(57)【要約】  式（Ｉ）：【化１】2013517762.tif 000021（式中：Ｒ１、Ｒ２およびＲ３から選択される第１の基は、アミノ単糖部分もしくはアシル基が１個〜６個の炭素原子を有するＮ−アシルアミノ単糖部分であるか、または２個〜４個の単糖部分を含みそのうちの少なくとも１個はアミノもしくはＮ−アシルアミノ単糖部分であるオリゴ糖鎖であり；Ｒ１、Ｒ２およびＲ３から選択される第２の基は、３個〜４０個の炭素原子を有する飽和もしくは不飽和のアシル基であり；そしてＲ１、Ｒ２およびＲ３から選択される第３の基は、水素である）の化合物を調製する方法であって、モノアシルグリセロールであってそのアシル部分が３個〜４０個の炭素原子を有する飽和もしくは不飽和のアシル基であるモノアシルグリセロールまたはその活性化誘導体と、アミノもしくはＮ−アシルアミノ単糖部分の供給源またはその活性化誘導体、および必要であれば、非置換の単糖部分の供給源またはその活性化誘導体とを、任意選択で適切な触媒または活性化剤の存在下で、接触させる工程を含む方法が記載される。新規の化合物、ならびにその化合物のインサイチュ製造方法、ならびに乳化剤、界面活性剤および殺菌剤としての、特に食料および洗剤組成物における、それらの使用もまた記載される。
2013517762.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
式（Ｉ）：
【化１】
2013517762.tif 000019
（式中：
Ｒ１、Ｒ２およびＲ３から選択される第１の基は、アミノ単糖部分もしくはＮ−アシルアミノ基のアシル部分が１個〜６個の炭素原子を有するＮ−アシルアミノ単糖部分であるか、または２個〜４個の単糖部分を含みそのうちの少なくとも１個は上で定義されるとおりのアミノもしくはＮ−アシルアミノヘキソース部分であるオリゴ糖鎖であり；
Ｒ１、Ｒ２およびＲ３から選択される第２の基は、３個〜４０個の炭素原子を有する飽和もしくは不飽和のアシル基であり；そして
Ｒ１、Ｒ２およびＲ３から選択される第３の基は、水素である）
の化合物を製造する方法であって、アシル部分が３個〜４０個の炭素原子を有する飽和もしくは不飽和のアシル基であるモノアシルグリセロールまたはその活性化誘導体と、アミノもしくはＮ−アシルアミノ単糖部分の供与源またはその活性化誘導体、および必要であれば、非置換の単糖部分の供与源またはその活性化誘導体とを、任意選択的に適切な触媒または活性化剤の存在下で、接触させる工程を含む、上記方法。
【請求項２】
触媒または活性化剤が、トランスグリコシダーゼ酵素である、請求項１に記載の方法。
【請求項３】
アミノもしくはＮ−アシルアミノ単糖部分の供与源が、キトサン、キトビオース、もしくはそれらのうちの任意のものの、Ｎ−アシルアミノ基のアシル部分が１個〜６個の炭素原子を有するＮ−アシル誘導体、またはそれらのうちの任意のものの混合物から選択される、請求項１または請求項２に記載の方法。
【請求項４】
トランスグリコシダーゼ酵素が、酵素分類（Ｅ．Ｃ．）３．２．１．２１または３．２．１．７４に分類される、請求項２または請求項３に記載の方法。
【請求項５】
トランスグリコシダーゼ酵素が、β−グルコシダーゼ酵素である、請求項２〜４のいずれか一項に記載の方法。
【請求項６】
トランスグリコシダーゼ酵素が、トリコデルマ・レエセイ（Ｔｒｉｃｈｏｄｅｒｍａ  ｒｅｅｓｅｉ）（配列番号１）であるか、またはそれと少なくとも５０％、好ましくは少なくとも５５％、例えば少なくとも６０％、少なくとも６５％、少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、もしくは少なくとも９９％の配列同一性を有する、請求項２〜５のいずれか一項に記載の方法。
【請求項７】
組成物において請求項１に定義されるとおりの式（Ｉ）の化合物のインサイチュ生成のための方法であって、該組成物は、以下の成分：
（ｉ）モノアシルグリセロールのアシル部分が、３個〜４０個の炭素原子を有する飽和もしくは不飽和のアシル基である、該モノアシルグリセロールまたはその活性化誘導体；
（ｉｉ）アミノもしくはＮ−アシルアミノ単糖部分の供与源またはその活性化誘導体；
（ｉｉｉ）必要であれば、非置換の単糖部分の供与源またはその活性化誘導体；および
（ｉｖ）必要であれば、適切な触媒または活性化剤
を含み、上記方法は、該組成物に、該組成物中にまだ存在しない成分（ｉ）および（ｉｉ）の任意のもの、および必要であれば、該組成物中にまだ存在しない（ｉｉｉ）および／または（ｉｖ）を添加する工程、ならびに該成分を反応させる工程を含む、上記方法。
【請求項８】
Ｏ−β−Ｄ−グルコピラノシル−（１→４）−Ｏ−２−アシルアミド−２−デオキシ−β−Ｄ−グルコピラノシルモノアシルグリセロール以外の、式（Ｉ’）：
【化２】
2013517762.tif 000020
の化合物であって、式中：
Ｒ１、Ｒ２およびＲ３から選択される第１の基は、アミノ基もしくはＮ−アシルアミノ基のアシル部分が１個〜６個の炭素原子を有するＮ−アシルアミノ基が、ヘキソース部分の２位にヒドロキシル基の代わりに存在するアミノもしくはＮ−アシルアミノヘキソース部分であるか、または２個〜４個の単糖部分を含みそのうちの少なくとも１個は上で定義されるとおりのアミノもしくはＮ−アシルアミノヘキソース部分であるオリゴ糖鎖であり；Ｒ１、Ｒ２およびＲ３から選択される第２の基は、３個〜４０個の炭素原子を有するアルカノイル基または３個〜４０個の炭素原子および１個〜５個の二重結合を有するアルケノイル基であり；そして
Ｒ１、Ｒ２およびＲ３から選択される第３の基は、水素である、
化合物。
【請求項９】
第１の基が、アミノヘキソース部分、またはＮ−アシルアミノ基のアシル部分が１〜６個の炭素原子を有するＮ−アシルアミノヘキソース部分である、請求項８に記載の化合物。
【請求項１０】
第１の基が、アミノヘキソース部分、またはＮ−アシルアミノ基のアシル部分が２個〜４個の炭素原子を有するＮ−アシルアミノヘキソース部分である、請求項９に記載の化合物。
【請求項１１】
第２の基が、８個〜１８個の炭素原子を有するアルカノイル基または８個〜１８個の炭素原子および１個〜３個の二重結合を有するアルケノイル基である、請求項８〜１０のいずれか一項に記載の化合物。
【請求項１２】
１−Ｏ−（２−アミノ−２−デオキシ−β−Ｄ−グルコピラノシル）−３−ｎ−デカノイルグリセロール；１−Ｏ−（２−（アセチルアミノ）−２−デオキシ−β−Ｄ−グルコピラノシル）−３−ｎ−デカノイルグリセロール；および１−Ｏ−（２−アミノ−２−デオキシ−β−Ｄ−グルコピラノシル）−３−ｎ−オクタデカノイルグリセロールから選択される、請求項８に記載の化合物。
【請求項１３】
請求項８〜１２のいずれか一項に定義されるとおりの化合物、または請求項１〜７のいずれか一項に定義されるとおりの方法によって製造された化合物を含み、任意選択的に、１つまたはそれ以上の酵素をさらに含有する、食料または飼料。
【請求項１４】
請求項８〜１２のいずれか一項に定義されるとおりの化合物、または請求項１〜７のいずれか一項に定義されるとおりの方法によって製造された化合物を含み、任意選択的に、１つまたはそれ以上の酵素をさらに含む、洗浄剤組成物。
【請求項１５】
任意選択的に１つまたはそれ以上の酵素と組み合わせての、請求項８〜１２のいずれか一項に記載の化合物の、乳化剤；界面活性剤；および／または殺菌剤としての使用。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、一連のアミノ置換糖脂質化合物に関する。本発明はまた、それらの調製のための方法、ならびに多くの用途における、特に界面活性剤および乳化剤としての、それらの使用に関する。
【背景技術】
【０００２】
グリコグリセロリピドまたは糖脂質は、自然界に見出される脂質のクラスである。この化合物は、最も多くの場合、モノまたはジアシルグリセロールにグリコシド結合した１個または２個の単糖単位を含有している。３個または４個の単糖単位を有する糖脂質もまた、知られている。それらは、それらが光合成膜中に位置している高等植物、藻類および細菌において特に重要であるが、それらは、動物においてはそれほど顕著ではない。
【０００３】
グルコグリセロリピドは、それらを食品中の成分として興味深いものにする物理的および生物学的性質を有しており、いくつもの健康増進特性（例えば、胃腸管（ＧＩＴ）における腫瘍生長の阻害、抗炎症効果および抗ウイルス効果）が報告されている：非特許文献１；２；３；４；５；６；７；８；９；および１０を参照されたい。
【０００４】
非特許文献１１は、高度好熱好酸菌バキッルス・アキドカルダリウス（Ｂａｃｉｌｌｕｓ  ａｃｉｄｏｃａｌｄａｒｉｕｓ）からのグルコサミジル糖脂質の単離について記載している。全脂質の約６４％を構成する主要化合物は、グルコピラノシル（１→４）グルコサミン（１→３）−ジアシルグリセロールの脂肪Ｎ−アシル誘導体であるようである。アミド結合した脂肪酸は、主として分岐ヘプタデカン酸であったが、１１−シクロヘキシルウンデカン酸または１３−シクロヘキシルトリデカン酸もあった。微量生成物は、Ｏ−β−Ｄ−グルコピラノシル−（１→４）−Ｏ−２−アシルアミド−２−デオキシ−β−Ｄ−グルコピラノシルモノアシルグリセロールとして仮に同定された。
【０００５】
細菌および藻類において、それぞれに異なる糖組み合わせを含有する多数の糖脂質が報告されている。例えば、１−（Ｏ−β−グルコサミニル）−２，３−ジグリセリドが、バキッルス・メガテリウム（Ｂａｃｉｌｌｕｓ  ｍｅｇａｔｅｒｉｕｍ）において同定された：非特許文献１２を参照されたい。これは、生体中の全脂質グルコサミニドの約５％を構成し、クロマトグラフィにより他の脂質から分離された。この脂質は、グリセロール、脂肪酸およびグルコサミンを、１：２：１のモル割合で含有していた。脂肪酸は、エステル結合により結合していた。この脂質の部分酸加水分解またはアルカリ加水分解によって、１−（Ｏ−β−グルコサミニル）グリセロールが生じる。
【０００６】
非特許文献１３および１４は、シアロシルグリセロール誘導体およびそれらの合成について記載している。これらの化合物において、Ｎ−アシルアミノ基は、単糖部分の４位にヒドロキシル基の代わりに存在する（グリセロール部分への結合点は１位である）。
【０００７】
特許文献２は、単糖基をその１位でグリセロール部分に結合させたグリセリド誘導体について記載している。これらの化合物はまた、単糖部分の４位にヒドロキシル基の代わりにＮ−アシルアミノ基を有する。
【０００８】
非特許文献１５は、天然α−６−デヒドロキシ−６−アミノグルコグリセロリピドの合成について記載している。合成経路には、中間体３−Ｏ−（２’，３，４’−トリ−Ｏ−ベンジル−６−デヒドロキシ−６’−ベンジルオキシカルボニルアミノ−α−Ｄ−グルコピラノシル）−１−Ｏ−パルミトイルグリセロールが含まれる。
【０００９】
非特許文献１６は、アルケニル２−アセチルアミノ−２−デオキシ−β−Ｄ−グルコピラノシドの不斉ジヒドロキシル化について記載している。合成経路には、中間体（３’Ｓ）−４’−ベンゾイルオキシ−３’−ヒドロキシブチル３，４，６−トリ−Ｏ−アセチル−２−アセチルアミノ−２−デオキシ−β−グルコシドが含まれる。
【００１０】
特許文献１は、グリコグリセロリピドおよびその殺菌薬としての使用について記載している。
【００１１】
アニオン性およびカチオン性の界面活性溶液は、洗剤および乳化剤などの多くの用途において使用されている。
【先行技術文献】
【特許文献】
【００１２】
【特許文献１】独国特許出願公開第１９６３４０１９Ａ１号明細書
【特許文献２】特開平２−２２５４８９号公報
【非特許文献】
【００１３】
【非特許文献１】Ｃｏｌｏｍｂｏ，Ｄ，ｅｔ  ａｌ．Ｃａｎｃｅｒ  Ｌｅｔｔｅｒｓ（Ｓｈａｎｎｏｎ，Ｉｒｅｌａｎｄ），（２０００）１６１，２０１−２０５
【非特許文献２】Ｃｏｌｏｍｂｏ，Ｄ．，ｅｔ  ａｌ．Ｃａｎｃｅｒ  Ｌｅｔｔｅｒｓ（Ｓｈａｎｎｏｎ，Ｉｒｅｌａｎｄ），（１９９８）１２３，２３３
【非特許文献３】Ｌａｒｓｅｎ，Ｅ．，ｅｔ  ａｌ；Ｊ．Ｎａｔ．Ｐｒｏｄ．（２００３）６６，９９４−９９５
【非特許文献４】Ｍｏｒｉｍｏｔｏ，Ａ．，ｅｔ  ａｌ．Ｐｈｙｔｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ，（１９９５）４０，１４３３−１４３７
【非特許文献５】Ｎａｇａｔｓｕ，Ａ．，ｅｔ  ａｌ．Ｂｉｏｏｒｇ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．Ｌｅｔｔ．，１９９４，４，１６１９−１６２２
【非特許文献６】Ｎａｋａｔａ，Ｋ．Ｊ．Ｂｉｏｃｈｅｍ．（Ｔｏｋｙｏ），（２０００），１２７，７３１−７３７
【非特許文献７】Ｐａｈｌｓｓｏｎ，Ｐ．，ｅｔ  ａｌ．Ａｒｃｈ．Ｂｉｏｃｈｅｍ．Ｂｉｏｐｈｙｓ．（２００１）３９６，１８７−１９８
【非特許文献８】Ｓｈｉｒａｈａｓｈｉ，Ｈ．，ｅｔ  ａｌ．Ｃｈｅｍ．Ｐｈａｒｍ．Ｂｕｌｌ．，１９９６，４４，１４０４−１４０６
【非特許文献９】Ｓｈｉｒａｈａｓｈｉ，Ｈ．，ｅｔ  ａｌ．Ｃｈｅｍ．Ｐｈａｒｍ．Ｂｕｌｌ．，１９９３，４１，１６６４−１６６６
【非特許文献１０】Ｊａｎｗｉｔａｙａｎｕｃｈｉｔ，Ｗ．，ｅｔ  ａｌ，Ｐｈｙｔｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ（Ｅｌｓｅｖｉｅｒ），（２００３），６４，１２５３−１２６４
【非特許文献１１】Ｌａｎｇｗｏｒｔｈｙ，Ｔ．Ａ．，ｅｔ  ａｌ．Ｂｉｏｃｈｉｍｉｃａ  ｅｔ  Ｂｉｏｐｈｙｓｉｃａ  Ａｃｔａ，（１９７６），４３１，５５０−５６９
【非特許文献１２】Ｐｈｉｚａｃｋｅｒｌｅｙ，Ｐ．Ｊ．Ｒ．，ｅｔ  ａｌ．Ｂｉｏｃｈｅｍ．Ｊ．，１９７２，１２６，４９９
【非特許文献１３】Ｓｈｉｍｉｚｕ，Ｃ．ｅｔ  ａｌ．Ｃｈｅｍ．Ｐｈａｒｍ．Ｂｕｌｌ．１９８９，３７（８），２２５８−２２６０
【非特許文献１４】Ｃｈｅｍ．Ｐｈａｒｍ．Ｂｕｌｌ．１９９０，３８（１２），３３４７−３３５４
【非特許文献１５】Ｗｕ  ｅｔ  ａｌ．，Ｃｈｉｎ．Ｊ．Ｃｈｅｍ．，２００８，２６，１６４１−１６４６
【非特許文献１６】Ｆａｉｒｗｅａｔｈｅｒ，Ｊ．Ｋ．ｅｔ  ａｌ．，Ａｕｓｔ．Ｊ．Ｃｈｅｍ．，１９９８，５１，４７１−４８２
【発明の概要】
【課題を解決するための手段】
【００１４】
本発明は、モノグリセリドを、アミノもしくはＮ−アシルアミノ単糖部分、好ましくはグルコサミンもしくはＮ−アセチルグルコサミン部分の供給源、またはそれらの任意の混合物と反応させることにより、バイオフレンドリーな荷電界面活性分子の合成について記載する。カチオン性分子は、多くの異なるモノグリセリドおよびアミノもしくはＮ−アシルアミノ単糖供給源からグリコシドを作製することによって製造され得る。この分子は、化学合成によって、または基質（例えば、グルコサミン単位の供給源として機能するキトサンもしくはキチンまたはキトサンオリゴマーもしくはキチンオリゴマー）からモノグリセリドへのアミノもしくはＮ−アシルアミノ単糖部分の酵素転移によって、生成され得る。
【００１５】
したがって、本発明の１つの態様によれば、Ｏ−β−Ｄ−グルコピラノシル−（１→４）−Ｏ−２−アシルアミド−２−デオキシ−β−Ｄ−グルコピラノシルモノアシルグリセロール以外の、式（Ｉ）：
【化１】
2013517762.tif 000003
の化合物であって、式中：
Ｒ１、Ｒ２およびＲ３から選択される第１の基は、アミノ単糖部分もしくはアシル基が１個〜６個の炭素原子を有するＮ−アシルアミノ単糖部分であるか、または２個〜４個の単糖部分を含みそのうちの少なくとも１個はアミノもしくはＮ−アシルアミノ単糖部分であるオリゴ糖鎖であり；Ｒ１、Ｒ２およびＲ３から選択される第２の基は、３個〜４０個の炭素原子を有する飽和もしくは不飽和のアシル基であり；そして、
Ｒ１、Ｒ２およびＲ３から選択される第３の基は、水素である、
化合物が提供される。
【００１６】
一部の実施形態において、（３’Ｓ）−４’−ベンゾイルオキシ−３’−ヒドロキシブチル３，４，６−トリ−Ｏ−アセチル−２−アセチルアミノ−２−デオキシ−β−グルコシド以外の、上で定義されるとおりの式（Ｉ）の化合物が提供される。
【００１７】
一部の実施形態において、３−Ｏ−（２’，３，４’−トリ−Ｏ−ベンジル−６−デヒドロキシ−６’−ベンジルオキシカルボニルアミノ−α−Ｄ−グルコピラノシル）−１−Ｏ−パルミトイルグリセロール以外の、上で定義されるとおりの式（Ｉ）の化合物が提供される。
【００１８】
一部の実施形態において、Ｏ−β−Ｄ−グルコピラノシル−（１→４）−Ｏ−２−アシルアミド−２−デオキシ−β−Ｄ−グルコピラノシルモノアシルグリセロール以外の、式（Ｉ’）：
【化２】
2013517762.tif 000004
の化合物であって、式中：
Ｒ１、Ｒ２およびＲ３から選択される第１の基は、アミノもしくはＮ−アシルアミノ基がヘキソース部分の２位にヒドロキシル基の代わりに存在するアミノもしくはＮ−アシルアミノヘキソース部分であり、Ｎ−アシルアミノ基のアシル部分は１個〜６個の炭素原子を有するか、または第１の基は、２個〜４個の単糖部分を含みそのうちの少なくとも１個は上で定義されるとおりのアミノもしくはＮ−アシルアミノヘキソース部分であるオリゴ糖鎖であり；
Ｒ１、Ｒ２およびＲ３から選択される第２の基は、３個〜４０個の炭素原子を有するアルカノイル基または３個〜４０個の炭素原子および１個〜５個の二重結合を有するアルケノイル基であり；そして
Ｒ１、Ｒ２およびＲ３から選択される第３の基は、水素である、
化合物が提供される。
【００１９】
本発明の別の態様によれば、上で定義されるとおりの式（Ｉ）または（Ｉ’）の化合物を調製する方法であって、モノアシルグリセロールであってそのアシル部分が３個〜４０個の炭素原子を有する飽和もしくは不飽和のアシル基であるモノアシルグリセロールまたはその活性化誘導体と、アミノもしくはＮ−アシルアミノ単糖部分の供給源またはその活性化誘導体、および必要であれば、非置換の単糖部分の供給源またはその活性化誘導体とを、任意選択で適切な触媒または活性化剤の存在下で、接触させる工程を含む、方法が提供される。
【００２０】
特に、本発明の好ましい態様によれば、上で定義されるとおりの式（Ｉ）または（Ｉ’）の化合物を調製する方法であって、モノアシルグリセロールであってそのアシル部分が３個〜４０個の炭素原子を有する飽和もしくは不飽和のアシル基であるモノアシルグリセロールを、アミノもしくはＮ−アシルアミノ単糖部分の供給源、および必要であれば、非置換の単糖部分の供給源およびトランスグリコシダーゼ酵素により処理する工程を含む方法が提供される。
【００２１】
さらに、本発明の別の態様によれば、組成物中での上で定義されるとおりの式（Ｉ）または（Ｉ’）の化合物のインサイチュ生成のための方法であって、当該組成物は、以下の成分：
（ｉ）モノアシルグリセロールであってそのアシル部分が３個〜４０個の炭素原子を有する飽和もしくは不飽和のアシル基であるモノアシルグリセロールまたはその活性化誘導体；
（ｉｉ）アミノもしくはＮ−アシルアミノ単糖部分の供給源またはその活性化誘導体；
（ｉｉｉ）必要であれば、非置換の単糖部分の供給源またはその活性化誘導体；および
（ｉｖ）必要であれば、適切な触媒または活性化剤
を含み、当該方法は、当該組成物に、その組成物中にまだ存在しない成分（ｉ）および（ｉｉ）の任意のもの、ならびに必要であれば、その組成物中にまだ存在しない（ｉｉｉ）および／または（ｉｖ）を添加し、それらの成分が反応するのを可能にする工程を含む、方法が提供される。
【００２２】
本発明によれば、本発明の化合物または本発明の方法によって製造された化合物を含む食料もまた提供される。
【００２３】
本発明によれば、本発明の化合物または本発明の方法によって製造された化合物を含む洗剤組成物がさらに提供される。
【００２４】
本発明のさらなる態様によれば、上記の化合物の、乳化剤としての使用が提供される。
【００２５】
本発明のよりさらなる態様によれば、上記の化合物の、界面活性剤としての使用が提供される。
【００２６】
本発明のなおさらなる態様によれば、上記の化合物の、殺菌剤としての使用が提供される。
【図面の簡単な説明】
【００２７】
【図１】ｍ／ｚ  ４７２．２５の１−Ｏ−（２−（アセチルアミノ）−２−デオキシ−β−Ｄ−グルコピラノシル）−３−ｎ−デカノイルグリセロール（化合物２）のＮａ付加物のＭＳ２スペクトルである。
【図２】図１のＭＳ２スペクトルにフラグメントを割り当てたものである。
【図３】ｍ／ｚ  ４３０．２４の１−Ｏ−（２−アミノ−２−デオキシ−β−Ｄ−グルコピラノシル）−３−ｎ−デカノイルグリセロール（化合物１）のＮａ付加物のＭＳ２スペクトルである。
【図４】図３のＭＳ２スペクトルにフラグメントを割り当てたものである。
【図５】表３に示されたＨＰＬＣ／ＭＳ結果の略図を示している。
【図６】配列番号１（使用された配列）を示している。
【図７】配列番号２（成熟配列）を示している。
【図８】中間体２の１Ｈ  ＮＭＲスペクトルである。
【図９】中間体２の１３Ｃ  ＮＭＲスペクトルである。
【図１０】図１４のＭＳ２スペクトルにフラグメントを割り当てたものである。
【図１１】図１４のＭＳ２スペクトルのフラグメントのさらなる説明である。
【図１２】図１３および図１５のＭＳおよびＭＳ３スペクトルにフラグメントを割り当てたものである。
【図１３】中間体２のＭＳスペクトルである。
【図１４】中間体２のＭＳ２スペクトルである。
【図１５】中間体２のＭＳ３スペクトルである。
【図１６】中間体３の１Ｈ  ＮＭＲスペクトルである。
【図１７】中間体３の１３Ｃ  ＮＭＲスペクトルである。
【図１８】中間体３のＭＳスペクトルである。
【図１９】図１８のＭＳ２スペクトルにフラグメントを割り当てたものである。
【発明を実施するための形態】
【００２８】
定義
単糖およびアミノ／Ｎ−アシルアミノ単糖
本出願において、用語「単糖」とは、その最も広い意味において、より単純な炭水化物へとさらに加水分解され得ない炭水化物部分を意味する。この用語は、その最も広い意味において、遊離単糖と、（出発物質、生成物または任意の中間体において）分子の他の部分（例えば、グリセロール、アシル基および他の単糖部分）に（好ましくはグリコシド結合により）結合した単糖部分との両方を対象として含むことが意図される。この用語はまた、その最も広い意味において、以下でより詳細に定義される、非置換単糖（すなわち、その単糖に通常存在するヒドロキシル基の全てが存在し、いずれも別の官能基で置換されていない単糖）と置換単糖（例えば、アミノおよびＮ−アシルアミノ単糖、酸化単糖およびデオキシ単糖）との両方を対象として含むことが意図される。
【００２９】
単糖部分は、Ｄ型配置またはＬ型配置を有し得る。さらに、単糖部分は、アルドース部分またはケトース部分であり得る。
【００３０】
好適には、単糖部分は、３個〜７個、好ましくは４個〜６個、より好ましくは５個〜６個の炭素原子を有し得る。１つの実施形態において、単糖部分はヘキソース部分であり（すなわち、この単糖部分は６個の炭素原子を有する）、その例としては、グルコース、ガラクトース、アロース、アルトロース、マンノース、グロース、イドースおよびタロースなどのアルドヘキソース、ならびにフルクトースおよびソルボースなどのケトヘキソースが挙げられる。好ましくは、ヘキソース部分は、グルコース部分である。別の実施形態において、単糖単位は、リボース、アラビノース、キシロースまたはリキソースなどのペントース部分である（すなわち、この単糖単位は５個の炭素原子を有する）。
【００３１】
１つの実施形態において、単糖部分は、デオキシ単糖部分、すなわち、ヒドロキシル基のうちの１個以上（好ましくは１個または２個、より好ましくは１個のみ）が水素原子に置換されている単糖部分である。他の実施形態において、単糖は、デオキシ単糖ではなく、ヒドロキシル基は、いずれも水素原子に置換されていない。
【００３２】
１つの実施形態において、単糖部分上の１個以上の第一級ヒドロキシル基は、酸化されてカルボン酸（−ＣＯ２Ｈ）基を形成し得る。この基は適切な塩基と塩を形成し得、そのような塩の例は当業者によく知られており、例えば、リチウム、ナトリウムおよびカリウムなどのアルカリ金属、マグネシウムおよびカルシウムなどのアルカリ土類金属、ならびにアンモニウムまたはモノ、ジ、トリおよびテトラアルキルアンモニウムが挙げられる。他の実施形態において、単糖は、酸化単糖ではなく、第一級ヒドロキシル基は、いずれも−ＣＯ２Ｈ基へと酸化されていない。
【００３３】
用語「アミノ単糖」とは、少なくとも１個のアミン（−ＮＲ２）基（ここで、各基Ｒは、独立して水素またはＣ１〜６アルキルである）を、それに対応する数の単糖ヒドロキシル基の代わりに含有する、上で定義されるとおりの単糖を意味する。この用語は、その最も広い意味において、遊離アミノ単糖と、（出発物質、生成物または任意の中間体において）分子の他の部分（例えば、アシル基、グリセロール部分および他の単糖部分（これは、非置換単糖部分または置換単糖部分（例えば、さらなるアミノもしくはＮ−アシルアミノ置換単糖部分）であり得る））に（好ましくはグリコシド結合により）結合したアミノ単糖部分との両方を対象として含むことが意図される。
【００３４】
アミン基ＮＲ２において、各基Ｒは、独立して、水素またはＣ１〜６アルキル（以下に定義されるとおり）である。基Ｒは、同じであっても異なっていてもよい。好ましくは、各基Ｒは、独立して、水素またはＣ１〜４アルキルであり、より好ましくは、水素、メチルまたはエチルであり、最も好ましくは、水素またはメチルである。特に好ましい実施形態においては、両方の基Ｒが、水素である。
【００３５】
上記のアミン基ＮＲ２の定義において、用語「アルキル」とは、１個〜６個の炭素原子を含有する、直鎖または分岐の、一価の飽和炭化水素鎖を意味する。アルキル基の例としては、メチル、エチル、ｎ−プロピル、ｉ−プロピル、ｎ−ブチル、ｉ−ブチル、ｓｅｃ−ブチル、ｔ−ブチル、ｎ−ペンチル、ｉ−ペンチル、ネオペンチル、ｎ−ヘキシルおよびｉ−ヘキシルが挙げられる。好ましくは、「アルキル」は、Ｃ１〜４アルキルであり、最も好ましくは、メチルまたはエチルである。
【００３６】
用語「Ｎ−アシルアミノ単糖」とは、アシル基Ｒ’−Ｃ（＝Ｏ）−（ここで、Ｒ’は、水素または上で定義されるとおりのＣ１〜５アルキル基である）がアミン基上の基Ｒのうちの１つの代わりに存在する、上で定義されるとおりのアミノ単糖を意味する。換言すれば、用語「Ｎ−アシルアミノ単糖」とは、少なくとも１個のアシルアミノ（−ＮＲ−Ｃ（＝Ｏ）−Ｒ’）基（ここで、Ｒは上で定義されるとおりである）を、その対応する数の単糖ヒドロキシル基の代わりに含有する、上で定義されるとおりの単糖を意味する。Ｎ−アシルアミノ基の定義におけるアシル基Ｒ’−Ｃ（＝Ｏ）−は、合計１個〜６個の炭素原子（カルボニル炭素を含む）を有する。好適なアシル基の例としては、メタノイル（ホルミル）、エタノイル（アセチル）、プロパノイル、ブタノイル、ペンタノイルおよびヘキサノイルが挙げられる。好ましくは、アシル基は、２個〜４個の炭素原子を有する。より好ましくは、アシル基は、アセチルである。
【００３７】
アミノもしくはＮ−アシルアミノ単糖部分は、Ｄ型配置またはＬ型配置を有し得る。さらに、アミノもしくはＮ−アシルアミノ単糖部分は、アミノもしくはＮ−アシルアミノアルドースまたはアミノケトース部分であり得る。
【００３８】
好適には、アミノもしくはＮ−アシルアミノ単糖部分は、５個〜７個、好ましくは５個〜６個の炭素原子を有し得る。好ましい実施形態において、アミノもしくはＮ−アシルアミノ単糖部分は、アミノもしくはＮ−アシルアミノヘキソース部分であり（すなわち、このアミノもしくはＮ−アシルアミノ単糖部分は６個の炭素原子を有する）、その例としては、アミノ−もしくはＮ−アシルアミノ置換グルコース、ガラクトース、アロース、アルトロース、マンノース、グロース、イドースおよびタロースなどのアミノもしくはＮ−アシルアミノアルドヘキソース、ならびにアミノもしくはＮ−アシルアミノ置換フルクトースおよびソルボースなどのアミノもしくはＮ−アシルアミノケトヘキソースが挙げられる。好ましくは、アミノもしくはＮ−アシルアミノヘキソース部分は、アミノもしくはＮ−アシルアミノグルコース部分である。
【００３９】
アミノもしくはＮ−アシルアミノ単糖部分上のアミノもしくはＮ−アシルアミノ基の数は、その単糖上の置換可能なヒドロキシル基の数によってのみ制限される。好適には、アミノ置換単糖部分は、１個〜３個、好ましくは１個または２個、より好ましくは１個のみのアミノ基またはＮ−アシルアミノ基を、その対応する数の単糖ヒドロキシル基の代わりに含有する。
【００４０】
１個もしくは複数個のアミノもしくはＮ−アシルアミノ基は、単糖部分上のヒドロキシル基のうちの任意のものの代わりに存在し得る。例えば、それらは、２位、３位、４位、５位または６位に存在し得る（単糖は１位で分子のグリセロール部分に連結されている）。しかしながら、アミノもしくはＮ−アシルアミノ単糖部分がアミノもしくはＮ−アシルアミノヘキソース部分である場合、アミノもしくはＮ−アシルアミノ基は、ヘキソース部分の２位にヒドロキシル基の代わりに存在することが好ましい。
【００４１】
アミノもしくはＮ−アシルアミノ単糖の例としては、以下が挙げられる。
【００４２】
アミノもしくはＮ−アシルアミノペントース（例えば、２−アミノ−２−デオキシ−（ＤまたはＬ）−アラビノース、３−デオキシ−３−（メチルアミノ）−Ｌ−アラビノース（４−ｅｐｉ−ゲントサミン（ｇｅｎｔｏｓａｍｉｎｅ））、２，４−ジアミノ−２，４−ジデオキシ−Ｌ−アラビノース、２，３，５−トリアミノ−２，３，５−トリデオキシ−Ｄ−アラビノン酸、２−アミノ−２−デオキシ−Ｄ−リボース、２−アミノ−２−デオキシペントフラノース、３−アミノ−３−デオキシ−Ｄ−リボース、２−アミノ−２−デオキシ−Ｄ−キシロース、３−デオキシ−３−（メチルアミノ）−Ｄ−キシロース（ゲントサミン）および５−アミノ−５−デオキシペントフラノース）；
【００４３】
アミノもしくはＮ−アシルアミノヘキソース、例えば、アミノもしくはＮ−アシルアミノアロースおよびアミノもしくはＮ−アシルアミノアルトロース（例えば、２−アミノ−２−デオキシ−Ｄ−アロース（Ｄ−アロサミン）、３，６−ジデオキシ−３−（ジメチルアミノ）−Ｄ−アルトロース（ラビドサミン））；アミノもしくはＮ−アシルアミノガラクトース（例えば、２−アミノ−２−デオキシ−Ｄ−ガラクトース（コンドロサミン、Ｄ−ガラクトサミン）、２，６−ジデオキシ−２−（メチルアミノ）−Ｄ−ガラクトース（メチルフコサミン）、４−アミノ−４，６−ジデオキシ−Ｄ−ガラクトース（トモサミン）、４，６−ジデオキシ−４−（メチルアミノ）−Ｄ−ガラクトース、２，４−ジアミノ−２，４，６−トリデオキシ−Ｄ−ガラクトース）、アミノもしくはＮ−アシルアミノグルコース（例えば、２−アミノ−２−デオキシ−Ｄ−グルコース（Ｄ−グルコサミン、キトサミン）、２−（アセチルアミノ）−２−デオキシ−Ｄ−グルコース（Ｎ−アセチルグルコサミン）２−アミノ−２−デオキシ−Ｌ−グルコース、２−デオキシ−２−（メチルアミノ）−Ｌ−グルコース、２−アミノ−２，６−ジデオキシ−Ｄ−グルコース（Ｄ−キノボサミン）、３−アミノ−３−デオキシ−Ｄ−グルコース（カナサミン（ｋａｎａｓａｍｉｎｅ））、３，６−ジデオキシ−３−（ジメチルアミノ）−Ｄ−グルコース（ミカミノース）、４−アミノ−４−デオキシ−Ｄ−グルコース、４−アミノ−４，６−ジデオキシ−Ｄ−グルコース（ビオサミン）、４，６−ジデオキシ−４−（メチルアミノ）−Ｄ−グルコース（バモサミン（ｂａｍｏｓａｍｉｎｅ））、４，６−ジデオキシ−４−（ジメチルアミノ）−Ｄ−グルコース（アモサミン）、４−アミノ−４−デオキシ−Ｄ−グルクロンアミド、６−アミノ−６−デオキシ−Ｄ−グルコース、２，６−ジアミノ−２，６−ジデオキシ−Ｄ−グルコース（ネオサミンＣ））；アミノもしくはＮ−アシルアミノグロース、アミノもしくはＮ−アシルアミノイドースおよびアミノもしくはＮ−アシルアミノマンノース（例えば、２−アミノ−２−デオキシ−Ｄ−グロース（Ｄ−グロサミン）、２−デオキシ−２−（メチルアミノ）−Ｄ−グロース、２−アミノ−２−デオキシ−Ｌ−グロース（Ｌ−グロサミン）、２，６−ジアミノ−２，６−ジデオキシ−Ｌ−イドース（ネオサミンＢ、パロモース）、３−アミノ−３，６−ジデオキシ−Ｄ−マンノース（ミコサミン）、４−アミノ−４，６−ジデオキシ−Ｄ−マンノース（ペロサミン））、または他のアミノもしくはＮ−アシルアミノヘキソース（例えば、２−アミノ−２，３−ジデオキシ−Ｄ−リボ−ヘキソース、３−アミノ−２，３，６−トリデオキシ−Ｄ−アラビノ−ヘキソース（Ｄ−アコサミン）、３−アミノ−２，３，６−トリデオキシ−Ｌ−アラビノ−ヘキソース（Ｌ−アコサミン）、３−アミノ−２，３，６−トリデオキシ−３−Ｃ−メチル−Ｌ−アラビノ−ヘキソース（４−エピ−バンコサミン）、３−アミノ−２，３，６−トリデオキシ−Ｌ−リキソ−ヘキソース（Ｌ−ダウノサミン）、２，３，６−トリデオキシ−３−（メチルアミノ）−Ｌ−リキソ−ヘキソース（２，３，６−トリデオキシ−３−（ジメチルアミノ）−Ｌ−リキソ−ヘキソース（Ｌ−ロドサミン）、２，３，６−トリデオキシ−３−（ジメチルアミノ）−Ｄ−キシロ−ヘキソース（Ｄ−アンゴロサミン）、３−アミノ−２，３，６−トリデオキシ−Ｌ−リボ−ヘキソース（リストサミン）、２，３，６−トリデオキシ−３−（ジメチルアミノ）−Ｌ−リボ−ヘキソース（Ｌ−メゴサミン（ｍｅｇｏｓａｍｉｎｅ））、３，４，６−トリデオキシ−３−（ジメチルアミノ）−Ｄ−キシロ−ヘキソース（デソサミン）、４−アミノ−２，３，４，６−テトラデオキシ−Ｌ−エリトロ−ヘキソース（トリポサミン（ｔｏｌｙｐｏｓａｍｉｎｅ））、２，３，４，６−テトラデオキシ−４−（ジメチルアミノ）−Ｄ−エリトロ−ヘキソース（ホロサミン）、２，４−ジアミノ−２，３，４，６−テトラデオキシ−Ｄ−アラビノ−ヘキソース（カスガミン（ｋａｓｕｇａｍｉｎｅ））、２，６−ジアミノ−２，３，６−トリデオキシ−Ｄ−リボ−ヘキソース（ネブロサミン（ｎｅｂｒｏｓａｍｉｎｅ）、トブロサミン（ｔｏｂｒｏｓａｍｉｎｅ））、２，６−ジアミノ−２，４，６−トリデオキシ−Ｄ−キシロ−ヘキソース、２，６−ジアミノ−２，３，４，６−テトラデオキシ−Ｄ−エリトロ−ヘキソース（プルプロサミンＣ（ｐｕｒｐｕｒｏｓａｍｉｎｅ  Ｃ））および２，６−ジアミノ−２，３，４，６−テトラデオキシ−６−Ｎ−メチル−Ｄ−エリトロ−ヘキソース）；
【００４４】
アミノもしくはＮ−アシルアミノヘプトース（例えば、２−アミノ−２，７−ジデオキシ−Ｄ−グリセロ−Ｄ−グルコ−ヘプトース、４−アミノ−４−デオキシ−（ＤまたはＬ）−グリセロ−Ｄ−グルコ−ヘプトース、４−アミノ−４−デオキシ−（ＤまたはＬ）−グリセロ−Ｄ−マンノ−ヘプトース、６−アミノ−６，７−ジデオキシ−Ｄ−グリセロ−Ｄ−グルコ−ヘプトース、２，６−ジアミノ−２，３，４，６，７−ペンタデオキシ−Ｌ−リキソ−ヘプトース（６−エピ−プルプロサミンＢ）、２，６−ジアミノ−２，３，４，６，７−ペンタデオキシ−Ｄ−リボ−ヘプタ−４−エノピラノース、２，６−ジアミノ−２，３，４，６，７−ペンタデオキシ−Ｄ−リボ−ヘプトース（プルプロサミンＢ）および２−アミノ−２，３，４，６，７−ペンタデオキシ−６−（メチルアミノ）−Ｄ−リボ−ヘプトース（プルプロサミンＡ））。
【００４５】
本発明の化合物において、１個もしくは複数個のアミノ単糖部分のアシル化の程度は、０（すなわち、アミノ基は１つもアシル化されていない）から１（すなわち、全てのアミノ基がアシル化されている）まで可変である。好ましいアシル化の程度は、必要とされる官能基および完成品の意図される使用に依存し、カチオン性乳化剤として使用する予定の化合物は、（十分な塩基性−ＮＲ２基がプロトン化に利用可能であるためには）低度のアシル化を必要とするが、中性の化合物は、確実に塩基性基が過剰に存在しないようするために、高度のアシル化を必要とする。好ましくは、１個もしくは複数個のアミノ単糖部分のアシル化の程度は、０．０５から０．８の範囲である。
【００４６】
本発明の化合物において、アミノもしくはＮ−アシルアミノ単糖部分は、グリコシド結合により、１個以上の（ａ）さらなるアミノもしくはＮ−アシルアミノ単糖部分（上で定義され例示されるとおり）および／または１個以上の（ｂ）上に定義されるとおりの非置換単糖部分と結合して、２個〜４個の単糖部分を有するオリゴ糖鎖を形成し得る。本実施形態において、オリゴ糖鎖を形成している単糖部分のうちの少なくとも１個は、アミノもしくはＮ−アシルアミノ単糖部分でなければならない。好ましくは、オリゴ糖鎖を形成している単糖部分のうちの１個または２個、より好ましくは１個のみが、アミノもしくはＮ−アシルアミノ単糖部分である。１個もしくは複数個のアミノもしくはＮ−アシルアミノ単糖部分は、オリゴ糖鎖上の任意の位置に存在し得る。しかしながら、１個のアミノもしくはＮ−アシルアミノ単糖部分は、グリセロール主鎖に結合されていることが好ましい。
【００４７】
本発明の化合物において、アミノもしくはＮ−アシルアミノ単糖部分は、分子上に存在する唯一の単糖部分である（すなわち、このアミノもしくはＮ−アシルアミノ単糖部分は、非置換単糖部分にも、さらなるアミノもしくはＮ−アシルアミノ単糖部分にも結合されていない）ことが好ましい。
【００４８】
好ましくは、アミノもしくはＮ−アシルアミノ単糖部分は、グルコサミンまたはＮ−アセチルグルコサミンから選択される。
【００４９】
アシル基
用語「アシル基」（特に本発明の化合物の第２の基の定義におけるものであるが、それに限らない）とは、直鎖または分岐鎖の、飽和または不飽和の、式Ｒ−Ｃ（＝Ｏ）−（式中、Ｒはヒドロカルビル基である）の基を意味する。典型的に、そのようなアシル基は、合計３個〜４０個の炭素原子、好ましくは６個〜３０個の炭素原子（例えば、少なくとも８個〜２４個の炭素原子、例えば、１０個〜２２個、例えば、１０個、１２個、１４個、１６個または１８個の炭素原子）を有する。１つの特定の実施形態において、そのようなアシル基は、アルカノイル基（すなわち、基Ｒがアルキルである、完全飽和の完全脂肪族基）である。あるいは、そのようなアシル基は、アルケノイル基（すなわち、基Ｒがアルケニルである、不飽和の完全脂肪族基、すなわち、１個以上の二重結合を含有する不飽和脂肪族基）を含み、そのような基は、例えば、１個〜５個の二重結合、好ましくは１個、２個または３個の二重結合、より好ましくは１個または２個の二重結合を有し得る。
【００５０】
アシル基の例としては、飽和アシル基、例えば、アルカノイル基（例えば、ブタノイル（ブチリル）、ヘキサノイル（カプロイル）、オクタノイル（カプリル）、デカノイル（カプリニル）、ドデカノイル（ラウロイル）、テトラデカノイル、（ミリストイル）、ヘキサデカノイル（パルミトイル）、オクタデカノイル（ステアロイル）、エイコサノイル（アラキドニル）、ドコサノイル（ベヘノイル）およびテトラコサノイル（リグノセロイル）基）、および不飽和アシル基、例えば、アルケノイル基（例えば、シス−テトラデカ−９−エノイル（ミリストレイル）、シス−ヘキサデカ−９−エノイル（パルミトレイル）、シス−オクタデカ−９−エノイル（オレイル）、シス  シス−９，１２−オクタデカジエノイル（リノレイル）、シス，シス，シス−９，１２，１５−オクタデカトリエノイル（リノレニル）、シス，シス，シス−６，９，１２−オクタデカトリエノイル（ガモレイル（ｇａｍｏｌｅｙｌ））、およびシス，シス，シス，シス−５，８，１１，１４−エイコサ−テトラエノイル（アラキドニル）基）が挙げられる。
【００５１】
本態様において、好ましいアシル基は、６個〜２４個の炭素原子を有する飽和もしくは不飽和（好ましくは飽和）のアシル基である。より好ましいアシル基は、８個〜１８個の炭素原子を有する飽和もしくは不飽和のアシル基であり、特に、ｎ−デカノイル（カプリニル）、ｎ−ドデカノイル（ラウロイル）、ｎ−テトラデカノイル（ミリストイル）、ｎ−ヘキサデカノイル（パルミトイル）、ｎ−オクタデカノイル（ステアロイル）、シス−オクタデカ−９−エノイル（オレイル）、シス，シス−９，１２−オクタデカジエノイル（リノレイル）、およびシス，シス，シス−９，１２，１５−オクタデカトリエノイル（リノレニル）基である。特に好ましくは、ｎ−デカノイル基およびｎ−オクタデカノイル基である。
【００５２】
１つの態様において、アシル基は、合計３個〜４０個の炭素原子、好ましくは６個〜３０個の炭素原子（例えば、８個〜２４個の炭素原子）を有するアルカノイル基である。１つの実施形態において、アシル基は、合計８個〜１８個の炭素原子（例えば、８個、１０個、１２個、１４個、１６個または１８個の炭素原子）を有するアルカノイル基である。
【００５３】
１つの態様において、アシル基は、合計３個〜４０個の炭素原子、好ましくは６個〜３０個の炭素原子（例えば、８個〜２４個の炭素原子）および１個〜５個、好ましくは１個、２個または３個、より好ましくは１個または２個の二重結合を有するアルケノイル基である。１つの実施形態において、アシル基は、合計８個〜１８個の炭素原子（例えば、８個、１０個、１２個、１４個、１６個または１８個の炭素原子）および１個〜３個の二重結合を有するアルケノイル基である。
【００５４】
本発明の化合物において、Ｒ１、Ｒ２およびＲ３から選択される（好ましくはＲ１およびＲ３から選択される）第１の基は、アミノ単糖部分もしくはアシル基が１個〜６個の炭素原子を有するＮ−アシルアミノ単糖部分であるか、または２個〜４個の単糖部分を含みそのうちの少なくとも１個はアミノもしくはＮ−アシルアミノ単糖部分であるオリゴ糖鎖である。
【００５５】
より好ましくは、第１の基は、アミノ単糖部分もしくはアシル基が１〜６個の炭素原子を有するＮ−アシルアミノ単糖部分である。換言すれば、このアミノもしくはＮ−アシルアミノ単糖部分は、分子上に存在する唯一の単糖部分であり、さらなる非置換単糖またはアミノもしくはＮ−アシルアミノ単糖部分に結合されていないことが好ましい。
【００５６】
好ましくは、第１の基は、アミノヘキソース部分もしくはアシル基が２個〜４個の炭素原子を有するＮ−アシルアミノヘキソース部分である。本実施形態において、アミノもしくはＮ−アシルアミノ基は、好ましくは、ヘキソース部分の２位に存在する。
【００５７】
特に好ましい実施形態において、第１の基は、グルコサミンまたはＮ−アセチルグルコサミンから選択される。
【００５８】
本発明の化合物において、Ｒ１、Ｒ２およびＲ３から選択される（好ましくは、Ｒ１およびＲ３から選択される）第２の基は、好ましくは、３個〜４０個の炭素原子を有する飽和もしくは不飽和のアシル基（好ましくは、アルカノイルもしくはアルケノイル基）である。好ましくは、第２の基は、６個〜２４個の炭素原子を有する飽和もしくは不飽和のアシル基（好ましくは、アルカノイルもしくはアルケノイル基）である。より好ましくは、第２の基は、８個〜１８個の炭素原子、特に１０個、１２個、１４個、１６個または１８個の炭素原子を有する、飽和もしくは不飽和（好ましくは飽和）のアシル基（好ましくは、アルカノイル基）である。さらにより好ましくは、第２の基は、ｎ−デカノイル、ｎ−ドデカノイル、ｎ−テトラデカノイル、ｎ−ヘキサデカノイル、ｎ−オクタデカノイル、シス−オクタデカ−９−エノイル（オレイル）、シス，シス−９，１２−オクタデカジエノイル（リノレイル）またはシス，シス，シス−９，１２，１５−オクタデカトリエノイル（リノレニル）である。
【００５９】
特に好ましい実施形態において、第２の基は、ｎ−デカノイルまたはｎ−オクタデカノイルである。
【００６０】
本発明の化合物において、Ｒ１、Ｒ２およびＲ３から選択される第３の基は、水素である。好ましくは、Ｒ２が、水素である。
【００６１】
本発明によれば、
Ｒ１およびＲ３から選択される第１の基が、アミノ単糖部分もしくはアシル基が１個〜６個の炭素原子を有するＮ−アシルアミノ単糖部分であるか、または２個〜４個の単糖部分を含みそのうちの少なくとも１個はアミノもしくはＮ−アシルアミノ単糖部分であるオリゴ糖鎖であり；
Ｒ１およびＲ３から選択される第２の基が、３個〜４０個の炭素原子を有する飽和もしくは不飽和のアシル基（好ましくは、アルカノイルもしくはアルケノイル基）であり；そして
Ｒ２が、水素である
化合物が好ましい。
【００６２】
本発明によれば、とりわけ、
第１の基（好ましくは、Ｒ１およびＲ３から選択される）が、アミノ単糖部分もしくはアシル基が１個〜６個の炭素原子を有するＮ−アシルアミノ単糖部分であり；そして
第２の基（好ましくは、Ｒ１およびＲ３から選択される）が、６個〜２４個の炭素原子を有する飽和もしくは不飽和のアシル基（好ましくは、アルカノイルもしくはアルケノイル基）である
化合物が好ましい。
【００６３】
本発明によれば、特に、
第１の基（好ましくは、Ｒ１およびＲ３から選択される）が、アミノヘキソース部分もしくはアシル基が２個〜４個の炭素原子を有するＮ−アシルアミノヘキソース部分であり；そして
第２の基（好ましくは、Ｒ１およびＲ３から選択される）が、８個〜１８個の炭素原子を有する飽和もしくは不飽和のアシル基（好ましくは、アルカノイルもしくはアルケノイル基）である
化合物が好ましい。
【００６４】
本発明によれば、なおさらには、
第１の基（好ましくは、Ｒ１およびＲ３から選択される）が、グルコサミンもしくはＮ−アセチルグルコサミンから選択され；そして
第２の基（好ましくは、Ｒ１およびＲ３から選択される）が、ｎ−デカノイル、ｎ−ドデカノイル、ｎ−テトラデカノイル、ｎ−ヘキサデカノイル、ｎ−オクタデカノイル、シス−オクタデカ−９−エノイル（オレイル）、シス，シス−９，１２−オクタデカジエノイル（リノレイル）またはシス，シス，シス−９，１２，１５−オクタデカトリエノイル（リノレニル）から選択される
化合物が好ましい。
【００６５】
本発明の特に好ましい化合物は、１−Ｏ−（２−アミノ−２−デオキシ−β−Ｄ−グルコピラノシル）−３−ｎ−デカノイルグリセロール；１−Ｏ−（２−（アセチルアミノ）−２−デオキシ−β−Ｄ−グルコピラノシル）−３−ｎ−デカノイルグリセロール；および１−Ｏ−（２−アミノ−２−デオキシ−β−Ｄ−グルコピラノシル）−３−ｎ−オクタデカノイルグリセロールから選択される。
【００６６】
方法
本発明の化合物は、当業者に一般的に知られている多くの方法により調製され得る。概して、化合物は、モノアシルグリセロールであってそのアシル部分が３個〜４０個の炭素原子を有する飽和もしくは不飽和のアシル基であるモノアシルグリセロールまたはその活性化誘導体と、アミノもしくはＮ−アシルアミノ単糖部分の供給源またはその活性化誘導体、および必要であれば、非置換の単糖部分の供給源またはその活性化誘導体とを、任意選択で適切な触媒または活性化剤の存在下で、接触させることによって、調製され得る。
【００６７】
本発明の化合物がオリゴ糖鎖を含む場合、そのような化合物は、標的化合物よりも１つ少ない単糖部分を有する本発明の化合物をアミノもしくはＮ−アシルアミノ単糖部分の供給源またはその活性化誘導体と反応させて、このアミノもしくはＮ−アシルアミノ置換されていない単糖を鎖に付加することによっても形成され得る。したがって、本発明の化合物は中間体化合物よりも１つ多い単糖またはアミノもしくはＮ−アシルアミノ単糖を有する本発明のさらなる化合物の製造のための中間体として機能し得ることが、本発明の範囲内で想定される。
【００６８】
本発明の化合物は、例えば食料もしくは飼料においてまたは洗剤もしくは洗濯用組成物において、インサイチュで（すなわち、化合物がその中で使用されることが意図される組成物中で）生成され得る。本態様は、以下でより詳細に説明される。
【００６９】
モノグリセリド（モノアシルグリセロール）
本発明の化合物を調製するための出発物質のうちの１つは、モノグリセリドである。本明細書において、用語「モノグリセリド」（モノアシルグリセロールとしても知られる）とは、グリセロール部分にエステル結合により共有結合された１個のアシル基（上で定義され例示されるとおり）を含む化合物（グリセロール部分のその他の２個のＯＨ基は、自由にアミノもしくはＮ−アシルアミノ置換単糖とグリコシド結合を形成することができる）を意味する。脂質受容体はモノグリセリドの混合物を含み得ることが、本発明の範囲内で想定される。
【００７０】
モノグリセリドのアシル基は、グリセロール分子の３個の炭素のうちのいずれか１つの上に存在し得、したがって、モノグリセリドは１−モノアシルグリセロール、２−モノアシルグリセロール、またはそれらの混合物を含み得ることが、本発明の範囲内で想定される。好ましくは、モノグリセリドは、１−モノアシルグリセロールである。モノグリセリドの混合物が存在する場合、その混合物は、好適には少なくとも５０％、好ましくは少なくとも６０％、より好ましくは少なくとも７０％、さらにより好ましくは少なくとも８０％、なおより好ましくは少なくとも９０％、なおさらに好ましくは少なくとも９５％、なおより好ましくは少なくとも９７％、最も好ましくは少なくとも９９％の１−モノアシルグリセロール（重量による）を含む。
【００７１】
好適には、モノアシルグリセロールのアシル部分は、６個〜２４個の炭素原子を有する飽和もしくは不飽和のアシル基（好ましくは、アルカノイルもしくはアルケノイル基）である。好ましくは、モノアシルグリセロールのアシル部分は、８個〜１８個の炭素原子を有する飽和もしくは不飽和のアシル基（好ましくは、アルカノイルもしくはアルケノイル基）である。さらにより好ましくは、モノアシルグリセロールのアシル部分は、ｎ−デカノイル、ｎ−ドデカノイル、ｎ−テトラデカノイル、ｎ−ヘキサデカノイル、ｎ−オクタデカノイル、シス−オクタデカ−９−エノイル（オレイル）、シス，シス−９，１２−オクタデカジエノイル（リノレイル）またはシス，シス，シス−９，１２，１５−オクタデカトリエノイル（リノレニル）である。最も好ましくは、モノアシルグリセロールは、１−ｎ−デカノイル−グリセロールまたは１−ｎ−オクタデカノイル−グリセロールである。
【００７２】
モノアシルグリセロールは、本発明の化合物の調製の間、１個以上の保護基により保護され得る。好適な保護基の例は、それらの付加および除去の方法と共に、Ｇｒｅｅｎｅ  ａｎｄ  Ｗｕｔｓ，“Ｇｒｅｅｎｅ’ｓ  Ｐｒｏｔｅｃｔｉｖｅ  Ｇｒｏｕｐｓ  ｉｎ  Ｏｒｇａｎｉｃ  Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ”，４ｔｈ  Ｅｄｉｔｉｏｎ，ｐｕｂｌ．Ｗｉｌｅｙ，２００６に記載されている。特に好ましい保護基は、ベンジルである。
【００７３】
本発明の化合物を調製するために、モノアシルグリセロールは、活性化誘導体として存在し得る。本明細書において、モノアシルグリセロールに適用される場合、用語「活性化誘導体」とは、モノアシルグリセロールの１個以上（好ましくは１個のみ）のヒドロキシル基が脱離基に変換された誘導体を意味する。好適な脱離基の例としては、ハロゲン、アシルオキシ（ここで、アシルは上で定義され例示されている）およびアルキル−もしくはアリールスルホニルオキシ（例えば、ベンゼンスルホニルオキシまたはｐ−トルエンスルホニルオキシ）が挙げられる。好ましい脱離基は、ハロゲン、特に塩素である。
【００７４】
アミノもしくはＮ−アシルアミノ単糖部分の供給源
本発明の化合物におけるアミノもしくはＮ−アシルアミノ単糖部分の供給源は、それが１個以上のアミノもしくはＮ−アシルアミノ単糖部分を含有する限り、特に重要ではない。
【００７５】
アミノもしくはＮ−アシルアミノ単糖部分の供給源において、アミノ単糖部分のアシル化の程度は、０（すなわち、アミノ基は１つもアシル化されていない）から１（すなわち、全てのアミノ基がアシル化されている）まで可変である。好ましくは、アミノ単糖部分のアシル化の程度は、０．０５〜０．８の範囲であることが好ましい。
【００７６】
アミノもしくはＮ−アシルアミノ単糖部分のヒドロキシル基および／またはアミノ基は、本発明の化合物の調製の間、１個以上の保護基により保護され得る。好適な保護基の例は、それらの付加および除去の方法と共に、Ｇｒｅｅｎｅ  ａｎｄ  Ｗｕｔｓ，“Ｇｒｅｅｎｅ’ｓ  Ｐｒｏｔｅｃｔｉｖｅ  Ｇｒｏｕｐｓ  ｉｎ  Ｏｒｇａｎｉｃ  Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ”，４ｔｈ  Ｅｄｉｔｉｏｎ，ｐｕｂｌ．Ｗｉｌｅｙ，２００６に記載されている。特に好ましい保護基は、アセチルである。
【００７７】
本発明の化合物を調製するために、アミノもしくはＮ−アシルアミノ単糖部分の供給源は、活性化誘導体として存在し得る。本明細書において、アミノもしくはＮ−アシルアミノ単糖部分の供給源に適用される場合、用語「活性化誘導体」とは、アミノもしくはＮ−アシルアミノ単糖部分の供給源の１個以上（好ましくは１個のみ）のヒドロキシル基が脱離基に変換された誘導体を意味する。好適な脱離基の例としては、ハロゲン、アシルオキシ（ここで、アシルは上で定義され例示されている）およびアルキル−もしくはアリールスルホニルオキシ（例えば、ベンゼンスルホニルオキシ、ｐ−トルエンスルホニルオキシ）が挙げられる。好ましい脱離基は、ハロゲン、特に塩素である。
【００７８】
反応が酵素を使用して行われる場合、１個以上のアミノもしくはＮ−アシルアミノ単糖部分は、供給源分子の残部にグリコシド結合により結合しており、このグリコシド結合が、転移の過程の中で酵素により加水分解される。
【００７９】
１つの実施形態において、アミノもしくはＮ−アシルアミノ単糖の供給源が、グリコシド結合により一緒に連結された１個より多くのアミノもしくはＮ−アシルアミノ単糖部分を含む高次の（ｈｉｇｈｅｒ）アミノもしくはＮ−アシルアミノ糖（すなわち、二糖、オリゴ糖または多糖）であり、その高次のアミノもしくはＮ−アシルアミノ糖中の１個以上のグリコシド結合を酵素が作用して加水分解し、アミノもしくはＮ−アシルアミノ単糖部分をモノグリセリドに転移させることが好ましい。この点に関し、高次のアミノもしくはＮ−アシルアミノ糖を構成するアミノもしくはＮ−アシルアミノ単糖部分は、同じであっても異なっていてもよく、各々独立して、Ｄ型配置またはＬ型配置を有し得る。
【００８０】
高次のアミノもしくはＮ−アシルアミノ糖を構成するアミノもしくはＮ−アシルアミノ単糖部分は、各々独立して、アルドース部分またはケトース部分であり得、同じ数の炭素原子を有していても異なる数の炭素原子を有していてもよい。好適には、各アミノもしくはＮ−アシルアミノ単糖部分は、３個〜８個、好ましくは４個〜６個、より好ましくは５個〜６個の炭素原子を有し得る。
【００８１】
別の実施形態において、高次のアミノもしくはＮ−アシルアミノ糖を構成する単糖部分は、ヘキソース部分である。好ましくは、そのような高次の糖のヘキソース部分は、１個以上のアミノもしくはＮ−アシルアミノグルコース部分（特に、グルコサミンもしくはＮ−アセチルグルコサミン部分）を含む。１つの特に好ましい実施形態において、そのような高次の糖のヘキソース部分の全ては、アミノもしくはＮ−アシルアミノグルコース部分（特に、グルコサミンもしくはＮ−アセチルグルコサミン部分）である。
【００８２】
アミノもしくはＮ−アシルアミノ高次糖を構成するアミノもしくはＮ−アシルアミノ単糖部分は、グリコシド結合により一緒に連結されている。単糖部分がヘキソース部分である場合、グリコシド結合は、１−α，１’−αグリコシド結合、１，２’−グリコシド結合（これは、１−α−２’もしくは１−β−２’グリコシド結合であり得る）、１，３’−グリコシド結合（これは、１−α−３’もしくは１−β−３’−グリコシド結合であり得る）、１，４’−グリコシド結合（これは、１−α−４’もしくは１−β−４’−グリコシド結合であり得る）、１，６’−グリコシド結合（これは、１−α−６’もしくは１−β−６’−グリコシド結合であり得る）、またはそれらの任意の組み合わせであり得る。好ましくは、グリコシド結合は、１，４’−グリコシド結合、好ましくは１−β−４’−グリコシド結合である。
【００８３】
１つの実施形態において、高次のアミノもしくはＮ−アシルアミノ糖は、２個のアミノもしくはＮ−アシルアミノ単糖単位を含む（すなわち、アミノもしくはＮ−アシルアミノ二糖である）。そのようなアミノもしくはＮ−アシルアミノ二糖のアシル化の程度は、０（すなわち、いずれのアミノ単糖部分上のどちらのアミノ基もアシル化されていないアミノ二糖）から１（すなわち、全てのアミノ単糖部分上の両方のアミノ基がアシル化されているＮ−アシルアミノ二糖）まで可変である。好ましくは、アミノ二糖のアシル化の程度は、０．０５〜０．９５の範囲である。
【００８４】
好適なアミノもしくはＮ−アシルアミノ二糖の例としては、β−１，４−結合グルコサミン単位の二量体であるキトビオース、またはそのＮ−アシル誘導体、特にＮ−アセチルキトビオースが挙げられる。キトビオースのアシル化の程度は、０（すなわち、いずれのグルコサミン部分上のどちらのアミノ基もアシル化されていない）から１（すなわち、全てのグルコサミン部分上の両方のアミノ基がアシル化されている）まで可変である。１つの実施形態において、アシル化の程度は、０である。別の実施形態において、アシル化の程度は、１である。さらなる実施形態において、キトビオースのアシル化の程度は、０．０５〜０．９５の範囲である。
【００８５】
【化３】
2013517762.tif 000005
【００８６】
別の実施形態において、高次のアミノもしくはＮ−アシルアミノ糖は、３個〜１０個の単糖単位を含む（すなわち、アミノもしくはＮ−アシルアミノオリゴ糖である）か、またはグリコシド結合により一緒に連結された少なくとも１０個のより高次のアミノもしくはＮ−アシルアミノ単糖単位を含むアミノもしくはＮ−アシルアミノ多糖である。典型的に、そのようなアミノもしくはＮ−アシルアミノ多糖は、少なくとも４０個、例えば、少なくとも１００個（例えば、少なくとも２００個（少なくとも５００個、例えば、少なくとも１０００個（例えば、少なくとも５０００個、例えば、１００００個、例えば、少なくとも５００００個、例えば、１０００００個）を含む））のアミノもしくはＮ−アシルアミノ単糖単位を含む。
【００８７】
１つの実施形態において、アミノもしくはＮ−アシルアミノ多糖は、キチンを含む。キチンは、多糖であり；これは、Ｎ−アセチルグルコサミンの単位から合成される。これらの単位は、β−１，４−共有グリコシド結合（セルロースを構成するグルコース単位間の結合と同様）を形成する。
【００８８】
別の１つの実施形態において、アミノもしくはＮ−アシルアミノ多糖は、ランダムに分布したβ−（１−４）−結合Ｄ−グルコサミン（脱アセチル化単位）およびＮ−アセチル−Ｄ−グルコサミン（アセチル化単位）からなる線状多糖である、キトサンを含む。
【００８９】
好ましくは、アミノもしくはＮ−アシルアミノ単糖部分の供給源は、キトサン、キトビオース、またはそのうちの任意のものの、アシル基が１個〜６個の炭素原子を有する、Ｎ−アシル誘導体から選択される。より好ましくは、アミノもしくはＮ−アシルアミノ単糖部分の供給源は、キトサンもしくはキトビオース、またはそれらのうちのいずれかのＮ−アセチル誘導体から選択される。
【００９０】
単糖供給源
本発明の化合物がオリゴ糖鎖を含み、その鎖中の単糖部分のうちの少なくとも１個が非置換単糖部分である場合、そのような化合物は、概して、モノアシルグリセロール（またはその活性化誘導体）またはアミノ置換糖脂質（すなわち、標的化合物よりも１つ少ない単糖部分を有する本発明の化合物）を（非置換）単糖供給源と反応させて、この非置換単糖を鎖に付加することによって形成される。
【００９１】
本発明に従って転移されるべき単糖部分の供給源は、それが非置換単糖部分を含有する限り、特に重要ではない。本発明の化合物が化学合成により調製される場合、単糖部分の供給源は、上で説明され例示されるとおり、遊離単糖であり得る。しかしながら、本発明の化合物が酵素合成により調製される場合は、単糖部分は、供給源分子の残部にグリコシド結合により結合しており、このグリコシド結合が、転移の過程の中で酵素により加水分解される。
【００９２】
特に、本発明の化合物が酵素合成により調製される場合は、単糖の供給源が、グリコシド結合により一緒に連結された１個より多くの単糖部分を含む高次の糖（すなわち、二糖、オリゴ糖または多糖）であり、その高次の糖中の１個以上のグリコシド結合を酵素が作用して加水分解し、単糖を受容体分子に転移させることが好ましい。本実施形態において、高次の糖を構成する単糖部分は、同じであっても異なっていてもよく、各々独立して、Ｄ型配置またはＬ型配置を有し得る。
【００９３】
１つの実施形態において、高次の糖を構成する単糖部分は、各々独立して、アルドース部分またはケトース部分であり得、同じ数の炭素原子を有していても異なる数の炭素原子を有していてもよい。好適には、各単糖部分は、３個〜８個、好ましくは４個〜６個、より好ましくは５個〜６個の炭素原子を有し得る。
【００９４】
１つの実施形態において、高次の糖を構成する単糖部分は、ヘキソース部分であり、その例としては、グルコース、ガラクトース、アロース、アルトロース、マンノース、グロース、イドースおよびタロースなどのアルドヘキソース、ならびにフルクトースおよびソルボースなどのケトヘキソースが挙げられる。好ましくは、そのような高次の糖のヘキソース部分は、１個以上のグルコース部分を含む。１つの特に好ましい実施形態において、そのような高次の糖のヘキソース部分の全てが、グルコース部分である。
【００９５】
別の実施形態において、高次の糖を構成する単糖部分は、リボース、アラビノース、キシロースまたはリキソースなどのペントース部分である。好ましくは、そのような高次の糖のペントース部分は、アラビノースもしくはキシロース部分である。
【００９６】
高次の糖を構成する単糖部分は、グリコシド結合により一緒に連結されている。単糖部分がヘキソース部分である場合、グリコシド結合は、１−α，１’−αグリコシド結合、１，２’−グリコシド結合（これは、１−α−２’もしくは１’−β−２’グリコシド結合であり得る）、１，３’−グリコシド結合（これは、１−α−３’もしくは１−β−３’−グリコシド結合であり得る）、１，４’−グリコシド結合（これは、１−α−４’もしくは１−β−４’−グリコシド結合であり得る）、１，６’−グリコシド結合（これは、１−α−６’もしくは１−β−６’−グリコシド結合であり得る）、またはそれらの任意の組み合わせであり得る。
【００９７】
１つの実施形態において、高次の糖は、２個の単糖単位を含む（すなわち、二糖である）。好適な二糖の例としては、マルトース、イソマルトース、イソマルツロース、ラクトース、スクロース、セロビオース、ニゲロース、コージビオース、トレハロースおよびトレハルロースが挙げられる。
【００９８】
別の実施形態において、高次の糖は、鎖中に３個〜１０個の単糖単位を含み（すなわち、オリゴ糖であり）、これは、分岐であっても非分岐であってもよい。好ましくは、オリゴ糖は、３個〜８個、より好ましくは３個〜６個の単糖単位を含む。好適なオリゴ糖の例としては、マルトデキストリン、マルトトリオース、マルトテトラオース、マルトペンタオース、マルトヘキサオース、マルトヘプタオース、メレジトース、セロトリオース、セロテトラオース、セロペンタオース、セロヘキサオースおよびセロヘプタオースが挙げられる。
【００９９】
別の実施形態において、高次の糖は、グリコシド結合により一緒に連結された少なくとも１０個の単糖単位を含む、多糖である。典型的に、そのような多糖は、少なくとも４０個、例えば、少なくとも１００個（例えば、少なくとも２００個（少なくとも５００個、例えば、少なくとも１０００個（例えば、少なくとも５０００個、例えば、１００００個、例えば、少なくとも５００００個、例えば、１０００００個）を含む））の単糖単位を含む。
【０１００】
一部の実施形態において、多糖は、１０個〜５０００００個の単糖単位を含む。他の実施形態において、多糖は、１００個〜１０００個の単糖単位を含む。他の実施形態において、多糖は、１０００個〜１００００個の単糖単位を含む。他の実施形態において、多糖は、１００００個〜１０００００個の単糖単位を含む。一部の実施形態において、多糖は、４０個〜３０００個、好ましくは２００個〜２５００個の単糖単位を含む。
【０１０１】
そのような多糖の例としては、澱粉およびその誘導体（例えば、カチオン性もしくはアニオン性、酸化またはリン酸処理澱粉）、アミロース、アミロペクチン、グリコーゲン、セルロースまたはその誘導体（例えば、カルボキシメチルセルロース）、アルギン酸またはその塩もしくは誘導体、ポリデキストロース、ペクチン、プルラン、カラゲナン、ローカストビーンガムおよびグアーならびにそれらの誘導体（例えば、カチオン性もしくはアニオン性グアー）が挙げられる。
【０１０２】
１つの実施形態において、多糖は、澱粉を含む。澱粉は、グルコピラノース単位がα結合により結合しているグルコースポリマーである。これは、アミロースおよびアミロペクチンの混合物からなる。アミロースは、１，４’−α−グリコシド結合により一緒に結合された数百個のグルコース分子の直鎖からなる。これに対し、アミロペクチンは、数千個のグルコース単位でできた枝分れした分子であり、その主鎖は、１，４’−α−グリコシド結合を含むが、およそ２５個のグルコース単位ごとに１，６’−α−グリコシド分岐を有する。
【０１０３】
１つの実施形態において、多糖は、グリコーゲンを含む。グリコーゲンは、動物において見出される、グルコース残基の分岐鎖からなる多糖である。
【０１０４】
１つの実施形態において、多糖は、セルロースを含む。セルロースは、１，４’−β−グリコシド結合により一緒に結合された数千個のグルコース単位から形成されるポリマーである。
【０１０５】
単糖部分の好ましい供給源としては、スクロースおよびマルトースが挙げられる。
【０１０６】
酵素合成
１つの態様において、本発明の化合物は、トランスグリコシダーゼ酵素を使用して調製され得、この酵素は、アミノもしくはＮ−アシルアミノ単糖部分の供給源中のグリコシド結合の加水分解およびこの部分のモノグリセリド受容体分子への転移を触媒するものである。
【０１０７】
したがって、１つの実施形態において、本発明の化合物を調製する方法であって、モノアシルグリセロールであってそのアシル部分が３個〜４０個の炭素原子を有する飽和もしくは不飽和のアシル基であるモノアシルグリセロールを、アミノもしくはＮ−アシルアミノ単糖部分の供給源およびトランスグリコシダーゼ酵素により処理する工程を含む方法が提供される。
【０１０８】
本明細書において、用語「トランスグリコシダーゼ酵素」は、単糖部分（その最も広い態様または好ましい態様において、上で定義され例示されるとおりであり、特に非置換単糖部分および／またはアミノもしくはＮ−アシルアミノ単糖部分であるがこれに限定されない）を、１つの分子から別の分子に転移させることが可能な任意の酵素を対象として含むことが意図される。用語「トランスグルコシダーゼ」は、単糖部分がグルコース部分である場合に使用される。
【０１０９】
１つの実施形態において、トランスグリコシダーゼ酵素は、アミノグリコシルトランスフェラーゼ酵素である。本明細書において、用語「アミノグリコシルトランスフェラーゼ酵素」とは、好適なアミノもしくはＮ−アシルアミノ単糖供給源（上で定義され例示されるとおり）から受容体分子、好ましくはモノグリセリド（上で定義され例示されるとおり）への、アミノもしくはＮ−アシルアミノ単糖部分（上で定義され例示されるとおり）の転移を触媒することが可能な酵素を意味する。
【０１１０】
好適には、この酵素のトランスグリコシダーゼ活性は、酵素の全活性の少なくとも０．５％、好ましくは少なくとも２％、より好ましくは少なくとも５％を構成し得る。この酵素の残りの活性は、例えば、受容体基質が水である加水分解活性を実質的に含み得る。
【０１１１】
本発明において、酵素のトランスグリコシダーゼ活性（特にアミノグリコシルトランスフェラーゼ活性）百分率は、遊離単糖（具体的には、アミノもしくはＮ−アシルアミノ単糖）のモル割合と、単糖（具体的には、アミノもしくはＮ−アシルアミノ単糖）がモノグリセリドに結合している本発明の化合物の割合とを、反応の完了後に測定することによって計算され得る。遊離単糖（具体的には、アミノもしくはＮ−アシルアミノ単糖）は、供給源分子の酵素加水分解の結果として生じるのに対して、本発明の化合物は、供給源分子からモノグリセリドへの単糖（具体的には、アミノもしくはＮ−アシルアミノ単糖）の酵素転移の結果として生じる。
【０１１２】
典型的なトランスグリコシダーゼ酵素触媒反応は、以下の反応スキーム１に従う。
【０１１３】
【化４】
2013517762.tif 000006
【０１１４】
スキーム１において、Ｒ’は、上で定義され例示されるとおりのアシル基のヒドロカルビル部分である。
【０１１５】
好適には、トランスグリコシダーゼ酵素は、酵素分類（Ｅｎｚｙｍｅ  Ｃｌａｓｓｉｆｉｃａｔｉｏｎ：Ｅ．Ｃ．）３．２．１．２１またはＥ．Ｃ３．２．１．７４に分類される。
【０１１６】
１つの実施形態において、トランスグリコシダーゼ酵素は、β−グルコシダーゼ酵素である。β−グルコシダーゼは、２つのグルコース部分（例えば、二糖セロビオース）を結合しているβ１−＞４結合に作用する、グルコシダーゼ酵素である。これは、グルコースの放出を伴う、β−Ｄ−グルコシド中の末端非還元性残基の加水分解を触媒する。
【０１１７】
驚くべきことに、本発明によれば、本発明において使用されるβ−グルコシダーゼ酵素がトランスグリコシダーゼ活性（上記のとおり）、特にアミノグリコシルトランスフェラーゼ活性をも示すことが見出された。これは、β−グルコシダーゼ酵素の主要活性が加水分解活性であるので、予想されなかったことであろう。
【０１１８】
典型的に、β−グルコシダーゼ酵素のトランスグリコシダーゼ活性は、酵素の全活性の少なくとも０．５％、好ましくは少なくとも２％、より好ましくは少なくとも５％である。
【０１１９】
アミノ酸配列
本明細書に定義されるとおりの、脂質にアミノもしくはＮ−アシルアミノ単糖部分を転移させることが可能なトランスグリコシダーゼ酵素のアミノ酸配列、特に、以下に定義される配列番号１のアミノ酸配列を有する、またはそれと少なくとも５０％、好ましくは少なくとも５５％（例えば、少なくとも６０％、少なくとも６５％、少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％または少なくとも９９％）の配列同一性を有するトランスグリコシダーゼ酵素が、本発明において使用され得る。
【０１２０】
本明細書で使用される場合、用語「アミノ酸配列」は、用語「ポリペプチド」および／または用語「タンパク質」と同義である。用語「アミノ酸配列」は、場合によっては用語「ペプチド」と同義である。用語「アミノ酸配列」は、場合によっては用語「酵素」と同義である。
【０１２１】
アミノ酸配列は、好適な供給源から調製／単離され得るか、またはアミノ酸配列は、合成により作製され得るか、またはアミノ酸配列は、組換えＤＮＡ技術の使用により調製され得る。
【０１２２】
本発明において使用されるタンパク質は、他のタンパク質、特に他の酵素（例えば、アミラーゼ、プロテアーゼまたはリパーゼ）と共に使用され得る。したがって、本発明はまた、酵素の組み合わせを含む組成物をも使用し得、この組み合わせは、本発明において使用されるトランスグリコシラーゼ酵素と、例えば本明細書に記載されるような別のトランスグリコシダーゼ酵素であり得る、別の酵素とを含む。本態様は、後の節で述べられる。
【０１２３】
配列同一性／配列相同性／変異体／相同体／誘導体
本発明はまた、本明細書で定義される１つもしくは複数のアミノ酸配列と、または本明細書で定義される特定の特性を有するポリペプチドと、ある程度の配列同一性または配列相同性を有するポリペプチドの使用を包含する。本発明は、特に、以下に定義される配列番号１とある程度の配列同一性を有するペプチドまたはその相同体を包含する。本明細書において、用語「相同体」とは、対象アミノ酸配列または対象ヌクレオチド配列と配列同一性を有する実体を意味する。本明細書において、用語「相同性」は、「配列同一性」と同等として扱われ得る。
【０１２４】
相同なアミノ酸配列および／またはヌクレオチド配列は、トランスグリコシダーゼ酵素の機能的活性を保持しかつ／またはトランスグリコシダーゼ酵素の活性を増強するポリペプチドを、提供および／またはコードするはずである。
【０１２５】
本文脈において、相同配列は、対象配列と、少なくとも６０％、例えば、少なくとも６５％、少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％または少なくとも９９％同一であり得るアミノ酸配列を含むものと解釈される。典型的に、相同体は、対象アミノ酸配列と同一の活性部位などを含む。相同性は、類似性（すなわち、類似の化学的特性／機能を有するアミノ酸残基）の観点からも考えられ得るが、本発明の文脈においては、配列同一性の観点から相同性を表すことが好ましい。
【０１２６】
配列同一性比較は、目で、またはより一般的には、容易に入手可能な配列比較プログラムの助けを借りて行われ得る。こうした市販のコンピュータプログラムは、複雑な比較アルゴリズムを使用して、２つ以上の配列の間の１つもしくは複数の差異に繋がり得た進化的事象を最もよく反映するその２つ以上の配列をアラインメントする。したがって、これらのアルゴリズムは、同一または類似のアミノ酸のアラインメントに対して加点（ｒｅｗａｒｄｉｎｇ）し、ギャップの挿入、ギャップ伸長および非類似アミノ酸のアラインメントに対して減点（ｐｅｎａｌｉｓｉｎｇ）する評点システムを用いて動作する。比較アルゴリズムの評点システムは、以下を含む：
ｉ）１つのギャップが挿入される毎のペナルティスコアの割り当て（ギャップペナルティスコア）、
ｉｉ）既存のギャップが追加位置により伸長される毎のペナルティスコアの割り当て（伸長ペナルティスコア）、
ｉｉｉ）同一アミノ酸のアラインメントに対する高スコアの割り当て、および
ｉｖ）非同一アミノ酸のアラインメントに対する様々なスコアの割り当て。
【０１２７】
多くのアラインメントプログラムは、ギャップペナルティの修正を可能にする。しかしながら、そのような配列比較用ソフトウェアを使用する場合、デフォルト値を使用することが好ましい。
【０１２８】
非同一アミノ酸のアラインメントに付与されるスコアは、置換マトリックスとも呼ばれる評点マトリックスに従って割り当てられる。そのような置換マトリックスにおいて与えられるスコアは、あるアミノ酸が進化の中で別のアミノ酸に置換される可能性が様々であり、置換されるべきアミノ酸の物理的／化学的性質に依存するという事実を反映している。例えば、極性アミノ酸が別の極性アミノ酸に置換される可能性は、疎水性アミノ酸に置換されるのに比べて高い。したがって、評点マトリックスは、同一のアミノ酸には最も高いスコアを割り当て、非同一であるが類似したアミノ酸にはそれより低いスコアを割り当て、そして非同一非類似のアミノ酸にはそれよりさらに低いスコアを割り当てるであろう。最もよく使用されている評点マトリックスは、ＰＡＭマトリックス（Ｄａｙｈｏｆｆ  ｅｔ  ａｌ．（１９７８）、Ｊｏｎｅｓ  ｅｔ  ａｌ．（１９９２））、ＢＬＯＳＵＭマトリックス（ＨｅｎｉｋｏｆｆおよびＨｅｎｉｋｏｆｆ（１９９２））およびＧｏｎｎｅｔマトリックス（Ｇｏｎｎｅｔ  ｅｔ  ａｌ．（１９９２））である。
【０１２９】
そのようなアラインメントを実施するのに好適なコンピュータプログラムとしては、Ｖｅｃｔｏｒ  ＮＴＩ（Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ  Ｃｏｒｐ．）ならびにＣｌｕｓｔａｌＶ、ＣｌｕｓｔａｌＷおよびＣｌｕｓｔａｌＷ２プログラム（Ｈｉｇｇｉｎｓ  ＤＧ  ＆  Ｓｈａｒｐ  ＰＭ（１９８８）、Ｈｉｇｇｉｎｓ  ｅｔ  ａｌ．（１９９２）、Ｔｈｏｍｐｓｏｎ  ｅｔ  ａｌ．（１９９４）、Ｌａｒｋｉｎ  ｅｔ  ａｌ．（２００７）が挙げられるが、これらに限定されない。種々のアラインメントツールの品揃えが、ｗｗｗ．ｅｘｐａｓｙ．ｏｒｇ．のＥｘＰＡＳｙ  Ｐｒｏｔｅｏｍｉｃｓサーバーから利用可能である。配列アラインメントを実行し得るソフトウェアの別の例は、現在ｈｔｔｐ：／／ｗｗｗ．ｎｃｂｉ．ｎｌｍ．ｎｉｈ．ｇｏｖ／で見出され得るＮａｔｉｏｎａｌ  Ｃｅｎｔｅｒ  ｆｏｒ  Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ  Ｉｎｆｏｒｍａｔｉｏｎのウェブページから入手可能であり、Ａｌｔｓｃｈｕｌ  ｅｔ  ａｌ．Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．（１９９０）２１５；４０３−４１０に最初に記載された、ＢＬＡＳＴ（Ｂａｓｉｃ  Ｌｏｃａｌ  Ａｌｉｇｎｍｅｎｔ  Ｓｅａｒｃｈ  Ｔｏｏｌ）である。配列アラインメントを実行し得るソフトウェアのさらなる例は、Ｔａｔｕｓｏｖａ  ａｎｄ  Ｍａｄｄｅｎ，ＦＥＭＳ  Ｍｉｃｒｏｂｉｏｌ．Ｌｅｔｔ．（１９９９）１７４，２４７−２５０に最初に記載された、ＢＬＡＳＴ２である。
【０１３０】
ソフトウェアがアラインメントを生成すると、％類似性および％配列同一性を計算することができる。このソフトウェアは、典型的に、配列比較の一部としてこれを行い、数値結果を生成する。
【０１３１】
１つの実施形態において、配列アラインメントを実施するためにはＣｌｕｓｔａｌＷソフトウェアを使用することが好ましい。好ましくは、ＣｌｕｓｔａｌＷでのアラインメントは、以下のペアワイズアラインメントのためのパラメータを用いて実施される。
【０１３２】
【表１】
2013517762.tif 000007
【０１３３】
ＣｌｕｓｔａｌＷ２は、例えば、ＥＭＢＬ−ＥＢＩウェブページｗｗｗ．ｅｂｉ．ａｃ．ｕｋのｔｏｏｌｓ−ｓｅｑｕｅｎｃｅ  ａｎａｌｙｓｉｓ−ＣｌｕｓｔａｌＷ２の項目下で、Ｅｕｒｏｐｅａｎ  Ｂｉｏｉｎｆｏｒｍａｔｉｃｓ  Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅにより、インターネット上で提供されている。現在のＣｌｕｓｔａｌＷ２ツールの正確なアドレスは、ｗｗｗ．ｅｂｉ．ａｃ．ｕｋ／Ｔｏｏｌｓ／ｃｌｕｓｔａｌｗ２である。
【０１３４】
したがって、本発明はまた、本明細書において定義されるとおりのタンパク質の任意のアミノ酸配列の変異体、相同体および誘導体、特に下記に定義される配列番号１の変異体、相同体および誘導体の使用をも包含する。
【０１３５】
配列（特に、配列番号１）はまた、サイレントな変化を生じ、機能的に等価な物質をもたらす、アミノ酸残基の欠失、挿入または置換を有し得る。意図的なアミノ酸置換は、その物質の二次的結合活性が保持される限り、残基の極性、電荷、溶解性、疎水性、親水性、および／または両親媒性における類似性に基づいてなされ得る。例えば、負に荷電したアミノ酸としては、アスパラギン酸およびグルタミン酸が挙げられ；正に荷電したアミノ酸としては、リジンおよびアルギニンが挙げられ；そして類似の親水性値を有する非荷電の極性先端基をもつアミノ酸としては、ロイシン、イソロイシン、バリン、グリシン、アラニン、アスパラギン、グルタミン、セリン、スレオニン、フェニルアラニン、およびチロシンが挙げられる。
【０１３６】
本発明はまた、行われ得る保存的置換（置換および置き換えは共に、本明細書において、既存のアミノ酸残基と代替残基との相互交換を意味するのに使用される）、すなわち、類似のものと類似のものとの置換（例えば、塩基性のものと塩基性のものとの置換、酸性のものと酸性のものとの置換、極性のものと極性のものとの置換など）をも包含する。非保存的置換（すなわち、あるクラスの残基から別のクラスの残基への置換、あるいは非天然アミノ酸（例えば、オルニチン（以下、Ｚと称する）、ジアミノ酪酸オルニチン（以下、Ｂと称する）、ノルロイシンオルニチン（以下、Ｏと称する）、ピリイルアラニン、チエニルアラニン、ナフチルアラニンおよびフェニルグリシン）を含めることを伴う置換）もまた行われ得る。
【０１３７】
なされ得る保存的置換は、例えば、塩基性アミノ酸（アルギニン、リジンおよびヒスチジン）、酸性アミノ酸（グルタミン酸およびアスパラギン酸）、脂肪族アミノ酸（アラニン、バリン、ロイシン、イソロイシン）、極性アミノ酸（グルタミン、アスパラギン、セリン、スレオニン）、芳香族アミノ酸（フェニルアラニン、トリプトファンおよびチロシン）、ヒドロキシルアミノ酸（セリン、スレオニン）、大型アミノ酸（フェニルアラニンおよびトリプトファン）および小型アミノ酸（グリシン、アラニン）の群内である。
【０１３８】
置換はまた、非天然アミノ酸（α＊およびα二置換＊アミノ酸、Ｎ−アルキルアミノ酸＊、乳酸＊、天然アミノ酸のハロゲン化物誘導体（例えば、トリフルオロチロシン＊、ｐ−Ｃｌ−フェニルアラニン＊、ｐ−Ｂｒ−フェニルアラニン＊、ｐ−Ｉ−フェニルアラニン＊）、Ｌ−アリル−グリシン＊、β−アラニン＊、Ｌ−α−アミノ酪酸＊、Ｌ−γ−アミノ酪酸＊、Ｌ−α−アミノイソ酪酸＊、Ｌ−ε−アミノカプロン酸＃、７−アミノヘプタン酸＊、Ｌ−メチオニンスルホン＃＊、Ｌ−ノルロイシン＊、Ｌ−ノルバリン＊、ｐ−ニトロ−Ｌ−フェニルアラニン＊、Ｌ−ヒドロキシプロリン＃、Ｌ−チオプロリン＊、フェニルアラニン（Ｐｈｅ）のメチル誘導体（例えば、４−メチル−Ｐｈｅ＊、ペンタメチル−Ｐｈｅ＊）、Ｌ−Ｐｈｅ（４−アミノ）＃、Ｌ−Ｔｙｒ（メチル）＊、Ｌ−Ｐｈｅ（４−イソプロピル）＊、Ｌ−Ｔｉｃ（１，２，３，４−テトラヒドロイソキノリン−３−カルボキシル酸）＊、Ｌ−ジアミノプロピオン酸＃およびＬ−Ｐｈｅ（４−ベンジル）＊を含む）によってもなされ得る。上記の（相同的または非保存的置換に関する）説明では、記号＊は誘導体の疎水性を示すのに利用されているのに対して、＃は誘導体の親水性を示すのに利用されており、＃＊は両親媒性を示している。
【０１３９】
変異体アミノ酸配列は、配列の任意の２つのアミノ酸残基の間に挿入され得る好適なスペーサー基（アミノ酸スペーサー（例えば、グリシンもしくはβ−アラニン残基）の他に、アルキル基（例えば、メチル、エチルもしくはプロピル基）を含む）を含み得る。変異のさらなる形態は、ペプトイド形態の１個以上のアミノ酸残基の存在を含んでおり、当業者には十分に理解されるであろう。疑義を避けるために述べると、「ペプトイド形態」は、α−炭素置換基がα−炭素ではなく残基の窒素原子上にある変異体アミノ酸残基をいうのに使用される。ペプトイド形態のペプチドを調製するための方法は、当該技術分野において、例えば、Ｓｉｍｏｎ  ＲＪ  ｅｔ  ａｌ．（１９９２），Ｈｏｒｗｅｌｌ  ＤＣ．（１９９５）において知られている。
【０１４０】
精製
１つの態様において、本発明において使用される配列は、好ましくは、精製された形態である。用語「精製（された）」とは、所与の成分が高いレベルで存在することを意味する。この成分は、望ましくは、組成物中に存在する主活性成分である。
【０１４１】
量／濃度
本発明のグリコシル化方法において必要とされるトランスグリコシダーゼの量は、特に限定されない。
【０１４２】
１つの実施形態において、本発明の酵素転移方法は、有効量のトランスグリコシダーゼ酵素を必要とする。本明細書において、用語「有効量」とは、測定可能な量のアミノもしくはＮ−アシルアミノ単糖部分をモノグリセリド分子に転移させることが可能なトランスグリコシダーゼ酵素の量を意味する。
【０１４３】
脂質受容体分子に転移されたアミノもしくはＮ−アシルアミノ単糖部分の量は、液体クロマトグラフィ−質量分析（ＬＣ−ＭＳ）を使用して測定され得る。
【０１４４】
例えば、アミノもしくはＮ−アシルアミノ単糖供給源の量の減少または反応混合物中の生成物の量の増加が、反応の間の異なる時点で測定され得る。
【０１４５】
トランスグリコシダーゼ酵素は、アミノもしくはＮ−アシルアミノ単糖部分をモノグリセリドへと転移させるという上記の必要とされる機能をそれが果たすことを可能にする、任意の濃度で存在し得る。
【０１４６】
１つの実施形態において、トランスグリコシダーゼは、モノグリセリド受容体１グラム当たり１〜１０００単位のトランスグリコシダーゼ活性（Ｕ）、好ましくは２〜４００Ｕ、最も好ましくは５〜２００Ｕの濃度で存在する。
【０１４７】
１つの実施形態において、トランスグリコシダーゼは、モノグリセリド受容体１グラム当たり０．０００３３〜０．３３ｇ、好ましくは０．０００６７〜０．１３ｇ、最も好ましくは０．００１７〜０．０６７ｇの濃度で存在する。
【０１４８】
トランスグリコシダーゼ酵素がβ−グルコシダーゼ酵素である場合、トランスグリコシダーゼ活性は、そのβ−グルコシダーゼ活性を参照して測定され得る。β−グルコシダーゼ活性の１単位は、アッセイ条件（ｐＨ４．８および５０℃）下で、毎分１μｍｏｌのｐ−ニトロフェノールをｐ−ニトロフェニルβ−Ｄ−グルコピラノシドから生成する酵素量として定義される。次いで、必要とされるトランスグリコシダーゼ活性が、上で言及されたトランスグリコシダーゼ活性および加水分解活性の割合に基づき（全活性に対する％として）計算され得る。
【０１４９】
１つの実施形態において、トランスグリコシダーゼ酵素は、真菌由来のものであるか、または真菌由来のトランスグリコシダーゼ酵素と、少なくとも５０％、好ましくは少なくとも５５％（例えば、少なくとも６０％、少なくとも６５％、少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、または少なくとも９９％）の配列同一性を有する。
【０１５０】
好ましくは、トランスグリコシダーゼ酵素は、トリコデルマ属種（Ｔｒｉｃｈｏｄｅｒｍａ  ｓｐｅｃｉｅｓ）に由来するか、またはトリコデルマ属種（Ｔｒｉｃｈｏｄｅｒｍａ  ｓｐｅｃｉｅｓ）由来のトランスグリコシダーゼ酵素と少なくとも５０％、好ましくは少なくとも５５％（例えば、少なくとも６０％、少なくとも６５％、少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、または少なくとも９９％）の配列同一性を有する。
【０１５１】
特に好ましい実施形態において、トランスグリコシダーゼ酵素は、トリコデルマ・レエセイ（Ｔｒｉｃｈｏｄｅｒｍａ  ｒｅｅｓｅｉ）（配列番号１）であるか、それと少なくとも５０％、好ましくは少なくとも５５％（例えば、少なくとも６０％、少なくとも６５％、少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、または少なくとも９９％）の配列同一性を有する。
【０１５２】
配列番号１の配列を有する酵素は、配列番号２の配列を有する成熟酵素のアミノ酸３２〜７４４に相当し、最初の３１個のアミノ酸は、シグナルペプチドを構成する。したがって、本明細書中での配列番号１への言及はまた、配列番号２のアミノ酸３２〜７４４を有するペプチド、またはそれと少なくとも６０％、少なくとも６５％、少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％もしくは少なくとも９９％の配列同一性を有するペプチドをも意味するとも解され得る。
【０１５３】
酵素組み合わせ
トランスグリコシダーゼ酵素（特に、アミノグリコシルトランスフェラーゼ酵素）は、１つ以上のさらなる活性剤と組み合わせて、本発明に従って使用され得る。そのような組合せは、組成物（特に、食料）中で一緒に使用される場合に、相乗作用を含む利点を提供し得る。
【０１５４】
特に、トランスグリコシダーゼ酵素（特に、アミノグリコシルトランスフェラーゼ酵素）は、活性剤として１種以上のさらなる酵素と組み合わせて、本発明に従って使用され得る。そのような組み合わせは、組成物（特に、食料）中で一緒に使用される場合に、相乗作用を含む利点を提供し得る。
【０１５５】
１つの実施形態において、そのさらなる酵素は、別のトランスグリコシダーゼ酵素（特に、さらなるアミノグリコシルトランスフェラーゼ酵素）であり、したがって、２つ（またはそれ以上）の異なるトランスグリコシダーゼ（特に、アミノグリコシルトランスフェラーゼ）酵素が、組み合わされて使用される。理論に拘束されることを望むものではないが、ある１つのアミノグリコシルトランスフェラーゼは、１個のアミノもしくはＮ−アシルアミノ単糖部分の、モノグリセリド受容体への転移を触媒し得、別のトランスグリコシダーゼ（例えば、アミノグリコシルトランスフェラーゼ）は、結果として生じるアミノもしくはＮ−アシルアミノグリコシルモノグリセリド上のアミノもしくはＮ−アシルアミノ単糖部分への転移を触媒し、それにより、そのモノグリセリド上のグルカン鎖を伸長し得ることが想定される。
【０１５６】
１つの実施形態において、さらなる酵素は、グリコシダーゼ（Ｅ．Ｃ．３．２．１）である。理論に拘束されることを望むものではないが、グリコシダーゼと本発明のトランスグリコシダーゼ酵素とを組み合わせることは、グリコシダーゼがより長鎖の高次の糖のグリコシド結合を加水分解してより短鎖の高次の糖（特に、二糖およびオリゴ糖）にすることが可能であり、次いで、その単糖部分が、モノグリセリドまたはグリコシルモノグリセリド受容体へと、そのようなより長鎖の高次の糖からよりも容易に転移され得るという点で、特に有利であり得ることが想定される。グリコシダーゼは、α−グリコシダーゼまたはβ−グリコシダーゼであり得る。特に、グリコシダーゼは、アミラーゼ（例えば、α−アミラーゼ（Ｅ．Ｃ．３．２．１．１）またはβ−アミラーゼ（Ｅ．Ｃ．３．２．１．２））を含み得る。そのようなアミラーゼ酵素は、澱粉をより短鎖のオリゴ糖（例えば、マルトース）へと加水分解することが可能であり、次いで、グルコース部分が、マルトースからモノグリセリドまたはグリコシルモノグリセリドへと、元の澱粉分子からよりも容易に転移され得る。
【０１５７】
１つの実施形態において、さらなる酵素は、ヘキソシルトランスフェラーゼ（Ｅ．Ｃ．２．４．１）である。理論に拘束されることを望むものではないが、ヘキソシルトランスフェラーゼと本発明のトランスグリコシダーゼ酵素とを組み合わせることは、ヘキソシルトランスフェラーゼが、本発明のトランスグリコシダーゼ酵素が概してそれに対して不活性である化合物から単糖部分（例えば、アミノもしくはＮ−アシルアミノ単糖部分）を転移させて、本発明のトランスグリコシダーゼ酵素がそれに作用して単糖部分をモノグリセリドまたはグリコシルモノグリセリドへと転移させ得る他の化合物（例えば、単糖または高次の糖（特に、二糖およびオリゴ糖））を形成することが可能であるという点で、特に有利であり得ることが想定される。また、理論に拘束されることを望むものではないが、グリコシルトランスフェラーゼおよび他のヘキソシルトランスフェラーゼが、１個以上の単糖部分を、モノグリセリドもしくはグリコシルモノグリセリド上に既に存在するかまたは先に本発明のトランスグリコシダーゼによってモノグリセリドもしくはグリコシルモノグリセリドに転移された、１個もしくは複数個の単糖部分に転移させ、それにより、モノグリセリド上のグルカン鎖を伸長し得ることが想定される。
【０１５８】
別の実施形態において、さらなる酵素は、カルボン酸エステルヒドロラーゼ（Ｅ．Ｃ．３．１．１）である。理論に拘束されることを望むものではないが、カルボン酸エステルヒドロラーゼと本発明のトランスグリコシダーゼ酵素とを組み合わせることは、カルボン酸エステルヒドロラーゼが、トリグリセリド（これには単糖部分を受容するのに必要な自由ＯＨ基がない）を本発明における受容体分子として機能し得るモノグリセリドへと部分的に加水分解することが可能であるという点で、特に有利であり得ることが想定される。特に、カルボン酸エステルヒドロラーゼは、カルボキシルエステラーゼ（Ｅ．Ｃ．３．１．１．１）を含み得る。
【０１５９】
本発明におけるトランスグリコシダーゼとの組み合わせに好適な酵素のさらなるクラスの例としては、オキシダーゼ（Ｅ．Ｃ．１．１．３）およびＯ−アシルトランスフェラーゼ（特に、Ｅ．Ｃ．２．３．１．４３に分類されるもの）が挙げられる。
【０１６０】
化学合成−一般
式（Ｉ）の化合物は、以下の一般スキーム２および３に従って作製され得る。
【０１６１】
【化５】
2013517762.tif 000008
【０１６２】
スキーム２において、式（Ｉ’）の化合物は、単一のアミノ単糖部分のみをグリセロー
ル単位に結合させた式（Ｉ）の化合物である。
Ｒ’は、アシル基（上で定義され例示されるとおり）のヒドロカルビル部分であり；
Ｐ１は、アミノ保護基であり、その例は、上で参照されたＧｒｅｅｎｅ  ＆  Ｗｕｔｓ（２００６）に記載されており、とりわけ、１個〜６個の炭素原子を有するアシル基、特に、アセチルであり；
Ｐ２は、ヒドロキシ保護基であり、とりわけ、１個〜６個の炭素原子を有するアシル基、特に、アセチルであり；
Ｐ３は、ヒドロキシ保護基であり、その例は、上で参照されたＧｒｅｅｎｅ  ＆  Ｗｕｔｓ（２００６）に記載されており、とりわけ、ベンジルであり；
ＬＧ１は、脱離基であり、例えば、ハロゲン、１個〜６個の炭素原子を有するアルコキシ基、または１個〜６個の炭素原子を有するアシルオキシ基であり、とりわけ、ハロゲン、特に、塩素であり；そして
ＬＧ２は、脱離基であり、例えば、ハロゲン、１個〜６個の炭素原子を有するアルコキシ基、または１個〜６個の炭素原子を有するアシルオキシ基であり、とりわけ、ハロゲン、特に、塩素である。
【０１６３】
工程（ａ）：脱離基へのアノマーヒドロキシル基の同時変換を伴う非アノマーヒドロキシル基の保護は、例えば“Ｂｅｓｔ  Ｓｙｎｔｈｅｔｉｃ  Ｍｅｔｈｏｄｓ：Ｃａｒｂｏｈｙｄｒａｔｅｓ”Ｅｌｓｅｖｉｅｒ  Ｓｃｉｅｎｃｅ  Ｌｔｄ．２００３，ｐｐ６９−８０に記載されるような、標準的な方法によって行われ得る。典型的に、試薬Ｐ２−ＬＧ１は、酸塩化物、とりわけ、塩化アセチルである。
【０１６４】
工程（ｂ）：式（ＩＩＩ）の保護されたアミノ糖と式（ＩＶ）の保護されたグリセロールとのカップリングは、酸の存在下で行われ得、この酸は、ブレンステッド酸（例えば、強鉱酸）またはルイス酸（例えば、ＺｎＣｌ２）であり得る。
【０１６５】
工程（ｃ）：式（ＶＩ）の保護された化合物を提供する式（Ｖ）の化合物のアシル化は、式Ｒ−Ｃ（＝Ｏ）−ＬＧ２（例えば、酸塩化物または酸無水物）のアシル化剤を用いて達成され得る。
【０１６６】
工程（ｄ）および（ｅ）：式（ＶＩ）の化合物の脱保護は、標準的な方法（例えば、上で参照されたＧｒｅｅｎｅ  ＆  Ｗｕｔｓ（２００６）に記載されている方法）を使用して行われ得る。Ｐ１がアシルである場合、脱保護は、基Ｐ２だけが除去されて式（Ｉ）のＮ−アシルアミノ化合物が得られるように行われ得る。Ｐ２がアシルである場合の典型的な脱保護剤は、ヒドラジンである。Ｐ３がベンジルである場合の典型的な脱保護剤は、金属触媒（例えば、パラジウム）の存在下で水素である。
【０１６７】
【化６】
2013517762.tif 000009
【０１６８】
スキーム３において：
Ｒ’は、スキーム２で定義されたとおりであり；
Ｒ’’は、ＨまたはＰ３であり、ここでＰ３は、スキーム２で定義されたとおりであり；
Ｐ４は、ヒドロキシ基およびアミノ基の両方を保護することが可能な基であり、その例は、上で参照されたＧｒｅｅｎｅ  ＆  Ｗｕｔｓ（２００６）に記載されており、とりわけ、アセチルであり；そして
ＬＧ３は、脱離基であり、例えば、ハロゲンまたは１個〜６個の炭素原子を有するアシルオキシ基であり、特に、アセチルオキシである。
【０１６９】
工程（ａ）：脱離基へのアノマーヒドロキシル基の同時変換を伴う式（ＶＩＩ）のアミノ糖の非アノマーヒドロキシル基およびアミノ基の保護は、例えば“Ｂｅｓｔ  Ｓｙｎｔｈｅｔｉｃ  Ｍｅｔｈｏｄｓ：Ｃａｒｂｏｈｙｄｒａｔｅｓ”Ｅｌｓｅｖｉｅｒ  Ｓｃｉｅｎｃｅ  Ｌｔｄ．２００３，ｐｐ６９−８０に記載されるような、標準的な方法によって行われ得る。典型的に、試薬Ｐ４−ＬＧ３は、酸無水物であり、とりわけ、無水酢酸である。
【０１７０】
工程（ｂ）：式（ＶＩＩＩ）の保護されたアミノ糖と式（ＩＸ）の保護されたモノアシルグリセロールとのカップリングは、酸触媒（例えば、強鉱酸）の存在下で行われ得る。典型的な触媒は、シリカ上に担持されたＨ２ＳＯ４である。
【０１７１】
工程（ｃ）および（ｄ）：式（Ｘ）の化合物の脱保護は、例えば上で参照されたＧｒｅｅｎｅ  ＆  Ｗｕｔｓ（２００６）に記載されるような、標準的な方法を使用して行われ得る。Ｐ４がアシルである場合の典型的な脱保護剤は、ヒドラジンである。Ｐ３がベンジルである場合の典型的な脱保護剤は、金属触媒（例えば、パラジウム）の存在下で水素である。
【産業上の利用可能性】
【０１７２】
本発明の化合物は、多くの用途における、特に、乳化剤および／または界面活性剤として、ならびに抗菌剤としての、使用を見出す。
【０１７３】
特に、本発明の化合物は、家庭内ケアにおいて洗剤としての用途を見出す、生分解性の天然のカチオン性界面活性剤である。本発明の化合物はまた、様々な細菌（グラム陰性およびグラム陽性の両方）ならびにカビおよび酵母に対して抗菌特性を示す。本発明の化合物は、熱可塑性プラスチック（押出物およびフィルムを含む）において界面活性抗菌効果を有し、パーソナルケア製品（一般用（ＯＴＣ）クリームを含む）における抗菌薬および乳化促進物質としての用途を見出す。
【０１７４】
食料
本発明の化合物は、食料もしくは飼料中に組み込まれ得る、かつ／または食料もしくは飼料の調製において使用され得る。用語「食料」とは、本明細書で使用される場合、ヒトおよび／または動物の消費に適した物質を意味する。用語「飼料」とは、本明細書で使用される場合、特に、動物の消費に適した物質をいう。
【０１７５】
好適には、用語「食料」とは、本明細書で使用される場合、消費のための準備が整った形態の食料を意味し得る。あるいは、またはさらには、他方において、用語食料は、本明細書で使用される場合、食料の調製において使用される１つ以上の食材を意味し得る。
【０１７６】
食料は、用途および／または利用形態および／または投与形態に依存して、溶液の形で、または固体として、存在し得る。
【０１７７】
食品（例えば、機能性食品）として、またはその調製において使用される場合、本発明の化合物は、１つ以上の、栄養学的に受容可能なキャリア、栄養学的に受容可能な希釈剤、栄養学的に受容可能な賦形剤、栄養学的に受容可能なアジュバント、栄養学的に活性な成分と共に使用され得る。
【０１７８】
好ましい態様において、本発明は、本発明の化合物を含む食料（上で定義されるとおり）であって、以下：卵、卵ベースの製品（マヨネーズ、サラダドレッシング、ソース、アイスクリーム、卵粉、改質卵黄およびそれらから製造された製品が挙げられるが、これらに限定されない）；焼いた品物（パン、ケーキ、甘い生地の製品、積層生地、液状バッター、マフィン、ドーナツ、ビスケット、クラッカーおよびクッキーを含む）；菓子（チョコレート、キャンディー、キャラメル、ハルバ、ガム（無糖および砂糖入りガム、風船ガム、ソフト風船ガム、チューインガムを含む）およびプディングを含む）；冷凍製品（シャーベットを含む）、好ましくは、冷凍乳製品（アイスクリームおよびアイスミルクを含む）；乳製品（チーズ、バター、ミルク、コーヒークリーム、ホイップクリーム、カスタードクリーム、乳飲料およびヨーグルトを含む）；ムース、植物性ホイップクリーム、肉製品（加工肉製品を含む）；食用油脂、エアレーション（ａｅｒａｔｅｄ）および非エアレーション（ｎｏｎ−ａｅｒａｔｅｄ）ホイップ製品、水中油型エマルジョン、油中水型エマルジョン、マーガリン、ショートニングおよびスプレッド（低脂肪および極低脂肪スプレッドを含む）；ドレッシング、マヨネーズ、ディップ、クリームベースのソース、クリームベースのスープ、飲料、スパイスエマルジョンおよびソースのうちの１つ以上から選択される、食料を提供する。
【０１７９】
好適には、本発明に従う食料は、ケーキ、ペーストリー、菓子、チョコレート、ファッジなどを含む、「ファインフード（ｆｉｎｅ  ｆｏｏｄ）」であり得る。
【０１８０】
１つの態様において、本発明に従う食料は、生地製品または焼き製品、例えば、パン、揚げ製品、スナック、ケーキ、パイ、ブラウニー、クッキー、ヌードル、スナック品目、例えば、クラッカー、全粒粉クラッカー、プレッツェル、ポテトチップス、トルティーヤ、ナチョおよびパスタであり得る。
【０１８１】
さらなる態様において、本発明に従う食料は、植物由来食品（例えば、穀粉、プレミックス、油、脂肪、カカオバター、コーヒー用クリーム、サラダドレッシング、マーガリン、スプレッド、ピーナッツバター、ショートニング、アイスクリーム、料理用油）であり得る。
【０１８２】
別の態様において、本発明に従う食料は、乳製品（バター、ミルク、クリーム、チーズ（例えば、種々の形態（シュレッド、ブロック、スライスまたはすりおろしを含む）のナチュラル、プロセス、および模造チーズ）、クリームチーズ、アイスクリーム、フローズンデザート、ヨーグルト、ヨーグルト飲料、バター脂肪、無水乳脂肪、他の乳製品を含む）であり得る。本発明に従う酵素は、乳製品における油脂安定度を改善し得る。
【０１８３】
別の態様において、本発明に従う食料は、動物由来成分を含有する食品（例えば、加工肉製品、料理用油、ショートニング）であり得る。
【０１８４】
さらなる態様において、本発明に従う食料は、飲料、果物、ミックスフルーツ、野菜、マリネードまたは果実酒であり得る。
【０１８５】
１つの態様において、本発明に従う食料は、植物由来油（すなわち、植物油）（例えば、オリーブ油、ヒマワリ油、ラッカセイ油またはナタネ油）である。
【０１８６】
本発明の化合物は、食料または飼料においてインサイチュで生成され得る。
【０１８７】
したがって、さらなる態様において、本発明は、食料または飼料組成物中での本発明の化合物のインサイチュ生成のための方法であって、当該組成物は、以下の成分：
（ｉ）モノアシルグリセロール（上で定義され例示されるとおり）またはその活性化誘導体；
（ｉｉ）アミノもしくはＮ−アシルアミノ単糖部分の供給源（上で定義され例示されるとおり）またはその活性化誘導体；
（ｉｉｉ）必要であれば、非置換の単糖部分の供給源（上で定義され例示されるとおり）またはその活性化誘導体；および
（ｉｖ）必要であれば、適切な触媒または活性化剤
を含み、当該方法は、当該組成物に、その組成物中にまだ存在しない成分（ｉ）および（ｉｉ）の任意のもの、ならびに必要であれば、その組成物中にまだ存在しない（ｉｉｉ）および／または（ｉｖ）を添加し、それらの成分が反応するのを可能にする工程を含む、方法を提供する。
【０１８８】
清浄化組成物および洗剤組成物
本発明の化合物は、清浄化組成物および／または洗剤組成物の一成分を構成し得る。概して、清浄化組成物および洗剤組成物は、当該技術分野において十分に記載されており、好適な清浄化組成物および洗剤組成物のさらなる説明については国際公開第９６／３４９４６号パンフレット；国際公開第９７／０７２０２号パンフレット；および国際公開第９５／３００１１号パンフレットが参照される。
【０１８９】
本発明の化合物は、例えば、手洗いもしくは機械洗い洗濯用洗剤組成物（汚れた布帛の前処理に適した洗濯用添加剤組成物およびリンス添加布帛柔軟剤組成物を含む）として配合され得るか、または一般家庭用硬表面清浄化作業における使用のための洗剤組成物として配合され得るか、または食器の手洗いもしくは機械洗い作業用に配合され得る。
【０１９０】
１つの実施形態において、本発明の洗濯用組成物は、本発明の化合物を、１種以上の酵素（例えば、プロテアーゼ、アミラーゼ、グルコアミラーゼ、マルトース生成アミラーゼ、非マルトース生成アミラーゼ、リパーゼ、クチナーゼ、カルボヒドラーゼ、セルラーゼ、ペクチナーゼ、マンナナーゼ、アラビナーゼ、ガラクタナーゼ、キシラナーゼ、オキシダーゼ、ラッカーゼ、および／もしくはペルオキシダーゼ、ならびに／またはそれらの組み合わせ）と組み合わせて含み得る。概して、１種もしくは複数種の選択された酵素の特性（例えば、ｐＨ最適条件、他の酵素および非酵素成分との適合性など）は、選択された洗剤と適合すべきであり、かつその１種もしくは複数種の酵素は、有効量で存在すべきである。
【０１９１】
プロテアーゼ：好適なプロテアーゼとしては、動物、植物または微生物由来のものが挙げられる。化学的に修飾されたまたはタンパク質工学により産生された変異体もまた、好適である。プロテアーゼは、セリンプロテアーゼまたはメタロプロテアーゼ（例えば、アルカリ性微生物プロテアーゼまたはトリプシン様プロテアーゼ）であり得る。アルカリ性プロテアーゼの例は、スブチリシンであり、とりわけ、バキッルス属種（Ｂａｃｉｌｌｕｓ  ｓｐ．）に由来するもの（例えば、スブチリシンＮｏｖｏ、スブチリシンＣａｒｌｓｂｅｒｇ、スブチリシン３０９（例えば、米国特許第６，２８７，８４１号明細書参照）、スブチリシン１４７、およびスブチリシン１６８（例えば、国際公開第８９／０６２７９号パンフレット参照））である。トリプシン様プロテアーゼの例は、トリプシン（例えば、ブタまたはウシ由来のもの）、およびフサリウム（Ｆｕｓａｒｉｕｍ）プロテアーゼ（例えば、国際公開第８９／０６２７０号パンフレットおよび国際公開第９４／２５５８３号パンフレット参照）である。また、有用なプロテアーゼの例としては、国際公開第９２／１９７２９号パンフレットおよび国際公開第９８／２０１１５号パンフレットに記載されている変異体が挙げられるが、これらに限定されない。好適な市販のプロテアーゼ酵素としては、Ａｌｃａｌａｓｅ（登録商標）、Ｓａｖｉｎａｓｅ（登録商標）、Ｌｉｑｕａｎａｓｅ（登録商標）、Ｏｖｏｚｙｍｅ（登録商標）、Ｐｏｌａｒｚｙｍｅ（登録商標）、Ｅｓｐｅｒａｓｅ（登録商標）、Ｅｖｅｒｌａｓｅ（登録商標）、およびＫａｎｎａｓｅ（登録商標）（Ｎｏｖｏｚｙｍｅｓ、以前のＮｏｖｏ  Ｎｏｒｄｉｓｋ  Ａ／Ｓ）；Ｅｘｃｅｌｌａｓｅ（商標）、Ｍａｘａｔａｓｅ（登録商標）、Ｍａｘａｃａｌ（商標）、Ｍａｘａｐｅｍ（商標）、Ｐｒｏｐｅｒａｓｅ（登録商標）、Ｐｒｏｐｅｒａｓｅ  Ｌ（登録商標）、Ｐｕｒａｆｅｃｔ（登録商標）、Ｐｕｒａｆｅｃｔ  Ｌ（登録商標）、ＰｕｒａＦａｓｔ（商標）、ＯｘＰ（商標）、ＦＮ２（商標）、およびＦＮ３（商標）（Ｇｅｎｅｎｃｏｒ−Ｄａｎｉｓｃｏ  Ａ／Ｓの一部門）が挙げられる。
【０１９２】
リパーゼ：この酵素は、カルボン酸エステル結合を加水分解してカルボキシレートを放出することが可能なリパーゼ（ＥＣ３．１．１）であり得る。リパーゼの例としては、トリアシルグリセロールリパーゼ（ＥＣ３．１．１．３）、ガラクトリパーゼ（ＥＣ３．１．１．２６）、ホスホリパーゼＡ１（ＥＣ３．１．１．３２）、ホスホリパーゼＡ２（ＥＣ３．１．１．４）およびリポタンパク質リパーゼＡ２（ＥＣ３．１．１．３４）が挙げられるが、これらに限定されない。好適なリパーゼとしては、細菌または真菌由来のものが挙げられる。化学的に修飾されたまたはタンパク質工学により産生された変異体が含まれる。有用なリパーゼの例としては、フミコラ属（Ｈｕｍｉｃｏｌａ）（同義語テルモミュケス（Ｔｈｅｒｍｏｍｙｃｅｓ））、例えば、Ｈ．ラヌギノサ（Ｈ．ｌａｎｕｇｉｎｏｓａ）（Ｔ．ラヌギノスス（Ｔ．ｌａｎｕｇｉｎｏｓｕｓ））（例えば、欧州特許第２５８０６８号明細書および欧州特許第３０５２１６号明細書参照）およびＨ．インソレンス（Ｈ．ｉｎｓｏｌｅｎｓ）（例えば、国際公開第９６／１３５８０号パンフレット参照）由来のリパーゼ；プセウドモナス（Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ）リパーゼ（例えば、Ｐ．アルカリゲネス（Ｐ．ａｌｃａｌｉｇｅｎｅｓ）またはＰ．プセウドアルカリゲネス（Ｐ．ｐｓｅｕｄｏａｌｃａｌｉｇｅｎｅｓ）由来のもの；例えば、欧州特許第２１８  ２７２号明細書参照）、Ｐ．ケパキア（Ｐ．ｃｅｐａｃｉａ）（例えば、欧州特許第３３１  ３７６号明細書参照）、Ｐ．ストゥトゼリ（Ｐ．ｓｔｕｔｚｅｒｉ）（例えば、英国特許第１，３７２，０３４号明細書参照）、Ｐ．フルオレスケンス（Ｐ．ｆｌｕｏｒｅｓｃｅｎｓ）、プセウドモナス属種（Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ  ｓｐ．）ＳＤ７０５株（例えば、国際公開第９５／０６７２０号パンフレットおよび国際公開第９６／２７００２号パンフレット参照）、Ｐ．ウィスコンシネンシス（Ｐ．ｗｉｓｃｏｎｓｉｎｅｎｓｉｓ）（例えば、国際公開第９６／１２０１２号パンフレット参照）；バキッルス（Ｂａｃｉｌｌｕｓ）リパーゼ（例えば、Ｂ．スブティリス（Ｂ．ｓｕｂｔｉｌｉｓ）由来のもの；例えば、Ｄａｒｔｏｉｓ  ｅｔ  ａｌ．（１９９３）参照）、Ｂ．ステアロテルモピルス（Ｂ．ｓｔｅａｒｏｔｈｅｒｍｏｐｈｉｌｕｓ）（例えば、特公昭６４−７４４９９２号公報参照）、またはＢ．プミルス（Ｂ．ｐｕｍｉｌｕｓ）（例えば、国際公開第９１／１６４２２号パンフレット参照）が挙げられるが、これらに限定されない。配合物中での使用のために企図されるさらなるリパーゼ変異体としては、例えば、国際公開第９２／０５２４９号パンフレット、国際公開第９４／０１５４１号パンフレット、国際公開第９５／３５３８１号パンフレット、国際公開第９６／００２９２号パンフレット、国際公開第９５／３０７４４号パンフレット、国際公開第９４／２５５７８号パンフレット、国際公開第９５／１４７８３号パンフレット、国際公開第９５／２２６１５号パンフレット、国際公開第９７／０４０７９号パンフレット、国際公開第９７／０７２０２号パンフレット、欧州特許出願公開第４０７２２５号明細書、および欧州特許第２６０１０５号明細書に記載されているものが挙げ��れる。一部の市販のリパーゼ酵素としては、Ｌｉｐｅｘ（登録商標）、Ｌｉｐｏｌａｓｅ（登録商標）およびＬｉｐｏｌａｓｅ（登録商標）Ｕｌｔｒａ（Ｎｏｖｏｚｙｍｅｓ、以前のＮｏｖｏ  Ｎｏｒｄｉｓｋ  Ａ／Ｓ）が挙げられる。
【０１９３】
ポリエステラーゼ：好適なポリエステラーゼとしては、国際公開第０１／３４８９９号パンフレット（Ｇｅｎｅｎｃｏｒ）および国際公開第０１／１４６２９号パンフレット（Ｇｅｎｅｎｃｏｒ）に記載されているものが挙げられるが、これらに限定されず、本明細書において述べた他の酵素との任意の組み合わせで含まれ得る。
【０１９４】
アミラーゼ：組成物は、α−アミラーゼ（ＥＣ３．２．１．１）、Ｇ４生成アミラーゼ（ＥＣ３．２．１．６０）、β−アミラーゼ（ＥＣ３．２．１．２）およびγ−アミラーゼ（ＥＣ３．２．１．３）などのアミラーゼを含み得る。これらは、細菌または真菌由来のアミラーゼを含み得、化学的に修飾されたまたはタンパク質工学により産生された変異体が含まれる。市販のアミラーゼは、例えば、Ｄｕｒａｍｙｌ（登録商標）、Ｔｅｒｍａｍｙｌ（商標）、Ｆｕｎｇａｍｙｌ（登録商標）およびＢＡＮ（商標）（Ｎｏｖｏｚｙｍｅｓ、以前のＮｏｖｏ  Ｎｏｒｄｉｓｋ  Ａ／Ｓ）、Ｒａｐｉｄａｓｅ（登録商標）、およびＰｕｒａｓｔａｒ（登録商標）（Ｄａｎｉｓｃｏ  ＵＳＡ，Ｉｎｃ．）、ＬＩＱＵＥＺＹＭＥ（商標）、ＮＡＴＡＬＡＳＥ（商標）、ＳＵＰＲＡＭＹＬ（商標）、ＳＴＡＩＮＺＹＭＥ（商標）、ＦＵＮＧＡＭＹＬおよびＢＡＮ（商標）（Ｎｏｖｏｚｙｍｅｓ  Ａ／Ｓ）、ＲＡＰＩＤＡＳＥ（商標）、ＰＵＲＡＳＴＡＲ（商標）およびＰＵＲＡＳＴＡＲＯＸＡＭ（商標）（Ｄａｎｉｓｃｏ  ＵＳＡ  Ｉｎｃ．から）、ＧＲＩＮＤＡＭＹＬ（商標）ＰｏｗｅｒＦｒｅｓｈ、ＰＯＷＥＲＦｌｅｘ（商標）およびＧＲＩＮＤＡＭＹＬ  ＰｏｗｅｒＳｏｆｔ（Ｄａｎｉｓｃｏ  Ａ／Ｓから）であるが、これらに限定されない。
【０１９５】
ペルオキシダーゼ／オキシダーゼ：組成物中での使用のために企図される好適なペルオキシダーゼ／オキシダーゼとしては、植物、細菌または真菌由来のものが挙げられる。化学的に修飾されたまたはタンパク質工学により産生された変異体が含まれる。有用なペルオキシダーゼの例としては、コプリヌス属（Ｃｏｐｒｉｎｕｓ）由来の（例えば、Ｃ．キネレウス（Ｃ．ｃｉｎｅｒｅｕｓ）およびその変異体（例えば、国際公開第９３／２４６１８号パンフレット、国際公開第９５／１０６０２号パンフレット、および国際公開第９８／１５２５７号パンフレットに記載されているもの）由来の）ペルオキシダーゼが挙げられる。市販のペルオキシダーゼとしては、ＧＵＡＲＤＺＹＭＥ（登録商標）（Ｎｏｖｏｚｙｍｅｓ  Ａ／Ｓ）が挙げられる。
【０１９６】
セルラーゼ：好適なセルラーゼとしては、細菌または真菌由来のものが挙げられる。化学的に修飾されたまたはタンパク質工学により産生された変異体が含まれる。好適なセルラーゼとしては、バキッルス属（Ｂａｃｉｌｌｕｓ）、プセウドモナス属（Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ）、フミコラ属（Ｈｕｍｉｃｏｌａ）、フサリウム属（Ｆｕｓａｒｉｕｍ）、ティエラウィア属（Ｔｈｉｅｌａｖｉａ）、アクレモニウム属（Ａｃｒｅｍｏｎｉｕｍ）由来のセルラーゼ（例えば、例えば米国特許第４，４３５，３０７号明細書；同第５，６４８，２６３号明細書；同第５，６９１，１７８号明細書；同第５，７７６，７５７号明細書；および国際公開第８９／０９２５９号パンフレットに開示されているフミコラ・インソレンス（Ｈｕｍｉｃｏｌａ  ｉｎｓｏｌｅｎｓ）、ミュケリオプトラ・テルモピラ（Ｍｙｃｅｌｉｏｐｈｔｈｏｒａ  ｔｈｅｒｍｏｐｈｉｌａ）およびフサリウム・オクシュスポルム（Ｆｕｓａｒｉｕｍ  ｏｘｙｓｐｏｒｕｍ）から産生される真菌セルラーゼ）が挙げられる。使用のために企図される例示的なセルラーゼは、テキスタイルに対しカラーケア（ｃｏｌｏｒ  ｃａｒｅ）の利点を有するセルラーゼである。そのようなセルラーゼの例は、例えば、欧州特許第０４９５２５７号明細書；欧州特許第５３１３７２号明細書；国際公開第９９／２５８４６号パンフレット（Ｇｅｎｅｎｃｏｒ  Ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ，Ｉｎｃ．）、国際公開第９６／３４１０８号パンフレット（Ｇｅｎｅｎｃｏｒ  Ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ，Ｉｎｃ．）、国際公開第９６／１１２６２号パンフレット；国際公開第９６／２９３９７号パンフレット；および国際公開第９８／０８９４０号パンフレットに記載されているセルラーゼである。他の例は、セルラーゼ変異体（例えば、国際公開第９４／０７９９８号パンフレット；国際公開第９８／１２３０７号パンフレット；国際公開第９５／２４４７１号パンフレット；国際公開第９９／０１５４４号パンフレット；欧州特許第５３１  ３１５号明細書；米国特許第５，４５７，０４６号明細書；同第５，６８６，５９３号明細書；および同第５，７６３，２５４号明細書に記載されているもの）である。市販のセルラーゼとしては、Ｃｅｌｌｕｚｙｍｅ（登録商標）、Ｃａｒｅｚｙｍｅ（登録商標）およびＥｎｄｏｌａｓｅ（登録商標）（Ｎｏｖｏｚｙｍｅｓ、以前のＮｏｖｏ  Ｎｏｒｄｉｓｋ  Ａ／Ｓ）；Ｃｌａｚｉｎａｓｅ（商標）およびＰｕｒａｄａｘ（登録商標）ＨＡ（Ｇｅｎｅｎｃｏｒ）；ならびにＫＡＣ−５００（Ｂ）（商標）（花王株式会社）が挙げられる。
【０１９７】
市販のマンナナーゼの例としては、ＭＡＮＮＡＷＡＹ（商標）（Ｎｏｖｏｚｙｍｅｓ，Ｄｅｎｍａｒｋ）およびＭａｎｎａＳｔａｒ（商標）（Ｇｅｎｅｎｃｏｒ）が挙げられる。
【０１９８】
本発明の化合物は、１種以上の酵素を含有する別個の添加剤を添加することにより、またはこれらの酵素の全てを含む合わせた添加剤を添加することにより、洗剤組成物中に含まれ得る。本発明の化合物は、例えば粒質物、液体、スラリーなどとして、配合され得る。好ましい洗剤添加剤配合物は、粒質物、特に、非粉塵粒質物、液体、特に、安定化された液体、またはスラリーである。
【０１９９】
非粉塵粒質物は、例えば米国特許第４，１０６，９９１号明細書および同第４，６６１，４５２号明細書に開示されているように製造され得、任意選択で、当該技術分野において知られている方法によってコーティングされ得る。蝋質コーティング材の例は、１０００〜２００００の平均分子量を有するポリ（エチレンオキシド）製品（ポリエチレングリコール、ＰＥＧ）；１６個〜５０個のエチレンオキシド単位を有するエトキシル化ノニルフェノール；アルコールが１２個〜２０個の炭素原子を含有し、１５個〜８０個のエチレンオキシド単位が存在する、エトキシル化脂肪アルコール；脂肪アルコール；脂肪酸；ならびに脂肪酸のモノおよびジおよびトリグリセリドである。流動床技術による適用に適した皮膜形成コーティング材の例は、英国特許第１４８３５９１号明細書に示されている。液体酵素調製物は、例えば、ポリオール（例えば、プロピレングリコール）、糖もしくは糖アルコール、乳酸またはホウ酸を、確立された方法に従って添加することにより安定化され得る。保護された酵素は、欧州特許出願公開第Ａ−２３８２１６号明細書に開示されている方法に従って調製され得る。
【０２００】
本発明の洗剤組成物は、任意の好都合な形態（例えば、バー、タブレット、粉末、顆粒、ペーストまたは液体）であり得る。液体洗剤は、水性であり得、典型的に７０％までの水および０〜３０％の有機溶媒を含有するか、または非水性であり得る。
【０２０１】
洗剤組成物はまた、１つ以上のさらなる界面活性剤をも含み得、この界面活性剤は、非イオン性（半極性を含む）および／またはアニオン性および／またはカチオン性および／または双性イオン性であり得る。界面活性剤は、典型的に、０．１重量％〜６０重量％のレベルで存在する。
【０２０２】
洗剤は、それに含まれる場合、アニオン性界面活性剤（例えば、直鎖アルキルベンゼンスルホン酸塩、α−オレフィンスルホン酸塩、アルキル硫酸塩（脂肪アルコール硫酸塩）、アルコールエトキシ硫酸塩、第２級アルカンスルホン酸塩、α−スルホ脂肪酸メチルエステル、アルキルもしくはアルケニルコハク酸またはセッケン）を、通常、約１％〜約４０％含有する。
【０２０３】
洗剤は、それに含まれる場合、非イオン性界面活性剤（例えば、アルコールエトキシレート、ノニルフェノールエトキシレート、アルキルポリグリコシド、アルキルジメチルアミンオキシド、エトキシル化脂肪酸モノエタノールアミド、脂肪酸モノエタノールアミド、ポリヒドロキシアルキル脂肪酸アミド、またはグルコサミンの他のＮ−アシルもしくはＮ−アルキル誘導体）を、通常、約０．２％〜約４０％含有する。
【０２０４】
洗剤は、０〜６５％の洗剤ビルダーまたは錯化剤（例えば、ゼオライト、ジホスフェート、トリホスフェート、ホスホネート、カーボネート、シトレート、ニトリロ三酢酸、エチレンジアミン四酢酸、ジエチレントリアミン五酢酸、アルキルもしくはアルケニルコハク酸、可溶性シリケートまたは層状シリケート（例えば、ＨｏｅｃｈｓｔからのＳＫＳ−６）を含有し得る。
【０２０５】
洗剤は、１つ以上のポリマーを含み得る。例には、カルボキシメチルセルロース、ポリ（ビニルピロリドン）、ポリ（エチレングリコール）、ポリ（ビニルアルコール）、ポリ（ビニルピリジン−Ｎ−オキシド）、ポリ（ビニルイミダゾール）、ポリカルボキシレート（例えば、ポリアクリレート）、マレイン酸／アクリル酸コポリマーおよびラウリルメタクリレート／アクリル酸コポリマーがある。
【０２０６】
洗剤は、過酸形成漂白活性化剤（例えば、テトラアセチルエチレンジアミンまたはノナノイルオキシベンゼンスルホネート）と組み合され得る過酸化水素源（例えば、過ホウ酸塩または過炭酸塩）を含み得る漂白系を含有し得る。あるいは、漂白系は、例えば、アミド、イミドまたはスルホン型のペルオキシ酸を含み得る。
【０２０７】
本発明の洗剤組成物の１種もしくは複数種の酵素は、従来の安定化剤（例えば、ポリオール（例えば、プロピレングリコールまたはグリセロール）、糖もしくは糖アルコール、乳酸、ホウ酸、またはホウ酸誘導体（例えば、芳香族ホウ酸エステル）、またはフェニルボロン酸誘導体（例えば、４−ホルミルフェニルボロン酸））を使用して安定化され得、当該組成物は、例えば国際公開第９２／１９７０９号パンフレットおよび国際公開第９２／１９７０８号パンフレットに記載されているように配合され得る。
【０２０８】
洗剤はまた、他の従来の洗剤成分（例えば、粘土を含む柔軟仕上げ剤、気泡増強剤、泡抑制剤、錆止め剤、泥れ懸濁化剤、泥れ再付着防止剤、染料、殺菌剤、蛍光増白剤、ヒドロトロープ、退色防止剤、または香料など）を含有し得る。
【０２０９】
洗剤組成物において、本発明の化合物は、洗浄液（ｗａｓｈ  ｌｉｑｕｏｒ）１リットル当たり０．５〜２５ｇの化合物、好ましくは洗浄液１リットル当たり０．７５〜１０ｇの化合物、特に洗浄液１リットル当たり１〜５ｇの化合物に相当する量で添加され得ることが、現在のところ企図される。
【０２１０】
洗濯用組成物におけるインサイチュでの使用
本発明の化合物は、洗濯用組成物においてインサイチュで生成され得る。
【０２１１】
したがって、さらなる態様において、本発明は、洗濯用組成物中での本発明の化合物のインサイチュ生成のための方法であって、当該組成物は、以下の成分：
（ｉ）モノアシルグリセロール（上で定義され例示されるとおり）またはその活性化誘導体；
（ｉｉ）アミノもしくはＮ−アシルアミノ単糖部分の供給源（上で定義され例示されるとおり）またはその活性化誘導体；
（ｉｉｉ）必要であれば、非置換単糖部分の供給源（上で定義され例示されるとおり）またはその活性化誘導体；および
（ｉｖ）必要であれば、適切な触媒または活性化剤
を含み、当該方法は、当該組成物に、その組成物中にまだ存在しない成分（ｉ）および（ｉｉ）の任意のもの、ならびに必要であれば、その組成物中にまだ存在しない（ｉｉｉ）および／または（ｉｖ）を添加し、それらの成分が反応するのを可能にする工程を含む、方法を提供する。
【０２１２】
上記の方法において、モノアシルグリセロールおよびアミノもしくはＮ−アシルアミノ単糖部分の供給源、またはその各々の活性化誘導体は、洗濯用組成物の初期成分として存在し得る。あるいは、初期に全くもしくは不十分にしかモノアシルグリセロールまたはアミノもしくはＮ−アシルアミノ単糖部分の供給源（またはその各々の活性化誘導体）が存在しない場合は、これらの成分は、組成物に添加され得る。
【０２１３】
非置換単糖部分の供給源（上で定義され例示されるとおり）またはその活性化誘導体は、第１の基が非置換単糖を含むオリゴ糖鎖である本発明の化合物をインサイチュで生成するために必要とされる。これは、洗濯用組成物の初期成分として存在し得る。あるいは、初期に全くもしくは不十分にしか非置換単糖源が存在しない場合は、この成分は、組成物に添加され得る。
【０２１４】
必要とされる場合、触媒（特に、酵素、とりわけ、トランスグリコシダーゼ酵素）が存在し得る。これは、洗濯用組成物の初期成分として存在し得る。あるいは、初期に全くもしくは不十分にしか触媒が存在しない場合は、この成分は、組成物に添加され得る。
【０２１５】
洗濯用組成物は、リパーゼ（Ｅ．Ｃ．３．１．１）をさらに含み得る。
【０２１６】
洗濯用組成物は、脂質（特に、トリグリセリドおよび／またはジグリセリドおよび／またはモノグリセリド）であり得る汚れをさらに含み得る。汚れは、表面（例えば、布帛）上にあり得る。したがって、本発明の洗濯用組成物は、表面（例えば、布帛）を含み得る。
【０２１７】
１つの実施形態において、洗濯用組成物は、本明細書において定義されるようなトランスグリコシダーゼ酵素と、アミノもしくはＮ−アシルアミノ単糖供給源と、モノグリセリドを含む汚れとを含む。アミノもしくはＮ−アシルアミノ単糖部分がトランスグリコシダーゼ酵素によってモノグリセリドに転移され、本発明の化合物が生成される。
【０２１８】
１つの実施形態において、汚れはトリグリセリドを含み、洗濯用組成物はリパーゼをさらに含む。リパーゼによるトリグリセリドの加水分解は、モノグリセリドの供給源をもたらす。アミノもしくはＮ−アシルアミノ単糖部分がトランスグリコシダーゼ酵素によってモノグリセリドに転移されて、本発明の化合物が形成される。
【０２１９】
トリグリセリド、ジグリセリドまたはモノグリセリドを本発明の化合物に変換することは、脂質を含む汚れを布帛から除去するのを助け得る。
【実施例】
【０２２０】
実施例１：グリコシルトランスフェラーゼ反応のための基質としてのキトビオースのインビトロ調製
キトビオース基質は、低い程度のアシル化よび分子量を有する低分子量キトサンの試料から調製した。その手順は、Ｒｏｎｃａｌ  ｅｔ  ａｌ．Ｃａｒｂｏｈｙｄｒａｔｅ  Ｒｅｓ．，３４２．２７５０−２７５６（２００７）に記載されている。
【０２２１】
以下の基質を使用した：キトサンＩ：ＰｒｉｍｅｘからのＣｈｉｔｏｃｌｅａｒ（商標）１９７９。
【０２２２】
【表２】
2013517762.tif 000010
【０２２３】
まず、１０００ｍＬの脱塩水に４．１０ｇの酢酸ナトリウムを溶解させ、１％酢酸水溶液でｐＨ４．５に調製することにより、５０ｍＭ酢酸ナトリウム緩衝液（ｐＨ４．５）を調製した。
【０２２４】
キトサン溶液：５％の選択されたキトサンを、上記の５０ｍＭ酢酸ナトリウム緩衝液（ｐＨ４．５）に溶解させた。
【０２２５】
５ｇのキトサンを９５ｇの緩衝液に加え、丸底ガラスフラスコ中で８０℃まで加熱した。キトサンは溶解して、僅かに粘性の淡赤茶色の液体になった。溶液を４０℃まで冷却し、０．０５グラムのペプシン（Ｓｉｇｍａ）を加え、３０分間反応させ、続いて９０℃まで加熱してペプシンを不活性化する。
【０２２６】
Ｎ，Ｎ’−ジアセチル−キトビオース溶液（キトサンＩＩ）の調製
次いで、上記のアセテート緩衝液（ｐＨ４．５）中の５％Ｎ，Ｎ’−ジアセチル−キトビオース溶液を、５グラムのＮ，Ｎ’−ジアセチル−キトビオース（Ｓｉｇｍａ）を１５０ｍＬガラスビーカーに入れ、８０ｍＬの緩衝液ｐＨ４．５を加えることによって調製した。この溶液を、Ｎ，Ｎ’−ジアセチル−キトビオースが溶解する８０℃まで加熱した。溶液を冷却し、周囲温度で保存した。
【０２２７】
実施例２：実施例１の炭水化物溶液を基質として使用したグリコシルトランスフェラーゼによるモノグリセリドのインビトログリコシル化
Ｃ１０ベースのモノグリセリド（グリセロールモノデカノエート、ＣＡＳ  Ｎｏ．２６４０２−２２−２）を、緩衝液ベースのインビトロ系において、トランスグリコシダーゼ反応のための受容体基質として試験する。
【０２２８】
調製：
モノデカノエート溶液：アセテート緩衝液（ｐＨ６．０）中の２０％モノデカノエート
８０ｇの緩衝液ｐＨ６．０を１５０ｍＬのガラスビーカーに入れ、４０〜４４℃まで加熱し、２０ｇの融解したグリセロールモノデカノエート（Ｄａｎｉｓｃｏ  Ａ／Ｓ）を加えた。このモノデカノエートを、２０秒間Ｕｌｔｒａ  Ｔｕｒａｘを使用して水に分散させた。１０グラムのモノグリセリド分散体を１２×２０ｍＬホイートンガラス器（ｗｈｅａｔｏｎ  ｇｌａｓｓ）に入れ、表２に従って処理する。
【０２２９】
【表３】
2013517762.tif 000011
【０２３０】
表２において、使用したトランスグリコシダーゼ酵素は、Ａｃｃｅｌｌｅｒａｓｅ  ＢＧ（３５００  Ｕ／ｍＬ）として市販されている、トリコデルマ・レエセイ（Ｔｒｉｃｈｏｄｅｒｍａ  ｒｅｅｓｅｉ）由来のβ−グルコシダーゼであった。３５００Ｕのこの酵素を使用した。
【０２３１】
これらのガラス器を、磁気攪拌および温度制御を備えた加熱ブロックに入れ、４５℃まで加熱した。各ガラス器に炭水化物溶液の最初の部分を加え、１００ＵのＡｃｃｅｌｌｅｒａｓｅ  ＢＧ（ロット１６０１１７０９４４４）酵素溶液の添加により反応を開始し、４５℃にて攪拌しながらインキュベートした。１８時間後および２６時間後に炭水化物溶液のさらなる部分を反応ガラス器に加えて、確実に反応混合物中の平衡が糖脂質形成に有利に働くようにした。４８時間後に反応ガラス器を９０℃の水浴中で２分間加熱処理して、酵素を不活性化した。２５℃まで冷却し、１．５ｍＬの試料を各反応ガラス器から取り出した。この試料を凍結乾燥により乾固させた。２ｍｇの各試料を、１００μＬのクロロホルム／メタノール／水／蟻酸（５０／５０／１０／０．５）中に懸濁させた。２００μＬのＨ２Ｏを添加し、試料混合物を激しく振盪させ、２つの液相を遠心分離により分離した。ポジティブモードでのエレクトロスプレーイオン化質量分析とオンラインで連結された逆相高速液体クロマトグラフィ（ＨＰＬＣ／ＥＳＰ−ＭＳ）を使用して、液体クロマトグラフィ−質量分析（ＬＣ−ＭＳ）により、上相（Ｈ２Ｏ／メタノール）を可能性のある標的生成物について分析した。カラムはＣ１８カラムであり、勾配は水／アセトンに基づいた。酢酸ナトリウムを、ポジティブモードでの付加物形成のために加えた。以下に示される標的アミノグリコシルおよびＮ−アシルアミノグリコシルモノグリセリド（化合物１および２）の形成、ならびにモノガラクトシルモノグリセリド（参照化合物１）を、ＭＳ／ＭＳスペクトル分析により確認した（図１〜４参照）。
【０２３２】
【化７】
2013517762.tif 000012
化合物１：３−Ｏ−（２−アミノ−２−デオキシ−β−Ｄ−グルコピラノシル）−１−ｎ−デカノイルグリセロール
ＭＷ：４０７．５０グラム／モル
【０２３３】
【化８】
2013517762.tif 000013
化合物２：３−Ｏ−（２−（アセチルアミノ）−２−デオキシ−β−Ｄ−グルコピラノシル）−１−ｎ−デカノイルグリセロール
ＭＷ＝４４９．５４グラム／モル
【０２３４】
【化９】
2013517762.tif 000014
参照化合物１：１−Ｏ−（Ｄ−ガラクトピラノシル）−３−ｎ−デカノイルグリセロール
【０２３５】
【表４】
2013517762.tif 000015
【０２３６】
実施例３および４：３−Ｏ−グルコサミニル−１−ｎ−オクタデカノイルグリセロールの化学合成
実施例３：
化合物３を、以下のスキーム４に従って作製した。
【化１０】
2013517762.tif 000016
スキーム４において、「Ｂｎ」はベンジルである。
【０２３７】
中間体１：２−アセトアミド−３，４，６−トリ−Ｏ−アセチル−２−デオキシ−α−Ｄ−グルコピラノシルクロリド
この化合物は、例えば“Ｂｅｓｔ  Ｓｙｎｔｈｅｔｉｃ  Ｍｅｔｈｏｄｓ：Ｃａｒｂｏｈｙｄｒａｔｅｓ”，Ｅｌｓｅｖｉｅｒ  Ｓｃｉｅｎｃｅ  Ｌｔｄ．２００３，ｐｐ６９−８０に記載されているような、文献手順に従って、Ｎ−アセチル−Ｄ−グルコサミンから調製した。
【０２３８】
中間体２：１−Ｏ−（２−アセトアミド−３，４，６−トリ−Ｏ−アセチル−２−デオキシ−α−Ｄ−グルコピラノシル）−２−Ｏ−ベンジル−グリセロール
中間体１の化合物（８ｇ）を、磁気攪拌機、乾燥管付き冷却器および温度計を備えた５００ｍＬの三つ口丸底フラスコに計り入れた。この化合物をＣＨ２Ｃｌ２（２５０ｍＬ）に溶解し、モレキュラーシーブ（４Å、２ｇ）、２−Ｏ−ベンジル−グリセロール（４．８ｇ）およびＺｎＣｌ２（１．８ｇ）を加えた。この溶液を一晩還流させ、室温まで冷却した。反応混合物を、ＮａＨＣＯ３（飽和水溶液、２×２００ｍＬ）および水（２００ｍＬ）で洗浄した。有機相をＮａ２ＳＯ４で乾燥させ、濾過し、蒸発させた。生成物を、カラムクロマトグラフィにより精製した。中間体２の構造を、１Ｈ−ＮＭＲ、１３Ｃ−ＮＭＲおよびポジティブモードでの注入エレクトロスプレー−ＭＳにより確認した（図８〜１５参照）。
【０２３９】
中間体３：１−Ｏ−（２−アセトアミド−３，４，６−トリ−Ｏ−アセチル−２−デオキシ−α−Ｄ−グルコピラノシル）−２−Ｏ−ベンジル−３−ｎ−オクタデカノイルグリセロール
中間体２の化合物（０．５ｇ）を、１０ｍＬの乾燥ＣＨＣｌ３に溶解させ、６０ｍｇのピリジンを加え、０℃まで冷却した。０．２１ｇのｎ−オクタデカノイルクロリドを、１０ｍＬの乾燥ＣＨＣｌ３に溶解させ、温度を０℃で維持しながら１時間の間に反応物に滴下した。この反応を、室温にて２４時間継続させる。３ｍＬの水を反応混合物に加え、分離した。有機相を、ＮａＨＣＯ３（飽和水溶液、２×３ｍＬ）および水（３×２ｍＬ）で洗浄した。有機相を、ＭｇＳＯ４で乾燥させ、濾過し、蒸発させた。
【０２４０】
中間体３の構造を、１Ｈ−ＮＭＲ、１３Ｃ−ＮＭＲおよびポジティブモードでの注入エレクトロスプレー−ＭＳにより確認した（図１６〜１８参照）。
【０２４１】
中間体４：１−Ｏ−（２−アセトアミド−３，４，６−トリ−Ｏ−アセチル−２−デオキシ−α−Ｄ−グルコピラノシル）−３−ｎ−オクタデカノイルグリセロール
中間体３の化合物におけるベンジル保護基は、Ｅｕｒ．Ｊ．Ｏｒｇ．Ｃｈｅｍ．，２００６，４，９７８−９８５に記載されている標準的な手順に従う水素化により除去し得る。
【０２４２】
化合物３：１−Ｏ−（２−アミノ−２−デオキシ−α−Ｄ−グルコピラノシル）−３−ｎ−オクタデカノイルグリセロール
中間体４の糖部分上のアセチル保護基の除去は、Ｊ．Ａｇｒｉｃ．Ｆｏｏｄ  Ｃｈｅｍ．２００８，５６，６６９１−６７００に記載されている手順に従って、加ヒドラジン分解により達成され得ることが予想される。
【０２４３】
実施例４：
化合物３の代替的な合成を、以下のスキーム５に示す。
【化１１】
2013517762.tif 000017
スキーム５において、「Ｂｎ」はベンジルである。
【０２４４】
中間体５：２−アセトアミド−１，３，４，６−テトラ−Ｏ−アセチル−２−デオキシ−α−Ｄ−グルコピラノース
この化合物は、例えば“Ｂｅｓｔ  Ｓｙｎｔｈｅｔｉｃ  Ｍｅｔｈｏｄｓ：Ｃａｒｂｏｈｙｄｒａｔｅｓ”，Ｅｌｓｅｖｉｅｒ  Ｓｃｉｅｎｃｅ  Ｌｔｄ．２００３，ｐｐ６９−８０に記載されているような、文献手順に従って、Ｄ−グルコサミン塩酸塩から調製した。
【０２４５】
中間体３：１−Ｏ−（２−アセトアミド−３，４，６−トリ−Ｏ−アセチル−２−デオキシ−α−Ｄ−グルコピラノシル）−２−Ｏ−ベンジル−３−ｎ−オクタデカノイルグリセロール
Ｈ２ＳＯ４−シリカを、濃Ｈ２ＳＯ４（１ｍＬ）を乾燥Ｅｔ２Ｏ（５０ｍＬ）中のシリカゲル（１０ｇ）のスラリーに加えることによって調製し、このスラリーを５分間振盪させた。溶媒を減圧下で蒸発させると、易流動性のＨ２ＳＯ４−シリカが結果として得られ、これを一晩１１０℃で乾燥させた。
【０２４６】
中間体５の化合物、２−ベンジル−１−ｎ−オクタデカノイルグリセロールおよびＨ２ＳＯ４−シリカを、乾燥ＣＨＣｌ３に溶解させ、この反応混合物を、加熱して還流させた。およそ４時間後に、反応混合物を室温まで冷却し、Ｃｅｌｉｔｅ（登録商標）に通して濾過した。生成物を、カラムクロマトグラフィにより精製した。中間体３の構造を、１Ｈ−ＮＭＲ、１３Ｃ−ＮＭＲおよびポジティブモードでの注入エレクトロスプレー−ＭＳにより確認した（図１６〜１８参照）。
【０２４７】
中間体４：１−Ｏ−（２−アセトアミド−３，４，６−トリ−Ｏ−アセチル−２−デオキシ−α−Ｄ−グルコピラノシル）−３−ｎ−オクタデカノイルグリセロール
および
化合物３：１−Ｏ−（２−アミノ−２−デオキシ−α−Ｄ−グルコピラノシル）−３−ｎ−オクタデカノイルグリセロール
脱保護は、実施例３について上で記載したようにして達成されることが予想される。
【０２４８】
上記の明細書において言及された全ての文献は、参照により本明細書に援用される。記載された本発明の方法およびシステムの、本発明の範囲および精神から逸脱することのない、種々の修正および変更が、当業者には明らかであろう。本発明を特定の好ましい実施形態に関して記載してきたが、特許請求の範囲に記載された発明が、そのような特定の実施形態に過度に限定されるべきではないことが理解されるべきである。実際は、記載された発明を実施するための形態の、化学、生化学およびバイオテクノロジーまたは関連分野における当業者にとっては明らかな種々の修正は、以下の特許請求の範囲の範囲内にあることが意図される。
【０２４９】
本発明の態様を、以下の番号付けされた項において定義する。
【０２５０】
１．Ｏ−β−Ｄ−グルコピラノシル−（１→４）−Ｏ−２−アシルアミド−２−デオキシ−β−Ｄ−グルコピラノシルモノアシルグリセロール以外の、式（Ｉ）：
【化１２】
2013517762.tif 000018
の化合物であって、式中：
Ｒ１、Ｒ２およびＲ３から選択される第１の基は、アミノ単糖部分もしくはアシル基が１個〜６個の炭素原子を有するＮ−アシルアミノ単糖部分であるか、または２個〜４個の単糖部分を含みそのうちの少なくとも１個はアミノもしくはＮ−アシルアミノ単糖部分であるオリゴ糖鎖であり；
Ｒ１、Ｒ２およびＲ３から選択される第２の基は、３個〜４０個の炭素原子を有する飽和もしくは不飽和のアシル基であり；そして
Ｒ１、Ｒ２およびＲ３から選択される第３の基は、水素である、
化合物。
【０２５１】
２．式中：
Ｒ１およびＲ３から選択される第１の基が、アミノ単糖部分もしくはアシル基が１個〜６個の炭素原子を有するＮ−アシルアミノ単糖部分であるか、または２個〜４個の単糖部分を含みそのうちの少なくとも１個はアミノもしくはＮ−アシルアミノ単糖部分であるオリゴ糖鎖であり；
Ｒ１およびＲ３から選択される第２の基が、３個〜４０個の炭素原子を有する飽和もしくは不飽和のアシル基であり；そして
Ｒ２が、水素である、
第１項に記載の化合物。
【０２５２】
３．第１の基が、アミノ単糖部分もしくはアシル基が１個〜６個の炭素原子を有するＮ−アシルアミノ単糖部分である、第１項または第２項に記載の化合物。
【０２５３】
４．第１の基が、アミノヘキソース部分もしくはアシル基が２個〜４個の炭素原子を有するＮ−アシルアミノヘキソース部分である、第３項に記載の化合物。
【０２５４】
５．アミノもしくはＮ−アシルアミノ基が、ヘキソース部分の２位に存在する、第４項に記載の化合物。
【０２５５】
６．第１の基が、グルコサミンまたはＮ−アセチルグルコサミンから選択される、第５項に記載の化合物。
【０２５６】
７．第２の基が、６個〜２４個の炭素原子を有する飽和もしくは不飽和のアシル基である、第１項〜第６項のいずれか一項に記載の化合物。
【０２５７】
８．第２の基が、８個〜１８個の炭素原子を有する飽和もしくは不飽和のアシル基である、第７項に記載の化合物。
【０２５８】
９．第２の基が、ｎ−デカノイル、ｎ−ドデカノイル、ｎ−テトラデカノイル、ｎ−ヘキサデカノイル、ｎ−オクタデカノイル、シス−オクタデカ−９−エノイル（オレイル）、シス，シス−９，１２−オクタデカジエノイル（リノレイル）またはシス，シス，シス−９，１２，１５−オクタデカトリエノイル（リノレニル）である、第８項に記載の化合物。
【０２５９】
１０．１−Ｏ−（２−アミノ−２−デオキシ−β−Ｄ−グルコピラノシル）−３−ｎ−デカノイルグリセロール；１−Ｏ−（２−（アセチルアミノ）−２−デオキシ−β−Ｄ−グルコピラノシル）−３−ｎ−デカノイルグリセロール；および１−Ｏ−（２−アミノ−２−デオキシ−β−Ｄ−グルコピラノシル）−３−ｎ−オクタデカノイルグリセロールから選択される、第１項に記載の化合物。
【０２６０】
１１．モノアシルグリセロールであってそのアシル部分が３個〜４０個の炭素原子を有する飽和もしくは不飽和のアシル基であるモノアシルグリセロールまたはその活性化誘導体と、アミノもしくはＮ−アシルアミノ単糖部分の供給源またはその活性化誘導体、および必要であれば、非置換の単糖部分の供給源またはその活性化誘導体とを、任意選択で適切な触媒または活性化剤の存在下で、接触させる工程を含む、第１項〜第１０項のいずれか一項に記載の化合物を調製する方法。
【０２６１】
１２．触媒または活性化剤が、トランスグリコシダーゼ酵素である、第１１項に記載の方法。
【０２６２】
１３．モノアシルグリセロールのアシル部分が、６個〜２４個の炭素原子を有する飽和もしくは不飽和のアシル基である、第１１項または第１２項に記載の方法。
【０２６３】
１４．モノアシルグリセロールのアシル部分が、８個〜１８個の炭素原子を有する飽和もしくは不飽和のアシル基である、第１３項に記載の方法。
【０２６４】
１５．モノアシルグリセロールのアシル部分が、ｎ−デカノイル、ｎ−ドデカノイル、ｎ−テトラデカノイル、ｎ−ヘキサデカノイル、ｎ−オクタデカノイル、シス−オクタデカ−９−エノイル（オレイル）、シス，シス−９，１２−オクタデカジエノイル（リノレイル）またはシス，シス，シス−９，１２，１５−オクタデカトリエノイル（リノレニル）である、第１４項に記載の方法。
【０２６５】
１６．モノアシルグリセロールが、１−ｎ−デカノイル−グリセロールまたは１−ｎ−オクタデカノイル−グリセロールである、第１５項に記載の方法。
【０２６６】
１７．アミノもしくはＮ−アシルアミノ単糖部分の供給源が、キトサン、キトビオース、もしくはそれらのうちの任意のものの、アシル基が１個〜６個の炭素原子を有するＮ−アシル誘導体、またはそれらのうちの任意のものの混合物から選択される、第１１項〜第１６項のいずれか一項に記載の方法。
【０２６７】
１８．アミノもしくはＮ−アシルアミノ単糖部分の供給源が、キトサンもしくはキトビオース、またはそれらのうちのいずれかのＮ−アセチル誘導体から選択される、第１７項に記載の方法。
【０２６８】
１９．トランスグリコシダーゼ酵素が、酵素分類（Ｅ．Ｃ．）３．２．１．２１または３．２．１．７４に分類される、第１１項〜第１７項のうちのいずれか一項に記載の方法。
【０２６９】
２０．トランスグリコシダーゼ酵素が、アミノグリコシルトランスフェラーゼ酵素である、第１１項〜第１７項のいずれか一項に記載の方法。
【０２７０】
２１．トランスグリコシダーゼ酵素が、β−グルコシダーゼ酵素である、第１１項〜第１７項のいずれか一項に記載の方法。
【０２７１】
２２．トランスグリコシダーゼ酵素が、真菌由来のものであるか、または真菌由来のトランスグリコシダーゼ酵素と少なくとも５０％、好ましくは少なくとも５５％（例えば、少なくとも６０％、少なくとも６５％、少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、または少なくとも９９％）の配列同一性を有する、第１１項〜第２１項のいずれか一項に記載の方法。
【０２７２】
２３．トランスグリコシダーゼ酵素が、トリコデルマ属種（Ｔｒｉｃｈｏｄｅｒｍａ  ｓｐｅｃｉｅｓ）に由来するか、またはトリコデルマ属種（Ｔｒｉｃｈｏｄｅｒｍａ  ｓｐｅｃｉｅｓ）由来のトランスグリコシダーゼ酵素と少なくとも５０％、好ましくは少なくとも５５％（例えば、少なくとも６０％、少なくとも６５％、少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、または少なくとも９９％）の配列同一性を有する、第１１項〜第２１項のいずれか一項に記載の方法。
【０２７３】
２４．トランスグリコシダーゼ酵素が、トリコデルマ・レエセイ（Ｔｒｉｃｈｏｄｅｒｍａ  ｒｅｅｓｅｉ）（配列番号１）であるか、またはそれと少なくとも５０％、好ましくは少なくとも５５％（例えば、少なくとも６０％、少なくとも６５％、少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、または少なくとも９９％）の配列同一性を有する、第１１項〜第２１項のいずれか一項に記載の方法。
【０２７４】
２５．組成物中での第１項〜第１０項のいずれか一項に定義されるとおりの化合物のインサイチュ生成のための方法であって、当該組成物は、以下の成分：
（ｉ）モノアシルグリセロールであってそのアシル部分が３個〜４０個の炭素原子を有する飽和もしくは不飽和のアシル基であるモノアシルグリセロールまたはその活性化誘導体；
（ｉｉ）アミノもしくはＮ−アシルアミノ単糖部分の供給源またはその活性化誘導体；
（ｉｉｉ）必要であれば、非置換の単糖部分の供給源またはその活性化誘導体；および
（ｉｖ）必要であれば、適切な触媒または活性化剤
を含み、当該方法は、当該組成物に、その組成物中にまだ存在しない成分（ｉ）および（ｉｉ）の任意のもの、ならびに必要であれば、その組成物中にまだ存在しない（ｉｉｉ）および／または（ｉｖ）を添加し、それらの成分が反応するのを可能にする工程を含む、方法。
【０２７５】
２６．第１項〜第１０項のいずれか一項に定義されるとおりの化合物、または請求項１０〜２４のいずれか一項に定義されるとおりの方法によって製造された化合物を含む、食料または飼料。
【０２７６】
２７．１種以上の酵素をさらに含む、第２６項に記載の食料または飼料。
【０２７７】
２８．１種以上の酵素が、プロテアーゼ、アミラーゼ、グルコアミラーゼ、マルトース生成アミラーゼ、非マルトース生成アミラーゼ、リパーゼ、クチナーゼ、カルボヒドラーゼ、セルラーゼ、ペクチナーゼ、マンナナーゼ、アラビナーゼ、ガラクタナーゼ、キシラナーゼ、オキシダーゼ、ラッカーゼ、および／もしくはペルオキシダーゼ、またはそれらの任意の組み合わせから選択される、第２７項に記載の食料または飼料。
【０２７８】
２９．第１項〜第１０項のうちのいずれか一項に定義されるとおりの化合物、または第１０項〜第２４項のいずれか一項に定義されるとおりの方法によって製造された化合物を含む、洗剤組成物。
【０２７９】
３０．１種以上の酵素をさらに含む、第２７項に記載の洗剤組成物。
【０２８０】
３１．１種以上の酵素が、プロテアーゼ、アミラーゼ、グルコアミラーゼ、マルトース生成アミラーゼ、リパーゼ、クチナーゼ、カルボヒドラーゼ、セルラーゼ、ペクチナーゼ、マンナナーゼ、アラビナーゼ、ガラクタナーゼ、キシラナーゼ、オキシダーゼ、ラッカーゼ、および／もしくはペルオキシダーゼ、またはそれらの任意の組み合わせから選択される、第２８項に記載の洗剤組成物。
【０２８１】
３２．第１項〜第１０項のいずれか一項に記載の化合物の、乳化剤としての使用。
【０２８２】
３３．化合物が、１種以上の酵素と組み合わせて使用される、第３２項に記載の使用。
【０２８３】
３４．１種以上の酵素が、プロテアーゼ、アミラーゼ、グルコアミラーゼ、マルトース生成アミラーゼ、非マルトース生成アミラーゼ、リパーゼ、クチナーゼ、カルボヒドラーゼ、セルラーゼ、ペクチナーゼ、マンナナーゼ、アラビナーゼ、ガラクタナーゼ、キシラナーゼ、オキシダーゼ、ラッカーゼ、および／もしくはペルオキシダーゼ、またはそれらの任意の組み合わせから選択される、第３３項に記載の使用。
【０２８４】
３５．第１項〜第１０項のいずれか一項に記載の化合物の、界面活性剤としての使用。
【０２８５】
３６．化合物が、１種以上の酵素と組み合わせて使用される、第３５項に記載の使用。
【０２８６】
３７．１種以上の酵素が、プロテアーゼ、アミラーゼ、グルコアミラーゼ、マルトース生成アミラーゼ、非マルトース生成アミラーゼ、リパーゼ、クチナーゼ、カルボヒドラーゼ、セルラーゼ、ペクチナーゼ、マンナナーゼ、アラビナーゼ、ガラクタナーゼ、キシラナーゼ、オキシダーゼ、ラッカーゼ、および／もしくはペルオキシダーゼ、またはそれらの任意の組み合わせから選択される、第３６項に記載の使用。
【０２８７】
３８．第１項〜第１０項のうちのいずれか一項に記載の化合物の、抗菌剤としての使用。
【０２８８】
３９．化合物が、１種以上の酵素と組み合わせて使用される、第３８項に記載の使用。
【０２８９】
４０．１種以上の酵素が、プロテアーゼ、アミラーゼ、グルコアミラーゼ、マルトース生成アミラーゼ、非マルトース生成アミラーゼ、リパーゼ、クチナーゼ、カルボヒドラーゼ、セルラーゼ、ペクチナーゼ、マンナナーゼ、アラビナーゼ、ガラクタナーゼ、キシラナーゼ、オキシダーゼ、ラッカーゼ、および／もしくはペルオキシダーゼ、またはそれらの任意の組み合わせから選択される、第３９項に記載の使用。
【図１】
2013517762.tif 000022
【図２】
2013517762.tif 000023
【図３】
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【図４】
2013517762.tif 000025
【図５】
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【図６】
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【図７】
2013517762.tif 000028
【図８】
2013517762.tif 000029
【図９】
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【図１０】
2013517762.tif 000031
【図１１】
2013517762.tif 000032
【図１２】
2013517762.tif 000033
【図１３】
2013517762.tif 000034
【図１４】
2013517762.tif 000035
【図１５】
2013517762.tif 000036
【図１６】
2013517762.tif 000037
【図１７】
2013517762.tif 000038
【図１８】
2013517762.tif 000039
【図１９】
2013517762.tif 000040
【配列表】
2013517762000001.app
【国際調査報告】
2013517762.tif 000041
2013517762.tif 000042
2013517762.tif 000043