(57)【要約】  本発明は、ピロロ｛２，３−ｄ｝ピリミジン化合物、ヤヌスキナーゼ（ＪＡＫ）阻害剤としてのそれらの使用、この化合物を含有する医薬組成物、およびこれらの化合物を調製する方法を提供する。【特許請求の範囲】
【請求項１】
式Ｉの化合物：
【化１】
2013518882.tif 000012
または薬学的に許容できるその塩（式中、Ｒ１は、Ｈまたは−Ｃ１〜４アルキルであり、Ｒ２は、−ＯＨまたは−ＯＣＨ３によって置換されていてもよいチアジアゾール基である）。
【請求項２】
式ＩＡの化合物
【化２】
2013518882.tif 000013
または薬学的に許容できるその塩である、請求項１に記載の化合物。
【請求項２】
Ｒ１が、メチルである、請求項１に記載の化合物。
【請求項３】
Ｒ２が、１，３，４−チアジアゾール−２−イルである、請求項１に記載の化合物。
【請求項４】
Ｒ２が、３−メトキシ−１，２，４−チアジアゾール−５−イルである、請求項１に記載の化合物。
【請求項５】
（３Ｒ，４Ｒ）−４−メチル−３−［メチル（７Ｈ−ピロロ［２，３−ｄ］ピリミジン−４−イル）アミノ］−Ｎ−（１，３，４−チアジアゾール−２−イル）ピペリジン−１−カルボキサミドである、請求項１に記載の化合物。
【請求項６】
（３Ｒ，４Ｒ）−Ｎ−（３−メトキシ−１，２，４−チアジアゾール−５−イル）−４−メチル−３−［メチル（７Ｈ−ピロロ［２，３−ｄ］ピリミジン−４−イル）アミノ］ピペリジン−１−カルボキサミドである、請求項１に記載の化合物。
【請求項７】
請求項１に記載の化合物、または薬学的に許容できるその塩、および薬学的に許容できる担体を含む医薬組成物。
【請求項８】
哺乳動物におけるアレルギー反応、アレルギー性皮膚炎、アトピー性皮膚炎、湿疹、またはそう痒症を治療する方法であって、必要とする哺乳動物に、治療有効量の請求項１に記載の化合物を投与するステップを含む方法。
【請求項９】
前記治療有効量が、０．０１ｍｇ／ｋｇ体重／日〜１００ｍｇ／ｋｇ体重／日である、請求項８に記載の方法。
【請求項１０】
前記治療有効量が、０．１ｍｇ／ｋｇ体重／日〜１０ｍｇ／ｋｇ体重／日である、請求項８に記載の方法。
【請求項１１】
前記治療有効量が、０．２ｍｇ／ｋｇ体重／日〜１．５ｍｇ／ｋｇ体重／日である、請求項８に記載の方法。
【請求項１２】
前記哺乳動物が、愛玩動物を含む、請求項８に記載の方法。
【請求項１３】
前記愛玩動物が、イヌである、請求項１２に記載の方法。
【請求項１４】
前記哺乳動物が、家畜を含む、請求項８に記載の方法。
【請求項１５】
請求項１に記載の化合物が、経口、非経口、または局所的に投与される、請求項８に記載の方法。
【請求項１６】
哺乳動物における神経変性疾患、角結膜炎、慢性呼吸器疾患、自己免疫疾患、炎症性腸疾患、新形成、および関節炎状態を治療する方法であって、必要とする哺乳動物に、治療有効量の請求項１に記載の化合物を投与するステップを含む方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本明細書には、７Ｈ−ピロロ［２，３−ｄ］ピリミジン−４−イル）アミノ］−Ｎ−ピペリジン−１−カルボキサミド誘導体、それらの類似体、ヤヌスキナーゼ（ＪＡＫ）阻害剤としてのそれらの使用、これらの化合物を含有する医薬組成物、およびこれらの化合物を調製する方法を記載している。
【背景技術】
【０００２】
タンパク質キナーゼは、タンパク質中の特定の残基のリン酸化を触媒する酵素のファミリーであり、チロシンおよびセリン／スレオニンキナーゼに大きく分類される。突然変異、過剰発現、または不適当な調節、調節不全もしくは調節解除、ならびに増殖因子またはサイトカインの過剰もしくは過少産生から生じる不適当なキナーゼ活性は、がん、心血管疾患、アレルギー、喘息および他の呼吸器疾患、自己免疫疾患、炎症性疾患、骨疾患、代謝障害、ならびにアルツハイマー病などの神経および神経変性障害を含むが、それらに限らない多くの疾患に関与している。不適当なキナーゼ活性は、前述のおよび関係する疾患に関与している細胞増殖、細胞分化、生存、アポトーシス、有糸分裂誘発、細胞周期制御、および細胞運動と関係する種々の生物学的細胞応答を引き起こす。
【０００３】
したがって、タンパク質キナーゼは、治療介入の標的としての酵素の重要なクラスとして浮上している。特に、細胞性タンパク質チロシンキナーゼのＪＡＫファミリー（ＪＡＫ−１、ＪＡＫ−２、ＪＡＫ−３、およびＴｙｋ−２）は、サイトカインシグナル伝達において中心的な役割を果たす（Ｋｉｓｓｅｌｅｖａら、Ｇｅｎｅ、２００２、２８５、１；Ｙａｍａｏｋａら、Ｇｅｎｏｍｅ  Ｂｉｏｌｏｇｙ、２００４、５、２５３）。それらの受容体と結合すると、サイトカインはＪＡＫを活性化し、ＪＡＫは次いで、サイトカイン受容体をリン酸化し、それによって、シグナル伝達分子、特に、最終的に遺伝子発現をもたらすシグナル伝達兼転写活性化因子（ＳＴＡＴ）ファミリーのメンバーのためのドッキング部位が形成される。多くのサイトカインは、ＪＡＫファミリーを活性化することが知られている。
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００４】
したがって、ＪＡＫ−１、ＪＡＫ−２、ＪＡＫ−３、および／またはＴｙｋ−２を含むＪＡＫ酵素を有効に阻害する代替化合物の必要性が依然としてある。
【課題を解決するための手段】
【０００５】
本発明は、式Ｉの化合物
【０００６】
【化１】
2013518882.tif 000002
または薬学的に許容できるその塩（式中、Ｒ１は、Ｈまたは−Ｃ１〜４アルキルであり、Ｒ２は、−ＯＨまたは−ＯＣＨ３で置換されていてもよいチアジアゾール基である）を提供する。
【０００７】
特に、Ｒ１は、メチルである。
【０００８】
特に、Ｒ２は、１，３，４−チアジアゾール−２−イルである。
【０００９】
特に、Ｒ２は、３−メトキシ−１，２，４−チアジアゾール−５−イルである。
【００１０】
別の一態様では、本発明はまた、
薬学的に許容できる担体および式Ｉの化合物を含む医薬組成物、
必要とする哺乳動物に、治療有効量の式Ｉの化合物または薬学的に許容できるその塩を投与することによって、臓器移植拒絶反応、狼瘡、多発性硬化症、関節リウマチ、乾癬、がん、骨関節炎、および糖尿病から選択される障害または状態を制御または治療する方法、
必要とする哺乳動物に、治療有効量の式Ｉの化合物または薬学的に許容できるその塩を投与することによって、糖尿病、がん、自己免疫性甲状腺障害、潰瘍性大腸炎、クローン病、ドライアイ、アルツハイマー病、白血病、および免疫抑制または免疫調節が望ましいであろう他の適応症から選択される障害または状態を制御または治療する方法、
必要とする哺乳動物に、治療有効量の式Ｉの化合物または薬学的に許容できるその塩を投与することによって、哺乳動物における、アレルギー性皮膚炎、湿疹、アトピー性皮膚炎、そう痒症および他のそう痒性状態を含むアレルギー反応ならびに腸疾患などの炎症性疾患から選択される障害または状態を制御または治療する方法、
必要とする哺乳動物に、治療有効量の式Ｉの化合物または薬学的に許容できるその塩を投与することによって、慢性または難治性喘息、遅発型喘息、気道過敏症、気管支炎、気管支喘息、アレルギー性喘息、内因性喘息、外因性喘息、塵埃喘息、再発性気道閉塞、および慢性閉塞性肺疾患を含む喘息および他の閉塞性気道疾患から選択される障害または状態を制御または治療する方法、
治療有効量の式Ｉの化合物または薬学的に許容できるその塩を必要とする哺乳動物に投与することによって、タンパク質チロシンキナーゼ、またはＪＡＫ−１、ＪＡＫ−２、ＪＡＫ−３、および／もしくはＴｙｋ−２を阻害する方法、ならびに
本発明の化合物を調製する方法を提供する。
【発明を実施するための形態】
【００１１】
上記化合物に関して、ならびに本出願および特許請求の範囲の全体にわたって、下記の用語は、以下に定義した意味を有する。
【００１２】
「哺乳動物」という用語は、ヒトまたは家畜および愛玩動物を含む動物を指す。「愛玩動物」（単数または複数）という語句は、ペットとして飼われている動物を指す。愛玩動物の例には、ネコ、イヌ、およびウマがある。「家畜」という用語は、食物もしくは繊維などの生産物を作るため、またはその労働のために農業環境で飼育または育成した動物を指す。いくつかの実施形態では、家畜は、哺乳動物、例えば、ヒトによる摂取に適している。家畜動物の例には、ウシ、ヤギ、ウマ、ブタ、ラムを含むヒツジ、およびウサギなどの哺乳動物、ならびにニワトリ、カモ、およびシチメンチョウなどの鳥がある。
【００１３】
疾患の「制御すること」、「治療すること」または「治療」という用語には、（１）疾患を予防すること、すなわち、疾患にさらされているもしくはその素因を有する可能性があるがその疾患の症状／徴候をまだ経験もしくは示していない哺乳動物において疾患の臨床症状もしくは徴候を発生させないようにすること、（２）疾患を阻害すること、すなわち、疾患もしくはその臨床症状／徴候の発生を阻止もしくは低減させること、または（３）疾患を軽減させること、すなわち、疾患もしくはその臨床症状／徴候を後退させることが含まれる。
【００１４】
「治療有効量」という用語は、疾患を治療するために哺乳動物に投与したとき、その疾患に対してこうした治療を実現するのに十分な化合物の量を意味する。「治療有効量」は、化合物、疾患、およびその重症度、ならびに治療すべき哺乳動物の年齢、体重などに応じて変わり得る。
【００１５】
「薬学的に許容できる」という用語、哺乳動物、愛玩動物、または家畜動物での使用に適していることを意味する。
【００１６】
様々な炭化水素含有部分の炭素原子含有量は、その部分の炭素原子の最小数および最大数を指す接頭辞によって示されており、すなわち、接頭辞Ｃｉ〜ｊは、整数「ｉ」〜整数「ｊ」個（両端を含む）の炭素原子の部分を示す。したがって、例えば、Ｃ１〜４アルキルは、１〜４個（両端を含む）の炭素原子のアルキルを指す。
【００１７】
アルキルという用語は、直鎖状、分岐状、および環状の飽和一価炭化水素基を指すが、「プロピル」などの個々の基に対する言及は、直鎖基のみを包含し、「イソプロピル」などの分岐鎖異性体またはシクロプロピルメチルもしくはシクロペンチルなどの環状異性体は明確に言及される。
【００１８】
同じ分子式を有するが、それらの原子の結合の性質もしくは順序、またはそれらの原子の空間的な配置が異なる化合物は、「異性体」と呼ばれている。それらの原子の空間的な配置が異なる異性体は、「立体異性体」と呼ばれる。式Ｉの化合物がｃｉｓ−およびｔｒａｎｓ−アキラルジアステレオマーとして存在できることは、当業者なら理解されよう。
【００１９】
本明細書に記載の化合物のすべての異性体（例えば、ｃｉｓ−、ｔｒａｎｓ−、またはジアステレオマー）単独ならびに任意の混合物が、記載の化合物の範囲内に含まれている。鏡像異性体、ジアステレオマー、ｃｉｓ、ｔｒａｎｓ、ｓｙｎ、ａｎｔｉ、溶媒和物（水和物を含む）、互変異性体、およびそれらの混合物を含むこれらの形態すべてが記載の化合物に含まれている。
【００２０】
特に、本発明は、式ＩＡの化合物
【００２１】
【化２】
2013518882.tif 000003
または薬学的に許容できるその塩を提供する。
【００２２】
特に、Ｒ１は、メチルである。
【００２３】
特に、Ｒ２は、１，３，４−チアジアゾール−２−イル、または１，２，４−チアジアゾール−５−イルである。
【００２４】
特に、Ｒ２は、３−メトキシ−１，２，４−チアジアゾール−５−イルである。
【００２５】
特に、式ＩＡの化合物は（３Ｒ，４Ｒ）−４−メチル−３−［メチル（７Ｈ−ピロロ［２，３−ｄ］ピリミジン−４−イル）アミノ］−Ｎ−（１，３，４−チアジアゾール−２−イル）ピペリジン−１−カルボキサミド、または（３Ｒ，４Ｒ）−Ｎ−（３−メトキシ−１，２，４−チアジアゾール−５−イル）−４−メチル−３−［メチル（７Ｈ−ピロロ［２，３−ｄ］ピリミジン−４−イル）アミノ］ピペリジン−１−カルボキサミドである。
【００２６】
立体異性体混合物、例えばジアステレオマーの混合物は、適した分離法によって既知の様式で、それらの対応する異性体に分離することができる。ジアステレオマー混合物は、例えば、分別結晶化、クロマトグラフィー、溶媒分配、および類似の手順によってそれらの個々のジアステレオマーに分離することができる。この分離は、出発化合物のうちの１つのレベルで、または式Ｉの化合物自体においてのいずれかで行うことができる。鏡像異性体は、ジアステレオマー塩の形成によって、例えば、鏡像異性的に純粋なキラル酸との塩形成によって、またはクロマトグラフィー、例えば、キラル配位子を有するクロマトグラフィー基材を使用するＨＰＬＣによって、分離することができる。
【００２７】
投与経路
哺乳動物（すなわち、ヒトおよび動物）における障害を治療するための治療的使用では、本発明の化合物またはその医薬組成物は、経口、非経口、局所、経直腸、経粘膜、または経腸的に投与することができる。非経口投与には、全身作用を生じさせる間接注入または罹患部への直接注入が含まれる。局所投与には、皮膚または局所適用によって容易に到達できる臓器、例えば、眼または耳の治療が含まれる。これにはまた、全身作用を生じさせる経皮送達も含まれる。直腸投与には、坐薬の形態が含まれる。好ましい投与経路は、経口および非経口である。
【００２８】
医薬用塩
式Ｉの化合物は、その元の形態でまたは塩として使用することができる。安定な無毒の酸または塩基の塩の形成が望ましい場合、薬学的に許容できる塩としての化合物の投与が適切である可能性がある。式Ｉの化合物の薬学的に許容できる塩には、酢酸塩、アスコルビン酸塩、アスパラギン酸塩、安息香酸塩、ベシル酸塩、重炭酸塩／炭酸塩、重硫酸塩／硫酸塩、ホウ酸塩、カンシル酸塩、クエン酸塩、エジシル酸塩、エトグルタル酸塩、エシル酸塩、ギ酸塩、フマル酸塩、グルセプト酸塩、グルコン酸塩、グルクロン酸塩、グリセロリン酸塩、ヘキサフルオロリン酸塩、ヒベンズ酸塩、塩酸塩／塩化物、臭化水素酸塩／臭化物、ヨウ化水素酸塩／ヨウ化物、イセチオン酸塩、乳酸塩、リンゴ酸塩、マレイン酸塩、マロン酸塩、メシル酸塩、メチル硫酸塩、ナフチル酸塩、２−ナプシル酸塩、ニコチン酸塩、硝酸塩、オロチン酸塩、シュウ酸塩、パルミチン酸塩、パモ酸塩、リン酸塩／リン酸水素／リン酸二水素、サッカリン酸塩、ステアリン酸塩、コハク酸塩、酒石酸塩、トシル酸塩、およびトリフルオロ酢酸塩がある。
【００２９】
組成物／製剤
本発明の医薬組成物は、当技術分野で周知のプロセスによって、例えば、通常の混合、溶解、顆粒化、糖衣錠形成、研和、乳化、カプセル化、封入、凍結乾燥プロセス、または噴霧乾燥によって製造することができる。
【００３０】
本発明に従って使用する医薬組成物は、活性化合物を薬学的に使用することができる調製物へ加工するのを容易にする添加剤および佐剤を含む１つまたは複数の薬学的に許容できる担体を使用して、従来のように製剤化することができる。適切な製剤は、選択する投与経路に依存する。薬学的に許容できる添加剤および担体は、一般に当業者に既知であり、したがって本発明に含まれる。こうした添加剤および担体は、例えば、「Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ’ｓ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｓｃｉｅｎｃｅｓ」Ｍａｃｋ  Ｐｕｂ．Ｃｏ．、Ｎｅｗ  Ｊｅｒｓｅｙ（１９９１）に記載されている。
【００３１】
本発明の製剤は、短時間作用型、速放型、長時間作用型、および持続放出型になるように設計することができる。したがって、医薬製剤はまた、制御放出または徐放用に製剤化することができる。
【００３２】
投与量
本発明での使用に適した医薬組成物には、活性成分が意図される目的、すなわち、障害または疾患の制御または治療を達成するのに十分な量で含有されている組成物が含まれる。より詳細には、治療有効量は、疾患の症状／徴候の予防、軽減、もしくは改善、または治療対象の延命に有効な化合物の量を意味する。
【００３３】
医薬組成物およびその単位剤形における本発明の化合物である活性要素の量は、投与の様式、特定の化合物の効力、および所望の濃度に応じて広く変化させてもよくまたは調整してもよい。治療有効量の決定は、当業者の能力の範囲内に十分にある。一般に、活性要素の量は、組成物の０．０１重量％から９９重量％の間の範囲である。
【００３４】
一般に、活性要素の投与量の治療有効量は、約０．０１〜約１００ｍｇ／ｋｇ体重／日、好ましくは約０．１〜約１０ｍｇ／ｋｇ体重／日、より好ましくは約０．２〜３ｍｇ／ｋｇ体重／日、さらにより好ましくは約０．２〜１．５ｍｇ／ｋｇ体重／日の範囲である。投与量は、各対象の要件および治療している障害または疾患の重症度に応じて異なり得ることを理解されたい。
【００３５】
所望の用量は、好都合には、単一用量で、または適切な間隔で投与する分割用量、例えば、１日当たり２、３、４回、もしくはそれ以上の部分用量として与えることができる。部分用量自体をさらに、例えば、注入器からの複数回吸入または目に複数の液滴を適用することによってなど、大まかに間隔を置いた何回かの個別の投与に分けることができる。
【００３６】
また、投与する初回投与量は、所望の血漿濃度を速やかに達成するために、上記の上限レベルを超えて増加させてもよいことを理解されたい。一方、初回投与量は、最適量よりも少なくてもよく、１日の投与量は、特定の状況に応じて治療の過程において次第に増加させてもよい。必要に応じて、１日の用量を複数回の投与用量、例えば１日当たり２〜４回に分けることもできる。
【００３７】
医学的および獣医学的使用
本発明の化合物は、ヤヌスキナーゼ−１（ＪＡＫ−１）、ヤヌスキナーゼ−２（ＪＡＫ−２）、およびヤヌスキナーゼ−３（ＪＡＫ−３）に対して効能があるヤヌスキナーゼ阻害剤（ＪＡＫ−ｉ）である。したがって、これらは、臓器移植、狼瘡、多発性硬化症、関節リウマチ、乾癬、Ｉ型糖尿病および糖尿病からの合併症、がん、喘息、アトピー性皮膚炎、自己免疫性甲状腺障害、潰瘍性大腸炎、クローン病、アルツハイマー病、白血病、骨関節炎、真性赤血球増加症（ＰＶ）および本態性血小板血症（ＥＴ）などの骨髄増殖性疾患、そう痒症の制御、慢性呼吸器疾患、ならびに免疫抑制／免疫調節が望ましいであろう他の適応症のための治療剤として有用である。
【００３８】
さらに、動物におけるアトピー性皮膚炎を制御する安全で効果的な薬剤が実質的に必要とされている。動物におけるアトピー性皮膚炎の治療に関する市場は、現在、動物、特にイヌなどの愛玩動物において苦痛および望ましくない副作用を引き起こすコルチコステロイドに独占されている。抗ヒスタミン剤も使用されているが、有効性が不十分である。シクロスポリンのイヌ用製剤（ＡＴＯＰＩＣＡ（商標））は、現在、アトピー性皮膚炎用に販売されているが、高価であり、効能が現れるのが遅い。さらに、ＡＴＯＰＩＣＡ（商標）については、ＧＩ耐性問題がある。本発明の化合物は、ＪＡＫ−１およびＪＡＫ−３に対して効能があるＪＡＫ阻害剤である。これらの化合物は、ステロイド使用の代替になり、アトピー性皮膚炎において持続するか、またはノミアレルギー性皮膚炎におけるノミなどのアレルゲンもしくは原因物質の除去後にゆっくり後退する慢性そう痒症および炎症の解消をもたらすであろう。
【００３９】
本発明の化合物は、薬学的に許容できる形態で単独で、または哺乳動物の免疫系を調節する１つもしくは複数のさらなる薬剤または抗炎症剤と組み合わせてのいずれかで投与することができる。これらの薬剤には、シクロスポリンＡ（例えば、Ｓａｎｄｉｍｍｕｎｅ（登録商標）またはＮｅｏｒａｌ（登録商標）、ラパマイシン、ＦＫ−５０６（タクロリムス）、レフルノミド、デオキシスパガリン、ミコフェノール酸塩（例えば、Ｃｅｌｌｃｅｐｔ（登録商標）、アザチオプリン（例えば、Ｉｍｕｒａｎ（登録商標））、ダクリズマブ（例えば、Ｚｅｎａｐａｘ（登録商標））、ＯＫＴ３（例えば、Ｏｒｔｈｏｃｏｌｏｎｅ（登録商標））、ＡｔＧａｍ、アスピリン、アセトアミノフェン（ａｃｃｔａｍｉｎｏｐｈｅｎ）、イブプロフェン、ナプロキセン、ピロキシカム、および抗炎症性ステロイド（例えば、プレドニゾロンまたはデキサメタゾン）があるが、それらに限らない。これらの薬剤は、同じまたは別個の剤形の一部として、同じまたは異なる投与経路によって、同じまたは異なる投与スケジュールで、当業者に既知の標準的薬務に従って投与することができる。
【００４０】
一実施形態では、本発明は、ヒトまたはヒト以外の哺乳動物などの対象における、ＪＡＫに関連した疾患、状態、または障害を治療または予防する方法であって、有効量の１つまたは複数の本明細書に記載の化合物を対象に投与するステップを含む方法を提供する。ＪＡＫ関連疾患、状態、または障害は、ＪＡＫ−１、ＪＡＫ−２、ＪＡＫ−３、および／またはＴｙｋ−２と関係している可能性がある。治療することができる適した対象には、イヌ、ネコ、ウマなどの家畜動物または野生動物、愛玩動物；雌ウシおよび他の反芻動物、ブタ、家禽、ウサギなどを含む家畜；霊長類、例えば、アカゲザルおよびカニクイザル（カニクイ（ｃｒａｂ−ｅａｔｉｎｇ）ザルまたはオナガザルとしても知られている）、マーモセット、タマリン、チンパンジー、マカクなどのサル；ならびにラット、マウス、アレチネズミ、モルモットなどのげっ歯動物がある。一実施形態では、化合物は、薬学的に許容できる形態で、場合により薬学的に許容できる担体で投与する。
【００４１】
ＪＡＫ／ＳＴＡＴシグナル伝達は、アレルギー、喘息、移植（同種移植）拒絶反応などの自己免疫疾患、関節リウマチ、筋萎縮性側索硬化症、および多発性硬化症など多くの異常免疫応答の媒介、ならびに白血病やリンパ腫などの固形および血液悪性疾患に関与している。ＪＡＫ／ＳＴＡＴ経路の薬学的介入の概説については、Ｆｒａｎｋ、（１９９９）、Ｍｏｌ．Ｍｅｄ．５：４３２：４５６およびＳｅｉｄｅｌら、（２０００）、Ｏｎｃｏｇｅｎｅ  １９：２６４５〜２６５６を参照されたい。
【００４２】
ＪＡＫ−３は特に、種々の生物学的プロセスに関与している。例えば、ＩＬ−４およびＩＬ−９によって誘導されるマウス肥満細胞の増殖および生存は、ＪＡＫ−３およびγ鎖シグナル伝達に依存していることが示されている。Ｓｕｚｕｋｉら、（２０００）、Ｂｌｏｏｄ  ９６：２１７２〜２１８０。ＪＡＫ−３はまた、ＩｇＥ受容体媒介肥満細胞脱顆粒応答に重大な役割を果たし（Ｍａｌａｖｉｙａら、（１９９９）、Ｂｉｏｃｈｅｍ．Ｂｉｏｐｈｙｓ．Ｒｅｓ．Ｃｏｍｍｕｎ．２５７：８０７〜８１３）、ＪＡＫ−３キナーゼの阻害は、アナフィラキシーを含むＩ型過敏症反応を予防することが示されている（Ｍａｌａｖｉｙａら、（１９９９）、Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．２７４：２７０２８〜２７０３８）。ＪＡＫ−３阻害はまた、同種移植拒絶反応に対して免疫抑制をもたらすことが示されている（Ｋｉｒｋｅｎ、（２００１）、Ｔｒａｎｓｐｌ．Ｐｒｏｃ．３３：３２６８〜３２７０）。ＪＡＫ−３キナーゼはまた、関節リウマチの初期および後期（Ｍｕｌｌｅｒ−Ｌａｄｎｅｒら、（２０００）、Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．１６４：３８９４〜３９０１）；家族性筋萎縮性側索硬化症（Ｔｒｉｅｕら、（２０００）、Ｂｉｏｃｈｅｍ  Ｂｉｏｐｈｙｓ．Ｒｅｓ．Ｃｏｍｍｕｎ．２６７：２２〜２５）；白血病（Ｓｕｄｂｅｃｋら、（１９９９）、Ｃｌｉｎ．Ｃａｎｃｅｒ  Ｒｅｓ．５：１５６９〜１５８２）；Ｔ細胞リンパ腫の一形態である菌状息肉症（Ｎｉｅｌｓｅｎら、（１９９７）、Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ  ９４：６７６４〜６７６９）；および異常細胞増殖（Ｙｕら、（１９９７）、Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．１５９：５２０６〜５２１０；Ｃａｔｌｅｔｔ−Ｆａｌｃｏｎｅら、（１９９９）、Ｉｍｍｕｎｉｔｙ  １０：１０５〜１１５）に関わる機序に関与している。
【００４３】
ＪＡＫ−１およびＪＡＫ−３を含むＪＡＫキナーゼは、最もよく見られる形態の小児がんである急性リンパ芽球性白血病に罹っている小児由来の原発性白血病細胞で大量に発現されており、研究は、いくつかの細胞におけるＳＴＡＴ活性化とアポトーシスを調節するシグナルとを関連付けている（Ｄｅｍｏｕｌｉｎら、（１９９６）、Ｍｏｌ．Ｃｅｌｌ．Ｂｉｏｌ．１６：４７１０〜６；Ｊｕｒｌａｎｄｅｒら、（１９９７）、Ｂｌｏｏｄ  ８９：４１４６〜５２；Ｋａｎｅｋｏら、（１９９７）、Ｃｌｉｎ．Ｅｘｐ．Ｉｍｍｕｎ．１０９：１８５〜１９３；およびＮａｋａｍｕｒａら、（１９９６）、Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．２７１：１９４８３〜８）。それらはまた、リンパ球の分化、機能および生存に重要であることが知られている。ＪＡＫ−３は、特に、リンパ球、マクロファージ、および肥満細胞の機能に不可欠な役割を果たしている。このＪＡＫキナーゼの重要性を考慮すると、ＪＡＫ−１およびＪＡＫ−３に対して選択的なものを含むＪＡＫ経路を調節する化合物は、リンパ球、マクロファージ、または肥満細胞の機能が関わる疾患または状態を治療するのに有用であり得る（Ｋｕｄｌａｃｚら、（２００４）Ａｍ．Ｊ．Ｔｒａｎｓｐｌａｎｔ  ４：５１〜５７；Ｃｈａｎｇｅｌｉａｎ（２００３）Ｓｃｉｅｎｃｅ  ３０２：８７５〜８７８）。
【００４４】
ＪＡＫ経路の標的化またはＪＡＫキナーゼ、特にＪＡＫ−１およびＪＡＫ−３の調節が治療的に有用であると企図される状態には、関節炎、喘息、自己免疫疾患、がんまたは腫瘍、糖尿病、いくつかの眼の疾患、障害、または状態、炎症、腸管の炎症、アレルギー、または状態、神経変性疾患、乾癬、移植拒絶反応、およびウイルス感染症がある。ＪＡＫ−１およびＪＡＫ−３の阻害が有益であり得る状態を、以下により詳細に論じる。
【００４５】
したがって、式Ｉの化合物またはその薬学的に許容できる塩および医薬組成物は、
関節リウマチ、若年性関節炎、および乾癬性関節炎を含む関節炎；
慢性または難治性喘息、遅発型喘息、気道過敏症、気管支炎、気管支喘息、アレルギー性喘息、内因性喘息、外因性喘息、塵埃喘息、再発性気道閉塞、および慢性閉塞性肺疾患を含む喘息および他の閉塞性気道疾患；
単一臓器または単一細胞型の自己免疫障害に指定されているもの、例えば、橋本甲状腺炎、自己免疫性溶血性貧血、悪性貧血の自己免疫性萎縮性胃炎、自己免疫性脳脊髄炎、自己免疫性精巣炎、グッドパスチャー病、自己免疫性血小板減少症、交感性眼炎、重症筋無力症、グレーブス病、原発性胆汁性肝硬変、慢性活動性肝炎、潰瘍性大腸炎、および膜性糸球体症、全身性の自己免疫障害を伴うと指定されているもの、例えば、全身性エリテマトーデス、関節リウマチ、シェーグレン症候群、ライター症候群、多発性筋炎−皮膚筋炎、全身性硬化症、結節性多発性動脈炎、多発性硬化症、および水疱性類天疱瘡を含む自己免疫疾患または障害、ならびにコーガン症候群、強直性脊椎炎、ウェゲナー肉芽腫症、自己免疫性脱毛症、Ｉ型または若年型糖尿病、および甲状腺炎を含むＯ細胞（体液）に基づき得るまたはＴ細胞に基づき得るさらなる自己免疫疾患；
消化管／胃腸管がん、結腸がん、肝臓がん、肥満細胞腫瘍および扁平上皮癌を含む皮膚がん、乳房がんおよび乳がん、卵巣がん、前立腺がん、リンパ腫、急性骨髄性白血病および慢性骨髄性白血病を含む白血病、腎臓がん、肺がん、筋肉腫、骨肉腫、膀胱がん、脳腫瘍、口腔黒色腫および転移性黒色腫を含む黒色腫、カポジ肉腫、多発性骨髄腫を含む骨髄腫、骨髄増殖性疾患、増殖性糖尿病性網膜症、および固形腫瘍を含む血管形成関連障害を含むがんまたは腫瘍；
Ｉ型糖尿病および糖尿病の合併症を含む糖尿病；
眼の自己免疫疾患、角結膜炎、春季結膜炎、ベーチェット病に関連したブドウ膜炎および水晶体原性ブドウ膜炎を含むブドウ膜炎、角膜炎、ヘルペス性角膜炎、円錐角膜炎、角膜上皮ジストロフィー、角膜白色混濁、眼天疱瘡、モーレン潰瘍、強膜炎、グレーブス眼症、フォークト−小柳−原田症候群、乾性角結膜炎（ドライアイ）、フリクテン、虹彩毛様体炎、サルコイドーシス、内分泌性眼障害、交感性眼炎、アレルギー性結膜炎、および眼内血管新生を含む眼疾患、障害、または状態；
クローン病および／または潰瘍性大腸炎、炎症性腸疾患、小児脂肪便症、直腸炎、好酸球性胃腸炎、および肥満細胞症を含む腸管の炎症、アレルギー、または状態；
運動ニューロン疾患、アルツハイマー病、パーキンソン病、筋萎縮性側索硬化症、ハンチントン病、脳虚血を含む神経変性疾患、または外傷、ストライク、グルタミン酸神経毒性、もしくは低酸素によって引き起こされる神経変性疾患；脳卒中での虚血性／再灌流傷害、心筋虚血、腎虚血、心臓発作、心肥大、アテローム性動脈硬化および動脈硬化症、臓器低酸素症、および血小板凝集；
アトピー性皮膚炎、湿疹、乾癬、強皮症、そう痒症、および他のそう痒性状態を含む皮膚疾患、状態、または障害；
ウマのアレルギー性疾患、例えばウマにおける咬傷過敏症、夏季湿疹、および皮膚掻痒などを含む哺乳動物におけるアレルギー性疾患を含むアレルギー反応；ならびに
ランゲルハンス島移植拒絶反応、骨髄移植拒絶反応、移植片対宿主疾患、骨髄、軟骨、角膜、心臓、椎間板、小島、腎臓、肢、肝臓、肺、筋肉、筋芽細胞、神経、膵臓、皮膚、小腸、または気管、および異種移植などの臓器および細胞移植拒絶反応を含む移植拒絶反応などの様々な状態または疾患の治療に使用することができる。
【００４６】
別の一実施形態は、ＪＡＫ−１、ＪＡＫ−２、ＪＡＫ−３、および／またはＴｙｋ−２を含むＪＡＫ酵素を阻害する方法であって、ＪＡＫ酵素を非治療量または治療有効量のいずれかの本発明の化合物の１つまたは複数と接触させるステップを含む方法を提供する。こうした方法は、ｉｎ  ｖｉｖｏまたはｉｎ  ｖｉｔｒｏで行うことができる。ｉｎ  ｖｉｔｒｏ接触は、種々の量または濃度の選択された酵素に対する１つまたは複数の化合物の効能を決定するために、スクリーニングアッセイを伴うことができる。治療有効量の１つまたは複数の化合物とのｉｎ  ｖｉｖｏ接触は、接触が行われる動物における記載された疾患、障害、もしくは状態の治療、または臓器移植拒絶反応の予防を伴うことができる。ＪＡＫ酵素および／または宿主動物に対する１つまたは複数の化合物の効果も、決定または測定することができる。ＪＡＫ活性を決定する方法には、実施例に記載のもの、ならびにＷＯ９９／６５９０８、ＷＯ９９／６５９０９、ＷＯ０１／４２２４６、ＷＯ０２／００６６１、ＷＯ０２／０９６９０９、ＷＯ２００４／０４６１１２、またはＷＯ２００７／０１２９５３に開示されているものがある。
【００４７】
次のスキームは、本発明の化合物の一般的な合成手順を例示している。すべての出発材料は、これらのスキームに記載されている手順によって、または当業者に周知の手順によって調製する。
【００４８】
【化３】
2013518882.tif 000004
【００４９】
感受性の官能基（Ｐｇ）は、本発明の化合物の合成中に保護および脱保護する必要がある場合があることが、当業者には明らかであろう。これは、従来の方法によって、例えばＴＷ  ＧｒｅｅｎｅおよびＰＧＭ  Ｗｕｔｓによる「Ｐｒｏｔｅｃｔｉｖｅ  Ｇｒｏｕｐｓ  ｉｎ  Ｏｒｇａｎｉｃ  Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ」、Ｊｏｈｎ  Ｗｉｌｅｙ  ＆  Ｓｏｎｓ  Ｉｎｃ（１９９９）、およびその中の参考文献に記載されているように、実現することができる。
【００５０】
スキームＩでは、構造（ｂ）の化合物は、構造（ａ）の化合物から、ＷＯ２００７０１２９５）に記載されている手順に従って、当技術分野でよく知られている手順を使用して、フェニルチアジアゾールカルバマート基などの適したカルバマートと反応させることによって得ることができる。
【００５１】
本発明の式Ｉの化合物は、Ｐｇが適した保護基である式（ｂ）の化合物から、当業者に既知の脱保護手順によって調製することができる。例えば、保護基（Ｐｇ）がトシルの場合、適した脱保護条件は、メタノールまたはイソプロパノールなどのプロトン性溶媒および場合によりテトラヒドロフランおよび水などの混和性共溶媒中での水酸化リチウムまたは炭酸セシウムなどの塩基と室温で数時間反応させて、式Ｉの脱保護アミンを生じさせることを伴う。
【実施例】
【００５２】
（実施例１）
（３Ｒ，４Ｒ）−４−メチル−３−［メチル（７Ｈ−ピロロ［２，３−ｄ］ピリミジン−４−イル）アミノ］−Ｎ−（１，３，４−チアジアゾール−２−イル）ピペリジン−１−カルボキサミドの調製。
【００５３】
【化４】
2013518882.tif 000005
【００５４】
ステップ１：（３Ｒ，４Ｒ）−４−メチル−３−（メチル｛７−［（４−メチルフェニル）スルホニル］−７Ｈ−ピロロ［２，３−ｄ］ピリミジン−４−イル｝アミノ）−Ｎ−（１，３，４−チアジアゾール−２−イル）ピペリジン−１−カルボキサミドの調製。
【００５５】
【化５】
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Ｎ−メチル−７−［（４−メチルフェニル）スルホニル］−Ｎ−［（３Ｒ，４Ｒ）−４−メチルピペリジン−３−イル］−７Ｈ−ピロロ［２，３−ｄ］ピリミジン−４−アミン（ＷＯ２００７０１２９５３に記載されている手順に従って調製）を、トリエチルアミン（０．１９ｍＬ、１．３ｍｍｏｌ）と共に、ＴＨＦ（５ｍＬ）およびフェニル１，３，４−チアジアゾール−２−イルカルバマート（１９６ｍｇ、０．８９ｍｍｏｌ）中に溶解させる。混合物を６０℃まで約３時間加熱し、次いで、室温で一晩置く。溶媒を減圧下で除去し、粗化合物を、純粋のＤＣＭから１０％ＭｅＯＨ／ＤＣＭで溶離するシリカゲルのフラッシュカラムクロマトグラフィーで精製して、表題化合物を白色固体として得る。
m/z(CI)527([M+H]+.
【００５６】
ステップ２：（３Ｒ，４Ｒ）−４−メチル−３−［メチル（７Ｈ−ピロロ［２，３−ｄ］ピリミジン−４−イル）アミノ］−Ｎ−（１，３，４−チアジアゾール−２−イル）ピペリジン−１−カルボキサミドの調製。
調製１（１７０ｍｇ）の化合物をメタノール（５ｍＬ）中に溶解させ、水酸化リチウム（８ｍｇ）を添加する。反応混合物を約６０℃まで約２時間加熱する。溶媒を減圧下で除去し、得られた残渣を、アミノ担持シリカゲルのフラッシュカラムクロマトグラフィーで精製して、表題化合物を白色固体として得る。
1H NMR
(DMSO-d6): 11.65 (1H), 11.44 (1H), 8.96 (1H), 8.12 (1H), 7.15-7.14
(1H), 6.58 (1H), 4.91 (1H), 4.02-3.77 (3H), 3.55-3.49 (1H), 3.34 (3H),
2.43-2.40 (1H), 1.82-1.76 (1H), 1.64-1.60 (1H), 1.06-1.04 (3H); m/z (CI) 373 ([M+H]+.
【００５７】
（実施例２）
（３Ｒ，４Ｒ）−Ｎ−（３−メトキシ−１，２，４−チアジアゾール−５−イル）−４−メチル−３−［メチル（７Ｈ−ピロロ［２，３−ｄ］ピリミジン−４−イル）アミノ］ピペリジン−１−カルボキサミドの調製。
【００５８】
【化６】
2013518882.tif 000007
トリエチルアミンを、５−アミノ−３−メトキシ−１，２，４−チアジアゾールとホスゲン（０．７２ｍＬ、１．２２ｍｍｏｌ、１．７Ｍ）とのＤＣＭ（６ｍＬ）溶液に０℃で添加する。約１５分後、Ｎ−メチル−Ｎ−［（３Ｒ，４Ｒ）−４−メチルピペリジン−３−イル］−７Ｈ−ピロロ［２，３−ｄ］ピリミジン−４−アミン（２５０ｍｇ、１．０２ｍｍｏｌ）を添加する。約１時間撹拌した後、混合物を水（５０ｍＬ）とＤＣＭ（５０ｍＬ）とに分配する。有機物を、分離し、ＭｇＳＯ４で乾燥させ、ろ過し、蒸発させて、黄色オイルを得、黄色オイルをさらに、純粋のＤＣＭから１０％ＭｅＯＨ／ＤＣＭで溶離するカラムクロマトグラフィーで精製して、表題化合物を白色固体として得る。
m/z(CI)403([M+H]+．
【００５９】
（実施例３）
（３Ｒ，４Ｒ）−Ｎ−（４−シアノ−３−メチルイソオキサゾール−５−イル）−４−メチル−３−［メチル（７Ｈ−ピロロ［２，３−ｄ］ピリミジン−４−イル）アミノ］ピペリジン−１−カルボキサミドの調製。
【００６０】
【化７】
2013518882.tif 000008
実施例１の一般的手順に従い、大きな変更はしないが、出発材料としてフェニル４−シアノ−３−メチルイソオキサゾール−５−イルカルバマートを使用して、表題化合物を得る。
【００６１】
（実施例４）
（３Ｒ，４Ｒ）−４−メチル−Ｎ−［１−メチル−３−（メチルスルファニル）−１Ｈ−１，２，４−トリアゾール−５−イル］−３−［メチル（７Ｈ−ピロロ［２，３−ｄ］ピリミジン−４−イル）アミノ］ピペリジン−１−カルボキサミドの調製。
【００６２】
【化８】
2013518882.tif 000009
実施例１の一般的手順に従い、大きな変更はしないが、出発材料としてフェニル）−１Ｈ−１，２，４−トリアゾール−５−イルカルバマートを使用して、表題化合物を得る。
【００６３】
（実施例５）
イヌのｉｎ  ｖｉｔｒｏ  Ｔ細胞増殖アッセイ
序論：Ｔ細胞活性化は、種々の炎症性障害および自己免疫障害、ならびに喘息、アレルギー、およびそう痒症において重要な役割を果たす。Ｔ細胞活性化は、部分的に、ＪＡＫ−ＳＴＡＴ経路を介してシグナル伝達するサイトカインによって誘発することができるので、ＪＡＫ阻害剤は、異常なＴ細胞活性化を伴うこうした疾患に対して有効な可能性がある。低ｎＭ範囲でＴ細胞増殖を阻害する化合物は、細胞のＪＡＫ１およびＪＡＫ３酵素の阻害に対して有効性を示唆する。
【００６４】
方法：イヌの全血を、ビーグル犬からヘパリン硫酸塩チューブに採取する。全血（２０μＬ）を、ビヒクル対照または試験化合物（０．００１〜１０μＭ）、コンカナバリンＡ（ＣｏｎＡ；１μｇ／ｍｌ）、およびイヌインターロイキン−２（ＩＬ−２；５０ｎｇ／ｍｌ）を含有するＤＭＥＭ完全培地（Ｄｕｂｌｅｃｃｏ改変イーグル培地；１０％熱不活性化ウシ胎児血清；１００ｕ／ｍｌペニシリン；Ｇｉｂｃｏ製の１００ｕｇ／ｍＬストレプトマイシン）１８０μＬと共に９６ウェルプレート（Ｃｏｓｔａｒ）に播く。全血と、ビヒクル対照を含むがＣｏｎＡまたはＩＬ−２を含まない培地とを含有するウェルをバックグラウンド（ＢＫＧ）対照として使用する。プレートを３７℃で４８時間インキュベートする。トリチウム化チミジン、０．４μＣｉ／ウェル（Ｐｅｒｋｉｎ  Ｅｌｍｅｒ）をさらに２０時間添加する。Ｂｒａｎｄｅｌ  ＭＬＲ−９６セルハーベスタおよびプリウェットフィルターマット（Ｗａｌｌａｃ  １２０５−４０１、Ｐｅｒｋｉｎ  Ｅｌｍｅｒ）を使用して、プレートを凍結し、次いで、解凍、洗浄、およびろ過する。フィルターを６０℃で１時間乾燥させ（Ｐｒｅｃｉｓｉｏｎ  １６ＥＧ熱対流炉）、シンチラント（Ｗａｌｌａｃ  １２０５−４４０、Ｐｅｒｋｉｎ  Ｅｌｍｅｒ）１０ｍＬと共にフィルターサンプルバッグ（Ｗａｌｌａｃ  １２０５−４１１、Ｐｅｒｋｉｎ  Ｅｌｍｅｒ）中に置く。密封したフィルターを、ＬＫＢ  Ｗａｌｌａｃ  １２０５  Ｂｅｔａｐｌａｔｅ液体シンチレーションカウンタでカウントする。Ｇｔｅｒｍ  Ｂｅｔａｐｌａｔｅプログラムｖ１．１（Ｗａｌｌａｃ（著作権）１９８９〜１９９０）によってデータを集め、次式を使用して計算したパーセント阻害に変換する：
【００６５】
【数１】
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【００６６】
データを、ＧｒａｐｈＰａｄ  Ｐｒｉｓｍ４．００を使用してパーセント阻害として示し、ＩＣ  ＩＣ５０曲線を、ポイントツーポイント分析を使用して適合させる。実施例１〜４の平均アッセイ結果を表１に示している。
【００６７】
【表１】
2013518882.tif 000011
【国際調査報告】
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2013518882.tif 000015