(57)【要約】  骨を侵す疾患及び障害を治療、管理及び予防する化合物を開示する。特定の化合物は、Ｎｏｔｕｍペクチンアセチルエステラーゼの強力な阻害剤であり、式：2013537202.tif 000045（式中、Ｅ、Ｇ、Ｙ、Ｚ、Ｒ１、Ｒ２及びＲ３は本明細書で規定されている）の化合物である。【選択図】なし
2013537202.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
式：
【化１】
2013537202.tif 000042
の化合物又はその薬学的に許容される塩（式中、
ＸはＯＲ１Ｂ又はＮ（Ｒ１Ｂ）２であり、
Ｒ１Ｂはそれぞれ独立して水素、又は必要に応じて置換されたアルキル、アリール、ヘテロアルキル若しくは複素環であり、
Ｒ２は水素、ハロ、−ＣＯ２Ｒ２Ａ、−Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ２Ａ）２、−ＳＲ２Ａ、−ＯＲ２Ａ、−Ｎ（Ｒ２Ａ）２、又は必要に応じて置換されたアルキル、アリール、ヘテロアルキル若しくは複素環であり、
Ｒ２Ａはそれぞれ独立して水素、又は必要に応じて置換されたアルキル、アリール、ヘテロアルキル若しくは複素環であり、
Ｒ３は水素、ハロ、シアノ、−ＣＯ２Ｒ３Ａ、−Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ３Ａ）２、−ＳＲ３Ａ、−ＯＲ３Ａ、−Ｎ（Ｒ３Ａ）２、又は必要に応じて置換されたアルキル、アリール、ヘテロアルキル若しくは複素環であり、
Ｒ３Ａはそれぞれ独立して水素、又は必要に応じて置換されたアルキル、アリール、ヘテロアルキル若しくは複素環であり、
Ｒ５は水素、ハロ、−ＣＯ２Ｒ５Ａ、−Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ５Ａ）２、−ＳＲ５Ａ、−ＯＲ５Ａ、−Ｎ（Ｒ５Ａ）２、又は必要に応じて置換されたアルキル、アリール、ヘテロアルキル若しくは複素環であり、
Ｒ５Ａはそれぞれ独立して水素、又は必要に応じて置換されたアルキル、アリール、ヘテロアルキル若しくは複素環であり、
ｎは１又は２であり、
ここで、「必要に応じて置換された」とは、アルコキシ、アルキル、アミノ（アルキルアミノ、ジアルキルアミノを含む）、アリール、カルボン酸、シアノ、ハロ、ハロアルキル、複素環、又はヒドロキシルのうちの１つ又は複数で必要に応じて置換されていることを意味する）。
【請求項２】
式：
【化２】
2013537202.tif 000043
の化合物又はその薬学的に許容される塩（式中、
ＸはＯＲ１Ｂ又はＮ（Ｒ１Ｂ）２であり、
Ｒ１Ｂはそれぞれ独立して水素、又は必要に応じて置換されたアルキル、アリール、ヘテロアルキル若しくは複素環であり、
Ｒ２は水素、ハロ、−ＣＯ２Ｒ２Ａ、−Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ２Ａ）２、−ＳＲ２Ａ、−ＯＲ２Ａ、−Ｎ（Ｒ２Ａ）２、又は必要に応じて置換されたアルキル、アリール、ヘテロアルキル若しくは複素環であり、
Ｒ２Ａはそれぞれ独立して水素、又は必要に応じて置換されたアルキル、アリール、ヘテロアルキル若しくは複素環であり、
Ｒ３は水素、ハロ、シアノ、−ＣＯ２Ｒ３Ａ、−Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ３Ａ）２、−ＳＲ３Ａ、−ＯＲ３Ａ、−Ｎ（Ｒ３Ａ）２、又は必要に応じて置換されたアルキル、アリール、ヘテロアルキル若しくは複素環であり、
Ｒ３Ａはそれぞれ独立して水素、又は必要に応じて置換されたアルキル、アリール、ヘテロアルキル若しくは複素環であり、
Ｒ４は水素、ハロ、又は必要に応じて置換されたアルキル、アリール、ヘテロアルキル若しくは複素環であり、
Ｒ５は水素、ハロ、−ＣＯ２Ｒ５Ａ、−Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ５Ａ）２、−ＳＲ５Ａ、−ＯＲ５Ａ、−Ｎ（Ｒ５Ａ）２、又は必要に応じて置換されたアルキル、アリール、ヘテロアルキル若しくは複素環であり、
Ｒ５Ａはそれぞれ独立して水素、又は必要に応じて置換されたアルキル、アリール、ヘテロアルキル若しくは複素環であり、
ｎは０、１又は２であり、
ここで、「必要に応じて置換された」とは、アルコキシ、アルキル、アミノ（アルキルアミノ、ジアルキルアミノを含む）、アリール、カルボン酸、シアノ、ハロ、ハロアルキル、複素環、又はヒドロキシルのうちの１つ又は複数で必要に応じて置換されていることを意味する）。
【請求項３】
ｎが０である、請求項２に記載の化合物。
【請求項４】
ＸがＯＲ１Ｂである、請求項１又は２に記載の化合物。
【請求項５】
Ｒ１Ｂが水素、又は必要に応じて置換されたアルキル若しくはアリールである、請求項１〜４のいずれか一項に記載の化合物。
【請求項６】
Ｒ１Ｂが水素又はアルキルである、請求項５に記載の化合物。
【請求項７】
Ｒ２が水素又は必要に応じて置換されたアルキルである、請求項１〜４のいずれか一項に記載の化合物。
【請求項８】
Ｒ３がアルキル又はハロである、請求項１〜４のいずれか一項に記載の化合物。
【請求項９】
Ｒ３がクロロである、請求項８に記載の化合物。
【請求項１０】
Ｒ５がアルキル又はハロである、請求項１〜４のいずれか一項に記載の化合物。
【請求項１１】
Ｒ５がＣ１〜４アルキルである、請求項１０に記載の化合物。
【請求項１２】
２−（（５，６−ジメチルチエノ［２，３−ｄ］ピリミジン−４−イル）チオ）酢酸、２−（（５−クロロ−６−イソプロピルチエノ［２，３−ｄ］ピリミジン−４−イル）チオ）酢酸、２−（（６−クロロ−７−シクロプロピルチエノ［３，２−ｄ］ピリミジン−４−イル）チオ）酢酸、又は２−（（６−クロロ−７−メチルチエノ［３，２−ｄ］ピリミジン−４−イル）チオ）酢酸である、化合物又はその薬学的に許容される塩。
【請求項１３】
請求項１〜１２のいずれか一項に記載の化合物と、薬学的に許容される賦形剤又は希釈剤とを含む医薬組成物。
【請求項１４】
骨量の低下を特徴とする疾患又は障害を治療又は管理する薬の製造のための請求項１〜１２のいずれか一項に記載の化合物の使用。
【請求項１５】
骨量の低下を特徴とする疾患又は障害を治療又は管理する薬の製造のための式：
【化３】
2013537202.tif 000044
の化合物又はその薬学的に許容される塩の使用（式中、
ＸはＯＲ１Ｂ又はＮ（Ｒ１Ｂ）２であり、
Ｒ１Ｂはそれぞれ独立して水素、又は必要に応じて置換されたアルキル、アリール、ヘテロアルキル若しくは複素環であり、
Ｒ２は水素、ハロ、−ＣＯ２Ｒ２Ａ、−Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ２Ａ）２、−ＳＲ２Ａ、−ＯＲ２Ａ、−Ｎ（Ｒ２Ａ）２、又は必要に応じて置換されたアルキル、アリール、ヘテロアルキル若しくは複素環であり、
Ｒ２Ａはそれぞれ独立して水素、又は必要に応じて置換されたアルキル、アリール、ヘテロアルキル若しくは複素環であり、
Ｒ３は水素、ハロ、シアノ、−ＣＯ２Ｒ３Ａ、−Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ３Ａ）２、−ＳＲ３Ａ、−ＯＲ３Ａ、−Ｎ（Ｒ３Ａ）２、又は必要に応じて置換されたアルキル、アリール、ヘテロアルキル若しくは複素環であり、
Ｒ３Ａはそれぞれ独立して水素、又は必要に応じて置換されたアルキル、アリール、ヘテロアルキル若しくは複素環であり、
Ｒ５は水素、ハロ、−ＣＯ２Ｒ５Ａ、−Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ５Ａ）２、−ＳＲ５Ａ、−ＯＲ５Ａ、−Ｎ（Ｒ５Ａ）２、又は必要に応じて置換されたアルキル、アリール、ヘテロアルキル若しくは複素環であり、
Ｒ５Ａはそれぞれ独立して水素、又は必要に応じて置換されたアルキル、アリール、ヘテロアルキル若しくは複素環であり、
ここで、「必要に応じて置換された」とは、アルコキシ、アルキル、アミノ（アルキルアミノ、ジアルキルアミノを含む）、アリール、カルボン酸、シアノ、ハロ、ハロアルキル、複素環、又はヒドロキシルのうちの１つ又は複数で必要に応じて置換されていることを意味する）。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
１．  発明の分野
本発明はＮｏｔｕｍペクチンアセチルエステラーゼの小分子阻害剤と、それを含む組成物と、その使用方法とに関する。
【０００２】
本願は、２０１０年９月１４日付けで出願された米国仮特許出願第６１／３８２，５２６号（引用することによりその全体が本明細書の一部をなすものとする）に対する優先権を主張する。
【背景技術】
【０００３】
２．  発明の背景
骨の健康は骨を形成する骨芽細胞と骨を吸収する破骨細胞との協調活性によって決まる。「骨代謝回転はこれらの細胞の同化機能と異化機能とのバランスを反映するものであり、損傷を受けた場合に成熟骨格が自己修復し、カルシウム及びリン等のミネラルの血液循環への放出によりその内分泌機能を維持することができるようにしている（Bone turnover reflects a balance between these anabolic and catabolic cellular functions and ensures that the mature skeleton can repair itself when damaged and sustain its endocrine function by release of minerals such as calcium and phosphorous into the circulation.）」（非特許文献１、４３３２頁）。多くの疾患状態によってこのバランスが変わり、その結果骨量の増減又は骨質の変化が起こる。骨ミネラル密度の漸減が骨減少症として知られており、重度の骨量の低下が骨粗鬆症として知られている（非特許文献１）。
【０００４】
骨粗鬆症の治療及び予防に関する現在の標準治療では、ビスホスホネート系の経口用の小分子骨吸収抑制剤が利用されている（非特許文献１、４３３３頁）。ゾレドロン酸、ラロキシフェン、カルシウム及びビタミンＤのサプリメントも骨粗鬆症の治療で一般的に使用されている（非特許文献１）。骨吸収抑制剤が骨量の低下の予防に役立つとされる一方で、同化剤は「骨量を更に大きく増大させることが可能であり．．．骨質を改善し、骨の強度を増大する働きもある（are capable of increasing bone mass to a greater degree ... and also have the capacity to improve bone quality and increase bone strength.）」（非特許文献２、１８１９頁）。米国では、ヒトＰＴＨが唯一ＦＤＡに認可された同化剤である（非特許文献１、４３３３頁）。「骨粗鬆症の治療に利用可能な同化剤が不足していることから、この疾患を治療するために、非毒性で費用対効果が高く、かつ投与が容易な小分子化合物を開発することが急務とされる（Because of the paucity of available anabolic agents for osteoporosis treatment, there is an urgent need to develop small molecular compounds to treat this disease that are nontoxic, cost-effective, and easy to administer.）」（非特許文献２、１８１９頁）。
【０００５】
「骨形成を刺激する医薬品の開発は骨吸収抑制剤による治療法に比べるとそれ程進んでいないが、幾つかの経路が骨芽細胞の機能を促進することが知られている（Although the development of pharmacological agents that stimulate bone formation is less advanced compared to antiresporptivetherapies, several pathways are known to facilitate osteoblast function.）」（非特許文献１、４３３８頁）。これらの経路には、骨形態形成タンパク質、形質転換成長因子β、副甲状腺ホルモン、インスリン様成長因子、線維芽細胞成長因子及び無翅型ＭＭＴＶ組込部位（ＷＮＴ）のシグナル伝達が含まれる（非特許文献１）。最近になってGuo及び共同研究者らによって、これらの経路のうちの骨形態形成タンパク質に関するものの結果が報告された（非特許文献２）。具体的には、Guo及び共同研究者らは、或る特定の置換されたベンゾチオフェン化合物及びベンゾフラン化合物がマウス及びラットにおいて骨形態形成タンパク質２の発現を高めることを報告した。報告によると、この２つの化合物はｉｎ  ｖｉｖｏで骨形成及び骨梁の結合性の回復を刺激する（非特許文献２、１８１９頁）。
【０００６】
これらの経路のうちのもう１つが、多様な発達プロセス及び再生プロセスにかかわるＷＮＴ経路である（非特許文献１、４３４０頁）。しかしながら、その経路は複雑であり、ＷＮＴ経路について、及びその構成要素が骨にどのような影響を与えるかについてはほとんど明らかになっていない。例えば、ＬＲＰ−５（その突然変異がヒトにおいて骨量の増大に関連する）及びβ−カテニン（これにより正準ＷＮＴシグナル伝達が起こる）が「ＷＮＴシグナル伝達を介して骨量の制御に直接結び付くことはない（may not be linked directly via WNT signaling to the control of bone mass）」ことが示唆されている（非特許文献１）。
【０００７】
最近の遺伝子発現データの解析によって、ＷＮＴシグナル伝達の新たな標的が同定されている。例えば非特許文献３の１１４３頁を参照されたい。かかる標的の１つが、ＮＯＴＵＭ及びＬＯＣ１７４１１１としても知られるＮｏｔｕｍペクチンアセチルエステラーゼである。
【先行技術文献】
【非特許文献】
【０００８】
【非特許文献１】Allen, J.G. et al., J. Med. Chem., 53 (June 10, 2010), pp. 4332 - 4353
【非特許文献２】Guo, H., et al., J. Med. Chem., 53 (February 25, 2010), pp. 1819 - 1829
【非特許文献３】Torisu, Y., et al., Cancer Sci., 99(6):1139-1146 (2008)
【発明の概要】
【０００９】
３．  発明の概要
本発明は、式：
【化１】
2013537202.tif 000003
【００１０】
の化合物及びその薬学的に許容される塩を包含する（式中、Ｅ及びＧの一方が窒素であり、Ｅ及びＧのもう一方が窒素又はＣＲ４であり、Ｙ及びＺの一方がＣＲ５であり、Ｙ及びＺのもう一方がＯ又はＳ（Ｏ）ｍ（ここでｍは０、１又は２である）であり、Ｒ１はハロ、−Ｒ１Ａ、−ＯＲ１Ａ、−Ｓ（Ｏ）ｎＲ１Ａ、−Ｓ（Ｏ）ｎＯＲ１Ａ、又は−Ｓ（Ｏ）ｎＮ（Ｒ１Ａ）２（ここでｎは０、１又は２である）であり、Ｒ１Ａはそれぞれ独立して水素、又は必要に応じて置換されたアルキル、アリール、ヘテロアルキル若しくは複素環であり、Ｒ２は水素、ハロ、−ＣＯ２Ｒ２Ａ、−Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ２Ａ）２、−ＳＲ２Ａ、−ＯＲ２Ａ、−Ｎ（Ｒ２Ａ）２、又は必要に応じて置換されたアルキル、アリール、ヘテロアルキル若しくは複素環であり、Ｒ２Ａはそれぞれ独立して水素、又は必要に応じて置換されたアルキル、アリール、ヘテロアルキル若しくは複素環であり、Ｒ３は水素、ハロ、シアノ、−ＣＯ２Ｒ３Ａ、−Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ３Ａ）２、−ＳＲ３Ａ、−ＯＲ３Ａ、−Ｎ（Ｒ３Ａ）２、必要に応じて置換されたアルキル、アリール、ヘテロアルキル若しくは複素環であるか、又はＲ５とＲ５及びＲ３が結合する原子とともに必要に応じて置換された環式部分を形成し、Ｒ３Ａはそれぞれ独立して水素、又は必要に応じて置換されたアルキル、アリール、ヘテロアルキル若しくは複素環であり、Ｒ４は水素、ハロ、又は必要に応じて置換されたアルキル、アリール、ヘテロアルキル若しくは複素環であり、Ｒ５は水素、ハロ、−ＣＯ２Ｒ５Ａ、−Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ５Ａ）２、−ＳＲ５Ａ、−ＯＲ５Ａ、−Ｎ（Ｒ５Ａ）２、又は必要に応じて置換されたアルキル、アリール、ヘテロアルキル若しくは複素環であるか、又はＲ３とＲ３及びＲ５が結合する原子とともに必要に応じて置換された環式部分を形成し、Ｒ５Ａはそれぞれ水素、又は必要に応じて置換されたアルキル、アリール、ヘテロアルキル若しくは複素環である）。
【００１１】
本発明は本明細書で開示される化合物を含む医薬組成物を包含する。
【００１２】
本発明は、本明細書で開示される化合物を用いて、Ｎｏｔｕｍペクチンアセチルエステラーゼ（「ＮＯＴＵＭ」）を阻害する方法と、皮質骨内の骨形成を刺激する方法と、骨粗鬆症等の骨量の低下に関連する疾患及び障害を治療、管理及び予防する方法とを更に包含する。
【００１３】
４．  図面の簡単な説明
添付の図面を参照して本発明の或る特定の態様を理解することができる。
【図面の簡単な説明】
【００１４】
【図１】ＮＯＴＵＭホモ接合型ノックアウトマウス（「ＨＯＭ」）の様々な骨部位の皮質骨の厚さとその野生型同腹子（「ＷＴ」）の様々な骨部位の皮質骨の厚さとの間の差を示す図である。
【図２】ＮＯＴＵＭホモ接合型ノックアウトマウスとヘテロ接合型ノックアウトマウス（「ＨＥＴ」）の両方で観察される皮質骨の厚さがその野生型同腹子と比較して増大していることを示す図である。
【図３】雄性のＮＯＴＵＭホモ接合型ノックアウトマウス及びヘテロ接合型ノックアウトマウス及びその野生型同腹子の骨で行った大腿骨破壊強度試験及び脊椎圧迫試験により得られた結果を示す図である。
【図４】雌性のＮＯＴＵＭホモ接合型ノックアウトマウス及びヘテロ接合型ノックアウトマウス及びその野生型同腹子の骨で行った大腿骨破壊強度試験及び脊椎圧迫試験により得られた結果を示す図である。
【図５】Ｆ１雄性ハイブリッド（１２９×Ｃ５７）マウスに、１ｍｇ／ｋｇ、８ｍｇ／ｋｇ及び２４ｍｇ／ｋｇのＮＯＴＵＭ阻害剤２−（（５，６−ジメチルチエノ［２，３−ｄ］ピリミジン−４−イル）チオ）酢酸を投与した２５日後に得られる大腿骨の中央骨幹の皮質骨の厚さの測定結果を示す図である。
【図６】卵巣切除したＦｉｓｃｈｅｒ  ３４４ラットに、２−（（５−クロロ−６−メチルチエノ［２，３−ｄ］ピリミジン−４−イル）チオ）酢酸を投与した５週間後に得られる大腿骨の中央骨幹の皮質骨の厚さの測定結果を示す図である。ここで「擬似対照」は卵巣切除せず、化合物を投与しなかったラットを表し、「擬似＋化合物」は卵巣切除しなかったが、化合物を投与したラットを表し、「ＯＶＸ対照」は卵巣切除したが、化合物を投与しなかったラットを表し、「ＯＶＸ＋化合物」は卵巣を切除し、化合物を投与したラットを表す。
【図７】図６に関連して同じ実験により得られた脛骨の中央骨幹の皮質骨の厚さの測定結果を示す図である。
【図８】Ｆ１雄性ハイブリッド（１２９×Ｃ５７）マウスに、３ｍｇ／ｋｇ、１０ｍｇ／ｋｇ及び３０ｍｇ／ｋｇのＮＯＴＵＭ阻害剤２−（（６−クロロ−７−シクロプロピルチエノ［３，２−ｄ］ピリミジン−４−イル）チオ）酢酸を投与した２５日後に得られた大腿骨の中央骨幹の皮質骨の厚さの測定結果を示す図である。
【図９】Ｆ１雄性ハイブリッド（１２９×Ｃ５７）マウスに、３４ｍｇ／ｋｇのＮＯＴＵＭ阻害剤２−（（６−クロロ−７−メチルチエノ［３，２−ｄ］ピリミジン−４−イル）チオ）酢酸を投与した７日後及び１８日後に得られた大腿骨の中央骨幹の皮質骨の厚さの測定結果を示す図である。
【発明を実施するための形態】
【００１５】
５．  発明の詳細な説明
本発明は、ＮＯＴＵＭの阻害が皮質骨内の骨形成に影響を与えることができるという発見に一部基づいている。本発明の特定の態様は、機能的なＮＯＴＵＭ遺伝子を欠いたマウス（「ノックアウトマウス」）の研究に、ＮＯＴＵＭを阻害する化合物の発見に、並びにかかる化合物をマウス及びラットにおいて皮質の骨形成を刺激するのに使用することができるという発見に基づいている。
【００１６】
５．１．  定義
特に明示のない限り、「アルケニル」という用語は、２〜２０（例えば、２〜１０又は２〜６）個の炭素原子を有し、少なくとも１つの炭素−炭素二重結合を含む直鎖、分岐鎖及び／又は環式の炭化水素を意味する。代表的なアルケニル部分としては、ビニル、アリル、１−ブテニル、２−ブテニル、イソブチレニル、１−ペンテニル、２−ペンテニル、３−メチル−１−ブテニル、２−メチル−２−ブテニル、２，３−ジメチル−２−ブテニル、１−ヘキセニル、２−ヘキセニル、３−ヘキセニル、１−ヘプテニル、２−ヘプテニル、３−ヘプテニル、１−オクテニル、２−オクテニル、３−オクテニル、１−ノネニル、２−ノネニル、３−ノネニル、１−デセニル、２−デセニル及び３−デセニルが挙げられる。
【００１７】
特に明示のない限り、「アルコキシ」という用語は、−Ｏ−アルキル基を意味する。アルコキシ基の例としては、−ＯＣＨ３、−ＯＣＨ２ＣＨ３、−Ｏ（ＣＨ２）２ＣＨ３、−Ｏ（ＣＨ２）３ＣＨ３、−Ｏ（ＣＨ２）４ＣＨ３及び−Ｏ（ＣＨ２）５ＣＨ３が挙げられるが、これらに限定されない。
【００１８】
特に明示のない限り、「アルキル」という用語は、直鎖、分岐鎖及び／又は環式（「シクロアルキル」）の炭化水素を意味する。非環式アルキル部分は１〜２０（例えば、１〜１０又は１〜４）個の炭素原子を有するものとし、環式アルキル部分は３〜２０（例えば３〜１０又は３〜６）個の炭素原子を有するものとする。１個〜４個の炭素を有するアルキル部分は「低級アルキル」と称される。アルキル基の例としては、メチル、エチル、プロピル、イソプロピル、ｎ−ブチル、ｔ−ブチル、イソブチル、ペンチル、ヘキシル、イソヘキシル、ヘプチル、４，４−ジメチルペンチル、オクチル、２，２，４−トリメチルペンチル、ノニル、デシル、ウンデシル及びドデシルが挙げられるが、これらに限定されない。シクロアルキル部分は単環式又は多環式であってもよく、例としてはシクロプロピル、シクロブチル、シクロペンチル、シクロヘキシル及びアダマンチルが挙げられる。アルキル部分の更なる例は直鎖部分、分岐鎖部分及び／又は環式部分（例えば、１−エチル−４−メチル−シクロヘキシル）を有する。「アルキル」という用語は飽和炭化水素、並びにアルケニル部分及びアルキニル部分を含む。
【００１９】
特に明示のない限り、「アルキルアリール」又は「アルキル−アリール」という用語は、アリール部分と結合したアルキル部分を意味する。
【００２０】
特に明示のない限り、「アルキルヘテロアリール」又は「アルキル−ヘテロアリール」という用語は、ヘテロアリール部分と結合したアルキル部分を意味する。
【００２１】
特に明示のない限り、「アルキル複素環」又は「アルキル−複素環」という用語は、複素環部分と結合したアルキル部分を意味する。
【００２２】
特に明示のない限り、「アルキニル」という用語は、２〜２０（例えば、２〜２０又は２〜６）個の炭素原子を有し、少なくとも１つの炭素−炭素三重結合を含む直鎖、分岐鎖又は環式の炭化水素を意味する。代表的なアルキニル部分としては、アセチレニル、プロピニル、１−ブチニル、２−ブチニル、１−ペンチニル、２−ペンチニル、３−メチル−１−ブチニル、４−ペンチニル、１−ヘキシニル、２−ヘキシニル、５−ヘキシニル、１−ヘプチニル、２−ヘプチニル、６−ヘプチニル、１−オクチニル、２−オクチニル、７−オクチニル、１−ノニニル、２−ノニニル、８−ノニニル、１−デシニル、２−デシニル及び９−デシニルが挙げられる。
【００２３】
特に明示のない限り、「アリール」という用語は、炭素原子及び水素原子で構成される芳香環、又は芳香族若しくは部分芳香族の環系を意味する。アリール部分はともに結合又は縮合した複数の環を含んでいてもよい。アリール部分の例としては、アントラセニル、アズレニル、ビフェニル、フルオレニル、インダン、インデニル、ナフチル、フェナントレニル、フェニル、及び１，２，３，４−テトラヒドロ−ナフタレンが挙げられるが、これらに限定されない。
【００２４】
特に明示のない限り、「アリールアルキル」又は「アリール−アルキル」という用語は、アルキル部分と結合したアリール部分を意味する。
【００２５】
特に明示のない限り、「ハロゲン」及び「ハロ」という用語は、フッ素、塩素、臭素及びヨウ素を包含する。
【００２６】
特に明示のない限り、「ヘテロアルキル」という用語は、炭素原子の少なくとも１つがヘテロ原子（例えば、Ｎ、Ｏ又はＳ）で置き換えられたアルキル部分（直鎖、分岐鎖又は環式）を表す。
【００２７】
特に明示のない限り、「ヘテロアルキルアリール」又は「ヘテロアルキル−アリール」という用語は、アルキル部分と結合したヘテロアルキル部分を表す。
【００２８】
特に明示のない限り、「ヘテロアルキル複素環」又は「ヘテロアルキル−複素環」という用語は、複素環部分と結合したヘテロアルキル部分を表す。
【００２９】
特に明示のない限り、「ヘテロアリール」という用語は、炭素原子の少なくとも１つがヘテロ原子（例えば、Ｎ、Ｏ又はＳ）で置き換えられたアリール部分を意味する。例としては、アクリジニル、ベンゾイミダゾリル、ベンゾフラニル、ベンゾイソチアゾリル、ベンゾイソオキサゾリル、ベンゾキナゾリニル、ベンゾチアゾリル、ベンズオキサゾリル、フリル、イミダゾリル、インドリル、イソチアゾリル、イソオキサゾリル、オキサジアゾリル、オキサゾリル、フタラジニル、ピラジニル、ピラゾリル、ピリダジニル、ピリジル、ピリミジニル、ピリミジル、ピロリル、キナゾリニル、キノリニル、テトラゾリル、チアゾリル及びトリアジニルが挙げられるが、これらに限定されない。
【００３０】
特に明示のない限り、「ヘテロアリールアルキル」又は「ヘテロアリール−アルキル」という用語は、アルキル部分と結合したヘテロアリール部分を意味する。
【００３１】
特に明示のない限り、「複素環」という用語は、炭素、水素及び少なくとも１つのヘテロ原子（例えば、Ｎ、Ｏ又はＳ）で構成される芳香族、部分芳香族、又は非芳香族の単環式又は多環式の環又は環系を表す。複素環は、ともに縮合又は結合した複数（すなわち２つ以上）の環を含み得る。複素環はヘテロアリールを含む。例としては、ベンゾ［１，３］ジオキソリル、２，３−ジヒドロ−ベンゾ［１，４］ジオキシニル、シンノリニル、フラニル、ヒダントイニル、モルホリニル、オキセタニル、オキシラニル、ピペラジニル、ピペリジニル、ピロリジノニル、ピロリジニル、テトラヒドロフラニル、テトラヒドロピラニル、テトラヒドロピリジニル、テトラヒドロピリミジニル、テトラヒドロチオフェニル、テトラヒドロチオピラニル及びバレロラクタミルが挙げられるが、これらに限定されない。
【００３２】
特に明示のない限り、「複素環アルキル」又は「複素環−アルキル」という用語は、アルキル部分と結合した複素環部分を表す。
【００３３】
特に明示のない限り、「ヘテロシクロアルキル」という用語は、非芳香族の複素環を表す。
【００３４】
特に明示のない限り、「ヘテロシクロアルキルアルキル」又は「ヘテロシクロアルキル−アルキル」という用語は、アルキル部分と結合したヘテロシクロアルキル部分を表す。
【００３５】
特に明示のない限り、「管理する（manage）」、「管理すること（managing）」及び「管理（management）」という用語は、特定の疾患若しくは障害に既に罹患した患者において疾患若しくは障害の再発を予防すること、及び／又は疾患若しくは障害に罹患している患者が寛解期にある時間を延長させることを包含する。この用語は、疾患若しくは障害の閾値、発症及び／又は継続期間を調節すること、又は患者の疾患若しくは障害に対する応答の仕方を変えることを包含する。
【００３６】
特に明示のない限り、「薬学的に許容される塩」という用語は、薬学的に許容される非毒性の酸又は塩基（無機酸及び無機塩基並びに有機酸及び有機塩基を含む）から調製される塩を表す。好適な薬学的に許容される塩基付加塩としては、アルミニウム、カルシウム、リチウム、マグネシウム、カリウム、ナトリウム及び亜鉛から生成される金属塩、又はリジン、Ｎ，Ｎ’−ジベンジルエチレンジアミン、クロロプロカイン、コリン、ジエタノールアミン、エチレンジアミン、メグルミン（Ｎ−メチルグルカミン）及びプロカインから生成される有機塩が挙げられるが、これらに限定されない。好適な非毒性の酸としては、酢酸、アルギン酸、アントラニル酸、ベンゼンスルホン酸、安息香酸、カンファースルホン酸、クエン酸、エテンスルホン酸、ギ酸、フマル酸、フロ酸、ガラクツロン酸、グルコン酸、グルクロン酸、グルタミン酸、グリコール酸、臭化水素酸、塩酸、イセチオン酸、乳酸、マレイン酸、リンゴ酸、マンデル酸、メタンスルホン酸、ムチン酸、硝酸、パモン酸、パントテン酸、フェニル酢酸、リン酸、プロピオン酸、サリチル酸、ステアリン酸、コハク酸、スルファニル酸、硫酸、酒石酸及びｐ−トルエンスルホン酸等の無機酸及び有機酸が挙げられるが、これらに限定されない。具体的な非毒性の酸としては、塩酸、臭化水素酸、リン酸、硫酸、及びメタンスルホン酸が挙げられる。したがって、具体的な塩の例としては、塩酸塩及びメシル酸塩が挙げられる。他のものも当該技術分野において既知である。例えば、Remington's Pharmaceutical Sciences（第１８版、Mack Publishing, Easton PA: 1990）、及びRemington: The Science and Practice of Pharmacy（第１９版、Mack Publishing, Easton PA: 1995）を参照されたい。
【００３７】
特に明示のない限り、「予防する（prevent）」、「予防すること（preventing）」及び「予防（prevention）」という用語は、患者が特定の疾患又は障害に罹患し始める前に行う処置を意図するものであり、疾患又は障害の重症度を抑制又は低減する。換言すると、この用語は予防法を包含する。
【００３８】
特に明示のない限り、化合物の「予防的に有効な量」は、疾患若しくは病態、若しくは疾患若しくは病態に関連する１つ若しくは複数の症状を予防するのに、又はその再発を予防するのに十分な量である。化合物の「予防的に有効な量」は、単独で又は他の薬剤と組み合わせて、疾患の予防において予防的利点をもたらす治療剤の量を意味する。「予防的に有効な量」という用語は、予防法を全体的に改善する、又は別の予防剤の予防的な有効性を高める量を包含し得る。
【００３９】
特に明示のない限り、「置換（された）」という用語は、化学構造又は部分を説明するために使用する場合は、水素原子の１つ又は複数が、アルコール、アルデヒド、アルコキシ、アルカノイルオキシ、アルコキシカルボニル、アルケニル、アルキル（例えば、メチル、エチル、プロピル、シクロプロピル、ｔ−ブチル）、アルキニル、アルキルカルボニルオキシ（−ＯＣ（Ｏ）アルキル）、アミド（例えば、−Ｃ（Ｏ）ＮＨ−アルキル−、−アルキルＮＨＣ（Ｏ）アルキル）、アミジニル（例えば、−Ｃ（ＮＨ）ＮＨ−アルキル−、−Ｃ（ＮＲ）ＮＨ２）、アミン（アルキルアミノ、アリールアミノ、アリールアルキルアミノ等の第１級、第２級及び第３級のアミン）、アロイル、アリール、アリールオキシ、アゾ、カルバモイル（例えば、−ＮＨＣ（Ｏ）Ｏ−アルキル−、−ＯＣ（Ｏ）ＮＨ−アルキル）、カルバミル（例えば、ＣＯＮＨ２、ＣＯＮＨ−アルキル、ＣＯＮＨ−アリール、ＣＯＮＨ−アリールアルキル）、カルボニル、カルボキシル、カルボン酸、カルボン酸無水物、カルボン酸塩化物、シアノ、エステル、エポキシド、エーテル（例えば、メトキシ、エトキシ）、グアニジノ、ハロ、ハロアルキル（例えば、−ＣＣｌ３、−ＣＦ３、−Ｃ（ＣＦ３）３）、ヘテロアルキル、ヘミアセタール、イミン（第１級及び第２級）、イソシアネート、イソチオシアネート、ケトン、ニトリル、ニトロ、オキソ、ホスホジエステル、スルフィド、スルホンアミド（例えば、ＳＯ２ＮＨ２）、スルホン、スルホニル（アルキルスルホニル、アリールスルホニル及びアリールアルキルスルホニルを含む）、スルホキシド、チオール（例えば、スルフヒドリル、チオエーテル）並びに尿素（例えば、−ＮＨＣＯＮＨ−アルキル−）等の（しかしこれらに限定されない）化学的部分又は官能基で置換された、その構造又は部分の誘導体を表す。特定の置換基は、アルコキシ、アルキル、アミノ（アルキルアミノ、ジアルキルアミノを含む）、アリール、カルボン酸、シアノ、ハロ、ハロアルキル、複素環及びヒドロキシルである。
【００４０】
特に明示のない限り、化合物の「治療的に有効な量」は、疾患若しくは病態の治療若しくは管理において治療的利点をもたらすのに、又は疾患若しくは病態に関連した１つ若しくは複数の症状を遅延させる若しくは最小限に抑えるのに十分な量である。化合物の「治療的に有効な量」は、疾患又は病態の治療又は管理に治療的利点をもたらす、単独の又は他の療法と組み合わせた治療剤の量を意味する。「治療的に有効な量」という用語は、療法を全体的に改善するか、疾患若しくは病態の症状若しくは原因を低減若しくは回避するか、又は別の治療剤の治療的な有効性を高める量を包含し得る。
【００４１】
特に明示のない限り、「治療する（treat）」、「治療すること（treating）」及び「治療（treatment）」という用語は、患者が特定の疾患又は障害に罹患している間に行う処置を意図し、これによって疾患若しくは障害の重症度が低減するか、又は疾患若しくは障害の進行が遅延若しくは減速する。
【００４２】
特に明示のない限り、「挙げられる（含む）（include）」という用語は、「挙げられる（含む）が、これらに限定されない」と同じ意味を有し、「挙げられる（含む）（includes）」という用語は、「挙げられる（含む）が、これらに限定されない」と同じ意味を有する。同様に、「等の（such as）」という用語は、「等の（しかしこれらに限定されない）」という用語と同じ意味を有する。
【００４３】
特に明示のない限り、一連の名詞の直前にくる１つ又は複数の形容詞は、それぞれの名詞を修飾するものとして解釈される。例えば、「必要に応じて置換されたアルキル、アリール又はヘテロアリール」という語句は、「必要に応じて置換されたアルキル、必要に応じて置換されたアリール、又は必要に応じて置換されたヘテロアリール」と同じ意味を有する。
【００４４】
より大きい化合物の一部分を形成する化学的部分は、単一分子として存在する場合に一般的に与えられる名称、又はその基に一般的に与えられる名称を使用して本明細書に記載されることがあることに留意すべきである。例えば、「ピリジン」及び「ピリジル」という用語には、他の化学的部分と結合した部分を説明するのに使用する場合に、同じ意味が与えられる。したがって、「ＸＯＨ（式中、Ｘはピリジルである）」及び「ＸＯＨ（式中、Ｘはピリジンである）」という２つの語句には同じ意味が与えられ、化合物ピリジン−２−オール、ピリジン−３−オール及びピリジン−４−オールが包含される。
【００４５】
或る構造又は或る構造の一部分の立体化学が例えば太線又は破線で示されない場合、その構造又はその構造の一部分はその全ての立体異性体を包含すると解釈されることにも留意すべきである。さらに、満たされていない原子価を有することが図で示された任意の原子はこの原子価を満たすのに十分な水素原子と結合していると推測される。加えて、一本の破線と平行した一本の実線で示された化学結合は、原子価が許容する場合、単結合及び二重結合の両方（例えば、芳香族結合）を包含する。
【００４６】
５．２．  化合物
本発明は、式：
【化２】
2013537202.tif 000004
【００４７】
の化合物及びその薬学的に許容される塩を包含する（式中、Ｅ及びＧの一方が窒素であり、Ｅ及びＧのもう一方が窒素又はＣＲ４であり、Ｙ及びＺの一方がＣＲ５であり、Ｙ及びＺのもう一方がＯ又はＳ（Ｏ）ｍ（ここでｍは０、１又は２である）であり、Ｒ１はハロ、−Ｒ１Ａ、−ＯＲ１Ａ、−Ｓ（Ｏ）ｎＲ１Ａ、−Ｓ（Ｏ）ｎＯＲ１Ａ、又は−Ｓ（Ｏ）ｎＮ（Ｒ１Ａ）２（ここでｎは０、１又は２である）であり、Ｒ１Ａはそれぞれ独立して水素、又は必要に応じて置換されたアルキル、アリール、ヘテロアルキル若しくは複素環であり、Ｒ２は水素、ハロ、−ＣＯ２Ｒ２Ａ、−Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ２Ａ）２、−ＳＲ２Ａ、−ＯＲ２Ａ、−Ｎ（Ｒ２Ａ）２、又は必要に応じて置換されたアルキル、アリール、ヘテロアルキル若しくは複素環であり、Ｒ２Ａはそれぞれ独立して水素、又は必要に応じて置換されたアルキル、アリール、ヘテロアルキル若しくは複素環であり、Ｒ３は水素、ハロ、シアノ、−ＣＯ２Ｒ３Ａ、−Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ３Ａ）２、−ＳＲ３Ａ、−ＯＲ３Ａ、−Ｎ（Ｒ３Ａ）２、必要に応じて置換されたアルキル、アリール、ヘテロアルキル若しくは複素環であるか、又はＲ５とＲ５及びＲ３が結合する原子とともに必要に応じて置換された環式部分を形成し、Ｒ３Ａはそれぞれ独立して水素、又は必要に応じて置換されたアルキル、アリール、ヘテロアルキル若しくは複素環であり、Ｒ４は水素、ハロ、又は必要に応じて置換されたアルキル、アリール、ヘテロアルキル若しくは複素環であり、Ｒ５は水素、ハロ、−ＣＯ２Ｒ５Ａ、−Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ５Ａ）２、−ＳＲ５Ａ、−ＯＲ５Ａ、−Ｎ（Ｒ５Ａ）２、又は必要に応じて置換されたアルキル、アリール、ヘテロアルキル若しくは複素環であるか、又はＲ３とＲ３及びＲ５が結合する原子とともに必要に応じて置換された環式部分を形成し、Ｒ５Ａはそれぞれ独立して水素、又は必要に応じて置換されたアルキル、アリール、ヘテロアルキル若しくは複素環である）。Ｙと、Ｒ３が結合する炭素と、Ｚとの間に示される内部結合は破線で示していることに留意されたい。
【００４８】
幾つかの化合物では、Ｅ及びＧの両方が窒素である。
【００４９】
幾つかの化合物では、ＺはＳである。
【００５０】
幾つかの化合物では、ＹはＳである。
【００５１】
幾つかの化合物では、Ｒ１は−Ｒ１Ａ又は−Ｓ（Ｏ）ｎＲ１Ａである。幾つかの化合物では、Ｒ１Ａは置換アルキルである。特定の化合物では、Ｒ１Ａは、シアノ、ハロ、ヒドロキシル、−Ｎ（Ｒ１Ｂ）２、−Ｓ（Ｏ）ｐＲ１Ｂ、−Ｓ（Ｏ）ｐＯＲ１Ｂ、−Ｓ（Ｏ）ｐＮ（Ｒ１Ｂ）２、−Ｃ（Ｏ）ＯＲ１Ｂ、−Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ１Ｂ）２、又は−Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ１Ｂ）Ｓ（Ｏ）ｐＲ１Ｂ（ここでＲ１Ｂはそれぞれ独立して水素、又は必要に応じて置換されたアルキル、アリール、ヘテロアルキル若しくは複素環であり、ｐは０、１又は２である）のうちの１つ又は複数で置換されている。幾つかの化合物では、Ｒ１Ｂは、アルコキシ、アルキル、アミノ（アルキルアミノ、ジアルキルアミノを含む）、アリール、カルボン酸、シアノ、ハロ、ハロアルキル、複素環、又はヒドロキシルのうちの１つ又は複数で必要に応じて置換されている。
【００５２】
幾つかの化合物では、Ｒ１Ａは置換アルキルである。幾つかの化合物では、Ｒ１Ａは−Ｃ（Ｏ）ＯＲ１Ｂで置換されている。他の化合物では、Ｒ１Ａは−Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ１Ｂ）２で置換されている。特定の化合物では、Ｒ１Ｂは水素又は低級アルキルである。
【００５３】
幾つかの化合物では、Ｒ２は水素、ハロ又は低級アルキルである。特定の化合物では、Ｒ２は水素である。
【００５４】
幾つかの化合物では、Ｒ３はシアノ、ハロ、ヒドロキシル、又は必要に応じて置換されたアルキルである。
【００５５】
幾つかの化合物では、Ｒ４は水素である。
【００５６】
幾つかの化合物では、Ｒ５はシアノ、ハロ、ヒドロキシル、又は必要に応じて置換されたアルキルである。
【００５７】
幾つかの化合物は、式：
【化３】
2013537202.tif 000005
の化合物である。
【００５８】
他の化合物は、式：
【化４】
2013537202.tif 000006
の化合物である。
【００５９】
幾つかの化合物は、式：
【化５】
2013537202.tif 000007
【００６０】
の化合物である（式中、ＸはＯＲ１Ａ又はＮ（Ｒ１Ａ）２であり、Ｒ１Ｂはそれぞれ独立して水素、又は必要に応じて置換されたアルキル、アリール、ヘテロアルキル若しくは複素環であり、Ｒ２は水素又は必要に応じて置換されたアルキルであり、Ｒ２Ａはそれぞれ独立して、水素、又は必要に応じて置換されたアルキル、アリール、ヘテロアルキル若しくは複素環であり、Ｒ３はハロ、−Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ３Ａ）２、−ＳＲ３Ａ、−ＯＲ３Ａ、−Ｎ（Ｒ３Ａ）２、必要に応じて置換されたアルキル、アリール、ヘテロアルキル、又は複素環であり、Ｒ３Ａはそれぞれ独立して、水素、必要に応じて置換されたアルキル、アリール、ヘテロアルキル、又は複素環であり、Ｒ５はハロ、−ＣＯ２Ｒ５Ａ、−Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ５Ａ）２、−ＳＲ５Ａ、−ＯＲ５Ａ、−Ｎ（Ｒ５Ａ）２、又は必要に応じて置換されたアルキル、アリール、ヘテロアルキル若しくは複素環であり、Ｒ５Ａはそれぞれ独立して水素、必要に応じて置換されたアルキル、アリール、ヘテロアルキル、又は複素環であり、ｎは０、１又は２である）。
【００６１】
この式の特定の化合物では、ｎは１又は２である。幾つかの化合物では、ｎは０である。
【００６２】
幾つかの化合物では、ＸはＮ（Ｒ１Ａ）２である。
【００６３】
本発明の一実施形態は、式：
【化６】
2013537202.tif 000008
【００６４】
の化合物及びその薬学的に許容される塩を包含する（式中、Ｒ１Ｂは水素、又は必要に応じて置換されたアルキル、アリール、ヘテロアルキル若しくは複素環であり、Ｒ２は水素又は必要に応じて置換されたアルキルであり、Ｒ２Ａはそれぞれ独立して水素、又は必要に応じて置換されたアルキル、アリール、ヘテロアルキル若しくは複素環であり、Ｒ３はハロ、−Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ３Ａ）２、−ＳＲ３Ａ、−ＯＲ３Ａ、−Ｎ（Ｒ３Ａ）２、必要に応じて置換されたアルキル、アリール、ヘテロアルキル、又は複素環であり、Ｒ３Ａはそれぞれ独立して水素、必要に応じて置換されたアルキル、アリール、ヘテロアルキル、又は複素環であり、Ｒ５はハロ、−ＣＯ２Ｒ５Ａ、−Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ５Ａ）２、−ＳＲ５Ａ、−ＯＲ５Ａ、−Ｎ（Ｒ５Ａ）２、又は必要に応じて置換されたアルキル、アリール、ヘテロアルキル若しくは複素環であり、Ｒ５Ａはそれぞれ独立して水素、必要に応じて置換されたアルキル、アリール、ヘテロアルキル、又は複素環である）。
【００６５】
特定の化合物は、Ｒ２が水素であり、Ｒ３はメチルであり、Ｒ５がクロロである場合、Ｒ１Ｂはエチルではなく；Ｒ３がメチルである場合、Ｒ５はメチル又は必要に応じて置換されたフェニルではないようなものである。幾つかの化合物では、Ｒ３は低級アルキル（例えばメチル）ではない。幾つかの化合物では、Ｒ５は低級アルキル（例えばメチル）ではない。
【００６６】
幾つかの化合物では、Ｒ１Ｂは水素、又は必要に応じて置換されたアルキル（例えば低級アルキル）若しくはアリールである。特定の化合物では、Ｒ１Ｂは水素又はアルキルである。
【００６７】
幾つかの化合物では、Ｒ３はアルキル又はハロ（例えばクロロ）である。
【００６８】
幾つかの化合物では、Ｒ５はアルキル（例えば低級アルキル）又はハロである。
【００６９】
本発明の一実施形態は、式：
【化７】
2013537202.tif 000009
【００７０】
の化合物及びその薬学的に許容される塩を包含する（式中、Ｒ１Ｂは水素、又は必要に応じて置換されたアルキル、アリール、ヘテロアルキル若しくは複素環であり、Ｒ２は水素、ハロ、−ＣＯ２Ｒ２Ａ、−Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ２Ａ）２、−ＳＲ２Ａ、−ＯＲ２Ａ若しくは−Ｎ（Ｒ２Ａ）２、又は必要に応じて置換されたアルキル、アリール、ヘテロアルキル若しくは複素環であり、Ｒ２Ａはそれぞれ独立して水素、必要に応じて置換されたアルキル、アリール、ヘテロアルキル、又は複素環であり、Ｒ３は水素、ハロ、シアノ、−ＣＯ２Ｒ３Ａ、−Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ３Ａ）２、−ＳＲ３Ａ、−ＯＲ３Ａ、−Ｎ（Ｒ３Ａ）２、必要に応じて置換されたアルキル、アリール、ヘテロアルキル、又は複素環であり、Ｒ３Ａはそれぞれ独立して水素、必要に応じて置換されたアルキル、アリール、ヘテロアルキル、又は複素環であり、Ｒ５は水素、ハロ、−ＣＯ２Ｒ５Ａ、−Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ５Ａ）２、−ＳＲ５Ａ、−ＯＲ５Ａ、−Ｎ（Ｒ５Ａ）２、又は必要に応じて置換されたアルキル、アリール、ヘテロアルキル若しくは複素環であり、Ｒ５Ａはそれぞれ独立して水素、必要に応じて置換されたアルキル、アリール、ヘテロアルキル、又は複素環であり、ｎは１又は２である）。
【００７１】
この式の幾つかの化合物では、Ｒ１Ｂは水素、又は必要に応じて置換されたアルキル（例えば低級アルキル）若しくはアリールである。特定の化合物では、Ｒ１Ｂは水素又はアルキルである。
【００７２】
幾つかの化合物では、Ｒ２は水素又は必要に応じて置換されたアルキルである。
【００７３】
幾つかの化合物では、Ｒ３はアルキル又はハロ（例えばクロロ）である。幾つかの化合物では、Ｒ３は低級アルキル（例えばメチル）ではない。
【００７４】
幾つかの化合物では、Ｒ５はアルキル（例えば低級アルキル）又はハロである。幾つかの化合物では、Ｒ５は低級アルキル（例えばメチル）ではない。
【００７５】
本発明の幾つかの化合物は、式：
【化８】
2013537202.tif 000010
【００７６】
の化合物である（式中、ＸはＯＲ１Ａ又はＮ（Ｒ１Ａ）２であり、Ｒ１Ｂはそれぞれ独立して水素、又は必要に応じて置換されたアルキル、アリール、ヘテロアルキル若しくは複素環であり、Ｒ２は水素又は必要に応じて置換されたアルキルであり、Ｒ２Ａはそれぞれ独立して水素、又は必要に応じて置換されたアルキル、アリール、ヘテロアルキル若しくは複素環であり、Ｒ３はハロ、−Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ３Ａ）２、−ＳＲ３Ａ、−ＯＲ３Ａ、−Ｎ（Ｒ３Ａ）２、必要に応じて置換されたアルキル、アリール、ヘテロアルキル、又は複素環であり、Ｒ３Ａはそれぞれ独立して水素、必要に応じて置換されたアルキル、アリール、ヘテロアルキル、又は複素環であり、Ｒ５はハロ、−ＣＯ２Ｒ５Ａ、−Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ５Ａ）２、−ＳＲ５Ａ、−ＯＲ５Ａ、−Ｎ（Ｒ５Ａ）２、又は必要に応じて置換されたアルキル、アリール、ヘテロアルキル若しくは複素環であり、Ｒ５Ａはそれぞれ独立して水素、必要に応じて置換されたアルキル、アリール、ヘテロアルキル、又は複素環であり、ｎは０、１又は２である）。
【００７７】
この式の特定の化合物では、ｎは１又は２である。幾つかの化合物では、ｎは０である。
【００７８】
幾つかの化合物では、ＸはＮ（Ｒ１Ａ）２である。
【００７９】
本発明の一実施形態は、式：
【化９】
2013537202.tif 000011
【００８０】
の化合物及びその薬学的に許容される塩を包含する（式中、Ｒ１Ｂは水素、又は必要に応じて置換されたアルキル、アリール、ヘテロアルキル若しくは複素環であり、Ｒ２は水素又は必要に応じて置換されたアルキルであり、Ｒ２Ａはそれぞれ独立して水素、必要に応じて置換されたアルキル、アリール、ヘテロアルキル、又は複素環であり、Ｒ３はハロ、−ＣＯ２Ｒ３Ａ、−Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ３Ａ）２、−ＳＲ３Ａ、−ＯＲ３Ａ、−Ｎ（Ｒ３Ａ）２、必要に応じて置換されたアルキル、アリール、ヘテロアルキル、又は複素環であり、Ｒ３Ａはそれぞれ独立して水素、必要に応じて置換されたアルキル、アリール、ヘテロアルキル、又は複素環であり、Ｒ５はハロ、−ＣＯ２Ｒ５Ａ、−Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ５Ａ）２、−ＳＲ５Ａ、−ＯＲ５Ａ、−Ｎ（Ｒ５Ａ）２、又は必要に応じて置換されたアルキル、アリール、ヘテロアルキル若しくは複素環であり、Ｒ５Ａはそれぞれ独立して水素、必要に応じて置換されたアルキル、アリール、ヘテロアルキル、又は複素環である）。
【００８１】
この式の幾つかの化合物では、Ｒ２は水素、又は必要に応じて置換されたアルキルである。
【００８２】
幾つかの化合物では、Ｒ１Ｂは水素、又は必要に応じて置換されたアルキル（例えば低級アルキル）若しくはアリールである。特定の化合物では、Ｒ１Ｂは水素又はアルキルである。
【００８３】
幾つかの化合物では、Ｒ３はアルキル又はハロ（例えばクロロ）である。幾つかの化合物では、Ｒ３は低級アルキル（例えばメチル）ではない。
【００８４】
幾つかの化合物では、Ｒ５はアルキル（例えば低級アルキル）又はハロである。幾つかの化合物では、Ｒ５は低級アルキル（例えばメチル）ではない。
【００８５】
本発明の一実施形態は、式：
【化１０】
2013537202.tif 000012
【００８６】
の化合物及びその薬学的に許容される塩を包含する（式中、Ｒ１Ｂは水素、又は必要に応じて置換されたアルキル、アリール、ヘテロアルキル若しくは複素環であり、Ｒ２は水素、ハロ、−ＣＯ２Ｒ２Ａ、−Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ２Ａ）２、−ＳＲ２Ａ、−ＯＲ２Ａ若しくは−Ｎ（Ｒ２Ａ）２、又は必要に応じて置換されたアルキル、アリール、ヘテロアルキル若しくは複素環であり、Ｒ２Ａはそれぞれ独立して水素、必要に応じて置換されたアルキル、アリール、ヘテロアルキル、又は複素環であり、Ｒ３は水素、ハロ、シアノ、−ＣＯ２Ｒ３Ａ、−Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ３Ａ）２、−ＳＲ３Ａ、−ＯＲ３Ａ、−Ｎ（Ｒ３Ａ）２、必要に応じて置換されたアルキル、アリール、ヘテロアルキル、又は複素環であり、Ｒ３Ａはそれぞれ独立して水素、必要に応じて置換されたアルキル、アリール、ヘテロアルキル、又は複素環であり、Ｒ４は水素、ハロ、又は必要に応じて置換されたアルキル、アリール、ヘテロアルキル若しくは複素環であり、Ｒ５は水素、ハロ、−ＣＯ２Ｒ５Ａ、−Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ５Ａ）２、−ＳＲ５Ａ、−ＯＲ５Ａ、−Ｎ（Ｒ５Ａ）２、又は必要に応じて置換されたアルキル、アリール、ヘテロアルキル若しくは複素環であり、Ｒ５Ａはそれぞれ独立して水素、必要に応じて置換されたアルキル、アリール、ヘテロアルキル、又は複素環であり、ｎは１又は２である）。
【００８７】
この式の幾つかの化合物では、Ｒ１Ｂは水素、又は必要に応じて置換されたアルキル（例えば低級アルキル）若しくはアリールである。特定の化合物では、Ｒ１Ｂは水素又はアルキルである。
【００８８】
幾つかの化合物では、Ｒ２は水素又は必要に応じて置換されたアルキルである。
【００８９】
幾つかの化合物では、Ｒ３はアルキル又はハロ（例えばクロロ）である。幾つかの化合物では、Ｒ３は低級アルキル（例えばメチル）ではない。
【００９０】
幾つかの化合物では、Ｒ５はアルキル（例えば低級アルキル）又はハロである。幾つかの化合物では、Ｒ５は低級アルキル（例えばメチル）ではない。
【００９１】
本発明の一実施形態は、式：
【化１１】
2013537202.tif 000013
【００９２】
の化合物及びその薬学的に許容される塩を包含する（式中、Ｒ１Ａはそれぞれ独立して水素、又は必要に応じて置換されたアルキル、アリール、ヘテロアルキル若しくは複素環であり、Ｒ２は水素又は必要に応じて置換されたアルキルであり、Ｒ２Ａはそれぞれ独立して水素、又は必要に応じて置換されたアルキル、アリール、ヘテロアルキル若しくは複素環であり、Ｒ３はハロ、−ＣＯ２Ｒ３Ａ、−Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ３Ａ）２、−ＳＲ３Ａ、−ＯＲ３Ａ、又は−Ｎ（Ｒ３Ａ）２、必要に応じて置換されたアルキル、アリール、ヘテロアルキル、又は複素環であり、Ｒ３Ａはそれぞれ独立して水素、必要に応じて置換されたアルキル、アリール、ヘテロアルキル、又は複素環であり、Ｒ５はハロ、−ＣＯ２Ｒ５Ａ、−Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ５Ａ）２、−ＳＲ５Ａ、−ＯＲ５Ａ、−Ｎ（Ｒ５Ａ）２、又は必要に応じて置換されたアルキル、アリール、ヘテロアルキル若しくは複素環であり、Ｒ５Ａはそれぞれ独立して水素、必要に応じて置換されたアルキル、アリール、ヘテロアルキル又は複素環であり、ｎは０、１又は２である）。
【００９３】
特定の化合物は、Ｒ２が水素である場合、Ｒ３及びＲ５はいずれもフェニルではなく；Ｒ１Ａが置換ピリミジンであり、Ｒ２が水素であり、Ｒ３が置換フェニルである場合、Ｒ５はメチルではなく；Ｒ２が水素である場合、Ｒ３及びＲ５はいずれもメチルではなく；Ｒ１Ａが置換フェニルであり、Ｒ２が水素であり、Ｒ３が置換フェニルである場合、Ｒ５は水素ではないようなものである。
【００９４】
幾つかの化合物では、Ｒ１Ａは置換アルキルである。特定の化合物では、Ｒ１Ａは、シアノ、ハロ、ヒドロキシル、−Ｎ（Ｒ１Ｂ）２、−Ｓ（Ｏ）ｐＲ１Ｂ、−Ｓ（Ｏ）ｐＯＲ１Ｂ、−Ｓ（Ｏ）ｐＮ（Ｒ１Ｂ）２、−Ｃ（Ｏ）ＯＲ１Ｂ、−Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ１Ｂ）２、又は−Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ１Ｂ）Ｓ（Ｏ）ｐＲ１Ｂ（ここでＲ１Ｂはそれぞれ独立して水素、又は必要に応じて置換されたアルキル、アリール、ヘテロアルキル若しくは複素環であり、ｐは０、１又は２である）のうちの１つ又は複数で置換されている。
【００９５】
幾つかの化合物では、Ｒ１Ｂは、アルコキシ、アルキル、アミノ（アルキルアミノ、ジアルキルアミノを含む）、アリール、カルボン酸、シアノ、ハロ、複素環、又はヒドロキシルのうちの１つ又は複数で必要に応じて置換されている。特定の化合物では、Ｒ１Ｂは水素、又は必要に応じて置換されたアルキル（例えば低級アルキル）若しくはアリールである。幾つかの化合物では、Ｒ１Ｂは水素又はアルキルである。
【００９６】
幾つかの化合物では、Ｒ２は水素又は必要に応じて置換されたアルキルである。
【００９７】
幾つかの化合物では、Ｒ３はアルキル又はハロである。
【００９８】
幾つかの化合物では、Ｒ５はアルキル又はハロである。
【００９９】
本発明の一実施形態は、式：
【化１２】
2013537202.tif 000014
【０１００】
の化合物及びその薬学的に許容される塩を包含する（式中、Ｒ１Ａはそれぞれ独立して水素、又は必要に応じて置換されたアルキル、アリール、ヘテロアルキル若しくは複素環であり、Ｒ２は水素又は必要に応じて置換されたアルキルであり、Ｒ２Ａはそれぞれ独立して水素、又は必要に応じて置換されたアルキル、アリール、ヘテロアルキル若しくは複素環であり、Ｒ３はハロ、−ＣＯ２Ｒ３Ａ、−Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ３Ａ）２、−ＳＲ３Ａ、−ＯＲ３Ａ、又は−Ｎ（Ｒ３Ａ）２、必要に応じて置換されたアルキル、アリール、ヘテロアルキル、又は複素環であり、Ｒ３Ａはそれぞれ独立して水素、必要に応じて置換されたアルキル、アリール、ヘテロアルキル、又は複素環であり、Ｒ５はハロ、−ＣＯ２Ｒ５Ａ、−Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ５Ａ）２、−ＳＲ５Ａ、−ＯＲ５Ａ、−Ｎ（Ｒ５Ａ）２、又は必要に応じて置換されたアルキル、アリール、ヘテロアルキル若しくは複素環であり、Ｒ５Ａはそれぞれ独立して水素、必要に応じて置換されたアルキル、アリール、ヘテロアルキル又は複素環であり、ｎは０、１又は２である）。
【０１０１】
特定の実施形態は、化合物が２−（（６，７−ジフェニルフロ［３，２−ｄ］ピリミジン−４−イル）チオ）−１−モルホリノエタノンではないようなものである。一実施形態は、Ｒ３及びＲ５がいずれもフェニルではないようなものである。
【０１０２】
幾つかの化合物では、Ｒ１Ａは置換アルキルである。特定の化合物では、Ｒ１Ａは、シアノ、ハロ、ヒドロキシル、−Ｎ（Ｒ１Ｂ）２、−Ｓ（Ｏ）ｐＲ１Ｂ、−Ｓ（Ｏ）ｐＯＲ１Ｂ、−Ｓ（Ｏ）ｐＮ（Ｒ１Ｂ）２、−Ｃ（Ｏ）ＯＲ１Ｂ、−Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ１Ｂ）２、又は−Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ１Ｂ）Ｓ（Ｏ）ｐＲ１Ｂ（ここでＲ１Ｂはそれぞれ独立して水素、又は必要に応じて置換されたアルキル、アリール、ヘテロアルキル若しくは複素環であり、ｐは０、１又は２である）のうちの１つ又は複数で置換されている。
【０１０３】
幾つかの化合物では、Ｒ１Ｂは、アルコキシ、アルキル、アミノ（アルキルアミノ、ジアルキルアミノを含む）、アリール、カルボン酸、シアノ、ハロ、複素環、又はヒドロキシルのうちの１つ又は複数で必要に応じて置換されている。特定の化合物では、Ｒ１Ｂは水素、又は必要に応じて置換されたアルキル（例えば低級アルキル）若しくはアリールである。幾つかの化合物では、Ｒ１Ｂは水素又はアルキルである。
【０１０４】
幾つかの化合物では、Ｒ２は水素又は必要に応じて置換されたアルキルである。
【０１０５】
幾つかの化合物では、Ｒ３はアルキル又はハロである。
【０１０６】
幾つかの化合物では、Ｒ５はアルキル又はハロである。
【０１０７】
特定の化合物は、本明細書に記載の結合アッセイにより決定されるように、約０．１μＭ、０．０５μＭ、又は０．０２５μＭ未満のＩＣ５０を有する。特定の化合物は、本明細書に記載のレポーターアッセイにより決定されるように、約５μＭ、２．５μＭ、又は１μＭ未満のＥＣ５０を有する。
【０１０８】
本発明の化合物（すなわち本明細書で開示される化合物）を本明細書で開示される方法及び当該技術分野で既知の方法により調製することができる。例えばStewart et al.の米国特許第６，５７９，８８２号、Wiesenfeldt et al.の欧州特許第０４４７８９１号を参照されたい。
【０１０９】
５．３．  治療方法
本発明は、有効量の本発明の化合物を、それを必要とする患者に投与することを含む、患者において皮質骨内の骨形成を刺激する方法を包含する。本発明は、有効量の本発明の化合物を、それを必要とする患者に投与することを含む、皮質骨の厚さを増大する方法も包含する。
【０１１０】
本発明は、治療的又は予防的に有効な量の本発明の化合物を、それを必要とする患者に投与することを含む、骨量の低下に伴って起こる疾患又は障害を治療、管理又は予防する方法を包含する。この疾患及び障害の例としては、骨粗鬆症（例えば閉経後骨粗鬆症、ステロイド誘発性骨粗鬆症又はグルココルチコイド誘発性骨粗鬆症）、骨減少症及びパジェット病が挙げられる。
【０１１１】
治療的又は予防的に有効な量の本発明の化合物を、それを必要とする患者に投与することを含む、骨折を治療、管理又は予防する方法も本発明に包含される。特定の骨折は、転移性骨疾患、すなわち骨に転移するがんに伴って起こるものである。骨に転移する可能性のあるがんの例としては、前立腺がん、乳がん、肺がん、甲状腺がん及び腎臓がんが挙げられる。
【０１１２】
本発明は、治療的又は予防的に有効な量の本発明の化合物を、それを必要とする患者に投与することを含む、疾患又は障害に伴って起こる又はそれにより引き起こされる骨量の低下を治療、管理又は予防する方法も包含する。この疾患及び障害の例としては、セリアック病、クローン病、クッシング症候群、副甲状腺機能亢進症、炎症性腸疾患及び潰瘍性大腸炎が挙げられる。
【０１１３】
本発明の方法から利益を享受することができる患者の例としては、５５歳を超えた男女、閉経後の女性、及び腎不全を患う患者が挙げられる。
【０１１４】
本発明の化合物を、骨を侵す疾患又は病態の治療、管理又は予防に有用であることが知られている他の薬物と併用して（例えば同時に又は別々に）投与することができる。他の薬物の例としては、アンドロゲン受容体モジュレータ；ビスホスホネート；カルシトニン；カルシウム感知受容体拮抗薬；カテプシンＫ阻害剤；エストロゲン及びエストロゲン受容体モジュレータ；インテグリン結合剤、インテグリン抗体及びインテグリン受容体拮抗薬；副甲状腺ホルモン（ＰＴＨ）、並びにそのアナログ及び類似物質；並びにビタミンＤ及び合成ビタミンＤアナログが挙げられる。
【０１１５】
アンドロゲン受容体モジュレータの例としては、フィナステリド及び他の５α−レダクターゼ阻害剤、ニルタミド、フルタミド、ビカルタミド、リアロゾール、並びにアビラテロンアセテートが挙げられる。
【０１１６】
ビスホスホネートの例としては、アレンドロネート、シマドロネート、クロドロネート、エチドロネート、イバンドロネート、インカドロネート、ミノドロネート、ネリドロネート、オルパドロネート、パミドロネート、ピリドロネート、リセドロネート、チルドロネート及びゾレンドロネート、並びにそれらの薬学的に許容される塩及びエステルが挙げられる。
【０１１７】
カテプシンＫ阻害剤の例としては、ＶＥＬ−０２３０、ＡＡＥ５８１（バリカチブ）、ＭＶ０６１１９４、ＳＢ−４６２７９５（レラカチブ）、ＭＫ−０８２２（オダナカチブ）及びＭＫ−１２５６が挙げられる。
【０１１８】
エストロゲン及びエストロゲン受容体モジュレータの例としては、天然のエストロゲン（例えば７−エストラジオール、エストロン及びエストリオール）、抱合型エストロゲン（例えば抱合型ウマエストロゲン）、経口避妊薬、硫酸化エストロゲン、プロゲストゲン、エストラジオール、ドロロキシフェン、ラロキシフェン、ラソホキシフェン、ＴＳＥ−４２４、タモキシフェン、イドキシフェン、ＬＹ３５３３８１、ＬＹ１１７０８１、トレミフェン、フルベストラント、４−［７−（２，２−ジメチル−１−オキソプロポキシ−４−メチル−２−［４−［２−（１−ピペリジニル）エトキシ］フェニル］−２Ｈ−１−ベンゾピラン−３−イル］−フェニル−２，２−ジメチルプロパノエート、４，４’−ジヒドロキシベンゾフェノン−２，４−ジニトロフェニル−ヒドラゾン、及びＳＨ６４６が挙げられる。
【０１１９】
インテグリン結合剤、抗体及び受容体拮抗薬の例としては、ビタキシン（ＭＥＤＩ−５２２）、シレンジタイド及びＬ−０００８４５７０４が挙げられる。
【０１２０】
５．４．  医薬製剤
本発明は、１つ又は複数の本発明の化合物と、任意で上記のような１つ又は複数の他の薬物とを含む医薬組成物を包含する。
【０１２１】
或る特定の医薬組成物は、患者への経口投与、粘膜（例えば、鼻腔、舌下、膣、口腔又は直腸）投与、非経口（例えば、皮下、静脈内、ボーラス注入、筋肉内又は動脈内）投与、又は経皮投与に好適な単一の単位剤形である。剤形の例としては、錠剤；カプレット；軟弾性ゼラチンカプセル等のカプセル；カシェ（cachets：カプセル）；トローチ；ロゼンジ；分散液；坐剤；軟膏；パップ（湿布）；ペースト；粉末；包帯剤；クリーム；硬膏；溶液；パッチ；エアロゾル（例えば、経鼻スプレー又は吸入器）；ゲル；懸濁液（例えば、水性又は非水性の液体懸濁液、水中油型エマルション、又は油中水型液体エマルション）、溶液及びエリキシルを含む患者への経口投与又は粘膜投与に好適な液体剤形；患者への非経口投与に好適な液体剤形；並びに再構成して患者への非経口投与に好適な液体剤形をもたらすことができる無菌固体（例えば、結晶性又は非結晶性の固体）が挙げられるが、これらに限定されない。
【０１２２】
製剤は、投与方式に合わせる必要がある。例えば、経口投与は、本発明の化合物を消化管内での分解から保護するために腸溶性コーティングを必要とする。同様に、製剤は作用部位への活性成分（複数の場合もあり）の送達を促進する成分を含有し得る。例えば、化合物は、分解酵素から該化合物を保護し、循環系における輸送を促進し、細胞膜を通って細胞内部位へ至る送達を行うために、リポソーム製剤で投与され得る。
【０１２３】
剤形の組成、形状及び種類は、その用途に応じて異なる。例えば、疾患の急性期治療に使用する剤形は、該剤形に含まれる活性成分の１つ又は複数を、同じ疾患の慢性期治療に使用する剤形よりも多量に含有していてもよい。同様に、非経口剤形は、該剤形に含まれる活性成分の１つ又は複数を、同じ疾患を治療するために使用する経口剤形よりも少量含有していてもよい。本発明により包含される特定の剤形が互いに異なるこれら及び他の方法は当業者には容易に明らかとなる。例えばRemington's Pharmaceutical Sciences（第１８版、Mack Publishing, Easton PA: 1990）を参照されたい。
【０１２４】
本発明の医薬組成物は経口投与するのが好ましい。経口投与に好適な個別剤形としては、錠剤（例えば、チュアブル錠）、カプレット、カプセル及び液体（例えば、香味付与したシロップ）が挙げられる。このような剤形は所定量の活性成分を含有し、当業者に既知の製薬法によって調製することができる。例えば、Remington's Pharmaceutical Sciences（第１８版、Mack Publishing, Easton PA: 1990）を参照されたい。
【０１２５】
典型的な経口剤形は、従来の薬学的配合技法に従い、密接な混和物中で活性成分（複数の場合もあり）を少なくとも１つの賦形剤と組み合わせることによって調製する。賦形剤は、投与に望ましい調製物の形態に応じて広範な形態を取ることができる。
【０１２６】
その投与のしやすさから、錠剤及びカプセルが最も有益な経口単位剤形である。所望に応じて、錠剤は、標準的な水性又は非水性の技法によってコーティングすることができる。このような剤形は、従来の製薬法により調製することができる。一般に、医薬組成物及び剤形は、活性成分を液体担体、微粉固体担体、又はその両方と均一かつ密接に混和し、次に必要に応じて生成物を所望の形状に成形することによって調製する。崩壊剤を固体剤形に組み込み、迅速な溶解を容易にすることができる。また、滑沢剤を組み込んで、剤形（例えば、錠剤）の製造を容易にすることができる。
【実施例】
【０１２７】
６．  実施例
６．１．  ノックアウトマウス
ヒトＮＯＴＵＭ遺伝子のマウスオーソログでの遺伝子操作した突然変異に関してホモ接合型のマウスを、突然変異マウス胚性幹（ＥＳ）細胞クローンのＯＭＮＩＢＡＮＫコレクションを元に、対応する突然変異ＥＳ細胞クローンを用いて発生させた（概して米国特許第６，０８０，５７６号を参照されたい）。簡潔に述べると、マウスＮＯＴＵＭ遺伝子座に突然変異誘発性のウイルス挿入を含有するＥＳ細胞クローンを胚盤胞にマイクロインジェクトし、その胚盤胞を偽妊娠状態の雌性宿主に移植し、妊娠させた。続いて得られたキメラ子孫をＣ５７  ｂｌａｃｋ  ６雌性マウスと交配させ、子孫において、ノックアウトしたＮＯＴＵＭ対立遺伝子の生殖細胞系列伝達を確認した。続いて突然変異したＮＯＴＵＭ対立遺伝子に関してヘテロ接合型の動物同士を交配させ、突然変異したＮＯＴＵＭ対立遺伝子に関してホモ接合型の子孫と、突然変異したＮＯＴＵＭ対立遺伝子に関してヘテロ接合型の子孫と、野生型の子孫とをおよそ１：２：１の比で得た。
【０１２８】
ＮＯＴＵＭ遺伝子の破壊に関してホモ接合型（−／−）のマウスを、ＮＯＴＵＭ遺伝子の破壊に関してヘテロ接合型（＋／−）のマウス及び野生型（＋／＋）の同腹子とともに研究した。この分析ではマウスに、哺乳動物被験体において主要器官系の機能を評価するために設計された、統合された一連の医学的診断法を用いて医学的精密検査を行った。記載の数のホモ接合型（−／−）「ノックアウト」マウスを、ヘテロ接合型（＋／−）及び野生型（＋／＋）の同腹子とともに研究することで、より信頼性及び再現性のあるデータが得られた。
【０１２９】
図１で示されるように、１６週齢では、ＮＯＴＵＭ遺伝子のホモ接合型破壊を有する雄性マウス（「ｈｏｍ」）は、その野生型同腹子と比較して様々な骨部位でより大きい皮質骨の厚さを示した（両群のマウスの数  Ｎ＝１０）。マイクロＣＴ（Scanco、μＣＴ４０）により測定されたこれらの差は、大腿骨の中央骨幹で２８％（ｐ＜０．００１）、上腕骨の中央骨幹で１９％（ｐ＜０．００１）、脛骨の中央骨幹で１７％（ｐ＜０．００１）、脛骨と腓骨との接合部で１１％（ｐ＜０．００１）であった。図２で示されるように、１６週齢では、ＮＯＴＵＭ突然変異に関してヘテロ接合型のマウス（「ｈｅｔ」）の大腿骨の中央骨幹の皮質骨の厚さも、その野生型同腹子よりも大きく、雄性ｈｅｔ（Ｎ＝５０）はその野生型同腹子（Ｎ＝２３）と比較して６％（ｐ＝０．００７）の増大を示し、雌性ｈｅｔ（Ｎ＝５７）はその野生型同腹子（Ｎ＝２２）と比較して９％（ｐ＜０．００１）の増大を示した。
【０１３０】
ＮＯＴＵＭ動物で観察される骨形成の再分布の実際の徴候は図３及び図４に反映されており、これらの図は標準的な４点曲げ試験を用いた大腿骨破壊強度試験（SkeleTech、現在のRicerca Biosciencesにより実施された）の結果を示す。１６週齢の雄性マウスで得られた結果を示す図３で示されるように、ｈｅｔ（Ｎ＝２０）はその野生型同腹子（Ｎ＝２３）と比較して大腿骨破壊強度の５％（ｐ＝０．５４）の増大を示し、ｈｏｍ（Ｎ＝１７）は２８％（ｐ＜０．００１）の増大を示した。その一方、ＮＯＴＵＭ  ｈｏｍ及びｈｅｔの両方の脊椎圧迫試験は、野生型対照と比較して脊椎圧迫最大荷重の有意な低減を示さなかった。同様の結果が１６週齢の雌性マウスで得られた。図４で示されるように、ｈｅｔ（Ｎ＝２０）がその野生型同腹子（Ｎ＝２１）と比較して大腿骨破壊強度の１２％（ｐ＝０．０４）の増大を示した一方で、ｈｏｍ（Ｎ＝１８）は２８％（ｐ＜０．００１）の増大を示した。これらのデータ及び他のデータの解析により、皮質骨の厚さと大腿骨破壊強度との間の強い相関関係が明らかになった。
【０１３１】
６．２．  レポーターアッセイ
化合物のＥＣ５０値を、以下のように調製した馴化培地を利用したレポーターアッセイを用いて決定した。ｐｃＤＮＡ３．１（＋）ベクターにヒトｎｏｔｕｍペクチンアセチルトランスフェラーゼを含有するプラスミドをＨＥＫ２９３細胞にトランスフェクトし、クローンを４００ｕｇ／ｍＬのＧ４１８の存在下で成長させることで選択した。馴化培地中に最大に発現したヒトｎｏｔｕｍペクチンアセチルトランスフェラーゼを含有するクローンを後の全ての活性アッセイのために維持した。Ｗｎｔ３ａを過剰発現し、馴化培地に分泌するＬ細胞をATCCから購入した。
【０１３２】
アッセイプロトコルは以下のとおりであった。およそ５００万個のＣｅｌｌＳｅｎｓｏｒ（商標）ＬＥＦ／ＴＣＦ−ｂｌａ  ＦｒｅｅＳｔｙｌｅ（商標）  ２９３Ｆ細胞を１５ｃｍ径のプレートで略コンフルエンシーまで成長させた。細胞成長培地は、１０％  透析ＦＢＳ、５μｇ／ｍＬ  ブラストサイジン（Invitrogen、Ｒ２１０−０１）、０．１ｍＭ  ＮＥＡＡ、２５ｍＭ  ＨＥＰＥＳ及び１×ＧＰＳの入ったＤＭＥＭから構成されるものであった。それから細胞を、初めにＰＢＳで洗い流した後、５ｍＬのトリプシンを添加し、室温で２分間プレートをインキュベートすることでトリプシン処理した。それから、合計１０ｍＬのアッセイ培地（Ｏｐｔｉ−ＭＥＭ＋０．５％  透析ＦＢＳ、０．１ｍＭ  ＮＥＡＡ、１ｍＭ  ピルビン酸ナトリウム、１０ｍＭ  ＨＥＰＥＳ、１×ＧＰＳ）を１５ｃｍ径のプレートごとに加えた。細胞の数をカウントし、１ｍＬ当たり７５万個の細胞を懸濁させた。細胞をウェルごとに２０μＬ当たり１５０００個の細胞密度でＢｉｏｃｏａｔ  ３８４ウェルプレート（Fisher、カタログ番号３５６６６３）に播種した。３７℃で３時間細胞をインキュベートした後、１０μＬの３０ｍＭ  ＬｉＣｌの入ったアッセイ培地をウェルごとに加えた後、３７℃で更に３時間インキュベートした。一方、化合物を、ＥＣＨＯを用いてGreinerの３８４ウェルプレート（カタログ番号７８１０７６）に音響的に分注した（acoustically pinged）後、１０μＬ／ウェルのＷｎｔ３ａ馴化培地及び１０μＬ／ウェルのｎｏｔｕｍペクチンアセチルエステラーゼ馴化培地を加えた。それから、１０μＬのＷｎｔ３ａ／ｎｏｔｕｍペクチンアセチルトランスフェラーゼ混合物をGreinerのプレートからＣｅｌｌＳｅｎｓｏｒ細胞の入った３８４ウェルプレートの各ウェルに移した。細胞を３７℃で一晩インキュベートした後、５μＬの１×ＣＣＦ４（Invitrogen、カタログ番号Ｋ１０８５）を各ウェルに加え、３８４ウェルプレート全体にカバーをかけ、室温で３時間、暗所でゆっくりと振動させることで、反応を進行させた。それからプレートを４００ｎｍの励起波長と４６０ｎｍ及び５３５ｎｍの発光波長を用いてＥｎｖｉｓｉｏｎ  Ｐｌａｔｅ  Ｒｅａｄｅｒによって読み取った。
【０１３３】
６．３．  結合アッセイ
化合物のＩＣ５０値を、エステラーゼ及びリパーゼの蛍光分析アッセイの水溶性の酵素基質である８−オクタノイルオキシピレン−１，３，６−トリスルホン酸三ナトリウム（ＯＰＴＳ）を利用した結合アッセイを用いて決定した。ヒトｎｏｔｕｍペクチンアセチルトランスフェラーゼをｐｃＤＮＡ３．１（＋）ベクターに含有するプラスミドをＨＥＫ２９３細胞にトランスフェクトし、クローンを４００ｕｇ／ｍＬのＧ４１８の存在下で成長させることで選択した。これらの細胞による条件培地をこのアッセイに使用した。
【０１３４】
ＥＣＨＯを用いて、７５ｎＬの化合物を乾燥したGreinerの３８４ウェルプレート（カタログ番号７８１０７６）に音響的に分注した後、１０ｕＬの５０ｍＭ  Ｔｒｉｓ／ＨＣｌ（ｐＨ  ６．８）をこれらの３８４ウェルアッセイプレートの各ウェルに加えた。ヒトｎｏｔｕｍペクチンアセチルトランスフェラーゼの入った馴化培地をアッセイバッファー（５０ｍＭ  Ｔｒｉｓ（ｐＨ  ６．８）、５ｍＭ  ＣａＣｌ２、０．５ｍＭ  ＭｇＣｌ２）で７５倍に希釈し、２５μＬのこの「Ｅｎｚｙｍｅ  Ｍｉｘ」を各ウェルに加えた後、１０分間プレインキュベートした。酵素反応を、１５μＬのＯＰＴＳ基質（Sigma、カタログ番号７４８７５）を５μＭの最終濃度まで添加することで開始させた。反応時間は室温で１０分間であった。全てのプレートを４８５ｎｍの励起波長及び５３５ｎｍの発光波長を用いてＥｎｖｉｓｉｏｎ  Ｐｌａｔｅ  Ｒｅａｄｅｒによって読み取った。
【０１３５】
６．４．  一般的合成方法Ａ：３−クロロ−２−メチルチエノ［２，３−ｂ］ピリジン−４−オール（２）；３−ブロモ−２−メチルチエノ［２，３−ｂ］ピリジン−４−オール（３）の調製
本発明に包含される化合物の合成に対するこの一般的アプローチを以下に記載の具体例によって示す：
【化１３】
2013537202.tif 000015
【０１３６】
１００ｍＬ容の丸底フラスコにおいて、６−メチルチエノ［２，３−ｄ］ピリミジン−４−オール１（１ｇ、６．２ｍｍｏｌ）を酢酸（１２ｍＬ）中に取り、室温で撹拌した。これに臭素（０．３ｍＬ、６．２ｍｍｏｌ）を添加し、反応混合物を室温で一晩撹拌した。それから反応物を氷によってクエンチさせ、氷が溶けるまで撹拌した。それから生成物をろ別し、水で洗浄して、乾燥させ、乾燥生成物として３−ブロモ−２−メチルチエノ［２，３−ｂ］ピリジン−４−オール２を得た（１ｇ、収率６６％）。
【０１３７】
３Ｌ容の丸底フラスコににおいて、６−メチルチエノ［２，３−ｄ］ピリミジン−４−オール１（５０ｇ、３１０ｍｍｏｌ）を酢酸（５２５ｍＬ）中に取り、ＮＣＳ（３７．５ｇ、３７２ｍｍｏｌ）を添加した。反応物を５５℃で８時間加熱した。それから反応物を室温まで冷却し、水によってクエンチさせ、化合物を塩化メチレン（２×２５０ｍＬ）で抽出した。合わせた有機層をブラインで洗浄し、ＭｇＳＯ４で乾燥させ、ろ過して、濃縮し、固体として３−クロロ−２−メチルチエノ［２，３−ｂ］ピリジン−４−オール３を得た（４２．１５ｇ、収率７０％）。
【０１３８】
６．５．  一般的合成方法Ｂ：２−（５−クロロ−６−メチルチエノ［２，３−ｄ］ピリミジン−４−イルチオ）酢酸（６）の調製
本発明に包含される化合物の合成に対するこの一般的アプローチを以下に記載の具体例によって示す：
【化１４】
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【０１３９】
４の合成：３−クロロ−２−メチルチエノ［２，３−ｂ］ピリジン−４−オール３（４０ｇ、２０００ｍｍｏｌ、１当量）をＰＯＣｌ３（３６８ｍＬ、４０００ｍｍｏｌ、２０当量）中で懸濁し、４時間かけて９０℃に加熱した。冷却後、反応物を濃縮し、残渣を０℃に冷却した。それから氷冷水を徐々に加え、ＰＯＣｌ３を完全に消費させた。黒色の溶液を酢酸エチルで３回抽出した。合わせた有機抽出物を飽和ＮａＨＣＯ３水溶液で２回、ブラインで１回洗浄し、ＭｇＳＯ４で乾燥させ、ろ過し、濃縮して、薄褐色の固体の４，５−ジクロロ−６−メチルチエノ［２，３−ｄ］ピリミジン４を得て（４１．６ｇ、収率９３％）、それを完全に乾燥させた直後に使用した。
【０１４０】
５の合成：４，５−ジクロロ−６−メチルチエノ［２，３−ｄ］ピリミジン４（４０ｇ、１８２．２ｍｍｏｌ、１当量）をメタノール（５００ｍＬ）中で懸濁し、０℃に冷却した。メチル２−メルカプトアセテート（２７ｍＬ、１９１．５ｍｍｏｌ、１.０５当量）を徐々に添加した後、ＴＥＡ（５３ｍＬ、３８２.６ｍｍｏｌ、２.１当量）を徐々に添加した。９０分間撹拌した後、反応物を濃縮した。残渣を酢酸エチル中に取り、シリカゲルプラグを通してろ過し、塩及び一部の色素を除去した。ろ液を濃縮し、ヘキサン中、０％から１５％の酢酸エチルによるシリカゲルクロマトグラフィを用いて精製して、オフホワイト色の固体としてメチル２−（５−クロロ−６−メチルチエノ［２，３−ｄ］ピリミジン−４−イルチオ）アセテート５を得た（４７．３０ｇ、収率９１％）。
【０１４１】
６の合成：２−（５−クロロ−６−メチルチエノ［２，３−ｄ］ピリミジン−４−イルチオ）アセテート５（４５ｇ、１５０ｍｍｏｌ、１当量）をＴＨＦ（３５０ｍＬ）中に取り、１Ｎ  ＮａＯＨ水溶液（３００ｍＬ、３００ｍｍｏｌ、２当量）を効率的に撹拌しながら添加した。４０分後、反応物を濃縮し、残渣を水中に取り、０℃に冷却して、１Ｎ  ＨＣｌを用いて低ｐＨまで酸性化した。析出物を真空ろ過により回収し、水で洗浄した。それを真空下で一晩乾燥し、白色固体として純粋な２−（５−クロロ−６−メチルチエノ［２，３−ｄ］ピリミジン−４−イルチオ）酢酸６を得た（４０．５ｇ、収率９４％）。ＭＳ  ｍ／ｚ  Ｃ９Ｈ７ＣｌＮ２Ｏ２Ｓ２［Ｍ＋１］＋＝２７５及び［Ｍ＋１］＋３＝２７７。１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，メタノール−ｄ４）  δ  ｐｐｍ  ８．６６（ｓ，１Ｈ）、４．０５（ｓ，２Ｈ）、２．５４（ｓ，３Ｈ）。１３Ｃ  ＮＭＲ（１０１ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）  δ  ｐｐｍ  １７０．０４（ｓ）、１６２．５５（ｓ，１Ｃ）、１６２．４８（ｓ，１Ｃ）、１５２．５５（ｓ，１Ｃ）、１３５．０３（ｓ，１Ｃ）、１２５．０３（ｓ，１Ｃ）、１１４．３６（ｓ，１Ｃ）、３２．１７（ｓ，１Ｃ）、１４．０５（ｓ，１Ｃ）。
【０１４２】
６．６．  一般的合成方法Ｃ：２−（６−ブロモ−５−メチルチエノ［２，３−ｄ］ピリミジン−４−イルチオ）酢酸（１０）の調製
本発明に包含される化合物の合成に対するこの一般的アプローチを以下に記載の具体例によって示す：
【化１５】
2013537202.tif 000017
【０１４３】
８の合成：一般的合成方法Ｂに従って調製した４−クロロ−５−メチルチエン［２，３−ｄ］ピリミジン７（１ｇ、５．４ｍｍｏｌ）を酢酸中に取り、室温で撹拌した。この反応混合物に、臭素（１当量＝２７５μＬ、５．４ｍｍｏｌ）を添加し、反応混合物を一晩撹拌した。それから反応物を氷によってクエンチさせ、氷が溶けるまで撹拌した。それから生成物をろ別し、水で洗浄して、乾燥させ、淡黄色の固体として１ｇの６−ブロモ−４−クロロ−５−メチルチエノ［２，３−ｄ］ピリミジン８を得た（７８６ｍｇ、収率５５％）。
【０１４４】
化合物９及び化合物１０を一般的合成方法Ｂに従って調製した。
【０１４５】
６．７．  一般的合成方法Ｄ：メチル２−（５−シクロプロピル−６−メチルチエノ［２，３−ｄ］ピリミジン−４−イルチオ）アセテート（１２）の調製
本発明に包含される化合物の合成に対するこの一般的アプローチを以下に記載の具体例によって示す：
【化１６】
2013537202.tif 000018
【０１４６】
１００ｍＬ容の丸底フラスコに、メチル２−（５−ブロモ−６−メチルチエノ［２，３−ｄ］ピリミジン−４−イルチオ）アセテート１１（０．１００ｇ、０．３ｍｍｏｌ、１当量）を入れ、シクロプロピルボロン酸（５１ｍｇ、０．６ｍｍｏｌ）及びトリシクロヘキシルホスフィン（８．４ｍｇ、０．０３ｍｍｏｌ）及びＫ３ＰＯ４（２１２ｍｇ、１．０５ｍｍｏｌ）をトルエン水混合物（４ｍＬ、１：１）中に取った。この混合物をＮ２雰囲気下、室温で撹拌した。この撹拌溶液に、ジアセトキシパラジウム（４ｍｇ、０．０１５ｍｍｏｌ）を添加した。それから反応混合物を１００℃で８時間加熱した。反応物を１Ｎ  ＨＣｌの添加によってクエンチさせ、水性画分をＥｔＯＡｃで３回抽出した。合わせた有機画分をＭｇＳＯ４で乾燥させ、ろ過し、濃縮して、薄黄色の固体としてメチル２−（５−シクロプロピル−６−メチルチエノ［２，３−ｄ］ピリミジン−４−イルチオ）アセテート１２を得た（４０ｍｇ、収率４５％）。
【０１４７】
６．８．  一般的合成方法Ｅ：メチル２−（６−エチル−５−メチルチエノ［２，３−ｄ］ピリミジン−４−イルチオ）アセテート（１３）の調製
本発明に包含される化合物の合成に対するこの一般的アプローチを以下に記載の具体例によって示す：
【化１７】
2013537202.tif 000019
【０１４８】
１００ｍＬ容の丸底フラスコに、一般的合成方法Ｃに従って調製したメチル２−（６−ブロモ−５−メチルチエノ［２，３−ｄ］ピリミジン−４−イルチオ）アセテート９（５０ｍｇ、０．１５ｍｍｏｌ）を入れ、ジエチル亜鉛（トルエン中、１．１Ｍ、２０４μＬ、０．２３ｍｍｏｌ）、Ｐｄ（ｄｂａ）３（４ｍｇ、０．００７５ｍｍｏｌ）及び２−ジシクロヘキシルホスフィン−２’，６’−イソプロポキシジフェニル（１３ｍｇ、０．０３ｍｍｏｌ）をマイクロ波容器内の乾燥ＤＭＦ（２．５ｍＬ）中に取り、１６０℃で１０分間、マイクロ波照射下で加熱した。それを室温に冷却した後、セライトを通してろ過し、濃縮した。これをＥｔＯＡｃ中に取り、水で洗浄した。有機層をブラインで洗浄し、硫酸マグネシウムで乾燥させ、濃縮して、メチル２−（６−エチル−５−メチルチエノ［２，３−ｄ］ピリミジン−４−イルチオ）アセテート１３を得た（１７ｍｇ、収率４０％）。
【０１４９】
６．９．  一般的合成方法Ｆ：２−（５−（ジメチルアミノ）−６−メチルチエノ［２，３−ｄ］ピリミジン−４−イルチオ）酢酸（１４）の調製
本発明に包含される化合物の合成に対するこの一般的アプローチを以下に記載の具体例によって示す：
【化１８】
2013537202.tif 000020
【０１５０】
一般的合成方法Ｃを用いて調製したメチル２−（５−ブロモ−６−メチルチエノ［２，３−ｄ］ピリミジン−４−イルチオ）アセテート１１（１００ｍｇ、０．３ｍｍｏｌ）を１ｍＬ（溶媒として過剰量）の４０％  ジメチルアミン水溶液中に取った。それから触媒量の酸化銅を添加し、反応物を１４０℃で１５分間、マイクロ波照射下で加熱した。反応物をストリッピングした後、分取ＨＰＬＣ（酢酸アンモニウム水溶液／アセトニトリル）により精製した。白色固体として１４を単離した（６０ｍｇ、収率７１％）。
【０１５１】
６．１０．  一般的合成方法Ｇ：２−（５，６−ジメチルチエノ［２，３−ｄ］ピリミジン−４−イルチオ）−Ｎ−（２−メトキシエチル）アセトアミド（１７）の調製
本発明に包含される化合物の合成に対するこの一般的アプローチを以下に記載の具体例によって示す：
【化１９】
2013537202.tif 000021
【０１５２】
市販されており、一般的合成方法Ｂを用いて調製することもできる２−（５，６−ジメチルチエノ［２，３−ｄ］ピリミジン−４−イルチオ）酢酸１５（０．０５０ｇ、０．２ｍｍｏｌ、１当量）をＤＭＦ（２．２ｍＬ）中に取った。この混合物に、２−メトキシエタンアミン１６（０．０１９ｇ、０．２４ｍｍｏｌ、１．２当量）、ＨＡＴＵ（０．０７６ｇ、０．２ｍｍｏｌ、１当量）及びＮ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン（０．０８ｍＬ、０．４４ｍｍｏｌ、２．２当量）を添加し、反応混合物を室温で８時間撹拌した。水を添加し、クエンチさせ、水性画分をＥｔＯＡｃで３回抽出した。合わせた有機層をＭｇＳＯ４で乾燥させ、ろ過し、濃縮した。残渣を中性条件を用いて分取ＨＰＬＣにより精製し、オフホワイト色の固体として２−（５，６−ジメチルチエノ［２，３−ｄ］ピリミジン−４−イルチオ）−Ｎ−（２−メトキシエチル）アセトアミド１７を得た（５６ｍｇ、収率９０％）。
【０１５３】
６．１１．  一般的合成方法Ｈ：イソプロピル２−（５，６−ジメチルチエノ［２，３−ｄ］ピリミジン−４−イルチオ）アセテート（１９）の調製
本発明に包含される化合物の合成に対するこの一般的アプローチを以下に記載の具体例によって示す：
【化２０】
2013537202.tif 000022
【０１５４】
市販されており、一般的合成方法Ｂを用いて調製することもできる化合物１５（１００ｍｇ、０．４ｍｍｏｌ）を乾燥ＤＣＭ中に溶解し、塩化チオニル（５６ｕＬ、０．８ｍｍｏｌ）を添加し、室温で１時間撹拌した。それから過剰量のプロパン−２−オール１８を添加し、室温で更に１時間撹拌した。次いで、反応混合物を濃縮し、中性相の分取ＨＰＬＣ（酢酸アンモニウム水溶液／アセトニトリル）を用いて精製し、固体として１９を得た（１００ｍｇ、収率８５％）。
【０１５５】
６．１２．  一般的合成方法Ｉ：２−（５−クロロ−６−イソプロピルチエノ［２，３−ｄ］ピリミジン−４−イルチオ）酢酸（２４）の調製
本発明に包含される化合物の合成に対するこの一般的アプローチを以下に記載の具体例によって示す：
【化２１】
2013537202.tif 000023
【０１５６】
２１の合成：市販されており、一般的合成方法Ｄを用いて調製することもできるピリミドン２０（１０ｇ、５１．４ｍｍｏｌ、１当量）をＰＯＣｌ３（９５ｍＬ、１０２８ｍｍｏｌ、２０当量）中で懸濁し、４時間かけて９０℃に加熱した。冷却後、反応物を濃縮し、残渣を０℃に冷却した。それから氷冷水を徐々に加え、ＰＯＣｌ３を完全に消費させた。黒色の溶液を酢酸エチルで３回抽出した。合わせた有機抽出物を飽和ＮａＨＣＯ３水溶液で２回、ブラインで１回洗浄し、ＭｇＳＯ４で乾燥させ、ろ過し、濃縮して、薄褐色の固体の４−クロロ−６−イソプロピルチエノ［２，３−ｄ］ピリミジン２１を得て（１０．１６ｇ、収率９３％）、それを完全に乾燥させた直後に使用した。
【０１５７】
２２の合成：固体の４−クロロ−６−イソプロピルチエノ［２，３−ｄ］ピリミジン２１（９．２ｇ、４３．２ｍｍｏｌ、１当量）を酢酸（７５ｍＬ）中に取り、ＮＣＳ（８．６５ｇ、８６．５ｍｍｏｌ、２当量）を添加した。反応物を５５℃で６時間加熱した。反応物を冷却し、水によってクエンチさせ、化合物を塩化メチレン（２×５０ｍＬ）で抽出した。合わせた有機層をブラインで洗浄し、ＭｇＳＯ４で乾燥させ、ろ過し、濃縮して、固体として４，５−ジクロロ−６−イソプロピルチエノ［２，３−ｄ］ピリミジン２２を得た（６．２ｇ、収率５８％）。
【０１５８】
２３の合成：４，５−ジクロロ−６−イソプロピルチエノ［２，３−ｄ］ピリミジン２２（１１．６ｇ、４７ｍｍｏｌ、１当量）をメタノール（１２５ｍＬ）中で懸濁し、０℃に冷却した。メチル２−メルカプトアセテート（６．８６ｍＬ、４９．３５ｍｍｏｌ、１．０５当量）を徐々に添加した後、ＴＥＡ（１３．７ｍＬ、９８.７ｍｍｏｌ、２.１当量）を徐々に添加した。９０分間撹拌した後、反応物を濃縮した。残渣を酢酸エチル中に取り、シリカゲルプラグを通してろ過し、塩及び一部の色素を除去した。ろ液を濃縮し、ヘキサン中、０％から１５％の酢酸エチルによるシリカゲルクロマトグラフィを用いて精製して、オフホワイト色の固体としてメチル２−（５−クロロ−６−イソプロピルチエノ［２，３−ｄ］ピリミジン−４−イルチオ）アセテート２３を得た（１３．６ｇ、収率９２％）。
【０１５９】
２４の合成：化合物２３（５．０ｇ、１５．８ｍｍｏｌ、１当量）をＴＨＦ（５０ｍＬ）中に取り、１Ｎ  ＮａＯＨ水溶液（３２ｍＬ、３２ｍｍｏｌ、２当量）を効率的に撹拌しながら添加した。４０分後、反応物を濃縮し、残渣を水中に取り、０℃に冷却して、１Ｎ  ＨＣｌを用いて低ｐＨまで酸性化した。析出物を真空ろ過により回収し、水で洗浄した。それを真空下で一晩乾燥し、白色固体として純粋な２−（５−クロロ−６−イソプロピルチエノ［２，３−ｄ］ピリミジン−４−イルチオ）酢酸２４を得た（４．５ｇ、収率９４％）。ＭＳ  ｍ／ｚ  Ｃ１１Ｈ１１ＣｌＮ２Ｏ２Ｓ２［Ｍ＋１］＋＝３０３及び［Ｍ＋１］＋３＝３０５。１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）  δ  ｐｐｍ  １２．８３（ｓ，１Ｈ）、８．８１（ｓ，１Ｈ）、４．１２（ｓ，２Ｈ）、３．５２〜３．７６（ｍ，１Ｈ）、１．３２（ｄ，Ｊ＝７．０３Ｈｚ，６Ｈ）。１３Ｃ  ＮＭＲ（１０１ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）  δ  ｐｐｍ  １７０．０（ｓ，１Ｃ）、１６２．８（ｓ，１Ｃ）、１６２．２（ｓ，１Ｃ）、１５２．６（ｓ，１Ｃ）、１４６．９（ｓ，１Ｃ）、１２５．１（ｓ，１Ｃ）、１１２．３（ｓ，１Ｃ）、３２．２（ｓ，１Ｃ）、２８．６（ｓ，１Ｃ）、２３．４（ｓ，１Ｃ）、２３．１（ｓ，１Ｃ）。
【０１６０】
６．１３．  一般的合成方法Ｊ：２−（６−クロロ−７−シクロプロピルチエノ［２，３−ｄ］ピリミジン−４−イルチオ）酢酸（３１）の調製
本発明に包含される化合物の合成に対するこの一般的アプローチを以下に記載の具体例によって示す：
【化２２】
2013537202.tif 000024
【０１６１】
２６の合成：５００ｍＬ容の丸底フラスコに、７−ブロモ−４−メトキシチエノ［３，２−ｄ］ピリミジン２５（４ｇ、１６．３２ｍｍｏｌ、１当量）を入れ、シクロプロピルボロン酸（２．８１ｇ、３２．６ｍｍｏｌ、２当量）及び炭酸カリウム（６．７６ｇ、４９ｍｍｏｌ、３当量）及び触媒としてＰｄＣｌ２（Ｐｈ３Ｐ）２（５７５ｍｇ、０．８１６ｍｍｏｌ、０．０５当量）をトルエン（６０ｍＬ）及びＨ２Ｏ（１６ｍＬ）の混合物中に取った。反応混合物をＮ２で５分間強くパージし、反応混合物を１００℃で６時間加熱した。それを室温に冷却した後、反応混合物をろ過し、両方の層を分けた。水性層をトルエンで洗浄し、合わせた有機溶媒を濃縮した。粗物質をＥｔＯＡｃ及びヘプタン（１０％から３０％）の溶媒を用いるシリカゲルカラムクロマトグラフィを用いて精製し、薄黄色の固体として７−シクロプロピル−４−メトキシチエノ［３，２−ｄ］ピリミジン２６を得た（３ｇ、収率９０％）。
【０１６２】
化合物２７を一般的合成方法Ａを用いて合成した。
【０１６３】
２８の合成：６−クロロ−７−シクロプロピル−４−メトキシチエノ［３，２−ｄ］ピリミジン（２ｇ、８．２５ｍｍｏｌ）を１２Ｎ  ＨＣｌ（６ｍＬ、７２．５ｍｍｏｌ）中に取り、反応混合物を７０℃で４０分間加熱した。それを室温に冷却した後、水（１５ｍＬ）をこの淡褐色のスラリーに添加し、十分に混合した。析出物をろ別し、それを水及びヘプタンで洗浄した。それを４０℃で一晩乾燥させ、薄黄色の固体を得た（１．６ｇ、収率９０％）。
【０１６４】
化合物２９を一般的合成方法Ｂを用いて合成した。化合物３０を一般的合成方法Ｂを用いて合成した。ＭＳ  ｍ／ｚ  Ｃ１１Ｈ９ＣｌＮ２Ｏ２Ｓ２  ［Ｍ＋１］＋＝３０１及び［Ｍ＋１］＋３＝３０３。１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）  δ  ｐｐｍ  ８．９２（ｓ，１Ｈ）、４．２２（ｓ，２Ｈ）、２．１０〜２．２０（ｍ，１Ｈ）、１．４５〜１．５２（ｍ，２Ｈ）、０．９６〜１．０６（ｍ，２Ｈ）。１３Ｃ  ＮＭＲ（１０１ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）  δ  ｐｐｍ  １６９．６（ｓ，２Ｃ）、１６１．４（ｓ，１Ｃ）、１５６．２（ｓ，１Ｃ）、１５４．１（ｓ，２Ｃ）、１３４．４（ｓ，１Ｃ）、１２５．９（ｓ，１Ｃ）、３１．９（ｓ，１Ｃ）、１０．２（ｓ，１Ｃ）、６．３（ｓ，２Ｃ）。
【０１６５】
６．１４．  一般的合成方法Ｋ：２−（７−シクロプロピル−６−メチルチエノ［２，３−ｄ］ピリミジン−４−イルチオ）酢酸（３５）の調製
本発明に包含される化合物の合成に対するこの一般的アプローチを以下に記載の具体例によって示す：
【化２３】
2013537202.tif 000025
【０１６６】
化合物２６を一般的合成方法Ｊを用いて合成した。
【０１６７】
３１の合成：ＴＨＦ（６０ｍＬ）中のＮ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン（１４ｍＬ、８０ｍｍｏｌ）に、ｎ−ＢｕＬｉ（３７．５ｍＬ、１．６Ｍ、６０ｍｍｏｌ）を−６０℃で滴加した。この温度で１５分間撹拌した後、化合物３１（４．１４ｇ、２０ｍｍｏｌ）を一度に添加し、４５分で−４５℃に加温した。それからそれを再び−６０℃まで冷却し、ＭｅＩ（５ｍＬ、８０ｍｍｏｌ）を、徐々に滴加することによりクエンチし、反応混合物が室温に加温されるまで２時間撹拌した。２時間後、それをブライン及び水（１００ｍＬ）の混合物によってクエンチし、ＴＨＦ層を分離した。水性層をジクロロメタンで抽出し、合わせた有機溶媒を再びブラインで洗浄して、ＭｇＳＯ４に通した。粗生成物を酢酸エチル／ヘキサン混合物（１０％から３０％）を用いるシリカゲルクロマトグラフィを用いて精製し、化合物３２を得た（２．６４ｇ、収率６０％）。
【０１６８】
化合物３２〜化合物３５を一般的合成方法Ｂを用いて合成した。ＭＳ  ｍ／ｚ  Ｃ１２Ｈ１２Ｎ２Ｏ２Ｓ２［Ｍ＋１］＋＝２８１。１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）  δ  ｐｐｍ  １２．８６（ｂｒ．ｓ．，１Ｈ）、８．８５（ｓ，１Ｈ）、４．２０（ｓ，２Ｈ）、２．６５（ｓ，３Ｈ）、１．９９（ｔｔ，Ｊ＝８．６３，５．４３Ｈｚ，１Ｈ）、１．２３〜１．３０（ｍ，２Ｈ）、０．８８〜０．９７（ｍ，２Ｈ）。
【０１６９】
６．１５．  一般的合成方法Ｌ：４−（カルボキシメチルチオ）−７−メチルチエノ［３，２−ｄ］ピリミジン−６−カルボン酸（４０）の調製
本発明に包含される化合物の合成に対するこの一般的アプローチを以下に記載の具体例によって示す：
【化２４】
2013537202.tif 000026
【０１７０】
化合物３６は市販されている。化合物３７を一般的合成方法Ｂを用いて合成した。
【０１７１】
３８の合成：−３０℃のチオフェン３７（３６８ｍｇ、２ｍｍｏｌ、１．０当量）の無水ＴＨＦ（５ｍＬ）撹拌溶液に、ＬＤＡのＴＨＦ溶液（２．２ｍｍｏｌ、１．１当量）（０．３４ｍＬのジイソプロピルアミンと、０．９６ｍＬの２．５Ｍ  ｎＢｕＬｉとを−３０℃で５ｍＬのＴＨＦ中で混合することにより新たに調製した）を添加した。反応物が透明色から黄色へと変わった。２０分後、エチルクロロホルメート（０．２８ｍＬ、３ｍｍｏｌ、１．５当量）を滴加した。それを冷浴中で室温まで加温した後、反応物を水によりクエンチさせた。混合物を１０ｍＬの酢酸エチルで希釈し、酢酸エチル（１０ｍＬ×２回）で抽出した。合わせた有機層をブラインで洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、濃縮した。それから粗混合物をシリカゲル上に吸着させ、フラッシュクロマトグラフィ（１０％  ＤＣＭ／ＥＡにより溶出）により精製し、白色固体としてエステル３８を得た（１２７ｍｇ、収率２５％）。
【０１７２】
化合物３９及び化合物４０を一般的合成方法Ｂを用いて合成した。
【０１７３】
６．１６．  一般的合成方法Ｍ：２−（６−シアノ−７−メチルチエノ［３，２−ｄ］ピリミジン−４−イルチオ）酢酸（４４）及び２−（６−カルバモイル−７−メチルチエノ［３，２−ｄ］ピリミジン−４−イルチオ）酢酸（４６）の調製
本発明に包含される化合物の合成に対するこの一般的アプローチを以下に記載の具体例によって示す：
【化２５】
2013537202.tif 000027
【０１７４】
４１の合成：一般的合成方法Ｂを用いて調製した３７（３６８ｍｇ、２ｍｍｏｌ、１．０当量）の無水ＴＨＦ（５ｍＬ）溶液に、−３０℃でＬＤＡのＴＨＦ溶液（２．２ｍｍｏｌ、１．１当量）（０．３４ｍＬのジイソプロピルアミンと、０．９６ｍＬの２．５Ｍ  ｎＢｕＬｉとを−３０℃で５ｍＬのＴＨＦ中で混合することにより新たに調製した）を添加した。反応物が透明色から黄色へと変わった。２０分後、ヨウ化物（６０９ｍｇ、２．４ｍｍｏｌ、１．２当量）を滴加した。それを冷浴中で室温まで加温した後、反応物を水によってクエンチさせた。反応物を１０ｍＬの酢酸エチルで希釈し、酢酸エチル（１０ｍＬ×２）で抽出した。合わせた有機層をブラインで洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、濃縮した。それから粗混合物をシリカゲル上に吸着させ、フラッシュクロマトグラフィ（１０％  ヘキサン／酢酸エチルにより溶出）により精製し、白色固体として化合物４１を得た（４０７ｍｇ、収率６５％）。
【０１７５】
化合物４２及び化合物４３を、一般的合成方法Ｂを用いて合成した。
【０１７６】
４４の合成：ＤＭＦ（１ｍＬ）中の化合物４３（７０ｍｇ、０．１９ｍｍｏｌ、１当量）をＰｄ（ＰＰｈ３）４（４４ｍｇ、０．０３８ｍｍｏｌ、０．２当量）及びＺｎ（ＣＮ）２（３０ｍｇ、０．２５ｍｍｏｌ、１．１当量）に添加した。バイアルを、Ｎ２を用いて５分間脱気した後、バイアルに蓋をした。それから反応物を１００℃で１．５時間マイクロ波照射下で加熱した。溶媒を全て除去し、残渣を分取薄層クロマトグラフィにより精製し、白色固体を得た（２８ｍｇ、収率４２％）。ＭＳ  ｍ／ｚ  Ｃ１０Ｈ７Ｎ３Ｏ２Ｓ２  ［Ｍ＋１］＋＝２６６．０；１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）  δ  ｐｐｍ  ９．０９（ｓ，１Ｈ）、４．１２（ｂｒ．ｓ．，２Ｈ）、２．６０（ｓ，３Ｈ）。
【０１７７】
４６の合成：一般的合成方法Ｍを用いて調製した化合物４５（４０ｍｇ、０．１４２ｍｍｏｌ、１当量）を１ｍＬのＭｅＯＨ中に取った。この溶液に、１Ｎ  ＮａＯＨ（２．１ｍＬ）を添加した。それから得られた混合物を室温で撹拌した後、それを１Ｎ  ＨＣｌを添加することにより中性にした。反応物を分取ＨＰＬＣにより精製し、白色固体として化合物４６を得た（１２ｍｇ、収率２９％）。ＭＳ  ｍ／ｚ  Ｃ１０Ｈ９Ｎ３Ｏ３Ｓ２  ［Ｍ＋１］＋＝２８４．０、実測値２２４。１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，クロロホルム−ｄ）  δ  ｐｐｍ  ８．８３（ｓ，１Ｈ）、６．０６〜６．３６（ｍ，２Ｈ）、４．２０（ｓ，２Ｈ）、２．７７（ｓ，３Ｈ）。
【０１７８】
６．１７．  一般的合成方法Ｎ：２−（３−クロロ−２−メチルチエノ［３，２−ｃ］ピリジン−４−イルチオ）酢酸（５０）の調製
本発明に包含される化合物の合成に対するこの一般的アプローチを以下に記載の具体例によって示す：
【化２６】
2013537202.tif 000028
【０１７９】
化合物４７は市販されている。化合物４８を一般的方法Ａを用いて合成した。化合物４９及び化合物５０を一般的方法Ｂを用いて合成した。
【０１８０】
６．１８．  一般的合成方法Ｏ：２−（５，６−ジメチルフロ［２，３−ｄ］ピリジン−４−イルチオ）酢酸（５５）の調製
本発明に包含される化合物の合成に対するこの一般的アプローチを以下に記載の具体例によって示す：
【化２７】
2013537202.tif 000029
【０１８１】
５２の合成：５０ｍＬ容の丸底フラスコに、２−アミノ−４，５−ジメチルフラン−３−カルボニトリル５１（１ｇ、７．４ｍｍｏｌ）を溶媒であるギ酸（１５ｍＬ）中に取った。この混合物を６時間かけて還流温度に加熱した。反応物を室温まで冷却し、真空ポンプで濃縮した。それからそれをジクロロメタン中に取り、Ｈ２Ｏで洗浄した。次いで粗生成物をＮａ２ＳＯ４に通し、濃縮して、粗生成物として粗ジメチルフロピリミジノール５２を得た。それを次の工程に直接使用する。
【０１８２】
５３の合成：５，６−ジメチルフロ［２，３−ｄ］ピリミジン−４−オール５２（７００ｍｇ、４．３ｍｍｏｌ、１当量）をＰＯＣｌ３（１０ｍＬ、１００ｍｍｏｌ、２３当量）中で懸濁し、３時間かけて９０℃に加熱した。冷却後、反応物を濃縮し、残渣を０℃に冷却した。それから氷冷水を徐々に加え、ＰＯＣｌ３を完全に消費させた。黒色の溶液を酢酸エチルで３回抽出した。合わせた有機抽出物を飽和ＮａＨＣＯ３水溶液で２回、ブラインで１回洗浄し、ＭｇＳＯ４で乾燥させ、ろ過し、濃縮して、薄褐色の固体の４−クロロ−５，６−ジメチルフロ［２，３−ｄ］ピリミジン５３を得て（３５０ｍｇ、収率５５％）、それを完全に乾燥させた直後に使用した。
【０１８３】
５４の合成：４−クロロ−５，６−ジメチルフロ［２，３−ｄ］ピリミジン５３（３５０ｍｇ、１．９１ｍｍｏｌ、１当量）をメタノール（１０ｍＬ）中で懸濁し、０℃に冷却した。メチル２−メルカプトアセテート（０．１３ｍＬ、２．０ｍｍｏｌ、１.０５当量）を徐々に添加した後、ＴＥＡ（０．３９ｍＬ、３．８４ｍｍｏｌ、２.１当量）を徐々に添加した。９０分間撹拌した後、反応物を濃縮した。残渣を酢酸エチル中に取り、シリカゲルプラグを通してろ過し、塩及び一部の色素を除去した。ろ液を濃縮し、ヘキサン中、０％から１５％の酢酸エチルによるシリカゲルクロマトグラフィを用いて精製して、固体としてメチル２−（５，６−ジメチルフロ［２，３−ｄ］ピリミジン−４−イルチオ）アセテート５４を得た（４２０ｍｇ、収率９０％）。
【０１８４】
５５の合成：メチル２−（５，６−ジメチルフロ［２，３−ｄ］ピリミジン−４−イルチオ）アセテート５４（４００ｍｇ、１．５８ｍｍｏｌ、１当量）をＴＨＦ（１０ｍＬ）中に取り、１Ｎ  ＮａＯＨ水溶液（３．２ｍＬ、３．２ｍｍｏｌ、２当量）を効率的に撹拌しながら添加した。４０分後、反応物を濃縮し、残渣を水中に取り、０℃に冷却して、１Ｎ  ＨＣｌを用いて低ｐＨまで酸性化した。析出物を真空ろ過により回収し、水で洗浄した。それを真空下で一晩乾燥し、固体として純粋な２−（５，６−ジメチルフロ［２，３−ｄ］ピリミジン−４−イルチオ）酢酸５５を得た（３５３ｍｇ、収率９４％）。
【０１８５】
６．１９．  一般的合成方法Ｐ：２−（７−シクロプロピル−６−（トリフルオロメチル）チエノ［３，２−ｄ］ピリミジン−４−イル）チオ）酢酸（６０）の調製：
【化２８】
2013537202.tif 000030
【０１８６】
化合物２６、化合物５６、化合物５７、化合物５８及び化合物６０は一般的合成方法Ｊを用いて合成した。
【０１８７】
５９の合成：１００ｍＬ容の丸底フラスコに、Ｒｕ（ｐｈｅｎ）３Ｃｌ２（１４ｍｇ、０．０１当量）及びＫ２ＨＰＯ４（９３０ｍｇ、３当量）を入れ（equipped with）、反応混合物を、真空排気と窒素バックフィル（backfill）とを交互に行う（×３）ことで脱気した後、ＭｅＣＮ（２０ｍＬ、０．１２５Ｍ）及びエチル２−（７−シクロプロピルチエノ［３，２−ｄ］ピリミジン−４−イル）チオ）アセテート５８（５００ｍｇ、１当量）をシリンジにより添加した。得られる溶液を、−７８℃で真空排気と窒素バックフィルとを交互に行う（×３）ことで脱気し、溶液はそれぞれの反復の間に窒素下で室温に加温させた。トリフリルクロリド（０．４ｍＬ、２当量）をシリンジにより添加し、バイアルにパラフィルムで封をし、２５Ｗの小型蛍光電球からおよそ２ｃｍ離して置いた。４８時間後、反応物を水（２ｍＬ）によってクエンチさせ、ＣＨ２Ｃｌ２（×２）で抽出し、合わせた有機層をＭｇＳＯ４で乾燥させ、真空下で濃縮した。それから粗物質を中性条件を用いて分取ＨＰＬＣにより精製し、１０％の収率でメチル２−（７−シクロプロピル−６−（トリフルオロメチル）チエノ［３，２−ｄ］ピリミジン−４−イル）チオ）アセテート５９（６２ｍｇ）を得た。
【０１８８】
６．２０．  代表的な化合物
多くの化合物を作製し、本明細書に記載のアッセイの１つ又は複数においてそれらの活性を試験した。それらの化合物の一部を以下の表１に示し、「調製方法（Prep）」の列は指定の化合物を作製するのに用いられる一般的合成方法を示す。「ＨＰＬＣ方法及び時間（分）」の列は以下のＨＰＬＣ条件を表す：
Ａ：Ｓｕｎｆｉｒｅ  Ｃ１８  ５ｕ  ４．６×５０ｍｍ、１０％から９０％  Ｂ、勾配時間＝２分、流量＝３．５ｍＬ／分、波長＝２２０ｎｍ及び２５４ｎｍ、溶媒Ａ＝１０ｍＭ  酢酸アンモニウム水溶液、溶媒Ｂ＝アセトニトリル。
Ｂ：Ｓｕｎｆｉｒｅ  Ｃ１８  ５ｕ  ４．６×５０ｍｍ、１０％から９０％  Ｂ、勾配時間＝２分、流量＝３．５ｍＬ／分、波長＝２５４ｎｍ及び２８０ｎｍ、溶媒Ａ＝精製水、溶媒Ｂ＝９５％メタノール／５％水＋０．１％トリフルオロ酢酸（ｖ／ｖ）。
「ＩＣ５０」の列は本明細書に記載の結合アッセイを用いて測定される化合物のＩＣ５０を示し、＊＊＊＊は０．０２５μＭ以下の値を意味し、＊＊＊は０．０５μＭ以下の値を意味し、＊＊は０．１μＭ以下の値を意味し、＊は０．２５μＭ以下の値を意味し、−−はＩＣ５０が未測定であったことを意味する。「ＥＣ５０」の列は本明細書に記載のレポーターアッセイを用いて測定される化合物のＥＣ５０を示し、＊＊＊＊は１μＭ以下の値を意味し、＊＊＊は５μＭ以下の値を意味し、＊＊は１０μＭ以下の値を意味し、＊は１５μＭ以下の値を意味し、−−はＥＣ５０が未測定であったことを意味する。
【０１８９】
【表１】
2013537202.tif 000031
【０１９０】
2013537202.tif 000032
【０１９１】
2013537202.tif 000033
【０１９２】
2013537202.tif 000034
【０１９３】
2013537202.tif 000035
【０１９４】
2013537202.tif 000036
【０１９５】
６．２１．  ２−（（５，６−ジメチルチエノ［２，３−ｄ］ピリミジン−４−イル）チオ）酢酸の薬理
【化２９】
2013537202.tif 000037
【０１９６】
第１の研究では、２−（（５，６−ジメチルチエノ［２，３−ｄ］ピリミジン−４−イル）チオ）酢酸のｉｎ  ｖｉｖｏでの効果を、１０．７週齢から開始してＦ１雄性ハイブリッド（１２９×Ｃ５７）マウスを該化合物で２５日間処理することにより決定した。該化合物を動物の食餌に入れて投与した。４つのマウス群を使用した：対照（Ｎ＝１２）；２５ｍｇ／ｋｇの化合物（Ｎ＝９）；８３ｍｇ／ｋｇの化合物（Ｎ＝９）；及び追加群（Ｌｉ２ＣＯ３を食餌に入れて投与した（０．１％））（Ｎ＝９）。
【０１９７】
大腿骨の中央骨幹の皮質骨の厚さを、ScancoのμＣＴ４０を用いて測定した。皮質骨の厚さの増大は、対照群と比較して両用量の化合物で観察された：２５ｍｇ／ｋｇでは９％（ｐ＝０．０４）；及び８３ｍｇ／ｋｇでは８％（ｐ＝０．０７）。Ｌｉ２ＣＯ３群では、２％（ｐ＝０．９０）の皮質骨の厚さの低減が観察された。
【０１９８】
第２の研究では、２−（（５，６−ジメチルチエノ［２，３−ｄ］ピリミジン−４−イル）チオ）酢酸のｉｎ  ｖｉｖｏでの効果を、同様に１０．７週齢から開始してＦ１雄性ハイブリッド（１２９×Ｃ５７）マウスを該化合物で２５日間処理することにより決定した。該化合物を動物の食餌に入れて投与した。４つのマウス群を使用した：対照（Ｎ＝１２）；１ｍｇ／ｋｇの化合物（Ｎ＝９）；８ｍｇ／ｋｇの化合物（Ｎ＝９）；及び２４ｍｇ／ｋｇの化合物（Ｎ＝９）。図５で示されるように、８ｍｇ／ｋｇの化合物で処理したマウスは大腿骨の中央骨幹の皮質骨の厚さの４％（ｐ＝０．１９）の増大を示し、２４ｍｇ／ｋｇの化合物で処理したマウスは６％（ｐ＝０．０５）の増大を示した。
【０１９９】
６．２２．  ２−（（５−クロロ−６−メチルチエノ［２，３−ｄ］ピリミジン−４−イル）チオ）酢酸の薬理
【化３０】
2013537202.tif 000038
【０２００】
２−（（５−クロロ−６−メチルチエノ［２，３−ｄ］ピリミジン−４−イル）チオ）酢酸の薬理を、卵巣切除したＦｉｓｃｈｅｒ  ３４４ラットで研究した。ラットに対して４３週齢又は４６週齢で卵巣摘出手術又は擬似手術を行い、化合物による処理は３７週齢又は４０週齢、その後８３週齢で開始した。
【０２０１】
４つの処理群を使用した：対照食餌を与える擬似手術群（Ｎ＝１４）；化合物を与える擬似手術群（Ｎ＝１２）；対照食餌を与えるＯＶＸ手術群（Ｎ＝１４）；及び化合物を与えるＯＶＸ手術群（Ｎ＝１２）。化合物をラットの食餌に組み込むことにより投与した：食餌１ｋｇ当たり０．４６グラムの化合物。標的用量は３０ｍｇ／ｋｇであった。投与は５週間行った。
【０２０２】
骨量及び骨構造をScancoのμＣＴ４０を用いるマイクロＣＴにより決定した。図６で示されるように、処理によって、擬似群及びＯＶＸ群の両方において大腿骨の中央骨幹の皮質骨の厚さが増大した：卵巣切除していない（intact）ラットで３％及び卵巣切除したラットで５％。擬似対照の皮質骨の厚さとＯＶＸ対照の皮質骨の厚さとの差は−１３％であった。２要因ＡＮＯＶＡ値は、ＯＶＸ手術でｐ＜０．００１、処理でｐ＝０．０５、及び交互作用でｐ＝０．６５であった。
【０２０３】
図７で示されるように、処理によって、擬似群及びＯＶＸ群の両方において脛骨の中央骨幹の皮質骨の厚さも増大した：卵巣切除していないラットで２％及び卵巣切除したラットで５％。２要因ＡＮＯＶＡ値は、ＯＶＸ手術でｐ＝０．７９、処理でｐ＝０．０５、及び交互作用でｐ＝０．５２であった。
【０２０４】
６．２３．  ２−（（５−クロロ−６−イソプロピルチエノ［２，３−ｄ］ピリミジン−４−イル）チオ）酢酸の薬理
【化３１】
2013537202.tif 000039
【０２０５】
２−（（５−クロロ−６−イソプロピルチエノ［２，３−ｄ］ピリミジン−４−イル）チオ）酢酸のｉｎ  ｖｉｖｏでの効果を、８．７週齢から開始してＦ１雄性ハイブリッド（１２９×Ｃ５７）マウスを該化合物で２５日間処理することにより決定した。該化合物を経口強制飼養により１日２回投与した（ビヒクル＝０．１％  Ｔｗｅｅｎ  ８０の水溶液）。４つのマウス群を使用した：対照（Ｎ＝１３）；５ｍｇ／ｋｇの化合物（Ｎ＝１３）；１０ｍｇ／ｋｇの化合物（Ｎ＝１３）；１５ｍｇ／ｋｇの化合物（Ｎ＝１３）。
【０２０６】
大腿骨の中央骨幹の皮質骨の厚さを、マイクロＣＴ（Scanco、μＣＴ４０）を用いて測定した。皮質骨の厚さの増大は、対照群と比較して全ての用量の化合物で観察された：５ｍｇ／ｋｇでは６％（ｐ＝０．００２）；１０ｍｇ／ｋｇでは５％（ｐ＝０．００７）；及び１５ｍｇ／ｋｇでは６％（ｐ＝０．００１）。
【０２０７】
６．２４．  ２−（（６−クロロ−７−シクロプロピルチエノ［３，２−ｄ］ピリミジン−４−イル）チオ）酢酸の薬理
【化３２】
2013537202.tif 000040
【０２０８】
２−（（６−クロロ−７−シクロプロピルチエノ［３，２−ｄ］ピリミジン−４−イル）チオ）酢酸のｉｎ  ｖｉｖｏでの効果を、８．７週齢から開始してＦ１雄性ハイブリッド（１２９×Ｃ５７）マウスを該化合物で２５日間処理することにより決定した。該化合物を毎日の経口強制飼養により投与した（ビヒクル＝０．１％  Ｔｗｅｅｎ  ８０の水溶液）。４つのマウス群を使用した：対照（Ｎ＝１３）；３ｍｇ／ｋｇの化合物（Ｎ＝１３）；１０ｍｇ／ｋｇの化合物（Ｎ＝１３）；３０ｍｇ／ｋｇの化合物（Ｎ＝１３）。
【０２０９】
大腿骨の中央骨幹の皮質骨の厚さを、マイクロＣＴ（Scanco、μＣＴ４０）を用いて測定した。図８で示されるように、皮質骨の厚さの増大は、対照と比較して全ての用量で観察された：３ｍｇ／ｋｇでは７％（ｐ＝０．００３）；１０ｍｇ／ｋｇでは１０％（ｐ＜０．００１）；及び３０ｍｇ／ｋｇでは１３％（ｐ＜０．００１）。
【０２１０】
６．２５．  ２−（（６−クロロ−７−メチルチエノ［３，２−ｄ］ピリミジン−４−イル）チオ）酢酸の薬理
【化３３】
2013537202.tif 000041
【０２１１】
第１の実験では、２−（（６−クロロ−７−メチルチエノ［３，２−ｄ］ピリミジン−４−イル）チオ）酢酸のｉｎ  ｖｉｖｏでの効果を、５４週齢から開始してＦ１雄性ハイブリッド（１２９×Ｃ５７）マウスを該化合物で２５日間処理することにより決定した。該化合物を毎日の経口強制飼養により投与した（ビヒクル＝０．１％  Ｔｗｅｅｎ  ８０の水溶液）。３つのマウス群を使用した：対照（Ｎ＝１０）；１０ｍｇ／ｋｇの化合物（Ｎ＝１０）；及び１００ｍｇ／ｋｇの化合物（Ｎ＝１０）。マイクロＣＴ（Scanco、μＣＴ４０）により測定した大腿骨の中央骨幹の皮質骨の厚さの増大が、対照と比較して両用量で観察された：１０ｍｇ／ｋｇでは６％（ｐ＝０．０６）；及び１００ｍｇ／ｋｇでは７％（ｐ＝０．０３）。この実験では、全般的にも当てはまることではあるが、大腿骨の中央骨幹の皮質骨の厚さのデータは、各マウスの右大腿骨を用いて入手した。この実験では、１０ｍｇ／ｋｇ用量群の結果には、右大腿骨の測定結果が異常であった１匹のマウスの左大腿骨の測定結果が含まれている。
【０２１２】
第２の実験では、２−（（６−クロロ−７−メチルチエノ［３，２−ｄ］ピリミジン−４−イル）チオ）酢酸のｉｎ  ｖｉｖｏでの効果を、８．１週齢から開始してＦ１雄性ハイブリッド（１２９×Ｃ５７）マウスを該化合物で７日間及び１８日間処理することにより決定した。該化合物を動物の食餌に入れて投与した。３つのマウス群を使用した：対照（Ｎ＝９）；７日間の３４ｍｇ／ｋｇの化合物（Ｎ＝９）；及び１８日間の３４ｍｇ／ｋｇの化合物（Ｎ＝９）。図９で示されるように、大腿骨の中央骨幹の皮質骨の厚さの増大は対照と比較して両処理群で観察された：７日の処理後で６％（ｐ＝０．１３）；及び１８日の処理後で１０％（ｐ＜０．０１）。
【０２１３】
上で引用した全ての刊行物（例えば、特許及び特許出願）は引用することによりその全体が本明細書の一部をなすものとする。
【図１】
2013537202.tif 000046
【図２】
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【図３】
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【図４】
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【図５】
2013537202.tif 000050
【図６】
2013537202.tif 000051
【図７】
2013537202.tif 000052
【図８】
2013537202.tif 000053
【図９】
2013537202.tif 000054
【国際調査報告】
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