(57)【要約】軟膜の分離および軸方向拡張のための管およびフロートシステムが提供される。概して、システムは、可撓性試料管と、赤血球と血漿との中間の比重を有する剛体セパレータフロートとを含む。試料管は、第１の断面内径を有する伸長側壁を有する。フロートは、本体部分と、試料管の側壁を係合し、それを支持する本体部分から突出する１つ以上の支持部材とを有する。遠心分離中、遠心力は、管の直径を拡大し、管内のフロートの密度に基づいた軸方向移動を可能にする。遠心分離終了後、管側壁は、その第１の直径に戻り、それによって、フロートを捕捉し、環状容積内に軟膜成分を捕集する。軟膜成分を捕捉し、回収するためのいくつかの異なるシステムが、説明される。
2013528785.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
血液試料中の軟膜成分を分離し、軸方向に拡張する方法であって、
前記血液試料を可撓性試料管内に導入することであって、前記試料管は、側壁を有している、ことと、
剛体容積占有フロートを前記可撓性試料管内に導入することであって、前記剛体フロートは、赤血球と血漿との中間の比重を有しており、
前記フロートは、
本体部分であって、前記本体部分と前記側壁との間に環状容積を形成するために、前記本体部分は、前記側壁によって半径方向に間隔をあけて包囲されている、本体部分と、
前記本体部分から突出し、前記側壁を係合する１つ以上の支持部材と、
を備えている、ことと、
ある回転速度で前記試料管を遠心分離することであって、前記回転速度は、前記フロートの軸方向移動を可能にするための十分に大きい直径への前記側壁の拡大と、別々の層への血液の分離と、前記血液試料の少なくとも前記軟膜成分と整列する前記フロートの移動とを生じさせる、ことと、
前記回転速度を低減することにより、前記側壁に、前記フロートを捕捉させ、前記環状容積内に軟膜成分を捕集させることと、
前記１つ以上の支持部材のうちの少なくとも１つを前記側壁に溶接することと
を含む、方法。
【請求項２】
前記溶接は、少なくとも１つの溶接される支持部材の円周の周囲において連続的である、請求項１に記載の方法。
【請求項３】
前記溶接は、少なくとも１つの溶接される支持部材の円周の周囲において不連続的である、請求項１に記載の方法。
【請求項４】
前記溶接は、超音波溶接である、請求項１に記載の方法。
【請求項５】
前記フロートは、前記軟膜成分を通る過剰な流体流動を阻止するための解放手段をさらに備えている、請求項１に記載の方法。
【請求項６】
前記フロートは、前記本体部分の上端から半径方向に延在する上部支持部材と、前記本体部分の下端から半径方向に延在する下部支持部材とを備え、前記上部および下部支持部材は両方とも、前記試料管に溶接される、請求項１に記載の方法。
【請求項７】
血液試料中の標的細胞を検出する方法であって、
前記標的細胞を前記血液試料中の他の細胞から区別するために、前記血液試料を１つ以上の標識薬剤と組み合わせることと、
前記血液試料を可撓性側壁を備えている透明試料管内に導入することであって、前記透明試料管は、第１の断面内径を有している、ことと、
容積占有セパレータフロートを前記試料管内に導入することであって、
前記セパレータフロートは、本体部分と、前記本体部分から突出する１つ以上の支持部材とを備え、前記１つ以上の支持部材は、前記試料管の側壁を係合し、前記フロートの前記支持部材は、前記管の第１の内径に実質的に等しい断面直径を有し、前記本体部分は、前記側壁の軸方向に整列された部分と一緒に、前記本体部分と前記側壁との間に環状容積を画定し、前記支持部材は、前記環状容積を横断し、１つ以上の分析領域を生成する、ことと、
ある回転速度で前記試料管を遠心分離することであって、前記回転速度は、前記フロートの軸方向移動を可能にするために十分に大きい第２の内径への前記側壁の拡大と、別々の層への血液の分離と、前記血液試料の少なくとも前記軟膜層と整列する前記フロートの移動とを生じさせる、ことと、
前記回転速度を低減することにより、前記側壁に前記フロートを捕捉させることと、
前記１つ以上の支持部材のうちの少なくとも１つを前記試料管の側壁に溶接することと、
前記１つ以上の分析領域内に存在する前記血液試料を検査し、前記分析領域内に含まれる任意の標的細胞を識別することと
を含む、方法。
【請求項８】
前記溶接は、前記少なくとも１つの溶接される支持部材の円周の周囲において連続的である、請求項７に記載の方法。
【請求項９】
前記溶接は、前記少なくとも１つの溶接される支持部材の円周の周囲において不連続的である、請求項７に記載の方法。
【請求項１０】
前記溶接は、超音波溶接である、請求項７に記載の方法。
【請求項１１】
前記１つ以上の標識薬剤は、蛍光標識されたリガンドを備えている、請求項７に記載の方法。
【請求項１２】
前記試料管は、少なくとも前記フロートの軸方向移動の経路内の前記側壁の一部に沿って継目がない、請求項７に記載の方法。
【請求項１３】
前記フロートは、前記本体部分の上端から半径方向に延在する上部支持部材と、前記本体部分の下端から半径方向に延在する下部支持部材とを備え、前記上部および下部支持部材は両方とも、前記試料管に溶接される、請求項７に記載の方法。
【請求項１４】
前記フロートは、前記軟膜成分を通る過剰な流体流動を阻止するための解放手段をさらに備えている、請求項７に記載の方法。
【請求項１５】
血液試料中の軟膜成分を分離し、軸方向に拡張する方法であって、
前記血液試料を可撓性スリーブ内に導入することであって、前記可撓性スリーブは、試料管の内部側壁と接触する、ことと、
容積占有フロートを前記スリーブ内に導入することであって、前記剛体フロートは、赤血球と血漿との中間の比重を有しており、
前記フロートは、
本体部分であって、前記本体部分と前記スリーブとの間に環状容積を形成するために、前記本体部分は、前記スリーブによって半径方向に間隔をあけて包囲されている、本体部分と、
前記本体部分から突出し、前記可撓性スリーブに係合する１つ以上の支持部材と
を備えている、ことと、
ある回転速度で前記試料管を遠心分離することであって、前記回転速度は、前記フロートの軸方向移動を可能にするために十分に大きい直径への前記スリーブの拡大と、別々の層への血液の分離と、前記血液試料の少なくとも前記軟膜成分と整列する前記フロートの移動とを生じさせる、ことと、
前記回転速度を低減することにより、前記可撓性スリーブに、前記フロートを捕捉させることと、
前記１つ以上の支持部材のうちの少なくとも１つを前記可撓性スリーブに溶接することと
を含む、方法。
【請求項１６】
前記溶接は、前記少なくとも１つの溶接される支持部材の円周の周囲において連続的である、請求項１５に記載の方法。
【請求項１７】
前記溶接は、前記少なくとも１つの溶接される支持部材の円周の周囲において不連続的である、請求項１５に記載の方法。
【請求項１８】
前記溶接は、超音波溶接である、請求項１５に記載の方法。
【請求項１９】
前記フロートは、前記軟膜成分を通る過剰な流体流動を阻止するための解放手段をさらに備えている、請求項１５に記載の方法。
【請求項２０】
前記フロートは、前記本体部分の上端から半径方向に延在する上部支持部材と、前記本体部分の下端から半径方向に延在する下部支持部材とを備え、前記上部および下部支持部材は両方とも、前記可撓性スリーブに溶接される、請求項１５に記載の方法。
【請求項２１】
試料容積を前記環状容積から除去することと、
前記試料容積を１つ以上の標識薬剤によって標識し、標的細胞を区別することと、
前記試料容積を検査し、前記標的細胞を識別することと
をさらに含む、請求項１５に記載の方法。
【請求項２２】
試料を保持するための試料管であって、
第１の断面内径の側壁と、
前記試料管上の１つ以上の円周方向切り欠きであって、前記１つ以上の円周方向切り欠きは、各切り欠きにおける前記管の破断を促進する、１つ以上の円周方向切り欠きと
を備えている、試料管。
【請求項２３】
前記１つ以上の円周方向切り欠きは、前記試料管の側壁の外部表面上に位置している、請求項２２に記載の試料管。
【請求項２４】
前記１つ以上の円周方向切り欠きは、前記試料管の側壁の内部表面上に位置している、請求項２２に記載の試料管。
【請求項２５】
前記１つ以上の円周方向切り欠きは、前記試料管の円周の周囲において連続的である、請求項２２に記載の試料管。
【請求項２６】
前記１つ以上の円周方向切り欠きは、前記試料管の円周の周囲において不連続的である、請求項２２に記載の試料管。
【請求項２７】
前記１つ以上の円周方向切り欠きは、前記管を３つの容積に分割する２つの組の切り欠きを備えている、請求項２２に記載の試料管。
【請求項２８】
前記試料管は、透明ポリマー材料から形成されている、請求項２２に記載の試料管。
【請求項２９】
血液試料中の軟膜成分を分離し、軸方向に拡張する方法であって、
前記血液試料を可撓性試料管内に導入することであって、前記試料管は、側壁と、前記試料管上の１つ以上の円周方向切り欠きであって、前記１つ以上の円周方向切り欠きは、各切り欠きにおける前記管の破断を促進する、１つ以上の円周方向切り欠きとを有している、ことと、
容積占有フロートを前記可撓性試料管内に導入することであって、前記剛体フロートは、赤血球と血漿との中間の比重を有しており、
前記フロートは、
本体部分であって、前記本体部分と前記側壁との間に環状容積を形成するために、前記本体部分は、前記側壁によって半径方向に間隔をあけて包囲されている、本体部分と、
前記本体部分から突出し、前記側壁を係合する１つ以上の支持部材と
を備えている、ことと、
ある回転速度で前記試料管を遠心分離することであって、前記回転速度は、前記フロートの軸方向移動を可能にするための十分に大きい直径への前記側壁の拡大と、別々の層への血液の分離と、前記血液試料の少なくとも前記軟膜成分と整列する前記フロートの移動とを生じさせる、ことと、
前記回転速度を低減することにより、前記側壁に前記フロートを捕捉させることと、
前記１つ以上の切り欠きのうちの少なくとも１つにおいて前記試料管を破断することにより、前記フロートと拡張された軟膜成分とを含む前記管の破断セクションを得ることと
を含む、方法。
【請求項３０】
前記１つ以上の円周方向切り欠きは、前記試料管の側壁の外部表面上に位置している、請求項２９に記載の方法。
【請求項３１】
前記１つ以上の円周方向切り欠きは、前記試料管の側壁の内部表面上に位置している、請求項２９に記載の方法。
【請求項３２】
前記１つ以上の円周方向切り欠きは、前記試料管の円周の周囲において連続的である、請求項２９に記載の方法。
【請求項３３】
前記１つ以上の円周方向切り欠きは、前記試料管の円周の周囲において不連続的である、請求項２９に記載の方法。
【請求項３４】
前記１つ以上の円周方向切り欠きは、前記管を３つの容積に分割する２つの組の切り欠きを備えている、請求項２９に記載の方法。
【請求項３５】
前記回転速度低減後、１つの組の切り欠きは、前記フロートの上方にあって、１つの組の切り欠きは、前記フロートの下方にある、請求項３４に記載の方法。
【請求項３６】
前記フロートの軸方向長に沿って、破断される切り欠きは存在しない、請求項２９に記載の方法。
【請求項３７】
前記フロートは、前記軟膜成分を通る過剰な流体流動を阻止するための解放手段をさらに備えている、請求項２９に記載の方法。
【請求項３８】
２つの切り欠きが破断される、請求項２９に記載の方法。
【請求項３９】
前記フロートの上方における１つの切り欠きと、前記フロートの下方における１つの切り欠きとが破断される、請求項３８に記載の方法。
【請求項４０】
標的細胞を前記血液試料中の他の細胞から区別するために、前記血液試料を１つ以上の標識薬剤と組み合わせることをさらに含む、請求項２９に記載の方法。
【請求項４１】
前記環状容積内に存在する血液試料を検査し、前記環状容積内に含まれる任意の標的細胞を識別することをさらに含む、請求項４０に記載の方法。
【請求項４２】
試料容積を前記環状容積から除去することと、
前記試料容積を１つ以上の標識薬剤によって標識し、標的細胞を区別することと、
前記試料容積を検査し、前記標的細胞を識別することと
をさらに含む、請求項２９に記載の方法。
【請求項４３】
第１の本体部分であって、上端からアクセス可能である中心ボアを画定する円筒形と、前記円筒形の下端から半径方向に延在する下部支持部材と、前記円筒形内に位置し、前記中心ボアの下端内への流体の流入を可能にするように向けられている１つ以上の一方向弁とを備えている第１の本体部分と、
第２の本体部分であって、前記中心ボア内に摺動可能に嵌入するためのサイズを有する中心部分と、前記第２の本体部分の上端から半径方向に延在する上部支持部材とを備えている第２の本体部分と
を備えている、容積占有セパレータフロート。
【請求項４４】
試料管であって、
第１の開放端部および第２の開放端部を備えている円筒形と、
前記第１の端部を密閉するための第１の閉鎖デバイスと、
前記第２の端部を密閉するための第２の閉鎖デバイスと
を備えている、試料管。
【請求項４５】
前記円筒形は、可撓性ポリマー材料から形成されている、請求項４４に記載の試料管。
【請求項４６】
前記円筒形は、透明または半透明材料から形成されている、請求項４５に記載の試料管。
【請求項４７】
前記円筒形は、継目がない、請求項４５に記載の試料管。
【請求項４８】
前記第１および第２の閉鎖デバイスは、前記円筒形の中に入り込まない外部キャップである、請求項４４に記載の試料管。
【請求項４９】
前記第１および第２の閉鎖デバイスは、前記円筒形の中に入り込むストッパである、請求項４４に記載の試料管。
【請求項５０】
血液試料中の軟膜成分を分離し、軸方向に拡張する方法であって、
前記血液試料を可撓性試料管内に導入することであって、
前管は、
第１の開放端部および第２の開放端部を備えている円筒形と、
前記第１の端部を密閉する第１の閉鎖デバイスと
を備えている、ことと、
剛体容積占有フロートを前記可撓性試料管内に導入することであって、前記剛体フロートは、赤血球と血漿との中間の比重を有しており、
前記フロートは、
本体部分であって、前記本体部分と前記側壁との間に環状容積を形成するために、前記本体部分は、前記側壁によって半径方向に間隔をあけて包囲されている、本体部分と、
前記本体部分から突出し、前記側壁を係合する１つ以上の支持部材と
を備えている、ことと、
ある回転速度で前記試料管を遠心分離することであって、前記回転速度は、前記フロートの軸方向移動を可能にするための十分に大きい直径への前記側壁の拡大と、別々の層への血液の分離と、前記血液試料の少なくとも前記軟膜層と整列する前記フロートの移動とを生じさせる、ことと、
前記回転速度を低減することにより、前記側壁に前記フロートを捕捉させることと、
前記第１の閉鎖デバイスを除去し、前記フロートおよび拡張された軟膜層にアクセスすることと
を含む、方法。
【請求項５１】
前記血液試料およびフロートが導入された後、第２の閉鎖デバイスによって、前記第２の開放端部を密閉することをさらに含む、請求項５０に記載の方法。
【請求項５２】
遠心分離後、前記第２の閉鎖デバイスを前記第２の開放端部から除去し、前記フロートおよび拡張された軟膜層にアクセスすることをさらに含む、請求項５１に記載の方法。
【請求項５３】
血液試料中の軟膜成分を捕捉する方法であって、
前記血液試料を可撓性試料管内に導入することであって、前記試料管は、側壁を有している、ことと、
剛体容積占有フロートを前記可撓性試料管内に導入することであって、前記剛体フロートは、赤血球と血漿との中間の比重を有しており、
前記フロートは、
本体部分であって、前記本体部分と前記側壁との間に環状容積を形成するために、前記本体部分は、前記側壁によって半径方向に間隔をあけて包囲されている、本体部分と、
前記本体部分から突出し、前記側壁を係合する１つ以上の支持部材と
を備えている、ことと、
ある回転速度で前記試料管を遠心分離することであって、前記回転速度は、前記フロートの軸方向移動を可能にするための十分に大きい直径への前記側壁の拡大と、別々の層への血液の分離と、前記血液試料の少なくとも前記環状容積内に軟膜成分を捕集するための前記フロートの移動とを生じさせる、ことと、
前記回転速度を低減させ、前記側壁内側に、前記フロートを捕捉させることと、
除去デバイスを使用して、前記試料管の側壁を通して前記環状容積内に含まれる前記軟膜成分の少なくとも一部を除去することと
を含む、方法。
【請求項５４】
前記除去デバイスは、注射器である、請求項５３に記載の方法。
【請求項５５】
前記血液試料を染色することをさらに含む、請求項５３に記載の方法。
【請求項５６】
前記フロートは、前記軟膜成分を通る過剰な流体流動を阻止するための解放手段をさらに備えている、請求項５３に記載の方法。
【請求項５７】
前記フロートは、前記血液試料が前記試料管内に導入される前に前記試料管内に導入される、請求項５３に記載の方法。
【請求項５８】
前記血液試料は、前記フロートが前記試料管内に導入される前に前記試料管内に導入される、請求項５３に記載の方法。
【請求項５９】
前記試料管は、少なくとも、前記フロートの軸方向移動の経路内の内側周辺表面の一部に沿って継目がない、請求項５３に記載の方法。
【請求項６０】
前記フロートは、約１．０８から約１．０９の比重を有している、請求項５３に記載の方法。
【請求項６１】
前記管は、アクリル、テレフタル酸ポリエチレングリコール（ＰＥＴＧ）、ポリカーボネート、ポリスチレン、ＴＯＰＡＳ、およびスチレンブタジエンスチレンポリマーから形成される、請求項５３に記載の方法。
【請求項６２】
前記環状容積内に存在する血液試料を検査し、前記環状容積内に含まれる任意の標的細胞を識別することをさらに含む、請求項５３に記載の方法。
【請求項６３】
試料容積を前記環状容積から除去することと、
前記試料容積を１つ以上の標識薬剤によって標識し、標的細胞を区別することと、
前記試料容積を検査し、前記標的細胞を識別することと、
をさらに含む、請求項５３に記載の方法。
【請求項６４】
血液試料中の標的細胞を検出する方法であって、
前記標的細胞を前記血液試料中の他の細胞から区別するために、前記血液試料を１つ以上の標識薬剤と組み合わせることと、
前記血液試料を可撓性側壁を備えている試料管内に導入することと、
容積占有セパレータフロートを前記試料管内に導入することであって、
前記セパレータフロートは、前記試料管の内径未満の断面直径を有する剛体本体部分と、前記本体部分から外向きに半径方向に延在し、前記試料管の側壁を係合し、前記本体部分と前記側壁との間の環状容積を維持するためのサイズを有する１つ以上の剛体支持部材とを備えている、ことと、
ある回転速度で前記試料管を遠心分離することであって、前記回転速度は、前記フロートの軸方向移動を可能にするための十分に大きい直径への前記側壁の拡大と、別々の層への血液の分離と、前記血液試料の少なくとも前記軟膜層と整列する前記フロートの移動とを生じさせる、ことと、
前記回転速度を低減することにより、前記側壁に前記フロートを捕捉させることと、
前記環状容積内に存在する血液試料を検査し、前記環状容積内に含まれる任意の標的細胞を識別することと、
除去デバイスを使用して、前記試料管の側壁を通して前記標的細胞の少なくとも一部を除去することと
を含む、方法。
【請求項６５】
前記１つ以上の標識薬剤は、蛍光標識されたリガンドを備えている、請求項６４に記載の方法。
【請求項６６】
前記除去デバイスは、注射器である、請求項６４に記載の方法。
【請求項６７】
前記血液試料を染色することをさらに含む、請求項６４に記載の方法。
【請求項６８】
前記フロートは、前記軟膜成分を通る過剰な流体流動を阻止するための解放手段をさらに備えている、請求項６４に記載の方法。
【請求項６９】
前記解放手段は、軸方向ボアである、請求項６８に記載の方法。
【請求項７０】
前記標的細胞は、癌細胞、幹細胞、細胞断片、ウイルス感染細胞、またはトリパノソーマである、請求項６４に記載の方法。
【請求項７１】
前記フロートは、前記血液試料が前記試料管内に導入される前に前記試料管内に導入される、請求項６４に記載の方法。
【請求項７２】
前記血液試料は、前記フロートが前記試料管内に導入される前に前記試料管内に導入される、請求項６４に記載の方法。
【請求項７３】
前記試料管は、少なくとも、前記フロートの軸方向移動の経路内の内側周辺表面の一部に沿って継目がない、請求項６４に記載の方法。
【請求項７４】
前記フロートは、約１．０８から約１．０９の比重を有している、請求項６４に記載の方法。
【請求項７５】
赤血球と血漿との中間の比重を有する容積占有セパレータフロートであって、
上端および下端を有する本体部分と、
前記本体部分から突出する１つ以上の支持部材であって、
前記本体部分および前記１つ以上の支持部材は、環状容積を画定する、１つ以上の支持部材と、
ピトー管を受け取るための隔壁であって、前記本体部分の上端から前記環状容積まで延在する、隔壁と
を備えている、セパレータフロート。
【請求項７６】
前記１つ以上の支持部材は、前記本体部分の上端から半径方向に延在する上部支持部材を備えている、請求項７５に記載のセパレータフロート。
【請求項７７】
前記１つ以上の支持部材は、前記本体部分の下端から半径方向に延在する下部支持部材を備えている、請求項７５に記載のセパレータフロート。
【請求項７８】
前記１つ以上の支持部材は、前記本体部分の上端から半径方向に延在する上部支持部材と、前記本体部分の下端から半径方向に延在する下部支持部材とを備えている、請求項７５に記載のセパレータフロート。
【請求項７９】
前記フロートは、前記フロートの周囲の過剰な流体流動を阻止するための解放手段をさらに備えている、請求項７５に記載のセパレータフロート。
【請求項８０】
前記フロートは、約１．０２８から約１．０８９の比重を有している、請求項７５に記載のセパレータフロート。
【請求項８１】
前記フロートは、約１．０４０から約１．０７０の比重を有している、請求項７５に記載のセパレータフロート。
【請求項８２】
赤血球と血漿との中間の比重を有する容積占有セパレータフロートであって、
本体部分と、
前記本体部分から突出する１つ以上の支持部材であって、
前記本体部分および前記１つ以上の支持部材は、環状容積を画定する、１つ以上の支持部材と、
前記本体部分の上端から前記環状容積まで延在する隔壁と、
遠位端を有するピトー管であって、前記ピトー管は、前記上端において前記隔壁を係合し、前記遠位端は、前記本体部分の上端から離れて位置している、ピトー管と
を備えている、セパレータフロート。
【請求項８３】
前記１つ以上の支持部材は、前記本体部分の上端から半径方向に延在する上部支持部材を備えている、請求項８２に記載のセパレータフロート。
【請求項８４】
前記１つ以上の支持部材は、前記本体部分の下端から半径方向に延在する下部支持部材を備えている、請求項８２に記載のセパレータフロート。
【請求項８５】
前記１つ以上の支持部材は、前記本体部分の上端から半径方向に延在する上部支持部材と、前記本体部分の下端から半径方向に延在する下部支持部材とを備えている、請求項８２に記載のセパレータフロート。
【請求項８６】
前記フロートの周囲の過剰な流体流動を阻止するための解放手段をさらに備えている、請求項８２に記載のセパレータフロート。
【請求項８７】
前記フロートは、約１．０２８から約１．０８９の比重を有している、請求項８２に記載のセパレータフロート。
【請求項８８】
前記フロートは、約１．０４０から約１．０７０の比重を有している、請求項８２に記載のセパレータフロート。
【請求項８９】
血液試料中の軟膜成分を分離し、軸方向に拡張する方法であって、
前記血液試料を可撓性試料管内に導入することであって、前記試料管は、側壁を有している、ことと、
剛体容積占有フロートを前記可撓性試料管内に導入することであって、前記剛体フロートは、赤血球と血漿との中間の比重を有しており、
前記フロートは、
本体部分と、
前記本体部分から突出する１つ以上の支持部材であって、前記本体部分および前記１つ以上の支持部材は、環状容積を画定する、１つ以上の支持部材と、
ピトー管を受け取るための隔壁であって、前記本体部分の上端から前記環状容積まで延在する、隔壁と、
を備えている、ことと、
ある回転速度で前記試料管を遠心分離することであって、前記回転速度は、前記フロートの軸方向移動を可能にするための十分に大きい直径への前記側壁の拡大と、別々の層への血液の分離と、前記血液試料の少なくとも前記軟膜層と整列する前記フロートの移動とを生じさせる、ことと、
前記回転速度を低減することにより、前記側壁に前記フロートを捕捉させることと、
前記隔壁をピトー管と係合することと、
前記ピトー管を通して前記軟膜層の少なくとも一部を前記環状容積から除去することと
を含む、方法。
【請求項９０】
前記血液試料は、前記フロートが前記試料管内に導入される前に前記試料管内に導入される、請求項８９に記載の方法。
【請求項９１】
前記フロートは、前記血液試料が前記試料管内に導入される前に前記試料管内に導入される、請求項８９に記載の方法。
【請求項９２】
前記血液試料を染色することをさらに含む、請求項８９に記載の方法。
【請求項９３】
前記試料管は、少なくとも前記フロートの軸方向移動の経路内の前記側壁の一部に沿って継目がない、請求項８９に記載の方法。
【請求項９４】
前記血液試料を１つ以上の標識薬剤と組み合わせることをさらに含む、請求項８９に記載の方法。
【請求項９５】
前記１つ以上の標識薬剤は、蛍光標識されたリガンドを備えている、請求項９４に記載の方法。
【請求項９６】
血液試料中の軟膜成分を分離し、軸方向に拡張する方法であって、
前記血液試料を可撓性試料管内に導入することであって、前記試料管は、側壁を有している、ことと、
剛体容積占有フロートを前記可撓性試料管内に導入することであって、前記剛体フロートは、赤血球と血漿との中間の比重を有しており、
前記フロートは、
本体部分と、
前記本体部分から突出する１つ以上の支持部材であって、前記本体部分および前記１つ以上の支持部材は、環状容積を画定する、１つ以上の支持部材と、
前記本体部分の上端から前記環状容積まで延在する隔壁と、
遠位端を有するピトー管であって、前記ピトー管は、前記上端において前記隔壁を係合し、前記遠位端は、前記本体部分の上端から離れて位置している、ピトー管と、
を備えている、ことと、
ある回転速度で前記試料管を遠心分離することであって、前記回転速度は、前記フロートの軸方向移動を可能にするための十分に大きい直径への前記側壁の拡大と、別々の層への血液の分離と、前記血液試料の少なくとも前記軟膜層と整列する前記フロートの移動とを生じさせる、ことと、
前記回転速度を低減することにより、前記側壁に前記フロートを捕捉させることと、
前記ピトー管を通して前記軟膜層の少なくとも一部を前記環状容積から除去することと
を含む、方法。
【請求項９７】
前記血液試料は、前記フロートが前記試料管内に導入される前に前記試料管内に導入される、請求項９６に記載の方法。
【請求項９８】
前記フロートは、前記血液試料が前記試料管内に導入される前に前記試料管内に導入される、請求項９６に記載の方法。
【請求項９９】
前記血液試料を１つ以上の標識薬剤と組み合わせることをさらに含む、請求項９６に記載の方法。
【請求項１００】
前記１つ以上の標識薬剤は、蛍光標識されたリガンドを備えている、請求項９９に記載の方法。
【請求項１０１】
容積占有セパレータフロートであって、
本体部分と、
前記本体部分の上端から半径方向に延在する上部支持部材と、
前記本体部分の下端から半径方向に延在する下部支持部材と、
前記本体部分、前記上部支持部材、および前記下部支持部材によって画定される環状容積と、
前記本体部分から半径方向に延在し、前記環状容積内に複数のウェルを形成する１つ以上の中間支持部材と、
前記本体部分内の複数の隔壁であって、各隔壁は、前記本体部分の上端から特定のウェルへのアクセスを可能にする、隔壁と
を備えている、セパレータフロート。
【請求項１０２】
前記１つ以上の中間支持部材は、複数の軸方向に配向されたリッジから成る、請求項１０１に記載のセパレータフロート。
【請求項１０３】
前記１つ以上の中間支持部材は、複数の円周方向に配向されたリッジから成る、請求項１０１に記載のセパレータフロート。
【請求項１０４】
前記１つ以上の中間支持部材は、複数の円周方向に配向されたリッジと交差する、複数の軸方向に配向されたリッジから成る、請求項１０１に記載のセパレータフロート。
【請求項１０５】
前記フロートは、約１．０２８から約１．０８９の比重を有している、請求項１０１に記載のセパレータフロート。
【請求項１０６】
前記フロートは、約１．０４０から約１．０７０の比重を有している、請求項１０１に記載のセパレータフロート。
【請求項１０７】
前記フロートは、前記フロートの周囲の過剰な流体流動を阻止するための解放手段をさらに備えている、請求項１０１に記載のセパレータフロート。
【請求項１０８】
血液試料中の軟膜成分を分離し、軸方向に拡張する方法であって、
前記血液試料を可撓性試料管内に導入することであって、前記試料管は、側壁を有している、ことと、
容積占有フロートを前記可撓性試料管内に導入することであって、前記フロートは、赤血球と血漿との中間の比重を有しており、
前記フロートは、
本体部分と、
前記本体部分の上端から半径方向に延在する上部支持部材と、
前記本体部分の下端から半径方向に延在する下部支持部材と、
前記本体部分、前記上部支持部材、および前記下部支持部材によって画定される環状容積と、
前記本体部分から半径方向に延在し、前記環状容積内に複数のウェルを形成する１つ以上の中間支持部材と、
前記本体部分内の複数の隔壁であって、各隔壁は、前記本体部分の上端から特定のウェルへのアクセスを可能にする、隔壁と、
を備えている、ことと、
ある回転速度で前記試料管を遠心分離することであって、前記回転速度は、前記フロートの軸方向移動を可能にするための十分に大きい直径への前記側壁の拡大と、別々の層への血液の分離と、前記血液試料の少なくとも前記軟膜層と整列する前記フロートの移動とを生じさせる、ことと、
前記回転速度を低減することにより、前記側壁に前記フロートを捕捉させることと、
抽出デバイスを使用して、前記ウェルのうちの少なくとも１つから、前記軟膜層の少なくとも一部を抽出することと、
流体を前記環状容積内に流出させることと
を含む、方法。
【請求項１０９】
前記１つ以上の中間支持部材は、複数の軸方向に配向されたリッジから成る、請求項１０８に記載の方法。
【請求項１１０】
前記１つ以上の中間支持部材は、複数の円周方向に配向されたリッジから成る、請求項１０８に記載の方法。
【請求項１１１】
前記１つ以上の中間支持部材は、複数の円周方向に配向されたリッジと交差する、複数の軸方向に配向されたリッジから成る、請求項１０８に記載の方法。
【請求項１１２】
前記抽出デバイスは、注射器である、請求項１０８に記載の方法。
【請求項１１３】
前記抽出デバイスは、ピトー管である、請求項１０８に記載の方法。
【請求項１１４】
前記フロートは、前記軟膜成分を通る過剰な流体流動を阻止するための解放手段をさらに備えている、請求項１０８に記載の方法。
【請求項１１５】
前記血液試料は、前記フロートが前記試料管に導入される前に前記試料管に導入される、請求項１０８に記載の方法。
【請求項１１６】
前記フロートは、前記血液試料が前記試料管に導入される前に前記試料管に導入される、請求項１０８に記載の方法。
【請求項１１７】
標的細胞を前記血液試料中の他の細胞から区別するために、前記血液試料を１つ以上の標識薬剤と組み合わせることをさらに含む、請求項１０８に記載の方法。
【請求項１１８】
前記１つ以上の標識薬剤は、蛍光標識されたリガンドを備えている、請求項１１７に記載の方法。
【請求項１１９】
前記軟膜層は、標的細胞を含む特定のウェルからのみ抽出される、請求項１１７に記載の方法。
【請求項１２０】
容積占有セパレータフロートであって、
上端および下端を有する本体部分と、
前記本体部分の下端から半径方向に延在する下部支持部材と、
前記本体部分から半径方向に延在し、かつ、前記本体部分の上端と前記下部支持部材との間に軸方向に延在することにより、少なくとも１つの軸方向に延在する縦溝を形成する複数のリッジと
を備えている、セパレータフロート。
【請求項１２１】
１つの軸方向に延在する縦溝から成る、請求項１２０に記載のセパレータフロート。
【請求項１２２】
複数の軸方向に延在する縦溝から成る、請求項１２０に記載のセパレータフロート。
【請求項１２３】
前記フロートの周囲の過剰な流体流動を阻止するための解放手段をさらに備えている、請求項１２０に記載のセパレータフロート。
【請求項１２４】
前記解放手段は、軸方向ボアを備えている、請求項１２３に記載のセパレータフロート。
【請求項１２５】
前記フロートは、約１．０２８から約１．０８９の比重を有している、請求項１２０に記載のセパレータフロート。
【請求項１２６】
前記フロートは、約１．０４０から約１．０７０の比重を有している、請求項１２０に記載のセパレータフロート。
【請求項１２７】
血液試料中の軟膜成分を分離し、軸方向に拡張する方法であって、
前記血液試料を可撓性試料管内に導入することであって、前記試料管は、側壁を有している、ことと、
剛体容積占有フロートを前記可撓性試料管内に導入することであって、前記剛体フロートは、赤血球と血漿との中間の比重を有しており、
前記フロートは、
上端および下端を有する本体部分と、
前記本体部分の下端から離れるように半径方向に延在する下部支持部材と、
前記本体部分から離れるように半径方向に延在し、かつ、前記本体部分の上端と前記下部支持部材との間に軸方向に延在することにより、少なくとも１つの軸方向に延在する縦溝を形成する複数のリッジと、
を備えている、ことと、
ある回転速度で前記試料管を遠心分離することであって、前記回転速度は、前記フロートの軸方向移動を可能にするための十分に大きい直径への前記側壁の拡大と、別々の層への血液の分離と、前記血液試料の少なくとも前記軟膜成分と整列する前記フロートの移動とを生じさせる、ことと、
前記回転速度を低減することにより、前記側壁に前記フロートを捕捉させることと、
抽出デバイスを使用して、前記軟膜成分の少なくとも一部を前記少なくとも１つの縦溝から抽出することと、
流体を前記環状容積内に流出させることと
を含む、方法。
【請求項１２８】
前記フロートは、前記本体部分の上端から離れるように半径方向に延在する上部支持部材をさらに備えている、請求項１２７に記載の方法。
【請求項１２９】
前記フロートは、１つの縦溝から成る、請求項１２７に記載の方法。
【請求項１３０】
前記フロートは、複数の縦溝から成る、請求項１２７に記載の方法。
【請求項１３１】
前記抽出デバイスは、注射器を備えている、請求項１２７に記載の方法。
【請求項１３２】
前記抽出デバイスは、ピトー管を備えている、請求項１２７に記載の方法。
【請求項１３３】
前記血液試料は、前記フロートが前記試料管に導入される前に前記試料管に導入される、請求項１２７に記載の方法。
【請求項１３４】
前記フロートは、前記血液試料が前記試料管に導入される前に前記試料管に導入される、請求項１２７に記載の方法。
【請求項１３５】
前記フロートは、前記軟膜成分を通る過剰な流体流動を阻止するための解放手段をさらに備えている、請求項１２７に記載の方法。
【請求項１３６】
前記フロートは、非対称である、請求項１２７に記載の方法。
【請求項１３７】
標的細胞を前記血液試料中の他の細胞から区別するために、前記血液試料を１つ以上の標識薬剤と組み合わせることをさらに含む、請求項１２７に記載の方法。
【請求項１３８】
前記１つ以上の標識薬剤は、蛍光標識されたリガンドを備えている、請求項１３７に記載の方法。
【請求項１３９】
前記複数の縦溝を検査することと、
前記複数の縦溝のうちの１つ内の標的細胞を識別することと、
前記標的細胞を含む前記１つの縦溝からのみ前記軟膜成分を抽出することと、
をさらに含む、請求項１３７に記載の方法。
【請求項１４０】
血液試料の軟膜成分を分離し、軸方向に拡張する方法であって、
前記血液試料を可撓性スリーブに導入することと、
フロートを前記可撓性スリーブ内に導入することであって、前記フロートは、赤血球と血漿との中間の比重を有しており、
前記フロートは、
上端および下端を有する本体部分と、
前記本体部分の下端から半径方向に延在する下部支持部材と、
前記可撓性スリーブを係合する複数のリッジであって、前記本体部分から離れるように半径方向に延在し、かつ、前記上端から前記下部支持部材に軸方向に延在することにより、前記フロートの円周に複数の軸方向に配向されたウェルを形成する、リッジと、
を備えている、ことと、
ある回転速度で前記試料管を遠心分離することであって、前記回転速度は、前記フロートの軸方向移動をもたらすための十分に大きい前記スリーブの拡大と、別々の層への血液の分離と、前記血液試料の少なくとも前記軟膜成分と整列する前記フロートの移動とを生じさせる、ことと、
前記回転速度を低減することにより、前記フロートを捕捉することと、
前記スリーブによって前記ウェルのうちの少なくとも１つを密閉し、前記軟膜成分を捕集することと
を含む、方法。
【請求項１４１】
前記血液試料を染色剤と組み合わせることをさらに含む、請求項１４０に記載の方法。
【請求項１４２】
前記フロートは、前記本体部分の上端から半径方向に延在する上部支持部材をさらに備えている、請求項１４０に記載の方法。
【請求項１４３】
前記少なくとも１つのウェルは、前記上部および下部支持部材を前記可撓性スリーブに溶接することによって密閉される、請求項４２に記載の方法。
【請求項１４４】
除去デバイスを使用して、前記軟膜成分の少なくとも一部を前記ウェルから除去することをさらに含む、請求項１４０に記載の方法。
【請求項１４５】
前記除去デバイスは、注射器である、請求項４４に記載の方法。
【請求項１４６】
前記フロートは、前記軟膜層を通る過剰な流体流動を阻止するための解放手段をさらに備えている、請求項１４０に記載の方法。
【請求項１４７】
前記フロートは、非対称である、請求項１４０に記載の方法。
【請求項１４８】
前記血液試料は、前記フロートが前記試料管に導入される前に前記試料管に導入される、請求項１４０に記載の方法。
【請求項１４９】
前記フロートは、前記血液試料が前記試料管に導入される前に前記試料管に導入される、請求項１４０に記載の方法。
【請求項１５０】
前記フロートは、前記血液試料が前記試料管に導入される前に前記試料管に導入される、請求項１４０に記載の方法。
【請求項１５１】
血液試料中の標的細胞を検出する方法であって、
前記標的細胞を前記血液試料中の他の細胞から区別するために、前記血液試料を１つ以上の標識薬剤と組み合わせることと、
前記血液試料を透明可撓性スリーブに導入することと、
フロートを前記可撓性スリーブ内に導入することであって、前記フロートは、赤血球と血漿との中間の比重を有しており、
前記フロートは、
上端および下端を有する本体部分と、
前記本体部分の上端から半径方向に延在する上部支持部材と、
前記本体部分の下端から半径方向に延在する下部支持部材と、
前記可撓性スリーブを係合する複数のリッジであって、前記本体部分から離れるように半径方向に延在し、かつ、前記上部支持部材から前記下部支持部材に軸方向に延在することにより、前記フロートの円周に複数の軸方向に配向されたウェルを形成する、リッジと、
を備えている、ことと、
ある回転速度で前記試料管を遠心分離することであって、前記回転速度は、前記フロートの軸方向移動をもたらすための十分に大きい前記スリーブの拡大と、別々の層への血液の分離と、前記血液試料の少なくとも前記軟膜成分と整列する前記フロートの移動とを生じさせる、ことと、
前記回転速度を低減することにより、前記フロートを捕捉することと、
前記スリーブによって、前記複数のウェル内の前記軟膜成分の少なくとも一部を密閉することと、
前記ウェルを検査し、前記ウェルの中に含まれる任意の標的細胞を識別することと
を含む、方法。
【請求項１５２】
前記１つ以上の標識薬剤は、蛍光標識されたリガンドを備えている、請求項１５１に記載の方法。
【請求項１５３】
抽出デバイスを使用して、前記軟膜成分を少なくとも１つの標的細胞を含むウェルから抽出することをさらに含む、請求項１５１に記載の方法。
【請求項１５４】
前記抽出デバイスは、注射器である、請求項１５３に記載の方法。
【請求項１５５】
前記密閉することは、前記上部および下部支持部材を前記可撓性スリーブに溶接することによって行われる、請求項１５３に記載の方法。
【請求項１５６】
前記フロートは、前記軟膜層を通る過剰な流体流動を阻止するための解放手段をさらに備えている、請求項１５１に記載の方法。
【請求項１５７】
前記解放手段は、軸方向ボアである、請求項１５６に記載の方法。
【請求項１５８】
前記フロートは、非対称である、請求項１５１に記載の方法。
【請求項１５９】
前記血液試料は、前記フロートが前記試料管に導入される前に前記試料管に導入される、請求項１５１に記載の方法。
【請求項１６０】
前記フロートは、前記血液試料が前記試料管に導入される前に前記試料管に導入される、請求項１５１に記載の方法。
【請求項１６１】
血液試料の軟膜成分を分離し、軸方向に拡張する方法であって、
前記血液試料を側壁を備えている可撓性スリーブ内に導入することであって、前記側壁は、ｎ個の辺を有する多角形断面形状を有している、ことと、
剛体容積占有フロートを前記可撓性試料管内に導入することであって、前記剛体フロートは、赤血球と血漿との中間の比重を有し、かつ、ｎ個の辺を有しており、
前記フロートは、
本体部分と、前記本体部分から突出し、前記可撓性スリーブの側壁を係合する１つ以上の支持部材とを備え、前記本体部分は、前記側壁の軸方向に整列された部分と一緒に、前記本体部分と前記側壁との間に環状容積を画定し、前記支持部材は、前記環状容積を横断し、ｎ個のウェルを生成する、ことと、
ある回転速度で前記試料管を遠心分離することであって、前記回転速度は、前記フロートの軸方向移動をもたらすための十分に大きい前記スリーブの拡大と、別々の層への血液の分離と、前記血液試料の少なくとも前記軟膜成分と整列する前記フロートの移動とを生じさせる、ことと、
前記回転速度を低減することにより、前記スリーブ壁に、前記スリーブを収縮させ、前記フロートに取り付かせ、前記軟膜成分の少なくとも一部を前記ｎ個のウェル内に捕集することと
を含む、方法。
【請求項１６２】
前記多角形断面形状は、等辺等角である、請求項１６１に記載の方法。
【請求項１６３】
ｎは、３である、請求項１６１に記載の方法。
【請求項１６４】
ｎは、４である、請求項１６１に記載の方法。
【請求項１６５】
ｎは、５である、請求項１６１に記載の方法。
【請求項１６６】
前記フロートは、前記ｎ個の辺の間の角にｎ個の軸方向に配向されたリッジをさらに備えている、請求項１６１に記載の方法。
【請求項１６７】
前記血液試料を染色剤と組み合わせることをさらに含む、請求項１６１に記載の方法。
【請求項１６８】
除去デバイスを使用して、前記軟膜成分の少なくとも一部を前記ｎ個のウェルから除去することをさらに含む、請求項１６１に記載の方法。
【請求項１６９】
前記フロートは、前記軟膜層を通る過剰な流体流動を阻止するための解放手段をさらに備えている、請求項１６１に記載の方法。
【請求項１７０】
前記解放手段は、軸方向ボアである、請求項１６９に記載の方法。
【請求項１７１】
前記血液試料は、前記フロートの前に前記試料管内に導入される、請求項１６１に記載の方法。
【請求項１７２】
前記フロートは、前記血液試料の前に前記試料管に導入される、請求項１６１に記載の方法。
【請求項１７３】
血液試料中の標的細胞を検出する方法であって、
前記標的細胞を前記試料中の他の細胞から区別するために、前記血液試料を１つ以上の標識薬剤と組み合わせることと、
前記血液試料を側壁を備えている可撓性スリーブ内に導入することであって、前記側壁は、ｎ個の辺を有する多角形断面形状を有している、ことと、
剛体容積占有フロートを前記可撓性スリーブ内に導入することであって、前記剛体フロートは、赤血球と血漿との中間の比重を有し、かつ、ｎ個の辺を有しており、
前記フロートは、
本体部分と、前記本体部分から突出し、前記可撓性スリーブの側壁を係合する１つ以上の支持部材とを備え、前記本体部分は、前記側壁の軸方向に整列された部分と一緒に、前記本体部分と前記側壁との間に環状容積を画定し、前記支持部材は、前記環状容積を横断し、ｎ個のウェルを生成する、ことと、
ある回転速度で前記試料管を遠心分離することであって、前記回転速度は、前記フロートの軸方向移動をもたらすための十分に大きい前記スリーブの拡大と、別々の層への血液の分離と、前記血液試料の少なくとも前記軟膜成分と整列する前記フロートの移動とを生じさせる、ことと、
前記回転速度を低減することにより、前記スリーブ壁に、前記スリーブを収縮させ、前記フロートに取り付かせ、前記軟膜成分の少なくとも一部を前記ｎ個のウェル内に捕集することと、
前記ｎ個のウェル内の血液試料を検査し、前記ウェル内に含まれる任意の標的細胞を識別することと
を含む、方法。
【請求項１７４】
前記多角形断面形状は、等辺等角である、請求項１７３に記載の方法。
【請求項１７５】
前記１つ以上の標識薬剤は、蛍光標識されたリガンドを備えている、請求項１７３に記載の方法。
【請求項１７６】
除去デバイスを使用して、少なくとも１つの標的細胞をウェルから除去することをさらに含む、請求項１７３に記載の方法。
【請求項１７７】
前記除去デバイスは、注射器である、請求項１７６に記載の方法。
【請求項１７８】
ｎは、３である、請求項１７３に記載の方法。
【請求項１７９】
ｎは、４である、請求項１７３に記載の方法。
【請求項１８０】
ｎは、５である、請求項１７３に記載の方法。
【請求項１８１】
前記フロートは、前記軟膜層を通る過剰な流体流動を阻止するための解放手段をさらに備えている、請求項１７３に記載の方法。
【請求項１８２】
関連付けられた可撓性スリーブと共に使用するために適合された容積占有フロートであって、
上端、下端、およびｎ個の辺を有する本体部分であって、ｎは、３以上の整数である、本体部分と、
前記本体部分の上端から離れるように側方に延在する上部支持部材と、
前記本体部分の下端から離れるように側方に延在する下部支持部材と、
複数のリッジであって、各リッジは、前記本体部分から離れるように側方に延在し、かつ、前記上部支持部材から前記下部支持部材に軸方向に延在することにより、軸方向に配向されたｎ個のウェルを形成し、各ウェルは、外部表面を有する、複数のリッジと
を備え、前記フロートは、前記ウェルの外部表面が、実質的に同一平面上にあることが可能であるように、展開されるように適合されている、フロート。
【請求項１８３】
ｎは、３である、請求項１８２に記載のフロート。
【請求項１８４】
ｎは、４である、請求項１８２に記載のフロート。
【請求項１８５】
ｎは、５である、請求項１８２に記載のフロート。
【請求項１８６】
前記本体部分の辺は、同一長さを有している、請求項１８２に記載のフロート。
【請求項１８７】
前記フロートの周囲の過剰な流体流動を阻止するための解放手段をさらに備えている、請求項１８２に記載のフロート。
【請求項１８８】
前記解放手段は、軸方向ボアを備えている、請求項１８７に記載の方法。
【請求項１８９】
前記フロートは、約１．０２８から約１．０８９の比重を有している、請求項１８２に記載のセパレータフロート。
【請求項１９０】
前記フロートは、約１．０４０から約１．０７０の比重を有している、請求項１８２に記載のセパレータフロート。
【請求項１９１】
血液試料の軟膜成分を分離し、軸方向に拡張する方法であって、
前記血液試料を可撓性スリーブ内に導入することと、
赤血球と血漿との中間の比重を有するフロートを前記可撓性スリーブ内に導入することであって、
前記フロートは、
上端、下端、およびｎ個の辺を有する本体部分と、
前記本体部分の上端から離れるように側方に延在する上部支持部材と、
前記本体部分の下端から離れるように側方に延在する下部支持部材と、
複数のリッジであって、各リッジは、前記本体部分から離れるように側方に延在し、かつ、前記上部支持部材から前記下部支持部材に軸方向に延在することにより、軸方向に配向されたウェルを形成し、各ウェルは、外部表面を有する、リッジと、
を備え、前記フロートは、前記ウェルの外部表面が、実質的に同一平面上にあることが可能であるように、展開されるように適合されている、ことと、
ある回転速度で前記試料管を遠心分離することであって、前記回転速度は、前記フロートの軸方向移動をもたらすための十分に大きい前記スリーブの拡大と、別々の層への血液の分離と、前記血液試料の少なくとも前記軟膜層と整列する前記フロートの移動とを生じさせる、ことと、
前記回転速度を低減することにより、前記スリーブに、密閉前記ウェル内の前記軟膜層の少なくとも一部を密閉させることと、
前記フロートを展開し、少なくとも２つのウェルを実質的に同一平面に配置することと
を含む、方法。
【請求項１９２】
ｎは、３である、請求項１９１に記載の方法。
【請求項１９３】
ｎは、４である、請求項１９１に記載の方法。
【請求項１９４】
ｎは、５である、請求項１９１に記載の方法。
【請求項１９５】
標的細胞を前記血液試料中の他の細胞から区別するために、前記血液試料を１つ以上の標識薬剤と組み合わせることをさらに含む、請求項１９１に記載の方法。
【請求項１９６】
前記１つ以上の標識薬剤は、蛍光標識されたリガンドを備えている、請求項１９５に記載の方法。
【請求項１９７】
前記フロートは、前記軟膜層を通る過剰な流体流動を阻止するための解放手段をさらに備えている、請求項１９１に記載の方法。
【請求項１９８】
前記可撓性スリーブは、透明である、請求項１９１に記載の方法。
【請求項１９９】
除去デバイスを使用して、前記軟膜層の少なくとも一部を前記ウェルから除去することをさらに含む、請求項１９１に記載の方法。
【請求項２００】
前記除去デバイスは、注射器である、請求項１９９に記載の方法。
【請求項２０１】
前記フロートは、前記血液試料が前記可撓性スリーブの中に導入される前に前記可撓性スリーブに導入される、請求項１９１に記載の方法。
【請求項２０２】
前記血液試料は、前記フロートが前記可撓性スリーブの中に導入される前に前記可撓性スリーブに導入される、請求項１９１に記載の方法。
【請求項２０３】
容積占有フロートであって、
上端および下端を有する本体部分と、
前記本体部分から突出する１つ以上の支持部材と、
前記本体部分内の中空内部空洞と
を備え、前記本体部分および前記１つ以上の支持部材は、環状容積を画定し、１つ以上の一方向弁が、前記環状容積から前記中空内部空洞への流動を可能にする、
フロート。
【請求項２０４】
単一の一方向弁を備えている、請求項２０３に記載のセパレータフロート。
【請求項２０５】
複数の一方向弁を備えている、請求項２０３に記載のセパレータフロート。
【請求項２０６】
前記１つ以上の支持部材は、前記本体部分の上端から離れるように半径方向に延在する上部支持部材と、前記本体部分の下端から離れるように半径方向に延在する下部支持部材とを備えている、請求項２０３に記載のセパレータフロート。
【請求項２０７】
一方向弁は、前記下部支持部材の近位にある、請求項２０６に記載のセパレータフロート。
【請求項２０８】
前記フロートは、約１．０２８から約１．０８９の比重を有している、請求項２０３に記載のセパレータフロート。
【請求項２０９】
前記フロートは、約１．０４０から約１．０７０の比重を有している、請求項２０３に記載のセパレータフロート。
【請求項２１０】
前記本体部分の上端に、前記中空内部空洞にアクセスするためのプラグをさらに備えている、請求項２０３に記載のセパレータフロート。
【請求項２１１】
血液試料の軟膜成分を捕捉する方法であって、
前記血液試料を可撓性試料管内に導入することであって、前記試料管は、側壁を有し、第１の断面内径を有している、ことと、
剛体容積占有フロートを前記可撓性試料管内に導入することであって、前記剛体フロートは、赤血球と血漿との中間の比重を有しており、
前記フロートは、
本体部分であって、前記本体部分は、前記本体部分と前記側壁との間に環状容積を画定するために、前記側壁によって半径方向に間隔をあけて包囲され、前記本体部分は、上端および下端を有する、本体部分と、
前記本体部分から突出し、前記側壁を係合する１つ以上の支持部材と、
前記本体部分内の中空内部空洞と、
前記環状容積から前記中空内部空洞への流動を可能にする、１つ以上の一方向弁と、
を備えている、ことと、
ある回転速度で前記試料管を遠心分離することであって、前記回転速度は、前記フロートの軸方向移動をもたらすための十分に大きい前記スリーブの拡大と、別々の層への血液の分離と、前記血液試料の少なくとも前記軟膜層と整列する前記フロートの移動とを生じさせる、ことと、
前記回転速度を低減することにより、前記管側壁に前記第１の直径に戻らせ、それによって、前記フロートを捕捉し、前記環状容積内に前記軟膜成分を捕集することと、
前記軟膜成分の少なくとも一部を前記中空内部空洞内に排出することと、
流体を前記環状容積内に流出させることと、
除去デバイスを使用して、前記軟膜成分を前記中空内部空洞から除去することと
を含む、方法。
【請求項２１２】
前記１つ以上の支持部材は、前記本体部分の上端から離れるように半径方向に延在する上部支持部材と、前記本体部分の下端から離れるように半径方向に延在する下部支持部材とを備えている、請求項２１１に記載の方法。
【請求項２１３】
一方向弁は、前記下部支持部材の近位にある、請求項２１２に記載の方法。
【請求項２１４】
標的細胞を前記血液試料中の他の細胞から区別するために、前記血液試料を１つ以上の標識薬剤と組み合わせることをさらに含む、請求項２１１に記載の方法。
【請求項２１５】
前記１つ以上の標識薬剤は、蛍光標識されたリガンドを備えている、請求項２１４に記載の方法。
【請求項２１６】
前記除去デバイスは、注射器またはピトー管である、請求項２１１に記載の方法。
【請求項２１７】
前記フロートは、前記血液試料が前記可撓性試料管に導入される前に前記可撓性試料管に導入される、請求項２１１に記載の方法。
【請求項２１８】
前記血液試料は、前記フロートが前記試料管に導入される前に前記試料管に導入される、請求項２１１に記載の方法。
【請求項２１９】
前記フロートは、単一の一方向弁から成る、請求項２１１に記載の方法。
【請求項２２０】
前記フロートは、複数の一方向弁を有している、請求項２１１に記載の方法。
【請求項２２１】
前記血液試料を染色剤と組み合わせることをさらに含む、請求項２１１に記載の方法。
【請求項２２２】
前記試料管は、少なくとも前記フロートの軸方向移動の経路内の前記側壁の一部に沿って継目がない、請求項２１１に記載の方法。
【請求項２２３】
前記血液試料は、抗凝固処理された全血を備えている、請求項２１１に記載の方法。
【請求項２２４】
容積占有セパレータフロートであって、
上端からアクセス可能な中心ボアを画定する側壁と、前記側壁の下端から半径方向に延在する下部支持部材と、前記中心ボア内に位置する第１のネジ山と、前記側壁内に位置し、前記中心ボアの下端内への流体の流入を可能にするように向けられている１つ以上の一方向弁とを備えている、第１の本体部分と、
前記中心ボア内に嵌入するためのサイズを有する中心部分と、前記第１の本体部分の前記第１のネジ山を係合するための前記中心部分上に位置する相補的ネジ山と、前記第２の本体部分の上端から半径方向に延在する上部支持部材とを備えている、第２の本体部分と
を備えている、セパレータフロート。
【請求項２２５】
前記第１の本体部分は、単一の一方向弁から成る、請求項２２４に記載のセパレータフロート。
【請求項２２６】
前記第１の本体部分は、複数の一方向弁を備えている、請求項２２４に記載のセパレータフロート。
【請求項２２７】
前記フロートは、約１．０２８から約１．０８９の比重を有している、請求項２２４に記載のセパレータフロート。
【請求項２２８】
前記フロートは、約１．０４０から約１．０７０の比重を有している、請求項２２４に記載のセパレータフロート。
【請求項２２９】
前記第２の本体部分の上端に、前記中心ボアにアクセスするためのプラグをさらに備えている、請求項２２４に記載のセパレータフロート。
【請求項２３０】
前記第２の本体部分を前記第１の本体部分からねじって後退させるための前記第２の本体部分内のキー孔をさらに備えている、請求項２２４に記載のセパレータフロート。
【請求項２３１】
血液試料の軟膜成分を分離し、軸方向に拡張する方法であって、
前記血液試料を可撓性試料管内に導入することであって、前記試料管は、側壁を有し、第１の断面内径を有している、ことと、
容積占有フロートを前記可撓性試料管内に導入することであって、前記フロートは、赤血球と血漿との中間の比重を有しており、
前記フロートは、
上端からアクセス可能な中心ボアを画定する円筒形と、前記円筒形の下端から半径方向に延在し、前記側壁を係合する下部支持部材と、前記中心ボア内に位置する第１のネジ山と、前記側壁内に位置し、前記中心ボアの下端内に流体の流入を可能にするように向けられている１つ以上の一方向弁とを備えている、第１の本体部分と、
前記中心ボア内に嵌入するためのサイズを有する中心部分と、前記第１の本体部分の第１のネジ山を係合するための前記中心部分上に位置する相補的ネジ山と、前記第２の本体部分の上端から半径方向に延在し、前記側壁を係合する上部支持部材とを備えている、第２の本体部分と
を備え、前記中心部分は、前記中心ボアを実質的に充填し、前記下部支持部材および上部支持部材は、前記試料管の側壁を係合し、
前記第１の本体部分および前記試料管の側壁は、前記本体部分と前記側壁との間に環状容積を画定する、
ことと、
ある回転速度で前記試料管を遠心分離することであって、前記回転速度は、前記フロートの軸方向移動をもたらすための十分に大きい前記スリーブの拡大と、別々の層への血液の分離と、前記血液試料の少なくとも前記軟膜成分と整列する前記フロートの移動とを生じさせる、ことと、
前記回転速度を低減することにより、前記管側壁に前記第１の直径に戻らせ、それによって、前記フロートを捕捉し、前記環状容積内に前記軟膜成分を捕集することと、
前記第２の本体部分をねじって後退させることにより、前記第２の本体部分を上方に移動し、前記中心ボア内の圧力を低減し、前記軟膜成分の少なくとも一部を前記中心ボア内に排出することと、
流体を前記環状容積内に流出させることと
を含む、方法。
【請求項２３２】
標的細胞を前記血液試料中の他の細胞から区別するために、前記血液試料を１つ以上の標識薬剤と組み合わせることをさらに含む、請求項２３１に記載の方法。
【請求項２３３】
前記１つ以上の標識薬剤は、蛍光標識されたリガンドを備えている、請求項２３２に記載の方法。
【請求項２３４】
前記フロートは、前記血液試料が前記可撓性試料管に導入される前に前記可撓性試料管に導入される、請求項２３１に記載の方法。
【請求項２３５】
前記血液試料は、前記フロートが前記試料管に導入される前に前記試料管に導入される、請求項２３１に記載の方法。
【請求項２３６】
前記第１の本体部分は、単一の一方向弁から成る、請求項２３１に記載の方法。
【請求項２３７】
前記第１の本体部分は、複数の一方向弁を備えている、請求項２３１に記載の方法。
【請求項２３８】
前記血液試料を染色剤と組み合わせることをさらに含む、請求項２３１に記載の方法。
【請求項２３９】
前記試料管は、少なくとも前記フロートの軸方向移動の経路内の前記側壁の一部に沿って継目がない、請求項２３１に記載の方法。
【請求項２４０】
前記血液試料は、抗凝固処理された全血を備えている、請求項２３１に記載の方法。
【請求項２４１】
容積占有セパレータフロートであって、
上端からアクセス可能である中心ボアを画定する円筒形と、前記円筒形の下端から半径方向に延在する下部支持部材と、前記円筒形内に位置し、前記中心ボアの下端内への流体の流入を可能にするように向けられている１つ以上の一方向弁とを備えている、第１の本体部分と、
前記中心ボア内に摺動可能に嵌入するためのサイズを有する中心部分と、前記第２の本体部分の上端から半径方向に延在する上部支持部材とを備えている、第２の本体部分と
を備えている、セパレータフロート。
【請求項２４２】
前記第１の本体部分は、単一の一方向弁を備えている、請求項２４１に記載のセパレータフロート。
【請求項２４３】
前記第１の本体部分は、複数の一方向弁を備えている、請求項２４１に記載のセパレータフロート。
【請求項２４４】
前記フロートは、約１．０２８から約１．０８９の比重を有している、請求項２４１に記載のセパレータフロート。
【請求項２４５】
前記フロートは、約１．０４０から約１．０７０の比重を有している、請求項２４１に記載のセパレータフロート。
【請求項２４６】
前記第２の本体部分の上端に、前記中心ボアにアクセスするためのプラグをさらに備えている、請求項２４１に記載のセパレータフロート。
【請求項２４７】
前記第１の本体部分および前記第２の本体部分の分離を防止するための停止部をさらに備えている、請求項２４１に記載のセパレータフロート。
【請求項２４８】
血液試料の軟膜成分を分離し、軸方向に拡張する方法であって、
前記血液試料を可撓性試料管内に導入することであって、前記試料管は、側壁を有し、第１の断面内径を有している、ことと、
容積占有フロートを前記可撓性試料管内に導入することであって、前記フロートは、赤血球と血漿との中間の比重を有しており、
前記フロートは、
上端からアクセス可能である中心ボアを画定する円筒形と、前記円筒形の下端から半径方向に延在する下部支持部材と、前記円筒形内に位置し、前記中心ボアの下端内への流体の流入を可能にするように向けられている１つ以上の一方向弁とを備えている、第１の本体部分と、
前記中心ボア内に摺動可能に嵌入するためのサイズを有する中心部分と、前記第２の本体部分の上端から半径方向に延在する上部支持部材とを備えている、第２の本体部分と
を備え、前記上部および下部支持部材は、前記試料管の側壁を係合し、
前記第１の本体部分および前記試料管の側壁は、前記本体部分と前記側壁との間に環状容積を画定する、
ことと、
ある回転速度で前記試料管を遠心分離することであって、前記回転速度は、前記フロートの軸方向移動を可能にする第２の直径への前記スリーブの拡大と、別々の層への血液の分離と、前記血液試料の少なくとも前記軟膜成分と整列する前記フロートの移動とを生じさせる、ことと、
前記回転速度を低減することにより、前記管側壁に前記第１の直径に戻らせ、それによって、前記フロートを捕捉し、前記環状容積内に前記軟膜成分を捕集することと、
前記第２の本体部分を軸方向上方に摺動させることにより、前記中心ボア内の圧力を低下させることと、
前記軟膜成分の少なくとも一部を前記中心ボア内に排出することと、
流体を前記環状容積内に流出させることと
を含む、方法。
【請求項２４９】
標的細胞を前記血液試料中の他の細胞から区別するために、前記血液試料を１つ以上の標識薬剤と組み合わせることをさらに含む、請求項２４８に記載の方法。
【請求項２５０】
前記１つ以上の標識薬剤は、蛍光標識されたリガンドを備えている、請求項２４９に記載の方法。
【請求項２５１】
除去デバイスを使用して、前記軟膜成分を前記中心ボアから除去することをさらに含む、請求項２４８に記載の方法。
【請求項２５２】
前記除去デバイスは、注射器またはピトー管である、請求項２５１に記載の方法。
【請求項２５３】
前記フロートは、前記血液試料が前記可撓性試料管に導入される前に前記可撓性試料管に導入される、請求項２４８に記載の方法。
【請求項２５４】
前記血液試料は、前記フロートが前記試料管に導入される前に前記試料管に導入される、請求項２４８に記載の方法。
【請求項２５５】
前記フロートは、単一の一方向弁から成る、請求項２４８に記載の方法。
【請求項２５６】
前記フロートは、複数の一方向弁を備えている、請求項２４８に記載の方法。
【請求項２５７】
前記血液試料を染色剤と組み合わせることをさらに含む、請求項２４８に記載の方法。
【請求項２５８】
前記試料管は、少なくとも前記フロートの軸方向移動の経路内の前記側壁の一部に沿って継目がない、請求項２４８に記載の方法。
【請求項２５９】
前記血液試料は、抗凝固処理された全血を備えている、請求項２４８に記載の方法。
【請求項２６０】
容積占有セパレータフロートであって、
上端および下端を有する本体部分と、
前記本体部分から半径方向に延在する少なくとも１つの支持部材であって、鋭利円周方向縁を備えている、支持部材と
を備え、前記本体部分と前記少なくとも１つの支持部材とは、前記本体部分の周囲に環状容積を画定する、セパレータフロート。
【請求項２６１】
前記少なくとも１つの支持部材は、前記本体部分の上端に位置している、請求項２６０に記載のフロート。
【請求項２６２】
前記少なくとも１つの支持部材は、前記本体部分の下端に位置している、請求項２６０に記載のフロート。
【請求項２６３】
少なくとも２つの支持部材を有し、１つの支持部材は、前記本体部分の上端に位置し、他の支持部材は、前記本体部分の下端に位置している、請求項２６０に記載のフロート。
【請求項２６４】
前記上端から前記下端に延在する圧力解放通路をさらに備えている、請求項２６０に記載のフロート。
【請求項２６５】
前記上端と前記下端との間に少なくとも１つの中間支持部材をさらに備え、前記中間支持部材は、鋭利円周方向縁を備えていない、請求項２６０に記載のフロート。
【請求項２６６】
血液試料中の軟膜成分を分離し、軸方向に拡張する方法であって、
前記血液試料を可撓性試料管内に導入することであって、前記試料管は、側壁を有している、ことと、
容積占有フロートを前記可撓性試料管内に導入することであって、前記剛体フロートは、赤血球と血漿との中間の比重を有しており、
前記フロートは、
本体部分であって、前記本体部分と前記側壁との間に環状容積を形成するために、前記本体部分は、前記側壁によって半径方向に間隔をあけて包囲されている、本体部分と、
上部鋭利円周方向縁を備えている上部支持部材と、
下部鋭利円周方向縁を備えている下部支持部材と、
を備えている、ことと、
ある回転速度で前記試料管を遠心分離することであって、前記回転速度は、前記フロートの軸方向移動を可能にするための十分に大きい直径への前記側壁の拡大と、別々の層への血液の分離と、前記血液試料の少なくとも前記軟膜成分と整列する前記フロートの移動とを生じさせる、ことと、
前記回転速度を低減することにより、前記側壁に前記フロートを捕捉させることと、
前記上部および下部支持部材のうちの少なくとも１つに対して、前記試料管を圧縮することにより、前記フロートと拡張された軟膜成分とを含む前記管の破断セクションを得ることと、
を含む、方法。
【請求項２６７】
前記フロートは、前記軟膜成分を通る過剰な流体流動を阻止するための解放手段をさらに備えている、請求項２６６に記載の方法。
【請求項２６８】
前記管は、前記上部および下部支持部材の両方において圧縮される、請求項２６６に記載の方法。
【請求項２６９】
標的細胞を前記血液試料中の他の細胞から区別するために、前記血液試料を１つ以上の標識薬剤と組み合わせることをさらに含む、請求項２６６に記載の方法。
【請求項２７０】
前記環状容積内に存在する血液試料を検査し、前記環状容積内に含まれる任意の標的細胞を識別することをさらに含む、請求項２６６に記載の方法。
【請求項２７１】
試料容積を前記環状容積から除去することと、
前記試料容積を１つ以上の標識薬剤によって標識し、標的細胞を区別することと、
前記試料容積を検査し、前記標的細胞を識別することとをさらに含む、請求項２６６に記載の方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本願は、米国仮特許出願第６１／３１８，９０３号（２０１０年３月３０日出願）および米国仮特許出願第６１／３７２，８８９号（２０１０年８月１２日出願）を基礎とする優先権を主張する。該出願の開示の全内容が参照により本明細書に援用される。
【０００２】
本開示は、概して、密度ベースの流体分離に関し、特に、軸方向拡張による、流体化合物の分離、識別、および／または定量化のための改良された試料管ならびにフロート設計と、それを採用する方法に関する。本開示は、血液分離および軟膜層の軸方向拡張において、特定の用途を見出し、それらに特に言及し説明される。
【背景技術】
【０００３】
定量的軟膜（ＱＢＣ）分析は、全血の評価のために、臨床実験室において、日常的に行われる。軟膜は、凝固していない血液が遠心分離されるか、または放置される場合に、赤血球の層と血漿との間に形成される、白血球の一連の薄い淡色層である。
【０００４】
ＱＢＣ分析技法は、概して抗凝固処理された全血を含む小毛細管の遠心分離を採用し、本質的に、（１）濃縮赤血球、（２）網状赤血球、（３）顆粒球、（４）リンパ球／単球、（５）血小板、および（６）血漿の６層に血液を分離する。軟膜は、上部から下部へと、血小板、リンパ球と顆粒球、および網状赤血球の層から成る。
【０００５】
毛細管の検査に基づいて、各層の長さまたは高さが、ＱＢＣ分析中に決定され、細胞数に変換され、したがって、各層の定量的測定を可能にする。各層の長さまたは高さは、手動読取デバイス、すなわち、拡大接眼レンズおよび手動ポインティングデバイスによって、または管の長さに沿って光透過性および蛍光性を測定することによって、層を見出す、自動光学走査デバイスによって、光度的に測定することができる。一連の一般的に使用されるＱＢＣ器具は、Ｂｅｃｔｏｎ−Ｄｉｃｋｉｎｓｏｎ  ａｎｄ  Ｃｏｍｐａｎｙ（Ｆｒａｎｋｌｉｎ  Ｌａｋｅｓ、Ｎ．Ｊ．）によって製造されるものである。
【０００６】
軟膜層は、非常に薄いため、軟膜は、多くの場合、プラスチック製円筒形またはフロートを管内に配置することによって、より正確な視覚的または光学的測定のために、毛細管内で拡張される。フロートは、赤血球（約１．０９０ｇ／ｍｌ）未満であって、血漿（約１．０２８ｇ／ｍｌ）超の密度を有し、管の断面積のほぼすべてを占有する。容積占有フロートは、したがって、概して、より容易かつ正確な測定のために、濃縮赤血球層上に静置し、管内の軟膜層の軸方向長を拡張させる。
【０００７】
当技術分野において、血液を分離し、および／または、血液試料中の軟膜または他の層内の循環癌および／または他の希少細胞、有機体または微粒子、あるいは物体（すなわち、幹細胞、細胞断片、ウイルス感染細胞、トリパノソーマ等）を識別するための改良された試料管およびフロートシステムならびに方法の必要性が存在する。しかしながら、典型的に、軟膜内に存在することが予測される細胞の数は、血液の容積と比較して、非常に少なく、例えば、血液１ミリメートルあたり約１−１００個の細胞の範囲内であって、したがって、特に、従来のＱＢＣ毛細管およびフロートで採用される、非常に小さい試料サイズでは、測定を困難にする。
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００８】
本開示は、前述の問題およびその他を克服する、新しく改良された血液分離アセンブリおよび方法を想定する。
【課題を解決するための手段】
【０００９】
本願は、種々の実施形態において、血液試料中の軟膜成分を分離し、軸方向に拡張するための装置および方法を開示する。装置は、セパレータフロートおよび試料管を含む。
【００１０】
本明細書に開示されるのは、血液試料中の軟膜成分を分離し、軸方向に拡張し、血液試料中の標的細胞を検出し、血液試料中の軟膜成分／標的細胞を捕捉または抽出する方法である。それらの方法は、血液試料および剛体容積占有フロートを可撓性試料管内に導入することを必要とする。剛体フロートは、本体部分であって、赤血球と血漿との中間の比重を有し、試料管の側壁によって半径方向に間隔をあけて包囲され、前記本体部分と前記側壁との間に環状容積を形成する、本体部分と、本体部分から突出し、側壁に係合する１つ以上の支持部材とを備えている。試料管は、フロートの軸方向移動を可能にするために十分に大きい直径への側壁の拡大、血液の別々の層への分離、および血液試料の少なくとも軟膜成分と整列するフロートの移動を生じさせる回転速度で遠心分離される。回転速度が低減され、側壁にフロートを捕捉させ、環状容積内に軟膜成分を捕集し、１つ以上の分析領域に分割され得る。
【００１１】
本明細書に開示されるいくつかの方法はさらに、１つ以上の支持部材のうちの少なくとも１つを側壁に溶接することを含む。
【００１２】
他の方法はさらに、標的細胞を血液試料中の他の細胞から区別するために、血液試料を１つ以上の標識薬剤と組み合わせることを含む。これは、遠心分離に先立って、または遠心分離後の後の処理の間、行うことができる。環状容積中の１つ以上の分析領域内に存在する血液試料はまた検査され、その中に含まれる任意の標的細胞を識別することができる。
【００１３】
さらなる実施形態に開示されるのは、試料を保持するための試料管である。試料管は、第１の断面内径、内部表面、および外部表面を有する側壁を備えている。１つ以上の円周方向切り欠き、切り込み、または刻目が、試料管の側壁に作製され、各切り欠きにおける、破断、分割、または分離を促進する。通常、切り欠きは、側壁の表面におけるＶ−形状またはＵ−形状陥没である。しかしながら、他の構成もまた想定される。
【００１４】
円周方向切り欠きは、試料管の側壁の外部表面または内部表面上に位置することができる。切り欠きはまた、円周の周囲に連続であるか、または不連続であることができる。特定の実施形態では、１つ以上の円周方向切り欠きは、管を３つの容積に分割する２つの組の切り欠きを備えている。
【００１５】
円周方向切り欠きを伴う、試料管を使用する方法では、遠心分離後、試料管は、１つ以上の切り欠きのうちの少なくとも１つにおいて破断され、フロートおよび拡張された軟膜成分を含む管の破断または隔離セクションを得る。
【００１６】
１つ以上の円周方向切り欠きは、管を３つの容積に分割する２つの組の切り欠きを備えていることができる。望ましくは、回転速度低減後、１つの組の切り欠きは、フロートの上方にあって、１つの組の切り欠きは、フロートの下方にある。フロートの軸方向長に沿って破断される切り欠きは、作製されるべきでなく、存在すべきでない。
【００１７】
また、実施形態に開示されるのは、第１の開放端部および第２の開放端部を有する円筒形を備えている、試料管である。２つの閉鎖デバイスが、２つの端部を密閉するために提供される。
【００１８】
２つの閉鎖デバイスを伴う、試料管を使用する方法では、閉鎖デバイスは、遠心分離後、除去される。これによって、赤血球および血漿を試料管から空にし、フロートおよび拡張された軟膜層を隔離することが可能となる。そのような閉鎖デバイスの実施例として、可撤性嵌めまたはネジ式キャップが挙げられるが、他の閉鎖デバイスもまた想定される。
【００１９】
さらに開示されるのは、環状容積内に含まれる軟膜成分の少なくとも一部が、除去デバイスを使用して、試料管の側壁を通して、除去されるいくつかの方法である。
【００２０】
異なるフロート設計もまた、本明細書に提供される。いくつかの実施形態では、容積占有セパレータフロートは、赤血球と血漿との中間の比重を有する。フロートは、上端および下端を有する本体部分と、本体部分から突出する１つ以上の支持部材とを備えている。本体部分および１つ以上の支持部材は、環状容積を画定する。本体部分はまた、ピトー管を受け取るための隔壁であって、本体部分の上端から環状容積に延在する隔壁を含む。
【００２１】
他の実施形態では、セパレータフロートは、遠位端を有するピトー管であって、ピトー管が上端において隔壁を係合し、遠位端が本体部分の上端から離れて位置している、ピトー管を含む。
【００２２】
隔壁を有するそのようなフロートを使用する方法では、隔壁は、ピトー管と係合される。軟膜層の少なくとも一部は、ピトー管を通して、環状容積から除去される。
【００２３】
加えて、開示されるのは、異なる容積占有セパレータフロートである。これらのフロートは、本体部分と、本体部分の上端から半径方向に延在する上部支持部材と、本体部分の下端から半径方向に延在する下部支持部材とを備えている。環状容積は、本体部分、上部支持部材、および下部支持部材によって画定される。１つ以上の中間支持部材は、本体部分から半径方向に延在し、環状容積内に複数のウェルを形成する。複数の隔壁が、本体部分内に存在し、各隔壁は、本体部分の上端から特定のウェルへのアクセスを可能にする。
【００２４】
いくつかのさらなる実施形態では、１つ以上の中間支持部材は、複数の軸方向に配向されたリッジから成る。その他では、１つ以上の中間支持部材は、複数の円周方向に配向されたリッジから成る。さらにその他では、１つ以上の中間支持部材は、複数の円周方向に配向されたリッジと交差する、複数の軸方向に配向されたリッジから成る。
【００２５】
さらに他の実施形態では、容積占有セパレータフロートは、上端および下端を有する本体部分と、本体部分の下端から半径方向に延在する下部支持部材と、本体部分から半径方向に延在し、かつ、本体部分の上端と下部支持部材との間に軸方向に延在し、少なくとも１つの軸方向に延在する縦溝を形成する複数のリッジとを備えている。フロートは、１つの軸方向に延在する縦溝または複数の軸方向に延在する縦溝から成り得る。軟膜成分の少なくとも一部は、注射器等の抽出デバイスを使用して、そのような縦溝から抽出することができる。
【００２６】
他の方法は、複数の縦溝を検査することと、複数の縦溝のうちの１つ以上内の標的細胞を識別することと、標的細胞を含む縦溝のみから軟膜成分を抽出することとを含む。
【００２７】
可撓性スリーブを伴うフロートを使用する他の方法もまた、本明細書に開示される。概して、血液試料およびフロートは、可撓性スリーブ内に導入され、次いで、遠心分離される。スリーブは、ウェルのうちの少なくとも１つを密閉し、フロート中のウェル内に軟膜成分を捕集するために使用される。
【００２８】
いくつかの実施形態では、スリーブは、側壁を備え、側壁は、ｎ個の辺を有する多角形断面形状を有する。フロートはまた、ｎ個の辺を有する。遠心分離後、スリーブは、収縮し、フロートに取り付き、軟膜成分の少なくとも一部をｎ個のウェル内に捕集する。例えば、そのようなスリーブは、側方断面構成において、三角形（すなわち、ｎ＝３）、正方形（すなわち、ｎ＝４）、五角形（すなわち、ｎ＝５）等であることができる。
【００２９】
本明細書に説明されるいくつかのフロートは、上端、下端、およびｎ個の辺を有する本体部分を備え、ｎは、３以上の整数である。上部支持部材は、本体部分の上端から側方に延在し、下部支持部材は、本体部分の下端から側方に延在する。複数のリッジがまた、存在し、各リッジは、本体部分から側方に延在し、かつ、上部支持部材から下部支持部材に軸方向に延在し、ｎ個の軸方向に配向されたウェルを形成し、各ウェルは、外部表面を有する。フロートは、ウェルの外部表面が、実質的に同一平面上にあることが可能であるように、展開されるように適合される。
【００３０】
フロートを展開することを使用する方法は、フロートを展開し、少なくとも２つのウェルを実質的に同一平面に配置することを含む。
【００３１】
本明細書に開示されるいくつかの容積占有フロートは、上端および下端を有する本体部分を備えている。１つ以上の支持部材は、本体部分から突出し、中空内部空洞が、本体部分内に存在する。本体部分および１つ以上の支持部材は、環状容積を画定し、１つ以上の一方向弁が、環状容積から中空内部空洞への流動をもたらす。プラグが、中空内部空洞にアクセスするために、本体部分の上端に存在し得る。
【００３２】
そのようなフロートは、軟膜成分の少なくとも一部を中空内部空洞内に排出することと、流体を環状容積内に流出させることと、注射器等の除去デバイスを使用して、軟膜成分を中空内部空洞から除去することとによって使用される。
【００３３】
別の類似容積占有セパレータフロートは、２つの本体部分を備えている。第１の本体部分は、上端からアクセス可能な中心ボアを画定する側壁を備えている。下部支持部材は、側壁の下端から半径方向に延在する。第１のネジ山は、中心ボア内に位置する。１つ以上の一方向弁は、側壁内に位置し、中心ボアの下端内に流体の流入を可能にするように向けられている。第２の本体部分は、中心ボア内に嵌入するためのサイズを有する中心部分と、第１の本体部分の第１のネジ山に係合するために、中心部分上に位置する相補的ネジ山とを備えている。上部支持部材は、第２の本体部分の上端から半径方向に延在する。本フロートは、中心ボア内の容積を増加させるように、ねじって後退させられることによって、動作する。
【００３４】
本フロートはさらに、第２の本体部分の上端に、中心ボアにアクセスするためのプラグを備え得る。本フロートはまた、概して、第２の本体部分を第１の本体部分から外すための第２の本体部分内のキー孔を備えている。
【００３５】
第２の本体部分がねじって後退させられると、第２の本体部分は、上方に移動し、中心ボア内の圧力を低減し、軟膜成分の少なくとも一部を中心ボア内に排出する。続いて、流体を環状容積内に流出することができる。
【００３６】
別の容積占有セパレータフロートはまた、２つの本体部分を備えている。第１の本体部分は、上端からアクセス可能な中心ボアを画定する円筒形を備えている。下部支持部材は、円筒形の下端から半径方向に延在する。円筒形内に位置する１つ以上の一方向弁は、中心ボアの下端内に流体の流入を可能にするように向けられている。第２の本体部分は、中心ボア内に摺動可能に嵌入するためのサイズを有する中心部分を備え、上部支持部材は、第２の本体部分の上端から半径方向に延在する。
【００３７】
本フロートは、第２の本体部分を軸方向上方に摺動させ、中心ボア内の圧力を低下させることと、軟膜成分の少なくとも一部を中心ボア内に排出することと、流体を環状容積内に流出させることとによって使用される。
【００３８】
本開示のこれらおよび他の非限定的特徴は、以下により具体的に開示される。
【図面の簡単な説明】
【００３９】
以下は、限定する目的ではなく、本明細書に開示される例示的実施形態を例証する目的のために提示される、図面の簡単な説明である。
【図１】図１は、容積占有セパレータフロートを含む試料管の側面図である。
【図２】図２は、本開示の方法を例証する、略図である。
【図３Ａ】図３Ａは、その中に容積占有セパレータフロートを含む切り欠き付き試料管の側面図である。
【図３Ｂ】図３Ｂは、切り欠き付き試料管の連続切り欠きの斜視図である。
【図３Ｃ】図３Ｃは、切り欠き付き試料管の不連続切り欠きの斜視図である。
【図３Ｄ】図３Ｄは、切り欠き付き試料管の長方形切り欠きの側面図である。
【図３Ｅ】図３Ｅは、切り欠き付き試料管の三角形切り欠きの側面図である。
【図４】図４は、閉鎖デバイスによって密閉され、その中に容積占有セパレータフロートを含む２つの開放端部を有する、例示的試料管の側面図である。
【図５】図５は、試料管試料管内の、容積占有セパレータフロート、および試料管の側壁を貫通し、環状容積にアクセスする注射器を備えている、装置の側面図である。
【図６】図６は、フロートを通して延在し、環状容積にアクセスするピトー管を有する、容積占有セパレータフロートを含む試料管の側面図である。
【図７】図７は、軸方向ウェルを形成する、軸方向中間支持部材を有する、容積占有セパレータフロートの斜視図である。
【図８】図８は、円周を形成する、円周方向中間支持部材を有する、容積占有セパレータフロートの側面図である。
【図９】図９は、複数のウェルを形成するように交差する、軸方向中間支持部材および円周方向中間支持部材を有する、容積占有セパレータフロートの斜視図である。
【図１０】図１０は、単一軸方向縦溝を有する、容積占有セパレータフロートの上部斜視図である。
【図１１】図１１は、複数の軸方向縦溝を有する、容積占有セパレータフロートの上部斜視図である。
【図１２】図１２は、その中に容積占有セパレータフロートを含む可撓性スリーブの一部の断面図である。
【図１３】図１３は、正方形断面を伴う、容積占有セパレータフロートを含む可撓性スリーブの斜視図である。
【図１４】図１４は、展開された容積占有セパレータフロートの斜視図である。
【図１５】図１５は、フロートの環状容積から中空内部空洞内への流動をもたらす一方向弁を伴う、容積占有セパレータフロートの側面図である。
【図１６】図１６は、別の容積占有セパレータフロートの側面図である。フロートは、ともにねじ込まれる２つの部品を有する。
【図１７】図１７は、別の容積占有セパレータフロートの側面図である。フロートは、摺動可能に係合される２つの部品を有する。
【図１８】図１８は、別の容積占有セパレータフロートの側面図である。フロートは、鋭利支持部材を有する。
【発明を実施するための形態】
【００４０】
本明細書に開示される構成要素、プロセス、および装置のより完全なる理解は、付随の図面を参照することによって、得ることができる。これらの図は、本開示を実証する便宜性および容易性に基づく、単なる略図であって、したがって、デバイスまたはその構成要素の相対的サイズおよび寸法を示すこと、および／または例示的実施形態の範囲を定義あるいは限定することを意図するものではない。
【００４１】
具体的用語が、明確性のために、以下の説明において使用されるが、これらの用語は、図面における例証のために選択された実施形態の特定の構造のみを参照することを意図し、本開示の範囲を定義または限定することを意図するものではない。図面および以下の説明では、同一数字表示は、同一機能の構成要素を指すことを理解されたい。
【００４２】
数量に関して使用される修飾語句「約」は、記述された値を含み、文脈によって示される意味を有する（例えば、少なくとも、特定の数量の測定と関連付けられる、誤差の程度を含む）。範囲の文脈で使用される場合、修飾語句「約」はまた、２つの端点の絶対値によって画定される範囲を開示するものと見なされるべきである。例えば、「約２から約１０」の範囲は、範囲「２から１０」も開示する。
【００４３】
本開示は、概して、種々の構成要素の密度に基づいて、血液試料の種々の構成要素を分離、識別、捕捉、および／または定量化するために有用である装置およびアセンブリに関する。それらの装置は、容積占有セパレータフロート、試料管、およびそれらの組み合わせを含む。
【００４４】
図１は、血液分離管およびフロートアセンブリ１００の軸方向断面である。アセンブリは、試料管１１０と、その中に配置されるセパレータフロートまたは浮き１３０とを含む。
【００４５】
試料管１１０は、概して、円筒形である。しかしながら、多角形および他の幾何学形状断面形状を有する試料管もまた想定される。言い換えると、試料管は、ｎ個の辺を有する多角形である断面を有し得る。例えば、ｎ＝３の時、試料管は、三角形断面を有する。特に、試料管は、等辺等角多角形断面を有し得る（すなわち、各辺の長さが、実質的に等しい）。
【００４６】
試料管１１０は、第１の閉鎖端部１１４と、ストッパまたはキャップ１２５を受け取る、第２の開放端部１１６とを含む。パラフィルム等の他の閉鎖手段もまた想定される。さらに本明細書に論じられる代替実施形態では、試料管は、各端部において、開放され得、各端部は、適切な閉鎖デバイスを受け取る。
【００４７】
管は、概して、円筒形として描写されるが、管１１０は、特に、射出成形プロセスによって製造される場合、最小限に先細にされ、開放端部１１６に向かって、若干拡大され得る。本先細または抜き勾配は、概して、射出成形ツールから管の除去を容易にするために必要である。
【００４８】
管１１０は、透明または半透明材料から形成され、管１１０の側壁１１２は、例えば、遠心分離中に、遠心負荷下、結果としての試料の静水圧によって半径方向に拡張するように、十分に可撓性または変形可能である。遠心力が、除去された場合、管側壁１１２は、実質的にその元のサイズおよび形状に戻る。側壁１１２は、外部表面１２１および内部表面１２３を有する。
【００４９】
管は、ポリスチレン、ポリカーボネート、スチレンブタジエンスチレン（「ＳＢＳ」）、スチレン／ブタジエン共重合体（Ｐｈｉｌｌｉｐｓ  ６６  Ｃｏ．（Ｂａｒｔｌｅｓｖｉｌｌｅ、Ｏｋｌａｈｏｍａ）から市販の「Ｋ−Ｒｅｓｉｎ（登録商標）」等）等の任意の透明または半透明の可撓性ポリマー材料（有機および無機）から形成され得る。好ましくは、管材料は、透明である。しかしながら、管は、試料標本中の着目細胞またはアイテムを探す受取器具が、管内にそれらのアイテムを「認める」または検出することができる限り、必ずしも、クリアである必要はない。例えば、バルク試料中では検出することができない、非常に低レベルの放射線のアイテムは、以下により詳細に説明される、本開示のプロセスによって分離され、フロート１３０によって、壁の近傍に捕集された後、非クリアまたは半透明壁を通して検出することができる。望ましくは、試料管は、少なくとも、それに沿ってフロートが移動する管のそれらの部分に沿って継目がない。
【００５０】
いくつかの実施形態では、管１１０は、血液または試料流体の少なくとも約５ミリメートル、より好ましくは、血液または流体の少なくとも約８ミリメートル、最も好ましくは、血液または流体の少なくとも約１０ミリメートルを加算して、フロート１３０を収容するためのサイズを有する。特定の実施形態では、管１１０は、約１．５ｃｍの内径１１７を有し、フロート１３０に加え、血液の少なくとも約１０ミリメートルを収容する。
【００５１】
ここに描写されるフロート１３０は、本体部分１３２と、フロート１３０の対向する軸方向端部に配置される２つの密閉リングまたはフランジ１４０とを含む。フロート１３０の本体部分１３２と密閉リングまたは支持部材１４０とは、圧力または遠心分離下、試料管１１０の内径１１７未満である外径を有するようなサイズを有する。換言すると、支持部材の外径は、フロートが、試料管によって、特定の場所に保持されることができるように、非屈曲状態では、実質的に試料管１１０の内径１１７に等しい。フロート１３０の本体部分１３２はまた、密閉または支持リング１４０の直径未満であるより小さい外径１３８を有し、それによって、フロート１３０と管１１０の側壁１１２との間に環状容積１７０を画定する。本体部分は、管の断面積の大部分を占有し、環状容積１７０は、管が、非屈曲状態にある場合、軟膜層の細胞構成要素（すなわち、軟膜成分）および関連付けられた標的細胞を含むために十分に大きい。好ましくは、寸法１３８および１１７は、環状容積１７０が、約２５ミクロンから約２５０ミクロン、最も好ましくは、約５０ミクロンの範囲の半径方向厚を有するようなものである。用語「環状」は、管内のフロートによって形成される、リング状の形状を指すために使用され、２つの同心円によって画定される形状を必要とするものと解釈されるべきではないことに留意されたい。むしろ、管およびフロートはそれぞれ、異なる形状を有し得、「環状」は、その間に形成される形状を指す。支持部材１４０の数もまた、さらに本明細書に見られるように、可変であり得る。
【００５２】
ボアまたはチャネル１５０は、フロート１３０を通して、軸方向に延在する。管／フロートシステムが、遠心分離されている場合、管は、拡張し、血液試料中のフロートを解放する。遠心分離が、減速されるのに伴って、フロートは、管が、その元の直径に戻るのに伴って、管の側壁１１２によって、捕捉される。管が、収縮し続けるのに伴って、圧力は、フロートの下方に捕集された血液分画、主に、赤血球内に蓄積し得る。この圧力によって、赤血球は、捕捉された軟膜成分を含む環状容積１７０内に付勢され、したがって、含有量を希釈するか、または軟膜の含有量の撮像をより困難にし得る。代替として、減速の間、試料管の側壁のしぼみは、分離された軟膜層を通る過剰または破壊的な流体流動を生成し得る。ボア１５０は、フロート１３０下方に捕集された高密度分画内の任意の過剰な流体流動または任意の得られた圧力を解放させる。ボア１５０内への過剰な流体流動は、したがって、軟膜試料の劣化を防止する。本ボアは、軟膜成分を通る過剰な流体流動を阻止するための圧力解放手段と見なすことができる。ボアは、ここでは、フロート１３０内の中心かつ軸方向に整列されて描写されるが、ボアが、一端から他端へとフロートを通して完全に延在する限り、他の構成も想定される。いくつかの実施形態では、ボア１５０は、中心に位置し、軸方向に延在する。
【００５３】
いくつかの事例では、フロート１３０の本体部分１３２の外径１３８は、管１１０の内径１１７未満であり得るが、本関係は必須ではない。これは、管１１０が、遠心分離される（または、加圧される）と、管１１０が拡張し、フロート１３０が自由に移動するからである。遠心分離（または、加圧）ステップが、完了すると、管１３０は、密閉リングまたは支持リッジ１４０に対して収縮し、フロートを捕捉する。環状容積１７０が、次いで、生成され、支持リッジまたは密閉リング１４０の長さによってサイズ決定される（すなわち、「プール」の深さは、管直径に関わらず、支持リッジ１４０の長さと等しい）。
【００５４】
所望の実施形態では、フロート寸法は、高さ３．５×直径１．５ｃｍであって、本体部分は、血液の軟膜層を捕捉するために、５０ミクロンの間隙を提供するためのサイズを有する。したがって、軟膜層の捕捉のために利用可能な容積は、約０．０８ミリリットルである。軟膜層全体は、概して、総血液試料の約０．５％未満であるので、好ましいフロートは、血液の８から１０ミリリットル試料中に分離された軟膜層の全体量を収容する。
【００５５】
密閉または支持フランジ付き端部１４０は、実質的に管の内径１１７に等しい、または若干大きたサイズを有する。概して剛体であるフロート１３０も、可撓性管壁１１２に対して支持を提供することができる。さらに、支持部材１４０は、血液成分層の分離を維持するための密閉機能を提供する。フロートの支持部材１４０と管の壁１１２との間に形成される密閉は、流体密閉を形成し得る。本明細書で使用される場合、用語「密閉」は、フランジ１４０と管壁１１２との間における、ほとんどの場合本開示の目的のために適切である実質的密閉を提供するほぼゼロの隙間または若干の干渉をも包含することが意図される。
【００５６】
支持部材１４０は、最も好ましくは、連続リッジであって、その場合、試料は、より低速で遠心分離され、分離された層の急激な下降（ｓｌａｍｐｉｎｇ）は、阻止される。しかしながら、さらに本明細書に論じられる代替実施形態では、支持部材は、環状間隙１７０を出入りする流体経路を提供する１つ以上の開口部を有する、不連続またはセグメント化された帯域であることができる。支持部材１４０は、別個に形成され、本体部分１３２に取り付けられ得る。しかしながら、好ましくは、支持部材１４０および本体部分１３２は、一体型または一体型構造を形成する。
【００５７】
支持部材の幾何学形状構成は、例示に過ぎず、異なる構成も想定される。例えば、図１における支持部材１４０は、平坦である。図３Ａにおける支持部材２４０は、本体部分２３２から先細にされ、図４における支持部材３４０は、凹面湾曲である。これらの形状は、遠心分離中、フロートの周囲の血液の流動を助長する表面を提供することができる。想定されるさらなる例示的形状として、限定ではないが、屋根形状および切頭屋根形状、３つ、４つ、またはそれ以上の辺の錐体および角錐台、弓形または切頭弓形、測地線形状等が挙げられる。
【００５８】
セパレータフロート１３０の全体的比重は赤血球（約１．０９０）と血漿（約１．０２８）との間であるべきである。より具体的実施形態では、比重は、約１．０８９から約１．０２９、より好ましくは、約１．０７０から約１．０４０の範囲、最も好ましくは、約１．０５である。
【００５９】
フロートは、フロートの全体的比重が、所望の範囲内にある限り、異なる比重を有する複数の材料から形成され得る。フロート１３０の全体的比重および環状間隙１７０の容積は、軟膜層といくらかの赤血球および／または血漿とが、環状間隙内に保持され得るように、選択され得る。遠心分離の際、フロート１３０は、軟膜層および標的細胞と同一軸方向位置を占有し、濃縮赤血球層上に浮遊する。軟膜は、フロート１３０と管１１０の内側壁１１２との間の狭小環状間隙１７０内に保持される。拡張された軟膜領域は、次いで、照明および拡大下、循環上皮癌または腫瘍細胞または他の標的検体を識別するために検査されることができる。
【００６０】
実施形態では、フロート１３０の密度は、血液試料の顆粒球層内に安定するように選択される。顆粒球は、濃縮赤血球層上またはその直上に安定し、約１．０８−１．０９の比重を有する。本好ましい実施形態では、フロートの比重は、遠心分離の際、フロートが、顆粒球層内に安定するように、約１．０８から約１．０９の範囲にある。顆粒球の量は、約２０倍も、患者毎に異なり得る。したがって、フロートが、顆粒球層内に安定するように、フロート密度を選択することは、顆粒球層の直上に安定する、リンパ球／単球層のいずれの損失も、回避されるため、特に、有利である。遠心分離中、顆粒球層のサイズが増加するのに伴って、フロートは、顆粒球内でより上に安定し、リンパ球および単球を本質的にフロートに対して同じ位置に維持する。さらに本明細書に説明される他の実施形態では、フロートは、２つの部品から作製され得、各部品の比重は、異なり得る。
【００６１】
フロート１３０は、１つ以上の概して硬質有機または無機材料、好ましくは、ポリスチレン、アクリロニトリルブタジエンスチレン（ＡＢＳ）共重合体、芳香族ポリカーボネート、芳香族ポリエステル、カルボキシメチルセルロース、エチルセルロース、エチレン酢酸ビニル共重合体、ナイロン、ポリアセタール、ポリアセテート、ポリアクリロニトリルおよび他のニトリル樹脂、ポリアクリロニトリル塩化ビニル共重合体、ポリアミド、芳香族ポリアミド（アラミド）、ポリアミドイミド、ポリアリレート、ポリアリーレンオキシド、ポリアリーレンスルフィド、ポリアリルスルホン、ポリベンゾイミダゾール、ポリブチレンテレフタレート、ポリカーボネート、ポリエステル、ポリエステルイミド、ポリエーテルスルホン、ポリエーテルイミド、ポリエーテルケトン、ポリエーテルエーテルケトン、テレフタル酸ポリエチレン、ポリイミド、ポリメタクリレート、ポリオレフィン（例えば、ポリエチレン、ポリプロピレン）、ポリアロマー、ポリオキサジアゾール、ポリパラキシリレン、ポリフェニレンオキシド（ＰＰＯ）、変性ＰＰＯ、ポリスチレン、ポリスルホン、フッ素含有ポリマー、例えば、ポリテトラフルオロエチレン、ポリウレタン、ポリ酢酸ビニル、ポリビニルアルコール、ハロゲン化ポリビニル、例えば、ポリ塩化ビニル、ポリ塩化ビニル酢酸ビニル共重合体、ポリビニルピロリドン、ポリ塩化ビニリデン、特殊ポリマー等、最も好ましくは、ポリスチレン、ポリカーボネート、ポリプロピレン、アクリロニトリルブタジエンスチレン共重合体（「ＡＢＳ」）、およびその他等の硬質プラスチック材料から形成される。
【００６２】
この点において、検出または走査方法に干渉する材料および／または添加剤の使用を回避することが望ましい。例えば、蛍光性が、検出目的のために利用される場合、フロート１３０を構築するために利用される材料は、着目波長において、干渉または「背景」蛍光性を有するべきではない。
【００６３】
いくつかの側面では、可撓性管と剛体フロートとの圧縮性および／または剛性は、逆にされることができる。フロートが可撓性であり、より高い圧力では、直径が収縮し、剛体管内を自由に移動するように設計される。圧縮性フロートの使用は、いくつかの事例では、ポリマー管より向上した光学特性を呈する、透明ガラス管の使用を可能にする。さらに、本側面は、概して、ガラス管の公差要件を低減させ（フロートは、圧力低下後、管壁に対して拡張するであろうため）、あらゆる種類のフロート設計が、可能である。
【００６４】
米国特許第６，１９７，５２３号に開示される、対象の血液中の循環上皮癌細胞を検出する方法は、有利には、本開示の試料管およびフロートシステムを採用するように修正され得る。前述の米国特許第６，１９７，５２３号は、参照することによって、全体として本明細書に組み込まれる。
【００６５】
本開示の管／フロートシステム１００を使用する例示的方法では、抗凝固処理された血液の試料が提供される。例えば、分析される血液は、標準的Ｖａｃｕｔａｉｎｅｒ（登録商標）またはその中に事前に配置された抗凝固剤を有する種類の他の同様の血液採取デバイスを使用して採取され得る。代替として、可撓性試料管は、分析される血液を直接捕捉するために使用され得る。
【００６６】
着目標的上皮細胞または他の標的検体に特定的である蛍光標識された抗体またはリガンド等のタグが、血液試料に添加され、遠心分離に先立って培養されることができる。例示的実施形態では、上皮細胞は、それに取り付けられる蛍光タグを有する抗上皮細胞接着分子によって標識される。抗上皮細胞接着分子は、通常、血流中に認められる、任意の他の細胞において存在することが予期されない上皮細胞特定の部位に結合する。アクリジンオレンジ等の染色剤または着色剤もまた、試料に添加され、照明下、軟膜層の判別を容易にするために、種々の細胞種が異なる色に着色するようにし、試料の検査中、上皮細胞の形態を強調または明確にし得る。
【００６７】
血液は、次いで、遠心分離のために、アセンブリ１００に移転される。フロート１３０は、血液試料が、試料管１１０内に導入された後、管１１０内に導入され得、または別様に、事前にその中に配置され得る。試料を含む管およびフロートアセンブリは、次いで、遠心分離される。本管／フロートシステム１００によって、血液を遠心分離するために必要とされる動作は、従来の場合と明示的に異なるわけではないが、前述のように、遠心速度の減速が可能であり、急激な下降の問題も低減され得る。アダプタが、随意に、応力による、可撓性管の故障を防止するために、ロータ内で利用され得る。
【００６８】
遠心分離中、試料管は、いくつかの効果を生じさせるために十分な回転速度でスピンされる。特に、結果としての静水圧は、第１の断面内径から第２の直径に管の直径を拡大するように、壁１１２を変形または屈曲させる（第２の直径は、第１の直径より大きい）。第２の直径は、管１１０内において、遠心力下、血液構成要素およびフロート１３０が軸方向に移動することを可能にするために十分に大きい。血液試料は、密度に従って、下部から上部（最も高密度から最も低密度）へと濃縮赤血球、網状赤血球、顆粒球、リンパ球／単球、血小板、および血漿の６つの離散かつ個別の層に分離される。撮像が試みられる上皮細胞は、軟膜層内、すなわち、顆粒球、リンパ球／単球、および血小板層内に密度別に集まる傾向にある。フロートの密度に起因して、フロートは、試料管内において、軟膜層／成分と同じ軸方向位置を占有し、したがって、狭小環状容積１７０（可能性として、少量の赤血球および／または血漿とともに）を占有する。換言すると、フロートは、血液試料の少なくとも軟膜成分と整列するように移動する。
【００６９】
遠心分離が、完了し、遠心力が、除去された後、管１１０は、その元の直径に戻り、環状容積１７０内にフロートならびに軟膜層および標的検体を捕捉または保持する。管／フロートシステムは、血液試料中の任意の標的検体を識別するために、顕微鏡または光学読取機に移転されることができる。フロートのその後の使用に応じて、環状容積は、１つ以上の分析領域を構成すると見なされ得る。
【００７０】
遠心分離は、必要とされないことがある。時として、管の内側に対する圧力の印加のみ、または単純に、管の拡張（または、フロートの圧縮）が、必要とされる。例えば、そのような圧力は、管の外側における真空源の使用を通して、生成することができる。そのような印加はまた、試料管の上部を開放したまま維持し、容易にアクセス可能にする。加えて、真空源の使用は、いくつかの状況において、遠心力の印加より、実装が容易であり得る。加えて、機械、電気、磁気等の管状拡張／収縮（または、フロート圧縮）の任意の方法を実装することができる。管が、拡張される（または、フロートが圧縮される）と、フロートは、試料内の密度変動によって生成される浮力によって、適切な場所に移動するであろう。
【００７１】
本明細書に説明されるさらなる実施形態では、注射器等の除去デバイスが、次いで、使用され、軟膜層／成分を環状容積から抽出する。ここでの意図は、着目標的細胞を抽出することであって、したがって、本プロセス中、赤血球および／または血漿のいくつかを除去することも容認可能である。タグが、未だ添加されていない場合、ここで添加され、着目「標的」細胞にタグ付けまたは標識し得る。再び、タグは、分析器具または検出器が、例えば、蛍光性、放射線等を検出し得る、任意の種類である。タグは、除去デバイス自体内にあるか、または別個に添加されることもできる。
【００７２】
試料は、次いで、器具／検出器を通して、「噴出」等によって適用され、タグ付けされた細胞が分析される。これは、タグ付けされた細胞の数を計数するために十分であり得る。しかしながら、さらなる実施形態では、「陽性」試料細胞は、さらなる分析のために、ホルダの中に迂回される。そのような細胞を分離する手段は、当技術分野において周知であって、例えば、器具／検出器のタイミングをホルダと調整することによって、流動フローサイトメトリー内で使用されるものに類似することができる。陽性試料は、次いで、例えば、さらなる検査のためのスライドを調製するために、さらに分析することができる。本「噴出および迂回」方法は、数倍大きい元の血液試料と比較して、分析がより容易となる、より小さい試料容積をもたらす。
【００７３】
フロートは、採取管システムまたはアセンブリの一部を備えていることができる。したがって、軟膜試料を採取容器から分析管に移転させることは必要ない。血液または試料流体は、直ぐに採取され、次いで、試験することができる。そのようなシステムは、幾分、高速であって、また、生物学的災害の観点から、より安全である。例えば、本システムは、血液へのいかなる種類の暴露も、最小限にされなければならない、非常に感染性の状況（すなわち、Ｅｂｏｌａウイルス、ＨＩＶ等）において望ましい。
【００７４】
図２は、前述の一般的方法のうちのいくつかを例証する、略図である。ステップ２では、血液試料の軟膜層内の標的細胞は、遠心分離に先立って、タグ付けすることができる。ステップ４では、軟膜は、例えば、遠心分離によって、分離される。ステップ６では、軟膜を含み、元の血液試料と比較して容積が低減された試料が、試料管から抽出される。ステップ８では、標的細胞が、未だタグ付けされていない場合、ここでタグ付けすることができる。代替として、所与の器具／検出器との使用に好適な異なるタグを使用して、タグ付けすることができる。ステップ１０では、低減された容積が、検出器を通される。ここで例証されるように、タグ付けされた標的細胞を伴う、低減された容積は、注射器２０内から開始し、検出器２５内に注入され、そこで、「陽性」試料（すなわち、標的細胞）を分離し、それらをホルダ３０内に迂回させる。「陰性」試料は、廃棄物３５に進み、すなわち、廃棄される。最後に、ステップ１２において、陽性試料は、さらに分析される。
【００７５】
前述の試料管、セパレータフロート、および方法は、本開示の一般的概念を提供する。いくつかのさらなる概念が、本明細書に説明される。
【００７６】
軟膜層／成分を試料管から除去するためのいくつかの異なる手段が可能である。いくつかの実施形態では、血液試料およびフロートは、試料管内に導入され、管は、遠心分離され、次いで、回転速度が低減され、環状容積内に軟膜成分を捕集する。次に、少なくとも１つの支持部材１４０が、試料管１１０の側壁１１２に溶接される。本溶接は、ここでは、封入された環状体と見なすことができる環状容積内に軟膜層を捕集し、軟膜層が血漿および／または赤血球から分離される。
【００７７】
溶接は、溶接される部材の円周、すなわち、支持部材が側壁に接触する周縁の周囲に連続し得る。溶接はまた、不連続、すなわち、溶接の間に間隙が存在し得る。特定の実施形態では、溶接は、超音波で行われる。超音波溶接は、プラスチックのために一般的産業技法であって、２つのアイテムがともに保持され、２つのアイテム間に溶接された固体状態を生成するように、高周波数超音波音響振動が局所的に印加される。用語「溶接」は、ここでは具体的場所において、フロートを試料管と継合する作用を示すために使用され、融解と同意語である。
【００７８】
いくつかの実施形態では、可撓性スリーブは、試料管内に配置され、次いで、フロートおよび血液試料が可撓性スリーブ内に配置される。これらの実施形態では、少なくとも１つの支持部材１４０は、スリーブに溶接され得る。
【００７９】
図３Ａを参照すると、特定の実施形態では、セパレータフロート２３０は、上端２３４および下端２３６を有する本体部分２３２を含む。上部支持部材２４２は、上端２３４から半径方向に延在し、下部支持部材２４４は、下端２３６から半径方向に延在する。側壁２１２、本体部分２３２、上部支持部材２４２、および下部支持部材２４４は一緒に、環状容積２７０を画定する。好ましい実施形態では、上部および下部支持部材は両方とも、試料管に溶接される。軸方向ボア２５０は、軟膜層の下方の赤血球部分の圧力解放のために存在する。
【００８０】
図３Ａに示される血液分離装置２００はまた、試料管２１０の別の例示的実施形態を示す。試料管２１０は、側壁２１２と、第１の閉鎖端部２１４と、第２の開放端部２１６と、円周方向切り欠き２２０とを含む。円周方向切り欠きは、実質的に同一平面にある、１つ以上の溝によって形成され、平面は、管の側壁に垂直である。第１の組の切り欠き２２２は、フロート１３０の上方に位置し、第２の組の切り欠き２２４は、フロートの下方に位置する。各組は、図３では、３つの切り欠きを伴って示されるが、本数は、可変であることができ、概して、各組内に１つから４つの切り欠きである。試料管は、１つ以上の切り欠きに沿って破断され、フロートおよび環状容積２７０内に捕集された軟膜層へのアクセスを得る。
【００８１】
図３Ｂ−３Ｅは、切り欠きの異なる変形例を例証する。図３Ｂでは、描写される組は、１つの連続溝２１９によって形成される、１つの切り欠きを有する。すなわち、切り欠きは、円周の周囲に連続する。図３Ｃでは、描写される切り欠きは、一式の短い溝２１９によって形成される。すなわち、切り欠きは、円周の周囲に不連続である。図３Ｄでは、組は、２つの切り欠きを有し、それらの各々は、長方形形状である一方、図３Ｅでは、切り欠きは、三角形形状である。言い換えると、切り欠きは、三角形または長方形軸方向断面を有し得る。Ｕ−形状等の他の切り欠き形状もまた想定される。これらの形態は、管がどのように破断するかを指示する際に有用となり得る。図３Ａにおける切り欠き２２０は、試料管２１０の外部表面２２１上にあり、切り欠きは、試料管２１０の内部表面２２３上に位置し得るが、フロートの軸方向移動に干渉すべきではない。試料管は、いくつかの実施形態では、単一切り欠きのみ有し得る。しかしながら、望ましい実施形態では、試料管２１０は、第１の組の切り欠き２２２および第２の組の切り欠き２２４を備え、管を３つの容積２２５、２２７、２２９に分割する。
【００８２】
再び、血液試料およびフロートは、試料管２１０内に導入され、管は、遠心分離され、次いで、回転速度が低減され、環状容積内に軟膜成分を捕集する。試料管２１０を使用する方法はさらに、１つ以上の切り欠き２２０のうちの少なくとも１つにおいて、試料管２１０を破断し、フロート２３０および軟膜成分を含む環状容積２７０を含む管２１０のセクションを得るステップを含む。ある好ましい実施形態では、フロート１３０上方の第１の組の切り欠き２２２のうちの少なくとも１つの切り欠きおよびフロート２３０下方の第２の組の切り欠き２２４のうちの少なくとも１つの切り欠きが、破断される。管は、例えば、単純に捻ることまたはスナップすることによって、破断され得る。環状容積２７０は、所望に応じて、管を破断前または後のいずれかにおいて、標的細胞を識別するために検査することができる。
【００８３】
望ましくは、試料管内に導入される血液の量は、遠心分離後、フロート２３０が、管２１０の中央容積２２５内に位置するように制御される。図３Ａに見られるように、フロートの軸方向長２３１に沿って切り欠きは、存在しない。本結果は、軟膜層の破断および結果として生じる損失が生じないことを確実にする補助をする。
【００８４】
試料を含む下側球状部を密閉させる密閉ガラスアンプルが知られている。典型的には、そのようなアンプルは、熱がガラスを軟化させるように印加される、狭窄を有する。ガラスは、しぼみ、密閉を形成し、下側球状部は、管の残部からゆっくりと引き離される。そのような密閉されたアンプルは、管のガラス材料が、試料を完全に包囲するという点において、図３Ａの試料管と異なるが、ここでは、セパレータフロート自体が、軟膜試料を包囲する、１つまたは２つの表面を提供する。加えて、そのような密閉されたアンプルは、典型的には、下側球状部内のその試料を密閉する。すなわち、アンプルは、２つの容積に分割される。対照的に、図３Ａの試料管は、３つの容積に分割することができる。最後に、試料管の破断は、加熱し、アンプルを密閉するより、容易かつ時間がかからない。
【００８５】
図４は、試料管３１０およびセパレータフロート３３０を含む、血液分離装置３００の別の概念を示す。試料管３１０は、側壁３１２から形成され、ここでは、円筒形３１３として示されるが、管は、概して、任意の側方断面形状を有し得る。側壁は、相互に対向する、第１の開放端部３１５および第２の開放端部３１６を画定する。第１の閉鎖デバイス３２６は、第１の端部３１５を閉鎖し、第２の閉鎖デバイス３２８は、第２の端部３１６を閉鎖する。閉鎖デバイスは、円筒形内に入り込まないキャップ３１９等の外部キャップ、または円筒形内に入り込むストッパ３２１等の内部キャップ、あるいは任意のそれらの組み合わせであることができる。
【００８６】
図４の装置が、使用される場合、第１の閉鎖デバイス３２６は、遠心分離中、第１の端部３１５を密閉する。第２の端部３１６は、第２の閉鎖デバイス３２８によって密閉される、または開放されたままであり得る。遠心分離終了時、第１の閉鎖デバイス３２６および／または第２の閉鎖デバイス３２８は、次いで、フロートおよび拡張された軟膜層にアクセスするために除去される。特に、２つのキャップ設計は、有利には、血漿および赤血球を試料管３１０から排出させ、拡張された軟膜層を分析される円筒形３１３内に残す。所望に応じて、本概念はまた、試料管が、円周方向切り欠きおよび２つの開放端部を有し、管が、血漿および赤血球の排出後、切り欠きにおいて、破断されるように、前述の切り欠き２２０と組み合わせることができる。
【００８７】
軟膜成分はまた、他の手段によって、環状容積から採取することができる。図５は、試料管４１０およびセパレータフロート４３０を含む、血液分離装置４００を示す。試料管４１０は、側壁４１２と、第１の端部４１４と、第２の端部４１６とを有する。描写されるセパレータフロート４３０は、上端４３４および下端４３６を有する本体部分４３２と、本体部分４３２から半径方向に延在する上部支持部材４４２および下部支持部材４４４と、上端４３４から下端４３６を通して延在する、軸方向ボア４５０等の圧力解放手段とを含む。環状容積４７０は、本体部分４３２と側壁４１２との間に形成される。
【００８８】
図５の装置が、軟膜成分を分離するために使用される場合、軟膜成分の少なくとも一部は、注射器４８０等の除去デバイスを使用して、環状容積４７０から、側壁４１２を通して、除去される。この点において、側壁は、典型的には、概して、遠心分離によって生成される力に耐えるために十分に頑丈であるが、注射器４８０によって貫通されることができる、材料から形成される。好ましくは、材料は、除去デバイスによって、側壁内に作製された小孔を密閉することができる。材料を選択するための基準として、高透明度、射出成形グレード、高流動、中から低弾性率、低収縮、およびコストが、挙げられる。この点において、試料管４１０を形成するための好適な材料として、アクリル、テレフタル酸ポリエチレングリコール（ＰＥＴＧ）、ポリカーボネート、ポリスチレン、スチレンブタジエンスチレンポリマー、およびＴＯＰＡＳポリマー（環状オレフィンおよびエチレンに基づく、非晶質透明共重合体）が挙げられ得る。
【００８９】
別の概念は、図６に例証される。ここでは、血液分離装置５００は、試料管５１０と、セパレータフロート５３０と、ピトー管５９０を含む。試料管５１０は、側壁５１２と、第１の閉鎖端部５１４と、第２の開放端部５１６とを含む。セパレータフロート５３０は、上端５３４および下端５３６を有する本体部分５３２と、本体部分５３２から半径方向に延在する１つ以上の支持部材５４０とを含む。隔壁５５２は、本体部分５３２内に存在し、および隔壁は、上端５３４から環状容積５７０に延在する。軸方向ボア５５０もまた、上端５３４から下端５３６を通して延在する。
【００９０】
ピトー管５９０は、近位端５９２および遠位端５９４を有する。内部通路５９３は、当然ながら、管内に存在し、近位端と遠位端との間に延びている。近位端５９２は、本体部分５３２の上端５３４において、隔壁５５２を係合し、遠位端５９４は、上端５３４から離れて位置する。セパレータフロート５３０およびピトー管５９０は、別個の部品または１つの一体型ユニットであり得る。
【００９１】
図６の装置が、軟膜成分を分離するために使用される場合、環状容積５７０内の軟膜層／成分は、例えば、真空を印加することによって、ピトー管５９０を通して除去することができる。この点において、ピトー管は、ストローのように作用する。すなわち、流体は、ピトー管の上部における圧力が、ピトー管の下部における圧力を下回ると、ピトー管を通して流動する。ピトー管５９０および隔壁５５２が、一体型ではない場合、ピトー管５９０は、軟膜層／成分の除去に先立って、隔壁５５２に係合する。
【００９２】
図７−９は、一般的概念の異なる実施形態を示す。図１に見られるように、セパレータフロートは、軟膜成分が捕集される、環状容積を画定する、本体部分と、上部支持部材と、下部支持部材とを備えている。フロートは、分析されなければならない血液試料の容積を低減させて、着目標的細胞を配置するが、個別にアクセスすることができるウェルに環状容積を分割することによって、容積を低減することが可能である。換言すると、各ウェル内の容積は、別のウェルの容積と別個に除去することができる。これを達成するために、フロートはさらに、環状容積内に複数のウェルを形成する。すなわち、環状容積を複数のウェルに分割する１つ以上の中間支持部材を含む。複数の隔壁もまた、本体部分内に存在し、各隔壁は、本体部分の上端から、特定のウェルへのアクセスを可能にするか、またはそこへのアクセスを提供する。軟膜成分が、特定のウェルから除去されると、空気等の流体が、そのウェル内に流入し、抽出された容積に取って代わることができる。例えば、軟膜成分は、ウェルの下部近傍の管側壁を通して挿入される注射器を介して、採取され得る一方、同時に、側壁は、同一ウェルの上部において穿刺され、空気に、軟膜成分に取って代わらせ得る。代替として、特定のウェルに隣接する試料管は、２つのポートを生成するために、２つの異なる場所において、穿刺され得る。圧力が、次いで、第１のポートに印加され、軟膜成分を第２のポートの外へ圧送させ得る。注射器はまた、フロートを通して、ウェル内に挿入され、そのウェルから含有量を抽出し得る。
【００９３】
図７では、セパレータフロート６３０は、上端６３４および下端６３６を有する本体部分６３２と、上端６３４から半径方向に延在する上部支持部材６４２と、下端６３６から半径方向に延在する下部支持部材６４４とを含む。中間支持部材６４０は、本実施形態では、複数の軸方向リッジ６４６から成る。軸方向リッジは、本体部分から半径方向に延在し、また、上部支持部材６３４と下部支持部材６４４との間に軸方向に延在する。軸方向リッジは、概して、上部支持部材および下部支持部材と同一距離だけ、本体部分から、半径方向に延在する。各軸方向ウェル６７５は、本体部分６３２、上部支持部材６４２、下部支持部材６４４、および２つの軸方向リッジ６４６によって、画定される。概して、各軸方向ウェル６７５は、同一容積を有するが、これは、必須ではないことが想定される。各軸方向ウェルは、その独自の隔壁６５２を有し、本体部分６３２の上端６３４から、軸方向ウェル６７５へのアクセスを可能にする。隔壁が、本体部分の下端６３６近傍の軸方向ウェルにアクセスすることが望ましいであろう。
【００９４】
図８では、セパレータフロート７３０は、上端７３４および下端７３６を有する本体部分７３２と、上端７３４から半径方向に延在する上部支持部材７４２と、下端７３６から半径方向に延在する下部支持部材７４４とを含む。中間支持部材は、本実施形態では、複数の円周方向リッジ７４８から成る。円周方向リッジは、本体部分から半径方向に延在し、本体部分７３２、上部支持部材７４２、および下部支持部材７４４によって画定される容積内に、複数の円周方向ウェル７７５を形成する。各ウェル７７５は、本体部分７３２および少なくとも１つの円周方向リッジ７４８によって画定される。円周方向リッジは、概して、上部支持部材および下部支持部材と同一距離だけ、本体部分から半径方向に延在する。概して、各ウェル７７５は、同一容積を有するが、これは、必須ではないことが想定される。各ウェルは、その独自の隔壁７５２を有し、本体部分７３２の上端７３４から、ウェル７７５へのアクセスを可能にする。特定の実施形態では、各ウェルの隔壁は、本体部分の下端７３６に最も近い支持部材に近位のウェルにアクセスする。例えば、隔壁７５３は、下部支持部材７４４に近位のウェル７７７にアクセスする一方、隔壁７５５は、円周方向リッジ７８１に近位のウェル７７９にアクセスする。
【００９５】
図９では、セパレータフロート８３０は、上端８３４および下端８３６を有する本体部分８３２と、上端８３４から半径方向に延在する上部支持部材８４２と、下端８３６から半径方向に延在する下部支持部材８４４とを含む。中間支持部材は、本実施形態では、複数の軸方向リッジ８４６および複数の円周方向リッジ８４８から成る。これらのリッジ８４６、８４８は、概して、上部支持部材および下部支持部材と同一距離だけ、本体部分から半径方向に延在する。軸方向リッジ８４６は、円周方向リッジ８４８を交差し、本体部分８３２、上部支持部材８４２、および下部支持部材８４４によって画定される容積内に、複数のウェル８７５を形成する。概して、各ウェル８７５は、同一容積を有するが、これは、必須ではないことが想定される。各ウェルは、その独自の隔壁８５２を有し、本体部分８３２の上端８３４から、特定のウェル８７５へのアクセスを可能にする。隔壁は、可能な限り、本体部分の下端６３６に近位において、各ウェルにアクセスすることが望ましくあり得る。
【００９６】
図７−９のフロートが、軟膜成分を分離するために使用される場合、特定のウェル内の軟膜層は、注射器またはピトー管等の抽出デバイスを使用して、抽出することができる。特に、環状容積は、最初に、標的細胞が配置されているウェルを識別するために検査され、そのウェル内の流体のみ、より綿密な分析のために抽出される。
【００９７】
図１０および図１１は、関連概念を示す。図１０は、試料管９１０およびセパレータフロート９３０を示す。セパレータフロート９３０は、上端９３４および下端９３６を有する本体部分９３２と、下端９３６から半径方向に延在する下部支持部材９４４とを含む。複数の軸方向リッジ９４６は、本体部分９３２から半径方向に延在し、また、上端９３４と下部支持部材９４４との間に軸方向に延在する。軸方向リッジは、概して、下部支持部材と同一距離だけ、本体部分から半径方向に延在する。軸方向リッジ９４６は、軸方向に延在する縦溝９７８を形成する。ここでは、縦溝９７８内の液体は、本体部分内に隔壁を含む必要なく、上端９３４からアクセス可能である。これは、フロートを製造するために必要とされる複雑性およびコストを削減し得る。
【００９８】
図１１は、試料管１０１０およびセパレータフロート１０３０を示す。セパレータフロート１０３０は、上端１０３４および下端１０３６を有する本体部分１０３２と、下端１０３６から半径方向に延在する下部支持部材１０４４と、上端１０３４と下部支持部材１０４４との間に延在し、軸方向リッジ間に複数の縦溝１０７８を形成する、複数の軸方向リッジ１０４６とを含む。上端１０３４と下端１０３６との間の圧力差を解放するための軸方向ボア１０５０も描写される。
【００９９】
図１０および図１１のフロートが、使用される場合、特定の縦溝９７８、１０７８内の軟膜成分の少なくとも一部は、注射器またはピトー管等の抽出デバイスを使用して、抽出される。特に、環状容積は、最初に、標的細胞が配置されている縦溝を識別するために検査され、その縦溝内の流体のみ、より綿密な分析のために抽出される。
【０１００】
さらなる概念では、可撓性スリーブがフロートと併用され得る。血液試料およびフロートは、可撓性スリーブ内に配置され、次いで、試料管内に配置することができる。可撓性スリーブ自体は、半透明または透明であり得る。遠心分離後、可撓性スリーブは、フロート上のウェル内に軟膜層を密閉するために使用される。密閉されたウェルは、次いで、分析のための小スライドとして、処理することができる。
【０１０１】
図１２は、１つの概念を例示する、可撓性スリーブ１１１８およびセパレータフロート１１３０の上部断面図を示す。セパレータフロート１１３０は、本体部分１１３２および複数の軸方向リッジ１１４６を含む。軸方向リッジは、本体部分から半径方向に延在し、また、本体部分の上端（図示せず）と下端（図示せず）との間に軸方向に延在する。下部支持部材１１４４は、概して、存在し、上部支持部材（図示せず）もまた、存在し得る。リッジは、概して、下部支持部材および上部支持部材と同一距離だけ、本体部分から半径方向に延在する。複数のウェル１１７５は、リッジによって形成される。各リッジ１１４６の端部１１４７は、円唇であることに留意されたい。これは、可撓性スリーブの穿孔を低減する。
【０１０２】
可撓性スリーブ１１１８は、概して、セパレータフロート１１３０の直径未満である、断面直径を有する。これは、ウェル１１７５を覆うスリーブの密閉／伸展を助長する。遠心分離の際、可撓性スリーブの直径は、増加し、フロートが、軟膜成分と整列されることができるように、フロートの軸方向移動をもたらす。回転速度の低減に応じて、スリーブは、フロートを捕捉する。少なくとも１つのウェル１１７５は、次いで、スリーブ１１１８によって密閉され、軟膜成分の一部を捕集する。スリーブは、摩擦によって、すなわち、そのより小さい直径のため、定位置に保持され得るか、またはスリーブは、前述のように、溶接されることができる。上部支持部材が、存在しない場合、特定のウェル内の軟膜成分は、所望に応じて、注射器またはピトー管等の除去デバイスを使用して、除去することができる。また、所望に応じて、フロートは、非対称である。すなわち、本体部分が、試料管の軸と同軸ではないように、または異なるウェルが、異なる容積を有するように、成形することができることに留意されたい。
【０１０３】
関連概念では、可撓性スリーブは、ｎ個の辺を有する多角形断面形状を有し、フロートもまた、ｎ個のウェルを有する。図１３に例証されるように、可撓性スリーブ１２１８およびセパレータフロート１２３０は両方とも、４辺を有する断面形状を有する。可撓性スリーブは、４辺を有する断面形状を有する側壁１２１２を有する。いくつかの実施形態では、側壁およびフロートの横断面は、ｎ個の辺を有する等辺等角多角形である。概して、ｎは、３以上の整数であって、特定の実施形態では、３、４、または５である（すなわち、三角形、正方形、または五角形）。フロートは、その結果、ウェルを画定する辺の間の角に、ｎ個の軸方向に配向されたリッジ１２４８を有するであろう。再び、ウェルは、異なる容積であり得ることに留意されたい。しかしながら、概して、ウェルはすべて、同一寸法および容積を有する。
【０１０４】
セパレータフロート１２３０は、本体部分１２３２と、本体部分１２３２から半径方向に延在する１つ以上の支持部材１２４０とを含む。好ましい実施形態では、本体部分１２３２は、上端１２３４から延在する上部支持部材１２４２と、下端１２３６から延在する下部支持部材１２４４とを有する。環状容積１２７０は、本体部分１２３２および側壁１２１２によって画定される。
【０１０５】
再び、可撓性スリーブ１２１８は、概して、セパレータフロート１２３０の直径未満である断面直径を有する。これは、ウェル１２７５を覆うスリーブの密閉／伸展を助長する。遠心分離の際、可撓性スリーブの直径が増加し、フロートが、軟膜成分と整列されることができるように、フロートの軸方向移動をもたらす。回転速度を低減すると、スリーブは、収縮し、フロートに取り付く。ウェルは、所望に応じて、スリーブによって密閉または溶接されることができる。スリーブによって提供される平坦表面により、ウェルは、次いで、スライドのように分析されることができる。
【０１０６】
本概念の拡張では、フロートは、ウェルが、スティックのように分析されることができるように、展開されることができる。図１４は、本概念を例示する、セパレータフロート１３３０を示す。セパレータフロート１３３０は、本描写では、展開されている。セパレータフロートは、本体部分１３３２と、本体部分１３３２から側方に延在する、４つの軸方向に配向されたリッジ１３４０とを含む。上部支持部材（図示せず）および下部支持部材（図示せず）もまた、本体部分から側方に延在する。上部支持部材、下部支持部材、および軸方向リッジは、概して、同一距離だけ、本体部分から半径方向に延在する。したがって、フロートは、リッジ１３４０、支持部材、および本体部分１３３２間のウェル１３７５を画定する。フロートの本体部分１３３２は、ウェルの外部表面１３４５が、実質的に同一平面にあることができるように、展開されるように適合される。換言すると、本体部分１３３２は、本実施形態では、４つの異なる部品１３３３として見なすことができ、各部品は、各ウェル１３７５のための表面を提供する。フロートは、例えば、ヒンジまたは他の類似方法を提供することによって、屈曲される各リッジ１３４０の端部１３４７に、より薄い材料を提供することによって、展開することができる。本質的に、各リッジは、フロートを展開させるためにヒンジとして作用する。軸方向ボアは、一緒に継合された際に、部品１３３３が、中実体を形成しないことを提供することによって、容易に形成することができる。
【０１０７】
遠心分離回転速度の低減後、スリーブは、収縮し、再び、所望に応じて、密閉または溶接することによって、軟膜層／成分を密閉する。フロート１３３０は、ウェル１３７５の外部表面１３４５を実質的に同一平面に配置するように展開される。ここでの別の利点は、スリーブが、注射器等の除去デバイスによって、より容易に穿通され得ることである。
【０１０８】
別の組の概念では、軟膜成分は、前述のように、試料管とフロートとの間の環状容積内に捕集される。軟膜成分は、次いで、フロートの本体部分内の空洞中に排出される。軟膜成分は、次いで、本空洞から除去される。所望に応じて、軟膜成分を含むフロートが、試料管から除去され、軟膜成分が、続いて、フロートから除去されることができる。代替として、軟膜成分は、フロートから除去することができる一方、フロートは、依然として、管内にある。例えば、本概念は、フロート内の空洞にアクセスするのに先立って、血漿および／または赤血球を除去するための図４の２つのキャップ試料管と組み合わせられ得る。
【０１０９】
図１５は、本概念の例示的実施形態を示す。血液分離装置１４００は、試料管１４１０およびセパレータフロート１４３０を含む。試料管１４１０は、側壁１４１２を含む。セパレータフロートは、上端１４３４、下端１４３６を有する本体部分１４３２を含む。少なくとも１つの支持部材１４４０が、本体部分から突出する。本体部分および支持部材１４４０は、環状容積１４７０を画定する。特定の実施形態では、下部支持部材１４４４は、下端１４３６から半径方向に延在する。さらなる実施形態では、下部支持部材が、存在し、上部支持部材１４４２もまた、上端１４３４から半径方向に延在する。
【０１１０】
中空内部空洞１４５６は、本体部分内に存在する。内部空洞１４５６は、１つ以上の一方向弁１４５４によって、環状容積１４７０に接続され、中空内部空洞１４５６内への流体の流体をもたらす。換言すると、一方向弁は、中空内部空洞内側の圧力が、環状容積内の圧力を下回ると、開放されるように配向される。特定の実施形態では、一方向弁は、本体部分の下端１４３６または下部支持部材１４４４の近位にある。ストッパに類似する、プラグ１４５８は、中空内部空洞１４５６にアクセスするために、本体部分の上端１４３４に存在し得る。注射器は、プラグ１４５８を貫通し、中空内部空洞１４５６にアクセスするために使用することができる。
【０１１１】
図１５の装置は、概して、前述のように、使用される。遠心分離中、環状容積１４７０と中空内部空洞１４５６との間の圧力差は、一方向弁１４５４を開放させるために十分に大きい。軟膜成分が、次いで、遠心分離中、中空内部空洞１４５６内に流入し得る。遠心分離後、圧力差は低減され、一方向弁１４５４は閉鎖し、中空内部空洞１４５６内に軟膜成分を捕集する。ピトー管または注射器等の除去デバイスが、プラグ１４５８を通して、中空内部空洞１４５６内に挿入され、軟膜成分を除去する。
【０１１２】
図１６は、別の例示的実施形態を示す。セパレータフロート１５３０は、第１の本体部分１５６０および第２の本体部分１５８０を含む。第１の本体部分１５６０は、中心ボア１５５０を画定する側壁１５６２を備えている。側壁は、上端１５３４および下端１５３６を有し、中心ボア１５５０は、上端からアクセス可能である。下部支持部材１５４４は、側壁の下端１５３６から半径方向に延在する。第１のネジ山１５４６は、中心ボア内に位置する。側壁１５６２内に位置する１つ以上の一方向弁１５５４は、環状容積１５７０から、中心ボア１５５０の下端１５５１内への流体の流動をもたらす。換言すると、一方向弁は、中心ボア１５５０内側の圧力が、環状容積１５７０内の圧力を下回ると、開放するように配向される。一方向弁は、概して、下部支持部材１５４４の近位に位置する。
【０１１３】
第２の本体部分１５８０は、中心ボア１５５０内に嵌入するためのサイズを有する中心部分１５８２を備えている。相補的ネジ山１５８４は、中心部分１５８２上に位置し、第１のネジ山１５４６に係合する。上部支持部材１５８６は、第２の本体部分の上端１５８８から半径方向に延在する。ストッパに類似するプラグ１５８９が、中心ボア１５５０にアクセスするために、上部支持部材１５８６および中心部分１５８２を通して、存在し得る。
【０１１４】
図１６の装置は、概して、前述のように使用される。使用時、フロート１５３０は、中心ボア１５５０が、中心部分１５８２によって充填されるように、完全にねじ込まれている。換言すると、第１の本体部分１５６０の上端１５３４は、第２の本体部分１５８０の上部支持部材１５８６に接触する。遠心分離および回転速度の低減後、軟膜成分は、環状容積１５７０内に位置する。第２の本体部分１５８０は、次いで、第１の本体部分１５６０からねじって後退させられ、中心ボア１５５０の内部容積を増加させる。本作用は、中心ボア１５５０内側の圧力を低減させ、一方向弁１５５４を開放し、軟膜成分を中心ボア内に排出させる。ピトー管または注射器１５９９等の除去デバイスは、プラグ１５８９を通して、中心ボア１５５０内に挿入され、軟膜成分を除去することができる。代替として、第２の本体部分は、部分的に、ねじって後退させられ、軟膜成分を排出することができる。フロートは、次いで、試料管から除去され、第２の本体部分は、完全にねじって後退させられ、成分は、第１の本体部分の中心ボア１５５０から吐き出されるか、または別様に、回収されることができる。
【０１１５】
第２の本体部分は、キーを使用して、ねじって後退させられる。ここに描写されるように、キー１５９０は、ハンドル１５９２と、第２の本体部分の上端１５８８上に存在するキー孔１５９６に係合するインターフェース１５９４とを備えている。
【０１１６】
図１７は、セパレータフロート１６３０の第３の例示的実施形態を示す。セパレータフロート１６３０は、第１の本体部分１６６０および第２の本体部分１６８０を含む。第１の本体部分１６６０は、中心ボア１６５０を画定する側壁１６６２を備えている。側壁は、上端１６３４および下端１６３６を有し、中心ボア１６５０は、上端からアクセス可能である。下部支持部材１６４４は、側壁の下端１６３６から半径方向に延在する。側壁１６６２内に位置する１つ以上の一方向弁１６５４は、環状容積１６７０から、中心ボア１６５０の下端１６５１内への流体の流動をもたらす。換言すると、一方向弁は、中心ボア１６５０内側の圧力が、環状容積１６７０内の圧力を下回ると、開放するように配向される。一方向弁は、概して、下部支持部材１６４４の近位に位置する。
【０１１７】
第２の本体部分１６８０は、中心ボア１６５０内に嵌入するためのサイズを有する中心部分１６８２を備えている。上部支持部材１６８６は、第２の本体部分の上端１６８８から半径方向に延在する。ストッパに類似する、プラグ１６８９は、中心ボア１６５０にアクセスするために、上部支持部材１６８６および中心部分１６８２を通して、存在し得る。
【０１１８】
図１７の装置は、図１６の装置に類似するが、内部容積を増加させ、中心ボア１６５０内の圧力を低減させるためにねじって後退させられる代わりに、２つの本体部分が離れるように摺動し、したがって、軟膜成分を中心ボア１６５０内に排出させる。この点において、第１の本体部分１６６０は、側壁１６６２の上端１６３４に、第１の唇部１６７２を含み得、第２の本体部分１６８０は、中心部分１６８２の下端１６９１において、第２の唇部１６７４を含み得、２つの唇部は、本体部分の移動を終了させる停止部１６７６を協働して形成し、したがって、第１および第２の本体部分が分離しない。
【０１１９】
図１８は、セパレータフロートの別の例示的実施形態である。試料管１７１０は、側壁１７１２から形成される。フロート１７３０は、本体部分１７３２と、フロートの対向する軸方向端部に位置する２つの支持部材１７４０とを含む。フロートは、本体部分１７３２の内径１７３８より大きい、支持部材１７４０の外径１７１７を有し、環状容積１７７０を形成するためのサイズを有する。ここでは、上部および下部支持部材１７４０は、鋭利円周方向縁１７４２を有する。言い換えると、とがった周縁または円周が、各支持部材１７４０の外径１７３８に沿って提供される。遠心分離後、軟膜成分は、環状容積１７７０内に捕集される。次いで、試料管が上部および下部支持部材のうちの少なくとも１つに対して圧縮される。圧縮下、鋭利縁１７４２は、管側壁１７１２を切断し、フロートを含む管の破断セクションおよび拡張された軟膜成分をもたらす。管は、上部支持部材のみ、下部支持部材のみ、または支持部材両方において、フロートに対して圧縮され得る。管が、支持部材に対して圧縮される順序は、重要ではないと考えられる。これによって、試料管を破断し、フロートおよび環状容積１４７０内に捕集された軟膜層へのアクセスが可能となる。当然ながら、フロートはまた、図７−９に示される軸方向リッジまたは円周方向リッジ、螺旋リッジ、あるいは米国特許第７，０７４，５７７号（その開示は、参照することによって、本明細書に完全に組み込まれる）に示されるもの等の突起等、他の中間支持部材を含み得る。そのような中間支持部材は、本段落に説明される、鋭利円周方向縁を有さないであろう。
【０１２０】
特定の実施形態が説明されたが、予期されていない、または現在予期され得ない、代替、修正、変形例、改良、および実質的均等物が、出願人または他の当業者に想起され得る。故に、出願および修正され得る、添付の請求項は、そのような代替、修正、変形例、改良、および実質的均等物すべてを包含することが意図される。
【図１】
2013528785.tif 000003
【図２】
2013528785.tif 000004
【図３Ａ】
2013528785.tif 000005
【図３Ｂ】
2013528785.tif 000006
【図３Ｃ】
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【図３Ｄ】
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【図３Ｅ】
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【図４】
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【図５】
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【図６】
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【図７】
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【図８】
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【図９】
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【図１０】
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【図１１】
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【図１２】
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【図１３】
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【図１４】
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【図１５】
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【図１６】
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【図１７】
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【図１８】
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【手続補正書】
【提出日】平成24年11月29日(2012.11.29)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
容積占有セパレータフロートであって、
本体部分と、
前記本体部分から半径方向に延在し、前記本体部分を包囲する容積内に少なくとも１つのウェルを形成する１つ以上の中間支持部材と、
前記本体部分内の少なくとも１つの隔壁であって、前記少なくとも１つの隔壁は、前記本体部分の上端から特定のウェルへのアクセスを可能にする、少なくとも１つの隔壁と
を備えている、セパレータフロート。
【請求項２】
前記１つ以上の中間支持部材は、複数の軸方向に配向されたリッジから成る、請求項１に記載のセパレータフロート。
【請求項３】
前記１つ以上の中間支持部材は、複数の円周方向に配向されたリッジから成る、請求項１に記載のセパレータフロート。
【請求項４】
前記１つ以上の中間支持部材は、複数の円周方向に配向されたリッジと交差する、複数の軸方向に配向されたリッジから成る、請求項１に記載のセパレータフロート。
【請求項５】
複数の隔壁をさらに備え、各隔壁は、特定のウェルへのアクセスを可能にする、請求項１に記載のセパレータフロート。
【請求項６】
複数の隔壁をさらに備え、少なくとも２つの隔壁が、特定のウェルへのアクセスを可能にする、請求項１に記載のセパレータフロート。
【請求項７】
前記フロートは、約１．０２９から約１．０８９の比重を有している、請求項１に記載のセパレータフロート。
【請求項８】
容積占有セパレータフロートであって、
上端および下端を有する本体部分と、
前記本体部分の下端から半径方向に延在する下部支持部材と、
前記本体部分から半径方向に延在し、かつ、前記本体部分の上端と前記下部支持部材との間に軸方向に延在することにより、少なくとも１つの軸方向に延在する縦溝を形成する複数のリッジと
を備えている、セパレータフロート。
【請求項９】
複数の軸方向に延在する縦溝から成る、請求項８に記載のセパレータフロート。
【請求項１０】
前記フロートは、約１．０２９から約１．０８９の比重を有している、請求項８に記載のセパレータフロート。
【請求項１１】
容積占有フロートであって、
上端、下端、およびｎ個の辺を有する本体部分であって、ｎは、２以上の整数である、本体部分と、
複数のリッジであって、各リッジは、前記本体部分から離れるように側方に延在し、かつ、前記上部支持部材から前記下部支持部材に軸方向に延在することにより、軸方向に配向されたｎ個のウェルを形成し、各ウェルは、外部表面を有する、複数のリッジと
を備えている、フロート。
【請求項１２】
前記本体部分の上端から離れるように半径方向に延在する上部支持部材、または、前記本体部分の下端から離れるように半径方向に延在する下部支持部材のうちの少なくとも１つをさらに備えている、請求項１１に記載のフロート。
【請求項１３】
前記フロートは、前記ウェルの外部表面が、実質的に同一平面上にあることが可能であるように、展開されるように適合されている、請求項１１に記載のフロート。
【請求項１４】
前記本体部分の辺は、同一長さを有している、請求項１１に記載のフロート。
【請求項１５】
前記フロートは、約１．０２９から約１．０８９の比重を有している、請求項１１に記載のフロート。
【請求項１６】
容積占有フロートであって、
上端および下端を有する第１の本体部分と、
前記第１の本体部分から突出する１つ以上の支持部材と、
前記第１の本体部分内の中空内部空洞と
を備え、前記第１の本体部分および前記１つ以上の支持部材は、環状容積を画定し、１つ以上の一方向弁が、前記環状容積から前記中空内部空洞への流動を可能にする、
フロート。
【請求項１７】
前記中空内部空洞内に位置する第１のネジ山と、第２の本体部分とをさらに備え、前記第２の本体部分は、前記中空内部空洞内に嵌入するためのサイズを有する中心部分と、前記第１の本体部分の前記第１のネジ山を係合するための前記中心部分上に位置する相補的ネジ山とを備えている、請求項１６に記載のセパレータフロート。
【請求項１８】
第２の本体部分をさらに備え、前記第２の本体部分は、前記中空内部空洞内に摺動可能に嵌入するためのサイズを有する中心部分を備えている、請求項１６に記載のセパレータフロート。
【請求項１９】
前記本体部分の上端に、前記中空内部空洞にアクセスするためのプラグをさらに備えている、請求項１６に記載のセパレータフロート。
【請求項２０】
血液を分離するためのキットであって、前記キットは、
可撓性スリーブと、
セパレータフロートと
を備え、
前記セパレータフロートは、本体部分と、前記本体部分から突出する１つ以上の支持部材とを備え、前記１つ以上の支持部材は、前記可撓性スリーブの側壁を係合し、前記本体部分は、前記側壁の軸方向に整列された部分と一緒に、前記本体部分と前記側壁との間に環状容積を画定し、前記支持部材は、前記環状容積を横断し、ｎ個のウェルを生成し、
前記可撓性スリーブは、前記環状容積内の軟膜の少なくとも一部分を密閉することが可能である、血液を分離するためのキット。
【手続補正２】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００３８
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００３８】
本開示のこれらおよび他の非限定的特徴は、以下により具体的に開示される。
本発明はさらに、例えば、以下を提供する。
（項目１）
血液試料中の軟膜成分を分離し、軸方向に拡張する方法であって、
前記血液試料を可撓性試料管内に導入することであって、前記試料管は、側壁を有している、ことと、
剛体容積占有フロートを前記可撓性試料管内に導入することであって、前記剛体フロートは、赤血球と血漿との中間の比重を有しており、
前記フロートは、
本体部分であって、前記本体部分と前記側壁との間に環状容積を形成するために、前記本体部分は、前記側壁によって半径方向に間隔をあけて包囲されている、本体部分と、
前記本体部分から突出し、前記側壁を係合する１つ以上の支持部材と、
を備えている、ことと、
ある回転速度で前記試料管を遠心分離することであって、前記回転速度は、前記フロートの軸方向移動を可能にするための十分に大きい直径への前記側壁の拡大と、別々の層への血液の分離と、前記血液試料の少なくとも前記軟膜成分と整列する前記フロートの移動とを生じさせる、ことと、
前記回転速度を低減することにより、前記側壁に、前記フロートを捕捉させ、前記環状容積内に軟膜成分を捕集させることと、
前記１つ以上の支持部材のうちの少なくとも１つを前記側壁に溶接することと
を含む、方法。
（項目２）
前記溶接は、少なくとも１つの溶接される支持部材の円周の周囲において連続的である、項目１に記載の方法。
（項目３）
前記溶接は、少なくとも１つの溶接される支持部材の円周の周囲において不連続的である、項目１に記載の方法。
（項目４）
前記溶接は、超音波溶接である、項目１に記載の方法。
（項目５）
前記フロートは、前記軟膜成分を通る過剰な流体流動を阻止するための解放手段をさらに備えている、項目１に記載の方法。
（項目６）
前記フロートは、前記本体部分の上端から半径方向に延在する上部支持部材と、前記本体部分の下端から半径方向に延在する下部支持部材とを備え、前記上部および下部支持部材は両方とも、前記試料管に溶接される、項目１に記載の方法。
（項目７）
血液試料中の標的細胞を検出する方法であって、
前記標的細胞を前記血液試料中の他の細胞から区別するために、前記血液試料を１つ以上の標識薬剤と組み合わせることと、
前記血液試料を可撓性側壁を備えている透明試料管内に導入することであって、前記透明試料管は、第１の断面内径を有している、ことと、
容積占有セパレータフロートを前記試料管内に導入することであって、
前記セパレータフロートは、本体部分と、前記本体部分から突出する１つ以上の支持部材とを備え、前記１つ以上の支持部材は、前記試料管の側壁を係合し、前記フロートの前記支持部材は、前記管の第１の内径に実質的に等しい断面直径を有し、前記本体部分は、前記側壁の軸方向に整列された部分と一緒に、前記本体部分と前記側壁との間に環状容積を画定し、前記支持部材は、前記環状容積を横断し、１つ以上の分析領域を生成する、ことと、
ある回転速度で前記試料管を遠心分離することであって、前記回転速度は、前記フロートの軸方向移動を可能にするために十分に大きい第２の内径への前記側壁の拡大と、別々の層への血液の分離と、前記血液試料の少なくとも前記軟膜層と整列する前記フロートの移動とを生じさせる、ことと、
前記回転速度を低減することにより、前記側壁に前記フロートを捕捉させることと、
前記１つ以上の支持部材のうちの少なくとも１つを前記試料管の側壁に溶接することと、
前記１つ以上の分析領域内に存在する前記血液試料を検査し、前記分析領域内に含まれる任意の標的細胞を識別することと
を含む、方法。
（項目８）
前記溶接は、前記少なくとも１つの溶接される支持部材の円周の周囲において連続的である、項目７に記載の方法。
（項目９）
前記溶接は、前記少なくとも１つの溶接される支持部材の円周の周囲において不連続的である、項目７に記載の方法。
（項目１０）
前記溶接は、超音波溶接である、項目７に記載の方法。
（項目１１）
前記１つ以上の標識薬剤は、蛍光標識されたリガンドを備えている、項目７に記載の方法。
（項目１２）
前記試料管は、少なくとも前記フロートの軸方向移動の経路内の前記側壁の一部に沿って継目がない、項目７に記載の方法。
（項目１３）
前記フロートは、前記本体部分の上端から半径方向に延在する上部支持部材と、前記本体部分の下端から半径方向に延在する下部支持部材とを備え、前記上部および下部支持部材は両方とも、前記試料管に溶接される、項目７に記載の方法。
（項目１４）
前記フロートは、前記軟膜成分を通る過剰な流体流動を阻止するための解放手段をさらに備えている、項目７に記載の方法。
（項目１５）
血液試料中の軟膜成分を分離し、軸方向に拡張する方法であって、
前記血液試料を可撓性スリーブ内に導入することであって、前記可撓性スリーブは、試料管の内部側壁と接触する、ことと、
容積占有フロートを前記スリーブ内に導入することであって、前記剛体フロートは、赤血球と血漿との中間の比重を有しており、
前記フロートは、
本体部分であって、前記本体部分と前記スリーブとの間に環状容積を形成するために、前記本体部分は、前記スリーブによって半径方向に間隔をあけて包囲されている、本体部分と、
前記本体部分から突出し、前記可撓性スリーブに係合する１つ以上の支持部材と
を備えている、ことと、
ある回転速度で前記試料管を遠心分離することであって、前記回転速度は、前記フロートの軸方向移動を可能にするために十分に大きい直径への前記スリーブの拡大と、別々の層への血液の分離と、前記血液試料の少なくとも前記軟膜成分と整列する前記フロートの移動とを生じさせる、ことと、
前記回転速度を低減することにより、前記可撓性スリーブに、前記フロートを捕捉させることと、
前記１つ以上の支持部材のうちの少なくとも１つを前記可撓性スリーブに溶接することと
を含む、方法。
（項目１６）
前記溶接は、前記少なくとも１つの溶接される支持部材の円周の周囲において連続的である、項目１５に記載の方法。
（項目１７）
前記溶接は、前記少なくとも１つの溶接される支持部材の円周の周囲において不連続的である、項目１５に記載の方法。
（項目１８）
前記溶接は、超音波溶接である、項目１５に記載の方法。
（項目１９）
前記フロートは、前記軟膜成分を通る過剰な流体流動を阻止するための解放手段をさらに備えている、項目１５に記載の方法。
（項目２０）
前記フロートは、前記本体部分の上端から半径方向に延在する上部支持部材と、前記本体部分の下端から半径方向に延在する下部支持部材とを備え、前記上部および下部支持部材は両方とも、前記可撓性スリーブに溶接される、項目１５に記載の方法。
（項目２１）
試料容積を前記環状容積から除去することと、
前記試料容積を１つ以上の標識薬剤によって標識し、標的細胞を区別することと、
前記試料容積を検査し、前記標的細胞を識別することと
をさらに含む、項目１５に記載の方法。
（項目２２）
試料を保持するための試料管であって、
第１の断面内径の側壁と、
前記試料管上の１つ以上の円周方向切り欠きであって、前記１つ以上の円周方向切り欠きは、各切り欠きにおける前記管の破断を促進する、１つ以上の円周方向切り欠きと
を備えている、試料管。
（項目２３）
前記１つ以上の円周方向切り欠きは、前記試料管の側壁の外部表面上に位置している、項目２２に記載の試料管。
（項目２４）
前記１つ以上の円周方向切り欠きは、前記試料管の側壁の内部表面上に位置している、項目２２に記載の試料管。
（項目２５）
前記１つ以上の円周方向切り欠きは、前記試料管の円周の周囲において連続的である、項目２２に記載の試料管。
（項目２６）
前記１つ以上の円周方向切り欠きは、前記試料管の円周の周囲において不連続的である、項目２２に記載の試料管。
（項目２７）
前記１つ以上の円周方向切り欠きは、前記管を３つの容積に分割する２つの組の切り欠きを備えている、項目２２に記載の試料管。
（項目２８）
前記試料管は、透明ポリマー材料から形成されている、項目２２に記載の試料管。
（項目２９）
血液試料中の軟膜成分を分離し、軸方向に拡張する方法であって、
前記血液試料を可撓性試料管内に導入することであって、前記試料管は、側壁と、前記試料管上の１つ以上の円周方向切り欠きであって、前記１つ以上の円周方向切り欠きは、各切り欠きにおける前記管の破断を促進する、１つ以上の円周方向切り欠きとを有している、ことと、
容積占有フロートを前記可撓性試料管内に導入することであって、前記剛体フロートは、赤血球と血漿との中間の比重を有しており、
前記フロートは、
本体部分であって、前記本体部分と前記側壁との間に環状容積を形成するために、前記本体部分は、前記側壁によって半径方向に間隔をあけて包囲されている、本体部分と、
前記本体部分から突出し、前記側壁を係合する１つ以上の支持部材と
を備えている、ことと、
ある回転速度で前記試料管を遠心分離することであって、前記回転速度は、前記フロートの軸方向移動を可能にするための十分に大きい直径への前記側壁の拡大と、別々の層への血液の分離と、前記血液試料の少なくとも前記軟膜成分と整列する前記フロートの移動とを生じさせる、ことと、
前記回転速度を低減することにより、前記側壁に前記フロートを捕捉させることと、
前記１つ以上の切り欠きのうちの少なくとも１つにおいて前記試料管を破断することにより、前記フロートと拡張された軟膜成分とを含む前記管の破断セクションを得ることと
を含む、方法。
（項目３０）
前記１つ以上の円周方向切り欠きは、前記試料管の側壁の外部表面上に位置している、項目２９に記載の方法。
（項目３１）
前記１つ以上の円周方向切り欠きは、前記試料管の側壁の内部表面上に位置している、項目２９に記載の方法。
（項目３２）
前記１つ以上の円周方向切り欠きは、前記試料管の円周の周囲において連続的である、項目２９に記載の方法。
（項目３３）
前記１つ以上の円周方向切り欠きは、前記試料管の円周の周囲において不連続的である、項目２９に記載の方法。
（項目３４）
前記１つ以上の円周方向切り欠きは、前記管を３つの容積に分割する２つの組の切り欠きを備えている、項目２９に記載の方法。
（項目３５）
前記回転速度低減後、１つの組の切り欠きは、前記フロートの上方にあって、１つの組の切り欠きは、前記フロートの下方にある、項目３４に記載の方法。
（項目３６）
前記フロートの軸方向長に沿って、破断される切り欠きは存在しない、項目２９に記載の方法。
（項目３７）
前記フロートは、前記軟膜成分を通る過剰な流体流動を阻止するための解放手段をさらに備えている、項目２９に記載の方法。
（項目３８）
２つの切り欠きが破断される、項目２９に記載の方法。
（項目３９）
前記フロートの上方における１つの切り欠きと、前記フロートの下方における１つの切り欠きとが破断される、項目３８に記載の方法。
（項目４０）
標的細胞を前記血液試料中の他の細胞から区別するために、前記血液試料を１つ以上の標識薬剤と組み合わせることをさらに含む、項目２９に記載の方法。
（項目４１）
前記環状容積内に存在する血液試料を検査し、前記環状容積内に含まれる任意の標的細胞を識別することをさらに含む、項目４０に記載の方法。
（項目４２）
試料容積を前記環状容積から除去することと、
前記試料容積を１つ以上の標識薬剤によって標識し、標的細胞を区別することと、
前記試料容積を検査し、前記標的細胞を識別することと
をさらに含む、項目２９に記載の方法。
（項目４３）
第１の本体部分であって、上端からアクセス可能である中心ボアを画定する円筒形と、前記円筒形の下端から半径方向に延在する下部支持部材と、前記円筒形内に位置し、前記中心ボアの下端内への流体の流入を可能にするように向けられている１つ以上の一方向弁とを備えている第１の本体部分と、
第２の本体部分であって、前記中心ボア内に摺動可能に嵌入するためのサイズを有する中心部分と、前記第２の本体部分の上端から半径方向に延在する上部支持部材とを備えている第２の本体部分と
を備えている、容積占有セパレータフロート。
（項目４４）
試料管であって、
第１の開放端部および第２の開放端部を備えている円筒形と、
前記第１の端部を密閉するための第１の閉鎖デバイスと、
前記第２の端部を密閉するための第２の閉鎖デバイスと
を備えている、試料管。
（項目４５）
前記円筒形は、可撓性ポリマー材料から形成されている、項目４４に記載の試料管。
（項目４６）
前記円筒形は、透明または半透明材料から形成されている、項目４５に記載の試料管。
（項目４７）
前記円筒形は、継目がない、項目４５に記載の試料管。
（項目４８）
前記第１および第２の閉鎖デバイスは、前記円筒形の中に入り込まない外部キャップである、項目４４に記載の試料管。
（項目４９）
前記第１および第２の閉鎖デバイスは、前記円筒形の中に入り込むストッパである、項目４４に記載の試料管。
（項目５０）
血液試料中の軟膜成分を分離し、軸方向に拡張する方法であって、
前記血液試料を可撓性試料管内に導入することであって、
前管は、
第１の開放端部および第２の開放端部を備えている円筒形と、
前記第１の端部を密閉する第１の閉鎖デバイスと
を備えている、ことと、
剛体容積占有フロートを前記可撓性試料管内に導入することであって、前記剛体フロートは、赤血球と血漿との中間の比重を有しており、
前記フロートは、
本体部分であって、前記本体部分と前記側壁との間に環状容積を形成するために、前記本体部分は、前記側壁によって半径方向に間隔をあけて包囲されている、本体部分と、
前記本体部分から突出し、前記側壁を係合する１つ以上の支持部材と
を備えている、ことと、
ある回転速度で前記試料管を遠心分離することであって、前記回転速度は、前記フロートの軸方向移動を可能にするための十分に大きい直径への前記側壁の拡大と、別々の層への血液の分離と、前記血液試料の少なくとも前記軟膜層と整列する前記フロートの移動とを生じさせる、ことと、
前記回転速度を低減することにより、前記側壁に前記フロートを捕捉させることと、
前記第１の閉鎖デバイスを除去し、前記フロートおよび拡張された軟膜層にアクセスすることと
を含む、方法。
（項目５１）
前記血液試料およびフロートが導入された後、第２の閉鎖デバイスによって、前記第２の開放端部を密閉することをさらに含む、項目５０に記載の方法。
（項目５２）
遠心分離後、前記第２の閉鎖デバイスを前記第２の開放端部から除去し、前記フロートおよび拡張された軟膜層にアクセスすることをさらに含む、項目５１に記載の方法。
（項目５３）
血液試料中の軟膜成分を捕捉する方法であって、
前記血液試料を可撓性試料管内に導入することであって、前記試料管は、側壁を有している、ことと、
剛体容積占有フロートを前記可撓性試料管内に導入することであって、前記剛体フロートは、赤血球と血漿との中間の比重を有しており、
前記フロートは、
本体部分であって、前記本体部分と前記側壁との間に環状容積を形成するために、前記本体部分は、前記側壁によって半径方向に間隔をあけて包囲されている、本体部分と、
前記本体部分から突出し、前記側壁を係合する１つ以上の支持部材と
を備えている、ことと、
ある回転速度で前記試料管を遠心分離することであって、前記回転速度は、前記フロートの軸方向移動を可能にするための十分に大きい直径への前記側壁の拡大と、別々の層への血液の分離と、前記血液試料の少なくとも前記環状容積内に軟膜成分を捕集するための前記フロートの移動とを生じさせる、ことと、
前記回転速度を低減させ、前記側壁内側に、前記フロートを捕捉させることと、
除去デバイスを使用して、前記試料管の側壁を通して前記環状容積内に含まれる前記軟膜成分の少なくとも一部を除去することと
を含む、方法。
（項目５４）
前記除去デバイスは、注射器である、項目５３に記載の方法。
（項目５５）
前記血液試料を染色することをさらに含む、項目５３に記載の方法。
（項目５６）
前記フロートは、前記軟膜成分を通る過剰な流体流動を阻止するための解放手段をさらに備えている、項目５３に記載の方法。
（項目５７）
前記フロートは、前記血液試料が前記試料管内に導入される前に前記試料管内に導入される、項目５３に記載の方法。
（項目５８）
前記血液試料は、前記フロートが前記試料管内に導入される前に前記試料管内に導入される、項目５３に記載の方法。
（項目５９）
前記試料管は、少なくとも、前記フロートの軸方向移動の経路内の内側周辺表面の一部に沿って継目がない、項目５３に記載の方法。
（項目６０）
前記フロートは、約１．０８から約１．０９の比重を有している、項目５３に記載の方法。
（項目６１）
前記管は、アクリル、テレフタル酸ポリエチレングリコール（ＰＥＴＧ）、ポリカーボネート、ポリスチレン、ＴＯＰＡＳ、およびスチレンブタジエンスチレンポリマーから形成される、項目５３に記載の方法。
（項目６２）
前記環状容積内に存在する血液試料を検査し、前記環状容積内に含まれる任意の標的細胞を識別することをさらに含む、項目５３に記載の方法。
（項目６３）
試料容積を前記環状容積から除去することと、
前記試料容積を１つ以上の標識薬剤によって標識し、標的細胞を区別することと、
前記試料容積を検査し、前記標的細胞を識別することと、
をさらに含む、項目５３に記載の方法。
（項目６４）
血液試料中の標的細胞を検出する方法であって、
前記標的細胞を前記血液試料中の他の細胞から区別するために、前記血液試料を１つ以上の標識薬剤と組み合わせることと、
前記血液試料を可撓性側壁を備えている試料管内に導入することと、
容積占有セパレータフロートを前記試料管内に導入することであって、
前記セパレータフロートは、前記試料管の内径未満の断面直径を有する剛体本体部分と、前記本体部分から外向きに半径方向に延在し、前記試料管の側壁を係合し、前記本体部分と前記側壁との間の環状容積を維持するためのサイズを有する１つ以上の剛体支持部材とを備えている、ことと、
ある回転速度で前記試料管を遠心分離することであって、前記回転速度は、前記フロートの軸方向移動を可能にするための十分に大きい直径への前記側壁の拡大と、別々の層への血液の分離と、前記血液試料の少なくとも前記軟膜層と整列する前記フロートの移動とを生じさせる、ことと、
前記回転速度を低減することにより、前記側壁に前記フロートを捕捉させることと、
前記環状容積内に存在する血液試料を検査し、前記環状容積内に含まれる任意の標的細胞を識別することと、
除去デバイスを使用して、前記試料管の側壁を通して前記標的細胞の少なくとも一部を除去することと
を含む、方法。
（項目６５）
前記１つ以上の標識薬剤は、蛍光標識されたリガンドを備えている、項目６４に記載の方法。
（項目６６）
前記除去デバイスは、注射器である、項目６４に記載の方法。
（項目６７）
前記血液試料を染色することをさらに含む、項目６４に記載の方法。
（項目６８）
前記フロートは、前記軟膜成分を通る過剰な流体流動を阻止するための解放手段をさらに備えている、項目６４に記載の方法。
（項目６９）
前記解放手段は、軸方向ボアである、項目６８に記載の方法。
（項目７０）
前記標的細胞は、癌細胞、幹細胞、細胞断片、ウイルス感染細胞、またはトリパノソーマである、項目６４に記載の方法。
（項目７１）
前記フロートは、前記血液試料が前記試料管内に導入される前に前記試料管内に導入される、項目６４に記載の方法。
（項目７２）
前記血液試料は、前記フロートが前記試料管内に導入される前に前記試料管内に導入される、項目６４に記載の方法。
（項目７３）
前記試料管は、少なくとも、前記フロートの軸方向移動の経路内の内側周辺表面の一部に沿って継目がない、項目６４に記載の方法。
（項目７４）
前記フロートは、約１．０８から約１．０９の比重を有している、項目６４に記載の方法。
（項目７５）
赤血球と血漿との中間の比重を有する容積占有セパレータフロートであって、
上端および下端を有する本体部分と、
前記本体部分から突出する１つ以上の支持部材であって、
前記本体部分および前記１つ以上の支持部材は、環状容積を画定する、１つ以上の支持部材と、
ピトー管を受け取るための隔壁であって、前記本体部分の上端から前記環状容積まで延在する、隔壁と
を備えている、セパレータフロート。
（項目７６）
前記１つ以上の支持部材は、前記本体部分の上端から半径方向に延在する上部支持部材を備えている、項目７５に記載のセパレータフロート。
（項目７７）
前記１つ以上の支持部材は、前記本体部分の下端から半径方向に延在する下部支持部材を備えている、項目７５に記載のセパレータフロート。
（項目７８）
前記１つ以上の支持部材は、前記本体部分の上端から半径方向に延在する上部支持部材と、前記本体部分の下端から半径方向に延在する下部支持部材とを備えている、項目７５に記載のセパレータフロート。
（項目７９）
前記フロートは、前記フロートの周囲の過剰な流体流動を阻止するための解放手段をさらに備えている、項目７５に記載のセパレータフロート。
（項目８０）
前記フロートは、約１．０２８から約１．０８９の比重を有している、項目７５に記載のセパレータフロート。
（項目８１）
前記フロートは、約１．０４０から約１．０７０の比重を有している、項目７５に記載のセパレータフロート。
（項目８２）
赤血球と血漿との中間の比重を有する容積占有セパレータフロートであって、
本体部分と、
前記本体部分から突出する１つ以上の支持部材であって、
前記本体部分および前記１つ以上の支持部材は、環状容積を画定する、１つ以上の支持部材と、
前記本体部分の上端から前記環状容積まで延在する隔壁と、
遠位端を有するピトー管であって、前記ピトー管は、前記上端において前記隔壁を係合し、前記遠位端は、前記本体部分の上端から離れて位置している、ピトー管と
を備えている、セパレータフロート。
（項目８３）
前記１つ以上の支持部材は、前記本体部分の上端から半径方向に延在する上部支持部材を備えている、項目８２に記載のセパレータフロート。
（項目８４）
前記１つ以上の支持部材は、前記本体部分の下端から半径方向に延在する下部支持部材を備えている、項目８２に記載のセパレータフロート。
（項目８５）
前記１つ以上の支持部材は、前記本体部分の上端から半径方向に延在する上部支持部材と、前記本体部分の下端から半径方向に延在する下部支持部材とを備えている、項目８２に記載のセパレータフロート。
（項目８６）
前記フロートの周囲の過剰な流体流動を阻止するための解放手段をさらに備えている、項目８２に記載のセパレータフロート。
（項目８７）
前記フロートは、約１．０２８から約１．０８９の比重を有している、項目８２に記載のセパレータフロート。
（項目８８）
前記フロートは、約１．０４０から約１．０７０の比重を有している、項目８２に記載のセパレータフロート。
（項目８９）
血液試料中の軟膜成分を分離し、軸方向に拡張する方法であって、
前記血液試料を可撓性試料管内に導入することであって、前記試料管は、側壁を有している、ことと、
剛体容積占有フロートを前記可撓性試料管内に導入することであって、前記剛体フロートは、赤血球と血漿との中間の比重を有しており、
前記フロートは、
本体部分と、
前記本体部分から突出する１つ以上の支持部材であって、前記本体部分および前記１つ以上の支持部材は、環状容積を画定する、１つ以上の支持部材と、
ピトー管を受け取るための隔壁であって、前記本体部分の上端から前記環状容積まで延在する、隔壁と、
を備えている、ことと、
ある回転速度で前記試料管を遠心分離することであって、前記回転速度は、前記フロートの軸方向移動を可能にするための十分に大きい直径への前記側壁の拡大と、別々の層への血液の分離と、前記血液試料の少なくとも前記軟膜層と整列する前記フ  ロートの移動とを生じさせる、ことと、
前記回転速度を低減することにより、前記側壁に前記フロートを捕捉させることと、
前記隔壁をピトー管と係合することと、
前記ピトー管を通して前記軟膜層の少なくとも一部を前記環状容積から除去することと
を含む、方法。
（項目９０）
前記血液試料は、前記フロートが前記試料管内に導入される前に前記試料管内に導入される、項目８９に記載の方法。
（項目９１）
前記フロートは、前記血液試料が前記試料管内に導入される前に前記試料管内に導入される、項目８９に記載の方法。
（項目９２）
前記血液試料を染色することをさらに含む、項目８９に記載の方法。
（項目９３）
前記試料管は、少なくとも前記フロートの軸方向移動の経路内の前記側壁の一部に沿って継目がない、項目８９に記載の方法。
（項目９４）
前記血液試料を１つ以上の標識薬剤と組み合わせることをさらに含む、項目８９に記載の方法。
（項目９５）
前記１つ以上の標識薬剤は、蛍光標識されたリガンドを備えている、項目９４に記載の方法。
（項目９６）
血液試料中の軟膜成分を分離し、軸方向に拡張する方法であって、
前記血液試料を可撓性試料管内に導入することであって、前記試料管は、側壁を有している、ことと、
剛体容積占有フロートを前記可撓性試料管内に導入することであって、前記剛体フロートは、赤血球と血漿との中間の比重を有しており、
前記フロートは、
本体部分と、
前記本体部分から突出する１つ以上の支持部材であって、前記本体部分および前記１つ以上の支持部材は、環状容積を画定する、１つ以上の支持部材と、
前記本体部分の上端から前記環状容積まで延在する隔壁と、
遠位端を有するピトー管であって、前記ピトー管は、前記上端において前記隔壁を係合し、前記遠位端は、前記本体部分の上端から離れて位置している、ピトー管と、
を備えている、ことと、
ある回転速度で前記試料管を遠心分離することであって、前記回転速度は、前記フロートの軸方向移動を可能にするための十分に大きい直径への前記側壁の拡大と、別々の層への血液の分離と、前記血液試料の少なくとも前記軟膜層と整列する前記フロートの移動とを生じさせる、ことと、
前記回転速度を低減することにより、前記側壁に前記フロートを捕捉させることと、
前記ピトー管を通して前記軟膜層の少なくとも一部を前記環状容積から除去することと
を含む、方法。
（項目９７）
前記血液試料は、前記フロートが前記試料管内に導入される前に前記試料管内に導入される、項目９６に記載の方法。
（項目９８）
前記フロートは、前記血液試料が前記試料管内に導入される前に前記試料管内に導入される、項目９６に記載の方法。
（項目９９）
前記血液試料を１つ以上の標識薬剤と組み合わせることをさらに含む、項目９６に記載の方法。
（項目１００）
前記１つ以上の標識薬剤は、蛍光標識されたリガンドを備えている、項目９９に記載の方法。
（項目１０１）
容積占有セパレータフロートであって、
本体部分と、
前記本体部分の上端から半径方向に延在する上部支持部材と、
前記本体部分の下端から半径方向に延在する下部支持部材と、
前記本体部分、前記上部支持部材、および前記下部支持部材によって画定される環状容積と、
前記本体部分から半径方向に延在し、前記環状容積内に複数のウェルを形成する１つ以上の中間支持部材と、
前記本体部分内の複数の隔壁であって、各隔壁は、前記本体部分の上端から特定のウェルへのアクセスを可能にする、隔壁と
を備えている、セパレータフロート。
（項目１０２）
前記１つ以上の中間支持部材は、複数の軸方向に配向されたリッジから成る、項目１０１に記載のセパレータフロート。
（項目１０３）
前記１つ以上の中間支持部材は、複数の円周方向に配向されたリッジから成る、項目１０１に記載のセパレータフロート。
（項目１０４）
前記１つ以上の中間支持部材は、複数の円周方向に配向されたリッジと交差する、複数の軸方向に配向されたリッジから成る、項目１０１に記載のセパレータフロート。
（項目１０５）
前記フロートは、約１．０２８から約１．０８９の比重を有している、項目１０１に記載のセパレータフロート。
（項目１０６）
前記フロートは、約１．０４０から約１．０７０の比重を有している、項目１０１に記載のセパレータフロート。
（項目１０７）
前記フロートは、前記フロートの周囲の過剰な流体流動を阻止するための解放手段をさらに備えている、項目１０１に記載のセパレータフロート。
（項目１０８）
血液試料中の軟膜成分を分離し、軸方向に拡張する方法であって、
前記血液試料を可撓性試料管内に導入することであって、前記試料管は、側壁を有している、ことと、
容積占有フロートを前記可撓性試料管内に導入することであって、前記フロートは、赤血球と血漿との中間の比重を有しており、
前記フロートは、
本体部分と、
前記本体部分の上端から半径方向に延在する上部支持部材と、
前記本体部分の下端から半径方向に延在する下部支持部材と、
前記本体部分、前記上部支持部材、および前記下部支持部材によって画定される環状容積と、
前記本体部分から半径方向に延在し、前記環状容積内に複数のウェルを形成する１つ以上の中間支持部材と、
前記本体部分内の複数の隔壁であって、各隔壁は、前記本体部分の上端から特定のウェルへのアクセスを可能にする、隔壁と、
を備えている、ことと、
ある回転速度で前記試料管を遠心分離することであって、前記回転速度は、前記フロートの軸方向移動を可能にするための十分に大きい直径への前記側壁の拡大と、別々の層への血液の分離と、前記血液試料の少なくとも前記軟膜層と整列する前記フロートの移動とを生じさせる、ことと、
前記回転速度を低減することにより、前記側壁に前記フロートを捕捉させることと、
抽出デバイスを使用して、前記ウェルのうちの少なくとも１つから、前記軟膜層の少なくとも一部を抽出することと、
流体を前記環状容積内に流出させることと
を含む、方法。
（項目１０９）
前記１つ以上の中間支持部材は、複数の軸方向に配向されたリッジから成る、項目１０８に記載の方法。
（項目１１０）
前記１つ以上の中間支持部材は、複数の円周方向に配向されたリッジから成る、項目１０８に記載の方法。
（項目１１１）
前記１つ以上の中間支持部材は、複数の円周方向に配向されたリッジと交差する、複数の軸方向に配向されたリッジから成る、項目１０８に記載の方法。
（項目１１２）
前記抽出デバイスは、注射器である、項目１０８に記載の方法。
（項目１１３）
前記抽出デバイスは、ピトー管である、項目１０８に記載の方法。
（項目１１４）
前記フロートは、前記軟膜成分を通る過剰な流体流動を阻止するための解放手段をさらに備えている、項目１０８に記載の方法。
（項目１１５）
前記血液試料は、前記フロートが前記試料管に導入される前に前記試料管に導入される、項目１０８に記載の方法。
（項目１１６）
前記フロートは、前記血液試料が前記試料管に導入される前に前記試料管に導入される、項目１０８に記載の方法。
（項目１１７）
標的細胞を前記血液試料中の他の細胞から区別するために、前記血液試料を１つ以上の標識薬剤と組み合わせることをさらに含む、項目１０８に記載の方法。
（項目１１８）
前記１つ以上の標識薬剤は、蛍光標識されたリガンドを備えている、項目１１７に記載の方法。
（項目１１９）
前記軟膜層は、標的細胞を含む特定のウェルからのみ抽出される、項目１１７に記載の方法。
（項目１２０）
容積占有セパレータフロートであって、
上端および下端を有する本体部分と、
前記本体部分の下端から半径方向に延在する下部支持部材と、
前記本体部分から半径方向に延在し、かつ、前記本体部分の上端と前記下部支持部材との間に軸方向に延在することにより、少なくとも１つの軸方向に延在する縦溝を形成する複数のリッジと
を備えている、セパレータフロート。
（項目１２１）
１つの軸方向に延在する縦溝から成る、項目１２０に記載のセパレータフロート。
（項目１２２）
複数の軸方向に延在する縦溝から成る、項目１２０に記載のセパレータフロート。
（項目１２３）
前記フロートの周囲の過剰な流体流動を阻止するための解放手段をさらに備えている、項目１２０に記載のセパレータフロート。
（項目１２４）
前記解放手段は、軸方向ボアを備えている、項目１２３に記載のセパレータフロート。
（項目１２５）
前記フロートは、約１．０２８から約１．０８９の比重を有している、項目１２０に記載のセパレータフロート。
（項目１２６）
前記フロートは、約１．０４０から約１．０７０の比重を有している、項目１２０に記載のセパレータフロート。
（項目１２７）
血液試料中の軟膜成分を分離し、軸方向に拡張する方法であって、
前記血液試料を可撓性試料管内に導入することであって、前記試料管は、側壁を有している、ことと、
剛体容積占有フロートを前記可撓性試料管内に導入することであって、前記剛体フロートは、赤血球と血漿との中間の比重を有しており、
前記フロートは、
上端および下端を有する本体部分と、
前記本体部分の下端から離れるように半径方向に延在する下部支持部材と、
前記本体部分から離れるように半径方向に延在し、かつ、前記本体部分の上端と前記下部支持部材との間に軸方向に延在することにより、少なくとも１つの軸方向に延在する縦溝を形成する複数のリッジと、
を備えている、ことと、
ある回転速度で前記試料管を遠心分離することであって、前記回転速度は、前記フロートの軸方向移動を可能にするための十分に大きい直径への前記側壁の拡大と、別々の層への血液の分離と、前記血液試料の少なくとも前記軟膜成分と整列する前記フロートの移動とを生じさせる、ことと、
前記回転速度を低減することにより、前記側壁に前記フロートを捕捉させることと、
抽出デバイスを使用して、前記軟膜成分の少なくとも一部を前記少なくとも１つの縦溝から抽出することと、
流体を前記環状容積内に流出させることと
を含む、方法。
（項目１２８）
前記フロートは、前記本体部分の上端から離れるように半径方向に延在する上部支持部材をさらに備えている、項目１２７に記載の方法。
（項目１２９）
前記フロートは、１つの縦溝から成る、項目１２７に記載の方法。
（項目１３０）
前記フロートは、複数の縦溝から成る、項目１２７に記載の方法。
（項目１３１）
前記抽出デバイスは、注射器を備えている、項目１２７に記載の方法。
（項目１３２）
前記抽出デバイスは、ピトー管を備えている、項目１２７に記載の方法。
（項目１３３）
前記血液試料は、前記フロートが前記試料管に導入される前に前記試料管に導入される、項目１２７に記載の方法。
（項目１３４）
前記フロートは、前記血液試料が前記試料管に導入される前に前記試料管に導入される、項目１２７に記載の方法。
（項目１３５）
前記フロートは、前記軟膜成分を通る過剰な流体流動を阻止するための解放手段をさらに備えている、項目１２７に記載の方法。
（項目１３６）
前記フロートは、非対称である、項目１２７に記載の方法。
（項目１３７）
標的細胞を前記血液試料中の他の細胞から区別するために、前記血液試料を１つ以上の標識薬剤と組み合わせることをさらに含む、項目１２７に記載の方法。
（項目１３８）
前記１つ以上の標識薬剤は、蛍光標識されたリガンドを備えている、項目１３７に記載の方法。
（項目１３９）
前記複数の縦溝を検査することと、
前記複数の縦溝のうちの１つ内の標的細胞を識別することと、
前記標的細胞を含む前記１つの縦溝からのみ前記軟膜成分を抽出することと、
をさらに含む、項目１３７に記載の方法。
（項目１４０）
血液試料の軟膜成分を分離し、軸方向に拡張する方法であって、
前記血液試料を可撓性スリーブに導入することと、
フロートを前記可撓性スリーブ内に導入することであって、前記フロートは、赤血球と血漿との中間の比重を有しており、
前記フロートは、
上端および下端を有する本体部分と、
前記本体部分の下端から半径方向に延在する下部支持部材と、
前記可撓性スリーブを係合する複数のリッジであって、前記本体部分から離れるように半径方向に延在し、かつ、前記上端から前記下部支持部材に軸方向に延在することにより、前記フロートの円周に複数の軸方向に配向されたウェルを形成する、リッジと、
を備えている、ことと、
ある回転速度で前記試料管を遠心分離することであって、前記回転速度は、前記フロートの軸方向移動をもたらすための十分に大きい前記スリーブの拡大と、別々の層への血液の分離と、前記血液試料の少なくとも前記軟膜成分と整列する前記フロートの移動とを生じさせる、ことと、
前記回転速度を低減することにより、前記フロートを捕捉することと、
前記スリーブによって前記ウェルのうちの少なくとも１つを密閉し、前記軟膜成分を捕集することと
を含む、方法。
（項目１４１）
前記血液試料を染色剤と組み合わせることをさらに含む、項目１４０に記載の方法。
（項目１４２）
前記フロートは、前記本体部分の上端から半径方向に延在する上部支持部材をさらに備えている、項目１４０に記載の方法。
（項目１４３）
前記少なくとも１つのウェルは、前記上部および下部支持部材を前記可撓性スリーブに溶接することによって密閉される、項目４２に記載の方法。
（項目１４４）
除去デバイスを使用して、前記軟膜成分の少なくとも一部を前記ウェルから除去することをさらに含む、項目１４０に記載の方法。
（項目１４５）
前記除去デバイスは、注射器である、項目４４に記載の方法。
（項目１４６）
前記フロートは、前記軟膜層を通る過剰な流体流動を阻止するための解放手段をさらに備えている、項目１４０に記載の方法。
（項目１４７）
前記フロートは、非対称である、項目１４０に記載の方法。
（項目１４８）
前記血液試料は、前記フロートが前記試料管に導入される前に前記試料管に導入される、項目１４０に記載の方法。
（項目１４９）
前記フロートは、前記血液試料が前記試料管に導入される前に前記試料管に導入される、項目１４０に記載の方法。
（項目１５０）
前記フロートは、前記血液試料が前記試料管に導入される前に前記試料管に導入される、項目１４０に記載の方法。
（項目１５１）
血液試料中の標的細胞を検出する方法であって、
前記標的細胞を前記血液試料中の他の細胞から区別するために、前記血液試料を１つ以上の標識薬剤と組み合わせることと、
前記血液試料を透明可撓性スリーブに導入することと、
フロートを前記可撓性スリーブ内に導入することであって、前記フロートは、赤血球と血漿との中間の比重を有しており、
前記フロートは、
上端および下端を有する本体部分と、
前記本体部分の上端から半径方向に延在する上部支持部材と、
前記本体部分の下端から半径方向に延在する下部支持部材と、
前記可撓性スリーブを係合する複数のリッジであって、前記本体部分から離れるように半径方向に延在し、かつ、前記上部支持部材から前記下部支持部材に軸方向に延在することにより、前記フロートの円周に複数の軸方向に配向されたウェルを形成する、リッジと、
を備えている、ことと、
ある回転速度で前記試料管を遠心分離することであって、前記回転速度は、前記フロートの軸方向移動をもたらすための十分に大きい前記スリーブの拡大と、別々の層への血液の分離と、前記血液試料の少なくとも前記軟膜成分と整列する前記フロートの移動とを生じさせる、ことと、
前記回転速度を低減することにより、前記フロートを捕捉することと、
前記スリーブによって、前記複数のウェル内の前記軟膜成分の少なくとも一部を密閉することと、
前記ウェルを検査し、前記ウェルの中に含まれる任意の標的細胞を識別することと
を含む、方法。
（項目１５２）
前記１つ以上の標識薬剤は、蛍光標識されたリガンドを備えている、項目１５１に記載の方法。
（項目１５３）
抽出デバイスを使用して、前記軟膜成分を少なくとも１つの標的細胞を含むウェルから抽出することをさらに含む、項目１５１に記載の方法。
（項目１５４）
前記抽出デバイスは、注射器である、項目１５３に記載の方法。
（項目１５５）
前記密閉することは、前記上部および下部支持部材を前記可撓性スリーブに溶接することによって行われる、項目１５３に記載の方法。
（項目１５６）
前記フロートは、前記軟膜層を通る過剰な流体流動を阻止するための解放手段をさらに備えている、項目１５１に記載の方法。
（項目１５７）
前記解放手段は、軸方向ボアである、項目１５６に記載の方法。
（項目１５８）
前記フロートは、非対称である、項目１５１に記載の方法。
（項目１５９）
前記血液試料は、前記フロートが前記試料管に導入される前に前記試料管に導入される、項目１５１に記載の方法。
（項目１６０）
前記フロートは、前記血液試料が前記試料管に導入される前に前記試料管に導入される、項目１５１に記載の方法。
（項目１６１）
血液試料の軟膜成分を分離し、軸方向に拡張する方法であって、
前記血液試料を側壁を備えている可撓性スリーブ内に導入することであって、前記側壁は、ｎ個の辺を有する多角形断面形状を有している、ことと、
剛体容積占有フロートを前記可撓性試料管内に導入することであって、前記剛体フロートは、赤血球と血漿との中間の比重を有し、かつ、ｎ個の辺を有しており、
前記フロートは、
本体部分と、前記本体部分から突出し、前記可撓性スリーブの側壁を係合する１つ以上の支持部材とを備え、前記本体部分は、前記側壁の軸方向に整列された部分と一緒に、前記本体部分と前記側壁との間に環状容積を画定し、前記支持部材は、前記環状容積を横断し、ｎ個のウェルを生成する、ことと、
ある回転速度で前記試料管を遠心分離することであって、前記回転速度は、前記フロートの軸方向移動をもたらすための十分に大きい前記スリーブの拡大と、別々の層への血液の分離と、前記血液試料の少なくとも前記軟膜成分と整列する前記フロートの移動とを生じさせる、ことと、
前記回転速度を低減することにより、前記スリーブ壁に、前記スリーブを収縮させ、前記フロートに取り付かせ、前記軟膜成分の少なくとも一部を前記ｎ個のウェル内に捕集することと
を含む、方法。
（項目１６２）
前記多角形断面形状は、等辺等角である、項目１６１に記載の方法。
（項目１６３）
ｎは、３である、項目１６１に記載の方法。
（項目１６４）
ｎは、４である、項目１６１に記載の方法。
（項目１６５）
ｎは、５である、項目１６１に記載の方法。
（項目１６６）
前記フロートは、前記ｎ個の辺の間の角にｎ個の軸方向に配向されたリッジをさらに備えている、項目１６１に記載の方法。
（項目１６７）
前記血液試料を染色剤と組み合わせることをさらに含む、項目１６１に記載の方法。
（項目１６８）
除去デバイスを使用して、前記軟膜成分の少なくとも一部を前記ｎ個のウェルから除去することをさらに含む、項目１６１に記載の方法。
（項目１６９）
前記フロートは、前記軟膜層を通る過剰な流体流動を阻止するための解放手段をさらに備えている、項目１６１に記載の方法。
（項目１７０）
前記解放手段は、軸方向ボアである、項目１６９に記載の方法。
（項目１７１）
前記血液試料は、前記フロートの前に前記試料管内に導入される、項目１６１に記載の方法。
（項目１７２）
前記フロートは、前記血液試料の前に前記試料管に導入される、項目１６１に記載の方法。
（項目１７３）
血液試料中の標的細胞を検出する方法であって、
前記標的細胞を前記試料中の他の細胞から区別するために、前記血液試料を１つ以上の標識薬剤と組み合わせることと、
前記血液試料を側壁を備えている可撓性スリーブ内に導入することであって、前記側壁は、ｎ個の辺を有する多角形断面形状を有している、ことと、
剛体容積占有フロートを前記可撓性スリーブ内に導入することであって、前記剛体フロートは、赤血球と血漿との中間の比重を有し、かつ、ｎ個の辺を有しており、
前記フロートは、
本体部分と、前記本体部分から突出し、前記可撓性スリーブの側壁を係合する１つ以上の支持部材とを備え、前記本体部分は、前記側壁の軸方向に整列された部分と一緒に、前記本体部分と前記側壁との間に環状容積を画定し、前記支持部材は、前記環状容積を横断し、ｎ個のウェルを生成する、ことと、
ある回転速度で前記試料管を遠心分離することであって、前記回転速度は、前記フロートの軸方向移動をもたらすための十分に大きい前記スリーブの拡大と、別々の層への血液の分離と、前記血液試料の少なくとも前記軟膜成分と整列する前記フロートの移動とを生じさせる、ことと、
前記回転速度を低減することにより、前記スリーブ壁に、前記スリーブを収縮させ、前記フロートに取り付かせ、前記軟膜成分の少なくとも一部を前記ｎ個のウェル内に捕集することと、
前記ｎ個のウェル内の血液試料を検査し、前記ウェル内に含まれる任意の標的細胞を識別することと
を含む、方法。
（項目１７４）
前記多角形断面形状は、等辺等角である、項目１７３に記載の方法。
（項目１７５）
前記１つ以上の標識薬剤は、蛍光標識されたリガンドを備えている、項目１７３に記載の方法。
（項目１７６）
除去デバイスを使用して、少なくとも１つの標的細胞をウェルから除去することをさらに含む、項目１７３に記載の方法。
（項目１７７）
前記除去デバイスは、注射器である、項目１７６に記載の方法。
（項目１７８）
ｎは、３である、項目１７３に記載の方法。
（項目１７９）
ｎは、４である、項目１７３に記載の方法。
（項目１８０）
ｎは、５である、項目１７３に記載の方法。
（項目１８１）
前記フロートは、前記軟膜層を通る過剰な流体流動を阻止するための解放手段をさらに備えている、項目１７３に記載の方法。
（項目１８２）
関連付けられた可撓性スリーブと共に使用するために適合された容積占有フロートであって、
上端、下端、およびｎ個の辺を有する本体部分であって、ｎは、３以上の整数である、本体部分と、
前記本体部分の上端から離れるように側方に延在する上部支持部材と、
前記本体部分の下端から離れるように側方に延在する下部支持部材と、
複数のリッジであって、各リッジは、前記本体部分から離れるように側方に延在し、かつ、前記上部支持部材から前記下部支持部材に軸方向に延在することにより、軸方向に配向されたｎ個のウェルを形成し、各ウェルは、外部表面を有する、複数のリッジと
を備え、前記フロートは、前記ウェルの外部表面が、実質的に同一平面上にあることが可能であるように、展開されるように適合されている、フロート。
（項目１８３）
ｎは、３である、項目１８２に記載のフロート。
（項目１８４）
ｎは、４である、項目１８２に記載のフロート。
（項目１８５）
ｎは、５である、項目１８２に記載のフロート。
（項目１８６）
前記本体部分の辺は、同一長さを有している、項目１８２に記載のフロート。
（項目１８７）
前記フロートの周囲の過剰な流体流動を阻止するための解放手段をさらに備えている、項目１８２に記載のフロート。
（項目１８８）
前記解放手段は、軸方向ボアを備えている、項目１８７に記載の方法。
（項目１８９）
前記フロートは、約１．０２８から約１．０８９の比重を有している、項目１８２に記載のセパレータフロート。
（項目１９０）
前記フロートは、約１．０４０から約１．０７０の比重を有している、項目１８２に記載のセパレータフロート。
（項目１９１）
血液試料の軟膜成分を分離し、軸方向に拡張する方法であって、
前記血液試料を可撓性スリーブ内に導入することと、
赤血球と血漿との中間の比重を有するフロートを前記可撓性スリーブ内に導入することであって、
前記フロートは、
上端、下端、およびｎ個の辺を有する本体部分と、
前記本体部分の上端から離れるように側方に延在する上部支持部材と、
前記本体部分の下端から離れるように側方に延在する下部支持部材と、
複数のリッジであって、各リッジは、前記本体部分から離れるように側方に延在し、かつ、前記上部支持部材から前記下部支持部材に軸方向に延在することにより、軸方向に配向されたウェルを形成し、各ウェルは、外部表面を有する、リッジと、
を備え、前記フロートは、前記ウェルの外部表面が、実質的に同一平面上にあることが可能であるように、展開されるように適合されている、ことと、
ある回転速度で前記試料管を遠心分離することであって、前記回転速度は、前記フロートの軸方向移動をもたらすための十分に大きい前記スリーブの拡大と、別々の層への血液の分離と、前記血液試料の少なくとも前記軟膜層と整列する前記フロートの移動とを生じさせる、ことと、
前記回転速度を低減することにより、前記スリーブに、密閉前記ウェル内の前記軟膜層の少なくとも一部を密閉させることと、
前記フロートを展開し、少なくとも２つのウェルを実質的に同一平面に配置することと
を含む、方法。
（項目１９２）
ｎは、３である、項目１９１に記載の方法。
（項目１９３）
ｎは、４である、項目１９１に記載の方法。
（項目１９４）
ｎは、５である、項目１９１に記載の方法。
（項目１９５）
標的細胞を前記血液試料中の他の細胞から区別するために、前記血液試料を１つ以上の標識薬剤と組み合わせることをさらに含む、項目１９１に記載の方法。
（項目１９６）
前記１つ以上の標識薬剤は、蛍光標識されたリガンドを備えている、項目１９５に記載の方法。
（項目１９７）
前記フロートは、前記軟膜層を通る過剰な流体流動を阻止するための解放手段をさらに備えている、項目１９１に記載の方法。
（項目１９８）
前記可撓性スリーブは、透明である、項目１９１に記載の方法。
（項目１９９）
除去デバイスを使用して、前記軟膜層の少なくとも一部を前記ウェルから除去することをさらに含む、項目１９１に記載の方法。
（項目２００）
前記除去デバイスは、注射器である、項目１９９に記載の方法。
（項目２０１）
前記フロートは、前記血液試料が前記可撓性スリーブの中に導入される前に前記可撓性スリーブに導入される、項目１９１に記載の方法。
（項目２０２）
前記血液試料は、前記フロートが前記可撓性スリーブの中に導入される前に前記可撓性スリーブに導入される、項目１９１に記載の方法。
（項目２０３）
容積占有フロートであって、
上端および下端を有する本体部分と、
前記本体部分から突出する１つ以上の支持部材と、
前記本体部分内の中空内部空洞と
を備え、前記本体部分および前記１つ以上の支持部材は、環状容積を画定し、１つ以上の一方向弁が、前記環状容積から前記中空内部空洞への流動を可能にする、
フロート。
（項目２０４）
単一の一方向弁を備えている、項目２０３に記載のセパレータフロート。
（項目２０５）
複数の一方向弁を備えている、項目２０３に記載のセパレータフロート。
（項目２０６）
前記１つ以上の支持部材は、前記本体部分の上端から離れるように半径方向に延在する上部支持部材と、前記本体部分の下端から離れるように半径方向に延在する下部支持部材とを備えている、項目２０３に記載のセパレータフロート。
（項目２０７）
一方向弁は、前記下部支持部材の近位にある、項目２０６に記載のセパレータフロート。
（項目２０８）
前記フロートは、約１．０２８から約１．０８９の比重を有している、項目２０３に記載のセパレータフロート。
（項目２０９）
前記フロートは、約１．０４０から約１．０７０の比重を有している、項目２０３に記載のセパレータフロート。
（項目２１０）
前記本体部分の上端に、前記中空内部空洞にアクセスするためのプラグをさらに備えている、項目２０３に記載のセパレータフロート。
（項目２１１）
血液試料の軟膜成分を捕捉する方法であって、
前記血液試料を可撓性試料管内に導入することであって、前記試料管は、側壁を有し、第１の断面内径を有している、ことと、
剛体容積占有フロートを前記可撓性試料管内に導入することであって、前記剛体フロートは、赤血球と血漿との中間の比重を有しており、
前記フロートは、
本体部分であって、前記本体部分は、前記本体部分と前記側壁との間に環状容積を画定するために、前記側壁によって半径方向に間隔をあけて包囲され、前記本体部分は、上端および下端を有する、本体部分と、
前記本体部分から突出し、前記側壁を係合する１つ以上の支持部材と、
前記本体部分内の中空内部空洞と、
前記環状容積から前記中空内部空洞への流動を可能にする、１つ以上の一方向弁と、
を備えている、ことと、
ある回転速度で前記試料管を遠心分離することであって、前記回転速度は、前記フロートの軸方向移動をもたらすための十分に大きい前記スリーブの拡大と、別々の層への血液の分離と、前記血液試料の少なくとも前記軟膜層と整列する前記フロートの移動とを生じさせる、ことと、
前記回転速度を低減することにより、前記管側壁に前記第１の直径に戻らせ、それによって、前記フロートを捕捉し、前記環状容積内に前記軟膜成分を捕集することと、
前記軟膜成分の少なくとも一部を前記中空内部空洞内に排出することと、
流体を前記環状容積内に流出させることと、
除去デバイスを使用して、前記軟膜成分を前記中空内部空洞から除去することと
を含む、方法。
（項目２１２）
前記１つ以上の支持部材は、前記本体部分の上端から離れるように半径方向に延在する上部支持部材と、前記本体部分の下端から離れるように半径方向に延在する下部支持部材とを備えている、項目２１１に記載の方法。
（項目２１３）
一方向弁は、前記下部支持部材の近位にある、項目２１２に記載の方法。
（項目２１４）
標的細胞を前記血液試料中の他の細胞から区別するために、前記血液試料を１つ以上の標識薬剤と組み合わせることをさらに含む、項目２１１に記載の方法。
（項目２１５）
前記１つ以上の標識薬剤は、蛍光標識されたリガンドを備えている、項目２１４に記載の方法。
（項目２１６）
前記除去デバイスは、注射器またはピトー管である、項目２１１に記載の方法。
（項目２１７）
前記フロートは、前記血液試料が前記可撓性試料管に導入される前に前記可撓性試料管に導入される、項目２１１に記載の方法。
（項目２１８）
前記血液試料は、前記フロートが前記試料管に導入される前に前記試料管に導入される、項目２１１に記載の方法。
（項目２１９）
前記フロートは、単一の一方向弁から成る、項目２１１に記載の方法。
（項目２２０）
前記フロートは、複数の一方向弁を有している、項目２１１に記載の方法。
（項目２２１）
前記血液試料を染色剤と組み合わせることをさらに含む、項目２１１に記載の方法。
（項目２２２）
前記試料管は、少なくとも前記フロートの軸方向移動の経路内の前記側壁の一部に沿って継目がない、項目２１１に記載の方法。
（項目２２３）
前記血液試料は、抗凝固処理された全血を備えている、項目２１１に記載の方法。
（項目２２４）
容積占有セパレータフロートであって、
上端からアクセス可能な中心ボアを画定する側壁と、前記側壁の下端から半径方向に延在する下部支持部材と、前記中心ボア内に位置する第１のネジ山と、前記側壁内に位置し、前記中心ボアの下端内への流体の流入を可能にするように向けられている１つ以上の一方向弁とを備えている、第１の本体部分と、
前記中心ボア内に嵌入するためのサイズを有する中心部分と、前記第１の本体部分の前記第１のネジ山を係合するための前記中心部分上に位置する相補的ネジ山と、前記第２の本体部分の上端から半径方向に延在する上部支持部材とを備えている、第２の本体部分と
を備えている、セパレータフロート。
（項目２２５）
前記第１の本体部分は、単一の一方向弁から成る、項目２２４に記載のセパレータフロート。
（項目２２６）
前記第１の本体部分は、複数の一方向弁を備えている、項目２２４に記載のセパレータフロート。
（項目２２７）
前記フロートは、約１．０２８から約１．０８９の比重を有している、項目２２４に記載のセパレータフロート。
（項目２２８）
前記フロートは、約１．０４０から約１．０７０の比重を有している、項目２２４に記載のセパレータフロート。
（項目２２９）
前記第２の本体部分の上端に、前記中心ボアにアクセスするためのプラグをさらに備えている、項目２２４に記載のセパレータフロート。
（項目２３０）
前記第２の本体部分を前記第１の本体部分からねじって後退させるための前記第２の本体部分内のキー孔をさらに備えている、項目２２４に記載のセパレータフロート。
（項目２３１）
血液試料の軟膜成分を分離し、軸方向に拡張する方法であって、
前記血液試料を可撓性試料管内に導入することであって、前記試料管は、側壁を有し、第１の断面内径を有している、ことと、
容積占有フロートを前記可撓性試料管内に導入することであって、前記フロートは、赤血球と血漿との中間の比重を有しており、
前記フロートは、
上端からアクセス可能な中心ボアを画定する円筒形と、前記円筒形の下端から半径方向に延在し、前記側壁を係合する下部支持部材と、前記中心ボア内に位置する第１のネジ山と、前記側壁内に位置し、前記中心ボアの下端内に流体の流入を可能にするように向けられている１つ以上の一方向弁とを備えている、第１の本体部分と、
前記中心ボア内に嵌入するためのサイズを有する中心部分と、前記第１の本体部分の第１のネジ山を係合するための前記中心部分上に位置する相補的ネジ山と、前記第２の本体部分の上端から半径方向に延在し、前記側壁を係合する上部支持部材とを備えている、第２の本体部分と
を備え、前記中心部分は、前記中心ボアを実質的に充填し、前記下部支持部材および上部支持部材は、前記試料管の側壁を係合し、
前記第１の本体部分および前記試料管の側壁は、前記本体部分と前記側壁との間に環状容積を画定する、
ことと、
ある回転速度で前記試料管を遠心分離することであって、前記回転速度は、前記フロートの軸方向移動をもたらすための十分に大きい前記スリーブの拡大と、別々の層への血液の分離と、前記血液試料の少なくとも前記軟膜成分と整列する前記フロートの移動とを生じさせる、ことと、
前記回転速度を低減することにより、前記管側壁に前記第１の直径に戻らせ、それによって、前記フロートを捕捉し、前記環状容積内に前記軟膜成分を捕集することと、
前記第２の本体部分をねじって後退させることにより、前記第２の本体部分を上方に移動し、前記中心ボア内の圧力を低減し、前記軟膜成分の少なくとも一部を前記中心ボア内に排出することと、
流体を前記環状容積内に流出させることと
を含む、方法。
（項目２３２）
標的細胞を前記血液試料中の他の細胞から区別するために、前記血液試料を１つ以上の標識薬剤と組み合わせることをさらに含む、項目２３１に記載の方法。
（項目２３３）
前記１つ以上の標識薬剤は、蛍光標識されたリガンドを備えている、項目２３２に記載の方法。
（項目２３４）
前記フロートは、前記血液試料が前記可撓性試料管に導入される前に前記可撓性試料管に導入される、項目２３１に記載の方法。
（項目２３５）
前記血液試料は、前記フロートが前記試料管に導入される前に前記試料管に導入される、項目２３１に記載の方法。
（項目２３６）
前記第１の本体部分は、単一の一方向弁から成る、項目２３１に記載の方法。
（項目２３７）
前記第１の本体部分は、複数の一方向弁を備えている、項目２３１に記載の方法。
（項目２３８）
前記血液試料を染色剤と組み合わせることをさらに含む、項目２３１に記載の方法。
（項目２３９）
前記試料管は、少なくとも前記フロートの軸方向移動の経路内の前記側壁の一部に沿って継目がない、項目２３１に記載の方法。
（項目２４０）
前記血液試料は、抗凝固処理された全血を備えている、項目２３１に記載の方法。
（項目２４１）
容積占有セパレータフロートであって、
上端からアクセス可能である中心ボアを画定する円筒形と、前記円筒形の下端から半径方向に延在する下部支持部材と、前記円筒形内に位置し、前記中心ボアの下端内への流体の流入を可能にするように向けられている１つ以上の一方向弁とを備えている、第１の本体部分と、
前記中心ボア内に摺動可能に嵌入するためのサイズを有する中心部分と、前記第２の本体部分の上端から半径方向に延在する上部支持部材とを備えている、第２の本体部分と
を備えている、セパレータフロート。
（項目２４２）
前記第１の本体部分は、単一の一方向弁を備えている、項目２４１に記載のセパレータフロート。
（項目２４３）
前記第１の本体部分は、複数の一方向弁を備えている、項目２４１に記載のセパレータフロート。
（項目２４４）
前記フロートは、約１．０２８から約１．０８９の比重を有している、項目２４１に記載のセパレータフロート。
（項目２４５）
前記フロートは、約１．０４０から約１．０７０の比重を有している、項目２４１に記載のセパレータフロート。
（項目２４６）
前記第２の本体部分の上端に、前記中心ボアにアクセスするためのプラグをさらに備えている、項目２４１に記載のセパレータフロート。
（項目２４７）
前記第１の本体部分および前記第２の本体部分の分離を防止するための停止部をさらに備えている、項目２４１に記載のセパレータフロート。
（項目２４８）
血液試料の軟膜成分を分離し、軸方向に拡張する方法であって、
前記血液試料を可撓性試料管内に導入することであって、前記試料管は、側壁を有し、第１の断面内径を有している、ことと、
容積占有フロートを前記可撓性試料管内に導入することであって、前記フロートは、赤血球と血漿との中間の比重を有しており、
前記フロートは、
上端からアクセス可能である中心ボアを画定する円筒形と、前記円筒形の下端から半径方向に延在する下部支持部材と、前記円筒形内に位置し、前記中心ボアの下端内への流体の流入を可能にするように向けられている１つ以上の一方向弁とを備えている、第１の本体部分と、
前記中心ボア内に摺動可能に嵌入するためのサイズを有する中心部分と、前記第２の本体部分の上端から半径方向に延在する上部支持部材とを備えている、第２の本体部分と
を備え、前記上部および下部支持部材は、前記試料管の側壁を係合し、
前記第１の本体部分および前記試料管の側壁は、前記本体部分と前記側壁との間に環状容積を画定する、
ことと、
ある回転速度で前記試料管を遠心分離することであって、前記回転速度は、前記フロートの軸方向移動を可能にする第２の直径への前記スリーブの拡大と、別々の層への血液の分離と、前記血液試料の少なくとも前記軟膜成分と整列する前記フロートの移動とを生じさせる、ことと、
前記回転速度を低減することにより、前記管側壁に前記第１の直径に戻らせ、それによって、前記フロートを捕捉し、前記環状容積内に前記軟膜成分を捕集することと、
前記第２の本体部分を軸方向上方に摺動させることにより、前記中心ボア内の圧力を低下させることと、
前記軟膜成分の少なくとも一部を前記中心ボア内に排出することと、
流体を前記環状容積内に流出させることと
を含む、方法。
（項目２４９）
標的細胞を前記血液試料中の他の細胞から区別するために、前記血液試料を１つ以上の標識薬剤と組み合わせることをさらに含む、項目２４８に記載の方法。
（項目２５０）
前記１つ以上の標識薬剤は、蛍光標識されたリガンドを備えている、項目２４９に記載の方法。
（項目２５１）
除去デバイスを使用して、前記軟膜成分を前記中心ボアから除去することをさらに含む、項目２４８に記載の方法。
（項目２５２）
前記除去デバイスは、注射器またはピトー管である、項目２５１に記載の方法。
（項目２５３）
前記フロートは、前記血液試料が前記可撓性試料管に導入される前に前記可撓性試料管に導入される、項目２４８に記載の方法。
（項目２５４）
前記血液試料は、前記フロートが前記試料管に導入される前に前記試料管に導入される、項目２４８に記載の方法。
（項目２５５）
前記フロートは、単一の一方向弁から成る、項目２４８に記載の方法。
（項目２５６）
前記フロートは、複数の一方向弁を備えている、項目２４８に記載の方法。
（項目２５７）
前記血液試料を染色剤と組み合わせることをさらに含む、項目２４８に記載の方法。
（項目２５８）
前記試料管は、少なくとも前記フロートの軸方向移動の経路内の前記側壁の一部に沿って継目がない、項目２４８に記載の方法。
（項目２５９）
前記血液試料は、抗凝固処理された全血を備えている、項目２４８に記載の方法。
（項目２６０）
容積占有セパレータフロートであって、
上端および下端を有する本体部分と、
前記本体部分から半径方向に延在する少なくとも１つの支持部材であって、鋭利円周方向縁を備えている、支持部材と
を備え、前記本体部分と前記少なくとも１つの支持部材とは、前記本体部分の周囲に環状容積を画定する、セパレータフロート。
（項目２６１）
前記少なくとも１つの支持部材は、前記本体部分の上端に位置している、項目２６０に記載のフロート。
（項目２６２）
前記少なくとも１つの支持部材は、前記本体部分の下端に位置している、項目２６０に記載のフロート。
（項目２６３）
少なくとも２つの支持部材を有し、１つの支持部材は、前記本体部分の上端に位置し、他の支持部材は、前記本体部分の下端に位置している、項目２６０に記載のフロート。
（項目２６４）
前記上端から前記下端に延在する圧力解放通路をさらに備えている、項目２６０に記載のフロート。
（項目２６５）
前記上端と前記下端との間に少なくとも１つの中間支持部材をさらに備え、前記中間支持部材は、鋭利円周方向縁を備えていない、項目２６０に記載のフロート。
（項目２６６）
血液試料中の軟膜成分を分離し、軸方向に拡張する方法であって、
前記血液試料を可撓性試料管内に導入することであって、前記試料管は、側壁を有している、ことと、
容積占有フロートを前記可撓性試料管内に導入することであって、前記剛体フロートは、赤血球と血漿との中間の比重を有しており、
前記フロートは、
本体部分であって、前記本体部分と前記側壁との間に環状容積を形成するために、前記本体部分は、前記側壁によって半径方向に間隔をあけて包囲されている、本体部分と、
上部鋭利円周方向縁を備えている上部支持部材と、
下部鋭利円周方向縁を備えている下部支持部材と、
を備えている、ことと、
ある回転速度で前記試料管を遠心分離することであって、前記回転速度は、前記フロートの軸方向移動を可能にするための十分に大きい直径への前記側壁の拡大と、別々の層への血液の分離と、前記血液試料の少なくとも前記軟膜成分と整列する前記フロートの移動とを生じさせる、ことと、
前記回転速度を低減することにより、前記側壁に前記フロートを捕捉させることと、
前記上部および下部支持部材のうちの少なくとも１つに対して、前記試料管を圧縮することにより、前記フロートと拡張された軟膜成分とを含む前記管の破断セクションを得ることと、
を含む、方法。
（項目２６７）
前記フロートは、前記軟膜成分を通る過剰な流体流動を阻止するための解放手段をさらに備えている、項目２６６に記載の方法。
（項目２６８）
前記管は、前記上部および下部支持部材の両方において圧縮される、項目２６６に記載の方法。
（項目２６９）
標的細胞を前記血液試料中の他の細胞から区別するために、前記血液試料を１つ以上の標識薬剤と組み合わせることをさらに含む、項目２６６に記載の方法。
（項目２７０）
前記環状容積内に存在する血液試料を検査し、前記環状容積内に含まれる任意の標的細胞を識別することをさらに含む、項目２６６に記載の方法。
（項目２７１）
試料容積を前記環状容積から除去することと、
前記試料容積を１つ以上の標識薬剤によって標識し、標的細胞を区別することと、
前記試料容積を検査し、前記標的細胞を識別することとをさらに含む、項目２６６に記載の方法。
【国際調査報告】
2013528785.tif 000025
2013528785.tif 000026
2013528785.tif 000027
2013528785.tif 000028