(57)【要約】本発明では、ヒトポリペプチドのユビキチンリガーゼ活性阻害剤であるキナゾリン−４（３Ａ）−オン誘導体、詳細にはＰＯＳＨ阻害剤、およびＲＩＮＧ  Ｅ３ユビキチンリガーゼ関連疾患の治療のための組成物および方法が提供される。【選択図】なし【特許請求の範囲】
【請求項１】
対象におけるＲＩＮＧ  Ｅ３ユビキチンリガーゼ関連疾患を治療する方法であって、下記一般式Ｉ：
【化１】
2013518810.tif 000010
式中、
Ｒ１は、水素、Ｃ１−６アルキル、Ｃ１−６アルケニル、Ｃ１−６アルキニル、アリールアルキル、シアノ、ヒドロキシル、アルコキシル、ヒドロキシアルキル、またはアルコキシアルキル、１〜５個のＲ３で任意に置換されたアリールまたはヘテロアリールであり；
各Ｒ３は、独立してハロゲン、ヒドロキシ、ヒドロキシアルキル、ヒドロキシアルコキシ、Ｃ１−Ｃ１０アルキル、Ｃ１−Ｃ６ハロアルキル、Ｃ１−Ｃ１０アルコキシ、アルコキシアルキル、アルコキシアルコキシ、Ｃ１−Ｃ６ハロアルコキシ、Ｃ６−Ｃ１０アリール、Ｃ４−Ｃ１０ヘテロアリール、Ｃ７−Ｃ１２アラルキル、Ｃ５−Ｃ１２ヘテロアラルキル、Ｃ２−Ｃ８ヘテロシクリル、Ｃ２−Ｃ１２アルケニル、Ｃ２−Ｃ１２アルキニル、Ｃ５−Ｃ１０シクロアルケニル、Ｃ４−Ｃ１０ヘテロシクロアルケニル、カルボキシ、カルボン酸塩、シアノ、ニトロ、アミノ、アミノアルキル、Ｃ１−Ｃ６アルキルアミノ、Ｃ１−Ｃ６アルキルアミノアルキル、Ｃ１−Ｃ６ジアルキルアミノ、Ｃ１−Ｃ６ジアルキルアミノアルキル、メルカプト、ＳＯ３Ｈ、−Ｓ−アルキル、−Ｓ（Ｏ）アルキル、Ｓ（Ｏ）２アルキル、硫酸塩、Ｓ（Ｏ）ＮＨ２、Ｓ（Ｏ）２ＮＨ２、ホスホニル（ｐｈｏｓｐｈｏｎｙｌ）、アシル、アミノカルボニル、Ｃ１−Ｃ６アルキルアミノカルボニル、Ｃ１−Ｃ６ジアルキルアミノカルボニル、Ｃ１−Ｃ１０アルコキシカルボニル、Ｃ１−Ｃ１０チオアルコキシカルボニル、ヒドラジノカルボニル、Ｃ１−Ｃ６アルキルヒドラジノカルボニル、Ｃ１−Ｃ６ジアルキルヒドラジノカルボニル、ヒドロキシアミノカルボニル、アルコキシアミノカルボニル、−ＮＨＳＯ２ＮＨ２、または−ＯＣＨ２ＣＨ２Ｎ（Ｒ７）２から選ばれ；
Ｒ２は、水素、Ｃ１−６アルキル、Ｃ１−６アルケニル、Ｃ１−６アルキニル、アリールアルキル、シアノ、ヒドロキシル、アルコキシル、ヒドロキシアルキル、またはアルコキシアルキル、１〜５個のＲ３で任意に置換されたアリールまたはヘテロアリールであり；
各Ｒ３は上記のとおりである；
で表される治療有効量の化合物、もしくは鏡像異性体、またはその薬剤的に許容される塩を、該対象に投与することを含む、方法。
【請求項２】
対象におけるＲＩＮＧ  Ｅ３ユビキチンリガーゼ関連疾患の治療方法であって、下記一般式Ｉ：
【化２】
2013518810.tif 000011
式中、
Ｒ１は、水素、Ｃ１−６アルキル、Ｃ１−６アルケニル、Ｃ１−６アルキニル、アリールアルキル、シアノ、ヒドロキシル、アルコキシル、ヒドロキシアルキル、またはアルコキシアルキル、１〜５個のＲ３で任意に置換されたアリールまたはヘテロアリールであり；
各Ｒ３は、独立してハロゲン、ヒドロキシ、ヒドロキシアルキル、ヒドロキシアルコキシ、Ｃ１−Ｃ１０アルキル、Ｃ１−Ｃ６ハロアルキル、Ｃ１−Ｃ１０アルコキシ、アルコキシアルキル、アルコキシアルコキシ、Ｃ１−Ｃ６ハロアルコキシ、Ｃ６−Ｃ１０アリール、Ｃ４−Ｃ１０ヘテロアリール、Ｃ７−Ｃ１２アラルキル、Ｃ５−Ｃ１２ヘテロアラルキル、Ｃ２−Ｃ８ヘテロシクリル、Ｃ２−Ｃ１２アルケニル、Ｃ２−Ｃ１２アルキニル、Ｃ５−Ｃ１０シクロアルケニル、Ｃ４−Ｃ１０ヘテロシクロアルケニル、カルボキシ、カルボン酸塩、シアノ、ニトロ、アミノ、アミノアルキル、Ｃ１−Ｃ６アルキルアミノ、Ｃ１−Ｃ６アルキルアミノアルキル、Ｃ１−Ｃ６ジアルキルアミノ、Ｃ１−Ｃ６ジアルキルアミノアルキル、メルカプト、ＳＯ３Ｈ、−Ｓ−アルキル、−Ｓ（Ｏ）アルキル、Ｓ（Ｏ）２アルキル、硫酸塩、Ｓ（Ｏ）ＮＨ２、Ｓ（Ｏ）２ＮＨ２、ホスホニル（ｐｈｏｓｐｈｏｎｙｌ）、アシル、アミノカルボニル、Ｃ１−Ｃ６アルキルアミノカルボニル、Ｃ１−Ｃ６ジアルキルアミノカルボニル、Ｃ１−Ｃ１０アルコキシカルボニル、Ｃ１−Ｃ１０チオアルコキシカルボニル、ヒドラジノカルボニル、Ｃ１−Ｃ６アルキルヒドラジノカルボニル、Ｃ１−Ｃ６ジアルキルヒドラジノカルボニル、ヒドロキシアミノカルボニル、アルコキシアミノカルボニル、−ＮＨＳＯ２ＮＨ２、または−ＯＣＨ２ＣＨ２Ｎ（Ｒ７）２から選ばれ；
Ｒ２は、水素、Ｃ１−６アルキル、Ｃ１−６アルケニル、Ｃ１−６アルキニル、アリールアルキル、シアノ、ヒドロキシル、アルコキシル、ヒドロキシアルキル、またはアルコキシアルキル、１〜５個のＲ３で任意に置換されたアリールまたはヘテロアリールであり；
各Ｒ３は上記のとおりである；
で表される化合物、もしくは鏡像異性体、またはその薬剤的に許容される塩を含む治療有効量の医薬組成物を該対象に投与することを含む、方法。
【請求項３】
前記化合物が、
下記式：
【化３】
2013518810.tif 000012
で表される化合物Ａ、
下記式：
【化４】
2013518810.tif 000013
で表される化合物Ｂ、
下記式：  
【化５】
2013518810.tif 000014
で表される化合物Ｃ、
下記式：
【化６】
2013518810.tif 000015
で表される化合物Ｄ
からなる群から選択される、請求項２に記載の方法。
【請求項４】
前記医薬組成物が、少なくとも一つの薬剤的に許容される担体をさらに含む、請求項２に記載の方法。
【請求項５】
前記ＲＩＮＧ  Ｅ３ユビキチンリガーゼ関連疾患が、がん、炎症性疾患、自己免疫疾患、および血管新生障害からなる群から選択される、請求項１〜３のいずれか一項に記載の方法。
【請求項６】
前記ＲＩＮＧ  Ｅ３ユビキチンリガーゼ関連疾患ががんである、請求項５に記載の方法。
【請求項７】
前記がんが、肛門がん、星状細胞腫、白血病、リンパ腫、頭頸部がん、肝臓がん、精巣がん、子宮頸がん、肉腫、血管腫、食道がん、眼がん、喉頭がん、口腔がん、中皮腫、骨髄腫、口腔がん、直腸がん、咽喉がん、膀胱がん、乳がん、子宮がん、卵巣がん、前立腺がん、肺がん、結腸がん、膵がん、腎細胞癌、胃がん、皮膚がん、基底細胞癌、メラノーマ、扁平上皮癌、口腔扁平上皮癌、結腸直腸がん、多形神経膠芽腫、子宮内膜がん、および悪性神経膠腫からなる群から選択される、請求項６に記載の方法。
【請求項８】
前記医薬組成物が、有効量の少なくとも一つの抗癌剤をさらに含む、請求項６に記載の方法。
【請求項９】
前記少なくとも一つの抗癌剤が、イマチニブ、ダサチニブ、アキシチニブ、ボスチニブ（ｂｏｓｕｔｉｎｉｂ）、セジラニブ、エルロチニブ、ゲフィチニブ、ラパチニブ、レスタウルチニブ、ニロチニブ、セマクサニブ（ｓｅｍａｘａｎｉｂ）、スニチニブ、トセラニブ（ｔｏｃｅｒａｎｉｂ）、バンデタニブ、およびバタラニブからなる群から選択される、請求項８に記載の方法。
【請求項１０】
前記対象に有効量の少なくとも一つの抗癌剤を投与することをさらに含む、請求項６に記載の方法。
【請求項１１】
前記少なくとも一つの抗癌剤が、前記医薬組成物の投与と同時、投与前または投与後に投与される、請求項１０に記載の方法。
【請求項１２】
前記医薬組成物が、有効量の少なくとも一つのがん化学療法剤をさらに含む、請求項６に記載の方法。
【請求項１３】
前記少なくとも一つのがん化学療法剤が、メクロレタミン、シクロホスファミド、イホスファミド、メルファラン、クロラムブシル、ジカルバジン（ｄｉｃａｒｂａｚｉｎｅ）、ストレプトゾシン、カルムスチン、ロムスチン、セムスチン、クロロゾトシン、ブスルファン、トリエチレンメラミン、チオテパ、ヘキサメチルメラミン、代謝拮抗剤、メトトレキサート、フルオロウラシル、５−フルオロウラシル、フロクスウリジン（５’−フルオロ−２’−デオキシウリジン）、イドクスウリジン、シタラビン、Ｎ−ホスホノアセチル−Ｌ−アスパラギン酸、５−アザシチジン、アザリビン、６−アザウリジン、ピラゾフラン（ｐｙｒａｚｏｆｕｒａｎ）、３−デアザウリジン、アシビシン、プリン類似体、チオグアニン、メルカプトプリン、アザチオプリン、ペントスタチン、エリトロヒドロキシノニルアデニン（ｅｒｙｔｈｒｏｈｙｄｒｏｘｙｎｏｎｙｌａｄｅｎｉｎｅ）、ビンカアルカロイド、ビンクリスチン、ビンブラスチン、エピポドフィロトキシン、エトポシド、テニポシド、抗菌剤、ダクチノマイシン、ダウノルビシン、ドキソルビシン、硫酸ブレオマイシン、プリカマイシン、マイトマイシン、酵素、Ｌ−アスパラギナーゼ、白金配位錯体、シスプラチン、カルボプラチン、ヒドロキシ尿素、プロカルバジン、ミトタン、ホルモン、副腎皮質ステロイド、プレドニゾン、プレドニゾロン、アミノグルテチミド、プロゲスチン、カプロン酸ヒドロキシプロゲステロン、酢酸メドロキシプロゲステロン、酢酸メゲステロール、エストロゲン、アンドロゲン、ジエチルスチルベストロール、フルオキシメステロン、エチニルエストラジオール、抗エストロゲン剤、タモキシフェン、性腺刺激ホルモン放出ホルモン類似体、およびロイプロリドからなる群から選択される、請求項１２に記載の方法。
【請求項１４】
前記対象に、有効量の少なくとも一つのがん化学療法剤を投与することをさらに含む、請求項６に記載の方法。
【請求項１５】
前記少なくとも一つのがん化学療法剤が、前記医薬組成物の投与と同時、投与前または投与後に投与される、請求項１４に記載の方法。
【請求項１６】
前記対象に放射線治療を行うことをさらに含む、請求項６に記載の方法。
【請求項１７】
放射線治療が前記医薬組成物の投与と同時、投与前または投与後に行われる、請求項１６に記載の方法。
【請求項１８】
前記ＲＩＮＧ  Ｅ３ユビキチンリガーゼ関連疾患が炎症性疾患である、請求項５に記載の方法。
【請求項１９】
前記炎症性疾患が、肺線維症、虚血性心疾患、クローン病、皮膚筋炎、真性糖尿病、ギラン・バレー症候群、橋本病、特発性血小板減少性紫斑病、混合結合組織病、重症筋無力症、ナルコレプシー、尋常性天疱瘡、悪性貧血、多発性筋炎、原発性胆汁性肝硬変、シェーグレン症候群、側頭動脈炎、潰瘍性大腸炎、脈管炎、ウェゲナー肉芽腫症、全身性エリテマトーデス、ループス腎炎、グッドパスチャー症候群、溶血性貧血、甲状腺中毒症、多発性硬化症、強皮症、喘息、関節リウマチ、変形性関節症、敗血症、粥状動脈硬化症、慢性腎疾患、炎症性腸疾患、脈管炎、腹膜炎、巨大乳頭結膜炎、ブドウ膜炎、季節性アレルギー性結膜炎、慢性前立腺炎、糸球体腎炎、過敏症、炎症性腸疾患、骨盤腹膜炎、再灌流障害、移植拒絶反応、チェディアック−東症候群、慢性肉芽腫症、尿路炎症性疾患、間質性膀胱炎、潰瘍性大腸炎、全身性硬化症、皮膚筋炎、多発性筋炎、および封入体筋炎からなる群から選択される、請求項１８に記載の方法。
【請求項２０】
前記医薬組成物が少なくとも一つの抗炎症剤をさらに含む、請求項１８に記載の方法。
【請求項２１】
前記抗炎症剤が、副腎皮質ステロイド、コルチゾル、アルドステロン、ヒドロコルチゾン、酢酸ヒドロコルチゾン、酢酸コルチゾン、ピルビン酸チキソコルトール、プレドニゾロン、メチルプレドニゾロン、プレドニゾン、トリアムシノロンアセトニド、トリアムシノロンアルコール（ｔｒｉａｍｃｉｎｏｌｏｎｅ  ａｌｃｏｈｏｌ）、モメタゾン、アムシノニド、ブデソニド、デソニド、フルオシノニド、フルオシノロンアセトニド、ハルシノニド、ベタメタゾン、リン酸ベタメタゾンナトリウム、デキサメタゾン、リン酸デキサメタゾンナトリウム、フルオコルトロン、ヒドロコルチゾン−１７−ブチレート、ヒドロコルチゾン−１７−バレレート、プロピオン酸アルクロメタゾン、吉草酸ベタメタゾン、ジプロピオン酸ベタメタゾン、プレドニカルベート、クロベタゾン−１７−ブチレート、クロベタゾール−１７−プロピオネート、フルオコルトロンカプロン酸、ピバリン酸フルオコルトロン、酢酸フルプレドニデン（ｆｌｕｐｒｅｄｎｉｄｅｎｅ  ａｃｅｔａｔｅ）、非ステロイド性抗炎症薬、ＣＯＸ−２阻害剤、ニメスリド、ジクロフェナク、リコフェロン（ｌｉｃｏｆｅｌｏｎｅ）、アスピリン、イブプロフェン、ナプロキセン、免疫選択的抗炎症性誘導体（ｉｍｍｕｎｅ  ｓｅｌｅｃｔｉｖｅ  ａｎｔｉ−ｉｎｆｌａｍｍａｔｏｒｙ  ｄｅｒｉｖａｔｉｖｅ）、フェニルアラニン−グルタミン−グリシン（ｐｈｅｎｙｌａｌａｎｉｎｅ−ｇｌｕｔａｍｉｎｅ−ｇｌｙｃｉｎｅ）、薬草、ハルパゴフィツム属、ヒソップ、ショウガ、ウコン、アルニカ、ヤナギ樹皮、およびアサからなる群から選択される、請求項２０に記載の方法。
【請求項２２】
前記対象に、有効量の少なくとも一つの抗炎症剤を投与することをさらに含む、請求項１８に記載の方法。
【請求項２３】
前記少なくとも一つの抗炎症剤が、前記医薬組成物の投与と同時、投与前または投与後に投与される、請求項２２に記載の方法。
【請求項２４】
前記ＲＩＮＧ  Ｅ３ユビキチンリガーゼ関連疾患が血管新生障害である、請求項５に記載の方法。
【請求項２５】
前記血管新生障害が、糖尿病性失明、慢性炎症、関節炎、加齢性黄斑変性、網膜症、関節リウマチ、変形性関節症、クローン病、乾癬、がん、アルツハイマー病、再狭窄、肺線維症、喘息、血管線維腫、血管新生緑内障、動静脈奇形、偽関節骨折（ｎｏｎｕｎｉｏｎ  ｆｒａｃｔｕｒｅ）、狼瘡、結合組織障害、ランデュ−オースラー−ウェーバー症候群（Ｏｓｌｅｒ−Ｗｅｂｅｒ  ｓｙｎｄｒｏｍｅ）、動脈硬化巣、移植角膜血管新生（ｃｏｒｎｅａｌ  ｇｒａｆｔ  ｎｅｏｖａｓｃｕｌａｒｉｚａｔｉｏｎ）、化膿性肉芽腫、水晶体後線維増殖症、強皮症、肉芽形成、血管腫、トラコーマ、血友病関節、腹膜子宮内膜症、肥満症、および血管接着（ｖａｓｃｕｌａｒ  ａｄｈｅｓｉｏｎ）からなる群から選択される、請求項２４に記載の方法。
【請求項２６】
前記医薬組成物が、少なくとも一つの血管新生阻害剤をさらに含む、請求項２４に記載の方法。
【請求項２７】
前記少なくとも一つの血管新生阻害剤が、ベバシズマブ、スニチニブ、ソラフェニブ、サリドマイド、レナリドマイド、パニツムマブ、セツキシマブ、およびエルロチニブからなる群から選択される、請求項２６に記載の方法。
【請求項２８】
前記ＲＩＮＧ  Ｅ３ユビキチンリガーゼ関連疾患が自己免疫疾患である、請求項５に記載の方法。
【請求項２９】
前記自己免疫疾患が、クローン病、皮膚筋炎、真性糖尿病、ギラン・バレー症候群、橋本病、特発性血小板減少性紫斑病、混合結合組織病、重症筋無力症、ナルコレプシー、尋常性天疱瘡、悪性貧血、多発性筋炎、原発性胆汁性肝硬変、シェーグレン症候群、側頭動脈炎、潰瘍性大腸炎、脈管炎、ウェゲナー肉芽腫症、全身性エリテマトーデス、ループス腎炎、グッドパスチャー症候群、溶血性貧血、甲状腺中毒症、多発性硬化症、および強皮症からなる群から選択される、請求項２８に記載の方法。
【請求項３０】
抗癌剤、血管新生阻害剤、および抗炎症剤からなる群から選択される、治療有効量の少なくとも一種を、前記対象に投与することをさらに含む、請求項２に記載の方法。
【請求項３１】
前記医薬組成物が、抗癌剤、血管新生阻害剤および抗炎症剤からなる群から選択される、有効量の少なくとも一種をさらに含む、請求項２に記載の方法。
【請求項３２】
前記医薬組成物が、抗癌剤、血管新生阻害剤、および任意に抗炎症剤をさらに含む、請求項６に記載の方法。
【請求項３３】
下記式ＩＩ：
【化７】
2013518810.tif 000016
で表される化合物、またはその薬剤的に許容できる塩。
【請求項３４】
下記式ＩＩＩ：
【化８】
2013518810.tif 000017
で表される化合物、またはその薬剤的に許容できる塩。
【請求項３５】
下記式ＩＶ：
【化９】
2013518810.tif 000018
で表される化合物、またはその薬剤的に許容できる塩。
【請求項３６】
ＲＩＮＧ  Ｅ３ユビキチンリガーゼ関連疾患の治療のための、下記一般式Ｉ：
【化１０】
2013518810.tif 000019
式中、
Ｒ１は、水素、Ｃ１−６アルキル、Ｃ１−６アルケニル、Ｃ１−６アルキニル、アリールアルキル、シアノ、ヒドロキシル、アルコキシル、ヒドロキシアルキル、またはアルコキシアルキル、１〜５個のＲ３で任意に置換されたアリールまたはヘテロアリールであり；
各Ｒ３は、独立してハロゲン、ヒドロキシ、ヒドロキシアルキル、ヒドロキシアルコキシ、Ｃ１−Ｃ１０アルキル、Ｃ１−Ｃ６ハロアルキル、Ｃ１−Ｃ１０アルコキシ、アルコキシアルキル、アルコキシアルコキシ、Ｃ１−Ｃ６ハロアルコキシ、Ｃ６−Ｃ１０アリール、Ｃ４−Ｃ１０ヘテロアリール、Ｃ７−Ｃ１２アラルキル、Ｃ５−Ｃ１２ヘテロアラルキル、Ｃ２−Ｃ８ヘテロシクリル、Ｃ２−Ｃ１２アルケニル、Ｃ２−Ｃ１２アルキニル、Ｃ５−Ｃ１０シクロアルケニル、Ｃ４−Ｃ１０ヘテロシクロアルケニル、カルボキシ、カルボン酸塩、シアノ、ニトロ、アミノ、アミノアルキル、Ｃ１−Ｃ６アルキルアミノ、Ｃ１−Ｃ６アルキルアミノアルキル、Ｃ１−Ｃ６ジアルキルアミノ、Ｃ１−Ｃ６ジアルキルアミノアルキル、メルカプト、ＳＯ３Ｈ、−Ｓ−アルキル、−Ｓ（Ｏ）アルキル、Ｓ（Ｏ）２アルキル、硫酸塩、Ｓ（Ｏ）ＮＨ２、Ｓ（Ｏ）２ＮＨ２、ホスホニル（ｐｈｏｓｐｈｏｎｙｌ）、アシル、アミノカルボニル、Ｃ１−Ｃ６アルキルアミノカルボニル、Ｃ１−Ｃ６ジアルキルアミノカルボニル、Ｃ１−Ｃ１０アルコキシカルボニル、Ｃ１−Ｃ１０チオアルコキシカルボニル、ヒドラジノカルボニル、Ｃ１−Ｃ６アルキルヒドラジノカルボニル、Ｃ１−Ｃ６ジアルキルヒドラジノカルボニル、ヒドロキシアミノカルボニル、アルコキシアミノカルボニル、−ＮＨＳＯ２ＮＨ２、または−ＯＣＨ２ＣＨ２Ｎ（Ｒ７）２から選ばれ、
Ｒ２は、水素、Ｃ１−６アルキル、Ｃ１−６アルケニル、Ｃ１−６アルキニル、アリールアルキル、シアノ、ヒドロキシル、アルコキシル、ヒドロキシアルキル、またはアルコキシアルキル、１〜５個のＲ３で任意に置換されたアリールまたはヘテロアリールであり；
各Ｒ３は上記のとおりである；
で表される化合物、もしくは鏡像異性体、またはその薬剤的に許容される塩の使用。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明の主題は、ヒトポリペプチドのユビキチンリガーゼ活性の阻害剤、とりわけＰＯＳＨ阻害剤である小分子ピリミジン誘導体及びＲＩＮＧ型Ｅ３ユビキチンリガーゼ関連疾患の治療のための組成物と方法に関する。
【背景技術】
【０００２】
創薬ターゲットの妥当性評価には、ＤＮＡ、ＲＮＡ又はタンパク質分子が疾患過程に関係しているのかどうかと、したがって新治療薬の開発に妥当なターゲットなのかどうかを決定することを含む。創薬は、生物活性化合物を同定し、特徴づける過程であり、ヒトの疾患の新しい治療法の開発において重大なステップである。創薬の展望はゲノミクスの革命により劇的に変化している。ＤＮＡ配列及びタンパク質配列は多くの新薬ターゲットと膨大な量の関連情報を生み出している。
【０００３】
癌や炎症、免疫応答のような様々な疾患又は重要な生物学的プロセスに関与する遺伝子やタンパク質を同定することは、薬物設計の過程において重要な部分である。仮に妥当な分子標的が同定され、適切なアンタゴニストが開発されれば、その状態の分子的病因に関与する一つ又は複数の遺伝子の発現を減少させることにより、多くの疾患や障害を治療又は予防することができるだろう。例えば、一つ又は複数の細胞由来遺伝子が活性化し細胞周期プロセスが監視されることなく進行する癌は、適切な細胞周期抑制遺伝子を拮抗させることにより治療できるだろう。さらに、ハンチントン病やあるプリオンの状態のような遺伝的、後成的要因の両方によって影響を受ける多くのヒト遺伝疾患は、ポリペプチドの機能が完全に失われることに対して、ポリペプチドの不適当な活性に起因する。従って、このような突然変異遺伝子の異常機能を拮抗させることにより、治療手段が提供されるであろう。このような疾患や障害を治療するための薬物療法戦略において、疾患遺伝子のポリペプチド産物を標的にした分子拮抗薬が頻繁に使用されている。しかしながら、関係する遺伝子又は標的タンパク質を発見することは、難しく多大な時間を必要とすることが多い。
【０００４】
おそらくユビキチン依存性プロテアソームの作用を通じて選択的分解が行われる標的タンパク質は、ユビキチンのＣ末端グリシル残基と基質タンパク質における特定のリジル残基との間でイソペプチド結合が形成されることを通じて、ユビキチンが共有結合的に付加される。
【０００５】
ユビキチンは、ユビキチン活性化酵素（Ｅ１）とユビキチン結合酵素（Ｅ２）、ユビキチンリガーゼ（Ｅ３）を含む酵素のカスケードによりタンパク質に付加される（Ｈｅｒｓｈｋｏ  ｅｔ  ａｌ．、１９８３）。Ｅ１はユビキチンに結合し、ユビキチンを活性化し、ユビキチンをＥ２酵素に移す。続いて、Ｅ３−ユビキチンリガーゼは、Ｅ２に結びつけられたユビキチンをリクルートし、特異的基質を認識し、ユビキチンの基質への移行を仲介又は直接触媒することにより、ユビキチン化プロセスの最終段階において重要な役割を担う。Ｅ３ユビキチンリガーゼはいくつかのサブファミリー；ＲＩＮＧドメイン含有Ｅ３、ＨＥＣＴドメイン含有Ｅ３、Ｕ−ｂｏｘ及びＰＨＤドメイン含有Ｅ３、に分類することができる。
【０００６】
ＲＩＮＧドメインサブファミリーは、数百もの異なるＥ３を含む最大のサブファミリーである。ＲＩＮＧ  Ｅ３はユビキチンのＥ２酵素から基質への直接移動を促進する。タンパク質修飾のユビキチンシステムは細胞プロセスのほぼ全ての局面に関与する重要なメカニズムである。ユビキチンシステムがヒト疾患に関与しているというエビデンスは急速に蓄積しており、それゆえ細胞機能における該システムの重要な役割を反映している。ＲＩＮＧ  Ｅ３の作用機序において標準的な酵素活性の欠如は、治療用途の低分子阻害剤により特異的Ｅ３を標的にするという課題を非常に難しくする。
【０００７】
ＰＯＳＨは、ＪＮＫ経路の活性化とＮＦ−κＢの核移行、アポトーシスの誘導を導くシグナル伝達経路に関与するＲａｃ１ターゲットとして最初に同定されたＥ３ユビキチンリガーゼである（Ｔａｐｏｎ  ｅｔ  ａｌ．、１９９８）。大多数の報告では、ＰＯＳＨは、混合系列キナーゼ（ＭＬＫ）、ＭＡＰキナーゼキナーゼ（ＭＫＫ）４及びＭＫＫ７、ｃ−Ｊｕｎ  Ｎ末端キナーゼ（ＪＮＫ）のようなＪＮＫ経路の構成要素のための足場として作用することによるプレアポトーシス機能に結びつけられた（Ａｉｇａｋｉ  ｅｔ  ａｌ．、２００２；  Ｆｉｇｕｅｒｏａ  ｅｔ  ａｌ．、２００３；  Ｋｉｍ  ｅｔ  ａｌ．、２００５ａ；  Ｋｕｋｅｋｏｖ  ｅｔ  ａｌ．、２００６；  Ｓｅｏｎｇ  ｅｔ  ａｌ．、２００１；  Ｔａｐｏｎ  ｅｔ  ａｌ．、１９９８；  Ｔｓｕｄａ  ｅｔ  ａｌ．、２００５；  Ｔｓｕｄａ  ｅｔ  ａｌ．、２００６；  Ｗａｎｇ  ｅｔ  ａｌ．、２００７；  Ｗｉｌｈｅｌｍ  ｅｔ  ａｌ．、２００７；  Ｘｕ  ｅｔ  ａｌ．、２００３；  Ｘｕ  ｅｔ  ａｌ．、２００５；  Ｘｕ  ｅｔ  ａｌ．、２００６；  Ｚｈａｎｇ  ｅｔ  ａｌ．、２００５）。他の機能のなかでＰＯＳＨを意味づける報告はほんのわずかしかない。別の報告では、ＰＯＳＨはＨＩＶ−１が原形質膜を標的にすることに関与するトランスゴルジ網関連タンパク質であることを示した（Ａｌｒｏｙ  ｅｔ  ａｌ．、２００５）。ウイルス放出との別の可能な関連として、ＰＯＳＨがショウジョウバエでのカルシウム依存的な様式で、アポトーシス関連遺伝子−２（ＡＬＧ−２）とＡＬＧ−２相互作用タンパク質（ＡＬＩＸ／ＡＩＰ１）と複合体を形成することを述べた報告がある（Ｔｓｕｄａ  ｅｔ  ａｌ．、２００６）。Ａｌｉｘは多胞体でのベシクル形成で重要な役割を持ち、ウイルス出芽に関与している（Ｆｕｊｉｉ  ｅｔ  ａｌ．、２００７）。ＰＯＳＨ／ＡＬＧ−２／ＡＬＩＸ複合体はＪＮＫ経路の制御において共に機能しているかもしれないことが示された（Ｔｓｕｄａ  ｅｔ  ａｌ．、２００６）。ＰＯＳＨは、さらにＨｅｒｐのユビキチン化を通じてＥＲ内でカルシウム恒常性を制御し（Ｔｕｖｉａ  ｅｔ  ａｌ．、２００７）、かつ初期エンドソームで肝細胞増殖因子調節性チロシンキナーゼ基質（Ｈｒｓ）のユビキチン化も行っている（Ｋｉｍ  ｅｔ  ａｌ．、２００５ｂ）。最近では、ＰＯＳＨは軸索伸長も制御することも報告されている（Ｔａｙｌｏｒ  ｅｔ  ａｌ．、２００８）。ＲＮＡｉによるＰＯＳＨのサイレンシングはマウスの皮質ニューロンとマウスＰ１９細胞由来のニューロン内で軸索伸長を促進していることが示された。ＰＯＳＨ活性は増殖過程を抑制するためにＲｈｏキナーゼをリクルートするアクトミオシン調節タンパク質Ｓｈｒｏｏｍ３によって仲介される。
【発明の概要】
【課題を解決するための手段】
【０００８】
本発明の主題により、ある種のピリミジン誘導体はＲＩＮＧ  Ｅ３ユビキチンリカーゼ阻害剤として作用し、細胞遊走を遮断できることがわかった。
【０００９】
本発明の主題はＲＩＮＧ  Ｅ３ユビキチンリガーゼ活性を強く阻害する小分子を対象とする。本発明の主題では、さらにＲＩＮＧ  Ｅ３ユビキチンリガーゼ関連疾患を含む異なる兆候のための治療薬として、抑制分子の可能性を記述する。このようなＲＩＮＧ  Ｅ３ユビキチンリガーゼ関連疾患にはこれらに限定されないが、例えば、がんや様々な炎症関連疾患、加齢性黄斑変性（ＡＭＤ）及び網膜症のような血管新生関連疾患、並びに遺伝性疾患を含む細胞遊走が関係する疾患又は障害、状態が挙げられる。
【００１０】
一実施形態において、本発明の主題は、治療有効量の本化合物を対象に投与することを含む、対象におけるＲＩＮＧ  Ｅ３ユビキチンリガーゼ関連疾患の治療方法を対象としている。
【００１１】
別の実施形態では、本発明の主題は、本化合物を含む治療有効量の医薬組成物を対象に投与することを含む、対象におけるＲＩＮＧ  Ｅ３ユビキチンリガーゼ関連疾患の治療方法を対象としている。
【図面の簡単な説明】
【００１２】
【図１】図１はＨＮＭＲによる化合物Ａの特徴付けである。
【図２Ａ】図２ＡはＡ３７５癌細胞における化合物Ａ、Ｂ、Ｃ、Ｄの殺滅能を示す図である。
【図２Ｂ】図２ＢはＡ３７５癌細胞における化合物Ａの細胞遊走阻害能力を示す図である。
【図２Ｃ】図２ＣはＡ３７５メラノーマ細胞株の５０％阻害濃度（ＩＣ５０）０．０４５μＭでの細胞遊走に対する化合物Ｂの阻害効果である。
【図２Ｄ】図２ＤはＡ３７５メラノーマ細胞株の５０％阻害濃度（ＩＣ５０）０．９２μＭでの細胞遊走に対する化合物Ｃの阻害効果である。
【図２Ｅ】図２ＥはＡ３７５メラノーマ細胞株の５０％阻害濃度（ＩＣ５０）０．０６１μＭでの細胞遊走に対する化合物Ｄの阻害効果である。
【図３】図３は肺癌転移の形成に対する化合物Ａのｉｎ  ｖｉｖｏ効果を示す図である。
【図４】図４はＥＡＥモデルにおける化合物Ａの抑制活性を示す図である。
【図５】図５はＨＮＭＲによる化合物Ｂの特徴付けである。
【図６】図６はＨＮＭＲによる化合物Ｃの特徴付けである。
【図７】図７は化合物Ａ、Ｂ、ＣでのＤＴＨ試験を示す。
【発明を実施するための形態】
【００１３】
定義
さらなる可能な定義への範囲を制限することなく、本明細書で使用される場合、下記の用語は以下のように定義される。
【００１４】
「アルキル」という用語は、直鎖又は分岐鎖であり得、表示された数の炭素原子を含む、炭化水素鎖を意味する。例えば、Ｃ１〜Ｃ１０は、包括的に１〜１０個の炭素原子をその中に有し得る基であることを意味している。
【００１５】
「アルキル」、「アルケニル」又は「アルキニル」ラジカルは、それぞれ、直鎖又は分岐鎖であり得る、「Ｃ１〜Ｃ１０アルキル」又は「Ｃ１〜Ｃ６アルキル」、「Ｃ１〜Ｃ１２アルケニル」、「Ｃ２〜Ｃ１２アルケニル」又は「Ｃ１〜Ｃ６アルケニル」、「Ｃ１〜Ｃ１２アルキニル」、「Ｃ２〜Ｃ１２アルケニル」又は「Ｃ１〜Ｃ６アルキニル」である。
【００１６】
「Ｃ１〜Ｃ６アルキル」という用語は、１〜６個の炭素原子を含む、直鎖又は分岐鎖の飽和炭化水素を意味する。Ｃ１〜Ｃ６アルキル基の例として、これらに限定されないが、メチル、エチル、プロピル、イソプロピル、ｎ−ペンチル、イソペンチル、ネオペンチル及びヘキシルが挙げられる。
【００１７】
「アルケニル」という用語は、直鎖又は分岐鎖の不飽和炭化水素を意味する。
【００１８】
「Ｃ１〜Ｃ６アルケニル」という用語は、１〜６個の炭素原子且つ少なくとも１つの二重結合を含む、直鎖又は分岐鎖の不飽和炭化水素を意味する。Ｃ１〜Ｃ６アルケニル基の例として、これらに限定されないが、メチレン、エチレン、プロピレン、１−ブチレン、２−ブチレン、イソブチレン、ｓｅｃ−ブチレン、１−ペンテン、２−ペンテン、イソペンテン、１−ヘキセン、２−ヘキセン、３−ヘキセン及びイソヘキセンが含まれる。
【００１９】
「Ｃ２〜Ｃ１２アルケニル」という用語は、２〜１２個の炭素原子且つ少なくとも１つの二重結合を含む、直鎖又は分岐鎖の不飽和炭化水素を意味する。
【００２０】
「Ｃ１〜Ｃ１０アルコキシ」という用語は、１〜１０個の炭素原子且つ少なくとも１個の酸素原子を含む、直鎖又は分岐鎖の飽和又は不飽和炭化水素を意味する。
【００２１】
「アルコキシル」という用語は、酸素と結合したアルキル基、つまりＲ−Ｏを意味する。
【００２２】
「アミノ基」という用語は、単結合により水素原子と結合した１個の窒素原子から成る官能基を意味する。
【００２３】
「アリール」という用語は、６〜１８個の炭素を含む、環式の芳香族炭素環構造を意味する。アリール基の例として、これらに限定されないが、フェニル、ナフチル、アントラセニル、テトラセニル及びフェナントレニルが挙げられる。
【００２４】
「アリールアルキル」という用語は、少なくとも１つのアルキル置換基を有するアリール基を意味する。アリールアルキルの例として、これらに限定されないが、トルエニル、フェニルエチル、キシレニル、フェニルブチル、フェニルペンチル及びエチルナフチルが挙げられる。
【００２５】
シアノという用語はＣ≡Ｎを意味する。
【００２６】
「シクロアルケニル」という用語は、それぞれ、すなわち、Ｃ５〜１０の部分不飽和炭素環式基を意味し、例えば、シクロペンテニル及びシクロヘキセニルが挙げられる。
【００２７】
「ハロゲン」という用語は、フッ素、塩素、臭素又はヨウ素原子を意味する。
【００２８】
「ヘテロアリール」という用語は、少なくとも１個のヘテロ原子を含む、４〜１０個の原子から成る単環式芳香族基及び二環式芳香族基を意味する。ヘテロアリールという用語の中で使用される場合のヘテロ原子は、酸素、硫黄及び窒素を意味する。単環式ヘテロアリールの例として、これらに限定されないが、オキサジニル、チアジニル、ジアジニル、トリアジニル、テトラジニル、イミダゾリル、テトラゾリル、イソオキサゾリル、フラニル、フラザニル、オキサゾリル、チアゾリル、チオフェニル、ピラゾリル、トリアゾリル、及びピリミジニルが挙げられる。
【００２９】
「ヘテロアリールアルキル」という用語は、少なくとも１つのアルキル置換基を有するヘテロアリール基を意味する。
【００３０】
「ヒドロキシル」という用語は、官能基−ＯＨを意味する。
【００３１】
「ニトロ」という用語は２個の酸素原子に結合した窒素原子を有する官能基を意味する。
【００３２】
「ヘテロ原子」という用語は、Ｎ、Ｓ及び／又はＯから選択される原子を意味する。
【００３３】
「アリール」という用語は、本明細書の上記で定義されるような一つ又は複数のラジカルにより置換され得る、例えばフェニル、ナフチル及びアントラセニル（ａｎｔｒａｃｅｎｙｌ）等の単環式、二環式又は三環式の環で構成される、６〜１４個の炭素原子又は６〜１０個の炭素原子を有する「Ｃ６〜Ｃ１４」芳香族炭素環式基を意味する。
【００３４】
「ヘテロシクリル」という用語は、２〜８又は５〜６の環員から成る飽和又は部分不飽和（非芳香族の）単環式、二環式又は三環式のヘテロ環に由来するラジカルを意味し、前記環員の１〜３個はＯ、Ｓ及び／又はＮから選択されるヘテロ原子である。非芳香族ヘテロシクリルの非限定的な例としては、ジヒドロフリル、テトラヒドロフリル、ジヒドロチエニル、ピロリジニル（ｐｙｒｒｏｌｙｄｉｎｙｌ）、ピロリニル（ｐｙｒｒｏｌｙｎｙｌ）、ジヒドロピリジル、ピペリジニル、ピペラジニル、モルホリノ等が挙げられる。
【００３５】
本明細書で使用される場合、「ヘテロアリール」という用語は、Ｏ、Ｓ及びＮからなる群から選択される１〜３個のヘテロ原子を含む単環式又は多環式の芳香族複素環に由来するラジカルを意味する。具体的な例としては、ピロリル、フリル、チエニル、ピラゾリル、イミダゾリル、オキサゾリル、チアゾリル、ピリジル、キノリニル、イソキノリニル、ピリダジニル、ピリミジニル、ピラジニル、１，３，４−トリアジニル、１，２，３−トリアジニル、１，３，５−トリアジニル、ベンゾフリル、イソベンゾフリル、インドリル、イミダゾ［１，２−ａ］ピリジル、ベンゾイミダゾリル、ベンズチアゾリル及びベンズオキサゾリル、ベンゾジアゼピニル、並びにさらなる多環式芳香族複素環に由来する他のラジカルが挙げられる。ヘテロアリールラジカルは、本明細書の上記で定義されるような一つ又は複数のラジカルにより置換され得る。多環式ヘテロアリール環が置換される場合、その置換は炭素環及び／又は複素環のいずれかで起こり得ることを理解されたい。一実施形態において、ヘテロアリールはチエニルである。
【００３６】
「ハロゲン」という用語は、フルオロ、クロロ、ブロモ又はヨードを意味する。いくつかの実施形態において、ハロゲンはクロロである。
【００３７】
本明細書で使用される場合、「投与すること」、「投与」等の用語は、健全な医療行為において、治療効果が得られるように被験者に組成物を送達する任意の方法を意味する。本発明の主題の一態様において、治療有効量の本発明の主題の組成物がそれを必要とする患者に経口投与される。他の好適な投与経路には、非経口、皮下、静脈内、筋肉内、腹腔内、経皮、頬側、くも膜下腔内、頭蓋内、鼻腔内又は局所的な経路が含まれ得る。あるいは、同時に、経口的経路により投与されてもよい。投与量は、受容者の年齢、健康及び体重、併用療法の種類、もしあれば、治療頻度及び所望される効果の性質に依存するだろう。
【００３８】
「血管新生関連疾患」というフレーズは、新生血管の成長又は望ましくない成長を含む、あらゆる血管新生関連疾患を意味する。このような血管新生関連疾患には、過剰な又は望ましくない血管新生に関連した状態が含まれ得、例えば、糖尿病性失明；慢性炎症；関節炎；加齢性黄斑変性；網膜症；関節リウマチ；変形性関節症；クローン病；乾癬；がん；アルツハイマー病；再狭窄；肺線維症；喘息；血管線維腫；血管新生緑内障；動静脈奇形；偽関節骨折；狼瘡及び他の結合組織障害；ランデュ−オースラー−ウェーバー症候群（Ｏｓｌｅｒ−Ｗｅｂｅｒ  ｓｙｎｄｒｏｍｅ）；動脈硬化巣；移植角膜血管新生；化膿性肉芽腫；水晶体後線維増殖症；強皮症；肉芽形成、血管腫；トラコーマ；血友病関節；腹膜子宮内膜症；肥満症；並びに血管接着（ｖａｓｃｕｌａｒ  ａｄｈｅｓｉｏｎ）が挙げられる。
【００３９】
「血管新生阻害剤」というフレーズは、血管新生を阻害する任意の物質を意味する。好適な血管新生阻害剤には、これらに限定されないが、ベバシズマブ（ＡＶＡＳＴＩＮ（商標））、スニチニブ（ＳＵＴＥＮＴ（商標））、ソラフェニブ（ＮＥＸＡＶＡＲ（商標））、サリドマイド（ＴＨＡＬＯＭＩＤ（商標））、レナリドマイド（ＲＥＶＬＩＭＩＤ（商標））、パニツムマブ（ＶＥＣＴＩＢＩＸ（商標））、セツキシマブ（ＥＲＢＩＴＵＸ（商標））及びエルロチニブ（ＴＡＲＣＥＶＡ（商標））が含まれる。
【００４０】
「抗癌剤」というフレーズは、一つ又は複数のチロシンキナーゼ阻害剤を意味する。好適なチロシンキナーゼ阻害剤には、これらに限定されないが、イマチニブ、ダサチニブ、アキシチニブ、ボスチニブ（ｂｏｓｕｔｉｎｉｂ）、セジラニブ、エルロチニブ、ゲフィチニブ、ラパチニブ、レスタウルチニブ、ニロチニブ、セマクサニブ（ｓｅｍａｘａｎｉｂ）、スチニブ（ｓｕｔｉｎｉｂ）、トセラニブ（ｔｏｃｅｒａｎｉｂ）、バンデタニブ及びバタラニブが含まれる。
【００４１】
「抗炎症剤」というフレーズは、炎症を軽減又は抑制する任意の物質を意味する。好適な抗炎症剤には、これらに限定されないが、例えば、コルチゾル、アルドステロン、ヒドロコルチゾン、酢酸ヒドロコルチゾン、酢酸コルチゾン、ピルビン酸チキソコルトール、プレドニゾロン、メチルプレドニゾロン、プレドニゾン、トリアムシノロンアセトニド、トリアムシノロンアルコール（ｔｒｉａｍｃｉｎｏｌｏｎｅ  ａｌｃｏｈｏｌ）、モメタゾン、アムシノニド、ブデソニド、デソニド、フルオシノニド（ｆｌｕｃｉｎｏｎｉｄｅ）、フルオシノロンアセトニド、ハルシノニド、ベタメタゾン、リン酸ベタメタゾンナトリウム、デキサメタゾン、リン酸デキサメタゾンナトリウム（ｄｅｘａｍｅｔｈａｓｏｎｅ  ｄｏｄｉｕｍ  ｐｈｏｓｐｈａｔｅ）、フルオコルトロン（ｆｌｕｃｏｒｔｏｌｏｎｅ）、ヒドロコルチゾン−１７−ブチレート、ヒドロコルチゾン−１７−バレレート、プロピオン酸アルクロメタゾン（ａｃｌｏｍｅｔａｓｏｎｅ  ｄｉｐｒｏｐｉｏｎａｔｅ）、吉草酸ベタメタゾン、ジプロピオン酸ベタメタゾン、プレドニカルベート、クロベタゾン−１７−ブチレート、クロベタゾール−１７−プロピオネート、カプリン酸フルオコルトロン（ｆｌｕｃｏｒｔｏｌｏｎｅ  ｃａｐｒｏａｔｅ）、ピバリン酸フルオコルトロン及び酢酸フルプレドニデン（ｆｌｕｐｒｅｄｎｉｄｅｎｅ  ａｃｅｔａｔｅ）を含む副腎皮質ステロイド；例えば、ｃｏｘ−２阻害剤、ニメスリド、ジクロフェナク、リコフェロン（ｌｉｃｏｆｅｌｏｎｅ）、アスピリン、イブプロフェン及びナプロキセンを含む非ステロイド性抗炎症剤；フェニルアラニン−グルタミン−グリシン（ｐｈｅｎｙｌａｌａｎｉｎｅ−ｇｌｕｔａｍｉｎｅ−ｇｌｙｃｉｎｅ）及びそのＤ−異性体等の免疫選択的抗炎症誘導体；並びに、例えば、ハルパゴフィツム属、ヒソップ、ショウガ、ウコン、アルニカ、ヤナギ樹皮及びアサを含む薬草が含まれる。
【００４２】
「がん」という用語は、異常な、制御されない細胞分裂、正常組織への浸潤能及び他の身体部分への転移能により特徴付けられる疾患群の総称である。そのようながんには、肛門がん；星状細胞腫；白血病；リンパ腫；頭頸部がん；肝臓がん；精巣がん；子宮頸がん；肉腫；血管腫；食道がん；眼がん；喉頭がん；口腔がん；中皮腫；骨髄腫；口腔がん；直腸がん；咽喉がん；膀胱がん；乳がん；子宮がん；卵巣がん；前立腺がん；肺がん；結腸がん；膵がん；腎細胞癌；胃がん；皮膚がん；並びに基底細胞癌、メラノーマ及び扁平上皮癌；口腔扁平上皮癌；結腸直腸がん；多形神経膠芽腫；子宮内膜がん；並びに悪性神経膠腫が含まれる。
【００４３】
「がん化学療法剤」というフレーズは、本発明の主題と共に併用療法で使用され得る任意の周知な化学療法剤を意味し、例えば、これらに限定されないが、メクロレタミン、シクロホスファミド、イホスファミド、メルファラン、クロラムブシル、ジカルバジン（ｄｉｃａｒｂａｚｉｎｅ）、ストレプトゾシン（ｓｔｒｅｐｔａｚｏｃｉｎｅ）、カルムスチン、ロムスチン、セムスチン、クロロゾトシン、ブスルファン、トリエチレンメラミン、チオテパ、ヘキサメチルメラミンを含むアルキル化剤；メトトレキサートを含む代謝拮抗剤；  フルオロウラシル；  ５−フルオロウラシル；  フロクスウリジン  （５’−フルオロ−２’−デオキシウリジン）；  イドクスウリジン；  シタラビン；  Ｎ−ホスホノアセチル−Ｌ−アスパラギン酸；  ５−アザシチジン；  アザリビン；  ６−アザウリジン；  ピラゾフラン（ｐｙｒａｚｏｆｕｒａｎ）；  ３−デアザウリジン；  アシビシン；チオグアニン、メルカプトプリン、アザチオプリン、ペントスタチン、エリトロヒドロキシノニルアデニン（ｅｒｙｔｈｒｏｈｙｄｒｏｘｙｎｏｎｙｌａｄｅｎｉｎｅ）を含むプリン類似体；ビンクリスチン及びビンブラスチンを含むビンカアルカロイド；エトポシド及びテニポシドを含むエピポドフィロトキシン；ダクチノマイシン、ダウノルビシン、ドキソルビシン、硫酸ブレオマイシン、プリカマイシン、マイトマイシンを含む抗菌剤；Ｌ−アスパラギナーゼを含む酵素；シスプラチン、カルボプラチンを含む白金配位錯体；ヒドロキシ尿素、プロカルバジン、ミトタン；並びにプレドニゾン及びプレドニゾロン等の副腎皮質ステロイド；アミノグルテチミド；カプロン酸ヒドロキシプロゲステロン、酢酸メドロキシプロゲステロン、酢酸メゲステロール等のプロゲスチン、ジエチルスチルベストロール、フルオキシメステロン、エチニルエストラジオール等のエストロゲン及びアンドロゲン、タモキシフェン等の抗エストロゲン剤、並びにロイプロリド等の性腺刺激ホルモン放出ホルモン類似体を含むホルモン又はホルモン関連薬剤が含まれる。
【００４４】
がんを治療するために本方法を実施する際に、本化合物は、単位医薬組成物の一部として少なくとも１種の周知な化学療法剤及び／又は少なくとも１種の抗癌剤と一緒に投与され得る。あるいは、本化合物は、少なくとも１種の周知ながん化学療法剤及び／又は少なくとも１種の抗癌剤に加えて、投与される。
一実施形態において、本化合物並びに少なくとも１種の周知ながん化学療法剤及び／又は少なくとも１種の抗癌剤は、実質的に同時に投与される、すなわち、前記化合物は血液中で同時に治療レベルに達する限り、同時に又は順々に投与される。別の実施形態において、本化合物並びに少なくとも１種の周知ながん化学療法剤及び／又は少なくとも１種の抗癌剤は、血液中で治療レベルに達する限り、個々の投与計画に基づいて投与される。
【００４５】
同様に、本発明の主題の別の実施形態は、放射線治療と併用して本化合物を投与することによりがんを治療する方法を対象としている。本実施形態において、本化合物は放射線治療の施行と同時に又は異なる時間に、投与され得る。
「細胞遊走に関連した疾患、障害又は状態」というフレーズは、異常な細胞遊走を特徴とする、あらゆる疾患、障害又は状態を意味する。そのような疾患、障害又は状態には、がん；自己免疫疾患を含む種々の炎症関連疾患；並びに加齢性黄斑変性（ＡＭＤ）、網膜症等の血管新生関連疾患が含まれ得る。
【００４６】
本明細書で使用される場合、「担体」、「賦形剤」又は「免疫賦活剤」という用語は、医薬原体ではない、医薬組成物のあらゆる成分を意味する。
【００４７】
本明細書で使用される場合、「製剤」、「薬の剤形」、「最終剤形」等の用語は、それを必要とする患者に投与される、一つ又は複数の医薬原体及び一つ又は複数の賦形剤の組み合わせ（すなわち、医薬組成物）を意味し、その形態は液剤、水性液剤、乳剤、懸濁剤、錠剤、カプセル剤、貼付剤、坐剤、クリーム剤、ゲル剤、ローション剤等であり得る。
【００４８】
活性成分として本化合物又はその薬剤的に許容できる塩を含有する医薬組成物は、従来的な薬剤配合技術に従って調製できる。例えば、Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ’ｓ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｓｃｉｅｎｃｅｓ、第１８版（１９９０年、マック・パブリッシング社、ペンシルバニア州イーストン）を参照されたい。
【００４９】
「炎症関連疾患」というフレーズは、異常な細胞遊走を特徴とするあらゆる炎症状態を意味する。そのような炎症状態には、肺線維症；虚血性心疾患；クローン病、皮膚筋炎、真性糖尿病、ギラン・バレー症候群、橋本病、特発性血小板減少性紫斑病、混合結合組織病、重症筋無力症、ナルコレプシー、尋常性天疱瘡、悪性貧血、多発性筋炎、原発性胆汁性肝硬変、シェーグレン症候群、側頭動脈炎、潰瘍性大腸炎、脈管炎、ウェゲナー肉芽腫症、全身性エリテマトーデス、ループス腎炎、グッドパスチャー症候群、溶血性貧血、甲状腺中毒症、多発性硬化症及び強皮症等の自己免疫疾患；喘息、関節リウマチ、変形性関節症、敗血症、アテローム性動脈硬化症（ａｒｔｈｅｒｏｓｃｌｅｒｏｓｉｓ）、慢性腎疾患、炎症性腸疾患及び脈管炎等の慢性炎症状態；腹膜炎；巨大乳頭結膜炎、ブドウ膜炎及び季節性アレルギー性結膜炎等の眼炎症性疾患；慢性前立腺炎；糸球体腎炎；過敏症；炎症性腸疾患；骨盤腹膜炎；再灌流障害；移植拒絶反応；チェディアック−東症候群；慢性肉芽腫症；尿路炎症性疾患；間質性膀胱炎；潰瘍性大腸炎；全身性硬化症；皮膚筋炎；多発性筋炎並びに封入体筋炎が含まれ得る。
【００５０】
本明細書で使用される場合、「薬剤的に許容される担体」という用語は、無毒の、不活性な固形、半固形、液体の充填剤、希釈剤、封入材料、製剤助剤のあらゆるタイプを意味し、又は、単に食塩水等の無菌の水性媒体を意味する。薬剤的に許容される担体として使用され得る物質には、いくつかの例として、ラクトース、グルコース及びスクロース、コーンスターチ及びジャガイモデンプン等のデンプン、カルボキシルメチルセルロースナトリウム、エチルセルロース及びセルロースアセテート等のセルロース及びその誘導体等の糖類；粉末トラガント；麦芽、ゼラチン、滑石；カカオ脂及び座薬ワックス等の賦形剤；落花生油、綿実油、紅花油、ゴマ油、オリーブ油、トウモロコシ油及びダイズ油等の油剤；プロピレングリコール等のグリコール、グリセリン、ソルビトール、マンニトール及びポリエチレングリコール等のポリオール；オレイン酸エチル及びラウリン酸エチル等のエステル、寒天；水酸化マグネシウム及び水酸化アルミニウム等の緩衝剤；アルギン酸；発熱性物質除去水；等張食塩水、リンゲル液；エチルアルコール及びリン酸緩衝液、並びに医薬製剤で使用される他の無毒で相性の良い物質が挙げられる。
【００５１】
本明細書で担体として使用され得る物質には、いくつかの非制限的な例として、糖、デンプン、セルロース及びその誘導体、粉末トラガント、麦芽、ゼラチン、滑石、ステアリン酸、ステアリン酸マグネシウム、硫酸カルシウム、植物油、ポリオール、アルギン酸、発熱性物質除去水、等張食塩水、リン酸緩衝液、カカオ脂（坐剤基剤）、乳化剤、並びに他の医薬製剤で使用される他の無毒な薬剤的に相性の良い物質が含まれる。ラウリル硫酸ナトリウム等の湿潤剤及び潤滑剤、並びに着色料、香味剤、賦形剤、錠剤化薬剤（ｔａｂｌｅｔｔｉｎｇ  ａｇｅｎｔ）、安定剤、抗酸化剤及び保存剤も含まれ得る。
【００５２】
無毒で、不活性で、且つ有効であればいかなる担体も、本明細書で企図される化合物を処方するために使用され得る。この点において好適な薬剤的に許容される担体、賦形剤及び希釈剤は、当業者に周知であり、例えば、Ｔｈｅ  Ｍｅｒｃｋ  Ｉｎｄｅｘ、第１３版，Ｂｕｄａｖａｒｉら編集、メルク・アンド・カンパニー社、ニュージャージー州ローウェイ（２００１）；ＣＴＦＡ（トイレ化粧品・香料工業協会）Ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ  Ｃｏｓｍｅｔｉｃ  Ｉｎｇｒｅｄｉｅｎｔ  Ｄｉｃｔｉｏｎａｒｙ  ａｎｄ  Ｈａｎｄｂｏｏｋ、第１０版（２００４）；並びに「Ｉｎａｃｔｉｖｅ  Ｉｎｇｒｅｄｉｅｎｔ  Ｇｕｉｄｅ」，アメリカ合衆国食品医薬品局（ＦＤＡ）医薬品評価センター（ＣＤＥＲ）管理部、に記載されるものが挙げられ、これら全ての文献の内容の全体が参照により本明細書に組み込まれる。本組成物において有用な薬剤的に許容される賦形剤、担体及び希釈剤の例として、蒸留水、生理食塩水、リンゲル液、デキストロース溶液、ハンクス液及びＤＭＳＯが挙げられる。
【００５３】
これらのさらなる不活性成分、並びに効果的な製剤及び投与手順は該技術分野において十分周知であり、標準的な教科書、例えばＧｏｏｄｍａｎ及びＧｉｌｌｍａｎ’ｓ：  Ｔｈｅ  Ｐｈａｒｍａｃｏｌｏｇｉｃａｌ  Ｂａｓｅｓ  ｏｆ  Ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃｓ、第８版、Ｇｉｌｍａｎら編集、パーガモンプレス社（Ｐｅｒｇａｍｏｎ  Ｐｒｅｓｓ）（１９９０）並びにＲｅｍｉｎｇｔｏｎ’ｓ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｓｃｉｅｎｃｅｓ、第１８版、マック・パブリッシング社（Ｍａｃｋ  Ｐｕｂｌｉｓｈｉｎｇ  Ｃｏ．）、ペンシルバニア州イーストン（１９９０）等に記載されており、これら両方の文献の全体が参照により本発明に組み込まれる。
【００５４】
担体は、全体として、本明細書で提示される医薬組成物の約０．１〜約９９．９９９９９重量％を構成し得る。
【００５５】
本明細書の本医薬組成物は経口組成物の形態であり得る。本明細書で企図される経口組成物は、錠剤、カプセル剤、ソフトゲル剤、ハードゲル剤、水剤、懸濁剤、散剤、分散顆粒剤、カシェ剤、それらの組み合わせ、又は該技術分野において周知であろう任意の他の経口的な薬の剤形の形態をとり得る。
【００５６】
固形の担体は、希釈剤、香味剤、可溶化剤、潤滑剤、懸濁化剤、結合剤又は錠剤崩壊剤としても作用し得る一つ又は複数の物質であり得、また封入材料でもあり得る。散剤において、担体は活性化合物と混合状態にある微細固体であり得る。錠剤において、活性化合物は必要な結合特性を有する担体と適切な比率で混合され、所望のサイズ及び形に圧縮され得る。好適な固形担体には、非制限的な例として、炭酸マグネシウム、ステアリン酸マグネシウム、滑石、コーンスターチ、糖、ラクトース、ペクチン、デキストリン、デンプン、ゼラチン、トラガント、メチルセルロース、カルボキシルメチルセルロースナトリウム、ヒドロキシプロピルメチルセルロース、ヒドロキシエチルセルロース、ヒドロキシプロピルセルロース、他のセルロース誘導体、低融点のワックス、カカオ脂等が挙げられる。
【００５７】
本明細書で使用される場合、「薬剤的に許容できる塩」というフレーズは、無修飾の化合物と同様の活性を有し、生物学的でも、さもなければ望ましくもない、特定の成分から成る塩を意味する。塩は、例えば、有機酸又は無機酸との反応で生じ得る。好適な酸には、非制限的な例として、酢酸、アセチルサリチル酸、アジピン酸、アルギン酸、アスコルビン酸、アスパラギン酸、安息香酸、ベンゼンスルホン酸、重亜硫酸（ｂｉｓｕｌｆｉｃ  ａｃｉｄ）、ホウ酸、酪酸、ショウノウ酸、カンファースルホン酸、炭酸、クエン酸、シクロペンタンプロピオン酸、ジグルコン酸、ドデシル硫酸（ｄｏｄｅｃｙｌｓｕｌｆｉｃ  ａｃｉｄ）、エタンスルホン酸、ギ酸、フマル酸、グリセリン酸、グリセロリン酸、グリシン、グルコヘプタン酸、グルコン酸、グルタミン酸、グルタル酸、グリコール酸、ヘミ硫酸（ｈｅｍｉｓｕｌｆｉｃ  ａｃｉｄ）、ヘプタン酸、ヘキサン酸、馬尿酸、臭化水素酸、塩酸、ヨウ化水素酸、ヒドロキシエタンスルホン酸、乳酸、マレイン酸、リンゴ酸、マロン酸、マンデル酸、メタンスルホン酸、粘液酸、ナフチレンスルホン酸（ｎａｐｈｔｈｙｌａｎｅｓｕｌｆｏｎｉｃ  ａｃｉｄ）、ナフチル酸（ｎａｐｈｔｈｙｌｉｃ  ａｃｉｄ）、ニコチン酸、亜硝酸、シュウ酸、ペラルゴン酸（ｐｅｌａｒｇｏｎｉｃ）、リン酸、プロピオン酸、サッカリン、サリチル酸、ソルビン酸、コハク酸、硫酸、酒石酸、チオシアン酸、チオグリコール酸、チオ硫酸、トシル酸、ウンデシレン酸、並びに天然由来アミノ酸及び合成的に誘導されるアミノ酸が挙げられる。
【００５８】
有機塩基が使用される場合、好ましくは揮発性が乏しい塩基が使用され、例えば、エタノールアミン、ジエタノールアミン、Ｎ−エチルエタノールアミン、Ｎ−メチルジエタノールアミン、トリエタノールアミン、ジエチルアミノエタノール、２−アミノ−２−メチル−ｎ−プロパノール、ジメチルアミノプロパノール、２−アミノ−２−メチルプロパンジオール及びトリイソプロパノールアミン等の低分子アルカノールアミンが含まれる。エタノールアミンはこの点において好適である。さらなる揮発性が乏しい塩基として、例えば、エチレンジアミン、ヘキサメチレンジアミン、モルホリン、ピペリジン、ピペラジン、シクロヘキシルアミン、トリブチルアミン、ドデシルアミン、Ｎ，Ｎ−ジメチルドデシルアミン、ステアリルアミン、オレイルアミン、ベンジルアミン、ジベンジルアミン、Ｎ−エチルベンジルアミン、ジメチルステアリルアミン、Ｎ−メチルモルホリン、Ｎ−メチルピペラジン、４−メチルシクロヘキシルアミン及びＮ−ヒドロキシエチルモルホリンが記載できる。
【００５９】
水酸化トリメチルベンジルアンモニウム、水酸化テトラメチルアンモニウム又は水酸化テトラエチルアンモニウム等の水酸化第４級アンモニウムの塩もまた使用され得、グアニジン及びその誘導体、特にそのアルキル化生成物も使用され得る。しかしながら、塩形成剤として、例えば、メチルアミン、エチルアミン又はトリエチルアミン等の低分子アルキルアミンを使用することも可能である。本発明の主題により使用される成分に好適な塩として、例えば、特にナトリウム、カリウム等のアルカリ金属塩、又はアンモニウム塩、特にマグネシウム又はカルシウム塩等のアルカリ土類金属塩等の無機陽イオンとの塩、並びに、例えば亜鉛、アルミニウム又はジルコニウム塩等の二価又は四価の陽イオンとの塩が挙げられる。ジシクロヘキシルアミン塩等の、有機塩基との塩；メチル−Ｄ−グルカミン；並びにアルギニン、リジン等のアミノ酸との塩もまた企図される。また、塩基性の窒素含有基は、塩化メチル、臭化メチル及びヨウ化メチル、塩化エチル、臭化エチル及びヨウ化エチル、及び塩化プロピル、臭化プロピル及びヨウ化プロピル、並びに塩化ブチル、臭化ブチル及びヨウ化ブチル等の低級ハロゲン化アルキル；硫酸ジメチル、硫酸ジエチル、硫酸ジブチル及び硫酸ジアミル等の硫酸ジアルキル；塩化デシル、臭化デシル及びヨウ化デシル、塩化ラウリル、臭化ラウリル及びヨウ化ラウリル、及び塩化ミリスチル、臭化ミリスチル及びヨウ化ミリスチル、並びに塩化ステアリル、臭化ステアリル及びヨウ化ステアリル等の長鎖ハロゲン化物；臭化ベンジル及び臭化フェネチル等の喘息ハロゲン化物（ａｓｔｈｍａ  ｈａｌｉｄｅ）等の作用物質により四級化され得る。それによって、水溶性若しくは油溶性の産物、又は分散性の産物が得られる。
【００６０】
本明細書で使用される場合、「ＰＯＳＨ」、「ＰＯＳＨタンパク質」又は「ＰＯＳＨポリペプチド」という用語は同義的に使用され、ＲＩＮＧドメイン及び少なくとも１つのＳＨ３ドメインをアミノ酸配列に含むポリペプチドを意味する。いくつかの例では、ＰＯＳＨタンパク質は３つ又は４つのＳＨ３ドメインを有し得る。
【００６１】
「ＰＯＳＨ介在性ユビキチン化」又は「ＰＯＳＨタンパク質介在性ユビキチン化」という用語は同義的に使用され、ＰＯＳＨタンパク質の関与を必要とするあらゆるユビキチン化プロセスを意味する。
【００６２】
「ユビキチン化阻害剤」、「ＰＯＳＨ阻害剤」又は「ＰＯＳＨタンパク質阻害剤」という用語は同義的に使用され、ＰＯＳＨタンパク質介在性ユビキチン化を含むＰＯＳＨ活性を阻害する、本明細書において式Ｉで表わされるピリミジン誘導体を意味し、前記ＰＯＳＨ活性は、ＰＣＴ／ＵＳ０２／３６３６６（ＷＯ０３／０９５９７２）に定義され、前記特許文献は、あたかも本明細書で完全に開示されるかの如く、参照によりその全体が本明細書に組み込まれる。
【００６３】
活性薬剤は、好ましくは治療有効量において投与される。本明細書で使用される場合、「安全且つ有効な量」という用語は、本方法で使用される場合、過度の有害副作用（毒性反応、刺激反応又はアレルギー反応等）無しに、所望の治療反応を十分に得ることができ、且つ妥当なリスク・ベネフィット比に十分見合う、成分の量を意味する。本明細書で使用される場合、「治療有効量」というフレーズは、効率的に所望の治療反応が得られる本活性薬剤の量を意味する。実際に投与される量、並びに投与の速度及び経時プロフィール（ｒａｔｅ  ａｎｄ  ｔｉｍｅ−ｃｏｕｒｓｅ）は、治療の対象となる状態の性質や重症度に依存するだろう。治療の処方（投与量、投与タイミング等の決定等）は、一般医や専門医の責任の範囲内であり、典型的には治療対象の障害、個々の患者の状態、送達部位、投与方法、及び医師に周知の他の因子群が考慮される。技法及びプロトコルの例は、Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ’ｓ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｓｃｉｅｎｃｅｓに見出すことができる。
【００６４】
本明細書で使用される場合、「対象」、「個体」、「動物」、「患者」又は「哺乳動物」という用語は、あらゆる対象を意味し、特に診断、予後、又は治療が望まれる哺乳類の対象で、例えばヒトを意味する。
【００６５】
本明細書で使用される場合、疾患、障害又は状態の「治療」又は疾患、障害又は状態を「治療すること」という用語には、少なくとも１つのその症状の緩和、その重症度の軽減、又はその進行の遅延、予防又は阻害が含まれる。治療により、疾患、障害又は状態が必ずしも完全に治癒されるわけではない。効果的な治療であるためには、本明細書における有用な組成物は、疾患、障害又は状態の重症度の軽減、それに随伴する症状の重症度の軽減、患者または対象の生活の質の改善、疾患、障害又は状態の発症の遅延、予防又は阻害をすることのみを要する。
【００６６】
「ＲＩＮＧ  Ｅ３ユビキチンリガーゼ関連疾患」というフレーズは、ユビキチンリガーゼ活性を阻害又は調節することにより治療できる、あらゆる疾患、障害又は状態を意味する。そのような疾患には、これらに限定されないが、例えば、がん、血管新生障害及び炎症性疾患を含む細胞遊走が関連する疾患、障害及び状態；ハンチントン病、パーキンソン病、ラフォラ病（ＬＤ）、アンゲルマン症候群、フォン・ヒッペル−リンダウ症候群、リドル症候群、ファンコニー貧血及び３Ｍ症候群を含む遺伝性疾患；並びに腎疾患が含まれる。
【００６７】
特に明記しない限り、本明細書に列挙されるあらゆる濃度の範囲、パーセントテージの範囲又は比の範囲は、その範囲内の整数で表わされるあらゆる濃度、パーセンテージ又は比を含み、整数の１０分の１及び整数の１００分の１等で表わされるその分数も含むことを理解されたい。
【００６８】
特に明記しない限り、高分子サブユニット、サイズ又は厚み等のあらゆる物理的特性に関する、本明細書に列挙されたいかなる数値範囲も、列挙された範囲内にあらゆる整数を含むことを理解されたい。
【００６９】
本明細書における上記及び他の場所で使用されるとき、「ａ」及び「ａｎ」という用語は、列挙された成分のうちの「一つ又は複数」を意味することを理解すべきである。特に記載のない限り、単数形の使用により複数も含まれることは、当業者には明らかであろう。従って、本明細書では、「ａ」、「ａｎ」及び「少なくとも一つ」という用語は同義的に使用される。
【００７０】
本願を通して、種々の実施形態の説明には「含むこと」という文体が用いられるが、いくつかの特定の場合で、一実施形態が「から本質的に成る」又は「から成る」という文体を用いて代替的に説明され得ることは、当業者に理解されるだろう。
【００７１】
本教示を範囲を制限することなくより良く理解する目的のために、特に明記しない限り、本明細書及び特許請求の範囲で用いられる量、パーセンテージ又は比率を表わす全ての数値並びに他の数値は、全ての場合において、「約」という用語により変更されることを理解されたい。従って、特に記載のない限り、下記の明細書及び添付の特許請求の範囲に記載される数値パラメーターは、得ようと試みる所望の特性に応じて変えることのできる近似値である。少なくとも、それぞれの数値パラメーターは、報告された有効数字の数値に照らし、概数技法（ｏｒｄｉｎａｒｙ  ｒｏｕｎｄｉｎｇ  ｔｅｃｈｎｉｑｕｅｓ）を適用することにより、少なくとも解釈されるべきである。
【００７２】
本明細書で使用される場合、他の用語は当該分野において周知の意味によって定義されることが意図される。
【００７３】
本発明の主題の一実施形態は、対象におけるＲＩＮＧ  Ｅ３ユビキチンリガーゼ関連疾患の治療方法であって、下記一般式Ｉ：
【化１】
2013518810.tif 000002
式中、
Ｒ１は、水素、Ｃ１−６アルキル、Ｃ１−６アルケニル、Ｃ１−６アルキニル、アリールアルキル、シアノ、ヒドロキシル、アルコキシル、ヒドロキシアルキル、またはアルコキシアルキル、１〜５個のＲ３で任意に置換されたアリールまたはヘテロアリールであり；
各Ｒ３は、独立してハロゲン、ヒドロキシ、ヒドロキシアルキル、ヒドロキシアルコキシ、Ｃ１−Ｃ１０アルキル、Ｃ１−Ｃ６ハロアルキル、Ｃ１−Ｃ１０アルコキシ、アルコキシアルキル、アルコキシアルコキシ、Ｃ１−Ｃ６ハロアルコキシ、Ｃ６−Ｃ１０アリール、Ｃ４−Ｃ１０ヘテロアリール、Ｃ７−Ｃ１２アラルキル、Ｃ５−Ｃ１２ヘテロアラルキル、Ｃ２−Ｃ８ヘテロシクリル、Ｃ２−Ｃ１２アルケニル、Ｃ２−Ｃ１２アルキニル、Ｃ５−Ｃ１０シクロアルケニル、Ｃ４−Ｃ１０ヘテロシクロアルケニル、カルボキシ、カルボン酸塩、シアノ、ニトロ、アミノ、アミノアルキル、Ｃ１−Ｃ６アルキルアミノ、Ｃ１−Ｃ６アルキルアミノアルキル、Ｃ１−Ｃ６ジアルキルアミノ、Ｃ１−Ｃ６ジアルキルアミノアルキル、メルカプト、ＳＯ３Ｈ、−Ｓ−アルキル、−Ｓ（Ｏ）アルキル、Ｓ（Ｏ）２アルキル、硫酸塩、Ｓ（Ｏ）ＮＨ２、Ｓ（Ｏ）２ＮＨ２、ホスホニル（ｐｈｏｓｐｈｏｎｙｌ）、アシル、アミノカルボニル、Ｃ１−Ｃ６アルキルアミノカルボニル、Ｃ１−Ｃ６ジアルキルアミノカルボニル、Ｃ１−Ｃ１０アルコキシカルボニル、Ｃ１−Ｃ１０チオアルコキシカルボニル、ヒドラジノカルボニル、Ｃ１−Ｃ６アルキルヒドラジノカルボニル、Ｃ１−Ｃ６ジアルキルヒドラジノカルボニル、ヒドロキシアミノカルボニル、アルコキシアミノカルボニル、−ＮＨＳＯ２ＮＨ２、または−ＯＣＨ２ＣＨ２Ｎ（Ｒ７）２から選ばれ；
Ｒ２は、水素、Ｃ１−６アルキル、Ｃ１−６アルケニル、Ｃ１−６アルキニル、アリールアルキル、シアノ、ヒドロキシル、アルコキシル、ヒドロキシアルキル、またはアルコキシアルキル、１〜５個のＲ３で任意に置換されたアリールまたはヘテロアリールであり；
各Ｒ３は上記のとおりである；
で表される治療有効量の化合物、もしくは鏡像異性体、またはその薬剤的に許容される塩を、該対象に投与することを含む、方法に関する。
【００７４】
別の実施形態において、本発明の主題は対象におけるＲＩＮＧ  Ｅ３ユビキチンリガーゼ関連疾患の治療方法であって、下記一般式Ｉ：
【化２】
2013518810.tif 000003
式中、
Ｒ１は、水素、Ｃ１−６アルキル、Ｃ１−６アルケニル、Ｃ１−６アルキニル、アリールアルキル、シアノ、ヒドロキシル、アルコキシル、ヒドロキシアルキル、またはアルコキシアルキル、１〜５個のＲ３で任意に置換されたアリールまたはヘテロアリールであり；
各Ｒ３は、独立してハロゲン、ヒドロキシ、ヒドロキシアルキル、ヒドロキシアルコキシ、Ｃ１−Ｃ１０アルキル、Ｃ１−Ｃ６ハロアルキル、Ｃ１−Ｃ１０アルコキシ、アルコキシアルキル、アルコキシアルコキシ、Ｃ１−Ｃ６ハロアルコキシ、Ｃ６−Ｃ１０アリール、Ｃ４−Ｃ１０ヘテロアリール、Ｃ７−Ｃ１２アラルキル、Ｃ５−Ｃ１２ヘテロアラルキル、Ｃ２−Ｃ８ヘテロシクリル、Ｃ２−Ｃ１２アルケニル、Ｃ２−Ｃ１２アルキニル、Ｃ５−Ｃ１０シクロアルケニル、Ｃ４−Ｃ１０ヘテロシクロアルケニル、カルボキシ、カルボン酸塩、シアノ、ニトロ、アミノ、アミノアルキル、Ｃ１−Ｃ６アルキルアミノ、Ｃ１−Ｃ６アルキルアミノアルキル、Ｃ１−Ｃ６ジアルキルアミノ、Ｃ１−Ｃ６ジアルキルアミノアルキル、メルカプト、ＳＯ３Ｈ、−Ｓ−アルキル、−Ｓ（Ｏ）アルキル、Ｓ（Ｏ）２アルキル、硫酸塩、Ｓ（Ｏ）ＮＨ２、Ｓ（Ｏ）２ＮＨ２、ホスホニル（ｐｈｏｓｐｈｏｎｙｌ）、アシル、アミノカルボニル、Ｃ１−Ｃ６アルキルアミノカルボニル、Ｃ１−Ｃ６ジアルキルアミノカルボニル、Ｃ１−Ｃ１０アルコキシカルボニル、Ｃ１−Ｃ１０チオアルコキシカルボニル、ヒドラジノカルボニル、Ｃ１−Ｃ６アルキルヒドラジノカルボニル、Ｃ１−Ｃ６ジアルキルヒドラジノカルボニル、ヒドロキシアミノカルボニル、アルコキシアミノカルボニル、−ＮＨＳＯ２ＮＨ２、または−ＯＣＨ２ＣＨ２Ｎ（Ｒ７）２より選ばれ；
Ｒ２は、水素、Ｃ１−６アルキル、Ｃ１−６アルケニル、Ｃ１−６アルキニル、アリールアルキル、シアノ、ヒドロキシル、アルコキシル、ヒドロキシアルキル、またはアルコキシアルキル、１〜５個のＲ３で任意に置換されたアリールまたはヘテロアリールであり；
各Ｒ３は上記のとおりである；
で表される化合物、もしくは鏡像異性体、またはその薬剤的に許容される塩を含む治療有効量の医薬組成物を、該対象に投与することを含む方法に関する。
【００７５】
更なる実施形態において、本発明の主題は、前記化合物が下記式：
【化３】
2013518810.tif 000004
で表される、ＲＩＮＧ  Ｅ３ユビキチンリガーゼ関連疾患の治療方法に関する。
【００７６】
更なる別の実施態様において、本発明の主題は、前記医薬組成物が更に少なくとも一つの薬剤的に許容される担体をさらに含む、ＲＩＮＧ  Ｅ３ユビキチンリガーゼ関連疾患の治療方法に関する。
【００７７】
別の実施形態において、本発明の主題は、前記ＲＩＮＧ  Ｅ３ユビキチンリガーゼ関連疾患が、がん、炎症性疾患、自己免疫疾患、および血管新生障害からなる群から選択される、ＲＩＮＧ  Ｅ３ユビキチンリガーゼ関連疾患の治療方法に関する。
【００７８】
別の実施形態において、本発明の主題は、前記ＲＩＮＧ  Ｅ３ユビキチンリガーゼ関連疾患ががんである、ＲＩＮＧ  Ｅ３ユビキチンリガーゼ関連疾患の治療方法に関する。
【００７９】
更なる別の実施形態において、本発明の主題は、前記がんが、肛門がん；星状細胞腫；白血病；リンパ腫；頭頸部がん；肝臓がん；精巣がん；子宮頸がん；肉腫；血管腫；食道がん；眼がん；喉頭がん；口腔がん；中皮腫；骨髄腫；口腔がん；直腸がん；咽喉がん；膀胱がん；乳がん；子宮がん；卵巣がん；前立腺がん；肺がん；結腸がん；膵がん；腎細胞癌；胃がん；皮膚がん；基底細胞癌；メラノーマ；扁平上皮癌；口腔扁平上皮癌；結腸直腸がん；多形神経膠芽腫；子宮内膜がん；および悪性神経膠腫からなる群から選択される、がんの治療方法に関する。
【００８０】
一実施形態において、本発明の主題は、前記医薬組成物が、少なくとも一つの有効量の抗癌剤をさらに含む、がんの治療方法に関する。
【００８１】
更なる実施形態において、本発明の主題は、前記少なくとも一つの抗癌剤が、イマチニブ、ダサチニブ、アキシチニブ、ボスチニブ（ｂｏｓｕｔｉｎｉｂ）、セジラニブ、エルロチニブ、ゲフィチニブ、ラパチニブ、レスタウルチニブ、ニロチニブ、セマクサニブ（ｓｅｍａｘａｎｉｂ）、スニチニブ、トセラニブ（ｔｏｃｅｒａｎｉｂ）、バンデタニブ、およびバタラニブからなる群から選択される、がんの治療方法に関する。
【００８２】
更なる別の実施態様において、本発明の主題は、前記対象に有効量の少なくとも一つの抗癌剤を投与することをさらに含む、がんの治療方法に関する。
【００８３】
更なる別の実施態様において、本発明の主題は、前記少なくとも一つの抗癌剤が、前記医薬組成物の投与と同時、投与前または投与後に投与される、がんの治療方法に関する。
【００８４】
一実施形態において、本発明の主題は、前記医薬組成物が、有効量の少なくとも一つのがん化学療法剤をさらに含む、がんの治療方法に関する。
【００８５】
別の実施形態において、本発明の主題は、前記少なくとも一つのがん化学療法剤が、メクロレタミン；シクロホスファミド；イホスファミド；メルファラン；クロラムブシル；ジカルバジン（ｄｉｃａｒｂａｚｉｎｅ）；ストレプトゾシン；カルムスチン；ロムスチン；セムスチン；クロロゾトシン；ブスルファン；トリエチレンメラミン；チオテパ；ヘキサメチルメラミン；代謝拮抗剤；メトトレキサート；フルオロウラシル；５−フルオロウラシル；フロクスウリジン（５’−フルオロ−２’−デオキシウリジン）；イドクスウリジン；シタラビン；Ｎ−ホスホノアセチル−Ｌ−アスパラギン酸；５−アザシチジン；アザリビン；６−アザウリジン；ピラゾフラン（ｐｙｒａｚｏｆｕｒａｎ）；３−デアザウリジン；アシビシン；プリン類似体；チオグアニン；メルカプトプリン；アザチオプリン；ペントスタチン；エリトロヒドロキシノニルアデニン（ｅｒｙｔｈｒｏｈｙｄｒｏｘｙｎｏｎｙｌａｄｅｎｉｎｅ）；ビンカアルカロイド；ビンクリスチン；ビンブラスチン；エピポドフィロトキシン；エトポシド；テニポシド；抗菌剤；ダクチノマイシン；ダウノルビシン；ドキソルビシン；硫酸ブレオマイシン；プリカマイシン；マイトマイシン；酵素；Ｌ−アスパラギナーゼ；白金配位錯体；シスプラチン；カルボプラチン；ヒドロキシ尿素；プロカルバジン；ミトタン；ホルモン；副腎皮質ステロイド；プレドニゾン；プレドニゾロン；アミノグルテチミド；プロゲスチン；カプロン酸ヒドロキシプロゲステロン；酢酸メドロキシプロゲステロン；酢酸メゲステロール；エストロゲン；アンドロゲン；ジエチルスチルベストロール；フルオキシメステロン；エチニルエストラジオール；抗エストロゲン剤；タモキシフェン；性腺刺激ホルモン放出ホルモン類似体；およびロイプロリドからなる群から選択される、がんの治療方法に関する。
【００８６】
さらなる別の実施形態において、本発明の主題は、前記対象に、有効量の少なくとも一つのがん化学療法剤を投与することをさらに含む、がんの治療方法に関する。
【００８７】
更なる実施形態において、本発明の主題は、前記少なくとも一つのがん化学療法剤が、前記医薬組成物の投与と同時、投与前または投与後に投与される、がんの治療方法に関する。
【００８８】
更なる別の実施態様において、本発明の主題は、前記対象に放射線治療を行うことをさらに含むがんの治療方法に関する。
【００８９】
一実施形態において、本発明の主題は、放射線治療が前記医薬組成物の投与と同時、投与前または投与後に行われる、がんの治療方法に関する。
【００９０】
更なる実施形態において、本発明の主題は、前記ＲＩＮＧ  Ｅ３ユビキチンリガーゼ関連疾患が炎症性疾患である、ＲＩＮＧ  Ｅ３ユビキチンリガーゼ関連疾患の治療方法に関する。
【００９１】
別の実施形態において、本発明の主題は、前記炎症性疾患が、肺線維症；虚血性心疾患；クローン病；皮膚筋炎；真性糖尿病；ギラン・バレー症候群；橋本病；特発性血小板減少性紫斑病；混合結合組織病；重症筋無力症；ナルコレプシー；尋常性天疱瘡；悪性貧血；多発性筋炎；原発性胆汁性肝硬変；シェーグレン症候群；側頭動脈炎；潰瘍性大腸炎；脈管炎；ウェゲナー肉芽腫症；全身性エリテマトーデス；ループス腎炎；グッドパスチャー症候群；溶血性貧血；甲状腺中毒症；多発性硬化症；強皮症；喘息；関節リウマチ；変形性関節症；敗血症；粥状動脈硬化症；慢性腎疾患；炎症性腸疾患；脈管炎；腹膜炎；巨大乳頭結膜炎；ブドウ膜炎；季節性アレルギー性結膜炎；慢性前立腺炎；糸球体腎炎；過敏症；炎症性腸疾患；骨盤腹膜炎；再灌流障害；移植拒絶反応；チェディアック−東症候群；慢性肉芽腫症；尿路炎症性疾患；間質性膀胱炎；潰瘍性大腸炎；全身性硬化症；皮膚筋炎；多発性筋炎；および封入体筋炎からなる群から選択される、炎症性疾患の治療方法に関する。
【００９２】
一実施形態において、本発明の主題は、前記医薬組成物が少なくとも一つの抗炎症剤をさらに含む、炎症性疾患の治療方法に関する。
【００９３】
別の実施形態において、本発明の主題は、前記抗炎症剤が、副腎皮質ステロイド；コルチゾル；アルドステロン；ヒドロコルチゾン；酢酸ヒドロコルチゾン；酢酸コルチゾン；ピルビン酸チキソコルトール；プレドニゾロン；メチルプレドニゾロン；プレドニゾン；トリアムシノロンアセトニド；トリアムシノロンアルコール（ｔｒｉａｍｃｉｎｏｌｏｎｅ  ａｌｃｏｈｏｌ）；モメタゾン；アムシノニド；ブデソニド；デソニド；フルオシノニド；フルオシノロンアセトニド；ハルシノニド；ベタメタゾン；リン酸ベタメタゾンナトリウム；デキサメタゾン；リン酸デキサメタゾンナトリウム；フルオコルトロン；ヒドロコルチゾン−１７−ブチレート；ヒドロコルチゾン−１７−バレレート；アルクロメタゾンプロピオン酸エステル；吉草酸ベタメタゾン；ジプロピオン酸ベタメタゾン；プレドニカルベート；クロベタゾン−１７−ブチレート；クロベタゾール−１７−プロピオネート；フルオコルトロンカプロン酸；ピバリン酸フルオコルトロン；酢酸フルプレドニデン（ｆｌｕｐｒｅｄｎｉｄｅｎｅ  ａｃｅｔａｔｅ）；非ステロイド性抗炎症薬；ＣＯＸ−２阻害剤；ニメスリド；ジクロフェナク；リコフェロン（ｌｉｃｏｆｅｌｏｎｅ）；アスピリン；イブプロフェン；ナプロキセン；免疫選択的抗炎症性誘導体（ｉｍｍｕｎｅ  ｓｅｌｅｃｔｉｖｅ  ａｎｔｉ−ｉｎｆｌａｍｍａｔｏｒｙ  ｄｅｒｉｖａｔｉｖｅ）；フェニルアラニン−グルタミン−グリシン（ｐｈｅｎｙｌａｌａｎｉｎｅ−ｇｌｕｔａｍｉｎｅ−ｇｌｙｃｉｎｅ）；薬草；ハルパゴフィツム属；ヒソップ；ショウガ；ウコン；アルニカ；ヤナギ樹皮；およびアサからなる群から選択される、炎症性疾患の治療方法に関する。
【００９４】
更に別の実施形態において、本発明の主題は前記対象に、有効量の少なくとも一つの抗炎症剤を投与することをさらに含む、炎症性疾患の治療方法に関する。
【００９５】
更なる別の実施形態において、本発明の主題は、前記少なくとも一つの抗炎症剤が、前記医薬組成物の投与と同時、投与前または投与後に投与される、炎症性疾患の治療方法に関する。
【００９６】
更なる実施形態において、本発明の主題は、前記ＲＩＮＧ  Ｅ３ユビキチンリガーゼ関連疾患が血管新生障害である、ＲＩＮＧ  Ｅ３ユビキチンリガーゼ関連疾患の治療方法に関する。
【００９７】
更なる実施形態において、本発明の主題は、前記血管新生障害が、糖尿病性失明；慢性炎症；関節炎；加齢性黄斑変性；網膜症；関節リウマチ；変形性関節症；クローン病；乾癬；がん；アルツハイマー病；再狭窄；肺線維症；喘息；血管線維腫；血管新生緑内障；動静脈奇形；偽関節骨折（ｎｏｎｕｎｉｏｎ  ｆｒａｃｔｕｒｅ）；狼瘡；結合組織障害；ランデュ−オースラー−ウェーバー症候群（Ｏｓｌｅｒ−Ｗｅｂｅｒ  ｓｙｎｄｒｏｍｅ）；動脈硬化巣；移植角膜血管新生（ｃｏｒｎｅａｌ  ｇｒａｆｔ  ｎｅｏｖａｓｃｕｌａｒｉｚａｔｉｏｎ）；化膿性肉芽腫；水晶体後線維増殖症；強皮症；肉芽形成、血管腫；トラコーマ；血友病関節；腹膜子宮内膜症；肥満症；および血管接着（ｖａｓｃｕｌａｒ  ａｄｈｅｓｉｏｎ）からなる群から選択される、血管新生障害の治療方法に関する。
【００９８】
更なる別の実施態様において、本発明の主題は、前記医薬組成物が少なくとも一つの血管新生阻害剤をさらに含む、血管新生障害の治療方法に関する。
【００９９】
更なる別の実施態様において、本発明の主題は、前記少なくとも一つの血管新生阻害剤が、ベバシズマブ、スニチニブ、ソラフェニブ、サリドマイド、レナリドマイド、パニツムマブ、セツキシマブ、およびエルロチニブからなる群から選択される、血管新生障害の治療方法に関する。
【０１００】
一実施形態において、本発明の主題は、前記ＲＩＮＧ  Ｅ３ユビキチンリガーゼ関連疾患が自己免疫疾患である、ＲＩＮＧ  Ｅ３ユビキチンリガーゼ関連疾患の治療方法に関する。
【０１０１】
別の実施形態において、本発明の主題は、前記自己免疫疾患が、クローン病、皮膚筋炎、真性糖尿病、ギラン・バレー症候群、橋本病、特発性血小板減少性紫斑病、混合結合組織病、重症筋無力症、ナルコレプシー、尋常性天疱瘡、悪性貧血、多発性筋炎、原発性胆汁性肝硬変、シェーグレン症候群、側頭動脈炎、潰瘍性大腸炎、脈管炎、ウェゲナー肉芽腫症、全身性エリテマトーデス、ループス腎炎、グッドパスチャー症候群、溶血性貧血、甲状腺中毒症、多発性硬化症、および強皮症からなる群から選択される、自己免疫疾患の治療方法に関する。
【０１０２】
一実施形態において、本発明の主題は、抗癌剤、血管新生阻害剤、および抗炎症剤からなる群から選択される、治療有効量の少なくとも一種を、前記対象に投与することをさらに含む、自己免疫疾患の治療方法に関する。
【０１０３】
更なる実施形態において、本発明の主題は、前記医薬組成物が、抗癌剤、血管新生阻害剤および抗炎症剤からなる群から選択される有効量の少なくとも一種をさらに含む、ＲＩＮＧ  Ｅ３ユビキチンリガーゼ関連疾患の治療方法に関する。
【０１０４】
更なる別の実施態様において、本発明の主題は、前記医薬組成物が、抗癌剤、血管新生阻害剤、および任意に抗炎症剤をさらに含む、がんの治療方法に関する。
【実施例】
【０１０５】
実施例１：  化合物Ａ（７００６２８６）の合成経路
Ｎ−アセチルアントラニル酸（２）
１０ｇ（７３ｍｍｏｌ）のアントラニル酸（１）を１５ｍｌの無水酢酸及び１５ｍｌの酢酸と混合し、２時間還流させた。冷却後、その混合物を氷上に注ぎ、沈殿物を濾過し、５０％ＥｔＯＨから再結晶化した。収率９．３ｇ（８０％）。
【０１０６】
２−メチル−３−（３−ニトロフェニル）−４−キナゾロン（３）
２５０ｍｌフラスコ中に、３．５８ｇ（２０ｍｍｏｌ）のＮ−アセチルアントラニル酸（２）、２．７６ｇ（２０ｍｍｏｌ）の３−ニトロアニリン及び３５ｍｌのトルエンを入れた。その混合物に、撹拌させながら、５ｍｌのトルエン中の９２０ｍｇ（６．７ｍｍｏｌ）の三塩化リン溶液を滴加した。その後得られた懸濁液を還流させながら２時間撹拌し、冷却後、４０ｍｌの１０％炭酸ナトリウム溶液で処理された。真空中の間接的水蒸気蒸留によりトルエンを除去した後、固形物が濾去され、メタノールから再結晶化した。収率３．２５ｇ（５８％）
【０１０７】
２−［２−（４−ヒドロキシフェニル）−ビニル］−３−（３−ニトロフェニル）−４−キナゾロン（化合物Ａ）
２−メチル−３−（３−ニトロフェニル）−４−キナゾロン（３）（２．８１ｇ、１０ｍｍｏｌ）、４−ヒドロキシベンズアルデヒド（１．３４ｇ、１１ｍｍｏｌ）及び６００ｍｇ（７．３ｍｍｏｌ）の無水酢酸ナトリウムの混合物を２５ｍｌの酢酸に溶解させ、１０時間還流させた。冷却時に形成された沈殿物を濾過し、沸騰水で洗浄し、空気中で乾燥させた。山吹色の粉末（ｍｐ  ２８６〜８９）の収率は１．７２ｇ（４５％）であった。
【化４】
2013518810.tif 000005
ＨＮＭＲによる化合物Ａの特徴付けを図１に示す。
【０１０８】
実施例２：  化合物Ｂ（７０８４０１６）の合成経路
（Ｅ）−２−（４−メトキシスチリル）−３−（３−ニトロフェニル）キナゾリン−４（３Ｈ）−オン
氷酢酸（３．０ｍｌ）中の２−メチル−３−（３−ニトロフェニル）−３Ｈ−キナゾリン−４−オン（合成１については、化合物Ａの調製を参照、１６５ｍｇ、０．６ｍｍｏｌ）、４−メトキシベンズアルデヒド（４−ｍｅｔｈｏｘｙｂｅｎｚａｌｄｈｅｙｄｅ）（１２０ｍｇ、０．７０ｍｍｏｌ）及びＮａＯＡｃ（５３ｍｇ、０．７０ｍｍｏｌ）の混合物を還流させながら１０時間加熱した。反応混合物を室温まで冷却した後、得られた沈殿物を減圧濾過により収集し、水で洗浄し、ＥｔＯＨから再結晶し、１１４ｍｇ（５１％）の標的化合物を得た。
【化５】
2013518810.tif 000006
ＨＮＭＲによる化合物Ｂの特徴付けは図５に示した。
【０１０９】
実施例３：  化合物Ｃ（７０８４１５１）の合成経路
（Ｅ）−２−（４−ブロモスチリル）−３−（３−ニトロフェニル）キナゾリン−４（３Ｈ）−オン
氷酢酸（３．０ｍｌ）中の２−メチル−３−（３−ニトロフェニル）−３Ｈ−キナゾリン−４−オン（合成１については、化合物Ａの調製を参照、１６５ｍｇ、０．６ｍｍｏｌ）、４−ブロモベンズアルデヒド（４−ｂｒｏｍｏｂｅｎｚａｌｄｈｅｙｄｅ）（１２０ｍｇ、０．７０ｍｍｏｌ）及びＮａＯＡｃ（５３ｍｇ、０．７０ｍｍｏｌ）の混合物を還流させながら１０時間加熱した。反応混合物を室温まで冷却した後、得られた沈殿物を減圧濾過により収集し、水で洗浄し、ＥｔＯＨから再結晶し、１１４ｍｇ（５１％）の標的化合物を得た。
【化６】
2013518810.tif 000007
ＨＮＭＲによる化合物Ｃの特徴付けは図６に示した。
【０１１０】
実施例４：  化合物Ｄ（７０８４１７５）の合成経路
（Ｅ）−３−（３−（ジヒドロキシアミノ）フェニル）−２−（２−（１−メチル−１Ｈ−ピラゾール−３−イル）ビニル）キナゾリン−４（３Ｈ）−オン
氷酢酸（３．０ｍｌ）中の２−メチル−３−（３−ニトロフェニル）−３Ｈ−キナゾリン−４−オン（合成１については、化合物Ａの調製を参照、１６５ｍｇ、０．６ｍｍｏｌ）、１−メチル−１Ｈ−ピラゾール−３−カルバルデヒド（１２０ｍｇ、０．７０ｍｍｏｌ）及びＮａＯＡｃ（５３ｍｇ、０．７０ｍｍｏｌ）の混合物を還流させながら１０時間加熱した。反応混合物を室温まで冷却した後、得られた沈殿物を減圧濾過により収集し、水で洗浄し、ＥｔＯＨから再結晶し、１１４ｍｇ（５１％）の標的化合物を得た。
【化７】
2013518810.tif 000008
【０１１１】
実施例５：  化合物Ａ、Ｂ、Ｃ及びＤの癌細胞に対するｉｎ  ｖｉｔｒｏにおける効果
３７５細胞（ＣＲＬ−１６１９、メラノーマ癌細、アメリカ合衆国培養細胞系統保存機関（「ＡＴＣＣ」）、米国バージニア州マナッサス）を１０％ＦＢＳ含有ＲＰＭＩで培養した（１ウェル当たり３００細胞）。播種から２４時間後、細胞を様々な濃度の化合物Ａで処理した。ＷＳＴ−１試薬（ロシェ）処理から７２時間後に細胞の生存率を検査した。ＬＤ５０をＰｒｉｓｍソフトウェア（グラフパッド社）を用いて計算した。化合物Ａは２０μＭのＬＤ５０でＡ３７５癌細胞を死滅させた。
【０１１２】
Ａ３７５細胞を１０％ＦＢＳ含有ＲＰＭＩで培養した。細胞をＦＢＳを含まない培地で２４時間飢餓状態にした。スタベーションの終わりに、ＦＢＳを含まない培地中の５ｘ１０４個の細胞を２４ウェルのＴＲＡＮＳＷＥＬＬ装置（Ｃｏｒｎｉｎｇ  ＴＲＡＮＳＷＥＬＬ（登録商標）ポリカーボネート膜インサート、孔径５μｍ）のアッパーチャンバーに溶媒（ＤＭＳＯ／ＰＥＧ４００）又は様々な濃度の化合物Ａ、Ｂ、Ｃ又はＤと共に播いた。ＦＢＳ並びに化合物Ａ、Ｂ、Ｃ又はＤを含む培地をボトムチャンバーに加えた。２４時間後、アッパーチャンバーからの細胞を綿棒で除去した。膜の底部に遊走した細胞をＣａｌｃｅｉｎ−ＡＭ（シグマ）で染色し、蛍光顕微鏡で画像を取り込んだ。遊走細胞の数をＩｍａｇｅ  Ｊソフトウェアで定量化し、ＩＣ５０値をＰｒｉｓｍソフトウェア（グラフパッド）を用いて計算した。図２Ｂには、Ａ３７５メラノーマ細胞株において０．１μＭのＩＣ５０を有する化合物Ａの細胞遊走阻害効果を示す。
【０１１３】
３つの実験から得られた結果により、化合物Ａ、Ｂ、Ｃ及びＤはＡ３７５細胞に対し、これらの化合物の毒性濃度より２００〜１５０倍低い濃度で、抗遊走活性を有することが示された。これにより、これらの化合物が顕著な細胞毒性を引き起こさずに、細胞遊走を含む兆候の治療ために使用され得ることが示された。
【０１１４】
実施例６：  化合物Ａの肺がん転移形成に対するｉｎ  ｖｉｖｏでの効果
肺がん転移形成に対する抑制活性を、Ｄ１２２Ｌｅｗｉｓ肺がん細胞を雄Ｃ５７ＢＬマウスの尾静脈に注入することにより検査した。動物には、２０ｍｇ／ｋｇの化合物Ａ又は溶媒（５％ＤＭＳＯ、１０％ＰＥＧ４００、５％Ｓｏｌｕｔｏｌ  ＨＳ１５、５％トウィーン８０）を腹腔内に１日２回注射処理した。２８日間処理を継続した。３３日目に、動物を屠殺し、肺を取り出し重量を計測した。化合物Ａ群とビヒクル群を比較すると、化合物Ａ群における増加肺重量が５０％減少している（図３）。対照群の平均体重増加が２５０ｍｇであるのに対し、化合物Ａ群の平均体重増加は１２５ｍｇだけであった。両側ｔ検定を用いてデータを解析し、そのデータが有意であることが示された（ｐ値＝０．００８５）。化合物Ａの投与後に観察された効果により、該化合物が抗転移活性を有するという主張が裏付けられる。
【０１１５】
実施例７：  抗炎症性検定法
遅延型過敏（ＤＴＨ）反応は、細胞免疫の発現によるものであり、多くの炎症性疾患の病理及び慢性化において主要な役割を持つ。遅延型過敏（ＤＴＨ）反応は、オキサゾロン、２、４−ジニトロフルオロベンゼン（ＤＮＦＢ）及び羊赤血球（ＳＲＢＣ）を含む種々のアレルゲンにより誘導され得る。最も特徴的なＤＴＨの兆候の１つは接触過敏症であり、腫脹により、且つサイトカインの組織レベルの増加により特徴付けられる。接触過敏症（ＣＨＳ）は、皮膚感作及び反応性ハプテンでの攻撃に応じたＴ細胞介在性の免疫反応であり、前記ハプテンは可溶性の細胞結合タンパク質に直接結合でき、自己のＭＨＣ産物との関連においてＴ細胞により認識される。皮膚において、抗原−タンパク質複合体を認識する細胞はランゲルハンス細胞（ＬＣ）である。局所的なアレルゲン処理の後、皮膚における免疫応答を誘導する主要な抗原提示細胞（ＡＰＣ）である、ランゲルハンス細胞（ＬＣ）は、表面ＭＨＣクラスＩＩ分子の発現増強を示し、皮膚から、特異的なリンパ球活性化が起こると考えられる所属リンパ節へと遊走し始める。ハプテンとの２度目の接触後、Ｔ細胞がまず組織にリクルートされ、その後抗原提示細胞により活性化され、局所炎症を仲介するサイトカインを産生する。ミエロペルオキシダーゼ（ＭＰＯ）は好中性顆粒中にのみ存在する酵素であり、一般に顆粒球浸潤の指標として使用され、その阻害により消炎作用が示される。
【０１１６】
本研究の目標は、化合物Ａ、Ｂ及びＣのオキサゾロン誘導性ＤＴＨに対する効果を調べることである。
【０１１７】
動物：
動物の種及び系統：５０ＢＡＬＢ／ｃマウス
性別、年齢及び重量：雌、１９〜２１ｇ、６〜８週齢
ブリーダー／供給元：上海ＳＬＡＣ実験動物有限公司（Ｓｈａｎｇｈａｉ  ＳＬＡＣ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ  Ａｎｉｍａｌ  Ｃｏ．  Ｌｔｄ．）
動物社及び飼育：
試験設備：  ファーマレガシー実験動物施設（ＰｈａｒｍａＬｅｇａｃｙ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓ  Ｖｉｖａｒｉｕｍ）
順応：  ７日以上
飼育部屋：  通常飼育部屋
室温：  （１９〜２６）℃
室内相対湿度：  ４０〜７０％
光周期：  蛍光灯で１２時間明（８：００〜２０：００）及び１２時間暗
動物の収納：  治療群ごとに５マウス／ケージ
餌：  自由に餌を得られる環境（照射済み、上海ＳＬＡＣ実験動物有限公司（Ｓｈａｎｇｈａｉ  ＳＬＡＣ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ  Ａｎｉｍａｌ  Ｃｏ．  Ｌｔｄ．）、中国）
水：  自由に水を得られる環境（Ｍｏｌａｎｉｍａｌ  Ｕｌｔｒａｐｕｒｅ  Ｗａｔｅｒ  Ｓｙｓｔｅｍにより濾過された都市水道水）
試薬：  
オキサゾロン：  シグマ・アルドリッチ社（米国ミズーリ州セントルイス）、カタログ番号：  Ｅ０７５３、ロット番号：  １２４Ｋ３６９０
ペントバルビタールナトリウム：  上海Ｗｅｓｔａｎｇバイオテック有限公司（Ｓｈａｎｇｈａｉ  Ｗｅｓｔａｎｇ  Ｂｉｏｔｅｃｈ  Ｃｏ．、Ｌｔｄ）（中国上海）、ロット番号：  ＷＳ２００９０５２０
イソフルラン：  Ｈｅ  Ｂｅｉ  Ｊｉｕ  Ｐａｉバイオテック有限公司（Ｈｅ  Ｂｅｉ  Ｊｉｕ  Ｐａｉ  Ｂｉｏｔｅｃｈ  Ｃｏ．、Ｌｔｄ）、カタログ番号：  Ｈ１９９８０１４１
アセトン：  シノファームケミカルリエージェント有限会社（Ｓｉｎｏｐｈａｒｍ  Ｃｈｅｍｉｃａｌ  Ｒｅａｇｅｎｔ  Ｃｏ．、Ｌｔｄ）、カタログ番号：  １００００４１８
オリーブ油：  シノファームケミカルリエージェント有限会社（Ｓｉｎｏｐｈａｒｍ  Ｃｈｅｍｉｃａｌ  Ｒｅａｇｅｎｔ  Ｃｏ．、Ｌｔｄ）、カタログ番号：  ６９０１８０２８
食塩水：  安徽ダブルクレーン製薬有限会社（ｄｏｕｂｌｅ−ｃｒａｎｅ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｃｏ．、Ｌｔｄ）、カタログ番号：Ｈ３４０２３６０９
対照薬剤：  デキサメタゾン：  シグマ・アルドリッチ社、カタログ番号：  Ｄ１７５６−１Ｇ
設備：
マイクロメーター：  ミツトヨ（Ｎｏ．０４５−０２０、０〜２５ｍｍ、０．００１ｍｍ、日本）
手順：
試薬は下記のように調製した：
オキサゾロン溶液：  オキサゾロンを１０ｍｇ／ｍＬでアセトン／オリーブ油（４：１）に溶解させた。
対照薬剤溶液：  デキサメタゾンを２．５ｍｇ／ｍＬでアセトンに溶解させた。
【０１１８】
免疫化及び攻撃
無作為に選んだ５０匹の動物を５つのグループに分けた（ｎ＝１０）。
【０１１９】
マウスを１．０％ペントバルビタールナトリウム（６０ｍｇ／ｋｇ）で麻酔し、腹部を剪毛した。アセトン／オリーブ油（４：１）中３％オキサゾロンを１５０μＬ、０日目に各マウスの腹部に塗布した。
【０１２０】
５日目に全てのマウスを、アセトン／オリーブ油（４：１）中１％オキサゾロンを２０μＬ、右耳の両側に局所的（１０μＬ／側）に塗布することで攻撃した。
【０１２１】
処理：
化合物Ａ、Ｂ及びＣ、並びに対照薬剤を、別々の投与プロトコルに従い投与した：ａ）グループ１（ビヒクル群）、食塩水をオキサゾロンによる攻撃の１時間前に経口投与した。ｂ）対照薬剤群、グループ２において、アセトン中デキサメタゾン（０．０５ｍｇ／耳）を、オキサゾロンによる攻撃の１時間後及び６時間後に、右耳の両側に局所的（２０μＬ／耳、１０μＬ／側）に塗布した。異なる用量の、３種の食塩水中被験物質を、グループ３、４及び５におけるオキサゾロンによる攻撃の１時間前に、経口投与した。
【０１２２】
測定：
全てのマウスの体重を、０日目から６日目まで、毎日記録した。
【０１２３】
耳の膨張反応を、オキサゾロンによる攻撃の前及び２４時間後に、マイクロメーターを用いて耳の厚さを測定することにより判定し、耳の厚さにおける平均値の変化（ΔＴ±標準誤差）として報告した。耳の膨張反応の抑制率を、抑制率＝［１−（試験処理に曝された感作マウスのΔＴ／ビヒクル処理に曝された感作マウスのΔＴ）］×１００として計算した。
【０１２４】
マウスを、最後の耳の厚さ測定後（オキサゾロンによる攻撃の２４時間後）に、９５％ＣＯ２で安楽死させた。
【０１２５】
各群の耳介を、安楽死後すぐに、直径１０ｍｍパンチを用いてパンチングすることにより収集し、重量を測定した。グループ１については、左耳及び右耳の両方が収集され、グループ２〜５については、右耳だけが収集された。耳サンプルは液体窒素で凍結した。
【０１２６】
図７で示されるように、化合物Ａ、Ｂ及びＣは対照と同様の抗炎症活性を有する。
【０１２７】
統計：
結果は平均値±標準誤差として示されている。分散の１元分析と続くダネットの事後検定（Ｄｕｎｎｅｔｔ’ｓ  ｐｏｓｔ  ｔｅｓｔ）を用いて、群間の差異を測定した。Ｐ＜０．０５は統計的に有意であると考えられる。
【０１２８】
実施例８：  多発性硬化症のＥＡＥモデル
ＣＳＪＬ／Ｆ１マウスにおけるＥＡＥモデルは、多発性硬化症用に確立されたモデルである。全てのマウスに脳炎惹起性の乳剤を注入（ＭＳＣＨ／ＣＦＡ、各マウスの左足蹠に０．０５ｍｌ注射）し、疾患を誘導した。１０ｍｇ／ｋｇ及び２０ｍｇ／ｋｇの化合物Ａ又は溶媒（５％ＤＭＳＯ、１０％ＰＥＧ４００、５％Ｓｏｌｕｔｏｌ  ＨＳ１５、５％トウィーン８０）を腹腔内に注射する処理は、試験の１日目から開始し、最初の９日間は１日２回投与し、その後は試験終了まで１日１回投与した。ＥＡＥの臨床兆候のスコアリングをＥＡＥ誘導の１０日後から開始し、毎日継続した。前記臨床兆候は表１に記載される評点方式に従って記録された。
【表１】
2013518810.tif 000009
【０１２９】
化合物Ａを２０ｍｇ／ｋｇで投与することにより、ＥＡＥ誘導により発現した臨床兆候は、水及びビヒクル対照のスコアの約半分まで減少した。化合物Ａを１０ｍｇ／ｋｇで投与した場合効果は観察されず、このことはこの投与計画では有効濃度に到達しなかったことを示している。テヴァ製薬産業（Ｔｅｖａ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｉｎｄｕｓｔｒｉｅｓ）により供給されるラキニモド（Ｌａｑｕｉｎｉｍｏｄ）で処理された群（一日１ｍｇ／ｋｇを経口投与）を対照群とした。
【０１３０】
実施例９：  化合物Ａ、Ｂ、Ｃ及びＤの使用
患者は乳がん患者である。治療有効量の化合物Ａ、Ｂ、Ｃ又はＤを条件に合う剤形で患者に投与される。患者は状態を改善又は回復するであろうことが期待される。
【０１３１】
本明細書を通して、種々の科学出版物及び米国特許若しくは米国特許出願公開が参照される。これら各出版物の全開示は、その全体が参照により本明細書に組み込まれる。本章又は本願の他のあらゆる部分におけるいかなる参考文献の引用又は特定も、このような参考文献が本発明の従来技術として使用可能であるとは解釈しないものとする。
【０１３２】
種々の変更がその本質的な性質から逸脱することなく行われ得ることは、本発明の主題が関係する分野の当業者に明白であろう。そのような変更全てが、添付の特許請求の範囲の範囲内で包含されることが意図される。
【図１】
2013518810.tif 000020
【図２Ａ】
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【図２Ｂ】
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【図２Ｃ】
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【図２Ｄ】
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【図２Ｅ】
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【図３】
2013518810.tif 000026
【図４】
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【図５】
2013518810.tif 000028
【図６】
2013518810.tif 000029
【図７】
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