(57)【要約】  本発明は、新規な置換1-[3-(ヘテロサイクリル)ベンジル]-1H-ピラゾール誘導体、それらの製造方法、疾患の処置および/または予防のための使用、および疾患、より具体的には、過増殖性および血管新生疾患処置および/または予防および低酸素状態への代謝的適応に起因する疾患の処置および/または予防のための医薬の製造のためのそれらの使用に関する。そのような処置剤は、単独療法剤としてまたは他の医薬と、または他の治療手段と組み合わせて投与される。【特許請求の範囲】
【請求項１】
式(I)
【化１】
2013526497.tif 000095
｛式中、
mは、1または2を表し、
nは、1、2または3を表し、
R1は、ヒドロキシルまたはシアノを表し、
および
R2は、トリフルオロメトキシ、トリフルオロメチルスルファニル、トリフルオロメチルスルホニル、ペンタフルオロスルファニルまたは式
【化２】
2013526497.tif 000096
（式中、*は、フェニル環との結合点を表し、
R3AおよびR3B は独立してフッ素またはメチルを表すか
または
互いに一体となってそれらが結合する炭素原子と一緒に、シクロプロパン-1,1-ジイル、シクロブタン-1,1-ジイル、シクロペンタン-1,1-ジイル、シクロヘキサン-1,1-ジイル、オキセタン-3,3-ジイルまたはテトラヒドロ-2H-ピラン-4,4-ジイル環を形成し、
R4は、水素、フッ素、メチル、トリフルオロメチルまたはメトキシを表す。｝の基を表す。｝
の基を表す。）
の化合物およびそれらの塩類、溶媒和物および塩類の溶媒和物。
【請求項２】
請求項1に記載の式(I)
【化３】
2013526497.tif 000097
｛式中、
mおよびnは、独立して1または2を表し、
R1は、ヒドロキシルまたはシアノを表し、
および
R2は、トリフルオロメチル、トリフルオロメトキシ、トリフルオロメチルスルファニルまたは式
【化４】
2013526497.tif 000098
（式中、
*は、フェニル環との結合点を表し、
R3AおよびR3B はいずれもメチルまたは互いに一体となってそれらが結合する炭素原子と一緒に、シクロプロパン-1,1-ジイル、シクロブタン-1,1-ジイル、オキセタン-3,3-ジイルまたはテトラヒドロ-2H-ピラン-4,4-ジイル環を形成し、
および
R4は、水素、フッ素、メチルまたはトリフルオロメチルを表す。）
の基を表す。｝
の化合物およびそれらの塩類、溶媒和物および塩類の溶媒和物。
【請求項３】
請求項1または2に記載の式(I)
｛式中、
mおよびnはいずれも1または2を表し、
R1は、ヒドロキシルまたはシアノを表し、
および
R2は、トリフルオロメトキシまたは式
（式中
【化５】
2013526497.tif 000099
*は、フェニル環との結合点を表す。）
の基を表す。｝
の化合物およびそれらの塩類、溶媒和物および塩類の溶媒和物。
【請求項４】
請求項1、2または3に記載の式(I)
（式中、
R1は、ヒドロキシルを表し、
および
m、nおよびR2 はそれぞれ請求項1、2または3に記載した意味を有する。）
の化合物およびそれらの塩類、溶媒和物および塩類の溶媒和物。
【請求項５】
式(I-PD)
【化６】
2013526497.tif 000100
｛式中、m、nおよびR2 はそれぞれ請求項1ないし4のいずれかに記載した意味を有し、
および
RPDは、式
【化７】
2013526497.tif 000101
（式中
#は、酸素原子との結合部位を表し、
R5は、水素または(C1-C4)-アルキルを表し、
および
R6AおよびR6B はそれぞれ独立して水素またはメチルを表す。）
のプロドラッグ基を表す。｝
の化合物およびそれらの塩類、溶媒和物および塩類の溶媒和物。
【請求項６】
請求項5に記載の式(I-PD)
｛式中、RPDは、式
【化８】
2013526497.tif 000102
（式中、
#は、酸素原子との結合部位を表す。）
のプロドラッグ基を表す。｝
の化合物およびそれらの塩類、溶媒和物および塩類の溶媒和物。
【請求項７】
式(II)
【化９】
2013526497.tif 000103
（式中、R2 は請求項1ないし4のいずれかに記載した意味を有し、
および
Xは、臭素またはヨウ素を表す。）
の化合物を、適切なパラジウム触媒および塩基の存在下、式(III)
【化１０】
2013526497.tif 000104
（式中、
m、nおよびR1 はそれぞれ請求項1ないし4のいずれかに記載した意味を有する。）
の化合物とカップリングさせ、
および生成した式(I)の化合物を、場合によりそれらのエナンチオマーおよび/またはジアステレオマーに分離し、および/または適切な(i)溶媒および/または(ii)酸を用いて、溶媒和物、塩および/またはそれらの塩の溶媒和物に変換することにより特徴付けられる請求項1ないし4のいずれかに定義される式(I)の化合物の製造方法。
【請求項８】
式(I-A)
【化１１】
2013526497.tif 000105
（式中、m、nおよびR2 はそれぞれ請求項1ないし4に記載した意味を有する。）
の化合物を、式(VIII)
【化１２】
2013526497.tif 000106
の化合物またはRPD が請求項5または6に定義される、この化合物の活性化形態を用いて慣用される方法によりエステル化し、
生成した式(I-PD)の化合物を、場合によりそれらのエナンチオマーおよび/またはジアステレオマーに分離し、および/または適切な(i)溶媒および/または(ii)酸を用いて、溶媒和物、塩および/またはそれらの塩の溶媒和物に変換することにより特徴付けられる請求項5および6に定義される式(I-PD)の化合物の製造方法。
【請求項９】
疾患の処置および/または予防のための請求項1ないし6のいずれかに記載の化合物。
【請求項１０】
癌または腫瘍の処置および/または予防のための方法に用いられる請求項1ないし6のいずれかに記載の化合物。
【請求項１１】
虚血性心血管疾患、心不全、心筋梗塞、不整脈、卒中、肺高血圧、腎臓および肺の線維性疾患、乾癬、糖尿病性網膜症、黄斑変性症、リウマチ性関節炎およびチュバシュ赤血球増多症の処置および/または予防の方法に用いられる請求項1ないし5のいずれかに記載の化合物。
【請求項１２】
癌または腫瘍の処置および/または予防のための医薬の製造における請求項1ないし6のいずれかに記載の化合物の使用。
【請求項１３】
虚血性心血管疾患、心不全、心筋梗塞、不整脈、卒中、肺高血圧、腎臓および肺の線維性疾患、乾癬、糖尿病性網膜症、黄斑変性症、リウマチ性関節炎およびチュバシュ赤血球増多症の処置および/または予防のための医薬の製造における請求項1ないし6のいずれかに記載の化合物の使用。
【請求項１４】
請求項1ないし6のいずれかに記載の化合物を1種以上の不活性で、非毒性の、薬学的に適切な添加物と組み合わせで含む医薬。
【請求項１５】
請求項1ないし6のいずれかに記載の化合物を1種以上のさらなる活性成分と組み合わせて含む医薬。
【請求項１６】
癌または腫瘍の処置および/または予防のための請求項14または15に記載の医薬。
【請求項１７】
虚血性心血管疾患、心不全、心筋梗塞、不整脈、卒中、肺性高血圧、腎臓および肺の線維性疾患、乾癬、糖尿病性網膜症、黄斑変性症、リウマチ性関節炎およびチュバシュ赤血球増多症の処置および/または予防のための請求項14または15に記載の医薬。
【請求項１８】
請求項1ないし6のいずれかに記載の化合物の少なくとも1種、または請求項14ないし16のいずれかに記載の医薬の有効量を用いるヒトおよび動物における癌または腫瘍の処置および/または予防方法。
【請求項１９】
請求項1ないし6のいずれかに記載の化合物の少なくとも1種、または請求項14、15および16のいずれかに記載の医薬の有効量を用いるヒトおよび動物における虚血性心血管疾患、心不全、心筋梗塞、不整脈、卒中、肺高血圧、腎臓の線維性疾患および肺、乾癬、糖尿病性網膜症、黄斑変性症、リウマチ性関節炎およびチュバシュ赤血球増多症の処置および/または予防方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本出願は、新規な置換1-[3-(ヘテロサイクリル)ベンジル]-1H-ピラゾール誘導体、それらの製造方法、疾患の処置および/または予防のためのそれらの使用、および疾患の処置および/または予防のための、より具体的には、過増殖性および血管新生疾患および低酸素状態への代謝適応に起因する疾患の処置および/または予防のための医薬の製造のためのそれらの使用に関する。そのような処置は、単独療法の形でまたはその他の医薬と、または他の治療手段と組み合わせて実施できる。
【背景技術】
【０００２】
癌は、広い種類の様々な組織における制御不可能な細胞増殖の結果である。多くの症例で、新細胞は、既存の組織に浸透し(浸潤性増殖)、またはそれらは離れた臓器に転移する。癌は、広い種類の様々な臓器において生じ、しばしば、組織に特異的な方法で進行する。一般的用語としての用語「癌」は、このように様々な臓器、組織および細胞型の定義された疾患の大きな群を意味する。
【０００３】
2002年、世界中で440万人が乳房、小腸、卵巣、肺または前立腺の腫瘍であると診断された。同年、約250万人がこれらの疾患の結果死亡したと見られる(Globocan 2002 Report)。米国単独で、2005年において、125万人を超える新症例、および50万人を超える死亡が、癌によると予測された。これらの新症例の大部分が、小腸(〜 100000)、肺(〜 170000)、乳房(〜 210000)および前立腺(〜 230000)の癌に関連する。これから10年で約15%の癌の増加が予測されている(American Cancer Society、Cancer Facts and Figures 2005)。
【０００４】
初期段階のいくつかの腫瘍は、外科的および放射線療法的手段により除去できる。転移腫瘍は、一般的に化学療法剤により一時的にしのげるだけである。ここでの目的は、クオリティ・オブ・ライフの改善および寿命の延長の最適な組合せを達成することである。
【０００５】
化学療法剤は、細胞毒性のある医薬の組合せからなる。これらの物質の大部分は、その作用機序としてチューブリンに結合するか、または核酸の形成およびプロセシングと相互作用する化合物である。近年では、これらは、後成的DNA修飾または細胞周期進行を阻害する酵素阻害剤も含む(例えばヒストンデアセチラーゼ阻害剤、オーロラキナーゼ阻害剤)。そのような治療は毒性があるため、近年は、細胞における特定の工程が高レベルの細胞毒性負荷なしに阻害される標的療法への注目が増えている。これらには特に、受容体およびシグナル伝達分子のリン酸化を阻害する、キナーゼ阻害剤を含む。その一例はイマチニブであり、これは慢性骨髄性白血病(CML)および消化管間質腫瘍(GIST)の処置に極めて有効に使用されている。さらなる例は、EGFR キナーゼおよびHER2を阻害する物質、例えばエルロチニブ、およびVEGFR キナーゼ阻害剤、例えば、腎細胞癌、肝癌および進行期GISTに用いられる例えばソラフェニブおよびスニチニブである。
【０００６】
VEGFに対する抗体を用いて、結腸直腸癌患者の寿命を延ばす可能性がある。ベバシズマブは血管増殖を阻害し、これは、腫瘍が継続的に供給および廃棄を機能させるには、血管系への接続を必要とするため、急速な腫瘍の増殖の妨害となる。
【０００７】
血管形成の1つの刺激因子は低酸素症であり、これは制御されない成長により血液が適切に供給されないため、固体腫瘍で繰り返し起こる。酸素が欠乏すると、細胞は、細胞におけるATPレベルを安定化させるために酸化的リン酸化から解糖に代謝を変更する。この工程は、細胞における酸素含量に依存して上方制御される転写因子によって制御される。「低酸素症誘導因子」(HIF)と呼ばれるこの転写因子は、通常急速な分解により翻訳後除去され、細胞核への輸送が妨げられる。これは、酵素プロリルデヒドロゲナーゼおよびFIH(「HIF阻害因子」)により、酸素分解性ドメイン(ODD)における2個のプロリンユニットおよびC末端に隣接する1個のアスパラギンユニットのヒドロキシル化によって行われる。プロリンユニットの修飾の後、HIFはプロテアソーム器官を介してHippel-Lindauタンパク質(ユビキチン-E3-リガーゼ複合体の一部)によって分解される(Maxwell、Wiesener et al.、1999)。酸素欠乏の場合、分解は起こらず、タンパク質は上方制御され、多くの(100種を超える)他のタンパク質の転写または転写の阻害に至る(Semenza and Wang、1992；Wang and Semenza、1995)。
【０００８】
転写因子HIFは、制御されたα-サブユニットおよび構造的に存在するβ-サブユニット(ARNT、アリール炭化水素受容体核輸送体)で形成される。α-サブユニットには、1α、2αおよび3αの3種の異なる種があり、後者は、どちらかと言えば抑制剤であると考えられている(Makino、Cao et al.、2001)。HIFサブユニットは、転写活性を開始する、HLHおよびPAS(Per-Arnt-Sim)ドメインを介して二量化するbHLH(塩基性ヘリックスループヘリックス)タンパク質である(Jiang、Rue et al.、1996)。
【０００９】
最も重要な腫瘍の実体において、HIF1α タンパク質の過剰発現は血管密度の増加および高度VEGF発現に関連している(Hirota and Semenza、2006)。同時に、グルコース代謝が解糖に移行し、かつクレブス回路が細胞ユニットの生産の利益となるように減少する。これは、また脂質代謝の変化を示唆する。そのような変化は、腫瘍の生存を保障するように見える。一方で、ここでHIFの活性が阻害されれば、その結果として腫瘍の成長は抑制できるであろう。これは、種々の試験モデルによってすでに観測されている(Chen、Zhao et al.、2003；Stoeltzing、McCarty et al.、2004；Li、Lin et al.、2005；Mizukami、Jo et al.、2005；Li、Shi et al.、2006)。それゆえ、HIF-制御代謝の特異的阻害剤は、腫瘍治療剤として適当であるはずである。
【００１０】
国際公開第2004/089303-A2号は、精神障害の処置のためのmGluR5 モジュレーターとしてのジアリール-置換ピラゾール類を開示する。国際公開第2010/072352-A1号および国際公開第2010/085584-A1号は、自己免疫および血管障害の処置のためのスフィンゴシン-1-ホスフェートアゴニストとしての3-フェニル-5-(1H-ピラゾール-4-イル)-1,2,4-オキサジアゾール誘導体を開示する。
【００１１】
国際公開第2005/030121-A2号および国際公開第2007/065010-A2号は、腫瘍細胞におけるHIFおよびHIF-制御遺伝子の発現の阻害のための特定のピラゾール誘導体の使用可能性を開示する。国際公開第2008/141731-A2号は、癌の処置のためのHIF制御経路阻害剤としてのヘテロアリール-置換N-ベンジルピラゾール類を開示する。しかし、これらの多くの化合物は、十分な阻害活性等を有していないか、動物モデルにおける薬物動態学的特性に基づき、人体で、反復1日1回投与後に、相当量物質が蓄積する可能性のある長い半減期(＞48時間)を有することが予期されることがわかった。
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【００１２】
それゆえ、本発明は、第一に転写因子HIFのトランス活性化の強力な阻害剤として作用し、第二に臨床的に関連のある蓄積が同時に起こることのない反復1日1回投与を可能とする薬物動態学的プロファイルを有する新規な化合物を開発し、提供することが目的であった。そのような性質は、全体としてこれらのHIF阻害剤の臨床適用性を広げ、より具体的には、それらと他の活性成分、例えば慣用の腫瘍化学療法剤との併用性をも促進しうる。
【課題を解決するための手段】
【００１３】
この目的は、ここに記載する発明化合物によって達成される。構造的な観点からは、新規なN-ベンジルピラゾール誘導体群はベンジル頭部基の3位のヒドロキシルまたはシアノ置換ヘテロサイクリル基を特徴とし、これが驚くべきことに化合物の性質の改善されたプロファイルを導く。
【００１４】
本発明は、具体的に式(I)
【化１】
2013526497.tif 000002
｛式中、
mは1または2を表し、
nは1、2または3を表し、
R1はヒドロキシルまたはシアノを表し、
R2はトリフルオロメトキシ、トリフルオロメチルスルファニル、トリフルオロメチルスルホニル、ペンタフルオロスルファニルまたは式
【化２】
2013526497.tif 000003
（式中
*は、フェニル環との結合点を表し、
R3AおよびR3B は、それぞれ独立してフッ素またはメチルを表し、
または
互いに一体となってそれらが結合する炭素原子と一緒に、シクロプロパン-1,1-ジイル、シクロブタン-1,1-ジイル、シクロペンタン-1,1-ジイル、シクロヘキサン-1,1-ジイル、オキセタン-3,3-ジイルまたはテトラヒドロ-2H-ピラン-4,4-ジイル環を形成する。）
の基を表し、
R4は、水素、フッ素、メチル、トリフルオロメチルまたはメトキシを表す。｝
の化合物およびそれらの塩類、溶媒和物および塩類の溶媒和物に関する。
【００１５】
本発明の情況において特に好ましくは、式(I)
｛式中、
mおよびnは、それぞれ独立して1または2を表し、
R1は、ヒドロキシルまたはシアノを表し、
R2は、トリフルオロメチル、トリフルオロメトキシ、トリフルオロメチルスルファニルまたは式
【化３】
2013526497.tif 000004
（式中、
*は、フェニル環との結合点を表し、
R3AおよびR3B はいずれもメチルを表すか、または互いに一体となってそれらが結合する炭素原子と一緒に、シクロプロパン-1,1-ジイル、シクロブタン-1,1-ジイル、オキセタン-3,3-ジイルまたはテトラヒドロ-2H-ピラン-4,4-ジイル環を形成し、
R4は、水素、フッ素、メチルまたはトリフルオロメチルを表す。）
の基を表す。}
の化合物およびそれらの塩類、溶媒和物および塩類の溶媒和物である。
【００１６】
本発明の情況において特に好ましくは、式(I)
｛式中、
mおよびnいずれも1または2を表し、
R1は、ヒドロキシルまたはシアノを表し、
R2は、トリフルオロメトキシまたは式
【化４】
2013526497.tif 000005
（式中、
*は、フェニル環との結合点を表す。）
の基を表す。}
の化合物およびそれらの塩類、溶媒和物および塩類の溶媒和物である。
【００１７】
本発明の特定の態様は、式(I)
（式中、
R1は、ヒドロキシルを表し、
および
m、nおよびR2 はそれぞれ上に示した意味を有する。）
の化合物およびそれらの塩類、溶媒和物および塩類の溶媒和物である。
直前の態様は、式(I-A)
【化５】
2013526497.tif 000006
（式中、m、nおよびR2 はそれぞれ上に示した意味を有する。）
化合物およびそれらの塩類、溶媒和物および塩類の溶媒和物に関する。
更なる局面としては、本発明はまた特定の式(I-A)の化合物のプロドラッグに関する。一般に用語「プロドラッグ」は、ここでは、それ自体生物学的に活性でも不活性でもよく、体内において存在している間に、例えば代謝または加水分解経路により式(I-A)の化合物に変換される式(I-A)の化合物の共有結合誘導体を言う。
【００１８】
本発明はさらに、式(I-PD)
【化６】
2013526497.tif 000007
｛式中、
m、nおよびR2 はそれぞれ上に示した意味を有し、
RPDは、式
【化７】
2013526497.tif 000008
（式中、
#は、酸素原子との結合点を表し、
R5は、水素または(C1-C4)-アルキルを表し、
および
R6AおよびR6B はそれぞれ独立して水素またはメチルを表す。）
のプロドラッグ基を表す。｝
の化合物および塩類、溶媒和物およびそれらの溶媒和物を提供する。
本発明の情況において特に好ましくは、式(I-PD)
（式中、
RPDは、式
【化８】
2013526497.tif 000009
（式中、
#は、酸素原子との結合点を表す。）
のプロドラッグ基を表す。｝
の化合物およびそれらの塩類、溶媒和物および塩類の溶媒和物である。
【発明を実施するための形態】
【００１９】
式(I-PD)の化合物は、水性または他の生理学的に適合性のある媒体に良好な溶解性を示す式(I-A)の化合物のプロドラッグである；加えてそれらは、溶解性をさらに増加させることができる適切な酸と塩の形成の可能性を提供する。従って、式(I-PD)およびそれらの塩類の化合物は、特に静脈内投与形態または修正放出特性を有する他の固体形態にも適している。これは、これらの化合物のさらなる治療上の利用分野を開拓する。
それゆえ本発明の化合物は、式(I)、(I-A)および(I-PD)の化合物およびそれらの塩類、溶媒和物および塩類の溶媒和物、式(I)、(I-A)および(I-PD)に包含され、下に具体的に記載する式の化合物、およびそれらの塩類、溶媒和物および塩類の溶媒和物、および式(I)、(I-A)および(I-PD)に含まれ、下に作業実施例として特定する化合物およびそれらの塩類、溶媒和物および塩類の溶媒和物を含む。
【００２０】
構造に依存して、本発明の化合物は、異なる立体異性体の形態、すなわち立体配置異性体(configurational isomers)又は適切である場合には配座異性体(conformational isomers)(アトロプ異性体である場合を含む、エナンチオマー及び/又はジアステレオマー)を含む。それゆえ本発明は、エナンチオマー又はジアステレオマー及びそれらの混合物を含む。立体異性体として単一の構成物は、エナンチオマー及び/又はジアステレオマーの混合物から知られた方法で単離できる；この目的にはクロマトグラフィー法、特にアキラル又はキラル相によるHPLCクロマトグラフィーを使用するのが好ましい。
本発明における化合物が互変異性体の形態で生じうる場合には、本発明はすべての互変異性体の形態を含む。
【００２１】
また本発明は、本発明化合物のすべての適切な同位体化合物を含む。本発明の同位体化合物は、本発明の化合物において少なくとも1個の元素が、同じ元素番号の原子であるが、天然に通常又は優勢に存在するものとは異なる原子質量の原子で置き換えられていることを意味する。本発明の化合物に組み込まれる同位体の例は、水素、炭素、窒素、酸素、リン、硫黄、フッ素、塩素、臭素及びヨウ素、例えば、2H(重水素)、3H(トリチウム)、13C、14C、15N、17O、18O、32P、33P、33S、34S、35S、36S、18F、36Cl、82Br、123I、124I、129I及び131Iである。特に、1個以上の放射性同位体が組み込まれている本発明の化合物の特定の同位体化合物は、例えば、作用機序又は体内での活性化合物分布の試験に有益でありうる；比較的容易な調製及び検出可能性のため、特にこの目的で3H又は14C同位体で標識した化合物が適切である。加えて、同位体、例えば重水素の組み込みは、該化合物の大きな代謝安定性の結果、例えば、体内における半減期の延長又は有効用量の減少のような特定の治療利益をもたらしうる；本発明の化合物のそのような修飾は、それゆえある場合には本発明の好ましい態様をも構成する。本発明化合物の同位体化合物は、当業者に一般に知られた工程を用いて製造され、例えば、後述する方法及び作業実施例に記載した方法で、特定の試薬及び/又は出発物質を同位体に置き換えたものを用いて行われる。
【００２２】
本発明の情況において好ましい塩類は、本発明の化合物の生理学的に許容される塩類である。また、それ自体は薬学的適用に適していないが、例えば本発明の化合物の単離、精製又は保存において使用し得る塩も包含する。
【００２３】
本発明の化合物の生理学的に許容される塩は、特に鉱酸、カルボン酸及びスルホン酸の酸付加塩を含み、例えば、塩酸、臭化水素酸、硫酸、リン酸、メタンスルホン酸、エタンスルホン酸、トルエンスルホン酸、ベンゼンスルホン酸、ナフタレンジスルホン酸、酢酸、トリフルオロ酢酸、プロピオン酸、乳酸、酒石酸、リンゴ酸、クエン酸、フマル酸、マレイン酸及び安息香酸の塩がある。
【００２４】
本発明の情況において、溶媒和物は、固体または液体の形態において、溶媒分子と配位により複合体を形成する本発明化合物の形態を言う。水和物は、配位が水である特定の溶媒和物の形態である。本発明の情況において、好ましい溶媒和物は、水和物である。
本発明の情況において、他に示さない限り、置換基は以下に定義するとおりである：
【００２５】
本発明の情況において、(C1-C4)-アルキルは、1個ないし4個の炭素原子を有する直鎖または分岐鎖アルキルである。好ましい例としては：メチル、エチル、n-プロピル、イソプロピル、n-ブチル、イソブチル、sec-ブチル、tert-ブチルがある。
本発明の情況において、1回以上現れる全ての基は互いに独立している。本発明の化合物の基が置換されている場合、他に示さない限り、基は一または多置換であってもよい。一個または二個または三個の同一または異なる置換基により置換されていることが好ましい。特に好ましくは、一置換基により置換されている。
【００２６】
それぞれの基の組合せまたは好ましい組合せに定義された個々の基は、特定の基のそれぞれの組合せにより独立しており、所望により他の組合せの基の定義により置き換えられる。
極めて好ましくは、上述の好ましい範囲の二種以上の組合せである。
【００２７】
本発明は、さらに式(II)
【化９】
2013526497.tif 000010
（式中、R2 は上に示した意味を有し、
Xは、臭素またはヨウ素である。）
の化合物を、適切なパラジウム触媒および塩基の存在下、式(III)
【化１０】
2013526497.tif 000011
（式中、m、nおよびR1 はそれぞれ上に示したとおりである。）
の化合物とカップリングさせ、
生成した式(I)の化合物を、場合によりそれらのエナンチオマーおよび/またはジアステレオマーに分離し、および/または適切な(i)溶媒および/または(ii)酸を用いて、溶媒和物、塩および/またはそれらの塩の溶媒和物に変換することにより特徴付けられる式(I)の化合物の製造方法を提供する。
【００２８】
反応(II)+(III)→(I)に適切な不活性溶媒は、例えば、芳香族性炭化水素、例えば、ベンゼン、トルエンまたはキシレン、エーテル、例えば、ジエチルエーテル、ジイソプロピルエーテル、メチルtert-ブチルエーテル、1,2-ジメトキシエタン、ビス(2-メトキシエチル)エーテル、テトラヒドロフランまたは1,4-ジオキサン、または双極性非プロトン性溶媒、例えば、アセトニトリル、N,N-ジメチルホルムアミド(DMF)、N,N-ジメチルアセトアミド(DMA)、ジメチルスルホキシド(DMSO)、N,N’-ジメチルプロピレンウレア(DMPU)、N-メチルピロリジノン(NMP)またはピリジンである。これらの溶媒の混合物を用いることも同等に可能であった。好ましくは、1,2-ジメトキシエタン、テトラヒドロフラン、N,N-ジメチルホルムアミドまたはトルエンを用いることである。
【００２９】
カップリング反応(II)+(III)→(I)は、遷移金属触媒を用いて行われる。この目的に特に適切なものは、パラジウム(0)触媒、例えば、ビス(ジベンジリデンアセトン)パラジウム(0)、トリス(ジベンジリデンアセトン)ジパラジウム(0)またはテトラキス(トリフェニルホスフィノ)パラジウム(0)であり、場合により、追加のホスフィンリガンド、例えば、2-ジシクロヘキシルホスフィノ-2’-(N,N-ジメチルアミノ)ビフェニル、2-ジシクロヘキシルホスフィノ-2’,4’,6’-トリイソプロピルビフェニル(X-Phos)または4,5-ビス(ジフェニルホスフィノ)-9,9-ジメチルキサンテン(キサントホス)[例えば、J.Hassan et al.、Chem.Rev.102、1359-1469 (2002)参照]と組合わせてもよい。好ましくは、トリス(ジベンジリデンアセトン)ジパラジウム(0)と合わせて2-ジシクロヘキシルホスフィノ-2’,4’,6’-トリイソプロピルビフェニル(X-Phos)を用いることである。
【００３０】
カップリングは、一般的に塩基を加えることにより行われる。この目的に特に適切なものは、アルカリ金属炭酸塩、重炭酸塩、ホスフェート、リン酸水素塩またはtert-ブトキシド、例えば、炭酸ナトリウム、炭酸カリウム、炭酸セシウム、炭酸水素ナトリウム、炭酸水素カリウム、トリカリウムホスフェート、リン酸水素二ナトリウム、リン酸水素二カリウム、ナトリウムtert-ブトキシドまたはカリウムtert-ブトキシドである。好ましくは、炭酸セシウムまたはナトリウムtert-ブトキシドを用いることである。
【００３１】
反応(II)+(III)→(I)は一般的に、+50℃〜+200℃、好ましくは+100℃〜+150℃の温度範囲で、常圧で行われる。しかし、減圧下または加圧下で行うことも可能であった(例えば、0.5〜5 bar)。変換においてマイクロ波照射を同時に行うことが助けとなりうる。
【００３２】
R1 基がヒドロキシルである場合、上述のカップリング反応(II)+(III)→(I)において一時的にヒドロキシル基を保護することが有利である。この目的で、化合物(III)から公知の方法で容易に得られるシリルエーテル誘導体の化合物(III)、トリメチルシリル、トリイソプロピルシリル、tert-ブチルジメチルシリルまたはtert-ブチル(ジフェニル)シリルエーテルを用いることが好ましい。続いてカップリングの完了時に、慣用される方法、例えばテトラ-n-ブチルアンモニウムフルオライドで処理することにより、これらの保護基を再び切り離すことができる。
【００３３】
式(II)の化合物それ自体は、まず式(IV)
【化１１】
2013526497.tif 000012
（式中、R2 は上に示した意味を有する。）
のN’-ヒドロキシアミジンを式(V)
【化１２】
2013526497.tif 000013
のピラゾールカルボン酸と反応させて
式(VI)
【化１３】
2013526497.tif 000014
（式中、R2 は上に示した意味を有する。）
の1,2,4-オキサジアゾール誘導体を得て、続いて、化合物(VI)を塩基の存在下、式(VII)
【化１４】
2013526497.tif 000015
（式中、Xは上に示した意味を有し、
Yは、脱離基、例えば塩素、臭素、ヨウ素、メシレート、トリフレートまたはトシレートである。）
の化合物と反応させることにより製造できる。
【００３４】
縮合反応(IV)+(V)→(VI)は好ましくは、カルボジイミド、例えばN’-(3-ジメチルアミノプロピル)-N-エチルカルボジイミド(EDC)を活性エステル成分として1-ヒドロキシ-1H-ベンゾトリアゾール(HOBt)と組み合わせて用いて、またはホスゲン誘導体、例えば1,1’-カルボニルジイミダゾール(CDI)を用いて、高沸点双極性非プロトン性溶媒、例えばN,N-ジメチルホルムアミドまたはジメチルスルホキシド中で行われる。
この反応における最初のカップリング工程は、一般的に0℃〜+50℃の温度範囲で有効である；続いて1,2,4-オキサジアゾールへの環化は、反応混合物を温度+100℃ないし+150℃で加熱することにより行われる。反応は、常圧、加圧または減圧下において行われる(例えば、0.5から5 bar)；一般に、常圧が用いられる。
【００３５】
工程(VI)+(VII)→(II)のための不活性溶媒は、例えば、ハロ炭化水素、例えば、ジクロロメタン、トリクロロメタン、テトラクロロメタン、トリクロロエチレンまたはクロロベンゼン、エーテル、例えば、ジエチルエーテル、ジイソプロピルエーテル、メチルtert-ブチルエーテル、テトラヒドロフラン、1,4-ジオキサン、1,2-ジメトキシエタンまたはビス(2-メトキシエチル)エーテル、炭化水素、例えばベンゼン、トルエン、キシレン、ペンタン、ヘキサン、シクロヘキサンまたは鉱油分画、または双極性非プロトン性溶媒、例えばアセトン、メチルエチルケトン、酢酸エチル、アセトニトリル、N,N-ジメチルホルムアミド(DMF)、N,N-ジメチルアセトアミド(DMA)、ジメチルスルホキシド(DMSO)、N,N’-ジメチルプロピレンウレア(DMPU)、N-メチルピロリジノン(NMP)またはピリジンがある。言及した溶媒の混合物を用いることも等しく可能であった。好ましくは、テトラヒドロフランまたは1,4-ジオキサンを用いることである。
【００３６】
反応(VI)+(VII)→(II)に好ましい塩基は、慣用される無機または有機塩基である。これらには好ましくは、アルカリ金属ヒドロキシド、例えば、水酸化リチウム、ナトリウムまたはカリウム、アルカリ金属アルコキシド、例えば、ナトリウムまたはカリウムメトキシド、ナトリウムまたはカリウムエトキシドまたはナトリウムまたはカリウムtert-ブトキシド、アルカリ金属ハイドライド、例えば、ナトリウムまたはカリウムハイドライド、またはアミド、例えば、ナトリウムアミド、リチウムまたはカリウムビス(トリメチルシリル)アミドまたはリチウムジイソプロピルアミドが含まれる。好ましくは、カリウムtert-ブトキシドを用いることである。アルキル化触媒、例えば、リチウムブロマイド、ナトリウムアイオダイド、テトラ-n-ブチルアンモニウムブロマイドまたは塩化ベンジルトリエチルアンモニウムを添加することは、有利である。
【００３７】
反応は、温度範囲-20℃〜+100℃、好ましくは0℃〜+60℃で一般的に有効である。反応は、反応は、常圧、加圧または減圧下において行われる(例えば、0.5から5 bar)；一般に、常圧が用いられる。
本発明はさらに式(I-PD)の化合物の製造方法を提供するが、これは式(I-A)
【化１５】
2013526497.tif 000016
（式中、m、nおよびR2 はそれぞれ上に示した意味を有する。）
の化合物を式(VIII)
【化１６】
2013526497.tif 000017
の化合物または、RPDが上に定義されるこの化合物の活性化形態と慣用される方法によりエステル化し、
生成した式(I-PD)の化合物を、場合によりそれらのエナンチオマーおよび/またはジアステレオマーに分離し、および/または適切な(i)溶媒および/または(ii)酸を用いることにより溶媒和物、塩類および/またはそれらの塩類の溶媒和物に変換することにより特徴付けられる。
【００３８】
プロドラッグ基 RPD の導入に適切な化合物(VIII)の活性化形態は、例えば、対応するクロライド類または混合無水物を含む無水物、または他の特定のエステルまたはアミド誘導体がある。RPD 基に存在する遊離アミノ基は、ここでは適切に一時的に保護された形態で存在し、続いてエステル化の終わりに慣用される方法により再び遊離される。使用するそのような保護は、好ましくは、tert-ブトキシカルボニル基の形態であり、それは、強酸、例えば塩酸またはトリフルオロ酢酸による処理により脱離できる [例えば、M. Bodanszky and A.Bodanszky、The Practice of Peptide Synthesis、Springer-Verlag、Berlin、1984；M.Bodanszky、Principles of Peptide Synthesis、Springer-Verlag、Berlin、1993；T.W.Greene and P.G.M. Wuts、Protective Groups in Organic Synthesis、Wiley、New York、1999参照]
式(I-A)化合物それ自体は、上に記載したカップリング反応(II)+(III)→(I)により得られる。
【００３９】
式(III)、(IV)、(V)、(VII)および(VIII)化合物は、市販されているか、そのようなものが文献に記載されているか、または刊行された文献の方法と類似の方法により当業者に明らかな方法により製造できる。出発物質の製造のための数多くの説明および文献情報が、実験項の出発化合物および中間体の製造の項において見られる。
発明化合物の調製は、以下の反応スキームにより説明される：
【００４０】
スキーム1
【化１７】
2013526497.tif 000018
スキーム2
【００４１】
【化１８】
2013526497.tif 000019
スキーム3
【００４２】
【化１９】
2013526497.tif 000020
発明化合物は価値ある薬理学的性質を有し、ヒトおよび動物における疾患の予防および処置に使用できる。
本化合物は、制御的HIF経路の非常に強力な阻害剤である。加えて、本発明化合物は、それらの分布容積および/またはそれらクリアランスおよびそれらから得られる半減期について有利な薬物動態学的特性を有しており、反復1日1回投与に適している。
作用のプロファイルに基づき、本発明化合物は、特にヒトおよび哺乳動物において一般に過増殖性疾患の処置に特に適している。本化合物は細胞増殖および細胞分裂を阻害、阻止、減少または低下させ、そして二次的にアポトーシスを増加できる。
【００４３】
本発明化合物をその処置に用いることができる過増殖性疾患は、とりわけ、乾癬、ケロイド、瘢痕形成および皮膚の他の増殖性疾患、良性疾患、例えば、良性前立腺過形成(BPH)、および特に腫瘍疾患群を含む。本発明の情況において、これらは特に以下の疾患を意味するが、それらに限られないことは理解されるであろう：乳癌および乳房腫瘍(腺および小葉癌、また上皮内癌も含む)、呼吸管の腫瘍(乏細胞および非乏細胞癌、気管支の癌)、脳腫瘍(例えば、脳幹および視床下部、星状細胞腫、髄芽腫、上衣腫および神経外胚葉性および松果体腫瘍)、消化器の腫瘍(食道、胃、胆嚢、小腸、大腸、直腸)、肝臓腫瘍(とりわけ肝細胞癌、胆管細胞癌および混合型肝細胞・胆管細胞癌)、頭頚部腫瘍(喉頭、下咽頭、上咽頭、中咽頭、口唇および口腔)、皮膚腫瘍(扁平上皮癌、カポジ肉腫、悪性黒色腫、メルケル皮膚癌および非黒色腫皮膚癌)、軟部組織の腫瘍(とりわけ軟部組織肉腫、骨肉腫、悪性線維性組織球腫、リンパ肉腫および横紋筋肉腫)、眼の腫瘍(とりわけ眼内黒色腫および網膜芽細胞腫)、内分泌および外分泌腺の腫瘍(例えば甲状腺および副甲状腺、膵臓および唾液腺)、尿路の腫瘍(膀胱、陰茎、腎臓、腎盂および輸尿管の腫瘍)および生殖器の腫瘍(女性における子宮内膜、頸、卵巣、膣、外陰および子宮の癌腫および男性における前立腺および睾丸の癌腫)。これらはまた、固体形態のおよび循環血球としての増殖性血液疾患、例えば、リンパ腫、白血病および骨髄増殖性疾患、例えば、急性骨髄性、急性リンパ芽球性、慢性リンパ性、慢性骨髄性および有毛細胞性白血病、およびAIDS関連リンパ腫、ホジキンリンパ腫、非ホジキンリンパ腫、皮膚T細胞リンパ腫、バーキットリンパ腫および中枢神経系におけるリンパ腫を含む。
【００４４】
これらのよく述べられているヒトにおける疾患は、他の哺乳動物でも同等の病因で起こることがあり、本発明化合物で治療できる。
【００４５】
本発明の情況において、用語「処置」または「処置する」は、疾患または健康異常の撲滅、減少、軽減または改善を目的として、およびこれらの疾患により、例えば、癌の結果損なわれた生活の状態の改善を目的として、患者を世話し、看護し、介護する慣例の意義および意味で用いられる。
本発明化合物は、HIF制御経路のモジュレーターとして作用し、それゆえ、HIF転写因子の有害な発現に関連する疾患の処置に適している。これは特に転写因子 HIF-1αおよびHIF-2αに適用される。用語「HIFの有害な発現」は、ここでは異常な生理学的HIFタンパク質の存在を意味する。これは、過剰なタンパク質(mRNA-または翻訳関連)の合成により、分解の減少によりまたは転写因子の機能における不適切な逆調節により引き起こされうる。
【００４６】
HIF-1αおよびHIF-2αは、100種を超える遺伝子を制御する。これは血管形成において役割を果たし、それ故に直接腫瘍に関連するタンパク質、およびまたグルコース、アミノ酸および脂質代謝、および細胞移動、転移およびDNA修復に影響するタンパク質に、またはアポトーシス抑制による腫瘍細胞の生存の改善にも当てはまる。その他は、免疫反応の阻害および炎症細胞における血管新生因子の上方制御を介して、より間接的に作用する。HIFはまた幹細胞、およびここにおいては特に上昇したHIFレベルを有するとして報告されている腫瘍幹細胞において重要な役割を果たす。それゆえ、本発明化合物によるHIF制御経路の阻害は、高増殖速度を有さず、それゆえ細胞毒性物質により適切に影響されない腫瘍幹細胞に対する治療的影響も有する(Semenza、2007；Weidemann and Johnson、2008参照)。
【００４７】
HIFによる細胞代謝の変化は、腫瘍に限定されたものではなく、他の慢性または一過性の低酸素病態生理学的過程においても起こる。HIF阻害剤−例えば、本発明化合物−は、損傷した細胞は、それらが意図されたように機能しなければ、さらなる損傷を引き起こしうるため、例えば低酸素状態への細胞の適合に起因するさらなる損傷においても治療的に有効である。この1つの例は、卒中後に部分的に破壊された組織におけるてんかん病巣の形成である。類似の状態は、血栓塞栓性事象、炎症、創傷、中毒または他の原因の結果として、虚血の過程が心臓または脳において起こるならば、心血管疾患の症例で見られる。これらは、局所遅延活性電位のような障害を起こしえて、これは、次に不整脈または慢性心不全を導きうる。一過性の形態、例えば無呼吸症候群の結果として起こるものにおいては、特定の状況下では本態性高血圧が存在しえて、それは公知の続発症、例えば卒中および心筋梗塞を導きうる。
【００４８】
本発明化合物により達成されるようなHIF制御経路の阻害は、それゆえ例えば心不全、不整脈、心筋梗塞、無呼吸症候群-誘導性高血圧、肺高血圧、移植虚血、再かん流損傷、卒中および黄斑変性症のような疾患、ならびに外傷性損傷または切断後の神経機能の回復にもまた有効である。
【００４９】
HIFは、特に肺および腎臓において重要である上皮性から間葉性細胞型の遷移を制御する因子の1つであるため、発明化合物はまた、HIFと関連する肺および腎臓における線維症の予防または制御にも用いることができる。
その処置に本発明化合物が用いられうる更なる疾患は、炎症性関節疾患、例えば種々の形態の関節炎、および炎症性小腸疾患、例えば、クローン病である。
チュバシュ赤血球増多症は、数ある臓器の中で特に脾臓において行われる、HIF-2α活性が仲介する赤血球新生である。それゆえHIF制御経路の阻害剤としての発明化合物は、ここでは過剰の赤血球形成の抑制に適切であり、従って、この疾患の軽減に効果がある。
【００５０】
本発明化合物は、過剰なまたは異常な血管形成と関連する疾患の処置にも用いられうる。これらは、とりわけ、糖尿病性網膜症、虚血性網膜静脈閉塞症および未熟児網膜症(Aiello et al.、1994；Peer et al.、1995参照)、加齢黄斑変性症(AMD；Lopex et al.、1996参照)、血管新生緑内障、乾癬、水晶体後線維増殖症、血管線維腫、炎症、リウマチ性関節炎(RA)、再狭窄、ステント内再狭窄および血管植え込み術後再狭窄を含む。
血液供給の増加はさらに癌性、新生物組織に関連し、ここで腫瘍増殖を加速させる。さらに、新血管およびリンパ管の増殖は転移、すなわち腫瘍の拡散を促進する。新リンパ管および血管は、免疫特権組織、例えば眼の同種移植に有害であり、例えば拒絶反応に対する感受性を高める。それゆえ本発明化合物は、例えば、血管の増殖の阻害または血管の数の減少により、前述の疾患の１つの治療にも用いることができる。これは、内皮細胞の増殖阻害または血管形成を阻害または減衰させる他の機序により、およびアポトーシスによる新生物細胞の減少により達成される。
【００５１】
肥満の場合、HIF-1αは、脂肪組織において豊富になり、増加したエネルギー担体としてのグルコース量が消費されるように、異化において解糖方向へのHIF-介在性シフトが生じる。これは、同時に脂質代謝の減少および従って組織の脂質貯蔵を導く。それゆえ本発明物質は、特に肥満の症例における、組織におけるHIF-1α-介在性の脂質富化の処置にも適している。
本発明は、さらに疾患、特に上述した疾患の処置および/または予防のための本発明化合物の使用を提供する。
本発明は、さらに疾患、特に上述した疾患の処置および/または予防のための医薬の製造のための本発明化合物の使用を提供する。
本発明は、さらに疾患、特に上述した疾患の処置および/または予防の方法における本発明化合物の使用を提供する。
本発明は、さらに少なくとも1種の本発明化合物の有効量を用いる、疾患、特に上述した疾患の処置および/または予防方法を提供する。
【００５２】
発明化合物は単独で、または、必要であれば、組合せが望まない、および許容されない副作用を引き起こさない限り、1種以上の薬理活性物質と組み合わせて用いることができる。それゆえさらに本発明は、少なくとも1種の本発明化合物および上述した疾患の処置および/または予防のための1種以上の更なる活性化合物を含有する医薬を提供する。
例えば、本発明の化合物は、癌疾患の処置のための公知の抗過増殖性、細胞増殖抑制性または細胞毒性物質と組み合わせることができる。腫瘍の低酸素領域は記載の慣用の治療には弱くしか反応しないのに対し、本発明化合物は、特にそこで活性を示すため、本発明の化合物と他の癌治療に慣用されている物質とのあるいはまた放射線療法との組合せが特に示唆される。
【００５３】
一例として述べうる、組合せに適切な活性化合物は：
アルデスロイキン、アレンドロン酸、アルファフェロン、アリトレチノイン、アロプリノール、アロプリム、アロキシ、アルトレタミン、アミノグルテチミド、アミホスチン、アムルビシン、アムサクリン、アナストロゾール、アンズメット、アラネスプ、アルグラビン、三酸化ヒ素、アロマシン、5-アザシチジン、アザチオプリン、BCGまたはタイス-BCG、ベスタチン、酢酸ベタメタゾン、リン酸ベタメタゾンナトリウム、ベキサロテン、硫酸ブレオマイシン、ブロクスウリジン、ボルテゾミブ、ブスルファン、カルシトニン、キャンパス、カペシタビン、カルボプラチン、カソデックス、セフェゾン、セルモロイキン、セルビジン、クロラムブシル、シスプラチン、クラドリビン、クロドロン酸、シクロホスファミド、シタラビン、ダカルバジン、ダクチノマイシン、ダウノキソーム、デカドロン、リン酸デカドロン、デレストロゲン、デニロイキンジフチトクス、デポメドロール、デスロレリン、デクスラゾキサン、ジエチルスチルベストロール、ダイフルカン、ドセタキセル、ドキシフルリジン、ドキソルビシン、ドロナビノール、DW-166HC、エリガード、エリテック、エレンス、エメンド、エピルビシン、エポエチンアルファ、エポジェン、エプタプラチン、エルガミゾール、エストレース、エストラジオール、リン酸エストラムスチンナトリウム、エチニルエストラジオール、エチオル、エチドロン酸、エトポホス、エトポシド、ファドロゾール、ファルストン、フィルグラスチム、フィナステリド、フリグラスチム、フロクスウリジン、フルコナゾール、フルダラビン、5-フルオロデオキシウリジン一リン酸、5-フルオロウラシル(5-FU)、フルオキシメステロン、フルタミド、フォルメスタン、フォステアビン、ホテムスチン、フルベストラント、ガンマガード、ゲムシタビン、ゲムツズマブ、グリベック、グリアデル、ゴセレリン、グラニセトロン ヒドロクロライド、ヒストレリン、ヒカムチン、ヒドロコルトン、エリスロ-ヒドロキシノニルアデニン、ヒドロキシウレア、イブリツモマブチウキセタン、イダルビシン、イホスファミド、インターフェロン-アルファ、インターフェロン-アルファ−2、インターフェロン-アルファ−2α、インターフェロン-アルファ−2β、インターフェロン-アルファ−n1、インターフェロン-アルファ−n3、インターフェロン-ベータ、インターフェロン-ガンマ−1α、インターロイキン-2、イントロンA、イレッサ、イリノテカン、カイトリル、リン酸レンチナン、レトロゾール、ロイコボリン、リュープロリド、酢酸リュープロリド、レバミソール、レボホリン酸カルシウム塩、レボチロイド、レボキシル、ロムスチン、ロニダミン、マリノール、メクロレタミン、メコバラミン、酢酸メドロキシプロゲステロン、酢酸メゲストロール、メルファラン、メネスト、6-メルカプトプリン、メスナ、メトトレキサート、メトビクス、ミルテホシン、ミノサイクリン、マイトマイシンC、ミトタン、ミトキサントロン、モドレナル、ミオセット、ネダプラチン、ノイラスタ、ノイメガ、ノイポゲン、ニルタミド、ノルバデックス、NSC-631570、OCT-43、オクトレオチド、オンダンセトロン塩酸塩、オラプレド、オキサリプラチン、パクリタキセル、ペジアプレッド、ペガスパルガーゼ、ペガシス、ペントスタチン、��シバニール、ピロカルピンヒドロクロライド、ピラルビシン、プリカマイシン、ナトリウムポルフィマー、プレドニムスチン、プレドニゾロン、プレドニゾン、プレマリン、プロカルバジン、プロクリット、ラルチトレキセド、レビフ、レニウム-186エチドロネート、リツキシマブ、ロフェロン-A、ロムルチド、サラゲン、サンドスタチン、サルグラモスチム、セムスチン、シゾフィラン、ソブゾキサン、ソリューメドール、ストレプトゾシン、ソトロンチウム-89塩化物、シンチロイド、タモキシフェン、タムスロシン、タソネルミン、タストラクトン、タキソテール、テセロイキン、テモゾロミド、テニポシド、プロピオン酸テストステロン、テストレド、チオグアニン、チオテパ、チオトロピン、チルドロン酸、トポテカン、トレミフェン、トシツモマブ、トラスツズマブ、テオスルファン(teosulfan)、トレチノイン、トレキサル、トリメチルメラミン、トリメトレキサート、酢酸トリプトレリン、パモ酸トリプトレリン、UFT、ウリジン、バルルビシン、ベスナリノン、ビンブラスチン、ビンクリスチン、ビンデシン、ビノレルビン、ビルリジン、ジネカルド、ジノスタチンスチマラマー、ゾフラン；ABI-007、アコルビフェン、アクティミューン、アフィニタク、アミノプテリン、アルゾキシフェン、アソプリシニル、アタメスタン、アトラセンタン、アバスチン、CCI-779、CDC-501、セレブレックス、セツキシマブ、クリスナトール、酢酸シプロテロン、デシタビン、DN-101、ドキソルビシン-MTC、dSLIM、デュタステライド、エドテカリン、エフロルニチン、エクサテカン、フェンレチニド、ヒスタミン二塩酸塩、ヒストレリンハイドロゲルインプラント、ホルミウム-166 DOTMP、イバンドロン酸、インターフェロン-ガンマ、イントロン-PEG、イクサベピロン、キーホールリンペットヘモシアニン、L-651582、ランレオチド、ラソフォキシフェン、リブラ、ロナファルニブ、ミプロキシフェン、ミノドロネート、MS-209、リポソームMTP-PE、MX-6、ナファレリン、ネモルビシン(nemorubicin)、ネオバスタット、ノラトレックスド、オブリメルセン、オンコ-TCS、オシデム、パクリタキセルポリグルタメート、パミドロン酸二ナトリウム、PN-401、QS-21、クアゼパム、R-1549、ラロキシフェン、ランピルナーゼ、レゴラフェニブ、13-シス-レチノイン酸、サトラプラチン、セオカルシトール、ソラフェニブ、T-138067、タルセバ、タキソプレキシン、チモシン-アルファ−1、チアゾフリン、ティピファルニブ、チラパザミン、TLK-286、トレミフェン、トランスMID-107R、バルスポダル、バプレオチド、バタラニブ、ベルテポルフィン、ビンフルニン、Z-100、ゾレドロン酸および及びそれらの組み合わせである。
【００５４】
好ましい態様において、本発明化合物は、抗過増殖剤と組み合わせてもよく、それは、一例として-この一覧が最終的ではないが-：
アミノグルテチミド、L-アスパラギナーゼ、アザチオプリン、5-アザシチジン、ブレオマイシン、ブスルファン、カンプトテシン、カルボプラチン、カルムスチン、クロラムブシル、シスプラチン、コラスパーゼ、シクロホスファミド、シタラビン、ダカルバジン、ダクチノマイシン、ダウノルビシン、ジエチルスチルベストロール、2’,2’-ジフルオロデオキシシチジン、ドセタキセル、ドキソルビシン(アドリアマイシン)、エピルビシン、エポチロンおよびその誘導体、エリスロ-ヒドロキシノニルアデニン、エチニルエストラジオール、エトポシド、リン酸フルダラビン、5-フルオロデオキシウリジン、5-フルオロデオキシウリジン一リン酸、5-フルオロウラシル、フルオキシメステロン、フルタミド、ヘキサメチルメラミン、ヒドロキシウレア、カプリル酸ヒドロキシプロゲステロン、イダルビシン、イホスファミド、インターフェロン、イリノテカン、ロイコボリン、ロムスチン、メクロレタミン、酢酸メドロキシプロゲステロン、酢酸メゲストロール、メルファラン、6-メルカプトプリン、メスナ、メトトレキサート、マイトマイシン C、ミトタン、ミトキサントロン、パクリタキセル、ペントスタチン、N-ホスホノアセチル L-アスパルテート(PALA)、プリカマイシン、プレドニゾロン、プレドニゾン、プロカルバジン、ラロキシフェン、セムスチン、ストレプトゾシン、タモキシフェン、テニポシド、テストステロン プロピオネート、チオグアニン、チオテパ、トポテカン、トリメチルメラミン、ウリジン、ビンブラスチン、ビンクリスチン、ビンデシンおよびビノレルビンでありえる。
【００５５】
本発明化合物は、またHIFシグナル伝達経路の阻害効果を相加的または相乗的に促進する、生物学的治療剤、例えば、抗体(例えば、アバスチン、リツキサン、アービタックス、ハーセプチン)および組み換えタンパク質と極めて有望な方法で組み合わせることもできる。
HIF制御経路阻害剤、例えば本発明化合物は、血管新生に対する他の治療薬、例えば、アバスチン、アクシチニブ、レセンチン、レゴラフェニブ、ソラフェニブまたはスニチニブと組み合わせて、好ましい効果を達成できる。プロテアソームおよびmTORの阻害剤および抗ホルモン剤およびステロイド性代謝酵素阻害剤との組合せは、それらの副作用の好ましいプロファイルのため特に適切である。
【００５６】
一般的に、本発明化合物は、他の細胞増殖抑制または細胞毒性活性剤と組み合わせて以下の目的を達成できる：
個々の活性成分での処置に比べて、腫瘍の増殖遅延、大きさの減少またはそれらの完全な消滅における改善された効果;
単剤療法の場合よりも、低用量で化学療法剤を使用する可能性；
個々の投与に比べて、より少ない副作用でより耐用性の治療の可能性;
より広範囲の腫瘍の処置の可能性;
治療に対する高応答率の達成;
現在の標準的治療と比較した患者のより長い生存期間。
加えて、本発明化合物は、また放射線療法および/または外科的介入と併用して用いることができる。
【００５７】
本発明はさらに少なくとも1種の本発明化合物を、典型的には1種以上の不活性、非毒性、薬学的に適切な助剤と共に含む医薬、および前述の目的のためのその使用を提供する。
本発明の化合物は、全身的および/または局所的に作用しうる。この目的のため、経口、非経腸、経肺、経鼻、舌下、舌側、バッカル、経直腸、皮下、経皮、経結膜、経耳経路による投与、またはインプラントまたはステントにより投与できる。
本発明化合物は、これらの投与経路について、適切な投与形態で投与できる。
【００５８】
経口投与に適する形態は、先行技術に従い働き、本発明の化合物を急速に及び/又は修飾した方法で放出し、そして本発明の化合物を結晶及び/又はアモルファスで及び/又は溶解した形態で含むもので、例えば、錠剤(素錠又は、例えば本発明の化合物の放出を制御する胃液抵抗性又は遅延溶解性又は不溶性コーティングでコーティングされた錠剤)、口腔内で急速に崩壊する錠剤又はフィルム/オブラート、フィルム/凍結乾燥製剤またはカプセル剤(例えば、ハード又はソフトゼラチンカプセル剤)、糖衣錠、顆粒剤、丸薬、散剤、乳濁液、懸濁液、エアロゾル又は溶液である。
非経腸投与は、吸収過程を迂回するもの(例えば、静脈内、動脈内、心臓内、髄腔内又は腰椎内投与)でも、吸収を伴うもの(例えば、筋肉内、皮下、皮内、経皮又は腹腔内投与)でもよい。非経腸投与の適切な投与形態は、溶液、懸濁液、乳濁液、凍結乾燥製剤又は滅菌散剤がある。
【００５９】
他の投与経路には、例えば、吸入製剤(粉末吸入製剤及びネブライザーを含む)、鼻用の滴剤、溶液又はスプレー、舐剤、舌下錠又はバッカル投与用錠剤、錠剤、フィルム/ウエハース又はカプセル剤、坐剤、耳又は眼用製剤、膣カプセル剤、水性懸濁液(ローション、振とう混合物)、親油性懸濁液、軟膏剤、クリーム剤、経皮治療システム(例えば、プラスター)、乳液剤、泥膏剤、フォーム剤、散布剤(dusting powder)、インプラント又はステントが適切である。
経口又は非経腸投与、特に経口及び静脈内投与が好ましい。
【００６０】
本発明の化合物は、記載した投与形態に変換することができる。これは、不活性で、非毒性の、薬学的に適切な助剤と混合することによりそれ自体知られた方法で行いうる。これらの添加剤は、担体(例えば、微結晶セルロース、乳糖、マンニトール)、溶媒(例えば、液体ポリエチレングリコール)、乳化剤及び分散剤又は湿潤剤(例えば、ドデシル硫酸ナトリウム、オレイン酸ポリオキシソルビタン)、結合剤(例えば、ポリビニルピロリドン)、合成及び天然のポリマー(例えばアルブミン)、安定化剤(例えば、抗酸化剤、例えばアスコルビン酸)、着色剤(例えば、無機色素、例えば、酸化鉄)及び風味剤及び/又は矯臭剤を含む。
一般に、非経腸投与で有益な結果を得るためには、約0.001ないし10mg/kg体重、好ましくは約0.01ないし1mg/kg体重の量を投与することが有利であることが判明した。経口投与においては、用量は、0.01ないし100mg/kg体重、好ましくは0.01ないし20mg/kgであり、極めて好ましくは0.1ないし10mg/kg体重である。
【００６１】
それにもかかわらず、特に体重、投与経路、活性物質に対する個体の反応、製剤の性質及び投与が行われる時間又は間隔によって、該用量から逸脱することが適当である場合があるかもしれない。それゆえ、ある場合には、前述した最小用量より低用量が十分でありうるのに対して、他の場合には述べた上限を超えなければならない。比較的大用量を投与する場合には、これらを一日を通して数回の投与に分けることが賢明でありうる。
以下の作業実施例において本発明を説明する。本発明は実施例に限られるものではない。
他に述べない限り、以下の試験及び実施例例における割合は、重量パーセントであり、部は、重量部である。溶媒比、希釈比及び液体/液体溶液の濃度値は、それぞれ容量に基づく。
【実施例】
【００６２】
A.  実施例
略語および頭字語：
abs.  無水
Ac  アセチル
aq.  水性
Ex.  実施例
Bu  ブチル
approx.  およそ(circa)、約(approximately)
CDI  1,1’-カルボニルジイミダゾール
CI  化学イオン化(MSで)
d  ダブレット(NMRで)
d  日
DAST  ジエチルアミノサルファートリフルオライド
TLC  薄層クロマトグラフィー
DCI  直接化学イオン化(MSで)
dd  ダブレットのダブレット(NMRで)
DMAP  4-N,N-ジメチルアミノピリジン
DME  1,2-ジメトキシエタン
DMF  N,N-ジメチルホルムアミド
DMSO  ジメチルスルホキシド
dt  トリプレットのダブレット(NMRで)
EDC  N’-(3-ジメチルアミノプロピル)-N-エチルカルボジイミド ヒドロクロライド
ee  エナンチオマー過剰率
EI  電子衝撃イオン化(MSで)
eq.  当量
ESI  エレクトロスプレーイオン化(MSで)
Et  エチル
GC  ガスクロマトグラフィー
h  時間
HOBt  1-ヒドロキシ-1H-ベンゾトリアゾール水和物
HPLC  高圧、高速液体クロマトグラフィー
iPr  イソプロピル
LC-MS  液体クロマトグラフィー-結合質量分析
lit.  文献(参考)
m  マルチプレット(NMRで)
Me  メチル
min  分間
MPLC  中圧液体クロマトグラフィー(シリカゲル上；「フラッシュクロマトグラフィー」とも呼ぶ)
Ms  メタンスルホニル(メシル)
MS  質量分析
NMP  N-メチル-2-ピロリジノン
NMR  核磁気共鳴分光法
Pd/C  活性炭上のパラジウム 
PEG  ポリエチレングリコール
Pr  プロピル
quart  カルテット(NMRで)
quint  クインテット(NMRで)
Rf  保持指数(TLCで)
RT  室温
Rt  保持時間(HPLCで)
s  シングレット(NMRで)
sept  セプテット(NMRで)
t  トリプレット(NMRで)
TBAF  テトラ-n-ブチルアンモニウム フルオライド
tBu  tert-ブチル
Tf  トリフルオロメチルスルホニル(トリフリル)
TFA  トリフルオロ酢酸
THF  テトラヒドロフラン
UV  紫外分光分析
v/v  容積比(溶液の)
【００６３】
HPLC、LC/MSおよびGC/MS法：
方法1(LC/MS)：
MS装置の型：Micromass ZQ；装置型HPLC：HP 1100 series；UV DAD；カラム：Phenomenex Gemini 3μ、30 mm x 3.00 mm；溶離剤A：水1 l＋50%ギ酸0.5 ml、溶離剤B：アセトニトリル1 l＋50%ギ酸0.5 ml；勾配：0.0分 90% A → 2.5分 30% A → 3.0分 5% A → 4.5分 5% A；流速：0.0分 1 ml/分 → 2.5分/3.0分/4.5分 2 ml/分；オーブン：50℃；UV検出：210 nm
方法2(LC/MS)：
装置：HPLC Agilent Series 1100を組み合わせたMicromass Quattro Micro MS；カラム：Thermo Hypersil GOLD 3μ、20 mm x 4 mm；溶離剤A：水1 l＋50%ギ酸0.5 ml、溶離剤B：アセトニトリル1 l＋50%ギ酸0.5 ml；勾配：0.0分 100% A → 3.0分 10% A → 4.0分 10% A → 4.01分 100% A(流速 2.5 ml/分)→ 5.00分 100% A；オーブン：50℃；流速：2 ml/分；UV検出：210 nm
【００６４】
方法3(LC/MS)：
MS装置の型：Micromass ZQ；装置型HPLC：Waters Alliance 2795；カラム：Phenomenex Synergi 2.5μ MAX-RP 100A Mercury 20 mm x 4 mm；溶離剤A：水1 l＋50%ギ酸0.5 ml、溶離剤B：アセトニトリル1 l＋50%ギ酸0.5 ml；勾配：0.0分 90% A → 0.1分 90% A → 3.0分 5% A → 4.0分 5% A → 4.01分 90% A；流速：2 ml/分；オーブン：50℃；UV検出：210 nm
方法4(LC/MS)：
装置：Waters UPLC Acquity を組み合わせたMicromass Quattro Premier；カラム：Thermo Hypersil GOLD 1.9μ、50 mm x 1 mm；溶離剤A：水1 l＋50%ギ酸0.5 ml、溶離剤B：アセトニトリル1 l＋50%ギ酸0.5 ml；勾配：0.0分 90% A → 0.1分 90% A → 1.5分 10% A → 2.2分 10% A；流速：0.33 ml/分；オーブン：50℃；UV検出：210 nm
方法5(LC/MS)：
装置：HPLC Agilent series 1100を組み合わせたMicromass Quattro LCZ；カラム：Phenomenex Synergi 2.5μ MAX-RP 100A Mercury 20 mm x 4 mm；溶離剤A：水1 l＋50%ギ酸0.5 ml、溶離剤B：アセトニトリル1 l＋50%ギ酸0.5 ml；勾配：0.0分 90% A → 0.1分 90% A → 3.0分 5% A → 4.0分 5% A → 4.1分 90% A；流速：2 ml/分；オーブン：50℃；UV検出：208-400 nm。
【００６５】
方法6(LC/MS)：
装置：Waters Acquity SQD UPLC System；カラム：Waters Acquity UPLC HSS T3 1.8μ 50 mm x 1 mm；溶離剤A：水1 l＋99%ギ酸0.25 ml、溶離剤B：アセトニトリル1 l＋99% ギ酸0.25 ml；勾配：0.0分 90% A → 1.2分 5% A → 2.0分 5% A；流速：0.40 ml/分；オーブン：50℃；UV検出：210-400 nm。
方法7(LC/MS)：
MS装置の型：Waters ZQ；装置型HPLC：Agilent 1100 Series；UV DAD；カラム：Thermo Hypersil GOLD 3μ、20 mm x 4 mm；溶離剤A：水1 l＋50%ギ酸0.5 ml、溶離剤B：アセトニトリル1 l＋50%ギ酸0.5 ml；勾配：0.0分 100% A → 3.0分 10% A → 4.0分 10% A → 4.1分 100% A(流速 2.5 ml/分)；オーブン：55℃；流速：2 ml/分；UV検出：210 nm
方法8(LC/MS)：
MS装置の型：Micromass ZQ；装置型HPLC：HP 1100 series；UV DAD；カラム：Phenomenex Gemini 3μ、30 mm x 3.00 mm；溶離剤A：水1 l＋50%ギ酸0.5 ml、溶離剤B：アセトニトリル1 l＋50%ギ酸0.5 ml；勾配：0.0分 90% A → 2.5分 30% A → 3.0分 5% A → 4.5分 5% A；流速：0.0分 1 ml/分 → 2.5分/3.0分/4.5分 2 ml/分；オーブン：50℃；UV検出：210 nm
【００６６】
方法9(LC/MS)：
装置：Micromass GCT、GC 6890；カラム：Restek RTX-35、15 m x 200 μm x 0.33 μm；ヘリウムを通気した一定流速：0.88 ml/分；オーブン：70℃；入力：250℃；勾配：70℃、30℃/分 → 310℃(3分維持)。
方法10(分析的HPLC)：
装置：DAD検出を組み合わせたHP 1100；カラム：Kromasil 100 RP-18、60 mm x 2.1 mm、3.5 μm；溶離剤A：過塩素酸(70%濃度)5 ml/lの水、溶離剤B：アセトニトリル；勾配：0分 2% B → 0.5分 2% B → 4.5分 90% B → 6.5分 90% B → 6.7分 2% B → 7.5分 2% B；流速：0.75 ml/分；カラム 温度：30℃；UV検出：210 nm
方法11(分取用HPLC)：
カラム：GROM-SIL 120 ODS-4 HE、10 μm、250 mm x 30 mm；溶離剤および勾配プログラム：アセトニトリル/0.1%ギ酸水溶液 10：90(0-3分)、アセトニトリル/0.1% ギ酸水溶液10：90 → 95：5(3-27分)、アセトニトリル/0.1% ギ酸水溶液95：5(27-34分)、アセトニトリル/0.1% ギ酸水溶液10：90(34-38分)；流速：50 ml/分、温度：22℃；UV検出：254 nm
【００６７】
方法12(分取用HPLC)：
カラム：Daiso C18 Bio Spring カラム、10 μm、300 mm x 100 mm；溶離剤および勾配プログラム：水/メタノール 80：20(0-6分)、水/メタノール 80：20 → 20：80(6-60分)、水/メタノール 20：80(60-95分)、水/メタノール 10：90(95-105分)、水/メタノール 80：20(105-113分)；流速：250 ml/分、温度：25℃；UV検出：240 nm
方法13(分取用HPLC)：
カラム：Reprosil-Pur C18、10 μm、250 mm x 30 mm；溶離剤および勾配プログラム：アセトニトリル/0.1% ギ酸水溶液10：90(0-3分)、アセトニトリル/0.1% ギ酸水溶液10：90 → 95：5(3-27分)、アセトニトリル/0.1% ギ酸水溶液95：5(27-34分)、アセトニトリル/0.1% ギ酸水溶液10：90(34-38分)；流速：50 ml/分、温度：22℃；UV検出：254 nm
方法14(LC/MS)：
装置：Waters Acquity SQD UPLC System；カラム：Waters Acquity UPLC HSS T3 1.8μ、30 mm x 2 mm；溶離剤 A：水1 l+99% ギ酸0.25 ml、溶離剤 B：アセトニトリル1 l+99% ギ酸0.25 ml；勾配：0.0 分 90% A → 1.2 分 5% A → 2.0 分 5% A；流速：0.60 ml/分；オーブン：50℃；UV検出：208-400 nm。
以下に調製が明確に記載されていないすべての反応物または試薬については、それらは一般的に入手可能なところから商業的に得た。以下に調製が同様に明確に示されておらず、市販で入手できないか一般にアクセスできないところから得た他の全ての反応物または試薬については、それらの調製を記載した刊行文献の参照をつけた。
【００６８】
出発化合物および中間体：
実施例1A
5-[1-(3-ブロモベンジル)-5-メチル-1H-ピラゾール-3-イル]-3-[4-(トリフルオロメトキシ)フェニル]-1,2,4-オキサジアゾール
【化２０】
2013526497.tif 000021
工程1： 5-(5-メチル-1H-ピラゾール-3-イル)-3-[4-(トリフルオロメトキシ)フェニル]-1,2,4-オキサジアゾール
【化２１】
2013526497.tif 000022
1,1’-カルボニルジイミダゾール20.25 g(125 mmol)の無水DMF懸濁液75 ml を、室温で15分以内に、5-メチル-1H-ピラゾール-3-カルボン酸15.0 g(119 mmol)の無水DMF溶液75 mlに滴下した。室温で1時間45分撹拌した後、N’-ヒドロキシ-4-(トリフルオロメトキシ)ベンゼンカルボキシミドアミド26.19 g(119 mmol)を加えた。続いて、反応混合物を110℃で4時間加熱した。冷却した後、大部分の溶媒をロータリーエバポレーターで除去した。残渣に水800 mlを加え、これを数分間撹拌した。不溶物を吸引濾過し、ジエチルエーテルで洗浄した。濾液からエーテル相を除去し、水相をもう1回ジエチルエーテルで抽出した。メタノール25 mlを合わせたエーテル相に加え、予め吸引濾過した生成物をそこに懸濁させた。数分間撹拌した後、混合物を再び吸引濾過した。残渣を高真空下乾燥させ、表題化合物(8.79 g)の第一分画を得た。濾液に同量の水を加え、振とうして抽出した。相分離後、有機相を飽和塩化ナトリウム溶液で洗浄し、無水硫酸マグネシウムで乾燥させ、最後に溶媒をロータリーエバポレーターで除去した。残渣を高真空下乾燥させ、このようにして、表題化合物の第二分画を得た(24.43 g)。こうして、合わせて表題化合物33.32 g(理論値の90%)を得た。
1H NMR (400 MHz、CDCl3、δ/ppm)：10.64 (broad、1H)、8.23 (d、2H)、7.34 (d、2H)、6.82 (s、1H)、2.46 (s、3H)。
LC/MS (方法4、ESIpos)：Rt = 1.28 分、m/z = 311 [M+H]+。
【００６９】
工程2： 5-[1-(3-ブロモベンジル)-5-メチル-1H-ピラゾール-3-イル]-3-[4-(トリフルオロメトキシ)フェニル]-1,2,4-オキサジアゾール
【化２２】
2013526497.tif 000023
固体カリウムtert-ブトキシド6.58 g(58.7 mmol)を室温で、実施例1A/工程1からの化合物14.0 g(45.1 mmol)および3-ブロモベンジルブロマイド13.54 g(54.2 mmol)の無水ジオキサン溶液450 mlに加えた。反応混合物をまず室温で16時間撹拌し、続いて、45℃でさらに2時間、反応を完了させるため撹拌した。続いて、水500 mlを加え、混合物を酢酸エチル約300 mlで抽出した。合わせた有機抽出物を、水および飽和塩化ナトリウム溶液で順に洗浄し、無水硫酸マグネシウムで乾燥させ、最後に溶媒をロータリーエバポレーターで除去した。生成した粗生成物を、ペンタン525 mlおよびジイソプロピルエーテル35 mlの混合物で撹拌して精製した。固体を吸引濾過した後、乾燥させ、表題化合物19.08 g(理論値の84%、95%純度)を得た。
1H NMR (400 MHz、CDCl3、δ/ppm)：8.25 (d、2H)、7.44 (d、1H)、7.33 (d、2H)、7.32 (s、1H)、7.22 (t、1H)、7.08 (d、1H)、6.83 (s、1H)、5.43 (s、2H)、2.30 (s、3H)。
LC/MS(方法6、ESIpos)：Rt = 1.45 分、m/z = 479/481 [M+H]+。
【００７０】
実施例2A
5-[1-(3-ブロモベンジル)-5-メチル-1H-ピラゾール-3-イル]-3-{4-[1-(トリフルオロメチル)シクロプロピル]フェニル}-1,2,4-オキサジアゾール
【化２３】
2013526497.tif 000024
【００７１】
工程1： 1-ブロモ-4-[1-(トリフルオロメチル)シクロプロピル]ベンゼン
【化２４】
2013526497.tif 000025
最初に、モンモリロナイトにおいて活性化した臭化亜鉛を以下の通り調製した：まず臭化亜鉛7.0 g(31.1 mmol)を加えたメタノール225 mlの1リットルフラスコに、K10 モンモリロナイト28.2 gを加えた。続いて、懸濁液を室温で1時間撹拌した。続いて混合物をロータリーエバポレーターで濃縮乾固した。残った細かい粉末を、緩やかな真空下(約500 mbar)温度200℃の砂浴で1時間加熱し、続いてアルゴン下冷却した。
続いて表題化合物を以下の通り調製した：1-フェニル-1-(トリフルオロメチル)シクロプロパン49.63 g(267 mmol)をまず、ペンタン1.25リットルに加え、上で得たモンモリロナイトにおいて活性化した臭化亜鉛を加えた。続いて、反応容器を、光の入射を減じるため、外部をアルミニウムホイルで包んだ。撹拌下、臭素137 ml(2.67 mol)をゆっくりと加えた。続いて、反応混合物を暗室で、室温で16時間撹拌した。続いて、氷冷下、飽和亜硫酸ナトリウム溶液1リットルを滴下した。固体を吸引濾過し、吸引濾過し、ペンタンで2回洗浄した。相分離後、濾液をそれぞれ1リットルのペンタンでもう2回抽出した。合わせた有機抽出物を無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過し、緩やかな真空でのみ溶媒をロータリーエバポレーターで除去した。表題化合物77.18 g(92%純度、理論値の100%)を得た。
1H NMR (400 MHz、CDCl3、δ/ppm)：7.47 (d、2H)、7.33 (s、2H)、1.37-1.34 (m、2H)、1.03-0.98 (m、2H)。
GC/MS (方法9、ESIpos)：Rt = 3.43 分、m/z = 264/266 [M]+。
【００７２】
工程2： 4-[1-(トリフルオロメチル)シクロプロピル]ベンゾニトリル
【化２５】
2013526497.tif 000026
実施例2A/工程1からの化合物75.0 g(283 mmol)のDMF990 mlおよび水10 mlの混合物中の溶液を、繰り返し、緩やかな真空にし、アルゴンを注入することにより酸素を除去した。続いて、シアン化亜鉛37.87 g(322 mmol)およびテトラキス(トリフェニルホスフィン)パラジウム(0)32.69 g(28.3 mmol)を加えた。続いて、反応混合物を120℃で5時間加熱した。室温に冷却した後、不溶物を濾過し、残渣を少量のDMFで洗浄した。続いて濾液について、溶媒をロータリーエバポレーターで除去した。生成した粗生成物を酢酸エチル1.5リットルに溶解し、混合物をそれぞれ500 mlの飽和塩化アンモニウム溶液で2回および飽和塩化ナトリウム溶液500 mlで1回洗浄した。有機相を無水硫酸マグネシウムで乾燥させた後、混合物を濾過し、濾液をロータリーエバポレーターで濃縮した。得られた油状物を、溶離剤としてシクロヘキサン/酢酸エチル40：1を用いたシリカゲル175 gで吸引濾過することにより精製した。生成物分画を濃縮し、高真空下乾燥させ、表題化合物49.7 g(理論値の83%)を得た。
1H NMR (400 MHz、CDCl3、δ/ppm)：7.65 (d、2H)、7.57 (d、2H)、1.46-1.42 (m、2H)、1.09-1.03 (m、2H)。
GC/MS (方法9、ESIpos)：Rt = 3.79 分、m/z = 211 [M]+。
【００７３】
工程3： N’-ヒドロキシ-4-[1-(トリフルオロメチル)シクロプロピル]ベンゼンカルボキシミド アミド
【化２６】
2013526497.tif 000027
ヒドロキシルアンモニウムクロライド14.48 g(208 mmol)およびトリエチルアミンを、実施例2A/工程2からの化合物20.0 g(94.7 mmol)のエタノール溶液500 mlに加えた。反応混合物を2時間加熱還流した。続いて、溶媒の約半分をロータリーエバポレーターで除去した。残渣に水1.5リットルを加え、精製した懸濁液を室温で20 分撹拌した。続いて、固体を吸引濾過し、少量の冷水で洗浄し、高真空下乾燥させた。さらなる精製のため、これをペンタン120 mlおよびジクロロメタン30 ml中で撹拌した。固体を再び吸引濾過して乾燥させ、表題化合物15.79 g(理論値の68%)を得た。
1H NMR (400 MHz、DMSO-d6、δ/ppm)：9.68 (s、1H)、7.67 (d、2H)、7.46 (d、2H)、5.83 (s、broad、2H)、1.36-1.32 (m、2H)、1.15-1.11 (m、2H)。
LC/MS (方法4、ESIpos)：Rt = 0.80 分、m/z = 245 [M+H]+。
【００７４】
工程4： 5-(5-メチル-1H-ピラゾール-3-イル)-3-{4-[1-(トリフルオロメチル)シクロプロピル]フェニル}-1,2,4-オキサジアゾール
【化２７】
2013526497.tif 000028
1,1’-カルボニルジイミダゾール6.75 g(41.6 mmol)の無水DMF懸濁液25 ml に、室温で15 分以内に、5-メチル-1H-ピラゾール-3-カルボン酸5.0 g(36.6 mmol)の無水DMF溶液25 mlを加えた。混合物を室温で1時間45分撹拌した後、実施例2A/工程3からの化合物9.68 g(39.6 mmol)を加えた。続いて、反応混合物を110℃で2.5時間加熱した。室温に冷却した後、激しい撹拌下、水800 mlを徐々に加えたところ、生成物が沈殿した。固体を吸引濾過し、少量の冷水で洗浄した。いまだ湿潤した粗生成物をエタノール300 mlおよび水350 mlの沸騰混合物から再結晶した。表題化合物11.03 g(理論値の83%)を得た。
1H NMR (400 MHz、CDCl3、δ/ppm)：11.04 (s、broad、1H)、8.16 (d、2H)、7.60 (d、2H)、6.82 (s、1H)、2.45 (s、3H)、1.43-1.40 (m、2H)、1.11-1.07 (m、2H)。
LC/MS (方法6、ESIpos)：Rt = 1.14 分、m/z = 335 [M+H]+。
工程5： 5-[1-(3-ブロモベンジル)-5-メチル-1H-ピラゾール-3-イル]-3-{4-[1-(トリフルオロメチル)シクロプロピル]フェニル}-1,2,4-オキサジアゾール
【化２８】
2013526497.tif 000029
0℃において固体カリウムtert-ブトキシド436 mg(3.89 mmol)を、実施例2A/工程4からの化合物1.0 g(2.99 mmol)および3-ブロモベンジルブロマイド897 mg(3.59 mmol)の無水ジオキサン溶液30 mlに加えた。続いて、反応混合物を室温で16時間撹拌した。水約200 mlを加え、混合物をそれぞれ約100 mlの酢酸エチルで抽出した。合わせた有機抽出物を、水および飽和塩化ナトリウム溶液で順に洗浄し、無水硫酸マグネシウムで乾燥させ、最後に溶媒をロータリーエバポレーターで除去した。得られた粗生成物を、まず、溶離剤としてシクロヘキサン/酢酸エチル10：1を用いたシリカゲルで吸引濾過することにより精製した。生成物をさらにペンタン50 mlおよびジエチルエーテル2 mlの混合物で撹拌することにより精製した。固体を吸引濾過した後、乾燥させ、表題化合物1.34 g(理論値の88%)を得た。
1H NMR (400 MHz、CDCl3、δ/ppm)：8.19 (d、2H)、7.59 (d、2H)、7.44 (d、1H)、7.31 (s、1H)、7.22 (t、1H)、7.08 (d、1H)、6.83 (s、1H)、5.43 (s、2H)、2.28 (s、3H)、1.42-1.39 (m、2H)、1.11-1.07 (m、2H)。
LC/MS (方法6、ESIpos)：Rt = 1.48 分、m/z = 503/505 [M+H]+。
【００７５】
実施例3A
5-[1-(3-ブロモベンジル)-5-メチル-1H-ピラゾール-3-イル]-3-[4-(1,1,1-トリフルオロ-2-メチルプロパン-2-イル)フェニル]-1,2,4-オキサジアゾール
【化２９】
2013526497.tif 000030
工程1： 2-(4-ブロモフェニル)-1,1,1-トリフルオロプロパン-2-オール
【化３０】
2013526497.tif 000031
ジクロロ(ジメチル)チタニウムのヘプタン/ジクロロメタン混合物の懸濁液をまず以下の通り調製した：1 Mチタニウムテトラクロライドのジクロロメタン溶液100 ml(100 mmol)を-30℃に冷却し、1 Mジメチル亜鉛のヘプタン溶液100 ml(100 mmol)を滴下し、混合物を-30℃でさらに30 分撹拌した。続いて、この懸濁液を-40℃に冷却し、1-(4-ブロモフェニル)-2,2,2-トリフルオロエタノン10 g(39.5 mmol)のジクロロメタン溶液50 mlを加えた。混合物を-40℃でさらに5 分撹拌し、続いて温度を室温にし、混合物を室温でさらに2時間撹拌した。氷冷下、水50 mlをゆっくり滴下し、続いて混合物をさらに水300 mlで希釈した。混合物をジクロロメタンで2回抽出し、合わせたジクロロメタン相を水で1回洗浄し、無水硫酸マグネシウムで乾燥させ、濾過し、溶媒をロータリーエバポレーターで除去した。残渣をシリカゲルクロマトグラフィーカラム(溶離剤：85：15 シクロヘキサン/酢酸エチル)で精製した。1H NMRによるといまだ溶媒を含有する、表題化合物10.5 g(理論値の100 %)を得た。
1H NMR (400 MHz、CDCl3、δ/ppm)：7.52 (d、2H)、7.47 (d、2H)、1.76 (s、3H)。
LC/MS (方法1、ESIpos)：Rt = 2.27 分、m/z = 268 [M+H]+。
【００７６】
工程2： 2-(4-ブロモフェニル)-1,1,1-トリフルオロプロパン-2-イル メタンスルホネート
【化３１】
2013526497.tif 000032
アルゴン下、水素化ナトリウム3.12 g(78.05 mmol、60% 鉱油中)をTHF45 mlに加え、実施例3A/工程1で得られた化合物10.5 g(39.03 mmol)のTHF溶液20 mlを室温で滴下した。混合物を室温で1時間および40℃で30 分撹拌した後、メタンスルホニルクロライド8.94 g(78.05 mmol)のTHF溶液45 ml を滴下し、反応混合物を40℃でさらに60 分撹拌した。続いて、混合物に水50 mlをゆっくり滴下し、飽和炭酸水素ナトリウム水溶液で希釈し、酢酸エチルで2回抽出した。合わせた酢酸エチル相を無水硫酸マグネシウムで乾燥させ、濾過し、溶媒をロータリーエバポレーターで除去した。残渣をヘキサン中で撹拌し、得られた固体を濾過し、減圧下乾燥させた。表題化合物12.4 g(理論値の92%)を得た。
1H NMR (400 MHz、CDCl3、δ/ppm)：7.58 (d、2H)、7.43 (d、2H)、3.16 (s、3H)、2.28 (s、3H)。
LC/MS (方法2、ESIpos)：Rt = 2.32 分、m/z = 364 [M+NH4]+。
工程3： 1-ブロモ-4-(1,1,1-トリフルオロ-2-メチルプロパン-2-イル)ベンゼン
【化３２】
2013526497.tif 000033
実施例3A/工程2で得られた化合物12.4 g(35.72 mmol)をまず、ジクロロメタン250 mlに加え、混合物を0℃に冷却した。続いて、0℃で撹拌下、2 Mトリメチルアルミニウム溶液35.7 ml(71.44 mmol)をゆっくりと滴下し、続いて混合物を室温にし、室温でさらに1.5時間撹拌した。飽和炭酸水素ナトリウム水溶液120 ml、および続いて飽和塩化ナトリウム水溶液40 mlをゆっくりと混合物に滴下した。混合物をkieselguhrで濾過し、kieselguhrをジクロロメタンで2回洗浄した。合わせたジクロロメタン相を飽和塩化ナトリウム水溶液で1回洗浄し、無水硫酸マグネシウムで乾燥させ、溶媒をロータリーエバポレーターで除去した。表題化合物8.69 g(理論値の87%)を純度95%で得た。
1H NMR (400 MHz、CDCl3、δ/ppm)：7.49 (d、2H)、7.33 (d、2H)、1.55 (s、6H)。
GC/MS (方法9、ESIpos)：Rt = 3.48 分、m/z = 266 [M]+。
【００７７】
工程4： 4-(1,1,1-トリフルオロ-2-メチルプロパン-2-イル)ベンゼンカルボニトリル
【化３３】
2013526497.tif 000034
アルゴン下、実施例3A/工程3から得られた化合物3.34 g(12.50 mmol)をまず、脱気したDMF2.5 mlに加え、シアン化亜鉛881 mg(7.50 mmol)およびテトラキス(トリフェニルホスフィン)パラジウム(0)867 mg(0.75 mmol)を加え、混合物を80℃で一夜撹拌した。室温に冷却した後、反応混合物を酢酸エチルで希釈し、固体成分を濾過した。濾液を2 Nアンモニア水溶液で2回および飽和塩化ナトリウム水溶液で1回洗浄し、無水硫酸マグネシウムで乾燥させ、溶媒をロータリーエバポレーターで除去した。残渣をシリカゲルクロマトグラフィーカラムで精製した(溶離剤：85：15 シクロヘキサン/酢酸エチル)。表題化合物2.08 g(78%理論値の)を得た。
1H NMR (400 MHz、CDCl3、δ/ppm)：7.68 (d、2H)、7.62 (d、2H)、1.60 (s、6H)。
GC/MS (方法9、ESIpos)：Rt = 3.83 分、m/z = 213 [M]+。
【００７８】
工程5： N’-ヒドロキシ-4-(1,1,1-トリフルオロ-2-メチルプロパン-2-イル)ベンゼンカルボキシミド アミド
【化３４】
2013526497.tif 000035
実施例3A/工程4からの化合物2.40 g(11.26 mmol)、ヒドロキシルアミンヒドロクロライド1.72 g(24.77 mmol)およびトリエチルアミン3.45 ml(24.77 mmol)のエタノール混合物60 mlを還流下1時間撹拌した。室温に冷却した後、溶媒をロータリーエバポレーターで除去した。酢酸エチルを残渣に加え、存在する固体を濾過した。酢酸エチル溶液を水および飽和塩化ナトリウム水溶液で順に洗浄し、無水硫酸マグネシウムで乾燥させ、濾過した。溶媒を除去した後、得られた油状物を石油エーテルで摩砕した。生成した固体を吸引濾過し、高真空下乾燥させ、表題化合物2.65 g(理論値の96%)を得た。
1H NMR (400 MHz、CDCl3、δ/ppm)：8.0 (s、broad、1H)、7.62 (d、2H)、7.52 (d、2H)、4.88 (s、broad、2H)、1.60 (s、6H)。
LC/MS (方法2、ESIpos)：Rt = 1.34 分、m/z = 247 [M+H]+。
工程6： 5-(5-メチル-1H-ピラゾール-3-イル)-3-[4-(1,1,1-トリフルオロ-2-メチルプロパン-2-イル)フェニル]-1,2,4-オキサジアゾール
【化３５】
2013526497.tif 000036
EDC11.6 g(60.0 mmol)、HOBt8.13 g(60.0 mmol)および実施例3A/工程5からの化合物14.8 g(60.0 mmol)を、室温で、5-メチル-1H-ピラゾール-3-カルボン酸7.57 g(60.0 mmol)の無水DMF溶液300 mlに続いて加えた。混合物をまず室温で2時間、および続いて140℃で5時間撹拌した。冷却した後、反応混合物を氷水900 ml中で撹拌した。沈殿した生成物を吸引濾過し、冷水で洗浄し、続いて高真空下乾燥させた。表題化合物14.7 g(理論値の73%)を得た。
1H NMR (400 MHz、DMSO-d6、δ/ppm)：11.80 (s、broad、1H)、8.17 (d、2H)、7.63 (d、2H)、6.83 (s、1H)、2.46 (s、3H)、1.63 (s、6H)。
LC/MS(方法4、ESIpos)：Rt = 1.34 分、m/z = 337 [M+H]+。
【００７９】
工程7： 5-[1-(3-ブロモベンジル)-5-メチル-1H-ピラゾール-3-イル]-3-[4-(1,1,1-トリフルオロ-2-メチルプロパン-2 -イル)フェニル]-1,2,4-オキサジアゾール
【化３６】
2013526497.tif 000037
実施例2A/工程5に記載したのと類似の方法により、実施例3A/工程6からの化合物750 mg(2.23 mmol)および3-ブロモベンジルブロマイド669 mg(2.68 mmol)を用いて表題化合物1.02 g(理論値の84%、94%純度)を得た。
1H NMR (400 MHz、CDCl3、δ/ppm)：8.20 (d、2H)、7.62 (d、2H)、7.44 (d、1H)、7.32 (s、1H)、7.22 (t、1H)、7.08 (d、1H)、6.83 (s、1H)、5.43 (s、2H)、2.29 (s、3H)、1.63 (s、6H)。
LC/MS (方法6、ESIpos)：Rt = 1.49 分、m/z = 505/507 [M+H]+。
【００８０】
実施例4A
5-[1-(3-ブロモベンジル)-5-メチル-1H-ピラゾール-3-イル]-3-[4-(テトラヒドロ-2H-ピラン-4-イル)フェニル]-1,2,4-オキサジアゾール
【化３７】
2013526497.tif 000038
工程1： 4-(テトラヒドロ-2H-ピラン-4-イル)ベンゾニトリル
【化３８】
2013526497.tif 000039
ニッケル(II)アイオダイド186 mg(0.594 mmol)、trans-2-アミノシクロヘキサノールヒドロクロライド90 mg(0.594 mmol)およびナトリウムヘキサメチルジシラジド3.63 g(19.8 mmol)を、4-シアノフェニルボロン酸 [M.Nishimura et al.、Tetrahedron 2002、58 (29)、5779-5788] 2.91 g(19.8 mmol)のイソプロパノール溶液20 mlに加えた。こうして得られた懸濁液をアルゴン雰囲気下、室温で5 分攪拌した。続いて、4-ヨードテトラヒドロピラン [Heuberger et al.、J.Chem.Soc.1952、910] 2.1 g(9.90 mmol)を加えた。反応混合物を温度75℃で15時間攪拌した後、これを室温に冷却し、続いて、ジクロロメタンを用いたシリカゲル約50 gによる濾過により、無機塩類を実質的に除去した。粗生成物をMPLC(シリカゲル、溶離剤：ジクロロメタン)により精製した。表題化合物986 mg(理論値の53%)を得た。
1H NMR (400 MHz、CDCl3、δ/ppm)：7.60 (d、2H)、7.32 (d、2H)、4.12-4.07 (m、2H)、3.56-3.50 (m、2H)、2.87-2.79 (m、1H)、1.86-1.73 (m、4H)。
GC/MS (方法9、ESIpos)：Rt = 5.97 分、m/z = 187 [M]+。
【００８１】
工程2： N’-ヒドロキシ-4-(テトラヒドロ-2H-ピラン-4-イル)ベンゼンカルボキシミド アミド
【化３９】
2013526497.tif 000040
実施例4A/工程1からの化合物480 mg(2.56 mmol)、ヒドロキシルアミンヒドロクロライド392 mg(5.64 mmol)およびトリエチルアミン786 μl(5.64 mmol)をエタノール18 mlで16時間加熱還流した。続いて、揮発性成分の大部分をロータリーエバポレーターで除去した。残った残渣に水50 mlを加え、室温で数分間攪拌した。続いて、固体を吸引濾過し、少量の冷水で洗浄し、最後に高真空下乾燥させた。表題化合物525 mg(理論値の93%)を得た。
1H NMR (400 MHz、CDCl3、δ/ppm)：7.58 (d、2H)、7.26 (d、2H)、6.79 (broad、1H)、4.82 (s、broad、2H)、4.11-4.05 (m、2H)、3.57-3.50 (m、2H)、2.83-2.74 (m、1H)、1.87-1.73 (m、4H)。
LC/MS (方法2、ESIpos)：Rt = 0.92 分、m/z = 221 [M+H]+。
【００８２】
工程3： 5-(5-メチル-1H-ピラゾール-3-イル)-3-[4-(テトラヒドロ-2H-ピラン-4-イル)フェニル]-1,2,4-オキサジアゾール
【化４０】
2013526497.tif 000041
EDC785 mg(4.10 mmol)、HOBt627 mg(4.10 mmol)および実施例4A/工程2からの化合物820 mg(3.72 mmol)を順に、室温で、5-メチル-1H-ピラゾール-3-カルボン酸469 mg(3.72 mmol)の無水DMF溶液15 mlに加えた。混合物をまず室温で16時間および続いて140℃で20 分攪拌した。冷却した後、水100 mlを反応混合物に加え、それぞれ約100 mlの酢酸エチルで3回抽出した。合わせた有機抽出物を飽和塩化ナトリウム溶液で洗浄し、無水硫酸マグネシウムで乾燥させ、および最後に乾燥するまでロータリーエバポレーターで濃縮した。残った残渣を使用して、アセトニトリルからの攪拌抽出して表題化合物450 mgを得て、さらにHPLC(方法13)による母液の精製により表題化合物97 mgを得た(総収量は理論値の47%)。
1H NMR (400 MHz、DMSO-d6、δ/ppm)：13.52 (s、1H)、8.01 (d、2H)、7.49 (d、2H)、6.79 (s、1H)、3.99-3.95 (m、2H)、3.49-3.42 (m、2H)、2.92-2.84 (m、1H)、2.34 (s、3H)、1.77-1.65 (m、4H)。
LC/MS (方法6、ESIpos)：Rt = 0.98 分、m/z = 311 [M+H]+。
工程4： 5-[1-(3-ブロモベンジル)-5-メチル-1H-ピラゾール-3-イル]-3-[4-(テトラヒドロ-2H-ピラン-4-イル)フェニル]-1,2,4-オキサジアゾール
【化４１】
2013526497.tif 000042
実施例1A/工程2に記載したのと類似の方法により、実施例4A/工程3からの化合物250 mg(0.806 mmol)および3-ブロモベンジルブロマイド242 mg(0.967 mmol)を用いて表題化合物338 mg(理論値の87%)を得た。生成物の最終精製は、ここでは数滴のジクロロメタンを加えたペンタン/ジイソプロピルエーテル(5：1)10 mlでの攪拌抽出により行った。
1H NMR (400 MHz、CDCl3、δ/ppm)：8.17 (d、2H)、7.44 (d、1H)、7.37 (d、2H)、7.32 (s、1H)、7.22 (t、1H)、7.08 (d、1H)、6.83 (s、1H)、5.43 (s、2H)、4.13-4.08 (m、2H)、2.54 (dt、2H)、2.88-2.79 (m、1H)、2.28 (s、3H)、1.92-1.78 (m、4H)。
LC/MS (方法4、ESIpos)：Rt = 1.52 分、m/z = 479/481 [M+H]+。
【００８３】
実施例5A
5-[1-(3-ブロモベンジル)-5-メチル-1H-ピラゾール-3-イル]-3-[4-(4-フルオロテトラヒドロ-2H-ピラン-4-イル)フェニル]-1,2,4-オキサジアゾール
【化４２】
2013526497.tif 000043
工程1： 4-(4-ヒドロキシテトラヒドロ-2H-ピラン-4-イル)ベンゼンカルボニトリル
【化４３】
2013526497.tif 000044
不活性条件下、2 Mイソプロピルマグネシウムクロライド109 ml(218 mmol)のジエチルエーテル溶液を、-40℃において、4-ヨードベンゾニトリル50.0 g(218 mmol)の無水THF溶液1000 mlに加えた。混合物を同温で1.5時間攪拌した後、テトラヒドロ-4H-ピラン-4-オン32.8 g(327 mmol)の無水THF溶液250 mlを加えた。添加が終了すると、反応混合物をまず40℃で10 分、続いて0℃で30 分および最後に室温で60 分攪拌した。続いて飽和塩化アンモニウム水溶液約20 mlを-20℃で加えた。続いて、溶媒をロータリーエバポレーターで実質的に除去した。残った残渣に1000 ml水を加え、これをそれぞれ約500 mlのジクロロメタンで3回抽出した。合わせた有機抽出物を水および飽和塩化ナトリウム溶液で順に洗浄した。無水硫酸マグネシウムで乾燥させた後、混合物を濾過し、溶媒をロータリーエバポレーターで除去した。生成した粗生成物をシクロヘキサン/酢酸エチル10：1で撹拌した。表題化合物19.3 g(理論値の43%)を得た。
1H NMR (400 MHz、DMSO-d6、δ/ppm)：7.80 (d、2H)、7.70 (d、2H)、5.30 (s、1H)、3.81-3.70 (m、4H)、2.02-1.94 (m、2H)、1.51-1.48 (m、2H)。
LC/MS (方法4、ESIpos)：Rt = 0.71 分、m/z = 186 [M-H2O+H]+、204 [M+H]+。
【００８４】
工程2： 4-(4-フルオロテトラヒドロ-2H-ピラン-4-イル)ベンゼンカルボニトリル
【化４４】
2013526497.tif 000045
不活性条件下、ジエチルアミノサルファートリフルオライド(DAST)6.19 g(38.4 mmol)のジクロロメタン溶液58 mlを、-78℃において、実施例5A/工程1からの化合物6.5 g(31.98 mmol)のジクロロメタン懸濁液800 mlに滴下した。-78℃で30 分後、反応混合物を氷/水浴を用いて急速に-20℃に温めた。約30秒後、1 M水酸化ナトリウム溶液200 mlを加え、混合物を室温に温めた。水500 mlで希釈した後、混合物をそれぞれ約200 mlのジエチルエーテルで2回抽出した。合わせた有機抽出物を無水硫酸マグネシウムで乾燥させ、濾過した後、溶媒をロータリーエバポレーターで除去した。粗生成物をMPLC(シリカゲル、溶離剤：10：1→ 5：1 → 2：1 → 1：1 シクロヘキサン/酢酸エチル)で精製した。表題化合物3.73 g(理論値の57%)を得た。
1H NMR (400 MHz、CDCl3、δ/ppm)：7.68 (d、2H)、7.50 (d、2H)、3.98-3.83 (m、4H)、2.23-2.05 (m、2H)、1.91-1.85 (m、2H)。
GC/MS (方法9、ESIpos)：Rt = 5.82 分、m/z = 205 [M]+。
【００８５】
工程3： 4-(4-フルオロテトラヒドロ-2H-ピラン-4-イル)-N’-ヒドロキシベンゼンカルボキシミド アミド
【化４５】
2013526497.tif 000046
実施例4A/工程2に記載した方法により、実施例5A/工程2からの化合物3.5 g(17.05 mmol)から表題化合物3.57 g(理論値の88%)を得た。この場合の反応時間は2時間であった。
1H NMR (500 MHz、DMSO-d6、δ/ppm)：9.64 (s、1H)、7.70 (d、2H)、7.44 (d、2H)、5.81 (s、2H)、3.88-3.83 (m、2H)、3.73-3.67 (m、2H)、2.23-2.06 (m、2H)、1.87-1.81 (m、2H)。
LC/MS (方法4、ESIpos)：Rt = 0.40 分、m/z = 239 [M+H]+。
工程4： 3-[4-(4-フルオロテトラヒドロ-2H-ピラン-4-イル)フェニル]-5-(5-メチル-1H-ピラゾール-3-イル)-1,2,4-オキサジアゾール
【化４６】
2013526497.tif 000047
5-メチル-1H-ピラゾール-3-カルボン酸4.30 g(34.1 mmol)の無水DMF溶液20 mlを、室温で約15 分以内に、1,1’-カルボニルジイミダゾール(CDI)5.81 g(35.8 mmol)の無水DMF懸濁液25 mlに滴下した。混合物を室温で105 分攪拌した後、実施例5A/工程3からの化合物8.12 g(34.1 mmol)を加えた。続いて、反応混合物を110℃で5時間加熱した。室温に冷却した後、混合物を攪拌しながら、水800 mlにゆっくりと加えた。この過程で、生成物が沈殿した。これを吸引濾過し、水で洗浄した。続いて、湿った粗生成物を、エタノール430 mlから再結晶した。固体を濾過し、乾燥させ、表題化合物8.31 g(理論値の74%)を得た。更なる分画を、母液を濃縮することにより得た(85%純度で1.69 g、理論値の13%)。
1H NMR (400 MHz、CDCl3、δ/ppm)：10.73 (broad、1H)、8.20 (d、2H)、7.52 (d、2H)、6.81 (s、1H)、4.00-3.88 (m、4H)、2.45 (s、3H)、2.30-2.11 (m、2H)、1.98-1.91 (m、2H)。
LC/MS (方法1、ESIpos)：Rt = 4.24 分、m/z = 329 [M+H]+。
【００８６】
工程5： 5-[1-(3-ブロモベンジル)-5-メチル-1H-ピラゾール-3-イル]-3-[4-(4-フルオロテトラヒドロ-2H-ピラン-4-イル)フェニル]-1,2,4-オキサジアゾール
【化４７】
2013526497.tif 000048
実施例1A/工程2に記載したのと類似の方法により、実施例5A/工程4からの化合物250 mg(0.761 mmol)および3-ブロモベンジルブロマイド228 mg(0.914 mmol)から表題化合物355 mg(理論値の94%)を得た。反応混合物を45℃に加熱して用いることは可能であった。生成物の最終精製は、ジクロロメタンを数滴加えたペンタン/ジイソプロピルエーテル(5：1)10 mlから攪拌抽出により、行った。
1H NMR (400 MHz、CDCl3、δ/ppm)：8.23 (d、2H)、7.53 (d、2H)、7.44 (d、1H)、7.32 (s、1H)、7.23 (t、1H)、7.08 (d、1H)、6.84 (s、1H)、5.43 (s、2H)、4.00-3.87 (m、4H)、2.29 (s、3H)、2.30-2.11 (m、2H)、1.98-1.91 (m、2H)。
LC/MS (方法4、ESIpos)：Rt = 1.52 分、m/z = 497/499 [M+H]+。
【００８７】
実施例6A
5-[1-(3-ブロモベンジル)-5-メチル-1H-ピラゾール-3-イル]-3-[4-(3-フルオロオキセタン-3-イル)フェニル]-1,2,4-オキサジアゾール
【化４８】
2013526497.tif 000049
工程1： 4-(3-ヒドロキシオキセタン-3-イル)ベンゼンカルボニトリル
【化４９】
2013526497.tif 000050
不活性条件下、2 Mイソプロピルマグネシウムクロライドのジエチルエーテル溶液11 ml(21.8 mmol)を-40℃において、4-ヨードベンゾニトリル5.0 g(21.8 mmol)の無水THF100 ml溶液に加えた。混合物を同温で1.5時間攪拌した後、これを-78℃まで冷却し、溶液に、同様に-78℃に冷却した、3-オキソオキセタン [G.Wuitschik et al.、Angew.Chem.Int.Ed.Engl.2006、45 (46)、7736-7739] 2.95 g(32.7 mmol、80% ジクロロメタン中)の無水THF100 mlをカニューレによってゆっくりと滴下した。添加が終了すると、反応混合物をまず-78℃で10 分攪拌し、続いて0℃で2時間および最後に室温で30 分攪拌した。続いて飽和塩化アンモニウム水溶液数mlを加えた。続いて、溶媒を実質的にロータリーエバポレーターで除去した。得られた残渣を水200 mlで希釈し、それぞれ約200 mlの酢酸エチルで3回抽出した。合わせた有機抽出物を水および飽和塩化ナトリウム溶液で順に洗浄した。無水硫酸マグネシウムで乾燥させた後、混合物を濾過し、溶媒をロータリーエバポレーターで除去した。生成した粗生成物をシクロヘキサン/酢酸エチル10：1から再結晶により精製した。表題化合物2.42 g(理論値の63%)を得た。
1H NMR (400 MHz、DMSO-d6、δ/ppm)：7.88 (d、2H)、7.80 (d、2H)、6.63 (s、1H)、4.79 (d、2H)、4.65 (d、2H)。
HPLC (方法10)：Rt = 3.09 分。
MS (DCI、NH3)：m/z = 193 [M+NH4]+。
工程2： 4-(3-フルオロオキセタン-3-イル)ベンゼンカルボニトリル
【化５０】
2013526497.tif 000051
実施例5A/工程2に記載したのと類似の方法により、実施例6A/工程1からの化合物600 mg(3.43 mmol)およびジエチルアミノサルファートリフルオライド(DAST)662 mg(4.11 mmol)を用いて表題化合物495 mg(理論値の82%)を得た。MPLC精製には、溶離剤としてシクロヘキサン/酢酸エチル8：1を用いた。
1H NMR (400 MHz、CDCl3、δ/ppm)：7.76 (d、2H)、7.73 (d、2H)、5.15 (dd、2H)、4.81 (dd、2H)。
LC/MS (方法2、ESIpos)：Rt = 1.59 分、m/z = 178 [M+H]+。
【００８８】
工程3： 4-(3-フルオロオキセタン-3-イル)-N’-ヒドロキシベンゼンカルボキシミド アミド
【化５１】
2013526497.tif 000052
実施例4A/工程2に記載した方法により、実施例6A/工程2からの化合物450 mg(2.54 mmol)から表題化合物470 mg(理論値の86%)を得た。
1H NMR (400 MHz、DMSO-d6、δ/ppm)：9.71 (s、1H)、7.77 (d、2H)、7.54 (d、2H)、5.87 (s、broad、2H)、4.97 (dd、2H)、4.91 (dd、2H)。
LC/MS (方法2、ESIpos)：Rt = 0.80 分、m/z = 211 [M+H]+。
工程4： 3-[4-(3-フルオロオキセタン-3-イル)フェニル]-5-(5-メチル-1H-ピラゾール-3-イル)-1,2,4-オキサジアゾール
【化５２】
2013526497.tif 000053
EDC502 mg(2.62 mmol)、HOBt401 mg(2.62 mmol)および実施例6A/工程3からの化合物500 mg(2.38 mmol)を順に室温で、5-メチル-1H-ピラゾール-3-カルボン酸300 mg(2.38 mmol)の無水DMF溶液10 mlに加えた。混合物をまず室温で16時間、続いて140℃で45 分攪拌した。冷却した後、溶媒をロータリーエバポレーターで除去した。残った残渣に水120 mlを加え、それぞれ約100 mlのジエチルエーテルで洗浄した。合わせた有機抽出物を飽和塩化ナトリウム溶液で洗浄し、無水硫酸マグネシウムで乾燥させ、濾過し、最後にロータリーエバポレーターで濃縮した。粗生成物をエタノール5 mlと共に室温で1時間攪拌した。不溶性の固体を濾過し、高真空下乾燥させた後、表題化合物の最初の分画204 mgを得た。母液を濃縮乾固した。続いて、残渣から、表題化合物の更なる分画29 mgを、分取用HPLC(方法13)で得た。合わせて、表題化合物233 mg(33%理論値の)をこのようにして得た。
1H NMR (400 MHz、CDCl3、δ/ppm)：8.27 (d、2H)、7.72 (d、2H)、6.81 (s、1H)、5.05 (dd、2H)、5.01 (dd、2H)、2.47 (s、3H)。
LC/MS (方法2、ESIpos)：Rt = 1.93 分、m/z = 301 [M+H]+。
【００８９】
工程5： 5-[1-(3-ブロモベンジル)-5-メチル-1H-ピラゾール-3-イル]-3-[4-(3-フルオロオキセタン-3-イル)フェニル]-1,2,4-オキサジアゾール
【化５３】
2013526497.tif 000054
実施例1A/工程2に記載したのと類似の方法により、実施例6A/工程4からの化合物250 mg(0.833 mmol)および3-ブロモベンジルブロマイド250 mg(0.999 mmol)を用いて表題化合物347 mg(理論値の89%)を得た。ここでは、反応混合物の45℃への加熱を省略することは可能であった。生成物の最終精製は、数滴のジクロロメタンを加えたペンタン/ジイソプロピルエーテル(5：1)10 mlからの攪拌抽出により行った。
1H NMR (400 MHz、CDCl3、δ/ppm)：8.30 (d、2H)、7.72 (d、2H)、7.45 (d、1H)、7.33 (s、1H)、7.22 (t、1H)、7.09 (d、1H)、6.85 (s、1H)、5.43 (s、2H)、5.04 (dd、2H)、5.00 (dd、2H)、2.29 (s、3H)。
LC/MS (方法4、ESIpos)：Rt = 1.46 分、m/z = 469/471 [M+H]+。
【００９０】
実施例7A
5-[1-(3-ブロモベンジル)-5-メチル-1H-ピラゾール-3-イル]-3-[4-(1-メトキシシクロブチル)フェニル]-1,2,4-オキサジアゾール
【化５４】
2013526497.tif 000055
工程1： 4-(1-ヒドロキシシクロブチル)ベンゾニトリル
【化５５】
2013526497.tif 000056
実施例5A/工程1に記載したのと類似の方法により、4-ヨードベンゾニトリル32.67 g(143 mmol)、2 Mイソプロピルマグネシウムクロライド75 ml(150 mmol)のジエチルエーテル溶液およびシクロブタノン15.0 g(214 mmol)を用いて、表題化合物13.31 g(理論値の78%)を得た。この場合、反応時間は室温で16時間であり、水性後処理により、粗生成物を、溶離剤としてシクロヘキサン/酢酸エチル10：1 → 4：1を用いてシリカゲル150 gにより吸引濾過して精製した。
1H NMR (400 MHz、CDCl3、δ/ppm)：7.67 (d、2H)、7.62 (d、2H)、2.58-2.51 (m、2H)、2.44-2.37 (m、2H)、2.23-2.04 (m、2H)、1.83-1.72 (m、1H)。
HPLC (方法10)：Rt = 3.47 分。
MS (DCI、NH3)：m/z = 191 [M+NH4]+。
【００９１】
工程2： 4-(1-メトキシシクロブチル)ベンゾニトリル
【化５６】
2013526497.tif 000057
水素化ナトリウム(60%鉱油中懸濁液)508 mg(12.7 mmol)を、0℃で実施例7A/工程1からの化合物2.0 g(11.5 mmol)の無水DMF溶液40 mlに加えた。1時間後、ヨードメタン863 μl(13.9 mmol)を加え、氷-水浴を外した。室温で16時間撹拌した後、反応混合物を水120 mlに注ぎ、それぞれ約100 mlのジエチルエーテルで3回抽出した。合わせた有機抽出物を水および飽和塩化ナトリウム溶液で順に洗浄し、無水硫酸マグネシウムで乾燥させ、濾過し、最後に溶媒をロータリーエバポレーターで除去した。残った残渣を溶離剤としてシクロヘキサン/酢酸エチル20：1 → 4：1を用いてシリカゲル約100 gにより吸引濾過して精製した。表題化合物1.27 g(理論値の59%)を得た。
1H NMR (400 MHz、CDCl3、δ/ppm)：7.68 (d、2H)、7.54 (d、2H)、2.95 (s、3H)、2.46-2.32 (m、4H)、2.03-1.93 (m、1H)、1.76-1.63 (m、1H)。
MS (DCI、NH3)：m/z = 205 [M+NH4]+。
【００９２】
工程3： N’-ヒドロキシ-4-(1-メトキシシクロブチル)ベンゼンカルボキシミド アミド
【化５７】
2013526497.tif 000058
実施例3A/工程5に記載したのと類似の方法により、実施例7A/工程2からの化合物1.10 g(5.88 mmol)およびヒドロキシルアンモニウムクロライド612 mg(8.81 mmol)を用いて、表題化合物1.28 g(93%理論値の、95%純度)を得た。この場合、反応時間は16時間であった。
1H NMR (400 MHz、DMSO-d6、δ/ppm)：9.62 (s、1H)、7.68 (d、2H)、7.40 (d、2H)、5.80 (s、broad、2H)、2.83 (s、3H)、2.37-2.24 (m、4H)、1.91-1.81 (m、1H)、1.65-1.53 (m、1H)。
HPLC (方法10)：Rt = 3.02 分。
MS (DCI、NH3)：m/z = 221 [M+H]+。
工程4： 3-[4-(1-メトキシシクロブチル)フェニル]-5-(5-メチル-1H-ピラゾール-3-イル)-1,2,4-オキサジアゾール
【化５８】
2013526497.tif 000059
1,1’-カルボニルジイミダゾール(CDI)491 mg(3.03 mmol)の無水DMF懸濁液2 mlに、室温で15 分以内に、5-メチル-1H-ピラゾール-3-カルボン酸364 mg(2.88 mmol)の無水DMF溶液2 mlを滴下した。混合物を室温で2時間攪拌した後、実施例7A/工程3からの化合物635 mg(2.88 mmol)を加えた。続いて、反応混合物を110℃で4.5時間攪拌した。室温に冷却した後、反応混合物を、激しく攪拌している水60 mlに徐々に注ぎ入れ、この工程中に生成物が沈殿した。固体を吸引濾過し、少量の冷水で洗浄した。高真空下乾燥させた後、表題化合物640 mg(理論値の68%、95%純度)を得た。
1H NMR (400 MHz、CDCl3、δ/ppm)：10.85 (broad、1H)、8.19 (d、2H)、7.57 (d、2H)、6.82 (s、1H)、2.98 (s、3H)、2.45 (s、3H)、2.45-2.37 (m、4H)、2.03-1.93 (m、1H)、1.78-1.67 (m、1H)。
LC/MS (方法6、ESIpos)：Rt = 1.06 分、m/z = 311 [M+H]+。
【００９３】
工程5： 5-[1-(3-ブロモベンジル)-5-メチル-1H-ピラゾール-3-イル]-3-[4-(1-メトキシシクロブチル)フェニル]-1,2,4-オキサジアゾール
【化５９】
2013526497.tif 000060
実施例1A/工程2に記載したのと類似の方法により、実施例7A/工程4からの化合物250 mg(0.806 mmol)および3-ブロモベンジルブロマイド242 mg(0.967 mmol)を用いて表題化合物326 mg(理論値の84%)を得た。ここでは、反応混合物の45℃への加熱を省略することは可能であった。
1H NMR (400 MHz、CDCl3、δ/ppm)：8.21 (d、2H)、7.56 (d、2H)、7.44 (d、1H)、7.32 (s、1H)、7.22 (t、1H)、7.09 (d、1H)、6.83 (s、1H)、5.43 (s、2H)、2.97 (s、3H)、2.44-2.40 (m、4H)、2.29 (s、3H)、2.03-1.93 (m、1H)、1.78-1.67 (m、1H)。
LC/MS (方法6、ESIpos)：Rt = 1.44 分、m/z = 479/481 [M+H]+。
【００９４】
実施例8A
3-{[tert-ブチル(ジフェニル)シリル]オキシ}アゼチジン
【化６０】
2013526497.tif 000061
工程1： tert-ブチル 3-{[tert-ブチル(ジフェニル)シリル]オキシ}アゼチジン-1-カルボキシレート
【化６１】
2013526497.tif 000062
tert-ブチル 3-ヒドロキシアゼチジン-1-カルボキシレート20.0 g(115 mmol)およびイミダゾール9.43 g(139 mmol)をまず無水DMF200 mlに加え、tert-ブチル(ジフェニル)シリルクロライド34.91 g(127 mmol)を室温で加えた。反応混合物を室温で18時間攪拌した後、これを水3.2リットルに注ぎ続いて、それぞれ約1リットルのジエチルエーテルで3回抽出した。合わせた有機抽出物を、飽和炭酸水素ナトリウム溶液、水および飽和塩化ナトリウム溶液で順に洗浄した。無水硫酸マグネシウムで乾燥させた後、混合物を濾過し、溶媒をロータリーエバポレーターで除去した。残った残渣をペンタン100 mlで数分間攪拌した。続いて、固体を吸引濾過し、高真空下乾燥させた。表題化合物29.18 g(理論値の61%)を得た。
1H NMR (400 MHz、CDCl3、δ/ppm)：7.60 (d、4H)、7.46-7.37 (m、6H)、4.53-4.49 (m、1H)、3.93 (dd、2H)、3.87 (dd、2H)、1.41 (s、9H)、1.04 (s、9H)。
LC/MS (方法6、ESIpos)：Rt = 1.65 分、m/z = 412 [M+H]+。
【００９５】
工程2： 3-{[tert-ブチル(ジフェニル)シリル]オキシ}アゼチジン
【化６２】
2013526497.tif 000063
トリフルオロ酢酸(TFA)70 mlを室温で、実施例8A/工程1からの化合物20.0 g(48.6 mmol)のジクロロメタン溶液70 mlに滴下した。反応混合物を室温で30 分攪拌した後、全ての揮発性成分をロータリーエバポレーターで除去した。残った残渣に1 M水酸化ナトリウム溶液1リットルを加え、これをそれぞれ約200 mlのジクロロメタンで3回抽出した。合わせた有機抽出物を無水硫酸マグネシウムで乾燥させ、濾過し、最後にロータリーエバポレーターで濃縮乾固した。残渣を高真空下乾燥させた後、表題化合物14.85 g(理論値の98%)を得た。
1H NMR (400 MHz、CDCl3、δ/ppm)：7.61 (d、4H)、7.45-7.36 (m、6H)、4.64-4.58 (m、1H)、3.68 (dd、2H)、3.53 (dd、2H)、2.19 (broad、1H)、1.03 (s、9H)。
LC/MS (方法6、ESIpos)：Rt = 0.90 分、m/z = 312 [M+H]+。
【００９６】
実施例9A
4-{[tert-ブチル(ジフェニル)シリル]オキシ}ピペリジン
【化６３】
2013526497.tif 000064
工程1： tert-ブチル 4-{[tert-ブチル(ジフェニル)シリル]オキシ}ピペリジン-1-カルボキシレート
【化６４】
2013526497.tif 000065
tert-ブチル 4-ヒドロキシピペリジン-1-カルボキシレート10.0 g(49.7 mmol)およびイミダゾール4.06 g(59.7 mmol)をまず無水DMF100 mlに加え、0℃でtert-ブチル(ジフェニル)シリルクロライド15.02 g(54.7 mmol)を加えた。反応混合物を室温で48時間攪拌した後、これを水1.6リットルに注ぎ、続いてそれぞれ約500 mlのジエチルエーテルで3回抽出した。合わせた有機抽出物を、飽和炭酸水素ナトリウム溶液、水および飽和塩化ナトリウム溶液で順に洗浄した。無水硫酸マグネシウムで乾燥させた後、混合物を濾過し、溶媒をロータリーエバポレーターで除去した。残った残渣を溶離剤：シクロヘキサン → 2：1 シクロヘキサン/酢酸エチル)を用いて吸引濾過(シリカゲル約300 g)して粗く精製した。表題化合物22.21 g(理論値の91%、約90%純度)を得た。
1H NMR (400 MHz、CDCl3、δ/ppm)：7.67 (d、4H)、7.43-7.37 (m、6H)、3.93-3.87 (m、1H)、3.68-3.60 (m、2H)、3.22-3.14 (m、2H)、1.63-1.48 (m、4H)、1.43 (s、9H)、1.07 (s、9H)。
LC/MS (方法6、ESIpos)：Rt = 1.68 分、m/z = 440 [M+H]+。
【００９７】
工程2： 4-{[tert-ブチル(ジフェニル)シリル]オキシ}ピペリジン
【化６５】
2013526497.tif 000066
実施例8A/工程2に記載したのと類似の方法により、実施例9A/工程1からの化合物2.5 g(5.12 mmol、90%純度)から表題化合物1.45 g(理論値の83%)を得た。溶離剤：酢酸エチル → 9：1 酢酸エチル/トリエチルアミン)を用いてMPLC(シリカゲル約50 g)を用いて精製した。
1H NMR (400 MHz、CDCl3、δ/ppm)：7.68 (d、4H)、7.45-7.35 (m、6H)、3.83-3.77 (m、1H)、3.07-3.01 (m、2H)、2.52-2.47 (m、2H)、1.72-1.66 (m、2H)、1.53-1.45 (m、2H)、1.07 (s、9H)。
LC/MS (方法14、ESIpos)：Rt = 0.87 分、m/z = 340 [M+H]+。
【００９８】
実施例10A
5-[1-(3-ブロモベンジル)-5-メチル-1H-ピラゾール-3-イル]-3-{4-[(トリフルオロメチル)スルファニル]フェニル}-1,2,4-オキサジアゾール
【化６６】
2013526497.tif 000067
工程1： N’-ヒドロキシ-4-[(トリフルオロメチル)スルファニル]ベンゼンカルボキシミド アミド
【化６７】
2013526497.tif 000068
ヒドロキシルアンモニウムクロライド73 g(1.05 mol)を4-[(トリフルオロメチル)スルファニル]ベンゼンカルボニトリル113 g(500 mmol)およびトリエチルアミン147 ml(1.05 mol)のエタノール溶液1.4リットルに加え、続いて混合物を30 分加熱還流した。室温に冷却した後、水1リットルを加え、混合物を合計1.4リットルの酢酸エチルで抽出した。合わせた有機抽出物を、水および飽和塩化ナトリウム溶液で順に洗浄した。無水硫酸マグネシウムで乾燥させた後、混合物を濾過し、溶媒をロータリーエバポレーターで除去した。生成した残渣をシクロヘキサン1リットルに取り込み、ジイソプロピルエーテル40 mlを加え、混合物を室温で20 分攪拌した。生成した固体を吸引濾過し、高真空下乾燥させた後、表題化合物の第一の部分78.6 gを得た。濾液を濃縮し、続いて残渣をシクロヘキサン100 mlおよび酢酸エチル5 mlの混合物の沸騰中30 分攪拌した。冷却した後固体を吸引濾過し、高真空下乾燥させた。これにより表題化合物の第二の部分4.2 gを得た。合計82.8 g(理論値の70%)の表題化合物をこうして得た。
1H NMR (400 MHz、DMSO-d6、δ/ppm)：9.90 (s、1H)、7.80 (d、2H)、7.72 (d、2H)、5.94 (s、2H)。
LC/MS (方法2、ESIpos)：Rt = 1.42 分、m/z = 237 [M+H]+。
工程2： 5-(5-メチル-1H-ピラゾール-3-イル)-3-{4-[(トリフルオロメチル)スルファニル]フェニル}-1,2,4-オキサジアゾール
【化６８】
2013526497.tif 000069
1,1’-カルボニルジイミダゾール63.45 g(391 mmol)の無水DMF懸濁液235 mlに、室温で15 分以内に、5-メチル-1H-ピラゾール-3-カルボン酸47 g(373 mmol)の無水DMF溶液235 mlを滴下した。混合物を室温で1時間45分攪拌した後、実施例10A/工程1からの化合物88 g(373 mmol)を加えた。続いて、反応混合物を110℃で4時間加熱した。室温に冷却した後、激しく攪拌しながら水3.5リットルをゆっくりと加えたところ、生成物が沈殿した。固体を吸引濾過し、冷水約1リットルで洗浄した。粗生成物を各500 mlのアセトニトリルおよびエタノールで構成される溶媒混合物から再結晶により精製した。冷却し、濾過し、高真空下乾燥させた後、表題化合物の第一の部分94.2 gを得た。濃縮し、さらなるエタノール150 mlからの結晶化の後、さらに表題化合物6.2 gを得た。こうして、合わせて100.4 g(理論値の83%)の表題化合物が得られた。
1H NMR (400 MHz、CDCl3、δ/ppm)：10.60 (broad、1H)、8.23 (d、2H)、7.79 (d、2H)、6.81 (s、1H)、2.47 (s、3H)。
LC/MS(方法6、ESIpos)：Rt = 1.17 分、m/z = 327 [M+H]+。
【００９９】
工程3： 5-[1-(3-ブロモベンジル)-5-メチル-1H-ピラゾール-3-イル]-3-{4-[(トリフルオロメチル)スルファニル]フェニル}-1,2,4-オキサジアゾール
【化６９】
2013526497.tif 000070
固体カリウムtert-ブトキシド2.24 g(19.9 mmol)を、室温で実施例10A/工程2からの化合物5.0 g(15.3 mmol)および3-ブロモベンジルブロマイド4.60 g(18.4 mmol)の無水ジオキサン溶液150 mlに加えた。反応混合物を室温で16時間攪拌した。続いて、溶媒約50-100 mlをロータリーエバポレーターで除去した。残った残渣を酢酸エチル900 mlで希釈し、それぞれ200 mlの水で3回洗浄し、最後に飽和塩化ナトリウム溶液200 mlで1回洗浄した。無水硫酸マグネシウムで乾燥させた後、濾過し、溶媒をロータリーエバポレーターで除去した。生成した粗生成物をシクロヘキサンで再結晶した。固体を吸引濾過した後、乾燥させ、表題化合物5.03 g(理論値の66%)を得た。
1H NMR (400 MHz、CDCl3、δ/ppm)：8.27 (d、2H)、7.78 (d、2H)、7.44 (d、1H)、7.32 (s、1H)、7.22 (t、1H)、7.09 (d、1H)、6.84 (s、1H)、5.43 (s、2H)、2.29 (s、3H)。
LC/MS (方法6、ESIpos)：Rt = 1.49 分、m/z = 495/497 [M+H]+。
【０１００】
実施例11A
(S)-1-{3-[(5-メチル-3-{3-[4-(トリフルオロメトキシ)フェニル]-1,2,4-オキサジアゾール-5-イル}-1H-ピラゾール-1-イル)メチル]フェニル}アゼチジン-3-イル N-(tert-ブトキシカルボニル)-L-バリネート
【化７０】
2013526497.tif 000071
4-N,N-ジメチルアミノピリジン117 mg(0.955 mmol)およびEDC915 mg(4.77 mmol)を、実施例1(作業実施例の項を参照)からの化合物750 mg(1.59 mmol)および(S)-N-(tert-ブトキシカルボニル)-L-バリン691 mg(3.18 mmol)のジクロロメタン溶液30 mlに加えた。反応混合物を室温で2時間攪拌した後、これをジクロロメタン100 mlで希釈し、それぞれ100 mlの水で2回および100 mlの飽和塩化ナトリウム溶液で1回洗浄した。無水硫酸マグネシウムで乾燥させた後、濾過し、濃縮し、生成物はMPLC(シリカゲル約100 g、溶離剤：4：1 → 3：1 シクロヘキサン/酢酸エチル)により精製した。表題化合物671 mg(理論値の90%)を得た。
1H NMR (400 MHz、CDCl3、δ/ppm)：8.27 (d、2H)、7.33 (d、2H)、7.19 (t、1H)、6.81 (s、1H)、6.56 (d、1H)、6.38 (d、1H)、6.24 (s、1H)、5.39 (s、2H)、5.37-5.31 (m、1H)、4.95 (d、broad、1H)、4.24-4.18 (m、3H)、3.83-3.73 (m、2H)、2.28 (s、3H)、2.20-2.11 (m、1H)、1.43 (s、9H)、0.98 (d、3H)、0.90 (d、3H)。
LC/MS (方法14、ESIpos)：Rt = 1.53 分、m/z = 671 [M+H]+。
【０１０１】
作業実施例：
実施例1
1-{3-[(5-メチル-3-{3-[4-(トリフルオロメトキシ)フェニル]-1,2,4-オキサジアゾール-5-イル}-1H-ピラゾール-1-イル)メチル]フェニル}アゼチジン-3-オール
【化７１】
2013526497.tif 000072
実施例1Aからの化合物2.0 g(4.17 mmol)、実施例8Aからの化合物1.95 g(6.26 mmol)、トリス(ジベンジリデンアセトン)ジパラジウム(0)256 mg(0.280 mmol)、2-ジシクロヘキシルホスフィノ-2’,4’,6’-トリイソプロピルビフェニル(X-Phos)398 mg(0.835 mmol)および炭酸セシウム2.72 g(8.35 mmol)の無水DMF20 ml混合物をアルゴン下、マイクロ波オーブン中(Biotage Initiator、入射電力のダイナミック制御)120℃で2.5時間加熱した。室温に冷却した後、水100 mlを反応混合物に加え、これをそれぞれ約100 mlの酢酸エチルで3回抽出した。合わせた有機抽出物を水および飽和塩化ナトリウム溶液で順に洗浄し、無水硫酸マグネシウムで乾燥させ、濾過し、最後に溶媒をロータリーエバポレーターで除去した。残った残渣をTHF40 mlに溶解し、1 Mテトラ-n-ブチルアンモニウムフルオライド(TBAF)のTHF溶液6.3 ml(6.26 mmol)を加えた。この混合物を室温で1時間攪拌した後、これを上に記載したのと同じ方法で水性の後処理をした。残った残渣を、溶離剤としてシクロヘキサン/酢酸エチル2：1(3リットル)→ 1：1(3リットル)を用いてシリカゲル200 gにより吸引濾過して精製した。濃縮し、高真空下乾燥させ、表題化合物1.56 g(理論値の79%)を得た。
1H NMR (400 MHz、CDCl3、δ/ppm)：8.25 (d、2H)、7.33 (d、2H)、7.17 (t、1H)、6.80 (s、1H)、6.53 (d、1H)、6.39 (d、1H)、6.27 (s、1H)、5.38 (s、2H)、4.77-4.70 (m、1H)、4.13 (dd、2H)、3.63 (dd、2H)、2.27 (s、3H)、2.12 (d、1H)。
LC/MS (方法6、ESIpos)：Rt = 1.20 分、m/z = 472 [M+H]+。
【０１０２】
実施例2
1-(3-{[5-メチル-3-(3-{4-[1-(トリフルオロメチル)シクロプロピル]フェニル}-1,2,4-オキサジアゾール-5-イル)-1H-ピラゾール-1-イル]メチル}フェニル)アゼチジン-3-オール
【化７２】
2013526497.tif 000073
実施例1に記載したのと類似の方法により、実施例2Aからの化合物500 mg(0.993 mmol)および実施例8Aからの化合物464 mg(1.49 mmol)を用いて、表題化合物289 mg(理論値の58%)を得た。ここでは、保護基はすでにその方法の第一成分工程で切り離されているため、第二部分工程(TBAFによるシリルエーテル開裂)を省略することが可能であった。粗生成物を、MPLC(シリカゲル、溶離剤：1：1 シクロヘキサン/酢酸エチル)、および続くペンタン25 ml、ジイソプロピルエーテル1 mlおよびジクロロメタン125 μlの混合物における攪拌抽出により精製した。
1H NMR (400 MHz、CDCl3、δ/ppm)：8.19 (d、2H)、7.58 (d、2H)、7.17 (t、1H)、6.80 (s、1H)、6.53 (d、1H)、6.39 (d、1H)、6.27 (s、1H)、5.38 (s、2H)、4.77-4.70 (m、1H)、4.13 (dd、2H)、3.63 (dd、2H)、2.27 (s、3H)、2.01 (d、1H)、1.42-1.39 (m、2H)、1.10-1.07 (m、2H)。
LC/MS (方法6、ESIpos)：Rt = 1.26 分、m/z = 496 [M+H]+。
【０１０３】
実施例3
1-{3-[(5-メチル-3-{3-[4-(1,1,1-トリフルオロ-2-メチルプロパン-2-イル)フェニル]-1,2,4-オキサジアゾール-5-イル}-1H-ピラゾール-1-イル)メチル]フェニル}アゼチジン-3-オール
【化７３】
2013526497.tif 000074
実施例1に記載したのと類似の方法により、実施例3Aからの化合物150 mg(0.297 mmol)および実施例8Aからの化合物139 mg(0.445 mmol)を用いて表題化合物68 mg(理論値の46%)を得た。ここでの方法の第一部分工程での反応時間は1時間であった。粗生成物を分取用HPLC(方法13)により精製した。遊離塩基を、生成した表題化合物のギ酸塩から、塩のメタノール性溶液を重炭酸塩カートリッジ(Polymerlabsより入手、Stratospheres SPE、PL-HCO3 MP SPE、限度0.9 mmol)に通すことにより得た。最終精製は、ペンタン3 mlおよび数滴のジイソプロピルエーテルの混合物の攪拌抽出により行った。
1H NMR (400 MHz、CDCl3、δ/ppm)：8.20 (d、2H)、7.63 (d、2H)、7.17 (t、1H)、6.80 (s、1H)、6.53 (d、1H)、6.39 (d、1H)、6.27 (s、1H)、5.38 (s、2H)、4.77-4.70 (m、1H)、4.13 (dd、2H)、3.63 (dd、2H)、2.27 (s、3H)、2.18 (d、1H)、1.62 (s、6H)。
LC/MS (方法6、ESIpos)：Rt = 1.27 分、m/z = 498 [M+H]+。
【０１０４】
実施例4
1-{3-[(5-メチル-3-{3-[4-(テトラヒドロ-2H-ピラン-4-イル)フェニル]-1,2,4-オキサジアゾール-5-イル}-1H-ピラゾール-1-イル)メチル]フェニル}アゼチジン-3-オール
【化７４】
2013526497.tif 000075
実施例3に記載したのと類似の方法により、実施例4Aからの化合物150 mg(0.313 mmol)および実施例8Aからの化合物146 mg(0.469 mmol)を用いて表題化合物77 mg(理論値の52%)を得た。
1H NMR (400 MHz、CDCl3、δ/ppm)：8.17 (d、2H)、7.36 (d、2H)、7.17 (t、1H)、6.80 (s、1H)、6.53 (d、1H)、6.39 (d、1H)、6.27 (s、1H)、5.38 (s、2H)、4.77-4.70 (m、1H)、4.15-4.07 (m、4H)、3.63 (dd、2H)、3.55 (dt、2H)、2.87-2.78 (m、1H)、2.26 (s、broad、4H)、1.91-1.78 (m、4H)。
LC/MS (方法4、ESIpos)：Rt = 1.27 分、m/z = 472 [M+H]+。
【０１０５】
実施例5
1-{3-[(3-{3-[4-(4-フルオロテトラヒドロ-2H-ピラン-4-イル)フェニル]-1,2,4-オキサジアゾール-5-イル}-5-メチル-1H-ピラゾール-1-イル)メチル]フェニル}アゼチジン-3-オール
【化７５】
2013526497.tif 000076
実施例3に記載したのと類似の方法により、実施例5Aからの化合物150 mg(0.302 mmol)および実施例8Aからの化合物141 mg(0.452 mmol)を用いて表題化合物62 mg(理論値の42%)を得た。
1H NMR (400 MHz、CDCl3、δ/ppm)：8.23 (d、2H)、7.53 (d、2H)、7.17 (t、1H)、6.80 (s、1H)、6.53 (d、1H)、6.39 (d、1H)、6.27 (s、1H)、5.38 (s、2H)、4.77-4.70 (m、1H)、4.13 (dd、2H)、4.00-3.87 (m、4H)、3.63 (dd、2H)、2.27 (d、1H)、2.26 (s、3H)、2.29-2.12 (m、2H)、1.99-1.90 (m、2H)。
LC/MS (方法4、ESIpos)：Rt = 1.28 分、m/z = 490 [M+H]+。
【０１０６】
実施例6
1-{3-[(3-{3-[4-(3-フルオロオキセタン-3-イル)フェニル]-1,2,4-オキサジアゾール-5-イル}-5-メチル-1H-ピラゾール-1-イル)メチル]フェニル}アゼチジン-3-オール
【化７６】
2013526497.tif 000077
実施例3に記載したのと類似の方法により、実施例6Aからの化合物150 mg(0.320 mmol)および実施例8Aからの化合物149 mg(0.479 mmol)を用いて、表題化合物60 mg(理論値の39%)を得た。
1H NMR (400 MHz、CDCl3、δ/ppm)：8.29 (d、2H)、7.71 (d、2H)、7.17 (t、1H)、6.81 (s、1H)、6.53 (d、1H)、6.39 (d、1H)、6.27 (s、1H)、5.39 (s、2H)、5.06 (dd、2H)、5.00 (dd、2H)、4.77-4.70 (m、1H)、4.13 (dd、2H)、3.63 (dd、2H)、2.29 (d、1H)、2.27 (s、3H)。
LC/MS (方法4、ESIpos)：Rt = 1.22 分、m/z = 462 [M+H]+。
【０１０７】
実施例7
1-{3-[(3-{3-[4-(1-メトキシシクロブチル)フェニル]-1,2,4-オキサジアゾール-5-イル}-5-メチル-1H-ピラゾール-1-イル)メチル]フェニル}アゼチジン-3-オール
【化７７】
2013526497.tif 000078
実施例3に記載したのと類似の方法により、実施例7Aからの化合物150 mg(0.313 mmol)および実施例8Aからの化合物146 mg(0.469 mmol)を用いて表題化合物53 mg(理論値の36%)を得た。
1H NMR (400 MHz、CDCl3、δ/ppm)：8.22 (d、2H)、7.56 (d、2H)、7.17 (t、1H)、6.80 (s、1H)、6.53 (d、1H)、6.39 (d、1H)、6.27 (s、1H)、5.38 (s、2H)、4.77-4.70 (m、1H)、4.13 (dd、2H)、3.63 (dd、2H)、2.97 (s、3H)、2.46-2.39 (m、4H)、2.27 (s、3H)、2.21 (d、1H)、2.03-1.93 (m、1H)、1.78-1.67 (m、1H)。
LC/MS (方法6、ESIpos)：Rt = 1.21 分、m/z = 472 [M+H]+。
【０１０８】
実施例8
1-{3-[(5-メチル-3-{3-[4-(トリフルオロメトキシ)フェニル]-1,2,4-オキサジアゾール-5-イル}-1H-ピラゾール-1-イル)メチル]フェニル}ピペリジン-4-オール
【化７８】
2013526497.tif 000079
実施例1Aからの化合物150 mg(0.313 mmol)、4-ヒドロキシピペリジン63 mg(0.626 mmol)、トリス(ジベンジリデンアセトン)ジパラジウム(0)19 mg(0.021 mmol)、2-ジシクロヘキシルホスフィノ-2’,4’,6’-トリイソプロピルビフェニル(X-Phos)30 mg(0.063 mmol)および炭酸セシウム254 mg(0.782 mmol)の無水DMF混合物3 mlを、80℃でアルゴン下、12時間攪拌した。室温に冷却した後、反応混合物を少量のセライトで濾過し、続いて濾液を、分取用HPLC(方法11)を用いてその成分に分離した。生成物分画を濃縮し、高真空下乾燥させ、表題化合物36 mg(理論値の23%)を得た。
1H NMR (400 MHz、CDCl3、δ/ppm)：8.27 (d、2H)、7.34 (d、2H)、7.21 (t、1H)、6.86 (d、1H)、6.81 (s、1H)、6.75 (s、1H)、6.61 (d、1H)、5.40 (s、2H)、3.87-3.81 (m、1H)、3.53-3.49 (m、2H)、2.90 (dt、2H)、2.28 (s、3H)、2.01-1.95 (m、2H)、1.70-1.61 (m、3H)。
LC/MS (方法6、ESIpos)：Rt = 1.18 分、m/z = 500 [M+H]+。
【０１０９】
実施例9
1-(3-{[5-メチル-3-(3-{4-[1-(トリフルオロメチル)シクロプロピル]フェニル}-1,2,4-オキサジアゾール-5-イル)-1H-ピラゾール-1-イル]メチル}フェニル)ピペリジン-4-オール
【化７９】
2013526497.tif 000080
実施例3に記載したのと類似の方法により、実施例2Aからの化合物125 mg(0.248 mmol)および4-ヒドロキシピペリジン50 mg(0.497 mmol)を用いて表題化合物20 mg(理論値の16%)を得た。ここでは、方法の第一部分工程は、130℃の反応温度で行った。分取用HPLC精製は方法11で行った。
1H NMR (400 MHz、CDCl3、δ/ppm)：8.18 (d、2H)、7.59 (d、2H)、7.20 (t、1H)、6.86 (d、1H)、6.80 (s、1H)、6.75 (s、1H)、6.61 (d、1H)、5.40 (s、2H)、3.87-3.81 (m、1H)、3.53-3.49 (m、2H)、2.90 (dt、2H)、2.27 (s、3H)、2.01-1.94 (m、2H)、1.70-1.60 (m、3H)、1.43-1.39 (m、2H)、1.10-1.07 (m、2H)。
LC/MS (方法4、ESIpos)：Rt = 1.39 分、m/z = 524 [M+H]+。
【０１１０】
実施例10
1-{3-[(5-メチル-3-{3-[4-(1,1,1-トリフルオロ-2-メチルプロパン-2-イル)フェニル]-1,2,4-オキサジアゾール-5-イル}-1H-ピラゾール-1-イル)メチル]フェニル}ピペリジン-4-オール
【化８０】
2013526497.tif 000081
実施例9に記載したのと類似の方法により、実施例3Aからの化合物125 mg(0.247 mmol)および4-ヒドロキシピペリジン50 mg(0.495 mmol)を用いて、表題化合物16 mg(理論値の12%)を得た。
1H NMR (400 MHz、CDCl3、δ/ppm)：8.20 (d、2H)、7.62 (d、2H)、7.20 (t、1H)、6.86 (d、1H)、6.80 (s、1H)、6.75 (s、1H)、6.61 (d、1H)、5.40 (s、2H)、3.88-3.80 (m、1H)、3.54-3.48 (m、2H)、2.90 (dt、2H)、2.27 (s、3H)、2.01-1.94 (m、2H)、1.69-1.64 (m、2H)、1.62 (s、6H)、1.43 (d、1H)。
LC/MS (方法6、ESIpos)：Rt = 1.20 分、m/z = 526 [M+H]+。
【０１１１】
実施例11
1-{3-[(5-メチル-3-{3-[4-(トリフルオロメトキシ)フェニル]-1,2,4-オキサジアゾール-5-イル}-1H-ピラゾール-1-イル)メチル]フェニル}ピペリジン-4-カルボニトリル
【化８１】
2013526497.tif 000082
実施例8に記載したのと類似の方法により、実施例1Aからの化合物150 mg(0.313 mmol)および4-シアノピペリジン69 mg(0.626 mmol)を用いて表題化合物68 mg(理論値の43%)を得た。
1H NMR (400 MHz、CDCl3、δ/ppm)：8.26 (d、2H)、7.34 (d、2H)、7.23 (t、1H)、6.86 (d、1H)、6.81 (s、1H)、6.74 (s、1H)、6.67 (d、1H)、5.40 (s、2H)、3.41-3.34 (m、2H)、3.11-3.03 (m、2H)、2.81-2.75 (m、1H)、2.28 (s、3H)、2.07-1.92 (m、4H)。
LC/MS (方法2、ESIpos)：Rt = 2.79 分、m/z = 509 [M+H]+。
【０１１２】
実施例12
1-(3-{[5-メチル-3-(3-{4-[1-(トリフルオロメチル)シクロプロピル]フェニル}-1,2,4-オキサジアゾール-5-イル)-1H-ピラゾール-1-イル]メチル}フェニル)ピペリジン-4-カルボニトリル
【化８２】
2013526497.tif 000083
実施例9に記載したのと類似の方法により、実施例2Aからの化合物50 mg(0.099 mmol)および4-シアノピペリジン22 mg(0.199 mmol)を用いて表題化合物23 mg(理論値の43%)を得た。
1H NMR (400 MHz、CDCl3、δ/ppm)：8.19 (d、2H)、7.58 (d、2H)、7.22 (t、1H)、6.84 (d、1H)、6.81 (s、1H)、6.73 (s、1H)、6.67 (d、1H)、5.40 (s、2H)、3.41-3.34 (m、2H)、3.10-3.03 (m、2H)、2.80-2.74 (m、1H)、2.28 (s、3H)、2.07-1.92 (m、4H)、1.42-1.39 (m、2H)、1.11-1.07 (m、2H)。
LC/MS (方法6、ESIpos)：Rt = 1.37 分、m/z = 533 [M+H]+。
【０１１３】
実施例13
1-{3-[(5-メチル-3-{3-[4-(1,1,1-トリフルオロ-2-メチルプロパン-2-イル)フェニル]-1,2,4-オキサジアゾール-5-イル}-1H-ピラゾール-1-イル)メチル]フェニル}ピペリジン-4-カルボニトリル
【化８３】
2013526497.tif 000084
実施例9に記載したのと類似の方法により、実施例3Aからの化合物125 mg(0.247 mmol)および4-シアノピペリジン55 mg(0.495 mmol)を用いて表題化合物66 mg(理論値の50%)を得た。
1H NMR (400 MHz、CDCl3、δ/ppm)：8.20 (d、2H)、7.62 (d、2H)、7.22 (t、1H)、6.84 (d、1H)、6.81 (s、1H)、6.73 (s、1H)、6.67 (d、1H)、5.40 (s、2H)、3.40-3.34 (m、2H)、3.10-3.03 (m、2H)、2.80-2.74 (m、1H)、2.28 (s、3H)、2.07-1.91 (m、4H)、1.63 (s、6H)。
LC/MS (方法6、ESIpos)：Rt = 1.38 分、m/z = 535 [M+H]+。
【０１１４】
実施例14
1-(3-{[5-メチル-3-(3-{4-[(トリフルオロメチル)スルファニル]フェニル}-1,2,4-オキサジアゾール-5-イル)-1H-ピラゾール-1-イル]メチル}フェニル)ピペリジン-4-オール
【化８４】
2013526497.tif 000085
実施例10Aからの化合物500 mg(1.01 mmol)、実施例9Aからの化合物514 mg(1.51 mmol)、トリス(ジベンジリデンアセトン)ジパラジウム(0)92 mg(0.101 mmol)、2-ジシクロヘキシルホスフィノ-2’,4’,6’-トリイソプロピルビフェニル(X-Phos)96 mg(0.202 mmol)およびナトリウム tert-ブトキシド194 mg(2.02 mmol)のトルエン10 ml中の混合物を、80℃で、アルゴン下、マイクロ波オーブン中で3時間加熱した(Biotage Initiator、マイクロ波電力のダイナミック制御)。室温に冷却した後、水100 mlを反応混合物に加え、これをそれぞれ約100 mlの酢酸エチルで3回抽出した。合わせた有機抽出物を水および飽和塩化ナトリウム溶液で順に洗浄し、無水硫酸マグネシウムで乾燥させ、、濾過し、最後に溶媒をロータリーエバポレーターで除去した。対応するシリル中間体である生成した粗生成物をMPLC(シリカゲル約70 g、溶離剤：シクロヘキサン → 5：1 シクロヘキサン/酢酸エチル)で精製した。続いて、この生成物をTHF3.5 mlに溶解し、1 Mテトラ-n-ブチルアンモニウム フルオライド(TBAF)のTHF溶液3.5 ml(3.5 mmol)を加えた。この混合物を室温で20 分攪拌した後、これをロータリーエバポレーターで濃縮した。表題化合物をMPLC(シリカゲル約20 g、溶離剤：2：1 → 1：3 シクロヘキサン/酢酸エチル)で単離した。濃縮し、乾燥させ、生成物をもう一度ペンタン/ジエチルエーテル中で攪拌した。こうして表題化合物65 mg(理論値の12%)を得た。
1H NMR (400 MHz、CDCl3、δ/ppm)：8.27 (d、2H)、7.78 (d、2H)、7.21 (t、1H)、6.87 (d、1H)、6.81 (s、1H)、6.75 (s、1H)、6.61 (d、1H)、5.40 (s、2H)、3.88-3.81 (m、1H)、3.54-3.49 (m、2H)、2.90 (dt、2H)、2.29 (s、3H)、2.01-1.94 (m、2H)、1.69-1.61 (m、3H)。
LC/MS (方法6、ESIpos)：Rt = 1.25 分、m/z = 516 [M+H]+。
【０１１５】
実施例15
1-{3-[(5-メチル-3-{3-[4-(トリフルオロメトキシ)フェニル]-1,2,4-オキサジアゾール-5-イル}-1H-ピラゾール-1-イル)メチル]フェニル}アゼチジン-3-イル N,N-ジメチルグリシネート
【化８５】
2013526497.tif 000086
4-N,N-ジメチルアミノピリジン86 mg(0.70 mmol)およびEDC671 mg(3.50 mmol)を、実施例1からの化合物550 mg(1.17 mmol)およびN,N-ジメチルグリシン361 mg(3.50 mmol)のジクロロメタン溶液11 mlに加えた。反応混合物を室温で8時間攪拌した後、全ての揮発性成分をロータリーエバポレーターで除去した。得られた残渣を酢酸エチル200 mlに取り込み、約100 mlの水で1回洗浄した。無水硫酸マグネシウムで乾燥させた後、濾過し、濃縮し、生成物をMPLC(シリカゲル約30 g、溶離剤：25：25：1 シクロヘキサン/酢酸エチル/トリエチルアミン)で精製した。表題化合物の第一分画328 mgを得た。さらに、シクロペンチルメチルエーテルからの再結晶によりいまだ不純物を含む第二分画から表題化合物115 mgを得た。こうして、合わせて、表題化合物443 mg(理論値の68%)を得た。続くジイソプロピルエーテル/シクロペンチルメチルエーテル(2：1、100 mgにつき1.5 ml)からの再結晶により、融点が117℃である表題化合物を得た。
1H NMR (400 MHz、CDCl3、δ/ppm)：8.26 (d、2H)、7.33 (d、2H)、7.18 (t、1H)、6.81 (s、1H)、6.55 (d、1H)、6.39 (d、1H)、6.24 (s、1H)、5.39 (s、2H)、5.38-5.32 (m、1H)、4.21 (dd、2H)、3.79 (dd、2H)、3.20 (s、2H)、2.36 (s、6H)、2.28 (s、3H)。
LC/MS (方法6、ESIpos)：Rt = 0.95 分、m/z = 557 [M+H]+。
【０１１６】
実施例16
(S)-1-{3-[(5-メチル-3-{3-[4-(トリフルオロメトキシ)フェニル]-1,2,4-オキサジアゾール-5-イル}-1H-ピラゾール-1-イル)メチル]フェニル}アゼチジン-3-イル L-バリネート
【化８６】
2013526497.tif 000087
トリフルオロ酢酸(TFA)25 mlを、0℃において実施例11Aからの化合物965 mg(1.44 mmol)のジクロロメタン溶液45 mlに加えた。反応混合物を室温で1時間攪拌した。その後、全ての揮発性成分をロータリーエバポレーターで除去し、得られた残渣をジクロロメタン500 mlに溶解した。生成物をそれぞれ約100 mlの飽和炭酸水素ナトリウム溶液で2回洗浄し、100 mlの水で1回洗浄し、最後に100 mlの飽和塩化ナトリウム溶液で1回洗浄した。無水硫酸マグネシウムで乾燥させた後、混合物を濾過し、溶媒をロータリーエバポレーターで除去した。生成した粗生成物(780 mg)をペンタン40 ml、ジイソプロピルエーテル2 mlおよび数滴のジクロロメタンの混合物中で攪拌した。固体を吸引濾過した後、高真空下乾燥させ、表題化合物659 mg(理論値の80%)を得た。
1H NMR (400 MHz、CDCl3、δ/ppm)：8.27 (d、2H)、7.33 (d、2H)、7.19 (t、1H)、6.80 (s、1H)、6.57 (d、1H)、6.39 (d、1H)、6.25 (s、1H)、5.39 (s、2H)、5.35-5.30 (m、1H)、4.24-4.20 (m、2H)、3.80-3.74 (m、2H)、3.32 (d、1H)、2.28 (s、3H)、2.12-2.00 (m、1H)、0.98 (d、3H)、0.91 (d、3H)。
LC/MS (方法14、ESIpos)：Rt = 0.96 分、m/z = 571 [M+H]+。
【０１１７】
B.  薬理学的活性の評価
本発明化合物の薬理学的活性は当業者に知られたインビトロおよびインビボ研究によって証明できる。本発明の物質の有用性は、以下に示されるインビトロ(腫瘍)細胞試験およびインビボ腫瘍モデルによる例により説明できる。HIF転写活性と腫瘍成長阻害の関連性は、文献記載されている多くの研究により示されている(例えば Warburg、1956；Semenza、2007参照)。
B-1.  HIF-ルシフェラーゼ アッセイ
HCT 116 細胞を、HIF-応答配列の制御の下、ルシフェラーゼレポーターを含有するプラスミドで、安定した方法でトランスフェクトした。これらの細胞を、マイクロタイタープレートに播種した [10% ウシ胎児血清(FCS)および100 μg/ml ハイグロマイシンを有するRPMI 1640 培地中、20 000 細胞/ウェルに]。インキュベーションを、一夜、標準的な条件下で行った(5% CO2、21% O2、37℃、湿潤)。翌朝、低酸素チャンバー(1% O2)において種々の濃度の試験物質(0-10 μmol/l)で細胞をインキュベートした。24時間後、Bright Glo 試薬(Promega、Wisconsin、USA)を製造者の説明書に従い加え、5分後蛍光を測定した。酸素正常状態で培養した細胞をバックグラウンドコントロールとした。
このアッセイからの代表的な作業実施例のIC50値を、以下の表に示す：
【表１】
2013526497.tif 000088
本発明化合物と異なり、ベンジル頭基においてヘテロサイクリル置換基を有さない国際公開第2008/141731-A2号の実施例1に記載された化合物5-[5-メチル-1-(4-メチルベンジル)-1H-ピラゾール-3-イル]-3-[4-(トリフルオロメトキシ)フェニル]-1,2,4-オキサジアゾールは、このアッセイにおいて30 nmol/lのIC50値を示した。
【０１１８】
B-2.  インビトロにおけるHIF標的遺伝子の抑制：
ヒト気管支癌細胞(H460およびA549)を、定常酸素圧状態および1 %酸素分圧下(HIF-ルシフェラーゼアッセイ参照)、種々の濃度の試験物質と共に16時間インキュベートした。全RNAを細胞から単離し、cDNAに転写し、HIF標的遺伝子のmRNA発現をリアルタイムPCRで分析した。活性な試験物質は、定常酸素圧状態において無処置細胞と比較して、HIF標的遺伝子のmRNA発現をすでに低下させたが、全ての低酸素状態下のものより上であった。
B-3.  ヒト異種移植腫瘍モデル：
免疫不全マウスにおけるヒト腫瘍異種移植モデルを、この物質の評価に用いた。この目的で、腫瘍細胞をインビトロで培養し、皮下に埋め込み、または腫瘍異種移植片をさらに皮下に埋め込んだ。動物は、腫瘍が確立された後、経口、皮下または腹腔内治療により処置した。試験物質の活性を、単独療法および他の薬理学的活性物質との併用療法で分析した。加えて、進行した腫瘍の大きさ(約100 mm2)で試験物質の腫瘍阻害能力を特徴付けた。動物の健康状態を毎日観察し、処置は動物福祉規制に従って行った。腫瘍面積は、スライドゲージで測定した(長さ L、幅 B＝短い面)。腫瘍体積は、式(L x B2)/2で計算した。腫瘍成長阻害は、試験の終わりに、腫瘍面積および腫瘍重量のT/C比およびTGI値(腫瘍成長阻害、式 [1-(T/C)] x 100)で計算した)(T＝処置群における腫瘍サイズ；C＝無処置コントロール群における腫瘍サイズ)として決定した。
処置および無処置の腫瘍担持マウスにおいて、試験物質の腫瘍血管形成および腫瘍における血流における影響を、コンピューターマイクロトモグラフィーおよび超音波ミクロ研究の助けを借りて同定した。
【０１１９】
C.  薬物動態学的パラメーターの決定
静脈内または経口投与後の、本発明化合物の薬物動態学的パラメーターを以下のとおり決定できる：
試験される物質を動物(例えばマウスまたはラット)に、溶液(例えば、対応する血漿に少量のDMSOを添加またはPEG/エタノール/水混合物中)として静脈内に投与し、経口投与は溶液(例えばSolutol/エタノール/水またはPEG/エタノール/水混合物中)または懸濁液(例えばタイロース中)で、いずれの場合も栄養チューブにより行った。物質の投与後、血液を一定時間に動物から採取した。血液をヘパリン処理し、続いてそこから遠心分離により血漿を得た。物質を、血漿中でLC-MS/MSにより分析的に定量した。内部標準を用い、そして有効な、コンピュータープログラムを用いて、このように決定した血漿濃度/時間プロットから薬物動態学的パラメーター、例えば、AUC(時間曲線下面積/時間曲線)、Cmax(最大血漿濃度)、t1/2(半減期)、VSS(分布容積)およびCL(クリアランス)、および絶対的および相対的バイオアベイラビリティFおよびFrel(i.v./p.o.比較または経口投与後の懸濁液と溶液の比較)を計算した。
プロドラッグ化合物から放出された活性成分を決定するため、プロドラッグを、上述した方法で静脈内または経口的に投与し、処理血漿においてプロドラッグおよび放出された活性成分の濃度の両方を定量した。
C-1.  ラットにおける静脈内投与後の薬物動態学的パラメーター：
2%までのDMSOを含有する、それぞれ0.3から1.0 mg/kgの血漿中溶液としてラットに試験物質を静脈内を投与した。作業実施例1および14について決定した動態パラメーターを発明化合物の例として、以下に示す [CL血漿＝血漿クリアランス]：
【表２】
2013526497.tif 000089
国際公開第号2008/141731-A2の実施例1に記載されている化合物 5-[5-メチル-1-(4-メチルベンジル)-1H-ピラゾール-3-イル]-3-[4-(トリフルオロメトキシ)フェニル]-1,2,4-オキサジアゾールは、本発明化合物と異なり、ベンジル頭基にヘテロサイクリル置換基を有さず、ラットへの静脈内投与後、以下のデータを示した：t1/2＝30時間、CL血漿＝0.4 l/h/kg、VSS＝6.9 l/kg。
【０１２０】
C-2.  ラットにおける経口投与後の薬物動態学的パラメーター：
試験物質を経口的にラットに、Solutol/エタノール/水(40：10：50または40：20：40)溶液として、それぞれ1から3 mg/kgで投与した。以下、こうして決定した動態パラメーターをいくつかの例示的な作業実施例について示す [AUCnorm＝用量-標準化暴露(時間曲線下面積/時間曲線)]：
【表３】
2013526497.tif 000090
この表における第2列は、実施例15からのプロドラッグ化合物(1 mg/kg、タイロース水懸濁液としての結晶物質)の非経腸投与後に得られた実施例1の薬物動態学的パラメーターを示す。プロドラッグ化合物自体は、ラット血漿において試験したいずれの時間においても検出されなかった。
国際公開第号2008/141731-A2の実施例1に記載されている化合物 5-[5-メチル-1-(4-メチルベンジル)-1H-ピラゾール-3-イル]-3-[4-(トリフルオロメトキシ)フェニル]-1,2,4-オキサジアゾールは、本発明化合物と異なり、ベンジル頭基にヘテロサイクリル置換基を有さず、ラットへの経口投与後、以下のデータを示した：t1/2＝29時間、AUCnorm＝1.9 kg・h/l、F＝74%。
【０１２１】
D.  安定性特性の決定
非特異的加水分解および血漿中に関して、本発明のプロドラッグ化合物の安定性は以下の試験において決定できる：
D-1.  pH-依存性加水分解安定性の決定：
試験物質(プロドラッグ)0.3 mg を2 ml HPLCバイアルに計り取り、アセトニトリル0.6 mlまたはアセトニトリル/DMSO混合物(DMSO 20容積パーセントまで)を加えた。物質を溶解させるため、サンプル容器を約10秒間超音波浴に浸した。続いて、特定の緩衝水溶液1.0 mlを加え(pH 2、4、6.5、8および10の市販の緩衝溶液)、およびサンプルを再び超音波浴で処理した。37℃において24 時間より長期間、サンプル溶液5 μlを1時間ごとに無変化のプロドラッグまたは加水分解により放出された活性成分の内容物をHPLCにより分析した。定量は対応するHPLCピークの面積パーセントによって行った。
pH 6.5における作業実施例15の安定性を以下に示す：
【表４】
2013526497.tif 000091
pHの関数として、12時間後、作業実施例15について以下の値が得られた：
【表５】
2013526497.tif 000092
【０１２２】
D-2.  血漿安定性インビトロの決定：
試験物質(プロドラッグ)1 mg を2 ml HPLCバイアルに計り取り、DMSO1.5 mlおよび水1 mlを加えた。物質を溶解させるため、サンプル容器を約10秒間超音波浴に浸した。この溶液0.5 mlに、37℃でラット血漿0.5 mlまたはヒト血漿を加えた。サンプルを攪拌し、約10 μlを最初の分析に採取した(時間 t0)。インキュベーション開始から2時間以内に、4-6のさらなるアリコートを定量のため採取した。サンプルは試験期間中、37℃に維持した。帰属および定量はHPLCにより行った。
作業実施例15におけるラット血漿の安定性の値を以下に記載する：
【表６】
2013526497.tif 000093
ヒト血漿においては、作業実施例15について以下の値が得られた：
【表７】
2013526497.tif 000094
【０１２３】
E.  医薬組成物のための作業実施例
本発明の化合物を、以下の方法で医薬製剤に加工しうる：
錠剤：
組成：
本発明の化合物100mg、乳糖(一水和物)50mg、トウモロコシデンプン(天然)50mg、ポリビニルピロリドン(PVP 25)(BASF、Ludwigshafen、Germanyより入手)10mg及びステアリン酸マグネシウム2mg。
錠剤の重量212mg、直径8mm、湾曲部分の半径12mm。
製造：
本発明の化合物、乳糖及びデンプンの混合物を5%PVP水溶液(m/m)と造粒する。顆粒を乾燥させ、続いてステアリン酸マグネシウムと5分間混合する。この混合物を、通常の打錠機で打錠する(錠剤の形態は上述を参照)。圧縮のための指針となる圧縮力は15kNである。
経口投与できる懸濁液：
組成：
本発明の化合物1000mg、エタノール(96%)1000mg、ロジゲル(Rhodigel(登録商標))(FMC、Pennsylvania、USAのキサンタンガム)400mg及び水99g。
10mLの経口懸濁液が本発明の化合物100mgの1回量に対応する。
製造：
ロジゲルをエタノールに懸濁させ、本発明の化合物を懸濁液に加える。攪拌しながら水を加える。ロジゲルの膨潤が完了するまで約6時間攪拌する。
経口投与できる溶液：
組成：
本発明の化合物500mg、ポリソルベート2.5g及びポリエチレングリコール400 97g。20gの経口溶液が本発明の化合物100mgの1回量に対応する。
製造：
本発明の化合物をポリエチレングリコール及びポリソルベートの混合物に攪拌しながら加える。本発明の化合物が完全に溶解するまで攪拌を行う。
静注溶液：
本発明の化合物を生理学的に許容される溶媒(例えば、等張生理食塩水、5%グルコース溶液及び/又は30%PEG400溶液)に飽和未満の濃度で溶解させる。溶液を濾過し、滅菌し、無菌の、発熱物質なしの注射容器への充填に使用する。
【０１２４】
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