(57)【要約】本明細書に提供されたものは、ヘッジホッグ阻害剤を、単独で又は別の抗癌剤（例えば、パクリタキセル又はパクリタキセル剤、チロシンキナーゼ阻害剤（受容体チロシンキナーゼ（ＲＴＫ）阻害剤）又はｍＴＯＲ阻害剤）と併用して被験者に投与することによって、ヘッジホッグ関連癌（例えば、神経内分泌癌、肉腫（例えば、軟骨肉腫及び骨肉腫のような筋骨格肉腫）から選択されたヘッジホッグリガンド依存性癌細胞増殖）、頭頚部癌、又は肺癌を治療又は予防するための方法及び組成物である。【特許請求の範囲】
【請求項１】
ヘッジホッグ阻害を必要とする被験者におけるヘッジホッグ関連癌又は腫瘍を治療する方法であって、前記方法は、被験者に、第１の抗癌剤と第２の抗癌剤とを、癌又は腫瘍を治療するのに十分な量で投与することを含み、前記第１の抗癌剤がヘッジホッグ阻害剤であり、並びに前記ヘッジホッグ関連癌又は腫瘍と前記第２の抗癌剤が、
ａ）前記ヘッジホッグ関連癌又は腫瘍が肉腫であり、並びに前記第２の抗癌剤が、ｍＴＯＲ阻害剤、ドキソルビシン、シスプラチン、イフォスファミド、又はメトトレキサートの１つまたはそれより多くから選択されることと、
ｂ）前記ヘッジホッグ関連癌又は腫瘍が神経内分泌癌であり、並びに前記第２の抗癌剤が、チロシンキナーゼ阻害剤であることと、
ｃ）前記ヘッジホッグ関連癌又は腫瘍が頭頚部扁平上皮癌であり、並びに前記第２の抗癌剤がチロシンキナーゼ阻害剤であることと、
ｄ）前記ヘッジホッグ関連癌又は腫瘍が膵臓癌であり、並びに前記第２の抗癌剤がパクリタキセル剤であることと、
ｅ）前記ヘッジホッグ関連癌又は腫瘍が膵臓癌であり、並びに前記第２の抗癌剤がＶＥＧＦ阻害剤であることと、
ｆ）前記ヘッジホッグ関連癌又は腫瘍が肺癌であり、並びに前記第２の抗癌剤がスニチニブ、エルロチニブ、ゲフィチニブ、又はソラフェニブから選択されるチロシンキナーゼ阻害剤であることと、からなる群からそれぞれ選択される、方法。
【請求項２】
被験者でのチロシンキナーゼ阻害剤による療法後に、ヘッジホッグ関連癌又は腫瘍の再発を低減又は予防する方法であって、前記方法は、癌又は腫瘍の再増殖又は再発を低減又は阻害するのに十分な量で、ヘッジホッグ阻害剤を被験者に投与することを含み、前記被験者が前記チロシンキナーゼ阻害剤による療法を実施中又は実施された被験者であり、並びにヘッジホッグ関連癌又は腫瘍が肺癌又は頭頚部扁平上皮細胞癌である、方法。
【請求項３】
前記ヘッジホッグ阻害剤が、腫瘍細胞、腫瘍微小環境、又はヘッジホッグリガンドに反応する他の残存病変の１つ又はそれより多くを標的とする、請求項１又は２に記載の方法。
【請求項４】
前記ヘッジホッグ阻害剤がＳｍｏｏｔｈｅｎｅｄ拮抗剤である、請求項１又は２に記載の方法。
【請求項５】
前記ヘッジホッグ阻害剤が、式Ｉの化合物：
【化１６】
2013511549.tif 000029
、又はその薬剤的に許容し得る塩である、請求項１に記載の方法。
【請求項６】
前記ヘッジホッグ阻害剤が、式Ｉの化合物：
【化１７】
2013511549.tif 000030
、又はその薬剤的に許容し得る塩である、請求項２に記載の方法。
【請求項７】
前記肉腫が、骨の肉腫、軟組織の肉腫、滑液膜の肉腫、脂肪肉腫、筋骨格肉腫、軟骨の肉腫、軟骨肉腫又は骨肉腫のうちの１つ又はそれより多くから選択される、請求項１又は５に記載の方法。
【請求項８】
前記ヘッジホッグ阻害剤が、ｍＴＯＲ阻害剤と同時に又は順次に投与される、請求項７に記載の方法。
【請求項９】
前記ヘッジホッグ阻害剤とｍＴＯＲ阻害剤が、局所的又は転移性肉腫侵襲を低減又は阻害する、請求項８に記載の方法。
【請求項１０】
前記ヘッジホッグ阻害剤とｍＴＯＲ阻害剤が再発した又は治療抵抗性骨肉腫を低減又は阻害する、請求項８に記載の方法。
【請求項１１】
前記ｍＴＯＲ阻害剤が、ラパマイシン、テムシロリムス（ＴＯＲＩＳＥＬ（登録商標））、エベロリムス（ＲＡＤ００１、ＡＦＩＮＩＴＯＲ（登録商標））、リダフォロリムス、ＡＰ２３５７３、ＡＺＤ８０５５、ＢＥＺ２３５、ＢＧＴ２２６、ＸＬ７６５、ＰＦ−４６９１５０２、ＧＤＣ０９８０、ＳＦ１１２６又はＯＳＩ−０２７のうちの１つ又はそれより多くから選択される、請求項８に記載の方法。
【請求項１２】
前記神経内分泌癌が、膵臓、肺、虫垂、十二指腸、回腸、直腸、又は小腸の神経内分泌癌；副腎髄質、下垂体、副甲状腺、甲状腺内分泌島、膵臓内分泌島、呼吸管又は胃腸管に分散された内分泌細胞からの神経内分泌癌；あるいは、機能的又は非機能的癌様体神経内分泌癌のうちの１つ又はそれより多くから選択される、請求項１又は５に記載の方法。
【請求項１３】
前記ヘッジホッグ阻害剤が、前記チロシンキナーゼ阻害剤と同時に又は順次に投与される、請求項１２に記載の方法。
【請求項１４】
前記ヘッジホッグ阻害剤が、前記チロシンキナーゼ阻害剤による治療が開始される前に、又は前記チロシンキナーゼ阻害剤による治療が終了した後に投与され、若しくは互いに部分的に重複し、並びにそのいずれかが他の薬剤による治療が終了した後に、単独投与薬剤として継続される、請求項１３に記載の方法。
【請求項１５】
前記ヘッジホッグ関連癌又は腫瘍が、頭頚部扁平上皮癌であり、並びに前記チロシンキナーゼ阻害剤がＥＧＦＲ−チロシンキナーゼ阻害剤である、請求項１、２、５又は６に記載の方法。
【請求項１６】
前記ヘッジホッグ阻害剤が、前記ＥＧＦＲ−チロシンキナーゼ阻害剤と同時又は順次投与される、請求項１５に記載の方法。
【請求項１７】
前記ヘッジホッグ阻害剤が、前記ＥＧＦＲ−チロシンキナーゼ阻害剤による治療が終了した後に投与されるか、又は互いに部分的に重複して投与され、並びに前記ＥＧＦＲ−チロシンキナーゼ阻害剤による治療が終了した後に、単独投与薬剤として継続される、請求項１６に記載の方法。
【請求項１８】
前記肺癌が、小細胞肺癌又は非小細胞肺癌から選択される、請求項１、２、５又は６に記載の方法。
【請求項１９】
前記ヘッジホッグ阻害剤が、前記チロシンキナーゼ阻害剤と同時又は順次に投与され、前記チロシンキナーゼ阻害剤がゲフィチニブである、請求項１８に記載の方法。
【請求項２０】
前記ヘッジホッグ阻害剤が、ゲフィチニブによる治療が終了した後に投与されるか、又は互いに部分的に重複して投与され、並びにゲフィチニブによる治療が終了した後に単独投与薬剤として継続される、請求項１９に記載の方法。
【請求項２１】
前記チロシンキナーゼ阻害剤が、スニチニブ、エルロチニブ、ゲフィチニブ、又はソラフェニブから選択される、請求項１２に記載の方法。
【請求項２２】
前記ＥＧＦＲ−チロシンキナーゼ阻害剤が、エルロチニブ、ゲフィチニブ、イコチニブ、ラパチニブ、ネラチニブ、バンデタニブ、ＢＩＢＷ２９９２又はＸＬ−６４７のうちの１つ又はそれより多くから選択される小分子ＥＧＦＲ−チロシンキナーゼ阻害剤である、請求項１５に記載の方法。
【請求項２３】
前記ＥＧＦＲ−チロシンキナーゼ阻害剤が、セツキマブ、パニツムマブ、ザルツムマブ、ニモツズマブ、ネシツムマブ又はマツズマブから選択されるモノクローナル抗体である、請求項１５に記載の方法。
【請求項２４】
前記ヘッジホッグ関連癌又は腫瘍が膵臓癌であり、前記第２の抗癌剤がパクリタキセル剤である、請求項１又は５に記載の方法。
【請求項２５】
前記パクリタキセル剤が、アルブミン安定化ナノ粒子パクリタキセル製剤又はリポソーマルパクリタキセル製剤から選択される、請求項２４に記載の方法。
【請求項２６】
前記ヘッジホッグ阻害剤と前記パクリタキセル剤が、順次又は連続的に投与される、請求項２４に記載の方法。
【請求項２７】
前記ヘッジホッグ阻害剤の前記投与が、前記パクリタキセル剤による治療と重複し、並びに前記パクリタキセル又は前記パクリタキセル剤による治療が終了した後に継続する、請求項２６に記載の方法。
【請求項２８】
前記ヘッジホッグ阻害剤と前記パクリタキセル剤が、ゲムシタビン、シスプラチン、エピルビシン、５−フルオロウラシル、ＶＥＧＦ阻害剤（例えば、抗−ＶＥＧＦ抗体）、ロイコボリン、オキサリプラチン、又はそれらの組み合わせから選択される第３の抗癌剤と併用して投与される、請求項２６に記載の方法。
【請求項２９】
前記被験者が、第３の抗癌剤、手術及び／又は放射線療法による治療を実施中、又は実施した患者である、請求項１に記載の方法。
【請求項３０】
前記被験者が、１つ又はそれより多くの追加の抗癌剤、手術及び／又は放射線療法による治療を実施中、又は実施した患者である、請求項２に記載の方法。
【請求項３１】
前記第３の抗癌剤が、インシュリン様成長因子受容体（ＩＧＦ−１Ｒ）阻害剤、ＰＩ３Ｋ阻害剤、フォルフィリノクス、ＢＲＡＦ阻害剤、ＭＥＫ阻害剤、ＪＡＫ２阻害剤、細胞毒性剤又は細胞増殖抑制剤のうちの１つ又はそれより多くから選択される、請求項２９に記載の方法。
【請求項３２】
前記１つ又はそれより多くの抗癌剤が、インシュリン様成長因子受容体（ＩＧＦ−１Ｒ）阻害剤、ＰＩ３Ｋ阻害剤、フォルフィリノクス、ＢＲＡＦ阻害剤、ＭＥＫ阻害剤、ＪＡＫ２阻害剤、細胞毒性剤又は細胞増殖抑制剤のうちの１つ又はそれより多くから選択される、請求項３０に記載の方法。
【請求項３３】
前記ヘッジホッグ阻害剤と前記第２の又は第３の抗癌剤が、別個の又は同一の医薬組成物で同時に投与される、請求項３１に記載の方法。
【請求項３４】
前記ヘッジホッグ阻害剤と前記第２の又は第３の抗癌剤が、順次に投与される、請求項３１に記載の方法。
【請求項３５】
前記チロシンキナーゼ阻害剤が、経口投与量として、１日当たり、少なくとも約１０ｍｇ、約２５ｍｇ、約３７．５ｍｇ、約５０ｍｇ、約７０ｍｇ、約８７．５ｍｇ、約１００ｍｇ、約１２５ｍｇ、又は約１５０ｍｇで被験者に投与される、請求項２０に記載の方法。
【請求項３６】
前記チロシンキナーゼ阻害剤が、約１週、２週、３週、４週又はそれより多くの週の期間、毎日被験者に投与される、請求項２０に記載の方法。
【請求項３７】
第３の抗癌剤、手術又は放射線療法のうちの１つ又はそれより多くから選択された癌治療を更に含む、請求項５に記載の方法。
【請求項３８】
第３の抗癌剤、手術又は放射線療法のうちの１つ又はそれより多くから選択された癌治療を更に含む、請求項６に記載の方法。
【請求項３９】
前記ヘッジホッグ阻害剤が、癌治療前に、癌治療と同時に、治療後に、又は癌の寛解状態中に、前記被験者に投与される、請求項３７又は３８に記載の方法。
【請求項４０】
前記ヘッジホッグ阻害剤が、
前記ヘッジホッグ関連癌又は腫瘍の第一選択治療、
前記ヘッジホッグ関連癌又は腫瘍の第二選択治療、
前記ヘッジホッグ関連癌又は腫瘍の第三又は第四選択治療、
術前補助療法、或いは、
補助療法、の１つ又はそれより多くの治療として投与される、請求項１又は５に記載の方法。
【請求項４１】
前記ヘッジホッグ阻害剤が、前記ヘッジホッグ関連癌又は腫瘍の外科的切除／除去の前又は後に、被験者に投与される、請求項１、２、５又は６のうちのいずれか一項に記載の方法。
【請求項４２】
前記ヘッジホッグ阻害剤が、前記ヘッジホッグ関連癌又は腫瘍の放射線療法前、放射線療法中又はその後に、被験者に投与される、請求項１、２、５又は６のうちのいずれか一項に記載の方法。
【請求項４３】
腫瘍サイズ、ヘッジホッグレベル又はシグナル伝達、間質活性化、１つ又はそれより多くの癌マーカーのレベル、新しい病巣の出現速度、新しい疾患関連症状の出現、軟組織腫瘤のサイズ、生活の質、又は臨床転帰に関連する任意の他のパラメータのうちの１つ又はそれより多くでの変化に関して、前記被験者を監視する工程を更に含む、請求項１、２、５又は６のうちのいずれか一項に記載の方法。
【請求項４４】
前記被験者からの核酸又は蛋白質を分析する工程を更に含む、請求項１、２、５又は６のうちのいずれか一項に記載の方法。
【請求項４５】
ヘッジホッグリガンド、ヘッジホッグリガンドをコードする核酸、又は前記ヘッジホッグシグナル伝達の上流又は下流成分のうちの１つ又はそれより多くが分析される、請求項４４に記載の方法。
【請求項４６】
前記ヘッジホッグリガンドが、血液中、尿中、循環する腫瘍細胞中、腫瘍生検中又は骨髄生検中で検出される、請求項４５に記載の方法。
【請求項４７】
ＥＧＦＲ遺伝子又は遺伝子生成物中の変化の存在又は不在を検出するために、前記腫瘍、前記癌細胞又は前記被験者からのサンプルを評価する工程を更に含む、請求項１、２、５又は６のうちのいずれか一項に記載の方法。
【請求項４８】
ヘッジホッグ阻害剤と併用してのＥＧＦＲ阻害剤を含む治療に反応する傾向を有するとして腫瘍、癌細胞、又は被験者を同定又は選択する工程を更に含み、前記ＥＧＦＲ遺伝子又は遺伝子生成物の前記変化の存在が、前記治療に対する増加した反応性の指標である、請求項４７に記載の方法。
【請求項４９】
前記ＥＧＦＲ遺伝子又は遺伝子生成物中の前記変化が、ＥＧＦＲエクソン欠失、及び／又はエクソン突然変異である、請求項４８に記載の方法。
【請求項５０】
請求項１〜４９のうちのいずれかに記載の前記ヘッジホッグ関連腫瘍又は癌の治療で使用されるための組成物。
【請求項５１】
薬剤的に許容し得る担体又は賦形剤中に、ヘッジホッグ阻害剤とパクリタキセル若しくはパクリタキセル剤、チロシンキナーゼ阻害剤、又はｍＴＯＲ阻害剤とを含む医薬組成物。
【請求項５２】
請求項５１に記載の前記医薬組成物を製造するための方法。
【請求項５３】
ヘッジホッグ阻害剤とパクリタキセル若しくはパクリタキセル剤、チロシンキナーゼ阻害剤、又はｍＴＯＲ阻害剤、並びにヘッジホッグ関連癌又は腫瘍の治療のための使用に関する使用説明書を含むキット。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
関連出願の相互参照
本願は、２０１０年４月１６日に出願された米国特許出願第１２／７６２，００８号の一部継続出願である。本願は、２００９年１１月２０日に出願された米国特許仮出願第６１／２６３，１８４号、２０１０年１月１１に出願された米国特許仮出願第６１／２９４，０２９号、２０１０年４月１６日に出願された米国特許仮出願第６１／３２４，９３４号、２０１０年４月２３日に出願された米国特許仮出願第６１／３２７，３７３号、２０１０年５月４日に出願された米国特許仮出願第６１／３３１，３６５号、２０１０年６月３日に出願された米国特許仮出願第６１／３５１，０８２号、並びに２０１０年９月２７日に出願された米国特許仮出願第６１／３８６，７６３号に対する優先権の利益を主張するものでもある。上記出願の内容は、参照によりその全体を本明細書に組み込まれている。
【背景技術】
【０００２】
ヘッジホッグシグナル伝達は、多くの発育段階において、特に左右対称性の形成において影響を及ぼす。ヘッジホッグシグナル伝達の損失又は低減は、多発性発生欠損及び奇形に導き、その最も顕著な例は単眼症である。
【０００３】
多くの癌及び増殖病態は、ヘッジホッグ経路に依存することが確認されている。このような細胞の増殖及び生存は、本明細書に開示された化合物での処置により影響され得る。ヘッジホッグ経路突然変異の活性化が、散発性基底細胞癌中で発生すること（非特許文献１）並びに中枢神経系の初期神経外胚葉腫中で発生することが報告されている（非特許文献２）。ヘッジホッグ経路の無制御の活性化もまた、膵臓癌、食道癌、胃癌を含む胃腸管癌（非特許文献３、非特許文献４）、肺癌（非特許文献５）、前立腺癌（非特許文献６、非特許文献７、非特許文献８）、乳癌（非特許文献９、非特許文献１０）、及び肝細胞癌（Ｓｉｃｋｌｉｃｋら、（２００５年）「ＡＳＣＯ会議」、Ｍｏｈｉｎｉら（２００５年）「ＡＡＣＲ会議」）のような多くの癌型でも認められている。
【０００４】
新しい癌治療、特にヘッジホッグ作用調節に反応を示す癌の治療のための、ヘッジホッグ阻害剤の単独または他の治療薬剤と併用された新しい使用を特定するための要求が未だに存在している。
【先行技術文献】
【非特許文献】
【０００５】
【非特許文献１】Ｘｉｅら著（１９９８年）「Ｎａｔｕｒｅ」３９１：９０−２頁
【非特許文献２】Ｒｅｉｆｅｎｂｅｒｇｅｒら著、（１９９８年）「Ｃａｎｃｅｒ  Ｒｅｓ」５８：１７９８−８０３頁
【非特許文献３】Ｂｅｒｍａｎら著、（２００３年）「Ｎａｔｕｒｅ」４２５：８４６−５１頁
【非特許文献４】Ｔｈａｙｅｒら著、（２００３年）「Ｎａｔｕｒｅ」４２５：８５１−５６頁
【非特許文献５】Ｗａｔｋｉｎｓら著（２００３年）「Ｎａｔｕｒｅ」４２２：３１３−３１７頁
【非特許文献６】Ｋａｒｈａｄｋａｒら著、（２００４年）「Ｎａｔｕｒｅ」４３１：７０７−１２頁
【非特許文献７】Ｓｈｅｎｇら著、（２００４年）「Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｃａｎｃｅｒ」３：２９−４２頁
【非特許文献８】Ｆａｎら著、（２００４年）「Ｅｎｄｏｃｒｉｎｏｌｏｇｙ」１４５：３９６１−７０頁
【非特許文献９】Ｋｕｂｏら著、（２００４年）「Ｃａｎｃｅｒ  Ｒｅｓｅａｒｃｈ」６４：６０７１−７４頁
【非特許文献１０】Ｌｅｗｉｓら著、（２００４年）「Ｊｏｕｒｎａｌ  ｏｆ  Ｍａｍｍａｒｙ  Ｇｌａｎｄ  Ｂｉｏｌｏｇｙ  ａｎｄ  Ｎｅｏｐｌａｓｉａ」２：１６５−１８１頁
【発明の概要】
【課題を解決するための手段】
【０００６】
本発明は、少なくとも部分的には、単独薬剤又は他の抗癌剤と併用してのヘッジホッグ（Ｈｈ）阻害剤が、ヘッジホッグ関連癌の細胞増殖を低減し得ることを開示する。一実施形態では、出願者は、ヘッジホッグ阻害物質の投与が、単独またはチロシンキナーゼ阻害剤（例えば、スニチニブ）と併用されて、インビボにおける神経内分泌癌増殖及び／又は腫瘍進行を低減させることを発見した。更に、ヘッジホッグ阻害剤の投与が、神経内分泌癌の周囲の間質中でヘッジホッグ依存性マーカー（例えば遺伝子）の発現を低減させるが、一方では神経内分泌腫瘍細胞中ではヘッジホッグ依存性マーカー（例えば遺伝子）に及ぼす顕著な効果が検出されないことを見出した。
【０００７】
他の実施形態では、ヘッジホッグ阻害剤の投与は、それが単独であってもｍＴＯＲ阻害剤又は他の抗癌剤（例えば、１つ又はそれより多くのドキソルビシン、シスプラチン、イフォスファミド、又はメトトレキサート（例えば、高用量メトトレキサート））と併用されても、軟骨肉腫及び骨肉腫などのような筋骨格肉腫の増殖及び／又は腫瘍進行を低減させる。出願者は、ヘッジホッグ阻害剤の投与が、腫瘍細胞及び周囲の間質中のシグナル伝達経路を減少させて、これによって、ヘッジホッグリガンドと腫瘍との間の直接的シグナル伝達機構を支援し、並びに周囲の間質を介して腫瘍に及ぼす間接的影響を支援することを発見した。
【０００８】
更に別の実施例では、パクリタキセル又はパクリタキセル剤と併用したヘッジホッグ阻害剤の投与は、膵臓癌、例えば転移性膵臓癌のような膵臓癌の増殖及び／又は腫瘍進行を、それぞれの薬剤の単独投与よりもはるかに大きな程度で減少させる。ヘッジホッグ阻害剤とパクリタキセル又はパクリタキセル剤の併用は、ゲムシタビン（例えば、ＧＥＭＺＡＲ（登録商標））を更に含み得る。ヘッジホッグ阻害剤の投与は、ヘッジホッグ阻害剤を併用しないパクリタキセル又はパクリタキセル剤（及び／又はゲムシタビン）の使用と比べて、併用使用された場合、パクリタキセル又はパクリタキセル薬剤及び／又はゲムシタビンの送達の増強をもたらすと考えられる。一実施形態では、被験者は、転移性膵臓癌患者である。別の実施形態では、被験者は、事前の癌治療を受けていない（例えば、他の抗癌剤、外科的又は放射線療法への事前の曝露がないこと、彼らの疾患に対して事前の癌治療がないこと）膵臓癌又は進行性膵臓癌の患者である。
【０００９】
更に別の実施形態では、ＶＥＧＦ（血管内皮成長因子）拮抗剤、例えば抗−ＶＥＧＦ抗体（例えばベバシズマブ）と併用されたヘッジホッグ阻害剤の投与は、いずれかの薬剤の単独投与よりもはるかに大きな程度に膵臓癌の増殖及び／又は腫瘍進行を減少させる。
【００１０】
他の実施形態では、チロシンキナーゼ阻害剤（例えば、ＥＧＦＲ阻害剤のような受容体チロシンキナーゼ（ＲＴＫ）阻害剤）と併用されたヘッジホッグ阻害剤の投与は、頭頚部癌及び／又は肺癌（例えば、非小細胞肺癌）の増殖及び／又は腫瘍進行を低減させる。一実施形態では、ヘッジホッグ阻害剤は、別の抗癌剤（例えば、チロシンキナーゼ阻害剤）の治療を実施している又は先行治療を受けた被験者の無再発生存率を延ばす。一実施形態では、チロシンキナーゼ阻害剤は、ゲフィチニブ又はセツキシマブである。例えば、ヘッジホッグ阻害剤は、チロシンキナーゼ阻害剤による治療が有効性に劣る又は無効である（例えば、チロシンキナーゼ阻害剤による治療の後に、被験者に再発がある場合、又は腫瘍がチロシンキナーゼ阻害剤に耐性を生じている場合）後に、ヘッジホッグ関連癌の腫瘍再増殖を低減又は阻害する。一実施形態では、被験者は、ゲフィチニブ治療後に再発した肺癌（例えば非小細胞肺癌）を持つ患者である。別の実施形態では、被験者は、チロシンキナーゼ阻害剤（例えば、セツキシマブのようなＥＧＦＲチロシンキナーゼ阻害剤）による治療を実施中又は治療実施後の頭頸部扁平上皮細胞癌（ＨＮＳＣＣ）の患者である。
【００１１】
すなわち、被験者にヘッジホッグ阻害剤を、単独または別の抗癌剤（例えば、パクリタキセル又はパクリタキセル剤、チロシンキナーゼ阻害剤（例えば、受容体チロシンキナーゼ（ＲＴＫ）阻害剤）又はｍＴＯＲ阻害剤など）と併用して投与することによる、ヘッジホッグ関連癌（例えば、神経内分泌癌、肉腫（軟骨肉腫、骨肉腫、滑液膜肉腫又は脂肪肉腫などのような筋骨格肉腫又は軟組織肉腫）、頭頚部癌、又は肺癌から選択されるヘッジホッグリガンド依存性癌細胞増殖）を治療又は予防するための方法及び組成物が開示されている。
【００１２】
したがって、一態様では、本発明は、被験者における腫瘍又は癌、例えばヘッジホッグ関連腫瘍又は癌の増殖を低減又は阻害する方法を特徴とする。本発明はまた、腫瘍又は癌、例えばヘッジホッグ関連癌又は腫瘍を有する、若しくは癌又は腫瘍を有する危険性がある被験者の治療法を特徴とする。方法は、ヘッジホッグ阻害剤、例えば本明細書に記載されたような１つ又はそれより多くのヘッジホッグ阻害剤を、被験者の腫瘍細胞増殖を低減又は阻害させるのに十分な量、及び／若しくは癌又は腫瘍を治療又は予防するのに十分な量で、被験者に投与することを含む。特定の実施形態では、ヘッジホッグ阻害剤は、単独薬剤として、又は他の抗癌剤と併用して（例えば、パクリタキセル又はパクリタキセル剤、チロシンキナーゼ阻害剤（例えば、受容体チロシンキナーゼ（ＲＴＫ）阻害剤）、ｍＴＯＲ阻害剤又はＶＥＧＦ阻害剤と併用）投与される。特定の実施形態では、ヘッジホッグ関連腫瘍又は癌は、神経内分泌癌、肉腫（軟骨肉腫、骨肉腫、滑液膜肉腫又は脂肪肉腫などのような筋骨格肉腫又は軟組織肉腫）、膵臓癌、頭頚部癌、前立腺癌、卵巣癌、又は肺癌（例えば小細胞又は非小細胞肺癌）のうちの１つ又はそれより多くから選択されたヘッジホッグリガンド依存性癌細胞増殖である。
【００１３】
別の態様では、本発明は、ヘッジホッグ阻害を必要とする被験者において、ヘッジホッグ関連癌又は腫瘍を治療する方法を特徴とする。方法は、第１の抗癌剤及び第２の抗癌剤を、癌又は腫瘍を治療するのに十分な量で被験者に投与することを含み、第１の抗癌剤はヘッジホッグ阻害剤である。特定の実施形態では、ヘッジホッグ関連癌又は腫瘍及び第２の抗癌剤は、（ｉ）ヘッジホッグ関連癌又は腫瘍が肉腫であり、並びに第２の抗癌剤が、ｍＴＯＲ阻害剤、ドキソルビシン、シスプラチン、イフォスファミド、又はメトトレキサートのうちの１つ又はそれより多くから選択され、（ｉｉ）ヘッドホッグ関連癌又は腫瘍が神経内分泌癌であり、並びに第２の抗癌剤がチロシンキナーゼ阻害剤であり、（ｉｉｉ）ヘッジホッグ関連癌又は腫瘍が頭頸部扁平上皮細胞癌であり、並びに第２の抗癌剤がチロシンキナーゼ阻害剤であり、（ｉｖ）ヘッジホッグ関連癌又は腫瘍が膵臓癌であり、並びに第２の抗癌剤がパクリタキセル剤であり、（ｖ）ヘッジホッグ関連癌又は腫瘍が膵臓癌であり、並びに第２の抗癌剤がＶＥＧＦ阻害剤であり、又は（ｖｉ）ヘッジホッグ関連癌又は腫瘍が肺癌であり、並びに第２の抗癌剤がスニチニブ、エルロチニブ、ゲフィチニブ、又はソラフェニブから選択されるチロシンキナーゼ阻害剤である、からそれぞれ選択される。特に明示されない限り、本明細書で使用するとき、用語「第１の」、「第２の」又は「第３の」薬剤は、特別な投与の順序を意図したものではない。これは、使用される薬剤の異なる部類を明確にするよう意図されている。
【００１４】
別の態様では、本発明は、腫瘍又は癌、例えばヘッジホッグ関連腫瘍又は癌を有する被験者における再発を低減又は予防する方法を特徴とする。方法は、ヘッジホッグ阻害剤、例えば本明細書で記載された１つ又はそれより多くのヘッジホッグ阻害剤を、被験者において腫瘍又は癌の再増殖又は再発を低減若しくは阻害するために十分な量で被験者に投与することを含む。特定の実施形態では、ヘッジホッグ阻害剤は、単独薬剤として、或いは他の抗癌剤と併用して（例えば、パクリタキセル又はパクリタキセル剤、チロシンキナーゼ阻害剤（例えば、受容体チロシンキナーゼ（ＲＴＫ）阻害剤）又はｍＴＯＲ阻害剤との併用）投与される。特定の実施形態では、ヘッジホッグ関連腫瘍又は癌は、神経内分泌癌、肉腫（軟骨肉腫、骨肉腫のような筋骨格肉腫、若しくは滑液膜肉腫又は脂肪肉腫などのような軟組織肉腫）、膵臓癌、頭頚部癌、又は肺癌（例えば小細胞又は非小細胞肺癌）のうちの１つ又はそれより多くから選択されるヘッジホッグリガンド依存性癌細胞増殖である。特定の実施形態では、被験者は、癌治療を実施中の（例えば、他の抗癌剤、外科的及び／又は放射線治療による治療）患者である。特定の実施形態では、被験者は、癌治療（例えば他の抗癌剤、外科的及び／又は放射線治療による治療）を実施した患者である。一実施形態では、低減又は防止された再発が、チロシンキナーゼ阻害剤治療後、例えば、チロシンキナーゼ阻害剤治療による治療を実施した又は実施中の被験者で発生する。いくつかの実施形態では、癌は肺癌（例えば非小細胞肺癌）又は頭頚部扁平上皮細胞癌である。
【００１５】
本発明の方法によって治療されるこれら被験者では、治療としては、限定されるものではないが、腫瘍増殖を阻害すること、腫瘍質量又は体積を減少させること、転移性病巣の寸法及び数を減少させること、新しい転移性病巣の発生を阻害すること、１つ又はそれより多くの非侵襲的腫瘍体積、代謝を減少させること、延長された生存率、延長された無進行生存率、進行までの延長された時間、及び／又は向上された生活の質が挙げられる。
【００１６】
一実施形態では、ヘッジホッグ阻害剤は、ヘッジホッグシグナル伝達経路を低減又は阻害する。例えば、ヘッジホッグ阻害剤は、ヘッジホッグ受容体、例えばＳｍｏｏｔｈｅｎｅｄの活性を低減又は阻害する。一実施形態では、ヘッジホッグ阻害剤は、ヘッジホッグ受容体、例えばＰａｔｃｈｅｄへのヘッジホッグリガンドの結合を減少又は阻害する。
【００１７】
他の実施形態では、ヘッジホッグ阻害剤は、ヘッジホッグリガンド依存性癌又は腫瘍を標的にし、例えば１つ又はそれより多くの腫瘍細胞、腫瘍微小環境、又はヘッジホッグリガンドに反応を示す他の残存病変を標的にする（例えば、図１９に示されたような、標的腫瘍細胞、標的腫瘍微小環境、及び／又は標的残存病変）。いくつかの実施形態では、ヘッジホッグ阻害剤は、ヘッジホッグリガンド依存性癌又は腫瘍の腫瘍微小環境（膵臓癌及び／又は神経内分泌腫瘍などのような癒着性腫瘍）を標的にし、それによって、（ｉ）癒着性間質及び／又は腫瘍に提供される間質支援の枯渇又は減少、（ｉｉ）腫瘍の血管新生の増加、或いは（ｉｉｉ）化学療法に対する接触可能性の腫瘍への供与、のうちの１つ又はそれより多くをもたらす。このような実施形態では、ヘッジホッグ阻害剤は、線維化を低減させ得、それによって、改善された薬剤送達及び／又は生存へと導く。
【００１８】
他の実施形態では、ヘッジホッグ阻害剤は、ヘッジホッグリガンド非依存性癌又は腫瘍、例えばヘッジホッグ受容体中に遺伝子突然変異を有する癌又は腫瘍（例えば、Ｐａｔｃｈｅｄ変異体腫瘍）を標的にする。代表的なヘッジホッグリガンド非依存性癌又は腫瘍としては、限定されるものではないが、基底細胞癌（例えば進行性基底細胞癌）及び神経髄芽細胞腫が挙げられる。
【００１９】
特定の実施形態では、治療される腫瘍又は癌、例えばヘッジホッグ関連癌又は腫瘍としては、限定されるものではないが、固形腫瘍、軟組織腫瘍（例えば、ヘム悪性腫瘍）、及び転移性病巣、例えば本明細書に開示されたいずれかの癌の転移性病巣が挙げられる。
【００２０】
一実施形態では、ヘッジホッグ阻害剤で治療される腫瘍又は癌、例えばヘッジホッグ関連癌又は腫瘍は、肉腫、例えば骨又は軟組織肉腫（滑液膜肉腫、脂肪肉腫、骨及び軟骨肉腫、軟骨肉腫、骨肉腫などの筋骨格肉腫）である。一実施形態では、ヘッジホッグ阻害剤単独又は第二の薬剤（例えば、ｍＴＯＲ阻害剤及び／又は他の抗癌剤（例えば、１以上の：ドクソルビシン、シスプラチン、イフォスファミド又はメトトレキサート（例えば、高用量メトトレキサート）））との併用が、局所性又は転移性肉腫の浸潤を低減又は阻害する。一実施形態では、ヘッジホッグ阻害剤単独又はｍＴＯＲ阻害剤との併用が、軟骨肉腫を治療又は予防する。他の実施形態では、ヘッジホッグ阻害剤単独又はｍＴＯＲ阻害剤との併用が、骨肉腫、例えば再発した又は治療抵抗性骨肉腫を治療又は予防する。
【００２１】
他の実施形態では、ヘッジホッグ阻害剤によって治療される腫瘍又は癌、例えばヘッジホッグ関連癌又は腫瘍は、神経内分泌癌又は腫瘍である。一実施形態では、治療される癌又は腫瘍は、例えば膵臓の神経内分泌癌（例えば、膵臓内分泌腫瘍）、肺、虫垂、十二指腸、回腸、直腸、小腸の神経内分泌癌、又は副腎髄質、下垂体、副甲状腺、甲状腺内分泌島、膵臓内分泌島、若しくは呼吸器又は胃腸管中の分散された内分泌細胞からの神経内分泌癌のうちの１つ又はそれより多くから選択される神経内分泌癌である。他の実施形態では、治療される癌又は腫瘍は、カルチノイド腫瘍、例えば機能的又は非機能的カルチノイド神経内分泌癌である。特定の実施形態では、ヘッジホッグ阻害剤は、神経内分泌腫瘍を治療又は予防するのに十分な量で、チロシンキナーゼ阻害剤（例えば、１つ又はそれより多くの受容体チロシン阻害剤（ＲＴＫ）、例えばスニチニブ）と併用されて投与される。一実施形態では、ヘッジホッグ阻害剤とチロシンキナーゼ阻害剤とが、同時に投与される。他の実施形態では、ヘッジホッグ阻害剤とチロシンキナーゼ阻害剤とが、順次に投与される。例えば、ヘッジホッグ阻害剤が、チロシンキナーゼ阻害剤による治療が開始する前に、又はチロシンキナーゼ阻害剤による治療が終了した後に投与され得る。ヘッジホッグ阻害剤及びチロシンキナーゼ阻害剤の投与は、互いにその一部が重複し得、並びにそのいずれかが、他による治療の終了後に、単独薬剤として継続され得る。
【００２２】
更に別の実施形態では、腫瘍又は癌、例えばヘッジホッグ関連癌又は腫瘍は、膵臓癌であり、ヘッジホッグ阻害剤とパクリタキセル又はパクリタキセル剤（例えば、ＴＡＸＯＬ（登録商標）のようなパクリタキセル製剤、アルブミン安定化ナノ粒子パクリタキセル製剤（例えばＡＢＲＡＸＡＮＥ（登録商標）又はリポソームパクリタキセル製剤、例えばＥｎｄｏ  Ｔａｇ１）の併用によって治療される。特定の実施形態では、ヘッジホッグ阻害剤は、パクリタキセル又はパクリタキセル剤と同時に投与される。他の実施形態では、ヘッジホッグ阻害剤とパクリタキセル又はパクリタキセル剤は、順次に投与される。例えば、ヘッジホッグ阻害剤が、パクリタキセル又はパクリタキセル剤による治療が開始する前に、又はそれらによる治療が終了した後に投与され得る。更に他の実施形態では、ヘッジホッグ阻害剤の投与は、パクリタキセル又はパクリタキセル剤による治療と重なり、並びにパクリタキセル又はパクリタキセル剤による治療が終了後に継続される。他の実施形態では、ヘッジホッグ阻害剤とパクリタキセルは、追加の治療用薬剤（例えば、ゲムシタビン、シスプラチン、エピルビシン、５−フルオロウラシル、ロイコボリン、オキサリプラチン、ＶＥＧＦ拮抗剤、例えば抗ＶＥＧＦ抗体（例えば、ベバシズマブ）、又はこれらの組み合わせから選択された第３の抗癌剤）と併用されて投与される。特定の実施形態では、ヘッジホッグ阻害剤、パクリタキセル剤及び第３の抗癌剤は、同時に、順次に、又は部分的に重複したスケジュールで投与される。他の実施形態では、第３の抗癌剤は、ヘッジホッグ阻害剤とパクリタキセル又はパクリタキセル剤による治療に先立って、又はそれらによる治療が終了した後に投与される。一実施形態では、ヘッジホッグ阻害剤とパクリタキセル又はパクリタキセル剤の併用は、ゲムシタビン（例えばＧＥＭＺＡＲ（登録商標））を更に含み得る。一実施形態では、被験者は、転移性膵臓癌を持つ患者である。別の実施形態では、被験者は、事前の癌治療を受けていないような（例えば、彼らの転移性疾患などの疾患に対する事前の癌治療がないような、他の抗癌剤、外科的又は放射線療法に対する事前の曝露がないこと）、膵臓癌又は転移性膵臓癌の患者である。
【００２３】
他の実施形態では、腫瘍又は癌、例えばヘッジホッグ関連癌又は腫瘍は、膵臓癌であり、ヘッジホッグ阻害剤によって治療され、並びにパクリタキセル、パクリタキセル剤、ＶＥＧＦ拮抗剤、例えば抗ＶＥＧＦ抗体（例えばベバシズマブ）、５−フルオロウラシル、又はオキサリプラチンのうちの１つ又はそれより多くを更に含み得る。
【００２４】
他の実施形態では、腫瘍又は癌、例えばヘッジホッグ関連癌又は腫瘍は、膵臓癌であって、ヘッジホッグ阻害剤とパクリタキセル又はパクリタキセル剤の併用で治療され、並びにＶＥＧＦ拮抗剤、例えば抗ＶＥＧＦ抗体（例えばベバシズマブ）、５−フルオロウラシル、又はオキサリプラチンのうちの１つ又はそれより多くを更に含み得る。
【００２５】
他の実施形態では、ヘッジホッグ阻害剤によって治療される腫瘍又は癌、例えばヘッジホッグ関連癌又は腫瘍は、頭頚部扁平上皮細胞癌である。特定の実施形態では、頭頚部扁平上皮細胞癌を治療又は予防するために、ヘッジホッグ阻害剤は、チロシンキナーゼ阻害剤と併用して（例えば、抗ＥＧＦＲ抗体（例えばセツキシマブ）のようなＥＧＦＲ−チロシンキナーゼ阻害剤である１つ又はそれより多くの受容体チロシンキナーゼ阻害剤（ＲＴＫ）と併用して）投与される。一実施形態では、ヘッジホッグ阻害剤とチロシンキナーゼ阻害剤とは、同時に投与される。他の実施形態では、ヘッジホッグ阻害剤とチロシンキナーゼ阻害剤は、順次に投与される。例えば、ヘッジホッグ阻害剤は、チロシンキナーゼ阻害剤による治療を開始する前に、又はそれによる治療が終了した後に投与され得る。一実施形態では、ヘッジホッグ阻害剤の投与が、チロシンキナーゼ阻害剤による治療と重なり、並びにチロシンキナーゼ阻害剤による治療が終了した後に継続する。
【００２６】
更に別の実施形態では、ヘッジホッグ阻害剤によって治療される腫瘍又は癌、例えばヘッジホッグ関連癌又は腫瘍は、肺癌、例えば小細胞肺癌又は非小細胞肺癌である。一実施形態では、肺癌は非小細胞肺癌である。特定の実施形態では、肺癌を治療又は予防するために、ヘッジホッグ阻害剤は、チロシンキナーゼ阻害剤と併用して（例えば、受容体チロシンキナーゼ阻害剤（ＲＴＫ）、例えばゲフィチニブ又はＶＥＧＦ阻害剤の１つ又はそれより多くと併用して）投与される。一実施形態では、肺癌は非小細胞肺癌であって、ヘッジホッグ阻害剤は、カルボプラチン及び／若しくはパクリタキセル又はパクリタキセル剤と組み合わされて、ＶＥＧＦ阻害剤（例えば、ベバシズマブのような抗ＶＥＧＦ抗体）と併用されて投与される。一実施形態では、ヘッジホッグ阻害剤とチロシンキナーゼ阻害剤又は他の薬剤阻害剤は、同時に投与される。他の実施形態では、ヘッジホッグ阻害剤とチロシンキナーゼ阻害剤又は他の薬剤は、順次に投与される。例えば、ヘッジホッグ阻害剤は、チロシンキナーゼによる治療が開始する前に、又はそれによる治療が終了した後に投与され得る。一実施形態では、ヘッジホッグ阻害剤の投与は、チロシンキナーゼ阻害剤又は他の薬剤による治療と重複し、並びにチロシンキナーゼ阻害剤又は他の薬剤による治療が終了した後に継続する。
【００２７】
特定の実施形態では、チロシンキナーゼ阻害剤は、受容体チロシンキナーゼ阻害剤である。一実施形態では、チロシンキナーゼ阻害剤は、スニチニブ、エルロチニブ、ゲフィチニブ、又はソラフェニブから選択される。特定の実施形態では、チロシンキナーゼ阻害剤は、ＥＧＦＲ−チロシンキナーゼ阻害剤である。特定の実施形態では、ＥＧＦＲ−チロシンキナーゼ阻害剤は、小分子ＥＧＦＲ−チロシンキナーゼ阻害剤である。一実施形態では、小分子ＥＧＦＲ−チロシンキナーゼ阻害剤は、エルロチニブ、ゲフィチニブ、イコチニブ、ラパチニブ、ネラチニブ、バンデタニブ、ＢＩＢＷ２９９２又はＸＬ−６４７のうちの１つ又はそれより多くから選択される。他の実施形態では、小分子ＥＧＦＲ−チロシンキナーゼ阻害剤は、ゲフィチニブ又はエルロチニブである。特定の実施形態では、小分子ＥＧＦＲ−チロシンキナーゼ阻害剤は、ゲフィチニブである。他の実施形態では、小分子ＥＧＦＲ−チロシンキナーゼ阻害剤は、エルロチニブである。特定の実施形態では、ＥＧＦＲ−チロシンキナーゼ阻害剤は、モノクローナル抗体である。特定の実施形態では、モノクローナル抗体は、セツキマブ、パニツムマブ、ザルツムマブ、ニモツズマブ、ネシツムマブ又はマツズマブから選択される。一実施形態では、モノクローナル抗体は、セツキマブである。
【００２８】
本発明の方法及び組成物は、本明細書に記載されたような他の治療形態、例えば１つ又はそれより多くの抗癌剤、及び／若しくは外科的及び／又は放射線療法と併用して、必要に応じて用いられてもよい。
【００２９】
本発明の追加的実施形態又は特徴は、以下のとおりである。一実施形態では、治療される被験者は、哺乳類、例えば霊長類で、典型的にはヒト（例えば、本明細書に記載されたような癌又は腫瘍を有する、又その危険性を有する）である。別の実施形態では、治療される被験者は、ヘッジホッグ阻害剤を必要としている（上昇したヘッジホッグレベルを示すと判定された）被験者である。特定の実施形態では、被験者は、ヘッジホッグ関連腫瘍又は癌を有する、又はその危険性を有するヒトである。一実施形態では、被験者は、ヘッジホッグリガンド非依存性腫瘍又は癌を有する、又はその危険性を有するヒトである。別の実施形態では、被験者は、ヘッジホッグリガンド依存性癌又は腫瘍を有する、又はその危険性を有するヒトである。一実施形態では、被験者は、神経内分泌癌、肉腫（例えば、軟骨肉腫及び骨肉腫などのような筋骨格肉腫）、膵臓癌、頭頚部癌、又は肺癌（例えば小細胞又は非小細胞肺癌）のうちの１つ又はそれより多くから選択されたヘッジホッグリガンド依存性癌又は腫瘍を有する、又はその危険性を有するヒトである。一実施形態では、被験者は、１型多発性内分泌腺腫を発症した患者である。他の実施形態では、被験者は、軟骨肉腫、又は再発した又は難治性骨肉腫のような骨肉腫を発症した患者である。
【００３０】
別の実施形態では、被験者は、ヘッジホッグ阻害剤による単独治療を、又は本明細書に記載されたようないずれかの抗癌剤と併用治療を必要としている、又は必要であると考えられる被験者である。被験者は、疾患を有する危険性のある、例えばその疾患に罹患した血縁者を有する、又はその疾患に関する危険性に関連する遺伝形質を有する被験者であり得る。一実施形態では、被験者は、症候性又は無症候性であり得る。特定の実施形態では、被験者は、ＥＧＦＲ遺伝子又は遺伝子生成物中の改変を宿している。特定の実施形態では、被験者は、癌治療（例えば、他の抗癌剤、外科的及び／又は放射線療法）を実施している患者である。特定の実施形態では、被験者は、癌治療（例えば、他の抗癌剤、外科的及び／又は放射線療法）を実施した患者である。一実施形態では、被験者は、チロシンキナーゼ阻害剤（例えば、スニチニブ、セツキマブ又はゲフィチニブ）によって治療されている。特定の実施形態では、被験者は、先の抗癌治療に対して部分的又は完全に耐性を発現している、例えば、チロシンキナーゼ阻害剤（例えば、スニチニブ、セツキマブ又はゲフィチニブ）による治療に対して良好に反応しない被験者である。
【００３１】
一実施形態では、被験者は、例えば転移性膵臓癌のような、転移性癌を有する患者である。別の実施形態では、被験者は、癌又は転移性癌（例えば膵臓癌又は転移性膵臓癌）を有する患者で、並びに事前の癌治療を受けていない（例えば、彼らの転移性疾患のような彼らの疾患に関して事前の癌治療がないような、他の抗癌剤、外科的又は放射線療法への事前の曝露がない）患者である。
【００３２】
一実施形態では、本発明の方法又は組成物中で使用されるヘッジホッグ阻害剤は、式Ｉの化合物、又はその医薬上許容し得る塩である。
【化１】
2013511549.tif 000002
式Ｉの化合物の医薬上許容し得る塩の例は、塩化水素塩である。
【００３３】
いくつかの実施形態では、ヘッジホッグ阻害剤は、ヘッジホッグ阻害剤、又はその医薬上許容し得る塩、及び医薬上許容し得る賦形剤を含む医薬組成物として投与される。
【００３４】
特定の実施形態では、ヘッジホッグ阻害剤が投与されるか、又は例えば医薬組成物のような組成物中に存在する。
【００３５】
本明細書に記載されたヘッジホッグ阻害剤は、全身的に（例えば、経口的、非経口的、皮下的、経静脈内、直腸内、筋肉内、腹腔内、鼻腔内、経皮的、又は吸入又は腔内設置によって）被験者に投与され得る。典型的には、ヘッジホッグ阻害剤は、経口的に投与される。
【００３６】
一実施形態では、ヘッジホッグ阻害剤はＩＰＩ−９２６である。ＩＰＩ−９２６は、単独又は本明細書に記載された第２の薬剤と併用して、約２０ｍｇ〜２００ｍｇの投与量にて、典型的には約５０〜１５０ｍｇ、７５〜１４０ｍｇ、及びより典型的には１２０〜１３０ｍｇの投与量で、毎日のスケジュールで経口的に投与され得る。
【００３７】
本発明の方法及び組成物は、必要に応じて、他の治療形態、例えば１つ又はそれより多くの追加の抗癌剤と併用して、及び／若しくは外科的及び／又は放射線療法と併用して使用される。他の実施形態では、本発明の方法及び組成物は、外科的及び／又は放射線療法と併用して使用される。ヘッジホッグ阻害剤と他の治療形態とのいかなる組み合わせも使用され得る。例えば、ヘッジホッグ阻害剤と他の治療形態は、疾患が活発な期間中、又は疾患の寛解又は活性が劣る期間中に投与され得る。ヘッジホッグ阻害剤と他の治療形態は、治療前、治療と同時に、治療後、又は疾患の寛解中に投与され得る。一実施形態では、抗癌剤は、ヘッジホッグ阻害剤と同時に又は順次に投与される。
【００３８】
他の実施形態では、ヘッジホッグ阻害剤と抗癌剤は、別個の組成物、例えば医薬組成物として投与される。他の実施形態では、ヘッジホッグ阻害剤と抗癌剤は、別個に、しかし同一の経路を介して（例えば双方ともに経口的に又は双方ともに経静脈内的に）投与される。更に他の例において、ヘッジホッグ阻害剤と抗癌剤は、同一の組成物中、例えば医薬組成物中で投与される。
【００３９】
いくつかの実施形態では、ヘッジホッグ阻害剤は、癌、例えばヘッジホッグ関連癌又は腫瘍のための第一選択療法であり、すなわち、癌を治療するよう意図された別の薬剤を事前に投与されていない被験者で使用される。
【００４０】
他の実施形態では、ヘッジホッグ阻害剤は、癌、例えばヘッジホッグ関連癌又は腫瘍のための第二選択療法であり、すなわち、癌を治療するよう意図された別の薬剤を事前に投与されている被験者で使用される。
【００４１】
他の実施形態では、ヘッジホッグ阻害剤は、癌、例えばヘッジホッグ関連癌又は腫瘍のための第三又は第四選択療法であり、すなわち、癌を治療するよう意図された２つ又は３つの他の薬剤を事前に投与されている被験者で使用される。
【００４２】
他の実施形態では、ヘッジホッグ阻害剤は、術前補助療法として、すなわち、別の治療に先立って投与される。
【００４３】
他の実施形態では、ヘッジホッグ阻害剤は、補助療法として、すなわち、一次治療に追加しての治療として投与される。
【００４４】
いくつかの実施形態では、ヘッジホッグ阻害剤は、例えばヘッジホッグ関連癌又は腫瘍のような癌の外科的切除／除去に先立って、又は続いて被験者に投与される。
【００４５】
いくつかの実施形態では、ヘッジホッグ阻害剤は、例えばヘッジホッグ関連癌又は腫瘍のような癌の放射線療法前、放射線療法中及び／又は後に、被験者に投与される。
【００４６】
いくつかの実施形態では、ヘッジホッグ阻害剤は、例えば癌治療を実施中又は癌治療を実施した（例えば、別の抗癌剤による治療、放射線療法及び／又は手術）癌患者のような被験者に投与される。他の実施形態では、ヘッジホッグ阻害剤は、癌治療と同時に投与される。同時投与の例では、ヘッジホッグ阻害剤は、癌治療が終了した後に、投与されることを継続し得る。他の実施形態では、ヘッジホッグ阻害剤は、癌治療に引き続いて投与される。例えば、ヘッジホッグ阻害剤は、癌療法による治療が開始される前に、又は癌療法による治療が終了した後に投与され得る。一実施形態では、ヘッジホッグ阻害剤の投与は、癌療法と重複し、並びに癌療法が終了した後に継続する。一実施形態では、ヘッジホッグ阻害剤は、癌療法が終了した後に投与される（すなわち、癌療法と重なる期間はない）。例えば、癌療法とヘッジホッグ阻害剤は、同時に、順次に、又は抗癌剤又はヘッジホッグ阻害剤のいずれかによる単独治療に続く同時投与の併用として投与され得る。
【００４７】
一実施形態では、方法は、第１の治療薬剤としてヘッジホッグ阻害剤を投与すること、続いて癌療法の適用（例えば、第２の治療薬剤（例えば、他の抗癌剤）による治療、放射線療法及び／又は手術）が行われることを含む。別の実施形態では、方法は、先ず初めに癌療法を適用すること（第１の治療薬剤（例えば別の抗癌剤）による治療、放射線療法及び／又は手術）、続いて第２の治療薬剤としてのヘッジホッグ阻害剤の投与を行うことを含む。
【００４８】
更に他の実施形態では、方法は、第２、第３又はそれより多くの追加の治療薬剤（例えば、本明細書に記載された抗癌剤）と併用してヘッジホッグ阻害剤を投与することを含む。例えば、ヘッジホッグ阻害剤と別の抗癌剤（例えば、チロシンキナーゼ阻害剤、パクリタキセル又はパクリタキセル剤、ｍＴＯＲ阻害剤から選択された第２の抗癌剤）が、更に別の治療薬剤（例えば、ゲムシタビン、シスプラチン、エピルビシン、５−フルオロウラシル、ＶＥＧＦ拮抗剤（例えば、抗ＶＥＧＦ抗体（ベバシツマブ）、ロイコボリン、オキサリプラチン、又はそれらの組み合わせ）から選択される第３の抗癌剤）と併用されて投与される。一実施形態では、ヘッジホッグ阻害剤、第２及び第３の抗癌剤が、同時に投与される。他の実施形態では、第３の抗癌剤が、ヘッジホッグ阻害剤と第２の抗癌剤とによる治療が開始される前に、又はそれらによる治療が終了した後に投与される。ヘッジホッグ阻害剤と第２、第３又はそれより多くの抗癌剤との投与のいかなる順序及び組み合わせも、本発明の範囲内である。
【００４９】
他の実施形態では、１つ又はそれより多くのヘッジホッグ阻害剤（例えば、本明細書に記載されたような１つ又はそれより多くのヘッジホッグ阻害剤）が、併用されて投与される。一実施形態では、複数個のヘッジホッグ阻害剤は、同時に投与される。別の実施形態では、複数個のヘッジホッグ阻害剤が順次に投与される。例えば、ＩＰＩ−９２６とＧＤＣ−０４４９などのような組み合わせが、同時又は順次に投与される。一実施形態では、ＧＤＣ−００４９が先ず初めに投与されて、続いて重複する期間を伴い又は伴わず、ＩＰＩ−９２６が投与される。別の実施形態では、ＩＰＩ−９２６が先ず初めに投与されて、続いて重複する期間を伴い又は伴わず、ＧＤＣ−００４９が投与される。
【００５０】
一実施形態では、ヘッジホッグ阻害剤と併用して使用される抗癌剤は、細胞障害剤又は細胞増殖抑制剤である。代表的な細胞障害剤としては、微小管阻害剤、トポイソメラーゼ阻害剤（例えば、イリノテカン）、又はタキサン（例えば、ドセタキセル）、代謝拮抗剤、有糸分裂阻害剤、アルキル化剤、挿入剤、シグナル伝達経路を妨害することが可能な薬剤、アポトーシス及び放射を推進する薬剤などが挙げられる。更に他の実施形態では、方法は、免疫調節剤、例えばＩＬ−１、２、４、６、又は１２、又はインターフェロンα又はγ、ＧＭ−ＣＳＦのような免疫細胞成長因子と併用して使用され得る。一実施形態では、抗癌剤は、例えばイリノテカンのようなトポイソメラーゼ阻害剤である。
【００５１】
他の実施形態では、ヘッジホッグ阻害剤と併用して使用される抗癌剤は、パクリタキセル又はパクリタキセル剤、チロシンキナーゼ阻害剤（例えば、ＥＧＦＲ阻害剤、ゲフィチニブ、スニチニブなどのような受容体チロシンキナーゼ（ＲＴＫ）阻害剤）又はｍＴＯＲ阻害剤である。
【００５２】
特定の実施形態では、抗癌剤は、チロシンキナーゼ阻害剤（例えば受容体チロシンキナーゼ（ＲＴＫ）阻害剤）である。したがって、特定の実施形態では、本発明の方法は、治療を必要としている、又は癌を有している危険性のある被験者に、チロシンキナーゼ阻害剤（例えば、受容体チロシンキナーゼ（ＲＴＫ）阻害剤）と併用された、本明細書に記載されたヘッジホッグ阻害剤を、癌又は腫瘍、例えば本明細書に記載されたようなヘッジホッグリガンド依存性癌又は腫瘍を低減又は治療するために有効な量で投与することを含む。一実施形態では、チロシンキナーゼ阻害剤としては、限定されるものではないが、上皮細胞成長因子（ＥＧＦ）経路阻害剤（例えば、上皮細胞成長因子受容体（ＥＧＦＲ）阻害剤）、血管内皮成長因子（ＶＥＧＦ）経路阻害剤（例えば、血管内皮成長因子受容体（ＶＥＧＦＲ）阻害剤（例えば、ＶＥＧＦＲ−１阻害剤、ＶＥＧＦＲ−２阻害剤、ＶＥＧＦＲ−３阻害剤）、血小板由来成長因子（ＰＤＧＦ）経路阻害剤（例えば、血小板由来成長因子受容体（ＰＤＧＦＲ）阻害剤（例えば、ＰＤＧＦＲ−β阻害剤））、ＲＡＦ−１阻害剤、ＫＩＴ阻害剤及びＲＥＴ阻害剤などが挙げられる。いくつかの実施形態では、ヘッジホッグ阻害剤と併用して使用される抗癌剤は、アキチニブ（ＡＧ０１３７３６）、ボスチニブ（ＳＫＩ−６０６）、セディラニブ（ＲＥＣＥＮＴＩＮ（商標）、ＡＺＤ２１７１）、ダサチニブ（ＳＰＲＹＣＥＬ（登録商標）、ＢＭＳ−３５４８２５）、エルロチニブ（ＴＡＲＣＥＶＡ（登録商標））、ゲフィチニブ（ＩＲＥＳＳＡ（登録商標））、イマチニブ（Ｇｌｅｅｖｅｃ（登録商標）、ＣＧＰ５７１４８Ｂ、ＳＴＩ−５７１）、ラパチニブ（ＴＹＫＥＲＢ（登録商標）、ＴＹＶＥＲＢ（登録商標））、レスタウルチニブ（ＣＥＰ−７０１）、ネラチニブ（ＨＫＩ−２７２）、ニロチニブ（ＴＡＳＩＧＮＡ（登録商標））、セマキサニブ（セマキニブ、ＳＵ５４１６）、スニチニブ（ＳＵＴＥＮＴ（登録商標）、ＳＵ１１２４８）、トセラニブ（ＰＡＬＬＡＤＩＡ（登録商標））、バンデタニブ（ＺＡＣＴＩＭＡ（登録商標）、ＺＤ６４７４）、バタラニブ（ＰＴＫ７８７、ＰＴＫ／ＺＫ）、トラスツズマブ（ＨＥＲＣＥＰＴＩＮ（登録商標））、ベバシズマブ（ＡＶＡＳＴＩＮ（登録商標））、リツキシマブ（ＲＩＴＵＸＡＮ（登録商標））、セツキシマブ（ＥＲＢＩＴＵＸ（登録商標））、パニツムマブ（ＶＥＣＴＩＢＩＸ（登録商標））、ラニビズマブ（Ｌｕｃｅｎｔｉｓ（登録商標））、ニロチニブ（ＴＡＳＩＧＮＡ（登録商標））、ソラフェニブ（ＮＥＸＡＶＡＲ（登録商標））、アレムツズマブ（ＣＡＭＰＡＴＨ（登録商標））、ゲムツズマブオゾガミシン（ＭＹＬＯＴＡＲＧ（登録商標））、ＥＮＭＤ−２０７６、ＰＣＩ−３２７６５、ＡＣ２２０、乳酸ドビチニブ（ＴＫＩ２５８、ＣＨＩＲ−２５８）、ＢＩＢＷ  ２９９２（ＴＯＶＯＫ（商標））、ＳＧＸ５２３、ＰＦ−０４２１７９０３、ＰＦ−０２３４１０６６、ＰＦ−２９９８０４、ＢＭＳ−７７７６０７、ＡＢＴ−８６９、ＭＰ４７０、ＢＩＢＦ  １１２０（ＶＡＲＧＡＴＥＦ（登録商標））、ＡＰ２４５３４、ＪＮＪ−２６４８３３２７、ＭＧＣＤ２６５、ＤＣＣ−２０３６、ＢＭＳ−６９０１５４、ＣＥＰ−１１９８１、チボザニブ（ＡＶ−９５１）、ＯＳＩ−９３０、ＭＭ−１２１、ＸＬ−１８４、ＸＬ−６４７、及び／又はＸＬ２２８からなる群から選択される。選択されたチロシンキナーゼ阻害剤は、スニチニブ、エルロチニブ、ゲフィチニブ、又はソラフェニブから選択される。特定の実施形態では、チロシンキナーゼ阻害剤は、セツキシマブ、ベバシズマブ、パニツムマブ、ザルツムマブ、ニモツズマブ、ネシツムマブ、又はマツズマブから選択される。
【００５３】
一実施形態では、ヘッジホッグ阻害剤は、ｍＴＯＲ阻害剤、例えば１つ又はそれより多くのｍＴＯＲ阻害剤と併用して投与され、これらｍＴＯＲ阻害剤は、ラパマイシン、テムシロリムス（ＴＯＲＩＳＥＬ（登録商標））、エベロリムス（ＲＡＤ００１、ＡＦＩＮＩＴＯＲ（登録商標））、ラダフォロリムス、ＡＰ２３５７３、ＡＺＤ８０５５、ＢＥＺ２３５、ＢＧＴ２２６、ＸＬ７６５、ＰＦ−４６９１５０２、ＧＤＣ０９８０、ＳＦ１１２６、ＯＳＩ−０２７、ＧＳＫ１０５９６１５、ＫＵ−００６３７９４、ＷＹＥ−３５４、ＩＮＫ１２８、テムシロリムス、（ＣＣＩ−７７９）、Ｐａｌｏｍｉｄ  ５２９（Ｐ５２９）、ＰＦ−０４６９１５０２、又はＰＫＩ−５８７のうちの１つ又はそれより多くから選択される。一実施形態では、ｍＴＯＲ阻害剤は、ＴＯＲＣ１及びＴＯＲＣ２を阻害する。ＴＯＲＣ１及びＴＯＲＣ２二重阻害剤の例としては、例えばＯＳＩ−０２７、ＸＬ７６５、Ｐａｌｏｍｉｄ  ５２９、及びＩＮＫ  １２８が挙げられる。ヘッジホッグ阻害剤は、ｍＴＯＲ阻害剤と同一又はそれとは異なる経路を介して投与され得る。一実施形態では、ｍＴＯＲ阻害剤は、全身的に、例えば経口的に、皮下的に、又は経静脈内的に投与される。
【００５４】
他の実施形態では、ヘッジホッグ阻害剤は、インシュリン様成長因子受容体（ＩＧＦ−１Ｒ）の阻害剤と共に投与される。代表的ＩＧＦ−１Ｒ阻害剤としては、限定されるものではないが、小分子ＩＧＲ−１Ｒ拮抗剤（例えば、ＧＳＫ１９０４５２９Ａ）、抗体拮抗剤、ＩＧＦ−１Ｒペプチド拮抗剤、又はアンチセンス又は他の核酸拮抗剤が挙げられる。
【００５５】
更に別の実施形態では、ヘッジホッグ阻害剤は、ＡＬＫキナーゼ阻害剤（複数可）と併用して投与される。例示的なＡＬＫ阻害剤としては、ＴＡＥ−６８４（本明細書では「ＮＶＰ−ＴＡＥ６９４」としても称される）、ＰＦ０２３４１０６６（本明細書では「クリゾチニブ」又は「１０６６」としても称される）、及びＡＰ２６１１３が挙げられる。ＡＬＫキナーゼ阻害剤の追加的例は、Ｇａｒｃｉａ−Ｅｃｈｅｖｅｒｒｉａ  Ｃらによる、ＷＯ第２００５０１６８９４号の実施例３−３９に記載されている。
【００５６】
いくつかの実施形態では、ヘッジホッグ阻害剤は、フォルフィリノクスと併用して投与される。フォリフィリノクスは、オキサリプラチン８５ｍｇ／ｍ２及びイリノテカン１８０ｍｇ／ｍ２、これに加えてロイコボリン４００ｍｇ／ｍ２を含み、１日目にボーラスのフルオロウラシル（５−ＦＵ）４００ｍｇ／ｍ２、次いで４６時間連続輸注として５−ＦＵ  ２，４００ｍｇ／ｍ２が続く。
【００５７】
いくつかの実施形態では、ヘッジホッグ阻害剤は、ＰＩ３Ｋ阻害剤と併用して投与される。一実施形態では、ＰＩ３Ｋ阻害剤は、ＰＩ３Ｋのδ及びγイソ型の阻害剤である。別の実施形態では、ＰＩ３Ｋ阻害剤は、Ｐ１３ＫとｍＴＯＲの二重阻害剤である。ヘッジホッグ阻害剤と併用して使用され得る例示的ＰＩ３Ｋ阻害剤としては、限定されるものではないが、ＧＳＫ２１２６４５８、ＧＤＣ−０９８０、ＧＤＣ−０９４１、Ｓａｎｏｆｉ  ＸＬ１４７、ＸＬ７５６、ＸＬ１４７、ＰＦ−４６９１５０３２、ＢＫＭ１２０、ＣＡＬ−１０１、ＣＡＬ２６３、ＳＦ１１２６、ＰＸ−８８６、及び二重ＰＩ３Ｋ阻害剤（例えばＮｏｖａｒｔｉｓ  ＢＥＺ２３５）が挙げられる。一実施形態では、ＰＩ３Ｋ阻害剤は、イソキノリノンである。一実施形態では、ＰＩ３Ｋ阻害剤は、ＩＮＫ１１９７又はそれらの誘導体である。他の実施形態では、ＰＩ３Ｋ阻害剤は、ＩＮＫ１１１７又はそれらの誘導体である。
【００５８】
いくつかの実施形態では、ヘッジホッグ阻害剤は、ＢＲＡＦ阻害剤、例えばＧＳＫ２１１８４３６、ＲＧ７２０４、ＰＬＸ４０３２、ＧＤＣ−０８７９、ＰＬＸ４７２０、及びトシル酸ソラフェニブ（Ｂａｙ４３−９００６）と併用して投与される。
【００５９】
いくつかの実施形態では、ヘッジホッグ阻害剤は、ＭＥＫ阻害剤、例えば、ＡＲＲＹ−１４２８８６、ＧＳＫ１１２０２１２、ＲＤＥＡ４３６、ＲＤＥＡ１１９／ＢＡＹ８６９７６６、ＡＳ７０３０２６、ＡＺＤ６２４４（セルメチニブ）、ＢＩＸ０２１８８、ＢＩＸ０２１８９、ＣＩ−１０４０（ＰＤ１８４３５２）、ＰＤ０３２５９０１、ＰＤ９８０５９、及びＵ０１２６などと併用して投与される。
【００６０】
いくつかの実施形態では、ヘッジホッグ阻害剤は、ＪＡＫ２阻害剤、例えばＣＥＰ−７０１、ＩＮＣＢ１８４２４、ＣＰ−６９０５５０（タソシチニブ）などと併用して投与される。
【００６１】
他の実施形態では、ヘッジホッグ阻害剤は、血管破壊剤（例えばＤＭＸＡＡ、バジメザン）と併用して投与される。
【００６２】
上記併用は、本明細書に記載されたいかなる癌及び転移性増殖の治療にも使用され得る。本明細書に記載された併用は、いかなる順序にても投与され得る。別に明記しない限り、本明細書で使用するとき、「第１」、「第２」又は「第３」の薬剤は、投与の特別な順序を与えるよう意図したものではない。これは、使用される薬剤の異なる部類を明確にすることを意図している。
【００６３】
更に他の実施形態では、単独又は抗癌剤と併用されたヘッジホッグ阻害剤は、治療上有効な量で、例えば所定の投与量スケジュールにて投与される。
【００６４】
ヘッジホッグ阻害剤がチロシンキナーゼ阻害剤と併用して使用されるような特定の実施形態では、方法は、ヘッジホッグ阻害剤及び／又はチロシンキナーゼ阻害剤を、準細胞毒性性レベルにて投与することを含む。いくつかの実施形態では、チロシンキナーゼ阻害剤は、一日当たり、少なくとも約１０ｍｇ、約２５ｍｇ、約３７．５ｍｇ、約５０ｍｇ、約７０ｍｇ、約８７．５ｍｇ、約１００ｍｇ、約１２５ｍｇ、又は約１５０ｍｇの投与量（例えば、経口投与量）にて、被験者に投与される。いくつかの実施形態では、チロシンキナーゼ阻害剤は、一日当たり、約３７．５ｍｇ、約５０ｍｇ、又は約８７．５ｍｇの投与量（例えば、経口投与量）にて、被験者に投与される。いくつかの実施形態では、チロシンキナーゼ阻害剤は、一日当たり約５０ｍｇの投与量（例えば、経口投与量）にて、被験者に投与される。いくつかの実施形態では、チロシンキナーゼ阻害剤は、一日当たり、１回、２回、３回、又はそれより多い回数で、被験者に投与される。いくつかの実施形態では、チロシンキナーゼ阻害剤は、一日当たり、１回、被験者に投与される。いくつかの実施形態では、チロシンキナーゼ阻害剤は、約１週間、２週間、３週間、４週間又はそれより多くの週の期間で、毎日被験者に投与される。いくつかの実施形態では、チロシンキナーゼ阻害剤は、約４週間の期間で、毎日被験者に投与される。
【００６５】
例えば、スニチニブが、ヘッジホッグ阻害剤と併用して投与されるチロシンキナーゼ阻害剤であるような実施形態では、一日当たり約５０ｍｇ、一日当たり５０ｍｇ未満、例えば一日当たり３７．５ｍｇ、又は一日当たり５０ｍｇ以上、例えば一日当たり６２．５ｍｇの投与量にて投与される。一実施形態では、チロシンキナーゼ阻害剤（例えばスニチニブ）は、１週間、２週間、３週間、４週間又は５週間にわたって毎日投与され、それに続く１週間、２週間又は３週間の期間には投与されない。特定の実施形態では、スニチニブは、経口的に投与される。
【００６６】
本発明の方法は、例えばＥＧＦＲ遺伝子又は遺伝子産物中の変化の存在又は不在を検出するために、腫瘍、癌細胞又は被験者からのサンプルを判定する工程を更に含む。方法は、腫瘍、癌細胞、又は被験者（例えば、癌又は腫瘍を有する、若しくは癌又は腫瘍を生じる危険性を有する被験者）を、ヘッジホッグ阻害剤と併用されたＥＧＦＲ阻害剤を含む治療に反応する可能性を有する（例えば、増加した又は減少した可能性）ものとして、同定又は選択するために使用され得る。判定評価され得る及び／又は治療され得るＥＧＦＲ遺伝子又は遺伝子産物中の変化の例示的変化としては、限定されるものではないが、ＥＧＦＲエクソン欠失（例えばＥＧＦＲエクソン１９欠失、Ｅ７４６−Ａ７５０欠失）、及び／又はエクソン突然変異（例えば、Ｌ８５８Ｒ／Ｔ７９０Ｍ  ＥＧＦＲ突然変異）が挙げられる。他の例示的な変化としては、限定されるものではないが、ＥＧＦＲ＿Ｄ７７０＿Ｎ７７１＞ＡＧＧ、ＥＧＦＲ＿Ｄ７７０＿Ｎ７７１ｉｎｓＧ、ＥＧＦＲ＿Ｄ７７０＿Ｎ７７１ｉｎｓＧ、ＥＧＦＲ＿Ｄ７７０＿Ｎ７７１ｉｎｓＮ、ＥＧＦＲ＿Ｅ７０９Ａ、ＥＧＦＲ＿Ｅ７０９Ｇ、ＥＧＦＲ＿７０９Ｈ、ＥＧＦＲ＿Ｅ７０９Ｋ、ＥＧＦＲ＿Ｅ７０９Ｖ、ＥＧＦＲ＿Ｅ７４６＿Ａ７５０ｄｅｌ、ＥＧＦＲ＿Ｅ７４６＿Ａ７５０ｄｅｌ，Ｔ７５１Ａ、ＥＧＦＲ＿Ｅ７４６＿Ａ７５０ｄｅｌ，Ｖｉｎｓ、ＥＧＦＲ＿Ｅ７４６＿Ｔ７５１ｄｅｌ，Ｉｉｎｓ、ＥＧＦＲ＿Ｅ７４６＿Ｔ７５１ｄｅｌ，Ｓ７５２Ａ、ＥＧＦＲ＿Ｅ７４６＿Ｔ７５１ｄｅｌ，Ｓ７５２Ｄ、ＥＧＦＲ＿Ｅ７４６＿Ｔ７５１ｄｅｌ，Ｖｉｎｓ、ＥＧＦＲ＿Ｇ７１９Ａ、ＥＧＦＲ＿Ｇ７１９Ｃ、ＥＧＦＲ＿Ｇ７１９Ｓ、ＥＧＦＲ＿Ｈ７７３＿Ｖ７７４ｉｎｓＨ、ＥＧＦＲ＿Ｈ７７３＿Ｖ７７４ｉｎｓＮＰＨ、  ＥＧＦＲ＿Ｈ７７３＿Ｖ７７４ｉｎｓＰＨ、ＥＧＦＲ＿Ｈ７７３＞ＮＰＹ、ＥＧＦＲ＿Ｌ７４７＿Ｅ７４９ｄｅｌ、ＥＧＦＲ＿Ｌ７４７＿Ｅ７４９ｄｅｌ，Ａ７５０Ｐ、ＥＧＦＲ＿Ｌ７４７＿Ｓ７５２ｄｅｌ、ＥＧＦＲ＿Ｌ７４７＿Ｓ７５２ｄｅｌ，Ｐ７５３Ｓ、ＥＧＦＲ＿Ｌ７４７＿Ｓ７５２ｄｅｌ，Ｑｉｎｓ、ＥＧＦＲ＿Ｌ７４７＿Ｔ７５０ｄｅｌ，Ｐｉｎｓ、ＥＧＦＲ＿Ｌ７４７＿Ｔ７５１ｄｅｌ、ＥＧＦＲ＿Ｌ８５８Ｒ、ＥＧＦＲ＿Ｌ８６１Ｑ、ＥＧＦＲ＿Ｍ７６６＿Ａ７６７ｉｎｓＡＩ、ＥＧＦＲ＿Ｐ７７２＿Ｈ７７３ｉｎｓＶ、ＥＧＦＲＳ７５２＿１７５９ｄｅｌ、ＥＧＦＲ＿Ｓ７６８Ｉ、ＥＧＦＲ＿Ｔ７９０Ｍ、ＥＧＦＲ＿Ｖ７６９＿Ｄ７７０ｉｎｓＡＳＶ、ＥＧＦＲ＿Ｖ７６９＿Ｄ７７０ｉｎｓＡＳＶ，及びＥＧＦＲ＿Ｖ７７４＿Ｃ７７５ｉｎｓＨＶが挙げられる。
【００６７】
本発明の方法は、次の項目のうちの１つ又はそれより多くの例えば変化（例えば、増加または減少）に関して、被験者を監視する工程を更に含み得、これらは、腫瘍の寸法；ヘッジホッグレベル又はシグナル伝達；間質活性化；１つ又はそれより多くの癌マーカーのレベル；骨スキャンなどでの新しい病巣の出現率；１つ又はそれより多くの非侵襲的腫瘍体積、代謝、低酸素症発生及び／又は腫瘍骨合成；新しい疾患関連症状の出現；軟組織質量の寸法、例えば減少されたか又は安定化されたか；疾患随伴疼痛、骨痛の量などの生活の質；軟骨の合成、糸葉体分葉化、及び／又は有糸分裂細胞の存在又は不在などのような組織学的解析；腫瘍攻撃力、原発腫瘍の血管新生、転移の拡がり；多モード画像撮影技術（例えば、１８Ｆ−ＦＤＧ  ＰＥＴ、１８ＦＮＡ、ＭＲＩ  １８ＦＭＩＳＯシンチグラィーなど）を使用して可視化可能である腫瘍寸法及び位置；臨床転帰に関する任意の他のパラメータなどである。被験者は、以下に示した１つ又はそれより多くの期間で監視され得、期間は、治療開始前、治療中、又は１つ又はそれより多くの治療要素が投与された後である。監視は、ヘッジホッグ阻害剤単独又は同一の抗癌剤と併用しての同一のヘッジホッグ阻害剤による更なる治療の必要性、又は追加の薬剤による追加的治療の必要性を評価するために使用され得る。一般的に、上記の１つ又はそれより多くのパラメータの減少は、改善された被験者の病状を示唆するが、血清ヘモグロビンレベルに関しては、その増加が被験者の改善された病状に関係し得る。
【００６８】
本発明の方法は、例えば被験者の遺伝子型を解析することなどの被験者からの核酸又は蛋白質を分析する工程を更に含み得る。一実施形態では、ヘッジホッグ蛋白質、又はヘッジホッグリガンド及び／又はヘッジホッグシグナル伝達の上流又は下流成分（複数可）、例えば受容体、ヘッジホッグ活性化物質又は阻害物質をコード化する核酸が分析される。上昇したヘッジホッグリガンドは、血液、尿、循環する腫瘍細胞、腫瘍生検又は骨髄生検中で検出することができる。上昇したヘッジホッグリガンドはまた、ヘッジホッグリガンドに対する抗体の標識を付した形態の全身投与及びそれに続く画像撮影によって、検出され得る。これら分析は、例えば、代替療法の適合性を評価するため、又は代替療法のどちらかを選択するために使用され得、例えばこれらは特別な投与量、送達方式、送達の時間、第２の薬剤と併用しての投与などのような補助療法の介入などであり、或いは一般的には、被験者の推定薬物反応が表現型であるか遺伝子型であるかを決定するために、分析が使用され得る。核酸又は蛋白質は、治療の任意の段階にて分析され得るが、ヘッジホッグ阻害剤及び／又は抗癌剤の投与に先立って分析されるのが好ましく、これによって、被験者の予防的又は治療的処置のために、ヘッジホッグ阻害剤の適切な投与量（複数可）及び治療計画（複数可）（例えば、１回の治療当たりの量又は治療の頻度）を決定する。
【００６９】
特定の実施形態では、本発明の方法は、ヘッジホッグ阻害剤を患者に投与する前又は後に、被験者の上昇したヘッジホッグリガンドを検出する工程を更に含む。上昇したヘッジホッグリガンドは、血液、尿、循環する腫瘍細胞、腫瘍生検又は骨髄生検中で検出することができる。上昇したヘッジホッグリガンドはまた、ヘッジホッグリガンドに対する抗体の標識を付した形態の全身投与及びそれに続く画像撮影によって、検出され得る。上昇したヘッジホッグリガンドを検出する工程は、他の癌療法の投与前に患者のヘッジホッグリガンドを測定すること、他の癌療法の投与後に患者のヘッジホッグリガンドを測定すること、並びに他の化学療法の投与後のヘッジホッグリガンドの量が、他の化学療法投与前のヘッジホッグリガンドの量よりも大きいかどうかを決定することの工程を含み得る。他の癌治療は、例えば、化学療法又は放射線療法などであり得る。
【００７０】
別の態様では、方法は、腫瘍（例えば、神経内分泌癌又は肉腫）内のヘッジホッグリガンド発現を上昇させる１つ又はそれより多くの抗癌剤を同定すること、並びに腫瘍内でヘッジホッグリガンド発現を上昇させる１つ又はそれより多くの抗癌剤の治療上有効な量と、ヘッジホッグ阻害剤の治療上有効な量を投与することを更に含む。ヘッジホッグ発現を上昇させる抗癌剤を同定する工程は、腫瘍からの細胞をインヴィトロで１つ又はそれより多くの抗癌剤に曝す工程と、細胞中のヘッジホッグリガンドを測定する工程を含み得る。
【００７１】
別の態様では、本発明は、１つ又はそれより多くのヘッジホッグ阻害剤、例えば本明細書に記載されたようなヘッジホッグ阻害剤と、１つ又はそれより多くの抗癌剤（例えば本明細書に開示されたような抗癌剤）を含有する組成物、例えば医薬組成物を特徴とする。組成物は、薬剤的に許容し得る担体又は賦形剤を更に含み得る。
【００７２】
別の態様では、本発明は、本明細書に記載されたようなヘッジホッグ関連癌又は腫瘍などのような癌又は腫瘍の治療に使用されるための組成物、或いは単独で又は本明細書に記載されたような抗癌剤（例えば、パクリタキセル又はパクリタキセル剤、チロシンキナーゼ阻害剤、ｍＴＯＲ阻害剤、及び／又はＩＧＦ−ＩＲ拮抗剤）と併用してのヘッジホッグ阻害剤の使用を特徴とする。
【００７３】
別の態様では、本発明は、本明細書に記載されたようなヘッジホッグ関連癌又は腫瘍などの癌の治療に使用するための、単独で又は本明細書に記載されたような抗癌剤（例えば、パクリタキセル又はパクリタキセル剤、チロシンキナーゼ阻害剤、ｍＴＯＲ阻害剤、及び／又はＩＧＦ−ＩＲ拮抗剤）と併用してのヘッジホッグ阻害剤と、使用説明書を含有する治療用キットを特徴とする。
【００７４】
本明細書に記載された全ての公開論文、特許出願、特許、及び他の参照文献は、参照によりその全体が組み込まれている。
【００７５】
本発明の他の特徴、目的、及び利点は、記述及び図面、並びに特許請求の範囲から明らかになるであろう。
用語の意味
【００７６】
特定の官能基及び化学用語の意味が、以下に詳細に記載されている。本発明の目的のために、化学元素は、元素の周期表、ＣＡＳ版、Ｈａｎｄｂｏｏｋ  ｏｆ  Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ  ａｎｄ  Ｐｈｙｓｉｃｓ、第７５版、内表紙に従って同定され、並びに特定の官能基は、それに記載されているように一般的に定義される。更には、有機化学の一般的原理、並びに特定の官能性部分及び反応性は、例えば「Ｏｒｇａｎｉｃ  Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ」，Ｔｈｏｍａｓ  Ｓｏｒｒｅｌｌ，Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ  Ｓｃｉｅｎｃｅ  Ｂｏｏｋｓ，Ｓａｕｓａｌｉｔｏ，１９９９年、ＳｍｉｔｈとＭａｒｃｈ  Ｍｓｒｃｈの「Ａｄｖａｎｃｅｄ  Ｏｒｇａｎｉｃ  Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ」，第５版、Ｊｏｈｎ  Ｗｉｌｅｙ＆Ｓｏｎｓ，Ｉｎｃ．，Ｎｅｗ  Ｙｏｒｋ，２０１１年、Ｌａｒｏｃｋ，「Ｃｏｍｐｒｅｈｅｎｓｉｖｅ  Ｏｒｇａｎｉｃ  Ｔｒａｎｓｆｏｒｍａｔｉｏｎｓ」，ＶＣＨ  Ｐｉｂｌｉｓｈｅｒｓ，Ｉｎｃ．，Ｎｅｗ  Ｙｏｒｋ，１９８９年、及びＣａｒｒｕｔｈｅｒｓ，「Ｓｏｍｅ  Ｍｏｄｅｒｎ  Ｍｅｔｈｏｄｓ  ｏｆ  Ｏｒｇａｎｉｃ  Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ」，第３版、Ｃａｍｂｒｉｄｇｅ  Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ  Ｐｒｅｓｓ，Ｃａｍｂｒｉｄｇｅ，１９８７年に記載されている。
【００７７】
本発明の特定の化合物は、１つ又はそれより多くの非対称中心を含み得るので、種々の異性体型、例えば立体異性体（鏡像異性体、ジアステレオマー、シス−トランス異性体、Ｅ／Ｚ異性体など）が存在し得る。したがって、本発明の化合物及び医薬組成物は、個々の鏡像異性体、ジアステレオマー又は他の幾何異性体の形であり得、或いは立体異性体の混合物であり得る。鏡像異性体、ジアステレオマー及び他の幾何異性体は、キラル体高速液体クロマトグラフィー（ＨＰＬＣ）及びキラル体塩又は非対称合成による調製物の形成及び結晶化を含む当業者に既知の任意の方法によって、混合物（ラセミ体混合物を含む）から単離され得、例えば、Ｊａｃｑｕｅｓら著、「Ｅｎａｎｔｉｏｍｅｒｓ，Ｒａｃｅｍａｔｅ  ａｎｄ  Ｒｅｓｏｌｕｔｉｏｎｓ」（Ｗｉｌｅｙ  Ｉｎｔｅｒｓｃｉｅｎｃｅ，Ｎｅｗ  Ｙｏｒｋ，１９８１年）、Ｗｉｌｅｎ，Ｓ．Ｈ．ら著、「Ｔｅｔｒａｈｅｄｒｏｎ  ３３：２７２５（１９７７年）、Ｅｌｉｅｌ，Ｅ．Ｌ．「Ｓｔｅｒｅｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ  ｏｆ  Ｃａｒｂｏｎ  Ｃｏｍｐｏｕｎｄｓ」（ＭｃＧｒａｗ−Ｈｉｌｌ，ＮＹ，１９６２年）、Ｗｉｌｅｎ，Ｓ．Ｈ．「Ｔａｂｌｅｓ  ｏｆ  Ｒｅｓｏｌｖｉｎｇ  Ａｇｅｎｔｓ  ａｎｄ  Ｏｐｔｉｃａｌ  Ｒｅｓｏｌｕｔｉｏｎｓ」２６８頁（Ｅ．Ｌ．Ｅｌｉｅｌ版、Ｕｎｉｖ．ｏｆ  Ｎｏｔｒｅ  Ｄａｍｅ  Ｐｒｅｓｓ，Ｎｏｔｒｅ  Ｄａｍｅ，ＩＮ  １９９２年）を参照されたい。
【００７８】
別に特記されない限り、炭素原子は、必要に応じて、１つ又はそれより多くの置換基によって置換されている。置換基の数は、一般的には炭素原子上の利用可能な原子価の数によって限定され、並びに非置換基上で利用可能であるような１つ又はそれより多くの水素原子の交換によって置換され得る。適切な置換基は当業者に既知であり、限定されるものではないが、アルキル、アルケニル、アルキニル、アルコキシ、アリール、アリールオキシ、アリールチオ、アラルキル、ヘテロアリール、ヘテロアラルキル、シクロアルキル、ヘテロシクリル、ハロ、アジド、ヒドロキシル、チオ、アルクチオオキシ、アミノ、ニトロ、ニトリル、イミノ、アミド、カルボン酸、アルデヒド、カルボニル、エステル、シリル、アルキルチオ、ハロアルキル（例えば、−ＣＦ３のようなペルフルオロアルキル）、＝Ｏ、＝Ｓなどが挙げられる。
【００７９】
数値の範囲が表示される場合、それは、それぞれの数値及び範囲内の部分範囲を包含するよう意図されている。例えば、１〜６個の炭素原子を含有するアルキル基（Ｃ１−６アルキル）は、Ｃ１、Ｃ２、Ｃ３、Ｃ４、Ｃ５、Ｃ６、Ｃ１−６、Ｃ２−６、Ｃ３−６、Ｃ４−６、Ｃ５−６、Ｃ１−５、Ｃ２−５、Ｃ３−５、Ｃ４−５、Ｃ１−４、Ｃ２−４、Ｃ３−４、Ｃ１−３、Ｃ２−３、及びＣ１−２アルキルを包含するよう意図されている。
【００８０】
本明細書で使用するとき、用語「アルキル」とは、１〜３０個の炭素原子を含有する飽和した、直鎖又は分岐鎖炭化水素残基を指す。特定の実施形態では、アルキル基は、１〜２０個の炭素原子を含有する。別に特記されない限り、アルキル基は、必要に応じて、１つ又はそれより多くの置換基で置換されている。特定の実施形態では、アルキル基は１〜１０個の炭素原子を含有する。特定の実施形態では、アルキル基は、１〜６個の炭素原子を含有する。特定の実施形態では、アルキル基は、１〜５個の炭素原子を含有する。特定の実施形態では、アルキル基は、１〜４個の炭素原子を含有する。特定の実施形態では、アルキル基は、１〜３個の炭素原子を含有する。特定の実施形態では、アルキル基は、１〜２個の炭素原子を含有する。特定の実施形態では、アルキル基は、１個の炭素原子を含有する。アルキル残基の例としては、限定されるものではないが、メチル、エチル、ｎ−ピロピル、イソプロピル、ｎ−ブチル、イソ−ブチル、ｓｅｃ−ブチル、ｓｅｃ−ペンチル、イソ−ペンチル、ｔｅｒｔ−ブチル、ｎ−ペンチル、ネオペンチル、ｎ−ヘキシル、ｓｅｃ−ヘキシル、ｎ−ヘプチル、ｎ−オクチル、ｎ−デシル、ｎ−ウンデシル、ドデシルなどが挙げられる。
【００８１】
本明細書で使用するとき、用語「アルケニル」とは、単一の水素原子を除去することによって少なくとも１つの炭素−炭素二重結合を有し、並びに２〜３０個の炭素原子を含有する直鎖又は分岐鎖炭化水素残基を指す。別に特記されない限り、アルケニル基は、１つ又はそれより多くの置換基によって置換され得る。特定の実施形態では、アルケニル基は、２〜２０個の炭素原子を含有する。特定の実施形態では、アルケニル基は、２〜１０個の炭素原子を含有する。特定の実施形態では、アルケニル基は、２〜６個の炭素原子を含有する。特定の実施形態では、アルケニル基は、２〜５個の炭素原子を含有する。特定の実施形態では、アルケニル基は、２〜４個の炭素原子を含有する。特定の実施形態では、アルケニル基は、２〜３個の炭素原子を含有する。特定の実施形態では、アルケニル基は、２個の炭素原子を含有する。アルケニル基としては、例えば、エテニル、プロペニル、ブテニル、１−メチル−２−ブテン−１−イルなどが挙げられる。
【００８２】
本明細書で使用するとき、用語「アルキニル」とは、単一の水素原子の除去によって、少なくとも１つの炭素−炭素三重結合を有し、並びに２〜３０個の炭素原子を含有する直鎖又は分岐鎖の炭化水素残基を指す。別に特記されない限り、アルキニル基は、必要に応じて１つ又はそれより多くの置換基に置換され得る。特定の実施形態では、アルキニル基は、２〜２０個の炭素原子を含有する。特定の実施形態では、アルキニル基は、２〜１０個の炭素原子を含有する。特定の実施形態では、アルキニル基は、２〜６個の炭素原子を含有する。特定の実施形態では、アルキニル基は、２〜５個の炭素原子を含有する。特定の実施形態では、アルキニル基は、２〜４個の炭素原子を含有する。特定の実施形態では、アルキニル基は、２〜３個の炭素原子を含有する。特定の実施形態では、アルキニル基は、２個の炭素原子を含有する。代表的なアルキニル基としては、限定されるものではないが、エチニル、２−プロピル（プロパルジル）、１−プロピニルなどが挙げられる。
【００８３】
単独で又はより大きな部分の一部として使用するとき、用語「シクロアルキルと」は、３〜１５個の炭素環員を有する飽和された単環式又は二環式炭化水素環系を指す。シクロアルキル基は、別に特記されない限り、１つ又はそれより多くの置換基によって置換され得る。特定の実施形態では、シクロアルキル基は、３〜１０個の炭素環員を含有する。特定の実施形態では、シクロアルキル基は、３〜９個の炭素環員を含有する。特定の実施形態では、シクロアルキル基は、３〜８個の炭素環員を含有する。特定の実施形態では、シクロアルキル基は、３〜７個の炭素環員を含有する。特定の実施形態では、シクロアルキル基は、３〜６個の炭素環員を含有する。特定の実施形態では、シクロアルキル基は、３〜５個の炭素環員を含有する。シクロアルキル基としては、限定されるものではないが、シクロプロピル、シクロブチル、シクロペンチル、シクロヘキシル、シクロヘプチル、及びシクロオクチルが挙げられる。用語「シクロアルキル」はまた、１つ又はそれより多くのアリール又はヘテロアリール環に融合した飽和炭化水素環系を含み、これらは結合の点が飽和炭化水素環上にあるような、デカヒドロナフチル又はテトラヒドロナフチルなどである。
【００８４】
単独又はより大きな部分の一部として（「アラルキル」中として）使用するとき、用語「アリール」とは、全体で６〜１０個の炭素環員を有する芳香族単環式及び二環式炭化水素環系を指す。別に特記されない限り、アリール基は、必要に応じて、１つ又はそれより多くの置換基によって置換され得る。本発明の特定の実施形態では、「アリール」は、限定されるものではないが、１つ又はそれよりも多い置換基を保持し得る、フェニル、ビフェニル、ナフチル、アントランシルなどが挙げられる芳香族環系を指す。本明細書で使用するとき、用語「アリール」の範囲内に更に含まれるものは、その中のアリール環が、結合の点がアリール環上にある、インダニル、フタルイミジル又はテトラヒドロナフタリルなどのような１つ又はそれより多くの非芳香族環に融合されている基である。
【００８５】
用語「アラルキル」とは、本明細書で定義されたようなアルキル基を指し、結合の点がアルキル基上にあるような、本明細書で定義されたアリール基によって置換されているものを指す。
【００８６】
用語「ヘテロ原子」とは、ホウ素、リン、セレニウム、窒素、酸素又はイオウを指し、並びに窒素又はイオウの任意の酸化型、及び脱塩基窒素の任意の四級化型を含む。
【００８７】
単独又は、例えば「ヘテロアラルキル」のようなより大きな部分の一部として使用されるとき、用語「ヘテロアリール」とは、環原子が、炭素原子に加えて５〜１０個のヘテロ原子を含むような５〜１０個の環原子を有する芳香族単環式又は二環式炭化水素環系を指す。別に特記されない限り、ヘテロアリール基は、１つ又はそれより多くの置換基に置換され得る。ヘテロアリール基の環原子と関連して使用される場合、用語「窒素」は、置換された窒素を含む。ヘテロアリール基としては、限定されるものではないが、チエニル、フラニル、ピロリル、イミダゾリル、ピラゾリル、トリアゾリル、テトラゾリル、オキサゾリル、イソキサゾリル、オキサジアゾリル、チアゾリル、イソチアゾリル、チアジアゾリル、ピリジル、ピリダジニル、ピリミジニル、ピラジニル、インドリジニル、プリニル、ナフチリジニル、及びプテリジニルが挙げられる。本明細書で使用するとき、用語「ヘテロアリール」及び「ｈｅｔｅｒｏａｒ−」はまた、ヘテロアリール環が１つ又はそれより多くのアリール、シクロアルキル又はヘテロシクロアルキル環に融合されている基を含み、この中で、結合の点は、ヘテロアリール環上にある。非限定的例としては、インドリル、イソインドリル、ベンゾチエニル、ベンゾフラニル、ジベンゾフラニル、インダゾリル、ベンズイミダゾリル、ベンズチアゾリル、キノリル、イソキノリル、シンノリニル、フタラジニル、キナゾリニル、キノキサリニル、４Ｈ−キノリジニル、カルバゾリル、アクリジニル、フェナジニル、フェノチアジニル、フェノキサジニル、テトラヒドロキノリニル、及テトラヒドロイソキノリニルが挙げられる。
【００８８】
用語「ヘテロアラルキル」とは、本明細書で定義されたようなヘテロアリール基によって置換された、本明細書で定義されたようなアルキル基を指し、この中で、結合の点は、アルキル基上にある。
【００８９】
本明細書で使用するとき、用語「ヘテロシクロアルキル」又は「ヘテロシクリル」とは、飽和された又は必要に応じて不飽和であり、並びに炭素原子に加えて、１つ又はそれより多くのヘテロ原子を有するような、安定な非芳香族５〜７員の単環式炭化水素又は安定な非芳香族７〜１０員の二環式炭化水素を指す。ヘテロアルキル又はヘテロシクリル基は、別に特記されない限り、１つ又はそれより多くの置換基で置換され得る。ヘテロシクロアルキル基の環原子に関連して使用される場合、用語「窒素」は、置換された窒素を含む。ヘテロシクロアルキル基の結合の点は、結果的に安定な構造をもたらすような、そのヘテロ原子又は炭素環原子のいずれかに存在し得る。ヘテロシクロアルキル基の例としては、限定されるものではないが、テトラヒドロフラニル、テトラヒドロチエニル、ピロリジニル、ピロリドニル、ピペラジニル、ピロリニル、テトラヒドロキノリニル、テトラヒドロイソキノリニル、デカヒドロキノリニル、オキサゾリジニル、ピペラジニル、ジオキサニル、ジオキソラニル、ジアゼピニル、オキサゼピニル、チアゼピニル、モルホリニル、及びキヌクリジニルが挙げられる。「ヘテロシクロアルキル」はまた、その中でヘテロシクロアルキル環が、結合基又は結合点がヘテロシクロアルキル環上にあるような、インドリニル、クロマニル、フェナントリジニル、又はテトラヒドロキノリニルなどのような１つ又はそれより多くのアリール、ヘテロアリール又はシクロアルキル環に融合されている基を含む。
【００９０】
本明細書で使用するとき、用語「不飽和」とは、一部分が１つ又はそれより多くの二重結合または三重結合を有することを意味する。
【００９１】
本明細書で使用するとき、用語「部分的に不飽和」とは、少なくとも１つの二重結合または三重結合を含有する環部分を指す。用語「部分的に不飽和」は、不飽和の複数個の部位を有する環を包含することを意図しているが、本明細書で定義されたようなアリール又はヘテロアリール部分のような芳香族を含むことを意図していない。
【００９２】
本明細書で使用するとき、用語「ジラジカル」とは、本明細書で定義されたアルキル、アルケニル、アルキニル、アリール、シクロアルキル、ヘテロシクロアルキル、アラルキル、ヘテロアリール、及びヘテロアラルキル基を指し、この中で、二価の部分を形成するために、２つの水素原子が除去されている。ジラジカルは、典型的には「−ｅｎｅ」の接尾語を伴う末端である。例えば、アルキルジラジカルは、アルキレン類（例えば、
【化２】
2013511549.tif 000003
及び−（ＣＲ’２）ｘ−、式中Ｒ’は水素又は他の置換基で、ｘは１、２、３、４、５又は６である）と呼ばれ、アルケニルジラジカルは、「アルケニレン」と呼ばれ、アルキニルジラジカルは、「アルキニレン」と呼ばれ、アリール及びアラルキルジラジカルは、それぞれ「アリーレン」及び「アラルキレン」と呼ばれ（例えば、
【化３】
2013511549.tif 000004
）、ヘテロアリール及びヘテロアラルキルジラジカルは、それぞれ「ヘテロアリーレン」及び「ヘテロアラルキレン」と呼ばれ（例えば、
【化４】
2013511549.tif 000005
）、シクロアルキルジラジカルは、「シクロアルキレン」と呼ばれ、ヘテロシクロアルキルジラジカルは、「ヘテロシクロアルキレン」などのように呼ばれる。
【００９３】
本明細書で使用するとき、用語「ハロ」、「ハロゲン」及び「ハライド」とは、フッ素（フルオロ、Ｆ）、塩素（クロロ、Ｃｌ）、臭素（ブロモ、Ｂｒ）、及びヨウ素（ヨード、Ｉ）から選択される原子を指す。
【００９４】
本明細書で使用するとき、用語「ハロアルキル」とは、アルキル基の１つ又はそれより多くの水素原子が、１つ又はそれより多くのハロゲン原子によって置き換えられているような、本明細書にて定義されたアルキル基を指す。特定の実施形態では、ハリアルキル基は、ペルハロアルキル基であり、これは、ハロゲン（例えば、ペルフルオロアルキル基―ＣＦ３）によって置換されたアルキル基の全ての水素原子を有する。
【００９５】
本明細書で使用するとき、用語「アジド」とは、基−Ｎ３を指す。
【００９６】
本明細書で使用するとき、用語「ニトリル」とは、基―ＣＮを指す。
【００９７】
本明細書で使用するとき、用語「ニトロ」とは、基―ＮＯ２を指す。
【００９８】
本明細書で使用するとき、用語「ヒドロキシル」又は「ヒドロキシ」とは、基―ＯＨを指す。
【００９９】
本明細書で使用するとき、用語「チオール」とは、基−ＳＨを指す。
【０１００】
本明細書で使用するとき、用語「カルボン酸」とは、基−ＣＯ２Ｈを指す。
【０１０１】
本明細書で使用するとき、用語「アルデヒド」とは、基−ＣＨＯを指す。
【０１０２】
本明細書で使用するとき、用語「アルコキシ」とは、基―ＯＲ’を指し、式中Ｒ’は、本明細書で定義されたようなアルキル、アルケニル又はアルキル基である。
【０１０３】
本明細書で使用するとき、用語「アリールオキシ」とは、基―ＯＲ’を指し、式中それぞれのＲ’は、本明細書で定義されたアリール又はヘテロアリール基である。
【０１０４】
本明細書で使用するとき、用語「アルクチオオキシ」とは、基−ＳＲ’を指し、式中それぞれのＲ’は、独立して、本明細書で定義されたようなアルキル、アルケニル、又はアルキニル基のような炭素部分である。
【０１０５】
本明細書で使用するとき、用語「アリールチオ」は、基−ＳＲ’を指し、式中それぞれのＲ’は、本明細書で定義されたようなアリール、ヘテロアリール基である。
【０１０６】
本明細書で使用するとき、用語「アミノ」とは、基―ＮＲ’２を指し、式中それぞれのＲ’は、独立して、例えば本明細書で定義されたような、アルキル、アルケニル、アルキニル、アリール又はヘテロアリール基であり、若しくは２つのＲ’基は、それらに結合されている窒素原子と一緒に５〜８員環を形成する。
【０１０７】
本明細書で使用するとき、用語「カルボニル」とは、基―Ｃ（＝Ｏ）Ｒ’を指し、式中Ｒ’は、独立して、例えば本明細書で定義されたようなアルキル、アルケニル、アルキニル、アリール又はヘテロアリール基のような炭素部分である。
【０１０８】
本明細書で使用するとき、用語「エステル」とは、基―Ｃ（＝Ｏ）ＯＲ’又は−ＯＣ（＝Ｏ）Ｒ’を指し、式中それぞれのＲ’は、独立して、例えば本明細書で定義されたようなアルキル、アルケニル、アルキニル、アリール又はヘテロアリール基のような炭素部分である。
【０１０９】
本明細書で使用するとき、用語「アミド」とは、基―Ｃ（＝Ｏ）Ｎ（Ｒ’）２又は−ＮＲ’Ｃ（＝Ｏ）Ｒ’を指し、式中それぞれのＲ’は、独立して、水素又は、例えば本明細書で定義されたアルキル、アルケニル、アルキニル、アリール又はヘテロアリールのような炭素部分であるか、若しくは２つのＲ’基は、それらに結合されている窒素原子と一緒に５〜８員環を形成する。
【０１１０】
用語「スルホンアミド、ｓｕｌｆｏｎａｍｉｄｏ」又は「スルホンアミド、ｓｕｌｆｏｎａｍｉｄｅ」とは、基―Ｎ（Ｒ’）ＳＯ２Ｒ’又は−ＳＯ２Ｎ（Ｒ’）２を指し、式中それぞれのＲ’は、独立して、水素、又は例えば本明細書で定義されたようなアルキル、アルケニル、アルキニル、アリール又はヘテロアリール基のような炭素部分であるか、若しくは２つのＲ’基は、それらに結合されている窒素原子と一緒に５〜８員環を形成する。
【０１１１】
用語「スルファミド、ｓｕｌｆａｍｉｄｏ」又は「スルファミド、ｓｕｌｆａｍｉｄｅ」とは、基−ＮＲ’ＳＯ２Ｎ（Ｒ’）２を指し、式中それぞれのＲ’は、独立して、水素、又は本明細書で定義されたようなアルキル、アルケニル、アルキニル、アリール又はヘテロアリール基のような炭素部分であるか、若しくは２つのＲ’基が、それらの結合している窒素原子と一緒に５〜８員環を形成する。
【０１１２】
本明細書で使用するとき、用語「イミド、ｉｍｉｄｅ」又は「イミド、ｉｍｉｄｏ」とは、基―Ｃ（＝ＮＲ’）Ｎ（Ｒ’）２又は−ＮＲ’Ｃ（＝ＮＲ’）Ｒ’を指し、式中それぞれのＲ’は、独立して、水素、又は本明細書で定義されたようなアルキル、アルケニル、アルキニル、アリール又はヘテロアリール基のような炭素部分であるか、若しくは２つのＲ’基が、それらの結合している窒素原子と一緒に５〜８員環を形成する。
【０１１３】
本明細書で使用するとき、「シリル」とは、基−ＳｉＲ’を指し、式中Ｒ’は、例えばアルキル、アルケニル、アルキニル、アリール又はヘテロアリール基のような炭素部分である。
【０１１４】
いくつかの場合で、ヘッジホッグ阻害剤は、１つ又はそれより多くの塩基性官能基（例えば、アミノ基のような）を含有し得、したがって、薬剤的に許容し得る酸と共に薬剤的に許容し得る塩を形成することが可能である。これら具体例における用語「薬剤的に許容し得る塩」とは、相対的に非毒性の、無機または有機酸添加塩を指す。これら塩は、投与用ビヒクル又は投薬形態製造工程中、インサイチュで調製され得、又はその遊離塩基形での化合物を適切な酸で別個に処理することによって調製され得る。薬剤的に許容し得る、無機酸からの非毒性酸添加塩の例としては、限定されるものではないが、塩酸、臭化水素酸、リン酸、硫酸、硝酸及び過塩素酸添加塩が挙げられ、有機酸からの酸添加塩の例としては、限定されるものではないが、酢酸、アジピン酸、アルギン酸、アスコルビン酸、アスパラギン酸、２−アセトキシ安息香酸、ベンゼンスルホン酸、安息香酸、ビスルホン酸、ホウ酸、酪酸、カンフル酸、カンフルスルホン酸、クエン酸、シクロペンタンプロピオン酸、ジグルコン酸、ドデシルスルホン酸、エタンスルホン酸、１，２−エタンスルホン酸、ギ酸、フマル酸、グルコヘプト酸、グリセロホスホン酸、グルコン酸、ヘミスルホン酸、ヘプタン酸、ヘキサン酸、ヨウ化水素酸、２−ヒドロキシエタンスルホン酸、ヒドロキシマレイン酸、イソチオン酸、ラクトビオン酸、乳酸、ラウリン酸、ラウリルスルホン酸、リンゴ酸、マレイン酸、マロン酸、メタンスルホン酸、２−ナフタレンスルホン酸、ナプチル酸、ニコチン酸、オレイン酸、シュウ酸、パルミチン酸、パモ酸、ペクチン酸、ペルスルホン酸、３−フェニルプロピオン酸、ピクリン酸、ピバリン酸、プロピオン酸、フェニル酢酸、ステアリン酸、ウンデカン酸、及び吉草酸添加塩などが挙げられる。他の場合では、ヘッジホッグ阻害剤は、１つ又はそれより多くの酸性官能基を含有し得、並びにこれによって、薬剤的に許容し得る塩基と共に薬剤的に許容し得る塩を形成することが可能である。これら具体例における用語「薬剤的に許容し得る塩」とは、相対的に非毒性の、無機及び有機塩基添加塩を指す。これら塩は、同様に、投与用ビヒクル又は投薬形態製造工程中、インサイチュで調製され得、又はその遊離酸形での化合物を適切な塩基で別個に処理することによって調製され得る。適切な塩基の例としては、限定されるものではないが、金属水酸化物、金属の炭酸塩又は金属重炭酸塩などが挙げられ、この中で、金属は、リチウム、ナトリウム、カリウム、カルシウム、マグネシウム、又はアルミニウムなどのようなアルカリ又はアルカリ土類金属である。更に適切な塩基としては、アンモニア又は有機一級アミン、二級アミン又は三級アミンが挙げられる。塩基添加塩の形成のために有用な代表的な有機アミンとしては、例えば、エチルアミン、ジエチルアミン、エチレンジアミン、エタノールアミン、ジエタノールアミン、ピペラジンなどが挙げられる（例えば、Ｂｅｒｇｅら著、ｓｕｐｒａ参照）。
【０１１５】
用語「溶媒和物」とは、化合物に結合された、化学量論量又は非化学量論量のいずれかの溶媒を有する本発明の化合物を指す。溶媒は水であり得（すなわち水和物）、並びに阻害剤のそれぞれの分子は、水の１つ又はそれより多くの分子に結合され得る（例えば、一水和物、二水和物、三水和物など）。溶媒は、アルコール（例えば、メタノール、エタノール、プロパノール、イソプロパノールなど）、グリコール（例えば、プロピレングリコール）、エーテル（例えば、ジエチルエーテル）、エステル（例えば、酢酸エチル）、又は任意の他の適切な溶媒であり得る。ヘッジホッグ阻害剤はまた、混合された溶媒和物として（すなわち、２つ又はそれより多くの異なる溶媒と結合して）存在し得る。
【０１１６】
本明細書で使用するとき、用語「糖」とは、天然又は非天然の単糖類、二糖類、若しくは１つ又はそれより多くのピラノース又はフラノース環を含むオリゴ糖類を指す。糖は、エーテル結合を経て又はアルキル結合を経て、本発明のステロイド性アルカロイドに共有結合され得る。特定の実施形態では、糖類部分は、糖類環のアノマー中心にて、本発明のステロイド性アルカロイドに共有結合され得る。糖としては、限定されるものではないが、リボース、アラビノース、キシロース、リキソース、アロース、アルトロース、グルコース、マンノース、グロース、イドース、ガラクトース、タロース、トレハロースが挙げられる。
【０１１７】
本明細書で使用するとき、冠詞「ａ」及び「ａｎ」とは、冠詞の文法上の目的の１つ又は１つ以上（例えば、少なくとも１つ）を指す。
【０１１８】
本明細書で使用されている用語「又は」は、文脈が別途明確に示されない限り、用語「及び／又は」と互換的に使用される。
【０１１９】
「約」及び「およそ」は、測定の所定の質又は精度で測定された量の誤差の許容可能な範囲を一般的に意味するべきである。具体的な誤差範囲は、所定の値又は値の範囲の２０パーセント（％）以内であり、典型的には、１０％以内であり、並びにより典型的には５％以内である。
【図面の簡単な説明】
【０１２０】
【図１】本発明の、ビヒクル及びＩＰＩ−９２６で処置されたＢｘＰＣ−３膵臓腫瘍異種移植片に関して、経時的な腫瘍体積での変化を示すグラフである。
【図２Ａ】本発明の、ビヒクル及びＩＰＩ−９２６で処置されたＢｘＰＣ−３膵臓腫瘍異種移植片中のヒトＧｌｉ−１レベルを示すグラフである。
【図２Ｂ】本発明の、ビヒクル及びＩＰＩ−９２６で処置されたＢｘＰＣ−３膵臓腫瘍異種移植片中のネズミＧｌｉ−１レベルを示すグラフである。
【図３】本発明の、ビヒクル、ＩＰＩ−９２６、ゲムシタビン、及びＩＰＩ−９２６とゲムシタビンの併用で処置されたＢｘＰＣ−３膵臓腫瘍異種移植片に関する、経時的な腫瘍体積での変化を示すグラフである。
【図４】本発明の、ビヒクル、ＩＰＩ−９２６、ゲムシタビン、及びＩＰＩ−９２６とゲムシタビンの併用で処置されたＭｉａＰａＣａ膵臓腫瘍異種移植片に関する、経時的な腫瘍体積での変化を示すグラフである。
【図５】本発明の、ビヒクル、ＩＰＩ−９２６、エトポシド／カルボプラチン、及びＩＰＩ−９２６とエトポシド／カルボプラチンとの併用で処置されたＬＸ２２小細胞肺癌腫瘍異種移植片に関する、経時的な腫瘍体積での変化を示すグラフである。
【図６】本発明の、ビヒクル、ＩＰＩ−９２６、エトポシド／カルボプラチン然る後ビヒクル、及びエトポシド／カルボプラチン然る後ＩＰＩ−９２６で処置されたＬＸ２２小細胞肺癌腫瘍異種移植片に関する、経時的な腫瘍体積での変化を示すグラフである。
【図７Ａ】本発明の、エトポシド／カルボプラチン然る後ビヒクル又はＩＰＩ−９２６で処置された、ＬＸ２２小細胞肺癌腫瘍異種移植片中のネズミのインディアンヘッジホッグレベルを示すグラフである。
【図７Ｂ】本発明の、エトポシド／カルボプラチン然る後ビヒクル又はＩＰＩ−９２６で処置された、ＬＸ２２小細胞肺癌腫瘍異種移植片中のヒトのインディアンヘッジホッグレベルを示すグラフである。
【図８Ａ】本発明の、エトポシド／カルボプラチン然る後ビヒクル又はＩＰＩ−９２６で処置された、ＬＸ２２小細胞肺癌腫瘍異種移植片中のネズミのＧｌｉ−１発現レベルを示すグラフである。
【図８Ｂ】本発明の、エトポシド／カルボプラチン然る後ビヒクル又はＩＰＩ−９２６で処置された、ＬＸ２２小細胞肺癌腫瘍異種移植片中のヒトのＧｌｉ−１発現レベルを示すグラフである。
【図９Ａ】本発明の、未処置ＵＭＵＣ−３膀胱癌腫瘍異種移植片と比較して、ゲムシタビンで処置されたＵＭＵＣ−３膀胱癌腫瘍異種移植片中のネズミのヘッジホッグリガンド発現レベルでの変化を示すグラフである。
【図９Ｂ】本発明の、未処置ＵＭＵＣ−３膀胱癌腫瘍異種移植片と比較して、ゲムシタビンで処置されたＵＭＵＣ−３膀胱癌腫瘍異種移植片中のヒトのヘッジホッグリガンド発現レベルでの変化を示すグラフである。
【図１０】本発明の、未処置ＵＭＵＣ−３膀胱癌腫瘍細胞と比較して、ドキソルビシンで処置されたＵＭＵＣ−３膀胱癌腫瘍細胞中のヒトのソニック、インディアン及びデザートヘッジホッグリガンド発現での変化を示すグラフである。
【図１１】本発明の、未処置Ａ２７８０卵巣癌腫瘍細胞と比較して、カルボプラスチン又はドセタキセルで処置されたＡ２７８０卵巣癌腫瘍細胞中のヒトのソニック、インディアン及びデザートヘッジホッグリガンド発現での変化を示すグラフである。
【図１２】本発明の、未処置ＩＧＲＯＶ−１卵巣癌腫瘍細胞と比較して、カルボプラスチン又はドセタキセルで処置されたＩＧＲＯＶ−１卵巣癌腫瘍細胞中のヒトのソニック、インディアン及びデザートヘッジホッグリガンド発現での変化を示すグラフである。
【図１３】本発明の、未処置Ｈ８２小細胞肺癌腫瘍細胞と比較して、カルボプラスチン又はドセタキセルで処置されたＨ８２小細胞肺癌腫瘍細胞中のヒトのソニック、インディアン及びデザートヘッジホッグリガンド発現での変化を示すグラフである。
【図１４】本発明の、正常酸素状態に曝されたＵＭＵＣ−３膀胱癌腫瘍細胞と比較して、低酸素状態に曝されたＵＭＵＣ−３膀胱癌腫瘍細胞中のソニック、インディアン及びデザートヘッジホッグリガンド発現での変化を示すグラフである。
【図１５Ａ】本発明の、免疫組織化学法による、虫垂（Ａ）、十二指腸（Ｂ）、回腸（Ｃ）、膵臓（Ｄ）、直腸（Ｅ）、小腸（Ｆ）、又は肺（Ｇ）からの良性又は腫瘍組織中のヒトのソニックヘッジホッグ（ＳＨＨ）発現の検出を示すグラフである。Ｎ／Ａはスポットなし／解釈不能な染色、−は陰性、−／＋は全体的に明るい染色、＋は５〜２５％、＋＋は２５〜５０％、＋＋＋は５０〜７５％、＋＋＋＋は７５〜１００％である。
【図１５Ｂ】本発明の、免疫組織化学法による、虫垂（Ａ）、十二指腸（Ｂ）、回腸（Ｃ）、膵臓（Ｄ）、直腸（Ｅ）、小腸（Ｆ）、又は肺（Ｇ）からの良性又は腫瘍組織中のヒトのソニックヘッジホッグ（ＳＨＨ）発現の検出を示すグラフである。Ｎ／Ａはスポットなし／解釈不能な染色、−は陰性、−／＋は全体的に明るい染色、＋は５〜２５％、＋＋は２５〜５０％、＋＋＋は５０〜７５％、＋＋＋＋は７５〜１００％である。
【図１５Ｃ】本発明の、免疫組織化学法による、虫垂（Ａ）、十二指腸（Ｂ）、回腸（Ｃ）、膵臓（Ｄ）、直腸（Ｅ）、小腸（Ｆ）、又は肺（Ｇ）からの良性又は腫瘍組織中のヒトのソニックヘッジホッグ（ＳＨＨ）発現の検出を示すグラフである。Ｎ／Ａはスポットなし／解釈不能な染色、−は陰性、−／＋は全体的に明るい染色、＋は５〜２５％、＋＋は２５〜５０％、＋＋＋は５０〜７５％、＋＋＋＋は７５〜１００％である。
【図１５Ｄ】本発明の、免疫組織化学法による、虫垂（Ａ）、十二指腸（Ｂ）、回腸（Ｃ）、膵臓（Ｄ）、直腸（Ｅ）、小腸（Ｆ）、又は肺（Ｇ）からの良性又は腫瘍組織中のヒトのソニックヘッジホッグ（ＳＨＨ）発現の検出を示すグラフである。Ｎ／Ａはスポットなし／解釈不能な染色、−は陰性、−／＋は全体的に明るい染色、＋は５〜２５％、＋＋は２５〜５０％、＋＋＋は５０〜７５％、＋＋＋＋は７５〜１００％である。
【図１５Ｅ】本発明の、免疫組織化学法による、虫垂（Ａ）、十二指腸（Ｂ）、回腸（Ｃ）、膵臓（Ｄ）、直腸（Ｅ）、小腸（Ｆ）、又は肺（Ｇ）からの良性又は腫瘍組織中のヒトのソニックヘッジホッグ（ＳＨＨ）発現の検出を示すグラフである。Ｎ／Ａはスポットなし／解釈不能な染色、−は陰性、−／＋は全体的に明るい染色、＋は５〜２５％、＋＋は２５〜５０％、＋＋＋は５０〜７５％、＋＋＋＋は７５〜１００％である。
【図１５Ｆ】本発明の、免疫組織化学法による、虫垂（Ａ）、十二指腸（Ｂ）、回腸（Ｃ）、膵臓（Ｄ）、直腸（Ｅ）、小腸（Ｆ）、又は肺（Ｇ）からの良性又は腫瘍組織中のヒトのソニックヘッジホッグ（ＳＨＨ）発現の検出を示すグラフである。Ｎ／Ａはスポットなし／解釈不能な染色、−は陰性、−／＋は全体的に明るい染色、＋は５〜２５％、＋＋は２５〜５０％、＋＋＋は５０〜７５％、＋＋＋＋は７５〜１００％である。
【図１５Ｇ】本発明の、免疫組織化学法による、虫垂（Ａ）、十二指腸（Ｂ）、回腸（Ｃ）、膵臓（Ｄ）、直腸（Ｅ）、小腸（Ｆ）、又は肺（Ｇ）からの良性又は腫瘍組織中のヒトのソニックヘッジホッグ（ＳＨＨ）発現の検出を示すグラフである。Ｎ／Ａはスポットなし／解釈不能な染色、−は陰性、−／＋は全体的に明るい染色、＋は５〜２５％、＋＋は２５〜５０％、＋＋＋は５０〜７５％、＋＋＋＋は７５〜１００％である。
【図１６−１】本発明の、ＩＰＩ−９２６で処置された、Ｂｏｎ−１膵臓神経内分泌癌（ＮＥＴ）異種移植片中のネズミ（Ａ）又はヒト（Ｂ）のＧｌｉ−１ｍＲＮＡレベルを示すグラフである（＊ｐ＜０．００５）
【図１６−２】本発明の、ＩＰＩ−９２６で処置されたＢｏｎ−１膵臓神経内分泌癌（ＮＥＴ）異種移植片中のヒトのソニックヘッジホッグ（ＳＨＨ）（Ａ）又はインディアンヘッジホッグ（ＩＨＨ）（Ｂ）のｍＲＮＡレベルを示す棒グラフである。
【図１７】本発明の、免疫染色によって検出されたＢｏｎ−１膵臓神経内分泌癌（ＮＥＴ）異種移植片中のヒトのソニックヘッジホッグ（ＳＨＨ）の発現を示す画像（１０×対物レンズ）
【図１８】本発明の、ビヒクル、ＩＰＩ−９２６、スニチニブ、又はＩＰＩ−９２６とスニチニブの併用で処置された、Ｂｏｎ−１膵臓神経内分泌癌（ＮＥＴ）異種移植片中の経時的な腫瘍体積での変化を示すグラフである。
【図１９】本発明の、ヘッジホッグ阻害剤、例えばＩＰＩ−９２６で処置され得るような癌の概要である。
【図２０】本発明の、ラット軟骨肉腫モデルの検出及び組織学的特性を示す写真のパネルである。パネル（Ａ）は、腫瘍移植１１日後の移植片部位にての、及び周辺の筋肉（矢印）中の腫瘍小葉のＭＲＩ画像である。パネル（Ｂ）は、筋膜によって分離された小葉を備えた軟骨肉腫の典型的なパターンの組織構造を示している。パネル（Ｃ）は、グレードＩＩ軟骨肉腫として本モデルで分類された軟骨及び有糸分裂細胞の存在を示している。
【図２１−１】本発明の、骨肉腫異種移植片モデルの腫瘍及び間質細胞中のＨｈシグナル伝達を減少させることへのＩＰＩ−９２６の効果を示している棒グラフのパネルである。図２１Ａ〜２１Ｂは、ＩＰＩ−９２６で処置された異種移植片Ａ及びＢ動物からの腫瘍細胞中でのＰＴＣＨ１及びＧｌｉ１のｍＲＮＡ発現での対照と比較しての減少を示している。ＰＴＣＨ１及びＧｌｉ１  ｍＲＮＡ発現における同様な減少が、対照と比較して、ＩＰＩ−９２６で処置された間質細胞中で検出されている（図２１Ｃ〜２１Ｄ）。
【図２１−２】本発明の、骨肉腫異種移植片モデルの腫瘍及び間質細胞中のＨｈシグナル伝達を減少させることへのＩＰＩ−９２６の効果を示している棒グラフのパネルである。図２１Ａ〜２１Ｂは、ＩＰＩ−９２６で処置された異種移植片Ａ及びＢ動物からの腫瘍細胞中でのＰＴＣＨ１及びＧｌｉ１のｍＲＮＡ発現での対照と比較しての減少を示している。ＰＴＣＨ１及びＧｌｉ１  ｍＲＮＡ発現における同様な減少が、対照と比較して、ＩＰＩ−９２６で処置された間質細胞中で検出されている（図２１Ｃ〜２１Ｄ）。
【図２２−１】本発明の、骨肉腫異種移植片モデル中の増殖及びアポトーシスにおけるＩＰＩ−９２６の効果を示している棒グラフのパネルである。図２２Ａと２２Ｃは、対照と比較して、ＩＰＩ−９２６に反応する２つの異なる動物におけるＫｉ−６７染色を示している、細胞のパーセンテージによって検出された腫瘍細胞の増殖での減少を示す。図２２Ｂと２２Ｄは、対照と比較された、ＩＰＩ−９２６への反応でのＴｕｎｅｌ染色によって検出されたアポトーシスの増加を示す。
【図２２−２】本発明の、骨肉腫異種移植片モデル中の増殖及びアポトーシスにおけるＩＰＩ−９２６の効果を示している棒グラフのパネルである。図２２Ａと２２Ｃは、対照と比較して、ＩＰＩ−９２６に反応する２つの異なる動物におけるＫｉ−６７染色を示している、細胞のパーセンテージによって検出された腫瘍細胞の増殖での減少を示す。図２２Ｂと２２Ｄは、対照と比較された、ＩＰＩ−９２６への反応でのＴｕｎｅｌ染色によって検出されたアポトーシスの増加を示す。
【図２３】本発明の、ビヒクル対照と比較された、ＩＰＩ−９２６で処置された腫瘍細胞中のＨｈ経路マーカーの阻害を示している棒グラフである。
【図２４】本発明の、ＩＰＩ−９２６処理初期軟骨肉腫異種移植片と他の化学療法との比較を示している棒グラフである。
【図２５】本発明の、複数の阻害剤で処置された初期軟骨肉腫異種移植片モデルでのヒトＧｌｉ１調節における効果の概要を示している棒グラフである。
【図２６】本発明の、ビヒクル、ＡＢＲＡＸＡＮＥ（登録商標）、及びＩＰＩ−９２６とＡＢＲＡＸＡＮＥとの併用で処置されたＬ３．６ｐｌ膵臓腫瘍異種移植片に関する、経時的な腫瘍体積での変化を示す図である。
【図２７Ａ】本発明の、ビヒクル、ＡＢＲＡＸＡＮＥ、及びＡＢＲＡＸＡＮＥとＩＰＩ−９２６との併用を比較している、Ｌ３．６ｐｌ腫瘍モデル上のホスホヒストン３（ＰＨ３）染色を示している画像である。
【図２７Ｂ】本発明の、図２７Ａの染色された腫瘍部分当たりのＰＨ３陽性の腫瘍性核の％を定量化しているグラフである。
【図２８Ａ】本発明の、ビヒクル、ＩＰＩ−９２６、ＡＢＲＡＸＡＮＥ、及びＩＰＩ−９２６とＡＢＲＡＸＡＮＥとの併用で処置されたＡＳＰＣ−１腫瘍保持Ｎｃｒヌードマウスに関する、経時的な腫瘍増殖での変化を示すグラフである。
【図２８Ｂ】本発明の、ビヒクル、ＩＰＩ−９２６、パクリタキセル、及びＩＰＩ−９２６とパクリタキセルとの併用で処置されたＡＳＰＣ−１腫瘍保持Ｎｃｒヌードマウスに関する、経時的な腫瘍増殖での変化を示すグラフである。
【図２９Ａ】本発明の、ビヒクル、ＩＰＩ−９２６単独、ＡＢＲＡＸＡＮＥ＋／−ＩＰＩ−９２６、Ｇｅｍｚｅｒ（登録商標）＋／−ＩＰＩ−９２６、ＡＢＲＡＸＡＮＥ＋Ｇｅｍｚａｒ、及びＡＢＲＡＸＡＮＥ＋Ｇｅｍｚａｒ＋ＩＰＩ−９２６で処置されたＬ３．６ｐｌ腫瘍保持マウスに関する、経時的な腫瘍増殖での変化を示すグラフである。
【図２９Ｂ】本発明の、ビヒクル、ＩＰＩ−９２６単独、ＡＢＲＡＸＡＮＥ単独、及びＡＢＲＡＸＡＮＥとＩＰＩ−９２６との併用で処置されたＬ３．６ｐｌ腫瘍保持マウスに関する、経時的な腫瘍増殖での変化を示すグラフである。
【図２９Ｃ】本発明の、ビヒクル、ＩＰＩ−９２６単独、ＡＢＲＡＸＡＮＥ＋／−ＩＰＩ−９２６、Ｇｅｍｚｅｒ＋／−ＩＰＩ−９２６、ＡＢＲＡＸＡＮＥ＋Ｇｅｍｚａｒ、及びＡＢＲＡＸＡＮＥ＋Ｇｅｍｚａｒ＋ＩＰＩ−９２６で処置されたＬ３．６ｐｌ腫瘍保持マウスの生存を比較するグラフである。
【図２９Ｄ】本発明の、ビヒクル、ＩＰＩ−９２６単独、ＡＢＲＡＸＡＮＥ単独、及びＡＢＲＡＸＡＮＥとＩＰＩ−９２６との併用で処置されたＬ３．６ｐｌ腫瘍保持マウスの生存を比較するグラフである。
【図３０Ａ】本発明の、ビヒクル処置動物中の腫瘍潅流を示している造影強化超音波画像である。
【図３０Ｂ】本発明の、ＩＰＩ−９２６処置動物中の腫瘍潅流を示している造影強化超音波画像である。
【図３０Ｃ】本発明の、ビヒクル処置動物中の腫瘍潅流を示している造影強化超音波画像の定量化を示す図である。
【図３０Ｄ】本発明の、ＩＰＩ−９２６処置動物中の腫瘍潅流を示している造影強化超音波画像の定量化を示す図である。
【図３１】本発明の、対照に対する、Ｌ３．６ｐｌ膵臓細胞系及びＡＳＰＣ−１膵臓細胞系中の切除されたＩＰＩ−９２６処置腫瘍中のＧｌｉ−１阻害の量を示すグラフである。
【図３２】本発明の、頭頚部扁平上皮細胞癌（ＨＮＳＣＣ）の直接的患者腫瘍モデル（ＤＰＴＭ）におけるＩＰＩ−９２６及びセツキマブ（ＥＲＢＩＴＵＸ（登録商標））の治療用試験を示すグラフである。３継代ＣＵＨＮ００４腫瘍が、ヌードマウスに皮下移植され、対照（ビヒクル）、ＥＲＢＩＴＵＸ（登録商標）（腹腔内注入投与によって、ＥＲＢＩＴＵＸを４０ｍｇ／ｋｇ／日で、週２回、５週間）、ＩＰＩ−９２６（ＩＰＩ−９２６を４０ｍｇ／ｋｇ／日で、経口投与、５週間）、及び併用（ＥＲＢＩＴＵＸ＋ＩＰＩ−９２６、）５週間）の群に割付けされた。群当たりＮ＝１０であった。処置後５週間で、腫瘍保持動物は、腫瘍再増殖について観察され、更に２か月間観察された。腫瘍体積が指示されたように測定され、ベースラインに標準化されて（処置前１日目）表された。
【図３３】本発明の、ゲフィチニブ処置後に、非小細胞癌ＮＣＩ−Ｈ１６５０異種移植片モデル中で、ＩＰＩ−９２６が再増殖を遅延させることを示すグラフである。ＮＣＩ−Ｈ１６５０は、ヌードマウスに皮下移植されて増殖された。腫瘍保持マウスにゲフィニチブ（４０ｍｇ／ｋｇ、経口投与）が７日間投与されて、続いて（ｆｂ）ＩＰＩ−９２６（４０ｍｇ／ｋｇ、経口投与）が一日おきに投与された。インヴィヴォでのゲフィニチブに対するＨ１６５０の感応性（病変退縮）は、ＩＰＩ−９２６処置による腫瘍再増殖の６５％阻害（ｐ＜０．０２）に引き続いて生じた。
【図３４】本発明の、ゲフィチニブ処置後に、非小細胞癌ＨＣＣ８２７異種移植片モデル中で、ＩＰＩ−９２６が再増殖を遅延させることを示すグラフである。ＨＣＣ８２７細胞は、ヌードマウスに皮下移植されて増殖された。ゲフィニチブ（１０ｍｇ／ｋｇ、経口投与）が３日間投与されて、続いて（ｆｂ）ＩＰＩ−９２６（４０ｍｇ／ｋｇ、経口投与）が一日おきに投与された。ゲフィニチブによる病変退縮後の腫瘍再増殖の７０％阻害（ｐ＜０．０３）が、ＩＰＩ−９２６処理によって観察された。
【図３５】本発明の、ゲフィチニブ処置後に、非小細胞癌ＮＣＩ−Ｈ１６５０異種移植片モデル中で、腫瘍ヒトヘッジホッグリガンドＩＨｈ及びＤＨｈがアップレギュレートされることを示しているグラフである。
【図３６】本発明の、ゲフィチニブ処置後に、非小細胞癌ＮＣＩ−Ｈ１６５０異種移植片モデル中で、ＩＰＩ−９２６が間質細胞Ｇｌｉ１及びＧｌｉ２のアップレギュレーションを阻害することを示しているグラフである。ネズミＧｌｉ１は、ビヒクル処理腫瘍に比べて、治療後にアップレギュレートされ（ｐ＜０．０５）、並びにＩＰＩ−９２６処理によってダウン調節される（ｐ＜０．０００１）。ネズミＧｌｉ２は、ビヒクルと比較される場合、標的処置後にアップレギュレートされ（ｐ＜０．０１）、並びにＩＰＩ−９２６処置によってダウン調節される（ｐ＜０．０３）。
【図３７】本発明の、ＢＸＰＣ３腫瘍保持マウスにおけるＩＰＩ−９２６、Ａｖａｓｔｉｎ（登録商標）、又はＩＰＩ−９２６及びＡｖａｓｔｉｎの併用の効果を示している線グラフである。
【発明を実施するための形態】
【０１２１】
ヘッジホッグ（Ｈｈ）経路の悪性活性化は、複数の腫瘍型に関連していて、少なくとも３つのモードを介して特定の癌の増殖を促進し得、これらは、腫瘍細胞間のＨｈリガンド依存性シグナル伝達、腫瘍細胞とそれらの微小環境との間のＨｈリガンドシグナル伝達、及びＨｈ受容体であるＰａｔｃｈｅｄ又はＳｍｏｏｔｈｅｎｅｄ中の突然変異によって生じるリガンド非依存性シグナル伝達である。図１９は、ＩＰＩ−９２６のようなヘッジホッグ阻害剤によって治療され得る癌の概要を提供している。例えば、ヘッジホッグ阻害剤は、腫瘍を直接的に標的にし得る。他の実施形態では、Ｈｈ阻害剤は、リガンド依存性癌（例えば、膵臓癌及び／又は神経内分泌癌のような線維形成癌）の腫瘍微小環境を標的にすることができる。このような実施形態では、ヘッジホッグ阻害剤は、線維化を低減し得、これによって、改善された薬剤送達及び／又は生存へと導く。他の実施形態では、ヘッジホッグ阻害剤は、リガンド依存性の残存病変を標的にすることができる。更に他の実施形態では、ヘッジホッグ阻害剤は、リガンド非依存性癌を標的にすることができる。
【０１２２】
特定の癌（膵臓癌、卵巣癌、前立腺癌、結腸直腸癌、小細胞肺癌）において、Ｈｈリガンドは、パラクリンの役割を介して作用すると考えられ、この場合、周辺の間質細胞微小環境中でＨｈ経路を活性化するＨｈリガンドを癌細胞が生成する。他の癌では、Ｈｈリガンドが周辺の間質組織を介することとは対照的に、腫瘍又は癌細胞に直接的にシグナル伝達し得る。Ｈｈリガンドによって直接的に活性化されると考えられる代表的腫瘍又は癌細胞としては、慢性骨髄性白血病（ＣＭＬ）、慢性リンパ球性白血病（ＣＬＬ）、急性リンパ芽球性白血病（ＡＬＬ）、多発性骨髄腫、小細胞肺癌、軟骨肉腫及び骨肉腫が挙げられる。癌の他の部類は、それらがＨｈ受容体Ｐａｔｃｈｅｄ又はＳｍｏｏｔｈｅｎｅｄ中に遺伝子突然変異を含有するために、Ｈｈリガンド非依存性であると考えられる。このような癌の例としては、限定されるものではないが、ゴーリン症候群、基底細胞癌（ＢＣＣ）及び神経髄芽細胞腫が挙げられる。
【０１２３】
ＩＰＩ−９２６は、固形腫瘍及び転移性膵臓癌で現在臨床試験中の潜在的かつ選択的Ｓｍｏｏｔｈｅｎｅｄ（Ｓｍｏ）阻害剤である。Ｓｍｏは、Ｈｈリガンド依存性及びリガンド非依存性癌の双方において、ヘッジホッグ経路の転移性活性化での重要な役割を果たすと考えられている。したがって、ＩＰＩ−９２６は、Ｈｈリガンド依存性及びリガンド非依存性癌の双方の転移性活性化を阻害すると考えられている。例えば、ＩＰＩ−９２６は、間質内のＳｍｏを阻害することによって、膵臓癌を阻害すると信じられている。腫瘍微小環境内のＳｍｏの阻害は、線維形成性間質を枯渇させて、腫瘍の血管新生を増加させて、並びにそれを化学療法に対してより接触可能にさせると考えられている。このモデルと同様に、ＩＰＩ−９２６は、数個の膵臓異種移植片モデルの腫瘍随伴間質細胞中のＨｈシグナル伝達をブロックするが、その癌細胞中のＨｈシグナル伝達はブロックせず、異種移植片の低減された増殖をもたらす。このことが、間質組織の枯渇へと導く。Ｋｒｓ、膵臓癌のｐ５３モデルでの研究が、ＩＰＩ−９２６が線維形成性間質を減少させて、化学療法が腫瘍細胞に接触することを可能にし、これが低減された腫瘍転移の発現率及び増加した生存期間の中間値へと導くことを立証した。膵臓癌モデルの改善された生存率は、ＩＰＩ−９２６がゲムシタビンと併用投与された場合に認められる。
【０１２４】
一実施形態では、出願者は、ヘッジホッグ阻害剤の単独又はチロシンキナーゼ阻害剤（この場合は、スニチニブ）との併用投与が、インヴィヴォでの膵臓神経内分泌癌細胞の増殖を低減させることを示した（実施例１４〜１５）。ソニックヘッジホッグ（ＳＨＨ）リガンドの発現が、種々の臓器、例えば膵臓、十二指腸、肺、直腸、及び小腸の神経内分泌腫瘍中で検出された（実施例１３）。ヘッジホッグ阻害剤の投与が、神経内分泌癌を取り巻く間質中のＨｈ依存性遺伝子の発現を減少させるが、一方神経内分泌腫瘍中のＨｈ依存性遺伝子の顕著な減少が検出されないことが更に発見され、したがって、周囲の間質中のヘッジホッグ分泌腫瘍とヘッジホッグシグナル伝達経路との間の膵臓シグナル伝達機構を裏付けた（実施例１４）。他の実施形態では、ヘッジホッグ阻害剤は、腫瘍微小環境中のヘッジホッグ受容体、例えばＳｍｏｏｔｈｅｎｅｄ及び／又はＰａｔｃｈｅｄの活性を低減させて、これによって、（ｉ）線維形成性間質を枯渇又は減少させる、（ｉｉ）腫瘍の血管新生を増加させる、又は（ｉｉｉ）腫瘍を化学療法により接触可能にさせる、のうちの１つ又はそれより多くを生じさせる。したがって、被験者にヘッジホッグ阻害剤の単独、又はチロシンキナーゼ阻害剤（例えば、受容体チロシンキナーゼ（ＲＴＫ）阻害剤）と併用して投与することによって、癌（例えば神経内分泌癌）を治療又は予防するための方法及び組成物が開示されている。
【０１２５】
他の実施形態では、軟骨肉腫及び骨肉腫細胞系におけるヘッジホッグシグナル伝達の阻害剤を使用する前臨床試験は、筋骨格肉腫治療のための更なる薬剤としてのＨｈ阻害剤の潜在能力に関する証拠を提供した（実施例１６）。Ｈｈ経路を阻害することが、抗腫瘍及び抗間質活性を有すると考えられ、したがって肉腫侵襲（局所性及び転移性）を制限又は防止するために用いられ得る。先の研究は、ｍＴＯＲ経路の阻害が、軟骨肉腫のような肉腫に向かう強い抗腫瘍活性を有することを立証した（Ｂｒｏｗｎ，Ｒ．Ｅ．（２００４年）「Ａｎｎａｌｓ  ｏｆ  Ｃｌｉｎｉｃａｌ＆Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ  Ｓｃｉｅｎｃｅ」３４：３９７−３９９頁、Ｃｈａｎ，Ｓ．（２００４年）「Ｂｒ  Ｊ  Ｃａｎｃｅｒ」９１（８）：１４２０−４頁、Ｇｅｒｙｋ−Ｈａｌｌ，Ｍら著（２００９年）「Ｃｕｒｒ  Ｏｎｃｏｌ  Ｒｅｐ．」１１（６）：４４６−５３頁などを参照）。したがって、ヘッジホッグ阻害剤の単独またはｍＴＯＲ阻害剤と併用しての投与は、軟骨肉腫、滑液膜肉腫、脂肪肉腫、及び骨肉腫のような筋骨格肉腫又は軟組織肉腫の増殖及び／又は腫瘍進行を低減させることが期待される。
【０１２６】
更に他の実施形態では、パクリタキセル又はパクリタキセル剤と併用したヘッジホッグ阻害剤の投与が、それぞれの薬剤が単独で投与される場合よりもなおいっそう大きな程度まで膵臓癌の増殖及び／又は腫瘍進行を減少させる（実施例１７〜１９）。この併用は、ゲムシタビン及び／又はＶＥＦ阻害剤（例えばベバシズマブ）を追加的に含み得る。理論に束縛されるものではないが、ヘッジホッグ阻害剤の投与は、パクリタキセル又はパクリタキセル剤と併用して使用される場合に、パクリタキセル剤の単独使用と比較して、パクリタキセル又はパクリタキセル剤の送達の増強をもたらすことが信じられている。
【０１２７】
他の実施形態では、チロシンキナーゼ阻害剤（例えば、ＥＧＦＲ阻害剤のような受容体チロシンキナーゼ（ＲＴＫ）阻害剤）と併用してのヘッジホッグ阻害剤の投与が、ヘッジホッグ関連癌又は腫瘍（例えば頭頚部癌及び／又は肺癌（例えば非小細胞肺癌））の増殖及び／又は腫瘍進行を低減させる（実施例２２〜２５）。一実施形態では、ヘッジホッグ阻害剤は、抗癌剤（例えば、チロシンキナーゼ阻害剤）治療を実施中又は既に実施した被験者の無再発生存率を延ばす。一実施形態では、チロシンキナーゼ阻害剤は、ゲフィチニブ又はセツキシマブである。例えば、チロシンキナーゼ阻害剤による治療が有効でない又は無効である（例えば、チロシンキナーゼ阻害剤による治療後に被験者が再発を有するような）後に、ヘッジホッグ阻害剤は、ヘッジホッグ関連癌の腫瘍再増殖を低減又は阻害する。一実施形態では、被験者は、ゲフィチニブ治療後に再発した肺癌（例えば非小細胞肺癌）を有する患者である。別の実施形態では、被験者は、チロシンキナーゼ阻害剤（例えば、セツキマブのようなＥＧＦＲチロシンキナーゼ阻害剤）による治療を実施中又は治療を既に実施後の頭頚部扁平上皮細胞癌（ＨＮＳＣＣ）を有する患者である。
【０１２８】
したがって、被験者に、ヘッジホッグ阻害剤を単独又は他の抗癌剤（例えば、パクリタキセル又はパクリタキセル剤、チロシンキナーゼ阻害剤（例えば、受容体チロシンキナーゼ（ＲＴＫ）阻害剤）又はｍＴＯＲ阻害剤）と併用して投与することによって、ヘッジホッグ関連癌（例えば、神経内分泌癌、肉腫（例えば、軟骨肉腫及び骨肉腫のような筋骨格肉腫）、頭頚部癌、又は肺癌）を治療又は予防するための方法及び組成物が開示されている。
【０１２９】
本発明の種々の態様が、以下に更に詳細に記載されている。追加の定義は、明細書全体にわたって提示されている。
ヘッジホッグ阻害剤
【０１３０】
適切なヘッジホッグ阻害剤としては、例えば、それらの全体の開示が参照により本明細書に組み込まれた、米国特許第７，２３０，００４号、米国特許出願公開第２００８／０２９３７５４号、米国特許出願公開第２００８／０２８７４２０号、及び米国特許出願公開第２００８／０２９３７５５号に記載及び開示されているヘッジホッグ阻害剤が挙げられる。他の好適なヘッジホッグ阻害剤の例としては、米国特許出願公開第ＵＳ２００２／００６９３１号、同第ＵＳ２００７／００２１４９３号及び同第ＵＳ２００７／００６０５４６号、並びに国際特許出願公開第ＷＯ２００１／１９８００号、同第ＷＯ２００１／２６６４４号、同第ＷＯ２００１／２７１３５号、同第ＷＯ２００１／４９２７９号、同第ＷＯ２００１／７４３４４号、同第ＷＯ２００３／０１１２１９号、同第ＷＯ２００３／０８８９７０号、同第ＷＯ２００４／０２０５９９号、同第ＷＯ２００５／０１３８００号、同第ＷＯ２００５／０３３２８８号、同第ＷＯ２００５／０３２３４３号、同第ＷＯ２００５／０４２７００号、同第ＷＯ２００６／０２８９５８号、同第ＷＯ２００６／０５０３５１号、同第ＷＯ２００６／０７８２８３号、同第ＷＯ２００７／０５４６２３号、同第ＷＯ２００７／０５９１５７号、同第ＷＯ２００７／１２０８２７号、同第ＷＯ２００７／１３１２０１号、同第ＷＯ２００８／０７０３５７号、同第ＷＯ２００８／１１０６１１号、同第ＷＯ２００８／１１２９１３号、及び同第ＷＯ２００８／１３１３５４号に記載されているヘッジホッグ阻害剤が挙げられる。
【０１３１】
Ｈｈ阻害剤の追加例は、Ｙａｕｃｈ，Ｒ．Ｌら著（２００９年）「Ｓｃｉｅｎｃｅ３２６」：５７２−５７４頁  Ｓｃｉｅｎｃｅｘｐｒｅｓｓ：１−３（１０．１１２６／ｓｃｉｅｎｃｅ．１１７９３８６）、Ｒｕｄｉｎ，Ｃ．ら著（２００９年）「Ｎｅｗ  Ｅｎｇｌａｎｄ  Ｊ  ｏｆ  Ｍｅｄｉｃｉｎｅ」３６１−３６６頁（１０．１０５６／ｎｅｊｉｍａ０９０２９０３）に記載されている。
【０１３２】
例えば、ヘッジホッグ阻害剤は、以下の構造を有する化合物又はその薬剤的に許容し得る塩であり得、
【化５】
2013511549.tif 000006
式中、Ｒ１はＨ、アルキル、−ＯＲ、アミノ、スルホンアミド、スルファミド、−ＯＣ（Ｏ）Ｒ５、−Ｎ（Ｒ５）Ｃ（Ｏ）Ｒ５、又は糖であり；
Ｒ２はＨ、アルキル、アルケニル、アルキニル、アリール、シクロアリール、ニトリル、又はヘテロシクロアルキルであり；
若しくはＲ１とＲ２は一緒に＝Ｏ、＝Ｓ、＝Ｎ（ＯＲ）、＝Ｎ（Ｒ）、＝Ｎ（ＮＲ２）、又は＝Ｃ（Ｒ）２を形成し；
Ｒ３はＨ、アルキル、アルケニル、又はアルキニルであり；
Ｒ４はＨ、アルキル、アルケニル、アルキニル、アリール、シクロアルキル、ヘテロシクロアルキル、アラルキル、ヘテロアリール、ヘテロアラルキル、ハロアルキル、−ＯＲ、−Ｃ（Ｏ）Ｒ５、−ＣＯ２Ｒ５、−ＳＯ２Ｒ５、−Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ５）（Ｒ５）、−［Ｃ（Ｒ）２］ｑ−Ｒ５、−［（Ｗ）−Ｎ（Ｒ）Ｃ（Ｏ）］ｑＲ５、−［（Ｗ）−Ｃ（Ｏ）］ｑＲ５、−［（Ｗ）−Ｃ（Ｏ）Ｏ］ｑＲ５、−［（Ｗ）−ＯＣ（Ｏ）］ｑＲ５、−［（Ｗ）−ＳＯ２］ｑＲ５、−［（Ｗ）−Ｎ（Ｒ５）ＳＯ２］ｑＲ５、−［（Ｗ）−Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ５）］ｑＲ５、−［（Ｗ）−Ｏ］ｑＲ５、−［（Ｗ）−Ｎ（Ｒ）］ｑＲ５、−Ｗ−ＮＲ３＋Ｘ−又は−［（Ｗ）−Ｓ］ｑＲ５であり；
それぞれのＷは独立に、ジラジカルであり；
それぞれのｑは独立に１、２、３、４、５、又は６であり；
Ｘはハライドであり；
それぞれのＲ５は独立に、Ｈ、アルキル、アルケニル、アルキニル、アリール、シクロアルキル、ヘテロシクロアルキル、アラルキル、ヘテロアリール、ヘテロアラルキル又は−［Ｃ（Ｒ）２］ｐ−Ｒ６であり；
若しくは同一の置換基上の任意の２つのＲ５は、一緒に、Ｎ、Ｏ、Ｓ、及びＰから選択された０〜３のヘテロ原子を含有する４〜８員の必要に応じて置換された環を形成し；
ｐは０〜６であり；
それぞれのＲ６は、独立に、ヒドロキシル、−Ｎ（Ｒ）ＣＯＲ、−Ｎ（Ｒ）Ｃ（Ｏ）ＯＲ、−Ｎ（Ｒ）ＳＯ２（Ｒ）、−Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ）２、−ＯＣ（Ｏ）Ｎ（Ｒ）（Ｒ）、−ＳＯ２Ｎ（Ｒ）（Ｒ）、−Ｎ（Ｒ）（Ｒ）、−ＣＯＯＲ、−Ｃ（Ｏ）Ｎ（ＯＨ）（Ｒ）、−ＯＳ（Ｏ）２ＯＲ、−Ｓ（Ｏ）２ＯＲ、−ＯＰ（Ｏ）（ＯＲ）（ＯＲ）、−ＮＰ（Ｏ）（ＯＲ）（ＯＲ）、又は−Ｐ（Ｏ）（ＯＲ）（ＯＲ）であり；
Ｒ２、Ｒ３がＨであり、かつＲ４がヒドロキシルであるとき、Ｒ１はヒドロキシルであり得なく；
Ｒ２、Ｒ３、及びＲ４がＨのとき、Ｒ１はヒドロキシルであり得なく；並びに、
Ｒ２、Ｒ３、及びＲ４がＨのとき、Ｒ１は糖であり得ない。
【０１３３】
化合物の例としては、
【化６】
2013511549.tif 000007
【化７】
2013511549.tif 000008
【化８】
2013511549.tif 000009
【化９】
2013511549.tif 000010
【化１０】
2013511549.tif 000011
【化１１】
2013511549.tif 000012
【化１２】
2013511549.tif 000013
、並びにそれらの薬剤的に許容し得る塩である。
【０１３４】
本発明の方法のために好適なヘッジホッグ阻害剤の一例は、式Ｉの化合物：
【化１３】
2013511549.tif 000014
又はその薬剤的に許容し得る塩である。薬剤的に許容し得る塩の例は、式Ｉの化合物（本明細書では「化合物４２」又は「ＩＰＩ−９２６」と呼ばれる）塩酸塩である。
【０１３５】
ＩＰＩ−９２６は、Ｈｈリガンド依存性癌及びＨｈリガンド非依存性癌の双方で、ヘッジホッグ経路の悪性活性化を阻害すると考えられている。ＩＰＩ−９２６は、Ｃ３Ｈ１０細胞中で７〜１５ｎＭのＥＣ５０を示し、並びに１〜２ｎＭのＩＣ５０でＳｍｏ結合を阻害する。ＩＰＩ−９２６は、一日一回又は連続的に経口投与され得、単回投与後に２０〜４０時間の活性半減期を有する。
【０１３６】
本発明で有用なヘッジホッグ阻害剤は、アミノ又はアルキルアミノのような塩基性官能基を含有し、したがって、薬剤的に許容し得る酸と薬剤的に許容し得る塩を形成することが可能である。この点における用語「薬剤的に許容し得る塩」とは、本発明の化合物の相対的に非毒性の、無機及び有機酸添加塩を指す。これら塩は、投与用ビヒクル又は投与剤形製造工程において、或いは遊離塩基形の化合物を適切な有機又は無機酸で別個に処理することによって、インサイチュで調製され得、続く精製中で、このように形成された塩を単離する。代表的な塩としては、臭素酸塩、塩酸塩、硫酸塩、重硫酸塩、リン酸塩、硝酸塩、酢酸塩、吉草酸塩、オレイン酸塩、パルミチン酸塩、ステアリン酸塩、ラウリン酸塩、安息香酸塩、乳酸塩、トシル酸塩、クエン酸塩、マレイン酸塩、フマル酸塩、コハク酸塩、酒石酸塩、ナプチル酸塩、メシル酸塩、ベシル酸塩、グルコヘプトン酸塩、ラクトビオン酸塩、及びラウリル硫酸塩などが挙げられる（例えば、Ｂｅｒｇｅら著（１９７７年）「Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｓａｌｔｓ」、Ｊ．Ｐｈａｒｍ．Ｓｃｉ．６６：１〜１９頁を参照）。
【０１３７】
本発明の薬剤的に許容し得る塩は、例えば非毒性有機又は無機酸からの、化合物の通常の非毒性塩又は四級アンモニウム塩を含む。例えば、このような通常の非毒性塩は、塩酸、臭化水素酸、硫酸、スルファミン酸、リン酸、硝酸などの無機酸から誘導された塩を含み、並びに酢酸、プロピオン酸、コハク酸、グリコール酸、ステアリン酸、乳酸、リンゴ酸、酒石酸、クエン酸、アスコルビン酸、パルミチン酸、マレイン酸、ヒドロキシマレイン酸、フェニル酢酸、グルタミン酸、安息香酸、サリチル酸、スルファニル酸、２−アセトキシ安息香酸、フマル酸、トルエンスルホン酸、メタンスルホン酸、ベンゼンスルホン酸、エタンジスルホン酸、シュウ酸、イソチオン酸などの有機酸から調製された塩を含む。
【０１３８】
その他の場合では、本発明の化合物は、１つ又はそれより多くの酸性官能基を含有し得、したがって、薬剤的に許容し得る塩基と薬剤的に許容し得る塩を形成することが可能である。これらの例における用語「薬剤的に許容し得る塩」とは、本発明の化合物の相対的に非毒性の、無機及び有機塩基添加塩を指す。これら塩は、投与用ビヒクル又は投与剤形製造工程において、或いは遊離酸形の化合物を適切な塩基、例えば薬剤的に許容し得る金属陽イオンの水酸化物、炭酸塩又は重炭酸塩、アンモニアで、或いは薬剤的に許容し得る第一級、第二級又は第三級アミンで別個に処理することによって、インサイチュで同様に調製され得る。代表的アルカリ又はアルカリ土類金属塩としては、リチウム塩、ナトリウム塩、カリウム塩、カルシウム塩、マグネシウム塩、及びアルミニウム塩などが挙げられる。塩基添加塩の形成のために有用である代表的な有機アミンとしては、エチルアミン、ジエチルアミン、エチレンジアミン、エタノールアミン、ジエタノールアミン、ピペラジンなどが挙げられる（例えば、Ｂｅｒｇｅら著、「ｓｕｐｒａ」を参照）。
医薬組成物
【０１３９】
本発明の方法を実行するために、ヘッジホッグ阻害剤及び／又は化学療法剤は、１つ又はそれより多くの薬剤的に許容し得る賦形剤と一緒に調合された、治療上有効な量の１つ又はそれより多くのヘッジホッグ阻害剤及び／又は１つ又はそれより多くの化学療法剤を含む、薬剤的に許容し得る組成物の形で供給され得る。いくつかの例では、ヘッジホッグ阻害剤と化学療法剤は、別個の医薬組成物中で投与され、並びに（例えば、異なる物理的及び／又は化学的特性のために）異なる経路（例えば、１つの治療薬は経口投与され、一方他の治療薬は経静脈投与される）によって投与され得る。他の例では、ヘッジホッグ阻害剤と化学療法剤は、別個ではあるが、同一の経路（双方ともに経口又は経静脈）を介して投与され得る。更に他の例では、ヘッジホッグ阻害剤と化学療法剤は、同一の医薬組成物中で投与され得る。
【０１４０】
医薬組成物は、固形又は液体形で投与されるために特別に製剤化され得、以下のように適合された医薬組成品が挙げられ、それらは例えば、灌注（水性又は非水性溶液又は懸濁液）、錠剤（例えば頬側、舌下、及び全身吸収を標的にした錠剤）、カプセル、丸薬、粉末剤、顆粒剤、舌に適用するためのペーストなどのような経口投与用；例えば、無菌溶液又は懸濁液、若しくは持続放出性製剤のための皮下注射、筋肉内注射、静脈内注射又は硬膜外注射による非経口投与用；例えば、クリーム、軟膏、又は制御放出パッチ又は皮膚に適用されるスプレーなどのような局所適用用；例えば坐剤又は泡沫剤のような膣内又は直腸内投与用；舌下投与用；点眼用；経皮投与用；肺投与用；又は経鼻投与用である。
【０１４１】
医薬組成物中で採用され得る好適な水性又は非水性担体としては、水、エタノール、ポリオール（例えば、グリセロール、プロピレングリコール、ポリエチレングリコールなど）、及びそれらの好適な混合物、オリーブ油のような植物油、並びにオレイン酸エチルのような注入可能な有機エステルが挙げられる。例えば、レシチンのようなコーティング材料を使用することによって、分散液の場合は必要とされる粒子サイズの維持によって、並びに界面活性剤の使用によって、適切な流動性が維持され得る。
【０１４２】
これら組成物はまた、防腐剤、湿潤剤、乳化剤、分散剤、滑沢剤、及び／又は酸化防止剤のような補助剤を含有し得る。本発明の化合物への微生物の作用の防止は、種々の抗細菌剤及び抗カビ剤、例えばパラベン、クロロブタノール、ソルビン酸フェノールなどを封入によって確実にすることができる。糖、塩化ナトリウムなどのような等張剤を組成物中に含有させることも更に望ましい。更には、注入可能な薬剤形態の延長された吸収は、モノステアリン酸アルミニウムとゼラチンのような吸収を遅延させる薬剤の封入によってもたらし得る。
【０１４３】
これら製剤又は組成物の調製の方法は、ヘッジホッグ阻害剤及び／又は化学療法剤を担体と、必要に応じて１つ又はそれよりも多くの補助成分と混合する工程を含む。一般的に、製剤は、本発明の化合物を液体担体と均一かつ完全に混合することによって、又は固体担体に微粉砕されることによって、若しくはその双方によって調製され、次いで、必要に応じて製剤が成形される。
【０１４４】
本発明のヘッジホッグ阻害剤と化学療法剤は、それ自体で、又は、薬剤的に許容し得る担体と組み合わされた、例えば活性成分の約０．１〜９９％、又は約１０〜５０％、又は約１０〜４０％、又は約１０〜３０％、又は約１０〜２０％、又は約１０〜１５％を含有する医薬組成物として与えられ得る。本発明の医薬組成物中の活性成分の実際の投与量レベルは、患者に対して毒性がない状態で、患者、組成物、及び投与のモードに対する所望の治療応答を達成するために有効である活性成分の量を獲得するために、変動され得る。
【０１４５】
選択された投与量レベルは、例えば、採用される特定の化合物の活性、投与の経路、投与の時間、採用される化合物の排泄又は代謝の速度、吸収の速度及び範囲、治療期間、採用される特定の化合物と併用して使用される他の薬剤、化合物及び／又は材料物質、治療される患者の年齢、性、体重、病状、全身状態及び既往歴、及び医薬分野で周知である同様な因子などを含む種々の因子に依存するであろう。
【０１４６】
一般的に、ヘッジホッグ阻害剤及び／又は化学療法剤の適切な日々の投与量は、治療的効果を生み出すために有効な最低投与量である化合物の量であるだろう。このような有効投与量は、一般的に上記の因子に依存するであろう。一般的には、所定の効果のために使用される場合、本発明の化合物の被験者に対する経口、経静脈及び皮下投与量は、一日当たり約０．０００１ｍｇ〜約１００ｍｇ、又は一日当たり約０．００１ｍｇ〜約１００ｍｇ、又は一日当たり約０．０１ｍｇ〜１００ｍｇ、又は一日当たり約０．１ｍｇ〜約１００ｍｇ、又は約０．０００１ｍｇ〜約５００ｍｇ、又は一日当たり約０．００１ｍｇ〜約５００ｍｇ、又は一日当たり約０．０１ｍｇ〜約５００ｍｇ、又は一日当たり約０．１ｍｇ〜５００ｍｇの範囲であろう。
【０１４７】
本治療を受ける対象は、治療を必要としている動物であり、霊長類、特にヒト、ウマ、ウシ、ブタ、ヒツジ、家禽類、イヌ、ネコ、マウス及びラットが挙げられる。
【０１４８】
化合物は、毎日、隔日、１週間に３回、１週間に２回、毎週、又は毎２週で投与され得る。投与計画は、「薬剤休日」すなわち、薬剤を２週間投与後１週間休み、又は３週間投与後１週間休み、又は４週間投与後１週間休みなど、を含むことが可能で、若しくは薬剤休日がなく連続的に投与され得る。化合物は、経口、静脈内、腹腔内、局所的、経皮、経筋肉、皮下、経鼻、舌下、又は任意の他の経路によって投与され得る。
【０１４９】
ヘッジホッグ阻害剤は、他の療法（例えば追加の化学療法、放射線療法又は外科的療法など）と併用して投与されるために、それぞれの薬剤又は療法の投与量は、単一薬剤治療のための相当する投与量よりは低くなり得る。単一薬剤治療のための投与量は、例えば、毎日、体重１ｋｇ当たり約０．０００１〜約２００ｍｇ、又は約０．００１〜約１００ｍｇ、又は約０．０１〜約１００ｍｇ、又は約０．１〜約１００ｍｇ、又は約１〜約５０ｍｇの範囲であり得る。投与のモードの決定および好適な投与量は、臨床医の知識の十分な範囲内である。
治療方法
【０１５０】
一態様では、本発明は、ヘッジホッグ阻害剤を単独で又は第２の治療用薬剤、例えば抗癌剤（例えば、受容体チロシンキナーゼ阻害剤、パクリタキセル又はパクリタキセル剤、ｍＴＯＲ阻害剤、及び／又はＩＧＦ−１Ｒ拮抗剤）と併用して投与することによって癌を治療する方法に関する。
【０１５１】
本明細書で使用するとき、並びに別に特記されない限り、用語「治療する、ｔｒｅａｔ」、「治療すること、ｔｒｅａｔｉｎｇ」及び「治療、ｔｒｅａｔｍｅｎｔ」とは、患者が癌を発症すると同時に発生する、癌の重篤度を低減させるか、或いは癌の進行を遅延又は遅らせる行為を意図しているものである。
【０１５２】
本明細書で使用するとき、別に特記されない限り、用語「予防する、ｐｒｅｖｅｎｔ」、「予防すること、ｐｒｅｖｅｎｔｉｎｇ」及び「予防、ｐｒｅｖｅｎｔｉｏｎ」とは、患者が癌の再増殖を発症する前に発生する行為であり、及び／又は癌の重篤度を低減させるために発生する行為を意図しているものである。
【０１５３】
本明細書で使用するとき、並びに別に特記されない限り、用語「管理する、ｍａｎａｇｅ」、「管理すること。ｍａｎａｇｉｎｇ」及び「管理、ｍａｎａｇｅｍｅｎｔ」とは、すでに癌を発症した患者における癌の再発の予防、及び／又は癌を発症した患者が寛解を維持する時間を延長させることを包含している。この用語は、癌の閾値、進行及び／又は期間を調節すること、或いは患者が癌に反応する方法を変えることを包含する。
【０１５４】
本明細書で使用するとき、並びに別に特記されない限り、化合物の「治療的有効量」とは、癌の治療又は管理において治療的有益性を提供するために十分な量、又は癌に関連する１つ又はそれより多くの症状を遅延又は最小限にとどめるために十分な量である。化合物の治療的有効量は、癌の治療又は管理において治療的有益性を提供するような、治療用薬剤の単独の量又は他の治療用薬剤と併用された量を意味する。用語「治療的有効量」は、治療の全体にわたって改善し、症状又は癌の原因を低減又は回避し、若しくは別の治療用薬剤の効果を増強させる量を包含し得る。
【０１５５】
本明細書で使用するとき、並びに別に特記されない限り、化合物の「予防的有効量」とは、癌の再増殖、又は癌に関連する１つ又はそれより多くの症状を防止するために十分な量、或いはその再発を防止するために十分な量である。化合物の予防的有効量は、癌の予防において予防的有益性を提供する、単独での又は他の治療用薬剤と併用された化合物の量を意味する。用語「予防的有効量」は、予防の全体にわたって改善し、又は別の予防用薬剤の効果を増強させる量を包含し得る。
【０１５６】
本明細書で使用するとき、「癌」及び「腫瘍」は同義語である。
【０１５７】
本明細書で使用するとき、「癌療法、ｃａｎｃｅｒ  ｔｈｅｒａｐｙ」及び「癌治療、ｃａｎｃｅｒ  ｔｒｅａｔｍｅｎｔ」は同義語である。
【０１５８】
本明細書で使用するとき、「化学療法、ｃｈｅｍｏｔｈｅｒａｐｙ」及び「化学療法剤、ｃｈｅｍｏｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃ」並びに「化学療法剤、ｃｈｅｍｏｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃ  ａｇｅｎｔ」は同義語である。
【０１５９】
本明細書で使用するとき、「患者」又は「被験者」は、動物を指し、治療、観察、及び／又は実験の対象とされる、或いは対象とされた動物を指し、一般的にはヒト（すなわち、任意の年齢、例えば小児患者（例えば幼児、小児、青少年）又は成人患者（若年成人、中年成人又は高齢成人）の群の男性又は女性）、又は他の哺乳類、例えば霊長類（カニクイザル、アカゲザルなど）、ウシ、ブタ、ウマ、ヒツジ、ヤギ、ネコ、及び／又はイヌなどの市販されている哺乳類、及び／又はニワトリ、アヒル、ガチョウ及び／又は七面鳥などの市販されている鳥類を含む鳥類である。用語が、化合物または薬剤の投与と同時に使用される場合、前記患者は、治療、観察、および／または前記化合物または薬剤の投与における、対象となっている。
【０１６０】
ヘッジホッグ阻害剤は、癌のための第一選択療法であり、すなわち、癌を治療することを意図した別の薬剤が先に投与されていない被験者で使用されるものである。
【０１６１】
他の実施形態では、ヘッジホッグ阻害剤は、癌のための第二選択療法であり、すなわち、癌を治療することを意図した別の薬剤で先に治療された患者で使用されるものである。
【０１６２】
他の実施形態では、ヘッジホッグ阻害剤は、癌のための第三又は第四選択療法であり、すなわち、癌を治療することを意図した、２つ又は３つの別の薬剤で先に治療された患者で使用されるものである。
【０１６３】
いくつかの実施形態では、ヘッジホッグ阻害剤は、癌の外科的切除／除去に続いて、被験者に投与される。
【０１６４】
いくつかの実施形態では、ヘッジホッグ阻害剤は、癌の放射線療法前、療法中、又は療法後に被験者に投与される。
【０１６５】
他の実施形態では、ヘッジホッグ阻害剤は、術前補助療法として、すなわち、別の治療に先立って投与される。
【０１６６】
他の実施形態では、ヘッジホッグ阻害剤は、補助療法として、すなわち、一次治療に追加しての治療として投与される。
【０１６７】
特定の実施形態では、方法は、第１の治療用薬剤と第２の治療用薬剤の投与を含み、この中で、第２の治療用薬剤はヘッジホッグ阻害剤である。２つの薬剤は、同時に（すなわち、実質的に同じ時間に、又は同じ治療内において）投与され得、若しくは順次に（すなわち、一方が他方の直後に、或いは２つの薬剤の投与の間に間隔をあけて）投与され得る。いくつかの実施形態では、ヘッジホッグ阻害剤は、順次に（すなわち第１の薬剤の投与後に）投与される。第１の治療用薬剤は、順次又は併用して投与される１つの化学療法剤、又は複数個の化学療法剤であり得る。
【０１６８】
別の態様では、本発明は、第１の治療用薬剤を被験者に投与し、次いで第２の治療用薬剤と併用して第１の治療用薬剤を投与する工程を含む方法に関し、この中で、第２の治療用薬剤はヘッジホッグ阻害剤である。
【０１６９】
別の態様では、本発明は、第１の治療用薬剤及び第２の治療用薬剤を投与することによって、ヘッジホッグ経路によって媒介された病状を治療するための方法に関し、この中で第２の治療用薬剤はヘッジホッグ阻害剤である。２つの薬剤は、同時に（すなわち、実質的に同じ時間に、又は同じ治療内において）投与され得、若しくは順次に（すなわち、一方が他方の直後に、或いは２つの薬剤の投与の間に間隔をあけて）投与され得る。いくつかの実施形態では、ヘッジホッグ阻害剤は、順次に（すなわち第１の薬剤の投与後に）投与される。第１の治療用薬剤は、化学療法剤があり得る。
【０１７０】
別の態様では、本発明は、第１の治療薬剤を被験者に投与し、次いで第２の治療用薬剤と併用して第１の治療用薬剤を投与することを含む、ヘッジホッグ経路によって媒介された病状を治療する方法に関し、この中で、第２の治療用薬剤はヘッジホッグ阻害剤である。
【０１７１】
本発明はまた、患者にヘッジホッグ阻害剤の治療的有効量を投与することによって、癌治療を実施中又は癌治療を既に実施した（例えば化学療法（抗体などの小分子及びバイオ療法剤を含む）による治療、放射線療法、手術、ＲＮＡｉ療法及び／又はアンチセンス療法）癌患者における無再発生存率を延長させる方法に関する。「無再発生存率」とは、当業者に理解されているように、その期間で臨床的に定義された癌の再発がないような癌治療の特定ポイント後の時間の長さである。いくつかの実施形態では、ヘッジホッグ阻害剤は、癌療法と同時に投与される。同時投与の例では、ヘッジホッグ阻害剤は、癌療法が終了後に、投与が継続され得る。他の実施形態では、ヘッジホッグ阻害剤は、癌療法が終了した後に投与される（すなわち、癌療法と重複する期間はない）。ヘッジホッグ阻害剤は、癌療法が終了した直後投与され得るか、又は癌療法の終了とヘッジホッグ阻害剤の投与との間の時間的間隔（例えば約１日、１週間、１か月、６か月、又は１年に及ぶ）が存在し得ない。ヘッジホッグ阻害剤による治療は、無再発生存率が維持される限りにおいて、継続し得る（例えば、約１日、１週間、１か月、６か月、１年、２年、３年、４年、５年、又はそれよりも長期にわたって）。
【０１７２】
一態様では、本発明は、癌療法が終了した後に、患者にヘッジホッグ阻害剤の治療的有効量を投与することによって、癌治療を先に実施した（例えば化学療法（抗体などの小分子及びバイオ療法剤を含む）による治療、放射線療法、手術、ＲＮＡｉ療法及び／又はアンチセンス療法）癌患者における無再発生存率を延長させる方法に関する。ヘッジホッグ阻害剤は、癌療法が終了した直後に投与され得るか、又は癌療法の終了とヘッジホッグ阻害剤の投与との間の時間的間隔（例えば約１日、１週間、１か月、６か月、又は１年に及ぶ）が存在し得ない。
【０１７３】
双方共に参照によって本明細書に組み込まれた、ＰＣＴ公開第ＷＯ２００８０８３２５２号及び同第ＷＯ２００８０８３２４８号に記載された、例えばＩＰＩ−９２６のようなヘッジホッグ阻害剤が、膵臓癌、神経髄芽細胞腫、肺癌、多発性骨髄腫、急性リンパ球性白血病、骨髄異形成症候群、非ホジキン型リンパ腫、ホジキン病及びリンパ球性白血病を持つ患者に由来するヒト細胞系のインヴィトロ増殖を阻害することが示されている。
【０１７４】
ＩＰＩ−９２６のようなヘッジホッグ阻害剤はまた、多くの前臨床的インヴィヴォモデルにおける腫瘍増殖阻害を示していて、例えばこれらモデルは神経髄芽細胞腫（Ｐｉｎｋら著、「Ａｍｅｒｉｃａｎ  Ａｓｓｏｃｉａｔｉｏｎ  ｆｏｒ  Ｃａｎｃｅｒ  Ｒｅｓｅａｒｃｈ」，１５８８、２００８年、Ｖｉｌｌａｖｉｃｅｎｃｉａら著、「Ａｍｅｒｉｃａｎ  Ａｓｓｏｃｉａｔｉｏｎ  ｆｏｒ  Ｃａｎｓｅｒ  Ｒｅｓｅａｒｃｈ」，２００９年）、小細胞肺癌（Ｔｒａｖａｇｌｉｏｎｅら著，「Ａｍｅｒｉｃａｎ  Ａｓｓｏｃｉａｔｉｏｎ  ｆｏｒ  Ｃａｎｃｅｒ  Ｒｅｓｅａｒｃｈ」、４６１１，２００８年；Ｐｅａｃｏｃｋ  ｅｔ  ａｌ．，Ａｍｅｒｉｃａｎ  Ａｓｓｏｃｉａｔｉｏｎ  ｆｏｒ  Ｃａｎｃｅｒ  Ｒｅｓｅａｒｃｈ，２００９年）、及び卵巣癌（Ｇｒｏｗｄｏｎら著、「Ｓｏｃｉｅｔｙ  ｏｆ  Ｇｙｎｅｃｏｌｏｇｉｃ  Ｏｎｃｏｌｏｇｉｓｔｓ  Ａｎｎｕａｌ  Ｍｅｅｔｉｎｇ  ｏｎ  Ｗｏｍｅｎ‘ｓ  Ｃａｎｃｅｒ」，２００９年）である。
【０１７５】
更には、ＩＰＩ−９２６のようなヘッジホッグ阻害剤は、ヒト膵臓癌のモデルにおける単回投与後に、ヘッジホッグシグナル伝達の下流仲介媒体である間質細胞中の、急速かつ持続されたヘッジホッグ経路阻害を立証した（Ｔｒａｖｉｇｌｉｏｎｅら著，「ＥＯＲＴＣ−ＮＣＩ−ＡＡＣＲ  Ｓｙｍｐｏｓｉｕｍｕ  ｏｎ“Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｔａｒｇｅｔｓ  ａｎｄ  Ｃａｎｃｅｒ  Ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃｓ”」２００８年）。
【０１７６】
ヘッジホッグ経路の阻害は、種々の癌の増殖を低減又は阻害することが示されていて、これら癌は、急性リンパ球性白血病（ＡＬＬ）（Ｊｉら著，「Ｊｏｕｒｎａｌ  ｏｆ  Ｂｉｏｌｏｇｉｃａｌ  Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ（２００７年）２８２：３７３７０−３７３７７頁」、基底細胞癌（Ｘｉｅら著、「Ｎａｔｕｒｅ」（１９９８年）３９１：９０−９２頁、Ｗｉｌｌｉａｍｓら著，「ＰＮＡＳ」（２００３年）１００：４６１６−４６２１頁、ＢａｌｅとＹｕ著（２００１年）「Ｈｕｍａｎ  Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｇｅｎｅｔｉｃｓ（２００１年）１０：７５７−７６２頁」、胆管癌（Ｂｅｒｍａｎら著，「Ｎａｔｕｒｅ」（２００３年）４２５：８４６−８５１頁、ＷＯ第２００５／０１３８００号）、脳腫瘍及び神経膠腫（Ｃｌｅｍｅｎｔら著，「Ｃｕｒｒｅｎｔ  Ｂｉｏｌｏｇｙ」（２００７年）１７：１−８頁、Ｅｈｔｅｓｈａｍら著，「Ｏｎｇｏｇｅｎｅ」（２００７年）１−１０頁）、膀胱癌、乳癌（Ｋｕｂｏら著，「Ｃａｎｃｅｒ  Ｒｅｓｅａｒｃｈ」（２００４年）６４：６０７１−６０７４頁、Ｌｅｗｉｓら著，「Ｊ．Ｍａｍｍａｒｙ  Ｇｌａｎｄ  Ｂｉｏｌｏｇｙ  ａｎｄ  Ｎｅｏｐｌａｓｉａ」（２００４年）２：１６５−１８１頁）、軟骨肉腫（Ｗｕｎｄｅｒら著，「Ｌａｎｃｅｔ  Ｏｎｃｏｌｏｇｙ（２００７年）５１３−５２４頁」、慢性リンパ球性白血病（ＣＬＬ）（Ｈｅｄｇｅら著「Ｍｏｌ．Ｃａｎｃｅｒ  Ｒｅｓ．」（２００８年）６：１９２８−１９３６頁）、慢性骨髄性白血病（ＣＭＬ）（Ｄｉｅｒｋｓら著，「Ｃａｎｃｅｒ  Ｃｅｌｌ」（２００８年）１４：２３８−２４９頁）、結腸癌（ＹａｎｇとＨｉｎｄｓ著、「ＢＭＣ  Ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔａｌ  Ｂｉｏｌｏｇｙ」（２００７年）７：６頁）、食道癌（Ｂｅｒｍａｎら著，「Ｎａｔｕｒｅ」（２００３年）４２５：８４６−８５１頁、ＷＯ第２００５／０１３８００号）、胃癌（Ｂｅｒｍａｎら著，「Ｎａｔｕｒｅ」（２００３年）４２５：８４６−８５１頁、Ｍａら著、「Ｃａｒｃｉｎｏｇｅｎｅｓｉｓ」（２００５年）２６：１６９８−１７０５頁、ＷＯ第２００５／０１３８００号、Ｓｈｉｏｔａｎｉら著，「Ｊ．Ｇａｓｔｒｏｅｎｔｅｒｏｌ．Ｈｅｐａｔｏｌ」（２００８年）Ｓ１６１−Ｓ１６６、Ｏｈｔａら著、「Ｃａｎｃｅｒ  Ｒｅｓｅａｒｃｈ」（２００５年）６５：１０８２２−１０８２９頁、Ｍａら著、「ＷｏｒｌｄＪ．Ｇａｓｔｒｏｅｎｔｅｒｏｌ」（２００６年）１２：３９６−３９６９頁）、胃腸間質性腫瘍（ＧＩＳＴ）（Ｙｏｓｈｉｚａｋｉら著，「ＷｏｒｌｄＪ．Ｇａｓｔｒｏｅｎｔｅｒｏｌ」（２００６年）１２：５６８７−５６９１頁）、肝細胞癌（Ｓｉｃｋｌｉｃｋら著，「Ｃａｒｃｉｎｏｇｅｎｅｓｉｓ」（２００６年）２７：７４８−７５７、Ｐａｔｉｌら著，「Ｃａｎｃｅｒ  Ｂｉｏｌｏｇｙ  ＆  Ｔｈｅｒａｐｙ」（２００６年）５：１１１−１１７頁）、腎臓癌（Ｃｕｔｃｌｉｆｆｅら著，「Ｈｕｍａｎ  Ｃａｎｃｅｒ  Ｂｉｏｌｏｇｙ」（２００５年）１１：７９８６−７９９４頁）、肺癌（Ｗａｔｋｉｎｓら著，「Ｎａｔｕｒｅ」（２００３年）４２２：３１３−３１７頁）、神経髄芽細胞腫（Ｂｅｒｍａｎら著，「Ｓｃｉｅｎｃｅ（２００２年）２９７：１５５９−１５６１頁、Ｐｉｅ���ｓｃｈら著，「Ｃａｎｃｅｒ  Ｒｅｓｅａｒｃｈ」（１９９７年）５７：２０８５−２０８８頁」、黒色腫（Ｓｔｅｃｃａら著，「ＰＮＡＳ」（２００７年）１０４：５８９５−５９００頁、Ｇｅｎｇら著，「Ａｎｇｉｏｇｅｎｅｓｉｓ」（２００７年）１０：２５９−２６７頁）、多発性黒色腫（Ｐｅａｃｏｃｋら著，「ＰＮＡＳ  ＵＳＡ」（２００７年）１０４：４０４８−４０５３頁、Ｄｉｅｒｋｓら著，「Ｎａｔｕｒｅ  Ｍｅｄｉｃｉｎｅ」（２００７年）１３：９４４−９５１頁）、神経外胚葉腫瘍（Ｒｅｉｆｅｎｂｅｒｇｅｒら著，「Ｃａｎｃｅｒ  Ｒｅｓｅａｒｃｈ」（１９９８年）５８：１７９８−１８０３頁）、非ホジキン型リンパ腫（ＮＨＬ）（Ｄｉｅｒｋｓら著，「Ｎａｔｕｒｅ  Ｍｅｄｉｃｉｎｅ」（２００７年）１３：９４４−９５１頁、Ｌｉｎｄｅｍａｎｎ著，「Ｃａｎｃｅｒ  Ｒｅｓｅａｒｃｈ（２００８年）６８：９６１−９６４頁」、骨肉腫（Ｗａｒｚｅｃｈａら著，「Ｊ．Ｃｈｅｍｏｔｈｅｒ．」（２００７年）１９：５５４−５６１頁）、卵巣癌（Ｓｔｅｇら著，「Ｊ．Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｄｉａｇｎｏｓｔｉｃｓ」（２００６年）８：７６−８３頁）、膵臓癌（Ｔｈａｙｅｒら著，「Ｎａｔｕｒｅ」（２００３年）４２５：８５１−８５６頁、Ｂｅｒｍａｎら著，「Ｎａｔｕｒｅ」（２００３年）４２５：８４６−８５１頁、ＷＯ第２００５／０１３８００号）、前立腺癌（Ｋａｒｈａｄｋａｒら著，「Ｎａｔｕｒｅ」（２００４年）４３１：７０７−７１２頁、Ｓｈｅｎｇら著，「Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｃａｎｃｅｒ」（２００４年）３：２９−４２頁、Ｆａｎら著，「Ｅｎｄｏｃｒｉｎｏｌｏｇｙ」（２００４年）１４５：３９６１−３９７０頁）、及び精巣癌（Ｄｏｒｍｅｙｅｒら著，「Ｊ．Ｐｒｏｔｅｏｍｅ  Ｒｅｓ．」（２００８年）７：２９３６−２９５１頁）である。
【０１７７】
治療され得る病状の例としては、肺癌（例えば小細胞肺癌又は非小細胞肺癌）、膵臓癌、膀胱癌、卵巣癌、乳癌、結腸癌、多発性黒色腫、急性骨髄性白血病（ＡＭＬ）、慢性骨髄性白血病（ＣＭＬ）、神経外胚葉癌、及び肉腫（例えば軟骨肉腫及び骨肉腫のような筋骨格肉腫）が挙げられる。
【０１７８】
本明細書で記載された方法を使用して治療され得る増殖性疾患及び癌のより包括的リストとしては、例えば肺癌（小細胞肺癌又は非小細胞肺癌を含む）、肺系の他の癌、神経髄芽細胞腫及び他の脳腫瘍、膵臓癌、基底細胞癌、乳癌、前立腺癌及び他の尿生殖器癌、胃腸間質性癌（ＧＩＳＴ）及び胃腸管の他の癌、結腸癌、結腸直腸癌、卵巣癌、造血器系の癌（多発性骨髄腫、急性リンパ球性白血病、急性骨髄性白血病、慢性骨髄性白血病、慢性リンパ球性白血病、ホジキンリンパ腫、非ホジキンリンパ腫、及び骨髄異形成症候群を含む）、１次性赤血球増加症、ワルデンストローム・マクログロブリン血症、Ｈ鎖病、線維肉腫のような軟組織肉腫、粘液肉腫、脂肪肉腫、軟骨肉腫、骨肉腫、脊索腫、血管肉腫、内皮肉腫、リンパ管肉腫、リンパ管内皮肉腫、滑膜腫、中皮腫、Ｅｗｉｎｇ腫瘍、平滑筋肉腫、横紋筋肉腫、扁平上皮癌、基底細胞癌、黒色腫、及び他の皮膚癌、腺癌、汗腺癌、脂腺癌、乳頭癌、乳頭腺癌、乳頭状嚢胞腺癌、髄質癌、気管支癌、腎細胞癌、肝細胞癌、胆管癌、絨毛膜癌腫、胎児性癌、腎芽細胞腫、子宮頚癌、子宮癌、精巣癌、膀胱癌、及び他の尿生殖器癌、上皮癌、神経膠腫、神経膠星状細胞腫、神経髄芽細胞腫、頭蓋咽頭管腫瘍、脳室上衣腫、松果体腫、血管芽細胞腫、聴神経腫、希突起神経膠腫、脳膜腫、神経芽細胞腫、網膜細胞腫、子宮体癌、濾胞性リンパ腫、びまん性大細胞型Ｂ細胞性リンパ腫、暗殻細胞リンパ腫、肝細胞癌、甲状腺癌、胃癌、食道癌、頭頚部癌、小細胞癌、本能性血小板血症、原因不明骨髄様化生、過好酸性症候群、全身性肥満細胞症、家族性過好酸球増加症、慢性好酸球性白血病、神経内分泌癌、及びカルチノイド腫瘍が挙げられる。
【０１７９】
特定の実施形態では、癌は、膀胱癌、脳腫瘍、乳癌、結腸直腸癌、食道癌、子宮体癌、胃癌、頭頚部癌、腎臓癌、肝臓癌、肺癌、リンパ腫、白血病、神経髄芽細胞腫、黒色腫、多発性黒色腫、神経内分泌癌、骨肉腫、卵巣癌、膵臓癌及び前立腺癌から選択される。
【０１８０】
特定の実施形態では、癌は肺癌である。特定の実施形態では、肺癌は、小細胞肺癌（ＳＣＬＣ）である。特定の実施形態では、肺癌は非小細胞癌（ＮＳＣＬＣ）である。
【０１８１】
特定の実施形態では、癌は結腸直腸癌である。
【０１８２】
特定の実施形態では、癌は神経内分泌癌である。
【０１８３】
神経内分泌癌（胃腸膵管系腫瘍又は胃腸膵管系神経内分泌癌としても知られている）は、内分泌（ホルモン）系と神経系との間の境界にての細胞に由来する癌である。大部分の神経内分泌癌は、２種類、つまり癌様体と膵臓内分泌腫瘍（内分泌膵臓腫瘍又は島細胞腫瘍としても知られている）に分類される。２種類の主な分類に加えて、神経内分泌癌の他の型が存在し、これらは胃腸膵管系よりはむしろ呼吸器系から発生する神経内分泌肺腫瘍が挙げられる。神経内分泌癌は、副腎髄質、下垂体、及び副甲状腺などの内分泌腺、並びに甲状腺又は膵臓の内分泌島、更に呼吸管及び胃腸管内の分散された内分泌細胞に由来する。合衆国内の神経内分泌癌の全発生率は、毎年約９，０００件の新規症例である。
【０１８４】
例えば、治療される癌は、膵臓、肺、盲腸、十二指腸、回腸、直腸又は小腸の神経内分泌癌などのうちの１つ又はそれより多くが選択される神経内分泌癌であり得る。他の実施形態では、神経内分泌癌は、膵臓内分泌腫瘍、神経内分泌肺腫瘍、若しくは副腎髄質、下垂体、副甲状腺、甲状腺内分泌島、膵臓内分泌島、又は呼吸管又は胃腸管内に分散された内分泌細胞からの神経内分泌癌のうちの１つ又はそれより多くから選択される。
【０１８５】
膵臓内分泌腫瘍は、被験者において種々の症状を引き起こし得る生物学的に活性なペプチド（例えばホルモン）を分泌し得る。このような腫瘍は機能的又は分泌的腫瘍と呼ばれる。機能的腫瘍は、もっとも強力に分泌されるホルモンによって分類され得る。機能的膵臓内分泌腫瘍の例としては、ガストリン産生腫瘍（過剰のガストリンを産生し、Ｚｏｌｌｉｎｇｅｒ−Ｅｌｌｉｓｏｎ症候群を発症させる）、インシュリン産生腫瘍（過剰のインシュリンを産生する）、グルカゴン産生腫瘍（過剰のグルカゴンを産生する）、血管作動性ペプチド産生腫瘍（ＶＩＰ産生腫瘍、過剰の血管作動性ペプチドを産生する）ＰＰ産生腫瘍（過剰の膵臓ポリペプチドを産生する）、ソマトスタチン産生腫瘍（過剰のソマトスタチンを産生する）、水様下痢低カリウム血症無胃酸症（ＷＤＨＡ）、ＣＲＨ産生腫瘍（過剰のコルチコトロピン放出ホルモンを産生する）、ＧＨＲＨ産生腫瘍（過剰の成長ホルモン放出因子を産生する）、ニューロテンシノーマ（過剰のニューロテンシンを産生する）、ＡＣＴＨ産生腫瘍（過剰の副腎皮質刺激ホルモンを産生する）、ＧＲＦ産生腫瘍（過剰の成長ホルモン放出因子を産生する）、及び副甲状腺ホルモン関連ペプチド腫瘍が挙げられる。いくつかの例では、膵臓内分泌腫瘍は、下垂体腺又は膵臓島細胞中で頻繁に発生する多発性内分泌腺腫症１型（ＭＥＮ１）を有する被験者において発生し得る。ペプチド（例えばホルモン）を分泌しない膵臓内分泌腫瘍は、非機能的（又は非分泌性又は非機能性）腫瘍と呼ばれる。一実施形態では、治療される癌は、膵管腺癌である。
【０１８６】
他の実施形態では、治療される癌は、癌様性神経内分泌癌のような癌様性腫瘍である。癌様性腫瘍は、膵臓内分泌腫瘍よりもゆっくりと増殖する傾向がある。癌様性腫瘍は、セロトニン、すなわちカルチノイド症候群と呼ばれる特異的セットの症状を引き起こす生体分子のような生物学的に活性な分子を産生し得る。生物学的に活性な分子を産生する癌様腫瘍は、機能的癌様腫瘍としばしば称され、一方このような分子を産生しない癌様腫瘍は非機能的癌様腫瘍と称される。いくつかの実施形態では、神経内分泌癌は機能的癌様腫瘍（例えばセロトニンのような生物学的に活性な分子を産生できる癌様腫瘍）である。他の実施形態では、神経内分泌癌は非機能的癌様腫瘍である。特定の実施形態では、癌様腫瘍は、胸腺、胃、小腸（十二指腸、空腸、回腸）、大腸（盲腸、結腸）、直腸、膵臓、虫垂、卵巣及び精巣癌様腫瘍からの腫瘍である。
【０１８７】
癌様腫瘍は、肺、胸腺、胃、小腸（十二指腸、空腸、回腸）、大腸（盲腸、結腸）、直腸、膵臓、虫垂、卵巣及び精巣などの発生点に依存して、更に分離され得る。
【０１８８】
いくつかの実施形態では、神経内分泌癌は癌様性腫瘍である。他の実施形態では、神経内分泌癌は、膵臓内分泌腫瘍である。更に他の実施形態では、神経内分泌癌は、神経内分泌肺腫瘍である。特定の実施形態では、神経内分泌癌は、副腎髄質、下垂体、副甲状腺、甲状腺内分泌島、膵臓内分泌島、又は呼吸管又は胃腸管内に分散された内分泌細胞に由来する。
【０１８９】
治療され得る神経内分泌癌の更なる例としては、限定されるものではないが、甲状腺の髄質癌、メルケル細胞癌（索状癌）、小細胞肺癌（ＳＣＬＣ）、大細胞神経内分泌癌（肺の）、肺外小細胞癌（ＥＳＣＣ又はＥＰＳＣＣ）、子宮頚部の神経内分泌癌、多発性内分泌腺腫症１型（ＭＥＮ−１又はＭＥＮ１）、多発性内分泌腺腫症２型（ＭＥＮ−２又はＭＥＮ２）、神経線維腫症１型、結節硬化症、フォンヒッペル‐リンダウ（ＶＨＬ）病、神経細胞腫、クロム親和性細胞腫（ｐｈａｅｏｃｈｒｏｍｏｃｙｔｏｍａ）傍神経節腫、下垂体前葉の神経内分泌癌、及び／又はカーニー複合などが挙げられる。
【０１９０】
他の実施形態では、治療される癌又は腫瘍は、筋骨格肉腫（例えば骨及び軟骨肉腫）のような肉腫である。代表的な筋骨格肉腫としては、限定されるものではないが、骨肉腫（例えば通常の骨原性肉腫）、軟骨肉腫（例えば、通常の軟骨肉腫）、Ｅｗｉｎｇ肉腫、退行分化型軟骨肉腫、傍骨性骨原性肉腫、骨膜性骨原性肉腫、間葉性軟骨肉腫、骨の巨細胞腫、アダマンチノーマ、脊索腫、及び悪性線維症組織球種（ＭＦＨ、［これは高悪性度分化型多形性肉腫又はＨＧＵＰＳとも称する］）線維肉腫、平滑筋肉腫、加えて血管肉腫などのような骨において更に発生し得る、成人の軟組織内で局所的に発生する他の肉腫が挙げられる。これら肉腫のそれぞれが、以下の本明細書にてより詳細に説明されている。
【０１９１】
比較的一般的な骨及び軟骨肉腫亜種の例としては、限定されるものではないが、骨肉腫（例えば、通常の骨原性肉腫）、軟骨肉腫（通常の軟骨肉腫）、Ｅｗｉｎｇ肉腫、及び退行分化型軟骨肉腫である。
【０１９２】
骨原性肉腫（骨肉腫とも呼ばれる）は、もっとも一般的な骨の腫瘍である。合衆国では、毎年、骨原性肉腫の約８００〜１０００の症例がみられる。骨肉腫、典型的には、骨のパジェット病に関連した骨肉腫の発生率の第２のピークは、８０代で発生する。骨肉腫は、典型的に青年期に発症し、並びに一般的には膝関節周辺の骨で発症するが身体のいかなる骨でも発症し得る。治療は、典型的には最高の治癒率を達成するための化学療法及び手術を含む。使用される標準的薬剤は、成人ではドキソルビシンとシスプラチン、小児、青年期又は若年成人では高投与量のメトトレキサートが加えられた同一の２つの薬剤を含む。イフォスファミドの使用については、未だ議論の余地がある。再発は、典型的には肺で起こる。これは、手術で根治され得るような１つの場合であり、すなわち、初期骨肉腫からの肺転移の切除が、安全に除去し得、かつ３０〜３５％の治癒率が組み合わされ得るような少数の肺小結節がある場合の標準的な治療である。一般的に、骨肉腫は、Ｌｉ−Ｆｒａｕｍｅｎｉ症候群（ｐ５３遺伝子中の突然変異を包含する）、網膜芽細胞腫（Ｒｂ遺伝子中の突然変異を包含する）、及びＲｏｔｈｍｕｎｄ−Ｔｈｏｍｓｏｎ症候群などのような肉腫に関連した家族性症候群で発生する。
【０１９３】
通常の軟骨肉腫は、治療するのに困難な腫瘍であり得る。これは高齢な患者で頻繁に発生し、並びに骨盤中で頻繁に発生する。結果として、複数の医学的診断を有する人々が、機能の損失に導くような術後合併症の危険を伴う非常に広範囲な手術を必要する状況に置かれる。他の部位に発症した軟骨肉腫に関しては、手術は罹患性が低く、標準的治療に相当する。転移性疾患を有する患者は、化学療法に良好に反応しないことが多い。等級１の軟骨肉腫はほとんど転移せず、等級２の軟骨肉腫は転移の危険性はわずか１０〜１５％であり、並びに等級３の軟骨肉腫は、２／３又はそれ以上の転移の危険性を有する。結果的に、等級３の軟骨肉腫を有する何人かの人々は、補助的な化学療法が与えられるであろう。透明細胞軟骨肉腫と呼ばれる軟骨肉腫の変型は、転移の中等度の危険性を有するが、治療は典型的には手術のみである。
【０１９４】
Ｅｗｉｎｇ肉腫は、骨の肉腫では第三番目に一般的であり、並びに小児では第二番目に一般的である。同じ腫瘍は、成人の軟組織で、骨で発生するより多く発生する。合衆国では、年間５００症例よりも少ないと推定される。化学療法なしでは、治癒率は最高で１０％であるが、化学療法によって、治癒率は小児では７５％まで上昇し、成人では５０〜６０％まで上昇するとみられる。より高い治癒率を可能にするために、手術及び放射線療法もまた、初期腫瘍の治療として一般的に使用されている。Ｅｗｉｎｇ肉腫は、体のいかなる部位にも出現し得る。それらが再発する際には、肺及び骨での再発がもっとも一般的である。
【０１９５】
退行分化型軟骨肉腫は、軟骨肉腫のより攻撃的な変型であり、典型的には青年期と６０歳以上の人々で発生する。これは、軟骨肉腫と、軟骨肉腫への関連性の手掛かりさえも示さないＭＦＨ（悪性線維性組織球腫）のような低分化型腫瘍の両方の特徴を示す。この軟骨肉腫の変型は、再発の高い危険性を有し、これは３等級の通常の軟骨肉腫（上述のような）よりも更に高い。
【０１９６】
稀な骨及び軟骨肉腫亜種としては、傍骨性骨原性肉腫、骨膜骨原性肉腫、間葉性軟骨肉腫、骨の巨細胞腫瘍、アダマンチノーマ、及び脊索腫が挙げられる。
【０１９７】
傍骨性骨肉腫は、骨膜と呼ばれる、骨の表面接続組織をリフトオフすることなく骨の表面から成長する低悪性度骨肉腫である。これは、非常に一般的に、３０代成人の後方の大腿骨遠位部に沿って発生する。この骨肉腫の稀な型の治療は、たいていは手術のみであるが、退行分化型又は高悪性度成分のような攻撃的な特徴が認められた場合は、化学療法も頻繁に提供される。
【０１９８】
骨膜骨肉腫は、骨の表面から成長し、骨膜と呼ばれる骨の表面接続組織をリフトオフする低悪性度骨肉腫であり、持ち上げられた骨膜の領域中での新しい骨形成にも関連している。これは、典型的には１０〜３０歳の間で発生する。骨肉腫のこの稀な変型のための治療は、一般的には手術のみである。このタイプの骨肉腫に化学療法が有益であるかどうかは明確ではないが、腫瘍が通常よりも攻撃性を示した場合、化学療法がしばしば提供される。
【０１９９】
間葉性軟骨肉腫は、より典型的な低悪性度の軟骨肉腫と混合された攻撃的な小さい円形の青色細胞の混合物を示す稀な骨腫瘍である。これらは、たいてい１５〜３０歳の人々で発症し、再発の高いリスクを有する。化学療法の有益性は知られていないが、化学療法は頻繁に使用される。補助療法（又は同様に転移性状況で）で使用される典型的な化学療法剤は、Ｅｗｉｎｇ肉腫及び同様な肉腫のために使用される薬剤である。
【０２００】
骨の巨細胞腫瘍は、典型的に２０〜４０歳で発症する骨の腫瘍であり、顕微鏡下での特徴的な外観を有する。これは、典型的に膝と脊椎下部の領域で発生する。腫瘍を削り取ることで治療され、更に腫瘍腔をセメント（これは腫瘍を加熱し、結果的に腫瘍を崩壊させる）又は液体窒素（腫瘍をその場で凍結及び融解し、残存する細胞を大抵は殺傷する）で処置する。同様に、その領域を再建することを意図して、骨移植片が頻繁に使用される。いくつかの場合、他の組織を損傷することなく、腫瘍が一断片として除去され得、並びにこのような場合、骨移植が同様に実施され得る。通常の巨細胞腫瘍は、再発を開始するリスクを有するが、肺へ実際に転移する機会は低い。巨細胞腫瘍は、動脈瘤性骨嚢腫から必ず分化される。
【０２０１】
アダマンチノーマは、歯の形成に役割を果たす細胞と同様であり得る骨形成に関連する細胞の非常に稀な腫瘍である。歯の形成に役割を果たす細胞は、上顎よりも下顎に多く癌を形成し得、エナメル上皮腫と称される。アダマンチノーマは、ほとんどの場合脛骨にも発症し、手術で治療される。稀な症例は、体のどこかに転移し、この時点で、寿命を延ばすために、化学療法が用いられる。
【０２０２】
脊索腫は、発達中の脊椎、いわゆる脊索を形成した胎児細胞の細胞に非常に類似する腫瘍である。この種の腫瘍は典型的には５０歳を過ぎた人々で発症するために、子宮内で胎児が成長すると同時に、骨の発達への関係を理解することは困難である。この腫瘍は、典型的には、頭蓋骨の基底部で、又は仙骨中（骨盤内の脊椎の最も基底部）で発症する。このような位置であるために、外科的除去は不可能なことが多い。これは、外科的除去が不可能である腫瘍であっても治療するという意図によって、放射線に反応し得る腫瘍であり、並びにプロトンビーム放射を試みるために理想的なタイプの腫瘍でもある。再発する腫瘍に関しては、イマチニブ（Ｇｌｅｅｖｅｃ（登録商標））がいくつかに使用可能であるヒントがあるが、他の化学療法剤に反応がみられることは非常に稀である。
【０２０３】
成人の軟組織中で典型的に発生する他の肉腫は、骨でもまた発生し得る。これらは、悪性線維性組織球種（ＭＦＨ［高悪性度未分化型多形性肉腫又はＨＧＵＰＳとも称される］）、線維肉腫、平滑筋肉腫、及び血管肉腫などが挙げられる。
【０２０４】
本発明の特定の方法は、既存の化学療法剤に良好に反応するが、高再発率を呈するような癌の治療に特に有効であり得る。これらの例では、ヘッジホッグ阻害剤による治療は、患者の無再発生存時間又は生存率を増強させ得る。このような癌の例としては、肺癌（例えば小細胞癌又は非小細胞癌）、膀胱癌、卵巣癌、乳癌、結腸癌、多発性黒色腫、急性骨髄性白血病（ＡＭＬ）、慢性骨髄性白血病（ＣＭＬ）、神経内分泌癌、及び肉腫が挙げられる。
【０２０５】
本発明はまた、癌患者で無再発生存率を延長させる方法で使用するための、１つ又はそれより多くの医薬品の調製における化学療法剤とヘッジホッグ阻害剤の使用も包含する。本発明はまた、化学療法剤で既に治療された癌患者の無再発生存を延長させる方法で使用するための、医薬品の調製におけるヘッジホッグ阻害剤の使用にも関する。本発明は、更に膵臓癌患者を治療する方法で使用するための医薬品の調製におけるヘッジホッグ阻害剤の使用も包含する。
【０２０６】
複数の腫瘍型が、化学療法後（本明細書の実施例１１及び１２参照）並びに低酸素状態のようなストレスに反応して（実施例１２参照）、Ｈｈリガンドのアップレギュレーションを示すことが発見されている。アップレギュレートされるＨｈリガンドのタイプ（すなわち、ソニック、インディアン及び／又はデザート）及びアップレギュレーションの程度は、腫瘍型と化学療法剤に強く依存する。理論に束縛されるものではないが、これらの結果は、ストレス（化学療法を含む）は、保護的又は生存的機構として、腫瘍細胞内におけるヘッジホッグリガンドの生成を誘導することを示唆している。この結果は、化学療法後の腫瘍由来Ｈｈリガンドのアップレギュレーションが、腫瘍の再発にとって重要であるＨｈ経路に依存する細胞集団の生存に影響を及ぼし得、これによって、Ｈｈ経路の阻害に感受性を示し得ることを、更に示唆している。
【０２０７】
したがって、本発明の一態様は、化学療法中又は化学療法後に、１つ又はそれより多くのヘッジホッグリガンドの発現が増加したかどうかを決定することによって、次いでヘッジホッグ阻害剤を投与することによって癌を治療する方法である。リガンド発現は、末梢血液及び／又は尿中のリガンドの可溶型の検出によって（例えば、ＥＬＩＳＡアッセイ又はラジオイムノアッセイによって）、循環する腫瘍細胞中（例えば蛍光活性化−細胞選別法（ＦＡＣＳ）アッセイ、免疫組織化学アッセイ、又は逆転写ポリメラーゼ連鎖反応（ＲＴ−ＰＣＲ）アッセイによって）で、若しくは腫瘍又は骨髄生検中（例えば、免疫組織化学アッセイ、ＲＴ−ＰＣＲアッセイ、又はインサイチュハイブリダイゼーションによって）で測定され得る。所定の患者の腫瘍内でのヘッジホッグリガンドの検出は、前立腺癌患者でのＰＳＭＡの検出（Ｂａｎｄｅｒ著，「ＮＨ  Ｎａｔ  Ｃｌｉｎ  Ｐｒａｃｔ  Ｕｒｏｌ」２００６年，３：２１６−２２５頁）と同様に、ヘッジホッグリガンドに対する抗体の標識付型の全身投与とそれに続く画像撮影によって、インヴィヴォにて評価され得る。患者での発現レベルは、少なくとも２時点にて測定され得、リガンド誘導が発生したことを決定される。例えば、ヘッジホッグリガンド発現は、化学療法前かつ化学療法後、化学療法前かつ化学療法実施中の１つ又はそれより多くの時点にて、若しくは化学療法実施中の２つ又はそれより多くの異なる時点にて測定され得る。ヘッジホッグリガンドがアップレギュレートされたことが確認できた場合、ヘッジホッグ阻害剤が投与され得る。したがって、患者のヘッジホッグリガンド誘導の測定によって、他の化学療法と併用して、又はそれに続く化学療法を伴ってヘッジホッグ経路阻害剤を患者に投与されるべきであるか否かを決定することができる。
【０２０８】
本発明の別の態様は、癌腫瘍中のヘッジホッグリガンドの発現を上昇させる１つ又はそれより多くの化学療法剤を同定することによって、並びにヘッジホッグリガンド発現を上昇させる１つ又はそれより多くの化学療法剤とヘッジホッグ阻害剤を投与することによって患者の癌を治療する方法に関する。いずれの化学療法剤がヘッジホッグ発現を上昇させるかを決定するために、治療前に患者から腫瘍細胞を切除し、生体外にて化学療法剤のパネルに曝し、ヘッジホッグリガンド発現における変化を測定するよう試験する（例えば、Ａｍ．Ｊ．Ｏｂｓｔｅｔ著，「Ｇｙｎｅｃｏｌ．」，２００３年１１月，１８９（５）：１３０１−７頁、「Ｊ．Ｎｅｕｒｏｏｎｃｏｌ．」，２００４年２月，６６（３）：３６５−７５頁を参照）。１つ又はそれより多くのヘッジホッグリガンドでの増加を引き起こす化学療法剤が、次いで患者に投与される。１つ又はそれより多くのヘッジホッグリガンドでの増加を引き起こす化学療法剤が、単独で、若しくは１つ又はそれより多くのヘッジホッグリガンドでの増加を引き起こし得る又は引き起こし得ない１つ又はそれより多くの異なる化学療法剤と併用して投与され得る。ヘッジホッグ阻害剤と化学療法剤は、同時に（すなわち、実質的に同一時間にて、又は同一治療内で）、又は順次に（すなわち、１つの投与直後に他方を投与、或いは２つの薬剤の投与の間に間隔をおいて）投与され得る。ヘッジホッグ阻害剤による治療は、化学療法剤による治療が終了後に継続し得る。したがって、化学療法剤は、ヘッジホッグリガンド発現をアップレギュレートするその能力に基づいて（同様に腫瘍をヘッジホッグ経路に依存させるように）選択されて、このことが、ヘッジホッグ阻害剤による治療に腫瘍をより感受性にさせることができる。
【０２０９】
本発明の別の態様は、ＥＧＦＲ遺伝子又は遺伝子生成物中の変化を同定することによって、患者の癌を治療する方法に関する。ＥＧＦＲ遺伝子又は遺伝子生成物の変化としては、限定されるものではないが、細胞遺伝学的異常、非可逆的転座、再構成、染色体内部逆位、突然変異、点変異、欠失、遺伝子コピー数の変化、転写物中の突然変異、遺伝子又は遺伝子生成物の発現中の変化が挙げられる。特定の実施形態では、転写物中の突然変異は、ｍＲＮＡ突然変異、ｒＲＮＡ突然変異又はｔＲＮＡ突然変異である。特定の実施形態では、発現レベル、構造（例えば、リン酸化などのような翻訳後修飾）及び／又は１つ又はそれより多くの癌遺伝子ポリペプチドの活性が評価される。関連する実施形態では、発現レベル、構造、及び／又は１つ又はそれより多くの変異体癌遺伝子イソ型、例えば１つまたはそれより多くの選択的スプライシングに起因するイソ型の活性、フレームシフト、細胞中の種々の癌原遺伝子発現生成物の翻訳及び／又は翻訳後事象、例えば高増殖性細胞（癌性又は腫瘍細胞）などが検出される。
【０２１０】
ＥＧＦＲ突然変異の例は、例えば、Ｃｏｕｚｉｎ  Ｊ著，（２００４年）「Ｓｃｉｅｎｃｅ」３０５：１２２２−１２２３頁、Ｆｕｋｕｏｋａ，Ｍ．ら著，（２００３年）「Ｊ．Ｃｌｉｎ．Ｏｎｃｏｌ．」２１：２２３７−４６頁、Ｌｙｎｃｈら著，（２００４年）「ＮＥＪＭ」３５０（２１）：２１２９−２１３９頁、Ｐａｅｚら著，（２００４年）「Ｓｃｉｅｎｃｅ」３０４：１４９７−１５００頁、Ｐａｏ，Ｗ．ら著，「Ｐｒｏｃ  Ｎａｔｌ  Ａｃａｄ  Ｓｃｉ  ＵＳＡ．」（２００４年）１０１（３６）：１３３０６−１１ページ、Ｇａｚｄａｒ  Ａ．Ｆ．ら著，「Ｔｒｅｎｄｓ  Ｍｏｌ  Ｍｅｄ．」（２００４年）１０（１０）：４８１−６頁、Ｈｕａｎｇ  Ｓ．Ｆ．ら著，（２００４年）「Ｃｌｉｎ  Ｃａｎｃｅｒ  Ｒｅｓ．」１０（２４）：８１９５−２０３頁、Ｃｏｕｚｉｎ  Ｊ．著，「Ｓｃｉｅｎｃｅ」（２００４年）３０５（５６８８）：１２２２−３頁、Ｓｏｒｄｅｌｌａ  Ｒ．ら著，（２００４年）３０５（５６８７）：１１６３−７頁、Ｋｏｓａｋａ  Ｔ．ら著，（２００４年）「Ｃａｎｃｅｒ  Ｒｅｓ．」６４（２４）：８９１９−２３頁、Ｍａｒｃｈｅｔｔｉ  Ａ．ら著，「Ｊ  Ｃｌｉｎ  Ｏｎｃｏｌ．」（２００５年）２３（４）：８５７−６５頁、Ｔｏｋｕｍｏ  Ｍ．ら著，（２００５年）「Ｃｌｉｎ  Ｃａｎｃｅｒ  Ｒｅｓ．」１１（３）：１１６７−１１７３頁、Ｈａｎ  Ｓ．Ｗ．ら著，（２００５年）「Ｊ  Ｃｌｉｎ  Ｏｎｃｏｌ．」２３（１１）：２４９３−５０１頁、Ｍｉｔｓｕｄｏｍｉ  Ｔ．ら著，（２００５年）「Ｊ  Ｃｌｉｎ  Ｏｎｃｏｌ．」２３（１１）：２５１３−２０頁、Ｓｈｉｇｅｍａｔｓｕ  Ｈ．ら著，「Ｊ  Ｎａｔｌ  Ｃａｎｃｅｒ  Ｉｎｓｔ．」９７（５）：３３９−４６頁、Ｋｉｍ  Ｋ．  Ｓ．ら著，（２００５）「Ｃｌｉｎ  Ｃａｎｃｅｒ  Ｒｅｓ．」１１（６）：２２４４−５１頁、Ｃａｐｐｕｚｚｏ  Ｆ．ら著，（２００５年）「Ｊ  Ｎａｔｌ  Ｃａｎｃｅｒ  Ｉｎｓｔ．」９７（９）：６４３−５５頁、Ｃｏｒｔｅｓ−Ｆｕｎｅｓ  Ｈ．ら著，「Ａｎｎ  Ｏｎｃｏｌ．」（２００５年）１６（７）：１０８１−６頁、Ｓａｓａｋｉ  Ｈ．ら著，（２００５年）「Ｃｌｉｎ  Ｃａｎｃｅｒ  Ｒｅｓ．」１１（８）：２９２４−９頁、Ｃｈｏｕ  Ｔ．  Ｙ．ら著，（２００５年）「Ｃｌｉｎ  Ｃａｎｃｅｒ  Ｒｅｓ．」１１（１０）：３７５０−７頁、Ｐａｏ  Ｗ．ら著，（２００５年）「ＰＬｏＳ  Ｍｅｄ．」２（３）：ｅ７３、Ｓａｓａｋｉ  Ｈ．ら著，（２００５年）「Ｉｎｔ  Ｊ  Ｃａｎｃｅｒ．」１１８（１）：１８０−４頁、Ｅｂｅｒｈａｒｄ  Ｄ．Ａ．ら著，（２００５年）「Ｊ  Ｃｌｉｎ  Ｏｎｃｏｌ．」２３（２５）：５９００−９頁、Ｔａｋａｎｏ  Ｔ．ら著，（２００５）「Ｊ  Ｃｌｉｎ  Ｏｎｃｏｌ．」２３（２８）：６８２９−３７頁、Ｔｓａｏ  Ｍ．Ｓ．ら著，（２００５年）「Ｎ  Ｅｎｇｌ  Ｊ  Ｍｅｄ．」３５３（２）：１３３−４４頁、Ｍｕ  Ｘ．Ｌ．ら著，（２００５年）「Ｃｌｉｎ  Ｃａｎｃｅｒ  Ｒｅｓ．」１１（１２）：４２８９−９４頁、Ｓｏｎｏｂｅ  Ｍ．ら著，（２００５年）「Ｂｒ  Ｊ  Ｃａｎｃｅｒ．」９３（３）：３５５−６３頁、Ｔａｒｏｎ  Ｍ．ら著，（２００５年）「Ｃｌｉｎ  Ｃａｎｃｅｒ  Ｒｅｓ．」１１（１６）：５８７８−８５頁、  ���ｕｋｏｈａｒａ  Ｔ．ら著，（２００５年）「Ｊ  Ｎａｔｌ  Ｃａｎｃｅｒ  Ｉｎｓｔ．」９７（１６）：１１８５−９４頁、Ｚｈａｎｇ  Ｘ．Ｔ．ら著，（２００５年「Ｏｎｃｏｌ．」１６（８）：１３３４−４２頁に記載されている。ＥＧＦＲ遺伝子又は遺伝子生成物中の変化の例としては、限定されるものではないが、ＥＧＦＲエクソン欠失（例えば、ＥＧＦＲエクソン１９欠失）、及び／又はエクソン突然変異（例えば、Ｌ８５８Ｒ／Ｔ７９０Ｍ  ＥＧＦＲ突然変異）が挙げられる。他の代表的変化としては、限定されるものではないが、ＥＧＦＲ＿Ｄ７７０＿Ｎ７７１＞ＡＧＧ、ＥＧＦＲ＿Ｄ７７０＿Ｎ７７１ｉｎｓＧ、ＥＧＦＲ＿Ｄ７７０＿Ｎ７７１ｉｎｓＧ、ＥＧＦＲ＿Ｄ７７０＿Ｎ７７１ｉｎｓＮ、ＥＧＦＲ＿Ｅ７０９Ａ、ＥＧＦＲ＿Ｅ７０９Ｇ、ＥＧＦＲ＿７０９Ｈ、ＥＧＦＲ＿Ｅ７０９Ｋ、ＥＧＦＲ＿Ｅ７０９Ｖ、ＥＧＦＲ＿Ｅ７４６＿Ａ７５０ｄｅｌ、ＥＧＦＲ＿Ｅ７４６＿Ａ７５０ｄｅｌ，Ｔ７５１Ａ、ＥＧＦＲ＿Ｅ７４６＿Ａ７５０ｄｅｌ，Ｖｉｎｓ、ＥＧＦＲ＿Ｅ７４６＿Ｔ７５１ｄｅｌ，Ｉｉｎｓ、ＥＧＦＲ＿Ｅ７４６＿Ｔ７５１ｄｅｌ，Ｓ７５２Ａ、ＥＧＦＲ＿Ｅ７４６＿Ｔ７５１ｄｅｌ，Ｓ７５２Ｄ、ＥＧＦＲ＿Ｅ７４６＿Ｔ７５１ｄｅｌ，Ｖｉｎｓ、ＥＧＦＲ＿Ｇ７１９Ａ、ＥＧＦＲ＿Ｇ７１９Ｃ、ＥＧＦＲ＿Ｇ７１９Ｓ、ＥＧＦＲ＿Ｈ７７３＿Ｖ７７４ｉｎｓＨ、ＥＧＦＲ＿Ｈ７７３＿Ｖ７７４ｉｎｓＮＰＨ、  ＥＧＦＲ＿Ｈ７７３＿Ｖ７７４ｉｎｓＰＨ、ＥＧＦＲ＿Ｈ７７３＞ＮＰＹ、ＥＧＦＲ＿Ｌ７４７＿Ｅ７４９ｄｅｌ、ＥＧＦＲ＿Ｌ７４７＿Ｅ７４９ｄｅｌ，Ａ７５０Ｐ、ＥＧＦＲ＿Ｌ７４７＿Ｓ７５２ｄｅｌ、ＥＧＦＲ＿Ｌ７４７＿Ｓ７５２ｄｅｌ，Ｐ７５３Ｓ、ＥＧＦＲ＿Ｌ７４７＿Ｓ７５２ｄｅｌ，Ｑｉｎｓ、ＥＧＦＲ＿Ｌ７４７＿Ｔ７５０ｄｅｌ，Ｐｉｎｓ、ＥＧＦＲ＿Ｌ７４７＿Ｔ７５１ｄｅｌ、ＥＧＦＲ＿Ｌ８５８Ｒ、ＥＧＦＲ＿Ｌ８６１Ｑ、ＥＧＦＲ＿Ｍ７６６＿Ａ７６７ｉｎｓＡＩ、ＥＧＦＲ＿Ｐ７７２＿Ｈ７７３ｉｎｓＶ、ＥＧＦＲＳ７５２＿１７５９ｄｅｌ、ＥＧＦＲ＿Ｓ７６８Ｉ、ＥＧＦＲ＿Ｔ７９０Ｍ、ＥＧＦＲ＿Ｖ７６９＿Ｄ７７０ｉｎｓＡＳＶ、ＥＧＦＲ＿Ｖ７６９＿Ｄ７７０ｉｎｓＡＳＶ，及びＥＧＦＲ＿Ｖ７７４＿Ｃ７７５ｉｎｓＨＶが挙げられる。
【０２１１】
遺伝子又は遺伝子生成物中の変化は、当該技術分野で使用可能な検出の任意の方法によって検出され得、これらは、限定されるものではないが、１つ又はそれより多くの核酸ハイブリダイゼーションアッセイ、増幅ベースのアッセイ（例えば、ポリメラーゼ連鎖反応（ＰＣＲ）、ＰＣＲ−ＲＦＬＰアッセイ、リアルタイムＰＣＲ、配列化、スクリーニング解析（標準核型法による分裂中期細胞遺伝学的解析、ＦＩＳＨ、分光核型決定法又はＭＦＩＳＨ、比較ゲノムハイブリダイゼーションを含む）、インサイチュハイブリダイゼーション、ＳＳＰ、ＨＰＬＣ又は質量分析遺伝子型決定法などが挙げられる。
併用療法
【０２１２】
上記及び本明細書で記載されたようなヘッジホッグ阻害剤は、１つ又はそれより多くの追加療法、例えば放射線療法、手術及び／又は１つ又はそれより多くの治療用薬剤と併用して、本明細書に記載されたような癌に投与され得ると理解されるであろう。
【０２１３】
「併用して」とは、療法又は療法剤が同時に投与されるべき及び／又は一緒に送達するよう製剤化されることを暗示することを意図しているものではなく、これら送達の方法は本発明の範囲内である。医薬組成物は、１つ又はそれより多くの他の追加的療法又は療法剤と同時に、それに先立って、或いは順次に投与され得る。一般的に、それぞれの薬剤は、それら薬剤で決定された投与量及び／又はタイムスケジュールにて投与されるであろう。この組み合わせで使用される追加的療法剤は、単一の組成物中で投与され得るか、又は異なる組成物中で別個に投与され得ることを更に理解されたい。投薬計画で用いるための特別な組み合わせでは、本発明の医薬組成物と追加療法の活性薬剤及び／又は達成されるべき治療的効果との適合性が考慮されるであろう。
【０２１４】
一般的に、併用して使用される追加的療法剤は、それらが個々で使用される場合のレベルを超えないレベルにて使用されることが予期される。いくつかの実施形態では、併用して使用されるレベルは、個々に使用される場合のレベルよりも低いであろう。
【０２１５】
特定の実施形態では、本明細書で記載された方法によって治療される癌は、例えば、神経髄芽細胞腫、肉腫（例えば、骨又は軟組織肉腫（例えば、滑液膜肉腫、脂肪肉腫など）、骨及び軟骨肉腫、骨肉腫、及び軟骨肉腫のような筋骨格肉腫、膵臓癌、肺癌（例えば、小細胞肺癌（ＳＣＬＣ）又は非小細胞肺癌（ＮＳＣＬＣ））、結腸直腸癌、卵巣がん、頭頚部扁平上皮癌（ＨＮＳＣＣ）、慢性骨髄性白血病（ＣＭＬ）、慢性リンパ球性白血病（ＣＬＬ）、急性リンパ芽球性白血病（ＡＬＬ）、急性骨髄性白血病（ＡＭＬ）、多発性骨髄腫、及び前立腺癌から選択され得る。
【０２１６】
小細胞肺癌の治療のために、ヘッジホッグ阻害剤と併用して使用される好適な療法剤の例としては、限定されるものではないが、例えば、エトポシド、カルボプラチン、シスプラチン、イリノテカン、トポテカン、ゲムシタビン、リポソーマルＳＮ−３８、ベンダムスチン、テモゾロミド、ベロテカン、ＮＫ０１２、ＦＲ９０１２２８、フラボピリドールなどの化学療法剤；チロシンキナーゼ阻害剤（例えばＥＧＦＲ阻害剤（例えばエルロチニブ、ゲフィチニブ、セツキマブ、パニツムマブ）；マルチキナーゼ阻害剤（例えばソラフェニブ、スニチニブ）；ＶＥＧＦ阻害剤（例えばベバシズマブ、バンデタニブ）；癌ワクチン（例えばＧＶＡＸ）；Ｂｃｌ−２阻害剤（例えばナトリウムオブリメルセン、ＡＢＴ−２６３）；プロテアソーム阻害剤（例えばボルテゾミブ（Ｖｅｌｃａｄｅ）、ＮＰＩ−００５２）、パクリタキセル又はパクリタキセル剤；ドセタキセル；ＩＧＩ−１受容体阻害剤（例えばＡＭＧ  ４７９）；ＨＧＦ／ＳＦ阻害剤（例えばＡＭＧ  １０２、ＭＫ−０６４６）；クロロキン；オーロラキナーゼ阻害剤（例えばＭＬＮ８２３７）；放射線免疫療法（例えばＴＦ２）；ヘッジホッグ阻害剤（例えばＩＰＩ−４９３、ＩＰＩ−５０４、タネスピマイシン、ＳＴＡ−９０９０）；ｍＴＯＲ阻害剤（例えばエベロリムス）；Ｅｐ−ＣＡＭ−／ＣＤ３−二重特異性抗体（例えばＭＴ１１０）；ＣＫ−２阻害剤（例えばＣＸ−４９４５）；ＨＤＡＣ阻害剤（例えばベリノスタット）；ＳＭＯ拮抗剤（例えばＢＭＳ  ８３３９２３）；アムルビシン、ペプチド癌ワクチン、及び放射線療法（例えば、強度変調放射線療法（ＩＭＲＴ）、少分割放射線療法、低酸素誘導放射線療法）、手術、及びこれらの組み合わせが挙げられる。
【０２１７】
非小細胞肺癌の治療のために、ヘッジホッグ阻害剤と併用して使用される好適な療法剤の例としては、限定されるものではないが、例えば、ビノレルビン、シスプラチン、ドセラキセル、二ナトリウムペメトレキセド、エトポシド、ゲムシタビン、カルボプラチン、リポソーマルＳＮ−３８、ＴＬＫ２８６、テモゾロミド、トポテカン、二ナトリウムペメトレキセド、アザシチジン、イリノテカン、カリウムテガフール−ギメラシル−オテラシル、サパシタビンなどの化学療法剤；チロシンキナーゼ阻害剤（例えばＥＧＦＲ阻害剤（例えばエルロチニブ、ゲフィチニブ、セツキマブ、パニツムマブ、ネシシツムマブ、ＰＦ−００２９９８０４、ニモツズマブ、ＲＯ５０８３９４５）、ＭＥＴ阻害剤（例えばＰＦ−０２３４１０６６、ＡＲＱ１９７）、Ｐ１３Ｋキナーゼ阻害剤（例えばＸＬ１４７、ＧＤＣ−０９４１）、Ｒａｆ／ＭＥＫ二重キナーゼ阻害剤（例えばＲＯ５１２６７６６）、ＰＩ３Ｋ／ｍＴＯＲ二重キナーゼ阻害剤（例えばＸＬ７６５）、ＳＲＣ阻害剤（例えばダサチニブ）、二重阻害剤（例えばＢＩＢＷ２９９２、ＧＳＫ１３６３０８９、ＺＤ６４７４、ＡＺＤ０５３０、ＡＧ−０１３７３６、ラパチニブ、ＭＥＨＤ７９４５Ａ、リニファニブ）、マルチキナーゼ阻害剤（例えばソラフェニブ、スニチニブ、パゾパニブ、ＡＭＧ７０６、ＸＬ１８４、ＭＧＣＤ２６５、ＢＭＳ−６９０５１４、Ｒ９３５７８８）、ＶＥＧＦ阻害剤（例えばエンドスタル、エンドスタチン、ベバシズマブ、セディラニブ、ＢＩＢＦ１１２０、アキシチニブ、チボザニブ、ＡＺＤ２１７１）、癌ワクチン（例えばボルテゾミブ、カルフィルゾミブ、ＮＰＩ−００５２、ＭＬＮ９７０８）、パクリタキセル又はパクリタキセル剤、ドセタキセル、ＩＧＦ−１受容体阻害剤（例えばシクスツムマブ、ＭＫ−０６４６、ＯＳＩ９０６、ＣＰ−７５１，８７１、ＢＩＩＢ０２２）、ヒドロキシクロロキン、ヘッジホッグ阻害剤（例えばＩＰＩ−４９３、ＩＰＩ−５０４、タネスピマイシン、ＳＴＡ−９０９０、ＡＵＹ９２２、ＸＬ８８８）、ｍＴＯＲ阻害剤（例えばエベロリムス、テムシロリムス、ラダフォロリムス）、Ｅｐ−ＣＡＭ−／ＣＤ３−二重特異的抗体（例えばＭＴ１１０）、ＣＫ−２阻害剤（例えばＣＸ−４９４５）、ＨＤＡＣ阻害剤（例えばＭＳ２７５、ＬＢＨ５８９、ボリノスタット、バルプロン酸、ＦＲ９０１２２８）、ＤＨＦＲ阻害剤（例えばプララトレキサート）、レチノイド（例えばベキサロテン、トレチノイン）、抗体−薬剤結合体（例えばＳＧＮ−１５）、ビスフォスフォネート（例えばゾレドロン酸）、癌ワクチン（例えばベラゲンプマツセル−Ｌ）、低分子量ヘパリン（ＬＭＷＨ）（例えばチンザパリン、エノキサパリン）、ＧＳＫ１５７２９３２Ａ、メラトニン、タラクトフェリン、ディメスナ、トポイソメラーゼ阻害剤（例えばアムルビシン、エトポシド、カレニテシン）、ネルフィナビル、シレンジタイド、ＥｒｂＢ３阻害剤（例えばＭＭ−１２１、Ｕ３−１２８７）、サバイビン阻害剤（例えばＹＭ１５５、ＬＹ２１８１３０８）、エリブリンメシル酸塩、ＣＯＸ−２阻害剤（例えばセレコキシブ）、ペグフィルグラスチム、ポロ様キナーゼ１阻害剤（例えばＢＩ６７２７）、ＴＲＡＩＬ受容体２（ＴＲ−２）拮抗剤（例えばＣＳ−１００８）、ＣＮＧＲＣペプチド−ＴＮＦα結合体、ジクロロアセテート（ＤＣＡ）、ＨＧＦ阻害剤（例えばＳＣＨ９００１０５）、ＳＡＲ２４０５５０、ＰＰＡＲ−γ作用薬（例えばＣＳ−７０１７）、γ−セクレターゼ阻害剤（例えばＡＺＤ６２４４）、サイクリン依存性キナーゼ阻害剤（例えばＵＣＮ−０１）、コレステロールーＦｕｓ１、抗チューブリン剤（例えばＥ７３８９）、ファルネシル−ＯＨ−トランスフェラーゼ阻害剤（例えばロナファルニブ）、免疫毒素（例えばＢＢ−１０９０１、ＳＳ１（ｄｓＦｖ）ＰＥ３８）、フォンダパリヌクス、血管破壊剤（例えばＡＶＥ８０６２）、ＰＤ−Ｌ１阻害剤（例えばＭＤＸ−１１０５、ＭＤＸ−１１０６）β−グルカン、ＮＧＲ−ｈＴＮＦ、ＥＭＤ５２１８７３、ＭＥＫ阻害剤（例えばＧＳＫ１１２０２１２）、エポチロン類似体（例えばイキサベピロン）、キネシンスピンドル阻害剤（例えば４ＳＣ−２０５）、テロメア標的剤（例えばＫＭＬ−００１）、Ｐ７０経路阻害剤（例えばＬＹ２５８４７０２）、ＡＫＴ阻害剤（例えばＭＫ−２２０６）、血管新生阻害剤（例えばレナリドミド）、Ｎｏｔｃｈシグナル伝達阻害剤（例えばＯＭＰ−２１Ｍ１８）、放射療法、手術、及びこれらの組み合わせが挙げられる。
【０２１８】
結腸直腸癌の治療のために、ヘッジホッグ阻害剤と併用して使用される好適な療法剤の例としては、限定されるものではないが、５−フルオロウラシル（５ＦＵ−ＴＳ阻害剤）；イリノテカン（Ｔｏｐｏ  Ｉ毒素）；オキサリプラチン（ＤＮＡ付加体）、すなわちＥＧＦＲに対するモノクローナル抗体、例えばＥｒｂｉｔｕｘ（登録商標）及びＶｅｃｔａｂｉｘ、ＦＯＬＦＯＸ：５−フルオロウラシル＋ロイコボリン＋オキサリプラチン；ＦＯＬＦＩＲＩ：５−フルオロウラシル＋ロイコボリン＋イリノテカン、単独又は５ＦＵと併用されたＶＥＧＦ阻害剤（例えば抗―ＶＥＧＦ抗体）及びこれらの組み合わせが挙げられる。
【０２１９】
神経髄芽細胞腫の治療のために、ヘッジホッグ阻害剤と併用して使用される好適な療法剤としては、限定されるものではないが、化学療法剤（例えばロムスチン、シスプラチン、カルボプラチン、ビンクリスチン、及びシクロフォスファミド）、放射線療法、手術、及びこれらの組み合わせが挙げられる。
【０２２０】
軟骨肉腫の治療のために、ヘッジホッグ阻害剤と併用して使用される好適な療法剤としては、限定されるものではないが、化学療法剤（例えばドキソルビシン、シスプラチン、イフォスファミド、又はメトトレキサート（抗投与量メトトレキサート）、トラベクテジン、トリパラノール、又はＤＡＲＴのうちの１つ又はそれより多く）、ｍＴＯＲ阻害剤、ＮＯＴＣＨ阻害剤（例えばγセクレターゼ阻害剤（例えばＲＯ４９９０９７））、放射線療法（例えば陽子線療法）、手術、及びこれらの組み合わせが挙げられる。ヘッジホッグ阻害剤と併用して使用され得る追加的薬剤は、肉腫治療のために使用される他の抗癌剤を含む。
【０２２１】
骨肉腫の治療のために、ヘッジホッグ阻害剤と併用して使用される好適な療法剤の例としては、限定されるものではないが、化学療法剤（例えば、ドキソルビシン、シスプラチン、メトトレキサート（例えば高投与量メトトレキサート）（例えば、単独又はロイコボリンレスキューと併用して）、ゲムシタビン、ドセタキセル、アドリアマイシン、イフォスファミド（例えば単独又はメスナと併用して）、ＢＣＧ（カルメットとゲランの菌）、エトポシド、ムラミルトリペプチド（ＭＴＰ）のうちの１つ又はそれよりも多く）、放射線療法、手術、及びこれらの組み合わせが挙げられる。一実施形態では、ヘッジホッグ阻害剤は、ゲムシタビン及びドセタキセルと併用して使用される。ヘッジホッグ阻害剤と併用して使用され得る追加的薬剤としては、肉腫治療のために使用される他の抗癌剤を含む。
【０２２２】
膵臓癌の治療のために、ヘッジホッグ阻害剤と併用して使用される好適な療法剤の例としては、限定されるものではないが、化学療法剤、例えばパクリタキセル又はパクリタキセル剤（例えばＴＡＸＯＬ（登録商標）のようなパクリタキセル製剤）、アルブミン安定化ナノ粒子パクリタキセル製剤（例えばＡＢＲＡＸＡＮＥ（登録商標））又はリポソーマルパクリタキセル製剤）；ゲムシタビン（例えばゲムシタビン単独又はＡＸＰ１０７−１１と併用して）；オキサリプラチン、５−フルオロウラシル、カペシタビン、ルビテカン、エピルビシン塩酸塩、ＮＣ−６００４、ススプラチン、ドセタキセル（例えばＴＡＸＯＴＥＲＥ（登録商標））、ミトマイシンＣ、イフォスファミドのような他の化学療法剤；インターフェロン；チロシンキナーゼ阻害剤（例えばＥＧＦＲ阻害剤（例えばエルロチニブ、パニツムマブ、セツキシマブ、ニモツズマブ）；ＨＥＲ２／ｎｅｕ受容体阻害剤（例えばトラスツズマブ）；二重キナーゼ阻害剤（例えばソラフェニブ、スニチニブ、ＸＬ１８４、パゾパニブ）；ＶＥＧＦ阻害剤（ベバシズマブ、ＡＶ−９５１、ブリバニブ）；放射免疫療法（例えばＸＲ３０３）、癌ワクチン（例えばＧＶＡＸ、スバイビンペプチド）；ＣＯＸ−２阻害剤（例えばセレコキアシブ）；ＩＧＩ−１受容体阻害剤（例えばＡＭＧ４７９、ＭＫ−０６４６）；ｍＴＯＲ阻害剤（例えばエベロリムス、テムシロリムス）；ＩＬ−６阻害剤（例えばＣＮＴＯ３２８）、サイクリン依存性キナーゼ（例えばＰ２７６−００、ＵＣＮ−０１）；変更エネルギー代謝監督（ＡＥＭＤ）化合物（例えばＣＰＩ−６１３）；ＨＤＡＣ阻害剤（例えばボリノスタット）；ＴＲＡＩＬ受容体２（ＴＲ−２）作用薬（例えばコナツムマブ）；ＭＥＫ阻害剤（例えばＡＳ７０３０２６、セルメチニブ、ＧＳＫ１１２０２１２）；Ｒａｆ／ＭＥＫ二重キナーゼ阻害剤（例えばＲＯ５１２６７６６）；Ｎｏｔｃｈシグナル伝達阻害剤（例えばＭＫ０７５２）；モノクローナル抗体−抗体融合蛋白質（例えばＬ１９ＩＬ２）；クルクミン；ヘッジホッグ阻害剤（例えばＩＰＩ−４９３、ＩＰＩ−５０４、タネスピマイシン、ＳＴＡ−９０９０）；ｒＩＬ−２；デニロイキンジフチトクス；トポイソメラーゼＩ阻害剤（例えばイリノテカン、ＰＥＰ０２）；スタチン（例えばシムバスタチン）；ＶＩＩａ因子阻害剤（例えばＰＣＩ−２７４８３）；ＡＫＴ阻害剤（例えばＲＸ−０２０１）；低酸素活性化プロドラッグ（例えばＴＨ−３０２）；メトフォルミン塩酸塩、すなわちγ−セクレターゼ阻害剤（例えばＲＯ４９２９０９７）；リボヌクレオチド還元酵素阻害剤（例えば３−ＡＰ）；免疫毒素（例えばＨｕＣ２４２−ＤＭ４）；ＰＡＲＰ阻害剤（例えばＫＵ−００５９４３６、ベリパリブ）；ＣＴＬＡ−４阻害剤（例えばＣＰ−６７５，２０６、イピリムマブ）；ＡｄＶ−ｔｋ療法；プロテアゾーム阻害剤（例えばボルテゾミブ（Ｖｅｌｃａｄｅ）、ＮＰＩ−００５２）；チアゾリジネジオン（例えばピオグリタゾン）；ＮＰＣ−１Ｃ；オーロラキナーゼ阻害剤（例えばＲ７６３／ＡＳ７０３５６９）、ＣＴＧＦ阻害剤（例えばＦＧ−３０１９）；ｓｉＧ１２Ｄ  ＬｏＤＥＲ；及び放射線療法（例えばトモセラピー、定位放射線、陽子線療法）、手��、及びこれらの組み合わせが挙げられる。特定の実施形態では、パクリタキセル又はパクリタキセル剤及びゲムシタビンとの組み合わせが、ヘッジホッグ阻害剤と共に使用され得る。いくつかの実施形態では、膵臓癌の治療のために、ヘッジホッグ阻害剤がフォルフィリノクスと併用して使用される。フォルフィリノクスとは、オキサリプラチン８５ｍｇ／ｍ２及びイリノテカン１８０ｍｇ／ｍ２、これに加えてロイコボリン４００ｍｇ／ｍ２を含み、続いて１日目にボーラスフルオロウラシル（５−ＦＵ）４００ｍｇ／ｍ２、次いで（５−ＦＵ）２，４００ｍｇ／ｍ２を４６時間連続輸注する療法である。
【０２２３】
卵巣癌治療のために、ヘッジホッグ阻害剤と併用して使用される好適な療法剤としては、限定されるものではないが、化学療法剤（例えばパクリタキセル又はパクリタキセル剤；ドセタキセル；カルボプラチン；ゲムシタビン；ドキソルビシン；トポテカン；シスプラチン；イリノテカン、ＴＬＫ２８６、イフォスファミド、オラパリブ、オキサリプラチン、メルファラン、二ナトリウムペメトレキセド、ＳＪＧ−１３６、シクロフォスファミド、エトポシド、デシタビン）；グレリン拮抗剤（例えばＡＥＺＳ−１３０）、免疫療法（例えばＡＰＣ８０２４、オレゴボマブ、ＯＰＴ−８２１）、チロシンキナーゼ阻害剤（例えばＥＧＦＲ阻害剤（例えばエルロチニブ）、二重阻害剤（例えばＥ７０８０）、マルチキナーゼ阻害剤（例えばＡＺＤ０５３０、ＪＩ−１０１、ソラフェニブ、スニチニブ、パゾパニブ）、ＯＮ０１９１０．Ｎａ）、ＶＥＧＦ阻害剤（例えばベバシズマブ、ＢＩＢＦ１１２０、セディラニブ、ＡＺＤ２１７１）、ＰＤＧＦＲ阻害剤（例えばＩＭＣ−３Ｇ３）、パクリタキセル、トポイソメラーゼ阻害剤（例えばカレニテシン、イリノテカン）、ＨＤＡＣ阻害剤（例えばバルプロ酸塩、ボリノスタット）、葉酸受容体阻害剤（例えばファルレツズマブ）、アンジオポイエチン阻害剤（例えばＡＭＧ３８６）、エポチロン同類体（例えばイクサベピロン）、プロテアゾーム阻害剤（例えばカーフィルゾミブ）、ＩＧＦ−１受容体阻害剤（例えばＯＳＩ９０６  ＡＭＧ４７９）ＰＡＲＰ阻害剤（例えばベリパリブ、ＡＧ０１４６９９、イニパリブ、ＭＫ−４８２７）、オーロラキナーゼ阻害剤（例えばＭＬＮ８２３７、ＥＮＭＤ−２０７６）、血管新生阻害剤（例えばレナリドミド）、ＤＨＦＲ阻害剤（例えばプララトレキセート）、放射免疫療法剤（例えばＨｕ３Ｓ１９３）、スタチン（例えばロバスタチン）、トポイソメラーゼ１阻害剤（例えばＮＫＴＲ−１０２）、癌ワクチン（例えばｐ５３合成長ペプチドワクチン、自家ＯＣ−ＤＣワクチン）、ｍＴＯＲ阻害剤（例えばテムシロリムス、エベロリムス）、ＢＣＲ／ＡＢＬ阻害剤（例えばイマチニブ）、ＥＴ−Ａ受容体拮抗剤（例えばＺＤ４０５４）、ＴＲＡＩＬ受容体２（ＴＲ−２）作用薬（例えばＣＳ−１００８）、ＨＧＦ／ＳＦ阻害剤（例えばＡＭＧ  １０２）、ＥＧＥＮ−００１、ポロ様キナーゼ１阻害剤（例えばＢＩ６７２７）、γ−セクレターゼ阻害剤（例えばＲＯ４９２９０９７）、Ｗｅｅ−１阻害剤（例えばＭＫ−１７７５）、抗チューブリン剤（例えばビノレルビン、Ｅ７３８９）、免疫毒素（例えばデニロイキンジフチトクス）、ＳＢ−４８５２３２、血管破壊剤（例えばＡＶＥ８０６２）、インテグリン阻害剤（例えばＥＭＤ５２５７９７）、キネシン−スピンドル阻害剤（例えば４ＳＣ−２０５）、レブリミド、ＨＥＲ２阻害剤（例えばＭＧＡＨ２２）、ＥｒｒＢ３阻害剤（例えばＭＭ−１２１）、放射線療法；トラベクタジン、及びこれらの組み合わせが挙げられる。
【０２２４】
本発明による慢性骨髄性白血病（ＣＭＬ）の治療のために、ヘッジホッグ阻害剤と併用して使用される好適な療法剤としては、限定されるものではないが、化学療法剤（例えばスタラビン、ヒドロキシウレア、クロファラビン、メルファラン、チオテパ、フルダラビン、ブスルファン、エトポシド、コルジセピン、ペントスタチン、カペシタビン、アザシチジン、シクロフォスファミド、クラドリビン、トポテカン）、チロシンキナーゼ阻害剤（例えばＢＣＲ／ＡＢＬ阻害剤（例えばイマチニブ、ニロチニブ）、ＯＮ  ０１９１０．Ｎａ、二重阻害剤（例えばダサチニブ、ボスチニブ）、マルチキナーゼ阻害剤（例えばＤＣＣ−２０３６、ポナチニブ、ソラフェニブ、スニチニブ、ＲＧＢ−２８６６３８））、インターフェロンα、ステロイド、アポトーシス薬剤（例えばオマセタキシンｍｅｐｅスクシネート）、免疫療法（例えば同種ＣＤ４＋記憶Ｔｈ１様Ｔ細胞／微小粒子結合抗−ＣＤ３／抗−ＣＤ２８、自家サイトカイン誘導キラー細胞（ＣＩＫ）、ＡＨＮ−１２）、ＣＤ５２標的剤（例えばアレムツズマブ）、ヘッジホッグ阻害剤（例えばＩＰＩ−４９３、ＩＰＩ−５０４、タネスピマイシン、ＳＴＡ−９０９０、ＡＵＹ９２２、ＸＬ８８８）、ｍＴＯＲ阻害剤（例えばエベロリムス）、ＳＭＯ拮抗剤（例えばＢＭＳ８３３９２３）、リボヌクレオチド還元酵素阻害剤（例えば３−ＡＰ）、ＪＡＫ−２阻害剤（例えばＩＮＣＢ０１８４２４）、ヒドロキシクロロキン、レチノイド（例えばフェンレチニド）、サイクリン依存性キナーゼ阻害剤（例えばＵＣＮ−０１）、ＨＤＡＣ阻害剤（例えばベリノスタット、ボリノスタット、ＪＮＪ−２６４８１５８５）、ＰＡＲＰ阻害剤（例えばベリパリブ）、ＭＤＭ２拮抗剤（例えばＲＯ５０４５３３７）、オーロラＢキナーゼ阻害剤（例えばＴＡＫ−９０１）、放射免疫療法（例えばアクチニウムー２２５標識付抗―ＣＤ３３抗体ＨｕＭ１９５）、ヘッジホッグ阻害剤（例えばＰＦ−０４４４９９１３）、ＳＴＡＴ３阻害剤（例えばＯＰＢ−３１１２１）、ＫＢ００４、癌ワクチン（例えばＡＧ８５８）、骨髄移植、肝細胞移植、放射療法、及びこれらの組み合わせが挙げられる。
【０２２５】
慢性リンパ球性白血病（ＣＬＬ）の治療のために、ヘッジホッグ阻害剤と併用して使用される好適な療法剤の例としては、限定されるものではないが、化学療法剤（例えばフルダラビン、シクロフォスファミド、ドキソルビシン、ビンクリスチン、クロラムブシル、ベンダムスチン、ブスルファン、ゲムシタビン、メルファラン、ペントスタチンミトキサントロン、５−アザシチジン、二ナトリウムペメトレキセド）、チロシンキナーゼ阻害剤（例えばＥＧＦＲ阻害剤（例えばエルロチニブ）、ＢＴＫ阻害剤（例えばＰＣＩ−３２７６５）、マルチキナーゼ阻害剤（例えばＭＧＣＤ２６５、ＲＧＢ−２８６６３８））、ＣＤ−２０標的剤（例えばリツキシマブ、オファツムマブ、ＲＯ５０７２７５９、ＬＦＢ−Ｒ６０３）、ＣＤ５２標的剤（例えばアレムツズマブ）、プレドニソロン、ダルベポエチンα、レナリドミド、Ｂｃｌ−２阻害剤（例えばＡＢＴ−２６３）、免疫療法（例えば同種ＣＤ４＋記憶Ｔｈ１様Ｔ細胞／微小粒子結合抗ＣＤ３／抗ＣＤ２８、自家サイトカイン誘導キラー細胞（ＣＩＫ））、ＨＤＡＣ阻害剤（例えばボリノスタット、バルプロン酸、ＬＢＨ５８９、ＪＮＪ−２６４８１５８５、ＡＲ−４２）、ＸＩＡＰ阻害剤（例えばＡＥＧ３５１５６）、ＣＤ−７４標的剤（例えばミラツズマブ）、ｍＴＯＲ阻害剤（例えばエベロリムス）、ＡＴ−１０１、免疫毒素（例えばＣＡＴ−８０１５、抗Ｔａｃ（Ｆｖ）−ＰＥ３８（ＬＭＢ−２））、ＣＤ３７標的剤（例えばＴＲＵ−０１６）、放射免疫療法（例えば１３１−トシツモマブ）、ヒドロキシクロロキン、ペリフォシン、ＳＲＣ阻害剤（例えばダサチニブ）、タリドミド、ＰＩ３Ｋδ阻害剤（例えばＣＡＬ−１０１）、レチノイド（例えばフェンレチニド）、ＭＤＭ２拮抗剤（例えばＲＯ５０４５３３７）、プレリキサフォル、オーロラキナーゼ阻害剤（例えばＭＬＮ８２３７、ＴＡＫ−９０１）、プロテアゾーム阻害剤（例えばボルテゾミブ）、ＣＤ−１９標的剤（例えばＭＥＤＩ−５５１，ＭＯＲ２０８）、ＭＥＫ阻害剤（例えばＡＢＴ−３４８）、ＪＡＫ−２阻害剤（例えばＩＮＣＢ０１８４２４）、低酸素活性化プロドラッグ（例えばＴＨ−３０２）、パクリタキセル又はパクリタキセル剤、ヘッジホッグ阻害剤、ＡＫＴ−阻害剤（例えばＭＫ２２０６）、ＨＭＧ−ＣｏＡ阻害剤（例えばシムバスタチン）、ＧＮＫＧ１８６、放射線療法、骨髄移植、幹細胞移植、及びこれらの組み合わせが挙げられる。
【０２２６】
急性リンパ球性白血病（ＡＬＬ）の治療のために、ヘッジホッグ阻害剤と併用して使用される好適な療法剤の例としては、限定されるものではないが、化学療法剤（例えばプレドニソロン、デキサメタゾン、ビンクリスチン、アスパラギナーゼ、ダウノルビシン、シクロフォスファミド、シタラビン、エトポシド、チオグアニン、メルカプトプリン、クロファラビン、リポソーマルアナマイシン、ブスルファン、カペシタビン、デシタビン、アザシタビン、トポテカン、テモゾロミド）、チロシンキナーゼ阻害剤（例えばＢＣＲ／ＡＢＬ阻害剤（例えばイマチニブ、ニロチニブ）、ＯＮ０１９１０．Ｎａ、ムルチキナーゼ阻害剤（例えばソラフェニブ））、ＣＤ−２０標的剤（例えばリツキシマブ）、ＣＤ５２標的剤（例えばアレムツズマブ）、ヘッジホッグ阻害剤（例えばＳＴＡ−９０９０）、ｍＴＯＲ阻害剤（例えばエベロリムス、ラパマイシン）、ＪＡＫ−２阻害剤（例えばＩＮＣＢ０１８４２４）、ＨＥＲ２／ｎｅｕ受容体阻害剤（例えばトラスツズマブ）、プロテアゾーム阻害剤（例えばボルテゾミブ）、メトトレキサート、アスパラギナーゼ、ＣＤ−２２標的剤（例えばエプラツズマブ、イノツズマブ）、免疫療法（例えば自家サイトカイン誘導キラー細胞（ＣＩＫ）、ＡＨＮ−１２）、ブリナツモマブ、サイクリン依存性キナーゼ阻害剤（例えばＵＣＮ−０１）、ＣＤ４５標的剤（例えばＢＣ８）、ＭＤＭ２拮抗剤（例えばＲＯ５０４５３３７）、免疫毒素（例えばＣＡＴ−８０１５、ＤＴ２２１９ＡＲＬ）、ＨＤＡＣ阻害剤（例えばＪＮＪ−２６４８１５８５）、ＪＶＲＳ−１００、パクリタキセル又はパクリタキセル剤、ＳＴＡＴ３阻害剤（例えばＯＰＢ−３１１２１）、ＰＡＲＰ阻害剤（例えばベリパリブ）、ＥＺＮ−２２８５、放射線療法、ステロイド、骨髄移植、幹細胞移植、又はこれらの組み合わせが挙げられる。
【０２２７】
急性骨髄性白血病（ＡＭＬ）の治療のために、ヘッジホッグ阻害剤と併用して使用される好適な療法剤の例としては、限定されるものではないが、化学療法剤（シタラビン、ダウノルビシン、イダルビシン、クロファラビン、デシタビン、ボサロキシン、アザシタジン、リバビリン、ＣＰＸ−３５１、トレオスルファン、エラシタラビン）、チロシンキナーゼ阻害剤（例えばＢＣＲ／ＡＢＬ阻害剤（例えばイマチニブ、ニロチニブ）、ＯＮ０１９１０．Ｎａ、マルチキナーゼ阻害剤（例えばミドスタウリン、ＳＵ１１２４８、キザルチニブ、ソラフィニブ））、免疫毒素（例えばゲムツズマブオゾガミシン）、ＤＴ３８８ＩＬ３融合蛋白質、ＨＤＡＣ阻害剤（例えばボリノスタット、ＬＢＨ５８９）、プレリキサフォル、ｍＴＯＲ阻害剤（例えばエベロリムス）、ＳＲＣ阻害剤（例えばダサチニブ）、ヘッジホッグ阻害剤（例えばＳＴＡ−９０９０）、レチノイド（例えばベキサロテン）、オーロラキナーゼ阻害剤（例えばＢＩ８１１２８３）、ＪＡＫ−２阻害剤（例えばＩＮＣＢ０１８４２４）、ポロ様キナーゼ阻害剤（例えばＢＩ６７２７）、セネルセン、ＣＤ４５標的剤（例えばＢＣ８）、サイクリン依存性キナーゼ阻害剤（例えばＵＣＮ−０１）、ＭＤＭ２拮抗剤（例えばＲＯ５０４５３３７）、ＬＹ５７３６３６−ナトリウム、ＺＲｘ−１０１、ＭＬＮ４９２４、レナリドミド、免疫療法（例えばＡＨＮ−１２）、ヒスタミン二塩化水素化物、放射線療法、骨髄移植、幹細胞移植、及びこれらの組み合わせが挙げられる。
【０２２８】
多発性骨髄腫（ＭＭ）の治療のために、ヘッジホッグ阻害剤と併用して使用される好適な療法剤の例としては、限定されるものではないが、化学療法剤（例えばメルファラン、アミフォスチン、シクロフォスファミド、ドキソルビシン、クロファラビン、ベンダムスチンフルダラビン、アドリアマイシン、ＳｙＢＬ−０５０１）、タリドミド、レナリドミド、デキサメタゾン、プレドニゾン、ポマリドミド、プロテアゾーム阻害剤（例えばボルテゾミブ、カーフィルゾミブ、ＭＬＮ９７０８）、癌ワクチン（例えばＧＶＡＸ）、ＣＤ−４０標的剤（例えばＳＧＮ−４０、ＣＨＩＲ−１２．１２）、ペリフォシン、ゾレドロン酸、免疫療法（例えばＭＡＧＥ−Ａ３、ＮＹ−ＥＳＯ−１、ＨｕＭａｘ−ＣＤ３８）、ＨＤＡＣ阻害剤（例えばボリノスタット、ＬＢＨ５８９、ＡＲ−４２）、アピリジン、サイクリン依存性キナーゼ阻害剤（例えばＰＤ−０３３２９９１、ジナシクリブ）、三酸化ヒ素、ＣＢ３３０４、ヘッジホッグ阻害剤（例えばＫＷ−２４７８）、チロシンキナーゼ阻害剤（例えばＥＧＦＲ阻害剤（例えばセツキシマブ）、マルチキナーゼ阻害剤（例えばＡＴ９２８３））、ＶＥＧＦ阻害剤（例えばベバシズマブ）、プレリキサフォル、ＭＥＫ阻害剤（例えばＡＺＤ６２４４）、ＩＰＨ２１０１、アトルバスタチン、免疫毒素（例えばＢＢ−１０９０１）、ＮＰＩ−００５２、放射免疫療法剤（例えばイットリウム９０イブリツモマブ・チウキセタン）、ＳＴＡＴ３阻害剤（例えばＯＰＢ−３１１２１）、ＭＬＮ４９２４、オーロラキナーゼ阻害剤（例えばＥＮＭＤ−２０７６）、ＩＭＧＮ９０１、ＡＣＥ−０４１、ＣＫ−２阻害剤（例えばＣＸ−４９４５）、放射線療法、骨髄移植、幹細胞移植、及びこれらの組み合わせが挙げられる。
【０２２９】
頭頚部癌の治療のために、ヘッジホッグ阻害剤と併用して使用される好適な療法剤の例としては、限定されるものではないが、化学療法剤（パクリタキセル又はパクリタキセル剤、カルボプラチン、ドセタキセル、アミフォスチン、シスプラチン、オキサリプラチン）、チロシンキナーゼ阻害剤（例えばＥＧＦＲ阻害剤（例えばエルロチニブ、ゲフィチニブ、イコチニブ、セツキシマブ、パニツムマブ、ザルツムマブ、ニモツズマブ、ネシツムマブ、マツズマブ）、二重阻害剤（例えばラパチニブ、ネラチニブ、バンデチニブ、ＢＩＢＷ２９９２、マルチキナーゼ阻害剤（例えばＸＬ−６４７））、ＶＥＧＦ阻害剤（例えばベバシズマブ）、レオウィルス、放射療法、手術、及びこれらの組み合わせが挙げられる。
【０２３０】
前立腺癌の治療のために、ヘッジホッグ阻害剤と併用して使用される好適な療法剤の例としては、限定されるものではないが、化学療法剤（例えばドセタキセル、カルボプラチン、フルダラビン）、ホルモン療法（例えばフルタミド、ビカルタミド、ヌルタミド、シプロテロン酢酸塩、ケトコナゾール、アミノグルテチミド、アバレリクス、デガレリクス、ロイプロリド、ゴセレリン、トリプトレリン、ブセレリン）、チロシンキナーゼ阻害剤（例えば二重キナーゼ阻害剤（例えばラパタニブ）、マルチキナーゼ阻害剤（例えばソラフェニブ、スニチニブ））、ＶＥＧＦ阻害剤（例えばベバシズマブ）、ＴＡＫ−７００、癌ワクチン（例えばＢＰＸ−１０１、ＰＥＰ２２３）、レナリドミド、ＴＯＫ−００１、ＩＧＦ−１受容体阻害剤（例えばシクスツムマブ）、ＴＲＣ１０５、オーロラキナーゼ阻害剤（例えばＭＬＮ８２３７）、プロテオゾーム阻害剤（例えばボルテゾミブ）、ＯＧＸ−０１１、放射免疫療法（例えばＨｕＪ５９１−ＧＳ）、ＨＤＡＣ阻害剤（例えばバルプロン酸、ＳＢ９３９、ＬＢＨ５８９）、ヒドロキシクロルキン、ｍＴＯＲ阻害剤（例えばエベロリムス）、ドミチニブ硫酸塩、ジインドリルメタン、エファビレンツ、ＯＧＸ−４２７、ゲニステイン、ＩＭＣ−３Ｇ３、バフェチニブ、ＣＰ−６７５，２０６、アビラテロン（ＣＢ−７５９８）、チトクロームＰ４５０  １７α−ヒドロキシラーゼ−１７，２０−リアーゼ阻害剤（ＣＹＰ１７）、ＣＢ−７５９８及びプレドニゾン、放射線療法、手術、アンドロゲン除去、又はこれらの組み合わせが挙げられる。アンドロゲン除去は、ゴセレリン酢酸塩及びロイプロリド酢酸塩を含み得る。
【０２３１】
いくつかの実施形態では、ヘッジホッグ阻害剤は、ｍＴＯＲ阻害剤と併用して使用される。本明細書で使用するとき、「ｍＴＯＲ阻害剤」とは、ｍＴＯＲキナーゼ（ｍａｍｍａｌｉａｎ  Ｔａｒｇｅｔ  Ｏｆ  Ｒａｐａｍｙｃｉｎ、哺乳類ラパマイシン標的蛋白質）を直接的又は間接的に標的にする、若しくはｍＴＯＲキナーゼの活性／機能を低減又は阻害する薬剤を指す。いくつかの報告では、軟骨細胞分化におけるｍＴＯＲの役割を記載していて、例えば、Ｂｒｏｗｎ，Ｒ．Ｅ．著（２００４年）「Ａｎｎａｌｓ  ｏｆ  Ｃｌｉｎｉｃａｌ  ＆  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ  Ｓｃｉｅｎｃｅ」３４：３９７−３９９頁、Ｃｈａｎ，Ｓ．著（２００４年）「Ｂｒ  Ｊ  Ｃａｎｃｅｒ」９１（８）：１４２０−４頁、及びＧｅｒｙｋ−Ｈａｌｌ．Ｍら著（２００９年）「Ｃｕｒｒ  Ｏｎｃｏｌ  Ｒｅｐ．」！！（＆）：４４６−５３頁を参照されたい。本発明で使用されるために適切なｍＴＯＲ阻害剤は、多くの参考文献で記載されていて、限定されるものではないが、ＷＯ第９４／０２１３６号（１６−Ｏ−置換誘導体）；米国特許第５，２５８，３６８号（４０−Ｏ−置換誘導体）；ＷＯ第９４／９０１０号（Ｏ−アリール及びＯ−アルキル誘導体）；ＷＯ第９２／０５１７９（カルボン酸エステル）；米国特許第５，１１８，６７７号及び同第５，１１８，６７７号（アミドエステル）；米国特許第５，１１８，６７８号（カルバメート）；米国特許第５，１００，８８３号（フッ化エステル）；米国特許第５，１５１，４１３号（アセタール）；米国特許第５，１２０，８４２号（シリルエステル）；ＷＯ第９３，１１１３０号（メチレン誘導体）；ＷＯ第９４／０２１３６号（メトキシ誘導体）；ＷＯ第９４／０２３８５号及びＷＯ第９５／１４０２３号（アルケニル誘導体）；米国特許第５，２５６，７９０号（３２−Ｏ−ジヒドロ又は置換誘導体）；欧州特許第９６／０２４４１号；米国特許第２００４／０２３５６２号（炭水化物誘導体）；米国特許第４，３１６，８８５号（モノ及びジアシル化誘導体）；米国特許第５，１２０，７２５号（二環式誘導体）；米国特許第５，１２０，７２７号（ラパマイシン二量体）；欧州特許第４６７６０６号（ラパマイシンの２７−オキシム）；米国特許第５，０２３，２６２号（４２−オキソ同類体）；米国特許第５，１７７，２０３号（アリールスルホン酸塩及びスルファミン酸塩）；米国特許第５，１７７，２０３号などが挙げられる。更に、種々のラパマイシンプロドラッグが、米国特許第４，６５０，８０３号、同第５，６７２，６０５号、同第５，５８３，１８９号、同第５，５２７，９０６号、同第５，４５７，１１１号、同第５，９９５，１００号、及び同第６，１４６，６５８号に記載されている。治療方法で使用されるために特に興味深いものは、Ｎｏｖａｒｉｔｉｓが所有する特許（米国特許第５，６６５，７７２号、同第５，９１２，２５３号、同第５，９８５，８９０号、同第５，９１２，２５３号、同第６，２００，９８５号、同第６，３８４，０４６号、及び同第６，４４０，９９０号）、Ａｒｉａｄが所有する特許（ＷＯ第９６／４１８６５号）、並びにＷｙｅｔｈが所有する特許（米国特許第５，３６２，７１８号、同第６，３９９，６２５号、同第６，３９９，６２７号、同第６，４３２，９７３号、同第６，４４０，９９１号、同第６，６７７，３５７号、及び同第６，６８０，７１８号）に記載されている誘導体である。代表的なｍＴＯＲ阻害剤としては、限定されるものではないが、ラパマイシン、テムシロリムス（ＴＯＲＩＳＥＬ（登録商標））、エベロリムス（ＲＡＤ００１、ＡＦＵＮＩＴＯＲ（登録商標））、リダフォロリムス、ＡＰ２３５７３、ＡＺＤ８０５５、ＢＥＺ２３５、ＢＧＴ２２６、ＸＬ７６５、ＰＦ−４６９１５０２、ＧＤＣ０９８０、ＳＦ１１２６、ＯＳＩ−０２７、ＧＳＫ１０５９６１５、ＫＵ−００６３７９４、ＷＹＥ−３５４、ＩＮＫ１２８、テムスロリムス（ＣＣＩ−７７９）、パロミド５２９（Ｐ５２９）、ＰＦ−０４６９１５０２、又はＰＫＩ−５８７が挙げられる。一実施形態では、ｍＴＯＲ阻害剤は、ＴＯＲＣ１とＴＯＲＣ２を阻害する。ＴＯＲＣ１及びＴＯＲＣ２二重阻害剤の例としては、例えばＯＳＩ−０２７、ＸＬ７６５、パロミド５２９、及びＩＮＫ１２８が挙げられる。
【０２３２】
いくつかの実施形態では、ヘッジホッグ阻害剤は、インシュリン様成長因子受容体（ＩＧＦ−１Ｒ）の阻害剤と併用して使用される。ＩＧＦ−１Ｒ（ＥＣ２．７．１１２、ＣＤ２２１抗原としても知られている）は、膜貫通蛋白質チロシンキナーゼの族に属し（Ｕｌｌｒｉｃｈら著「Ｃｅｌｌ」，６１：２０３−２１２頁，（１９９０年）、ＬｅＲｏｉｔｈら著「Ｅｎｄｏｃｒｉｎ．Ｒｅｖ．」，１６：１４３−１６３頁（１９９５年）、Ｔｒａｘｌｅｒ著「Ｅｘｐ．Ｏｐｉｎ．Ｔｈｅｒ．Ｐａｔｅｎｔｓ」，７：５７１−５８８（１９９７年）、Ａｄａｍｓら著「Ｃｅｌｌ．Ｍｏｌ．Ｌｉｆｅ．Ｓｃｉ．」，５７：１０５０−１０６３頁（２０００年））、並びに小児期の発育に関与する（Ｌｉｕら著「Ｃｅｌｌ」，７５：５９−７２頁（１９９３年）、Ａｂｕｚｚａｈａｂら著「Ｎ  Ｅｎｇｌ  Ｊ  Ｍｅｄ」，３４９：２２１１−２２２２（２００３年））。ＩＧＦ系は、数個の癌に関与してきた。例えば、Ｐｏｌｌａｋら著「Ｎａｔ  Ｒｅｖ  Ｃａｎｃｅｒ」，４：５０５−５１８頁（２００４年）、Ｙｅｅ著，「Ｂｒｉｔｉｓｈ  Ｊ．  Ｃａｎｃｅｒ」，９４：４６５−４６８頁（２００６年）、Ｂｏｈｕｌａら著「Ａｎｔｉ−Ｃａｎｃｅｒ  Ｄｒｕｇｓ」，１４：６６９−６８２頁（２００３年）、Ｓｕｒｍａｃｚ著「Ｏｎｃｏｇｅｎｅ」，２２：６５８９−９７頁（２００３年）、Ｂａｈｒ及びＧｒｏｎｅｒ著「Ｇｒｏｗｔｈ  Ｈｏｒｍｏｎｅ  ａｎｄ  ＩＧＦ  Ｒｅｓｅａｒｃｈ」１４：２８７−２９５頁（２００４年）、Ｇｕｉｌｌｅｍａｒｄ及びＳａｒａｇｏｖｉ著「Ｃｕｒｒｅｎｔ  Ｃａｎｃｅｒ  Ｄｒｕｇ  Ｔａｒｇｅｔｓ」，４：３１３−３２６頁（２００４年）、Ｊｅｒｏｍｅら著「Ｓｅｍｉｎａｒｓ  ｉｎ  Ｏｎｃｏｌｏｇｙ  ３１／１  Ｓｕｐｐｌ．」３（５４−６３頁）（２００４年）、Ｚｈａｎｇ及びＹｅｅ著「Ｂｒｅａｓｔ  Ｄｉｓｅａｓｅ」，１７：１１５−１２４頁（２００３年）、Ｓａｍａｎｉ及びＢｒｏｄｔ著「Ｓｕｒｇｉｃａｌ  Ｏｎｃｏｌｏｇｙ  Ｃｌｉｎｉｃｓ  ｏｆ  Ｎｏｒｔｈ  Ａｍｅｒｉｃａ」，１０：２８９−３１２頁（２００１年）、Ｎａｈｔａら著「Ｏｎｃｏｌｏｇｉｓｔ」，８：５−１７頁（２００３年）、Ｄａｎｃｅｙ及びＣｈｅｎ「Ｎａｔｕｒｅ  Ｒｅｖｉｅｗｓ」，５：６４９−６５９頁（２００６年）、Ｊｏｎｅｓら著「Ｅｎｄｏｃｒ．  Ｒｅｌａｔ．  Ｃａｎｃｅｒ」，１１：７９３−８１４頁（２００４年）、Ｓｃｈｅｄｉｎ著「Ｎａｔｕｒｅ  Ｒｅｖｉｅｗｓ」，６：２８１−２９０頁（２００６年）、Ｔｈｏｍｅ及びＬｅｅ著「Ｂｒｅａｓｔ  Ｄｉｓｅａｓｅ」，１７：１０５−１１４頁（２００３年）、Ｍｉｎｃｈｉｎｔｏｎ及びＴａｎｎｏｃｋ著「Ｎａｔｕｒｅ  Ｒｅｖｉｅｗｓ」，６：５８３−５９２頁（２００６年）、及びＫｕｒｍａｓｈｅｖａ及びＨｏｕｇｈｔｏｎ著「Ｂｉｏｃｈｉｍ．Ｂｉｏｐｈｙｓ．Ａｃｔａ」１７６６：１−２２頁（２００６年）を参照されたい。肉腫（例えば、軟骨肉腫、脊索腫、Ｅｗｉｎｇ肉腫、又は骨肉腫）中のＩＧＦ−１Ｒシグナル伝達に関する役割については、例えば、Ｍａｔｓｕｍｕｒａ，Ｔ．ら著（２０００年）「Ｊ．Ｏｒｔｈｏｐ  Ｒｅｓ．」１８（３）：３５１−５頁、Ｈｏ，Ｌ．ら著（２００９年）「Ｃａｎｃ��ｒ  Ｃｅｌｌ」１６：１２６−１３６頁、Ｓｏｍｍｅｒ，Ｊ．ら著（２０１０年）「Ｊ．Ｐａｔｈｏｌ．」２２０（５）：６０８−１７頁、Ｇｅｒｙｋ−Ｈａｌｌ，Ｍ．ら著（２００９年）「Ｃｕｒｒ  Ｏｎｃｏｌ  Ｒｅｐ．」１１（６）：４４６−５３頁に記載されている。
【０２３３】
阻害性ペプチド標的ＩＧＦ−１Ｒは、インヴィトロ及びインヴィヴォにて抗増殖活性を所有するものから生成された（Ｐｉｅｔｒｚｋｏｗｓｋｉら著「Ｃａｎｃｅｒ  Ｒｅｓ．」，５２：６４４７−６４５１頁（１９９２年）、Ｈａｙｌｏｒら著「Ｊ．Ａｍ．  Ｓｏｃ．Ｎｅｐｈｒｏｌ．」１１：２０２７−２０３５頁（２０００年））。ＩＧＦ−Ｉのペプチド同類体を用いて、増殖がまた阻害された（Ｐｉｅｔｒｚｋｏｗｓｋｉら著「Ｃｅｌｌ  Ｇｒｏｗｔｈ＆Ｄｉｆｆ．」，３：１９９−２０５頁（１９９２年）、Ｐｉｅｔｒｚｋｏｗｓｋｉら著「Ｍｏｌ．  Ｃｅｌｌ．  Ｂｉｏｌ．」，１２：３８８３−３８８９頁（１９９２年））。更に、ＩＧＦ−１Ｒの優性阻害変異体（Ｌｉら著「Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．」，２６９：３２５５８−３２５６４頁（１９９４年）、Ｊｉａｎｇら著「Ｏｎｃｏｇｅｎｅ」，１８：６０７１−６０７７頁（１９９９年）、Ｓｃｏｔｌａｎｄｉら著「Ｉｎｔ．Ｊ．Ｃａｎｃｅｒ」，１０１：１１−１６頁（２００２年）、Ｓｅｅｌｙら著「ＢＭＣ  Ｃａｎｃｅｒ」，２：１５頁（２００２年））が、形質転換された表現型を逆転させ得、癌発現を阻害し得、並びに転移表現型の損失を誘導し得る。ＩＧＦ−１ＲのＣ末端ペプチドがアポトーシスを誘導し、並びに腫瘍増殖を著しく阻害することが示された（Ｒｅｉｓｓら著「Ｊ．Ｃｅｌｌ．Ｐｈｙｓ．」，１８１：１２４−１３５頁（１９９９年））。更に、ＩＧＦ−１Ｒの可溶型が、インヴィヴォにおいて腫瘍増殖を阻害した（Ｄ’Ａｍｂｒｏｓｉｏら著「Ｃａｎｃｅｒ  Ｒｅｓ．」，５６：４０１３−４０２０頁（１９９６年））。
【０２３４】
したがって、本明細書で開示された治療と併用して使用され得るＩＧＦ−１Ｒの拮抗剤又は阻害剤としては、限定されるものではないが、小分子ＩＧＦ−１Ｒ拮抗剤（例えばＧＳＫ１９０４５２９Ａ）、抗体拮抗剤、ＩＧＦ−１Ｒペプチド拮抗剤、又はアンチセンス又は他の核酸拮抗剤が挙げられる。代表的なＩＧＦ−１Ｒ阻害剤としては、限定されるものではないが、ＢＭＳ−５３６９２４、ＧＳＫ１９０４５２９Ａ、ＡＭＧ４７９、ＭＫ−０６４６、シクスツムマブ、ＯＳＩ９０６、フィギツムマブ（ＣＰ−７５１，８７１）、及びＢＩＩＢ０２２が挙げられる。
【０２３５】
一実施形態では、ＩＧＦ−１Ｒ拮抗剤は、例えばＳａｂｂａｔｉｎｉ，Ｐ．ら著（２００９年）「Ｍｏｌ  Ｃａｎｃｅｒ  Ｔｈｅｒ」８（１０）：２８１１−２０頁、Ｓａｂｂａｔｉｎｉ，Ｐ．ら著（２００９年）「Ｃｌｉｎ  Ｃａｎｃｅｒ  Ｒｅｓ．」，３０５８頁に記載されているＧＳＫ１９０４５２９Ａである。更なるＩＧＦ−１Ｒの小分子阻害剤が、例えば、Ｇａｒｃｉａ−Ｅｃｈｅｖｅｒｒｉａら著「Ｃａｎｃｅｒ  Ｃｅｌｌ」，５：２３１−２３９頁（２００４年）、Ｍｉｔｓｉａｄｅｓら著「Ｃａｎｃｅｒ  Ｃｅｌｌ」，５：２２１−２３０頁（２００４年）、及びＣａｒｂｏｎｉら著「Ｃａｎｃｅｒ  Ｒｅｓ」，６５：３７８１−３７８７頁（２００５年）に記載されている。更には、ＩＧＦ−１Ｒに特異的であると思われるシクロリグナン、ピクロポドフィリンを記載しているＶａｓｉｌｃａｎｕら著「Ｏｎｃｏｇｅｎｅ」，２３：７８５４−７８６２頁（２００４年）のような受容体活性化を破壊するような化合物が開発されている（Ｇｉｍｉｔａら著「Ｃａｎｃｅｒ  Ｒｅｓ」、６４：２３６−２４２（２００４年）、Ｓｔｒｏｍｂｅｒｇら著「Ｂｌｏｏｄ」，１０７：６６９−６７８（２００６年））。ノルジヒドログアイヤレチン酸（ＮＤＧＡ）もまた、ＩＧＦ−１Ｒ機能を破壊する（Ｙｏｕｎｇｒｅｎら著「Ｂｒｅａｓｔ  Ｃａｎｃｅｒ  Ｒｅｓ  Ｔｒｅａｔ」，９４：３７−４６（２００５年））。更には、小分子阻害剤の例としては、ＷＯ第２００２／１０２８０４号、ＷＯ第２００２／１０２８０５号、ＷＯ第２００４／５５０２２号、米国特許第６，０３７，３３２号、ＷＯ第２００３／４８１３３号、ＵＳ第２００４／０５３９３１号、ＵＳ第２００３／１２５３７０号、米国特許第６，５９９，９０２号、米国特許第６，１１７，８８０号、ＷＯ第２００３／３５６１９号、ＷＯ第２００３／３５６１４号、ＷＯ第２００３／３５６１６号、ＷＯ第１９９８／４８８３１号、米国特許第６，３３７，３３８号、ＵＳ第２００３／００６４４８２号、米国特許第６，４７５，４８６号、米国特許第６，６１０，２９９号、米国特許５，５６１，１１９号、ＷＯ第２００６／０８０４５０号、ＷＯ第２００６／０９４６００号及びＷＯ第２００４／０９３７８１号が挙げられる。同様に、ＷＯ第２００７／０９９１７１号（ビシクロ−ピラゾール阻害剤）及びＷＯ第２００７／０９９１６６号（ピラゾロ−ピリジン誘導体阻害剤）を参照されたい。更に、Ａｂｂｏｔｔ  Ｃｏｒｐｏｒａｔｉｏｎの「ｍｏｌｅｃｕｌｅ  Ａ−９２８６０５」にての（Ｈｕｂｂａｒｄら著「ＡＡＣＲ−ＮＣＩ−ＥＯＲＴＣ  Ｉｎｔ  Ｃｏｎｆ  Ｍｏｌ  Ｔａｒｇｅｔｓ  Ｃａｎｃｅｒ  Ｔｈｅｒ」（１０月２２−２６日，Ｓａｎ  Ｆｒａｎｃｉｓｃｏ）２００７年，Ａｂｓｔ  Ａ２２７）も参照されたい。
【０２３６】
ＩＧＦ−１Ｒに拮抗し又はＩＧＦ−Ｉが関与して癌を治療する代表的ペプチドとしては、米国特許第６，０８４，０８５号、米国特許第５，９４２，４８９号、ＷＯ第２００１／７２７７１号、ＷＯ第２００１／７２１１１９号、ＵＳ第２００４／００８６８６３号、米国特許第５，６３３，２６３号、及びＵＳ第２００３／００９２６３１号に記載されたようなペプチドが挙げられる。更に、米国特許第７，１７３，００５号、「Ｂｉｏｗｏｒｌｄ  Ｔｏｄａｙ」２００６年５月１９日出版（第１７巻、１頁）も参照されたい。
【０２３７】
ＩＧＦ−１Ｒに拮抗する代表的アンチセンス及び核酸が、例えばＷｒａｉｇｈｔら著「Ｎａｔ．Ｂｉｏｔｅｃｈ．」，１８：５２１−５２６頁（２０００年）、米国特許第５，６４３，７８８号、米国特許第６，３４０，６７４号、ＵＳ第２００３／００３１６５８号、米国特許第６，３４０，６７４号、米国特許第５，４５６，６１２号、米国特許第５，６４３，７８８号、米国特許第６，０７１，８９１号、ＷＯ第２００２／１０１００２号、ＣＮ第１２３７５８２Ａ号、ＣＮ第１１１７０９７Ｂ号、ＷＯ第１９９９／２３２５９号、ＷＯ第２００３／１０００５９号、ＵＳ第２００４／１２７４４６、ＵＳ第２００４／１４２８９５号、ＵＳ第２００４／１１０２９６号、ＵＳ第２００４／００６０３５号、ＵＳ第２００３／２０６８８７号、ＵＳ第２００３／１９０６３５号、ＵＳ第２００３／１７０８９１号、ＵＳ第２００３／０９６７６９号、米国特許第５，９２９，０４０号、米国特許第６，２８４，７４１号、ＵＳ第２００６／０２３４２３９号、及び米国特許第５，８７２，２４１号に記載されている。更には、ＵＳ第２００５／０２５５４９３号には、短い二重鎖ＲＮＡを使用するＲＮＡ干渉によるＩＧＲ−１Ｒ発現の低減化が開示されている。
【０２３８】
いくつかの実施形態では、ヘッジホッグ阻害剤が、チロシンキナーゼ阻害剤（例えば、受容体チロシンキナーゼ（ＲＴＫ）阻害剤）と併用して使用されている。代表的なチロシンキナーゼ阻害剤としては、限定されるものではないが、上皮細胞成長因子（ＥＧＦ）経路阻害剤（例えば、上皮細胞成長因子受容体（ＥＧＦＲ）阻害剤）、血管内皮成長因子（ＶＥＧＦ）経路阻害剤（例えば、血管内皮成長因子受容体（ＶＥＧＦＲ）阻害剤（例えばＶＥＧＦＲ−１阻害剤、ＶＥＧＦＲ−２阻害剤、ＶＥＧＦＲ−３阻害剤））、血小板由来成長因子（ＰＤＧＦ）経路阻害剤（例えば、血小板由来成長因子受容体（ＰＤＧＦＲ）阻害剤（例えばＰＤＧＦＲ−β阻害剤））、ＲＡＦ−１阻害剤、ＫＩＴ阻害剤及びＲＥＴ阻害剤が挙げられる。いくつかの実施形態では、ヘッジホッグ阻害剤と併用して使用される抗癌剤は、アキシチニブ（ＡＧ０１３７３６）、ボスチニブ（ＳＫＩ−６０６）、セディラニブ（ＲＥＣＥＮＴＩＮ（商標）、ＡＺＤ２１７１）、ダサチニブ（ＳＰＲＹＣＥＬ（登録商標）、ＢＭＳ−３５４８２５）、エルロチニブ（ＴＡＲＣＥＶＡ（登録商標））、ゲフィチニブ（ＩＲＥＳＳＡ（登録商標））、イマチニブ（Ｇｌｅｅｖｅｃ（登録商標）、ＣＧＰ５７１４８Ｂ、ＳＴＩ−５７１）、ラパチニブ（ＴＹＫＥＲＢ（登録商標）、ＴＹＶＥＲＢ（登録商標））、レスタウルチニブ（ＣＥＰ−７０１）、ネラチニブ（ＨＫＩ−２７２）、ニロチニブ（ＴＡＳＩＧＮＡ（登録商標））、セマキサニブ（セマキサニブ、ＳＵ５４１６）、スニチニブ（ＳＵＴＥＮＴ（登録商標）、ＳＵ１１２４８）、トセラニブ（ＰＡＬＬＡＤＩＡ（登録商標））、バンデタニブ（ＺＡＣＴＩＭＡ（登録商標）、ＺＤ６４７４）、バタラニブ（ＰＴＫ７８７、ＰＴＫ／ＺＫ）、トラスツズマブ（ＨＥＲＣＥＰＴＩＮ（登録商標））、ベバシズマブ（ＡＶＡＳＴＩＮ（登録商標））、リツキシマブ（ＲＩＴＵＸＡＮ（登録商標））、セツキシマブ（ＥＲＢＩＴＵＸ（登録商標））、パニツムマブ（ＶＥＣＴＩＢＩＸ（登録商標））、ラニビズマブ（Ｌｕｃｅｎｔｉｓ（登録商標））、ニロチニブ（ＴＡＳＩＧＮＡ（登録商標））、ソラフェニブ（ＮＥＸＡＶＡＲ（登録商標））、アレムツズマブ（ＣＡＭＰＡＴＨ（登録商標））、ゲムツズマブオゾガミシン（ＭＹＬＯＴＡＲＧ（登録商標））、ＥＮＭＤ−２０７６、ＰＣＩ−３２７６５、ＡＣ２２０、ドビチニブ乳酸塩（ＴＫＩ２５８、ＣＨＩＲ−２５８）、ＢＩＢＷ  ２９９２（ＴＯＶＯＫ（商標））、ＳＧＸ５２３、ＰＦ−０４２１７９０３、ＰＦ−０２３４１０６６、ＰＦ−２９９８０４、ＢＭＳ−７７６０７、ＡＢＴ−８６９、ＭＰ４７０、ＢＩＢＦ  １１２０（ＶＡＲＧＡＴＥＦ（登録商標））、ＡＰ２４５３４、ＪＮＪ−２６４８３３２７、ＭＧＣＤ２６５、ＤＣＣ−２０３６、ＢＭＳ−６９０１５４、ＣＥＰ−１１９８１、チボザニブ（ＡＶ−９５１）、ＯＳＩ−９３０、ＭＭ−１２１、ＸＬ−１８４、ＸＬ−６４７、ＸＬ２２８、ＡＥＥ７８８、ＡＧ−４９０、ＡＳＴ−６、ＢＭＳ−５９９６２６、ＣＵＤＣ−１０１、ＰＤ１５３０３５、ペリチニブ（ＥＫＢ−５６９）、バンデタニブ（ザクチマ）、ＷＺ３１４６、ＷＺ４００２、ＷＺ８０４０、ＡＢＴ−８６９（リニファニブ）、ＡＥＥ７８８、ＡＰ２４５３４（ポナチニブ）、ＡＶ−９５１（チボザニブ）、アキシチニブ、ＢＡＹ  ７３−４５０６（レゴラフェニブ）、ブリバニブアラニナト（ＢＭＳ−５８２６６４）、ブリバニブ（ＢＭＳ−５４０２１５）、セディラニブ（ＡＺＤ２１７１）、ＣＨＩＲ−２５８（ドビチニブ）、ＣＰ  ６７３４５１、ＣＹＣ１１６、Ｅ７０８０、Ｋｉ８７５１、マシチニブ（ＡＢ１０１０）、ＭＧＣＤ−２６５、モテサニブ二リン酸塩（ＡＭＧ−７０６）、ＭＰ−４７０、ＯＳＩ−９３０、パゾパニブ塩酸塩、ＰＤ１７３０７４、ソラフェニブトシル酸塩（Ｂａｙ４３−９００６）、ＳＵ５４０２、ＴＳＵ−６８（ＳＵ６６６８）、バタラニブ、ＸＬ８８０（ＧＳＫ１３６３０８９、ＥＸＥＬ−２８８０）からなる群から選択される。選抜されたチロシンキナーゼ阻害剤は、スニチニブ、エルロチニブ、ゲフィチニブ、又はソラフェニブから選択される。一実施形態では、チロシンキナーゼ阻害剤はスニチニブである。
【０２３９】
いくつかの実施形態では、本明細書に記載された癌及び転移性増殖、例えば膵臓癌を治療するために、ヘッジホッグ阻害剤は、フォルフィリノクスと併用して使用される。フォルフィリノクスは、オキサリプラチン８５ｍｇ／ｍ２とイリノテカン１８０ｍｇ／ｍ２に加えてロイコボリン４００ｍｇ／ｍ２を含み、続いて１日目にボーラスフルオロウラシル（％−ＦＵ）４００ｍｇ／ｍ２、次いで４６時間連続輸注にての５−ＦＵ  ２，４００ｍｇ／ｍ２を含む。
【０２４０】
いくつかの実施形態では、ヘッジホッグ阻害剤は、ＰＩ３Ｋ阻害剤と併用して使用される。一実施形態では、ＰＩ３Ｋ阻害剤は、ＰＩ３Ｋのδ及びγイソ型である。別の実施形態では、ヘッジホッグ阻害剤は、二重ＰＩ３Ｋ／ｍＴＯＲ阻害剤と併用して使用される。併用して使用され得る代表的Ｐｉ３Ｋ阻害剤は、例えばＷＯ２０１０／０３６３８０号、ＷＯ第２０１０／００６０８６号、ＷＯ第０９／１１４８７０号、ＷＯ第０５・１１３５５６号に記載されている。医薬組成物と併用して使用され得る追加のＰＩ３Ｋ阻害剤としては、限定されるものではないが、ＧＳＫ  ２１２６４５８、ＧＤＣ−０９８０、ＧＤＣ−０９４１、Ｓａｎｏｆｉ  ＸＬ１４７、ＸＬ７５６、ＸＬ１４７、ＰＦ−４６９１５０３２、ＢＫＭ  １２０、ＣＡＬ−１０１、ＣＡＬ２６３、ＳＦ１１２６、ＰＸ−８８６、及び二重ＰＩ３Ｋ阻害剤（例えばＮｏｖａｒｉｔｉｓ  ＢＥＺ２３５）が挙げられる。一実施形態では、ＰＩ３Ｋ阻害剤はイソキノリノンである。一実施形態では、ＰＩ３Ｋ阻害剤はＩＮＫ１１９７又はその誘導体である。他の実施形態では、ＰＩ３Ｋ阻害剤はＩＮＫ１１１７又はその誘導体である。
【０２４１】
いくつかの実施形態では、ヘッジホッグ阻害剤は、ＢＲＡＦ阻害剤、例えばＧＳＫ２１１８４３６、ＲＧ７２０４、ＰＬＸ４０３２、ＧＤＣ−０８７９、ＰＬＸ４７２０、及びソラフェニブトシル酸塩（Ｂａｙ４３−９００６）などと、及び／又は他の抗癌剤と併用して投与される。
【０２４２】
いくつかの実施形態では、ヘッジホッグ阻害剤は、ＭＥＫ阻害剤、例えばＡＲＲＹ−１４２８８６、ＧＳＫ１１２０２１２、ＲＤＥＡ４３６、ＲＤＥＡ１１９／ＢＡＹ８６９７６６、ＡＳ７０３０２６、ＡＺＤ６２４４（セルメチニブ）、ＢＩＸ０２１８８、ＢＩＸ０２１８９、ＣＩ−１０４０（ＰＤ１８４３５２）、ＰＤ０３２５９０１、ＰＤ９８０５９、及びＵ０１２６などと、及び／又は他の抗癌剤と併用して投与される。
【０２４３】
いくつかの実施形態では、ヘッジホッグ阻害剤は、ＪＡＫ２阻害剤、例えばＣＥＰ−７０１、ＩＮＣＢ１８４２４、ＣＰ−６９０５５０（タソシチニブ）などと併用して投与される。
【０２４４】
いくつかの実施形態では、本明細書で記載されたヘッジホッグ阻害剤と併用して、１つ又はそれより多くの以下の薬剤が使用され、これらは、Ｂ−Ｒａｆの阻害剤（例えば、ソラフェニブ、ＰＬＸ４０３２）、Ｍｅｋ（例えばＰＤ０３２９０１）、Ｅｒｋ（例えばＰＤ９８０５９）、Ｃｄｋ４／６（例えばＰＤ０３３２９９１）、及びＥＧＦＲ（例えばＴａｒｃｅｖａ（登録商標））である。
【０２４５】
いくつかの実施形態では、ヘッジホッグ阻害剤は、パクリタキセル又はパクリタキセル剤、例えばＴＡＸＯＬ、蛋白質結合パクリタキセル（例えばＡＢＲＡＸＡＮＥ（登録商標））など、及び／又は他の抗癌剤と併用して投与される。
【０２４６】
本明細書で使用するとき、「パクリタキセル」とは、以下の構造を有する化合物：
【化１４】
2013511549.tif 000015
、又はその薬剤的に許容し得る塩を指す。
【０２４７】
ＴＡＸＯＬ（Ｂｒｉｓｔｏｌ−Ｍｙｅｒｓ  Ｓｑｕｉｂｂ，Ｐｒｉｎｃｅｔｏｎ，ＮＪ）として市販されているパクリタキセルは、薬剤可能性を増強させるために、非イオン性界面活性剤のＣｒｅｍｏｐｈｒ  ＥＬ（ポリオキシエチレン化ヒカシ油）とエタノール中に製剤化されていている（Ｄｏｒｒら著「Ａｎｎ．Ｐｈａｒｍａｃｏｔｈｅｒ．」，（１９９４年）２８：Ｓ１１−Ｓ１４）。Ｃｒｅｍｏｐｈｏｒ  ＥＬは、一般的に融合中に発生する、詳しく記載された超過敏反応を生み出す又は関与することによって、パクリタキセルの毒性作用を増加させる可能があり、これによって治療された患者の２５〜３０％に影響を及ぼす（Ｗｅｉｓｓら著「Ｊ．Ｃｌｉｎ．Ｏｎｃｏｌ．」（１９９０年）８：１２６３−１２６８頁及びＲｏｗｉｎｓｋｙら著「Ｎ．Ｅｎｇ．Ｊ．Ｍｅｄ．」（１９９５年）３３２：１００４−１０１４頁）。これら反応の発生及び重症度を最小限にとどめるために、ヒスタミン１及び２ブロッカー、並びにグルココルチコイド（例えばデキサメタゾン）による前投薬が、標準的実施法になってきた（Ｆｉｎｌｅｙら著「Ａｎｎ．Ｐｈａｒｍａｃｏｔｈｅｒ．」（１９９４年）２８：Ｓ２７−Ｓ３０）。前投薬として使用されるデキサメタゾンの累積的副作用は、治療関連疾患を増加させる可能性があり、時には治療の早期中断という結果をもたらす。Ｃｒｅｍａｐｈｏｒ  ＥＬはまた、末梢神経疾患のような慢性パクリタキセル毒性作用を増加させ得る（Ｗｉｎｄｅｂａｎｋら著「Ｊ．Ｐｈａｒｍａｃｏｌ．Ｅｘｐ．Ｔｈｅｒ．」（１９９４年）２６８：１０５１−１０５６）。Ｃｒｅｍｏｐｈｏｒとエタノール溶媒から生じる更なる問題は、ルーチンの臨床用使用におけるＰＶＣバッグ及び輸液セットからの可塑化剤の浸出である（Ｗａｕｇｈら著「Ａｍ．Ｊ．Ｈｏｓｐ．Ｐｈａｒｍ．」（１９９１年）４８：１５２０−１５２４頁）。したがって、ＴＡＸＯＬとして市販されているパクリタキセルは、ガラス瓶又は非ＰＶＣ輸液システムのいずれか並びにインライン濾過を備えたシステムで調製されねばならない。これら諸問題が、水溶液中での改善された溶解性を備えたパクリタキセルの新しい製剤の開発における関心に拍車をかけてきた。
【０２４８】
本明細書で使用するとき、「パクリタキセル剤」とは、パクリタキセルの製剤（例えばＴＡＸＯＬ）又はパクリタキセル等価物（例えば、パクリタキセルのプロドラッグ）を指す。代表的なパクリタキセル等価物としては、限定されるものではないが、ナノ粒子アルブミン結合パクリタキセル（Ａｂｒａｘｉｓ  Ｂｉｏｓｃｉｅｎｃｅから市販されているＡＢＲＡＸＡＮＥ）、ドコサヘキサエン酸結合パクリタキセル（Ｐｒｏｔａｒｇａから市販されているＤＨＡ−パクリタキセル、Ｔａｘｏｐｒｅｘｉｎ）、ポリグルタミン酸結合パクリタキセル（Ｃｅｌｌ  Ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃから市販されているＰＧ−パクリタキセル、パクリタキセルポリグルメクス、ＣＴ−２１０３、ＸＹＯＴＡＸ）、腫瘍活性化プロドラッグ（ＴＡＰ）、ＡＮＧ１０５（ＩｍｍｕｎｏＧｅｎから市販されているパクリタキセルの３分子に結合されたＡｎｇｉｏｐｅｐ−２）、パクリタキセル−ＥＣ−１（ｅｒｂＢ２識別ペプチドＥＣ−１に結合されたパクリタキセル、Ｌｉら著「Ｂｉｏｐｏｌｙｍｅｒｓ」（２００７年）１７：６１７−６２０参照）、及びグルコース複合パクリタキセル（例えば、２’−パクリタキセルメチル２−グルコピラノシルスクシネート、Ｌｉｕら著「Ｂｉｏｏｒｇａｎｉｃ＆Ｍｅｄｉｃｉｎａｌ  Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ  Ｌｅｔｔｅｒｓ」（２００７年）１７：６１７−６２０参照）が挙げられる。
【０２４９】
特定の実施形態では、ヘッジホッグ阻害剤と追加の抗癌剤とは、同時に投与される（すなわち、２つの薬剤の同時間又は同日にての投与、若しくは同治療計画内での投与）か、又は順次に投与される（１つの薬剤の一期間時間にわたっての投与、次いで第２の期間時間に他の薬剤の投与、若しくは２つの薬剤の異なる治療計画内での投与）。
【０２５０】
特定の実施形態では、ヘッジホッグ阻害剤と追加の抗癌剤は同時に投与される。例えば、特定の実施形態では、ヘッジホッグ阻害剤と追加の抗癌剤とは、同一時間にて投与される。特定の実施形態では、ヘッジホッグ阻害剤と追加の抗癌剤とが、同日に投与される。特定の実施形態では、ヘッジホッグ阻害剤が、追加の抗癌剤が投与された後の同日に、又は同じ治療計画内で投与される。特定の実施形態では、ヘッジホッグ阻害剤が、追加の抗癌剤が投与される前の同日に、又は同じ治療計画内で投与される。
【０２５１】
特定の実施形態では、ヘッジホッグ阻害剤が、ある期間時間で追加の抗癌剤と同時に投与され、追加の抗癌剤による治療が中止された時点後に、ヘッジホッグ阻害剤による治療が継続する。
【０２５２】
他の実施形態では、ヘッジホッグ阻害剤が、ある期間時間で追加の抗癌剤と同時に投与され、ヘッジホッグ阻害剤による治療が中止された時点後に、追加の抗癌剤による治療が継続する。
【０２５３】
特定の実施形態では、ヘッジホッグ阻害剤と追加の抗癌剤とが、順次に投与される。例えば、特定の実施形態では、追加の抗癌剤の治療計画が終了した後に、ヘッジホッグ阻害剤が投与される。特定の実施形態では、ヘッジホッグ阻害剤の治療計画が終了した後に、追加の抗癌剤が投与される。
【０２５４】
２つ又は３つのステップの併用療法の特定の代表的な実施形態が、第２の薬剤（例えばパクリタキセル剤）とヘッジホッグ阻害剤との併用に基づいて以下のように提供されている。これらは、本明細書に開示された他の併用療法に修正を加え、及び／又はそれに応用され得る併用療法を説明するよう意図されている。
【０２５５】
一態様では、第２の薬剤（例えばパクリタキセル剤）とヘッジホッグ阻害剤とが、同時に投与される。特定の実施形態では、第２の薬剤（例えば、パクリタキセル剤）及びヘッジホッグ阻害剤が同日に同時に患者に投与される。特定の実施形態では、第２の薬剤（例えば、パクリタキセル剤）が先ず初めに投与され、ヘッジホッグ阻害剤もまた、同日に患者に投与されることが提供される。他の実施形態では、ヘッジホッグ阻害剤が先ず初めに投与され、第２の薬剤（例えば、パクリタキセル剤）もまた、同日に患者に投与されることが提供される。更に他の実施形態では、第２の薬剤（例えば、パクリタキセル剤）とヘッジホッグ阻害剤とが、同日の同時に（同一時間にて）患者に投与される。或いは、特定の実施形態では、第２の薬剤（例えば、パクリタキセル剤）とヘッジホッグ阻害剤とが、異なる日及び／又は異なるスケジュールで投与され（例えば、１つの薬剤が毎日投与され、一方他の薬剤が毎週投与される）、両薬剤に関する治療計画が、同日に開始および終了するよう提供される。
【０２５６】
別の態様では、第２の薬剤（例えば、パクリタキセル剤）とヘッジホッグ阻害剤とが、経時的に投与される。例えば、特定の実施形態では、第２の薬剤（例えば、パクリタキセル剤）の投与が終了した後に、ヘッジホッグ阻害剤が投与される。特定の実施形態では、ヘッジホッグ阻害剤は第２の薬剤（パクリタキセル剤）の投与が終了した直後に投与される（すなわち、第２の薬剤（例えば、パクリタキセル剤）による治療が終了した日と同日に）か、又は特定の実施形態では、第２の薬剤（例えば、パクリタキセル剤）投与の終了とヘッジホッグ阻害剤投与の開始との間に、ある期間（例えば、１日間、２日間、１週間、２週間、１か月間、２か月間、６か月間、１年間など）が存在する。或いは、特定の実施形態では、ヘッジホッグ阻害剤の投与が終了した後に、第２の薬剤（例えば、パクリタキセル剤）が投与される。特定の実施形態では、ヘッジホッグ阻害剤の投与が終了した直後に、第２の薬剤（例えばパクリタキセル剤）が投与される（すなわち、ヘッジホッグ阻害剤による治療が終了した日と同日に）か、又は、特定の実施形態では、ヘッジホッグ阻害剤投与の終了と第２の薬剤（例えば、パクリタキセル剤）投与の開始との間に、ある期間（例えば、１日間、２日間、１週間、２週間、１か月間、２か月間、６か月間、１年間など）が存在する。
【０２５７】
特定の実施形態では、第２の薬剤（例えば、パクリタキセル剤）とヘッジホッグ阻害剤とが、ある期間時間で同時に投与され、その後、第２の期間時間（すなわち、第２の薬剤（例えば、パクリタキセル剤）の投与が終了した）にてのヘッジホッグ阻害剤の投与が続く。特定の実施形態では、第２の薬剤（例えば、パクリタキセル剤）とヘッジホッグ阻害剤との同時投与が終了した直後に（すなわち、それと同日に）、ヘッジホッグ阻害剤の投与が継続する。或いは、特定の実施形態では、第２の薬剤とヘッジホッグ阻害剤との同時投与が終了した後のある期間時間（例えば、１日間、２日間、１週間、２週間、１か月間、２か月間、６か月間、１年間など）後に、ヘッジホッグ阻害剤による治療が開始する。これら実施形態のそれぞれでは、第２の期間時間中のヘッジホッグ治療計画が、第１の期間時間中にヘッジホッグ阻害剤が第２の薬剤（例えば、パクリタキセル剤）と同時に投与された場合の治療計画と同一であり得るか、又は第２の期間時間中のヘッジホッグ阻害剤治療計画が、第１の期間時間中にヘッジホッグ阻害剤が第２の薬剤（例えば、パクリタキセル剤）と同時に投与された場合の治療計画と異なり得る。
【０２５８】
他の実施形態では、第２の薬剤（例えば、パクリタキセル剤）とヘッジホッグ阻害剤とが、第１の期間時間で同時に投与され、続いて第２の薬剤（例えば、パクリタキセル剤）が第２の期間時間（すなわち、ヘッジホッグ阻害剤の投与期間が終了している）で投与される。特定の実施形態では、第２の薬剤（例えば、パクリタキセル剤）とヘッジホッグ阻害剤との同時投与が終了した直後に（すなわち、それと同日に）、第２の薬剤（例えば、パクリタキセル剤）の投与が継続する。或いは、特定の実施形態では、第２の薬剤（例えば、パクリタキセル剤）とヘッジホッグ阻害剤との同時投与が終了後のある期間時間（例えば、１日間、２日間、１週間、２週間、１か月間、２か月間、６か月間、１年間など）後に、第２の薬剤（例えば、パクリタキセル剤）の投与が開始する。これら実施形態のそれぞれでは、第２の期間時間中の第２の薬剤（例えば、パクリタキセル剤）治療計画が、第１の期間時間中に第２の薬剤（例えば、パクリタキセル剤）がヘッジホッグ阻害剤と同時に投与された場合の治療計画と同一であり得るか、又は第２の期間時間中の第２の薬剤（例えば、パクリタキセル剤）治療計画が、第１の期間時間中に第２の薬剤（例えば、パクリタキセル剤）がヘッジホッグ阻害剤と同時に投与された場合の治療計画と異なり得る。
【０２５９】
特定の実施形態では、第２の薬剤（例えば、パクリタキセル剤）が、第１の期間時間で患者に投与され、続いて第２の期間時間での第２の薬剤（例えば、パクリタキセル剤）とヘッジホッグ阻害剤との併用投与が実施される。特定の実施形態では、第２の薬剤（例えば、パクリタキセル剤）とヘッジホッグ阻害剤との同時投与は、第２の薬剤（例えば、パクリタキセル剤）の投与が終了した直後に（すなわち、それと同日に）開始する。或いは、特定の実施形態では、第２の薬剤（例えば、パクリタキセル剤）とヘッジホッグ阻害剤との同時投与は、第２の薬剤（例えば、パクリタキセル剤）の投与が終了した後のある時間期間（例えば、１日間、２日間、１週間、２週間、１か月間、２か月間、６か月間、１年間など）後に開始する。これら実施形態のそれぞれでは、第２の期間時間中の第２の薬剤（例えば、パクリタキセル剤）治療計画が、第１の期間時間における治療計画と同一であり得、又は、第２の期間時間中の第２の薬剤（例えば、パクリタキセル剤）治療計画が、第１の期間時間における治療計画と異なり得る。いくつかの実施形態では、ヘッジホッグ阻害剤の投与が、同時投与が終了後に継続する（すなわち、第２の薬剤（例えば、パクリタキセル剤）の第１の期間時間での投与、続いて第２の投与期間時間での第２の薬剤（例えば、パクリタキセル剤）とヘッジホッグ阻害剤との同時投与、続いて第３の期間時間でのヘッジホッグ阻害剤の投与が実施される）。他の実施形態では、第２の薬剤（例えば、パクリタキセル剤）の投与が、同時投与が終了した後に継続する（すなわち、第２の薬剤（例えば、パクリタキセル剤）の第１の期間時間での投与、続いて第２の投与期間時間での第２の薬剤（例えば、パクリタキセル剤）とヘッジホッグ阻害剤との同時投与、続いて第３の期間時間での第２の薬剤（例えば、パクリタキセル剤）の投与が実施される）。
【０２６０】
特定の実施形態では、ヘッジホッグ阻害剤が、第１の期間時間に患者に投与され、続いて第２の投与期間時間での第２の薬剤（例えば、パクリタキセル剤）とヘッジホッグ阻害剤との同時投与が実施される。特定の実施形態では、第２の薬剤（例えば、パクリタキセル剤）とヘッジホッグ阻害剤との同時投与は、ヘッジホッグ阻害剤の投与が終了した直後（すなわち、それと同日に）開始する。或いは、特定の実施形態では、ヘッジホッグ阻害剤の投与が終了した後のある期間時間（例えば、１日間、２日間、１週間、２週間、１か月間、２か月間、６か月間、１年間など）後に、第２の薬剤（例えば、パクリタキセル剤）とヘッジホッグ阻害剤との同時投与が開始する。これら実施形態のそれぞれでは、第２の期間時間中のヘッジホッグ阻害剤の治療計画が、第１の期間時間中の治療計画と同一であり得、又は第２の期間時間中のヘッジホッグ阻害剤の治療計画が、第１の期間時間中の治療計画と異なり得る。いくつかの実施形態では、ヘッジホッグ阻害剤の投与が、同時投与が終了した後に継続する（すなわち、第１の期間時間でのヘッジホッグ阻害剤の投与、続いて第２の期間時間での第２の薬剤（例えば、パクリタキセル剤）とヘッジホッグ阻害剤との同時投与、続いて第３の期間時間でのヘッジホッグ阻害剤の投与が実施される）。他の実施形態では、第２の薬剤（例えば、パクリタキセル剤）の投与が、同時投与が終了した後に継続する（すなわち、第１の期間時間でのヘッジホッグ阻害剤の投与、続いて第２の期間時間での第２の薬剤（例えば、パクリタキセル剤）とヘッジホッグ阻害剤との同時投与、続いて第３の期間時間での第２の薬剤（例えば、パクリタキセル剤）の投与が実施される）。
【０２６１】
第２の薬剤（例えば、パクリタキセル剤）の治療的有効量と、ヘッジホッグ阻害剤の治療的有効量と、追加の治療用薬剤の治療的有効量とを患者に投与することによって、癌を治療する方法が更に提供されている。第２の薬剤（例えば、パクリタキセル剤）、ヘッジホッグ阻害剤、及び追加の治療用薬剤は、同時に又は順次に投与され得、若しくは同時投与と順次投与の組み合わせを使用して投与され得る。
【０２６２】
いくつかの実施形態では、第２の薬剤（例えば、パクリタキセル剤）、ヘッジホッグ阻害剤、及び追加の治療用薬剤は、同時に投与される。例えば、特定の実施形態では、第２の薬剤（例えば、パクリタキセル剤）、ヘッジホッグ阻害剤、及び追加の治療用薬剤は、同日に患者に投与されるか、又は、特定の実施形態では、これらは同日の同時に投与される。或いは、特定の実施形態では、第２の薬剤（例えば、パクリタキセル剤）、ヘッジホッグ阻害剤、及び追加の治療用薬剤は、異なる日に及び／又は異なるスケジュールで投与され（例えば、１つが毎日又は隔日に投与され、一方他が毎週投与される）、すべての薬剤に関する治療計画が同日に開始または終了するよう提供される。
【０２６３】
特定の実施形態では、第２の薬剤（例えば、パクリタキセル剤）、ヘッジホッグ阻害剤、及び追加の治療用薬剤は、順次に投与される。例えば、特定の実施形態では、第１の期間時間で追加の治療用薬剤が投与され、その後、第２の期間時間で第２の薬剤（例えば、パクリタキセル剤）とヘッジホッグ阻害剤との同時投与が続く。特定の実施形態では、第２の薬剤（例えば、パクリタキセル剤）とヘッジホッグ阻害剤との同時投与が、第３の薬剤の投与が終了した直後に（すなわち、それと同日に）開始する。或いは、特定の実施形態では、第３の薬剤の投与が終了後のある時間期間（例えば、１日間、２日間、１週間、２週間、１か月間、２か月間、６か月間、１年間など）後に、第２の薬剤（例えば、パクリタキセル剤）とヘッジホッグ阻害剤との同時投与が開始する。本方法はまた、第１の期間時間でのヘッジホッグ阻害剤の投与、それに続く第２の期間時間での第２の薬剤（例えば、パクリタキセル剤）と第３の薬剤の投与、並びに第１の期間時間での第２の薬剤（例えば、パクリタキセル剤）の投与、それに続く第２の期間時間でのヘッジホッグ阻害剤と第３の薬剤の投与も考えられる。これら実施形態のいずれにおいても、第２の薬剤（例えば、パクリタキセル剤）、ヘッジホッグ阻害剤、及び／又は第３の治療用薬剤のうちのいずれの１つも、第２の期間時間での同時投与に続く第３の期間時間で投与され得る。
【０２６４】
更には、第２の薬剤（例えば、パクリタキセル剤）、ヘッジホッグ阻害剤、及び第３の治療用薬剤が、第１の期間時間で投与され得、続いて、第２の期間時間での第２の薬剤（例えば、パクリタキセル剤）、ヘッジホッグ阻害剤、及び第３の治療用薬剤の同時投与が実施される。例えば、第２の薬剤（例えば、パクリタキセル剤）が第１の期間時間で投与され得、その後、第２の期間時間での第２の薬剤（例えば、パクリタキセル剤）、ヘッジホッグ阻害剤、及び第３の治療用薬剤の同時投与が続く。同時投与に続いて、第３の期間時間には、第２の薬剤（例えば、パクリタキセル剤）、ヘッジホッグ阻害剤、及び／又は第３の治療用薬剤のいずれか１つが投与され得る。
【０２６５】
いくつかの例では、第２の薬剤（例えば、パクリタキセル剤）、ヘッジホッグ阻害剤、及び第３の治療用薬剤が、第１の期間時間で投与され得、その後、第２の期間時間での、第２の薬剤（例えば、パクリタキセル剤）、ヘッジホッグ阻害剤及び第３の治療用薬剤のうちの１つ又は２つの投与が続く（すなわち、第２の薬剤（例えば、パクリタキセル剤）、ヘッジホッグ阻害剤及び第３の治療用薬剤のうちの１つ又は２つの投与が終了し、その一方で他の薬剤の投与が継続する）。例えば、第２の薬剤（例えば、パクリタキセル剤）、ヘッジホッグ阻害剤、及び第３の治療用薬剤が、第１の期間時間で投与され得、その後、第２の期間時間でのヘッジホッグ阻害剤の投与が続く。第２の期間時間に引き続いて、第２の薬剤（例えば、パクリタキセル剤）、ヘッジホッグ阻害剤及び第３の治療用薬剤のうちのいずれか１つが、第３の期間時間で投与され得る。
【０２６６】
第２の薬剤（例えば、パクリタキセル剤）の治療的有効量、ヘッジホッグ阻害剤の治療的有効量、及び必要に応じて第３の薬剤の治療的有効量を投与することによって、癌治療を実施中又は実施した膵臓癌患者の無再発生存を延長させる方法が、更に提供されている。
【０２６７】
本明細書に記載されたように、第２の薬剤（例えば、パクリタキセル剤）とヘッジホッグ阻害剤は、同時投与され得、順次投与され得、又は同時及び順次投与の組み合わせを使用して投与され得る。いくつかの実施形態では、第２の薬剤（例えば、パクリタキセル剤）及び／又はヘッジホッグ阻害剤が、癌治療と共に同時に投与される。同時投与の例では、癌治療が終了した後に、第２の薬剤（例えば、パクリタキセル剤）及び／又はヘッジホッグ阻害剤は、投与されることが継続し得る。他の実施形態では、癌治療が終了した後に、第２の薬剤（例えば、パクリタキセル剤）及び／又はヘッジホッグ阻害剤が投与される（すなわち、癌治療と重複する期間を伴わない）。第２の薬剤（例えば、パクリタキセル剤）及び／又はヘッジホッグ阻害剤は、癌治療が終了した直後に投与され得るか、又は癌治療の終了と第２の薬剤（例えば、パクリタキセル剤）及び／又はヘッジホッグ阻害剤の投与との間に時間的ギャップ（例えば、１日、１週間、１か月、６か月、又は１年に及ぶ）が存在し得る。第２の薬剤（例えば、パクリタキセル剤）及び／又はヘッジホッグ阻害剤による治療は、無再発生存が維持される限り長く（例えば、１日、１週間、１か月、６か月、１年、２年、３年、４年、５年、またはそれ以上長期にわたって）継続し得る。
【０２６８】
癌治療が終了した後、第２の薬剤（例えば、パクリタキセル剤）の治療的有効量とヘッジホッグ阻害剤の治療的有効量とを患者に投与することによって、癌治療をすでに実施した膵臓癌患者の無再発生存を延長させる方法が、更に提供されている。本明細書に記載されているように、第２の薬剤（例えば、パクリタキセル剤）とヘッジホッグ阻害剤は、同時投与され得、順次投与され得、又は同時及び順次投与の組み合わせを使用して投与され得る。第２の薬剤（例えば、パクリタキセル剤）とヘッジホッグ阻害剤は、癌治療が終了した直後に投与され得るか、又は癌治療の終了と第２の薬剤（例えば、パクリタキセル剤）及び／又はヘッジホッグ阻害剤の投与との間に時間的ギャップ（例えば、１日、１週間、１か月、６か月、又は１年に及ぶ）が存在し得る。
【０２６９】
第２の薬剤（例えば、パクリタキセル剤）の治療的有効量とヘッジホッグ阻害剤の治療的有効量を投与することによって、患者の膵臓腫瘍及び／又は転移癌を治療（例えば腫瘍の量又は発生を減らす）又は予防するための方法も、更に提供されている。本明細書に記載されたように、第２の薬剤（例えば、パクリタキセル剤）とヘッジホッグ阻害剤は、同時投与され得、順次投与され得、又は同時及び順次投与の組み合わせを使用して投与され得る。
【０２７０】
他の実施形態では、本明細書で記載されたヘッジホッグ阻害剤及び併用療法は、他の化学療法剤、放射線療法、又は外科手術手技のうちの１つ又はそれより多くと併用して更に使用され得る。
【実施例】
【０２７１】
実施例
【０２７２】
ここまで一般的に説明されてきた本発明は、以下の実施例を参照することによってより容易に理解されるであろうが、この実施例は、本発明の特定の態様及び実施形態の単なる例示目的で挙げられたものであり、本発明を限定しようとするものではない。
実施例１：ヘッジホッグ経路における活性
【０２７３】
癌細胞殺傷効果に特異的なヘッジホッグ経路は、以下のアッセイ法によって確認され得る。Ｃ３Ｈ１０Ｔ１／２細胞は、ソニックヘッジホッグペプチド（Ｓｈｈ−Ｎ）に接触する場合に、骨芽細胞へと分化する。分化の際に、これら骨芽細胞は、酵素アッセイ法で測定され得る高レベルのアルカリホスファターゼ（ＡＰ）を産生する（Ｎａｋａｍｕｒａら著，１９９７年、「ＢＢＲＣ」２３７：４６５頁）。したがって、Ｃ３Ｈ１０Ｔ１／２の骨芽細胞への分化をブロックする（Ｓｈｈ依存性事象）化合物は、ＡＰ生成の低減によって同定され得る（ｖａｎ  ｄｅｒ  Ｈｏｒｓｔら著，２００３年，「Ｂｏｎｅ」３３：８９９頁）。アッセイ法の詳細は、以下に記載されている。
細胞培養
【０２７４】
マウス胎児中胚葉繊維芽細胞Ｃ３Ｈ１０Ｔ１／２細胞（ＡＴＣＣから入手）を、１０％熱不活性化ＦＢＦ（Ｈｙｃｌｏｎｅ）、５０単位／ｍｌのペニシリン及び５０ｕｇ／ｍｌのストレプトマイシン（Ｇｉｂｃｏ／Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ）を補充したＢａｓａｌ  ＭＥＭ培地（Ｇｉｂｃｏ／Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ）中、５％のＣＯ２を含む大気中、３７℃で培養した。
アルカリホスファターゼアッセイ
【０２７５】
Ｃ３Ｈ１０Ｔ１／２細胞を、８×１０３細胞／ウェルの細胞密度で、９６ウェル中にプレートした。細胞を集密になるまで増殖した（７２時間）。ソニックヘッジホッグ（２５０ｎｇ／ｍｌ）及び／又は化合物での処置後、細胞を溶解緩衝液（５０ｍＭ  Ｔｒｉｓ  ｐＨ７．４、０．１％  ＴｒｉｔｏｎＸ１００）１１０μＬ中で溶解させて、プレートを音波処理し、並びに溶解物を、０．２μｍＰＶＤＦプレート（Ｃｏｒｎｉｎｇ）を通して回転させた。溶解物４０μＬを、１ｍｇ／ｍｌのｐ−ニトロフェニルホスフェートを含有するアルカリ緩衝溶液（Ｓｉｇｍａ）中のＡＰ活性について評価分析した。３７℃にて３０分間のインキュベーション後、Ｅｎｖｉｓｉｏｎプレートリーダー上、４０５ｎｍにてプレートを読み取った。総蛋白質を、Ｐｉｅｒｃｅから入手したＢＣＡ蛋白質アッセイキットによって、製造者の使用説明書に従って定量化した。ＡＰ活性は、総蛋白質に対して標準化された。上記アッセイを使用することによって、ＩＰＩ−９２６は、２０ｎＭ未満のＩＣ５０を備えたヘッジホッグ経路の拮抗剤であることが示された。
【化１５】
2013511549.tif 000016
実施例２：膵臓癌単剤療法モデル
【０２７６】
ＩＰＩ−９２６の活性を、ヒト膵臓癌モデルでテストした。ＢｘＰＣ−３細胞を、マウス右脚の側部に皮下移植した。腫瘍移植後４２日目に、マウスを、ベヒクル（３０％ＨＰＢＣＤ）又はＩＰＩ−９２６のいずれかを投与される２つの群に無作為割付けした。ＩＰＩ−９２６は、４０ｍｇ／ｋｇ／日で投与された。２５日間の毎日投与後に、ＩＰＩ−９２６は、ベヒクル対照と比較した場合、約４０％まで腫瘍体積を統計学的に減少させた（ｐ＝０．０３０９）（図１参照）。
【０２７７】
研究の最後で、最終投与から４時間後に腫瘍を収穫し、ヘッジホッグ経路遺伝子のｑ−ＲＴ−ＰＣＲ解析によって、標的反応を評価した。図２Ａで示されたように、ヒトＧｌｉ−１は、ベヒクル又は処置群のいずれでも調節されなかった。しかしながら、ネズミＧｌｉ−１  ｍＲＮＡレベルは、ベヒクル処置群と比較した場合、ＩＰＩ−９２６処置群で著しくダウンレギュレートされた（図２Ｂ参照）。
実施例３：膵臓癌同時併用療法モデル
【０２７８】
ＢｘＰＣ−３膵臓癌異種移植片を保持する動物が、ＩＰＩ−９２６と同時併用されて化学療法剤ゲムシタビンで処置された。ゲムシタビンは、腹腔内注入によって、１週間に２回、１００ｍｇ／ｋｇの投与量で投与され、一方ＩＰＩ−９２６は、経口強制給飼によって、４０ｍｇ／ｋｇ／日の投与量で投与された。図３で示されたように、これら状況下において、腫瘍はゲムシタビン単独に対して３３％、ＩＰＩ−９２６単独に対して５５％、及びＩＰＩ−９２６とゲムシタビンの併用に対して６７％の反応を示した。
【０２７９】
別のモデルでは、ＭｉａＰａＣａ膵臓癌異種移植片を保持する動物が、ＩＰＩ−９２６と同時併用された化学療法剤ゲムシタビンで処置された。ゲムシタビンは、腹腔内注入によって、１週間に１回、１００ｍｇ／ｋｇの投与量で投与され、一方ＩＰＩ−９２６は、経口強制給飼によって、４０ｍｇ／ｋｇ／日の投与量で投与された。図４で示されたように、これら状況下において、腫瘍は、ゲムシタビン単独に対して５２％の反応、ＩＰＩ−９２６単独に対して５０％の反応、及びＩＰＩ−９２６とゲムシタビンの併用に対して７０％の反応を示した。
実施例４：肺癌同時併用療法モデル
【０２８０】
ヒト小細胞肺癌腫瘍モデルにおけるＩＰＩ−９２６の活性をテストするために、ＬＸ２２細胞を、オスＮｃｒヌードマウスの右脚側部に皮下移植した。ＬＸ２２は、化学療法歴のない患者から誘導されたＳＣＬＣの初期異種移植モデルであり、マウスからマウスへの継代によって維持されてきたものである。この腫瘍は、臨床的設定に極めて似た、エトポシド／カルボプラチン化学療法に反応する。ＬＸ２２は、化学療法中に退行し、寛解期を経て、次いで再発を開始する。
【０２８１】
ＬＸ−２２小細胞肺癌異種移植片を保持する動物が、ＩＰＩ−９２６と同時併用して、化学療法剤エトポシドとカルボプラチンで処置された。この実験では、エトポシドは、静脈内経路によって１２ｍｇ／ｋｇの投与量で３日間連続して投与され、次いで最初の投与から２週間後に、単回投与された。カルボプラチンは、毎週６０ｍｇ／ｋｇの投与量にて３週間、静脈内注入によって投与された。ＩＰＩ−９２６は、エトポシド／カルボプラチン処置と同時に、又はエトポシド／カルボプラチン処置の直後に、毎日４０ｍｇ／ｋｇの投与量にて、経口強制給飼によって投与された。図５で示されたように、これら条件下において、エトポシド／カルボプラチン単独投与された動物と比較した場合、腫瘍は、全ての処置に対して全体として４０％の反応を示した。
実施例５：化学療法耐性再発モデル
【０２８２】
ＬＸ２２モデルでは、ＩＰＩ−９２６単独薬剤活性及びその化学療法耐性再発を調節する能力がテストされた。腫瘍移植後３２日目に、マウスを、ベヒクル（３０％ＨＢＰＣＤ）、ＩＰＩ−９２６、又はエトポシドとカルボプラスチン（Ｅ／Ｐ）の多剤併用化学療法を与えられる群に無作為割付けした。ＩＰＩ−９２６は４０ｍｇ／ｋｇ／日の投与量で投与され、エトポシドは、１２ｍｇ／ｋｇの投与量で、移植後３４、３５、３６及び４８日目に静脈内投与され、並びにカルボプラスチンは、６０ｍｇ／ｋｇの投与量で、移植後３４、４１、及び４８日目に静脈内投与された。１６日間の連続投与後には、ＩＰＩ−９２６で処置された群とベヒクル処置群との間には、測定可能な差異はなかった（図６参照）。５０日目に、Ｅ／Ｐ処置マウスが、ベヒクル（３０％ＨＰＢＣＤ）又はＩＰＩ−９２６追加処置のいずれかを受ける群に更に無作為割付けされた。ＩＰＩ−９２６は４０ｍｇ／ｋｇ／日の投与量で投与された。図６で示されたように、ＩＰＩ−９２６の３５日間の連続投与後に、ベヒクル群と比較して、処理群で腫瘍再発の実質的な遅延（８２％）が存在した（ｐ＝０．０１０１）。
実施例６：結腸癌併用療法モデル
【０２８３】
Ｃｏｌｏ２０５結腸癌異種移植片を保持する動物が、ＩＰＩ−９２６と併用して、化学療法剤５−フルオロウラシルで処置された。５−フルオロウラシルは、５０ｍｇ／ｋｇ又は１００ｍｇ／ｋｇのいずれかの投与量にて、１週間に１回、腹腔内注入として２週間投与された。ＩＰＩ−９２６は、４０ｍｇ／ｋｇの投与量にて、毎日、経口強制給飼として２１日間投与された。これら条件下において、腫瘍は、５−フルオロウラシル単独又はＩＰＩ−９２６との併用に対して、腫瘍は６８％の反応を示した。
実施例７：結腸癌化学療法耐性再発モデル
【０２８４】
動物に、ＳＷ６２０結腸癌細胞を移植する。腫瘍保持動物の腫瘍が化学療法処置に反応するような期間に、動物にパクリタキセルが投与される。これら動物が、一方がベヒクルが投与される、並びにもう一方がＩＰＩ−９２６が投与される２つの群に無作為割り付けされた。異なる療法に対する腫瘍反応が、本明細書で説明されたように決定される。
【０２８５】
或いは、Ｃｏｌｏ２０５結腸癌細胞が、実験動物に移植される。腫瘍保持動物の腫瘍が化学療法処置に反応するような期間に、動物に５−フルオロウラシルを投与される。次いで、これら動物を、一方がベヒクルを投与される、もう一方がＩＰＩ−９２６を投与される２つの群に無作為割付けする。異なる療法への腫瘍反応が、本明細書で説明されたように決定される。
実施例８：卵巣癌モデル
【０２８６】
ＩＧＲＯＶ−１卵巣癌異種移植片を保持するマウスが、４０ｍｇ／ｋｇにてのＩＰＩ−９２６の投与量で、毎日、２１日間連続で処置された。腫瘍増殖への実質的影響は、この特別な卵巣癌細胞異種移植片でのこの投与量では観測されなかった。更なる研究において、ＩＧＲＯＶ−１卵巣癌異種移植片保持マウスが、１５ｍｇ／ｋｇの投与量にてのパクリタキセルによる５日間連続投与、続いて４０ｍｇ／ｋｇの投与量にてのＩＰＩ−９２６による２１日間連続投与で処置された。同様に、腫瘍増殖に及ぼす実質的な影響は、この特別な卵巣癌細胞異種移植片で、この投与量では観測されなかった。
【０２８７】
他の卵巣癌細胞型がＩＰＩ−９２６による処置に反応するかどうかを判断するために、ＳＫＯＶ−３、ＯＶＣＡＲ−４又はＯＶＣＡＲ−５卵巣癌細胞が、実験動物に移植される。単剤療法及び同時併用療法の効果を決定するために、腫瘍保持動物に、パクリタキセル又はカルボプラスチン単独で、ＩＰＩ−９２６単独で、若しくはＩＰＩ−９２６及びパクリタキセル又はカルボプラスチンの併用が投与される。連続併用療法の効果を判断するために、腫瘍保持動物に、その腫瘍が化学療法に反応するような期間に、パクリタキセル又はカルボプラスチンが投与される。次いで、これら動物を、一方がベヒクルを投与され、他方がＩＰＩ−９２６を投与される２つの群に無作為割付けする。異なる療法に対する腫瘍反応が、本明細書で説明されたように決定される。
実施例９：膀胱癌モデル
【０２８８】
単剤療法及び同時併用療法の効果を決定するために、ＵＭＵＣ−３膀胱癌細胞が動物に移植される。次いで腫瘍保持動物に、ゲムシタビン／シスプラチン単独、ＩＰＩ−９２６単独、又は３つの薬剤を併用して投与される。異なる療法に対する腫瘍反応が、本明細書で説明されたように決定される。
【０２８９】
連続併用療法の効果を判断するために、動物にＵＭＵＣ−３膀胱癌細胞が移植され、次いで腫瘍保持動物に、その腫瘍が化学療法に反応する期間に、ゲムシタビンとシスプラチンが併用して投与される。次いで、これら動物を、一方がベヒクルを投与され、他方がＩＰＩ−９２６を投与される２つの群に無作為割付けする。異なる療法に対する腫瘍反応が、本明細書で説明されたように決定される。
【０２９０】
或いは、ＳＷ７８０膀胱癌細胞が、実験動物に移植される。単剤療法及び同時併用療法の効果を決定するために、腫瘍保持動物に、ゲムシタビン／シスプラチン単独で、ＩＰＩ−９２６単独で、若しくは３つの薬剤を併用して投与される。連続併用療法の効果を決定するために、腫瘍保持動物に、その腫瘍が化学療法に反応する期間に、ゲムシタビンとシスプラチンとを併用して投与する。次いで、これら動物を、一方がベヒクルを投与され、他方がＩＰＩ−９２６を投与される２つの群に無作為割付けする。異なる療法に対する腫瘍反応が、本明細書で説明されたように決定される。
実施例１０：非小細胞癌モデル
【０２９１】
単剤療法及び同時併用療法の効果を決定するために、動物にＮＣＩ−Ｈ１６５０非小細胞肺癌細胞が移植される。次いで腫瘍保持動物に、ゲフィチニブ単独、ＩＰＩ−９２６単独、又は２つの薬剤を併用して投与される。異なる療法に対する腫瘍反応が、本明細書で説明されたように決定される。
【０２９２】
連続併用療法の効果を判断するために、動物にＮＣＩ−Ｈ１６５０非小細胞肺癌細胞が移植され、次いで腫瘍保持動物に、その腫瘍がゲフィチニブ処置に反応する期間に、ゲフィニチブ投与される。次いで、これら動物を、一方がベヒクルを投与され、他方がＩＰＩ−９２６を投与される２つの群に無作為割付けする。異なる療法に対する腫瘍反応が、本明細書で説明されたように決定される。
実施例１１：ヘッジホッグリガンド誘導研究
【０２９３】
ＬＸ２２モデルでの追跡研究が、エトポシド及びカルボプラチン（Ｅ／Ｐ）処置後のＩＰＩ−９２６によるＨｈ経路の調節を検討するようにデザインされた。上記実施例４で記載されたように、ＬＸ２２小細胞肺癌異種移植片保持動物が、エトポシド及びカルボプラチンで処置された。回収されるそれぞれの時点の２４時間前に、ＩＰＩ−９２６単回投与（４０ｍｇ／ｋｇ）が投与された。化学療法処置に先立って、ベースラインのために、未処置腫瘍が５匹の動物から回収された。４匹の動物からの腫瘍が、１、４、７、及び１０日目に、３匹の動物からの腫瘍が、１４日目に回収された。ｑ−ＲＴ−ＰＣＲ解析及び組織学／免疫組織化学法評価のために、サンプルが回収された。ＲＮＡが抽出され、更にｃＤＮＡの第１変換によって、次いで一段階マスターミックス（７９００でのＦＡＳＴ法）を使用して、ｑ−ＲＴ−ＰＣＲ分析が完了した。
【０２９４】
本研究の結果は、ＲＴ−ＰＣＲ法及び免疫組織化学法の双方で測定されたように、Ｈｈリガンド、特にインディアンＨｈ（ＩＨＨ）が、ヒト腫瘍細胞中及び周辺のネズミ間質細胞中でアップレギュレートされることを示した（図７Ａ及び７Ｂ参照）。更に、間質由来ネズミＧｌｉ−１及び腫瘍由来ヒトＧｌｉ−１が、腫瘍由来リガンドに応答して誘導された。ネズミＧｌｉ−１発現は、未処置腫瘍での発現レベルに比べて、Ｅ／Ｐ処置の中断後少なくとも１４日間で上昇したままであり、並びにＩＰＩ−９２６の投与によって阻害され（図８Ａ参照）、一方ヒトＧｌｉ−１発現は、ＩＰＩ−９２６の投与によって影響されなかった（図８Ｂ参照）。いかなる理論にも束縛されるものではないが、化学療法後の腫瘍由来Ｈｈリガンドのアップレギュレーションは、腫瘍再発にとって重要であるようなＨｈ経路に依存する細胞集団の生存に影響を与え得ると考えられる。これらの所見は、先にＨｈシグナル伝達のために重要であると示された（Ｙａｕｃｈら著、２００８年、「Ｎａｔｕｒｅ」４５５：４０６−４１０頁）、観測された腫瘍と周辺間質との間のパラクリン相互干渉と合致している。
実施例１２：ヘッジホッグリガンド誘導研究
【０２９５】
化学療法後のＨｈリガンドの誘導もまた、他の癌腫瘍モデルにおいて研究された。インヴィヴォで、ＵＭＵＣ−３膀胱癌異種移植片保持マウスに、１００ｍｇ／ｋｇのゲムシタビンが、１週間に１回、４週間投与された。最終投与後２４時間で、腫瘍は、ＬＸ２２モデルで観測されたものと同様な増加したＩＨＨ発現を示した（図９Ａ及び図９Ｂ参照）。インヴィトロ研究では、ドキソルビシン又はゲムシタビンのいずれかに１２〜２４時間曝されたＵＭＵＣ−３細胞中で、全てのＨｈリガンド（ソニック、インディアン及びデザート）がアップレギュレートされることを示した（図１０中のドキソルビシンデータを参照）。追加のインヴィトロ研究は、カルボプラチンによる処置後に、Ａ２７８０卵巣癌細胞中で、ＩＨＨ発現が増加されるが、一方ソニックＨｈ（ＳＨＨ）発現は影響されないこと（図１１参照）、並びにＳＨＨが最大程度までアップレギュレートされることを伴って、ＩＨＨとＳＨＨの双方がＩＧＲＯＶ−１細胞中で増加されること（図１２参照）を示した。更なるインヴィトロ研究は、少細胞肺癌Ｈ８２細胞中で、ドセタキセルによってＳＨＨがアップレギュレートされるが、カルボプラチンではアップレギュレートされず、一方ＩＨＨは、これらいずれの薬剤によってもアップレギュレートされないことを示した（図１３参照）。
【０２９６】
化学療法以外で、細胞性ストレスがＨｈリガンド発現をアップレギュレートするかどうかを判断するために、ＵＭＵＣ−３細胞が、インヴィトロにて低酸素を含む種々のストレス源に曝された。非毒性対照と比較された場合、ＳＨＨリガンド発現は、ＲＮＡ及び蛋白質レベルの双方で増加された（図１４参照）。
【０２９７】
要約すると、複数の腫瘍型が、化学療法後のＨｈリガンドのアップレギュレーションを表す。アップレギュレートされるＨｈリガンドの型（すなわち、ソニック、インディアン及び／又はデザート）及びアップレギュレーションの程度は、腫瘍型及び化学療法剤に依存して変化する。いかなる理論にも束縛されるものではないが、これら結果は、ストレス（化学療法を含む）は、保護又は生存機構として、腫瘍細胞中のヘッジホッグリガンド生産を誘導することを示唆している。これら結果は、生存する亜集団は、Ｈｈ経路に依存し得ること、したがって、Ｈｈ経路阻害への感受性を示し得ることを更に示唆している。まとめると、これら結果は、ヘッジホッグ阻害は、初期は化学療法に反応性であるが、最終的に再発するような臨床適応（例えば小細胞肺癌、非小細胞肺癌、膀胱癌、結腸癌、又は卵巣癌のような）における無再発生存率を増大し得ることを示唆している。
実施例１３：ソニックヘッジホッグ（ＳＨＨ）を検出するための免疫組織化学（ＩＨＣ）研究
【０２９８】
ヒト神経内分泌サンプルで、免疫組織化学分析によって、ソニックヘッジホッグ（ＳＨＨ）リガンドが検出され得るかどうかを決定するために、神経内分泌組織マイクロアレイ（ＴＭＡ）ＨＴＭＡ１７（Ｄａｎａ−Ｆａｒｂｅｒ  Ｃａｎｃｅｒ  Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅ（ＤＦＣＩ）から入手）が、ＳＨＨ免疫染色に関してテストされた。染色のための部分が、先ず初めに脱パラフィン化され、一連の段階的なアルコール中で水和処理され、次いで、加圧下、１２０℃にて、クエン酸緩衝液（ｐＨ＝６）中で２０分間、熱誘導エピトープ検索（ＨＩＥＲ）を経て処理された。次に、サンプルが室温に戻されて、ＳＨＨ免疫組織化学（ＩＨＣ）法のために調製された。ウサギ抗−ヒトＳＨＨ抗体（ＥＰ１１９０Ｙ）（Ａｂｃａｍカタログ＃ａｂ５３２８１）を、第一抗体として１：２０００希釈にて使用された。Ｒａｂｂｉｔ−ｏｎ−Ｒｏｄｅｎｔ  Ｐｏｌｙｍｅｒ（Ｂｉｏｃａｒｅカタログ＃ＲＭＲ６２２Ｌ）が、第二ポリマーシステムとして使用された。ＤＡＢ液基質緩衝液＋クロモゲンシステム（ＤＡＫＯカタログ＃Ｋ３４６８）を、顕色及び染色の検出のために使用した。
【０２９９】
それぞれのＴＭＡスポットに関する肉眼的観察によって計算された染色のパーセンテージに基づいて、データが評価された。起源の臓器でサンプルをグループ分けすることによって、データが整理された（良性対腫瘍性）。図１５Ａ〜１５Ｇに示されたように、ＳＨＨリガンドの発現は、虫垂、十二指腸、回腸膵臓直腸、小腸及び肺を含む異なる起源の臓器の複数の神経内分泌癌中で検出された。
実施例１４：神経内分泌癌モデルにおけるＩＰＩ−９２６の効果
【０３００】
神経内分泌癌（ＮＥＴ）モデルにおけるＩＰＩ−９２６の効果を決定するために、Ｂｏｎ−１細胞が、オスＮｃｒヌードマウスに移植された（５×１０６細胞／マウス）。Ｂｏｎ−１（Ｐｕｒｄｕｅ  Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙから入手）は、ヒト膵臓神経内分泌癌細胞系であり、１０％ＦＢＳと１％ペニシリン／ストレプトマイシンで補充されたＲＰＭＩ１４６０培地中で維持された。ＩＰＩ−９２６による処置は、腫瘍体積が一旦約２００ｍｍ３に到達してから開始された。腫瘍保持マウスが、５％ＨＰＢＣＤ中のＩＰＩ−９２６の単回投与で、投与量４０ｍｇ／ｋｇで経口強制給飼によって処置された（８ｍｌ／ｋｇ）。
ＲＴ−ＰＣＲ分析
【０３０１】
サンプルが、ＩＰＩ−９２６の単回投与処置後、２４、４８及び７２時間で回収され、ｑＲＴ−ＰＣＲ分析のために、急速凍結された。未処置腫瘍が回収され、ＩＰＩ−９２６処置腫瘍と比較するための対照として供給した。標準ＴＲＩＺＯＬ（登録商標）（Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ）法を使用して、全ての腫瘍から総ＲＮＡが抽出され、ＲＮＥＡＳＹ（登録商標）Ｍｉｎｉ  Ｋｉｔ（Ｑｉａｇｅｎ）を使用して洗浄された。次に、ＲＮＡがｃＤＮＡに変換され、ネズミＧｌｉ１、ヒトＧｌｉ１、及びヒトヘッジホッグリガンド（ソニックＨｈ（ＳＨＨ）及びインディアンＨｈ（ＩＨＨ）））の発現のｑＲＴ−ＰＣＲ分析のための各反応／サンプル中で、５０ｎｇのｃＤＮＡが使用された。全てのサンプルは、繰り返しテストされた。
【０３０２】
図１６Ａ〜１６Ｂで示されたように、間質由来ネズミＧｌｉ−１  ｍＲＮＡの発現は、ＩＰＩ−９２６による処置後、７２時間に至るまでダウンレギュレートされたが、一方、腫瘍由来ヒトＧｌｉ−１の発現は、ＩＰＩ−９２６に対して顕著には調節されなかった。図１６Ｃ〜１６Ｄに示されたように、ヒトソニックヘッジホッグ（ｈＳＨＨ）とヒトインディアンヘッジホッグ（ｈＩＨＨ）は、ＩＰＩ−９２６で処置された腫瘍中では、著しく影響されることはなかった。これらの結果は、腫瘍細胞から分泌されるＨｈリガンドは、腫瘍細胞と間質との間で発生するパラクリンシグナル伝達カスケード中の周辺の間質細胞微小環境を活性化することを示唆している。Ｈｈ経路の活性化は、膵臓ＮＥＴｓ中の腫瘍微小環境を維持する上で、重要な役割を果たす。
ソニックヘッジホッグ（ＳＨＨ）免疫染色
【０３０３】
腫瘍が切除され、１０％中性緩衝ホルマリン中で２４時間固定された。翌日、サンプルを７０％エタノール中の保存に切り替えた。腫瘍が、標準プロトコールに従って処理され、埋設された。埋設された腫瘍組織が、ＳＨＨ免疫組織化学（ＩＨＣ）法のために、５ｕｍ部分に区分化された。染色される部分が、先ず初めに脱パラフィン化され、一連の段階的アルコール中で水和され、次いで、クエン酸緩衝液（ｐＨ＝６）中、加圧化１２０℃にて２０分間、熱誘導エピトープ検索（ＨＩＥＲ）を通過させた。次に、サンプルを室温に戻し、ＳＨＨ免疫組織化学（ＩＨＣ）法のために調製した。ウサギ抗−ヒトＳＨＨ抗体（ＥＰ１１９０Ｙ）（Ａｂｃａｍカタログ＃ａｂ５３２８１）を、１：２０００希釈にて、第一抗体として使用した。Ｒｂｂｉｔｏ−ｏｎ−Ｒｏｄｅｎｔ  Ｐｏｌｙｍｅｒ（Ｂｉｏｃａｒｅカタログ＃ＲＭＲ６２２Ｌ）を、第二ポリマーシステムとして使用した。ＤＡＢ液体基質緩衝液＋クロモゲンシステム（ＤＡＫＯカタログ＃Ｋ３４６８）を、顕色及び染色の検出のために使用した。図１７に示されたように、ヒトＳＨＨの発現は、ヒト腫瘍細胞中及び周囲のネズミ間質細胞中で検出された。
実施例１５：神経内分泌癌細胞モデルにおける、ＩＰＩ−９２６単独又はスニチニブと併用された場合のＩＰＩ−９２６の効果
【０３０４】
神経内分泌癌（ＮＥＴ）モデルにおける、ＩＰＩ−９２６の単独又はスニチニブと併用された場合の効果を決定するために、Ｂｏｎ−１細胞を、オスＮｃｒヌードマウスに移植した（５×１０６細胞／マウス）。移植前に、Ｂｏｎ−１細胞を、１０％ＦＢＳと１％ペニシリン／ストレプトマイシンで補充されたＲＰＭＩ１４６０培地中で培養した。腫瘍体積が約２００ｍｍ３に一旦到達した時点で、処置が開始された。
【０３０５】
腫瘍細胞移植後１３日目に、マウスを、ベヒクル対照（５％ＨＰＢＣＤ）、５％ＨＰＢＣＤ中のＩＰＩ−９２６、スニチニブ（水溶液）、又はＩＰＩ−９２６と併用したスニチニブを投与する３つの投与群に無作為割付けした。１３日目から３３日目に至るまで、ＩＰＩ−９２６は、投与量４０ｍｇ／ｋｇで隔日、経口強制給飼によって投与された（８ｍｌ／ｋｇ）。スニチニブは、投与量４０ｍｇ／ｋｇで毎日、経口強制給飼によって投与された（８ｍｌ／ｋｇ）。したがって、この実験では、Ｂｏｎ−１膵臓神経内分泌癌細胞を保持するマウスは、合計でＩＰＩ−９２６の１０回投与及び／又はスニチニブの２０回投与を受けたことになる。体重と腫瘍測定が、１週間に３回行われた。腫瘍測定は、カリパスを使用して、二寸法（幅×長さ）で測定され、並びに腫瘍体積は長さ×幅２／２に等しい。処置の開始日から２０％より大きい体重減少又は３０００ｍｍ３以上の腫瘍体積は、動物を安楽死させた。分析のためのサンプルを、最終投与後２４時間で回収した。回収された腫瘍は分析的評価及びｑＲＴ−ＰＣＲ解析のために急速凍結された。病理組織検査のために、サンプルを７０％エタノール中に移す前に、腫瘍を１０％ホルマリン中で２４時間固定化した。
【０３０６】
図１８に示されたように、腫瘍測定の最終日に、ＩＰＩ−９２６単独投与群は、対照群と比較した場合に、３５％の腫瘍増殖阻害（ＴＧＩ）を示し、一方スニチニブ（「Ｓｕｔｅｎｔ」として表示）単独投与群は、対照群と比較した場合に、６０％のＴＧＩを示した。スニチニブとＩＰＩ−９２６を併用投与されたマウスは、７２％のＴＧＩを示した。ベヒクル対照と比較した全ての％ＴＧＩは、統計的に有意であった（ＩＰＩ−９２６単独群ではｐ＝０．００９６、スニチニブ単独群ではｐ＝０．００２８、ＩＰＩ−９２６とスニチニブ併用群ではｐ＝０．０００２）。ＩＰＩ−９２６とスニチニブの併用投与群は、ＩＰＩ−９２６単独（ｐ＝０．１６３１）又はスニチニブ単独（ｐ＝０．３５９３）群と比較した場合、統計的に有意な％ＴＧＩを示さなかった。これら結果は、ＩＰＩ−９２６とスニチニブが併用投与された場合に、対照群と比較して腫瘍体積増殖の減少における効果での統計的に有意な増加を示した。
実施例１６Ａ：ラット同系軟骨肉腫モデルにおける術前補助療法及び補助療法でのＩＰＩ−９２６の効果
軟骨肉腫の治療的課題
【０３０７】
軟骨肉腫は、一般的に腫瘍細胞による軟骨様マトリックスの産生を有する新生細胞の異種群を構成する。骨格悪性疾患の２番目の位置を占めるこれらタイプの臨床管理は、過去３０年間大きく変わらないままである。それらの細胞外マトリックス、分裂細胞の低パーセンテージ、及び劣悪な血管分布のために、軟骨系腫瘍は、比較的に化学療法及び放射線療法耐性であると一般的に信じられている。したがって、この腫瘍の主たる治療法として、手術が未だ広く普及している。軟骨肉腫の臨床管理を改善することは課題であり、並びに革新的な治療手段を開発することが、軟骨肉腫の患者の治療においての重要なゴールである。
肉腫治療のためのＨｈ経路の阻害
【０３０８】
ヘッジホッグ（Ｈｈ）遺伝子は、胚発生中の増殖及び分化のシグナル伝達経路において重要である。この経路の無制御の活性化は、癌の特異的型をもたらし、並びにＨｈシグナル伝達の阻害が、腫瘍増殖を抑制することが可能であるという証拠がある。軟骨肉腫及び骨肉腫細胞系中のヘッジホッグシグナル伝達の阻害剤を使用する前臨床的研究は、筋骨格肉腫治療のための今後の薬剤としてのＨｈ阻害剤の有効性に関する証拠を提供した。Ｈｈ経路の阻害は、抗癌活性を有し、並びに肉腫侵襲（局所的又は転移）を制限又は阻害するために使用され得ると考えられている。先の研究は、ｍＴＯＲ経路の阻害は、軟骨肉腫へ向けられる強い抗腫瘍活性を有することを確立した。これらデータに基づいて、Ｈｈ阻害剤とｍＴＯＲの阻害剤の組み合わせが、付加的抗腫瘍効果のために注目すべき組み合わせを構成する。
【０３０９】
以下に記載されているのは、Ｈｈ−特異的阻害剤ＩＰＩ−９２６（本明細書では化合物４２とも称される）の単独又はｍＴＯＲの特異的阻害剤と併用されての使用が、軟骨肉腫進行を阻害し得るかどうかを評価することを意図するインヴィヴォ実験（臨床関連設定における）である。これを評価するために、ラット同系軟骨肉腫モデルが、２つの主要な設定において特性評価され得る。
設定１．軟骨肉腫のための治癒的治療としてＩＰＩ−９２６を評価
ＩＰＩ−９２６の腫瘍増殖に及ぼす効果が、同系軟骨肉腫モデルにおいて評価され得る。この設定では、処置は、腫瘍移植後１０日目に開始されるであろう（実験プロトコール参照）。ＩＰＩ−９２６の治療的効果（単独又はｍＴＯＲ阻害剤との併用）は、通常の化学療法の１つ（アドリアマイシン）及びｍＴＯＲの阻害剤と比較され得る。
設定２．「再発した」軟骨肉腫に及ぼすＩＰＩ−９２６治療的効果を評価
実験の第２の設定では、ＩＰＩ−９２６とＩＰＩ−９２６をベースにする薬剤の組み合わせが、病巣内掻爬後に発生した腫瘍増殖に及ぼす効果が評価され得る。これらシリーズでは、病巣内掻爬が、進行性腫瘍を持つ（すなわち、１０００ｍｍ３の腫瘍体積を備える）ラットで実施されるであろう。この設定では、処置は、掻爬後１日目に開始される。第１の設定のように、ＩＰＩ−９２６の治療的効果は、通常の化学療法の１つ（アドリアマイシン）及びｍＴＯＲの阻害剤と比較され得る。
【０３１０】
それぞれの設定に関して、ＩＰＩ−９２６及び通常の細胞毒性薬剤療法の治療的効果の比較は、腫瘍体積変化（ＭＲＩ及びカリパスを使用した腫瘍測定）、腫瘍壊死パーセンテージ及び有糸分裂指数、腫瘍ＭＶＤ定量化、及びＩＰＩ−９２６処置群と対照群との間の全体的生存分析を使用する。
【０３１１】
ＩＰＩ−９２６は、インヴィヴォにての軟骨肉腫腫瘍進行を低減させる有益的効果を有すると期待される。他の群と比較して、ＩＰＩ−９２６処置群では、よりゆっくりと腫瘍が進行することが予期される。第２のステップでは、単独又はｍＴＯＲ阻害剤と併用してのＩＰＩ−９２６の抗腫瘍及び抗転移効果を評価するために、同一のプロトコールが骨肉腫モデルで実施され得た。
【０３１２】
本明細書でもたらされたデータは、軟骨肉腫又は再発した／治療抵抗性の骨肉腫を持つ患者の補助療法のためのＩＰＩ−９２６の添加の有益性を評価するための更なる研究をデザインすることへの堅固な実験的根拠を提供する。
実験デザイン
【０３１３】
動物モデル
２つの同所性肉腫モデルが、以下に簡単に提示されている。
軟骨肉腫モデル
移植可能な同所性Ｓｃｈｗａｒｍ軟骨肉腫モデルが使用され得る。先に記載された方法に従って、２１〜２８日齢のＳｐｒａｇｕｅ−Ｄａｗｌｅｙラットに、腫瘍が移植される。簡単に説明すると、側面法を用いて、６〜８ｍｍ３の腫瘍断片が脛骨骨幹に隣接して配置され、次いで、皮膚及び筋肉創部が縫合される。腫瘍は、移植後８〜１１日目に、触診及び図２０のＭＲＩ画像撮影（Ａ）によって、移植部位にて検出され得た。組織学分析では、このモデルを、軟骨の合成、図２０の小葉パターン（Ｂ）、及び有糸分裂細胞の存在によって特徴付けられるグレードＩＩ軟骨肉腫として分類した。
【０３１４】
骨肉腫モデル
ラットでの骨髄内及び転移性骨肉腫モデルが開発された。簡単に説明すると、超増殖性骨原性腫瘍領域から採取された小腫瘍断片（１００ｍｍ３）が、３週齢の免疫適格ラットに移植される。側面法を用いて、腫瘍断片が動物の大腿骨骨幹内に配置され、次いで、皮膚及び筋肉創部が縫合される。腫瘍は、触診及び１８ＦＤＧ  ＰＥＴスキャンによる形態学的画像撮影法によって、移植部位にて、９５％の動物で移植後９日目に検出され得る。このモデルは、攻撃性、初期腫瘍の血管形成性、及び初期腫瘍の肺への血行性拡大という点に関して、ヒト同等物を疑似する。移植後２１〜２４日で、８０％の動物で肺転移が検出される。通常の組織学的分析と並行して、非侵襲的に腫瘍体積、代謝、低酸素発生及び腫瘍性骨合成を評価するために、多様な撮像技術（１８ＦＤＧ  ＰＥＴ、１８ＦＮａ、ＭＲＩ  １８ＦＭＩＳＯシンチグラフィー）が成功裏に使用された。
【０３１５】
処置スケジュール
２つの治療スケジュールが実施され得る。
Ｉ）．肉腫の治癒可能な治療としてのＩＰＩ−９２６
腫瘍移植後１０日目に、動物が以下の処置群（８匹の実験動物／群；５治療群）に分割され得、これらは（ｉ）ＩＰＩ−９２６、（ｉｉ）アドリアマイシン、（ｉｉｉ）ｍＴＯＲ阻害剤、（ｉｖ）ＩＰＩ−９２６＋ｍＴＯＲ阻害剤、（ｖ）対照（生理食塩水）である。処置群または対照群のそれぞれのラットは、安楽死（４０日目）に至るまで移植後１０日に開始される対応する処置を加えられる（同一の頻度で、同一の投与経路を使用して）。腫瘍があまりに大きく増殖した場合、及び動物の生命が脅かされた場合、動物は致死させ得る。
【０３１６】
ＩＰＩ−９２６及びＩＰＩ−９２６をベースとした薬剤併用の投与量及び投与の頻度は、ＩＰＩ−９２６ラットＰＫ／ＰＤ研究に基づいて選択され得る。
ＩＩ）．肉腫の補助薬物療法としてのＩＰＩ−９２６
第２の設定において、腫瘍再発を予防するためのＩＰＩ−９２６の効果を判定するために、治療が、病巣内腫瘍掻爬後１日目に開始し得る。この設定では、病巣内掻爬が、進行性腫瘍を有する動物で実施され得る（すなわち、腫瘍が体積１０００ｍｍ３に到達するときに）。手術後１日目に、動物が以下の処置群（８匹の実験動物／群；５治療群）に分割され、これらは（ｉ）ＩＰＩ−９２６、（ｉｉ）アドリアマイシン、（ｉｉｉ）ｍＴＯＲ阻害剤、（ｉｖ）ＩＰＩ−９２６＋ｍＴＯＲ阻害剤、（ｖ）対照（生理食塩水）である。ＩＰＩ−９２６処置群のラットは、ＩＰＩ−９２６をベースとした薬剤併用を与えられ（現決定下でのＩＰＩ−９２６投与量及び頻度）、これは病巣内掻爬後１日目から開始し、安楽死（４０日目）まで行われる。アドリアマイシン群、ｍＴＯＲ阻害剤群及び対照群からの動物は、同一の頻度で対応する溶液が与えられるであろう。腫瘍があまりに大きく増殖した場合、及び動物の生命が脅かされた場合、動物は致死させ得る。
【０３１７】
ＩＰＩ−９２６治療的効果の評価
腫瘍は１週間に２回カリパスで測定され、並びに腫瘍体積はＣａｒｌｓｏｎｎの式に従って計算され得る。治療全体にわたる軟骨肉腫の変化はまた、ＭＲＩを使用して追跡される。画像作成は、治療の開始時（Ｔ０）、次いで安楽死まで１０日毎に、動物で実施される。実験の最終には、全ての動物から、腫瘍、筋肉、骨、肺が回収される。回収した組織のサンプルは、免疫組織学法及び分子分析のために、急速凍結され、−８０℃で保存される。
【０３１８】
画像診断観察は、処置及び対照群からの動物の腫瘍及び組織部分で実施された免疫組織化学分析と相関性が示され得る。この目的のために、抗−ＭＭＰｓ、ＣＤ３１、Ｇｌｕｔ−１、Ｋｉ６７抗体が使用されるであろう。ＩＰＩ−９２６によって誘導された腫瘍壊死が、安楽死に時点で回収されたＨ＆Ｅ染色された腫瘍標本の顕微鏡検査で評価される。それぞれの腫瘍に関して、壊死及び有糸分裂指数が、腫瘍の１／４遠位部、中間部及び１／４近位部からの全腫瘍部分で概算され、システムに従って、前腫瘍体積のパーセンテージとして表される。石灰化／骨分化マーカー並びに侵入性のマーカーの分析が、適切なプライマーのセット（すなわち、Ｒｕｎｘ２、コラーゲンＩ、ＩＩ型、ｓｏｘ９、インディアンＨｈインテグリン）を使用するＲＴ−ＰＣＲｑによって実施される。
【０３１９】
研究に関わる動物の所定の数によって、実験は２段階で実施され得る。第１の工程では、ＩＰＩ−９２６の軟骨肉腫の治癒的治療としての効果が評価される。次いで第２の工程では、再発した軟骨肉腫へのＩＰＩ−９２６の効果が評価される。投与の２つの設定は、２つの臨床的に異なる状態を再現し、相補的である。
実施例１６Ｂ：ＩＰＩ−９２６はインヴィヴォにての骨肉腫及び軟骨肉腫の増殖及び生存に影響を及ぼす
【０３２０】
本実施例は、インヴィヴォにおいて骨肉腫及び軟骨肉腫の増殖及び生存に及ぼすＩＰＩ−９２６の効果の実験的な立証を提供する。
骨肉腫異種移植モデル
【０３２１】
骨肉腫異種移植モデル（異種移植モデルＡ〜Ｃ）からの腫瘍細胞及び間質細胞中のＨｈリガンドとＨｈ受容体のｍＲＮＡ発現が、ヒト及びマウス特異的プライマーを使用して定量化された。ＩＨＨ  ｍＲＮＡ及びＧｌｉ１  ｍＲＮＡの上昇した発現が、腫瘍−間質結合細胞と比較して、腫瘍細胞中で検出された（データ表示なし）。ＰＴＣＨ１  ｍＲＮＡの発現が、腫瘍細胞と腫瘍−間質結合細胞の双方で上昇された（データ表示なし）。
【０３２２】
ＩＰＩ−９２６によって低減された腫瘍増殖と可能な血管形成は、対照動物と比較して骨肉腫異種移植モデルで存在する。例えば、異種移植モデルＡに関しては、平均腫瘍重量は、０．２３のＰ値で、対照動物では２．４９ｇまでの減少であったのに比較して、ＩＰＩ−９２６処置動物では１．８３ｇまで減少した。異種移植モデルＣに関しては、平均腫瘍体積は、０．０４のＰ値で、対照動物では５．１９ｃｍ３までの減少であったのに比較して、ＩＰＩ−９２６処置動物では２．９５ｃｍ３まで減少され、平均腫瘍重量は、０．０５のＰ値で、対照動物では３．３４ｇまでの減少であったのに比較して、ＩＰＩ−９２６処置動物では２．０５ｇまで減少した。処置された異種移植モデルＢに関しては、体積又は重量での差異は観測されなかった。
【０３２３】
図２１Ａ〜２１Ｄは、骨肉腫異種移植モデルの腫瘍及び間質細胞中のＨｈシグナル伝達の減少でのＩＰＩ−９２６の効果を示している。図２１Ａ〜２１Ｂは、対照動物と比較して、ＩＰＩ−９２６で処置された異種移植モデルＡ及びＢからの腫瘍細胞中でのＰＴＣＨ１及びＧｌｉ１  ｍＲＮＡ発現での減少を示している。ＰＴＣＨ１及びＧｌｉ１  ｍＲＮＡ発現の同様な減少が、対照動物と比較してＩＰＩ−９２６で処置された間質細胞中で検出されている（図２１Ｃ〜２１Ｄ）。異種移植モデルＢでは、腫瘍細胞Ｈｈシグナル伝達での変化は検出されなかった。
【０３２４】
図２２Ａ〜２２Ｄは、骨肉腫異種移植モデルでの増殖及びアポトーシスにおけるＩＰＩ−９２６の効果を示している。図２２Ａと２２Ｃは、対照動物と比較して、ＩＰＩ−９２６に反応しての２つの動物モデルでのＫｉ−６７染色を示す細胞のパーセンテージによって検出された、腫瘍細胞の増殖における減少を示している。図２２Ｂと２２Ｄは、対照動物と比較して、ＩＰＩ−９２６に反応するＴｕｎｅｌ染色によって検出されたアポトーシスでの増加を示している。
【０３２５】
本明細書に示された結果は、骨肉腫におけるＨｈシグナル伝達の自己分泌及びパラクリンのメカニズムの双方共に、少なくともその一部分がＳｍｏｏｔｈｅｎｅｄ（Ｓｍｏ）受容体によって媒介されることを裏付けている。Ｓｍｏ活性はＩＰＩ−９２６によって阻害されうる。
軟骨肉腫異種移植モデル
【０３２６】
軟骨肉腫は、ＩＨＨ、ＰＴＣＨ１及びＧｌｉ１などのようなＨｈ経路遺伝子の高レベルを発現する（Ｔｉｅｔら著（２００６年）「Ａｍｅｒｉｃａｎ  Ｊ．Ｐａｔｈｏｌｏｇｙ」１６８（１）：３２１−３３０頁）。Ｈｈリガンドは、インヴィトロにおいて初期軟骨肉腫細胞の増殖を増加させる。
【０３２７】
これら所見のインヴィヴォモデルへの関連性を評価するために、本明細書で記載されたような初期軟骨肉腫異種移植モデルを、４０ｍｇ／ｋｇ；ＰＯ（経口投与）ＱＤ（１日１回）、５回の投与量にてＩＰＩ−９２６で処置した。本研究は、腫瘍体積、腫瘍及び間質中でのＨｈ経路阻害の薬物動力学的特性、及び腫瘍形態に及ぼすＩＰＩ−９２６の効果を評価した。４０ｍｇＱＤ（６〜１０週間の経口毎日投与）にて投与されたＩＰＩ−９２６は、３つの独立した腫瘍モデルにおいて、３７〜５５％まで腫瘍体積を減少させることが確認された。
【０３２８】
ＩＰＩ−９２６は、腫瘍細胞の増殖を阻害する、並びに間質を介さない直接的効果を有することが示された。図２３は、ヒト細胞でのヒトＧｌｉ１及びＰＴＣＨ１の発現の阻害を示している棒グラフである。したがって、軟骨肉腫は、腫瘍細胞へと向かうＨｈリガンド依存性シグナル伝達を有する固形癌の例を提供している。Ｈｈ阻害は、周辺の腫瘍間質に及ぼす効果を有することもまた示された。ＩＰＩ−９２６による処置の際に、処置されたサンプルで石灰化が検出され、このサンプルでは軟骨細胞は殆ど又は全く検出できなかった。これとは対照的に、多くの軟骨細胞が、未処置の初期腫瘍で検出された（データ表示なし）。
【０３２９】
ＩＰＩ−９２６処置腫瘍は、初期軟骨肉腫異種移植モデルの他の化学療法と比較して、４４％、ｐ＋０．０１２３の腫瘍増殖阻害を示す（図２４）。図２４に概説された初期軟骨肉腫異種移植モデルの処置研究は、ＮＳＧマウスへの腫瘍移植後１か月で開始された。経口ＩＰＩ−９２６は、４０ｍｇ／ｋｇの投与量にて、５日／週で合計３週間投与された。本研究に関連するため処置群としては、５日／週で経口、４００ｍｇ／ｋｇの投与量にて投与されたトリパラノール、３日／週、隔日で静脈内、５ｍｇ／ｋｇの投与量にて投与されたドキソルビシン、１週間に１回、８ｍｇ／ｋｇの投与量で投与されたシスプラチン、並びに３日／週、隔日で静脈内、１０ｍｇ／ｋｇの投与量にて投与されたＤＡＰＴである。ＩＰＩ−９２６で処置された動物のみが、ヒトＨｈ経路（Ｇｌｉ１）遺伝子発現で、対照群と比較して、統計的に有意な変化を示した群であった（図２５）。
【０３３０】
要約すると、Ｈｈ経路は、軟骨細胞の生物学と軟骨肉腫において、重要な役割を果たす。ＩＰＩ−９２６は、１°軟骨肉腫腫瘍異種移植モデルにおいて、腫瘍増殖阻害に導く。軟骨肉腫異種移植モデルでのＨｈ経路の阻害は、形態的変化を導く。
実施例１７：Ｌ３．６ｐｌ腫瘍保持マウスにおけるパクリタキセルとヘッジホッグ阻害剤の併用研究
【０３３１】
本実施例は、Ｌ３．６ｐｌ腫瘍保持動物における、Ａｂｒａｘａｎｅ（登録商標）単独又はＩＰＩ−９２６（ＨＣＬ塩）との併用の効果について記載するものである。
実験デザイン
マウスモデル
【０３３２】
５週齢のオスＮｃｒヌードマウス（体重２０〜２５ｇ）を、Ｔａｃｏｎｉｃ  Ｆａｒｍｓ，Ｉｎｃ．（Ｈｕｄｓｏｎ，ＮＹ）から購入した。
細胞系
【０３３３】
Ｌ３．６ｐｌは、ＡＴＣＣから購入された膵臓腫瘍モデルである。細胞を、１０％ＦＢＳと１％Ｐ／Ｓで補充された最新式ＤＭＥＭ培地中で培養した。トリプシンを用いて、細胞を収穫し、生細胞計測を、死細胞のトリパンブルー排除法を用いて実施した。細胞をＤＭＥＭ培地（血清フリー）中に再懸濁させて、２×１０６細胞／１００ｕＬ／マウスにて右側腹部に皮下移植した。
マウスモデル実験
【０３３４】
腫瘍細胞移植後９日目に、ベヒクル投与（５％ヒドロキプロピルβシクロデキストリン（ＨＰＢＣＤ）中）（Ｎ＝７）、ＡＢＲＡＸＡＮＥ単独投与（生理食塩水中）（Ｎ＝８）、又はＡＢＲＡＸＡＮＥ（生理食塩水中）＋ＩＰＩ−９２６（５％ＨＰＢＣＤ中）（Ｎ＝７）の併用投与の３つの投与グループに、マウスを無作為割付けした。９日目から２７日目まで、ＩＰＩ−９２６が、隔日、経口で１日おきに（ＱＯＤ）４０ｍｇ／ｋｇの投与量にて、合計１０回投与で投与された。９日目に、ＡＢＲＡＸＡＮＥが、２ｍｇ／ｋｇの投与量にて静脈内投与され、並びに１３、２０及び２７日目に、ＡＢＲＡＸＡＮＥが２０ｍｇ／ｋｇの投与量にて静脈内投与された（９日目に、ＡＢＲＡＸＡＮＥ投与量の調製中に計算違いがあった。１３、２０及び２７日目に、計算が訂正され、これらの日には２０ｍｇ／ｋｇの完全な投与量が投与された）。２７日目に、ＡＢＲＡＸＡＮＥ単独とＡＢＲＡＸＡＮＥ＋ＩＰＩ−９２６群が、処置の最終投与を受けた。最終投与後２４時間で、分析のためのサンプルが回収された。
【０３３５】
対照動物の複数の動物が腫瘍内に潰瘍を有し、それがＩＡＣＵＣガイドライン下、動物を致死させるための基準となるために、２０日目に排除された。２０日目に、ＡＢＲＡＸＡＮＥ単独投与群は、ベヒクル投与群と比較した場合、２７％の腫瘍増殖阻害（ＴＧＩ）を示したが、一方、ＡＢＲＡＸＡＮＥ＋ＩＰＩ−９２６併用投与群は、ベヒクル投与群と比較した場合、６８％のＴＧＩを示した。投与の最終日（２７日目）には、ＡＢＲＡＸＡＮＥ＋ＩＰＩ−９２６併用投与群は、ＡＢＲＡＸＡＮＥ単独投与群と比較した場合、７１％のＴＧＩを示した。スチューデントのＴ検定が、全ての群に関して、２０日目と２７日目に実施され、報告された全ての％ＴＧＩが統計的に有意であることが確認された。本実験の結果は、図２６及び以下の表１に要約されている。データは、ＡＢＲＡＸＡＮＥとＩＰＩ−９２６が併用して投与された場合、対照又はＡＢＲＡＸＡＮＥ単独投与と比較して、効能での統計的に有意な増加を示している。
【表１】
2013511549.tif 000017
免疫組織化学分析
【０３３６】
ホスホヒストン３（ＰＨ３）は、後期Ｇ２／Ｍ相の細胞の核マーカーである。パクリタキセルは、後期Ｇ２／Ｍ相の細胞を抑制し得る微小管の解縮を阻害し、細胞が有糸分裂を実行することを防止し得る。ＩＰＩ−９２６が腫瘍薬剤レベルを増強させるならば、ＰＨ３染色での増加が、ＩＰＩ−９２６＋Ａｂｒａｘａｎｅ処置腫瘍部分で検出されるはずである。
【０３３７】
２７日目に、ＩＰＩ−９２６とＡＢＲＡＸＡＮＥの最終投与後２４時間で、腫瘍が回収され、１０％中性緩衝ホルマリン中で一夜固定させた。翌日に、サンプルを７０％ＥＴＯＨ中での保存に切り替えた。標準的プロコールに従って、腫瘍が処理され、埋設された。埋設された腫瘍組織が、ホスホヒストン３（ＰＨ３）の免疫染色のために、５ｕｍ部分に切断された。染色する部分を脱パラフィン化し、一連のキシレンと１００％、９５％及び７０％ＥＴＯＨ中で水和した。染色される部分をクエン酸緩衝液中に浸漬させて、加圧下で２０分間加熱した。サンプルを室温に戻し、ＤＡＫＯ自動染色装置でＰＨ３免疫染色するよう調製された。ウサギ抗−ヒトＰＨ３（ｓｅ１０）（ｃｅｌｌ  ｓｉｇｎａｌｉｎｇ＃９７０１Ｌ）が、１：１００にて使用された。Ｒａｂｂｉｔ  ｏｎ  Ｒｏｄｅｎｔポリマー（Ｂｉｏｃａｒｅ＃ＲＭＲ６２２Ｌ９が、第２ポリマーシステムとして使用された。ＤＡＢ液体基質緩衝液＋クロモゲンシステム（ＤＡＫＯ＃Ｋ３４６８）が、顕色及び染色の検出に用いられた。
【０３３８】
ＰＨ３で染色された部分が、Ａｐｅｒｉｏスキャナーシステムを使用してスキャンされ、画像が携帯計測的解析を受けた（図２７Ａ；Ｌ３．６ｐｌ腫瘍モデルでのＰＨ３染色の２００×画像を参照）。Ｇｅｎｉｅパターン認識ツール及び核アルゴリズムを使用して、染色した腫瘍部分当たりの％ＰＨ３陽性腫瘍性核を定量化した（図２７Ｂ）。陽性腫瘍性核の計測数は、ＡＢＲＡＸＡＮＥ単独投与群で２０％のＰＨ３陽性の増加であったのに対し、ＩＰＩ−９２６＋ＡＢＲＡＸＡＮＥ併用群では３０％ＰＨ３陽性の増加を示した。これらデータは、ＩＰＩ−９２６＋ＡＢＲＡＸＡＮＥ併用で処置されたＬ３．６ｐｌ腫瘍でのＰＨ３染色の増加を立証し、並びにＩＰＩ−９２６が併用して使用された場合に、対照又はＡＢＲＡＸＡＮＥ単独投与と比較して、ＡＢＲＡＸＡＮＥ送達が増強されることを示唆している。
腫瘍の終点のＰＫデータ
【０３３９】
ＩＰＩ−９２６とＡＢＲＡＸＡＮＥの併用又はＡＢＲＡＸＡＮＥ単独で処置されたＬ３．６ｐｌ腫瘍中のパクリタキセルレベルを測定するために、並びにＩＰＩ−９２６による処置が、腫瘍中での増加したパクリタキセルレベルへと導くかどうかを決定するために、実験を行った。２７日目に、ＩＰＩ−９２６とＡＢＲＡＸＡＮＥの最終投与後２４時間で、それぞれのマウスからのＬ３．６ｐｌ腫瘍５０〜３００ｍｇを、腫瘍パクリタキセルレベルの薬物動力学的（ＰＫ）評価のために急速凍結した。これら腫瘍のＰＫ分析は、ＡＢＲＡＸＡＮＥ単独処置動物に対して、ＡＢＲＡＸＡＮＥ＋ＩＰＩ−９２６併用処置腫瘍中の腫瘍パクリタキセルレベルの２８％の増加（ｎｇ／組織のｇ）を示した（ベヒクル対照群は、パクリタキセルの低い検出レベルであった）。上述したＰＨ３実験と同様な実験では、ＩＰＩ−９２６が、Ｌ３．６ｐｌ腫瘍に対してパクリタキセルレベルを増強させることが可能であった。
実施例１８：ＡＳＰＣ−１腫瘍保持Ｎｃｒヌードマウスにおける代表的パクリタキセル剤及び代表的ヘッジホッグ阻害剤の併用研究
【０３４０】
本実施例は、ＡＳＰＣ−１腫瘍保持マウスのＩＰＩ−９２６（ＨＣｌ塩）とＡＢＲＡＸＡＮＥ又はパクリタキセルによる処置の併用効果を記載するものである。
実験デザイン
マウスモデル
【０３４１】
ＡＳＰＣ−１は膵臓腫瘍モデルである。
細胞系
【０３４２】
細胞を、１０％ＦＢＳ及び１％Ｐ／Ｓで補充された最新式ＲＰＭＩ８２２６培地で培養した。細胞は、ＡＴＣＣから購入された。トリプシンを使用して、細胞を収穫し、トリパンブルー排除法を用いて、生細胞が判定された。細胞を、５×１０６細胞／マウス／１００ｕＬで、右側腹部に皮下移植した。
実験及び結果
【０３４３】
腫瘍体積が〜２００ｍｍ３の間に一旦到達した時点で、処置が開始された。ＩＰＩ−９２６が、５％ＨＰＢＣＤ＠中、４０ｍｇ／ｋｇ（８ｍｌ／ｋｇ）の投与量で、１日おきに、すなわちＱＯＤで経口強制給餌によって投与された。生理食塩水中のＡＢＲＡＸＡＮＥ又はパクリタキセルは、２７ゲージ針Ｑ１Ｗを使用して、２０ｍｇ／ｋｇの投与量にて静脈内投与された。体重及び腫瘍測定が、１週間に２回測定された。体重減少が処置開始日から２０％以上又は腫瘍体積が３０００ｍｍ３以上の動物は、安楽死させた。研究デザインは、表２中に要約されている
【０３４４】
腫瘍細胞移植後２０日目に、ベヒクル投与対照、ＩＰＩ−９２６単独投与、Ａｂｒａｘａｎｅ＋／−ＩＰＩ−９２６投与又はパクリタキセル＋／−ＩＰＩ−９２６投与の６つのグループに、マウスを無作為割付けした（図２８Ａ〜２８Ｂ）。ＩＰＩ−９２６は、４０ｍｇ／ｋｇの投与量にて、経口ＱＯＤで、２１〜４１日の間、合計１１回投与された。Ａｂｒａｘａｎｅとパクリタキセルの双方は、２０ｍｇ／ｋｇの投与量で、１週間に１回、Ｑ１Ｗで、２１、２８及び３５日に静脈投与された。４１日目に、最後のＩＰＩ−９２６が投与され、再増殖が監視された。表３は、対照群に対して、全てのテスト群の４１日目に得られた％腫瘍増殖阻害（ＴＧＩ）を要約していて、更にｐ値が、ＪＭＰスタットプログラムを使用して計算された（平均値比較スチューデントｔ検定）。
【０３４５】
実施例１７と同様に、Ｌ３．６ｐｌ異種移植モデル中において、Ａｂｒａｘａｎｅ＋ＩＰＩ−９２６は、ベヒクル対照、ＩＰＩ−９２６単独、又はＡｂｒａｘａｎｅ単独投与群と比較して、併用投与される場合に、相乗的効果を示した。腫瘍再発が監視され、並びにＡｂｒａｘａｎｅ  ＋ＩＰＩ−９２６群は、ＩＰＩ−９２６又はＡｂｒａｘａｎｅ単独処置群と比較して、同一の腫瘍体積に到達するまでに１５日間の遅延がみられた。
【０３４６】
ＩＰＩ−９２６とパクリタキセルが併用された場合に、それほど顕著ではないが、併用効果が存在した。４１日目には、ＩＰＩ−９２６とパクリタキセルの併用は、パクリタキセル単独処置群と著しい差異はなかったが、４８日目には、研究の再増殖期中に、統計的に有意である４７％のＴＧＩが存在した（ｐ＝０．００６）。
【表２】
2013511549.tif 000018
【表３】
2013511549.tif 000019
実施例１９：Ｌ３．６ｐｌ腫瘍保持マウスにおける、パクリタキセル剤、ヘッジホッグ阻害剤及び追加の療法剤の三剤併用研究
【０３４７】
本実施例は、Ｌ３．６ｐｌ腫瘍保持動物における、Ａｂｒａｘａｎｅ、ＩＰＩ−９２６（ＨＣＬ塩）及びゲムシタビン（ＧＥＭＺＡＲ）の併用効果を記載するものである。
実験デザイン
マウスモデル
【０３４８】
５週齢のＮｃｒヌードマウス（体重２０〜２５ｇ）を、Ｔａｃｏｎｉｃ  Ｆａｒｍｓ，Ｉｎｃ．（Ｈｕｄｓｏｎ，ＮＹ）から購入した。
細胞系
【０３４９】
Ｌ３．６ｐｌは、ＡＴＣＣから購入された膵臓腫瘍モデルである。細胞を、１０％ＦＢＳと１％Ｐ／Ｓで補充された最新式ＤＭＥＭ培地中で培養した。トリプシンを用いて、細胞を収穫し、生細胞計測を、死細胞のトリパンブルー排除法を用いて実施した。細胞をＤＭＥＭ培地（血清フリー）中に再懸濁させて、２×１０６細胞／１００ｕＬ／マウスにて右側腹部に皮下移植した。
実験及び結果
【０３５０】
腫瘍細胞移植後１０日目に、マウスを、ベヒクル投与群、ＩＰＩ−９２６単独投与群、Ａｂｒａｘａｎｅ単独投与群、Ｇｅｍｚａｒ単独投与群、Ａｂｒａｘａｎｅ＋ＩＰＩ−９２６投与群、Ｇｅｍｚａｒ＋ＩＰＩ−９２６投与群、Ａｂｒａｘａｎｅ＋Ｇｅｍｚａｒ投与群、及びＡｂｒａｘａｎｅ＋Ｇｅｍｚａｒ＋ＩＰＩ−９２６投与群の８つの群に無作為割付けした（累積結果に関しては図２９Ａ参照。図２９Ｂは、図２９Ａの結果のサブセットを示している。ＩＰＩ−９２６は、１０日〜３１日に、合計１１回の投与で、４０ｍｇ／ｋｇの投与量にて経口ＱＯＤ投与された。Ａｂｒａｘａｎｅは、１０日目から開始して、１０、１７及び２４日目に、２０ｍｇ／ｋｇの投与量にて、静脈内に、１週間に１回、すなわちＱ１Ｗで投与された。１０日目に開始して、Ｇｅｍｚａｒは、１０、１３、１７、２０、２４及び３１日目に、１００ｍｇ／ｋｇの投与量にて、静脈内に１週間に２回（火曜日／金曜日スケジュール）投与された。３１日後に、処置を継続しながら、生存を監視するために、研究が継続された（累積結果については、図２９Ｃを参照。図２９Ｄは、図２９Ｃの結果のサブセットを示している）。
【０３５１】
ベヒクル対照群の全ての動物は、２６日までに致死させた。ベヒクル対照と比較した場合、最も顕著なパーセント腫瘍増殖阻害（％ＴＧＩ）をもたらした群は、Ａｂｒａｘａｎｅ＋ＩＰＩ−９２６群であった。２６日目には、Ａｂｒａｘａｎｅ＋ＩＰＩ−９２６群は、ベヒクル対照と比較して、８３．３％ＴＧＩを示した。Ａｂｒａｘａｎｅ単独、Ａｂｒａｘａｎｅ＋Ｇｅｍｚａｒ、及びＡｂｒａｘａｎｅ＋Ｇｅｍｚａｒ＋ＩＰＩ−９２６の全ては、ベヒクル対照と比較した場合、それぞれ６１．３％、５７．２％及び６６．５％の％ＴＧＩを示した。この特別なモデルでは、ＩＰＩ−９２６又はＧｅｎｚａｒの統計的に有意な単一薬剤活性は存在せず、並びに２つの薬剤を併用することの付加的有益性も存在しなかった（図２９Ａ及び２９Ｃ並びに表４〜５参照）。２６日目に、全てのグループについて、ＪＭＰスタットプログラムを使用して、平均値比較スチューデントのｔ検定が実施された。表４は、全てのテスト群の２６日目に取得された％腫瘍増殖阻害（ＴＧＩ）、並びにＪＭＰスタットプログラムを使用して計算されたｐ値（平均値比較スチューデントのｔ検定）を要説している。
【０３５２】
腫瘍進行に対する時間もまた記録された（図２９Ｃ〜２９Ｄ及び表５）。処置中の進行が、それぞれの腫瘍が１０００ｍｍ３に到達するのに要する時間として測定された。腫瘍が一旦１０００ｍｍ３と測定された場合、動物は致死され、Ｋａｐｌａｎ−Ｍｅｉｅｒ曲線としてプロットするために、その日が記録された。進行のための平均時間は、全ての他の群と比較した場合、Ａｂｒａｘａｎｅ  ＋ＩＰＩ−９２６併用群で著しく増加することが見出された。
【表４】
2013511549.tif 000020
【表５】
2013511549.tif 000021
実施例２０：腫瘍潅流実験
【０３５３】
本実施例は、ＩＰＩ−９２６（ＨＣｌ塩）とＡＢＲＡＸＡＮＥの併用の相乗的効果が、増加された腫瘍潅流を介してのマウス間質に及ぼすＩＰＩ−９２６の効果を通しての、腫瘍へのＡＢＲＡＸＡＮＥの増強された送達によるものであるかどうかを評価した。
マウスモデル
【０３５４】
５週齢のＮｃｒヌードマウス（体重２０〜２５ｇ）を、Ｔａｃｏｎｉｃ  Ｆａｒｍｓ，Ｉｎｃ．（Ｈｕｄｓｏｎ，ＮＹ）から購入した。
細胞系
【０３５５】
Ｌ３．６ｐｌは、ＡＴＣＣから購入された膵臓腫瘍モデルである。細胞を、１０％ＦＢＳと１％Ｐ／Ｓで補充された最新式ＤＭＥＭ培地中で培養した。トリプシンを用いて、細胞を収穫し、生細胞計測を、死細胞のトリパンブルー排除法を用いて実施した。細胞をＤＭＥＭ培地（血清フリー）中に再懸濁させて、２×１０６細胞／１００ｕＬ／マウスにて右側腹部に皮下移植した。
実験及び結果
【０３５６】
腫瘍潅流を、造影強化超音波画像法を使用してＩＰＩ−９２６（ＨＣｌ塩）処置及び未処置動物で直接的に測定した。Ｌ３．６ｐｌ腫瘍細胞系を皮下注入し、ＩＰＩ−９２６による処置を開始した。ＩＰＩ−９２６又はベヒクルが、４０ｍｇ／ｋｇの投与量にて７日間連続して経口投与された。８日目に、画像撮影手技中、潅流造影強化法（マイクロバブル）を使用して、動物が超音波画像解析にかけられた。
【０３５７】
ＩＰＩ−９２６で処置された腫瘍保持動物では、超音波画像データは、ＩＰＩ−９２６によるより大きな腫瘍潅流が示された（図３０Ａ／３０Ｃを３０Ｂ／３０Ｄと比較）。超音波を介して撮影されたベヒクル処置動物は、ＩＰＩ−９２６処置動物よりも、より少ない造影剤を示している。ピーク値の造影剤に到達する時間が測定され、ベヒクル処置動物に比べて、ＩＰＩ−９２６処置動物では、その時間の低減が示された。平均で、造影剤レベルに関するピーク時間は、ベヒクル対ＩＰＩ−９２６処置動物で、それぞれ１１．０秒から４．７５秒へと減少した（ｐ＝０．０３２１）（表６）。これらデータは、ＩＰＩ−９２６とＡＢＲＡＸＡＮＥとの併用の相乗的効果が、増加された腫瘍潅流を介してのマウス間質へのＩＰＩ−９２６が及ぼす効果を通して、ＡＢＲＡＸＡＮＥの腫瘍への薬剤送達が増強される傾向にあることを示唆している。
【表６】
2013511549.tif 000022
＊対照値と比較して統計的に有意、ｐ＜０．０５スチューデントＴ検定
実施例２１：Ｇｌｉ−１レベルの測定
【０３５８】
図３１は、実施例１７（Ｌ３．６ｐｌ膵臓細胞系）及び実施例１８（ＡＳＰＣ−１膵臓細胞系）の切除されたＩＰＩ−９２６処置された腫瘍のＱ−ＲＴ−ＰＣＲ分析の結果を示している。Ｑ−ＲＴ−ＰＣＲ分析は、ＩＰＩ−９２６によるネズミＧｌｉ−１の阻害を明らかにした。ヒトＨｈリガンドが検出され、並びにヒトＧｌｉ−１レベルは、処置によって調節されなかった。これらのデータは、Ｈｈパラクリンシグナル伝達が、膵臓異種移植腫瘍モデル中でパラクリン的に作用して発生し得ることを示唆していて、ここでは腫瘍細胞はＨｈリガンドを提供していて、ネズミＧｌｉ１を活性化し、これがＩＰＩ−９２６処置によって阻害される。
実施例２２：頭頚部癌モデル
【０３５９】
実施例２２の目的は、頭頚部扁平上皮細胞癌（ＨＮＳＣＣ）におけるヘッジホッグ経路の関連性、ＨＮＳＣＣの直接的患者腫瘍モデル（ＤＰＴＭ）におけるＥＲＢＩＲＵＸ（登録商標）（セツキマブ）との併用でのヘッジホッグ阻害剤、つまりＩＰＩ−９２６の効果、並びに治療後の再発にける癌幹細胞（ＣＳＣ）の役割を解明することであった。
【０３６０】
４２個のＨＮＳＣＣ及び１４個の頭頚部正常組織（ＧＳＥ６７９１）を備えたＨＮＳＣＣ遺伝子発現データセットでの普遍性大域経路分析が、遺伝子セット富化分析（ＧＳＥＡ）を使用して、正常の部類の細胞に対して癌細胞で富化された経路を比較し、ヘッジホッグ経路が正常な部類と比較して、癌表現型で富化されていることを示した。ヘッジホッグ経路の活性化をテストするために、３０個のＨＮＳＣＣと１０個の正常組織サンプルの組織マイクロアレイ（ＴＭＡ）をリガンドソニックヘッジホッグ（ＳＨＨ）蛋白質発言に関して染色した。癌の３５％が陰性又はわずかに陰性であり、６５％が陽性又は強陽性であり、正常組織の７８％が陰性又はわずかに陰性であり、２２％が強い陽性ではないサンプルを備えた陽性であった。３個のＤＰＴＭ（ＣＵＨ００２、ＣＵＨＮ００４、及びＣＵＨＮ０１３）と異種移植片由来の細胞系（ＨＮ１１、ＨＮ１２、及びＵＭＭＣ２２）からの６個の腫瘍サンプルは、陽性又は強陽性であった。ＥＲＢＩＴＵＸ（エルビタクス）（セツキマブ）、ＩＰＩ−９２６、及びそれらの併用による３つのＤＴＰＭの場合のインヴィヴォでの処置は、全ての３つの場合で、ＥＲＢＩＴＵＸ処置腫瘍は、治療後４〜８週間で再増殖したが、一方併用処置されたマウスは、治療後３か月は、均一な無再発生存を示した（図３２）。
【０３６１】
ＥＲＢＩＴＵＸ処置が、推定的癌幹細胞（ＣＳＣ）の増加を導くかどうかを解決するために、全ての３つのＤＴＰＭの場合で、ＥＲＢＩＴＵＸで処置された腫瘍中の推定的ＣＳＣ亜集団ＣＤ２４／４４及びＣＤ２４／ＡＬＤＨを、フルーサイトメトリーによって測定した。我々は、ＥＲＢＩＴＵＸで処置された腫瘍中でのこれら細胞型が蓄積されたが、併用処置された腫瘍でのＣＳＣの絶対的減少を見出した。単離されたＣＤ２４／４４及びＣＤ２４／ＡＬＤＨ陽性細胞は、１００倍の細胞数希釈にもかかわらず、それぞれ腫瘍を発生させて、重要なＨｈシグナル伝達要素ＳＭＯ及びＧＬＩ１転写因子遺伝子は、陰性細胞中よりもそれぞれ２００倍及び７００倍高く発現された。
【０３６２】
結論：データが自己シグナル伝達を示唆しているようなＣＳＣ亜集団中でみられる過発現を伴って、ヘッジホッグ経路はＨＮＳＣＣ中で活性である。ＥＲＢＩＴＵＸと併用される場合、ＩＰＩ−９２６によるＨｈ経路阻害はＣＳＣ（これが元の腫瘍の再増殖の部分的な原因であり得る）を低減し、このことがＨＮＳＣＣの腫瘍増殖の再発を防止する。
実施例２３：ゲフィチニブ療法後の非小細胞肺癌ＮＣＩ−Ｈ１６５０異種移植モデル
【０３６３】
本実施例は、ゲフィチニブによる標的療法後のＮＣＩ−Ｈ１６５０腫瘍異種移植モデルにおけるＩＰＩ−９２６の活性を評価するものである。
モデル
【０３６４】
ＮＣＩ−Ｈ１６５０肺癌細胞系（ＡＴＣＣ＃ＣＲＬ−５８８３）は、１９８７年に２７歳のコーカサス系男性喫煙者から単離された腺癌である。これら細胞は、ＥＧＦＲチロシンキナーゼドメイン中に後天性突然変異（Ｅ７４６−Ａ７５０欠失）を有する。この突然変異は、ゲフィニチブのようなＥＧＦＲチロシンキナーゼ阻害剤に対してそれらを感受性にする。Ｈ１６５０細胞がＡＴＣＣから入手され、１％ペニシリン／ストレプトマイシン及び１０％ウシ胎児血清が補充されたＲＰＭＩ  １６４０培地中で培養された。細胞をトリプシンで収穫し、死細胞のトリパンブルー排除法を使用して、生細胞計測を実施した。細胞をＲＰＭＩ  １６４０培地（血清フリー）中に再懸濁し、５〜６週齢のオス無胸腺マウス（ＴａｃｏｎｉｃＮｃｒＮｕ−Ｍ）の右腹部に２×１０６細胞／１００ｕＬ／マウスにて皮下移植した。
研究概要
【０３６５】
腫瘍体積が１５０〜２００ｍｍ３の間に一旦到達したら、マウスを無作為割付けし、処置を開始した。無作為割付けされたマウスを、ベヒクル（５％ＨＰＢＣＤ）、４０ｍｇ／ｋｇのゲフィチニブ、経口投与、ＱＤ、７日間投与、次いで４０ｍｇ／ｋｇのＩＰＩ−９２６又はベヒクルのいずれかで処置した。
投与群
【０３６６】
（１）ベヒクル（５％ＨＰＢＣＤ）；（２）ゲフィチニブ（１％カルボキシメチルセルロース）４０ｍｇ／ｋｇ投与量にて、経口投与、ＱＤ、次いでベヒクル（５％ＨＰＢＣＤ）；（３）ゲフィチニブ（１％カルボキシメチルセルロース）４０ｍｇ／ｋｇ投与量にて、経口投与、ＱＤ、次いでＩＰＩ−９２６（５％ＨＰＢＣＤ）４０ｍｇ／ｋｇ投与量にて、ＱＯＤ。
投与計画
【０３６７】
ＩＰＩ−９２６、８ｍｌ／ｋｇの投与用量にて、経口投与、ＱＯＤ、３週間；ゲフィチニブ、８ｍｌ／ｋｇの投与用量にて、経口投与、ＱＤ、７日間。
実験及び結果
【０３６８】
腫瘍移植後３４日目に、マウスを２つの投与群、すなわちベヒクル、腹腔内投与、ＱＤ、又はゲフィチニブ（４０ｍｇ／ｋｇ、経口投与、ＱＤ）のいずれかに無作為割付けした。次いで４１日目に、ゲフィチニブ処置マウスを、ベヒクル、経口投与、ＱＤ、又はＩＰＩ−９２６（４０ｍｇ／ｋｇ、経口投与、ＱＯＤ）２５日間のいずれかに無作為割付けした。最終投与後２４時間で、分析のためのサンプルを回収した。６７日目に、ゲフィチニブ次いでＩＰＩ−９２６（ゲフィチニブ→ＩＰＩ−９２６）群は、ゲフィチニブ次いでベヒクル（ゲフィチニブ→ベヒクル）群と比較した場合に、６５％腫瘍増殖阻害（ＴＧＩ）を示した（図３３）。
【０３６９】
ＪＭＰスタットプログラムを使用して、全ての群で平均値比較スチューデントのＴ検定を実施し、報告されたすべての％ＴＧＩが、統計的に有意であった。ＴＧＩ及びｐ値は、以下の表７に要説されている。本研究からのデータは、ゲフィチニブによる退縮後にＩＰＩ−９２６が投与された場合に、腫瘍増殖阻害での統計的に有意な増加を示している。
【表７】
2013511549.tif 000023
実施例２４：ゲフィチニブ療法後の非小細胞肺癌ＨＣＣ８２７異種移植モデル
【０３７０】
本実施例は、ゲフィチニブによる標的療法後のＨＣＣ８２７腫瘍異種移植モデルにおけるＩＰＩ−９２６の活性を評価するものである。
モデル
【０３７１】
ＨＣＣ８２７腫瘍細胞は、非小細胞肺癌（ＮＳＣＬＣ）の患者から単離された。これら細胞は、ＥＧＦＲチロシンキナーゼドメイン中に後天性突然変異（Ｅ７４６−Ａ７５０欠失）を有する。この突然変異が、それらをチロシンキナーゼ阻害剤であるゲフィチニブによる標的療法に対して感受性にする。ＨＣＣ８２７細胞がＡＴＣＣから入手され、１％ペニシリン／ストレプトマイシン及び５％ウシ胎児血清が補充されたＲＰＭＩ  １６４０培地中で培養された。細胞をトリプシンで収穫し、死細胞のトリパンブルー排除法を使用して、生細胞計測を実施した。細胞をＲＰＭＩ  １６４０培地（血清フリー）中に再懸濁し、５〜６週齢のオス無胸腺マウス（ＴａｃｏｎｉｃＮｃｒＮｕ−Ｍ）の右腹部に５×１０６細胞／１００ｕＬ／マウスにて皮下移植した。
研究概要
【０３７２】
腫瘍体積が１５０〜２００ｍｍ３の間に一旦到達したら、マウスを無作為割付けし、処置を開始した。無作為割付けされたマウスを、ベヒクル（５％ＨＰＢＣＤ）、１０ｍｇ／ｋｇのゲフィチニブ、経口投与、ＱＤ、３日間投与、次いで４０ｍｇ／ｋｇのＩＰＩ−９２６又はベヒクルのいずれかで処置した。
投与群
【０３７３】
（１）ベヒクル（５％ＨＰＢＣＤ）；（２）ゲフィチニブ（１％カルボキシメチルセルロース）１０ｍｇ／ｋｇ投与量にて、経口投与、ＱＤ、次いでベヒクル（５％ＨＰＢＣＤ）；（３）ゲフィチニブ、１０ｍｇ／ｋｇ投与量にて、経口投与、ＱＤ、次いでＩＰＩ−９２６（５％ＨＰＢＣＤ）（４０ｍｇ／ｋｇ投与量にて、ＱＯＤ；（４）ＩＰＩ−９２６（５％ＨＰＢＣＤ）４０ｍｇ／ｋｇ投与量にて、経口投与、ＱＯＤ。
投与計画
【０３７４】
ゲフィチニブ、８ｍｌ／ｋｇの投与用量にて、経口投与、ＱＤ、３日間；ＩＰＩ−９２６、８ｍｌ／ｋｇの投与用量にて３週間。
実験及び結果
【０３７５】
腫瘍移植後１８日目に、マウスを３投与グループ、すなわちベヒクル（腹腔内投与、ＱＤ）、はゲフィチニブ（４０ｍｇ／ｋｇ、経口投与、ＱＤ）又はＩＰＩ−９２６（４０ｍｇ／ｋｇ、経口投与、ＱＯＤ）のいずれかに無作為割付けした。次いで２０日目に、ゲフィチニブ処置マウスを、ベヒクル（経口投与、ＱＤ）、又はＩＰＩ−９２６（４０ｍｇ／ｋｇ、経口投与、ＱＯＤ）３６日間のいずれかに無作為割付けした。最終投与後２４時間で、分析のためのサンプルを回収した。５６日目に、ゲフィチニブ次いでＩＰＩ−９２６（ゲフィチニブ→ＩＰＩ−９２６）群は、ゲフィチニブ次いでベヒクル（ゲフィチニブ→ベヒクル）群と比較した場合に、７０％腫瘍増殖阻害（ＴＧＩ）を示した（図２９）。ＪＭＰスタットプログラムを使用して、全ての群で平均値比較スチューデントのＴ検定を実施し、報告された全ての％ＴＧＩが、統計的に有意であった。ＴＧＩ及びｐ値は、以下の表８に要説されている。本研究からのデータは、ゲフィチニブによる退縮後にＩＰＩ−９２６が投与された場合に、腫瘍増殖阻害での統計的に有意な増加を示している。
【表８−１】
2013511549.tif 000024
【表８−２】
2013511549.tif 000025
実施例２５：ゲフィチニブ退縮後の非小細胞肺癌ＮＣＩ−Ｈ１６５０異種移植モデルにおけｒＨｈ経路プロファイル発現
【０３７６】
本実施例の目的は、ゲフィチニブ処置直後のインヴィヴォにてのＨｈ経路発現プロファイルを理解するためのものであった。
モデル
【０３７７】
ＮＣＩ−Ｈ１６５０肺癌細胞系（ＡＴＣＣ＃ＣＲＬ−５８８３）は、１９８７年に２７歳のコーカサス系男性喫煙者から単離された腺癌である。これら細胞は、ＥＧＦＲチロシンキナーゼドメイン中に後天性突然変異（Ｅ７４６−Ａ７５０欠失）を有する。この突然変異は、ゲフィニチブのようなＥＧＦＲチロシンキナーゼ阻害剤に対してそれら細胞を感受性にする。Ｈ１６５０細胞がＡＴＣＣから入手され、１％ペニシリン／ストレプトマイシン及び１０％ウシ胎児血清が補充されたＲＰＭＩ  １６４０培地中で培養された。細胞をトリプシンで収穫し、死細胞のトリパンブルー排除法を使用して、生細胞計測を実施した。細胞をＲＰＭＩ  １６４０培地（血清フリー）中に再懸濁し、５〜６週齢のオス無胸腺マウス（ＴａｃｏｎｉｃＮｃｒＮｕ−Ｍ）の右腹部に２×１０６細胞／１００ｕＬ／マウスにて皮下移植した。
研究概要
【０３７８】
腫瘍体積が１５０〜２００ｍｍ３の間に一旦到達したら、マウスを無作為割り付けし、処置を開始した。無作為割り付けされたマウスを、ベヒクル（５％ＨＰＢＣＤ）、４０ｍｇ／ｋｇのゲフィチニブ、経口投与、ＱＤ、５日間投与又は腫瘍退縮５０％の場合、次いで４０ｍｇ／ｋｇのＩＰＩ−９２６又はベヒクルのいずれかで処置した。
投与群
【０３７９】
（１）ベヒクル（５％ＨＰＢＣＤ）；（２）ゲフィチニブ（１％カルボキシメチルセルロース）、４０ｍｇ／ｋｇ投与量にて、経口投与、ＱＤ、次いでベヒクル；（３）ゲフィチニブ、４０ｍｇ／ｋｇ投与量にて、経口投与、ＱＤ、次いでＩＰＩ−９２６（５％ＨＰＢＣＤ）、４０ｍｇ／ｋｇ投与量にて、ＱＯＤ。
投与計画
【０３８０】
ＩＰＩ−９２６、８ｍｌ／ｋｇの投与用量にて、経口投与、ＱＤ、１、４、７又は１０日；ゲフィチニブ、８ｍｌ／ｋｇの投与用量にて、経口投与、ＱＤ、５日間。
実験及び結果
【０３８１】
ゲフィチニブ処置後１、４、７及び１０日目に、ヘッジホッグリガンド調節に関して、腫瘍サンプルを分析した。本研究からのデータは、ヒトヘッジホッグリガンドＩＨｈ及びＤＨｈが、ゲフィチニブ処置後にアップレギュレートされること（図３５及び表９）、並びにＩＰＩ−９２６が、間質細胞Ｇｌｉ１及びＧｌｉ２のアップレギュレーションを阻害すること（図３６）を示している。例えば、ネズミＧｌｉ１は、ベヒクル処置腫瘍と比較して療法後にアップレギュレートされ、並びにＩＰＩ−９２６処置の際にダウン調節される。ネズミＧｌｉ２は、ベヒクルと比較した場合、標的療法後にアップレギュレートされ、並びにＩＰＩ−９２６処置の際にダウン調節される。
【０３８２】
実施例２３のＮＣＳＬＣ異種移植モデルＮＣＩ−Ｈ１６５０では、ゲフィチニブ療法後にＩＰＩ−９２６は腫瘍再増殖を著しく阻害する。実施例２５データは、この異種移植モデルにおけるゲフィチニブ療法後に、Ｈｈリガンドがアップレギュレートされること、並びにヘッジホッグ阻害剤ＩＰＩ−９２６が間質Ｇｌｉ１及びＧｌｉ２をダウンレギュレートすることを示唆している。実施例２３及び実施例２５データを組み合わせると、Ｈｈシグナル伝達経路の治療的阻害は、最初の時点では療法に反応するがその後再発するような患者における無進行生存率を延長させるために、更にＮＳＣＬＣの患者におけるＩＰＩ−９２６を評価するための理論的根拠を提供するために、重要な戦略である。
【表９】
2013511549.tif 000026
【０３８３】
本願全般に引用された全ての参考文献、係属中の特許出願及び公開された特許出願の内容は、個々の公開又は特許出願が、参照により組み込まれるように特別かつ個別に指示されているかのように、参照によりその全体を本明細書に組み込まれている。
実施例２６：ＢＸＰＣ−３におけるＩＰＩ−９２６とアバスチンの投与
【０３８４】
本実施例は、膵臓腫瘍モデルであるＢＸＰＣ３の血管系及び間質に及ぼすＩＰＩ−９２６とアバスチンの効果について記載するものである。
【０３８５】
腫瘍体積が１００〜２００ｍｍ３に一旦到達してから、処置が開始された。ＩＰＩ−９２６の経口投与は、４０ｍｇ／ｋｇ、経口投与、ＱＯＤにて投与される。アバスチンは、５ｍｇ／ｋｇの投与量にて、腹腔内投与、１週間当たり２回投与される。２週間の処置後に、イソレクチンとマレイミドが、安楽死前３０分に静脈内注射される。
投与群：
１．ベヒクル
２．ＩＰＩ−９２６、４０ｍｇ／ｋｇ／日の投与量にて、経口投与、ＱＯＤ
３．アバスチン、５ｍｇ／ｋｇの投与量にて、腹腔内投与、毎週２回
４．ＩＰＩ−９２６、４０ｍｇ／ｋｇ／日投与量にて、経口投与＋アバスチン、腹腔内投与、５ｍｇ／ｋｇ投与量にて、毎週２回
【表１０】
2013511549.tif 000027
材料及び方法
Ａ．細胞培養
【０３８６】
細胞を、１％ＦＢＳ及び１％Ｐ／Ｓで補充された最新式ＲＰＭＩ８２２６培地中で培養した。細胞は、ＡＴＣＣから購入された。細胞を収穫し、１×１０７細胞／マウスで移植した。
Ｂ．動物
【０３８７】
品種：Ｎｃｒヌード
週齢：５週齢
性別：オス
体重：２０〜２５ｇ
群当たりのＮ数：投与群に依存
発注日及び販売元：０２／１６／０９（Ｔａｃｏｎｉｃ）
受領日：０２／１８／０９
移植日：０２／２３／０９
処置開始日：０３／３１／０９
飼育管理：オスのマウスを、ステンレススチール製吊ケージ中で、１ケージ当たり４匹の群に分けて飼育し、餌と水を自由に摂取させた。動物室の環境調節が、１０回の室内大気交換／時間で、１８〜２６℃、相対湿度３０〜７０％に維持するよう設定され、１２時間光の中／１２時間暗所のサイクルに保持された。
Ｃ．被験物質
【０３８８】
５％ＨＰＢＣＤ中のＩＰＩ−９２６ＨＣｌ／ＩＰＡ
生理食塩水中のアバスタチン
Ｄ．薬剤投与
【０３８９】
ＩＰＩ−９２６は、毎週８ｍｌ／ｋｇの投与用量にて強制給餌を介して経口投与され得る。アバスチンは、１週間に２回、８ｍｌ／ｋｇの投与用量にて、２７Ｇ針を介して腹腔内投与される。
Ｅ．最終時点
【０３９０】
回収された腫瘍は、分析的評価及びＲＴ−ＰＣＲのために急速凍結される（Ｇｌｉ、Ｐｔｃｈ、Ｓｍｏ、ＨＨ及び有効な肝細胞マーカーは、現在開発中である）。
病理組織学検査：サンプルを７０％エタノール中に移動する前に、腫瘍を１０％ホルマリン中で２４時間固定する。
腫瘍測定
毎週２回、カリパスを使用して２寸法（幅×長さ）で行われる。
腫瘍体積＝長さ×幅２／２
死亡率
臨床的観察
体重
実験及び結果
【０３９１】
腫瘍体積が平均で１００ｍｍ３に一旦到達してから、処置が開始された。ＩＰＩ−９２６は、経口強制給餌によって隔日で、ＱＯＤで４０ｍｇ／ｋｇ（８ｍＬ／ｋｇ）の投与量及び投与用量で、５％ＨＰＢＣＯ中、投与された。生理食塩水中のアバスチン又はベバシズマブは、１週間に２回、２７ゲージ針を使用して５ｍｇ／ｋｇの投与量にて腹腔内投与される。体重及び腫瘍測定が、毎週２回実施された。処置の開始日からの体重減少が２０％以上又は腫瘍体積が３０００ｍｍ３以上の動物は、安楽死させた。
【０３９２】
腫瘍細胞移植後３１日目に、マウスを、ベヒクル対照投与、ＩＰＩ−９２６単独投与、アバスチン＋／−ＩＰＩ−９２６投与の４つの投与群に無作為割付けした。ＩＰＩ−９２６は、４０ｍｇ／ｋｇの投与量にて経口、ＱＯＤで合計１３回投与された。アバスタチンは、５ｍｇ／ｋｇの投与量にて、腹腔内、毎週２回、合計で８回投与された。表１１は、対照群に対する全てのテスト群の５６日目に取得された％腫瘍増殖阻害（ＴＧＩ）、及びＪＭＰスタットプログラムを使用して計算されたｐ値（平均値比較スチューデントのＴ検定）を概説している。これら結果は、図３７にまとめられている。
【表１１】
2013511549.tif 000028
同等物
【０３９３】
当業者は、ルーチンの実験法以上のものを用いなくても、本明細書に記載される本発明の特定の実施形態には多くの同等物があることを認識するであろうし、または確認することが可能であろう。このような同等物は、以下の特許請求の範囲に包含されるよう意図している。
【図１７】
2013511549.tif 000031
【図２０Ａ】
2013511549.tif 000032
【図２０Ｂ】
2013511549.tif 000033
【図２０Ｃ】
2013511549.tif 000034
【図１】
2013511549.tif 000035
【図２Ａ】
2013511549.tif 000036
【図２Ｂ】
2013511549.tif 000037
【図３】
2013511549.tif 000038
【図４】
2013511549.tif 000039
【図５】
2013511549.tif 000040
【図６】
2013511549.tif 000041
【図７Ａ】
2013511549.tif 000042
【図７Ｂ】
2013511549.tif 000043
【図８Ａ】
2013511549.tif 000044
【図８Ｂ】
2013511549.tif 000045
【図９Ａ】
2013511549.tif 000046
【図９Ｂ】
2013511549.tif 000047
【図１０】
2013511549.tif 000048
【図１１】
2013511549.tif 000049
【図１２】
2013511549.tif 000050
【図１３】
2013511549.tif 000051
【図１４】
2013511549.tif 000052
【図１５Ａ】
2013511549.tif 000053
【図１５Ｂ】
2013511549.tif 000054
【図１５Ｃ】
2013511549.tif 000055
【図１５Ｄ】
2013511549.tif 000056
【図１５Ｅ】
2013511549.tif 000057
【図１５Ｆ】
2013511549.tif 000058
【図１５Ｇ】
2013511549.tif 000059
【図１６−１】
2013511549.tif 000060
【図１６−２】
2013511549.tif 000061
【図１８】
2013511549.tif 000062
【図１９】
2013511549.tif 000063
【図２１−１】
2013511549.tif 000064
【図２１−２】
2013511549.tif 000065
【図２２−１】
2013511549.tif 000066
【図２２−２】
2013511549.tif 000067
【図２３】
2013511549.tif 000068
【図２４】
2013511549.tif 000069
【図２５】
2013511549.tif 000070
【図２６】
2013511549.tif 000071
【図２７Ａ】
2013511549.tif 000072
【図２７Ｂ】
2013511549.tif 000073
【図２８Ａ】
2013511549.tif 000074
【図２８Ｂ】
2013511549.tif 000075
【図２９Ａ】
2013511549.tif 000076
【図２９Ｂ】
2013511549.tif 000077
【図２９Ｃ】
2013511549.tif 000078
【図２９Ｄ】
2013511549.tif 000079
【図３０Ａ】
2013511549.tif 000080
【図３０Ｂ】
2013511549.tif 000081
【図３０Ｃ】
2013511549.tif 000082
【図３０Ｄ】
2013511549.tif 000083
【図３１】
2013511549.tif 000084
【図３２】
2013511549.tif 000085
【図３３】
2013511549.tif 000086
【図３４】
2013511549.tif 000087
【図３５】
2013511549.tif 000088
【図３６】
2013511549.tif 000089
【図３７】
2013511549.tif 000090
【国際調査報告】
2013511549.tif 000091
2013511549.tif 000092