(57)【要約】  本発明は、１０−プロパルギル−１０−デアザアミノプテリンのジアステレオマー、１０−プロパルギル−１０−デアザアミノプテリンの光学的に純粋なジアステレオマー、特にＣ１０位に関する２つの（Ｒ，Ｓ）ジアステレオマーを含む組成物に関する。これらのジアステレオマー、該ジアステレオマーを含有する組成物、ならびに炎症性障害および癌に関連する状態の治療に関するその使用もまた開示される。【選択図】図１
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【特許請求の範囲】
【請求項１】
１０−プロパルギル−１０−デアザアミノプテリンの実質的に純粋なジアステレオマー、またはその塩を含む化合物であって、ジアステレオマーが、（２Ｓ）−２−［［４−［（１Ｓ）−１−［（２，４−ジアミノプテリジン−６−イル）メチル］ブト−３−イニル］ベンゾイル］アミノ］ペンタンジオン酸または（２Ｓ）−２−［［４−［（１Ｒ）−１−［（２，４−ジアミノプテリジン−６−イル）メチル］ブト−３−イニル］ベンゾイル］アミノ］ペンタンジオン酸である、前記化合物。
【請求項２】
実質的に純粋なジアステレオマーが、（２Ｓ）−２−［［４−［（１Ｓ）−１−［（２，４−ジアミノプテリジン−６−イル）メチル］ブト−３−イニル］ベンゾイル］アミノ］ペンタンジオン酸またはその塩である、請求項１記載の化合物。
【請求項３】
実質的に純粋なジアステレオマーが、（２Ｓ）−２−［［４−［（１Ｒ）−１−［（２，４−ジアミノプテリジン−６−イル）メチル］ブト−３−イニル］ベンゾイル］アミノ］ペンタンジオン酸またはその塩である、請求項１記載の化合物。
【請求項４】
塩が塩酸塩である、請求項１〜３のいずれか記載の化合物。
【請求項５】
実質的に純粋な（２Ｓ）−２−［［４−［（１Ｓ）−１−［（２，４−ジアミノプテリジン−６−イル）メチル］ブト−３−イニル］ベンゾイル］アミノ］ペンタンジオン酸またはその塩、あるいは実質的に純粋な（２Ｓ）−２−［［４−［（１Ｒ）−１−［（２，４−ジアミノプテリジン−６−イル）メチル］ブト−３−イニル］ベンゾイル］アミノ］ペンタンジオン酸またはその塩、および薬学的に許容されうるキャリアーを含む、薬学的組成物。
【請求項６】
薬学的に有効な量の実質的に純粋な（２Ｓ）−２−［［４−［（１Ｒ）−１−［（２，４−ジアミノプテリジン−６−イル）メチル］ブト−３−イニル］ベンゾイル］アミノ］ペンタンジオン酸またはその塩、あるいは実質的に純粋な（２Ｓ）−２−［［４−［（１Ｓ）−１−［（２，４−ジアミノプテリジン−６−イル）メチル］ブト−３−イニル］ベンゾイル］アミノ］ペンタンジオン酸またはその塩、および薬学的に許容されうるキャリアーを含む、薬学的組成物。
【請求項７】
癌を治療する方法において使用するための、請求項５または６の薬学的組成物。
【請求項８】
癌が、前立腺癌、Ｔ細胞リンパ腫、乳癌、肺癌、血液系腫瘍、頭部および頸部の癌、胃腸管の癌、卵巣癌、および骨肉腫からなる群より選択される、請求項７の薬学的組成物。
【請求項９】
炎症性障害を治療する際に使用するための、請求項５または６の薬学的組成物。
【請求項１０】
炎症性障害が関節リウマチである、請求項９の薬学的組成物。
【請求項１１】
経口投与用に配合されている、請求項５または６記載の薬学的組成物。
【請求項１２】
静脈内投与用に配合されている、請求項５または６記載の薬学的組成物。
【請求項１３】
療法的に有効な量の１０−プロパルギル−１０−デアザアミノプテリンの実質的に純粋なジアステレオマーまたはその塩を、癌の治療が必要な哺乳動物に投与する工程を含む、癌を治療するための方法であって、前記ジアステレオマーが、（２Ｓ）−２−［［４−［（１Ｓ）−１−［（２，４−ジアミノプテリジン−６−イル）メチル］ブト−３−イニル］ベンゾイル］アミノ］ペンタンジオン酸または（２Ｓ）−２−［［４−［（１Ｒ）−１−［（２，４−ジアミノプテリジン−６−イル）メチル］ブト−３−イニル］ベンゾイル］アミノ］ペンタンジオン酸である、前記方法。
【請求項１４】
癌が、前立腺癌、Ｔ細胞リンパ腫、乳癌、肺癌、血液系腫瘍、頭部および頸部の癌、胃腸管の癌、卵巣癌、および骨肉腫からなる群より選択される、請求項１３の方法。
【請求項１５】
療法的に有効な量の１０−プロパルギル−１０−デアザアミノプテリンの実質的に純粋なジアステレオマーまたはその塩を、炎症の治療が必要な哺乳動物に投与する工程を含む、炎症を治療するための方法であって、前記ジアステレオマーが、（２Ｓ）−２−［［４−［（１Ｓ）−１−［（２，４−ジアミノプテリジン−６−イル）メチル］ブト−３−イニル］ベンゾイル］アミノ］ペンタンジオン酸または（２Ｓ）−２−［［４−［（１Ｒ）−１−［（２，４−ジアミノプテリジン−６−イル）メチル］ブト−３−イニル］ベンゾイル］アミノ］ペンタンジオン酸である、前記方法。
【請求項１６】
炎症性障害が関節リウマチである、請求項１５の方法。
【請求項１７】
実質的に純粋なジアステレオマーが、１０−プロパルギル−１０−デアザアミノプテリンの総量の重量約９０％より多い量の（２Ｓ）−２−［［４−［（１Ｓ）−１−［（２，４−ジアミノプテリジン−６−イル）メチル］ブト−３−イニル］ベンゾイル］アミノ］ペンタンジオン酸である、請求項１３〜１６のいずれか記載の方法。
【請求項１８】
実質的に純粋なジアステレオマーが、１０−プロパルギル−１０−デアザアミノプテリンの総量の重量約９０％より多い量の（２Ｓ）−２−［［４−［（１Ｒ）−１−［（２，４−ジアミノプテリジン−６−イル）メチル］ブト−３−イニル］ベンゾイル］アミノ］ペンタンジオン酸である、請求項１３〜１６のいずれか記載の方法。
【請求項１９】
実質的に純粋なジアステレオマーが、（２Ｓ）−２−［［４−［（１Ｓ）−１−［（２，４−ジアミノプテリジン−６−イル）メチル］ブト−３−イニル］ベンゾイル］アミノ］ペンタンジオン酸またはその塩である、請求項１３〜１８のいずれか記載の方法。
【請求項２０】
実質的に純粋なジアステレオマーが、（２Ｓ）−２−［［４−［（１Ｒ）−１−［（２，４−ジアミノプテリジン−６−イル）メチル］ブト−３−イニル］ベンゾイル］アミノ］ペンタンジオン酸またはその塩である、請求項１３〜１８のいずれか記載の方法。
【請求項２１】
塩が塩酸塩である、請求項１３〜２０のいずれか記載の方法。
【請求項２２】
方法がさらに、実質的に純粋なジアステレオマーとともに薬学的に許容されうるキャリアーの使用を含む、請求項１３〜２１のいずれか記載の方法。
【請求項２３】
実質的に純粋なジアステレオマーが経口投与される、請求項１３〜２２記載の方法。
【請求項２４】
実質的に純粋なジアステレオマーが静脈内投与される、請求項１３〜２２記載の方法。
【請求項２５】
実質的に純粋なジアステレオマーが毎週投与される、請求項１３〜２４記載の方法。
【請求項２６】
実質的に純粋なジアステレオマーが、１回あたり３０ｍｇ／ｍ２の量で投与される、請求項２５の方法。
【請求項２７】
実質的に純粋なジアステレオマーが、１回あたり１０〜１５０ｍｇ／ｍ２の量で投与される、請求項２５の方法。
【請求項２８】
実質的に純粋なジアステレオマーが隔週で投与される、請求項２４記載の方法。
【請求項２９】
実質的に純粋なジアステレオマーが、１回あたり１００〜２７５ｍｇ／ｍ２の量で投与される、請求項２８の方法。
【請求項３０】
実質的に純粋なジアステレオマーが、１回あたり１０〜２７５ｍｇ／ｍ２の量で投与される、請求項２８の方法。
【請求項３１】
実質的に純粋なジアステレオマーが、１またはそれより多い周期で投与され、各周期が、１回あたり３０〜１５０ｍｇ／ｍ２の量で１週間に１度、６週間投与を行い、その後、１週間の休薬を含む、請求項１３〜２４のいずれか記載の方法。
【請求項３２】
葉酸およびビタミンＢ１２の補充をさらに含む、請求項１３〜３１のいずれか記載の方法。
【請求項３３】
実質的に純粋なジアステレオマーが、１回あたり０．２５〜４ｍｇ／ｋｇの量で投与される、請求項１３〜３２のいずれか記載の方法。
【請求項３４】
癌を治療するための薬学的組成物の製造における、請求項１〜４のいずれか記載の化合物の使用。
【請求項３５】
癌が、前立腺癌、Ｔ細胞リンパ腫、乳癌、肺癌、血液系腫瘍、頭部および頸部の癌、胃腸管の癌、卵巣癌、および骨肉腫からなる群より選択される、請求項３４記載の使用。
【請求項３６】
炎症性障害を治療するための薬学的組成物の製造における、請求項１〜４のいずれか記載の化合物の使用。
【請求項３７】
炎症性障害が関節リウマチである、請求項３６記載の使用。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
[0001]本発明は、１０−プロパルギル−１０−デアザアミノプテリンの変異体型を含む化合物および組成物、ならびに癌および炎症性障害を治療する方法におけるその使用に関する。
【背景技術】
【０００２】
[0002]１０−プロパルギル−１０−デアザアミノプテリン（「１０−プロパルギル−１０−ｄＡＭ」、「プララトレキセート」、「ラセミ体ＰＤＸ」、「（２Ｓ）−２−［［４−［（１ＲＳ）−１−［（２，４−ジアミノプテリジン−６−イル）メチル］ブト−３−イニル］ベンゾイル］アミノ］ペンタンジオン酸」、「（２ＲＳ）−２−［［４−［（１ＲＳ）−１−［（２，４−ジアミノプテリジン−６−イル）メチル］ブト−３−イニル］ベンゾイル］アミノ］ペンタンジオン酸」、および「ＰＤＸ」を含む）は、癌の治療において試験され、そして有用であることが見出されてきている化合物である。ラセミ型、（２Ｓ）−２−［［４−［（１ＲＳ）−１−［（２，４−ジアミノプテリジン−６−イル）メチル］ブト−３−イニル］ベンゾイル］アミノ］ペンタンジオン酸は、米国食品医薬品局（ＦＤＡ）によって、再発性および難治性末梢Ｔ細胞リンパ腫の治療として認可されてきている。（２Ｓ）−２−［［４−［（１ＲＳ）−１−［（２，４−ジアミノプテリジン−６−イル）メチル］ブト−３−イニル］ベンゾイル］アミノ］ペンタンジオン酸はまた、リンパ腫、肺癌、膀胱癌、および乳癌において使用するためにも研究中である。
【０００３】
[0003]図１に示す構造を有する本化合物は、元来、ＤｅＧｒａｗら，  “Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ  ａｎｄ  Ａｎｔｉｔｕｍｏｒ  Ａｃｔｉｖｉｔｙ  ｏｆ  １０−Ｐｒｏｐａｒｇｙｌ−１０−ｄｅａｚａａｍｉｎｏｐｔｅｒｉｎ，”  Ｊ．  Ｍｅｄ．  Ｃｈｅｍ．  ３６：２２２８−２２３１（１９９３）に記載され、そして酵素ジヒドロ葉酸レダクターゼ（「ＤＨＦＲ」）の阻害剤として、そしてネズミＬ１２１０細胞株における増殖の阻害剤として作用することが示された。さらに、いくつかの結果が、Ｅ０７７１ネズミ乳腺腫瘍モデルを用いて、該化合物の抗腫瘍特性に関して提示された。
【０００４】
[0004]米国特許第６，０２８，０７１号およびＰＣＴ公報第ＷＯ  １９９８／０２１６３号は、非常に精製されたＰＤＸ組成物を異種移植片モデルにおいて試験すると、ＰＤＸ組成物がヒト腫瘍に対して有効性を有することを開示する。ＰＤＸを用いた続く研究では、組成物がそれ自体で、そして他の療法剤と組み合わされて有用であることが示されてきている。例えば、Ｓｉｒｏｔｎａｋら，  Ｃｌｉｎｉｃａｌ  Ｃａｎｃｅｒ  Ｒｅｓｅａｒｃｈ  Ｖｏｌ．  ６，  ３７０５−３７１２（２０００）は、ＰＤＸ、およびｃＭＯＡＴ／ＭＲＰ様形質膜ＡＴＰアーゼ阻害剤であるプロベネシドを同時投与すると、ヒト固形腫瘍に対するＰＤＸの有効性が非常に増進されると報告している。ＰＤＸ、およびＰＤＸと白金に基づく化学療法剤の組み合わせは、中皮腫に対して有効であることが示されてきている（Ｋｈｏｋａｒら，  Ｃｌｉｎ．  Ｃａｎｃｅｒ  Ｒｅｓ．  ７：３１９９−３２０５（２００１））。リンパ腫の治療のためのゲムシタビン（Ｇｅｍ）との同時投与がＷＯ／２００５／１１７８９２に開示されてきている。タキソールとＰＤＸの組み合わせが有効であると米国特許第６，３２３，２０５号に開示されている。ＰＤＸはまた、Ｔ細胞リンパ腫の治療にも有効であることが示されてきている。米国特許第７，６２２，４７０号を参照されたい。他の研究は、試料によって発現される還元型葉酸キャリアー−１酵素（ＲＦＣ−１）の量を決定することによって、ＰＤＸでの治療に対するリンパ腫の感受性を評価するための方法を示してきており、ここで、より高レベルのＲＦＣ−１が発現されていると、１０−プロパルギル−１０−ｄＡＭに対する感受性がより高いことの指標になり、これは、ＰＣＴ公報第ＷＯ  ２００５／１１７８９２号に開示される。
【先行技術文献】
【特許文献】
【０００５】
【特許文献１】米国特許第６，０２８，０７１号
【特許文献２】ＰＣＴ公報第ＷＯ  １９９８／０２１６３号
【特許文献３】ＷＯ／２００５／１１７８９２
【特許文献４】米国特許第６，３２３，２０５号
【特許文献５】米国特許第７，６２２，４７０号
【特許文献６】ＰＣＴ公報第ＷＯ  ２００５／１１７８９２号
【非特許文献】
【０００６】
【非特許文献１】ＤｅＧｒａｗら，  “Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ  ａｎｄ  Ａｎｔｉｔｕｍｏｒ  Ａｃｔｉｖｉｔｙ  ｏｆ  １０−Ｐｒｏｐａｒｇｙｌ−１０−ｄｅａｚａａｍｉｎｏｐｔｅｒｉｎ，”  Ｊ．  Ｍｅｄ．  Ｃｈｅｍ．  ３６：２２２８−２２３１（１９９３）
【非特許文献２】Ｓｉｒｏｔｎａｋら，  Ｃｌｉｎｉｃａｌ  Ｃａｎｃｅｒ  Ｒｅｓｅａｒｃｈ  Ｖｏｌ．  ６，  ３７０５−３７１２（２０００）
【非特許文献３】Ｋｈｏｋａｒら，  Ｃｌｉｎ．  Ｃａｎｃｅｒ  Ｒｅｓ．  ７：３１９９−３２０５（２００１）
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００７】
[0005]本発明は、上に論じる問題の１またはそれより多くを克服することに向けられる。
【課題を解決するための手段】
【０００８】
[0006]１つの態様において、本発明には、１０−プロパルギル−１０−デアザアミノプテリンの実質的に純粋なジアステレオマー、またはその塩であって、ジアステレオマーが、（２Ｓ）−２−［［４−［（１Ｓ）−１−［（２，４−ジアミノプテリジン−６−イル）メチル］ブト−３−イニル］ベンゾイル］アミノ］ペンタンジオン酸または（２Ｓ）−２−［［４−［（１Ｒ）−１−［（２，４−ジアミノプテリジン−６−イル）メチル］ブト−３−イニル］ベンゾイル］アミノ］ペンタンジオン酸である、前記ジアステレオマーまたはその塩が含まれる。１つの態様において、実質的に純粋なジアステレオマーは、（２Ｓ）−２−［［４−［（１Ｓ）−１−［（２，４−ジアミノプテリジン−６−イル）メチル］ブト−３−イニル］ベンゾイル］アミノ］ペンタンジオン酸またはその塩である。別の態様において、実質的に純粋なジアステレオマーは、（２Ｓ）−２−［［４−［（１Ｒ）−１−［（２，４−ジアミノプテリジン−６−イル）メチル］ブト−３−イニル］ベンゾイル］アミノ］ペンタンジオン酸またはその塩である。１つの側面において、塩は塩酸塩である。
【０００９】
[0007]別の態様において、本発明には、実質的に純粋な（２Ｓ）−２−［［４−［（１Ｓ）−１−［（２，４−ジアミノプテリジン−６−イル）メチル］ブト−３−イニル］ベンゾイル］アミノ］ペンタンジオン酸またはその塩、あるいは実質的に純粋な（２Ｓ）−２−［［４−［（１Ｒ）−１−［（２，４−ジアミノプテリジン−６−イル）メチル］ブト−３−イニル］ベンゾイル］アミノ］ペンタンジオン酸またはその塩、および薬学的に許容されうるキャリアーを含む、薬学的組成物が含まれる。いくつかの態様において、本発明には、薬学的に有効な量の実質的に純粋な（２Ｓ）−２−［［４−［（１Ｒ）−１−［（２，４−ジアミノプテリジン−６−イル）メチル］ブト−３−イニル］ベンゾイル］アミノ］ペンタンジオン酸またはその塩、あるいは実質的に純粋な（２Ｓ）−２−［［４−［（１Ｓ）−１−［（２，４−ジアミノプテリジン−６−イル）メチル］ブト−３−イニル］ベンゾイル］アミノ］ペンタンジオン酸またはその塩、および薬学的に許容されうるキャリアーを含む、薬学的組成物が含まれる。いくつかの態様において、本発明の薬学的組成物は、癌を治療する方法において使用されてもよい。治療すべき癌には、前立腺癌、Ｔ細胞リンパ腫、乳癌、肺癌、血液系腫瘍、頭部および頸部の癌、胃腸管の癌、卵巣癌、および骨肉腫が含まれる。いくつかの態様において、本発明の薬学的組成物は、炎症性障害を治療するための方法において使用されてもよい。治療すべき炎症性障害には関節リウマチが含まれる。いくつかの態様において、本発明の薬学的組成物は経口投与用に配合されており；他の態様において、本発明の薬学的組成物は、静脈内投与用に配合されている。
【００１０】
[0008]別の態様において、本発明には、療法的に有効な量の１０−プロパルギル−１０−デアザアミノプテリンの実質的に純粋なジアステレオマーまたはその塩を、癌の治療が必要な哺乳動物に投与する工程を含む、癌を治療するための方法であって、前記ジアステレオマーが、（２Ｓ）−２−［［４−［（１Ｓ）−１−［（２，４−ジアミノプテリジン−６−イル）メチル］ブト−３−イニル］ベンゾイル］アミノ］ペンタンジオン酸または（２Ｓ）−２−［［４−［（１Ｒ）−１−［（２，４−ジアミノプテリジン−６−イル）メチル］ブト−３−イニル］ベンゾイル］アミノ］ペンタンジオン酸である、前記方法が含まれる。
【００１１】
[0009]別の態様において、本発明には、療法的に有効な量の１０−プロパルギル−１０−デアザアミノプテリンの実質的に純粋なジアステレオマーまたはその塩を、炎症の治療が必要な哺乳動物に投与する工程を含む、炎症を治療するための方法であって、前記ジアステレオマーが、（２Ｓ）−２−［［４−［（１Ｓ）−１−［（２，４−ジアミノプテリジン−６−イル）メチル］ブト−３−イニル］ベンゾイル］アミノ］ペンタンジオン酸または（２Ｓ）−２−［［４−［（１Ｒ）−１−［（２，４−ジアミノプテリジン−６−イル）メチル］ブト−３−イニル］ベンゾイル］アミノ］ペンタンジオン酸である、前記方法が含まれる。１つの態様において、実質的に純粋なジアステレオマーは、１０−プロパルギル−１０−デアザアミノプテリンの総量の重量約９０％より多い量の（２Ｓ）−２−［［４−［（１Ｓ）−１−［（２，４−ジアミノプテリジン−６−イル）メチル］ブト−３−イニル］ベンゾイル］アミノ］ペンタンジオン酸である。別の態様において、実質的に純粋なジアステレオマーは、１０−プロパルギル−１０−デアザアミノプテリンの総量の重量約９０％より多い量の（２Ｓ）−２−［［４−［（１Ｒ）−１−［（２，４−ジアミノプテリジン−６−イル）メチル］ブト−３−イニル］ベンゾイル］アミノ］ペンタンジオン酸である。本発明の方法には、本発明の実質的に純粋なジアステレオマーとともに、薬学的に許容されうるキャリアーの使用がさらに含まれる。本発明の実質的に純粋なジアステレオマーは、経口または静脈内投与されてもよい。
【００１２】
[0010]１つの態様において、本発明の実質的に純粋なジアステレオマーは毎週投与されてもよい。この態様において、実質的に純粋なジアステレオマーは、１回あたり３０ｍｇ／ｍ２の量で、または１回あたり１０〜１５０ｍｇ／ｍ２の量で投与されてもよい。
【００１３】
[0011]１つの態様において、本発明の実質的に純粋なジアステレオマーは隔週で投与されてもよい。この態様において、実質的に純粋なジアステレオマーは、１回あたり１００〜２７５ｍｇ／ｍ２の量で、または１回あたり１０〜２７５ｍｇ／ｍ２の量で投与される。
【００１４】
[0012]本発明の実質的に純粋なジアステレオマーは、１またはそれより多い周期で投与され、各周期が、１回あたり３０〜１５０ｍｇ／ｍ２の量で１週間に１度、６週間投与を行い、その後、１週間の休薬を含んでもよい。
【００１５】
[0013]場合によって、本発明の実質的に純粋なジアステレオマーの投与には、葉酸およびビタミンＢ１２の補充が含まれる。１つの態様において、本発明の実質的に純粋なジアステレオマーは、１回あたり０．２５〜４ｍｇ／ｋｇの量で投与される。
【００１６】
[0014]１つの態様において、本発明には、癌を治療するための薬学的組成物の製造における、本発明の実質的に純粋なジアステレオマーの使用が含まれる。本発明にはまた、炎症性障害を治療するための薬学的組成物の製造における、本発明の実質的に純粋なジアステレオマーの使用も含まれる。
【図面の簡単な説明】
【００１７】
【図１】[0015]図１は、（２Ｓ）−２−［［４−［（１ＲＳ）−１−［（２，４−ジアミノプテリジン−６−イル）メチル］ブト−３−イニル］ベンゾイル］アミノ］ペンタンジオン酸を調製する際に有用な合成スキームを示す。
【発明を実施するための形態】
【００１８】
[0016]別に示さない限り、明細書および請求項で用いられる、成分、寸法、反応条件等の量を示すすべての数字は、すべての例において、用語「約」によって修飾されていると理解すべきである。
【００１９】
[0017]本出願および請求項において、単数形の使用には、特に別に言及しない限り、複数形が含まれる。さらに、「または」の使用は、別に言及しない限り、「および／または」を意味する。さらに、用語「を含む」、ならびに他の形式、例えば「が含まれる」および「含まれた」の使用は限定的ではない。また、用語、例えば「要素」または「構成要素」は、特に別に言及しない限り、１つの単位を含む要素および構成要素、ならびに１より多い単位を含む要素および構成要素の両方を含む。
【００２０】
[0018]本発明は、プララトレキセートのジアステレオマーを含む、癌および炎症性障害を治療するのに有効な方法および組成物に関する。プララトレキセートは、炭素１０（Ｃ１０）および炭素１９（Ｃ１９）位に非対称中心を含有する。１つの態様において、ラセミ体プララトレキセートには、Ｃ１０キラル中心でのＲおよびＳ立体配置のほぼ１：１ラセミ混合物が含まれ、そしてＣ１９キラル中心での≧９８．０％のＳ−ジアステレオマーが含まれる。この態様の２つのＣ１０ジアステレオマーは：
[0019]ＰＤＸ−１０ａ［Ｓ立体配置］化学名：（２Ｓ）−２−［［４−［（１Ｓ）−１−［（２，４−ジアミノプテリジン−６−イル）メチル］ブト−３−イニル］ベンゾイル］アミノ］ペンタンジオン酸
[0020]ＰＤＸ−１０ｂ［Ｒ立体配置］化学名：（２Ｓ）−２−［［４−［（１Ｒ）−１−［（２，４−ジアミノプテリジン−６−イル）メチル］ブト−３−イニル］ベンゾイル］アミノ］ペンタンジオン酸と称される。
【００２１】
[0021]ラセミ体は、１つの態様において、（２Ｓ）−２−［［４−［（１ＲＳ）−１−［（２，４−ジアミノプテリジン−６−イル）メチル］ブト−３−イニル］ベンゾイル］アミノ］ペンタンジオン酸と記載されてもよく、分子量：４７７．５、分子式：Ｃ２３Ｈ２３Ｎ７Ｏ５、Ｃ１０でのジアステレオマーの１：１混合物であってもよい。
【００２２】
[0022]式１：ＰＤＸ−１０ａ［Ｓ立体配置］化学名：（２Ｓ）−２−［［４−［（１Ｓ）−１−［（２，４−ジアミノプテリジン−６−イル）メチル］ブト−３−イニル］ベンゾイル］アミノ］ペンタンジオン酸。
【００２３】
【化１】
2013518879.tif 000003
【００２４】
[0023]式２：ＰＤＸ−１０ｂ［Ｒ立体配置］化学名：（２Ｓ）−２−［［４−［（１Ｒ）−１−［（２，４−ジアミノプテリジン−６−イル）メチル］ブト−３−イニル］ベンゾイル］アミノ］ペンタンジオン酸。
【００２５】
【化２】
2013518879.tif 000004
【００２６】
[0024]ＰＤＸのＣ１０ジアステレオマー、ＰＤＸ−１０ａおよびＰＤＸ−１０ｂでは、癌細胞株に基づいて多様である活性が観察されてきており；いくつかの場合、Ｓジアステレオマーは、ラセミ体に対して優れた活性を示し、他の場合では、優れた活性を有するのはＲジアステレオマーである。互いに比較した際に、ジアステレオマーの薬物動態学においてもまた相違が見出されてきている。ＰＤＸがその活性の実質的な部分を発揮する葉酸経路は、多くの同定された酵素を含み、そしてさらに同定されていない酵素も含む可能性もあることが注目される。この複雑な経路における酵素には、還元型葉酸キャリアー−１酵素（ＲＦＣ−１）、ジヒドロ葉酸レダクターゼ（ＤＨＦＲ）、ホリルポリ−ガンマ−グルタミン酸シンテターゼ（ＦＰＧＳ）、チミジル酸シンターゼ（ＴＳ）、γ−グルタミルヒドロラーゼ（ＧＧＨ）、およびグリシンアミドリボヌクレオチドホルミルトランスフェラーゼ（ＧＡＲＦＴ）が含まれる。他のデアザアミノプテリンに関する技術によって、デアザアミノプテリンのＣ１０キラル中心周囲の変動に関して許容度があることが示唆され（例えばＤｅＧｒａｗら，  １９９５，  Ｃｕｒｒｅｎｔ  Ｍｅｄｉｃｉｎａｌ  Ｃｈｅｍ．  ２：６３０およびＤｅＧｒａｗら  １９８６，  Ｊ．  Ｍｅｄ．  Ｃｈｅｍ．  ２９（６）：１０５６）、これはさらに、ジアステレオマー間の活性において観察された相違を予期されぬものとする。
【００２７】
[0025]他のジアステレオマー、ラセミ体、または両方に比較して、特定の癌において増進された活性を有するＰＤＸの特定のジアステレオマーを選択することが可能であれば、癌患者を治療する際に、実際のそして実質的な利点が医師に提供される。例えば、治療する医師は、ＰＤＸのラセミ体、ＰＤＸ−１０ａ［Ｓ立体配置］およびＰＤＸ−１０ｂ［Ｒ立体配置］のラセミ体を選択する多数のオプションを有するであろう。本明細書の実施例においてより詳細に示すように、ＰＤＸ−１０ａおよびＰＤＸ−１０ｂを、多様な癌細胞株に対する有効性に関して、モデル系において試験してきている。
【００２８】
[0026]ラセミ体ＰＤＸは、ＤｅＧｒａｗの１９９３年の論文、上記、またはＤｅＧｒａｗら、米国特許第５，３５４，７５１号の実施例７に開示される方法を用いて合成可能である。ＰＤＸ製造に関する特許第５，３５４，７５１号は、その全体が本明細書に援用される。ラセミ体ＰＤＸはまた、米国特許第６，０２８，０７１号、特に実施例１に提示される方法によっても合成可能であり、この実施例は、本明細書に援用される。
【００２９】
[0027]ＰＤＸ−１０ａおよび／またはＰＤＸ−１０ｂを生成するため、本明細書および他に解説されるようにラセミ体ＰＤＸを合成し、そして続いて、いずれかの最終産物またはより初期の中間産物を出発物質として用いて、Ｃ１０ジアステレオマーを分離してもよい。あるいは、実質的に純粋なＰＤＸ−１０ａおよび／またはＰＤＸ−１０ｂが多くの出発物質のいずれかから直接産生される、キラル合成を使用してもよい。当該技術分野に知られるエナンチオマーまたはジアステレオマーを分離するキラルカラムを使用して、最終ラセミ体ＰＤＸまたはより初期の中間体のジアステレオマーを分離してもよい。ジアステレオマーを分離するのに適したキラルカラムには、エタノールを移動相として用いる、ダイセル化学工業、日本から入手可能なキラルカラムＣＨＩＲＡＬＡＫ  ＡＤが含まれる。
【００３０】
[0028]１つの側面において、本発明は、１０−プロパルギル−１０−デアザアミノプテリンの実質的に純粋なジアステレオマー、あるいはその塩、エステル、溶媒和物、および／または多形型を含む化合物であって、実質的に純粋なジアステレオマーが、（２Ｓ）−２−［［４−［（１Ｓ）−１−［（２，４−ジアミノプテリジン−６−イル）メチル］ブト−３−イニル］ベンゾイル］アミノ］ペンタンジオン酸または（２Ｓ）−２−［［４−［（１Ｒ）−１−［（２，４−ジアミノプテリジン−６−イル）メチル］ブト−３−イニル］ベンゾイル］アミノ］ペンタンジオン酸である、前記ジアステレオマーを提供する。１つの態様において、実質的に純粋なジアステレオマーは、（２Ｓ）−２−［［４−［（１Ｓ）−１−［（２，４−ジアミノプテリジン−６−イル）メチル］ブト−３−イニル］ベンゾイル］アミノ］ペンタンジオン酸、あるいはその塩、エステル、溶媒和物、および／または多形型である。別の態様において、実質的に純粋なジアステレオマーは、（２Ｓ）−２−［［４−［（１Ｒ）−１−［（２，４−ジアミノプテリジン−６−イル）メチル］ブト−３−イニル］ベンゾイル］アミノ］ペンタンジオン酸、あるいはその塩、エステル、溶媒和物、および／または多形型である。
【００３１】
[0029]本発明はまた、療法的に有効な量の１０−プロパルギル−１０−デアザアミノプテリンの実質的に純粋なジアステレオマー、あるいはその塩、エステル、溶媒和物、および／または多形型を、患者に投与する工程を含む、癌の治療が必要な患者において癌を治療するための方法であって、実質的に純粋なジアステレオマーが、（２Ｓ）−２−［［４−［（１Ｓ）−１−［（２，４−ジアミノプテリジン−６−イル）メチル］ブト−３−イニル］ベンゾイル］アミノ］ペンタンジオン酸または（２Ｓ）−２−［［４−［（１Ｒ）−１−［（２，４−ジアミノプテリジン−６−イル）メチル］ブト−３−イニル］ベンゾイル］アミノ］ペンタンジオン酸である、前記方法も提供する。
【００３２】
[0030]１つの癌治療態様において、実質的に純粋なジアステレオマーは、（２Ｓ）−２−［［４−［（１Ｓ）−１−［（２，４−ジアミノプテリジン−６−イル）メチル］ブト−３−イニル］ベンゾイル］アミノ］ペンタンジオン酸、あるいはその塩、エステル、溶媒和物、および／または多形型である。別の癌治療態様において、実質的に純粋なジアステレオマーは、（２Ｓ）−２−［［４−［（１Ｒ）−１−［（２，４−ジアミノプテリジン−６−イル）メチル］ブト−３−イニル］ベンゾイル］アミノ］ペンタンジオン酸、あるいはその塩、エステル、溶媒和物、および／または多形型である。いくつかの態様において、１０−プロパルギル−１０−デアザアミノプテリンの実質的に純粋なジアステレオマー、あるいはその塩、エステル、溶媒和物、および／または多形型は、１０−デアザアミノプテリンを実質的に含まない。
【００３３】
[0031]「実質的に純粋なＰＤＸ−１０ａ」は、本明細書において、ＰＤＸ−１０ａの量が、１０−プロパルギル−１０−ｄＡＭの総量の重量約９０％より多く；１０−プロパルギル−１０−ｄＡＭの総量の重量約９１％より多く；１０−プロパルギル−１０−ｄＡＭの総量の重量約９２％より多く；１０−プロパルギル−１０−ｄＡＭの総量の重量約９３％より多く；１０−プロパルギル−１０−ｄＡＭの総量の重量約９４％より多く；１０−プロパルギル−１０−ｄＡＭの総量の重量約９５％より多く；１０−プロパルギル−１０−ｄＡＭの総量の重量約９６％より多く；１０−プロパルギル−１０−ｄＡＭの総量の重量約９７％より多く；１０−プロパルギル−１０−ｄＡＭの総量の重量約９８％より多く；１０−プロパルギル−１０−ｄＡＭの総量の重量約９８．５％より多く；１０−プロパルギル−１０−ｄＡＭの総量の重量約９９％より多く；１０−プロパルギル−１０−ｄＡＭの総量の重量約９９．５％より多く；１０−プロパルギル−１０−ｄＡＭの総量の重量約９９．７％より多く；１０−プロパルギル−１０−ｄＡＭの総量の重量約９９．８％より多く；そして１０−プロパルギル−１０−ｄＡＭの総量の重量約９９．９％より多いことを意味する。同様に、「実質的に純粋なＰＤＸ−１０ｂ」は、本明細書において、ＰＤＸ−１０ｂの量が、１０−プロパルギル−１０−ｄＡＭの総量の重量約９０％より多く；１０−プロパルギル−１０−ｄＡＭの総量の重量約９１％より多く；１０−プロパルギル−１０−ｄＡＭの総量の重量約９２％より多く；１０−プロパルギル−１０−ｄＡＭの総量の重量約９３％より多く；１０−プロパルギル−１０−ｄＡＭの総量の重量約９４％より多く；１０−プロパルギル−１０−ｄＡＭの総量の重量約９５％より多く；１０−プロパルギル−１０−ｄＡＭの総量の重量約９６％より多く；１０−プロパルギル−１０−ｄＡＭの総量の重量約９７％より多く；１０−プロパルギル−１０−ｄＡＭの総量の重量約９８％より多く；１０−プロパルギル−１０−ｄＡＭの総量の重量約９８．５％より多く；１０−プロパルギル−１０−ｄＡＭの総量の重量約９９％より多く；１０−プロパルギル−１０−ｄＡＭの総量の重量約９９．５％より多く；１０−プロパルギル−１０−ｄＡＭの総量の重量約９９．７％より多く；１０−プロパルギル−１０−ｄＡＭの総量の重量約９９．８％より多く；そして１０−プロパルギル−１０−ｄＡＭの総量の重量約９９．９％より多いことを意味する。
【００３４】
[0032]ＰＤＸ−１０ａおよび／またはＰＤＸ−１０ｂを用いて治療すべき癌には、例えば、前立腺癌、乳癌、黒色腫、肺癌、およびＴ細胞リンパ腫が含まれる。Ｔ細胞リンパ腫に関しては、本発明のジアステレオマーを用いた治療に供される多様な状態があり、そしてこれらには：（ａ）悪性腫瘍が胸腺由来の原始リンパ前駆細胞で生じるリンパ芽球性リンパ腫；（ｂ）Ｔ細胞前リンパ球性白血病、Ｔ細胞顆粒リンパ球性白血病、侵襲性ＮＫ細胞白血病、皮膚Ｔ細胞リンパ腫（菌状息肉腫／セザリー症候群）、Ｔ細胞型未分化大細胞リンパ腫、腸疾患型Ｔ細胞リンパ腫、ＨＴＬＶ−１に関連するものを含む成人Ｔ細胞白血病／リンパ腫、および血管免疫芽細胞性Ｔ細胞リンパ腫、および皮下脂肪織炎性（ｐａｎｎｉｃｕｌｉｔｉｃ）Ｔ細胞リンパ腫を含む、成熟または末梢Ｔ細胞新生物；ならびに（ｃ）最初はリンパ節傍皮質に関与し、そして真の濾胞パターンには決して増殖しない末梢Ｔ細胞リンパ腫が含まれる。治療すべき他の癌には、血液系腫瘍、頭部および頸部の癌、胃腸管の癌、卵巣癌、および骨肉腫が含まれる。
【００３５】
[0033]別の態様において、本発明には、療法的に有効な量の１０−プロパルギル−１０−デアザアミノプテリンの実質的に純粋なジアステレオマー、あるいはその塩、エステル、溶媒和物、および／または多形型を、炎症性障害に罹患した哺乳動物に投与する工程を含む、炎症性障害を治療するための方法であって、実質的に純粋なジアステレオマーが、（２Ｓ）−２−［［４−［（１Ｓ）−１−［（２，４−ジアミノプテリジン−６−イル）メチル］ブト−３−イニル］ベンゾイル］アミノ］ペンタンジオン酸または（２Ｓ）−２−［［４−［（１Ｒ）−１−［（２，４−ジアミノプテリジン−６−イル）メチル］ブト−３−イニル］ベンゾイル］アミノ］ペンタンジオン酸である、前記方法が含まれる。
【００３６】
[0034]用語「炎症性障害」は、本明細書において、炎症によって引き起こされるか、またはその症状に炎症が含まれる、いかなる障害も指す。例えば、炎症によって引き起こされる炎症性障害は、敗血症ショックであってもよく、そして症状が炎症を含む炎症性障害は、関節リウマチであってもよい。本発明の炎症性障害には、限定されるわけではないが：心臓血管疾患、関節リウマチ、多発性硬化症、クローン病、炎症性腸疾患、全身性エリテマトーデス、多発性筋炎、敗血症ショック、移植片対宿主病、喘息、鼻炎、乾癬、および湿疹が含まれる。１つの態様において、治療すべき炎症性障害には関節リウマチおよび若年性関節リウマチが含まれる。
【００３７】
[0035]用語「治療」、「治療する」および「治療すること」は、本明細書において、症状を軽減し、一時的または永続的にのいずれかで癌または炎症性障害の原因を取り除き、障害の症状の出現および／または進行を遅延させるか、あるいは疾患を防止する（すなわち予防的に治療する）ことを意味する。予防的治療を受ける被験体は、一般的に、例えば遺伝的素因、食餌、障害を引き起こす物質への曝露、病原体への曝露等のため、癌または炎症性状態に関するリスクがある哺乳動物である。
【００３８】
[0036]用語「患者」または「哺乳動物」は、本明細書において、ヒト、家畜および農場動物、ならびに動物園またはコンパニオン動物、例えばイヌ、ウマ、ネコ、ウシ等を含む、哺乳動物と分類されるいかなる動物も指す。好ましくは、哺乳動物はヒトである。
【００３９】
[0037]ＰＤＸ−１０ａおよび／またはＰＤＸ−１０ｂは、典型的には、当該技術分野に知られるように、患者が治療されているものに対して最も有効な治療（有効性および安全性の観点の両方から）を提供する投薬措置で、患者に投与されるであろう。本発明の治療法を行う際、ＰＤＸ−１０ａおよび／またはＰＤＸ−１０ｂは、当該技術分野に知られる任意の有効な方式で投与されてもよく、例えば、治療中の癌のタイプ、および例えば公表される臨床研究の結果に基づくような処方医師の医学的判断に応じて、経口、局所、静脈内、腹腔内、筋内、関節内、皮下、鼻内、眼内、膣、直腸、頭蓋内、または皮内経路によってもよい。
【００４０】
[0038]実質的に純粋なＰＤＸ−１０ａまたはＰＤＸ−１０ｂを薬学的調製物の一部として配合してもよい。特定の投薬型は、投与法に応じるが、錠剤、カプセル、経口液体、ならびに経口、静脈内、筋内、頭蓋内、または腹腔内投与等のための注射可能溶液が含まれてもよい。投薬は、ｍｇ／ｍ２として表されてもよい。あるいは、投薬は当業者に認められうる任意の方式によって、ｍｇ／ｋｇ体重として表されてもよい。ｍｇ／ｋｇ体重で同等の投薬量を得るための１つの方法は、ほぼ１ｍｇ／ｍ２に同等であるように、平均的なヒトに関して、変換係数０．０２５ｍｇ／ｋｇを適用することを伴う。この計算にしたがって、１５０ｍｇ／ｍ２の投薬量は、約３．７５ｍｇ／ｋｇにほぼ同等である。
【００４１】
[0039]本発明のジアステレオマーに関する癌のための適切な投薬には、以下の投薬措置が含まれる。例えば、約１０〜１２０ｍｇ／ｍ２体表面積／日（約０．２５〜３ｍｇ／ｋｇ体重／日）の用量が適切である。毎週３０ｍｇ／ｍ２（約０．７５ｍｇ／ｋｇ）の投薬を３週間、その後、１週間の休薬、毎週３０ｍｇ／ｍ２（約０．７５ｍｇ／ｋｇ）の投薬を６週間、その後、１週間の休薬、あるいは毎週次第に増加する用量のＰＤＸを６週間のスケジュールもまた適切である。患者寛容性および悪性腫瘍のタイプに基づいて、適切であるように、より低い用量を用いてもよい。より頻繁でない投与を用いる場合には、より高い用量を利用してもよい。したがって、一般的な意味で、多様な投薬スケジュールを用いて、１０〜２７５ｍｇ／ｍ２（約０．２５〜約６．９ｍｇ／ｋｇ）の投薬量が適切に用いられ、例えば約１００〜２７５ｍｇ／ｍ２（約２．５〜約６．８７ｍｇ／ｋｇ）の間を隔週投薬、および約１０〜１５０ｍｇ／ｍ２（約０．２５〜約３．７５ｍｇ／ｋｇ）の間、またはより具体的には、約１０〜６０ｍｇ／ｍ２の間を毎週投薬する。
【００４２】
[0040]米国特許第６，３２３，２０５号に記載されるものと類似のプロトコルを用いた適切な投薬決定は、当該技術分野の技術範囲内である。１つの態様において、実質的に純粋なＰＤＸ−１０ａまたはＰＤＸ−１０ｂジアステレオマーを、１回あたり約１０〜約２７５ｍｇ／ｍ２（約０．２５〜約６．８７ｍｇ／ｋｇ）の量で投与してもよい。本発明の方法にはまた、実質的に純粋なＰＤＸ−１０ａまたはＰＤＸ−１０ｂジアステレオマーを毎週；約１０ｍｇ／ｍ２（０．２５ｍｇ／ｋｇ）または約３０ｍｇ／ｍ２（０．７５ｍｇ／ｋｇ）の用量で；１回あたり約１０〜約１５０ｍｇ／ｍ２（約０．２５〜約３．７５ｍｇ／ｋｇ）の量を；隔週で；そして約１００〜約２７５ｍｇ／ｍ２（約２．５〜約６．９ｍｇ／ｋｇ）の投薬量で、投与することも含まれる。１つの態様において、実質的に純粋なＰＤＸ−１０ａまたはＰＤＸ−１０ｂジアステレオマーを、約０．２５ｍｇ／ｋｇ〜約４ｍｇ／ｋｇの間の量で；約０．７５ｍｇ／ｋｇ〜約３ｍｇ／ｋｇの間の量で；約１．０ｍｇ／ｋｇ〜約２．５ｍｇ／ｋｇの間の量で；約０．２５ｍｇ／ｋｇまたは約０．７５ｍｇ／ｋｇの量で（または体表面積（ＢＳＡ）での同等量で）投与してもよい。
【００４３】
[0041]炎症性障害の治療のため、実質的に純粋なＰＤＸ−１０ａまたはＰＤＸ−１０ｂジアステレオマーを、経口、筋内、静脈内、動脈内またはクモ膜下腔内経路によって投与してもよい。当業者には他の経路が思い浮かぶであろう。限定なしに、乾癬、関節リウマチ、および／または若年性関節リウマチを含む炎症性障害の治療のため、投薬には以下が含まれてもよい。成人関節リウマチまたは多関節型経過若年性関節リウマチに対する本発明の方法には、毎週１回約１〜約３０ｍｇの間の経口投与が含まれ；１つの態様において、約７．５ｍｇを毎週１回投与する。他の投薬には、毎週１回投与される１０ｍｇ／ｍ２が含まれてもよい。最適な反応を達成するため、投薬を次第に調整してもよい。より高い投薬量、例えば２０ｍｇ／ｍ２／週を超える投薬量、または０．６５〜１．０ｍｇ／ｋｇ／週の投薬量では、筋内または皮下投薬によって、より優れた吸収が達成可能である。適切な投薬にはまた、週あたり７．５ｍｇ、または約０．５〜約１０ｍｇの間の分割経口投薬が含まれることも可能であり；１つの態様において、投薬は、毎週１回のコースとして投与される３回の用量の１２時間間隔での２．５ｍｇの分割経口投薬であってもよい。投薬は、有効である限り続いてもよいし、そして投薬には、最大２年およびそれより長期間の療法が含まれる。
【００４４】
[0042]実質的に純粋なＰＤＸ−１０ａまたはＰＤＸ−１０ｂジアステレオマーおよび他の剤、例えばゲムシタビン、エルロチニブ、タキサン、またはボルテゾミブを同時に投与するか、または一般的な治療措置の一部として組み合わせて利用してもよく、ここで、ＰＤＸ−１０ａおよび／またはＰＤＸ−１０ｂ、ならびに他の剤（単数または複数）は、同時にまたは異なる時点で投与される。本発明の１つの態様において、薬学的組成物は、抗癌剤と組み合わせて実質的に純粋なＰＤＸ−１０ａまたはＰＤＸ−１０ｂジアステレオマーを含んでもよく、ここで前記抗癌剤は、アルキル化薬剤、代謝拮抗剤、微小管阻害剤、ポドフィロトキシン、抗生物質、ニトロソ尿素、ホルモン療法剤、キナーゼ阻害剤、腫瘍細胞アポトーシスの活性化剤、および抗血管形成剤からなる群より選択されるメンバーである。
【００４５】
[0043]例えば、他の剤を、実質的に純粋なＰＤＸ−１０ａまたはＰＤＸ−１０ｂジアステレオマーの投与の前に、該投与の直後に、または該投与のある期間後（例えば２４時間後）に投与してもよい。したがって、本出願の目的のため、用語、投与は、一般的に、薬剤の同時投与または連続投与を指し、そして別に明記しない限り、薬剤間に時間をおいてもまたはおかなくてもよいいずれかの順序の平行治療措置を指す。
【００４６】
[0044]１つの態様において、実質的に純粋なＰＤＸ−１０ａまたはＰＤＸ−１０ｂは、治療措置開始時に始まる、５日間、または各５日間２周期の２ｍｇ／ｋｇ  ＱＤで投与されてもよい。
【００４７】
[0045]実質的に純粋なＰＤＸ−１０ａまたはＰＤＸ−１０ｂは、治療の副作用を減少させるため、葉酸およびビタミンＢ１２補充と組み合わせて適切に用いられる。例えば、患者を葉酸（実質的に純粋なＰＤＸ−１０ａまたはＰＤＸ−１０ｂジアステレオマーでの治療の１週間前に始まって毎日１ｍｇ／ｍ２、あるいはＢＳＡに基づかず、毎日１ｍｇ経口（ｐ．ｏ．））；およびＢ１２（毎月１ｍｇ／ｍ２、あるいは８〜１０週ごとに１ｍｇとして（ＢＳＡに基づかず）筋内（ＩＭ．）投与、あるいはｐ．ｏ．で毎日１ｍｇ（ＢＳＡに基づかず））で治療してもよい。
【００４８】
[0046]実質的に純粋なＰＤＸ−１０ａまたはＰＤＸ−１０ｂを非常に多様な異なる投薬型で投与してもよい。例えば、実質的に純粋なＰＤＸ−１０ａまたはＰＤＸ−１０ｂは、好ましくは経口または非経口で投与されてもよい。１つの態様において、実質的に純粋なＰＤＸ−１０ａまたはＰＤＸ−１０ｂを経口投与してもよい。１つの態様において、実質的に純粋なＰＤＸ−１０ａまたはＰＤＸ−１０ｂを非経口投与し、そして静脈内経路を介して投与してもよい。
【００４９】
[0047]錠剤、カプセル、ロゼンジ、トローチ、ハードキャンディ、粉末、スプレー、クリーム、軟膏（ｓａｌｖｅ）、座薬、ジェリー、ゲル、ペースト、ローション、軟膏（ｏｉｎｔｍｅｎｔ）、エリキシル剤、シロップ等の形で、多様な薬学的に許容されうる不活性キャリアーとともに、実質的に純粋なＰＤＸ−１０ａまたはＰＤＸ−１０ｂを投与してもよい。こうした投薬型の投与を単回または多数回用量で行ってもよい。キャリアーには、固形希釈剤または増量剤、無菌水性媒体および多様な非毒性有機溶媒、およびその他が含まれる。経口薬学的組成物に、適切に甘味を付けそして／またはフレーバーを付けてもよい。実質的に純粋なＰＤＸ−１０ａまたはＰＤＸ−１０ｂの経口投与のため、１またはそれより多い活性剤を含有する錠剤を、例えば、微結晶性セルロース、クエン酸ナトリウム、炭酸カルシウム、リン酸二カルシウムおよびグリシンなどの多様な賦形剤と、多様な崩壊剤、例えばデンプン（そして好ましくはトウモロコシ、ジャガイモまたはタピオカ・デンプン）、アルギン酸および特定の複合ケイ酸とともに、ポリビニルピロリドン、スクロース、ゼラチンおよびアカシアのような顆粒結合剤と一緒に、組み合わせる。さらに、潤滑剤、例えばステアリン酸マグネシウム、ラウリル硫酸ナトリウムおよびタルクは、しばしば、錠剤化目的には非常に有用である。類似のタイプの固形組成物はまた、ゼラチンカプセル中の増量剤として使用可能であり；これに関連して好ましい材料にはまた、ラクトースまたは乳糖、ならびに高分子量ポリエチレングリコールも含まれる。水性懸濁物および／またはエリキシル剤が経口投与に望ましい場合、実質的に純粋なＰＤＸ−１０ａまたはＰＤＸ−１０ｂを、多様な甘味料またはフレーバー剤、着色剤または色素と組み合わせてもよく、そして望ましい場合、乳化剤および／または懸濁剤、ならびに水、エタノール、プロピレングリコール、グリセリン、およびその多様な同様の組み合わせなどの希釈剤とともに、組み合わせてもよい。場合によって、１またはそれより多い付属成分またはアジュバントとともに、圧縮または鋳造によって、本発明の組成物を含有する錠剤を調製してもよい。粉末または顆粒などの自由流動型の活性成分を、場合によって結合剤、潤滑剤、不活性希釈剤、表面活性剤または分散剤と混合して、適切な機械において圧縮することによって、圧縮錠剤を調製してもよい。不活性液体希釈剤で湿らせた粉末化合物の混合物を適切な機械において鋳造することによって、鋳造錠剤を作製してもよい。各錠剤は、好ましくは、約０．０５ｍｇ〜約１０ｇの活性成分を含有し、そして各カシェーまたはカプセルは、好ましくは、約０．０５ｍｇ〜約１０ｇの活性成分を含有し；錠剤はまた、適切に、錠剤あたり約２．５ｍｇの活性成分または錠剤あたり約７．５ｍｇを含有してもよい。
【００５０】
[0048]実質的に純粋なＰＤＸ−１０ａまたはＰＤＸ−１０ｂの非経口投与のため、溶液、ならびに活性剤または対応するその水溶性の塩を含む無菌水溶液を使用してもよい。こうした無菌水溶液は、好ましくは、適切に緩衝され、そしてまた、例えば十分な生理食塩水およびグルコースで、等張性を与えられる。これらの特定の水溶液は、静脈内、筋内、皮下、および腹腔内注射目的に特に適している。油性溶液は、関節内、筋内および皮下注射目的に適している。無菌状態下でのすべてのこれらの溶液の調製は、当業者に周知の標準的薬学的技術によって、容易に達成される。
【００５１】
[0049]獣医学的目的のため、任意の型を用いて、そして上記経路のいずれかによって、活性剤を別個にまたはともに動物に投与してもよい。好ましい態様において、実質的に純粋なＰＤＸ−１０ａまたはＰＤＸ−１０ｂをカプセル、ボーラス、錠剤、液体水薬の形で、注射によって、または移植物として投与する。代替法として、実質的に純粋なＰＤＸ−１０ａまたはＰＤＸ−１０ｂを動物飼料とともに投与してもよく、そしてこの目的のため、濃縮飼料添加物またはプレミックスを通常の動物飼料用に調製してもよい。標準的獣医学的実施にしたがって、慣用的な方式で、こうした配合物を調製する。
【００５２】
[0050]本発明はさらに、実質的に純粋なＰＤＸ−１０ａまたはＰＤＸ−１０ｂを含む単一の容器を含むキットを提供する。好ましい態様において、キット容器にはさらに、薬学的に許容されうるキャリアーが含まれてもよい。キットにはさらに、無菌希釈剤が含まれてもよく、これは好ましくは別個のさらなる容器中に保存される。キットにはさらに、癌および／または炎症性障害を治療するための方法として、併用治療の使用を指示する、印刷した使用説明書を含む添付文書が含まれてもよい。
【００５３】
[0051]好ましくは、組成物は、薬学的に許容されうるキャリアー、ならびに療法的に有効な量の実質的に純粋なＰＤＸ−１０ａまたはＰＤＸ−１０ｂ（各構成要素の薬学的に許容されうる塩、エステル、溶媒和物、および多形型を含む）で構成される。さらに、この好ましい態様内で、本発明は、薬学的に許容されうるキャリアーおよび非毒性の療法的に有効な量の実質的に純粋なＰＤＸ−１０ａまたはＰＤＸ−１０ｂ（その薬学的に許容されうる塩を含む）を含み、その使用が、新生物細胞の増殖、良性もしくは悪性腫瘍、または転移の阻害、あるいは炎症の治療を生じる、疾患の治療のための薬学的組成物を含む。
【００５４】
[0052]用語「薬学的に許容されうる塩」は、薬学的に許容されうる非毒性塩基または酸から調製される塩を指す。本発明の化合物が酸性である場合、その対応する塩は、無機塩基および有機塩基を含む、薬学的に許容されうる非毒性塩基から好適に調製可能である。こうした無機塩基由来の塩には、アルミニウム、アンモニウム、カルシウム、銅（二価銅および一価銅）、三価鉄、二価鉄、リチウム、マグネシウム、マンガン（第二マンガン（ｍａｎｇａｎｉｃ）および二価マンガン（ｍａｎｇａｎｏｕｓ））、カリウム、ナトリウム、亜鉛および同様の塩が含まれる。特に好ましいのは、アンモニウム、カルシウム、マグネシウム、カリウムおよびナトリウム塩である。１つの態様において、塩は塩酸塩である。薬学的に許容されうる有機非毒性塩基由来の塩にはまた、一級、二級、および三級アミン、ならびに環状アミンおよび置換アミン、例えば天然存在および合成置換アミンの塩も含まれる。塩を形成可能な他の薬学的に許容されうる有機非毒性塩基には、イオン交換樹脂、例えばアルギニン、ベタイン、カフェイン、コリン、Ｎ’，Ｎ’−ジベンジルエチレンジアミン、ジエチルアミン、２−ジエチルアミノエタノール、２−ジメチルアミノエタノール、エタノールアミン、エチレンジアミン、Ｎ−エチルモルホリン、Ｎ−エチルピペリジン、グルカミン、グルコサミン、ヒスチジン、ヒドラバミン、イソプロピルアミン、リジン、メチルグルカミン、モルホリン、ピペラジン、ピペリジン、ポリアミン樹脂、プロカイン、プリン、テオブロミン、トリエチルアメイン（ｔｒｉｅｔｈｙｌａｍｅｉｎｅ）、トリメチルアミン、トリプロピルアミン、トロメタミン等が含まれる。
【００５５】
[0053]上に示す一般的な投薬型に加えて、実質的に純粋なＰＤＸ−１０ａまたはＰＤＸ−１０ｂ（各構成要素の薬学的に許容されうる塩、エステル、溶媒和物，および多形型を含む）はまた、徐放手段および／または送達デバイスによって投与されてもよい。
【００５６】
[0054]本発明の薬学的組成物は、キャリアーが固形である直腸投与に適した型であってもよい。混合物が単位用量座薬を形成することが好ましい。適切なキャリアーには、ココアバターおよび当該技術分野で一般的に用いられる他の材料が含まれる。座薬は、まず、軟化したまたは融解したキャリアー（単数または複数）と組成物を混合し、その後、冷却し、そして鋳型中で成形することによって、好適に形成可能である。
【００５７】
[0055]前述のキャリアー成分に加えて、上記薬学的配合物には、適切なように、１またはそれより多いさらなるキャリアー成分、例えば希釈剤、緩衝剤、フレーバー剤、結合剤、表面活性剤、増粘剤、潤滑剤、保存剤（酸化防止剤を含む）等が含まれてもよい。さらに、意図されるレシピエントの血液と配合物を等張にする、他のアジュバントが含まれてもよい。また、ＰＤＸ−１０ａおよび／またはＰＤＸ−１０ｂ（各構成要素の薬学的に許容されうる塩、エステル、溶媒和物、および多形型を含む）を含有する組成物を、粉末または液体濃縮型で調製してもよい。
【００５８】
[0056]本発明の組み合わせの化合物に関する投薬レベルは、ほぼ、本明細書に記載するような、またはこれらの化合物に関して当該技術分野に記載されるようなものであろう。しかし、任意の特定の患者に関する特定の用量レベルは、年齢、体重、全身健康状態、性別、食餌、投与時期、投与経路、排出率、薬剤の組み合わせ、および療法を受けている特定の疾患の重症度を含む多様な要因に応じるであろう。
【００５９】
[0057]１つの側面において、本発明には、癌を治療する方法において使用するための、本発明の薬学的組成物が含まれる。治療すべき癌は、本明細書の別の箇所に定義するような多くの癌のいずれであってもよく、限定なしに、前立腺癌、Ｔ細胞リンパ腫、乳癌、肺癌、血液系腫瘍、頭部および頸部の癌、胃腸管の癌、卵巣癌、および骨肉腫が含まれる。
【００６０】
[0058]１つの側面において、本発明には、炎症性障害を治療する際に使用するための本発明の薬学的組成物が含まれる。治療すべき炎症性障害は、本明細書の別の箇所に定義するような多くの炎症性障害のいずれであってもよく、そして例えば関節リウマチが含まれる。
【００６１】
[0059]別の側面において、本発明には、癌を治療するための薬学的組成物の製造における本発明記載の化合物の使用が含まれる。治療すべき癌は、本明細書の別の箇所に定義するような多くの癌のいずれであってもよく、限定なしに、前立腺癌、Ｔ細胞リンパ腫、乳癌、肺癌、血液系腫瘍、頭部および頸部の癌、胃腸管の癌、卵巣癌、および骨肉腫が含まれる。
【００６２】
[0060]別の側面において、本発明には、炎症性障害を治療するための薬学的組成物の製造における本発明記載の化合物の使用が含まれる。治療すべき炎症性障害は、本明細書の別の箇所に定義するような多くの炎症性障害のいずれであってもよく、そして例えば関節リウマチが含まれる。本発明のさらなる目的、利点、および新規特徴は、限定を意図しない以下の実施例を検討すると、一般の当業者には明らかになるであろう。さらに、本明細書の上記に記述するような、そして以下の請求項セクションに請求するような本発明の多様な態様および側面の各々は、以下の実施例に実験的な裏付けを見出す。
【００６３】
[0061]本開示の多様な態様にはまた、各従属クレームが、先行する従属クレームならびに独立クレームの各々の限定を取り込む、多重従属クレームであるかのように、請求項中で引用される多様な要素の順列も含まれる。こうした順列は、明らかに、本開示の範囲内である。
【００６４】
[0062]本発明を、いくつかの態様に言及して特に示し、そして記載してきているが、当業者には、本発明の精神および範囲から逸脱することなく、本明細書に開示する多様な態様に対して型および詳細の変更が可能であり、そして本明細書に開示する多様な態様は、請求の範囲に対する限定として作用するよう意図されないことを、当業者は理解するであろう。本明細書に引用するすべての参考文献は、その全体が本明細書に援用される。
【実施例】
【００６５】
[0063]例示目的のために以下の実施例を提供し、そして実施例は本発明の範囲を限定することは意図されない。
実施例１：ラセミ体ＰＤＸの調製
[0064]図１は、本発明にしたがって、１０−プロパルギル−１０−ｄＡＭを調製するのに有用な合成スキームを示す。１８ｍＬの篩乾燥ＴＨＦ中の油分散物（１．０６ｇ、２６．５ｍｍｏｌ）中の６０％ＮａＨの混合物を０℃に冷却した。冷えた混合物を、乾燥ＴＨＦ（７ｍＬ）中、ホモテレフタル酸ジメチルエステル（５．０ｇ、２４ｍｍｏｌの図１中の化合物１）の溶液で処理し、そして混合物を０℃で１時間攪拌した。プロパルギルブロミド（２６．４ｍｍｏｌ）を添加し、そして混合物を０℃でさらに１時間攪拌し、そして次いで室温で１６時間攪拌した。生じた混合物を２．４ｍＬの５０％酢酸で処理し、そして次いで２４０ｍＬの水に注いだ。混合物をエーテルで抽出した（１５０ｍＬ、２回）。エーテル抽出物を合わせ、Ｎａ２ＳＯ４上で乾燥させ、そして黄桃色油に濃縮した。シクロヘキサン−ＥｔＯＡｃ（８：１）による溶出を用いて、シリカゲル（６００ｍＬの２３０〜４００メッシュ）上のクロマトグラフィーを行うと、白色固体（４．６６）としての産物α−プロパルギルホモテレフタル酸ジメチルエステル（化合物２）が得られ、これはＴＬＣ（シクロヘキサン−ＥｔＯＡｃ、３：１）によると均質であるようであった。しかし、この産物に関する質量スペクトルデータは、これが所望の産物２およびジプロパルギル化化合物の混合物であることを示した。出発材料１はまったく検出されなかった。ＨＰＬＣは、モノプロパルギル化産物対ジプロパルギル化産物の比が約３：１であることを示す。ジプロパルギル化産物は、化合物１とは異なり、反応の次の工程で望ましくない副産物を生じえないため、この物質は、化合物３に変換するのに適していた。最終産物を導く変換中に、続いて１０−ｄＡＭ形成が起こることを回避するため、合成において進行に用いる産物中に出発化合物１が存在しないことが好ましい。
【００６６】
[0065]油分散物中、０．３６ｇの６０％ＮａＨ（９ｍｍｏｌ）と、１０ｍＬの乾燥ＤＭＦを合わせることによって混合物を形成し、そして０〜５℃に冷却した。冷却混合物を１０ｍＬ乾燥ＤＭＦ中の最初の反応産物（化合物２）（２．９４ｇ、１２ｍｍｏｌ）の溶液、１滴ずつで処理し、そして次いで０℃で３０分間攪拌した。−２５℃に冷却した後、１０ｍＬ乾燥ＤＭＦ中の２，４，ジアミノ−６−（ブロモメチル）−プテリジン・ヒドロブロミド−０．２  ２−プロパノール（１．００ｇ、２．９ｍｍｏｌ）の溶液を１滴ずつ添加する一方、温度をほぼ−２５℃に維持した。攪拌混合物の温度を２時間の期間に渡って−１０℃に上昇させた。−１０℃でさらに２時間おいた後、温度を２０℃に上昇させ、さらに２時間、室温での攪拌を続けた。次いで、固体ＣＯ２を添加することによって、反応をｐＨ７に調整した。真空で濃縮して溶媒を取り除いた後、ジエチルエーテルで残渣を攪拌し、そしてエーテル不溶性物質を収集し、水で洗浄し、そして真空で乾燥させて１．４９ｇの未精製産物を得た。この未精製産物を、シリカゲルカラムに適用するため、ＣＨＣｌ３−ＭｅＯＨ（１０：１）に溶解した。同じ溶媒系による溶出で、１０−プロパルギル−１０−カルボメトキシ−４−デオキシ−４−アミノ−１０−デアザプテロイン酸メチルエステル（化合物３）を得て、これは４０％収量（４８５ｍｇ）でＴＬＣに関して均質であった。
【００６７】
[0066]２−メトキシエタノール（５ｍＬ）中の化合物３（４００ｍｇ、０．９５ｍｍｏｌ）の攪拌懸濁物を、水（５ｍＬ）で処理し、そして次いで、１０％水酸化ナトリウム溶液（３．９ｍＬ）で処理した。混合物を室温で４時間攪拌し、その間、溶液が生じた。溶液を酢酸でｐＨ８に調整し、そして高真空下で濃縮した。生じた残渣を１５ｍＬの水に溶解し、そしてｐＨ５．５〜５．８に酸性化して、沈殿物の形成を生じた。沈殿物を収集し、水で洗浄し、そして真空で乾燥させて、３４０ｍｇの化合物４（９１％収量）を回収した。ＨＰＬＣ分析によって、産物純度が９０％であることが示された。
【００６８】
[0067]１５ｍＬ  ＤＭＳＯ中、１１５〜１２０℃で１０分間加熱することによって、化合物４（３３０ｍｇ）を脱カルボキシル化した。１０分後、ＨＰＬＣによる試験によって、変換が本質的に完全であることが確認された。真空における蒸留によってＤＭＳＯを除去した（４０℃槽）。残渣を０．５Ｎ  ＮａＯＨと攪拌して、透明な溶液を生じた。１Ｎ  ＨＣｌでｐＨ５．０に酸性化して、７０％収量で黄色固体としての１０−プロパルギル−４−デオキシ−４−アミノ−１０−デアザプテロイン酸（化合物５）を得た。ＨＰＬＣは、この段階での産物純度を９０％と示した。
【００６９】
[0068]トリエチルアミン（１４８ｍｇ、１４６ｍｍｏｌ）を含有するＤＭＦ（１０ｍＬ）中のＢＯＰ試薬（ベンゾトリアゾール−１−イルオキシｔｒｉｓ（ジメチルアミノ）ホスホニウム・ヘキサフルオロリン酸（２８７ｍｇ、０．６５ｍｍｏｌ、Ａｌｄｒｉｃｈ  Ｃｈｅｍｉｃａｌ  Ｃｏ．））を用いて、化合物５（２２５ｍｇ、０．６５ｍｍｏｌ）を、ジメチルＬ−グルタミン酸塩酸塩（１３７ｍｇ、０．６５ｍｍｏｌ）とカップリングした。混合物を２０〜２５℃で３時間攪拌し、そして次いで、蒸発乾固した。残渣を水と攪拌し、そして水不溶性未精製産物を収集し、そして真空中で乾燥させた。トリエチルアミン（体積０．２５％）を含有するＣＨＣｌ３−ＭｅＯＨ（１０：１）による溶出を用いたシリカゲルクロマトグラフィーによって、未精製産物（３５０ｍｇ）を精製して、１６５ｍｇの１０−プロパルギル−１０−デアザアミノプテリンジメチルエステルを回収し（化合物６、５０％収量）、これはＴＬＣ（ＣＨＣｌ３−ＭｅＯＨ  ５：１）では均質であった。
【００７０】
[0069]化合物６（１６５ｍｇ、０．３２６ｍｍｏｌ）を１０ｍＬ攪拌ＭｅＯＨに懸濁して、これに０．７２ｍＬ（０．７２ｍｅｑ）の１Ｎ  ＮａＯＨを添加した。数時間後に溶液が生じるまで、室温での攪拌を続けた。溶液を２０〜２５℃で８時間維持し、次いで、１０ｍＬの水で希釈した。減圧下で蒸発させてメタノールを除去し、そして濃縮水溶液を２０〜２５℃でさらに２４時間放置した。次いで、ＨＰＬＣは、エステル加水分解が完全であることを示した。透明な水溶液を酢酸でｐＨ４．０に酸性化して、淡黄色固体として１０−プロパルギル−１０−デアザアミノプテリンを沈殿させた。収集し、水で洗浄し、そして真空で乾燥させた産物は、重量１２２ｍｇ（７９％収量）であった。元素分析、プロトンＮＭＲおよび質量分析によるアッセイは、割り当てられた構造と完全に一致した。ＨＰＬＣ分析は９８％の純度を示し、そして産物が１０−デアザアミノプテリンを含まないことが確立された。
【００７１】
実施例２：ＰＤＸ−１０ａおよびＰＤＸ−１０ｂジアステレオマーの調製
[0070]本発明のジアステレオマーを調製するため、２２５ｇのラセミ体化合物６（実施例１に示す方法によって調製）を移動相（１００％エタノール）中に３．１ｇ／ｌで溶解させた。攪拌および加熱を用いて、フィードを溶解した。フィード溶液を０．２μフィルターを通じてろ過した。キラルカラム内への注入体積は２３分ごとに２０４ｍｌであり、高いキラル純度を確実にするため、大きなミッドカット（ｍｉｄ−ｃｕｔ）を収集した。４０℃および５０ｍｂａｒで２０Ｌ回転蒸発装置を用いて、収集した分画を蒸発させた。カラムはＣＨＩＲＡＬＰＡＫ  ＡＤ  ２０μ、１１ｃｍ内径ｘ２７ｃｍ長（ダイセル化学工業、日本から入手可能）であり；流速４００ｍｌ／分、温度３０℃、ＵＶ検出３８５ｎｍであった。移動相９０／５／５のエタノール／メタノール／イソプロピルアルコール：０．８ｍｌ／分、４０℃、２６０ｎｍでの検出を用いて、Ｃｈｉｒａｌｐａｋ  ＡＤ−Ｈ  ４．６ｍｍＩＤｘ２５０ｍｍで決定すると、エナンチオマー純度は９７％またはそれより大きかった。次いで、分離された化合物６（Ｃ１０でのＲジアステレオマー（ピーク２）およびＣ１０でのＳジアステレオマー（ピーク１）に分離された）を、実施例１に論じる方法によって、それぞれＰＤＸ−１０ｂおよびＰＤＸ−１０ａとして、ＰＤＸの個々のジアステレオマー（化合物７）に変換した。
【００７２】
実施例３：腫瘍細胞株中のラセミ体およびジアステレオマーのＩＣ５０
[0071]剤、ＰＤＸ、ＰＤＸ−１０ａ、ＰＤＸ−１０ｂを、ＭＤＡ−ＭＢ−４３５、ＳＫＢＲ−３およびＮＣＩ−Ｈ４６０ヒト腫瘍細胞株に対する増殖阻害活性に関して評価した。３時間の連続処理および７２時間の回復インキュベーション後、ＭＴＳアッセイによって、増殖阻害を測定した。これらの研究の目的は、研究中の腫瘍細胞株研究における化合物の細胞傷害性活性を決定することであった。
【００７３】
[0072]材料および方法。実施例１〜２に論じるように、ＰＤＸ−１０ａおよびＰＤＸ−１０ｂの調製を行った。ＰＤＸ化合物を２０ｍＭの濃度でジメチルスルホキシド（ＤＭＳＯ）中で希釈した。この溶液から、リン酸緩衝生理食塩水（ＰＢＳ）での希釈によって、２ｍＭのストック溶液を作製した。１０％ＤＭＳＯ／９０％ＰＢＳ中のこの２ｍＭストック溶液を用いて、１：１比で細胞培養に添加され、１ｘ濃度を生じる、細胞増殖培地中の力価決定シリーズの２ｘ濃度を作製した。細胞株−ヒト腫瘍細胞株：ＭＤＡ−ＭＢ−４３５（黒色腫）、ＳＫＢＲ−３（乳癌）およびＮＣＩ−Ｈ４６０（肺癌）を、１０パーセント透析ウシ胎児血清（ＦＢＳ；  Ｎｏｖａ  Ｔｅｃｈ、ニューヨーク州グランドアイランド）を含有するＲＰＭＩ培地（ＲＰＭＩ；  Ｎｏｖａ  Ｔｅｃｈ）中で培養した。細胞が７０％集密に到達したら、トリプシン処理し、そして別の培地（５％透析ＦＢＳ（Ｈｙｃｌｏｎｅ、ユタ州ローガン）を含有するＲＰＭＩ）中に再懸濁した。処理の１日前（第０日）、培養を１〜７．５ｘ１０４細胞／ｍｌの濃度に懸濁し、そして１００μｌアリコットを１ｘ１０３〜７．５ｘ１０３細胞／ウェルの最終濃度で９６ウェル・マイクロタイタープレートの各ウェル内にプレーティングした。剤に曝露する前に、細胞を３７℃で２４時間インキュベーションした。
【００７４】
[0073]試験剤−ラセミ体ＰＤＸ、および個々のジアステレオマーＰＤＸ−１０ａおよびＰＤＸ−１０ｂを、上述のように調製した。プレーティング２４時間後（第１日）、細胞をビヒクル（培地）のみまたは３ｐＭ〜１０μＭの間の濃度の上記試験剤で３時間処理した。
【００７５】
[0074]単一剤パルス研究−試験剤または標準剤（対照）での処理を、細胞プレーティング２４時間後（第１日）に開始した。各試験剤、または最終濃度２１５μＭエトポシド、２０μＭタキソール、３８．５ｎＭベルケイドからなる「化学薬品カクテル」（陽性対照）と、細胞を３７℃で３時間インキュベーションした。処理後、薬剤を除去し、増殖培地を添加し、そして細胞を３７℃で７２時間インキュベーションした。インキュベーション後、以下に記載するＭＴＳアッセイによって、生存細胞数を定量化した。実験を同じ濃度で２回反復した。これらの研究の結果を用いて、各化合物に関するＩＣ５０値（細胞増殖をビヒクルの５０％に阻害する薬剤の濃度）を計算した。Ｐｒｉｚｍソフトウェアを用いて、ＩＣ５０値を生じた。
【００７６】
[0075]ＭＴＳアッセイ−ＭＴＳアッセイを用いて、細胞生存度を決定した。この比色法は、生存細胞によるＭＴＳ試薬（テトラゾリウム塩）からホルマザンへの変換を測定する。４９０ｎｍでの分光光度測定によって、ホルマザン産生を定量化し、そしてこれは生存細胞数に比例する。これらの研究のため、上に列挙するように細胞を培養し、そして処理した。処理終了時、２０μｌ  ＭＴＳテトラゾリウム（ＰＢＳ、ｐＨ６．０中、１．９ｍｇ／ｍｌ）を細胞に３７℃で１時間添加した。Ｄｙｎｅｘ  ＨＤマイクロプレート読み取り装置を用いて、４９０ｎｍの単一波長で、吸光度（ＯＤ）値を測定した。
【００７７】
[0076]データ分析−各実験からデータを収集し、そして試験剤濃度のｌｏｇ１０に対するＯＤ４９０として表した。Ｐｒｉｚｍ分析ソフトウェア（ＧｒａｐｈＰａｄ、カリフォルニア州サンディエゴ）の統計分析パッケージを用いて、非線形曲線適合を行い、試験物品の５０％阻害濃度（ＩＣ５０）を生じた。
【００７８】
結果および考察
[0077]結果および考察。上記のように、ＭＴＳ細胞生存度アッセイを用いて、試験剤ラセミ体ＰＤＸ、ならびにジアステレオマーＰＤＸ−１０ａおよびＰＤＸ−１０ｂを、ＭＤＡ−ＭＢ−４３５、ＳＫＢＲ−３およびＮＣＩ−Ｈ４６０ヒト腫瘍細胞株に対して試験した。ＳＫＢＲ３細胞は、それぞれ、２７．１、１１．９および２６．１ｎＭに等しいＩＣ５０で、用量依存方式に、ラセミ体ＰＤＸ、ＰＤＸ−１０ａおよびＰＤＸ−１０ｂに反応した。
【００７９】
[0078]ＭＤＡ−ＭＢＡ４３５細胞は、それぞれ、１２８．７、１００および１２０．６ｎＭのＩＣ５０値で、用量依存方式に、ＰＤＸ、ＰＤＸ−１０ａおよびＰＤＸ−１０ｂ試験剤に反応した。
【００８０】
[0079]ＮＣＩ−Ｈ４６０細胞は、それぞれ、１００、２８９および４５．８ｎＭのＩＣ５０値で、用量依存方式に、ＰＤＸ、ＰＤＸ−１０ａおよびＰＤＸ−１０ｂ試験剤に反応した。反復アッセイにおいて、ＰＤＸ、ＰＤＸ−１０ａ、およびＰＤＸ−１０ｂのＩＣ５０値はそれぞれ、１２４．３、１６９．３、および４６．２ｎＭであった。本明細書に記載する方法を用いて、ＣＷＲ２２−ＲＶ１（前立腺）細胞株に関するデータを別個の実験で得て、そしてこれを以下の表に含める。
【００８１】
[0080]
【００８２】
【表１】
2013518879.tif 000005
【００８３】
ＩＣ５０＝最大細胞傷害効果の半分を生じる濃度、ｎＭ＝ナノモル。
【００８４】
実施例４．  ＰＤＸの薬物動態学的研究
[0081]バイオ分析法を開発し、そしてヒト、ラットおよびイヌの血漿および尿において、２つのプララトレキセートＣ１０ジアステレオマー（ＰＤＸ−１０ａおよびＰＤＸ−１０ｂ）の定量化に関して検証した。基本的なバイオ分析法は、Ｃ１８固相抽出（ＳＰＥ）カートリッジを利用してマトリックスからＰＤＸ−１０ａおよびＰＤＸ−１０ｂを抽出し、その後、分離検出のためにジアステレオマーを誘導体化（塩化アセチルでメチル化）することを伴う。液体クロマトグラフィー−タンデム質量分析（ＬＣ／ＭＳ／ＭＳ）によって各ジアステレオマーを定量化するため、誘導体化抽出物をキラル高性能液体クロマトグラフィー（ＨＰＬＣ）カラム上に注入する。血漿および尿マトリックス中の両ジアステレオマーに関する定量化下限（ＬＬＯＱ）は、０．５ｎｇ／ｍＬであった。
【００８５】
[0082]ジアステレオマーの薬物動態学的パラメータ：２つのプララトレキセートＣ１０ジアステレオマーのクリアランスには、種依存性の相違があり（以下の表を参照されたい）、ラットが最小限の相違を示し、そしてイヌが、ＰＤＸ−１０ａに比較して、ＰＤＸ−１０ｂで２倍より高いクリアランスを示すことが、非臨床および臨床研究によって示された。ヒトでは、ＰＤＸ−１０ｂクリアランスは、腎クリアランス（ＣＬｒｅｎ）および非腎クリアランス（ＣＬｎｏｎｒｅｎ）の両方に関して、およそ５０％より低かった。ＰＤＸ−１０ｂがより低いクリアランスであり、そして定常状態（Ｖｄｓｓ）で〜２倍低い体積分布であるのは、ヒトにおいて観察される、ＰＤＸ−１０ａと比較した、ＰＤＸ−１０ｂの２倍高い血漿曝露のためであるようである。しかし、両ジアステレオマーの血漿濃度−時間プロファイルは、平行して減少し、そして両ジアステレオマーの最終排除半減期（ｔ１／２ｔｅｒｍ）は、実質的に同一であった。種間で観察される立体選択性の生物学的原因は不明であるが、血漿タンパク質結合における異性体相違のためである可能性もある。組織分布および／または腎および肝胆道輸送における異性体相違もまた寄与している可能性もある。さらに、ヒト肝細胞および肝臓ミクロソームにおけるｉｎ  ｖｉｔｒｏ研究に由来するデータによって、個々のジアステレオマーは、有意な代謝には供されず、そして相互変換されないことが示された。
【００８６】
[0083]反復投薬に際しての種に渡るラセミ体プララトレキセート薬物動態学的パラメータの比較
【００８７】
【表２】
2013518879.tif 000006
【００８８】
ａ著しく試料採取された患者からのノンコンパートメントＰＫデータ（ｎ＝１０［Ｃ１Ｄ１］およびｎ＝６［Ｃ１Ｄ６／Ｃ２Ｄ６］）
ｂラセミ体混合物（ＰＤＸ−１０ａ＋ＰＤＸ−１０ｂ）、男性および女性（平均）
男性（雄）および女性（雌）に関して、そしてＰＤＸ−１０ａおよびＰＤＸ−１０ｂに関して観察される平均の範囲
男性（雄）および女性（雌）に関する平均ＢＷを用いて、概算値を計算した；ラットに関しては０．３５ｋｇ、イヌに関しては８．５ｋｇ、そしてヒトに関しては８５ｋｇ（ＰＤＸ−００８ノンコンパートメントＰＫ集団由来の平均ＢＷ）
Ｃ＝周期、Ｄ＝用量、ｍｇ＝ミリグラム、ｋｇ＝キログラム、ｍ２＝平方メートル、Ｃｍａｘ＝最大濃度、ｎｇ＝ナノグラム、ｍＬ＝ミリリットル、ＡＵＣ∞＝無限大までの曲線下面積、ｍｉｎ＝分、ＣＬｔｏｔ＝総クリアランス、ＢＷ＝体重、ＮＤ＝未測定、ＶｄＳＳ＝定常状態での分布体積、Ｌ＝リットル、ｔ１／２ｔｅｒｍ＝最終半減期、ｈ＝時間
【００８９】
[0084]癌患者におけるラセミ体ＰＤＸ投与後のＰＤＸ−１０ａおよびＰＤＸ−１０ｂに関する集団（ＰＯＰ）薬物動態学的（ＰＫ）パラメータおよび共変量因子（ＣＯＶ）の効果を分析した。ＰＯＰＰＫデータを３つの研究からプールした：１）１５０〜３２５ｍｇ／ｍ２の静脈内（ＩＶ）用量を用いた非小細胞肺癌患者における第１期研究、２）８０〜１４０ｍｇ／ｍ２のＩＶ用量にタキサンを加えて用いた進行癌患者における第１期研究、および３）３０ｍｇ／ｍ２／週ＩＶの用量での再発性または難治性ＰＴＣＬ患者における第２期研究。一次条件付評価を伴う非線形混合効果モデルを用いて、各ジアステレオマーに関するＰＯＰ  ＰＫデータを分析した。モデル定量化には、ノンパラメトリック・ブートストラップおよび予測チェックが含まれた。
結果：ＰＯＰ  ＰＫデータベースは１５４人の患者（９４人の男性および６０人の女性、年齢２１〜８５歳、体重４２．９〜１５８ｋｇ）で構成され、１１７６のＰＤＸ−１０ａおよび１１７３のＰＤＸ−１０ｂ血漿濃度に寄与した。ＰＤＸ−１０ａおよびＰＤＸ−１０ｂに関するＰＯＰ  ＰＫデータを、クリアランス（ＣＬ）、コンパートメント（ＣＭＴ）１、２、および３に関する体積、ならびに第一および第二ＣＭＴ間ＣＬとしてパラメータ化した、３ＣＭＴモデルによって記載し、ＰＤＸ−１０ａに関するパラメータ概算値は、それぞれ：３５．０Ｌ／時間、１１．０Ｌ、９．７１Ｌ、５０．６Ｌ、６．９７Ｌ／時間、１．４３Ｌ／時間であり、そしてＰＤＸ−１０ｂに関しては：１７．２Ｌ／時間、８．８９Ｌ、６．７９Ｌ、１２．６５Ｌ、５．５３Ｌ／時間、および０．６０１Ｌ／時間であった。ＰＤＸ−１０ａおよびＰＤＸ−１０ｂ  ＣＬは、クレアチニン・クリアランスにおいて、１ｍＬ／分あたり、０．１３および０．０８Ｌ／時間減少した。他のＣＯＶ知見は、ＰＤＸ−１０ａおよびＰＤＸ−１０ｂの両方に関して類似であった。
【００９０】
実施例５：固形およびヘム癌細胞株におけるｉｎ  ｖｉｔｒｏ細胞傷害性アッセイ
[0085]実施例３に概略する方法にしたがって、さらなる癌細胞株を試験してもよい。Ｔ細胞リンパ腫、多発性骨髄腫、血液系腫瘍、頭部および頸部の癌、胃腸管の癌、卵巣癌、ならびに骨肉腫に関する癌細胞株をＰＤＸ−１０ａおよびＰＤＸ−１０ｂで試験する。それぞれのジアステレオマーは示差的活性を有し、ある細胞株では、ＰＤＸ−１０ａがラセミ体ＰＤＸおよび／またはＰＤＸ−１０ｂと比較して増加した活性を示し、他の細胞株では、ＰＤＸ−１０ｂがラセミ体ＰＤＸおよび／またはＰＤＸ−１０ａと比較して増加した活性を示す。
【００９１】
実施例６：固形腫瘍およびリンパ腫を用いたｉｎ  ｖｉｖｏ異種移植片モデル
[0086]ヌード雌マウスの右脇腹に、実施例５に論じるように適切な腫瘍細胞を皮下接種して、異種移植片を確立する。腫瘍体積および体重を週２回監視する。ひとたび確立された腫瘍が７５〜１５０ｍｍ３に達したら、マウスを、対照、ラセミ体ＰＤＸ、ＰＤＸ−１０ａ、またはＰＤＸ−１０ｂの治療群にランダム化する。ＩＰ注射によって治療を投与する。リン酸緩衝生理食塩水を対照ビヒクルとして投与する。それぞれのジアステレオマーは、示差活性を有する可能性もあり、ある外植片では、ＰＤＸ−１０ａがラセミ体ＰＤＸおよび／またはＰＤＸ−１０ｂと比較して増加した活性を示し、他の外植片では、ＰＤＸ−１０ｂがラセミ体ＰＤＸおよび／またはＰＤＸ−１０ａと比較して増加した活性を示す。
【００９２】
実施例７：哺乳動物におけるラセミ体ＰＤＸ、ＰＤＸ−１０ａおよびＰＤＸ−１０ｂの抗関節炎効果
[0087]本実施例は、哺乳動物における本発明のジアステレオマー化合物の抗関節炎活性を例示する。該研究は、Ｎａｔｕｒｅ  ２８３，  ６６６−６６８（１８９０）に記載される方法にしたがった、ＩＩ型コラーゲンでの抗原性曝露に対する反応を生じる、炎症性疾患のマウスモデルを用いる。完全フロイントアジュバント中で調製されたウシ胎児ＩＩ型コラーゲン（１ｍｇ／ｍｌ）の懸濁物で、ＤＢＡ／１マウスを免疫する。マウスあたり総量０．１ｍｇのＩＩ型コラーゲンを与えるコラーゲン・エマルジョン０．１ｍｌを用いて、一次注射を投与する。動物には、第２１日、腹腔内注射によって、ＩＩ型コラーゲン（０．０１Ｍ酢酸中の１００μｇ）のブースター注射を投与する。
【００９３】
[0088]ラセミ体ＰＤＸ、ＰＤＸ−１０ａおよびＰＤＸ−１０ｂのｉｎ  ｖｉｖｏ試験によって、薬剤投与を抗原（ＩＩ型コラーゲン）投与の２日前に開始する予防措置を用いると、最初のそして唯一のＩＩ型コラーゲンでのブーストの２日前である第１９日に薬剤を開始するよりもより有効であることが示されうる。このモデルにおいて、未処置陽性対照動物では、第４４日に注射された動物の９０％〜１００％の範囲で関節炎が発生しうる。炎症の度合いに対するメトトレキセート、ならびに試験化合物ラセミ体ＰＤＸ、ＰＤＸ−１０ａおよびＰＤＸ−１０ｂの効果を、視覚的観察によって、そしてノギス測定を用いた足浮腫の直接分析によって決定する。疾患を有する動物数の減少および足浮腫によって測定されるような炎症の度合いの減少の間に直接相関が存在しうる。それぞれのジアステレオマーは示差的活性を有し、関節炎のある構成要素／側面では、ＰＤＸ−１０ａがラセミ体ＰＤＸおよび／またはＰＤＸ−１０ｂと比較して増加した活性を示し、そして関節炎の他の構成要素／側面では、ＰＤＸ−１０ｂがラセミ体ＰＤＸおよび／またはＰＤＸ−１０ａと比較して増加した活性を示す。
【００９４】
[0089]メトトレキセートの抗炎症活性は、他の化合物の抗炎症活性の決定に関して有効な比較標準として認められている。それぞれのジアステレオマーは示差的活性を有する可能性もあり、関節炎のある構成要素／側面では、ＰＤＸ−１０ａがラセミ体ＰＤＸおよび／またはＰＤＸ−１０ｂと比較して増加した活性を示す可能性もあり、そして関節炎の他の構成要素／側面では、ＰＤＸ−１０ｂがラセミ体ＰＤＸおよび／またはＰＤＸ−１０ａと比較して増加した活性を示す。
【００９５】
[0090]実施例８：哺乳動物におけるラセミ体ＰＤＸ、ＰＤＸ−１０ａおよびＰＤＸ−１０ｂの抗関節炎効果
哺乳動物
[0091]ＩＩ型コラーゲン関節炎を１７日間発展させている雌Ｌｅｗｉｓラットを、生理食塩水ビヒクル（ｑｄ）で、メトトレキセート（ＭＴＸ、０．０７５、０．０５、または０．０２５ｍｇ／ｋｇ）、またはラセミ体ＰＤＸ、ＰＤＸ−１０ａおよびＰＤＸ−１０ｂ（０．０７５、０．０５、または０．０２５ｍｇ／ｋｇ）で、研究第０〜１６日、１日１回（ｑｄ）、経口または静脈内投与で処置する。動物を研究第１７日に屠殺する。有効性評価は、曲線下面積（ＡＵＣ）として表される足首ノギス測定、および最終後足重量、ならびに足首および膝の組織病理学的評価に基づく。すべての動物は研究終了時まで生き延びる。
【００９６】
[0092]特定の用量のＭＴＸ、ラセミ体ＰＤＸ、ＰＤＸ−１０ａおよびＰＤＸ−１０ｂで、ｐ．ｏ．、ｑ．ｄ．処置されたラットにおいて、足首直径の阻害が見られうる。足首直径ＡＵＣの阻害は、特定の用量のＭＴＸ、ラセミ体ＰＤＸ、ＰＤＸ−１０ａおよびＰＤＸ−１０ｂで、ｐｏ、ｑｄ処置されたラットに関して有意でありうる。最終足重量の阻害は、ＭＴＸ、ラセミ体ＰＤＸ、ＰＤＸ−１０ａおよびＰＤＸ−１０ｂで、ｐｏ、ｑｄ処置されたラットに関して有意でありうる。メトトレキセートの抗炎症活性は、他の化合物の抗炎症活性の決定のために有効な比較標準として認められている。それぞれのジアステレオマーは示差的活性を有する可能性もあり、関節炎のある構成要素／側面では、ＰＤＸ−１０ａがラセミ体ＰＤＸおよび／またはＰＤＸ−１０ｂと比較して増加した活性を示し、そして関節炎の他の構成要素／側面では、ＰＤＸ−１０ｂがラセミ体ＰＤＸおよび／またはＰＤＸ−１０ａと比較して増加した活性を示す。
【００９７】
[0093]実施例９：経口配合物−−錠剤
[0094]各錠剤は、実質的に純粋なＰＤＸ−１０ａまたはＰＤＸ−１０ｂの表示する量に同等な量で、ＰＤＸ−１０ａおよび／またはＰＤＸ−１０ｂナトリウム（活性成分）を含有し、そして以下の不活性成分：無水ラクトース、クロスポビドン、ヒドロキシプロピルメチルセルロース、ステアリン酸マグネシウム、微結晶性セルロース、ポリエチレングリコール、ポリソルベート８０、あらかじめゼラチン処理したデンプン、炭酸ナトリウム一水和物、タルクおよび二酸化チタンを含有する。錠剤あたりの活性成分の量は、２．５ｍｇ、５ｍｇ、７．５ｍｇ、または１０ｍｇである。
【００９８】
[0095]均一なブレンドが形成されるまで、活性成分を他の成分とブレンドする。１またはそれより多い他の成分を水とブレンドしてペーストを形成する。これを次いで、均一な顆粒が得られるまで混合する。１／４”ステンレススチールスクリーンを用いて、適切な製粉装置を通じて、顆粒をスクリーニングする。適切な乾燥オーブン中で、製粉された顆粒を乾燥させ、そして再び、適切な製粉装置を通じて製粉する。生じた混合物を所望の形状、濃さ、硬さおよび崩壊の錠剤に圧縮する。
【００９９】
[0096]本発明の前述の考察は、例示および説明の目的で提示されている。前記は、本発明を本明細書に開示する単数または複数の型に限定することを意図されない。本発明の説明は、１またはそれより多い態様、ならびに特定の変型および修飾の説明を含んできているが、例えば本開示を理解した後、当業者の技術および知識の範囲内でありうるような、他の変型および修飾が、本発明の範囲内である。請求するものの代替、交換可能および／または同等の構造、機能、範囲または工程を含み、こうした代替、交換可能および／または同等の構造、機能、範囲または工程が本明細書に開示されているかどうかにかかわらず、そしていかなる特許可能主題に公的に捧げることも意図せず、認可された度合いまでの代替態様を含む権利を得るよう意図される。
【図１】
2013518879.tif 000007
【手続補正書】
【提出日】平成25年3月1日(2013.3.1)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
１０−プロパルギル−１０−デアザアミノプテリンの実質的に純粋なジアステレオマー、またはその塩を含む化合物であって、ジアステレオマーが、（２Ｓ）−２−［［４−［（１Ｓ）−１−［（２，４−ジアミノプテリジン−６−イル）メチル］ブト−３−イニル］ベンゾイル］アミノ］ペンタンジオン酸または（２Ｓ）−２−［［４−［（１Ｒ）−１−［（２，４−ジアミノプテリジン−６−イル）メチル］ブト−３−イニル］ベンゾイル］アミノ］ペンタンジオン酸である、前記化合物。
【請求項２】
実質的に純粋なジアステレオマーが、（２Ｓ）−２−［［４−［（１Ｓ）−１−［（２，４−ジアミノプテリジン−６−イル）メチル］ブト−３−イニル］ベンゾイル］アミノ］ペンタンジオン酸またはその塩である、請求項１記載の化合物。
【請求項３】
実質的に純粋なジアステレオマーが、（２Ｓ）−２−［［４−［（１Ｒ）−１−［（２，４−ジアミノプテリジン−６−イル）メチル］ブト−３−イニル］ベンゾイル］アミノ］ペンタンジオン酸またはその塩である、請求項１記載の化合物。
【請求項４】
塩が塩酸塩である、請求項１〜３のいずれか１項記載の化合物。
【請求項５】
実質的に純粋な（２Ｓ）−２−［［４−［（１Ｓ）−１−［（２，４−ジアミノプテリジン−６−イル）メチル］ブト−３−イニル］ベンゾイル］アミノ］ペンタンジオン酸またはその塩、あるいは実質的に純粋な（２Ｓ）−２−［［４−［（１Ｒ）−１−［（２，４−ジアミノプテリジン−６−イル）メチル］ブト−３−イニル］ベンゾイル］アミノ］ペンタンジオン酸またはその塩、および薬学的に許容されうるキャリアーを含む、薬学的組成物。
【請求項６】
薬学的に有効な量の実質的に純粋な（２Ｓ）−２−［［４−［（１Ｒ）−１−［（２，４−ジアミノプテリジン−６−イル）メチル］ブト−３−イニル］ベンゾイル］アミノ］ペンタンジオン酸またはその塩、あるいは実質的に純粋な（２Ｓ）−２−［［４−［（１Ｓ）−１−［（２，４−ジアミノプテリジン−６−イル）メチル］ブト−３−イニル］ベンゾイル］アミノ］ペンタンジオン酸またはその塩、および薬学的に許容されうるキャリアーを含む、薬学的組成物。
【請求項７】
癌を治療する方法において使用するための、請求項５または６記載の薬学的組成物。
【請求項８】
癌が、前立腺癌、Ｔ細胞リンパ腫、乳癌、肺癌、血液系腫瘍、頭部および頸部の癌、胃腸管の癌、卵巣癌、および骨肉腫からなる群より選択される、請求項７記載の薬学的組成物。
【請求項９】
炎症性障害を治療する際に使用するための、請求項５または６記載の薬学的組成物。
【請求項１０】
炎症性障害が関節リウマチである、請求項９記載の薬学的組成物。
【請求項１１】
経口投与用に配合されている、請求項５または６記載の薬学的組成物。
【請求項１２】
静脈内投与用に配合されている、請求項５または６記載の薬学的組成物。
【請求項１３】
療法的に有効な量の１０−プロパルギル−１０−デアザアミノプテリンの実質的に純粋なジアステレオマーまたはその塩を含む、癌を治療するための薬学的組成物であって、前記ジアステレオマーが、（２Ｓ）−２−［［４−［（１Ｓ）−１−［（２，４−ジアミノプテリジン−６−イル）メチル］ブト−３−イニル］ベンゾイル］アミノ］ペンタンジオン酸または（２Ｓ）−２−［［４−［（１Ｒ）−１−［（２，４−ジアミノプテリジン−６−イル）メチル］ブト−３−イニル］ベンゾイル］アミノ］ペンタンジオン酸であり、前記薬学的組成物は前記治療が必要な哺乳動物に投与される、前記薬学的組成物。
【請求項１４】
癌が、前立腺癌、Ｔ細胞リンパ腫、乳癌、肺癌、血液系腫瘍、頭部および頸部の癌、胃腸管の癌、卵巣癌、および骨肉腫からなる群より選択される、請求項１３記載の薬学的組成物。
【請求項１５】
療法的に有効な量の１０−プロパルギル−１０−デアザアミノプテリンの実質的に純粋なジアステレオマーまたはその塩を含む、炎症を治療するための薬学的組成物であって、前記ジアステレオマーが、（２Ｓ）−２−［［４−［（１Ｓ）−１−［（２，４−ジアミノプテリジン−６−イル）メチル］ブト−３−イニル］ベンゾイル］アミノ］ペンタンジオン酸または（２Ｓ）−２−［［４−［（１Ｒ）−１−［（２，４−ジアミノプテリジン−６−イル）メチル］ブト−３−イニル］ベンゾイル］アミノ］ペンタンジオン酸であり、前記薬学的組成物は前記治療が必要な哺乳動物に投与される、前記薬学的組成物。
【請求項１６】
炎症性障害が関節リウマチである、請求項１５記載の薬学的組成物。
【請求項１７】
実質的に純粋なジアステレオマーが、１０−プロパルギル−１０−デアザアミノプテリンの総量の重量約９０％より多い量の（２Ｓ）−２−［［４−［（１Ｓ）−１−［（２，４−ジアミノプテリジン−６−イル）メチル］ブト−３−イニル］ベンゾイル］アミノ］ペンタンジオン酸である、請求項１３〜１６のいずれか１項記載の薬学的組成物。
【請求項１８】
実質的に純粋なジアステレオマーが、１０−プロパルギル−１０−デアザアミノプテリンの総量の重量約９０％より多い量の（２Ｓ）−２−［［４−［（１Ｒ）−１−［（２，４−ジアミノプテリジン−６−イル）メチル］ブト−３−イニル］ベンゾイル］アミノ］ペンタンジオン酸である、請求項１３〜１６のいずれか１項記載の薬学的組成物。
【請求項１９】
実質的に純粋なジアステレオマーが、（２Ｓ）−２−［［４−［（１Ｓ）−１−［（２，４−ジアミノプテリジン−６−イル）メチル］ブト−３−イニル］ベンゾイル］アミノ］ペンタンジオン酸またはその塩である、請求項１３〜１８のいずれか１項記載の薬学的組成物。
【請求項２０】
実質的に純粋なジアステレオマーが、（２Ｓ）−２−［［４−［（１Ｒ）−１−［（２，４−ジアミノプテリジン−６−イル）メチル］ブト−３−イニル］ベンゾイル］アミノ］ペンタンジオン酸またはその塩である、請求項１３〜１８のいずれか１項記載の薬学的組成物。
【請求項２１】
塩が塩酸塩である、請求項１３〜２０のいずれか１項記載の薬学的組成物。
【請求項２２】
前記薬学的組成物がさらに、実質的に純粋なジアステレオマーとともに薬学的に許容されうるキャリアーを含む、請求項１３〜２１のいずれか１項記載の薬学的組成物。
【請求項２３】
実質的に純粋なジアステレオマーが経口投与される、請求項１３〜２２のいずれか１項記載の薬学的組成物。
【請求項２４】
実質的に純粋なジアステレオマーが静脈内投与される、請求項１３〜２２のいずれか１項記載の薬学的組成物。
【請求項２５】
実質的に純粋なジアステレオマーが毎週投与される、請求項１３〜２４のいずれか１項記載の薬学的組成物。
【請求項２６】
実質的に純粋なジアステレオマーが、１回あたり３０ｍｇ／ｍ２の量で投与される、請求項２５記載の薬学的組成物。
【請求項２７】
実質的に純粋なジアステレオマーが、１回あたり１０〜１５０ｍｇ／ｍ２の量で投与される、請求項２５記載の薬学的組成物。
【請求項２８】
実質的に純粋なジアステレオマーが隔週で投与される、請求項２４記載の薬学的組成物。
【請求項２９】
実質的に純粋なジアステレオマーが、１回あたり１００〜２７５ｍｇ／ｍ２の量で投与される、請求項２８記載の薬学的組成物。
【請求項３０】
実質的に純粋なジアステレオマーが、１回あたり１０〜２７５ｍｇ／ｍ２の量で投与される、請求項２８記載の薬学的組成物。
【請求項３１】
実質的に純粋なジアステレオマーが、１またはそれより多い周期で投与され、各周期が、１回あたり３０〜１５０ｍｇ／ｍ２の量で１週間に１度、６週間投与を行い、その後、１週間の休薬を含む、請求項１３〜２４のいずれか１項記載の薬学的組成物。
【請求項３２】
葉酸およびビタミンＢ１２の補充をさらに含む、請求項１３〜３１のいずれか１項記載の薬学的組成物。
【請求項３３】
実質的に純粋なジアステレオマーが、１回あたり０．２５〜４ｍｇ／ｋｇの量で投与される、請求項１３〜３２のいずれか１項記載の薬学的組成物。
【請求項３４】
癌を治療するための薬学的組成物の製造における、請求項１〜４のいずれか１項記載の化合物の使用。
【請求項３５】
癌が、前立腺癌、Ｔ細胞リンパ腫、乳癌、肺癌、血液系腫瘍、頭部および頸部の癌、胃腸管の癌、卵巣癌、および骨肉腫からなる群より選択される、請求項３４記載の使用。
【請求項３６】
炎症性障害を治療するための薬学的組成物の製造における、請求項１〜４のいずれか１項記載の化合物の使用。
【請求項３７】
炎症性障害が関節リウマチである、請求項３６記載の使用。
【国際調査報告】
2013518879.tif 000008
2013518879.tif 000009