(57)【要約】【課題】認知障害の治療法を提供する。【解決手段】本発明は、認知障害、例えば、軽度認知機能障害などの治療法に関し、被験体、好ましくは患者の体内のホモシステイン濃度を下げることができる薬剤を使用することを含む。本発明は、そのような疾病の治療法に関し、該方法とは、ひとつもしくはそれ以上のビタミンＢ群、例えば、葉酸、ビタミンＢ６および／もしくはビタミンＢ１２、またはそれらの誘導体を投与することを含む。【選択図】  図１
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【特許請求の範囲】
【請求項１】
ホモシステイン（ｔＨｃｙ）濃度を低下させる少なくともひとつの薬剤を含む組成物であって、患者の軽度認知機能障害（ＭＣＩ）の治療に用いられることを特徴とする組成物。
【請求項２】
ホモシステイン（ｔＨｃｙ）濃度を低下させる少なくともひとつの薬剤を含む組成物であって、患者のＭＣＩの発症および／または進行を遅延させるために用いられることを特徴とする組成物。
【請求項３】
ホモシステイン（ｔＨｃｙ）濃度を低下させる少なくともひとつの薬剤を含む組成物であって、患者の認知機能の改善に用いられることを特徴とする組成物。
【請求項４】
ホモシステイン（ｔＨｃｙ）濃度を低下させる少なくともひとつの薬剤を含む組成物であって、ＭＣＩ患者の病状がアルツハイマー病へと進行することを遅延させる、または阻止するために用いられることを特徴とする組成物。
【請求項５】
ホモシステイン（ｔＨｃｙ）濃度を低下させる少なくともひとつの薬剤を含む組成物であって、患者の脳の萎縮速度を低下させるために使用することを特徴とする組成物。
【請求項６】
年齢が少なくとも６０才である患者に投与することを特徴とする請求項１から請求項５のうちの任意の請求項記載の組成物。
【請求項７】
患者の年齢が少なくとも７０才であることを特徴とする請求項６記載の組成物。
【請求項８】
第一のビタミンＢまたはその誘導体を含有することを特徴とする請求項１から請求項７の任意の請求項記載の組成物。
【請求項９】
第二のビタミンＢを追有する、または、第二のビタミンＢを含む第二の組成物と組み合わせて使用することを特徴とする請求項８記載の組成物。
【請求項１０】
第三のビタミンＢを追有する、または、第三のビタミンＢを含む第二の組成物と組み合わせて使用することを特徴とする請求項８または請求項９記載の組成物。
【請求項１１】
少なくとも３種類のビタミンＢを含有することを特徴とする請求項８から請求項１０のうちの任意の請求項記載の組成物。
【請求項１２】
第一のビタミンＢが、葉酸、ビタミンＢ６、ビタミンＢ１２およびそれらの誘導体から選択されることを特徴とする請求項８から請求項１１のうちのいずれかの請求項に記載の組成物。
【請求項１３】
第二のビタミンＢが、葉酸、ビタミンＢ６、ビタミンＢ１２およびそれらの誘導体から選択されることを特徴とする請求項９から請求項１２のうちのいずれかの請求項に記載の組成物。
【請求項１４】
第三のビタミンＢが、葉酸、ビタミンＢ６、ビタミンＢ１２およびそれらの誘導体から選択されることを特徴とする請求項１０から請求項１３のうちのいずれかの請求項に記載の組成物。
【請求項１５】
第一のビタミンＢ、第二のビタミンＢおよび第三のビタミンＢがそれぞれ独立して、葉酸（プテロイルモノグルタメート）、フォリルポリグルタメート類のうちのひとつもしくはそれ以上、葉酸分子もしくはフォリルポリグルタメート類分子内のプテリン部位のピラジン環が還元されてジヒドロフォレート類またはテトラヒドロフォレート類になる化合物、前出の全ての化合物の誘導体であって、Ｎ−５位もしくはＮ−１０位に多様な酸化レベルの１個の炭素ユニットを有するもの、または、それらのうちの２つもしくはそれ以上からなる組合せを含む群から選択されることを特徴とする請求項１０から請求項１４のうちのいずれかの請求項に記載の組成物。
【請求項１６】
前記第一、第二および第三のビタミンＢがそれぞれ独立して、ジヒドロフォレート、テトラヒドロフォレート、５−メチルテトラヒドロフォレート、５，１０−メチレンテトラヒドロフォレート、５，１０−メテニルテトラヒドロフォレート、５，１０−フォルミミノテトラヒドロフォレート、５−フォルミルテトラヒドロフォレート（ロイコボリン）および１０−フォルミルテトラヒドロフォレートから選択されることを特徴とする請求項１０から請求項１４のうちのいずれかの請求項に記載の組成物。
【請求項１７】
前記第一、第二および第三のビタミンＢを同時に、別々に、または順次投与することを含むことを特徴とする請求項１０から請求項１６のうちのいずれかの請求項記載の組成物。
【請求項１８】
葉酸、ビタミンＢ６およびビタミンＢ１２からなる組合せを含有することを特徴とする請求項１から請求項１７のうちのいずれかの請求項に記載の組成物。
【請求項１９】
前記薬剤がコリンおよびベタインから選択されることを特徴とする請求項１から請求項１７のいずれかの請求項に記載の組成物。
【請求項２０】
前記薬剤がベタインであることを特徴とする請求項１９に記載の組成物。
【請求項２１】
前記薬剤がコリンであることを特徴とする請求項１９に記載の組成物。
【請求項２２】
治療有効量のベタインおよび／またはコリンを含み、これに、少なくともひとつのビタミンＢを組み合わせるか、または、組み合わせるために使用することを特徴とする請求項１９から請求項２１のいずれかの請求項に記載の組成物。
【請求項２３】
ベタインおよび／またはコリンを含み、これに、葉酸、ビタミンＢ６、ビタミンＢ１２を組み合わせるか、または、組み合わせるために使用することを特徴とする請求項２２に記載の組成物。
【請求項２４】
患者の注意力を回復させるために使用することを特徴とする請求項１から請求項２３のうちのいずれかの請求項に記載の組成物。
【請求項２５】
患者の実行機能を改善するために使用することを特徴とする請求項１から請求項２４のうちのいずれかの請求項に記載の組成物。
【請求項２６】
患者の反応時間を短縮するために使用することを特徴とする請求項１から請求項２５のうちのいずれかの請求項に記載の組成物。
【請求項２７】
患者の学習能力または記憶力を向上させるために使用することを特徴とする請求項１から請求項２６のうちのいずれかの請求項に記載の組成物。
【請求項２８】
患者体内のｔＨｃｙのベースライン濃度が基準範囲の上四分の三位置であることを特徴とする請求項１から請求項２７のうちのいずれかの請求項に記載の組成物。
【請求項２９】
薬剤組成物であって、ひとつもしくはそれ以上の薬剤上許容される賦形剤を追有することを特徴とする請求項１から請求項２８のうちの任意の請求項記載の組成物。
【請求項３０】
経口投与用であることを特徴とする請求項１から請求項２９のうちのいずれかの請求項に記載の組成物。
【請求項３１】
固体剤形であることを特徴とする請求項３０に記載の組成物。
【請求項３２】
葉酸またはその誘導体を含有し、それらの含有量が約０．１ｍｇ〜約１０ｍｇであることを特徴とする請求項１から請求項３１のうちのいずれかの請求項に記載の組成物。
【請求項３３】
前記葉酸またはその誘導体の含有量が約０．５ｍｇ〜約１．５ｍｇであることを特徴とする請求項３２に記載の組成物。
【請求項３４】
前記葉酸またはその誘導体の含有量が約０．８ｍｇであることを特徴とする請求項３３に記載の組成物。
【請求項３５】
ビタミンＢ１２またはその誘導体を含有し、それらの含有量が約０．０１ｍｇ〜約２ｍｇであることを特徴とする請求項１から請求項３４のうちのいずれかの請求項に記載の組成物。
【請求項３６】
前記ビタミンＢ１２またはその誘導体の含有量が約０．４ｍｇ〜約１．０ｍｇであることを特徴とする請求項３５に記載の組成物。
【請求項３７】
前記ビタミンＢ１２またはその誘導体の含有量が約０．５ｍｇであることを特徴とする請求項３６に記載の組成物。
【請求項３８】
前記ビタミンＢ６またはその誘導体を含有し、それらの含有量が約１ｍｇ〜約４０ｍｇであることを特徴とする請求項１から請求項３７のうちのいずれか請求項に記載の組成物。
【請求項３９】
前記ビタミンＢ６またはその誘導体の含有量が約１５ｍｇ〜約３０ｍｇであることを特徴とする請求項３８に記載の組成物。
【請求項４０】
前記ビタミンＢ６またはその誘導体の含有量が約２０ｍｇであることを特徴とする請求項３９に記載の組成物。
【請求項４１】
投与頻度が一日１回であることを特徴とする請求項１から請求項４０のうちのいずれかの請求項に記載の組成物。
【請求項４２】
少なくとも２種類のビタミンＢ群を含有する配合剤であって、患者の軽度認知機能障害（ＭＣＩ）の治療に使用することを特徴とする配合剤。
【請求項４３】
少なくとも２つのビタミンＢ群を含有する配合剤であって、ＭＣＩの発症および／または進行を遅延させるために使用することを特徴とする配合剤。
【請求項４４】
少なくとも２種類のビタミンＢを含有する配合剤であって、患者の認知機能改善のために使用することを特徴とする配合剤。
【請求項４５】
少なくとも２種類のビタミンＢを含有する配合剤であって、ＭＣＩ患者の病状がアルツハイマー病へと進行することを遅延または阻止するために使用することを特徴とする配合剤。
【請求項４６】
３種類のビタミンＢを含有していることを特徴とする請求項４２から請求項４５のいずれかの請求項に記載の配合剤。
【請求項４７】
前記３種類のビタミンＢが、ビタミンＢ１２もしくはその誘導体、ビタミンＢ６もしくはその誘導体、または葉酸もしくはその誘導体から選択されることを特徴とする請求項４６記載の配合剤。
【請求項４８】
前記ビタミンＢ群が、請求項１５、請求項１６および請求項３４から請求項４０に記載しているひとつもしくはそれ以上の特徴を追有している、または、それらとの許容される組合せを追有していることを特徴とする請求項４７記載の配合剤。
【請求項４９】
患者の軽度認知機能障害（ＭＣＩ）を治療する方法であって、患者体内のホモシステイン濃度を低下させる作用を有する少なくともひとつの薬剤を患者に治療有効量で投与することを含むことを特徴とする方法。
【請求項５０】
患者のＭＣＩの発症および／または進行を遅延させる方法であって、患者体内のホモシステイン濃度を低下させる作用を有する少なくともひとつの薬剤を患者に治療有効量で投与することを含むことを特徴とする方法。
【請求項５１】
ＭＣＩ患者の認知機能を改善する方法であって、患者体内のホモシステイン濃度を低下させる作用を有する少なくともひとつの薬剤を患者に治療有効量で投与することを含むことを特徴とする方法。
【請求項５２】
ＭＣＩ患者のアルツハイマー病への進行を遅延させる、または阻止する方法であって、患者体内のホモシステイン濃度を低下させる作用を有する少なくともひとつの薬剤を患者に治療有効量で投与することを含むことを特徴とする方法。
【請求項５３】
患者の脳の萎縮率を低下させる方法であって、患者体内のホモシステイン濃度を低下させる作用を有する少なくともひとつの薬剤を患者に治療有効量で投与することを含むことを特徴とする方法。
【請求項５４】
患者の年齢が少なくとも６０才であることを特徴とする請求項４９から請求項５３のうちの任意の請求項記載の方法。
【請求項５５】
患者の年齢が少なくとも７０才であることを特徴とする請求項５４記載の方法。
【請求項５６】
患者に第一のビタミンＢまたはその誘導体を投与することを特徴とする請求項４９から請求項５５のうちのいずれかの請求項に記載の方法。
【請求項５７】
患者に、治療有効量の第一のビタミンＢおよび治療有効量の第二のビタミンＢを投与することを含むことを特徴とする、請求項４９から請求項５６のうちのいずれかの請求項に記載の方法。
【請求項５８】
患者に、治療有効量の第一のビタミンＢおよび第二のビタミンＢ、ならびに治療有効量の第三のビタミンＢを投与すること含むことを特徴とする請求項４９から請求項５７のうちのいずれかの請求項に記載の方法。
【請求項５９】
患者に少なくとも３種類のビタミンＢを投与することを特徴とする請求項４９から請求項５８のうちのいずれかの請求項に記載の方法。
【請求項６０】
第一のビタミンＢが、葉酸、ビタミンＢ６、ビタミンＢ１２およびそれらの誘導体から選択されることを特徴とする請求項５６から請求項５９のうちのいずれかの請求項に記載の方法。
【請求項６１】
第二のビタミンＢが、葉酸、ビタミンＢ６、ビタミンＢ１２およびそれらの誘導体から選択されることを特徴とする請求項５７から請求項５９のうちのいずれかの請求項に記載の方法。
【請求項６２】
第三のビタミンＢが、葉酸、ビタミンＢ６、ビタミンＢ１２およびそれらの誘導体から選択されることを特徴とする請求項５８から請求項６１のうちのいずれかの請求項に記載の方法。
【請求項６３】
第一のビタミンＢ、第二のビタミンＢおよび第三のビタミンＢがそれぞれ独立して、葉酸（プテロイルモノグルタメート）、フォリルポリグルタメート類のうちのひとつもしくはそれ以上、葉酸分子もしくはフォリルポリグルタメート類分子内のプテリン部位のピラジン環が還元されてジヒドロフォレート類またはテトラヒドロフォレート類になる化合物、前出の全ての化合物の誘導体であって、Ｎ−５位またはＮ−１０位に多様な酸化レベルの１個の炭素ユニットを有するもの、または、それらのうちの２つもしくはそれ以上からなる組合せを含む群から選択されることを特徴とする請求項５８から請求項６２のうちのいずれかの請求項に記載の方法。
【請求項６４】
前記第一、第二および第三のビタミンＢがそれぞれ独立して、ジヒドロフォレート、テトラヒドロフォレート、５−メチルテトラヒドロフォレート、５，１０−メチレンテトラヒドロフォレート、５，１０−メテニルテトラヒドロフォレート、５，１０−フォルミミノテトラヒドロフォレート、５−フォルミルテトラヒドロフォレート（ロイコボリン）および１０−フォルミルテトラヒドロフォレートから選択されることを特徴とする請求項５８から請求項６３のうちのいずれかの請求項に記載の方法。
【請求項６５】
前記第一、第二および第三のビタミンＢを同時に、別々に、または順次投与することを含むことを特徴とする請求項５８から請求項６４のうちのいずれかの請求項に記載の方法。
【請求項６６】
葉酸、ビタミンＢ６およびビタミンＢ１２の配合剤を投与することを含むことを特徴とする請求項４９から請求項５６のいずれかの請求項に記載の方法。
【請求項６７】
前記薬剤がコリンおよびベタインから選択されることを特徴とする請求項４９から請求項５５のいずれかの請求項に記載の方法。
【請求項６８】
前記薬剤がベタインであることを特徴とする請求項６７記載の方法。
【請求項６９】
前記薬剤がコリンであることを特徴とする請求項６７記載の方法。
【請求項７０】
治療有効量のベタインおよび／またはコリンを少なくとも１種類のビタミンＢと組み合わせて投与することを含むことを特徴とする請求項６７から請求項６９のうちのいずれかの請求項に記載の方法。
【請求項７１】
治療有効量のベタインおよび／またはコリンを葉酸、ビタミンＢ６、ビタミンＢ１２と組み合わせて投与することを含むことを特徴とする請求項７０の方法。
【請求項７２】
少なくともひとつの薬剤を投与した後に、患者の注意力が向上することを特徴とする請求項４９から請求項７１のうちのいずれかの請求項に記載の方法。
【請求項７３】
少なくともひとつの薬剤を投与した後に、患者の実行機能が改善することを特徴とする請求項４９から請求項７２のうちのいずれかの請求項に記載の方法。
【請求項７４】
少なくともひとつの薬剤を投与した後に、患者の反応時間が短縮することを特徴とする請求項４９から請求項７３のうちのいずれかの請求項に記載の方法。
【請求項７５】
少なくともひとつの薬剤を投与した後に、患者の学習能力または記憶力が向上することを特徴とする請求項４９から請求項７４のうちのいずれかの請求項に記載の方法。
【請求項７６】
患者体内のｔＨｃｙのベースライン濃度が９．５μｍｏｌ／Ｌ以上であることを特徴とする請求項４９から請求項７５のうちのいずれかの請求項に記載の方法。
【請求項７７】
葉酸またはそれらの誘導体の含有量が約０．１ｍｇ〜１０ｍｇであるような剤形を患者に投与することを含むことを特徴とする、請求項４９から請求項５６のうちのいずれかの請求項に記載の方法。
【請求項７８】
葉酸またはその誘導体の含有量が約０．５ｍｇ〜１．５ｍｇである剤形で患者に投与することを含むことを特徴とする請求項７７記載の方法。
【請求項７９】
葉酸またはその誘導体の含有量が約０．８ｍｇである剤形で患者に投与することを含むことを特徴とする請求項７８記載の方法。
【請求項８０】
ビタミンＢ１２またはその誘導体の含有量が約０．０１ｍｇ〜２ｍｇである剤形で患者に投与することを含むことを特徴とする、請求項４９から請求項５６、または、請求項７７から請求項７９のうちの任意の請求項記載の方法。
【請求項８１】
ビタミンＢ１２またはその誘導体の含有量が約０．４ｍｇ〜１．０ｍｇである剤形で患者に投与することを含むことを特徴とする、請求項８０記載の方法。
【請求項８２】
ビタミンＢ１２またはその誘導体の含有量が約０．５ｍｇである剤形で患者に投与することを含むことを特徴とする請求項８１記載の方法。
【請求項８３】
ビタミンＢ６またはその誘導体の含有量が約１ｍｇ〜４０ｍｇである剤形で患者に投与することを含むことを特徴とする、請求項４９から請求項５６、または請求項７７から請求項８２のうちのいずれかの請求項に記載の方法。
【請求項８４】
ビタミンＢ６またはその誘導体の含有量が約１５ｍｇ〜３０ｍｇである剤形で患者に投与することを含むことを特徴とする、請求項８３記載の方法。
【請求項８５】
ビタミンＢ６またはその誘導体の含有量が約２０ｍｇである剤形で患者に投与することを含むことを特徴とする請求項８４記載の方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、一般的には、日常生活に重大な影響を及ぼさない程度の認知障害と特徴づけられる軽度認知機能障害（Mild Cognitive Impairment：ＭＣＩ）などの認知障害の治療に関する。本発明は、ＭＣＩおよび／またはその他の型の認知障害を治療し、および／または進行を遅延させることを目的として、少なくとも一部においては、１種類以上のビタミンＢまたはその他の治療薬を使用して血漿中のホモシステイン総濃度を低下させることに関する。
【背景技術】
【０００２】
認知能力は、加齢の正常な成り行きとして低下する。さらに、高齢者のうちのかなりの人は、正常な加齢状態よりも極度に認知能力が低下する。軽度認知機能障害（ＭＣＩ）は、痴呆を伴わない程度の認知障害であり、日常生活における活動には支障がない。ＭＣＩは、アルツハイマー病の前駆症状と考えられている（デ・カーリ（De Carli）、２００３年；ペーターセン（Ｐｅｔｅｒｓｅｎ）ら、２００９年；ペーターセン（Petersen）ら、１９９９年）。ＭＣＩの有病率は、７０歳以上では１４〜１８％であることから（ペーターセン（Ｐｅｔｅｒｓｅｎ）ら、２００９年、プラスマン（Ｐｌａｓｓｍａｎ）ら、２００８年）、米国では約５００万人、ヨーロッパ諸国では１４００万人の人々がこの状態に苦しんでいることがわかる。ＭＣＩ患者の約半数は、５年以内にアルツハイマー病または別の型の認知症に移行することから（デ・カーリ（Ｄｅ  Ｃａｒｌｉ）、２００３年）、この転換を遅延または阻止するような治療法の確立が希求されている。これまでのところ、ＭＣＩに対する臨床試験は成功しておらず、現時点では、適切な治療法はない。
【０００３】
認識能力に関して正常な高齢者の脳は、顕著な進行性萎縮がみられ（レスニック（Ｒｅｓｎｉｃｋ）ら、２００３年）、脳萎縮の速度（割合）がより大きいことが、正常な加齢状態からアルツハイマー病への転換と関連している（ブラッドレー（Ｂｒａｄｌｅｙ）ら、２００２年；フォックス（Ｆｏｘ）ら、１９９９年；ジャック（Ｊａｃｋ）ら、２００４年；スミス（Ｓｍｉｔｈ）、２００２年）。ＭＣＩにおいては、中間的な萎縮速度を示しているものが見出されている（カールソン（Ｃａｒｌｓｏｎ）ら、２００８年；ジャック（Ｊａｃｋ）ら、２００５年；キリアニー（Ｋｉｌｌｉａｎｙ）ら、２０００年；リース（Ｒｉｅｓ）ら、２００８年；リサッシャー（Ｒｉｓａｃｈｅｒ）ら、２００９年；スルイマー（Ｓｌｕｉｍｅｒ）ら、２００８年）。アルツハイマー病へと転換したＭＣＩ患者においては、脳萎縮の進行速度がより速いことから（ジャック（Ｊａｃｋ）ら、２００４年）、萎縮の速度を規定している因子を突き止めることが重要である。つまり、萎縮の速度を抑制することによってアルツハイマー病への転換を遅らせることができると考えられるからである。そのような因子のうちのひとつが、血漿中の総ホモシステイン（total homocysteine：ｔＨｃｙ）の濃度の上昇と見受けられる。多くの横断的で有望な研究において、ｔＨｃｙ濃度の穏やかな上昇は、アルツハイマー病の顕著な状態である痴呆症になるリスクが高いという関係性が示されている（クラーケ（Ｃｌａｒｋｅ）ら、１９９８年；マクカドン（ＭｃＣａｄｄｏｎ）ら、１９９８年；セシャドリ（Ｓｅｓｈａｄｒｉ）ら、２００６年；スミス（Ｓｍｉｔｈ）、２００８年；ジルバースタイン（Ｚｙｌｂｅｒｓｔｅｉｎ）ら、２００９年）。ｔＨｃｙ濃度の上昇は、脳の局所的および全体的な萎縮にも関係しており、これは、アルツハイマー病患者のみならず（クラーケ（Ｃｌａｒｋｅ）ら、１９９８年）、正常な高齢者においても見られることである（デン・イェイヤー（ｄｅｎ Ｊｅｉｊｅｒ）ら、２００３年ａ；サハデフ（Ｓａｃｈｄｅｖ）ら、２００２年；セシャドリ（Ｓｅｓｈａｄｒｉ）ら、２００８年；ウィリアムズ（Ｗｉｌｌｉａｍｓ）ら、２００２年；ヤン（Ｙａｎｇ）ら、２００７年）。このようなことから、患者の脳の萎縮を遅延させてＭＣＩを治療する新規な治療法の確立が求められており、ｔＨｃｙ濃度を低下させることが１つの可能な手段となり得る。
【０００４】
ＭＣＩとアルツハイマー病とを関連づける報告があるにも拘わらず、アルツハイマー病の治療法として公認されている治療がＭＣＩ患者に効果的であることは必ずしも追跡されていない。例えば、アルツハイマー病治療薬であるガランタミンがＭＣＩの治療薬として使用できるか否かについての臨床試験は行われてきた。これらの臨床試験では、ガランタミンは、機能改善またはアルツハイマー病への移行阻止に関して顕著な効果を示さなかった。しかしながら、開発者らは、プラセボ投与群と比較して、ガランタミン投与群では、非常に多数の死亡者が出たことを特記している（ウィンブラッド（Ｗｉｎｂｌａｄ）、Ｂ．，ガウティエール（Ｇａｕｔｈｉｅｒ）、Ｓ．，シント（Ｓｃｉｎｔｏ）、Ｌ．，フェルドマン（Ｆｅｌｄｍａｎ）、Ｈ．，ウィルコック（Ｗｉｌｃｏｃｋ）、ＧＫら、２００８年、軽度認知機能障害患者におけるガランタミンの安全性および効果（Ｓａｆｅｔｙ  ａｎｄ  ｅｆｆｉｃａｃｙ  ｏｆ  ｇａｌａｎｔａｍｉｎｅ  ｉｎ  ｓｕｂｊｅｃｔｓ  ｗｉｔｈ  ｍｉｌｄ  ａｎｄ  ｃｏｇｎｉｔｉｖｅ  ｉｍｐａｉｒｍｅｎｔ）、Ｎｅｕｒｏｌｏｇｙ  ７０：２０２４−２０３５）。
【０００５】
臨床試験は、リバスチグミン（イクセロン（登録商標））についても、ＭＣＩからアルツハイマー病への移行を遅延させるか否かを判断する目的で実施されている。４年以上にわたる試験では、アルツハイマー病への進行率に関しても、認知機能に関しても、リバスチグミンによる顕著な効果は観察されなかった（フェルドマン（Ｆｅｌｄｍａｎ）、ＨＨ．，フェリス（Ｆｅｒｒｉｓ）、Ｓ．，ウィンブラッド（Ｗｉｎｂｌａｄ）、Ｂ．，スフィカス（Ｓｆｉｋａｓ）、Ｎ．，マンシオン（Ｍａｎｃｉｏｎｅ）、Ｌ．ら、２００７年、軽度認知機能障害からアルツハイマー病と診断されるまでの期間の延長に対するリバスチグミンの効果：ＩｎＤＤＥｘ試験（Ｅｆｆｅｃｔ  ｏｆ  ｒｉｖａｓｔｉｇｍｉｎｅ  ｏｎ  ｄｅｌａｙ  ｔｏ  ｄｉａｇｎｏｓｉｓ  ｏｆ  Ａｌｚｈｅｉｍｅｒ‘ｓ  ｄｉｓｅａｓｅ  ｆｒｏｍ  ｍｉｌｄ  ｃｏｇｎｉｔｉｖｅ  ｉｍｐａｉｒｍｅｎｔ：  ｔｈｅ  ＩｎＤＤＥｘ ｓｔｕｄｙ）：Ｌａｎｃｅｔ  Ｎｅｕｒｏｌ  ６：５０１−５１２）。
【０００６】
従って、臨床試験からは、アルツハイマー病薬として公認されている薬剤は、ＭＣＩ、またはＭＣＩからアルツハイマー病への転換に関して、必ずしも治療効果があるわけではないことが示された。
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００７】
最も広い態様に従えば、本発明は、患者体内のホモシステイン（ｔＨｃｙ）濃度を低下させる薬剤を投与することによってアルツハイマー病以外の認知障害の治療に関する。ひとつの態様として、該薬剤は、１種類以上のビタミンＢ群を含有する。本発明の実施形態は、患者の認知障害、例えば、軽度認知機能障害（ＭＣＩ）などの治療に使用できる。
【課題を解決するための手段】
【０００８】
本発明に従えば、軽度認知機能障害（ＭＣＩ）患者に対する治療法であって、患者体内のｔＨｃｙ濃度を下げる作用を有する少なくともひとつの薬剤を治療有効量投与することを含む方法が提供される。
【０００９】
本発明のひとつの態様においては、ＭＣＩの治療法、すなわち、ＭＣＩの発症および／または進行を遅延または阻止する方法であって、患者体内のｔＨｃｙ濃度を下げる作用を有する少なくともひとつの薬剤を治療有効量投与することを含む方法が提供される。患者に治療を勧める場合、該患者は、ＭＣＩを患っていてもいなくてもよい。
【００１０】
本発明のひとつの態様として、ＭＣＩを患っているか、または患っていると思われる患者において認知機能を改善させる方法であって、患者体内のｔＨｃｙ濃度を下げる作用を有する少なくともひとつの薬剤を治療有効量投与することを含む方法が提供される。
【００１１】
本発明のひとつの態様として、ＭＣＩを患っている患者がアルツハイマー病へと移行することを遅延または阻止する方法であって、患者体内のｔＨｃｙ濃度を下げる作用を有する少なくともひとつの薬剤を治療有効量投与することを含む方法が提供される。
【００１２】
本発明のひとつの側面においては、患者の脳の萎縮速度を減少させる方法であって、患者体内のｔＨｃｙ濃度を下げる作用を有する少なくともひとつの薬剤を治療有効量投与することを含む方法が提供される。
【００１３】
ひとつの実施形態においては、被験体はヒトであり、少なくとも６０才、例えば、少なくとも７０才であることが望ましい。
【００１４】
ひとつの実施形態においては、本発明に従う方法は、患者に少なくとも１種類のビタミンＢまたはそれらの誘導体を投与することを含む。ひとつの実施形態においては、前記方法は、患者に少なくとも２種類のビタミンＢまたはそれらの誘導体を治療有効量投与することを含む。ひとつの実施形態においては、本発明に従う方法は、患者に３種類以上のビタミンＢ群またはそれらの誘導体の治療有効量を投与することを含む。第一、第二および／または第三のビタミンＢは、それぞれ、塩または遊離酸の形態で用いられる。
【００１５】
ひとつの実施形態においては、本発明は、患者に少なくとも３種類のビタミンＢ群を投与することを含む。第一、第二および第三のビタミンＢ群は、それぞれ独立して、葉酸、ビタミンＢ６およびビタミンＢ１２、ならびにそれらの誘導体から選択される。すなわち、第一のビタミンＢは、葉酸、ビタミンＢ６およびビタミンＢ１２、ならびにそれらの誘導体から選択される。さらに、第二のビタミンＢは、葉酸、ビタミンＢ６およびビタミンＢ１２、ならびにそれらの誘導体から選択される。また更に、第三のビタミンＢは、葉酸、ビタミンＢ６およびビタミンＢ１２、ならびにそれらの誘導体から選択される。
【００１６】
ひとつの実施形態においては、第一のビタミンＢ、第二のビタミンＢおよび第三のビタミンＢは、それぞれ独立して、次のものを含む群から選択される：葉酸（プテロイルモノグルタメート）、フォリルポリグルタメート類のうちのひとつもしくはそれ以上、葉酸分子もしくはフォリルポリグルタメート分子内のプテリン部位のピラジン環が還元されてジヒドロフォレート類もしくはテトラヒドロフォレート類となる化合物、前出の全ての化合物の誘導体であって、Ｎ−５位またはＮ−１０位に多様な酸化レベルの１個の炭素ユニットを有するもの、または、それらの２つもしくはそれ以上の組合せ。
【００１７】
ひとつの実施形態においては、第一、第二および第三のビタミンＢは、それぞれ独立して、ジヒドロフォレート、テトラヒドロフォレート、５−メチルテトラヒドロフォレート、５，１０−メチレンテトラヒドロフォレート、５，１０−メテニルテトラヒドロフォレート、５，１０−フォルミミノテトラヒドロフォレート、５−フォルミルテトラヒドロフォレート（ロイコボリン）および１０−フォルミルテトラヒドロフォレートから選択される。
【００１８】
ひとつの実施形態においては、本発明に従う方法は、第一、第二および第三のビタミンＢを同時に、別々に、または順次投与することを含む。ひとつの実施形態においては、本発明に従う方法は、葉酸、ビタミンＢ６およびビタミンＢ１２からなる組み合わせを患者に投与することを含む。ひとつの実施形態においては、薬剤は、コリンおよびベタインから選択される。すなわち、ひとつの実施形態においては、該薬剤はコリンである。別の実施形態においては、該薬剤はベタインである。
【００１９】
ひとつの実施形態においては、本発明に従う方法は、治療有効量のベタインおよび／またはコリンに少なくともひとつのビタミンＢを組み合わせて投与することを含む。ひとつの実施形態においては、本発明に従う方法は、治療有効量のベタインおよび／またはコリンに葉酸、ビタミンＢ６およびビタミンＢ１２を組み合わせて患者に投与することを含む。
【００２０】
本明細書に記載している実施形態に従えば、例えば、患者に少なくともひとつの薬剤を投与した後、注意力の回復が観察される。更に別の場合においては、例えば、患者に少なくともひとつの薬剤を投与した後、実行機能および／または反応時間および／または学習能力もしくは記憶力が改善する。投与は、例えば、一定の日数、週数、月数または年数にわたって、行う。
【００２１】
患者体内のｔＨｃｙのベースライン濃度は、例えば、９．５μｍｏｌ／Ｌ以上である。
【００２２】
ひとつの実施形態においては、本発明に従う方法は、患者に葉酸またはその誘導体を剤形投与することを含み、ここで該剤形は、約０．１〜１０ｍｇ、例えば、約０．５〜１．５ｍｇ、更に特定すれば、約０．８ｍｇの葉酸またはその誘導体を含有する。
【００２３】
ひとつの実施形態においては、本発明に従う方法は、ビタミンＢ１２またはそれらの誘導体を剤形投与することを含み、ここで該剤形は、約０．０１〜２ｍｇ、例えば、約０４〜１．０ｍｇ、より特定すれば、約０．５ｍｇのビタミンＢ１２またはそれらの誘導体を含有する。ビタミンＢ１２は、単独で、または、葉酸もしくはそれらの誘導体、ならびに本明細書に記載しているその他の薬剤と組み合わせて投与できる。
【００２４】
ひとつの実施形態においては、本発明に従う方法は、患者にビタミンＢ６またはそれらの誘導体を剤形投与することを含み、ここで該剤形は、約１〜４０ｍｇ、例えば、約１５〜３０ｍｇ、更に特定すれば、約２０ｍｇのビタミンＢ６またはそれらの誘導体を含有する。
【００２５】
ひとつの実施形態においては、本発明に従う方法は、患者にコリンおよび／またはベタインを剤形として投与することを含み、ここで該剤形は、約１〜６ｇ、例えば、１、２、３、４、５もしくは６ｇのコリンまたはベタインを含有する。
【００２６】
本発明のひとつの態様においては、ホモシステイン（ｔＨｃｙ）濃度を下げる作用を有する少なくともひとつの薬剤を含む組成物を提供し、軽度認知機能障害（ＭＣＩ）患者の治療に使用する。また、本発明は、軽度認知機能障害（ＭＣＩ）患者の治療用薬剤の製造において、ホモシステイン（ｔＨｃｙ）濃度を低下させる薬剤を少なくともひとつ使用することを含む。
【００２７】
本発明のひとつの態様においては、ホモシステイン（ｔＨｃｙ）濃度を低下させる作用を有する薬剤を少なくともひとつ含有する組成物が提供され、ＭＣＩの発症および／または進行を遅延させるために使用される。また、本発明は、ホモシステイン（ｔＨｃｙ）濃度を低下させる薬剤を少なくともひとつ使用し、ＭＣＩの発症および／または進行を遅延させる薬剤を製造することを含む。
【００２８】
本発明のひとつの態様においては、ホモシステイン（ｔＨｃｙ）濃度を低下させる作用を有する薬剤を少なくともひとつ含有する組成物が提供され、これを患者の認識機能の改善に使用する。また、本発明は、ホモシステイン（ｔＨｃｙ）濃度を低下させる作用を有する薬剤を少なくともひとつ使用し、患者の認知機能を改善させる薬剤を製造することを含む。
【００２９】
本発明のひとつの態様においては、ホモシステイン（ｔＨｃｙ）濃度を低下させる作用を有する薬剤を少なくともひとつ含有する組成物を提供し、該組成物は、ＭＣＩを患っている患者がアルツハイマー病へと移行することを遅延させ、または阻止することを目的として使用する。また、本発明は、ＭＣＩからアルツハイマー病への移行を遅延または阻止するための薬剤の製造において、ホモシステイン（ｔＨｃｙ）濃度を低下させる作用を有する薬剤を少なくともひとつ使用することを含む。
【００３０】
本発明のひとつの態様においては、患者の脳の萎縮速度低下を目的として、ホモシステイン（ｔＨｃｙ）濃度を低下させる作用を有する薬剤を少なくともひとつ含有する組成物が提供される。また、本発明は、患者の脳の萎縮速度を低下させる薬剤の製造において、ホモシステイン（ｔＨｃｙ）濃度を低下させる作用を有する薬剤を少なくともひとつ使用することを含む。
【００３１】
本発明に従う組成物および／または薬剤は、少なくとも６０才、例えば、少なくとも７０才の患者に投与するためのものである。
【００３２】
ひとつの実施形態においては、前記組成物および／または薬剤は、第一のビタミンＢもしくはその誘導体を含有する。更に、前記組成物および／または薬剤は、第二のビタミンＢを追有する。ひとつの実施形態においては、前記組成物は第三のビタミンＢを追有する。
【００３３】
従って、ひとつの実施形態においては、本発明に従う前記組成物および／または薬剤は、少なくとも３種類のビタミンＢを含有する。
【００３４】
ひとつの実施形態においては、第一のビタミンＢ、第二のビタミンＢおよび第三のビタミンＢは、それぞれ独立して、葉酸、ビタミンＢ６およびビタミンＢ１２、ならびにそれらの誘導体から選択される。
【００３５】
ひとつの実施形態においては、第一のビタミンＢ、第二のビタミンＢおよび第三のビタミンＢは、それぞれ独立して、次のものを含む群から選択される。葉酸（プテロイルモノグルタメート）、フォリルポリグルタメート類のうちのひとつもしくはそれ以上、葉酸分子もしくはフォリルポリグルタメート分子内のプテリン部位のピラジン環が還元されてジヒドロフォレート類もしくはテトラヒドロフォレート類となる化合物、もしくは、前出の全ての化合物の誘導体であって、Ｎ−５位またはＮ−１０位に多様な酸化レベルの１個の炭素ユニットを有するもの、または、それらの２つもしくはそれ以上の組合せ。
【００３６】
ひとつの実施形態においては、第一、第二および第三のビタミンＢは、それぞれ独立して、ジヒドロフォレート、テトラヒドロフォレート、５−メチルテトラヒドロフォレート、５，１０−メチレンテトラヒドロフォレート、５，１０−メテニルテトラヒドロフォレート、５，１０−フォルミミノテトラヒドロフォレート、５−フォルミルテトラヒドロフォレート（ロイコボリン）および１０−フォルミルテトラヒドロフォレートから選択される。
【００３７】
ひとつの実施形態においては、本発明に従う組成物および／または薬剤は、葉酸、ビタミンＢ６およびビタミンＢ１２の組合せからなっている。
【００３８】
ひとつの実施形態においては、前記組成物および／または薬剤は、コリンおよびベタインから選択される薬剤を含む。すなわち、ひとつの実施形態においては、該薬剤はコリンである。別の実施形態においては、該薬剤はベタインである。ひとつの実施形態においては、前記組成物および／または薬剤は、治療有効量のベタインおよび／またはコリンに加えて、少なくとも１種類のビタミンＢを含有している。ひとつの実施形態においては、前記組成物は、治療有効量のベタインならびに／またはコリンに加えて、葉酸、ビタミンＢ６およびビタミンＢ１２を含有している。
【００３９】
前記組成物および／または薬剤は、次の目的で使用される：被験対象の（ａ）注意力の改善；（ｂ）実行機能の改善；（ｃ）反応時間の短縮；および／または（ｄ）学習能力もしくは記憶力の改善。
【００４０】
被験対象体内のｔＨｃｙのベースライン濃度は、例えば、９．５μｍｏｌ／Ｌ以上となっている。
【００４１】
ひとつの実施形態においては、前記組成物は医薬組成物であり、製薬上許容されるひとつもしくはそれ以上の賦形剤を追有する。前記組成物は、例えば、経口投与用であり、場合によっては固体投与剤形となる。
【００４２】
ひとつの実施形態においては、前記組成物および／または薬剤は、葉酸またはその誘導体を約０．１〜１０ｍｇ、例えば、約０．５〜１．５ｍｇ、更に特定すれば、約０．８ｍｇ含有する。
【００４３】
別のあるいは更なる実施形態においては、前記組成物および／または薬剤は、ビタミンＢ１２またはその誘導体を約０．０１〜２ｍｇ、例えば、約０．４〜１．０ｍｇ、より特定すれば、約０．５ｍｇ含有する。
【００４４】
別の、あるいは更なる実施形態においては、前記組成物および／または薬剤は、ビタミンＢ６またはその誘導体を約１〜４０ｍｇ、例えば、約１５〜３０ｍｇ、更に特定すれば、約２０ｍｇ含有する。
【００４５】
ひとつの実施形態においては、前記組成物および／または薬剤は、一日１回投与する。前記組成物は、週または月単位で一日１回投与できる。
【００４６】
ひとつの実施形態においては、本発明に従う方法は、ベタインを単独で、またはその他の薬剤と組み合わせて投与することを含む。ひとつの実施形態においては、本発明に従う方法は、ベタインに１種類以上のビタミンＢを組み合わせて投与することを含む。ひとつの実施形態においては、本発明に従う方法は、コリンを単独で、またはその他の薬剤、例えば、１種類以上のビタミンＢを組み合わせて投与することを含む。
【００４７】
本発明に従う実施形態は、被験対象体内のｔＨｃｙのベースライン濃度によって異なる。つまり、ひとつの実施形態においては、本発明は、ｔＨｃｙのベースライン濃度が上四分の三位置（upper or top three quartiles：総度数の上から４分の３の順位にあたる値）被験対象におけるＭＣＩまたはその他の認知障害の治療を目的としている。従って本発明は、ｔＨｃｙのベースライン濃度が約９．５μｍｏｌ／Ｌ以上である対象におけるＭＣＩおよびその他の認知障害の治療を包含する。
【００４８】
本発明は、ｔＨｃｙ濃度が約９．５μｍｏｌ／Ｌであるような被験対象の脳萎縮を軽減する方法であって、被験対象に少なくとも１種類のビタミンＢを投与することを含む方法を包含する。該方法は、葉酸、ビタミンＢ６およびビタミンＢ１２、ならびにそれらの誘導体から選択される少なくともひとつのビタミンＢ、更にそれらを組合せたものを投与することを含む。ひとつの実施形態においては、本発明に従う方法は、葉酸、ビタミンＢ６およびビタミンＢ１２からなる組合せを、それらを必要とする被験対象に投与することを含む。ひとつの実施形態においては、認知障害はアルツハイマー病ではない。
【発明の効果】
【００４９】
本発明に従う実施形態は、ＭＣＩを患っている高齢者に、補助薬としてビタミンＢ群を高用量投与することによってｔＨｃｙ濃度を低下させ、脳の萎縮速度を緩める。本明細書に記載しているように、本発明に従う実施形態は、小麦粉に葉酸を強制的に添加しなくても、英国内の人々のｔＨｃｙ濃度を約３０％低下させることが示されている。
【図面の簡単な説明】
【００５０】
図面を参照しながら、本発明に従う実施形態を、以下に詳細に記載する。
【図１】ＭＣＩにおける脳の萎縮速度に対するビタミンＢ群が及ぼす効果を調べる試験における被験者の流れを示すチャートである。
【図２】ｔＨｃｙのベースライン濃度に対する萎縮率速度を示す。９５％平均予測区間での線形回帰直線で表している。Ｒ２値は、プラセボ群（ｎ＝８３）に対しては０．２４２（Ｐ＝０．００１）、治療群（ｎ＝８５）に対しては０．００１（Ｐ＝０．７４）であった。
【図３】２年の期間中のｔＨｃｙ値の変化に伴う萎縮率速度を示す。本分析を行った患者は、プラセボ群８３人のうちの６６人、治療群８５人のうちの７０人であり、いずれも、服薬遵守によって生化学的証拠が得られた人々である。年齢に対するベースラインの調整を行い、９５％平均予測区間での線形回帰直線で表している。標準化ベータ値＝０．２２、Ｐ＝０．０１１。
【図４】サブトラクションＭＲＩ画像の中から選んだもの。（Ａ）プラセボ群の女性被験者のサブトラクション画像。７９才。２年の間に、ｔＨｃｙ濃度がベースライン値である２２μｍｏｌ／Ｌから８μｍｏｌ／Ｌ上昇した。着色部分は、脳が０．３〜１．０ｍｍ拡張（赤／黄）または収縮（青／水色）していることを示しており、最も色の薄いところは最も変化が大きかったことを示している。年毎の萎縮速度は２．５０％であった。萎縮は脳室の拡張として最も顕著に表れている。（Ｂ）治療群の女性被験者のサブトラクション画像。７２才。２年の間に、ｔＨｃｙ濃度がベースライン値である２４μｍｏｌ／Ｌから１２μｍｏｌ／Ｌ減少した。着色部分は、脳が０．３〜１．０ｍｍ拡張（赤／黄）または収縮（青／水色）していることを示しており、最も色の薄いところは最も変化が大きかったことを示している。年毎の萎縮速度は０．４６％であった。はっきりとした萎縮は認められなかった。
【図５ａ】治療を受けている「ｔＨｃｙ高濃度群」の患者が、ＨＶＬＴ−ＤＲの質問に対して正解を出すまでに要する時間に対し、もしその患者が治療を受けていなかった場合に正解を出すまでに要する時間に関して推定したオッズ比を示すグラフである。オッズ比は時間の経過と共に上昇している。例えば、「ｔＨｃｙ高濃度群」の患者が治療開始の２年後に正解するオッズは、治療を受けていないと仮定した場合のそれより７４％も高い（Ｐ−値＝０．００４）。
【図５ｂ】治療を受けた「ｔＨｃｙ高濃度群」の平均的な患者におけるＨＶＬＴ−ＤＲ総スコアの経時変化を示すグラフ。治療群では成績が維持されたが、プラセボ群では時間と共にスコアが低下した。ＨＶＬＴ−ＤＲスコアについては、初期練習効果を排除するため、０ヶ月時点でのデータは除いた。
【図６ａ】「ｔＨｃｙ高濃度群」の患者が治療開始の２年後にＭＭＳＥの質問に正解するオッズが、治療を施さなかったと仮定した場合よりも４４％大きいことを示すグラフ（Ｐ−値＝０．００３）。
【図６ｂ】「ｔＨｃｙ高濃度群」におけるＭＭＳＥ推定総スコアの経時変化を示すグラフ。プラセボ群ではＭＭＳＥスコアが低下したのに対し、治療群では有意の変化は見られなかった。
【図７】治療を受けた「ｔＨｃｙ高濃度群」患者のカテゴリー流ちょう性スコアの平均をその患者が治療を受けなかったと仮定した場合のそれと比較したもの。例えば、「ｔＨｃｙ高濃度群」患者の治療開始２年後の平均単語数は、治療を受けなかった場合のそれより１２％多かった（Ｐ−値＝０．００３）。
【図８】ｔＨｃｙのベースライン濃度に応じた、治療群とプラセボ群のＨＶＬＴ−ＤＲスコアの経時変化を示す。
【図９】ＣＤＲスコアがゼロである患者に対する治療効果について、ｔＨｃｙのベースライン濃度が７５パーセンタイル以下か以上かによって示したグラフ。図９（ｃ）は、２年間にわたる治療群対プラセボ群のオッズ比を示している。
【図１０】（ａ）は「ｔＨｃｙ低濃度群」におけるＭＭＳＥ総スコアの経時変化を示す。  （ｂ）は「ｔＨｃｙ高濃度群」における各患者のＭＭＳＥスコアの相対変化を示す。「ｔＨｃｙ高濃度群」の患者のみがビタミンＢ群治療による効果を発揮した。プラセボを投与された患者はＭＭＳＥのスコアが低下したが、ビタミンＢ群を投与された患者は有意の変化がなかった。  （ｃ）はビタミンＢ群を投与された「ｔＨｃｙ高濃度群」患者のＭＭＳＥでの正答数を同じ患者がプラセボを投与されたと仮定した場合のそれと経時比較した場合のオッズを示す。「ｔＨｃｙ高濃度群」の患者が治療開始の２年後にＭＭＳＥの質問に正解するオッズは、治療を施さなかったと仮定した場合よりも４４％大きかった（オッズ比＝１．４４、Ｐ＝０．００３）。  （ｄ）〜（ｆ）はＨＶＬＴ−ＤＲについて、それぞれ、の同様の結果を示す。この場合においても、ｔＨｃｙ高濃度群でビタミンＢ群を投与された患者は成績が維持されていたが、プラセボを投与された患者では、時間の経過と共にスコアが低下した。ＨＶＬＴ−ＤＲモデルについては、初期練習効果を排除するため、０〜３ヶ月の期間のデータを除いた。  （ｇ）および（ｈ）は「低ｔＨｃｙ群」と「ｔＨｃｙ高濃度群」におけるカテゴリー流ちょう性スコアの平均の経時変化をそれぞれ示す。「ｔＨｃｙ高濃度群」患者がビタミンＢ類による治療を開始してから２年後の平均単語数は、治療を受けなかったと仮定した場合のそれより１２％多かった（Ｐ−値＝０．００３）。
【発明を実施するための形態】
【００５１】
本発明をより詳細に以下に説明する。特に記載しない限り、技術用語は従来から使用されている意味に従って用いている。分子生物学において一般的に使用される用語の定義は、次の書籍に記載されている：ベンジャミン・レヴィン（Ｂｅｎｊａｍｉｎ  Ｌｅｗｉｎ）、「遺伝子（Ｇｅｎｅｓ）Ｖ」（オックスフォード大学出版社（Ｏｘｆｏｒｄ  Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ  Ｐｒｅｓｓ）、１９９４年）（ＩＳＢＮ  ０−１９−８５４２８７−９）；ケンドリュー（Ｋｅｎｄｒｅｗ）ら、（編）「分子生物学事典（Ｔｈｅ  Ｅｎｃｙｃｌｏｐｅｄｉａ  ｏｆ  Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｂｉｏｌｏｇｙ）」（ブラックウェル・サイエンス社（Ｂｌａｃｋｗｅｌｌ  Ｓｃｉｅｎｃｅ  Ｌｔｄ．）、１９９４年）（ＩＳＢＮ  ０−６３２−０２１８２−９）；およびロバート（Ｒｏｂｅｒｔ）Ａ．メイヤー（Ｍｅｙｅｒ）（編）「分子生物学および生物工学：机上総合参照集（Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｂｉｏｌｏｇｙ  ａｎｄ  Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ：ａ  Ｃｏｍｐｒｅｈｅｎｓｉｖｅ  Ｄｅｓｋ  Ｒｅｆｅｒｅｎｃｅｓ）」（ＶＣＨ出版社（ＶＣＨ  Ｐｕｂｌｉｓｈｅｒｓ）、１９９５年）（ＩＳＢＮ  １−５６０８１−５６９−８）。免疫学分野の当該業者において既知の定義およびその他の情報は、例えば、「基礎免疫学（Ｆｕｎｄａｍｅｎｔａｌ  Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｙ）第４版」、Ｗ．Ｅ．ポール（Ｐａｕｌ）編（リピンコット−ラーヴェン出版社（Ｌｉｐｐｉｎｃｏｔｔ−Ｒａｖｅｎ  Ｐｕｂｌｉｓｈｅｒｓ）、１９９９年）などに記載されている。
【００５２】
本明細書において使用しているように、「認知機能（ｃｏｇｈｉｔｉｖｅ  ｆｕｎｃｔｉｏｎ）」または「認知状態（ｃｏｇｎｉｔｉｖｅ  ｓｔａｔｕｓ）」とは、学習（ｌｅａｒｎｉｎｇ）および／または記憶（ｍｅｍｏｒｙ）に関与するそれぞれ、脳のあらゆる高次の知的処理過程または状態をさし、以下のようなものが挙げられるが、これらに限定されるわけではない：注意、情報収集、情報処理、作動記憶、短期記憶、長期記憶、前行記憶、逆行記憶、記憶想起、識別学習、決断、拒否反応制御、注意セットの移行、遅延強化学習、逆転学習、随意行動の時間的統合、ならびに個人の周囲とセルフケアにおける関心の表示など。ひとつの実施形態においては、本発明は、記憶力の向上をもたらす。ヒトにおいては、認知機能は、以下のような方法で測定できるが、これらに限定されるわけではない：変化スケールの臨床全般印象（ＣＩＢＩＣ−プラススケール）；ミニメンタルステート試験（ＭＭＳＥ）；神経精神症状評価（ＮＰＩ）；臨床痴呆検査（ＣＤＲ）；ケンブリッジ神経心理検査自動化バッテリー（ＣＡＮＴＡＢ）；またはサンド老年用臨床評価法（ＳＣＡＧ）など。フォルスティン（Ｆｏｌｓｔｅｉｎ）ら、Ｊ．Ｐｓｙｃｈｉａｔｒｉｃ  Ｒｅｓ．，１２：１８９−９８（１９７５）；ロビンス（Ｒｏｂｂｉｎｓ）ら、Ｄｅｍｅｎｔｉａ  ５：２６６−８１（１９９４）；レイ（Ｒｅｙ）、Ｌ‘ｅｘａｍｅｎ  ｃｌｉｎｉｑｕｅ  ｅｎ  ｐｓｙｃｈｏｌｏｇｉｅ（１９６４）；クルーガー（Ｋｌｕｇｅｒ）ら、Ｊ．Ｇｅｒｉａｔｒ．  Ｐｓｙｃｈｉａｔｒｙ  Ｎｅｕｒｏｌ．  １２：１６８−７９（１９９９）などを参照。動物モデル系においては、認知機能は当該分野において既知の従来から行われている多様な方法で測定でき、そのようなものとしては、以下のような方法が挙げられる：モーリス型水迷路（ＭＷＭ）、バーンズ円形迷路、高架式八方向迷路、Ｔ迷路、または、動物が空間情報を使用するその他の迷路など。当該分野において既知のその他の試験を用い、新規物体の認識および臭気認識などの認識機能を評価できる。認知機能は、陽電子放出型断層撮影法（ＰＥＴ）、機能的磁気共鳴画像撮影（ｆｌｖＩＲＩ）、単一光子放出型コンピューター断層撮影法（ＳＰＥＣＴ）、または、脳の機能を測定できるその他の任意の画像撮影技術を用いても測定できる。動物では、認知機能は、電気生理学分野の技術を用いても測定できる。従って、ひとつの実施形態においては、本発明は、患者の認知機能の改善に関する。ここで、患者とは、高齢者、例えば、６０才以上、例えば、７０才、７５才、もしくは８０才のヒトが考えられる。
【００５３】
本明細書において使用している「軽度認知機能障害（Ｍｉｌｄ  Ｃｏｇｎｉｔｉｖｅ  Ｉｍｐａｉｒｍｅｎｔ）」すなわち「ＭＣＩ」とは、同年齢で同等の教育をうけた人よりも認知機能が劣ってはいるものの、一般的には、日常生活に支障を来してはいない状態をさす。いくつかの実施形態においては、「ＭＣＩ」とは、正常な加齢と痴呆との境界もしくは過渡的状態を意味する。ＭＣＩは、記憶喪失などをふくむ多様な認知症状を呈する。記憶喪失は、例えば、次のようなことで確認することができる；（ａ）患者による自分自身の記憶障害についての報告であって、他者が確認できるもの；および／または、（ｂ）測定可能かつ通常の記憶障害よりも程度が重いものであって、標準的な記憶評価検査で検出されるもの（ペーターセン（Ｐｅｔｅｒｓｅｎ）ＲＣ．，ロバーツ（Ｒｏｂｅｒｔｓ）ＲＯ，ノップマン（Ｋｎｏｐｍａｎ）ベーベ（Ｂｏｅｖｅ）ＢＦ．，ジェダ（Ｇｅｄａ）ＹＥ．ら、（２００９）「軽度認知機能障害：１０年後（Ｍｉｌｄ  ｃｏｇｎｉｔｉｖｅ  ｉｍｐａｒｉｍｅｎｔ：  ｔｅｎ ｙｅａｒｓ  ｌａｔｅｒ）」Ａｒｃｈ．Ｎｅｕｒｏｌ．６６：１４４７−１４５５）。ひとつの実施形態においては、本発明は、患者のＭＣＩを治療する、または進行を遅延させることに関し、１種類またはそれ以上のビタミンＢを使用することを含む。本発明において使用するビタミンＢ群については以下に詳細に記載する。ひとつの実施形態においては、ＭＣＩは、健忘性ＭＣＩである。ひとつの実施形態においては、患者は脳機能（例えば、立案または注意など）についてその他の障害はない。別の実施形態においては、患者には次のような障害がある。記憶、言語あるいはその他の精神的機能、たとえば、（ｃ）正常な一般的な思考および推論能力の低下、および／または（ｄ）日常生活をこなす上での動作の減少など。そのような障害は、他者が気付くほど重篤であり、検査結果にも表れるが、日常生活を脅かすほど重篤ではない。ひとつの実施形態においては、患者は、５０歳以上、例えば、５５才、６０才、６５才、７０才、７５才、８０才もしくは８５才である。
【００５４】
本明細書において使用している「加齢に伴ってみられる記憶力減退（ＡＡＭＩ）」とは、加齢によって記憶力が低下していくことをさす。患者が少なくとも５０才以上であり、かつ、次の分類に全て当てはまる場合には、ＡＡＭＩだと考えて差し支えない：ａ）記憶力が低下していることに患者自身が気付いている；ｂ）年齢が若い成人と比較して、患者の記憶力標準検査の成績が低下している；ｃ）正常な加齢を除き、記憶力低下の原因として明らかな全てのその他の事象を除外する（換言すれば、記憶力の低下は、最近起こった心臓発作もしくは頭部の怪我、鬱病、薬の副作用、アルツハイマー病などのようなその他の事象が原因ではない）。ひとつの実施形態においては、本発明は、本明細書に記載している少なくとも１種類のビタミンＢを投与することによってＡＡＭＩを治療することを含む。
【００５５】
本明細書において使用している「加齢による認知能力低下（Ａｇｅ−Ｒｅｌａｔｅｄ  Ｃｏｇｎｉｔｉｖｅ  Ｄｅｃｌｉｎｅ：ＡＲＣＤ）」とは、記憶力および認知能力の低下をさし、これは、ヒトの加齢に伴う正常な経過である（例えば、クライク（Ｃｒａｉｋ）およびソルトハウス（Ｓａｌｔｈｏｕｓｅ）、１９９２年など）。これは、本質的に全てのほ乳類種に当てはまる。ひとつの実施形態においては、本発明は、本明細書に記載している薬剤を投与することにより、ＡＲＣＤを治療する、またはＡＲＣＤの速度（割合）を下げることを含む。ひとつの実施形態においては、そのような方法は、本明細書に記載しているビタミンＢを少なくとも一種類投与することを含む。ひとつの実施形態においては、そのような方法は、本明細書に記載しているビタミンＢのうちの少なくとも１種類を投与することを含む。ひとつの実施形態においては、該方法は、葉酸、ビタミンＢ１２およびビタミンＢ６の組合せを投与することを含む。本発明は、ＡＲＣＤの治療に使用する組成物であって、本明細書に記載している薬剤を少なくともひとつ含む組成物に及ぶ。ひとつの実施形態においては、該組成物は、少なくとも１種類のビタミンＢを含む。ひとつの実施形態においては、該組成物は、葉酸、ビタミンＢ１２およびビタミンＢ６を含む。
【００５６】
本明細書で使用している「患者」「（被験）対象」または「個体」とは、相互に入れ替えて使用可能であり、ヒトまたは非ヒト動物をさす。これらの用語にはほ乳類を含み、例えば、ヒト、霊長類、家畜（ウシ、ブタなどを含む）、ペット（例えば、イヌ、ネコなど）、および齧歯類（例えば、ネズミおよびラットなど）などが挙げられる。好ましい実施形態においては、被験対象（患者）はヒトである。
【００５７】
本明細書で使用している「治療」および「治療する」とは、処置を受けている個体または細胞に対し、自然経過を変化させる目的で臨床的介入を行うことをさし、予防または臨床病理学的経過中のいずれにも行える。所望される効果としては、疾病の発症もしくは再発の阻止、症状の緩和、疾病の病理学的結果を直接もしくは間接的に弱める、疾病進行の割合を下げる、疾病状態の改善もしくは一時的軽減、ならびに寛解もしくは予後の改善などが挙げられる。症状とは、処置を受けて、臨床効果を含む有効な結果または所望する結果を得るものである。ここで、有効な、または所望する臨床効果とは次のようなものが挙げられるが、これらに限定されるわけではない：ＭＣＩまたは加齢に伴う認知機能障害に関連する、ひとつもしくはそれ以上の症状の軽減または改善；そのような障害の発症を遅延する、または進行を遅らせる；そのような障害の改善、一時的軽減または安定化；その他の有効な結果、たとえば、認知機能の向上、あるいは、加齢に伴う認知機能障害の患者、またはそのようなリスクのある患者における認知機能の低下速度の減速など。
【００５８】
本発明における薬物または薬剤、例えば、ビタミンＢ群もしくはそれらの誘導体などにおける「治療有効量」とは、被験対象に投与した場合に、期待される治療効果を発揮する量であり、例えば、ＭＣＩ患者もしくはそのような疾患のリスクを有する患者において、脳萎縮の進行を遅らせる、または認知機能を改善することである。１回の投与によって治療効果が十分に発揮される必要はなく、一連の投与後に発揮されればよい。すなわち、治療有効量は１回またはそれ以上の投与によって達することができるものである。被験対象に必要とされる有効量は、例えば、被験対象の体格、健康状態および年齢、認知障害の状態および程度、投与のために選択される治療薬もしくは治療薬の組合せ、ならびに投与様式などによって異なる。当業者であれば、通常業務を通して、与えられた状況に対する有効量を容易に判断できるはずである。ひとつの実施形態においては、本明細書に記載しているビタミンＢのうちの少なくとも１種類を１日１回、または、１日１回以上、例えば、２回、３回、もしくは４回投与する。
【００５９】
薬剤
【００６０】
本発明は、被験対象の体内のホモシステイン濃度を低下させることができるひとつもしくはそれ以上の薬剤を、それを必要とする被験対象に使用することに関する。ひとつの実施形態においては、該薬剤は、コリンまたはベタインである。ひとつの実施形態においては、本発明に従う方法および組成物は、ベタインを１日約１〜約６ｇ、例えば、１日１、２、３、４、５もしくは６ｇ投与することを含む。該方法は、被験対象にベタインを１日１回もしくはそれ以上投与することを含む。ひとつの実施形態においては、本発明に従う方法および組成物は、コリンを１日約１〜約６ｇ投与することを含む。該方法は、被験対象にコリンを１日１回もしくはそれ以上投与することを含む。別の実施形態においては、薬剤はＮ−アセチルシステインであり、投与量は１日約０．５〜約４ｇである。
【００６１】
本発明に従う薬剤、およびそのような薬剤の使用を含む方法は、長期投与するためのものとすることができる。すなわち、本発明に従う実施形態は、薬剤を数日間、週間単位、月単位もしくは年単位で投与することを含む。ひとつの実施形態においては、薬剤は、１ヶ月、２ヶ月、３ヶ月、４ヶ月、５ヶ月、６ヶ月、７ヶ月、８ヶ月、９ヶ月、１０ヶ月、１１ヶ月、１２ヶ月、１３ヶ月、１４ヶ月、１５ヶ月、１６ヶ月、１７ヶ月、１８ヶ月、１９ヶ月、２０ヶ月、２１ヶ月、２２ヶ月、２３ヶ月もしくは２４ヶ月、またはそれ以上にわたり、少なくとも１日１回投与する。
【００６２】
ビタミンＢ群
【００６３】
ひとつの実施形態においては、薬剤はビタミンＢである。したがって、本発明は、１種類またはそれ以上のビタミンＢを使用することを含む。ひとつの実施形態においては、第一のビタミンＢは、ビタミンＢ６、ビタミンＢ１２、および葉酸ならびにそれらの誘導体から選択される。ひとつの実施形態においては、組成物とは、１種類またはそれ以上の別のビタミンＢを含む組成物と組み合わせて使用するためのものである。
【００６４】
ひとつの実施形態においては、本発明に従う方法、薬剤、および／または組成物は、第二のビタミンＢを追有する。第二のビタミンＢは、葉酸、ビタミンＢ６、ビタミンＢ１２、ならびにそれらの誘導体から選択される。
【００６５】
ひとつの実施形態においては、本発明に従う方法および組成物は、第三のビタミンＢを追有する。ひとつの実施形態においては、第三のビタミンＢは、ビタミンＢ６、ビタミンＢ１２、および葉酸ならびにそれらの誘導体から選択される。
【００６６】
ひとつの実施形態においては、本発明に従う方法および組成物は、３種類またはそれ以上のビタミンＢからなる組合せを使用することを含み、このとき、該組合せは、ビタミンＢ６、ビタミンＢ１２、および葉酸、ならびに前出のビタミン類のうちの１種類またはそれ以上のものの誘導体から選択される。従って、本発明は、ビタミンＢ群を組合せて投与することを含み、このとき、該ビタミンＢ群は、同一組成物中に含まれていてもよいし、別異に投与することもできる。ひとつの実施形態においては、認知障害の治療に使用するためのビタミンＢ群の組合せが提供され、該組合せには、例えば、ビタミンＢ６、ビタミンＢ１２、および葉酸ならびにそれらの誘導体が含まれている。該組成物の詳細については、本明細書に記載している。
【００６７】
ひとつの実施形態においては、本発明は、葉酸（プテロイルモノグルタメート）を単独で、または本明細書に記載しているその他の薬剤と組み合わせて対象に投与することを含む。葉酸は、ビタミンＢ９またはフォラシンという名称でも知られている。ひとつの実施形態においては、前記方法は、次の中から選択された化合物を投与することを含む：葉酸（プテロイルモノグルタメート）、フォリルポリグルタメート類のうちのひとつもしくはそれ以上、葉酸分子もしくはフォリルポリグルタメート類分子内のプテリン部位のピラジン環が還元され、ジヒドロフォレート類もしくはテトラヒドロフォレート類となる化合物、もしくは、前出のすべての化合物の誘導体であって、Ｎ−５位またはＮ−１０位に多様な酸化レベルの１個の炭素ユニットを有するもの、またはそれらのうちの２つもしくはそれ以上の組合せ。本発明のひとつの実施形態においては、上述したうちのひとつの型の葉酸または葉酸塩は、約０．１〜約１０ｍｇの量で組成物中に含まれており、および／または患者に投与できる。別の実施形態においては、ビタミンＢ１２の含有量は、薬０．０１〜約１．５ｍｇである。別の実施形態においては、組成物中のビタミンＢ１２の含有量は、約０．４〜約０．９ｍｇである。本発明のひとつの実施形態においては、ビタミンＢ１２の含有量は、約０．８ｍｇである。
【００６８】
ひとつの実施形態においては、本発明は、ビタミンＢ１２を単独で、または他のビタミンＢと組み合わせて投与することを含む。ビタミンＢ１２は、コバラミンという名称でも知られており、活性補酵素類であるメチルコバラミンおよび５‘−デオキシアデノシルコバラミンに転換できる。これらの補酵素類は、葉酸の代謝、ホモシステインの除去、およびミエリンの合成に必須である。例えば、メチルコバラミンは、フォレート補因子の脱メチル化を触媒する。脱メチル化が起こらないと、ＤＮＡ合成に必要なフォレートが不足する。デオキシアデノシルコバラミンは、メチルマロニル−ＣｏＡがサクシニル−ＣｏＡへ転換する反応の補酵素であり、炭素数が奇数である脂肪酸がクエン酸サイクルに取り込まれるために必要である。ビタミンＢ１２は、ピリドキシンおよび葉酸と共に、ホモシステインが適切に代謝されるために利用される。ビタミンＢ１２は、例えば、シアノコバラミン、メチルコバラミン、ヒドロキシコバラミンおよびアデノシルコバラミンとして使用できる。
【００６９】
本発明に従う組成物および方法のひとつの実施形態においては、ビタミンＢ１２を含む。本発明に従うひとつの実施形態においては、ビタミンＢ１２は、約０．０１〜約１．５ｍｇの範囲で組成物中に含まれ、および／または、被験対象に投与する。別の実施形態においては、ビタミン１２の含有量は、約０．２〜約１ｍｇである。別の実施形態においては、ビタミン１２の含有量は、約０．４〜約０．８ｍｇである。本発明に従うひとつの実施形態においては、ビタミンＢ１２の含有量は約０．５ｍｇである。ひとつの実施形態においては、ビタミンＢ１２はシアノコバラミンである。
【００７０】
ひとつの実施形態においては、本発明は、ビタミンＢ６を単独で、または他のビタミンＢ群と組み合わせて投与することを含む。本発明に従うひとつの実施形態においては、ビタミンＢ６は、組成物中に含まれ、および／または、約０．５〜約４０ｍｇの範囲で対象に投与する。別の実施形態においては、ビタミンＢ６の含有量は、約１５〜約３０ｍｇである。別の実施形態においては、ビタミンＢ６の含有量は約１５〜約２５ｍｇである。本発明のひとつの実施形態においては、ビタミンＢ６の含有量は約２０ｍｇである。
【００７１】
ひとつの実施形態においては、コリンを被験対象に投与する。コリンは、例えば、ホスファチジルコリンなどのようなリン脂質中に含まれている。ひとつの実施形態においては、ベタインを対象に投与する。ヒトの体内では、コリンはベタインの前駆体である。ベタインはホモシステインがメチオニンに転換する際に働く基質である。
【００７２】
製薬上許容される担体
【００７３】
本発明は、本明細書に記載されている製薬的組成物を含む。ひとつの実施形態においては、該組成物は、製薬上許容される担体を含有する。製薬上許容される担体であって、本明細書に開示している方法において有用なものは、従来から使用されているものである。「レミントン  薬剤学（Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ‘ｓ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｓｃｉｅｎｃｅｓ）第１５版」（Ｅ．Ｗ．マーティン（Ｍａｒｔｉｎ）、マック・パブリッシング社（Ｍａｃｋ  Ｐｕｂｌｉｓｈｉｎｇ  Ｃｏ）、米国ペンシルバニア州イーストン、１９７５年）には、本明細書に開示しているＩＬ−２受容体の拮抗物質を送達するために適した組成物および剤形について記載されている。
【００７４】
本明細書において用いられている「製薬上許容されている」という語句は、適正な医学的判断の範疇にあり、ヒトまたは動物に対して過剰な毒性、刺激、アレルギー反応もしくはその他の問題、または合併症などを起こすことなく、穏当な危険性−受益性比率でそれらの組織に接触させられる化合物、材料、組成物、ならびに／または投与剤形をさしている。
【００７５】
一般的には、担体の性質は、使用する特定の投与経路によって異なる。例えば、通常、経口投与用薬剤には、製薬上および生理的に許容される液体を含む注射可能な液体が用いられ、そのようなものとしては、例えば、水、生理食塩水、平衡塩類溶液、水性デキストロース、グリセロール、またはビヒクルとして用いられるようなものなどが挙げられる。固体組成物、例えば、粉末剤、丸剤、錠剤またはカプセル剤などに対しては、従来から用いられている非毒性の固体担体が使用でき、そのようなものとしては例えば、医薬等級のマンニトール、乳糖、デンプンまたはステアリン酸マグネシウムなどが挙げられる。生物学的に中性な担体に加えて、薬剤組成物には非毒性の補助物質を加えることができ、そのようなものとしては例えば、展着もしくは乳化剤、保存料、塩類、アミノ酸およびｐＨ緩衝剤などが挙げられる。ｐＨ緩衝剤の例としては、ナトリウムもしくはカリウムの塩酸塩またはリン酸塩、ツイーン（Ｔｗｅｅｎ）、酢酸ナトリウム、あるいはソルビタンモノラウレートなどが挙げられる。
【００７６】
好ましい実施形態においては、本発明に従う組成物は、経口投与用であり、例えば、固体投与剤形である。経口投与用固体投与剤形としては、カプセル剤、錠剤、丸剤、粉末剤および顆粒剤が挙げられる。一般的に、そのような固体剤形においては、活性化合物は、少なくともひとつの不活性で製薬上許容される賦形剤もしくは担体（例えば、クエン酸ナトリウムまたはリン酸二カルシウムなど）、ならびに／または、ひとつもしくはそれ以上の次のようなものと混合されている：ａ）充填剤または増量剤（例えば、デンプン類、乳糖、ショ糖、グルコース、マンニトールおよびケイ酸など）；ｂ）結合剤（例えば、カルボキシメチルセルロース、アルギナート類、ゼラチン、ポリビニルピロリドン、ショ糖およびアラビアゴムなど）；ｃ）湿潤剤（例えば、グリセロールなど）；ｄ）崩壊剤（例えば、寒天、カルシウムカーボネート、ジャガイモもしくはタピオカデンプン、アルギニン酸、ある種のシリケート類、およびナトリウムカーボネートなど）；ｅ）増粘剤（例えば、パラフィンなど）；ｆ）吸収促進剤（例えば、四級アンモニウム化合物など）；ｇ）展着剤（例えば、セチルアルコールおよびグリセロールモノステアレートなど）；ｈ）吸湿剤（例えば、カオリンおよびベントナイトクレイなど）；ならびにｉ）滑沢剤（例えば、タルク、カルシウムステアレート、マグネシウムステアレート、固体ポリエチレングリコール類、ラウリル硫酸ナトリウムおよびそれらの混合物など）。カプセル剤、錠剤および丸剤の場合には、投与剤形に緩衝剤を追有する場合がある。同様の様式の固体組成物では、ゼラチンの軟および硬カプセル内に充填剤を追有する場合もあり、例えば、乳糖などの賦形剤と共に、高分子量ポリエチレングリコールなどを用いる。
【００７７】
本発明に従う組成物は、経口投与用に剤形化することができ、従って、本発明に従う方法は、コリン、ベタインおよび／またはビタミンＢ群などの薬剤を経口投与することを含む。好ましくは、経口投与用剤形は、溶解剤を含有する。溶解剤は、製薬上許容される限りは、その特性に特に制約はない。そのような溶解剤の例としては、次のようなものが挙げられる：非イオン性界面活性剤、例えば、ショ糖脂肪酸エステル類、グリセロール脂肪酸エステル類、ソルビタン脂肪酸エステル類（ソルビタントリオレエートなど）、ポリエチレングリコール、ポリオキシエチレン水酸化ヒマシ油、ポリオキシエチレンソルビタン脂肪酸エステル類、ポリオキシエチレンアルキルエステル類、メトキシポリオキシエチレンアルキルエステル類、ポリオキシエチレンアルキルフェニルエステル類、ポリエチレングリコール脂肪酸エステル類、ポリオキシエチレンアルキルアミン類、ポリオキシエチレンアルキルチオエーテル類、ポリオキシエチレン−ポリオキシプロピレンコポリマー類、ポリオキシエチレングリセロール脂肪酸エステル類、ペンタエリスリトール脂肪酸エステル類、プロピレングリコールモノ脂肪酸エステル類、ポリオキシエチレンプロピレングリコールモノ脂肪酸エステル類、ポリオキシエチレンソルビトール脂肪酸エステル類、脂肪酸アルキロールアミド類、および酸化アルキルアミン類など；胆汁酸およびそれらの塩類など（例えば、ケノデオキシコール酸、コリン酸およびデオキシコリン酸、デヒドロコリン酸およびそれらの塩類、ならびにそれらにグリシンもしくはタウリンがコンジュゲートしたものなど）；イオン性界面活性剤、例えば、ラウリル硫酸ナトリウム、脂肪酸石けん、アルキルスルホナート類、アルキルホスフェート類、ホスフェートエーテル類、塩基性アミノ酸類の脂肪酸塩類など；トリエタノールアミン石けんおよびアルキル四級アンモニウム塩類；ならびに両性界面活性剤、例えば、ベタイン類およびアミノカルボン酸塩類など。
【００７８】
錠剤、カプセル剤、丸剤および顆粒剤などの固体投与剤形は、腸溶性コーティングなどのコーティングおよび外殻、ならびに、多層コーティングなど、製薬学分野において既知のその他のコーティングを施して調製できる。該剤形は、混濁剤を追有する場合があり、また、腸管内の特定部位においてのみ、もしくはその付近で活性成分を放出する、ならびに／または、遅延型放出をするような組成物にすることができる。埋込み用組成物の例においては、ポリマー性物質およびワックス類を含む。
【００７９】
別の方法としては、本明細書に記載している薬剤（例えば、ビタミンＢ群、ベタイン、および／またはコリンなど）は、液体投与剤形に調製できる。経口投与用液体剤形としては、製薬上許容される乳化剤形、液状剤、懸濁剤形、シロップおよびエリキシルが挙げられる。活性成分に加えて、液体投与剤形には、不活性な希釈剤（一般的に、当該分野においては、水およびその他の溶媒などが用いられる）、溶解剤、および乳化剤を含む。ここで、該溶解剤および乳化剤としては、エチルアルコール、イソプロピルアルコール、エチルカーボネート、エチルアセテート、ベンジルアルコール、ベンジルベンゾエート、プロピレングリコール、１，３−ブチレングリコール、ジメチルホルムアミド、油類（特に、綿実油、落花生油、トウモロコシ油、小麦胚芽油、オリーブオイル、ヒマシ油およびゴマ油など）、グリセロール、テトラヒドロフルフリルアルコール、ポリエチレングリコール類、およびソルビタンの脂肪酸エステル類、ならびにそれらの混合物などが挙げられる。不活性な希釈剤を含むにも拘わらず、経口組成物には、展着剤、乳化および懸濁剤、甘味料、香料および風味料などの媒質も用いることができる。懸濁剤形には、活性化合物に加えて懸濁剤を含み、そのようなものの例としては、エトキシル化イソステアリルアルコール類、ポリオキシエチレンソルビトールおよびソルビタンエステル類、微結晶性セルロース、アルミニウムメタヒドロキシド、ベントナイト、寒天およびトラガカントならびにそれらの混合物などが挙げられる。
【００８０】
ひとつの実施形態においては、本発明に従う薬剤の投与経路は、静脈内、動脈内、筋肉内、または皮下への注射である。ひとつの実施形態においては、１種類またはそれ以上のビタミンＢ（例えば、ビタミンＢ１２など）は、筋肉投与ができる。本明細書に記載しているビタミンＢ群は、同一または別異の組成物として調製できる。
【００８１】
本発明を以下の実施例を参照にして更に詳細に記載するが、本発明はこれらの実施例に限定されるわけではない。
【実施例】
【００８２】
実施例１
【００８３】
序論
【００８４】
血漿中の総ホモシステイン（ｔＨｃｙ）の上昇は、認知力減退およびアルツハイマー病の危険因子であり、脳のより急速萎縮と関連している。脳の萎縮速度（割合）の加速は、軽度認知機能障害（ＭＣＩ）の特徴である。発明者らは、無作為対照試験を行い（ＶＩＴＡＣＯＧ、ＩＳＲＣＴＮ  ９４４１０１５９）、ｔＨｃｙ濃度を下げる治療法、すなわち、高用量の葉酸、ビタミンＢ６およびＢ１２を投与する方法が脳の萎縮速度を減速するのか否か、さらに、結果として、ＭＣＩに対する処置として治療効果が得られるのか否かを確認した。
【００８５】
治験参加者は、６４６人の中から選出した、軽度認知機能障害を患っている２７１人であった。一部の志願者（１８７人）については、試験の開始時および終了時に頭蓋のＭＲＩスキャンを行った。試験は、２００４年〜２００９年にかけて、オックスフォード大学内の記憶および加齢に関する研究を行うオックスフォードプロジェクト（Ｏｘｆｏｒｄ  Ｐｒｏｊｅｃｔ  ｔｏ  Ｉｎｖｅｓｔｉｇａｔｅ  Ｍｅｍｏｒｙ  ａｎｄ  Ａｇｉｎｇ：ＯＰＴＩＭＡ）で実施した。治験参加者は同数からなる２群に無作為に振り分け、一方には葉酸（０．８ｍｇ／日）、ビタミンＢ１２（０．５ｍｇ／日）およびビタミンＢ６（２０ｍｇ／日）を含む錠剤を服用してもらい、もう一方にはプラセボ錠剤を服用してもらった、服用は２４ヶ月継続した。事前に定めていた主要なアウトカム測定は、脳全体に占める萎縮の割合の変化を捉えることであった。治療群８５人、プラセボ群８３人の計１６８人の被験者についてＭＲＩスキャンを行った。年毎の脳の萎縮割合の平均値は、治療群のほうがプラセボ群よりも３０％低かった（０．７６％［９５％ＣＩ、０．６３−０．９０］対１．０８％［０．９４−１．２２］、Ｐ−０．００１）。治療に対する応答は、ベースライン時のｔＨｃｙ濃度に関係していた。すなわち、ｔＨｃｙ濃度が１３μｍｏｌ／Ｌより高い被験者では、治療群で萎縮の割合が５３％低かった。また、治療に対する応答は、試験期間中の血漿中のｔＨｃｙ濃度の変化にも関係していた。すなわち、ｔＨｃｙ濃度が最も下がった被験者は、萎縮の割合が最も小さかった。萎縮の割合は、認知力試験の最終スコアに影響を与える因子のひとつである。萎縮の割合が高いと、認知力スコアが低かった。従って、本発明は、ビタミンＢを用いて治療することにより、軽度認知機能障害における脳萎縮の進行速度を減速する方法を提供する。
方法
試験のプロトコール
【００８６】
２００４年４月から２００６年１１月にかけて、オックスフォード地区で、記憶力に心配がある７０歳以上の人を捜している旨の広告を地元の新聞またはラジオに出し、治験参加者を募った。電話での聞き取り調査により、回答者は、組み入れおよび除外基準に関連する健康スクリーニングテストを受け、ＴＩＣＳ−Ｍおよびカテゴリー流ちょう性試験（ＣＥＲＡＤ）を受けた（デ・ヤーガー（De Jager）ら、２００３年；モリス（Morris）ら、１９８９年）。適格な治験参加者には、試験開始時に１回と２年後の治療終了時に１回の計２回のＭＲＩスキャンを行うことに同意するか否かを尋ねたが、このとき、スキャンを行うのは任意であることを強調した。試験はＮＨＳ研究倫理委員会に承認された（ＣＯＲＥＣ  ０４／Ｑ１６０４／１００）。
【００８７】
組み入れ基準としては次のようなものが挙げられる：年齢が７０歳以上である；記憶に関して自覚的な懸念がある；病歴提供者として治験パートナーが確保できる；日常生活での活動に基づくペーターセンの分類（Ｐｅｔｅｒｓｅｎ’ｓ  ｃｒｉｔｅｒｉａ）に従ってＭＣＩと診断されている、など。ここで、該診断は、ＭＣＩに関して事前に定めた限界スコア、すなわち、最高３９に対して１７〜２９を基準として、ＴＩＣＳ−Ｍ（ブラント（Ｂｒａｎｄｔ）ら、１９９３年）を用いて客観的記憶について評価したものである。ボーダーラインに相当する場合では、ＴＩＣＳ−Ｍは２９以上であるが、カテゴリー流ちょう性が１９未満の場合、またはＴＩＣＳ−Ｍにおいて思い出した語句数が１０／２０以下の場合、被験者は適格である。また別の場合には、ＴＩＣＳ−Ｍは１７未満であるが、カテゴリー流ちょう性は１９未満であるかまたは、ＴＩＣＳ−Ｍでの語句の思い出し数が１０／２０以下であるとき、被験者は適格である。初回来院時に集めたＭＣＩの診断を確定するために用いたその他の方法としては、ＭＭＳＥ（フォルステイン（Ｆｏｌｓｔｅｉｎ）ら、１９７５年）スコアが２４／３０より大きく、かつ、痴呆の確証がないことが挙げられる。除外基準としては次のようなものが挙げられる：痴呆と診断されている、または抗痴呆薬を処方されている；活動が活発な癌である；３ヶ月以内に脳梗塞を起こしている；メトトレキサート、抗癌剤または抗てんかん薬治療を受けている、もしくは、３００μｇ／日より多量の葉酸、３ｍｇ／日より多量のピリドキシン、または１．５μｇ／日より多量のコバラミンを経口投与または注射されている、など。 
【００８８】
来院時には、治験参加は血液および尿のサンプルを提供し、ＭＭＳＥ（フォルステイン（Ｆｏｌｓｔｅｉｎ）ら、１９８２年）を含む多様な認知試験を受け、老年期うつスケール（ＧＤＳ）質問票（イェサヴァッジ（Ｙｅｓａｖａｇｅ）ら、１９８２年）を記入した。また、治験参加者は、音叉を用いた足首の振動覚に関する簡単な試験も受けた。さらに、治療開始後、３、６、１２、１５および１８ヶ月後には、被験者に電話連絡を取り、服薬遵守を確認し、副作用の発現について尋ね、さらに、語彙記憶試験を行った。２４ヶ月後には、治験参加者は、試験および血液検査を受けるために診療所に行った。一連の認知試験を繰り返して行った。副作用および認知機能に関する最終的な電話による評価は、２７ヶ月後に行った。
【００８９】
ペーターセン（Ｐｅｔｅｒｓｅｎ）の健忘性および非健忘性ＭＣＩについての改定規準（ペーターセン（Ｐｅｔｅｒｓｅｎ）ら、２００９年）によってＭＣＩと診断され、さらに、登録基準を満たし、書面による同意書を提出した治験参加者を、治療群またはプラセボ群に無作為に振り分けた。電話による集中無作為化を利用することにより、群分けに私感が全く入り込まないようにし、かつ、年齢、性別、ＴＩＣＳ−Ｍのベースラインスコア、ＭＲＩに対する同意についての配慮を最小限に留めた。治療群は、ＴｒｉｏＢｅ  Ｐｌｕｓ（登録商標）（ｍｅｄａ  ＡＢ／Ｒｅｃｉｐ  ＡＢ、スウェーデン国、ソルナ、パイパーズ２Ａ（Ｐｉｐｅｒｓ  ｖaｇ  ２Ａ）、ＳＥ−１７０  ０９）を投与されたが、これは、葉酸０．８ｍｇ、シアノコバラミン０．５ｍｇ、および塩酸ピリドキシン２０ｍｇを含有する錠剤である。プラセボ錠剤は、ビタミンを除き、かわりに酸化鉄と硫酸鉄（０．００５５％）を加えてビタミンの錠剤（ＴｒｉｏＢｅ  Ｐｌｕｓ（登録商標））と同等の色になるようにした以外は、ビタミンの錠剤と見かけ上同一である。
【００９０】
治療は２年間行った。各治験参加者は初回来院時および６ヶ月毎の通院時に各試験用の薬剤を受け取った。ＭＲＩスキャンの採取に同意した患者に対しては、１回目のスキャン実施日に薬剤を渡した。
【００９１】
採血およびアッセイ
【００９２】
ベースライン時および２年経過後に、非絶食状態で、静脈穿刺によって採血を行った。血漿ｔＨｃｙ濃度、フォレート濃度、コバラミン濃度、ホロＴＣ濃度および総ＴＣ濃度は、文献に従って測定した（ヴォギアツォグロウ（Ｖｏｇｉａｔｚｏｇｌｏｕ）ら、２００８年）。ＴＣ飽和度は、ホロＴＣに対する総ＴＣの比として計算した。血漿シスタチオニン濃度は、液体クロマトグラフィータンデム質量スペクトロメトリーによって測定した（アントニアデス（Ａｎｔｏｎｉａｄｅｓ）ら、２００９年）。ゲノム性ＤＮＡは、ウィザードＤＮＡ精製キット（Ｗｉｚａｒｄ  ＤＮＡ  Ｐｕｒｉｆｉｃａｔｉｏｎ  Ｋｉｔ）（プロメガ（Ｐｒｏｍｅｇａ）社、英国サウザンプトン）を用いて血液から抽出した。ＭＴＨＦＲ６７７Ｃ＞Ｔ多型（ＮＣＢＩ  エントレツ・ジーン（Ｅｎｔｒｅｚ  Ｇｅｎｅ）４５２４）およびＴＣＮ２  ７７６Ｃ＞Ｇ多型（ＮＣＢＩ  エントレツ・ジーン（Ｅｎｔｒｅｚ  Ｇｅｎｅ）６９４８）については、アンプリフロア  ＳＮＰ  遺伝子型決定システム（Ａｍｐｌｉｆｌｏｕｒ  ＳＮＰ  Ｇｅｎｏｔｙｐｉｎｇ  Ｓｙｓｔｅｍ）（ケミコン（Ｃｈｅｍｉｃｏｎ）社、英国ワットフォード）を用いて遺伝子型を決定し（ワルデン（Ｗａｒｄｅｎ）およびレフサム（Ｒｅｆｓｕｍ）、２００５年）、一方、ＡＰＯＥ遺伝子型（ＮＣＢＩ  エントレツ・ジーン（Ｅｎｔｒｅｚ  Ｇｅｎｅ）３４８）は、一段階ＰＣＲ法（ウェンハム（Ｗｅｎｈａｍ）ら、１９９１年）を用いて決定した。
【００９３】
ＭＲＩスキャン
【００９４】
容積測定脳ＭＲＩスキャンは、ベースライン時および２年経過後に行った。脳特異的ＭＲＩスキャンは、１．５Ｔ  ＭＲＩシステム（ソナタ（Ｓｏｎａｔａ）；シーメンス・メディカル・ソリューションズ（Ｓｉｅｍｅｎｓ  Ｍｅｄｉｃａｌ  Ｓｏｌｕｔｉｏｎｓ）社、独国エルランゲン）を用いて測定した。プロトコールは、Ｔ１−強調撮像、グラジエントエコー（フラッシュ−ファスト（ＦＬＡＳＨ−Ｆａｓｔ）狭角ショット）３Ｄ集積を用い、１ｍｍの等方性ボクセル、フリップ角度１９°、ＴＲ＝１２ｍｓ、ＴＥ  ５．６５ｍｓ、１スラブあたり２０８スライスでコロナル方向に１スラブ集積、撮像回数１回で実施した。これを３回繰り返し、撮像および交差反復調整を行った後に標準化した。
【００９５】
完全自動化定量法であるＳＩＥＮＡを用いて、年あたりの脳全体の萎縮速度（割合）を求めた。ＳＩＥＮＡは正確であり（脳の容積の誤差が約０．２％）、ロバスト性が高い（スミス（Ｓｍｉｔｈ）ら、２００２年）。横断面法（ＳＩＥＮＥＸ）を用い、基準となる画像に対して空間的に標準化した頭蓋の単一画像から標準的な脳の容積を求めた（スミス（Ｓｍｉｔｈ）ら、２００２年）。ベースライン時における治験参加者の脳容積の標準値は、いくつかの分析において共変数として使用した。
【００９６】
変化速度は、別々の時点で撮影した２つのＭＲＩ画像から計算した。ＳＩＥＮＡでは、各画像において、脳以外の部分から脳部分を自動的に判別し、各画像において頭蓋の外表面の推定図をしめす。２つの脳の画像を登録し、頭蓋画像を用いてスケーリングおよび非対称化を行った。画像形状の変化に対するこのような補正は、全期間にわたって行った。脳の表面点（脳室表面を含む）は、サブボクセル確度で登録している脳画像およびこれらの点をもとにして推定された表面の動きを利用して見出した。脳の表面全体を横切るような垂直方向の平均的な動きによって画像が変化し、また、脳萎縮の速度（割合）を求めることができる。ここで、萎縮の速度（割合）とは、灰白質および白質の変化を反映している（スミス（Ｓｍｉｔｈ）ら、２００２年）。
【００９７】
統計分析
【００９８】
検出力計算は、高齢のＭＣＩ患者４９人において同一のＭＲＩ手法およびＳＩＥＮＡを用いてＯＰＴＩＭＡから得たデータに基づいて行ったが、このときの萎縮の平均（ＳＤ）速度（割合）は、０．７４（０．２７％）／年であった。２０％の縮小速度（率）を検出するためには、検出力９０％の場合には１群あたり７０人の被験者が必要であり、検出力８０％の場合には、１群あたり５０人が必要である（α値＝０．０５、両側検定）。脱落者またはＭＲＩの失敗の割合を２０％未満として、試験開始時の各群のサンプル数を９０人とした。
【００９９】
主要なアウトカム測定について、試験期間中、処置群間で年毎の脳全体の萎縮速度が異なっているか否かをＳＩＥＮＡ法を用いて判断した。要求に従い、ベースライン時と追跡調査時にＭＲＩを撮像した治験参加者に関して、主要アウトカムをプロトコール毎に分析した。最初に、対象は、無作為に振り分けられた群として分析した。データは、ビタミンＢ補助薬を服用した（またはコバラミンを注射された）各群の治験参加者を確認することによって定めた生物学的コンプライアンスに従って分析し、このときに次のような限界値を使用した：ベースライン時から追跡調査時までの増加量は、血漿中のフォレートで１０ｎｍｏｌ／Ｌより多く、コバラミンで１５０ｐｍｏｌ／Ｌより多い。年齢は、一次終点に対する交絡変数だと考えられた（ブラッドレー（Ｂｒａｄｌｅｙ）ら、２００２年）。脳の萎縮速度（割合）に関係すると考えられるその他の共変数（アンステイ（Ａｎｓｔｅｙ）ら、）２００６年；デン・イェイヤ―（Ｄｅｎ  Ｊｅｉｊｅｒ）ら、２００３年ｂ；エンジンガー（Ｅｎｚｉｎｇｅｒ）ら、２００５年；ジャック（Ｊａｃｋ）ら、２００４年；スクーグ（Ｓｋｏｏｇ）ら、１９９８年；ヴォギアツォグロウ（Ｖｏｇｉａｚｏｇｌｏｕ）ら、２００８年）またはビタミンＢの状態が関係すると考えられるその他の共変数（レフサム（Ｒｅｆｓｕｍ）ら、２００６年）については、試験前に確認してから分析を行った（以下の表２参照）。共変数の評価法としては、一変数法（非対ｔ検定またはピアソン（Ｐｅａｒｓｏｎ）相関）を含み、次に、年齢調整分析を行った。もし、ある変数がＰ＜０．１０であって、年齢調整分析に関係しているならば、それを次の分析に取り入れた。処置群間の差異について、絶対的変数に対してはカイ二乗検定を、連続的変数に対してはｔ検定もしくは分散分析を用いて調べた。
【０１００】
確定前の二次分析としては、認知力およびうつスコア、重篤な副作用、服薬中止、服薬遵守、ならびに生化学的マーカーの変化などが挙げられる。ＡＮＯＶＡ（絶対的変数）または直線回帰（連続変数）を用いたサブ群の分析としては、次のようなものが挙げられる：治療効果がベースラインマーカーに及ぼす影響、生化学的コンプライアンスの評価後における２つの群間の脳の萎縮速度（割合）、生化学的マーカーの変化（治療コードの独立性）と萎縮速度（割合）との関係、ならびに適切なサブ群内での萎縮速度（割合）など。報告されているＰ値は、両側検定のものであり、複数比較についての調整は行っていない；Ｐ＜０．０５は、統計的に有意であると考えられる。統計分析には、ＳＰＳＳのマッキントッシュ用（１６版）ままたはウィンドウズ用（１７版）（ＳＰＳＳ社、米国イリノイ州シカゴ）を用いた。
【０１０１】
結果
【０１０２】
治験参加者
【０１０３】
試験における治験参加者の流れを図１に示す。初回の電話インタビューで計６４６人の協力者を評価し、２９２人が参加基準を満たしていた。両群において追跡調査できなくなった人の数はほぼ同数であり、治療群では１１０人、プラセボ群では１１３人が、それぞれ２４ヶ月の治験を完了した。初回分析は、ベースライン時および追跡調査時に技術的に良好なＭＲＩスキャンが撮像できた被験者についてのみ行い、その数は、治療群では８５人、プラセボ群では８３人であった。群内のベースラインの特徴は類似していた（表１および表２）。ＭＲＩスキャンの実施間隔（ＳＤ）は２４．３ヶ月（０．７）であった。
【０１０４】
服薬遵守およびビタミンに対する生化学的応答
【０１０５】
返却された錠剤を計数することによって確認した服薬遵守は、両群ともに良好であり、全体の７８％以上の治験参加者が各自の薬剤の少なくとも７５％を服用していた。服薬厳守については、血漿中のビタミンおよび関連化合物の濃度を測定することによっても評価した（表２）。治療群では、血漿中のフォレート濃度は約２７０％、血漿中のコバラミン濃度は約倍に上昇していた（相乗平均：９５％信頼区間）。対照的に、プラセボ群では、前者が３％、後者が１０％とそれぞれわずかに上昇していただけだった。治療群では、血漿ｔＨｃｙ濃度が２２．５％低下していたが、プラセボ群では７．７％上昇していた。方法の項で定義したように、フォレートまたはコバラミの濃度変化に基づく生物学的コンプライアンスについての基準を用い、プラセボ群の8３人のうち１７人（２０．５％）が補助的に葉酸またはコバラミンを服用していたことが分かり、一方、治療群では、採血が行えた８４人のうち１４人（１６．７％）は、すくなくとも２回目の採血時（２４ヶ月時）の前の期間中はビタミン類を服用していなかったか、もしくは吸収していないことがわかった。従って、全体で１３６人が生物学的にコンプライアントであったと確認した。
【０１０６】
【表１】
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【０１０７】
【表２】
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【０１０８】
プラセボ群の萎縮速度（割合）に関係する因子
【０１０９】
これらの因子を表３および表４に示す。年齢は、脳の萎縮速度（割合）と深い関係があることから（ｒ＝０．３２、Ｐ＜０．０１）、続いて行った全ての分析について、年齢についての調整を行った。性別、喫煙歴、ＢＭＩ、飲酒、ＡＰＯＥ４、またはＭＴＨＦＲ  ６７７Ｃ＞Ｔ多型は、いずれも萎縮速度（割合）とは無関係であった（全ての項目に関してＰ＞０．１、年齢について調整）。連続変数については、萎縮速度（割合）が、ベースラインｌｏｇｔＨｃｙ（偏相関係数ｒ＝０．４１、Ｐ＜０．００１）および血漿クレアチニン濃度（偏相関係数ｒ＝０．２１、Ｐ＝０．０４９）と顕著な相関があった。拡張期血圧（偏相関係数ｒ＝−０．２１、Ｐ＝０．０５４）および初期の脳容量（偏相関係数ｒ＝−０．１９、Ｐ＝０．０９２）については、関係性がはっきりしなかった。あとに挙げた４つの変数については続いて行った調整分析に加えた。
【０１１０】
【表３】
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【０１１１】
【表４−１】
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【０１１２】
【表４−２】
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【０１１３】
【表４−３】
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【０１１４】
アウトカム
【０１１５】
ビタミンＢを用いて２４ヶ月間治療することにより、脳の萎縮速度がきわめて緩やかになった。年齢について調整後の年毎の脳の萎縮速度（割合）は、プラセボ群と比較して、治療群では２９．６％低下していた（０．７６％［９５％信頼区間、０．６３−０．９０］対１．０８％［０．９４−１．２２］、Ｐ＝０．００１）。上述した変数について更に調整を行ったが、低下率はわずかに変動して２７．１％となった程度であった（萎縮速度（割合）：０．７８％［０．６４−０．９１］対１．０７％［０．９４−１．２１］、Ｐ＝０．００３）。分析を生物学的にコンプライアントな治験参加者（ｎ＝１３６）に絞って行うと、治療効果が若干大きくなり、萎縮速度（割合）の低下が３１．１％になった（萎縮速度（割合）：０．７３％［０．５７−０．８８］対１．０６％［０．９０−１．２２］、多重調整分析後Ｐ＝０．００４）。
【０１１６】
さらに、ｔＨｃｙのベースライン濃度と処置との間に顕著な関係が見出された（ｌｏｇｔＨｃｙ×処置）Ｐ＝０．００１）。プラセボ群においては、ベースラインの時のｔＨｃｙ濃度は萎縮速度（割合）と強い正の関係を示した（Ｒ２＝０．２４）が、この関係は、治療群では見られなかった（図２）。フォレートまたはコバラミンのベースライン時の濃度についてもそのような関係は見られなかった。
【０１１７】
萎縮については、ベースライン時から追跡調査時の間に得られたｔＨｃｙ濃度、フォレート濃度およびコバラミン濃度の変化との関係性についても調べた（表５）。萎縮速度（割合）は、ｔＨｃｙ濃度と有意に関係しており、ホロＴＣおよびＴＣ飽和の変化とは逆の関係があった。さらに、分析を生物学的にコンプライアントな治験参加者に絞って行うと、効果はより強く表れ、フォレート濃度およびコバラミン濃度の変化との関係も有意になった。シスタチオニン濃度の変化とは全く関係が見られなかった。従って、フォレートまたはコバラミンの状態が改善すればするほど、萎縮の進行速度は遅くなった。逆に、フォレートまたはコバラミンの濃度が低下した治験参加者では、萎縮のリスクが上昇した（図３にｔＨｃｙ濃度を指標として示す）。図４は、サブトラクション頭蓋ＭＲＩスキャンを示しており、それぞれ、２年の試験期間中にｔＨｃｙ濃度が上昇したプラセボ群の治験参加者、ｔＨｃｙ濃度が低下した治療群の治験参加者のものである。開始時には、両者のｔＨｃｙ濃度は同程度であったが、プラセボを服用した治験参加者は、２年間にｔＨｃｙ濃度が非常に上昇し、一方、治療を受けた治験参加者は、この期間中にｔＨｃｙ濃度が大きく低下した。萎縮速度は、プラセボを服用した治験参加者に対して、ビタミンＢを服用した治験参加者は５分の１以下であった。
【０１１８】
【表５】
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【０１１９】
多様なサブ群での効果を表４に示す。治療と以下の変数とのあいだには有意な相互関係はなかった：年齢、性別、ＭＣＩの分類、基準化した初期の脳容量、高血圧、非アスピリン性ＮＳＡＩＤ類の服用、喫煙、クレアチニン、ＡＰＯＥ４およびＭＴＨＦＲ  ６７７Ｃ＞Ｔ。上述したｔＨｃのベースライン濃度との相関関係と同様に、治療を受けた治験参加者のうち、ｔＨｃｙのベースライン濃度が中央値以下であった人は、萎縮速度が１１．２％低下し、一方、ｔＨｃｙのベースライン濃度が中央値以上であった人は、萎縮速度が４３．０％低下した（Ｐｉｎｔｅｒａｃｔｉｏｎ=０．０１９）。ｔＨｃｙ濃度を４段階に分けると、一番低い４分の１（ｔＨｃｙ濃度≦９．５μｍｏｌ／Ｌ）に属する治験参加者には治療効果は見られなかったが、一番高い４分の１（＞１３．０μｍｏｌ／Ｌ）に属する治験参加者では、ビタミンＢを用いた治療は、プラセボ服用に対して、萎縮速度が５３．３％減速した（Ｐｔｒｅａｔｍｅｎｔ=０．００１；ＰｔＨｃｙ=０．１３９；Ｐｉｎｔｅｒａｃｔｉｏｎ=０．０２３）。治療と卒中歴もしくはベースライン時のＴＩＡとの間には相関関係が見られた：プラセボ群において、以前にそのような病歴がある治験参加者では、年毎の萎縮速度（割合）は１．７６％［１．３１−２．２１］であったのに対し、そのような病歴がない治験参加者では１．０１％［０．８６−１．１５］であった。治療群では、病歴のある治験参加者は０．７４％［０．３５−１．１４］、病歴のない治験参加者は０．７７％［０．６３−０．９１］であった（Ｐｔｒｅａｔｍｅｎｔ=０．００１；Ｐｓｔｒｏｋｅ=０．０２８；Ｐｉｎｔｅｒａｃｔｉｏｎ=０．０１４）。卒中に関するこの相関関係は、ＭＲＩで観察された無症候性梗塞の治験参加者が含まれていた場合には、梗塞が全体的には萎縮速度に大きな影響を与えているものの（Ｐ＝０．０２５）、統計的にはもはや有意ではなかった（Ｐ＝０．０９８）。アスピリンの常用は治療との相関傾向を示した（Ｐｔｒｅａｔｍｅｎｔ=０．０２１；Ｐａｓｐｉｒｉｎ=０．１９；Ｐｉｎｔｅｒａｃｔｉｏｎ=０．０５２）。アスピリンを服用している治験参加者には治療効果が上がっていないように見受けられた。治験参加者のあるサブセットでは、試験前にビタミンＢ類を含むマルチビタミンサプリメントを服用していたことが報告されている（表１）。このような治験参加者では、治療がもはや効果を上げていないことについての有意な結果が得られた（Ｐ＝０．０３４）。このような結果は、ベースライン時に既にｔＨｃｙ濃度が低いこと（相乗平均９．８［９．８−１０．５］μｍｏｌ／Ｌ）とフォレート濃度が高いこと（３７．５［３１．５−４４．７］ｎｍｏｌ／Ｌ）が関係していると考えられる。
【０１２０】
さらに、試験では認知力に関しては治療効果を確認することに重点をおいていなかったが、最終的な認知力試験のうちのいくつかのスコアは萎縮速度（割合）と相関していたことを特記しておく。複数の線形回帰から、試験の最後の時点でＭＭＳＥスコアを決定づける主要な因子は、ベースライン時のＭＭＳＥスコア（偏相関係数ｒ＝０．４２、Ｐ≦０．００１）、脳の萎縮速度（割合）（偏相関係数ｒ＝−０．３６、Ｐ≦０．００１）および年齢（偏相関係数ｒ＝０．２０、Ｐ＝０．０１）であることが示された（調整Ｒ２＝０．３３）。同様の因子は、ＴＩＣＳ−Ｍの最終スコアにも影響を与えた。すなわち、ベースライン時のＴＩＣＳ−Ｍスコア（偏相関係数ｒ＝０．３９、Ｐ＜０．０１）、萎縮速度（割合）（偏相関係数ｒ＝−０．３６、Ｐ＜０．００１）および年齢（偏相関係数ｒ＝０．２７、Ｐ≦０．００１）（調整Ｒ２＝０．３９）であった。
【０１２１】
全コホートでの安全性アウトカム
【０１２２】
２７１人の治験参加者から構成される全コホートにおいて、ビタミンＢは全体的に非常に良好な作用を示した。ベースライン時には、わずかに７人（２．５％）が血漿中のフォレート濃度が＜７ｎｍｏｌ／Ｌであり、６人（２．２％）がビタミンＢ１２濃度が＜１５０ｐｍｏｌ／Ｌであった。試験期間終了後にビタミン分析をおこなったので、これらの治験参加者は、ビタミン欠損症と分類されたにもかかわらず、かかりつけ医によって診断が下されない限りは、薬剤を処方しなかった。
【０１２３】
全試験期間を通して４８人が服用中止してしまい、そのうち、２８人が治療群、２０人がプラセボ群であった。服用中止の理由を以下の表６に示す。治療群の中で振動間隔消失を起こした治験参加者がわずかにいた以外は、安全性に対する目立った問題、副作用発現に関する顕著な差異はなかった（表６）。服用中止までの時間は、試験開始直後の離脱者を除いても、治療群の方が短かった。
【０１２４】
【表６】
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【０１２５】
考察
【０１２６】
ビタミンＢを用いた治療を行ったことにより、最終的なｔＨｃｙ濃度は、プラセボ群と比較して３１．７％の差が生じ、それに伴って脳の萎縮速度（割合）は約３０％低下した。安全性に関する問題点はなかったことから、高用量のビタミンＢを用いることで、ＭＣＩを患っている高齢者の脳の萎縮速度（割合）を下げられたと結論づけられた。
【０１２７】
治療効果は、ベースライン時のｔＨｃｙ濃度が最も高かった患者で大きく、ｔＨｃｙ濃度が高い方から４分の１（＞１３．０μｍｏｌ／Ｌ）に属する治験参加者では、萎縮速度（割合）の低下が５３％であった。ｔＨｃｙ濃度が低い方から４分の１（≦９．５μｍｏｌ／Ｌ）に属する治験参加者では、萎縮に対する治療効果はなかった。プラセボ群では、萎縮速度は、ベースライン時のｔＨｃｙ濃度と関係があった。対照的に、治療群では、ベースライン時のｔＨｃｙ濃度と萎縮速度（割合）との間には全く関係がなかった。この知見から、ｔＨｃｙ濃度が高いことは萎縮の直接の原因であること、および／または、ｔＨｃｙ濃度は、原因因子であるビタミン類が低〜正常濃度であることに関するマーカーであることを示しているといえる。
【０１２８】
本試験においては、ビタミンＢ１２またはフォレートのいずれかの上昇が、萎縮速度（割合）の低下と関連していることが見出された。
【０１２９】
結論
【０１３０】
本試験は英国内で実施した。英国では、食物に任意に葉酸を添加して強化することが認められているが、強制ではない。治療効果は、ベースライン時のｔＨｃｙ濃度によって異なり、その濃度が、４つに分けたうちの高い方から４分の３、すなわち９．５μｍｏｌ／Ｌの人では、低い方から４分の１の人と比較して、萎縮の進行が顕著に遅くなっていることが示された。米国では、ビタミンＢ類の強化が義務化されており、２００３〜４年では、６０歳以上の人の１３．６％でＨｃｙ濃度が１３μｍｏｌ／Ｌより高い（ファイファー（Ｐｆｅｉｆｆｅｒ）ら、２００８年）。高用量のビタミンＢを用いて治療をおこなうことで、萎縮速度が５０％より大きく下がったことがわかった。米国の６０歳以上の人におけるｔＨｃｙ濃度の中央値は１０．１μｍｏｌ／Ｌであることから、ＭＣＩを患っている人のうちのかなりがそのような措置による恩恵を受けていると考えられる。
【０１３１】
今回の知見は、ＭＣＩによって認知力が低下している人にとって有意味だと考えられる。第一に、長期（５年まで）にわたる試験において、ＭＣＩの場合の脳全体の萎縮速度（割合）は、ＭＭＳＥを含むいくつかのテストで明らかになった認知力の低下と相関していることがわかったからである（ジャック（Ｊａｃｋ）ら、２００４年）。第二に、発明者らが、最終認知試験スコアの重要な予測指標を捜していた時に、萎縮速度（割合）は、ＭＭＳＥおよびＴＩＣＳ−Ｍの最終スコアを決定づける３つの主要な因子のうちのひとつであったからである。第三に、ホモシステインを低下させる処置に関する他の２つの無作為対照試験が、認知力に効果を示したからである。ベースライン時のｔＨｃｙ濃度が１３μｍｏｌ／Ｌより高い健常な治験参加者に葉酸（０．８ｍｇ／日）を３年間投与した試験では、いくつかの認知力試験で効果が上がっていた（ドゥルガ（Ｄｕｒｇａ）ら、２００７年）。ＭＣＩを患っていてアルツハイマー病へ移行した患者では、脳の萎縮速度はより速いが、高用量の葉酸、ビタミンＢ６およびＢ１２を服用することで、ＭＣＩからアルツハイマー病への移行を遅らせることができると考えられる。
【０１３２】
実施例２
【０１３３】
更に分析を行い、次の事柄について確認した：（ａ）ビタミンＢを用いた治療が認知機能に効果を示したか否か；（ｂ）ベースライン時の血漿中ｔＨｃｙ濃度を調整する治療が認知力の低下速度に効果を示すか否か；（ｃ）どの認知ドメインがビタミンＢ治療に最も強く関係しているか；および（ｄ）試験終了時に何らかの有意な臨床なアウトカムがあったか否か。
【０１３４】
方法
【０１３５】
試験のプロトコール
【０１３６】
試験のプロトコールは既に実施例１に記載している。募集広告に応じた人（ｎ＝６４６）について、スクリーニング用質問事項を利用して、参加基準およびＭＣＩに関し、電話で聞き取ってスクリーニングした。このとき利用したのは、認知状態に関する電話インタビュー改訂版（Ｔｅｌｅｐｈｏｎｅ  ｉｎｔｅｒｖｉｅｗ  ｆｏｒ  Ｃｏｇｎｉｔｉｖｅ  Ｓｔａｔｕｓ−Ｍｏｄｉｆｉｅｄ：ＴＩＣＳ−Ｍ）（参考文献１５）（≧１７および≦２９）、およびカテゴリー流ちょう性試験（モリス（Ｍｏｒｒｉｓ）ら、１９８８年）であった。７０歳以上のＭＣＩ患者であって、試験パートナーがおり、次のような除外基準に当てはまらない人を被験者とした：痴呆；進行性の癌；３ヶ月以内に大発作を起こした；メトトレキセート、抗癌剤もしくは抗てんかん剤を用いた治療、または、葉酸（＞３００μｍｏｌ／日）、ピリドキシン（＞３ｍｇ／日）もしくはコバラミン（＞１．５ｇ／日）の服用または注射による治療を受けている；老年期うつスケール（Ｇｅｒｉａｔｒｉｃ  Ｄｅｐｒｅｓｓｉｏｎ  Ｓｃａｌｅ）（イェサヴァッジ（Ｙｅｓａｖａｇｅ）、ＪＡ）Ｐｓｙｃｈｏｐｈａｒｍａｃｏｌ  Ｂｕｌｌ  １９８８，２４：７０９−７１１）を用いて評価された重篤なうつ症状。
【０１３７】
初回来院時には、治療意志のある（ＩＴＴ）群は、同意書を提出した２６６人であり、彼等を無作為に治療群とプラセボ群とに振り分けた。試験パートナーの協力を得て判定したＭＣＩであるという診断を確定することを目的として、以下の測定を行った：ＭＭＳＥ＞２４／３０）；痴呆検査（ＣＤＲ＝０．５）；高齢者における認知力低下に関して情報提供者への聞き取り（ＩＱＣＯＤＥ）；高齢者のケンブリッジ精神疾患試験（ＣＡＭＤＥＸ）から引用した主観的記憶の不快症状に関する質問（参考文献２０）；およびケンブリッジ行動一覧表（Ｃａｍｂｒｉｄｇｅ  ｂｅｈａｖｉｏｕｒａｌ  Ｉｎｖｅｎｔｏｒｙ）から判断した日常生活内の活動。治験参加者については、以下に記載している神経心理学試験の認知力試験閾値に従い、健忘性ＭＣＩであるか非健忘性ＭＣＩであるか、また、それぞれについて、単一領域ＭＣＩであるか複数領域ＭＣＩであるかを分類した。非健忘性ＭＣＩの場合には、ビタミンＢの作用機作の一環と考えられ、また、ホモシステインが記憶および非記憶領域の機能に関与していると考えられた。
【０１３８】
治験参加者には、簡単な医学的検査を行い、血液および尿のサンプルを採取し、また、禁忌がない場合には、治療開始時と２年後の治療終了時の２回、頭蓋ＭＲＩスキャン撮影を行うことに関する同意を求めた。本試験は、ＮＨＳ研究倫理委員会によって承認された（ＣＯＲＥＣ  ０４／Ｑ１６０４／１００）。
【０１３９】
訓練を受けた研究看護士および心理士により、神経心理学試験を実施したが、このとき、ＣＤＲの結果および病歴提供者からの情報は、彼等には伏せていた。試験内容としては、次のものが挙げられる：エピソード記憶（ＨＶＬＴ−Ｒ（ブラント（Ｂｒａｎｄｔ）、１９９１年、ＣＡＮＴＡＢ  ＰＡＬおよび空間認識試験［ｗｗｗ．ｃａｍｃｏｇ．ｃｏｍ］）；意味記憶（段階的ネーミング試験（Ｇｒａｄｅｄ  Ｎａｍｉｎｇ  Ｔｅｓｔ）（マッケナ（ＭｃＫｅｎｎａ）、１９８９年）およびスーパーマーケットの品目に関するカテゴリー流ちょう性試験（ＣＥＲＡＤ）（モリス（Ｍｏｒｒｉｓ）、１９８８年））；実行機能（トレイルメーキングＡ＆Ｂ（Ｔｒａｉｌｍａｋｉｎｇ  Ａ＆Ｂ）（レイタン（Ｒｅｉｔａｎ））、ＳＤＭＴ（スミス（Ｓｍｉｔｈ））、ＣＬＯＸ（ローヤル（Ｒｏｙａｌｌ）、１９８８年）および選択的注意試験（地図探し：Ｍａｐ  Ｓｅａｒｃｈ）（ロバートソン（Ｒｏｂｅｒｔｓｏｎ）、１９９４年）など。
【０１４０】
治験参加者については、治療開始から３ヶ月、６ヶ月、１２ヶ月、１５ヶ月および１８ヶ月後に電話連絡をし、服薬遵守、副作用について確認し、また、ＨＶＬＴ−Ｒを６つの別異の版を用いて連続的に実施した。ここで、別異の版を使用したのは、練習の影響を避けるためである。２４ヶ月後、治験参加者は病院へ行き、１回目の来院時に行ったように、認知力試験を含む全試験を繰り返した。
【０１４１】
治療については、ＭＲＩスキャンを実施した治験参加者は、１回目の実施と同日、ＭＲＩを行わなかった治験参加者は、振り分け後の初回来院日に開始した。電話による集中無作為振り分けを利用することにより、振り分けに私感が全く入り込まないようにし、かつ、年齢、性別、ＴＩＣＳ−Ｍのベースラインスコア、ＭＲＩに対する同意についての配慮を最小限に留めた。治療群には、ＴｒｉｏＢｅ  Ｐｌｕｓ（登録商標）（ｍｅｄａ  ＡＢ／Ｒｅｃｉｐ  ＡＢ、スウェーデン国、ソルナ、パイパーズ２Ａ（Ｐｉｐｅｒｓ  ｖaｇ  ２Ａ）、ＳＥ−１７０  ０９）を処方したが、これは、葉酸０．８ｍｇ、シアノコバラミン０．５ｍｇ、および塩酸ピリドキシン２０ｍｇを含有する錠剤である。プラセボ錠剤は、ビタミン不含の錠剤を処方した。２回目の来院時、または２回目のＭＲＩスキャン実施時に、治験参加者は錠剤の瓶を返却した。
【０１４２】
採血およびアッセイ（既述）
【０１４３】
ベースライン時および２４ヶ月後、血液サンプルを通常の臨床試験室へ送り、血液学的および生化学的数値を即時測定した。ＥＤＴＡを含むサンプルを調製、保存した。血漿中のｔＨｃｙ濃度は、アボット（Ａｂｂｏｔｔ）社のＩＭｘ（登録商標）分析機を用い、蛍光偏光イムノアッセイによって測定した。血漿中のフォレートおよびコバラミンの濃度は、微生物学的アッセイで測定した。ゲノム性ＤＮＡは、ウィザードＤＮＡ精製キット（Ｗｉｚａｒｄ  ＤＮＡ  Ｐｕｒｉｆｉｃａｔｉｏｎ  Ｋｉｔ）（プロメガ（Ｐｒｏｍｅｇａ）社、英国サウザンプトン）を用いて血液から抽出した。ＡｐｏＥ遺伝子型（ＮＣＢＩ  エントレツ・ジーン（ＮＣＢＩ  Ｅｎｔｒｅｚ  Ｇｅｎｅ：３４８））は、一段階ＰＣＲ法を用いて決定した。
【０１４４】
統計分析
【０１４５】
２年間にわたる脳の萎縮速度に基づいた本試験についての検出力計算については、実施例１に記載している。しかしながら、ＩＴＴ治験参加者の大多数（ｎ＝２２３）について、本分析のために第二次アウトカム測定（精神心理学試験）を完了した。データが長期にわたっていることから、ＨＶＬＴ−遅延想起（ＨＶＬＴ−ＤＲ）およびＭＭＳＥに対してはロジットリンクを用いて二項分布により、カテゴリー流ちょう性に対してはログリンクを用いてポアソン（Ｐｏｉｓｓｏｎ）分布により、一般線形混合モデルを補正した。パラメトリックＡＦＴ生存モデルは、トレイルメーキングＡ（Ｔｒａｉｌｍａｋｉｎｇ  Ａ）に対しては、ウェイブル（Ｗｅｉｂｕｌｌ）分布を用いて補正した。ＨＶＬＴ−ＤＲおよびＭＭＳＥに対して二項分布を選択したことは適切であるが、これは、スコアが規定の一連の質問について得られた正答数を表しているからである。カテゴリー流ちょう性に対してはポアソン（Ｐｏｉｓｓｏｎ）分布を選択したが、これは、スコアが一定時間間隔内での正しい品目数だからである。ＣＬＯＸテストの解釈に一部関連していることから、後者については、追跡調査時にＣＬＯＸ１を模して比較分析を行ったが、このとき、ベースライン時にはＣＬＯＸ１、追跡調査時にはＣＬＯＸ２を用いた。ＭＭＳＥに対してはガウス（Ｇａｕｓｓｉａｎ）分布を用いたが、これは、線形混合モデルを用いることと同等である。ＣＤＲスコアは順序付きカテゴリカルアウトカムであるので、長期累積ロジットモデルを用いて分析した。しかしながら、CDRスコアが１以上であった治験参加者は非常に少数だったので、２値のアウトカムを０または０．５以上と記録し、次に、ロジットリンクを用いたバーノウリ分布（Ｂｅｒｎｏｕｌｌｉ）を利用して一般線形混合モデルを補正した。最後に、一般予測式を全てのアウトカムにあてはめて相対的な結果を得、無作為モデルから得られた最終結果を確定した。
【０１４６】
モデルについては、最初は、交互作用項を入れずに行い、共変数に対する認知力制御治療の直接的効果を判断した。ここで、共変数には、年齢、ＡｐｏＥ、性別および教育年数などが含まれる。その後、交互作用項にベースライン時のｔＨｃｙ濃度を加えたが、これをまずは連続変数として、次に２値変数として扱った。解釈を容易にするため、この分析の結果は、ｔＨｃｙ濃度を連続変数ではなく２値変数として報告した。更に特定すると、試験治験参加者は、ベースライン時のｔＨｃｙ濃度が中央値（１１．３ｍｉｃｒｏｍｏｌ／Ｌ）より低い場合には「低ｔＨｃｙ低群」、中央値より高い場合には「高ｔＨｃｙ濃度群」と分類した。
【０１４７】
統計分析は、認知領域毎にひとつの検定を行ったが、これは、各テストが別異の統計モデルを必要とするからである。すなわち、エピソード記憶についてはＨＶＬＴ、意味記憶に対してはカテゴリー流ちょう性、注意力および実行機能についてはＣＬＯＸ、および包括的認知力についてはＭＭＳＥを採用した。
【０１４８】
全てのアウトカムについて、全ての効果（エフェクト）すなわち、主要効果、二要因交互作用効果および三要因効果を含んだ飽和モデルを用いて分析を開始した。。次に、優度比検定およびＡＩＣ（赤池情報量基準（Ａｋａｉｋｅ  ｉｎｆｏｒｍａｔｉｏｎ  ｃｒｉｔｅｒｉｏｎ））を用いて階層型にあてはめた。
【０１４９】
結果
【０１５０】
統計的データ
【０１５１】
初回来院時に無作為に振り分けした２６６人のＩＴＴ治験参加者のうち、２２３人が２年後に再度来院し、精神心理学評価を全て繰り返し行った。中止理由については、既に実施例１に記載している。統計分析は、治験参加者の治療を主眼として行った（プラセボ群ｎ＝１３４、治療群ｎ＝１３２）。
【０１５２】
治療群およびプラセボ群に対する統計的データを表７に示す。
【０１５３】
【表７】
2013532166.tif 000011
【０１５４】
ベースライン測定時には、群間に差異は認められなかった。また、試験を完了した治験参加者の人口統計データは類似していた。次のものを含む認知力スコアの平均値はすべて、ＭＣＩについての閾値より高かった：ＭＭＳＥ２８．１３（１．７６）、ＴＩＣＳ−Ｍ２４．８５（２．８）およびＨＶＬＴの総想起数２３．２（５．２）。ＧＤＳスコアの平均が６．７（４．８）であったことから、軽いうつ症状があることが示唆された。ベースライン時のフォレート、ビタミンＢ１２およびｔＨｃｙの濃度は、全員、年齢相応の正常範囲内であった。認知力スコアがＭＣＩの閾値以下であった治験参加者について、初回来院時に、健忘性ＭＣＩであるか非健忘性ＭＣＩであるか、また、それぞれについて、単一領域ＭＣＩであるか複数領域ＭＣＩであるかを分類した。２１人については閾値以下のスコアのものが全くなかったが、このうち１０人はＣＤＲ評価が０．５であった。従って、電話によるスクリーニング法を経て試験に参加することになった人のうち、募集時にＭＣＩと分類されたにも拘わらず、無作為振り分け時に客観的に認知機能障害がないと考えられた人はわずか１１人（４％）であった。その人たちも治験参加者に加えた。
【０１５５】
認知力に対するビタミンＢを用いた長期的治療の効果
【０１５６】
ＨＶＬＴ遅延想起（ＨＶＬＴ−ＤＲ）、ＭＭＳＥ、ＣＬＯＸおよびカテゴリー流ちょう性の各スコアについて、ビタミンＢを用いた長期的治療の効果を調査した。
【０１５７】
ビタミンＢ治療群においては、追跡調査時に、ＣＬＯＸ１スコアが統計的に有意に上昇していた。ベースライン時にＣＬＯＸ１スコアが同程度であった治験参加者において、追跡調査時においてＣＬＯＸ１について正答を出すオッズは、治療を受けた治験参加者のほうがプラセボを投与された治験参加者よりも３０％も高かった（Ｐ＝０．０１４）。ベースライン時のＣＬＯＸ１、ならびに、交絡因子である年齢、教育年数、ＡｐｏＥおよび性別に加え、追跡調査時のＣＬＯＸ２についてモデルを制御した。治療とベースライン時のｔＨｃｙ濃度との間には有意な関係は見出されなかった。
【０１５８】
その他の認知力テストに対する治療効果は、ベースライン時のｔＨｃｙ濃度を交互作用項として取り入れた場合に明かだった。最終モデルでは、「高ｔＨｃｙ濃度群」でプラセボを服用した治験参加者は、認知力に顕著な低下が見られた一方、「高ｔＨｃｙ濃度群」のうちで治療を受けた治験参加者は全く低下が見られなかったことが示された。「低ｔＨｃｙ濃度群」では、治療群およびプラセボ群ともに、平均認知スコアは経時低下しなかった。モデルによって示された有意な差は、「高ｔＨｃｙ濃度群」の中で治療を受けた治験参加者とプラセボを服用した治験参加者との間のみで現れた。
【０１５９】
図５ａは、治療を受けた「高ｔＨｃｙ濃度群」の治験参加者が、ＨＶＬＴ−ＤＲの質問に対して正解を出すオッズを、もしその治験参加者が治療を受けていなかった場合に正解を出すそれと比較して示している。オッズ比は時間の経過と共に顕著に上昇している。例えば、「高ｔＨｃｙ濃度群」のある治験参加者が、治療開始から２年後に正答を出すオッズは、その治験参加者が治療を受けなかったと仮定した場合のそれよりも７４％も大きかった（Ｐ＝０．００４）．図５ｂは、治療を受けた「高ｔＨｃｙ濃度群」の平均的な治験参加者において、ＨＶＬＴ−ＤＲ総スコアが時間の経過に従ってどのように変化したのかを示している。治療群では成績が維持されたが、プラセボ群では時間と共にスコアが低下した。ＨＶＬＴ−ＤＲスコアについては、初期練習効果を排除するため、０ヶ月時点でのデータは除いた。
【０１６０】
図６ａは、「高ｔＨｃｙ濃度群」のある治験参加者が治療開始の２年後にＭＭＳＥの質問に正答を出すオッズが、治療を施さなかったと仮定した場合のそれよりも４４％大きいことを示している（Ｐ−値＝０．００３）。図６ｂは、「高ｔＨｃｙ濃度群」におけるＭＭＳＥ総スコアの経時変化を示している。プラセボ群ではＭＭＳＥスコアが低下したのに対し、治療群では大きな変化は見られなかった。
【０１６１】
図７は、治療を受けた「高ｔＨｃｙ濃度群」のある治験参加者のカテゴリー流ちょう性スコアの平均について、その治験参加者が治療を受けなかったと仮定した場合との比較を示している。例えば、「高ｔＨｃｙ濃度群」治験参加者の治療開始２年後の平均単語数は、治療を受けなかったと仮定した場合のそれより１２％多かった（Ｐ−値＝０．００３）。
【０１６２】
図８は、４段階に分けたｔＨｃｙベースライン濃度に応じ、ＨＶＬＴ−ＤＲスコアの経時変化を示している。スコアの低下を遅らせる治療の効果はｔＨｃｙのベースライン濃度が１０μｍｏｌ／Ｌ以上の治験参加者に限定されており、ｔＨｃｙのベースライン濃度が高いほど治療効果が大きかった。
【０１６３】
長期にわたる臨床アウトカムに対するビタミンＢの治療効果
【０１６４】
治験参加者全体をｔＨｃｙ濃度に従って４つに層別する、全体的なＣＤＲスコアに対する治療効果は明らかだった。ＣＤＲスコアについては、ベースライン時のサンプル組成は、プラセボ群と治療群ではほぼ同等であった。すなわち、プラセボ群ではＣＤＲ＝０：２９．８％、ＣＤＲ＝０．５：７０．２％、ＣＤＲ＝１：０％であり、治療群ではＣＤＲ＝０：２８．９％、ＣＤＲ＝０．５：７０％、ＣＤＲ＝１：１．１％であった。アウトカムは、プラセボ群ではそれぞれ４１．４％、５５．３％、３．３％であり、治療群では５０％、４７．８％、１．２％であった。ベースライン時のｔＨｃｙ濃度が高い方から４分の１（＞１３．１２μｍｏｌ／Ｌ）に属する治験参加者では、治療開始２年後にＣＤＲ＝０であるオッズは、治療を受けなかったと仮定した場合のそれの９倍であった（２年後のオッズ比＝９、Ｐ＝０．００４）。図９は、ＣＤＲスコアが０である治験参加者に対する治療効果を示しており、治療効果は、ｔＨｃｙ濃度が高い方から４分の１に属する治験参加者に限定されていることがわかる。
【０１６５】
考察
【０１６６】
結果から、ビタミンＢを用いた治療は、認知力テストの成績の低下を遅らせる効果があることが示された。実行機能テストであるＣＬＯＸでは、スコアの上昇に関する治療効果は直接的であり、一方、その他の認知領域に対しては、効果はベースライン時のｔＨｃｙ濃度によって異なっていた。血漿中のｔＨｃｙ濃度が１１．３μｍｏｌ／Ｌ以上であったプラセボ群では、認知力の低下速度が増していたのに対し、治療群では認知力は低下しなかった。該効果は、総合的認知力、エピソード記憶、および意味記憶について示された。該効果は、エピソード記憶について最も顕著であり、高ｔＨｃｙ濃度の治験参加者に２年間治療を行ったところ、プラセボ群と比較して、正しい単語を想起する尤度は７４％も高く、さらに、治療群とプラセボ群との間にはスコアの低下速度に有意差があった。ベースライン時にｔＨｃｙ濃度が高かった治験参加者は、ビタミンＢを用いた治療によりよく応答し、試験終了時にはｔＨｃｙ濃度が下がっており、また、ｔＨｃｙ濃度とは無関係に、治療群では、脳の萎縮速度（割合）が低下した。ベースライン時にｔＨｃｙ濃度が低かった治験参加者では、認知力に対する治療効果は見られなかったが、認知力は、ｔＨｃｙ濃度が高くて治療を受けた治験参加者と同程度に保たれていた。
【０１６７】
結果は、臨床評価尺度として広く一般的に使用されているＣＤＲに対しても有効であったことを示している。ｔＨｃｙ濃度が高い方から４分の１に属する治験参加者では、治療を受けた中からＣＤＲスコアが０の治験参加者の割合が急増したが、プラセボ群ではそのようなことは起きなかった。ＣＤＲによって示される臨床的改善から、ビタミンＢを用いた治療によってｔＨｃｙ濃度を下げたＭＣＩ治験参加者では、認知機能障害の反転を示すいくつかの事実が明らかになっている。
【０１６８】
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プラスマン（Ｐｌａｓｓｍａｎ），  ＢＬ．，ランガ（Ｌａｎｇａ），ＫＭ．，フィシュター（Ｆｉｓｈｔｅｒ），ＧＧ．，ヘーリンガ（Ｈｅｅｒｉｎｇａ），ＳＧ．，ウェイアー（Ｗｅｉｒ），ＤＲ．，オフステダール（Ｏｆｓｔｅｄａｌ），ＭＢ．ら、Ａｎｎ  Ｉｎｔｅｒｎ  Ｍｅｄ  ２００８；１４８：４２７−４３４
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レスニック（Ｒｅｓｎｉｃｋ），ＳＭ．，ファム（Ｐｈａｍ），ＤＬ．，クラウト（Ｋｒａｕｔ），ＭＡ．，ゾンダーマン（Ｚｏｎｄｅｒｍａｎ），ＡＢ．，ダヴァツィコス（Ｄａｖａｔｚｉｋｏｓ），Ｃ．  Ｊ  Ｎｅｕｒｏｓｃｉ  ２００３；２３：３２９５−３３０１
リース（Ｒｉｅｓ），ＭＬ．，カールソン（Ｃａｒｌｓｓｏｎ），ＣＭ．，ロウレイ（Ｒｏｗｌｅｙ），ＨＡ．，サガー（Ｓａｇｅｒ），ＭＡ．，グリーソン（Ｇｌｅａｓｏｎ），ＣＥ．，アスタナ（Ａｓｔｈａｎａ），Ｓ．ら、Ｊ  Ａｍ  Ｇｅｒｉａｔｒ  Ｓｏｃ  ２００８；５６：９２０−９３４
リサチェール（Ｒｉｓａｃｈｅｒ），ＳＬ．，サイキン（Ｓａｙｋｉｎ），ＡＪ．，ウェスト（Ｗｅｓｔ），ＪＤ．，シェン（Ｓｈｅｎ），Ｌ．，フィルピ（Ｆｉｒｐｉ），ＨＡ．，マクドナルド（ＭｃＤｏｎａｌｄ），ＢＣ．  Ｃｕｒｒ  Ａｌｚｈｅｉｍｅｒ  Ｒｅｓ  ２００９；６：３４７−３６１
ロビンス（Ｒｏｂｂｉｎｓ），ＴＷ．，ジェームズ（Ｊａｍｅｓ），Ｍ．，オウェン（Ｏｗｅｎ），ＡＭ．，サハキアン（Ｓａｈａｋｉａｎ），ＢＪ．，マクインネス（ＭｃＩｎｎｅｓ），Ｌ．，ラビット（Ｒａｂｂｉｔｔ），Ｐ．「ケンブリッジ神経心理検査自動化集団：健常な高齢ボランティアから構成される多数サンプルについての因子解析研究（Ｃａｍｂｒｉｄｇｅ  Ｎｅｕｒｏｐｓｙｃｈｏｌｏｇｉｃａｌ  Ｔｅｓｔ  Ａｕｔｏｍａｔｅｄ  Ｂａｔｔｅｒｙ（ＣＡＮＴＡＢ）：ａ  ｆａｃｔｏｒ  ａｎａｌｙｔｉｃ  ｓｔｕｄｙ ｏｆ  ａ  ｌａｒｇｅ  ｓａｍｐｌｅ  ｏｆ ｎｏｒｍａｌ ｅｌｄｅｒｌｙ ｖｏｌｕｎｔｅｅｒｓ）」Ｄｅｍｅｎｔｉａ  １９９４；５：２６６−２８１
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スルイマー（Ｓｌｕｉｍｅｒ），ＪＤ．，ヴァン・デル・フリール（ｖａｎ  ｄｅｒ  Ｆｌｉｅｒ），ＷＭ．，カラス（Ｋａｒａｓ），ＧＢ．，フォックス（Ｆｏｘ），ＮＣ．，シェルテンス（Ｓｃｈｅｌｔｅｎｓ），Ｐ．，バークホフ（Ｂａｒｋｈｏｆ），Ｆ．ら、Ｒａｄｉｏｌｏｇｙ  ２００８；２４８：５９０−５９８
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ヴォギアツォグロウ（Ｖｏｇｉａｔｚｏｇｌｏｕ），Ａ．，レフサム（Ｒｅｆｓｕｍ），Ｈ．，ジョンストン（Ｊｏｈｎｓｔｏｎ），Ｃ．，スミス（Ｓｍｉｔｈ），ＳＭ．，ブラッドレイ（Ｂｒａｄｌｅｙ），ＫＭ．，デ・ヤーガー（ｄｅ  Ｊａｇｅｒ），Ｃ．ら、Ｎｅｕｒｏｌｏｇｙ  ２００８；７１：８２６−８３２
ヴァルデン（Ｗａｒｄｅｎ），ＤＲ．，レフサム（Ｒｅｆｓｕｍ），Ｈ．，Ｃｌｉｎ  Ｃｈｅｍ  ２００５；５１：１７１３−１７１６
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ウィリアムズ（Ｗｉｌｌｉａｍｓ），ＪＨ．，ペレイラ（Ｐｅｒｅｉｒａ），ＥＡ．，バッジ（Ｂｕｄｇｅ），ＭＭ．，ブラッドレイ（Ｂｒａｄｌｅｙ），ＫＭ．  Ａｇｅ  Ａｇｅｉｎｇ  ２００２；３１：４４０−４４４
ウォルターズ（Ｗｏｌｔｅｒｓ），Ｍ．，ヒックステイン（Ｈｉｃｋｓｔｅｉｎ），Ｍ．，フリンターマン（Ｆｌｉｎｔｅｒｍａｎｎ），Ａ．，テウェス（Ｔｅｗｅｓ），Ｕ．，ハーン（Ｈａｈｎ），Ａ．「健康なドイツ人高齢女性における認知力とビタミン状態との関係−６ヶ月間のマルチビタミンサプリメント服用の効果（Ｃｏｇｎｉｔｉｖｅ  ｐｅｒｆｏｒｍａｎｃｅ ｉｎ  ｒｅｌａｔｉｏｎ  ｔｏ ｖｉｔａｍｉｎ  ｓｔａｔｕｓ ｉｎ  ｈｅａｌｔｈｙ  ｅｌｄｅｒｌｙ Ｇｅｒｍａｎ  ｗｏｍｅｎ−ｔｈｅ  ｅｆｆｅｃｔ  ｏｆ  ６−ｍｏｎｔｈ  ｍｕｌｔｉｖｉｔａｍｉｎ  ｓｕｐｐｌｅｍｅｎｔａｔｉｏｎ）」Ｐｒｅｖ  Ｍｅｄ  ２００５；４１：２５３−２５９
ヤン（Ｙａｎｇ），ＬＫ．，ウォン（Ｗｏｎｇ），ＫＣ．，ウー（Ｗｕ），ＭＹ．，リャオ（Ｌｉａｏ），ＳＬ．，クオ（Ｋｕｏ），ＣＳ．，ファン（Ｈｕａｎｇ），ＲＦＳ．  Ｊ，Ａｍ  Ｃｏｌｌ  Ｎｕｔｒ  ２００７；２６：２７２−２７８
イェサヴァッジ（Ｙｅｓａｖａｇｅ），ＪＡ，ブリンク（Ｂｒｉｎｋ），ＴＬ．，ローズ（Ｒｏｓｅ），ＴＬ．，ラム（Ｌｕｍ），Ｏ．，ファン（Ｈｕａｎｇ），Ｖ．，アデイ（Ａｄｅｙ），Ｍ．ら、Ｊ  Ｐｓｙｃｈｉａｔｒ  Ｒｅｓ  １９８２；１７：３７−４９
イェサヴァッジ（Ｙｅｓａｖａｇｅ），ＪＡ．，「老年期うつスケール（Ｇｅｒｉａｔｒｉｃ  Ｄｅｐｒｅｓｓｉｏｎ  Ｓｃａｌｅ）」、Ｐｓｙｃｈｏｐｈａｒｍａｃｏｌ  Ｂｕｌｌ  １９８８；２４：７０９−７１１
ジルバースタイン（Ｚｙｌｂｅｒｓｔｅｉｎ），ＤＥ．，リスナー（Ｌｉｓｓｎｅｒ），Ｌ．，ビヨーケルンド（Ｂｊｏｒｋｅｌｕｎｄ），Ｃ．，）メーリグ（Ｍｅｈｌｉｇ），Ｋ．，セレ（Ｔｈｅｌｌｅ），ＤＳ．，ガスタフソン（Ｇｕｓｔａｆｓｏｎ），  Ｄ．ら、Ｎｅｕｒｏｂｉｏｌ  Ａｇｉｎｇ  ２００９；印刷前に電子版で公開
【図１】
2013532166.tif 000012
【図２】
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【図３】
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【図５】
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【図６】
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【図７】
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【図８】
2013532166.tif 000018
【図９】
2013532166.tif 000019
【図１０】
2013532166.tif 000020
【図４】
2013532166.tif 000021
【国際調査報告】
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2013532166.tif 000023
2013532166.tif 000024