(57)【要約】本発明は、抗ＩＬ−１８Ｒ１抗体およびその同じものの使用の方法を提供する。【選択図】図１
2013541326.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
ヒトＩＬ−１８Ｒ１に結合し、可変重鎖領域のアミノ酸配列としてＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１および可変軽鎖領域のアミノ酸配列としてＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：５を含むモノクローナル抗体１Ｇ１２が結合するヒトＩＬ−１８Ｒ１エピトープと同じヒトＩＬ−１８Ｒ１エピトープに結合することを特徴とする単離された抗体であって、ヒトＩＬ−１８Ｒ１に１０−８Ｍ未満の結合親和性で結合する、前記抗体。
【請求項２】
ヒトＩＬ−１８Ｒ１に結合し、重鎖可変領域のＣＤＲとしてＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：２またはＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１０のＣＤＲＨ１領域、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：３のＣＤＲＨ２領域、およびＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：４のＣＤＲＨ３領域、ならびに軽鎖可変領域のＣＤＲとしてＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：６のＣＤＲＬ１領域、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：７のＣＤＲＬ２領域、およびＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８のＣＤＲＬ３領域を含むことを特徴とする単離された抗体、またはそのヒト化版。
【請求項３】
重鎖可変領域としてＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１および可変軽鎖領域としてＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：５、もしくは重鎖可変領域としてＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：９および可変軽鎖領域としてＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１１を含むことを特徴とする、請求項１に記載の抗体、またはそのヒト化版。
【請求項４】
請求項２または３に記載の抗体であって、以下：
ａ）重鎖可変領域のＣＤＲとしてＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：３０のＣＤＲＨ１領域、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：３１のＣＤＲＨ２領域、およびＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：３２のＣＤＲＨ３領域、ならびに軽鎖可変領域のＣＤＲとしてＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：３４のＣＤＲＬ１領域、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：３５のＣＤＲＬ２領域、およびＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：３６のＣＤＲＬ３領域；
ｂ）重鎖可変領域のＣＤＲとしてＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：３８のＣＤＲＨ１領域、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：３９のＣＤＲＨ２領域、およびＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：４０のＣＤＲＨ３領域、ならびに軽鎖可変領域のＣＤＲとしてＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：４２のＣＤＲＬ１領域、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：４３のＣＤＲＬ２領域、およびＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：４４のＣＤＲＬ３領域；
ｃ）重鎖可変領域のＣＤＲとしてＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：４６のＣＤＲＨ１領域、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：４７のＣＤＲＨ２領域、およびＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：４８のＣＤＲＨ３領域、ならびに軽鎖可変領域のＣＤＲとしてＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：５０のＣＤＲＬ１領域、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：５１のＣＤＲＬ２領域、およびＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：５２のＣＤＲＬ３領域；
ｄ）重鎖可変領域のＣＤＲとしてＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：５４のＣＤＲＨ１領域、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：５５のＣＤＲＨ２領域、およびＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：５６のＣＤＲＨ３領域、ならびに軽鎖可変領域のＣＤＲとしてＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：５８のＣＤＲＬ１領域、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：５９のＣＤＲＬ２領域、およびＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：６０のＣＤＲＬ３領域；または
ｅ）重鎖可変領域のＣＤＲとしてＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：６２のＣＤＲＨ１領域、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：６３のＣＤＲＨ２領域、およびＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：６４のＣＤＲＨ３領域、ならびに軽鎖可変領域のＣＤＲとしてＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：６６のＣＤＲＬ１領域、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：６７のＣＤＲＬ２領域、およびＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：６８のＣＤＲＬ３領域；
を含むことを特徴とする、前記抗体。
【請求項５】
請求項２または３に記載の抗体であって、以下：
ａ）重鎖可変領域としてＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：２９および可変軽鎖領域としてＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：３３；
ｂ）重鎖可変領域としてＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：３７および可変軽鎖領域としてＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：４１；
ｃ）重鎖可変領域としてＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：４５および可変軽鎖領域としてＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：４９；
ｄ）重鎖可変領域としてＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：５３および可変軽鎖領域としてＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：５７；または
ｅ）重鎖可変領域としてＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：６１および可変軽鎖領域としてＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：６５；
を含むことを特徴とする、前記抗体。
【請求項６】
アミノ酸位置２３４においてロイシンの代わりにアラニンがある変異Ｌ２３４Ａ、およびアミノ酸位置２３５においてロイシンの代わりにアラニンがある変異Ｌ２３５Ａを含むヒトＩｇＧ１アイソタイプの抗体であることを特徴とする、請求項１〜５のいずれか１項に記載の抗体。
【請求項７】
変異Ｓ２２８Ｐを有する、または有しないヒトＩｇＧ４アイソタイプの抗体であることを特徴とする、請求項１〜５のいずれか１項に記載の抗体。
【請求項８】
変異Ｓ２２８ＰおよびＬ２３５Ｅを含むことを特徴とする、請求項７に記載の抗体。
【請求項９】
請求項１〜８のいずれか１項に従う請求項に記載の抗体をコードする、単離された核酸。
【請求項１０】
請求項９に記載の核酸を含む宿主細胞。
【請求項１１】
ＩＬ−１８Ｒ１に結合する組み換え抗体の生成のための方法であって、請求項９に記載の核酸を原核または真核宿主細胞中で発現させ、前記の抗体を前記の細胞または細胞培養上清から回収することを特徴とする、前記方法。
【請求項１２】
請求項１〜８のいずれか１項に記載の抗体および医薬的に許容できるキャリヤーを含む医薬配合物。
【請求項１３】
医薬品としての使用のための、請求項１〜８のいずれか１項に記載の抗体。
【請求項１４】
慢性閉塞性肺疾患（ＣＯＰＤ）、炎症性疾患、自己免疫疾患、リウマチ性関節炎、狼瘡、乾癬または骨疾患の処置における使用のための、請求項１〜８のいずれか１項に記載の抗体。
【請求項１５】
医薬品の製造における請求項１〜８のいずれか１項に記載の抗体の使用。
【請求項１６】
医薬品が慢性閉塞性肺疾患（ＣＯＰＤ）、炎症性疾患、自己免疫疾患、リウマチ性関節炎、狼瘡、乾癬または骨疾患を処置するためのものである、請求項１５に記載の使用。
【請求項１７】
慢性閉塞性肺疾患（ＣＯＰＤ）、炎症性疾患、自己免疫疾患、リウマチ性関節炎、狼瘡、乾癬または骨疾患を有する個体を処置する方法であって、該個体に有効量の請求項１〜８のいずれか１項に記載の抗体を投与することを含む、前記方法。
【請求項１８】
部分的にフコシル化されている、またはフコシル化されていないことを特徴とする、請求項１〜８のいずれか１項に記載の抗体。
【請求項１９】
請求項１〜８のいずれか１項に記載の抗体および医薬的に許容できるキャリヤーを含む医薬配合物。
【請求項２０】
医薬品としての使用のための、請求項１〜８のいずれか１項に記載の抗体。
【請求項２１】
ＩＬ−１８およびＩＬ−１８Ｒ１の間の相互作用の遮断、ならびにＩＬ−１８Ｒ１およびＩＬ−１８ＲＡＰの間の複合体形成の遮断、ならびにＩｌ−１８受容体複合体に媒介されるシグナル伝達およびＮＦカッパＢ経路の活性化の阻害における使用のための、請求項１〜８のいずれか１項に記載の抗体。
【請求項２２】
癌の処置における使用のための、請求項１〜８のいずれか１項に記載の抗体。
【請求項２３】
医薬品が癌を処置するためのものである、請求項１５に記載の使用。
【請求項２４】
癌疾患を有する個体を処置する方法であって、該個体に有効量の請求項１〜８のいずれか１項に記載の抗体を投与することを含む、前記方法。
【請求項２５】
単離された抗ＩＬ−１８Ｒ１抗体であって、以下：
（ａ）アミノ酸ＸＡＳＫＳＶＳＴＳＧＤＳＹＭＨ（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：６９）を含むＣＤＲ−Ｌ１配列、ここでＸはＲまたはＱのどちらかである；
（ｂ）アミノ酸ＬＡＳＮＬＥＳを含むＣＤＲ−Ｌ２配列（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：７）；
（ｃ）アミノ酸ＱＱＳＲＥＬＰＬＳを含むＣＤＲ−Ｌ３配列（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８）；
（ｄ）アミノ酸ＸＹＴＦＴ（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：７０）を含むＣＤＲ−Ｈ１配列、ここでＸはＤまたはＧのどちらかである；
（ｅ）アミノ酸ＴＩＤＰＳＤＳＹＴＹＹＸ１ＱＫＸ２Ｘ３Ｇ（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：７１）を含むＣＤＲ−Ｈ２配列、ここでＸ１はＮまたはＡであり、Ｘ２はＦまたはＡであり、Ｘ３はＫまたはＱである；および
（ｆ）アミノ酸ＳＧＤＹＤＡＤＲＹＦＤＶを含むＣＤＲ−Ｈ３配列（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：４）；
から選択される相補性決定領域（ＣＤＲ）配列を含む、前記抗体、またはそのヒト化版。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、ヒトＩＬ−１８Ｒ１に対する抗体（ＩＬ−１８Ｒ１抗体またはＩＬ−１８Ｒα抗体）、補体因子Ｃ１ｑに結合しないそのような抗体、それらの生成のための方法、前記の抗体を含有する医薬組成物、およびその使用に関する。
【背景技術】
【０００２】
ＩＬ−１８はＩＬ−１サイトカインスーパーファミリーのメンバーである。それは先天免疫および適応免疫の重要な制御因子であり、それはＩＬ−１２と協同してＴｈ１／Ｔｃ１系列の分化を誘導し、ＴおよびＮＫ細胞の成熟を誘導し、ＩＦＮγ、ＴＮＦ−αおよびＧＭ−ＣＳＦの産生を刺激し、マクロファージおよび好中球の蓄積、機能および細胞アポトーシスを制御し、ならびにＩＬ−４またはＩＬ−２の存在下でＩｇＥの産生およびＴｈ２の分化を刺激することによりＴｈ２応答に寄与する。ＩＬ−１８受容体（ＩＬ−１８Ｒ１）は、リガンド結合（ＩＬ−１８Ｒ１）およびシグナル伝達サブユニット（ＩＬ−１８Ｒ１）からなる（Nakanishi, K. et al., Ann. Rev. Immunol. 19 (2001) 423-474において概説されている）。
【０００３】
ＩＬ−１８は多数のチェックポイントにおいて炎症を制御しており、可能性のある療法標的であると考えられている。以前の研究は、ＩＦＮαおよびＣＤ８  Ｔ細胞が肺気腫の発病において重要な役割（単数または複数）を果たしていることを示してきた(Grumelli, S. et al., PLoS Medicine 1 (2004) 75-83; Ma et al., J. Clin. Invest. 115 (2005); 3460-3472; Wang, Z. et al., J. Exp. Med. 192 (2000) 1587-1599; Sutherland and Cherniack, N. Engl. J. Med. 350 (2004) 2689-2697)。ＩＬ−１８はＴｈ１／Ｔｃ１系列の分化およびサイトカインの産生において重要な役割を果たしている。Hoshino, T. et al., Am. J. Respir. Crit. Care Med. 176 (2007) 49-62。マウスモデルでは、タバコの煙（ＣＳ）はマウスにおいてＩＬ−１８を誘導および活性化し、ＩＬ−１８Ｒ１αは発病ならびにＣＳに誘導される炎症および肺胞の破壊において重要な役割を果たしている(Kang, M.J., et al., J. Immunol. 178 (2007) 1948-1959; Kang, M.J., J. Clin. Invest. 118 (2008) 2771-2784)。
【０００４】
ヒトＩＬ−１８Ｒ１（インターロイキン１８受容体１、ＩＬ−１８Ｒα、ＣＤ２１８抗原様ファミリーメンバーＡ、ＣＤ２１８ａ、ＵｎｉＰｒｏｔＫＢ／Ｓｗｉｓｓ−Ｐｒｏｔ  Ｑ１３４７８；ＳＥＱ  ｉＤ  ＮＯ：７２）は、インターロイキン１８（ＩＬ−１８）に関する受容体であり、一回貫通型Ｉ型膜タンパク質である。作用物質への結合はＮＦカッパＢの活性化につながる。ＩＬ−１８Ｒ１は肺、白血球、脾臓、肝臓、胸腺、前立腺、小腸、結腸、胎盤、および心臓において発現しており、脳、骨格筋、膵臓、および腎臓には存在しない。ホジキン病細胞株において高レベルの発現が見られる。ＩＬ−１８Ｒ１は、Parnet, P. et al., J. Biol. Chem. 271 (1996) 3967-3970; Torigoe, K. et al., J. Biol. Chem. 272 (1997) 25737-25742）において言及されている。
【０００５】
ＩＬ−１８Ｒ１およびＩＬ−１８Ｒ１に対する抗体は、米国特許第７７０４９４５号、米国特許第７６１５２２０号、米国特許第７１６９５８１号、米国特許第７１４１３９３号、米国特許第６６０００２２号、欧州特許第１０４７７８１号、ＷＯ２０１００１１６９７、ＷＯ２００９０１５２８４、ＷＯ２００９０１５２８４、ＷＯ２００９０７４６３４、ＷＯ２００９０１５２８４、ＷＯ２００７１１７５７７、ＷＯ２００８０２７２３６、ＷＯ２００７１１７５７７、ＷＯ２００７０９６３９８、ＷＯ２００５０９７９９８Ａ３、ＷＯ２００６００９１１４、ＷＯ２００５０９７９９８、ＷＯ２００５０１２３５２、ＷＯ２００３０８０１０４、ＷＯ２００３０５７８２１、ＷＯ２００３００８４５２Ａ３、ＷＯ２００３０１２０６１、ＷＯ２００１０８５２０１、ＷＯ２００２００８２７２、ＷＯ１９９９０３７７７２において言及されている。
【０００６】
本発明の目的は、ＴＨ１に媒介される疾患、特にＣＯＰＤのような炎症性疾患、自己免疫疾患、リウマチ性関節炎、狼瘡、および乾癬疾患の処置のための療法剤として有用であるＩＬ−１８Ｒ１に対する抗体を提供することである。
【先行技術文献】
【特許文献】
【０００７】
【特許文献１】米国特許第７７０４９４５号
【特許文献２】米国特許第７６１５２２０号
【特許文献３】米国特許第７１６９５８１号
【特許文献４】米国特許第７１４１３９３号
【特許文献５】米国特許第６６０００２２号
【特許文献６】欧州特許第１０４７７８１号
【特許文献７】ＷＯ２０１００１１６９７
【特許文献８】ＷＯ２００９０１５２８４
【特許文献９】ＷＯ２００９０１５２８４
【特許文献１０】ＷＯ２００９０７４６３４
【特許文献１１】ＷＯ２００９０１５２８４
【特許文献１２】ＷＯ２００７１１７５７７
【特許文献１３】ＷＯ２００８０２７２３６
【特許文献１４】ＷＯ２００７１１７５７７
【特許文献１５】ＷＯ２００７０９６３９８
【特許文献１６】ＷＯ２００５０９７９９８Ａ３
【特許文献１７】ＷＯ２００６００９１１４
【特許文献１８】ＷＯ２００５０９７９９８
【特許文献１９】ＷＯ２００５０１２３５２
【特許文献２０】ＷＯ２００３０８０１０４
【特許文献２１】ＷＯ２００３０５７８２１
【特許文献２２】ＷＯ２００３００８４５２Ａ３
【特許文献２３】ＷＯ２００３０１２０６１
【特許文献２４】ＷＯ２００１０８５２０１
【特許文献２５】ＷＯ２００２００８２７２
【特許文献２６】ＷＯ１９９９０３７７７２
【非特許文献】
【０００８】
【非特許文献１】Nakanishi, K. et al., Ann. Rev. Immunol. 19 (2001) 423-474
【非特許文献２】Grumelli, S. et al., PLoS Medicine 1 (2004) 75-83
【非特許文献３】Ma et al., J. Clin. Invest. 115 (2005); 3460-3472
【非特許文献４】Wang, Z. et al., J. Exp. Med. 192 (2000) 1587-1599
【非特許文献５】Sutherland and Cherniack, N. Engl. J. Med. 350 (2004) 2689-2697
【非特許文献６】Hoshino, T. et al., Am. J. Respir. Crit. Care Med. 176 (2007) 49-62
【非特許文献７】Kang, M.J., et al., J. Immunol. 178 (2007) 1948-1959
【非特許文献８】Kang, M.J., J. Clin. Invest. 118 (2008) 2771-2784
【非特許文献９】Parnet, P. et al., J. Biol. Chem. 271 (1996) 3967-3970
【非特許文献１０】Torigoe, K. et al., J. Biol. Chem. 272 (1997) 25737-25742
【発明の概要】
【０００９】
本発明は、ヒトＩＬ−１８Ｒ１に結合し、可変重鎖領域のアミノ酸配列としてＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１および可変軽鎖領域のアミノ酸配列としてＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：５を含むモノクローナル抗体１Ｇ１２が結合するヒトＩＬ−１８Ｒ１エピトープと同じヒトＩＬ−１８Ｒ１エピトープに結合することを特徴とする単離された抗体に関し、ここで前記の抗体はヒトＩＬ−１８Ｒ１に１０−８Ｍ未満の結合親和性で結合する。
【００１０】
本発明は、ヒトＩＬ−１８Ｒ１に結合し、重鎖可変領域のＣＤＲとしてＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：２またはＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１０のＣＤＲＨ１領域、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：３のＣＤＲＨ２領域、およびＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：４のＣＤＲＨ３領域、ならびに軽鎖可変領域のＣＤＲとしてＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：６のＣＤＲＬ１領域、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：７のＣＤＲＬ２領域、およびＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８のＣＤＲＬ３領域を含むことを特徴とする単離された抗体に関する。従って、抗体１Ｇ１２および２Ｄ１１のＣＤＲＨ１領域のみが異なり、その他のＣＤＲ領域は同一である（ＩＩＩ．配列リストの記述を参照）。
【００１１】
本発明の１態様は、ヒトＩＬ−１８Ｒ１に結合し、重鎖可変領域のＣＤＲとしてＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：２またはＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１０のＣＤＲＨ１領域、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：３のＣＤＲＨ２領域、およびＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：４のＣＤＲＨ３領域、ならびに軽鎖可変領域のＣＤＲとしてＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：６のＣＤＲＬ１領域、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：７のＣＤＲＬ２領域、およびＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８のＣＤＲＬ３領域を含むことを特徴とする単離された抗体またはそのヒト化版である。１態様において、本発明に従う抗体は、その重鎖可変ドメインがＣＤＲとして以下：
ａ）ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：２のＣＤＲＨ１領域、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：３のＣＤＲＨ２領域、およびＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：４のＣＤＲＨ３領域、もしくは
ｂ）ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１０のＣＤＲＨ１領域、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：３のＣＤＲＨ２領域、およびＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：４のＣＤＲＨ３領域；
またはそのヒト化版を含むことを特徴とする。
【００１２】
別の態様において、本発明に従う抗体は、その軽鎖可変ドメインがＣＤＲとしてＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：６のＣＤＲＬ１領域、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：７のＣＤＲＬ２領域、およびＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８のＣＤＲＬ３領域またはそのヒト化版を含むことを特徴とする。
【００１３】
別の態様において、本発明に従う抗体は、その重鎖可変ドメインおよび軽鎖可変ドメインがＣＤＲとして以下：
ａ）ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：２のＣＤＲＨ１領域、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：３のＣＤＲＨ２領域、およびＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：４のＣＤＲＨ３領域、ならびにＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：６のＣＤＲＬ１領域、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：７のＣＤＲＬ２領域、およびＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８のＣＤＲＬ３領域、もしくは
ｂ）ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１０のＣＤＲＨ１領域、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：３のＣＤＲＨ２領域、およびＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：４のＣＤＲＨ３領域、ならびにＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：６のＣＤＲＬ１領域、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：７のＣＤＲＬ２領域、およびＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８のＣＤＲＬ３領域；
またはそのヒト化版を含むことを特徴とする。
【００１４】
本発明は、ヒトＩＬ−１８Ｒ１に結合し、重鎖可変領域としてＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１および可変軽鎖領域としてＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：５を含むこと、もしくは重鎖可変領域としてＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：９および可変軽鎖領域としてＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１１を含むことを特徴とする抗体またはそのヒト化版に関する。
【００１５】
１態様において、本発明に従うヒト化抗体は、以下：
ａ）重鎖可変領域のＣＤＲとしてＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：３０のＣＤＲＨ１領域、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：３１のＣＤＲＨ２領域、およびＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：３２のＣＤＲＨ３領域、ならびに軽鎖可変領域のＣＤＲとしてＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：３４のＣＤＲＬ１領域、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：３５のＣＤＲＬ２領域、およびＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：３６のＣＤＲＬ３領域；
ｂ）重鎖可変領域のＣＤＲとしてＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：３８のＣＤＲＨ１領域、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：３９のＣＤＲＨ２領域、およびＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：４０のＣＤＲＨ３領域、ならびに軽鎖可変領域のＣＤＲとしてＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：４２のＣＤＲＬ１領域、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：４３のＣＤＲＬ２領域、およびＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：４４のＣＤＲＬ３領域；
ｃ）重鎖可変領域のＣＤＲとしてＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：４６のＣＤＲＨ１領域、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：４７のＣＤＲＨ２領域、およびＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：４８のＣＤＲＨ３領域、ならびに軽鎖可変領域のＣＤＲとしてＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：５０のＣＤＲＬ１領域、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：５１のＣＤＲＬ２領域、およびＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：５２のＣＤＲＬ３領域；
ｄ）重鎖可変領域のＣＤＲとしてＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：５４のＣＤＲＨ１領域、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：５５のＣＤＲＨ２領域、およびＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：５６のＣＤＲＨ３領域、ならびに軽鎖可変領域のＣＤＲとしてＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：５８のＣＤＲＬ１領域、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：５９のＣＤＲＬ２領域、およびＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：６０のＣＤＲＬ３領域；または
ｅ）重鎖可変領域のＣＤＲとしてＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：６２のＣＤＲＨ１領域、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：６３のＣＤＲＨ２領域、およびＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：６４のＣＤＲＨ３領域、ならびに軽鎖可変領域のＣＤＲとしてＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：６６のＣＤＲＬ１領域、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：６７のＣＤＲＬ２領域、およびＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：６８のＣＤＲＬ３領域；
を含むことを特徴とする。
【００１６】
１態様において、本発明に従うヒト化抗体は、以下：
ａ）重鎖可変領域としてＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：２９および可変軽鎖領域としてＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：３３；
ｂ）重鎖可変領域としてＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：３７および可変軽鎖領域としてＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：４１；
ｃ）重鎖可変領域としてＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：４５および可変軽鎖領域としてＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：４９；
ｄ）重鎖可変領域としてＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：５３および可変軽鎖領域としてＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：５７；または
ｅ）重鎖可変領域としてＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：６１および可変軽鎖領域としてＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：６５；
を含むことを特徴とする。
【００１７】
本発明の１態様は単離された抗ＩＬ−１８Ｒ１抗体であり、ここでその抗体は、以下：
（ａ）アミノ酸ＸＡＳＫＳＶＳＴＳＧＤＳＹＭＨ（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：６９）を含むＣＤＲ−Ｌ１配列、ここでＸはＲまたはＱのどちらかである；
（ｂ）アミノ酸ＬＡＳＮＬＥＳを含むＣＤＲ−Ｌ２配列（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：７）；
（ｃ）アミノ酸ＱＱＳＲＥＬＰＬＳを含むＣＤＲ−Ｌ３配列（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８）；
（ｄ）アミノ酸ＸＹＴＦＴ（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：７０）を含むＣＤＲ−Ｈ１配列、ここでＸはＤまたはＧのどちらかである；
（ｅ）アミノ酸ＴＩＤＰＳＤＳＹＴＹＹＸ１ＱＫＸ２Ｘ３Ｇ（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：７１）を含むＣＤＲ−Ｈ２配列、ここでＸ１はＮまたはＡであり、Ｘ２はＦまたはＡであり、Ｘ３はＫまたはＱである；および
（ｆ）アミノ酸ＳＧＤＹＤＡＤＲＹＦＤＶを含むＣＤＲ−Ｈ３配列（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：４）；
から選択される相補性決定領域（ＣＤＲ）配列を含み、またはそのヒト化版である。
【００１８】
本発明は、ヒトＩＬ−１８Ｒ１に結合し、モノクローナル抗体１Ｇ１２が結合するＩＬ−１８Ｒ１エピトープと同じＩＬ−１８Ｒ１エピトープに結合することを特徴とする抗体に関する。従って、その抗体はＩＬ−１８Ｒ１のドメイン２に結合する。典型的な抗体は、抗体２Ｄ１１である。
【００１９】
その抗体は好ましくはモノクローナル抗体、加えて、ヒトの定常鎖を含むキメラ抗体、またはヒト化抗体である。特に好ましいのはヒト化抗体である。本発明に従う抗体は、好ましくはヒト起源に由来するＦｃ部分を含む。本発明に従う抗体の軽鎖可変ドメインは、好ましくはヒトラムダアイソタイプのものである。本発明の好ましい態様は、抗体１Ｇ１２の、または抗体２Ｄ１１のキメラまたはヒト化変種（ｖａｒｉａｎｔ）である。好ましくは、本発明に従う抗体は上記で言及したアミノ酸配列またはアミノ酸配列断片および特性を特徴とする。
【００２０】
好ましくは、本発明に従う抗体はヒトＩｇＧ１またはＩｇＧ４アイソタイプの抗体である。本発明に従う抗体は、好ましくはおよそアミノ酸位置２１６〜２４０における、好ましくはおよそアミノ酸位置２２０〜２４０における、ＣＨ１およびＣＨ２の間のヒンジ領域において、および／またはおよそアミノ酸位置３２７〜３３１におけるＣＨ２およびＣＨ３の間の第２ドメイン間領域において改変されたＩｇＧ１アイソタイプの抗体である。好ましくは、本発明に従う抗体は、好ましくは変異Ｌ２３４Ａ（アミノ酸位置２３４においてロイシンの代わりにアラニン）および変異Ｌ２３５Ａ（アミノ酸位置２３５においてロイシンの代わりにアラニン）を含むヒトＩｇＧ１アイソタイプの抗体であることを特徴とする。そのアミノ酸位置は、異なるアロタイプに関して、アミノ酸位置２３４のロイシンがそのようなアロタイプにおいて例えば位置２３５に位置し得るように、約１または２の数の範囲内で変動する可能性がある。従って、“アミノ酸位置２３４のロイシン”は、アミノ酸位置２３４または１（ｏｎ）もしくは２前後した位置に位置するロイシンを意味する。
【００２１】
本発明に従う抗体は、好ましくは変異Ｓ２２８Ｐを有する、または有しないヒトＩｇＧ４アイソタイプの抗体である。
その抗体は好ましくはさらにヒトＩＬ−１８Ｒ１への結合において１０−８Ｍ（ＫＤ）以下の、好ましくは約１０−８〜１０−１３Ｍの、好ましくは約１０−９〜１０−１３Ｍの親和性を特徴とする。好ましくは、本発明に従う抗体は、カニクイザルのＩＬ−１８Ｒ１にも結合する（交差反応する）。
【００２２】
本発明はさらに、そのような抗体の組み換えによる生成のための方法を提供する。本発明はさらに、ＩＬ−１８Ｒ１に結合する抗体をコードする核酸をＣＨＯ宿主細胞中で発現させ、前記の抗体を前記の細胞から回収することを特徴とする、本発明に従う組み換え抗体の生成のための方法を含む。本発明はさらに、本発明に従う抗体をコードする核酸を提供する。
【００２３】
本発明はさらに、慢性閉塞性肺疾患（ＣＯＰＤ）、炎症性疾患、自己免疫疾患、リウマチ性関節炎、狼瘡、乾癬または骨疾患の処置のための本発明に従う抗体の使用を含む。本発明はさらに、疾患の処置、好ましくは炎症性疾患、自己免疫疾患、狼瘡、乾癬または骨疾患の処置のための医薬品の製造のための本発明に従う抗体の使用を含む。本発明はさらに、本発明に従う抗体を含むことを特徴とする、疾患の処置、好ましくは慢性閉塞性肺疾患（ＣＯＰＤ）、炎症性疾患、自己免疫疾患、リウマチ性関節炎、狼瘡、乾癬または骨疾患の処置のための医薬品の製造のための方法を含む。本発明に従う抗体は、上記で言及した特性を特徴とする。
【００２４】
本発明はさらに、慢性閉塞性肺疾患（ＣＯＰＤ）、炎症性疾患、自己免疫疾患、リウマチ性関節炎、狼瘡、乾癬または骨疾患を処置するための方法であって、そのような疾患を有する（従ってそのような療法を必要とする）と診断された患者に本発明に従うＩＬ−１８Ｒ１に対する抗体を投与することを含む前記方法を提供する。その抗体は、単独で、医薬組成物中で、あるいは慢性閉塞性肺疾患（ＣＯＰＤ）、炎症性疾患、自己免疫疾患、リウマチ性関節炎、狼瘡、乾癬または骨疾患を処置するための他の医薬品との組み合わせで投与されてよい。その抗体は医薬的に有効な量で投与される。
【００２５】
本発明はさらに、慢性閉塞性肺疾患（ＣＯＰＤ）、炎症性疾患、自己免疫疾患、リウマチ性関節炎、狼瘡、乾癬または骨疾患の処置のための、および本発明に従う医薬組成物の製造のための、本発明に従う抗体の使用を含む。加えて、本発明は、本発明に従う医薬組成物の製造のための方法を含む。
【００２６】
本発明はさらに、慢性閉塞性肺疾患（ＣＯＰＤ）、炎症性疾患、自己免疫疾患、リウマチ性関節炎、狼瘡、乾癬または骨疾患の処置のための本発明に従う抗体を含む。
本発明はさらに、本発明に従う抗体を、場合により医薬目的のための抗体の配合に有用な緩衝剤および／またはアジュバントと一緒に含有する医薬組成物を含む。
【００２７】
本発明はさらに、医薬的に許容できるキャリヤー中にそのような抗体を含む医薬組成物を提供する。１態様において、その医薬組成物は製品またはキット中に含まれていてよい。本発明はさらに、癌または慢性閉塞性肺疾患（ＣＯＰＤ）、炎症性疾患、自己免疫疾患、リウマチ性関節炎、狼瘡、乾癬または骨疾患の処置のための医薬組成物の製造のための本発明に従う抗体の使用を提供する。その抗体は医薬的に有効な量で用いられる。
【００２８】
本発明はさらに、慢性閉塞性肺疾患（ＣＯＰＤ）、炎症性疾患、自己免疫疾患、リウマチ性関節炎、狼瘡、乾癬または骨疾患の処置のための医薬組成物の製造のための本発明に従う抗体の使用を含む。その抗体は医薬的に有効な量で用いられる。
【００２９】
本発明に従う抗体は、Ｉｌ−１８受容体に媒介されるシグナル伝達およびＮＦカッパＢ経路の活性化と関係する疾患を患う患者に利益をもたらす新規の発明的な特性を有する。
本発明に従う抗体は、ＩＬ−１８Ｒ１に結合し、ＩＬ−１８のＩＬ−１８Ｒ１への結合を阻害する新規の発明的な特性を有する。結果として、ＩＬ−１８Ｒ１およびＩＬ−１８ＲＡＰの間の複合体の形成が阻害され、ＩＬ−１８受容体複合体により引き起こされるシグナル伝達が阻害される。これはＮＦカッパＢ経路の活性化を阻害する。
【図面の簡単な説明】
【００３０】
【図１】図１：ヒトＩＬ−１８Ｒα／ＩＬ−１８Ｒβを形質移入したＨＥＫ２９３細胞に対するＦＡＣＳ
【図２】図２：カニクイザルのＩＬ−１８Ｒα／ＩＬ−１８Ｒβを形質移入したＨＥＫ２９３細胞に対するＦＡＣＳ
【発明を実施するための形態】
【００３１】
Ｉ．定義
本明細書における目的に関する“アクセプターヒトフレームワーク”は、下記で定義するように、ヒト免疫グロブリンフレームワークまたはヒトコンセンサスフレームワークに由来する軽鎖可変ドメイン（ＶＬ）のフレームワークまたは重鎖可変ドメイン（ＶＨ）のフレームワークのアミノ酸配列を含むフレームワークである。ヒト免疫グロブリンフレームワークまたはヒトコンセンサスフレームワークに“由来する”アクセプターヒトフレームワークはそれと同じアミノ酸配列を含んでいてよく、またはそれはアミノ酸配列の変化を含有していてよい。一部の態様において、アミノ酸の変化の数は１０以下、９以下、８以下、７以下、６以下、５以下、４以下、３以下、または２以下である。一部の態様において、ＶＬアクセプターヒトフレームワークはＶＬヒト免疫グロブリンフレームワーク配列またはヒトコンセンサスフレームワーク配列と配列が同一である。
“親和性”は、分子（例えば抗体）の単一の結合部位とその結合パートナー（例えば抗原）の間の非共有結合的相互作用の合計の強度を指す。別途示さない限り、本明細書で用いられる際、“結合親和性”は、結合ペア（例えば抗体および抗原）のメンバー間の１：１相互作用を反映する固有の結合親和性を指す。分子ＸのそれのパートナーＹに関する親和性は、一般に解離定数（Ｋｄ）により表すことができる。親和性は、本明細書で記述する方法を含め、当技術で既知の一般的な方法により測定することができる。結合親和性を測定するための特定の説明的および典型的な態様を、以下で記述する。
【００３２】
用語“抗ＩＬ−１８Ｒ１抗体”および“ＩＬ−１８Ｒ１に結合する抗体”は、その抗体がＩＬ−１８Ｒ１の標的化において診断および／または療法剤として有用であるような十分な親和性でヒトＩＬ−１８Ｒ１に結合することができる抗体を指す。１態様において、抗ＩＬ−１８Ｒ１抗体の無関係な非ＩＬ−１８Ｒ１タンパク質への結合の程度は、表面プラスモン共鳴により測定した場合に、その抗体のＩＬ−１８Ｒ１への結合の約１０％未満である。特定の態様において、ＩＬ−１８Ｒ１に結合する抗体は、１０−８Ｍ以下、例えば１０−８Ｍから１０−１３Ｍまで、例えば１０−９Ｍから１０−１３Ｍまでの解離定数（Ｋｄ）を有する。
【００３３】
本明細書における用語“抗体”は、最も広い意味で用いられ、モノクローナル抗体、ポリクローナル抗体、多重特異性（ｍｕｌｔｉｓｐｅｃｉｆｉｃ）抗体（例えば、二重特異性抗体）、および抗体断片が含まれるがそれらに限定されない様々な抗体構造を、それらが望まれる抗原結合活性を示す限り含む。
【００３４】
“抗体断片”は、完全な抗体が結合する抗原に結合する完全な抗体の一部を含む、完全な抗体以外の分子を指す。抗体断片の例には、Ｆｖ、Ｆａｂ、Ｆａｂ’、Ｆａｂ’−ＳＨ、Ｆ（ａｂ’）２；二特異性抗体（ｄｉａｂｏｄｉｅｓ）；線状抗体；単鎖抗体分子（例えばｓｃＦｖ）；および抗体断片から形成される多重特異性抗体が含まれるが、それらに限定されない。
【００３５】
用語“癌”は、本明細書で用いられる際、増殖性疾患、例えばリンパ腫、リンパ性白血病、肺癌、非小細胞肺（ＮＳＣＬ）癌、細気管支肺胞（ｂｒｏｎｃｈｉｏｌｏａｌｖｉｏｌａｒ）細胞肺癌、骨癌、膵臓癌、皮膚癌、頭または頸部の癌、皮膚または眼内黒色腫、子宮癌、卵巣癌、直腸癌、肛門領域の癌、胃癌（ｓｔｏｍａｃｈ  ｃａｎｃｅｒ）、胃癌（ｇａｓｔｒｉｃ  ｃａｎｃｅｒ）、結腸癌、乳癌、子宮癌、卵管の癌、子宮内膜の癌腫、子宮頚部の癌腫、膣の癌腫、外陰部の癌腫、ホジキン病、食道の癌、小腸の癌、内分泌系の癌、甲状腺の癌、副甲状腺の癌、副腎の癌、軟組織の肉腫、尿道の癌、陰茎の癌、前立腺癌、膀胱の癌、腎臓または尿管の癌、腎細胞癌、腎盂の癌腫、中皮腫、肝細胞癌、胆道癌、中枢神経系（ＣＮＳ）の新生物、脊髄軸の腫瘍、脳幹神経膠腫、多形性膠芽腫、星状細胞腫、神経鞘腫、上衣腫（ｅｐｅｎｄｙｍｏｎａｓ）、髄芽腫、髄膜腫、扁平上皮癌、下垂体腺腫およびユーイング肉腫を指し、上記の癌のいずれかの難治性版、または上記の癌の１種類以上の組み合わせを含む。
【００３６】
用語“キメラ”抗体は、その重および／または軽鎖の一部が特定の源または種に由来し、一方でその重および／または軽鎖の残りの部分が異なる源または種に由来する抗体を指す。
【００３７】
抗体の“クラス”は、その重鎖が有する定常ドメインまたは定常領域のタイプを指す。５種類の主な抗体のクラス：ＩｇＡ、ＩｇＤ、ＩｇＥ、ＩｇＧ、およびＩｇＭが存在し、これらのいくつかはさらにサブクラス（アイソタイプ）、例えばＩｇＧ１、ＩｇＧ２、ＩｇＧ３、ＩｇＧ４、ＩｇＡ１、およびＩｇＡ２に分けることができる。異なるクラスの免疫グロブリンに対応する重鎖の定常ドメインは、それぞれα、δ、ε、γ、およびμと呼ばれる。本発明に従う抗体は、好ましくは、変異ＰＶＡ２３６（ＰＶＡ２３６は、ＩｇＧ１のアミノ酸位置２３３〜２３６からのアミノ酸配列ＥＬＬＧ（一文字アミノ酸コードで示す）またはＩｇＧ４のＥＦＬＧがＰＶＡにより置き換えられていることを意味する）、Ｌ２３４Ａ／Ｌ２３５Ａおよび／またはＧＬＰＳＳ３３１（ＧＬＰＳＳ３３１は、ＩｇＧ１の３３１領域のＡＬＰＡＰまたはＩｇＧ２のＧＬＰＡＰがＧＬＰＳＳに変化していることを意味する）を有するヒトのサブクラスＩｇＧ１の、またはサブクラスＩｇＧ４の抗体であることを特徴とする。本発明のさらに好ましい態様において、その抗体はＥ２３３、Ｌ２３４、Ｌ２３５、Ｇ２３６、Ｄ２７０、Ｎ２９７、Ｅ３１８、Ｋ３２０、Ｋ３２２、Ａ３２７、Ａ３３０、Ｐ３３１および／またはＰ３２９（ＥＵインデックスに従う番号付け）において少なくとも１個の変異を含有するあらゆるＩｇＧクラスの抗体であること、好ましくはＩｇＧ１またはＩｇＧ４であることを特徴とする。特に好ましいのは、ＩｇＧ１変異ＰＶＡ２３６、Ｌ２３４Ａ／Ｌ２３５Ａおよび／またはＧＬＰＳＳ３３１、ならびにＩｇＧ４変異Ｌ２３５Ｅである。ＩｇＧ４サブクラスの抗体が変異Ｓ２２８Ｐまたは変異Ｓ２２８ＰおよびＬ２３５Ｅを含有するのがさらに好ましい(Angal、S.、et al.、Mol. Immunol. 30 (1993) 105-108)。従って、本発明に従う抗体は、好ましくはＰＶＡ２３６、ＧＬＰＳＳ３３１および／またはＬ２３４Ａ／Ｌ２３５Ａ（ＥＵインデックスに従う番号付け）からの１個以上の変異（単数または複数）を含有するヒトのサブクラスＩｇＧ１の抗体である。
【００３８】
疾患はＩＬ１８Ｒ１に媒介される疾患を指す。これらのＩＬ１８Ｒ１に媒介される疾患には以下のものが含まれるが、それらに限定されない：リウマチ性関節炎、骨関節炎、若年性慢性関節炎、ライム関節炎、乾癬性関節炎、反応性関節炎、脊椎関節症、全身性エリテマトーデス、クローン病、潰瘍性結腸炎、炎症性腸疾患、インスリン依存性糖尿病、甲状腺炎、喘息、アレルギー性疾患、乾癬、皮膚炎、強皮症、移植片対宿主病、臓器移植拒絶、臓器移植と関係する急性または慢性免疫疾患、サルコイドーシス、アテローム性動脈硬化症、播種性血管内凝固、川崎病、グレーブス病、ネフローゼ症候群、慢性疲労症候群、ヴェグナー肉芽腫症、ヘノッホ−シェーンライン紫斑（Ｈｅｎｏｃｈ−Ｓｃｈｏｅｎｌｅｉｎ  ｐｕｒｐｕｒｅａ）、腎臓の顕微鏡的（ｍｉｃｒｏｓｃｏｐｉｃ）血管炎、慢性活動性肝炎、ブドウ膜炎、敗血症性ショック、毒素ショック症候群、敗血症症候群、悪液質、感染症、寄生虫症、後天性免疫不全症候群、急性横断性脊髄炎、ハンチントン舞踏病、パーキンソン病、アルツハイマー病、卒中、原発性胆汁性肝硬変、溶血性貧血、悪性腫瘍、心不全、心筋梗塞、アジソン病（散発性）、多腺性機能不全（ｐｏｌｙｇｌａｎｄｕｌａｒ  ｄｅｆｉｃｉｅｎｃｙ）Ｉ型および多腺性機能不全ＩＩ型、シュミット症候群、成人呼吸窮迫症候群、脱毛症、円形脱毛症（ａｌｏｐｅｃｉａ  ｇｒｅａｔａ）、血清陰性関節症（ａｒｔｈｏｐａｔｈｙ）、関節症、ライター病、乾癬性関節症、潰瘍性大腸炎性関節症、腸疾患性滑膜炎、クラミジア、エルシニアおよびサルモネラと関係する関節症、脊椎関節症（ｓｐｏｎｄｙｌｏａｒｔｈｏｐａｔｈｙ）、アテローム性疾患１、動脈硬化症、アトピー性アレルギー、自己免疫性水疱性疾患、尋常性天疱瘡、落葉状天疱瘡、類天疱瘡、線状ＩｇＡ病、自己免疫性溶血性貧血、クームス陽性溶血性貧血、後天性悪性貧血、若年性悪性貧血、筋痛性脳炎／ローヤルフリー病、慢性皮膚粘膜カンジダ症、巨細胞性動脈炎、原発性硬化性肝炎、原因不明の自己免疫性肝炎、後天性免疫不全疾患症候群、後天性免疫不全関連疾患、Ｃ型肝炎、分類不能型免疫不全（ｃｏｍｍｏｎ  ｖａｒｉｅｄ  ｉｍｍｕｎｏｄｅｆｉｃｉｅｎｃｖ）、分類不能型低ガンマグロブリン血症、拡張型心筋症、女性不妊症、卵巣機能不全、早期卵巣機能不全、線維性肺疾患、原因不明の線維性肺胞炎、炎症後間質性肺疾患、間質性肺炎、結合組織疾患関連間質性肺疾患、混合性結合組織疾患関連肺疾患、全身性硬化症関連間質性肺疾患、リウマチ性関節炎関連間質性肺疾患、全身性エリテマトーデス関連肺疾患、皮膚筋炎／多発性筋炎関連肺疾患、シェーグレン病関連肺疾患、強直性脊椎炎関連肺疾患、血管炎性びまん性肺疾患、ヘモジデリン沈着症関連肺疾患、薬剤誘発性間質性肺疾患、放射線性線維症、閉塞性細気管支炎、慢性好酸球性肺炎、リンパ球性浸潤性肺疾患、感染後間質性肺疾患、痛風性関節炎、自己免疫性肝炎、１型自己免疫性肝炎、古典的自己免疫性またはルポイド肝炎、２型自己免疫性肝炎、抗ＬＫＭ抗体肝炎、自己免疫媒介低血糖、黒色表皮腫を伴うＢ型インスリン抵抗性、副甲状腺機能低下症、臓器移植に伴う急性免疫疾患、臓器移植に伴う慢性免疫疾患、骨関節症、原発性硬化性��管炎、１型乾癬、２型乾癬、特発性白血球減少症（ｌｅｕｃｏｐａｅｎｉａ）、自己免疫性好中球減少症、腎疾患ＮＯＳ、糸球体腎炎、腎臓の顕微鏡的血管炎（ｖａｓｕｌｉｔｉｓ）、ライム病、円板状エリテマトーデス、男性不妊症（特発性またはＮＯＳ）、精子自己免疫、多発性硬化症の全亜型、交感性眼炎、結合組織疾患に続発する肺高血圧症、グッドパスチャー症候群、結節性多発動脈炎の肺症状発現、急性リウマチ熱、リウマチ性脊椎炎、スティル病、全身性硬化症、シェーグレン症候群、高安病／動脈炎、自己免疫性血小板減少症、特発性血小板減少症、自己免疫性甲状腺疾患、甲状腺機能亢進症、甲状腺腫性自己免疫性甲状腺機能低下症または橋本病、萎縮性自己免疫性甲状腺機能低下症、原発性粘液水腫（ｍｙｘｏｅｄｅｍａ）、水晶体起因性（ｐｈａｃｏｇｅｎｉｃ）ブドウ膜炎、原発性血管炎、白斑、急性肝疾患、慢性肝疾患、アレルギーおよび喘息、精神障害、抑うつ、統合失調症ならびにＴｈ２型およびＴｈ１型に媒介される疾患。
【００３９】
“エフェクター機能”は、抗体のアイソタイプによって異なる抗体のＦｃ領域に帰することができる生物学的活性を指す。抗体のエフェクター機能の例には以下のものが含まれる：Ｃ１ｑ結合および補体依存性細胞毒性（ＣＤＣ）；Ｆｃ受容体結合；抗体依存性細胞媒介細胞毒性（ＡＤＣＣ）；貪食作用；細胞表面受容体（例えばＢ細胞受容体）の下方制御；ならびにＢ細胞活性化。
【００４０】
薬剤、例えば医薬配合物の“有効量”は、必要な投与量において、および必要な期間の間、望まれる療法的または予防的結果を達成するのに有効な量を指す。
用語“同じエピトープ”は、抗体１Ｇ１２のＩＬ−１８Ｒ１への結合を阻害することを特徴とする、本発明に従う抗体を指す。抗体は、その抗体が抗体１Ｇ１２が結合するのと同じＩＬ−１８Ｒ１のエピトープに結合する場合、この基準抗体による結合の立体障害のため、ＩＬ−１８Ｒ１への結合を阻害され、またはＩＬ−１８Ｒへの結合を阻害される。ＩＬ−１８Ｒ１および調べるべき抗体の間の結合の阻害は、ＳＰＲ（ＢＩＡＣＯＲＥ）アッセイにより検出することができる。調べるべき抗ＩＬ−１８Ｒ１抗体を、６μｇ／ｍｌ（４０ｎＭに相当する）の濃度で、チップ表面にカップリングさせた抗種抗体（ａｎｔｉ  ｓｐｅｃｉｅｓ  ａｎｔｉｂｏｄｙ）により捕捉させる。次いで２．５μｇ／ｍｌのＩＬ−１８Ｒ１タンパク質（２０ｎＭのＩＬ−１８Ｒ１  Ｆｃ融合物に相当する）を２０ｎＭの濃度で抗体でコートされた表面上に注入する。分析のため、抗体１Ｇ１２を５０ｎＭの濃度でこの表面上に２分間添加し、結合を測定する。注入の際、あらゆるシグナルの低減またはシグナルに変化がないことは、調べるべき抗体がＩｇ１２のＩＬ−１８Ｒ１への結合を阻害することを示している。加えて、同じアッセイであるが抗体１Ｇ１２を固定して調べるべき抗体を添加するアッセイに関して同じ結果が見られたならば、その調べるべき抗体は“同じエピトープ”に結合する。それに対し、両方のアッセイの少なくとも一方において抗体の注入により引き出されたシグナルの少なくとも１０％の増大は、その調べるべき抗体がＩｇ１２のＩＬ−１８Ｒ１への結合を阻害しないことを示す。
【００４１】
さらに、抗体１Ｇ１２が結合するのと同じエピトープに結合する抗体は変異ＩＬ−１８Ｒ１にも結合することが分かっており、ここでその変異はＳＲＩＡＬ（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１９）からＰＲＶＴＦ（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：２０）へのＤ１−変異、ＭＫＮＹＴＱＫ（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：２１）からＶＧＮＤＲＲＮ（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：２２）へのＤ１−変異、ＱＴＬＶＮＳＴＳ（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：２３）からＥＥＬＩＱＤＴＷ（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：２４）へのＤ２−変異、ＮＰＴＩＫＫＮ（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：２５）からＴＰＲＩＬＫＤ（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：２６）へのＤ２−変異、またはＨＦＬＨＨＮＧＫＬＦ（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：  ２７）からＦＳＶＨＨＮＧＴＲＹ（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：２８）へのＤ２−変異からなる。さらに、抗体１Ｇ１２が結合するのと同じエピトープに結合する抗体は、ドメイン（ｄｏｍａｉｎｄ）Ｄ１およびＤ２が欠失している変異ＩＬ−１８Ｒ１には結合しないことが分かっている。上記で言及したことに従って、変異していないＩＬ−１８Ｒ１への結合により引き出されたシグナルの２０％を超えないそのような変異ＩＬ−１８Ｒ１へのＳＰＲ結合に関するシグナル偏差は、調べるべき抗体がそのような変異ＩＬ−１８Ｒ１変種にも結合することを示している。
【００４２】
“抗体のＦｃ部分またはＦｃ領域”は当業者に周知の用語であり、抗体のパパインでの切断に基づいて定義されている。その用語は、その定常領域の少なくとも一部を含有する免疫グロブリン重鎖のＣ末端領域を定める。その用語には、天然の配列のＦｃ領域および変種のＦｃ領域が含まれる。１態様において、ヒトＩｇＧ重鎖Ｆｃ領域は、Ｃｙｓ２２６から、またはＰｒｏ２３０からその重鎖のカルボキシル末端までに及ぶ。しかし、そのＦｃ領域のＣ末端のリシン（Ｌｙｓ４４７）は存在していても存在していなくてもよい。本明細書において別途明記しない限り、Ｆｃ領域または定常領域におけるアミノ酸残基の番号付けは、ＥＵインデックスとも呼ばれるＥＵ番号付け方式に従い、それはKabat et al., Sequences of Proteins of Immunological Interest, 第５版、公衆衛生局国立衛生研究所(メリーランド州ベセスダ) (1991)において記述されている通りである。好ましくはそのＦｃ部分はヒトのＦｃ部分であり、特に好ましくはヒトＩｇＧ４サブクラス、好ましくはヒンジ領域において変異した（例えばＳ２２８Ｐおよび／またはＬ２３５Ｅ）ヒトＩｇＧ４サブクラス、またはヒトＩｇＧ１サブクラスからの変異したＦｃ部分のどちらかからのものである。最も好ましいのは、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１４、１５、１６、１７、および１８で示した領域から選択される重鎖定常領域を含むＦｃ部分である。好ましい軽鎖定常領域をＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１２および１３において示す。
【００４３】
“フレームワーク”または“ＦＲ”は、超可変領域（ＨＶＲ）の残基以外の可変ドメインの残基を指す。可変ドメインのＦＲは一般に４種類のＦＲドメインからなる：ＦＲ１、ＦＲ２、ＦＲ３、およびＦＲ４。従って、そのＣＤＲおよびＦＲの配列は一般にＶＨ（またはＶＬ）において以下の順序で現れる：ＦＲ１−ＣＤＲ１（Ｌ１）−ＦＲ２−ＣＤＲ２（Ｌ２）−ＦＲ３−ＣＤＲ３（Ｌ３）−ＦＲ４。
【００４４】
用語“完全長抗体”、“完全抗体”、および“抗体全体”は、本明細書において、天然の抗体の構造に実質的に類似した構造を有する、または本明細書で定義したようなＦｃ領域を含有する重鎖を有する抗体を指して互換的に用いられる。
【００４５】
用語“宿主細胞”、“宿主細胞株”、および“宿主細胞培養物”は互換的に用いられ、その中に外来性の核酸が導入されている細胞を指し、そのような細胞の子孫を含む。宿主細胞には“形質転換体”および“形質転換された細胞”が含まれ、それには初代の形質転換された細胞および継代の数に関わらずそれらに由来する子孫が含まれる。子孫は核酸含有量が親細胞と完全に同一であることはできないが、変異を含有していてよい。最初に形質転換された細胞に関してスクリーニングまたは選択された機能または生物学的活性と同じ機能または生物学的活性を有する変異体子孫はこれに含まれる。
【００４６】
“ヒトコンセンサスフレームワーク”は、ヒト免疫グロブリンＶＬまたはＶＨフレームワーク配列の選択において最も一般的に生じるアミノ酸残基を表わすフレームワークである。一般に、ヒト免疫グロブリンＶＬまたはＶＨ配列の選択は、可変ドメイン配列の亜集団からである。一般に、その配列の亜集団は、Kabat et al., Sequences of Proteins of Immunological Interest, 第５版, NIH Publication 91-3242, メリーランド州ベセスダ(1991), Vols. 1-3におけるような亜集団である。１態様において、ＶＬに関して、その亜集団はKabat et al.,（上記）におけるような亜集団カッパＩである。１態様において、ＶＨに関して、その亜集団はKabat et al.,（上記）におけるような亜集団ＩＩＩである。
【００４７】
“ヒト化”抗体は、非ヒトＣＤＲからのアミノ酸残基およびヒトＦＲからのアミノ酸残基を含むキメラ抗体を指す。特定の態様において、ヒト化抗体は、少なくとも１個、典型的には２個の可変ドメインの実質的に全部を含むと考えられ、ここでそのＣＤＲの全部または実質的に全部は非ヒト抗体のＣＤＲに対応し、そのＦＲの全部または実質的に全部はヒト抗体のＦＲに対応する。ヒト化抗体は場合によりヒト抗体に由来する抗体定常領域の少なくとも一部を含んでいてよい。抗体、例えば非ヒト抗体の“ヒト化された形態”または“ヒト化版”または“ヒト化抗体”は、ヒト化を受けた抗体を指す。１態様において、“ヒト化抗体”を調製するために、非ヒト種（例えばハムスター）に由来する抗体のＣＤＲの１個〜６個全部がヒト抗体のフレームワーク領域中に移植される。例えば、Riechmann, L., et al., Nature 332 (1988) 323-327;およびNeuberger, M.S., et al., Nature 314 (1985) 268-270を参照。１態様において、本発明に従う（非ヒト由来である）“抗体のヒト化版”は、ＶＨおよびＶＬが（ＣＤＲの移植を含む）標準的な技法および場合によりそれに続くそのフレームワーク領域およびＣＤＲ中の特定のアミノ酸の変異誘発によりヒト化されている、非ヒト抗体配列に基づく抗体を指す。１態様において、そのフレームワーク領域中の１〜５個のアミノ酸（例えば３個まで）および／またはそのＣＤＲ中の１〜３個のアミノ酸（例えば２個まで）を、さらなる変異により改変することができる。例えば、その変異誘発は、Riechmann, L., et al., Nature 332 (1988) 323-327およびQueen, C., et al., Proc. Natl. Acad. Sci. USA 86 (1989) 10029-10033、または他の文献により記述されているような分子モデリングに基づくことができる。そのような変異に適した位置は、例えば配列もしくは相同性分析により、ヒトのフレームワークを選択することにより（固定フレームワークアプローチ；相同性マッチングまたは最適合致（ｂｅｓｔ−ｆｉｔ））、コンセンサス配列を用いることにより、いくつかの異なる生殖細胞系列からＦＲを選択することにより、または３次元表面上の非ヒト残基をヒト抗体において見られる最も一般的な残基で、もしくは立体的に最適化された相互作用に基づいて置き換えることにより同定することができる。１態様において、そのようなヒト化版はヒト定常領域を用いてキメラ化される。
【００４８】
用語“相補性決定領域”または“ＣＤＲ”は、本明細書で用いられる際、配列が超可変性である、および／または構造的に定められたループ（“超可変性ループ”）を形成する抗体可変ドメインの領域のそれぞれを指す(Kabat et al., Sequences of Proteins of Immunological Interest, 第５版、公衆衛生局国立衛生研究所(メリーランド州ベセスダ) (1991); Chothia, C. and Lesk, A.M., J. Mol. Biol. 196 (1987) 901-917)。ＶＨ中のＣＤＲ１を除き、ＣＤＲは一般に超可変性ループを形成するアミノ酸残基を含む。一般に、天然の４鎖抗体は６個のＣＤＲを含む：ＶＨ中に３個（Ｈ１、Ｈ２、Ｈ３）、およびＶＬ中に３個（Ｌ１、Ｌ２、Ｌ３）。ＨＶＲは一般にその超可変性ループからの、および／またはその“相補性決定領域”（ＣＤＲ）からのアミノ酸残基を含み、後者は配列の可変性が最も高く、および／または抗原認識に関わっている。典型的なＣＤＲは、アミノ酸残基２６〜３２（Ｌ１）、５０〜５２（Ｌ２）、９１〜９６（Ｌ３）、２６〜３２（Ｈ１）、５３〜５５（Ｈ２）、および９６〜１０１（Ｈ３）(Chothia, C. and Lesk, A.M., J. Mol. Biol. 196 (1987) 901-917)、またはＬ１のアミノ酸残基２４〜３４、Ｌ２のアミノ酸残基５０〜５６、Ｌ３のアミノ酸残基８９〜９７、Ｈ１のアミノ酸残基３１〜３５Ｂ、Ｈ２のアミノ酸残基５０〜６５、およびＨ３のアミノ酸残基９５〜１０２(Kabat, E.A. et al., Sequences of Proteins of Immunological Interest, 第５版、公衆衛生局国立衛生研究所(メリーランド州ベセスダ) (1991), NIH Publication 91-3242.)に存在する。ＶＨ中のＣＤＲ１を除き、ＣＤＲは一般に超可変性ループを形成するアミノ酸残基を含む。ＳＤＲは、省略されたＣＤＲ（ａｂｂｒｅｖｉａｔｅｄ−ＣＤＲｓ）またはａ−ＣＤＲと呼ばれるＣＤＲの領域内に含まれる。典型的なａ−ＣＤＲ（ａ−ＣＤＲ−Ｌ１、ａ−ＣＤＲ−Ｌ２、ａ−ＣＤＲ−Ｌ３、ａ−ＣＤＲ−Ｈ１、ａ−ＣＤＲ−Ｈ２、およびａ−ＣＤＲ−Ｈ３）は、Ｌ１のアミノ酸残基３１〜３４、Ｌ２のアミノ酸残基５０〜５５、Ｌ３のアミノ酸残基８９〜９６、Ｈ１のアミノ酸残基３１〜３５Ｂ、Ｈ２のアミノ酸残基５０〜５８、およびＨ３のアミノ酸残基９５〜１０２に存在する(Almagro, J.C. and Fransson, J., Front. Biosci. 13 (2008) 1619-1633参照)。別途示さない限り、ＣＤＲ残基および可変ドメイン中の他の残基（例えばＦＲ残基）は本明細書においてKabat et al.（上記）に従って番号付けされる。
【００４９】
“免疫コンジュゲート（ｉｍｍｕｎｏｃｏｎｊｕｇａｔｅ）”は、１個以上の異種分子（単数または複数）にコンジュゲートした抗体である。
“個体”または“対象”は哺乳類である。哺乳類には、飼い慣らされた動物（例えば、ウシ、ヒツジ、ネコ、イヌ、およびウマ）、霊長類（例えば、ヒトおよび非ヒト霊長類、例えばサル）、ウサギ、およびげっ歯類（例えば、マウスおよびラット）が含まれるが、それらに限定されない。特定の態様において、その個体または対象はヒトである。
【００５０】
“単離された抗体”は、それの天然の環境の構成要素から分離された抗体である。一部の態様において、抗体は、例えばクロマトグラフィー（例えばイオン交換または逆相ＨＰＬＣ）法により決定されるような９５％または９９％より大きい純度まで精製される。抗体の純度の評価に関する方法の総説に関して、例えばFlatman, S. et al., J. Chromatogr. B 848 (2007) 79-87を参照。
【００５１】
“単離された”核酸は、それの天然の環境の構成要素から分離された核酸分子を指す。単離された核酸には、通常その核酸分子を含有する細胞中に含有される核酸分子が含まれるが、その核酸分子は染色体外に、またはそれの天然の染色体上の位置とは異なる染色体上の位置に存在する。
【００５２】
“抗ＩＬ−１８Ｒ１抗体をコードする単離された核酸”は、抗体重鎖および軽鎖（またはその断片）をコードする１種類以上の核酸分子を指し、単一のベクターまたは別個のベクター中のそのような核酸分子（単数または複数）、および宿主細胞中の１個以上の位置に存在するそのような核酸分子（単数または複数）を含む。
【００５３】
用語“モノクローナル抗体”は、本明細書で用いられる際、実質的に均質な抗体の集団から得られたを指し、すなわち、その集団を構成する個々の抗体は同一であり、および／または、例えば自然に生じる変異を含有する、またはモノクローナル抗体調製物の生成の間に生じる可能性のある変種抗体を除いて同じエピトープに結合し、そのような変種は一般に少量存在する。典型的に異なる決定基（エピトープ）に対して向けられた異なる抗体を含むポリクローナル抗体調製物とは対照的に、モノクローナル抗体調製物のそれぞれのモノクローナル抗体は抗原上の単一の決定基に対して向けられている。従って、修飾語“モノクローナル”は、実質的に均質な抗体の集団から得られるものとしての抗体の性質を示し、いずれかの特定の方法によるその抗体の生成を必要とするものと解釈されるべきではない。例えば、本発明に従って用いられるためのモノクローナル抗体は、ハイブリドーマ法、組換えＤＮＡ法、ファージディスプレイ法、およびヒト免疫グロブリン座位の全部または一部を含有するトランスジェニック動物を利用する方法が含まれるがそれらに限定されない様々な技法により作ることができ、そのような方法およびモノクローナル抗体を作るための他の典型的な方法は本明細書で記述されている。
【００５４】
“裸抗体（ｎａｋｅｄ  ａｎｔｉｂｏｄｙ）”は、異種部分にコンジュゲートされていない抗体を指す。裸抗体は医薬配合物中に存在していてよい。
“天然抗体”は、様々な構造を有する天然存在免疫グロブリン分子を指す。例えば、天然ＩｇＧ抗体は約１５０，０００ダルトンのヘテロ４量体糖タンパク質であり、ジスルフィド結合した２個の同一の軽鎖および２個の同一の重鎖からなる。Ｎ末端からＣ末端の方向に、それぞれの重鎖は可変重ドメイン（ｖａｒｉａｂｌｅ  ｈｅａｖｙ  ｄｏｍａｉｎ）または重鎖可変ドメインとも呼ばれる可変領域（ＶＨ）を有し、続いて３個の定常ドメイン（ＣＨ１、ＣＨ２、およびＣＨ３）を有する。同様に、Ｎ末端からＣ末端の方向に、それぞれの軽鎖は可変軽ドメイン（ｖａｒｉａｂｌｅ  ｌｉｇｈｔ  ｄｏｍａｉｎ）または軽鎖可変ドメインとも呼ばれる可変領域（ＶＬ）を有し、続いて定常軽（ＣＬ)ドメインを有する。抗体の軽鎖は、その定常ドメインのアミノ酸配列に基づいて、カッパ（κ）およびラムダ（λ）と呼ばれる２つのタイプの１つに割り当てることができる。
【００５５】
用語“添付文書”は、療法製品の市販の包装の中に習慣的に含まれる説明書を指して用いられ、それはそのような療法製品の使用に関する適応症、使用法、投与量、投与、組み合わせ療法、禁忌および／または警告に関する情報を含む。
【００５６】
基準ポリペプチド配列に関する“パーセント（％）アミノ酸配列同一性”は、配列を整列させて必要であればギャップを導入して最大パーセントの配列の同一性を達成した後の、基準ポリペプチド配列中のアミノ酸配列と同一である候補配列中のアミノ酸残基の百分率として定義され、保存的置換は一切その配列の同一性の一部として考慮しない。パーセントアミノ酸配列同一性を決定するための整列は、当技術分野の技術の範囲内である様々な方法で、例えば公的に利用可能なコンピューターソフトウェア、例えばＢＬＡＳＴ、ＢＬＡＳＴ−２、ＡＬＩＧＮまたはＭｅｇａｌｉｇｎ（ＤＮＡＳＴＡＲ）ソフトウェアを用いて達成することができる。当業者は、比較している配列の完全長にわたって最大限の整列を達成するのに必要なあらゆるアルゴリズムを含め、配列を整列させるための適切なパラメーターを決定することができる。しかし、本明細書における目的に関して、％アミノ酸配列同一性の値は配列比較コンピュータープログラムＡＬＩＧＮ−２を用いて生成される。ＡＬＩＧＮ−２配列比較コンピュータープログラムはＧｅｎｅｎｔｅｃｈ，Ｉｎｃ．により生み出され、そのソースコードは米国著作権庁（ワシントンＤＣ，２０５５９）において利用者文書で保存されており、そこでそれは米国著作権登録番号ＴＸＵ５１００８７の下で登録されている。ＡＬＩＧＮ−２プログラムはＧｅｎｅｎｔｅｃｈ，Ｉｎｃ．（カリフォルニア州サウスサンフランシスコ）から公的に入手可能であり、またはそのソースコードからコンパイルすることができる。ＡＬＩＧＮ−２プログラムは、デジタルＵＮＩＸ  Ｖ４．０Ｄを含め、ＵＮＩＸオペレーティングシステム上での使用のためにコンパイルされるべきである。全ての配列比較パラメーターはＡＬＩＧＮ−２プログラムにより設定され、変動しない。
【００５７】
ＡＬＩＧＮ−２がアミノ酸配列比較のために用いられる状況では、所与のアミノ酸配列Ａの所与のアミノ酸配列Ｂへの、所与のアミノ酸配列Ｂとの、または所与のアミノ酸配列Ｂに対する％アミノ酸配列同一性（それはあるいは、所与のアミノ酸配列Ｂに、所与のアミノ酸配列Ｂと、または所与のアミノ酸配列Ｂに対してある特定の％のアミノ酸配列同一性を有する、または含む所与のアミノ酸配列Ａと表現することができる）は、以下のように計算される：
１００×比Ｘ／Ｙ
ここでＸは、配列整列プログラムＡＬＩＧＮ−２によりそのプログラムのＡおよびＢの整列において同一の一対（ｍａｔｃｈｅｓ）として採点されたアミノ酸残基の数であり、ＹはＢ中のアミノ酸残基の総数である。アミノ酸配列Ａの長さがアミノ酸配列Ｂの長さと等しくない場合、ＡのＢに対する％アミノ酸配列同一性は、ＢのＡに対する％アミノ酸配列同一性と等しくないと考えられることは理解されるであろう。別途明確に記載しない限り、本明細書で用いられる全ての％アミノ酸配列同一性の値はＡＬＩＧＮ−２コンピュータープログラムを用いて直前の段落で記述したように得られる。
【００５８】
用語“医薬配合物”は、その中に含有される有効成分の生物学的活性が有効であることを可能にするような形態であり、その配合物が投与されるであろう対象にとって許容できない程毒性である追加の構成要素を含有しない製剤を指す。
【００５９】
“医薬的に許容できるキャリヤー”は、対象にとって非毒性である有効成分以外の医薬配合物中の成分を指す。医薬的に許容できるキャリヤーには、緩衝剤、賦形剤、安定剤、または保存剤が含まれるが、それらに限定されない。
【００６０】
“ＩＬ−１８Ｒ１”は、本明細書で用いられる際、ヒトのＩＬ−１８Ｒ１（インターロイキン１８受容体１、ＩＬ−１８Ｒα、ＣＤ２１８抗原様ファミリーメンバーＡ、ＣＤ２１８ａ、ＵｎｉＰｒｏｔＫＢ／Ｓｗｉｓｓ−Ｐｒｏｔ  Ｑ１３４７８）を指す。
【００６１】
本明細書で用いられる際、“処置”（およびその文法的変形、例えば“処置する”または“処置すること”）は、処置されている個体の自然経過を変化させることを試みる臨床的介入を指し、予防のために、または臨床病理の経過の間に実施することができる。処置の望ましい作用には、疾患の発生または再発の予防、症状の軽減、その疾患のあらゆる直接的または間接的な病理的結果の減弱、疾患の進行の速度の低下、疾患状態の改善または緩和が含まれるが、それらに限定されない。一部の態様において、本発明の抗体は、疾患の発生を遅らせるために、または疾患の進行を遅くするために用いられる。
【００６２】
用語“可変領域”または“可変ドメイン”は、抗体の抗原への結合に関わる抗体重鎖または軽鎖のドメインを指す。天然の抗体の重鎖および軽鎖（それぞれＶＨおよびＶＬ）の可変ドメインは一般に類似の構造を有し、それぞれのドメインは４個の保存されたフレームワーク領域（ＦＲ)および３個の超可変領域（ＨＶＲ）を含む(例えば、Kindt et al., Kuby Immunology, 第６版, W.H. Freeman and Co., 91ページ(2007)を参照)。単一のＶＨまたはＶＬドメインは抗原結合特異性を与えるのに十分である可能性がある。さらに、特定の抗原に結合する抗体は、その抗原に結合する抗体からのＶＨまたはＶＬドメインを用いてそれぞれ相補的なＶＬまたはＶＨドメインのライブラリーをスクリーニングして単離することができる(例えばPortolano, S. et al., J. Immunol. 150 (1993) 880-887; Clarkson, T. et al., Nature 352 (1991) 624-628参照)。
【００６３】
用語“ベクター”は、本明細書で用いられる際、それが連結される別の核酸を増殖させることができる核酸分子を指す。その用語には、自己複製核酸構造としてのベクターならびにそれが導入された宿主細胞のゲノム中に組み込まれるベクターが含まれる。特定のベクターは、それらが作動できる方式で連結されている核酸の発現を方向づけることができる。そのようなベクターは本明細書において“発現ベクター”と呼ばれる。
【００６４】
ＩＩ．組成物および方法
１観点において、本発明はＩＬ−１８Ｒ１に結合する抗体に基づく。本発明の抗体は、例えば慢性閉塞性肺疾患（ＣＯＰＤ）、炎症性疾患、自己免疫疾患、リウマチ性関節炎、狼瘡、乾癬もしくは骨疾患または他のＩＬ１８Ｒ１に媒介される疾患の診断または処置に有用である。
【００６５】
Ａ．典型的な抗ＩＬ−１８Ｒ１抗体
本発明のさらなる観点において、上記の態様のいずれかに従う抗ＩＬ−１８Ｒ１抗体は、キメラまたはヒト化抗体を含むモノクローナル抗体である。１態様において、抗ＩＬ−１８Ｒ１抗体は抗体断片、例えばＦｖ、Ｆａｂ、Ｆａｂ’、ｓｃＦｖ、二特異性抗体、またはＦ（ａｂ’）２断片である。別の態様において、その抗体は完全長抗体、例えば完全なＩｇＧ１抗体または本明細書で記述したような他の抗体のクラスまたはアイソタイプである。
【００６６】
さらなる観点において、上記の態様のいずれかに従う抗ＩＬ−１８Ｒ１抗体は、下記の節で記述するような特徴のいずれかを単独で、または組み合わせで組み込むことができる：
１態様において、本発明に従うヒト化抗体は、重鎖可変領域のＣＤＲとしてＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：２またはＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１０のＣＤＲＨ１領域、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：３のＣＤＲＨ２領域、およびＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：４のＣＤＲＨ３領域、ならびに軽鎖可変領域のＣＤＲとしてＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：６のＣＤＲＬ１領域、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：７のＣＤＲＬ２領域、およびＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８のＣＤＲＬ３領域を含むことを特徴とし、またはそのヒト化版である。
【００６７】
１態様において、本発明に従うヒト化抗体は、重鎖可変領域としてＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１および可変軽鎖領域としてＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：５、もしくは重鎖可変領域としてＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：９および可変軽鎖領域としてＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１１を含むことを特徴とし、またはそのヒト化版である。
【００６８】
１態様において、本発明に従う抗体は、以下：
ａ）重鎖可変領域のＣＤＲとしてＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：３０のＣＤＲＨ１領域、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：３１のＣＤＲＨ２領域、およびＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：３２のＣＤＲＨ３領域、ならびに軽鎖可変領域のＣＤＲとしてＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：３４のＣＤＲＬ１領域、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：３５のＣＤＲＬ２領域、およびＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：３６のＣＤＲＬ３領域；
ｂ）重鎖可変領域のＣＤＲとしてＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：３８のＣＤＲＨ１領域、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：３９のＣＤＲＨ２領域、およびＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：４０のＣＤＲＨ３領域、ならびに軽鎖可変領域のＣＤＲとしてＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：４２のＣＤＲＬ１領域、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：４３のＣＤＲＬ２領域、およびＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：４４のＣＤＲＬ３領域；
ｃ）重鎖可変領域のＣＤＲとしてＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：４６のＣＤＲＨ１領域、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：４７のＣＤＲＨ２領域、およびＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：４８のＣＤＲＨ３領域、ならびに軽鎖可変領域のＣＤＲとしてＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：５０のＣＤＲＬ１領域、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：５１のＣＤＲＬ２領域、およびＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：５２のＣＤＲＬ３領域；
ｄ）重鎖可変領域のＣＤＲとしてＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：５４のＣＤＲＨ１領域、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：５５のＣＤＲＨ２領域、およびＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：５６のＣＤＲＨ３領域、ならびに軽鎖可変領域のＣＤＲとしてＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：５８のＣＤＲＬ１領域、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：５９のＣＤＲＬ２領域、およびＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：６０のＣＤＲＬ３領域；または
ｅ）重鎖可変領域のＣＤＲとしてＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：６２のＣＤＲＨ１領域、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：６３のＣＤＲＨ２領域、およびＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：６４のＣＤＲＨ３領域、ならびに軽鎖可変領域のＣＤＲとしてＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：６６のＣＤＲＬ１領域、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：６７のＣＤＲＬ２領域、およびＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：６８のＣＤＲＬ３領域；
を含むことを特徴とする。
【００６９】
１態様において、本発明に従う抗体は、以下：
ａ）重鎖可変領域としてＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：２９および可変軽鎖領域としてＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：３３；
ｂ）重鎖可変領域としてＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：３７および可変軽鎖領域としてＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：４１；
ｃ）重鎖可変領域としてＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：４５および可変軽鎖領域としてＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：４９；
ｄ）重鎖可変領域としてＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：５３および可変軽鎖領域としてＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：５７；または
ｅ）重鎖可変領域としてＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：６１および可変軽鎖領域としてＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：６５；
を含むことを特徴とする。
【００７０】
１．抗体親和性
特定の態様において、本明細書で提供する抗体は、１０−８Ｍ以下の、例えば１０−８Ｍから１０−１３Ｍまでの、例えば１０−９Ｍから１０−１３Ｍまでの解離定数（ＫＤ）を有する。
【００７１】
ＫＤは、ＢＩＡＣＯＲＥ（登録商標）−Ｔ１００またはＢＩＡＣＯＲＥ（登録商標）−Ａ１００（ＧＥ  Ｈｅａｌｔｈｃａｒｅ，ドイツ、フライブルク）を用いる表面プラスモン共鳴アッセイを用いて、２５℃において、抗原固定ＣＭ５チップを用いて、１０反応単位（ＲＵ）で測定される。簡潔には、カルボキシメチル化デキストランバイオセンサーチップ（ＣＭ５、ＧＥ  Ｈｅａｌｔｈｃａｒｅ）を、供給業者の説明書に従ってＮ−エチル−Ｎ’−（３−ジメチルアミノプロピル）−カルボジイミド塩酸塩（ＥＤＣ）およびＮ−ヒドロキシスクシンイミド（ＮＨＳ）を用いて活性化する。抗原または適切な捕捉抗体を１０ｍＭ酢酸ナトリウム（ｐＨ４．８）で５μｇ／ｍｌに希釈した後、５μｌ／分の流速で注入し、カップリングさせたタンパク質のおおよそ１０反応単位（ＲＵ）を達成する。タンパク質の注入の後、１Ｍエタノールアミンを注入して未反応の基をブロックする。測定されるべき結合事象の前に、一方の結合パートナーは既にその表面上に固定されており、または適切な捕捉系（例えばヒトＩｇＧを捕捉するためのヒトＩｇＧ特異的抗体）により捕捉された。速度論的測定のため、Ｆａｂ／抗体／抗原の２倍系列希釈物（０．７８ｎＭ〜５００ｎＭ）を０．０５％ポリソルベート２０（ＴＷＥＥＮ−２０（商標））界面活性剤を含むＰＢＳ（ＰＢＳＴ）中で２５℃においておおよそ３０μｌ／分の流速で注入した。結合事象の後、次のサイクルのためにその表面を再生した。会合速度（ｋａ）および解離速度（ｋｄ）を、単純な１対１ラングミュア結合モデル（ＢＩＡＣＯＲＥ（登録商標）評価ソフトウェアバージョン４．１）を用いて、会合および解離曲線を同時に当てはめる（ｆｉｔｔｉｎｇ）ことにより計算する。平衡解離定数（ＫＤ）は比ｋｄ／ｋａとして計算される。例えば、Chen, Y. et al., J. Mol. Biol. 293 (1999) 865-881を参照。上記の表面プラスモン共鳴アッセイによりｋａが１０６Ｍ−１ｓ−１を超える場合、そのオン速度（ｏｎ−ｒａｔｅ）は、２５℃においてＰＢＳ（ｐＨ７．２）中２０ｎＭの抗抗原抗体（Ｆａｂ形態）の蛍光放射強度（励起＝２９５ｎｍ；放射＝３４０ｎｍ、バンドパス１６ｎｍ）の増大または減少を、増大する濃度の抗原の存在下で、分光計、例えば流れ停止（ｓｔｏｐ−ｆｌｏｗ）を備えた分光光度計（ｓｐｅｃｔｒｏｐｈｏｍｅｔｅｒ）において測定されるように測定する蛍光消光技法を用いることにより決定することができる。
【００７２】
２．抗体断片
特定の態様において、本明細書で提供される抗体は抗体断片である。抗体断片には、Ｆａｂ、Ｆａｂ’、Ｆａｂ’−ＳＨ、Ｆ（ａｂ’）２、Ｆｖ、およびｓｃＦｖ断片、ならびに下記で記述される他の断片が含まれるが、それらに限定されない。特定の抗体断片の総説に関して、Hudson, P.J. et al., Nat. Med. 9 (2003) 129-134参照。ｓｃＦｖ断片の総説に関して、例えばPlueckthun, In: The Pharmacology of Monoclonal Antibodies, Vol. 113, Rosenburg and Moore (編者), Springer-Verlag, ニューヨーク (1994), pp. 269-315参照；ＷＯ９３／１６１８５；ならびに米国特許第５，５７１，８９４号および第５，５８７，４５８号も参照。サルベージ受容体（ｓａｌｖａｇｅ  ｒｅｃｅｐｔｏｒ）結合エピトープ残基を含み、増大した生体内半減期を有するＦａｂおよびＦ（ａｂ’）２断片の論考に関して、米国特許第５，８６９，０４６号を参照。
【００７３】
二特異性抗体は、二価または二重特異性であることができる２個の抗原結合部位を有する抗体断片である。例えば、欧州特許第４０４，０９７号；ＷＯ１９９３／０１１６１；Hudson, P.J. et al., Nat. Med. 9 (2003) 129-134；およびHolliger, P. et al., Proc. Natl. Acad. Sci. USA 90 (1993) 6444-6448参照。三特異性抗体（Ｔｒｉａｂｏｄｉｅｓ）および四特異性抗体（ｔｅｔｒａｂｏｄｉｅｓ）もHudson, P.J. et al., Nat. Med. 9 (2003) 129-134において記述されている。
【００７４】
単一ドメイン抗体は、抗体の重鎖可変ドメインの全部もしくは一部または軽鎖可変ドメインの全部もしくは一部を含む抗体断片である。特定の態様において、単一ドメイン抗体はヒトの単一ドメイン抗体である(Domantis, Inc., マサチューセッツ州ウォルサム；例えば米国特許第６，２４８，５１６  Ｂ１号参照)。
【００７５】
抗体断片は、本明細書で記述するように、完全な抗体のタンパク質分解による消化ならびに組換え宿主細胞（例えば大腸菌またはファージ）による生成が含まれるがそれらに限定されない様々な技法により作ることができる。
【００７６】
３．多重特異性抗体
特定の態様において、本明細書で提供する抗体は多重特異性抗体、例えば二重特異性抗体である。多重特異性抗体は、少なくとも２個の異なる部位に関する結合特異性を有するモノクローナル抗体である。特定の態様において、その結合特異性の一方はＩＬ−１８Ｒ１に関してであり、他方はいずれかの他の抗原に関してである。特定の態様において、二重特異性抗体はＩＬ−１８Ｒ１の２個の異なるエピトープに結合することができる。二重特異性抗体は、完全長抗体または抗体断片として調製することができる。
【００７７】
多重特異性抗体を作るための技法には、異なる特異性を有する２種類の免疫グロブリン重鎖−軽鎖対の組換えによる同時発現（Milstein, C. and Cuello, A.C., Nature 305 (1983) 537-540、ＷＯ９３／０８８２９、およびTraunecker, A. et al., EMBO J. 10 (1991) 3655-3659）、および“ノブインホール（ｋｎｏｂ−ｉｎ−ｈｏｌｅ）”設計（ｅｎｇｉｎｅｅｒｉｎｇ）（例えば米国特許第５，７３１，１６８号参照）が含まれるが、それらに限定されない。多重特異性抗体は、抗体Ｆｃヘテロ二量体分子を作るために静電的操縦作用（ｅｌｅｃｔｒｏｓｔａｔｉｃ  ｓｔｅｅｒｉｎｇ  ｅｆｆｅｃｔｓ）を設計する（ＷＯ２００９／０８９００４Ａ１）；２個以上の抗体または断片を架橋する（例えば米国特許第４，６７６，９８０号およびBrennan, M. et al., Science 229 (1985) 81-83参照)；ロイシンジッパーを用いて二重特異性抗体を生成する（例えばKostelny, S.A. et al., J. Immunol. 148 (1992) 1547-1553参照）；二重特異性抗体断片を作るために“二特異性抗体”技術を用いる（例えばHolliger, P. et al., Proc. Natl. Acad. Sci. USA, 90 (1993) 6444-6448参照）；および単鎖Ｆｖ（ｓＦｖ）二量体を用いる（例えばGruber, M. et al., J. Immunol., 152 (1994) 5368-5374参照）；および例えばTutt, A. et al., J. Immunol. 147 (1991) 60-69において記述されているように三重特異性抗体を調製することにより作ることもできる。
【００７８】
“タコ抗体（Ｏｃｔｏｐｕｓ  ａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ）”が含まれる３個以上の機能する抗原結合部位を有する設計された抗体も、本明細書に含まれる（例えばＵＳ２００６／００２５５７６Ａ１参照）。
【００７９】
本明細書における抗体または断片には、ＩＬ−１８Ｒ１ならびに別の異なる抗原に結合する抗原結合部位を含む“二重作用ＦＡｂ”または“ＤＡＦ”も含まれる（例えばＵＳ２００８／００６９８２０参照）。
【００８０】
４．抗体変種
ａ）糖鎖付加変種
特定の態様において、本明細書で提供される抗体は、その抗体が糖鎖付加される程度を増大または減少させるように変更されている。抗体への糖鎖付加部位の追加または削除は、そのアミノ酸配列を１個以上の糖鎖付加部位が作り出される、または除去されるように変更することにより好都合に成し遂げることができる。
【００８１】
その抗体がＦｃ領域を含む場合、それに付加される糖質を変更することができる。哺乳類細胞により産生される天然の抗体は典型的には分枝状の二分岐のオリゴ糖を含み、それは一般にそのＦｃ領域のＣＨ２ドメインのＡｓｎ２９７にＮ−結合により付加されている（例えばWright, A. et al., TIBTECH 15 (1997) 26-32参照）。そのオリゴ糖には様々な糖質、例えばマンノース、Ｎ−アセチルグルコサミン（ＧｌｃＮＡｃ）、ガラクトース、およびシアル酸、ならびに二分岐オリゴ糖構造の“幹”においてＧｌｃＮＡｃに付加されているフコースが含まれてよい。一部の態様において、本発明の抗体中のオリゴ糖の修飾は、特定の向上した特性を有する抗体変種を作り出すためになされてよい。
【００８２】
フコースの量は、例えばＷＯ２００８／０７７５４６において記述されているようなＭＡＬＤＩ−ＴＯＦ質量分析により測定されるような、Ａｓｎ２９７における糖鎖内のフコースの、Ａｓｎ２９７に付加されている全ての糖構造（例えば複合型、混成型および高マンノース型構造）の合計と比較した平均量を計算することにより決定される。Ａｓｎ２９７はＦｃ領域中のおよそ位置２９７（Ｆｃ領域の残基のＥｕ番号付け）に位置するアスパラギン残基を指す；しかし、抗体中のわずかな配列の変動のため、Ａｓｎ２９７は位置２９７の約±３アミノ酸上流または下流、すなわち位置２９４〜３００にも位置していてよい。そのようなフコシル化変種は、向上したＡＤＣＣ機能を有する可能性がある。例えば、米国特許公開第ＵＳ２００３／０１５７１０８号(Presta, L.)；第ＵＳ２００４／００９３６２１号(Kyowa Hakko Kogyo Co., Ltd)を参照。“脱フコシル化”または“フコース欠損”抗体変種に関する刊行物の例には、以下の刊行物が含まれる：ＵＳ２００３／０１５７１０８；ＷＯ２０００／６１７３９；ＷＯ２００１／２９２４６；ＵＳ２００３／０１１５６１４；ＵＳ２００２／０１６４３２８；ＵＳ２００４／００９３６２１；ＵＳ２００４／０１３２１４０；ＵＳ２００４／０１１０７０４；ＵＳ２００４／０１１０２８２；ＵＳ２００４／０１０９８６５；ＷＯ２００３／０８５１１９；ＷＯ２００３／０８４５７０；ＷＯ２００５／０３５５８６；ＷＯ２００５／０３５７７８；ＷＯ２００５／０５３７４２；ＷＯ２００２／０３１１４０；Okazaki, A. et al., J. Mol. Biol. 336 (2004) 1239-1249；Yamane-Ohnuki, N. et al., Biotech. Bioeng. 87 (2004) 614-622。脱フコシル化抗体を産生することができる細胞株の例には、タンパク質のフコシル化を欠くＬｅｃ１３  ＣＨＯ細胞(Ripka, J. et al., Arch. Biochem. Biophys. 249 (1986) 533-545；米国特許出願第ＵＳ２００３／０１５７１０８  Ａ１号, Presta, L；およびＷＯ２００４／０５６３１２  Ａ１, Adams et al., 特に実施例１１における)、およびノックアウト細胞株、例えばアルファ−１，６−フコシルトランスフェラーゼ遺伝子ＦＵＴ８ノックアウトＣＨＯ細胞(例えばYamane-Ohnuki, N. et al., Biotech. Bioeng. 87 (2004) 614-622;Kanda, Y. et al., Biotechnol. Bioeng. 94 (2006) 680-688；およびＷＯ２００３／０８５１０７参照)が含まれる。
【００８３】
さらに、例えばその抗体のＦｃ領域に付加されている二分岐オリゴ糖がＧｌｃＮＡｃにより二分されている二分オリゴ糖（ｂｉｓｅｃｔｅｄ  ｏｌｉｇｏｓａｃｃｈａｒｉｄｅｓ）を有する抗体変種が提供される。そのような抗体変種は低減したフコシル化および／または向上したＡＤＣＣ機能を有する可能性がある。そのような抗体変種の例は、例えばＷＯ２００３／０１１８７８(Jean-Mairet et al.)；米国特許第６，６０２，６８４号(Umana et al.)；およびＵＳ２００５／０１２３５４６(Umana et al.)において記述されている。Ｆｃ領域に付加されたオリゴ糖中に少なくとも１個のガラクトース残基を有する抗体変種も提供される。そのような抗体変種は向上したＣＤＣ機能を有する可能性がある。そのような抗体変種は、例えばＷＯ１９９７／３００８７(Patel et al.)；ＷＯ１９９８／５８９６４(Raju, S.)；およびＷＯ１９９９／２２７６４(Raju, S.)において記述されている。
【００８４】
ｂ）Ｆｃ領域変種
特定の態様において、本明細書で提供する抗体のＦｃ領域中に１個以上のアミノ酸修飾を導入することができ、それによりＦｃ領域変種が生成される。そのＦｃ領域変種は、１個以上のアミノ酸位置におけるアミノ酸修飾（例えば置換）を含むヒトのＦｃ領域配列（例えば、ヒトＩｇＧ１、ＩｇＧ２、ＩｇＧ３またはＩｇＧ４のＦｃ領域）を含んでいてよい。
【００８５】
特定の態様において、本発明は、全部ではなく一部のエフェクター機能を有する抗体変種を意図しており、それはその抗体変種を、その抗体のインビボでの半減期は重要であるが特定のエフェクター機能（例えば補体およびＡＤＣＣ）は不要または有害である適用のための望ましい候補にする。ＣＤＣおよび／またはＡＤＣＣ活性の低減／減少を確認するために、インビトロおよび／またはインビボでの細胞毒性アッセイを実施することができる。例えば、その抗体がＦｃγＲ結合を欠いている（従っておそらくＡＤＣＣ活性を欠いている）がＦｃＲｎ結合能力を保持していることを確実にするために、Ｆｃ受容体（ＦｃＲ）結合アッセイを実施することができる。ＡＤＣＣの媒介に関する主な細胞であるＮＫ細胞はＦｃ（ＲＩＩＩのみを発現し、一方で単球はＦｃ（ＲＩ、Ｆｃ（ＲＩＩおよびＦｃ（ＲＩＩＩを発現する。造血細胞上でのＦｃＲの発現は、Ravetch, J.V. and Kinet, J.P., Annu. Rev. Immunol. 9 (1991) 457-492の４６４ページの表３において要約されている。対象の分子のＡＤＣＣ活性を評価するためのインビトロアッセイの限定的でない例が米国特許第５，５００，３６２号（例えばHellstrom, I. et al., Proc. Natl. Acad. Sci. USA 83 (1986) 7059-7063参照）およびHellstrom, I. et al., Proc. Natl. Acad. Sci. USA 82 (1985) 1499-1502；米国特許第５，８２１，３３７号（Brueggemann, M. et al., J. Exp. Med. 166 (1987) 1351-1361参照）において記述されている。あるいは、非放射性アッセイ法を用いることができる（例えば、フローサイトメトリーに関するＡＣＴＩ（商標）非放射性細胞毒性アッセイ（ＣｅｌｌＴｅｃｈｎｏｌｏｇｙ，Ｉｎｃ．カリフォルニア州マウンテンビュー）；およびＣｙｔｏＴｏｘ  ９６（登録商標）非放射性細胞毒性アッセイ（Ｐｒｏｍｅｇａ，ウィスコンシン州マディソン）参照）。そのようなアッセイに関する有用なエフェクター細胞には、末梢血単核細胞（ＰＢＭＣ）およびナチュラルキラー（ＮＫ）細胞が含まれる。あるいは、または加えて、対象の分子のＡＤＣＣ活性は、インビボで、例えば動物モデル、例えばClynes, R. et al.. Proc. Natl. Acad. Sci. USA 95 (1998) 652-656において開示されている動物モデルにおいて評価することができる。その抗体がＣ１ｑに結合することができず、従ってＣＤＣ活性を欠いていることを確認するために、Ｃ１ｑ結合アッセイを実施することもできる。例えば、ＷＯ２００６／０２９８７９およびＷＯ２００５／１００４０２におけるＣ１ｑおよびＣ３ｃ結合ＥＬＩＳＡを参照。補体活性化を評価するために、ＣＤＣアッセイを実施することができる（例えばGazzano-Santoro, H. et al., J. Immunol. Methods 202 (19969 163-171；Cragg, M.S. et al., Blood 101 (2003) 1045-1052；およびCragg, M.S. and M.J. Glennie, Blood 103 (2004) 2738-2743参照）。ＦｃＲｎ結合およびインビボでのクリアランス／半減期の決定も、当技術で既知の方法を用いて実施することができる（例えばPetkova, S.B. et al., Intl. Immunol. 18 (2006) 1759-1769参照）。
【００８６】
低減したエフェクター機能を有する抗体には、Ｆｃ領域の残基２３８、２６５、２６９、２７０、２９７、３２７および３２９の１個以上の置換を有する抗体が含まれる（米国特許第６，７３７，０５６号）。そのようなＦｃ変異体には、アミノ酸位置２６５、２６９、２７０、２９７および３２７の２個以上における置換を有するＦｃ変異体が含まれ、それには残基２６５および２９７のアラニンへの置換を有するいわゆる“ＤＡＮＡ”Ｆｃ変異体が含まれる（米国特許第７，３３２，５８１号）。
【００８７】
ＦｃＲへの向上または減少した結合を有する特定の抗体変種が記述されている。（例えば米国特許第６，７３７，０５６号；ＷＯ２００４／０５６３１２、およびShields, R.L. et al., J. Biol. Chem. 276 (2001) 6591-6604を参照。）
特定の態様において、抗体変種はＡＤＣＣを向上させる１個以上のアミノ酸置換、例えばＦｃ領域の位置２９８、３３３、および／または３３４（残基のＥＵ番号付け）における置換を有するＦｃ領域を含む。
【００８８】
一部の態様において、例えば米国特許第６，１９４，５５１号、ＷＯ９９／５１６４２、およびIdusogie, E.E. et al., J. Immunol. 164 (2000) 4178-4184において記述されているような、結果として変化した（すなわち向上したか減少したかのどちらかの）Ｃ１ｑ結合および／または補体依存性細胞毒性（ＣＤＣ）をもたらす変更がＦｃ領域においてなされる。
【００８９】
増大した半減期および、母体のＩｇＧの胎児への移行の原因である新生児のＦｃ受容体（ＦｃＲｎ）(Guyer, R.L. et al., J. Immunol. 117 (1976) 587-593、およびKim, J.K. et al., J. Immunol. 24 (1994) 2429-2434)への向上した結合を有する抗体が、ＵＳ２００５／００１４９３４Ａ１(Hinton et al.)において記述されている。それらの抗体は、その中にそのＦｃ領域のＦｃＲｎへの結合を向上させる１個以上の置換を有するＦｃ領域を含む。そのようなＦｃ変種には、以下のＦｃ領域の残基：２３８、２５６、２６５、２７２、２８６、３０３、３０５、３０７、３１１、３１２、３１７、３４０、３５６、３６０、３６２、３７６、３７８、３８０、３８２、４１３、４２４または４３４の１個以上における置換、例えばＦｃ領域の残基４３４の置換を有するＦｃ変種が含まれる（米国特許第７，３７１，８２６号）。
【００９０】
Ｆｃ領域変種の他の例に関して、Duncan, A.R. and Winter, G., Nature 332 (1988) 738-740：米国特許第５，６４８，２６０号；米国特許第５，６２４，８２１号；およびＷＯ９４／２９３５１も参照。
【００９１】
ｃ）システインを設計された抗体変種
特定の態様において、システインを設計された抗体、例えば抗体の１個以上の残基がシステイン残基で置換されている“チオＭＡｂ（ｔｈｉｏＭＡｂｓ）”を作成することが望ましい可能性がある。特定の態様において、その置換された残基はその抗体の近づくことができる（ａｃｃｅｓｓｉｂｌｅ）部位に存在する。それらの残基をシステインで置換することにより、反応性チオール基がそれによりその抗体の近づくことができる部位に配置され、それは本明細書でさらに記述するようにその抗体を他の部分、例えば薬物部分またはリンカー−薬物部分にコンジュゲートさせるために用いることができる。特定の態様において、以下の残基のいずれか１個以上をシステインで置換することができる：軽鎖のＶ２０５（Ｋａｂａｔ番号付け）；重鎖のＡ１１８（ＥＵ番号付け）；および重鎖Ｆｃ領域のＳ４００（ＥＵ番号付け）。システインを設計された抗体は、例えば米国特許第７，５２１，５４１号において記述されているように生成することができる。
【００９２】
ｄ）抗体誘導体
特定の態様において、本明細書で提供される抗体はさらに、当技術で既知であり、容易に利用可能である追加の非タンパク質性部分を含有するように改変されていてよい。その抗体の誘導体化に適した部分には水溶性ポリマーが含まれるが、それに限定されない。水溶性ポリマーの限定的でない例には、ポリエチレングリコール（ＰＥＧ）、エチレングリコール／プロピレングリコールのコポリマー、カルボキシメチルセルロース、デキストラン、ポリビニルアルコール、ポリビニルピロリドン、ポリ−１，３−ジオキソラン、ポリ−１，３，６−トリオキサン、エチレン／無水マレイン酸コポリマー、ポリアミノ酸類（ホモポリマーまたはランダムコポリマーのどちらか）、およびデキストランまたはポリ（ｎ−ビニルピロリドン）ポリエチレングリコール、プロピレングリコールホモポリマー類、ポリプロピレンオキシド（ｐｒｏｌｙｐｒｏｐｙｌｅｎｅ  ｏｘｉｄｅ）／エチレンオキシドコポリマー類、ポリオキシエチル化ポリオール類（ｐｏｌｙｏｘｙｅｔｈｙｌａｔｅｄ  ｐｏｌｙｏｌｓ）（例えばグリセロール）、ポリビニルアルコール、ならびにそれらの混合物が含まれるが、それらに限定されない。ポリエチレングリコールプロピオンアルデヒドは、その水中での安定性のため、製造において利点を有する可能性がある。そのポリマーはあらゆる分子量のものであってよく、分枝状または非分枝状であってよい。その抗体に付加されるポリマーの数は様々であってよく、１個より多くのポリマーが付加される場合、それらは同じまたは異なる分子であることができる。一般に、誘導体化のために用いられるポリマーの数および／またはタイプは、向上すべきその抗体の特定の特性または機能、その抗体誘導体が療法において定められた条件下で用いられるであろうかどうか等が含まれるがそれらに限定されない考慮すべき事柄に基づいて決定することができる。
【００９３】
別の態様において、放射への曝露により選択的に加熱することができる抗体および非タンパク質性部分のコンジュゲートが提供される。１態様において、その非タンパク質性部分はカーボンナノチューブである(Kam, N.W. et al., Proc. Natl. Acad. Sci. USA 102 (2005) 11600-11605)。その放射はあらゆる波長の放射であってよく、通常の細胞を傷つけないがその非タンパク質性部分をその抗体−非タンパク質性部分に最も近い細胞が殺される温度まで加熱する波長が含まれるが、それに限定されない。
【００９４】
Ｂ．組み換え法および組成物
抗体は、例えば米国特許第４，８１６，５６７号において記述されているような組み換え法および組成物を用いて生成することができる。１態様において、本明細書で記述した抗ＩＬ−１８Ｒ１抗体をコードする単離された核酸が提供される。そのような核酸は、その抗体のＶＬを含むアミノ酸配列および／またはＶＨを含むアミノ酸配列（例えばその抗体の軽および／または重鎖）をコードしていてよい。さらなる態様において、そのような核酸を含む１種類以上のベクター（例えば発現ベクター）が提供される。さらなる態様において、そのような核酸を含む宿主細胞が提供される。１つのそのような態様において、宿主細胞は以下のものを含む（例えば以下のもので形質転換されている）：（１）その抗体のＶＬを含むアミノ酸配列およびその抗体のＶＨを含むアミノ酸配列をコードする核酸を含むベクター、または（２）その抗体のＶＬを含むアミノ酸配列コードする核酸を含む第１ベクターおよびその抗体のＶＨを含むアミノ酸配列コードする核酸を含む第２ベクター。１態様において、その宿主細胞は真核細胞、例えばチャイニーズハムスター卵巣（ＣＨＯ）細胞またはリンパ系細胞（例えばＹ０、ＮＳ０、Ｓｐ２０細胞）である。１態様において、抗ＩＬ−１８Ｒ１抗体を作る方法が提供され、ここでその方法は、上記で提供したようなその抗体をコードする核酸を含む宿主細胞をその抗体の発現に適した条件下で培養し、場合によりその抗体をその宿主細胞（または宿主細胞の培地）から回収することを含む。
【００９５】
抗ＩＬ−１８Ｒ１抗体の組み換えによる生成のため、例えば上記で記述したような抗体をコードする核酸を単離し、さらなるクローニングおよび／または宿主細胞における発現のための１種類以上のベクター中に挿入する。そのような核酸は、従来の手順を用いて（例えばその抗体の重および軽鎖をコードする遺伝子に特異的に結合することができるオリゴヌクレオチドプローブを用いることにより）容易に単離および配列決定することができる。
【００９６】
抗体をコードするベクターのクローニングまたは発現のための適切な宿主細胞には、本明細書で記述した原核または真核細胞が含まれる。例えば、抗体は、特に糖鎖付加およびＦｃのエフェクター機能が必要でない場合、細菌中で生成されてよい。抗体断片およびポリペプチドの細菌中での発現に関して、例えば米国特許第５，６４８，２３７号、第５，７８９，１９９号および第５，８４０，５２３号を参照（大腸菌中での抗体断片の発現を記述しているCharlton, K.A., In: Methods in Molecular Biology, Vol. 248, Lo B.K.C. (編者), Humana Press, ニュージャージー州トトワ(2003), pp. 245-254も参照）。発現の後、その抗体を可溶性画分中で細菌細胞のペーストから単離することができ、それをさらに精製することができる。
【００９７】
原核生物に加えて、真核微生物、例えば糸状菌または酵母は抗体をコードするベクターのための適切なクローニングまたは発現用宿主であり、それにはそれらの糖鎖付加経路が“ヒト化”されており、結果として部分的にまたは完全にヒトの糖鎖付加パターンを有する抗体の生成をもたらす菌類および酵母株が含まれる。Gerngross, T.U., Nat. Biotech. 22 (2004) 1409-1414、およびLi, H. et al., Nat. Biotech. 24 (2006) 210-215を参照。
【００９８】
糖鎖付加された抗体の発現のための適切な宿主細胞は多細胞生物（無脊椎動物および脊椎動物）にも由来する。無脊椎動物細胞の例には、植物および昆虫細胞が含まれる。昆虫細胞と合わせて、特にヨトウガ（Ｓｐｏｄｏｐｔｅｒａ  ｆｒｕｇｉｐｅｒｄａ）細胞の形質移入のために用いることができる数多くのバキュロウイルス株が同定されてきた。
【００９９】
植物細胞培養物も宿主として利用することができる。例えば、米国特許第５，９５９，１７７号、第６，０４０，４９８号、第６，４２０，５４８号、第７，１２５，９７８号および第６，４１７，４２９号（トランスジェニック植物において抗体を生成するためのＰＬＡＮＴＩＢＯＤＩＥＳ（商標）技術を記述している）を参照。
【０１００】
脊椎動物細胞も宿主として用いてよい。例えば、懸濁状態で増殖するのに適合した哺乳類細胞株が有用である可能性がある。有用な哺乳類宿主細胞株の他の例は、ＳＶ４０により形質転換されたサル腎臓ＣＶ１株（ＣＯＳ−７）；ヒト胎児由来腎臓株（２９３または例えばGraham, F.L. et al., J. Gen Virol. 36 (1977) 59-74において記述されているような２９３細胞）；ベビーハムスター腎臓細胞（ＢＨＫ）；マウスセルトリ細胞（例えばMather, J.P., Biol. Reprod. 23 (1980) 243-252において記述されているようなＴＭ４細胞）；サル腎臓細胞（ＣＶ１）；アフリカミドリザル腎臓細胞（ＶＥＲＯ−７６）；ヒト子宮頚癌細胞（ＨＥＬＡ）；イヌ腎臓細胞（ＭＤＣＫ）；バッファローラット（ｂｕｆｆａｌｏ  ｒａｔ）肝細胞（ＢＲＬ  ３Ａ）；ヒト肺細胞（Ｗ１３８）；ヒト肝細胞（Ｈｅｐ  Ｇ２）；マウス乳房腫瘍（ＭＭＴ  ０６０５６２）；例えばMather et al., Annals N.Y. Acad. Sci. 383:44-68 (1982)において記述されているようなＴＲＩ細胞；ＭＲＣ５細胞；およびＦＳ４細胞である。他の有用な哺乳類宿主細胞株には、ＤＨＦＲ−  ＣＨＯ細胞が含まれるチャイニーズハムスター卵巣（ＣＨＯ）細胞(Urlaub, G. et al., Proc. Natl. Acad. Sci. USA 77 (1980) 4216-4220)；ならびに骨髄腫細胞株、例えばＹ０、ＮＳ０およびＳｐ２／０が含まれる。抗体の生成に適した特定の哺乳類宿主細胞株の総説に関して、例えばYazaki, P.J. et al., Methods in Molecular Biology 248 (2003) 255-268を参照。
【０１０１】
Ｃ．診断および検出のための方法および組成物
特定の態様において、本明細書で提供される抗ＩＬ−１８Ｒ１抗体はいずれも生物学的試料中のＩＬ−１８Ｒ１の存在を検出するのに有用である。用語“検出する”は、本明細書で用いられる際、定量的および定性的検出を含む。特定の態様において、生物学的試料は細胞または組織、例えば腫瘍組織を含む。
【０１０２】
１態様において、診断または検出の方法における使用のための抗ＩＬ−１８Ｒ１抗体が提供される。さらなる観点において、生物学的試料中のＩＬ−１８Ｒ１の存在を検出する方法が提供される。特定の態様において、その方法は、その生物学的試料を本明細書で記述したような抗ＩＬ−１８Ｒ１抗体と、抗ＩＬ−１８Ｒ１抗体のＩＬ−１８Ｒ１への結合を許容する条件の下で接触させること、およびその抗ＩＬ−１８Ｒ１抗体およびＩＬ−１８Ｒ１の間で複合体が形成されたかどうかを検出することを含む。そのような方法は、インビトロまたはインビボの方法であってよい。１態様において、抗ＩＬ−１８Ｒ１抗体は抗ＩＬ−１８Ｒ１抗体を用いた療法に適格な対象を選択するために用いられ、例えばここでＩＬ−１８Ｒ１は患者の選択のためのバイオマーカーである。
【０１０３】
本発明の抗体を用いて診断することができる典型的な障害は、慢性閉塞性肺疾患（ＣＯＰＤ）、炎症性疾患、自己免疫疾患、リウマチ性関節炎、狼瘡、乾癬または骨疾患である。
【０１０４】
特定の態様において、標識された抗ＩＬ−１８Ｒ１抗体が提供される。標識には、直接検出される標識または部分（例えば蛍光、発色団、高電子密度、化学発光、および放射性標識）、ならびに例えば酵素反応または分子相互作用により間接的に検出される酵素またはリガンドのような部分が含まれるが、それらに限定されない。典型的な標識には、放射性同位元素３２Ｐ、１４Ｃ、１２５Ｉ、３Ｈ、および１３１Ｉ、蛍光体、例えば希土類キレートまたはフルオレセインおよびその誘導体、ローダミンおよびその誘導体、ダンシル、ウンベリフェロン、ルシフェラーゼ類、例えばホタルルシフェラーゼおよび細菌のルシフェラーゼ（米国特許第４，７３７，４５６号）、ルシフェリン、２，３−ジヒドロフタラジンジオン類、ホースラディッシュペルオキシダーゼ（ＨＲＰ）、アルカリホスファターゼ、β−ガラクトシダーゼ、グルコアミラーゼ、リゾチーム、糖類オキシダーゼ類、例えばグルコースオキシダーゼ、ガラクトースオキシダーゼ、およびグルコース−６−リン酸デヒドロゲナーゼ、複素環オキシダーゼ類、例えばウリカーゼおよびキサンチンオキシダーゼ（過酸化水素を用いて色素前駆体を酸化する酵素、例えばＨＲＰ、ラクトペルオキシダーゼ、またはミクロペルオキシダーゼと組み合わせられる）、ビオチン／アビジン、スピン標識、バクテリオファージ標識、安定なフリーラジカル等が含まれるが、それらに限定されない。
【０１０５】
Ｄ．医薬配合物
本明細書で記述したような抗ＩＬ−１８Ｒ１抗体の医薬配合物は、望まれる程度の純度を有するそのような抗体を１種類以上の任意の医薬的に許容できるキャリヤー(Remington's Pharmaceutical Sciences, 第１６版, Osol, A. (編者) (1980))と混合することにより、凍結乾燥させた配合物または水溶液の形態で調製される。医薬的に許容できるキャリヤーは一般に用いられる投与量および濃度において受容者に非毒性であり、それには以下のものが含まれるが、それらに限定されない：緩衝剤、例えばホスフェート、シトレート、および他の有機酸；アスコルビン酸およびメチオニンが含まれる抗酸化剤；保存剤（例えばオクタデシルジメチルベンジルアンモニウムクロリド；塩化ヘキサメトニウム；塩化ベンザルコニウム；塩化ベンゼトニウム；フェノール、ブチルまたはベンジルアルコール；アルキルパラベン類、例えばメチルまたはプロピルパラベン；カテコール；レゾルシノール；シクロヘキサノール；３−ペンタノール；およびｍ−クレゾール）；低分子量（約１０残基未満の）ポリペプチド類；タンパク質、例えば血清アルブミン、ゼラチン、または免疫グロブリン類；親水性ポリマー、例えばポリビニルピロリドン；アミノ酸類、例えばグリシン、グルタミン、アスパラギン、ヒスチジン、アルギニン、またはリシン；グルコース、マンノース、またはデキストラン類が含まれる単糖類、二糖類、および他の炭水化物；キレート剤、例えばＥＤＴＡ；糖類、例えばスクロース、マンニトール、トレハロースまたはソルビトール；塩を形成する対イオン、例えばナトリウム；金属錯体（例えばＺｎ−タンパク質錯体）；および／または非イオン性界面活性剤、例えばポリエチレングリコール（ＰＥＧ）。本明細書における典型的な医薬的に許容できるキャリヤーにはさらに、介在性（ｉｎｓｔｅｒｓｔｉｔｉａｌ）薬物分散剤、例えば可溶性中性活性ヒアルロニダーゼ糖タンパク質（ｓＨＡＳＥＧＰ）、例えばヒト可溶性ＰＨ−２０ヒアルロニダーゼ糖タンパク質、例えばｒＨｕＰＨ２０（ＨＹＬＥＮＥＸ（登録商標），Ｂａｘｔｅｒ  Ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ，Ｉｎｃ．）が含まれる。ｒＨｕＰＨ２０を含む特定の典型的なｓＨＡＳＥＧＰ類および使用の方法が米国特許公開第２００５／０２６０１８６号および第２００６／０１０４９６８号において記述されている。１観点において、ｓＨＡＳＥＧＰは１種類以上の追加のグリコサミノグリカナーゼ類（ｇｌｙｃｏｓａｍｉｎｏｇｌｙｃａｎａｓｅｓ）、例えばコンドロイチナーゼ類と組み合わせられる。
【０１０６】
典型的な凍結乾燥された抗体配合物が米国特許第６，２６７，９５８号において記述されている。水性抗体配合物には、米国特許第６，１７１，５８６号およびＷＯ２００６／０４４９０８において記述されている水性抗体配合物が含まれ、後者の配合物にはヒスチジン−アセテート緩衝液が含まれる。
【０１０７】
本明細書における配合物は、処置される個々の適応症に関する必要に応じて１種類より多くの有効成分、好ましくは互いに悪影響を及ぼさない相補的活性を有する有効成分を含有していてよい。そのような有効成分は、意図される目的に有効である量での組み合わせで適切に存在する。
【０１０８】
有効成分は、コロイド系薬物送達系（例えばリポソーム、アルブミンマイクロスフィア、マイクロエマルジョン、ナノ粒子およびナノカプセル）において、またはマクロエマルジョンにおいて、それぞれ例えばコアセルベーション技法により、または界面重合により調製されたマイクロカプセル、例えばヒドロキシメチルセルロースまたはゼラチンマイクロカプセルおよびポリ（メタクリル酸メチル）マイクロカプセル中に捕捉されていてよい。そのような技法は、Remington's Pharmaceutical Sciences, 第１６版, Osol, A. (編者) (1980)において開示されている。
【０１０９】
持続放出製剤を調製することができる。持続放出製剤の適切な例には、その抗体を含有する固体疎水性ポリマーの半透性母材が含まれ、その母材は形作られた物品、例えば薄膜またはマイクロカプセルの形状である。
【０１１０】
インビボ投与のために用いられるべき配合物は、一般に無菌である。無菌性は、例えば無菌の濾過膜を通す濾過により容易に成し遂げることができる。
Ｅ．療法的方法および組成物
本明細書で提供される抗ＩＬ−１８Ｒ１抗体はいずれも療法的方法において用いることができる。
【０１１１】
１観点において、医薬品としての使用のための抗ＩＬ−１８Ｒ１抗体が提供される。さらなる観点において、慢性閉塞性肺疾患（ＣＯＰＤ）、炎症性疾患、自己免疫疾患、リウマチ性関節炎、狼瘡、乾癬もしくは骨疾患、または他のＩＬ−１８Ｒ１に媒介される疾患の処置における使用のための抗ＩＬ−１８Ｒ１抗体が提供される。特定の態様において、処置の方法における使用のための抗ＩＬ−１８Ｒ１抗体が提供される。特定の態様において、本発明は、個体に有効量の抗ＩＬ−１８Ｒ１抗体を投与することを含む、慢性閉塞性肺疾患（ＣＯＰＤ）、炎症性疾患、自己免疫疾患、リウマチ性関節炎、狼瘡、乾癬または骨疾患を有する個体を処置する方法における使用のための抗ＩＬ−１８Ｒ１抗体を提供する。１つのそのような態様において、その方法はさらに、その個体に有効量の少なくとも１種類の追加の療法剤、例えば下記で記述するような療法剤を投与することを含む。さらなる態様において、本発明は、ＩＬ−１８とその受容体であるＩＬ−１８Ｒ１およびＩＬ−１８ＲＡＰ（Ｕｎｉｐｒｏｔアクセス番号Ｏ９５２５６）の間の相互作用の遮断、ならびにＩｌ−１８受容体に媒介されるシグナル伝達およびＮＦカッパＢ経路の活性化の阻害における使用のための抗ＩＬ−１８Ｒ１抗体を提供する。そのＮＦカッパＢ経路およびその活性化（シグナル伝達）は、例えばKearns J.D. and Hoffmann, A., J. Biol. Chem. 284 (2009) 5439-5443において記述されている。上記の態様のいずれかに従う“個体”は、好ましくはヒトである。
【０１１２】
さらなる観点において、本発明は、医薬品の製造または調製における抗ＩＬ−１８Ｒ１抗体の使用を提供する。１態様において、その医薬品は慢性閉塞性肺疾患（ＣＯＰＤ）、炎症性疾患、自己免疫疾患、リウマチ性関節炎、狼瘡、乾癬または骨疾患の処置のためのものである。さらなる態様において、その医薬品は、慢性閉塞性肺疾患（ＣＯＰＤ）、炎症性疾患、自己免疫疾患、リウマチ性関節炎、狼瘡、乾癬または骨疾患を有する個体に有効量のその医薬品を投与することを含む、慢性閉塞性肺疾患（ＣＯＰＤ）、炎症性疾患、自己免疫疾患、リウマチ性関節炎、狼瘡、乾癬または骨疾患を処置する方法における使用のためのものである。１つのそのような態様において、その方法はさらに、その個体に有効量の少なくとも１種類の追加の療法剤、例えば下記で記述するような療法剤を投与することを含む。さらなる態様において、その医薬品は、個体においてＩＬ−１８とその受容体であるＩＬ−１８Ｒ１およびＩＬ−１８ＲＡＰ（Ｕｎｉｐｒｏｔアクセス番号Ｏ９５２５６）の間の相互作用を遮断するのに、ならびにＩｌ−１８受容体に媒介されるシグナル伝達およびＮＦカッパＢ経路の活性化を阻害するのに有用である。上記の態様のいずれかに従う“個体”はヒトであってよい。
【０１１３】
さらなる観点において、本発明は、慢性閉塞性肺疾患（ＣＯＰＤ）、炎症性疾患、自己免疫疾患、リウマチ性関節炎、狼瘡、乾癬または骨疾患を処置するための方法を提供する。１態様において、その方法は、そのような慢性閉塞性肺疾患（ＣＯＰＤ）、炎症性疾患、自己免疫疾患、リウマチ性関節炎、狼瘡、乾癬または骨疾患を有する個体に有効量の抗ＩＬ−１８Ｒ１抗体を投与することを含む。１つのそのような態様において、その方法はさらに、その個体に有効量の下記で記述するような少なくとも１種類の追加の療法剤を投与することを含む。上記の態様のいずれかに従う“個体”はヒトであってよい。
【０１１４】
好ましくは、本発明に従う抗体は、ＩＬ−１８とその受容体ＩＬ−１８Ｒ１およびＩＬ−１８ＲＡＰ（Ｕｎｉｐｒｏｔアクセス番号Ｏ９５２５６）の間の相互作用を遮断し、Ｉｌ−１８受容体に媒介されるシグナル伝達およびＮＦカッパＢ経路の活性化を阻害する。そのような抗体は抗体１Ｇ１２または抗体２Ｄ１１である。１態様において、その方法は、その個体に有効量の抗ＩＬ−１８Ｒ１抗体を投与することを含む。１態様において、“個体”はヒトである。
【０１１５】
さらなる観点において、本発明は、例えば上記の療法的方法のいずれかにおける使用のための、本明細書で提供する抗ＩＬ−１８Ｒ１抗体のいずれかを含む医薬配合物を提供する。１態様において、医薬配合物は本明細書で提供する抗ＩＬ−１８Ｒ１抗体のいずれかおよび医薬的に許容できるキャリヤーを含む。別の態様において、医薬配合物は本明細書で提供する抗ＩＬ−１８Ｒ１抗体のいずれかおよび少なくとも１種類の追加の療法剤、例えば下記で記述するような療法剤を含む。
【０１１６】
本発明の抗体は、療法において単独または他の薬剤との組み合わせのどちらかで用いることができる。例えば、本発明の抗体は少なくとも１種類の追加の療法剤と同時投与されてよい。
【０１１７】
上記で言及したそのような併用療法には、併用投与（２種類以上の療法剤が同じまたは別個の配合物中に含まれる）、および別々での投与が含まれ、その場合、本発明の抗体の投与は、追加の療法剤および／またはアジュバントの投与の前に、それと同時に、および／またはその後に行うことができる。本発明の抗体は放射線療法と組み合わせて用いることもできる。
【０１１８】
本発明の抗体（およびあらゆる追加の療法剤）は、非経口、肺内、および鼻内、ならびに局所的処置に関して望まれる場合は病巣内投与が含まれるあらゆる適切な手段により投与することができる。非経口注入には、筋内、静脈内、動脈内、腹腔内、または皮下投与が含まれる。投与は、部分的にはその投与が短期かまたは長期にわたるかに応じて、あらゆる適切な経路による、例えば注射、例えば静脈内または皮下注射によることができる。１回投与または様々な時点にわたる多数回投与、大量瞬時投与、およびパルス注入が含まれるがそれらに限定されない様々な投与スケジュールが本明細書において意図されている。
【０１１９】
本発明の抗体は、優れた医療行為と調和する様式で配合、投薬、および投与されるであろう。この状況における考慮のための要素には、処置されている個々の障害、処置されている個々の哺乳類、個々の患者の臨床状態、その障害の原因、その薬剤の送達の部位、投与の方法、投与のスケジューリング、および医師に既知の他の要素が含まれる。その抗体は、問題の障害を予防または処置するために現在用いられている１種類以上の薬剤と共に配合される必要はないが、場合によりそれと共に配合される。そのような他の薬剤の有効量は、その配合物中に存在する抗体の量、障害または処置のタイプ、および上記で論じた他の要素に依存する。これらは一般に、本明細書で記述したものと同じ投与量および投与経路で、または本明細書で記述した投与量の約１から９９％までで、または適切であると経験的に／臨床的に決定されているあらゆる投与量で、およびあらゆる経路により用いられる。
【０１２０】
疾患の予防または処置に関して、（単独で、または１種類以上の追加の療法剤との組み合わせで用いられる場合の）本発明の抗体の適切な投与量は、処置されるべき疾患のタイプ、抗体のタイプ、その疾患の重症度および経過、その抗体が予防目的で投与されるか療法目的で投与されるか、以前の療法、その患者の病歴およびその抗体への応答、ならびに主治医の裁量に依存するであろう。その抗体はその患者に一度にまたは一連の処置にわたって適切に投与される。その疾患のタイプおよび重症度に応じて、例えば１回もしくより多くの別個の投与によるか、または連続注入によるかのどちらかでの約１μｇ／ｋｇ〜１５ｍｇ／ｋｇ（例えば０．１ｍｇ／ｋｇ〜１０ｍｇ／ｋｇ）の抗体がその患者への投与に関する最初の候補投与量であることができる。１つの典型的な一日量は、上記で言及した要素に依存して、約１μｇ／ｋｇから１００ｍｇ／ｋｇ以上までの範囲である可能性がある。数日またはより長い期間にわたる繰り返し投与に関して、その条件に応じて、その処置は一般に疾患症状の望まれる抑制が起こるまで持続されるであろう。１つの典型的なその抗体の投与量は、約０．０５ｍｇ／ｋｇから約１０ｍｇ／ｋｇまでの範囲であろう。従って、約０．５ｍｇ／ｋｇ、２．０ｍｇ／ｋｇ、４．０ｍｇ／ｋｇまたは１０ｍｇ／ｋｇ（またはそれらのあらゆる組み合わせ）の１つ以上の用量がその患者に投与されてよい。そのような用量は断続的に、例えば１週間ごとまたは３週間ごとに（例えばその患者が約２用量から約２０用量まで、または例えば約６用量のその抗体を与えられるように）投与されてよい。最初のより高い初回量、続いて１回以上のより低い用量が投与されてよい。典型的な投与計画は、約４〜１０ｍｇ／ｋｇを投与することを含む。しかし、他の投与計画が有用である可能性がある。この療法の進行は、一般に用いられる技法およびアッセイにより容易に監視される。
【０１２１】
上記の配合物または療法的方法のいずれも、抗ＩＬ−１８Ｒ１抗体の代わりに、または抗ＩＬ−１８Ｒ１抗体に加えて本発明の免疫コンジュゲートを用いて実施することができることは理解されている。
【０１２２】
Ｆ．製品
本発明の別の観点において、上記で記述した障害の処置、予防および／または診断に有用な物質を含有する製品が提供される。その製品は、容器およびその容器上の、またはその容器に付属するラベルまたは添付文書を含む。適切な容器には、例えばボトル、バイアル、注射器、ＩＶ溶液バッグ等が含まれる。その容器は、様々な材料、例えばガラスまたはプラスチックから形成されていてよい。その容器は、単独で、または別の組成物との組み合わせでその病気を処置、予防および／または診断するのに有効な組成物を保持しており、無菌の出入り口（ａｃｃｅｓｓ  ｐｏｒｔ）を有していてよい（例えばその容器は皮下注射針により突き通すことができる栓を有する静脈内溶液バッグまたはバイアルであってよい）。その組成物中の少なくとも１種類の有効薬剤は本発明の抗体である。そのラベルまたは添付文書は、その組成物が選ばれた病気を処置するために用いられることを示す。さらに、その製品は以下のものを含んでいてよい：（ａ）その中に収容された組成物を有する第１容器、ここでその組成物は本発明の抗体を含む；および（ｂ）その中に収容された組成物を有する第２容器、ここでその組成物はさらなる療法剤を含む。本発明のこの態様における製品はさらに、その組成物を特定の病気を処置するために用いることができることを示す添付文書を含んでいてよい。あるいは、または加えて、その製品はさらに、医薬的に許容できる緩衝液、例えば注射のための静菌水（ＢＷＦＩ）、リン酸緩衝生理食塩水、リンガー溶液およびデキストロース溶液を含む第２（または第３）容器を含んでいてよい。それはさらに、他の緩衝剤、希釈剤、フィルター、針、および注射器が含まれる、商業的および使用者の立場から望ましい他の物質を含んでいてよい。
【０１２３】
上記の製品のいずれも、抗ＩＬ−１８Ｒ１抗体の代わりに、または抗ＩＬ−１８Ｒ１抗体に加えて本発明の免疫コンジュゲートを含んでいてよいことは理解されている。
ＩＩＩ．配列一覧表の記述
ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１    Ｍａｂ１Ｇ１２の重鎖可変領域（ＶＨ）
ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：２    重鎖ＣＤＲＨ１  Ｍａｂ１Ｇ１２
ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：３    重鎖ＣＤＲＨ２  Ｍａｂ１Ｇ１２
ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：４    重鎖ＣＤＲＨ３  Ｍａｂ１Ｇ１２
ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：５    Ｍａｂ１Ｇ１２の軽鎖可変領域（ＶＬ）
ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：６    軽鎖ＣＤＲＬ１  Ｍａｂ１Ｇ１２
ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：７    軽鎖ＣＤＲＬ２  Ｍａｂ１Ｇ１２
ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８    軽鎖ＣＤＲＬ３  Ｍａｂ１Ｇ１２
ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：９    Ｍａｂ２Ｄ１１の重鎖可変領域（ＶＨ）
ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１０    重鎖ＣＤＲＨ１  Ｍａｂ２Ｄ１１
ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：３    重鎖ＣＤＲＨ２  Ｍａｂ２Ｄ１１
ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：４    重鎖ＣＤＲＨ３  Ｍａｂ２Ｄ１１
ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１１    Ｍａｂ２Ｄ１１の軽鎖可変領域（ＶＬ）
ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：６    軽鎖ＣＤＲＬ１  Ｍａｂ２Ｄ１１
ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：７    軽鎖ＣＤＲＬ２  Ｍａｂ２Ｄ１１
ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８    軽鎖ＣＤＲＬ３  Ｍａｂ２Ｄ１１
ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１２    ヒトカッパ軽鎖
ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１３    ヒトラムダ軽鎖
ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１４    ヒトＩｇＧ１（コーカサスアロタイプ）
ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１５    ヒトＩｇＧ１（アフロアメリカンアロタイプ）
ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１６    ヒトＩｇＧ１  ＬＡＬＡ−変異体（コーカサスアロタイプ）
ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１７    ヒトＩｇＧ４
ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１８    ヒトＩｇＧ４  ＳＰＬＥ−変異体
ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１９〜２８：ＩＬ−１８Ｒαの断片および変異体断片
ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：２９    ヒト化Ｍａｂ１Ｇ１２−９．６の重鎖可変領域（ＶＨ）
ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：３０    重鎖ＣＤＲＨ１  ヒト化Ｍａｂ１Ｇ１２−９．６
ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：３１    重鎖ＣＤＲＨ２  ヒト化Ｍａｂ１Ｇ１２−９．６
ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：３２    重鎖ＣＤＲＨ３  ヒト化Ｍａｂ１Ｇ１２−９．６
ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：３３    ヒト化Ｍａｂ１Ｇ１２−９．６の軽鎖可変領域（ＶＬ）
ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：３４    軽鎖ＣＤＲＬ１  ヒト化Ｍａｂ１Ｇ１２−９．６
ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：３５    軽鎖ＣＤＲＬ２  ヒト化Ｍａｂ１Ｇ１２−９．６
ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：３６    軽鎖ＣＤＲＬ３  ヒト化Ｍａｂ１Ｇ１２−９．６
ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：３７    ヒト化Ｍａｂ１Ｇ１２−１０．５の重鎖可変領域（ＶＨ）
ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：３８    重鎖ＣＤＲＨ１  ヒト化Ｍａｂ１Ｇ１２−１０．５
ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：３９    重鎖ＣＤＲＨ２  ヒト化Ｍａｂ１Ｇ１２−１０．５
ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：４０    重鎖ＣＤＲＨ３  ヒト化Ｍａｂ１Ｇ１２−１０．５
ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：４１    ヒト化Ｍａｂ１Ｇ１２−１０．５の軽鎖可変領域（ＶＬ）
ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：４２    軽鎖ＣＤＲＬ１  ヒト化Ｍａｂ１Ｇ１２−１０．５
ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：４３    軽鎖ＣＤＲＬ２  ヒト化Ｍａｂ１Ｇ１２−１０．５
ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：４４    軽鎖ＣＤＲＬ３  ヒト化Ｍａｂ１Ｇ１２−１０．５
ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：４５    ヒト化Ｍａｂ１Ｇ１２−１０．６の重鎖可変領域（ＶＨ）
ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：４６    重鎖ＣＤＲＨ１  ヒト化Ｍａｂ１Ｇ１２−１０．６
ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：４７    重鎖ＣＤＲＨ２  ヒト化Ｍａｂ１Ｇ１２−１０．６
ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：４８    重鎖ＣＤＲＨ３  ヒト化Ｍａｂ１Ｇ１２−１０．６
ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：４９    ヒト化Ｍａｂ１Ｇ１２−１０．６の軽鎖可変領域（ＶＬ）
ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：５０    軽鎖ＣＤＲＬ１  ヒト化Ｍａｂ１Ｇ１２−１０．６
ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：５１    軽鎖ＣＤＲＬ２  ヒト化Ｍａｂ１Ｇ１２−１０．６
ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：５２    軽鎖ＣＤＲＬ３  ヒト化Ｍａｂ１Ｇ１２−１０．６
ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：５３    ヒト化Ｍａｂ１Ｇ１２−１１．６の重鎖可変領域（ＶＨ）
ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：５４    重鎖ＣＤＲＨ１  ヒト化Ｍａｂ１Ｇ１２−１１．６
ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：５５    重鎖ＣＤＲＨ２  ヒト化Ｍａｂ１Ｇ１２−１１．６
ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：５６    重鎖ＣＤＲＨ３  ヒト化Ｍａｂ１Ｇ１２−１１．６
ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：５７    ヒト化Ｍａｂ１Ｇ１２−１１．６の軽鎖可変領域（ＶＬ）
ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：５８    軽鎖ＣＤＲＬ１  ヒト化Ｍａｂ１Ｇ１２−１１．６
ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：５９    軽鎖ＣＤＲＬ２  ヒト化Ｍａｂ１Ｇ１２−１１．６
ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：６０    軽鎖ＣＤＲＬ３  ヒト化Ｍａｂ１Ｇ１２−１１．６
ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：６１    ヒト化Ｍａｂ１Ｇ１２−１２．６の重鎖可変領域（ＶＨ）
ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：６２    重鎖ＣＤＲＨ１  ヒト化Ｍａｂ１Ｇ１２−１２．６
ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：６３    重鎖ＣＤＲＨ２  ヒト化Ｍａｂ１Ｇ１２−１２．６
ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：６４    重鎖ＣＤＲＨ３  ヒト化Ｍａｂ１Ｇ１２−１２．６
ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：６５    ヒト化Ｍａｂ１Ｇ１２−１２．６の軽鎖可変領域（ＶＬ）
ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：６６    軽鎖ＣＤＲＬ１  ヒト化Ｍａｂ１Ｇ１２−１２．６
ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：６７    軽鎖ＣＤＲＬ２  ヒト化Ｍａｂ１Ｇ１２−１２．６
ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：６８    軽鎖ＣＤＲＬ３  ヒト化Ｍａｂ１Ｇ１２−１２．６
ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：６９    軽鎖ＣＤＲＬ１コンセンサス配列
ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：７０    軽鎖ＣＤＲＨ１コンセンサス配列
ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：７１    軽鎖ＣＤＲＨ２コンセンサス配列
ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：７２    ヒトＩＬ−１８Ｒ１（ＩＬ−１８Ｒα）
【実施例】
【０１２４】
以下は本発明の方法および組成物の実施例である。上記で提供した一般的な記述を考慮すれば様々な他の態様を実施することができることは理解されている。
上記の発明を理解の明確さの目的で説明および例としていくらか詳細に記述したが、その記述および例は本発明の範囲を限定するものとして解釈されるべきではない。本明細書で引用される全ての特許および科学文献の開示を明白にそのまま援用する。
【０１２５】
実施例１
免疫処置
８〜１０週齢のＮＭＲＩマウスを免疫処置のために用いた。免疫処置はＤＮＡワクチン接種により実施された。簡潔には、３０ｕｌの水に溶解させたヒトＩＬ−１８受容体の両方の鎖（アルファおよびベータ）を発現するＤＮＡプラスミドを、イソフルラン麻酔下のマウスの背部中に皮内に注射し、直後に電気穿孔した。免疫処置を、アジュバントを一切用いずに２週間ごとに実施した。そのマウスを定期的に採血し、十分な抗体応答が発現したかどうかを決定した。この目的のため、血液を後眼窩洞から集め、融合のための適切な動物の選択のため、血清をＩＬ−１８Ｒα特異的ＥＬＩＳＡにおいて、ならびに機能的ＫＧ−１／ＩＦＮガンマアッセイにおいて、およびＢｉａｃｏｒｅにおいて試験した。マウスに、Ｂ細胞を活性化させ、脾臓中に位置する抗原陽性細胞の数を増大させるため、脾臓を回収する４日前に静脈内抗原追加免疫を与えた。脾臓を、十分に免疫されたマウスから、骨髄腫細胞への融合の直前に集めた。
【０１２６】
実施例２
ｈｕＩＬ−１８のＩＬ−１８Ｒαβ複合体への結合の阻害（ＥＬＩＳＡ）
その試験は、３８４ウェルマイクロタイタープレート上で室温（ＲＴ）において実施された。それぞれの保温工程の後、プレートをＰＢＳＴ（リン酸緩衝生理食塩水  Ｔｗｅｅｎ（登録商標）−２０）で３回洗浄した。初めに、プレートを０．５μｇ／ｍｌのヤギ抗ヒトＩｇＧ  Ｆｃ断片（Ｊａｃｋｓｏｎ  Ｉｍｍ．Ｒｅｓ．，米国，カタログ番号１０９−００６−１７０）で少なくとも２時間（ｈ）コートした。その後、そのウェルを０．１％Ｔｗｅｅｎ（登録商標）−２０および２％  ＢＳＡ（Ｒｏｃｈｅ  Ｄｉａｇｎｏｓｔｉｃｓ  ＧｍｂＨ，ドイツ）を補ったＰＢＳで１時間ブロッキングした。０．２μｇ／ｍｌの組み換えヒトＩＬ−１８Ｒα  Ｆｃキメラ（Ｒ＆Ｄ  Ｓｙｓｔｅｍｓ，英国，カタログ番号８１６−ＬＲ）を１時間捕捉させた。精製された抗体の０．５％ＢＳＡおよび０．０５％Ｔｗｅｅｎ（登録商標）−２０を含むＰＢＳ中での希釈物を、その受容体タンパク質と共に１時間保温した。ビオチン化ヒトＩｌ−１８（ＭＢＬ  Ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ，米国，カタログ番号Ｂ００３−５）および０．２μｇ／ｍｌのＩＬ−１８Ｒβ（Ｒ＆Ｄ  Ｓｙｓｔｅｍｓ，英国，カタログ番号１１８−ＡＰ）をさらに１時間添加して、その３量体複合体を形成させた（ｂｕｉｌｄ  ｕｐ）。Ｉｌ−１８をスルホ−ＮＨＳ−ＬＣ−ビオチン（Ｔｈｅｒｍｏ  Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ  Ｐｉｅｒｃｅ，米国，カタログ番号２１３２７）で、製造業者のプロトコルに従ってビオチン化し、Ｚｅｂａ（商標）脱塩スピンカラム（Ｔｈｅｒｍｏ  Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ  Ｐｉｅｒｃｅ，米国，カタログ番号８９８８９）を用いて精製した。ビオチン化されたＩＬ−１８のその複合体への結合を、１：２０００希釈したストレプトアビジンＨＲＰ（Ｒｏｃｈｅ  Ｄｉａｇｎｏｓｔｉｃｓ  ＧｍｂＨ，ドイツ，カタログ番号１１０８９１５３００１）で検出した。１時間後、そのプレートをＰＢＳＴで６回洗浄し、新しく調製したＢＭ  ｂｌｕｅ（登録商標）ＰＯＤ基質溶液（ＢＭ  ｂｌｕｅ（登録商標）：３，３’−５，５’−テトラメチルベンジジン，Ｒｏｃｈｅ  Ｄｉａｇｎｏｓｔｉｃｓ  ＧｍｂＨ，ドイツ，カタログ番号１１４８４２８１００１）で室温において３０分間現像した。吸光度を３７０ｎｍにおいて測定した。その陰性対照はＩＬ−１８Ｒαタンパク質の添加なしで定義され、その陽性対照は抗体を含まない以外全ての構成要素で定義された。商業的に入手できる抗ヒトＩＬ−１８ＲαマウスＭＡｂクローン７０６２５（Ｒ＆Ｄ  Ｓｙｓｔｅｍｓ  ＃ＭＡＢ８４０）を比較のために用いた。結果を表１に示す：
【０１２７】
【表１】
2013541326.tif 000003
【０１２８】
ＩＬ−１８Ｒβ：ヒトＩＬ−１８受容体アクセサリータンパク質、ＩＬ−１８ＲＡＰ（Ｕｎｉｐｒｏｔアクセス番号Ｏ９５２５６）。
実施例３
ＩＬ−１８に誘導されるヒトＫＧ−１細胞によるＩＦＮγ産生
ａ）試薬：
ＫＧ１細胞株（ＡＴＣＣ＃ＣＣＬ２４６）
培地：１０％ＦＣＳおよびペニシリン／ストレプトマイシンを補ったＲＰＭＩ  １６４０
組み換えヒトＩＬ−１８（ＲｎＤ  ｓｙｓｔｅｍｓ  ＃Ｂ００３−２）
ＢＤ  ＯｐｔＥＩＡヒトＩＦＮγ  ＥＬＩＳＡセット（ＢＤ  ＃５５５１４２）
ｒｈＴＮＦアルファ（Ｒ＆Ｄ  カタログ番号２１０−ＴＡ）
ｂ）手順：
ＫＧ−１細胞を、１０％ＦＣＳおよびペニシリン／ストレプトマイシンを補ったＲＰＭＩ  １６４０中で、５％ＣＯ２／９５％空気の混合物中で、３７℃において増殖させた。細胞を、それらが２×１０６細胞／ｍｌの密度に達した際に継代し、４×１０５細胞／ｍｌの密度に希釈した。ＩＬ−１８に関する有効濃度を決定するため、ＫＧ−１細胞を９６ウェルプレートにおいて様々な用量のｒｈＩＬ−１８（０〜２００ｎｇ／ｍｌ）を含む増殖培地中で１×１０６細胞／ｍｌおよび１００μｌ／ウェルで再懸濁し、上清をＩＦＮγ  ＥＬＩＳＡ分析のために集めた。抗体を、９６ウェルプレートにおいて増殖培地中で１×１０６細胞／ｍｌおよび１００μｌ／ウェルのＫＧ−１細胞と共に６０分間前保温し（終濃度は１ｎｇ／ｍｌ〜１０ｕｇ／ｍｌ）、ｒｈＩＬ−１８（１０ｎｇ／ｍｌ）およびＴＮＦアルファ（５ｎｇ／ｍｌ）をその培養物に添加し、３７℃で１６〜２０時間培養した。上清をＩＦＮγ  ＥＬＩＳＡ分析のために集めた。ＫＧ−１細胞を１０ｎｇ／ｍｌのＴＮＦアルファで一夜刺激してＩＬ１８Ｒの発現を誘導した。次いで細胞を異なる期間の間抗ＩＬ−１８Ｒ１抗体と共に保温し、続いてａ）結合した抗体の検出またはｂ）ＩＬ１８Ｒの表面発現の決定を行った。結果を表２において示す。例えば抗ＩＬ−１８Ｒａ  Ｍａｂ  ８４０（Ｒ＆Ｄ  Ｓｙｓｔｅｍｓ）は７９８ｐＭのＩＣ５０［ｐＭ］値を示した。
【０１２９】
【表２】
2013541326.tif 000004
【０１３０】
実施例４
抗ＩＬ−１８Ｒα抗体の完全長ＩＬ−１８Ｒα（ｈＦｃキメラ）に対する親和性の決定
機器：ＢＩＡＣＯＲＥ（登録商標）Ａ１００
チップ：ＣＭ３（ＧＥ  Ｈｅａｌｔｈｃａｒｅ  ＢＲ−１００６−３６）
カップリング：アミンカップリング
緩衝液：１×ＰＢＳ（１０×ＰＢＳ，Ａｍｂｉｏｎ  カタログ番号ＡＭ９６２５）、ｐＨ７．４、３７℃
親和性の測定のため、１０μｇ／ｍｌの抗マウスＦｃγ抗体（ヤギ由来、Ｊａｃｋｓｏｎ  Ｉｍｍｕｎｏ  Ｒｅａｓｅａｒｃｈ  ＪＩＲ１１５−００５−０７１）または１０μｇ／ｍｌの抗ヒトＦｃγ抗体（ヤギ由来、Ｊａｃｋｓｏｎ  Ｉｍｍｕｎｏ  Ｒｅａｓｅａｒｃｈ  ＪＩＲ１０９−００５−０９８）をｈＩＬ−１８Ｒαに対する抗体の捕捉のためにチップ表面にカップリングさせておいた。ｈＩＬ−１８Ｒα（ｈＦｃ−キメラ  Ｒ＆Ｄ−Ｓｙｓｔｅｍｓ  ８１６−ＬＲ）を、０．１％ＢＳＡ（Ｒｏｃｈｅ  参照番号１０２３８０４０００１）を含有する溶液中で様々な濃度で添加した。会合を３７℃で１．５分間のｈＩＬ−１８Ｒαの注入により測定し；解離をそのチップ表面を緩衝液で３７℃で１０分間洗浄することにより測定した。見かけのＫＤおよび他の速度論的パラメーターの計算のため、ラングミュア１：１モデルを用いた。結果を表３において示す。
【０１３１】
【表３】
2013541326.tif 000005
【０１３２】
実施例５ａ
ＳＰＲを利用することによる交差競合（Ｃｒｏｓｓ−ｃｏｍｐｅｔｉｔｉｏｎ）
機器：ＢＩＡＣＯＲＥ（登録商標）Ａ１００
チップ：ＣＭ５（Ｂｉａｃｏｒｅ  ＢＲ−１００６−６８）
カップリング：アミンカップリング
緩衝液：１×ＰＢＳ（１０×ＰＢＳ，Ａｍｂｉｏｎ  カタログ番号ＡＭ９６２５）、ｐＨ７．４、２５℃
交差競合によるエピトープマッピングアッセイのため、３０μｇ／ｍｌの抗マウスＦｃγ抗体または抗ヒトＦｃγ抗体（ヤギ由来、Ｊａｃｋｓｏｎ  Ｉｍｍｕｎｏ  Ｒｅｓｅａｒｃｈ  カタログ番号１１５−００５−０７１およびカタログ番号１０９−００５−０９８）を、ｈＩＬ−１８Ｒαに対する抗体の提示のためにセンサーチップ表面にカップリングさせておいた。１〜６μｇ／ｍｌの抗ｈＩＬ−１８Ｒαモノクローナル抗体の捕捉後、捕捉抗体の空いている結合能力を２５０μｇ／ｍｌのマウスまたはヒト免疫グロブリン（Ｊａｃｋｓｏｎ  Ｉｍｍｕｎｏ  Ｒｅｓｅａｒｃｈ  ０１５−０００−００３または００９−０００−００３）を用いて４分間ブロッキングしておき、続いて２．５μｇ／ｍｌのｈＩＬ−１８Ｒα（ｈＦｃ−キメラ  Ｒ＆Ｄ−Ｓｙｓｔｅｍｓ  カタログ番号８１６−ＬＲ）を２分間注入した。０．６〜３μｇ／ｍｌの二次抗ｈＩＬ−１８Ｒα抗体の結合を２分間の注入により分析し、解離を緩衝液で２分間洗浄することにより測定した。そのアッセイおよびその測定は２５℃で実施された。その二次抗ｈＩＬ−１８Ｒα抗体の特異的な結合を、ｈＩＬ−１８Ｒを注入しないことだけを除いて同じチップ構成を有するスポットに対して参照した。その交差競合データを、その二次抗ｈＩＬ−１８Ｒα抗体の予想される結合応答の百分率（％）で計算した。Ｂｉａｃｏｒｅの（ＢＩＡＣＯＲＥ（登録商標）Ａ１００機器に関する）エピトープマッピングの説明書に記述されているように、その二次抗体の結合に関する項目“予想される結合応答の百分率（％）”は“１００＊相対応答（試料＿安定性＿遅れ（ｌａｔｅ））／ｒＭａｘ”により計算され、ここでｒＭａｘは“抗原の相対応答（一般的＿安定性＿遅れ）＊抗体分子量／抗原分子量”により計算される。結果を表４ａにおいて示す。
【０１３３】
【表４】
2013541326.tif 000006
【０１３４】
１Ｇ１２および２Ｄ１１の間の結合は、それらが同じエピトープクラスター内で結合するため検出不能であり、一方で‘ＭＳ’の結合は検出可能であり（二次抗ｈＩＬ−１８Ｒα抗体の予想される結合応答の（％）で表に記載されている）、これは‘ＭＳ’は１Ｇ１２および２Ｄ１１とは別のエピトープクラスターに結合することを示している。同様に、‘ＭＳ’が予め結合している場合、‘ＭＳ’の結合は検出不能である。
【０１３５】
第２の実験において、本発明に従う抗体の結合を抗ＩＬ−１８Ｒアルファ  Ｍａｂ  ８４０（Ｒ＆Ｄ  Ｓｙｓｔｅｍｓ）に対して比較した。結果を表４ａにおいて示す。
【０１３６】
【表５】
2013541326.tif 000007
【０１３７】
１Ｇ１２および２Ｄ１１の間の結合は、それらが同じエピトープ内で結合するため検出不能であり、一方でＭａｂ  ８４０は１Ｇ１２および２Ｄ１１とは異なるエピトープに結合する。
【０１３８】
実施例６
ａ）ヒトＩＬ−１８Ｒα／ＩＬ−１８Ｒβを形質移入されたＨＥＫ２９３細胞に対するＦＡＣＳアッセイ：
１０６個のＨＥＫ２９３細胞を、ヒトＩＬ−１８Ｒアルファ＋ＩＬ−１８Ｒβを発現するプラスミドにより形質移入した。形質移入された細胞を１日培養した。１×１０５個の細胞を氷上でＰＢＳ緩衝液＋２％ＦＣＳ中で保温し、ＩＬ−１８Ｒα抗体（１μｇ／ｍｌ）で染色した。二次抗体としてＲ＆Ｄ  Ｓｙｓｔｅｍｓからの抗マウスＩｇＧ１−ＰＥ（Ｆ０１０２Ｂ）を１：２０希釈で添加し、アイソタイプ対照としてＢＤ  ＰｈａｒｍｉｎｇｅｎからのマウスＩｇＧ１（５５７２７３）を１μｇ／ｍｌの濃度で用いた。図１における結果は、抗体１Ｇ１２（Ｆ２０．１Ｇ１２）および２Ｄ１１（（Ｆ２０．２Ｄ１１）は両方ともヒトＩＬ−１８Ｒアルファ＋ＩＬ−１８Ｒβサブユニットを形質移入されて発現している細胞に結合することを示している。
【０１３９】
ｂ）カニクイザルＩＬ−１８Ｒα／ＩＬ−１８Ｒβを形質移入されたＨＥＫ２９３細胞に対するＦＡＣＳアッセイ：
１０６個のＨＥＫ２９３細胞を、カニクイザルＩＬ−１８Ｒアルファ＋ＩＬ−１８Ｒβを発現するプラスミドにより形質移入した。形質移入された細胞を１日培養した。１０５個の細胞を氷上でＰＢＳ緩衝液＋２％ＦＣＳ中で保温し、１μｇ／ｍｌの濃度のＩＬ−１８Ｒα抗体で染色した。二次抗体としてＲ＆Ｄ  Ｓｙｓｔｅｍｓからの抗マウスＩｇＧ１−ＰＥ（Ｆ０１０２Ｂ）を１：２０希釈で添加し、アイソタイプ対照としてＢＤ  ＰｈａｒｍｉｎｇｅｎからのマウスＩｇＧ１（５５７２７３）を１μｇ／ｍｌの濃度で用いた。図２における結果は、抗体１Ｇ１２（Ｆ２０．１Ｇ１２）および２Ｄ１１（（Ｆ２０．２Ｄ１１）は両方ともカニクイザルＩＬ−１８Ｒアルファ＋ＩＬ−１８Ｒβサブユニットを形質移入されて発現している細胞に結合することを示している。
【０１４０】
実施例７
カニクイザルＩＬ−１８ＲアルファまたはカニクイザルＩＬ−１８Ｒアルファおよびベータを発現するＣＨＯ細胞に対する細胞ＥＬＩＳＡ
カニクイザルＩＬ−１８ＲαまたはカニクイザルＩＬ−１８Ｒα＋βを発現する組み換え細胞株ＣＨＯ−Ｋ１を、細胞ＥＬＩＳＡにおいてＭａｂ＿ＩＬ−１８Ｒ抗体で染色した。対照は形質移入されていないＣＨＯ−Ｋ１細胞である。細胞をＧｌｕｔａｍａｘ−１（ＧＩＢＣＯ  カタログ番号３１３３１−０２８）＋１０％ＦＣＳ（ＰＡＮ  カタログ番号２８０２−Ｐ９２０７０７）を含むＦ−１２培地（ＧＩＢＣＯ）中で増殖させた。組み換え細胞株の培養に関して、２５０μｇ／ｍｌのＧ４１８（Ｇｅｎｅｔｉｃｉｎ，ＧＩＢＣＯ，カタログ番号１０１３１−０１９）を添加した。対照抗体として、抗ｈＩＬ−１８Ｒアルファ抗体Ｍａｂ８４０（Ｒ＆Ｄ  Ｓｙｓｔｅｍｓからのマウスモノクローナル抗体ＩｇＧ１、カタログ番号ＭＡＢ  ８４０）を、検出抗体としてヤギ抗マウスＩｇＧ（Ｈ＋Ｌ）−ＨＲＰコンジュゲート（ＢｉｏＲａｄ）を添加した。そのアッセイを行うため、１日目に５０μｌのＦ−１２中の２×１０４個のＣＨＯ＿ＣｙｎｏＩＬ−１８Ｒα、ＣＨＯ＿ＣｙｎｏＩＬ−１８Ｒα＋βまたはＣＨＯ細胞／ウェルを９６ウェルプレートに蒔き、３７℃で一夜培養した。２日目に、５０μｌの上清または培地中で希釈された精製された抗体（２×）または５０μｌのハイブリドーマ上清を添加し、４℃で２時間保温した。上清を吸引し、１００μｌ／ウェルのグルタルアルデヒド固定溶液（２５％ストック溶液、グレードＥＭ；終濃度＝ＰＢＳ中０．０５％）を添加し、室温で１０分間保温した。洗浄のため、２回２００μｌ  ＰＢＳ／ウェルを添加し、除去した。５０μｌのＥＬＩＳＡブロッキング試薬（ＰＢＳ中で１：１０希釈したＥＬＩＳＡブロッキングストック試薬）中で希釈したＥＬＩＳＡ検出抗体を添加した。１：２０００希釈したヤギ抗マウスＩｇＧ（Ｈ＆Ｌ）−ＨＲＰコンジュゲートを添加し、室温で振盪機上で２時間保温した。溶液を吸引し、洗浄を２００μｌのＰＢＳで３回実施した。５０μｌのＴＭＢを７〜１０分間（青い色が現れるまで）添加した。その反応を、２５μｌの１Ｍ  Ｈ２ＳＯ４の添加により停止した。そのＭＴＰを、ＥＬＩＳＡ読み取り機（ＴＥＣＡＮ）を用いて４５０ｎｍ〜６２０ｎｍで測定した。結果を表５において示す。形質転換していない細胞では結合は観察されなかった。
【０１４１】
【表６】
2013541326.tif 000008
【０１４２】
Ｔｏｘ研究に関して、およびＰＫ／ＰＤアッセイに関して、その抗体がＣｙｎｏ  ＩＬ−１８Ｒαを、それのヒトＩＬ−１８Ｒαへの結合と比較した場合に類似したＥＣ５０で認識することは重要である。
【０１４３】
実施例８
ヒトＰＢＭＣにおけるＩＬ−１８に誘導されるＩＦＮγ産生の研究
ＩＬ−１８は、例えばＣＤ４＋および他のＴ細胞、Ｂ細胞、ＮＫ細胞および単球におけるインターフェロンガンマ（ＩＦＮγ）の誘導によるナチュラルキラー（ＮＫ）細胞およびＴＨ１細胞の活性化において生物学的機能を有する。また、ＩＬ−１８は、ＩＬ−１βに類似して、ヒトＴ細胞におけるＩＦＮγの誘導において（ＴＣＲの会合なしで）ＩＬ−１２と協同する(Tominaga, K. et al., Int. Immunol. 12 (2000) 151-160)。これにより、その機構は、ＴＨ１細胞に関して記述されているがＴＨ２細胞に関しては記述されていないようなＩＬ−１２に誘導されるＩＬ−１８Ｒα鎖の発現につながる。抗ＩＬ−１８ｍＡｂの機能上の影響を評価するため、その受容体およびそのリガンド両方に対して、末梢血単核球を標準的なＦｉｃｏｌｌ  Ｐａｑｕｅ技法により分離した。２×１０５細胞／ウェルを、９６平底ウェル（２００μｌ容積）において、５ｎｇ／ｍｌのＩＬ−１２（Ｓｉｇｍａ）の存在下で３日間前培養した。次いで、ＩＬ−１８（ＭＢＬ，http://www.mblintl.com/）を１０ｎｇ／ｍｌの終濃度でさらに３日間添加した。その受容体を遮断するため、またはそのリガンドを中和するため、この時点で抗ＩＬ−１８Ｒ  ｍＡｂを０．０１〜０．５／１．０μｇ／ｍｌの終濃度で添加した。合計６日後、上清中のＩＦＮγの産生をＥＬＩＳＡにより分析した。結果を表６において示す。
【０１４４】
【表７】
2013541326.tif 000009
【０１４５】
実施例９
抗体のｈｕＩＬ−１８Ｒαおよび他のＩＬ−１受容体ファミリーのタンパク質への結合（ＥＬＩＳＡ）
その試験は、３８４ウェルマイクロタイタープレート（ＭａｘｉＳｏｒｐ（商標），Ｔｈｅｒｍｏ  Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ  Ｎｕｎｃ，デンマーク，カタログ番号４６４７１８）上で室温において実施された。それぞれの保温工程の後、プレートをＰＢＳＴで３回洗浄した。初めに、プレートを０．５μｇ／ｍｌヤギ抗ヒトＩｇＧ  Ｆｃ断片（Ｊａｃｋｓｏｎ  Ｉｍｍ．Ｒｅｓ．，米国，カタログ番号１０９−００６−１７０）で少なくとも２時間（ｈ）コートした。その後、そのウェルを０．２％Ｔｗｅｅｎ（登録商標）−２０および２％ＢＳＡ（Ｒｏｃｈｅ  Ｄｉａｇｎｏｓｔｉｃｓ  ＧｍｂＨ，ドイツ）を補ったＰＢＳで１時間ブロッキングした。０．２μｇ／ｍｌの組み換えヒトＩＬ−１８Ｒα  Ｆｃキメラ（Ｒ＆Ｄ  Ｓｙｓｔｅｍｓ，英国，カタログ番号８１６−ＬＲ）をプレート上に１時間捕捉した。抗体のＩＬ−１受容体ファミリーの他のタンパク質への結合を試験するため、０．２μｇ／ｍｌのヒトＦｃ（ｈＦｃ）にコンジュゲートされた以下の組み換えヒトタンパク質を捕捉した：
ｒｈＩＬ−１ＲＩ／ｈＦｃ    （Ｒ＆Ｄ  Ｓｙｓｔｅｍｓ，英国，カタログ番号２６９−１Ｒ）
ｒｈＩＬ−１ｓＲＩＩ／ｈＦｃ    （Ｒ＆Ｄ  Ｓｙｓｔｅｍｓ，英国，カタログ番号２６３−２Ｒ）
ｒｈＩＬ−１Ｒ３／ｈＦｃ    （Ｒ＆Ｄ  Ｓｙｓｔｅｍｓ，英国，カタログ番号６７６−ＣＰ）
ｒｈＩＬ−２Ｒα／ｈＦｃ    （Ｒ＆Ｄ  Ｓｙｓｔｅｍｓ，英国，カタログ番号１０２０−ＲＬ）
ｒｈＩＬ−７Ｒα／ｈＦｃ    （Ｒ＆Ｄ  Ｓｙｓｔｅｍｓ，英国，カタログ番号３０６−ＩＲ）
ｒｈＩＬ−１５Ｒ／ｈＦｃ    （Ｒ＆Ｄ  Ｓｙｓｔｅｍｓ，英国，カタログ番号１４７−ＩＲ）
ｒｈＳＴ−２／ｈＦｃ    （Ｒ＆Ｄ  Ｓｙｓｔｅｍｓ，英国，カタログ番号５２３−ＳＴ）
そのプレートを洗浄した後、精製された抗体の０．０５％ＢＳＡおよび０．２％Ｔｗｅｅｎ（登録商標）−２０を含むＰＢＳ中での希釈液を、その受容体タンパク質と共に１時間保温した。抗体の結合を、１：２０００希釈した抗マウスＩｇＧのホースラディッシュペルオキシダーゼ（ＨＲＰ）コンジュゲート（ＧＥ  Ｈｅａｌｔｈｃａｒｅ，英国，カタログ番号ＮＡ９３１０Ｖ）で検出した。１時間後、そのプレートをＰＢＳＴで６回洗浄し、新しく調製したＢＭ  ｂｌｕｅ（登録商標）ＰＯＤ基質溶液（ＢＭ  ｂｌｕｅ（登録商標）：３，３’−５，５’−テトラメチルベンジジン，Ｒｏｃｈｅ  Ｄｉａｇｎｏｓｔｉｃｓ  ＧｍｂＨ，ドイツ，カタログ番号１１４８４２８１００１）で室温において３０分間現像した。吸光度を３７０ｎｍにおいて測定した。その値を抗体を含まない対照に関して補正した。結果を表７において示す。
【０１４６】
【表８】
2013541326.tif 000010
【０１４７】
実施例１０
受容体の内部移行
ＫＧ−１細胞を１０ｎｇ／ｍｌのＴＮＦアルファで一夜刺激してＩＬ１８Ｒの発現を誘導した。次いで細胞を異なる期間の間抗ＩＬ−１８Ｒ１抗体と共に保温し、続いてａ）結合した抗体の検出またはｂ）ＩＬ１８Ｒの表面発現の決定を行った。試験した本発明（ｉｎｖｅｎｔｉｎ）に従う抗体（２Ｄ１１、１Ｇ１２）はいずれも受容体の内部移行または下方制御を誘導しなかった。
【０１４８】
実施例１１
ヒトＴＨ１アッセイ
末梢血単核細胞（ＰＢＭＣ）を、健康なボランティアからＦｉｃｏｌｌ  Ｈｙｐａｑｕｅ密度勾配により分離した。その細胞をＲＰＭＩで洗浄した後、それらを０．５％ＢＳＡおよび２ｍＭ  ＥＤＴＡを含むＰＢＳ（ｐＨ  ７．２）中で再懸濁した。Ｔ細胞をＰＢＭＣからＰａｎ  Ｔ細胞分離キット（Ｍｉｌｔｅｎｙｉ  ｂｉｏｔｅｃ）およびＡｕｔｏＭＡＣＳ（商標）分離器による磁気分離を用いて分離した。その濃縮された（ｅｎｒｉｃｈｅｄ）Ｔ細胞を、完全（ｃｏｍｐｌｅｔｅｄ）ＲＰＭＩ  １６４０（１０％ＦＣＳ、２−メルカプトエタノール、Ｌ−グルタミン、ＨＥＰＥＳ緩衝剤、ピルビン酸ナトリウムおよびペニシリン／ストレプトマイシンを補ったもの）を用いて３回洗浄し、再懸濁し、２μｇ／ｍｌ抗−ＣＤ３でコートされた６ウェル平底プレートにおいて１×１０６細胞／ｍｌで蒔き、１ｕｇ／ｍｌの可溶性抗ＣＤ２８（ＢＤ  Ｂｉｏｓｃｉｅｎｃｅｓ）、１０ｎｇ／ｍｌのＩＦＮ−γ、３０ｎｇ／ｍｌのＩＬ−１２および１０ｕｇ／ｍｌの抗ＩＬ−４（Ｐｅｐｒｏｔｅｃｈ）と共に３７℃で４日間培養した。次いで、細胞を完全ＲＰＭＩで２回洗浄し、次いで組み換えＩＬ−２（５０単位／ｍｌ）を含む完全ＲＰＭＩ中で２×１０６細胞／ｍｌで静止させた（ｒｅｓｔｅｄ）。続いて細胞を、系列希釈した抗ＩＬ−１８Ｒα  Ａｂまたはアイソタイプ対照Ａｂ（０〜１ｕｇ／ｍｌ）で３０分間処理し、次いで１０ｎｇ／ｍｌのＩＬ−１８、２ｎｇ／ｍｌのＩＬ−１２（Ｐｅｐｒｏｔｅｃｈ）で再刺激し、ウェルあたり１×１０５細胞で、９６ウェル平底プレート中で３７℃において５％ＣＯ２の下で一夜培養した。ＢＤ  ＯｐｔＥＩＡ  ヒトＩＦＮ−γ  ＥＬＩＳＡセット（カタログ番号５５５１４２）（ＢＤ  Ｂｉｏｓｃｉｅｎｃｅｓ）を用いるＩＦＮ−γのＥＬＩＳＡ分析のために上清を集めた。吸光度をＳｐｅｃｔｒｏｍａｘマイクロプレートリーダーを用いて読み取り、そのデータをＰＲＩＳＭ（ＧｒａｐｈＰａｄ  Ｓｏｆｔｗａｒｅ）を用いて分析した。結果を表８ａにおいて示す。
【０１４９】
【表９】
2013541326.tif 000011
【０１５０】
Ｔｈ１／Ｔｃ１およびＴｈ２／Ｔｃ２の不均衡は慢性閉塞性肺疾患（ＣＯＰＤ）の発病に関係していることが示されており、Ｔｈ１／Ｔｃ１細胞は高レベルのＩＬ−１８Ｒαを発現しており、末梢Ｔ細胞の機能はＣＯＰＤの重症度と相関している(Zhu, X. et al., J. Immunol. 182 (2009) 3270-3277; Freeman, C.M. et al., J. Immunol. 184 (2010) 6504-6513; Shirai, T. et al., Allergol. Int. 59 (2010) 75-82)。このアッセイはＴ細胞に焦点を合わせており、それによりＴ細胞はＴｈ１条件で活性化および培養され、それらは高レベルのＩＬ−１８Ｒαを発現し、従ってこのアッセイは中和のために最も高い量の抗ＩＬ−１８Ｒαを必要とする。本発明に従う抗体はこのヒトＴＨ１アッセイにおいて向上したＩＣ９０値を示し、従ってそれらはＴＨ１依存性疾患の処置のための価値のある化合物である。
【０１５１】
第２の実験において、このヒトＴＨ１アッセイにおけるそのヒト化抗体に関するＩＣ９０値を決定した。結果を表８ｂにおいて示す。
【０１５２】
【表１０】
2013541326.tif 000012
【０１５３】
本発明に従うヒト化抗体もこのヒトＴＨ１アッセイにおいて向上したＩＣ９０値を示し、従ってそれはそのような疾患の処置のための価値のある化合物である。
実施例１２
主なヒトＣＯＰＤ全血アッセイの記述
健康な非喫煙者およびＣＯＰＤ（ＧｏｌｄステージＩＩ〜ＩＶ）を有する患者からの末梢血をヘパリンナトリウムチューブ中に集め、系列希釈した抗ＩＬ−１８Ｒα抗体またはアイソタイプ対照Ａｂ（０〜０．５ｕｇ／ｍｌ）で３０分間処理し、次いで９６ウェルプレートにおいて３７℃で５％ＣＯ２の下で１０ｎｇ／ｍｌのＩＬ−１８、２ｎｇ／ｍｌのＩＬ−１２で一夜刺激した。その細胞を遠心沈殿させ、ＢＤ  ＯｐｔＥＩＡ  ヒトＩＦＮ−ガンマＥＬＩＳＡセット（カタログ番号５５５１４２）（ＢＤ  Ｂｉｏｓｃｉｅｎｃｅｓ）を用いるＩＦＮガンマのＥＬＩＳＡ分析のために上清を集めた。吸光度をＳｐｅｃｔｒｏｍａｘマイクロプレートリーダーを用いて読み取り、そのデータをＰＲＩＳＭ（ＧｒａｐｈＰａｄ  Ｓｏｆｔｗａｒｅ）を用いて分析した。結果を表９において示す。
【０１５４】
【表１１】
2013541326.tif 000013
【０１５５】
実施例１３
Ｍａｂ１Ｇ１２およびＭａｂ２Ｄ１１のＩＬ−１８Ｒ変種への結合
抗体結合部位の研究のため、ＩＬ−１８Ｒαをクローニングし、Ｆｃ融合タンパク質（ヒトＩｇＧ１のヒンジ〜ＣＨ３）として発現させた。ＩＬ−１８Ｒαは３個のＩｇ様ドメインＤ１、Ｄ２、Ｄ３（スイスプロットアクセス番号Ｑ１３４７８）からなる。そのいくつかの変種および変異体を生成し、ＡＢ  １Ｇ１２および２Ｄ１１の残存する結合を試験した。変異は、ヒトＩＬ−１８Ｒα配列を対応するマウスＩＬ−１８Ｒα配列と交換することにより導入された。欠失は、ドメインのヒトＦｃ融合タンパク質としての別々のクローニングおよび発現により実施された。さらにカニクイザルのＩＬ−１８ＲαをヒトＦｃ融合タンパク質としてクローニングした。結果を表８において示す。抗体の異なるＩＬ−１８Ｒα変種への結合を、ＢＩＡｃｏｒｅ（登録商標）３０００機器（ＧＥ  Ｈｅａｌｔｈｃａｒｅ）を用いる表面プラスモン共鳴（ＳＰＲ）により２５℃で測定した。捕捉系（ヒトＩｇＧに特異的なｍＡＢを捕捉する、Ｊａｃｋｓｏｎ  Ｉｍｍｕｎｏｒｅｓｅａｒｃｈ／１０９−００５−０９８）のおよそ５００共鳴単位（ＲＵ）のアミンカップリングを、ＣＭ３チップ上でｐＨ５．０においてＧＥ  Ｈｅａｌｔｈｃａｒｅにより供給されたアミンカップリングキットを用いて実施した。分析のため、異なるヒトＦｃタグ化ＩＬ−１８Ｒα変種を、１０μｇ／ｍｌ溶液を１０μｌ／分の流速で２分間注入することにより捕捉した。過剰な結合部位を、１．２５μＭの濃度のヒトＦｃ混合物（Ｂｉｏｄｅｓｉｇｎ，５０１７５）を注入することによりブロッキングした。次いで、試験すべき抗体を０．２μｇ／ｍｌの濃度で１０μｌ／分の流速で３分間注入した。解離相を５分間まで監視し、試料溶液から運転緩衝液（ｒｕｎｎｉｎｇ  ｂｕｆｆｅｒ）への切り替えにより始動した（ｔｒｉｇｇｅｒｅｄ）。天然のリガンドＩＬ１８およびＩＬ１８Ｒβを試験した場合、１００ｎＭの濃度の両方のタンパク質の混合物を、抗体に関して上記で記述したように注入した。その表面を、１０μＬ／分の流速で１００ｍＭリン酸溶液で１分間洗浄し、続いて５ｍＭ  ＮａＯＨで１分間洗浄することにより再生させた。バルク屈折率の違いを、ブランクでカップリングさせた表面から得られた応答を差し引くことにより補正した。ブランクの注入も差し引かれる（ｓｕｂｓｔｒａｃｔｅｄ）（＝二重参照（ｄｏｕｂｌｅ  ｒｅｆｅｒｅｎｃｉｎｇ））。ＩＬ１８Ｒα野生型と比較可能な抗体により結合されているＩＬ１８Ｒα変種はそのような抗体の結合に影響を及ぼさず、従って挿入／変更された変異はその結合に寄与しないと結論付けられる（表７において＋の印を付けてある）。影響を受けた結合は、その結合シグナルが野生型により見られる結合シグナルと比較して２０〜５０％低減している場合を意味する。弱い結合は、野生型受容体に関して記述されたシグナルの１０％より上であるが５０％未満の明確な結合を意味する（０の印を付けてある）。結合が検出されない場合、それは表１０において−の印を付けてある。
【０１５６】
ｓｈＩＬ−１８Ｒα：Ｆｃの変異および変種
１．ＷＴ    野生型ｓｈＩＬ−１８Ｒα：Ｆｃ
２．ｃｙｎｏ    カニクイザルＩＬ−１８Ｒα：Ｆｃ
３．Ｄ３    欠失Ｄ１／Ｄ２；残存Ｄ３
４．Ｄ１−１    ＳＲＩＡＬからＰＲＶＴＦへのＤ１−変異
５．Ｄ１−２    ＭＫＮＹＴＱＫからＶＧＮＤＲＲＮへのＤ１−変異
６．Ｄ２−１    ＱＴＬＶＮＳＴＳからＥＥＬＩＱＤＴＷへのＤ２−変異
７．Ｄ２−２    ＮＰＴＩＫＫＮからＴＰＲＩＬＫＤへのＤ２−変異
８．Ｄ２−３    ＨＦＬＨＨＮＧＫＬＦからＦＳＶＨＨＮＧＴＲＹへのＤ２−変異
【０１５７】
【表１２】
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【０１５８】
実施例１４
ＩＬ−１８Ｒペプチドに関する結合アッセイ
ＵＳ２００８００６３６４４においてＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：５および６として記述されているペプチドに対する抗体の結合を研究した。これらのペプチドをＮ末端でビオチン化し、ＳＰＲによる結合に関して調べた。抗体のこれらのペプチドへの結合を、ＢＩＡｃｏｒｅ（登録商標）３０００機器（ＧＥ  Ｈｅａｌｔｈｃａｒｅ）を用いる表面プラスモン共鳴（ＳＰＲ）により２５℃で測定し、ＨＢＳ−Ｐ＋を運転および希釈（ｄｉｌｕａｔｉｏｎ）緩衝液として用いた。ビオチン化されたペプチドを、１０ｎＭのペプチド溶液の数回のパルス（６０秒）を注入することによりＳＡチップ上に固定し、４０ＲＵの応答をもたらした。その基準表面ならびにコートされた表面を、１μＭの濃度の遊離のビオチンを注入することにより不活性化した。分析のため、試験すべき抗体を１００ｎＭの濃度で１０μｌ／分の流速で３分間注入した。解離相を２．５分間まで監視し、試料溶液から運転緩衝液への切り替えにより始動した。バルク屈折率の違いを、ブランクでカップリングさせた表面から得られた応答を差し引くことにより補正した。ブランクの注入も差し引かれる（＝二重参照）。抗体Ｍａｂ１Ｇ１２に関して、これらのペプチドへの結合は検出できなかった。
【図１】
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【図２】
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【配列表】
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【国際調査報告】
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