(57)【要約】ヒトにおける角膜創傷治癒の促進のための５，６，７−トリヒドロキシヘプタン酸およびアナログの局所的眼用使用が開示される。一局面において、本発明の化合物は、角膜創傷または角膜混濁を処置するために使用され得る。特定の局面において、上記角膜創傷または混濁は、糖尿病；屈折矯正手術に起因する角膜フォトアブレーション；化学熱傷；真菌感染、ウイルス感染もしくは細菌感染の二次的炎症；コンタクトレンズ装着；外傷性損傷；または局所的薬物療法／保存薬、放射線（ＵＶ光を含む）、全身性自己免疫疾患、涙液膜異常（涙液欠損、脂質またはムチン欠損）に起因する欠損；神経栄養性欠損；または特発性欠損の結果である。
2013521230.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
処置を必要とするヒトにおける角膜創傷治癒を促進するか、または角膜混濁を処置する方法であって、該方法は、式Ｉの少なくとも１種の化合物：
【化１５】
2013521230.tif 000019
の治療上有効量を含む局所的眼用処方物で、罹患した個体を処置する工程を包含し、ここで：
Ｒ１は、ＣＯ２Ｒ、ＣＯＮＲ２Ｒ３、またはＣＨ２ＯＲ４であり：
Ｒは、Ｈ、Ｃ１−６直鎖もしくは分枝状のアルキル、Ｃ３−６シクロアルキル、またはフェニルであるか、
あるいはＲ１は、式ＣＯ２−Ｒ＋のカルボン酸塩であり、ここでＲ＋は、Ｌｉ＋、Ｎａ＋、Ｋ＋、または式＋ＮＲ８Ｒ９Ｒ１０Ｒ１１のアンモニウム部分であり；
Ｒ２、Ｒ３は、独立して、Ｈ、Ｃ１−６アルキル、Ｃ３−６シクロアルキル、ベンジル、フェニル、ＯＨ、ＯＣＨ３、またはＯＣ２Ｈ５であるが、ただし、多くてもＲ２、Ｒ３のうちの一方のみが、ＯＨ、ＯＣＨ３、またはＯＣ２Ｈ５であり；
Ｒ４は、Ｈ、Ｃ（Ｏ）Ｒ１２、Ｃ１−６アルキル、Ｃ３−６シクロアルキル、ベンジル、またはフェニルであり；
Ｒ５、Ｒ６、およびＲ７は、独立して、Ｈ、ＣＨ３、Ｃ２Ｈ５、Ｃ（Ｏ）Ｒ１２、またはＣＯ２Ｒ１３であるか；
あるいはＲ５とＲ６またはＲ６とＲ７は一緒になって、カルボニル基（Ｃ＝Ｏ）を構成し、従って、環式カーボネートを形成するか；
あるいはＯＲ５Ｒ１は一緒になって、以下に示されるように、環式エステル（ラクトン）を形成し：
【化１６】
2013521230.tif 000020
Ｒ８−Ｒ１１は、独立して、ＨまたはＣ１−６アルキルであり、各アルキル基は、必要に応じて、ＯＨまたはＯＣＨ３置換基を有し；
Ｒ１２は、Ｈ、Ｃ１−６アルキル、Ｃ３−６シクロアルキル、ベンジル、またはフェニルであり；
Ｒ１３は、Ｃ１−６アルキル、Ｃ３−６シクロアルキル、ベンジル、またはフェニルであり；
【化１７】
2013521230.tif 000021
は、ＯＲ６置換基がＲ絶対配置またはＳ絶対配置：
【化１８】
2013521230.tif 000022
を与えるように配置され得ることを示す、方法。
【請求項２】
前記処置は、式Ｉの化合物での処置を包含し、ここで：
Ｒ１は、ＣＯ２Ｒ、ＣＯＮＲ２Ｒ３、ＣＨ２ＯＲ４、または式ＣＯ２−Ｒ＋のカルボン酸塩であり；
Ｒ＋は、Ｌｉ＋、Ｎａ＋、Ｋ＋、またはＮＨ４＋であり；
Ｒは、Ｈ、Ｃ１−４アルキル、Ｃ３−６シクロアルキル、フェニル、またはベンジルであり；
Ｒ２およびＲ３のうちの一方は、Ｈであり、他方は、Ｈ、Ｃ１−５アルキル、Ｃ３−６シクロアルキル、ベンジル、フェニル、ＯＨ、ＯＣＨ３、またはＯＣ２Ｈ５であり；
Ｒ４は、Ｈ、ＣＯＣＨ３、またはＣＨ３であり；
ＯＲ６を有する炭素における絶対立体化学は、以下に示されるとおりであり
【化１９】
2013521230.tif 000023
Ｒ５、Ｒ６、Ｒ７は、独立して、Ｈ、ＣＨ３、またはＣＨ３ＣＯであるか；
あるいはＲ５とＲ６またはＲ６とＲ７は一緒になって、カルボニル基（Ｃ＝Ｏ）を構成し、従って、環式カーボネートを形成するか；
あるいはＯＲ５Ｒ１は一緒になって、以下に示されるような環式エステル（ラクトン）：
【化２０】
2013521230.tif 000024
を形成する、請求項１に記載の方法。
【請求項３】
前記式Ｉの化合物は、以下からなる群：
【化２１】
2013521230.tif 000025
より選択される、請求項２に記載の方法。
【請求項４】
前記角膜創傷または角膜混濁は、糖尿病；屈折矯正手術に起因する角膜フォトアブレーション；化学熱傷；真菌感染、ウイルス感染もしくは細菌感染の二次的炎症；コンタクトレンズ装着；外傷性損傷；局所的薬物療法／保存薬に起因する欠損；放射線（ＵＶ光を含む）に起因する欠損；全身性自己免疫疾患に起因する欠損；涙液膜異常に起因する欠損；神経栄養性欠損；または特発性欠損の結果である、請求項１に記載の方法。
【請求項５】
前記局所的眼用処方物は、界面活性剤；等張剤；緩衝剤；保存薬；共溶媒；および増粘剤からなる群より選択される１種以上の成分を含む、請求項１〜４のいずれかに記載の方法。
【請求項６】
前記式Ｉの化合物の治療上有効な量は、０．０１〜３％の間である、請求項５に記載の方法。
【請求項７】
前記式Ｉの化合物の治療上有効な量は、０．１〜１％の間である、請求項６に記載の方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本出願は、２０１０年２月２５日に出願された米国仮特許出願第６１／３０７，９４７号の利益を主張し、この出願の開示は本明細書において参照として具体的に援用される。
【０００２】
（発明の分野）
本発明は、角膜創傷治癒の促進のための化合物および方法に関する。特定の実施形態において、本発明は、角膜創傷または角膜混濁を処置するための、５，６，７−トリヒドロキシヘプタン酸およびそのアナログの使用に関する。
【背景技術】
【０００３】
（背景）
角膜創傷は、眼に対する外傷から頻繁に生じる（例えば、自動車事故、労働災害、および武器によって引き起こされた創傷において起こり得る）。眼に対する創傷はまた、手術の不可避的結果（例えば、白内障手術、全層角膜移植、緑内障濾過手術、および屈折矯正手術（例えば、レーザー角膜剥離または放射状角膜切開術）として起こる。治癒しない角膜潰瘍はまた、非外傷性の病的原因（例えば、糖尿病または全身性自己免疫疾患（例えば、シェーグレン症候群））から生じ得る。これら創傷の治癒は、頻繁に、外傷または手術の術後経過からのゆっくりかつ困難な、悪化した回復であり得る。
【０００４】
現在の処置は、局所的または全身性の抗炎症性／免疫調節性薬物、保護コンタクトレンズ、および自家血清の使用を包含する（非特許文献１）。角膜潰瘍化／欠損／遅延した角膜創傷治癒を処置するために頻繁に使用される薬物処置、外科的介入、および物理的方法は、それほど有効ではなく、実質的に副作用を有するかまたは極めて不便である。例えば、炎症誘導性潰瘍化を処置するためのステロイドの使用は、増大したＩＯＰ、水晶体混濁化（ｌｅｎｓ  ｏｐａｃｉｆｉｃａｔｉｏｎ）副作用および上皮細胞移動（創傷閉鎖）の低下によって悪化させられ得る。強力な抗有糸分裂剤であるマイトマイシンＣでの、屈折矯正手術後に時折観察される角膜混濁の処置は、表層基質ケラトサイト（ａｎｔｅｒｉｏｒ  ｓｔｒｏｍａｌ  ｋｅｒａｔｏｃｙｔｅ）密度を減少させ得、おそらく、上記角膜の長期間の健康状態に欠陥を生じさせる。本発明の化合物は、これら現在使用される処置よりも少ない副作用および／または増大した効力という利点を有し得る。
【０００５】
従って、眼の創傷治癒、特に、角膜創傷の創傷治癒を促進する容易に適用可能な方法が必要である。
【先行技術文献】
【非特許文献】
【０００６】
【非特許文献１】Ｔｕｌｉ，Ｓ．Ｓ．；Ｓｃｈｕｌｔｚ，Ｇ．Ｓ．；Ｄｏｗｎｅｒ，Ｄ．Ｍ．  「Ｓｃｉｅｎｃｅ  ａｎｄ  ｓｔｒａｔｅｇｙ  ｆｏｒ  ｐｒｅｖｅｎｔｉｎｇ  ａｎｄ  ｍａｎａｇｉｎｇ  ｃｏｒｎｅａｌ  ｕｌｃｅｒａｔｉｏｎ」  Ｏｃｕｌ．Ｓｕｒｆ．２００７，５（１），２３−３９
【発明の概要】
【課題を解決するための手段】
【０００７】
（発明の要旨）
本発明は、角膜創傷治癒の促進のための組成物および方法を提供する。本発明の一実施形態によれば、５，６，７−トリヒドロキシヘプタン酸またはそのアナログは、局所的な眼への送達を介して、このような処置の必要な患者に投与される。
【０００８】
一局面において、本発明の化合物は、角膜創傷または角膜混濁を処置するために使用され得る。特定の局面において、上記角膜創傷または混濁は、糖尿病；屈折矯正手術に起因する角膜フォトアブレーション；化学熱傷；真菌感染、ウイルス感染もしくは細菌感染の二次的炎症；コンタクトレンズ装着；外傷性損傷；または局所的薬物療法／保存薬、放射線（ＵＶ光を含む）、全身性自己免疫疾患、涙液膜異常（涙液欠損、脂質またはムチン欠損）に起因する欠損；神経栄養性欠損；または特発性欠損の結果である。
【０００９】
本発明の具体的な好ましい実施形態は、特定の好ましい実施形態および特許請求の範囲の以下のより詳細な説明から明らかになる。
【図面の簡単な説明】
【００１０】
【図１】図１である。
【図２】図２である。
【図３】図３である。
【図４】図４である。
【発明を実施するための形態】
【００１１】
（発明の詳細な説明）
別段示されなければ、すべての成分量は、％（ｗ／ｖ）ベースで示される。
【００１２】
本発明の方法および組成物は、眼用に受容可能なキャリアおよび式Ｉの少なくとも１種の化合物：
【００１３】
【化１】
2013521230.tif 000003
【００１４】
を包含し、ここで：
Ｒ１は、ＣＯ２Ｒ、ＣＯＮＲ２Ｒ３、またはＣＨ２ＯＲ４であり；
Ｒは、Ｈ、Ｃ１−６直鎖もしくは分枝状のアルキル、Ｃ３−６シクロアルキル、またはフェニルであるか、あるいはＲ１は、式ＣＯ２−Ｒ＋のカルボン酸塩であり、ここでＲ＋は、Ｌｉ＋、Ｎａ＋、Ｋ＋、または式＋ＮＲ８Ｒ９Ｒ１０Ｒ１１のアンモニウム部分であり；
Ｒ２、Ｒ３は、独立して、Ｈ、Ｃ１−６アルキル、Ｃ３−６シクロアルキル、ベンジル、フェニル、ＯＨ、ＯＣＨ３、またはＯＣ２Ｈ５であるが、ただし、多くてもＲ２、Ｒ３のうちの一方のみが、ＯＨ、ＯＣＨ３、またはＯＣ２Ｈ５であり；
Ｒ４は、Ｈ、Ｃ（Ｏ）Ｒ１２、Ｃ１−６アルキル、Ｃ３−６シクロアルキル、ベンジル、またはフェニルであり；
Ｒ５、Ｒ６、およびＲ７は、独立して、Ｈ、ＣＨ３、Ｃ２Ｈ５、Ｃ（Ｏ）Ｒ１２、またはＣＯ２Ｒ１３であるか；
あるいはＲ５とＲ６またはＲ６とＲ７は一緒になって、カルボニル基（Ｃ＝Ｏ）を構成し、従って、環式カーボネートを形成するか；
あるいはＯＲ５Ｒ１は一緒になって、以下に示されるように、環式エステル（ラクトン）を形成し：
【００１５】
【化２】
2013521230.tif 000004
【００１６】
Ｒ８−Ｒ１１は、独立して、ＨまたはＣ１−６アルキルであり、各アルキル基は、必要に応じて、ＯＨまたはＯＣＨ３置換基を有し；
Ｒ１２は、Ｈ、Ｃ１−６アルキル、Ｃ３−６シクロアルキル、ベンジル、またはフェニルであり；
Ｒ１３は、Ｃ１−６アルキル、Ｃ３−６シクロアルキル、ベンジル、またはフェニルであり；
【００１７】
【化３】
2013521230.tif 000005
【００１８】
は、ＯＲ６置換基がＲ絶対配置またはＳ絶対配置：
【００１９】
【化４】
2013521230.tif 000006
を与えるように配置され得ることを示す。
【００２０】
本発明の方法および眼用組成物における使用に好ましいのは、式Ｉの化合物であり：ここで
Ｒ１は、ＣＯ２Ｒ、ＣＯＮＲ２Ｒ３、ＣＨ２ＯＲ４、または式ＣＯ２−Ｒ＋のカルボン酸塩であり；
Ｒ＋は、Ｌｉ＋、Ｎａ＋、Ｋ＋、またはＮＨ４＋であり；
Ｒは、Ｈ、Ｃ１−４アルキル、Ｃ３−６シクロアルキル、フェニル、またはベンジルであり；
Ｒ２およびＲ３のうちの一方は、Ｈであり、他方は、Ｈ、Ｃ１−５アルキル、Ｃ３−６シクロアルキル、ベンジル、フェニル、ＯＨ、ＯＣＨ３、またはＯＣ２Ｈ５であり；
Ｒ４は、Ｈ、ＣＯＣＨ３、またはＣＨ３であり；
上記ＯＲ６を有する炭素における絶対立体化学は、以下に示されるとおりであり：
【００２１】
【化５】
2013521230.tif 000007
【００２２】
Ｒ５、Ｒ６、Ｒ７は、独立して、Ｈ、ＣＨ３、またはＣＨ３ＣＯであるか；
あるいはＲ５とＲ６またはＲ６とＲ７は一緒になって、カルボニル基（Ｃ＝Ｏ）を構成し、従って、環式カーボネートを形成するか；
あるいはＯＲ５Ｒ１は一緒になって、以下に示されるような環式エステル（ラクトン）：
【００２３】
【化６】
2013521230.tif 000008
【００２４】
を形成する。
【００２５】
本発明の方法および眼用組成物における使用に特に好ましい化合物は、化合物１〜７である。化合物１は、例えば、Ｃａｙｍａｎ  Ｃｈｅｍｉｃａｌ  Ｃｏｍｐａｎｙ（Ａｎｎ  Ａｒｂｏｒ，ＭＩ）およびＥｎｚｏ  Ｌｉｆｅ  Ｓｃｉｅｎｃｅｓ（Ｐｌｙｍｏｕｔｈ  Ｍｅｅｔｉｎｇ，ＰＡ）から市販されている。化合物２〜７は、以下の実施例１〜６に記載されるように調製され得る。
【００２６】
【化７】
2013521230.tif 000009
【００２７】
本発明の化合物は、角膜創傷または角膜混濁を処置するために使用され得る。上記角膜創傷または角膜混濁としては、以下が挙げられるが、これらに限定されない：糖尿病；屈折矯正手術に起因する角膜フォトアブレーション；化学熱傷；真菌感染、ウイルス感染もしくは細菌感染の二次的炎症；コンタクトレンズ装着；外傷性損傷；または局所的薬物療法／保存薬、放射線（ＵＶ光を含む）、全身性自己免疫疾患、涙液膜異常（涙液欠損、脂質またはムチン欠損）に起因する欠損；神経栄養性欠損；または特発性欠損から生じる角膜創傷または混濁。
【００２８】
特定の実施形態において、式Ｉの化合物は、局所的な眼への投与のための眼用に受容可能なキャリア中で投与される。上記組成物は、当該分野で公知の方法に従って処方される。上記組成物は、１種より多くの式Ｉの化合物を含み得る。さらに、上記組成物は、式Ｉの化合物以外の第２の薬物を含み得る。
【００２９】
本発明の組成物は、式Ｉの化合物の眼用に有効な量を含む。本明細書で使用される場合、「眼用に有効な量」とは、角膜創傷治癒を促進するのに十分な量を意味する。一般に、本発明の組成物は、０．０１％〜３％の式Ｉの化合物を含む。好ましくは、本発明の組成物は、０．１％〜１％の式Ｉの化合物を含む。
【００３０】
本発明に従って投与される上記組成物はまた、種々の他の成分（界面活性剤、等張剤、緩衝剤、保存薬、共溶媒および増粘剤（ｖｉｓｃｏｓｉｔｙ  ｂｕｉｌｄｉｎｇ  ａｇｅｎｔ）が挙げられるが、これらに限定されない）を含み得る。
【００３１】
種々の等張剤が、上記組成物の張度を調節するために、好ましくは、眼用組成物のために天然の涙液の張度を調節するために、使用され得る。例えば、塩化ナトリウム、塩化カリウム、塩化マグネシウム、塩化カルシウム、デキストロースおよび／またはマンニトールは、生理学的張度に近づけるために上記組成物に添加され得る。等張剤のこのような量は、添加される特定の剤に依存して変動する。しかし、一般に、上記組成物は、最終組成物が眼用に受容可能な浸透圧重量モル濃度（一般に、約１５０〜４５０ｍＯｓｍ、好ましくは、２５０〜３５０ｍＯｓｍ）を有するようになるのに十分な量の等張剤を有する。
【００３２】
適切な緩衝系（例えば、リン酸ナトリウム、酢酸ナトリウム、クエン酸ナトリウム、ホウ酸ナトリウムまたはホウ酸）は、貯蔵条件下でのｐＨ変動を妨げるように、上記組成物に添加され得る。特定の濃度は、使用される剤に依存して変動する。しかし、好ましくは、上記緩衝剤は、ｐＨ５．５〜８の範囲内の標的ｐＨを維持するように選択される。
【００３３】
潤滑するか、「濡ら」すか、内因性の涙液の粘稠度に近づけるか、天然の涙液増大を補助するか、または別の方法で眼への投与の際のドライアイ症状および状態の一時的な軽減を提供するように設計される他の化合物は、当該分野で公知であり、本発明の組成物中に含まれ得る。このような化合物は、上記組成物の粘度を増強し得、これらとしては、以下が挙げられるが、これらに限定されない：モノマーポリオール（例えば、グリセロール、プロピレングリコール、エチレングリコール）；ポリマーポリオール（例えば、ポリエチレングリコール、ヒドロキシプロピルメチルセルロース（「ＨＰＭＣ」）、カルボキシメチルセルロースナトリウム、ヒドロキシプロピルセルロース（「ＨＰＣ」）、デキストラン（例えば、デキストラン７０））；水溶性タンパク質（例えば、ゼラチン）；およびビニルポリマー（例えば、ポリビニルアルコール、ポリビニルピロリドン、ポピドン）およびカルボマー（例えば、カルボマー９３４Ｐ、カルボマー９４１、カルボマー９４０、カルボマー９７４Ｐ）。
【００３４】
局所的眼病用生成物は、代表的には、複数用量形態でパッケージされる。保存薬は、代表的には、使用の間の微生物汚染を防ぐために必要とされる。適切な保存薬としては、以下が挙げられる：塩化ベンザルコニウム、クロロブタノール、ベンゾドデシニウムブロミド、メチルパラベン、プロピルパラベン、フェニルエチルアルコール、エデト酸二ナトリウム、ソルビン酸、ポリクオタニウム−１、または当業者に公知の他の剤。このような保存薬は、代表的には、０．００１〜１．０％  ｗ／ｖのレベルで使用される。本発明の単位用量組成物は、滅菌されているが、代表的には、保存薬を含まず、保存処理がされていない（ｕｎｐｒｅｓｅｒｖｅｄ）。
【００３５】
本発明の方法における使用のための代表的な点眼処方物は、以下に提供される。
【００３６】
【表１】
2013521230.tif 000010
本明細書で引用される参考文献は、これらが本明細書に示されるものを捕捉する例示的手順または他の詳細を提供する程度まで、具体的に参考として援用される。
【実施例】
【００３７】
以下の実施例は、本発明の好ましい実施形態を示すために含められる。以下に示す実施例において開示される技術は、本発明者らが本発明の実施において十分に機能することを発見した技術を代表し、よって、その実施のための好ましい態様を構成すると考えられ得ることは、当業者によって認識されるべきである。しかし、当業者は、本開示に鑑みて、多くの変更が、開示される具体的実施形態において行われ得、それでもなお、本発明の趣旨および範囲から逸脱することなく同様のまたは類似の結果が得られることを認識するはずである。
【００３８】
（実施例１：化合物２の合成）
２Ｍのメタノール中アンモニア（ｍｅｔｈａｎｏｌｉｃ  ａｍｍｏｎｉａ）中の化合物１の溶液を、マイクロ波反応器を使用して、密封チューブの中で、８５℃へと１時間にわたって加熱する。室温へと冷却した後、上記溶液をエバポレートし、その残渣を、シリカゲルクロマトグラフィーを使用して精製して、アミド２を得る。
【００３９】
【化８】
2013521230.tif 000011
【００４０】
（実施例２：化合物３の合成）
３３％のエタノール中メチルアミン中の化合物１の溶液を、マイクロ波反応器を使用して、密封チューブの中で、８５℃へと１時間にわたって加熱する。室温へと冷却した後、上記溶液をエバポレートし、その残渣を、シリカゲルクロマトグラフィーを使用して精製して、Ｎ−メチルアミド３を得る。
【００４１】
【化９】
2013521230.tif 000012
【００４２】
（実施例３：化合物４の合成）
【００４３】
【化１０】
2013521230.tif 000013
【００４４】
１Ｍ  ＬｉＯＨ（０．５ｍＬ，０．５ｍｍｏｌ）を含むＭｅＯＨ（２．１ｍＬ）中のメチルエステル化合物１（２０ｍｇ，０．１０４ｍｍｏｌ）の溶液を、１２０℃において６分間にわたってマイクロ波ヒーターで加熱した。上記反応系を濃縮し、その残渣を、７：３(ｖ：ｖ)  ０．０５Ｍ  ＨＣｌ：アセトニトリルで溶出する、１０ｍｍ直径×１８ｃｍ高さのＣ１８逆相シリカゲルカラムでクロマトグラフィーにかけて、濃縮後に粗製の白色固体を得た（４０．９ｍｇ）。上記固体を、熱ＣＨ３ＣＮ（２×２ｍＬ）ですすぎ、その濾液を濃縮して、ラクトン４を得た（７．８ｍｇ，４７％）。13C  NMR  (150  MHz,  dmso-d6)  δ  171.12  (C),  79.86  (CH),  72.44  (CH),  62.03  (CH2),  29.39  (CH2),  21.67  (CH2),  17.55  (CH2).
（実施例４：化合物５の合成）
【００４５】
【化１１】
2013521230.tif 000014
【００４６】
水性ＭｅＯＨ中の、メチルエステル化合物１の溶液を、３当量の水酸化リチウムの存在下で加熱して還流した。６時間後、上記反応系を室温へと冷却し、上記溶液のｐＨを、７０−９  メッシュスルホン酸樹脂ＭＰ（Ｎｏｖａｂｉｏｃｈｅｍ／ＥＭＤ  Ｂｉｏｓｃｉｅｎｃｅｓ（１０３９４  Ｐａｃｉｆｉｃ  Ｃｅｎｔｅｒ  Ｃｏｕｒｔ，Ｓａｎ  Ｄｉｅｇｏ，ＣＡ  ９２１２１）から市販される）を添加することによって、６へと調節する。上記溶液を、０．２μＭ  ポリ−テトラフルオロエチレン（ｔｅｒｆｌｕｏｒｏｅｔｈｙｌｅｎｅ）シリンジフィルタを通して濾過し、濃縮して、白色固体としてカルボン酸リチウム５を得た。1H  NMR  (D2O,  400  MHz)  δ  3.69-3.64  (m,  1H),  3.55-3.47  (m,  3H),  2.16-2.12  (m,  2H),  1.67-1.64  (m,  1H),  1.54-1.48  (m,  2H),  1.38-1.34  (m,  1H).    13C  NMR  (D2O,  100  MHz)  δ  183.46  (C),  74.61  (CH),  71.67  (CH),  62.49  (CH2),  37.26  (CH2),  31.55  (CH2),  22.04  (CH2).
（実施例５：化合物６の合成）
【００４７】
【化１２】
2013521230.tif 000015
ｐ−トルエンスルホン酸一水和物を、２−デオキシ−Ｄ−リボース、ドライエライト（ｄｒｉｅｒｉｔｅ）、および２−メトキシ−２−プロペンのＤＭＦ溶液に添加して、固体Ｎａ２ＣＯ３でクエンチしてクロマトグラフィーによる精製後、ラクトール８を得る。８と、触媒性安息香酸の存在下、ＴＨＦ中での、８とＰｈ３Ｐ＝ＣＨＣＯ２Ｅｔとのウィッティッヒ反応から、エノエート（ｅｎｏａｔｅ）９が得られ、これを、エタノール中触媒性Ｐｄ／Ｃの存在下、水素雰囲気下で１０へと還元する。５分間にわたるエタノール中の０．１Ｎ  ＨＣｌを使用する１０の脱保護、続いて、ＮａＨＣＯ３水溶液でのクエンチにより、シリカゲルクロマトグラフィー精製の後に６を得る。
【００４８】
（実施例６：化合物７の合成）
【００４９】
【化１３】
2013521230.tif 000016
触媒性安息香酸の存在下、ＴＨＦ中での、ラクトール８（実施例５を参照のこと）とＰｈ３Ｐ＝ＣＨＣＯ２−ｉ−Ｃ３Ｈ７とのウィッティッヒ反応から、エノエート１１が得られ、これを、イソプロパノール中触媒性Ｐｄ／Ｃの存在下、水素雰囲気下で１２へと還元する。５分間にわたるイソプロパノール中の０．１Ｎ  ＨＣｌを使用する１２の脱保護、続いて、ＮａＨＣＯ３水溶液でのクエンチから、シリカゲルクロマトグラフィー精製の後に７を得る。
【００５０】
（実施例７：角膜損傷のラットモデルにおける化合物１および化合物５の効力）
（方法）
（角膜上皮創傷生成）
雌性Ｌｅｗｉｓラット（１７５〜２００ｇ）を、キシラジン／ケタミンカクテル（それぞれ、５ｍｇ／ｋｇおよび５０ｍｇ／ｋｇ）で麻酔した。３ｍｍトレフィンを使用して、角膜中心の表面に、３ｍｍ直径の円形の境界線を画定した。１ｍｍ鋼鉄製バー（ｓｔｅｅｌ  ｂｕｒｒ）を先端に備えた角膜さびリングリムーバー（ｃｏｒｎｅａｌ  ｒｕｓｔ  ｒｉｎｇ  ｒｅｍｏｖｅｒ）（ＡｌｇｅｒｂｒｕｓｈＩＩ  Ａｌｇｅｒ  Ｃｏ．）を使用して、上記確立した３ｍｍ境界線内で基底膜まで角膜上皮を除去した。上皮除去の直後に、２％  フルオレセインナトリウム（Ａｌｃｏｎ）で角膜を局所的に染色し、平衡食塩水（ＢＳＳ）で洗浄し、時間０時間の画像を獲得した。２４時間後に、動物を再び麻酔し、時間２４時間の画像を獲得した。
【００５１】
（薬物処置）
時間０の画像を獲得した直後に、試験物品（５μｌ）を眼の表面に局所投与した。２４時間の研究時間の最初の８時間の間、２時間ごとに動物は局所投与を受けた。ヒアルロン酸（ＨＡ）の０．４％溶液を、リン酸緩衝化食塩水（ＰＢＳ）中に調製した。化合物１および化合物５をＰＢＳ中に調製し、使用するまで−７０℃で貯蔵した。投与の間には、化合物を４℃で貯蔵した。
【００５２】
（角膜フルオレセイン染色／画像分析）
麻酔したラット（時間０：キシラジン／ケタミン；時間２４時間：５％  イソフルランガス）。上皮細胞がない角膜の領域を、２％  フルオレセインナトリウム溶液（Ａｌｃｏｎ）の局所付与によって染色し、１０秒後に、ＢＳＳで徹底的にすすいだ。染色した眼の画像を、画像視野のほぼ全体が角膜で埋まるように、マクロ撮影用クローズアップレンズ（ｍａｃｒｏ  ａｎｄ  ｃｌｏｓｅ−ｕｐ  ｌｅｎｓ）を備えたＣａｎｏｎデジタルカメラで集めた。Ｎｏｖｏｆｌｅｘ  Ｃｏｌｄ  Ｌｉｇｈｔ  Ｓｏｕｒｃｅ  Ｍａｃｒｏｌｉｇｈｔ  Ｐｌｕｓ  ｉｌｌｕｍｉｎａｔｏｒで、連続のフラッシュ照射を提供した。上記連続源を使用して、上記Ｃａｎｏｎカメラのビデオ出力の助けを借りて、眼に焦点を合わせた。フラッシュランプ照射器およびカメラレンズシステムに取り付けられたリングライトは、角膜表面の同期化されかつ均一な照射を提供した。眼を照射し、フルオレセイン励起（４８２±３５ｎｍ）および発光（５３６±４０ｎｍ）のために設計した一連のフィルタを通して画像を取り込んだ。
【００５３】
２個の画像ファイルを、各露出について記録した（画像ディスプレイのために使用されるＪＰＧフォーマットＲＧＢ（赤−緑−青）ファイルおよび生のセンサデータを含むＣａｎｏｎ生ファイル）。上記生データを、１６ビットポータブルグレーマップファイルへと抽出し、これをその後、モザイク除去機能（ｄｅｍｏｓａｉｃ  ｆｕｎｃｔｉｏｎ）で加工処理して、フルオレセイン情報を含む緑色画素のみの画像を作製した。円形関心領域（ＲＯＩ）を、角膜の中心に合わせ、ＲａｔＯＳＩＷｏｕｎｄ  ｖ  ２．０ソフトウェア（Ａｌｃｏｎ）を使用して、自動分析を行った。自動分析は、上皮創傷を示す単一の大きなスポットのフルオレセイン総陽性領域を計算した。２４時間での％閉鎖（図１および図３におけるグラフの縦座標軸に「％閉鎖  ２４時間」として示される）は、以下のように計算し、また決定した：
【００５４】
【数１】
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完全に治癒した（すなわち、検出可能な欠損なし；図２および図４のグラフの縦座標軸に「治癒  ２４時間  ｎ＝１０」として示される）眼の数を、数／１０の眼として正規化した。
【００５５】
データを、９５  ％  信頼区間において、ＡＮＯＶＡとＤｕｎｎｅｔｔ事後検定を使用して分析した。
【００５６】
（結果）
化合物１および化合物５を、０．１％〜３％  ｗ／ｖ  濃度範囲に対していくつかの用量で評価した。
【００５７】
【化１４】
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【００５８】
特に、化合物１の０．５％用量および１％用量、ならびに化合物５の１％用量は、％創傷閉鎖および完全に治癒した眼の正規化した数に関しては陽性コントロール０．４％  ＨＡと同程度に有効であった。これらデータを図１〜４にまとめる。
【００５９】
本発明およびその実施形態は、詳細に記載されてきた。しかし、本発明の範囲は、本明細書に記載される任意のプロセス、製造、組成物、化合物、手段、方法、および／または工程の特定の実施形態に限定されるとは意図されない。種々の改変、置換、および変更は、本発明の趣旨および／または本質的特徴から逸脱することなく、開示された材料に対して行われ得る。よって、当業者は、本明細書に記載される実施形態と実質的に同じ機能を発揮するかまたは実質的に同じ結果を達成する後の改変、置換、および／または変更が、本発明のこのような関連する実施形態に従って利用され得ることを、本開示から容易に認識する。従って、以下の特許請求の範囲は、本明細書に開示されるプロセス、製造、組成物、化合物、手段、方法および／または工程に対するそれらの範囲内にの改変、置換、および変更を包含することが意図される。
【図１】
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【図２】
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【図３】
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【図４】
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【国際調査報告】
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