(57)【要約】  本発明は、小児患者、高齢患者および成人患者、特に、嚥下障害のある患者またはそのような組成物を使用する経腸投与が適している患者を含めて、必要とする患者に使用するための消化酵素を含有するパンクレアチンを含む小粒径組成物に関する。加えて、本発明は、高い効力、高い有効収量を有し、少なくとも１０％〜９０％が４００〜８００μｍであるマイクロペレットまたはマイクロ顆粒などの粒子としての組成物を対象とする。さらに、この組成物は、任意選択的に、従来の腸溶性コーティングされた膵酵素粒子の調製物と比較して、改善された腸溶性コーティングおよびそれに伴う改善された安定性および酵素活性を有する。【選択図】図２Ｃ
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【特許請求の範囲】
【請求項１】
少なくとも１種の消化酵素を含む複数の粒子を含み、前記粒子が低い粒径ディメンションを有することを特徴とする医薬組成物。
【請求項２】
請求項１に記載の医薬組成物において、前記粒子が約４００μｍ以上の体積径ｄ（ｖ，０．１）および約８００μｍ以下の体積径ｄ（ｖ，０．９）を有することを特徴とする医薬組成物。
【請求項３】
請求項１に記載の医薬組成物において、前記粒子が約８００μｍ未満の粒径を有することを特徴とする医薬組成物。
【請求項４】
請求項１または請求項３に記載の医薬組成物において、前記粒子が約４００μｍ〜約６００μｍの粒径を有することを特徴とする医薬組成物。
【請求項５】
請求項１または請求項３に記載の医薬組成物において、前記粒子が約２５０μｍ〜約５００μｍの粒径を有することを特徴とする医薬組成物。
【請求項６】
請求項１〜５のいずれか一項に記載の医薬組成物において、前記粒子が少なくとも１種のコーティングを有し、かつ前記粒子が、約４０〜９８重量％の消化酵素混合物、約２〜２０重量％のポリマー、任意選択的に約０〜３０重量％の不活性コア、および任意選択的に１種または複数の医薬的に許容される賦形剤を含むことを特徴とする医薬組成物。
【請求項７】
請求項６に記載の医薬組成物において、前記粒子が少なくとも約６０重量％の消化酵素混合物を含むことを特徴とする医薬組成物。
【請求項８】
請求項６に記載の医薬組成物において、前記粒子がマイクロペレットであり、少なくとも１種のコーティングを有し、かつ前記粒子が、約４０〜９８重量％の消化酵素混合物、約２〜１０重量％の水溶性ポリマー、任意選択的に約０〜３０重量％の不活性コア、および任意選択的に１種または複数の医薬的に許容される賦形剤を含むことを特徴とする医薬組成物。
【請求項９】
請求項８に記載の医薬組成物において、前記ポリマーがポリマー結合剤であることを特徴とする医薬組成物。
【請求項１０】
請求項８または請求項９に記載の医薬組成物において、前記ポリマー結合剤が、ヒドロキシプロピルセルロース、ポビドン、メチルセルロース、ヒドロキシプロピルメチルセルロース、カルボキシアルキルセルロース、ポリエチレンオキシド、ビニルピロリドン−ビニルアセテートコポリマー、多糖およびそれらの混合物からなる群から選択されることを特徴とする医薬組成物。
【請求項１１】
請求項６に記載の医薬組成物において、前記粒子がマイクロ顆粒であり、少なくとも１種のコーティングを有し、かつ前記粒子が、約８０〜９５重量％の消化酵素混合物、約５〜２０重量％の水不溶性ポリマー、および任意選択的に１種または複数の医薬的に許容される賦形剤を含むことを特徴とする医薬組成物。
【請求項１２】
請求項１１に記載の医薬組成物において、前記水不溶性ポリマーがコアセルベート化ポリマーであることを特徴とする医薬組成物。
【請求項１３】
請求項１１または請求項１２に記載の医薬組成物において、前記ポリマーがエチルセルロースであることを特徴とする医薬組成物。
【請求項１４】
請求項６〜１０のいずれか一項に記載の医薬組成物において、前記コーティングが、１種または複数の親水性ポリマー、１種または複数の可塑剤および任意選択の医薬的に許容される疎水性材料を含むことを特徴とする医薬組成物。
【請求項１５】
請求項６〜１３のいずれか一項に記載の医薬組成物において、前記コーティングが、１種または複数の腸溶性ポリマーおよび１種または複数の可塑剤を含むことを特徴とする医薬組成物。
【請求項１６】
請求項１〜１５のいずれか一項に記載の医薬組成物において、前記少なくとも１種の消化酵素が、パンクレリパーゼ、リパーゼ、トリプシン、キモトリプシン、キモトリプシンＢ、パンクレアトペプチダーゼ、カルボキシペプチダーゼＡ、カルボキシペプチダーゼＢ、グリセロールエステルヒドロラーゼ、ホスホリパーゼ、ホスホリパーゼＡ２、ステロールエステルヒドロラーゼ、リボヌクレアーゼ、デオキシリボヌクレアーゼ、α−アミラーゼ、パパイン、キモパパイン、ブロメライン、フィシン、β−アミラーゼ、セルラーゼ、β−ガラクトシダーゼおよびそれらの混合物からなる群から選択されることを特徴とする医薬組成物。
【請求項１７】
請求項１〜１５のいずれか一項に記載の医薬組成物において、前記少なくとも１種の消化酵素が、少なくとも１種のリパーゼ、少なくとも１種のアミラーゼおよび少なくとも１種のプロテアーゼを含む混合物であることを特徴とする医薬組成物。
【請求項１８】
請求項１〜１５のいずれか一項に記載の医薬組成物において、前記少なくとも１種の消化酵素が、動物、細菌、真菌、植物、組換え体起源に由来するか、または化学的に改変されていることを特徴とする医薬組成物。
【請求項１９】
請求項１４に記載の医薬組成物において、前記親水性ポリマーが、ポリビニルピロリドン、ポリエチレングリコール、ヒドロキシプロピルメチルセルロース、ヒドロキシプロピルセルロース、低粘度エチルセルロース、ビニルピロリドン−ビニルアセテートコポリマー、ポリビニルアルコールおよびそれらの混合物からなる群から選択されることを特徴とする医薬組成物。
【請求項２０】
請求項１４に記載の医薬組成物において、前記疎水性材料が、タルク、コロイド状二酸化ケイ素、およびステアリン酸マグネシウム、ステアリン酸カルシウム、ステアリン酸亜鉛、脂肪酸ベヘン酸グリセリル、パルミトステアリン酸グリセリン、ならびにそれらの混合物からなる群から選択されることを特徴とする医薬組成物。
【請求項２１】
請求項１５に記載の医薬組成物において、前記腸溶性ポリマーが、セルロースアセテートフタレート、ヒドロキシプロピルメチルセルロースフタレート、ヒドロキシプロピルメチルセルロースアセテートスクシネート、ポリビニルアセテートフタレートおよびそれらの混合物からなる群から選択されることを特徴とする医薬組成物。
【請求項２２】
請求項１５に記載の医薬組成物において、前記可塑剤が、トリアセチン、クエン酸トリブチル、クエン酸トリエチル、アセチルクエン酸トリｎ−ブチル、フタル酸ジエチル、セバシン酸ジブチル、ポリエチレングリコール、ポリプロピレングリコール、ヒマシ油、アセチル化モノグリセリド、アセチル化ジグリセリド、セチルアルコールおよびそれらの混合物からなる群から選択されることを特徴とする医薬組成物。
【請求項２３】
請求項１５に記載の組成物において、前記腸溶性コーティングが、腸溶性ポリマーと無機剤との比が重量で約４：１〜約１：２５である無機剤をさらに含むことを特徴とする医薬組成物。
【請求項２４】
請求項１〜２３のいずれか一項に記載の医薬組成物において、前記組成物が、乾燥減量により測定すると約３％以下の含水率を有することを特徴とする医薬組成物。
【請求項２５】
請求項１〜２４のいずれか一項に記載の医薬組成物において、前記消化酵素が、６ヶ月の加速安定性試験の後に、約２０％以下の消化酵素活性の損失を示すことを特徴とする医薬組成物。
【請求項２６】
請求項２５に記載の医薬組成物において、前記加速安定性試験が、４０℃、相対湿度７５％で密封ナイアレンバッグの中に前記組成物を６ヶ月間保存することを含むことを特徴とする医薬組成物。
【請求項２７】
請求項１〜２３のいずれか一項に記載の医薬組成物を調製するための方法であって、制御された球状化、粉末層状化またはコアセルベーションにより粒子を形成させることを含む方法。
【請求項２８】
請求項２７に記載の方法において、前記制御された球状化が、約２５μｍ以下の体積中央径ｄ（ｖ，０．５）を有する少なくとも１種の消化酵素ならびに任意選択的にポリマー結合剤および流動補助剤を含む粉末混合物を生成物チャンバーの粉末層の中に、ポリマー結合剤溶液を噴霧すると同時に、向けることにより実施されることを特徴とする方法。
【請求項２９】
請求項２７に記載の方法において、前記粉末層状化が、約２５μｍ以下の体積中央径ｄ（ｖ，０．５）を有する少なくとも１種の消化酵素ならびに任意選択的にポリマー結合剤および流動補助剤を含む粉末混合物を生成物チャンバーに懸濁した不活性コアに、ポリマー結合剤溶液を噴霧しながら、向けることにより実施されることを特徴とする方法。
【請求項３０】
請求項２７に記載の方法において、前記コアセルベーションが、相分離剤の存在下で、疎水性有機溶媒に溶解した水不溶性ポリマーを用いて実施されることを特徴とする方法。
【請求項３１】
請求項３０に記載の方法において、前記水不溶性ポリマーがエチルセルロースであり、前記疎水性有機溶媒がシクロヘキサンであり、前記相分離剤がポリエチレンであることを特徴とする方法。
【請求項３２】
医薬組成物を調製する方法であって、
ａ）約４００〜８００μｍの範囲のｄ（ｖ，０．１）〜ｄ（ｖ，０．９）粒径を有する少なくとも１種の消化酵素を含む粒子を形成させることと、
ｂ）任意選択的に、少なくとも１種の親水性ポリマーおよび少なくとも１種の可塑剤を含むコーティング製剤を用いてステップａ）の粒子をコーティングすることと、
ｃ）腸溶性ポリマーおよび任意選択的に可塑剤を含む腸溶性コーティングを、ステップａ）の粒子またはステップｂ）の粒子に施すことと
を含む方法。
【請求項３３】
医薬組成物を調製するための方法であって、
ａ）約２５０μｍ〜約５００μｍの粒径を有する少なくとも１種の消化酵素を含む粒子を形成させることと、
ｂ）任意選択的に、少なくとも１種の親水性ポリマーおよび少なくとも１種の可塑剤を含むコーティング製剤を用いてステップａ）の粒子をコーティングすることと、
ｃ）腸溶性ポリマーおよび任意選択的に可塑剤を含む腸溶性コーティングを、ステップａ）の粒子またはステップｂ）の粒子に施すことと
を含むことを特徴とする方法。
【請求項３４】
請求項２９または請求項３０に記載の方法において、ステップａ）が球状化、粉末層状化またはコアセルベーションにより実施されることを特徴とする方法。
【請求項３５】
請求項１〜２３のいずれか一項に記載の組成物を含む投与剤形。
【請求項３６】
カプセル剤、サッシェ剤または錠剤である、請求項３５に記載の投与剤形。
【請求項３７】
請求項３６に記載の投与剤形において、前記カプセル剤が、約３％以下の含水率を有するヒドロキシプロピルメチルセルロースを含むことを特徴とする投与剤形。
【請求項３８】
消化酵素欠乏症に関連した疾患の患者を治療または予防する方法であって、消化性疾患、膵外分泌機能不全、嚢胞性線維症、Ｉ型糖尿病および／またはＩＩ型糖尿病の治療のために、請求項１〜２３のいずれか一項に記載の医薬組成物を患者に投与することを含む方法。
【請求項３９】
消化酵素欠乏症に関連した疾患の患者を治療または予防する方法であって、請求項１〜２３のいずれか一項に記載の組成物を、ＧＩ管ｐＨを上昇させる薬剤と併用して、それを必要とする患者に投与することを含む方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
関連出願の相互参照
本出願は２０１０年５月３日に出願された米国仮特許出願第６１／３３０，７６８号明細書に対する優先権を主張するものであり、この仮出願の内容全体は参照によって本明細書に組み込まれるものとする。
【背景技術】
【０００２】
膵酵素サプリメントは、１９３８年の食品医薬品化粧品法の通過以前に米国において入手可能であった。腸溶性コーティングが有りおよび無しのパンクレアチン酵素が、規制認可なしで最近まで製剤化され売買されていた。
【０００３】
膵炎、膵切除、嚢胞性線維症（ＣＦ）などの膵臓を冒す各種疾患に起因する膵外分泌機能不全（ＥＰＩ）が膵酵素サプリメントを使用する症状であった。パンクレリパーゼおよび他の膵酵素製品（ＰＥＰ）を投与して、食物中の栄養源を消化するのに必要な膵酵素の産生および／または分泌における酵素欠乏症を少なくとも部分的に改善することができる。これらのサプリメントがないと、患者は重度の栄養障害になる。この栄養障害を、特に乳児の場合に治療せずに放置すると、命が脅かされる恐れがある。
【０００４】
微生物起源の脂肪分解活性、タンパク質分解活性およびデンプン分解活性を有する生理学的に許容される膵酵素混合物および／または特に動物起源の消化酵素混合物は、脂肪のグリセロールおよび脂肪酸への加水分解、デンプンのデキストリンおよび糖への加水分解、タンパク質のアミノ酸および誘導物質への加水分解を触媒する。膵酵素が認識できる量で胃腸（ＧＩ）管から吸収されることはまったくない。膵酵素混合物に関する一次の効果エンドポイントは、膵治療とプラセボ治療との間における脂肪吸収係数（ＣＦＡ）の平均差である。脂肪排泄および脂肪摂取の両方を測定すると、ＣＦＡは治療中の７２時間糞便回収により決定される。プラセボ治療中の各患者のＣＦＡは、無治療ＣＦＡ値として使用される。
【０００５】
パンクレリパーゼは、主として３つの酵素クラス、すなわちリパーゼ、プロテアーゼおよびアミラーゼをそれらの様々な補因子および補酵素も含めて組み合せたものであり、いくつかの必須な体内過程に使用される消化酵素の損失または低レベルを補うために使用される。これらの酵素は、膵臓内で天然に産生され、脂肪、タンパク質および炭水化物の消化において重要である。パンクレリパーゼは、典型的には、ブタの膵腺から調製されるが、他の供給源、例えば、米国特許第６，０５１，２２０号明細書、米国特許出願公開第２００４／００５７９４４号明細書、同第２００１／００４６４９３号明細書および国際公開第２００６０４４５２９号パンフレットに記載のものを使用することもできる。これらの酵素は、脂肪のグリセロールおよび脂肪酸への加水分解、デンプンのデキストリンおよび糖への加水分解およびタンパク質のアミノ酸および誘導物質への加水分解を触媒する。
【０００６】
パンクレアチンは、いくつかの必須な体内過程に使用される消化酵素の損失または低レベルを補うためにも使用される消化酵素である。パンクレアチンは膵酵素、すなわちリパーゼ、アミラーゼおよびプロテアーゼを含む。パンクレアチンは、これら３種の主要酵素の活性レベルに関してパンクレリパーゼとは異なる。
【０００７】
膵酵素による消化および代謝産物の吸収は、ＧＩ通過の全体にわたって起こり得る。しかしながら、膵酵素は、中性付近から弱アルカリ性の下で最適な活性を示す。胃の条件下、すなわち酸およびペプシンの存在下では、酵素の大部分、特にリパーゼは、非可逆的に不活性化されて生物活性を損失する可能性がある。したがって、外因的に投与される酵素は、一般に、胃による不活性化から保護されており、胃を通って十二指腸へと通過する間はインタクトなままである。これらの酵素は、ｐＨ≧５．５の十二指腸おいて、膵酵素の活性がそのような条件下で保持され、代謝産物の吸収が主として腸の上部で起こるので、５〜３０分以内に優先的に放出される。
【０００８】
膵酵素の保護は、典型的には、腸溶性コーティングポリマーを用いてコーティングすることにより達成されており、これにより、胃の酸性環境から酵素組成物が保護され、その後、小腸内で酵素の放出が行われる。リパーゼは最も影響を受けやすい膵酵素であり、吸収不良の治療で最も重要な単一酵素である。典型的には、リパーゼ活性をモニターしてリパーゼ含有酵素組成物の安定性を判定する。このような保護は望ましいが、コーティングされていない調製物も商業的には存在する。
【０００９】
膵酵素組成物は、典型的には、従来のパンコーティング法または流動層コーティング法を使用してコーティングされるが、これらの方法では、膵酵素粒子（例えば、果粒、マイクロ錠剤、ミニ錠剤等）は、コーティング溶媒が迅速に蒸発するように十分に高い温度で、ポリマー溶液またはポリマー懸濁液を用いてコーティングされ、それによって、比較的乾燥し固化したポリマーコーティングが酵素粒子に施される。しかしながら、スプリンクリングによる乳児摂食に適したコーティングなど、膵酵素粒子上に従来のパンコーティング法または流動層コーティング法を使用して、均一なポリマーコーティングを施すのは困難である。さらに、このようなコーティング条件では、膵酵素粒子は、酵素安定性に影響を与え、したがって酵素活性の損失をもたらし得る加熱、湿気および酸素に晒される。したがって、酵素活性および安定性が維持される、それほど過酷でない条件下でコーティングされた膵酵素粒子を得ることが望ましいであろう。
【００１０】
従来の膵酵素組成物はまた、比較的大きな膵酵素粒子で構成され、小児患者、または経鼻胃（ＮＧ）チューブ、経鼻空腸（ＮＪ）チューブ、胃瘻（ＰＥＧ）チューブもしくは空腸瘻チューブなどの経腸投与にあまり適していない。Ｔ．Ｓｉｐｏｓは、米国特許第４，０７９，１２５号明細書および米国特許第５，３０２，４００号明細書において、後で腸溶性ポリマーによりコーティングされるパンクレアチンマイクロペレットコアの調製であって、パンクレアチン酵素混合物、結合剤、崩壊剤、発泡性カップルおよび胆汁酸の造粒、押出しおよび球状化を含む調製を教示している。腸溶性コーティングされたペレットの粒径は、１．４〜２．０ｍｍであった。米国特許第４，２８０，９７１号明細書は、イソプロパノールを用いて造粒されたパンクレアチン、ステアリン酸マグネシウムの混合物を押出し、ポビドンまたはポリエチレングリコールのイソプロパノール溶液とパンクレアチンとを交互に噴霧することにより乾燥ストランドを球状化することによる、長さ１．５〜１．７ｍｍのストランドの調製を教示している。腸溶性コーティングされたペレットの粒径は、０．５〜４ｍｍ、好ましくは１〜２．５ｍｍであった。Ｍ．Ｍａｉｏは、米国特許出願公開第２００４０１０１５６２号明細書において、いかなる溶媒も使用することなく溶融造粒することによる、パンクレアチン酵素および親水性低溶融ポリマーを含むマイクロスフェアの調製を開示している。粒径範囲が１０〜１５００μｍのマイクロスフェアは、腸溶性ポリマーを用いてコーティングされる。米国特許第５，３７８，４６２号明細書、米国特許第５，７２５，８８０号明細書などの米国特許および米国特許出願公開第２００７０１４８１５２Ａ１号明細書、米国特許出願公開第２００７０１４８１５３Ａ１号明細書などの刊行物は、パンクレアチンマイクロペレットコアの調製を教示しており、このコアはその後に、パンクレアチン、ポリエチレングリコール（ＰＥＧ４０００）および押出し可能な堅さを達成するのに十分な低級アルコールを含む混合物を押出し、流動パラフィンまたはイソプロパノールの存在下でこの押出物を球状化することにより胃抵抗性ポリマーでコーティングされ、最終的に最小直径が０．７〜１．４ｍｍ以上の球状から楕円状のペレットが得られる。水中および／または湿気存在下でのパンクレアチンの不安定性によるパンクレアチン組成物の製剤化の困難さが、溶融押出し球状化に適したフレンドリーな溶媒または低溶融親水性ポリマーの前述の使用の一因となった。しかしながら、これらの溶融押出し法は、典型的には、広い粒径分布を有するパンクレアチン酵素粒子を製造する。従来の膵酵素組成物の比較的大きな膵酵素粒子およびそれらの製造方法に関する前述の問題に対しては、狭い粒径分布を有する比較的小さな酵素粒子で構成された膵酵素組成物が望ましいであろう。
【００１１】
代替的な膵組成物が製造されている。ＫＹ  Ｗｅｏｎらは、国際公開第２００７０１３７５２号パンフレットにおいて、高分子結合剤の水溶液中にパンクレアチン酵素を含む分散液を噴霧することによる、パンクレアチン酵素コアの調製を開示している。この工程の主な欠点は、顕著な活性損失を回避するために、製剤調製の６０〜９０分以内にパンクレアチン層状化工程を完了させることの困難さである。Ａ．Ｍａｒｇｏｌｉｎらは、米国特許出願公開第２００１００４６４９３号明細書、米国特許出願公開第２００３００１７１４４号明細書および国際公開第２００６０４４５２９号パンフレットにおいて、酸安定性微生物リパーゼ結晶、微生物無定形アミラーゼおよび微生物プロテアーゼを含む組成物ならびに胃抵抗性コーティングを必要とせずにＥＰＩを含む症状を治療するための方法を開示している。Ｇａｌｌｅらは、米国特許出願公開第２００４００５７９４４号明細書において、ＣＦに関連したＥＰＩを治療するのに適していることが報告された微生物酵素混合物の調製物を開示している。この調製物は、ｐＨ４〜８の範囲において生物活性を保持することが可能であったが、胃のｐＨが２．５〜４であるＣＦ患者のｉｎ  ｖｉｖｏ条件下では、ある程度不活化された。米国特許出願第１２／０３４Ａ８０号明細書（米国特許出願公開第２００８／０２９９１８５号明細書）は、安定な消化酵素組成物を記載している。Ｓｃｈａｒｐｅは、米国特許第６，０５１，２２０号明細書において、ＥＰＩ治療で使用するための、マルターゼ、アミラーゼおよびデキストリン化活性を有し、タンパク質分解酵素および脂質開裂酵素と組み合わせて最大７５％の酸安定リパーゼを含有する、微生物起源の酸安定酵素または複合体を含む組成物を開示している。米国特許出願公開第２００８０２７９８３９号明細書（米国特許出願第１２／０９２，２５５号明細書）は、ＣＦに関連したＥＰＩの治療に有効であることが示された消化酵素組成物の調製物であって、少なくとも１種の微生物由来リパーゼ、少なくとも１種の微生物由来アミラーゼおよび好ましくは植物由来の少なくとも１種のプロテアーゼを含み、これらはすべてｐＨ２〜８の範囲で不活化に抵抗性がある調製物を教示している。米国特許第６，０５１，２２０号明細書、米国特許出願公開第２００１００４６４９３号明細書、米国特許出願公開第２００３０１７１４４号明細書、米国特許出願公開第２００４００５７９４４号明細書、国際公開第２００６０４４５２９号パンフレットおよび米国特許第２００８０２７９８３９号明細書もまた、膵酵素調製物を記載している。米国特許第７，６５８，９１８号明細書は、ＨＰＭＣカプセル形態の治療有効用量の酵素混合物であるＺｅｎｐｅｐ（登録商標）を記載している。各経口投与用カプセルは、腸溶性コーティングされたビーズを含有している（リパーゼ５，０００ＵＳＰ単位用には１．８〜１．９ｍｍ、リパーゼ１０，０００、１５，０００および２０，０００ＵＳＰ単位用には２．２〜２．５ｍｍ）。
【００１２】
酵素投薬は、４歳より上の人に対しては、１回の食事当たり５００リパーゼ単位／ｋｇ体重で開始し、最大で１回の食事当たり２，５００リパーゼ単位／ｋｇ体重（もしくは１日当たり１０，０００リパーゼ単位／ｋｇ体重以下）、または１日当たり４，０００リパーゼ単位／ｇ摂取脂肪未満までにすべきである。パンクレアチンの５００ミリグラム錠剤は、通常、トリプシンを約１２，５００ＵＳＰ単位、アミラーゼを１２，５００ＵＳＰ単位、リパーゼを１，０００ＵＳＰ単位含有する。したがって、患者は、食事または間食時に数個のカプセル剤を飲み込むことを要求され、これにより、投薬レジメンの遵守および／または粒子の９０％が９００μｍを超える現在入手可能なパンクレアチン調製物の投与が困難になっている。
【００１３】
さらに、パンクレアチンと食品調製物との間に粒径分布に顕著な差があるため、これら２つの調製物が胃腸管を通って通過する間の同調的な動きは、脂肪および栄養源のより良好な吸収の観点から重要であるにもかかわらず、多くの場合、達成することが困難であり、特に幼児および乳児において主要な問題になっている。Ｃｈｏｅらは、胃内容排出がペレットの化学構成ではなく粒径にのみ依存することを示した（Ｃｈｏｅ  ｅｔ  ａｌ．ｉｎ  Ｅｕｒｏ  Ｊ．Ｐｈａｒｍａ  Ｓｃｉ．２００１；１４，３４７−３５３）。そこでは、ＡＰＡＰまたはカフェインを含有する０．７ｍｍペレットおよびガンマシンチグラフィーが使用された。さらに、彼らは、０．７ｍｍおよび３．６ｍｍペレット（ＡＰＡＰ）の同時投与により、小粒径の０．７ｍｍペレット（カフェイン）が大粒径の３．６ｍｍペレット（ＡＰＡＰ）より有意に早く排出され吸収されることを少量流動食（３５分までに）および標準的な食事（３３分までに）の両方を用いて示した（Ｐ＜０．０５）。これらのペレットに対する胃内容排出時間の差は、絶食状態では有意ではなかった。ＪＨ  Ｍｅｙｅｒらは、４２０ｇまたは１００ｇの食事と一緒に摂取された場合、１ｍｍのスフェアは２．４または３．２ｍｍのスフェアより一貫して迅速に排出される（＜＜０．０１、対応のあるｔ検定）ことを示した（ＪＨ  Ｍｅｙｅｒ  ｅｔ  ａｌ．  Ｇａｓｔｒｏｅｎｔｅｒｏｌｏｇｙ  １９８８；９４：１３１５−１３２５）。治療（例えば、カプセル化された、腸溶性コーティングされたジダノシンビーズ（１×２００ｍｇ；直径約２ｍｍの腸溶性ビーズ）および腸溶性コーティングされたジダノシンミニ錠剤（４×５０ｍｇ；直径約５ｍｍの腸溶性コーティングされた錠剤））の間に少なくとも１週間の休薬期間を置いた１８〜５０歳の１８名の健常男性ボランティアに対する、非盲検、無作為化、単回投与、３期クロスオーバー試験に基づいて、Ｂ．Ｄａｍｌｅらは、腸溶性ビーズに対する、ジダノシン投与剤形の放射能の９５％またはそれ以下が胃の中に観察される時間として定義される最初の胃内容排出時間は、腸溶性錠剤に対して得られる時間より長時間であるが、腸溶性ビーズに対する、ジダノシンの最初の定量化可能濃度が血漿中で観察される時間は、より短時間であるとの結論を得た。それ故、腸溶性ビーズに対する、胃内容排出とジダノシン吸収開始との間の時間として定義される遅延時間は、腸溶性錠剤に対する時間より顕著に短時間であった（Ｂ．Ｄａｍｌｅ  ｅｔ  ａｌ．ｉｎ  Ｂｒ．Ｊ．Ｃｌｉｎ．Ｐｈａｒｍａｃｏｌ．２００２；５４（３）：２５５−２６１）。
【００１４】
したがって、パンクレアチン含有消化酵素混合物（例えば、典型的には、プロテアーゼ、リパーゼおよびアミラーゼ）の医薬的に許容される経口用遅延放出性組成物であって、腸溶性コーティングされたマイクロ粒子の９０％が８００μｍ以下の粒径であり、小児患者、高齢患者および成人患者に使用するための組成物に対する未だ対処されていない必要性が存在する。さらに、このような調製物は、特に乳児および幼児において、投与がより容易になり得るであろう。
【００１５】
狭い／小さな粒径分布、高い有効収量、およびマイクロペレットまたはマイクロ顆粒の少なくとも１０％〜９０％の直径が４００〜８００μｍである、パンクレアチン含有マイクロペレットの消化酵素混合物を含む医薬的に許容される組成物がここに見出された。これらは、少なくとも部分的に酵素欠乏症を改善するために小児患者、高齢患者および成人患者に使用するのに適している、安定な消化酵素組成物および投与剤形を製造するために、例えば、親水性ポリマーおよび任意選択的に疎水性抗タッキング剤（タルク、ステアリン酸マグネシウム、コロイド状二酸化ケイ素およびそれらの組合せなど；さらに任意選択的に低粘度エチルセルロース）を含めた可塑剤を含む、胃抵抗性コーティングまたは耐湿性コーティングにより任意選択的にコーティングされる。
【図面の簡単な説明】
【００１６】
【図１】図１は、円錐形回転プレートおよびＧＸＲ−３５インサートを装着したＶＥＣ−Ｌａｂ３を備えるＧｒａｎｕｒｅｘ  ＧＸ−３５−ＧＸＲ加工インサートの写真を示す。
【図２】図２Ａは、Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ  Ｐｒｏｔｅｉｎ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓからのパンクレアチン含有消化酵素（ロットＳｌ）の写真を示す。図２Ｂは、Ｇｒａｎｕｒｅｘ  ＧＸ−３５における粉末層状化により調製されたマイクロペレット（ロットＳ２）の写真を示す。図２Ｃは、消化酵素の腸溶性コーティングされたマイクロペレット（ロットＳ３）の写真を示す。図２Ｄは、消化酵素の腸溶性コーティングされたマイクロペレット（ロットＳ４）の写真を示す。
【図３】図３Ａは、Ｎｏｒｄｍａｒｋからのパンクレアチン含有消化酵素の写真を示す。図３Ｂは、微粒子化されたパンクレアチン含有消化酵素の写真を示す。
【図４】図４Ａは、シクロヘキサン中での熱処理前のパンクレアチン粒子（ロットＮｌ）の写真を示す。図４Ｂは、シクロヘキサン中での熱処理後のパンクレアチン粒子（ロットＮ２）の写真を示す。
【図５】図５Ａは、パンクレアチンマイクロ顆粒（ロットＮ３、５％のコアセルベート化ポリマー）の顕微鏡写真を示す。図５Ｂは、パンクレアチンマイクロ顆粒（ロットＮ３、５％のコアセルベート化ポリマー）の顕微鏡写真を示す。
【図６】図６Ａは、パンクレアチンマイクロ顆粒（ロットＮ４、２０％のコアセルベート化ポリマー）の顕微鏡写真を示す。図６Ｂは、パンクレアチンマイクロ顆粒（ロットＮ４、２０％のコアセルベート化ポリマー）の顕微鏡写真を示す。
【図７】図７Ａは、パンクレアチンマイクロ顆粒（ロットＮ５、２０％のコアセルベート化ポリマー）の顕微鏡写真を示す。図７Ｂは、パンクレアチンマイクロ顆粒（ロットＮ５、２０％のコアセルベート化ポリマー）の顕微鏡写真を示す。
【図８】図８Ａは、選択されたパンクレアチンロットＮｌ（＞２５０μｍ）の顕微鏡写真を示す。図８Ｂは、選択されたパンクレアチンロットＮｌ（＞２５０μｍ）の顕微鏡写真を示す。
【図９】図９Ａは、パンクレアチンマイクロ顆粒（ロットＮ６、５％のコアセルベート化ポリマー）の顕微鏡写真を示す。図９Ａは、パンクレアチンマイクロ顆粒（ロットＮ６、５％のコアセルベート化ポリマー）の顕微鏡写真を示す。
【図１０】図１０Ａは、パンクレアチンマイクロ顆粒（ロットＮ７、５％のコアセルベート化ポリマー）の顕微鏡写真を示す。図１０Ｂは、パンクレアチンマイクロ顆粒（ロットＮ７、５％のコアセルベート化ポリマー）の顕微鏡写真を示す。
【図１１】図１１Ａは、選択されたパンクレアチンロットＮｌ（＜２５０μｍ）の顕微鏡写真を示す。図１１Ｂは、選択されたパンクレアチンロットＮｌ（＜２５０μｍ）の顕微鏡写真を示す。
【図１２】図１２Ａは、パンクレアチンマイクロ顆粒（ロットＮ８、２０％のコアセルベート化ポリマー）の顕微鏡写真を示す。図１２Ｂは、パンクレアチンマイクロ顆粒（ロットＮ８、２０％のコアセルベート化ポリマー）の顕微鏡写真を示す。
【図１３】図１３Ａは、パンクレアチンマイクロ顆粒（ロットＮ９、２０％のコアセルベート化ポリマー）の顕微鏡写真を示す。図１３Ａは、パンクレアチンマイクロ顆粒（ロットＮ９、２０％のコアセルベート化ポリマー）の顕微鏡写真を示す。
【発明を実施するための形態】
【００１７】
様々な実施形態において、本発明は、消化酵素を含有するパンクレアチンを含む小粒径の組成物であって、小児患者、高齢患者および成人患者、特に嚥下障害があるかまたはこのような組成物を使用する経腸投与が適している患者を含むそれを必要とする患者に使用するための組成物に関する。追加の実施形態では、本発明は、高い効力、高い有効収量および少なくとも１０％〜９０％が４００〜８００μｍの粒子であるマイクロペレットまたはマイクロ顆粒などの粒子形態の組成物を対象とする。さらに、この組成物は、任意選択的に、従来の腸溶性コーティングされた膵酵素粒子の調製物と比較して、改善された腸溶性コーティングおよびそれに伴う改善された安定性および酵素活性を有する。
【００１８】
本発明は、少なくとも１種の消化酵素を含む複数粒子を含むか、それらから本質的になるか、またはそれらからなる医薬組成物であって、前記粒子が低い粒径ディメンションを有する医薬組成物を対象とする。具体的には、前記粒子は、レーザー回析により測定すると、４００μｍ以上の体積径ｄ（ｖ，０．１）および８００μｍ以下の体積径ｄ（ｖ，０．９）を有するか、または前記粒子は、篩別して測定すると、約８００μｍ未満の粒径を有する。特定の実施形態では、粒子は、篩別して測定すると、約２００μｍ〜約７００μｍ、約２００μｍ〜約６００μｍ、約４００μｍ〜約６００μｍ、または約２５０μｍ〜約５００μｍの範囲、ならびにそれらの間のすべての範囲および部分範囲の粒径を有する。
【００１９】
粒子は、４０〜９８重量％の消化酵素混合物、２〜２０重量％のポリマー、任意選択的に０〜３０重量％の不活性コア、および任意選択的に１種または複数の医薬的に許容される賦形剤を含むか、それらから本質的になるか、またはそれらからなる。粒子は、消化酵素混合物を少なくとも６０重量％含むことができる。粒子は、１種または複数のコーティング層を有することができる。
【００２０】
粒子は、マイクロペレットとすることができ、このマイクロペレットは、４０〜９８重量％の消化酵素混合物、２〜１０重量％の水溶性ポリマー、任意選択的に０〜３０重量％の不活性コア、および任意選択的に１種または複数の医薬的に許容される賦形剤を含むか、それらから本質的になるか、またはそれらからなる。マイクロペレットは、１種または複数のコーティング層を有することができる。マイクロペレットの構成要素であるポリマーは、医薬的に許容される水溶性ポリマーであり、ヒドロキシプロピルセルロース、ポビドン、メチルセルロース、ヒドロキシプロピルメチルセルロース、カルボキシアルキルセルロース、ポリエチレンオキシド、ビニルピロリドン−ビニルアセテートコポリマー、多糖およびそれらの混合物からなる群から選択することができる。前記マイクロペレットは、任意選択的に、低粘度エチルセルロース、セルロースアセテート、セルロースアセテートブチレート、ポリビニルアセテート、中性メタクリル酸エステルコポリマー、アンモニオ−メタクリレートコポリマーおよびそれらの混合物からなる群から選択することができる疎水性の水不溶性ポリマーを含むことができる。
【００２１】
粒子は、さらにマイクロ顆粒とすることができ、このマイクロ顆粒は、８０〜９５重量％の消化酵素混合物、５〜２０重量％の水不溶性ポリマー、および任意選択的に１つまたは複数の医薬的に許容される賦形剤を含むか、それらから本質的になるか、またはそれらからなる。マイクロ顆粒の水不溶性ポリマーは、マイクロ顆粒の上に沈着したコアセルベート化ポリマーである。本発明の特定実施形態では、水不溶性ポリマーは、エチルセルロース、セルロースアセテート、セルロースアセテートブチレート、ポリビニルアセテート、中性メタクリル酸エステルコポリマー、アンモニオ−メタクリレートコポリマーおよびそれらの混合物から選択される。
【００２２】
用語「消化酵素」は、生物が吸収できるように食物成分を分解する、消化管中の酵素を示す。用語「安定化消化酵素」は、長期保存後に実質的な酵素活性を維持している消化酵素を意味する。用語「パンクレリパーゼ」または「パンクレアチン」もまた、本明細書において使用され、両方の用語は、アミラーゼ、リパーゼおよびプロテアーゼ酵素を含む数種の酵素の混合物を示す。
【００２３】
本発明で使用するのに適した消化酵素の非限定的なクラスとしては、リパーゼ、アミラーゼおよびプロテアーゼが挙げられる。消化酵素の非限定的な例としては、パンクレリパーゼ、リパーゼ、トリプシン、キモトリプシン、キモトリプシンＢ、パンクレアトペプチダーゼ、カルボキシペプチダーゼＡ、カルボキシペプチダーゼＢ、グリセロールエステルヒドロラーゼ、ホスホリパーゼ、ホスホリパーゼＡ２、ステロールエステルヒドロラーゼ、リボヌクレアーゼ、デオキシリボヌクレアーゼ、α−アミラーゼ、パパイン、キモパパイン、ブロメライン、フィシン、β−アミラーゼ、セルラーゼ、β−ガラクトシダーゼおよびそれらの混合物が挙げられる。これらの酵素は、膵臓からの抽出によって得るか、人為的に製造するか、または微生物形態、植物または他の動物組織など膵臓以外の供給源から得ることが可能である。
【００２４】
リパーゼは、グリセロールおよび単純脂肪酸への脂質の加水分解を触媒する酵素である。本発明に適したリパーゼの例としては、これらに限定されないが、動物リパーゼ（例えば、ブタリパーゼ）、細菌リパーゼ（例えば、シュードモナス（Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ）リパーゼおよび／またはバークホルデリア（Ｂｕｒｋｈｏｌｄｅｒｉａ）リパーゼ）、真菌リパーゼ、植物リパーゼ、組換えリパーゼ（例えば、細菌、酵母、真菌、植物、昆虫または哺乳動物宿主細胞のいずれか１つから選択された適切な宿主細胞を培養して、組換えＤＮＡ技術により生成されたもの、すなわち天然に存在する配列と相同であるかもしくは実質的に同一であるアミノ酸配列を含む組換えリパーゼ、天然に存在するリパーゼコード化核酸と相同であるかもしくは実質的に同一である核酸によってコードされたリパーゼなど）、合成リパーゼ、化学修飾リパーゼおよびそれらの混合物が挙げられる。
【００２５】
アミラーゼは、デンプンを分解するグリコシドヒドロラーゼ酵素、例えばα−アミラーゼ、β−アミラーゼ、酸α−グルコシダーゼ、唾液アミラーゼ（プチアリンなど）等である。本発明で使用するのに適したアミラーゼは、これらに限定されないが、動物アミラーゼ、細菌アミラーゼ、真菌アミラーゼ（例えば、アスペルギルス（Ａｓｐｅｒｇｉｌｌｕｓ）アミラーゼ、例えばアスペルギルス・オリゼ（Ａｓｐｅｒｇｉｌｌｕｓ  ｏｒｙｚａｅ）アミラーゼ）、植物アミラーゼ、組換えアミラーゼ（例えば、細菌、酵母、真菌、植物、昆虫または哺乳動物宿主細胞のいずれか１つから選択された適切な宿主細胞を培養して、組換えＤＮＡ技術により生成されたもの、すなわち天然に存在する配列と相同であるかもしくは実質的に同一であるアミノ酸配列を含む組換えアミラーゼ、天然に存在するアミラーゼコード化核酸と相同であるかもしくは実質的に同一である核酸によってコードされたアミラーゼなど）、化学修飾アミラーゼおよびそれらの混合物が挙げられる。
【００２６】
プロテアーゼは、一般に、タンパク質のアミノ酸間のペプチド結合を切断する酵素（プロテイナーゼ、ペプチダーゼ、タンパク質分解酵素）である。本発明で使用するのに適したプロテアーゼの非限定的な例としては、セリンプロテアーゼ、スレオニンプロテアーゼ、システインプロテアーゼ、アスパラギン酸プロテアーゼ（例えば、プラスメプシン）メタロプロテアーゼおよびグルタミン酸プロテアーゼが挙げられる。加えて、本発明で使用するのに適したプロテアーゼの例としては、これらに限定されないが、動物プロテアーゼ、細菌プロテアーゼ、真菌プロテアーゼ（例えば、アスペルギルス・メレウス（Ａｓｐｅｒｇｉｌｌｕｓ  ｍｅｌｌｅｕｓ）プロテアーゼ）、植物プロテアーゼ、組換えプロテアーゼ（例えば、細菌、酵母、真菌、植物、昆虫または哺乳動物宿主細胞のいずれか１つから選択された適切な宿主細胞を培養して、組換えＤＮＡ技術により生成されたもの、すなわち天然に存在する配列と相同であるかもしくは実質的に同一であるアミノ酸配列を含む組換えプロテアーゼ、天然に存在するプロテアーゼコード化核酸と相同であるかもしくは実質的に同一である核酸によってコードされたプロテアーゼなど）、化学修飾プロテアーゼおよびそれらの混合物が挙げられる。
【００２７】
本発明の組成物は、１種または複数のリパーゼ（すなわち、１種のリパーゼ、または２種以上のリパーゼ）、１種または複数のアミラーゼ（すなわち、１種のアミラーゼ、または２種以上のアミラーゼ）、１種または複数のプロテアーゼ（すなわち、１種のプロテアーゼ、または２種以上のプロテアーゼ）、１種または複数のリパーゼと１種または複数のアミラーゼとの混合物、１種または複数のリパーゼと１種または複数のプロテアーゼとの混合物、１種または複数のアミラーゼと１種または複数のプロテアーゼとの混合物、あるいは１種または複数のリパーゼと１種または複数のアミラーゼおよび１種または複数のプロテアーゼとの混合物を含むことができる。
【００２８】
一実施形態では、消化酵素は、様々なリパーゼ（例えば、リパーゼ、コリパーゼ、ホスホリパーゼＡ２、コレステロールエステラーゼ）、プロテアーゼ（例えば、トリプシン、キモトリプシン、カルボキシペプチダーゼＡおよびＢ、エラスターゼ、キニノゲナーゼ、トリプシンインヒビター）、アミラーゼ、および任意選択的にヌクレアーゼ（リボヌクレアーゼ、デオキシリボヌクレアーゼ）を含むブタ膵臓抽出物である。別の実施形態では、消化酵素はヒト膵液と実質的に同様である。さらに別の実施形態では、消化酵素はパンクレリパーゼＵＳＰである。
【００２９】
ブタ膵酵素調製物は広く使用されるが、約７５％少ないリパーゼ活性を含有するウシ酵素調製物は、ブタ製品を摂取しない患者のための代替物である。膵酵素（リパーゼ、アミラーゼおよびプロテアーゼ）の微生物調製物も存在する。特定の細菌（例えば、バークホルデリア・プランタリー（Ｂｕｒｋｈｏｌｄｅｒｉａ  ｐｌａｎｔａｒｉｉ））および真菌（例えば、アスペルギルス・ニガー（Ａｓｐｅｒｇｉｌｌｕｓ  ｎｉｇｅｒ）、リゾプス・アリズス（Ｒｈｉｚｏｐｕｓ  ａｒｒｈｉｚｕｓ））が、実質的な脂肪分解活性と胃酸分解に対するより大きな抵抗性とを有するパンクレアチン酵素を産生することが示されている。
【００３０】
組成物のリパーゼ活性は、約２，５００〜約２８，０００ＩＵ（ＵＳＰ法）、約２，７００〜約３，３００ＩＵ、約４，５００〜約５，５００ＩＵ、約９，０００〜約１１，０００ＩＵ、約１３，５００〜約１６，５００ＩＵ、および約１８，０００〜約２２，０００ＩＵ、約２５，０００〜約２７，５００ＩＵ、ならびにそれらの間のすべての範囲および部分範囲とすることができる。組成物のアミラーゼ活性は、約６，０００〜約２２，５００ＩＵ（ＵＳＰ）、例えば、約６，４００〜約２６，３００ＩＵ、約１０，７００〜約４３，８００ＩＵ、約２１，５００〜約８７，５００ＩＵ、約３２，１００〜約１３１，３００ＩＵ、約４２，９００〜約１７５，０００ＩＵ、約５３，６００〜約２１８，７００ＩＵ、ならびにそれらの間のすべての範囲および部分範囲とすることができる。組成物のプロテアーゼ活性は、約５，０００〜約１３０，０００ＩＵ（ＵＳＰ）、例えば、約５，０００〜約１５，４００ＩＵ、約８，４００〜約２５，７００ＩＵ、約１６，８００〜約５１，３００ＩＵ、約２５，０００〜約７７，０００ＩＵ、約３３，５００〜約１０２，８００ＩＵ、約４１，８００ＩＵ〜約１２８，３００ＩＵ、ならびにそれらの間のすべての範囲および部分範囲とすることができる。
【００３１】
一実施形態では、リパーゼ活性は、約２，７００〜約３，３００ＩＵの範囲であり、アミラーゼ活性は、約６，４００〜約２６，３００ＩＵの範囲であり、プロテアーゼ活性は、約５，０００〜約１５，４００ＩＵ（ＵＳＰ）の範囲である。別の実施形態では、リパーゼ活性は約４，５００〜約５，５００ＩＵの範囲であり、アミラーゼ活性は、約１０，７００〜約４３，８００ＩＵの範囲であり、プロテアーゼ活性は、約８，４００〜約２５，７００ＩＵ（ＵＳＰ）の範囲である。別の実施形態では、リパーゼ活性は、約９，０００〜約１１，０００ＩＵの範囲であり、アミラーゼ活性は、約２１，５００〜約８７，５００ＩＵの範囲であり、プロテアーゼ活性は、約１６，８００〜約５１，３００ＩＵ（ＵＳＰ）の範囲である。別の実施形態では、リパーゼ活性は、約１３，５００〜約１６，５００ＩＵの範囲であり、アミラーゼ活性は、約３２，１００〜約１３１，３００ＩＵの範囲であり、プロテアーゼ活性は、約２５，０００〜約７７，０００ＩＵ（ＵＳＰ）の範囲である。さらに別の実施形態では、リパーゼ活性は、約１８，０００〜約２２，０００ＩＵの範囲であり、アミラーゼ活性は、約４２，９００〜約１７５，０００ＩＵの範囲であり、プロテアーゼ活性は、約３３，５００〜約１０２，８００ＩＵ（ＵＳＰ）の範囲である。さらに別の実施形態では、リパーゼ活性は、約２５，０００〜約２７，５００ＩＵの範囲であり、アミラーゼ活性は、約５３，６００〜約２１８，７００ＩＵの範囲であり、プロテアーゼ活性は、約４１，８００ＩＵ〜約１２８，３００ＩＵ（ＵＳＰ）の範囲である。
【００３２】
さらに別の実施形態では、リパーゼ活性は、約５，０００ＰｈＥｕｒリパーゼ単位〜約３０，０００ＰｈＥｕｒリパーゼ単位の範囲にあり、この活性は、約５，０００または約１０，０００または約１５，０００または２０，０００または約３０，０００ＰｈＥｕｒリパーゼ単位とすることができる。
【００３３】
組成物中のアミラーゼ／リパーゼの比は、約１〜約１０の範囲とすることができ、特定の実施形態では、アミラーゼ／リパーゼの比は、約２．３８〜約８．７５（酵素アッセイはＵＳＰに従って実施される）とすることができる。本発明の組成物または経口投与剤形中のプロテアーゼ／リパーゼの比は、約１〜約８の範囲とすることができ、特定の実施形態では、約１．８６〜約５．１３（酵素アッセイはＵＳＰに従って実施される）とすることができる。
【００３４】
本発明の組成物または投与剤形中の消化酵素の総量（重量による）は、約２０〜１００％、約４０〜１００％、約４０〜９０％、約４０〜８０％、約４０〜７０％、約４０〜６０％、約４０〜５０％、およびそれらの間のすべての範囲もしくは部分範囲、または約２０％、約３０％、約４０％、約５０％、約６０％、約７０％、約８０％、約９０％、または約１００％とすることができる。一実施形態では、消化酵素の総量は４０〜８０％である。別の実施形態では、消化酵素（例えばパンクレリパーゼ）の総量は約５５〜６５％である。
【００３５】
用語「粒子」は、これらに限定されないが、篩別によって測定すると、約２００μｍ〜約８００μｍ、約２００μｍ〜約７００μｍ、約２００μｍ〜約６００μｍ、約２００μｍ〜約５００μｍ、約２００μｍ〜約４００μｍ、約２５０μｍ〜約８００μｍ、約２５０μｍ〜約７００μｍ、約２５０μｍ〜約６００μｍ、約２５０μｍ〜約５００μｍ、約３００μｍ〜約８００μｍ、約３００μｍ〜約７００μｍ、約３００μｍ〜約６００μｍ、約３００μｍ〜約５００μｍ、約４００μｍ〜約８００μｍ、約４００μｍ〜約７００μｍ、約４００μｍ〜約６００μｍ、約４００μｍ〜約５００μｍ、約７００μｍ〜約８００μｍおよびそれらの間のすべての部分範囲を含む約１００μｍ〜約８００μｍの範囲の粒径を典型的に有するマイクロ粒子、マイクロ顆粒、ビーズペレット、グラニュレート（ｇｒａｎｕｌａｔｅ）、マイクロスフェア、粉末等を含む。
【００３６】
粒子（マイクロペレットおよびマイクロ顆粒など）は、外的環境から酵素を保護することができる（湿気などから、保護コーティング）、または分離膜として機能することができる（密封コーティング）、または薬物放出を調節することができる（機能コーティング）１種または複数のコーティングを有することができる。コーティング組成物は、１種または複数の親水性ポリマー、および１種または複数の可塑剤、および任意選択的に医薬的に許容される疎水性材料、ならびにそれらの混合物を含む。前記疎水性材料は、抗タッキング特性があってもよい（例えば、タルク、ステアリン酸マグネシウム、コロイド状二酸化ケイ素、例えばステアリン酸、パルミチン酸、またはモノステアリン酸グリセリン、パルミトステアリン酸グリセリンなどの脂肪酸エステル、およびそれらの混合物）。消化酵素混合物の供給源および組成物の使用意図に応じて、親水性ポリマーと疎水性剤との比は、重量で約１０：１〜約１：１０の範囲にすることができる。別の実施形態では、親水性ポリマーと疎水性剤との比は、重量で約５：１〜約１：５の範囲にすることができる。親水性ポリマーの非限定的な例としては、ヒドロキシプロピルセルロース、ヒドロキシプロピル−メチルセルロース、ポリビニルアルコール、ビニルピロリドン−ビニルアセテートコポリマー（例えば、ＢＡＳＦからのＫｏｌｌｉｄｏｎ（登録商標）ＶＡ６４）、ある低粘度のエチルセルロース（例えば、ウッベローデ粘度計を使用して測定した場合、８０／２０トルエン／アルコール中の５％溶液で２５℃の粘度が１０ｃｐｓ以下）およびそれらの混合物などが挙げられる。
【００３７】
適切な可塑剤の非限定的な例としては、トリアセチン、クエン酸トリブチル、クエン酸トリエチル、アセチルクエン酸トリｎ−ブチル、フタル酸ジエチル、セバシン酸ジブチル、ポリエチレングリコール、ポリプロピレングリコール、ヒマシ油、アセチル化モノグリセリド、アセチル化ジグリセリド、セチルアルコールおよびそれらの混合物が挙げられる。一実施形態では、可塑剤は非フタル酸エステル系可塑剤である。
【００３８】
一実施形態では、密封コーティングを構成する親水性ポリマーは低粘度エチルセルロース（例えば、Ｅｔｈｙｌｃｅｌｌｕｌｏｓｅ  Ｓｔａｎｄａｒｄ  Ｐｒｅｍｉｕｍ７または１０）と組み合わせたヒドロキシプロピルセルロース（例えば、Ｋｌｕｃｅｌ  ＬＦ）であり、可塑剤はクエン酸トリエチルである。別の実施形態では、コーティングを構成する親水性ポリマーはヒドロキシプロピルセルロースであり、可塑剤はクエン酸トリエチルであり、抗タッキング剤はタルクである。特定の他の実施形態では、親水性ポリマーはヒドロキシプロピルセルロースと低粘度エチルセルロースとの混合物であり、可塑剤はセバシン酸トリブチルであり、疎水性剤はグリセリルパルミテート−ステアレートである。密封材コーティングは、薬物含有密封材でコーティングされたコアの重量約１％〜約２０％、例えば、約１％、約２％、約３％、約４％、約５％、約７％、約１０％、約１２％、約１５％、約１７％、または約２０％（それらの間のすべての範囲および部分範囲を含めて）を構成することができる。
【００３９】
例えば基材の上へのコーティングに関して、用語「の上に配置された」は、例えば基材に対するコーティングの相対的位置を指し、コーティングが基材に直接接触していることは要求されない。例えば、基材「の上に配置された」第１のコーティングが、基材と直接接触することも、または１つまたは複数の介在材料もしくはコーティングが、第１のコーティングと基材との間に挿入されることもある。言いかえれば、例えば、マイクロペレットまたはマイクロ顆粒の上に配置された遅延放出性（ＤＲ）または腸溶性ポリマーコーティングは、粒子の上に直接沈着した腸溶性コーティングを指すことも、または粒子の上に沈着した保護コーティングの上に沈着したＤＲコーティングを指すこともある。コーティングが胃腸環境から薬物を保護する場合、コーティング組成物は１種または複数の腸溶性ポリマーおよび１種または複数の可塑剤を含む。このタイプのコーティングは、コーティングされていないマイクロペレットもしくはマイクロ顆粒の上に、またはコーティングされた（例えば、保護コーティングされた、もしくは密封コーティングされた）粒子の上に配置することができる。
【００４０】
用語「腸溶性ポリマー」は、胃内容物から消化酵素を保護するポリマー、例えば、酸性ｐＨレベル（例えば、胃の中）では不溶性であるが、より高いｐＨレベル（例えば、下方胃腸管の中）では分解もしくは溶解するポリマー、または胃内容物と消化酵素との接触が、胃腸管の残部とは対照的に、胃の中で相対的に少なくなることが確実な十分遅い水和速度もしくは浸食速度を有するポリマーを意味する。本明細書で使用する用語「ｐＨ感受性」は、ｐＨ依存的な溶解性を示すポリマーを指す。腸溶性コーティングは、少なくとも１種の腸溶性ポリマーおよび少なくとも１種の可塑剤（例えば、ヒプロメロースフタレート、ＨＰ−５５およびクエン酸トリエチル）を含む。一実施形態では、腸溶性ポリマーと可塑剤との比は、重量で約７：３〜約９：１の範囲である。別の実施形態では、腸溶性ポリマーと可塑剤との比は、重量で９：１であり、腸溶性コーティングは、コーティングされたマイクロペレットまたはマイクロ顆粒の重量を基準にして、約１０重量％〜約５０重量％の範囲とすることができる。腸溶性コーティングは、重量で約２５％〜約４０％の範囲にあり、コーティングレベルは、重量で約１０％、約２５％、約３０％、約３３％、約３５％、約４０％、約５０％とすることができる。
【００４１】
本発明に適した腸溶性ポリマーの例としては、これらに限定されないが、セルロースアセテートフタレートおよびヒドロキシプロピルメチルセルロースフラレート、ヒドロキシプロピルメチルセルロースアセテートスクシネート、ポリビニルアセテートフタレート、セルロースアセテートスクシネート、ｐＨ感受性メタクリル酸−メタクリル酸メチルコポリマー（例えば、Ｅｕｄｒａｇｉｔ  Ｓ  １００、Ｅｕｄｒａｇｉｔ  Ｌ  １００、Ｅｕｄｒａｇｉｔ  ＦＳ等）、脂肪酸、ワックス、シェラックおよびそれらの混合物が挙げられる。特定の実施形態では、腸溶性ポリマーは有機溶媒に可溶である。
【００４２】
腸溶性コーティング層に組み込むのに適した可塑剤の非限定的な例としては、トリアセチン、クエン酸トリブチル、クエン酸トリエチル、アセチルクエン酸トリｎ−ブチル、セチルアルコール、フタル酸ジエチル、セバシン酸ジブチル、ポリエチレングリコール、ポリプロピレングリコール、ヒマシ油、アセチル化モノグリセリド、アセチル化ジグリセリドおよびそれらの混合物が挙げられる。一実施形態では、可塑剤は非フタル酸エステル系可塑剤である。
【００４３】
腸溶性ポリマーは、重量で約１０：１〜約１：６０の範囲とすることができるタルクなどの少なくとも１種の無機剤をさらに含むことができる。別の実施形態では、腸溶性ポリマーと少なくとも１種の無機材料との比は、重量で約８：１〜約１：５０の範囲である。別の実施形態では、腸溶性ポリマーと少なくとも１種の無機材料との比は、重量で約６：１〜約１：４０の範囲である。別の実施形態では、腸溶性ポリマーと少なくとも１種の無機材料との比は、重量で約５：１〜約１：３０の範囲である。別の実施形態では、腸溶性ポリマーと少なくとも１種の無機材料との比は、重量で約４：１〜約１：２５の範囲である。別の実施形態では、腸溶性ポリマーと少なくとも１種の無機材料との比は、重量で約４：１〜約１：９の範囲である。別の実施形態では、腸溶性ポリマーと少なくとも１種の無機材料との比は、重量で約１０：４〜約１０：７の範囲である。
【００４４】
さらに別の実施形態では、腸溶性コーティングは、少なくとも１種の抗タッキング剤をさらに含むことができる。適切な抗タッキング剤の非限定的な例としては、コロイド状二酸化ケイ素、ステアリン酸マグネシウム、タルク、モノステアリン酸グリセリンおよびそれらの混合物が挙げられる。一実施形態では、抗タッキング剤はタルクである。腸溶性ポリマーまたは組成物の使用意図に応じて、腸溶性ポリマーと抗タッキング剤との比は、重量で約１０：０〜約６：４の範囲とすることができる。別の実施形態では、腸溶性ポリマーと抗タッキング剤との比は、重量で約９：１〜約７：３の範囲である。
【００４５】
他に指示されていない限り、本明細書に記載の様々なコーティングまたは層の量（「コーティング重量」）は、コーティング前の粒子またはビーズの初期重量に対する、乾燥コーティングにより加えられた、粒子（マイクロペレットまたはマイクロ顆粒）のパーセント重量増加として表現される。したがって、１０％コーティング重量は、粒子重量を１０％増加させる乾燥コーティングを指す。
【００４６】
本発明の組成物は、適切なデバイス（Ｖｅｃｔｏｒ  ＣｏｒｐｏｒａｔｉｏｎからのＧｒａｎｕｒｅｘ  ＧＸ−３５など）での制御された球状化または粉末層状化、米国特許第６，５６９，４６２号明細書の開示に基づくパンコーティング機での粉末層状化等、任意選択的に、疎水性の抗タッキング剤を任意選択で含有する親水性ポリマー溶液でマイクロペレットをコーティングすることによって、約３０μｍ以下の中央粒径を有する、少なくとも１種の消化酵素を含むマイクロペレットを形成することを含む。コーティングされたマイクロペレットおよびコーティングされていないマイクロペレットは両方とも、特に、ブタ由来消化酵素混合物を含むマイクロペレットの場合、腸溶性ポリマーおよび任意選択的に可塑剤を含む胃抵抗性コーティングで場合に応じてコーティングされる。
【００４７】
制御された球状化または粉末層状化のいずれかによる、滑らかな表面テクスチャを有する小さな球状マイクロペレットの製造には、機能性ポリマーを用いてコーティングするための滑らかな形態を有するマイクロペレットを実現するために、３０μｍ未満、好ましくは２０μｍ未満の中央径を有する消化酵素の使用が必要である。「ドライセル」または「ウェットセル」の方法による、微粉末および顆粒状マイクロ粒子の粒径分布を測定するために、Ｍａｌｖｅｒｎ  ＩｎｓｔｒｕｍｅｎｔｓのＭａｓｔｅｒｓｉｚｅｒなどのレーザー粒径アナライザーが典型的には使用される。ローアングルレーザービームを用いて粉末の懸濁液を測定し、ユーザ用マニュアル（Ｔｈｅ  Ｍａｌｖｅｒｎ  Ｍａｓｔｅｒｓｉｚｅｒ  Ｂａｓｉｃ  ｕｓｅｒ  ｍａｎｕａｌ；ＱＳ  Ｓｍａｌｌ  Ｖｏｌｕｍｅ  Ｓａｍｐｌｅ  Ｄｉｓｐｅｒｓｉｏｎ  Ｕｎｉｔ  ｕｓｅｒ  ｍａｎｕａｌ）の指示のとおりに、粒径分布を計算する。体積中央径ｄ（ｖ，０．５）は、分布の５０％が上回り、５０％が下回る直径として定義された。体積径ｄ（ｖ，０．９）は、体積分布の９０％がこの値を下回り、１０％が上回る直径として定義された。体積径ｄ（ｖ，０．１）は、体積分布の１０％がこの値を下回り、９０％がこの値を上回る直径として定義された。本発明の特定の実施形態では、マイクロペレットコアの粒径の範囲は約４００μｍ〜約６００μｍである。微粉末およびマイクロ粒子の粒径分布はまた、一連の篩を使用して、ソニックシフター法により測定される。
【００４８】
制御された球状化および粉末層状化工程は両方とも、微粉化された薬物粒子を必要とする（例えば、最も望ましくは：ｄ（ｖ，０．５）＜２０μｍおよびｄ（ｖ，０．９）＜５０μｍ）。製品層の内部にそのような微粉末を保持するために、空気速度および全空気流量の両方を、最適化／バランス化し、工程の間制御する必要がある。ポリマー結合剤溶液への溶解または懸濁および噴霧によってよりもむしろ粉末形態に活性物を添加することによって顕著な時間節約が達成される。この工程により、狭い粒径分布と共に高い有効収量が得られる。
【００４９】
粉末層状化の間に、リアクタ（Ｇｒａｎｕｒｅｘ  ＧＸ−３５など）のローターインサートに、所望の粒径の糖スフェアなどの不活性コアを装填する。消化酵素を含む微粉末混合物、Ｃａｂ−Ｏ−Ｓｉｌ（コロイド状二酸化ケイ素）などの流動補助剤（ｆｌｏｗ−ａｉｄ）および任意選択的にポリマー結合剤を、高精度粉末供給装置によってマシンに供給し、コア材料の外側に消化酵素粉末を結合させるためのポリマー結合剤溶液を同時に噴霧しながら、不活性コアの上に直接分散させる。したがって、マイクロペレットは層を重ねながら成長し始める。低収量の原因となる過剰湿潤および凝集または不活性コアへの粉末の非効率的粘着のいずれかを回避するために、粉末供給速度と噴霧速度とのバランスを取ることが粉末層状化の間に達成すべき最も重要なパラメータである。すべての遊離粉末がマイクロペレットとして結合した後に、噴霧を停止し、マイクロペレットを乾燥する。乾燥は、例えば、スリットエアのみを使用するか、またはＭｏｖ−Ａ−Ｂｌｏと呼ばれるエアー装置を弱くして使用するかのいずれかにより実施することができる。
【００５０】
制御された球状化の間、適切な装置（Ｇｒａｎｕｒｅｘ  ＧＸ−３５など）のローターインサートに、消化酵素、Ｃａｂ−Ｏ−Ｓｉｌ（コロイド状二酸化ケイ素）などの流動補助剤および任意選択的にポリマー結合剤を含む微粉末混合物を装填する。制御された速度で粉末供給装置（Ｋ−Ｔｒｏｎ）によって粉末をユニットの中に加えながら、同時にポリマー結合剤溶液を制御された速度で微粉末層の上に噴霧する。結合剤溶液の微細ミストは、層を重ねながら成長するマイクロペレット上への消化酵素粉末混合物の結合を促進する。さらに、空気速度、空気流量、製品温度、噴霧速度などの工程パラメータを最適化／制御化し、それによって、低収量の原因となる湿潤／凝集またはマイクロペレット上への連続的な粉末層の非効率的な粘着を回避する。
【００５１】
コーティングされていない、または密封コーティングされた消化酵素を含有するマイクロペレットに、腸溶性コーティング溶液を、流動層コーティングもしくはパンコーティングを介して、またはＧｒａｎｕｒｅｘ  ＧＸ−３５等介して、さらに塗布することができる。
【００５２】
制御された球状化および粉末層状化法に加えて、消化酵素を含む小粒径粒子は、約２５０μｍ〜５００μｍの間の粒径（篩別法により測定する場合）を有するパンクレアチン原料から出発してコアセルベーション工程により調製することができる。この工程では、消化酵素粒子は、シクロヘキサンなどの疎水性有機溶媒に溶解した水不溶性ポリマーを含む溶液を用いて処理される。水不溶性ポリマー溶液はさらに相分離剤を含む。この工程は、コアセルベーションリアクタの中で、不溶性ポリマー、疎水性有機溶媒および相分離剤の溶液ならびに懸濁した消化酵素粒子を８０℃まで加熱し、次いで、この混合物を約２５℃まで冷却することを含む。相分離剤としては、ポリエチレンブチルゴム、ポリブタジエン、ポリイソブチレン、有機ケイ素ポリマーおよびパラフィンが挙げられる。この工程は、酵素の酵素的安定性に影響を及ぼさない。得られた消化酵素マイクロ顆粒は、低い含水率（３％未満）を有し、約２００〜約７００ミクロン、約２００〜約６００ミクロン、約２５０〜約５００ミクロン、ならびにそれらの間のすべての範囲および部分範囲を含む、約８００ミクロン未満の粒径（篩別により測定する場合）を有する。コアセルベート化ポリマーを有する前記マイクロ顆粒は、医薬的に許容される溶媒に溶解した腸溶性ポリマーを含む腸溶性コーティング溶液でさらにコーティングすることができる。腸溶性コーティングステップは、腸溶性コーティング溶液を用いて、流動層コーティング手段またはパンコーティング手段によりマイクロ顆粒をコーティングするステップを含む。好ましい腸溶性ポリマーは、有機溶媒に可溶なものであり、ヒドロキシプロピルメチルセルロースフタレートである。好ましい溶媒はアセトンである。得られた腸溶性コーティングされたマイクロ顆粒の含水率は、約３％未満、好ましくは約２％未満であり、約１．２％のこともある（乾燥減量（ＬｏＤ）試験（ＵＳＰ法）により測定する場合）。
【００５３】
少なくとも１種の消化酵素を含有する低い粒径ディメンションの粒子を含む本発明の組成物および経口投与剤形の含水率は、約４，５％以下、約３％以下、約２．５％以下、約２％以下、約１．５％以下であり、それらの間のすべての範囲および部分範囲（例えば、約１．５％〜約４．５％の間、約１．５％〜約１．５％の間、約１．５％〜約２．５％の間）が含まれる。本発明の組成物または経口投与剤形は、保存に際して低い含水率を維持し、高い含水率、例えば４％以上で維持される従来の組成物と比較して、実質的により安定である。本発明の投与剤形および組成物の含水率の測定は、乾燥減量測定法（ＬｏＤ、ＵＳＰ法）によって行われる。
【００５４】
本発明の組成物および投与剤形が示す消化酵素活性の損失は、６ヶ月の加速安定性試験後に、約２５％以下、約２０％以下、約１５％以下、約１２％以下、約１０％以下、約８％以下または約５％以下である。この安定性試験には、４０℃、相対湿度７５％で密封ナイアレン（Ｎｉａｌｅｎｅ）バッグの中に組成物を保存することが含まれる。
【００５５】
用語「加速安定性試験」または「加速保存試験」は、酵素活性に対する比較的長期間の保存条件の影響をシミュレートするために使用する試験方法を指すが、この方法は比較的短時間で実施することができる。加速安定性試験法は、当技術分野では、リアルタイムの安定性試験の信頼性できる代替法であることが知られており、生物学的製品の有効期間を正確に予測することができる。このような「加速安定性試験」の条件は当技術分野で知られており、参照により本明細書に組み込まれる、Ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ  Ｃｏｎｆｅｒｅｎｃｅ  ｆｏｒ  Ｈａｒｍｏｎｉｚａｔｉｏｎ  ｏｆ  Ｔｅｃｈｎｉｃａｌ  Ｒｅｑｕｉｒｅｍｅｎｔｓ  ｆｏｒ  Ｒｅｇｉｓｔｒａｔｉｏｎ  ｏｆ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｓ  ｆｏｒ  Ｈｕｍａｎ  Ｕｓｅ：Ｓｔａｂｉｌｉｔｙ  Ｔｅｓｔｉｎｇ  ｏｆ  Ｎｅｗ  Ｄｒｕｇ  Ｓｕｂｓｔａｎｃｅｓ  ａｎｄ  Ｐｒｏｄｕｃｔｓ  ＱｌＡに準拠する。
【００５６】
本発明の微細パンクレアチン粒子（マイクロペレットまたはマイクロ顆粒など）を含有する消化酵素組成物は、従来の錠剤／カプセル剤を飲み込むのに困難を感じる小児患者、高齢患者および／または嚥下障害を有する患者に適した医薬投与剤形（例えば、カプセル剤、サッシェ剤および迅速に分散する錠剤）を調製するために使用することができる。これらの投与剤形は患者への経口投与および経腸投与に適している。カプセル剤などの投与剤形は食物と一緒に飲み込んだり、または分散させたりすることができる。
【００５７】
微細マイクロペレットまたはマイクロ顆粒を充填するカプセルは、ヒドロプロピル−メチルセルロースカプセルとすることができ、その含水率は約２重量％以下であり、複数のコーティングされたマイクロペレットまたはマイクロ顆粒を充填する前に乾燥させることができる。
【００５８】
本発明の組成物はまた、サッシェ剤、例えば単用量サッシェ剤に製剤化することができ、この製剤では、本発明の組成物を、例えばサッシェに各用量を入れることにより、別々にパッケージされた単回用量に分割する。使用の際に、これらのサッシェ剤は水などの水性媒体の中に調合し、それによって患者に投与する懸濁液を形成する。あるいは、本発明の組成物は、サッシェ剤から口に直接投与することも、または食物に直接配合することもできる。直接摂取されるか、または食物に直接配合される場合、そのような単回用量サッシェ剤は、「ドライサッシェ剤」と呼ばれる。
【００５９】
したがって、様々な投与剤形の本発明の組成物は、１種または複数の医薬的に許容される賦形剤をさらに含むことができる。用語「賦形剤」は、加工性、安定性、嗜好性などを改善するために、組成物の活性成分（例えば、消化酵素）を含む粒子とブレンドされた他の医薬的に許容される成分を含む。適切な賦形剤の非限定的な例としては、医薬的に許容される結合剤、甘味料、着香料、安定剤、崩壊剤、滑沢剤、流動促進剤、希釈剤およびそれらの混合物が挙げられる。医薬製剤の当業者には、特定の賦形剤が組成物の中で複数の機能を果たし得ることが認識されよう。したがって、例えば、結合剤は増量剤としても機能することができる。
【００６０】
適切な滑沢剤の非限定的な例としては、ステアリン酸カルシウム、ステアリン酸マグネシウム、ナトリウムステアリルフマラート、ステアリン酸、ステアリン酸亜鉛、タルク、ワックス、ベヘン酸グリセリル、Ｓｔｅｒｏｔｅｘ（登録商標）、Ｓｔｅａｒｏｗｅｔ（登録商標）およびそれらの混合物が挙げられる。適切な流動促進剤の非限定的な例としては、コロイド状二酸化ケイ素、タルクおよびそれらの混合物が挙げられる。適切な安定剤の非限定的な例としては、トレハロース、プロリン、デキストラン、マルトース、スクロース、マンニトール、ポリオール、シリカゲル、アミノグアニジン、ピリドキサミンおよびそれらの混合物が挙げられる。
【００６１】
崩壊剤の非限定的な例としては、クロスポビドン（例えば、Ｐｏｌｙｐｌａｓｄｏｎｅ  ＸＬ、Ｐｏｌｙｐｌａｓｄｏｎｅ  ＸＬ−１０）、クロスカルメロースナトリウム（例えば、Ａｃ−Ｄｉ−Ｓｏｌ）、デンプングリコール酸ナトリウム（例えば、Ｅｘｐｌｏｔａｂ、Ｅｘｐｌｏｔａｂ  ＣＶ）およびそれらの混合物、微結晶セルロース、デンプングリコール酸ナトリウムまたはクロスカルメロースナトリウムおよびクロスポビドンなどが挙げられる。
【００６２】
崩壊剤の量は、約０．１〜３０％、約１％〜３０％、約１％〜２５％、約１％〜２０％、約１％〜１５％、約１％〜１０％、約１％〜５％、約５％〜１０％、約５％〜１５％、約５％〜２０％、約５％〜２５％または約５％〜３０％、ならびにそれらの間のすべての範囲および部分範囲のいずれの範囲であってもよい。一実施形態では、崩壊剤の量は、約２％〜４％または約２％〜３％または約２．５％である。
【００６３】
適切な希釈剤および増量剤の非限定的な例としては、無水リン酸水素カルシウム、無水リン酸水素カルシウム二水和物、第三リン酸カルシウム、セルロース、ラクトース、炭酸マグネシウム、微結晶セルロース、微結晶セルロース、デンプン、リン酸カルシウム、ラクトース、スクロース、マンニトール、ソルビトールおよびそれらの混合物が挙げられる。一実施形態では、希釈剤は微結晶セルロース（例えば、Ａｖｉｃｅｌ）である。別の実施形態では、希釈剤はデンプンである。別の実施形態では、希釈剤はラクトースである（例えば、Ｐｈａｒｍａｔｏｌ）。別の実施形態では、本発明の組成物は、微結晶セルロース、デンプンおよびラクトースなどの希釈剤の組合せを含むことができる。
【００６４】
希釈薬の量は、約０．１〜９９％、約１％〜３０％、約ｌ％〜２５％、約１％〜２０％、約１％〜１５％、約１％〜１０％、約１％〜５％、約５％〜１０％、約５％〜１５％、約５％〜２０％、約５％〜２５％または約５％〜３０％、ならびにそれらの間のすべての範囲および部分範囲のいずれの範囲であってもよい。一実施形態では、希釈剤の量は、約２％〜５％、約３％〜５％または約４％である。
【００６５】
本発明の組成物は、コーティングされていないマイクロペレットまたはマイクロ顆粒および／または当技術分野で公知の方法を使用して胃抵抗性ポリマーでコーティングされた粒子を必要量充填することによりカプセル剤として製剤化することができる。あるいは、消化酵素組成物は、迅速に分散する錠剤として製剤化することができる。迅速に分散する錠剤（ＲＤＴ）として経口投与剤形を形成するステップは、例えば、前記機能性ポリマーでコーティングされたマイクロペレットまたはマイクロ顆粒および少なくとも１種の医薬的に許容される賦形剤を含むブレンドを、回転式打錠機ならびに望ましい場合にはロゴおよび／またはスコアを備えた適切なツーリングを使用して、迅速に分散する錠剤形態に圧縮することを含むことができる。迅速に分散する錠剤は、（１）錠剤全体を飲み込む投与様式、（２）錠剤を半分に割って別々に飲み込む投与様式、ならびに（３）約１５０ｍＬの水、スワール（ｓｗｉｒｌ）および飲料に錠剤を分散させる投与様式のうちの１つによって疾患状態を治療するための薬剤を必要とする対象または患者に経口投与するのに適している。このように形成された迅速に分散する錠剤は、水または体液と接触すると迅速に分散し、胃から排出されるまでは胃抵抗性であり、そして小腸管の中で消化酵素を迅速かつ実質上完全に放出することになる。圧縮混合物はステアリン酸マグネシウムなどの滑沢剤を用いて内部から滑らかにするか、または外部の潤滑装置（Ｍａｔｓｕｉ  ＥｘＬｕｂｅなど）を使用して圧縮前にパンチおよびダイを滑らかにすることができる。
【００６６】
本発明の組成物または投与剤形（例えば、錠剤またはカプセル剤またはサッシェ剤）は、適切なパッケージに保存することができる。パッケージは、輸送および／または保存の間、湿気の進入を最小限にすべきであり、防湿にして、さらに乾燥剤を含有する。パッケージは、耐湿性材料で構成される密閉容器を含む。乾燥剤（すなわち、水を吸収するか、水と反応するか、または水を吸収する物質であって、それによってパッケージ内部の湿度を低下させることができる物質）および少なくとも１種の投与剤形が密閉容器の内部にある。耐湿性材料は、金属、ガラス、プラスチックおよび金属でコーティングされたプラスチックからなる群から選択され、乾燥剤は、分子篩、粘土、シリカゲル、活性炭およびそれらの混合物からなる群から選択される。用語「防湿」は、水の浸透性が１年間で容器の１ｃｍ３当たり約０．５ｍｇ未満の水であるパッケージを指す。
【００６７】
本発明の組成物により、消化酵素欠乏症に関連した症状または疾患を罹患する患者において、脂肪、タンパク質および炭水化物の吸収が改善される。一実施形態では、本発明の組成物、具体的にはパンクレリパーゼ組成物またはパンクレアチン組成物を使用して、各種疾患に関連した膵外分泌機能不全（ＥＰＩ）を治療することができる。このような疾患としては、これに限定されないが、嚢胞性線維症（ＣＦ）が挙げられる。一部の実施形態では、このような組成物は、嚢胞性線維症患者および小児患者を含めた他の患者におけるＥＰＩに関連した吸収不良（例えば、脂肪の）を実質的に緩和することができる。一部の実施形態では、このような組成物は、嚢胞性線維症患者において、脂肪吸収係数（ＣＦ−Ａ）を少なくとも約８５％以上に増加させることができる。このような結果は、他の薬剤または組成物との同時投与の有無にかかわらず達成することができる。一実施形態では、このようなＣＦ−Ａ結果は、プロトンポンプ阻害剤の同時投与なしで達成される。
【００６８】
ＧＩｐＨレベルが低い（例えば、ＧＩｐＨレベル＜約４）と確認された患者の場合には、プロトンポンプ阻害剤、制酸剤およびＧＩ管のｐＨを上昇させる他の薬物と共に本発明の組成物または投与剤形を投与することにより、改善された結果を得ることができる。例えば、本発明の組成物または投与剤形を、プロトンポンプ阻害剤、制酸剤、または他の薬物と別々に（プロトンポンプ阻害剤、制酸剤等の投与の前、同時、または後に）投与することができる。あるいは、単一投与剤形として、プロトンポンプ阻害剤、制酸剤または他の薬物を本発明のパンクレアチン組成物と併用することができる。
【００６９】
さらに別の実施形態では、本発明は、消化酵素欠乏症に関連した疾患の患者を治療または予防する方法であって、動物、微生物、真菌、細菌を起源とする消化酵素混合物を含むコーティングされていない粒子、胃抵抗性ポリマーを用いてコーティングされたブタ由来消化酵素混合物を含む粒子、またはコーティングされていない粒子および腸溶性コーティングされた粒子の両方の混合物を含む本発明の組成物を、それを必要とする哺乳動物に投与することを含む方法を提供する。一実施形態では、哺乳動物はヒトである。
【００７０】
さらに別の実施形態では、本発明は、消化酵素欠乏症に関連した疾患の患者を治療または予防する方法であって、本発明の組成物または投与剤形をそれを必要とする患者に投与することを含み、本発明の組成物または投与剤形が、少なくとも１種の消化酵素に加えて、プロトンポンプ阻害剤、制酸剤またはＧＩｐＨを上昇させる他の薬剤を含む方法を提供する。さらに別の実施形態では、本発明は、消化酵素欠乏症に関連した患者を治療するかまたは消化酵素欠乏症に関連した疾患を予防する方法であって、プロトンポンプ阻害剤、制酸剤またはＧＩｐＨを上昇させる他の薬剤を含む投与剤形と併用して、本発明の組成物または投与剤形を投与することを含む方法を提供する。
【００７１】
本発明の組成物または投与剤形を用いて治療できる疾患には、患者の消化酵素がないかもしくは低レベルである症状、または患者が消化酵素の補充を必要とする症状が含まれる。例えば、このような症状としては、嚢胞性線維症、慢性膵炎、他の膵疾患（例えば、遺伝性、外傷後および同種移植片膵炎、ヘモクロマトーシス、シュバックマン症候群、脂肪腫症、または副甲状腺機能亢進症）、癌または癌治療の副作用、外科手術（例えば、胃腸バイパス手術、ウィップル法、膵全摘出術等）の副作用または膵酵素が腸に到達できない他の症状、不十分なミキシング（例えば、ビルロートＩＩ胃摘出術、他のタイプの胃のバイパス手術、ガストリノーマ等）、膵臓が損なわれている可能性のあるＨＩＶおよび糖尿病などの自己免疫性疾患の症候を治療するために使用されるメトホルミンまたはその種の薬物による治療などの薬物治療の副作用、閉塞症（例えば、膵管および胆管の結石症、膵臓および十二指腸の新生物、管狭窄症）、小児脂肪便症、食物アレルギーおよび加齢に関連した吸収不良が挙げられる。
【００７２】
哺乳動物（例えば、ヒト）に毎日投与される本発明の組成物または投与剤形の量は、意図した結果に応じて決まる。熟練医師は、治療すべき症状の診断に基づいて必要な用量を処方することができる。
【００７３】
例えば、ヒトの消化酵素不全症（例えば、嚢胞性線維症に関連する）の治療の場合は、米国ＦＤＡの勧告に従って、開始用量を５００〜１０００リパーゼ単位／ｋｇ／食事とし、総用量は２５００リパーゼ単位／ｋｇ／食事または４０００リパーゼ単位／ｇ脂肪／食事を超えるべきでない。典型的には、患者は１日に、好ましくは食物と一緒に投与される少なくとも４つの投与剤形を受けるべきである。
【００７４】
本明細書に引用された参考文献はすべて、あらゆる目的のために、その内容全体が参照によって組み込まれるものとする。
【実施例】
【００７５】
実施例１〜３のマイクロペレットのｉｎ  ｖｉｔｒｏ効力／胃抵抗性／溶出試験。
リパーゼ活性は、マイクロビュレット、カロメルガラス電極システム、抵抗温度計を装備した電位差滴定装置を使用する認定された滴定法により測定する。ＵＳＰパンクレアチンリパーゼＲＳまたはパンクレリパーゼ標準物質。アミラーゼ活性もまた認定された滴定法により測定し、一方プロテアーゼ活性は認定されたＵＶ検出試験法により測定する。同定は、適正なＲＰ−ＨＰＬＣ法を用いて得られるクロマトグラフィーパターン（例えば、リパーゼ、アミラーゼおよびプロテアーゼに特徴的な特定の相対保持時間での試験酵素および参照／標準物質のピーク）の比較により行う。試験物質と参照／標準物質との間で特徴的ピークのピーク面積は、現行規格を満足しなければならない。ＵＳＰ  Ａｐｐａｒａｔｕｓ  １（バスケット法、１００ｒｐｍ）を使用し、現行のＵＳＰ  Ｇｅｎｅｒａｌ  Ｃｈａｐｔｅｒ＜７１１＞に準拠して、人工胃液ＴＳ８００ｍＬ中で、酵素なしで３７±０．５℃にて６０分間（胃抵抗性）、その後、ｐＨ６．０リン酸緩衝液（水１０００ｍｌ中に塩化ナトリウム２ｇおよびリン酸二水素塩９．２０ｇを溶解し、１Ｎ水酸化ナトリウムを用いてｐＨを６．０±０．０５に調整して得られる）８００ｍＬ中で３０分間（溶出規格を満たすため）溶出試験を行ったときに溶解した消化酵素のパーセント。６０分および９０分に取り出した試料を、認定された電位差滴定法を使用して、リパーゼ活性について試験する。
【００７６】
乾燥減量試験（ＬｏＤ）は、現行のＵＳＰ  Ｃｈａｐｔｅｒ＜７３１＞に準拠して実施する。この試験は、基礎試料２ｇについて実施し、真空下で６０℃にて４時間オーブン中で乾燥させた後、乾燥減量を測定する。
【００７７】
遊離フタル酸含量：遊離フタル酸含量は、参照フタル酸と比較して、適正ＨＰＬＣ法（ＵＶ検出）により検出／定量する。
【００７８】
実施例１
実施例１．Ａ  粉末層状化によるパンクレリパーゼマイクロペレット
ポビドン（ＰＶＰ  Ｋ−３０；５０ｇ）を５０／５０のイソプロパノール／精製水（５００ｇ）に、常時撹拌しながら徐々に加え、１０％ｗ／ｗ固形分のポリマー結合剤溶液を調製する。Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ  Ｐｒｏｔｅｉｎ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓ（２０００ｇ）からのパンクレリパーゼ（ロットＳ１）を、Ｖ−ブレンダーの中で、コロイダルシリカ１０ｇ（流動補助剤、ＷＲ  Ｇｒａｃｅ  Ｃｏ．からのＳｙｌｏｉｄ）およびポビドン（５０ｇ）とブレンドする。糖スフェア（６０〜８０メッシュまたは直径１７０〜２５０μｍ）を、Ｖｅｃｔｏｒ  Ｃｏｒｐｏｒａｔｉｏｎ（Ｉｏｗａ，ＵＳＡ）からのＧｒａｎｕｒｅｘ  ＧＸ−３５の生成ボウルに装填する。粉末供給装置によって消化酵素粉末混合物を制御された速度で供給しながら、１０％ＰＶＰ結合剤溶液を回転する材料層の中に制御された速度で噴霧する。ペレット形成中の最適化工程パラメータは、処理空気温度：約１９〜２０℃、生成物温度：１６±２℃、ローター回転数：４２５ＲＰＭ、外部空気供給：１５０Ｌ／分、噴霧速度：１５ＲＰＭ（約８ｍＬ／分）、スリットを介した圧力降下：水で１．３〜１１ｍｍである。ペレット乾燥中の最適化工程パラメータは、処理空気量：３０ＣＦＭ、処理空気温度：約６０℃、生成物温度：３５℃（乾燥停止まで）、ローター回転数：１８０ＲＰＭ、スリット空気量：１０ＣＦＭ、処理時間：４０分である。入荷原材料ロットの典型的なＬｏＤは、１．５〜２．０％であるが、このように製造された（ロットＳ２）マイクロペレットの含水率（乾燥減量）は４．１％であった。マイクロペレットの組成は、Ｍａｌｖｅｒｎレーザー粒径測定器により測定すると、パンクレアチン：８２．５％、糖スフェア：１４．０％、およびポビドン：３．５％である。粒径分布は、ｄ（０．１）：３７０μｍ、ｄ（０．５）：５２０μｍ、ｄ（０．９）：７３３μｍである。ソニックシフターを使用して測定した粒径分布データを、下表１に示す。
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【００７９】
実施例１．Ｂ  マイクロペレットの胃抵抗性コーティング（ロットＳ３、重量増加：最大４５重量％）
ヒプロメロースフタレート（ＨＰ−５５、７８５．１６ｇ）を、常時撹拌しながらアセトンおよび水の９０／１０混合物に徐々に加えて溶解させた後、ジエチルフタレート（ＤＥＰ、１９６．１５ｇ）を加えて、この可塑剤を溶解させる。７インチボトムスプレーＷｕｒｓｔｅｒ高さ２２ｍｍカラム、２００メッシュの生成物保持スクリーンでカバーされた「Ｄ」ボトム空気分配プレートから１５ｍｍの分配カラムギャップ（１．０ｍｍのポートノズル）を装備したＧｌａｔｔ  ＧＰＣＧ  ３に、実施例１．Ａからのマイクロペレットを装填し、ヒプロメロースフタレート溶液（１５％固形分）を用いて、４５重量％のＤＲコーティングレベルのために、生成物温度３７±１℃、噴霧空気圧１．５バール、入口空気速度５０〜６０ｍ／秒、噴霧流速１５〜４０ｍＬ／分でコーティングする。試料を、２５％、３０％、３５％および４０％のコーティングレベルで取り出す。３５重量％および４５重量％のコーティングレベルのマイクロペレットを胃抵抗性について試験する。このデータに基づくと、３５％ｗ／ｗの遅延放出性コーティングがマイクロペレット上に胃抵抗性特性を付与するのに十分であると判断される。
【００８０】
実施例１．Ｃ  マイクロペレットの胃抵抗性コーティング（重量増加：３５重量％）
ＨＰ−５５／ＤＥＰを用いて、３５重量％（ロットＳ４）のコーティングレベルに胃抵抗性コーティングされたマイクロペレットのバッチを調製する。処理条件は、生成物温度３７〜４２℃、処理空気速度：約５〜６０ｍ／秒である。コーティングされたバッチのＬｏＤは、１０５℃で乾燥すると２．４％であった。遅延放出性パンクレアチンマイクロペレットの粒径分布は、ｄ（０．１）：４４５μｍ、ｄ（０．５）：６０５μｍ、ｄ（０．９）：８２７μｍ）であった。
【００８１】
実施例１．Ｄ  ＤＲコーティングされたマイクロペレット（ロットＳ３）の安定性試験
標準試料を含めて、リパーゼ、アミラーゼ、およびプロテアーゼ酵素の同定、確認、効力、胃抵抗性、およびｐＨ６．０での完全放出について、消化酵素の胃抵抗性コーティングされたマイクロペレットの試験を前述のように実施する。最初の試験結果を下表２に示す。９５％超が３０分間に放出（検出）されるので、胃抵抗性試験が必要とは考えられない。遅延放出性マイクロペレットを含有する密封ガラス瓶を、安定性に関し、２５℃／６０％ＲＨおよび４０℃／７５％ＲＨの状態に置く。
2013525488.tif 000004
【００８２】
実施例１．Ｅ  マイクロペレットの胃抵抗性コーティング（重量増加：２８重量％）
マイクロペレット（ロットＳ２）を使用して、２８重量％のコーティングレベルのために、タルク１０ｇを含有する１００％アセトン中のＨＰ−５５／ＤＥＰ（８０／２０）溶液を用いて胃抵抗性コーティングされたマイクロペレットのバッチをさらに調製する。処理条件は、生成物温度３１〜３３．５２℃、処理空気量：６５〜７０ＣＦＭ、噴霧速度：１５〜３０ｇ／分である。
【００８３】
実施例２
実施例２．Ａ  粉末層状化によるパンクレリパーゼマイクロペレット
ポビドン（ＰＶＰ  Ｋ−３０；５０ｇ）をイソプロパノール（６５０ｇ）に、常時撹拌しながら徐々に加え、７％ｗ／ｗ固形分のポリマー結合剤溶液を調製する。Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ  Ｐｒｏｔｅｉｎ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓ（２０００ｇ）からのパンクレリパーゼ（ロットＳｌ）を、Ｖ−ブレンダーの中で、コロイダルシリカ１０ｇ（流動補助剤、ＷＲ  Ｇｒａｃｅ  Ｃｏ．からのＳｙｌｏｉｄ）およびポビドン（５０ｇ）とブレンドする。糖スフェア（６０〜８０メッシュまたは直径１７０〜２５０μｍ）を、Ｖｅｃｔｏｒ  Ｃｏｒｐｏｒａｔｉｏｎ（Ｉｏｗａ，ＵＳＡ）からのＧｒａｎｕｒｅｘ  ＧＸ−３５の生成ボウルに装填する。粉末供給装置によって消化酵素粉末混合物を制御された速度で供給しながら、７％ＰＶＰ結合剤溶液を回転する材料層の中に制御された速度で噴霧する。ペレット形成中の最適化工程パラメータは、処理空気温度：約１９〜２０℃、生成物温度：１６±２℃、ローター回転数：４２５ＲＰＭ、外部空気供給：１５０Ｌ／分、噴霧速度：１５ＲＰＭ（約８ｍＬ／分）、スリットを介した圧力降下：水で１．３〜１１ｍｍである。ペレット乾燥中の最適化工程パラメータは、処理空気量：３０ＣＦＭ、処理空気温度：約６０℃、生成物温度：３５℃（乾燥停止まで）、ローター回転数：１８０ＲＰＭ、スリット空気量：１０ＣＦＭ、処理時間：４０分である。
【００８４】
実施例２．Ｂ  マイクロペレットの胃抵抗性コーティング（重量増加：３０重量％）
上記実施例２．Ａからのマイクロペレットを、Ｇｒａｎｕｒｅｘ  ＧＸ−３５の中で３０重量％のコーティングレベルに胃抵抗性ポリマーＨＰ−５５／ＴＥＣ／タルク（比：１０／１／５）を用いてコーティングする（ロットＳ５）。ヒプロメロースフタレート（ＨＰ−５５）を、ステンレス鋼タンク中のアセトンに常時撹拌しながら徐々に加え溶解させる。この溶液にクエン酸トリエチル（ＴＥＣ）を加え溶解させ、このコーティング溶液にタルク（アルカリ化剤）を加え均一分散液を得る。処理条件は、生成物温度３７〜４２℃、処理空気速度：約５〜６０ｍ／秒である。
【００８５】
実施例３
実施例３．Ａ  制御された球状化によるパンクレリパーゼマイクロペレット
ポビドン（ＰＶＰ  Ｋ−３０；５０ｇ）を９０／１０のイソプロパノール／精製水に、常時撹拌しながら徐々に加え、７％ｗ／ｗ固形分のポリマー結合剤溶液を調製する。ＳＰＬ（２０００ｇ）からのパンクレリパーゼ粉末を、Ｖブレンダーの中でコロイダルシリカ１０ｇ（流動補助剤、Ｃａｂｏｔ  ＣｏｒｐｏｒａｔｉｏｎからのＣａｂ−Ｏ−Ｓｉｌ  Ｍ−５Ｐ）およびポビドン（９０ｇ）とブレンドし、Ｖｅｃｔｏｒ  Ｃｏｒｐｏｒａｔｉｏｎ（Ｉｏｗａ，ＵＳＡ）からのＧｒａｎｕｒｅｘ  ＧＸ−３５の生成ボウルに装填する。粉末供給装置（Ｋ−Ｔｒｏｎ）によってユニットの中に粉末を制御された速度で加えながら、同時に７％ＰＶＰポリマー結合剤を回転する材料層の中に制御された速度で噴霧する。ペレット形成中の最適化工程パラメータは、処理空気温度：約１９〜２０℃、生成物温度：１６±２℃、ローター回転数：１８０ＲＰＭ、スリット空気量：１０ＣＦＭ、噴霧速度：１５ＲＰＭ（約８ｍＬ／分）、スリットを介した圧力降下：水で１．３〜１１ｍｍ、処理時間：４０分である。
【００８６】
実施例３．Ｂ  マイクロペレットの耐湿性コーティング
Ｋｌｕｃｅｌ  ＬＦを、ステンレス鋼タンク中の無水エタノールに常時撹拌しながら徐々に加え溶解させる。エチルセルロース（ＥＣ−１０）を、Ｋｌｕｃｅｌ溶液に常時撹拌しながら徐々に加え溶解させる。ステアリン酸マグネシウム（Ｍｇｓｔ）をこのコーティング溶液に加え均一分散液を得る。６インチボトムスプレーＷｕｒｓｔｅｒ高さ８インチカラム、２００メッシュの生成物保持スクリーンでカバーされた「Ｄ」ボトム空気分配プレートから１５ｍｍの分配カラムギャップ（１．０ｍｍのポートノズル）を装備したＧｌａｔｔ  ＧＰＣＧ  ３に、上記実施例３．Ａからのマイクロペレット（１２００ｇ）を装填し、保護耐湿性コーティング溶液（１０重量％固形分のＫｌｕｃｅｌ／ＥＣ−１０／Ｍｇｓｔ（３０／４５／２５比））を用いて、５ｍＬ／分から約２０ｍＬ／分まで増加させながらコーティングする。
【００８７】
実施例３．Ｃ  マイクロペレットの胃抵抗性コーティング
上記実施例３．Ａからのマイクロペレットを、上記に開示のように、Ｇｌａｔｔ  ＧＰＣＧ  ３の中で３０重量％のコーティングレベルにＨＰ−５５／ＴＥＣ（比：９０／１０）の胃抵抗性コーティングを用いてコーティングする。
【００８８】
実施例４
実施例４．Ａ  マイクロペレットの耐湿性コーティング
Ｋｌｕｃｅｌ  ＬＦを、精製水に常時撹拌しながら徐々に加え溶解させる。エチルセルロース（ＥＣ−１０）を、Ｋｌｕｃｅｌ溶液に常時撹拌しながら徐々に加え溶解させる。上記実施例３．Ａからのマイクロペレット（１２００ｇ）を、この保護耐湿性コーティング溶液（１０重量％固形分のＫｌｕｃｅｌ／ＥＣ−１０（４０／６０））を用いて、１０％重量増加になるようにコーティングする。
【００８９】
実施例４．Ｂ  マイクロペレットの胃抵抗性コーティング
上記実施例３．Ａからのマイクロペレットを、上記に開示のように、Ｇｌａｔｔ  ＧＰＣＧ  ３の中で３０重量％のコーティングレベルにＨＰ−５５／ＴＥＣ（比：９０／１０）の胃抵抗性コーティングを用いてコーティングする。
【００９０】
実施例４．Ｃ  改変された放出性消化酵素カプセル
上記の実施例３．Ｂからの耐湿性コーティングされたマイクロペレットおよび実施例４．Ｂからの胃抵抗性コーティングされたマイクロペレットをＨＰＭＣカプセルの中に消化酵素重量比１：１で充填し、消化酵素を含むＭＲカプセルを製造する。ＨＰＭＣカプセルを、任意選択的に分子篩タイプ乾燥剤を含有する密封ガラス瓶に詰める。
【００９１】
実施例４．Ｄ  迅速に分散する消化酵素錠剤
上記実施例４．Ｂからの胃抵抗性コーティングされたマイクロペレット７５〜８５部を、噴霧乾燥マンニトール１０〜１５部、微結晶セルロース（Ａｖｉｃｅｌ  ＰＨＩ０２）１０〜１５部、低置換ＨＰＣ（崩壊剤）２〜７部とブレンドし、ＦＤ＆Ｃ  Ｒｅｄ０．２〜０．５部を、Ｖブレンダーの中で２０分間最初にブレンドし、次いで、ナトリウムステアリルフマラート０．５部をブレンダーに加え、約１０分間ブレンドしてこの滑沢剤を均一に分散させる。このようにして生成した圧縮ブレンドを、回転式打錠機を使用して、５００または１，０００ｍｇＲＤＴ（迅速に分散する錠剤）に圧縮する。
【００９２】
実施例５
実施例５．Ａ  パンクレリパーゼの微粒子化
ｄ（０．９５）が１１５μｍであるＮｏｒｄｍａｒｋ  Ａｒｚｎｅｉｍｉｔｔｅｌ  ＧｍｂＨからのパンクレリパーゼを、窒素パージ下、ＪＥＴ  ＰＨＡＲＭＡの中間エネルギーレベルで微粒子化して、ｄ（０．９５）を２２．８μｍにする。
【００９３】
実施例５．Ｂ  重力式供給装置による粉末層状化：
粉末供給装置、エアキャップ噴霧システムおよびペリスタル型ポンプを装備した、換気型コーティングドラム（Ｐｅｌｌｅｇｒｉｎｉ  ＧＳ）をセットアップする。上記実施例５．Ａに開示の微粒子化パンクレアチンをラクトースおよびコロイド状二酸化ケイ素とブレンドする。ポリマー結合剤およびＴｗｅｅｎ８０を、常時撹拌しながらステンレス鋼容器中の適切な混合溶媒の中に溶解する。１５ＲＰＭで回転する換気型コーティングドラムの中で３０℃に予熱された糖スフェア（６０〜８０メッシュ）を、重力式供給装置、結合剤溶液噴霧、ならびに入口温度設定４０℃および空気流設定約２５０〜３００ｍ３／時における乾燥を通して、パンクレアチン粉末混合物の不連続サイクルの層状化と共に層形成させる。いったん薬物負荷を完了すると、マイクロペレットを乾燥して残留溶媒を除去し、室温に冷却し、適切な篩を使用して篩別し、過大な物質（すなわち、＞７００μｍ）および微細な物質（すなわち、＜３００μｍ）を捨てる。
【００９４】
実施例５．Ｃ  静電式供給装置による粉末層状化
静電ガンを結合した粉末供給装置、エアキャップ噴霧システムおよびペリスタル型ポンプを装備した、換気型コーティングドラム（Ｐｅｌｌｅｇｒｉｎｉ  ＧＳ）をセットアップする。上記実施例５．Ａに開示の微粒子化パンクレアチンをラクトースおよびコロイド状二酸化ケイ素とブレンドする。ポリマー結合剤およびＴｗｅｅｎ８０を、常時撹拌しながらステンレス鋼容器中の適切な混合溶媒の中に溶解する。１５ＲＰＭで回転する換気型コーティングドラムの中で３０℃に予熱された糖スフェア（６０〜８０メッシュ）を、静電式供給装置、結合剤溶液噴霧、ならびに入口温度設定４５℃および空気流設定約２５０ｍ３／時における乾燥を通して、パンクレアチン粉末混合物を同時に供給することにより層形成させる。いったん薬物負荷を完了すると、マイクロペレットを乾燥して残留溶媒を除去し、室温に冷却し、適切な篩を使用して篩別し、過大な物質（すなわち、＞７００μｍ）および微細な物質（すなわち、＜３００μｍ）を捨てる。
【００９５】
実施例５．Ｂまたは実施例５．Ｃからのマイクロペレットを、先に開示のように、耐湿性および／または胃抵抗性コーティングを用いてさらにコーティングして、耐湿特性および／または胃抵抗特性を付与する。コーティングされていないマイクロペレットまたは任意選択的に耐湿性コーティングされたマイクロペレットおよび／または胃抵抗性コーティングされたマイクロペレットの必要量を、ＨＰＭＣもしくはゼラチンのカプセルまたはサッシェに充填するか、または医薬的に許容される賦形剤とブレンドし、迅速に分散する錠剤に圧縮して、薬物治療を必要とする患者に対する経口投与用の所望の放出性改変消化酵素を製造することができる。
【００９６】
実施例６：パンクレアチン出発原料の特徴づけ
パンクレリパーゼ出発原料−パンクレアチンロットＮｌの外観、酵素活性およびプロテアーゼ溶出率を分析する。溶出率試験はｐＨ６．０で実施し、マイクロ顆粒溶出率評価のためのモデル酵素として、３０分間の試験手順中に溶出媒体中で分解するリパーゼ（約５分後に、リパーゼのレベルはわずか８０％に降下し、３０分後には７３％まで減少した）の代わりにプロテアーゼを選択する。プロテアーゼ溶出率および酵素活性（米国薬局方、パンクレリパーゼ：プロテアーゼ活性のアッセイ（Ｕｎｉｔｅｄ  Ｓｔａｔｅｓ  Ｐｈａｒｍａｃｏｐｏｅｉａ，Ｐａｎｃｒｅｌｉｐａｓｅ：Ａｓｓａｙ  ｆｏｒ  Ｐｒｏｔｅａｓｅ  ａｃｔｉｖｉｔｙ）に基づいた方法で測定した）を、下表３に示す。粒径分布を表４に示す。
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【００９７】
実施例７  シクロヘキサン中のパンクレアチンに対する熱サイクルの影響
シクロヘキサン中で実施されるコアセルベーション工程の間に生成する熱および機械的ストレスに対するパンクレアチンロットＮ２の安定性について以下のように試験する。シクロヘキサン１ｋｇを含有するリアクタにパンクレアチン１３５ｇを入れ、常時撹拌（２９０ＲＰＭ）しながら、加熱し冷却する（表５）。
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【００９８】
熱サイクルに供した後、パンクレアチンを濾過し、換気フード内で一晩（約１６時間）乾燥する。得られた粉末を、５００μｍの篩を通して篩別し、高密度ポリエチレン（ＨＤＰＥ）容器に保存する。パンクレアチンロットＮｌの顕微鏡写真を、シクロヘキサン中での熱処理の前（図４Ａ）および後（図４Ｂ；ロットＮ２）にＺｅｉｓｓ  Ａｘｉｏｓｃｏｐｉｃ顕微鏡を用いて撮影する。これらの写真には、粒子の外観、形状および寸法に顕著な変化を示す形跡はまったくない。分析結果から、顕微鏡観察が確認される（表６）。
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【００９９】
ロットＮ２のプロテアーゼおよびリパーゼの活性は、シクロヘキサン中の熱サイクルに供された前後で顕著な変化を示さない。換気フード内での室温１６時間の乾燥後におけるシクロヘキサンの残留量は無視できるものであり、パンクレアチンには水を吸収する傾向があることが確認される。プロテアーゼ溶出値は、５分以内に１００％に到達し、試験の間に減少するようには見えない。
【０１００】
実施例８  パンクレアチンマイクロ顆粒の調製
シクロヘキサン１０００ｇをコアセルベーションリアクタに注入する。次いで、常時撹拌（２９０ＲＰＭ）しながら、パンクレアチン、エチルセルロース（０．４％〜５％の範囲の量）およびポリエチレン（０％〜３％の範囲の量）を加える。表５の熱サイクルに従い、得られた混合物を加熱し冷却する。得られたパンクレアチンマイクロ顆粒を洗浄（１回または複数回）して濾過し、換気フード内で一晩（約１６時間）乾燥し、次いで、５００μｍ開口篩により篩別し、ＨＤＰＥ容器に保存する。工程フローシートを下記に示す。
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【０１０１】
この手順を基本的に使用してマイクロ顆粒を３バッチ調製する。洗浄回数、エチルセルロースおよびポリエチレンの濃度、および最終生成物中のコアセルベート化エチルセルロースのコーティング重量（％ｗ／ｗ；パンクレアチンマイクロ顆粒の出発重量に対するマイクロ顆粒の重量増加）を表７に要約する。
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【０１０２】
マイクロ顆粒の外観、粒径分布、残留溶媒含量、溶出率および酵素活性を、先の実施例に記載の手法を用いて分析する。３ロットの顕微鏡評価により、パンクレアチン物質の周囲に適切にポリマーが沈着していることが示される（図５Ａ〜Ｂ、６Ａ〜Ｂおよび７Ａ〜Ｂ）。
【０１０３】
粒径ディメンションおよび分布を下記の手順に従って篩別することにより測定する。ある量のマイクロ顆粒（２５〜５０ｇ）を１００ｍＬのＨＤＰＥ瓶の中に入れる。０．２％（ｗ／ｗ）二酸化ケイ素を１５０μｍのスクリーンを通して篩別し、マイクロ顆粒に加え、手作業で２分間ブレンドする。マイクロ顆粒およびＳｙｌｏｉｄ２４４の混合物を、デジタルＯｃｔａｇｏｎ装置を用いて、振幅設定７で１０分間篩別する。
【０１０４】
表８から、コアセルベート化ポリマー重量が５％のマイクロ顆粒（ロットＮ３）は、コアセルベート化ポリマー重量が２０％のマイクロ顆粒（ロットＮ４、ロットＮ５）よりも、その粒径は小さく、ロットＮ４とロットＮ５との間（同じ重量、異なる量のポリエチレンが調製工程で使用される）では、顕著な粒径の差は認められないことがわかる。
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【０１０５】
溶出率分析に適した粒子を得るためにシクロヘキサン中のナトリウムドクセート１％溶液を用いて処理したロットＮ３およびロットＮ４について、溶出率を測定する。処理は以下のとおりに実施する。シクロヘキサン５９４ｇ中に界面活性剤６ｇを室温で溶解することにより、シクロヘキサン中のナトリウムドクセート１％溶液を調製する。ナトリウムドクセート溶液１００ｇを含有する２５０ｍＬのビーカーにマイクロ顆粒２２ｇを入れ、次いで、ステンレス鋼プロペラ（２５０ＲＰＭ）を用いて１５分間撹拌する。マイクロ顆粒を濾過して換気フード内で約６時間乾燥し、５００μｍ開口篩を通して篩別し、ＨＤＰＥ容器に保存する。この方法は以後のすべての実施例に適用される。溶出率および酵素力価を表９に示す。
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【０１０６】
マイクロ顆粒中のリパーゼおよびプロテアーゼの酵素活性（先の実施例と同様に測定した）は、理論値に近く、塗布するコアセルベート化ポリマーのコーティング量を増加させると、溶出率の値は減少した。ロットＮ３の残留シクロヘキサンレベルは３１ｐｐｍである。
【０１０７】
実施例９  選択粒径範囲（２５０μｍ〜５００μｍ）のパンクレアチンからマイクロ顆粒の調製
パンクレアチンロットＮｌを開口２５０μｍのステンレス鋼篩を通して篩別し、微細粒子（「微粉」）を除去する。篩上に残る画分（約４０％）を使用して、２バッチのマイクロ顆粒を調製する。図８Ａ〜Ｂに示すように、選択された物質は、約３００μｍ〜４００μｍの不規則な粒子および約１０μｍ〜３０μｍの極めて微細な粒子から構成される（表１０）。
【０１０８】
０．５５〜１％の範囲のポリエチレン量を用い上記の工程条件を使用して、２バッチのパンクレアチンマイクロ顆粒を、シクロヘキサン１ｋｇを含有する実験室規模リアクタの中で調製する。
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【０１０９】
マイクロ顆粒を濾過して換気フード内で一晩（約１６時間）乾燥し、５００μｍ開口篩を通して篩別し、次いで、ＨＤＰＥ容器に保存する。生成物の外観、残留溶媒含量、溶出率および酵素活性を分析する。
【０１１０】
顕微鏡写真（図９Ａ〜Ｂおよび図１０Ａ〜Ｂ）から、ロットＮ６（より少量のポリエチレンを用いて調製された）がマイクロ顆粒の２種の異なる集団、すなわち、（ａ）いくつかの微細粒子を含有する小さなマイクロ顆粒、および（ｂ）より大きな粒子（約３００μｍ）を含有するマイクロ顆粒を含むことがわかる。ロットＮ７マイクロ顆粒はより均一であり、２バッチの粒径分布（篩）は同様である（表１１）。顕微鏡観察から予測されるとおり、ロットＮ７の微細粒子量は減少している。
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【０１１１】
ロットＮ７の溶出率の値（ナトリウムドクセートを用いて前処理された後に測定された、表１１）は、非選択パンクレアチンから得られた対応する試料（ロットＮ３）より低い。
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【０１１２】
実施例１０  選択粒径（＜２５０μｍ）のパンクレアチンからマイクロ顆粒の調製
パンクレアチンロットＮｌを２５０μｍ開口ステンレス鋼篩によって篩別し、篩を通過した物質を使用して２バッチのマイクロ顆粒を調製する。選択パンクレアチン粒子は、粒径が約２０μｍ〜約２５０μｍの範囲にあり、不規則な形状をしている（図１１Ａ〜Ｂ）。
【０１１３】
選択パンクレアチン物質を、上記の工程条件および異なる濃度のポリエチレンを使用して、シクロヘキサン１ｋｇを含有する実験室規模リアクタに導入する。マイクロ顆粒を分析する（表１３）。
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【０１１４】
マイクロ顆粒を濾過して換気フード内で一晩（約１６時間）乾燥し、５００μｍ開口篩を通して篩別し、次いで、ＨＤＰＥ容器に保存する。外観、残留溶媒含量、溶出率およびプロテアーゼ活性ならびに顕微鏡写真（図１１Ａ〜Ｂおよび１２Ａ〜Ｂ）を先の実施例の方法を用いて分析する。ロットＮ８のマイクロ顆粒は、ロットＮ９（より高いポリエチレン濃度を用いて調製された）のマイクロ顆粒よりわずかに小さい。
【０１１５】
篩別法から、ロットＮ８のマイクロ顆粒には、ロットＮ９のマイクロ顆粒に比べて、より大きなマイクロ顆粒がわずかに多いことがわかるが（表１４）、これは顕微鏡観察と一致しない。これにより、顕微鏡法および篩別法の異なる測定基準が評価に影響を及ぼす可能性があることがわかる。そのため、測定手法を常に明示する必要がある。
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【０１１６】
ロットＮ９の溶出率の値（ナトリウムドクセートの１％溶液を用いて前処理する方法）は、ロットＮ８の値よりも低い（表１５）。
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【０１１７】
実施例１１  選択粒径範囲（＞２５０μｍ）のパンクレアチンマイクロ顆粒の調製
数バッチのパンクレアチンマイクロ顆粒を、選択粒径範囲（＞２５０μｍ）にあり、５％のコアセルベート化ポリマー重量を有するパンクレアチンから調製する。これらのマイクロ顆粒は、ロットＮ７の調製に使用したときと同量のエチルセルロースおよびポリエチレンを使用して製造する。このパンクレアチンマイクロ顆粒を、真空下室温で、窒素ガス流の下乾燥し、５００μｍの篩を用いて篩別する。残留シクロヘキサンレベルは５００ｐｐｍであると測定される。次いで、前述のように、バッチの粒径分布、溶出率および酵素力価を測定する。
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【０１１８】
実施例１２  腸溶性コーティングされたパンクレアチンマイクロ顆粒の調製
パンクレアチンマイクロ顆粒ロットＮ１０およびロットＮ１１（実施例１１）をＧｌａｔｔ−ＧＰＣＧ１流動層コーティング機（４インチのＷｕｒｓｔｅｒインサートおよびＭｕｎｔｅｒｓ  ＭＬ  １３５０減湿装置を装備した）に負荷し、以下の組成（％ｗ／ｗ）を有するコーティング懸濁液（ＨＰ５５：ＴＥＣ：タルク＝ｌ０：１：５）を噴霧する。
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【０１１９】
表１９に示すように、異なるコーティングレベルで腸溶性コーティングされたマイクロ顆粒を３バッチ調製する。
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【０１２０】
８５０μｍスクリーンを通して最終生成物を篩別し、表２０〜２１に示すように、酵素活性および溶出率を測定する。
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【０１２１】
コーティングされたパンクレチンマイクロ顆粒ロットＮ１３の抵抗性は、ｐＨ５（３７℃で６０分間のバスケット）で４３％、ｐＨ５（３７℃で３０分間のバスケット）で９０％であり、ｐＨ１．２における抵抗性は、３０分後に１００％、６０分後に７１％である。
【０１２２】
実施例１３  腸溶性コーティングされたパンクレアチンマイクロ顆粒の安定性試験
ロットＮ１４の加速安定性条件下の安定性を評価する。マイクロ顆粒をポリエチレンサッシェに密封し、次いで、このサッシェを熱密閉ＮＡＰＥバッグに入れる。この製品を４０℃および７５％相対湿度の安定性試験に供し、１ヶ月の保存後、酵素活性および溶出率を測定する（表２３）。
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【０１２３】
実施例１４  コーティングされたパンクレアチンマイクロ顆粒の調製および安定性
パンクレリパーゼ出発材料（ロットＭ１、１００％パンクレアチン）の粒径は、３００〜７００μｍ（適切な篩を装備した自動篩Ｏｃｔａｇｏｎデジタル、Ｅｎｄｅｃｏｔｔｅタイプを使用して実施された）であり、平均幾何直径の計算値は３５５μｍである。図１４に、コーティング用流動層に負荷されているこれらのマイクロペレットのＰＳＤを示す。コーティング懸濁液は以下の組成である：ＨＰ−５５  １０％、タルク１％、クエン酸トリエチル１％、エタノール８０％、アセトン８％。流動層コーティングは以下の工程パラメータおよび装置形態を用いて実施する。すなわち、Ｗｕｒｓｔｅｒの高さ２ｃｍおよび長さ１５ｃｍ、プレートタイプＢ、噴霧ノズル０．８ｍｍ、噴霧速度３．５ｇ／分、噴霧圧１．４バール、入口空気温度５０℃、入口空気速度２．０ｍ／秒、乾燥温度５０℃、乾燥時間１５分。粒子は均一に丸く、薄茶色である。これらの得られたパンクレリパーゼ粒子を用いて、サッシェ剤およびカプセル剤などの投与剤形を調製する。ナイアレンサッシェへの包装は、腸溶性コーティングされた粒子２ｇを手作業で充填することにより得られ、その後、サッシェを１３０℃で接着する。投与剤形カプセル剤は、各硬ゼラチンカプセルにコーティングされた粒子５００ｍｇを充填することにより得られ、これらのカプセル剤はＨＤＰＥ瓶に保存する。固有安定性データを表２４〜２５に報告する。
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【０１２４】
安定性データから、ナイアレンサッシェに調剤されると、腸溶性コーティングされた粒子は、許容される性状に確実になることがわかる。２５℃および６０％Ｒ．Ｈ．において、１２ヶ月後の結果は、両方の投与剤形についてかなり満足すべきものである。ナイアレンサッシェ包装材料は、酵素分解の点からより良好な性状を保証するように見える。２５℃で１２ヶ月後において、ナイアレンサッシェに詰められたコーティングされた粒子のリパーゼ活性は、実際上変化していないが、ゼラチンカプセルに充填され、ＨＤＰＥ瓶に詰められた同じ調製物は、酵素活性の減少を示す。同じパンクレアチン腸溶性コーティングされた粒子を含有するカプセル投与剤形の安定性は、コーティングされた粒子がゼラチンカプセルの代わりにＨＰＭＣ（３％未満の含水率）カプセルに充填されると改善される。
【０１２５】
これらすべての実施例により、以下のことが示される。すなわち、十分小さいが粒径分布が狭い（例えば、レーザー回析により測定すると、４００〜８００μｍのｄ（０．１）〜ｄ（０．９）であり、または篩別により測定すると、約４００μｍ〜約６００μｍ、より好ましくは約２５０μｍ〜約５００μｍの粒径である）高用量粒子を含む、消化酵素の医薬組成物または投与剤形は、経口投与または経腸投与に適し、許容できる胃抵抗性および安定性の特性を示し、嚥下障害により従来の錠剤またはカプセル剤を飲み込むのに困難を感じる小児患者、高齢患者および他の患者にとってかなり有益なものとなり得る。したがって、これらの医薬組成物または投与剤形により、消化酵素と食物小片とがより良好に同調して通過することによって、栄養源の消化／吸収が改善され、そのため患者の服薬遵守も改善される。本発明によるこれらの組成物または投与剤形は、高用量、小粒径粒子の安定した消化酵素混合物を含む。
【図１】
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【図２Ａ】
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【図２Ｂ】
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【図２Ｃ】
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【図２Ｄ】
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【図３Ａ】
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【図３Ｂ】
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【図４】
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【図５】
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【図６】
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【図７】
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【図８】
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【図９】
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【図１０】
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【図１１】
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【図１２】
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【図１３】
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【手続補正書】
【提出日】平成25年4月25日(2013.4.25)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】請求項３８
【補正方法】変更
【補正の内容】
【請求項３８】
消化性疾患、膵外分泌機能不全、嚢胞性線維症、Ｉ型糖尿病および／またはＩＩ型糖尿病の治療または予防用の薬剤の製造のための請求項１ないし２３のいずれか１項に記載の医薬組成物の使用。
【手続補正２】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】請求項３９
【補正方法】変更
【補正の内容】
【請求項３９】
消化酵素欠乏症に関連した疾患の治療または予防用の薬剤の製造のための請求項１ないし２３のいずれか１項に記載の医薬組成物の使用であって、前記医薬組成物がＧＩ管ｐＨを上昇させる別の組成物と併用されることを特徴とする使用。
【国際調査報告】
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