(57)【要約】  12-リポキシゲナーゼ介在の疾患又は障害（例、糖尿病）の治療又は予防に有用な、式 (I)又は(II)のヒト12-リポキシゲナーゼ阻害剤を開示する。また、医薬上許容される担体及び少なくとも一つの本発明の阻害剤を含む組成物、並びに哺乳動物の上記の疾患又は障害の治療又は予防方法を開示する。2013526576.tif 000017［式中、R1、R2、R3及びR4は明細書中で定義されている通りである。］【選択図】なし
2013526576.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
式(I)又は式(II)：
【化１】
2013526576.tif 000016
［式中、
R1 及びR2 は、独立して水素、アルキル、アルケニル、アルキニル、アリール、ヘテロシクリル、ヘテロアリール、ニトロ、フルオロ、ブロモ、クロロ及びヨードからなる群から選ばれ、
R3 は、ハロ、C1-C6アルキル、C2-C6 アルケニル、C2-C6 アルキニル、C3-C8シクロアルキル、C3-C8 シクロアルケニル、C6-C10 アリール、ヘテロアリール、-NO2、-OH、-OR5、-SH、-SR5、-SOR5、-SO2R5、-COR5、-COOH、-COOR5、-CONHR5及び-CONR5R6からなる群から選ばれる１個以上の置換基でそれぞれ置換されていてもよい、イソアルキル、シクロアルキル、アリール、ヘテロシクリル及びヘテロアリールからなる群から選ばれ、
R4 は、水素及びアルキルからなる群から選ばれ（ただし、当該アルキルはハロ、-NO2、-OH、-OR5、-SH、-SR5、-SOR5、-SO2R5、-COR5、-COOH、-COOR5、-CONHR5及び-CONR5R6で置換されていてもよい）、且つ
R5 及びR6 は、独立してC1-C6 アルキル、C2-C6アルケニル、C2-C6 アルキニル、C3-C8 シクロアルキル及びC3-C8シクロアルケニルからなる群から選ばれる。］
の化合物又はその医薬上許容される塩、そのエナンチオマー、そのエナンチオマー混合物若しくはそのジアステレオマー。
【請求項２】
化合物が式(I)の化合物である、請求項１に記載の化合物、その塩、そのエナンチオマー、そのエナンチオマー混合物又はそのジアステレオマー。
【請求項３】
R1 が水素である、請求項２に記載の化合物、その塩、そのエナンチオマー、そのエナンチオマー混合物又はそのジアステレオマー。
【請求項４】
R2 がニトロ、フルオロ、クロロ及びブロモからなる群から選ばれる、請求項２又は３に記載の化合物、その塩、そのエナンチオマー、そのエナンチオマー混合物又はそのジアステレオマー。
【請求項５】
R3 が、ハロ、C1-C6 アルキル、C2-C6アルケニル、C2-C6 アルキニル、C3-C8 シクロアルキル、C3-C8シクロアルケニル、C6-C10 アリール、ヘテロアリール、-NO2、-OH、-OR5、-SH、-SR5、-SOR5、-SO2R5、-COR5、-COOH、-COOR5、-CONHR5及び-CONR5R6からなる群から選ばれる１個以上の置換基でそれぞれ置換されていてもよい、イソアルキル、シクロアルキル、ヘテロアリール及びアリールからなる群から選ばれる、請求項２〜４の何れかに記載の化合物、その塩、そのエナンチオマー、そのエナンチオマー混合物又はそのジアステレオマー。
【請求項６】
R3 がイソアルキルである、請求項５に記載の化合物、その塩、そのエナンチオマー、そのエナンチオマー混合物又はそのジアステレオマー。
【請求項７】
R3 がイソプロピルである、請求項６に記載の化合物、その塩、そのエナンチオマー、そのエナンチオマー混合物又はそのジアステレオマー。
【請求項８】
化合物がN-((5-クロロ-8-ヒドロキシキノリン-7-イル)(イソプロピル)メチル)プロピオンアミド及びN-((5-クロロ-8-ヒドロキシキノリン-7-イル)(イソプロピル)メチル)アセトアミドからなる群から選ばれる、請求項７に記載の化合物、その塩、そのエナンチオマー、そのエナンチオマー混合物又はそのジアステレオマー。
【請求項９】
R3 がシクロアルキルである、請求項５に記載の化合物、その塩、そのエナンチオマー、そのエナンチオマー混合物又はそのジアステレオマー。
【請求項１０】
R3 がシクロプロピルである、請求項９に記載の化合物、その塩、そのエナンチオマー、そのエナンチオマー混合物又はそのジアステレオマー。
【請求項１１】
化合物がN-((5-クロロ-8-ヒドロキシキノリン-7-イル)(シクロプロピル)メチル)プロピオンアミド及びN-((5-クロロ-8-ヒドロキシキノリン-7-イル)(シクロプロピル)メチル)アセトアミドからなる群から選ばれる、請求項１０に記載の化合物、その塩、そのエナンチオマー、そのエナンチオマー混合物又はそのジアステレオマー。
【請求項１２】
R3 が、ハロ、C1-C6アルキル、C2-C6 アルケニル、C2-C6 アルキニル、C3-C8シクロアルキル、C3-C8 シクロアルケニル、C6-C10 アリール、ヘテロアリール、-NO2、-OH、-OR5、-SH、-SR5、-SOR5、-SO2R5、-COR5、-COOH、-COOR5、-CONHR5及び-CONR5R6からなる群から選ばれる１個以上の置換基で置換されていてもよいヘテロアリールである、請求項５に記載の化合物、その塩、そのエナンチオマー、そのエナンチオマー混合物又はそのジアステレオマー。
【請求項１３】
R3 がフラン-2-イル、チオフェン-2-イル及びそれらのアルキル化誘導体又はハロゲン化誘導体からなる群から選ばれる、請求項１２に記載の化合物、その塩、そのエナンチオマー、そのエナンチオマー混合物又はそのジアステレオマー。
【請求項１４】
R3 がフラン-2-イルである、請求項１３に記載の化合物、その塩、そのエナンチオマー、そのエナンチオマー混合物又はそのジアステレオマー。
【請求項１５】
化合物がN-((5-ニトロ-8-ヒドロキシキノリン-7-イル)(フラン-2-イル)メチル)プロピオンアミド、N-((5-クロロ-8-ヒドロキシキノリン-7-イル)(フラン-2-イル)メチル)プロピオンアミド、N-((5-クロロ-8-ヒドロキシキノリン-7-イル)(フラン-2-イル)メチル)アセトアミド、N-((5-ブロモ-8-ヒドロキシキノリン-7-イル)(フラン-2-イル)メチル)プロピオンアミド、N-((5-ブロモ-8-ヒドロキシキノリン-7-イル)(フラン-2-イル)メチル)アセトアミド及びN-((5-フルオロ-8-ヒドロキシキノリン-7-イル)(フラン-2-イル)メチル)アセトアミドからなる群から選ばれる、請求項１４に記載の化合物、その塩、そのエナンチオマー、そのエナンチオマー混合物又はそのジアステレオマー。
【請求項１６】
化合物がN-((5-クロロ-8-ヒドロキシキノリン-7-イル)(5-ブロモフラン-2-イル)メチル)プロピオンアミドである、請求項１３に記載の化合物、その塩、そのエナンチオマー、そのエナンチオマー混合物又はそのジアステレオマー。
【請求項１７】
R3 がチオフェン-2-イルである、請求項１３に記載の化合物、その塩、そのエナンチオマー、そのエナンチオマー混合物又はそのジアステレオマー。
【請求項１８】
化合物がN-((5-ニトロ-8-ヒドロキシキノリン-7-イル)(チオフェン-2-イル)メチル)プロピオンアミド、N-((5-クロロ-8-ヒドロキシキノリン-7-イル)(チオフェン-2-イル)メチル)プロピオンアミド、N-((5-クロロ-8-ヒドロキシキノリン-7-イル)(チオフェン-2-イル)メチル)アセトアミド、N-((5-ブロモ-8-ヒドロキシキノリン-7-イル)(チオフェン-2-イル)メチル)プロピオンアミド、N-((5-ブロモ-8-ヒドロキシキノリン-7-イル)(チオフェン-2-イル)メチル)アセトアミド、N-((8-ヒドロキシキノリン-7-イル)(チオフェン-2-イル)メチル)プロピオンアミド及びN-((5-フルオロ-8-ヒドロキシキノリン-7-イル)(チオフェン-2-イル)メチル)アセトアミドからなる群から選ばれる、請求項１７に記載の化合物、その塩、そのエナンチオマー、そのエナンチオマー混合物又はそのジアステレオマー。
【請求項１９】
化合物がN-((5-クロロ-8-ヒドロキシキノリン-7-イル)(5-メチルチオフェン-2-イル)メチル)プロピオンアミドである、請求項１３に記載の化合物、その塩、そのエナンチオマー、そのエナンチオマー混合物又はそのジアステレオマー。
【請求項２０】
R3 が、ハロ、C1-C6 アルキル、C2-C6アルケニル、C2-C6 アルキニル、C3-C8 シクロアルキル、C3-C8シクロアルケニル、C6-C10 アリール、ヘテロアリール、-NO2、-OH、-OR5、-SH、-SR5、-SOR5、-SO2R5、-COR5、-COOH、-COOR5、-CONHR5及び-CONR5R6からなる群から選ばれる１個以上の置換基で置換されていてもよいアリールである、請求項１３に記載の化合物、その塩、そのエナンチオマー、そのエナンチオマー混合物又はそのジアステレオマー。
【請求項２１】
化合物がN-((5-クロロ-8-ヒドロキシキノリン-7-イル)(4-メチルフェニル)メチル)プロピオンアミド又はN-((5-クロロ-8-ヒドロキシキノリン-7-イル)(4-フルオロフェニル)メチル)プロピオンアミドである、請求項２０に記載の化合物、その塩、そのエナンチオマー、そのエナンチオマー混合物又はそのジアステレオマー。
【請求項２２】
R4がアルキルであって、当該アルキルはハロ、-NO2、-OH、-OR5、-SH、-SR5、-SOR5、-SO2R5、-COR5、-COOH、-COOR5、-CONHR5及び-CONR5R6で置換されていてもよい、請求項２〜７、９、１０、１２〜１４、１７及び２０のいずれかに記載の化合物、その塩、そのエナンチオマー、そのエナンチオマー混合物又はそのジアステレオマー。
【請求項２３】
R4 がメチル又はエチルである、請求項２２に記載の化合物、その塩、そのエナンチオマー、そのエナンチオマー混合物又はそのジアステレオマー。
【請求項２４】
化合物が少なくとも75%の鏡像体過剰率の単一の左旋性エナンチオマーを含む、請求項８、１１、１３、１５、１６、１８、１９及び２１のいずれかに記載の化合物、その塩、そのエナンチオマー、そのエナンチオマー混合物又はそのジアステレオマー。
【請求項２５】
化合物が式 (II)の化合物である、請求項１に記載の化合物、その塩、そのエナンチオマー、そのエナンチオマー混合物又はそのジアステレオマー。
【請求項２６】
R1 が水素である、請求項２５に記載の化合物、その塩、そのエナンチオマー、そのエナンチオマー混合物又はそのジアステレオマー。
【請求項２７】
R2 がニトロ、フルオロ、クロロ及びブロモからなる群から選ばれる、請求項２５又は２６に記載の化合物、その塩、そのエナンチオマー、そのエナンチオマー混合物又はそのジアステレオマー。
【請求項２８】
R3 が、ハロ、C1-C6アルキル、C2-C6 アルケニル、C2-C6 アルキニル、C3-C8シクロアルキル、C3-C8 シクロアルケニル、C6-C10 アリール、ヘテロアリール、-NO2、-OH、-OR5、-SH、-SR5、-SOR5、-SO2R5、-COR5、-COOH、-COOR5、-CONHR5及び-CONR5R6からなる群から選ばれる１個以上の置換基でそれぞれ置換されていてもよい、イソアルキル、シクロアルキル、ヘテロアリール及びアリールからなる群から選ばれる、請求項２５〜２７のいずれかに記載の化合物、その塩、そのエナンチオマー、そのエナンチオマー混合物又はそのジアステレオマー。
【請求項２９】
R3 がイソアルキルである、請求項２８に記載の化合物、その塩、そのエナンチオマー、そのエナンチオマー混合物又はそのジアステレオマー。
【請求項３０】
R3 がシクロアルキルである、請求項２８に記載の化合物、その塩、そのエナンチオマー、そのエナンチオマー混合物又はそのジアステレオマー。
【請求項３１】
R3 が、ハロ、C1-C6アルキル、C2-C6 アルケニル、C2-C6 アルキニル、C3-C8シクロアルキル、C3-C8 シクロアルケニル、C6-C10 アリール、ヘテロアリール、-NO2、-OH、-OR5、-SH、-SR5、-SOR5、-SO2R5、-COR5、-COOH、-COOR5、-CONHR5及び-CONR5R6からなる群から選ばれる１個以上の置換基で置換されていてもよいヘテロアリールである、請求項２８に記載の化合物、その塩、そのエナンチオマー、そのエナンチオマー混合物又はそのジアステレオマー。
【請求項３２】
R3 がフラン-2-イル、チオフェン-2-イル及びそれらのアルキル化誘導体又はハロゲン化誘導体からなる群から選ばれる、請求項３１に記載の化合物、その塩、そのエナンチオマー、そのエナンチオマー混合物又はそのジアステレオマー。
【請求項３３】
R3 がフラン-2-イルである、請求項３２に記載の化合物、その塩、そのエナンチオマー、そのエナンチオマー混合物又はそのジアステレオマー。
【請求項３４】
化合物がN-((5-ニトロ-8-ヒドロキシ-1,2,3,4-テトラヒドロキノリン-7-イル)(フラン-2-イル)メチル)プロピオンアミドである、請求項３３に記載の化合物、その塩、そのエナンチオマー、そのエナンチオマー混合物又はそのジアステレオマー。
【請求項３５】
R3 がチオフェン-2-イルである、請求項３２に記載の化合物、その塩、そのエナンチオマー、そのエナンチオマー混合物又はそのジアステレオマー。
【請求項３６】
R3 が、ハロ、C1-C6アルキル、C2-C6 アルケニル、C2-C6 アルキニル、C3-C8シクロアルキル、C3-C8 シクロアルケニル、C6-C10 アリール、ヘテロアリール、-NO2、-OH、-OR5、-SH、-SR5、-SOR5、-SO2R5、-COR5、-COOH、-COOR5、-CONHR5及び-CONR5R6からなる群から選ばれる１個以上の置換基で置換されていてもよいアリールである、請求項２８に記載の化合物、その塩、そのエナンチオマー、そのエナンチオマー混合物又はそのジアステレオマー。
【請求項３７】
R4 がアルキルであって、当該アルキルはハロ、-NO2、-OH、-OR5、-SH、-SR5、-SOR5、-SO2R5、-COR5、-COOH、-COOR5、-CONHR5及び-CONR5R6で置換されていてもよい、請求項２５〜３３、３５及び３６のいずれかに記載の化合物、その塩、そのエナンチオマー、そのエナンチオマー混合物又はそのジアステレオマー。
【請求項３８】
R4 がメチル又はエチルである、請求項３７に記載の化合物、その塩、そのエナンチオマー、そのエナンチオマー混合物又はそのジアステレオマー。
【請求項３９】
請求項１〜３８のいずれかに記載の化合物、その塩、そのエナンチオマー、そのエナンチオマー混合物又はそのジアステレオマー及び医薬上許容される担体を含む医薬組成物。
【請求項４０】
治療有効量又は予防有効量の請求項１〜３８のいずれかに記載の化合物、その塩、そのエナンチオマー、そのエナンチオマー混合物又はそのジアステレオマーを治療又は予防を必要とする哺乳動物に投与することを含む、12-リポキシゲナーゼ介在の疾患又は障害を治療又は予防する方法。
【請求項４１】
12-リポキシゲナーゼがヒト12-リポキシゲナーゼである、請求項４０に記載の方法。
【請求項４２】
12-リポキシゲナーゼ介在の疾患又は障害が、糖尿病、心血管疾患及び血栓症からなる群から選ばれる、請求項４０又は４１に記載の方法。
【請求項４３】
心血管疾患が心筋梗塞である、請求項４２に記載の方法。
【請求項４４】
治療有効量の請求項１〜３８のいずれかに記載の化合物、その塩、そのエナンチオマー、そのエナンチオマー混合物又はそのジアステレオマーを患者に投与することを含む、糖尿病に苦しむ患者のベータ細胞を保護する方法。
【請求項４５】
糖尿病、心血管疾患及び血栓症からなる群から選ばれる介在疾患又は障害の治療又は予防のための、請求項１〜３８のいずれか１項に記載の化合物、その塩、そのエナンチオマー、そのエナンチオマー混合物又はそのジアステレオマー。
【請求項４６】
糖尿病に苦しむ患者のベータ細胞を保護するための、請求項１〜３８のいずれか１項に記載の化合物、その塩、そのエナンチオマー、そのエナンチオマー混合物又はそのジアステレオマー。
【発明の詳細な説明】
【関連出願の相互参照】
【０００１】
本願は2010年5月18日出願の米国仮特許出願No.61/345,708の利益を主張し、これを参照することにより援用する。
【発明の背景】
【０００２】
リポキシゲナーゼは、多価不飽和脂肪酸（リポタンパク質で見られるものを含む）のヒドロペルオキシ誘導体への酸化を触媒する、植物及び動物で見られる非ヘム鉄含有酵素の一種である。ヒトでは、以下のリポキシゲナーゼをコードする遺伝子が存在する：e-LOX-3 (表皮型 リポキシゲナーゼ 3)、5-LO (5-リポキシゲナーゼ)、12-LO (12-リポキシゲナーゼ)、12(R)-LOX (12(R)-リポキシゲナーゼ)、15-LO-1 (網状赤血球型 15-リポキシゲナーゼ-1)及び15-LO-2 (上皮型 15-リポキシゲナーゼ-2)。リポキシゲナーゼは、アラキドン酸における酸化位置の特異性に基づき命名される。12-LOおよび15-LOは、それぞれアラキドン酸を12(S)-ヒドロキシペルオキシ-5,8,10,14(Z,Z,E,Z)エイコサテトラエン酸(12(S)-HPETE)及び15(S)-ヒドロキシペルオキシ-5,8,10,14(Z,Z,E,Z)エイコサテトラエン酸(15(S)-HPETE)に変換する。12(S)-HPETE及び15(S)-HPETEの生化学的還元は、それぞれ、リポキシンとして知られる化合物の群の前駆体である、12(S)-HETE(12-(S)-ヒドロキシ-エイコサテトラエン酸)及び15(S)-HETE(15-(S)-ヒドロキシ-エイコサテトラエン酸)の形成を導く。
【０００３】
12-リポキシゲナーゼ酵素は、ヒト単球、大動脈平滑筋(aortic vascular sooth muscle)及び内皮の細胞、心筋細胞、骨格筋、腎臓、乳癌細胞、並びに膵島のベータ細胞で見られる。12-リポキシゲナーゼの発現増強は、細胞接着を促進し、それにより血管損傷に反応して大きな凝血塊を形成する血小板の能力を増大させる得ると考えられている。1型糖尿病で見られるサイトカインによって誘導される膵ベータ細胞破壊及び膵島移植片拒絶は、炎症性傷害又はプログラム細胞死を直接的又は間接的にもたらす、12-リポキシゲナーゼにより形成される生成物が関与する複数の細胞内シグナル伝達経路と関係している。また、炎症は2型糖尿病におけるベータ細胞の機能障害及び死を導く重要な病理過程である。炎症性サイトカインが12-LOを急速に活性化すること、及びヒト膵島において、12-LO生成物がインシュリン分泌を抑制し、代謝活性を低下させ、そして細胞死を引き起こすことが知られている。さらに、12-LO活性化が、糖尿病におけるベータ細胞の機能障害又はベータ細胞量の減少を介在する重要なローカル経路であると考えられている（Ma et al.，J. Clin. Endocrinol. Metab.，February 2010，95(2):  887-893）。さらに、12-HETEのような12-LOの生成物が、糖尿病及び／又は心血管疾患に起因する、血小板介在の凝血塊の形成に寄与することが知られている。
【０００４】
上述したことを考慮すると、新しい12-リポキシゲナーゼ阻害剤を提供することが望まれている。
【発明の概要】
【０００５】
本発明は強力且つ選択的な12-リポキシゲナーゼ阻害剤である化合物を提供する。さらに本発明はこれらの化合物を含む組成物、ならびに12-リポキシゲナーゼ介在の疾患又は障害の治療、特に、糖尿病の治療及び心血管疾患に起因する血小板介在の凝血塊の形成の予防における治療薬としてのこれらの化合物の使用方法を提供する。
【０００６】
本発明は式(I)又は式(II)：
【０００７】
【化１】
2013526576.tif 000003
【０００８】
［式中、
R1 及びR2 は、独立して水素、アルキル、アルケニル、アルキニル、アリール、ヘテロシクリル、ヘテロアリール、ニトロ、フルオロ、ブロモ、クロロ及びヨードからなる群から選ばれ、
R3 は、ハロ、C1-C6アルキル、C2-C6 アルケニル、C2-C6 アルキニル、C3-C8シクロアルキル、C3-C8 シクロアルケニル、C6-C10 アリール、ヘテロアリール、-NO2、-OH、-OR5、-SH、-SR5、-SOR5、-SO2R5、-COR5、-COOH、-COOR5、-CONHR5及び-CONR5R6からなる群から選ばれる１個以上の置換基でそれぞれ置換されていてもよい、イソアルキル、シクロアルキル、アリール、ヘテロシクリル及びヘテロアリールからなる群から選ばれ、
R4 は、水素及びアルキルからなる群から選ばれ（ただし、当該アルキルはハロ、-NO2、-OH、-OR5、-SH、-SR5、-SOR5、-SO2R5、-COR5、-COOH、-COOR5、-CONHR5及び-CONR5R6で置換されていてもよい）、且つ
R5 及びR6 は、独立してC1-C6 アルキル、C2-C6アルケニル、C2-C6 アルキニル、C3-C8 シクロアルキル及びC3-C8シクロアルケニルからなる群から選ばれる。］
の化合物又はその医薬上許容される塩を提供する。
【０００９】
また、本発明は、本発明の化合物又は塩及び医薬上許容される担体を含む医薬組成物を提供する。
【００１０】
さらに、本発明は、治療有効量の本発明の化合物又はその塩を投与することを含む、治療を必要とする哺乳動物における12-リポキシゲナーゼ介在の障害（例、糖尿病、心血管疾患及び血栓症）の治療方法を提供する。
【００１１】
有利には、本発明の実施形態は、5hLO、15hLO-1及び15hLO-2に比較して12hLOに対する高い選択性を示す。さらに、本発明の実施形態は、許容できる速度論的水溶解度、良好な細胞透過性、及びバッファー及びマウス血漿における優れた安定性を示す。
【図面の簡単な説明】
【００１２】
【図１】図１は、本発明の実施形態に基づく式 (I)の化合物を製造するための合成スキームを説明する。
【図２】図２は、本発明の実施形態に基づく化合物によって示される、トロンビン(図2A)、アラキドン酸(図2B)、PAR1-AP(図2C)、コラーゲン(図2D)、PAR4-AP(図2E)及びADP(図2F)による刺激に反応する血小板凝集に対する作用を説明する。
【図３】図３は、本発明の実施形態に基づく化合物によって示される、トロンビン(図3A)、アラキドン酸(図3B)、PAR1-AP(図3C)、コラーゲン(図3D)、PAR4-AP(図3E)及びADP(図3F)による刺激に反応する濃染顆粒分泌に対する作用を説明する。
【図４】図４は、本発明の実施形態に基づく化合物によって示される、トロンビン(図4A)、PAR4-AP(図4B)、PAR1-AP(図4C)及びADP(図4D)によるアゴニスト刺激に反応する、ヒト血小板表面上のP-セレクチンの増加によって測定されるα顆粒分泌に対する作用を説明する。
【図５】図５は、本発明の実施形態に基づく化合物によって示される、トロンビン(図5A)、PAR4-AP(図5B)、PAR1-AP(図5C)及びADP(図5D)によるアゴニスト刺激に反応する、ヒト血小板におけるインテグリンαIIbβ3の活性化によって測定されるα顆粒分泌に対する作用を説明する。
【図６】図６は、ヒト膵島のIL-12p40mRNAレベルに対する12(S)-HETEの作用を説明する。
【図７】図７は、ヒト膵島のIFN-γmRNAレベルに対する12(S)-HETEの作用を説明する。
【図８】図８は、本発明の実施形態に基づく化合物によるcPLA2活性に対する作用を説明する。
【発明の詳細な説明】
【００１３】
一実施形態によれば、本発明は式(I)又は式(II)：
【００１４】
【化２】
2013526576.tif 000004
【００１５】
［式中、
R1 及びR2は、独立して水素、アルキル、アルケニル、アルキニル、アリール、ヘテロシリル(heterocylyl)、ヘテロアリール、ニトロ、フルオロ、ブロモ、クロロ及びヨードからなる群から選ばれ、
R3 は、ハロ、C1-C6アルキル、C2-C6 アルケニル、C2-C6 アルキニル、C3-C8シクロアルキル、C3-C8 シクロアルケニル、C6-C10 アリール、ヘテロアリール、-NO2、-OH、-OR5、-SH、-SR5、-SOR5、-SO2R5、-COR5、-COOH、-COOR5、-CONHR5及び-CONR5R6からなる群から選ばれる１個以上の置換基でそれぞれ置換されていてもよい、イソアルキル、シクロアルキル、アリール、ヘテロシクリル及びヘテロアリールからなる群から選ばれ、
R4 は、水素及びアルキルからなる群から選ばれ（ただし、当該アルキルはハロ、-NO2、-OH、-OR5、-SH、-SR5、-SOR5、-SO2R5、-COR5、-COOH、-COOR5、-CONHR5及び-CONR5R6で置換されていてもよい）、且つ
R5 及びR6は、独立してC1-C6 アルキル、C2-C6 アルケニル、C2-C6アルキニル、C3-C8 シクロアルキル及びC3-C8 シクロアルケニルからなる群から選ばれる。］
の化合物又はその医薬上許容される塩を提供する。
【００１６】
本明細書で総称的に用いられる専門用語について言及する。用語「アルキル」は、例えば、1個から約6個の炭素原子、好ましくは1個から約4個の炭素原子、より好ましくは1個から2個の炭素原子を含む直鎖又は分枝鎖のアルキル置換基を意味する。このような置換基の例としては、メチル、エチル、プロピル、イソプロピル、n-ブチル、sec-ブチル、イソブチル、tert-ブチル、ペンチル、イソアミル、ヘキシル等が挙げられる。
【００１７】
本明細書で用いられる用語「アルケニル」は、少なくとも一つの炭素-炭素二重結合を含み、且つ例えば、2個から6個の炭素原子(分枝鎖アルケニルは3個から6個の炭素原子)、好ましくは2個から5個の炭素原子(分枝鎖アルケニルは好ましくは3個から5個の炭素原子)、より好ましくは3個から4個の炭素原子を含む直鎖アルケニル置換基を意味する。このような置換基の例としては、ビニル、プロペニル、イソプロペニル、n-ブテニル、sec-ブテニル、イソブテニル、tert-ブテニル、ペンテニル、イソペンテニル、ヘキセニル等が挙げられる。
【００１８】
本明細書で用いられる用語「アルキニル」は、少なくとも一つの炭素-炭素三重結合を含み、且つ例えば2個から6個の炭素原子(分枝鎖アルキニルは3個から6個の炭素原子)、好ましくは2個から5個の炭素原子(分枝鎖アルキニルは好ましくは3個から5個の炭素原子)、より好ましくは3個から4個の炭素原子を含む直鎖アルキニル置換基を意味する。このような置換基の例としては、エチニル、プロピニル、イソプロピニル、n-ブチニル、sec-ブチニル、イソブチニル、tert-ブチニル、ペンチニル、イソペンチニル、ヘキシニル等が挙げられる。
【００１９】
本明細書で用いられる用語「シクロアルキル」は、例えば、約3個から約8個の炭素原子、好ましくは約3個から約7個の炭素原子、より好ましくは約3個から約6個の炭素原子を含む環状アルキル置換基を意味する。このような置換基の例としては、シクロプロピル、シクロブチル、シクロペンチル、シクロヘキシル、シクロヘプチル、シクロオクチル等が挙げられる。本明細書で用いられている用語「シクロアルケニル」は、用語「シクロアルキル」と同様なものであって、１個以上の二重結合が存在することを意味する。このような置換基の例としてはシクロペンテニル及びシクロヘキセニルが挙げられる。環状アルキル基は無置換であってもよいし、メチル基、エチル基等のアルキル基でさらに置換されていてもよい。
【００２０】
本明細書で用いられる用語「ヘテロシクリル」は、O、N、S及びそれらの組み合わせからなる群から選ばれる１個以上のヘテロ原子を含む単環式又は二環式の5又は6員環系を示す。ヘテロシクリル基は任意の好適なヘテロシクリル基であり、脂肪族ヘテロシクリル基、芳香族ヘテロシクリル基、又はそれらの組み合わせであり得る。ヘテロシクリル基は単環式ヘテロシクリル基又は二環式ヘテロシクリル基であり得る。好適な二環式ヘテロシクリル基としては、C6-C10 アリール環と縮合した単環式ヘテロシクリル環が挙げられる。ヘテロシクリル基が二環式ヘテロシクリル基である場合、両方の環系が脂肪族若しくは芳香族であるか、又は一方の環系が芳香族で他方の環系が脂肪族であり得る（例、ジヒドロベンゾフラン）。好ましくは、ヘテロシクリル基が芳香族ヘテロシクリル基である（芳香族ヘテロシクリル基はヘテロアリール基とも呼ばれる）。6員のヘテロアリール基がヒュッケル則に従う4n+2π電子を含むということ、並びに5、7及び8員のヘテロアリール基がp軌道の組み合わせから供される6電子及びヘテロ原子又は結合性軌道を占有するヘテロ原子により供される非共有電子対を有し、芳香族六電子群を構成するということが理解される。好適なヘテロシクリル基の例としては、フラニル、チオフェネイル(thiopheneyl)、ピロリル、ピラゾリル、イミダゾリル、1,2,3-トリアゾリル、1,2,4-トリアゾリル、イソオキサゾリル、オキサゾリル、イソチアゾリル、チアゾリル、ピリジニル、ピリミジニル、ピラジニル、トリアジニル、ベンゾフラニル、ベンゾチオフェネイル(benzothiopheneyl)、インドリル、キノリニル、イソキノリニル、ベンゾイミダゾリル、ベンゾオキサゾリニル、ベンゾチアゾリニル及びキナゾリニルが挙げられるが、これらに限定されない。ヘテロシクリル基はヘテロシクリル基の任意のオープンポジションで結合することができる。例えば、フラニル基はフラン-2-イル基又はフラン-3-イル基であり得、チオフェネイル(thiopheneyl)基はチオフェン-2-イル基又はチオフェン-3-イル基であり得る。ヘテロシクリル基は本明細書で挙げられたような1、2、3、4又は5個の置換基で置換されていてもよく、任意の置換基がヘテロシクリル基上の任意のオープンポジションに存在し得る。
【００２１】
構造中の原子数の範囲が示される（例、C1-C12、C1-C8、C1-C6、C1-C4又はC2-C12、C2-C8、C2-C6、C2-C4アルキル、アルケニル、アルキニル等）ときはいつでも、その示された範囲内のどんな部分的範囲又は個々の数の炭素原子もまた使用され得ることを具体的に意図している。従って、本明細書で言及された任意の化学基（例、アルキル、アルキルアミノ等）に関して用いられた、例えば1-8の炭素原子（例、C1-C8）、1-6の炭素原子（例、C1-C6）、1-4の炭素原子（例、C1-C4）、1-3の炭素原子（例、C1-C3）または2-8の炭素原子（例、C2-C8）の範囲の記載は、それぞれに見合った1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、および／または12の炭素原子、および、任意のその部分的範囲（例えば、それぞれに見合った1-2の炭素原子、1-3の炭素原子、1-4の炭素原子、1-5の炭素原子、1-6の炭素原子、1-7の炭素原子、1-8の炭素原子、1-9の炭素原子、1-10の炭素原子、1-11の炭素原子、1-12の炭素原子、2-3の炭素原子、2-4の炭素原子、2-5の炭素原子、2-6の炭素原子、2-7の炭素原子、2-8の炭素原子、2-9の炭素原子、2-10の炭素原子、2-11の炭素原子、2-12の炭素原子、3-4の炭素原子、3-5の炭素原子、3-6の炭素原子、3-7の炭素原子、3-8の炭素原子、3-9の炭素原子、3-10の炭素原子、3-11の炭素原子、3-12の炭素原子、4-5の炭素原子、4-6の炭素原子、4-7の炭素原子、4-8の炭素原子、4-9の炭素原子、4-10の炭素原子、4-11の炭素原子および／または4-12の炭素原子等）も包含し且つ明確に表している。同様に、本明細書において言及されたあらゆる化学基（例、アリール）に関して用いられた6-10の炭素原子（例、C6-C10）の範囲の記載は、それぞれに見合った6、7、8、9および／または10の炭素原子、および、あらゆるその部分的範囲（例えば、それぞれに見合った6-10の炭素原子、6-9の炭素原子、6-8の炭素原子、6-7の炭素原子、7-10の炭素原子、7-9の炭素原子、7-8の炭素原子、8-10の炭素原子及び/又は8-9の炭素原子等）を包含し且つ具体的に記述する。
【００２２】
本明細書で用いられる用語「ハロ」又は「ハロゲン」は例えばフッ素、臭素、塩素及びヨウ素のようなVIIA族から選ばれる置換基を意味する。
【００２３】
用語「アリール」は、当該技術分野で通常理解されるような、無置換又は置換された芳香族炭素環の置換基を示し、用語「C6-C10アリール」としてはフェニル及びナフチルが挙げられる。用語アリールには、平面的でヒュッケル則に基づく4n+2π電子を含む環状置換基が適用されることが理解される。
【００２４】
一実施形態によれば、化合物は式(I)の化合物である。
【００２５】
上記実施形態によれば、R1 は水素である。
【００２６】
式 (I)の上記実施形態の何れかでは、R2 はニトロ、フルオロ、クロロ及びブロモからなる群から選ばれる。
【００２７】
式 (I)の上記実施形態の何れかでは、R3 は、ハロ、C1-C6 アルキル、C2-C6アルケニル、C2-C6 アルキニル、C3-C8 シクロアルキル、C3-C8シクロアルケニル、C6-C10 アリール、ヘテロアリール、-NO2、-OH、-OR5、-SH、-SR5、-SOR5、-SO2R5、-COR5、-COOH、-COOR5、-CONHR5及び-CONR5R6からなる群から選ばれる１個以上の置換基でそれぞれ置換されていてもよい、イソアルキル、シクロアルキル、ヘテロアリール及びアリールからなる群から選ばれる。
【００２８】
式 (I)の上記実施形態の何れかでは、R3 はイソアルキル又はシクロアルキル基である。ある好ましい実施形態では、R3 はC3-C6 イソアルキル基である。好適なC3-C6 イソアルキル基の例としては、イソプロピル、イソブチル、イソペンチル及びイソヘキシルが挙げられる。接頭辞「イソ」は、イソアルキル基の炭素原子で分岐点を有するアルキル基（分子の残りに結合している）に言及する。ある好ましい実施形態では、R3 はC3-C6 シクロアルキル基である。好適なC3-C6 シクロアルキル基の例としては、シクロプロピル、シクロブチル、シクロペンチル及びシクロヘキシルが挙げられる。
【００２９】
ある好ましい実施形態では、本発明は、N-((5-クロロ-8-ヒドロキシキノリン-7-イル)(イソプロピル)メチル)プロピオンアミド及びN-((5-クロロ-8-ヒドロキシキノリン-7-イル)(イソプロピル)メチル)アセトアミドからなる群から選ばれる化合物を提供する。
【００３０】
ある好ましい実施形態では、本発明は、N-((5-クロロ-8-ヒドロキシキノリン-7-イル)(シクロプロピル)メチル)プロピオンアミド及びN-((5-クロロ-8-ヒドロキシキノリン-7-イル)(シクロプロピル)メチル)アセトアミドからなる群から選ばれる化合物を提供する。
【００３１】
式 (I)のある実施形態では、R3 は、ハロ、C1-C6アルキル、C2-C6 アルケニル、C2-C6 アルキニル、C3-C8シクロアルキル、C3-C8 シクロアルケニル、C6-C10 アリール、ヘテロアリール、-NO2、-OH、-OR5、-SH、-SR5、-SOR5、-SO2R5、-COR5、-COOH、-COOR5、-CONHR5及び-CONR5R6からなる群から選ばれる１個以上の置換基で置換されていてもよいヘテロアリールである。ある好ましい実施形態では、R3 はフラン-2-イル又はチオフェン-2-イル及びそれらのアルキル化誘導体又はハロゲン化誘導体である。アルキル化誘導体又はハロゲン化誘導体の例としては、5-メチルフラン-2-イル、5-メチルチオフェン-2-イル、5-ブロモフラン-2-イル及び5-ブロモチオフェン-2-イルが挙げられるが、これらに限定されない。あるより好ましい実施形態では、R3 はフラン-2-イル又はチオフェン-2-イルである。
【００３２】
ある好ましい実施形態では、本発明はN-((5-ニトロ-8-ヒドロキシキノリン-7-イル)(フラン-2-イル)メチル)プロピオンアミド、N-((5-クロロ-8-ヒドロキシキノリン-7-イル)(フラン-2-イル)メチル)プロピオンアミド、N-((5-クロロ-8-ヒドロキシキノリン-7-イル)(フラン-2-イル)メチル)アセトアミド、N-((5-ブロモ-8-ヒドロキシキノリン-7-イル)(フラン-2-イル)メチル)プロピオンアミド、N-((5-ブロモ-8-ヒドロキシキノリン-7-イル)(フラン-2-イル)メチル)アセトアミド及びN-((5-フルオロ-8-ヒドロキシキノリン-7-イル)(フラン-2-イル)メチル)アセトアミドからなる群から選ばれる化合物を提供する。
【００３３】
特定の実施形態では、本発明はN-((5-クロロ-8-ヒドロキシキノリン-7-イル)(5-ブロモフラン-2-イル)メチル)プロピオンアミドである化合物を提供する。
【００３４】
ある好ましい実施形態では、本発明はN-((5-ニトロ-8-ヒドロキシキノリン-7-イル)(チオフェン-2-イル)メチル)プロピオンアミド、N-((5-クロロ-8-ヒドロキシキノリン-7-イル)(チオフェン-2-イル)メチル)プロピオンアミド、N-((5-クロロ-8-ヒドロキシキノリン-7-イル)(チオフェン-2-イル)メチル)アセトアミド、N-((5-ブロモ-8-ヒドロキシキノリン-7-イル)(チオフェン-2-イル)メチル)プロピオンアミド、N-((5-ブロモ-8-ヒドロキシキノリン-7-イル)(チオフェン-2-イル)メチル)アセトアミド、N-((8-ヒドロキシキノリン-7-イル)(チオフェン-2-イル)メチル)プロピオンアミド及びN-((5-フルオロ-8-ヒドロキシキノリン-7-イル)(チオフェン-2-イル)メチル)アセトアミドからなる群から選ばれる化合物を提供する。
【００３５】
特定の実施形態では、本発明はN-((5-クロロ-8-ヒドロキシキノリン-7-イル)(5-メチルチオフェン-2-イル)メチル)プロピオンアミドである化合物を提供する。
【００３６】
式 (I)のある実施形態では、R3 は、ハロ、C1-C6アルキル、C2-C6 アルケニル、C2-C6 アルキニル、C3-C8シクロアルキル、C3-C8 シクロアルケニル、C6-C10 アリール、ヘテロアリール、-NO2、-OH、-OR5、-SH、-SR5、-SOR5、-SO2R5、-COR5、-COOH、-COOR5、-CONHR5及び-CONR5R6からなる群から選ばれる１個以上の置換基で置換されていてもよいアリールである。
【００３７】
式 (I)のある好ましい実施形態では、本発明はN-((5-クロロ-8-ヒドロキシキノリン-7-イル)(4-メチルフェニル)メチル)プロピオンアミド又はN-((5-クロロ-8-ヒドロキシキノリン-7-イル)(4-フルオロフェニル)メチル)プロピオンアミドからなる群から選ばれる化合物を提供する。
【００３８】
上記実施形態の何れかでは、R4 は水素又はアルキル（ここで、当該アルキルはハロ、-NO2、-OH、-OR5、-SH、-SR5、-SOR5、-SO2R5、-COR5、-COOH、-COOR5、-CONHR5及び-CONR5R6で置換されていてもよい）である。ある好ましい実施形態では、R4 はメチル又はエチルである。
【００３９】
一実施形態によれば、化合物は式 (II)の化合物である。
【００４０】
式 (II)の実施形態によれば、R1は水素である。
【００４１】
式 (II)のある実施形態では、 R2 はニトロ、フルオロ、クロロ及びブロモからなる群から選ばれる。
【００４２】
式 (II)のある実施形態では、R3 は、ハロ、C1-C6 アルキル、C2-C6アルケニル、C2-C6 アルキニル、C3-C8 シクロアルキル、C3-C8シクロアルケニル、C6-C10 アリール、ヘテロアリール、-NO2、-OH、-OR5、-SH、-SR5、-SOR5、-SO2R5、-COR5、-COOH、-COOR5、-CONHR5及び-CONR5R6からなる群から選ばれる１個以上の置換基でそれぞれ置換されていてもよい、イソアルキル、シクロアルキル、ヘテロアリール及びアリールからなる群から選ばれる。
【００４３】
式 (II)のある実施形態では、R3 はイソアルキル又はシクロアルキル基である。ある好ましい実施形態では、R3 はC3-C6 イソアルキル基である。好適なC3-C6 イソアルキル基の例としては、イソプロピル、イソブチル、イソペンチル及びイソヘキシルが挙げられる。接頭辞「イソ」は、イソアルキル基の炭素原子で分岐点を有するアルキル基（分子の残りに結合している）に言及することを意図している。ある好ましい実施形態では、R3 はC3-C6 シクロアルキル基である。好適なC3-C6 シクロアルキル基の例としては、シクロプロピル、シクロブチル、シクロペンチル及びシクロヘキシルが挙げられる。
【００４４】
式 (II)のある実施形態では、R3 は、ハロ、C1-C6アルキル、C2-C6 アルケニル、C2-C6 アルキニル、C3-C8シクロアルキル、C3-C8 シクロアルケニル、C6-C10 アリール、ヘテロアリール、-NO2、-OH、-OR5、-SH、-SR5、-SOR5、-SO2R5、-COR5、-COOH、-COOR5、-CONHR5及び-CONR5R6からなる群から選ばれる１個以上の置換基で置換されていてもよいヘテロアリールである。ある好ましい実施形態では、R3 はフラン-2-イル又はチオフェン-2-イル及びそれらのアルキル化誘導体又はハロゲン化誘導体である。アルキル化誘導体又はハロゲン化誘導体の例としては、5-メチルフラン-2-イル、5-メチルチオフェン-2-イル、5-ブロモフラン-2-イル及び5-ブロモチオフェン-2-イルであるが、これらに限定されない。より好ましい実施形態では、R3 はフラン-2-イル又はチオフェン-2-イルである。
【００４５】
特定の実施形態では、本発明は、N-((5-ニトロ-8-ヒドロキシ-1,2,3,4-テトラヒドロキノリン-7-イル)(フラン-2-イル)メチル)プロピオンアミドである化合物を提供する。
【００４６】
式 (II)のある実施形態では、R3 は、ハロ、C1-C6アルキル、C2-C6 アルケニル、C2-C6 アルキニル、C3-C8シクロアルキル、C3-C8 シクロアルケニル、C6-C10 アリール、ヘテロアリール、-NO2、-OH、-OR5、-SH、-SR5、-SOR5、-SO2R5、-COR5、-COOH、-COOR5、-CONHR5及び-CONR5R6からなる群から選ばれる１個以上の置換基で置換されていてもよいアリールである。
【００４７】
上記実施形態の何れかでは、R4 は水素又はアルキル（ここで、当該アルキルはハロ、-NO2、-OH、-OR5、-SH、-SR5、-SOR5、-SO2R5、-COR5、-COOH、-COOR5、-CONHR5及び-CONR5R6で置換されていてもよい）である。ある好ましい実施形態では、R4 はメチル又はエチルである。
【００４８】
上記実施形態の何れかでは、式 (I)又は(II)の化合物又は塩は、ラセミ体として、純粋な光学異性体の形態として、又は１つの異性体が他の異性体に比べて豊富な混合物の形態として存在している。特に、本発明によれば、本発明の化合物が単一の不斉炭素原子を有する場合、本発明の化合物はラセミ体（即ち、光学異性体の等量混合物、即ち、２種のエナンチオマーの等量混合物）として存在していてもよい。好ましくは、式 (I)又は(II)の化合物又は塩は単一エナンチオマーの形態で存在し、より好ましくは単一の左旋性エナンチオマーの形態で存在する。ここで「単一エナンチオマー」は50％を超える単一エナンチオマーを含んでいる化合物を意味することを意図する。したがって、「単一の左旋性エナンチオマー」は50%未満の右旋性ナンチオマーと共に50%を超える左旋性ナンチオマーが存在することを意味し（これも単一の左旋性エナンチオマーと呼ぶことができる）、逆の場合も同様である（これも単一の右旋性エナンチオマーと呼ぶことができる）。ここで左旋性エナンチオマーは589nmの光波長でマイナスの比旋光度を有するエナンチオマーとして定義される。逆に、右旋性エナンチオマーは、589nmの光波長でプラスの比旋光度を有するとして定義される。
【００４９】
好ましくは、単一エナンチオマーは、少なくとも75%の単一エナンチオマー（50%鏡像体過剰率)（「e.e.」）を含み、より好ましくは、少なくとも90%の単一エナンチオマー（80%e.e.）を含み、さらに好ましくは、少なくとも95%の単一エナンチオマー（90%e.e.）を含み、なお好ましくは、少なくとも97.5%の単一エナンチオマー（95%e.e.）を含み、最も好ましくは、少なくとも99%の単一エナンチオマー（98%e.e.）を含む。
【００５０】
化合物又は塩が１を超えるの不斉中心を有し、したがってジアステレオマー混合物として存在し得る場合、好ましくは、化合物又は塩は単一ジアステレオマーの形態で存在する。ここで「単一ジアステレオマー」は、50%を超える単一ジアステレオマーを含む化合物を意味することを意図する。
【００５１】
語句「医薬上許容される塩」は、従来の化学法によって塩基部位又は酸部位を含む親化合物から合成される非毒性の塩を含むことを意図する。一般に、このような塩は、遊離酸又は遊離塩基形態のこれらの化合物を、水中若しくは有機溶媒中又は２つの混合溶媒中で化学量論量の好適な塩基又は酸と反応させることにより生成させることができる。一般的に、エーテル、酢酸エチル、エタノール、イソプロパノール又はアセトニトリルのような非水性媒体が好ましい。好適な塩のリストはRemington’s Pharmaceutical Sciences，18th ed.，Mack Publishing Company、Easton、PA、1990，p. 1445及びJournal of Pharmaceutical Science，66，2-19 (1977)に示されている。
【００５２】
好適な塩基としては、アルカリ金属塩基及びアルカリ土類金属塩基のような無機塩基（例、ナトリウム、カリウム、マグネシウム、カルシウム等のような金属カチオンを含むもの）が挙げられる。好適な塩基の例としては、水酸化ナトリウム、水酸化カリウム、炭酸ナトリウム及び炭酸カリウムが挙げられるが、これらに限定されない。好適な酸としては、塩酸、臭化水素酸、ヨウ化水素酸、硫酸、リン酸等のような無機酸及びp-トルエンスルホン酸、メタンスルホン酸、ベンゼンスルホン酸、シュウ酸、p-ブロモフェニルスルホン酸、炭酸、コハク酸、クエン酸、安息香酸、酢酸、マレイン酸、酒石酸、脂肪酸、長鎖脂肪酸等のような有機酸が挙げられる。酸部位を有する本発明の化合物の好ましい医薬上許容される塩としては、ナトリウム塩及びカリウム塩が挙げられる。塩基部位（例、キノリン基又はジメチルアミノアルキル基）を有する本発明の化合物の好ましい医薬上許容される塩としては、塩酸塩及び臭化水素酸塩が挙げられる。酸部位又は塩基部位を含む本発明の化合物は、遊離塩基若しくは遊離酸の形態又はその医薬上許容される塩の形態で有用である。
【００５３】
本発明のあらゆる塩の一部を形成する特定の対イオンは、塩全体が医薬上許容でき且つ対イオンが塩全体の望ましくない性質に寄与しない限り、通常は重大な性質を示さないと理解するべきである。
【００５４】
さらに、上記の化合物及び塩は溶媒和物を形成してもよいし、或いは無水形態のような実質的に錯体を形成していない形態で存在してもよいと理解される。ここで用語「溶媒和物」は、結晶化溶媒のような溶媒分子が結晶格子に取り込まれた分子複合体に言及する。溶媒和物に取り込まれた溶媒が水である場合、分子複合体は水和物と呼ばれる。医薬上許容される溶媒和物としては、水和物、メタノール和物及びエタノール和物のようなアルコール和物、アセトニトリル和物等が挙げられる。これらの化合物は多形で存在し得る。
【００５５】
さらに、本発明は医薬上許容される担体及び本明細書に記載される少なくとも一つの化合物又はその塩を含む医薬組成物を対象とする。
【００５６】
医薬上許容される担体は、活性化合物に対して化学的に不活性なものであり且つ使用条件下で有害な副作用又は毒性を有さないものであることが好ましい。
【００５７】
担体の選択は、選択された本発明の特定の化合物により、また組成物を投与するために用いられる特定の方法によりある程度決定されるだろう。したがって、本発明の医薬組成物の好適な製剤は多種多様である。経口投与、エアロゾル投与、経鼻投与、経肺投与、非経口投与、皮下投与、静脈内投与、動脈内投与、筋内投与、腹腔内投与、くも膜下投与、腫瘍内投与、局所投与、直腸投与及び膣内投与のための以下の製剤は、単なる例示であり、限定されるものではない。
【００５８】
医薬組成物は、非経口投与（例えば、静脈内投与、動脈内投与、皮下投与、経皮投与又は筋内投与）され得る。したがって、本発明は、非経口投与に好適な許容できる担体（水性及び非水性の等張無菌注射溶液を含む）に溶解又は懸濁させた本発明の化合物又は塩の溶液又は懸濁液を含む非経口投与用の組成物を提供する。
【００５９】
概して、非経口組成物用の効果的な薬剤担体の必要条件は当業者に周知である。「Banker and Chalmers，eds.，Pharmaceutics and Pharmacy Practice，J. B. Lippincott Company、Philadelphia，pp. 238-250 (1982)」及び「Toissel，ASHP Handbook on Injectable Drugs，4th ed.，pp. 622-630 (1986)」を参照。このような溶液には、酸化防止剤、緩衝剤、静菌剤及び製剤を対象被投与者の血液と等張にする溶質、並びに水性及び非水性の無菌の懸濁液（懸濁化剤、可溶化剤、増粘剤、安定剤及び防腐剤を含み得る）が含まれ得る。本発明の化合物又は塩は、水、食塩水、水性デキストロース及びそれに類する糖溶液類、アルコール（エタノール、イソプロパノール又はヘキサデシルアルコール等）、グリコール類（プロピレングリコール又はポリエチレングリコール等）、ジメチルスルホキシド、グリセロールケタール類（2,2-ジメチル-1,3-ジオキソラン-4-メタノール等）、エーテル類（ポリ(エチレングリコール) 400等）、オイル、脂肪酸、脂肪酸エステル若しくはグリセリド、又はアセチル化脂肪酸グリセリド［医薬上許容される界面活性剤（ソープ又は洗剤等）、懸濁化剤（ペクチン、カルボマー、メチルセルロース、ヒドロキシプロピルメチルセルロース、又はカルボキシメチルセルロース等）又は乳化剤及びその他の薬剤の補助剤が添加された若しくは添加されていない］を含む滅菌液又は液体混合物のような医薬的担体中の生理的に許容される希釈液で投与され得る。
【００６０】
非経口製剤に有用なオイルとしては、石油、動物油脂、食物油又は合成油が挙げられる。上記の製剤に有用なオイルの具体例としては、ピーナッツ油、大豆油、ゴマ油、綿実油、コーン油、オリーブ油、鉱油及びミネラル油が挙げられる。非経口製剤に用いられる好適な脂肪酸としては、オレイン酸、ステアリン酸及びイソステアリン酸が挙げられる。オレイン酸エチル及びミリスチン酸イソプロピルは、好適な脂肪酸エステルの例である。
【００６１】
非経口製剤で用いられる好適なソープとしては、脂肪族アルカリ金属塩、脂肪族アンモニウム塩、及び脂肪族トリエタノールアミン塩が挙げられる。そして、好適な洗剤としては、(a) 例えば、ジメチルジアルキルアンモニウムハライド、及びアルキルピリジニウムハライドのようなカチオン性洗剤、(b) 例えば、アルキル、アリール及びオレフィンのスルホン酸塩、アルキル、オレフィン、エーテル、及びモノグリセリドの硫酸塩及びスルホコハク酸塩のようなアニオン性洗剤、(c) 例えば、脂肪族アミンオキシド類、脂肪酸アルカノールアミド類及びポリオキシエチレンポリプロピレン共重合体類のような非イオン性洗剤、(d) 例えば、アルキル−ベータ−アミノプロピオン酸と２−アルキル−イミダゾリンの第四級アンモニム塩類のような両性洗剤、並びに(e) それらの混合物が挙げられる。
【００６２】
非経口製剤は防腐剤及び緩衝剤を含有し得る。注射部位で刺激を最小限に又は除くために、上記組成物は、約12から約17の親水性-親油性バランス(HLB)を有する１種以上の非イオン性界面活性剤を含有し得る。このような製剤における界面活性剤の量は、通常約5から約15重量%の範囲であるだろう。好適な界面活性剤としては、ポリエチレンソルビタン脂肪酸エステル類（例、モノオレイン酸ソルビタンとエチレンオキシドの疎水性基剤（プロピレンオキシドと、プロピレングリコールとの縮合により形成される）との高分子量付加体とから得られる）が挙げられる。非経口製剤は、アンプル及びバイアルのような単回投与量又は多回投与量を封入した容器に存在し得る。そして、使用直前に注射のための無菌液体賦形剤（例えば、水）の添加のみを必要とする、フリーズドライ(凍結乾燥)状態で保存することができる。即席の注射液及び注射懸濁液は、上述したような滅菌した粉末、顆粒及びタブレットから調製することができる。
【００６３】
局所製剤（経皮薬物放出に有用なものを含む）は当業者に周知であり、且つ本発明では皮膚への塗布に好適である。局所適用の組成物は、通常、液体、クリーム、ペースト、ローション及びゲルの形態である。局所投与としては、口腔粘膜(口腔、口腔上皮、口蓋、歯肉及び鼻粘膜を含む)への塗布が挙げられる。ある実施形態では、組成物は、少なくとも一つの活性成分及び適切な媒体又は担体を含む。また、抗刺激成分のような他の成分を含んでいてもよい。担体は液体、固体又は半固体であり得る。実施形態では、組成物は水溶液である。あるいは、組成物は、様々な成分のための、分散、乳液、ゲル、ローション又はクリーム媒体であり得る。一実施形態では、主な媒体は、水又は実質的に中性又は実質的に中性とする生体適合性の溶媒である。液体の媒体は、所望のpH、濃度及び粘度を得るために当該技術分野で知られているような種々の乳化剤又は分散剤と共に、バッファー、アルコール、グリセリン及び鉱油のような他の物質が含んでもよい。組成物は、粉末又は顆粒のような固体として製造することができるかもしれない。固体は直接塗布するか、又は使用前に水又は生物適合性の溶媒に溶解し、実質的に中性又は実質的に中性にし、標的部位に塗布できる溶液を形成する。本発明の実施形態では、皮膚への局所塗布のための媒体には、水、バッファー溶液、様々なアルコール類、グリセリンのようなグリコール類、脂肪酸のような脂質物質類、鉱油類、ホスホグリセリド類、コラーゲン、ゼラチン及びシリコーンベースの物質が含まれ得る。
【００６４】
経口投与に好適な製剤は、(a) 水、食塩水、又はオレンジジュースのような希釈液に溶解した治療有効量の本発明の化合物のような溶液、(b) 固体又は顆粒として所定の量の活性成分をそれぞれ含む、カプセル剤、サシェ剤、タブレット剤、ロゼンジ(lozenge)剤及びトローチ剤、(c) 粉末、(d) 好適な液体の懸濁液、及び(e) 好適なエマルションからなり得る。液体製剤は、医薬上許容される界面活性剤、懸濁化剤、又は乳化剤を添加した又は添加していない、水及びアルコール（例えばエタノール、ベンジルアルコール、及びポリエチレンアルコール等）のような希釈液を含み得る。カプセルの形態は、通常、例えば、界面活性剤、潤滑剤および不活性な充填剤（ラクトース、スクロース、リン酸カルシウム及びコーンスターチ等）を含む硬質殻又は軟質殻のゼラチンの形態であり得る。タブレットの形態には、１種以上のラクトース、スクロース、マンニトール、コーンスターチ、ポテトスターチ、アルギン酸、微結晶セルロース、アカシア、ゼラチン、グァーガム、コロイド状二酸化ケイ素、クロスカルメロースナトリウム、タルク、ステアリン酸マグネシウム、ステアリン酸カルシウム、ステアリン酸亜鉛、ステアリン酸、及びその他の賦形剤、着色剤、希釈液、緩衝薬剤、崩壊剤、湿潤剤、防腐剤、着香剤、及び薬学的に混合可能な賦形剤を含み得る。芳香錠が、不活性基剤（例、ゼラチン及びグリセリン又はスクロース及びアカシア等）中に活性成分を含み、マルション、ゲル等が、活性成分に加えて当該技術分野で公知の上記賦形剤を含むのと同様に、ロゼンジの形態は、香料、通常、スクロース及びアカシア又はトラガカント中に活性成分を含み得る。
【００６５】
本発明の化合物又は塩は、単独で又は他の好適な成分と組み合わせて、吸入によって投与されるエアロゾル製剤にすることができる。化合物は好ましくは、界面活性剤及び噴射剤と共に微細に分散された形態で供給される。活性化合物の典型的な割合は0.01重量％〜20重量％、好ましくは1重量％〜10重量％である。界面活性剤は当然ながら非毒性でなくてはならず、好ましくは噴射剤に可溶性である。このような界面活性剤の代表例は、6〜22個の炭素原子からなる脂肪酸（カプロン酸、オクタン酸、ラウリン酸、パルミチン酸、ステアリン酸、リノール酸、リノレン酸、オレステリン酸（olesteric acid）及びオレイン酸等）と脂肪族多価アルコール又はその環状無水物とのエステル又は部分エステルである。混合グリセリド又は天然グリセリドのような混合エステルを利用してもよい。界面活性剤は、組成物中に0.1重量％〜20重量％、好ましくは0.25重量％〜5重量％構成してもよい。組成物の残りは通常噴射剤である。また、所望により、例えばレシチンのような鼻腔内投与のための担体が含まれていてもよい。これらのエアロゾル製剤をジクロロジフルオロメタン、プロパン、窒素等の許容される加圧した噴射剤中に入れることができる。また、これらは、例えばネブライザー又はアトマイザー中の非加圧調製物用の医薬品として製剤化してもよい。このようなスプレー製剤は粘膜にスプレーするために使用され得る。
【００６６】
さらに、本発明の化合物又は塩を、様々な基剤（例えば、乳化基剤又は水溶性基剤）と混合することによって坐剤にすることができる。腟内投与に好適な製剤は、活性成分に加えて、適切であると当該分野で知られている担体を含有する、腟坐薬、タンポン、クリーム、ゲル、ペースト、フォーム又はスプレー処方として存在し得る。
【００６７】
当業者により、上記の医薬組成物に加えて、本発明の化合物又は塩を包接複合体（シクロデキストリン包接複合体等）又はリポソームとして製剤化してもよいことが理解されるだろう。リポソームは、化合物をリンパ組織又は癌性肝細胞のような特定の組織に向けるのに役立つ。リポソームはまた、本発明の化合物の半減期を延ばすのに使用することができる。本発明で有用なリポソームとしては、乳剤、フォーム、ミセル、不溶性単層、液晶、リン脂質分散剤、ラメラ層等が挙げられる。これらの調整物において、送達されるべき活性剤は単独で又は好適な化学療法剤と共にリポソームの一部として取り込まれる。したがって、所望の本発明の化合物又はその塩で充填されたリポソームは、例えば、特定の組織タイプ（肝細胞等）の部位に導かれ、そこでリポソームが選択された組成物を送達する。本発明で用いられるリポソームは、中性及び陰性に荷電したリン脂質及びステロール（コレステロールなど）を通常含む標準的な小胞形成性脂質から形成される。脂質は、通常、例えばリポソームの大きさ及び血流中での安定性を考慮することによって選択される。リポソームの調製には種々の方法が利用でき、例えば、「Szoka et al.，Ann．Rev．Biophys．Bioeng.，9,467（1980）」並びに米国特許第4,235,871 号、同第4,501,728 号、同第4,837,028 号及び同第5,019,369 号に記載された方法が利用できる。特定の組織タイプの細胞を標的とするために、リポソームに組み入れるべきリガンドとしては、例えば、標的とする組織タイプの細胞表面決定基に特異的な抗体又はそのフラグメントが挙げられる。本発明の化合物又は塩を含有するリポソーム懸濁液は、投与方式、送達される薬剤、治療する疾患の段階に応じた投与量で静脈内、局部的、局所的等で投与してもよい。
【００６８】
さらに、本発明は12-リポキシゲナーゼ介在の疾患又は障害を治療又は予防する方法を提供する。方法には、それを患っている哺乳動物に有効量の本発明の化合物を投与することが含まれる。好ましくは哺乳動物はヒトである。
【００６９】
用語「哺乳動物」としては、ネズミのようなネズミ目及びウサギのようなウサギ目(order Logomorpha)が挙げられるが、限定されない。好ましくは、哺乳動物はネコ科(ネコ)およびイヌ科(イヌ)を含むネコ目からのものである。より好ましくは、哺乳動物は、ウシ科（ウシ）及びイノシシ科（ブタ）を含むウシ目からのもの、又はウマ科（ウマ）を含むウマ目（order Perssodactyla）のものである。最も好ましくは、哺乳動物は、サル目（サル）、セボイド目（order Ceboids）、もしくはシモイド目（order Simoids）のものまたは真猿亜目（order Anthropoids）（ヒトおよび類人猿）のものである。特に好ましくは、哺乳動物はヒトである。さらに対象は、前述のホスト(forgoing host)（特に哺乳動物（例、ヒト））の何れかの出生前の子孫であり得る。その場合、対象若しくは対象の細胞のどんなスクリーニングも、又は化合物の対象若しくは対象の細胞へのどんな投与も子宮内で行われ得る。
【００７０】
12-リポキシゲナーゼ介在の疾患又は障害は、通常、12-ヒドロペルオキシエイコサテトラエン酸(12(S)-HPETE)及び／又は12-ヒドロキシエイコサテトラエン酸(12(S)-HETE)の生成が、疾患又は障害の発症又は進行に関係している疾患又は障害である。(12(S)-HETE)及び／又は(12(S)-HPETE)は、膵島で見られるベータ細胞でのインシュリン分泌の減少及び細胞死の増加に関係しており、それ故I型及びII型の糖尿病の両方の発症に関係している。例えば「Ma et al., J. Clin. Endocrinol. Metab., February 2010, 95(2):  887-893」を参照。従って、12-LOの阻害がヒト膵島のベータ細胞を保護すると期待される。12-リポキシゲナーゼの発現及び活性の増加は、アテローム性動脈硬化症、心臓血管疾患並びに糖尿病性血管症及び糖尿病性腎症のようなの発症機序に関係している。さらに、12-リポキシゲナーゼは高脂肪摂取のマウスの内臓脂肪細胞で上方制御される。それにより過量の内臓脂肪を有する肥満個体で糖尿病が発症するための可能性があるメカニズムが示唆されている。
【００７１】
さらに、12-リポキシゲナーゼの発現増強は、細胞接着を促進し、それにより血管損傷に反応して大きな凝血塊を形成する血小板の能力を増大させ得ると考えられている。血管損傷は冠動脈疾患の発病の主要なステップである。血小板は血管損傷部位で活性化され、α顆粒及び濃染顆粒の内容物を分泌する。血小板のα顆粒は、P-セレクチン、CD40L及びRANTESのような接着性且つ炎症性の分子のための一次貯蔵細胞器官であるが、血小板の濃染顆粒もセロトニン、ヒスタミン及びアデニンヌクレオチドのような細胞活性化分子(炎症性分子であると考えてもよい)を含む。血小板顆粒から放出される接着性且つ炎症性の分子の局所送達は、傷後のアテローム性動脈硬化症及び内膜新生の原因となり得る。12-リポキシゲナーゼの阻害は、血小板による濃染顆粒及びα顆粒の分泌を妨げる。12-リポキシゲナーゼの活性化が血小板による濃染顆粒分泌に必要であると考えられる。したがって、12-リポキシゲナーゼの選択的阻害は、出血のような副作用を抑えた脈管疾患の治療又は予防に有用であり得る。
【００７２】
一実施形態によれば、本発明は、治療有効量の式(I)又は(II)で表される化合物又はその塩を、治療又は予防を必要とする患者に投与することを含む、糖尿病の治療又は予防の方法を提供する。
【００７３】
他の実施形態によれば、本発明は、治療有効量の式(I)又は(II)で表される化合物又はその塩を、治療又は予防を必要とする患者に投与することを含む、血栓症の治療又は予防の方法を提供する。
【００７４】
他の実施形態によれば、本発明は、治療有効量の式(I)又は(II)で表される化合物又はその塩を、治療又は予防を必要とする患者に投与することを含む、心血管疾患の治療又は予防の方法を提供する。
【００７５】
他の実施形態によれば、本発明は、治療有効量の式(I)又は(II)で表される化合物又はその塩を、ベータ細胞の保護を必要とする患者に投与することを含む、糖尿病に苦しむ患者のベータ細胞を保護するための方法を提供する。
【００７６】
本発明の文脈における「治療」は、疾患又は障害による症状の緩和、又はその症状のさらなる進行又は悪化の停止を意味する。例えば、糖尿病患者の治療の文脈では、良好な治療には血糖制御に必要なインシュリン量を減少させること、又は疾患（例えば、潜在性クッシング症候群、テストステロン欠乏、高血圧、高コレステロール値、冠動脈疾患、妊娠糖尿病、多嚢胞性卵巣症候群、慢性膵炎、脂肪肝、血色素沈着症、嚢胞性線維症、いくつかのミトコンドリア性の神経障害および筋疾患、筋強直性ジストロフィー、及びフリートライヒ運動失調が挙げられるが、これらに限定されない）の進行を停止させることが含まれ得る。心血管疾患患者の治療の文脈では、良好な治療には、低比重リポタンパク質(「LDL」)及びリポタンパク質Aのような臨床マーカーを減少させること、及び／又は高血圧症、血栓症傾向等のような臨床症状の変化させることが含まれ得る。さらに、治療は、冠動脈バイパスグラフト手術及び心臓経皮的冠動脈形成術のような外科的処置と同時に又は続けて行うことができる。ベータ細胞の保護の文脈では、良好な治療には、糖尿病を制御するために必要なインシュリンの投薬量の変化、又は臨床症状の変化が含まれ得る。また、治療には他の治療と共に本発明の医薬製剤を投与することが含まれ得る。例えば、本発明の化合物および医薬製剤は長期間投与されてもよい。また、本発明の化合物は、他の抗糖尿病薬又は心臓脈管薬と共に投与することができる。適切な組み合わせは医薬分野の技術を有する者により決定される得る。
【００７７】
心血管疾患患者の治療に関して、治療は、治療の結果として出血をもたらさないことが望ましい。凝固を含む血小板障害の治療で現在使用される医薬（例、クロピドグレル及びアスピリン）は、主な副作用として消化管出血および脳内出血を伴う。さらに、血小板インテグリンαIIbβ3が、急性冠不全症候群および脳卒中で生じるような内皮障害の部位での閉塞性血栓の形成に密接に関係することが知られている。12-LOの阻害はαIIbβ3活性化を部分的に妨害する結果となり得る。したがって上記事象での血栓の形成を緩和し得る。
【００７８】
本発明の文脈における「予防」は、状態（特に、12-リポキシゲナーゼの阻害に反応する疾患又は障害）が進行しがちである又は進行する傾向のある個体の予防的治療を示す。例えば、医薬分野の技術を有する者が、臨床症状及び患者の病歴に基づき、前述の疾患又は障害の発症の、特定個人の統計的素因を決定でき得る。例えば、糖尿病及び／若しくは心血管疾患並びに／又は様々な生活要因の家族歴が、糖尿病及び心血管疾患の発症の特定個人の素因を評価し、そしてそれにより、本発明の化合物若しくは塩又はそれからなる医薬を用いる予防的治療の望ましさについて特定個人に知らせるために用いることができる。従って、12-リポキシゲナーゼの阻害に反応する疾患又は障害の発症しやすい個体を、疾患又は障害の発症を予防するため、阻害するため又は遅らせるために、本発明の化合物又は組成物で治療してもよい。
【００７９】
一当業者は、本発明の方法において有用である病態（特に、糖尿病、心血管疾患及び血栓症）の治療又は予防のため及びベータ細胞の保護のための化合物の適切な利用方法、及びそのヒトへの適切な投与方法が利用できることを理解するだろう。２以上のルートを使用して特定の化合物を投与することができるが、特定のルートは他のルートよりも即時的且つ効果的な反応もたらし得る。したがって、記載の方法は単なる例示であって、限定するものではない。
【００８０】
本発明による哺乳動物（特にヒト）へ投与される投与量は、所望の反応をもたらすのに十分なものであるだろう。このような反応には、治療が望まれる疾患の弊害を好転若しくは予防、又は所望の利益を導くことが含まれる。用量は様々な要素（ヒトの年齢、状態及び体重、さらに、病因、疾患の特有のタイプ、ヒトにおける疾患の程度）によって決まることを当業者は認識するだろう。投与量の大きさは、投与の経路、タイミング及び頻度、さらに、特定の化合物の投与に伴って生じる何らかの副作用の存在、性質及び程度や、所望の生理学的効果によっても決定され得る。様々な状態又は病態が、複数回の投与を伴う長期間の治療を必要とし得ることは当業者に理解されるだろう。
【００８１】
適切な投与量及び用法量の計画は、当業者に公知の従来の範囲検出技術（range-finding techniques）によって決定することができる。一般に、治療は化合物の最適な投与量未満の少ない用量で開始される。その後、その状況の下での最適な効果に達するまで、少量の増分で用量は増加される。本発明の方法は典型的には、哺乳動物の体重1ｋｇ当たり、約0.1から約300 mgの１種以上の上述の化合物を投与することを伴い得る。
【００８２】
例として（本発明を限定する意図はない）、糖尿病、心血管疾患及び血栓症の予防の方法のための、本明細書に記載の薬学的活性剤の投与量は、一日あたり、約0.001から約1 mg/kg(治療される対象の体重)であり得る。例えば、一日あたり、約0.001 mg、0.002 mg、0.005 mg、0.010 mg、0.015 mg、0.020 mg、0.025mg、0.050 mg、0.075 mg、0.1 mg、0.15 mg、0.2 mg、0.25 mg、0.5 mg、0.75 mg又は1 mg/kg（体重）である。糖尿病、心血管疾患及び血栓症の治療方法のための、本明細書に記載の薬学的活性剤の投与量は、一日あたり、約1から約1000 mg/kg(治療される対象の体重)であり得る。例えば、一日あたり、約1 mg、2 mg、5 mg、10 mg、15 mg、0.020 mg、25 mg、50 mg、75 mg、100 mg、150 mg、200 mg、250 mg、500 mg、750 mg又は1000 mg/kg（体重）である。
【００８３】
さらに、本発明は、糖尿病、心血管疾患及び血栓症からなる群から選ばれる疾患の治療又は予防のための、並びにベータ細胞の保護のための医薬の製造における、本発明の化合物又は塩の使用を提供する。医薬は、通常、本明細書に記載のような医薬組成物である。
【００８４】
本発明の化合物は任意の適切な方法（例、図１（R1、R2、R3及びR4は本明細書で定義されるもの）に示す手順）で合成することができる。120度から150度の温度で無溶媒中での置換された8-ヒドロキシキノリンＡのアルデヒドＢ及びアミドＣとのベッティ反応で化合物Ｄを得た。化合物Ｄは適切な溶媒及びその混合物（例、エタノール−ジメチルホルムアミド）から結晶化することにより精製することができる。
【００８５】
以下の実施例で本発明を更に説明するが、決して本発明の範囲を限定するものとして解釈するべきではない。
【００８６】
別段の記載がない限り、全ての反応を、乾燥ガラス器具内にて乾燥アルゴンまたは窒素の雰囲気下で行った。記載した反応温度は反応槽の温度を示し、室温（ｒｔ）は２５℃を示す。全ての溶媒は、アルドリッチケミカル社から購入した無水の品質のものであり、そのまま使用した。市販の出発原料および試薬はアルドリッチから購入し、そのまま使用した。
【００８７】
1Hおよび13C NMRスペクトルはバリアンイノヴァ400MHz分光計にて記録した。化学シフトは、内部標準（CDCl3 7.26ppm、77.00ppm、DMSO-d6 2.49ppm、39.51ppm（それぞれ1H、13Cに対する）)とする溶媒共鳴でppmにて報告した。データは以下のように報告される：化学シフト、多重度(s = シングレット、d = ダブレット、t = トリプレット、q = カルテット、br = ブロード、m = マルチプレット)、結合定数及びプロトン数。低分解能質量スペクトル(エレクトロスプレーイオン化)は、HPLCシステムに連結したアジレント テクノロジー 6130 四重極型分光計にて測定した。もし必要となれば、生成物を流速45 mL/分のPhenomenex Luna（登録商標）C18逆相（5ミクロン、30ｘ75mm）カラムを備えたウォータースセミ分取HPLCにより精製した。移動相は、アセトニトリル及びH2O（それぞれ0.1%トリフルオロ酢酸含有）の混合物であった。移動相は、アセトニトリル(0.025%TFA)及びH2O(0.05%TFA)の混合物であり、温度を50℃に維持した。
【００８８】
サンプルは、流速0.8〜1.0 mL/分、7分にわたるグラジエント、8.5分のランタイムでLuna（登録商標）C18逆相（3ミクロン、3ｘ75mm）カラムを備えたアジレント1200シリーズLC/MSにて純度を分析した。最終化合物の純度は220及び254nmでのAUC(アジレントダイオードアレイ検出器)による定量法で3μLを注入し、＞95％であると決定した。
【実施例１】
【００８９】
本実施例は本発明の化合物を製造するための一般的合成を示す。
【００９０】
キノリン-8-オール(0.5g, 2.78 mmoles)、アミド(2.92 mmoles)及びアルデヒド(3.06 mmoles)を、そのまま120〜150℃で15分間撹拌した。加熱すると、反応混合物が溶け、そして反応終了後に固体が形成した。冷却後、固体生成物を酢酸エチルで洗浄し、そして粗生成物をエタノール-ジメチルホルムアミドから結晶化し精製生成物を得た。
【実施例２】
【００９１】
以下の化合物を実施例１記載の方法に従って製造した。
【００９２】
N-((8-ヒドロキシ-5-ニトロキノリン-7-イル)(チオフェン-2-イル)メチル)プロピオンアミド (1):  LC-MS: rt (分) = 5.16; 1H NMR (DMSO-d6) δ 1.03 (t, J=7.53 Hz, 3 H), 2.23 (qd, J=7.56, 3.13 Hz, 2 H), 6.81 (dt, J=3.52, 1.17 Hz, 1 H), 6.89 (dd, J=8.61, 0.98 Hz, 1 H), 6.95 (dd, J=5.09, 3.52 Hz, 1 H), 7.43 (dd, J=5.09, 1.17 Hz, 1 H), 7.90 (dd, J=8.80, 4.30 Hz, 1 H), 8.76 (s, 1 H), 9.02 (dd, J=4.11, 1.56 Hz, 1 H), 9.09 (d, J=8.80 Hz, 1 H), 9.19 (dd, J=8.80, 1.57 Hz, 1 H); 13C NMR (DMSO-d6) δ 9.86, 28.38, 45.33, 121.73, 123.84, 125.21, 125.29, 125.35, 126.87, 127.23, 133.05, 134.37, 136.80, 145.17, 149.03, 157.34, 172.29; HRMS (m/z): [M + H]+ calcd. for C17H16N3O4S, 358.0856; found, 358.0861.
【００９３】
N-((5-クロロ-8-ヒドロキシキノリン-7-イル)(チオフェン-2-イル)メチル)プロピオンアミド (2): LC-MS: rt (分) = 5.6; 1H NMR (DMSO-d6) δ 1.03 (t, J = 7.6 Hz, 3 H), 2.16 - 2.28 (m, 2 H), 6.75 - 6.78 (m, 1 H), 6.89 - 6.96 (m, 2 H), 7.40 (dd, J = 5.1 Hz and 1.0 Hz, 1 H), 7.74 (dd, J = 8.6 Hz and 4.1 Hz, 1 H), 7.79 (s, 1 H), 8.50 (dd, J = 8.5 Hz and 1.5 Hz, 1 H), 8.91 (d, J = 8.8 Hz, 1 H), 8.98 (dd, J = 4.1 Hz and 1.4 Hz, 1 H) and 10.42 (br, 1 H); HRMS (m/z): [M + H]+ calcd. for C17H16ClN2O2S, 347.0618; found, 347.0621. (-)-2 (e.g. 38) [α]D 23= -24 (c = 0.6, CHCl3); (+)-2 (e.g. 39) [α]D 23= +24 (c = 0.6, CHCl3).
【００９４】
N-((5-クロロ-8-ヒドロキシキノリン-7-イル)(チオフェン-2-イル)メチル)アセトアミド (3): LC-MS: rt (分) = 5.28 ; 1H NMR (DMSO-d6) δ 1.94 (s, 3 H), 6.78 (d, J = 3.5 Hz, 1 H), 6.89 (d, J = 8.8 Hz, 1 H), 6.94 (dd, J = 5.1 Hz and 3.5 Hz, 1 H), 7.41 (dd, J = 5.1 Hz and 1.0 Hz, 1 H), 7.75 (dd, J = 8.5 Hz and 4.2 Hz, 1 H), 7.78 (s, 1 H), 8.51 (dd, J = 8.6 Hz and 1.4 Hz, 1 H), 8.96 - 9.02 (m, 2 H) and 10.43 (br, 1 H); ); HRMS (m/z): [M + H]+ calcd. for C16H14ClN2O2S, 333.0459; found, 333.0460.
【００９５】
N-((5-ブロモ-8-ヒドロキシキノリン-7-イル)(チオフェン-2-イル)メチル)プロピオンアミド (4): LC-MS: rt (分) = 5.70; 1H NMR (DMSO-d6) δ 1.03 (t, J = 7.5 Hz, 3 H), 2.16 - 2.29 (m, 2 H), 6.76 (d, J = 3.3 Hz, 1 H), 6.87 - 6.96 (m, 2 H), 7.40 (dd, J = 5.1 Hz and 1.0 Hz, 1 H), 7.74 (dd, J = 8.5 Hz and 4.2 Hz, 1 H), 7.96 (s, 1 H), 8.43 (dd, J = 8.6 Hz and 1.4 Hz, 1 H), 8.86 - 8.99 (m, 2 H) and 10.45 (br, 1 H); HRMS (m/z): [M + H]+ calcd. for C17H16BrN2O2S, 391.0105; found, 391.0108.
【００９６】
N-((5-ブロモ-8-ヒドロキシキノリン-7-イル)(チオフェン-2-イル)メチル)アセトアミド (5):  LC-MS: rt (分) = 5.36; 1H NMR (DMSO-d6) δ 1.94 (s, 3 H), 6.78 (dt, J=3.5, 1.2 Hz, 1 H), 6.89 (dd, J=8.9, 1.1 Hz, 1 H), 6.93 (dd, J=5.1, 3.3 Hz, 1 H), 7.40 (dd, J=5.1, 1.4 Hz, 1 H), 7.74 (dd, J=8.6, 4.1 Hz, 1 H), 7.95 (s, 1 H), 8.43 (dd, J=8.5, 1.5 Hz, 1 H), 8.95 (dd, J=4.1, 1.6 Hz, 1 H), 9.00 (d, J=8.8 Hz, 1 H), 10.46 (s, 1 H); 13C NMR (DMSO-d6) d  22.55, 45.35, 108.50, 123.41, 124.84, 125.08, 125.68, 126.34, 126.78, 129.38, 134.97, 138.89, 145.91, 149.24, 149.71, 168.39; HRMS (m/z): [M + H]+ calcd. for C16H14BrN2O2S, 376.9954; found, 376.9956.
【００９７】
N-((5-フルオロ-8-ヒドロキシキノリン-7-イル)(チオフェン-2-イル)メチル)アセトアミド (7):  LC-MS: rt (分) = ; 1H NMR (DMSO-d6) δ 1.93 (s, 3 H), 6.77 (dt, J=3.5, 1.2 Hz, 1 H), 6.88 - 6.95 (m, 2 H), 7.40 (dd, J=5.0, 1.3 Hz, 1 H), 7.47 (d, J=11.2 Hz, 1 H), 7.68 (dd, J=8.5, 4.2 Hz, 1 H), 8.44 (dd, J=8.5, 1.7 Hz, 1 H), 8.91 - 8.99 (m, 2 H), 10.07 (s, 1 H); 13C NMR (DMSO-d6) δ  22.55, 45.49, 104.54, 109.27, 109.48, 117.53, 117.72, 122.27, 123.67, 123.73, 124.86, 125.04, 126.73, 129.13, 129.16, 137.80, 137.83, 145.91, 146.04, 146.08, 148.17, 149.52, 150.60, 168.37; HRMS (m/z): [M + H]+ calcd. for C16H14FN2O2S, 317.076; found, 317.0761.
【００９８】
N-(フラン-2-イル(8-ヒドロキシ-5-ニトロキノリン-7-イル)メチル)プロピオンアミド (8): LC-MS: rt (分) = 4.96; 1H NMR (DMSO-d6) δ 1.01 (t, J = 7.6 Hz, 3 H), 2.16 - 2.27 (m, 2 H), 6.13 (d, J = 3.3 Hz, 1 H), 6.38 (dd, J = 3.1 Hz and 1.8 Hz, 1 H), 6.69 (d, J = 8.41 Hz, 1 H), 7.61 (d, J = 1.0 Hz, 1 H), 7.90 (dd, J = 8.9 Hz and 4.2 Hz, 1 H), 8.68 (s, 1 H), 8.97 (d, J = 8.4 Hz, 1 H), 9.01 (dd, J = 4.1 Hz and 1.37 Hz, 1 H) and 9.17 - 9.21 (m, 1 H); HRMS (m/z): [M + H]+ calcd. for C17H16N3O5, 342.1084; found, 342.1082.
【００９９】
N-((5-クロロ-8-ヒドロキシキノリン-7-イル)(フラン-2-イル)メチル)プロピオンアミド (9):  LC-MS: rt (分) = 5.26; 1H NMR (DMSO-d6) δ 1.01 (t, J=7.53 Hz, 3 H) 2.20 (qd, J=7.53, 2.64 Hz, 2 H) 6.07 (d, J=3.13 Hz, 1 H) 6.37 (dd, J=3.03, 1.86 Hz, 1 H) 6.72 (d, J=8.61 Hz, 1 H) 7.59 (s, 1 H) 7.66 - 7.89 (m, 2 H) 8.49 (dd, J=8.51, 1.47 Hz, 1 H) 8.80 (d, J=8.80 Hz, 1 H) 8.97 (dd, J=4.21, 1.47 Hz, 1 H) 10.38 (s, 1 H) 13C NMR (DMSO-d6) d 9.81, 28.28, 43.99, 106.95, 110.39, 118.47, 123.04, 123.07, 125.04, 126.15, 132.50, 138.62, 142.51, 149.16, 149.42, 153.95, 172.21; HRMS (m/z): [M + H]+ calcd. for C17H16ClN2O3, 331.0844; found, 331.0849.
【０１００】
N-((5-クロロ-8-ヒドロキシキノリン-7-イル)(フラン-2-イル)メチル)アセトアミド (10):  LC-MS: rt (分) = 4.83; 1H NMR (DMSO-d6) δ 1.92 (s, 3 H), 6.06 - 6.09 (m, 1 H), 6.37 (dd, J=3.2, 1.9 Hz, 1 H), 6.70 (d, J=8.4 Hz, 1 H), 7.59 (dd, J=1.9, 0.9 Hz, 1 H), 7.71 (s, 1 H), 7.74 (dd, J=8.5, 4.2 Hz, 1 H), 8.50 (dd, J=8.6, 1.6 Hz, 1 H), 8.88 (d, J=8.6 Hz, 1 H), 8.97 (dd, J=4.1, 1.6 Hz, 1 H), 10.39 (s, 1 H); 13C NMR (DMSO-d6) d 22.51, 44.05, 106.99, 110.39, 118.48, 123.00, 123.05, 125.05, 126.14, 132.52, 138.62, 142.52, 149.19, 149.40, 153.86, 168.47; HRMS (m/z): [M + H]+ calcd. for C16H14ClN2O3, 317.0687; found, 317.0689.
【０１０１】
N-((5-ブロモ-8-ヒドロキシキノリン-7-イル)(フラン-2-イル)メチル)プロピオンアミド (11):  LC-MS: rt (分) = 5.39; 1H NMR (DMSO-d6) δ 1.01 (t, J=7.6 Hz, 3 H), 2.20 (qd, J=7.5, 2.2 Hz, 2 H), 6.07 (d, J=3.1 Hz, 1 H), 6.37 (dd, J=3.2, 1.9 Hz, 1 H), 6.71 (d, J=8.4 Hz, 1 H), 7.59 (dd, J=1.8, 0.8 Hz, 1 H), 7.73 (dd, J=8.6, 4.1 Hz, 1 H), 7.88 (s, 1 H), 8.42 (dd, J=8.6, 1.6 Hz, 1 H), 8.81 (d, J=8.8 Hz, 1 H), 8.94 (dd, J=4.1, 1.6 Hz, 1 H), 10.41 (s, 1 H); 13C NMR (DMSO-d6) δ  9.81, 28.29, 43.96, 106.94, 108.33, 110.39, 123.38, 123.73, 126.35, 129.63, 134.95, 138.86, 142.51, 149.17, 150.03, 153.96, 172.22; HRMS (m/z): [M + H]+ calcd. for C17H16BrN2O3, 375.0339; found, 375.0344.
【０１０２】
N-((5-ブロモ-8-ヒドロキシキノリン-7-イル)(フラン-2-イル)メチル)アセトアミド (12):  LC-MS: rt (分) = 5.03; 1H NMR (DMSO-d6) δ 1.92 (s, 3 H), 6.04 - 6.11 (m, 1 H), 6.37 (dd, J=3.2, 1.9 Hz, 1 H), 6.70 (d, J=8.6 Hz, 1 H), 7.56 - 7.62 (m, 1 H), 7.73 (dd, J=8.5, 4.2 Hz, 1 H), 7.87 (s, 1 H), 8.43 (dd, J=8.6, 1.6 Hz, 1 H), 8.89 (d, J=8.6 Hz, 1 H), 8.94 (dd, J=4.1, 1.6 Hz, 1 H), 10.42 (s, 1 H); 13C NMR (DMSO-d6) d 22.51, 43.99, 106.96, 108.33, 110.39, 123.38, 123.65, 126.35, 129.61, 134.96, 138.86, 142.52, 149.18, 150.00, 153.87, 168.47; HRMS (m/z): [M + H]+calcd. for C16H14BrN2O3, 361.0182; found, 361.019.
【０１０３】
N-((5-クロロ-8-ヒドロキシキノリン-7-イル)(シクロプロピル)メチル)アセトアミド (15):  LC-MS: rt (分) = 4.49; 1H NMR (DMSO-d6) δ 0.32 - 0.40 (m, 3 H), 0.43 - 0.52 (m, 1 H), 1.15 - 1.25 (m, 1 H), 1.85 (s, 3 H), 4.99 (t, J=8.4 Hz, 1 H), 7.70 (dd, J=8.5, 4.2 Hz, 1 H), 7.76 (s, 1 H), 8.41 (d, J=8.6 Hz, 1 H), 8.47 (dd, J=8.4, 1.6 Hz, 1 H), 8.95 (dd, J=4.1, 1.6 Hz, 1 H), 10.06 (s, 1 H); 13C NMR (DMSO-d6) δ 2.38, 3.50, 16.46, 22.65, 49.51, 118.37, 122.67, 124.51, 126.19, 126.38, 132.39, 138.62, 148.78, 148.98, 168.25; HRMS (m/z): [M + H]+ calcd. for C15H16ClN2O2, 291.0895; found, 291.090.
【０１０４】
N-((5-クロロ-8-メトキシキノリン-7-イル)(フラン-2-イル)メチル)プロピオンアミド (33):  LC-MS: rt (分) = 4.91; 1H NMR (DMSO-d6) d 1.00 (t, J=7.5 Hz, 3 H), 2.21 (qd, J=7.5, 5.6 Hz, 2 H), 4.06 (s, 3 H), 6.16 (d, J=3.1 Hz, 1 H), 6.40 (dd, J=3.2, 1.9 Hz, 1 H), 6.74 (d, J=8.6 Hz, 1 H), 7.61 (d, J=1.8 Hz, 1 H), 7.73 (dd, J=8.5, 4.2 Hz, 1 H), 7.79 (s, 1 H), 8.54 (dd, J=8.6, 1.8 Hz, 1 H), 8.90 (d, J=8.6 Hz, 1 H), 9.03 (dd, J=4.1, 1.6 Hz, 1 H); 13C NMR (DMSO-d6) δ 9.72, 28.24, 44.31, 62.33, 107.29, 110.49, 122.81, 124.76, 125.65, 126.06, 132.65, 132.73, 142.45, 142.77, 150.59, 151.81, 153.51 and 172.31; HRMS (m/z): [M + H]+ calcd. for C18H18ClN2O3, 345.1; found, 345.1008.
【０１０５】
N-((4-クロロ-1-ヒドロキシナフタレン-2-イル)(フラン-2-イル)メチル)アセトアミド (34):  LC-MS: rt (分) = 5.87; 1H NMR (DMSO-d6) d 1.90 (s, 3 H), 6.13 (d, J=3.13 Hz, 1 H), 6.39 (dd, J=3.03, 1.86 Hz, 1 H), 6.73 (d, J=8.41 Hz, 1 H), 7.51 - 7.58 (m, 1 H), 7.58 - 7.72 (m, 3 H), 8.07 (d, J=8.02 Hz, 1 H), 8.29 (d, J=8.41 Hz, 1 H), 8.94 (d, J=8.41 Hz, 1 H), 10.00 (s, 1 H); 13C NMR (DMSO-d6) δ 22.43, 44.56, 107.06, 110.37, 121.01, 122.29, 123.06, 123.56, 125.48, 126.09, 126.49, 127.59, 129.94, 142.53, 148.84, 153.91, 168.94; HRMS (m/z): [M + H]+ calcd. for C17H15ClNO3, 316.0735; found, 316.0725.
【実施例３】
【０１０６】
本実施例ではヒト12-リポキシゲナーゼ阻害(「12hLO」)アッセイを用いることによる、一実施形態に基づく式Iの本発明の化合物の機能的生物活性について説明する。
【０１０７】
12hLOの酵素活性は、2mLキュベット中234nmでの吸光度をモニタリングすることで生成物の形成を直接測定することにより決定した。阻害剤のIC50値は様々な濃度で酵素反応速度(enzymatic rate)を測定することにより得た。
【０１０８】
対照実験のために、基質バッファー(10μMアラキドン酸 / 25 mM HEPES / 0.01%(v/v)トリトン X-100，pH 8.0) 2 mLを、磁気撹拌バーを備えたキュベットに分注した。平衡を確保した後、阻害剤溶媒の一定分量を加え(DMSO)、そして平衡を再度確保した。酵素をキュベットに加えることにより反応を開始し、そして完了するまで反応を続けた。阻害実験は媒体(vehicle)の代わりに実際の阻害化合物を加えた点以外は上記のように行った。IC50を得るために、通常5つの濃度の阻害剤を検討した。阻害剤の濃度が一定だった場合、5つの異なる反応体積を使用した。すべての実験は全く同じの実験を二回行った。
【０１０９】
Kinlabを用いて、234nmでの最大微分係数(largest derivative)をAU/sでのデータポイントとして使用する。したがって、％阻害は実験の反応速度(experimental rate)に対する対照の反応速度の比として表す(eq. 1)。
【０１１０】
パーセント阻害＝[1 - (実験の反応速度) / (対照の反応速度(control rate)) ] * 100% (eq. 1)
【０１１１】
各パーセント阻害のデータポイントは濃度関数としてプロットする。次いで、プロットを、方程式2を用いて双曲線に適合させる。
【０１１２】
( [I] * Imax ) / ( [I] + IC50 )   (eq. 2)
【０１１３】
式中、[I]は阻害剤濃度であり、Imaxは最大パーセント阻害であり、IC50は50％阻害濃度である。Imax及びIC50値は適合させた双曲線から引き出される。結果を表1に示す。
【０１１４】
【化３】
2013526576.tif 000005
【０１１５】
【表１】
2013526576.tif 000006
【実施例４】
【０１１６】
本実施例では本発明の一実施形態に基づく本発明の式Iの化合物の一部の性質について説明する。
【０１１７】
化合物1、3、5、6、9、36及び38をヒト12-リポキシゲナーゼ(「12hLO」)、ヒト5-リポキシゲナーゼ(「5hLO」)、ヒト15-リポキシゲナーゼ-1(「15hLO-1」)及びヒト15-リポキシゲナーゼ-2(「15hLO-2」)に対してスクリーニングした。IC50値を表2に示す。
【０１１８】
【表２】
2013526576.tif 000007
【０１１９】
表２に示された結果から明確であるように、化合物1、3、5、6、9、36及び38が、ヒト5-リポキシゲナーゼ、ヒト15-リポキシゲナーゼ-1及びヒト15-リポキシゲナーゼ-2の阻害に比べてヒト12-リポキシゲナーゼの阻害に対する選択性を示した。
【実施例５】
【０１２０】
本実施例では式(I)：
【０１２１】
【化４】
2013526576.tif 000008
【０１２２】
［式中、R1 はH、R2 はフルオロ、クロロ、ブロモ又はニトロ、R3はフラン-2-イル、及びR4 はメチル又はエチルである。］
の化合物のキラル分離について説明する。
【０１２３】
解析的分析をChiralcel ODカラム(4.6ｘ150 mm、5ミクロン)で行った。移動相は1.0 mL/分の100%メタノールであった。サンプルを220nm及び254nmでダイオードアレイ検出器(DAD)にて検出した。旋光度はインライン偏光計(PDR-キラル)にて決定した。
【０１２４】
分取精製は、Chiralcel ODカラム(2ｘ25 cm、5ミクロン)で行った。移動相は4.5 mL/分の100%メタノールであった。分画の収集はUV吸光度(254nm)に従い行った。LCシステムは100マイクロリットル注入に制限した。
【実施例６】
【０１２５】
本実施例では式(III)：
【０１２６】
【化５】
2013526576.tif 000009
【０１２７】
［式中、R1 はH、R2 はフルオロ、クロロ、ブロモ又はニトロ、R3はフラン-2-イル、及びR4 はメチル又はエチルである。］
の化合物（式(I)の化合物の2-トリメチルシリルエチル誘導体である）のキラル分離について説明する。
【０１２８】
式(I)の化合物を、既知の方法を用いて式(III)の化合物に変換した。
【０１２９】
解析的分析をChiralcel IAカラム(4.6ｘ250 mm、5ミクロン)で行った。移動相は1.0 mL/分の60%イソプロパノール/ヘキサンであった。サンプルを220nm及び254nmでダイオードアレイ検出器(DAD)にて検出した。旋光度はインライン偏光計(PDR-キラル)にて決定した。
【０１３０】
分取精製を、Chiralcel ODカラム(2ｘ25 cm、5ミクロン)で行った。移動相は60%イソプロパノール/ヘキサンであった。分画の収集はUV吸光度(254nm)に従い行った。LCシステムは100マイクロリットル注入に制限した。
【実施例７】
【０１３１】
本実施例では分離された式(III)のエナンチオマーの式(I)のエナンチオマーへの変換について説明する。
【０１３２】
実施例６に記載の方法による式(III)のエナンチオマーの分割に続き、分離された式(III)のエナンチオマーを室温にてテトラ-n-ブチルアンモニウムフルオリド/テトラヒドロフランで処理した。反応混合物の後処理後、得られた式(I)のエナンチオマーを逆相HPLCによる精製にて単離した。式(I)のエナンチオマーの％鏡像体過剰率は実施例５に記載の分析方法を用いて決定した。
【実施例８】
【０１３３】
本実施例では、本発明の実施形態に基づく、エナンチオマーのラセミ混合物、及び２つの分割されたエナンチオマーそれぞれについて見られる12-リポキシゲナーゼ阻害について説明する。
【０１３４】
N-((5-ブロモ-8-ヒドロキシキノリン-7-イル)(チオフェン-2-イル)メチル)アセトアミド (5) を実施例５に記載したように左旋性エナンチオマー及び右旋性エナンチオマーに分割した。12-リポキシゲナーゼ阻害は、ラセミ体 5 (「(±)-5」)、左旋性5 (36)及び右旋性5 (37)に対して実施例３に記載の方法を用いて決定した。結果を表３に示す。
【０１３５】
【表３】
2013526576.tif 000010
【０１３６】
表３に示された結果から明らかなように、化合物 5の左旋性エナンチオマー 36は、12-リポキシゲナーゼ阻害剤として、化合物 5の右旋性エナンチオマー 37の58倍超強力であった。
【実施例９】
【０１３７】
本実施例では、本発明の実施形態に基づく、エナンチオマーのラセミ混合物、及び２つの分割されたエナンチオマーそれぞれについて見られる12-リポキシゲナーゼ阻害について説明する。
【０１３８】
N-((5-クロロ-8-ヒドロキシキノリン-7-イル)(チオフェン-2-イル)メチル)プロプリオンアミド(proprionamide) (2) を実施例５に記載したように左旋性エナンチオマー及び右旋性エナンチオマーに分割した。12-リポキシゲナーゼ阻害は、ラセミ体 2 (「(±)-2」)、左旋性2 (38)及び右旋性2 (39)に対して実施例３に記載の方法を用いて決定した。結果を表４に示す。
【０１３９】
【表４】
2013526576.tif 000011
【０１４０】
表３に示された結果から明らかなように、化合物 2の左旋性エナンチオマーは、12-リポキシゲナーゼ 38阻害剤として、化合物 2の右旋性エナンチオマー 39の66倍超強力であった。
【実施例１０】
【０１４１】
本実施例ではヒト血液からのヒト血小板の分離について説明する。
【０１４２】
ヒト血小板は、トーマスジェファーソン大学のコミュニティー及びフィラデルフィアのエリア内からの健康なボランティアから得た。これらの研究はトーマスジェファーソン大学機関の倫理委員会によって承認された。採血前にすべてのドナーからインフォームド・コンセントを得た。血液を室温にて200gで15分間遠心分離した。多血小板血漿を、10% 酸クエン酸デキストロース溶液 (39 mMクエン酸、75 mMクエン酸ナトリウム及び135 mMグルコース、pH 7.4)を含む円錐形チューブへ移し、室温にて2000gで15分間遠心分離した。血小板を、タイロードバッファー(Tyrode’s buffer)(12 mM NaHCO3、127 mM NaCl、5 mM KCl、0.5 mM NaH2PO4、1 mM MgCl2、5 mM グルコース及び10 mM HEPES)中に再懸濁し、コールターカウンター(ベックマンコールター(カルフォルニア州フラートン))を用いて計測後、示すように最終の血小板濃度を調整した。報告結果は少なくとも3人の異なる対象者由来の血小板を使用して得られたデータである。
【実施例１１】
【０１４３】
本実施例では、本発明の実施形態に基づく化合物によって示される、血小板凝集に対する作用について実証する。
【０１４４】
洗浄血小板を実施例１０で示されたようにして得た。洗浄血小板を、2×108 血小板/mlの最終濃度に調整した。血小板を化合物１で10分間前処理し、アゴニストのトロンビン、PAR1-AP、PAR4-AP、ADP及びコラーゲンによる種々のアゴニスト濃度での刺激に反応する凝集を、37℃にて1100rpmで撹拌しながら、lumi-aggregometer model 700D (Chrono-log Corp., ペンシルベニア州ハバータウン)を用いた光透過凝集測定法にて測定した。結果を、アゴニスト濃度（化合物１（図２でNCG-56として識別される）の非存在下及び存在下の両方）の関数としての、パーセンテージに基づいて表される血小板凝集の用量作用曲線として図２に示す。
【０１４５】
図２に示された結果から明確なように、アゴニスト濃度の関数としての、パーセンテージに基づいて表される血小板凝集の用量作用曲線は、実質的に化合物１の存在により実質的には影響受けなかった。
【実施例１２】
【０１４６】
本実施例では、本発明の実施形態に基づく化合物によって示される、アゴニスト刺激に反応する濃染顆粒分泌に対する作用について実証する。
【０１４７】
洗浄血小板を実施例１０で示されたようにして得た。血小板濃染顆粒から放出されるATPを用いて濃染顆粒分泌を検出した。2×108 血小板/mlの最終濃度に調整した洗浄血小板245μlを、10分間阻害剤で前処理した。Chrono-lume試薬(Chrono-log Corp., ペンシルベニア州ハバータウン)5μl加えた後、1100rpmで撹拌しながら、37℃にてLumi-aggregometer Model 700D (Chrono-log Corp., ペンシルベニア州ハバータウン)を用いて、アゴニストのトロンビン、PAR1-AP、PAR4-AP、ADP、アラキドン酸及びコラーゲンによる刺激反応するATP放出を測定した。結果を、アゴニスト濃度（化合物１（図３でNCG-56として識別される）の非存在下及び存在下の両方）の関数としての、ATP分泌の用量作用曲線として図３に示す。
【０１４８】
図３に示された結果から明確なように、化合物１の存在により、アゴニストのトロンビン、PAR1-AP、PAR4-AP、ADP、アラキドン酸及びコラーゲンによって引き起こされるATP分泌の実質的な完全阻害がもたらされた。
【実施例１３】
【０１４９】
本実施例では、本発明の一実施形態に基づく化合物によって示される、アゴニスト刺激に反応する、ヒト血小板表面上のP-セレクチンの増加によって測定されるα顆粒分泌に対する作用について説明する。
【０１５０】
洗浄血小板を実施例１０で示されたようにして得た。フローサイトメトリーを用いてα顆粒の分泌を測定した。具体的には、P-セレクチン発現を用いてα顆粒分泌を検出した。これらの実験のために、5×105血小板/mlの最終濃度に調整した洗浄血小板50μl一定分量を、化合物１で10分間前処理した。PE結合抗P-セレクチン抗体10μlを加えた後、アゴニストのトロンビン、PAR1-AP、PAR4-AP又はADPで血小板を10分間刺激し、次いでタイロードバッファーを用いて500μlの最終体積に希釈した。10,000の血小板の蛍光強度を、C6 Accuriフローサイトメーターを用いて直ちに測定した。結果を図４に示す。
【０１５１】
図４に示された結果から明確なように、ヒト血小板を、アゴニストのトロンビン、PAR1-AP、PAR4-AP及びADPそれぞれで処理すると、抗P-セレクチンの結合で決定されるような、血小板表面上のP-セレクチンの発現増加がもたらされた。血小板の化合物１（図４でNCG-56として識別される）での前処理により、アゴニスト単独での処理に比べて、血小板表面上のP-セレクチンの発現減少がもたらされた。
【実施例１４】
【０１５２】
本実施例では、本発明の一実施形態に基づく化合物によって示される、アゴニスト刺激に反応する、ヒト血小板におけるインテグリンαIIbβ3の活性化によって測定されるα顆粒分泌に対する作用について実証する。
【０１５３】
洗浄血小板を実施例１０で示されたようにして得た。フローサイトメトリーを用いてインテグリンαIIbβ3の活性化を測定した。具体的には、PAC1(αIIbβ3が活性型コンフォーメーションである場合にのみ結合する抗体)結合を用いて、αIIbβ3のコンフォメーショナルな活性化を選択的に検知するために利用した。これらの実験のために、5×105 血小板/mlの最終濃度に調整した洗浄血小板50μl一定分量を、10分間阻害剤で前処理した。10μlのFITC結合PAC1を加えた後、アゴニストのトロンビン、PAR1-AP、PAR4-AP又はADPで血小板を10分間刺激し、次いでタイロードバッファーを用いて500μlの最終体積に希釈した。10,000の血小板の蛍光強度を、C6 Accuriフローサイトメーターを用いて直ちに測定した。結果を図５に示す。
【０１５４】
図５に示された結果から明確なように、ヒト血小板を、アゴニストのトロンビン、PAR1-AP、PAR4-AP及びADPそれぞれで処理すると、血小板表面上のPAC1の結合増加がもたらされた。血小板の化合物１（図５でNCG-56として識別される）での前処理により、アゴニスト単独での処理に比べて、血小板表面上のPAC1の結合減少がもたらされた。
【実施例１５】
【０１５５】
ヒト膵島を炎症性サイトカインIFN-γ、TNF-α及びIL-1-β単独で又は化合物１若しくは化合物９の存在下で刺激した後、22時間インキュベートした。コントロール膵島を炎症性サイトカイン又は化合物の不存在下で22時間インキュベートした。インキュベートに続いて、12-LO、15-LO、5-LO、IL-12p40およびIFN-γの遺伝子発現を、Taqman リアルタイムPCRを用いて決定した。コントロール膵島に対する遺伝子発現の変化を表５に示す。
【０１５６】
【表５】
2013526576.tif 000012
【０１５７】
表４に示されたデータから明確なように、化合物１及び９の存在により、IFN-γ、TNF-α及びIL-1-βにより誘導されるIL-12p40のmRNA発現において40倍の減少が、IFN-γ発現において4倍の減少がもたらされた。
【実施例１６】
【０１５８】
本実施例ではヒト膵島におけるIL-12p40のmRNAレベルの作用について説明する。
【０１５９】
12(S)-HETEを培養したヒト膵島に加えた。12(S)-HETEの存在しない状態で膵島を培養することによりコントロールを決定した。4時間、6時間及び24時間の期間で膵島をmRNAについて抽出し、TaqmanリアルタイムPCRを用いて、コントロール膵島に対するIL-12p40のmRNA発現の変化を決定した。結果を図６に示す。図６において、各タイムポイントで、左の棒はコントロール膵島のIL-12p40のmRNA発現を示し、中央の棒は、1nMの12(S)-HETEで処理した膵島のIL-12p40のmRNA発現を示し、そして右の棒は100nMの12(S)-HETEで処理した膵島のIL-12p40のmRNA発現を示す。
【０１６０】
図６に示したデータから明確であるように、ヒト膵島の1nMの12(S)-HETEでの処理により、6時間及び24時間両方で、IL-12p40のmRNAの発現について約1.2倍の増加がもたらされた。ヒト膵島の100nMの12(S)-HETEでの処理により、6時間及び24時間両方でIL-12p40のmRNAの発現について約1.4倍及び約1.5倍の増加がもたらされた。
【実施例１７】
【０１６１】
本実施例ではヒト膵島におけるIFN-γのmRNAレベルに対する12(S)-HETEの作用について説明する。
【０１６２】
12(S)-HETEを培養したヒト膵島に加えた。12(S)-HETEの存在しない状態で膵島を培養することによりコントロールを決定した。4時間、6時間及び24時間の期間で膵島をmRNAについて抽出し、TaqmanリアルタイムPCRを用いて、コントロール膵島に対するIFN-γのmRNA発現の変化を決定した。結果を図７に示す。図７において、各タイムポイントで、左の棒はコントロール膵島のIFN-γのmRNA発現を示し、中央の棒は、1nMの12(S)-HETEで処理した膵島のIFN-γのmRNA発現を示し、右の棒は100nMの12(S)-HETEで処理した膵島のIFN-γのmRNA発現を示す。
【０１６３】
図７に示されたデータから明確なように、ヒト膵島の1nMの12(S)-HETEでの処理により、4時間、6時間及び24時間でIFN-γのmRNAの発現について約2倍、4倍及び8倍の増加がもたらされた。ヒト膵島の100nMの12(S)-HETEでの処理により、4時間、6時間及び24時間でIFN-γのmRNAの発現について約2倍、3倍及び6倍の増加がもたらされた。
【実施例１８】
【０１６４】
本実施例ではヒト12-リポキシゲナーゼ阻害(「12hLO」)アッセイを用いることによる、一実施形態に基づく本発明の式IIの化合物の機能的生物活性について説明する。
【０１６５】
12hLOの酵素活性を実施例３に示されるように決定した。N-((5-クロロ-8-メトキシキノリン-7-イル)(フラン-2-イル)メチル)プロピオンアミド (33) (比較)、N-((4-クロロ-1-ヒドロキシナフタレン-2-イル)(フラン-2-イル)メチル)アセトアミド (34) (比較)及びN-((5-クロロ-8-ヒドロキシ-1,2,3,4-テトラヒドロキノリン-7-イル)(フラン-2-イル)メチル)プロピオンアミド (35) (発明)を、ヒト12-リポキシゲナーゼ(「12hLO」)に対してスクリーニングした。IC50値を表６に示す。
【０１６６】
【表６】
2013526576.tif 000013
【０１６７】
表６に示された結果から明確なように、化合物３５はヒト12-リポキシゲナーゼに対して3.0μMのIC50値を示した。
【実施例１９】
【０１６８】
本実施例では本発明の一実施形態に基づく化合物である化合物３６のインビトロADME特性について説明する。
【０１６９】
【表７】
2013526576.tif 000014
【０１７０】
表７に示された結果から明確なように、化合物３６は許容できる速度論的水溶解度、良好な細胞透過性及びPBSバッファー及びマウス血漿での優れた安定性を示した。
【実施例２０】
【０１７１】
本実施例は本発明の一実施形態に基づく化合物である化合物３６のインビボ薬物動態学(「PK」)特性を説明する。
【０１７２】
【表８】
2013526576.tif 000015
【０１７３】
a腹腔内 (IP)投与 (30 mg/kg 体重 (mpk))、CD1マウス、n = 3、8タイムポイント (0.25 時間、0.5、1、2、4、8、12、24)でモニタリング。化合物３６を50％PEG200及び10％Cremophor EL /食塩水に懸濁させて製剤化した。b8タイムポイント(24時間)にわたる平均[b/p]比に基づき計算した。
【０１７４】
表８に示された結果から明確なように、化合物３６は3.5時間という合理的な血中濃度半減期及び288μMという合理的なCmaxを示した。Cmaxによって示される暴露レベルは、24時間いっぱいの精製酵素アッセイIC50及び8時間の血小板アッセイでのIC50を超えた。さらに、化合物３６は、脳血液関門を効率的に通過しない。そのため、CNS-活性化合物は望ましくない副作用をもたらし得るので、に対して、糖尿病及び血栓症のような疾患の治療のために、化合物３６が望ましい結果となると考えられる。
【実施例２１】
【０１７５】
cPLA2(細胞質型ホスホリパーゼA2)に対する化合物NCTT-956(化合物１)(本発明)、化合物NCTT-694(化合物３３)(陰性対照)、ならびに12hLO及び15hLOの非選択的阻害剤バイカレインの作用を、「Reed, K.A., et al., Biochemistry, 2011, 50: 1731-1738」により記載された酵素活性アッセイ（以下の点で異なる）を用いて組み換え型ヒトcPLA2にて試験した。組み換え酵素を添加して反応を開始する直前に、DMSO溶液中の阻害剤を50μMの最終濃度で加えた。5分のインキュベート後に、反応生成物を分析し、そして結果を図８に示した。
【０１７６】
図８に示されたデータから明確なように、化合物１はcPLA2を阻害しなかった。一方で、非特異的阻害剤バイカレインは、約60％のcPLA2阻害を示した。
【０１７７】
出版物、特許出願及び特許を含む本明細書に挙げた全ての参考文献を、各参考文献を参照することにより援用することが個々に具体的に述べられ且つその全体が本明細書に示されているのと同程度まで、参照することにより本明細書に援用する。
【０１７８】
本発明を説明する文脈（特には、添付の特許請求の範囲の文脈）における用語 「a」及び「an」及び「the」並びに同様の指示語の使用は、本明細書に別段の記載がない限り、あるいは文脈に明らかに矛盾しない限り、単数及び複数の両方を含むものと解釈される。用語「含む」、「有する」、「含有する」及び「としては〜挙げられる」（「comprising」、「having」、「including」及び「containing」）は、別段の記載がなければ、オープンエンドターム（すなわち、「〜を含むが限定されない」を意味する）として解釈される。本明細書における数値範囲の具陳は、別段の記載がない限り、単にその範囲内に該当する各値を個々に言及するための略記法としての役割を果たすことだけを意図しており、各値は、本明細書中で個々に列挙されるかのように、明細書に組み込まれる。本明細書に記載した全ての方法は、別段の記載がないか、あるいは文脈に明らかに矛盾していなければ、任意の好適な順序で実施することができる。本明細書で与えた任意の及び全ての例、又は例示的な表現（例えば、「のように」）の使用は、単に本発明をより明確にすることを意図し、別段の主張がなければ、本発明の範囲に限定を与えるものではない。本明細書中の如何なる言い回しも、本発明の実施に不可欠である、請求項に記載されていない要素を示すものとは解釈されない。
【０１７９】
本明細書中では、発明を実施するため本発明者が知っている最良の形態を含め、本発明の好ましい実施形態について説明している。当業者にとっては、上記説明を読んだ上で、これらの好ましい実施形態の変形が明らかとなり得る。本発明者らは、熟練者が適宜このような変形を適用することを期待しており、本明細書中で具体的に説明される以外の方法で発明が実施されることを予定している。従って本発明は、準拠法で許されているように、本明細書に添付された特許請求に範囲に記載の内容の修正及び均等物をすべて含む。さらに、本明細書中で特に指摘したり、明らかに文脈と矛盾したりしない限り、好ましい実施形態で考えられるすべての変形における上記要素のいずれの組合せも本発明に包含される。
【図１】
2013526576.tif 000018
【図２】
2013526576.tif 000019
【図３】
2013526576.tif 000020
【図４】
2013526576.tif 000021
【図５】
2013526576.tif 000022
【図６】
2013526576.tif 000023
【図７】
2013526576.tif 000024
【図８】
2013526576.tif 000025
【国際調査報告】
2013526576.tif 000026
2013526576.tif 000027
2013526576.tif 000028