(57)【要約】  本発明は、慢性血液透析患者において動静脈瘻及び動静脈グラフトの機能的合併症を予防するための、ヘパリンを含む局所用医薬組成物及びその使用に関する。【選択図】なし【特許請求の範囲】
【請求項１】
ヘパリンと、少なくとも１種の、ヒドロキシ脂肪酸のポリオキシアルキレンエステルとの溶液を含む、局所用医薬製剤。
【請求項２】
ヘパリンを局所適用するための医薬製剤であって、ヘパリンと、少なくとも１種の、ヒドロキシ脂肪酸のポリオキシアルキレンエステルとの溶液である、医薬製剤。
【請求項３】
前記製剤が水溶液である、請求項１又は２に記載の医薬製剤。
【請求項４】
前記水溶液が更に少なくとも１種のアルコールを含む、請求項３に記載の医薬製剤。
【請求項５】
前記アルコールが、薬学的に許容可能なアルコール、好ましくはエタノール、１−プロパノール、２−プロパノール及びこれらの混合物を含む群から選択される、請求項４に記載の医薬製剤。
【請求項６】
前記少なくとも１種のヒドロキシ脂肪酸のポリオキシアルキレンエステルが、８〜３０個の炭素原子、好ましくは１４〜２４個の炭素原子を有するヒドロキシ脂肪酸と、２００〜６０００、好ましくは４００〜１５００の分子量を有するポリオキシアルキレンとのエステルから成る群から選択される、請求項１〜５のいずれか一項に記載の医薬製剤。
【請求項７】
前記少なくとも１種のヒドロキシ脂肪酸のポリオキシアルキレンエステルが、ポリエチレングリコールと１２−ヒドロキシステアリン酸とのポリグリコールエステル（マクロゴール１５ヒドロキシステアレート）である、請求項６に記載の医薬製剤。
【請求項８】
慢性血液透析患者において動静脈瘻及び動静脈グラフトの機能的合併症を治療又は予防するための、請求項１〜７のいずれか一項に記載の医薬製剤。
【請求項９】
前記機能的合併症が、動静脈瘻及び動静脈グラフトを縮小及び／又は閉塞する狭窄につながる新生内膜過形成である、請求項８に記載の医薬製剤。
【請求項１０】
慢性血液透析患者において動静脈瘻及び動静脈グラフトの機能的合併症を治療又は予防するための局所用医薬製剤を調製するためのヘパリンの使用。
【請求項１１】
慢性血液透析患者において動静脈瘻及び動静脈グラフトの一次及び／又は二次開存性を低下させる現象を治療又は予防するための局所用医薬製剤を調製するためのヘパリンの使用。
【請求項１２】
慢性血液透析患者において動静脈瘻及び動静脈グラフトの機能的合併症を治療又は予防するための、ヘパリンを含む全身用医薬製剤と組み合わせてのヘパリンを含む局所用医薬製剤の使用。
【請求項１３】
慢性血液透析患者において動静脈瘻及び動静脈グラフトの機能的合併症を治療又は予防するための、抗血小板薬を含む全身用医薬製剤と組み合わせてのヘパリンを含む局所用医薬製剤の使用。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、慢性血液透析患者において動静脈瘻及びグラフトの機能的合併症を治療又は予防するための、ヘパリンを含む局所用医薬組成物及びその使用に関する。
【背景技術】
【０００２】
ヘパリンは、血液透析カテーテルとの関連でカテーテルの閉塞及びカテーテル周囲血栓症、急性表在性静脈炎等の合併症の両方を予防するために広く使用されている。
【０００３】
一般に、ヘパリンで前処理したカテーテルの使用が推奨されている。あるいは、ヘパリンをカテーテルに間欠的に流す及び／又は持続注入する（Ａ．Ｇ．Ｒａｎｄｏｌｐｈ  ｅｔ  ａｌ．，ＢＭＪ，３１６，９６９−９７５（１９９８））。どちらの技法であっても、常に満足のいく結果が得られるとは限らない。
【０００４】
したがって、血管内カテーテルの使用における主な懸念は依然としてこれらの補綴材料の挿入及び留置に関連した合併症のままであり、このような合併症には中心静脈の感染症及び血栓症が含まれる。このため、好ましくは、カテーテルは、一時的に血管アクセスを得るために使用される。
【０００５】
ある臨床研究（Ｖｉｌｌａｒｄｅｌｌ  Ｍ．ｅｔ  ａｌ．，Ｅｕｒ．Ｊ．Ｃｌｉｎ．Ｐｈａｒｍａｃｏｌ．，５４（１２），９１７−２１（１９９９））は、留置静脈カテーテルに続発する急性表在性静脈炎の治療に局所用ヘパリンを使用することを提案していて、局所用ヘパリンは安全で有効であると結論付けている。
【０００６】
長期的に埋め込む補綴材料を使用することなく動脈と静脈とを直接つなぐ動静脈（ａｒｔｅｒｉｏｖｅｎｏｕｓ：Ａ−Ｖ）瘻が最も良い血管アクセスであることが証明されているが、これは静脈が十分に太い患者でしか実現できない。動静脈瘻はより長期間に亘って機能し、また他のタイプのアクセス方法よりその機能性を失いにくい又は感染を起こしにくい。
【０００７】
動静脈瘻の形成が困難な場合、合成又は生物学的（自己、同種又は異種）補綴材料を使用した動静脈グラフト（Ｊ．Ａ．Ａｋｏｈ，Ｔｈｅ  Ｊｏｕｒｎａｌ  ｏｆ  Ｖａｓｃｕｌａｒ  Ａｃｃｅｓｓ，１０，１３７−１４７（２００９））を形成することもできる。
【０００８】
長期に亘る動静脈瘻又はグラフトでは、新生内膜過形成から始まって瘻孔の狭窄ひいては閉塞に続く一連の事象に関連する機能的合併症を発症する場合がある（Ｄ．Ｍ．Ｈｅｎｔｓｃｈｅｌ，Ｎｅｐｈｒｏｌｏｇｙ  Ｒｏｕｎｄｓ，Ｊａｎｕａｒｙ  ２００８，Ｖｏｌ  ６，Ｉｓｓｕｅ  １；ｗｗｗ．ｎｅｐｈｒｏｌｏｇｙｒｏｕｎｄｓ．ｏｒｇ）。
【０００９】
ここでもまた、主な目標は、一次開存性及び機能的又は二次開存性の寿命を延ばすことである（Ｈ．Ｊ．Ｔ．Ｈｕｉｊｂｒｅｇｔｓ  ｅｔ  ａｌ．，Ｃｌｉｎ．Ｊ．Ａｍ．Ｓｏｃ．Ｎｅｐｈｒｏｌ．，３，７１４−７１９（２００８）及びＬ．Ｍ．Ｄｅｍｂｅｒ  ｅｔ  ａｌ．，Ｃｌｉｎ．Ｔｒｉａｓ，２００５；２；４１３））。一次開存性の維持は、動静脈瘻又はグラフトまで少なくとも８ｃｍの近位の静脈に沿った、収縮期及び拡張期を通じて聴診器で聞こえる雑音の検出により確認する。機能的又は二次開存性の維持は、少なくとも３００ｍｌ／分の公称透析装置血液流量を得ることで確認する。
【００１０】
瘻孔の開存性（及び患者の生存率）を維持するための通常のアプローチは、アスピリン、チクロジピン（ticlodipine）、ジピリダモール、クロピドグレル等の抗血小板薬での患者の全身的処置（Ｏｓｂｏｒｎ  Ｇ，Ｅｓｃｏｆｅｔ  Ｘ，Ｄａ  Ｓｉｌｖａ  Ａ．，“Ｍｅｄｉｃａｌ  ａｄｊｕｖａｎｔ  ｔｒｅａｔｍｅｎｔ  ｔｏ  ｉｎｃｒｅａｓｅ  ｐａｔｅｎｃｙ  ｏｆ  ａｒｔｅｒｉｏｖｅｎｏｕｓ  ｆｉｓｔｕｌａｅ  ａｎｄ  ｇｒａｆｔｓ”，Ｃｏｃｈｒａｎｅ  Ｄａｔａｂａｓｅ  ｏｆ  Ｓｙｓｔｅｍａｔｉｃ  Ｒｅｖｉｅｗｓ  ２００８，Ｉｓｓｕｅ  ４）及び術中のヘパリン（Ｈ．Ｒａｖａｒｉ，ｅｔ  ａｌ．，Ａｃｔａ  Ｍｅｄｉｃａ  Ｉｒａｎｉｃａ，４６（５），３７９−３８２（２００８））である。これらの処置は効果的だが、出血の危険性が大きく上昇する。放射線照射、細胞周期阻害剤（例えば、パクリタキセル）の局所的送達、血管形成術、外科的処置等の他のプラクティスを現在評価している。
【００１１】
しかしながら、専門的な支援なくして適用可能な効果的で非侵襲的、事実上、副作用がない処置は依然として存在しない。
【００１２】
国際公開第２００５／０２７９９３号では患者の血液透析療法に関連した長期に亘る血管アクセスで起きる合併症を減らすための方法が開示され、この方法は、ａ）血液透析セッション中、血液透析時の血管アクセス部位に、血管アクセス部位での血液透析後の出血を軽減又は停止させるのに有効なある量の血管収縮薬又は血液凝固薬を含む組成物を局所的に適用し、ｂ）血液透析時の血管アクセス部位を約１〜１４分間に亘って圧迫することを含む。国際公開第２００５／０２７９９３号の開示は概して、繰り返される血管アクセスでよく起きる問題、例えば過形成、血栓症、血腫、静脈狭窄、動脈狭窄、血管閉塞、感染及び罹患率について論じたものであり、動静脈瘻又はグラフトの機能的合併症を治療又は予防するための方法は提案されていない。
【００１３】
ヘパリンナトリウムをベースとした局所製剤が、一部の欧州市場で現在入手可能である。
【００１４】
国際公開第１９９７／０３０７１４号には、血栓症、様々な原因の血腫（外傷性血腫、血球減少後の血腫（ｐｏｓｔｃｙｔｏｐｅｎｉａ  ｈｅｍａｔｏｍａ）を含む）、慢性ベネスタシア（venestasia）、広汎な血腫による変色部を治療するためのヘパリンを含むクリーム、軟膏又はゲルの形態の局所用医薬組成物が開示されている。
【００１５】
最も流通している製品は、（米国特許第５９５８３７９号に記載されるように）ゲル形態のＬｉｏｔｏｎTM及びＭｅｎａｖｅｎTM並びにリポソームスプレー形態のＶｉａｔｒｏｍｂTM及びＬｉｐｏｈｅｐTMである。
【００１６】
局所用ヘパリンは、局所微小循環を改善するその能力から、末梢血管疾患に関連した局所症状の予防及び治療に広く使用される。
【００１７】
特に、２４００ＩＵ／ｇのリポソーム化ヘパリンを含有するＬｉｐｏｈｅｐTM／ＶｉａｔｒｏｍｂTMは、表在性静脈血栓症（ｓｕｐｅｒｆｉｃｉａｌ  ｖｅｎｏｕｓ  ｔｈｒｏｍｂｏｓｉｓ：ＳＶＴ）の局所症状の緩和において皮下低分子量ヘパリンとして有効であることが判明している（Ｇｒｚｅｇｏｒｚ  Ｇｏｒｓｋｉ，ＭＤ  ｅｔ  ａｌ．，“Ｌｉｐｏｓｏｍａｌ  Ｈｅｐａｒｉｎ  Ｓｐｒａｙ：Ａ  Ｎｅｗ  Ｆｏｒｍｕｌａ  ｉｎ  Ａｄｊｕｎｃｔｉｖｅ  Ｔｒｅａｔｍｅｎｔ  ｏｆ  Ｓｕｐｅｒｆｉｃｉａｌ  Ｖｅｎｏｕｓ  Ｔｈｒｏｍｂｏｓｉｓ”，Ａｎｇｉｏｌｏｇｙ，Ｖｏｌ．５６，Ｎｏ．１，９−１７（２００５））。ＳＶＴは瘻孔／グラフトに代表される状態ほど概して重篤ではない状態であり、その病因論は完全に異なる根拠に基づく。
【００１８】
リポソーム化ヘパリン製剤には、工程制御及び工程用機器の点で幾つかの欠点がある。所望の粒径を有するヘパリンリポソームの調製は段階的に進めることを必要とし、規定の時間に亘ってホモジナイザーで撹拌し且つ粒径を調節しながらリポソームを調製し、各成分の添加後にこの作業を繰り返し、粒径が所望のサイズより大きい場合はホモジナイザーによる撹拌を継続する。得られた粒径が所望のサイズより小さい場合、大きくするのは事実上不可能なため、バッチを廃棄しなくてはならない。更に悪いことに、十分な品質等級のリン脂質はかなり高価であり、また天然由来であることから内因性の可変性を特徴とする。
【００１９】
これら全ての側面により製造が困難且つ高コストとなり、幾つかの工程内制御を必要とし、規格外のバッチがでるリスクは高く、そして不可避である。
【発明の概要】
【００２０】
出願人は、機能的合併症を予防し、また動静脈瘻及び動静脈グラフトの開存性を維持するために局所用ヘパリンを使用する着想を得た。主な機能的合併症は狭窄につながる新生内膜過形成であり、狭窄は瘻孔が閉塞するまで開存性を低下させて外科的処置又は新しい瘻孔の形成が必要になる場合がある。
【００２１】
出願人は、驚くべきことに、局所用ヘパリンを動静脈瘻領域に定期的に適用することによって、循環している血液の凝固特性に干渉することなく少なくとも抗血小板薬のそれに匹敵する有効性でもって開存性を維持でき、また動静脈瘻の狭窄及び／又は閉塞を予防できることを発見した。
【００２２】
出願人はまた、ヘパリンと、少なくとも１種の、ヒドロキシ脂肪酸のポリオキシアルキレンエステルとの溶液によって表わされる、ヘパリンを局所適用するための新しい組成物を発見した。
【００２３】
出願人は更に、本発明のヘパリンを局所適用するためのこの新しい組成物が、ゲル又はリポソーム化スプレーの形態の既知のヘパリン製剤と比較して幾つかのはっきりとした利点を示すことを発見した。
【００２４】
本発明の組成物は無色透明の溶液に見え、再分割前に容易に濾過できる。
【００２５】
本発明の組成物は調製がずっと容易である。これは製品の品質が実質的に撹拌速度に依存せず、またホモジナイザーを必要とすることなく普通の機器を使用できるからである。
【００２６】
本発明の組成物は、粒径の工程内制御を必要としない。
【００２７】
本発明の組成物で使用するヒドロキシ脂肪酸のポリオキシアルキレンエステルは低価格及び医薬品グレードで市販されていて（例えば、マクロゴール１５ヒドロキシステアレート）、また薬剤の賦形剤としての使用にあたって特別な精製及び条件を必要としない。
【００２８】
更に、治療効果は少なくとも同じであり、場合によっては利点を伴う。
【発明を実施するための形態】
【００２９】
したがって、本発明は、ヘパリンと、少なくとも１種の、ヒドロキシ脂肪酸のポリオキシアルキレンエステルとの溶液によって表わされる、ヘパリンを局所適用するための新しい医薬製剤に関する。
【００３０】
有利には、ヘパリンと、少なくとも１種の、ヒドロキシ脂肪酸のポリオキシアルキレンエステルとのこの溶液は、少なくとも１種のアルコール又はこれらの混合物である水溶液である。好ましくは、この少なくとも１種のアルコールは、薬学的に許容可能なアルコール、例えばエタノール、１−プロパノール、２−プロパノール及びこれらの混合物を含む群から選択される。好ましくは、ヘパリンと、少なくとも１種のヒドロキシ脂肪酸のポリオキシアルキレンエステルとのこの溶液は水溶液である。
【００３１】
本発明及び本明細書に添付の請求項において、用語「局所適用（ｔｏｐｉｃａｌ  ａｐｐｌｉｃａｔｉｏｎ）」は皮膚への適用を意味し、好ましくは実質的に局所的な効果を有し、本質的に全身作用を有さない。
【００３２】
本明細書で使用の用語「ヘパリン」とは、いずれのタイプの薬学的に許容可能なヘパリン、ヘパリネート又はヘパリノイドをも意味する。このため、本明細書で使用の用語「ヘパリン」には、錯化（ｃｏｍｐｌｅｘｅｄ）及び非錯化（ｕｎｃｏｍｐｌｅｘｅｄ）ヘパリン、ヘパリン塩、例えばヘパリンナトリウム、ヘパリンカリウム、ヘパリンカルシウム及びヘパリンマグネシウム、ヘパリンエステル並びにヘパリン酸（ｈｅｐａｒｉｎｉｃ  ａｃｉｄ）が含まれる。
【００３３】
このようなヘパリン化合物は、多数の商業的供給源から広く入手可能である。例えば、ヘパリンカルシウムはＣＡＬＣＩＰＡＲＩＮＥ及びＥＣＡＳＯＬＶの商標名で販売され、ヘパリンマグネシウムはＣＵＴＨＥＰＡＲＩＮＥの商標名で入手可能であり、ヘパリンナトリウムはＨＥＰＲＩＮＡＲ及びＨＥＰＳＡＬを含む多くの商標名で入手可能である。市販のヘパリンはウシの肺又はブタの腸粘膜から単離され、一般に分子量６〜３０ｋＤを有する。
【００３４】
好ましくは、少なくとも１種のヒドロキシ脂肪酸のポリオキシアルキレンエステルは、８〜３０個の炭素原子、好ましくは１４〜２４個の炭素原子を有するヒドロキシ脂肪酸と２００〜６０００、好ましくは４００〜１５００の分子量を有するポリオキシアルキレンとのエステル化から得られる。
【００３５】
有利には、ヒドロキシ脂肪酸は、ヒドロキシカプリル酸、ヒドロキシカプリン酸、ヒドロキシラウリン酸、ヒドロキシミリスチン酸、ヒドロキシパルミチン酸、ヒドロキシステアリン酸、ヒドロキシアラキジン酸、ヒドロキシベヘン酸、ヒドロキシリグノセリン酸等の飽和鎖ヒドロキシ脂肪酸及びヒドロキシミリストレイン酸、ヒドロキシパルミトレイン酸、ヒドロキシオレイン酸、ヒドロキシリノール酸、ヒドロキシリノレン酸、ヒドロキシアラキドン酸、ヒドロキシエイコサペンタエン酸、ヒドロキシエルカ酸、ヒドロキシドコサヘキサエン酸等の不飽和鎖ヒドロキシ脂肪酸を含む群から選択される。
【００３６】
特に有用なヒドロキシ脂肪酸は、ヒドロキシラウリン酸、ヒドロキシミリスチン酸、ヒドロキシパルミチン酸、ヒドロキシステアリン酸、ヒドロキシアラキジン酸を含む飽和ヒドロキシ脂肪酸の群から選択される。出願人は、飽和ヒドロキシ脂肪酸の使用が好ましいことを発見した。これは、脂肪酸鎖中の不飽和が酸化による劣化を促進して医薬製剤の有効期限を短縮する場合があるからである。特に好ましいヒドロキシ脂肪酸はヒドロキシステアリン酸である。
【００３７】
有利には、ポリオキシアルキレンは、ポリエチレングリコール２００（ＰＥＧ２００）、ポリエチレングリコール３００（ＰＥＧ３００）、ポリエチレングリコール４００（ＰＥＧ４００）、ポリエチレングリコール６００（ＰＥＧ６００）、ポリエチレングリコール６６０（ＰＥＧ６６０）、ポリエチレングリコール１０００（ＰＥＧ１０００）、ポリエチレングリコール１５００（ＰＥＧ１５００）、ポリエチレングリコール３０００（ＰＥＧ３０００）、ポリエチレングリコール３３５０（ＰＥＧ３３５０）、ポリエチレングリコール４０００（ＰＥＧ４０００）、ポリエチレングリコール６０００（ＰＥＧ６０００）及びこれらの混合物を含む群から選択される。
【００３８】
好ましい実施形態において、ポリオキシアルキレンは、ポリエチレングリコール４００（ＰＥＧ４００）、ポリエチレングリコール６００（ＰＥＧ６００）、ポリエチレングリコール６６０（ＰＥＧ６６０）、ポリエチレングリコール１０００（ＰＥＧ１０００）、ポリエチレングリコール１５００（ＰＥＧ１５００）及びこれらの混合物を含む。
【００３９】
本発明の好ましい実施形態において、少なくとも１種のヒドロキシ脂肪酸のポリオキシアルキレンエステルは、ＳｏｌｕｔｏｌTMＨＳ  １５（ポリエチレングリコール６６０ヒドロキシステアレート／ヨーロッパ薬局方名称：マクロゴール１５ヒドロキシステアレート）、ポリエチレングリコールと１２−ヒドロキシステアリン酸とのポリグリコールエステル及びこれらの混合物の群から選択される。
【００４０】
Ｓｏｌｕｔｏｌ  ＨＳ  １５は、ＢＡＳＦ社（パーシッパニー、ニュージャージー州）が製造するポリエチレングリコール６６０ヒドロキシステアレートである。遊離ポリエチレングリコール及びそのモノエステルとは別に、ジエステルも検出可能である。製造業者によると、Ｓｏｌｕｔｏｌ  ＨＳ  １５の典型的なロットは約３０％の遊離ポリエチレングリコール及び７０％のポリエチレングリコールエステルを含有する。
【００４１】
少なくとも１種のヒドロキシ脂肪酸のポリオキシアルキレンエステルの本発明の医薬製剤における濃度は好ましくは１〜２０％（ｗ／ｖ）、より好ましくは２〜１５％（ｗ／ｖ）、最も好ましくは５〜１５％（ｗ／ｖ）である。有利には、ポリオキシアルキレンヒドロキシ脂肪酸エステルの濃度は約５〜約１０％（ｗ／ｖ）である。
【００４２】
本発明の医薬製剤は水溶液である。有利には、本発明の医薬製剤は少なくとも１種のアルコールも含み得る。
【００４３】
好ましくは、この少なくとも１種のアルコールは、薬学的に許容可能なアルコール、例えばエタノール、１−プロパノール、２−プロパノール及びこれらの混合物を含む群から選択される。
【００４４】
本発明の医薬製剤におけるこの少なくとも１種のアルコールの濃度は好ましくは１〜４０％（ｗ／ｖ）、より好ましくは２〜３０％（ｗ／ｖ）、最も好ましくは５〜２５％（ｗ／ｖ）である。
【００４５】
本発明の医薬製剤のｐＨは好ましくは５〜８、より好ましくは５．５〜７．５である。有利には、本発明の医薬製剤のｐＨは６〜７である。
【００４６】
本発明の医薬製剤は更に、当該分野で一般に知られまた使用される幾つかの添加剤を含み得る。本発明の医薬製剤のこのような非本質的な添加剤は、例えば安定剤、抗酸化剤、ｐＨ調節剤、緩衝液、界面活性剤、着色剤及び／又は香料である。
【００４７】
本発明の医薬製剤は、局所適用のための剤形として通常用いられる剤形に製剤することができる。
【００４８】
有利には、有用な剤形には、様々な溶液、スプレー、フォーム剤、パップ剤、プラスター剤等が含まれる。溶液及びスプレーの形態の局所用製剤が特に好ましい。
【００４９】
本発明の医薬製剤は、慢性血液透析患者において動静脈瘻及び動静脈グラフトの機能的合併症を治療又は予防するのに有用である。
【００５０】
有利には、本発明の医薬製剤は、動静脈瘻及び動静脈グラフトを縮小及び／又は閉塞する狭窄につながる新生内膜過形成を治療又は予防するのに有用である。
【００５１】
このため、本発明の医薬製剤は、慢性血液透析患者において動静脈瘻及び動静脈グラフトの一次及び／又は二次開存性を低下させるこれらの現象を治療及び予防するのに有用である。
【００５２】
有利には、本発明の医薬製剤を、慢性血液透析患者において動静脈瘻及び動静脈グラフトの機能的合併症を治療又は予防するために抗血小板薬及び全身用ヘパリンと組み合わせて使用することができる。抗血小板薬及び／又は全身用ヘパリンと組み合わせての本発明の医薬製剤の使用は、このような抗血小板薬及び／又は全身用ヘパリンの用量の減量、ひいてはこれらの有害作用を軽減することを可能にする。
【００５３】
以下の実施例は、限定することなく本発明を更に例証するものである。
【実施例】
【００５４】
実施例１
ヘパリンリポソーム製剤の調製（２４００ＩＵ／ｍｌ）
十分な容器に水（３１５ｍｌ）及びＮＡＴ８５３９（８７ｇ）を入れた。ＮＡＴ８５３９（登録商標）（Ｐｈｏｓｐｈｏｌｉｐｉｄ  ＧｍｂＨ、ケルン、ドイツ）はエタノール（２５重量％）とＰｈｏｓｐｈｏｌｉｐｏｎ  ８０（７５重量％）との混合物であり、後者は大豆脂質抽出物であり、ホスファチジルコリン（７６重量％）及び少量のリゾホスファチジルコリン（最高６％）、セファリン（最高４％）及びホスファチジン酸を含む。
【００５５】
この混合物を、ホモジナイザで３０分間に亘って撹拌した（３０ｒｐｍ、室温）。９６％エタノール（１１１ｍｌ）を添加し、撹拌を３０分間に亘って継続した。
【００５６】
この混合物中に存在する粒子の粒径を定期的に制御し、約１５０ｎｍの所望の平均粒径に達するまで撹拌を継続した。大きな粒径に戻すのは困難であり不可能でさえあることから、所望の粒径より小さい粒子が形成されないように撹拌操作を慎重に行わなくてはならない。
【００５７】
別の十分な容器に、水（１２０ｍｌ）及びヘパリンナトリウム（１０．４ｇ、１５０ＩＵ／ｍｌ）を入れ、完全に溶解するまで撹拌した。
【００５８】
ヘパリン溶液を、撹拌しながら（水及びＮＡＴ８５３９が入った）第１容器にゆっくりと移した。撹拌を３０分間に亘って継続した。この混合物中に存在する粒子の粒径を定期的に制御し、所望の平均粒径に達するまで撹拌を継続した。
【００５９】
所望の平均粒径に達したら、３．３８ｇのリン酸二水素カリウム及び０．２６ｇの水酸化ナトリウムを含有する水溶液（２９ｍｌ）を撹拌しながら添加した（緩衝液のｐＨ：６．６）。この混合物中に存在する粒子の粒径を定期的に制御し、所望の平均粒径に達するまで撹拌を継続した。
【００６０】
所望の平均粒径に達したら水で体積を６５０ｍｌにし、ｐＨを最終的にチェックしてその値が６〜７の間にあることを確認した。
【００６１】
最終的なリポソーム溶液を３０ｍｌのボトルに注ぎ（２５ｍｌまで満たす）、１回の噴射で２００μｌを供給可能なスプレー定量ポンプで閉じた。この製剤は、商標ＶｉａｔｒｏｍｂTMとして販売されている市販のリポソーム化ヘパリン製剤の類似物である。
【００６２】
実施例２
ヘパリン溶液の調製（溶液Ａ：２４００ＩＵ／ｍｌ）
適切な容器に水（４００ｍｌ）及びヘパリンナトリウム（１０．４ｇ、１５０ＩＵ／ｍｇ）を入れた。この混合物を完全に溶解するまで撹拌し、撹拌しながらマクロゴール１５ヒドロキシステアレート（６５ｇ）を添加した。
【００６３】
完全に溶解した後、９６％エタノール（１４０ｍｌ）並びに３．３８ｇのリン酸二水素カリウム及び０．２６ｇの水酸化ナトリウムを含有する水溶液（２９ｍｌ）を撹拌しながら添加した（緩衝液のｐＨ：６．６）。水で体積を６５０ｍｌにし、ｐＨを最終的にチェックしてその値が６〜７の間にあることを確認した。
【００６４】
最終的な溶液Ａを３０ｍｌのボトルに注ぎ（２５ｍｌまで満たす）、１回の噴射で２００μｌを供給可能なスプレー定量ポンプで閉じた。
【００６５】
実施例３
ヘパリン溶液の調製（溶液Ｂ：２４００ＩＵ／ｍｌ）
エタノールの代わりに同体積のイソプロパノールを使用して製剤Ａと同じ手順を踏んだ。
【００６６】
実施例４
ヘパリン溶液の調製（溶液Ｃ：２４００ＩＵ／ｍｌ）
エタノールの代わりに同体積の水を使用して製剤Ａと同じ手順を踏んだ。
【００６７】
経時的な動静脈瘻の開存性に対する影響
透析用に動静脈瘻を形成したばかりの異なる年齢及び性別の６０人の患者を３つのグループに無作為に分けた。各グループを異なる処置、すなわちＶｉａｔｒｏｍｂTMでの局所的処置、溶液Ａでの局所的処置及び抗血小板薬での全身的処置に帰属（attribute）させた。
【００６８】
比較溶液ＶｉａｔｒｏｍｂTM及び本発明の溶液Ａを、１日２回、瘻孔領域に３回噴射して局所的に適用した。
【００６９】
抗血小板薬での処置は、実験責任者により、アスピリン、チクロジピン（ticlodipine）、ジピリダモール、クロピドグレルの中から患者の特徴に応じて選択された。このタイプのプロトコルで用いられる標準的なレジメンに従った。
【００７０】
結果を以下の表１にまとめた。
【００７１】
【表１】
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【００７２】
期間中の患者数の減少は、瘻孔の閉塞、抗血小板薬での処置による副作用等の様々な原因で治療が中断されたからである。結果は、提示した期間での処置患者総数に対する使用可能な動静脈瘻（すなわち二次開存性が維持されている）を有する患者数として表わされている。
【００７３】
この結果により抗血小板薬での治療の有効性が裏付けられたが、局所用ヘパリン製剤は開存性の維持において間違いなくより効果的であった。局所的処置は更に、いずれの有害作用も引き起こさないことから、全身的処置より良好な忍容性を示した。Ｂ及びＣ溶液は溶液Ａのものと同様の特性を示した。
【国際調査報告】
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