(57)【要約】  本発明は、インゲノール メブテートの新規な結晶形、その製造方法およびその使用に関する。より具体的には、本発明は、アモルファスのインゲノール メブテート(インゲノール−３−アンゲレート, PEP005)を、単結晶Ｘ線結晶解析(ＸＲＣ)、フーリエ変換赤外全反射分光法(ＦＴＩＲ−ＡＴＲ)および示差走査熱量測定(ＤＳＣ)によって特徴付けられた結晶形に変換することに関する。【特許請求の範囲】
【請求項１】
結晶性インゲノール メブテート。
【請求項２】
溶媒和物でない、請求項１記載の結晶性インゲノール メブテート。
【請求項３】
斜方晶系である、請求項１記載の結晶形。
【請求項４】
空間群がP212121に属する、請求項１記載の結晶形。
【請求項５】
約3535、2951、1712、1456、1378、1246、1133、1028および／または956cm-1(±3cm-1)の全反射測定ピークを示すＦＴＩＲ−ＡＴＲスペクトルによってさらに特徴付けられる、請求項１記載の結晶形。
【請求項６】
約１５３±５℃で開始する事象を含む示差走査熱量測定曲線を有する、請求項１記載の結晶形。
【請求項７】
アセトン、アセトニトリル、エタノール、２−プロパノール、ヘプタン、メチル ｔｅｒｔ−ブチル エーテル、モノグリム、トルエン、アセトンおよびヘプタンの混合物、アセトンおよびｃ−ヘキサンの混合物、アセトンおよびｉ−オクタンの混合物、アセトンおよびキシレンの混合物、アセトニトリルおよび水の混合物、エタノールおよび水の混合物、２−プロパノールおよび水の混合物、２−プロパノールおよびヘプタンの混合物、１,４−ジオキサンおよびヘプタンの混合物、１,４−ジオキサン、ジメチルスルホキシドおよびヘプタンの混合物、または、トルエンおよびヘプタンの混合物から、式１の化合物を結晶化することによって得られる、請求項１記載の結晶形。
【請求項８】
表１に示されたものと実質的に同一のＸＲＣ単結晶パラメーターを有する、請求項１記載の結晶形。
【請求項９】
(ａ)表２に示した単位胞の起点に対する原子の位置にある原子を含むか、あるいは、(ｂ)表３に示した結合長または結合角を含む、請求項１記載の結晶形。
【請求項１０】
式２のＸＲＣ単結晶構造を有する、請求項１記載の結晶形。
【請求項１１】
少なくとも約９９.５％の純度を有する、インゲノール メブテート。
【請求項１２】
純度が少なくとも約９９.７％である、請求項１１記載のインゲノール メブテート。
【請求項１３】
純度が少なくとも約９９.９％である、請求項１１記載のインゲノール メブテート。
【請求項１４】
医薬として使用するための、請求項１〜１０の何れか１項に記載の結晶性インゲノール メブテート、または請求項１１〜１３の何れか１項に記載のインゲノール メブテート。
【請求項１５】
癌、または腫瘍性細胞が関与する他の状態を処置するための、請求項１〜１０の何れか１項に記載の結晶性インゲノール メブテート、または請求項１１〜１３の何れか１項に記載のインゲノール メブテート。
【請求項１６】
日光角化症または光線性角化症を処置するための、請求項１〜１０の何れか１項に記載の結晶性インゲノール メブテート、または請求項１１〜１３の何れか１項に記載のインゲノール メブテート。
【請求項１７】
皮膚癌、黒色腫、悪性黒色腫、メルケル細胞癌、扁平上皮癌、基底細胞癌または表在型基底細胞癌である癌を処置するための、請求項１〜１０の何れか１項に記載の結晶性インゲノール メブテート、または請求項１１〜１３の何れか１項に記載のインゲノール メブテート。
【請求項１８】
癌を処置するための、請求項１〜１０の何れか１項に記載の結晶性インゲノール メブテート、または請求項１１〜１３の何れか１項に記載のインゲノール メブテート。
【請求項１９】
請求項１〜１０の何れか１項に記載の結晶性インゲノール メブテートまたは請求項１１〜１３の何れか１項に記載のインゲノール メブテート、および、１種以上の薬学的に許容される担体またはビークルを含む医薬組成物。
【請求項２０】
局所投与に適当である、請求項１９に記載の医薬組成物。
【請求項２１】
結晶性インゲノール メブテートを薬学的に許容される担体またはビークルと合わせることを含む、結晶性インゲノール メブテートを含む医薬組成物の製造方法。
【請求項２２】
結晶性インゲノール メブテートを製造する方法であって、(ａ)一定量のインゲノール メブテートを、溶媒または溶媒混合物に溶解し、(ｂ)所望により水を加え、(ｃ)インゲノール メブテートのほぼ全量が溶液に溶解できない温度まで溶液を冷却し、(ｄ)形成した全てのインゲノール メブテート結晶を濾過によって単離することを含む方法。
【請求項２３】
溶媒が、Ｃ１−Ｃ６直鎖または分枝鎖アルキルアルコール、例えばエタノール、および、Ｃ２−Ｃ６直鎖または分枝鎖アルキルニトリル、例えばアセトニトリルから選択される、請求項２２記載の方法。
【請求項２４】
癌、または腫瘍性細胞が関与する他の状態を処置する方法であって、有効量の請求項１９記載の医薬組成物を、処置を必要とする対象に投与することを含む方法。
【請求項２５】
光線性角化症を処置する方法であって、有効量の請求項１９記載の医薬組成物を、処置を必要とする対象に投与することを含む方法。
【請求項２６】
表在型基底細胞癌を処置する方法であって、有効量の請求項１９記載の医薬組成物を、処置を必要とする対象に投与することを含む方法。
【請求項２７】
尋常性疣贅、生殖器疣贅および肛門周囲疣贅からなる疣贅の群から選択される疣贅を処置する方法であって、有効量の請求項１９記載の医薬組成物を、処置を必要とする対象に投与することを含む方法。
【請求項２８】
光損傷を処置する方法であって、有効量の請求項１９記載の医薬組成物を、処置を必要とする対象に投与することを含む方法。
【請求項２９】
棒状結晶である、請求項１記載の結晶形。
【請求項３０】
無色である、請求項１記載の結晶形。
【請求項３１】
棒状結晶が、約0.3mm×約0.05mm×約0.05mmのサイズを有する、請求項２９記載の結晶形。
【請求項３２】
処置領域の皮膚障害を処置するのに有効な量の結晶性インゲノール メブテートを局所送達するために、対象の処置領域に局所適用するための医薬組成物であって、有効量の結晶性インゲノール メブテートおよび薬学的に許容されるビークルを含む医薬組成物。
【請求項３３】
医薬組成物がゲルである、請求項３２記載の医薬組成物。
【請求項３４】
医薬組成物がクリームである、請求項３２記載の医薬組成物。
【請求項３５】
医薬組成物が軟膏である、請求項３２記載の医薬組成物。
【請求項３６】
医薬組成物が懸濁液である、請求項３２記載の医薬組成物。
【請求項３７】
医薬組成物がローションである、請求項３２記載の医薬組成物。
【請求項３８】
医薬組成物がロウ膏である、請求項３２記載の医薬組成物。
【請求項３９】
医薬組成物が香膏である、請求項３２記載の医薬組成物。
【請求項４０】
皮膚障害が光線性角化症である、請求項３２〜３９の何れか１項に記載の医薬組成物。
【請求項４１】
皮膚障害が、尋常性疣贅、生殖器疣贅および肛門周囲疣贅からなる疣贅の群から選択される疣贅である、請求項３２〜３９の何れか１項に記載の医薬組成物。
【請求項４２】
皮膚障害が表在型基底細胞癌である、請求項３２〜３９の何れか１項に記載の医薬組成物。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
関連出願の相互引用
本出願は、米国特許出願第61/325,032号(2010年4月16日出願)(その内容は、言及することによって本明細書に組み込まれる。)に基づく優先権を主張している。
【０００２】
本発明の分野
本発明は、インゲノール メブテート(ingenol mebutate)の新規な結晶形、その製造方法およびその使用に関する。
【背景技術】
【０００３】
本発明の背景
インゲノール メブテートは、式１に示す構造および下記の化学名を有する：
１) ２−ブテン酸, ２−メチル (１ａＲ,２Ｓ,５Ｒ,５ａＳ,６Ｓ,８ａＳ,９Ｒ,１０ａＲ)−１ａ,２,５,５ａ,６,９,１０,１０ａ−オクタヒドロ−５,５ａ−ジヒドロキシ−４−(ヒドロキシメチル)−１,１,７,９−テトラメチル−１１−オキソ−１Ｈ−２,８ａ−メタノシクロペンタ[ａ]シクロプロパ[ｅ]シクロデセン−６−イル エステル, (２Ｚ)−
２) (１ａＲ,２Ｓ,５Ｒ,５ａＳ,６Ｓ,８ａＳ,９Ｒ,１０ａＲ)−５,５ａ−ジヒドロキシ−４−(ヒドロキシメチル)−１,１,７,９−テトラメチル−１１−オキソ−１ａ,２,５,５ａ,６,９,１０,１０ａ−オクタヒドロ−１Ｈ−２,８ａ−メタノシクロペンタ[ａ]シクロプロパ[ｅ]シクロデセン−６−イル (２Ｚ)−２−メチルブタ−２−エノエート)
【化１】
2013525300.tif 000002
式１：インゲノール メブテート
【０００４】
インゲノール メブテート(同義語：PEP005, インゲノール−３−アンゲレート, ＣＡＳ番号75567-37-2)は、種々のトウダイグサ科、特にユーフォルビア ペプルス(Euphorbia peplus)およびユーフォルビア ドルモンディー(Euphorbia drummondii)から単離され得る。インゲノール メブテートは、式１に示した構造を有する。
【０００５】
ユーフォルビア ペプルス、ユーフォルビア ヒルタ(Euphorbia hirta)および／またはユーフォルビア ドルモンディーの樹液から９５％  エタノールで抽出し、続いてクロマトグラフィーで精製することによるインゲノール メブテートの調製が、欧州特許第1015413 B1号(その全体が、言及することによって本明細書に組み込まれる。)に開示されている。ユーフォルビア ペプルスからの単離はまた、Hohmann et. al. Planta Med. 66, 3, (2000)(その全体が、言及することによって本明細書に組み込まれる。)に記載されている。インゲノール メブテートおよび他の薬学的に活性なインゲノール誘導体を対象とする他の特許出願は、国際公開第2008/131491号、第2007/068963号、第2007/059584号および第2007/053912号(各々の全体が、言及することによって本明細書に組み込まれる。)を含む。
【０００６】
インゲノール メブテートは、皮膚癌細胞に対して、迅速なミトコンドリア破壊による、および原発性壊死による細胞死による高い毒性が見出されている一方で、正常細胞は、インゲノール メブテートに対する感受性が低い。
【０００７】
インゲノール メブテートは、強力な抗癌剤であり、マイクログラムの量で治療上有効であることが示されている。皮膚癌の一般的な前駆状態である光線性角化症(ＡＫ)処置におけるインゲノール メブテートを評価する第III相試験からの近年の発見が、第６８回米国皮膚病学会年次総会(AAD) (Scientific Session Poster Discussion: P105)に発表された。該試験のREGION-Iの結果は、非頭部領域のインゲノール メブテートゲルによる１日１回連続２日間の処置(ｎ＝１１７)が、ビークルまたはプラセボ(ｎ＝１１８)と比較して、有意なＡＫ病変の浄化をもたらすことを証明した。該試験は、ＡＫ病変数中央値の約６６.７％の減少(ｐ＜０.０００１)、極めて処置の難しい手の裏面および腕の病変を含む約２７.４％の完全浄化率(ｐ＜０.０００１)、および約４４.４％の部分浄化率(ｐ＜０.０００１)を示した。
【０００８】
インゲノール メブテートは、アモルファスの形態で、Sigma-Aldrichから市販されている。しかし、インゲノール メブテートの結晶形は、全く報告されていない。
【発明の概要】
【０００９】
本発明の概要
本発明は、インゲノール メブテートの新規な結晶形、この結晶形を含む医薬組成物、およびその製造方法および使用を目的とする。
【００１０】
従って、本発明の第１の態様は、式１の化合物の結晶形を含む。
【００１１】
一つの態様において、式１の化合物の結晶形は、下のグラフ１に示したものと本質的に同様のフーリエ変換赤外全反射(ＦＴＩＲ−ＡＴＲ)スペクトルを有する：
【表１】
2013525300.tif 000003
【００１２】
グラフ１は、Perkin Elmer Spectrum One FTIR spectrometerで、the Universal Attenuated Total Reflectance accessoryを用いて得た、結晶性インゲノール メブテートの特徴的なＦＴＩＲ−ＡＴＲスペクトルである。
【００１３】
他の態様において、式１の化合物の結晶形は、約3535、2951、1712、1456、1378、1246、1133、1028および／または956cm-1(±3cm-1)の全反射測定ピークをそれぞれ１つ以上示すフーリエ変換赤外全反射(ＦＴＩＲ−ＡＴＲ)スペクトルによって特徴付けられる。
【００１４】
また、他の態様において、式１の化合物の結晶形は、約１５３℃(±５℃)で開始する事象を含む示差走査熱量測定(ＤＳＣ)曲線を有する。特徴的なＤＳＣ曲線は、２０℃/分の加熱速度でPerkin Elmer DSC 8500を用いて特性決定した。
【００１５】
また、他の態様において、式１の化合物の結晶形は、表１に記載した結晶パラメーターを１つ以上有する。
【表２】
2013525300.tif 000004
【００１６】
また、他の態様において、式１の化合物の結晶形は、表２に示した単位胞の起点に対する原子の位置にある原子を含むか、あるいは、表３に示した結合長または結合角を含む。
【００１７】
また、他の態様において、式１の化合物の結晶形は、式２に示した単結晶Ｘ線結晶解析(ＸＲＣ)によって得られる構造を有する：
【化２】
2013525300.tif 000005
式２：結晶性インゲノール メブテートの立体配置
単結晶Ｘ線結晶解析(ＸＲＣ)により得た。熱振動楕円体は３５％の確率水準で描いた。
【００１８】
或る態様において、本発明は、結晶性インゲノール メブテートを提供する。或る態様において、本結晶形は、溶媒和物でない。或る態様において、本結晶形は、斜方晶系である。或る態様において、本結晶形は、約3535、2951、1712、1456、1378、1246、1133、1028および／または956cm-1(±3cm-1)の全反射率ピークを示すＦＴＩＲ−ＡＴＲスペクトルによってさらに特徴付けられる。或る態様において、本結晶形は、約１５３±約５℃で開始する事象を含む示差走査熱量測定曲線を有する。或る態様において、本結晶形は、アセトン、アセトニトリル、エタノール、２−プロパノール、ヘプタン、メチル ｔｅｒｔ−ブチル エーテル、モノグリム、トルエン、アセトンおよびヘプタンの混合物、アセトンおよびｃ−ヘキサンの混合物、アセトンおよびｉ−オクタンの混合物、アセトンおよびキシレンの混合物、アセトニトリルおよび水の混合物、エタノールおよび水の混合物、２−プロパノールおよび水の混合物、２−プロパノールおよびヘプタンの混合物、１,４−ジオキサンおよびヘプタンの混合物、１,４−ジオキサン、ジメチルスルホキシドおよびヘプタンの混合物、または、トルエンおよびヘプタンの混合物から、式１の化合物を結晶化することによって得られる。本発明の態様において、結晶性インゲノール メブテートは、アセトニトリルから、または、エタノールおよび水の混合物から得られる。或る態様において、本結晶形は、表１に示されたものと実質的に同一のＸＲＣ単結晶パラメーターを有する。或る態様において、本結晶形は、表２に示した単位胞の起点に対する原子の位置にある原子を含むか、あるいは、表３に示した結合長または結合角を含む。
【００１９】
好ましくは、本発明の結晶性インゲノール メブテートは、約９９.５％(例えば実施例１に記載された通りにＨＰＬＣによって測定)の結晶純度を有する。或る態様において、結晶純度は、少なくとも約９９.７％であり、より好ましくは約９９.７２％である。或る態様において、結晶純度は、少なくとも約９９.９％である。
【００２０】
本発明はまた、医薬として使用するための、結晶性インゲノール メブテート、または高純度結晶性インゲノール メブテートを提供する。本発明はまた、皮膚障害、すなわち、癌、または腫瘍性細胞が関与する他の皮膚状態、例えば日光角化症または光線性角化症の局所的処置における、結晶性インゲノール メブテートまたは高純度結晶性インゲノール メブテートの使用を意図している。本発明で意図される皮膚癌は、とりわけ、皮膚癌、黒色腫、悪性黒色腫、メルケル細胞癌、扁平上皮癌、および、表在型基底細胞癌(ｓＢＣＣ)を含む基底細胞癌(ＢＣＣ)などを含む。
【００２１】
本発明はまた、結晶性インゲノール メブテートまたは高純度インゲノール メブテート、および１種以上の薬学的に許容される担体またはビークルを含む医薬組成物を提供する。或る態様において、医薬組成物は、皮膚障害を処置するために、有効量の結晶性インゲノール メブテートを皮膚の処置領域に送達する医薬組成物の局所投与に適当である。本発明に従って、医薬組成物は、液体または半固体、例えばゲル、クリーム、軟膏、ロウ膏(salve)、香膏(balm)、液体、懸濁液またはローションとして製剤化され得る。本発明はまた、薬学的に許容される担体またはビークルと結晶性インゲノール メブテートを合わせることを含む、結晶性インゲノール メブテートを含む医薬組成物を製造する方法を提供する。
【００２２】
本発明はまた、処置が必要な対象の処置領域に、有効量の本発明の医薬組成物を適用することを含む、皮膚障害、例えば癌または腫瘍性細胞が関与する他の状態を処置する方法を提供する。
【００２３】
定義
用語“Ｃ１−Ｃ６直鎖または分枝鎖アルキルアルコール”は、メタノール、エタノール、１−プロパノール、２−プロパノール、１−ブタノール、ｔｅｒｔ−ブタノールおよび２−ブタノールを含む。
【００２４】
用語“Ｃ２−Ｃ６直鎖または分枝鎖アルキルニトリル”は、アセトニトリルおよびプロピオニトリルを含む。
【発明を実施するための形態】
【００２５】
本発明の詳細な説明
本発明は、インゲノール メブテートの新規な結晶形に関する。この特定の結晶形は、驚くべきことに、ＡＰＩおよび最終投与形の取り扱いおよび製造を容易にすると考えられる物理学的性質を有する。
【００２６】
投与形を製造する容易性および安全性、ならびに薬物の性質が、薬学的有効成分(ＡＰＩ)の純度、溶解度、均一性、吸湿性および流動性などのような、しかしこれらに限定されない因子に依存し得ることがよく知られている。これらの性質は、アモルファスよりむしろ、特定の結晶形のＡＰＩが製造できたならば、変化させたり改善させたりし得る。本発明によって、驚くべきことに、結晶性インゲノール メブテートの加工可能性および物理化学的性質が好都合であることが見出された。本発明の医薬製剤について、結晶性インゲノール メブテートの有用性は、例えば懸濁液または微細化またはナノ加工法を用いる多様な局所製剤を独自に提供する。式１の化合物の結晶形を得るプロセスは、さらに、本化合物の純度を改善し、先の単離工程から副生成物を除去する。
【００２７】
上記のグラフ１は、本結晶形の特徴的なＦＴＩＲ−ＡＴＲスペクトルを示す。
上記の表１は、本結晶形についての単結晶パラメーターを示す。選択された原子の配置およびデータから決定された等方性熱的パラメーターを表２に提供する。結合長および結合角を表３に示す。他の結晶データおよび構造精密化詳細を表４に提供する。
上記の式２は、結晶性インゲノール メブテートの単結晶配置を示す。
【００２８】
本明細書で開示された結晶性組成物は、アモルファス(すなわち非結晶)または不純なインゲノール メブテートから製造してよい。インゲノール メブテートの製造は、欧州特許第1015413 B1号、または、Hohmann et. al., Planta Med. 66, 3, (2000)(これらは共に、その全体が言及することによって本明細書に組み込まれる。)に開示されている。
【００２９】
結晶性インゲノール メブテートを形成する好ましい方法は、アモルファス化合物を溶媒または溶媒混合物に溶解することを含む。現在好ましい溶媒は、Ｃ１−Ｃ６直鎖または分枝鎖アルキルアルコール、例えばエタノール、および、Ｃ２−Ｃ６直鎖または分枝鎖アルキルニトリル、例えばアセトニトリルを含む。本発明の一つの局面において、溶媒は、アセトン、エタノール、２−プロパノール、ヘプタン、メチル ｔｅｒｔ−ブチル エーテル、モノグリム、トルエン、アセトンおよびヘプタンの混合物、アセトンおよびｃ−ヘキサンの混合物、アセトンおよびｉ−オクタンの混合物、アセトンおよびキシレンの混合物、アセトニトリルおよび水の混合物、２−プロパノールおよび水の混合物、２−プロパノールおよびヘプタンの混合物、１,４−ジオキサンおよびヘプタンの混合物、１,４−ジオキサン、ジメチルスルホキシドおよびヘプタンの混合物、または、トルエンおよびヘプタンの混合物である。
【００３０】
好ましくは、溶媒を加熱し、アモルファス化合物をほぼ飽和量と同量まで溶解し、所望により水を加え、溶解させた本化合物の全量が溶媒または溶媒混合物に溶解できなくなる温度まで、得られた溶液を冷却する。濾過によって結晶を単離し、所望により真空で、所望により高温で乾燥させる。
【００３１】
また、他の局面において、本発明は、約８０％、例えば約８１％、約８２％、約８３％、約８４％、約８５％、約８６％、約８７％、約８８％、約８９％、約９０％、約９１％、約９２％、約９３％、約９４％、約９５％、約９６％、約９７％、約９８％、約９９％、または約１００％の多形純度を有する、上で定義した単離された本発明の結晶性インゲノール メブテートに関する。
【００３２】
また、他の局面において、本発明は、少なくとも約８０％、例えば約８１％、約８２％、約８３％、約８４％、約８５％、約８６％、約８７％、約８８％、約８９％、約９０％、約９１％、約９２％、約９３％、約９４％、約９５％、約９６％、約９７％、約９８％、約９９％、または約１００％の結晶化度を有する、上で定義した単離された本発明のインゲノール メブテートに関する。
【００３３】
また、他の局面において、本発明は、少なくとも約９０％、例えば約９０％、約９１％、約９２％、約９３％、約９４％、約９５％、約９６％、約９７％、約９８％、約９９％、または約１００％のアイソフォーム‘ｂ’、すなわちインゲノール−３−メブテートを含む、上で定義した単離された本発明のインゲノール メブテートに関する。
【００３４】
医薬製剤および処置方法
本発明のさらなる態様は、式１の化合物の結晶形および１種以上の薬学的に許容される担体またはビークルを含む医薬組成物を含む。
【００３５】
薬剤処方は、局所、経口、直腸、非経腸(静脈内、筋肉内)、経皮、頬側、鼻腔、舌下または皮下投与用のものを含み得る。
一つの具体的態様において、本発明の医薬組成物は、局所投与に適当である。
【００３６】
式１の化合物の結晶形は、例えば懸濁液中のような化合物が結晶として残っている、医薬製剤において有用である。
【００３７】
懸濁液は、加工された結晶性インゲノール メブテート、例えば微細化されたまたはナノ加工された結晶性インゲノール メブテートから製造できる。懸濁液は、そのままエアゾールに用いられても、他の医薬製剤、例えばクリーム、ゲル、軟膏、または局所適用に有用な他の製剤に加工されてもよい。
【００３８】
一般的に、結晶性インゲノール メブテートを、ビークルに分散させる。ビークルは、結晶性インゲノール メブテートがその中で懸濁液として維持され、送達に適当な、および保存中に活性物質が沈殿するのを防ぐのに適当な粘度を有する、水または他の適当なビークルであり得る。ビークルはまた、溶媒混合物であってもよい。
【００３９】
さらなる添加剤は、安定剤、乳化剤、浸透増強剤、ゲル化剤、および、皮膚製剤に一般的に用いられる他の成分、例えば抗酸化剤、保存料、顔料、皮膚軟化(soothing)剤、皮膚治癒剤、および皮膚コンディショニング剤であり得る。CTFA Cosmetic Ingredients Handbook, 2nd Ed., 1992を参照のこと。本発明の一つの態様において、保存料は、ベンジルアルコールである。
【００４０】
本発明は、上記の薬学的目的のための、結晶性インゲノール メブテートの懸濁液を提供する。医薬製剤中の化合物の濃度は、処置される疾患に基づいて決定される。局所投与において、結晶性インゲノール メブテートは、典型的に、組成物の重量に対して約０.００１〜約２０％、例えば約０.０１％〜約１０％の量で存在し得る。他の本発明の態様において、結晶性インゲノール メブテートは、約０.０５重量％〜約１重量％の量で存在する。本発明の他の態様において、結晶性インゲノール メブテートは、約０.０１％〜約０.５％の量で存在する。また、本発明の他の態様において、結晶性インゲノール メブテートは、０.１％付近の濃度で存在する。
【００４１】
本発明の医薬製剤の例は、例えば、ゲルの重量に対して０.０１５％または０.０５％のインゲノール メブテート(アモルファスまたは結晶)、イソプロピルアルコール、ヒドロキシエチルセルロース、クエン酸一水和物、クエン酸ナトリウム二水和物、ベンジルアルコールおよび精製水で製剤化された、局所用薬学的ゲルを含む。
【００４２】
例えば、対象の顔面および／または頭皮の光線性角化症の処置において、本発明の０.０１５％  インゲノール メブテート局所用ゲルは、１日１回連続３日間、顔面および頭皮の皮膚患部(処置領域)に適用され得る。
【００４３】
例えば、対象の体幹および／または四肢の光線性角化症の処置において、本発明の０.０５％  インゲノール メブテート局所用ゲルは、１日１回連続２日間、体幹および四肢の皮膚患部(処置領域)に適用され得る。
【００４４】
処置領域は、例えば、約２５cm2(例えば５cm×５cm)の１つの連続した領域として定義され得る。例えば、約０.４７ｇのゲルを含む単位投与チューブまたはパッケージのゲルを、指先に絞り出して、処置領域全体に均一に広げ、ゲルを約１５分間乾燥させる。好ましくは、１単位投与チューブ(ネジ式の蓋を有するチューブまたは個別包装を、１つの処置領域に用い得る。処置領域へのゲルの適用後すぐに、対象は手を洗うべきである。
【００４５】
最大使用条件下、例えば、約１００cm2の連続した処置領域が、４単位投与量の０.０５％  インゲノール メブテートゲルで、１日１回連続２日間、局所処置されるとき、インゲノール メブテートの全身吸収はほとんどないか全くないと考えられている。従って、本発明は、各々約０.４７ｇの量の０.０５％  インゲノール メブテートゲルを充填した少なくとも最大約２単位の投与チューブ、または、約０.４７ｇの量の０.０１５％  インゲノール メブテートゲルを充填した約６単位の投与チューブが、１日１回連続２日間、光線性角化症に罹患した最大処置領域が総計約１００cm2となる処置領域に、処置制限インゲノール メブテート全身吸収を起こすことなく適用され得ることを意図している。
【００４６】
本発明のさらなる態様は、医薬としての式１の化合物の結晶形の使用を含む。
本発明の他の態様において、光線性角化症または日光角化症または脂漏性角化症を処置するための、式１の化合物の結晶形の使用を含む。
【００４７】
本発明の他の態様は、癌、または腫瘍性細胞が関与する他の状態、ウイルス感染、細菌感染、創傷治癒、光線性皮膚障害および皮膚の皺を処置するための、式１の化合物の結晶形を含む。
【００４８】
本発明の一つの態様において、式１の化合物の結晶形は、基底細胞癌(ＢＣＣ)、結節性ＢＣＣ、表在型基底細胞癌(ｓＢＣＣ)、扁平上皮癌または正常所在扁平上皮癌(ＳＣＣＩＳ)の処置における使用が意図される。
【００４９】
本発明の一つの態様において、式１の化合物の結晶形は、光線性角化症の処置における使用が意図される。
本発明の一つの態様において、式１の化合物の結晶形は、脂漏性角化症の処置における使用が意図される。
本発明の一つの態様において、式１の化合物の結晶形は、光線性皮膚障害および小皺小皺の処置における使用が意図される。
【００５０】
本発明の一つの態様において、式１の化合物の結晶形は、ＨＰＶ感染が原因の病変または障害の処置における使用が意図される。
本発明の一つの態様において、病変は、尋常性疣贅または生殖器もしくは肛門周囲疣贅である。
【００５１】
本発明の一つの態様において、光線性角化症または日光角化症を処置する医薬を製造するための、式１の化合物の結晶形の使用を意図している。
本発明の一つの態様において、脂漏性角化症を処置する医薬を製造するための、式１の化合物の結晶形の使用を意図している。
【００５２】
本発明の一つの態様において、癌、または腫瘍性細胞が関与する他の状態を処置する医薬を製造するための、式１の化合物の結晶形の使用を意図している。
【００５３】
本発明の一つの態様において、ウイルス感染、細菌感染、創傷治癒、光線性皮膚障害および皮膚の皺を処置する医薬を製造するための、式１の化合物の結晶形の使用を意図している。
【００５４】
本発明の一つの態様において、基底細胞癌(ＢＣＣ)、結節性ＢＣＣ、表在型基底細胞癌(ｓＢＣＣ)、扁平上皮癌または正常所在扁平上皮癌(ＳＣＣＩＳ)を処置する医薬を製造するための、式１の化合物の結晶形の使用を意図している。
【００５５】
本発明の一つの態様において、光線性皮膚障害および小皺を処置する医薬を製造するための、式１の化合物の結晶形の使用を意図している。
【００５６】
本発明の一つの態様において、ＨＰＶ感染が原因の病変または障害を処置する医薬を製造するための、式１の化合物の結晶形の使用を意図している。
【００５７】
本発明の一つの態様において、尋常性疣贅または生殖器もしくは肛門周囲疣贅を処置する医薬を製造するための、式１の化合物の結晶形の使用を意図している。
【００５８】
用語“癌”は、本発明の内容において、皮膚癌、例えば非黒色腫皮膚癌、黒色腫、悪性黒色腫、メルケル細胞癌、扁平上皮癌および基底細胞癌を包含することを意図している。基底細胞癌は、表在型基底細胞癌および結節性基底細胞癌を包含する。他の癌のタイプは、血液系癌、例えば骨髄の癌、特に急性骨髄性白血病および慢性骨髄性白血病；良性前立腺肥大症、前立腺上皮内癌、膀胱癌、前立腺の腺癌および腎臓細胞癌を含む前立腺および膀胱の癌を含む。他の癌は、ＡＩＤＳ関連癌、聴神経腫(acoustic neoma)、腺嚢癌腫、副腎皮質癌、特発性骨髄線維症、脱毛症、胞巣状軟部肉腫、肛門の癌、血管肉腫、再生不良性貧血、星状細胞腫、毛細血管拡張性運動失調症、基底細胞癌(ｂｃｃ)、膀胱癌、骨の癌、腸の癌、脳幹神経膠腫、脳およびＣＮＳ癌、乳癌、ＣＮＳ癌、カルチノイド癌、子宮頸癌、小児脳癌、小児癌、小児軟部肉腫、軟骨肉腫、絨毛癌、結腸直腸癌、皮膚Ｔ細胞リンパ腫、隆起性皮膚線維肉腫、線維形成性小円形細胞腫瘍、腺管癌、内分泌癌、子宮内膜癌、上衣腫、食道癌、ユーイング肉腫、肝外胆管癌、眼の癌、眼内黒色腫、網膜芽細胞腫、卵管癌、ファンコニー貧血、線維肉腫、胆嚢癌、胃癌、消化器の癌、消化管カルチノイド癌、尿生殖器癌、胚細胞癌、妊娠性絨毛性疾患、神経膠腫、婦人科の癌、血液系腫瘍、頭頚部癌、肝細胞癌、遺伝性乳癌、組織球増殖症、ホジキン病、ヒトパピローマウイルス、胞状奇胎、高カルシウム血症、下咽頭癌、眼内黒色腫、膵島Ｔ細胞癌、カポジ肉腫、腎臓の癌、ランゲルハンス細胞組織球症、喉頭癌、平滑筋肉腫、リー・フラウメニ症候群、口唇の癌、脂肪肉腫、肝臓癌、肺癌、リンパ浮腫、リンパ腫、ホジキンリンパ腫、非ホジキンリンパ腫、男性乳癌、腎臓の悪性ラブドイド腫瘍、髄芽腫、中皮腫、転移癌、口の癌、多発性内分泌腺腫症、菌状息肉症、骨髄異形成症候群、骨髄腫、骨髄増殖性障害、鼻の癌、鼻咽頭癌、腎芽腫、神経芽腫、神経線維腫症、ナイミーヘン染色体不安定症候群、小細胞肺癌(ｎｓｃｌｃ)、眼の癌、食道癌、口腔癌、中咽頭癌、骨肉腫、オストミー卵巣癌(ostomy ovarian cancer)、膵臓癌、副鼻腔癌、副甲状腺癌、耳下腺癌、陰茎癌、末梢性神経外胚葉性腫瘍、下垂体癌、真性赤血球増加症、前立腺癌、まれな癌および関連障害、網膜芽細胞腫、横紋筋肉腫、ロトムンド・トムソン症候群、唾液腺癌、肉腫、シュワン腫、セザリー症候群、小細胞肺癌(ｓｃｌｃ)、小腸癌、軟部組織肉腫、脊髄の癌、胃癌、滑膜肉腫、精巣癌、胸腺の癌、甲状腺癌、移行上皮癌(膀胱)、移行上皮癌(腎臓−骨盤−／−輸尿管)、絨毛性癌、尿道癌、尿路の癌、ウロプラキン、子宮肉腫、子宮癌、膣の癌、外陰部癌、ワルデンシュトレームマクログロブリン血症およびウイルムス癌を含む。本発明の方法を用いて処置される固形癌は、原発性病変であっても、原発性癌の転移の結果であってもよい。さらに、固形癌が原発性癌の転移ならば、原発性癌は、上記の原発性固形癌または分散型原発性癌の何れであってもよい。
【００５９】
本発明の一つの態様において、“癌”は皮膚癌である。本発明の態様において、皮膚癌は、非黒色腫皮膚癌、悪性黒色腫、メルケル細胞癌、扁平上皮癌または基底細胞癌、例えば表在型基底細胞癌または結節性基底細胞癌である。
【００６０】
用語“光線性皮膚障害”は、本発明の内容において、小皺、皺およびＵＶ老化を包含することを意図している。ＵＶ老化は、しばしば、上皮の厚さまたは表皮萎縮の増加によって顕在化し、最も顕著には、皮膚−上皮接合部直下へのエラスチン含有物質の蓄積である日光弾力線維症によって表される。コラーゲンおよび弾性繊維は、フラグメント化され、組織崩壊する。美容レベルでは、これは、皮革様外観、皮膚脆弱性および不規則な色素沈着をもたらす皮膚の発赤および／または肥厚、張りおよび弾力の低下、ならびに皺の形成、乾燥、そばかすおよび深い皺の形成として観察され得る。
【００６１】
用語“ウイルス感染”は、本発明の内容において、身体、例えば皮膚、生殖器および口に疣贅の形成を引き起こすＨＰＶ感染を包含することを意図している。ＨＰＶは、ヒトパピローマウイルスを言う。他のウイルスは、アデノウイルス、パポバウイルス、ヘルペスウイルス(例えばシンプレックスウイルス)、水痘帯状疱疹ウイルス、エプスタイン・バーウイルス、ＣＭＶウイルス、ポックスウイルス(例えば天然痘ウイルス)、ワクチニアウイルス、Ａ型肝炎ウイルス、Ｂ型肝炎ウイルス、Ｃ型肝炎ウイルス、ライノウイルス、ポリオウイルス、風疹ウイルス、アルボウイルス、狂犬病ウイルス、Ａ型およびＢ型インフルエンザ、麻疹ウイルス、ムンプスウイルス、ＨＩＶ、ＨＴＬＶ Ｉ型およびII型から選択される。本発明の一つの態様において、ＨＰＶ感染は、尋常性疣贅または生殖器疣贅を言う。
【００６２】
用語“細菌感染”は、本発明の内容において、原核生物および真核生物細菌感染、および、グラム陽性菌、グラム陰性菌およびグラム不定菌、および細胞内細菌を包含することを意図している。細菌の例は、トレポネーマ、ボレリア、ナイセリア、レジオネラ、ボルデテラ、エシェリキア、サルモネラ、シゲラ、クレブシエラ、エルシニア、ビブリオ、ヘモフィルス、リケッチア、クラミジア、マイコプラズマ、スタフィロコッカス、ストレプトコッカス、バチルス、クロストリジウム、コリネバクテリウム、プロピオニバクテリウム、マイコバクテリウム、ウレアプラズマおよびリステリアを含む。特に、下記の種である：梅毒トレポネーマ(Treponema pallidum)、ボレリア・ブルグドルフェリ(Borrelia Burgdorferi)、ナイセリア・ゴノレー(Neisseria gonorrhoea)、レジオネラ・ニューモフィラ(Legionella pneumophila)、ボルデテラ・パータシス(Bordetella pertussis)、大腸菌(Escherichia coli)、サルモネラ・チフィ(Salmonella typhi)、サルモネラ・チフィリウム(salmonella typhimurium)、赤痢菌(Shigella dysenteriae)、クレブシエラ・ニューモニエ(Klebsiella pneumoniae)、エルシニア・ペスチス(Yersinia pestis)、ビブリオ・コレラエ(Vibrio cholerae)、ヘモフィルス・インフルエンザエ(Hemophilus influenza)、リケッチア・リケッチイ(Rickettsia rickettsii)、クラミジア・トラコマチス(Chlamydia trachomatis)、マイコプラズマ・ニューモニエ(Mycoplasma pneumonia)、スタフィロコッカス・アウレウス(Staphylococcus aureus)、ストレプトコッカス・ニューモニエ(Streptococcus pneumoniae)、ストレプトコッカス・ピオゲネス(Streptococcus pyogenes)、バチルス・アントラシス(Bacillus anthracis)、クロストリジウム・ボツリヌム(Clostridium botulinum)、クロストリジウム・テタニ(Clostridium tetani)、クロストリジウム・パーフリンジェンス(clostridium perfringens)、コリネバクテリウム・ジフテリエ(Corynebacterium diphteriae)、プロピオニバクテリウム・アクネス(Proprionibacterium acne)、マイコバクテリウム・ツベルクローシス(Mycobacterium tuberculosis)、ライ菌(Mycobacterium leprae)およびリステリア・モノサイトゲネス(Listeriare monocytogenes)。低級真核生物は、酵母および真菌類、例えばニューモシスチス・カリニ(Pneumocystis nerinii)、カンジダ・アルビカンス(Candida albicans)、アスペルギルス(Aspergillus)、ヒストプラズマ・カプスラーツム(Histoplasma capsulatum)、ブラストミセス・デルマチチジス(Blastomyces dermatitidis)、クリプトコッカス・ネオフォルマンス(Cryptococcus neoformans)、トリコフィトン(Trichophyton)およびミクロスポルム(Microsporum)を含む。複雑な真核生物は、寄生虫、昆虫、蜘蛛、線虫、アメーバ(aemobe)、赤痢アメーバ(Entamoeba histolytica)、ランブル鞭毛虫(Giardia lamblia)、トリコモナス原虫(Trichonomonas vaginalis)、ガンビアトリパノソーマ(Trypanosoma brucei gembiense)、トリパノソーマ・クルージ(Trypanosoma cruzi)、大腸バランチジウム(Blantidium coli)、トキソプラズマ・ゴンディ(Toxoplasma gondii)、クリプトスポリジウム(Cryptosporidium)およびリーシュマニア(Leishmania)を含む。
【００６３】
本発明の内容において、用語“創傷治癒”は、瘢痕組織の減少または最小化、創傷部の美容術または機能的結果の改善および瘢痕軽減を意味し、創傷は、皮膚の創傷、慢性創傷、または、例えば糖尿病関連創傷であり、切り傷、裂傷、外科的切開、刺し傷、擦過傷(graces)、引っ掻き傷、圧迫創、表皮剥脱、摩擦傷、慢性創傷、潰瘍、熱の影響による創傷、化学的創傷、病原体感染の結果生じた創傷、皮膚移植／移植提供部位および受容部位、免疫応答異常(condition)、口腔内創傷、胃または腸の創傷、軟骨または骨の損傷、切断部、および角膜病変を含む。
【００６４】
本発明のさらなる態様は、皮膚癌、例えば悪性黒色腫、メルケル細胞癌、扁平上皮癌または基底細胞癌である癌を処置するための、式１の化合物の結晶形を含む。
本発明は、下記の非限定的実施例によって例示される。
【実施例】
【００６５】
実施例１：結晶性インゲノール メブテートの製造
【化３】
2013525300.tif 000006
【００６６】
４バッチの粗製のインゲノール メブテート(約２２ｇ, ５１.１mmol)を、約５００mlの容器中で合わせる。エタノール(約１５４ml)を容器に入れ、混合物を約１５〜２５℃で撹拌する(５分撹拌後、大部分の粗製インゲノール メブテートが溶解した)。油浴を予め約４０℃に加熱し、容器をそれに浸ける(これにより完全に溶解)。混合物が永続して不透明となるまで、精製水(約１７６ml)を容器に滴下する。混合物を約３０〜３５℃(内部温度)で約５〜６分間撹拌し、この時点で混合物は僅かに不透明であり、さらに水を入れる(２２ml)。混合物を約３５〜４０℃(内部温度)でさらに約１０〜１２分間撹拌し、熱源を除き、不透明な混合物を約２０〜２５℃まで冷却し、この温度で約４５〜５０分間撹拌する。さらに、反応物を約０〜５℃まで冷却し、この温度で約１３０〜１３５分間撹拌する。懸濁液を吸引濾過し、濾過した再結晶母液(反応容器を濯ぐために用いたもの)の半量で、集めた固体を洗浄する。さらに、集めた固体を精製水(２×１１０ml)で、次にヘプタン(２×１１０ml)で洗浄し、フィルターケーキを真空で約１４０分間乾燥させる。さらに、集めた固体を、真空オーブン中、約４０〜４５℃で乾燥させ、インゲノール メブテートを固体として得る(約１９.８５ｇ, 理論値の約９０%, 約９０％(w/w))。ＨＰＬＣ分析による純度：約９９.７２％エリア。
【００６７】
実施例２：結晶性インゲノール メブテートの製造
５ロットの粗製のインゲノール メブテートを、アセトン(約２３３mL)中で再度懸濁することによって合わせ、約４３.６ｇの１つのプール(約２８.０７ｇのインゲノール メブテートを含む)として、丸底フラスコに移し、次に、ロータリーエバポレーターで乾固するまで蒸発する。乾固させた粗製のインゲノール メブテートのプールを、約３８mLのアセトニトリルに加え、水浴(約４０℃)を用いてそれが加熱される間、ロータリーエバポレーターで約１０分間ゆっくり回転させる。これにより完全に溶解する。その後、水浴の温度を、さらに約２５分間約２５℃に維持されるまで、約２５〜３０分毎に約５℃下げる。フラスコをロータリーエバポレーターから除き、密閉した後、それを約−２０℃の冷凍庫中で約１１日間置く。約５日後に結晶が成長し始めた。パスツールピペットを使用して、上清(約１５.５mL)を除いた後、インゲノール メブテートの結晶を、ＰＴＦＥフィルター膜で吸引濾過によって集める。予め冷却したアセトニトリル(２４mL)を用いて、結晶化フラスコを濯ぎ、フィルターを均一に覆うように結晶を広げた後、予め冷却したアセトニトリル(２×２４mL)を滴下して、さらに洗浄を行う。完了後、結晶を、真空で約１５分間、次に窒素を約１.５時間流すことによって部分的に乾燥させる。これにより、約１０.９ｇのインゲノール メブテート結晶を得る(インゲノール メブテートをベースとして収率約３９％)。
【００６８】
実施例３：結晶性インゲノール メブテートのＸＲＣ単結晶構造
実施例１の方法を用いて得られた代表的な棒状結晶(約0.3mm×約0.05mm×約0.05mm)を調べて、NoniusKappaCCD面積検出器回折計で、データセットを集める。
他の実験の詳細：回折装置：Nonius KappaCCD面積検出器 (非対称ユニットを満たすためのφスキャンおよびωスキャン)。セル決定：DirAx (Duisenberg, AJ.M.(1992). J Appl. Cryst. 25, 92-96)。データ収集：Collect (Collect＝データ収集ソフトウェア, R Hooft, Nonius B.V., 1998)。データ整理およびセル精密化：Denzo (Z. Otwinowski & W. Minor, Methods in Enzymology (1997) vol. 276: Macromolecular Crystallography part A, pp. 307-326; C. W. Carter, Jr. & R. M. Sweet, Eds., Academic Press)。吸収補正：Sheldrick, G. M. SADABS - Bruker Nonius area detector scaling and absorption correction - V2.10。構造解析：SHELXS97 (G.M. Sheldrick, Acta Cryst. (1990) A46 467- 473)。構造精密化：SHELXS97 (G.M. Sheldrick (1997), University of Goettingen, Germany)。グラフィックス：Cameron＝分子グラフィックスパッケージ (D. M. Watkin, L. Pearce and C.K Prout, Chemical Crystallography Laboratory, University of Oxford, 1993)。
特別な詳細：全ての水素原子を理想化された位置に置き、ライディングモデルを用いて再構成する。大環状環に立体配座的無秩序がある。
【００６９】
結晶の詳細は、上記の表１で提供される。データから決定される選択された原子座標および等方性熱的パラメーターは、表２に提供する。他の結晶データおよび構造精密化の詳細は、表４に提供する。
表２：原子座標[×１０４]、等価の等方性置換パラメーター[Å２×１０３]およびサイト占有率。Ｕeqは、直交したＵijテンソルのトレースの１／３として定義される。
【表３】
2013525300.tif 000007
【００７０】
表３：結合長[Å]
【表４】
2013525300.tif 000008
【００７１】
表３(続き)：結合角[°]
【表５】
2013525300.tif 000009
【００７２】
表４：結晶データおよび構造精密化詳細
【表６】
2013525300.tif 000010
回折装置：Nonius KappaCCD面積検出器 (非対称ユニットを満たすためのφスキャンおよびωスキャン)。セル決定：DirAx (Duisenberg, AJ.M.(1992). J Appl. Cryst. 25, 92-96)。データ収集：Collect (Collect＝データ収集ソフトウェア, R Hooft, Nonius B.V., 1998)。データ整理およびセル精密化：Denzo (Z. Otwinowski & W. Minor, Methods in Enzymology (1997) vol. 276: Macromolecular Crystallography part A, pp. 307-326; C. W. Carter, Jr. & R. M. Sweet, Eds., Academic Press)。吸収補正：Sheldrick, G. M. SADABS - Bruker Nonius area detector scaling and absorption correction - V2.10。構造解析：SHELXS97 (G.M. Sheldrick, Acta Cryst. (1990) A46 467- 473)。構造精密化：SHELXS97 (G.M. Sheldrick (1997), University of Goettingen, Germany)。グラフィックス：Cameron＝分子グラフィックスパッケージ (D. M. Watkin, L. Pearce and C.K Prout, Chemical Crystallography Laboratory, University of Oxford, 1993)。
特別な詳細：全ての水素原子を理想化された位置に置き、ライディングモデルを用いて精密化した。大環状環に立体配座的無秩序がある。
【国際調査報告】
2013525300.tif 000011
2013525300.tif 000012
2013525300.tif 000013