(57)【要約】少なくとも１つの検出器を使用してサンプルを分析する方法および装置が開示される。【選択図】図１
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【特許請求の範囲】
【請求項１】
サンプルを分析する方法であって、
（ａ）液体クロマトグラフィーシステムの中の１つまたは複数の検出器からの信号を生成する工程であって、前記信号が少なくとも１つの検出器からの検出応答成分を含む工程と、
（ｂ）前記信号の変化に応じて画分収集器の中の新しいサンプル画分を収集する工程と、
を含み、
前記信号の振幅は、前記液体クロマトグラフィーシステムによって修正される、方法。
【請求項２】
請求項１記載の方法において、
前記信号の振幅は、電子的手段、またはデジタル手段によって修正される、方法。
【請求項３】
請求項１記載の方法において、
前記信号の振幅は、前記クロマトグラフィーシステムのコンポーネントを使用する前記信号の利得の変化によって修正される、方法
【請求項４】
請求項１記載の方法において、
前記信号の振幅は、コンピュータソフトウェアまたはコンピュータで読取り可能な媒体によって修正される、方法。
【請求項５】
請求項１記載の方法において、
前記信号の振幅は、光学手段によって修正される、方法。
【請求項６】
請求項１記載の方法において、
前記信号の振幅は、前記クロマトグラフィーシステムの１つまたは複数の検出器の光源によって修正される、方法。
【請求項７】
請求項１記載の方法において、
前記信号の振幅は、前記クロマトグラフィーシステムの１つまたは複数の検出器でそれぞれ異なる光源を使用することによって修正される、方法。
【請求項８】
請求項１記載の方法において、
前記信号の振幅は、前記クロマトグラフィーシステムの１つまたは複数の検出器の光源の強度を変更することによって修正される、方法。
【請求項９】
請求項１記載の方法において、
前記信号の振幅は、前記クロマトグラフィーシステムの１つまたは複数の検出器のそれぞれで複数の光源を使用することによって修正される、方法。
【請求項１０】
請求項１記載の方法において、
前記信号の振幅は、流体手段によって修正される、方法。
【請求項１１】
請求項１記載の方法において、
前記信号の振幅は、前記クロマトグラフィーシステムの１つまたは複数の検出器に運ばれる、サンプル量の変更によって修正される、方法。
【請求項１２】
請求項１の方法において、
（ａ）少なくとも１つの検出器と流体連通して位置する、流体移動デバイスを介して、前記液体クロマトグラフィーシステムの少なくとも１つの検出器へ流れる流体を能動的に制御する工程をさらに含む、方法。
【請求項１３】
請求項１２記載の方法において、
前記信号の振幅は、前記流体移動デバイスの中を通るサンプルの流量の変更を含む、前記クロマトグラフィーシステムの１つまたは複数の検出器に運ばれる、サンプル量の変更によって修正される、方法。
【請求項１４】
請求項１２記載の方法において、
前記信号の振幅は、前記流体移動デバイスの中を通るサンプルの流路の変更を含む、前記クロマトグラフィーシステムの１つまたは複数の検出器に運ばれる、サンプル量の変更によって修正される、方法。
【請求項１５】
請求項１２記載の方法において、
前記信号の振幅は、複数の流体移動デバイスの使用を含む、前記クロマトグラフィーシステムの１つまたは複数の検出器に運ばれる、サンプル量の変更によって修正される、方法。
【請求項１６】
請求項１２記載の方法において、
前記信号の振幅は、交換可能な流体移動デバイスコンポーネントの使用を含む、前記クロマトグラフィーシステムの１つまたは複数の検出器に運ばれる、サンプル量の変更によって修正される、方法。
【請求項１７】
請求項１２記載の方法において、
前記信号の振幅は、前記流体移動デバイスの動作条件の変更を含む、前記クロマトグラフィーシステムの１つまたは複数の検出器に運ばれる、サンプル量の変更によって修正される、方法。
【請求項１８】
請求項１２記載の方法において、
前記信号の振幅は、前記流体移動デバイスの少なくとも１つのコンポーネントの形状またはサイズの変更を含む、前記クロマトグラフィーシステムの１つまたは複数の検出器に運ばれる、サンプル量の変更によって修正される、方法。
【請求項１９】
請求項１２記載の方法において、
前記流体移動デバイスは、シャトルバルブ、スプリッタ、またはポンプを含む、方法。
【請求項２０】
請求項１９記載の方法において、
前記信号の振幅は、１つまたは複数のスプリッタコンポーネント、シャトルバルブコンポーネント、またはポンプコンポーネントの形状またはサイズの変更を含む、前記クロマトグラフィーシステムの１つまたは複数の検出器に運ばれる、サンプル量の変更によって修正される、方法。
【請求項２１】
請求項１９記載の方法において、
前記信号の振幅は、少なくとも１つのシャトルバルブ回転子または固定子の形状またはサイズの変更、少なくとも１つの固定子または回転子チャンバーまたはチャネルの形状またはサイズの変更、またはこれらの組み合わせによる変更を含む、前記クロマトグラフィーシステムの１つまたは複数の検出器に運ばれる、サンプル量の変更によって修正される、方法。
【請求項２２】
請求項１記載の方法において、
前記信号の振幅は、検出器の設計によって修正される、方法。
【請求項２３】
請求項２２記載の方法において、
前記信号の振幅は、前記クロマトグラフィーシステムのそれぞれの検出器に対して異なるコンポーネントを有する複数の検出器の使用を含む、検出器の設計によって修正される、方法。
【請求項２４】
請求項２２記載の方法において、
前記信号の振幅は、前記クロマトグラフィーシステムのそれぞれの検出器に対して、交換可能な検出器、または検出器のコンポーネントの使用を含む、検出器の設計によって修正される、方法。
【請求項２５】
請求項１記載の方法において、
前記信号の振幅は、前記クロマトグラフィーシステムの１つまたは複数の検出器に到達するサンプルの物理的特性によって修正される、方法。
【請求項２６】
請求項２５記載の方法において、
前記検出器は、ＥＰＤを含み、および、サンプル粒子のサイズを大きくすること、小さなサンプル粒子の数を減少させること、またはこれらの組み合わせによって変更される物理的特性を有する、方法。
【請求項２７】
請求項２５記載の方法において、
前記検出器は、ＥＰＤを含み、および少なくとも１つの異なるインパクター；異なるドリフトチューブ；異なるネブライザーガス流、ネブライザーガスタイプ、ネブライザーガス温度；異なる入口、ドリフトチューブ、光学部品、または排気温度；若しくはこれらの組み合わせの使用によって変更される物理的特性を有する、方法。
【請求項２８】
請求項２５記載の方法において、
前記検出器は、ＥＰＤを含み、および、少なくとも１つの異なる平板インパクター、スクリーンインパクター、球状インパクター、エルボーインパクター、３次元インパクター、または他の非線形流れ構造インパクター、またはこれらの組み合わせの使用によって変更される物理的特性を有する、方法。
【請求項２９】
請求項１記載の方法において、
前記信号の振幅は、ネブライザー、ドリフトチューブなどの検出器（単数または複数）の機械要素、または光学ブロックの設計、またはこれらの組み合わせを変更することによって修正される、方法。
【請求項３０】
請求項１記載の方法において、
前記信号の振幅は、少なくとも１つの検出器の動作条件の変更によって修正される、方法。
【請求項３１】
請求項１記載の方法において、
少なくとも１つの検出器は、蒸発性光散乱検出器（ＥＬＳＤ）を含む、方法。
【請求項３２】
請求項１記載の方法において、
前記液体クロマトグラフィーシステムは、２つ以上の検出器を含む、方法。
【請求項３３】
請求項１記載の方法において、
前記液体クロマトグラフィーシステムは、少なくとも１つのＵＶ検出器、少なくとも１つの蒸発性光散乱検出器（ＥＬＳＤ）、少なくとも１つの質量スペクトル検出器（ＭＳ）、少なくとも１つの凝集核形成光散乱検出器（ＣＮＬＳＤ）、少なくとも１つのコロナ放電検出器、少なくとも１つの屈折率検出器（ＲＩＤ）、少なくとも１つの蛍光検出器（ＦＤ）、少なくとも１つのカイラル検出器（ＣＤ）、少なくとも１つの電気化学検出器（ＥＤ）、またはそれらの組み合わせのいずれかから選択された少なくとも１つの検出器を含む、方法。
【請求項３４】
請求項１から請求項３３のいずれか一項記載の１つまたは複数の方法の工程を実施するための、コンピュータ−で実行可能な命令が記憶されたコンピュータで読取り可能な媒体。
【請求項３５】
請求項１から請求項３３のいずれかの方法を使用してサンプルを分析できる、装置。
【請求項３６】
請求項１から請求項３３のいずれかの方法を使用して、サンプルの分析に貢献することができる、装置または装置コンポーネント。
【請求項３７】
請求項３４のコンピュータで読取り可能な媒体を使用してサンプルの分析に貢献することができる、装置または装置コンポーネント。
【請求項３８】
サンプルを分析する方法であって、
（ａ）液体クロマトグラフィーシステムの中の１つまたは複数の検出器からの信号を生成する工程であって、前記信号が少なくとも１つの検出器からの検出応答成分を含む工程と、
（ｂ）前記信号の変化に応じて画分収集器の中の新しいサンプル画分を収集する工程と、
を含み、
前記サンプル画分は、約１００ｍｇ以下である、方法。
【請求項３９】
請求項３８記載の方法において、
前記サンプル画分は、約１００ｍｇ以下から少なくとも約０．１ｍｇである、方法。
【請求項４０】
請求項３８記載の方法において、
前記サンプル画分は、約９０ｍｇ以下である、方法。
【請求項４１】
請求項３８記載の方法において、
前記検出器は、破壊式検出器および非破壊式検出器を含む、方法。
【請求項４２】
請求項３８記載の方法において、
前記液体クロマトグラフィーシステムは、少なくとも１つのＵＶ検出器、少なくとも１つの蒸発性光散乱検出器（ＥＬＳＤ）、少なくとも１つの質量スペクトル検出器（ＭＳ）、少なくとも１つの凝集核形成光散乱検出器（ＣＮＬＳＤ）、少なくとも１つのコロナ放電検出器、少なくとも１つの屈折率検出器（ＲＩＤ）、少なくとも１つの蛍光検出器（ＦＤ）、少なくとも１つのカイラル検出器（ＣＤ）、少なくとも１つの電気化学検出器（ＥＤ）、またはそれらの組み合わせのいずれか、から選択された少なくとも１つの検出器を含む、方法。
【請求項４３】
サンプルを分析する方法であって、
（ａ）液体クロマトグラフィーシステムの中の１つまたは複数の検出器からの信号を生成する工程であって、前記信号が少なくとも１つの検出器からの検出応答成分を含む工程と、
（ｂ）前記信号の変化に応じて画分収集器の中の新しいサンプル画分を収集する工程と、
を含み、
前記信号は、少なくとも約４０μＬ／分で、１つまたは複数の検出器に供給されるサンプルから生成される、方法。
【請求項４４】
請求項４３記載の方法において、
前記サンプルは、少なくとも１つの検出器と流体連通して位置する流体移動デバイスを介して、前記液体クロマトグラフィーシステムの１つまたは複数の検出器に供給される、方法。
【請求項４５】
請求項４４記載の方法において、
前記流体移動デバイスは、シャトルバルブ、スプリッタ、またはポンプを含む、方法。
【請求項４６】
請求項４３記載の方法において、
前記信号は、少なくとも約５０μＬ／分で、１つまたは複数の検出器に供給されるサンプルから生成される、方法。
【請求項４７】
請求項４３記載の方法において、
前記信号は、少なくとも約６０μＬ／分で、１つまたは複数の検出器に供給されるサンプルから生成される、方法。
【請求項４８】
サンプルを分析する方法であって、
（ａ）液体クロマトグラフィーシステムの中の１つまたは複数の検出器からの信号を生成する工程であって、前記信号が少なくとも１つの検出器からの検出応答成分を含む工程と、
（ｂ）前記信号の変化に応じて画分収集器の中の新しいサンプル画分を収集する工程と、
を含み、
前記１つまたは複数の検出器は、ＥＬＳＤを含み、前記信号は、約１ｍＷよりも大きい光源から生成される、方法。
【請求項４９】
請求項４８記載の方法において、
前記信号は、約２ｍＷよりも大きい光源から生成される、方法。
【請求項５０】
請求項４８記載の方法において、
前記信号は、約５ｍＷよりも大きい光源から生成される、方法。
【請求項５１】
サンプルを分析する方法であって、
（ａ）液体クロマトグラフィーシステムの２つ以上の検出器から信号を生成する工程であって、前記信号が少なくとも１つの検出器からの検出応答成分を含む工程と、
（ｂ）前記信号の変化に応じて画分収集器の中の新しいサンプル画分を収集する工程と、
を含み、
２つ以上の検出器は、異なるダイナミックレンジを有する複数の検出器を含む、方法。
【請求項５２】
請求項５１記載の方法において、
前記検出器は、破壊式検出器および非破壊式検出器を含む、方法。
【請求項５３】
請求項５１記載の方法において、
前記液体クロマトグラフィーシステムは、少なくとも１つのＵＶ検出器、少なくとも１つの蒸発性光散乱検出器（ＥＬＳＤ）、少なくとも１つの質量スペクトル検出器（ＭＳ）、少なくとも１つの凝集核形成光散乱検出器（ＣＮＬＳＤ）、少なくとも１つのコロナ放電検出器、少なくとも１つの屈折率検出器（ＲＩＤ）、少なくとも１つの蛍光検出器（ＦＤ）、少なくとも１つのカイラル検出器（ＣＤ）、少なくとも１つの電気化学検出器（ＥＤ）、またはそれらの組み合わせのいずれか、から選択された少なくとも１つの検出器を含む、方法。
【請求項５４】
請求項５１記載の方法において、
２つ以上の検出器は、異なるダイナミックレンジを有する同一のタイプの複数の検出器を含む、方法。
【請求項５５】
請求項５４記載の方法において、
２つ以上の検出器は、複数のＥＬＳＤを含む、方法。
【請求項５６】
請求項５１記載の方法において、
２つ以上の検出器は、異なるダイナミックレンジを有する異なるタイプの複数の検出器を含む、方法。
【請求項５７】
請求項５６記載の方法において、
２つ以上の検出器は、異なるダイナミックレンジを有する、少なくとも１つのＥＬＳＤと少なくとも１つのＵＶ検出器を含む、方法。
【請求項５８】
請求項５１記載の方法において、
２つ以上の検出器は、異なるダイナミックレンジを２つ以上の領域で有する、少なくとも１つの検出器を含む、方法。
【請求項５９】
請求項５８記載の方法において、
少なくとも１つの検出器は、異なる電力レベルを有する複数の光源を備えるＥＬＳＤを含む、方法。
【請求項６０】
請求項５８記載の方法において、
少なくとも１つの検出器は、異なる経路長を有する複数のフローセルを備えるＵＶ検出器を含む、方法。
【請求項６１】
サンプルを分析するための装置であって、
（ａ）液体クロマトグラフィーシステムの中の１つまたは複数の検出器から信号を生成可能なように構成されるシステムハードウェアであって、前記信号が１つまたは複数の検出器からの検出応答成分を含むシステムハードウェアと、
（ｂ）前記信号の変化に応じて新しいサンプル画分を収集可能なように構成される画分収集器と、
を含み、
前記液体クロマトグラフィーシステムは、信号の振幅を修正可能なように構成される、装置。
【請求項６２】
請求項６１記載の装置において、
前記信号の振幅は、電子的手段、またはデジタル手段によって修正される、装置。
【請求項６３】
請求項６１記載の装置において、
前記信号の振幅は、前記信号の利得を変更可能なように構成される前記クロマトグラフィーシステムのコンポーネントによって修正される、装置。
【請求項６４】
請求項６１記載の装置において、
前記信号の振幅は、コンピュータソフトウェアまたはコンピュータで読取り可能な媒体によって修正される、装置。
【請求項６５】
請求項６１記載の装置において、
前記信号の振幅は、光学手段によって修正される、装置。
【請求項６６】
請求項６１記載の装置において、
前記信号の振幅は、前記クロマトグラフィーシステムの１つまたは複数の検出器の光源によって修正される、装置。
【請求項６７】
請求項６１記載の装置において、
前記信号の振幅は、１つまたは複数の検出器のそれぞれに異なる光源を使用可能なように構成される前記クロマトグラフィーシステムによって修正される、装置。
【請求項６８】
請求項６１記載の装置において、
前記信号の振幅は、１つまたは複数の検出器の光源の強度を変更可能なように構成される、前記クロマトグラフィーシステムによって修正される、装置。
【請求項６９】
請求項６１記載の装置において、
前記信号の振幅は、１つまたは複数の検出器のそれぞれに複数の光源を使用可能なように構成される前記クロマトグラフィーシステムによって修正される、装置。
【請求項７０】
請求項６１記載の装置において、
前記信号の振幅は、流体手段によって修正される、装置。
【請求項７１】
請求項６１記載の装置において、
前記信号の振幅は、１つまたは複数の検出器に運ばれるサンプル量を、変更可能なように構成される前記クロマトグラフィーシステムによって修正される、装置。
【請求項７２】
請求項６１記載の装置において、
さらに１つまたは複数の検出器と流体連通するように配置され、１つまたは複数の検出器へ流れる流体を能動的に制御する流体移動デバイスを含む、装置。
【請求項７３】
請求項７２記載の装置において、
前記信号の振幅は、流体移動デバイスの中を通るサンプルの流量の変更を含む、１つまたは複数の検出器に運ばれるサンプル量を変更可能なように構成される前記クロマトグラフィーシステムによって修正される、装置。
【請求項７４】
請求項７２記載の装置において、
前記信号の振幅は、流体移動デバイスの中を通るサンプルの流路の変更を含む、１つまたは複数の検出器に運ばれるサンプル量を、変更可能なように構成される前記クロマトグラフィーシステムによって修正される、装置。
【請求項７５】
請求項７２記載の装置において、
前記信号の振幅は、複数の流体移動デバイスの使用を含む、１つまたは複数の検出器に運ばれるサンプル量を、変更可能なように構成される前記クロマトグラフィーシステムによって修正される、装置。
【請求項７６】
請求項７２記載の装置において、
前記信号の振幅は、交換可能な流体移動デバイスコンポーネントの使用を含む、１つまたは複数の検出器に運ばれるサンプル量を、変更可能なように構成される前記クロマトグラフィーシステムによって修正される、装置。
【請求項７７】
請求項７２記載の装置において、
前記信号の振幅は、流体移動デバイスの動作条件の変更を含む、１つまたは複数の検出器に運ばれるサンプル量を変更可能なように構成される前記クロマトグラフィーシステムによって修正される、装置。
【請求項７８】
請求項７２記載の装置において、
前記信号の振幅は、流体移動デバイスの少なくとも１つのコンポーネントの形状またはサイズの変更を含む、１つまたは複数の検出器に運ばれるサンプル量を、変更可能なように構成される前記クロマトグラフィーシステムによって修正される、装置。
【請求項７９】
請求項７２記載の装置において、
流体移動デバイスは、シャトルバルブ、スプリッタ、またはポンプを含む、装置。
【請求項８０】
請求項７９記載の装置において、
前記信号の振幅は、１つまたは複数のスプリッタコンポーネント、シャトルバルブコンポーネント、またはポンプコンポーネントの形状またはサイズの変更を含む、１つまたは複数の検出器に運ばれるサンプル量を、変更可能なように構成される前記クロマトグラフィーシステムによって修正される、装置。
【請求項８１】
請求項７９記載の装置において、
前記信号の振幅は、少なくとも１つのシャトルバルブ回転子または固定子の形状またはサイズ、少なくとも１つの固定子または回転子チャンバーまたはチャネルの形状またはサイズの変更、またはこれらの組み合わせの変更を含む、１つまたは複数の検出器に運ばれるサンプル量を、変更可能なように構成される前記クロマトグラフィーシステムによって修正される、装置。
【請求項８２】
請求項６１記載の装置において、
前記信号の振幅は、検出器の設計によって修正される、装置。
【請求項８３】
請求項８２記載の装置において、
前記信号の振幅は、１つまたは複数の検出器のそれぞれに対して、異なるコンポーネントを備える複数の検出器を使用可能なように構成される、前記クロマトグラフィーシステムによって修正される、装置。
【請求項８４】
請求項８２記載の装置において、
前記信号の振幅は、１つまたは複数の検出器のそれぞれに対して、交換可能な検出器、またはそれらのコンポーネントを使用可能なように構成される、前記クロマトグラフィーシステムによって修正される、装置。
【請求項８５】
請求項６１記載の装置において、
前記信号の振幅は、１つまたは複数の検出器に到達するサンプルの物理的特性を変更可能なように構成される、前記クロマトグラフィーシステムによって修正される、装置。
【請求項８６】
請求項８５記載の装置において、
１つまたは複数の検出器は、少なくとも１つのＥＰＤを含み、前記信号の振幅は、１つまたは複数の検出器の光学部品部分（単数または複数）に到達するサンプルの物理的特性を変更可能なように構成される前記クロマトグラフィーシステムによって修正される、装置。
【請求項８７】
請求項６１記載の装置において、
１つまたは複数の検出器は、少なくとも１つのＥＰＤを含み、前記信号の振幅は、少なくとも１つの異なるインパクター；異なるドリフトチューブ；異なるネブライザーガス流、ネブライザーガスタイプ、ネブライザーガス温度；異なる入口、ドリフトチューブ、光学部品、または排気温度；またはこれらの組み合わせの使用によって、１つまたは複数の検出器の光学部品部分（単数または複数）に到達するサンプルの物理的特性を変更可能なように構成される前記クロマトグラフィーシステムによって修正される、装置。
【請求項８８】
請求項６１記載の装置において、
１つまたは複数の検出器は、少なくとも１つのＥＰＤを含み、前記信号の振幅は、少なくとも１つの異なる平板インパクター、スクリーンインパクター、球状インパクター、エルボーインパクター、３次元インパクター、または他の非線形流れ構造インパクター、またはこれらの組み合わせの使用によって、１つまたは複数の検出器の光学部品部分（単数または複数）に到達するサンプルの物理的特性を変更可能なように構成される前記クロマトグラフィーシステムによって修正される、装置。
【請求項８９】
請求項６１記載の装置において、
前記信号の振幅は、ネブライザー、ドリフトチューブなどの検出器（単数または複数）の機械要素、または光学ブロックの設計、またはこれらの組み合わせを変更可能なように構成される前記クロマトグラフィーシステムによって修正される、装置。
【請求項９０】
請求項６１記載の装置において、
前記信号の振幅は、１つまたは複数の検出器の動作条件を変更可能なように構成される前記クロマトグラフィーシステムによって修正される、装置。
【請求項９１】
請求項６１記載の装置において、
少なくとも１つの検出器は、蒸発性光散乱検出器（ＥＬＳＤ）を含む、装置。
【請求項９２】
サンプルを分析するための装置であって、
（ａ）液体クロマトグラフィーシステムの中の１つまたは複数の検出器から信号を生成可能なように構成されるシステムハードウェアであって、前記信号が１つまたは複数の検出器からの検出応答成分を含むシステムハードウェアと、
（ｂ）前記信号の変化に応じて新しいサンプル画分を収集可能なように構成される画分収集器と、
を含み、
液体クロマトグラフィーシステムは、約１００ｍｇ以下のサンプル画分を収集可能なように構成される、装置。
【請求項９３】
請求項９２記載の装置において、
前記サンプル画分は、約１００ｍｇ以下から少なくとも約０．１ｍｇである、装置。
【請求項９４】
請求項９２記載の装置において、
前記サンプル画分は、約９０ｍｇ以下である、装置。
【請求項９５】
請求項９２記載の装置において、
前記検出器は、破壊式検出器および非破壊式検出器を含む、装置。
【請求項９６】
請求項９２記載の装置において、
前記液体クロマトグラフィーシステムは、少なくとも１つのＵＶ検出器、少なくとも１つの蒸発性光散乱検出器（ＥＬＳＤ）、少なくとも１つの質量スペクトル検出器（ＭＳ）、少なくとも１つの凝集核形成光散乱検出器（ＣＮＬＳＤ）、少なくとも１つのコロナ放電検出器、少なくとも１つの屈折率検出器（ＲＩＤ）、少なくとも１つの蛍光検出器（ＦＤ）、少なくとも１つのカイラル検出器（ＣＤ）、少なくとも１つの電気化学検出器（ＥＤ）、またはそれらの組み合わせのいずれか、から選択された少なくとも１つの検出器を含む、装置。
【請求項９７】
サンプルを分析するための装置であって、
（ａ）液体クロマトグラフィーシステムの中の１つまたは複数の検出器から信号を生成可能なように構成されるシステムハードウェアであって、前記信号が１つまたは複数の検出器からの検出応答成分を含むシステムハードウェアと、
（ｂ）前記信号の変化に応じて新しいサンプル画分を収集可能なように構成される画分収集器と、
を含み、
前記液体クロマトグラフィーシステムは、少なくとも約４０μＬ／分で、１つまたは複数の検出器に供給されるサンプルから信号を生成可能なように構成される、装置。
【請求項９８】
請求項９７記載の装置において、
前記サンプルは、少なくとも１つの検出器と流体連通して位置する流体移動デバイスを介して、前記液体クロマトグラフィーシステムの１つまたは複数の検出器に供給される、装置。
【請求項９９】
請求項９８記載の装置において、
前記流体移動デバイスは、シャトルバルブ、スプリッタ、またはポンプを含む、装置。
【請求項１００】
請求項９７記載の装置において、
前記信号は、少なくとも約５０μＬ／分で、１つまたは複数の検出器に供給されるサンプルから生成される、装置。
【請求項１０１】
請求項９７記載の装置において、
前記信号は、少なくとも約６０μＬ／分で、１つまたは複数の検出器に供給されるサンプルから生成される、装置。
【請求項１０２】
サンプルを分析するための装置であって、
（ａ）液体クロマトグラフィーシステムの中の１つまたは複数の検出器から信号を生成可能なように構成されるシステムハードウェアであって、前記信号が１つまたは複数の検出器からの検出応答成分を含むシステムハードウェアと、
（ｂ）前記信号の変化に応じて新しいサンプル画分を収集可能なように構成される画分収集器と、
を含み、
１つまたは複数の検出器は、ＥＬＳＤを含み、信号は、約１ｍＷよりも大きい光源から生成される、装置。
【請求項１０３】
請求項１０２記載の装置において、
前記信号は、約２ｍＷよりも大きい光源から生成される、装置。
【請求項１０４】
請求項１０２記載の装置において、
前記信号は、約５ｍＷよりも大きい光源から生成される、装置。
【請求項１０５】
サンプルを分析するための装置であって、
（ａ）液体クロマトグラフィーシステム内の２つ以上の検出器からの信号を生成可能なように構成されるシステムハードウェアであって、前記信号が１つまたは複数の検出器からの検出応答成分を含むシステムハードウェアと、
（ｂ）前記信号の変化に応じて新しいサンプル画分を収集可能なように構成される画分収集器と、
を備え、
２つ以上の検出器は、異なるダイナミックレンジを有する複数の検出器を備える、装置。
【請求項１０６】
請求項１０５記載の装置において、
前記検出器は、破壊式検出器および非破壊式検出器を含む、装置。
【請求項１０７】
請求項１０５記載の装置において、
前記液体クロマトグラフィーシステムは、少なくとも１つのＵＶ検出器、少なくとも１つの蒸発性光散乱検出器（ＥＬＳＤ）、少なくとも１つの質量スペクトル検出器（ＭＳ）、少なくとも１つの凝集核形成光散乱検出器（ＣＮＬＳＤ）、少なくとも１つのコロナ放電検出器、少なくとも１つの屈折率検出器（ＲＩＤ）、少なくとも１つの蛍光検出器（ＦＤ）、少なくとも１つのカイラル検出器（ＣＤ）、少なくとも１つの電気化学検出器（ＥＤ）、またはそれらの組み合わせのいずれか、から選択された少なくとも１つの検出器を含む、装置。
【請求項１０８】
請求項１０５記載の装置において、
２つ以上の検出器は、異なるダイナミックレンジを有する同一のタイプの複数の検出器を含む、装置。
【請求項１０９】
請求項１０８記載の装置において、
２つ以上の検出器は、複数のＥＬＳＤを含む、装置。
【請求項１１０】
請求項１０５記載の装置において、
２つ以上の検出器は、異なるダイナミックレンジを有する異なるタイプの複数の検出器を含む、装置。
【請求項１１１】
請求項１１０記載の装置において、
２つ以上の検出器は、異なるダイナミックレンジを有する、少なくとも１つのＥＬＳＤと少なくとも１つのＵＶ検出器を含む、装置。
【請求項１１２】
請求項１０５記載の装置において、
２つ以上の検出器は、異なるダイナミックレンジを２つ以上の領域で有する、少なくとも１つの検出器を含む、装置。
【請求項１１３】
請求項１１２記載の装置において、
少なくとも１つの検出器は、異なる電力レベルを有する複数の光源を備えるＥＬＳＤを含む、装置。
【請求項１１４】
請求項１１２記載の装置において、
少なくとも１つの検出器は、異なる経路長を有する複数のフローセルを備えるＵＶ検出器を含む、装置。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
[0001]本発明は、クロマトグラフィーシステムで、サンプルを分析し、サンプル画分を収集する方法および装置を対象とする。
【背景技術】
【０００２】
[0002]当分野には、クロマトグラフィーシステムにおいて効率的に且つ効果的にサンプルを分析する方法およびサンプル画分を収集する方法へのニーズがある。また、当分野では、効果的にサンプルを分析しサンプル画分を収集することができる装置へのニーズがある。
【先行技術文献】
【特許文献】
【０００３】
【特許文献１】米国仮特許出願第６１／２００，８１４号明細書
【発明の概要】
【課題を解決するための手段】
【０００４】
[0003]本発明は、クロマトグラフィーシステムにおいて、サンプルを分析する方法およびサンプル画分を収集するための方法の発見に関する。開示される方法は、サンプルを分析する公知の方法に優る多くの利点を提供する。たとえば、本発明の開示される方法は、少なくとも１つの検出器を通る流体流れを能動的に制御するために、プロセス変数（たとえば、流れ制限、全流量、温度、および／または溶媒組成）が少なくとも１つの検出器を通る流体流れに悪影響を与えないように、スプリッタまたはシャトルバルブを用いることができる。また、本発明の開示される方法は、１つまたは複数の検出器からの１つまたは複数の検出器信号に応答して１つまたは複数のサンプル画分を収集するとともに、所定のサンプルのより完全な分析を提供するために、１つまたは複数の検出器を用いることができる。
【０００５】
[0004]本発明はサンプルを分析する方法およびサンプル画分を収集する方法を対象とする。例示的な一実施形態では、サンプルを分析する方法は、液体クロマトグラフィーシステムにおいて１つまたは複数の検出器から信号を生成する工程を有し、この信号は、少なくとも１つの検出器からの検出応答成分を有し、また、サンプルを分析する方法は、信号の変化に応答して、画分収集器内に新しいサンプル画分を収集する工程を有し、ここで、信号の振幅は、液体クロマトグラフィーシステムによって修正される。例示的な一実施形態では、信号は、（ｉ）少なくとも１つの光学吸収検出器（たとえばＵＶ検出器）からの検出応答成分と、（ｉｉ）少なくとも１つの蒸発性粒子検出器からの検出応答成分とを有することができる。例示的な一実施形態では、発色性または非発色性溶媒を、クロマトグラフィーシステムにおけるキャリア流体として使用することができる。別の例示的な実施形態では、複合信号は、（ｉ）２つ以上の特定の光学波長における光学吸収検出器（たとえばＵＶ検出器）からの２つ以上の検出器応答を含む検出応答成分と、（ｉｉ）蒸発性粒子検出器からの検出応答成分とを有する。
【０００６】
[0005]別の例示的な実施形態では、サンプルを分析する方法は、液体クロマトグラフィーシステムの中の１つまたは複数の検出器からの信号を生成する工程であって、該信号は、それぞれの検出器からの検出応答成分を含む工程と、信号の変化に応じて画分収集器の中の新しいサンプル画分を収集する工程とを含み、ここで、該信号の振幅は、電子的手段、またはデジタル手段によって修正される。例示的な一実施形態では、信号の利得は、コンピュータソフトウェアまたはコンピュータで読取り可能な媒体などの、クロマトグラフィーシステムのコンポーネントによって修正される。
【０００７】
[0006]さらに例示的な実施形態では、サンプルを分析する方法は、液体クロマトグラフィーシステムの中の１つまたは複数の検出器からの信号を生成する工程であって、該信号が、それぞれの検出器からの検出応答成分を含む工程と、信号の変化に応じて画分収集器の中の新しいサンプル画分を収集する工程とを含み、ここで、該信号の振幅は、光学手段によって修正される。例示的な一実施形態では、信号の振幅は、検出器の光強度を変更すること、取り替え可能な光源を使用すること、または検出器（単数または複数）の複数の光源を使用することなどの、クロマトグラフィーシステムの１つまたは複数の検出器の光源によって修正される。
【０００８】
[0007]さらにもっと例示的な実施形態では、サンプルを分析する方法は、液体クロマトグラフィーシステムの中の１つまたは複数の検出器からの信号を生成する工程であって、該信号は、それぞれの検出器からの検出応答成分を含む工程と、信号の変化に応じて画分収集器の中の新しいサンプル画分を収集する工程とを含み、ここで、信号の振幅は、流体手段によって修正される。例示的な一実施形態では、該信号の振幅は、たとえばサンプル移動デバイスの設計変更などによって、クロマトグラフィーシステムの１つまたは複数の検出器に運ばれるサンプル量の変更によって修正される。たとえば、シャトルバルブが、１つまたは複数の検出器へサンプルを運ぶために利用される、例示的な実施形態では、運ばれるサンプル量の変更は、シャトルバルブ回転子または固定子チャンバーまたはチャネルの形状またはサイズの変更によって、異なる固定子または回転子チャンバーまたはチャネルサイズを有する、複数バルブまたは複数バルブコンポーネントの使用によって、または異なるバルブ動作条件（たとえば、バルブ回転周波数の変更）に使用によって達成されてもよい。他のタイプのスプリッタシステムが、１つまたは複数の検出器に、サンプルを運ぶために利用される、例示的な実施形態では、サンプル移動速度は、単純なコンポーネントの交換によって、複数のスプリッタを使用することによって、またはスプリッタ（単数または複数）の動作条件を修正することによって修正してもよい。
【０００９】
[0008]またさらに例示的な実施形態では、サンプルを分析する方法は、液体クロマトグラフィーシステムの中の１つまたは複数の検出器からの信号を生成する工程であって、該信号は、それぞれの検出器からの検出応答成分を含む工程と、信号の変化に応じて画分収集器の中の新しいサンプル画分を収集する工程とを含み、ここで、該信号の振幅は、検出器の設計によって修正される。例示的な一実施形態では、信号の振幅は、クロマトグラフィーシステムの１つまたは複数の検出器に到達するサンプルの物理的特性を変更することによって修正される。たとえば、ＥＰＤが利用される例示的な一実施形態では、検出器の光学部分（単数または複数）に到達するサンプルの物理的特性は、異なるインパクター（たとえば、平板またはスクリーン）の使用、または異なるドリフトチューブの使用、若しくはこれらの組み合わせなどによって変更されてもよい。別の例示的な実施形態では、１つまたは複数の検出器（単数または複数）の信号レベルは、検出器（単数または複数）の機械要素の変更によって修正されてもよい。たとえば、ＥＰＤが利用される例示的な実施形態では、ネブライザー、ドリフトチューブ、または光学ブロックの設計、またはこれらの組み合わせが修正されてもよい。別の例示的な実施形態では、１つまたは複数の検出器（単数または複数）の信号レベルは、検出器（単数または複数）の動作条件を変更することによって修正されてもよい。
【００１０】
[0009]別の例示的な実施形態では、サンプルを分析する方法は、液体クロマトグラフィーシステムの中の１つまたは複数の検出器からの信号を生成する工程であって、前記信号は少なくとも１つの検出器からの検出応答成分を含む工程と、信号の変化に応じて画分収集器の中の新しいサンプル画分を収集する工程とを含み、ここで、該信号の振幅は、少なくとも約２ｍＶである。
【００１１】
[0010]さらに例示的な実施形態では、サンプルを分析する方法は、液体クロマトグラフィーシステムの中の１つまたは複数の検出器からの信号を生成する工程であって、前記信号は少なくとも１つの検出器からの検出応答成分を含む工程と、信号の変化に応じて画分収集器の中の新しいサンプル画分を収集する工程とを含み、ここで、サンプル画分は、約１００ｍｇ以下である。
【００１２】
[0011]さらにもっと例示的な実施形態では、サンプルを分析する方法は、液体クロマトグラフィーシステムの中の１つまたは複数の検出器からの信号を生成する工程であって、前記信号は少なくとも１つの検出器からの検出応答成分を含む工程と、信号の変化に応じて画分収集器の中の新しいサンプル画分を収集する工程とを含み、ここで、該信号は、少なくとも約４０μＬ／分で、１つまたは複数の検出器に供給されるサンプルから生成される。
【００１３】
[0012]別の例示的な実施形態では、サンプルを分析する方法は、液体クロマトグラフィーシステムの中の１つまたは複数の検出器からの信号を生成する工程であって、前記信号は少なくとも１つの検出器からの検出応答成分を含む工程と、信号の変化に応じて画分収集器の中の新しいサンプル画分を収集する工程とを含み、ここで、１つまたは複数の検出器は、ＥＬＳＤを含み、該信号は、約１ｍＷよりも大きい光源から生成される。
【００１４】
[0013]さらに例示的な実施形態では、サンプルを分析する方法は、液体クロマトグラフィーシステムの２つ以上の検出器から信号を生成する工程であって、前記信号は少なくとも１つの検出器からの検出応答成分を含む工程と、信号の変化に応じて画分収集器の中の新しいサンプル画分を収集する工程とを含み、ここで、２つ以上の検出器は、異なるダイナミックレンジを有する複数の検出器を備える。
【００１５】
[0014]本発明はさらに、サンプルを分析できる装置を対象とする。例示的な一実施形態では、サンプルを分析するための装置は、液体クロマトグラフィーシステムの中の１つまたは複数の検出器から信号を生成可能なように構成されるシステムハードウェアであって、前記信号は少なくとも１つの検出器からの検出応答成分を含むシステムハードウェアと、該信号の変化に応じて新しいサンプル画分を収集可能なように構成される画分収集器を含み、ここで、液体クロマトグラフィーシステムは、信号の振幅を修正可能なように構成される。
【００１６】
[0015]別の例示的な実施形態では、サンプルを分析するための装置は、液体クロマトグラフィーシステムの中の１つまたは複数の検出器から信号を生成可能なように構成されるシステムハードウェアであって、前記信号は少なくとも１つの検出器からの検出応答成分を含むシステムハードウェアと、該信号の変化に応じて新しいサンプル画分を収集可能なように構成される画分収集器を含み、ここで、液体クロマトグラフィーシステムは、電子的手段、またはデジタル手段によって、信号の振幅を修正可能なように構成される。例示的な一実施形態では、信号の利得は、コンピュータソフトウェアまたはコンピュータで読取り可能な媒体などの、クロマトグラフィーシステムのコンポーネントによって修正される。
【００１７】
[0016]別の例示的な実施形態では、サンプルを分析するための装置は、液体クロマトグラフィーシステムの中の１つまたは複数の検出器から信号を生成可能なように構成されるシステムハードウェアであって、前記信号は少なくとも１つの検出器からの検出応答成分を含むシステムハードウェアと、信号の変化に応じて新しいサンプル画分を収集可能なように構成される画分収集器とを含み、ここで、液体クロマトグラフィーシステムは、光学手段によって、信号の振幅を修正可能なように構成される。例示的な一実施形態では、信号の振幅は、検出器の光強度を変更すること、取り替え可能な光源を使用すること、または検出器に複数の光源を使用することなどの、クロマトグラフィーシステムの１つまたは複数の検出器の光源によって修正される。
【００１８】
[0017]別の例示的な実施形態では、サンプルを分析するための装置は、液体クロマトグラフィーシステムの中の１つまたは複数の検出器から信号を生成可能なように構成されるシステムハードウェアであって、前記信号は少なくとも１つの検出器からの検出応答成分を含むシステムハードウェアと、信号の変化に応じて新しいサンプル画分を収集可能なように構成される画分収集器とを含み、ここで、液体クロマトグラフィーシステムは、流体手段によって、信号の振幅を修正可能なように構成される。例示的な一実施形態では、信号の振幅は、サンプル移動デバイスの設計変更等による、クロマトグラフィーシステムの１つまたは複数の検出器に運ばれる、サンプル量の変更によって修正される。たとえば、シャトルバルブが、１つまたは複数の検出器へサンプルを運ぶために利用される、例示的な実施形態では、運ばれるサンプル量の変更は、シャトルバルブ回転子または固定子チャンバーまたはチャネルの形状またはサイズの変更によって、異なる固定子または回転子チャンバーまたはチャネルサイズを有する、複数バルブまたは複数バルブコンポーネントの使用によって、または異なるバルブ動作条件（たとえば、バルブ回転周波数の変更）に使用によって達成されてもよい。他のタイプのスプリッタシステムが、１つまたは複数の検出器にサンプルを運ぶために利用される、例示的な実施形態では、サンプル移動速度は、単純なコンポーネントの交換によって、複数のスプリッタを使用することによって、またはスプリッタ（単数または複数）の動作条件を修正することによって、修正してもよい。
【００１９】
[0018]別の例示的な実施形態では、サンプルを分析するための装置は、液体クロマトグラフィーシステムの中の１つまたは複数の検出器から信号を生成可能なように構成されるシステムハードウェアであって、前記信号は少なくとも１つの検出器からの検出応答成分を含むシステムハードウェアと、信号の変化に応じて新しいサンプル画分を収集可能なように構成される画分収集器とを含み、ここで、液体クロマトグラフィーシステムは、検出器の設計によって、信号の振幅を修正可能なように構成される。例示的な一実施形態では、信号の振幅は、クロマトグラフィーシステムの１つまたは複数の検出器に到達するサンプルの物理的特性を変更することによって修正される。たとえば、ＥＰＤが利用される例示的な一実施形態では、１つまたは複数の検出器の光学部分（単数または複数）に到達するサンプルの物理的特性は、異なるインパクター（たとえば、平板またはスクリーン）の使用または異なるドリフトチューブの使用、またはこれらの組み合わせなどによって変更されてもよい。別の例示的な実施形態では、１つまたは複数の検出器（単数または複数）の信号レベルは、検出器（単数または複数）の機械要素の変更によって修正されてもよい。たとえば、ＥＰＤが利用される例示的な実施形態では、ネブライザー、ドリフトチューブ、または光学ブロックの設計、またはこれらの組み合わせが修正されてもよい。別の例示的な実施形態では、１つまたは複数の検出器（単数または複数）の信号レベルは、検出器（単数または複数）の動作条件を変更することによって修正されてもよい。
【００２０】
[0019]例示的な実施形態では、サンプルを分析するための装置は、液体クロマトグラフィーシステムの中の１つまたは複数の検出器から信号を生成可能なように構成されるシステムハードウェアであって、該信号は、１つまたは複数の検出器からの検出応答成分を含むシステムハードウェアと、該信号の変化に応じて新しいサンプル画分を収集可能なように構成される画分収集器とを含み、液体クロマトグラフィーシステムは、少なくとも約２ｍＶの信号の振幅を生成可能なように構成される。
【００２１】
[0020]さらに例示的な実施形態では、サンプルを分析するための装置は、液体クロマトグラフィーシステムの中の１つまたは複数の検出器から信号を生成可能なように構成されるシステムハードウェアであって、該信号は、１つまたは複数の検出器からの検出応答成分を含むシステムハードウェアと、信号の変化に応じて新しいサンプル画分を収集可能なように構成される画分収集器とを含み、ここで、液体クロマトグラフィーシステムは、約１００ｍｇ以下のサンプル画分を収集可能なように構成される。
【００２２】
[0021]別の例示的な実施形態では、サンプルを分析するための装置は、液体クロマトグラフィーシステムの中の１つまたは複数の検出器から信号を生成可能なように構成されるシステムハードウェアであって、該信号は、１つまたは複数の検出器からの検出応答成分を含むシステムハードウェアと、信号の変化に応じて新しいサンプル画分を収集可能なように構成される画分収集器とを含み、ここで、液体クロマトグラフィーシステムは、少なくとも約３０μＬ／分で、１つまたは複数の検出器に供給されるサンプルから信号を生成可能なように構成される。
【００２３】
[0022]さらに例示的な実施形態では、サンプルを分析するための装置は、液体クロマトグラフィーシステムの中の１つまたは複数の検出器から信号を生成可能なように構成されるシステムハードウェアであって、該信号は、１つまたは複数の検出器からの検出応答成分を含み、信号の変化に応じて新しいサンプル画分を収集可能なように構成される画分収集器を含み、ここで、１つまたは複数の検出器は、ＥＬＳＤを含み、信号は、約１ｍＷよりも大きい光源から生成される。
【００２４】
[0023]別の例示的な実施形態では、サンプルを分析するための装置は、液体クロマトグラフィーシステム内の２つ以上の検出器からの信号を生成可能なように構成されるシステムハードウェアであって、該信号は、１つまたは複数の検出器からの検出応答成分を含むシステムハードウェアと、信号の変化に応じて新しいサンプル画分を収集可能なように構成される画分収集器とを含み、ここで、２つ以上の検出器は、異なるダイナミックレンジを有する複数の検出器を備える。
【００２５】
[0024]更に別の例示的な実施形態では、サンプルを分析するための装置は、液体クロマトグラフィーシステム内の画分収集器を有し、この画分収集器は、（ｉ）少なくとも１つの検出器からの１つまたは複数の信号を認識、受信、および処理し、また、（ｉｉ）この１つまたは複数の信号に基づいて１つまたは複数のサンプル画分を収集する、ように構成される。
【００２６】
[0025]本発明の方法および装置は、少なくとも１つの検出器を有する。適切な検出器は、限定するわけではないが、ＵＶ検出器、ＲＩ検出器、伝導率検出器、蛍光検出器、光散乱検出器、粘性検出器、および偏光検出器などの非破壊式検出器（すなわち、検出のときにサンプルを消費または破壊しない検出器）、および／または、たとえば蒸発性光散乱検出器（ＥＬＳＤ）および凝集核形成光散乱検出器（ＣＮＬＳＤ）等の蒸発性粒子検出器（ＥＰＤ）、コロナ放電検出器、質量スペクトル計、原子吸光検出器等の破壊式検出器（すなわち検出するときにサンプルを消費または破壊する検出器）を含むことができる。たとえば、本発明の装置は、少なくとも１つのＵＶ検出器、少なくとも１つの蒸発性光散乱検出器（ＥＬＳＤ）、少なくとも１つの質量スペクトル計（ＭＳ）、少なくとも１つの凝集核形成光散乱検出器（ＣＮＬＳＤ）、少なくとも１つのコロナ放電検出器、少なくとも１つの屈折率検出器（ＲＩＤ）、少なくとも１つの蛍光検出器（ＦＤ）、カイラル検出器（ＣＤ）、少なくとも１つの電気化学検出器（ＥＤ）（たとえば、アンペロメトリー検出器または電量検出器）、またはこれらの組み合わせを含むことができる。例示的な一実施形態では、検出器は、１つまたは複数の蒸発性粒子検出器（ＥＰＤ）を有し、これは可動フェーズとして発色性溶媒または非発色性溶媒の使用を可能にする。さらなる例示的な実施形態では、非破壊式検出器を破壊式検出器と組み合わせることができ、これは、たとえばピークに関連する化学種の存在のような、さまざまな物質の特性、分子量、化学構造、元素組成、サンプルのカイラル性の検出を可能にする。
【００２７】
[0026]本発明はさらに、本明細書で説明される任意の例示的な方法の工程の１つまたは複数を実行するための、コンピュータが実行可能な命令が格納されたコンピュータで読取り可能な媒体を対象とする。このコンピュータで読取り可能な媒体は、装置または本明細書で説明されるような装置コンポーネントのような装置コンポーネントにアプリケーションコードをロードするために用いることができ、（ｉ）操作者へのインターフェースを提供し、および／または（ｉｉ）本明細書で説明される方法の工程の１つまたは複数を実行するロジックを提供する。
【００２８】
[0027]本発明のこれらのおよびその他の特徴および利点は、以下に開示される実施形態の詳細な説明および添付の特許請求の範囲を参照することにより明らかになるであろう。
【図面の簡単な説明】
【００２９】
【図１】検出器へ流れる流体を能動的に制御するためのスプリッタポンプを有する、本発明の例示的な液体クロマトグラフィーシステムを示す図である[0028]。
【図２】スプリッタポンプおよび検出器を有する、本発明の液体クロマトグラフィーシステムの他の例を示す図である[0029]。
【図３Ａ】シャトルバルブおよび検出器を有する、本発明の液体クロマトグラフィーシステムの一例を示す図である[0030]。
【図３Ｂ】本発明に好適に使用できる例示的なシャトルバルブの動作を示す図である[0031]。
【図３Ｃ】本発明に好適に使用できる例示的なシャトルバルブの動作を示す図である[0031]。
【図４】スプリッタポンプおよび２つの検出器を有する、本発明の例示的な液体クロマトグラフィーシステムを示す図である[0032]。
【図５】２つのスプリッタポンプおよび２つの検出器を有する、本発明の例示的な液体クロマトグラフィーシステムを示す図である[0033]。
【図６】シャトルバルブおよび２つの検出器を有する、本発明の例示的な液体クロマトグラフィーシステムを示す図である[0034]。
【図７】２つのシャトルバルブおよび２つの検出器を有する、本発明の例示的な液体クロマトグラフィーシステムを示す図である[0035]。
【図８】スプリッタポンプ、蒸発性光散乱検出器（ＥＬＳＤ）、および紫外線（ＵＶ）検出器を有する、本発明の例示的な液体クロマトグラフィーシステムを示す図である[0036]。
【図９】スプリッタポンプ、ＥＬＳＤおよびＵＶ検出器を有する、本発明の他の例示的な液体クロマトグラフィーシステムを示す図である[0037]。
【図１０Ａ】本発明に好適に利用できる例示的なシャトルバルブの動作を示す図である[0038]。
【図１０Ｂ】本発明に好適に利用できる例示的なシャトルバルブの動作を示す図である[0038]。
【図１０Ｃ】本発明に好適に利用できる例示的なシャトルバルブの動作を示す図である[0038]。
【図１１】本発明の例示的なクロマトグラフィーシステムを使用して、多様な天然物を分離するためのＥＬＳＤ応答値を示すグラフである[0039]。
【図１２】本発明の例示的なクロマトグラフィーシステムを使用して、カフェインの分離するためのＥＬＳＤ検出器応答値を示すグラフである[0040]。
【発明を実施するための形態】
【００３０】
[0041]本発明の原理の理解を促進するために、本発明の特定の例示的な実施形態が説明され、特定の例示的な実施形態を説明するために特定の文言が用いられる。しかし、特定の文言の使用により本発明の範囲を限定することを意図していないことを理解されたい。変形形態、さらなる修正形態、および議論される本発明の原理のさらなる応用は、本発明の技術分野に関連する当業者に通常に起こり得るものであることと考えられる。
【００３１】
[0042]本明細書および添付の特許請求の範囲で用いられるように単数形「ａ」、「ａｎｄ」および「ｔｈｅ」の表現は、文脈上明らかに他の意味に解すべき場合を除き複数の参照物を含む。従って、たとえば、「溶媒」に対する語は複数の溶媒を含み、当業者などに知られた１つまたは複数の溶媒およびその均等物を含むことを意図している。
【００３２】
[0043]たとえば、複合物の成分の量、濃度、容積、プロセス温度、プロセス時間、回収率または産出率、流量、およびこれら類似の値、並びに範囲を修飾する本開示の実施形態の説明の中で用いられる「約」という語は、たとえば典型的な測定および処理手順を通じて生じ得る数値的な量の変動を示し、これらの手順における不慮の誤差による変動、方法を実行するのに用いられる構成要素の相違による変動、および近似を考慮することによる変動を意味している。また、「約」という語は、特定の初期濃度および混合物での処方の時間経過による相違量、および特定の初期濃度または混合物で、処方を混合または処理することによる相違量を包含する。「約」という語で修飾されるかどうかに関わらず、添付の特許請求の範囲は、これらの量の均等の範囲を含む。
【００３３】
[0044]本明細書で使用する場合、「振幅」という語は、検出器によって表示されるクロマトグラフィーピークの大きさを意味する。
【００３４】
[0045]本明細書で使用する場合、「クロマトグラフィー」という語は、物理的な分離方法を意味し、分離される成分が、２つのフェーズの間で分配され、これらの一方は静的（静的フェーズ）であり、他方は一定方向に移動する（可動フェーズ）。
【００３５】
[0046]本明細書で使用する場合、「ダイナミックレンジ」という語は、電力、電流、電圧または周波数などの特定のパラメータの最大レベルと、前記パラメータの検出可能な最小値との比を示す。本出願では、ダイナミックレンジは、検出器が適切に画分収集器をトリガする、最小サンプル量と最大サンプル量との間の複数を意味する。
【００３６】
[0047]本明細書で使用する場合、「利得（ｇａｉｎ）」という語は、検出器信号の増幅度を意味する。
【００３７】
[0048]本明細書で使用する場合、「液体クロマトグラフィー」という語は、静止フェーズを有するカラムを通じて「可動フェーズ」内に溶解した液体混合物を通過させることよる混合物の分離を意味し、分析物（すなわち目標物質）を混合物内の他の分子から分離し、隔離されるようにする。
【００３８】
[0049]本明細書で使用する場合、「可動フェーズ」という語は、分離および／または分析されるサンプル、および溶媒を含む液体流体、ガス、または超臨界流体を意味し、溶媒は、カラムを通る分析物を有するサンプルを移動させる。可動フェーズは、クロマトグラフィーカラムまたはカートリッジ（すなわち、静止フェーズを収容する容器）を通って移動し、ここで、サンプル内の分析物は、静止フェーズと相互作用してサンプルから分離される。
【００３９】
[0050]本明細書で使用する場合、「静止フェーズ」という語は、カラムまたはカートリッジに固定された材料を意味し、これは、可動フェーズ内のサンプルから選択的に分析物を吸着し、静止フェーズを有するカラムを通して「可動フェーズ」内に溶解した流体混合物を通過させることにより混合物を分離し、混合物内の他の分子から測定される分析物を分離し、隔離するようにする。
【００４０】
[0051]本明細書で使用する場合、「フラッシュクロマトグラフィー」という語は、圧力下で「可動フェーズ」内に溶解した混合流体を静止フェーズを有するカラムに通過させることによる分離を意味し、これは、混合物内の他の分子から分析物（すなわち目標物質）を分離し、隔離できるようにする。
【００４１】
[0052]本明細書で使用する場合、「シャトルバルブ」という語は、１つまたは複数のソースから他の位置への流体供給を制御する制御バルブを意味する。シャトルバルブは、サンプルを流体から他方へ移動させるために回転運動または直線運動を利用することができる。
【００４２】
[0053]本明細書で使用する場合、「流体」という語は、気体、液体、超臨界流体を意味する。
【００４３】
[0054]本明細書で使用する場合、「層流」という語は、流体の滑らかな規則的な運動を意味し、層流では乱流が存在せず、所定の任意の副流れは、他の近隣の副流れに概ね平行に移動する。
【００４４】
[0055]本明細書で使用する場合、「実質的」という語は、合理的な量の範囲内であることを意味し、絶対値の約０％から約５０％、約０％から約４０％、約０％から約３０％、約０％から約２０％、または約０％から約１０％で変化する量を含む。
【００４５】
[0056]本発明は、サンプルを分析し、サンプル画分を収集する方法を対象とする。本発明はさらに、サンプルを分析し、サンプル画分を収集することができる装置を対象とする。本発明はさらに、サンプルを分析し、サンプル画分を収集することができる装置または装置部品内で用いるためにコンピュータソフトウェアを対象とし、このコンピュータソフトウェアは、装置が本明細書で説明される１つまたは複数の方法の工程を実行できるようにする。
【００４６】
[0057]クロマトグラフィー産業では、多様なタイプのサンプルが、フラッシュクロマトグラフィーによって分離および精製される候補である。本発明の例示的な実施形態では、サンプル成分からの検出器信号によって、マトリックスの残りから対象の化合物を分離する画分収集器をトリガする。適切な動作のためには、成分の検出器信号の振幅は、ソフトウェアが成分信号とバックグランドとを区別できるように十分大きくなければならない。動作中に、ユーザは振幅のしきい値を入力する。検出器の信号振幅がしきい値を超える場合にはいつでも、画分収集器は収集容器のピークを指示する。成分の信号振幅が小さすぎる場合には（しきい値未満）、収集されない。多くの場合、成分は、画分収集器をトリガさせる信号振幅を生成するには十分な量である。しかしながら、最初の生成または天然物の分離などのいくつかのサンプルタイプでは、存在する成分の量が画分収集器をトリガするには十分でない。これらの場合には、収集が可能なように、検出器信号振幅を大きくすることが必要である。
【００４７】
[0058]以下に、サンプルを分析する例示的な方法およびサンプルを分析することができる例示的な装置の説明が提供される。
【００４８】
Ｉ．サンプルの分析方法
[0059]本発明は、サンプルを分析し、サンプル画分を収集する方法を対象とする。このサンプルの分析方法は、多数のプロセス工程を有することができ、そのいくつかが以下に説明される。
【００４９】
Ａ．検出器への流体流れの能動的制御
[0060]本発明のいくつかの例示的な実施形態では、サンプルを分析する方法は、スプリッタポンプまたはシャトルバルブを介して検出器への流体流れを動的に制御する工程を有する。このような方法工程を示す１つの例示的な液体クロマトグラフィーシステムが図１に図示されている。図１に示されるように、例示的な液体クロマトグラフィーシステム１０は、（ｉ）クロマトグラフィーカラム１１と、（ｉｉ）第１入口２１、第１出口２２、および第２出口２３を備えるＴ部１２と、（ｉｉｉ）Ｔ部１２の第１出口２２と流体連通する画分収集器１４と、（ｉｖ）Ｔ部１２の第２出口２３と流体連通する第１検出器１３と、（ｖ）Ｔ部１２の第２出口２３と第１検出器１３とに流体連通するように位置決めされたスプリッタポンプ１５とを有する。
【００５０】
[0061]この例示的なシステムにおいて、スプリッタポンプ１５は、能動的に、流体流れを第１検出器１３に制御する。ここで用いられる「能動的に制御する」という表現は、たとえ液体クロマトグラフィーシステム内の他の部分で流量の変化が生じた場合にでも、所定のスプリッタポンプまたはシャトルバルブの、所定の検出器を通る流体流れを制御する能力のことである。単に流体流れを分割するだけの「受動的な」流れスプリッタとは異なり、本発明で用いられるスプリッタポンプおよびシャトルバルブは、たとえば、流れ制限、全流量、温度、および／または溶媒組成のような、液体クロマトグラフィーシステム内の流体流れ内の起こり得る変動に関係なく、少なくとも１つの検出器への流体流れを制御する。
【００５１】
[0062]流体流れを所定の検出器に能動的に制御する工程は、たとえば、スプリッタポンプまたはシャトルバルブに駆動信号を送る工程を有し、（ｉ）スプリッタポンプまたはシャトルバルブを駆動し、（ｉｉ）スプリッタポンプまたはシャトルバルブの駆動を停止し、（ｉｉｉ）１つまたは複数の流れを変更し、および／またはスプリッタポンプまたはシャトルバルブの圧力設定を変更し、または（ｉｖ）（ｉ）から（ｉｉｉ）までの任意の組み合わせを行う。適当な流れおよび圧力設定は、限定するわけではないが、（ｉ）バルブ位置、（ｉｉ）スプリッタポンプまたはシャトルバルブの圧力、（ｉｉｉ）バルブへの空気圧力、または（ｉｖ）（ｉ）から（ｉｉｉ）までの任意の組み合わせを含む。典型的には、駆動信号は、たとえば、電気信号、気体信号、デジタル信号、またはワイヤレス信号の形態である。
【００５２】
[0063]図１に示されているように、例示的な液体クロマトグラフィーシステム１０において、流体流れを検出器１３に能動的に制御する工程は、流体をＴ部１２から検出器１３へポンプ輸送するためにスプリッタポンプ１５を用いる工程を有する。他の実施形態では、流体流れを検出器へ能動的に制御する工程は、検出器を通して流体を引き出すためにスプリッタポンプを用いる工程を有してもよい。該システム構成を図２に示す。
【００５３】
[0064]図２は、例示的な液体クロマトグラフィーシステム２０を示し、このシステム２０は、クロマトグラフィーカラム１１と、第１入口２１、第１出口２２、および第２出口２３を備えるＴ部１２と、Ｔ部１２の第１出口２２に流体連通する画分収集器１４と、Ｔ部１２の第２出口２３に流体連通する第１検出器１３と、Ｔ部１２の第２出口２３から検出器１３を通して流体を引き出すように位置決めされたスプリッタポンプ１５とを有する。
【００５４】
[0065]いくつかの望ましい例示的な実施形態では、図３Ａ−３Ｃに示される例示的なシャトルバルブ１５１のようなシャトルバルブは、検出器１３１のような検出器へ流体流れを能動的に制御するために用いられる。図３Ａに示されるように、例示的な液体クロマトグラフィーシステム３０は、クロマトグラフィーカラム１１と、クロマトグラフィーカートリッジ入口１１１、画分収集器出口１１４、ガスまたは液体入口１１５、および検出器出口１１３を備えるシャトルバルブ１５１と、シャトルバルブ１５１の画分収集器出口１１４に流体連通する画分収集器１４と、シャトルバルブ１５１の検出器出口１１３に流体連通する第１検出器１３１と、シャトルバルブ１５１のガスまたは液体入口１１５に流体を提供する流体供給部１５２とを有する。
【００５５】
[0066]本発明のさらなる例示的な実施形態では、クロマトグラフィーを用いて流体サンプルを分析する方法は、クロマトグラフィーカラムから流出する第１流体を提供する工程と、流体サンプルを少なくとも１つの検出器へ輸送するための第２流体を提供する工程と、第１流体から流体サンプルのアリコット（ａｌｉｑｕｏｔ）を取り除き、このアリコットを第２流体へ輸送し、第２流体のシャトルバルブを通じた連続した通路を維持するために、シャトルバルブを用いる工程と、流体サンプルのアリコットを観察するために少なくとも１つの検出器を用いる工程と、検出器の応答の変化に応じて画分収集器内に第１流体の新しいサンプル画分を収集する工程とを有する。例示的な一実施形態では、流体サンプルのアリコットが第１流体から取り除かれるときに、第１流体のシャトルバルブを通る連続流れ通路は維持される。他の例示的な実施形態では、第１流体および第２流体の両方のシャトルバルブを通る連続流れ通路は、流体サンプルのアリコットが第１流体から取り除かれて第２流体に輸送されるときに維持される。
【００５６】
[0067]本発明の他の例示的な実施形態では、クロマトグラフィーを用いる流体サンプルを分析する方法は、サンプルを含む第１流体を提供する工程と、シャトルバルブを通る第１流体の流れ特性に実質的に影響を与えることなく、第１流体から流体サンプルのアリコットを取り除くために、シャトルバルブを用いる工程と、流体サンプルのアリコットを観察するために少なくとも１つの検出器を用いる工程と、少なくとも１つの検出器の応答の変化に応じて第１流れの新しいサンプル画分を画分収集器に収集する工程とを有する。第１流体通路またはチャネルが少なくともバルブの一部を通って実質的に線形または直線であることにより、シャトルバルブを通る第１流体の流れを、実質的に層流とすることができる。さらなる例示的な実施形態では、シャトルバルブを通る第１流体の圧力は、実質的に一定のままであり、および／または圧力は実質的に増加しない。他の例示的な実施形態では、第１流体の流量は、シャトルバルブを通じて実質的に一定にすることができる。代替例示的な実施形態では、シャトルバルブからの液体サンプルのアリコットを検出器（１つまたは複数）へ輸送するのに、第２流体が用いられる。第２流体通路またはチャネルがバルブの少なくとも一部を通じて実質的に線形または直線であることにより、シャトルバルブを通る第２流体の流れは、実質的に層流とすることができる。例示的な実施形態では、シャトルバルブを通る第２流体の圧力は実質的に一定であり、および／または圧力は実質的に増加しない。他の例示的な実施形態では、第２流体の流量はシャトルバルブを通じて実質的に一定とすることができる。
【００５７】
[0068]図３Ｂおよび図３Ｃは、所定の液体クロマトグラフィーシステム内での１つの例示的な実施形態におけるシャトルバルブの動作を示している。図３Ｂに示されるように、シャトルバルブ１５１は、クロマトグラフィーカラム（たとえばカラム１１）からシャトルバルブ１５１へ流体流れを提供するクロマトグラフィーカートリッジ入口１１１と、流入サンプルアリコット容積１１６と、シャトルバルブ１５１から画分収集器（たとえば画分収集器１４）へ流体流れを提供する画分収集器出口１１４と、シャトルバルブ１５１の一部を通じてガス（たとえば空気、窒素等）または液体（たとえばアルコール）流れを提供するガスまたは液体入口１１５と、流出サンプルアリコット容積１１７と、シャトルバルブ１５１から検出器（たとえばＥＬＳＤのような検出器１３１）へ流体流れを提供する検出器出口１１３とを有する。
【００５８】
[0069]シャトルバルブ１５１を通じてクロマトグラフィーカートリッジから入口１１１へ画分収集器出口１１４へ流体が流れるとき、流入サンプルアリコット容積１１６は、流体の特定の容積で満たされ、ここでは、この流体は、サンプルのアリコット１１８と言及される（図３Ｂの影付きの領域として示される）。所望の時間に、シャトルバルブ１５１は、流入サンプルアリコット容積１１６内のサンプルアリコット１１８を、図３Ｃに示す流出サンプルアリコット容積１１７内へ輸送する。サンプルアリコット１１８が流出サンプルアリコット容積１１７内に輸送されると、流出サンプルアリコット容積１１７を通る、入口１１５からのガスまたは液体は、サンプルアリコット１１８を検出器出口１１３を介して検出器１３１（たとえばＥＬＳＤ）へ輸送する。
【００５９】
[0070]シャトルバルブ１５１は、少なくとも１つの検出器への輸送のために、所望のサンプリング周波数で、サンプルからサンプルのアリコット（たとえばサンプルアリコット１１８）を取り除くようにプログラムできる。例示的な一実施形態では、サンプリング周波数は、１０秒毎に少なくとも１つのサンプルアリコット（または、５秒毎に少なくとも１つのサンプルアリコット、または３秒毎に少なくとも１つのサンプルのアリコット、または、２秒毎に少なくとも１つのサンプルアリコット、または、０．５秒毎に少なくとも１つのサンプルアリコット、または、０．１秒毎に少なくとも１つのサンプルアリコット）である。
【００６０】
[0071]図１０Ａ−１０Ｃは、本発明の例示的なシャトルバルブを示しており、また、所定のクロマトグラフィーシステム内でのシャトルバルブの動作を示している。図１０Ａに示されるように、シャトルバルブ１５１は、クロマトグラフィーカラム（たとえばカラム１１）からシャトルバルブ１５１への流体流れを提供するクロマトグラフィーカートリッジ入口１１１と、入口１１１を出口１１４に接続するチャネル１１７と、動的な本体１１９のディンプル１１６内の流入サンプルアリコット容積１１８と、シャトルバルブ１５１から画分収集（たとえば画分収集１４）への流体流れを提供する画分収集器出口１１４と、シャトルバルブ１５１を通るガス（たとえば空気、窒素等）または液体（たとえばアルコール）の流れを提供するガスまたは液体入口１１５と、ディンプル１１６内の流出サンプルアリコット容積１１８と、入口１１５を出口１１３に接続するチャネル１２０と、シャトルバルブ１５１から検出器（たとえばＥＬＳＤのような検出器１３１）への流体流れを提供する検出器出口１１３とを有する。
【００６１】
[0072]流体が、シャトルバルブ１５１を通って、クロマトグラフィーカートリッジから入口１１１へ、チャネル１１７を介して画分収集器出口１１４へ流れると、ディンプル１１６内の流入サンプルアリコット容積１１８は、サンプルアリコット１１８と言及される特定の流体の容積で満たされる（図１０Ａの影付きの領域で示される）。所望の時間において、シャトルバルブ１５１は、ディンプル回転通路１２１を介して動的本体１１９内のディンプル１１６を回転させることにより、チャネル１１７から取り出されたディンプル１１６内のサンプルアリコット１１８をチャネル１２０へ輸送する。サンプルアリコット１１８がチャネル１２０に輸送されると、入口１１５からチャネル１２０を通って流れるガスまたは液体は、サンプルアリコット１１８を検出器出口１１３を介して検出器１３１（たとえばＥＬＳＤ）に輸送する。本発明によるシャトルバルブの他の利点は、バルブを通るチャネルの流体工学的な設計に関わる。クロマトグラフィーシステム内の背圧を最小化するために、チャネル１１７およびチャネル１２０を通る流れは連続的である。これは、動的本体１１９がどこに位置していても、シャトルバルブ１５１を通る流れが連続になるように（図１０Ｂに示される）、チャネル１１７および１２０を静的な本体１２２内に配置することにより達成される。図１０Ａに示されるように、サンプル流れチャネル１１７および検出器流れチャネル１２０の少なくとも一部は、実質的に平面内または円周内にあり、これは、乱流を減らしさらにバルブを通る圧力の増加を最小化する。さらに、サンプル流れチャネル１１７および検出器流れチャネル１２０の少なくとも一部は、ディンプル１１６と隣接するときに実質的に平行であり、これは、さらに乱流を制限し、バルブ内の圧力増加を制限する。これは、バルブ内の圧力を増加させない構成を含み、５０ｐｓｉ以上、好ましくは３０ｐｓｉ未満、より好ましくは２０ｐｓｉ未満、さらに好ましくは１０、９、８、７、６、５、４、３、２、１ｐｓｉ以未満、圧力を増加させない構成を含む。ディンプル１１６は、動的本体１１９内に配置され、動的本体の面に流体連通し、動的本体は静的本体１２２に隣接する。これにより、動的本体１１９が第１位置にあるとき、ディンプル１１６は、サンプル流れチャネル１１７に流体連通し、動的本体１１９が第２位置に移動すると、ディンプル１１６は検出器流れチャネル１２０に流体連通する。ディンプル１１６は任意の形状とすることができるが、凹状の半球体として示されている。また、ディンプル１１６は任意の寸法とすることができる。例示的な一実施形態では、ディンプルは、極端に小さな寸法とすることができ（たとえば、２０００ｎＬ未満、好ましくは約５００ｎＬ未満、より好ましくは約１００ｎＬ未満、より好ましくは約１ｎＬ未満）、しかし１ｎＬから２０００ｎＬまでの任意の寸法を含むことができ、これは、迅速なサンプリングを可能にする。さらに、小さなディンプル１１６の寸法は、非常に短いディンプル回転通路１２１を可能にし、これは、動的本体１１９と静的本体１２２との表面の摩擦を有意に小さくし、シャトルバルブ１５１のメンテナンスが必要になる前の使用寿命が長くなる（たとえば一千万回がサービスの前に可能になる）。回転運動シャトルバルブが図１０Ａ−１０Ｃに示されていても、直線運動シャトルバルブ、またはこれらに等価なシャトルバルブも本発明に利用できる。
【００６２】
[0073]シャトルバルブ１５１は、少なくとも１つの検出器へ輸送するために、所望のサンプリング周波数で、サンプルからサンプルアリコット（たとえばサンプルアリコット１１８）を取り除くようにプログラムできる。例示的な一実施形態では、サンプリング周波数は、１０秒毎に少なくとも１サンプルアリコット（または５秒毎に少なくとも１サンプルアリコット、または３秒毎に少なくとも１サンプルアリコット、または２秒毎に少なくとも１サンプルアリコット、または０．５秒毎に１サンプルアリコット、または０．１秒毎に少なくとも１サンプルアリコット）とすることができる。このシャトルバルブは、さらに、同時係属中の米国仮特許出願第６１／２００，８１４号明細書に説明されており、この明細書の全体は参照により本明細書に組み込まれる。
【００６３】
[0074]別の例示的な実施形態では、サンプルを検出器へ運ぶために、クロマトグラフィーシステムにおいて、揮発性液体、および、さまざまなガスを含む一般的なキャリア流体を用いることができる。図３Ａに示されるように、流体供給部１５２からのキャリア流体は、シャトルバルブ１５１に入口１１５のところで入り、ここで、キャリア球体は、サンプルアリコット１１８を取り出して（図１０Ａに示す）、出口１１３を介して検出器１３１へ運ぶ。サンプルアリコットは、バルブのキャリア流体中で沈殿すべきでなく、関連する配管はブロックされるようにでき、あるいはサンプルが流れ経路の壁を覆いサンプルの一部または全部が検出器に到達しない。フラッシュクロマトグラフィーにおけるサンプルの組成は非常に多様であり、無機分子、有機分子、ポリマー、ペプチド、プロテイン、およびオリゴヌクレオチドを含む、広範囲の化学物質を包含する。さまざまな溶媒での溶解性は化合物のクラスの両方、化合物のクラスの範囲内および化合物のクラス間で異なる。また、検出器との適合性は、使用できるキャリア流体のタイプを制限する。たとえば、ＵＶ検出器の場合、溶媒は検出波長において非発色性とすべきである。蒸発粒子検出（ＥＰＤ）技術の場合（ＥＬＳＤ、ＣＮＬＳＤ、質量スペクトル等）、溶媒は、サンプルの融点よりも十分に低い温度で容易に蒸発するものとすべきである。さらに、キャリア流体は、バルブ入口１１１と画分収集器出口１１４との間を流れるサンプルと混和できるものであるべきである。たとえば、ある流れ通路でヘキサンが用いられる場合、他の流路で水を用いるべきではない。これは、両者が混和性ではないからである。上で提案したキャリア流体は、分離溶媒を変更するときに、カスタマイズすべきである。これは、時間を消費し実用的ではない。本発明の例示的な一実施形態によれば、有機溶媒および水に混和し、揮発性で、非発色性の溶媒を用いることでこの問題を回避できる。たとえば、イソプロピルアルコール（ＩＰＡ）のような、揮発性で、非発色性で、中間的な極性の溶媒をキャリア流体として用いることができる。ＩＰＡは、ほとんどすべての溶媒に混和し、一般的なＵＶ検出波長において非発色性であり、低温で容易に蒸発する。さらに、ＩＰＡは、広範囲の化学物質および化学種を溶解させる。従って、ＩＰＡは、事実上全サンプルの種類のキャリア流体として適合的である。他のキャリア流体は、アセトン、メタノール、エタノール、プロパノール、ブタノール、イソブタノール、テトラヒドロフラン等を含むことができる。例示的な代替実施形態では、キャリア流体としてガスを用いることができる。サンプルは、シャトルバルブを通じておよびその後の検出器を通じて分離溶媒中または可動フェーズに残存しているので、沈殿は生じない。同様に、分離溶媒または可動フェーズは、他の溶媒に混合することはなく、そのため混和性の問題は生じない。キャリアはガスであるので、揮発性は問題とならない。さらに、多くのガスは、非発色性であり、ＵＶ検出に適合的である。ガスをキャリアとして用いるとき、サンプルアリコット１１８は、図１０Ｃに示されるように、ガスポケット１２３の間にサンドイッチされた別個のスラグとして、バルブ１５１から検出器１３１に供給される。キャリア流体としてガスを用いることは他の利点もある。たとえば、蒸発性光散乱検出器、または他の検出技術とともに用いる場合、ここで、サンプルは、霧状にされ、ガスはサンプルを輸送するのに用いることができ、またサンプルを霧状にするのに用いることができ、また、別個の霧形成ガス供給の必要性をなくすことができる。さらに、ガスは蒸発させる必要がないので、周囲のドリフトチューブ温度は、ドリフトチューブ加熱器の必要性を取り除くのに用いることができる。高温度で蒸発するサンプルはドリフトチューブを通るときに固体または液体の状態であるので、広範囲のサンプルを検出することができる。さまざまなガスをキャリア流体として用いることができ、キャリアガスは空気、窒素、ヘリウム、水素、および二酸化炭素を含むことができる。超臨界二酸化炭素のような超臨界流体も用いることができる。
【００６４】
Ｂ．流体流れ内でのサンプル成分の検出
[0075]本発明の方法はさらに、流体流れ内の１つまたは複数のサンプル成分を検出するために少なくとも１つの検出器を用いることができる。本発明の液体クロマトグラフィーシステムに用いるのに好適な検出器は、限定するわけではないが、非破壊式および／または破壊式検出器を含む。適当な検出器は、限定するわけではないが、非破壊式の検出器（すなわち、検出中にサンプルを消費または破壊しない検出器）を含み、たとえばＵＶ検出器、ＲＩ検出器、伝導性検出器、蛍光検出器、光散乱検出器、粘度計、偏光計、等であり、また適当な検出器は、破壊式検出器（すなわち、検出中にサンプルを消費または破壊する検出器）を含み、たとえば、蒸発光散乱検出器（ＥＬＳＤ）および凝集核形成光散乱検出器（ＣＮＬＳＤ）等のような蒸発性粒子検出器（ＥＰＤ）、コロナ放電検出器、質量スペクトル検出器、原子吸光検出器等である。たとえば、本発明の装置は、少なくとも１つのＵＶ検出器、少なくとも１つの蒸発光散乱検出器（ＥＬＳＤ）、少なくとも１つの質量スペクトル検出器（ＭＳ）、少なくとも１つの凝集核形成光散乱検出器（ＣＮＬＳＤ）、少なくとも１つのコロナ放電検出器、少なくとも１つの屈折率検出器（ＲＩＤ）、少なくとも１つの蛍光検出器（ＦＤ）、少なくとも１つのカイラル検出器（ＣＤ）、少なくとも１つの電子化学検出器（ＥＤ）（たとえば、電流検出器または電量検出器）またはそれらの組み合わせを含むことができる。例示的な実施形態では、検出器は、１つまたは複数の蒸発粒子検出器（ＥＰＤ）を含むことができ、これは、流動相として発光性および非発光性の溶媒の使用を可能にする。さらなる実施形態では、非破壊式検出器は、破壊式検出器と組み合わせることができ、これは、たとえば、各クロマトグラフィーのピークに関連する、化学的性質、化学構造、分子量等のような、サンプルのさまざまな化合物の特性を検出することができる。質量スペクトル検出と組み合わせる場合、検出時に画分の化学構造および／または分子量を検出することができ、所望の画分の同定を連続的に行う。現在のシステムにおいて、画分の化学同一性および構造は、面倒な過去の分離技術を用いなければならない。
【００６５】
[0076]使用する検出器のタイプに関わらず、所定の検出器は、１つまたは複数の検出器応答を提供し、検出器応答は、信号を生成しまたここで説明される液体クロマトグラフィーシステム内の１つまたは複数の部品（たとえば画分収集器、他の検出器、スプリッタポンプ、シャトルバルブ、Ｔ字部など）に伝達するのに用いられる。典型的には、所定の検出器の応答の変化は、信号の生成および伝達をトリガする。本発明において、信号を生成し１つまたは複数の部品に伝達するトリガになる、所定の検出器の応答の変化は、限定するわけではないが、検出器応答値の変化、検出器応答値の閾値への到達または超過、検出器応答値の時間に対する傾斜、検出器応答値の時間傾斜の閾値、検出器応答値の時間傾斜の変化、検出器応答値の時間傾斜の閾値の変化、またはこれらの組み合わせを含む。
【００６６】
[0077]いくつかの例示的な実施形態では、本発明の液体クロマトグラフィーシステムは、図４に示すように少なくとも２つの検出器を有する。図４に示される例示的な液体クロマトグラフィーシステム４０は、クロマトグラフィーカラム１１、第１入口２１、第１出口２２、および第２出口２３を備えるＴ部１２、Ｔ部１２の第１出口２２に流体連通する画分収集器１４、Ｔ部１２の第２出口２３に流体連通する第１検出器１３、Ｔ部１２の第２出口２３から第１検出器１３への流体流れを能動的に制御するスプリッタポンプ１５、およびＴ部１２の第２出口２３に流体連通する第２検出器１６を有する。
【００６７】
[0078]２つ以上の検出器が存在する場合、液体クロマトグラフィーシステムは、操作者により多くの解析オプションを提供する。たとえば、図４に示される例示的な液体クロマトグラフィーシステム４０において、サンプルを分析する方法は、第１検出器１３（たとえばＥＬＳＤ）および／または第２検出器１６（たとえばＵＶ検出器のような光学吸収検出器）から１つまたは複数の信号を画分収集器１４に伝達し、画分収集器１４に新しいサンプル画分を収集させる。第１検出器１３および／または第２検出器１６からの１つまたは複数の信号は、第１検出器１３または第２検出器１６からの単一の信号、第１検出器１３および第２検出器１６からの２つ以上の信号、または、第１検出器１３および第２検出器１６からの複合信号を含むことができる。図４に示される例示的な液体クロマトグラフィーシステム４０において、サンプルを分析する方法は、さらに、第２検出器１６からの信号をスプリッタポンプ１５に伝達し、流体流れ内のサンプル成分を検出する第２検出器１６の応答により、第１検出器１３への流体流れをスプリッタポンプ１５が開始または中止する工程を有することができる。
【００６８】
[0079]他の例示的な実施形態では、本発明の液体クロマトグラフィーシステムは、図５に示すように、少なくとも２つの検出器、および少なくとも２つのスプリッタポンプを有する。図５に示される例示的な液体クロマトグラフィーシステム５０は、クロマトグラフィーカラム１１、第１入口２１、第１出口２２、および第２出口２３を備える第１Ｔ部１２、第１Ｔ部１２の第２出口２３に流体連通する第１検出器１３、第１Ｔ部１２の第２出口２３から第１検出器１３への流体流れを能動的に制御する第１スプリッタポンプ１５、第１入口３１、第１出口３２、および第２出口３３を備える第２Ｔ部１８、第２Ｔ部１８の第２出口３３に流体連通する第２検出器１６、第２Ｔ部１８の第２出口３３から第２検出器１６への流体流れを能動的に制御する第２スプリッタポンプ１７、第２Ｔ部１８の第２出口３２に流体連通する画分収集器１４を有する。
【００６９】
[0080]上述したように、本発明の液体クロマトグラフィーシステムは、少なくとも１つの検出器への流体流れを能動的に制御するために、図６および図７に示すように、所定位置に１つまたは複数のシャトルバルブを備えることができ、または１つまたは複数のＴ部／スプリッタポンプの組み合わせを備えることができる。図６に示されるように、例示的な液体クロマトグラフィーシステム６０は、クロマトグラフィーカラム１１、クロマトグラフィーカートリッジ入口１１１、画分収集器出口１１４、ガスまたは液体入口１１５、および検出器出口１１３を備えるシャトルバルブ１５１、シャトルバルブ１５１の画分収集器出口１１４に流体連通する画分収集器１４、シャトルバルブ１５１の検出器出口１１３に流体連通する第１検出器１３１、シャトルバルブ１５１のガスまたは液体入口１１５に流体を提供する流体供給部１５２、シャトルバルブ１５１の検出器出口１１３に流体連通する第２検出器１６１を有する。
【００７０】
[0081]図７に示されるように、例示的な液体クロマトグラフィーシステム７０は、クロマトグラフィーカラム１１；クロマトグラフィーカートリッジ入口１１１、画分収集器出口１１４、ガスまたは液体入口１１５、および検出器出口１１３を備える第１シャトルバルブ１５１；シャトルバルブ１５１の検出器出口１１３に流体連通する第１検出器１３１；シャトルバルブ１５１のガスまたは液体入口１１５に流体を提供する流体供給部１５２；クロマトグラフィーカートリッジ入口１２１、画分収集器出口１２４、ガスまたは液体入口１２５、および検出器出口１２３を備える第２シャトルバルブ１７１；シャトルバルブ１７１の検出器出口１２３に流体連通する第２検出器１６１；シャトルバルブ１７１のガスまたは液体入口１２５に流体を提供する流体供給部１７２；およびシャトルバルブ１７１の画分収集器出口１２４に流体連通する画分収集器１４を有する。
【００７１】
[0082]これらの例示的な実施形態、すなわち例示的な液体クロマトグラフィーシステム５０および７０において、サンプルを分析する方法はさらに、第２スプリッタポンプ１７（または第２シャトルバルブ１７１）を介して第２検出器１６（または第２検出器１６１）へ流体流れを能動的に制御する工程を有し、同様に、第１のスプリッタポンプ１５（または第１シャトルバルブ１５１）を介して第１検出器１３（または第１検出器１３１）へ流体流れを能動的に制御する工程を有する。図５には示されていないが、第１スプリッタポンプ１５および／または第２スプリッタポンプ１７は、例示的な液体クロマトグラフィーシステム５０内で、第１検出器１３および第２検出器１６のそれぞれを通って流体を押し出すまたは引き出すように、位置決めすることができることを理解されたい。
【００７２】
[0083]いくつかの例示的な実施形態では、吸収スペクトルの１つまたは複数の波長における検出器応答および検出器応答変化を観察するために、１つまたは複数のＵＶ検出器のような１つまたは複数の光学吸収検出器を用いることができる。これらの実施形態では、単一の検出器または複数の検出器内の複数のセンサと組み合わせて１つまたは複数の光源を用いることができ、複数の波長におけるサンプルによる光吸収を検出する。たとえば、ＵＶ吸収スペクトル全体にわたる１つまたは複数の波長における検出器応答および検出器応答変化を観察するために、１つまたは複数のＵＶ検出器を用いることができる。
【００７３】
[0084]サンプルを分析する例示的な一方法において、この方法は、ＵＶ検出器のような光学吸収検出器を用いる工程を有し、光学吸収検出器は、ＵＶ吸収スペクトルの全波長のわたってｎ個の波長においてサンプルを観察するためのｎ個のセンサを有し、またこの方法は、（ｉ）ｎ個のＵＶ波長におけるｎ個の検出器応答の任意の１つの変化、または（ｉｉ）ｎ個の検出器応答により表される複合応答の変化に応じて新しいサンプル画分を収集する工程を有する。ｎ個のセンサおよび複数の検出器が存在する場合、これらは、画分収集器および／または他のシステム要素（たとえば他のＵＶ検出器）に対する信号タイミングに影響を与えるように、互いに相対的に所望のように位置決めすることができる。
【００７４】
[0085]全スペクトルＵＶ（または他のスペクトル範囲の）分析を用いる場合、スペクトルは所望の数の関心領域に分割することができる（たとえば２００ｎｍから４００ｎｍを５ｎｍ毎に分割する）。各スペクトル範囲の有意な経時的な変化を監視することができる。所定の範囲内における受け取った光エネルギーの急な落ち込み（たとえば検出器応答の１次微分および２次微分の落ち込み）は、所定の関心範囲の波長の光を吸収する物質の到達を示す。この例示的な実施形態では、正確さを増加させるために各範囲の幅をより小さくすることができ、代替的に、計算の負担を減らすために各範囲の幅をより大きくすることができる（すなわち、秒あたりの計算が少なくなり、必要なメモリも少なくなる）。
【００７５】
[0086]他の例示的な実施形態では、さまざまな検出器応答を観測するために、また、所定のシステム内の検出器応答の変化を観測するために、複数の異なるタイプの検出器を用いることができる。図８に示される例示的な液体クロマトグラフィーシステム８０において、蒸発性光散乱検出器（ＥＬＳＤ）（すなわち、第１検出器１３）のような蒸発性粒子検出器（ＥＰＤ）が単独でまたはＵＶ検出器（すなわち、第２検出器１６）と組み合わせて用いられる。例示的な液体クロマトグラフィーシステム８０はさらに、クロマトグラフィーカラム１１と、第１入口２１、第１出口２２、および第２出口２３を備えるＴ部１２と、画分収集器１４と、Ｔ部１２の第２出口２３に流体連通するＥＰＤ１３と、能動的にＥＰＤ１３への流体流れを制御するスプリッタポンプ１５と、Ｔ部１２の第１出口２２に流体連通するＵＶ検出器１６とを有する。この例示的な実施形態では、蒸発性粒子検出器の使用は、いくつかの利益をもたらす。非発色性の可動フェーズは、ＵＶ検出とともに用いられなければならず、さもなくば可動フェーズのバックグランド吸収がサンプル信号を消してしまう。これは、トルエン、ピリジン、さもなければ価値のある発色性を備える他の溶媒を用いることを排除する。蒸発性粒子検出に関して、可動フェーズの発色性は重要でない。可動フェーズがよりサンプルよりも揮発性である限り、蒸発性粒子検出に発色性の溶媒を用いることができる。これは、高選択性発色性溶媒を可動フェーズとして用いることにより、分離を改善する機会を開く。さらに、ＵＶ検出器は、非発色性サンプル成分を検出しないであろう。ＵＶ検出のみに基づいて収集された画分は、１つまたはそれ以上の画定できない非発色性成分を含むことがあり、これは画分の純度を妥協させる。逆にいえば、非発色性サンプルは、ＵＶ検出器により完全に見のがされ、そのまま廃棄に送られ、またはサンプルフリー（空白の画分）として想定される画分内に収集される。正味の結果は、生産性の喪失、汚染された画分、または、価値あるサンプル成分の損失をもたらす。フラッシュシステム内にＥＰＤ（たとえばＥＬＳＤ）が単独でまたはＵＶ検出とともに用いられる場合、発色性成分および非発色性成分は、検出され且つ収集され、画分の純度を改善する。ＵＶ検出器だけを備えるフラッシュシステムは、サンプル成分を見落とし、または不正確に純粋な画分に信号を出し、多くのフラッシュ使用者は、純度を確認し、また、空白の画分が本当に空白であるのかを確認するために、収集された画分を薄膜クロマトグラフィーによりスクリーンするであろう。これは、時間を消費する分離後の手順であり、作業を遅くする。１つ以上の成分を含むことが発見されたこれらの画分は、しばしば、成分を適切に分離するために第２クロマトグラフィー工程を必要とする。
【００７６】
[0087]例示的な液体クロマトグラフィーシステム８０では、検出器（たとえばＥＬＳＤ）１３およびＵＶ検出器１６からの信号３１および信号６１はそれぞれ、それぞれ画分収集器１４に送られ、たとえば新しいサンプル画分の収集のような画分収集器１４からのいくつかの活動を開始する。好ましい例示的な実施形態では、（ｉ）ＥＬＳＤ１３、（ｉｉ）ＵＶ検出器１６、または（ｉｉｉ）ＥＬＳＤ１３およびＵＶ検出器１６の両方からの１つまたはそれ以上の検出器信号３１および６１に応じて、画分収集器１４は、新しいサンプル画分を収集する。
【００７７】
[0088]例示的な液体クロマトグラフィーシステム８０と類似して、図６に示される例示的な液体クロマトグラフィーシステム６０において、ＥＬＳＤ１３１およびＵＶ検出器１６１からの信号３１１および６１１は、それぞれ画分収集器１４に送られ、たとえば新しいサンプル画分の収集のような画分収集器１４からのいくつかの活動を開始する。好ましい例示的な実施形態では、（ｉ）ＥＬＳＤ１３１、（ｉｉ）ＵＶ検出器１６１、または（ｉｉｉ）ＥＬＳＤ１３１およびＵＶ検出器１６１からの１つまたはそれ以上の検出器信号３１１および６１１に応じて、画分収集器１４は、新しいサンプル画分を収集する。
【００７８】
[0089]上述のように、ＵＶ検出器１６（またはＵＶ検出器１６１）は、ｎ個のセンサを有し、サンプルをｎ個の特定の波長で、全ＵＶ吸収スペクトルの一部にわたって観察可能に構成される。図８に示される例示的な液体クロマトグラフィーシステム８０において、（ｉ）ＥＬＳＤ１３またはＵＶ検出器１６のいずれか一方からの単一の信号、（ｉｉ）ＥＬＳＤ１３およびＵＶ検出器１６両方からの２つまたはそれ以上の信号、または（ｉｉｉ）２つまたはそれ以上の特定のＵＶ波長（すなわち、ｎ個の特定のＵＶ波長）における２つまたはそれ以上の検出器応答を有する複合信号（すなわち、ｎ個の検出器応答まで）に応じて、画分収集器１４は、新しいサンプル画分を収集する。同様に、図６に示される例示的な液体クロマトグラフィーシステム６０は、（ｉ）ＥＬＳＤ１３１またはＵＶ検出器１６１のいずれか一方からの単一の信号、（ｉｉ）ＥＬＳＤ１３１およびＵＶ検出器１６１両方からの２つまたはそれ以上の信号、または（ｉｉｉ）２つまたはそれ以上の特定のＵＶ波長における２つまたはそれ以上の検出器応答を有する複合信号（すなわち、ｎ個の検出器応答まで）に応じて、画分収集器１４は、新しいサンプル画分を収集する。
【００７９】
[0090]さらに、例示的な液体クロマトグラフィーシステム８０において、ＵＶ検出器１６は、検出器信号（図示せず）を生成するために用いられてもよく、検出器信号は、（１）（ｉ）単一のセンサからの単一の検出器応答から、または（ｉｉ）１より大きいｎ個のセンサのｎ個の検出器応答から生じ、また、検出器信号は（２）少なくとも１つのスプリッタポンプ１５、ＥＬＳＤ１３およびＴ部１２に送られる。さらに、ＥＬＳＤ１３の検出器応答から生じる検出器信号（図示せず）は、ＵＶ検出器１６の１つまたは複数の設定を変更するために、ＵＶ検出器１６に送られてもよい。同様に、図６に示される例示的な液体クロマトグラフィーシステム６０において、ＵＶ検出器１６１は検出器信号（図示せず）を生成するために用いられてもよく、検出器信号は（１）（ｉ）単一のセンサからの単一の検出器応答から、または（ｉｉ）１より大きいｎ個のセンサのｎ個の検出器応答から生じ、また、検出器信号は（２）少なくとも１つのシャトルバルブ１５１およびＥＬＳＤ１３に送られる。さらに、ＥＬＳＤ１３１の検出器応答から生じる検出器信号（図示せず）は、ＵＶ検出器１６１の１つまたは複数の設定を変更するためにＵＶ検出器１６１に送られてもよい。
【００８０】
[0091]図９に示される例示的な液体クロマトグラフィーシステム９０に示されるように、所定のシステム内の異なるタイプの検出器の位置は、システムプロセスの１つまたは複数の特徴を提供するために所望のように調節できる。例示的な液体クロマトグラフィーシステム９０において、ＥＬＳＤ１３は、ＵＶ検出器１６の下流に位置決めされる。このような構成において、ＵＶ検出器１６は、画分収集器１４のために、ＥＬＳＤ１３からの信号３１の発生の前に、検出器応答を提供し、信号６１（たとえば、（ｉ）単一のセンサから単一の検出器応答から生成され、または（ｉｉ）１より大きいｎ個のセンサのｎ個の検出器応答から生じる信号）を発生させることができるように位置決めされる。また、ＵＶ検出器１６は、少なくとも１つのスプリッタポンプ１５、ＥＬＳＤ１３およびＴ部１２のために、スプリッタポンプ１５、ＥＬＳＤ１３および／またはＴ部１２が駆動または停止できるように、検出器応答を提供し且つ信号（図示せず）（たとえば、（ｉ）単一のセンサからの単一の検出器応答、または（ｉｉ）１より大きいｎ個のセンサのｎ個の検出器応答から生じる信号）を発生させることができるように位置決めされる。
【００８１】
[0092]図示しないが、シャトルバルブは、類似のシステムプロセス特徴を提供するために、図９に示される例示的な液体クロマトグラフィーシステム９０内のＴ部１２およびスプリッタポンプ１５の代わりに用いることができることを理解されたい。このような構成において、ＵＶ検出器１６は、ＥＬＳＤ１３からの信号３１の発生の前に、画分収集器１４のために、検出器応答を提供し且つ信号６１（たとえば、（ｉ）単一のセンサからの単一の検出器応答、または（ｉｉ）１より大きいｎ個のセンサのｎ個の検出器応答から生じる信号）を発生させることができるように位置決めされる。また、ＵＶ検出器１６は、少なくとも１つのシャトルバルブおよびＥＬＳＤ１３のために、シャトルバルブおよび／またはＥＬＳＤ１３を駆動または停止できるように、検出器応答を提供し且つ信号（図示せず）（たとえば、（ｉ）単一のセンサからの単一の検出器応答、または（ｉｉ）１より大きいｎ個のセンサのｎ個の検出器応答から生じる信号）を発生させることができるように位置決めされる。システム６０、８０、および９０は、ＥＬＳＤおよびＵＶを検出器として言及したが、任意のＥＰＤのような破壊式検出器をＥＬＳＤのために用いることができ、また、任意の非破壊式検出器をＵＶ検出器の代わりに用いることができる。
【００８２】
[0093]他の例示的な実施形態では、本発明の液体クロマトグラフィーシステムは、２つ以上の非破壊式検出器（たとえば、上述のＵＶ検出器のような１つまたは複数の光学吸収検出器）を備える非破壊式システムを備えることができ、破壊式検出器（質量スペクトル計）はシステム内に存在しない。例示的な一実施形態では、液体クロマトグラフィーシステムは、ＵＶ検出器のような２つの光学吸収検出器を有し、サンプルを分析する方法は、２つ以上の特定の波長においてサンプルを観察するために２つ以上の検出器を用いる工程と、（ｉ）第１の波長における第１検出器応答の変化、（ｉｉ）第２波長における第２検出器応答の変化、または（ｉｉｉ）第１検出器応答および第２検出器応答により表現される複合応答の変化に応じて、新しいサンプル画分を収集する工程とを有する。これらの例示的な実施形態では、第１波長は、第２波長と実質的に同一または異なってもよい。
【００８３】
[0094]２つまたはそれ以上のＵＶ検出器のような２つまたはそれ以上の光学吸収検出器を用いる例示的な実施形態では、光学吸収検出器は、１つまたは複数のシステムの利点を提供するために、所定の液体クロマトグラフィーシステム内に位置決めすることができる。２つまたはそれ以上の光学吸収検出器は、サンプルが各検出器に実質的に同時に到達するように、互いに平行関係になるように位置決めでき、また、２つまたはそれ以上の光学吸収検出器は、実質的に同時に信号（すなわち、第１検出器応答および第２検出器応答から）を生成し、画分収集器に信号を送る。
【００８４】
[0095]さらなる実施形態では、非破壊式検出器（たとえば、ＲＩ検出器、ＵＶ検出器等）を単独で、または破壊式検出器（たとえば、ＥＰＤ、質量スペクトル計、分光光度計、放射分光計、ＮＭＲ等）と組み合わせて用いることができる。たとえば、質量スペクトル計のような破壊式検出器は、成分のピークと、そのピークに関連する化学的性質を同時に検出することができる。これにより目標物を含む画分の迅速な決定が可能になる。他の検出技術に関しては、たとえば、分光光度計、質量スペクトル計、放射分光計、ＮＭＲ等による、画分が目標成分を含む分離後決定が必要となる。２つまたはそれ以上の化学的性質がフラッシュカートリッジから同時に溶出される場合（すなわち、同じ滞留時間を備える）、特定の検出器を用いるときに（すなわち化学的性質間の差異を同定できない検出器）、これらの検出器は化学組成を決定できないので、それらはシステムにより同じバイアルに堆積される。質量スペクトル検出器が破壊式検出器として用いられる例示的な実施形態では、同時に溶出されるすべての成分は同定され得る。これによって、分離後に純度を確認する必要性がなくなる。
【００８５】
[0096]任意の上述の液体クロマトグラフィーシステムにおいて、少なくとも１つのＵＶ検出器のような少なくとも１つの検出器を、少なくとも１つの他のＵＶ検出器またはＥＬＳＤのような少なくとも１つの他の検出器の下流に（たとえば直列に）位置決めすることは有利となり得る。このような例示的な実施形態では、第１検出器における第１検出器応答は、信号を生成し、且つ（１）スプリッタポンプ、（２）シャトルバルブ、（３）第２検出器、および（４）Ｔ部の少なくとも１つに信号を送るために用いられる。たとえば、第１検出器の第１検出器応答は、信号を生成し、スプリッタポンプまたはシャトルバルブに信号を送るために用いられ、（ｉ）スプリッタポンプまたはシャトルバルブを駆動し、（ｉｉ）スプリッタポンプまたはシャトルバルブを停止し、（ｉｉｉ）スプリッタポンプまたはシャトルバルブの、１つまたは複数の流れまたは圧力設定を変更し、（ｉｖ）あるいは、（ｉ）から（ｉｉｉ）までの任意の組み合わせを行う。適切な流れおよび圧力設定は、限定するわけではないが、上述の流れおよび圧力設定を含む。典型的には、信号は、たとえば電気信号、気体信号、デジタル信号、ワイヤレス信号の形態である。
【００８６】
[0097]いくつかの実施形態では、複数の検出器（すなわち２つまたはそれ以上の検出器）は、システム内の他の検出器から独立して、各検出器が、（１）スプリッタポンプ、（２）シャトルバルブ、（３）他の検出器、（４）Ｔ部の少なくとも１つに信号を送ることができるように位置決めされる。たとえば、複数の光学吸収検出器（たとえばＵＶ検出器）は、所定のシステム内で、シャトルバルブに独立した信号を提供するように位置決めでき、この信号により、シャトルバルブに能動的に制御された流体サンプルをＥＬＳＤのような他の検出器に提供させる。
【００８７】
[0098]他の例示的な実施形態では、第１検出器の第１検出器応答は、信号を生成し、第２検出器へ信号を送るために用いられ、（ｉ）第２検出器を駆動し、（ｉｉ）第１検出器で用いられる第１波長に実質的に類似した波長で第２検出器を駆動し、（ｉｉｉ）第１検出器で用いられる第１波長以外の波長で第２検出器を駆動し、（ｉｖ）第２検出器を停止し、（ｖ）第２検出器の他のいくつかの設定を変更し（たとえば、第２検出器の観察される波長）、または、（ｖｉ）（ｉ）から（ｖ）までの任意の組み合わせを行う。
【００８８】
[0099]さらに他の例示的な実施形態では、第１検出器の第１検出器応答は、信号を生成し信号をＴ部に送るために用いることができ、（ｉ）バルブを開き、または、（ｉｉ）液体クロマトグラフィーシステムの一部を通る流体流れを開始または停止するようにバルブを閉じる。上述したように、典型的には、信号は、たとえば電気信号、気体信号、デジタル信号、またはワイヤレス信号の形態である。
【００８９】
Ｃ．検出器応答からの信号の生成
[0100]本発明による方法はさらに、１つまたは複数の検出器応答から信号を生成する工程を有することができる。図１に示される例示的な液体クロマトグラフィーシステム１０のようないくつかの例示的な実施形態では、単一の検出器は、サンプル成分の存在を検出し、流体流れ内のサンプル成分の存在および濃度に基づいて検出器応答を生成する。図６に示される例示的な液体クロマトグラフィーシステム５０のような他の例示的な実施形態では、２つまたはそれ以上の検出器を、１つまたは複数のサンプル成分の存在を検出するために用いることができ、流体流れ内の１つまたは複数のサンプル成分の存在および濃度に基づいて２つまたはそれ以上の検出器応答を生成させることができる。
【００９０】
[0101]上述のように、所定の検出器は、１つまたは複数の検出器応答を提供し、これら検出器応答は、信号を生成し、本明細書で説明されるような液体クロマトグラフィーシステム内の１つまたは複数の構成要素（たとえば、画分収集器、他の検出器、スプリッタポンプ、シャトルバルブ、またはＴ部）に信号を送るのに用いることができる。典型的には、所定の検出器応答の変化は、信号の生成および送信をトリガする。信号を生成および１つ複数の構成要素への信号送信をトリガし得る、所定の検出器応答の変化は、限定するわけではないが、検出器応答値の変化、検出器応答値の閾値への到達または超過、経時的な検出器応答値の傾斜、経時的な検出器応答値の傾斜の閾値、経時的な検出器応答値の傾斜の変化、経時的な検出器応答値の傾斜の閾値の変化、または、これらの組み合わせを含む。
【００９１】
[0102]例示的な一実施形態では、本発明の方法は、少なくとも１つの検出器から検出器信号を生成する工程を有し、この検出器信号は、（ｉ）時間の関数としての検出器応答の傾斜（すなわち、検出器応答の１次微分）、（ｉｉ）時間の関数としての検出器応答の傾斜の変化（すなわち、検出器応答の２次微分）、（ｉｉｉ）随意に、検出器応答値の閾値、または、（ｉｖ）（ｉ）から（ｉｉｉ）までの任意の組み合わせおよび少なくとも（ｉ）または少なくとも（ｉｉ）を含む所望の組み合わせ、に応答して生成される。この例示的な実施形態では、検出器応答の形状から物質が認識され、特に、経時的な検出器応答の１次および／または２次微分（すなわち、それぞれ傾斜および傾斜の変化）から認識される。特に、コンピュータプログラムは、検出器応答値の時間シーケンスを解析し、その変化率（すなわち１次微分）および変化率の率（すなわち２次微分）を測定する。１次微分および２次微分の両方が増加している場合、物質が検出され始めている。同様に、１次微分および２次微分の両方が減少しているとき、物質の検出が終了してきている。
【００９２】
[0103]実際の検出器の値は典型的にはノイズを含み（たとえばギザギザである）、経時的な数値的なローパスフィルターを用いることが望ましい（たとえばスムージングする）。従って、少なくとも１つの検出器から検出器信号を生成する工程は、好ましくはさらに、（ｉ）時間傾斜データ、（ｉｉ）時間傾斜データの変化、（ｉｉｉ）随意に、検出器応答値の閾値、または（ｉｖ）（ｉ）から（ｉｉｉ）までの任意の組み合わせについて、数値的なローパスフィルターを行う工程を有し、（ｉ）時間傾斜データ、（ｉｉ）時間傾斜データの変化、（ｉｉｉ）随意に、検出器応答値の閾値、または（ｉｖ）（ｉ）から（ｉｉｉ）までの任意の組み合わせ、の実際の変化を検出器応答の考えられるノイズから区別する。好ましい例示的な実施形態では、有限インパルス応答（ＦＩＲ）フィルターまたは無限インパルス応答（ＩＩＲ）フィルターを、経時的なデータの数値的なローパスフィルターとして用いることができる（たとえば、いくつかの標本の単純平均）。典型的には、決定アルゴリズムは、ノイズではなく、実際の検出器応答／信号の確認として、時間における逐次呼出しを少量用いる。
【００９３】
[0104]他の例示的な実施形態では、サンプルを分析する方法は、各検出器からの検出応答成分を有する複合信号を生成する工程と、複合信号の変化に応じて新しいサンプル画分を収集する工程とを有することができる。これらの例示的な実施形態では、複合信号を生成する工程は、（ｉ）検出器応答値、（ｉｉ）時間の関数としての所定の検出器応答の傾斜（すなわち、与えられた検出器応答の１次微分）、（ｉｉｉ）時間の関数としての所定の検出器応答の傾斜の変化（すなわち、所定の検出器応答の２次微分）、または（ｉｖ）各検出器（すなわち２つ以上の検出器のそれぞれ）からの（ｉ）から（ｉｉｉ）までの任意の組み合わせを、数学的に相互関連させる工程を含むことができる。たとえば、いくつかの例示的な実施形態では、複合信号は、（ｉ）所定の時間における各検出器（すなわち２つ以上の検出器の各々）の検出器応答値の積、（ｉｉ）所定の時間における検出器応答の１次微分の積、（ｉｉｉ）所定の時間における検出器応答の２次微分の積、または（ｉｖ）（ｉ）から（ｉｉｉ）までの任意の組み合わせを有することができる。
【００９４】
[0105]複合信号が用いられる他の例示的な実施形態では、複合信号を生成する工程は、（ｉ）検出器応答値、（ｉｉ）時間の関数として所定の検出器応答の傾斜（すなわち、所定の検出器応答の１次微分）、（ｉｉｉ）時間の関数として所定の検出器応答の傾斜の変化（すなわち、所定の検出器応答の２次微分）、または、（ｉｖ）１つの検出器内の各センサ（すなわち、ｎ個の特定の波長でサンプルを観察するｎ個のセンサ）からの（ｉ）から（ｉｉｉ）までの任意の組み合わせのみ、または、（ｉｖ）システム内に存在する他の検出器応答との任意の組み合わせを数学的に相互関連させる工程を有することができる。たとえば、いくつかの例示的な実施形態では、複合信号は、（ｉ）所定の時間における、１つの検出器内の各センサ（すなわち、ｎ個の特定の波長でサンプルを観察するｎ個のセンサ）の検出器応答値の積、および、他の検出器（たとえば、ＵＶ検出器と組み合わせて用いられるＥＬＳＤ）からの任意の追加的な検出器応答値との積、（ｉｉ）所定の時間における、１つの検出器内の各センサ（すなわち、ｎ個の特定の波長でサンプルを観察するｎ個のセンサ）の検出器応答、および他の検出器からの任意の追加的な検出器応答の１次微分の積、（ｉｉｉ）所定の時間における、１つの検出器内の各センサ（すなわち、ｎ個の特定の波長でサンプルを観察するｎ個のセンサ）の検出器応答、および、他の検出器からの任意に追加的な検出器応答の２次微分の積、または（ｉｖ）（ｉ）から（ｉｉｉ）までの任意の組み合わせを有することができる。
【００９５】
[0106]別の例示的な実施形態では、サンプルを分析する方法は、液体クロマトグラフィーシステムの中の１つまたは複数の検出器からの信号を生成する工程であって、該信号は少なくとも１つの検出器からの検出応答成分を含む工程と、信号の変化に応じて画分収集器の中の新しいサンプル画分を収集する工程と、液体クロマトグラフィーシステムの１つまたは複数の検出器からの信号の振幅を修正する工程を含む。このような振幅の変更は、電子またはデジタル手段、光学手段、機械手段、または流体手段によって実施されてもよい。
【００９６】
[0107]１つまたは複数の検出器からの信号の振幅が、電子的またはデジタル的に修正される、例示的な実施形態では、このような修正は、クロマトグラフィーシステムのコンポーネントに使用する信号の利得を変更することによって実施されてもよい。利得は、コンピュータソフトウェアまたはコンピュータで読取り可能な媒体を使用して変更されてもよく、コンピュータソフトウェアまたはコンピュータで読取り可能な媒体は、乗法などの数学的操作によって、信号レベルを調節するようにプログラムされる。該信号は、アナログデジタル変換手段によって、信号の電子処理を変更すること、たとえば、演算増幅器のタイプまたは設定の変更によって、電子的に変更されてもよい。
【００９７】
[0108]１つまたは複数の検出器からの信号の振幅が光学的に修正される、例示的な実施形態では、このような修正はクロマトグラフィーシステムの１つまたは複数の検出器の光源によって実施されてもよく、例示的な一実施形態では、信号の振幅は、クロマトグラフィーシステムの１つまたは複数の検出器のそれぞれに、異なる光源を使用することによって修正されてもよい。別の例示的な実施形態では、信号の振幅は、クロマトグラフィーシステムの１つまたは複数の検出器の光源強度を、変更することによって修正されてもよい。さらに例示的な実施形態では、信号の振幅は、クロマトグラフィーシステムの１つまたは複数の検出器のそれぞれに、複数の光源を使用することによって修正されてもよい。たとえば、蒸発性光散乱検出器の場合には、光源の電力を増加させることによって、検出器の中を通過するときサンプル粒子によって、散乱される光量を増加させる。散乱光の増加によって、信号の振幅を増加させる。
【００９８】
[0109]１つまたは複数の検出器からの信号の振幅が、流体手段によって修正される、例示的な実施形態では、このような修正は、クロマトグラフィーシステムの１つまたは複数の検出器に運ばれるサンプル量を変更することによって、実施されてもよい。別の例示的な実施形態では、流体移動デバイスの中を通るサンプルの流量を変更することによる、クロマトグラフィーシステムの１つまたは複数の検出器に運ばれるサンプル量を変更することによって、信号の振幅が修正されてもよい。さらに例示的な実施形態では、流体移動デバイスの中を通るサンプルの流路を変更することによる、クロマトグラフィーシステムの１つまたは複数の検出器に運ばれるサンプル量を変更することによって、信号の振幅が修正されてもよい。別の例示的な実施形態では、複数の流体移動デバイスを使用することによる、クロマトグラフィーシステムの１つまたは複数の検出器に運ばれるサンプル量を変更することによって、信号の振幅が修正されてもよい。さらにもっと例示的な実施形態では、交換可能な流体移動デバイスコンポーネントを使用することによる、クロマトグラフィーシステムの１つまたは複数の検出器に運ばれる、サンプル量を変更することによって、信号の振幅は修正される。別の例示的な実施形態では、流体移動デバイスの動作条件の変更することを含む、クロマトグラフィーシステムの１つまたは複数の検出器に運ばれるサンプル量を変更することによって、該信号の振幅が修正されてもよい。さらに例示的な実施形態では、該信号の振幅は、少なくとも１つのシャトルバルブ回転子または固定子の形状またはサイズを変更すること、少なくとも１つの固定子または回転子チャンバー（たとえば、サンプルアリコット体積移動チャンバーまたはディンプル）またはチャネルの形状またはサイズを変更すること、またはこれらの組み合わせによる、クロマトグラフィーシステムの１つまたは複数の検出器に運ばれるサンプル量を変更することによって修正されてもよい。さらにもっと例示的な実施形態では、該信号の振幅は、１つまたは複数のスプリッタコンポーネント、シャトルバルブコンポーネント、またはポンプコンポーネント、またはこれらの組み合わせの形状またはサイズを変更することによる、クロマトグラフィーシステムの１つまたは複数の検出器に運ばれるサンプル量を変更することによって修正されてもよい。これらの修正のすべては、検出器に到達するサンプル量を増加させ、これによって信号の振幅を大きくする。たとえば、蒸発性光散乱検出器では、サンプル量を増加させることによって、検出器光学部分に到達するサンプル粒子の数を増加させる。これによって散乱光の量を増加させ、信号振幅を大きくする。
【００９９】
[0110]１つまたは複数の検出器からの信号の振幅が、機械的に修正される例示的な実施形態では、このような修正は、検出器の設計によって達成されてもよい。例示的な一実施形態では、該修正は、クロマトグラフィーシステムのそれぞれの検出器に対して、異なるコンポーネントを備える、複数の検出器の使用によって達成されてもよい。別の例示的な実施形態では、信号の振幅は、クロマトグラフィーシステムのそれぞれの検出器に対して、交換可能な検出器、またはそれらのコンポーネントを、使用することによって修正される。たとえば、システムは、それぞれが異なる電力の光源を備える、２つの蒸発性光散乱検出器を組み込んでもよい。高電力光源を備える検出器は、低電力光源を備える検出器に対して、振幅の大きい信号を生成する。
【０１００】
[0111]別の例示的な実施形態では、信号の振幅は、検出器に到達する、サンプルの物理的特性を変更することによって修正されてもよい。たとえば、蒸発性光散乱検出器では、大きな粒子は小さな粒子よりも光を多く散乱し、小さな粒子は、サンプル信号をマスクできるノイズに寄与する。これらの粒子は、ネブライザーで生成され、および、たとえば、ネブライザーガス流量、ネブライザーガスタイプ、ネブライザー液流量、ネブライザー液タイプ、ネブライザー設計またはタイプを変更することによって、生成される粒子のサイズを変更する。たとえば、クロス・フロー型ネブライザーまたはコンセントリック型ネブライザーが使用されてもよい。大きな粒子はより多くの光を散乱し、信号振幅を大きくする。さらに例示的な実施形態では、より大きい振幅信号が、より大きな粒子だけが検出器に到達するように、エアロゾルストリームから小さなサンプル粒子を除去することによって、生成される。より小さな粒子は、より大きな粒子によって生成される信号に干渉する、バックグランドノイズに寄与する。これらの小さな粒子を除去することによって、信号の振幅を大きくする。当該技術分野において公知の多様なタイプおよび設計のインパクターが、粒子が検出器に到達する前に、小さな粒子を選択的の除去するために使用されてもよい。平板インパクター、スクリーンインパクター、球状インパクター、エルボーインパクター、３次元インパクター、または他の非線形流れ構造インパクター、またはこれらの組み合わせが使用されてもよい。別の例示的な実施形態では、粒子のサイズは、蒸発特性を変更することによって修正されてもよい。たとえば、１つまたは複数のエアロゾルゾーン（ネブライザー、ドリフトチューブ、光学ブロック、排気ブロック）の温度の変更によって、信号振幅を大きくするより大きなサイズに、サンプル粒子を偏らせてもよい。
【０１０１】
[0112]別の例示的な実施形態では、サンプルを分析する方法は、液体クロマトグラフィーシステムの中の１つまたは複数の検出器からの信号を生成する工程であって、該信号は少なくとも１つの検出器からの検出応答成分を含む工程と、信号の変化に応じて画分収集器の中の新しいサンプル画分を収集する工程とを含み、ここで、該信号の振幅は、少なくとも約２ｍＶである。この例示的な実施形態では、該信号の振幅は、少なくとも約３ｍＶ、４ｍＶ、５ｍＶ、６ｍＶ、７ｍＶ、８ｍＶ、９ｍＶ、１０ｍＶ、またはそれ以上でもよい。
【０１０２】
[0113]さらに例示的な実施形態では、サンプルを分析する方法は、液体クロマトグラフィーシステムの中の１つまたは複数の検出器からの信号を生成する工程であって、該信号が少なくとも１つの検出器からの検出応答成分を含む工程と、信号の変化に応じて画分収集器の中の新しいサンプル画分を収集する工程とを含み、ここで、サンプル画分は、約１００ｍｇ以下である。この例示的な実施形態では、収集されるサンプル画分は、約１００ｍｇ以下から少なくとも約０．１ｍｇ、またはこの範囲内のいかなる整数または分数以下であってもよい。たとえば、収集されるサンプル画分は、約９０ｍｇ以下、８０ｍｇ、７０ｍｇ、６０ｍｇ、５０ｍｇ、４０ｍｇ、３０ｍｇ、２０ｍｇ、１０ｍｇ、またはそれ未満であってもよい。
【０１０３】
[0114]さらにもっと例示的な実施形態では、サンプルを分析する方法は、液体クロマトグラフィーシステムの中の１つまたは複数の検出器からの信号を生成する工程であって、該信号が少なくとも１つの検出器からの検出応答成分を含む工程と、信号の変化に応じて画分収集器の中の新しいサンプル画分を収集する工程とを含み、ここで、該信号は、少なくとも約４０μＬ／分で、１つまたは複数の検出器に供給されるサンプルから生成される。この例示的な実施形態では、１つまたは複数の検出器に供給されるサンプルは、少なくとも約４０μＬ／分から約５００μＬ／分、またはこの範囲内のいかなる整数または分数であってもよい。たとえば、１つまたは複数の検出器に供給されるサンプルは、少なくとも５０μＬ／分、６０μＬ／分、７０μＬ／分、８０μＬ／分、９０μＬ／分、１００μＬ／分、またはそれを越えてもよい。サンプルは、少なくとも１つの検出器と流体連通して位置する流体移動デバイスを介して、液体クロマトグラフィーシステムの１つまたは複数の検出器に供給されてもよい。流体移動デバイスは、シャトルバルブ、スプリッタ、ポンプなどを含んでもよい。
【０１０４】
[0115]別の例示的な実施形態では、サンプルを分析する方法は、液体クロマトグラフィーシステムの中の１つまたは複数の検出器からの信号を生成する工程であって、該信号は少なくとも１つの検出器からの検出応答成分を含む工程と、信号の変化に応じて画分収集器の中の新しいサンプル画分を収集する工程とを含み、ここで、１つまたは複数の検出器は、ＥＬＳＤを含み、該信号は、約１ｍＷよりも大きい光源から生成される。この例示的な実施形態では、信号は、少なくとも約１ｍＷから約１００ｍＷまで、またはこの範囲内のいかなる整数または分数の光源から生成されてもよい。たとえば、信号は、少なくとも約１ｍＷ、２ｍＷ、３ｍＷ、４ｍＷ、５ｍＷ、６ｍＷ、７ｍＷ、８ｍＷ、９ｍＷ、１０ｍＷ、またはそれ以上の光源から生成されてもよい。
【０１０５】
[0116]さらに例示的な実施形態では、サンプルを分析する方法は、液体クロマトグラフィーシステムの２つ以上の検出器から信号を生成する工程であって、該信号が少なくとも１つの検出器からの検出応答成分を含む工程と、信号の変化に応じて画分収集器の中の新しいサンプル画分を収集する工程とを含み、ここで、２つ以上の検出器は、異なるダイナミックレンジを有する複数の検出器を備える。いくつかのサンプルでは、いくつかのコンポーネントは大量に存在し、いくつかのコンポーネントは少量存在してもよい。この場合には、検出器は、大きなダイナミックレンジを有していなければならない。振幅の上端がダイナミックレンジを越える場合には、サンプル信号振幅が大きすぎて、ダイナミックレンジを越える部分のピーク部分は観察できない。単一のサンプルが、１つが検出器のダイナミックレンジの範囲内で、他がダイナミックレンジの範囲外である、２つ以上の成分を含む場合には、成分の１つは適切に収集できない。特定の検出器のダイナミックレンジは、検出原理と構成に依存する。
【０１０６】
[0117]たとえば、検出器が１００から１のダイナミックレンジを有し、画分収集器をトリガする最も少ないサンプル量が１００ｍｇである場合には、検出器レンジの上方でわかりにくくない最も多いサンプル量は１０００ｍｇである（１００ｍｇ×ダイナミックレンジ）。サンプルが、２００ｍｇの１つの成分と５００ｍｇの１つの成分を含む場合には、画分収集器は、成分を適切に分離することができる。１つの成分が１ｍｇで他の成分が２００ｍｇである場合には、第１の成分は収集されない。または、第１の成分が２００ｍｇで、第２の成分が１５００ｍｇである場合には、ピークの上方部分が視認できないので、第２の成分は適切には収集されず、ダイナミックレンジの上方よりも低い谷を示す、十分には解析されない複数の成分になる。これらの最後の２つの場合には、受け入れ可能な結果を得ることはできない。
【０１０７】
[0118]１つの例示的な実施形態によれば、この問題を克服する１つの方法は、同一のシステムで、２つ以上の検出器を使用することである。１つの検出器は、他の検出器とは異なるダイナミックレンジを有する。２つの検出器は、同一のタイプで異なる構成（すなわち２つのＥＬＳＤは異なる光源を有する）、または異なるタイプの検出器（すなわちＵＶおよびＥＬＳＤ）であってもよい。これらの場合に、合計ダイナミックレンジは、両方の検出器からの最小の収集可能な量と最大の検出可能な量である。たとえば、第１の検出器の最小収集可能量が１０ｍｇで、１００から１のダイナミックレンジを有する場合には、１０ｍｇから１０００ｍｇのサンプルでそれは適切に動作する。第２の検出器の最小収集可能量が５０ｍｇで、１００から１のダイナミックレンジを有する場合には、５０ｍｇから５０００ｍｇのサンプルでそれは適切に動作する。しかしながら、組み合わせによって、５００から１のダイナミックレンジを１０ｍｇから５０００ｍｇの間で適切に収集する。あるいは、同一の検出器が、異なるダイナミックレンジを有する２つのゾーンを備えてもよい。たとえば、ＥＬＳＤは、異なる電力を有する２つの光源を備えてもよい。またはＵＶ検出器は、異なる光路長を有するフローセルを含んでもよい。
【０１０８】
Ｄ．１つまたはそれ以上のサンプル画分の収集
[0119]所定の液体クロマトグラフィーシステム内の少なくとも１つの検出器からの１つまたは複数の信号に応答して、１つまたは複数のサンプル画分を収集するために、本発明の方法はさらに、図１−図３Ａおよび図４−図９に示される例示的な画分収集器１４のような画分収集器を用いてもよい。たとえば、図１、図２、図３Ａにそれぞれ示される例示的な液体クロマトグラフィーシステム１０、２０、３０において、サンプルを分析する方法は、さらに、第１検出器１３からの１つまたは複数の信号に応答して１つまたは複数のサンプル画分を収集する工程を備えることができる。図４、図５、図６にそれぞれ示される例示的な液体クロマトグラフィーシステム４０、５０、６０において、サンプルを分析する方法はさらに、第１検出器１３（または第１検出器１３１）、第２検出器１６（または第２検出器１６１）、または第１検出器１３および第２検出器１６の両方（または第１検出器１３１および第２検出器１６１の両方）からの１つまたは複数の信号に応じて１つまたは複数のサンプル画分を収集する工程を備えることができる。
【０１０９】
[0120]本発明のいくつかの実施形態では、画分収集器は、少なくとも１つの検出器からの１つまたは複数の信号を認識、受信、処理可能なように構成され、また、１つまたは複数の信号に基づいて１つまたは複数のサンプル画分を収集するように構成される。他の例示的な実施形態では、追加的なコンピュータまたはマイクロプロセッサ装置が少なくとも１つの検出器からの１つまたは複数の信号を処理し、その後に、画分収集器に、認識可能な信号を提供するために用いられる、画分収集器への信号は、追加的なコンピュータまたはマイクロプロセッサ装置からの１つまたは複数の信号に基づいて、画分収集器が１つまたは複数のサンプル画分を収集するように指示するものである。
【０１１０】
[0121]上述のように、１つまたは複数のシステム特徴を与えるために、システムコンポーネントは、所定の液体クロマトグラフィーシステム内に位置決めすることができる。たとえば、少なくとも１つの検出器は、（ｉ）所定の検出器応答の検出と、（ｉｉ）検出器応答から生成される信号に基づいてサンプル画分を収集する工程との間の時間遅れを最小化するように、所定の液体クロマトグラフィーシステム内に位置決めすることができる。本発明の例示的な実施形態では、液体クロマトグラフィーシステムは、望ましくは、約２．０秒より小さい（または約１．５秒より小さい、または約１．０秒より小さい、または約０．５秒より小さい）、所定の検出器信号の画分収集器への時間遅れ（すなわち、（ｉ）所定の検出器の検出と、（ｉｉ）検出器から生成される信号に基づくサンプル画分の収集工程との間の時間遅れ）の最大値を示す。
【０１１１】
[0122]２つ以上の検出器またはｎ個のセンサを備える少なくとも１つの検出器（上述した）を用いる本発明の例示的な実施形態では、液体クロマトグラフィーシステムは、望ましくは、約２．０秒より小さい（または約１．５秒より小さい、または約１．０秒より小さい、または約０．５秒より小さい）、任意の検出器からの任意の検出器信号の画分収集器への時間遅れ（すなわち、（ｉ）所定の検出器応答の検出と、（ｉｉ）検出器応答から生成される信号（たとえば単一信号または複合信号）に基づいてサンプル画分を収集する工程との間の時間遅れ）の最大値を示す。
【０１１２】
Ｅ．サンプル成分の分離工程
[0123]本発明の方法は、所定のサンプル内の成分を分離するために液体クロマトグラフィー（ＬＣ）工程を用いる。特定のサンプルに依存して、さまざまなＬＣカラム、可動フェーズ、および他のプロセス工程条件（たとえば、供給速度、勾配など）を用いることができる。
【０１１３】
[0124]本発明において、いくつかのＬＣカラムを用いることができる。一般に、本発明において、ポリマーまたは無機の通常相、反対相、イオン交換、親和力、疎水性相互作用、親水性相互作用、混合モード、および寸法除外カラムを用いることができる。例示的な商業的に入手できるカラムは、限定するわけではないが、Ｇｒａｃｅ  Ｄａｖｉｓｏｎ  Ｄｉｓｃｏｖｅｒｙ  Ｓｃｉｅｎｃｅｓ社から、ＶＹＤＡＣ（登録商標）、ＧＲＡＣＥＲＥＳＯＬＶ（商標）、ＤＡＶＩＳＩＬ（登録商標）、ＡＬＬＴＩＭＡ（商標）、ＶＩＳＩＯＮ（商標）、ＧＲＡＣＥＰＵＲＥ（商標）、ＥＶＥＲＥＳＴ（商標）、およびＤＥＮＡＬＩ（商標）の商標で入手できるもの、および他の類似の会社から入手できるものを含む。
【０１１４】
[0125]本発明において、いくつかの可動フェーズ成分を用いることができる。適切な可動フェーズ成分は、限定するわけではないが、アセトニトリル、ジクロロメタン、エチルアセテート、ヘプタン、アセトン、エチルエーテル、テトラヒドロフラン、クロロホルム、ヘキサン、メタノール、イソプロピルアルコール、水、エタノール、緩衝材、およびこれらの組み合わせを含む。
【０１１５】
Ｆ．ユーザインターフェース工程
[0126]本発明におけるサンプルを分析する方法は、さらに、操作者または使用者が液体クロマトグラフィーシステムの１つまたは複数のシステムコンポーネントに相互作用する１つまたは複数の工程を備えることができる。たとえば、サンプルを分析する方法は、１つまたは複数の工程を備えることができる。すなわち、試験のためにサンプルを液体クロマトグラフィーシステム内に入れる工程、システム内の１つまたは複数の要素の１つまたは複数の設定（たとえば、流量または圧力設定、波長など）を調節する工程、１つまたは複数のセンサおよび／または複数の検出器からの１つまたは複数の検出器応答を考慮する所望の数学的アルゴリズムに基づいて、信号を発生させるように少なくとも１つの検出器をプログラムする工程、１つまたは複数の検出器応答を考慮する所望の数学的アルゴリズムに基づいて信号を生成するように１つまたは複数のシステムコンポーネント（検出器以外）をプログラムする工程、少なくとも１つの検出器からの信号（たとえば、単一信号または複合信号）を認識し、受信した信号に基づいて１つまたは複数のサンプル画分を収集するように、画分収集器をプログラムする工程、画分収集器が１つまたは複数のシステムコンポーネント（画分収集器以外）からの入力に基づいて１つまたは複数のサンプルを収集できるように、少なくとも１つの検出器からの入力信号を認識し、この入力信号を画分収集器が認識でき且つ処理できる信号に変換するように１つまたは複数のシステムコンポーネント（画分収集器以外）をプログラムする工程、および、所望の時間において、または、液体クロマトグラフィーシステム内の他の動作（たとえば、操作者または使用者に表示される検出器応答）に応答して、１つまたは複数のシステムコンポーネント（たとえば、Ｔバルブ、スプリッタポンプ、シャトルバルブ、または検出器）を駆動または停止する工程を備えることができる。
【０１１６】
ＩＩ．サンプルを分析するための装置
[0127]本発明はまた、上述の方法の工程の１つ以上を用いてサンプルを分析することができるまたはサンプルの分析に貢献することができる装置および装置コンポーネントに関する。
【０１１７】
[0128]上述したように、本発明の例示的ないくつかの実施形態では、サンプルを分析する装置は、（ｉ）クロマトグラフィーカラム、（ｉｉ）第１入口、第１出口、および第２出口を備えるＴ部、（ｉｉｉ）Ｔ部の第１出口と流体連通する画分収集器、（ｉｖ）Ｔ部の第２出口と流体連通する第１検出器、および（ｖ）Ｔ部の第２出口および第１検出器と流体連通するように位置決めされ、第１検出器への流体流れを能動的に制御可能なように構成されるスプリッタポンプを備えることができる。本発明の他の例示的な実施形態では、第１検出器への流体流れを能動的に制御するために、Ｔ部／スプリッタポンプの組み合わせの代わりにシャトルバルブを用いることができる。
【０１１８】
[0129]図１−図９には示されていないが、上述の任意の装置（たとえば例示的な液体クロマトグラフィーシステム１０−９０）または装置コンポーネントは、さらに、システムハードウェアを備えることができ、このシステムハードウェアは、（ｉ）検出器応答値または検出器応答値の変化の認識、（ｉｉ）検出器応答値または検出器応答値の変化からシングルの生成、（ｉｉｉ）１つまたは複数のシステムコンポーネントへの信号の伝達、（ｉｖ）受信コンポーネントにより生成された信号の認識、（ｖ）受信コンポーネント内で認識された信号の処理、および（ｖｉ）認識された信号に応じた受信コンポーネントの処理工程の開始を可能にする。
【０１１９】
[0130]１つの例示的な実施形態では、装置（たとえば、液体クロマトグラフィーシステム１０−９０）または所定の装置コンポーネントは、さらに、システムハードウェアを備えることができ、このシステムハードウェアは、第１検出器が、スプリッタポンプまたはシャトルバルブに駆動信号を伝達するのを可能にし、（ｉ）スプリッタポンプまたはシャトルバルブを駆動し、（ｉｉ）スプリッタポンプまたはシャトルバルブを停止し、（ｉｉｉ）スプリッタポンプまたはシャトルバルブの流量または圧力設定の１つ以上を変更し、または（ｉｖ）（ｉ）から（ｉｉｉ）までの任意の組み合わせを行う。適切な流量および圧力の設定は、限定するわけではないが、（ｉ）バルブ位置、（ｉｉ）スプリッタポンプまたはシャトルバルブの圧力、（ｉｉｉ）バルブへの空気圧力、または（ｉｖ）（ｉ）から（ｉｉｉ）までの任意の組み合わせを含む。
【０１２０】
[0131]いくつかの例示的な実施形態では、スプリッタポンプは、Ｔ部と第１検出器との間に位置決めすることができる（たとえば、図１におけるＴ部１２と第１検出器１３との間に位置決めされたスプリッタポンプ１５を参照されたい）。他の例示的な実施形態では、第１検出器は、Ｔ部とスプリッタポンプとの間に位置決めすることができる（たとえば図２におけるＴ部１２とスプリッタポンプ１５との間に位置決めされた第１検出器１３を参照）。
【０１２１】
[0132]他の例示的な実施形態では、本発明の装置は、（ｉ）クロマトグラフィーカラム、（ｉｉ）２つ以上の検出器、および（ｉｉｉ）２つ以上の検出器に流体連通する画分収集器を有し、画分収集器は、２つ以上の検出器からの１つまたは複数の検出器信号に応答して、１つまたは複数のサンプル画分を収集可能なように構成される。いくつかの例示的な実施形態では、２つ以上の検出器は、２つ以上の非破壊式検出器（たとえば２つ以上のＵＶ検出器）を有し、システム内に破壊式検出器（たとえば、質量スペクトル検出器）を備えない。
【０１２２】
[0133]２つ以上の検出器が存在する場合、第１検出器と第２検出器との間の流体流れの容積を分割するために、スプリッタポンプまたはシャトルバルブを用いることができる。他の例示的な実施形態では、一方の検出器からの検出器応答に応じてもう一方の検出器への流体流れを開始または停止するために、スプリッタポンプまたはシャトルバルブを用いることができる。さらに、所定のシステムにおいて、２つ以上の検出器への流体流れを能動的に制御するために、複数のスプリッタポンプおよび／またはシャトルバルブを用いてもよい。
【０１２３】
[0134]上述したように、装置はさらにシステムハードウェアを備えることができ、このシステムハードウェアは、１つまたは複数の検出器応答から検出器信号の生成を可能にする。例示的な一実施形態では、装置はシステムハードウェアを備え、このシステムハードウェアは、検出器信号の生成を可能にし、この検出器信号は、（ｉ）時間の関数としての検出器応答の傾斜（すなわち、検出器応答の１次微分）、（ｉｉ）時間の関数としての検出器応答の傾斜の変化（すなわち検出器応答の２次微分）、（ｉｉｉ）随意に、検出器応答値の閾値、または（ｉｖ）少なくとも（ｉ）または少なくとも（ｉｉ）を含む所望の組み合わせを備える（ｉ）から（ｉｉｉ）までの任意の組み合わせに応じて生成される。システムハードウェアは、望ましくは、さらに、ローパス数値フィルタリング能力を有し、（ｉ）傾斜データ、（ｉｉ）傾斜データの変化、（ｉｉｉ）随意に、検出器応答値の閾値、または（ｉ）から（ｉｉｉ）までの経時的な任意の組み合わせをフィルター処理し、所定の検出器応答中の考えられるノイズから、（ｉ）傾斜データ、（ｉｉ）傾斜データの変化、（ｉｉｉ）随意に、検出器応答値の閾値、または（ｉ）から（ｉｉｉ）までの任意の組み合わせ、の実際の変化を区別する。
【０１２４】
[0135]マルチ検出器システムにおいて、システムハードウェアは、各検出器からの検出応答成分、並びに所定の検出器内の複数のセンサからの検出応答成分を含む、複合信号の生成を可能にするために用いることができる。これらの例示的な実施形態では、システムハードウェアは、画分収集器に、画分収集器が複合信号の変化に応じて新しいサンプル画分を収集するように指示する命令／信号を送達可能なように構成される。複合信号は、各検出器からの（ｉ）検出器応答値、（ｉｉ）時間の関数として所定の検出器応答の傾斜（すなわち所定の検出器応答の１次微分）、（ｉｉｉ）時間の関数として所定の検出器応答の傾斜の変化（すなわち所定の検出器応答の２次微分）、または各検出器から（ｉｖ）（ｉ）から（ｉｉｉ）までの任意の組み合わせ、の間に数学的な相関を備えることができる。たとえば、複合信号は、（ｉ）所定の時間における各検出器の検出器応答値の積、（ｉｉ）所定の時間における検出器応答値の１次微分の積、（ｉｉｉ）所定の時間における検出器応答の２次微分の積、または（ｉｖ）（ｉ）から（ｉｉｉ）までの任意の組み合わせを含むことができる。
【０１２５】
[0136]望ましい１つの構成において、サンプルを分析するための装置は、２つ以上の特定の光学波長（たとえばＵＶスペクトル内）でサンプルを観察可能なように構成された少なくとも１つの検出器を有する。また、本装置はシステムハードウェアを有し、システムハードウェハは、画分収集器が、（ｉ）第１波長における検出器応答の変化、（ｉｉ）第２波長における検出器応答の変化、または（ｉｉｉ）第１および第２の波長における検出器応答により表される複合応答の変化に応じて新しいサンプル画分を収集することを可能にする。各検出器は、同一の波長で、異なる波長で、または複数の波長で動作することができる。さらに、各検出器は、互いに並列、直列、あるいは並列検出器と直列検出器との組み合わせになるようにすることができる。
【０１２６】
[0137]上述したように、例示的な一実施形態では、装置は、ＵＶ吸収スペクトルの一部または全部（または他のタイプの検出器を用いる吸収スペクトルの任意の部分）にわたってｎ個の特定の光学波長でサンプルを観察可能なように構成されたｎ個のセンサを有する単一の検出器を備えることができる。また、装置はシステムハードウェアを備えることができ、システムハードウェアは、画分収集器が、（ｉ）ｎ個の特定の光学波長におけるｎ個の検出器応答の任意の１つの変化、（ｉｉ）ｎ個の検出器応答により表される複合応答の変化に応じて新しいサンプル画分を収集することを可能にする。
【０１２７】
[0138]少なくとも１つの検出器への流体流れを能動的に制御するために、スプリッタポンプまたはシャトルバルブが存在する場合、サンプルを分析するための装置はさらに、（ｉ）スプリッタポンプまたはシャトルバルブを駆動し、（ｉｉ）スプリッタポンプまたはシャトルバルブを停止し、（ｉｉｉ）スプリッタポンプまたはシャトルバルブの１つまたは複数の流体または圧力設定を変化させ、または（ｉｖ）（ｉ）から（ｉｉｉ）までの任意の組み合わせを行うため、スプリッタポンプまたはシャトルバルブへの駆動信号を生成することができるシステムハードウェアを備えることができる。駆動信号は、たとえば、システム操作者または検出器のようなシステムコンポーネントにより生成することができる（すなわち、駆動信号は、上述したように、検出器応答値に応じて、または検出器の検出器応答値の変化に応じて検出器により生成されて伝達される）。
【０１２８】
[0139]本発明のさらなる例示的な実施形態では、クロマトグラフィーシステムを用いて流体のサンプルを分析するための装置は、クロマトグラフィーカラムまたはカートリッジから流出する第１流体通路、流体のサンプルを分析することができる少なくとも１つの検出器、および、第１流体通路を通る流体の流れ特性に実質的に影響を与えることなく、流体のサンプルアリコットを第１流体通路から検出器（単数または複数）へ移動させるシャトルバルブを含む。第１流体通路またはチャネルは、少なくともバルブの一部を通るときにおいて、実質的に線形または真っ直ぐなので、第１流体通路を通る流体の流れを実質的に層流とすることができる。さらなる例示的な実施形態では、第１流体通路を通る流体の圧力は、実質的に一定であり、および／または実質的に増加しない。他の例示的な実施形態では、流体の流量は、第１流体通路を通るときに実質的に一定である。例示的な一代替実施形態では、シャトルバルブから検出器（単数または複数）へ流体のアリコットサンプルを輸送するのに、第２流体通路が用いられる。少なくともバルブの一部を通るところで、第２流体通路またはチャネルは、実質的に線形または真っ直ぐなので、第２流体通路を通る流れを実質的に層流とすることができる。例示的な一実施形態では、第２流体通路を通る流体の圧力は実質的に一定であり、および／または実質的に増加しない。さらなる例示的な実施形態では、流体の流量は、第２流体通路を通るときに実質的に一定にすることができる。
【０１２９】
[0140]さらなる例示的な実施形態では、クロマトグラフィーを用いて流体のサンプルを分析するための装置は、クロマトグラフィーカラムから流出する第１流体通路、サンプルを分析することができる少なくとも１つの検出器へ流体のサンプルを輸送する第２流体通路、第１流体通路から第２流体通路へ、流体のアリコットサンプルを移動させる間、シャトルバルブを通る連続な第２流体通路を維持するシャトルバルブを含む。例示的な一実施形態では、シャトルバルブを通る連続な第１流れ通路は、流体のアリコットサンプルが第１流体通路から取り除かれるときに維持される。他の例示的な実施形態では、シャトルバルブを通る連続な第１および第２流れ通路は、流体のアリコットサンプルが第１流体通路から取り除かれて第２流体通路に移動させられるときに維持される。
【０１３０】
[0141]本発明の例示的な実施形態では、サンプルを分析するための装置はさらに、１つまたは複数の検出器信号に応じて１つまたは複数のサンプル画分を収集可能なように構成される画分収集器を有し、検出器信号は、（ｉ）第１検出器、（ｉｉ）第２検出器（または任意の数の追加の検出器）、または（ｉｉｉ）第１検出器および第２検出器（または任意の数の追加の検出器）の両方から発される。複数の検出器が用いられる場合、本装置は、上述のように各検出器からの１つまたは複数の検出器応答による複合信号の変化に応じて新しいサンプル画分を収集可能なように構成される画分収集器を備えることができる。
【０１３１】
[0142]上述したように、いくつかの例示的な実施形態では、サンプルを分析するための装置は、少なくとも１つの検出器からの信号を認識し、受信し、処理可能なように構成された画分収集器を有し、また、画分収集器は、１つまたは複数の信号に基づいて１つまたは複数のサンプル画分を収集する。他の例示的な実施形態では、サンプルを分析する装置は、追加のコンピュータまたはマイクロプロセッサ装置を有し、これは、少なくとも１つの検出器からの１つまたは複数の信号を処理し、入力信号を画分収集器が認識できる信号に変換することができる。この後者の例示的な実施形態では、画分収集器は、画分収集器の信号処理成分からではなく、追加のコンピュータまたはマイクロプロセッサ装置からの１つまたは複数の信号に基づいて１つまたは複数のサンプル画分を収集する。
【０１３２】
[0143]上述された例示的な液体クロマトグラフィーシステムのいずれも、１つまたは複数のシステム特性を提供するために、所定のシステム内に戦略的に配置される、検出器、スプリッタポンプ、Ｔ部、およびシャトルバルブをいくつ含んでもよいことに留意されたい。たとえば、図６の例示的な液体クロマトグラフィーシステム６０では図示しないが、追加の検出器は、カラム１１とシャトルバルブ１５１との間、および／またはシャトルバルブ１５１と検出器１６１との間に配置されてもよい。図７の例示的な液体クロマトグラフィーシステム７０には示されないが、追加の検出器は、カラム１１とシャトルバルブ１５１との間、および／またはシャトルバルブ１５１とシャトルバルブ１７１との間、および／またはシャトルバルブ１７１と画分収集器１４との間に位置してもよい。追加の検出器は、同様に、図８および図９にそれぞれ示される例示的な液体クロマトグラフィーシステム８０および９０の中に位置してもよい。
【０１３３】
[0144]本発明の例示的な実施形態では、サンプルを分析するための装置は、液体クロマトグラフィーシステムの中の１つまたは複数の検出器から信号を生成可能なように構成されるシステムハードウェアであって、該信号は、１つまたは複数の検出器からの検出器応答成分を含むシステムハードウェアと、信号の変化に応じて新しいサンプル画分を収集可能なように構成される画分収集器とを含み、ここで、液体クロマトグラフィーシステムは、信号の振幅を修正可能なように構成される。いくつかの例示的な実施形態では、信号の振幅は、電子またはデジタル手段、光学手段、機械または流体手段によって修正される。
【０１３４】
[0145]信号の振幅は電子的手段またはデジタル手段によって修正される例示的な実施形態では、該変更は、信号の利得を変更可能なように構成されるクロマトグラフィーシステムのコンポーネントによって実施されてもよい。利得は、コンピュータソフトウェアまたはコンピュータで読取り可能な媒体を使用して変更されてもよく、コンピュータソフトウェアまたはコンピュータで読取り可能な媒体は、乗法などの数学的操作によって、信号レベルを調節するようにプログラムされる。該信号は、アナログデジタル変換手段によって、信号の電子処理を変更すること、たとえば、演算増幅器のタイプまたは設定を変更することによって、電子的に変更されてもよい。
【０１３５】
[0146]信号の振幅が光学手段によって修正される例示的な実施形態では、該変更はクロマトグラフィーシステムの１つまたは複数の検出器の光源によって実施されてもよい。例示的な一実施形態では、信号の振幅は、１つまたは複数の検出器のそれぞれに、異なる光源を使用可能なように構成されるクロマトグラフィーシステムによって修正されてもよい。別の例示的な実施形態では、信号の振幅は、１つまたは複数の検出器の光源強度を変更可能なように構成される、クロマトグラフィーシステムによって修正されてもよい。さらに例示的な実施形態では、信号の振幅は、１つまたは複数の検出器のそれぞれに、複数の光源を使用可能なように構成されるクロマトグラフィーシステムによって修正されてもよい。たとえば、蒸発性光散乱検出器の場合には、光源の電力を増加させることによって、検出器の中を通過するときサンプル粒子によって散乱される光量を増加させることができる。散乱光の増加によって、信号の振幅が増加する。
【０１３６】
[0147]信号の振幅が流体手段によって修正される例示的な実施形態では、１つまたは複数の検出器に運ばれるサンプル量を、変更可能なように構成されるクロマトグラフィーシステムによって、該変更が実施されてもよい。別の例示的な実施形態では、流体移動デバイスの中を通るサンプルの流量を変更することによって、１つまたは複数の検出器に運ばれるサンプル量を、変更可能なように構成されるクロマトグラフィーシステムによって、該信号の振幅は修正されてもよい。さらに例示的な実施形態では、流体移動デバイスの中を通るサンプルの流路を変更することによる、１つまたは複数の検出器に運ばれるサンプル量を、変更可能なように構成されるクロマトグラフィーシステムによって、該信号の振幅が修正されてもよい。別の例示的な実施形態では、複数の流体移動デバイスを使用することによって、１つまたは複数の検出器に運ばれるサンプル量を、変更可能なように構成されるクロマトグラフィーシステムによって、該信号の振幅が修正されてもよい。さらにもっと例示的な実施形態では、交換可能な流体移動デバイスコンポーネントを使用することによる、１つまたは複数の検出器に運ばれるサンプル量を、変更可能なように構成されるクロマトグラフィーシステムによって、信号の振幅が修正されてもよい。別の例示的な実施形態では、流体移動デバイスの動作条件を変更することによる、１つまたは複数の検出器に運ばれるサンプル量を、変更可能なように構成されるクロマトグラフィーシステムによって、信号の振幅が修正されてもよい。さらに例示的な実施形態では、流体移動デバイスの１つまたは複数のコンポーネントの形状またはサイズを変更することによって、１つまたは複数の検出器に運ばれるサンプル量を、変更可能なように構成されるクロマトグラフィーシステムによって、信号の振幅が修正されてもよい。シャトルバルブが流体移動デバイスとして使用される例示的な実施形態では、少なくとも１つのシャトルバルブ回転子または固定子の形状またはサイズ、少なくとも１つの固定子または回転子チャンバー（たとえばサンプルアリコット体積移動チャンバーまたはディンプル）またはチャネルの形状またはサイズ、またはこれらの組み合わせである。さらにもっと例示的な実施形態では、１つまたは複数のスプリッタコンポーネント、シャトルバルブコンポーネント、またはポンプコンポーネント、またはこれらの組み合わせの少なくとも１つのコンポーネントの形状またはサイズを変えることによって、１つまたは複数の検出器に運ばれるサンプル量を変更可能なように構成される、クロマトグラフィーシステムによって、信号の振幅が修正されてもよい。これらの変更のすべては、検出器に到達するサンプル量を増加させ、これによって信号の振幅を大きくする。たとえば、蒸発性光散乱検出器では、サンプル量を増加させることによって、検出器光学部分に到達するサンプル粒子の数を増加させる。これによって散乱光の量を増加させ、信号振幅を大きくする。
【０１３７】
[0148]信号の振幅は機械的に修正される例示的な実施形態では、該変更は、検出器の設計を変更することによって実施されてもよい。例示的な一実施形態では、信号の振幅は、１つまたは複数の検出器のそれぞれに対して、異なるコンポーネントを備える複数の検出器を使用可能なように構成されるクロマトグラフィーシステム、によって修正されてもよい。別の例示的な実施形態では、信号の振幅は、１つまたは複数の検出器のそれぞれに対して、交換可能な検出器、またはそれらのコンポーネントを、使用可能なように構成される、クロマトグラフィーシステムによって修正されてもよい。たとえば、システムは、それぞれが異なる電力の光源を備える、２つの蒸発性光散乱検出器を組み込んでもよい。高電力光源を備える検出器は、低電力光源を備える検出器に対して、振幅の大きい信号を生成する。
【０１３８】
[0149]別の例示的な実施形態では、信号の振幅は、検出器に到達する、サンプルの物理的特性を変更することによって修正されてもよい。たとえば、蒸発性光散乱検出器では、大きな粒子は小さな粒子よりも光を多く散乱し、小さな粒子は、サンプル信号をマスクすることができるノイズに寄与する。これらの粒子は、ネブライザーで生成され、および、たとえば、ネブライザーガス流量、ネブライザーガスタイプ、ネブライザー液流量、ネブライザー液タイプ、ネブライザー設計またはタイプの変更によって、生成される粒子のサイズを変更する。たとえば、クロス・フロー型ネブライザーまたはコンセントリック型ネブライザーが使用されてもよい。大きな粒子は多くの光を散乱し、信号振幅を大きくする。さらに例示的な実施形態では、大きい振幅信号は、大きな粒子だけが検出器に到達するように、エアロゾルストリームから小さなサンプル粒子を除去することによって、生成される。小さな粒子は、大きな粒子によって生成される信号に干渉する、バックグランドノイズに寄与する。これらの小さな粒子を除去することによって、信号の振幅を大きくする。当該技術分野において公知の多様なタイプおよび設計のインパクターが、粒子が検出器に到達する前に、小さな粒子を選択的に除去するために使用されてもよい。平板インパクター、スクリーンインパクター、球状インパクター、エルボーインパクター、３次元インパクター、または他の非線形流れ構造インパクター、またはこれらの組み合わせが使用されてもよい。別の例示的な実施形態では、粒子のサイズは、蒸発特性の変更によって修正されてもよい。たとえば、１つまたは複数のエアロゾルゾーン（ネブライザー、ドリフトチューブ、光学ブロック、排気ブロック）の温度の変更によって、信号振幅を大きくするより大きなサイズに、サンプル粒子を偏らせてもよい。
【０１３９】
[0150]例示的な実施形態では、サンプルを分析するための装置は、液体クロマトグラフィーシステムの中の１つまたは複数の検出器から信号を生成可能なように構成されるシステムハードウェアであって、該信号は、１つまたは複数の検出器からの検出応答成分を含むシステムハードウェアと、信号の変化に応じて新しいサンプル画分を収集可能なように構成される画分収集器とを含み、ここで、液体クロマトグラフィーシステムは、少なくとも約２ｍＶの信号の振幅を生成可能なように構成される。この例示的な実施形態では、信号の振幅は、少なくとも約３ｍＶ、４ｍＶ、５ｍＶ、６ｍＶ、７ｍＶ、８ｍＶ、９ｍＶ、１０ｍＶ、またはそれを越えてもよい。
【０１４０】
[0151]さらに例示的な実施形態では、サンプルを分析するための装置は、液体クロマトグラフィーシステムの中の１つまたは複数の検出器から信号を生成可能なように構成されるシステムハードウェアであって、該信号は、１つまたは複数の検出器からの検出応答成分を含むシステムハードウェアと、信号の変化に応じて新しいサンプル画分を収集可能なように構成される画分収集器とを含み、ここで、液体クロマトグラフィーシステムは、約１００ｍｇ以下のサンプル画分を収集可能なように構成される。この例示的な実施形態では、収集されるサンプル画分は、約１００ｍｇから少なくとも約０．１ｍｇ、またはこの範囲内のいかなる整数または分数以下であってもよい。たとえば、収集されるサンプル画分は、約９０ｍｇ以下、８０ｍｇ、７０ｍｇ、６０ｍｇ、５０ｍｇ、４０ｍｇ、３０ｍｇ、２０ｍｇ、１０ｍｇ、またはそれ未満であってもよい。この例示的な実施形態では、検出器（単数または複数）は、破壊式検出器および非破壊式検出器を含んでもよい。たとえば、検出器（単数または複数）は、少なくとも１つのＵＶ検出器、少なくとも１つの蒸発性光散乱検出器（ＥＬＳＤ）、少なくとも１つの質量スペクトル検出器（ＭＳ）、少なくとも１つの凝集核形成光散乱検出器（ＣＮＬＳＤ）、少なくとも１つのコロナ放電検出器、少なくとも１つの屈折率検出器（ＲＩＤ）、少なくとも１つの蛍光検出器（ＦＤ）、少なくとも１つのカイラル検出器（ＣＤ）、少なくとも１つの電気化学検出器（ＥＤ）、またはそれらの組み合わせのいずれかを含んでもよい。
【０１４１】
[0152]別の例示的な実施形態では、サンプルを分析するための装置は、液体クロマトグラフィーシステムの中の１つまたは複数の検出器から信号を生成可能なように構成されるシステムハードウェアであって、該信号は、１つまたは複数の検出器からの検出応答成分を含むシステムハードウェアと、信号の変化に応じて新しいサンプル画分を収集可能なように構成される画分収集器とを含み、ここで、液体クロマトグラフィーシステムは、少なくとも約３０μＬ／分で、１つまたは複数の検出器に供給されるサンプルから、信号を生成可能なように構成される。この例示的な実施形態では、１つまたは複数の検出器に供給されるサンプルは、少なくとも約４０μＬ／分から約５００μＬ／分、またはこの範囲内のいかなる整数または分数であってもよく、たとえば、１つまたは複数の検出器に供給されるサンプルは、少なくとも５０μＬ／分、６０μＬ／分、７０μＬ／分、８０μＬ／分、９０μＬ／分、１００μＬ／分、またはそれを超えてもよい。サンプルは、少なくとも１つの検出器と流体連通して位置する流体移動デバイスを介して、液体クロマトグラフィーシステムの１つまたは複数の検出器に、供給されてもよい。流体移動デバイスは、シャトルバルブ、スプリッタ、ポンプなどを含んでもよい。
【０１４２】
[0153]さらに例示的な実施形態では、サンプルを分析するための装置は、液体クロマトグラフィーシステムの中の１つまたは複数の検出器から信号を生成可能なように構成されるシステムハードウェアであって、該信号は、１つまたは複数の検出器からの検出応答成分を含むシステムハードウェアと、信号の変化に応じて新しいサンプル画分を収集可能なように構成される画分収集器とを含み、ここで、該１つまたは複数の検出器は、ＥＬＳＤを含み、信号は、約１ｍＷよりも大きい光源から生成される。この例示的な実施形態では、該信号は、少なくとも約１ｍＷから約１００ｍＷまで、または、この範囲内のいかなる整数または分数の光源から生成されてもよい。たとえば、信号は、少なくとも約１ｍＷ、２ｍＷ、３ｍＷ、４ｍＷ、５ｍＷ、６ｍＷ、７ｍＷ、８ｍＷ、９ｍＷ、１０ｍＷ、またはそれ以上の光源から生成されてもよい。
【０１４３】
[0154]別の例示的な実施形態では、サンプルを分析するための装置は、液体クロマトグラフィーシステム内の２つ以上の検出器からの信号を生成可能なように構成されるシステムハードウェアであって、該信号は、１つまたは複数の検出器からの検出応答成分を含むシステムハードウェアと、信号の変化に応じて新しいサンプル画分を収集可能なように構成される画分収集器とを含み、ここで、２つ以上の検出器は、異なるダイナミックレンジを有する複数の検出器を備える。この例示的な実施形態では、検出器は、破壊式検出器および非破壊式検出器を含んでもよい。たとえば、少なくとも１つの検出器は、少なくとも１つのＵＶ検出器、少なくとも１つの蒸発性光散乱検出器（ＥＬＳＤ）、少なくとも１つの質量スペクトル検出器（ＭＳ）、少なくとも１つの凝集核形成光散乱検出器（ＣＮＬＳＤ）、少なくとも１つのコロナ放電検出器、少なくとも１つの屈折率検出器（ＲＩＤ）、少なくとも１つの蛍光検出器（ＦＤ）、少なくとも１つのカイラル検出器（ＣＤ）、少なくとも１つの電気化学検出器（ＥＤ）、またはそれらの組み合わせのいずれかから選択されてもよい。別の例示的な実施形態では、２つ以上の検出器は、たとえば、異なるダイナミックレンジを有する複数のＥＬＳＤなどの、異なるダイナミックレンジを有する、同じタイプの複数の検出器を含んでもよい。別の例示的な実施形態では、２つ以上の検出器は、たとえば、異なるダイナミックレンジを有する、少なくとも１つのＥＬＳＤおよび少なくとも１つのＵＶ検出器などの、異なるダイナミックレンジを有する、異なるタイプの複数の検出器を含んでもよい。さらにもっと例示的な実施形態では、２つ以上の検出器は、たとえば、異なる電力レベルを有する複数の光源を備えるＥＬＳＤ、または異なる経路長を有する複数のフローセルを備えるＵＶ検出器、またはその両方などの、異なるダイナミックレンジを２つ以上の領域で有する、少なくとも１つの検出器を含んでもよい。
【０１４４】
[0155]以下に説明するように、多数の商業的に入手できる部品を本発明の装置に用いることができる。
【０１４５】
Ａ．クロマトグラフィーカラム
[0156]任意の公知のクロマトグラフィーカラムを本発明の装置に用いることができる。商業的に入手できる適当なクロマトグラフィーカラムは、限定するわけではないが、Ｇｒａｃｅ  Ｄａｖｉｓｏｎ  Ｄｉｓｃｏｖｅｒｙ  Ｓｃｉｅｎｃｅｓ社（ディアフィールド、イリノイ州）から、ＧＲＡＣＥＰＵＲＥ（商標）、ＧＲＡＣＥＲＥＳＯＬＶ（商標）、ＶＹＤＡＣ（登録商標）、およびＤＡＶＩＳＩＬ（登録商標）の商標で入手可能なクロマトグラフィーカラムを含む。
【０１４６】
Ｂ．検出器
[0157]任意の公知の検出器を本発明の装置に用いることができる。商業的に入手できる適切な検出器は、限定するわけではないが、Ｏｃｅａｎ  Ｏｐｔｉｃｓ社（ダニーディン、フロリダ州）からＵＳＢ２０００（商標）の商標で入手できるＵＶ検出器、Ｇｒａｃｅ  Ｄａｖｉｓｏｎ  Ｄｉｓｃｏｖｅｒｙ  Ｓｃｉｅｎｃｅｓ社（ディアフィールド、イリノイ州）から３３００ＥＬＳＤ（商標）の商標で入手できる蒸発性光散乱検出器（ＥＬＳＤ）、Ｗａｔｅｒｓ  Ｃｏｒｐｏｒａｔｉｏｎ社（ミルフォード、マサチューセッツ州）からＺＱ（商標）の商標で入手できる質量スペクトル計（ＭＳ）、Ｑｕａｎｔ社（ブレーン、ミネソタ州）からＱＴ−５００（商標）の商標で入手できる凝集核形成光散乱検出器（ＣＮＬＳＤ）、ＥＳＡ社（チェルムズフォード、マサチューセッツ州）からＣＯＲＯＮＡ  ＣＡＤ（商標）の商標で入手できるコロナ放電検出器（ＣＤＤ）、Ｗａｔｅｒｓ  Ｃｏｒｐｏｒａｔｉｏｎ社（ミルフォード、マサチューセッツ州）から２４１４の標識で入手できる屈折率検出器（ＲＩＤ）、およびＬａｂａｌｌｉａｎｃｅ社（Ｓｔ．Ｃｏｌｌｅｃｔ、ペンシルバニア州）からＵＬＴＲＡＦＬＯＲ（商標）の商標で入手できる蛍光検出器（ＦＤ）を含む。
【０１４７】
[0158]いくつかの実施形態では、商業的に入手可能な検出器は、修正またはプログラムされる必要があるかもしれない。あるいはいくつかの検出器は、本発明の上述の方法の工程の１つまたはそれ以上を実行するために構築する必要があるかもしれない。
【０１４８】
Ｃ．スプリッタポンプ
[0159]任意の公知のスプリッタポンプを本発明の装置に用いることができる。商業的に入手できる適切なスプリッタポンプは、限定するわけではないが、ＫＮＦ社（トレントン、ニュージャージー州）からＬＩＱＵＩＤ  ＭＩＣＲＯ（商標）の商標で入手できるスプリッタポンプを含む。
【０１４９】
Ｄ．シャトルバルブ
[0160]任意の公知のシャトルバルブを本発明の装置に用いることができる。商業的に入手できる適切なシャトルバルブは、限定するわけではないが、Ｖａｌｃｏ社（ヒューストン、テキサス州）からＣＨＥＭＩＮＥＲＴ（商標）、Ｒｈｅｏｄｙｎｅ（登録商標）の商標で入手できるシャトルバルブ、Ｉｄｅｘ  Ｃｏｒｐｏｒａｔｉｏｎ社からＭＲＡ（登録商標）の商標で入手できるシャトルバルブ、および本明細書で説明する連続流れシャトルバルブを含む。
【０１５０】
Ｅ．画分収集器
[0161]任意の公知の画分収集器を本発明の装置に用いることができる。商業的に入手できる適切な画分収集器は、限定するわけではないが、Ｇｉｌｓｏｎ社（ミドルトン、ウィスコンシン州）から２１５の表示で入手することができる画分収集器を含む。
【０１５１】
[0162]いくつかの例示的な実施形態では、商業的に入手できる画分収集器は、修正されおよび／またはプログラムされる必要があるかもしれない。または、いくつかの画分収集器は、本発明の上述の方法の工程の１つまたはそれ以上を実行するために構築される必要があるかもしれない。たとえば、少なくとも１つの検出器からの１つまたは複数の信号を認識し、受信し、処理可能なように、および１つまたは複数の信号に基づいて１つまたは複数のサンプル画分を収集可能なように構成される画分収集器は、現時点では商業的には入手できないかもしれない。
【０１５２】
ＩＩＩ．コンピュータソフトウェア
[0163]本発明はさらに、上述の方法の工程の１つまたはそれ以上を実行するための、コンピュータが実行可能な命令が格納された、コンピュータで読取り可能な媒体を対象とする。たとえば、コンピュータが実行可能な命令が格納されたコンピュータが読取り可能な媒体は、システム内の１つまたは複数の要素の１つまたは複数の設定（たとえば流れ設定、波長等）を調節し、１つまたは複数の検出器応答を考慮する所望の数学的アルゴリズムに基づいて信号を発生させ、少なくとも１つの検出器からの信号を認識し、受信信号に基づいて１つまたは複数のサンプル画分を収集し、画分収集器により、少なくとも１つの検出器からの入力信号を認識して、入力信号を画分収集器が認識および処理可能な信号に変換し、画分収集器が、１つまたは複数のシステムコンポーネントからの入力に基づいて１つまたは複数のサンプル画分を収集し、所望の時間または液体クロマトグラフィーシステム内の他のいくつかの活動（たとえば、検出器応答）に応じて、１つまたは複数のシステムコンポーネント（たとえば、Ｔバルブ、スプリッタポンプ、シャトルバルブ、または検出器）を開始または停止することができるようにするためのコンピュータが実行可能な命令を格納する。
【０１５３】
ＩＶ．分野／使用
[0164]上述の方法、装置およびコンピュータソフトウェアは、さまざまなサンプル内の１つまたは複数の成分の存在を検出するために用いることができる。上述の方法、装置、およびコンピュータソフトウェアは、限定されるわけではないが、石油産業、製薬産業、分析研究分野などを含む、液体クロマトグラフィーを用いる任意の産業に応用できる。
【実施例】
【０１５４】
[0165]本発明はさらに、以下の例により説明され、これらの例はいかなる意味においても本発明の範囲を限定するものとして解釈されるものではない。それどころか、本明細書の説明を参照することにより、さまざまな他の実施形態、修正形態、均等形態が、本発明の趣旨および／または添付の特許請求の範囲から逸脱することなく明確に当業者に認識される。
【０１５５】
（実施例１）
[0166]この実施例では、２つの異なるフラッシュクロマトグラフィーシステムが比較された（ＧｒａｃｅＤａｖｉｓｏｎ Ｄｉｓｃｏｖｅｒｙ Ｓｃｉｅｎｃｅｓ社から入手できるＲＥＶＥＬＥＲＩＳ（登録商標）システム）。第１の（比較）システム（「システムＡ」）は、１ｍＷレーザを有するＡＬＬＴＥＣＨ（登録商標）ＥＬＳＤ、３００ｎＬ回転ディンプル並びに１５０ミリ秒の分配および再補充時間のシャトルバルブ、および０．１ｍｍＵＶフローセルを有するＵＶ検出器を備える。第２のシステム（「システムＢ」）は、４．６ｍＷレーザ（ＭｉｄｗｅｓｔＬａｓｅｒ Ｐｒｏｄｕｃｔｓ社から入手可能）を有するＡＬＬＴＥＣＨ（登録商標）ＥＬＳＤ、６００ｎＬ回転ディンプル並びに２５０ミリ秒の分配および５０ミリ秒再補充時間のシャトルバルブ、および０．１ｍｍＵＶフローセルを有するＯｃｅａｎＯｐｔｉｃｓＵＶ検出器を備える。両方のシステムは、図３Ａに示すように構成される。０．５ｇの天然物を計量し、それを１００ｍＬ容量フラスコに添加し、２０／８０メタノール／水混合物で１００ｍＬまで希釈して、５つの異なる天然物（すなわち、カフェイン、エモディン、リポ酸、カテキン、およびモリン）をそれぞれ含む５ｍｇ／ｍＬ溶液を調製した。天然物のそれぞれのサンプルに対して、１ｍＬを５ｍＬプラスチック注射器を使用して、フラッシュシステムに備えられた４ｇＧＲＡＣＥＲＥＳＯＬＶ（商標）Ｃ１８フラッシュカラム（ＧｒａｃｅＤａｖｉｓｏｎ Ｄｉｓｃｏｖｅｒｙ Ｓｃｉｅｎｃｅｓ社から入手できる）に注入した。可動フェーズは、以下の勾配条件でシステムを通じてポンプされた、最初に３分間にわたりメタノールの量を６０％まで増加させ、次に６０％で１分間保持した。カラム排水は、システムＡでは３６μＬ／分およびシステムＢでは７２μＬ／分でシャトルバルブに流され、ＡＬＬＴＥＣＨ（登録商標）ＥＬＳＤにカラム排水を流した。排水の平衡量をＵＶ検出器を介して画分収集器に流した。
【０１５６】
[0167]天然物のそれぞれのサンプルは、同一の４ｇＧＲＡＣＥＲＥＳＯＬＶ（商標）Ｃ１８フラッシュカラム上で分離された。図１１に示される結果から、システムＢのＥＬＳＤはすべてを検出するが、システムＡのＥＬＳＤは、エモディンを除きサンプル中のどの天然物も検出しないことが示される。
【０１５７】
（実施例２）
[0168]この実施例では、システムＢは、ＡＬＬＴＥＣＨ（登録商標）ＥＬＳＤに７．５ｍＷレーザ（ＭｉｄｗｅｓｔＬａｓｅｒ Ｐｒｏｄｕｃｔｓ社から入手可能）（「システムＣ」）、およびＡＬＬＴＥＣＨ（登録商標）ＥＬＳＤに１０ｍＷレーザ（ＭｉｄｗｅｓｔＬａｓｅｒ Ｐｒｏｄｕｃｔｓ社から入手可能）（「システムＤ」）を有するように修正される。カフェインサンプルだけに対して、実施例１と同一の分離プロセスが実施される。図１２に示される結果から、システムＣのＥＬＳＤはシステムＢのＥＬＳＤに対して２倍から３倍の応答を示し、システムＤのＥＬＳＤは、システムのＢのＥＬＳＤ対して４倍の応答を示す。
【０１５８】
（実施例３）
[0169]この実施例では、システムＡの性能がシステムＤと比較される。カフェインサンプルだけに対して、実施例１と同一の分離プロセスが実施される。下記表１に示される結果から、システムＤのＥＬＳＤはシステムＡのＥＬＳＤの４０倍の応答を示し、システムＤのＵＶ検出器はシステムＡのＵＶ検出器の２倍の応答を示す。
【表１】
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【０１５９】
[0170]本発明が限られた数の例示的な実施形態とともに説明されてきたが、これらの特定の例示的な実施形態は、本発明の範囲を限定することを意図するものではなく、本発明の範囲は、添付の特許請求の範囲に記載及び請求されている。本明細書の例示的な実施形態を精査することにより、当業者にとっては、さらなる修正、等価物、および変形例が可能であることが明らかであろう。例の中のあらゆる部分、パーセンテージは、明細書の他の部分と同様に、特に明示しない限り重量による。さらに、特定の性質、計測単位、条件、物理状態、割合を示すように明細書または請求項に記載された数値の範囲は、参照により文字通りに明示的に統合することを意図しており、この範囲内の数値は記載された範囲内の任意の部分集合を含む。たとえば、下限ＲＬおよび上限ＲＵをともなう数値範囲が開示されているときは、この範囲内の任意の数Ｒが明確に開示されている。特に、以下の範囲内の数値Ｒが明確に開示されている。すなわち、Ｒ＝ＲＬ＋ｋ（ＲＵ−ＲＬ）が開示されており、ここで、ｋは１％から１００％までの範囲の１％刻みの変数であり、たとえば、ｋは１％、２％、３％、４％、５％．．．５０％、５１％、５２％．．．９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、または１００％である。さらに、上述のように計算される、Ｒの任意の２つの値により示される任意の数値範囲も明確に開示されている。これらの明細書での開示および記載に加えて、本発明の任意の修正は、以上の説明および添付の図面から当業者に明らかである。このような修正は、添付の特許請求の範囲内にあることを意図している。本明細書で引用された文献は、参照によってその全体を本明細書に援用する。
【図１】
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【図２】
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【図３Ａ】
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【図３Ｂ】
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【図３Ｃ】
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【図４】
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【図５】
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【図６】
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【図７】
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【図８】
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【図９】
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【図１０Ａ】
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【図１０Ｂ】
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【図１０Ｃ】
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【図１１】
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【図１２】
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【国際調査報告】
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