(57)【要約】  本発明は、それぞれ芳香族の「尾部基」を有する3-アミノラクタム化合物のスルホンアミド類似体を使用して、炎症性疾患を予防又は治療する方法を開示する。また、本明細書中で式（I）及び（I’）によって定義される化合物、及び斯かる化合物の医学的使用を開示する。
2013528201.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
炎症性疾患の治療における使用のための、一般式（I）
【化１】
2013528201.tif 000029
（式中、
nが、１〜４の整数であり、
kが、ベンジル環のC2、C3、C4、C5及び/又はC6の置換基の数を表す０〜５の整数であり、
Xが、アルキル、ハロアルキル、ヒドロキシアルキル、ヒドロキシ、アルコキシ、アミノ、アミノアルキル、アミノジアルキル、カルボキシ、及びハロゲンから成る群のいずれか１つから独立して選択される、ベンジル環の直鎖又は分枝の置換基である）
の化合物、又はその医薬的に許容される塩。
【請求項２】
炎症性疾患の治療における使用のための、式（I’）
【化２】
2013528201.tif 000030
（式中、n、k及びXが、請求項１に定義される通りである）
の化合物、又はその医薬的に許容される塩。
【請求項３】
炎症性疾患の治療のための医薬の製造における、一般式（I）
【化３】
2013528201.tif 000031
（式中、
nが、１〜４の整数であり、
kが、ベンジル環の置換基の数を表す０〜５の整数であり、
Xが、アルキル、ハロアルキル、ヒドロキシアルキル、ヒドロキシ、アルコキシ、アミノ、アミノアルキル、アミノジアルキル、カルボキシ、及びハロゲンから成る群のいずれか１つから独立して選択される、ベンジル環の直鎖又は分枝の置換基である）
の化合物、又はその医薬的に許容される塩の使用。
【請求項４】
炎症性疾患の治療のための医薬の製造における、式（I’）
【化４】
2013528201.tif 000032
（式中、n、k及びXが、請求項３に定義される通りである）
の化合物、又はその医薬的に許容される塩の使用。
【請求項５】
一般式（I）
【化５】
2013528201.tif 000033
（式中、
n、k及びXが、請求項１に定義される通りであり、
但し、
n=3の場合、
ベンジル環のC2-C6の少なくとも１つは、ハロゲン、C1-C7アルキル、又はC1-C7ハロアルキル以外の基で置換され、
n=1、2又は3の場合、
ベンジル環のC2又はC6が、水素又はフッ素以外である、又は
ベンジル環のC3が、水素、ハロゲン、C1-C6アルキル、C1-C6アルコキシ、又はC1-C6ハロアルキル以外である、又は
ベンジル環のC4が、水素、ハロゲン、C1-C6アルキル、C1-C6アルコキシ、C1-C6ハロアルキル、アミノ、アミノアルキル又はアミノジアルキル以外である、又は
ベンジル環のC5が、水素又はハロゲン以外である）
の化合物であって、但し、3-（2'-カルボキシベンゼンスルホニルアミノ）-テトラヒドロピリジン-2-オン、及び（R）-3-（4'-メチルベンゼンスルホニルアミノ）-カプロラクタムから成る群のいずれでもない化合物。
【請求項６】
式（I’）
【化６】
2013528201.tif 000034
（式中、n、k及びXが、請求項１又は５に定義される通りである）
の化合物であって、但し、（S）-3-（4'-メチルベンゼンスルホニルアミノ）-テトラヒドロピリジン-2-オン、（S）-3-（4'-メチルベンゼンスルホニルアミノ）-カプロラクタム、（S）-3-（4'-ブロモベンゼンスルホニルアミノ）-カプロラクタム、及び（S）-3-（4'-クロロベンゼンスルホニルアミノ）-カプロラクタムから成る群のいずれでもない化合物。
【請求項７】
活性成分として、請求項５又は６に記載の化合物、又はそれらの医薬的に許容される塩、及び少なくとも１つの医薬的に許容される賦形剤及び/又は担体を含む医薬組成物。
【請求項８】
n=2である、請求項１〜７のいずれか１項に記載の化合物、使用、又は組成物。
【請求項９】
n=3である、請求項１〜７のいずれか１項に記載の化合物、使用、又は組成物。
【請求項１０】
Xが、ハロアルキル、例えば、トリフルオロメチルである、請求項１〜９のいずれか１項に記載の化合物、使用、又は組成物。
【請求項１１】
化合物が、
（S）-3-（3'-フルオロベンゼンスルホニルアミノ）-テトラヒドロピリジン-2-オン、
（S）-3-（4'-フルオロベンゼンスルホニルアミノ）-テトラヒドロピリジン-2-オン、
（S）-3-（2'-トリフルオロメチルベンゼンスルホニルアミノ）-テトラヒドロピリジン-2-オン、
（S）-3-（3'-トリフルオロメチルベンゼンスルホニルアミノ）-テトラヒドロピリジン-2-オン、
（S）-3-（4'-トリフルオロメチルベンゼンスルホニルアミノ）-テトラヒドロピリジン-2-オン、
（S）-3-（2',4'-ジフルオロベンゼンスルホニルアミノ）-テトラヒドロピリジン-2-オン、
（S）-3-（2',5'-ジフルオロベンゼンスルホニルアミノ）-テトラヒドロピリジン-2-オン、
（S）-3-（2',6'-ジフルオロベンゼンスルホニルアミノ）-テトラヒドロピリジン-2-オン、
（S）-3-（3',4'-ジフルオロベンゼンスルホニルアミノ）-テトラヒドロピリジン-2-オン、
（S）-3-（3',5'-ジフルオロベンゼンスルホニルアミノ）-テトラヒドロピリジン-2-オン、
（S）-2-フルオロ-N-（2-オキソピペリジン-3-イル）ベンゼンスルホンアミド、
（S）-3-（4'-エチルベンゼンスルホニルアミノ）-アゼパン-2-オン、
（S）-3-（4'-ブチルベンゼンスルホニルアミノ）-アゼパン-2-オン、
（S）-3-（4'-tert-ブチルベンゼンスルホニルアミノ）-アゼパン-2-オン、
（S）-3-（4'-tert-ブチルベンゼンスルホニルアミノ）-テトラヒドロピリジン-2-オン、
（S）-3-（4'-オクチルベンゼンスルホニルアミノ）-アゼパン-2-オン、
（S）-3-（4'-オクチルベンゼンスルホニルアミノ）-テトラヒドロピリジン-2-オン、
及びそれらの医薬的に許容される塩、
から成る群から選択される、請求項１、２又は５のいずれか１項に記載の化合物、或いは請求項３又は４に記載の使用。
【請求項１２】
化合物が、
（R）-3-（4'-エチルベンゼンスルホニルアミノ）-テトラヒドロピリジン-2-オン、
（R）-3-（4'-tert-ブチルベンゼンスルホニルアミノ）-テトラヒドロピリジン-2-オン、
（R）-3-（4'-オクチルベンゼンスルホニルアミノ）-テトラヒドロピリジン-2-オン、
及びそれらの医薬的に許容される塩、
から成る群から選択される、請求項１又は５に記載の化合物、或いは又は請求項３に記載の使用。
【請求項１３】
化合物が、
（S）-3-（3'-フルオロベンゼンスルホニルアミノ）-テトラヒドロピリジン-2-オン、
（S）-3-（4'-フルオロベンゼンスルホニルアミノ）-テトラヒドロピリジン-2-オン、
（S）-3-（2'-トリフルオロメチルベンゼンスルホニルアミノ）-テトラヒドロピリジン-2-オン、
（S）-3-（3'-トリフルオロメチルベンゼンスルホニルアミノ）-テトラヒドロピリジン-2-オン、
（S）-3-（4'-トリフルオロメチルベンゼンスルホニルアミノ）-テトラヒドロピリジン-2-オン、
（S）-3-（2',4'-ジフルオロベンゼンスルホニルアミノ）-テトラヒドロピリジン-2-オン、
（S）-3-（2',5'-ジフルオロベンゼンスルホニルアミノ）-テトラヒドロピリジン-2-オン、
（S）-3-（2',6'-ジフルオロベンゼンスルホニルアミノ）-テトラヒドロピリジン-2-オン、
（S）-3-（3',4'-ジフルオロベンゼンスルホニルアミノ）-テトラヒドロピリジン-2-オン、
（S）-3-（3',5'-ジフルオロベンゼンスルホニルアミノ）-テトラヒドロピリジン-2-オン、
（S）-2-フルオロ-N-（2-オキソピペリジン-3-イル）ベンゼンスルホンアミド、
（S）-3-（4'-エチルベンゼンスルホニルアミノ）-アゼパン-2-オン、
（S）-3-（4'-ブチルベンゼンスルホニルアミノ）-アゼパン-2-オン、
（S）-3-（4'-tert-ブチルベンゼンスルホニルアミノ）-アゼパン-2-オン、
（S）-3-（4'-tert-ブチルベンゼンスルホニルアミノ）-テトラヒドロピリジン-2-オン、
（S）-3-（4'-オクチルベンゼンスルホニルアミノ）-アゼパン-2-オン、
（S）-3-（4'-オクチルベンゼンスルホニルアミノ）-テトラヒドロピリジン-2-オン、
及びそれらの医薬的に許容される塩、
から成る群から選択される、請求項６に記載の化合物。
【請求項１４】
化合物が、（S）-3-（4'-メチルベンゼンスルホニルアミノ）-カプロラクタム、又はその医薬的に許容される塩である、請求項１又は２に記載の化合物、或いは請求項３又は４に記載の使用。
【請求項１５】
化合物が、（S）-3-（4'-トリフルオロメチルベンゼンスルホニルアミノ）-テトラヒドロピリジン-2-オン、又はその医薬的に許容される塩である、請求項２又は６に記載の化合物、或いは請求項４に記載の使用。
【請求項１６】
炎症性疾患が、自己免疫疾患、喘息、関節リウマチ、TNF-αレベルの上昇を特徴とする疾患、乾癬、アレルギー、多発性硬化症、線維症（糖尿病性腎症を含む）、及び癒着の形成、から成る群から選択される、請求項１又は２に記載の化合物、或いは請求項３又は４に記載の使用。
【請求項１７】
炎症性疾患が癒着の形成である、請求項１６に記載の化合物又は使用。
【請求項１８】
化合物が局所的に投与される、請求項１６又は１７に記載の化合物又は使用。
【請求項１９】
請求項１〜１８のいずれか１項に記載の化合物、医薬組成物又は医薬の抗炎症量の患者への投与による、炎症性疾患の症状（任意の薬剤に対する有害な炎症反応を含む）の治療、寛解、又は予防方法。
【請求項２０】
抗炎症活性の特定のアッセイにおいて、新規特性又は改善された特性に関する化合物のスクリーニングに有用なライブラリーであって、請求項１〜１８のいずれか１項に記載の式（I）又は（I’）の構造を有し、それにより抗炎症活性を有するエレメントから成るライブラリー。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、アリール置換3-アミノラクタム誘導体、及び炎症性疾患を予防又は治療することにおけるその使用に関する。
【背景技術】
【０００２】
炎症は、生理的な生体防御の重要な要素である。しかしながら、時間的に又は空間的に望ましくない炎症反応が、白血球成分が明らかに関与する疾患（例えば、自己免疫疾患、喘息又はアテローム性動脈硬化症等）、及びこれまで白血球が関与すると考えられていない疾患（例えば、骨粗しょう症又はアルツハイマー病等）もまた含む広範囲の疾患に関与することが、徐々に明らかとなっている。
【０００３】
ケモカインは、インターロイキン8と相同性を有するシグナル伝達分子の大きなファミリーであり、健康状態及び病的状態双方において白血球の輸送制御に関与する。ケモカインのシグナル伝達に関与する５０以上のリガンド及び２０以上の受容体と共に、斯かる系は、骨髄から末梢まで、続いて二次リンパ器官に戻る複雑な体免疫制御プロセスを介して白血球を送達するための必要な情報密度を有する。しかしながら、このケモカイン系の複雑さは当初、ケモカイン受容体遮断を介した炎症反応の調節への薬理的アプローチの障害となっていた。所与の炎症性疾患に対する治療効果を得るために、いずれのケモカイン受容体を抑制すべきか決定することは、困難であることが判明している。
【０００４】
最近になって、同時に広範囲のケモカインによるシグナル伝達をブロックする薬剤のファミリーが記載された（Reckless et al., Biochem J. (1999) 340: 803-811を参照）。このような薬剤の１つである、「ペプチド3」と呼ばれるペプチドは、5個の異なるケモカインによって誘発される白血球遊走を抑制するが、一方他の化学誘引物質（例えば、fMLP又はTGF-beta等）に応答した遊走は不変のままであることが分かった。斯かるペプチド、及びその類似体、例えば、NR58-3.14.3（すなわち、c（DCys-DGln-DIle-DTrp-DLys-DGln-DLys-DPro-DAsp-DLeu-DCys）-NH2［配列番号:1］）等は、集合的に「広域スペクトルケモカイン阻害剤」（BSCIs）と呼ばれる。Grainger等（2003, Biochem. Pharm. 65: 1027-1034）は、続いてBSCIsが様々な疾患動物モデルにおいて潜在的に有用な抗炎症活性を有することを示した。興味深いことに、複数のケモカインを同時に遮断すると、これに伴う急性又は慢性毒性は観察されない。よって、斯かるアプローチは、ステロイドと同様の利益を発揮しながらも副作用が軽減された新規抗炎症薬物療法を開発する上で、有用なストラテジーとなり得ることを示唆している。斯かる有益なリスク・ベネフィット特性はおそらく、これらの化合物の作用の意外な機構に由来する（国際特許出願第PCT/GB2010/000354号、Cambridge Enterprise Limited、２０１０年２月２８日出願、及び国際特許出願第PCT/GB2010/000342号、Cambridge Enterprise Limited、２０１０年２月２６日出願を参照）。
【０００５】
しかしながら、ペプチド及びペプトイド誘導体、例えば、NR58-3.14.3等は、インビトロ（in vivo）での使用に最適ではないであろう。それらは合成が非常に高価であり、比較的好ましくない薬物動態及び薬力学特性を有する。例えば、NR58-3.14.3は、経口で生物学的に利用可能でなく、静脈内注射後30分未満の半減期で血漿から除去される。
【０００６】
ペプチド3及びNR58-3.14.3の抗炎症特性を有するが、医薬としての使用のための特徴を改善した新規製剤を特定するために、２つのストラテジーが並行して採用されている。第１に、一連のペプチド類似体が開発されている。その一部はNR58-3.14.3より長い血漿半減期を有し、相当安価に合成することが可能である（例えば、国際公開第WO2009/017620号を参照）。第２に、重要なファルマコフォアを特定し、元のペプチドの有益な特性を有する低分子の非ペプチド性構造を設計するべく、ペプチドの詳細な構造・活性分析が行われている。
【０００７】
この２つ目のアプローチによれば、前記ペプチドの抗炎症特性を有し、独自の構造を有する複数の化合物群（例えば、アルカロイドヨヒンビンの16-アミノ及び16-アミノアルキル誘導体や、一連のN-置換3-アミノグルタルイミド等）が、小さなコンビナトリアルライブラリーから同定された（Fox et al., 2002, J Med Chem 45: 360-370; 国際公開第WO99/12968号及び国際公開第WO00/42071号を参照）。これらの化合物は全て、非ケモカイン化学誘引物質に選択性を有し、広域スペクトルケモカイン阻害剤であり、多くはインビトロ（in vivo）で急性炎症をブロックすることが示されている。
【０００８】
上記アミノグルタルイミドの最も強力であり且つ選択的なものは、（S）-3-（ウンデ-10-エノイル）-アミノグルタルイミド（NR58,4）であり、5nMのED50でケモカイン誘発遊走をインビトロ（in vitro）で抑制した。この化合物は、より複雑なアシル側鎖（例えば、ベンゾイル又はtert-ブチルオキソ（Boc）基等）を有する3-アミノグルタルイミドより桁違いに強力であった。結果的に、アミノグルタルイミド及びアミノラクタムBSCIsのその後の研究は、もっぱら単純な直鎖及び分枝アルキル側鎖を有する化合物に焦点が当てられた。
【０００９】
しかしながらさらなる研究から、アミノグルタルイミド環が血清中の酵素性開環を受けやすいことが明らかとなった。従って、（例えば、自己免疫疾患等における、治療下の炎症が慢性的である）一部の適用に関して、これらの化合物は最適な特性を有しておらず、同様の抗炎症特性を有するより安定した化合物がより好適であろう。
【００１０】
このような安定な類似体を同定するアプローチとして、（S）-3-（ウンデ-10-エノイル）-アミノグルタルイミドの様々な誘導体が、血清中の安定性に関して試験されている。一誘導体である、6-デオキソ類似体（S）-3-（ウンデ-10-エノイル）-テトラヒドロピリジン-2-オンは、ヒト血清において、少なくとも37℃で7日間十分に安定であるが、類似分子と比較してかなり効力が減少した。
【００１１】
安定な、広域スペクトルのケモカイン阻害剤（BSCIs）のこれらの一ファミリーは、7員環モノラクタムを有する3-アミノカプロラクタムである（例えば、国際公開第WO2005/053702号及び国際公開第WO2006/016152号）。しかしながら、さらに有用な抗炎症性化合物もまた、異なる環サイズの他の3-アミノラクタムから生成されている（例えば、国際公開第2006/134385号を参照）。ヘテロ原子及びビシクロラクタム環系の導入を含むラクタム環への他の修飾もまた、BSCI活性を有する化合物を得る（例えば、国際公開第WO2006/018609号及び国際公開第WO2006/085096号）。
【００１２】
一般的に、これらの以前の研究は、BSCI活性が環状の「頭部基」（3-アミノラクタム又はイミド）によって分子に与えられることを示し、これにより活性に関する構造制限が幾分定義された（例えば、環窒素上の大きな置換基が、活性に有害であるが、環サイズ変化はほとんど影響ない）。BSCIとして活性であるために、この「頭部基」は、結合したアシル「尾部基（tail group）」を有しなければならない。遊離又はN-アルキル置換の3-アミノ基を有する化合物は生理的pHで正電荷を有し、BSCIsとして十分に不活性である。これまでの開示は、この「尾部基」は、単純なアミド、スルホンアミド、尿素又はカルバメートリンカーを介して「頭部基」に結合され得ることを示している。
【００１３】
「頭部」基及びリンカーの構造はBSCI活性に重要であるが、少なくともインビトロ（in vitro）で、化合物の主要な薬理に影響なく、様々な「尾部基」が選択され得ることが示されている。結果的に、「尾部基」の修飾は、化合物の物理及び医薬特性を最適化するために広範囲に使用されている。「尾部基」の構造変化は、例えば、代謝又は排出の最初の経路を変化し、薬物動態又は経口バイオアベイラビリティを変更し、よって選択化合物のADME特性の第一の決定因子として機能し得る。
【００１４】
適するアミノラクタム「頭部基」に関してBSCI活性を有することが知られる、可能性のある「尾部基」の分野は非常に広範囲にわたるが、一部の「尾部基」が好適であることが記載されている。一部の場合において、「尾部基」の構造特性は、アミノラクタム化合物のBSCI活性の効力を増大することが確認されている。最も明らかなこのような例は、尾部基における2’炭素中心における四面体sp3配置を有する2’、2’の二置換の導入であり（いわゆる「キー炭素」）、2’2’の二置換が欠如した関連の化合物と比較して、少なくともインビトロ（in vitro）でBSCIとして10倍の効力増加を与える。例えば、2’2’-ジメチルドデカノイル（dodecenanoyl）-3-アミノカプロラクタムは、MCP-1誘発THP-1細胞遊走においてBSCIとして、ドデカノイル-3-アミノカプロラクタム、又は実際直鎖状アルキル「尾部基」を有する任意の他の関連の化合物より10倍強力である（国際公開第WO2005/053702号に以前に開示）。分枝アルキル「尾部基」に関する効力の増大は、2’位での分枝に限定され、3’3’-ジメチルドデカノイル-3-アミノカプロラクタムは直鎖アルキル類似体よりもはや強力でない。
【００１５】
他の場合において、「尾部基」の構造特性は、ADME特性の改善と関係があることが確認されている。例えば、2’2’-ジメチルプロパノイル-3-アミノバレロラクタム（aminovalerolactam）のピバロイル（pivoyl）の「尾部基」は、斯かる分子の意外、且つ特に好都合な医薬特性に寄与する（国際公開第WO2009/016390号に以前に開示）。特に、ピバロイル基は、代謝に耐性があり、よってこの化合物の顕著な長期生物学的半減期に寄与する。
【００１６】
一方、他の可能性のある「尾部基」はこれと正反対に、一般的にあまり好まれていない。例えば、2’位に平面（sp2）炭素中心を有する化合物（例えば、ドデカ-2’,3’-エノイル-3-アミノカプロラクタム等）は、対応する飽和アルキル「尾部基」を有する化合物より顕著に低い、BSCIsとしての効力を有する。同様に、グルタルイミドのオリジナルのライブラリー由来のデータは、2-位の芳香環もまた実質的に活性が低いことを示した（Fox et al., 2002, J Med Chem 45: 360-370）。総合すると、これらの２つの発見から、例えば、ベンゾイル又は置換ベンゾイル等の、芳香族「尾部基」を有するアミノラクタムは、BSCIsとして有用でないであろうという合理的な仮定につながっている。その結果、BSCI活性を有する化合物の以前の開示は、このような芳香族「尾部基」を全て排除している。
【発明の概要】
【課題を解決するための手段】
【００１７】
本発明は、芳香族「尾部基」をそれぞれ有する3-アミノラクタム化合物の一連のスルホンアミド類似体、及び斯かる化合物を含む医薬組成物、及び例えば、炎症性疾患の治療等のための、斯かる化合物及び組成物の医学的使用を開示する。驚いたことに、以下に提示する化合物は全て実質的にBSCI活性（2’,3’-不飽和アシル3-アミノラクタム又はベンゾイルアミノグルタルイミド以上）を有する。
【００１８】
本発明の一態様において、炎症性疾患の治療における使用のための、一般式（I）
【化１】
2013528201.tif 000003
（式中、
nが、１〜４の整数であり、
kが、ベンジル環のC2、C3、C4、C5及び/又はC6を置換している基の数を表す０〜５の整数であり、
Xが、アルキル、ハロアルキル、ヒドロキシアルキル、ヒドロキシ、アルコキシ、アミノ、アミノアルキル、アミノジアルキル、カルボキシ、及びハロゲンから成る群のいずれか１つから独立して選択される、ベンジル環を置換している直鎖又は分枝の基である）
の化合物、又はその医薬的に許容される塩を供する。
【００１９】
ラクタム環の3位の炭素原子は、不斉炭素であり、従って本発明の化合物は少なくとも２つの可能性のある鏡像異性形態を有し、それは「R」及び「S」配置である。本発明は、２つの鏡像異性形態のそれぞれ及びラセミ「RS」混合物を含むこれらの形態の組み合わせの全てを含む。簡素化のため、構造式で非特異的配置を示す場合、２つの鏡像異性形態及びそれらの混合物をそれぞれ意味することと理解されたい。
【００２０】
本発明は、炎症性疾患の治療における使用のための、式（I’）
【化２】
2013528201.tif 000004
（式中、n、k及びXが、上記のとおりである）
の化合物、又はその医薬的に許容される塩、もまた供する。
【００２１】
立体中心に（S）配置を有する化合物（I’）は、同一化合物の（R）鏡像異性体より、BSCIsとして5〜100倍強力である。
【００２２】
本発明はさらに、炎症性疾患の治療のための医薬の製造における、一般式（I）
【化３】
2013528201.tif 000005
（式中、
nが、１〜４の整数であり、
kが、ベンジル環のC2、C3、C4、C5及び/又はC6の置換基の数を表す、０〜５の整数であり、
Xが、アルキル、ハロアルキル、ヒドロキシアルキル、ヒドロキシ、アルコキシ、アミノ、アミノアルキル、アミノジアルキル、カルボキシ、及びハロゲンから成る群のいずれか１つから独立して選択される、ベンジル環の直鎖又は分枝の置換基である）
の化合物、又はその医薬的に許容される塩の使用を供する。
【００２３】
本発明は、炎症性疾患の治療のための医薬の製造における、式（I’）
【化４】
2013528201.tif 000006
（式中、n、k及びXが、上記一般式（I）に関して定義される通りである）
の化合物、又はその医薬的に許容される塩の使用もまた供する。
【００２４】
特定の化合物は、それ自体新規であることが分かった。よって、本発明の他の態様において、一般式（I）
【化５】
2013528201.tif 000007
（式中、
n、k及びXが、上記（I）に関して定義される通りであり、
但し、
n=3の場合、
ベンジル環のC2-C6の少なくとも１つは、ハロゲン、C1-C7アルキル、又はC1-C7ハロアルキル以外の基で置換され、
n=1、2又は3の場合、
ベンジル環のC2又はC6が、水素又はフッ素以外である、又は
ベンジル環のC3が、水素、ハロゲン、C1-C6アルキル、C1-C6アルコキシ、又はC1-C6ハロアルキル以外である、又は
ベンジル環のC4が、水素、ハロゲン、C1-C6アルキル、C1-C6アルコキシ、C1-C6ハロアルキル、アミノ、アミノアルキル又はアミノジアルキル以外である、又は、
ベンジル環上のC5が、水素又はハロゲン以外である）
の化合物であって、但し、3-（2'-カルボキシベンゼンスルホニルアミノ）-テトラヒドロピリジン-2-オン、及び（R）-3-（4'-メチルベンゼンスルホニルアミノ）-カプロラクタムから成る群のいずれでもない化合物を供する。
【００２５】
誤解を避けるために、本発明によれば、一般式（I）化合物は、化合物3-（4'-メチルベンゼンスルホニルアミノ）-テトラヒドロピリジン-2-オン、3-（4'-クロロベンゼンスルホニルアミノ）-カプロラクタム、3-（4'-ブロモベンゼンスルホニルアミノ）-カプロラクタム、（R）-3-（4'-トリフルオロメチルベンゼンスルホニルアミノ）-カプロラクタム、3-（4'-クロロベンゼンスルホニルアミノ）-カプロラクタム、及び3-（4'-メチルベンゼンスルホニルアミノ）-カプロラクタムを含まないことに注意されたい。
【００２６】
本発明は、式（I’）
【化６】
2013528201.tif 000008
（式中、n、k及びXが、上記一般式（I）に関して定義される通りである）
の化合物であって、但し、（S）-3-（4'-メチルベンゼンスルホニルアミノ）-テトラヒドロピリジン-2-オン、（S）-3-（4'-メチルベンゼンスルホニルアミノ）-カプロラクタム、（S）-3-（4'-ブロモベンゼンスルホニルアミノ）-カプロラクタム、及び（S）-3-（4'-クロロベンゼンスルホニルアミノ）-カプロラクタムから成る群のいずれでもない化合物もまた含む。
【００２７】
国際公開第WO2005/042489号は、N-置換ベンゼンスルホンアミドの「スキーム3」における調製のための中間体として、式9.0（91ページ）のスルホンアミド化合物を教示し、それは認知障害の治療における使用用と言われている。これらの中間化合物との重複は、本明細書中で本発明から放棄する。
【００２８】
米国特許出願第2007/0037789号は、フルオロ置換2-オキソ-アゼパン誘導体をγ-セクレターゼ阻害剤として教示する。例えば、スキーム1（段落［0085］を参照）中の式IVの中間化合物は、それらの誘導体の合成において使用される。斯かる中間化合物との重複は、本明細書中で本発明から放棄する。
【００２９】
国際公開第WO2006/005486号は、アルツハイマー病又は一般的な癌の治療用スルホンアミド誘導体を教示する。例えば、式IV（12ページを参照）等中間化合物は、それらの誘導体の合成において使用される。斯かる中間化合物との重複は、本明細書中で本発明から放棄する。
【００３０】
国際公開第WO2007/0038669号は、ジアリールアミン含有化合物及びc-kit受容体の修飾因子としてのその使用を教示する。様々な中間化合物がジアリールアミン含有化合物の合成において使用される。斯かる中間化合物のいずれの重複も、本明細書中で本発明から放棄する。
【００３１】
先行技術はまた、特定の化合物、例えば、
−  3-（2'-カルボキシベンゼンスルホニルアミノ）-テトラヒドロピリジン-2-オン（Gombar et al. （1991）Quantitative Structure-Activity Relationships 10: 306-332に開示）;
−  3-（4'-メチルベンゼンスルホニルアミノ）-テトラヒドロピリジン-2-オン（Gut & Rudinger （1963）Collection of Czechoslovak Chemical Communications 28: 2953-2968に開示）;
−  （S）-3-（4'-メチルベンゼンスルホニルアミノ）-テトラヒドロピリジン-2-オン（Maguire et al. （1990） J. Organic Chem. 55: 948-955に開示）;
−  3-（4'-ブロモベンゼンスルホニルアミノ）-カプロラクタム（（S）及び（R）形態であり、不特定の立体化学を有する）及び（S）-3-（4'-クロロベンゼンスルホニルアミノ）-カプロラクタム（Parker et al. （2007） Bioorganic & Medicinal Chemistry Letters 17: 5790-5795に開示）;
−  3-（4'-メチルベンゼンスルホニルアミノ）-カプロラクタム（国際公開第WO2004/033455号に開示）; 及び
−  （R）-3-（4'-メチルベンゼンスルホニルアミノ）-カプロラクタム（独国特許第4117507号に開示）、を開示する。
【００３２】
しかしながら、上記先行技術の化合物はいずれも、BSCI活性を有する、又は炎症性疾患の治療に有用であることが示されていない。結果として、本明細書中で言及する先行技術文献に開示の化合物は、本明細書中で定義されるアリール置換アミノラクタムのスルホンアミド類似体のクラスが、有用なBSCI活性を有するという我々の意外な発見を全く教示又は示唆しておらず、また先行技術の化合物は本明細書中で放棄する。
【００３３】
本発明の他の態様において、活性成分として上記化合物、又はその医薬的に許容される塩、少なくとも１つの医薬的に許容される賦形剤及び/又は担体を含む医薬組成物を供する。
【００３４】
医薬的に許容される塩とは、特に、例えば、塩酸塩、臭化水素酸塩、ヨウ化水素酸塩、硫酸塩、リン酸塩、ジリン酸塩及び硝酸塩等の有機酸、又は、例えば、酢酸、マレイン酸、フマル酸、酒石酸、コハク酸、クエン酸、乳酸、メタンスルホン酸、p-トルエンスルホン酸、パルミチン酸及びステアリン酸等の有機酸の添加塩を意味する。また、それらを使用できる場合、例えば、水酸化ナトリウム又は水酸化カリウム等の塩基から形成される塩は本発明の範囲内である。医薬的に許容される塩の他の例に関して、「Salt selection for basic drugs」（1986） Int. J. Pharm. 33: 201-217を参照されたい。
【００３５】
医薬組成物は、固体の形態、例えば、粉末、顆粒、錠剤、ゼラチンカプセル、リポソーム又は坐薬とすることができる。適した固体担体は、例えば、リン酸カルシウム、ステアリン酸マグネシウム、タルク、糖、乳糖、デキストリン、デンプン、ゼラチン、セルロース、メチルセルロース、カルボキシメチルセルロースナトリウム、ポリビニルピロリジン及びワックスとすることができる。他の適した医薬的に許容される賦形剤及び/又は担体は、当業者に周知であろう。
【００３６】
本発明の医薬組成物は、液体形態、例えば、溶液、エマルション、懸濁液又はシロップで表すことができる。適した液体担体は、例えば、水、有機溶媒例えば、グリセロール又はグリコール等、及び水中の様々な割合のそれらの混合物とすることができる。
【００３７】
本発明の医学的使用のための、一般式（I）及び式（I’）の代表的な化合物は、
（S）-3-（3'-フルオロベンゼンスルホニルアミノ）-テトラヒドロピリジン-2-オン、
（S）-3-（4'-フルオロベンゼンスルホニルアミノ）-テトラヒドロピリジン-2-オン、
（S）-3-（2'-トリフルオロメチルベンゼンスルホニルアミノ）-テトラヒドロピリジン-2-オン、
（S）-3-（3'-トリフルオロメチルベンゼンスルホニルアミノ）-テトラヒドロピリジン-2-オン、
（S）-3-（4'-トリフルオロメチルベンゼンスルホニルアミノ）-テトラヒドロピリジン-2-オン［（S）-N-（2-オキソピペリジン-3-イル）-4-（トリフルオロメチル）ベンゼンスルホンアミド、又は（S）-3-（4'-トリフルオロメチルベンゼンスルホニルアミノ）ピペリジン-2-オンとしても周知］、
（S）-3-（2',4'-ジフルオロベンゼンスルホニルアミノ）-テトラヒドロピリジン-2-オン、
（S）-3-（2',5'-ジフルオロベンゼンスルホニルアミノ）-テトラヒドロピリジン-2-オン、
（S）-3-（2',6'-ジフルオロベンゼンスルホニルアミノ）-テトラヒドロピリジン-2-オン、
（S）-3-（3',4'-ジフルオロベンゼンスルホニルアミノ）-テトラヒドロピリジン-2-オン、
（S）-3-（3',5'-ジフルオロベンゼンスルホニルアミノ）-テトラヒドロピリジン-2-オン、
（S）-2-フルオロ-N-（2-オキソピペリジン-3-イル）ベンゼンスルホンアミド［（S）-3-（2'-フルオロベンゼンスルホニルアミノ）-テトラヒドロピリジン-2-オンとしても周知］、
（S）-3-（4'-エチルベンゼンスルホニルアミノ）-アゼパン-2-オン、
（S）-3-（4'-ブチルベンゼンスルホニルアミノ）-アゼパン-2-オン、
（S）-3-（4'-tert-ブチルベンゼンスルホニルアミノ）-アゼパン-2-オン、
（S）-3-（4'-tert-ブチルベンゼンスルホニルアミノ）-テトラヒドロピリジン-2-オン、
（S）-3-（4'-オクチルベンゼンスルホニルアミノ）-アゼパン-2-オン、及び、
（S）-3-（4'-オクチルベンゼンスルホニルアミノ）-テトラヒドロピリジン-2-オン、及びそれらの医薬的に許容される塩、から成る群から選択できる。
【００３８】
本発明の医学的使用のための、本発明の一般式（I）及び/又は一般式（I’）の代表的な化合物は、
（R）-3-（4'-エチルベンゼンスルホニルアミノ）-テトラヒドロピリジン-2-オン、
（R）-3-（4'-tert-ブチルベンゼンスルホニルアミノ）-テトラヒドロピリジン-2-オン、
（R）-3-（4'-オクチルベンゼンスルホニルアミノ）-テトラヒドロピリジン-2-オン、
及びそれらの医薬的に許容される塩、から成る群から選択できる。
【００３９】
一般式（I）及び式（I’）の本発明の代表的な化合物は、
（S）-3-（3'-フルオロベンゼンスルホニルアミノ）-テトラヒドロピリジン-2-オン、
（S）-3-（4'-フルオロベンゼンスルホニルアミノ）-テトラヒドロピリジン-2-オン、
（S）-3-（2'-トリフルオロメチルベンゼンスルホニルアミノ）-テトラヒドロピリジン-2-オン、
（S）-3-（3'-トリフルオロメチルベンゼンスルホニルアミノ）-テトラヒドロピリジン-2-オン、
（S）-3-（4'-トリフルオロメチルベンゼンスルホニルアミノ）-テトラヒドロピリジン-2-オン、
（S）-3-（2',4'-ジフルオロベンゼンスルホニルアミノ）-テトラヒドロピリジン-2-オン、
（S）-3-（2',5'-ジフルオロベンゼンスルホニルアミノ）-テトラヒドロピリジン-2-オン、
（S）-3-（2',6'-ジフルオロベンゼンスルホニルアミノ）-テトラヒドロピリジン-2-オン、
（S）-3-（3',4'-ジフルオロベンゼンスルホニルアミノ）-テトラヒドロピリジン-2-オン、
（S）-3-（3',5'-ジフルオロベンゼンスルホニルアミノ）-テトラヒドロピリジン-2-オン、
（S）-2-フルオロ-N-（2-オキソピペリジン-3-イル）ベンゼンスルホンアミド、
（S）-3-（4'-エチルベンゼンスルホニルアミノ）-アゼパン-2-オン、
（S）-3-（4'-ブチルベンゼンスルホニルアミノ）-アゼパン-2-オン、
（S）-3-（4'-tert-ブチルベンゼンスルホニルアミノ）-アゼパン-2-オン、
（S）-3-（4'-tert-ブチルベンゼンスルホニルアミノ）-テトラヒドロピリジン-2-オン、
（S）-3-（4'-オクチルベンゼンスルホニルアミノ）-アゼパン-2-オン、及び
（S）-3-（4'-オクチルベンゼンスルホニルアミノ）-テトラヒドロピリジン-2-オン、及び、それらの医薬的に許容される塩、から成る群から選択できる。
【００４０】
本発明の医学的使用のための一般式（I）又は（I’）の代表的な化合物は、（S）-3-（4'-メチルベンゼンスルホニルアミノ）-カプロラクタム、又はその医薬的に許容される塩である。
【００４１】
式（I’）の代表的な化合物それ自体又は医学的使用のためのその化合物は、（S）-3-（4'-トリフルオロメチルベンゼンスルホニルアミノ）-テトラヒドロピリジン-2-オン、又はその医薬的に許容される塩である。
【００４２】
本発明によれば、式（I）又は（I’）の化合物、又はそれらの医薬的に許容される塩又は活性成分としてそれらを含む医薬組成物又は医薬によって予防又は治療されることが意図される炎症性疾病（本明細書中で「炎症性疾患」と互換的に使用される）は特に、
−自己免疫疾患、例えば、多発性硬化症、関節リウマチ、ループス、過敏性腸症候群、クローン病等、
−脳卒中、冠動脈疾患、心筋梗塞、不安定狭心症、アテローム性動脈硬化症を含む血管障害、又は、例えば、ベーチェット病、巨細胞性動脈炎、リウマチ性多発筋痛症、ウェゲナー肉芽腫症、チャーグ・ストラウス症候群血管炎、ヘノッホ・シェーンライン紫斑病及び川崎病等の血管炎、
−喘息、例えば、アレルギー性鼻炎及びCOPD等の関連の呼吸器疾患、
−例えば、腎移植患者における、臓器移植拒絶反応及び/又は臓器移植後移植片又は臓器機能障害、
−乾癬、
−皮膚創傷及び肥厚性瘢痕（ケロイド形成）を含む他の線維性疾患、通常又は婦人科手術後の癒着形成、肺線維症、肝臓線維症（アルコール性肝臓疾患を含む）、又は特発性又は基礎疾患、例えば、糖尿病等の結果としての腎臓線維症（糖尿病性腎症）、又は
−アレルギー、を含む。
【００４３】
炎症性疾患は、自己免疫疾患、喘息、関節リウマチ、TNF-αレベルの上昇を特徴とする疾患、乾癬、アレルギー、多発性硬化症、線維症（糖尿病性腎症を含む）、及び癒着の形成から成る群から選択できる。
【００４４】
上記臨床徴候は、TNFαレベルの上昇を特徴とする炎症性疾病又は疾患の一般的定義に該当する。
【００４５】
本発明の一態様において、任意の潜在的に矛盾する先行技術（例えば、上記のもの）を単に回避するために、用語「炎症性疾患」とは、例えば、アルツハイマー病及び/又は記憶喪失等の認知障害を除くことができる。
【００４６】
式（I）又は（I’）の化合物は、局所送達に特に有用であり、また、局所送達のためのクリーム及び軟膏、吸入性送達のための粉末、エアロゾル又はエマルション、及びインジェクションのための溶液又はエマルションを含む局所送達のための医薬の調製にも特に有用である。よって、このような局所送達に適した1又は2以上の賦形剤を含む医薬組成物が想定され、特許請求される。
【００４７】
本発明はまた、本明細書中で定義される化合物、医薬組成物又は医薬の抗炎症量の患者への投与による、炎症性疾患の症状（任意の薬剤に対する有害な炎症反応を含む）の治療、寛解又は予防方法もまた供する。
【００４８】
本発明の化合物、組成物又は医薬の投与は、局所、経口、非経口経路、筋肉内投与等によって行うことができる。
【００４９】
本発明の化合物、組成物又は医薬に想定される投与量は、使用される投与製剤及び投与経路によって0.1 mg〜10 gで構成される。
【００５０】
本発明はさらに、式（I）又は（I’）の構造を有し、それにより抗炎症活性を有するエレメントから成るライブラリーを含み、特定の抗炎症活性アッセイにおいて新規特性又は特性の改善のための化合物のスクリーニングに有用である。
【００５１】
本発明は、上記の通り、化合物、組成物及びそれらの使用を含み、斯かる化合物は水和又は溶媒和形態である。他に規定しない限り、本発明の化合物は、互変異性体、分離型鏡像異性体、分離型ジアステレオマー、ラセミ混合物、溶媒和物、代謝物、それらの塩及び医薬的に許容される塩及びプロドラッグを含むプロドラッグを含む。
【００５２】
上記式（I）又は（I’）の化合物のいずれかにおいて（それ自体及び/又は医学的使用のため）、nは2とすることができる。あるいは、nは3とすることができる。
【００５３】
Xは、ハロアルキル、例えば、トリフルオロメチルとすることができる。
【００５４】
本発明のいずれかの態様の化合物それ自体及び/又は医学的使用のための化合物の代表的な群は、Xがハロゲン又はハロアルキルであり、kが1〜3である、式（I）又は（I’）の化合物から選択される。例えば、Xはフルオロ又はフルオロアルキル（例えば、トリフルオロメチル等）と、kは1〜3とすることができる。
【００５５】
特に、本明細書の式に関して、ベンジル環は、上記の基Xとの一置換（すなわち、k = 1）とすることができる。例えば、ベンジル環は、アルキル（例えば、パラメチル以外）、ハロアルキル（例えば、トリフルオロメチル等、例えば、パラトリフルオロメチル［すなわち、4’-トリフルオロメチル］）との一置換とすることができる。ベンジル環は、ハロゲンとの一置換とすることができる。ベンジル環は、オルト-カルボキシ（すなわち、2’-カルボキシ）との一置換とすることができる。
【００５６】
一態様において、k=1との上記特性は、n=2の場合に適用される。
【００５７】
本発明によれば、一般式（I）又は（I’）の化合物は、本明細書に記載の工程を使用して調製できる。
【００５８】
定義
用語「約」とは、考慮された値周囲の幅を意味する。本特許出願で使用される場合、「約X」とは、Xの±10%の幅、好ましくはXの±5%の幅を意味する。
【００５９】
斯かる記載における数的範囲の使用は、斯かる範囲の全ての個々の整数及び所定の範囲の最も広い範囲内の上下の数値のあらゆる組み合わせを本発明の範囲内に含むことを意図することは明らかである。よって、明確に例証さるか否かにかかわらず、例えば、（とりわけ）使用される本発明の化合物又は組成物の用量について特定される範囲0.1mg〜10gは、0.1mg〜10gのあらゆる用量及び上下の数の各組み合わせのあらゆる部分的範囲を含むことを意図する。
【００６０】
本明細書において用語「含む」とは、「含む」及び「から成る」双方を含むことを意味する又は含むことと読むべきである。従って、本発明が「活性成分として化合物を含む医薬組成物」に関する場合、斯かる用語は、上記のように、他の活性成分が存在してよい組成物及び１つの活性成分のみから成る組成物の双方を網羅することを意図する。
【００６１】
本明細書において用語「アルキル」又は「アルキル基」とは、飽和直鎖又は分枝鎖の一価の炭化水素基、例えば、１〜２０個の炭素原子、１〜１２個の炭素原子、１〜６個の炭素原子、１〜４個の炭素原子、又は他に本明細書中に規定する炭素原子の炭化水素基を意味する。アルキル基の例は、メチル（Me、-CH3）、エチル（Et、-CH2CH3）、1-プロピル（n-Pr、n-プロピル、-CH2CH2CH3）、2-プロピル（i-Pr、i-プロピル、-CH（CH3）2）、1-ブチル（n-Bu、n-ブチル、-CH2CH2CH2CH3）、2-メチル-1-プロピル（i-Bu、i-ブチル、-CH2CH（CH3）2）、2-ブチル（s-Bu、s-ブチル、-CH（CH3）CH2CH3）、2-メチル-2-プロピル（t-Bu、t-ブチル、-C（CH3）3）、1-ペンチル（n-ペンチル、-CH2CH2CH2CH2CH3）、2-ペンチル（-CH（CH3）CH2CH2CH3）、3-ペンチル（-CH（CH2CH3）2）5、2-メチル-2-ブチル（-C（CHs）2CH2CH3）、3-メチル-2-ブチル（-CH（CH3）CH（CH3）2）、3-メチル-l-ブチル（-CH2CH2CH（CH3）2）、2-メチル-l-ブチル（-CH2CH（CH3）CH2CH3）、1-ヘキシル（-CH2CH2CH2CH2CH2CH3）、2-ヘキシル（-CH（CH3）CH2CH2CH2CH3）、3-ヘキシル（-CH（CH2CH3）（CH2CH2CH3））、2-メチル-2-ペンチル（-C（CHs）2CH2CH2CH3）、3-メチル-2-ペンチル（-CH（CH3）CH（CH3）CH2CH3）、4-メチル-2-ペンチル（-CH（CH3）CH2CH（CH3）2）、3-メチル-3-ペンチル（-C（CH3）（CH2CH3）2）、2-メチル-3-ペンチル（-CH（CH2CH3）CH（CH3）2）、2,3-ジメチル-2-ブチル（-C（CH3）2CH（CH3）2）、3,3-ジメチル-2-ブチル（-CH（CH3）C（CH3）3、1-ヘプチル、及び1-オクチル、を含むがそれらに限定されない。
【００６２】
本明細書において用語「ハロアルキル」又は「ハロアルキル基」とは、1又は2以上又は全てのアルキル基の水素がハロゲンで置換されることを除いて、アルキル基（上記）を意味する。斯かる置換は、末端を含むアルキル上の任意の部位とすることができる。斯かる例は、CH2F、CHF2、CF3、CH2CH2F5CH2CHF2、CH2CF3、CHFCF3、CF2CF3、CH2Cl、CHCl2、CCl3、CH2CH2Cl、CH2CHCl2、CH2CCl3、CHClCCl3、及びCCl2CCl3を含むが、それらに限定されない。
【００６３】
本明細書において用語「ハロゲン」（「ハロ」と省略することができる）又は「ハロゲン基」とは、フッ素（F）、臭素（Br）、塩素（Cl）、及びヨウ素（I）を含む。
【００６４】
用語「ヒドロキシ」又は「ヒドロキシ基」とは、「-OH」基を意味する。
【００６５】
本明細書において用語「ヒドロキシアルキル」又は「ヒドロキシアルキル基」とは、1又は2以上又は全てのアルキル基の水素が、ヒドロキシ基で置換されることを除いて、アルキル基（上記）を意味し、斯かる置換は末端を含むアルキルの任意の部位とすることができる。
【００６６】
用語「アルコキシ」又は「アルコキシ基」とは、分子の残りの部分へ二価酸素原子を介して結合された上記のアルキル基を意味する。斯かる例は、メトキシ（-OCH3）、エトキシ、プロポキシ、イソプロポキシ、n-ブトキシ、sec-ブトキシ、tert-ブトキシ、ペントキシ、イソペントキシ、ネオペントキシ、ヘキソキシ、及び3-メチルペントキシを含むがそれらに限定されない。
【００６７】
用語「アミノ」又は「アミノ基」とは、「-NH2」基を意味する。
【００６８】
用語「アミノアルキル」又は「アミノアルキル基」とは、上記の水素原子の１つがアルキル基で置換されているアミノ基を意味する。
【００６９】
用語「アミノジアルキル」又は「アミノジアルキル基」とは、上記の、水素原子の双方がアルキル基で置換されているアミノ基を意味する。窒素原子に結合されたアルキル基は、異なる又は同一とすることができる。
【００７０】
用語「カルボキシ」又は「カルボキシ基」とは、「-C（O）OH」基を意味する。
【００７１】
用語「ベンジル環」（「フェニル基」としても周知）とは、上記一般式（I）及び（I’）の化合物中の6炭素アリール基を意味する。本発明の一般式の目的に関して、ベンジル環内の炭素原子C2-C6を位置付けるためのナンバリングは、3-アミノラクタム基に結合されたC1から時計回り方向である。しかしながら、特定の化合物に関するベンジル環上の1又は2以上の置換基に関する環炭素のナンバリングは、時計回り又は反時計回り方向の第二の置換基を小さい位置番号とできるIUPAC法に従う。２又は３個以上の置換基が特定の化合物に存在する場合、IUPAC法はそれらをアルファベット順で記載する。環上の位置番号はIUPAC法に従って、時計回り又は反時計回り方向にカウントし、最も小さい数を有するように置換基に割り当てる（3-アミノラクタム基に結合されたC1から始める）。
【００７２】
当業者に理解されるように、一般式（I）及び（I’）の化合物中に、ベンジル環を置換している基が5個未満存在する場合、すなわち、k=0、1、2、3又は4である場合、その非置換位置又は各非置換位置は水素原子で占有される。
【００７３】
他に定義しない限り、本明細書中で使用される技術及び科学用語は全て、本発明が属する技術分野の当業者に通常理解されるものと同一の意味を有する。同様に、本明細書中で言及する文献、特許出願、特許及び他の参考文献は全て、参照により組み込まれる（法律上許容される場合）。
【００７４】
一般式（I）又は（I’）の化合物の調製
典型的には、このような化合物は、適切に活性化された酸形態（例えば、酸塩化物等）の「尾部基」を、適した3-アミノラクタムと結合させることによって産生される。特許請求する全化合物を含む、5、6、7及び8員環の3-アミノラクタムの調製のための方法は、文献に広範囲に記載される。例えば、我々は、オルニチンからの６員環アミノラクタム（国際公開第WO2009/016390号を参照）及びリジンからの７員環アミノラクタム（国際公開第WO2005/053702号を参照）の調製のための適した方法、及び５及び８員環アミノラクタムに関する方法（国際公開第WO2006/134385号を参照）を供している。我々は、特に６員環アミノラクタムへの詳細な様々な合成経路を記載しており、製造のKg量へのスケールアップに適した工程を含む（国際公開第WO2009/016390号）。様々な環サイズの3-アミノラクタムの合成のための様々な他の方法もまた、文献に記載され（例えば、Pellegata et al., 1978, Synthesis 614-616 and Boyle et al., 1979, J Org Chem 44:4841-4847を参照）、任意のアミノラクタム「頭部基」の調製に適した方法が本発明の方法に従って採用できる。
【００７５】
3-アミノラクタム生成物は、第二の工程において、例えば、7-員環アミノラクタムに関する上記の通り、適したスルホニルクロリドと反応させ（Fox et al., 2005, J Med Chem 48: 867-74）、カルボン酸由来の酸塩化物（RC（O）Cl）の代わりにスルホニルクロリド（RS（O2）Cl）を使用する。この反応は、例えば、クロロホルム又はジクロロメタン中で行うことができる。最も好適な反応溶媒はジクロロメタンであり、好ましくは塩基、例えば、Na2CO3又はトリエチルアミンの存在下で（例えば、国際公開第WO2006/005486号又はParker et al. （2007） Bioorganic & Medicinal Chemistry Letters 17: 5790-5795に記載の同様の方法によって）行われる。上記反応は、環境温度（約25 °C）で、より通常は温度20〜50 °Cで行うことができる。２つの反応は、反応の間に3-アミノラクタムの分離及び精製と共に独立して行うことができ、あるいは反応は、スルホニルクロリドでの誘導体化の前に単一の容器において3-アミノラクタムの精製なく行うことができる。
【００７６】
上記の通り（国際公開第WO2009/016390号を参照）、鏡像異性的に純粋な3-アミノラクタムのアシル化によって式（I’）の、鏡像異性的に純粋な化合物を調製する場合、アシル化反応中に注意が必要である。特に、反応のpHを終始pH 9.0以下とするため、塩基、例えば、炭酸ナトリウム等を、反応容器のpHをモニタリングしながら徐々に継続的に添加しなければならない。例えば、炭酸ナトリウムの急な又は過剰の添加に起因する過塩基性は、3-アミノラクタムのラセミ化を増大し、鏡像異性的に不純な生成物を得る。
【００７７】
以下の実施例は、上記生成物を説明するために示し、本発明の範囲を限定するものとみなすべきではない。
【図面の簡単な説明】
【００７８】
【図１】図１は、本発明の化合物の様々な例及び参考例の化学構造を表す。
【図２】図２は、マウスの致死量以下の内毒血症試験の結果を示すグラフを表す。グラフにおいて、カラムAは、対照群（1% CMC 10ml/kg 経口投与）由来のデータを示し、カラムBは、10mg/kgサリドマイド経口投与の処理群由来のデータを示し、カラムCは、10mg/kg（S）-3-（4'-トリフルオロメチルベンゼンスルホニル-アミノ）-テトラヒドロピリジン-2-オン（本発明の一実施形態の化合物、以下の実施例4も参照されたい）経口投与の処理群由来のデータを示し、カラムDは1mg/kgソマトタキシン（somatotaxin）（S）-3-（アダマンタン-1-カルボニル）アミノカプロラクタム経口投与の処理群由来のデータを示す（国際公開第WO2006/016152号を参照）。y軸は、TNF-αのレベル（単位pg/ml）を示す。
【実施例】
【００７９】
以下の実施例において、1H-NMR及び13C-NMRスペクトルを、Bruker Avance DRX 400 MHz フーリエ変換機器上で記録し、19F-NMRスペクトルをBruker Avance DRX 300上で記録した。ケミカルシフトはppmで供し、結合定数、Jは、単位Hzの最寄りの0.5間隔の値で供する。IRスペクトルを、Avatar 320上で記録した。HRMSデータをEsquire 2000を介して得た。［α］D値を598 nmで光学活性AA 1000旋光計セット上で記録した（ナトリウムD線）。分光学的グレードMeOHを使用して、試料を作成した。
【００８０】
参考例 1:  3-（4’-メチルベンゼンスルホニルアミノ）テトラヒドロピリジン-2-オン:
3-アミノテトラヒドロピリジン-2-オン塩酸塩（10 mmol）、K2CO3（30 mmol）及び4-メチルベンゼンスルホニルクロリド（10 mmol）を、上記手順に従って反応させ、生成物を得た（1.64 g、69%）。
【００８１】
νmax/cm-1 3224、1658（第二のCONH、ラクタム）、1598、1494（芳香環）、1324、1161（SO2-N）、814、802（パラ二置換ベンゼン）.
【００８２】
1HNMR:δH（400MHz、CDCl3）7.77（2H、d、J8.5、オルト-H）、7.29（2H、d、J8.0、メタ-H）、5.79（1H、brd、J1.0、C7H7-SO2NH）、5.56（1H、brs、CONH-CH2）、3.49-3.42（1H、m、CH-CO）、3.31-3.24（2H、m、CH2NH）、2.53-2.45（1H、m、ラクタムCH2）、2.40（3H、s、CH3）、1.97-1.88（1H、m、ラクタムCH2）、1.88-1.68（2H、m、ラクタムCH2）.
【００８３】
13CNMR:δC（100MHz、CDCl3）172.2（ラクタムC=O）、142.2（イプソ-C）、136.2（パラ-C）、129.7（芳香族CH）、127.3（芳香族CH）、53.3（CH-CO）、42.0（CH2-NH）、29.6（ラクタムCH2）、28.6（ラクタムCH2）、27.9（ラクタムCH2）、21.5（CH3）.
【００８４】
HRMS（+ESI）C12H16N2O3S + Na+: calcd 291.0774; found 291.0777.
【００８５】
参考例 2:  3-（4’-メチルベンゼンスルホニルアミノ）アゼパン-2-オン: 
3-アミノアゼパン-2-オン塩酸塩（10 mmol）、K2CO3（30 mmol）及び4-メチルベンゼンスルホニルクロリド（10 mmol）を、上記手順に従って反応させ、生成物を得た（1.70 g、67%）。
【００８６】
νmax/cm-13393、1658（第二のCONH、ラクタム）、1598、1496（芳香環）、1324、1164（SO2-N）、818、802（パラ-二置換ベンゼン）.
【００８７】
1HNMR:δH（400MHz、CDCl3）7.70（2H、d、J8.5、オルト-H）、7.25（2H、d、J8.0、メタ-H）、6.22-6.03（2H、m、NH）、3.79（1H、ddd、J11.0、5.0、2.0、CH-CO）、3.19-3.10（1H、m、CH2NH）、3.08-2.98（1H、m、CH2NH）、2.38（3H、s、CH3）、2.14-2.08（1H、m、ラクタムCH2）、2.03-1.93（1H、m、ラクタムCH2）、1.82-1.71（1H、m、ラクタムCH2）、1.70-1.54（2H、m、ラクタムCH2）、1.38-1.25（1H、m、ラクタムCH2）.
【００８８】
13CNMR:δC（100MHz、CDCl3）174.5（ラクタムC=O）、143.6（イプソ-C）、137.2（パラ-C）、129.9（芳香族CH）、127.2（芳香族CH）、55.6（CH-CO）、42.4（CH2-NH）、33.6（ラクタムCH2）、28.9（ラクタムCH2）、28.2（ラクタムCH2）、21.7（CH3）.
【００８９】
HRMS（+ESI）C13H18N2O3S + Na+: calcd 305.0930; 305.0938.
【００９０】
以下の実施例に関して、3-スルホニルアミノ-2-オキソピペリジンの合成に関する基本手順は: 炭酸カリウム（3 mmol）及び（S）-3-アミノ-2-オキソピペリジン塩酸塩（1.5 mmol）を水中（5 ml）に溶解し、溶液を0℃まで冷却し、テトラヒドロフラン（5 mL）中の置換ベンゼンスルホニルクロリド（1 mmol）の溶液を添加した。混合物を16 時間撹拌し、続いて反応物をジクロロメタン又はクロロホルムで抽出した。結合された有機層を硫酸ナトリウム中で乾燥させ、真空で還元し、固体を得た。この固体を最少量のジクロロメタンに再溶解し、40〜60℃の石油エーテルの添加によって結晶化した。固体生成物を濾過によって単離し、五酸化カリウム中で乾燥させた。
【００９１】
実施例 1:  （S）-4-フルオロ-N-（2-オキソピペリジン-3-イル）ベンゼンスルホンアミド
【化７】
2013528201.tif 000009
【００９２】
0.196g白色の微粉末（48%）.mp153-156℃;［α］24D+30.35（c0.1、MeOH）;・max/cm-11656、1650（C=O、アミド）、1493（N-H、アミド）、1329（C-F）、1158（-SO2-）.Anal.（C11H13FN2O3S）C、H、N:calcdC48.52、H4.81、N10.29; foundC48.13、H4.74、N10.18.1H-NMR・H1H-NMR・H.7.90（2H、dd、J9  and 5、ArH2 and ArH6）、7.17（2H、t、J8.5、ArH3 and ArH5）、5.82（2H、NHCH and NHCH2）、3.48（1H、dd、J11 and 6、CHNH）、3.31-3.25（2H、m、CH2NH）、2.48-2.41（1H、m、CH2CH）、1.99-1.88（2H、m、CH2CH2NH）、1.87-1.66（1H、m、CH2CH）.13C-NMR・C169.74（CHCONH）、165.1（d、J255、ArC4）、135.2（d、J3、CSO2）、130.1（d、J9、ArC2/6）、116.4（d、J23、ArC3/5）、53.3（CHNH）、41.9（CH2NH）、28.6（CH2CHNH）、20.8（CH2CH2NH）.19F-NMR・F-105.1.HRMS（+ESI）C11H13FN2O3SNa:calcd 295.0523; found 295.0517.
【００９３】
実施例 2:  （S）-3-フルオロ-N-（2-オキソピペリジン-3-イル）ベンゼンスルホンアミド
【化８】
2013528201.tif 000010
【００９４】
0.215gオフホワイトの微粉末（53%）.mp159-160℃;［α］24D+29.80（c0.1、MeOH）;・max/cm-11669、1644（C=O、アミド）、1552（N-H、アミド）、1303（C-F）、1158（-SO2-）.Anal.（C11H13FN2O3S）C、H、N: calcd C48.52、H4.81、N10.29; found C48.10、H4.71、N10.05.1H-NMR・H 7.69（1H、dt、J8 and 1、ArH2）、7.60（1H、dt、J8 and 2.5、ArH5）、7.49（1H、td、J8 and 6、ArH4）、7.26（1H、tdd、J8、2.5 and 1、ArH6）、5.89（1H、s、NHCH）、5.69（1H、s、NHCH2）、3.52（1H、dd、J11 and 6、CHNH）、3.32-3.27（2H、m、CH2NH）、2.51-2.44（1H、m、CH2CH）、1.98-1.89（2H、m、CH2CH2NH）、1.87-1.67（1H、m、CH2CH）.13C-NMR・C169.1（CHCONH）、162.4（d、J250、ArC3）、141.2（d、J7、CSO2）、130.9（ArC5）、123.0（ArC6）、120.1（d、J21、ArC4）、114.8（d、J24、ArC2）、53.4（CHNH）、41.9（CH2NH）、28.6（CH2CHNH）、20.7（CH2CH2NH）.19F-NMR・F-109.4.HRMS（+ESI）C11H13FN2O3SNa: calcd 295.0523; found 295.0535.
【００９５】
実施例 3:  （S）-2-フルオロ-N-（2-オキソピペリジン-3-イル）ベンゼンスルホンアミド
【化９】
2013528201.tif 000011
【００９６】
0.197g白色粉末（48%）.mp180-183℃;［α］24D+35.80（c0.1、MeOH）; ・max/cm-11659、1647（C=O、アミド）、1474（N-H、アミド）、1332（C-F）、1157（-SO2-）.Anal.（C11H13FN2O3S.1/6H2O）C、H、N: calcdC47.99、H4.88、N10.18; found C47.94、H4.76、N10.01.1H-NMR・H7.87（1H、td、J7.5 and 2、ArH4）、7.56（1H、dddd、J8、7、5 and 2、ArH3）、7.21（2H、m、J7.5 and 1、ArH5 and ArH6）、6.05（1H、s、NHCH）、5.84（1H、s、NHCH2）、3.58（1H、dt、J10.5 and 6、CHNH）、3.29-3.24（2H、m、CH2NH）、2.51-2.43（1H、m、CH2CH）、1.98-1.89（2H、m、CH2CH2NH）、1.88-1.69（1H、m、CH2CH）.13C-NMR ・C169.6（CHCONH）、159.2（d、J256、ArC2）、135.2（d、J9、ArC4）、130.6（ArC5）、127.2（d、J14、CSO2）、124.2（d、J4、ArC6）、117.2（d、J21、ArC3）、53.7（CHNH）、41.9（CH2NH）、28.9（CH2CHNH）、20.9（CH2CH2NH）.19F-NMR・F-108.5. HRMS（+ESI）C11H13FN2O3SNa: calcd 295.0523; found 295.0516.
【００９７】
実施例 4:  （S）-N-（2-オキソピペリジン-3-イル）-4-（トリフルオロメチル）-ベンゼンスルホンアミド
【化１０】
2013528201.tif 000012
【００９８】
0.222gオフホワイトの微粉末（46%）.mp181-183℃;［α］24D+21.15（c0.1、MeOH）;・max/cm-11669、1644（C=O、アミド）、1552（N-H、アミド）、1303（C-F）、1158（-SO2-）.Anal.（C12H13F3N2O3S）C、H、N: calcdC44.72、H4.07、N8.69;foundC44.39、H3.98、N8.54.1H-NMR・H.8.03（2H、d、J8、ArH2 and ArH6）、7.76（2H、d、J8、ArH3 and ArH5）、5.99（1H、s、NHCH）、5.85（1H、s、NHCH2）、3.53（1H、dd、J11 and 6、CHNH）、3.31-3.26（2H、m、CH2NH）、2.49-2.42（1H、m、CH2CH）、1.99-1.91（2H、m、CH2CH2NH）、1.89-1.67（1H、m、CH2CH）.13C-NMR・C169.5（CHCONH）、142.9（CSO2）、134.5（q、J32、ArC4）、127.9（ArC2/6）、126.3（q、J4、ArC3/5）、123.3（q、J270、CF3）、53.4（CHNH）、41.9（CH2NH）、28.7（CH2CHNH）、20.8（CH2CH2NH）.19F-NMR・F-63.1.HRMS（+ESI）C12H13F3N2O3SNa: calcd345.0491; found345.0478.
【００９９】
実施例 5:  （S）-N-（2-オキソピペリジン-3-イル）-3-（トリフルオロメチル）ベンゼンスルホンアミド
【化１１】
2013528201.tif 000013
【０１００】
0.156gオフホワイトの針状結晶（32%）.mp158-160℃;［α］24D+22.90（c0.1、MeOH）;・max/cm-11632、1614（C=O、アミド）、1496（N-H、アミド）、1362（C-F）、1138（-SO2-）.Anal.（C12H13F3N2O3S）C、H、N:calcdC44.72、H4.07、N8.69;foundC44.56、H3.93、N8.63.1H-NMR・H1H-NMR・H.8.17（1H、s、ArH2）、8.09（1H、d、J8、ArH6）、7.82（1H、d、J8、ArH4）、7.66（1H、t、J7.5、ArH5）、5.97（1H、s、NHCH）、5.83（1H、s、NHCH2）、3.55（1H、dd、J10.5 and 6、CHNH）、3.32-3.26（2H、m、CH2NH）、2.49-2.41（1H、m、CH2CH）、1.98-1.89（2H、m、CH2CH2NH）、1.87-1.67（1H、m、CH2CH）.13C-NMR ・C169.6（CHCONH）、140.7（CSO2）、131.7（q、J34、ArC3）、130.5（ArC5）、129.9（ArC6）、129.4（q、J3、ArC2）、124.5（q、J3、ArC4）、123.2（q、J272.5、CF3）、53.4（CHNH）、41.9（CH2NH）、28.7（CH2CHNH）、20.8（CH2CH2NH）.19F-NMR ・F-62.7.HRMS（+ESI）C12H13F3N2O3SNa: calcd 345.0491; found345.0480.
【０１０１】
実施例 6:  （S）-N-（2-オキソピペリジン-3-イル）-2-（トリフルオロメチル）ベンゼンスルホンアミド
【化１２】
2013528201.tif 000014
【０１０２】
0.191gオフホワイトの微粉末（40%）.mp161-163℃;［α］24D+36.70（c0.1、MeOH）;・max/cm-11669、1644（C=O、アミド）、1552（N-H、アミド）、1303（C-F）、1158（-SO2-）.Anal.（C12H13F3N2O3S）C、H、N:calcd C44.72、H4.07、N8.69;foundC44.51、H3.89、N8.62.1H-NMR ・H.7.74（1H、td、J9 and 3.5、ArH6）、7.42（1H、dt、J9 and 4、ArH3）、7.22-7.15（2H、m、ArH4 and ArH5）、6.78（1H、d、J5、NHCH）、6.08（1H、s、NHCH2）、4.42（1H、dt、J11 and 6、CHNH）、3.35（2H、td、J6 and 2、CH2NH）、2.73（1H、dq、J13 and 6、CH2CH）、1.99-1.91（2H、m、CH2CH2NH）、1.59（1H、dq、J12 and 8、CH2CH）.13C-NMR ・C169.9（CHCONH）、138.1（CSO2）、132.8（ArC5）、132.2（ArC6）、131.1（ArC4）、128.7（q、J6、ArC3）、128.1（q、J34、ArC2）、122.9（q、J273、CF3）、53.7（CHNH）、41.9（CH2NH）、28.9（CH2CHNH）、20.9（CH2CH2NH）.19F-NMR・F-57.9.HRMS（+ESI）C12H13F3N2O3SNa: calcd 345.0491; found 345.0502.
【０１０３】
実施例 7:  （S）-2,4-ジフルオロ-N-（2-オキソピペリジン-3-イル）ベンゼンスルホンアミド
【化１３】
2013528201.tif 000015
【０１０４】
0.193gオフホワイトの微粉末（44%）.mp162-163℃;［α］22D+31.55（c0.1、MeOH）;・max/cm-11679、1655（C=O、アミド）、1475（N-H、アミド）、1342（C-F）、1160（-SO2-）.Anal.（C11H12F2N2O3S）C、H、N: calcdC45.51、H4.17、N9.65; foundC45.37、H4.14、N9.38.1H-NMR ・H.7.94（1H、td、J8.5 and 6、ArH3）、6.9（1H、m、ArH5 and ArH6）、6.09（1H、s、NHCH）、6.03（1H、s、NHCH2）、3.65（1H、dt、J11 and 5.5、CHNH）、3.35-3.29（2H、m、CH2NH）、2.52-2.45（1H、m、CH2CH）、2.03-1.95（2H、m、CH2CH2NH）、1.92-1.75（1H、m、CH2CH）.13C-NMR ・C169.7（CHCONH）、165.9（dd、J260 and 11.5、ArC2）、160.1（dd、J258 and 13、ArC4）、131.9（d、J10.5、ArC6）、123.9（dd、J12.5 and 3.5、CSO2）、111.6（dd、J22 and 4、ArC5）、105.8（t、J20、ArC3）、53.6（CHNH）、41.9（CH2NH）、28.9（CH2CHNH）、20.9（CH2CH2NH）.19F-NMR ・F-100.5（d、J12）、-103.3（d、J12）.HRMS（+ESI）C11H12F2N2O3SNa: calcd 313.0429; found 313.0440.
【０１０５】
実施例 8:  （S）-2,5-ジフルオロ-N-（2-オキソピペリジン-3-イル）ベンゼンスルホンアミド
【化１４】
2013528201.tif 000016
【０１０６】
0.234g白色の微粉末（54%）.mp183-185℃;［α］22D+26.30（c0.1、MeOH）;・max/cm-11692、1635（C=O、アミド）、1576（N-H、アミド）、1352（C-F）、1166（-SO2-）.Anal.（C11H12F2N2O3S）C、H、N: calcd C45.51、H4.17、N9.65; found C45.35、H4.11、N9.42.1H-NMR ・H.7.64（1H、ddd、J7、5 and 3、ArH6）、7.26（2H、tq、J8 and 4、ArH3 and ArH4）、5.91（2H、s、NHCH and NHCH2）、3.69（1H、dt、J11.5 and 6、CHNH）、3.36-3.31（2H、m、CH2NH）、2.55-2.47（1H、m、CH2CH）、2.04-1.95（2H、m、CH2CH2NH）、1.94-1.76（1H、m、CH2CH）.13C-NMR ・C171.3（CHCONH）、169.5（CCONH）、157.7（dd、J248 and 2、ArC5）、155.3（dd、J252 and 2、ArC2）、128.6（dd、J26 and 6、CSO2）、121.5（dd、J26 and 8、ArC3）、118.5（dd、J23.5 and 8.5、ArC4）、117.0（d、J28、ArC6）、53.7（CHNH）、41.9（CH2NH）、28.9（CH2CHNH）、20.9（CH2CH2NH）.19F-NMR ・F-114.6（d、J18）、-115.9（d.J19）.HRMS（+ESI）C11H12F2N2O3SNa: calcd 313.0429; found 313.0418.
【０１０７】
実施例 9:  （S）-2,6-ジフルオロ-N-（2-オキソピペリジン-3-イル）ベンゼンスルホンアミド
【化１５】
2013528201.tif 000017
【０１０８】
0.173g白色の粗い粉末（40%）.mp152-153℃;［α］22D+15.95（c0.1、MeOH）;・max/cm-11659、1621（C=O、アミド）、1493（N-H、アミド）、1326（C-F）、1161（-SO2-）.Anal.（C11H12F2N2O3S）C、H、N: calcd C45.51、H4.17、N9.65; found C45.18、H4.10、N9.20.1H-NMR ・H.7.54（1H、qt、J8.5 and 6、ArH4）、7.06（2H、t、J8.5、ArH3 and ArH5）、6.25（1H、s、NHCH）、5.93（1H、s、NHCH2）、3.79（1H、dd、J11.5 and 6、CHNH）、3.36-3.31（2H、m、CH2NH）、2.60-2.55（1H、m、CH2CH）、2.04-1.97（2H、m、CH2CH2NH）、1.87（1H、qd、J12 and 4、CH2CH）.13C-NMR ・C169.7（CHCONH）、159.8（dd、J260 and 4、ArC2 and ArC6）、134.5（t、J11、ArC4）、117.4（t、J16、CSO2）、113.0（dd、J23 and 4、ArC3 and ArC5）、53.8（CHNH）、41.8（CH2NH）、28.9（CH2CHNH）、20.9（CH2CH2NH）.19F-NMR ・F-107.5.HRMS（+ESI）C11H12F2N2O3SNa: calcd 313.0429; found 313.0417.
【０１０９】
実施例 10:  （S）-3,4-ジフルオロ-N-（2-オキソピペリジン-3-イル）ベンゼンスルホンアミド
【化１６】
2013528201.tif 000018
【０１１０】
0.200g白色の微粉末（46%）.mp153-155℃;［α］22D+25.60（c0.1、MeOH）;・max/cm-11656、1603（C=O、アミド）、1501（N-H、アミド）、1331（C-F）、1160（-SO2-）.Anal.（C11H12F2N2O3S）C、H、N: calcd C45.51、H4.17、N9.65; found C45.39、H4.11、N9.49.1H-NMR ・H.7.79（1H、dq、J7 and 2、ArH5）、7.73（1H、t、J8.5、ArH6）、7.34（1H、q、J8.5、ArH2）、6.00（2H、s、NHCH and NHCH2）、3.59（1H、dd、J11 and 6、CHNH）、3.36-3.32（2H、m、CH2NH）、2.52-2.45（1H、m、CH2CH）、2.03-1.97（2H、m、CH2CH2NH）、1.83（1H、qd、J12 and 4、CH2CH）.13C-NMR ・C169.6（CHCONH）、153.2（dd、J256 and 11、ArC3）、150.1（dd、J256 and 12、ArC4）、136.1（t、J4、CSO2）、124.4（q、J3.5、ArC6）、118.2（d、J18、ArC5）、117.4（d、J22、ArC2）、53.4（CHNH）、41.9（CH2NH）、28.7（CH2CHNH）、20.8（CH2CH2NH）.19F-NMR ・F-129.3（d、J18）、-133.5（d.J19）.HRMS（+ESI）C11H12F2N2O3SNa: calcd 313.0429; found 313.0417.
【０１１１】
実施例 11:  （S）-3,5-ジフルオロ-N-（2-オキソピペリジン-3-イル）ベンゼンスルホンアミド
【化１７】
2013528201.tif 000019
【０１１２】
0.193gオフホワイトの微粉末（44%）.mp170-174℃;［α］22D+21.10（c0.1、MeOH）;・max/cm-11658、1604（C=O、アミド）、1491（N-H、アミド）、1332（C-F）、1163（-SO2-）.Anal.（C11H12F2N2O3S）C、H、N: calcd C45.51、H4.17、N9.65; found C45.42、H4.12、N9.41.1H-NMR ・H.7.49（1H、ddt、J11、6.5 and 2.5、ArH4）、7.05（2H、tt、J8.5 and 2、ArH2 and ArH6）、6.09（2H、s、NHCH and NHCH2）、3.64（1H、dd、J11.5 and 6、CHNH）、3.36-3.32（2H、m、CH2NH）、2.52-2.45（1H、m、CH2CH）、2.04-1.96（2H、m、CH2CH2NH）、1.84（1H、qd、J12 and 6、CH2CH）.13C-NMR ・C169.6（CHCONH）、162.8（dd、J252 and 13、ArC3 and ArC5）、142.8（t、J8.5、CSO2）、110.9（dd、J21 and 7、ArC2 and ArC6）、108.5（t、J25、ArC4）、53.5（CHNH）、41.9（CH2NH）、28.6（CH2CHNH）、20.8（CH2CH2NH）.19F-NMR ・F-105.4.HRMS（+ESI）C11H12F2N2O3SNa: calcd 313.0429; found 313.0431.
【０１１３】
実施例 12:  （S）-3-（4'-エチルベンゼンスルホニルアミノ）-アゼパン-2-オン
【化１８】
2013528201.tif 000020
【０１１４】
（S）-3-アミノ-アゼパン-2-オン塩酸塩（0.55g、3.34mmoles）を、H2O（20mL）に溶解し、0°Cまで冷却した。ジクロロメタン（30mL）中の4-エチルベンゼンスルホニルクロリド（5mmole）、トリエチルアミン（1.3mL、9mmoles）を添加し、反応物を一晩撹拌した。ジクロロメタンで反応物を抽出し、pH2の緩衝剤（3×20mL）で洗浄し、真空で還元した。シリカゲルカラムクロマトグラフィーによって生成物を精製し（石油エーテル:酢酸エチル75:25〜0:100）、白色の固体0.17g（19%）として生成物を得た;δH（400MHz、CDCl3）7.72（d、2H、J8、CH-C-Et）、7.28（d、2H、J8、CH-C-SO2）、6.40（br.t、1H、J6、NH-C1）、6.18（d、1H、J5、NH-CH）、3.83-3.74（m、1H、CH-C4）、3.19-3.11（m、1H、H1）、3.03（ddd、1H、J16、11.5、5.5、H1）、2.08（q、2H、J8、H5）、2.15-2.09（m、1H、H4）、2.0-1.95（m、1H、H2）、1.80-1.77（m、1H、H3）、1.66-1.52（m、2H、H3&H4）、1.37-1.26（m、1H、H2） and 1.23（t、3H、J8、H6）;δC（100MHz、CDCl3）174.4（C=O）、149.5（C-Et）、137.2（C-SO2）、126.2（CHフェニル）、55.4（CH-NH）、42.2（C1）、33.4（C4）、28.8（C5）、28.6（C2）、28.0（C3） and 15.1（C6）;ESIm/z100%、319.1（MNa+） and 58%、614.6（M2Na+）;HRESIm/z（C114H20N2O3SNa+ requires 319.1087）found 319.1085;［α］25D（c=0.235、CHCl3）+128.79.
【０１１５】
実施例 13:  （R）-3-（4'-エチルベンゼンスルホニルアミノ）-テトラヒドロピリジン-2-オン
【化１９】
2013528201.tif 000021
【０１１６】
（R）-3-アミノ-γ-ラクタム（4mmoles）をH2O（20mL）に溶解し、0°Cまで冷却した。ジクロロメタン（25mL）中の4-エチルベンゼンスルホニルクロリド（4mmoles）、トリエチルアミン（1.7mL、12mmoles）を添加し、一晩反応を撹拌した。ジクロロメタンで反応物を抽出し、pH2の緩衝剤（3×20mL）で洗浄し、真空で還元した。生成物をシリカゲルカラムクロマトグラフィーによって精製し（石油エーテル:酢酸エチル:メタノール75:25:0〜0:90:10）、白色の固体0.25g（21%）として生成物を得た;δC（100MHz、CDCl3）170.0（C=O）、149.7（C-Et）、136.2（C-SO2）、129.1、128.6、127.5（CHフェニル）、55.3（CH-NH）、41.9（C1）、28.8（C3）、28.5（C4）、20.8（C2） and 15.1（C5）;ESIm/z100%、305.1（MNa+） and 56%、586.7（M2Na+）;HRESIm/z（C13H18N2O3SH+ requires 283.1111）found 283.1114;
【０１１７】
実施例 14:  （S）-3-（4'-ブチルベンゼンスルホニルアミノ）-アゼパン-2-オン
【化２０】
2013528201.tif 000022
【０１１８】
（S）-3-アミノ-アゼパン-2-オン塩酸塩（1.15g、7mmoles）を、H2O（20mL）に溶解し、0°Cまで冷却した。ジクロロメタン（30mL）中の4-ブチルベンゼンスルホニルクロリド（7mmoles）、トリエチルアミン（2.95mL、21mmoles）を添加し、反応を一晩撹拌した。ジクロロメタンで反応物を抽出し、pH2の緩衝剤（3×20mL）で洗浄し真空で還元した。生成物をシリカゲルカラムクロマトグラフィーによって精製し（石油エーテル:酢酸エチル75:25〜0:100）、白色の固体として生成物を得た。δH（400MHz、CDCl3）7.76（d、2H、J8、CH-CBu）、7.31（d、2H、J7.5、CH-C-SO2）、6.76（br.t、1H、J6、NH-C1）、6.28（d、1H、J5、NH-CH）、3.85（ddd、1H、J11、5、2、CH-C4）、3.24-3.16（m、1H、H1）、3.06（ddd、1H、J15、12、5、H1）、2.68（t、2H、J8、H5）、2.18-2.11（m、1H、H4）、2.03-1.93（m、1H、H3）、1.84-1.73（m、1H、H2）、1.69-1.55（m、4H、H3、H4&H6）、1.38（sextet、2H、J7.5、H7）、1.36-1.25（m、1H、H2） and 0.95（t、3H、J7.5、H8）;δC（100MHz、CDCl3）175.6（C=O）、148.3（C-Bu）、137.1（C-SO2）、129.1、127.0（CHフェニル）、55.3（CH-NH）、42.1（C1）、35.5（C4）、33.3（C5）、33.1（C3）、28.6（C6）、28.0（C7）、22.3（C2） and 13.9（C8）;ESIm/z100%、670.6（M2Na+）、86%、347.1（MNa+） and 43%、325.1（MH+）.
【０１１９】
実施例 15:  （S）-3-（4'-tert-ブチルベンゼンスルホニルアミノ）-アゼパン-2-オン
【化２１】
2013528201.tif 000023
【０１２０】
（S）-3-アミノ-アゼパン-2-オン塩酸塩（2.35g、9.18mmoles）をH2O（20mL）に溶解し、0°Cまで冷却した。THF（40mL）中の4-tブチルベンゼンスルホニルクロリド（1.92g、8.25）、トリエチルアミン（3.5mL、25mmoles）を添加し、反応物を一晩撹拌した。真空でTHFを除去し、生成物を酢酸エチルに溶解し、pH2の緩衝剤（3×20mL）で洗浄し、真空で還元した。生成物をシリカゲルカラムクロマトグラフィーによって精製し（石油エーテル:酢酸エチル50:50:0〜0:80:20）、白色の固体0.67g（25%）として生成物を得た;mp 189-190℃; δH（400MHz、CDCl3）7.74（d、2H、J8.5、CH-C-tBu）、7.47（d、2H、J8.5、CH-C-SO2）、6.27（br.t、1H、J6.5、NH-C1）、6.19（d、1H、J4.5、NH-CH）、3.88-3.81（m、1H、CH-C4）、3.21-3.12（m、1H、H1）、3.05（ddd、1H、J14.5、11.5、5、H1）、2.19-2.13（m、1H、H4）、2.02-1.96（m、1H、H3）、1.81-1.74（m、1H、H2）、1.71-1.54（m、2H、H3&H4）、1.33-1.29（m、1H、H2） and 1.31（s、3H、C（CH3）3）;δC（100MHz、CDCl3）175.5（C=O）、156.4（C-C（CH3）3）、137.0（C-C=O）、126.8、126.1（CHフェニル）、55.4（CH-NH）、42.3（C1）、35.2（C（CH3）3）、33.5（C4）、31.1（C（CH3）3） and 28.7（C2）、28.0（C3）;υmax/cm-1:3219（NHインドール）、2968（C-H）、1668（アミドC=O）、1594（芳香族）、1361（SO2） and 1159（SO2）; ESIm/z100%、347.1（MNa+） and 26%、670.6（M2Na+）;HRESIm/z（C16H24N2O3SH+ requires 325.1580） found 325.1580;［α］23D（c=0.532、CHCl3）+109.68.
【０１２１】
実施例 16:  （S）-3-（4'-tert-ブチルベンゼンスルホニルアミノ）-テトラヒドロピリジン-2-オン
【化２２】
2013528201.tif 000024
【０１２２】
（S）-3-アミノ-γ-ラクタム（10mmoles）を、H2O（40mL）に溶解し、0°Cまで冷却した。ジクロロメタン（25mL）中の4-tブチルベンゼンスルホニルクロリド（1.88g、8.08mmoles）、トリエチルアミン（3.5mL、25mmoles）を添加し、反応物を一晩撹拌した。ジクロロメタン（3×20mL）で反応物を抽出し、有機層をpH2の緩衝剤（3×20mL）で洗浄し、真空で還元した。生成物をシリカゲルカラムクロマトグラフィーによって精製し（石油エーテル:酢酸エチル:メタノール50:50:0〜0:80:20）、白色の固体0.76g（30%）として生成物を得た; mp155-156℃; δH（400MHz、CDCl3）7.79（d、2H、J8.5、CH-C-tBu）、7.47（d、2H、J8.5、CH-SO2）、6.38（br.s、1H、NH-C1）、5.98（d、1H、J3.5、NH-CH）、3.51-3.46（m、1H、CH-C4）、3.28-3.22（m、2H、H1）、2.49-2.42（m、1H、H3）、1.93-1.87（m、1H、H2）、1.86-1.67（m、2H、H2&H3） and 1.31（s、9H、C（CH3）3）;δC（100MHz、CDCl3）170.1（C=Oラクタム）、156.5（C-C（CH3）3）、136.0（C-SO2）、127.1、126.2（CHフェニル）、53.2（CH-NH）、41.8（C1）、35.2（C（CH3）3）、31.1（C（CH3）3）、28.4（C3） and 20.7（C2）; ESIm/z100%、333.1（MNa+） and 44%、642.6（M2Na+）; υmax/cm-1:3220（NH）、2946（C-H）、1665、1596（芳香族）、1331（SO2） and 1134（SO2）; HRESIm/z（C15H22N2O3SH+ requires 311.1424）found 311.1425;［α］23D（c=0.525、CHCl3）+122.92.
【０１２３】
実施例 17:  （R）-3-（4'-tert-ブチルベンゼンスルホニルアミノ）-テトラヒドロピリジン-2-オン
【化２３】
2013528201.tif 000025
【０１２４】
（R）-3-アミノ-γ-ラクタム（2.5mmoles）を、H2O（30mL）に溶解し、0°Cまで冷却した。ジクロロメタン（25mL）中の4-tブチルベンゼンスルホニルクロリド（0.61g、2.62mmoles）、トリエチルアミン（1.1mL、7.5mmoles）を添加し、反応物を一晩撹拌した。ジクロロメタン（3×20mL）で反応物を抽出し、有機層をpH2の緩衝剤（3×20mL）で洗浄し、真空で還元した。生成物をシリカゲルカラムクロマトグラフィーによって精製し（石油エーテル:酢酸エチル75:25〜0:100）、白色の固体0.33g（43%）として生成物を得た;δH（400MHz、CDCl3）7.80（d、2H、J8.5、CH-C-tBu）、7.50（d、2H、J8.5、CH-SO2）、5.99（br.s、1H、NH-C1）、5.90（br.d、1H、J2、NH-CH）、3.51-3.46（m、1H、CH-C4）、3.31-3.26（m、2H、H1）、2.53-2.43（m、1H、H3）、1.96-1.89（m、1H、H2）、1.85-1.69（m、2H、H2&H3） and 1.32（s、9H、C（CH3）3）;δC（100MHz、CDCl3）169.9（C=Oラクタム）、156.6（C-C（CH3）3）、135.8（C-SO2）、127.2、126.2（CHフェニル）、53.3（CH-NH）、42.0（C1）、35.2（C（CH3）3）、31.1（C（CH3）3）、28.5（C3） and 20.8（C2）;ESIm/z 37%、642.6（M2Na+）;HRESIm/z（C15H22N2O3SH+ requires 311.1424）found 311.1427;［α］25D（c=0.114、CHCl3）-116.52.
【０１２５】
実施例 18:  （S）-3-（4'-オクチルベンゼンスルホニルアミノ）-アゼパン-2-オン
【化２４】
2013528201.tif 000026
【０１２６】
（S）-3-アミノ-アゼパン-2-オン塩酸塩（0.73g、4.45mmoles）をH2O（30mL）に溶解し、0°Cまで冷却した。ジクロロメタン（25mL）中の4-オクチルベンゼンスルホニルクロリド（2.2mmoles）、トリエチルアミン（0.93mL、6.6mmoles）を添加し、反応物を一晩撹拌した。ジクロロメタン（3×20mL）で反応物を抽出し、有機層をpH2の緩衝剤（3×20mL）で洗浄し、真空で還元した。生成物をシリカゲルカラムクロマトグラフィーによって精製し（石油エーテル:酢酸エチル50:5〜0:100）、白色の固体0.49g（59%）として生成物を得た;δH（400MHz、CDCl3）7.71（d、2H、J8.5、CH-C-Oct）、7.25（d、2H、J8.5、CH-CSO2）、6.68（dd、1H、J7.5、5,5NH-C1）、6.22（d、1H、J5、NH-CH）、3.81（ddd、1H、J2、5、11CH-C4）、3.20-3.311（m、1H、H1）、3.02（ddd、1H、J16、11.5、5、H1）、2.63（t、2H、J8、H5）、2.12-2.07（m、1H、H4）、1.98-1.93（m、1H、H3）、1.79-1.72（m、1H、H2）、1.65-1.55（m、4H、H3、H4 & H5）、1.33-1.21（m、11H、H2、H7、H8、H9、H10 & H11） and 0.86（t、3H、J7、H12）;δC（100MHz、CDCl3）174.6（C=Oラクタム）、148.4（C-Oct）、137.2（C-SO2）、129.1、128.8（CHフェニル）、127.0（CHフェニル）、55.3（CH-NH）、42.1（C1）、35.8（C4）、33.3（C5）、31.8（C3）、31.0（C6）、29.4（C7）、29.2（C8）、28.6（C9）、28.0（C10）、22.7（C2）、22.6（C11） and 14.1（C12）; ESIm/z100%、403.2（MNa+） and 40%、381.2（MH+）;HRESIm/z（C20H32N2O3SH+ requires 381.2206）found 381.2205.
【０１２７】
実施例 19:  （S）-3-（4'-オクチルベンゼンスルホニルアミノ）-テトラヒドロピリジン-2-オン
【化２５】
2013528201.tif 000027
【０１２８】
（S）-3-アミノ-γ-ラクタム（2.5mmoles）をH2O（40mL）に溶解し、0°Cまで冷却した。ジクロロメタン（25mL）中の4-オクチルベンゼンスルホニルクロリド（1.34mmoles）、トリエチルアミン（0.57mL、4mmoles）を添加し、反応物を一晩撹拌した。ジクロロメタン（3×20mL）で反応物を抽出し、有機層をpH2の緩衝剤（3×20mL）で洗浄し、真空で還元した。生成物をシリカゲルカラムクロマトグラフィーによって精製し（石油エーテル:酢酸エチル:メタノール50:50:0〜0:80:20）、白色の固体0.31g（63%）として生成物を得た; mp98-99℃;δH（400MHz、CDCl3）7.76（d、2H、J、CH-C-Oct）、7.27（d、2H、J8、CH-CSO2）、6.50（br.s、1H、NH-C1）、6.00（d、1H、J2.5、NH-CH）、3.51-3.45（m、1H、CH-C3）、3.27-3.31（m、2H、H1）、2.62（t、2H、J7、H4）、2.45-2.36（m、1H、H3）、1.92-1.85（m、1H、H2）、1.80-1.67（m、2H、H2&H3）、1.62-1.55（m、2H、H5）、1.31-1.20（m、10H、H6、H7、H8、H9&H10） and 0.85（t、3H、J7、H11）;δC（100MHz、CDCl3）170.1（C=Oラクタム）、148.5（C-Oct）、136.3（C-SO2）、129.1（CHフェニル）、127.3（CHフェニル）、53.2（CH-NH）、41.8（C1）、35.9（C4）、31.8（C5）、31.0（C3）、29.4（C6）、29.3（C7）、29.2（C8）、28.4（C9）、22.7（C10）、20.7（C2） and 14.1（C11）;ESIm/z100%、389.2（MNa+） and 36%、367.2（MH+）;HRESIm/z（C19H30N2O3SNa+ requires 389.1869）found 389.1865;υmax/cm-1: 3207（NH）、2920（C-H）、1664、（C=O）、1544（芳香族）、1310（SO2） and 1188（SO2）;［α］24D（c=0.515、CHCl3）+99.97.
【０１２９】
実施例 20:  （R）-3-（4'-オクチルベンゼンスルホニルアミノ）-テトラヒドロピリジン-2-オン
【化２６】
2013528201.tif 000028
【０１３０】
（R）-3-アミノ-γ-ラクタム（2.5mmoles）をH2O（30mL）に溶解し、0°Cまで冷却した。ジクロロメタン（25mL）中の4-オクチルベンゼンスルホニルクロリド（1.34mmoles）、トリエチルアミン（0.57mL、4mmoles）を添加し、反応物を一晩撹拌した。ジクロロメタン（3×20mL）で反応物を抽出し、有機層をpH2の緩衝剤（3×20mL）で洗浄し、真空で還元した。生成物をシリカゲルカラムクロマトグラフィーによって精製し（石油エーテル:酢酸エチル50:50〜0:100）、白色の固体0.22g（45%）として生成物を得た;δH（400MHz、CDCl3）7.76（d、2H、J8、CH-C-Oct）、7.26（d、2H、J8、CH-CSO2）、6.85（br.s、1H、NH-C1）、6.14（d、1H、J3、NH-CH）、3.52-3.46（m、1H、CH-C3）、3.23-3.16（m、2H、H1）、2.62（t、2H、J7、H4）、2.38-2.31（m、1H、H3）、1.87-1.81（m、1H、H2）、1.74-1.65（m、2H、H2&H3）、1.62-1.54（m、2H、H5）、1.32-1.20（m、10H、H6、H7、H8、H9&H10） and 0.84（t、3H、J7、H11）;δC（100MHz、CDCl3）170.2（C=Oラクタム）、148.4（C-Oct）、136.5（C-SO2）、129.0（CHフェニル）、127.3（CHフェニル）、53.2（CH-NH）、41.5（C1）、35.8（C4）、32.0（C5）、31.8（C3）、29.4（C6）、29.3（C7）、29.1（C8）、25.5（C9）、22.7（C10）、20.7（C2） and 14.1（C11）;ESIm/z15%、389.2（MNa+）;HRESIm/z（C19H30N2O3SNa+ requires 389.1869）found 389.1872;［α］25D（c=0.238、CHCl3）-102.94.
【０１３１】
本発明の生成物の薬理試験
Ａ．MCP-1誘発白血球遊走の抑制
アッセイ原理
本発明の化合物の生物活性は、インビトロ（in vitro）での白血球遊走の任意の広範囲の機能解析を使用して説明することができる。それは、Boydenチャンバー法及び関連のトランスウェル遊走アッセイ、アガロース下遊走アッセイ及び直接的可視化チャンバー法、例えば、Dunn Chamber等を含むがそれらに限定されない。
【０１３２】
例えば、ケモカイン（他の化学誘引物質でない）に応答した血球遊走の抑制を証明するために、Neuroprobe（Gaithersburg, MD, USA）由来の96ウェル型のマイクロトランスウェルアッセイシステムを使用した。原則として、このアッセイは、多孔質膜によって分離された２つのチャンバーから成る。化学誘引物質を、下部のコンパートメント中に置き、上部コンパートメントに細胞を置く。37℃の所定期間のインキュベーション後、細胞は化学誘引物質の方へ移動し、下部のコンパートメント中の細胞の数は、化学誘引物質活性と比例する（一連の対照に対して）。
【０１３３】
このアッセイは、様々な異なる白血球群と使用できる。例えば、フレッシュに調製されたヒト末梢血白血球を使用できる。あるいは、当業者に周知の方法、例えば、密度勾配遠心分離又は磁性ビーズ分離法等を使用して、多形核細胞又はリンパ球又は単球を含む血球サブセットを調製できる。あるいは、単球のモデルとしてのTHP-1細胞又は未処理T細胞のモデルとしてのJurkat細胞を含むがそれらに限定されない、ヒト末梢血白血球のモデルとして広範囲に確認されている不死細胞株を使用できる。
【０１３４】
ケモカイン誘発白血球遊走の抑制を証明するためにアッセイの様々な条件が許容されるが、本明細書中では特定の実施例を供する。
【０１３５】
材料
トランスウェル遊走系をNeuroprobe、Gaithersburg、MD、USAによって製造する。
【０１３６】
使用するプレートは、ChemoTxプレート（Neuroprobe 101-8）及び30 μlの透明プレート（Neuroprobe MP30）である。
【０１３７】
Geys’ Balanced Salt 溶液をSigma（Sigma G-9779）から購入する。
【０１３８】
脂肪酸不含有BSAを、Sigma（Sigma A-8806）から購入する。
【０１３９】
MTT、すなわち、3-（4,5-ジメチルチアゾール-2-イル）-2,5-ジフェニルテトラゾリウムブロミドを、Sigma（Sigma M-5655）から購入する。
【０１４０】
フェノールレッド不含有のRPMI-1640を、Sigma（Sigma R-8755）から購入する。
【０１４１】
THP-1細胞株（European Cell culture Collection）を白血球細胞集団として使用した。
【０１４２】
試験プロトコール
MCP-1誘発白血球遊走に関して、本発明の化合物を試験するために、以下の手順を使用する。
【０１４３】
まず、上部コンパートメントに投入する細胞懸濁液を調製する。THP-1細胞を、遠心分離（770 x g; 4 mins）によってペレット状にし、1mg/ml BSA （GBSS + BSA）と共にGeys Balanced Salt溶液で洗浄する。この洗浄を繰り返し、細胞を再度ペレット状とし、例えば、標準血球計算器を使用したカウントのため少容量のGBSS + BSA中で再懸濁する。
【０１４４】
GBSS+BSAの量は、続いて存在する細胞の数に基づいて調整し、細胞をGBSS+BSA１mlあたり最終密度4.45 x 106 細胞とする。これにより、プレートの上部チャンバーに注ぐ溶液の各25μlに100,000 THP-1細胞の存在が保証される。
【０１４５】
MCP-1誘発遊走を抑制する能力に関して単一化合物を試験するために、２ロットの細胞を調製する必要がある。4.45 x 106 細胞/mlのTHP-1細胞の懸濁液を、２つのポットに分割する。第一のポットへ、適したビヒクル中で、適した最終濃度で試験用阻害剤を添加する（例えば、1%以下のDMSOの1μMで）。第二のポットへ、同量のGBSS+BSA及び適したビヒクル（例えば、1%以下のDMSO）を、対照として添加する。
【０１４６】
次に、下部のコンパートメントに注ぐ化学誘引物質溶液を調製する。MCP-1をGBSS+BSA中で希釈し、最終濃度25ng/mlとする。細胞懸濁液のため、これを２つのポットに分ける。第一のポットへ、試験化合物を、細胞懸濁液への添加と同一の最終濃度まで添加し、一方他のポットへ、同量のGBSS+BSA及び適したビヒクル（例えば、1%以下のDMSO）を添加する。
【０１４７】
下部のコンパートメントのための溶液中のMCP-1の最終濃度、及び上部のコンパートメントの細胞の最終濃度を確立する場合に、次の化合物の添加を行うために添加に必要な液体の量を考慮する必要があることに留意されたい。
【０１４８】
下部のウェル用化学誘引物質溶液及び上部チャンバー用細胞溶液を調製したら即座に、遊走チャンバーを組み立てるべきである。適した化学誘引物質溶液を29 μl、チャンバーの下部のウェル中に注ぐ。アッセイは、少なくとも３通りの条件測定で行うべきである。下部のチャンバー全てが充填されたら、製造者の指示に従って多孔膜をチャンバーに適用する。最後に、上部の各チャンバーに適した細胞溶液を25μl適用する。蒸発を防ぐためにプラスチック性の蓋をかぶせ、装置全体を覆う。
【０１４９】
組み立てたチャンバーを、37℃、5% CO2で2時間インキュベートする。GBSS+BSA中の細胞の懸濁液もまた、チューブ中で同一条件下でインキュベートし、これらの細胞は各条件下で下部のチャンバーへ遊走した細胞の数を測定するための検量線を作成するために使用できる。
【０１５０】
インキュベーションの終わりに、液体細胞懸濁液を上部チャンバーから穏やかに除去し、PBS中の20μlの氷冷の20mM EDTAを上部チャンバーに添加し、装置を4℃で15分間インキュベートする。この手順により、任意の細胞の膜の下面への付着を生じ、下部チャンバーへ入る。
【０１５１】
このインキュベーション後に、フィルターにGBSS+BSAを念入りに流し、EDTAを流し落とし、続いてフィルターを除去する。
【０１５２】
各条件下で下部のチャンバーへ遊走した細胞数を続いて、直接カウント、蛍光又は放射性マーカーで標識する方法又は生体色素の使用を介する方法、を含む多数の方法によって測定できる。典型的には、我々は生体色素MTTを利用する。3 μlのストックMTT溶液を各ウェルに添加し、続いてプレートを37℃で1〜2時間インキュベートする。この間、細胞内の脱水素酵素は可溶性MTTを分光測定で定量化できる不溶性青ホルマザン生成物へ変換する。
【０１５３】
並行して、8ポイント検量線を設定する。各上部チャンバーへ添加した細胞の数（100,000）から、GBSS+BSA中の2倍の段階希釈で減少させ、細胞を3μlのMTTストック溶液を添加した25 μl中のプレートへ添加する。検量線プレートを、遊走プレートのサイドに沿ってインキュベートする。
【０１５４】
このインキュベーションの終わりに、沈殿したホルマザン生成物をかき乱さないように注意しながら、液体を下部のチャンバーから丁寧に除去する。短時間の風乾後、20μlのDMSOを各下部チャンバーに添加し、青色色素を可溶化し、96ウェルプレートリーダーを使用して吸光度を595nmで測定する。続いて、各ウェルの吸光度を検量線へ補間し、各下部チャンバーの細胞数を評価する。
【０１５５】
MCP-1が25ng/mlで存在した下部のコンパートメントに達した細胞の平均数から、MCP-1を添加しなかったウェルの下部のコンパートメントに達した細胞の平均数を減算することによって、MCP-1刺激遊走を測定する。
【０１５６】
MCP-1誘発遊走を比較することによって、様々な濃度の試験物質の存在下又は不存在下で生じた試験物質の影響を算出する。典型的には、化合物の存在によってブロックされた総MCP-1誘発遊走の割合として、遊走の抑制を表す。大抵の化合物に関して、様々な異なる化合物濃度（典型的には、活性の低い化合物の場合、1nM〜1μMの範囲又はそれ以上）で生じるMCP-1誘発遊走の抑制を測定することによって、用量反応グラフを作成する。各化合物の阻害活性を続いて、50%までのMCP-1-誘発遊走の減少に必要とされる化合物濃度として表す（ED50 濃度）。
【０１５７】
結果
参考例1及び2の化合物を試験し、この試験で100 nM以下のED50を有することが示された。
【０１５８】
Ｂ．インビトロ（in vivo）でのアッセイ
本発明の代表的な化合物の抗炎症効果を、マウス致死量以下の内毒血症モデルを使用して試験した。このモデルは、インビトロ（in vivo）での化合物の抗炎症性効果を示すために広く使用される（例えば、Fox et al., 2009, J Med Chem. 52（11）: 3591-3595）。
【０１５９】
端的には、斯かる方法は次の通りである。メスCD1マウス（28〜30g、~7週齢）に、内毒素（LPS）誘発の１時間前に１用量10ml/kgで経口経管栄養によって、無菌濾過した1% CMC中のそれぞれの治療量を投与した。内毒素不含有PBS中のLPSの675,000内毒素ユニット（大腸菌株0111:B4（Code L4130））を含む内毒素誘発を、腹腔内経路によって注射した。マウスを２時間放置し、続いて局所麻酔下で放血し、血液を採取した。この末端血から血清を調製し、分注し-20℃で保存した。製造者（R and D Systems）の説明書に沿ってELISAによって、血清TNF-αレベルを測定した。
【０１６０】
各群８匹の動物に処理し、各群の最高及び最低TNF-αレベルの動物のデータを除去し、平均値及び標準誤差を残りの６匹の動物について記録した。
【０１６１】
経口経管栄養によって投与した（S）-3-（4'-トリフルオロメチルベンゼンスルホニルアミノ）-テトラヒドロピリジン-2-オン（実施例 4の（S）-N-（2-オキソピペリジン-3-イル）-4-（トリフルオロメチル）-ベンゼンスルホンアミドとしても周知の化合物を参照）の単回用量は、毒素刺激TNF-アルファレベルを60〜70%まで抑制した（図2を参照）。（S）-3-（4'-トリフルオロメチルベンゼンスルホニルアミノ）-テトラヒドロピリジン-2-オンを使用した、インビトロ（in vivo）でのTNF-αレベルへの抗炎症効果は、正の対照化合物サリドマイドの最大有効用量と定量的に同様であった。サリドマイドは、ハンセン病の治療に関して抗炎症剤として臨床上使用され、TNF-αのレベルを低下する。（S）-3-（4'-トリフルオロメチルベンゼンスルホニルアミノ）-テトラヒドロピリジン-2-オンのインビトロ（in vivo）での抗炎症効果は、前記ソマトタキシン（somatotaxin）（S）-3-（アダマンタン-1-カルボニル）アミノカプロラクタムともまた同様であった（国際公開第WO2006/016152号を参照）。
【０１６２】
これらのデータは、本発明の化合物が、炎症因子を伴う広範囲の疾患の治療のために使用される他の抗炎症剤に匹敵する、インビトロ（in vivo）で臨床上有用な抗炎症活性を有することを示す。
【図１−１】
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【図１−２】
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【図２】
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【国際調査報告】
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