(57)【要約】  式（Ｉ）の化合物またはその薬学的に許容される塩またはプロドラッグ：（Ｉ）［式中、Ｘは、ＮまたはＣＨであり；Ｑは、ＮＲ６またはＯであり；Ａ１およびＡ２は、独立して、水素もしくはＣ１−６アルキルであるか、または一緒にカルボニル基を形成してもよく；Ｒ１およびＲ２は、独立して、水素、ハロゲン、ＣＦ３、ＣＮ、ＯＲ７、ＯＲ８、ＮＲ８Ｒ９、ＮＲ８ＣＯＲ１０、ＮＲ８ＳＯ２Ｒ１０、ＳＯ２ＮＲ８Ｒ９、ＳＯ２Ｒ１０、または１個もしくは複数のヒドロキシル、Ｃ１−６アルコキシ、ハロゲンもしくはＮＲ８Ｒ９によって場合によってかつ独立して置換されたＣ１−６アルキルであり；Ｒ３は、水素、ハロゲン、ＣＦ３またはＯＲ７であり；Ｒ４は、水素、ハロゲン、ＣＦ３、ＯＲ８、ＮＲ８Ｒ９、ＮＲ８ＣＯＲ１０、ＮＲ８ＳＯ２Ｒ１０、またはヒドロキシル、Ｃ１−６アルコキシもしくはＮＲ８Ｒ９によって場合によって置換されたＣ１−６アルキルであり；または、Ｒ３およびＲ４がオルト位である場合、一緒になってｍが１〜３である−Ｏ（ＣＨ２）ｍＯ−を形成し；Ｒ５は、水素、またはヒドロキシル、Ｃ１−６アルコキシもしくはＮＲ８Ｒ９によって場合によって置換されたＣ１−６アルキルであり；Ｒ６は、水素またはＣ１−６アルキルであり；Ｒ７は、水素、またはＯＲ８もしくはＮＲ８Ｒ９によって場合によって置換されたＣ１−６アルキルであり；Ｒ８は、水素、ヒドロキシルもしくはＣ１−６アルコキシによって場合によって置換されたＣ１−６アルキル、またはＣ１−３アルキルフェニルであり、ここで、前記フェニル基は、ハロゲン、Ｃ１−６アルキル、ＣＦ３、ＯＲ７、ＮＲ８Ｒ９またはＯＣＦ３から選択される１個もしくは複数の置換基によって場合によって置換されており；または、基Ｒ８およびＲ９は、それらが窒素原子に結合している場合、ＮＲ７、ＳおよびＯから選択される１個のさらなるヘテロ原子を場合によって含む、ヒドロキシルまたはＣ１−６アルコキシによって場合によって置換された五または六員環を一緒に形成してもよく；または、基Ｒ８およびＲ９は、それらが窒素原子に結合している場合、ヒドロキシルまたはＣ１−６アルコキシによって場合によって置換されたアゼチジニル環を一緒に形成してもよく；Ｒ１０は、ハロゲン、Ｃ１−６アルキル、ＣＦ３、ＯＣＦ３またはＯＲ７から選択される１個もしくは複数の置換基によって場合によって置換されたＣ１−６アルキルもしくはフェニル基であり；ｎは１または２である。］。アミロイド病の治療における化合物の使用も開示される。【選択図】図１
2013526556.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
式（Ｉ）の化合物またはその薬学的に許容される塩もしくはプロドラッグ：
【化１】
2013526556.tif 000061
［式中、Ｘは、ＮまたはＣＨであり；
Ｑは、ＮＲ６またはＯであり；
Ａ１およびＡ２は、独立して、水素もしくはＣ１−６アルキルであるか、または一緒にカルボニル基を形成してもよく；
Ｒ１およびＲ２は、独立して、水素、ハロゲン、ＣＦ３、ＣＮ、ＯＲ７、ＯＲ８、ＮＲ８Ｒ９、ＮＲ８ＣＯＲ１０、ＮＲ８ＳＯ２Ｒ１０、ＳＯ２ＮＲ８Ｒ９、ＳＯ２Ｒ１０、または
１個もしくは複数のヒドロキシル、Ｃ１−６アルコキシ、ハロゲンもしくはＮＲ８Ｒ９によって場合によってかつ独立して置換されたＣ１−６アルキルであり；
Ｒ３は、水素、ハロゲン、ＣＦ３またはＯＲ７であり；
Ｒ４は、水素、ハロゲン、ＣＦ３、ＯＲ８、ＮＲ８Ｒ９、ＮＲ８ＣＯＲ１０、ＮＲ８ＳＯ２Ｒ１０ 
、または
ヒドロキシル、Ｃ１−６アルコキシもしくはＮＲ８Ｒ９によって場合によって置換されたＣ１−６アルキルであり；
または、Ｒ３およびＲ４がオルト位である場合、一緒になってｍが１〜３である−Ｏ（ＣＨ２）ｍＯ−を形成し；
Ｒ５は、水素、またはヒドロキシル、Ｃ１−６アルコキシもしくはＮＲ８Ｒ９によって場合によって置換されたＣ１−６アルキルであり；
Ｒ６は、水素またはＣ１−６アルキルであり；
Ｒ７は、水素、またはＯＲ８もしくはＮＲ８Ｒ９によって場合によって置換されたＣ１−６アルキルであり；
Ｒ８は、水素、ヒドロキシルもしくはＣ１−６アルコキシによって場合によって置換されたＣ１−６アルキル、またはＣ１−３アルキルフェニルであり、
ここで、前記フェニル基は、ハロゲン、Ｃ１−６アルキル、ＣＦ３、ＯＲ７、ＮＲ８Ｒ９またはＯＣＦ３から選択される１個もしくは複数の置換基によって場合によって置換されており；
Ｒ９は、水素、Ｃ１−６アルキル、Ｃ１−６アルケニル、Ｃ１−６アルキニル、フェニルまたはＣ１−３アルキルフェニルであり、ここで、前記フェニル基は、ハロゲン、Ｃ１−６アルキル、ＣＦ３、ＯＲ７またはＯＣＦ３から選択される１個もしくは複数の置換基によって場合によって置換されており；
または、基Ｒ８およびＲ９は、それらが窒素原子に結合している場合、
ＮＲ７、ＳおよびＯから選択される１個のさらなるヘテロ原子を場合によって含む、ヒドロキシルまたはＣ１−６アルコキシによって場合によって置換された五または六員環
を一緒に形成してもよく；
または、基Ｒ８およびＲ９は、それらが窒素原子に結合している場合、ヒドロキシルまたはＣ１−６アルコキシによって場合によって置換されたアゼチジニル環を一緒に形成してもよく；
Ｒ１０は、ハロゲン、Ｃ１−６アルキル、ＣＦ３、ＯＣＦ３またはＯＲ７から選択される１個もしくは複数の置換基によって場合によって置換されたＣ１−６アルキルもしくはフェニル基であり；
ｎは１または２である。］。
【請求項２】
式（Ｉａ）の化合物またはその薬学的に許容される塩またはプロドラッグ：
【化２】
2013526556.tif 000062
［式中、Ｘは、ＮまたはＣＨであり；
Ｑは、ＮＲ６またはＯであり；
Ａ１およびＡ２は、独立して、水素もしくはＣ１−６アルキルであるか、または一緒にカルボニル基を形成してもよく；
Ｒ１およびＲ２は、独立して、水素、ハロゲン、ＣＦ３、ＣＮ、ＯＲ７、ＯＲ８、ＮＲ８Ｒ９、ＮＲ８ＣＯＲ１０、ＮＲ８ＳＯ２Ｒ１０、ＳＯ２ＮＲ８Ｒ９、ＳＯ２Ｒ１０、または１個もしくは複数のヒドロキシル、Ｃ１−６アルコキシ、ハロゲンもしくはＮＲ８Ｒ９によって場合によってかつ独立して置換されたＣ１−６アルキルであり；
Ｒ３は、水素、ハロゲン、ＣＦ３またはＯＲ７であり；
Ｒ４は、水素、ハロゲン、ＣＦ３、ＯＲ８、ＮＲ８Ｒ９、ＮＲ８ＣＯＲ１０、ＮＲ８ＳＯ２Ｒ１０、またはヒドロキシル、Ｃ１−６アルコキシもしくはＮＲ８Ｒ９によって場合によって置換されたＣ１−６アルキルであり；
または、Ｒ３およびＲ４がオルト位である場合、一緒になってｍが１〜３である−Ｏ（ＣＨ２）ｍＯ−を形成し；
Ｒ５は、水素、またはヒドロキシル、Ｃ１−６アルコキシもしくはＮＲ８Ｒ９によって場合によって置換されたＣ１−６アルキルであり；
Ｒ６は、水素またはＣ１−６アルキルであり；
Ｒ７は、水素、またはＯＲ８もしくはＮＲ８Ｒ９によって場合によって置換されたＣ１−６アルキルであり；
Ｒ８は、水素、Ｃ１−６アルキル、またはＣ１−３アルキルフェニルであり、ここで、前記フェニル基は、ハロゲン、Ｃ１−６アルキル、ＣＦ３、ＯＲ７、ＮＲ８Ｒ９またはＯＣＦ３から選択される１個もしくは複数の置換基によって場合によって置換されており；
Ｒ９は、水素、Ｃ１−６アルキル、Ｃ１−６アルケニル、フェニルまたはＣ１−３アルキルフェニルであり、ここで、前記フェニル基は、ハロゲン、Ｃ１−６アルキル、ＣＦ３、ＯＲ７またはＯＣＦ３から選択される１個もしくは複数の置換基によって場合によって置換されており；
または、基Ｒ８およびＲ９は、それらが窒素原子に結合している場合、ＮＲ７、ＳおよびＯから選択される１個のさらなるヘテロ原子を場合によって含む、五または六員環  を一緒に形成してもよく；
Ｒ１０は、ハロゲン、Ｃ１−６アルキル、ＣＦ３、ＯＣＦ３またはＯＲ７から選択される１個もしくは複数の置換基によって場合によって置換されたＣ１−６アルキルもしくはフェニル基であり；
ｎは１または２である。］。
【請求項３】
請求項１または請求項２に記載の化合物であって、
Ｘが、ＮまたはＣＨであり；
Ｑが、ＮＲ６またはＯであり；
Ａ１およびＡ２が、独立して、水素またはＣ１−６アルキルであり、カルボニル基を一緒に形成してもよく；
ｍ＝１〜２およびｎ＝１であり；
Ｒ１およびＲ２が、独立して、水素、ハロゲン、ＣＦ３、ＣＮ、ＯＲ７、ＮＲ８Ｒ９、ＮＲ８ＣＯＲ１０、ＮＲ８ＳＯ２Ｒ１０、または、ヒドロキシル、Ｃ１−６アルコキシもしくはＮＲ８Ｒ９によって場合によって置換されたＣ１−６アルキルであり；
Ｒ３が、水素、ハロゲン、ＣＦ３またはＯＲ７であり；
Ｒ４が、水素、ハロゲン、ＣＦ３、ＯＲ８、ＮＲ８Ｒ９、ＮＲ８ＣＯＲ１０またはＮＲ８ＳＯ２Ｒ１０であり；
Ｒ５が、水素またはヒドロキシル、Ｃ１−６アルコキシもしくはＮＲ８Ｒ９によって場合によって置換されたＣ１−６アルキルであり；
Ｒ６が、水素またはＣ１−６アルキルであり；
Ｒ７が、水素またはＯＲ８もしくはＮＲ８Ｒ９によって場合によって置換されたＣ１−６アルキルであり；
Ｒ８が、水素、Ｃ１−６アルキル、またはＣ１−３アルキルフェニルであり、ここで、前記フェニル基は、ハロゲン、Ｃ１−６アルキル、ＣＦ３、ＯＲ７、ＮＲ８Ｒ９またはＯＣＦ３から選択される１個もしくは複数の置換基によって場合によって置換されており；
Ｒ９が、水素、Ｃ１−６アルキル、Ｃ１−６アルケニル、フェニルまたはＣ１−３アルキルフェニルであり、および／または、ハロゲン、Ｃ１−６アルキル、ＣＦ３、ＯＲ７またはＯＣＦ３から選択される１個もしくは複数の置換基によって場合によって置換されており；
または、基Ｒ８およびＲ９は、それらが窒素原子に結合している場合、ＮＲ７、ＳおよびＯから選択される１個のさらなるヘテロ原子を場合によって含む、ヒドロキシルまたはＣ１−６アルコキシによって場合によって置換された五または六員環を一緒に形成してもよく；
または、基Ｒ８およびＲ９は、それらが窒素原子に結合している場合、ヒドロキシルまたはＣ１−６アルコキシによって場合によって置換されたアゼチジニル環を一緒に形成してもよく；
Ｒ１０が、ハロゲン、Ｃ１−６アルキル、ＣＦ３、ＯＣＦ３またはＯＲ７から選択される１個もしくは複数の置換基によって場合によって置換されたＣ１−６アルキルもしくはフェニル基である、化合物。
【請求項４】
請求項１から３のいずれか一項に記載の化合物であって、
Ｘが、ＮまたはＣＨであり；
Ｑが、ＮＲ６またはＯであり；
Ａ１およびＡ２が、独立して、水素またはＣ１−６アルキルであり、カルボニル基を一緒に形成してもよく；
ｍ＝１〜２およびｎ＝１であり；
Ｒ１およびＲ２が、独立して、水素、ハロゲン、ＣＦ３、ＣＮ、ＯＲ７、またはＮＲ８Ｒ９であり；
Ｒ３が、水素、ハロゲン、ＦまたはＯＲ７であり；
Ｒ４が、水素、ハロゲン、ＣＦ３、ＯＲ８、またはＮＲ８Ｒ９であり；
Ｒ５が、水素またはヒドロキシル、Ｃ１−６アルコキシもしくはＮＲ８Ｒ９によって場合によって置換されたＣ１−６アルキルであり；
Ｒ６が、水素またはＣ１−６アルキルであり；
Ｒ７が、水素またはＣ１−６アルキルであり；
Ｒ８が、水素、Ｃ１−６アルキル、またはＣ１−３アルキルフェニルであり、ここで、前記フェニル基は、ハロゲン、Ｃ１−６アルキル、ＣＦ３、ＯＲ７、ＮＲ８Ｒ９またはＯＣＦ３から選択される１個もしくは複数の置換基によって場合によって置換されており；
Ｒ９が、水素、Ｃ１−６アルキル、Ｃ１−６アルケニル、フェニルまたはＣ１−３アルキルフェニルであり、および／または、ハロゲン、Ｃ１−６アルキル、ＣＦ３、ＯＲ７またはＯＣＦ３から選択される１個もしくは複数の置換基によって場合によって置換されており；
または、基Ｒ８およびＲ９は、それらが窒素原子に結合している場合、ＮＲ７、ＳおよびＯから選択される１個のさらなるヘテロ原子を場合によって含む、ヒドロキシルまたはＣ１−６アルコキシによって場合によって置換された五または六員環を一緒に形成してもよく；
または、基Ｒ８およびＲ９は、それらが窒素原子に結合している場合、ヒドロキシルまたはＣ１−６アルコキシによって場合によって置換されたアゼチジニル環を一緒に形成してもよく；  Ｒ１０は、ハロゲン、Ｃ１−６アルキル、ＣＦ３、ＯＣＦ３またはＯＲ７から選択される１個もしくは複数の置換基によって場合によって置換されたＣ１−６アルキルもしくはフェニル基である、化合物。
【請求項５】
８−フルオロ−４−［５−（３−モルホリノフェノキシ）ピリミジン−２−イル］−２，３−ジヒドロ−１，４−ベンゾキサジン、
６−フルオロ−４−［５−（３−モルホリノフェノキシ）ピリミジン−２−イル］−２，３−ジヒドロ−１，４−ベンゾキサジン、
６−シアノ−４−［５−（３−モルホリノフェノキシ）ピリミジン−２−イル］−２，３−ジヒドロ−１，４−ベンゾキサジン、
４−［５−（３−モルホリノフェノキシ）ピリミジン−２−イル］−２，３−ジヒドロ−１，４−ベンゾキサジン、
８−フルオロ−４−［５−（３−モルホリノフェノキシ）−２−ピリジル］−２，３−ジヒドロ−１，４−ベンゾキサジン、
９−フルオロ−５−［５−（３−モルホリン−４−イルフェノキシ）ピリミジン−２−イル］−２，３，４，５−テトラヒドロ−ベンゾ−［ｂ］［１，４］オキサゼピン、
１−［５−（３−モルホリン−４−イルフェノキシ）ピリミジン−２−イル］−２，３−ジヒドロ−１Ｈ−ピリド−［２，３−ｂ］［１，４］−オキサジン、
（Ｓ）−８−フルオロ−４−［５−（３−メチルモルホリン−４−イルフェノキシ）ピリミジン−２−イル］−２，３−ジヒドロ−１，４−ベンゾキサジン、
（Ｒ）−８−フルオロ−４−［５−（３−メチルモルホリン−４−イルフェノキシ）ピリミジン−２−イル］−２，３−ジヒドロ−１，４−ベンゾキサジン、
８−フルオロ−４−［５−（３−メトキシフェノキシ）ピリミジン−２−イル］−２，３−ジヒドロ−１，４−ベンゾキサジン、
８−フルオロ−４−［５−（３−Ｎ，Ｎ−ジメチルアミノフェノキシ）ピリミジン−２−イル］−２，３−ジヒドロ−１，４−ベンゾキサジン、
４−（５−（３−ブロモフェノキシ）ピリミジン−２−イル）−８−フルオロ−３，４−ジヒドロ−２Ｈ−ベンゾ［１，４］オキサジン、
１−｛３−［２−（８−フルオロ−２，３−ジヒドロ−ベンゾ［１，４］オキサジン−４−イル）−ピリミジン−５−イルオキシ］−フェニル｝−アゼチジン−３−オール、
４−［５−（３−モルホリン−４−イル−フェノキシ）ピリジン−２−イル］−３，４−ジヒドロ−２Ｈ−ベンゾ［１，４］オキサジン−６−カルボニトリル、
８−フルオロ−３−メチル−４−［５−（３−モルホリン−４−イル−フェノキシ）ピリミジン−２−イル］−３，４−ジヒドロ−２Ｈ−ベンゾ［１，４］オキサジンから選択される化合物。
【請求項６】
場合によって、１種または複数の薬学的に許容される担体または賦形剤と共に、請求項１から５のいずれか一項に記載の化合物を含む医薬品組成物。
【請求項７】
アミロイド関連疾患の治療において使用するための、請求項１から５のいずれか一項に記載の化合物または請求項６に記載の医薬品組成物。
【請求項８】
以下の治療において使用するためのものである、請求項７に記載の使用のための化合物または医薬品組成物：
ａ）任意の形態のアルツハイマー病（ＡＤまたはＦＡＤ）；
ｂ）任意の形態の軽度認知障害（ＭＣＩ）または老人性痴呆症；
ｃ）ダウン症候群；
ｄ）脳アミロイド血管症、包含体筋炎、アミロイドーシスを伴う遺伝性脳内出血（ＨＣＨＷＡ，オランダ型）、または年齢関連横斑性変性（ＡＲＭＤ）；
ｅ）フロントテンポラーレ痴呆症；
ｆ）任意の形態のパーキンソン病（ＰＤ）またはレヴィ小体を伴う痴呆症；
ｇ）ハンチントン病（ＨＤ）、歯状核赤核淡蒼球ルイ体萎縮症（ＤＲＰＬＡ）、脊髄小脳失調症（ＳＣＡ、１、２、３、６および７型）、球脊髄性筋萎縮症（ＳＢＭＡ、ケネディ病）、または他のポリグルタミン病；
ｈ）クロイツフェルト−ヤコブ病（ＣＪＤ）、ウシのウシ海綿状脳症（ＢＳＥ）、ヒツジのスクレイピー、クールー、ゲルストマン・シュトロイスラー・シャインカー病（ＧＳＳ）、致死性家族性不眠症、またはプリオンタンパク質の凝集に関連する他の伝搬性脳症；
ｉ）筋萎縮性側索硬化症（ＡＬＳ）または他の形態の運動ニューロン疾患；
ｊ）家族性英国型痴呆症（ＦＢＤ）または家族性オランダ型痴呆症（ＦＤＤ）；
ｋ）アミロイドーシスを伴う遺伝性脳内出血（ＨＣＨＷＡ、アイスランド型）；
ｌ）ＩＩ型糖尿病（成人発生型糖尿病、または非インスリン依存型糖尿病、ＮＩＤＤＭ）；
ｍ）透析関連アミロイドーシス（ＤＲＡ）または前立腺性アミロイド；
ｎ）原発性全身性アミロイドーシス、全身性ＡＬアミロイドーシス、または結節性ＡＬアミロイドーシス；
ｏ）骨髄腫関連アミロイドーシス；
ｐ）全身性（反応性）ＡＡアミロイドーシス、二次的全身性アミロイドーシス、慢性炎症性疾患、または家族性地中海熱；
ｑ）老人性全身性アミロイドーシス、家族性アミロイド多発ニューロパシー、または家族性心臓性アミロイド；
ｒ）家族性内臓性アミロイドーシス、遺伝性非ニューロパシー全身性アミロイドーシス、または他のリゾチーム関連アミロイドーシス；
ｓ）フィンランド遺伝性全身性アミロイドーシス；
ｔ）フィブリノーゲンα鎖アミロイドーシス；
ｕ）インスリン関連アミロイドーシス；
ｖ）甲状腺髄様癌；
ｗ）孤立した心房性アミロイドーシス；
ｘ）任意の形態の白内障；または
ｙ）毒性溶解性オリゴマー、原線維、イオンチャネル、可溶性アミロイド線維、プラークまたは包含体への特定の標的アミロイド形成タンパク質またはペプチドの誤った折り畳みまたは凝集に関連する他のアミロイド関連疾患。
【請求項９】
アミロイド関連疾患の治療の方法であって、請求項１から５のいずれか一項に記載の有効量の化合物または請求項６に記載の医薬組成物を対象に投与するステップを含む方法。
【請求項１０】
アミロイド関連疾患が請求項８に定義されるもののいずれか１つである、請求項９に記載の方法。
【請求項１１】
Ｒ３およびＲ４が請求項１に定義される通りである、請求項１に記載の化合物の合成において使用される、式（ＩＩ）および（ＩＶ）の中間体。
【化３】
2013526556.tif 000063
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、アルツハイマー病、パーキンソン病およびハンチントン病、ならびにＩＩ型糖尿病などの神経変性障害の予防および治療において有用な新規複素環化合物に関する。
【背景技術】
【０００２】
幾つかの不治の疾患、加齢関連または変性疾患は、タンパク質またはペプチドの誤った折り畳みおよび凝集の一般的かつ基本的な発症のプロセスに関連する。これらは、アルツハイマー病、パーキンソン病およびハンチントン病、ならびにＩＩ型糖尿病を含む。これらの疾患において存在するアミロイド沈着物は、これらの各疾患に特徴的な特定のペプチドからなるが、しかし、それらの配列に拘わらず、アミロイドフィブリルは特徴的なβシート構造を有し、共通の凝集経路を共有する。各疾患において、特定のタンパク質またはペプチドは誤って折り畳まれ、β鎖構造をとり、オリゴマー化し、フィブリル形成の途中の可溶性凝集中間体を形成し、最終的に不溶性アミロイド繊維、プラークまたは包含体を形成する。凝集したタンパク質またはペプチドのこれらの不溶性形態は、β鎖のβシートへの分子間の会合により形成される。目下の証拠によると、可溶性アミロイドオリゴマーは、神経毒の主要な原因であり得ることを示す。（Ｃｌｅａｒｙ  ｅｔ  ａｌ．，  ２００５；  Ｗａｌｓｈ  ａｎｄ  Ｓｅｌｋｏｅ，  ２００７）。
【０００３】
「アミロイド関連の」疾患は、種々の組織において通常可溶性のタンパク質が、βシート構造に富み、特徴的な色素結合性を有するフィブリルの不溶性沈着物として蓄積する疾患である（Ｇｌｅｎｎｅｒ，  １９８０ａ，  １９８０ｂ）。沈着物を含む特定のポリペプチドは各疾患毎に異なるが、幾つかの重要な特徴が共通する。これらのうち最も顕著なものは、生物学的流体に高可溶性のタンパク質が、βシート配座に富む不溶性の糸状ポリマーに徐々に変換される能力である。さらに、これらは、同様の分子メカニズム（分子間会合によりβ鎖が伸びたβシートに）により形成される傾向があり、そのためにこれらは、同様の分子構造、ならびにコンゴーレッドおよびチオフラビンＴなどの特定の色素と結合する共通の能力を共有する傾向がある（Ｓｅｌｋｏｅ  ２００３；  Ｓｔｅｆａｎｉ  ２００４）。
【０００４】
アミロイド関連疾患は２つの主要範疇に分類される：脳および他の部分の中枢神経系に影響する疾患、ならびに、脳の外側の、体中の他の器官または組織に影響する疾患。これらの２つの分類に分けられるアミロイド関連疾患の例は、以下の２つの項に列記するが、しかし、これに含まれない遺伝性のアミロイド関連疾患の他の多くの例も公知であり、アミロイド関連疾患のさらなる形態も将来発見される可能性がある。
アミロイドーシス関連神経変性疾患
【０００５】
多くの異なる神経変性障害は、その特定の疾患に依存して、脳の特定の部分または中枢神経系とは別の場所における特定のタンパク質またはペプチドの誤った折り畳みおよび凝集に関連する（ＬｅＶｉｎｅ，  ２００４；  Ｃａｕｇｈｅｙ  ａｎｄ  Ｌａｎｓｂｕｒｙ，  ２００３；  Ｄｅｖ  ｅｔ  ａｌ．，  ２００３；  Ｔａｙｌｏｒ  ｅｔ  ａｌ．，  ２００２；  Ｗｏｏｄ  ｅｔ  ａｌ．，  ２００３；  Ｍａｓｉｎｏ，  ２００４；  Ｒｏｓｓ  ａｎｄ  Ｐｏｉｒｉｅｒ，  ２００４；  Ｓｏｔｏ  ａｎｄ  Ｃａｓｔｉｌｌａ，  ２００４；  Ｆｏｒｍａｎ  ｅｔ  ａｌ．，  ２００４）。例えば、様々な形態のアルツハイマー病（ＡＤ／ＦＡＤ）、ならびにダウン症候群、アミロイドーシスを伴う遺伝性脳出血（ＨＣＨＷＡ、オランダ型）、脳アミロイド血管症、ならびに軽度認知障害および他の形態の痴呆症は、βアミロイド、Ａβ（１−４０）またはＡβ（１−４２）と呼ばれる４０／４２残基ペプチドの凝集と関連し、これらは、疾患に依存して不溶性アミロイド繊維およびプラークを大脳皮質、海馬または脳の他の場所に形成する；アルツハイマー病は、ｔａｕと呼ばれる過剰リン酸化タンパク質の凝集による神経フィブリルのもつれの形成に関連し、これはまた、前頭側頭型痴呆症（ピック病）において生じる；パーキンソン病  （ＰＤ），レヴィ小体を伴う痴呆症（ＤＬＢ）および多系統萎縮症（ＭＳＡ）は、αシヌクレインと呼ばれるタンパク質の凝集に関連し、結果として“レヴィ小体”と呼ばれる不溶性の包含体を形成する；ハンチントン病（ＨＤ）、球脊髄性筋萎縮症（ＳＢＭＡ、ケネディー病としても知られる）、歯状核赤核淡蒼球ルイ体萎縮症（ＤＲＰＬＡ）、異なる形態の脊髄小脳失調症（ＳＣＡ、１型、２型、３型、６型および７型）、および恐らくは幾つかの他の遺伝性神経変性疾患が、異常に広がったグルタミンの反復（ポリグルタミンの伸びた分子鎖）を含む種々のタンパク質およびペプチドの凝集に関連している；クロイツフェルト−ヤコブ病（ＣＪＤ）、ウシのウシ海綿状脳症（ＢＳＥ）、ヒツジのスクレイピー、クールー、ゲルストマン−シュトロイスラー−シャインカー病（ＧＳＳ）、致死性家族性不眠症、ならびに恐らくは他のすべての形態の伝染性脳症は、プリオンタンパク質の自己増殖性の誤った折り畳みおよび凝集に関連している；筋萎縮性側索硬化症（ＡＬＳ）、また恐らくは幾つかの形態の運動ニューロン疾患（ＭＮＤ）は、スーパーオキシドジスムターゼと呼ばれるタンパク質の凝集に関連している；家族性英国痴呆症（ＦＢＤ）および家族性デンマーク痴呆症（ＦＤＤ）は、それぞれＢＲＩタンパク質に由来するＡＢｒｉおよびＡＤａｎのペプチド配列の凝集に関連している；アミロイドーシス（ＨＣＨＷＡ（アイスランド型））を伴う遺伝性脳内出血は、シスタミンＣと称するタンパク質の凝集に関連している。
アミロイドーシス関連全身性疾患
【０００６】
上記で列挙した神経変性疾患に加えて、種々様々な加齢関連または変性疾患が、脳以外で、身体の様々な他の組織における特定のタンパク質またはペプチドの誤った折り畳みおよび凝集に関連している（Ｇｅｊｙｏ  ｅｔ  ａｌ．，  １９８５；  Ｊａｉｋａｒａｎ  ａｎｄ  Ｃｌａｒｋ，  ２００１；  Ｂｕｘｂａｕｍ，  ２００４）。例えば、ＩＩ型糖尿病（成人発症型糖尿病、またはインスリン非依存性糖尿病としても知られる）は、小島アミロイド・ポリペプチド（ＩＡＰＰ、または「アミリン」）と称する３７残基ペプチドの凝集に関連し、これは膵臓内のランゲルハンス島において、インスリン産生β細胞の進行性破壊に関連した不溶性溶着物を形成し、この点でもまた、有毒種がＩＡＰＰオリゴマーであるという証拠がある（Ｈａａｔａｊａ  ｅｔ  ａｌ．，  ２００８）。
【０００７】
透析関連アミロイドーシス（ＤＲＡ）および前立腺アミロイドは、ＤＲＡにおける骨、関節および腱の何れかにおけるβ２ミクログロブリンと称するタンパク質の凝集に関連し、これは長期間に亘る血液透析の間に発症し、または前立腺アミロイドの場合には前立腺内に発症する；原発性全身性アミロイドーシス、すなわち、全身性ＡＬアミロイドーシスおよび骨髄腫に関連するアミロイドーシスは、免疫グロブリン軽鎖（または幾つかの場合には免疫グロブリン重鎖）の不溶性アミロイド沈着物への凝集に関連し、これは徐々に肝臓、腎臓、心臓および胃腸（ＧＩ）管などの様々な主な器官に蓄積する；反応性全身性ＡＡアミロイドーシス、二次的全身性アミロイドーシス、家族性地中海熱および慢性炎症性疾患は、血清アミロイドＡタンパク質の凝集に関連し、これは肝臓、腎臓および脾臓などの主な器官で蓄積する不溶性アミロイド沈着物を形成する；老人性全身性アミロイドーシス（ＳＳＡ）、家族性アミロイドポリニューロパシー（ＦＡＰ）および家族性アミロイド心筋症（ＦＡＣ）は、トランスチレチンタンパク質（ＴＴＲ）の異なる突然変異体の誤った折り畳みおよび凝集に関連し、これは、様々な器官、および心臓（特にＦＡＣの）、末梢神経（特にＦＡＰの）および胃腸の（ＧＩ）管などの組織において不溶性の包含体を形成する；別の形態の家族性アミロイドポリニューロパシー（ＦＡＰ、ＩＩ型）は、末梢神経におけるアポリポタンパク質ＡＩの凝集に関連している；家族性内臓アミロイドーシスおよび遺伝性非ニューロパシー全身性アミロイドーシスは、リゾチームの様々な変異体の誤った折り畳みおよび凝集に関連し、これは、肝臓、腎臓および脾臓などの主な器官において不溶性沈着物を形成する；フィンランド遺伝性全身性アミロイドーシスは、目（特に角膜）におけるゲルソリンと称するタンパク質の凝集に関連している；フィブリノーゲンα鎖アミロイドーシスは、フィブリノーゲンＡα鎖の凝集に関連し、これは、肝臓および腎臓などの様々な器官において不溶性のアミロイド沈着物を形成する；インシュリン関連アミロイドーシスは、糖尿病患者のインスリン注射部位でのインスリンの凝集によって生じる；甲状腺の髄様癌は、周囲組織におけるカルシトニンの凝集に関連している；分離された心房のアミロイドーシスは、心臓における心房性ナトリウム利尿ペプチド（ＡＮＰ）の凝集に関連している；また、様々な形態の白内障は、眼球レンズにおけるγ結晶性タンパク質の凝集に関連している。
アミロイド関連疾患の発症メカニズム
【０００８】
これらすべてのアミロイド関連疾患はアミロイドーシスの発症プロセスと共通の関連性を共有するが、タンパク質／ペプチドの誤った折り畳みおよび凝集のこの一般的プロセスが、影響を受ける組織の進行性の変性につながる正確な分子メカニズムは明白ではない。多くの全身性アミロイド関連疾患が含まれる幾つかの場合において、絶対的多量の不溶性タンパク質またはペプチドが影響を受ける組織を単純に圧倒し、最終的には、急性臓器不全を引き起こすと考えられている。上で挙げたほとんどの神経変性疾患を含む他の場合においては、アミロイド形成性タンパク質の有毒形態は、大きさが二量体および三量体から、何十または何百または何千ものタンパク質またはペプチドモノマーさえをも含むはるかに大きい種類の範囲に及ぶ、可溶性オリゴマー種であることがより一層理解されている。さらに、オリゴマーは、不溶性の凝集がなくてもインビトロで細胞に対して本質的に有毒であり、これらは、非常に異なるアミノ酸配列を有するタンパク質またはペプチドにより形成され得るという事実にも拘わらず、同じ抗体によりすべて認識され得るような共通の構造的特徴を共有しているようである（Ｋａｙｅｄ  ｅｔ  ａｌ．，  ２００３；  Ｇｌａｂｅ，  ２００４；  Ｗａｌｓｈ  ｅｔ  ａｌ．，  ２００２；  Ｗａｌｓｈ  ａｎｄ  Ｓｅｌｋｏｅ，  ２００４）。アルツハイマー病の場合には、いくつかの検討で、ペプチドのフィブリル形態よりもＡβの可溶性形態と重症度がより密接に相関することが示され（Ｌｕｅ  ｅｔ  ａｌ．，  １９９９；  ＭｃＬｅａｎ  ｅｔ  ａｌ．，  １９９９；  Ｗａｎｇ  ｅｔ  ａｌ．，  １９９９）、Ａβの可溶性オリゴマーについて中心的な発症の役割を指摘している。
【０００９】
証拠（Ｅｓｔｒａｄａ  ａｎｄ  Ｓｏｔｏ，  ２００７）の蓄積は、Ａβ凝集を遮断し有毒なＡβ集合体の生成を阻止する化合物が、ＡＤの好結果の新規治療を提供し得るという有力な主張を提供する。疾患の症候のみを治療する目下の療法（Ｍｅｌｎｉｋｏｖａ，  ２００７；  Ｓｈａｈ  ｅｔ  ａｌ．，  ２００８；  Ｗｉｌｃｏｃｋ，  ２００８）と異なり、そのような「疾患を修正する」療法には疾患進行を遅らせるまたは停止さえする可能性があり得る。Ａβ凝集を阻害しオリゴマー化を阻止する、または有毒なＡβ集合体に結合しその毒性作用を中和することができる分子は、ＡＤの治療において有用であり得る。さらに、Ａβ凝集の阻止は、このプロセスがもっぱら病理学的な事象であると考えられ、このメカニズムを標的にする化合物が、現在追求されている他のいくつかの手法と比較してより良好な安全性プロフィールを有する可能性がより高いので、治療上魅力的である。
【００１０】
これらの有毒な可溶性オリゴマーの分子構造は知られていない。また、それらが細胞を殺す正確なメカニズムは明らかではないが、幾つかの理論が提案されている。例えば「チャンネル仮説」と称する一つの理論によれば、オリゴマーは、イオンを細胞膜を通して自由に流す不均一な孔または漏洩し易いイオンチャネルを形成し、それによって細胞膜の完全性を破壊し、最終的に細胞死を引き起こす（Ｋａｇａｎ  ｅｔ  ａｌ．  ２００２）。
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【００１１】
しかし、正確な発症メカニズムとは無関係に、今や圧倒的な量の証拠が蓄積されており、これらの証拠は、タンパク質／ペプチドの凝集の一般的なプロセスが、これら全部のアミロイド関連疾患、および恐らくは他の異なるアミロイド関連疾患の主要な原因であることを示唆している。
【図面の簡単な説明】
【００１２】
【図１】ＬＴＰのＡβ（１−４２）誘発された降下に対する実施例１（３μＭ）の影響を示す図である。
【図２】ＬＴＰのＡβ（１−４２）誘発された降下に対する実施例１（３μＭ）の影響についてのヒストグラム要約を示す図である。
【図３】ＬＴＰのＡβ（１−４２）誘発された降下に対する実施例１（３μＭ）の影響について作表された要約を示す図である。
【発明を実施するための形態】
【００１３】
本発明は、アミロイド毒性の阻害薬であり、そのためアミロイド関連の疾患および障害の治療に使用する化合物および組成物に関する。
【００１４】
したがって、第1の態様において、本発明は式（Ｉ）の化合物またはその薬学的に許容される塩もしくはプロドラッグを提供する。
【化１】
2013526556.tif 000003
(I)
［式中、
Ｘは、ＮまたはＣＨであり；
Ｑは、ＮＲ６またはＯであり；
Ａ１およびＡ２は、独立して、水素もしくはＣ１−６アルキルであるか、または一緒にカルボニル基を形成してもよく；
Ｒ１およびＲ２は、独立して、水素、ハロゲン、ＣＦ３、ＣＮ、ＯＲ７、ＯＲ８、ＮＲ８Ｒ９、ＮＲ８ＣＯＲ１０、ＮＲ８ＳＯ２Ｒ１０、ＳＯ２ＮＲ８Ｒ９、ＳＯ２Ｒ１０、または１個もしくは複数のヒドロキシル、Ｃ１−６アルコキシ、ハロゲンもしくはＮＲ８Ｒ９によって場合によってかつ独立して置換されたＣ１−６アルキルであり；
Ｒ３は、水素、ハロゲン、ＣＦ３またはＯＲ７であり；
Ｒ４は、水素、ハロゲン、ＣＦ３、ＯＲ８、ＮＲ８Ｒ９、ＮＲ８ＣＯＲ１０、ＮＲ８ＳＯ２Ｒ１０、またはヒドロキシル、Ｃ１−６アルコキシもしくはＮＲ８Ｒ９によって場合によって置換されたＣ１−６アルキルであり；
または、Ｒ３およびＲ４がオルト位である場合、一緒になってｍが１〜３である−Ｏ（ＣＨ２）ｍＯ−を形成し；
Ｒ５は、水素、またはヒドロキシル、Ｃ１−６アルコキシもしくはＮＲ８Ｒ９によって場合によって置換されたＣ１−６アルキルであり；
Ｒ６は、水素またはＣ１−６アルキルであり；
Ｒ７は、水素、またはＯＲ８もしくはＮＲ８Ｒ９によって場合によって置換されたＣ１−６アルキルであり；
Ｒ８は、水素、ヒドロキシルもしくはＣ１−６アルコキシによって場合によって置換されたＣ１−６アルキル、またはＣ１−３アルキルフェニルであり、ここで、前記フェニル基は、ハロゲン、Ｃ１−６アルキル、ＣＦ３、ＯＲ７、ＮＲ８Ｒ９またはＯＣＦ３から選択される１個もしくは複数の置換基によって場合によって置換されており；
Ｒ９は、水素、Ｃ１−６アルキル、Ｃ１−６アルケニル、Ｃ１−６アルキニル、フェニルまたはＣ１−３アルキルフェニルであり、ここで、前記フェニル基は、ハロゲン、Ｃ１−６アルキル、ＣＦ３、ＯＲ７またはＯＣＦ３から選択される１個もしくは複数の置換基によって場合によって置換されており；
または、基Ｒ８およびＲ９は、それらが窒素原子に結合している場合、ＮＲ７、ＳおよびＯから選択される１個のさらなるヘテロ原子を場合によって含む、ヒドロキシルまたはＣ１−６アルコキシによって場合によって置換された五または六員環を一緒に形成してもよく；
または、基Ｒ８およびＲ９は、それらが窒素原子に結合している場合、ヒドロキシルまたはＣ１−６アルコキシによって場合によって置換されたアゼチジニル環を一緒に形成してもよく；
Ｒ１０は、ハロゲン、Ｃ１−６アルキル、ＣＦ３、ＯＣＦ３またはＯＲ７から選択される１個もしくは複数の置換基によって場合によって置換されたＣ１−６アルキルもしくはフェニル基であり；
ｎは１または２である。］。
【００１５】
本明細書において使用される場合、「オルト位」は、Ｒ３およびＲ４が隣接炭素原子上にあることを意味する。これらは一緒になって、−Ｏ（ＣＨ２）ｍＯ−［式中、ｍは１−３である。］を形成することができる。ｍは、１または２であることが好ましい。そのような基の例は、−ＯＣＨ２Ｏ−，−ＯＣＨ２ＣＨ２Ｏ−または−ＯＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２Ｏ−を含む。これらの基は、これらが結合している炭素原子と一緒に五、六または七員環を形成する。
【００１６】
本明細書において使用される「アルキル」という用語は、それ自体であろうと、またはより大きい基の一部であろうと、例えば、「アルコキシ」または「アルキルフェニル」は共に、直鎖および分枝鎖基を含み、メチル、エチル、ｎ−プロピル、イソプロピル、ｎ−ブチル、ｓｅｃ−ブチルおよびｔｅｒｔ−ブチルを含むが、これらに限定されない。アルキルという用語はまた、１個または複数の水素原子をフッ素に置き換えた基、例えばＣＦ３を含む。
【００１７】
本明細書において使用される「アルケニル」および「アルキニル」という用語は、直鎖および分枝鎖基を共に含む。
【００１８】
本明細書において使用される「ハロゲン」という用語は、フッ素、塩素および臭素を含む。
【００１９】
好ましい化合物は次の通りである：８−フルオロ−４−［５−（３−モルホリノフェノキシ）ピリミジン−２−イル］−２，３−ジヒドロ−１，４−ベンゾキサジン、６−フルオロ−４−［５−（３−モルホリノフェノキシ）ピリミジン−２−イル］−２，３−ジヒドロ−１，４−ベンゾキサジン、６−シアノ−４−［５−（３−モルホリノフェノキシ）ピリミジン−２−イル］−２，３−ジヒドロ−１，４−ベンゾキサジン、４−［５−（３−モルホリノフェノキシ）ピリミジン−２−イル］−２，３−ジヒドロ−１，４−ベンゾキサジン、８−フルオロ−４−［５−（３−モルホリノフェノキシ）−２−ピリジル］−２，３−ジヒドロ−１，４−ベンゾキサジン、９−フルオロ−５−［５−（３−モルホリン−４−イルフェノキシ）ピリミジン−２−イル］−２，３，４，５−テトラヒドロ−ベンゾ−［ｂ］［１，４］オキサゼピン、１−［５−（３−モルホリン−４−イルフェノキシ）ピリミジン−２−イル］−２，３−ジヒドロ−１Ｈ−ピリド−［２，３−ｂ］［１，４］−オキサジン、（Ｓ）−８−フルオロ−４−［５−（３−メチルモルホリン−４−イルフェノキシ）ピリミジン−２−イル］−２，３−ジヒドロ−１，４−ベンゾキサジン、（Ｒ）−８−フルオロ−４−［５−（３−メチルモルホリン−４−イルフェノキシ）ピリミジン−２−イル］−２，３−ジヒドロ−１，４−ベンゾキサジン、８−フルオロ−４−［５−（３−メトキシフェノキシ）ピリミジン−２−イル］−２，３−ジヒドロ−１，４−ベンゾキサジン、８−フルオロ−４−［５−（３−Ｎ，Ｎ−ジメチルアミノフェノキシ）ピリミジン−２−イル］−２，３−ジヒドロ−１，４−ベンゾキサジン、４−（５−（３−ブロモフェノキシ）ピリミジン−２−イル）−８−フルオロ−３，４−ジヒドロ−２Ｈ−ベンゾ［１，４］オキサジン、１−｛３−［２−（８−フルオロ−２，３−ジヒドロ−ベンゾ［１，４］オキサジン−４−イル）−ピリミジン−５−イルオキシ］−フェニル｝−アゼチジン−３−オール、４−［５−（３−モルホリン−４−イル−フェノキシ）ピリジン−２−イル］−３，４−ジヒドロ−２Ｈ−ベンゾ［１，４］オキサジン−６−カルボニトリル、８−フルオロ−３−メチル−４−［５−（３−モルホリン−４−イル−フェノキシ）ピリミジン−２−イル］−３，４−ジヒドロ−２Ｈ−ベンゾ［１，４］オキサジン。
【００２０】
本発明は、本発明の化合物の任意の塩、特に、任意の薬理学的に許容される塩を包含する。本発明の好ましい塩は、ハロゲン化水素塩（例えば、塩酸塩、臭化水素酸塩、ヨウ化水素酸塩など）、無機酸塩（例えば、硫酸塩、硝酸塩、過塩素酸塩、リン酸塩、炭酸塩、重炭酸塩など）、有機カルボン酸塩（例えば、酢酸塩、マレイン酸塩、酒石酸塩、フマル酸塩、クエン酸塩など）、有機スルホン酸塩（例えば、メタンスルホン酸塩、エタンスルホン酸塩、ベンゼンスルホン酸塩、トルエンスルホン酸塩、カンファースルホン酸塩など）、アミノ酸塩（例えば、アスパラギン酸塩、グルタミン酸塩など）、第四級アンモニウム塩、アルカリ金属塩（例えば、ナトリウム塩、カリウム塩など）、アルカリ土類金属塩（例えば、マグネシウム塩、カルシウム塩など）などを含む。
【００２１】
塩は、当業界で周知の方法を使用して、従来の方式で調製することができる。前記塩基性化合物の酸付加塩は、水もしくは水性アルコール溶液または必要とされる酸を含有する他の適切な溶媒に、本発明の第１の態様による遊離塩基化合物を溶解することにより調製することができる。本発明の化合物が酸性官能基を含む場合、前記化合物の塩基塩は、前記化合物を適切な塩基と反応させることによって調製することができる。酸または塩基塩は、直接分離してもよく、または溶液を濃縮することによって、例えば、蒸発によって得てもよい。
【００２２】
本発明の化合物は、光学異性体、例えば、ジアステレオマー、およびあらゆる比の異性体の混合物、例えば、ラセミ混合物の形態で存在してもよい。本発明は、異性体の形態（ＲまたはＳ）を特に含む。異なる異性体の形態は、従来法によって一方から他方を分離もしくは分割することができ、または、任意の所与の異性体は、従来の合成法、または立体特異的もしくは不斉合成によって得ることができる。化合物がアルケン部分を含む場合、アルケンは、シスもしくはトランス異性体またはその混合物として提示することができる。本発明の化合物の提供される異性体の形態が他の異性体を実質的に含まない場合、それは、好ましくは５ｗ／ｗ％未満、より好ましくは２ｗ／ｗ％未満、特に１ｗ／ｗ％未満の他の異性体を含む。
【００２３】
本発明の化合物が医薬品組成物における使用を意図されるので、それらはそれぞれ、好ましくは、実質的に純粋な形態、例えば、少なくとも６０％純度、より適切には少なくとも７５％純度、好ましくは少なくとも８５％、特に少なくとも９８％純度（％は重量基準の重量である）で提供されることが容易に理解されよう。化合物の不純な調製物は、医薬品組成物において使用される、より純粋な形態を調製するために使用されてもよい。化合物のこれらのより低純度の調製物は、式（Ｉ）の化合物の少なくとも１％、より適切には少なくとも５％、例えば、１０から５９％を含んでいるべきである。
【００２４】
式（Ｉ）［式中、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５、Ａ１およびＡ２は式（Ｉ）について定義された通りであり、Ｘは窒素原子であり、Ｑは酸素原子である。］の化合物は、式（ＩＩ）
【化２】
2013526556.tif 000004
(II)
［式中、Ｒ３およびＲ４は式（Ｉ）において定義された通りである。］の化合物から、１，４−ジオキサンなどの溶媒中で加熱しながら、トリス（ジベンジリデンアセトン）−パラジウム（０）などの適切な触媒、４，５−ビス（ジフェニルホスフィノ）−９，９−ジメチルキサンテンなどのホスフィン配位子、および炭酸セシウムなどの塩基の存在下で適当な環状アニリンでの処理によって調製することができる。
【００２５】
式（ＩＩ）［式中、Ｒ３およびＲ４は式（Ｉ）において定義された通りである。］の化合物は、ジクロロメタンなどの適切な溶媒中でトリエチルアミンおよび酢酸銅（ＩＩ）の存在下で、式（ＩＩＩ）［式中、Ｒ３およびＲ４は式（Ｉ）において定義された通りである。］の１当量の適当なボロン酸で２−クロロ−５−ヒドロキシピリミジンを処理することによって調製することができる。２−クロロ−５−ヒドロキシピリミジンは当業者に周知の方法によって調製することができる。
【化３】
2013526556.tif 000005
(III)
【００２６】
式（Ｉ）［式中、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５、Ａ１およびＡ２は式（Ｉ）について定義された通りであり、Ｘは炭素原子であり、Ｑは酸素原子である。］の化合物は、式（ＩＶ）
【化４】
2013526556.tif 000006
(IV)
［式中、Ｒ３およびＲ４は式（Ｉ）において定義された通りである。］の化合物から、１，４−ジオキサンなどの溶媒中で加熱しながら、トリス（ジベンジリデンアセトン）−パラジウム（０）などの適切な触媒、４，５−ビス（ジフェニルホスフィノ）−９，９−ジメチルキサンテンなどのホスフィン配位子、および炭酸セシウムなどの塩基の存在下で適当な環状アニリンでの処理によって調製することができる。
【００２７】
式（ＩＶ）［式中、Ｒ３およびＲ４は式（Ｉ）において定義された通りである。］の化合物は、ジクロロメタンなどの適切な溶媒中でトリエチルアミンおよび酢酸銅（ＩＩ）の存在下で、式（ＩＩＩ）［式中、Ｒ３およびＲ４は式（Ｉ）において定義された通りである。］の１当量の適当なボロン酸で２−クロロ−５−ヒドロキシピリミジンを処理することによって調製することができる。２−クロロ−５−ヒドロキシピリジンは市販されている。
【００２８】
代替として、式（Ｉ）［式中、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５、Ａ１およびＡ２は式（Ｉ）について定義された通りであり、Ｘは窒素原子であり、Ｑは酸素原子である。］の化合物は、
ジクロロメタンなどの適切な溶媒中でトリエチルアミンおよび酢酸銅（ＩＩ）の存在下で、式（ＩＩＩ）［式中、Ｒ３およびＲ４は式（Ｉ）において定義された通りである。］のボロン酸での処理によって、式（Ｖ）の化合物から調製することができる。
【化５】
2013526556.tif 000007
【００２９】
式（Ｖ）の化合物は、パラジウム炭素などの適切な触媒の存在下でエタノールなどの適切な溶媒中で、水素ガスの古典的水素化分解条件を使用し脱ベンジル化によって式（ＶＩ）の化合物から調製することができる。
【化６】
2013526556.tif 000008
【００３０】
式（ＶＩ）の化合物は、２−クロロ−５−ベンジルオキシピリミジンから、１，４−ジオキサンなどの溶媒中で加熱しながら、トリス（ジベンジリデンアセトン）−パラジウム（０）などの適切な触媒、４，５−ビス（ジフェニルホスフィノ）−９，９−ジメチルキサンテンなどのホスフィン配位子、および炭酸セシウムなどの塩基の存在下で適当なアニリンを使用して調製することができる。
【００３１】
式（Ｉ）［式中、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５、Ａ１およびＡ２は式（Ｉ）について定義された通りであり、ＸおよびＱは窒素原子である。］の化合物は、式（ＶＩＩ）
【化７】
2013526556.tif 000009
［式中、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ５、Ａ１およびＡ２は式（Ｉ）中で定義された通りである。］の化合物から、１，４−ジオキサンなどの溶媒中で加熱しながら、トリス（ジベンジリデンアセトン）−パラジウム（０）などの適切な触媒、４，５−ビス（ジフェニルホスフィノ）−９，９−ジメチルキサンテンなどのホスフィン配位子、および炭酸セシウムなどの塩基の存在下で適当なアニリンでの処理によって調製することができる。
【００３２】
式（ＶＩＩ）［式中、Ｒ１、Ｒ２およびＲ５は式（Ｉ）中で定義された通りである。］の化合物は、アルコールなどの適切な溶媒中で封管中でマイクロ波照射下に加熱し、式（ＶＩＩ）の１当量の適当なアニリンでの２−クロロ−５−ブロモピリミジンの処理によって調製することができる。
【化８】
2013526556.tif 000010
【００３３】
式（Ｉ）［式中、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５、Ａ１およびＡ２は式（Ｉ）について定義された通りであり、Ｘは炭素原子であり、Ｑは窒素原子である。］の化合物は、式（ＶＩＩ）［式中、Ｘは炭素原子である。］の化合物から、１，４−ジオキサンなどの溶媒中で加熱しながら、トリス（ジベンジリデンアセトン）−パラジウム（０）などの適切な触媒、４，５−ビス（ジフェニルホスフィノ）−９，９−ジメチルキサンテンなどのホスフィン配位子、および炭酸セシウムなどの塩基の存在下で、適当なアニリンでの処理によって調製することができる。
【００３４】
式（ＶＩＩ）［式中、Ｘは炭素原子である。］の化合物は、アルコールなどの適切な溶媒中で封管中でマイクロ波照射下に加熱し、１当量の適当なアニリンでの２−クロロ−５−ブロモピリミジンの処理によって調製することができる。
【００３５】
式（ＶＩＩ）の化合物は、当業者に周知の方法で調製することができる。
【００３６】
式（Ｉ）の化合物の合成中、中間化合物中の不安定な官能基、例えば、ヒドロキシルおよびアミノ基は保護することができる。保護基は、式（Ｉ）の化合物の合成において任意の段階でも除去されてもよいし、または式（Ｉ）の最終化合物に存在してもよい。様々な不安定な官能基を保護し得る方法、および結果として得られた保護誘導体を切断する方法の包括的な議論は、例えば、以下に得られる。  Ｐｒｏｔｅｃｔｉｖｅ  Ｇｒｏｕｐｓ  ｉｎ  Ｏｒｇａｎｉｃ  Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ，  Ｔ．Ｗ．  Ｇｒｅｅｎｅ  ａｎｄ  Ｐ．Ｇ．Ｍ．  Ｗｕｔｓ  （Ｗｉｌｅｙ−Ｉｎｔｅｒｓｃｉｅｎｃｅ，  Ｎｅｗ  Ｙｏｒｋ，  ２ｎｄ  ｅｄｉｔｉｏｎ，  １９９１）。
【００３７】
上記の方法を様々に組み合わせて使用することによって、一般式（Ｉ）に包含される他の誘導体を合成することが可能であることは、当業者によって理解されよう。
【００３８】
また、一般式（Ｉ）の化合物の合成において使用される環状アニリンおよびボロン酸の構成要素は、市販されているか、または当業界で公知の方法によって合成することができることは理解されよう。
【００３９】
式（Ｉ）の薬学的に有効な化合物は、当業界で周知の従来の手順に従って、標準医薬品担体または賦形剤と式（Ｉ）の化合物（「活性成分」）とを組み合わせることによって調製された従来の剤形で投与することができる。その手順は、所望の調製物に向けて、適宜、成分の混合、造粒、圧縮、または溶解を伴ってもよい。
【００４０】
したがって、第３の態様において、本発明は、１種または複数の薬学的に許容される担体または賦形剤と共に、式（Ｉ）の化合物またはその薬学的に許容される塩またはプロドラッグを含む医薬品組成物を提供する。
【００４１】
活性成分または医薬品組成物は、治療されているアミロイド関連疾患の別の適当な治療と同時に、別々に、または連続して投与することができる。
【００４２】
活性成分または医薬品組成物は、薬の投与に従来通りに使用される経路のいずれかによって対象に投与することができ、例えば、ヒトを含む哺乳動物への経口（口腔内、舌下を含む）、経鼻（吸入を含む）または非経口（皮下、筋肉内、静脈内または皮内を含む）投与に適合させてもよい。任意の所与の事例における投与に最も適切な経路は、特定の化合物または医薬品組成物、対象、ならびに疾患の性質、構成および重症度、ならびに対象の健康状態に依存する。そのような組成物は、薬学の分野において公知の任意の方法により、例えば、活性成分と担体（複数可）または賦形剤（複数可）と組み合せることにより調製されてもよい。好ましい投与経路は経口および静脈内である。
【００４３】
経口投与に適合した医薬品組成物は、個別の単位、例えば、カプセルもしくは錠剤；散剤もしくは顆粒剤；水性、非水性液体の溶液もしくは懸濁液；食用の泡もしくはホイップ；または水中油型液体乳剤もしくは油中水型液体乳剤として提示されてもよい。
【００４４】
経口投与のための錠剤およびカプセル剤は、単位用量提示形態であってよく、従来の賦形剤、例えば、シロップ、アラビアゴム、ゼラチン、ソルビトール、トラガントもしくはポリビニルピロリジンなどの結合剤；ラクトース、糖、トウモロコシデンプン、リン酸カルシウム、ソルビトールもしくはグリシンなどの充填剤；ステアリン酸マグネシウム、タルク、ポリエチレングリコールもしくはシリカなどの錠剤化滑沢剤；ジャガイモデンプンなどの崩壊剤；またはラウリル硫酸ナトリウムなどの許容される湿潤剤などを含んでよい。錠剤は、通常の薬学的慣行上周知の方法に従って被覆されてもよい。経口液体調製物は、例えば、水性もしくは油性懸濁液、溶液、乳剤シロップもしくはエリキシル剤の形態であってもよく、または使用前に水もしくは他のビヒクルとの再構成のための適切な乾燥製品として存在してもよい。そのような液体調製物は、従来の添加剤、例えば、ソルビトール、メチルセルロース、グルコースシロップ、ゼラチン、ヒドロキシエチルセルロース、カルボキシメチルセルロース、ステアリン酸アルミニウムゲルまたは水素化食用脂肪などの懸濁剤、レシチン、モノオレイン酸ソルビタン、アラビアゴムなどの乳化剤；非水性ビヒクル（食用油を含んでよい）、例えば、アーモンド油、グリセリン、プロピレングリコール、またはエチルアルコールなどの油性エステル；ｐ−ヒドロキシ安息香酸エチルもしくはプロピルまたはソルビン酸などの防腐剤、および、所望に応じて、従来の香味剤または着色剤を含んでよい。
【００４５】
制御または継続した放出に適合させた医薬品組成物は、注入、例えば、皮下経路により投与されてよい。
【００４６】
経鼻的に投与するために適合させた、担体が固体である医薬品組成物は、粒子サイズが例えば、２０〜５００ミクロンの粗い粉末を含み、鼻の傍に保持された粉末の容器から鼻の通路を通る高速の吸入によって投与される。担体が鼻用スプレーまたは点鼻薬として投与するための液体である適切な組成物は、活性成分の水性または油性溶液を含む。
【００４７】
吸入による投与に適合させた医薬品組成物は、微粒子ダストまたはミストを含み、これは、種々のタイプの用量を計量する加圧エアロゾル、ネブライザーまたは通気器により発生させてもよい。
【００４８】
非経口投与に適用される医薬品組成物は、水性および非水性滅菌注射用溶液を含み、これは、抗酸化剤、緩衝剤、静菌剤および製剤を意図するレシピエントの血液と等張にする溶液；ならびに懸濁化剤および増粘剤を含んでもよい、水性および非水性の滅菌懸濁剤を含んでもよい。本組成物は、単位用量または多単位用量の容器、例えば、密封されたアンプルおよびバイアルに提示されてよく、使用前に、注射用水などの滅菌液体担体の添加のみが要求される冷凍乾燥された（凍結乾燥された）状態で貯蔵されてもよい。即席の注射溶液および懸濁液は、滅菌粉末、顆粒および錠剤から調製されてもよい。
【００４９】
非経口投与のために、流体単位用量形態が活性成分、滅菌ビヒクル、好ましくは水を使用して調製される。活性成分は、使用するビヒクルおよび濃度に依存して、ビヒクルに懸濁されても、または溶解されてもよい。溶液の調製において、活性成分を注射用水に溶解し、適切なバイアルまたはアンプルに充填し、密封する前に滅菌濾過してもよい。
【００５０】
有利なことには、局所的麻酔剤、防腐剤および緩衝剤などの薬剤をビヒクルに溶解してもよい。安定性を高めるために、組成物をバイアルに充填し、水を真空下で除去した後に凍結してもよい。次に、凍結乾燥した粉末をバイアルに密封し、注射用水の付随バイアルを、使用前に液体を再構築するために供給してもよい。非経口懸濁剤は、活性成分が溶解される代わりにビヒクルに懸濁され、濾過により滅菌が達成できないことを除いて実質的に同様に調製される。活性成分は、滅菌ビヒクルに懸濁する前にエチレンオキシドに曝露することにより滅菌されてもよい。有利なことに、界面活性剤または湿潤剤を組成物に含ませて、活性成分の均一な分布を容易にする。
【００５１】
本発明による医薬組成物は、好ましくは経口、静脈内または皮下投与に適合する。
【００５２】
特に上述された成分に加えて、本組成物は、問題の製剤の種類に関して、当分野において従来からの他の薬剤を含んでもよく、例えば、経口投与に適切な薬剤は、香味剤を含んでもよい。それらはまた、本発明の化合物に加えて、治療上活性な薬剤を含んでもよい。そのような担体は、製剤の約１％から約９８％までのように存在してもよい。より一般的には、それらは製剤の最大約８０％で形成される。
【００５３】
本組成物は、投与方法に依存して、約０．１重量％、好ましくは１０〜６０重量％の活性成分を含んでよい。
【００５４】
医薬品組成物は、用量当たりに所定量の活性成分を含む単位剤形で提示されてもよい。そのような単位は、治療される症状、投与経路および患者の年齢、体重および状態に依存して、例えば、０．１ｍｇ／ｋｇから１００ｍｇ／ｋｇ、より好ましくは０．１ｍｇ／ｋｇから１０ｍｇ／ｋｇを含んでよい。好ましい単位投与量組成物は、活性成分の上述の通りの一日量または副用量、またはその適切な分画を含むものである。
【００５５】
本発明の第１および第２の態様における化合物の最適な量および個々の投与の間隔は、治療される症状の性質および程度、投与形態、経路および部位、治療される特定の対象により決定されること、およびそのような最適化は従来の技法によって決定することができることは、当業者に認識されよう。また、最適な治療の過程、すなわち、規定の日数について一日当たりの前述の化合物の投与回数は、当業者により治療を決定する試験の従来の過程を用いて確認することができることは当業者に理解されよう。
【００５６】
投与経路に依存して、化合物または組成物は、物質に被覆して、それを酵素、酸の作用およびそれを不活性化し得る他の自然状態から保護することが必要であり得る。
【００５７】
化合物または組成物を非経口投与以外の他の経路により投与するためには、不活性化を阻止するための物質により被覆され、または該物質と共に投与されてもよい。例えば、アジュバント中で投与されてもよく、酵素阻害薬と、またはリポソームにおいて共投与されてもよい。アジュバントは、その最も広い意味で使用され、インターフェロンなどの任意の免疫賦活化合物を含む。本明細書において企図されるアジュバントは、レゾルシノール、ポリオキシエチレンオレイルエーテルおよびｎ−ヘキサデシルポリエチレンエーテルなどの非イオン性界面活性剤を含む。
【００５８】
リポソームには、水中油中水型ＣＧＦ乳剤、ならびに従来のリポソームを含む。
【００５９】
活性化合物または組成物はまた、非経口的にまたは腹腔内に投与されてもよい。分散液はまた、グリセリン、液体ポリエチレングリコールおよびその混合物および油中で調製することができる。通常の貯蔵および使用の条件下で、これらの調製物は微生物の成長を阻止するために防腐剤を含む。
【００６０】
注射可能な使用に適切な医薬品組成物または製剤は、滅菌水溶液（水溶性）または分散剤、および滅菌注射用溶液または分散剤の即席調製物のための滅菌粉末を含む。すべての場合において、本形態は、無菌でなければならず、容易な注射可能性（ｓｙｒｉｎｇａｂｉｌｉｔｙ）が存在する程度に流体であるべきである。それは、製造および貯蔵の条件下に安定であるべきであり、細菌および真菌などの微生物の汚染作用から保護されなければならない。担体は、例えば、水、エタノール、ポリオール（例えば、グリセリン、プロピレングリコールおよび液体ポリエチレン＊ｐｏｌｙｅｔｈｅｙｌｅｎｅグリコールなど）、その適切な混合物および植物油を含む溶媒または分散媒であってよい。適切な流動性は、例えば、レシチンなどの被覆の使用により、分散剤の場合には必要とする粒子サイズを維持することにより、界面活性剤＊ｓｕｐｅｒｆａｃｔａｎｔを使用することにより維持することができる。
【００６１】
微生物の作用の阻止は、種々の抗菌剤および抗真菌剤、例えば、パラベン、クロロブタノール、フェノール、ソルビン酸、サーメロサル（ｔｈｉｒｍｅｒｏｓａｌ）などにより達成することができる。多くの場合、好ましくは、等張剤、例えば、糖または塩化ナトリウムが含まれる。注射可能な組成物の吸収の延長は、組成物において吸収を遅延する薬剤、例えば、モノステアリン酸アルミニウムおよびゼラチンなどを使用することによりもたらすことができる。
【００６２】
滅菌注射可能な溶液は、活性化合物または組成物を必要量で適切な溶媒中に上記に列挙された、種々の他の成分と共に、必要に応じ、次に濾過滅菌することにより調製される。一般には、分散液は、滅菌された活性成分を、基礎となる分散媒と上記に列挙されたものからの他の必要成分とを含む滅菌ビヒクルに組み込むことにより調製される。滅菌注射用溶液の調製のための滅菌粉末の場合において、好ましい調製方法は、減圧乾燥および冷凍乾燥技法であり、これらにより活性成分およびさらなる所望の成分の粉末が、予め滅菌濾過されたその溶液から得られる。
【００６３】
化合物または組成物が上述されたように適切に保護される場合、それは、例えば、不活性な希釈剤と共に、もしくは吸収可能な食用担体と共に経口投与されてよく、または、硬または軟ゼラチンカプセルに封入されてよく、または、錠剤に加圧されてもよく、または直接に食事の食べ物と共に組み込まれてもよい。経口投与の治療のために、活性化合物は、賦形剤と共に組み込まれてもよく、摂食可能な錠剤、口腔錠、トローチ、カプセル、エリキシル剤、懸濁剤、シロップ、ウエハーなどの形態で使用されてもよい。そのような治療上有用な組成物における活性化合物の量は、適切な投与量が得られるような量である。
【００６４】
錠剤、トローチ、丸剤、カプセルなどはまた、以下を含んでよい；結合剤、例えば、トラガントゴム、アラビアゴム、トウモロコシデンプンまたはゼラチンなどの結合剤；リン酸二カルシウムなどの賦形剤；トウモロコシデンプン、ジャガイモデンプン、アルギン酸などの崩壊剤；ステアリン酸マグネシウムなどの滑沢剤；スクロース、ラクトースまたはサッカリンなどの甘味剤を添加してもよく、またはペパーミント、ウインターグリーン油またはチェリーフレーバーなどの香味剤を添加してもよい。投与単位形態がカプセルである場合、それは、上記の種類の物質に加えて液体担体を含んでもよい。
【００６５】
様々な他の物質が被覆として存在してもよく、投与単位の物理的な形態を別の方法で修飾してもよい。例えば、錠剤、丸剤、またはカプセル剤をシェラック、糖またはその両方により被覆してもよい。シロップまたはエリキシル剤は、活性化合物、甘味剤としてスクロース、保存剤としてメチルおよびプロピルパラベン、チェリーまたはオレンジ味などの染料および香味料を含んでもよい。もちろん、任意の投与単位形態の調製において使用される何れの物質も、薬学的に純粋であり、使用される量で実質的に無毒であるべきである。加えて、本活性化合物は、徐放性調製物および製剤に組み込まれてもよい。
【００６６】
本明細書において使用される場合、「薬学的に許容される担体および／または希釈剤」は、ありとあらゆる溶媒、分散媒、被覆、抗菌剤および抗真菌剤、等張剤および吸収遅延剤などを含む。薬学的活性物質のためのそのような媒体および薬剤の使用は、当分野において周知である。従来の媒体または薬剤が活性成分と両立困難である場合を除いて、治療組成物におけるその使用は企図される。補足の活性成分もまた、組成物に組み込むことが可能である。
【００６７】
投与のしやすさおよび均一な投薬量のために、非経口組成物を投与単位形態に製剤化することは特に有利である。本明細書において使用される場合、投与単位形態は、治療されるべき哺乳類の対象のために単位投与量として適した物理的に個別の単位を指す；各単位は、所望の医薬品担体と関連した所望の治療効果を生じるように計算された所定量の活性物質を含む。本発明の新規の投与単位形態のための規格は、以下によって規定され、以下に直接依存する；（ａ）活性物質および達成されるべき特定の治療効果の独自の特徴、および（ｂ）身体の健康を害した病気の症状を有する生きた対象における疾患を治療するための活性物質などの化合物の分野における固有の制約。
【００６８】
主要な活性成分は、投与単位形態において、適切な薬学的に許容される担体と共に有効量で都合よくかつ効果的な投与のために調合される。補足の活性成分を含む組成物の場合、投与量は、前記成分の投与の通常の用量および方法を参照することにより決定される。
【００６９】
他の態様において、本発明は、以下を提供する：
１．アミロイド関連疾患の治療における使用のための本発明の化合物。
特に、本医薬は以下の治療のためのものである：
ａ）任意の形態のアルツハイマー病（ＡＤまたはＦＡＤ）；
ｂ）任意の形態の軽度認知障害（ＭＣＩ）または老人性痴呆症；
ｃ）ダウン症候群；
ｄ）脳アミロイド血管症、包含体筋炎、アミロイドーシスを伴う遺伝性脳内出血（ＨＣＨＷＡ，オランダ型）、または  年齢関連横斑性変性（ＡＲＭＤ）；
ｅ）フロントテンポラーレ痴呆症；
ｆ）任意の形態のパーキンソン病（ＰＤ）またはレヴィ小体を伴う痴呆症；
ｇ）ハンチントン病（ＨＤ）、歯状核赤核淡蒼球ルイ体萎縮症（ＤＲＰＬＡ）、脊髄小脳失調症（ＳＣＡ、１、２、３、６および７型）、球脊髄性筋萎縮症（ＳＢＭＡ、ケネディ病）、または他のポリグルタミン病；
ｈ）クロイツフェルト−ヤコブ病（ＣＪＤ）、ウシのウシ海綿状脳症（ＢＳＥ）、ヒツジのスクレイピー、クールー、ゲルストマン・シュトロイスラー・シャインカー病（ＧＳＳ）、致死性家族性不眠症、またはプリオンタンパク質の凝集に関連する他の伝搬性脳症；
ｉ）筋萎縮性側索硬化症（ＡＬＳ）または他の形態の運動ニューロン疾患；
ｊ）家族性英国型痴呆症（ＦＢＤ）または家族性オランダ型痴呆症（ＦＤＤ）；
ｋ）アミロイドーシスを伴う遺伝性脳内出血（ＨＣＨＷＡ、アイスランド型）；
ｌ）ＩＩ型糖尿病（成人発生型糖尿病、または非インスリン依存型糖尿病、ＮＩＤＤＭ）；
ｍ）透析関連アミロイドーシス（ＤＲＡ）または前立腺性アミロイド；
ｎ）原発性全身性アミロイドーシス、全身性ＡＬアミロイドーシス、または結節性ＡＬアミロイドーシス（ｎｏｄｕｌａｒ  ＡＬ  ａｍｙｌｏｉｄｏｓｉｓ）；
ｏ）骨髄腫関連アミロイドーシス；
ｐ）全身性（反応性）ＡＡアミロイドーシス、二次的全身性アミロイドーシス、慢性炎症性疾患、または家族性地中海熱；
ｑ）老人性全身性アミロイドーシス、家族性アミロイド多発ニューロパシー、または家族性心臓性アミロイド；
ｒ）家族性内臓性アミロイドーシス、遺伝性非ニューロパシー全身性アミロイドーシス、または他のリゾチーム関連アミロイドーシス；
ｓ）フィンランド遺伝性全身性アミロイドーシス；
ｔ）フィブリノーゲンα鎖アミロイドーシス；
ｕ）インスリン関連アミロイドーシス；
ｖ）甲状腺髄様癌；
ｗ）孤立した心房性アミロイドーシス；
ｘ）任意の形態の白内障；および
ｙ）毒性溶解性オリゴマー、原線維、イオンチャネル、可溶性アミロイド線維、プラークまたは包含体への特定の標的アミロイド形成タンパク質またはペプチドの誤った折り畳みまたは凝集に関連する他のアミロイド関連疾患。
２．アミロイド関連疾患の治療の方法であって、有効量の本発明の化合物または医薬組成物を対象に投与するステップを含む方法。
実施例
【００７０】
以下の実施例は、単に例示と解釈されるべきであり、本発明の範囲について限定するものでは決してない。
中間体１：２，４−ジヒドロキシ−５−メトキシピリミジン
【化９】
2013526556.tif 000011
メトキシ酢酸メチル（１０４ｇ、１．０ｍｏｌ）およびギ酸エチル（７４ｇ、１．０ｍｏｌ）の混合物を、温度を３０℃未満に維持しながらナトリウム（２３ｇ、１．０ｍｏｌ）の撹拌したトルエン（３００ｍＬ）中懸濁液に滴下添加した。２４時間後、トルエン層を傾瀉し、粗の、粘性のあるメチルソジオ−β−ヒドロキシ−α−メトキシアクリラートにエタノール（１５０ｍＬ）および尿素（６０ｇ、１．０ｍｏｌ）を添加した。この混合物を室温で１時間撹拌し、次いで、５時間還流下に加熱した。冷却後、固形分を収集し水（５００ｍＬ）に溶解し、溶液を６Ｎ水溶性塩酸で中和した。結果として生じた沈殿物を濾過によって収集し、１００℃で乾燥した。この物質、２，４−ジヒドロキシ−５−メトキシピリミジン（４７ｇ、３３％）を、次の段階で直接使用した。
NMR: δH (d6-DMSO)
3.57 (3H, s), 7.00 (1H, s), 10.45 (1H, br) and 11.20 (1H, br).
【００７１】
中間体２：２，４−ジクロロ−５−メトキシピリミジン
【化１０】
2013526556.tif 000012
２，４−ジヒドロキシ−５−メトキシピリミジン（４５ｇ、０．３１６ｍｏｌ）、オキシ塩化リン（２２５ｍＬ、０．８８ｍｏｌ）、およびＮ，Ｎ−ジメチルアニリン（４５ｍＬ、０．３９１ｍｏｌ）を、２時間還流下に加熱した。その混合物を、破砕した氷（８０ｇ）の上に注ぎ、生成物をジエチルエーテルに抽出した。軽油（ｂ．ｐ：４０〜６０℃）からの再結晶化で２，４−ジクロロ−５−メトキシピリミジン（４３ｇ、７５％）が得られた。
【００７２】
Mass: (ES+) 179 (M+H)+
【００７３】
中間体３：２−クロロ−５−メトキシピリミジン
【化１１】
2013526556.tif 000013
２，４−ジクロロ−５−メトキシピリミジン（４３ｇ、０．２４ｍｏｌ）、亜鉛末（８６ｇ、１．３２ｍｏｌ）、エタノール（２００ｍＬ）および水（２００ｍＬ）を、４時間還流下に加熱した。高温の混合物を濾過し、エタノールを減圧下に除去した。冷却後、生成物をジエチルエーテルに抽出した。軽油（ｂ．ｐ：４０〜６０℃）から再結晶化で２−クロロ−５−メトキシピリミジン（２０ｇ、５８％）が得られた。
Mass: (ES+) 145 (M+H)+
NMR: δH (d6-DMSO)
3.92 (3H, s) and 8.55 (2H, s).
【００７４】
中間体４：２−クロロ−５−ヒドロキシピリミジン
【化１２】
2013526556.tif 000014
２−クロロ−５−メトキシピリミジン（１０ｇ、０．０６９ｍｏｌ）のジクロロメタン（８４ｍＬ）中溶液に、−７８℃で三臭化ホウ素（１０４ｍＬ、ジクロロメタン中の１Ｍ溶液）を滴下添加した。
この混合物を室温で２０時間撹拌し、次いで、メタノール（１５０ｍＬ）を−７８℃で滴下添加した。
反応混合物を、減圧下に濃縮し、水溶性水酸化ナトリウム溶液でｐＨ５に調節した。
その混合物を酢酸エチルで抽出し、水および塩水で洗浄した。
有機相を乾燥（ＭｇＳＯ４）し、減圧下に溶媒を除去し、
２−クロロ−５−ヒドロキシピリミジン（５．７ｇ、６１％）が得られた。
Mass: (ES-) 129
NMR: δH (d6-DMSO)
8.27 (2H, s) and 10.85 (1H, br s).
【００７５】
中間体５：
３−モルホリン−４−イルフェニルボロン酸
【化１３】
2013526556.tif 000015
１，３−ジブロモベンゼン（５０ｇ、０．２１ｍｏｌ）、モルホリン（１５．８９ｍＬ、０．１９ｍｏｌ）および無水トルエン（２００ｍＬ）を、アルゴン下で注射器によってフラスコに添加した。この溶液を完全に混合した後、Ｒ−ＢＩＮＡＰ（１．３２ｇ、０．００２１ｍｏｌ）およびトリス（ジベンジリデンアセトンパラジウム（０）（０．６４０ｇ、０．００６ｍｏｌ）が添加し、最終的に、ＤＢＵ（２５．８ｍＬ、０．１７ｍｏｌ）が注射器経由で添加した。反応混合物を６０℃で撹拌した。ナトリウムｔｅｒｔ−ブトキシド（３０．５５ｇ、０．３２ｍｏｌ）を添加し、反応物を１００℃に終夜加熱した。
この懸濁液を酢酸エチルで希釈し、セライトに通して濾過し、水および塩水で洗浄した。有機相を乾燥（ＭｇＳＯ４）し減圧下に溶媒を除去した。粗生成物をシリカのカラムクロマトグラフィーによって酢酸エチル：ヘキサン、１：１で溶出して精製し、黄色油状物（３６．５ｇ、７１％）として４−（３−ブロモフェニル）モルホリンが得られた。
Mass: (ES+) 242 (M+H)+
【００７６】
４−（３−ブロモフェニル）モルホリン（１６．５ｇ、０．０６８ｍｏｌ）の撹拌した乾燥ＴＨＦ（３００ｍＬ）中混合物に、−７８℃から−７０℃でｎ−ブチルリチウム（９８．１ｍＬ、０．１０２ｍｏｌ、ｎ−ヘキサン中１．６Ｍ溶液）を滴下添加した。この混合物を２時間同じ温度で撹拌した。この反応混合物に、−７０℃から−７８℃に温度を維持しながらホウ酸トリイソプロピル（３０．５ｍＬ、０．１５０ｍｏｌ）を滴下添加した。ドライアイス−アセトン浴を除去し、室温に混合物を暖め、室温で終夜撹拌した。混合物を塩化アンモニウムの飽和溶液に注ぎ、水を添加し、反応混合物を酢酸エチルで抽出した。有機相を乾燥（ＭｇＳＯ４）し、減圧下に溶媒を除去した。残渣をｎ−ヘキサンおよびジエチルエーテルで研和し、オフホワイト色の固形物として３−モルホリン−４−イル−フェニルボロン酸（１２ｇ、８５％）が得られた。
Mass: (ES+) 208 (M+H)+
NMR: δH (d6-DMSO)
3.05 (4H, m), 3.72 (4H, m), 6.95 (1H, d), 7.18 (1H, t), 7.21 (1H, d), 7.38 (1H,
br s) and 7.94 (2H, s).
【００７７】
中間体６：（２−フルオロ−６−ニトロフェノキシ）酢酸
【化１４】
2013526556.tif 000016
２−フルオロ−６−ニトロフェノール（２．２ｇ、０．０１４０ｍｏｌ）、ブロモ酢酸メチル（３．２ｍＬ、０．０１７７ｍｏｌ）、Ｋ２ＣＯ３（４ｇ、０．０１８４ｍｏｌ）の撹拌したアセトン（１００ｍＬ）中混合物を、６５℃で３時間加熱した。反応混合物を真空下に濃縮し、結果として生じた固形分をジクロロメタンに溶解した。次いで、水を添加し、混合物をジクロロメタンで抽出した。有機相を乾燥（ＭｇＳＯ４）し、減圧下に溶媒を除去した。残渣をジエチルエーテルで研和した。褐色の油状物（１．４４ｇ、９８％）として（２−フルオロ−６−ニトロフェノキシ）酢酸が得られ、これは次の段階で直接使用した。
Mass: (ES+) 198 (M+H)+
【００７８】
中間体７：８−フルオロ−４Ｈ−ベンゾ［１，４］オキサジン−３−オン
【化１５】
2013526556.tif 000017
（２−フルオロ−６−ニトロフェノキシ）酢酸（１．４４ｇ、０．００７３ｍｏｌ）および鉄粉末（２．４４ｇ、０．０４３８ｍｏｌ）の撹拌した酢酸（５０ｍＬ）中混合物を、室温で終夜撹拌した。反応混合物のｐＨを重炭酸ナトリウムおよび水酸化ナトリウム溶液の使用により７に調節した。この混合物を酢酸エチルで希釈した。水を添加し、混合物をジクロロメタンで抽出した。有機相を乾燥（ＭｇＳＯ４）し、減圧下に溶媒を除去した。
残渣をジエチルエーテルで研和し、黄色固形分（１．０ｇ、８２％）として８−フルオロ−４Ｈ−ベンゾ［１，４］オキサジン−３−オンが得られた。
NMR: δH (d6-DMSO)
4.63 (2H, s), 6.70 (1H, d), 6.88 (2H, m) and 10.88 (1H, br s).
【００７９】
中間体８：８−フルオロ−３，４−ジヒドロ−２Ｈ−ベンゾ［１，４］オキサジン
【化１６】
2013526556.tif 000018
８−フルオロ２Ｈ−１、４−ベンゾオキサジン−３（４Ｈ）−オン（１．０ｇ、０．００５９ｍｏｌ）の撹拌したＴＨＦ（２５ｍＬ）中混合物に、０℃から−５℃でリチウムアルミニウム水素化物（７ｍＬ、ＴＨＦ中１Ｍの溶液）滴下添加した。反応混合物を室温で２時間撹拌し、次いで、氷上に注ぎ、酢酸エチルで抽出した。有機相を乾燥（ＭｇＳＯ４）し、減圧下に溶媒を除去した。残渣をジエチルエーテルで研和した。黒褐色の固形分として８−フルオロ−３，４−ジヒドロ−２Ｈ−ベンゾ［１，４］オキサジン（０．８ｇ、８７％）が得られた。
Mass: (ES+) 154 (M+H) +
NMR: δH (d6-DMSO)
3.27 (2H, m), 4.11 (2H, m), 6.05 (1H, br s), 6.34 (2H, m) and 6.58 (1H, m).
【００８０】
中間体９：４−［３−（２−クロロピリミジン−５−イルオキシ）フェニル］モルホリン
【化１７】
2013526556.tif 000019
２−クロロ−５−ヒドロキシピリミジン（１５ｇ、０．１１５ｍｏｌ）、３−モルホリニルフェニルボロン酸（２４ｇ、０．１１５ｍｏｌ）、酢酸銅（ＩＩ）（２１ｇ、０．１１５ｍｏｌ）、トリエチルアミン（７９．５ｍＬ、０．４０２ｍｏｌ）および粉末状４Åモレキュラーシーブのジクロロメタン（６００ｍＬ）中混合物を３日間大気下に撹拌した。塩化カルシウム防護管を水分との反応から保護するために使用した。この懸濁液をジクロロメタンで希釈し、濾過し、水および塩水で洗浄した。有機相を乾燥（ＭｇＳＯ４）し、減圧下に溶媒を除去した。粗生成物をシリカのカラムクロマトグラフィーによって（酢酸エチル：ヘキサン１：１）で溶出して精製し、無色油状物として４−［３−（２−クロロピリミジン−５−イルオキシ）フェニル］モルホリン（８．０ｇ、２４％）が得られた。
Mass: (ES+) 292 (M+H)+
NMR: δH
(d6-DMSO)
3.15 (4H, m), 3.84 (4H, m), 6.50 (1H, d), 6.58 (1H, s), 6.75 (1H, d), 7.28 (1H,
t) and 8.35 (2H, s).
【００８１】
中間体１０：４−［３−（６−クロロピリジン−３−イルオキシ）フェニル］モルホリン
【化１８】
2013526556.tif 000020
２−クロロ−５−ヒドロキシピリジン（２ｇ、０．０１５４ｍｏｌ）、３−モルホリン−４−イルフェニルボロン酸（３．２ｇ、０．０１５４ｍｏｌ）、酢酸銅（ＩＩ）（２．８ｇ、０．０１５４ｍｏｌ）、トリエチルアミン（１０．８ｍＬ、０．０７７ｍｏｌ）および粉末状４Åモレキュラーシーブのジクロロメタン（９０ｍＬ）中混合物を大気下に３日間撹拌した。塩化カルシウム防護管を水分との反応から保護するために使用した。反応混合物をジクロロメタンで希釈し、濾過し、水および塩水で洗浄した。有機相を乾燥（ＭｇＳＯ４）し、減圧下に溶媒を除去した。粗生成物をシリカゲル（酢酸エチル：ヘキサン１：１）のカラムクロマトグラフィーによって精製し、無色油状物として４−［３−（６−クロロピリジン−３−イルオキシ）フェニル］モルホリン（１．０ｇ、２２％）が得られた。
Mass: (ES+) 291
(M+H)+
【００８２】
中間体１１：（４−フルオロ−６−ニトロフェノキシ）酢酸
【化１９】
2013526556.tif 000021
４−フルオロ−６−ニトロフェノール（２．２ｇ、０．０１４０ｍｏｌ）、ブロモ酢酸メチル（３．２ｇ、０．０１７７ｍｏｌ）、Ｋ２ＣＯ３（４ｇ、０．０１８４ｍｏｌ）の撹拌したアセトン（１００ｍＬ）中混合物を、３時間還流加熱した。この混合物を真空下に濃縮し、結果として生じた固形分をジクロロメタンに溶解した。次いで、水を添加し、反応混合物をジクロロメタンで抽出した。有機相を乾燥（ＭｇＳＯ４）し、減圧下に溶媒を除去した。残渣をジエチルエーテルで研和し、褐色油状物として（４−フルオロ−６−ニトロフェノキシ）酢酸（１．３ｇ、８８％）が得られ、これは次の段階で直接使用した。
Mass: (ES+) 198 (M+H) +
【００８３】
中間体１２：６−フルオロ−４Ｈ−ベンゾ［１，４］オキサジン−３−オン  
【化２０】
2013526556.tif 000022
（４−フルオロ−６−ニトロフェノキシ）酢酸（１．３ｇ、０．００６５ｍｏｌ）、鉄粉末（２．２ｇ、０．０３９５ｍｏｌ）の酢酸（４５ｍＬ）中混合物を、室温で終夜撹拌した。反応混合物のｐＨを重炭酸ナトリウムおよび水酸化ナトリウム溶液の使用により７に調節した。この混合物を酢酸エチルで希釈した。水を添加し、混合物をジクロロメタンで抽出した。有機相を乾燥（ＭｇＳＯ４）し、減圧下に溶媒を除去した。残渣をジエチルエーテルで研和し、黄色固形分として６−フルオロ−４Ｈ−ベンゾ［１，４］オキサジン−３−オン（０．９ｇ、８２％）が得られた。これは次の段階で直接使用した。
Mass: (ES-) 166
【００８４】
中間体１３：
６−フルオロ−３，４−ジヒドロ−２Ｈ−ベンゾ［１，４］オキサジン
【化２１】
2013526556.tif 000023
６−フルオロ−２Ｈ−１，４−ベンゾオキサジン−３（４Ｈ）−オン（０．９ｇ、０．００５３ｍｏｌ）の撹拌したＴＨＦ（２３ｍＬ）中混合物に、０℃から−５℃でリチウムアルミニウム水素化物（６．５ｍＬ、ＴＨＦ中１Ｍの溶液）を滴下添加した。反応混合物を室温で２時間撹拌した。この混合物を氷の上に注ぎ、酢酸エチルで抽出した。有機相を乾燥（ＭｇＳＯ４）し、減圧下に溶媒を除去した。残渣をジエチルエーテルで研和し、黒褐色の固形分として６−フルオロ−３，４−ジヒドロ−２Ｈ−ベンゾ［１，４］オキサジン（０．５ｇ、６１％）が得られた。
NMR: δH (d6-DMSO)
3.25 (2H, m), 4.05 (2H, m), 6.03 (1H, br s), 6.17 (1H, dt), 6.31 (1H, dd) and 6.57
(1H, dd).
【００８５】
中間体１４：１−（３−ブロモフェニル）−４−メチルピペラジン
【化２２】
2013526556.tif 000024
１，３−ジブロモベンゼン（１０ｇ、０．０４２３ｍｏｌ）、Ｎ−メチルピペラジン（３．２ｍＬ、０．０２９６ｍｏｌ）および無水トルエン（４０ｍＬ）を、アルゴン下で注射器によってフラスコに添加した。結果として生じた溶液を完全に混合した後、Ｒ−ＢＩＮＡＰ（０．２６４ｇ、０．０００４２ｍｏｌ）およびトリス（ジベンジリデンアセトン）パラジウム（０）（０．１２８ｇ、０．０００１３ｍｏｌ）を加え、次いで、ＤＢＵ（５．１６ｍＬ、０．０３４５  ｍｏｌ）を注射器経由で添加した。反応混合物を６０℃で５分間撹拌した。ナトリウムｔｅｒｔ−ブトキシド（６．１１ｇ、０．０６３５ｍｏｌ）を添加し、反応物を１００℃に終夜加熱した。この懸濁液を酢酸エチルで希釈し、セライトに通して濾過し、水および塩水で洗浄した。有機相を乾燥（ＭｇＳＯ４）し、減圧下に溶媒を除去した。粗生成物をシリカのカラムクロマトグラフィーによってジクロロメタン：メタノール（１９：１）で溶出して精製し、黄色油状物として１−（３−ブロモフェニル）−４−メチルピペラジン（５．６ｇ、５２％）が得られた。
Mass: (ES+) 256 (M+H) + 
【００８６】
中間体１５：３−（４−メチルピペラジン−１−イル）フェニルボロン酸
【化２３】
2013526556.tif 000025
１−（３−ブロモフェニル）−４−メチルピペラジン（５．６ｇ、０．０２２２ｍｏｌ）の撹拌した乾燥ＴＨＦ（８０ｍＬ）中混合物に、−７０℃から−７８℃でｎ−ブチルリチウム（３３．５ｍＬ、０．０３３３ｍｏｌ、ｎ−ヘキサン中の１．６Ｍ溶液）を滴下添加した。反応混合物を同じ温度で２時間撹拌した。この混合物に、−７０℃から−７８℃に温度を維持しながらホウ酸トリイソプロピル（１１．２８ｍＬ、０．０４８９ｍｏｌ）を滴下添加した。ドライアイス−アセトン浴を除去し、室温に混合物を暖め、この温度で終夜撹拌した。この混合物を塩化アンモニウム飽和溶液に注ぎ、水を添加し、反応混合物を酢酸エチルで抽出した。有機相を乾燥（ＭｇＳＯ４）し、減圧下に溶媒を除去した。残渣をｎ−ヘキサンおよびジエチルエーテルで研和し、油状物として３−（４−メチルピペラジニル）フェニルボロン酸（１．２６ｇ、２６％）が得られた。
Mass: (ES+) 305 (M+H) +
【００８７】
中間体１６：１−［３−（２−クロロピリミジン−５−イルオキシ）フェニル］−４−メチルピペラジン
【化２４】
2013526556.tif 000026
２−クロロ−５−ヒドロキシピリミジン（０．７１１ｇ、０．００５４５ｍｏｌ）、３−（４−メチル−ピペラジン−１−イル）フェニルボロン酸（１．５ｇ、０．００５４５ｍｏｌ）、酢酸銅（ＩＩ）（０．９９ｇ、０．００５４５ｍｏｌ）、トリエチルアミン（３．８ｍＬ、０．０２７２ｍｏｌ）および粉末状４Åモレキュラーシーブのジクロロメタン（４０ｍＬ）中混合物を大気下に３日間撹拌した。その懸濁液をジクロロメタンで希釈し、濾過し、水および塩水で洗浄した。有機相を乾燥（ＭｇＳＯ４）し、減圧下に溶媒を除去した。粗生成物をシリカのカラムクロマトグラフィーによってジクロロメタン：メタノール（１９：１）で溶出して精製し、無色油状物として１−［３−（２−クロロピリミジン−５−イルオキシ）フェニル］−４−メチルピペラジン（０．６８ｇ、４１％）が得られた。
Mass: (ES+) 305 (M+H) + 
【００８８】
中間体１７：９−フルオロ−２，３，４，５−テトラヒドロベンゾ［ｂ］［１，４］オキサゼピン
【化２５】
2013526556.tif 000027
２−フルオロ−６−アミノフェノール（２ｇ、０．０１５７ｍｏｌ）、Ｋ２ＣＯ３（１０．８ｇ、０．０７８４ｍｏｌ）の撹拌したＤＭＦ（３０ｍＬ）中混合物に、室温で１，３−ジブロモプロパン（４．７５ｇ、０．０２３５ｍｏｌ）を滴下添加した。この混合物を１２５℃で２４時間撹拌し、氷の上に注ぎ、次いで酢酸エチルで抽出した。有機相を乾燥（ＭｇＳＯ４）し、減圧下に溶媒を除去した。粗生成物をカラムクロマトグラフィーによって移動相として酢酸エチル：ヘキサン（７：３）を使用して精製し、褐色油状物として９−フルオロ−２，３，４，５−テトラヒドロベンゾ［ｂ］［１，４］オキサゼピン（０．３ｇ、１１％）が得られた。
Mass: (ES+) 167 (M+H)
+ 
NMR:
N-388/ST-VIII/94-amine/47
【００８９】
中間体１８：２，３−ジヒドロ−１Ｈ−ピリド［２，３−ｂ］［１，４］オキサジン
【化２６】
2013526556.tif 000028
３−アミノピリジン−２−オール（１．０ｇ、９．０８ｍｍｏｌ）、Ｋ２ＣＯ３（６．２７ｇ、４５．４６ｍｍｏｌ）の撹拌したＤＭＦ（１０ｍＬ）中混合物に、室温で１，２−ジブロモエタン（２．５３ｇ、１３．６ｍｍｏｌ）を滴下添加した。この混合物を８０℃で２４時間撹拌し、次いで、氷の上に注ぎ、酢酸エチルで抽出し、水および塩水で洗浄した。有機相を乾燥（ＭｇＳＯ４）し、減圧下に溶媒を除去した。粗生成物をカラムクロマトグラフィーによって移動相として酢酸エチル：ヘキサン（７：３）を使用して精製し、褐色油状物として２，３−ジヒドロ−１Ｈ−ピリド［２，３−ｂ］［１，４］オキサジン（１００ｍｇ、８％）が得られた。
Mass: (ES+) 137
(M+H)+
【００９０】
中間体１９：（Ｒ）−４−（３−ブロモフェニル）−３−メチルモルホリン
【化２７】
2013526556.tif 000029
１，３−ジブロモベンゼン（１．９７ｍＬ、０．０１６２ｍｏｌ）、（Ｒ）−３−メチルモルホリン（１．５ｇ、０．０１４６ｍｏｌ）および無水トルエン（５０ｍＬ）を、アルゴン下で注射器によってフラスコに添加した。溶液を完全に混合し、Ｒ−ＢＩＮＡＰ（０．１０１ｇ、０．０００１６ｍｏｌ）、トリス（ジベンジリデンアセトンパラジウム（０）（０．０４９ｇ、０．００００５３ｍｏｌ）を添加し、次いで、最終的に、ＤＢＵ（１．９８ｍＬ、  ０．０１３２  ｍｏｌ）を注射器経由で添加した。反応混合物を６℃で撹拌した。ナトリウムｔ−ブトキシド（２．３４ｇ、０．０２４４ｍｏｌ）を添加し、反応混合物を１００℃で終夜加熱した。この懸濁液をジクロロメタンで希釈し、セライトを通して濾過し、水および塩水で洗浄した。有機相を乾燥（ＭｇＳＯ４）し、減圧下に溶媒を除去した。
粗生成物を、フラッシュクロマトグラフィーによって溶離液として０〜３０％酢酸エチル：ヘキサンを使用して精製した。黄色油状物として（Ｒ）−４−（３−ブロモ−フェニル）−３−メチルモルホリン（０．７５ｇ）が得られた。
Mass: (ES+) 256 (M+H)+
NMR: δH (d6-DMSO) 1.00
(3H, d), 2.98 (1H, dt), 3.21(1H, br d), 3.52 (1H, dt), 3.67 (2H, m), 3.90 (2H,
br s), 6.89 (2H, br d), 7.01 (1h m) and 7.15 (1H, t).
【００９１】
中間体２０：（Ｒ）−３−（３−メチル−モルホリン−４−イル）フェニルボロン酸
【化２８】
2013526556.tif 000030
（Ｓ）−４−（３−ブロモフェニル）−３−メチルモルホリン（０．７４５ｇ、０．００２９１ｍｏｌ）の撹拌した乾燥ＴＨＦ（２０ｍＬ）中混合物に、ｎ−ＢｕＬｉ（６．０ｍＬ、０．００９６ｍｏｌ、ｎ−ヘキサン中１．６Ｍ溶液）を−７０℃から−７８℃で滴下添加した。この混合物を同じ温度で２時間撹拌した。この混合物に、この温度を維持しながらホウ酸トリイソプロピル（２．０ｍＬ、０．００８７３ｍｏｌ）を滴下添加した。ドライアイスアセトン浴を除去し、室温に混合物を暖め、室温で終夜撹拌した。混合物を飽和水性塩化アンモニウムへ注ぎ、水を添加し、反応混合物を酢酸エチルで抽出した。有機相を乾燥（ＭｇＳＯ４）し、溶媒を減圧下に４０℃未満で除去し、（Ｓ）−３−（３−メチル−モルホリン−４−イル）フェニルボロン酸（０．７０ｇ）が得られた。これは次の段階で直接使用するのに十分な純度であった。
Mass: (ES+) 221 (M+H)+
【００９２】
中間体２１：（Ｒ）−４−［３−（２−クロロピリミジン−５−イルオキシ）フェニル］−３−メチルモルホリン
【化２９】
2013526556.tif 000031
２−クロロ−５−ヒドロキシピリミジン（０．２９５ｇ、２．２６１ｍｍｏｌ）、（Ｓ）−３−（３−メチル−モルホリン−４−イル）フェニルボロン酸（０．５ｇ、２．２６１ｍｍｏｌ）、酢酸銅（ＩＩ）（０．４１０ｇ、２．２６１ｍｍｏｌ）、トリエチルアミン（１．６ｍＬ、１１．３ｍｍｏｌ）および粉末状４Åモレキュラーシーブのジクロロメタン（５０ｍＬ）中混合物を大気下に３日間撹拌した。塩化カルシウム防護管を水分との反応から保護するために使用した。この懸濁液をジクロロメタンで希釈し、濾過し、水および塩水で洗浄した。有機相を乾燥（ＭｇＳＯ４）し、減圧下に溶媒を除去した。粗生成物をフラッシュクロマトグラフィーによって、溶離液として０〜１５％酢酸エチル：ヘキサンを使用して精製し、褐色油状物として（Ｒ）−４−｛３−［（２−クロロピリミジン−５−イル）オキシ］フェニル｝３−メチルモルホリン（０．２５８ｇ）が得られた。
Mass: (ES+) 305 (M+H)+
【００９３】
中間体２２：（Ｓ）−４−（３−ブロモフェニル）−３−メチルモルホリン
【化３０】
2013526556.tif 000032
３５ｍＬ密封管中で、１，３−ジブロモベンゼン（０．５９ｍＬ、４．９５ｍｍｏｌ）、（Ｒ）−３−メチルモルホリン（０．５ｇ、４．９５ｍｍｏｌ）、Ｒ−ＢＩＮＡＰ（０．２３１ｇ、０．３７ｍｍｏｌ）、トリス（ジベンジリデンアセトン）パラジウム（０）（０．１１３ｇ、０．１２３ｍｍｏｌ）、ナトリウムｔ−ブトキシド（０．５７０ｇ、５．９４ｍｍｏｌ）の無水トルエン（１０ｍＬ）中混合物を８５〜９５℃で終夜加熱した。この懸濁液をジクロロメタンで希釈し、セライトに通して濾過し、水および塩水で洗浄した。有機相を乾燥（ＭｇＳＯ４）し、減圧下に溶媒を除去した。粗生成物を、フラッシュクロマトグラフィーによって溶離液として０〜１５％酢酸エチル：ヘキサンを使用して精製し、黄色油状物として（Ｓ）−４−（３−ブロモフェニル）−３−メチルモルホリン（０．９５３ｇ）が得られた。
Mass: (ES+) 256 (M+H)+
NMR: δH (d6-DMSO) 1.00
(3H, d), 2.98 (1H, dt), 3.21(1H, br d), 3.52 (1H, dt), 3.67 (2H, m), 3.90 (2H,
br s), 6.89 (2H, br d), 7.01 (1h m) and 7.15 (1H, t).
【００９４】
中間体２３：（Ｓ）−３−（３−メチル−モルホリン−４−イル）フェニルボロン酸
【化３１】
2013526556.tif 000033
（Ｒ）−４−（３−ブロモフェニル）−３−メチルモルホリン（０．９５３ｇ、０．００３７２ｍｏｌ）の撹拌した乾燥ＴＨＦ（２０ｍＬ）中混合物に、−７０℃から−７８℃でｎ−ＢｕＬｉ（７．７ｍＬ、０．００１２３ｍｏｌ、ｎ−ヘキサン中１．６Ｍ溶液）を滴下添加した。この混合物を同じ温度で２時間撹拌した。この混合物に、この温度を維持しながらホウ酸トリイソプロピル（２．６ｍＬ、０．０１１３ｍｏｌ）を滴下添加した。ドライアイスアセトン浴を除去し、室温に混合物を暖め、室温で終夜撹拌した。反応混合物を飽和水性塩化アンモニウムへ注ぎ、水を添加し、混合物を酢酸エチルで抽出した。有機相を乾燥（ＭｇＳＯ４）し、減圧下に４０℃未満で溶媒が除去した。残渣をヘキサンで研和し、（Ｓ）−３−（３−メチル−モルホリン−４−イル）フェニルボロン酸（０．７０ｇ、５１％）が得られた。これは次の段階で直接使用した。
Mass: (ES+) 221 (M+H)+
【００９５】
中間体２４：（Ｓ）−４−［３−（２−クロロピリミジン−５−イルオキシ）フェニル］−３−メチルモルホリン
【化３２】
2013526556.tif 000034
２−クロロ−５−ヒドロキシピリミジン（０．２５０ｇ、０．００１９１ｍｏｌ）、Ｒ−３−（３−メチル−モルホリン−４−イル）フェニルボロン酸（０．４２３ｇ、０．００１９１ｍｏｌ）、酢酸銅（ＩＩ）（０．３４７ｇ、０．００１９１ｍｏｌ）、トリエチルアミン（１．３３ｍＬ、０．００９６ｍｏｌ）および粉末状４Åモレキュラーシーブのジクロロメタン（３０ｍＬ）中混合物を３日間大気下に撹拌した。塩化カルシウム防護管を水分との反応から保護するために使用した。その懸濁液をジクロロメタンで希釈し、濾過し、水および塩水で洗浄した。有機相を乾燥（ＭｇＳＯ４）し、減圧下に溶媒を除去した。粗生成物をフラッシュクロマトグラフィーによって溶離液として０−１５％の酢酸エチル：ヘキサンを使用して精製し、褐色油状物として（Ｓ）−４−［３−（２−クロロピリミジン−５−イルオキシ）フェニル］−３−メチルモルホリン（０．１７５ｇ、３０％）が得られた。
Mass: (ES+) 305
(M+H)+
【００９６】
中間体２５：２−クロロ−５−（３−メトキシフェノキシ）ピリミジン
【化３３】
2013526556.tif 000035
２−クロロ−５−ヒドロキシピリミジン（１．０ｇ、７．６６ｍｍｏｌ）、３−メトキシフェニルボロン酸（１．１６ｇ、７．６６ｍｍｏｌ）、酢酸銅（ＩＩ）（１．３９ｇ、７．６６ｍｍｏｌ）、トリエチルアミン（５．３４ｍＬ、７．６６ｍｍｏｌ）および、粉末状４Åモレキュラーシーブのジクロロメタン（３０ｍＬ）中混合物を３日間大気下に撹拌した。塩化カルシウム防護管を水分との反応から保護するために使用した。反応混合物をジクロロメタンで希釈し、濾過し、水および塩水で洗浄した。有機相を乾燥（ＭｇＳＯ４）し、溶媒を減圧下に除去し、粗生成物をフラッシュクロマトグラフィーによって溶離液として０〜１５％酢酸エチル：ヘキサンを使用して精製し、黄色油状物として２−クロロ−５−（３−メトキシフェノキシ）−ピリミジン（０．４４８ｇ、２５％）が得られた。
Mass: (ES+) 237 (M+H)+
NMR:
δH (CDCl3)
3.82 (3H, s), 6.63 (2H, m), 6.81 (1H, br d), 7.33 (1H, t) and 8.39 (2H, s).
【００９７】
中間体２６：２−クロロ−５−ベンジルオキシピリミジン
【化３４】
2013526556.tif 000036
２−クロロ−５−ヒドロキシピリミジン（２．０ｇ、０．０１５３２ｍｏｌ）、Ｋ２ＣＯ３
（４．２３ｇ、０．０３０７ｍｏｌ）の撹拌した乾燥ＴＨＦ（３０ｍＬ）中混合物に、室温で塩化ベンジル（２．６ｍＬ、０．０２３ｍｏｌ）を滴下添加した。この混合物を終夜還流加熱した。反応混合物をジクロロメタンで希釈し、水および塩水で洗浄した。有機相を乾燥（ＭｇＳＯ４）し、減圧下に溶媒を除去し、２−クロロ−５−ベンジルオキシピリミジン（１．３ｇ）が得られた。これは次の段階で直接使用するのに十分な純度であった。
Mass: (ES+) 221 (M+H)
+
【００９８】
中間体２７：４−［５−（ベンジルオキシ）ピリミジン−２−イル］−８−フルオロ−３，４−ジヒドロ−２Ｈ−ベンゾ−［１，４］オキサジン
【化３５】
2013526556.tif 000037
２−クロロ−５−ベンジルオキシピリミジン（１．２５ｇ、０．００５６７ｍｏｌ）、８−フルオロ−３，４−ジヒドロ−２Ｈ−ベンゾ［ｂ］［１，４］オキサジン（８６８ｍｇ、０．００５６７ｍｏｌ）、トリス（ジベンジリデンアセトン）−パラジウム（０）（３６０ｍｇ、０．０００２８ｍｏｌ）、４，５−ビス（ジフェニルホスフィノ）−９，９−ジメチルキサンテン（３２８ｍｇ、０．０００５６ｍｏｌ）および炭酸セシウム（３．７ｇ、０．０１１３４ｍｏｌ）の脱気した１，４−ジオキサン（１５ｍＬ）中の懸濁液を８０℃で２日間加熱した。反応混合物をジクロロメタンで希釈し、水および塩水で洗浄した。有機相を乾燥（ＭｇＳＯ４）し、溶媒を減圧下に除去し、粗生成物をフラッシュクロマトグラフィー、によって溶離液として０〜５％酢酸エチル：ヘキサンを使用して精製し、黄色固形分として４−（５−（ベンジルオキシ）ピリミジン−２−イル）−８−フルオロ−３，４−ジヒドロ−２Ｈ−ベンゾ［１，４］オキサジン（１．１４ｇ、６０％）が得られた。
Mass: (ES+) 338(M+H)+
【００９９】
中間体２８：８−フルオロ−４−［５−（ヒドロキシ）ピリミジン−２−イル］−３，４−ジヒドロ−２Ｈ−ベンゾ−［１，４］オキサジン
【化３６】
2013526556.tif 000038
４−［５−（ベンジルオキシ）ピリミジン−２−イル］−８−フルオロ−３，４−ジヒドロ−２Ｈ−ベンゾ−［１，４］オキサジン（１．１ｇ）、パラジウム炭素（０．４ｇ）の撹拌した乾燥エタノール中混合物を室温で２０分間水素でパージした。反応混合物をセライトに通して濾過し、エタノールで洗浄し、溶媒を減圧下に除去し、８−フルオロ−４−［５−（ヒドロキシ）ピリミジン−２−イル］−３，４−ジヒドロ−２Ｈ−ベンゾ［１，４］オキサジン（０．８１８ｇ）が得られた。
Mass: (ES+) 248 (M+H)+
【０１００】
中間体２９：４−ベンジル−８−フルオロ−４Ｈ−ベンゾ［１，４］オキサジン−３−オン
【化３７】
2013526556.tif 000039
８−フルオロ−４Ｈ−ベンゾ［１，４］オキサジン−３−オン（１ｇ、０．００５９ｍｏｌ）および炭酸セシウム（４．８ｇ、０．０１４７ｍｏｌ）の撹拌した１，４ジオキサン（１５ｍＬ）中混合物に、０℃から５℃で塩化ベンジル（０．８２１ｇ、０．００６４９ｍｏｌ）を滴下添加した。この混合物を１００〜１１０℃で２時間加熱した。反応混合物を氷の上に注ぎ、酢酸エチルで抽出した。有機相を乾燥（ＭｇＳＯ４）し、溶媒を減圧下に４０℃未満で除去した。残渣をヘキサンで研和し、明るい褐色の固形分として８−フルオロ−４Ｈ−ベンゾ−［１，４］オキサジン−３−オン（１．３ｇ、８５％）が得られた。
Mass: (ES+) 258(M+H)+
【０１０１】
中間体３０：（±）−４−ベンジル−８−フルオロ−３−メチル−３，４−ジヒドロ−２Ｈ−ベンゾ［１，４］−オキサジン
【化３８】
2013526556.tif 000040
４−ベンジル−８−フルオロ−２Ｈ−ベンゾ［１，４］オキサジン−３−オン（１ｇ、０．００３８ｍｏｌ）の撹拌したＴＨＦ（１５ｍＬ）中混合物に０℃から−５℃でＣＨ３ＭｇＢｒ（５．０７ｍＬ、ＴＨＦ中の３Ｍ溶液）を滴下添加した。この混合物を２時間室温で撹拌した。反応混合物を０〜５℃に冷却し、酢酸（１０ｍＬ）、続いてＮａＢＨ４（０．３６１ｇ、０．００９５ｍｏｌ）を０〜５℃でゆっくり添加した。反応混合物を室温で１２時間撹拌し、次いで、氷の上に注ぎ、酢酸エチルで抽出した。有機相を乾燥（ＭｇＳＯ４）し、溶媒を減圧下に４０℃未満で除去した。残渣をジエチルエーテルで研和し、（±）−４−ベンジル−８−フルオロ−３−メチル−３，４−ジヒドロ−２Ｈ−ベンゾ［１，４］オキサジン（０．８ｇ、８０％）が得られた。
Mass: (ES+) 257(M+H)+
【０１０２】
中間体３１：（±）−８−フルオロ−３−メチル−３，４−ジヒドロ−２Ｈ−ベンゾ［１，４］オキサジン
【化３９】
2013526556.tif 000041
（±）−４−ベンジル−８−フルオロ−３−メチル−３，４−ジヒドロ−２Ｈ−ベンゾ［１，４］−オキサジン（０．８ｇ、０．００３１ｍｍｏｌ）およびパラジウム炭素（０．２４ｇ、１０％、５０％Ｈ２Ｏｗ／ｗ）の撹拌したエタノール中混合物を、室温で４時間水素でパージした。混合物をセライト床に通して濾過し、エタノールで洗浄し、減圧下に４０℃未満で溶媒を除去して、明黄色の固形分（０．４ｇ、７７％）として（±）−８−フルオロ−３−メチル−３，４−ジヒドロ−２Ｈ−ベンゾ［１，４］オキサジンが得られた。これは精製をせずに実施例１６に直接使用した。
Mass: (ES+) 167
(M+H)+
【０１０３】
中間体３２：２−クロロ−５−（３−Ｎ，Ｎ−ジメチルアミノフェノキシ）ピリミジン
【化４０】
2013526556.tif 000042
２−クロロ−５−ヒドロキシピリミジン（１．０ｇ、０．００７６６ｍｏｌ）、３−Ｎ，Ｎ−ジメチルアミノ−フェニルボロン酸（１．２６ｇ、０．００７６６ｍｏｌ）、酢酸銅（ＩＩ）（１．３９ｇ、０．００７６６ｍｏｌ）、トリエチルアミン（５．３４ｍＬ、０．００７６６ｍｏｌ）および粉末状４Åモレキュラーシーブのジクロロ−メタン（３０ｍＬ）中混合物を３日間大気下に撹拌した。塩化カルシウム防護管を水分との反応から保護するために使用した。この懸濁液をジクロロメタンで希釈し、濾過し、水および塩水で洗浄した。有機相を乾燥（ＭｇＳＯ４）し、減圧下に溶媒を除去した。粗生成物をフラッシュクロマトグラフィーによって溶離液として０〜１５％酢酸エチル：ヘキサンを使用して精製し、黄色油状物として２−クロロ−５−（３−Ｎ，Ｎ−ジメチルアミノフェニル）ピリミジン（０．４４８，２５％）が得られた。
Mass: (ES+) 250 (M+H)+
HPLC: 99.8%
NMR:
δH (CDCl3)
2.98 (6H, s), 6.35 (1H, dd), 6.40 (1H, m), 6.60 (1H, dd), 7.25 (1H, t) and 8.38
(2H, s).
【０１０４】
実施例１：８−フルオロ−４−［５−（３−モルホリノフェノキシ）ピリミジン−２−イル］−３，４−ジヒドロ−２Ｈ−ベンゾ［１，４］オキサジン
【化４１】
2013526556.tif 000043
４−［３−（２−クロロピリミジン−５−イルオキシ）フェニル］モルホリン（４００ｍｇ、１．３７ｍｍｏｌ）、８−フルオロ−２Ｈ−１，４−ベンゾオキサジン−３（４Ｈ）−オン（２１０ｍｇ、１．３７ｍｍｏｌ）、トリス（ジベンジリデンアセトン）パラジウム（０）（６２ｍｇ、０．０６７ｍｍｏｌ）、４，５−ビス（ジフェニルホスフィノ）−９，９−ジメチルキサンテン（７９ｍｇ、０．１３７ｍｍｏｌ）および炭酸セシウム（８９５ｍｇ、２．７５ｍｍｏｌ）、脱気した１，４−ジオキサン（８ｍＬ）中懸濁液を、２日間８０℃で加熱した。この懸濁液を酢酸エチルで希釈し、水および塩水で洗浄した。有機相を乾燥（ＭｇＳＯ４）し、減圧下に溶媒を除去した。粗生成物をシリカのカラムクロマトグラフィーによって移動相として酢酸エチル：ヘキサン（７：３）を使用して精製し、白色固形物として８−フルオロ−４［５−（３−（モルホリン−４−イルフェノキシ）ピリミジン−２−イル］−３，４−ジヒドロ−２Ｈ−１，４−ベンゾ［１，４］オキサジン（１５０ｍｇ、２７％）が得られた。
Mass: (ES+) 409(M+H)+ 
HPLC: 98.5%
NMR:  δH (d6-DMSO)
3.08 (4H, m), 3.70 (4H, m), 4.20 (2H, m), 4.34 (2H, m), 6.38 (1H, dd), 6.63
(1H, br s), 6.70 (1H, dd), 6.81 (1H, m), 6.88 (1H, m), 7.18 (1H, t), 7.82 (1H,
d) and 8.44 (2H, s). 
【０１０５】
実施例２：６−フルオロ−４−［５−（３−モルホリノフェノキシ）ピリミジン−２−イル］−３，４−ジヒドロ−２Ｈ−ベンゾ［１，４］オキサジン
【化４２】
2013526556.tif 000044
４−［３−（２−クロロピリミジン−５−イルオキシ）フェニル］モルホリン、６−フルオロ−２Ｈ−１，４−ベンゾオキサジン−３（４Ｈ）−オン（２１０ｍｇ、１．３７ｍｍｏｌ）、トリス（ジベンジリデンアセトン）パラジウム（０）（６２ｍｇ、０．０６７ｍｍｏｌ）、４，５−ビス（ジフェニルホスフィノ）−９，９−ジメチルキサンテン（７９ｍｇ、０．１３７ｍｍｏｌ）および炭酸セシウム（８９５ｍｇ、２．７５ｍｍｏｌ）の脱気した１，４−ジオキサン（８ｍＬ）中懸濁液を、２日間８０℃で加熱した。この懸濁液を酢酸エチルで希釈し、水および塩水で洗浄した。有機相を乾燥（ＭｇＳＯ４）し、減圧下に溶媒を除去した。粗生成物をシリカのカラムクロマトグラフィーによって移動相として酢酸エチル：ヘキサン（７：３）を使用して精製し、白色固形物として６−フルオロ−４−［５−（３−モルホリノフェノキシ）ピリミジン−２−イル］−３，４−ジヒドロ−２Ｈ−ベンゾ［１，４］オキサジン（１１０ｍｇ、２０％）が得られた。
Mass: (ES+) 409(M+H)+
HPLC: 97.1%
NMR:  δH (d6-DMSO)
3.08 (4H, m), 3.70 (4H, m), 4.15 (2H, m), 4.25 (2H, m), 6.38 (1H, dd), 6.64
(1H, br s), 6.70 (1H, dd), 6.78 (1H, m), 6.88 (1H, m), 7.18 (1H, t), 8.00 (1H,
dd) and 8.48 (2H, s). 
【０１０６】
実施例３：
６−シアノ−４−［５−（３−モルホリノフェノキシ）ピリミジン−２−イル］−３，４−ジヒドロ−２Ｈ−ベンゾ［１，４］オキサジン
【化４３】
2013526556.tif 000045
４−［３−（２−クロロピリミジン−５−イルオキシ）フェニル］モルホリン（２００ｍｇ、０．６８５ｍｍｏｌ）、６−シアノ−２Ｈ−１，４−ベンゾオキサジン−３（４Ｈ）−オントリス（ジベンジリデンアセトン）（１１０ｍｇ、０．６８５ｍｍｏｌ）、パラジウム（０）（３１．９ｍｇ、０．０３４ｍｍｏｌ）、４，５−ビス（ジフェニル−ホスフィノ）−９，９−ジメチルキサンテン（４０ｍｇ、０．０６８ｍｍｏｌ）および炭酸セシウム（４４８ｍｇ、１．３７４ｍｍｏｌ）の脱気した１，４−ジオキサン（５ｍＬ）中懸濁液を、２日間８０℃で加熱した。この懸濁液を酢酸エチルで希釈し、水および塩水で洗浄した。有機相を乾燥（ＭｇＳＯ４）し、減圧下に溶媒を除去した。粗生成物をシリカのカラムクロマトグラフィーによって移動相として酢酸エチル：ヘキサン（７：３）を使用して精製し、白色固形物として６−シアノ−４−［５−（３−モルホリノフェノキシ）ピリミジン−２−イル］−３，４−ジヒドロ−２Ｈ−ベンゾ［１，４］オキサジン（７５ｍｇ，２６％）が得られた。
Mass: (ES+) 416 (M+H) +
HPLC: 99.3% 
NMR:  δH (d6-DMSO)
3.10 (4H, m), 3.70 (4H, m), 4.20 (2H, m), 4.38 (2H, m), 6.38 (1H, dd), 6.64
(1H, br s), 6.70 (1H, dd), 7.06 (1H, d), 7.20 (1H, t), 7.39 (1H, d), 8.50 (1H)
and 8.50 (2H, s). 
【０１０７】
実施例４：４−［５−（３−モルホリノフェノキシ）ピリミジン−２−イル］−３，４−ジヒドロ−２Ｈ−ベンゾ−［１，４］オキサジン
【化４４】
2013526556.tif 000046
この化合物を、実施例１を調製するために使用したのと同じ方法によって調製した。
Mass: (ES+) 391 (M+H)+
HPLC: 97.4%
NMR:  δH (d6-DMSO)
3.08 (4H, m), 3.70 (4H, m), 4.17 (2H, m), 4.27 (2H, m), 6.36 (1H, dd), 6.62
(1H, br s), 6.68 (1H, dd), 6.85 (2H, m), 6.93 (1H, m), 7.17 (1H, t), 7.95 (1H,
d) and 8.42 (2H, s).
【０１０８】
実施例５：８−フルオロ−４−［５−［３−（４−メチルピペラジン−１−イル）フェノキシ］ピリミジン−２−イル］−３，４−ジヒドロ−２Ｈ−ベンゾ［１，４］オキサジン
【化４５】
2013526556.tif 000047
１−［３−（２−クロロピリミジン−５−イルオキシ）フェニル］−４−メチルピペラジン（２００ｍｇ、０．６５６ｍｍｏｌ）、８−フルオロ−２Ｈ−１，４−ベンゾキサジン（１００ｍｇ、０．６５６ｍｍｏｌ）、トリス（ジベンジリデンアセトン）パラジウム（０）（３０ｍｇ、０．０３２ｍｍｏｌ）、４，５−ビス（ジフェニルホスフィノ）−９，９−ジメチルキサンテン（３８ｍｇ、０．０６５ｍｍｏｌ）および炭酸セシウム（４２７ｍｇ、１．３１ｍｍｏｌ）の脱気した１，４−ジオキサン（５ｍＬ）中懸濁液を２日間８０℃で加熱した。この懸濁液を酢酸エチルで希釈し、水および塩水で洗浄した。有機相を乾燥（ＭｇＳＯ４）し、減圧下に溶媒を除去した。粗生成物を、シリカのカラム精製によってジクロロメタン：メタノール（１９：１）を使用して精製し、白色固形物として８−フルオロ−４−［５−［３−（４−メチルピペラジン−１−イル）フェノキシ］ピリミジン−２−イル］−３，４−ジヒドロ−２Ｈ−ベンゾ［１，４］オキサジン（３８ｍｇ、１４％）が得られた。
Mass: (ES+) 422(M+H)+
HPLC: 99.4%
NMR:  δH (d6-DMSO)
2.83 (3H, s), 2.95 (2H, br t), 3.10 (2H, m), 3.48 (2H, br d), 3.87 (2H, br d),
4.20 (2H, m), 4.34 (2H, m), 6.45 (1H, dd), 6.74 (1H, br s), 6.77 (1H, dd), 6.82
(1H, m), 6.89 (1H, m), 7.22 (1H, t), 7.81 (1H, d) and 8.44 (2H, s). 
【０１０９】
実施例６：８−フルオロ−４−［５−（３−モルホリノフェノキシ）−２−ピリジル］−３，４−ジヒドロ−２Ｈ−ベンゾ−［１，４］オキサジン
【化４６】
2013526556.tif 000048
４−［３−（６−クロロピリジン−３−イルオキシ）フェニル］モルホリン（２００ｍｇ、０．６８９ｍｍｏｌ）、８−フルオロ−２Ｈ−１，４−ベンゾキサジン（１０６ｍｇ、０．６８９ｍｍｏｌ）、トリス（ジベンジリデンアセトン）−パラジウム（０）（３２ｍｇ、０．０３４ｍｍｏｌ）、４，５−ビス（ジフェニルホスフィノ）−９，９−ジメチル−キサンテン（４０ｍｇ、０．０６８ｍｍｏｌ）および炭酸セシウム（４４９ｍｇ、１．３８ｍｏｌ）の脱気した１，４−ジオキサン（５ｍＬ）中懸濁液を２日間８０℃で加熱した。この懸濁液を酢酸エチルで希釈し、水および塩水で洗浄した。有機相を乾燥（ＭｇＳＯ４）し、減圧下に溶媒を除去した。粗生成物をカラムクロマトグラフィーによって移動相として酢酸エチル：ヘキサン（７：３）を使用して精製し、白色固形物として８−フルオロ−４−［５−（３−モルホリノフェノキシ）−２−ピリジル］−２，３−ジヒドロ−１，４−ベンゾキサジン（１００ｍｇ、３６％）が得られた。
Mass: (ES+) 408(M+H) + 
HPLC: 99.1%
NMR:  δH (d6-DMSO)
3.08 (4H, m), 3.70 (4H, m), 3.95 (2H, m), 4.29 (2H, m), 6.35 (1H, dd), 6.62
(1H, br s), 6.70 (1H, dd), 6.72-6.83 (2H, m), 7.12 (1H, m), 7.18 (1H, t), 7.24
(1H, d), 7.40 (1H, d) and 8.11 (1H, s). 
【０１１０】
実施例７：９−フルオロ−５−［５−（３−モルホリン−４−イルフェノキシ）ピリミジン−２−イル］−２，３，４，５−テトラ−ヒドロ−ベンゾ［ｂ］［１，４］オキサゼピン
【化４７】
2013526556.tif 000049
４−［３−（２−クロロピリミジン−５−イルオキシ）フェニル］モルホリン（１７５ｍｇ、０．６ｍｍｏｌ）、９−フルオロ−２，３，４，５−テトラヒドロベンゾ［ｂ］［１，４］オキサゼピン（１００ｍｇ、０．６ｍｍｏｌ）、トリス（ジベンジル−ｉｄｅｎｅａｃｅｔｏｎｅ）パラジウム（０）（２７．５ｍｇ、０．０３ｍｍｏｌ）、４，５−ビス（ジフェニル−ホスフィノ）−９，９−ジメチルキサンテン（３５ｍｇ、０．０６ｍｍｏｌ）および炭酸セシウム（３９２ｍｇ、１．２ｍｍｏｌ）の脱気した１，４−ジオキサン（８ｍＬ）中の懸濁液を、２日間８０℃で加熱した。反応混合物を酢酸エチルで希釈し、水および塩水で洗浄した。有機相を乾燥（ＭｇＳＯ４）し、溶媒を減圧下に除去した。粗生成物をカラムクロマトグラフィーによって移動相として酢酸エチル：ヘキサン（７：３）を使用して精製し、白色固形物として９−フルオロ−５−［５−（３−モルホリノフェノキシ）ピリミジン−２−イル］−２，３，４，５−テトラヒドロベンゾ−［ｂ］［１，４］オキサゼピンが得られた。
Mass: (ES+) 423 (M+H)+
HPLC: 99.5% 
NMR:  δH (d6-DMSO)
2.05 (2H, m), 3.10 (4H, m), 3.72 (4H, m), 4.05 (2H, m), 4.16 (2H, m), 6.32 (1H,
dd), 6.62 (1H, br s), 6.69 (1H, dd), 7.01-7.08 (1H, m), 7.10-7.22 (3H, m) and
8.30 (2H, s).
【０１１１】
実施例８：１−［５−（３−モルホリン−４−イルフェノキシ）ピリミジン−２−イル］−２，３−ジヒドロ−１Ｈ−ピリド−［２，３−ｂ］［１，４］オキサジン
【化４８】
2013526556.tif 000050
４−［３−（２−クロロピリミジン−５−イル）オキシフェニル］モルホリン（２１４ｍｇ、０．７３５ｍｍｏｌ）、２，３−ジヒドロ−１Ｈ−ピリド［２，３−ｂ］［１，４］オキサジン（１００ｍｇ、０．７３５ｍｍｏｌ）、トリス（ジ−ベンジリデンアセトン）パラジウム（０）（３３ｍｇ、０．０３６ｍｍｏｌ）、４，５−ビス（ジフェニルホスフィノ）−９，９−ジメチルキサンテン（４２．５ｍｇ、０．０７３ｍｍｏｌ）および炭酸セシウム（４７８ｍｇ、１．４７ｍｍｏｌ）の脱気した１，４−ジオキサン（８ｍＬ）中懸濁液を２日間８０℃で加熱した。反応混合物を酢酸エチルで希釈し、水および塩水で洗浄した。有機相を乾燥（ＭｇＳＯ４）し、減圧下に溶媒を除去した。粗生成物をカラムクロマトグラフィーによって移動相として酢酸エチル：ヘキサン（７：３）を使用して精製し、白色固形物として１−［５−（３−モルホリン−４−イルフェノキシ）ピリミジン−２−イル］−２，３−ジヒドロ−１Ｈ−ピリド［２，３−ｂ］［１，４］−オキサジン（３６ｍｇ、１２．５％）が得られた。
Mass: (ES+) 392 (M+H)+
HPLC: 100%
NMR:  δH (d6-DMSO)
3.11 (4H, m), 3.72 (4H, m), 4.20 (2H, m), 4.32 (2H, m), 6.40 (1H, dd), 6.64
(1H, br s), 6.72 (1H, dd), 6.99 (1H, m), 7.20 (1H, t), 7.85 (1H, dd), 8.50 (2H,
s) and 8.52 (1H, m). 
【０１１２】
実施例９：（Ｒ）−８−フルオロ−４−［５−（３−メチルモルホリン−４−イルフェノキシ）ピリミジン−２−イル］−３，４−ジヒドロ−２Ｈ−ベンゾ［１，４］オキサジン
【化４９】
2013526556.tif 000051
（Ｒ）−４−［３−（２−クロロピリミジン−５−イルオキシ）フェニル］−３−メチルモルホリン（２５５ｍｇ、０．８３３ｍｍｏｌ）、８−フルオロ−３，４−ジヒドロ−２Ｈ−ベンゾ［１，４］オキサジン（１２８ｍｇ、０．８３３ｍｍｏｌ）、トリス（ジベンジリデンアセトン）パラジウム（０）（３８ｍｇ、０．０４１ｍｍｏｌ）、４，５−ビス（ジ−フェニル−ホスフィノ）−９，９−ジメチルキサンテン（４８ｍｇ、０．０８３ｍｍｏｌ）および炭酸セシウム（５４３ｍｇ、１．６６ｍｏｌ）の脱気した１，４−ジオキサン（５ｍＬ）中の懸濁液を２日間８０℃で加熱した。反応混合物をジクロロメタンで希釈し、水および塩水で洗浄した。有機相を乾燥（ＭｇＳＯ４）し、減圧下に溶媒を除去した。粗生成物を、フラッシュクロマトグラフィーによって、溶離液として０〜１５％酢酸エチル：ヘキサンを使用して、精製し、分取ＨＰＬＣによってさらに精製して、白色固形物として（Ｒ）−８−フルオロ−４−［５−（３−メチルモルホリン−４−イルフェノキシ）ピリミジン−２−イル］−３，４−ジヒドロ−２Ｈ−ベンゾ［１，４］オキサジン（２３ｍｇ，６．５％）が得られた。
Mass: (ES+)
422(M+H)+
Chiral HPLC: 99.8%
NMR: δH (d6-DMSO)
2.97 (2H, m), 3.20 (1H, m), 3.52 (2H, m), 3.66 (3H, d), 3.84-3.94 (2H, m), 4.22
(2H, m), 4.36 (2H, m), 6.34 (1H, dd), 6.59 (1H, br s), 6.67 (1H, dd), 6.83 (1H,
m), 6.91 (1H, m), 7.19 (1H, t), 7.82 (1H, d) and 8.45 (2H, s). 
【０１１３】
実施例１０：（Ｓ）−８−フルオロ−４−［５−（３−メチルモルホリン−４−イルフェノキシ）ピリミジン−２−イル］−３，４−ジヒドロ−２Ｈ−ベンゾ［１，４］オキサジン
【化５０】
2013526556.tif 000052
（Ｓ）−４−［３−（２−クロロピリミジン−５−イルオキシ）フェニル］−３−メチルモルホリン（１７６ｍｇ、０．５７５ｍｍｏｌ）、８−フルオロ−３，４−ジヒドロ−２Ｈ−ベンゾ［１，４］オキサジン（８８ｍｇ、０．５７５ｍｍｏｌ）、トリス（ジベンジリデンアセトン）パラジウム（０）（２６ｍｇ、０．０２８ｍｍｏｌ）、４，５−ビス（ジフェニル−ホスフィノ）−９，９−ジメチルキサンテン（３３ｍｇ、０．０５８ｍｍｏｌ）および炭酸セシウム（３７４ｍｇ、１．１５ｍｍｏｌ）の脱気した１，４−ジオキサン（５ｍＬ）中の懸濁液を、２日間８０℃で加熱した。この懸濁液をジクロロメタンで希釈し、水および塩水で洗浄した。有機相を乾燥（ＭｇＳＯ４）し、減圧下に溶媒を除去した。粗生成物を、まず、フラッシュクロマトグラフィーによって溶離液として０〜１５％酢酸エチル：ヘキサンを使用して精製し、分取キラルＨＰＬＣによってさらに精製して白色固形物として（Ｓ）−８−フルオロ−４−［５−（３−メチルモルホリン−４−イルフェノキシ）−ピリミジン−２−イル］−３，４−ジヒドロ−２Ｈ−ベンゾ−［１，４］オキサジン（３３ｍｇ、１４％）が得られた。
Mass: (ES+) 422(M+H)+
HPLC: 100.0% 
NMR: δH (d6-DMSO)
2.97 (2H, m), 3.20 (1H, m), 3.52 (2H, m), 3.66 (3H, d), 3.84-3.94 (2H, m), 4.22
(2H, m), 4.36 (2H, m), 6.34 (1H, dd), 6.59 (1H, br s), 6.67 (1H, dd), 6.83 (1H,
m), 6.91 (1H, m), 7.19 (1H, t), 7.82 (1H, d) and 8.45 (2H, s). 
【０１１４】
実施例１１：
８−フルオロ−４−［５−（３−メトキシフェノキシ）ピリミジン−２−イル］−３，４−ジヒドロ−２Ｈ−ベンゾ［１，４］オキサジン
【化５１】
2013526556.tif 000053
２−クロロ−５−（３−メトキシフェノキシ）ピリミジン（２００ｍｇ、０．８４７ｍｍｏｌ）、８−フルオロ−３，４−ジヒドロ−２Ｈ−ベンゾ［１，４］オキサジン（１３０ｍｇ、０．８４７ｍｍｏｌ）、トリス（ジベンジリデンアセトン）パラジウム（０）（３９ｍｇ、０．０４２ｍｍｏｌ）、４，５−ビス（ジフェニルホスフィノ）−９，９−ジメチル−キサンテン（４９ｍｇ、０．０８４ｍｍｏｌ）および炭酸セシウム（５５２ｍｇ、１．６９ｍｍｏｌ）の脱気した１，４−ジオキサン（８ｍＬ）中懸濁液を、２日間８０℃で加熱した。反応混合物をジクロロメタンで希釈し、水および塩水で洗浄した。有機相を乾燥（ＭｇＳＯ４）し、溶媒を減圧下に除去し、粗生成物をフラッシュクロマトグラフィーによって溶離液として０〜１５％酢酸エチル：ヘキサンを使用して精製し、白色固形物として８−フルオロ−４−［５−（３−メトキシフェノキシ）ピリミジン−２−イル］−３，４−ジヒドロ−２Ｈ−ベンゾ［１，４］オキサジン（１１０ｍｇ、３７％）が得られた。
Mass: (ES+)
354(M+H)+ 
HPLC: 99.5% 
NMR: δH (d6-DMSO)
3.74 (3H, s), 4.22 (2H, m), 4.36 (2H, m), 6.57 (1H, dd), 6.64 (1H, br s), 6.71
(1H, dd), 6.83 (1H, m), 6.91 (1H, m), 7.27 (1H, t), 7.83 (1H, d) and 8.48 (2H,
s). 
【０１１５】
実施例１２：８−フルオロ−４−［５−（３−Ｎ，Ｎ−ジメチルアミノフェノキシ）ピリミジン−２−イル］−３，４−ジヒドロ−２Ｈ−ベンゾ［１，４］オキサジン
【化５２】
2013526556.tif 000054
２−クロロ−５−（３−Ｎ，Ｎ−ジメチルアミノフェニル）ピリミジン、（２１０ｍｇ、０．０００８４７ｍｏｌ）、８−フルオロ−３，４−ジヒドロ−２Ｈ−ベンゾ［ｂ］［１，４］オキサジン（１３０ｍｇ、０．０００８４７ｍｏｌ）、トリス（ジベンジリデンアセトン）パラジウム（０）（３９ｍｇ、０．００００４２ｍｏｌ）、４，５−ビス（ジフェニル−ホスフィノ）−９，９−ジメチルキサンテン（４９ｍｇ、０．００００８４ｍｏｌ）および炭酸セシウム（５５２ｍｇ、０．００１６９ｍｏｌ）の脱気した１，４−ジオキサン（８ｍＬ）中懸濁液を、２日間８０℃で加熱した。この懸濁液をジクロロメタンで希釈し、水および塩水で洗浄した。有機相を乾燥（ＭｇＳＯ４）し、減圧下に溶媒を除去した。粗生成物をフラッシュクロマトグラフィーによって溶離液として０〜５％酢酸エチル：ヘキサンを使用して精製し、白色固形物として８−フルオロ−４−［５−（３−Ｎ，Ｎ−ジメチルアミノフェノキシ）ピリミジン−２−イル］−３，４−ジヒドロ−２Ｈ−ベンゾ［１，４］オキサジン（１１０ｍｇ、３７％）が得られた。
Mass: (ES+)
367(M+H)+
HPLC: 99.8% 
NMR: δH (d6-DMSO)
2.88 (3H, s), 4.20 (2H, m), 4.35 (2H, m), 6.21 (1H, dd), 6.40 (1H, br s), 6.49
(1H, dd), 6.82 (1H, m), 6.91 (1H, m), 7.15 (1H, t), 7.82 (1H, d) and 8.45 (2H,
s). 
【０１１６】
実施例１３：４−（５−（３−ブロモフェノキシ）ピリミジン−２−イル）−８−フルオロ−３，４−ジヒドロ−２Ｈ−ベンゾ［１，４］オキサジン
【化５３】
2013526556.tif 000055
８−フルオロ−４−［５−（ヒドロキシ）ピリミジン−２−イル］−３，４−ジヒドロ−２Ｈ−ベンゾ−［１，４］オキサジン（０．８１８ｇ、０．００３３ｍｏｌ）、３−ブロモフェニルボロン酸（０．７９７ｇ、０．００３９ｍｏｌ）、酢酸銅（ＩＩ）（０．６ｇ、０．００２９ｍｏｌ）、トリエチルアミン（２．３ｍＬ、０．０１６５ｍｏｌ）および粉末状４Åモレキュラーシーブのジクロロメタン（４０ｍＬ）中混合物を３日間大気下に撹拌した。塩化カルシウム防護管を水分との反応から保護するために使用した。反応混合物をジクロロメタンで希釈し、濾過し、水および塩水で洗浄した。有機相を乾燥（ＭｇＳＯ４）し、減圧下に溶媒を除去した。粗生成物をフラッシュクロマトグラフィーによって溶離液として０〜１５％酢酸エチル：ヘキサンを使用して精製し、白色固形物として４−（５−（３−ブロモ−フェノキシ）ピリミジン−２−イル）−８−フルオロ−３，４−ジヒドロ−２Ｈ−ベンゾ−［１，４］オキサジン（０．６１４ｇ、６１％）が得られた。
Mass: (ES+) 403 (M+H)+
HPLC: 96.2%
NMR: δH (d6-DMSO)
4.22 (2H, m), 4.36 (2H, m), 6.84 (1H, m), 6.92 (1H, m), 7.08 (1H, m), 7.28 (1H,
m), 7.30-7.38 (2H, m), 7.83 (1H, br d) and 8.53 (2H, s). 
【０１１７】
実施例１４：１−｛３−［２−（８−フルオロ−２，３−ジヒドロ−ベンゾ［１，４］オキサジン−４−イル）−ピリミジン−５−イルオキシ］−フェニル｝アゼチジン−３−オール
【化５４】
2013526556.tif 000056
４−（５−（３−ブロモ−フェノキシ）ピリミジン−２−イル）−８−フルオロ−３，４−ジヒドロ−２Ｈ−ベンゾ−［１，４］オキサジン（３００ｍｇ、０．７４６ｍｍｏｌ）、アゼチジン−３−オール塩酸塩（９８ｍｇ、０．８９５ｍｍｏｌ）、トリス（ジベンジリデンアセトン）パラジウム（０）（３４ｍｇ、０．０３７ｍｍｏｌ）、４，５−ビス（ジフェニル−ホスフィノ）−９，９−（ジメチルキサンテン）（４３ｍｇ、０．０７４ｍｍｏｌ）および炭酸セシウム（３２４ｍｇ、０．９９ｍｍｏｌ）の脱気した１，４−ジオキサン（５ｍＬ）中の懸濁液を、２日間８０℃で加熱した。反応混合物をジクロロメタンで希釈し、水および塩水で洗浄した。有機相を乾燥（ＭｇＳＯ４）し、減圧下に溶媒を除去した。粗生成物をフラッシュクロマトグラフィーによって溶離液としての０〜１５％酢酸エチル：ヘキサンを使用して精製し、白色固形物として１−｛３−［２−（８−フルオロ−２，３−ジヒドロ−ベンゾ［１，４］オキサジン−４−イル）−ピリミジン−５−イルオキシ］−フェニル｝アゼチジン−３−オール（１１０ｍｇ、５６％）が得られた。
Mass: (ES+) 395(M+H)+
HPLC: 99.8% 
NMR: δH (d6-DMSO)
3.50 (2H, m), 4.05 (2H, t), 4.21 (2H, m), 4.36 (2H, m), 4.55 (1H, m), 5,62 (1H,
d), 6.10 (1H, br s), 6.19 (1H, dd), 6.25 (1H, dd), 6.83 (1H, m), 6.91 (1H, m),
7.14 (1H, t), 7.83 (1H, br d) and 8.44 (2H, s). 
【０１１８】
実施例１５：４−［５−（３−モルホリン−４−イル−フェノキシ）ピリジン−２−イル］−３，４−ジヒドロ−２Ｈ−ベンゾ［１，４］オキサジン−６−カルボニトリル
【化５５】
2013526556.tif 000057
４−｛３−［（６−クロロピリジン−３−イル）オキシ］フェニル｝モルホリン（２００ｍｇ、０．６８９ｍｍｏｌ）、３，４−ジヒドロ−２Ｈ−ベンゾ［１，４］オキサジン−６−カルボニトリル（１１０ｍｇ、０．６８９ｍｏｌ）、トリス（ジベンジリデンアセトン）パラジウム（０）（３１ｍｇ、０．０３４ｍｍｏｌ）、４，５−ビス（ジフェニル−ホスフィノ）−９，９−ジメチルキサンテン（３０ｍｇ、０．０６８ｍｍｏｌ）および炭酸セシウム（４４９ｍｇ、１．３７９ｍｍｏｌ）の脱気した１，４−ジオキサン（５ｍＬ）中の懸濁液を、２日間８０℃で加熱した。反応混合物を酢酸エチルで希釈し、水および塩水で洗浄した。有機相を乾燥（ＭｇＳＯ４）し、減圧下に溶媒を除去した。粗生成物をカラムクロマトグラフィーによって移動相として酢酸エチル：ヘキサン（７：３）を使用して精製し、白色固形物として４−［５−（３−モルホリン−４−イル−フェノキシ）ピリジン−２−イル］−３，４−ジヒドロ−２Ｈ−ベンゾ［１，４］オキサジン−６−カルボニトリル（１１０ｍｇ、３９％）が得られた。
Mass: (ES+)
415(M+H)+
HPLC: 98.7% 
NMR: δH (d6-DMSO)
3.12 (4H, m), 3.72 (4H, m), 3.94 (2H, m), 4.34 (2H, m), 6.40 (1H, dd), 6.55
(1H, br s), 6.74 (1H, dd), 7.04 (1H, d), 7.22 (1H, t), 7.30 (2H, m), 7.47 (1H,
dd), 7.82 (1H, d) and 8.65 (1H, d).
【０１１９】
実施例１６：８−フルオロ−３−メチル−４−［５−（３−モルホリン−４−イル−フェノキシ）ピリミジン−２−イル］−３，４−ジヒドロ−２Ｈ−ベンゾ［１，４］オキサジン
【化５６】
2013526556.tif 000058
４−［３−（２−クロロピリミジン−５−イル）オキシ）フェニル］モルホリン（６１１ｍｇ、０．００２１ｍｏｌ）、（±）−８−フルオロ−３−メチル−３，４−ジヒドロ−２Ｈ−ベンゾ［１，４］オキサジン）（３５０ｍｇ、０．００２１ｍｏｌ）、トリス（ジベンジリデンアセトン）パラジウム（０）（９６ｍｇ、０．０００１０５ｍｏｌ）、４，５−ビス（ジフェニルホスフィノ）−９，９−ジメチルキサンテン（１２１ｍｇ、０．０００２１ｍｏｌ）および炭酸セシウム（１．３６ｇ、０．００４２ｍｏｌ）の脱気した１，４−ジオキサン（１０ｍＬ）中懸濁液を、９０℃で２４時間加熱した。反応混合物を酢酸エチルで希釈し、水および塩水で洗浄した。有機相を乾燥（ＭｇＳＯ４）し、減圧下に溶媒を除去した。粗生成物をカラムクロマトグラフィーによって移動相として酢酸エチル：ヘキサン（７：３）を使用して精製し、黄色固形分として８−フルオロ−３−メチル−４−［５−（３−モルホリン−４−イル−フェノキシ）ピリミジン−２−イル］−３，４−ジヒドロ−２Ｈ−ベンゾ［１，４］オキサジン（２８０ｍｇ）が得られた。鏡像体を分取キラルＨＰＬＣによって分離し７５ｍｇの各異性体が得られた。
Mass: (ES+) 423
(M+H)+ 
HPLC: 分画−１  １００％（キラル）、分画−２  ９８．１％（キラル）
NMR: δH (d6-DMSO)
1.25 (3H, d), 3.11 (4H, m), 3.70 (4H, m), 4.14 (1H, br d), 4.38 (1H, d), 5.17
(1H, m), 6.40 (1H, dd), 6.67 (1H, br s), 6.72 (1H, dd), 6.78-6.92 (2H, m), 7.20
(1H, t), 7.85 (1H, d) and 8.45 (2H, s). 
【０１２０】
実施例１７：生物学的アッセイのためのストック溶液の調製
Ａβ（１−４２）調製物
アミロイド凝集および毒性アッセイのためにＡβ（１−４２）ＨＣｌをヘキサフルオロイソプロパノール（ＨＦＩＰ）に短時間超音波処理およびボルテックスで溶解することによりＡβ（１−４２）を調製した。このＨＦＩＰ中のＡβ（１−４２）ペプチドの溶液を４℃で２ｍＭずつ保存した。必要な場合、このストックのアリコートを冷凍乾燥し、ＤＭＳＯに２００倍に溶解し、所望の最終アッセイ濃度に溶解した（例えば、１０μＭの最終アッセイ濃度のために２ｍＭ）。
化合物の調製
各試験化合物の２０ｍＭのストック溶液をＤＭＳＯ中に調製し、これらの溶液のアリコートを使用して３μＭから１０ｍＭまでの濃度範囲の各試験化合物のさらなるＤＭＳＯ中ストック溶液を調製した。これらのストック溶液を必要とする際に必要に応じて調製し、−２０℃で保存した（最大３回の凍結融解サイクル）。２０ｍＭの親ストック溶液を−２０℃で凍結して保存した。
【０１２１】
実施例１８：ＭＴＴ還元を使用するアミロイド毒性の細胞生存率アッセイ
細胞生存率を手段としてＭＴＴ還元の阻害を用いて、１０μＭのＡβ（１−４２）の毒性傷害からのＳＨ  ＳＹ５Ｙ細胞の保護における化合物の活性を試験した。ＤＭＳＯ中のアリコート（３μＬ）の試験化合物（種々の濃度）を２９４μＬのＯｐｔｉ−Ｍｅｍ（２％のＦＢＳ、１％のＰｅｎ／Ｓｔｒｅｐ、１％のＬ−Ｇｌｎを含有）｛娘プレート（ｄａｕｇｈｔｅｒ  ｐｌａｔｅ）｝。ウェルを完全に混合した。次にアリコート（３μｌ）のＡβ（１−４２）［２ｍＭ］をその娘プレートウェルに添加し、再度完全に混合した。５０μＬを次に吸引し、５０μＬの培地とＳＨ  ＳＹ５Ｙ細胞を含むウェルに分注した（細胞もＯｐｔｉ−Ｍｅｍに、〜３０，０００細胞／ウェル／５０μＬで平板培養する）。Ａβ（１−４２）の［１０μＭ］の最終濃度と共に、細胞上の化合物の最終濃度を［５０μＭ］から［〜１５ｍＭ］の範囲にした。
【０１２２】
細胞プレートは、２４時間インキュベートし、次にＭＴＴアッセイを実施する（Ｓｈｅａｒｍａｎ，１９９９）。短時間に１５μＬのＭＴＴ（３−（４，５−ジメチルジアゾール−２−イル）−２，５−ジフェニル−テトラゾリウムブロミド）色素（Ｐｒｏｍｅｇａより）を各ウェルに添加し、各プレートを５％ＣＯ２中３７℃で４時間インキュベートした。１００μＬ停止／可溶化溶液（Ｐｒｏｍｅｇａから）を各ウェルに添加し、プレートを加湿箱中で室温で終夜放置した。プレートを振盪し、吸光度を５７０ｎｍと６５０ｎｍの両方で記録した。５７０ｎｍでの吸光度から６５０ｎｍでの吸光度を差し引くことによりΔＡ値を算出し、非特異的バックグラウンド吸光度を低減した。同等の試験からのΔＡ値を平均し、細胞生存率％を以下の通りに決定した。
【数１】
2013526556.tif 000059
生細胞対照：Ｏｐｔｉ−Ｍｅｍ中の１％のＤＭＳＯ
死細胞対照：細胞に０．１％のトリトンＸ−１００を添加
【０１２３】
実施例１９：細胞生存率を手段としてＭＴＴ還元の阻害を用いる、１０μＭのＡβ（１−４２）の毒性傷害からのＳＨ  ＳＹ５Ｙ細胞の保護における化合物の活性
【表１】
2013526556.tif 000060
【０１２４】
実施例２０
長期増強（ＬＴＰ）は、学習及び短期記憶の神経学的プロセスに関連した自然の長期電気生理学的応答であり、アルツハイマー病に影響を及ぼす。Ａβ（１−４０）は、ＬＴＰの強力な阻害薬として作用することが示されており、したがって、ＬＴＰは、その疾患のための潜在的治療剤の効能を試験するためのモデル系として用いられてきた（Ｗａｌｓｈ  ｅｔ  ａｌ．  ２００２；Ｒｏｗａｎ  ｅｔ  ａｌ．  ２００４）。下記のように、ラット海馬脳組織薄片中のＳｃｈａｆｆｅｒ側枝の刺激を使用してＬＴＰを測定した。
【０１２５】
試料調製
ＤＭＳＯ中の２０μＬの５ｍＭの実施例１をストックＡβ（１−４２）（１ｍＬ）に添加され、３７℃で２４時間撹拌した。実験の日に、混合物は使用前にａＣＳＦ（３２ｍＬ）中に３３ｍＬに希釈する。実施例１の最終濃度は３μＭであった。Ａβ（１−４２）の最終濃度は１μＭであり、ＤＭＳＯの最終濃度は０．０６％であった。
【０１２６】
脳薄片の調製および前処理
雄の若い成体Ｓｐｒａｇｕｅ  Ｄａｗｌｅｙラット（６〜８週、２００〜２５０ｇ）を頸椎脱臼によって人道的に安楽死させた。４００μｍ厚の横断海馬薄片を、マイクロスライサー（ＬｅｉｃａＶＴ１０００Ｓ）を用いて４℃未満で、人工脳脊髄液（ａＣＳＦ：１２７ｍＭＮａＣｌ、１．６ｍＭＫＣｌ、１．２４ｍＭＫＨ２ＰＯ４、１．３ｍＭＭｇＳＯ４、２．４ｍＭＣａＣｌ２、２６ｍＭＮａＨＣＯ３、１０ｍＭグルコース）中で切断した。その後、薄片を酸素処理したａＣＳＦ（９５％Ｏ２、５％ＣＯ２）中で、室温で少なくとも１時間保持した後、電気生理学的に記録した。この回復期間後、薄片を変形「Ｈａａｓ」チャンバーに移して、温かく（３０℃）通気したａＣＳＦで１．５〜３．０ｍＬ／分の速度で絶えず潅流した。
【０１２７】
電気生理学的記録
Ｓｃｈａｆｆｅｒ側枝を同軸双極電極で刺激し（３〜２２Ｖ、０．１ｍｓパルス幅、０．０３Ｈｚ）、４ＭＮａＣｌを充填したガラス毛細管微小電極（抵抗２〜４ＭΩ）を用いて海馬のＣＡ１領域の放線状層からＡｘｏｃｌａｍｐ２Ａ増幅器により、誘発された細胞外の興奮性シナプス後電位（ｆＥＰＳＰｓ）を記録した。刺激パラメーターを設定して、最大増幅のおよそ５０％のｆＥＰＳＰを生じた。１０分間の安定な基線（対照）を記録し、続いて、最終の高周波刺激プロトコル後に、試験化合物の８０分間洗浄で１０分間隔で３回印加した、高周波刺激（１秒１００Ｈｚの継続）の１０分前に試験化合物を投与した。
【０１２８】
実施例１について得られた結果（図１〜３）は、ＬＴＰに及ぼす１μＭＡβ（１−４２）の毒性作用が３μＭの濃度でこの化合物により効果的に遮断されることを示している。
【０１２９】
統計的分析：スチューデントｔ検定を使用してデータの平均Ｓ．Ｅ．Ｍ．有意差が計算されたように、データが提示される。Ｐの確率値＜０．０５は、有意差を表すと考えられる。
【０１３０】
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【図１】
2013526556.tif 000064
【図２】
2013526556.tif 000065
【図３】
2013526556.tif 000066
【国際調査報告】
2013526556.tif 000067
2013526556.tif 000068
2013526556.tif 000069