる。例えば、ヒドロキシプロピルメチルセルロース、ポリビニルピロリドン、ヒドロキシプロピルセルロースなどの物質を少量使用して、分離層の付着又は凝集を増加することができる。
【００９４】
充填賦形剤を分離層に使用して、層の平滑性及び固体性を増加することができる。微粉末化したタルク、二酸化ケイ素などの物質は、医薬賦形剤として全般的に許容されており、分離層を充填する及び平滑にする場合に都合が良いので添加することができる。
【００９５】
一般に、分離層における糖の量は、製品の約2%〜約10%の範囲であることができ、糖が使用される場合では、ポリマー材料又は他の粘着性材料の量は、約0.1〜約5%の範囲でありうる。タルクなどの充填剤の量は、最終製品の重量に基づいて、約5〜約15%の範囲でありうる。
【００９６】
分離層は、糖又はポリマー材料の水溶液を噴霧し、活性層の調製について記載されたように、充填剤を振りかけることにより適用することができる。しかし分離層の平滑性及び均質性は、活性層を有するコアの調製について上記に記載された装置を使用して、充填剤が糖及び/又はポリマー材料の溶液中に懸濁剤として十分に分散され、懸濁剤がコアに噴霧され、乾燥される場合に改善することができる。
【００９７】
C.腸溶層
腸溶層は、活性成分との適合性によって選択することができる腸溶性ポリマーから構成される。ポリマーは、ポリマー単位重量又は反復単位あたり少数のカルボン酸基しか有さないものでありうる。
【００９８】
一般に、活性医薬製剤(親水性、疎水性又は両親媒性にかかわらず)の放出速度は、被覆の厚さ及び/又は組成を調整することにより、場合によりポリマー賦形剤及び/又は非ポリマー賦形剤の種類及び/又は濃度を調整することにより制御できる。
【００９９】
放出速度は、ポリエチレンオキシドの分子量が比較的高いので、コアにおけるポリマーにより抑制される。比較的高い分子量のポリエチレンオキシドを使用する追加的な利点は、ポリアクリル酸などのイオン性ポリマーを使用する場合と異なって、放出がpH非依存性であることである。更に、そのようなポリマーと反応しうる官能基を含む(すなわち、アミン基及び/又はカルボン酸基を含む)活性薬剤を、活性剤とポリマーとの有害な反応がなく使用することができる。
【０１００】
腸溶性ポリマーを、水性懸濁液から、水溶液若しくは有機溶媒の溶液から被覆として又は粉末として適用することができる。当業者は、適宜、既知の溶媒及び/又は方法から選択することができる。
【０１０１】
特定の腸溶性ポリマーは、Eudragit(登録商標)L100-55及びL100などの粉末用途を含む、商標名Eudragit(登録商標)で販売されているものなどのポリメタクリレートなどの薬物送達アクリルポリマーである。
【０１０２】
腸溶性ポリマーは、Shin-Etsu Chemical Co. Ltd. (Obara, et al., Poster PT6115, AAPS Annual Meeting, Seattle, Wash., Oct. 27-31, 1996)により記載されている方法に従って適用することもできる。この方法において、腸溶性ポリマーが粉末として適用される場合、腸溶性ポリマーは、固体状態で錠剤又はペレット剤に直接添加されるが、同時に可塑剤が錠剤又はペレット剤に噴霧される。次に固体腸溶性粒子の付着が硬化により膜になる。硬化は、被覆錠剤又はペレット剤に少量の水を噴霧し、次に錠剤又はペレット剤を短時間加熱することにより行われる。この腸溶性被覆適用の方法は、活性成分層を有するコアの調製について上記に記載されたものと同じ種類の装置を用いて実施することができる。
【０１０３】
腸溶性ポリマーが水性懸濁液として適用される場合、均一な凝集膜を得る問題が常にもたらされる。この問題が生じる場合、微粒子等級を使用することができる又はポリマーの粒子を粉砕して、適用前に極めて小さいサイズにすることができる。エアーインパクションミル(air-impaction mill)のように乾燥ポリマーを粉砕すること又は懸濁液を調製し、ポリマーをスラリー形態で粉砕することが可能である。スラリー粉砕は、特に、同じ工程で腸溶層の充填剤部分を粉砕することもできるので、一般的に好ましい。幾つかの実施態様において、腸溶性ポリマーの平均粒径を約1マイクロメートルから約5マイクロメートルの範囲、特に3マイクロメートル以下に低減することが推奨される。
【０１０４】
腸溶性ポリマーが懸濁液の形態で適用される場合、懸濁液は、典型的には均質に維持される。そのような事前の対策には、懸濁液を穏やかな撹拌条件下に維持するが、泡を作り出すほど激しく撹拌しないこと及び懸濁液が例えばノズル本体又は大きすぎる送達管系の中で小さな渦として留まらないことを確実にすることが含まれる。頻繁に、懸濁液形態のポリマーは、懸濁液が温かくなりすぎると凝塊し、臨界温度は個別の場合において30℃の低さでありうる。噴霧ノズル及び管系が通常の流動床型装置では熱風に曝されるので、懸濁液が装置の中を活発に移動し続けて、管系及びノズルを冷却するのを確実にするように注意しなければならない。HPMCASが使用される場合、特に、適用の前に懸濁液を20℃未満に冷却すること、懸濁液をポンプで送る前に少量の冷水をポンプで送ることにより管系及びノズルを冷却すること、並びに懸濁液を管系の中で素早く動かし続けることができるように、噴霧速度が許す限り小さな直径の供給管系を使用することが推奨される。
【０１０５】
一つの実施態様において、腸溶性ポリマーを、可能な限りいつでも水溶液として適用することができる。ポリマーの溶解は、ポリマーを特にアンモニアにより中和することによって得ることができる。ポリマーの中和は、単にアンモニアを好ましくは水酸化アンモニウム水溶液の形態で水中のポリマー懸濁液に加えることにより得ることができ、完全な中和は、約pH5.7〜5.9でポリマーの完全な溶解をもたらす。良好な結果は、ポリマーがアンモニアの当量未満の添加により部分的に中和される場合も得られる。そのような場合では、中和されなかったポリマーは、中和ポリマーの溶液中に懸濁されている懸濁形態を維持する。そのような方法が使用される場合、ポリマーの粒径を制御することができる。中和ポリマーの使用は、懸濁ポリマーを使用する場合よりも平滑で凝集性の腸溶層を容易に提供し、部分的に中和されたポリマーの使用は、中間程度の平滑性及び凝集性を提供する。特に、腸溶層が非常に平滑な分離層を覆って適用される場合、部分的に中和された腸溶ポリマーにより優れた結果を得ることができる。
【０１０６】
中和の程度は、結果又は操作の容易性に有害な影響を及ぼさない範囲にわたって変わることができる。例えば、中和の程度は、約25%〜約100%の中和の範囲でありうる。別の特定の条件は、約45%〜約100%の中和であり、別の条件は、約65%〜約100%である。更に別の特定の中和方法は、約25%〜約65%の中和である。しかし、得られる製品の腸溶性ポリマーが、乾燥した後、適用したときよりも少ない程度で中和することを見出すことができる。
【０１０７】
可塑剤を腸溶性ポリマーと共に使用して、結果を改善することができる。特定の可塑剤は、水性懸濁液適用中の腸溶性ポリマーの量の約15%〜30%までの量で使用されるクエン酸トリエチルでありうる。低レベルの可塑剤が必要とされる又は可塑剤は必要ない可能性がある。膜の平滑化を助けるための消泡剤、懸濁剤(ポリマーが懸濁液形態の場合)又は界面活性剤などの少量の成分も、一般的に使用される。例えば、シリコーン消泡剤、ポリソルベート80、ラウリル硫酸ナトリウムなどの界面活性剤、カルボキシメチルセルロース、植物ガムなどの懸濁剤を、製品の1%までの一般的範囲の量で一般に使用することができる。
【０１０８】
腸溶層に、タルク、モノステアリン酸グリセリル又は水和二酸化ケイ素などの粉末賦形剤を充填して、層の厚さを高めること、強化すること、静電荷を低減すること及び粒子凝集を低減することができる。最終製品の約1%〜約10%の範囲のそのような固体の量を、腸溶性ポリマー混合物に加えることができ、一方、腸溶性ポリマー自体の量は、約5%〜約25%、とりわけ約10%〜約20%の範囲でありうる。
【０１０９】
ペレット剤への腸溶層の適用は、腸溶性ポリマー溶液又は懸濁液の噴霧及び温風乾燥を同時に行う流動床型装置を使用する前記で考察されたものと同じ一般的手順に従う。乾燥空気の温度及びペレット剤の循環塊の温度は、典型的には、腸溶性ポリマーの製造会社により推奨された範囲に保持される。
【０１１０】
D.仕上層
腸溶層を覆う仕上層は、全ての場合において必要であるわけではないが、製品の簡潔性、取扱い、保存及び機械加工性を改善することができ、更なる利益も提供することができる。最も簡単な仕上層は、単に、約1%未満の少量のタルク又は二酸化ケイ素などの帯電防止成分であり、ペレット剤の表面に単に振りかけられている。別の簡単な仕上層は、ペレット剤を更に平滑にするため、静電荷を低減するため、ペレット剤が互いに粘着する傾向を防止するため及び表面の疎水性を増加するためにペレット剤の循環塊の上に溶融された、約1%の少量のミツロウなどのロウである。
【０１１１】
更に複雑な仕上層は、成分の最終噴霧層から構成されうる。例えば、約2%から約10%までなどの量のヒドロキシプロピルメチルセルロース、ポリビニルピロリドンなどのポリマー材料の薄層を適用することができる。ポリマー材料は、乳白剤、タルクなどの嵩高剤又は着色材料、特に不透明な微粉化した酸化鉄赤又は黄などの着色剤の懸濁液を有することもできる。そのような層は、胃において素早く溶解して、活性成分を保護する腸溶層を残すが、医薬的簡潔性の追加的な手段及び製品に対する機械的損傷からの保護を提供する。
【０１１２】
本発明の製品に適用される仕上層は、腸溶性製品を平滑、封入及び着色するために薬学において一般的に使用されるものと実質的に同じ種類のものであり、通常の方法により配合及び適用することができる。
【０１１３】
上記の例に従って作製されるペレット剤及びそのようなペレット剤の多様なバッチが充填されるゼラチンカプセル剤は、薬学において通常の方法により十分に試験される。安定性試験の結果は、ペレット剤及びカプセル剤が従来の薬学的な方法で分配、市販及び使用されるのに十分な保存安定性を有することを示す。
【０１１４】
ペレット剤及びカプセル剤は、胃において支配的な条件下で腸溶性保護についての従来の試験に合格すると考えられる。ペレット剤は、小腸において支配的な条件に曝露されたとき、薬物製品の充填物を許容される程度で迅速に放出すると考えられる。
【０１１５】
腸溶性被覆粒子をHDP #1カプセルに充填することができる。USPの手順に基づいてHCl 0.1N中のカプセルバッチの溶解プロフィールを用いることができる。リン酸緩衝液中のカプセルの溶解プロフィールを測定することができる。溶解プロフィールは、球体が胃において溶解するのを保護するために腸溶性被覆が有効であること及び腸様条件下で容易に可溶性であることを示すと予測される。
【０１１６】
本発明は、活性成分の量が、例えば、1〜10mgを含む、更には5mgを含む、0.5〜50mgの範囲である錠剤及びカプセル剤を含む。
【実施例】
【０１１７】
実施例1:ラセミ5-((E)-2-ピロリジン-3-イルビニル)ピリミジンヘミガラクタレート:
トリフルオロ酢酸(1.2cm3、15.6mm)を、アルゴン下にあり、0℃に冷却した6cm3のジクロロメタン中の0.43g(1.56mmol)のラセミ3-((E)-2-ピリミジン-5-イルビニル)ピロリジン-1-カルボン酸tert-ブチルエステルの溶液に滴加した。反応混合物をこの温度で0.5時間、次に22℃の領域の温度で20時間撹拌し、減圧下(2.7kPa)で濃縮乾固した。油状残渣を5cm3の水に取り、得られた溶液を28%のアンモニア水溶液の添加により塩基性(pH=8)にし、次に25cm3のジクロロメタンで3回抽出した。合わせた有機相を25cm3の水で洗浄し、硫酸マグネシウムで乾燥し、濾過し、減圧下(2.7kPa)で濃縮乾固して、0.126gの橙色の油状物を得て、それをシリカゲルのクロマトグラフィー[溶離剤:ジクロロメタン/メタノール(容量に基づいて9/1、次に8/2)]により精製した。画分を減圧下(2.7kPa)で濃縮して、0.1g(0.57mmol)の橙色の油状物を得た。ガラクタル酸(0.06g、0.28mmol)を、2cm3のメタノール中のこの油状物の溶液に加え、これに0.5cm3の水を加えた。混合物を還流し、22℃の領域の温度に冷却し、不溶性物質を濾過により除去した。濾液を減圧下(2.7kPa)で濃縮乾固し、油状残渣を2cm3のエタノールに取った。沈殿した固体を濾取し、2cm3の酢酸イソプロピル及び2cm3のジイソプロピルエーテルで洗浄し、次に真空下(2.7kPa)、40℃で乾燥して、0.1gのラセミ5-((E)-2-ピロリジン-3-イルビニル)ピリミジンヘミガラクタレートを黄土色の固体の形態で得た。質量スペクトル(DCI):m/z 176(MH+)。
【０１１８】
1H NMRスペクトル(300MHz, 2、3滴のCD3COOD d4を含む(CD3)2SO d6, δ、ppm単位): 1.82 (m: 1H); 2.18 (m: 1H); 2.98 (dd, J=11及び8.5Hz: 1H); 3.10 (m: 1H); 3.20 (m: 1H); 3.33 (m: 1H); 3.42 (dd, J=11及び7.5Hz: 1H); 3.79 (s: 1H); 4.24 (s: 1H); 6.55 (AB類似: 2H); 8.87 (s: 2H); 9.04 (s: 1H).
【０１１９】
ラセミ3-((E)-2-ピリミジン-5-イルビニル)ピロリジン-1-カルボン酸tert-ブチルエステルを以下のように調製することができる。
【０１２０】
酢酸パラジウム(0.117g、0.52mmol)、0.678g(16mmol)の塩化リチウム及び7.25cm3(42mmol)のエチルジイソプロピルアミンを、15cm3のジメチルホルムアミド中の0.822g(5.17mmol)の5-ブロモピリミジン及び1.2g(5.17mmol)のラセミ3-ビニルピロリジン-1-カルボン酸tert-ブチルエステルのアルゴン下の溶液に連続的に加えた。撹拌しながら110℃で3時間加熱した後、反応混合物を22℃の領域の温度で2時間撹拌し、次に減圧下(2.7kPa)で濃縮乾固した。油状残渣を50cm3の酢酸エチルに取り、得られた溶液を、25cm3の水で2回、25cm3の飽和重炭酸溶液、25cm3の水で2回及び25cm3の飽和塩化ナトリウム溶液で連続的に洗浄し、次に硫酸マグネシウムで乾燥し、濾過し、減圧下(2.7kPa)で濃縮乾固して、1.1gの褐色の油状物を得た。この残渣をシリカゲルのクロマトグラフィー[溶離剤:シクロヘキサン/酢酸エチル(容量に基づいて8/2)]により精製した。画分を減圧下(2.7kPa)で濃縮して、0.43gのラセミ3-((E)-2-ピリミジン-5-イルビニル)ピロリジン-1-カルボン酸tert-ブチルエステルを油状物の形態で得た。
【０１２１】
1H NMRスペクトル(300MHz, (CD3)2SO d6, δ、ppm単位): 1.42 (s: 9H); 1.78 (m: 1H); 2.05 (m: 1H); 2.90〜3.15 (m: 2H); 3.15〜3.60 (m: 3H); 6.51 (d, J=16.5Hz: 1H); 6.64 (dd, J=16.5及び7Hz: 1H); 8.89 (s: 2H); 9.04 (s: 1H).
【０１２２】
実施例2:(S)-5-((E)-2-ピロリジン-3-イルビニル)ピリミジンガラクタレート:
ヨウ化トリメチルシリル(0.2cm3、1.4mmol)を、10cm3のジクロロメタン中の0.26g(0.944mmol)の(S)-3-((E)-2-ピリミジン-5-イルビニル)ピロリジン-1-カルボン酸tert-ブチルエステルのアルゴン下の溶液に22℃の領域の温度で加えた。この温度で2時間撹拌した後、反応混合物を15cm3の5%アンモニア水溶液と混合し、22℃の領域の温度で1時間撹拌し、放置して沈降させた。水相を分離し、ジクロロメタンで抽出した。合わせた有機相を水で二回及び飽和塩化ナトリウム水溶液で洗浄し、次に硫酸マグネシウムで乾燥し、濾過し、減圧下(2.7kPa)で濃縮乾固して、0.06gの橙色の油状物を得た。ガラクタル酸(0.035g、0.16mmol)を、6cm3のメタノール中のこの油状物の溶液に加え、これに0.6cm3の水を加えた。混合物を還流し、22℃の領域の温度に冷却し、減圧下(2.7kPa)で濃縮乾固した。油状残渣を5cm3のジイソプロピルエーテルの存在下で粉砕し、形成された固体を濾取し、次に真空下(2.7kPa)、45℃で乾燥して、0.072gの(S)-5-((E)-2-ピロリジン-3-イルビニル)ピリミジンガラクタレートを黄色の固体の形態で得た。質量スペクトル(DCI):m/z=176(MH+)。
【０１２３】
1H NMRスペクトル(300MHz, 2、3滴のCD3COOD d4を含む(CD3)2SO d6, δ、ppm単位): 1.81 (m: 1H); 2.19 (m: 1H); 2.98 (dd, J=11及び9Hz: 1H); 3.10 (m: 1H); 3.21 (m: 1H); 3.33 (m: 1H); 3.43 (dd, J=11及び8Hz: 1H); 3.79 (s: 2H); 4.25 (s: 2H); 6.56 (AB類似: 2H); 8.88 (s: 2H); 9.05 (s: 1H).
【０１２４】
(S)-3-((E)-2-ピリミジン-5-イルビニル)ピロリジン-1-カルボン酸tert-ブチルエステルを以下のように調製することができる。
【０１２５】
ラセミ混合物の3-((E)-2-ピリミジン-5-イルビニル)ピロリジン-1-カルボン酸tert-ブチルエステル(0.5g)を、1.2kgのキラル固定相Chiralpak AS(商標)20μmを含有する直径8cmのカラム[流速:130ml/分、溶離剤:ヘプタン/メタノール/エタノール(容量に基づいて98/1/1)]に二つに分けて注入した。画分を減圧下(2.7kPa)で濃縮して、0.24gの(S)-((E)-2-ピリミジン-5-イルビニル)ピロリジン-1-カルボン酸tert-ブチルエステル及び0.27gの(R)-((E)-2-ピリミジン-5-イルビニル)ピロリジン-1-カルボン酸tert-ブチルエステルを得た。(+)-((E)-2-ピリミジン-5-イルビニル)ピロリジン-1-カルボン酸tert-ブチルエステルは、直径4.6mm及び長さ250mmのChiralpak AS(商標)20μmカラム[流速:1ml/分、溶離剤:ヘプタン/メタノール/エタノール(容量に基づいて98/1/1)]に保持時間14.2分で第1の位置に溶離した。
【０１２６】
1H NMRスペクトル(300MHz, (CD3)2SO d6, δ、ppm単位): 1.43 (s: 9H); 1.79 (m: 1H); 2.06 (m: 1H); 2.95〜3.15 (m: 2H); 3.20〜3.35 (m: 1H); 3.44 (ddd, J=11-8.5及び3Hz: 1H); 3.53 (広幅dd, J=10及び7.5Hz: 1H); 6.52 (d, J=16.5Hz: 1H); 6.63 (dd, J=16.5及び7Hz: 1H); 8.89 (s: 2H); 9.04 (s: 1H).
【０１２７】
(R)-((E)-2-ピリミジン-5-イルビニル)ピロリジン-1-カルボン酸tert-ブチルエステルは、直径4.6mm及び長さ250mmのChiralpak AS(商標)20μmカラム[流速:1ml/分、溶離剤:ヘプタン/メタノール/エタノール(容量に基づいて98/1/1)]に保持時間17分で第2の位置に溶離した。
【０１２８】
1H NMRスペクトル(300MHz, (CD3)2SO d6, δ、ppm単位): 1.43 (s: 9H); 1.79 (m: 1H); 2.06 (m: 1H); 2.95〜3.15 (m: 2H); 3.20〜3.35 (m: 1H); 3.44 (ddd, J=11-8.5及び3Hz: 1H); 3.53 (広幅dd, J=10及び7.5Hz: 1H); 6.52 (d, J=16.5Hz: 1H); 6.63 (dd, J=16.5及び7Hz: 1H); 8.89 (s: 2H); 9.04 (s: 1H).
【０１２９】
実施例3:(R)-5-((E)-2-ピロリジン-3-イルビニル)ピリミジンガラクタレート:
ヨウ化トリメチルシリル(0.2cm3、1.4mmol)を、10cm3のジクロロメタン中の0.29 g(1.053 mmol)の(-)-3-((E)-2-ピリミジン-5-イルビニル)ピロリジン-1-カルボン酸tert-ブチルエステルのアルゴン下の溶液に22℃の領域の温度で加えた。この温度で2時間撹拌した後、反応混合物を15cm3の5%アンモニア水溶液と混合し、22℃の領域の温度で1時間撹拌し、放置して沈降させた。水相を分離し、ジクロロメタンで抽出した。合わせた有機相を水で二回及び飽和塩化ナトリウム水溶液で洗浄し、次に硫酸マグネシウムで乾燥し、濾過し、減圧下(2.7kPa)で濃縮乾固して、0.1gの橙色の油状物を得た。ガラクタル酸(0.06g、0.28mmol)を、10cm3のメタノール中のこの油状物の溶液に加え、これに1cm3の水を加えた。混合物を還流し、22℃の領域の温度に冷却し、減圧下(2.7kPa)で濃縮乾固した。油状残渣を5cm3のジイソプロピルエーテルの存在下で粉砕し、形成された固体を濾過し、次に真空下(2.7kPa)、45℃で乾燥して、0.094gの(R)-5-((E)-2-ピロリジン-3-イルビニル)ピリミジンガラクタレートを黄色の固体の形態で得た。質量スペクトル(DCI):m/z=176(MH+)。
【０１３０】
1H NMRスペクトル(300MHz, 2、3滴のCD3COOD d4を含む(CD3)2SO d6, δ、ppm単位): 1.82 (m: 1H); 2.19 (m: 1H); 2.98 (dd, J=11及び9Hz: 1H); 3.10 (m: 1H); 3.21 (m: 1H); 3.32 (m: 1H); 3.43 (dd, J=11及び7.5Hz: 1H); 3.79 (s: 2H); 4.24 (s: 2H); 6.57 (AB類似: 2H); 8.88 (s: 2H); 9.05 (s: 1H).
【０１３１】
(R)-3-((E)-2-ピリミジン-5-イルビニル)ピロリジン-1-カルボン酸tert-ブチルエステルを実施例2に記載されたように調製することができる。
【０１３２】
実施例4.tert-ブチル(R)-3-(メチルスルホニルオキシ)ピロリジン-1-カルボキシレート(2)の合成
手順A:-20〜-30℃のトルエン(700mL)中のtert-ブチル(R)-3-ヒドロキシピロリジン-1-カルボキシレート(200g、1.07mol)及びトリエチルアミン(167g、1.63mol)の溶液に、塩化メタンスルホニル(156g、1.36mol)を、-10〜-20℃の温度に維持しながら滴加した。溶液を周囲温度に温め、撹拌した。反応溶液を1時間毎に試料採取し、HPLCで分析して、反応の完了を確立した。反応の終了時に、懸濁液を濾過して、トリエチルアミン塩酸塩を除去した。濾液を約600mLの希重炭酸ナトリウム水溶液で洗浄した。有機層を乾燥し、減圧下で濃縮して、2を粘性油状物(260g、92%)として得て、それを更に精製することなく使用する。
【０１３３】
1H NMR (CDCl3, 400MHz) δ 5.27 (m, 1H), 3.44-3.76 (m, 4H), 3.05 (s, 3H), 2.26 (m, 1H), 2.15 (m, 1H), 1.47 (s, 9H).
【０１３４】
手順B:反応器に、tert-ブチル(R)-3-ヒドロキシピロリジン-1-カルボキシレート(2.00kg、10.7mol)、トルエン(8.70kg)及びトリエチルアミン(1.75kg、17.3mol)を投入した。反応器を窒素で15分間フラッシュした。混合物を撹拌し、3℃に冷却した。塩化メタンスルホニル(1.72kg、mol)を、連続氷浴冷却しながら(発熱反応)ゆっくりと(2時間かけて)加えた(添加が完了した後、温度は14℃であった)。沈殿したトリエチルアミン塩酸塩により粘性になった混合物を12時間撹拌すると、20℃に温まった。GCとTLCの両方の分析(ニンヒドリン染色)は、出発材料が残っていないことを示した。混合物を濾過して、トリエチルアミン塩酸塩を除去し、濾液を反応器に戻した。次に濾液を、それぞれの洗浄の際に15分間の撹拌及び15分間の沈降時間を使用して、5%重炭酸ナトリウム水溶液(2×3kg)で洗浄した。得られた有機層を無水硫酸ナトリウムで乾燥し、濾過した。揮発物を、最初に50℃で4時間、次に周囲温度で10時間、濾液から真空下で除去した。残渣の重量は3.00kg(収率106%)であり、予め調製した試料のクロマトグラフィー及びNMR分析と、トルエンを含有した以外は同一であった。
【０１３５】
実施例5.ジエチル(R)-2-(1-(tert-ブトキシカルボニル)ピロリジン-3-イル)マロネート(3)の合成
調製A:1-メチル-2-ピロリジノン(1.19L)中のカリウムtert-ブトキシド(187g、1.62mol)の溶液に、温度を35℃未満に維持しながらマロン酸ジエチル(268g、1.67mol)を加えた。溶液を40℃に加熱し、20〜30分間撹拌した。tert-ブチル(R)-3-(メチルスルホニルオキシ)ピロリジン-1-カルボキシレート(112g、420mmol)を加え、溶液を65℃に加熱し、6時間撹拌した。反応溶液を2時間毎に試料採取し、HPLCで分析して、反応の完了を確立した。反応が完了すると(10〜12時間)、混合物をおよそ25℃に冷却した。脱イオン水(250mL)を溶液に加え、pHを、2N塩酸(650mL)の添加により3〜4に調整した。得られた懸濁液を濾過し、水(1.2L)及びクロロホルム(1.4L)を加えた。溶液を十分に混合し、クロロホルム層を収集し、減圧下で蒸発させて、黄色の油状物を得た。油状物をヘキサン(2.00L)に溶解し、脱イオン水(2×1.00L)で洗浄した。有機層を減圧下、50〜55℃で濃縮して、淡黄色の油状物(252g)を得て、その1H NMR分析は、48.5%のマロン酸ジエチル(122g)及び2%の1-メチル-2-ピロリジノン(5g)を伴って、49.1%の3(123.8g)を示す。物質を更に精製することなく次の工程に進めた。
【０１３６】
1H NMR (CDCl3, 400MHz) δ 4.20 (q, 4H), 3.63 (m, 1H), 3.48 (m, 1H), 3.30 (m, 1H), 3.27 (d, J=10Hz, 1H), 3.03 (m, 1H), 2.80 (m, 1H), 2.08 (m, 1H), 1.61 (m,1H), 1.45 (s, 9H), 1.27 (t, 6H).
【０１３７】
調製B:窒素雰囲気下に維持した反応器に、200プルーフのエタノール(5.50kg)及びエタノール(7.00kg、21.9mol)中の21%(重量に基づく)のナトリウムエトキシドを投入した。混合物を撹拌し、30℃に温めた。マロン酸ジエチル(3.50kg、21.9mol)を20分間かけて加えた。次に反応混合物を40℃で1.5時間温めた。200プルーフのエタノール(5.50kg)中のtert-ブチル(R)-3-(メチルスルホニルオキシル)ピロリジン-1-カルボキシレート(3.00kgの実施例2、手順Bの生成物、10.7mol)の溶液を加え、得られた混合物を2時間加熱還流(78℃)した。GCとTLCの両方の分析(ニンヒドリン染色)は、出発材料が残っていないことを示した。次に撹拌混合物を25℃に冷却し、水(2.25kg)で希釈し、水(5.44kg)中の濃塩酸(1.27kg、12.9mol)の溶液でゆっくりと処理した。この混合物を、それぞれの洗浄の際に15分間の撹拌及び15分間の沈降時間を使用して、メチルtert-ブチルエーテル(MTBE)(14.1kg及び11.4kg)で二回洗浄した。合わせたMTBE洗浄液を無水硫酸ナトリウム(1kg)で乾燥し、濾過し、真空下、50℃で6時間濃縮した。残渣(赤色油状物)の重量は4.45kgであり、GC分析によると49%の目的生成物であった(tert-ブチル(R)-3-ヒドロキシピロリジン-1-カルボキシレートの全収率は62%であった)。
【０１３８】
実施例6.(R)-2-(1-(tert-ブトキシカルボニル)ピロリジン-3-イル)マロン酸(4)の合成
手順A:テトラヒドロフラン(1.2L)中の、123.8g(380mmol)の3及び121.8g(760mmol)のマロン酸ジエチルを含有する実施例3、手順Aの生成物(232g)の溶液に、21%水酸化カリウム溶液(0.50Lの脱イオン水中450g)を、温度を25℃未満に維持しながら加えた。反応混合物を45℃に加熱し、1時間撹拌した。反応溶液を毎時間試料採取し、HPLCで分析して、反応の完了を確立した。反応が完了すると(2〜3時間)、混合物をおよそ25℃に冷却した。水層を収集し、5℃に冷却した。pHを、4N塩酸(750mL)の添加により2に調整し、得られた懸濁液を5〜10℃で30分間保持した。混合物を濾過し、フィルターケーキをヘキサン(1L)で洗浄した。水性濾液をクロロホルム(1L)で抽出し、クロロホルム層を取っておいた。濾過工程で収集した固体を、40℃に加熱してクロロホルム(1L)に再溶解した。溶液を濾過して、未溶解の無機固体を除去した。クロロホルム層を合わせ、減圧下、50〜55℃で濃縮して、オフホワイトの固体(15g)を得た。固体を合わせ、酢酸エチル(350mL)に溶解して、懸濁液を得て、それを55〜60℃で2時間温めた。懸濁液を熱い間に濾過し、得られたケーキを酢酸エチル(2×150mL)及びヘキサン(2×250mL)で洗浄して、83.0g(80.1%)の4を白色の固体として得て、それを更に精製することなく次の工程に使用した。
【０１３９】
1H NMR (d4-CH3OH, 400MHz) δ 3.60 (m, 1H), 3.46 (m, 1H), 3.29-3.32 (m, 2H), 2.72 (m, 1H), 2.09 (m, 1H), 1.70 (m, 1H), 1.45 (s, 9H).
【０１４０】
手順B:テトラヒドロフラン(13.9kg)中の、2.13kg(6.47mol)の3を含有する実施例3、手順Bの生成物(4.35kg)の溶液を、脱イオン水(2.00kg)中の水酸化カリウム(1.60kg、40.0mol)の撹拌し冷却した溶液に、窒素雰囲気下、温度を35℃未満に維持しながら加えた。反応混合物を加熱し、40〜45℃で24時間維持し、その時間で、GC及びTLC分析は反応が完了したことを示した。混合物を25℃に冷却し、MTBE(34kg)により、15分間の撹拌及び15分間の沈降時間を使用して洗浄した。水層を収集し、1℃に冷却した。次に脱イオン水(2.18kg)中の濃塩酸(2.61kg、26.5mol)の混合物をゆっくりと加え、混合物の温度を添加の間及び後の15分間、<15℃に保持した。溶液のpHを、塩酸の更なる添加により3.7に調整した。白色の固体を濾過により収集し、水(16kg)で洗浄し、周囲温度で6日間真空乾燥した。乾燥固体の重量は1.04kgであった。濾液を<10℃に冷却し、pHを更なる塩酸の添加により下げたとき(1.6Lの6Nを使用した;9.6mol;最終pH=2)、この温度で保持した。白色の固体を濾過により収集し、水(8L)で洗浄し、40℃で3日間真空乾燥した。乾燥固体の重量は0.25 kgであった。合わせた固体(1.2kg、収率73%)は、予め調製した試料とクロマトグラフ的に同一であった。
【０１４１】
実施例7.(R)-2-(1-(tert-ブトキシカルボニル)ピロリジン-3-イル)酢酸(5)の合成
手順A:1-メチル-2-ピロリジノン(0.42L)中の(R)-2-(1-(tert-ブトキシカルボニル)ピロリジン-3-イル)マロン酸(83g)の溶液を、窒素下、110〜112℃で2時間撹拌した。反応溶液を毎時間試料採取し、HPLCで分析して、反応の完了を確立した。反応が終了すると、反応溶液を20〜25℃に冷却した。溶液を脱イオン水(1.00L)と混合し、MTBE(1.00L)を加えた。相を分離し、有機層を収集した。水相を、MTBE(1.00L)、次にクロロホルム(1.00L)で抽出した。有機層を合わせ、減圧下、50〜55℃で濃縮して、油状物を得た。この油状物をMTBE(2.00L)に溶解し、0.6N塩酸(2×1.00L)で二回洗浄した。有機層を収集し、減圧下、50〜55℃で濃縮して、半固体を得た。半固体を1:4の酢酸エチル/ヘキサン(100mL)に懸濁し、50℃に加熱し、30分間保持し、-10℃に冷却し、濾過した。濾液を減圧下で濃縮して、油状物を得て、これをMTBE(250mL)に溶解し、0.6N塩酸(2×100mL)で二回洗浄した。有機層を減圧下、50〜55℃で濃縮して、半固体を得て、それを1:4の酢酸エチル/ヘキサン(50mL)に懸濁し、50℃に加熱し、30分間保持し、-10℃に冷却し、濾過した。固体を収集し、ヘキサン(200mL)に懸濁し、濾過により収集して、54.0g(77.6%)の5を得た。
【０１４２】
1H NMR (CDCl3, 400MHz) δ 11.00 (br s, 1H), 3.63 (m, 1H), 3.45 (M, 1H), 3.30 (M, 1H), 2.97 (m, 1H), 2.58 (m, 1H), 2.44 (m, 2H), 2.09 (m, 1H), 1.59 (M, 1H), 1.46 (s, 9H).
【０１４３】
手順B:1-メチル-2-ピロリジノン(6.49kg)中の(R)-2-(1-(tert-ブトキシカルボニル)ピロリジン-3-イル)マロン酸(1.04kg、3.81mol)の溶液を、窒素下、110℃で5時間撹拌し、その時間で、TLC及びHPLC分析は反応が完了したことを示した。反応混合物を25℃に冷却し(4時間)、水(12.8kg)及びMTBE(9.44kg)と合わせた。混合物を20分間激しく撹拌し、相を分離させた(10時間)。有機相を収集し、水相をMTBE(9.44kg)と合わせ、15分間撹拌し、沈降させた(45分間)。有機相を収集し、水相をMTBE(9.44kg)と合わせ、15分間撹拌し、沈降させた(15分間)。三つの有機相を合わせ、それぞれの洗浄の際に15分間の撹拌及び15分間の沈降時間を使用して、1N塩酸(8.44kgの部分)で三回及び水(6.39kg)で一回洗浄した。得られた溶液を無水硫酸ナトリウム(2.0kg)で乾燥し、濾過した。濾液を減圧下、31℃で濃縮して(2時間)、固体を得た。この固体を真空下、4時間39℃で4時間、25℃で16時間加熱すると、704g(81%)の5(GCにより99.7%の純度)が残った。
【０１４４】
手順C(2を出発材料として使用する5の合理化合成(streamlined synthesis)):エタノール中ナトリウムエトキシド(21重量パーセント、343g、1.05mol)、エタノール(無水、300mL)及びマロン酸ジエチル(168g、1.05mol)の撹拌混合物を、40℃で1.5時間加熱した。この混合物に、エタノール(100mL)中の(R)-tert-ブチル3-(メチルスルホニルオキシ)ピロリジン-1-カルボキシレート(138g、0.592mol)の溶液を加え、反応混合物を78℃で8時間加熱した。冷却反応混合物を水(2.0L)で希釈し、6M HCl(100mL)でpH=3に酸性化した。水性エタノール混合物をトルエン(1.0L)で抽出し、有機相を真空下で濃縮して、230gの赤色の油状物を得た。赤色の油状物を85℃で22.5重量パーセントの水酸化カリウム水溶液(784g、3.01mol)に加えた。添加が完了した後、反応温度をゆっくりと102℃に上げ、その間、エタノールの蒸留が起きた。反応温度が102℃に達したとき、蒸留を沈静化させ、加熱を更に90分間続けた。反応混合物を周囲温度に冷却し、トルエン(2×400mL)で洗浄した。水層に600mLの6M塩酸を加え、その間、内部温度を20℃未満に保持した。このことは沈殿物の形成をもたらし、約4〜5のpHで始まった。懸濁液を濾過し、フィルターケーキを300mLの水で洗浄した。固体を真空下で乾燥して、77gの(R)-2-(1-(tert-ブトキシカルボニル)ピロリジン-3-イル)マロン酸をオフホワイトの固体として得た((R)-tert-ブチル3-(メチルスルホニルオキシ)ピロリジン-1-カルボキシレートに関する収率54%)。
【０１４５】
1H NMR (DMSO-d6, 400MHz): δ 3.47 (m, 1H); 3.32 (m, 1H); 3.24 (m, 1H); 3.16 (m, 1H); 3.92 (m, 1H); 2.86 (m, 1H); 1.95 (m, 1H); 1.59 (m, 1H); 1.39 (s, 9H).
【０１４６】
トルエン(150mL)及びジメチルスルホキシド(2mL)中の(R)-2-(1-(tert-ブトキシカルボニル)ピロリジン-3-イル)マロン酸(15g、55mmol)の懸濁液を、2時間加熱還流した。混合物を周囲温度で反応させ、MTBE(150mL)で希釈した。有機溶液を10%クエン酸水溶液(2×200mL)で洗浄し、溶媒を真空下で除去して、11.6gの(R)-2-(1-(tert-ブトキシカルボニル)ピロリジン-3-イル)酢酸をオフホワイトの固体(収率92%)として得た。
【０１４７】
1H NMR (DMSO-d6, 400MHz): δ 12.1 (s, 1H); 3.36-3.48 (m, 1H); 3.20-3.34 (m, 1H); 3.05-3.19 (m, 1H; 2.72-2.84 (m, 1H); 2.30-2.42 (m, 1H), 2.22-2.30 (m, 2H); 1.85-2.00 (m, 1H); 1.38-1.54 (m, , 1H), 1.35 (2, 9H).
【０１４８】
実施例8.tert-ブチル(R)-3-(2-ヒドロキシエチル)ピロリジン-1-カルボキシレート(6)の合成
手順A:テトラヒドロフラン(THF)(200mL)中の(R)-2-(1-(tert-ブトキシカルボニル)ピロリジン-3-イル)酢酸(49.0g、214mmol)の溶液を-10℃に冷却した。THF溶液中の250mL(250mmol)の1Mボランを、温度を0℃未満に維持しながらフラスコにゆっくりと加えた。溶液を周囲温度に温め、1時間撹拌した。溶液を1時間毎に試料採取し、HPLCで分析して、反応の完了を確立した。反応が完了すると、溶液を0℃に冷却し、10%水酸化ナトリウム溶液(80mL)を、30分間かけて滴加して、ガスの発生を制御した。溶液を500mLの1:1ヘキサン/酢酸エチル溶液で抽出した。有機層を飽和塩化ナトリウム溶液で洗浄し、10gのシリカゲルで乾燥した。シリカゲルを濾過により除去し、100mLの1:1ヘキサン/酢酸エチルで洗浄した。有機層を合わせ、真空下で濃縮して、6(42g、91.3%)を明橙色の油状物として得て、それを放置して凝固させた。
【０１４９】
1H NMR (CDCl3, 400MHz) δ 3.67 (m, 2H), 3.38-3.62 (m, 2H), 3.25 (m, 1H),  2.90 (m, 1H), 2.25 (m, 1H), 1.98-2.05 (m, 1H), 1.61-1.69 (m, 2H), 1.48-1.59 (m, 2H), 1.46 (s, 9H).
【０１５０】
手順B:ボラン-THF錯体(3.90kg又は3.90Lの、THF中1M、mol)を、窒素ガス下に保持したTHF(2.5kg)中の(R)-2-(1-(tert-ブトキシカルボニル)ピロリジン-3-イル)酢酸(683g、3.03mol)の撹拌溶液に、温度を23〜28℃に保持するために水浴を使用して、ゆっくりと加えた。添加は1.75時間かかった。25℃での撹拌を1時間続け、その時間の後、GC分析は反応の完了を示した。反応混合物を<10℃に冷却し、10%水酸化ナトリウム水溶液(1.22kg)をゆっくりと加えて25℃未満に維持した。添加は40分間かかった。混合物を25℃で1時間撹拌し、次に1:1(v/v)のヘプタン/酢酸エチル(7L)と合わせた。混合物を15分間撹拌し、相に分離させた(1時間)。有機相を取り出し、水相を第2の7L部分の1:1ヘプタン/酢酸エチルと合わせた。これを15分間撹拌し、相に分離させた(20分間)。有機相を再び取り出し、合わせた有機相を、15分間の混合及び1時間の沈降時間を使用して飽和塩化ナトリウム水溶液(4.16kg)で洗浄した。有機相をシリカゲル(140g)と合わせ、1時間撹拌した。無水硫酸ナトリウム(700g)を加え、混合物を1.5時間撹拌した。混合物を濾過し、フィルターケーキを1:1のヘプタン/酢酸エチル(2L)で洗浄した。濾液を真空下、<40℃で6時間濃縮した。得られた油状物は670gの重量があり(収率103%)、微量のヘプタンを含有するが、そうでなければ、NMR分析によると予め調製した6の試料と同一である。
【０１５１】
実施例9:tert-ブチル(R)-3-(2-(メチルスルホニルオキシ)エチル)ピロリジン-1-カルボキシレート(7)
手順A:tert-ブチル(R)-3-(2-ヒドロキシメチル)ピロリジン-1-カルボキシレート(41.0g、190mmol)の溶液に、トルエン(380mL)中のトリエチルアミン(40mL)を加え、-10℃に冷却した。塩化メタンスルホニル(20.0mL、256mmol)を、およそ-5〜0℃の温度を維持するようにゆっくりと加えた。溶液を周囲温度に温め、1時間撹拌した。溶液を1時間毎に試料採取し、HPLCで分析して、反応の完了を確立した。反応が完了すると、溶液を濾過し、濾液を5%重炭酸ナトリウム溶液(250mL)で洗浄した。有機層を収集し、飽和塩化ナトリウム水溶液(250mL)で洗浄した。有機層を収集し、シリカゲル(10g)で乾燥し、真空下で濃縮して、7(53.0g、92.8%)を明黄色の粘性油状物として得た。
【０１５２】
1H NMR (CDCl3, 400MHz) δ 4.26 (t, J=6.8Hz, 2H), 3.41-3.63 (m, 2H),3.27 (m, 1H), 3.02 (s, 3H), 2.92 (m, 1H), 2.28 (m, 1H), 2.05 (m, 1H), 1.83 (m, 2H), 1.50-1.63 (m, 1H), 1.46 (s, 9H).
【０１５３】
手順B:窒素雰囲気下、トルエン(5.20kg)中のトリエチルアミン(460g、4.55mol)及びtert-ブチル(R)-3-(2-ヒドロキシメチル)ピロリジン-1-カルボキシレート(実施例7、手順Bの全試料、3.03mol)の溶液を撹拌し、5℃に冷却した。塩化メタンスルホニル(470g、4.10mol)を、氷浴冷却を使用して温度を15℃未満に保持しながら、1.25時間かけてゆっくりと加えた。混合物を35℃まで徐々に(1.5時間かけて)温め、この温度を1.25時間維持し、この時点でGC分析は、反応が完了したことを示した。混合物を25℃に冷却し、固体を濾取し、フィルターケーキをトルエン(1.28kg)で洗浄した。濾液を10%重炭酸ナトリウム水溶液(4.0kg)と共に15分間撹拌し、相を30分間かけて分離させた。次に有機相を飽和塩化ナトリウム水溶液(3.9kg)と共に30分間撹拌し、相を20分間かけて分離させた。有機相をシリカゲル(160g)と合わせ、1時間撹拌した。無水硫酸ナトリウム(540g)を加え、混合物を更に40分間撹拌した。次に混合物を濾過し、フィルターケーキをトルエン(460g)で洗浄した。濾液を真空下、50℃で5時間濃縮し、得られた油状物を真空下、23℃で更に8時間保持した。これは、798gの7を残し、GC分析によると純度93%であった。
【０１５４】
実施例10:tert-ブチル(R)-3-ビニルピロリジン-1-カルボキシレート(9)の合成
手順A:tert-ブチル(R)-3-((メチルスルホニルオキシ)エチル)ピロリジン-1-カルボキシレート(49.0g、167mmol)、ヨウ化ナトリウム(30.0g、200mmol)及び1,2-ジメトキシエタン(450mL)の溶液を50〜60℃で4時間撹拌した。溶液を1時間毎に試料採取し、HPLCで分析して、反応の完了を確立した。反応が完了すると、溶液を-10℃に冷却し、固体カリウムtert-ブトキシド(32.0g、288mmol)を、温度を0℃未満に維持しながら加えた。反応混合物を周囲温度に温め、1時間撹拌した。混合物を1時間毎に試料採取し、HPLCで分析して、反応の完了を確立した。反応が完了すると、混合物を珪藻土のパッド(乾燥基準で25g)で濾過した。ケーキを1,2-ジメトキシエタン(100mL)で洗浄した。合わせた濾液を真空下で濃縮して、固体を懸濁する橙色の油状物を生じた。油状物をヘキサン(400mL)に溶解し、30分間撹拌し、濾過して、固体を除去した。有機層をシリカゲル(10g)で乾燥し、真空下で濃縮して、9(26.4g、82.9%)を無色の油状物として得た。
【０１５５】
1H NMR (CDCl3, 400MHz) δ 5.77 (m, 1H), 5.10 (dd, J=1.2Hz, J=16Hz, 1H), 5.03 (dd, J=1.2Hz, J=8.8Hz, 1H), 3.41-3.59 (m, 2H), 3.29 (m, 1H), 3.05 (m, 1H), 2.78 (m, 1H), 2.01 (m, 1H), 1.62-1.73 (m, 1H), 1.46 (m, 9H).
【０１５６】
手順B:tert-ブチル(R)-3-(2-(メチルスルホニルオキシ)エチル)ピロリジン-1-カルボキシレート(792gの実施例7、手順Bの生成物、約2.5mol)、ヨウ化ナトリウム(484g、3.27mol)及び1,2-ジメトキシエタン(7.2L)の溶液を、窒素下、55℃で4.5時間撹拌し、その時間で、GC分析は反応が完了したことを示した。溶液を<10℃に冷却し、固体カリウムtert-ブトキシド(484g、4.32mol)を、温度を15℃未満に維持しながら一部ずつ加えた(添加時間1.25時間)。反応混合物を5℃で1時間撹拌し、ゆっくりと(6時間)20℃に温め、20℃で1時間撹拌した。溶液を珪藻土のパッド(乾燥基準で400g)で濾過した。フィルターケーキを1,2-ジメトキシエタン(1.6kg)で洗浄した。合わせた濾液を真空下で濃縮し、半固体残渣をヘプタン(6.0L)で2時間撹拌した。固体を濾過により除去し(フィルターケーキを440mLのヘプタンで洗浄し)、濾液を真空下、20℃で濃縮して、455gの9(純度90.7%)を得た。この物質の試料(350g)を20〜23torrで分留して、296gの精製された9(沸点130〜133℃)(GC分析によると純度>99%)を得た。
【０１５７】
実施例11:(R)-5-((E)-2-ピロリジン-3-イルビニル)ピリミジン(11)の合成
窒素を、N,N-ジメチルアセトアミド(250mL)中の(R)-tert-ブチル3-ビニルピロリジン-1-カルボキシレート(25g、127mmol)、5-ブロモピリミジン(30.3g、190mmol)、1,1'-ビス(ジフェニルホスフィノ)フェロセン(2.11g、3.8mmol)及び酢酸ナトリウム(18.8g、229mmol)の溶液に1時間泡立て、酢酸パラジウム(850mg、3.8mmol)を加えた。反応混合物を40℃/時間の速度で150℃に加熱し、16時間撹拌した。混合物を10℃に冷却し、内部温度を20℃未満に維持しながら、水(750mL)で停止させた。MTBE(300mL)を加え、続いて珪藻土(乾燥基準で40g)を加えた。懸濁液を周囲温度で1時間撹拌し、珪藻土の床で濾過した。残渣をMTBE(2×100mL)で洗浄し、濾液を、オーバーヘッド撹拌機を備えた2Lの容器に移し、活性炭(40g)を投入した。懸濁液を周囲温度で2時間撹拌し、珪藻土で濾過した。残渣をMTBE(2×100mL)で洗浄し、濾液を真空下で濃縮して、28.6gの橙色の油状物を得た。油状物をMTBE(100mL)に溶解し、Si-Thiol(登録商標)(2.0g、1.46mmolのチオール/g、Silicycle Inc.)を加えた。懸濁液を窒素下、周囲温度で3時間撹拌し、微細フィルターで濾過し、ガラス容器に保持した。
【０１５８】
6M HCl(70mL)の溶液に、内部温度を20℃〜23℃に維持しながら、濾液を30分間かけて加えた。混合物を1時間激しく撹拌し、有機層を除去した。残った水層を45重量%のKOH(50mL)で塩基性化し、得られた懸濁液をクロロホルム(300mL)で一回抽出した。真空下での溶媒の蒸発(浴温度45℃)は、16.0g(71.8%)の(R)-5-((E)-2-ピロリジン-3-イルビニル)ピリミジン遊離塩基を赤色の油状物として得て、それを直ぐにイソプロパノール(50mL)に溶解して、塩形成に使用した。
【０１５９】
実施例12:(R)-5-((E)-2-ピロリジン-3-イルビニル)ピリミジンモノクエン酸塩の合成
イソプロパノール(250mL)及び水(25mL)中のクエン酸(17.6g、91.6mmol)の溶液に、イソプロパノール(50mL)中の(R)-5-((E)-2-ピロリジン-3-イルビニル)ピリミジン遊離塩基(16.0g、91.2mmol)の溶液を55℃で滴加した。得られた溶液に、(R)-5-((E)-2-ピロリジン-3-イルビニル)ピリミジンモノクエン酸塩II型(200mg)を接種し、15分間撹拌した。懸濁液を65℃に加熱し、1時間撹拌し、その時間の後、懸濁液を-10℃/時間で20℃に冷却し、20℃で12時間放置した。懸濁液を粗ガラスフィルターで濾過し、収集した固体をイソプロパノール(64mL)及びメチルtert-ブチルエーテル(64mL)で洗浄した。得られた易流動性の黄褐色固体を真空下、70℃で乾燥して、17.4g(36%)の(R)-5-((E)-2-ピロリジン-3-イルビニル)ピリミジンモノクエン酸塩(II及びIII型の混合物)を褐色の固体として得た。
【０１６０】
1H NMR (D2O, 400MHz) δ: 8.85 (s, 1H), 8.70 (s, 1H), 6.50 (d, J=17Hz, 1H), 6.35 (dd, J=7Hz, J=17Hz, 1H), 3.43-3.50 (m, 1H), 3.34-3.43 (m, 1H), 3.20-3.30 (m, 1H), 3,08-3.19 (m, 1H), 3.00-3.08 (m, 1H), 2.77 (d; J=16Hz, 2H), 2.65 (d, J=16Hz, 2H), 2.16-2.26 (m, 1H), 1.80-1.92 (m, 1H).
【０１６１】
実施例13:(R)-5-((E)-2-ピロリジン-3-イルビニル)ピリミジンの塩酸付加塩のスクリーニング
(R)-5-((E)-2-ピロリジン-3-イルビニル)ピリミジン遊離塩基を、酢酸イソプロピル、テトラヒドロフラン、メチルイソブチルケトン、アセトニトリル又はイソプロピルアルコールのいずれかに溶解した。得られた溶液を、以下の形態:ジエチルエーテル中1M、水中1M、イソプロピルアルコール中5M又はジオキサン中4Mのうちの一つで供給されたHClの1当量により処理した。混合物を50℃/周囲温度(4時間周期)で24時間インキュベートした。実験が安定した固体をもたらした場合、物質をXRPDで分析した。
【０１６２】
実施例14:(R)-5-((E)-2-ピロリジン-3-イルビニル)ピリミジンの「モノ」酸付加塩のスクリーニング
(R)-5-((E)-2-ピロリジン-3-イルビニル)ピリミジン遊離塩基(10mg、0.057mmol)を、酢酸イソプロピル又はアセトニトリルのいずれかに溶解した。溶液を1当量の対応する酸(下記を参照すること)で処理し、50℃に温め、一晩かけて周囲温度にゆっくりと冷ました。次に溶媒を、加熱することなく真空下で蒸発させ、残渣をXRPDで分析した。次に固体を湿度チャンバに40℃及び75%RHで1週間保存し、XRPDで再分析した。
【０１６３】
実験が結晶質固体を生じなかった場合、試料をテトラヒドロフラン及びイソプロピルアルコールで成熟させ、固体が得られた場合、固体をXRPDで分析し、湿度チャンバに1週間保存して安定性を評価した。
【０１６４】
以下の酸を、「モノ」酸付加塩を形成する上記の手順を使用してスクリーニングした:塩酸、硫酸、メタンスルホン酸、マレイン酸、リン酸、1-ヒドロキシ-2-ナフトエ酸、ケトグルタル酸、マロン酸、L-酒石酸、フマル酸、クエン酸、L-リンゴ酸、馬尿酸、L-乳酸、安息香酸、コハク酸、アジピン酸、酢酸、ニコチン酸、プロピオン酸、オロチン酸、4-ヒドロキシ安息香酸及びジ-p-トルオイル-D-酒石酸。
【０１６５】
実施例15:(R)-5-((E)-2-ピロリジン-3-イルビニル)ピリミジンの「ヘミ」酸付加塩のスクリーニング
(R)-5-((E)-2-ピロリジン-3-イルビニル)ピリミジン遊離塩基(10mg、0.057mmol)を、酢酸イソプロピル又はアセトニトリルのいずれかに溶解した。次に溶液を0.5当量の対応する酸(下記を参照すること)で処理し、50℃に温め、一晩かけて周囲温度にゆっくりと冷ました。次に溶媒を、加熱することなく真空下で蒸発させ、残渣をXRPDで分析した。次に固体を湿度チャンバに40℃及び75%RHで1週間保存し、XRPDで再分析した。
【０１６６】
実験が結晶質固体を生じなかった場合、試料をテトラヒドロフラン及びイソプロピルアルコールで成熟させ、固体が得られた場合、固体をXRPDで分析し、湿度チャンバに1週間保存して安定性を評価した。
【０１６７】
以下の酸を、「ヘミ」酸付加塩を形成する上記の手順を使用してスクリーニングした:硫酸、マレイン酸、リン酸、ケトグルタル酸、マロン酸、L-酒石酸、フマル酸、クエン酸、L-リンゴ酸、コハク酸、アジピン酸及びジ-p-トルオイル-D-酒石酸。
【０１６８】
実施例16:(R)-5-((E)-2-ピロリジン-3-イルビニル)ピリミジンの選択された塩の一般的なスケールアップ(scale-up)手順  
多数の(R)-5-((E)-2-ピロリジン-3-イルビニル)ピリミジ塩を、更なる特徴決定において約200mgにスケールアップするために選択した。これらの塩形態には、クエン酸塩(モノ及びヘミ)、オロチン酸塩(モノ)、4-ヒドロキシ安息香酸塩(モノ)、ジ-p-トルオイル-D-酒石酸塩(モノ及びヘミ)、マレイン酸塩(モノ及びヘミ)並びにフマル酸塩(モノ及びヘミ)が含まれる。
【０１６９】
(R)-5-((E)-2-ピロリジン-3-イルビニル)ピリミジン遊離塩基(189mg、1.077mmol)をアセトニトリルに溶解した。次に溶液を、モノ塩の調製に対応する酸の1.1当量及びヘミ塩の調製に対応する酸の0.5当量で処理した。混合物を50℃まで温め、一晩かけて周囲温度にゆっくりと冷ました。
【０１７０】
得られた固体を、XRPD及び1H-NMRで分析する前に、吸引下で濾過及び乾燥した。TGA実験を実施して、水又は他の溶媒の含有量を決定し、DSC実験を行ってそれぞれの塩の単離形の安定性及び新たな形態の可能性を確立した。DVS実験を使用して、塩の吸湿性を評価した。HPLC純度及び熱力学的可溶性もそれぞれの塩において測定した。
【０１７１】
実施例17:(R)-5-((E)-2-ピロリジン-3-イルビニル)ピリミジンモノクエン酸塩I型
(R)-5-((E)-2-ピロリジン-3-イルビニル)ピリミジンモノクエン酸塩I型を、蒸発及びテトラヒドロフランでの成熟により、酢酸イソプロピルからモノ塩スクリーニング手順に従って得た。或いは、モノクエン酸塩I型を、蒸発及びイソプロピルアルコールでの成熟により、アセトニトリルからモノ塩スクリーニング手順に従って得た。
【０１７２】
実施例18:(R)-5-((E)-2-ピロリジン-3-イルビニル)ピリミジンモノクエン酸塩II型
メタノール中の(R)-5-((E)-2-ピロリジン-3-イルビニル)ピリミジンモノクエン酸塩II及びIII型混合物の懸濁液を50℃に加熱し、1時間撹拌した。続いて懸濁液を、-30℃/時間の速度で20℃に冷却し、直ちに+30℃/時間の速度で50℃に加熱し戻した。加熱を、50℃に達したときに停止し、懸濁液を冷却し、周囲温度で16時間撹拌した。懸濁液を濾過し、フラスコの残留物質を、追加のメタノールですすぎ流した。残渣を真空下、70℃で16時間乾燥して、(R)-5-((E)-2-ピロリジン-3-イルビニル)ピリミジンモノクエン酸塩II型を得た。
【０１７３】
実施例19:非晶質(R)-5-((E)-2-ピロリジン-3-イルビニル)ピリミジンモノクエン酸塩
非晶質(R)-5-((E)-2-ピロリジン-3-イルビニル)ピリミジンモノクエン酸塩は、水中の(R)-5-((E)-2-ピロリジン-3-イルビニル)ピリミジンモノクエン酸塩II型の溶液を凍結乾燥することにより調製した。
【０１７４】
実施例20:(R)-5-((E)-2-ピロリジン-3-イルビニル)ピリミジンモノクエン酸塩III型
(R)-5-((E)-2-ピロリジン-3-イルビニル)ピリミジンモノクエン酸塩III型は、非晶質(R)-5-((E)-2-ピロリジン-3-イルビニル)ピリミジンモノクエン酸塩を周囲温度で2時間放置することにより調製した。
【０１７５】
実施例21:(R)-5-((E)-2-ピロリジン-3-イルビニル)ピリミジンモノクエン酸塩IV型
(R)-5-((E)-2-ピロリジン-3-イルビニル)ピリミジンモノクエン酸塩IV型は、アセトン/メチルイソブチルケトン中のII型の成熟により得た。
【０１７６】
実施例22:(R)-5-((E)-2-ピロリジン-3-イルビニル)ピリミジンモノ-(R)-(-)-オロチン酸塩
オロチン酸(0.965g、6.18mmol)を、丸底フラスコにおける2-プロパノール(10mL)中の(R)-5-((E)-2-ピロリジン-3-イルビニル)ピリミジン遊離塩基(1.084g、6.18mmol)の撹拌した高温溶液に固体として加えた。得られた固体の混合物を5分間加熱還流し、周囲温度に冷却し、一晩撹拌した。明ベージュ色の粉末を濾過し、2-プロパノール(10.8mL)で洗浄し、真空オーブン(空気ブリード)により50℃で20時間乾燥して、1.872g(77.9%)のオフホワイトから白色で塊状の固体、融点230〜233℃を得た。
【０１７７】
1H NMR (D2O): δ 8.80 (s, 1H), 8.60 (s, 2H), 6.40 (d, 1H), 6.25 (dd, 1H), 5.93 (s, 1H, オロチン酸の=CHでありモノ塩化学量論量を示す), 3.38 (dd, 1H), 3.29 (m, 1H), 3.17 (m, 1H), 3.04 (m, 1H), 2.97 (dd, 1H), 2.13 (m, 1H), 1.78 (m, 1H).
元素分析の結果は、過剰オロチン酸及び1:1.1の塩基:オロチン酸塩の理論量の存在を示唆する。元素分析:C10H13N3.C5H4N2O4での計算:(C 54.38%; H 5.17%, N 21.14%);実測値:(C 53.49%, 53.44%; H 5.04%, 5.10%; N 20.79%, 20.84%)。
【０１７８】
実施例23:(R)-5-((E)-2-ピロリジン-3-イルビニル)ピリミジンモノオロチン酸塩I型
(R)-5-((E)-2-ピロリジン-3-イルビニル)ピリミジン遊離塩基(189mg、1.077mmol、新たに調製)をアセトニトリル(5ml)に溶解した。次に溶液を周囲温度で1.1当量のオロチン酸溶液(エタノール中1M)により処理した。混合物を50℃まで温め、一晩かけて周囲温度にゆっくりと冷ました。得られた固体を、XRPD及び1H-NMRで分析する前に、吸引下で濾過及び乾燥した。
【０１７９】
実施例24:(R)-5-((E)-2-ピロリジン-3-イルビニル)ピリミジンモノマレイン酸塩I型
(R)-5-((E)-2-ピロリジン-3-イルビニル)ピリミジン遊離塩基(189mg、1.077mmol、新たに調製)をアセトニトリル(5ml)に溶解した。次に溶液を1.1当量のマレイン酸溶液(テトラヒドロフラン中1M)により周囲温度で処理した。混合物を50℃まで温め、一晩かけて周囲温度にゆっくりと冷ました。得られた固体を、XRPD及び1H-NMRで分析する前に、吸引下で濾過及び乾燥した。
【０１８０】
実施例25:(R)-5-((E)-2-ピロリジン-3-イルビニル)ピリミジンモノマレイン酸塩II型
(R)-5-((E)-2-ピロリジン-3-イルビニル)ピリミジンモノマレイン酸塩(I型)を、エタノールでスラリー化し、50℃/室温、4時間周期で48時間インキュベートした。固体のXRPD分析はII型を示した。
【０１８１】
実施例26:(R)-5-((E)-2-ピロリジン-3-イルビニル)ピリミジンモノシュウ酸塩
シュウ酸(0.516g、5.73mmol)を、エタノール(10mL)中の(R)-5-((E)-2-ピロリジン-3-イルビニル)ピリミジン(1.00g、5.70mmol)の撹拌した温溶液に固体として加えた。溶液を更に温めることにより、塩が沈殿した。撹拌を促進するために、混合物をエタノール(6mL)で希釈し、塊をスパチュラで砕いた。混合物を室温に冷却し、一晩放置した。明ベージュ色の粉末を濾過し、エタノールで洗浄し、真空オーブンにより50℃で6時間乾燥し、1.40g(92.3%)の乳白色の綿毛状粉末、融点149〜151℃を得た。
【０１８２】
1H NMR (DMSO-d6): δ 9.03 (s, 1H), 8.86 (s, 2H), 6.56 (m, 2H), 3.40 (dd, 1H), 3.31 (m, 1H), 3.18 (m, 1H), 3.08 (m, 1H), 2.96 (dd, 1H), 2.15 (m, 1H), 1.80 (m, 1H), 13C NMR (DMSO-d6): δ 164.90 (シュウ酸のC=O), 156.97, 154.17, 133.66, 130.31, 124.20, 48.70, 44.33, 40.98, 30.42. 元素分析: C10H13N3 . C2H2O4の計算値(C, 54.33%; H, 5.70%, N, 15.84%); 実測値(C, 54.39%, 54.29%; H, 5.68%, 5.66%; N, 15.68%, 15.66%).
【０１８３】
実施例27:(R)-5-((E)-2-ピロリジン-3-イルビニル)ピリミジンヘミ-ジ-p-トルオイル-D-酒石酸塩
固体のジ-p-トルオイル-D-酒石酸塩は、蒸発により又は酢酸イソプロピルの場合では蒸発に続いてテトラヒドロフランでの成熟により又はアセトニトリルの蒸発に続いてイソプロピルアルコールでの成熟により、酢酸イソプロピル又はアセトニトリルから「ヘミ」塩スクリーニング手順に従って得た。
【０１８４】
以下の手順を使用して大量の塩を作製した。(+)-O,O'-ジ-p-トルオイル-D-酒石酸(1.103g、2.85mmol)を、エタノール(10mL)中の(R)-5-((E)-2-ピロリジン-3-イルビニル)ピリミジン遊離塩基(1.007g、5.74mmol)の撹拌した温溶液に固体として加えた。混合物を加熱還流したときに溶解しなかった幾つかの不溶性固体が沈殿した。明琥珀色の溶液(幾つかの微細固体を有する)を、4〜5時間撹拌し、次に周囲温度で一晩放置した。明ベージュ色の粉末としての塩の沈殿は、ゆっくりであった。15日間撹拌した後、固体を濾過し、エタノール(5mL)で洗浄し、真空オーブンにより50℃で21時間乾燥して、1.50g(71.5%)のオフホワイトから僅かに黄色を帯びた粉末、融点178〜180℃を得た。1H NMR(DMSO-d6)は、1:0.5の塩基:酸塩の理論量を確認する。
【０１８５】
1H NMR (DMSO-d6): δ 10.30 (広幅s, 〜1H), 9.02 (s, 1H), 8.80 (s, 2H), 7.87 (d, 2H, -C6H4-で、ヘミ塩化学量論量を示す), 7.27 (d, 2H, -C6H4-で、ヘミ塩化学量論量を示す), 6.40 (dd, 1H), 6.34 (d, 1H), 5.58 (s, 1H, 酸部分のCH(CO2H)-O-で、ヘミ塩化学量論量を示す), 3.21 (dd, 1H), 3.14 (m, 1H), 3.00 (m, 1H), 2.86 (m, 1H), 2.75 (dd, 1H), 2.30 (s, 3H, 酸部分の-CH3で、ヘミ塩化学量論量を示す), 1.93 (m, 1H), 1.61 (m, 1H).
【０１８６】
実施例28:(R)-5-((E)-2-ピロリジン-3-イルビニル)ピリミジンヘミ-ジ-p-ベンゾイル-D-酒石酸塩
(+)-O,O'-ジ-ベンゾイル-D-酒石酸(1.025g、2.72mmol)を、エタノール(10mL)中の(R)-5-((E)-2-ピロリジン-3-イルビニル)ピリミジン遊離塩基(1.003g、5.72mmol)の撹拌した温溶液に固体として加えた。混合物を、ホットプレートによりほぼ還流するまで加熱して、明琥珀色の溶液を生じた。得られた溶液を室温に冷却し、一晩放置した。固体の存在がなかったので、溶液を換気フードによりゆっくりと蒸発させて、黄褐色-褐色のゴム状固体を得た。酢酸イソプロピル(10mL)を加え、スパチュラによるかき取り及び撹拌により、明ベージュ色の固体が沈積する。混合物を一晩撹拌した。固体を濾過し、酢酸イソプロピル(2×5mL)で洗浄し、真空オーブンにより50℃で24時間乾燥して、1.93g(95.2%)のオフホワイトの粉末、融点155〜160℃を得た。1H NMR(DMSO-d6)は、1:0.5の塩基:酸塩の理論量を確認した。
【０１８７】
1H NMR (DMSO-d6): δ 10.25 (広幅s, 〜1H), 9.02 (s, 1H), 9.80 (s, 2H), 7.98 (d, 2H C6H5-), 7.57 (m, 1H, C6H5-), 7.48 (m, 2H, C6H5-), 6.38 (m, 2H), 5.61 (s, 1H, 酸部分の-CH(CO2H)-O-で、ヘミ塩化学量論量を示す), 3.22 (dd, 1H), 3.14 (dt, 1H), 3.00 (dt, 1H), 2.88 (m, 1H), 2.77 (dd, 1H), 1.92 (m, 1H), 1.61 (m, 1H).
【０１８８】
実施例29:(R)-5-((E)-2-ピロリジン-3-イルビニル)ピリミジンヘミ-ジ-p-アニソイル-D-酒石酸塩
(+)-ジ-p-アニソイル-D-酒石酸(1.199g)を、エタノール(10mL)中の(R)-5-((E)-2-ピロリジン-3-イルビニル)ピリミジン遊離塩基(0.999g)の撹拌した温溶液に固体として加えた。幾つかの固体が存在する得られた溶液を、全ての固体の溶解を試みるために、撹拌及び加熱した。溶液は濃密な塊体になった。周囲温度で4〜5時間放置した後、追加のエタノール(10mL)を加えた。明ベージュ色からクリーム色の固体を含有する混合物を一晩撹拌した。固体を濾過し、エタノール(10mL)で洗浄し、真空オーブンにより50℃で21時間乾燥して、1.91g(87.3%)の白色の粉末、融点173〜177℃を得た。1H NMR(DMSO-d6)は、1:0.5の塩基:酸塩の理論量を確認した。
【０１８９】
1H NMR (DMSO-d6): δ 10.20 (広幅s, 〜1H), 9.02 (s, 1H), 8.80 (s, 2H), 7.93 (d, 2H, -C6H4-で、ヘミ塩化学量論量を示す), 7.00 (d, 2H, -C6H4-で、ヘミ塩化学量論量を示す), 6.40 (dd, 1H), 6.34 (d, 1H), 5.56 (s, 1H, 酸部分のCH(CO2H)-O-で、ヘミ塩化学量論量を示す), 3.76 (s, 3H, 酸部分の-OCH3で、ヘミ塩化学量論量を示す), 3.22 (dd, 1H), 3.14 (m, 1H), 3.01 (m, 1H), 2.85 (m, 1H), 2.75 (m, 1H), 1.92 (m, 1H), 1.61 (m, 1H).
【０１９０】
実施例30:(R)-5-((E)-2-ピロリジン-3-イルビニル)ピリミジンモノ-ジ-p-トルオイル-D-酒石酸塩
固体のジ-p-トルオイル-D-酒石酸塩は、蒸発により酢酸イソプロピル又はアセトニトリルから「モノ」塩スクリーニング手順に従って得た。
【０１９１】
以下の手順を使用して大量の塩を作製した。(+)-O,O'-ジ-p-トルオイル-D-酒石酸(2.205g、5.71mmol)を、エタノール(21mL)中の(R)-5-((E)-2-ピロリジン-3-イルビニル)ピリミジン遊離塩基(1.000g、5.70mmol)の撹拌した温溶液に固体として加えた。塩の沈殿は直後であった。撹拌混合物をホットプレートによりほぼ還流するまで穏やかに加熱した後、得られた混合物を周囲温度に冷却した。得られた固体を濾過し、エタノール(3×5mL)で洗浄し、真空オーブンにより50℃で13時間乾燥して、3.081g(96.1%)の明ベージュ色の粉末、融点181〜184℃を得た。1H NMR(DMSO-d6)は、1:1の塩の理論量を確認した。
【０１９２】
1H NMR (DMSO-d6): δ 9.60 (広幅s, 〜1H), 9.03 (s, 1H), 8.82 (s, 2H), 7.83 (d, 4H, -C6H4-で、モノ塩化学量論量を示す), 7.27 (d, 4H, -C6H4-で、モノ塩化学量論量を示す), 6.44 (d, 2H), 5.62 (s, 2H, 酸部分のCH(CO2H)-O-で、モノ塩化学量論量を示す), 3.30 (dd, 1H), 3.23 (m, 1H), 3.09 (m, 1H), 2.95 (m, 1H), 2.85 (dd, 1H), 2.33 (6H, 酸部分の-CH3で、モノ塩化学量論量を示す), 2.02 (m, 1H), 1.69 (m, 1H).
【０１９３】
実施例31:(R)-5-((E)-2-ピロリジン-3-イルビニル)ピリミジンモノ-ジ-p-ベンゾイル-D-酒石酸塩
(+)-O,O'-ジ-ベンゾイル-D-酒石酸(2.05g、5.72mmol)を、丸底フラスコにおけるエタノール(21mL)中の(R)-5-((E)-2-ピロリジン-3-イルビニル)ピリミジン遊離塩基(0.999g、5.69mmol)の撹拌した温溶液に固体として加え、溶液を作製した。撹拌及び更なる加熱の後、塩の沈殿が温溶液において生じた。得られた混合物を週末の2日間にわたって周囲温度に冷ました。得られた固体をBuechner漏斗で濾過し、エタノール(4×5mL)で洗浄し、真空オーブン(空気ブリード)により50℃で13時間乾燥して、2.832g(93.0%)の明ベージュ色からオフホワイトの粉末、融点165〜171℃を得た。
【０１９４】
1H NMR (DMSO-d6)は、1:1の塩の理論量を確認した。1H NMR (DMSO-d6): δ 9.65 (広幅s, 〜1H), 9.03 (s, 1H), 9.83 (s, 2H), 7.94 (d, 4H, C6H5-), 7.60 (m, 2H, C6H5-), 7.50 (m, 4H, C6H5-), 6.45 (m, 2H), 5.67 (s, 2H, 酸部分の-CH(CO2H)-O-で、モノ塩化学量論量を示す), 3.31 (dd, 1H), 3.22 (m, 1H), 3.08 (m, 1H), 2.96 (m, 1H), 2.85 (dd, 1H), 2.01 (m, 1H), 1.69 (m, 1H).
【０１９５】
実施例32:(R)-5-((E)-2-ピロリジン-3-イルビニル)ピリミジンモノ-(1S)-10-カンファースルホン酸塩
(1S)-(+)-10-カンファースルホン酸(1.329g、5.72mmol)を、丸底フラスコにおける2-プロパノール(23mL、5.70mmol)中の(R)-5-((E)-2-ピロリジン-3-イルビニル)ピリミジン遊離塩基(1.00g)の撹拌した温溶液に固体として加えた。周囲温度に冷却すると、固体の沈殿があった。溶液を一晩放置した。白色の固体を含有するゲル状物質が観察された。2日間撹拌した後、このゼリー状の白色塊体の撹拌は困難であったので、混合物を2-プロパノール(10.5mL)で希釈した。一晩撹拌した後、得られた白色の粉末をBuechner漏斗で濾過し、2-プロパノール(5mL)で洗浄し(注:固体は2-プロパノールにおいていくらかの可溶性を有すると思われた)、真空オーブン(空気ブリード)により50℃で6時間乾燥して、1.47g(63.2%)の白色の粉末、融点172〜173℃を得た。1H NMR(DMSO-d6)は、1:1の塩の理論量を確認する。7日間放置した後、明ベージュ色の針の第2生成物が結晶化液において観察された。この物質を濾過し、2-プロパノール(10mL)で洗浄し、真空オーブン(空気ブリード)により50℃で21時間乾燥して、0.245gの明ベージュ色の針、融点173〜174℃を得た。
【０１９６】
1H NMR (DMSO-d6): δ 9.03 (s, 1H), 8.87 (s, 2H), 6.57 (m, 2H), 3.41 (dd, 1H) 3.33 (m, 1H, H2Oで部分マスク), 3.21 (m, 1H), 3.10 (m, 1H), 2.98 (dd, 1H), 2.89 (d, 1H, 酸部分の-CH2-で、モノ塩化学量論量を示す), 2.64 (m, 1H), 2.41 (d, 1H, 酸部分の-CH2-で、モノ塩化学量論量を示す), 2.25 (t, 0.5 H), 2.20 (t 0.5 H), 2.15 (m, 1H), 1.93 (t, 1H), 1.82 (m, 3H), 1.28 (m, 2H, 酸部分の-CH2-で、モノ塩化学量論量を示す), 1.03 (s, 3H, 酸部分の-CH3で、モノ塩化学量論量を示す), 0.73 (s, 3H, 酸部分の-CH3で、モノ塩化学量論量を示す).
【０１９７】
実施例33:(R)-5-((E)-2-ピロリジン-3-イルビニル)ピリミジンモノ-(1R,2S)-(+)-ショウノウ酸塩(Camphorate)
(1R,2S)-(+)-ショウノウ酸(1.149g、5.74mmol)を、丸底フラスコにおけるエタノール(14mL)中の(R)-5-((E)-2-ピロリジン-3-イルビニル)ピリミジン遊離塩基(1.00g、5.70mmol)の撹拌した温溶液に固体として加えた。加熱すると、全ての固体が溶解し、黄色の溶液を得た。周囲温度で一晩放置すると沈殿物は形成されない。溶液をロータリー蒸発により濃縮して、琥珀色-褐色の泡状物とし、これを真空下、50℃(空気ブリード)で6時間乾燥して、2.098gの粘性の琥珀色油状物を得た。酢酸イソプロピル(10mL)を加え、溶液を周囲温度で一晩放置した。ガム状の赤色-琥珀色油状物に結晶核生成の幾つかの証拠があった。更なる酢酸イソプロピル(10mL)及び2-プロパノール(20滴)を加え、混合物を48時間、穏やかに加熱及び撹拌した。幾つかの橙色の塊を有する得られた乳状のクリーム色固体をスパチュラで砕き、混合物(無色の液体)を一晩撹拌した。オフホワイトの固体をBuechner漏斗で濾過し、冷酢酸イソプロピル(10mL)で洗浄し、真空オーブン(空気ブリード)により50℃で21時間乾燥して、2.034g(94.9%)のオフホワイトからクリーム色の粉末、融点157〜159℃を得た。1H NMR(DMSO-d6)は、1:1の塩の理論量を確認した。
【０１９８】
1H NMR (DMSO-d6): δ 9.00 (s, 1H), 8.85 (s, 2H), 6.58 (dd, 1H), 6.47 (d, 1H), 3.17 (dd, 1H), 3.08 (m, 1H), 2.97 (m, 1H), 2.92 (dd, 1H) 2.74 (dd, 1H), 2.61 (dd, 1H), 2.30 (六重線, 1H), 2.00 (m, 2H), 1.65 (m, 2H), 1.32 (m, 1H), 1.15 (s, 3H, 酸部分の-CH3で、モノ塩化学量論量を示す), 1.07 (s, 3H, 酸部分の-CH3で、モノ塩化学量論量を示す), 0.75 (s, 3H, 酸部分の-CH3で、モノ塩化学量論量を示す).
【０１９９】
実施例34:(R)-5-((E)-2-ピロリジン-3-イルビニル)ピリミジンモノ-ジ-p-アニソイル-D-酒石酸塩
(+)-ジ-p-アニソイル-D-酒石酸(2.388g、5.71mmol)を、丸底フラスコにおけるエタノール(22mL)中の(R)-5-((E)-2-ピロリジン-3-イルビニル)ピリミジン遊離塩基(1.008g、5.75mmol)の撹拌した温溶液に固体として加えた。塩の沈殿は、全ての(+)-ジ-p-アニソイル-D-酒石酸が添加される前に生じた。塩は加熱により溶解しなかったが、固体の外観は変化して、軽量の綿毛状白色粉末に変わった。混合物を周囲温度に冷却し、48時間撹拌した。得られた固体をBuechner漏斗で濾過し、エタノール(5×5mL)で洗浄し、真空オーブン(空気ブリード)により50℃で13時間乾燥して、3.20g(94.4%)のオフホワイトから白色の白亜質粉末、融点173〜176℃を得た。1H NMR(DMSO-d6)は、1:1の塩の理論量を確認する。
【０２００】
1H NMR (DMSO-d6): δ 9.65 (広幅s, 〜1H), 9.03 (s, 1H), 8.82 (s, 2H), 7.89 (d, 4H, -C6H4-で、モノ塩化学量論量を示す), 7.01 (d, 4H, -C6H4-で、モノ塩化学量論量を示す), 6.44 (m, 2H), 5.60 (s, 2H, 酸部分のCH(CO2H)-O-で、モノ塩化学量論量を示す), 3.79 (s, 6H, 酸部分の-OCH3で、モノ塩化学量論量を示す), 3.30 (dd, 1H), 3.22 (m, 1H), 3.09 (m, 1H), 2.95 (m, 1H), 2.84 (m, 1H), 2.01 (m, 1H), 1.69 (m, 1H).
【０２０１】
実施例35:(R)-5-((E)-2-ピロリジン-3-イルビニル)ピリミジンモノ-(R)-(-)-フェンシホス(Phencyphos)塩
(R)-(-)-フェンシホス(1.391g、5.77mmol)を、丸底フラスコにおけるエタノール(10mL)中の(R)-5-((E)-2-ピロリジン-3-イルビニル)ピリミジン遊離塩基(1.006g、5.73mmol)の撹拌した溶液に固体として加えた。大部分の固体が周囲温度での撹拌により溶解し、全ての固体が穏やかな加熱により溶解した。撹拌した琥珀色溶液を加熱還流し、周囲温度に冷却し、一晩放置した。得られた白色の針様結晶をBuechner漏斗で濾過し、冷エタノール(5mL)で洗浄し、真空オーブン(空気ブリード)により50℃で18時間乾燥して、0.811g(33.9%)のオフホワイトの結晶、融点197〜201℃を得た。1H NMR(DMSO-d6)は、1:1の塩の理論量を確認する。
【０２０２】
1H NMR (DMSO-d6): δ 9.81 (広幅s, 〜1H), 9.02 (s, 1H), 8.85 (s, 2H), 7.27 (m, 5H, C6H5-), 6.56 (dd, 1H), 6.48 (d, 1H), 5.00 (d, 1H, 酸部分の-O-CH-で、モノ塩化学量論量を示す), 4.00 (d, 1H, 酸部分の-O-CH2-で、モノ塩化学量論量を示す), 3.48 (dd, 1H, 酸部分の-O-CH2-で、モノ塩化学量論量を示す), 3.36 (dd, 1H), 3.30 (m, 1H), 3.17 (m, 1H), 3.07 (m, 1H), 2.93 (dd, 1H), 2.12 (m, 1H), 1.78 (m, 1H), 0.79 (s, 3H, 酸部分の-CH3で、モノ塩化学量論量を示す), 0.60 (s, 3H, 酸部分の-CH3で、モノ塩化学量論量を示す).
【０２０３】
実施例36:IBSにおける(R)-5-((E)-2-ピロリジン-3-イルビニル)ピリミジンの腸溶性製剤
試験は、5mgの化合物Aカプセル剤を使用して実施した。二つのサブバッチ(合計120単位)から作製されるカプセル剤を集め、特徴決定して、バッチ放出データを生成した。バッチを、被覆外観、ID、アッセイ(90〜110%)、関連物質(非被覆カプセル剤CofAに従う)及び溶解(遅延放出についてのUSP規格)に関して特徴決定した。
【０２０４】
短期安定性研究を被覆活性バッチで実施して、意図される投与期間を包含する保存寿命を支持した。カプセル剤を、制御された周囲条件下(15〜25℃)で6個のガラス瓶又はHDPE容器(容器一つあたり10単位)においてバルクで保存し、二つの時点(例えば、7及び35日目)で分析した。これらのデータを、被覆と投与の間の全ての時間を包含する保存寿命を支持するために使用した。
【０２０５】
加えて、製品、例えばPharmadose又はVenalink Cold Sealの形態の患者用医薬品の意図される投与期間を包含する保存寿命を支持するために、短期間の「使用中」安定性研究を実施した。カプセル剤を制御周囲条件下(15〜25℃)で保存し、一つの時点(例えば、8日目)で分析した。
【０２０６】
薬局方崩壊方法(USP<701>に従う)を、腸溶性被覆カプセル製剤の酸耐性の初期特徴決定に使用した。また、カプセル剤を酸条件に付して、被覆がその位置を保持することを示し、次にpH6.8の媒体に移して、腸溶性被覆からの用量の放出を示す、腸溶性被覆化合物Aカプセル剤の薬局方二段階酸緩衝液溶解試験(USP<711>に従う)を実施した。溶解媒体を適切に選択して、シンク条件が達成されることを確実にした。
【０２０７】
実施例37:(R)-5-((E)-2-ピロリジン-3-イルビニル)ピリミジンの結合結果
化合物Aは、α4β2及びα3β4ニューロンニコチンレセプターのアゴニストである。ヒトのα4β2では、化合物Aは、17nMのKiを示し、ラットのα4β2では、34nMのKiを示す。
【０２０８】
細胞株
Sh-ep1/ヒトα4β2(Eaton et al., 2003)、sh-ep1/ヒトα4β4(Gentry et al., 2003)、sh-ep1/α6β3β4α5(Grinevich et al., 2005)、te671/rd及びsh-sy5y細胞株(Dr. Ron Lukas, Barrow Neurological Institute, St. Joseph's Hospital and Medical Center, Phoenix, Arizonaから入手)を、10%ウマ血清(Gibco brl)、5%ウシ胎児血清(Hyclone, Logan UT)、1mmのピルビン酸ナトリウム、4mmのl-グルタミンを有するダルベッコ改変イーグル培地(Gibco/brl)において増殖性発育相で維持した。安定したトランスフェクタントを維持するため、α4β2及びα4β4細胞培地に0.25mg/mlのゼオシン及び0.13mg/mlのハイグロマイシンBを補充した。選択は、α6β3β4α5細胞では0.25mg/mlのゼオシン、0.13mg/mlのハイグロマイシンB、0.4mg/mlのジェネテシン及び0.2mg/mlのブラスチシジンを維持した。
【０２０９】
HEK/ヒトα7/RIC3細胞(J. Lindstrom, U. Pennsylvania, Philadelphia, Pennsylvaniaから得た)を、10%ウシ胎児血清(Hyclone, Logan UT)、1mmのピルビン酸ナトリウム、4mmのl-グルタミン、0.4mg/mlのジェネテシン、0.2mg/mlのハイグロマイシンBを有するダルベッコ改変イーグル培地(Gibco/brl)において増殖性発育相で維持した。
【０２１０】
レセプター結合アッセイ
ラット組織からの膜の調製。ラットの皮質は、analytical biological services, incorporated(ABS, Wilmington, Delaware)から得た。組織は雌Sprague-Dawleyラットから切開され、凍結され、ドライアイスで搬送された。組織を、膜調製に必要になるまで-20℃で保存した。10匹のラットから皮質を集め、10容量(重量:容量)の氷冷調製緩衝液(KCl 11mM;KH2PO4 6mM;NaCl 137mM;Na2HPO4 8mM;HEPES(遊離酸) 20mM;ヨードアセトアミド 5mM;EDTA 1.5mM;0.1mM PMSF pH 7.4)中のポリトロン(Kinematica gmbh, Switzerland)で均質化した。得られたホモジェネートを、40,000gで20分間、4℃で遠心分離し、得られたペレット剤を20容量の氷冷水に再懸濁した。4℃で60分間のインキュベーションの後、新たなペレット剤を、40,000gで20分間、4℃で遠心分離して収集した。最終ペレット剤を調製懸濁液に再懸濁し、-20℃で保存した。アッセイの当日に、組織を解凍し、40,000gで20分間遠心分離し、次にPBS(ダルベッコリン酸緩衝生理食塩水、Life Technologies、pH 7.4)に再懸濁して、2〜3mgタンパク質/mlの最終濃度にした。タンパク質濃度は、標準としてウシ血清アルブミンを用いるPierce BCAタンパク質アッセイキット(Pierce Biotechnology, Rockford, IL)を使用して決定した。
【０２１１】
クローン細胞株からの膜の調製。細胞を氷冷pbs、pH7.4から採取し、次にポリトロン(Brinkmann Instruments, Westbury, NY)で均質化した。ホモジェネートを、40,000gで20分間(4℃)遠心分離した。ペレット剤をPBSに再懸濁し、タンパク質の濃度を、Pierce BCAタンパク質アッセイキット(Pierce Biotechnology, Rockford, IL)を使用して決定した。
【０２１２】
膜調製におけるレセプターへの競合結合。ニコチンレセプターへの結合を、公表された手順(Lippiello and Fernandes, 1986; Davies et al., 1999)を適合した標準的方法を使用して、膜においてアッセイした。簡潔には、膜を、凍結貯蔵物(およそ0.2mgのタンパク質)から再構成し、競合化合物(0.001nM〜100mM)及びラジオリガンドの存在下、150mlのアッセイ緩衝液(PBS)において氷上で2時間インキュベートした。[3H]-ニコチン(L-(-)-[N-メチル-3H]-ニコチン、69.5Ci/mmol、Perkin-Elmer Life Sciences)を、ヒトα4β2結合研究に使用した。[3H]-エピバチジン(52Ci/mmol、Perkin-Elmer Life Sciences)を、他のレセプターサブタイプでの結合研究に使用した。インキュベーションは、非特異的結合を低減するために0.33%ポリエチレンイミン(w/v)にプレソークしたGF/Bフィルターを使用して、多様組織採取器(multimanifold tissue harvester)(Brandel, Gaithersburg, MD)による急速濾過で終了させた。フィルターを3回洗浄し、保持された放射能を液体シンチレーションカウントにより決定した。
【０２１３】
結合データ分析。結合データを、総対照結合の率として表した。各時点での複製を平均化し、薬物濃度の対数に対してプロットした。IC50(結合の50%阻害を生じる化合物の濃度)は、GraphPad Prismソフトウエア(GraphPAD, San Diego, CA)を使用して、最小二乗非線形回帰により決定した。Kiは、Cheng-Prusoff方程式(Cheng and Prusoff, 1973)を使用して計算した。
【０２１４】
実施例38:IBSにおける(R)-5-((E)-2-ピロリジン-3-イルビニル)ピリミジン
迷走神経背側運動核(dorsal motor vagal nucleus)から消化管の多様な部門へ伸びているニューロンにおけるニコチンα4β2仲介薬理効果が報告されている。自律神経系において、α3β4レセプターは腸クロム親和性細胞に存在すると思われる。これらのサブタイプを標的にするアゴニストは、GI運動が損なわれている病理学的状態を軽減する可能性がある。Lee K, Miwa S, Koshimura K, Ito A. Characterization of nicotinic acetylcholine receptors on cultured bovine adrenal chromaffin cells using modified L-[3H]nicotine binding assay. Naunyn Schmiedebergs Arch Pharmacol. 1992;345(4):363-9;及びRacke K, Schworer. Nicotinic and muscarinic modulation of 5-hydroxytryptamine (5-HT) release from procine and canine small intestine. Clin Investig. 1992;70:190-200が参照される。
【０２１５】
前臨床では、神経因性疼痛の二つの動物モデルにおいて、化合物Aの反復投与は有意な鎮痛をもたらした。より詳細には、化合物Aは、神経因性疼痛のストレプトゾトシン(Streptozotocin)誘発糖尿病性異痛症モデル及び化学療法誘発モデルにおいて有効な鎮痛を示す。WO 08/157365を参照すると、ラットのストレプトゾトシン誘発糖尿病性神経障害モデルは、糖尿病性神経障害の臨床的に関連するモデルであり、高グルコースレベル、四肢の神経因性疼痛及び一般に健康障害などのヒトの場合の糖尿病状態の要素を複製する。この研究は、これらの群に血中グルコースレベルに変化がない状態において、四及び六週目の後肢の異痛試験により測定される進行性疼痛感覚、及び六週目の被験物質によるこの疼痛の顕著な回復を実証した。インスリン処理群は、血中グルコースレベルの低減を示したが、ビヒクル処理動物と比べて比較した疼痛感覚を有意に改善しなかった。このことは、この糖尿病性神経障害モデルにおいて血中グルコースレベルと異痛レベルとの間に対応性がないことを示し、文献における報告と一致している(Maneuf, et al, 2004、そのようなモデルに関して、参照として本明細書に組み込まれる)。この研究において示された結果は、糖尿病性神経障害のSTZラットモデルにおいて試験された三つの用量全てにおいて化合物Aを示唆している。更に、Taxol(登録商標)誘発性神経障害の研究は、慢性投与試験化合物(化合物A)、並びに急性投与されたガンバベチン(Gabapentin)の鎮痛効果を示した。とりわけ、4週目の異痛評価において、ビヒクル異痛反応が3週目の評価と比較して低下し、より大きな程度の異痛の緩和を実証できることを示唆している。したがって、Taxol(登録商標)の三週目にビヒクル群により示された異痛の有意な回復は、約10g効力(force)の50%閾値で達成され、一方、約7.5gのみが4週目に必要であった。
【０２１６】
動物モデルからわかった鎮痛では、正常な健康対象において実施された単回(SRD)及び多回増加用量(MRD)研究において、嘔気、嘔吐及び下痢が最も一般的に観察された有害事象であった。MRD研究において、一日あたり4回投与された≧10mgの用量の後、嘔気及び嘔吐が、典型的には、有意な全身性吸収の前である投与の30分以内に起こった。下痢は、典型的には、全身濃度がCmax値のおよそ20%である、投与後の5時間を越えて観察された。化合物Aは約1時間以下の全身(血漿内)半減期を有することが観察された。そのような薬力学的GI運動反応は、全身性血漿濃度ではなく、主に局所効果(おそらく、腸クロム親和性細胞に位置するα3β4レセプターの作動性)と相関すると思われる。したがって、化合物Aの薬理学が便秘優位型IBSに関連する便秘、疼痛及び腹部膨満の緩和を助けることができるので、健康なヒト対象においてもGI運動の増加が観察された。
【０２１７】
腸溶性被覆(EC)を介して下部GI管へ化合物Aを選択的に送達することは、IBS-Cの症状を緩和することができ、同時に、上部GI管での薬物曝露によってもたらされうる嘔吐及び嘔気を回避することができる。
【０２１８】
研究設計
便秘優位型過敏性腸管症候群の治療における化合物Aの安全性、許容性及び効能を評価する、無作為化二重盲検プラセボ対照平行群原理証明研究を実施した。
【０２１９】
研究の目的には以下が含まれる:便秘優位型過敏性腸管症候群(IBS-C)の治療における化合物Aの効能を評価すること;並びに、腸溶性被覆カプセル剤で28日間投与したときの、IBS-Cの対象における化合物Aの安全性、許容性及び薬力学的プロフィールを評価すること。
【０２２０】
便秘優位型過敏性腸管症候群(IBS-C)を有する対象は、以下:(1)排便により緩和される;(2)用便頻度の変化に関連して発症する;及び/又は(3)糞便外観の変化に関連して発症する、の二つ以上に関連する再発性腹痛又は不快感が、過去三か月間に一か月あたり少なくとも3日間あるというローマIII診断基準により定義される。
【０２２１】
治療には、一日一回の5mg(腸溶性カプセル剤)の14日間、続いて一日二回の5mgの更に14日間が含まれた。一つの終点には、全般的なIBS症状の緩和(7ポイントスケール)が含まれる。別の終点には、便通頻度、疼痛、腹部膨満、力み、糞便の硬さ及び救急薬(緩下薬)の頻度が含まれる。統計的にはαを0.1に設定した。
【０２２２】
結果
化合物Aは一般的に十分に耐用性であった。全ての有害事象は、軽度から中程度であった。最も一般的に報告された有害事象は、頭痛又は胃腸的なものであった。
【０２２３】
化合物Aは、自発的便通(SBM)の強い増加を生じ、これは少なくとも一か月間にわたって維持されるが、鎮痛性はないと思われる。この研究における試料サイズは、主観的変化を検知するには十分な大きさがなかった。1週目では、力み(p=0.024)、疼痛(p =0.059)及び全般的緩和スコア(p=0.101)は、全てにおいて化合物Aが好ましかった。
【０２２４】
化合物Aは、主として大腸運動増強剤である可能性があり、研究の結果は、異なる作用機構を有する慢性の特発性便秘(CIC)(疼痛がCICの主要な成分でない)において、好ましい作用物質である可能性を示唆している。化合物Aを、IBS-Cの増強療法として鎮痛薬と組み合わせることができる。
【０２２５】
図1は、IBS-Cの対象において観察されるSBMを表す棒グラフである。図の左側部分は、一週間ごとのSBMの客観的な計数を示す。図の右側部分は、4週間の治療期間の全てにわたってプラセボと比較した化合物Aの効能を示す。
【０２２６】
図2は、幾つかの治療薬によるSBMの相対的な比較を表す棒グラフである。化合物Aを、現存及び提案されている療法、すなわちテガセロッド(以前は商品名Zelnorm(登録商標)で販売されており、現在は回収されている)、ルビプロストン(商品名Amitiza(登録商標)で販売されている)及びリナクロチド(現在、第III相臨床試験の段階)、並びにプラセボとそれぞれの場合において比較した。図示されているように、化合物AはIBS-Cの対象において4週目のSBMについて良好に比較される。
【０２２７】
テガセロッド(以前は商品名Zelnorm(登録商標)で販売されており、現在は回収されている)のデータは、Summary of the Basis for Approvalに特に注意しながらNDA Application No. 021200から得た。ルビプロストン(商品名Amitiza(登録商標)で販売されている)のデータは、Summary of the Basis for Approvalに特に注意しながらNDA Application No. 021908から得た。リナクロチド(現在、第III相臨床試験の段階)のデータは、Johnston et al., Linaclotide Improves Abdominal Pain and Bowel Habits in a Phase IIb Study of Patinets with Irritable Bowel Syndrome with Constipation, Gastronenterology 2010; 139:1877-1886、Lembo et al., Efficacy of Linaclotide for Patients with Chronic Constipation, Gastroenterology 2010; 138(3):886-895 e1及びLembo et al., Efficacy and Safety of Once Daily Linaclotide Administered Orally for 12 Weeks in Patients with Chronic Constipation: Results from Two Randomized, Double-Blind, Palcebo-Controlled Phase 3 Trials, Presented at Digestive Disease Week (DDW) 2010 in New Orleans, LA 2010; Abstract 286から得た。これらの参考文献は、それぞれ、図2に提供されたデータに関して、並びにこのデータの供給源に関して、参照として組み込まれる。
【０２２８】
本明細書において示されているように、5mg(又は<100μg/kg)の総用量は効能を示す。これの一つの可能性のある有効用量は、10μg/kg<用量<100μg/kgである。
【０２２９】
試験化合物を遊離又は塩形態で用いた。特に示されていない限り、試験物質である化合物Aは、白色の粉末であるヘミガラクタル酸塩として提供されている。
【０２３０】
観察された特定の薬理学的反応は、選択された特定の活性化合物又は医薬担体が存在するか、並びに製剤の種類及び用いられた投与様式に従って又は応じて変わることがあり、結果におけるそのような予測される変動又は差異は、本発明の実施において考慮される。
【０２３１】
本発明の特定の実施態様が本明細書に説明されており、詳細に記載されているが、本発明はそれらに限定されない。上記の詳細な記載は、本発明の例として提示されており、本発明のあらゆる限定を構成すると考慮されるべきではない。変更が当業者には明らかであり、本発明の精神を逸脱しない全ての変更が、添付の特許請求の範囲の範囲に含まれることが意図される。
【図１】
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【図２】
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【国際調査報告】
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