(57)【要約】  高分子に負の実効電荷を与える、好ましくはアニオン性の基で周辺が官能化されたカルボシラン構造を有する、好ましくはケイ素又はポリフェノール性の多官能コアから合成される高度に分岐された高分子。更に、本発明は、これらの合成手順、並びに抗ウイルス剤、抗細菌剤及び抗真菌剤としてのこれらの使用に関する。【選択図】なし【特許請求の範囲】
【請求項１】
−多官能コアと、
−式（Ｉ）：
【化１】
2013519711.tif 000046
〔式中、Ｒ’は、アルキル基（Ｃ１〜Ｃ４）であり、
ｐは、１〜３に変わり、そして
Ｘは、次の式（ＩＩ）：
【化２】
2013519711.tif 000047
の基であり、
ここで、Ｅは、ケイ素とアミン基の間にある結合基であり、
ｚは、１〜４に変わり、
Ｒ１は、−ＣＯＯＲ２、−ＳＯ３Ｒ２又は−ＰＯ３（Ｒ２）２のリストを含む群から選択され、そして
Ｒ２は、水素又はアルキル基（Ｃ１〜Ｃ４）である〕
で示される基の同一又は異なる単位から完全又は部分的になる外側層と
を含む、カルボシランデンドリマー。
【請求項２】
コアが、ケイ素又はポリフェノールである、請求項１記載のデンドリマー。
【請求項３】
ポリフェノール核が１，３，５−トリヒドロキシベンゼンである、請求項２記載のデンドリマー。
【請求項４】
ｐが１である、請求項１〜３のいずれか１項記載のデンドリマー。
【請求項５】
Ｒ’がメチルである、請求項１〜４のいずれか１項記載のデンドリマー。
【請求項６】
Ｅが、アルキル（Ｃ１〜Ｃ１０）又は基−（ＣＨ２）ｘ−Ｒ３から選択され、Ｒ３が、トリアゾール又はフェノキシド基であり、そしてｘが１〜６に変わる、請求項１〜５のいずれか１項記載のデンドリマー。
【請求項７】
Ｅのアリル基がプロピルである、請求項６記載のデンドリマー。
【請求項８】
Ｒ２が、水素又はメチルである、請求項１〜７のいずれか１項記載のデンドリマー。
【請求項９】
Ｅが基−（ＣＨ２）ｘ−Ｒ３であり、Ｒ３がトリアゾールであり、ｘが請求項６に定義されている、請求項１〜８のいずれか１項記載のデンドリマー。
【請求項１０】
ｘが４である、請求項９記載のデンドリマー。
【請求項１１】
Ｅが基−（ＣＨ２）ｘ−Ｒ３であり、Ｒ３がフェノキシドであり、ｘが請求項６に定義されている、請求項１〜１０のいずれか１項記載のデンドリマー。
【請求項１２】
ｘが１である、請求項１１記載のデンドリマー。
【請求項１３】
Ｒ１が基−ＣＯＯＲ２である、請求項１〜１２のいずれか１項記載のデンドリマー。
【請求項１４】
Ｒ１が基−ＳＯ３Ｒ２である、請求項１〜１２のいずれか１項記載のデンドリマー。
【請求項１５】
Ｒ１が基−ＰＯ３（Ｒ２）２である、請求項１〜１２のいずれか１項記載のデンドリマー。
【請求項１６】
ｚが２である、請求項１〜１４のいずれか１項記載のデンドリマー。
【請求項１７】
ｚが１である、請求項１５記載のデンドリマー。
【請求項１８】
前記デンドリマーがアニオン性塩である、請求項１〜１７のいずれか１項記載のデンドリマー。
【請求項１９】
塩がＮａ＋である、請求項１８記載のデンドリマー。
【請求項２０】
前記デンドリマーが、式（ＩＩＩ）：
【化３】
2013519711.tif 000048
〔式中、Ｎｕは多官能コアを表し、Ｒａはアルキル基（Ｃ１〜Ｃ６）であり、ｙは２〜６の値を有し、そしてＲは、請求項１〜１９のいずれか１項記載の一般式（Ｉ）の末端基である〕
により示されるものである、請求項１〜１９のいずれか１項記載のデンドリマー。
【請求項２１】
前記デンドリマーが、以下の式（ＩＶ）：
【化４】
2013519711.tif 000049
〔式中、Ｎｕは多官能コアを表し、Ｒａ、Ｒｂ及びＲＩＩは、同一又は異なってアルキル基（Ｃ１〜Ｃ６）を表し、ｍは１〜３の値を有し、ｙは２〜６の値を有し、そしてＲは、請求項１〜１９のいずれか１項記載の一般式（Ｉ）の末端基である〕
を有する少なくとも第一世代である、請求項１〜１９のいずれか１項記載のデンドリマー。
【請求項２２】
前記デンドリマーが、以下の式（Ｖ）：
【化５】
2013519711.tif 000050
〔式中、Ｎｕは多官能コアを表し、Ｒａ、Ｒｂ、Ｒｃ、ＲＩＩ及びＲＩＩＩは、同一又は異なってアルキル基（Ｃ１〜Ｃ６）を表し、ｍ及びｎは、同一又は異なって１〜３の値を有し、ｙは２〜６の値を有し、そしてＲは、請求項１〜１９のいずれか１項記載の一般式（Ｉ）の末端基である〕
を有する少なくとも第二世代である、請求項１〜１９のいずれか１項記載のデンドリマー。
【請求項２３】
前記デンドリマーが、以下の式（ＶＩ）：
【化６】
2013519711.tif 000051
〔式中、Ｎｕは多官能コアを表し、Ｒａ、Ｒｂ、Ｒｃ、Ｒｄ、ＲＩＩ、ＲＩＩＩ及びＲＩＶは、同一又は異なってアルキル基（Ｃ１〜Ｃ６）を表し、ｍ、ｎ及びｑは、同一又は異なって１〜３の値を有し、ｙは２〜６の値を有し、そしてＲは、請求項１〜１９のいずれか１項記載の一般式（Ｉ）の末端基である〕
を有する少なくとも第三世代である、請求項１〜１９のいずれか１項記載のデンドリマー。
【請求項２４】
Ｒａ、Ｒｂ、Ｒｃ及びＲｄが、同一又は異なってアルキル基（Ｃ２〜Ｃ４）を表す、請求項２０〜２３のいずれか１項記載のデンドリマー。
【請求項２５】
Ｒ’’、Ｒ’’’又はＲＩＶがメチル基である、請求項２０〜２４のいずれか１項記載のデンドリマー。
【請求項２６】
下記式：
Ｅｔ３−Ｒ
〔式中、Ｅｔは、エチル基であり、そして
Ｒは、請求項１〜１９のいずれか１項記載の式（Ｉ）の末端基、基−Ｓｉ（Ｒ’）３−ｐ［（ＣＨ２）４−Ｎ３］ｐ又は基−Ｓｉ（Ｒ’）３−ｐ［Ｅ−ＮＨ２］ｐであり、ここでＲ’はアルキル基（Ｃ１〜Ｃ４）であり、ｐは１〜３の値を有し、そしてＥは、請求項１〜２５に記載された結合基である〕
で示される化合物。
【請求項２７】
−多官能コアと、
−基−Ｓｉ（Ｒ’）３−ｐ［（ＣＨ２）４−Ｎ３］ｐ又は基−Ｓｉ（Ｒ’）３−ｐ［Ｅ−ＮＨ２］ｐ（ここで、Ｒ’はアルキル基（Ｃ１〜Ｃ４）であり、ｐは１〜３に変わり、そしてＥは、請求項１〜２６に記載された結合基である）の同一又は異なる単位で完全又は部分的になる外側層と
を含む、カルボシランデンドリマー。
【請求項２８】
ｐが１である、請求項２４記載の化合物又は請求項２５記載のデンドリマー。
【請求項２９】
Ｒ’がメチル基である、請求項２４若しくは２６記載の化合物又は請求項２５若しくは２６記載のデンドリマー。
【請求項３０】
Ｅが基−（ＣＨ２）ｘ−Ｒ３であり、Ｒ３がトリアゾールであり、ｘが請求項６に定義されており、好ましくはｘが４である、請求項２４若しくは２６〜２７記載の化合物又は請求項２５〜２７のいずれか１項記載のデンドリマー。
【請求項３１】
請求項１〜２５のいずれか１項記載のデンドリマーを得る方法であって、
多価コア及び末端−ＮＨ２基を含有するデンドリマーの、アルケン含有スルホネート基若しくはカルボン酸基へのマイケル型付加又は多価コア及び末端−ＮＨ２基を含有するデンドリマーとホルムアルデヒド及びジメチルホスホネートとの２工程反応を含む方法。
【請求項３２】
請求項１〜２５のいずれか１項記載のデンドリマーを得る方法であって、
末端−Ｓｉ−Ｈ基を含有するデンドリマーと、カルボン酸基、ホスホン酸基又はスルホン酸基で官能化されたアリルアミン誘導体とのヒドロシリル化を含む方法。
【請求項３３】
薬剤の調製のための、請求項１〜２５のいずれか１項記載のデンドリマーの使用。
【請求項３４】
ウイルス、細菌又は真菌により引き起こされる疾患の予防及び／又は治療のための薬剤の調製における、請求項１〜２５のいずれか１項記載のデンドリマーの使用。
【請求項３５】
疾患がＨＩＶにより引き起こされる、請求項３４記載の使用。
【請求項３６】
請求項１〜２５のいずれか１項記載の少なくとも１つのデンドリマーと薬学的に許容されるビヒクルとを含む医薬組成物。
【請求項３７】
別の作用物質（活性成分）を更に含む、請求項３４記載の組成物。
【請求項３８】
分子の輸送ビヒクルとしての、請求項１〜２５のいずれか１項記載のデンドリマーの使用。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、カルボシラン構造及び負の実効電荷を高分子に与えるアニオン性基で官能化された周辺を持つ、多官能コアから合成したデンドリマーと呼ばれる高度に分岐した高分子に関する。更に、本発明は、これらの合成方法及びこれらの生物医学的用途に関する。
【背景技術】
【０００２】
ＨＩＶ又はＨＳＶのような多くの種類のウイルスがポリアニオン性化合物に結合するため、抗ウイルス剤として使用される、表面に負の実効電荷を有する数種類のデンドリマー又はデンドリマー化ポリマーが存在する。したがって、硫酸化多糖類がウイルス阻害の典型的に有効な阻害剤である。この種類のポリアニオン性デンドリマーの範囲内において、幾つかの例が記載されており、例えば、ＨＳＶ感染を有効に遮断することができるカルボキシレート及びスルホネート末端基を有するポリリジンデンドリマーである（Ｇｏｎｇ，Ｙ．ｅｔ  ａｌ．Ａｎｔｉｖｉｒａｌ  Ｒｅｓ，２００２，５５（２），３１９−３２９を参照すること）。同じ著者は、これらのデンドリマーが動物を膣感染から保護したことび及びスルホネート誘導体が感染細胞におけるウイルス複製の最終段階に干渉することができたことを示す、マウスの研究を実施した。
【０００３】
ポリリシン主鎖及び末端カルボキシレート又はスルホネート基を有する同様のデンドリマーも、インビトロでＨＩＶを阻害するのに有効であることを示した（ＭｃＣａｒｔｈｙ，ＴＤ  ｅｔ  ａｌ．Ｍｏｌ  Ｐｈａｒｍ．２００５  Ｊｕｌ−Ａｕｇ；２（４）：３１２−８を参照すること）。ポリアニオン性デンドリマーは、細胞へのウイルスの侵入及びリバーストランスクリプターゼとインテグラーゼの２つのウイルス酵素の活性を阻害し、このことは、これらのポリアニオン性誘導体が、細胞にどのように組み込まれ配置されるかに応じてＨＩＶの異なる複製サイクルに対して作用しうることを示している。最近の研究は、スルホネート基を有するデンドリマーが雌マカクザルをサル免疫不全ウイルス（ＳＩＶ）の膣感染から保護することを示す。
【０００４】
このセクションでは、本発明者たちは、ゲル剤として製剤されＳＰＬ７０１３と呼ばれる負荷電デンドリマーを強調する。このデンドリマーはオーストラリアの製薬会社により開発され、インビトロ及びインビボ研究はこれが市場に参入するのに最適な候補であることを示し、確定された生物医学的用途を有する最初の市販のデンドリマーとなった。ＳＰＬ７０１３は、表面にナフタレンジスルホン酸基を有する、リシン系デンドリマーであり、ＶｉｖａＧｅｌ（登録商標）と呼ばれる膣殺菌ゲル剤の有効成分である。ＨＩＶ−１の多くの菌株に対するインビトロでの強力な阻害剤である。ＨＩＶ及び陰部ヘルペスの膣伝播の予防に使用される。したがって、Ｄｅｚｕｔｔｉ及び同僚による研究は、このデンドリマー（５％）の生薬製剤が上皮細胞に非常に低い毒性を有し、末梢血単核細胞（ＰＢＭＣ）、マクロファージにおけるＨＩＶ−１の感染予防及び上皮細胞からＰＢＭＣへのＨＩＶ−１の移動に有効であることを示している。続く研究は、１〜３％の割合でのＳＰＬ７０１３ゲル剤の連日適用が良好に許容されたことを示している。同様の結果は、このゲル剤の直腸適用によるＨＩＶ−１の感染の予防によって得られた。また、マカクザルに膣レベルでゲル剤ＳＰＬ７０１３を使用する研究が実施され、膣粘膜の刺激の徴候を生じないこと及び５％で適用されたとき、マカクザルのＳＩＶ感染を完全に（１００％）防止できることを示した。ＳＰＬ７０１３と同様の他のデンドリマーも、タイプＰＡＭＡＭ又はＰＰＩの骨子を使用して調製され、同様の生物学的活性を有したが、合成方法が困難なために商業的使用は放棄された。
【０００５】
抗ウイルス剤として記載される他のアニオン性デンドリマーはＢＲＩ２９２３であり、これは、アンモニアのコアから成長し、２４個のナフタレンジスルホン酸基で表面官能化されているデンドリマー様ポリアミドアミン（ＰＡＭＡＭ）である。ＢＲＩ６１９５もＰＡＭＡＭデンドリマー型であり、この場合、エチレンジアミンコアから成長し、３２個のフェニルジカルボキシレート基で官能化されている。これらのデンドリマーは、細胞株ＭＴ−４において異なる菌株のＨＩＶの複製を阻害することができる（Ｊｉａｎｇ  ＹＨ，ｅｔ  ａｌ．，ＡＩＤＳ  Ｒｅｓ  Ｈｕｍ．Ｒｅｔｒｉｖｉｒｕｓｅｓ，２００５，２１，２０７を参照すること）。
【０００６】
リン原子を含有する骨子に基づいたデンドリマーの合成も発表されており、これらのデンドリマーは、アニオン性ホスホネート基で表面が官能化されている（Ｌ．Ｇｒｉｆｆｅ，ｅｔ  ａｌ．，Ａｎｇｅｗ．Ｃｈｅｍ  Ｉｎｔ  Ｅｄ，２００７，４６，２５２３を参照すること）。これらのデンドリマーは、ナチュラルキラー細胞（ＮＫ）の活性及び繁殖において高い活性を示す。これらのデータは、多数のＮＫ細胞が必要となりうる抗ウイルス又は抗癌免疫療法への使用に門戸を開くので、期待が持てる。
【先行技術文献】
【非特許文献】
【０００７】
【非特許文献１】Ｇｏｎｇ，Ｙ．ｅｔ  ａｌ．Ａｎｔｉｖｉｒａｌ  Ｒｅｓ，２００２，５５（２），３１９−３２９
【非特許文献２】ＭｃＣａｒｔｈｙ，ＴＤ  ｅｔ  ａｌ．Ｍｏｌ  Ｐｈａｒｍ．２００５  Ｊｕｌ−Ａｕｇ；２（４）：３１２−８
【非特許文献３】Ｊｉａｎｇ  ＹＨ，ｅｔ  ａｌ．，ＡＩＤＳ  Ｒｅｓ  Ｈｕｍ．Ｒｅｔｒｉｖｉｒｕｓｅｓ，２００５，２１，２０７
【非特許文献４】Ｌ．Ｇｒｉｆｆｅ，ｅｔ  ａｌ．，Ａｎｇｅｗ．Ｃｈｅｍ  Ｉｎｔ  Ｅｄ，２００７，４６，２５２３
【非特許文献５】Ｍ．Ａｎｇｅｌｅｓ  Ｍｕｎｏｚ−Ｆｅｒｎａｎｄｅｚ  ｅｔ  ａｌ．“Ｗａｔｅｒ−Ｓｏｌｕｂｌｅ  Ｃａｒｂｏｓｉｌａｎｅ  Ｄｅｎｄｒｉｍｅｒｓ：Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ，Ｂｉｏｃｏｍｐａｔｉｂｉｌｉｔｙ  ａｎｄ  Ｃｏｍｐｌｅｘａｔｉｏｎ  ｗｉｔｈ  Ｏｌｉｇｏｎｕｃｌｅｏｔｉｄｅｓ；ｅｖａｌｕａｔｉｏｎ  ｆｏｒ  Ｍｅｄｉｃａｌ  Ａｐｐｌｉｃａｔｉｏｎｓ”Ｃｈｅｍ．Ｅｕｒ．Ｊ．．２００７，１３，４８３−４９５
【非特許文献６】Ｓ．Ｗ．Ｋｒｓｋａ，Ｄ．Ｓｅｙｆｅｒｔｈ，Ｊ．Ａｍ．Ｃｈｅｍ．Ｓｏｃ．，１９９８，１２０，３６０４−３６１２
【非特許文献７】Ｃｈｅｎ，ＣＺ  ａｎｄ  ＳＬ  Ｃｏｏｐｅｒ，Ｂｉｏｍａｔｅｒｉａｌｓ，２００２，２３，３３５９−６８，ＣＺ  Ｃｈｅｎ  ｅｔ  ａｌ，ｂｉｏｍａｃｒｏｍｏｌｅｃｕｌｅｓ，２０００，１，４７３−８０
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００８】
本発明は、カルボシラン構造を持ち、負の実効電荷を高分子に与える、好ましくはアニオン性のカルボン酸、スルホン酸又はリン酸基で周辺が官能化された、多官能コアから合成したデンドリマーと呼ばれる高度に分岐した高分子に関する。更に、本発明は、これらの調製方法及び生物医学におけるこれらの使用を提供する。
【課題を解決するための手段】
【０００９】
本発明の最初の態様は、多官能核（Ｎｕ）と、式（Ｉ）：
【化１】
2013519711.tif 000002
【００１０】
〔式中、Ｒ’は、アルキル基（Ｃ１〜Ｃ４）であり、
ｐは、整数であり、１〜３に変わり、好ましくは、ｐは１であり、そして
Ｘは、以下の式（ＩＩ）：
【化２】
2013519711.tif 000003
【００１１】
の基であり、
ここで、Ｅは、一般式（Ｉ）のケイ素とアミン基の窒素との間に位置する結合基であり、
ｚは、整数であり、１〜４に変わり、Ｒ１は、−ＣＯＯＲ２、−ＳＯ３Ｒ２又は−ＰＯ３（Ｒ２）２を含むリストの群から選択され、そしてＲ２は、水素又はアルキル基（Ｃ１〜Ｃ４）である〕
で示される基の同一又は異なる単位から完全又は部分的になる外側層とを含む、カルボシランデンドリマーに関する。
【図面の簡単な説明】
【００１２】
【図１】ＨＥＣ−１Ａ（ヒト子宮内膜上皮細胞）中１０μＭの濃度のカルボキシレート（Ｇ１ＣＯＯ８、Ｇ２ＣＯＯ１６及びＧ３ＣＯＯ３２）とスルホネート（Ｇ１ＳＦ８、Ｇ２ＳＦ１６及びＧ３ＳＦ３２）の末端基を有する三世代のアニオン性デンドリマーの細胞毒性を示す。図１ＡはＬＤＨアッセイ（乳酸デヒドロゲナーゼの放出）である。ＴＸ−１００（Ｔｒｉｔｏｎ  Ｘ−１００）１％は、１００％の毒性を表す。図１Ｂは、臭化物ＭＴＴアッセイである。ＤＭＳＯ２０％は、１００％の毒性を表す。Ｄｘ（デキストラン）を安全な対照分子として使用し、ＤｘＳ（硫酸デキストラン）及びスラミンは、ＨＩＶ阻害の陽性対照として使用した、アニオン性基を有する分子である。
【図２】異なる濃度のＧ２ＣＯＯ１６及びＧ２ＳＦ１６の存在下でのＰＢＭＣの生存率を示す。図２ＡはＬＤＨアッセイであり、図２ＢはＭＴＴアッセイである。
【図３】ヒト赤血球に対するＧ２ＳＦ１６デントリマーの細胞毒性を示す（上澄みへのヘモグロビンの放出）。
【図４】ＰＢＭＣにおける４日間のリンパ球増殖性アッセイを表す。ＰＢＭＣを２μｇ／ｍＬのＰＨＡ（精製フィトヘマグルチニン）で刺激した。図４Ａは、デンドリマーＧ２ＳＦ１６が分裂促進効果を有さないことを示す。図４Ｂは、デントリマーＧ２ＳＦ１６がＰＢＭＣにおいてＰＨＡの分裂促進効果を阻害することを示す。
【図５】異なる時点でのＧ２ＣＯＯ１６とＧ２ＳＦ１６のデンドリマーによる前処理の存在下での上皮細胞の単層へのウイルス粒子の吸着試験を表す。培養上澄みにおいてＡｇｐ２４を定量化する酵素イムノアッセイによりＨＩＶの量を評価する（ｐ２４  ＥＬＩＳＡ）。感染の２４時間後（図５Ａ）及び感染の７２時間後（図５Ｂ）。
【図６】細胞株ＨＥＣ−１Ａを介するウイルス粒子の内部移行の内訳を示す。細胞を、Ｘ４  ＨＩＶ  ＮＬ４．３で３時間感染する前に、デンドリマーで１時間前処理した。感染した後、ＨＥＣ−１Ａ細胞を０．２％のＴＸ−１００で溶解して、細胞内のウイルス粒子を定量化した。
【図７】デンドリマーとウイルス粒子との相互作用の機構を示す。菌株Ｘ４  ＨＩＶ  ＮＬ４．３及びＲ５  ＨＩＶ  Ｂａｌを、ＰＢＭＣに曝露する前にデンドリマーで前処理した。ウイルス上澄みを４日後に収集した。
【図８】ＨＥＣ−１Ａにおけるトランスサイトーシスの阻害を示す。本発明者たちは、膣粘膜の単層を模擬するために使用したトランスウエル装置の側底上澄みにおけるＡｇｐ２４の量を評価した。
【図９】ＰＢＭＣにおけるデンドリマーＧ２ＳＦ１６の予防及び治療効果の評価を示す。ＰＢＭＣをＨＩＶによる感染の前後の異なる時点で処理して、デンドリマーＧ２ＳＦ１６の活性を分析した。Ｔ−２０は、ｇｐ４１タンパク質を介する細胞膜へのウイルス膜融合の阻害剤であり、細胞へのウイルス侵入を阻害し、ＡＺＴは、逆転写酵素阻害剤である。まとめると、両方ともウイルス複製の阻害剤であり、ウイルス複製を阻害する対照として使用される。図９Ａは前処理であり、最初にデンドリマーが添加され、次に感染が実施され、図９Ｂは後処理であり、すなわち、最初に感染が実施され、次にデンドリマーが添加される。
【図１０】樹状細胞及びマクロファージへのＨＩＶ侵入の阻害を示す。細胞をデンドリマーＧ２ＳＦ１６で１時間前処理した。細胞をＸ４  ＨＩＶ  ＮＬ４．３（黒色棒）及びＲ５  ＨＩＶ  Ｂａｌ（灰色棒）の菌株で感染した。
【図１１】アニオン性カルボシランデンドリマーの殺菌効果を示す。黄色ブドウ球菌での処理後２４時間のアンピリシン、並びにデンドリマーＧ２ＳＦ１６及びＧ２ＣＯＯ１６の濃度依存性効果を表す。三角形の傾斜は、抗生物質（２、１、０．５、０．２５、１．１２、０．６、０．３、０．１５μｇ／ｍＬ）又はデンドリマー（１６０、８０、４０、２０、１０、５、２．５、１．２５μＭ）の濃度の減少を表す。灰色棒は、１０μＭのデンドリマーを表す。
【図１２】アニオン性カルボシランデンドリマーの静菌効果を示す。黄色ブドウ球菌での処理後２４時間のアンピリシン、並びにデンドリマーＧ２ＳＦ１６及びＧ２ＣＯＯ１６の濃度依存性効果を表す。三角形の傾斜は、抗生物質（２、１、０．５、０．２５、１．１２、０．６、０．３、０．１５μｇ／ｍＬ）又はデンドリマー（１６０、８０、４０、２０、１０、５、２．５、１．２５μＭ）の濃度の減少を表す。灰色棒は、１０μＭのデンドリマーを表す。
【図１３】クリックケミストリーを介して得たデンドリマーの生体適合性及びＨＩＶ侵入に対する阻害効果の研究を示す。図１３Ａは、ＭＴＴアッセイによるＨＥＣ−１Ａ細胞におけるデンドリマーの毒性曲線を表す。図１３Ｂは、感染の１時間前のデンドリマーＧ２ＣＫＣＯＯ１６及びＧ２ＣＫＰ３２による前処理後の細胞ＨＥＣ−１ＡへのＨＩＶ侵入の阻害を示す。
【図１４】Ｔリンパ球におけるＴＮＦアルファ（ＴＮＦ）の阻害を示す。Ｇ２ＳＦ１６の存在下でのＴＮＦ−ｌｕｃプラスミドによるジャーカット細胞の形質移入である。ａＴＮＡはアンチＴＮＡアルファである。
【図１５】Ｇ２ＳＦ１６の存在下でのプラスミドｐＮＦ−ｋＢ−ｌｕｃによるジャーカット細胞の形質移入を示す。
【図１６】焦点（Ｆ．ｐ．ｆ）及び周辺（ＦＰ）での二重官能性を有するカルボシランデンドリマウェッジ（デンドロン）を概略的に表す。
【図１７】三世代のデンドリマーとＭＴ−２細胞との２４時間の接触後のＬＤＨの放出についての研究を示す。
【図１８】三世代のデンドリマーとＰＢＭＣとの２４時間の接触後のＬＤＨの放出についての研究を示す。
【図１９】異なる濃度のデンドリマーとの２４時間の接触におけるＰＢＭＣでのミトコンドリア活性の研究を示す。
【図２０】ＨＥＣ−１Ａ細胞の単層におけるＨＩＶトランスサイトーシスの阻害を表す。この単層を、デンドリマーによる前処理の１時間後、先端部を７０ｎｇのＢａｌウイルスで処理し、側底上澄みを４８時間後に収集した。
【図２１】Ｇ２Ｏ３ＳＦ２４で１時間前処理したＰＢＭＣの感染の阻害を表す。全ての試薬を１０μＭの最終濃度でウエルに加えた。
【図２２】マクロファージ（Ｍ）、未熟な樹状細胞（Ｄｉ）及び成熟した樹状細胞（Ｄｍ）における４日後の感染の阻害についての試験を表す。細胞を、ＮＬ４．３（３ｎｇ）で感染する１時間前に前処理した。
【図２３】黄色ブドウ球菌での処理の２４時間後のアンピリシン（市販の抗生物質）及びＧ２Ｏ３ＳＦ２４の濃度に依存した殺菌効果を表す。三角形の傾斜は、抗生物質（２、１、０．５、０．２５、１．１２、０．６、０．３、０．１５μｇ／ｍＬ）又はデンドリマー（１６０、８０、４０、２０、１０、５、２．５、１．２５μＭ）の濃度の減少を表す。灰色棒は、１０μＭのデンドリマーを表す。
【図２４】黄色ブドウ球菌での処理の２４時間後のアンピリシン（市販の抗生物質）及びＧ２Ｏ３ＳＦ２４の濃度に依存した静菌効果を表す。三角形の傾斜は、抗生物質（２；１；０．５；０．２５；１．１２；０．６；０．３；０．１５μｇ／ｍＬ）又はデンドリマー（１６０；８０；４０；２０；１０；５；２．５；１．２５μＭ）の濃度の減少を表す。灰色棒は、１０μＭのデンドリマーを表す。
【図２５】鵞口瘡カンジダでの処理の２４時間後のアンフォテリシンＢ（市販の殺真菌剤）及びＧ２Ｏ３ＳＦ２４の濃度に依存した殺真菌効果を表す。三角形の傾斜は、アンフォテリシンＢ（２；１；０．５；０．２５；１．１２；０．６；０．３；０．１５μｇ／ｍＬ）又はデンドリマー（１６０；８０；４０；２０；１０；５；２．５；１．２５μＭ）の濃度の減少を表す。灰色棒は、１０μＭのデンドリマーを表す。
【図２６】鵞口瘡カンジダでの処理の２４時間後のアンフォテリシンＢ（市販の殺真菌剤）及びＧ２Ｏ３ＳＦ２４の濃度に依存した静真菌効果を現す。三角形の傾斜は、アンフォテリシンＢ（２；１；０．５；０．２５；１．１２；０．６；０．３；０．１５μｇ／ｍＬ）又はデンドリマー（１６０；８０；４０；２０；１０；５；２．５；１．２５μＭ）の濃度の減少を表す。灰色棒は、１０μＭのデンドリマーを表す。
【発明を実施するための形態】
【００１３】
「カルボシランデンドリマー」とは、本明細書において、球状を有し、デンドリマー成長のコアが多官能性であり、成長の単位、分岐又は枝分かれがカルボシラン骨格を有し、デンドリマーの外側層、表面又は周辺が官能基を組み込む、高度に分岐した高分子を意味する。この表面又は周辺は、枝分かれの先端に相当する。
【００１４】
用語「多官能コア」は、本明細書において、少なくとも２つの分岐に共有結合している、すなわち少なくとも二価であるべきである、多機能性元素又は化合物を意味する。好ましい実施態様において、コアは四価であり、より好ましくは、コアはケイ素（すなわち、シリル基）である。別の好ましい実施態様において、コアはポリフェノールであり、用語「ポリフェノール」は、任意の位置の少なくとも２つのヒドロキシル基で置換されているベンゼンの分子を意味し、例えば、１，４−ジヒドロキシベンゼン、１，２−ジヒドロキシベンゼン又は１，３−ジヒドロキシベンゼン、最も好ましくはヒドロキノン（１，４−ジヒドロキシベンゼン）でありうるが、３、４、５又は６つのヒドロキシル基を有することができる。より好ましくは、ポリフェノールは三置換されており、より好ましくは１，３，５−トリヒドロキシベンゼンである。
【００１５】
結合基とは、本明細書において、分岐を結合し、次にデントリマーの外側層の官能基と共に核に結合する任意の基を意味する。Ｅ結合基は、好ましくは、アルキル（Ｃ１〜Ｃ１０）又は基−（ＣＨ２）ｘ−Ｒ３から選択することができ、ここでＲ３は、トリアゾール又はフェノキシド基であることができ、そしてｘは、１〜６の範囲の整数である。
【００１６】
用語「アルキル」は、本明細書において、直鎖又は分岐鎖の脂肪族鎖を意味する。Ｒ’及びＲ２の場合では、これらの分岐は炭素原子１〜４個のものであり、例えば、メチル、エチル、ｎ−プロピル、ｉ−プロピル、ｎ−ブチル、ｔｅｒｔ−ブチル又はｓｅｃ−ブチルであり、好ましくは、基アルキルはメチルである。結合基（Ｅ）の場合では、これらの鎖は、炭素原子１〜１０個のものであり、より好ましくは、鎖は１〜４個の炭素原子を有するアルキル基であり、より好ましくは、結合基（Ｅ）はプロピル基である。
【００１７】
別の好ましい実施態様において、結合基（Ｅ）は、基−（ＣＨ２）ｘ−Ｒ３であり、Ｒ３は、トリアゾール、すなわち下記式：
【化３】
2013519711.tif 000004
【００１８】
〔式中、ｘは上記に記載されており、より好ましくは、ｘは４である〕
で示されるものである。
【００１９】
別の好ましい実施態様において、結合基（Ｅ）は、基−（ＣＨ２）ｘ−Ｒ３であり、Ｒ３は、フェノキシド、すなわち下記式：
【化４】
2013519711.tif 000005
【００２０】
〔式中、ｘは上記に記載されており、より好ましくは、ｘは１である〕
で示されるものである。
【００２１】
Ｒ１がＣＯＯＲ２基又は基−ＳＯ３Ｒ２である場合、好ましくは、Ｒ２は水素又はメチルであり、より好ましくはｚは２である。基Ｒ１が−ＰＯ３（Ｒ２）２である場合、好ましくは、Ｒ２は水素又はメチルであり、より好ましくはｚは１である。
【００２２】
本発明のデンドリマーはアニオン性でもあり、カルボキシレート、ホスホネート又はスルホネート基を形成することができる。
【００２３】
したがって、本発明には、デンドリマーそれ自体のみならず、これらの塩、例えばアルカリ金属又はアルカリ土類金属のもののいずれかも含まれ、これらはナトリウム、カリウム又はカルシウム塩から選択することができ、好ましくはナトリウム塩である。
【００２４】
別の好ましい実施態様において、デンドリマーの世代はゼロであることができ、以下の式（ＩＩＩ）：
【化５】
2013519711.tif 000006
【００２５】
〔式中、Ｎｕは、上記に定義された多官能コアを表し、Ｒａは、アルキル基（Ｃ１〜Ｃ６）であり、ｙは２〜６の範囲の整数であり、コアがケイ素である場合、好ましくは４であり、そしてＲは、上記に記載された一般式（Ｉ）の末端基である〕で表すことができる。コアがケイ素又はポリフェノールである場合、式（ＩＩＩ）のデンドリマーはそれぞれ式ＩＩＩａ又はＩＩＩｂ：
【化６】
2013519711.tif 000007
【００２６】
〔式中、Ｒ、Ｒａ及びｙは上記に定義されている〕で示されるものでありうる。（ＩＩＩｂ）の場合、ｙは、好ましくは３である。
【００２７】
用語「世代」は、デンドリマーの調製に必要な分岐の反復回数を意味する。
【００２８】
別の好ましい実施態様において、デンドリマーは、少なくとも第一世代であり、以下の一般式（ＩＶ）：
【化７】
2013519711.tif 000008
【００２９】
〔式中、Ｎｕは、上記に定義された多官能コアを表し、Ｒａ、Ｒｂ及びＲＩＩは、同一又は異なってアルキル基（Ｃ１〜Ｃ６）を表し、ｍは、１〜３の範囲の整数であり、好ましくは、ｍは２であり、ｙは、２〜６の範囲の整数であり、そしてＲは、上記に記載された一般式（Ｉ）の末端基である〕により表すことができる。コアがケイ素又はポリフェノールである場合、式（ＩＶ）のデンドリマーはそれぞれ式（ＩＶａ）又は（ＩＶｂ）：
【化８】
2013519711.tif 000009
【００３０】
〔式中、Ｒ、Ｒａ、Ｒｂ、ＲＩＩ、ｍ及びｙは上記に定義されている〕で示されるものでありうる。（ＩＶｂ）の場合、ｙは、好ましくは３である。
【００３１】
別の好ましい実施態様において、デンドリマーは、少なくとも第二世代であり、以下の式（Ｖ）：
【化９】
2013519711.tif 000010
【００３２】
〔式中、Ｎｕは、上記に定義された多官能コアを表し、Ｒａ、Ｒｂ、Ｒｃ、ＲＩＩ及びＲＩＩＩは、同一又は異なってアルキル基（Ｃ１〜Ｃ６）を表し、ｍ及びｎは、同一又は異なって１〜３の範囲の整数であり、好ましくは、ｍ及び／又はｎは２であり、ｙは、２〜６の範囲の整数であり、そしてＲは、前記に記載された一般式（Ｉ）の末端基である〕により表すことができる。コアがケイ素又はポリフェノールである場合、式（Ｖ）のデンドリマーはそれぞれ式（Ｖａ）又は（Ｖｂ）：
【化１０】
2013519711.tif 000011
【００３３】
〔式中、Ｒ、Ｒａ、Ｒｂ、Ｒｃ、ＲＩＩ、ＲＩＩＩ、ｍ、ｎ及びｙは上記に定義されている〕で示されるものでありうる。（Ｖｂ）の場合、ｙは、好ましくは３である。
【００３４】
別の好ましい実施態様において、デンドリマーは、少なくとも第三世代であり、以下の式（ＶＩ）：
【化１１】
2013519711.tif 000012
【００３５】
〔式中、Ｒａ、Ｒｂ、Ｒｃ、Ｒｄ、ＲＩＩ、ＲＩＩＩ及びＲＩＶは、同一又は異なってアルキル基（Ｃ１〜Ｃ６）を表し、ｍ、ｎ及びｑは、同一又は異なって１〜３の範囲の整数であり、好ましくは、ｍ、ｎ及びｑは２であり、ｙは、２〜６の範囲の整数であり、そしてＲは、前に上記に記載された一般式（Ｉ）の末端基である〕により表すことができる。コアがケイ素又はポリフェノールである場合、式（ＶＩ）のデンドリマーはそれぞれ式（ＶＩａ）又は（ＶＩｂ）：
【化１２】
2013519711.tif 000013
【００３６】
〔式中、Ｒ、Ｒａ、Ｒｂ、Ｒｃ、Ｒｄ、ＲＩＩ、ＲＩＩＩ、ＲＩＶ、ｍ、ｎ、ｑ及びｙは、前記に記載されている〕で示されるものでありうる。（Ｖｂ）の場合、ｙは、好ましくは３である。
【００３７】
式（ＩＩＩ）、（ＩＶ）、（Ｖ）又は（ＶＩ）のデンドリマーにおいて、ラジカルＲａ、Ｒｂ、Ｒｃ又はＲｄは、同一又は異なってもよく、好ましくはアルキル（Ｃ２〜Ｃ４）を表すことができる。別の好ましい実施態様において、ラジカルＲＩＩ、ＲＩＩＩ及びＲＩＶは、互いに独立して、アルキル基（Ｃ１〜Ｃ４）を表し、好ましくはメチル基である。
【００３８】
本発明のこれらのオルガノシランデンドリマーは、好ましくはテトラアリルシランの多価コアからの分岐方法（内側から外側への成長）、続く、好ましくはアニオン性の異なる官能基による表面官能化を介する、周知の反応を使用して異なる世代から高収率で調製することができる。カルボキシレート及びスルホネートデンドリマーは、安定しており、水に可溶性である。ｐＨに応じて、デンドリマーをナトリウム塩、酸又はアミノ酸として得ることができ、これらの用途に大きな汎用性をもたらす。これらの合成は比較的簡素であり、これらを大量に得ることを容易にする。加えて、カルボシランデンドリマーは、高度な化学的不活性を有し、このことはあらゆる生物医学的用途の研究にとって非常に有用である。
【００３９】
焦点に官能基を有するカルボシラン性のデンドリマウェッジ又はデンドロンの合成は、これらのデンドロンの幾つかの、多価コアへのカップリングを可能にする。得られたデンドリマーの周辺の正確な官能化は、カルボキシレート、スルホネート又はホスホネートのような末端基を有するアニオン性デンドリマーを得ることを可能にする。すなわち、これらのアニオン性誘導体の調製は、３つの工程を伴う以下の合成順序によって実施することができる：
・焦点及び適切な官能化周辺を有するデンドロン又はデンドリマウェッジの合成。
【００４０】
・前のセクションで合成したデンドロン又はデンドリマウェッジと核のカップリング。
【００４１】
・カルボキシレート、スルホネート又はホスホネートのような異なる性質のアニオン性基による、前のセクションで得たデントリマーの周辺の官能化。
【００４２】
これらのデンドリマウェッジの合成では、分岐成長戦略を使用して、ハロアルケンから、より好ましく臭化アリル又は４−ブロモブテンのようなブロモアルカンから出発することができる。これらのデンドロンの周辺に達成される官能化の種類に応じて、アニオン性カルボシランデンドリマーを得る調製手順の大きな汎用性を可能にするデンドリマウェッジが利用可能である。この方法では、焦点にブロモアルキル基のＢｒＣＨ２−Ｄｅｎｄを有し、アリル、Ｓｉ−Ｈ又はＳｉ−Ｃｌ、エステル末端基などのような異なる基を表面に示すデンドリマウェッジを調製することができる。これらのデンドリマウェッジの概要を図１６に示す。
【００４３】
デンドロンは、その焦点に官能基−ＣＨ２Ｂｒを有することができ、これによりコアに固着することができ、表面に異なる官能基を有するデンドリマーを生じる。ポリフェノールのような多様な誘導体の焦点でのデンドリマウェッジとＣ−Ｂｒ結合とのこのカップリング反応は、アセトン、テトラヒドロフラン（ＴＨＦ）又はジメチルホルムアミド（ＤＭＦ）のような溶媒において、炭酸カリウム（Ｋ２ＣＯ３）又は炭酸セシウム（Ｃｓ２ＣＯ３）のような塩基の存在下、使用される有機溶媒中の無機塩の可溶性に有利なようにクラウンエーテル、例えば１８−Ｃ−６を添加して、６０〜１００℃の温度で数時間加熱することにより、一般に実施することができる。
【００４４】
上記に記載されたデンドリマーが合成されると、カルボン酸、ホスホン酸又はスルホン酸基、より好ましくはこれらのアニオン性基を表面に有するデンドリマーの形成は、第一には出発デンドリマーに存在する特徴に応じて、第二には最終デンドリマーに望ましいアニオン性基の性質に基づいて、異なる方法により取り組むことができる。
【００４５】
したがってカルボキシレート誘導体を得るために、２つの異なる方法を使用することができ、第一は、白金触媒を使用したアリルアミンとＳｉ−Ｈ末端デンドリマーとのヒドロシリル化反応、続くアミノ基−ＮＨ２末端デンドリマーへのメチルアクリレートのマイケル付加、後のエステル基の変換であり、ＮａＯＨのような塩基での処理によりカルボキシレート基を得る。第二の方法は、メチルアクリレートのマイケル型付加により初期アリルエステル末端アミン基を調製すること、続く官能化アリルアミンとＳｉ−Ｈ末端デンドリマーとのヒドロシリル化である。この場合、最終工程も、塩基の添加によるカルボキシレート基の末端エステル基への変換である。
【００４６】
一方、スルホネート基を有するデンドリマーは、最初のアリルアミンとＳ−Ｈ末端デンドリマーとのヒドロシリル化、後の最終工程において得られるＮＨ２末端デンドリマーへのビニルスルホン酸ナトリウムのマイケル型付加により調製することができる。
【００４７】
ホスホネート誘導体の場合では、最初にＮＨ２末端デンドリマーを合成し、後にメチルホスファイトＨＰＯ（ＯＭｅ）２の添加により対応する基を導入して調製することができる。ここでも、末端ホスホネート基を有するアニオン性誘導体の形成は、前記のデンドリマーへの塩基、例えばＮａＯＨの添加により達成することができる。
【００４８】
したがって、本発明の別の態様は、多価コア及び末端ＮＨ２基を含有するデンドリマーの、アルケン含有カルボン酸基若しくはスルホネート基、例えばメチルアクリレート若しくはビニルスルホネートへのマイケル型付加（カルボキシレート若しくはスルホネート基によるデンドリマー表面の官能化）又はこれらのデンドリマーとホルムアルデヒド及びジメチルホスホネートとの２工程反応（ホスホネート基によるデンドリマー表面の官能化）を含む、本発明のデンドリマーを得る方法に関する。スキームは以下でありうる：
【化１３】
2013519711.tif 000014
【００４９】
ここで、Ｅ、ｚ、Ｒ１は、上記に記載されており、ｎは、世代（Ｇ）の数を表し、そしてＸは、末端基の数であり、これは世代の数によって決まる。
【００５０】
「アルケン」とは、本明細書において、少なくとも１つの末端二重結合を含有する直鎖又は分岐鎖の不飽和炭化水素を意味し、２〜４個の炭素原子を有する鎖であり、カルボン酸基又はスルホネート基を更に含む。
【００５１】
本発明のデンドリマーを得る手順の好ましい実施態様において、ＮＨ２末端デンドリマーは、アリルアミンと、末端Ｓｉ−Ｈ結合を有する異なる世代のカルボシランデンドリマーとのヒドロシリル化により得ることができる。
【００５２】
別の好ましい実施態様において、ＮＨ２基を含有するデンドリマーは、
ａ）焦点にハロアルキルを有し、ハロ−アルケンのアリル基で官能化されたデンドロンを合成すること；
ｂ）工程（ａ）で得たデンドロンを多価コアにカップリングすること、及び
ｃ）（ｂ）で得たデンドリマーを末端ＮＨ２基で官能化すること
により得られる。
【００５３】
本発明の別の態様は、Ｓｉ−Ｈ基を含有するデンドリマーと、カルボン酸基、ホスホン酸基又はスルホン酸基で官能化された末端アリルアミン基とのヒドロシリル化を含む、本発明のデンドリマーを得る方法に関する。
【００５４】
別の好ましい実施態様において、多価核及びＳｉ−Ｈ末端基を含有する多価デンドリマーは、
ａ）焦点にハロアルキルを有し、ハロアルケンのＳｉ−Ｈ基で官能化されたデンドロンを合成すること、及び
ｂ）工程（ａ）で得たデンドロンを多価コアにカップリングすること、又は代替的に
ａ’）焦点にハロアルキルを有し、ハロアルケンのアリル基で官能化されたデンドロンを合成すること；
ｂ’）工程（ａ’）で得たデンドロンを核にカップリングすること、及び
ｃ’）（ｂ’）で得たデントリマーをＳｉ−Ｈ末端基で官能化すること
により得られる。
【００５５】
「ハロアルケン」とは、本発明において、ハロゲン原子、例えば、臭素、ヨウ素又は塩素で置換されているアルケン（Ｃ１〜Ｃ６）を意味し、より好ましくはブロモアルケン（Ｃ１〜Ｃ６）であり、さらにより好ましくは４−ブロモブテノのようなブロモアルケン（Ｃ２〜Ｃ４）である。本発明のデンドリマーを得る方法において、ＮＨ２末端デンドリマーは、プロパルギルアミンを含有するカルボシランデンドリマーと、末端アジド基で官能化された異なる世代のカルボシランデンドリマーとを結合する「クリックケミストリー」方法論を使用して得ることができる。しかし、上記に記載されているように、カルボン酸基、スルホン酸基又はホスホン酸基によるアミノ末端の官能化も、デンドリマー骨格の表面に予め結合させることができる。したがって、本発明の別の態様は、最初にカルボン酸基、スルホン酸基若しくはホスホン酸基又はこれらの基の前駆体による有機アミンを官能化すること、続いて末端Ｓｉ−Ｈ結合を有する又は末端アジド基で官能化された異なる世代のカルボシランデンドリマーに結合することを含む、本発明のデンドリマーを得る方法に関する。
【００５６】
別の態様において、本発明は、式（ＶＩＩ）：
Ｅｔ３−Ｒ      （ＶＩＩ）
〔式中、Ｅｔはエチル基であり、Ｒは、上記に記載された式（Ｉ）の末端基、基−Ｓｉ（Ｒ’）３−ｐ［（ＣＨ２）４−Ｎ３］ｐ又は基−Ｓｉ（Ｒ’）３−ｐ［Ｅ−ＮＨ２］ｐであり、Ｒ’はアルキル基（Ｃ１〜Ｃ４）であり、好ましくは、Ｒ’はメチルであり、ｐは、１〜３に変わり、好ましくは、ｐは１であり、そしてＥは、上記に記載された結合基である〕
で示される化合物に関する。
【００５７】
したがって、他の反応中間体は、
−上記に定義され多官能コア、好ましくはテトラアリルシラン又はポリフェノールと、
−基−Ｓｉ（Ｒ’）３−ｐ［（ＣＨ２）４−Ｎ３］ｐ又は基−Ｓｉ（Ｒ’）３−ｐ［Ｅ−ＮＨ２］ｐ
（ここで、Ｒ’、ｐ及びＥは、上記に記載されており、好ましくは、Ｅは基−（ＣＨ２）ｘ−Ｒ３であり、Ｒ３はトリアゾールであり、ｘは請求項６に定義されたとおりであり、好ましくは、ｘは４である）
の同一又は異なる単位から完全又は部分的になる外側層と
を含むアジド又はアミン末端基で官能化されたカルボシランデンドリマーであることができる。
【００５８】
本発明のデンドリマーを、生物医学の異なる分野に適用することができ、それらのうち、治療剤、抗ウイルス薬、抗細菌薬又は抗プリオン薬としての使用が含まれる。抗微生物有効成分に加えて、これらは抗炎症有効成分も有し、このことは、ＨＩＶによる炎症の可能性が炎症過程の存在により有意に増加するので予防特性を改善する。良好な膣局所殺菌剤はＨＩＶによる感染を防止し、膣上皮性関門の健全性を維持するべきであることは明白である。この意味において、膣炎症の過程は、樹状細胞の活性化及びＴ細胞（ＨＩＶの標的）の炎症部位への動員によりＨＩＶ感染を増加することができ、このことは、ＨＩＶ感染の危険性を増加し、転写因子ＮＦカッパＢを調節するサイトカインを介して転写過程を活性化し、次にＨＩＶに結合して、ＨＩＶを活性化する。転写因子ＮＦカッパＢは、抗炎症性化合物の主な薬剤標的である。本発明のデンドリマーの抗炎症特性は、当該技術で既知の抗ウイルス有効成分、抗細菌有効成分又は抗プリオン薬有効成分を有する他のデンドリマーに対する追加的な利点である。したがって、本発明の別な態様は、ウイルス、細菌又は真菌により引き起こされる疾患の予防及び／又は治療、より好ましくは疾患がＨＩＶの菌株により引き起こされる場合の第一選択薬である、薬剤としてのデンドリマーに関する。より好ましくは、これらのデンドリマーはアニオン性である。
【００５９】
抗ウイルス薬として、ナノスケールの寸法の本発明のデンドリマーは、標的細胞に付着する正確な過程、並びにこの感染及び新たなウイルス粒子の関連する産生を妨げる。
【００６０】
予防的適用に加えて、このナノ粒子は、実験の結果によると未だ感染していない細胞の感染を防止することができ、本発明のデンドリマーも、感染細胞においてこのナノ粒子がＨＩＶウイルス複製を低減するので治療効果を有するが、大部分は、性行為感染症（ＳＴＤ）に治療効果を有する（抗ウイルス性、抗細菌性又は抗真菌性）。したがって、好ましい実施態様において、疾患は、本発明のデンドリマーが抗ウイルス、抗細菌又は抗真菌系として作用する性行為感染症である。
【００６１】
用語「性行為感染症」は、本発明において、感染している何者かと性行為を有することにより得る感染を意味し、感染は、ＨＩＶにより引き起こされる感染のように細菌、真菌、原生動物及びウイルスにより引き起こされうる。大部分のＨＩＶ感染は、感染者と性行為を有したとき保護がないために生じる。
【００６２】
本発明の別の態様は、上記に記載された少なくとも１つのデンドリマーと、薬学的に許容される担体とを含む医薬組成物に関する。加えて、この医薬組成物は別の活性生成物を含むことができる。
【００６３】
そのような組成物に使用することができる「薬学的に許容される担体」は、当業者に既知のビークルである。医薬組成物の例には、経口、鼻腔内、局所又は非経口投与用の任意の固体（錠剤、丸剤、カプセル剤、顆粒剤など）又は液体（ゲル剤、液剤、懸濁剤又は乳剤）が含まれ、好ましくは、投与は局所であり、なおより好ましくはゲル剤の剤形である。
【００６４】
本発明の別の態様は、少なくとも１つの本発明のデンドリマーを含む組成物の治療有効量の投与を含む、哺乳動物、好ましくはヒトにおいてウイルス、細菌又は真菌により引き起こされる疾患を治療又は予防する方法に関する。好ましくは、組成物の投与は、経口、鼻腔内、局所又は非経的に実施することができる。
【００６５】
本明細書において使用されるとき、用語「治療有効量」は、所望の効果を生じるように計算された組成物の量を意味し、一般に、とりわけ、組成物の性質、患者の年齢、状態及び病歴、疾患の重篤性、並びに投与の経路及び頻度によって決定される。本発明のデンドリマーを、分子、好ましくは薬理学的活性（活性剤）を有する分子、より好ましくは、負荷電デンドリマーが使用される場合には正荷電分子を移動するビヒクルとして使用することも可能である。記載及び特許請求の範囲の全体にわたって、語「含む」及びその変形は、他の技術的特徴、添加剤、成分又は工程を除外することを意図しない。当業者には、本発明の他の目的、利点及び特徴は、本発明の記載及び一部の実施により現れる。以下の実施例及び図面は、例として提供され、本発明の範囲を制限することは意図していない。
【実施例】
【００６６】
以下は、発明者たちにより実施された試験によって本発明を説明し、カルボシランデンドリマーの有効性及びこれらの合成方法を強調している。
【００６７】
実施例１：ケイ素のコアから成長させた本発明のデンドリマーの合成
合成は、下記に提示されている２つの方法に従って実施した。
【００６８】
方法１：末端アミノ基を有するテトラアリルシランのコアからのカルボシランデンドリマーの合成
末端アミノ基を有するカルボシランデンドリマーの合成は２つの戦略：１）アリルアミンと、末端Ｓｉ−Ｈ結合を含有する異なる世代のカルボシランデンドリマーとをヒドロシリル化すること又は２）クリックケミストリー方法論を使用して、プロパルギルアミンを、末端アジドを含有する異なる世代のカルボシランデンドリマーに結合することにより実施した。
【００６９】
方法１（ａ）：アリルアミンのヒドロシリル化により得た、末端アミノ基を有するカルボシランデンドリマーからのアニオン性デンドリマーの合成
一般に、これらの実施例に記載されているデンドリマーの名称方法を簡素化するため、Ｇｎ−（Ｆｐ）ｘと表すことができ、ここで
ｎは、世代Ｇの数を示し、
Ｆは、デンドリマーの周辺に位置する官能基の性質を示し、
ｐは、それぞれの分岐における官能基の数を示し、
ｘは、デンドリマーに存在する末端単位の数を示す。
【００７０】
デンドリマーがゼロ世代Ｇ０、ｎ＝０である場合、又は第一世代Ｇ１、ｎ＝１若しくは第二世代Ｇ２、すなわちｎ＝２である場合、一般構造は以下の通りである：
【化１４】
2013519711.tif 000015
【００７１】
対応する単核化合物は、Ｅｔ３−［Ｆｐ］であり、ここでＥｔはエチル基である。
【００７２】
アニオン性デンドリマーを、アミノ末端基を有するカルボシランデンドリマーから又はこれらの単核対応物のトリエチルシリル置換（Ｅｔ３−［Ｓｉ（ＣＨ２）３ＮＨ２］（１）、ここでＦはＳｉ（ＣＨ２）３ＮＨ２基であり、式は、Ｇｎ−［Ｓｉ（ＣＨ２）３ＮＨ２］ｘ（ｎ＝０、ｘ＝４（２）；ｎ＝１、ｘ＝８（３）；ｎ＝２、ｘ＝１６（４））から出発して調製した。これらの異なる世代のデンドリマーは、分岐手順についての文献（Ｍ．Ａｎｇｅｌｅｓ  Ｍｕｎｏｚ−Ｆｅｒｎａｎｄｅｚ  ｅｔ  ａｌ．“Ｗａｔｅｒ−Ｓｏｌｕｂｌｅ  Ｃａｒｂｏｓｉｌａｎｅ  Ｄｅｎｄｒｉｍｅｒｓ：Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ，Ｂｉｏｃｏｍｐａｔｉｂｉｌｉｔｙ  ａｎｄ  Ｃｏｍｐｌｅｘａｔｉｏｎ  ｗｉｔｈ  Ｏｌｉｇｏｎｕｃｌｅｏｔｉｄｅｓ；ｅｖａｌｕａｔｉｏｎ  ｆｏｒ  Ｍｅｄｉｃａｌ  Ａｐｐｌｉｃａｔｉｏｎｓ”Ｃｈｅｍ．Ｅｕｒ．Ｊ．．２００７，１３，４８３−４９５）に記載されている反応に従って調製する。これらの化合物から、カルボキシレート、スルホネート又はホスホネート基を有するアニオン性デンドリマーを、下記に記載される手順に従って最終的に得ることができる。
【００７３】
方法１（ａ）カルボキシレートデンドリマー
異なる世代のアニオン性カルボキシレートデンドリマーの合成は、メチルアクリレートの、上記に記載された末端アミノ基−ＮＨ２を有するデンドリマー１〜４へのマイケル付加により実施した。反応条件は、スキーム２に記載されており、このようにして、デンドリマーのＧｎ−［Ｓｉ（ＣＨ２）３Ｎ（ＣＨ２ＣＨ２ＣＯＯＭｅ）２］ｘ（トリエチルシリル：Ｅｔ３−［Ｓｉ（ＣＨ２）３Ｎ（ＣＨ２ＣＨ２ＣＯＯＭｅ）２］（５）；Ｇ０−［Ｓｉ（ＣＨ２）３Ｎ（ＣＨ２ＣＨ２ＣＯＯＭｅ）２］４  ｎ＝０及びｘ＝４（６）；Ｇ１−［Ｓｉ（ＣＨ２）３Ｎ（ＣＨ２ＣＨ２ＣＯＯＭｅ）２］８  ｎ＝１及びｘ＝８（７）；Ｇ２−［Ｓｉ（ＣＨ２）３Ｎ（ＣＨ２ＣＨ２ＣＯＯＭｅ）２］１６  ｎ＝２及びｘ＝１６（８））を、一般的な有機溶媒には可溶性であるが水には不溶性である無色の油状物として得る。これを説明するために、トリエチルシリル中間体（５）とデンドリマー（６）、（７）及び（８）の構造を下記に表す。
【化１５】
2013519711.tif 000016
2013519711.tif 000017
【００７４】
誘導体５〜８を、ＮａＯＨでの処理により対応するアニオン性カルボキシレート誘導体に変換することができ、得られた化合物のＧｎ−［Ｓｉ（ＣＨ２）３Ｎ（ＣＨ２ＣＨ２ＣＯＯＮａ）２］ｘ：トリエチルシラン  Ｅｔ３−［Ｓｉ（ＣＨ２）３Ｎ（ＣＨ２ＣＨ２ＣＯＯＮａ）２］（９）；Ｇ０−［Ｓｉ（ＣＨ２）３Ｎ（ＣＨ２ＣＨ２ＣＯＯＮａ）２］４  ｎ＝０及びｘ＝４（１０）；Ｇ１−［Ｓｉ（ＣＨ２）３Ｎ（ＣＨ２ＣＨ２ＣＯＯＮａ）２］８  ｎ＝１及びｘ＝８（１１）；Ｇ２−［Ｓｉ（ＣＨ２）３Ｎ（ＣＨ２ＣＨ２ＣＯＯＮａ）２］ｘ  ｎ＝２及びｘ＝１６（１２）を、水に可溶性の白色の固体として高収率で単離する（スキーム２）。加えて、化合物９〜１２を１Ｍ  ＨＣｌの水溶液で処理して、カチオン性誘導体のＧｎ−［Ｓｉ（ＣＨ２）３Ｎ＋Ｈ（ＣＨ２ＣＨ２ＣＯＯＨ）２］ｘ：トリエチルシリル  Ｅｔ３−［Ｓｉ（ＣＨ２）３Ｎ＋Ｈ（ＣＨ２ＣＨ２ＣＯＯＨ）２］（１３）；Ｇ０−［Ｓｉ（ＣＨ２）３Ｎ＋Ｈ（ＣＨ２ＣＨ２ＣＯＯＨ）２］４  ｎ＝０及びｘ＝４（１４）；Ｇ１−［Ｓｉ（ＣＨ２）３Ｎ＋Ｈ（ＣＨ２ＣＨ２ＣＯＯＨ）２］８  ｎ＝２及びｘ＝８（１５）；Ｇ２−［Ｓｉ（ＣＨ２）３Ｎ＋Ｈ（ＣＨ２ＣＨ２ＣＯＯＨ）２］１６  ｎ＝３及びｘ＝１６（１６））をもたらす（スキーム２）。
【化１６】
2013519711.tif 000018
【００７５】
誘導体１３〜１６も、ＮａＯＨの溶液での処理による可逆的方法によりアニオン性デンドリマー９〜１２に変換し、再び１Ｍ  ＨＣｌの水溶液で処理すると、最初の化合物に戻る（スキーム２）。
【００７６】
例として、デンドリマー１３及び１４を以下に表す。
【化１７】
2013519711.tif 000019
【００７７】
方法１（ａ）スルホネートデンドリマー
スルホネート末端基を有する異なる世代のアニオン性デンドリマーの合成は、ビニルスルホン酸ナトリウムの、末端アミノ基−ＮＨ２を有するデンドリマー１〜４へのマイケル型付加反応により実施した。反応は、エタノール−水混合物において１２０℃で加熱して実施して、得られたアニオン性誘導体のＧｎ−［Ｓｉ（ＣＨ２）３Ｎ（ＣＨ２ＣＨ２ＳＯ３Ｎａ）２］ｘ（トリエチルシリル  Ｅｔ３−［Ｓｉ（ＣＨ２）３Ｎ（ＣＨ２ＣＨ２ＳＯ３Ｎａ）２］（１７）；Ｇ０−［Ｓｉ（ＣＨ２）３Ｎ（ＣＨ２ＣＨ２ＳＯ３Ｎａ）２］４  ｎ＝０、ｘ＝４（１８）；Ｇ１−［Ｓｉ（ＣＨ２）３Ｎ（ＣＨ２ＣＨ２ＳＯ３Ｎａ）２］８  ｎ＝１及びｘ＝８（１９）；Ｇ２−［Ｓｉ（ＣＨ２）３Ｎ（ＣＨ２ＣＨ２ＳＯ３Ｎａ）２］１６  ｎ＝２及びｘ＝１６（２０））を、水に可溶性の白色固体として高収率で得て、分解の徴候を示すことなく長期間にわたって保存することができる。（スキーム３）。
【化１８】
2013519711.tif 000020
【００７８】
カルボキシレート誘導体と同様に、アニオン性デンドリマー１７〜２０を、水中１Ｍ  ＨＣｌ溶液の過剰量で処理してプロトン化することができ、カチオン性デンドリマーのＧｎ−［Ｓｉ（ＣＨ２）３Ｎ＋Ｈ（ＣＨ２ＣＨ２ＳＯ３−Ｎａ＋）２］ｘ（トリエチルシリル  Ｅｔ３−［Ｓｉ（ＣＨ２）３Ｎ＋Ｈ（ＣＨ２ＣＨ２ＳＯ３−Ｎａ＋）２］（２１）；Ｇ０−［Ｓｉ（ＣＨ２）３Ｎ＋Ｈ（ＣＨ２ＣＨ２ＳＯ３−Ｎａ＋）２］４  ｎ＝０及びｘ＝４（２２）；Ｇ１−［Ｓｉ（ＣＨ２）３Ｎ＋Ｈ（ＣＨ２ＣＨ２ＳＯ３−Ｎａ＋）２］８  ｎ＝２及びｘ＝８（２３）；Ｇ２−［Ｓｉ（ＣＨ２）３Ｎ＋Ｈ（ＣＨ２ＣＨ２ＳＯ３−Ｎａ＋）２］１６  ｎ＝３及びｘ＝１６（２４））を生じ、これをＮａＯＨの溶液での処理により最初に戻すことができる（スキーム３）。
【００７９】
方法１（ａ）ホスホネートデンドリマー
アニオン性ホスホネート基を周辺に有するデンドリマーの合成は、アリルアミンとのヒドロシリル化で調製された末端−ＮＨ２を有するカルボシランデンドリマーから得ることができず、それは、これらの誘導体とホルムアルデヒド及びジメチルホスファイトＨＰＯ（ＯＭｅ）２との反応が、ホスホネート基を有する樹状系の官能化をもたらさないからである。
【００８０】
方法１（ｂ）：クリックケミストリーを介するアジド末端デンドリマーへのプロパルギルアミン基のカップリングにより得られる、末端アミノ基を有するデンドリマーからのアニオン性デンドリマーの合成
この合成経路は、最初に末端アジド基を有するテトラアリルシランのコアから成長させたカルボシランデンドリマーの調製を伴う。これらのアジド誘導体の調製は、Ｇｎ−［Ｓｉ−Ｈ］ｘの種類のＳｉ−Ｈ末端結合を含有するデンドリマーから２工程で実施した（スキーム４）。最初に、ｎＧ−［Ｓｉ−Ｈ］ｘと４−ブロモブテンのヒドロシリル化反応は、末端ＣＨ２Ｂｒ基を有する異なる世代のカルボシランデンドリマーのＧｎ−［Ｓｉ−ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２Ｂｒ］ｘ（トリエチルシリル  Ｅｔ３−［Ｓｉ−ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２Ｂｒ］（２５）；Ｇ０−［Ｓｉ−ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２Ｂｒ］４  ｎ＝０及びｘ＝４（２６）；Ｇ１−［Ｓｉ−ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２Ｂｒ］８  ｎ＝１及びｘ＝８（２７）；Ｇ２−［Ｓｉ−ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２Ｂｒ］１６  ｎ＝２及びｘ＝１６（２８））をもたらす。続く誘導体２５〜２８とアジ化ナトリウムとの反応は、末端アジド基を有するカルボシランデンドリマーのＧｎ−［Ｓｉ−ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２Ｎ３］ｘ（トリエチルシリル  Ｅｔ３−［Ｓｉ−ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２Ｎ３］（２９）；Ｇ０−［Ｓｉ−ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２Ｎ３］４  ｎ＝０及びｘ＝４（３０）；Ｇ１−［Ｓｉ−ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２Ｎ３］８  ｎ＝１及びｘ＝８（３１）；Ｇ２−［Ｓｉ−ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２Ｎ３］１６  ｎ＝２及びｘ＝１６（３２））をもたらす（スキーム４を参照すること）。
【化１９】
2013519711.tif 000021
【００８１】
化合物２５〜３２は、最も一般的に使用される有機溶媒に可溶性である、空気中で安定した油状固体であり、長期間にわたって分解することなく保存することができる。
【００８２】
末端アジド基を有するデンドリマーを調製すると、表面にアミノ基（−ＮＨ２）を有するデンドリマーの合成は、２９〜３２化合物とプロパルギルアミン化合物との「クリックケミストリー」の種類の反応により生じ、誘導体のｃｋ−Ｇｎ−［Ｓｉ（ＣＨ２）４（Ｎ３Ｃ２Ｈ）ＣＨ２ＮＨ２］ｘ（トリエチルシリル  Ｅｔ３−［Ｓｉ（ＣＨ２）４（Ｎ３Ｃ２Ｈ）ＣＨ２ＮＨ２］（３３）；ｃｋ−Ｇ０−［Ｓｉ（ＣＨ２）４（Ｎ３Ｃ２Ｈ）ＣＨ２ＮＨ２］４  ｎ＝０及びｘ＝４（３４）；ｃｋ−Ｇ１−［Ｓｉ（ＣＨ２）４（Ｎ３Ｃ２Ｈ）ＣＨ２ＮＨ２］８  ｎ＝２及びｘ＝８（３５）；ｃｋ−Ｇ３−［Ｓｉ（ＣＨ２）４（Ｎ３Ｃ２Ｈ）ＣＨ２ＮＨ２］１６  ｎ＝３及びｘ＝１６（３６））をもたらす（スキーム５を参照すること）。
【化２０】
2013519711.tif 000022
【００８３】
これらのデンドリマーをｃｋ−Ｇｎ−（Ｆｐ）ｘと表すことにより簡素化することができ、ここで、ｃｋは、アジド基と炭素−炭素三重結合とのクリックカップリングで得られるデンドリマーを示し、そしてｎ、Ｇ、Ｆ、Ｐ及びｘは、上記に記載されており、これらの構造は上記のとおりである。
【００８４】
この合成経路に従うアニオン性デンドリマーの調製は、末端アミノ基を有するカルボシランデンドリマーのｃｋ−Ｇｎ−［Ｓｉ（ＣＨ２）４（Ｎ３Ｃ２Ｈ）ＣＨ２ＮＨ２］ｘ（３３）〜（３６）の合成により出発する。これらの化合物から、カルボキシレート、スルホネート又はホスホネート基で得られるアニオン性デンドリマーは、アリルアミンのヒドロシリル化により得られる末端ＮＨ２基を有するデンドリマーについての前記セクションに記載されたものと同様の手順に従って生じる。このように、本発明者たちは、下記に記載されている化合物のファミリーを得た。
【００８５】
カルボキシレート基を有するアニオン性デンドリマーの方法１（ｂ）
スキーム５に記載された反応条件を使用する、ＮＨ２末端デンドリマー３３〜３６へのメチルアクリレートのマイケル型付加反応は、デンドリマーのｃｋ−Ｇｎ−［Ｓｉ（ＣＨ２）４（Ｎ３Ｃ２Ｈ）ＣＨ２Ｎ（ＣＨ２ＣＨ２ＣＯＯＭｅ）２］ｘ（トリエチルシリル  Ｅｔ３−［Ｓｉ（ＣＨ２）４（Ｎ３Ｃ２Ｈ）ＣＨ２Ｎ（ＣＨ２ＣＨ２ＣＯＯＭｅ）２］（３７）；ｃｋ−Ｇ０−Ｓｉ（ＣＨ２）４（Ｎ３Ｃ２Ｈ）ＣＨ２Ｎ（ＣＨ２ＣＨ２ＣＯＯＭｅ）２］４  ｎ＝０及びｘ＝４（３８）；ｃｋ−Ｇ１−［Ｓｉ（ＣＨ２）４（Ｎ３Ｃ２Ｈ）ＣＨ２Ｎ（ＣＨ２ＣＨ２ＣＯＯＭｅ）２］８  ｎ＝１及びｘ＝８（３９）；ｃｋ−Ｇ２−［Ｓｉ（ＣＨ２）４（Ｎ３Ｃ２Ｈ）ＣＨ２Ｎ（ＣＨ２ＣＨ２ＣＯＯＭｅ）２］１６  ｎ＝２及びｘ＝１６（４０））を、一般的な有機溶媒に可溶性であるが、水には不溶性である無色の油状物としてもたらす。
【００８６】
誘導体３７〜４０を、ＮａＯＨでの処理により対応するアニオン性カルボキシレートデンドリマーに変換して、化合物のｃｋ−Ｇｎ−［Ｓｉ（ＣＨ２）４（Ｎ３Ｃ２Ｈ）ＣＨ２Ｎ（ＣＨ２ＣＨ２ＣＯＯＮａ）２］ｘ（トリエチルシリル  Ｅｔ３−［Ｓｉ（ＣＨ２）４（Ｎ３Ｃ２Ｈ）ＣＨ２Ｎ（ＣＨ２ＣＨ２ＣＯＯＮａ）２］（４１）；ｃｋ−Ｇ０−［Ｓｉ（ＣＨ２）４（Ｎ３Ｃ２Ｈ）ＣＨ２Ｎ（ＣＨ２ＣＨ２ＣＯＯＮａ）２］４  ｎ＝０及びｘ＝４（４２）；ｃｋ−Ｇ１−［Ｓｉ（ＣＨ２）４（Ｎ３Ｃ２Ｈ）ＣＨ２Ｎ（ＣＨ２ＣＨ２ＣＯＯＮａ）２］８  ｎ＝１及びｘ＝８（４３）；ｃｋ−Ｇ２−［Ｓｉ（ＣＨ２）４（Ｎ３Ｃ２Ｈ）ＣＨ２Ｎ（ＣＨ２ＣＨ２ＣＯＯＮａ）２］１６  ｎ＝２及びｘ＝１６（４４））を得ることができ、これを水に可溶性の白色固体として高収率で単離する（スキーム６）。
【化２１】
2013519711.tif 000023
【００８７】
スルホネート基を有するアニオン性デンドリマーの方法１（ｂ）
水−エタノール混合物における−ＮＨ２末端デンドリマー３３〜３６へのビニルスルホン酸ナトリウムの１２０℃でのマイケル型付加は、アニオン性誘導体のｃｋ−Ｇｎ−［Ｓｉ（ＣＨ２）４（Ｎ３Ｃ２Ｈ）ＣＨ２Ｎ（ＣＨ２ＣＨ２ＳＯ３Ｎａ）２］ｘ（トリエチルシリル  ｘ＝１（４５）；ｎ＝１、ｘ＝４（４６）；ｎ＝２、ｘ＝８（４７）；ｎ＝３、ｘ＝１６（４８））を、水に可溶性の白色固体として高収率でもたらし、分解の徴候を示すことなく長期間にわたって保存することができる（スキーム７）。
【化２２】
2013519711.tif 000024
【００８８】
ホスホネート基を有するアニオン性デンドリマーの方法１（ｂ）
末端−ＮＨ２基を有するデンドリマー３３〜３６をホルムアルデヒドとＴＨＦにおいて室温で１時間反応し、次にメチルホスファイトＨＰＯ（ＯＭｅ）２を「その場」で加え、混合物を４０℃で３時間加熱して、アニオン性誘導体のｃｋ−Ｇｎ−［Ｓｉ（ＣＨ２）４（Ｎ３Ｃ２Ｈ）ＣＨ２Ｎ（ＣＨ２ＰＯ（ＯＭｅ）２）２］ｘ（トリエチルシリル  Ｅｔ３−［Ｓｉ（ＣＨ２）４（Ｎ３Ｃ２Ｈ）ＣＨ２Ｎ（ＣＨ２ＰＯ（ＯＭｅ）２）２］（４９）；ｃｋ−Ｇ０−［Ｓｉ（ＣＨ２）４（Ｎ３Ｃ２Ｈ）ＣＨ２Ｎ（ＣＨ２ＰＯ（ＯＭｅ）２）２］４  ｎ＝０及びｘ＝４（５０）；ｃｋ−Ｇ１−［Ｓｉ（ＣＨ２）４（Ｎ３Ｃ２Ｈ）ＣＨ２Ｎ（ＣＨ２ＰＯ（ＯＭｅ）２）２］８  ｎ＝１及びｘ＝８（５１）；ｃｋ−Ｇ２−［Ｓｉ（ＣＨ２）４（Ｎ３Ｃ２Ｈ）ＣＨ２Ｎ（ＣＨ２ＰＯ（ＯＭｅ）２）２］１６  ｎ＝２及びｘ＝１６（５２））を無色の油状物として高収率で得て、分解の徴候を示すことなく長期間にわたって保存することができる（スキーム８）。誘導体４９〜５２を、ＮａＯＨでの処理により末端ホスホネート基を有するアニオン性カルボキシレートデンドリマーのｃｋ−Ｇｎ−［Ｓｉ（ＣＨ２）４（Ｎ３Ｃ２Ｈ）ＣＨ２Ｎ（ＣＨ２ＰＯ（ＯＮａ）２）２］ｘ（トリエチルシリル  Ｅｔ３−［Ｓｉ（ＣＨ２）４（Ｎ３Ｃ２Ｈ）ＣＨ２Ｎ（ＣＨ２ＰＯ（ＯＮａ）２）２］（５３）；ｃｋ−Ｇ０−［Ｓｉ（ＣＨ２）４（Ｎ３Ｃ２Ｈ）ＣＨ２Ｎ（ＣＨ２ＰＯ（ＯＮａ）２）２］４  ｎ＝０及びｘ＝４（５４）；ｃｋ−Ｇ１−［Ｓｉ（ＣＨ２）４（Ｎ３Ｃ２Ｈ）ＣＨ２Ｎ（ＣＨ２ＰＯ（ＯＮａ）２）２］８  ｎ＝１及びｘ＝８（５５）；ｃｋ−Ｇ２−［Ｓｉ（ＣＨ２）４（Ｎ３Ｃ２Ｈ）ＣＨ２Ｎ（ＣＨ２ＰＯ（ＯＮａ）２）２］１６  ｎ＝２及びｘ＝１６（５６）） に変換することができる（スキーム８）。これらのデンドリマーを水中に白色固体として単離し、分解の徴候を示すことなく長期間にわたって保存することができる。
【化２３】
2013519711.tif 000025
【００８９】
方法２−アニオン性基による有機アミンの官能化、続くカルボシランデンドリマーへの固着
これらの化合物の合成に進むために、最初に、アニオン性基又はアニオン性基の前駆体による一連の脂肪族及び芳香族の有機アミンの官能化を実施した。これらのアミンは、これらの末端基を介したカルボシランデンドリマーへの結合を可能にする他の官能基を有することもできる。
【００９０】
カルボキシレート基（Ａ）、スルホネート基（Ｂ）、ホスホネート基（Ｃ）を有するアリル誘導体を合成し、末端Ｓｉ−Ｈ結合を含有するデンドリマーのＧｎ−（ＳｉＨ）ｘ（トリエチルシラン、Ｇ０、Ｇ１、Ｇ２、ここで、それぞれｘ＝１、４、８及び１６である）とのヒドロシリル化反応によりカルボシラン足場への結合に使用することができた。
【００９１】
合成される化合物の別のファミリーは、カルボキシレート基（Ｄ）スルホネート基（Ｅ）又はホスホネート基（Ｆ）によるプロパルギルアミンの官能化によって誘導されるものである。この場合、これらの誘導体における炭素−炭素三重結合の存在は、プロパルギル誘導体とデンドリマーのアジド基とのカップリング反応により、末端アジド基を有するカルボシランデンドリマーのＧｎ−［Ｓｉ−ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２Ｎ３］ｘへの結合を可能にする。
【化２４】
2013519711.tif 000026
【００９２】
調製される第三の種類の化合物は、カルボキシレート基（Ｇ）又はホスホネート基（Ｈ）を有する４−アミノフェノール誘導体の基−ＮＨ２から得られるものである。この場合、これらの化合物の結合は、Ｓｉ−Ｃｌ又はＳｉＣＨ２−Ｃｌ末端結合を含有するカルボシランデンドリマーとのフェノリシス反応により生じる（スキーム１１）。
【００９３】
方法２（ａ）アリルアミンの官能化
化合物Ａ及びＢの合成は、アリルアミンと、メチルアクリレート及びビニルスルホン酸ナトリウムそれぞれとのマイケル付加型反応により実施した。誘導体Ａの合成では、マイケル付加は、ＴＨＦにおいて室温でちょうど３時間で完了する。誘導体Ｂは、アリルアミンへのビニルスルホン酸ナトリウムのマイケル付加により調製する。この場合、反応は、溶媒としてＨ２Ｏにおいて１２０℃で４８時間にわたって実施する。誘導体Ｃの場合では、調製はアリルアミンから出発する２工程反応により実施する。最初にアリルアミンをＴＨＦにおいてホルミアルデヒドと室温で１時間反応させ、次にジメチルホスファイトを「その場」で加え、混合物を４０℃で３時間加熱して、誘導体Ｃを無色の油状物として得る。
【００９４】
Ａ〜Ｃのアリル誘導体を得た後、これらの誘導体と、末端Ｓｉ−Ｈ結合を有するテトラアリルシランのコアから成長させた世代０〜２のカルボシランデンドリマー（トリエチルシラン、Ｇ０、Ｇ１、Ｇ２、それぞれｘ＝１、４、８及び１６である）とのヒドロシリル化反応は、メチルアクリレート基で官能化された（５〜８）又はスルホン酸ナトリウムで官能化された（１７〜２０）カルボシランデンドリマーの合成をもたらし、これは、前述のセクションにおいて既に記載されている（スキーム９を参照すること）。
【化２５】
2013519711.tif 000027
【００９５】
誘導体５〜８を、ＮａＯＨ溶液での処理により、カルボキシレート基を有する対応するアニオン性デンドリマー９〜１２に変換することができる（スキーム２を参照すること）。
【００９６】
方法２（ｂ）プロパルギルアミンの官能化
化合物Ｄ及びＥの合成は、プロパルギルアミンと、メチルアクリレート及びビニルスルホン酸ナトリウムそれぞれとのマイケル型付加反応により実施した。誘導体Ｄの合成では、マイケル付加は、ＴＨＦにおいて室温でちょうど３時間で完了する。誘導体Ｅは、プロパルギルアミンへのビニルスルホン酸ナトリウムのマイケル付加により調製する。この場合、反応は、溶媒としてＨ２Ｏにおいて１２０℃で４８時間にわたって実施する。Ｆの場合では、合成はプロパルギルアミンから２工程で実施した。プロパルギルアミンをＴＨＦにおいてホルミアルデヒドと室温で１時間反応させ、ジメチルホスファイトを「その場」で加え、混合物を４０℃で３時間加熱して、誘導体Ｆを無色の油状物として得る。
【００９７】
化合物Ｄ〜Ｆを得た後、テトラアリルシランのコア及びアジド末端基を含有する世代０〜２のデンドリマーのＧｎ−［Ｓｉ−ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２Ｎ３］ｘ（トリエチルシリル  Ｅｔ３−［Ｓｉ−ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２Ｎ３］（２９）；Ｇ０−［Ｓｉ−ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２Ｎ３］４  ｎ＝０及びｘ＝４（３０）；Ｇ１−［Ｓｉ−ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２Ｎ３］８  ｎ＝１及びｘ＝８（３１）；Ｇ２−［Ｓｉ−ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２Ｎ３］１６  ｎ＝２、ｘ＝１６（３２））へのクリックカップリングは、エステル基により官能化された（３７〜４０）又はスルホン酸ナトリウムで官能化された（４５〜４８）又はメチルホスホネート基で官能化されたカルボシランデンドリマーのｃｋ−Ｇｎ−［Ｓｉ（ＣＨ２）４（Ｎ３Ｃ２Ｈ）ＣＨ２Ｎ（ＣＨ２ＰＯ（ＯＭｅ）２）２］ｘ（トリエチルシリル  Ｅｔ３−［Ｓｉ（ＣＨ２）４（Ｎ３Ｃ２Ｈ）ＣＨ２Ｎ（ＣＨ２ＰＯ（ＯＭｅ）２）２］（４９）；ｃｋ−Ｇ０−［Ｓｉ（ＣＨ２）４（Ｎ３Ｃ２Ｈ）ＣＨ２Ｎ（ＣＨ２ＰＯ（ＯＭｅ）２）２］４  ｎ＝０及びｘ＝４（５０）；ｃｋ−Ｇ１−［Ｓｉ（ＣＨ２）４（Ｎ３Ｃ２Ｈ）ＣＨ２Ｎ（ＣＨ２ＰＯ（ＯＭｅ）２）２］８  ｎ＝１及びｘ＝８（５１）；ｃｋ−Ｇ２−［Ｓｉ（ＣＨ２）４（Ｎ３Ｃ２Ｈ）ＣＨ２Ｎ（ＣＨ２ＰＯ（ＯＭｅ）２）２］１６  ｎ＝２及びｘ＝１６（５２））の合成をもたらす。（スキーム１０）。
【化２６】
2013519711.tif 000028
【００９８】
カルボキシレート基、スルホネート基又はホスホネート基を有するこれらのデンドリマーは、本発明において前記に記載されている。
【００９９】
方法２（ｃ）４−アミノフェノールの官能化
化合物Ｇの合成は、４−アミノフェノールへのメチルアクリレートのマイケル型付加反応により実施した。この誘導体は文献に記載されている。誘導体Ｈを、４−アミノフェノールから２工程で調製する。最初に４−アミノフェノールをホルミアルデヒドとＴＨＦにおいて室温で１時間反応させ、次にジメチルホスホネートを「その場」で加え、混合物を４０℃で３時間加熱して、化合物Ｈを無色の油状物として得る。
【０１００】
誘導体Ｇ及びＨを得た後、これらの誘導体と、末端Ｓｉ−Ｃｌ又はＳｉ−ＣＨ２Ｃｌ基を有するテトラアリルシランのコアから成長させた世代０〜２のカルボシランデンドリマーとのフェノリシス反応は、メチルアクリレート基で官能化されたカルボシランデンドリマーのＧｎ−［ＳｉＣＨ２−ＯＣ６Ｈ４−Ｎ（ＣＨ２ＣＨ２ＣＯＯＭｅ）２］ｘ（トリエチルシリル  Ｅｔ３−［ＳｉＣＨ２−ＯＣ６Ｈ４−Ｎ（ＣＨ２ＣＨ２ＣＯＯＭｅ）２］（５７）；Ｇ０−［ＳｉＣＨ２−ＯＣ６Ｈ４−Ｎ（ＣＨ２ＣＨ２ＣＯＯＭｅ）２］４  ｎ＝０及びｘ＝４（５８）；Ｇ１−［ＳｉＣＨ２−ＯＣ６Ｈ４−Ｎ（ＣＨ２ＣＨ２ＣＯＯＭｅ）２］８  ｎ＝１及びｘ＝８（５９）；Ｇ２−［ＳｉＣＨ２−ＯＣ６Ｈ４−Ｎ（ＣＨ２ＣＨ２ＣＯＯＭｅ）２］１６  ｎ＝２及びｘ＝１６（６０））又はメチルホスホネート基で官能化されたカルボシランデンドリマーのＧｎ−［ＳｉＣＨ２−ＯＣ６Ｈ４−Ｎ（ＣＨ２ＰＯ（ＯＭｅ）２）２］ｘ（トリエチルシリル  Ｅｔ３−［ＳｉＣＨ２−ＯＣ６Ｈ４−Ｎ（ＣＨ２ＰＯ（ＯＭｅ）２）２］（６１）；Ｇ０−［ＳｉＣＨ２−ＯＣ６Ｈ４−Ｎ（ＣＨ２ＰＯ（ＯＭｅ）２）２］４  ｎ＝０及びｘ＝４（６２）；Ｇ１−［ＳｉＣＨ２−ＯＣ６Ｈ４−Ｎ（ＣＨ２ＰＯ（ＯＭｅ）２）２］８  ｎ＝１及びｘ＝８（６３）；Ｇ２−［ＳｉＣＨ２−ＯＣ６Ｈ４−Ｎ（ＣＨ２ＰＯ（ＯＭｅ）２）２］１６  ｎ＝２及びｘ＝１６（６４））の合成を得た（スキーム１１）。化合物５７〜６４を、最も一般的な有機溶媒に可溶性であるが、水には不溶性である無色の油状物として得た。
【化２７】
2013519711.tif 000029
【０１０１】
実施例１：テトラアリルシランのコアから成長させた本発明のデンドリマーの合成
合成は、下記に提示されている２つの方法に従って実施した。
【０１０２】
方法１：テトラアリルシランのコアからの末端アミノ基を有するカルボシランデンドリマーの合成
末端アミノ基を有するカルボシランデンドリマーの合成は２つの戦略：１）アリルアミンと、末端Ｓｉ−Ｈ結合を含有する異なる世代のカルボシランデンドリマーとのヒドロシリル化又は２）プロパルギルアミンを、末端アジドを含有する異なる世代のカルボシランデンドリマーに結合するクリックケミストリー方法論の使用により実施した。
【０１０３】
これらの化合物の合成を記載する幾つかの例を下記に提示する。
【０１０４】
カルボシランデンドリマーの合成及び特徴決定
デンドリマーの構造的特徴決定は、元素分析、１Ｈ、１３Ｃ、２９Ｓｉ、３１Ｐ及び１５Ｎ−ＲＭＮ分光法、並びに質量分析法を使用して実施した。分光及び分析データは、誘導体の推定構造と一致した。
【０１０５】
実施例１．２：Ｇ１−［Ｓｉ（ＣＨ２）３Ｎ（ＣＨ２ＣＨ２ＣＯＯＭｅ）２］４（６）の合成
方法１
文献（Ｓ．Ｗ．Ｋｒｓｋａ，Ｄ．Ｓｅｙｆｅｒｔｈ，Ｊ．Ａｍ．Ｃｈｅｍ．Ｓｏｃ．，１９９８，１２０，３６０４−３６１２）に従って調製した、ＭｅＯＨ中のＧ１−［（ＣＨ２）３ＮＨ２］４（０．８８ｇ、１．３４ｍｍｏｌ）の溶液に、メチルアクリレートＣＨ２＝ＣＨＣＯＯＭｅ（１．０ｍｌ、１１．１ｍｍｏｌ）を加えた。反応混合物を室温で１２時間撹拌した。その後、揮発物を真空下で除去し、化合物６（１．７９ｇ、９９％）を得た。
【０１０６】
方法２
ＣＨ２＝ＣＨＣＨ２Ｎ（ＣＨ２ＣＨ２ＣＯＯＭｅ）２（０．５ｇ、２．１８ｍｍｏｌ）及び一滴のＫａｒｓｔｅｄ〔ポリ（ジメチルシロキサン）中３〜３．５％Ｐｔ）〕触媒を、トルエン中の第一世代水素末端デンドリマーＧ１−［Ｓｉ−Ｈ］４（０．２４ｇ、０．０５ｍｍｏｌ）の溶液に加えた。反応混合物を室温で１２時間撹拌した。その後、揮発物を真空下で除去し、化合物６（０．５８ｇ、８０％）を得た。
【０１０７】
１Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）：δ３．６４（ｓ，２４Ｈ，−ＯＭｅ），２．７５（ｔ，１６Ｈ，−ＮＣＨ２ＣＨ２ＣＯＯＭｅ）２．４２（ｍ，１６Ｈ，−ＮＣＨ２ＣＨ２ＣＯＯＭｅ及び−ＳｉＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２Ｎ−），１．３２（ｍ，１６Ｈ，ＳｉＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２Ｓｉ−及び−ＳｉＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２Ｎ−），０．５４（ｍ，２４Ｈ，ＳｉＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２Ｓｉ−及び−ＳｉＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２Ｎ−），０．３７（ｍ，８Ｈ，ＳｉＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２Ｓｉ−），−０．０６（ｓ，２４Ｈ  −ＳｉＭｅ２）。１３Ｃ｛１Ｈ｝−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）：δ１７３．０（ＣＯＯＭｅ），５７．５（ＳｉＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２Ｎ−），５１．５（−ＯＭｅ），４９．３（−ＮＣＨ２ＣＨ２ＣＯＯＭｅ），３２．４（−ＮＣＨ２ＣＨ２ＣＯＯＭｅ），２１．６（−ＳｉＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２Ｎ−），２０．３，１８．５，１８．０（Ｓｉ（ＣＨ２）３Ｓｉ−），１３．０（−ＳｉＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２Ｎ−），−３．３（−ＳｉＭｅ２）。２９Ｓｉ｛１Ｈ｝−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）：δ０．８（Ｇ０−Ｓｉ），１．９（Ｇ１−Ｓｉ）。分析  Ｃ６４Ｈ１２８Ｎ４Ｏ１６Ｓｉ５での計算値：％：Ｃ、５６．９３；Ｈ、９．５６；Ｎ、４．１５；実測値％：Ｃ、５７．０９；Ｈ、１０．０６；Ｎ、４．３４．ＧＰＣ：ＰＤＩ実測値＝１．０４。
【０１０８】
実施例１．２：Ｇ２−［Ｓｉ（ＣＨ２）３Ｎ（ＣＨ２ＣＨ２ＣＯＯＭｅ）２］8（７）の合成
この第二世代のデンドリマーは、メタノール及び過剰量のメチルアクリレートＣＨ２＝ＣＨＣＯＯＭｅ（１ｍｌ、１１．１ｍｍｏｌ）に溶解したＧ２−［（ＣＨ２）３ＮＨ２］８（０．６５ｇ、０．３９ｍｍｏｌ）から出発して、６のために記載されたものと同様の方法を使用して調製した。化合物７を無色の油状物（１．０９ｇ、９２％）として単離した。
【０１０９】
１Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）：δ３．６４（ｓ，４８Ｈ，−ＯＭｅ），２．７５（ｍ，３２Ｈ，−ＮＣＨ２ＣＨ２ＣＯＯＭｅ），２．４２（ｍ，４８Ｈ，−ＮＣＨ２ＣＨ２ＣＯＯＭｅ及び−ＳｉＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２Ｎ−），１．３１（ｍ，４０Ｈ，ＳｉＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２Ｓｉ−及び−ＳｉＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２Ｎ−），０．５３（ｍ，４８Ｈ，ＳｉＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２Ｓｉ−及び−ＳｉＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２Ｓｉ−），０．３８（ｍ，１６Ｈ，ＳｉＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２Ｎ−），−０．０６（ｓ，４８Ｈ，−ＳｉＭｅ２），−０．１（ｓ，１２Ｈ，−ＳｉＭｅ）。１３Ｃ｛１Ｈ｝−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）：δ１７３．０（−ＣＯＯＭｅ），５７．５（（−ＳｉＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２Ｎ−），５１．５ＯＭｅ），４９．２（−ＮＣＨ２ＣＨ２ＣＯＯＭｅ），３２．５（−ＮＣＨ２ＣＨ２ＣＯＯＭｅ），２１．５（−ＳｉＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２Ｎ−），２０．１−１７．７（Ｓｉ（ＣＨ２）３Ｓｉ−），１２．８（−ＳｉＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２Ｎ−），−３．３（−ＳｉＭｅ２）−５．０（−ＳｉＭｅ）。２９Ｓｉ｛１Ｈ｝−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）：δ（Ｇ０−Ｓｉは観測されず），０．７８（Ｇ１−Ｓｉ），１．８８（Ｇ２−Ｓｉ）．分析  Ｃ１４４Ｈ２９２Ｎ８Ｏ３２Ｓｉ１３での計算値：％：Ｃ、５７．４０；Ｈ、９．７７；Ｎ、３．７２；実測値％：Ｃ、５６．７６；Ｈ、９．７８；Ｎ、３．８８．ＧＰＣ：ＰＤＩ実測値＝１．３。
【０１１０】
実施例１．３：Ｇ３−［Ｓｉ（ＣＨ２）３Ｎ（ＣＨ２ＣＨ２ＣＯＯＭｅ）２］16（８）の合成
この第三世代のデンドリマーは、メタノール及び過剰量のメチルアクリレートＣＨ２＝ＣＨＣＯＯＭｅ（１ｍｌ、１１．１ｍｍｏｌ）に溶解したＧ３−［（ＣＨ２）３ＮＨ２］16（０．２５ｇ、０．０６ｍｍｏｌ）から出発して、第一及び第二世代のデンドリマーために記載されたものと同様の方法を使用して調製した。化合物８を無色の油状物（０．３９ｇ、９９％）として単離した。
【０１１１】
１Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）：δ３．６３（ｓ，９６Ｈ，−ＯＭｅ），２．７４（ｍ，６４Ｈ，−ＮＣＨ２ＣＨ２ＣＯＯＭｅ），２．４１（ｍ，９６Ｈ，−ＮＣＨ２ＣＨ２ＣＯＯＭｅ及び−ＳｉＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２Ｎ−），１．３１（ｍ，８８Ｈ，ＳｉＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２Ｓｉ−及び−ＳｉＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２Ｎ−），０．５３（ｍ，１１２Ｈ，ＳｉＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２Ｓｉ−及び−ＳｉＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２Ｓｉ−），０．３７（ｍ，３２Ｈ，ＳｉＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２Ｎ−），−０．０７（ｓ，９６Ｈ，−ＳｉＭｅ２），−０．１（ｓ，３６Ｈ，−ＳｉＭｅ）。１３Ｃ｛１Ｈ｝−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）：δ１７３．０（−ＣＯＯＭｅ），５７．５（−ＳｉＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２Ｎ−），５１．５（−ＯＭｅ），４９．２（−ＮＣＨ２ＣＨ２ＣＯＯＭｅ），３２．５（−ＮＣＨ２ＣＨ２ＣＯＯＭｅ），２１．５（−ＳｉＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２Ｎ−），２０．１−１７．９（Ｓｉ（ＣＨ２）３Ｓｉ−），１２．８（−ＳｉＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２Ｎ−），−３．３（−ＳｉＭｅ２）−５．０（−ＳｉＭｅ）。２９Ｓｉ｛１Ｈ｝−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）：δ（Ｇ０−Ｓｉ及びＧ１−Ｓｉは観測されず），０．８（Ｇ２−Ｓｉ），１．９（Ｇ３−Ｓｉ）．分析  Ｃ３０４Ｈ６２０Ｎ１６Ｏ６４Ｓｉ２９での計算値：％：Ｃ、５７．６０；Ｈ、９．８６；Ｎ、３．５４；実測値％：Ｃ、５８．３８；Ｈ、９．８６；Ｎ、３．０８．ＧＰＣ：ＰＤＩ実測値＝１．３。
【０１１２】
実施例１．４：Ｇ１−［Ｓｉ（ＣＨ２）３Ｎ（ＣＨ２ＣＨ２ＣＯＯＮａ）２］４（１０）の合成
ＮａＯＨ（ｐＨ＝１０）の溶液を、デンドリマー６（１．８０ｇ、１．３４ｍｍｏｌ）のエタノール溶液に加えた。得られた溶液を室温で２時間撹拌し、次に減圧下で蒸発させて、残留溶媒を除去した。残渣をＥｔ２Ｏで洗浄し、真空下で乾燥して、１０を水に可溶性の白色の固体（１．８６ｇ、９８％）として得た。
【０１１３】
１Ｈ−ＮＭＲ（Ｄ２Ｏ）：δ２．５７（ｍ，８Ｈ，−ＮＣＨ２ＣＨ２ＣＯＯ−Ｎａ＋），２．７２（ｍ，８Ｈ，−ＳｉＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２Ｎ−），２．１６（ｍ，１６Ｈ，−ＮＣＨ２ＣＨ２ＣＯＯ−Ｎａ＋），１．２５（ｍ，１６Ｈ，−ＳｉＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２Ｎ−，ＳｉＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２Ｓｉ−），０．４３（ｍ，８Ｈ，ＳｉＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２Ｓｉ−），０．２７（ｔ，８Ｈ，ＳｉＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２Ｎ），−０．２０（ｓ，２４Ｈ，−ＳｉＭｅ２）。１３Ｃ｛１Ｈ｝−ＮＭＲ（Ｄ２Ｏ）：δ１７９．９（−ＮＣＨ２ＣＨ２ＣＯＯ−Ｎａ＋），５５．３（−ＳｉＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２Ｎ−），４８．６（−ＮＣＨ２ＣＨ２ＣＯＯ−Ｎａ＋），３２．７（−ＮＣＨ２ＣＨ２ＣＯＯ−Ｎａ＋），１９．０（−ＳｉＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２Ｎ−），１８．４，１７．５及び１５．９（Ｓｉ（ＣＨ２）３Ｓｉ），１１．４（−ＳｉＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２Ｎ−），−４．８（−ＳｉＭｅ２）。２９Ｓｉ｛１Ｈ｝−ＮＭＲ（Ｄ２Ｏ）：δ１．１（Ｇ０−Ｓｉ），１．８（Ｇ１−Ｓｉ）。１５Ｎ｛１Ｈ｝−ＮＭＲ（Ｄ２Ｏ）：δ−３２２．６。分析  Ｃ５６Ｈ１０４Ｎ４Ｎａ８Ｏ１６Ｓｉ５での計算値：％：Ｃ、４７．５７；Ｈ、７．４１；Ｎ、３．９６；実測値％：Ｃ、４６．１５；Ｈ、７．５３；Ｎ、３．６２。
【０１１４】
実施例１．５：Ｇ２−［Ｓｉ（ＣＨ２）３Ｎ（ＣＨ２ＣＨ２ＣＯＯＮａ）２］8（１１）の合成
この第二世代デンドリマーは、エタノール及びｐＨ＝１０のＮａＯＨ溶液中の第二世代デンドリマー７（１．０５ｇ、０．３５ｍｍｏｌ）から出発して、１０について記載されたものと同様の方法を使用して調製した。得られた溶液を室温で２時間撹拌し、次に減圧下で蒸発させて、残留溶媒を除去した。残渣をＥｔ２Ｏで洗浄し、真空下で乾燥して、１１を水に可溶性の白色の固体（１．０６ｇ、９７％）として得た。
【０１１５】
１Ｈ−ＮＭＲ（Ｄ２Ｏ）：δ２．６１（ｍ，３２Ｈ，−ＮＣＨ２ＣＨ２ＣＯＯ−Ｎａ＋），２．３１（ｍ，１６Ｈ，−ＳｉＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２Ｎ−），２．１７（ｍ，３２Ｈ，−ＮＣＨ２ＣＨ２ＣＯＯ−Ｎａ＋），１．３１（ｍ，１６Ｈ，−ＳｉＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２Ｎ−），１．２０（ｍ，２４Ｈ，ＳｉＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２Ｓｉ−），０．４２（ｍ，４８Ｈ，ＳｉＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２Ｓｉ−），０．２６（ｍ，１６Ｈ，−ＳｉＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２Ｎ−），−０．１７（ｓ  広帯域，４８Ｈ，−ＳｉＭｅ２），−０，２１（ｓ  広帯域，１２Ｈ，−ＳｉＭｅ）。１３Ｃ｛１Ｈ｝−ＮＭＲ（Ｄ２Ｏ）：δ１８０．５（−ＮＣＨ２ＣＨ２ＣＯＯ−Ｎａ＋），５６．８（−ＳｉＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２Ｎ−），４９．７（−ＮＣＨ２ＣＨ２ＣＯＯ−Ｎａ＋），３３．７（−ＮＣＨ２ＣＨ２ＣＯＯ−Ｎａ＋），１９．９（−ＳｉＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２Ｎ−），１９．３−１７．９（Ｓｉ（ＣＨ２）３Ｓｉ），１２．７（−ＳｉＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２Ｎ−），−３．４（−ＳｉＭｅ２），−４．４（−ＳｉＭｅ）。２９Ｓｉ｛１Ｈ｝−ＮＭＲ（Ｄ２Ｏ）：δ（Ｇ０−Ｓｉは観測されず），１．２（Ｇ１−Ｓｉ），１．９（Ｇ２−Ｓｉ）。１５Ｎ｛１Ｈ｝−ＮＭＲ（Ｄ２Ｏ）：δ−３２９。分析  Ｃ１２８Ｈ２４４Ｎ８Ｎａ１６Ｏ３２Ｓｉ１３での計算値：％：Ｃ、４８．９６；Ｈ、７．８３；Ｎ３．５７；実測値％：Ｃ、４９．０３；Ｈ、７．７９；Ｎ３．３１。
【０１１６】
実施例１．６：Ｇ３−［Ｓｉ（ＣＨ２）３Ｎ（ＣＨ２ＣＨ２ＣＯＯＮａ）２］16（１２）の合成
この第三世代デンドリマーは、エタノール及び過剰量のＮａＯＨ溶液（ｐＨ＝１０）に溶解したデンドリマー８（０．３９ｇ、０．０７ｍｍｏｌ）から出発して、第一及び第二世代のデンドリマーについて記載されたものと同様の方法を使用して調製した。得られた溶液を室温で２時間撹拌し、次に減圧下で蒸発させて、残留溶媒を除去した。残渣をＥｔ２Ｏで洗浄し、真空下で乾燥して、１２を水に可溶性の白色の固体（１．０７ｇ、９５％）として得た。
【０１１７】
１Ｈ−ＮＭＲ（Ｄ２Ｏ）：δ２．５４（ｍ，６４Ｈ，−ＮＣＨ２ＣＨ２ＣＯＯ−Ｎａ＋），２．２２（ｍ，３２Ｈ，−ＳｉＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２Ｎ−），２．１４（ｍ，６４Ｈ，−ＮＣＨ２ＣＨ２ＣＯＯ−Ｎａ＋），１．２０（ｍ，８８Ｈ  −ＳｉＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２Ｎ−，ＳｉＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２Ｓｉ−），０．４２（ｍ，１１２Ｈ，ＳｉＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２Ｓｉ−），０．２５（ｍ，３２Ｈ，−ＳｉＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２Ｎ−），−０．１７（ｓ  広帯域，９６Ｈ，−ＳｉＭｅ２），−０，２５（ｓ  広帯域，３６Ｈ，−ＳｉＭｅ）。１３Ｃ｛１Ｈ｝−ＮＭＲ（Ｄ２Ｏ）：δ１８１．２（−ＮＣＨ２ＣＨ２ＣＯＯ−Ｎａ＋），５７．１（−ＳｉＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２Ｎ−），４９．６（−ＮＣＨ２ＣＨ２ＣＯＯ−Ｎａ＋），３４．３（−ＮＣＨ２ＣＨ２ＣＯＯ−Ｎａ＋），２０．３（−ＳｉＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２Ｎ−），１９．５−１８．０（Ｓｉ（ＣＨ２）３Ｓｉ），１３．０（−ＳｉＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２Ｎ），−３．４（−ＳｉＭｅ２），−４．５（−ＳｉＭｅ）。２９Ｓｉ｛１Ｈ｝−ＮＭＲ（Ｄ２Ｏ）：δ（Ｇ０−Ｓｉ及びＧ１−Ｓｉは観測されず），１．１（Ｇ２−Ｓｉ），２．０（Ｇ３−Ｓｉ）。
【０１１８】
実施例１．７：Ｇ１−［Ｓｉ（ＣＨ２）３Ｎ＋Ｈ（ＣＨ２ＣＨ２ＣＯＯＨ）２］４４Ｃｌ−（１４）の合成
メタノール中のデンドリマー１０（１．３６ｇ、１．０１ｍｍｏｌ）の溶液に、過剰量の３７％ＨＣｌ溶液（２．３６ｍｍｏｌ）を加えた。得られた溶液を室温で３時間撹拌し、次に減圧下で蒸発させ、５０℃で加熱して残留溶媒を除去した。残渣を新たなＥｔ２Ｏ（２×２５ｍｌ）で洗浄し、真空下で乾燥して、１４を白色の固体（１．１７ｇ、８４％）として得た。
【０１１９】
１Ｈ−ＮＭＲ（Ｄ２Ｏ）：δ３．３０（ｍ，１６Ｈ，−Ｎ＋ＨＣＨ２ＣＨ２ＣＯＯＨ），２．９９（ｍ，８Ｈ，−ＳｉＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２Ｎ＋Ｈ−），２．７０（ｍ，１６Ｈ，−Ｎ＋ＨＣＨ２ＣＨ２ＣＯＯＨ），１．５７（ｍ，８Ｈ，−ＳｉＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２Ｎ＋Ｈ−），１，２１（ｍ，８Ｈ，ＳｉＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２Ｓｉ−），０．４４（ｍ，２４Ｈ，ＳｉＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２Ｓｉ−及び−ＳｉＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２Ｎ＋Ｈ−），−０．１５（ｓ  広帯域，６Ｈ，−ＳｉＭｅ２）。１３Ｃ｛１Ｈ｝−ＮＭＲ（Ｄ２Ｏ）：δ１７４．０（−ＣＯＯＨ），５５．２（−ＳｉＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２Ｎ＋Ｈ−），４９．１（−Ｎ＋ＨＣＨ２ＣＨ２ＣＯＯＨ），２８．４（−Ｎ＋ＨＣＨ２ＣＨ２ＣＯＯＨ），１９．６，１８．５，１８．２（Ｓｉ（ＣＨ２）３Ｓｉ），１７．２（−ＳｉＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２Ｎ＋Ｈ−），１１．５（−ＳｉＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２Ｎ＋Ｈ−），−３．６（−ＳｉＭｅ２）。１５Ｎ｛１Ｈ｝−ＮＭＲ（Ｄ２Ｏ）：δ−３２５（−Ｎ＋Ｈ（ＣＨ２ＣＨ２ＣＯＯＨ）２）。２９Ｓｉ｛１Ｈ｝−ＮＭＲ（Ｄ２Ｏ）：δ（Ｇ０−Ｓｉは観測されず），２．２（Ｇ１−Ｓｉ）。分析  Ｃ５６Ｈ１１６Ｃｌ４Ｎ４Ｏ１６Ｓｉ５での計算値：％：Ｃ、４８．６１；Ｈ、８．４５；Ｎ、４．０５；実測値  Ｃ、４８．７８；Ｈ、８．４１；Ｎ４．００。
【０１２０】
実施例１．８：Ｇ２−［Ｓｉ（ＣＨ２）３Ｎ＋Ｈ（ＣＨ２ＣＨ２ＣＯＯＨ）２］８８Ｃｌ−（１５）の合成
この第二世代のデンドリマーは、メタノール及び過剰量の３７％ＨＣｌ溶液（２．６５ｍｍｏｌ）中の第二世代デンドリマー１１（１．０ｇ、０．３３ｍｍｏｌ）から出発して、１４について記載されたものと同様の方法を使用して調製し、デンドリマー１５を、水に可溶性の白色固体（０．９８ｇ、９６％）として得た。
【０１２１】
１Ｈ−ＮＭＲ  Ｄ２Ｏ）：δ３．３０（ｍ，３２Ｈ，−Ｎ＋ＨＣＨ２ＣＨ２ＣＯＯＨ），３．０１（ｍ，１６Ｈ，−ＳｉＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２Ｎ＋Ｈ−），２．７４（ｍ，３２Ｈ，−Ｎ＋ＨＣＨ２ＣＨ２ＣＯＯＨ），１．５７（ｍ，１６Ｈ，−ＳｉＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２Ｎ＋Ｈ−），１．２０（ｍ，２４Ｈ，ＳｉＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２Ｓｉ−及び−ＳｉＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２Ｓｉ−），０．４２（ｍ，６４Ｈ，ＳｉＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２Ｓｉ−及び−ＳｉＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２Ｎ＋Ｈ−），−０．１４（ｓ  広帯域，６０Ｈ，−ＳｉＭｅ２及び−ＳｉＭｅ）。１３Ｃ｛１Ｈ｝−ＮＭＲ（Ｄ２Ｏ）：δ１７３．８（−ＣＯＯＨ），５５．３（−ＳｉＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２Ｎ＋Ｈ−），４９．１（−Ｎ＋ＨＣＨ２ＣＨ２ＣＯＯＨ），２８．４（−Ｎ＋ＨＣＨ２ＣＨ２ＣＯＯＨ），１９．６−１７．０（Ｓｉ（ＣＨ２）３Ｓｉ−及び−ＳｉＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２Ｎ＋Ｈ−），１１．６（−ＳｉＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２Ｎ＋Ｈ−），−３．５（−ＳｉＭｅ２及び−ＳｉＭｅ）。２９Ｓｉ｛１Ｈ｝−ＮＭＲ（Ｄ２Ｏ）：δ（Ｇ０−Ｓｉは観測されず），１．１（Ｇ１−Ｓｉ），２．２（Ｇ２−Ｓｉ）。分析  Ｃ１２８Ｈ２６８Ｃｌ８Ｎ８Ｏ３２Ｓｉ１３での計算値：％：Ｃ、４９．９１；Ｈ、８．７７；Ｎ、３．６４；実測値％：Ｃ、５０．６４；Ｈ、８．６１；Ｎ、３．４５。
【０１２２】
実施例１．９：Ｇ３−［Ｓｉ（ＣＨ２）３Ｎ＋Ｈ（ＣＨ２ＣＨ２ＣＯＯＨ）２］１６１６Ｃｌ−（１６）の合成
この第三世代のデンドリマーは、ＭｅＯＨ及び過剰量の３７％ＨＣｌ溶液（２．５２ｍｍｏｌ）中のデンドリマー１２の溶液（１．０ｇ、０．１７ｍｍｏｌ）から出発して、第一及び第二世代のデンドリマー１４及び１５について記載されたものと同様の方法を使用して調製し、デンドリマー１６を、水に可溶性の白色固体（０．８ｇ、８６％）として得た。
【０１２３】
１Ｈ−ＮＭＲ（Ｄ２Ｏ）：δ３．２９（ｍ，６４Ｈ，−Ｎ＋ＨＣＨ２ＣＨ２ＣＯＯＨ），３．０（ｍ，３２Ｈ，−ＳｉＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２Ｎ＋Ｈ−），２．７１（ｍ，３２Ｈ，−Ｎ＋ＨＣＨ２ＣＨ２ＣＯＯＨ），１．５７（ｍ，３２Ｈ，−ＳｉＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２Ｎ＋Ｈ−），１．１９（ｍ，５６Ｈ，ＳｉＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２Ｓｉ−及び−ＳｉＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２Ｓｉ−），０．４０（ｍ，１４４Ｈ，ＳｉＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２Ｓｉ−及び−ＳｉＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２Ｎ＋Ｈ−），−０．１４（ｓ  広帯域，１３２Ｈ，−ＳｉＭｅ２及び−ＳｉＭｅ）。１３Ｃ｛１Ｈ｝−ＮＭＲ（Ｄ２Ｏ）：δ１７４．６（−ＣＯＯＨ），５５．８（−ＳｉＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２Ｎ＋Ｈ−），４９．４（−Ｎ＋ＨＣＨ２ＣＨ２ＣＯＯＨ），２８．９（−Ｎ＋ＨＣＨ２ＣＨ２ＣＯＯＨ），１９．８−１７．２（Ｓｉ（ＣＨ２）３Ｓｉ−及び−ＳｉＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２Ｎ＋Ｈ−），１１．６（−ＳｉＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２Ｎ＋Ｈ−），−３．５（−ＳｉＭｅ２），−４．４（−ＳｉＭｅ）。２９Ｓｉ｛１Ｈ｝−ＮＭＲ（Ｄ２Ｏ）：δ（Ｇ０−Ｓｉ，Ｇ１−Ｓｉ及びＧ２−Ｓｉは観測されず），２．５（Ｇ３−Ｓｉ）。分析  Ｃ２７２Ｈ５７２Ｃｌ１６Ｎ１６Ｏ６４Ｓｉ２９での計算値：％：Ｃ、５０．４７；Ｈ、８．９１；Ｎ、３．４６；実測値％：Ｃ、５０．９９；Ｈ、８．６１；Ｎ２．９９。
【０１２４】
実施例１．１０：Ｇ１−［Ｓｉ（ＣＨ２）３Ｎ（ＣＨ２ＣＨ２ＳＯ３Ｎａ）２］４（１８）の合成
Ｈ２Ｏ（５．１６ｍｌ、１４．０ｍｍｏｌ）中の約３０重量％のビニルスルホン酸ナトリウムＣＨ２＝ＣＨＳＯ３Ｎａの溶液を、エタノール中のＧ１−［ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２ＮＨ２］４（１．１６ｇ、１．７５ｍｍｏｌ）の溶液に加えた。得られた溶液を１２０℃で３日間撹拌した。次に溶液を濾過し、残渣をＭｅＯＨで洗浄し、真空下で乾燥して、１８を白色の固体（２．２５ｇ、７３％）として得た。
【０１２５】
１Ｈ−ＮＭＲ（Ｄ２Ｏ）：δ２．８６（ｍ，１６Ｈ，−ＮＣＨ２ＣＨ２ＳＯ３−Ｎａ＋），２．７７（ｍ，１６Ｈ，−ＮＣＨ２ＣＨ２ＳＯ３−Ｎａ＋），２．２７（ｍ，８Ｈ，−ＳｉＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２Ｎ−），１．３９（ｍ，８Ｈ  −ＳｉＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２Ｎ−），１．２１（ｍ，８Ｈ，ＳｉＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２Ｓｉ−），０．４２（ｍ，９Ｈ，ＳｉＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２Ｓｉ−及び−ＳｉＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２Ｎ−），−０．２０（ｓ，２４Ｈ，−ＳｉＭｅ２）。１３Ｃ｛１Ｈ｝−ＮＭＲ（Ｄ２Ｏ）：δ５６．５（−ＳｉＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２Ｎ−），４７．８（−ＮＣＨ２ＣＨ２ＳＯ３−Ｎａ＋），４７．０（−ＮＣＨ２ＣＨ２ＳＯ３−Ｎａ＋），２０．４（ＳｉＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２Ｓｉ−），１９．４，１６．９（−ＳｉＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２Ｎ−及びＳｉＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２Ｓｉ−），１８．５（−ＳｉＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２Ｎ−），１２．３（ＳｉＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２Ｓｉ−），−３．８（−ＳｉＭｅ２）。１５Ｎ｛１Ｈ｝−ＮＭＲ（Ｄ２Ｏ）：δ−３３９．１（−ＮＣＨ２ＣＨ２ＳＯ３−Ｎａ＋）。２９Ｓｉ｛１Ｈ｝−ＮＭＲ（Ｄ２Ｏ）：δ（Ｇ０−Ｓｉは観測されず），１．８（Ｇ１−Ｓｉ）。分析  Ｃ５２Ｈ１１６Ｎ４Ｎａ８Ｏ２４Ｓ８Ｓｉ５での計算値：％：Ｃ、３５．４４；Ｈ、６．６３；Ｎ、３．１８；Ｓ１４．５６；実測値％：Ｃ、３４．５４；Ｈ、６．５６；Ｎ、３．０２；Ｓ、１５．２８。
【０１２６】
実施例１．１１：Ｇ２−［Ｓｉ（ＣＨ２）３Ｎ（ＣＨ２ＣＨ２ＳＯ３Ｎａ）２］8（１９）の合成
Ｈ２Ｏ（１．８６ｍｌ、４．９１ｍｍｏｌ）中の約３０重量％のビニルスルホン酸ナトリウムＣＨ２＝ＣＨＳＯ３Ｎａの溶液を、エタノール中のＧ２−［ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２ＮＨ２］8（０．５ｇ、０．３１ｍｍｏｌ）の溶液に加えた。得られた溶液を１２０℃で３日間撹拌した。次に溶液を濾過し、残渣をＭｅＯＨで洗浄し、真空下で乾燥して、１９を白色の固体（０．９１ｇ、８０％）として得た。
【０１２７】
１Ｈ−ＮＭＲ（Ｄ２Ｏ）：δ２．８６（ｍ，３２Ｈ，−ＮＣＨ２ＣＨ２ＳＯ３−Ｎａ＋），２．７６（ｍ，３２Ｈ，−ＮＣＨ２ＣＨ２ＳＯ３−Ｎａ＋），２．２８（ｍ，１６Ｈ，−ＳｉＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２Ｎ−），１．２１（ｍ，４０Ｈ，−ＳｉＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２Ｎ−，−ＳｉＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２Ｓｉ−及びＳｉＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２Ｓｉ−），０．４３（ｍ，４８Ｈ，ＳｉＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２Ｓｉ−及び−ＳｉＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２Ｓｉ−），０．２８（ｍ，１６Ｈ，−ＳｉＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２Ｎ−），−０．１６（ｓ  広帯域，４８Ｈ，−ＳｉＭｅ２），−０．２１（ｓ  広帯域，１２Ｈ，−ＳｉＭｅ）。１３Ｃ｛１Ｈ｝−ＮＭＲ（Ｄ２Ｏ）：δ５６．９（−ＳｉＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２Ｎ−），４８．０（−ＮＣＨ２ＣＨ２ＳＯ３−Ｎａ＋），４６．７（−ＮＣＨ２ＣＨ２ＳＯ３−Ｎａ＋），２０．１（−ＳｉＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２Ｎ−），１８．５−１７．７（Ｓｉ（ＣＨ２）３Ｓｉ），１２．４（−ＳｉＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２Ｎ−），−３．５（ＳｉＭｅ２），−４．４（ＳｉＭｅ）。１５Ｎ｛１Ｈ｝−ＮＭＲ（Ｄ２Ｏ）：δ−３４８．５（−ＮＣＨ２ＣＨ２ＳＯ３−Ｎａ＋）。２９Ｓｉ｛１Ｈ｝−ＮＭＲ（Ｄ２Ｏ）：δ（Ｇ０−Ｓｉは観測されず），１．１（Ｇ１−Ｓｉ），２．１（Ｇ２−Ｓｉ）。分析  Ｃ１１２Ｈ２４４Ｎ８Ｎａ１６Ｏ４８Ｓ１６Ｓｉ１３での計算値：％：Ｃ、３６．１９；Ｈ、６．６２；Ｎ、３．０１；Ｓ、１３．８０；実測値％：Ｃ、３６．０６；Ｈ、７．０４；Ｎ、２．６３；Ｓ、１３．９１。
【０１２８】
実施例１．１２：Ｇ３−［Ｓｉ（ＣＨ２）３Ｎ（ＣＨ２ＣＨ２ＳＯ３Ｎａ）２］16（２０）の合成
Ｈ２Ｏ（１．７０ｍｌ、４．６４ｍｍｏｌ）中の約３０重量％のビニルスルホン酸ナトリウムＣＨ２＝ＣＨＳＯ３Ｎａの溶液を、エタノール中のＧ３−［ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２ＮＨ２］16（０．５２ｇ、０．１４ｍｍｏｌ）の溶液に加えた。得られた溶液を１２０℃で３日間撹拌した。次に溶液を濾過し、残渣をＭｅＯＨで洗浄し、真空下で乾燥して、２０を白色の固体（０．７９ｇ、７３％）として得た。
【０１２９】
１Ｈ−ＮＭＲ（Ｄ２Ｏ）：δ２．８５（ｍ，６４Ｈ，−ＮＣＨ２ＣＨ２ＳＯ３−Ｎａ＋），２．７８（ｍ，６４Ｈ，−ＮＣＨ２ＣＨ２ＳＯ３−Ｎａ＋），２．２７（ｍ，３２Ｈ，−ＳｉＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２Ｎ−），１．２４（ｍ，８８Ｈ，−ＳｉＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２Ｎ−，−ＳｉＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２Ｓｉ−及びＳｉＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２Ｓｉ−），０．４４（ｍ，１４４Ｈ，ＳｉＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２Ｓｉ−，−ＳｉＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２Ｓｉ−及び−ＳｉＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２Ｎ−），−０．１５（ｓ  広帯域，１３２Ｈ，−ＳｉＭｅ２及び−ＳｉＭｅ）。１３Ｃ｛１Ｈ｝−ＮＭＲ（Ｄ２Ｏ）：δ５７．１（−ＳｉＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２Ｎ−），４７．９（−ＮＣＨ２ＣＨ２ＳＯ３−Ｎａ＋），４７．１（−ＮＣＨ２ＣＨ２ＳＯ３−Ｎａ＋），２０．６（−ＳｉＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２Ｎ−），２０．０−１８．０（Ｓｉ（ＣＨ２）３Ｓｉ），１２．７（−ＳｉＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２Ｓｉ−），−３．４（−ＳｉＭｅ２），−４．４（−ＳｉＭｅ）。１５Ｎ｛１Ｈ｝−ＮＭＲ（Ｄ２Ｏ）：δ−３４９．７。２９Ｓｉ｛１Ｈ｝−ＮＭＲ（Ｄ２Ｏ）：δ（Ｇ０−Ｓｉ及びＧ１−Ｓｉは観測されず），１．２（Ｇ２−Ｓｉ），２．０（Ｇ３−Ｓｉ）、分析  Ｃ２２４Ｈ４９２Ｎ１６Ｎａ３２Ｏ９６Ｓ３２Ｓｉ２９での計算値：％：Ｃ、３５．７６；Ｈ、６．５９；Ｎ、２．９８；Ｓ、１３．６４；実測値％：Ｃ、３６．９３；Ｈ、７．１９；Ｎ、２．５８；Ｓ、１２．８６。
【０１３０】
実施例１．１３：Ｇ１−［Ｓｉ（ＣＨ２）３Ｎ＋Ｈ（ＣＨ２ＣＨ２ＳＯ３−Ｎａ＋）２］４４Ｃｌ−（２２）の合成
デンドリマー１８（０．０５ｇ、０．０３ｍｍｏｌ）の水溶液に、Ｅｔ２Ｏ（０．５ｍｌ、０．２３ｍｍｏｌ）中１Ｍ  ＨＣｌ溶液の過剰量を加えた。得られた溶液を室温で１２時間撹拌し、減圧下で蒸発させて、残留溶媒を除去した。残渣をＥｔ２Ｏ（２×２５ｍｌ）で洗浄し、溶離剤としてＨ２Ｏを用いるｓｅｐｈａｄｅｘのカラムクロマトグラフィーにより精製した。デンドリマー２２を、水に可溶性の白色固体（０．０４ｇ、８０％）として得た。
【０１３１】
１Ｈ−ＮＭＲ（Ｄ２Ｏ）：δ３．４４（ｍ，１６Ｈ，−Ｎ＋ＨＣＨ２ＣＨ２ＳＯ３−Ｎａ＋），３．１６（ｍ，２４Ｈ，−Ｎ＋ＨＣＨ２ＣＨ２ＳＯ３−Ｎａ＋及び−ＳｉＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２Ｎ＋Ｈ−），１．５６（ｍ，１６Ｈ，−ＳｉＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２Ｎ＋Ｈ−及び−ＳＯ３−Ｎａ＋），１．２１（ｍ，８Ｈ，ＳｉＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２Ｓｉ−），０．４２（ｍ，９Ｈ，ＳｉＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２Ｓｉ−及び−ＳｉＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２Ｎ＋Ｈ−），−０．１６（ｓ  広帯域，２４Ｈ，−ＳｉＭｅ２）。１３Ｃ｛１Ｈ｝−ＮＭＲ（Ｄ２Ｏ）：δ５６．５（−ＳｉＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２Ｎ＋Ｈ−），４９．４（−Ｎ＋ＨＣＨ２ＣＨ２ＳＯ３−Ｎａ＋），４４．８（−Ｎ＋ＨＣＨ２ＣＨ２ＳＯ３−Ｎａ＋），１９．６（ＳｉＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２Ｓｉ−），１８．５，１８．２（−ＳｉＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２Ｎ＋Ｈ−及びＳｉＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２Ｓｉ−），１７．２（−ＳｉＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２Ｎ＋Ｈ−），１１．４（ＳｉＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２Ｓｉ−），−３．５（−ＳｉＭｅ２）。１５Ｎ｛１Ｈ｝−ＮＭＲ（Ｄ２Ｏ）：δ−３３８．５（Ｎ＋ＨＣＨ２ＣＨ２ＳＯ３−Ｎａ＋）。２９Ｓｉ｛１Ｈ｝−ＮＭＲ（Ｄ２Ｏ）：δ（Ｇ０−Ｓｉは観測されず），２．３（Ｇ１−Ｓｉ）。分析  Ｃ４６Ｈ１１２Ｃｌ４Ｎ４Ｏ２４Ｓ８Ｓｉ５での計算値：％：Ｃ、３３．６０；Ｈ、６．８７；Ｎ、３．４１；Ｓ、１５．６０；実測値％：Ｃ、３２．５２；Ｈ、５．８７；Ｎ、３．７２；Ｓ１４．５８。
【０１３２】
実施例１．１４：Ｇ２−［Ｓｉ（ＣＨ２）３Ｎ＋Ｈ（ＣＨ２ＣＨ２ＳＯ３−Ｎａ＋）２］８８Ｃｌ−（２３）の合成
この第二世代デンドリマーは、水及び過剰量のＥｔ２Ｏ（０．５ｍｌ、０．３ｍｍｏｌ）中１Ｍ  ＨＣｌ中の第二世代デンドリマー１９（０．０７ｇ、０．０２ｍｍｏｌ）から出発して、２２について記載されたものと同様の方法を使用して調製し、デンドリマー２３を水に可溶性の白色固体（０．０４ｇ、６０％）として得た。
【０１３３】
１Ｈ−ＮＭＲ（Ｄ２Ｏ）：δ３．４７（ｍ，３２Ｈ，−Ｎ＋ＨＣＨ２ＣＨ２ＳＯ３−Ｎａ＋），３．１７（ｍ，４８Ｈ，−Ｎ＋ＨＣＨ２ＣＨ２ＳＯ３−Ｎａ＋及び−ＳｉＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２Ｎ＋Ｈ−），１．５８（ｍ，３２Ｈ，−ＳｉＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２Ｎ＋Ｈ−及び−ＳＯ３−Ｎａ＋），１．２３（ｍ，２４Ｈ，−ＳｉＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２Ｓｉ−及びＳｉＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２Ｓｉ−），０．４６（ｍ，６４Ｈ，ＳｉＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２Ｓｉ−，−ＳｉＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２Ｓｉ−及び−ＳｉＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２Ｎ＋Ｈ−），−０．１１（ｓ  広帯域，６０Ｈ，−ＳｉＭｅ２及び−ＳｉＭｅ）。１３Ｃ｛１Ｈ｝−ＮＭＲ（Ｄ２Ｏ）：δ５５．６（−ＳｉＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２Ｎ＋Ｈ−），４８．４（−Ｎ＋ＨＣＨ２ＣＨ２ＳＯ３−Ｎａ＋），４３．９（−Ｎ＋ＨＣＨ２ＣＨ２ＳＯ３−Ｎａ＋），２０．５−１７．１（−ＳｉＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２Ｎ＋Ｈ−及びＳｉ（ＣＨ２）３Ｓｉ），１０．６（−ＳｉＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２Ｎ＋Ｈ−），−３．３（−ＳｉＭｅ２及び−ＳｉＭｅ）。２９Ｓｉ｛１Ｈ｝−ＮＭＲ（Ｄ２Ｏ）：δ（Ｇ０−Ｓｉは観測されず），０．７（Ｇ１−Ｓｉ），２．２（Ｇ２−Ｓｉ）。分析  Ｃ１１２Ｈ２６８Ｃｌ８Ｎ８Ｏ４８Ｓ１６Ｓｉ１３での計算値％：Ｃ、３６．７８；Ｈ、７．３９；Ｎ、３．０６；Ｓ、１４．０３；実測値％：Ｃ、３５．９３；Ｈ、７．４６；Ｎ、３．４３；Ｓ１３．９７。
【０１３４】
実施例１．１５：Ｇ３−［Ｓｉ（ＣＨ２）３Ｎ＋Ｈ（ＣＨ２ＣＨ２ＳＯ３−Ｎａ＋）２］１６１６Ｃｌ−（２４）の合成
この第三世代のデンドリマーは、水及び過剰量のＥｔ２Ｏ（０．５ｍｌ、０．３ｍｍｏｌ）中１Ｍ  ＨＣｌ溶液中のデンドリマー２０（０．０６ｇ、０．００８ｍｍｏｌ）の溶液から出発して、第一及び第二世代のデンドリマー２２及び２３について記載されたものと同様の方法を使用して調製し、デンドリマー２４を、水に可溶性の白色固体（０．０４ｇ、６０％）として得た。
【０１３５】
１Ｈ−ＮＭＲ（Ｄ２Ｏ）：δ３．４７（ｍ，６４Ｈ，−Ｎ＋ＨＣＨ２ＣＨ２ＳＯ３−Ｎａ＋），３．１６（ｍ，９６Ｈ，−Ｎ＋ＨＣＨ２ＣＨ２ＳＯ３−Ｎａ＋及び−ＳｉＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２Ｎ＋Ｈ−），１．５７（ｍ，６４Ｈ，−ＳｉＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２Ｎ＋Ｈ−及び−ＳＯ３−Ｎａ＋），１．２１（ｍ，５６Ｈ，−ＳｉＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２Ｓｉ−及びＳｉＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２Ｓｉ−），０．４４（ｍ，１４４Ｈ，ＳｉＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２Ｓｉ−，−ＳｉＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２Ｓｉ−及び−ＳｉＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２Ｎ＋Ｈ−），−０．１１（ｓ  広帯域，１３２Ｈ，−ＳｉＭｅ２及び−ＳｉＭｅ）。１３Ｃ｛１Ｈ｝−ＮＭＲ（Ｄ２Ｏ）：δ５６．５（−ＳｉＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２Ｎ＋Ｈ−），４５．１及び４４．９（Ｎ＋ＨＣＨ２ＣＨ２ＳＯ３−Ｎａ＋及び−Ｎ＋ＨＣＨ２ＣＨ２ＳＯ３−Ｎａ＋），２０．０−１７．８（−ＳｉＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２Ｎ＋Ｈ及びＳｉ（ＣＨ２）３Ｓｉ），１１．６（ＳｉＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２Ｓｉ），−３．３（−ＳｉＭｅ２），−４．４（−ＳｉＭｅ）。分析  Ｃ２２４Ｈ５４０Ｃｌ１６Ｎ１６Ｏ９６Ｓ３２Ｓｉ２９での計算値％：Ｃ、３６．３４；Ｈ、７．３５；Ｎ、３．０３；Ｓ１３．８６；実測値％：Ｃ、３５．８７；Ｈ、７．８４；Ｎ、３．３４；Ｓ、１２．９６。
【０１３６】
実施例１．１６：Ｇ１−［ＳｉＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２Ｂｒ］４（２６）の合成
ヘキサン（５ｍＬ）に溶解したデンドリマーＧ１−［Ｓｉ−Ｈ］４（３．５２ｍｍｏｌ）の溶液に、１．６１ｍＬのヘキサン中４−Ｂｒ−１ブテン（１５．８５ｍｍｏｌ）及び５滴のＫａｒｓｔｅｄｔ触媒を加え、６０℃で５日間撹拌した。その後、揮発物を真空下で除去し、ジクロロメタンを加え、溶液を活性炭で濾過した。揮発物の真空下での除去は、２６を淡黄色の液体（２．３２ｇ、６８％）として得た。
【０１３７】
１Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）：δ３．４０（８Ｈ，ｔ，ＣＨ２Ｂｒ），１．８５（８Ｈ，ｍ，ＳｉＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２Ｂｒ），１．３７（１６Ｈ，ｍ，ＳｉＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２Ｂｒ及びＳｉＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２Ｓｉ），０．５１（２４Ｈ，ｍ，Ｓｉに結合したＣＨ２），−０．０５（２４Ｈ，ｓ，ＳｉＣＨ３）。１３Ｃ｛１Ｈ｝−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）：δ３６．４（ＣＨ２Ｂｒ），３３．７（ＳｉＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２Ｂｒ），２２．５（ＳｉＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２Ｂｒ），２０．２（ＳｉＣＨ２），１８．６（ＳｉＣＨ２），１７．６（ＳｉＣＨ２），１４．５（ＳｉＣＨ２），−３．２８１（ＳｉＣＨ３）。分析  Ｃ３６Ｈ８０Ｂｒ４Ｓｉ５での計算値％：Ｃ、４４．４４；Ｈ、８．２９；実測値％：Ｃ、４４．２４；Ｈ、８．１８。
【０１３８】
実施例１．１７：Ｇ２−［ＳｉＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２Ｂｒ］8（２７）の合成
この第二世代デンドリマーは、ヘキサン（１０ｍＬ）、０．２８ｍＬの４−Ｂｒ−１ブテン（２．７ｍｍｏｌ）及び２滴のＫａｒｓｔｅｄｔ触媒に溶解した０．３８ｇのＧ２−［Ｓｉ−Ｈ］８から出発し、６０℃で１６時間撹拌して、２６のために記載されたものと同様の方法を使用して調製した。その後、揮発物を真空下で除去し、ジクロロメタンを加え、溶液を活性炭で濾過した。揮発物の真空下での除去は、２７を淡黄色の液体（０．６１ｇ、８３％）として得た。
【０１３９】
１Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）：δ３．４０（１６Ｈ，ｔ，ＣＨ２Ｂｒ），１．８５（１６Ｈ，ｍ，ＳｉＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２Ｂｒ），１．３１（４０Ｈ，ｍ，ＳｉＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２Ｂｒ及びＳｉＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２Ｓｉ），０．５３（６４Ｈ，ｍ，Ｓｉに結合したＣＨ２），−０．０５（４８Ｈ，ｓ，Ｓｉ（ＣＨ３）２），−０．０９（１２Ｈ，ｓ，ＳｉＣＨ３）。１３Ｃ｛１Ｈ｝−ＲＭＮ（ＣＤＣｌ３）：δ３６．８（ＣＨ２Ｂｒ），３４．０（ＳｉＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２Ｂｒ），２２．９３（ＳｉＣＨ２ＣＨ２），２０．５（ＳｉＣＨ２ＣＨ２），１９．６（ＳｉＣＨ２ＣＨ２），１９．３（ＳｉＣＨ２），１９．１（ＳｉＣＨ２），１８．９（ＳｉＣＨ２），１８．２（ＳｉＣＨ２），１４．９（ＳｉＣＨ２），−２．８（ＳｉＣＨ３），−４．５（ＳｉＣＨ３）。分析  Ｃ８８Ｈ１９６Ｂｒ８Ｓｉ１３での計算値％：Ｃ、４６．７９；Ｈ、８．７５；実測値％：Ｃ、４６．５１；Ｈ８．７５。
【０１４０】
実施例１．１８：Ｇ３−［ＳｉＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２Ｂｒ］16（２８）の合成
この第三世代デンドリマーは、ヘキサン（２０ｍＬ）、０．５１ｍＬの４−Ｂｒ−１ブテン（５．０４ｍｍｏｌ）及び２滴のＫａｒｓｔｅｄｔ触媒に溶解した０．８１ｇのＧ３−［Ｓｉ−Ｈ］16（０．３１ｍｍｏｌ）から出発し、６０℃で１６時間撹拌して、２６のために記載されたものと同様の方法を使用して調製した。その後、揮発物を真空下で除去し、ジクロロメタンを加え、溶液を活性炭で濾過した。揮発物の真空下での除去は、２８を淡黄色の液体（１．２７ｇ、８６％）として得た。
【０１４１】
１Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）：δ３．４０（３２Ｈ，ｔ，ＣＨ２Ｂｒ），１．８５（３２Ｈ，ｍ，ＳｉＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２Ｂｒ），１．３０（８８Ｈ，ｍ，ＳｉＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２Ｂｒ及びＳｉＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２Ｓｉ），０．５３（１４４Ｈ，ｍ，Ｓｉに結合したＣＨ２），−０．０５（１２０Ｈ，ｓ，Ｓｉ（ＣＨ３）２及びＳｉＣＨ３），−０．０９（１２Ｈ，ｓ，ＳｉＣＨ３）。１３Ｃ｛１Ｈ｝−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）：δ３６．４（ＣＨ２Ｂｒ），３３．６（ＳｉＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２Ｂｒ），２２．５（ＳｉＣＨ２ＣＨ２），２０．１（ＳｉＣＨ２ＣＨ２），１９．０−１４．５（ＳｉＣＨ２），−３．３（ＳｉＣＨ３），−４．８（ＳｉＣＨ３，両方の信号）。分析  Ｃ１９２Ｈ４２８Ｂｒ１６Ｓｉ２９での計算値％：Ｃ、４７．７４；Ｈ、８．９３；実測値％：Ｃ、４８．６２；Ｈ、９．００。
【０１４２】
実施例１．１９：Ｇ１−［ＳｉＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２Ｎ３］４（３０）の合成
ＤＭＦ中のデンドリマー２６（０．５２ｍｍｏｌ）の溶液に、０．３４ｇのアジ化ナトリウム（５．１６ｍｍｏｌ）及び少量のＫＩを加え、９０℃で５日間撹拌し、真空下で密閉アンプルに３日間入れた。その後、揮発物を真空下で除去し、１０ｍＬのジクロロメタンを加え、水で２回抽出した。有機相を分離し、ＭｇＳＯ4で乾燥した。溶液を濾過し、揮発物を真空下で除去して、３０を淡黄色の油状物（０．３５ｇ、８１％）として生じた。
【０１４３】
１Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）：δ３．２４（８Ｈ，ｔ，ＣＨ２Ｎ３），１．６０（８Ｈ，ｍ，ＳｉＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２Ｎ３），１．３５（１６Ｈ，ｍ，ＳｉＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２Ｎ３及びＳｉＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２Ｓｉ），０．５２（２４Ｈ，ｍ，Ｓｉに結合したＣＨ２），−０．０６（２４Ｈ，ｓ，Ｓｉ（ＣＨ３）２）。１３Ｃ｛１Ｈ｝−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）：δ５１．１（ＣＨ２Ｎ３），３２．６（ＳｉＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２Ｎ３），２１．１（ＳｉＣＨ２ＣＨ２），２０．２（ＳｉＣＨ２ＣＨ２），１８．６（ＳｉＣＨ２），１７．５（ＳｉＣＨ２），１５．０（ＳｉＣＨ２），−３．３（ＳｉＣＨ３）。
【０１４４】
実施例１．２０：Ｇ２−［ＳｉＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２Ｎ３］8（３１）の合成
この第二世代デンドリマーは、ＤＭＦ（３０ｍＬ）、０．４３ｇのアジ化ナトリウム（６．６４ｍｍｏｌ）及び少量のＫＩに溶解した２７（１．００ｇ、０．４４ｍｍｏｌ）から出発して、３０について記載されたものと同様の方法を使用して調製した。反応を９０℃で５日間撹拌し、真空下で密閉アンプルに１６時間入れた。その後、揮発物を真空下で除去し、３０ｍＬのジクロロメタンを加え、水で２回（２×１５ｍＬ）抽出した。有機相を分離し、ＭｇＳＯ4で乾燥した。溶液を濾過し、揮発物を真空下で除去して、３１を淡黄色の油状物（０．６７ｇ、７８％）として得た。
【０１４５】
１Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）：δ３．２４（１６Ｈ，ｔ，ＣＨ２Ｎ３），１．６０（１６Ｈ，ｍ，ＳｉＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２Ｎ３），１．２９（４０Ｈ，ｍ，ＳｉＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２Ｎ３及びＳｉＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２Ｓｉ），０．５１（６４Ｈ，ｍ，Ｓｉに結合したＣＨ２），−０．０６（４８Ｈ，ｓ，Ｓｉ（ＣＨ３）２），−０．１０（２４Ｈ，ｓ，ＳｉＣＨ３）。１３Ｃ｛１Ｈ｝−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）：δ５１．１（ＣＨ２Ｎ３），３２．６（ＳｉＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２Ｎ３），２１．２（ＳｉＣＨ２ＣＨ２），２０．５（ＳｉＣＨ２ＣＨ２），１９．２（ＳｉＣＨ２ＣＨ２），１８．８（ＳｉＣＨ２），１８．６（ＳｉＣＨ２），１８．５（ＳｉＣＨ２），１７．７（ＳｉＣＨ２），１５．０（ＳｉＣＨ２），−３．３（Ｓｉ（ＣＨ３）２），−４．９（ＳｉＣＨ３）。分析  Ｃ８８Ｈ１９６Ｎ２４Ｓｉ１３での計算値％：Ｃ、５４．０４；Ｈ、１０．１０；Ｎ、１７．１９；実測値％：Ｃ、５４．８１；Ｈ、９．７２；Ｎ、１２．９４。
【０１４６】
実施例１．２１：Ｇ３−［ＳｉＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２Ｎ３］16（３２）の合成
この第三世代デンドリマーは、ＤＭＦ−ＴＨＦ（３０ｍＬ／１０ｍＬ）、０．５０ｇのアジ化ナトリウム（７．７０ｍｍｏｌ）及び少量のＫＩに溶解した２８（１．８２ｇ、０．３８ｍｍｏｌ）から出発して、３０について記載されたものと同様の方法を使用して調製した。反応を９０℃で５日間撹拌し、真空下で密閉アンプルに１６時間入れた。その後、揮発物を真空下で除去し、３０ｍＬのジクロロメタンを加え、水で２回（２×１５ｍＬ）抽出した。有機相を分離し、ＭｇＳＯ4で乾燥した。溶液を濾過し、揮発物を真空下で除去して、３２を淡黄色の油状物（１．３３ｇ、８２％）として得た。
【０１４７】
１Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）：δ３．２４（３２Ｈ，ｔ，ＣＨ２Ｎ３），１．６０（３２Ｈ，ｍ，ＳｉＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２Ｎ３），１．３２（８８Ｈ，ｍ，ＳｉＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２Ｎ３及びＳｉＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２Ｓｉ），０．５４（１４４Ｈ，ｍ，Ｓｉに結合したＣＨ２），−０．０５（１２０Ｈ，ｓ，Ｓｉ（ＣＨ３）２及びＳｉＣＨ３），−０．０９（１２Ｈ，ｓ，ＳｉＣＨ３）。１３Ｃ｛１Ｈ｝−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）：δ５１．１（ＣＨ２Ｎ３），３２．６（ＳｉＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２Ｎ３），２１．２（ＳｉＣＨ２ＣＨ２），２０．０（ＳｉＣＨ２ＣＨ２），１９．０−１７．５（ＳｉＣＨ２）１５．０（ＳｉＣＨ２），−３．３（Ｓｉ（ＣＨ３）２），−４．９（ＳｉＣＨ３）。分析  Ｃ１９２Ｈ４２８Ｎ４８Ｓｉ２９での計算値％：Ｃ、５４．５９；Ｈ、１０．２１；Ｎ、１５．９２；実測値％：Ｃ、５６．０８；Ｈ、９．５８；Ｎ、１１．０８。
【０１４８】
実施例１．２２：ｃｋ−Ｇ１−［Ｓｉ（ＣＨ２）４（Ｎ３Ｃ２Ｈ）ＣＨ２ＮＨ２］４（３４）の合成
ＴＨＦ（１０ｍＬ）及び０．１１ｍＬ（１．６６ｍｍｏｌ）のプロパルギルアミンに溶解した０．３１ｇ（０．３８ｍｍｏｌ）のＧ１−［ＳｉＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２Ｎ３］４の混合物に、アスコルビン酸ナトリウム（０．０４ｇ、０．１１ｍｍｏｌ）の水溶液（１．２５ｍＬ）及び１．２５ｍＬの水中のＣｕＳＯ４（０．０２ｍｇ、０．０７ｍｍｏｌ）の溶液を加えた。反応混合物を室温で１６時間撹拌した。その後、２ｍＬのＮＨ３溶液（１５％）を加え、１０分間撹拌した。得られた溶液をＥｔＯＡｃ（３×１０ｍＬ）で抽出した。合わせた有機相を硫酸ナトリウムで乾燥し、濃縮し、溶媒を真空下で除去して、第一世代デンドリマー３４を黄色の油状物として得た。
【０１４９】
１Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）：δ７．４１（４Ｈ，ｓ，ＮＣＨＣＮ），４．３０（８Ｈ，ｔ，ＣＨ２ＣＨ２Ｎ），３．９７（８Ｈ，ｓｂ，ＮＨ２），１．８８（（８Ｈ，ｍ，ＣＨ２ＣＨ２Ｎ），１．２７（１６Ｈ，ｍ，ＳｉＣＨ２ＣＨ２），０．５４（２４Ｈ，ｍ，ＳｉＣＨ２），０．０８（２４Ｈ，ｓ，ＳｉＣＨ３）。
【０１５０】
実施例１．２３：ｃｋ−Ｇ１−［Ｓｉ（ＣＨ２）４（Ｎ３Ｃ２Ｈ）ＣＨ２Ｎ（ＣＨ２ＣＨ２ＣＯＯＭｅ）２］４（３８）の合成
この第一世代デンドリマー３８は、５ｍｌのＴＨＦ中のＧ１−［ＳｉＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２Ｎ３］４（０．３０ｇ、０．３７ｍｍｏｌ）、エステル基（Ｄ）で官能化されたプロパルギルアミン（０．３３ｇ、１．４６ｍｍｏｌ）、アスコルビン酸ナトリウム（３５ｍｇ、０．１８ｍｍｏｌ）の水溶液（０．７５ｍＬ）及び０．７５ｍＬの水中のＣｕＳＯ４（１８ｍｇ、０．０７３ｍｍｏｌ）の溶液から出発して、３４に記載されたものと同様の方法を使用して調製した。反応混合物を室温で１６時間撹拌した。その後、４ｍＬのＮＨ３溶液（１５％）を加え、１０分間撹拌した。得られた溶液をＥｔＯＡｃ（３×１０ｍＬ）で抽出した。合わせた有機相を硫酸ナトリウムで乾燥し、濃縮し、溶媒を真空下で除去した。化合物３８をゲル浸透クロマトグラフィーにより精製して、所望の生成物を黄色の油状物（０．４３ｇ、６８％）として得た。
【０１５１】
１Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）：δ７．４３（４Ｈ，ｓ，ＮＣＨＣＮ），４．３（８Ｈ，ｔ，ＣＨ２ＣＨ２Ｎ），３．７８（８Ｈ，ｓ，ＣＣＨ２Ｎ），３．６４（２４Ｈ，ｓ，ＯＣＨ３），２．７８（１６Ｈ，ｔ，ＮＣＨ２ＣＨ２Ｃ（Ｏ）），２．４７（１６Ｈ，ｔ，ＮＣＨ２ＣＨ２Ｃ（Ｏ）），１．９０（８Ｈ，ｍ，ＣＨ２ＣＨ２Ｎ），１．２７（１６Ｈ，ｍ，ＳｉＣＨ２ＣＨ２），０．５２（２４Ｈ，ｍ，ＳｉＣＨ２），−０．０８（２４Ｈ，ｓ，ＳｉＣＨ３）。１３Ｃ｛１Ｈ｝−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）：δ１７２．８（ＣＯ２ＣＨ３），１４４．６（ＮＣＣＣＨ２），１２２．２（ＮＣＣＣＨ２），５１．５（ＯＣＨ３），４９．９（ＣＨ２Ｎ），４８．９（ＣＨ２Ｎ），４８．７（ＣＨ２Ｎ），３４．０（ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２Ｎ），３２．６（ＣＨ２ＣＯ），２１．０（ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２Ｓｉ），２０．１（ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２），１８．５（ＳｉＣＨ２），１７．５（ＳｉＣＨ２），１４．９（ＳｉＣＨ２），−３．４（ＳｉＣＨ３）。
【０１５２】
実施例１．２４：ｃｋ−Ｇ１−［Ｓｉ（ＣＨ２）４（Ｎ３Ｃ２Ｈ）ＣＨ２Ｎ（ＣＨ２ＰＯ（ＯＭｅ）２）２］４（５０）の合成
この第一世代デンドリマー５０は、１０ｍｌのＴＨＦ中のＧ１−［ＳｉＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２Ｎ３］４（０．３０ｇ、０．３７ｍｍｏｌ）、ホスファイト基（Ｆ）で官能化されたプロパルギルアミン（０．４４ｇ、１．４６ｍｍｏｌ）、アスコルビン酸ナトリウム（３５ｍｇ、０．１８ｍｍｏｌ）の水溶液（１．２５ｍＬ）及び１．２５ｍＬの水中のＣｕＳＯ４（１８ｍｇ、０．０７３ｍｍｏｌ）の溶液から出発して、３４に記載されたものと同様の方法を使用して調製した。反応混合物を室温で１６時間撹拌した。その後、２ｍＬのＮＨ３溶液（１５％）を加え、１０分間撹拌した。得られた溶液をＥｔＯＡｃ（３×１０ｍＬ）で抽出した。合わせた有機相を硫酸ナトリウムで乾燥し、濃縮し、溶媒を真空下で除去して、５０を黄色の油状物（０．１６ｇ、６５％）として得た。
【０１５３】
１Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）：δ７．６（４Ｈ，ｓ，ＮＣＨＣＮ），４．３２（８Ｈ，ｔ，ＣＨ２ＣＨ２Ｎ），４．１３（８Ｈ，ｓ，ＣＣＨ２Ｎ），３．７６（４８Ｈ，ｄ，ＯＣＨ３），３．１５（４Ｈ，ｄ，ＮＣＨ２Ｐ），１．８９（８Ｈ，ｍ，ＣＨ２ＣＨ２Ｎ），１．２７（１６Ｈ，ｍ，ＳｉＣＨ２ＣＨ２），０．５４（２４Ｈ，ｍ，ＳｉＣＨ２），−０．０８（２４Ｈ，ｓ，ＳｉＣＨ３）。１３Ｃ｛１Ｈ｝−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）：δ１４３．１（ＮＣＣＣＨ２），１２３．０（ＮＣＣＣＨ２），５２．７（ｄ，ＯＣＨ３），５１．２（ｔ，ＣＣＨ２Ｎ），５０．０，４９．０（ｄｄ，ＮＣＨ２Ｐ），３４．１（ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２Ｎ），２１．０（ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２Ｎ），２０．１（ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２Ｓｉ），１８．５（ＳｉＣＨ２），１７．５（ＳｉＣＨ２），１４．９（ＳｉＣＨ２），−３．４（ＳｉＣＨ３）。
【０１５４】
実施例２：ポリフェノールのコアからのデンドリマー
Ａ．−焦点及び正確に官能化された周辺基を有するデンドロン又はデンドリマウェッジの合成
末端アリル基を有する世代１〜３のデンドリマウェッジの、４−ブロモブテンとしてのブロモアルケンからの合成手順をスキーム１２に記載する。最初の工程において、アルケンの二重結合とＨＳｉＭｅＣｌ２とのヒドロシリル化は、末端ＳｉＣｌ２基を有する第一世代のデンドリマウェッジＢｒＧ１Ｃｌ２（６５）の形成をもたらし、これを、臭化アリルマグネシウムとの反応により末端アリル基を有する対応する第一世代デンドリマウェッジＢｒＭｇ（Ｃ３Ｈ５）に変換することができ、これを本発明者たちはＢｒＧ１Ａ２（６６）と呼ぶ。化合物ＢｒＧ１Ａ２で前記の２つの反応を繰り返すと、第二世代デンドロンのＢｒＧ２Ｃｌ４（６７）及びＢｒＧ２Ａ４（６８）をもたらし、これらをＢｒＧ２Ａ４ウエッジで再び繰り返すと、第三世代デンドロンＢｒＧ３Ｃｌ８（６９）及びＢｒＧ３Ａ８（７０）を得る。
【化２８】
2013519711.tif 000030
【０１５５】
ここで、ｉ）ＨＳｉＭｅＣｌ２、白金触媒であり；ｉｉ）ＢｒＭｇ（Ｃ３Ｈ５）である。
【０１５６】
末端Ｓｉ−Ｈ結合を有する前記記載のデンドリマウェッジの官能化は、最初はアリル末端デンドロンとクロロジメチルシランＳｉＭｅ２ＣｌＨとのヒドロシリル化、次には水素化リチウムアルミニウムＬｉＡｌＨ４によるＣｌ−Ｈ交換によって実施し、これはスキーム１３に記載されている。このように、第一世代デンドロンＢｒＧ１Ａ２（６６）から出発して、デンドリマウェッジＢｒＧ１Ｈ２（７１）を単離し、第二世代デンドロン６８から出発して、デンドリマウェッジＢｒＧ２Ｈ４（７２）を単離し、第三世代デンドロン６９から出発して、８つのＳＩ−Ｈ基を有するデンドリマウェッジＢｒＧ３Ｈ８（７３）を得る。
【化２９】
2013519711.tif 000031
【０１５７】
ここで、ｉ）ＨＳｉＭｅ２Ｃｌ、白金触媒であり；ｉｉ）ＬｉＡｌＨ４である。
【０１５８】
本発明に反映される第三の種類のデンドリマウェッジは、焦点に官能基−ＣＨ２Ｂｒが存在するものであり、エステル基で周辺が官能化されており、この報告のパートＩにおいて記載したように、アニオン性リガンドの前駆体の基である。これらのデンドロンを、スキーム１４に記載されている合成経路に従って、第三世代まで調製した。反応は、Ｋａｒｓｔｅｄｔ触媒を使用する、末端Ｓｉ−Ｈ結合を有するカルボシランウエッジとアリルアミン含有メチルアクリレート基とのヒドロシリル化からなる。この合成に使用されるアリルアミンを化合物Ａとして記載する。
【化３０】
2013519711.tif 000032
【０１５９】
したがって、反応が第一世代デンドリマウェッジ７１に基づく場合、化合物Ａとの反応は、４つの末端メチルエステル基で修飾された第一世代デンドリマウェッジＢｒＧ１（ＣＯＯＭｅ）４（７４）をもたらす。出発化合物が第二世代ウエッジ８である場合、第二世代ウエッジＢｒＧ２（ＣＯＯＭｅ）８を得て（７５）、これは表面に８つのエステル基を有し、反応が第三世代ウエッジ９とアリルアミンＡで実施される場合、第三世代デンドロンＢｒＧ３（ＣＯＯＭｅ）１６（７６）を得て、これは１６個のエステル基を周辺に有する。
【化３１】
2013519711.tif 000033
2013519711.tif 000034
【０１６０】
ここで、ｉ）Ｃ３Ｈ５Ｎ（Ｃ２Ｈ４ＣＯＯＭｅ）２、白金触媒である。
【０１６１】
このセクションに記載されたデンドロン又はデンドリマウェッジ６５〜７６を、炭素、水素及び窒素、１Ｈ、１３Ｃ及び２９Ｓｉ  ＮＭＲ分光法、並びに質量分析法の元素分析により特徴決定し、下記に詳述する。
【０１６２】
ＢｒＧ１（ＳｉＣｌ２）（６５）の合成
０℃に冷却したヘキサン（４ｍＬ）中４−ブロモ−１−ブテン（４．００ｇ、０．０３０ｍｏｌ）の溶液に、ＨＳｉＭｅＣｌ２（５．１０ｇ、０．０４５ｍｏｌ）及びＫａｒｄｓｔｅｄ触媒（３％ｍｏｌ）を加える。反応を室温で一晩撹拌し、次に揮発物を真空下で除去する。ヘキサン（１５ｍＬ）を加え、溶液を活性炭で濾過する。溶媒を蒸発させ、化合物ＢｒＧ１（ＳｉＣｌ２）（６５）を無色の液体（７．０３ｇ、９５％）として得る。
【０１６３】
１Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）：δ０．７７（ｓ，３Ｈ，ＭｅＳｉＣｌ２），１．１１（ｍ，２Ｈ，ＣＨ２Ｓｉ），１．６５（ｍ，２Ｈ，ＣＨ２ＣＨ２Ｓｉ），１．９３（ｍ，２Ｈ，ＢｒＣＨ２ＣＨ２），３．４１（ｔ，Ｊ＝６．６Ｈｚ，２Ｈ，ＢｒＣＨ２）；１３Ｃ−ＮＭＲ｛１Ｈ｝（ＣＤＣｌ３）：δ５．１（ＭｅＳｉＣｌ２），２０．６（ＣＨ２ＣＨ２Ｓｉ），２１．１（ＣＨ２ＣＨ２Ｓｉ），３２．８（ＢｒＣＨ２ＣＨ２），３４．９（ＢｒＣＨ２ＣＨ２）；２９Ｓｉ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）：δ３２．３（ＭｅＳｉＣｌ２）。
【０１６４】
ＢｒＧ１Ａ２（６６）の合成
０℃に冷却したＥｔ２Ｏ（２５ｍＬ）中ＢｒＧ１（ＳｉＣｌ２）（１０．００ｇ、０．０４０ｍｏｌ）の溶液に、ＢｒＭｇ（Ｃ３Ｈ５）（０．０８５ｍｏｌ）をゆっくりと加え、混合物を室温で一晩撹拌する。その後、水中のＮＨ４Ｃｌの冷溶液（１２％、５０ｍＬ）を加える。次に、水／エーテル抽出（３回）を実施し、有機相をＭｇＳＯ４で乾燥し、最後に揮発物を真空下で除去して、化合物ＢｒＧ１Ａ２を無色の液体（８．３５ｇ、８０％）として得る。
【０１６５】
１Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）：δ−０．０２（ｓ，３Ｈ，ＭｅＳｉ（ＣＨ２ＣＨＣＨ２）２），０．５３（ｍ，２Ｈ，ＣＨ２Ｓｉ），１．４４（ｍ，２Ｈ，ＣＨ２ＣＨ２Ｓｉ），１．５４（ｄ，Ｊ＝８．５Ｈｚ，４Ｈ，ＳｉＣＨ２ＣＨ），１．８５（ｍ，２Ｈ，ＢｒＣＨ２ＣＨ２），３．４０（ｔ  Ｊ＝６．６Ｈｚ，２Ｈ，ＢｒＣＨ２），４．８４（ｍ，４Ｈ，ＣＨ＝ＣＨ２），５．７４（ｍ，２Ｈ，ＣＨ＝ＣＨ２）；１３Ｃ−ＮＭＲ｛１Ｈ｝（ＣＤＣｌ３）：δ−５．９（ｅ），１２．０（ｄ），２１．２（ｆ），２２．１（ｃ），３３．５（ａ），３６．２（ｂ），１１３．３（ｈ），１３４．５（ｇ）；２９Ｓｉ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）：δ０．９９（ＭｅＳｉ）。分析  Ｃ１１Ｈ２１ＢｒＳｉ（２６１．２７ｇ／ｍｏｌ）での計算値：Ｃ、５０．５７；Ｈ、８．１０；実測値：Ｃ、５１．０３；Ｈ、８．１７。
【０１６６】
ＢｒＧ２（ＳｉＣｌ２）２（６７）の合成
この化合物は、ＢｒＧ１Ａ（４．３０ｇ、０．０１６ｍｏｌ）、ＨＳｉＭｅＣｌ２（３．４１ｇ、０．０３ｍｏｌ）及びＫａｒｄｓｔｅｄ触媒（３％ｍｏｌ）から、ＢｒＧ１（ＳｉＣｌ２）の合成について記載された手順に従って調製して、ＢｒＧ２（ＳｉＣｌ２）２（６７）を無色の油状物（７．６０ｇ、９４％）として得た。
【０１６７】
１Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）：δ−０．０３（ｓ，３Ｈ，ＭｅＳｉ），０．５３（ｍ，２Ｈ，ＳｉＣＨ２），０．６６（ｍ，４Ｈ，ＳｉＣＨ２），０．７５（ｓ，６Ｈ，ＭｅＳｉＣｌ２），１．１９（ｍ，４Ｈ，ＣＨ２ＳｉＣｌ２），１．５０（ｍ，６Ｈ，ＣＨ２），１．８５（ｍ，２Ｈ，ＢｒＣＨ２ＣＨ２），３．４０（ｔ，Ｊ＝６．６Ｈｚ，２Ｈ，ＢｒＣＨ２）；１３Ｃ−ＮＭＲ｛１Ｈ｝（ＣＤＣｌ３）：δ−５．１（ＭｅＳｉ），５．１（ＭｅＳｉＣｌ２），１２．５（ＳｉＣＨ２），１７．３（ＣＨ２），１７．９（ＣＨ２），２２．３（ＢｒＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２），２５．９（ＣＨ２ＳｉＣｌ２），３３．７（ＢｒＣＨ２），３６．４（ＢｒＣＨ２ＣＨ２）；２９Ｓｉ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）：δ２．３（ＭｅＳｉ），３２．１（ＭｅＳｉＣｌ２）。
【０１６８】
ＢｒＧ２Ａ４（６８）の合成
この化合物は、ＢｒＧ２（ＳｉＣｌ２）２（６．２５ｇ、０．０１３ｍｏｌ）及びＢｒＭｇ（Ｃ３Ｈ５）（０．０５５ｍｏｌ）から、ＢｒＧ１Ａ２の合成について記載された手順に従って調製して、ＢｒＧ２Ａ４を無色の油状物（５．１０ｇ、７８％）として得た。
【０１６９】
１Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）：δ−０．０８（ｓ，３Ｈ，ＭｅＳｉ），−０．０４（ｓ，６Ｈ，ＭｅＳｉ），０．５６（ｍ，１０Ｈ，ＳｉＣＨ２），１．２５（ｍ，６Ｈ，ＣＨ２），１．５２（ｄ，Ｊ＝８．４Ｈｚ，８Ｈ，ＣＨ２ＣＨ＝ＣＨ２），１．８４（ｍ，２Ｈ，ＢｒＣＨ２ＣＨ２），３．４０（ｔ，Ｊ＝６．６Ｈｚ，２Ｈ，ＢｒＣＨ２），４．８４（ｍ，８Ｈ，ＣＨ＝ＣＨ２），５．７４（ｍ，４Ｈ，ＣＨ＝ＣＨ２）；１３Ｃ−ＮＭＲ｛１Ｈ｝（ＣＤＣｌ３）：δ−５．７（ＭｅＳｉ），−５．１（ＭｅＳｉ），１２．９（ＳｉＣＨ２），１７．９，１８．２及び１８．６（ＣＨ２），２１．４（ＣＨ２ＣＨ＝ＣＨ２），２２．５（ＢｒＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２），３３．６（ＢｒＣＨ２），３６．３（ＢｒＣＨ２ＣＨ２），１１３．０（ＣＨ＝ＣＨ２），１３４．８（ＣＨ＝ＣＨ２）；２９Ｓｉ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）：δ０．１（ＭｅＳｉ），１．８（ＭｅＳｉ）。分析  Ｃ２５Ｈ４９ＢｒＳｉ３（５１３．８２ｇ／ｍｏｌ）での計算値：Ｃ、５８．４４；Ｈ、９．６１；実測値：Ｃ、５８．０１；Ｈ、９．５３。
【０１７０】
ＢｒＧ３（ＳｉＣｌ２）４（６９）の合成
この化合物は、ＢｒＧ２Ａ４（２．５０ｇ、４．８６ｍｍｏｌ）、ＨＳｉＭｅＣｌ２（３．８０ｇ、０．０３３ｍｏｌ）及びＫａｒｄｓｔｅｄ触媒（３％ｍｏｌ）から、ＢｒＧ１（ＳｉＣｌ２）の合成について記載された手順に従って調製して、ＢｒＧ３（ＳｉＣｌ２）４を無色の油状物（４．４５ｇ、９４％）として得た。
【０１７１】
１Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）：δ−０．０７（ｓ，３Ｈ，ＭｅＳｉ），−０．０４（ｓ，６Ｈ，ＭｅＳｉ），０．５８（ｍ，１８Ｈ，ＳｉＣＨ２），０．７５（ｓ，１２Ｈ，ＭｅＳｉＣｌ２），０．８７（ｍ，８Ｈ，ＣＨ２），１．１６（ｍ，８Ｈ，ＣＨ２ＳｉＣｌ２），１．５２（ｍ，６Ｈ，ＣＨ２），１．８５（ｍ，２Ｈ，ＢｒＣＨ２ＣＨ２），３．４０（ｔ，Ｊ＝６．６Ｈｚ，２Ｈ，ＢｒＣＨ２）；１３Ｃ−ＮＭＲ｛１Ｈ｝（ＣＤＣｌ３）：δ−５．２（ＭｅＳｉ），５．５（ＭｅＳｉＣｌ２），１２．９（ＳｉＣＨ２），１７．３及び１７．５（ＣＨ２），１８．４，１８．６及び１８．７（ＣＨ２），２２．６（ＢｒＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２），２５．９（ＣＨ２ＳｉＣｌ２），３３．６ＢｒＣＨ２），３６．３（ＢｒＣＨ２ＣＨ２）；２９Ｓｉ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）：δ１．４（ＭｅＳｉ），１．８（ＭｅＳｉ），３２．１（ＭｅＳｉＣｌ２）。
【０１７２】
ＢｒＧ３Ａ８（７０）の合成
この化合物は、ＢｒＧ３（ＳｉＣｌ２）４（３．３０ｇ、３．３９ｍｍｏｌ）及びＢｒＭｇ（Ｃ３Ｈ５）（０．０３１ｍｏｌ）から、ＢｒＧ１Ａ２の合成について記載された手順に従って調製し、ＢｒＧ３Ａ８を無色の油状物（２．６２ｇ、７６％）として得た。
【０１７３】
１Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）：δ−０．１０（ｓ，３Ｈ，ＭｅＳｉ），−０．０８（ｓ，６Ｈ，ＭｅＳｉ），−０．０４（ｓ，１２Ｈ，ＭｅＳｉ），０５５（ｍ，２６Ｈ，ＳｉＣＨ２），１．３１（ｍ，１６Ｈ，ＣＨ２），１．５２（ｄ，Ｊ＝８．４Ｈｚ，１６Ｈ，ＣＨ２ＣＨ＝ＣＨ２），１．８４（ｍ，２Ｈ，ＢｒＣＨ２ＣＨ２），３．４０（ｔ，Ｊ＝６．６Ｈｚ，２Ｈ，ＢｒＣＨ２），４．８４（ｍ，１６Ｈ，ＣＨ＝ＣＨ２），５．７３（ｍ，８Ｈ，ＣＨ＝ＣＨ２）；１３Ｃ−ＮＭＲ｛１Ｈ｝（ＣＤＣｌ３）：δ−５．７（ＭｅＳｉ），−５．１（ＭｅＳｉ），−４．９（ＭｅＳｉ），１３．０（ＳｉＣＨ２），１７．９，１８．３，１８．５，１８．８及び１８．９（ＣＨ２），２１．５（ＣＨ２ＣＨ＝ＣＨ２），２２．６（ＢｒＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２），３３．６（ＢｒＣＨ２），３６．４（ＢｒＣＨ２ＣＨ２），１１３．１（ＣＨ＝ＣＨ２），１３４．９（ＣＨ＝ＣＨ２）；２９Ｓｉ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）：δ０．１（ＭｅＳｉ），０．９（ＭｅＳｉ），１．８（ＭｅＳｉ）。分析    Ｃ５３Ｈ１０５ＢｒＳｉ７（１０１８．９０ｇ／ｍｏｌ）での計算値：Ｃ、６２．４８；Ｈ、１０．３９；実測値：Ｃ、６１．９２；Ｈ、１０．３３。
【０１７４】
ＢｒＧ１Ｈ２（７１）の合成
Ｅｔ２Ｏ（２５ｍＬ）中のＢｒＧ１（ＳｉＣｌ）２（２．００ｇ、４．４４ｍｍｏｌ）の溶液を、Ｅｔ２Ｏ（２５ｍＬ）中のＬｉＡｌＨ４（７．７６ｍｍｏｌ）の溶液に０℃でゆっくりと加える。添加が完了すれば、一晩室温で反応を撹拌する。その後、混合物をＮａＣｌの水溶液に注ぎ、次に水／エーテル抽出（３回）を実施する。有機相をＭｇＳＯ４で乾燥し、最後に蒸発乾固して、化合物７１を無色の液体（１．２０ｇ、７１％）として得る。
【０１７５】
１Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）：δ−０．０８（ｓ，３Ｈ，ＭｅＳｉ），０．０４（ｄ，Ｊ＝４．２Ｈｚ，１２Ｈ，Ｍｅ２ＳｉＨ），０．５２（ｍ，２Ｈ，ＳｉＣＨ２），０．５８（ｍ，８Ｈ，ＳｉＣＨ２），１．３８（ｍ，６Ｈ，ＣＨ２），１．８５（ｍ，２Ｈ，ＢｒＣＨ２ＣＨ２），３．４０（ｔ，Ｊ＝６．６Ｈｚ，２Ｈ，ＢｒＣＨ２），３．８２（ｍ，２Ｈ，ＳｉＨ）；１３Ｃ−ＮＭＲ｛１Ｈ｝（ＣＤＣｌ３）：δ−５．１（ＭｅＳｉ），−４．３（Ｍｅ２ＳｉＨ），１２．９（ＳｉＣＨ２），１７．９（ＣＨ２），１８．８及び１９．０（ＣＨ２），２２．５（ＢｒＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２），３３．７（ＢｒＣＨ２），３６．４（ＢｒＣＨ２ＣＨ２）；２９Ｓｉ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）：δ−１４．６（Ｍｅ２ＳｉＨ），２．１（ＭｅＳｉ）。分析  Ｃ１５Ｈ３７ＢｒＳｉ３（３８１．６１ｇ／ｍｏｌ）での計算値：Ｃ、４７．２１；Ｈ、９．７７；実測値：Ｃ、４７．８９；Ｈ９．５３。
【０１７６】
ＢｒＧ２Ｈ４（７２）の合成
この化合物は、ＢｒＧ２（ＳｉＣｌ）４（３．１５ｇ、３．５３ｍｍｏｌ）及びＬｉＡｌＨ４（１０．６０ｍｍｏｌ）から、ＢｒＧ１Ｈ２の合成について記載された手順に従って調製し、ＢｒＧ２Ｈ４（７２）を無色の油状物（１．７６ｇ、６６％）として得た。
【０１７７】
１Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）：δ−０．１０（ｓ，６Ｈ，ＭｅＳｉ），−０．０８（ｓ，３Ｈ，ＭｅＳｉ），０．０４（ｄ，Ｊ＝４．２Ｈｚ，１２Ｈ，Ｍｅ２ＳｉＨ），０．５４（ｍ，２６Ｈ，ＳｉＣＨ２），１．３５（ｍ，１４Ｈ，ＣＨ２），１．８５（ｍ，２Ｈ，ＢｒＣＨ２ＣＨ２），３．４０（ｔ，Ｊ＝６．６Ｈｚ，２Ｈ，ＢｒＣＨ２），３．８２（ｍ，４Ｈ，ＳｉＨ）；１３Ｃ−ＮＭＲ｛１Ｈ｝（ＣＤＣｌ３）：δ−５．０（ＭｅＳｉ），−４．３８（Ｍｅ２ＳｉＨ），１３．０（ＳｉＣＨ２），１８．２，１８．５，１８．７，１８．８，１９．０（ＣＨ２），２２．５（ＢｒＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２），３３．６（ＢｒＣＨ２），３６．４（ＢｒＣＨ２ＣＨ２）；２９Ｓｉ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）：δ−１４．（Ｍｅ２ＳｉＨ），１．０（ＭｅＳｉ），１．８（ＭｅＳｉ）。分析  Ｃ３３Ｈ８１ＢｒＳｉ７（７５４．５０ｇ／ｍｏｌ）での計算値：Ｃ，５２．５３；Ｈ，１０．８２；実測値：Ｃ、５３．００；Ｈ、１０．２５。
【０１７８】
ＢｒＧ３Ｈ８（７３）の合成
この化合物は、ＢｒＧ３（ＳｉＣｌ）8（２．００ｇ、１．１３ｍｍｏｌ）及びＬｉＡｌＨ４（６．７５ｍｍｏｌ）から、ＢｒＧ１Ｈ２の合成について記載された手順に従って調製し、ＢｒＧ３Ｈ８（７３）を無色の油状物（１．１１ｇ、６６％）として得た。
【０１７９】
１Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）：δ−０．１０（ｓ，２１Ｈ，ＭｅＳｉ），０．０４（ｄ，Ｊ＝４．２Ｈｚ，４８Ｈ，Ｍｅ２ＳｉＨ），０．５８（ｍ，５８Ｈ，ＳｉＣＨ２），１．３１（ｍ，３０Ｈ，ＣＨ２），１．８２（ｍ，２Ｈ，ＢｒＣＨ２ＣＨ２），３．４０（ｔ，Ｊ＝６．６Ｈｚ，２Ｈ，ＢｒＣＨ２），３．８３（ｍ，８Ｈ，ＳｉＨ）；１３Ｃ−ＮＭＲ｛１Ｈ｝（ＣＤＣｌ３）：−５．０（ＭｅＳｉ），−４．３（Ｍｅ２ＳｉＨ），１３．０（ＳｉＣＨ２），１８．２−１９．０（ＣＨ２），２２．６（ＢｒＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２），３３．５（ＢｒＣＨ２），３６．５（ＢｒＣＨ２ＣＨ２）；２９Ｓｉ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）：δ−１４．６（Ｍｅ２ＳｉＨ），１．４（ＭｅＳｉ）。分析  Ｃ６９Ｈ１６９ＢｒＳｉ１５（１５００．２７ｇ／ｍｏｌ）での計算値：Ｃ、５５．２４；Ｈ、１１．３５；実測値：Ｃ、５４．８８；Ｈ、１０．７３。
【０１８０】
ＢｒＧ１（ＣＯＯＭｅ）４（７４）の合成
ヘキサン（２ｍＬ）中のＢｒＧ１Ｈ２（１．００ｇ、２．６２ｍｍｏｌ）、Ｃ３Ｈ５Ｎ（Ｃ２Ｈ４ＣＯＯＭｅ）２（１．２１ｇ、５．２４ｍｍｏｌ）及びＫａｒｄｓｔｅｄ触媒（３％ｍｏｌ）の溶液を一晩撹拌する。次にヘキサン（１５ｍＬ）を加え、溶液を活性炭で濾過する。溶媒を真空下で除去して、ＢｒＧ１（ＣＯＯＭｅ）４（７４）を無色の油状物（２．０４ｇ、９２％）として得る。
【０１８１】
１Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）：δ−０．１０（ｓ，３Ｈ，ＭｅＳｉ），−０．０８（ｓ，１２Ｈ，Ｍｅ２Ｓｉ），０．３３（ｍ，４Ｈ，ＳｉＣＨ２），０．５２（ｍ，１０Ｈ，ＳｉＣＨ２），１．２７（ｍ，４Ｈ，ＣＨ２），１．３５（ｍ，６Ｈ，ＣＨ２），１．８３（ｍ，２Ｈ，ＢｒＣＨ２ＣＨ２），２．３３（ｍ，４Ｈ，ＣＨ２Ｎ），２．４１（ｔ，Ｊ＝７．３Ｈｚ，８Ｈ，ＣＨ２Ｎ），２．７４（ｔ，Ｊ＝７．３Ｈｚ，８Ｈ，ＣＨ２ＣＯ），３．３９（ｔ，Ｊ＝６．６Ｈｚ，２Ｈ，ＢｒＣＨ２），３．６１（ｓ，１２Ｈ，ＯＭｅ）。１３Ｃ−ＮＭＲ｛１Ｈ｝（ＣＤＣｌ３）：δ−５．１（ＭｅＳｉ），−３．３（Ｍｅ２Ｓｉ），１２．８（ＳｉＣＨ２），１２．９（ＳｉＣＨ２），１８．４（ＣＨ２），１８．６及び２０．１（ＣＨ２），２１．５（ＣＨ２ＣＨ２Ｎ），２２．５（ＢｒＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２），３２．５（ＣＨ２ＣＯ），３３．７（ＢｒＣＨ２），３６．４（ＢｒＣＨ２ＣＨ２），４９．２（ＣＨ２Ｎ），５１．６（ＯＭｅ），５７．５（ＣＨ２Ｎ），１７３．１（ＣＯ）。分析  Ｃ３７Ｈ７５ＢｒＮ２Ｏ８Ｓｉ３（８４０．１６ｇ／ｍｏｌ）での計算値：Ｃ、５２．８９；Ｈ、９．００；実測値：Ｃ、５２．２９；Ｈ、８．６３。
【０１８２】
ＢｒＧ２（ＣＯＯＭｅ）8（７５）の合成
この化合物は、ＢｒＧ２Ｈ４（０．３０ｇ、０．４０ｍｍｏｌ）及びＣ３Ｈ５Ｎ（Ｃ２Ｈ４ＣＯ２Ｍｅ）２（０．４０ｇ、１．７５ｍｍｏｌ）から、ＢｒＧ１（ＣＯ２Ｍｅ）４について記載された手順に従って調製し、トルエンにおけるゲル浸透クロマトグラフィーの後でＢｒＧ２（ＣＯ２Ｍｅ）８を無色の油状物（０．５３ｇ、８０％）として得た。
【０１８３】
１Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）：δ−０．１０（ｓ，６Ｈ，ＭｅＳｉ），−０．０８（ｓ，３Ｈ，ＭｅＳｉ），−０．０７（ｓ，２４Ｈ，Ｍｅ２Ｓｉ），０．３７（ｍ，８Ｈ，ＳｉＣＨ２），０．５２（ｍ，２６Ｈ，ＳｉＣＨ２），１．３３（ｍ，２２Ｈ，ＣＨ２），１．８３（ｍ，２Ｈ，ＢｒＣＨ２ＣＨ２），２．３３（ｍ，８Ｈ，ＣＨ２Ｎ），２．４１（ｔ，Ｊ＝７．３Ｈｚ，１６Ｈ，ＣＨ２Ｎ），２．７４（ｔ，Ｊ＝７．３Ｈｚ，１６Ｈ，ＣＨ２ＣＯ），３．３９（ｔ，Ｊ＝６．６Ｈｚ，２Ｈ，ＢｒＣＨ２），３．６１（ｓ，２４Ｈ，ＯＭｅ）。
【０１８４】
Ｂ．−前記セクションで合成したデンドロンとポリフェノールのコアとのカップリング
前段落に記載された全てのデンドロンには、それらの焦点に−ＣＨ２Ｂｒ官能基が存在し、これを、ヒドロキノン又は１，３，５−トリヒドロキシベンゼンのようなポリフェノールコアへの固着に用いて、表面に異なる官能基を有するデンドリマーを生じることができる。焦点にＣ−Ｂｒ結合を有するデンドリマウェッジとフェノール化合物とのこのカップリング反応は、スキーム１５に記載されているように、一般に、炭酸カリウム（Ｋ２ＣＯ３）及びクラウンエーテル１８−Ｃ−６の存在下、アセトン中、８０℃で実施される。
【化３２】
2013519711.tif 000035
【０１８５】
ここで、ｉ）Ｋ２ＣＯ３、Ｃ１８Ｈ３２Ｏ６、アセトン、８０°Ｃであり；Ｆは官能基であり；ｙは官能基の数である。
【０１８６】
下記に記載されるこれらのデンドリマーにおいて、ＧｎＯｘＦｙ型の命名法が使用され、ここで
Ｇｎ：デンドリマウェッジとポリフェノール核とのカップリングにより得たデンドリマー世代を意味する。
【０１８７】
Ｏｘ：フェノール化合物の酸素原子を介してデンドリマーのコアに結合したデンドリマウェッジを意味する。数ｘは、初期ポリフェノール誘導体に存在する基の数を意味する。したがって、Ｏ２は、ヒドロキノンのコアへのカップリングに相当し、Ｏ３は、３つのフェノール基が存在する１，３，５−トリヒドロキシベンゼンのコアへのカップリングに相当する。
【０１８８】
Ｆ：デンドリマーの表面に存在する官能基の性質を示す１つ以上の文字を表す。したがって、Ａはアルキル基、Ｃｌは末端Ｓｉ−Ｃｌ結合、Ｈは末端Ｓｉ−Ｈ結合、Ｎは末端アミノ基などを表す。
【０１８９】
ｙ：デンドリマーの表面に存在する官能基の数を意味する。
【０１９０】
末端アリル基を有するデンドリマーの合成
焦点にＣ−Ｂｒ結合及び表面にアリル部分を有するデンドリマウェッジとポリフェノールのコアとのカップリング反応は、アリル末端球状デンドリマーの形成をもたらし、これは第一世代デンドリマーについてスキーム１６に図式化されている。例えば、１，３，５−トリヒドロキシベンゼンとデンドリマウェッジＢｒＧ１Ａ２（２）との反応は、表面に６つのアリル基を含有するデンドリマーＧ１Ｏ３Ａ６（１３）の形成をもたらす。第二世代デンドリマウェッジＢｒＧ２Ａ４（４）が使用される場合、第二世代デンドリマーＧ２Ｏ３Ａ１２（１４）が得られ、第三世代デンドリマウェッジＢｒＧ３Ａ８（６）が使用される場合、第三世代デンドリマーＧ３Ｏ３Ａ２４（１５）が得られる。
【化３３】
2013519711.tif 000036
【０１９１】
ここで、ｉ）Ｋ２ＣＯ３、１８Ｃ６（１０％）、アセトン、８０℃である。
【０１９２】
末端Ｓｉ−Ｈ基を有するデンドリマーの合成
焦点にＣ−Ｂｒ結合及び表面にＳｉ−Ｈ結合を含有するデンドリマウェッジと、ポリフェノールのコアとのカップリング反応は、末端Ｓｉ−Ｈ基で官能化された球状デンドリマーの形成をもたらす（第一世代の誘導体についてのスキーム１７）。この方法では、ＢｒＧ１Ｈ２（７１）から出発して、第一世代デンドリマーＧ１Ｏ３Ｈ６（８０）を得て、ＢｒＧ２Ｈ４から出発して、第二世代デンドリマーＧ２Ｏ３Ｈ１２（８１）を単離し、ＢｒＧ３Ｈ８（７３）から出発して、２４個のＳｉ−Ｈ分岐を含有するデンドリマーＧ３Ｏ３Ｈ２４（８２）を得る。
【０１９３】
これらの誘導体は、第１がアリルデンドリマーとＨＳｉＭｅ２Ｃｌとのヒドロシリル化であり、第２がＬｉＡｌＨ４による水素原子での塩素原子の置換である２工程方法を介して、アリル末端デンドリマー７７〜７９から入手することもでき、このようにして、上記に記載されたデンドリマー８０〜８２を得る。
【化３４】
2013519711.tif 000037
【０１９４】
ここで、ｉ）Ｋ２ＣＯ３、１８Ｃ６（１０％）、アセトン、８０℃である。
【０１９５】
末端エステルＣＯ２Ｍｅ基を有するデンドリマーの合成
２つの先行段落に記載されたものと同様の方法により、焦点にＣ−Ｂｒ結合及び表面にメチルエステル基を有するデンドリマウェッジと、ポリフェノールのコアとのカップリング反応は、末端エステル基で官能化された球状デンドリマーの形成をもたらす（方法Ａ）。スキーム１８は、第一世代デンドリマーの調製を示す。この方法では、ＢｒＧ１（ＣＯＯＭｅ）４（７４）から出発して、第一世代デンドリマーＧ１Ｏ３（ＣＯＯＭｅ）１２（８３）を得て、ＢｒＧ２（ＣＯＯＭｅ）８（７５）から出発して、第二世代デンドリマーＧ２Ｏ３（ＣＯＯＭｅ）２４（８４）を形成し、ＢｒＧ３（ＣＯＯＭｅ）１６（７６）から出発して、４８個の末端エステル基を含有するデンドリマーＧ３Ｏ３（ＣＯＯＭｅ）４８（８５）を単離する。また、これらの化合物を、アリルアミンＡと末端Ｓｉ−Ｈデンドリマー（８０〜８２）とのヒドロシリル化（方法Ｂ）により又はメチルアクリレートへのＮＨ２官能化デンドリマー（８６〜８８）のマイケル型付加（方法Ｃ）により調製することができる。スキーム１９は、方法Ｂ及びＣにより調製される、エステル基を有するこれらのデンドリマーの合成を示す。
【化３５】
2013519711.tif 000038
【０１９６】
ここで、ｉ）Ｋ２ＣＯ３、１８Ｃ６（１０％）、アセトン、８０℃である。
【化３６】
2013519711.tif 000039
【０１９７】
ここで、ｉ）ＨＳｉＭｅ２Ｃｌ、白金触媒であり；ｉｉ）ＬｉＡｌＨ４であり；ｉｉｉ）Ｃ３Ｈ５ＮＨ２、白金触媒であり；ｉｖ）Ｃ２Ｈ３ＣＯ２Ｍｅであり；ｖ）Ｃ３Ｈ５Ｎ（Ｃ２Ｈ４ＣＯ２Ｍｅ）２、白金触媒である。
【０１９８】
デンドリマー７７〜８５を、炭素、水素及び窒素、１Ｈ、１３Ｃ及び２９Ｓｉ  ＮＭＲ分光法、並びに質量分析法の元素分析により特徴決定し、下記に詳述する。
【０１９９】
Ｇ１Ｏ３Ａ６（７７）の合成
アセトン（５０ｍＬ）中にＢｒＧ１Ａ２（１．５０ｇ、５．７４ｍｍｏｌ）、１，３，５−（ＨＯ）３Ｃ６Ｈ３（０．２４ｇ、１．９１ｍｍｏｌ）、Ｋ２ＣＯ３（１．５９ｇ、１１４８ｍｍｏｌ）及びクラウンエーテル１８−Ｃ−６（０．１５ｇ、０．５７ｍｍｏｌ）を含有するテフロン(登録商標)バルブアンプルを、８０℃で４８時間加熱する。処理し、Ｅｔ２Ｏ／Ｈ２Ｏ（アンモニア性、１２％）で抽出した後、有機相をＭｇＳＯ４で乾燥し、次にＳｉＯ２で３０分間乾燥する。溶液を濾過し、揮発物を真空下で除去して、Ｇ１Ｏ３Ａ６を淡黄色の油状物（１．０１ｇ、７９％）として得る。
【０２００】
１Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）：δ−０．０２（ｓ，９Ｈ，ＭｅＳｉ），０．５８（ｍ，６Ｈ，ＣＨ２Ｓｉ），１．４４（ｍ，６Ｈ，ＯＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２），１．５４（ｄ，Ｊ＝８．５Ｈｚ，１２Ｈ，ＣＨ２ＣＨ＝ＣＨ２），１．７６（ｍ，６Ｈ，ＯＣＨ２ＣＨ２），３．８９（ｔ，Ｊ＝６．４Ｈｚ，６Ｈ，ＯＣＨ２），４．８４（ｍ，１２Ｈ，ＣＨ＝ＣＨ２），５．７８（ｍ，６Ｈ，ＣＨ＝ＣＨ２），６．０４（ｓ，３Ｈ，Ｃ６Ｈ３）；１３Ｃ−ＮＭＲ｛１Ｈ｝（ＣＤＣｌ３）：δ−５．９（ＭｅＳｉ），１２．７（ＳｉＣＨ２），２０．１（ＯＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２），２１．３（ＣＨ２ＣＨ＝ＣＨ２），３２．９（ＯＣＨ２ＣＨ２），６７．４（ＯＣＨ２），９３．７（Ｃ６Ｈ３（ＣＨ），１１３．１（ＣＨ＝ＣＨ２），１３４．７（ＣＨ＝ＣＨ２），１６０．９（ｉ−Ｃ６Ｈ３）；２９Ｓｉ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）：δ０．８（ＭｅＳｉ）。分析  Ｃ３９Ｈ６６Ｏ３Ｓｉ３（６６７．２０ｇ／ｍｏｌ）での計算値：Ｃ７０．２１；Ｈ９．９７；実測値：Ｃ６９．８３；Ｈ９．２２。
【０２０１】
Ｇ２Ｏ３Ａ１２（７８）の合成
方法Ａ）この化合物は、ＢｒＧ２Ａ４（１．５０ｇ、２．９２ｍｍｏｌ）、１，３，５−（ＨＯ）３Ｃ６Ｈ３（０．１２ｇ、０．９７ｍｍｏｌ）、Ｋ２ＣＯ３（０．８１ｇ、５．８４ｍｍｏｌ）及びクラウンエーテル１８−Ｃ−６（０．０７７ｇ、０．２９ｍｍｏｌ）から、Ｇ１Ｏ３Ａ６の合成について記載された手順に従って調製して、Ｇ２Ｏ３Ａ１２（７８）を、黄色を帯びた油状物（０．９８ｇ、７１％）として得る。
【０２０２】
方法Ｂ）Ｇ２Ｏ３（ＳｉＣｌ２）６（４．２０ｇ、３．０９ｍｍｏｌ）及びＢｒＭｇ（Ｃ３Ｈ５）（０．０４４ｍｏｌ）から、ＢｒＧ１Ａ２の合成について記載された手順に従って、Ｇ２Ｏ３Ａ１２（７８）を、黄色を帯びた油状物（３．３５ｇ、７６％）として得る。
【０２０３】
１Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）：δ−０．０８（ｓ，９Ｈ，ＭｅＳｉ），−０．０４（ｓ，１８Ｈ，ＭｅＳｉ），０．５７（ｍ，３０Ｈ，ＳｉＣＨ２），１．３０（ｍ，１２Ｈ，ＣＨ２），１．４１（ｍ，６Ｈ，ＯＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２），１．５２（ｄ，Ｊ＝７．９Ｈｚ，２４Ｈ，ＣＨ２ＣＨ＝ＣＨ２），１．７５（ｍ，６Ｈ，ＯＣＨ２ＣＨ２），３．８８（ｔ，Ｊ＝６．３Ｈｚ，６Ｈ，ＯＣＨ２），４．８４（ｍ，２４Ｈ，ＣＨ＝ＣＨ２），５．７４（ｍ，１２Ｈ，ＣＨ＝ＣＨ２），６．０４（ｓ，３Ｈ，Ｃ６Ｈ３）；１３Ｃ−ＮＭＲ｛１Ｈ｝（ＣＤＣｌ３）：δ−５．７（ＭｅＳｉ），−５．１（ＭｅＳｉ），１３．８（ＳｉＣＨ２），１７．９，１８．２及び１８．６（ＣＨ２），２０．６（ＯＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２），２１．５（ＣＨ２ＣＨ＝ＣＨ２），３３．３（ＯＣＨ２ＣＨ２），６７．６（ＯＣＨ２），９３．７（Ｃ６Ｈ３（ＣＨ），１１３．１（ＣＨ＝ＣＨ２），１３４．９（ＣＨ＝ＣＨ２），１６０．９（ｉ−Ｃ６Ｈ３）；２９Ｓｉ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）：δ０．１（ＭｅＳｉ），１．５（ＭｅＳｉ）。分析  Ｃ８１Ｈ１５０Ｏ３Ｓｉ９（１４２４．８３ｇ／ｍｏｌ）での計算値：Ｃ６８．２８；Ｈ１０．６１；実測値：Ｃ６８．０１；Ｈ１０．３１。
【０２０４】
Ｇ３Ｏ３Ａ２４（７９）の合成
方法Ａ）この化合物は、ＢｒＧ３Ａ８（１．５０ｇ、１．４７ｍｍｏｌ）、１，３，５−（ＨＯ）３Ｃ６Ｈ３（０．０６１ｇ、０．４９ｍｍｏｌ）、Ｋ２ＣＯ３（０．４１ｇ、２．９４ｍｍｏｌ）及びクラウンエーテル１８−Ｃ−６（０．０３９ｇ、０．１４ｍｍｏｌ）から、Ｇ１Ｏ３Ａ６の合成について記載された手順に従って調製して、Ｇ３Ｏ３Ａ２４（７９）を、黄色を帯びた油状物（０．９２ｇ、６２％）として得る。
【０２０５】
方法Ｂ）Ｇ２Ｏ３（ＳｉＣｌ２）12（３．１０ｇ、１．１０ｍｍｏｌ）及びＢｒＭｇ（Ｃ３Ｈ５）（０．０２７ｍｏｌ）から、ＢｒＧ１Ａ２の合成について記載された手順に従って、Ｇ３Ｏ３Ａ２４を、黄色を帯びた油状物（２．５０ｇ、７７％）として得る。
【０２０６】
１Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）：δ−０．１０（ｓ，１８Ｈ，ＭｅＳｉ），−０．０７（ｓ，９Ｈ，ＭｅＳｉ），−０．０４（ｓ，３６Ｈ，ＭｅＳｉ），０．５５（ｍ，７８Ｈ，ＳｉＣＨ２），１．３１（ｍ，４２Ｈ，ＣＨ２），１．５２（ｄ，Ｊ＝７．９Ｈｚ，４８Ｈ，ＣＨ２ＣＨＣＨ２），１．７５（ｍ，６Ｈ，ＯＣＨ２ＣＨ２），３．８８（ｔ，Ｊ＝６．３Ｈｚ，６Ｈ，ＯＣＨ２），４．８４（ｍ，４８Ｈ，ＣＨ＝ＣＨ２），５．７４（ｍ，２４Ｈ，ＣＨ＝ＣＨ２），６．０４（ｓ，３Ｈ，Ｃ６Ｈ３）；１３Ｃ−ＮＭＲ｛１Ｈ｝（ＣＤＣｌ３）：δ−５．７（ＭｅＳｉ），−５．０（ＭｅＳｉ），１３．９（ＣＨ２Ｓｉ），１７．９，１８．２，１８．５，１８．８，１８．９（ＣＨ２），２０．６（ＯＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２），２１．５（ＣＨ２ＣＨ＝ＣＨ２），３３．３（ＯＣＨ２ＣＨ２），６７．７（ＯＣＨ２），９３．６（Ｃ６Ｈ３（ＣＨ），１１３．０（ＣＨ＝ＣＨ２），１３４．９（ＣＨ＝ＣＨ２），１６０．９（ｉ−Ｃ６Ｈ３）；２９Ｓｉ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）：δ０．１（ＭｅＳｉ），０．９（ＭｅＳｉ），１．７（ＭｅＳｉ）。分析  Ｃ１６５Ｈ３１８Ｏ３Ｓｉ２１（２９４０．０８ｇ／ｍｏｌ）での計算値：Ｃ６７．４１；Ｈ１０．９０；実測値：Ｃ６６．５６；Ｈ１０．８７。
【０２０７】
Ｇ１Ｏ３Ｈ６（８０）の合成
この化合物を、Ｇ１Ｏ３Ａ６（７７）から２段階方法で調製することができる。最初の工程は、７７（１．０１ｇ、１．５１ｍｍｏｌ）と、ＨＳｉＭｅ２Ｃｌ（１．４６ｇ、０．０１５ｍｏｌ）及びＫａｒｄｓｔｅｄ触媒（３％ｍｏｌ）とのヒドロシリル化からなり、Ｓｉ−Ｃｌ結合を有するデンドリマーＧ１Ｏ３（ＳｉＣｌ）６を、淡黄色の油状物（１．７７ｇ、９５％）として得る。ＢｒＧ１Ｈ２の合成について記載された手順に従ったＧ１Ｏ３（ＳｉＣｌ）６（１．７７ｇ、１．４３ｍｍｏｌ）とＬｉＡｌＨ４（６．４５ｍｍｏｌ）との反応は、Ｇ１Ｏ３Ｈ６（８０）を無色の油状化合物（１．００ｇ、６８％）として生じる。
【０２０８】
１Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）：δ−０．０８（ｓ，９Ｈ，ＭｅＳｉ），０．０４（ｄ，Ｊ＝４．２Ｈｚ，３６Ｈ，Ｍｅ２ＳｉＨ），０．５５（ｍ，１８Ｈ，ＳｉＣＨ２），０．６３（ｍ，１２Ｈ，ＣＨ２ＳｉＨ），１．２５（ｍ，１８Ｈ，ＣＨ２），１．７７（ｍ，６Ｈ，ＯＣＨ２ＣＨ２），３．８２（ｍ，６Ｈ，ＳｉＨ），３．８８（ｔ，Ｊ＝６．６Ｈｚ，６Ｈ，ＯＣＨ２），６．０４（ｓ，３Ｈ，Ｃ６Ｈ３）；１３Ｃ−ＮＭＲ｛１Ｈ｝（ＣＤＣｌ３）：δ−５．１（ＭｅＳｉ），−４．４（Ｍｅ２ＳｉＨ），１３．７（ＳｉＣＨ２），１８．０，１８．８及び１８．９（ＣＨ２），２０．５（ＯＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２），３３．２（ＯＣＨ２ＣＨ２），６７．６（ＯＣＨ２），９３．８（Ｃ６Ｈ３（ＣＨ），１６１．０（ｉ−Ｃ６Ｈ３）；２９Ｓｉ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）：δ−１４．０（Ｍｅ２ＳｉＨ），１．９（ＭｅＳｉ）。分析  Ｃ５１Ｈ１１４Ｏ３Ｓｉ９（１０２８．２２ｇ／ｍｏｌ）での計算値：Ｃ５９．５７；Ｈ１１．１８；実測値：Ｃ５９．８９；Ｈ１１．５３。
【０２０９】
Ｇ２Ｏ３Ｈ１２（８１）の合成
この化合物を、Ｇ２Ｏ３Ａ１２（７８）から２段階方法で調製することができる。最初の工程は、７８（２．００ｇ、１．４０ｍｍｏｌ）と、ＨＳｉＭｅ２Ｃｌ（２．７１ｇ，０．０２９ｍｏｌ）及びＫａｒｄｓｔｅｄ触媒（３％ｍｏｌ）とのヒドロシリル化からなり、Ｓｉ−Ｃｌ結合を有するデンドリマーＧ２Ｏ３（ＳｉＣｌ）12を、淡黄色の油状物（３．４１ｇ、９５％）として得る。ＢｒＧ１Ｈ２の合成について記載された手順に従ったＧ２Ｏ３（ＳｉＣｌ）12（１．４５ｇ、０．５７ｍｍｏｌ）とＬｉＡｌＨ４（５．１０ｍｍｏｌ）との反応は、Ｇ２Ｏ３Ｈ１２（８１）を無色の油状化合物（０．８０ｇ、６６％）として生じる。
【０２１０】
１Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）：δ−０．１０（ｓ，１８Ｈ，ＭｅＳｉ），−０．０８（ｓ，９Ｈ，ＭｅＳｉ），０．０３（ｄ，Ｊ＝４．２Ｈｚ，７２Ｈ，Ｍｅ２ＳｉＨ），０．５５（ｍ，５４Ｈ，ＳｉＣＨ２），０．６３（ｍ，２４Ｈ，ＣＨ２ＳｉＨ），１．３５（ｍ，４２Ｈ，ＣＨ２），１．７７（ｍ，６Ｈ，ＯＣＨ２ＣＨ２），３．８２（ｍ，１２Ｈ，ＳｉＨ），３．８８（ｔ，Ｊ＝６．６Ｈｚ，６Ｈ，ＯＣＨ２），６．０４（ｓ，３Ｈ，Ｃ６Ｈ３）；１３Ｃ−ＮＭＲ｛１Ｈ｝（ＣＤＣｌ３）：δ−５．１（ＭｅＳｉ），−５．０（ＭｅＳｉ），−４．４（Ｍｅ２ＳｉＨ），１３．９（ＳｉＣＨ２），１８．２，１８．５，１８．８及び１９．０（ＣＨ２），２０．５（ＯＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２），３３．３（ＯＣＨ２ＣＨ２），６７．７（ＯＣＨ２），９３．７（Ｃ６Ｈ３（ＣＨ），１６０．９（ｉ−Ｃ６Ｈ３）；２９Ｓｉ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）：δ−１４．２（Ｍｅ２ＳｉＨ），０．８（ＭｅＳｉ），１．９（ＭｅＳｉ）。分析  Ｃ１０５Ｈ２４６Ｏ３Ｓｉ２１（２１４６．８７ｇ／ｍｏｌ）での計算値：Ｃ５８．７４；Ｈ１１．５５；実測値：Ｃ５７．８９；Ｈ１１．５３。
【０２１１】
Ｇ３Ｏ３Ｈ２４（８２）の合成
この化合物を、Ｇ３Ｏ３Ａ２４（８２）から２段階方法で調製することができる。最初の工程は、７９（２．５０ｇ、０．８５ｍｍｏｌ）と、ＨＳｉＭｅ２Ｃｌ（３．２８ｇ、０．０３４ｍｏｌ）及びＫａｒｄｓｔｅｄ触媒（３％ｍｏｌ）とのヒドロシリル化からなり、Ｓｉ−Ｃｌ結合を有するデンドリマーＧ３Ｏ３（ＳｉＣｌ）24を、淡黄色の油状物（４．２１ｇ、９５％）として得る。ＢｒＧ１Ｈ２の合成について記載された手順に従ったＧ３Ｏ３（ＳｉＣｌ）24（３．００ｇ、０．５８ｍｍｏｌ）とＬｉＡｌＨ４（０．０１０ｍｏｌ）との反応は、Ｇ３Ｏ３Ｈ２４（８２）を無色の油状化合物（１．６４ｇ、６５％）として生じる。
【０２１２】
１Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）：δ−０．１０（ｓ．ａ．，５４Ｈ，ＭｅＳｉ），０．０３（ｄ，Ｊ＝４．２Ｈｚ，１４４Ｈ，Ｍｅ２ＳｉＨ），０．５８（ｍ，１７４Ｈ，ＳｉＣＨ２），１．３５（ｍ，９０Ｈ，ＣＨ２），１．７７（ｍ，６Ｈ，ＯＣＨ２ＣＨ２），３．８２（ｍ，３０Ｈ，ＳｉＨ及びＯＣＨ２），６．０３（ｓ，３Ｈ，Ｃ６Ｈ３）；１３Ｃ−ＮＭＲ｛１Ｈ｝（ＣＤＣｌ３）：δ−５．０（ＭｅＳｉ），−４．３（Ｍｅ２ＳｉＨ），１３．９（ＣＨ２Ｓｉ），１８．２，１８．５，１８．８，１８．９（ＣＨ２），２０．６（ＯＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２），３３．２（ＯＣＨ２ＣＨ２），６７．７（ＯＣＨ２），９４．５（Ｃ６Ｈ３（ＣＨ），１６０．９（ｉ−Ｃ６Ｈ３）；２９Ｓｉ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）：δ−１４．２（Ｍｅ２ＳｉＨ），１．０，１．２（ＭｅＳｉ）。分析  Ｃ２１３Ｈ５１０Ｏ３Ｓｉ４５（４３８４．１７ｇ／ｍｏｌ）での計算値：Ｃ５８．３５；Ｈ１１．７３；実測値：Ｃ５８．８５；Ｈ１０．９７。
【０２１３】
Ｃ．例えばカルボキシレート、スルホネート又はホスホネートのような異なる性質のアニオン性基による、前のセクションで得たデントリマーの周辺の官能化
先行段落において記載されたデンドリマーが単離されると、アニオン性デンドリマーの合成を、第一には出発デンドリマーに存在する官能基、第二には最終デンドリマーにおける望ましいアニオン性基の性質に応じて異なる方法により取り組むことができる。
【０２１４】
アニオン性カルボキシレートデンドリマー
上記に記載された方法Ａ、Ｂ及びＣにより調製された、末端エステル基を有するデンドリマーを、ＭｅＯＨ及び水の混合物において塩基、例えばＮａＯＨでの処理により、アニオン性カルボキシレートデンドリマー８９〜９１に変換することができる（スキーム２０）。
【０２１５】
前記の工程の後、１２個のアニオン性末端基を含有する第一世代デンドリマーＧ１Ｏ３（ＣＯＯＮａ）１２（８９）、２４個のアニオン性基を有するデンドリマーＧ２Ｏ３（ＣＯＯＮａ）２４（９０）及び４８個のカルボキシレート末端基が存在するデンドリマーＧ３Ｏ３（ＣＯＯＮａ）４８（９１）が生じる。スキーム２０は、第一世代デンドリマーの合成を記載する。
【化３７】
2013519711.tif 000040
【０２１６】
ここで、ｉ）ＮａＯＨである。
【０２１７】
アニオン性スルホネートデンドリマー
末端スルホネート基を有するアニオン性デンドリマーの合成は、ＮＨ２デンドリマー（８６〜８８）へのビニルスルホン酸ナトリウムのマイケル付加型を介して実施され、周辺スルホネート基を有するアニオン性デンドリマーをもたらす。
【０２１８】
この方法では、それぞれ１２、２４及び４８個の末端スルホネート基を含有するアニオン性デンドリマーＧ１Ｏ３（ＳＯ３Ｎａ）１２（９２）、Ｇ２Ｏ３（ＳＯ３Ｎａ）２４（９３）及びＧ３Ｏ３（ＳＯ３Ｎａ）４８（９４）が調製される。スキーム２１は、第一世代デンドリマーの合成を記載する。
【化３８】
2013519711.tif 000041
【０２１９】
ここで、ｉ）Ｃ２Ｈ３ＳＯ３Ｎａである。
【０２２０】
ホスホネートアニオン性デンドリマーの合成
アニオン性ホスホネートデンドリマーの合成は、ＮＨ２デンドリマー（８６〜８８）から出発して２工程で実施される。最初に、ＴＨＦにおいてホルムアルデヒドと室温で１時間反応させ、次に、ジメチルホスファイトを「その場」で加え、混合物を４０℃で３時間加熱して、末端ＰＯ（ＯＭｅ）２単位を有するデンドリマーを生じる。最後に、これらのデンドリマーをＮａＯＨと反応させて、周辺ＰＯ（ＯＭｅ）２基をアニオン性−ＰＯ（ＯＮａ）２基に変換する。
【０２２１】
この方法では、それぞれ１２、２４及び４８個の末端ホスホネート基を含有するアニオン性デンドリマーＧ１Ｏ３（ＰＯ（ＯＮａ）２）１２（９５）、Ｇ２Ｏ３（ＰＯ（ＯＮａ）２）２４（９６）及びＧ３Ｏ３（ＰＯ（ＯＮａ）２）４８（９７）が調製される。スキーム２２は、第一世代デンドリマーの合成を記載する。
【化３９】
2013519711.tif 000042
【０２２２】
ここで、ｉ）ＣＨ２Ｏ、ＨＰ（Ｏ）（ＯＭｅ）２であり；ｉｉ）ＮａＯＨである。
【０２２３】
デンドリマー８６〜９７を、下記に詳述するように、炭素、水素及び窒素、１Ｈ、１３Ｃ、２９Ｓｉ及び３１Ｐ  ＮＭＲ分光法、並びに質量分析法の元素分析により特徴決定する。
【０２２４】
Ｇ１Ｏ３（ＮＨ２）6（８６）の合成
ＴＨＦ（３ｍＬ）中にＧ１Ｏ３Ｈ６（０．５０ｇ、０．４９ｍｍｏｌ）、アリルアミンＣ３Ｈ５ＮＨ２（０．３７ｇ、６．４２ｍｍｏｌ）及びＫａｒｄｓｔｅｄ触媒（３％ｍｏｌ）を含有するテフロン(登録商標)バルブアンプルを、１２０℃で４８時間加熱する。次に、揮発物を除去し、ＣＨ２Ｃｌ２（１０ｍｌ）を加え、溶液を活性炭で濾過する。溶媒を蒸発させ、Ｇ１Ｏ３（ＮＨ２）６（８６）を淡黄色の油状物（０．５９ｇ、８９％）として得る。
【０２２５】
１Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）：δ−０．０９（ｓ，９Ｈ，ＭｅＳｉ），−０．０６（ｓ，３６Ｈ，Ｍｅ２ＳｉＨ），０．４８（ｍ，１８Ｈ，ＳｉＣＨ２），０．５４（ｍ，３６Ｈ，ＳｉＣＨ２），１．２９（ｍ，１８Ｈ，ＣＨ２），１．４０（ｍ，２４Ｈ，ＣＨ２），１．７４（ｍ，６Ｈ，ＯＣＨ２ＣＨ２），２．６３（ｔ，Ｊ＝７．１Ｈｚ，１２Ｈ，ＣＨ２Ｎ），３．８７（ｔ，Ｊ＝６．３Ｈｚ，６Ｈ，ＯＣＨ２），６．０４（ｓ，３Ｈ，Ｃ６Ｈ３）；１３Ｃ−ＮＭＲ｛１Ｈ｝（ＣＤＣｌ３）：δ−５．１（ＭｅＳｉ），−３．３（Ｍｅ２Ｓｉ），１２．３（ＮＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２），１３．８（ＳｉＣＨ２），１８．４，１８．６及び２０．０（ＣＨ２），２０．５（ＯＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２），３３．２（ＯＣＨ２ＣＨ２），４５．６（ＮＣＨ２），６７．６（ＯＣＨ２），９３．７（Ｃ６Ｈ３（ＣＨ），１６０．９（ｉ−Ｃ６Ｈ３）；２９Ｓｉ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）：δ１．８（ＭｅＳｉ），２．１（Ｍｅ２Ｓｉ）。分析  Ｃ６９Ｈ１５６Ｎ６Ｏ３Ｓｉ９（１３７０．７８ｇ／ｍｏｌ）での計算値：Ｃ６０．４６，Ｈ１１．４７，Ｎ６．１３；実測値：Ｃ６１．１１，Ｈ１１．２６，Ｎ５．８６。
【０２２６】
Ｇ２Ｏ３（ＮＨ２）12（８７）の合成
第二世代デンドリマー８７は、Ｇ２Ｏ３Ｈ１２（０．５０ｇ、０．２３ｍｍｏｌ）、Ｃ３Ｈ５ＮＨ２（０．３２ｇ、５．５９ｍｍｏｌ）から出発して、化合物８６について記載されたものと同様の手順により調製して、Ｇ２Ｏ３（ＮＨ２）１２を、黄色を帯びた油状物（０．４７ｇ、７２％）として得る。
【０２２７】
１Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）：δ−０．１１（ｓ，１８Ｈ，ＭｅＳｉ），−０．０９（ｓ，９Ｈ，ＭｅＳｉ），−０．０７（ｓ，７２Ｈ，Ｍｅ２ＳｉＨ），０．４３（ｍ，２６Ｈ，ＣＨ２），０．５４（ｍ，７２Ｈ，ＣＨ２），１．２１（ｓ，２４Ｈ，ＮＨ２），１．２８（ｍ，３６Ｈ，ＣＨ２），１．３８（ｍ，３０Ｈ），１．７４（ｍ，６Ｈ，ＯＣＨ２ＣＨ２），２．６３（ｔ，Ｊ＝７．１Ｈｚ，２４Ｈ，ＣＨ２Ｎ），３．８５（ｔ，Ｊ＝６．３Ｈｚ，６Ｈ，ＯＣＨ２），６．０４（ｓ，３Ｈ，Ｃ６Ｈ３）；１３Ｃ−ＮＭＲ｛１Ｈ｝（ＣＤＣｌ３）：δ−４．９（ＭｅＳｉ），−４．７（ＭｅＳｉ），−３．３（Ｍｅ２Ｓｉ），１２．３（ＳｉＣＨ２），１３．８（ＳｉＣＨ２），１８．４，１８．６，１８．８，２０．０，２０．１（ＣＨ２），２０．６（ＯＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２），２８．３（ＣＨ２ＣＨ２Ｎ），３３．３（ＯＣＨ２ＣＨ２），４５．７（ＣＨ２Ｎ），６７．６（ＯＣＨ２），９３．７（Ｃ６Ｈ３（ＣＨ），１６０．９（ｉ−Ｃ６Ｈ３）；２９Ｓｉ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）：δ９（ＭｅＳｉ），１．７（ＭｅＳｉ），１．９（Ｍｅ２Ｓｉ）。分析  Ｃ１４１Ｈ３３０Ｎ１２Ｏ３Ｓｉ２１（２８３２．００ｇ／ｍｏｌ）での計算値：Ｃ５９．８０；Ｈ１１．７５；Ｎ５．９４；実測値：Ｃ６０．９２；Ｈ１０．０３；Ｎ５．４４。
【０２２８】
Ｇ３Ｏ３（ＮＨ２）24（８８）の合成
第三世代デンドリマー８８は、Ｇ３Ｏ３Ｈ24（１．００ｇ、０．２３ｍｍｏｌ）、Ｃ３Ｈ５ＮＨ２（０．６２ｇ、０．０１１ｍｏｌ）から出発して、化合物８６について記載されたものと同様の手順により調製して、Ｇ３Ｏ３（ＮＨ２）２４を、黄色を帯びた油状物（０．４８ｇ、３６％）として得る。
【０２２９】
１Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）：δ−０．１１（ｓ．ａ．，５４Ｈ，ＭｅＳｉ），−０．０７（ｓ，１４４Ｈ，Ｍｅ２Ｓｉ），０．５２（ｍ，２２２Ｈ，ＳｉＣＨ２），１．２１−１．５０（ｍ，１８６Ｈ，ＮＨ２，ＣＨ２），１．７４（ｍ，６Ｈ，ＯＣＨ２ＣＨ２），２．６３（ｔ，Ｊ＝７．１Ｈｚ，４８Ｈ，ＣＨ２Ｎ），３．８５（ｔ，Ｊ＝６．３Ｈｚ，６Ｈ，ＯＣＨ２），６．０４（ｓ，３Ｈ，Ｃ６Ｈ３）；１３Ｃ−ＮＭＲ｛１Ｈ｝（ＣＤＣｌ３）：δ−４．９（ＭｅＳｉ），−３．３（Ｍｅ２Ｓｉ），１２．８（ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２Ｎ），１４．１（ＳｉＣＨ２），１７．９−２０．６（ＣＨ２），２７．１（ＣＨ２ＣＨ２Ｎ），３３．４（ＯＣＨ２ＣＨ２），４５．１（ＣＨ２Ｎ），６７．８（ＯＣＨ２），９３．７（Ｃ６Ｈ３（ＣＨ），１６１．０（ｉ−Ｃ６Ｈ３）。分析  Ｃ２８５Ｈ６７８Ｎ２４Ｏ３Ｓｉ４５（５７５４．４４ｇ／ｍｏｌ）での計算値：Ｃ５９．４９；Ｈ１１．８８；Ｎ５．８４；実測値：Ｃ５８．５０；Ｈ１１．６７；Ｎ５．３４。
【０２３０】
Ｇ１Ｏ３（ＣＯＯＭｅ）12（８３）の合成
方法Ａ）この化合物は、ＢｒＧ１（ＣＯ２Ｍｅ）４（０．５５ｇ、０．６５ｍｍｏｌ）、１，３，５−（ＨＯ）３Ｃ６Ｈ３（０．０２７ｇ、０．２１ｍｍｏｌ）、Ｋ２ＣＯ３（０．１８ｇ、１．３０ｍｍｏｌ）及びクラウンエーテル１８−Ｃ−６（０．０１７ｇ、０．０６ｍｍｏｌ）から、Ｇ１Ｏ３Ａ６の合成について記載された手順に従って調製して、 Ｇ１Ｏ３（ＣＯ２Ｍｅ）１２を、黄色を帯びた油状物（０．３６ｇ、６８％）として得る。
【０２３１】
方法Ｂ）Ｇ１Ｏ３Ｈ６（０．２０ｇ、０．１９ｍｍｏｌ）及びＣ３Ｈ５Ｎ（Ｃ２Ｈ４ＣＯ２Ｍｅ）２（０．２８ｇ、１．１８ｍｍｏｌ）から、ＢｒＧ１（ＣＯ２Ｍｅ）４の合成について記載された手順に従って、Ｇ１Ｏ３（ＣＯ２Ｍｅ）１２を、ヘキサン（２×１０ｍＬ）で洗浄した後に黄色を帯びた油状物（０．４２ｇ、８９％）として得る。
【０２３２】
方法Ｃ）ＣＨ３ＯＨ（５ｍＬ）中のＧ１Ｏ３（ＮＨ２）６（０．２５ｇ、０．１８ｍｍｏｌ）及びメチルアクリレートＣ２Ｈ３ＣＯ２Ｍｅ（０．２８ｇ、３．２８ｍｍｏｌ）の溶液を、室温で１６時間撹拌する。次に溶液を濾過し、揮発物を蒸発させ、残油をヘキサン（２×１０ｍＬ）で洗浄して、Ｇ１Ｏ３（ＣＯ２Ｍｅ）１２（８３）を、黄色を帯びた油状物（０．３９ｇ、９０％）として得る。
【０２３３】
１Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）：δ−０．０９（ｓ，９Ｈ，ＭｅＳｉ），−０．０７（ｓ，３６Ｈ，Ｍｅ２Ｓｉ），０．４０（ｍ，１２Ｈ，ＳｉＣＨ２），０．５３（ｍ，３０Ｈ，ＳｉＣＨ２），１．２７（ｍ，１２Ｈ，ＣＨ２），１．３６（ｍ，１８Ｈ，ＣＨ２），１．７５（ｍ，６Ｈ，ＯＣＨ２ＣＨ２），２．３９（ｍ，１２Ｈ，ＣＨ２Ｎ），２．４１（ｔ，Ｊ＝７．３Ｈｚ，２４Ｈ，ＣＨ２Ｎ），２．７４（ｔ，Ｊ＝７．３Ｈｚ，２４Ｈ，ＣＨ２ＣＯ），３．６４（ｓ，３６Ｈ，ＯＭｅ），３．８７（ｔ，Ｊ＝６．６Ｈｚ，６Ｈ，ＯＣＨ２），６．０３（ｓ，３Ｈ，Ｃ６Ｈ３）；１３Ｃ−ＮＭＲ｛１Ｈ｝（ＣＤＣｌ３）：δ−５．１（ＭｅＳｉ），−３．３（Ｍｅ２Ｓｉ），１２．８（ＳｉＣＨ２），１３．９（ＳｉＣＨ２），１８．４，１８．６及び２０．１（ＣＨ２），２０．５（ＯＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２），２１．５（ＣＨ２ＣＨ２Ｎ，３２．５（ＣＨ２ＣＯ），３３．７（ＯＣＨ２ＣＨ２），４９．２（ＣＨ２Ｎ），５１．６（ＯＭｅ），５７．５（ＣＨ２Ｎ），６７．７（ＯＣＨ２），９３．６（Ｃ６Ｈ３（ＣＨ），１６０．９（ｉ−Ｃ６Ｈ３），１７３．１（ＣＯ）；２９Ｓｉ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）：δ１．６（ＭｅＳｉ），１．９（Ｍｅ２Ｓｉ）。分析  Ｃ１１７Ｈ２２８Ｎ６Ｏ２７Ｓｉ９（２４０３．８６ｇ／ｍｏｌ）での計算値：Ｃ５８．４６，Ｈ９．５６，Ｎ３．５０；実測値：Ｃ５８．０９，Ｈ９．１３，Ｎ３．０２。
【０２３４】
Ｇ２Ｏ３（ＣＯＯＭｅ）24（８４）の合成
化合物８４の合成は、誘導体８３について記載されたものと同様の手順に従って実施することができる。例えば、Ｇ２Ｏ３Ｈ１２（０．３５ｇ、０．１６ｍｍｏｌ）及びＣ３Ｈ５Ｎ（Ｃ２Ｈ４ＣＯ２Ｍｅ）２（０．４６ｇ、２．００ｍｍｏｌ）から、ＢｒＧ１（ＣＯ２Ｍｅ）４の合成について記載された手順に従って、Ｇ２Ｏ３（ＣＯ２Ｍｅ）24を、黄色を帯びた油状物（０．７０ｇ、８８％）として得る。
【０２３５】
１Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）：δ−０．１０（ｓ，２７Ｈ，ＭｅＳｉ），−０．０７（ｓ，７２Ｈ，Ｍｅ２Ｓｉ），０．３９（ｍ，２４Ｈ，ＳｉＣＨ２），０．５３（ｍ，７８Ｈ，ＳｉＣＨ２），１．３０（ｍ，６６Ｈ，ＣＨ２），１．７５（ｍ，６Ｈ，ＯＣＨ２ＣＨ２），２．３９（ｍ，２４Ｈ，ＣＨ２Ｎ），２．４１（ｔ，Ｊ＝７．３Ｈｚ，４８Ｈ，ＣＨ２Ｎ），２．７４（ｔ，Ｊ＝７．３Ｈｚ，４８Ｈ，ＣＨ２ＣＯ），３．６４（ｓ，７２Ｈ，ＯＭｅ），３．８７（ｔ，Ｊ＝６．６Ｈｚ，６Ｈ，ＯＣＨ２），６．０３（ｓ，３Ｈ，Ｃ６Ｈ３）；１３Ｃ−ＮＭＲ｛１Ｈ｝（ＣＤＣｌ３）：δ−５．１（ＭｅＳｉ），−３．３（Ｍｅ２Ｓｉ），１２．８（ＳｉＣＨ２），１３．９（ＳｉＣＨ２），１８．４，１８．８，１９．０及び２０．１，２０．５，２１．５（ＣＨ２），３２．５（ＮＣＨ２），３３．７（ＯＣＨ２ＣＨ２），４９．２（ＣＨ２ＣＯ），５１．２（ＯＭｅ），５７．５（ＣＨ２Ｎ），６７．７（ＯＣＨ２），９３．６（Ｃ６Ｈ３（ＣＨ），１６０．９（ｉ−Ｃ６Ｈ３），１７３．１（ＣＯ）；２９Ｓｉ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）：δ０．９（ＭｅＳｉ），１．７（ＭｅＳｉ），１．９（Ｍｅ２Ｓｉ）。
【０２３６】
Ｇ３Ｏ３（ＣＯＯＭｅ）48（８５）の合成
化合物８５の合成は、誘導体８３について記載されたものと同様の手順に従って実施することができる。例えば、Ｇ３Ｏ３Ｈ２４（０．３２ｇ、０．０７５ｍｍｏｌ）及びＣ３Ｈ５Ｎ（Ｃ２Ｈ４ＣＯ２Ｍｅ）２（０．４１ｇ、１．８０ｍｍｏｌ）から、ＢｒＧ１（ＣＯ２Ｍｅ）４の合成について記載された手順に従って、Ｇ３Ｏ３（ＣＯ２Ｍｅ）48を、黄色を帯びた油状物（０．６３ｇ、８８％）として得る。
【０２３７】
１Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）：δ−０．１２（ｓ．ａ．，５４Ｈ，ＭｅＳｉ），−０．０７（ｓ，１４４Ｈ，Ｍｅ２Ｓｉ），０．３８（ｍ，４８Ｈ，ＳｉＣＨ２），０．５２（ｍ，１７４Ｈ，ＳｉＣＨ２），１．２６（ｍ，８４Ｈ，ＣＨ２），１．３８（ｍ，５４Ｈ，ＣＨ２），１．７５（ｍ，６Ｈ，ＯＣＨ２ＣＨ２），２．４５（ｍ，１４４Ｈ，ＣＨ２Ｎ），２．７４（ｓ．ａ．，９８Ｈ，ＣＨ２ＣＯ），３．６３（ｓ，１４４Ｈ，ＯＭｅ），３．８７（ｓ．ａ．，６Ｈ，ＯＣＨ２），６．００（ｓ，３Ｈ，Ｃ６Ｈ３）；１３Ｃ−ＮＭＲ｛１Ｈ｝（ＣＤＣｌ３）：δ−４．８（ＭｅＳｉ），−３．３（Ｍｅ２Ｓｉ），１２．８（ＳｉＣＨ２），１４．１（ＳｉＣＨ２），１８．４−２０．５（ＣＨ２），３２．３（ＮＣＨ２），３３．６（ＯＣＨ２ＣＨ２），４９．２（ＣＨ２ＣＯ），５１．６（ＯＭｅ），５７．４（ＣＨ２Ｎ），６７．８（ＯＣＨ２），９３．６（Ｃ６Ｈ３（ＣＨ），１６０．９（ｉ−Ｃ６Ｈ３），１７２．８（ＣＯ）；２９Ｓｉ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）：δ−０．９，１．８（ＭｅＳｉ），１．９（Ｍｅ２Ｓｉ）。分析  Ｃ４７７Ｈ９６６Ｎ２４Ｏ９９Ｓｉ４５（９８８６．７２ｇ／ｍｏｌ）での計算値：Ｃ５７．９５；Ｈ９．８５；Ｎ３．４０；実測値：Ｃ５７．０９；Ｈ１０．１０；Ｎ３．６３。
【０２３８】
Ｇ１Ｏ３（ＣＯＯＮａ）12（８９）の合成
Ｈ２Ｏ（１ｍＬ）中のＮａＯＨ（０．０４８ｇ、１．１９ｍｍｏｌ）の溶液を、ＭｅＯＨ（３ｍＬ）中のＧ１Ｏ３（ＣＯＯＭｅ）１２（０．２０ｇ、０．０８３ｍｍｏｌ）の溶液に加え、反応を２４時間撹拌する。次に溶媒を蒸発乾固し、残渣をＭｅＯＨ（２×１０ｍＬ）及びＥｔ２Ｏ（２×１０ｍＬ）で洗浄して、Ｇ１Ｏ３（ＣＯＯＮａ）１２（８９）を白色の固体（０．１７ｇ、８２％）として得る。
【０２３９】
１Ｈ−ＮＭＲ（Ｄ２Ｏ）：δ−０．２６（ｓ，４５Ｈ，ＭｅＳｉ），０．１９（ｍ，１８Ｈ，ＳｉＣＨ２），０．３２（ｍ，２４Ｈ，ＳｉＣＨ２），１．１９（ｍ，３０Ｈ，ＣＨ２），１．４５（ｍ，６Ｈ，ＯＣＨ２ＣＨ２），２．０７（ｍ，３６Ｈ，ＣＨ２Ｎ），２．４７（ｍ，２４Ｈ，ＣＨ２ＣＯ），３．５０（ｓ，６Ｈ，ＯＣＨ２），５．７０（ｓ，３Ｈ，Ｃ６Ｈ３）；１３Ｃ−ＮＭＲ｛１Ｈ｝（Ｄ２Ｏ）：δ−４．８（ＭｅＳｉ），−３．５（Ｍｅ２Ｓｉ），１２．８（ＳｉＣＨ２），１３．７（ＳｉＣＨ２），１８．４−２０．２（ＣＨ２），３２．９（ＯＣＨ２ＣＨ２），３４．２（ＣＨ２Ｎ），４９．４（ＣＨ２ＣＯ），５７．０（ＣＨ２Ｎ），６７．１（ＯＣＨ２），９３．７（Ｃ６Ｈ３（ＣＨ），１６０．５（ｉ−Ｃ６Ｈ３），１８１．１（ＣＯ）；２９Ｓｉ−ＮＭＲ（Ｄ２Ｏ）：δ１．６（ＭｅＳｉ）。
【０２４０】
Ｇ２Ｏ３（ＣＯＯＮａ）24（９０）の合成
Ｇ２Ｏ３（ＣＯＯＭｅ）２４（０．３５ｇ、０．０７１ｍｍｏｌ）及びＮａＯＨ（０．０４６ｇ、１．１６ｍｍｏｌ）から、８９の合成について記載された手順に従って、Ｇ２Ｏ３（ＣＯＯＮａ）２４（９０）を白色の固体（０．２９ｇ、８２％）として得る。
【０２４１】
１Ｈ−ＮＭＲ（Ｄ２Ｏ）：δ−０．２１（ｓ，９９Ｈ，ＭｅＳｉ及びＭｅ２Ｓｉ），０．２２（ｍ，３０Ｈ，ＳｉＣＨ２），０．３８（ｍ，７２Ｈ，ＳｉＣＨ２），１．１７（ｍ，６６Ｈ，ＣＨ２），１．５８（ｍ，６Ｈ，ＯＣＨ２ＣＨ２），２．１０（ｍ，４８Ｈ，ＣＨ２Ｎ），２．１９（ｍ，２４Ｈ，ＣＨ２Ｎ），２．５１（ｍ，４８Ｈ，ＣＨ２ＣＯ），３．４２（ｓ，６Ｈ，ＯＣＨ２），５．６４（ｓ，３Ｈ，Ｃ６Ｈ３）；１３Ｃ−ＮＭＲ｛１Ｈ｝（Ｄ２Ｏ）：δ−４．５（ＭｅＳｉ），−３．４（Ｍｅ２Ｓｉ），１３．０（ＳｉＣＨ２），１３．７（ＳｉＣＨ２），１８．４−２０．３（ＣＨ２），３２．９（ＯＣＨ２ＣＨ２），３４．３（ＮＣＨ２），４９．６（ＣＨ２ＣＯ），５７．２（ＮＣＨ２），６７．２（ＯＣＨ２），９３．８（Ｃ６Ｈ３（ＣＨ），１６８．４（ｉ−Ｃ６Ｈ３），１８１．２（ＣＯ）；２９Ｓｉ−ＮＭＲ（Ｄ２Ｏ）：δ１．７（ＭｅＳｉ及びＭｅ２Ｓｉ）。
【０２４２】
Ｇ３Ｏ３（ＣＯＯＮａ）48（９１）の合成
Ｇ３Ｏ３（ＣＯＯＭｅ）48（０．３０ｇ、０．０３０ｍｍｏｌ）及びＮａＯＨ（０．０６９ｇ、１．７４ｍｍｏｌ）から、８９の合成について記載された手順に従って、Ｇ３Ｏ３（ＣＯＯＮａ）48（９１）を白色の固体（０．２４ｇ、７９％）として得る。
【０２４３】
１Ｈ−ＮＭＲ（Ｄ２Ｏ）：δ−０．２１（ｓ．ａ．，２０７Ｈ，ＭｅＳｉ及びＭｅ２Ｓｉ），０．２０−０．４０（ｍ，２２２Ｈ，ＳｉＣＨ２），１．１６（ｍ，１３８Ｈ，ＣＨ２），１．５８（ｍ，６Ｈ，ＯＣＨ２ＣＨ２），２．０９（ｍ，１４４Ｈ，ＣＨ２Ｎ），２．４９（ｍ，９６Ｈ，ＣＨ２ＣＯ），３．４２（ｓ，６Ｈ，ＯＣＨ２），５．６４（ｓ，３Ｈ，Ｃ６Ｈ３）；１３Ｃ−ＮＭＲ｛１Ｈ｝（Ｄ２Ｏ）：δ−４．５（ＭｅＳｉ），−３．４（Ｍｅ２Ｓｉ），１２．９（ＳｉＣＨ２），１８．０−２１．０（ＣＨ２），３４．２（ＮＣＨ２），４９．４（ＣＨ２ＣＯ），５７．２（ＮＣＨ２），１８１．１（ＣＯ），ＯＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２又はＣ６Ｈ３の炭素原子は観測されず。
【０２４４】
Ｇ１Ｏ３（ＳＯ３Ｎａ）12（９２）の合成
Ｈ２Ｏ／ＥｔＯＨ混合物（５ｍＬ／１０ｍＬ）中にＧ１Ｏ３（ＮＨ２）６（０．２５ｇ、０．１８ｍｍｏｌ）及びＣ２Ｈ３ＳＯ３Ｎａ（０．２８ｇ、２．１８ｍｍｏｌ）を含有するテフロン(登録商標)バルブアンプルを、１２０℃で４８時間加熱する。次に揮発物を蒸発し、残渣をＭｅＯＨ（２×１０ｍＬ）、次にＥｔ２Ｏ（２×１５ｍＬ）で洗浄して、Ｇ１Ｏ３（ＳＯ３Ｎａ）１２（９２）を白色の固体（０．３０ｇ、５７％）として得る。
【０２４５】
１Ｈ−ＮＭＲ（Ｄ２Ｏ）：δ−０．１８（ｓ，４５Ｈ，ＭｅＳｉ），０．２６（ｍ，１８Ｈ，ＳｉＣＨ２），０．３９（ｍ，２４Ｈ，ＳｉＣＨ２），１．１９（ｍ，１８Ｈ，ＣＨ２），１．２９（ｍ，１２Ｈ，ＣＨ２），１．４７（ｍ，６Ｈ，ＯＣＨ２ＣＨ２），２．２６（ｍ，１２Ｈ，ＣＨ２Ｎ），２．７７（ｍ，２４Ｈ，ＣＨ２Ｎ），２．８６（ｍ，２４Ｈ，ＣＨ２Ｓ），３．５９（ｓ，６Ｈ，ＯＣＨ２），５．７８（ｓ，３Ｈ，Ｃ６Ｈ３）；１３Ｃ−ＮＭＲ｛１Ｈ｝（Ｄ２Ｏ）：δ−４．８（ＭｅＳｉ），−３．５（Ｍｅ２Ｓｉ），１２．７（ＳｉＣＨ２），１３．７（ＳｉＣＨ２），１８．４，１９．９及び２０．２（ＣＨ２），３２．７（ＯＣＨ２ＣＨ２），４７．１（ＣＨ２Ｓ），４７．８（ＣＨ２Ｎ），５７．１（ＣＨ２Ｎ），６７．２（ＯＣＨ２），９３．７（Ｃ６Ｈ３（ＣＨ），１６０．６（ｉ−Ｃ６Ｈ３）；２９Ｓｉ−ＮＭＲ（Ｄ２Ｏ）：δ１．９（ＭｅＳｉ）。
【０２４６】
Ｇ２Ｏ３（ＳＯ３Ｎａ）24（９３）の合成
Ｇ２Ｏ３（ＮＨ２）１２（０．２０ｇ、０．０７１ｍｍｏｌ）及びＣ２Ｈ３ＳＯ３Ｎａ（０．１３ｇ、０．９７ｍｍｏｌ）から、９２の合成について記載された手順に従って、Ｇ２Ｏ３（ＳＯ３Ｎａ）２４（９３）を白色の固体（０．２５ｇ、６０％）として得る。
【０２４７】
１Ｈ−ＮＭＲ（Ｄ２Ｏ）：δ−０．１８（ｓ，９９Ｈ，ＭｅＳｉ及びＭｅ２Ｓｉ），０．２６（ｍ，３０Ｈ，ＳｉＣＨ２），０．４１（ｍ，７２Ｈ，ＳｉＣＨ２），１．２５（ｍ，６６Ｈ，ＣＨ２），１．６０（ｍ，６Ｈ，ＯＣＨ２ＣＨ２），２．２７（ｍ，２４Ｈ，ＣＨ２Ｎ），２．７５（ｍ，４８Ｈ，ＣＨ２Ｎ），２．８６（ｍ，４８Ｈ，ＣＨ２Ｓ），３．４５（ｓ，６Ｈ，ＯＣＨ２），５．７８（ｓ，３Ｈ，Ｃ６Ｈ３）；１３Ｃ−ＮＭＲ｛１Ｈ｝（Ｄ２Ｏ）：δ−４．６（ＭｅＳｉ），−３．４（Ｍｅ２Ｓｉ），１２．７（ＳｉＣＨ２），１３．７（ＳｉＣＨ２），１８．５−２０．５（ＣＨ２），３３．０（ＯＣＨ２ＣＨ２），４７．０（ＮＣＨ２），４７．９（ＣＨ２Ｓ），５７．２（ＮＣＨ２），６６．８（ＯＣＨ２），９３．６（Ｃ６Ｈ３（ＣＨ），１６０．６（ｉ−Ｃ６Ｈ３）；２９Ｓｉ−ＮＭＲ（Ｄ２Ｏ）：δ１．９（ＭｅＳｉ及びＭｅ２Ｓｉ）。
【０２４８】
Ｇ３Ｏ３（ＳＯ３Ｎａ）48（９４）の合成
Ｇ３Ｏ３（ＮＨ２）24（０．２０ｇ、０．０３５ｍｍｏｌ）及びＣ２Ｈ３ＳＯ３Ｎａ（０．１２ｇ、０．９２ｍｍｏｌ）から、９２の合成について記載された手順に従って、Ｇ３Ｏ３（ＳＯ３Ｎａ）48（９３）を白色の固体（０．２６ｇ、６３％）として得る。
【０２４９】
１Ｈ−ＮＭＲ（Ｄ２Ｏ）：δ−０．１３（ｓ．ａ．，２０７Ｈ，ＭｅＳｉ及びＭｅ２Ｓｉ），０．４１（ｓ．ａ．，２２２Ｈ，ＳｉＣＨ２），１．１５−１．６０（ｓ．ａ．，１４４Ｈ，ＣＨ２），２．４０（ｓ．ａ．，４８Ｈ，ＣＨ２Ｎ），２．９０（ｓ．ａ．，１９２Ｈ，ＣＨ２Ｎ及びＣＨ２Ｓ），ＯＣＨ２及びＣ６Ｈ３に対応するものは観察されず）；１３Ｃ−ＮＭＲ｛１Ｈ｝（Ｄ２Ｏ）：δ−４．４（ＭｅＳｉ），−３．３（Ｍｅ２Ｓｉ），１２．５（ＳｉＣＨ２），１８．０−２１．０（ＣＨ２），４６．７（ＮＣＨ２），４８．５（ＣＨ２Ｓ），５７．２（ＮＣＨ２），ＯＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２又はＣ６Ｈ３の炭素原子は観察されず。
【０２５０】
実施例３：本発明のデンドリマーの生物学的活性
下記は、異なる生理学的個体群（末梢血単核細胞、赤血球、マクロファージ及び樹状細胞）、並びに細菌培養での異なる細胞株（膣及びリンパ系）における、本発明により合成された新たなアニオン性デンドリマーの細胞毒性、分裂促進性及び殺微生物性／静微生物性の評価である。
【０２５１】
材料及び方法
１．細胞
ヒト子宮内膜癌細胞（ＨＥＣ−１Ａ）：ヒト子宮内膜腺癌から誘導したヒト子宮内膜細胞株を、Ａｍｅｒｉｃａｎ  Ｔｙｐｅ  Ｃｕｌｔｕｒｅ  Ｃｏｌｌｅｃｔｉｏｎ（ＡＴＣＣ）から得た。ＨＥＣ−１Ａを、０．４ミクロン孔のポリカーボネート透過性支持体（Ｃｏｓｔａｒ，Ｃａｍｂｒｉｄｇｅ，ＭＡ）を有する完全培地〔１０％ウシ胎仔血清（ＳＦＴ）、２ｍＭのＬ−グルタミン及び抗生物質（１％のクロキサシリン、１％のアンピリシン及び０．３２％のゲンタマイシン）を補充したＲＰＭＩ１６４０（Ｇｉｂｃｏ）〕プレート２４又は９６ウエル若しくは１２ウエルのトランスウエルプレートにおいて培養条件（５％のＣＯ２及び９５％の相対湿度の雰囲気下で３７℃）で維持した。
【０２５２】
末梢血単核細胞（ＰＢＭＣ）：末梢血はＴｒａｎｓｆｕｓｉｏｎ  Ｃｅｎｔｒｅ  ｏｆ  Ｍａｄｒｉｄにおいて健康な提供者の軟膜から得た。この血液を、リン酸緩衝食塩水６．７ｍＭ（ＰＢＳ、Ｂｉｏ−Ｗｈｉｔｔａｋｅｒ（登録商標））で１／２に希釈し、密度勾配遠心法（Ｆｉｃｏｌｌ−Ｉｓｏｐａｑｕｅ（登録商標））に進む。この遠心法に続いて、ＰＢＭＣを含有するハロを回収し、ＰＢＳによる２サイクル洗浄遠心法（１５００ｒｐｍで１０分間）に進む。得られたＰＢＭＣを完全培地に培養条件で再懸濁した。
【０２５３】
ＭＴ−２：ヒトＴ細胞白血病ウイルス１型（ＨＴＬＶ−１）により変換された細胞株。Ａｍｅｒｉｃａｎ  Ｔｙｐｅ  Ｃｕｌｔｕｒｅ  Ｃｏｌｌｅｃｔｉｏｎ（ＡＴＣＣ）から得た。異なるプレートフォーマット（６、２４又は９６ウエル）及び培養条件により完全培地で培養した。
【０２５４】
樹状細胞（ＤＣ）：本発明者たちは、前記に記載した密度勾配によりＰＢＭＣの分離を実施した。単球は、分離カラム（ＭＡＣＳ（登録商標）、Ｍｉｌｔｅｎｙｉ  Ｂｉｏｔｅｃ，Ｇｅｒｍａｎｙ）による、抗ヒトモノクローナル抗体ＣＤ１４（ＭｉｃｒｏＢｅａｄｓ）を用いた免疫磁気分離法によって得た。精製単球を、２＊１０６細胞／ウエルの濃度により、６ウエルの平底プレートの完全培地に最終容量の３ｍＬで懸濁した。細胞を、５０ｎｇ／ｍｌのｒｈ  ＧＭ−ＣＳＦ及び２０ｎｇ／ｍｌのｒｈ  ＩＬ−４（ＩｍｍｕｎｏＴｏｏｌｓ，Ｇｅｒｍａｎｙ）と共に培養条件下で培養した。新たな完全培地の半分のポットを、５０ｎｇ／ｍｌのｒｈ  ＧＭ−ＣＳＦ及び２０ｎｇ／ｍｌのｒｈ  ＩＬ−４と共に、３日目に未熟細胞に加えた（ＣＤｉ）。６日目の成熟細胞を２０ｎｇ／ｍｌのＬＰＳ（Ｓｉｇｍａ）で２日間処理した（ＣＤＭ）。ＣＤｉ及びＣＤＭマーカーを、Ｂｅｃｋｍａｎ−Ｃｏｕｌｔｅｒ血球計算機（登録商標）４色を使用して分析し、Ｂｅｃｋｍａｎ−Ｃｏｕｌｔｅｒ（登録商標）用のＥＰＩＣＳ（登録商標）ソフトウエアを使用した。
【０２５５】
マクロファージ：ＰＢＭＣの分離は、前記に記載した密度勾配及び抗ヒトモノクローナル抗体ＣＤ１４（ＭｉｃｒｏＢｅａｄｓ）を用いる免疫磁気分離法により実施した。精製単球を、２＊１０６細胞／ウエルの濃度により、６ウエルの平底プレートに、１０％ヒト血清ＡＢ、２ｍＭのＬ−グルタミン及び抗生物質（１％のクロキサシリン、１％のアンピリシン及び０．３２％のゲンタマイシン）を補充したＲＰＭＩ１６４０（Ｇｉｂｃｏ）に最終容量の３ｍＬで再懸濁した。細胞を５０ｎｇ／ｍｌのｒｈ  Ｍ−ＣＳＦと共に培養し、新たな培地を、５０ｎｇ／ｍｌのｒｈ  Ｍ−ＣＳＦと共に３日後に加えた。７日目に、マクロファージマーカーを、Ｂｅｃｋｍａｎ−Ｃｏｕｌｔｅｒ血球計算機（登録商標）４色を使用して分析し、Ｂｅｃｋｍａｎ−Ｃｏｕｌｔｅｒ（登録商標）用のＥＰＩＣＳ（登録商標）ソフトウエアを使用した。
【０２５６】
Ｔ細胞株Ｊｕｒｋａｔ  Ｅ６クローン（ＡＴＣＣ、リンパ球細胞株）を、熱不活性化した５％ウシ胎仔血清（ＦＣＳ）、１％のペニシリン／ストレプトマイシン及び２ｍＭのＬ−グルタミン（ＩＣＮ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｓ，Ｃｏｓｔａ  Ｍｅｓａ，ＣＡ，ＵＳＡ）を補充したＲＰＭＩ１６４０（Ｂｉｏｃｈｒｏｍ  ＫＧ  Ｓｅｒｏｍｅｄ，Ｂｅｒｌｉｎ，Ｇｅｒｍａｎｙ）において、３７℃及び５％ＣＯ２の雰囲気下で日常的に増殖させた。
【０２５７】
２．デンドリマー
スルホネート末端基（Ｇ１ＳＦ８、Ｇ２ＳＦ１６及びＧ３ＳＦ３２）並びにカルボキシレート末端基（Ｇ１ＣＯＯ８、Ｇ２ＣＯＯ１６、Ｇ３ＣＯＯ３２）を有するカルボシランデンドリマーはの合成は、前記セクションに記載された（１５頁〜１９頁を参照すること）。デンドリマー及びＧ２ＣＫＰ３２、Ｇ２ＣＫＣＯＯ１６に加えて（２１頁〜２３頁を参照すること）。
【０２５８】
デンドリマーＧ１ＳＦ８、Ｇ２ＳＦ１６、Ｇ３ＳＦ３２は、デンドリマーＧ０−［Ｓｉ（ＣＨ２）３Ｎ（ＣＨ２ＣＨ２ＳＯ３Ｎａ）２］４  ｎ＝０及びｘ＝４（１８）；Ｇ１−［Ｓｉ（ＣＨ２）３Ｎ（ＣＨ２ＣＨ２ＳＯ３Ｎａ）２］８  ｎ＝１及びｘ＝８（１９）；Ｇ２−［Ｓｉ（ＣＨ２）３Ｎ（ＣＨ２ＣＨ２ＳＯ３Ｎａ）２］１６  ｎ＝２及びｘ＝１６（２０）にそれぞれ対応し、これらの合成及び特徴決定は、前記セクションに記載されている。同じ形態で、デンドリマーＧ１ＣＯＯ８、Ｇ３ＣＯＯ３２、Ｇ２ＣＯＯ１６は、デンドリマーＧ０−［Ｓｉ（ＣＨ２）３Ｎ（ＣＨ２ＣＨ２ＣＯＯＮａ）２］４  ｎ＝０及びｘ＝４（１０）；Ｇ１−［Ｓｉ（ＣＨ２）３Ｎ（ＣＨ２ＣＨ２ＣＯＯＮａ）２］８  ｎ＝１及びｘ＝８（１１）；Ｇ２−［Ｓｉ（ＣＨ２）３Ｎ（ＣＨ２ＣＨ２ＣＯＯＮａ）２］１６  ｎ＝２及びｘ＝１６（１２）にそれぞれ対応する。同じように、Ｇ２ＣＫＣＯＯ１６及びＧ２ＣＫＰ３２デンドリマーは、ｃｋ−Ｇ１−［Ｓｉ（ＣＨ２）４（Ｎ３Ｃ２Ｈ）ＣＨ２Ｎ（ＣＨ２ＣＨ２ＣＯＯＮａ）２］８（４３）及びｃｋ−Ｇ１−［Ｓｉ（ＣＨ２）４（Ｎ３Ｃ２Ｈ）ＣＨ２Ｎ（ＣＨ２ＰＯ（ＯＭｅ）２）２］８（５１）にそれぞれ対応する。
【０２５９】
スルホネート末端基を有するカルボシランデンドリマー（Ｇ１Ｏ３ＳＦ１２、Ｇ２Ｏ３ＳＦ２４及びＧ２Ｏ３ＳＦ４８）の合成は、前記にセクションに記載された。これらのデンドリマーＧ１Ｏ３ＳＦ１２、Ｇ２Ｏ３ＳＦ４８及びＧ２Ｏ３ＳＦ２４は、１２、２４及び４８個の末端スルホネート基を有するＧ１Ｏ３（ＳＯ３Ｎａ）１２（９２）、Ｇ２Ｏ３（ＳＯ３Ｎａ）２４（９３）及びＧ３Ｏ３（ＳＯ３Ｎａ）４８（９４）に対応する。
【０２６０】
本発明のこのパートのこの新たな命名法は、生物医学研究においてこれらのデンドリマーを表すことを簡素化し、結果についてのこの考察の追跡を促進すると考慮される。
【化４０】
2013519711.tif 000043
2013519711.tif 000044
2013519711.tif 000045
【０２６１】
３．毒性の評価
異なる技術を使用して、異なる局面における生存率を試験した：膜破裂（トリパンブルー染色及びＬＤＨアッセイ）、ミトコンドリア活性（ＭＴＴ試薬）、並びに細胞繁殖（ＢｒｄＵ組み込み）の試験。これらの技術を、ＨＥＣ−１Ａ及びヒトＰＢＭＣにおけるデンドリマー世代の毒性を研究するために適用した。加えて、ヒト赤血球に対するデンドリマーの毒性を、赤血球凝集及び溶血の存在についての試験を使用して研究した。
【０２６２】
３．１．トリパンブルーによる染色
トリパンブルー（Ｓｉｇｍａ（登録商標））により０．８％の溶液を調製した。デンドリマーで処理した細胞を遠心分離し、上澄みを廃棄し、再懸濁した後、細胞ペレットをトリパンブルー溶液で３０秒間処理し、次に細胞ペレットを遠心分離し、ＰＢＳで２回洗浄した。細胞を光学顕微鏡法により観察し、陰性細胞（生存細胞）の率に対するトリパンブルーの存在（青色細胞、死滅）を陽性として数えた。本発明者たちは、毎回少なくとも１００細胞の大きな領域を選択した。
【０２６３】
３．２．ＭＴＴアッセイ
この方法は、ミトコンドリア及び代謝活性に対する細胞内における有害な影響を分析するために選択された。生存細胞がＭＴＴを紫色のホフマザンに還元する選択的能力に基づいた比色ＭＴＴ試験は、無傷の代謝活性に依存しており、細胞毒性スクリーニングに頻繁に使用される。異なる細胞を異なる濃度のデンドリマーと９６ウエルプレート（それぞれ１００，０００細胞／ウエル）及び細胞不活性の陽性対照として３つのウエル〔２０％のジメチルスルホキシド（ＤＭＳＯ、Ｓｉｇｍａ（登録商標））〕において望ましい時間インキュベートした後、デンドリマーを含有する上澄みを除去し、血清又はフェノールレッド（Ｏｐｔｉ−ＭＥＭ（登録商標））を有さない２００ｍＬの培地に代えた。２００μＬのＯｐｔｉ−ＭＥＭ（登録商標）に加えて、無菌を達成するために（チアゾリルブルー、Ｓｉｇｍａ（登録商標））予め濾過した２０ｍＬのＭＴＴを、５ｍｇ／ｍＬの濃度でＰＢＳに加えた（最終濃度０．５ウエルｍｇＭＴＴ／ｍＬ）。培養条件下で４時間のインキュベートした後、続けてプレートを２０００ｒｐｍで１０分間遠心分離し、その後に過剰量の未反応ＭＴＴで上澄みを除去した。次にホルマザンの濃度を、５７０ｎｍ（試験）及び６９０ｎｍ（基準）の波長でプレート読み取り機により分光光度的に決定した。分光光度計を、細胞を有さないＯｐｔｉｍｅｍ培地を使用してゼロ吸光度に較正した。対照ウエル（デンドリマーのない細胞）に対する細胞生存率を、（［Ａ］試験／［Ａ］対照）Ｔ１００により計算した。それぞれのデンドリマーの濃度を、Ａｍｅｒｉｃａｎ  Ｔｙｐｅ  Ｃｕｌｔｕｒｅ  Ｃｏｌｌｅｃｔｉｏｎ（ＡＴＣＣ）指針に従って三重に試験した。
【０２６４】
３．３．ＬＤＨアッセイ
この技術（ＣｙｔｏＴｏｘ  ９６（登録商標）非放射性細胞毒性アッセイ）を使用して、デンドリマーのアニオン性周辺基の存在に起因する細胞膜表面の損傷を試験した。ラクテートデヒドロゲナーゼ（ＬＤＨ）は、細胞溶解に起因して細胞質に放出される酵素である。したがってＬＤＨアッセイは、膜の完全性の測度であり、ＬＤＨを酸化してピルビン酸塩にすること及びピルビン酸塩によりテトラゾリウム塩をホルマザン結晶に還元することに基づいている。
【０２６５】
１＊１０５細胞／ウエルを丸底９６ウエルプレートに１００μＬの完全培地の容量で分配し、デンドリマーを１００μＬの容量で加え、最終容量の２００μＬをウエルにおいて得た。対照：１．２００μＬの、細胞を有さない完全培地（バックグラウンド対照）、２．１００μＬの細胞＋１００μＬの完全培地、３．１００μＬの細胞＋１００μＬの０．２％のＴｒｉｔｏｎ  Ｘ−１００、４．１００μＬの細胞＋１００μＬの所望の濃度のデンドリマー。培養条件で最初の２４時間インキュベートする。
【０２６６】
プレートを１５００ｒｐｍで１０分間遠心分離し、細胞を取らないように注意しながら１００μＬの上澄みを取り出した。調製した１００μＬの反応混合物に、この時点で１００μＬの上澄みを加え、暗黒中、室温で３０分間インキュベートした。最後に、４９０ｎｍ及び６９０ｎｍ（基準）で測定した。細胞毒性を、次の式：細胞毒性（％）＝（４−２）／（３−２）＊１００から得た。
【０２６７】
３．４．溶血試験
赤血球を、前記に記載したものと同じ形態のＦｉｃｏｌｌ勾配によりＰＢＭＣから分離した。これらを個別に見ることができるまでＰＢＳで適切に希釈した。次に赤血球を５００ＬのＰＢＳに再懸濁し、２４ウエルプレート（３００，０００個／ウエル）で培養した。陽性対照として、細胞を０．２％のＴｒｉｔｏｎ  Ｘ−１００で処理した。陰性対照：細胞をＰＢＳのみで処理した。ＲＢＣを異なる濃度のデンドリマーと共にインキュベートした。本発明者たちは、１００μＬの上澄みを収集することにより、その時点での赤血球凝集、細胞数及びヘモグロビン放出の存在、並びにプレート読み取り機を使用した分光光度計による吸光度の測定を評価した。
【０２６８】
４．リンパ球増殖性の試験
デンドリマーの分裂促進性を評価するために、細胞繁殖アッセイを実施した。実験は、平底９６ウエル（２００μＬの完全培地において１ウエルあたり１００，０００細胞）により三重に準備した。実験には、繁殖の陰性対照（未処理細胞）、異なる濃度のデンドリマーで処理したウエル及び２ｍｇ／ｍＬのフィトヘマグルチニン（ＰＨＡ）で処理した繁殖の陽性対照が含まれた。培養条件下で４日間インキュベートした後、上澄みの除去に進み、試料を細胞キット繁殖ＢｒｄＵ（Ｂｒｏｍｏｄｅｏｘｙｕｒｉｄｉｎｅ  Ｃｅｌｌ  Ｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｏｎ  Ａｓｓａｙ，Ｃｈｅｍｉｃｏｎ  Ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ）で調製した。キットプロトコールに示されように実施して、新たに合成されたＤＮＡへのＢｒｄＵの組み込みを得た。ＢｒｄＵの組み込みが大きいほど、細胞繁殖が増大した。
【０２６９】
５．−ＨＩＶの阻害アッセイ
５．１．Ｘ４  ＨＩＶ−１ＮＬ４−３菌株の調製
単離されたウイルスＸ４  ＨＩＶ−１ＮＬ４−３は、実験室ウイルス標準菌株であり、ＭＴ−２細胞をウイルス拡散に使用した。２×１０６ＭＴ−２細胞を洗浄し、完全培地中の２×１０６細胞／ｍＬの濃度で１５ｍＬの円錐管に移した。次に、ＨＩＶ−１ＮＬ４−３を、細胞１個あたり１つの粒子の濃度又は同じことであるが１Ｍ．Ｏ．Ｉ（感染多重度）で加えた。ＭＴ−２細胞をウイルスと共に、１５〜３０分毎に振とうしながら、培養条件下で２時間培養した。最後に、細胞培養（細胞−ウイルス）を２回洗浄して、細胞ゲノムに組み込まれていないウイルスを除去した。細胞を３〜４ｍＬの容量でｐ６ウエルに移し、２〜３日間かけて培養し、ウエルにおけるシンシチウムの存在を観察した。シンシチウムの存在が産生の８０〜９０％に達したとき、２０＊１０６ＭＴ−２を含有する１２ｍLの完全培地を加え、ペトリ皿に分配した。２〜３日後、容量を遠心分離し、上澄みを収集した。２０＊１０６ＭＴ−２を有する１２ｍLの完全培地を、前記の細胞（感染ＭＴ−２）に加え、ペトリ皿に分配した。この過程を３回まで繰り返した。上澄みを取り出し、液体窒素タンクに保存し、後に滴定した。
【０２７０】
５．２．Ｒ５  ＨＩＶ−１Ｂａ−Ｌ菌株の調製
単離されたウイルスＲ５  ＨＩＶ−１Ｂａ−Ｌは、実験室ウイルス標準菌株であり、ウイルス拡散の過程は、ＨＩＶ−１ＮＬ４−３と同様の方法で実施したが、この場合、刺激ＰＢＭＣは感染された。上澄みを取り出し、液体窒素タンクに保存し、後に滴定した。
【０２７１】
５．３．ウイルス滴定
単離されたＨＩＶ−１ＮＬ４−３及びＨＩＶ−２ＣＢＬ２３を、ＭＴ−２細胞株に滴定した。２×１０４ＭＴ−２細胞を９６ウエルプレートにおいて完全培地で培養し、４０μＬのウイルス調製物を、適切な希釈を使用して異なる濃度で加えた。希釈を８部作り、培養条件下で１週間維持した。その後、細胞変性効果の可視化により滴定値を得た。滴定は、Ｓｐｅａｒｍａｎ−Ｋａｒｂｅｒ方程式を当てはめることにより計算した。また、滴定をｐ２４タンパク質酵素免疫測定法（ＥＬＩＳＡ  ｐ２４．ＩＮＮＯＴＥＳＴ（商標）ＨＩＶ抗原ｍＡＢ，Ｉｎｎｏｇｅｎｅｔｉｃｓ（登録商標））により定量化し、ウイルス１ｍＬ及び１μｇのあたりの粒子をｍＬで確立した。ＨＩＶ−１Ｂａ−Ｌ単離ウイルスを、ＥＬＩＳＡ試験におけるｐ２４タンパク質定量化により滴定した。ウイルス純度を確実にするため、解凍アリコートを、定量化の前に０．２２μｍフィルターで濾過した。
【０２７２】
５．４．異なる細胞個体群のインビトロ感染
ＰＢＭＣを２μｇ／ｍＬのＰＨＡ及び５０ＵＩのＩＬ−２で４８時間刺激して、ポリクローナル活性を誘発した。その後、細胞をＰＢＳで洗浄した。所望の濃度の細胞を所望の数のＨＩＶ粒子と共に、完全培地において培養条件下で２時間インキュベートした。この時間の後、細胞培養の細胞を収集し、ＰＢＳで３回洗浄して、細胞ゲノムに組み込まれていないウイルスを排除し、その後、２４ウエル又は９６ウエルプレート（試験に応じて）において、５０ＩＵ／ｍＬのＩＬ−２を有する完全培地に入れた。ＭＴ−２、ＨＥＣ−１Ａ、ＩＬＣ、ＣＤｍ及びマクロファージを、実験当日に収集し、ＨＩＶにより、試験に応じて２又は３時間感染する前にＰＢＳで２回洗浄した。
【０２７３】
５．５．付着／内部移行アッセイ
これらの試験では、コンフルエントＨＥＣ−１Ａを２４ウエルプレートで使用した。３＊１０５細胞を５００μＬの完全培地のウエルで３日間培養した。付着アッセイでは、細胞を、ＨＩＶ−１ＮＬ４−３で感染する２時間及び１時間３０分前にデントリマーで前処理した。次に、各ウエルをＨＩＶ−１ＮＬ４−３で３時間感染した。その後、単層をＰＢＳで３回洗浄し、培養条件下で放置した。２４時間及び７２時間後、上澄みをＥＬＩＳＡによりｐ２４抗原で定量化した。内部移行アッセイについて、初期手順は前記に特定された。感染の３時間後、単層をＰＢＳで３回洗浄し、細胞溶解を、０．２％のＴｒｉｔｏｎ  ｘ−１００の３７℃での４５分間の添加により誘発した。上澄みを収集して、ＥＬＩＳＡによりｐ２４抗原で定量化した。
【０２７４】
５．６．カルボシランデンドリマーの作用機構
この実験には、ウエルの底部を覆うＰｏｌｉ−Ｌ−ｌｙｓｉｎｅ（ＰＬＬ，Ｓｉｇｍａ（登録商標））を有する平底の９６ウエルプレートを使用した。このために、５０ｕＬのＰＬＬを３７℃で１時間インキュベートした。ウエルをＰＢＳで３回洗浄した後、４ｎｇのＨＩＶを４℃で一晩インキュベートして、ウイルス粒子がウエルの底に付着することを確実にした。各ウエルをＰＢＳで３回洗浄して、プレートに付着しなかったＨＩＶを除去し、次に各ウエルを異なる濃度のデンドリマーで１時間処理した。その後、産物をＰＢＳで洗浄することが必要であり、予め刺激したＰＢＭＣを加えた。この細胞培養の上澄みを４日後に回収し、ＥＬＩＳＡによりｐ２４抗原で定量化して、異なる処理においてＰＢＭＣにより産生されたＨＩＶの量を評価した。ウイルス粒子の溶解の陽性対照として、Ｔｒｉｔｏｎ  ｘ−１００（１％）を使用した。
【０２７５】
５．７．ＨＥＣ−１Ａ単層
極性化上皮細胞の完全単層を得るために、ＨＥＣ−１Ａを、０．４μｍ孔の透過性ポリカーボネート支持体（Ｃｏｓｔａｒ，Ｃａｍｂｒｉｄｇｅ，ＭＡ）における完全培地で増殖させた。次に、１ウエルあたり２＊１０５細胞を７日間培養し、培地を２〜３日毎に交換した。デンドリマーを感染の１時間前に加えた。ウイルス粒子を単層の上側チャンバーに加えた後（１００ｎｇ）、上澄みを２４／４８時間後に下側チャンバーから収集した。ウイルス濃度をＥＬＩＳＡにより定量化した。
【０２７６】
５．８．ＰＢＭＣ前処理
本発明者たちは、ｐ９６プレートの丸底ウエルにおける２００μＬの完全培地に分配した２＊１０５刺激ＰＢＭＣ細胞を使用した。前処理実験では、５０ｎｇのＨＩＶ−１ＮＬ４−３を、感染の１時間前にデンドリマーで処理し、次に細胞を培養条件下で３時間感染させた。この時間の後、ウエルをＰＢＳで２回洗浄し、培養条件下でインキュベートした。３日後のウイルス濃度を、ＥＬＩＳＡのｐ２４により定量化した。
【０２７７】
５．９．ＣＤｉ、ＣＤｍ及びマクロファージ前処理
細胞が分化したら、ＰＢＳで２回洗浄し、２＊１０５ＣＤｉ、２＊１０５ＣＤｍ及び１０５マクロファージを、底のｐ９６ウエルにおける２００ｕＬの完全培地に分配した。デンドリマーを感染の１時間前に加えた。ウイルス粒子（５０ｎｇ）を加えた後、培養条件下でインキュベートし、３時間後、上澄みを取り出し、ＰＢＳで４回洗浄した。上澄みを４日後に収集した。ウイルス濃度をＥＬＩＳＡにより定量化した。
【０２７８】
６．カルボシラノデンドリマーの殺菌／静菌効果
黄色ブドウ球菌の菌株及び培養条件
ＦＤＡ２０９（ＡＴＣＣ６５３８）菌株を使用して、殺菌剤としてのデンドリマーの能力を研究した。細菌を、それぞれの実験の前に、Ｍｕｅｌｌｅｒ  Ｈｉｎｔｏｎ寒天プレート（Ｓｉｇｍａ（商標））において３７℃で一晩増殖させた。
【０２７９】
バイオマスの実験：実験の当日、黄色ブドウ球菌のコロニーを１５ｍＬのＭｕｅｌｌｅｒ  Ｈｉｎｔｏｎ培地で５時間増殖させた。この時間の後、黄色ブドウ球菌の数を数え、１０５個の黄色ブドウ球菌を点で接種した（Ｕ底の９６ウエルプレートにおける１００μＬのＭｕｅｌｌｅｒ  Ｈｉｎｔｏｎ培地）。１つの点あたり総量が２００μＬまでのデンドリマーの段階希釈を加えた。アンピシリン（Ｇｏｂｅｍｉｃｉｎａ（登録商標）、Ｎｏｒｍｏｎ  ｌａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓ）を陽性対照殺菌剤として使用した。デンドリマー処理の２４時間後に形成されたバイオマスの量を、プレート読み取り機により分光光度的に定量化した（Ｂｉｏｗｈｉｔｔａｋｅｒｍｉｃｒｏｐｌａｔｅ読み取り機２００１，Ｉｎｎｏｇｅｎｅｔｉｃｓ（登録商標）λ＝５５０ｎｍ）。
【０２８０】
繁殖の実験：デンドリマーの存在下での黄色ブドウ球菌の繁殖を評価するために、細胞繁殖キットを、処理の２４時間後に使用した（Ｂｒｏｍｏｄｅｏｘｙｕｒｉｄｉｎｅ  Ｃｅｌｌ  Ｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｏｎ  Ａｓｓａｙ，Ｃｈｅｍｉｃｏｎ  Ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ．Ｂｉｏｗｈｉｔｔａｋｅｒｍｉｃｒｏｐｌａｔｅ読み取り機２００１，Ｉｎｎｏｇｅｎｅｔｉｃｓ（登録商標）λ＝４５０及び基準λ＝５５０ｎｍ）。細胞の数、デンドリマー処理及び曝露時間がバイオマス実験において記載される。
【０２８１】
鵞口瘡カンジダの菌株及び培養条件
単離された臨床用ＳＣ５３１４（ＡＴＣＣ  ＭＹＡ−２８７６）を使用して、殺真菌剤としてのデンドリマーの能力を研究した。酵母菌を、それぞれの実験の前に、ＹＥＤ寒天プレート（１％のｄ−グルコース、１％のＤｉｆｃｏ酵母菌抽出物（ＢＤ  Ｄｉａｇｎｏｓｔｉｃ  Ｓｙｓｔｅｍｓ，ＵＳＡ）及び２％の寒天）において３０℃で一晩増殖させた。
【０２８２】
バイオマスの実験：実験の当日に、酵母菌から単離されたコロニーを１５ｍＬのＹＥＤ寒天培地で５時間増殖させた。この時間の後、鵞口瘡カンジダの数を数え、１０５個を点により接種した（Ｕ底９６ウエルのＹＥＤ寒天プレートの１００μＬの培地）。評価デンドリマーの段階希釈を１つの点あたり２００μＬの総量で加えた。アンフォテリシンＢ（Ｄｕｃｈｅｆａ  Ｂｉｏｃｈｅｍｉｅ）を殺真菌剤の陽性対照として使用した。デンドリマー処理の２４時間後に形成されたバイオマスの量を、プレート読み取り機により分光光度的に定量化した（Ｂｉｏｗｈｉｔｔａｋｅｒｍｉｃｒｏｐｌａｔｅ読み取り機２００１，Ｉｎｎｏｇｅｎｅｔｉｃｓ（登録商標）λ＝５５０ｎｍ）。
【０２８３】
繁殖の実験：デンドリマーの存在下での鵞口瘡カンジダの繁殖を評価するため、細胞繁殖キットを、２４時間の処理が完了した後、３時間使用し（Ｂｒｏｍｏｄｅｏｘｙｕｒｉｄｉｎｅ  Ｃｅｌｌ  Ｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｏｎ  Ａｓｓａｙ，Ｃｈｅｍｉｃｏｎ  Ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ．Ｂｉｏｗｈｉｔｔａｋｅｒｍｉｃｒｏｐｌａｔｅ読み取り機２００１，Ｉｎｎｏｇｅｎｅｔｉｃｓ（登録商標）、λ＝４５０及び基準λ＝５５０ｎｍ）、この方法により、新たに合成されたＤＮＡへのＢｒｄＵの組み込みを研究した。細胞の数、デンドリマー処理及び曝露時間がバイオマス実験において記載される。
【０２８４】
７．カルボシランデンドリマーの抗炎症効果 
炎症実験：実験は、プロモーターの部位ＮＦ−κＢの３つのコピーを縦列で含有するプラスミドインジケーターのｐＴＮＦ−ｌｕｃ及びｐＮＦ−κＢ−ｌｕｃを使用して、一過性形質移入を実施した。Ｊｕｒｋａｔ細胞株を、市販のハウスプロトコール「細胞株ヌクレオフェクターキットＶ」及びＸ−００５に使用される特定のプログラムに従って、ＡＭＡＸＡヌクレオフェクターでヌクレオフェクトした。形質移入細胞を、グラフに現れた異なる刺激物質（ＴＮＦ−アルファ、抗体モノクローナル抗ＴＮＦ−アルファ及び異なる濃度（５及び１０マイクロモル）のアニオン性スホネートデンドリマー）により１６時間刺激した。異なる処理の後、形質移入細胞を遠心分離により収集し、製造会社の推奨に従って市販のタンポン溶解「Ｄｕａｌ−ｌｕｃｉｆｅｒａｓｅ  Ａｓｓａｙ  Ｓｙｓｔｅｍ  Ｋｉｔ」（Ｐｒｏｍｅｇａ）により溶解した。５μｌの溶解細胞におけるタンパク質の量を、ＢＳＡ−ＢＣＡ（Ｐｉｅｒｃｅ，Ｒｏｃｋｆｏｒｄ，ＵＳＡ）の方法により測定した。定量化すると、全ての試料の値を２０マイクログラムに規準化して、照度計１４５０  Ｍｉｃｒｏｂｅｔａ  Ｌｕｍｉｎｉｓｃｅｎｃｅ  Ｃｏｕｎｔｅｒ（Ｗａｌａｘ，Ｔｒｉｌｕｘ）によりルシフェラーゼ活性を約１０秒間測定した。ホタルのルシフェラーゼ活性値を、細胞対照に対する誘発として表す。
【０２８５】
７．１．ＴＮＦ−アルファによる形質移入実験（炎症誘発性サイトカイン）。ｐＴＮＦ−アルファで形質移入したＪｕｒｋａｔ  Ｅ６クローン細胞を、ＴＮＦ転写活性阻害の陽性対照としてモノクローナル抗体抗ＴＮＦで処理した。スルホネートデンドリマーは、ｐＴＮＦ−ｌｕｃプラスミドのプロモーター活性を５及び１０マイクロモル用量で低減することができた（３つの独立した実験において刺激しなかった細胞の制御に対して２〜３倍低い）。アニオン性デンドリマーは、ＴＮＦ−アルファの転写活性を減少する。
【０２８６】
７．２．プラスミドｐＮＦ−ｋＢ−ｌｕｃの形質移入実験。Ｊｕｒｋａｔ細胞をｐＮＦ−ｋＢ−ｌｕｃプラスミドで形質移入し、スルホネート（１０マイクロモル）の存在下で１６時間培養し、ルシフェラーゼ活性を測定した。ＴＮＦ（２０ｎｇ／ｍｌ）を陽性対照として使用した。実験は、細胞が１０マイクログラムｍｌの抗体抗ＴＮＦ−アルファで処理されたときに得たものと同様に、スルホネートの存在下でｐＮＦ−ｋＢ−ｌｕｃプラスミドの活性の減少を明らかに示した。加えて、細胞をスルホネート＋ＴＮＦ−アルファで処理したとき、ＮＦ−ｋＢ−ｌｕｃの誘発の逆転が観察された。示された結果を、処理制御なしの細胞対照の値の標準化誘発指数として表し、これは３つの独立した実験の代表例である。
【０２８７】
ケイ素原子コアのデンドリマーにより得られる結果
デントリマーの細胞毒性
それぞれ新たに合成されたデンドリマーの３つの世代の完全な特徴決定を実施するために、スクリーニング系を作り出して、より詳細な研究を必要とする生体適合濃度を決定した。最初に、可溶性の限界をそれぞれの世代について水で設定した。デンドリマーを３ｍＭ、２ｍＭ及び１ｍＭの濃度に溶解し、最後のものが、完全な可溶化のための追加の物理的要因（渦、熱など）の助けなしに良好な可溶性を表した。出発濃度が全ての試験デンドリマーに設定されると、これらの細胞毒性を標的細胞の膣上皮細胞（ＨＥＣ−１Ａ）及びＰＢＭＣおいてデンドリマーの増加濃度で研究した。死滅細胞の数をトリパンブルー技術により２４時間後に数えた。
【０２８８】
細胞は、２０μＭのデンドリマーから対照を越える青色染料を示し、そのため特定の濃度の１０μＭによる実現性可能性の検討に焦点を合わせることを決めた。周辺アニオン電荷を生じうる細胞膜の損傷（多様な細胞レセプターとの相互作用に起因する孔の形成又は膜の正の領域との静電的相互作用による孔の形成）を評価するために、上澄みにおけるラクテートデヒドロゲナーゼの遊離試験を実施した。これらの研究を、ホルマザン塩結晶へのテトラゾリウムの還元が正確な細胞代謝の間接的な反映であるミトコンドリアの細胞活性のアッセイにより補足した。図１を参照し、ここで本発明者たちは、ケイ素コアを有する２種類のデンドリマーの３世代を最初に評価して、許容レベルであり、両方の試験において常に許容限界内（上澄み中１０％以下のＬＤＨ及び細胞活性における２０％以下の低減）である生体適合性を得た。
【０２８９】
この実験は、膣の子宮内膜の上皮細胞（ＨＥＣ−１Ａ）において、デンドリマーが長時間曝露した細胞で実施した。細胞膜の良好な生存率は、短時間でＬＤＨ試験により確立することができ、それは、細胞との１時間の接触の後で１０％を越えるＬＤＨの放出を生じるデンドリマーがないからである。６つのナフタレンジスルホン酸基及び尿素コアから構成される分子であるスラミンは、高濃度にもかかわらず毒性を示さなかった。処理の２４時間の時点で、デキストラン（Ｄｘ）のような不活性分子で処理した細胞の制御は、対照と比べて、上澄みにおいてほぼ１０％の濃度のＬＤＨを示した。周辺にスルホネート基を有するデキストラン（ＤｘＳ）は、同様の毒性を示した。この方法において、１０％のＬＤＨは２４時間の時点で許容されると考慮され、それは、外来分子の存在が細胞において僅かな撹乱を生じていると思われるからである。カルボキシレート及びスルホネートデンドリマーによる同様の結果が得られたが、第二及び第三世代のカルボキシレートは、ＬＤＨの有意な値を示さないことが指摘された。
【０２９０】
細胞の生存率を、デンドリマーで２４時間処理したＨＥＣ−１Ａのミトコンドリアにより、テトラゾリウム塩の還元の定量化（ＭＴＴ）と同時に確立した。ホルマザン結晶の生成レベルを８０％超で得て、１０μＭのデンドリマーの濃度がＨＥＣ−１Ａの細胞代謝と生体適合することが決定された。
【０２９１】
この研究を広げるために、実験を設計して、これらのデンドリマーが感染処理の治療モデルにおいて引き起こしうる細胞損傷、並びに膣上皮の重層扁平上皮及びその下におけるＰＢＭＣ（ＣＤ４＋細胞）の感染を予防する可能性を評価した。
【０２９２】
より生理学的に毒性を再現するために、ＰＢＭＣにおける毒性を評価した。ここで可能性は全ての場合において低減され、最も目立つ転換点は１０μＭからより明白である。図２を参照すること。
【０２９３】
２４時間後に膜の良好な完全性が対照と比べて観察された。他の要因は、分光高度計の読み取りを変える可能性があり、生存率におけるこの僅かな増加は、デンドリマーの存在によって許容された。ＬＤＨ放出陽性対照である０．２％のＴｘ−１００は、両方の実験において作用し、対照に対して０％の生存率を表した。毒性は、カルボキシレート末端を有するデンドリマーを除いて１０μＭから表れた。ミトコンドリア活性は、１０μＭの濃度で安定していた。ＢＭＣのような生理学的細胞の膜に対して生じる低い損傷が、１０μＭの濃度の存在下での細胞の最適なミトコンドリア活性と共に、Ｇ２ＳＦ１６を、上皮細胞及びＰＢＭＣにおけるＨＩＶのウイルス−細胞付着、内部移行及び感染の阻害試験の開発のために選択することを決定した。このデンドリマーが作用濃度で生じる損傷を見るために、赤血球を異なる濃度のデンドリマーと直面させた。
【０２９４】
０．２％のＴｒｉｔｏｎ  Ｘ−１００で処理した赤血球において１００％の溶血があり（細胞は全て死滅し、壊れた）、ＰＢＳのみで処理した細胞の陰性対照では５％の溶血があった。それぞれのウエルを、０．２％のＴｒｉｔｏｎ  Ｘ−１００のＤ．Ｏ．（光学濃度）に関して百分率で表し、１００％であると考慮される。更に、その百分率から、未処理細胞の陰性対照の溶血の５％を差し引くと、１０μＭでの良好な生体適合性が見出され、光学顕微鏡により赤血球凝集がないことも見出される。図３を参照すること。
【０２９５】
リンパ球増殖
非特異的抗原刺激物質でありうるかにかかわらず、新たな分子の生体適合性プロフィールを知りたいと欲する時点が非常に重要である。免疫系の細胞が分子を外来要素として認識し、生物にとってほぼ有害である反応を誘発しうるので、このことは欠点である。したがって、異なるデンドリマーの存在下でのリンパ球繁殖の研究は、フィトヘマトグルチニン（ＰＨＡ）のような伝統的な分裂促進刺激物質に対してそのような系におけるリンパ球刺激の能力を比較するために実施した。ＰＢＭＣをｐ９６で培養し、異なる刺激物質で４日間処理した。本発明者たちは、ＨＩＶ感染の全ての実験に選択した１０μＭのデンドリマー濃度を使用した。
【０２９６】
結果を、対照と比較した、繁殖した細胞に組み込まれたＢｒｄＵの百分率として表す。図４Ａでは、ＰＨＡの存在に起因する、分化細胞により合成された新たなＤＮＡへのＢｒｄＵの組み込みの増加があった。濃度が１０ｍＭのデンドリマー単独は、ＰＢＭＣに対して分裂促進効果を有さない。ＰＨＡと同時のデンドリマー処理は、分裂促進効果を僅かに減少する。デンドリマーＧ２ＳＦ１６が分裂促進因子の存在下で細胞繁殖を遅延したかを調べるために、図４ＢではＰＨＡで予め刺激したＰＢＭＣを３日間使用した。４日目に、細胞を等量のＰＨＡ、ＰＨＡとＧ２ＳＦ１６及びＧ２ＳＦ１６単独で処理して、処理の４日後にＢｒｄＵの組み込みの減少を見出した。これは、デンドリマーが分裂促進刺激を阻害することを示しており、この種類のデンドリマーのインビボでの使用時における局所炎症の研究における興味深い知見である。図４を参照すること。
【０２９７】
付着／内部移行の試験
上皮細胞の単層を曝露したデンドリマーは、１０μＭの濃度で毒性も分裂促進性も示さなかった。殺微生物剤としての使用の可能性について、細胞膜の表面への到達の過程においてウイルスと相互作用する能力を評価することを決定した。デンドリマー分子は、上皮細胞のＨＩＶ感染及び子宮の空洞への通過を防止する物理的関門として作用する。
【０２９８】
細胞表面付着の障害の有効性及びＨＥＣ−１Ａへのウイルスの内部移行を遅延する能力を評価するため、末端単位としてカルボキシレート基及びスルホネート基を有する第二世代デンドリマーで実験を設計した。この分子の局所適用の考え方は、感染の前の処理（前処理）の時間が効力を制限するかを評価することが必要となる。
【０２９９】
下記のグラフは、異なる時点でのＨＥＣ−１Ａの前処理が、ＨＩＶ−１  ＮＬ４．３の付着の６０％阻害の有効性を有意に変更しないことを示す。このデータは、前処理が３０分、１時間及び２時間の時点であり、次にＨＩＶに感染させ、培養を２４時間維持し（図５Ａ）、上澄みを収集及び測定する及びＡｇｐ２４で７２時間感染し（図５Ｂ）、上澄みを収集し、Ａｇｐ２４を定量化する、感染後に２つの異なる時点で培養上澄みを収集することにより確認した。ＨＩＶのｇｐ１２０  Ｖ３領域への静電結合を示し、感染機構が正確に作用するのを防止するので、スラミンを付着阻害の陽性対照として選択した。ｐ２４は、ＥＬＩＳＡキット（ＩＮＮＯＴＥＳＴＴＭ  ＨＩＶ抗原ｍＡｂ，Ｉｎｎｏｇｅｎｅｔｉｃｓ（登録商標））を使用して細胞培養の上澄みから検出される、ｐ２４抗原（ウイルス遺伝物質）を表す。図５を参照すること。
【０３００】
以下の実験は、デンドリマーで予め処置された細胞の内部にあるウイルス粒子の数を定量化するために実施した。３時間の感染の間、ＥＬＩＳＡにより検出されたウイルスの量は、対照細胞よりも７０％少ないことが見出され、前記のデータが確認され、ポリアニオン性デンドリマーがウイルス攻撃の前に細胞において関門として作用するという理論を強化した。１０μＭの濃度を全ての試薬で使用した。図６を参照すること。
【０３０１】
作用機構
ウイルス粒子の付着及び内部移行を阻止するデンドリマーの有効性を確認した後、本発明者たちは、作用機構を理解する試みに進んだ。そのために、ウイルス粒子をデンドリマーの存在に曝露すること、次にこの組み合わせを刺激ＰＢＭＣ培養（ウイルス感染のために調製）に使用することからなる実験を設計した。ＨＩＶ−１  ＮＬ４．３（Ｘ４向性）及びＨＩＶ−１  ＢａＬ（Ｒ５向性）を使用して、両方のウイルス型のｇｐ１２０のＶ３を持つポリアニオン性デンドリマーが有する効果及び異なる補助レセプターの使用が阻害の効率を変えうるかを分析した。４日目の培養のｐ２４のＥＬＩＳＡ定量化による結果は、１０μＭのＧ２ＳＦ１６デンドリマーで処理されたＰＢＭＣの上澄みにおけるＨＩＶの低い蔓延を示す。このことは、ＰＢＭＣを感染するＨＩＶの通常の機能を包み込む又は干渉するデンドリマーの能力として解釈される。図７を参照すること。
【０３０２】
阻害アッセイ
アニオン性デンドリマーが子宮内膜の表面に展開する役割を可能な限り最適な方法で再現するため及び粘膜重層膣上皮を通過するウイルスの経路を研究するため、内部に付着細胞の完全な単層を形成する可能性、並びに単層の頂端面及び側底面の上澄みから情報を収集するためにトランスサイトーシス（細胞内小胞を介して細胞の細胞質を通る細胞外空間から別の細胞外空間への高分子の輸送）の現象を再形成するトランスウエル装置を使用した。以下のグラフは、単層を通過するウイルス粒子の経路に対するデンドリマーの効果を示す。
【０３０３】
この効果は、両方の場合において４０％低減したが、関連するデータとして、Ｒ５向性ウイルスの場合では、本発明の陽性対照（スラミン）は阻害効果を有さないことが示された。したがって、デンドリマーの内部構造は、分子の抗ウイルス能力に関連する（図８を参照すること）。ＨＥＣ−１Ａの単層では、濃度を１０μＭから５μＭのＧ２ＳＦ１６に低減して、トランスウエルの膜に完全に形成された単層におけるあらゆる損傷を回避した。このグラフは、単層を通過するＨＩＶ粒子の経路に対するデンドリマーの効果を示す。上澄みを感染の２４及び４８時間後に側底領域から収集した。
【０３０４】
第二世代のスルホネートデンドリマーを、ＰＢＭＣにおける予防及び治療効果の可能性について評価し、デンドリマーによる細胞の前処理の試験では８０％の阻害を示し、後処理試験では６０％の阻害を示し、一次リンパ球系であるように、このデンドリマーの２つの適用がより生理学的であることが確認された。Ｔ−２０（Ｆｕｚｅｏｎ）及びＡＺＴを、ウイルス融合及びリバーストランスクリプターゼの阻害の対照としてそれぞれ使用した。図９を参照すること。Ｇ２ＳＦ１６は、ＨＩＶ  ＮＬ４．３による感染の前のデンドリマーによる細胞の前処理試験では８０％の阻害を示し、後処理試験では６０％の阻害を示し、一次リンパ球培養であるように、このデンドリマーの２つの適用がより生理学的であることが確認された。ＨＩＶ感染の防止は、ＨＩＶにより既に感染した細胞におけるウイルス複製の阻害と同様に好ましい。
【０３０５】
樹状細胞及びマクロファージによるウイルス粒子の放出を評価した。対照をデキストラン、スラミン及びマンナンとして樹状細胞で試験した。Ｂａｌ及びＮＬ４．３を、ナノ粒子阻害剤の存在下でのウイルスの内部移行試験に使用した。Ｇ２ＳＦ１６の存在下ではマクロファージの上澄みにおいてｐ２４の減少が明らかであった。未熟樹状細胞では、ｐ２４抗原の減少は、スラミン、マンナン及びＧ２ＳＦ１６において有意であった。図１０を参照し、ここでは上記に記述されたように、感染細胞におけるウイルス粒子を放出する能力を評価し、良好な定量化のために５０ｎｇで感染させた。対照をデキストラン、スラミン及びマンナンとして樹状細胞で試験した。
【０３０６】
ＮＬ４．３（黒色棒）及びＢａｌ（白色棒）を、ナノ粒子阻害剤の存在下でのウイルス内部移行の試験に使用した。Ｇ２ＳＦ１６の存在下ではマクロファージの上澄みにおいてｐ２４の減少が明らかであった。未熟樹状細胞では、ｐ２４抗原の減少は、スラミン、マンナン及びＧ２ＳＦ１６において有意であった。
【０３０７】
本発明者たちは、細菌の存在下でのこれらのデンドリマーの抗細菌効果も決定した。黄色ブドウ球菌を実験モデルとして選択した。これらの実験において、１０μＭの使用濃度では、デンドリマーはおよそ５０％の殺菌効果（図１１）及び８５％の静菌効果（図１２）を有することが観察された。スルホネート末端デンドリマーが、カルボキシレート末端デンドリマー類似体よりも強力な殺菌剤であることも観察された。
【０３０８】
一方では、実施された予備実験は、本発明に記載されるデンドリマーが抗炎症効果を表すことを示すことに留意することが重要である。アニオン性デンドリマーＧ２ＳＦ１６の存在下でのＴＮＦ−ｌｕｃプラスミド（図１４）及びＰＮＦ−ｋＢ−ｌｕｃ（図１５）で形質移入されたＪｕｒｋａｔ細胞の実験で得られたデータは、アニオン性デンドリマーがＮＦ−カッパの転写活性、したがって炎症過程を減少することを明白に示している。
【０３０９】
クリックカップリングで得たアニオン性デンドリマーの侵入の生体適合性及び阻害剤効果
カルボキシレート及びホスホネート末端基を有する新たなクリックデンドリマー（Ｇ２ＣＫＣＯＯ１６及びＧ２ＣＫＰ３２）を、その作用に最も曝露される細胞個体群である子宮内膜上皮細胞における生体適合性についても評価した。図１３Ａにおいて、１０μＭまでの良好な細胞生存率が分かり、一方、図１３Ｂでは、ＶＩＨ  ＮＬ４−３で感染する１時間前にデンドリマーで前処理した同じ細胞株への侵入の阻害を示す。この阻害は、デンドリマーの濃度依存性であり、５０％までが１０μＭの濃度の場合に得られた。
【０３１０】
これらの結果は、いわゆる「クリックケミストリー」の基づいた合成経路により得られたアニオン性カルボシランデンドリマーが、上記に記載されたアニオン性スルホネート及びカルボキシレートデンドリマーと同様に、強力な殺微生物剤としても挙動することを示す。
【０３１１】
本発明の前記に記載されたデンドリマーは、細胞へのウイルス侵入と続くウイルス複製の工程の両方を干渉して、ウイルスにより引き起こされる感染を阻害することを示している。これは、例えば、感染が修飾ポリリシンデンドリマーの効果によりインビトロで阻害される単純ヘルペスの場合に当てはまる。この場合は、ウイルスのリバーストランスクリプターゼ及びインテグラーゼを干渉することができる共有的に修飾されたＰＡＭＡＭデンドリマーの使用を介して、細胞侵入時と続く工程の両方においてＨＩＶ複製を阻害することもできる。これらの特性を使用して、ＶｉｖａＧｅｌ（商標）（Ｓｔａｒｐｈａｒｍａ）の場合のように、デンドリマーに基づいた処方の膣ゲル剤が、性行為感染症の防止のために開発され、この活性成分は、ウイルス表面の糖タンパク質ｇｐ１２０に結合する能力を介してＨＩＶ感染の防止に有効であると思われる、ナフタレンジスルホネート単位で官能化されたポリリシンデンドリマーである。抗ウイルスデンドリマーの設計は、細胞表面に存在し、したがってウイルスへの結合を細胞と競合することができる、表面を擬似して群発するものを優先するが、呼吸器合胞体ウイルスの阻害剤として機能する、表面にアミド基を有するデンドリマーも設計される。デンドリマーの周辺基とウイルスの融合タンパク質との水素結合の形成によって、細胞表面との相互作用に関与するウイルスタンパク質と水素結合を形成することができる基で官能化されたデンドリマーは、異なるウイルスと相互作用することもでき、それらにより誘発される感染を阻害できることが予測されると考えられる。
【０３１２】
他の場合において、デンドリマーは、抗細菌薬として又は一部の真菌では細胞壁を分裂するために使用される。この目的のために設計されたとき、細菌膜へのデンドリマーの付着を促進し、細菌の溶解を引き起こす、アミン基又はテトラアルキルアンモニウム基のような表面基を有するカチオン性デンドリマーが優先される。第三級アミン基を表面に有するポリ（プロピレンイミン）（ＰＰＩ）デンドリマーがこのような場合に当てはまり、グラム陽性及びグラム陰性の両方の細菌に対して広範囲の抗細菌活性を示している〔Ｃｈｅｎ，ＣＺ  ａｎｄ  ＳＬ  Ｃｏｏｐｅｒ，Ｂｉｏｍａｔｅｒｉａｌｓ，２００２，２３，３３５９−６８，ＣＺ  Ｃｈｅｎ  ｅｔ  ａｌ，ｂｉｏｍａｃｒｏｍｏｌｅｃｕｌｅｓ，２０００，１，４７３−８０〕。これらのデンドリマーは、他の超分岐ポリマーよりも大きな抗細菌活性を有する。アニオン性基で官能化されたデンドリマーの場合では、デンドリマーが細胞レベルで生じることができるような静細菌及び静真菌効果が研究される。多様な病原体を加える能力及びこれらの増殖を防止する能力は、免疫系の多形核細胞による微生物の排除のために好ましいことがある。
【０３１３】
カルボキシレート基及びスルホネート基を含有するアニオン性残基で官能化された本発明のデンドリマーは、静微生物薬として使用する一つの選択肢である。
【０３１４】
本発明のデンドリマーは、生物医学の分野における興味深い代替案を表し、本明細書において、デンドリマーの化学的性質、生体適合性についての研究（細胞株、末梢血単核細胞（ＰＢＭＣ）及び赤血球において実施）、分裂促進性研究、細胞表面へのＨＩＶ粒子の付着及び内部移行の障害についての研究、並びに膣上皮単層を介したトランスサイトーシス阻害研究を記載する。予防適用に加えて、治療効果も評価され、これは感染患者において、デンドリマーが健康な細胞への感染の進行を防止しうるからである。
【０３１５】
フェノールコアデンドリマーによる結果
デンドリマーの細胞毒性の評価
合成された新たなデンドリマーの３つの世代の完全な特徴決定を実施するために、スクリーニング系を開発して、より詳細な研究を必要とする生体適合濃度を決定した。
【０３１６】
最初に、各世代のデンドリマーの水での可溶性の限界を定めた。デンドリマーを３ｍＭ、２ｍＭ及び１ｍＭの濃度に溶解し、最後のものが、完全な可溶化のための追加の物理的要因（渦、熱など）の助けなしに最適な可溶性を表した。試験する全てのデンドリマーの出発濃度を確定したら、本発明者たちは、本研究における標的細胞である膣上皮細胞（ＨＥＣ−１Ａ）及びＰＢＭＣに対する細胞毒性の評価に進んだ。異なる濃度でのデンドリマーの研究を行い、３世代の生体適合性をトリパンブルー染色により評価した。周辺アニオン電荷を生じうる細胞膜の損傷（多様な細胞レセプターとの相互作用又は膜の正の領域との静電的相互作用に起因する孔の形成）を評価するために、上澄みにおけるラクテートデヒドロゲナーゼの遊離試験を行った。１０μＭ未満の値では、デンドリマーはリンパ球細胞株（図１７）又はＰＢＭＣ（図１８）において毒性ではないことが見出された。
【０３１７】
これらの研究を、ホルマザン塩結晶へのテトラゾリウムの還元が正確な細胞代謝の間接的な反映であるミトコンドリアの細胞活性を試験することにより補足した。
【０３１８】
フェノールコアを有する３世代のデンドリマーを評価して、許容レベルであり、常に両方の試験で示された許容限界内（上澄み中１０％以下のＬＤＨ及び細胞活性における２０％以下の低減）である生体適合性を得た。結果は、５０μＭの濃度であっても、ＭＴ−２のような細胞株において有意な膜損傷がないことを示す。
【０３１９】
ＰＢＭＣの代謝におけるデンドリマーの効果を評価する詳細な研究を実施した。本発明者たちは、第二世代デンドリマーを試験し、顕著に低減したミトコンドリア活性がないことを観察した（図１９）。
【０３２０】
これらの結果を考慮して、Ｇ２Ｏ３ＳＦ２４を選択して、上皮細胞及びＰＢＭＣへのＨＩＶの付着、内部移行及び感染の阻害アッセイを調整することが決定された。
【０３２１】
付着／内部移行のアッセイ
上皮細胞の単層を曝露したデンドリマーは、１０μＭの濃度で毒性も分裂促進性も示さなかった。殺微生物剤としての使用の可能性について、細胞膜の表面への付着の過程においてウイルスと相互作用する能力を評価することを決定した。デンドリマー分子は、上皮細胞のＨＩＶ感染及び子宮の空洞への通過を防止する物理的関門として作用する。
【０３２２】
細胞表面付着の障害についての有効性及びＨＥＣ−１Ａへのウイルスの内部移行を遅延する能力を評価するため、本発明者たちはＧ２Ｏ３ＳＦ２４で実験を設計した。この分子の局所適用の考え方は、感染の前の処理（前処理）の時間が効力を調べるために制限的であるかを評価することが必要となる。試験は、異なる時間で実施され、全ての実験で１時間の前処理を確立した。ナフチル尿素のポリスルホネートであるスラミンは、Ｇ２Ｏ３ＳＦ２４と同一のスルホネート基を有するが、異なる内部構造を有する分子である。この分子は、インビトロで感染機構の正確な実施を防止する、ＨＩＶのｇｐ１２０  Ｖ３領域への静電結合を示すので、これを付着阻害の陽性対照として選択した。
【０３２３】
阻害アッセイ
アニオン性デンドリマーが子宮内膜の表面に展開する役割を可能な限り最適な方法で演じるため及び粘膜重層膣上皮を通過するウイルスの経路を研究するため、内部に付着細胞の完全な単層を形成する可能性、並びに単層の頂端面及び側底面の上澄みから情報を収集するためにトランスサイトーシス（細胞内小胞を介して細胞の細胞質を通る細胞外空間から別の細胞外空間への高分子の輸送）の現象を再形成するトランスウエル装置を使用した。図２０のグラフは、単層を通過するウイルス粒子の経路に対するデンドリマーの効果を示す。この効果は４０％低減されたが、本発明の陽性対照は阻害効果を欠く。したがって、デンドリマーの内部構造は、分子の抗ウイルス能力に関連する。
【０３２４】
第二世代のスルホネートをＰＢＭＣにおける予防及び治療効果の可能性について評価し、デンドリマーによる細胞の前処理試験において６０％の阻害を示し、一次リンパ球系としてのより生理学的な系におけるこのデンドリマーの適用が確認される（図２１）。
【０３２５】
樹状細胞及びマクロファージへの作用が現在評価されており、それは、これらの細胞株がリンパ球での実験よりも少なく感染したからであり、異なる細胞個体群における５０から７０％の減少は、細胞株への接触におけるウイルスの生存率に関連しているからである。図２２。
【０３２６】
抗細菌性及び抗真菌性の適用アッセイ
これらのデンドリマーの抗細菌及び抗真菌効果を細菌の存在下で評価した。黄色ブドウ球菌及び鵞口瘡カンジダを、細菌及び真菌試験のモデルとしてそれぞれ選択した。これらの実験において、デンドリマーの使用濃度の１０μＭは、４０％の殺細菌効果及び９０％の静細菌効果を有する（図２３〜２４）。使用した濃度で殺真菌又は静真菌効果はなかった（図２５〜２６）。
【図１】
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【図２】
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【図３】
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【図４】
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【図５】
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【図６】
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【図７】
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【図８】
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【図９】
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【図１０】
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【図１１】
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【図１２】
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【図１３】
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【図１４】
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【図１５】
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【図１６】
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【図１７】
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【図１８】
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【図１９】
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【図２０】
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【図２１】
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【図２２】
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【図２３】
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【図２４】
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【図２５】
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【図２６】
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【国際調査報告】
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