(57)【要約】  本発明は、(a)本出願に記載の化合物(1)、又はその医薬的に許容できる塩と、(b)本出願に記載の化合物(2)、又はその医薬的に許容できる塩と、必要に応じて(c)リバビリンとを含んでなる治療用組合せ物、並びに患者のHCV感染を治療するか又はその1つ以上の症状を軽減するための該治療用組合せ物の使用方法に関する。【選択図】なし【特許請求の範囲】
【請求項１】
患者のC型肝炎ウイルス(HCV)感染を治療するか又はその1つ以上の症状を軽減する方法であって、下記：
(a)下記式(1)の化合物又はその医薬的に許容できる塩：
【化１】
2013540112.tif 000029
；
(b)下記式(2)の化合物又はその医薬的に許容できる塩：
【化２】
2013540112.tif 000030
(2)        ；
及び必要に応じて(c)リバビリン
を含んでなる治療用組合せ物を前記患者に投与する工程を含む方法。
【請求項２】
HCV感染が遺伝子型1による、請求項１に記載の方法。
【請求項３】
患者が治療未経験患者である、請求項１又は２に記載の方法。
【請求項４】
患者が、リバビリンとインターフェロンαを使用する併用療法に非反応性である、請求項１〜３のいずれか１項に記載の方法。
【請求項５】
患者のHCV-RNAレベルが、前記治療の結果として1mlの血清又は血漿当たり25国際単位(IU)未満のレベルに減少する、請求項１〜４のいずれか１項に記載の方法。
【請求項６】
化合物(1)又はその医薬的に許容できる塩を、1日当たり約40mg〜1日当たり約480mgの用量で投与する、請求項１〜５のいずれか１項に記載の方法。
【請求項７】
化合物(1)をそのナトリウム塩の形で投与する、請求項１〜６のいずれか１項に記載の方法。
【請求項８】
化合物(2)又はその医薬的に許容できる塩を、1日当たり約800mg〜1日当たり約2400mgの用量で投与する、請求項１〜７のいずれか１項に記載の方法。
【請求項９】
化合物(2)をそのナトリウム塩の形で投与する、請求項１〜８のいずれか１項に記載の方法。
【請求項１０】
リバビリンを約400mg/日〜約1200mg/日の用量で投与する、請求項１〜９のいずれか１項に記載の方法。
【請求項１１】
投与される治療用組合せ物が、化合物(1)又はその医薬的に許容できる塩、化合物(2)又はその医薬的に許容できる塩及びリバビリンの投与を含む三剤併用療法である、請求項１〜１０のいずれか１項に記載の方法。
【請求項１２】
投与される治療用組合せ物が、化合物(1)又はその医薬的に許容できる塩及び化合物(2)又はその医薬的に許容できる塩の投与を含み、リバビリンの投与を含まない二剤併用療法である、請求項１〜１０のいずれか１項に記載の方法。
【請求項１３】
下記：
(a)1以上の用量の下記化合物(1)又はその医薬的に許容できる塩：
【化３】
2013540112.tif 000031
；
或いは(b)1以上の用量の下記化合物(2)又はその医薬的に許容できる塩：
【化４】
2013540112.tif 000032
(2)          ；
及びHCV感染の治療のための、化合物(1)、又はその医薬的に許容できる塩と、化合物(2)、又はその医薬的に許容できる塩と、必要に応じてリバビリンとの共投与を指示する書面による使用説明書
を含有する包装を含んでなる包装された医薬組成物。
【請求項１４】
HCV感染の治療用キットであって、下記：
(a)1以上の用量の下記化合物(1)又はその医薬的に許容できる塩：
【化５】
2013540112.tif 000033
；
及び(b)1以上の用量の下記化合物(2)又はその医薬的に許容できる塩：
【化６】
2013540112.tif 000034
(2)          ；
並びにHCV感染の治療のための、化合物(1)、又はその医薬的に許容できる塩と、化合物(2)、又はその医薬的に許容できる塩と、必要に応じてリバビリンとの共投与を指示する書面による使用説明書
を含んでなるキット。
【請求項１５】
下記式(2)の化合物又はその医薬的に許容できる塩：
【化７】
2013540112.tif 000035
(2)
と、必要に応じてリバビリンと共に、HCV感染の治療方法で使用するための、
下記式(1)の化合物又はその医薬的に許容できる塩：
【化８】
2013540112.tif 000036
。
【請求項１６】
下記式(1)の化合物又はその医薬的に許容できる塩：
【化９】
2013540112.tif 000037
と、必要に応じてリバビリンと共に、HCV感染の治療方法で使用するための、
下記式(2)の化合物又はその医薬的に許容できる塩：
【化１０】
2013540112.tif 000038
(2)
。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
発明の技術分野
本発明は、本明細書に記載の化合物(1)及び(2)と、必要に応じてリバビリンとを含む治療用組合せ物に関する。本発明は、患者のHCV感染を治療するか又はその1つ以上の症状を軽減するための該治療用組合せ物の使用方法にも関する。
【背景技術】
【０００２】
発明の背景
C型肝炎ウイルス(HCV)感染は、世界中の人の健康上の問題であり、米国だけでも毎年約150,000の新たな症例が報告されている。HCVは一本鎖RNAウイルスであり、非A型、非B型の輸血後及び移植後肝炎のほとんどの場合に確認される病原因子であり、急性散発性肝炎の一般的原因である。HCVに感染した患者の50%より多くが慢性感染症になり、20年以内にその20%が肝硬変を発症すると推定されている。
いくつかの型のインターフェロン、特にα-インターフェロン、例えば、インターフェロン-α-2a(ROFERON(登録商標)-A)、インターフェロン-α-2b (INTRON(登録商標)-A)、コンセンサスインターフェロン(INFERGEN(登録商標))、並びにこれら及び他のインターフェロンアルファ化形、例えばペグ化インターフェロンα-2a(PEGASYS(登録商標))及びペグ化インターフェロン-2b(PEG-INTRON(登録商標))は慢性HCV感染の治療用に承認されている。しかし、ほとんどの患者はインターフェロン-α治療に反応せず、反応者では、治療の休止後6カ月以内に高率で再発する(Liang et al., J. Med. Virol. 40:69, 1993)。
多くのRNA及びDNAウイルスに対して広い薬効範囲の活性を有するグアノシン類似体であるリバビリンは、臨床治験においてインターフェロン-αと併用すると慢性HCV感染に有効であることが示され(例えば、Poynard et al., Lancet 352:1426-1432, 1998; Reichard et al., Lancet 351:83-87, 1998参照)、この併用療法はHCV感染の治療用に承認されている：REBETRON(登録商標)(インターフェロンα-2bに加えてリバビリン、Schering-Plough)；PEGASYS(登録商標)RBV(登録商標)(ペグ化インターフェロンα-2aに加えてリバビリンの併用療法、Roche)；Manns et al, Lancet 358:958-965 (2001)及びFried et al., 2002, N. Engl. J. Med. 347:975-982をも参照されたい。しかしながら、この併用療法でさえ、ウイルス学的反応率はまだ50%以下である。
【０００３】
2011年5月に、最初の直接作用性抗ウイルス薬(DAA)が米国でFDAにより承認された：プロテアーゼインヒビターボセプレビル及びテラプレビル(Poordad et al., 2011 N Engl J Med 364:1195-2062; Jacobson et al.,2011 N Engl J Med 364:2405-2416; Zeuzem et al., 2011 N Engl J Med 364:2417-2428)。ペグ化インターフェロン及びリバビリンにこれらの薬物の1つを添加すると、治癒率が50%から70〜75%に改善する。後に欧州及び他国での承認が2011年又は2012年に続くと予想される。この治療は、より大きい患者集団のケアの新基準になると予想される。
該療法には典型的に付随する重大な副作用がある。リバビリンには、催奇活性、精子発生の妨害、溶血、疲労、頭痛、不眠、悪心及び／又は食欲不振を含めた欠点がある。インターフェロンαは、リバビリンの有無にかからわず、多くの副作用を伴う。治療中、患者をインフルエンザ様症状、うつ状態、発疹及び異常な血球数について慎重に監視しなければならない。インターフェロンα-2bに加えてリバビリンで治療される患者は、重篤な肝機能障害の合併症を有してはならず、このような対象は慎重に監視される研究でのC型肝炎の治療のためだけに考慮される。テラプレビル及びボセプレビルはさらに下記副作用を有する：貧血、発疹、味覚異常、好中球減少症、肛門直腸症状など。
【０００４】
化学名：1-{[4-[8-ブロモ-2-(2-イソプロピルカルバモイル-チアゾール-4-イル)-7-メトキシ-キノリン-4-イルオキシ]-1-(R)-(2-シクロペンチルオキシカルボニルアミノ-3,3-(S)-ジメチル-ブチリル)-ピロリジン-(S)-2-カルボニル]-アミノ}-2-(S)-ビニル-シクロプロパン-(R)-カルボン酸を有する下記化合物(1)：
【０００５】
【化１】
2013540112.tif 000002
【０００６】
は、HCV NS3セリンプロテアーゼの選択的かつ強力なインヒビターとして知られ、HCV感染の治療に有用である。化合物(1)は、米国特許第6,323,180号、第7,514,557号及び第7,585,845号で開示されているHCVインヒビターの非環式ペプチド系列の範囲内に含まれる。化合物(1)は、米国特許第7,585,845号の化合物#1055として、及び米国特許第7,514,557号の化合物#1008として具体的に開示されている。化合物(1)、及びその医薬製剤は、上記で引用した文献（全て参照によってその内容全体を本明細書に援用する）で見られる一般的手順により調製可能である。化合物(1)の好ましい形態には、結晶形、特に米国特許出願公開第2010/0093792号（これも参照によってここに援用する）に記載されてる結晶性ナトリウム塩形がある。
化合物(1)は、その化学構造の下記代替描写によっても知られており、これは上記構造と等価である。
【０００７】
【化２】
2013540112.tif 000003
【０００８】
ここで、Bは下記
【０００９】
【化３】
2013540112.tif 000004
であり；L0はMeO-であり；L1はBrであり；かつR2は下記である。
【００１０】
【化４】
2013540112.tif 000005
【００１１】
化合物(1)とインターフェロン-α及びリバビリンを投与する工程を含む併用療法レジメンは、米国特許出願公開第2010/0068182号に記載されている。しかしながら、インターフェロンによる治療(注射で投与される)の副作用の可能性及び全体的な不便さを考慮すると、当該分野では、インターフェロンの使用を含まない、HCV感染の治療及び予防のための代替療法が引き続き要望されている。
出願人らは、インターフェロンを使用しない併用療法として、後述するように、化合物(1)とHCVポリメラーゼインヒビター化合物(2)を併用し、必要に応じてリバビリンを併用することによって、優れた抗ウイルス成果を達成できることを発見した。
化学名：(E)-3-[2-(1-{[2-(5-ブロモ-ピリミジン-2-イル)-3-シアノペンチル-1-メチル-1H-インドール-6-カルボニル]-アミノ}-シクロブチル)-3-メチル-3H-ベンゾイミダゾール-5-イル]-アクリル酸を有する下記化合物(2)：
【００１２】
【化５】
2013540112.tif 000006
(2)
【００１３】
は、HCV NS5B RNA依存性RNAポリメラーゼの選択的かつ強力なインヒビターとして知られ、HCV感染の治療に有用である。化合物(2)は、米国特許第7,141,574号及び第7,582,770号、並びに米国特許出願公開第2009/0087409号で開示されているHCVインヒビターの範囲内に含まれる。化合物(2)は、米国特許第7,582,770号で化合物#3085として具体的に開示されている。化合物(2)、及びその医薬製剤は、上記で引用した文献（全て参照によってその内容全体を本明細書に援用する）で見られる一般的手順により調製可能である。化合物(2)の好ましい形態には、結晶形、特に結晶性ナトリウム塩形があり、ここに記載されているように調製される。
【発明の概要】
【００１４】
発明の概要
本発明は、患者のHCV感染を治療するか又はその1つ以上の症状を軽減する方法であって、有効量の、本明細書に記載の化合物(1)及び(2)、又はその医薬的に許容できる塩と、必要に応じてリバビリンとを含んでなる治療用組合せ物を患者に投与する工程を含む方法を提供する。この組合せの2又は3種の活性薬を同時又は別々に、レジメンの一部として投与することができる。
本発明は、化合物(1)を含む包装された医薬組成物であって、HCV感染の治療のために化合物(1)と化合物(2)及び必要に応じてリバビリンを投与することを示す書面による使用説明書が添付してある、包装された医薬組成物をさらに提供する。
本発明は、化合物(2)を含む包装された医薬組成物であって、HCV感染の治療のために化合物(1)と化合物(2)及び必要に応じてリバビリンを投与することを示す書面による使用説明書が添付してある、包装された医薬組成物をさらに提供する。
【図面の簡単な説明】
【００１５】
【図１】慢性HCV遺伝子型1感染を有し、かつ併用療法として化合物(1)のナトリウム塩(120mg/日)、化合物(2)のナトリウム塩(1200mg/日)及びリバビリンで4週間処置した後、化合物(1)のナトリウム塩、ペグ化インターフェロンα-2a及びリバビリンによる併用療法で処置した治療未経験患者群におけるHCVウイルス負荷の変化を表す。
【図２】慢性HCV遺伝子型1感染を有し、かつ併用療法として化合物(1)のナトリウム塩(120mg/日)、化合物(2)のナトリウム塩(1800mg/日)及びリバビリンで4週間処置した後、化合物(1)のナトリウム塩、ペグ化インターフェロンα-2a及びリバビリンによる併用療法で処置した治療未経験患者群におけるHCVウイルス負荷の変化を表す。
【発明を実施するための形態】
【００１６】
発明の詳細な説明
定義
「化合物(1)」及び「化合物(2)」は、上記定義どおりである。
「リバビリン」は、ICN Pharmaceuticals, Inc., Costa Mesa, Califから入手可能であり、かつMerck Index, compound No. 8199, Eleventh Editionに記載されている1-β-D-リボフラノシル-1H-1,2,4-トリアゾール-3-カルボキサミドを表す。その製造及び処方は米国特許第4,211,771号に記載されている。好ましい市販のリバビリン製品には、REBETOL(登録商標)及びCOPEGUS(登録商標)がある。この用語は、米国特許第6,063,772号、第6,403,564号及び第6,277,830号に記載されているもののようなその誘導体又は類似体をさらに包含する。例えば、誘導体又は類似体として、変性リバビリン、例えば5'-アミノエステル、ICN PharmaceuticalsのリバビリンのL-エナンチオマー(ICN 17261)、リバビリンの2'-デオキシ誘導体及びリバビリンの3-カルボキサミジン誘導体、ビラミジン(viramidine)(以前はリバミジン(ribamidine)として知られる)等が挙げられる。
用語「医薬的に許容できる塩」は、正当な医学的判断の範囲内で、過度の毒性、刺激、アレルギー反応等がなくヒト及び下等動物の組織と接触して使用するのに適し、妥当な利益／危険比で釣り合っており、一般的に水若しくは油に溶解又は分散し、かつそれらの意図した用途に有効である、式(I)の化合物の塩を意味する。
この用語には、医薬的に許容できる酸付加塩及び医薬的に許容できる塩基付加塩が含まれる。適切な塩のリストは、例えば、S. M. Birge et al., J. Pharm. Sci., 1977, 66, pp. 1-19で見つかる。
用語「医薬的に許容できる酸付加塩」は、塩酸、臭化水素酸、硫酸、スルファミン酸、硝酸、リン酸等の無機酸、及び酢酸、トリフルオロ酢酸、アジピン酸、アスコルビン酸、アスパラギン酸、ベンゼンスルホン酸、安息香酸、酪酸、ショウノウ酸、ショウノウスルホン酸、ケイ皮酸、クエン酸、ジグルコン酸、エタンスルホン酸、グルタミン酸、グリコール酸、グリセロリン酸、ヘミスルフ酸、ヘキサン酸、ギ酸、フマル酸、2-ヒドロキシエタン-スルホン酸(イセチオン酸)、乳酸、ヒドロキシマレイン酸、リンゴ酸、マロン酸、マンデル酸、メシチレンスルホン酸、メタンスルホン酸、ナフタレンスルホン酸、ニコチン酸、2-ナフタレンスルホン酸、シュウ酸、パモ酸、ペクチン酸、フェニル酢酸、3-フェニルプロピオン酸、ピバル酸、プロピオン酸、ピルビン酸、サリチル酸、ステアリン酸、コハク酸、スルファニル酸、酒石酸、p-トルエンスルホン酸、ウンデカン酸等の有機酸と形成される、遊離塩基の生物学的有効性及び特性を保持し、かつ生物学的及びその他の点でも望ましくなくない当該塩を意味する。
【００１７】
用語「医薬的に許容できる塩基付加塩」は、アンモニア或いはアンモニウム又は金属カチオン、例えばナトリウム、カリウム、リチウム、カルシウム、マグネシウム、鉄、亜鉛、銅、マンガン、アルミニウム等の水酸化物、炭酸塩、又は炭酸水素塩等の無機塩基と形成される、遊離酸の生物学的有効性及び特性を保持し、かつ生物学的及びその他の点でも望ましくなくない当該塩を意味する。アンモニウム塩、カリウム塩、ナトリウム塩、カルシウム塩、及びマグネシウム塩が特に好ましい。医薬的に許容できる無毒の有機塩基から誘導される塩としては、一級、二級、及び三級アミン、四級アミン化合物、置換アミン（天然に存在する置換アミンを含めて）、環状アミン及び塩基性イオン交換樹脂、例えばメチルアミン、ジメチルアミン、トリメチルアミン、エチルアミン、ジエチルアミン、トリエチルアミン、イソプロピルアミン、トリプロピルアミン、トリブチルアミン、エタノールアミン、ジエタノールアミン、2-ジメチルアミノエタノール、2-ジエチルアミノエタノール、ジクロロヘキシルアミン、リジン、アルギニン、ヒスチジン、カフェイン、ヒドラバミン、コリン、ベタイン、エチレンジアミン、グルコサミン、メチルグルカミン、テオブロミン、プリネス、ピペラジン、ピペリジン、N-エチルピペリジン、テトラメチルアンモニウム化合物、テトラエチルアンモニウム化合物、ピリジン、N,N-ジメチルアニリン、N-メチルピペリジン、N-メチルモルフォリン、ジクロロヘキシルアミン、ジベンジルアミン、N,N-ジベンジルフェネチルアミン、1-エフェナミン、N,N'-ジベンジルエチレンジアミン、ポリアミン樹脂等の塩が挙げられる。特に好ましい無毒の塩基は、イソプロピルアミン、ジエチルアミン、エタノールアミン、トリメチルアミン、ジクロロヘキシルアミン、コリン、及びカフェインである。
用語「治療用組合せ物」は、本明細書では、1種以上の活性薬物、すなわち、治療的有用性を有する化合物の組合せを意味する。典型的に、本発明の治療用組合せ物中のこのような各化合物は、当該化合物と医薬的に許容できる担体とを含む医薬組成物中に存在するであろう。本発明の治療用組合せ物中の化合物は、レジメンの一部として、同時又は別々に投与され得る。
【００１８】
発明の実施形態
一般的実施形態によれば、本発明は、患者のHCV感染を治療するか又はその1つ以上の症状を軽減する方法であって、有効量の、本明細書の定義どおりの化合物(1)、又はその医薬的に許容できる塩と、本明細書の定義どおりの化合物(2)、又はその医薬的に許容できる塩とを、必要に応じてリバビリンと共に含んでなる治療用組合せ物を患者に投与する工程を含む方法を提供する。さらなる実施形態は、化合物(1)、又はその医薬的に許容できる塩、及び化合物(2)、又はその医薬的に許容できる塩の、HCV感染の治療において、必要に応じてリバビリンとも一緒に使用するために各化合物の医薬組成物を製造するための使用に関する。
さらなる一般的実施形態は、HCV感染の治療のために化合物(1)と、化合物(2)と、必要に応じてリバビリンとの共投与を指示する書面による使用説明書と共に、1以上の用量の化合物(1)又はその医薬的に許容できる塩を含有するか、或いは1以上の用量の化合物(2)又はその医薬的に許容できる塩を含有する包装を含んでなる包装された医薬組成物を包含する。別の実施形態は、HCV感染の治療用キットであって、下記：(a)1以上の用量の化合物(1)又はその医薬的に許容できる塩と、(b)1以上の用量の化合物(2)又はその医薬的に許容できる塩と、HCV感染の治療のために化合物(1)と、化合物(2)と、必要に応じてリバビリンとの共投与を指示する書面による使用説明書とを含んでなるキットに関する。
本発明の治療用組合せ物を投与する際には、各活性薬を同時に一緒に或いは別々の用量投与で異なる時間に別々に投与することができる。本発明は、本明細書の定義どおりの二剤又は三剤治療用組合せ物を投与するときのこのような全ての投与レジメンを企図かつ包含する。
この併用療法は全てのHCV遺伝子型に対して有効であると予想されるが、亜型1a及び1bを含め、HCV遺伝子型1感染の治療に特に有効であることが実証された。
【００１９】
本発明の併用療法で治療すべき患者集団をさらに「治療未経験」患者、すなわち、HCV感染の如何なる治療も以前に受けたことがない当該患者（限定するものではないが、インターフェロン不耐性又は禁忌の患者が挙げられる）と、「治療経験」患者、すなわち、HCV感染の治療を以前に受けたことがある当該患者に分類することができる。これらの分類のどちらの患者も本発明の併用療法で治療することができる。治療するのが好ましい特定分類の患者は、以前にインターフェロンに加えてリバビリン療法を受けたが、前記療法に非反応性である当該治療経験患者(本明細書では「非反応者」)である。このような非反応者には以下の3つの異なる群の患者が含まれる：(1)インターフェロンに加えてリバビリンによる治療の最初の12週間でHCV RNAレベルの最大減少＜2×log10を経験した患者(「ヌル反応者」)、(2)インターフェロンに加えてリバビリンによる治療中にHCV RNAレベルの最大減少≧2×log10を経験したが、検出レベル未満のHCV RNAレベルを達成しない患者(「部分的反応者」)、及び(3)インターフェロンに加えてリバビリンの療法で該療法中にウイルス学的反応を達成したが、治療中にウイルス負荷がリバウンドした(患者のノンコンプライアンスのため以外)か又は治療完了後にウイルス負荷がリバウンドした患者(「再発者」)。
【００２０】
代替実施形態によれば、本発明は、HCV-RNAレベルの低減が必要な患者のHCV-RNAレベルの低減方法であって、前記患者に本発明の治療用組合せ物を投与する工程を含む方法を提供する。好ましくは、本発明の方法は、患者のHCV-RNAレベルを定量限界未満(又は「BLQ」)レベルに低減する。本発明で用いられるHCV RNAのBLQレベルは、WHO国際標準に従う定量的なマルチサイクルの逆転写酵素PCR法で測定した患者の血清又は血漿1ml当たり25国際単位(IU)未満のレベルを意味する(Saladanha J, Lelie N and Heath A, Establishment of the first international standard for nucleic acid amplification technology (NAT) assays for HCV RNA. WHO Collaborative Study Group. Vox Sang 76:149-158, 1999)。該方法は技術上周知である。好ましい実施形態では、本発明の方法は、患者のHCV-RNAレベルを血清又は血漿1ml当たり25IU未満に低減する。別の実施形態では、本発明の方法は、患者のHCV-RNAレベルを検出可能レベル未満に低減する。
【００２１】
標準的なインターフェロンに加えてリバビリンの療法の通常の治療持続時間は、HCV遺伝子型1感染では少なくとも48週間、HCV遺伝子型2及びHCV遺伝子型3では少なくとも24週間である。しかしながら、本発明の三剤併用療法では、ずっと短い持続期間の治療でも可能なことがある。本発明の三剤併用療法では、企図される治療の持続期間は、少なくとも4週間、好ましくは少なくとも12週間、例えば、約12週間〜約24週間であるが、48週間まで及び48週間を超える期間さえも可能である。従って、さらなる実施形態は、少なくとも24週間及び少なくとも48週間の治療を包含する。異なるHCV遺伝子型、例えばHCV遺伝子型2、3、4、5又は6についての期間も同様であると予想される。本発明の三剤併用療法による初期治療レジメン後に、化合物(1)のみとリバビリン(及びインターフェロンを含むか又は含まない)の併用療法又は化合物(2)のみとリバビリン(及びインターフェロンを含むか又は含まない)の併用療法ということも企図される。
【００２２】
治療用組合せ物の第1成分、すなわち化合物(1)又はその医薬的に許容できる塩は組成物に含まれる。該組成物は、化合物(1)、又はその医薬的に許容できる塩と、医薬的に許容できるアジュバント又は担体を含む。化合物(1)、又はその医薬的に許容できる塩のために使用できる典型的な医薬組成物については、米国特許第7,514,557号に記載されている。組成物のさらに具体的な例については以下の実施例セクションで述べる。
一般に、化合物(1)又はその医薬的に許容できる塩は、少なくとも40mg/日(単用量又は分割用量で)の薬用量で投与可能である。薬用量及び薬用量範囲のさらなる実施形態として以下のものが挙げられる。
(a)少なくとも100mg/日
(b)少なくとも120mg/日
(c)少なくとも200mg/日
(d)少なくとも240mg/日
(e)少なくとも360mg/日
(f)少なくとも480mg/日
(g)約40mg/日〜約480mg/日
(h)約120mg/日〜約240mg/日
(i)約240mg/日〜約480mg/日
(j)約120mg/日
(k)約240mg/日
(l)約360mg/日
(m)約480mg/日
【００２３】
化合物(1)又はその医薬的に許容できる塩を単一又は分割した1日量で投与してよいが、1日量の1日1回投与(QD)が好ましい。しかしながら、当業者は認めるように、上記用量より低いか又は高い用量が必要なこともある。いずれの特定患者の具体的薬用量及び治療レジメンも種々の因子、例えば年齢、体重、一般的健康状態、性別、食事制限、投与時期、排泄速度、薬物の組合せ、感染の重症度と経過、患者の感染への素質及び治療医師の判断等によって決まるであろう。一般に、如何なる有害な副作用をも引き起こすことなく抗ウイルス的に有効な結果を通常もたらすであろう濃度レベルで化合物を投与するのが最も望ましい。
本発明の別の実施形態では、治療の最初の投与用量で化合物(1)の負荷投与量(loading dose amount)が投与される。負荷投与量は、治療の引き続く投与のために投与される用量より高い。好ましくは、負荷投与量は、治療の引き続く投与の量の重量による量で約2倍である。例えば、一実施形態では、化合物(1)の最初の投与は約240mgの用量で投与され、化合物(1)の引き続く投与は約120mgの用量で投与される。別の実施形態では、化合物(1)の最初の投与は約480mgの用量で投与され、化合物(1)の引き続く投与は約240mgの用量で投与される。別の実施形態では、化合物(1)の最初の投与は約960mgの用量で投与され、化合物(1)の引き続く投与は約480mgの用量で投与される。
この負荷用量概念を使用することによって、患者の系においてそうでなければ達成されるであろうより早く活性薬の定常状態レベルを達成することができるという明白な利点がある。二剤負荷用量を用いて達成される血中レベルは、二剤用量で達成されるであろう血中レベルと同じであるが、引き続く二剤用量の連続投与に付随する安全性リスクがない。療法で活性薬の目標とする定常状態レベルにより早く到達するとは、抵抗性ウイルス株が出現する機会がより少ないように、療法の最初に不十分な薬物圧力の可能性が少ないことをも意味する。
【００２４】
治療用組合せ物の第2成分、すなわち、化合物(2)又はその医薬的に許容できる塩は組成物に含まれる。該組成物は、化合物(2)、又はその医薬的に許容できる塩と、医薬的に許容できるアジュバント又は担体とを含む。化合物(2)、又はその医薬的に許容できる塩のために使用できる典型的な医薬組成物は、米国特許第7,582,770号に記載されている。
一般に、化合物(2)又はその医薬的に許容できる塩は、以下の薬用量及び用量範囲で投与可能である(単用量又は分割用量で)：
（ａ）少なくとも800mg/日
（ｂ）少なくとも1200mg/日
（ｃ）少なくとも1800mg/日
（ｄ）少なくとも2400mg/日
（ｅ）約800mg/日〜約2400mg/日
（ｆ）約1200mg/日〜約1800mg/日
（ｇ）約1800mg/日〜約2400mg/日
（ｈ）約1200mg/日〜約2400mg/日
（ｉ）約1200mg/日
（ｊ）約1800mg/日
（ｋ）約2400mg/日
【００２５】
化合物(2)又はその医薬的に許容できる塩を単一又は分割した1日量で投与してよいが、分割した1日量の1日2回(BID)又は1日3回(TID)投与が好ましい。しかしながら、当業者は認めるように、上記用量より低いか又は高い用量が必要なこともある。いずれの特定患者の具体的投薬量及び治療レジメンも種々の因子、例えば年齢、体重、一般的健康状態、性別、食事制限、投与時期、排泄速度、薬物の組合せ、感染の重症度と経過、患者の感染への素質及び治療医師の判断等によって決まるであろう。一般に、如何なる有害な副作用をも引き起こすことなく抗ウイルス的に有効な結果を通常もたらすであろう濃度レベルで化合物を投与するのが最も望ましい。
本発明の別の実施形態では、治療の最初の投与用量で化合物(2)の導入投与量が投与される。導入投与量は、治療の引き続く投与のために投与される用量より高い。好ましくは、導入投与量は、治療の引き続く投与の量の重量による量で約2〜3倍である。例えば、一実施形態では、化合物(2)の最初の投与は約1200mgの用量で投与され、化合物(2)の引き続く投与は約600mgの用量で投与される。別の実施形態では、化合物(2)の最初の投与は約1200mgの用量で投与され、化合物(2)の引き続く投与は約400mgの用量で投与される。
この導入投与量概念を使用することによって、初期ウイルス負荷のより大きい降下を達成することができる。最初の用量で初期ウイルス反応を最大にしてから引き続くより少ない用量でその降下を維持することが、潜在的な抵抗性変異体の選択をも制限する。
【００２６】
治療用組合せ物の任意の第3成分、すなわちリバビリンは医薬組成物に含まれる。典型的に、該組成物は、リバビリン及び医薬的に許容できるアジュバント又は担体を含み、いくつかの市販のリバビリン製剤を含め、技術上周知である。リバビリンを含む製剤は、例えば、米国特許第4,211,771号にも開示されている。
本組合せで使用できるリバビリンのタイプは、上記定義セクションで概要を述べたとおりである。1つの好ましい実施形態では、リバビリンはREBETOL(登録商標)又はCOPEGUS(登録商標)のどちらかであり、HCV感染の治療のためのインターフェロンに加えてリバビリンの併用療法について示されたそれらの標示用量レベルで投与可能である。当然に、本発明の三剤併用療法では、リバビリンのより低い用量を使用することができ、例えば、現在の標準的なインターフェロンに加えてリバビリンの療法で用いられるより少ない用量で使用してよく、その上、該療法に通常付随する副作用が少なく、現在の標準的な療法と同一又はそれより良い効率を与える。
種々の実施形態によれば、リバビリンは下記薬用量で投与可能である(単一又は分割用量で)：
(a)400mg/日〜約1200mg/日；
(b)約800mg/日〜約1200mg/日；
(c)約1000mg/日〜約1200mg/日；
(d)約1000mg/日
(e)約1200mg/日
(f)約300mg/日〜約800mg/日
(g)約300mg/日〜約700mg/日
(h)500mg/日〜約700mg/日
(i)400mg/日〜約600mg/日
(j)約400mg/日
(k)約600mg/日
(l)約800mg/日
一実施形態によれば、リバビリン組成物は、1日1回、1日2回、1日3回、1日4回、1日5回、又は1日6回投与に適した製剤にリバビリンを含む。例えば、治療用組合せ物は約1000mg/日の薬用量のリバビリンを含み、かつ1日5回の投与が望ましい場合、治療用組合せ物は、製剤、例えば、錠剤中にリバビリンを含み、例えば、約200mgのリバビリンを含有する。
【００２７】
例えば、一実施形態では、本発明は、患者のC型肝炎ウイルス(HCV)感染を治療するか又はその1つ以上の症状を軽減する方法であって、下記：
(a)約48mg/日〜約480mg/日の薬用量で化合物(1)又はその医薬的に許容できる塩；
(b)約800mg/日〜約2400mg/日の薬用量で化合物(2)又はその医薬的に許容できる塩；及び
(c)必要に応じて、約400mg/日〜約1200mg/日の薬用量でリバビリン
を含んでなる治療用組合せ物を前記患者に投与する工程を含む方法を企図する。
別の実施形態では、本発明は、患者のC型肝炎ウイルス(HCV)感染を治療するか又はその1つ以上の症状を軽減する方法であって、下記：
(a)約120mg/日〜約240mg/日の薬用量で化合物(1)又はその医薬的に許容できる塩；
(b)約1200mg/日〜約1800mg/日の薬用量で化合物(2)又はその医薬的に許容できる塩；及び
(c)必要に応じて、約1000mg/日〜約1200mg/日の薬用量でリバビリン
を含んでなる治療用組合せ物を前記患者に投与する工程を含む方法を企図する。
別の実施形態では、本発明は、患者のC型肝炎ウイルス(HCV)感染を治療するか又はその1つ以上の症状を軽減する方法であって、下記：
(a)約120mg/日の薬用量で化合物(1)又はその医薬的に許容できる塩；
(b)約1200mg/日〜約1800mg/日の薬用量で化合物(2)又はその医薬的に許容できる塩；及び
(c)必要に応じて、約1000mg/日〜約1200mg/日の薬用量でリバビリン
を含んでなる治療用組合せ物を前記患者に投与する工程を含む方法を企図する。
【００２８】
さらなる実施形態には、上記実施形態のいずれかであって、下記：
(a)前記療法が、化合物(1)又はその医薬的に許容できる塩と、化合物(2)又はその医薬的に許容できる塩と、リバビリンとの投与を含む三剤併用療法であるか；又は
(b)前記療法が、化合物(1)又はその医薬的に許容できる塩と化合物(2)又はその医薬的に許容できる塩との投与を含む、すなわち、如何なる追加の抗HCV薬をも含まない、二剤併用療法である、
実施形態がある。
さらなる実施形態には、上記実施形態のいずれかであって、下記：
(a)前記HCV感染が遺伝子型1であり、かつ前記患者が治療未経験患者である；又は
(b)前記HCV感染が遺伝子型1であり、かつ前記患者が、インターフェロンに加えてリバビリンの併用療法に非反応性である、治療経験のある患者である
実施形態がある。
さらなる実施形態には、上記実施形態のいずれかであって、
化合物(1)又はその医薬的に許容できる塩を1日1回投与し、化合物(2)又はその医薬的に許容できる塩を1日3回投与し、かつ前記療法にリバビリンが含まれる場合はリバビリンを1日2回投与する実施形態がある。
さらなる実施形態には、上記実施形態のいずれかであって、
化合物(1)について用いられる負荷投与量概念、例えば、投与される化合物(1)の最初の用量が、引き続く用量に対して量が2倍である、実施形態がある。
さらなる実施形態には、上記実施形態のいずれかであって、本発明の療法レジメンが、少なくとも約4週間、さらに好ましくは少なくとも約12週間、少なくとも約16週間、少なくとも約24週間、少なくとも約28週間又は少なくとも約40週間患者に投与される、実施形態がある。
本発明の二剤又は三剤併用療法に関して、本発明は、本明細書に記載の種々の好ましい実施形態及び下位概念の実施形態の全ての組合せを企図かつ包含する。
【００２９】
さらなる実施形態は、1以上の用量の化合物(1)又はその医薬的に許容できる塩を含有するか、或いは1以上の用量の化合物(2)又はその医薬的に許容できる塩を含有する包装を、それぞれHCV感染の治療のために化合物(1)、化合物(2)及び必要に応じてリバビリンの共投与を指示する書面による使用説明書と共に含んでなる包装された医薬組成物に関する。別の実施形態では、1以上の用量の化合物(1)及び1以上の用量の化合物(2)を、いわゆる「キット」を形成する単一包装に一緒に入れ、キットは、HCV感染の治療のために化合物(1)、化合物(2)及び必要に応じてリバビリンの共投与を指示する書面による使用説明書を含む。どちらの場合も、化合物(1)又はその医薬的に許容できる塩、或いは化合物(2)又はその医薬的に許容できる塩の個々の用量は、いずれの標準的医薬剤形、例えば、錠剤、カプセル剤の形態中にあってもよく、かついずれかの標準タイプの医薬品包装材料、例えば紙／段ボール箱などの外装材料内にそれら自体が含まれ得るビン、ブリスターパック等内に包装されていてもよい。書面による使用説明書は、典型的に包装材料自体の上又は外装材料内に剤形と共に提供される別の紙(いわゆる「添付文書」)上に提供されるであろう。全ての該包装実施形態及びその変形が本発明に包含される。
【００３０】
さらに、本発明が企図した併用療法による治療中に優れた抗ウイルス活性及びHCVウイルス複製の抑制において驚くべき結果が見られ、ウイルスの抵抗性の出現を制限した。従って、さらなる実施形態では、本発明の併用療法中のウイルスの抵抗性の出現は制限されるか又は出現しない。さらなる実施形態では、本発明の併用療法中は、R155及び／又はD168及び／又はA156の1以上にHCV NS3プロテアーゼアミノ酸置換をコードするHCV変異体の出願が制限されるか又は出現しない。さらなる実施形態では、本発明の併用療法中は、P495にHCV NS5Bポリメラーゼアミノ酸置換をコードするHCV変異体の出現が制限されるか又は出現しない。さらに具体的な実施形態では、HCV NS3プロテアーゼアミノ酸置換(NS3R155及び／又はNS3D168及び／又はNS3A156)とHCV NS5Bポリメラーゼアミノ酸置換P495を両方ともコードするHCV変異体の出現が制限されるか又は出現しない。
さらなる実施形態には、上記実施形態のいずれかであって、下記： 
(a)HCV感染が遺伝子型1aであり、かつ患者が治療未経験患者である；又は
(b)HCV感染が遺伝子型1aであり、かつ患者が、インターフェロンに加えてリバビリンの併用療法に非反応性である、治療経験のある患者であり；
かつ本発明の併用療法中は、NS3プロテアーゼアミノ酸R155に置換及びNS5BポリメラーゼP495に置換をコードする変異体の出現が制限されるか又は出現しない
実施形態がある。
【実施例】
【００３１】
I.  化合物(1)の調製方法
非晶質化合物(1)の調製方法及び医薬的に許容できる塩形の一般的説明は、米国特許第6,323,180号、第7,514,557号及び第7,585,845号で見つけられる。化合物(1)のさらなる形、特に結晶性ナトリウム塩形の調製方法は、米国特許出願公開第2010/0093792号で見つけられる。
II.  化合物(1)の製剤
化合物(1)の医薬製剤の一例として、WO 2010/059667に開示されている経口溶液製剤が挙げられる。さらなる例として、WO 2011/005646に開示されているように、脂質ベースの液体製剤を含有するカプセル剤が挙げられる。該カプセル製剤の例を以下に記載する。
実施例1−ソフトゲル(Softgel)カプセル製剤#1
液体フィル製剤の組成：
【００３２】
2013540112.tif 000007
【００３３】
2つの具体的ソフトゲルカプセル医薬品製剤、40mgの製品及び120mgの製品を上記一般的製剤#1に従って調製した。
【００３４】
2013540112.tif 000008
1 42.30mgの化合物(1)Na塩は40.0mgの活性成分に相当する。
2 126.90mgの化合物(1)Na塩は120.0mgの活性成分に相当する。
3 窒素は加工助剤として用いられ、最終製品には見られない。
4 乾燥及び仕上げ前のカプセルシェルの近似重量は280mgである。乾燥及び仕上げ後のカプセルシェルの近似重量は198mgである。
5 乾燥及び仕上げ前のカプセルシェルの近似重量は590mgである。乾燥及び仕上げ後のカプセルシェルの近似重量は404mgである。
【００３５】
実施例2−ソフトゲルカプセル製剤#2
液体フィル製剤の組成：
【００３６】
2013540112.tif 000009
【００３７】
特定の150mgのソフトゲルカプセル医薬品製剤を上記一般的処方に従って調製した。
【００３８】
実施例3−硬シェルカップセル製剤#3
液体フィル製剤の組成：
【００３９】
2013540112.tif 000010
【００４０】
特定の150mgの硬シェルカプセル医薬品製剤を上記一般的処方に従って調製した。
【００４１】
製剤1〜3の調製：
バルクフィル製造の混合時間が一定かつ合理的に短かくなるように薬物をジェットミルで製粉して大きい凝集体を除去する。薬物の目標とする粒度分布は、Sympatecにより測定されるx90(v/v)を10μm以下、x98(v/v)を20μm以下に減少させることである。調合製剤中の全ての賦形剤を混合容器内で混ぜ合わせて、均一になるまで混合した後に活性物質を加える。活性物質の添加後、目視検査で調合溶液が清澄になるまで混合を続ける。この調製全体を通して標準的慣習として調合溶液を覆う窒素ブランケットを使用する。フィルターを通してフィル溶液からいずれの外来性粒子をも除去する。ろ過されたバルクフィル材料のカプセル封入は、標準的軟ゼラチン又は硬ゼラチンカプセル技術及びインプロセス制御を利用して行なわれる。充填されたカプセル剤を乾燥させてから仕上げ／洗浄溶液で洗浄した後に包装して光沢のある医薬的に洗練されたカプセル剤とする。
III.  化合物(2)の調製方法
非晶質化合物(2)の調製方法は米国特許第7,141,574号及び第7,582,770号、並びに米国特許出願公開第2009/0087409号で見つけられる。
下記実施例は、本発明で使用可能なさらなる形態の化合物(2)であるナトリウム塩形の調製方法を提供する。
【００４２】
実施例4−化合物(2)のナトリウム塩の調製
工程1.  3-シクロペンチル-1-メチル-1H-インドール-6-カルボン酸イソプロピルの合成
【００４３】
【化６】
2013540112.tif 000011
【００４４】
臭素化生成物の不安定性のため、簡単かつ高収率をもたらす操作によって3-シクロペンチル-1-メチル-1H-インドール-6-カルボン酸メチルをより安定な3-シクロペンチル-1-メチル-1H-インドール-6-カルボン酸イソプロピルに変換する必要があった。この変換は化学量論量の固体リチウムイソプロポキシドで最もよく機能した。0.1当量のリチウムイソプロポキシドの使用は、より長い反応時間につながり、結果として加水分解副生物を増やすこととなり、さらにTHF中のリチウムイソプロポキシド溶液は、問題のある単離をもたらし、THFの蒸留を必要とした。
手順：
2-プロパノール中の3-シクロペンチル-1-メチル-1H-インドール-6-カルボン酸メチル(50.0g,0.194mol)とリチウムイソプロポキシド(16.2g,95%,0.233mol)の混合物を完全なエステル化のため65±5℃で少なくとも30分間撹拌した。バッチを40±5℃に冷まし、バッチ温度を40±5℃で維持する速度で水(600g)を加えた。添加後、2±0.5時間かけて混合物を20〜25℃に冷まし、少なくとも1時間20〜25℃で維持した。バッチをろ過し、水中28wt%の2-プロパノール(186g)、及び水(500g)ですすいだ。ウェットケークを真空中(≦200トル)40〜45℃で含水量が≦0.5%になるまで乾燥させて3-シクロペンチル-1-メチル-1H-インドール-6-カルボン酸イソプロピル(52.7g,収率95%)を99.2A%(240nm)で得た。
出発原料3-シクロペンチル-1-メチル-1H-インドール-6-カルボン酸メチルは、米国特許第7,141,574号の実施例12、及び米国特許第7,642,352号の実施例12に記載されているように調製可能である。両特許文献は参照によってここに援用される。
工程2.  2-ブロモ-3-シクロペンチル-1-メチル-1H-インドール-6-カルボン酸イソプロピルの合成
【００４５】
【化７】
2013540112.tif 000012
【００４６】
このプロセスにより、臭素を用いた対応3-シクロペンチル-1-メチル-1H-インドール-6-カルボキシラートの臭素化による2-ブロモ-3-シクロペンチル-1-メチル-1H-インドール-6-カルボキシラートの合成の最適条件を確認した。反応温度を制御すること及び水性チオ硫酸ナトリウムと4-メチルモルフォリンの混合物で反応混合物をクエンチしてジブロモ不純物及び2-インドロン不純物の形成を最小限にすることが非常に重要である。イソプロパノール中のNaOHで粗生成物をさらに中和すると、単離生成物の安定性が大いに高まる。
手順：
3-シクロペンチル-1-メチル-1H-インドール-6-カルボン酸イソプロピル(50.0g,0.175mol)とアセトニトリル(393g)の混合物を-6±3℃に冷却した。バッチを-6±3℃で維持しながら臭素(33.6g,0.210mol)を加えた。結果として生じたスラリーを-6±3℃で少なくとも30分間撹拌した。HPLCが≧94%の変換を示したとき(HPLCサンプルを即座に4-メチルモルフォリン／チオ硫酸ナトリウム水溶液でクエンチしなければならない)、温度を-5℃±5℃で維持しながら、水(440g)中のチオ硫酸ナトリウム(15.3g)と28.4gの4-メチルモルフォリンの溶液で混合物をクエンチした。それを0±5℃で少なくとも2時間撹拌した後、バッチをろ過し、85wt%のメタノール/水溶液(415g)、次に水(500g)で洗浄し、含水量が≦30%になるまで乾燥させた。ウェットケークを2-プロパノール(675g)に懸濁させ、75±5℃に加熱した。結果として生じた濁った溶液を、バッチを75±5℃で維持する速度で1.0Mの水酸化ナトリウム水溶液(9.1g)で処理してから135.0gの水で処理した。懸濁液を75±5℃で少なくとも30分間撹拌し、30〜40分かけて15±2℃に冷却し、15±2℃で少なくとも1時間維持した。バッチをろ過し、75wt%の2-プロパノール/水溶液(161g)ですすぎ、含水量が≦0.4%になるまで真空中(≦200トル)50〜60℃で乾燥させて2-ブロモ-3-シクロペンチル-1-メチル-1H-インドール-6-カルボン酸イソプロピルを固体(55.6g,収率87%)として99.5A%(240nm)及び97.9Wt%で得た。
【００４７】
代替手順
3-シクロペンチル-1-メチル-1H-インドール-6-カルボン酸イソプロピル(84g,0.294mol)と酢酸イソプロピル(1074g)の混合物を-10〜0℃に冷却した。バッチを-10〜0℃で維持しながら臭素(50g,0.312mol)を加えた。結果として生じたスラリーを同温度でさらに30分間撹拌し、温度を0〜10℃で維持しながら、水(240g)中のチオ硫酸ナトリウム五水和物(13g)とトリエチルアミン(64.5g)の予冷溶液でクエンチした。混合物を40〜50℃に加熱し、メタノール(664g)を入れた。それを同温度で少なくとも0.5時間撹拌した後、バッチをさらに1時間0〜10℃に冷却した。沈殿物をろ過し、56wt%のメタノール/水溶液(322g)ですすぎ、含水量が≦0.4%になるまで真空中(≦200トル)50〜60℃で乾燥させて2-ブロモ-3-シクロペンチル-1-メチル-1H-インドール-6-カルボン酸イソプロピルをベージュ色固体(90〜95g,収率80〜85%)として得た。
【００４８】
工程3a、3b.  ワンポットPd触媒ホウ素化(borylation)-鈴木カップリング反応による化合物Iの調製
【００４９】
【化８】
2013540112.tif 000013
【００５０】
20.04gの2-ブロモ-3-シクロペンチル-1-メチル-1H-インドール-6-カルボン酸イソプロピル、1.06gのPd(TFP)2Cl2(3mol%)及び0.76gのトリ(2-フリル)ホスフィン(6mol%)を含むきれいな乾燥した反応器に、窒素又はアルゴン下で23±10℃にて8.35gのトリエチルアミン(1.5当量)、39.38gのCH3CNを入れて10分間の撹拌を開始した。9.24gの4,4,5,5-テトラメチル-1,3,2-ジオキサボロランを反応器に入れた。混合物を加熱して還流させ(約81〜83℃)、反応が完了するまで6時間撹拌した。バッチを30±5℃に冷まし、7.86gのCH3CN中0.99gの水の混合物でクエンチした。引き続きアルゴン又は窒素下で17.24gの5-ブロモ-2-ヨードピリミジン及び166.7gの脱気リン酸カリウム水溶液(予め46.70gのK3PO4と120gのH2Oから調製した)を入れた。反応が完了するまで内容物を加熱して2時間還流させた(約76〜77℃)。70℃で4.5gの1-メチルイミダゾールを反応器に入れた。バッチを0.5時間かけて20±3℃に冷まし、20±3℃で少なくとも1時間保持した。固体をろ過で収集した。ウェットケークをまず62.8gの2-プロパノールですすいだ後、200gのH2Oですすいだ。固体を真空下50℃未満の温度で乾燥させた。
乾燥したきれいな反応器に乾燥したI、10wt%のNorit SX Ultra及び5VのTHFを入れた。内容物を60±5℃で少なくとも1時間加熱した。内容物を35±5℃に冷ました後、炭素をろ別し、3VのTHFですすいだ。1-メチルイミダゾール(Iに対して10wt%)を含むきれいな反応器にろ液を入れた。蒸留で5VのTHFを除去した後、内容物を31±2℃に冷却した。撹拌速度を120rpm超えに調整した後、内容物温度を31±2℃で維持しながら少なくとも40分にわたって2.5Vの水を入れた。内容物をさらに20分間31±2℃で撹拌した後、31±2℃で少なくとも30分の時間をかけて9.5Vの水を反応器に入れた。次いでバッチを約25±3℃に冷却し、さらに30分間撹拌した。固体を収集し、3Vの水ですすいだ。湿潤生成物Iを真空下50℃未満の温度で乾燥させた(19.5g,95wt%,収率76%)。
【００５１】
代替手順：
40gの2-ブロモ-3-シクロペンチル-1-メチル-1H-インドール-6-カルボン酸イソプロピル(0.110mol)、0.74gのPd(OAc)2(3.30mmol,3mol%相当)及び3.2gのトリ(2-フリル)ホスフィン(13.78mmol,12.5mol%相当)を含むきれいな乾燥した反応器に窒素又はアルゴン下25℃で16.8gのトリエチルアミン(1.5当量)、100mLのアセトニトリルを入れた。20.8gの4,4,5,5-テトラメチル-1,3,2-ジオキサボロランを30分以内で反応器に入れた。混合物を加熱して還流させ(約81〜83℃)、反応が完了するまで5時間以上撹拌した。バッチを20℃に冷まし、50mLのCH3CN中2.7gの水の混合物でクエンチした。バッチを30℃に温め、1時間撹拌し、100mLのアセトニトリル中34.4gの5-ブロモ-2-ヨードピリミジンを含有する第2の反応器に移した。反応器を90mLのアセトニトリルですすいだ。第2の反応器にアルゴン又は窒素下で脱気リン酸カリウム水溶液(予め93.2gのK3PO4と100gのH2Oから調製した)を入れた。反応が完了するまで3時間以上内容物を加熱して(約80℃)還流させた。70℃で9.2gの1-メチルイミダゾールを反応器に入れて混合物を少なくとも10分間撹拌した。相分離後に水相を除去した。257gのイソプロパノールを70℃で入れた。バッチをゆっくり0℃に冷却し、少なくとも1時間保持した。固体をろ過で収集した。ウェットケークを2-プロパノールで2回すすぎ(2×164g)、真空下50℃未満の温度で乾燥させてIを黄色乃至褐色の固体として得た(26g,収率75%)。
【００５２】
工程4.  IのIIへの加水分解
【００５３】
【化９】
2013540112.tif 000014
【００５４】
I(20g)及び1-メチル-2-ピロリジノン(NMP)(113g)をきれいな反応器に窒素下で入れた。バッチを撹拌しながら50〜53℃に加熱した後、予混合したNaOH水溶液(5.4gの50%NaOH水溶液と14.3gの水)を反応器に導入した。結果として生じた混合物を反応が完了するまで50〜53℃で約10時間撹拌した。予混合HOAc水溶液(60gの水と9.0gのHOAc)を45±5℃で0.5時間かけて加えてpHを5.5〜7.5にした。バッチを20±5℃に冷却してから少なくとも1.0時間維持した。固体生成物を収集し、80gのNMP/水(1:3体積比)ですすいでから60gの水ですすいだ。生成物を真空下50℃未満の温度で乾燥させてIIを淡黄色粉末として得た(19〜20g,純度>99.0A%及び88.4wt%,5.4wt%のNMP含有)。収率は約93〜98%である。
注記：Iの加水分解のために用いた最初の手順は、MeOH/THF中のNaOH水溶液(2.5当量)を用いて60℃で行なった。それをIIの調製に数百グラム規模で適用したが、この方法の1つの欠点は、加水分解中の5-MeOピリミジンの形成であり(約0.4A%)、これはその後の工程で非常に除去しにくい。さらに、結晶化中には慎重な制御を行使しなければならない。さもないと、HOAcによる酸性化の際に濃厚スラリーが生じる可能性がある。溶媒としてNMPを使用すると、全ての上記問題を克服し、所望純度で生成物を得ることができた。
代替プロセス
反応器にI(71g)、イソプロパノール(332g)、NaOH水溶液(22g,45wt%)及び水(140g)を周囲温度で入れた。混合物を加熱して還流させ(80℃)、反応が完了するまで少なくとも3時間撹拌した。バッチを70℃に冷まし、イソプロパノール(31g)中の木炭(3.7g)の懸濁液を入れた。混合物を同温度で10分以上撹拌し、ろ過した。残渣をイソプロパノール(154g)ですすいだ。ろ液に70〜80℃で水(40g)を入れた後、36%HCl溶液(20g)をゆっくり添加してpHを5〜6にした。バッチを70℃で30分以上撹拌してから1時間かけて20℃に冷まして少なくとも1.0時間維持した。固体生成物を収集し、407gのイソプロパノール/水(229gのIPA,178gのH2O)ですすいだ。生成物を真空下80℃で5時間以上乾燥させてIIを白色粉末として得た(61g,収率95%)。
【００５５】
下記工程5〜8に関する注記：
ベンズイミダゾール中間体Vの簡潔かつスケーラブルな4工程調製プロセスを開発した。第1工程は、65℃でDMSO中の水性メチルアミンを用いて2,4-ジクロロニトロベンゼンから出発する4-クロロ-2-(メチル)-アミノニトロベンゼンの調製であった。次に、110℃でPd(OAc)2、iPr2NEt、LiCl、及びDMAcの存在下でアクリル酸n-ブチルを用いる非配位子Heck反応を発見した。
工程5：(5-クロロ-2-ニトロフェニル)-メチルアミンのSNAr反応
【００５６】
【化１０】
2013540112.tif 000015
【００５７】
DMSO(160mL)中の(5-クロロ-2-ニトロフェニル)-メチルアミン(40g,208.3mmol,1当量)の溶液に、温度を35℃未満に維持しながらゆっくり水中40%のMeNH2溶液(100mL,1145.6mmol,5.5当量)を加えた。出発原料の完全な消費まで(>10時間)、反応をr.t.で撹拌した。結果として生じた橙色スラリーに水(400mL)を加えてr.t.でさらに2時間撹拌した。固体をろ過し、水(200mL)ですすぎ、減圧下40℃で乾燥させた。(5-クロロ-2-ニトロフェニル)-メチルアミン(36.2g,収率93%,94A%純度)を固体として単離した。
工程6：(5-クロロ-2-ニトロフェニル)-メチルアミンのHeck反応
【００５８】
【化１１】
2013540112.tif 000016
【００５９】
DMAc(250mL)中の4-クロロ-2-メチルアミノニトロベンゼン(50.0g,268.0mmol,1.0当量)、Pd(OAc)2(0.30g,1.3mmol,0.005当量)及びLiCl(11.4g,268.0mmol,1.0当量)の混合物に窒素下でiPr2NEt(56mL,321.5mmol,1.2当量)の添加後、アクリル酸n-ブチル(40mL,281.4mmol,1.05当量)を加えた。反応混合物を110℃で12時間撹拌してから50℃に冷ました。1-メチルイミダゾール(10.6mL,134.0mmol,0.5当量)を加えて混合物を30分間撹拌した後ろ過し、水(250mL)を加えた。結果として生じた混合物を1時間かけてr.t.に冷ました。結果として生じた固体をろ過し、水で洗浄し、乾燥させて3-メチルアミノ-4-ニトロケイ皮酸n-ブチル(71.8g,96%,99.2A%純度)を得た。
工程7：(3-メチルアミノ-4-ニトロ)-ケイ皮酸n-ブチルの還元
【００６０】
【化１２】
2013540112.tif 000017
【００６１】
反応器に3-メチルアミノ-4-ニトロケイ皮酸n-ブチル(70.0g,mmol,1.0当量)、ラネーニッケル(4.9g,約20wt%のH2O)、木炭「Norit SX Ultra」(3.5g)、トルエン(476mL)及びMeOH(224mL)を入れた。反応器を水素(4バール)で満たし、反応が完了するまで混合物を20〜25℃で約2時間撹拌した。反応混合物をろ過し、フィルター残渣をトルエン(70mL)ですすいだ。混ぜ合わせたろ液に「Norit SX Ultra」木炭(3.5g)を加えた。混合物を50℃で1.0時間撹拌してろ過した。ろ液を減圧下で濃縮して溶媒を除去して最初の体積の50%にした。残存内容物を70℃に加熱し、ゆっくりメチルシクロヘキサン(335mL)を同温度で入れた。混合物を約30〜40℃に冷却し、III種晶を入れてから懸濁液をゆっくり約-10℃に冷却した。固体をろ過し、メチルシクロヘキサンで3回に分けて(3×46mL)すすいだ。ウェットケークを真空中40℃で乾燥させてIIIを得た(53.3g,215mmol,86%)。
工程8：ベンズイミダゾールVの調製
【００６２】
【化１３】
2013540112.tif 000018
【００６３】
反応器-1にトルエン(140g)中のIII(35g,140.95mmol)を入れた。混合物を50℃に加熱して清澄溶液を得た。第2反応器にIV(36.4g,169.10mmol)及びトルエン(300g)を入れた後、0〜10℃でジクロロヘキシルカルボジイミド溶液(11.6g,50%トルエン中,28.11mmol)を加えた。混合物を同温度で15分間撹拌してから、バッチ温度を0〜10℃で維持しながら1時間以内で反応器-1の内容物とジクロロヘキシルカルボジイミド溶液(52.4g,50%トルエン中,126.98mmol)を平行して入れた。混合物を同温度で3時間撹拌し、25℃にさらに1時間温めた。IIIが消費された時点で、減圧下70〜80℃でトルエン(約300mL)を蒸留して除いた。温度を70〜80℃で維持しながらn-ブタノール(200g)を添加した後、n-ブタノール中3MのHCl溶液(188g)を加えた(ガス発生、生成物は沈殿する)。70〜80℃で30分以上撹拌した後、混合物を1時間かけて20〜30℃に冷ました。沈殿物をろ過し、アセトン(172g)及びトルエン(88g)で洗浄した。ウェットケークを真空中で約60℃にて乾燥させてVトルエン溶媒和物をオフホワイトの固体として得た(60〜72g,収率85〜95%)。化合物Vは直接次工程で使用することができ、或いは次工程の前に塩基性にして、次工程で用いる遊離塩基化合物VIを得ることができる。
工程9.  (E)-ブチル 3-(2-(1-(2-(5-ブロモピリミジン-2-イル)-3-シクロペンチル-1-ヒドロキシ-1H-インドール-6-カルボキサミド)シクロブチル)-1-メチル-1H-ベンゾ[d]イミダゾール-6-イル)アクリラートVIIの合成
【００６４】
【化１４】
2013540112.tif 000019
【００６５】
注記：
触媒量のNMP又はDMFの存在下で安価な塩化チオニルを用いて、酸の酸塩化物への変換を達成した。高い収率と純度で所望生成物を単離するための効率的な結晶化を開発した。
手順(遊離塩基VIを使用)：
THF(133.4g)中の2-(5-ブロモピリミジン-2-イル)-3-シクロペンチル-1-メチル-1H-インドール-6-カルボン酸II(工程4参照)(33.36g,90.0wt%,前工程からの約0.2当量のNMPを含有,75.00mmol)の懸濁液に塩化チオニル(10.71g)を加えた。混合物を25±5℃で少なくとも1時間撹拌した。HPLCで決定されるように(ジエチルアミンの誘導体として)変換完了後、混合物を10±5℃に冷却し、25℃未満でN,N-ジイソプロピルエチルアミン(378.77g,300mmol)を加えた。THF(106.7g)に溶かした(E)-ブチル 3-(2-(1-アミノシクロブチル)-1-メチル-1H-ベンゾ[d]イミダゾール-6-イル)アクリラートVI(25.86g,97.8Wt%,77.25mmol)を内容物の温度≦25℃を維持する速度で加えた。アミド形成の完了のため混合物を25±5℃で少なくとも30分間撹拌した。混合物を常圧で蒸留して約197mL(171.5g)の揮発物を除去した(注：蒸留を減圧下で行なうこともできる)。バッチを40±5℃に調整し、MeOH(118.6g)を加えた。水(15.0g)を加え、結晶化が起こるまで(典型的に30分内)混合物を40±5℃で撹拌し、さらに1時間保持した。水(90g)を40±5℃で1時間かけて入れ、バッチを0.5時間内で25±5℃に冷まし、少なくとも1時間保持した。固体をろ過し、MeOH(39.5g)、水(100g)の混合物ですすぎ、真空中(≦200トル)50±5℃で乾燥させて(E)-ブチル 3-(2-(1-(2-(5-ブロモピリミジン-2-イル)-3-シクロペンチル-1-メチル-1H-インドール-6-カルボキサミド)シクロブチル)-1-メチル-1H-ベンゾ[d]イミダゾール-6-イル)アクリラートVII(51.82g,収率96.6%)を98.0A%(240nm)及び99.0Wt%のHPLC純度で得た。
【００６６】
代替プロセス(工程8から得た化合物Vを使用)
反応器1に2-(5-ブロモピリミジン-2-イル)-3-シクロペンチル-1-メチル-1H-インドール-6-カルボン酸II(33.6g)、トルエン(214g)及びN-メチルピロリドン(1.37g)を入れた。混合物を40℃に加熱してから塩化チオニル(13g)のトルエン(17g)中の溶液を加えた。混合物を40℃で少なくとも0.5時間撹拌し、30℃に冷ました。第2反応器に化合物V(工程8から得たビス-HCl塩トルエン溶媒和物)(39.4g)、トルエン(206g)及びN,N-ジイソプロピルエチルアミン(70.8g)を25℃で入れた。反応器1の内容物を反応器2に30℃で移してトルエン(50g)ですすいだ。混合物を30℃でさらに0.5時間撹拌してから、温度を25℃で維持しながらイソプロパノール(84g)と水(108g)を入れた。10分間撹拌した後、相カッティング後に水相を除去した。有機相にイソプロパノール(43g)、水(54g)を入れて10分間撹拌した。相カッティング後に水相を除去した。混合物を減圧下で蒸留して約250mLの揮発物を除去した後、メチルtert-ブチルエーテル(MTBE,238g)を加えた。バッチを65℃で1時間以上撹拌してから1時間かけて20℃に冷まし、同温度でさらに1時間保持した。固体をろ過し、MTBE(95g)ですすぎ、真空中80℃で乾燥させて(E)-ブチル 3-(2-(1-(2-(5-ブロモピリミジン-2-イル)-3-シクロペンチル-1-メチル-1H-インドール-6-カルボキサミド)シクロブチル)-1-メチル-1H-ベンゾ[d]イミダゾール-6-イル)アクリラートVIIをベージュ色固体として得た(50g,収率90%)。
工程10.  (E)-3-(2-(1-(2-(5-ブロモピリミジン-2-イル)-3-シクロペンチル-1-メチル-1H-インドール-6-カルボキサミド)シクロブチル)-1-メチル-1H-ベンゾ[d]イミダゾール-6-イル)アクリル酸(化合物(1))の合成
【００６７】
【化１５】
2013540112.tif 000020
【００６８】
注記：
このプロセスでは、(E)-ブチル 3-(2-(1-(2-(5-ブロモピリミジン-2-イル)-3-シクロペンチル-1-メチル-1H-インドール-6-カルボキサミド)シクロブチル)-1-メチル-1H-ベンゾ[d]イミダゾール-6-イル)アクリラートの加水分解をTHF/MeOHと水性NaOHの混合物中で行なった。高い収率及び純度で容易にろ過できる結晶性生成物を得るためには、対応するナトリウム塩の酢酸を用いた制御された酸性化が非常に重要である。
手順：
THF(1298g)とMeOH(387g)中の(E)-ブチル 3-(2-(1-(2-(5-ブロモピリミジン-2-イル)-3-シクロペンチル-1-メチル-1H-インドール-6-カルボキサミド)シクロブチル)-1-メチル-1H-ベンゾ[d]イミダゾール-6-イル)アクリラートVII(489.0g,91.9Wt%,633.3mmol)の懸濁液に50%NaOH(82.7g,949.9mmol)を添加した後、水(978g)ですすいだ。完全な加水分解のため混合物を65〜68℃で約1時間撹拌した。結果として生じた溶液を35℃に冷まし、インラインフィルター(0.5μm)を通してろ過し、水(978g)とMeOH(387g)の予混合溶液ですすいだ。溶液を60±4℃に加熱し、混合物をよく撹拌しながら酢酸(41.4g,689mmol)を1時間にわたって加えた。結果として生じた懸濁液を60±4℃で0.5時間撹拌した。さらに酢酸(41.4g,689mmol)を0.5時間内で入れて、バッチを60±4℃でさらに0.5時間撹拌した。バッチを1時間かけて26±4℃に冷まして1時間保持した。バッチをろ過し、水(1956g)とMeOH(773.6g)の予混合溶液ですすぎ、真空下50℃で乾燥させて(E)-3-(2-(1-(2-(5-ブロモピリミジン-2-イル)-3-シクロペンチル-1-メチル-1H-インドール-6-カルボキサミド)シクロブチル)-1-メチル-1H-ベンゾ[d]イミダゾール-6-イル)アクリル酸(1)(419.0g,収率95%)をHPLCにより≧99.0A%(240nm)及び94.1Wt%で得た。
工程11.  化合物(1)ナトリウム塩(A型)の形成
【００６９】
【化１６】
2013540112.tif 000021
【００７０】
反応器に化合物(1)(150g, mmol)、THF(492mL)、H2O(51mL)及び45%NaOH水溶液(20.4g, mmol)を入れた。混合物を約25℃で>1時間撹拌して清澄溶液(pH=9〜11)を形成した。この溶液に木炭(1.5g)とH2O(27mL)の懸濁液を入れた。混合物を約35℃で>30分間撹拌してろ過した。フィルターをTHF(108mL)及びH2O(21mL)ですすいだ。ろ液を50℃に加熱し、メチルエチルケトン(MEK)(300mL)を入れた。混合物に化合物(1)ナトリウム塩MEK溶媒和物(A型)種(0.5g)を入れて50℃でさらに1時間撹拌した。混合物にさらにMEK(600mL)を加えた。結果として生じた混合物を50℃でさらに1時間撹拌してから25℃に冷ました。沈殿物をろ過し、MEKで2回(2×300mL)すすいだ。ウェットケークを真空中80℃で乾燥させて化合物(1)ナトリウム塩(A型)(145.6g,94%)を得た。
種を使用しないこと及び溶媒和物を乾燥しないことを除き、上記プロセスによって、上記プロセス工程で使用する化合物(1)ナトリウム塩(A型)MEK溶媒和物種を製造することができる。
【００７１】
結晶化工程11に関する注記
より高いバルク密度材料を作り出すためのプロセス最適化
ラボ実験の考察は、シーディング(seeding)温度を60℃から50℃に下げて種晶の溶解を防止すべきであることを示した。THF/MEK/H2O系における結晶化の反応速度論は遅いことが分かった。またシーディング後の貧溶媒(anti-solvent)MEKの添加が早過ぎるときに油／エマルションを観察できた。このように実験を行なって、油化(oiling)を最小限にするためのMEK添加時間及び熟成時間を最適化した。この改良されたプロセスは、凝集した粒状結晶を一貫して作り出し、所望の高いバルク密度をもたらした。
貧溶媒添加及び熟成時間の最適化
50℃でのMEK貧溶媒添加後の熟成時間を最適化するように実験を設計した。データは、全ての固体が3時間以内の熟成で溶液から晶出することを示した。熟成後、スラリーを2時間かけて線形的に20℃に冷ました。熟成時間を延長しても母液内の収率損失を有意には改善しなかった。結晶化は92.4%の収率をもたらした。
MEK添加の完了直後に、大量の結晶と共に乳状の油性溶液が観察された。この油性溶液は1時間以内に消散した。別の実験は、MEKのより遅い添加速度が油の形成を回避できることを明らかにした。
ウェットケークについてのXRPDパターンはMEK溶媒和相を確証した。
別の実験を行なって、現在の結晶化システムで観察される遅い結晶化反応速度論に本プロセスを適合させた。シーディング後に1/2時間の熟成時間を含め、MEK貧溶媒添加時間を50℃で2から4時間に増やした。
全ての固体が2時間以内の熟成で溶液から晶出したことが分かった。熟成後、スラリーを2時間かけて線形的に20℃に冷まし、一晩保持した。これは母液損失について有意には改善しなかった。
結論として、MEK添加終了時のスラリーは油相のない清澄母液をもたらすことが分かり；一方、2時間のMEK添加以前には、乳状の油性母液が観察された。油化を防止するためには4時間の貧溶媒添加が推奨される。
乾燥時間の研究
MEK及びTHFの残存溶媒のICH限界を満たすために必要な80℃での乾燥時間を決定するための研究を行なった。結果は、THFについてのICH限界を満たすためには最短5時間の乾燥が必要であることを示した。
収率及び結晶化に及ぼす含水量の影響
結晶化に及ぼす含水量の影響を評価した。含水量は、既存手順で特定される5.6%(w/w)レベルとは異なった。結晶化において50%以上及び50%未満の水を用いて研究を行なった。データは、5.6%の含水量が良い収率と操作性のための最適条件に近いことを示した。
【００７２】
IV.  化合物(2)の製剤
化合物(2)を含む医薬製剤の例には、下記錠剤製剤がある。
実施例5：固体経口製剤#1
固体経口製剤の組成：
【００７３】
2013540112.tif 000022
【００７４】
2つの具体的固体経口医薬品製剤、50mgの製品及び200mgの製品を上記一般的製剤#1に従って調製した。
【００７５】
2013540112.tif 000023
1.206.7mg及び51.7mgの化合物(2)Na塩(ナトリウム塩)は、それぞれ200mg及び50mgの活性成分、化合物(2)(遊離酸)に相当する。
2.純水を造粒剤として使用；それは最終製品には存在しない。
3.植物由来
【００７６】
実施例6：固体経口製剤#2
固体経口製剤の組成：
【００７７】
2013540112.tif 000024
【００７８】
2つの具体的固体経口医薬品製剤、200mgの製品及び400mgの製品を上記一般的製剤#1に従って調製した。
【００７９】
2013540112.tif 000025
1.206.7mg及び413.4mgの化合物(2)Na塩(ナトリウム塩)は、それぞれ200mg及び400mgの活性成分、化合物(2)(遊離酸)に相当する。
2.純水を造粒剤として使用；それは最終製品には存在しない。
3.植物由来
【００８０】
製剤1〜2の調製
塩基性化剤、界面活性剤、可溶化剤／結合剤、充填剤を含めた粒内賦形剤と共に薬物を乾燥状態で高せん断造粒機内にて混合した後に水を添加する。必要ならば、製粉前に薬物と賦形剤をふるいにかけて大きい凝集体を除去してよい。混合の完了後、高せん断造粒機で造粒剤として純水を用いて混合物を適切な終点が達成されるまで造粒する。湿潤顆粒を取り出し、トレイ乾燥機又は流動床乾燥機で適切な乾燥温度にて乾燥させる。乾燥顆粒を高速ミル、例えばComillを通過させて製粉する。製粉された顆粒を次に粒外賦形剤、流動促進剤及び潤沢剤とブレンドしてから錠剤成形機で錠剤化する。
【００８１】
V.  臨床結果
下記臨床治験では、化合物(1)医薬品は、化合物(1)ナトリウム塩を含むソフトゲルカプセル脂質ベース製剤として投与した。化合物(2)医薬品は、化合物(2)ナトリウム塩を含む錠剤製剤として投与した。
実施例7−治療未経験患者についての臨床研究
慢性C型肝炎遺伝子型1感染の治療未経験患者におけるプロテアーゼインヒビター化合物(1)ナトリウム塩、HCVポリメラーゼインヒビター化合物(2)ナトリウム塩及びリバビリンを用いるインターフェロン節約(interferon-sparing)治療の安全性及び抗ウイルス活性。
背景：化合物(1)及び化合物(2)は、それぞれHCV NS3/4Aプロテアーゼ及びNS5B RNA依存性RNAポリメラーゼの強力かつ特異的なインヒビターである。HCV感染を根絶するための両抗ウイルス薬とリバビリン(RBV)のインターフェロンのない組合せは、HCV治療における主要なパラダイムシフトを引き起こすであろう。
方法：この無作為化非盲検治験では、32名の未治療HCV遺伝子型1患者を4週間にわたって、1日3回(TID)400mg又は600mgで投与される化合物(2)ナトリウム塩、1日2回(QD)120mgで投与される化合物(1)ナトリウム塩、及びRBV(毎日2回の投与で1000mg又は1200mgの重量ベース用量)で治療した。血漿HCV RNAウイルス負荷(VL)をRoche COBAS(登録商標) TaqMan(登録商標)アッセイにより25IU/mlの定量下限で測定した。
結果：ベースラインでは、平均年齢が51±11歳、平均BMIが23.8±3.5kg/m2、平均VLが6.48LOG10であった。全ての患者は最初の2日で急速かつシャープなVL減少を有し、その後2名の患者を除き、より遅い第2相の減少を有した。1名の患者は、VL破綻(治療中の最下点から>1 LOG10増加)を経験し、もう1名の患者は0.7 LOG10 VL増加を経験した。両者とも低用量群(400mgのTID化合物(2))であり、高いベースラインVLの遺伝子型1a患者(NS5B配列決定により確認した)であった。29日目に、全ての患者をプロトコル毎に化合物(1)ナトリウム塩、及びペグ化インターフェロン(PegIFN)/RBVによる治療に切り換えた。経口治療の1、2、3及び4週間後のウイルス学的反応率(VL＜25IU/ml)を下表に示す。
【００８２】
表：ウイルス負荷<25IU/mlの患者の割合
2013540112.tif 000026
【００８３】
以下に、用量群及び亜型(BLQ=VL<25IU/ml)（600mgのTID用量群において遺伝子型1を遺伝子型6eとしてさらに正確に特徴づけした）によるウイルス学的反応を示す同データのさらに詳細なデータを提示する。
【００８４】
2013540112.tif 000027
【００８５】
結果は、400mg TIDで頑強な抗ウイルス活性(全体で73%のRVR；GT1bでは100%、GT1aでは60%)、及び600mg TIDで優れた抗ウイルス活性(GT1a及び1bで100%のRVR)を実証した。400mg TID用量群の経時的なVL変化を図1にグラフで示し、600mg TID用量群の経時的なVL変化を図2にグラフで示す。
より高い用量レベルでは、遺伝子型(GT)1aと1bの間で差がなかったが、400mg TIDによるGT1a患者は、GT1b患者より低い反応率を有し、400mg TID用量群の1名のGT1a患者は、28日の治療中にウイルスリバウンド(最下点から≧1-log10の増加)を示した。PegIFN節約治療は耐容性が良かった。最も一般的な有害事象(AE)は、大部分は軽度の胃腸作用(下痢、悪心、嘔吐)、発疹又は光線過敏であった。4週間の研究期間内では重症なAE、SAE又は治療中断はなかった。実験室パラメーターは、全ての患者のALTの連続的降下、ヘモグロビンの減少(メジアン-2.5及び-3.6g/dL)及び非抱合ビリルビンの増加(メジアン+9.8及び+11.5umol/l)を除き、ベースラインからの如何なる関連性のある変化をも示さなかった。
さらに、研究者のフィードバックに基づき、併用療法は他のHCV治療に比べて改善された耐容性を有することが分かった。本発明の三剤併用療法と他のHCVレジメンの耐容性を比較するための質問票を14名全ての研究者に送った。耐容性を-5〜+5の段階で評価した(「0」は同等の耐容性、「-5」はずっと悪い耐容性、「+5」はずっと良い耐容性を示す)。
結果を下表に示す。
【００８６】
2013540112.tif 000028
【００８７】
結論：NS3/4Aインヒビター化合物(1)、NS5Bインヒビター化合物(2)、及びRBVを用いるPegIFN節約治療は、HCV遺伝子型1に対して良い安全性及び耐容性で強い早期の抗ウイルス活性を示した。より長い持続時間で、この組合せの異なる用量レジメンを試験するIIb相治験を計画して、持続性ウイルス学的反応率を評価する。
400mg TID用量群の1名のGT1a患者だけが28日の治療期間中にウイルス負荷のリバウンドを示した。リバウンドしたサンプルから得たウイルスの核酸の配列決定は、このウイルスが、ベースラインの前治療サンプルに比べて、NS3プロテアーゼとNS5Bポリメラーゼの両領域に配列変化を含むことを示した。ヌクレオチドの変化はNS3のアミノ酸置換R155K及びNS5Bのアミノ酸置換P495Lをコードしており、化合物(1)及び化合物(2)に対して二重に抵抗性であるウイルスを表す。治療中の低頻度のウイルス学的リバウンド(400mg TID用量群では15名の患者中1名のみ、600mg TID用量群では17名の患者中ゼロ)は、1a及び1bの両患者の大多数が治療期間中にリバウンドを示した14日間のPegIFN節約レジメンの単剤療法としての化合物(1)の初期の評価(米国特許出願公開第2010/0068182号で提示されている化合物(1)の単剤療法データ参照)に基づいて驚くべきかつ予想外の結果である。
確実に驚くべき結果には、化合物(1)、化合物(2)及びリバビリンで構成されるPegIFN節約レジメンは、単剤療法における化合物1又は他のプロテアーゼインヒビターの臨床治験で一般的に観察されている薬物耐性変異体の出現を効率的に抑制するという事実がある。400mg TID用量群における低頻度のウイルス学的失敗(1/15)及び600mg TID用量群では如何なるウイルス学的失敗もないこと(0/17)は、化合物1及び2の組合せは、新規かつ耐容性の高い治療レジメンで有意に改善された効率を達成する可能性があることを示唆している。
【図１】
2013540112.tif 000039
【図２】
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【手続補正書】
【提出日】平成25年4月22日(2013.4.22)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
患者のC型肝炎ウイルス(HCV)感染を治療するか又はその1つ以上の症状を軽減するための医薬組成物であって、下記：
(a)下記式(1)の化合物又はその医薬的に許容できる塩：
【化１】
2013540112.tif 000041
；および、
(b)下記式(2)の化合物又はその医薬的に許容できる塩：
【化２】
2013540112.tif 000042
(2)        
を含む前記医薬組成物。
【請求項２】
さらに（ｃ）リバビリンを含む、請求項１に記載の医薬組成物。
【請求項３】
HCV感染が遺伝子型1による、請求項１または２に記載の医薬組成物。
【請求項４】
患者が治療未経験患者である、請求項１〜３のいずれか１項に記載の医薬組成物。
【請求項５】
患者が、リバビリンとインターフェロンαを使用する併用療法に非反応性である、請求項１〜４のいずれか１項に記載の医薬組成物。
【請求項６】
患者のHCV-RNAレベルが、前記治療の結果として1mlの血清又は血漿当たり25国際単位(IU)未満のレベルに減少する、請求項１〜５のいずれか１項に記載の医薬組成物。
【請求項７】
化合物(1)又はその医薬的に許容できる塩を、1日当たり約40mg〜1日当たり約480mgの用量で投与する、請求項１〜６のいずれか１項に記載の医薬組成物。
【請求項８】
化合物(1)がそのナトリウム塩の形で投与される、請求項１〜７のいずれか１項に記載の医薬組成物。
【請求項９】
化合物(2)又はその医薬的に許容できる塩が、1日当たり約800mg〜1日当たり約2400mgの用量で含まれる、請求項１〜８のいずれか１項に記載の医薬組成物。
【請求項１０】
化合物(2)がそのナトリウム塩の形で含まれる、請求項１〜９のいずれか１項に記載の医薬組成物。
【請求項１１】
リバビリンが約400mg/日〜約1200mg/日の用量で含まれる、請求項２〜１０のいずれか１項に記載の方法。
【請求項１２】
化合物(1)又はその医薬的に許容できる塩、化合物(2)又はその医薬的に許容できる塩及びリバビリンの三剤組合せである、請求項２〜１１のいずれか１項に記載の方法。
【請求項１３】
化合物(1)又はその医薬的に許容できる塩及び化合物(2)又はその医薬的に許容できる塩の投与を含み、リバビリンを含まない二剤組合せである、請求項１または３〜１１のいずれか１項に記載の方法。
【請求項１４】
下記：
(a)1以上の用量の下記化合物(1)又はその医薬的に許容できる塩：
【化３】
2013540112.tif 000043
；
或いは(b)1以上の用量の下記化合物(2)又はその医薬的に許容できる塩：
【化４】
2013540112.tif 000044
(2)          ；
および、HCV感染の治療のために、化合物(1)、又はその医薬的に許容できる塩と、化合物(2)、又はその医薬的に許容できる塩との共投与を指示する書面による使用説明書
を含有する包装を含んでなる包装されたHCV感染の治療用医薬組成物。
【請求項１５】
さらに（ｃ）１以上の容量のリバビリン、および、HCV感染の治療のために、化合物(1)、又はその医薬的に許容できる塩と、化合物(2)、又はその医薬的に許容できる塩と、リバビリンとの共投与を指示する書面による使用説明書
を含有する、請求項１４記載の包装されたHCV感染の治療用医薬組成物。
【請求項１６】
HCV感染の治療用キットであって、下記：
(a)1以上の用量の下記化合物(1)又はその医薬的に許容できる塩：
【化５】
2013540112.tif 000045
；
及び(b)1以上の用量の下記化合物(2)又はその医薬的に許容できる塩：
【化６】
2013540112.tif 000046
(2)          ；
および、HCV感染の治療のために、化合物(1)、又はその医薬的に許容できる塩と、化合物(2)、又はその医薬的に許容できる塩との共投与を指示する書面による使用説明書
を含んでなるキット。
【請求項１７】
さらに（ｃ）１以上の容量のリバビリン、および、HCV感染の治療のために、化合物(1)、又はその医薬的に許容できる塩と、化合物(2)、又はその医薬的に許容できる塩と、リバビリンとの共投与を指示する書面による使用説明書
を含有する、請求項１６記載のキット。
【請求項１８】
下記式(2)の化合物又はその医薬的に許容できる塩：
【化７】
2013540112.tif 000047
(2)
と、
下記式(1)の化合物又はその医薬的に許容できる塩：
【化８】
2013540112.tif 000048
とからなる組合せを含むHCV感染の治療のための、組合せ医薬。
【請求項１９】
さらに組み合せにリバビリンが含まれる、請求項１８記載の組合せ医薬。
【国際調査報告】
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