(57)【要約】本発明は、少なくとも１つの開口端を有する中空本体と、この中空本体の内部にある少なくとも１つの障壁であって、周囲条件下では液体および固体に対して不透過性であるが圧力、抗力、または推進力のような外力を加えることによって液体透過性になり、中空本体の少なくとも１つの開口端から間隔をあけて配置された障壁とを含むデバイス、液体サンプルのプロセシングのためのそのようなデバイスの使用、前記デバイスを調製するための方法、ならびに前記デバイスを使用して任意の生体分子を単離または精製するための方法に言及する。【特許請求の範囲】
【請求項１】
（ｉ）それぞれが少なくとも１つの開口端を有する少なくとも１つの中空本体（１）；
（ｉｉ）該中空本体の少なくとも１つの開口端から間隔をあけて該中空本体の内部に配置された、周囲条件下では液体および固体に対して不透過性であるが外力を加えることによって液体透過性になる少なくとも１つの障壁（５）；
（ｉｉｉ）必要に応じて、前記中空本体の内部の少なくとも１つの多孔質液体透過性エレメント（４）；
（ｉｖ）必要に応じて、少なくとも１つの開口端を封止するための少なくとも１つの取外し可能な閉鎖デバイス（６）
を含むデバイス。
【請求項２】
（ｉ）それぞれが入口（２）および出口（３）を有する少なくとも１つの中空本体；
（ｉｉ）該出口（３）の上方に配置され、または存在する場合、（１つまたは複数の）該液体透過性エレメント（４）の少なくとも１つに隣接して配置される少なくとも１つの障壁（５）；
（ｉｉｉ）必要に応じて、該出口（３）の上方に配置された、好ましくは多孔質フリット、フィルター、フリース、または膜のような少なくとも１つの液体透過性エレメント（４）；
（ｉｖ）必要に応じて、該中空本体の該入口（２）および／または該出口（３）を封止するための少なくとも１つの取外し可能な閉鎖デバイス（６）；ならびに
（ｖ）必要に応じて、該出口（３）を通過した後に移動相（溶出液）を収集するための少なくとも１つの収集管
を含む、請求項１に記載のデバイス。
【請求項３】
前記中空本体（１）を２つより多いの区画に分離する、１つ超の障壁（５）、好ましくは２、３、４、５、または６つの障壁（５）を含む実施形態である、請求項１または２に記載のデバイス。
【請求項４】
前記障壁（５）が、フィルム、箔、コーティング、隔壁、膜、疎水性焼結材料、または疎水性繊維材料から個々に選択されることを特徴とする、請求項１から３のいずれかに記載のデバイス。
【請求項５】
前記中空本体（１）が、少なくとも部分的に円筒状または円錐状であることを特徴とする、請求項１から４のいずれかに記載のデバイス。
【請求項６】
反応管、反応カップ、収集管、収集容器、カラム本体、スピンカラム、遠心分離管、微小遠心分離管、特に、区画化された容器、例えば管、カップ、フラスコ、クロマトグラフィーカラム、スピンカラム、プラスチックシリンジ、マルチウェルプレート、マルチウェルブロック、マルチウェルカラムプレート、フラスコ、ボトル、カップ、フィオール（ｐｈｉｏｌ）、収集または遠心分離ベッセルを表す、請求項５に記載のデバイス。
【請求項７】
前記障壁（５）材料が、圧力、抗力、もしくは推進力を加えることによって多孔質になり、圧力、抗力、もしくは推進力を加えることによって開く所定のオリフィスを有し、または圧力、抗力、もしくは推進力を加えることによって好ましくは所定の破断点で破断することを特徴とする、請求項１から６のいずれかに記載のデバイス。
【請求項８】
前記中空本体の内部の前記障壁（５）の上方または下方に、圧力、抗力、または推進力が前記デバイスに加えられたときに該障壁（５）を穿刺し、切断し、または破裂させる任意の材料または構成要素を含むことを特徴とする、請求項１から６のいずれかに記載のデバイス。
【請求項９】
前記外力が除去されたとき、得られた液体透過性が不可逆的である、請求項７または８に記載のデバイス。
【請求項１０】
液体含有サンプルを収集、貯蔵、または処理するための、または生体分子もしくは生体分子含有サンプルを収集、貯蔵、処理、または単離するための、好ましくは液体サンプルから生体分子を単離および／もしくは精製するための、請求項１から８のいずれかに記載のデバイスの使用。
【請求項１１】
多相液体／固体系または多相液体系の相分離のための、請求項１から８のいずれかに記載のデバイスの使用。
【請求項１２】
少なくとも１つの開口端から間隔をあけて中空本体の内部に障壁（５）が得られるように、周囲条件下では液体および固体に対して不透過性であるが圧力、抗力、または推進力を加えることによって液体透過性になる少なくとも１つの障壁（５）を、該中空本体内に配置し、該中空本体（１）を少なくとも２つの区画に分離するステップを含む、請求項１から８のいずれかに記載のデバイスを調製するための方法。
【請求項１３】
少なくとも１つの液体透過性エレメント（４）、好ましくはフリット、フィルター、フリース、または膜を、前記中空本体（１）内にさらに配置するステップを含む、請求項１０に記載のデバイスを調製するための方法。
【請求項１４】
少なくとも１つのタイプの生体分子を含むサンプルから、対象とする少なくとも１つの生体分子を単離または精製するための方法であって、
（ａ）少なくとも１つの非液体透過性障壁（５）によって分離された少なくとも２つの区画を含む、請求項１から８のいずれかに記載のデバイスの前記中空本体（１）の第１の区画の内部に前記サンプルを配置するステップであって、該サンプルが液体サンプルであり、または該サンプルが、該サンプルを該中空本体の内部に配置する前もしくは後に任意の液体と接触する、または該中空本体が、該サンプルが該デバイス内に配置されたときに該サンプルと接触するようになる液体を含む、ステップと、
（ｂ）必要に応じて、該中空本体（１）の該第１の区画の内部の該サンプルをインキュベートするステップと、
（ｃ）外力、好ましくは圧力、抗力、または推進力を該障壁（５）に加え、その結果、第１の障壁（５）が液体透過性になり、該液体が、該中空本体（１）のさらなる区画内に移送されるステップと、
（ｄ）必要に応じて、該中空本体（１）の該さらなる区画の内部の該サンプルをインキュベートするステップと、
（ｅ）必要に応じて、後に続く障壁（５）に外力を加え、その結果、該障壁（５）が液体透過性になり、該液体が該中空本体（１）のさらなる区画内に移送されるステップと、
（ｆ）対象とする該生体分子を含む溶出液を収集するステップと
を含む方法。
【請求項１５】
前記デバイスの前記中空本体（１）が、２、３、４、５、または６つの障壁（５）を含み、その結果、該中空本体（１）の３、４、５、６、または７つの区画が得られ、含まれる該障壁（５）の全てを越えかつ対象とする前記生体分子を含有する溶出液が得られるように単離または精製プロセス中に必要な頻度でステップ（ｄ）および／または（ｅ）を繰り返す、請求項１２に記載の方法。
【請求項１６】
前記デバイスの前記中空本体（１）の前記区画の少なくとも１つが、前記生体分子を含むサンプルが添加される前にさらなる固体マトリックスおよび／または少なくとも１種の液体を含む、請求項１２または１３に記載の方法。
【請求項１７】
ステップ（ｃ）において加えられる（１つまたは複数の）前記外力と、必要に応じて繰り返される（１回または複数回の）ステップ（ｅ）で加えられる、加えられる（１つまたは複数の）該外力とは、該力の強度または該力のタイプが互いに異なり、好ましくは同じタイプの力の該強度が段階的に増加し、または該力の該タイプが変化し、その結果、前記障壁（５）が順次液体透過性になる、請求項１２から１４のいずれかに記載の方法。
【請求項１８】
生物学的サンプルを収集、貯蔵、もしくは処理するための、または生物学的サンプルから生体分子を単離するためのキットであって、請求項１から８のいずれかに記載のデバイスを含むキット。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、少なくとも１つの開口端を有する中空本体と、この中空本体の内部にある少なくとも１つの障壁であって、周囲条件下では液体および固体に対して不透過性であるが圧力、抗力、または推進力のような外力を加えることによって液体透過性になり、中空本体の少なくとも１つの開口端から間隔をあけて配置された障壁とを含むデバイス、液体サンプルのプロセシングのためのそのようなデバイスの使用、前記デバイスを調製するための方法、ならびに前記デバイスを使用して任意の生体分子を単離または精製するための方法に言及する。
【背景技術】
【０００２】
例えば生物学的サンプルから生体分子を単離または精製するための前記サンプルの処理中に、サンプルを、任意のまたはいくつかの（１種または複数の）液体と接触させ、必要に応じてインキュベートして任意の反応をさせ、その後、サンプルの対象の部分を残分から分離することは、非常に一般的である。通常、使用される液体はピペット操作によって添加されまたは移送され、その場合、対象の生体分子が所望の形態で得られる前に、しばしばいくつかの方法ステップを実施しなければならない。これらのステップのいずれかではサンプルの汚染が生じる可能性があり、さらにそれは面倒であり、時間がかかる。
【０００３】
生体分子を単離するためのいくつかの周知の手法が現況技術において記述されており、それには、例えば核酸結合材料のカラムに対するＤＮＡもしくはＲＮＡの結合のような、任意のマトリックスへの生体分子の結合、例えばタンパク質もしくは低分子量分子の親和性結合、または生体分子のサイズもしくは体積に応じて生体分子を分離するクロマトグラフィーデバイスが包含される。さらに、例えば、非特許文献１または非特許文献２に記載される、ＤＮＡ単離のためにＣｈｅｌｅｘ  １００を使用するような、任意の望ましくない化合物を結合してその化合物を所望の生体分子から分離することは公知である。
【０００４】
生体分子を含有するサンプルから生体分子を単離する間に、しばしば多相系が得られ、対象とする（１つまたは複数の）生体分子はこの相の１つに含有される。多相サンプルを、対象の部分および対象でない部分に分割するには、例えば、対象の相のそれぞれを別々にピペット操作することによって、対象の相が除去されるように対象でない相を浸透させることによって、または対象の相が得られるように液体が含まれている容器を浸透させることによって、相を個々にピペット操作または除去することができるが、対象のサンプル部分の汚染および／または損失のリスクは高い。
【先行技術文献】
【非特許文献】
【０００５】
【非特許文献１】Ｗａｌｓｈら、ＢｉｏＴｅｃｈｎｉｑｕｅｓ  １０巻、４号（１９９１年）
【非特許文献２】Ｂｕｒｋｈａｒｔら、２００２年、Ｊ  Ｂｉｏｃｈｅｍ  Ｂｉｏｐｈｙｓ  Ｍｅｔｈｏｄｓ  ５２巻（２００２年）１４５〜１４９頁
【発明の概要】
【課題を解決するための手段】
【０００６】
本発明の目的は、デバイスの少なくとも１つの区画内での液体の一時的な保持と、さらに前記デバイスの少なくとも１つのさらなる区画への前記液体のタイムリーに定められた送達とを可能にするデバイスと、少ないピペット操作ステップでかつ交差汚染のリスクが減じられた状態で液体サンプルを処理するための方法とを提供することであった。
【０００７】
この目的は、（ｉ）それぞれが少なくとも１つの開口端を有する少なくとも１つの中空本体（１）；（ｉｉ）中空本体の開口端の少なくとも１つから間隔をあけて中空本体の内部に配置された、周囲条件下では液体および固体に対して不透過性であるが外力を加えることによって液体透過性になる少なくとも１つの障壁（５）；（ｉｉｉ）必要に応じて、中空本体の内部の少なくとも１つの多孔質液体透過性エレメント（４）；（ｉｖ）必要に応じて、開口端の少なくとも１つを封止するための少なくとも１つの取外し可能な閉鎖デバイス（６）を含むデバイスを提供することによって、適えられる。
【０００８】
前記デバイスは、任意の液体を含むサンプル、例えば対象とする生体分子を含む液体サンプルを収集、貯蔵、もしくは処理するために、かつ／またはそのようなサンプルから対象とする生体分子を単離もしくは精製するために、または生体分子についての単離もしくは調製手順からサンプルの前処理、清浄化もしくはその他の部分を置き換えるために、使用することができる。
【０００９】
デバイスの中空本体（１）は、プラスチック、金属、ガラス、磁器、または類似のもののような、サンプルの収集、貯蔵、または処理に適切な任意の材料で作製することができ、好ましくは本体は、プラスチックで作製される。特に本体は、好ましくは、ポリプロピレン、ポリエチレン、ポリプロピレン−コポリマー、ポリ塩化ビニル、ポリウレタン、ポリカーボネート、ポリアミド、ポリイミド、ポリスチレン、ポリエチレンテレフタレート、ポリラクチド、エチレン−ポリ酢酸ビニル、塩化ビニル酢酸ビニルコポリマー、ポリアセタール、ポリエーテルアルコール、酢酸ビニルコポリマー、またはアクリルポリマーのような熱可塑性樹脂で作製されるが、これらに限定するものではない。
【００１０】
中空本体／デバイスの中空本体のそれぞれが少なくとも１つの開口端を有し、これにより、少なくとも１つの端部によって何かを中空本体内に挿入することが可能となり、例えば対象とするサンプルおよび／もしくは任意の液体を挿入することが可能となるか、または中空本体から何かを除去することが可能となるようなことを意味する。好ましくはデバイスは、入口（２）および出口（３）を有し、典型的には入口の開口はデバイスの「上」端にあり、出口の開口はデバイスの「底面」側にある。特に好ましいのは、入口（２）および出口（３）が互いに対向することである。必要に応じてデバイスは、開口の少なくとも１つ、例えば出口（３）もしくは入口（２）を、取外し可能に閉鎖する少なくとも１つの取外し可能な閉鎖デバイス（６）、または全ての開口に対するいくつかの（必要に応じて異なる形状の）閉鎖デバイスをさらに含む。
【００１１】
本発明によれば、中空本体（１）の内部では、デバイスが、周囲条件下では液体および固体に対して不透過性であるが外力を、好ましくは圧力、抗力、または推進力を加えることによって液体透過性になる材料からなる少なくとも１つの障壁（５）を有する。前記少なくとも１つの障壁（５）は、中空本体（１）の内部側壁の全てと接触しかつ前記側壁と同一平面にあり、または側壁と同一平面にあるホルダー（７）内に配置される。障壁（５）またはホルダー（７）の間に残っている任意の隙間は、適切な封止材料で封止することができる。少なくとも１つの障壁（５）は、中空本体（１）の少なくとも１つの開口端から間隔をあけて配置され、中空本体を少なくとも２つの区画に分割する。
【００１２】
「間隔」または「間隔をあけて」とは、（１つまたは複数の）障壁（５）の少なくとも１つが開口端の１つのごく近傍にはないが、中空本体は１つの開口端から少なくともその他の（必要に応じて開口）端部まで、少なくとも２つの区画に、即ち中空本体の少なくとも約１／１０から９／１０、約１／９から８／９、約１／８から７／８、約１／７から６／７、約１／６から５／６、約１／５から４／５、約１／４から３／４、約１／３から２／３、または約１／２から１／２を表す区画に分割されることを意味する。必要に応じて、これらの区画（ａ）は共に、（１つまたは複数の）さらなる障壁（５）を含むことができる。本発明によれば、少なくとも１つの障壁（５）が、中空本体を少なくとも２つの区画に分離することしか必要としない。
【図面の簡単な説明】
【００１３】
【図１】図１は、中空本体（１）、入口（２）および出口（３）、多孔質フリット（４）、上部障壁としてのポリエステルフィルム（５）および下部障壁としてのアルミ箔（５）を含むスピンカラムである、本発明のデバイスの一実施形態を示す。障壁（５）の間の空間には、例えば任意の液体を充填してもよい。
【図２】図２は、中空本体（１）、入口（２）および出口（３）、多孔質フリット（４）、ポリスチレンフィルム（５）、ホルダー（７）、ならびに２つの取外し可能な閉鎖デバイス（６）を含み、微粒子樹脂（ｒｅｓ）をさらに含むスピンカラムである、本発明のデバイスの一実施形態を示す。
【発明を実施するための形態】
【００１４】
本出願による「周囲条件」とは、障壁材料がデバイスの周囲と同じ条件下にあり、特に障壁材料には外力が全く加わらないことを意味する。外力は、表面の少なくとも１つもしくは障壁の側部のいずれかに対する高い圧力、真空もしくは吸引のような抗力、推進力、例えば遠心力、振盪、もしくは衝突であって挙げた最後の２つが好ましくは質量の慣性を利用することによるものであり、または穿刺、切断、破裂もしくは類似のもののような機械力であってもよい。したがって材料は、テーブル上に立たせるというようなデバイスの通常の取扱い中、ピペット操作ステップ中、インキュベーションステップ、加熱ステップ、および／もしくは冷却ステップ、振盪ステップ、また類似のステップ中では「周囲条件」下にある。「高い圧力」は、周囲圧力の少なくとも２倍の圧力が障壁材料に外部から加えられることを意味する。「高い圧力」は、例えばスピンカラムのようなカラムに液体または固体マトリックスが充填された場合、障壁材料に加えられた、任意の液体または固体マトリックスから生じる僅かに高い圧力を含まない。
【００１５】
「液体に対して不透過性」とは、液体、例えば水溶液または水、アルコール、または有機溶液、特に好ましくは水溶液が、障壁の表面に保持され、周囲条件下では前記障壁を通過できず、好ましくは障壁材料に進入すること、浸透すること、または浸み込むこともできないことを意味する。液体と障壁との接触時間とは無関係に、前記溶液は、外力が加えられない限り障壁を通過できないことが特に好ましい。
【００１６】
上記にて引用された外力のいずれかを加えることによって、障壁（５）の材料は液体透過性になる。これは、材料がその障壁特性を減少させ、少なくとも任意の液体、好ましくは溶解した材料を含む溶液を、材料に通すことが可能になることを意味する。好ましくは障壁の透過性は−得られる場合−周囲条件に戻った後も、特に外力を除去した後も、不可逆的である。これは、障壁材料が、圧力、抗力、もしくは推進力を加えることにより多孔質になること、または障壁材料が、周囲条件下では閉鎖されるが圧力、抗力、もしくは推進力を加えることにより開放される所定のオリフィスを有することによって例示される。好ましくは、多孔性が得られた後またはオリフィスが開放された後、障壁は、周囲条件下であっても含有される開口により液体透過性のままである。さらに障壁（５）は、圧力、抗力、または推進力を加えることにより、好ましくは所定の破断点で破断し得る。
【００１７】
さらなる可能性は、デバイスが、中空本体（１）内部の障壁（５）の上方または下方に、例えば圧力、抗力、または推進力のような外力がデバイスに加えられたときに障壁材料を穿刺し切断しまたは破裂させる任意の材料または構成要素（手段）を含むことである。障壁材料が穿刺される場合、穿刺は微小穿刺が好ましいが、これはごく小さな穿刺だけが障壁材料に得られ、その結果障壁（５）の破裂は生じないが障壁（５）が多孔質になることを意味する。
【００１８】
「上方」とは、デバイスがその使用様式で位置決めされた場合、例えばカラムがホルダーまたはカップ上に直立して配置された場合、障壁材料を穿刺し切断しまたは破裂させる材料または構成要素が、前記障壁材料の上側にあることを意味する。特に、デバイスが任意の液体を含んで意図されるように使用される場合、障壁材料を穿刺し切断しまたは破裂させる材料または構成要素は、液体と同じ側にあり、外力を加えることによって、特に圧力、抗力、または推進力を加えることによって、液体とも同様に接触する障壁材料の上面へと加圧される。
【００１９】
障壁材料を穿刺し切断しまたは破裂させる材料または構成要素が障壁材料の「下方」にある場合、障壁材料の底面は、外力によって、障壁材料を穿刺し切断しまたは破裂させる材料または構成要素へと加圧されることになる。後者の場合、障壁材料を穿刺し切断しまたは破裂させる材料または構成要素は、液体と同様に液体透過性エレメント（４）の反対側にある。
【００２０】
（１つまたは複数の）障壁（５）を液体透過性にするのに適切な、加えられる外力の強度およびタイプは、（１つまたは複数の）障壁（５）に使用される材料に、また必要に応じて（１つまたは複数の）障壁（５）を穿刺し切断しまたは破裂させるのに使用される構成要素または材料に依存する。（１つまたは複数の）障壁（５）は、所定強度まではいかなる外力に対しても抵抗性であることが好ましく、選択された材料によっておよび材料の任意の処理によって、（１つまたは複数の）障壁（５）が液体透過性になるときの強度は様々である。当業者にとって、どのタイプの外力が、またその力のいずれかがどの程度の強度であると、（１つまたは複数の）障壁（５）に関して選択された材料に液体透過性をもたらすのか、標準的な実験により決定することは容易である。障壁材料の異なる材料もしくは厚さ、または異なる原理があってもよく、その結果、障壁を液体透過性にするのに必要な外力は異なる強度になる。しかし、（１つまたは複数の）障壁（５）は、いずれにせよ、１×ｇに、好ましくは２×ｇに、より好ましくは５×ｇに、さらにより好ましくは１０×ｇに、特に好ましくは２０×ｇ、４０×ｇ、または５０×ｇに対して抵抗性であることが特に好ましい。（１つまたは複数の）障壁（５）は、１００×ｇに対して抵抗性であることが特に好ましい。特に、（１つまたは複数の）障壁は、ピペット操作中、旋回中、円滑なボルテックス中、およびその他の一般に使用されるプロセスステップ中に生じる力に対して抵抗性であるべきである。
【００２１】
（１つまたは複数の）障壁（５）は、好ましくは、フィルム、箔、コーティング、隔壁、膜、疎水性焼結材料（疎水性フリット）、化学的なもしくはその他の処理によって疎水性にされた材料の形態で、または効果的な障壁として働く任意のその他の適切な形態で提供される。障壁（５）に適切な材料は、例えば、疎水性フィルター材料；疎水性繊維ウェブ材料；ポリエチレン、ポリプロピレン、ポリプロピレン−コポリマー、ポリ塩化ビニル、ポリウレタン、ポリカーボネート、ポリアミド、ポリイミド、ポリスチレン、ポリエチレンテレフタレート、ポリラクチド、エチレン−ポリ酢酸ビニル、塩化ビニル酢酸ビニルコポリマー、ポリアセタール、ポリエーテルアルコール、酢酸ビニルコポリマー、アクリルポリマーのような、特に熱可塑性もしくは熱硬化性ポリマーの、プラスチックの膜、フィルム、もしくは箔；またはシリコーン；ラテックス；多糖、特にセルロースエーテルおよび誘導体；アルミ箔もしくは銅箔のような薄い金属層、または任意のその他の適切な、好ましくはフィルム、箔、コーティング、隔壁、もしくは膜として提供することができるフィルム形成材料である。フィルムまたはコーティングとして、ポリエチレン、ポリプロピレン、ポリプロピレン−コポリマー、ポリスチレン、ポリ塩化ビニル、ポリウレタン、ポリカーボネート、またはポリアミドのような熱可塑性ポリマーが特に好ましい。疎水性フィルター材料として、疎水性化ポリエチレンフィルターが好ましく、膜としては、例えばＦｉｌｔｒｏｎａ（登録商標）繊維膜（Ｆｉｌｔｒｏｎａ、Ｒｅｉｎｂｅｋ、ドイツ）のいずれかのような疎水性化繊維膜が、また膜としては、Ｇｏｒｅ  ｔｅｘ（登録商標）または類似のもののような材料が好ましい。任意の耐水性であるが蒸気透過性の膜も同様に好ましい。
【００２２】
障壁材料を穿刺し切断しまたは破裂させる構成要素または材料の例は：例えばシリカもしくはポリマーのような任意の不活性材料で作製された例えば多孔質のフリットのような、粗面を提供する任意の固体の多孔質の、穴のある、もしくは有孔プレート；その表面に微細な針を有する金属シーブ；穿孔部位に鋭いエッジを有する有孔プレート；鋭いエッジもしくは（１本または複数の）針を有する穿通デバイス、砂、または任意のその他の微粒子不活性材料である。好ましい実施形態では、上記の外力がデバイスに加えられたときに前記障壁（５）がエレメント（４）へと加圧される場合、液体透過性エレメント（４）として働く多孔質のフリットも同様に、障壁材料を穿刺する構成要素として働く。
【００２３】
本発明の最も単純な実施形態の１つによれば、デバイスは、少なくとも１つの開口端を有する中空本体（１）であって、この中空本体（１）の内部には開口の少なくとも１つから間隔をあけて配置された少なくとも１つの障壁（５）を含む中空本体（１）を表すことができ、この障壁は、圧力、抗力、または推進力を加えることによって、多孔質になり、所定のオリフィスを有し、または好ましくは所定の破断点で破断する材料を含む。
【００２４】
本発明の好ましい実施形態では、デバイスの中空本体（１）は、内部に、好ましくは多孔質フリット、フィルター、フリース、または膜のような少なくとも１つの液体透過性エレメント（４）をさらに含む。（１つまたは複数の）前記液体透過性エレメント（４）は主に、溶出から、中空本体区画の少なくとも１つに含まれる任意の固体材料を留めるが、任意の液体および溶解成分をエレメント（４）へと通過させる機能を有する。したがって、例えば液体サンプル部分を任意の固体サンプル部分から分離することができ、または液体サンプルを、デバイス内に含まれ保持されたクロマトグラフィーマトリックス、濾過マトリックス、キレート化マトリックス、もしくは結合マトリックスにより精製することができる。（１つまたは複数の）前記液体透過性エレメント（４）は、好ましくは、中空本体（１）の内部側壁の全てと接触しかつ前記側壁と同一平面にあり、もしくは側壁と同一平面にあるホルダー（７）内に配置され、かつ／または液体透過性エレメント（４）もしくはホルダー（７）の間に残っている任意の隙間は、適切な封止材料で封止することができる。
【００２５】
（１つまたは複数の）液体透過性エレメント（４）の少なくとも１つを（１つまたは複数の）障壁（５）の少なくとも１つに隣接させることが可能であり、「隣接」は、障壁（５）に近いが接触はしていないこと、または障壁（５）と直接接触していることを意味する。障壁（５）がコーティングを表す場合、コーティングは、液体透過性エレメント（４）の少なくとも１つの面上に配置することが好ましく、特に好ましいのはフリット、フィルター、または膜の１つの面上に配置することである。いずれにせよ、（１つまたは複数の）液体透過性エレメント（４）は、障壁（５）の上方または下方に配置することができ、「上方」および「下方」は、障壁材料を穿刺し切断しまたは破裂させる構成要素または材料に関して上記のものと同じ意味である。好ましくは、障壁（５）は液体透過性エレメント（４）の上方にあり、これは、デバイスがその使用様式で位置決めされる場合には（入口（２）が上、出口（３）が下）、前記障壁（５）が液体透過性エレメント（４）の上面に隣接することを意味する。
【００２６】
本発明によれば、中空本体（１）は、１つ超の障壁（５）を含んでいてもよく、障壁（５）は、中空本体（１）をいくつかの区画に分離している。例えば、２つの障壁（５）を含む中空本体（１）は、２つの障壁（５）の間の少なくとも１つの「閉鎖区画」と、中空本体（５）の少なくとも１つの開口端に対応した１つの開口端を有する少なくとも１つの区画とを含む。第３の区画は、中空本体がただ１つの開口端を有する場合は閉鎖され、または２つの開口端が中空本体に存在する場合は開放されている。中空本体は、デバイスの意図される用途に応じて、３、４、５、６つ、またはそれより多くの障壁（５）を同様に含んでいてもよい。
【００２７】
１つ超の障壁（５）が中空本体（５）に含まれる場合、それらは、液体透過性になる前に外力に対して異なる抵抗性を有することが好ましい。特に、同じ中空本体（１）の内部に含まれるいくつかの障壁は、入口（２）から出口（３）側まで、同じタイプの外力に対して高い抵抗性を示すことが好ましい。例えば、３つの障壁（５）が中空本体（１）に含まれる場合、第１の障壁（５）（入口側に最も近い。）は、遠心力に対して定められた抵抗性を有する。第２の障壁（５）（中空本体のさらに内部にある。）は、第１の障壁に比べて遠心力に対して高い抵抗性を有し、したがって遠心分離は、第２の障壁を液体透過性にするために加速しなければならない。第３の障壁（５）（中空本体の入口側から最も遠い。）は、やはり、第２の障壁に比べて遠心力に対して高い抵抗性を有し、したがって遠心分離は、第３の障壁を液体透過性にするために加速しなければならない。障壁（５）のそれぞれは、障壁に関して上記の材料とは無関係に選択することができるが、異なる材料からなるか、または同じ基礎材料であるが異なる性質を示すものからなることが好ましい。例えば、障壁のそれぞれは、同じ熱可塑性ポリマーフィルムからなるものでもよいが、フィルムのそれぞれは異なる厚さを有する。さらなる可能性は、障壁（５）が様々に処理されることであり、例えば第１の障壁は、遠心力を加えることによって開くオリフィスを含み、第２の障壁は、所定の破断点として働くスズ引きした領域を有する、定められた厚さのフィルムであり、第３の障壁は、遠心力が増加したときに多孔質になる、連続した厚さを有する同じ材料のフィルムであり、その結果前記フィルムは多孔質の材料、例えば前記第３の障壁の下方に隣接して配置されたフリットの粗面と接触するようになる。
【００２８】
本明細書に例示される実施形態は、可能性ある実施形態を限定するものではない。当業者にとって、デバイスの中空本体（１）に含まれる障壁（５）が前記中空本体（１）の区画を可能にしかつ任意の外力を加えることによって液体透過性になることができる限り、障壁材料および／または材料処理の任意の組合せを使用することができることは明らかである。好ましくは障壁（５）は、順次、液体透過性にすることができ、この場合「順次」は、外力を増加させることによってまたは外力を変更することによって、障壁が次々に液体透過性になることを意味する。
【００２９】
特に好ましいデバイスは、（ｉ）それぞれが入口（２）および出口（３）を有する少なくとも１つの中空本体（１）；（ｉｉ）出口（３）から間隔をあけて配置された、中空本体の内部の少なくとも１つの障壁（５）；（ｉｉｉ）必要に応じて、出口（３）の上方であるが（１つまたは複数の）障壁（５）の少なくとも１つの下方に配置された、好ましくは多孔質フリット、フィルター、フリース、または膜のような少なくとも１つの液体透過性エレメント（４）；（ｉｖ）必要に応じて、中空本体の入口（２）および／または出口（３）を封止するための少なくとも１つの取外し可能な閉鎖デバイス（６）；ならびに（ｖ）必要に応じて、出口（３）を通過した後に移動相（溶出液）を収集するための少なくとも１つの収集管を含む。
【００３０】
本発明による例は、少なくとも１つの不透過性障壁（５）が少なくとも１つの液体透過性エレメント（４）、特に多孔質フリット、フィルター、フリース、または膜に隣接して配置される実施形態であり、これは中空本体の内部のエレメント（４）に近いまたは直接接触することを意味する。さらに例えば、少なくとも１つの不透過性障壁（５）は、好ましくはフリット、フィルター、フリース、または膜から独立して選択された少なくとも２つの液体透過性エレメント（４）の間に、前記エレメント（４）の少なくとも１つと直接接触した状態で配置される。
【００３１】
さらに中空本体は、（１つまたは複数の）障壁（５）のいずれにも接触しない、少なくとも１つの液体透過性エレメント（４）を含んでいてもよい。好ましくは、液体透過性エレメント（４）は、デバイスの出口側付近に近接して存在する。「近接する」は、中空本体のさらなる反応区画がエレメント（４）と出口との間になく、しかしデバイスの構成により、確かにいくらかの空間がエレメント（４）とデバイス端部との間にある可能性があることを意味する。
【００３２】
好ましい性質が実現されるさらなる実施形態は、上記のいくつかの中空本体（１）を含むデバイスであり、中空本体（１）のそれぞれは同様に構築され、または中空本体のアセンブリーは互いに異なり、しかし中空本体の少なくとも一部は上記にて定義された記述に該当する。
【００３３】
デバイスの形態は本発明を限定するものではないが、好ましい実施形態では、デバイスの（１つまたは複数の）中空本体が、少なくとも部分的に円筒状または少なくとも部分的に円錐状である。本発明の実施形態に関する非限定的な例は、反応管、反応カップ、収集管、収集容器、カラム本体、遠心分離管、微小遠心分離管、特に、区画化された容器、例えば管、カップ、フラスコ、クロマトグラフィーカラム、スピンカラム、プラスチックシリンジ、マルチウェルプレート、マルチウェルブロック、マルチウェルカラムプレート、フラスコ、ボトル、カップ、フィオール（ｐｈｉｏｌ）、収集もしくは遠心分離ベッセル、または類似のものである。
【００３４】
デバイスは、取外し可能な閉鎖デバイス（６）を、開口端の少なくとも１つにさらに含むことができる。前記閉鎖デバイスは、デバイスの内部を清浄および／もしくは滅菌状態に保つように、または必要に応じてデバイスの内容物を中空本体（１）の内部に保つように働く。閉鎖デバイス（６）は、デバイスを使用する前、使用する間、および／または使用した後に容易に取り外すことができる。好ましくは閉鎖デバイス（６）は、デバイスが任意の液体または流動性もしくは移動性固体材料を含む場合に使用される。閉鎖デバイス（６）は、例えば、キャップ、栓、カバープレート、フィルムもしくは箔、または任意のその他の適切な取外し可能な閉鎖デバイスとすることができる。それは、閉鎖し直すことができまたは使い捨て可能な閉鎖デバイスとすることができる。入口（２）および出口（３）側の閉鎖デバイス（６）は、互いに異ならせることができ、または同じタイプの閉鎖デバイス（６）とすることができる。
【００３５】
本発明のデバイスは、中空本体（１）の区画の少なくとも１つに任意の液体、緩衝液、または溶液をさらに含んでいてもよく、この場合、前記液体、溶液、または緩衝液は、少なくとも１つの障壁（５）によって漏れが防止され、これは液体、溶液、もしくは緩衝液が２つの障壁（５）の間にあるということか、または液体が１つの障壁（５）によって保持され、デバイスが少なくとも１つの閉鎖デバイス（６）を含むことを意味する。デバイスはさらに、いくつかの独立して選択された液体を、いくつかの区画に含有することができる。追加としてまたは代替として、デバイスは固体材料を含むことができ、「固体」は、材料が液体に溶解しないが、液体中に懸濁または分散し得ることを意味する。固体マトリックス材料は、好ましくは微粒子材料であり、より好ましくは、以下により詳細に定義されるようなサンプルをキレート化し、結合し、吸着し、吸収し、濾過し、サイズ排除し、またはクロマトグラフィー分離するための微粒子マトリックス材料、繊維ウェブ、またはフリースである。当然ながらデバイスは、区画の少なくとも１つに任意の液体を、また少なくとも１つのさらなる区画に固体材料を、好ましくは微粒子マトリックス材料を同様に含有することができる。
【００３６】
本発明のデバイスは、サンプル、特に液体含有サンプルを収集、貯蔵、または処理するために使用することができる。「液体サンプル」とは、サンプルそのものが液体、溶液、懸濁物、または分散物であること、あるいは任意のゲル状、固体、もしくは微粒子サンプル、または以下に記述される生物学的サンプルを、溶液、分散物、または懸濁物が得られるように任意の液体または溶液と組み合わせることを意味する。好ましくはデバイスは、任意の生体分子を含む少なくとも１つの液体サンプルを収集、貯蔵、または処理するために、例えば前記サンプルから少なくとも１つの生体分子を単離または精製するために、使用することができる。液体は、上記のようにデバイスに（必要に応じて増加する）外力をそれぞれ加えることにより、所望の時点で、デバイスの区画の少なくとも１つに（一時的に）保持することができ、かつ１つの区画から隣の区画に順次移動させることができ、または放出することができる。
【００３７】
液体または溶液は、水、任意の水性緩衝液、細胞培養培地、栄養分溶液、有機溶媒、もしくは任意の反応溶液、またはこれらの混合物のような、任意の水性または有機ベースの液体または溶液とすることができる。好ましくは、溶液は水性緩衝液であり、この緩衝液は特定の緩衝液に限定されるものではないが、好ましくは、細胞処理に一般に使用され特に生体分子単離方法中に使用される緩衝液の、いずれかであり、または溶液は、細胞培養培地もしくは栄養分溶液である。
【００３８】
さらに、本発明によるデバイスは、多相液体系または多相液体／固体系を分離するために使用することができる。
【００３９】
本発明による生体分子は、生物学的サンプル中に出現する任意の分子である。生物学的サンプルは、血液、血漿、血清、白血球画分またはバフィコートのような血液画分、尿、血清、液（ｌｉｑｕｏｒ）、痰、精液、唾液など、脳、皮膚、筋肉などの任意の器官の組織、；鱗屑；スワブ；大便；毛髪、爪、角、または枝角のようなケラチンサンプル；甲皮（ｃａｒａｐａｃｅ）または羽（特に昆虫の）；細胞懸濁物または細胞培養物、細胞断片または細胞小器官、例えば葉緑体またはミトコンドリア、小胞、核または染色体；細菌、真菌、もしくは酵母細胞または断片、任意のタイプのウイルス、ウイロイド、またはプリオンを含むサンプル；穿刺液または組織切片のような組織学的サンプル；組織培養物；植物；植物の部分、細胞、または組織；例えば水、塵埃、空気、または泥サンプルのような、環境から採取されたサンプル；食物サンプル；煙草フィルター、織物サンプル、歯ブラシのような法医学的サンプル；予備精製されまたは予備単離された生体分子などを含む任意の溶液などのようなものであるが、挙げた例に限定することのない、任意の体液もしくは組織またはヒトもしくは昆虫を含む動物とすることができる。
【００４０】
したがって生体分子は、ＤＮＡまたはＲＮＡのような任意の核酸であり、特に直鎖状、分岐状、または環状の、一本鎖または二本鎖核酸、より具体的にはｍＲＮＡ、ｓｉＲＮＡ、ｍｉＲＮＡ、ｓｎＲＡＮ、ｔＲＮＡ、ｈｎＲＮＡ、またはリボザイム、ゲノムＤＮＡ、プラスミドＤＮＡ、またはオルガネラＤＮＡ；任意のヌクレオチド、オリゴヌクレオチド、またはポリヌクレオチド、さらに合成の、改変された、もしくは標識されたオリゴもしくはポリヌクレオチド；ハイブリダイゼーション用の、ＰＣＲ−プライマー、短鎖ＤＮＡまたはＲＮＡ断片；ＰＮＡ（ペプチド核酸）；標識されていないまたは標識された抗体、受容体、ホルモン、成長因子、ならびに改変タンパク質、核酸、感染由来のタンパク質およびペプチドを含む、任意のタンパク質、ペプチド、またはアミノ酸；代謝産物、任意の脂質；糖（モノマー、オリゴマー、またはポリマー）；プロテオグルカン；任意の低分子量経路産物、シグナル分子、受容体、または酵素アクチベータもしくはインヒビター；剤、薬物、および薬物の代謝産物、対象とする薬物または任意のその他の生体分子である。
【００４１】
本発明は、少なくとも１つのタイプの生体分子を含むサンプルから、対象とする少なくとも１つの生体分子を単離または精製するための方法であって、
（ａ）少なくとも１つの非液体透過性障壁（５）によって分離された少なくとも２つの区画を含む、上記のようにデバイスの中空本体（１）の第１の区画の内部にサンプルを配置するステップであって、サンプルが液体サンプルであり、またはサンプルが、中空本体の内部にサンプルを配置する前もしくは後に任意の液体と接触する、または中空本体が、前記サンプルがデバイス内に配置された場合にサンプルと接触するようになる液体を含む、ステップと、
（ｂ）必要に応じて、中空本体（１）の第１の区画の内部のサンプルをインキュベートするステップと、
（ｃ）外力、好ましくは圧力、抗力、または推進力を障壁（５）に加え、その結果、第１の障壁（５）が液体透過性になり、液体が中空本体（１）のさらなる区画内に移送されるステップと、
（ｄ）必要に応じて、中空本体（１）のさらなる区画の内部のサンプルをインキュベートするステップと、
（ｅ）必要に応じて、後に続く障壁（５）に外力を加え、その結果、前記障壁（５）が液体透過性になり、液体が中空本体（１）のさらなる区画内に移送されるステップと、
（ｆ）対象とする生体分子を含む溶出液を収集するステップと
を含む方法をさらに含む。
【００４２】
ステップ（ｄ）および（ｅ）は、中空本体（１）の内部の障壁（５）の数によって適切な頻度で繰り返すことができる。区画のそれぞれには、生物学的サンプルの任意の処理中に適切に使用される任意の液体または任意の固体材料が、少なくとも部分的に充填されていてもよい。
【００４３】
１つの好ましい実施形態による前記方法では、デバイスの中空本体（１）は、その区画の少なくとも１つに、固体マトリックス材料もしくは少なくとも１種の液体またはその両方を、生体分子を含むサンプルが添加される前に含んでいてもよい。例えばデバイスは、サンプルのクロマトグラフィー分離用の微粒子樹脂、サンプル組成物の特異的なもしくは非特異的な結合、吸収、もしくは吸着のための結合、吸収、吸着、もしくはキレート化マトリックス、濾過材料、細胞の溶解もしくは細胞成分の結合のためのビーズ、または生体分子の単離もしくは精製のために一般に使用される任意のその他の構成要素を含む。１つの好ましい固体微粒子マトリックスは、イオン交換によって化合物を精製し、例えば金属イオン、特に遷移金属イオンをキレート化する、キレート化樹脂である。そのような一般に公知の樹脂は、ＤＮＡまたはＲＮＡの単離に適切に使用されるＣｈｅｌｅｘ  １００（Ｂｉｏｒａｄ）という名称で販売されたイミノ二酢酸基を含むスチレン−ジビニルベンゼン樹脂であり、核酸は前記樹脂に結合しない。さらに、例えばアガロース、Ｓｅｐｈａｃｒｙｌ樹脂、シリコーン；ラテックス；多糖、セルロースエーテルおよび誘導体、熱硬化性もしくは熱可塑性ポリマー、金属、またはビーズ、フィルム、箔、粒子などのようなさらなる固体マトリックスのような、任意の不活性材料を使用してもよい。前記材料は、その（１つまたは複数の）表面に、望ましくない汚染物質のいずれかに選択的に結合する官能基を含んでいてもよい。さらなる好ましいマトリックスは、イオン交換マトリックスまたは生物学的化合物に特異的な結合部位を含むマトリックスを含みまたはそのようなマトリックスからなる。マトリックスはさらに、例えばシリカ、多糖、または任意のその他の適切な材料の、織りのもしくは不織の繊維またはフリースを含んでいてもよい。
【００４４】
汚染物質を所望の生体分子から分離するのに適切なマトリックスは、さらに、ＨＩＣ粒子（疎水性相互作用クロマトグラフィー粒子、Ｄｉｏｎｅｘ  Ｃｏｒｐ．、ＵＳＡ）、陽イオンまたは陰イオン交換材料；アガロースのようなサイズ排除材料；ゲル濾過材料；例えばハイドロキシアパタイト、ベントナイト、ゼオライト（ｚｅｏｌｉｔｈｅ）、カオリナイト、珪藻岩、またはシリカのような処理された鉱物のような鉱物；ＩｎｈｉｂｉｔＥＸ（登録商標）（Ｑｉａｇｅｎ、Ｈｉｌｄｅｎ、ドイツ）、ＩＤＡ（イミノ二酢酸）、ＮＴＡ（ニトリロ酢酸）、および挙げた最後の２種のものの誘導体、ＩＤＡもしくはＮＴＡ基またはそれらの誘導体を有する樹脂またはその他の基材、ＥＤＴＡ、特異的な抗体、アンフィポール；チャコール、ＰＶＰ（ポリビニルピロリドン）；超吸収ポリマー；ＢＬＯＴＴＯ（Ｂｏｖｉｎｅ  Ｌａｃｔｏ  Ｔｒａｎｓｆｅｒ  Ｔｅｃｈｎｉｑｕｅ  Ｏｐｔｉｍｉｚｅｒ）と呼ばれる無脂肪乳カクテル（Ｓ．Ｈ．  Ｄｅ  Ｂｏｅｒ＊（１９９５年）Ｎｕｃｌｅｉｃ  Ａｃｉｄｓ  Ｒｅｓｅａｒｃｈ、１９９５年、２３巻、１３号  ２５６７〜２５６８頁）；多糖、例えばキトサン（ｃｈｉｔｏｓａｎｅ）、デンプン、グリコーゲン、セルロース、またはそれらの誘導体；特異的な抗体または酵素のようなタンパク質を含むことができまたはこれらからなることができるが、挙げた例に限定するものではない。本発明の方法では、デバイスは、さらなるプロセシングには望ましくない生物学的サンプルの化合物を吸着、吸収、キレート化、結合、または濾過するマトリックスを含むのに対し、対象とする（１つまたは複数の）生体分子は、本質的に吸着されず、吸収されず、結合もされないことが、特に好ましい。さらなるプロセシングに望ましくない化合物は、プロセスで単離されるべきではない生体分子であり、一方では下流プロセスを妨げるインヒビターである。
【００４５】
さらなる適切なマトリックスは、例えばシリカまたは多糖の織りのもしくは不織の繊維またはフリースを含む。好ましくは、固体マトリックスを含む区画は少なくとも１つの液体透過性エレメント（４）によって境界が定められ、デバイスの任意のさらなる（１つまたは複数の）区画内またはデバイスの出口（３）への液体移動とは無関係に、区画内に固体マトリックスが保持される。
【００４６】
追加としてまたは代替として、中空本体（１）の区画のいずれかでは、細胞溶解用の溶解緩衝液、組織溶解用の液体、有機溶媒、またはサンプルから生体分子を単離および／もしくは精製する間に一般に使用される任意のその他の液体もしくは溶液のような、任意の液体または溶液が含まれ得る。
【００４７】
ステップ（ａ）では、対象とする少なくとも１つの生体分子を含むサンプルは、本発明のデバイスの中空本体（１）の第１の区画内に配置される。前記サンプルは液体サンプルであり、またはサンプルは、細胞、組織、もしくは少ない液体を含有する上述の生物学的サンプルの任意のその他のもののような固体サンプルであり、サンプルを中空本体の内部に配置する前もしくは後に任意の液体と接触させ、または中空本体は、前記サンプルがデバイス内に配置された場合にサンプルと接触するようになる液体を含む。
【００４８】
方法は、少なくとも１つの任意選択のインキュベーションステップ（ｂ）を含み、サンプルに含まれる溶液または緩衝液の成分は、活性であるかまたは生物学的サンプルと反応することが可能になる。例えば、生物学的サンプルが細胞含有または組織含有サンプルであり、溶解緩衝液が前記サンプルに添加された場合、細胞または組織の溶解は、任意選択のインキュベーションステップ中で引き起こされる。一方、固体マトリックス材料が中空本体に含まれる場合、（１つまたは複数の）任意のインキュベーションステップ中、サンプル成分の任意の結合、キレート化、吸収、または吸着が起こり得る。
【００４９】
ステップ（ｃ）では、定められた第１の外力が第１の障壁（５）に加えられ、その結果、前記第１の障壁（５）が液体透過性になることが好ましい。さらなる障壁（５）が中空本体（１）に含まれる場合、ステップ（ｃ）で定められた外力が加えられる間、障壁（５）が液体透過性にならないことが特に好ましい。例えば、圧力をデバイスの入口（２）に加え、対象とする生体分子を中空本体（１）の次の区画内へと加圧してもよく；または遠心力をデバイスに加え、対象とする生体分子を含む液体の少なくとも一部を中空本体（１）の次の区画内へと移送し；または前記力の組合せをデバイスに加える。１つの障壁（５）のみが中空本体に含まれる場合、デバイスの出口（３）を真空にし、対象とする生体分子をデバイスの出口側に吸引することも、同様に可能である。
【００５０】
任意選択のステップ（ｄ）では、液体サンプルを、さらなる液体または固相と接触している別の区画内でさらにインキュベートしてもよい。例として、第１の区画は、例えば溶解緩衝液のような液体を含み、ステップ（ｂ）によるインキュベーションとステップ（ｃ）により外力を最初に加えた後に、サンプルは、さらなる区画内で、例えばＣｈｅｌｅｘ樹脂のような固相と接触する。ステップ（ｅ）によるインキュベーションステップ（ｄ）の後に、さらなる外力、例えば高い圧力または遠心力がデバイスに加えられ、前記さらなる外力は、ステップ（ｃ）で加えられた外力とは異なり、異なるタイプの力を加えてもよくまたは力の強度を変化させることが好ましい。追加の外力を加えることにより、次に存在する障壁を液体透過性にし、液体サンプル部分を中空本体（１）の次の区画に移送しまたはデバイスから溶出する。サンプルが次の区画内に移送される場合、任意選択のステップ（ｄ）および（ｅ）は独立して繰り返してもよく、好ましくは、後に続く障壁（５）のそれぞれは、その前の障壁（５）よりも外力に対してより抵抗性であり、したがって任意のさらなるステップでは、加えられる外力が増加し、または加えられる外部のタイプが変化する。
【００５１】
本発明の方法には、デバイスの中空本体（１）が２、３、４、５、または６つの障壁（５）を含んで中空本体（１）の３、４、５、６、または７つの区画が得られ、したがって、含まれる障壁（５）の全てを越え対象とする生体分子を含有する溶出液が後のステップ（ｆ）で得られるように、単離または精製プロセス中に必要な頻度でステップ（ｄ）および／または（ｅ）を繰り返すという実施形態が含まれる。
【００５２】
本発明の方法には、ステップ（ａ）から（ｅ）を含むプロセス中の任意の段階で、追加として任意のさらなるステップが実施されることも、同様に含まれる。例えば任意の段階で、例えば液体を入口（２）側から中空本体（１）内にピペット操作することにより、任意の追加の液体をデバイスの中空本体（１）に添加してもよい。さらに、任意の加熱または冷却ステップを、意図される結果を求めて適当な場合実施してもよい。追加としてまたは代替として、反転または振盪のような混合を行うためのステップが、意図される結果に有用であり得る。
【００５３】
最後のステップ（ｆ）では、最後の区画を通過する少なくとも１種の溶出液を収集する。ステップ（ｃ）とステップ（ｅ）の間の任意のさらなる任意選択のステップとは無関係に、対象とする生体分子は、本発明のデバイスに外力を少なくとも１回加えた後に、得ることができる。
【００５４】
使用される単離または精製手順、およびデバイスの中空本体（１）に含まれる１種または複数のマトリックスに応じて、対象とする生体分子は、液体透過性エレメント（４）を通過する最初の溶出液に含有されていてもよく、または対象とする生体分子は、任意のその後の溶出液に含有される。例えば、出口（３）の前の最後の区画にあるマトリックスが生体分子用の結合、吸収、または吸着マトリックスであり、任意の洗浄ステップが単離／精製手順に含まれる場合、対象の生体分子は、その後の溶出液中に含まれる。この場合、前記溶出液は、デバイスに何らかの外力を再び加えることによって得ることができ、または溶出液は、重力のみによって液体透過性エレメントを通過することが可能である。好ましくは、中空本体（１）に含まれる少なくとも１つのマトリックスは、対象とする生体分子を吸収、吸着、そして結合もしない。
【００５５】
本発明のデバイスは、少なくとも１つの障壁（５）を、少なくとも１つの開口端を有する中空本体（１）の内部に配置することによって調製することができ、少なくとも１つの障壁（５）は、前記開口端から間隔をあけて配置され、デバイスの中空本体（１）を少なくとも２つの区画に区画分けする。（１つまたは複数の）障壁（５）は、障壁（５）もしくは障壁（５）のそれぞれが中空本体（１）の内部側壁の全てと直接接触しかつ前記側壁と同一平面にあるように、中空本体（１）内に配置され、または（１種または複数の）障壁は、中空本体（１）の内部側壁の全てと接触しかつ前記側壁と同一平面にあるホルダー（７）内に配置される。（１つまたは複数の）障壁（５）と側壁との間またはホルダー（７）と側壁との間に残っている任意の隙間に、接着剤または封止材料を充填することができる。
【００５６】
好ましい実施形態では、（１つまたは複数の）障壁（５）に加え、少なくとも１つの液体透過性エレメント（４）を、中空本体（１）の内部に、少なくとも１つの障壁（５）に隣接させてまたはその／それらの障壁から間隔をあけて配置する。液体透過性エレメント（４）は、障壁（５）が内部に配置される前に、中空本体（１）の内部に配置することができ、または障壁（５）は、液体透過性エレメント（４）が本体（１）の内部に配置される前に、中空本体（１）の内部に配置される。デバイスの、１つの好ましい調製方法では、少なくとも１つの液体透過性エレメント（４）を少なくとも１つの障壁（５）材料と接触させ、その後、液体透過性エレメント（４）と障壁（５）とを組み合わせた「モジュール」が中空本体の内部に配置される。例えば、そのような「モジュール」は、１つの液体透過性エレメント（４）、好ましくはフリット、フリース、フィルター、もしくは膜と、１つの障壁（５）材料、好ましくはフィルム、箔、もしくはコーティング、膜または隔壁、疎水性焼結材料、疎水性繊維材料とを含むことができ、またはモジュールは、２つの液体透過性エレメント（４）を含むことができ、それら２つの間には少なくとも１つの障壁（５）材料が「サンドイッチ」構造のように含まれている。中空本体（１）は、そのようなモジュールの１つまたはいくつかと、必要に応じて追加として、少なくとも１つの個別の障壁（５）または液体透過性エレメント（４）とを含むことができる。中空本体の少なくとも１つの区画が固体マトリックスを含む場合、前記区画は、少なくとも１つの液体透過性エレメント（４）、または少なくとも１つの液体透過性エレメントおよび少なくとも１つの障壁（５）を含むモジュールによって境界が定められて、この区画には、液体部分が次の区画内にもしくは出口（３）に移送されるときに固体マトリックスが保持されることが、特に好ましい。
【００５７】
障壁（５）、および必要に応じて液体透過性エレメント（４）、または両方を含むモジュールは、それらが中空本体に正確に取り付けられ、前記中空本体の側壁全てと同一平面にあるように、またはそれらが、中空本体に正確に取り付けられ前記中空本体の側壁全てと同一平面にあるホルダー（７）内に配置されもしくは接続されるように、サイズが決められることが好ましい。残っている任意の隙間に、接着剤または封止材料を充填することができる。障壁（５）および任意選択の液体透過性エレメント（４）は、障壁（５）および／または任意選択の液体透過性エレメント（４）の下方で締付けリングまたはグリッドを使用することにより、所定の点で固定することができる。
【００５８】
ホルダー（７）を使用しない場合、中空本体は、（１つまたは複数の）液体透過性エレメント（４）もしくは（１つまたは複数の）障壁（５）のいずれかまたは両方に用いられる、少なくとも１つのフランジもしくは支持エレメントを含み、その上にエレメント（４）もしくは障壁（５）が位置することができ、または障壁（５）もしくはエレメント（４）が、中空本体（１）の内部を貫通する支持エレメント上に配置され、または障壁（５）および／もしくは液体透過性エレメント（４）が、例えばシリコン（ｓｉｌｉｃｏｎ）接着剤、架橋樹脂、ゴム、熱可塑性もしくは熱硬化性ポリマーのような適切な接着剤を介して側壁と接触していることが好ましい。あるいは、接着剤のタイプは、意図されるように使用される場合、本発明のデバイスに添加される成分の１種に対して反応性ではない限り、本発明を限定するものではない。さらなる実施形態では、中空本体（１）は円錐状であり、液体透過性エレメント（４）および／または障壁（５）は、中空本体（１）の内部の所定の場所にのみ取り付けられるようにサイズが決められ、エレメント（４）または障壁（５）を前記場所へと加圧することによってこの所定の場所に配置され、そこでそれらは張力により保たれる。実施形態のいずれかでは、液体透過性エレメント（４）および／または障壁（５）またはホルダー（７）の間に残っている任意の隙間を、適切な封止材料で封止することが有利と考えられる。適切な封止材料は、例えばシリコーンポリマー、熱可塑性または熱硬化性ポリマーまたは樹脂である。
【００５９】
必要に応じて、中空本体（１）には、この得ることが可能な効果が例えば液体透過性エレメント（４）によってまだ発揮されていない場合、障壁材料を穿刺し切断しまたは破裂させる（１種または複数の）構成要素または（１種または複数の）材料を追加として投入することができる。
【００６０】
所望の使用、例えば所望の生体分子の単離または精製方法によれば、中空本体（１）にはさらに、少なくとも部分的に、そのような単離または精製方法で適切に使用される任意の材料を充填することができる。好ましい方法では、任意のクロマトグラフィー材料、キレート化材料、結合材料、吸収材料、吸着材料、または濾過材料、例えばＣｈｅｌｅｘ樹脂、シリケート粒子もしくは繊維、イオン交換材料、または任意の類似のものを、中空本体に添加する。特に好ましい実施形態では、中空本体の少なくとも１つの区画は、対象とする生体分子に結合しないキレート化樹脂、例えば核酸単離用のＣｈｅｌｅｘ樹脂で、少なくとも部分的に充填される。
【００６１】
本発明はさらに、上記のようなデバイスを含む、生物学的サンプルを収集、貯蔵、または処理するための、または生物学的サンプルから生体分子を単離するためのキットを含む。
【図１】
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【図２】
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【国際調査報告】
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2013537621.tif 000005
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