(57)【要約】  ＨＣＶに感染した患者におけるＶＸ−２２２の薬物動態を改善する方法であって、該患者にＶＸ−２２２およびＶＸ−９５０を併用投与することを含む方法。ＨＣＶに感染した患者の処置方法であって、該患者にＶＸ−２２２およびＶＸ−９５０を投与することを含み、ここで、ＶＸ−２２２は、約２０ｍｇないし約４００ｍｇ用量であり、ＶＸ−９５０は、約１００ｍｇないし約１，５００ｍｇ用量である、方法。ＨＣＶに感染した患者の処置方法であって、治療的有効量のＶＸ−２２２を投与することを含み、ここで、ＶＸ−２２２が、約２０ｍｇないし約２，０００ｍｇ用量で１日１回投与される、方法。【特許請求の範囲】
【請求項１】
ＨＣＶに感染した患者においてＶＸ−２２２の薬物動態を改善する方法であって、該患者にＶＸ−２２２およびＶＸ−９５０を共投与することを含む、方法。
【請求項２】
患者の血漿、血液または肝臓におけるＶＸ−２２２への暴露が改善される、請求項１に記載の方法。
【請求項３】
ＨＣＶに感染した患者の血漿中におけるＶＸ−２２２への暴露を増大する方法であって、該患者にＶＸ−２２２およびＶＸ−９５０を投与することを含む、方法。
【請求項４】
患者の血漿中、ＶＸ−２２２への暴露が、ＶＸ−９５０を投与しないときのＶＸ−２２２への血漿暴露と比較して２−６倍増大する、請求項１−３のいずれか一項に記載の方法。
【請求項５】
患者の血漿中、ＶＸ−２２２への暴露が、ＶＸ−９５０を投与しないときのＶＸ−２２２への血漿暴露と比較して２−４倍増大する、請求項４に記載の方法。
【請求項６】
ＶＸ−２２２のＣ(trough)レベルが増大する、請求項１−５のいずれか１項に記載の方法。
【請求項７】
ＶＸ−２２２のＣ(max)値が増大する、請求項１−５のいずれか１項に記載の方法。
【請求項８】
ＶＸ−２２２のＡＵＣ値が増大する、請求項１−５のいずれか１項に記載の方法。
【請求項９】
ＶＸ−２２２が、各投与にて約２０ｍｇないし約２，０００ｍｇ投与される、請求項１−８のいずれか１項に記載の方法。
【請求項１０】
ＶＸ−２２２が、各投与にて約５０ｍｇないし約２，０００ｍｇ投与される、請求項９に記載の方法。
【請求項１１】
ＶＸ−２２２が、各投与にて約１００ｍｇないし約１，５００ｍｇ投与される、請求項１０に記載の方法。
【請求項１２】
ＶＸ−２２２が、各投与にて約１００ｍｇ投与される、請求項１１に記載の方法。
【請求項１３】
ＶＸ−２２２が、各投与にて約４００ｍｇ投与される、請求項１１に記載の方法。
【請求項１４】
ＶＸ−２２２が、各投与にて約２５０ｍｇ投与される、請求項１１に記載の方法。
【請求項１５】
ＶＸ−２２２が、各投与にて約５００ｍｇ投与される、請求項１１に記載の方法。
【請求項１６】
ＶＸ−２２２が、各投与にて約７５０ｍｇ投与される、請求項１１に記載の方法。
【請求項１７】
ＶＸ−２２２が１日１回投与される、請求項１−１６のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１８】
ＶＸ−２２２が１日２回投与される、請求項１−１６のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１９】
ＶＸ−２２２が、各投与にて約１，５００ｍｇ投与される、請求項１１に記載の方法。
【請求項２０】
ＶＸ−２２２が１日１回投与される、請求項１９に記載の方法。
【請求項２１】
ＶＸ−９５０が、各投与にて約１００ｍｇないし約１，５００ｍｇ投与される、請求項１−２０のいずれか一項に記載の方法。
【請求項２２】
ＶＸ−９５０が、各投与にて約５００ｍｇないし約１，５００ｍｇ投与される、請求項２１に記載の方法。
【請求項２３】
ＶＸ−９５０が、各投与にて約７５０ｍｇ投与される、請求項２１に記載の方法。
【請求項２４】
ＶＸ−９５０が、約７５０ｍｇを１日３回投与される、請求項２３に記載の方法。
【請求項２５】
ＶＸ−９５０が、各投与にて約１，１２５ｍｇ投与される、請求項２２に記載の方法。
【請求項２６】
ＶＸ−９５０が、約１，１２５ｍｇを１日２回投与される、請求項２５に記載の方法。
【請求項２７】
ＶＸ−９５０およびＶＸ−２２２以外の１種以上のさらなるＨＣＶ薬を患者に投与することをさらに含む、請求項１−２６のいずれか一項に記載の方法。
【請求項２８】
インターフェロンを共投与する、請求項２７に記載の方法。
【請求項２９】
インターフェロンがペグ化インターフェロンである、請求項２８に記載の方法。
【請求項３０】
インターフェロンがペグ化インターフェロンαである、請求項２８に記載の方法。
【請求項３１】
ペグ化インターフェロンαが、ペグ化インターフェロン α−２ａまたはペグ化インターフェロン α−２ｂである、請求項３０に記載の方法。
【請求項３２】
リバビリンを共投与する、請求項２７または２８に記載の方法。
【請求項３３】
約８週間ないし約２４週間の期間に、ＶＸ−９５０およびＶＸ−２２２を共投与する、請求項１−３２のいずれか一項に記載の方法。
【請求項３４】
ＶＸ−９５０およびＶＸ−２２２を約１２週間共投与する、請求項３３に記載の方法。
【請求項３５】
ペグ化インターフェロンαおよびリバビリンを投与する、請求項２７に記載の方法。
【請求項３６】
ペグ化インターフェロンαが、ペグ化インターフェロン α−２ａまたはペグ化インターフェロン α−２ｂである、請求項３５に記載の方法。
【請求項３７】
ＶＸ−９５０およびＶＸ−２２２を約１２週間共投与する、請求項３５または３６に記載の方法。
【請求項３８】
ペグ化インターフェロンおよびリバビリンを約１２週間共投与する、請求項３７に記載の方法。
【請求項３９】
ペグ化インターフェロンおよびリバビリンを約２４週間共投与する、請求項３７に記載の方法。
【請求項４０】
ＨＣＶに感染した患者の処置方法であって、該患者にＶＸ−２２２およびＶＸ−９５０を投与することを含み、ここで、ＶＸ−２２２は、各投与にて約２０ｍｇないし約４００ｍｇ投与され、ＶＸ−９５０は、各投与にて約１００ｍｇないし約１５００ｍｇ投与される、方法。
【請求項４１】
ＶＸ−２２２が、各投与にて２０ｍｇまたは２０ｍｇより多く、かつ４００ｍｇ未満の量で投与される、請求項４０に記載の方法。
【請求項４２】
ＶＸ−２２２が、各投与にて約２０ｍｇないし約３００ｍｇ投与される、請求項４０に記載の方法。
【請求項４３】
ＶＸ−９５０が、各投与にて約３００ｍｇないし約１５００ｍｇ投与される、請求項４０に記載の方法。
【請求項４４】
ＶＸ−９５０が、約７５０ｍｇを１日３回投与される、請求項４０に記載の方法。
【請求項４５】
ＶＸ−９５０が、約１１２５ｍｇを１日２回投与される、請求項４０に記載の方法。
【請求項４６】
ＶＸ−２２２が、各投与にて約１００ｍｇ投与される、請求項４０−４５のいずれか一項に記載の方法。
【請求項４７】
ＶＸ−２２２が、各投与にて約４００ｍｇ投与される、請求項４０−４５のいずれか一項に記載の方法。
【請求項４８】
ＶＸ−２２２が１日１回投与される、請求項４０−４７のいずれか一項に記載の方法。
【請求項４９】
ＶＸ−２２２が１日２回投与される、請求項４０−４７のいずれか一項に記載の方法。
【請求項５０】
患者にＶＸ−９５０およびＶＸ−２２２以外の１種以上のさらなるＨＣＶ薬を投与することをさらに含む、請求項４０−４９のいずれか一項に記載の方法。
【請求項５１】
インターフェロンを共投与する、請求項５０に記載の方法。
【請求項５２】
インターフェロンがペグ化インターフェロンである、請求項５１に記載の方法。
【請求項５３】
インターフェロンがペグ化インターフェロンαである、請求項５２に記載の方法。
【請求項５４】
ペグ化インターフェロンαが、ペグ化インターフェロン α−２ａまたはペグ化インターフェロン α−２ｂである、請求項５２に記載の方法。
【請求項５５】
リバビリンを共投与する、請求項５０または５１に記載の方法。
【請求項５６】
約８週ないし約２４週間の期間に、ＶＸ−９５０およびＶＸ−２２２を共投与する、請求項４０−５５のいずれか一項に記載の方法。
【請求項５７】
ＶＸ−９５０およびＶＸ−２２２を、約１２週間共投与する、請求項５６に記載の方法。
【請求項５８】
ペグ化インターフェロンαおよびリバビリンを共投与する、請求項５０に記載の方法。
【請求項５９】
ペグ化インターフェロンαが、ペグ化インターフェロン α−２ａまたはペグ化インターフェロン α−２ｂである、請求項５８に記載の方法。
【請求項６０】
ＶＸ−９５０およびＶＸ−２２２を約１２週間共投与する、請求項５８または５９に記載の方法。
【請求項６１】
ペグ化インターフェロンおよびリバビリンを約１２週間共投与する、請求項６０に記載の方法。
【請求項６２】
ペグ化インターフェロンおよびリバビリンを２４週間共投与する、請求項６１に記載の方法。
【請求項６３】
ＨＣＶに感染した患者の処置方法であって、治療的有効量のＶＸ−２２２を投与することを含み、ここで、ＶＸ−２２２は、約２０ｍｇないし約２，０００ｍｇの量で１日１回投与される、方法。
【請求項６４】
ＶＸ−２２２が、約１００ｍｇないし約１，５００ｍｇの量で１日１回投与される、請求項６３に記載の方法。
【請求項６５】
ＶＸ−２２２が、約１，５００ｍｇの量で１日１回投与される、請求項６４に記載の方法。
【請求項６６】
ＶＸ−２２２が、約７５０ｍｇの量で１日１回投与される、請求項６４に記載の方法。
【請求項６７】
ＶＸ−２２２が、約５００ｍｇの量で１日１回投与される、請求項６４に記載の方法。
【請求項６８】
ＶＸ−２２２が、約４００ｍｇの量で１日１回投与される、請求項６４に記載の方法。
【請求項６９】
ＶＸ−２２２が、約２５０ｍｇの量で１日１回投与される、請求項６４に記載の方法。
【請求項７０】
ＶＸ−２２２が、約１００ｍｇの量で１日１回投与される、請求項６４に記載の方法。
【請求項７１】
患者にＶＸ−２２２以外の１種以上のさらなるＨＣＶ薬を投与することをさらに含む、請求項６３−７０のいずれか一項に記載の方法。
【請求項７２】
ＶＸ−９５０を共投与する、請求項７１に記載の方法。
【請求項７３】
ＶＸ−９５０が、各投与にて約５００ｍｇないし約１，５００ｍｇ投与される、請求項７２に記載の方法。
【請求項７４】
ＶＸ−９５０が、７５０ｍｇを１日３回投与される、請求項７２に記載の方法。
【請求項７５】
ＶＸ−９５０が、１１２５ｍｇを１日２回投与される、請求項７３に記載の方法。
【請求項７６】
ＶＸ−９５０およびＶＸ−２２２が、約８週間ないし約２４週間の期間投与される、請求項７２−７５のいずれか一項に記載の方法。
【請求項７７】
インターフェロンが共投与される、請求項７６に記載の方法。
【請求項７８】
インターフェロンがペグ化インターフェロンである、請求項７７に記載の方法。
【請求項７９】
インターフェロンがペグ化インターフェロンαである、請求項７８に記載の方法。
【請求項８０】
ペグ化インターフェロンαが、ペグ化インターフェロン α−２ａまたはペグ化インターフェロン α−２ｂである、請求項７９に記載の方法。
【請求項８１】
リバビリンが共投与される、請求項７１−７７のいずれか一項に記載の方法。
【請求項８２】
ペグ化インターフェロンαおよびリバビリンが共投与される、請求項７１−７６のいずれか一項に記載の方法。
【請求項８３】
ペグ化インターフェロンαが、ペグ化インターフェロン α−２ａまたはペグ化インターフェロン α−２ｂである、請求項８２に記載の方法。
【請求項８４】
ＶＸ−９５０；ペグ化インターフェロン α−２ａまたはペグ化インターフェロン α−２ｂ；および、リバビリンが共投与される、請求項８２に記載の方法。
【請求項８５】
ＶＸ−９５０およびＶＸ−２２２を約１２週間共投与する、請求項８４に記載の方法。
【請求項８６】
ペグ化インターフェロンおよびリバビリンを約１２週間共投与する、請求項８４に記載の方法。
【請求項８７】
ペグ化インターフェロンおよびリバビリンを約２４週間共投与する、請求項８４に記載の方法。
【請求項８８】
ａ）約２０ｍｇないし約４００ｍｇ量のＶＸ−２２２；および
ｂ）約１００ｍｇないし約１，５００ｍｇ量のＶＸ−９５０
を含む、薬学的に許容される組成物。
【請求項８９】
ＶＸ−２２２が、５０ｍｇまたは５０ｍｇより多く、かつ４００ｍｇ未満の量である、請求項８８に記載の組成物。
【請求項９０】
ＶＸ−２２２が約１００ｍｇないし約４００ｍｇの量であり、ＶＸ−９５０が約３００ｍｇないし約７５０ｍｇの量である、請求項８８に記載の組成物。
【請求項９１】
ＶＸ−９５０が約３７５ｍｇの量である、請求項８８−９０のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項９２】
ＶＸ−２２２が約５０ｍｇの量である、請求項８８−９０のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項９３】
ＶＸ−２２２が約２００ｍｇの量である、請求項８８−９０のいずれか一項に記載の組成物。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
関連出願
本出願は、２０１０年１月２９日出願の米国仮特許出願番号第６１／２９９,６４３号、２０１０年２月２６日出願の同第６１／３０８，５０６号、２０１０年３月１日出願の同第６１／３０９，１１７号、および２０１０年４月１５日出願の同第６１／３２４，３９５号に優先権の利益を主張する。これらの出願の開示内容全体は、参照により本明細書に包含される。
【０００２】
発明の技術分野
本発明は、Ｃ型肝炎ウイルス感染の処置法に関する。
【背景技術】
【０００３】
発明の背景
Ｃ型肝炎ウイルス(“ＨＣＶ”)による感染は、注目せざるを得ないヒトの医療問題である。ＨＣＶは、非Ａ非Ｂ型肝炎のほとんどの症例の原因因子として認識されており、全世界で、概算で３％のヒト血清陽性率である（例えば、A. Alberti et al., “Natural History of Hepatitis C,” J. Hepatology, 31., (Suppl. 1), pp. 17−24 (1999)を参照）。米国だけでも４００万名近くが感染している可能性がある（例えば、M.J. Alter et al., “The Epidemiology of Viral Hepatitis in the United States, Gastroenterol. Clin. North Am., 23, pp. 437−455 (1994); M. J. Alter “Hepatitis C Virus Infection in the United States,” J. Hepatology, 31., (Suppl. 1), pp. 88−91 (1999)を参照）。
【０００４】
ＨＣＶ感染者のうち、２０−２５％は、急性感染後にウイルスを除去することができるが、７５−８０％は、慢性感染症を発症する（例えば、preface, Frontiers in viral Hepatitis, Ed. RF Schinazi, J−P Sommadossi, and CM Rice, p. xi., Elsevier (2003)を参照のこと）。通常、これが肝炎の再発性および進行性の悪化を起こし、多くの場合、さらに重篤な病状、例えば、肝硬変および肝細胞癌を引き起こす（例えば、M.C. Kew, “Hepatitis C and Hepatocellular Carcinoma”, FEMS Microbiology Reviews, 14, pp. 211−220 (1994); I. Saito et. al., “Hepatitis C Virus Infection is Associated with the Development of Hepatocellular Carcinoma,” Proc. Natl. Acad. Sci. USA, 87, pp. 6547−6549 (1990)を参照）。残念なことに、慢性ＨＣＶ感染症の進行を遅らせるのに広く有効な処置は存在しない。
【０００５】
ＨＣＶゲノムは３０１０〜３０３３個のアミノ酸のポリタンパク質をコードする（例えば、Q.L. Choo, et. al., “Genetic Organization and Diversity of the Hepatitis C Virus.” Proc. Natl. Acad. Sci. USA, 88, pp. 2451−2455 (1991); N. Kato et al., “Molecular Cloning of the Human Hepatitis C Virus Genome From Japanese Patients with Non−A, Non−B Hepatitis,” Proc. Natl. Acad. Sci. USA, 87, pp. 9524−9528 (1990); A. Takamizawa et. al., “Structure and Organization of the Hepatitis C Virus Genome Isolated From Human Carriers,” J. Virol., 65, pp. 1105−1113 (1991)を参照）。ＨＣＶの非構造(ＮＳ)タンパク質は、ウイルス複製に必須の触媒機構を提供すると考えられている。ＮＳタンパク質は、ポリタンパク質のタンパク質分解的切断に由来する（例えば、R. Bartenschlager et. al., “Nonstructural Protein 3 of the Hepatitis C Virus Encodes a Serine−Type Proteinase Required for Cleavage at the NS3/4 and NS4/5 Junctions,” J. Virol., 67, pp. 3835−3844 (1993); A. Grakoui et. al., “Characterization of the Hepatitis C Virus−Encoded Serine Proteinase:  Determination of Proteinase−Dependent Polyprotein Cleavage Sites,” J. Virol., 67, pp. 2832−2843 (1993); A. Grakoui et. al., “Expression and Identification of Hepatitis C Virus Polyprotein Cleavage Products,” J. Virol., 67, pp. 1385−1395 (1993); L. Tomei et. al., “NS3 is a serine protease required for processing of hepatitis C virus polyprotein”, J. Virol., 67, pp. 4017−4026 (1993)を参照）。
【０００６】
ＨＣＶのＮＳタンパク質３(ＮＳ３)には、大部分のウイルス酵素の合成を補助するセリンプロテアーゼ活性が含まれ、それ故に、後者はウイルス複製および感染力に必須であると見なされる。黄熱病ウイルスＮＳ３プロテアーゼにおける変異は、ウイルス感染力を低減することが知られている（例えば、Chambers, T.J. et. al., “Evidence that the N−terminal Domain of Nonstructural Protein NS3 From Yellow Fever Virus is a Serine Protease Responsible for Site−Specific Cleavages in the Viral Polyprotein”, Proc. Natl. Acad. Sci. USA, 87, pp. 8898−8902 (1990)を参照）。ＮＳ３の最初の１８１個のアミノ酸(ウイルスポリタンパク質の残基１０２７〜１２０７)は、ＨＣＶポリタンパク質の４つ全ての下流部位を合成するＮＳ３のセリンプロテアーゼドメインを含むことが示されている（例えば、C. Lin et al., “Hepatitis C Virus NS3 Serine Proteinase: Trans−Cleavage Requirements and Processing Kinetics”, J. Virol., 68, pp. 8147−8157 (1994)を参照）。
【０００７】
ＨＣＶ ＮＳ３ セリンプロテアーゼおよびそれと関係する補因子ＮＳ４Ａは、全てのウイルス酵素プロセシングを補助し、故に、ウイルス複製に必須であると見なされる。このプロセシングはまた、ウイルス酵素プロセシングに関与する、ヒト免疫不全ウイルス アスパルチルプロテアーゼにより行われるものと同様のようである。ウイルスタンパク質プロセシングを阻害するＨＩＶプロテアーゼ阻害剤は、ヒトにおける強力な抗ウイルス剤であり、ウイルス生活環のこの段階を阻止することは、結果として治療的有効剤であることを示す。結果として、ＨＣＶ ＮＳ３ セリンプロテアーゼはまた、創薬の魅力的な標的である。
【０００８】
現在、満足のいく抗ＨＣＶ剤または処置剤は存在しない。最近まで、唯一の確立されたＨＣＶ疾患の治療法は、インターフェロンでの処置であった。ＨＣＶ感染のために最初に承認された治療法は、標準的な（非ペグ化）インターフェロンαでの処置であった。しかし、インターフェロンは重い副作用を有し（例えば、M. A. Walker et al., “Hepatitis C Virus: An Overview of Current Approaches and Progress(Ｃ型肝炎ウイルス；最新の対処法と進歩の概説),” DDT, 4, pp. 518−29 (1999); D. Moradpour et al., “Current and Evolving Therapies for Hepatitis C,” Eur. J. Gastroenterol. Hepatol., 11, pp. 1199−1202 (1999); H. L. A. Janssen et al. “Suicide Associated with Alfa−Interferon Therapy for Chronic Viral Hepatitis,” J. Hepatol., 21, pp. 241−243 (1994); P.F. Renault et al., “Side Effects of Alpha Interferon” seminars in Liver Disease, 9, pp. 273−277. (1989)を参照）、長期間の寛解を誘導するのは、疾患の僅かな割合(〜２５％)のみに限られる（例えば、O. Weiland, “Interferon Therapy in Chronic Hepatitis C Virus Infection”, FEMS Microbiol. Rev., 14, pp. 279−288 (1994)を参照）。処置レジメンへのリバビリンの追加は、わずかに治療応答率を増加させる。最近導入されたペグ化形態のインターフェロン(ペグ−イントロン(登録商標)およびペガシス(登録商標))とリバビリンとの併用もまた、寛解率の僅かながらの改善と副作用の部分的な軽減をもたらした。現在の標準的治療は、ＨＣＶ遺伝子型のような予後因子、および治療への初期応答の発現に依拠しながら、２４ないし４８週継続する処置レジメンである。さらに、有効な抗ＨＣＶワクチンの見込みは、不明確なままである。
【０００９】
従って、抗ＨＣＶ療法および抗ＨＣＶ化合物に適当な用量レジメンの必要性がある。
【００１０】
ＨＣＶならびに他の疾患および障害は、肝臓損傷と関係がある。肝臓損傷を処置するための治療法および適当な用量レジメンの必要性がある。
【発明の概要】
【００１１】
発明の概要
本発明は、一般的に、Ｃ型肝炎ウイルス(ＨＣＶ)感染の処置法を提供する。本発明はまた、一般的に、Ｃ型肝炎ウイルス感染の臨床的続発症の予防法を提供する。
【００１２】
一面において、本発明は、ＨＣＶに感染した患者におけるＶＸ−２２２の薬物動態を改善する方法に関する。該方法は、患者に対して、ＶＸ−２２２およびＶＸ−９５０を共投与することを含む。
【００１３】
他の面において、本発明は、ＨＣＶに感染した患者の血漿中におけるＶＸ−２２２への暴露を増大する方法に関する。該方法は、患者に対してＶＸ−２２２およびＶＸ−９５０を投与することを含む。
【００１４】
他の面において、本発明は、ＨＣＶに感染した患者の処置法に関する。該方法は、患者にＶＸ−２２２およびＶＸ−９５０を投与することを含み、ここで、ＶＸ−２２２は、約２０ｍｇないし約４００ｍｇの量であり、ＶＸ−９５０は、約１００ｍｇないし約１５００ｍｇの量である。
【００１５】
さらに他の面において、本発明は、治療的有効量のＶＸ−２２２を投与することを含むＨＣＶに感染した患者の処置法に関し、ここで、ＶＸ−２２２は、１日１回、約２０ｍｇないし約２０００ｍｇが投与される。
【００１６】
さらに他の面において、本発明は、a)約２０ｍｇないし約４００ｍｇのＶＸ−２２２；および、b) 約１００ｍｇないし約１５００ｍｇのＶＸ−９５０を含む、薬学的に許容される組成物に関する。
【００１７】
本発明はまた、ＨＣＶに感染した患者におけるＶＸ−２２２のバイオアベイラビリティを増大するための医薬の製造における、ＶＸ−２２２およびＶＸ−９５０の使用を提供する。
【００１８】
本発明はまた、ＨＣＶに感染した患者の血漿中におけるＶＸ−２２２のバイオアベイラビリティまたはＶＸ−２２２への暴露を増大するための医薬の製造における、ＶＸ−２２２およびＶＸ−９５０の使用を提供する。
【００１９】
本発明はまた、ＨＣＶに感染した患者の処置のための医薬の製造におけるＶＸ−２２２およびＶＸ−９５０の使用を提供し、ここで、ＶＸ−２２２は、約２０ｍｇないし約４００ｍｇの量であり、ＶＸ−９５０は、約１００ｍｇないし約１５００ｍｇの量である。
【００２０】
本発明はまた、ＨＣＶに感染した患者の処置のための医薬の製造におけるＶＸ−２２２の使用を提供し、ここで、ＶＸ−２２２は、約２０ｍｇないし約２０００ｍｇの量で、または約５０ｍｇないし約２０００ｍｇの量で１日１回投与される。
【図面の簡単な説明】
【００２１】
【図１】図１は、本発明の任意の態様の実験デザインを示すチャートである。
【図２】図２は、本発明の任意の態様の実験デザインを示すチャートである。
【図３】図３は、本発明の一態様の実験結果を示すチャートである。
【図４】図４は、本発明の一態様の実験結果を示すチャートである。
【図５】図５は、本発明の一態様の実験結果を示すチャートである。
【図６】図６は、本発明の一態様の実験結果を示すチャートである。
【図７】図７は、本発明の一態様の実験結果を示すチャートである。
【図８】図８は、本発明の一態様の実験結果を示すチャートである。
【図９】図９は、化合物１のプロドラッグおよび該プロドラッグの投与後にそれが変換される活性代謝物の血漿レベルを示すグラフである。
【発明を実施するための形態】
【００２２】
本発明の詳細な説明
本発明は、ＶＸ−２２２を投与するための特定の用量および投与量レジメンに関する。本発明の目的に関して、ＶＸ−２２２は、化合物１ならびにその薬学的に許容される塩、溶媒和物およびプロドラッグ、また化合物１のプロドラッグの薬学的に許容される溶媒和物を含み、ここで、化合物１は、次の構造式：
【化１】
2013518124.tif 000002
で示される。ＶＸ−２２２は、ＮＳ５Ｂポリメラーゼ阻害剤であり、ＷＯ２００８／０５８３９３に記載されている。
【００２３】
本発明はまた、ＶＸ−９５０を投与するための特定の用量および投与量レジメンに関する。ＶＸ−９５０は、７ｎｍの定常状態結合定数（steady state binding constant）（ｋｉ＊）を有する競合的な可逆性ペプチド模倣性ＮＳ３／４Ａプロテアーゼ阻害剤である。例えば、ＷＯ０２／０１８３６９を参照のこと。この目的に関して、ＶＸ−９５０は、化合物２ならびに化合物２の薬学的に許容される塩およびプロドラッグを含み、ここで、化合物２は、次の構造式：
【化２】
2013518124.tif 000003
により示される。ＶＸ−９５０は、ＰＣＴ公開番号ＷＯ０２／０１８３６９、ＷＯ２００６／０５０２５０およびＷＯ２００８１４４０７２に記載されている。ＶＸ−９５０の他の記載は、ＰＣＴ公開番号ＷＯ０７／０９８２７０およびＷＯ０８／１０６１５１に見出され得る。
【００２４】
本明細書で用いる用語“薬学的に許容される塩”は、ＨＣＶ感染の処置に対して安全かつ有効である塩を意味する。薬学的に許容される酸付加塩には、塩酸塩、臭化水素酸塩、ヨウ化水素酸塩、硝酸塩、硫酸塩、重硫酸塩、リン酸塩、過リン酸塩、イソニコチン酸塩、酢酸塩、および乳酸塩が含まれるが、これらに限定されない。種々のアミノ酸との薬学的に許容される塩もまた使用され得て、これらのアミノ酸塩の使用もまた、本発明の範囲内である。好適な塩基性塩には、アルミニウム塩、カルシウム塩、リチウム塩、マグネシウム塩、カリウム塩、ナトリウム塩、亜鉛塩およびジエタノールアミン塩が含まれるが、これらに限定されない。薬学的に許容される塩についての概要は、引用によりその内容全体を本明細書に包含させるberge et al., j. Pharm. Sci., 66, 1−19 (1977)を参照のこと。
【００２５】
化合物１の薬学的に許容される塩の特定の例は、ＷＯ２００８／０５８３９３に記載されており、例えば、アミノ酸（例えば、Ｌ−アルギニン、ｌ−リシン）から誘導される塩類、アルカリ金属（例えば、ナトリウム、リチウム、カリウム）塩、アルカリ土類金属（例えば、カルシウム、マグネシウム）、アンモニウム、ＮＲ４＋（式中、ｒは、Ｃ１−４アルキル）塩類、コリン塩およびトロメタミン塩類を含む適当な塩基から誘導される塩類である。一態様において、薬学的に許容される塩類は、ナトリウム塩である。別の態様において、薬学的に許容される塩類は、リチウム塩である。さらに別の態様において、薬学的に許容される塩は、カリウム塩である。さらに別の態様において、薬学的に許容される塩は、トロメタミン塩である。さらに別の態様において、薬学的に許容される塩は、ｌ−アルギニン塩である。
【００２６】
本明細書で用いる用語、化合物１の“薬学的に許容されるプロドラッグ”は、生理的条件下で、または化合物１の加溶媒分解により、またはＨＣＶ感染の処置においてその薬理学的効果を発揮する前に、化合物１の薬学的に許容される塩へ変換され得る化合物を意味する。本明細書で用いる用語、化合物２の“薬学的に許容されるプロドラッグ”は、生理的条件下で、または化合物２の加溶媒分解により、またはＨＣＶ感染の処置においてその薬理学的効果を発揮する前に、化合物２の薬学的に許容される塩へ変換され得る化合物を意味する。典型的に、プロドラッグは、改善された化学的安定性、改善された患者の受容性、改善されたバイオアベイラビリティ、延長された作用時間、改善された組織感受性、改善された剤形（例えば、増大した水溶性）、または低減された副作用（例えば、毒性）等の目的をもって製剤される。
【００２７】
薬学的に許容されるプロドラッグは、当技術分野で公知の方法、例えば、Burger’s Medicinal Chemistry and Drug Chemistry, Vol. 1, 172−178 and 949−982, John Wiley ＆ Sons (1995)に記載のような方法を用いて容易に製造され得る。Bertolini et al., J. Med. Chem., 40, 2011−2016 (1997); Shan et al., J. Pharm. Sci., 86(7), 765−767 (1997); Bagshawe, Drug Dev. Res., 34, 220−230 (1995); Bodor, Advances in Drug Res., 13, 224−331 (1984); Bundgaard, Design of Prodrugs, Elsevier Press (1985); および、Larsen, Design and Application of Prodrugs, Drug Design and Development (Krogsgaard−larsen et al., eds.), Harwood Academic Publishers (1991)も参照のこと。
【００２８】
化合物１のプロドラッグの特定の例には、２０１０年６月２８日出願のＵ．Ｓ．Ｓ．Ｎ． ６１／３５９，１６４に記載のものが含まれる：
【化３】
2013518124.tif 000004
【００２９】
さらに、本明細書に記載の化合物が、異なる溶媒和物形態、例えば水和物形態で存在していてよく、さらに生物学的有効性を保持することは、当業者に理解され得る。かかる溶媒和物はまた、溶媒分子が、結晶化過程において化合物分子の結晶格子構造に挿入されるとき、形成され得る。本明細書で用いる用語、化合物１の“薬学的に許容される溶媒和物”は、溶媒分子（複数可）を含み、化合物１の生物学的有効性を保持する化合物１の薬学的に許容される溶媒和物形態を意味する。本明細書で用いる用語、化合物１のプロドラッグの“薬学的に許容される溶媒和物”は、溶媒分子（複数可）を含み、化合物１の生物学的有効性を保持する化合物１のプロドラッグの薬学的に許容される溶媒和物形態を意味する。
【００３０】
１種以上の同位体に富む原子の存在でのみ化合物１および化合物２と異なる化合物は、本発明に包含される。例えば、水素を重水素またはトリチウムで置換したか、または炭素を１３Ｃ−もしくは１４Ｃ−に富む炭素により置換した以外は本発明化合物構造を有する化合物は、本発明の範囲内である。同位体に富む化合物２の任意の例は、ＷＯ２００７／１０９０８０およびMaltais et al., J. of Medicinal Chemistry, “In Vitro and In Vivo isotope effects with Hepatitis c Protease Inhibitors: Enhanced Plasma Exposure of Deuterated Telaprevir versus Telaprevir in Rats” 2009;52(24):7993−8001に見出され得る。
【００３１】
化合物１および化合物２は、それぞれ独立して、１個以上の不斉炭素原子を含んでいてよく、故に、ラセミ体およびラセミ混合物、単一のエナンチオマー、ジアステレオマー混合物および個々のジアステレオマーとして生じ得る。これらの化合物の全てのかかる同位体形態は、明示的に本発明に包含される。各立体中心炭素は、ＲまたはＳ配置であり得る。化合物２のｎ−プロピル側鎖でのＤ−およびＬ−異性体は、明示的に、本発明の範囲内に包含される。
【００３２】
本明細書に記載の化合物が異なる多形形態で存在し得ることは、当業者に当然理解され得る。当技術分野で公知の通り、多形性は、２種以上の異なる結晶または“多形”体として結晶化する化合物の能力である。多形体は、固体状態の化合物分子が少なくとも２個の異なる配位または多形形態である化合物の固体結晶形である。何れかの化合物の多形形態は、同じ化学式または組成で示され、２個の異なる化合物の結晶構造として異なる化学物質である
【００３３】
一面において、以下に記載の本発明の態様のいずれか１つに関して、ＶＸ−２２２は、化合物１、またはその薬学的に許容される塩、溶媒和物もしくはプロドラッグ、または化合物１のプロドラッグの溶媒和物であり；ＶＸ−９５０は、化合物２、またはその薬学的に許容される塩もしくはプロドラッグである。
【００３４】
別の面において、以下に記載の本発明の態様のいずれか１つに関して、ＶＸ−２２２は、化合物１、またはその薬学的に許容される塩、溶媒和物もしくはプロドラッグ、または化合物１のプロドラッグの溶媒和物であり；ＶＸ−９５０は、化合物２またはその薬学的に許容される塩である。
【００３５】
さらに別の面において、以下に記載の本発明の態様のいずれか１つに関して、ＶＸ−２２２は、化合物１、またはその薬学的に許容される塩、溶媒和物もしくはプロドラッグ、または化合物１のプロドラッグの溶媒和物であり；ＶＸ−９５０は化合物２である。
【００３６】
さらに別の面において、以下に記載の本発明の態様のいずれか１つに関して、ＶＸ−２２２は、化合物１、またはその薬学的に許容される塩もしくは溶媒和物、もしくはプロドラッグであり；ＶＸ−９５０は、化合物２、またはその薬学的に許容される塩もしくはプロドラッグである。
【００３７】
さらに別の面において、以下に記載の本発明の態様のいずれか１つに関して、ＶＸ−２２２は、化合物１、またはその薬学的に許容される塩もしくは溶媒和物、もしくはプロドラッグであり；ＶＸ−９５０は、化合物２またはその薬学的に許容される塩である。
【００３８】
さらに別の面において、以下に記載の本発明の態様のいずれか１つに関して、ＶＸ−２２２は、化合物１、またはその薬学的に許容される塩もしくは溶媒和物、もしくはプロドラッグであり；ＶＸ−９５０は、化合物２である。
【００３９】
さらに別の面において、以下に記載の本発明の態様のいずれか１つに関して、ＶＸ−２２２は、化合物１、またはその薬学的に許容される塩もしくは溶媒和物であり；ＶＸ−９５０は、化合物２、またはその薬学的に許容される塩もしくはプロドラッグである。
【００４０】
さらに別の面において、以下に記載の本発明の態様のいずれか１つに関して、ＶＸ−２２２は、化合物１、またはその薬学的に許容される塩もしくは溶媒和物であり；ＶＸ−９５０は、化合物２またはその薬学的に許容される塩である。
【００４１】
さらに別の面において、以下に記載の本発明の態様のいずれか１つに関して、ＶＸ−２２２は、化合物１、またはその薬学的に許容される塩もしくは溶媒和物であり；ＶＸ−９５０は化合物２である。
【００４２】
さらに別の面において、以下に記載の本発明の態様のいずれか１つに関して、ＶＸ−２２２は、化合物１またはその薬学的に許容される塩であり；ＶＸ−９５０は、化合物２、またはその薬学的に許容される塩もしくはプロドラッグである。
【００４３】
さらに別の面において、以下に記載の本発明の態様のいずれか１つに関して、ＶＸ−２２２は、化合物１またはその薬学的に許容される塩であり；ＶＸ−９５０は、化合物２またはその薬学的に許容される塩である。
【００４４】
さらに別の面において、以下に記載の本発明の態様のいずれか１つに関して、ＶＸ−２２２は、化合物１またはその薬学的に許容される塩であり；ＶＸ−９５０は、化合物２である。
【００４５】
さらに別の面において、以下に記載の本発明の態様のいずれか１つに関して、ＶＸ−２２２は化合物１であり；ＶＸ−９５０は、化合物２、またはその薬学的に許容される塩もしくはプロドラッグである。
【００４６】
さらに別の面において、以下に記載の本発明の態様のいずれか１つに関して、ＶＸ−２２２は化合物１であり；ＶＸ−９５０は、化合物２またはその薬学的に許容される塩である。
【００４７】
さらに別の面において、以下に記載の本発明の態様のいずれか１つに関して、ＶＸ−２２２は化合物１であり；ＶＸ−９５０は化合物２である。
【００４８】
一態様において、本発明は、ＨＣＶに感染した患者におけるＶＸ−２２２の薬物動態を改善する方法に関する。該方法は、患者にＶＸ−２２２およびＶＸ−９５０を共投与することを含む。ＶＸ−２２２の改善された薬物動態には、患者の血漿、血液または肝臓におけるＶＸ−２２２への暴露の増加が含まれる。別の態様において、本発明は、ＨＣＶに感染した患者の血漿におけるＶＸ−２２２への暴露を増大する方法に関する。例えば、血漿におけるＶＸ−２２２への暴露を、ＶＸ−２２２の、トラフ濃度（Ｃｔｒｏｕｇｈ）、平均血漿濃度（Ｃａｖｇ）、最大血漿濃度（Ｃｍａｘ）、またはＡＵＣ（曲線下面積）値により測定し得る。本明細書で用いる用語“トラフ濃度”（Ｃｔｒｏｕｇｈ）は、次の投与の直前の血漿中の薬物濃度、または２投与間の最小薬物濃度を意味する。本明細書で用いる用語“ＡＵＣ”は、血漿（血清または血液）濃度−時間曲線の下部の面積を意味する。特定の態様において、ＶＸ−２２２への暴露は、ＡＵＣ０−１２（０ないし１２時間）の値で示される。別の特定の態様において、ＶＸ−２２２への暴露は、ＡＵＣ０−２４（０ないし２４時間）の値で示される。
【００４９】
ＶＸ−９５０の共投与によるＶＸ−２２２への暴露の増大は、ＶＸ−９５０なしで投与されるＶＸ−２２２への暴露をＶＸ−９５０と共投与されるＶＸ−２２２への暴露と比較することにより決定され得る。１つの特定の態様において、ＶＸ−２２２への暴露は、ＶＸ−９５０なしで投与されるＶＸ−２２２への暴露と比較して、約２ないし６倍増加する。１つの特定の態様において、ＶＸ−２２２への暴露は、ＶＸ−９５０なしで投与されるＶＸ−２２２への暴露と比較して、約２ないし５倍増加する。１つの特定の態様において、ＶＸ−２２２への暴露は、ＶＸ−９５０なしで投与されるＶＸ−２２２への暴露と比較して、約２または３倍増加する。いくつかの特定の態様において、該増大は、血漿におけるＶＸ−２２２への暴露である。
【００５０】
本発明において、各投与でのＶＸ−９５０の量は、約１００ｍｇないし約１，５００ｍｇ、約３００ｍｇないし約１，５００ｍｇ、約５００ｍｇないし約１，５００ｍｇ、約３００ｍｇないし約１，２５０ｍｇ、約４５０ｍｇ、約７５０ｍｇ、または約１，２５０ｍｇであり得る。いくつかの特定の態様において、ＶＸ−９５０は、各投与にて約７５０ｍｇである。いくつかの特定の態様において、ＶＸ−９５０は、各投与にて約１，１２５ｍｇである。ＶＸ−９５０の量の好適な例は、ＷＯ２００８／１４４０７２およびＷＯ０６／０５０２５０に記載され、その内容全体は、参照により本明細書に包含される。
【００５１】
本発明において、各投与でのＶＸ−２２２の量は、約２０ｍｇないし約２，０００ｍｇ、約５０ｍｇないし約２，０００ｍｇ、約１００ｍｇないし約１，５００ｍｇ、約１００ｍｇないし約１，２５０ｍｇ、約１００ｍｇないし約１，０００ｍｇ、約１００ｍｇ、約２５０ｍｇ、約４００ｍｇ、または約７５０ｍｇであり得る。いくつかの特定の態様において、ＶＸ−２２２は、各投与にて約１００ｍｇである。いくつかの特定の態様において、ＶＸ−２２２は、各投与にて約２５０ｍｇである。いくつかの特定の態様において、ＶＸ−２２２は、各投与にて約４００ｍｇである。いくつかの特定の態様において、ＶＸ−２２２は、各投与にて約７５０ｍｇである。いくつかの特定の態様において、ＶＸ−２２２は、各投与にて約１，０００ｍｇである。いくつかの特定の態様において、ＶＸ−２２２は、各投与にて約１，５００ｍｇである。いくつかの特定の態様において、ＶＸ−２２２は、各投与にて約５００ｍｇである。いくつかの特定の態様において、ＶＸ−２２２は、各投与にて約１，１２５ｍｇである。いくつかの特定の態様において、ＶＸ−２２２は、各投与にて約１，２５０ｍｇである。
【００５２】
さらに別の態様において、本発明は、ＨＣＶに感染した患者の処置方法であって、該患者にＶＸ−２２２およびＶＸ−９５０を投与することを含む方法に関する。特定の態様において、ＶＸ−２２２は、各投与にて約２０ｍｇないし約２，０００ｍｇ、例えば約５０ｍｇないし約１，５００ｍｇであり、ＶＸ−９５０は、各投与にて約１００ｍｇないし約１，５００ｍｇ、例えば約３００ｍｇないし約１，５００ｍｇである。別の特定の態様において、ＶＸ−２２２は、各投与にて約２０ｍｇないし約４００ｍｇの用量、例えば約５０ｍｇないし約４００ｍｇであり、ＶＸ−９５０は、各投与にて約１００ｍｇないし約１５００ｍｇである。さらに別の特定の態様において、ＶＸ−２２２は、各投与にて２０ｍｇと等しいか、または２０ｍｇ以上ないし４００ｍｇ未満の量である。さらに別の特定の態様において、ＶＸ−２２２は、各投与にて約２０ｍｇないし約３００ｍｇの量である。さらに別の特定の態様において、ＶＸ−２２２は、各投与にて約５０ｍｇないし約３００ｍｇの量である。さらに別の特定の態様において、ＶＸ−２２２は、各投与にて約１００ｍｇの量である。さらに別の特定の態様において、ＶＸ−２２２は、各投与にて約４００ｍｇの量である。さらに別の特定の態様において、ＶＸ−９５０は、各投与にて約３００ｍｇないし約１，５００ｍｇの量である。さらに別の特定の態様において、ＶＸ−９５０は、各投与にて約５００ｍｇないし約１，５００ｍｇの量である。さらに別の特定の態様において、ＶＸ−９５０は、各投与にて約７５０ｍｇの量である。さらに別の特定の態様において、ＶＸ−９５０は、各投与にて約１，１２５ｍｇの量である。
【００５３】
さらに別の態様において、本発明は、ＨＣＶに感染した患者の処置方法であって、ＶＸ−２２２を投与すること（ここで、ＶＸ−２２２は、各投与にて、約２０ｍｇないし約２，０００ｍｇの量で投与される）を含む方法に関する。具体的には、ＶＸ−２２２の量は、各投与にて、約１００ｍｇないし約１，５００ｍｇ、約１００ｍｇないし約１，２５０ｍｇ、約１００ｍｇないし約１，０００ｍｇ、約１００ｍｇ、約２５０ｍｇ、約４００ｍｇ、約５００ｍｇ、約７５０ｍｇ、約１０００ｍｇ、約１１２５ｍｇ、または約１２５０ｍｇであり得る。いくつかの態様において、ＶＸ−２２２は、１日１回投与される。特定の態様において、該方法は、１日１回、約５０ｍｇないし約２，０００ｍｇの量でＶＸ−２２２を投与することを含む。いくつかの特定の態様において、ＶＸ−２２２の投与量は、約１００ｍｇを１日１回である。いくつかの特定の態様において、ＶＸ−２２２の投与量は、約２５０ｍｇを１日１回である。いくつかの特定の態様において、ＶＸ−２２２の投与量は、約４００ｍｇを１日１回である。いくつかの特定の態様において、ＶＸ−２２２の投与量は、約５００ｍｇを１日１回である。いくつかの特定の態様において、ＶＸ−２２２の投与量は、約７５０ｍｇを１日１回である。いくつかの特定の態様において、ＶＸ−２２２の投与量は、約１，０００ｍｇを１日１回である。いくつかの特定の態様において、ＶＸ−２２２の投与量は、約１，２５０ｍｇを１日１回である。いくつかの特定の態様において、ＶＸ−２２２の投与量は、約１，１２５ｍｇを１日１回である。いくつかの特定の態様において、ＶＸ−２２２の投与量は、約１，５００ｍｇを１日１回である。
【００５４】
特定の態様において、本発明は、約２０ｍｇないし約２，０００ｍｇ（または、約５０ｍｇないし約２，０００ｍｇ、または上記の何れかの特定の投与量レジメン）のＶＸ−２２２を１日１回投与し、さらにＶＸ−２２２以外の１種以上のさらなるＨＣＶ薬を投与することによる、ＨＣＶに感染した患者の処置方法に関する。さらなるＨＣＶ薬の好適な例は、以下に詳細に記載され、ＶＸ−９５０、インターフェロンおよびリバビリンが含まれる。さらなる特定の態様において、ＶＸ−９５０が共投与される。ＶＸ−９５０の用量の典型例は、上記の通りである。別のさらなる特定の態様において、リバビリンの含有不含有に関わらず、インターフェロン（例えば、ペグ化インターフェロン α−２ａまたはペグ化インターフェロン α−２ｂのようなペグ化インターフェロン）を共投与する。別のさらなる特定の態様において、ＶＸ−９５０；インターフェロン（例えば、ペグ化インターフェロン α−２ａまたはペグ化インターフェロン α−２ｂのようなペグ化インターフェロン）；および、リバビリンを共投与する。
【００５５】
さらに別の態様において、本発明は、約２０ｍｇないし約２，０００ｍｇのＶＸ−２２２；および約１００ｍｇないし約１，５００ｍｇのＶＸ−９５０を含む薬学的に許容される組成物を提供する。所望により、薬学的に許容される担体もまた包含されてもよい。特定の態様において、本発明は、約２０ｍｇないし約１，５００ｍｇ、または約５０ｍｇないし約１，５００ｍｇのＶＸ−２２２を含む薬学的に許容される組成物を提供する。別の特定の態様において、これらの医薬組成物におけるＶＸ−９５０の量は、約３００ｍｇないし約１５００ｍｇ、約３００ｍｇないし約１２５０ｍｇ、約３００ｍｇないし約１，０００ｍｇ、約３００ｍｇないし約７５０ｍｇ、または約３７５ｍｇである。別の特定の態様において、これらの医薬組成物におけるＶＸ−２２２の量は、５０ｍｇと等しいか、または５０ｍｇ以上ないし４００ｍｇ未満、約５０ｍｇないし約３００ｍｇ、約５０ｍｇ、約１００ｍｇ、または約２００ｍｇである。これらの医薬組成物はそれぞれ、例えば、１日当たり、１回、２回または３回投与され得る。これらの組成物はそれぞれ、１種以上の投与形態（例えば、アンプル、カプセル、クリーム、乳剤、液剤、粒塊剤、ドロップ剤、注射剤、懸濁液、錠剤、粉剤）であり得る。これらの医薬組成物はそれぞれ、当業者により適当であると考えられる１種以上の経路（例えば、経口的、注入、注射、局所的または非経腸的）により投与され得て、投与形態によって変わる。
【００５６】
一般的に、上記の本発明の方法において、ＶＸ−２２２およびＶＸ−９５０は、それぞれ独立して、１日１回（ＱＤ）、１日２回（例えば、ＢＩＤ；ｑ１２ｈ）、１日３回（例えば、ＴＩＤ；ｑ８ｈ）、または１日４回投与され得る。ＶＸ−２２２およびＶＸ−９５０は、それぞれ独立して、食事の有無とは関係なく、投与され得る。
【００５７】
いくつかの態様において、本発明の方法は、患者にＶＸ−９５０を（ａ）各約４５０ｍｇ、８時間毎に１日３回；（ｂ）各約７５０ｍｇ、８時間毎に１日３回；（ｃ）各約１，１２５ｍｇ、１２時間毎に１日２回；または、（ｄ）各約１２５０ｍｇ、１２時間毎に１日２回投与することを含む。
【００５８】
いくつかの態様において、本発明の方法は、患者にＶＸ−９５０を含む組成物の経口用量を投与することを含み、ここで、該用量は、患者に、投与後、ＶＸ−９５０の少なくとも約７５０ｎｇ／ｍｌの平均血漿濃度（ｃａｖｇ）を提供する。いくつかの態様において、ＶＸ−９５０のｃａｖｇは、約１０００ｎｇ／ｍｌまたは約１２５０ｎｇ／ｍｌである。いくつかの態様において、該用量は、本質的に約７５０ｍｇのＶＸ−９５０を含む。いくつかの態様において、ｃａｖｇは、ＶＸ−９５０の投与後、３時間以内（例えば、２時間または１時間）で得られるか、または達成される。いくつかの態様において、ＶＸ−９５０のｃａｖｇは、約２４時間以上（例えば、５週間または１２週間）維持される。
【００５９】
いくつかの態様において、本発明の方法は、患者にＶＸ−９５０を投与することを含み、ここで、ＶＸ−９５０のトラフ血漿濃度は、２４時間以上の間、最低でも約７５０、８００、９００または１０００ｎｇ／ｍｌで維持される。理論はともかく、約１５００ｎｇ／ｍｌ以上のトラフ濃度は、本発明には必要ないと考えられる。従って、約７５０、８００、９００、１０００ｎｇ／ｍｌないし約１５００ｎｇ／ｍｌ（特に、１０００ないし約１５００）のトラフ濃度は、本発明の範囲内である。
【００６０】
理想的には、本発明の方法が、ＨＣＶに感染した患者の処置を伴うとき、該方法は、比較的迅速に、ＶＸ−９５０の治療的に有効な血漿濃度を達成し、次いで有効な治療応答が達成されるようなトラフ濃度を維持することを伴う。有効な治療応答は、好ましくは、ａ）持続的ウイルス応答を達成すること；および、ｂ）少なくとも１２週間（１２週間以上）、血漿中において検出不可能なＨＣＶ ＲＮＡを達成すること、の一方または両方である。本明細書で用いる、ＨＣＶ ＲＮＡについて“検出不可能”とは、ＨＣＶ ＲＮＡが、現在市販されているアッセイにより決定される通り、好ましくはRoche COBAS TaqMan（商標） ＨＣＶ／ＨＰＳアッセイにより決定される通り、１０ＩＵ／ｍｌ未満で存在することを意味する。
【００６１】
血漿濃度の比較的迅速な低下は、患者にある投与量を投与することにより得られ得る。一態様において、該投与量は、ＶＸ−９５０を約１２５０ｍｇである。
【００６２】
いくつかの態様において、本発明の方法は、ＶＸ−９５０を共投与することを含み、ＶＸ−９５０は、約７５０ｍｇのＶＸ−９５０（例えば、約３７５ｍｇのＶＸ−９５０の２つの錠剤）を含む投与形態であって、該投与形態を１日３回、例えば８時間毎（すなわち、ｑ８ｈ）に投与する。いくつかの態様において、本発明の方法は、ＶＸ−９５０を投与することを含み、ＶＸ−９５０は、約１１２５ｍｇのＶＸ−９５０（例えば、約３７５ｍｇのＶＸ−９５０の３つの錠剤）を含む投与形態であって、該投与形態を１日２回、例えば１２時間毎（すなわち、ｑ１２ｈ）に投与する。
【００６３】
本発明において、ＶＸ−２２２および何れかのさらなるＨＣＶ薬（例えば、リバビリンの含有不含有に関わらず、ＶＸ−９５０；インターフェロン（例えば、ペグ化インターフェロン、例えばペグ化インターフェロン α−２ａまたはペグ化インターフェロン α−２ｂ）；または、ＶＸ−９５０、インターフェロン（例えば、ペグ化インターフェロン、例えばペグ化インターフェロン α−２ａまたはペグ化インターフェロン α−２ｂ）、およびリバビリン）を、処置期間全体を通して独立して投与することができる。これらの態様において、ＶＸ−２２２処置期間およびさらなるＨＣＶ薬（複数可）の処置期間は同じである。
【００６４】
あるいは、いくつかの態様において、ＶＸ−２２２およびさらなるＨＣＶ薬（例えば、リバビリンの含有不含有に関わらず、ＶＸ−９５０；インターフェロン（例えば、ペグ化インターフェロン α−２ａまたはペグ化インターフェロン α−２ｂのようなペグ化インターフェロン）；または、ＶＸ−９５０、インターフェロン（例えば、ペグ化インターフェロン α−２ａまたはペグ化インターフェロン α−２ｂのようなペグ化インターフェロン）およびリバビリン）を、第一段階および第二段階の２つの段階に独立して投与することができる。ＶＸ−２２２および何れかのさらなるＨＣＶ薬はそれぞれ、第一段階もしくは第二段階のいずれか、または両方の段階で投与され得る。いくつかの態様において、ＶＸ−２２２を、第一段階でのみ投与し、インターフェロンを、第一段階および第二段階の両方で投与する。あるいは、いくつかの他の態様において、ＶＸ−２２２を第二段階でのみ投与し、インターフェロンを第一段階および第二段階の両方で投与する。いくつかの態様において、ＶＸ−２２２およびＶＸ−９５０を共投与し、ＶＸ−２２２およびＶＸ−９５０を第一段階のみで投与するか、または第二段階のみで投与する。いくつかの態様において、ＶＸ−２２２、ＶＸ−９５０、インターフェロン（例えば、ペグ化インターフェロン α−２ａまたはペグ化インターフェロン α−２ｂのようなペグ化インターフェロン）、およびリバビリンを共投与し、ＶＸ−２２２およびＶＸ−９５０を第一段階のみで投与し、インターフェロンおよびリバビリンを第一段階および第二段階の両方で投与する。
【００６５】
第一段階および第二段階の期間の、好適な特定の例は、ＷＯ２００８／１４４０７２に見出され得る。例えば、第一段階は、少なくとも約４週間、または約４週ないし約２４週間（例えば、約４週間、約６週間、約８週間、約１０週間、約１２週間、約１６週間、約２０週間、約２４週間など）の期間であってよく、第二段階は、少なくとも約１２週間、例えば約１２週間ないし約３６週間の期間であり得る。ある態様において、第二段階は、約１２週間である。他の態様において、第二段階は約２４週間である。さらに他の態様において、第二段階は約３６週間である。ある態様において、第一段階および第二段階の和は、約２４週間ないし約４８週間（例えば、約２４週間、約３６週間、または約４８週間）である。いくつかの態様において、第一段階および第二段階は、同一期間であり得る。
【００６６】
いくつかの態様において、本発明の方法は、ＶＸ−２２２およびインターフェロンを独立して、約４週間ないし約１２週間（例えば、約４週間、約６週間、約８週間、または約１２週間）の期間、約２０週間ないし約２８週間（例えば、約２０週間、約２４週間、または約２８週間）の期間、または約８週間ないし約２４週間（例えば、約８週間、約１２週間、約１６週間、または約２４週間）の期間、共投与することを含む。これらの各態様の一面において、ＶＸ−２２２およびインターフェロンを独立して（第一段階）投与し、次いで約４週間ないし約３６週間（例えば、約８週間ないし約３６週間、約８週間ないし約２４週間、約４週間ないし約２４週間）の期間、インターフェロン（ＶＸ−２２２なし）を投与する（第二段階）。特定の例示的レジメンには、約２４週間の全処置レジメン期間中、約１６週間のインターフェロン（ＶＸ−２２２なし）の投与後に約８週間の間、ＶＸ−２２２およびインターフェロンを独立して投与すること；約２４週間の全処置レジメン期間中、約１２週間のインターフェロン（ＶＸ−２２２なし）の投与後に、約１２週間の間、ＶＸ−２２２およびインターフェロンを独立して投与すること、が含まれる。かかるレジメンにおいて、所望により、全て（第一段階および第二段階の両方）、または各レジメンの一部（例えば、第一段階または第二段階のみ）の期間、リバビリンを投与してもよい。
【００６７】
いくつかの態様において、本発明の方法は、ＶＸ−２２２およびＶＸ−９５０を独立して、約４週間ないし約１２週間（例えば、約４週間、約６週間、約８週間または約１２週間）、約２０週間ないし約２８週間（例えば、約２０週間、約２４週間、または約２８週間）、または約８週間ないし約２４週間（例えば、約８週間、約１２週間、約１６週間または約２４週間）の期間、共投与することを含む。これらの各態様の一面において、ＶＸ−２２２およびＶＸ−９５０を独立して（第一段階）投与し、次いで約４週間ないし約３６週間（例えば、約８週間ないし約３６週間、約８週間ないし約２４週間、約４週間ないし約２４週間）の期間、インターフェロンおよびリバビリン（ＶＸ−２２２およびＶＸ−９５０なし）を投与する（第二段階）。特定の例示的レジメンには、ＶＸ−２２２およびＶＸ−９５０を独立して約８週間投与し、次いでインターフェロンおよびリバビリン（ＶＸ−２２２およびＶＸ−９５０なし）を全体で約２４週間の処置レジメンについて約１６週間投与し；ＶＸ−２２２およびＶＸ−９５０を独立して約１２週間投与し、次いでインターフェロンおよびリバビリン（ＶＸ−２２２およびＶＸ−９５０なし）を全体で約２４週間の処置レジメンについて約１２週間投与することが含まれる。かかるレジメンにおいて、ＶＸ−２２２およびＶＸ−９５０の投与フェーズにインターフェロンおよびリバビリンの投与を供することも可能である。
【００６８】
ある態様において、ＶＸ−２２２および所望によりＶＸ−９５０またはインターフェロンを、約１２週間未満の期間、独立して投与する。
ある態様において、ＶＸ−２２２および所望によりＶＸ−９５０またはインターフェロンを、約８−１２週間の期間、独立して投与する。
ある態様において、ＶＸ−２２２および所望によりＶＸ−９５０またはインターフェロンを、約１０週間の期間、独立して投与する。
ある態様において、ＶＸ−２２２および所望によりＶＸ−９５０またはインターフェロンを、約１０週間未満の期間、独立して投与する。
【００６９】
ある態様において、ＶＸ−２２２および所望によりＶＸ−９５０またはインターフェロンを、約２週間の期間、独立して投与する。
ある態様において、ＶＸ−２２２および所望によりＶＸ−９５０またはインターフェロンを、約８週間未満（または約８週間）、約６週間未満（または約６週間）、または約４週間未満（または約４週間）の期間、独立して投与する。
ある態様において、ＶＸ−２２２およびＶＸ−９５０を、約１２週間（第一段階）の期間共投与し、次いで、所望によりインターフェロンおよびリバビリンを独立して約１２週間（第二段階）投与してよい。
【００７０】
ある態様において、ＶＸ−２２２、ＶＸ−９５０およびインターフェロンを約１２週間共投与し、次いで、所望によりインターフェロンおよびリバビリンを独立して約１２週間（第二段階）投与してよい。
ある態様において、ＶＸ−２２２、ＶＸ−９５０、インターフェロンおよびリバビリンを約１２週間共投与し、次いで、所望によりインターフェロンおよびリバビリンを独立して約１２週間（第二段階）投与してよい。
ある態様において、ＶＸ−２２２、インターフェロンおよびリバビリンを約１２週間（第一段階）共投与し、次いで、所望によりインターフェロンおよびリバビリンを独立して約１２週間（第二段階）投与してよい。
【００７１】
ある態様において、ＶＸ−２２２およびＶＸ−９５０を約１２週間（第一段階）共投与し、次いで、所望によりインターフェロンおよびリバビリンを約１２週間（第二段階）投与してよい。
ある態様において、ＶＸ−２２２、ＶＸ−９５０、インターフェロンおよびリバビリンを約１２週間（第一段階）共投与し、次いで、所望によりインターフェロンおよびリバビリンを約１２週間（第二段階）投与してよい。
ある態様において、ＶＸ−２２２、ＶＸ−９５０、インターフェロンおよびリバビリンを約１２週間（第一段階）共投与し、次いで、所望によりインターフェロンおよびリバビリンを約３６週間（第二段階）投与してよい。
【００７２】
いくつかの態様において、上記の第一段階の何れかを、１２週間未満の期間行い、第二段階を約１２週間行うことができる。あるいは、第一段階を約１２週間行い、第二段階を約２４週間行うことができる。さらに他の面において、第一段階を約８週間行い、第二段階を約３６週間行うことができる。さらに他の面において、第一段階を約４週間行い、第二段階を約３６週間行うことができる。
【００７３】
いくつかの態様において、上記の第一段階の何れかを、約８週間行い、第二段階を約１６週間行うことができる。あるいは、第一段階を約８週間行い、第二段階を約４０週間行うことができる。さらに他の面において、第一段階を約８週間行い、第二段階を約４０週間行うことができる。
【００７４】
いくつかの態様において、上記の第一段階および第二段階の何れかを、互いに入れ替えることができ、例えば、インターフェロン（所望によりリバビリンと共に）を第一段階に投与し、ＶＸ−２２２（所望によりＶＸ−９５０と共に、またはＶＸ−９５０、インターフェロンおよびリバビリンと共に）を第二段階に投与する。
【００７５】
いくつかの態様において、上記の本発明の方法は、全処置の約１２週間または約２４週間の短期間の処置レジメンを評価する際に、治療応答ガイド基準（response−guided criteria）を用いる。これらの態様において、処置の第２週および第８週で検出不可能なＨＣＶ ＲＮＡ（１０ＩＣ／ｍｌ未満）を達成する患者は、全約２４週間の処置中、１２週に全ての処置を停止するか、またはｐｅｇ−ＩＦＮ（ペグ化インターフェロン）およびＲＢＶ（リバビリン）治療をさらに１２週間受けるように無作為化され；処置の第２週および第８週で検出不可能なＨＣＶ ＲＮＡを達成しない患者は、全２４週間の処置中、ｐｅｇ−ＩＦＮおよびＲＢＶ（ＶＸ−２２２なし、またはＶＸ−２２２およびＶＸ−９５０なし）治療のさらに１２週間を受ける。
【００７６】
いくつかの態様において、上記の本発明の方法は、全処置が約１２週間、約２４週間または約３６週間の短期処置レジメンの評価において、応答反応に基づく基準（response−guided criteria）を用いる。これらの態様において、処置の第２週および第８週で検出不可能なＨＣＶ ＲＮＡ（１０ＩＣ／ｍｌ未満）を達成する患者は、第１２週で彼らに割り当てられた処置を終了し得る。第２週および第８週で検出不可能なＨＣＶ ＲＮＡを達成しない患者は、全２４週間の処置についてさらに１２週間のｐｅｇ−ＩＦＮおよびＲＢＶ（ＶＸ−２２２なし、またはＶＸ−２２２およびＶＸ−９５０なし）治療を受けるか、または全３６週間の処置についてさらに２４週間のｐｅｇ−ＩＦＮおよびＲＢＶ（ＶＸ−２２２なし、またはＶＸ−２２２およびＶＸ−９５０なし）治療を受ける。いくつかの特定の態様において、該方法は、ＶＸ−９５０およびＶＸ−２２２（ｐｅｇ−ＩＦＮおよびＲＢＶなし）を用い、例えば、１１２５ｍｇのＶＸ−９５０を１日２回および１００ｍｇまたは４００ｍｇのＶＸ−２２２を１日２回等であり、処置の第２週および第８週で検出不可能なＨＣＶ ＲＮＡ（１０ＩＣ／ｍｌ未満）を達成する患者は、第１２週で彼らの割り当てられた処置を終了してよく；第２週および第８週で検出不可能なＨＣＶ ＲＮＡを達成しない患者は、全３６週間の処置についてさらに２４週間のｐｅｇ−ＩＦＮおよびＲＢＶ（ＶＸ−２２２なし、またはＶＸ−２２２およびＶＸ−９５０なし）治療を受ける。いくつかの特定の態様において、該方法は、ＶＸ−９５０、ＶＸ−２２２、ｐｅｇ−ＩＦＮおよびＲＢＶ（例えば、１１２５ｍｇのＶＸ−９５０を１日２回、および１００ｍｇまたは４００ｍｇのＶＸ−２２２を１日２回、１８０ｍｃｇのｐｅｇ−ＩＦＮを１週間に１回、ならびに８００ｍｇ−１２００ｍｇのＲＢＶを１日２回（例えば、体重７５ｋｇ未満の患者に１０００ｍｇ、または体重７５ｋｇ以上の患者に１２００ｍｇ））を受け、処置の第２週および第８週で検出不可能なＨＣＶ ＲＮＡ（１０ＩＣ／ｍｌ未満）を達成する患者は、第１２週で彼らの割り当てられた処置を終了してよく；第２週および第８週で検出不可能なＨＣＶ ＲＮＡを達成しない患者は、全２４週間の処置についてさらに１２週間のｐｅｇ−ＩＦＮおよびＲＢＶ（ＶＸ−２２２なし、またはＶＸ−２２２およびＶＸ−９５０なし）治療を受ける。
【００７７】
当業者には、本発明の方法が患者を予防的に処置するために用いられ、患者がＣ型肝炎ウイルスに感染したとき、該処置は、感染を処置し得ることが容易に理解され得る。故に、本発明の１つの態様は、患者におけるＣ型肝炎感染の処置法または予防法を提供する。
【００７８】
Ｃ型肝炎に感染した患者の処置に加えて、本発明の方法は、Ｃ型肝炎に感染する可能性のある患者を予防するために用いられ得る。従って、本発明の１つの態様は、ｐｒｏｖｉｄｅｓ  患者におけるＣ型肝炎ウイルス感染の予防法であって、患者にＶＸ−２２２と、要すれば何らかのさらなるＨＣＶ薬、例えば、上記の通り、ＶＸ−９５０；インターフェロン；インターフェロンおよびリバビリン；ＶＸ−９５０、インターフェロンおよびリバビリンを投与することを含む方法を提供する。
【００７９】
本発明の方法はまた、免疫調節剤；抗ウイルス剤；ＨＣＶプロテアーゼの阻害剤（ＶＸ−２２２およびＶＸ−９５０以外）；ＨＣＶ生活環の別の標的の阻害剤（ＮＳ３／４Ａプロテアーゼ以外）；内部リボソーム侵入の阻害剤、広域的ウイルス阻害剤；または、シトクロムＰ−４５０阻害剤；または、それらの組み合わせ、から選択されるさらなる薬剤を含む別の成分の投与を含み得る。さらなる薬剤はまた、ウイルスの細胞侵入の阻害剤からも選択される。
【００８０】
従って、いくつかの態様において、さらなる薬剤は、別の抗ウイルス剤、好ましくは抗ＨＣＶ剤（ＶＸ−２２２およびＶＸ−９５０以外）である。そのような抗ウイルス剤には、α−、β−、およびγ−インターフェロンまたはチモシン、ペグ化誘導体化インターフェロン−α化合物、およびチモシンのような免疫調節剤；リバビリン、アマンタジン、およびテルビブジンのような他の抗ウイルス剤；Ｃ型肝炎プロテアーゼの他の阻害剤（ＮＳ２−ＮＳ３阻害剤およびＮＳ３−ＮＳ４Ａ阻害剤）；ヘリカーゼ、ポリメラーゼ、およびメタロプロテアーゼ阻害剤を含む、ＨＣＶ生活環における他の標的の阻害剤；内部リポソーム侵入の阻害剤；ＩＭＰＤＨ阻害剤のような広域的ウイルス阻害剤（例えば、ＶＸ−４９７、ＶＸ−１４８、およびＶＸ−９４４を含むが、それらに限定されない、米国特許第５，８０７，８７６号、同第６，４９８，１７８号、同第６，３４４，４６５号および同第６，０５４，４７２号ならびにＰＣＴ公報ＷＯ９７／４００２８、ＷＯ９８／４０３８１およびＷＯ００／５６３３１に記載の化合物；ならびにミコフェノール酸およびその誘導体）；または、上記のいずれかの組み合わせが含まれるが、それらに限定されない。
【００８１】
本発明の化合物と併用され得る他の薬剤（例えば、非免疫調節または免疫調節化合物）には、引用により本明細書中に包含されるＷＯ０２／１８３６９（例えば、２７３頁、９−２２行目、および２７４頁、４行目から２７６頁、１１行目、本開示は、引用により明確に本明細書中に包含される）に記載されるものが含まれるが、それらに限定されない。
【００８２】
種々の公開された米国特許出願に記載されるさらに他の薬剤が包含される。これらの刊行物は、本発明の方法、特に肝炎の処置方法においてＶＸ−９５０と併用され得る化合物および方法のさらなる教示を提供する。そのような方法および組成物は全て、本発明の方法および組成物と併用され得ると考えられる。簡単には、それらの刊行物の開示内容は、公開番号を引用することにより言及されるが、化合物の開示が、特に、引用により本明細書中に明確に包含されることが、特記されるべきである。そのような刊行物の例には、米国特許出願公開番号：ＵＳ２００４００５８９８２、ＵＳ２００５０１９２２１２、ＵＳ２００５００８０００５、ＵＳ２００５００６２５２２、ＵＳ２００５００２０５０３、ＵＳ２００４０２２９８１８、ＵＳ２００４０２２９８１７、ＵＳ２００４０２２４９００、ＵＳ２００４０１８６１２５、ＵＳ２００４０１７１６２６、ＵＳ２００４０１１０７４７、ＵＳ２００４００７２７８８、ＵＳ２００４００６７９０１、ＵＳ２００３０１９１０６７、ＵＳ２００３０１８７０１８、ＵＳ２００３０１８６８９５、ＵＳ２００３０１８１３６３、ＵＳ２００２０１４７１６０、ＵＳ２００４００８２５７４、ＵＳ２００５０１９２２１２、ＵＳ２００５０１８７１９２、ＵＳ２００５０１８７１６５、ＵＳ２００５００４９２２０、およびＵＳ２００５０２２２２３６が含まれる。
【００８３】
さらなる他の薬剤には、Human Genome Sciencesから市販されるアルブフェロン（商標）（アルブミン−インターフェロンα）；ＰＥＧ−イントロン（登録商標）(ペグ化インターフェロンα−２ｂ、Schering Corporation, Kenilworth, NJから市販される）；イントロン−Ａ（登録商標）（ＶＩＲＡＦＥＲＯＮ（登録商標）、インターフェロンα−２ｂ、Schering Corporation, Kenilworth, NJから市販される）；リバビリン（1−β−D−リボフラノシル−１Ｈ−１，２，４−トリアゾール−３−カルボキサミド、ICN Pharmaceuticals, Inc., Costa Mesa, CAから市販される；the Merck Index, entry 8365, Twelfth Editionに記載される）；ＲＥＢＥＴＲＯＬ（登録商標）（Schering Corporation, Kenilworth, NJ）；コーペガス（登録商標）（Hoffmann−La Roche, Nutley, NJ）；ペガシス（登録商標）（ペグ化インターフェロンα−２ａ、Hoffmann−La Roche, Nutley, NJから市販される）；ロフェロン（登録商標）（組換えインターフェロンα−２ａ、Hoffmann−La Roche, Nutley, NJから市販される）；ＢＥＲＥＦＯＲ（登録商標）（インターフェロンα２、Boehringer Ingelheim Pharmaceutical, Inc., Ridgefield, CTから市販される）；スミフェロン（登録商標）（スミフェロンのような、精製物と天然のαインターフェロンの混合物、住友製薬、日本から市販される）；ウェルフェロン（登録商標）（インターフェロン α ｎ１、Glaxo Wellcome Ltd., Great Britainから市販される）；アルフェロン（登録商標）（Interferon Sciencesにより製造される天然αインターフェロンの混合物、およびPurdue Frederick Co., CTから市販される）；α−インターフェロン；天然αインターフェロン ２ａ；天然αインターフェロン ２ｂ；ペグ化αインターフェロン ２ａまたは２ｂ；コンセンサスαインターフェロン（Amgen, Inc., Newbury Park, CA）；レベトロン（登録商標）（Schering Plough、インターフェロン−α ２Ｂ＋リバビリン）；ペグ化インターフェロンα（Reddy, K.R. et al. “Efficacy and Safety of Pegylated (40−kd) Interferon alpha−2a Compared with Interferon alpha−2a in Noncirrhotic Patients with Chronic Hepatitis C”(Hepatology, 33, pp. 433−438 (2001)；コンセンサスインターフェロン（インファゲン（登録商標））（Kao, J.H., et al., “Efficacy of Consensus Interferon in the Treatment of Chronic Hepatitis” J. Gastroenterol. Hepatol. 15, pp. 1418−1423 (2000)；リンパ芽球様または“天然”インターフェロン；インターフェロン ｔａｕ（Clayette, P. et al., “IFN−tau, A New Interferon Type I with Antiretroviral activity” Pathol. Biol. (Paris) 47, pp. 553−559 (1999)；インターロイキン−２（Davis, G.L. et al., “Future Options for the Management of Hepatitis C.” Seminars in Liver Disease, 19, pp. 103−112 (1999)；インターロイキン−６（Davis et al. “Future Options for the Management of Hepatitis C.” Seminars in Liver Disease 19, pp. 103−112 (1999)；インターロイキン−１２（Davis, G.L. et al., “Future Options for the Management of Hepatitis C." Seminars in Liver Disease, 19, pp. 103−112 (1999)；および、１型ヘルパーＴ細胞応答の発生を増強する化合物（Davis et al., “Future Options for the Management of Hepatitis C.” Seminars in Liver Disease, 19, pp. 103−112 (1999))が含まれるが、それらに限定されない。また、二本鎖ＲＮＡ単独、またはトブラマイシンおよびイミキモド（3M Pharmaceuticals；Sauder, D.N. “Immunomodulatory and Pharmacologic Properties of Imiquimod” J. Am. Acad. Dermatol., 43 pp. S6−11 (2000)）との組み合わせを含むが、これらに限定されない、細胞におけるインターフェロンの合成を刺���する化合物（Tazulakhova, E.B. et al., “Russian Experience in Screening, analysis, and Clinical Application of Novel Interferon Inducers” J. Interferon Cytokine Res., 21 pp. 65−73）も含まれる。また、ＷＯ０２／１８３６９、とりわけ２７２頁、１５行目から２７３頁、８行目を参照のこと（この開示内容は、引用により本明細書中に明確に包含される）。
【００８４】
シトクロムＰ４５０モノオキシゲナーゼ（“ＣＹＰ”）阻害剤の好適な例には、リトナビル（ＷＯ９４／１４４３６）、ケトコナゾール、トロレアンドマイシン、４−メチルピラゾール、シクロスポリン、クロメチアゾール、シメチジン、イトラコナゾール、フルコナゾール、ミコナゾール、フルボキサミン、フルオキセチン、ネファゾドン、セルトラリン、インジナビル、ネルフィナビル、アンプレナビル、ホスアンプレナビル、サキナビル、ロピナビル、デラビルジン、エリスロマイシン、ＶＸ−９４４およびＶＸ−４９７が含まれるが、これらに限定されない。好ましいＣＹＰ阻害剤には、リトナビル、ケトコナゾール、トロレアンドマイシン、４−メチルピラゾール、シクロスポリンおよびクロメチアゾールが含まれる。
【００８５】
本発明の一態様は、ＣＹＰ３Ａ４の阻害剤を共投与する方法を提供する。
【００８６】
本発明に用いられ得るインターフェロンの好適な例には、Human Genome Sciencesから市販されるアルブフェロン（商標）（アルブミン−インターフェロンα）；ＰＥＧ−イントロン（登録商標）(ペグ化インターフェロンα−２ｂ、Schering Corporation, Kenilworth, NJから市販される）；イントロン−Ａ（登録商標）（ＶＩＲＡＦＥＲＯＮ（登録商標）、インターフェロンα−２ｂ、Schering Corporation, Kenilworth, NJから市販される）；ペガシス（登録商標）（ペグ化インターフェロンα−２ａ、Hoffmann−La Roche, Nutley, NJから市販される）；ロフェロン（登録商標）（組換えインターフェロンα−２ａ、Hoffmann−La Roche, Nutley, NJから市販される）；ＢＥＲＥＦＯＲ（登録商標）（インターフェロンα２、Boehringer Ingelheim Pharmaceutical, Inc., Ridgefield, CTから市販される）；スミフェロン（登録商標）（スミフェロンのような、精製物と天然のαインターフェロンの混合物、住友製薬、日本から市販される）；ウェルフェロン（登録商標）（インターフェロン α ｎ１、Glaxo Wellcome Ltd., Great Britainから市販される）；アルフェロン（登録商標）（Interferon Sciencesにより製造される天然αインターフェロンの混合物、およびPurdue Frederick Co., CTから市販される）；α−インターフェロン；天然αインターフェロン ２ａ；天然αインターフェロン ２ｂ；ペグ化αインターフェロン ２ａまたは２ｂ；コンセンサスαインターフェロン（Amgen, Inc., Newbury Park, CA）；レベトロン（登録商標）（Schering Plough、インターフェロン−α ２Ｂ＋リバビリン）；ペグ化インターフェロンα（Reddy, K.R. et al. “Efficacy and Safety of Pegylated (40−kd) Interferon alpha−2a Compared with Interferon alpha−2a in Noncirrhotic Patients with Chronic Hepatitis C”(Hepatology, 33, pp. 433−438 (2001)；コンセンサスインターフェロン（インファゲン（登録商標））（Kao, J.H., et al., “Efficacy of Consensus Interferon in the Treatment of Chronic Hepatitis” J. Gastroenterol. Hepatol. 15, pp. 1418−1423 (2000)；リンパ芽球様または“天然”インターフェロン；インターフェロン ｔａｕ（Clayette, P. et al., “IFN−tau, A New Interferon Type I with Antiretroviral activity” Pathol. Biol. (Paris) 47, pp. 553−559 (1999)；ならびに、インプランタブル・デュロス（登録商標）を介してオメガ・インターフェロンを提供するオメガ・デュロス（登録商標）（intarcia therapeutics, inc., mountain view, ca）が含まれる。
【００８７】
いくつかの態様において、本発明の方法は、リバビリンの有無における、インターフェロンの共投与である。具体的には、インターフェロンは、ペグ化インターフェロン（ｐｅｇ−ｉｆｎ）である。より具体的には、ペグ化インターフェロンは、ペグ化インターフェロン α−２ａまたはペグ化インターフェロン α−２ｂのようなペグ化インターフェロンαである。
【００８８】
一般的に、ＶＸ−２２２および何れかのさらなるＨＣＶ剤（ＶＸ−９５０、インターフェロンおよびリバビリンのような）は、独立して個別に、または共に投与され得る。一般に、ＶＸ−２２２およびＶＸ−９５０は、独立して、経口、非経腸、舌下、吸入スプレーにより、局所、経直腸、経鼻、口腔、経膣、または埋め込みリザーバー（implanted reservoir）により投与され得る。インターフェロンは、通常、経口投与されないが、経口投与形態が開発されている。それにもかかわらず、本明細書中、本発明の方法または組み合わせを、何らかの特定の投与形態またはレジメンに限定すべきではない。当業者に認められる通り、インターフェロンの投与量は、一般的に、ＩＵで特定される（例えば、約４００万ＩＵないし約１２００万ＩＵ）。インターフェロンはまた、マイクログラム単位で投与され得る。例えば、Ｐｅｇ−イントロン（登録商標）の標準的用量は、約１．０−１．５μｇ／ｋｇ／週であり、ペガシス（登録商標）のそれは、１８０μｇ／週である。
【００８９】
リバビリンは、通常、経口投与され、リバビリンの錠剤形態は、現在、市販されている。一般的基準では、リバビリン錠（例えば、約２００ｍｇ錠剤）の１日投与量は、約８００ｍｇないし約１２００ｍｇである。例えば、リバビリン錠は、体重７５ｋｇ未満の対象に約１０００ｍｇ投与されるか、または体重７５ｋｇ以上または７５ｋｇの対象に約１２００ｍｇ投与される。それにもかかわらず、本明細書中、本発明の方法または組み合わせを、何らかの特定の投与形態またはレジメンに限定すべきではない。典型的に、リバビリンは、その商品ラベルに記載の投与量レジメンに従って投与され得る。
【００９０】
ある態様において、ＶＸ−２２２およびＶＸ−９５０（それを用いるとき）は、それぞれ独立して、経口的に、または静脈内に投与される。別のある態様において、ＶＸ−２２２およびＶＸ−９５０（それを用いるとき）は、それぞれ独立して、経口投与される。
【００９１】
いくつかの態様において、さらなる治療剤は、シトクロムｐ−４５０阻害剤である。ＣＹＰ阻害剤について、１日当たり、体重１ｋｇ当たり、約０．００１ないし約２００ｍｇの投与量が、一般的であり得る。より一般的には、１日当たり、体重１ｋｇ当たり、約０．１ないし約５０ｍｇまたは約１．１ないし約２５ｍｇの投与量であり得る。
【００９２】
いくつかの態様において、さらなる治療剤はリトナビルである。リトナビルの具体的投与形態については、米国特許番号第６，０３７，１５７号およびそこに開示される文献：米国特許番号第５，４８４，８０１号、米国特許出願番号第０８／４０２，６９０号、ならびにＰＣＴ公開番号ＷＯ９５／０７６９６およびＷＯ９５／０９６１４を参照のこと。
【００９３】
一般に、本発明において、１種以上の治療剤の“投与”または“共投与”（ＶＸ−９５０、インターフェロンおよびリバビリン、ならびにそれらの何れかの組み合わせを含む）は、各治療的活性剤を同じ投与形態で、または異なる投与形態で投与することを含む。異なる投与形態で投与するとき、治療的活性剤は、異なる時間に、同時に、または他の投与形態の投与中のいずれかの時間内に投与され得る。分割投与形態は、何れかの順序で投与され得る。すなわち、全ての投与形態は、他の投与形態の前に、共に、またはその後に投与され得る。
【００９４】
一般に、種々の投与形態、製剤タイプおよび投与頻度、ならびにそれらの組み合わせが、本発明において用いられ得る。何れかの好適な投与形態および製剤タイプが、本発明において用いられ得る。
【００９５】
いくつかの態様において、本発明の方法は、約１００ｍｇのＶＸ−２２２（例えば、５０ｍｇのＶＸ−２２２のカプセル２個）を含む投与形態でＶＸ−２２２を投与することを含み、該投与形態は、１日１回、１日２回、例えば１２時間毎（すなわち、ｑ１２ｈ）に、または１日３回、例えば８時間毎（すなわち、ｑ８ｈ）に、投与され得る。いくつかの態様において、本発明の方法は、約４００ｍｇのＶＸ−２２２（例えば、２００ｍｇのＶＸ−２２２のカプセル２個）を含む投与形態でＶＸ−２２２を投与することを含み、該投与形態は、１日１回、１日２回、例えば１２時間毎（すなわち、ｑ１２ｈ）に、または１日３回、例えば８時間毎（すなわち、ｑ８ｈ）に、投与され得る。いくつかの態様において、本発明の方法は、約７５０ｍｇのＶＸ−２２２（例えば、２００ｍｇのＶＸ−２２２のカプセル３個および５０ｍｇのＶＸ−２２２のカプセル３個）を含む投与形態でＶＸ−２２２を投与することを含み、該投与形態は、１日１回、１日２回、例えば１２時間毎（すなわち、ｑ１２ｈ）に、または１日３回、例えば８時間毎（すなわち、ｑ８ｈ）に、投与され得る。いくつかの態様において、本発明の方法は、約１，５００ｍｇのＶＸ−２２２（例えば、２００ｍｇのＶＸ−２２２のカプセル７個および５０ｍｇのＶＸ−２２２カプセル２個）を含む投与形態でＶＸ−２２２を投与することを含み、該投与形態は、１日１回投与され得る。
【００９６】
本発明の上記の方法のうち何れか１つの一面において、ＶＸ−９５０を含む組成物の経口用量が、それを必要とする患者に投与され、該用量は、患者に対して、投与後に少なくとも約７５０ｎｇ／ｍｌのＶＸ−９５０の平均血漿濃度（Ｃａｖｇ）を供する。いくつかの特定の態様において、ＶＸ−９５０のＣａｖｇは、約１０００ｎｇ／ｍｌまたは約１２５０ｎｇ／ｍｌである。いくつかの特定の態様において、該用量は本質的に、７５０mgのＶＸ−９５０を含む。いくつかの特定の態様において、Ｃａｖｇは、ＶＸ−９５０の投与後３時間以内（例えば、２時間または１時間以内）に得られるか、または達せられる。いくつかの特定の態様において、ＶＸ−９５０のＣａｖｇは、約２４時間（例えば、５週間または１２週以上）維持される。他の面において、該経口用量は、患者に対して、２４時間以上、約７５０ｎｇ／ｍｌの最低トラフ濃度のＶＸ−９５０血漿濃度を提供する。いくつかの特定の態様において、該投与形態は、２４時間の間、血漿ＶＸ−９５０を、約８００ｎｇ／ｍｌ（例えば、約９００ｎｇ／ｍｌまたは約１０００ｎｇ／ｍｌ）の最低トラフ濃度に維持するために投与する。さらに別の面において、該経口用量で、治療的に有効な血漿濃度が得られ、あるトラフ濃度が維持され、ここで、ＶＸ−９５０の血漿トラフ濃度は、２４時間の間、約７５０、８００、９００または１０００ｎｇ／ｍｌの最低レベルに維持される。ある具体的態様において、ＶＸ−９５０のトラフ濃度は、約７５０、８００、９００、１０００ｎｇ／ｍｌないし約１５００ｎｇ／ｍｌ（例えば、１０００ないし約１５００）である。ある具体的態様において、ＶＸ−９５０のトラフ濃度は、約７５０、８００、９００、１０００ｎｇ／ｍｌないし約２５００ｎｇ／ｍｌ（特に、１０００ないし約２５００）である。また、ヒトにＶＸ−９５０を送達するため投与形態が提供され、ここで、該投与形態はＶＸ−９５０を含み、該投与形態が２４時間以内に少なくとも１回投与されるとき、ＶＸ−９５０の血漿トラフ濃度は、２４時間の間、少なくとも約７５０ｎｇ／ｍｌ、８００ｎｇ／ｍｌ、９００ｎｇ／ｍｌ、または１０００ｎｇ／ｍｌないし約２５００ｎｇ／ｍｌ（例えば、１０００ｎｇ／ｍｌないし約２５００ｎｇ／ｍｌ、または１０００ｎｇ／ｍｌないし約１５００ｎｇ／ｍｌ）に維持される。別の面において、該経口用量は、２４時間の間、約３０，０００ ｈｒ＊ｎｇ／ｍｌないし約１２０，０００ ｈｒ＊ｎｇ／ｍｌの範囲のＶＸ−９５０の平均ＡＵＣ（０−２４時間）を患者に提供する。ある特定の態様において、ＶＸ−９５０のＡＵＣ（０−２４時間）は、約５０，０００ ｈｒ＊ｎｇ／ｍｌないし約１２０，０００ ｈｒ＊ｎｇ／ｍｌの範囲である。ある特定の態様において、ＶＸ−９５０のＡＵＣ（０−２４時間）は、約６０，０００ ｈｒ＊ｎｇ／ｍｌないし約１００，０００ ｈｒ＊ｎｇ／ｍｌの範囲である。ある具体的な態様において、ＶＸ−９５０のＡＵＣ（０−２４時間）は、約６０，０００ ｈｒ＊ｎｇ／ｍｌないし約９０，０００ ｈｒ＊ｎｇ／ｍｌの範囲である。ＷＯ２００８／１４４０７２およびＷＯ２００５／２５５１７に記載の他の具体的なＶＸ−９５０の投与量レジメンもまた、本発明において用い��れ得る。
【００９７】
本発明の上記の方法のうち何れか１つの一面において、ＶＸ−２２２を含む組成物の経口用量が、それを必要とする患者に投与され、該用量は、患者に対して、投与後に少なくとも約７５０ｎｇ／ｍｌのＶＸ−２２２の平均最大血漿濃度（ｃｍａｘ）を与える。いくつかの特定の態様において、ＶＸ−２２２のｃｍａｘは、少なくとも約１，０００ｎｇ／ｍｌである。いくつかの特定の態様において、ＶＸ−２２２のｃｍａｘは、約７５０ｎｇ／ｍｌないし約１５，０００ｎｇ／ｍｌの範囲である。いくつかの特定の態様において、ＶＸ−２２２のｃｍａｘは、約１，０００ｎｇ／ｍｌないし約１５，０００ｎｇ／ｍｌの範囲である。いくつかの特定の態様において、ＶＸ−２２２のｃｍａｘは、約３，０００ｎｇ／ｍｌないし約１５，０００ｎｇ／ｍｌの範囲である。いくつかの特定の態様において、ＶＸ−２２２のｃｍａｘは、約３，０００ｎｇ／ｍｌないし約１２，０００ｎｇ／ｍｌの範囲である。他の面において、ＶＸ−２２２を含む組成物の経口用量は、それを必要とする患者に提供され、該用量は、患者に、２４時間の間、約５，０００ ｈｒ＊ｎｇ／ｍｌないし約１５０，０００ ｈｒ＊ｎｇ／ｍｌの範囲のＶＸ−２２２の平均ＡＵＣ（０−２４時間）を供する。いくつかの特定の態様において、ＶＸ−２２２のＡＵＣ（０−２４時間）は、約５，０００ ｈｒ＊ｎｇ／ｍｌないし約１２５，０００ ｈｒ＊ｎｇ／ｍｌの範囲である。いくつかの特定の態様において、ＶＸ−２２２のＡＵＣ（０−２４時間）は、約２０，０００ ｈｒ＊ｎｇ／ｍｌないし約１００，０００ ｈｒ＊ｎｇ／ｍｌの範囲である。いくつかの特定の態様において、ＶＸ−２２２のＡＵＣ（０−２４時間）は、約２０，０００ ｈｒ＊ｎｇ／ｍｌないし約８０，０００ ｈｒ＊ｎｇ／ｍｌの範囲である。
【００９８】
ＶＸ−２２２および何れかのさらなる薬剤は、分割投与形態で製剤され得る。あるいは、患者に投与される投与形態の数を減らすために、ＶＸ−２２２および何れかのさらなる薬剤は、任意の組み合わせで共に製剤され得る。何れかの別個の投与形態は、同時に、または異なる時間に投与され得る。投与形態は、その生物学的効果が有利になるように時間内に投与されるべきであることが理解されるべきである。
【００９９】
例えば、本発明のＶＸ−２２２およびＶＸ−９５０の各量は、単一投与形態または２つ以上の投与形態で投与され得る。分割投与形態であるとき、各投与形態は、ほぼ同時に投与される。
【０１００】
本発明において薬学的に許容される塩を治療的活性剤として用いるとき、それらの塩類は、典型的に、無機または有機酸およびそれらの塩基から誘導される。そのような酸性塩類には、酢酸塩、アジピン酸塩、アルギン酸塩、アスパラギン酸塩、安息香酸塩、ベンゼンスルホン酸塩、重硫酸塩、酪酸塩、クエン酸塩、ショウノウ酸塩（camphorate）、カンファースルホン酸塩（camphor sulfonate）、シクロペンタン−プロピオン酸塩、二グルコン酸塩、ドデシル硫酸塩、エタンスルホン酸塩、フマル酸塩、グルコヘプタン酸塩、グリセロリン酸塩、ヘミ硫酸塩、ヘプタン酸塩、ヘキサン酸塩、塩酸塩、臭化水素酸塩、ヨウ化水素酸塩、２−ヒドロキシエタンスルホン酸塩、乳酸塩、マレイン酸塩、メタンスルホン酸塩、２−ナフタレンスルホン酸塩、ニコチン酸塩、シュウ酸塩、パモ酸塩、ペクチン酸塩（pectinate）、過硫酸塩、３−フェニル−プロピオン酸塩、ピクリン酸塩、ピバリン酸塩、プロピオン酸塩、コハク酸塩、酒石酸塩、チオシアン酸塩、トシル酸塩およびウンデカン酸塩が含まれる。塩基性塩類には、アンモニウム塩、ナトリウムおよびカリウム塩のようなアルカリ金属塩、カルシウムおよびマグネシウム塩のようなアルカリ土類金属塩、ジシクロヘキシルアミン塩、Ｎ−メチル−Ｄ−グルカミンのような有機塩基との塩、ならびにアルギニン、リジンのようなアミノ酸との塩等が含まれる。
【０１０１】
また、塩基性窒素含有基は、塩化、臭化およびヨウ化メチル、エチル、プロピルおよびブチルのような低級ハロゲン化アルキル；硫化ジメチル、硫化ジエチル、硫化ジブチルおよび硫化ジアミルのような硫化ジアルキル；塩化、臭化およびヨウ化デシル、ラウリル、ミリスチルおよびステアリルのような長鎖ハロゲン化物；ベンジルおよびフェネチル臭化物のようなハロゲン化アラルキルなどのような物質によって四級化され得る。それにより、水または油に可溶性または分散性の生成物が得られる。
【０１０２】
本発明において、要すれば、治療剤（複数可）の修飾が可能であり、例えば、選択的生物学的特性を高めるのに適当な機能性を付加することにより修飾され得る。そのような修飾は、当技術分野で公知であり、所定の生物系（例えば、血液系、リンパ系、中枢神経系）への生物学的浸透を増加し、経口アベイラビリティーを増大し、注射による投与を可能にするための溶解性を増加し、代謝を変化させ、排泄速度を変化させることが含まれる。
【０１０３】
本発明のＶＸ−２２２およびＶＸ−９５０を含む１種以上の治療剤は、医薬組成物に包含され、該治療剤（複数可）は、単独で投与され得る。“医薬組成物”とは、本明細書に記載の治療剤を含む組成物を意味し、少なくとも１個の成分が、投与方法および投与形態の性質によって、薬学的に許容される担体、希釈剤、コーティング、アジュバント、賦形剤、または保存料のようなビークル、充填剤、崩壊剤、湿潤剤、乳化剤、乳化安定剤、懸濁化剤、等張剤、甘味剤、芳香剤、香味剤、着色剤、抗菌剤、抗細菌剤、他の治療剤、滑沢剤、吸収遅延または促進剤、ならびに分散剤を含む群から選択される。組成物は、錠剤、丸剤、顆粒、粉末、水性溶液または懸濁液、注射可能溶液、エリキシルまたはシロップの形態で存在し得る。
【０１０４】
懸濁化剤の例には、エトキシル化イソステアリルアルコール、ポリオキシエチレンソルビトールおよびソルビタンエステル、微結晶セルロース、アルミニウムメタヒドロキシド（aluminum metahydroxide）、ベントナイト、寒天−寒天およびトラガカント、ならびにこれらの物質の混合物が含まれる。微生物作用の予防のための抗菌剤および抗細菌剤の例には、パラベン、クロロブタノール、フェノール、ソルビン酸等が含まれる。等張剤の例には、糖類、塩化ナトリウム等が含まれる。吸収時間を延長するための吸収遅延剤の例には、モノステアリン酸アルミニウムおよびゼラチンが含まれる。吸収を増強するための吸収促進剤の例には、ジメチルスルホキシドおよび関連する類縁体が含まれる。担体、希釈剤、溶媒、ビークル、可溶化剤、乳化剤および乳化安定剤の例には、水、クロロホルム、スクロース、エタノール、イソプロピルアルコール、炭酸エチル、酢酸エチル、ベンジルアルコール、テトラヒドロフルフリルアルコール、安息香酸ベンジル、ポリオール、プロピレングリコール、１，３−ブチレングリコール、グリセロール、ポリエチレングリコール、ジメチルホルムアミド、トゥイーン６０、ｓｐａｎ＆ｃｏｍｍａｔ；８０、セトステアリルアルコール、ミリスチルアルコール、モノステアリン酸グリセロールおよびラウリル硫酸ナトリウム、ソルビタンの脂肪酸エステル、植物油（綿実油、落花生油、コーン油オリーブ油、ヒマシ油およびゴマ油）、およびオレイン酸エチルなどのような注射可能な有機エステル、またはこれらの物質の好適な混合物が含まれる。賦形剤の例には、ラクトース、乳糖、クエン酸ナトリウム、炭酸カルシウム、リン酸二カルシウムが含まれる。崩壊剤の例には、デンプン、アルギン酸およびある種のケイ酸塩複合体が含まれる。滑沢剤の例には、ステアリン酸マグネシウム、ラウリル硫酸ナトリウム、タルク、ならびに高分子量ポリエチレングリコールが含まれる。
【０１０５】
治療剤以外の医薬組成物中の物質の選択は、一般的に、溶解性のような治療剤の化学的特性、特定の投与方法および医薬業界で守られるべきによって決定される。例えば、ラクトース、クエン酸ナトリウム、炭酸カルシウム、リン酸二カルシウムのような賦形剤、デンプン、アルギン酸およびある種のケイ酸塩複合体のような崩壊剤、ならびにステアリン酸マグネシウム、ラウリル硫酸ナトリウムおよびタルクのような滑沢剤が、錠剤の製造に用いられ得る。
【０１０６】
医薬組成物は、錠剤、丸剤、顆粒、粉末、水性溶液または懸濁液、注射可能溶液、エリキシルまたはシロップのような種々の形態で存在し得る。
【０１０７】
“液体投与形態”は、患者に投与される治療剤の用量は、液体形態、例えば、薬学的許容されるエマルジョン、溶液、懸濁液、シロップおよびエリキシルを意味する。活性化合物に加えて、液体投与形態は、溶媒、可溶化剤および乳化剤のような当技術分野で常用される不活性希釈剤を包含し得る。
【０１０８】
固体組成物はまた、ラクトースまたはミルク糖のような賦形剤ならびに高分子量ポリエチレングリコールなどを用いて、軟および硬−充填ゼラチンカプセル中に充填剤として用いられ得る。
【０１０９】
水性懸濁液を用いるとき、それらは、懸濁を促進する乳化剤または薬剤を含み得る。
【０１１０】
エマルジョン医薬組成物の油相は、公知の方法に従い公知の成分から構成され得る。この相は単に乳化剤（別名エマルジェント(emulgent)として公知）を含み得るが、望ましくは、少なくとも１つの乳化剤と脂肪もしくは油との混合物、または脂肪および油の両方との混合物を含む。好ましくは、親水性乳化剤は安定剤として作用する親油性乳化剤と共に含まれる。また、好ましくは、油および脂肪の両方を含む。安定剤の有無にかかわらず、ともに乳化剤はいわゆる乳化蝋を構成し、該蝋は油および脂肪とともにクリーム製剤の油性分散相を形成する乳化軟膏基剤を構成する。
【０１１１】
要すれば、クリーム基剤の水相には、例えば、少なくとも３０重量％の多価アルコール、すなわちプロピレングリコール、ブタン １，３−ジオール、マンニトール、ソルビトール、グリセロールおよびポリエチレングリコール（PEG 400を含む）のような２個以上のヒドロキシル基を有するアルコールならびにそれらの混合物が含まれ得る。局所用製剤は望ましくは、皮膚または他の塗布領域を介する有効成分の吸収または浸透を増強する化合物を含み得る。
【０１１２】
製剤用の好適な油または脂肪の選択は、所望の美的(cosmetic)特性を達成することに基づく。故に、該クリームは、好ましくはチューブまたは他の容器からの漏れを避けるのに好適な濃度の、脂っこくなく、非着色で、かつ洗浄可能な製品であるべきである。
【０１１３】
直鎖または分枝鎖一または二塩基性アルキルエステル、例えばミリスチン酸ジイソプロピル、オレイン酸デシル、パルミチン酸イソプロピル、ステアリン酸ブチル、パルミチン酸２−エチルヘキシルまたはCrodamol CAPとして公知の分枝鎖エステルの混合物が使用され得る。これらは、必要な特性に応じて、単独でまたは組み合わせて使用され得る。あるいは、高融点脂質、例えば、白色軟質パラフィンおよび／または液体パラフィンまたは他の鉱油が使用され得る。
【０１１４】
一般的に、本明細書に記載の治療剤／医薬組成物は、好適な製剤形で、経口、吸入、直腸、経鼻、口腔(buccal)、舌下、経膣、経結腸、非経口（皮下、筋肉内、静脈内、皮内、鞘内、および硬膜外を含む）、嚢内および腹腔内を含む、局所または全身投与によりヒトおよび動物に投与され得る。好ましい経路は、例えばレシピエントの状態によって変わり得ることが認められ得る。
【０１１５】
“薬学的に許容される投与形態”は、本明細書に記載の治療剤の投与形態（ＶＸ−９５０を含む）を意味し、例えば、錠剤、粉末、エリキシル剤、シロップ、液体製剤（懸濁液、スプレー、吸入剤、錠剤、ロゼンジ、エマルジョン、溶液、顆粒、カプセルおよび坐薬を含む）、ならびにリポソーム製剤を含む注射用液体製剤が含まれる。一般に、製剤技術および製剤は、remington’s pharmaceutical sciences, mack publishing co., easton, pa, latest editionに見出され得る。
【０１１６】
“経口投与に好適な製剤”は、所定量の有効成分をそれぞれ含むカプセル剤、カシェ剤または錠剤として；粉剤または顆粒として；水性液体または非水性液体中の溶液または懸濁液として；または、油中水液体エマルジョンもしくは水中油液体エマルジョンのような分離した単位として提供され得る。有効成分はまた、ボーラス剤、舐剤またはペーストとして提供され得る。
【０１１７】
錠剤は、圧縮または成型により、必要に応じて１種以上の補助成分とともに、製造され得る。圧縮された錠剤は、好適な機械中で有効成分を自由流動形態（例えば、粉剤または顆粒）で、必要に応じてバインダー、潤滑剤、不活性希釈剤、防腐剤、表面活性剤または分散剤と混合し、圧縮することにより製造され得る。成型された錠剤は、好適な機械中で、不活性な液体希釈剤で湿らされた（moistened）粉末化された化合物の混合物を成型することにより製造され得る。錠剤は、必要に応じて、コーティングまたは割線を施され得、そして錠剤中の有効成分の遅いまたは制御された放出を提供するように処方され得る。
【０１１８】
直腸投与用の固体組成物は、公知の方法で製剤される坐薬および少なくとも１個の本発明の化合物を含む。
【０１１９】
要すれば、より有効な分散性に関して、本明細書に記載の治療剤は、マイクロカプセル化されるか、または生体適合性の、生分解可能なポリマーマトリクス（例えば、ポリ（ｄ，ｌ−ラクチド コ−グリコチド））、リポソームおよびミクロスフェアのような遅延放出また標的送達システムと結合され得て、いわゆる皮下または筋肉内デポー技術により皮下または筋肉内に注射されて、２週間またはそれ以上の間、化合物をゆっくり放出し続ける。治療剤は、例えば、細菌保持フィルターを介して濾過されるか、または使用直前に滅菌水、または他の滅菌注射可能媒体に溶解され得る、滅菌固体組成物形態に滅菌剤を挿入されて、滅菌され得る。
【０１２０】
“経鼻または吸入投与に適する製剤”は、患者に経鼻的に、または吸入により投与されるのに適する形態の製剤を意味する。該製剤は、例えば１ないし５００ミクロンの範囲の粒子サイズ（３０ミクロン、３５ミクロンなどのような５ミクロン増加の２０ないし５００ミクロンの範囲の粒子サイズを含む）を有する粉末形態の担体を含み得る。担体が、例えば、経鼻スプレーまたは点鼻薬として投与するための液体である好適な製剤は、有効成分の水性または油性溶液を含む。エアロゾル投与に適する製剤は、常套法に従って製造され得て、他の治療剤と共に送達され得る。吸入治療剤は、定量吸入器により容易に投与される。
【０１２１】
“経口投与に好適な製剤”は、患者に経口的に投与されるのに好適な形態の製剤を意味する。該製剤は、一定量の有効成分をそれぞれ含むカプセル、カシェ剤または錠剤のような；粉末もしくは顆粒として；水性液体もしくは非水性液体中、溶液もしくは懸濁液のような；または、油中水液体エマルジョンもしくは水中油液体エマルジョンのような分離した単位として存在し得る。治療剤はまた、ボーラス剤、舐剤またはペーストとしても存在し得る。
【０１２２】
“非経腸投与に好適な製剤”は、患者に非経腸的投与されるのに好適な形態の製剤を意味する。該製剤は、滅菌され、エマルジョン、懸濁液、水性および非水性注射溶液を含み、それらは、懸濁化剤および濃化剤および抗酸化剤、緩衝剤、バクテリオスタットならびに製剤を意図されるレシピエントの血液と等張にし、ｐＨを適切に調節する溶質を含む。
【０１２３】
“経直腸または経膣投与に好適な製剤”は、患者に経直腸または経膣投与するのに適する形態の製剤を意味する。該製剤は、好ましくは、本発明の化合物と好適な非刺激性の賦形剤または担体、例えばカカオバター、ポリエチレングリコールまたは坐薬ワックス（こでは、常温では固体であるが、体温では液体であり、故に直腸または膣腔で融解し、有効成分を放出する）を混合することにより製造され得る坐薬の形態である。
【０１２４】
“全身投与に好適な製剤”は、患者に全身的に投与されるのに適する形態の製剤を意味する。該製剤は、好ましくは筋層内、静脈内、腹腔内および皮下を含む注射により投与される。注射に関して、本発明の化合物は、液体溶液、好ましくは、ハンク溶液またはリンゲル溶液のような生理的に許容可能な緩衝液に製剤される。さらに、該化合物は、固体形態で製剤され得て、使用直前に再溶解されるか、または懸濁され得る。凍結乾燥形態もまた包含される、全身投与はまた、経粘膜または経皮手段によっても可能であるか、または化合物は経口投与され得る。経粘膜または経皮投与に関して、透過されるバリアに適する浸透剤が製剤に用いられる。かかる浸透剤は一般的に、当技術分野で公知であり、例えば、経粘膜投与のための胆汁酸塩およびフシジン酸誘導体を含む。さらに、洗浄剤が浸透を容易にするために用いられ得る。経粘膜投与には、経鼻スプレー、または例えば坐薬が使用され得る。経口投与に関して、該化合物は、カプセル、錠剤およびトニック剤のような常套の経口投与形態に製剤される。
【０１２５】
“局所投与に好適な製剤”は、患者に局所的に投与されるのに適する形態の製剤を意味する。該製剤は、局所用軟膏、軟膏（salve）、粉剤、スプレーおよび吸入剤、ゲル（水またはアルコール基剤）、クリームとして、当技術分野で通常知られている形態で存在し得るか、または経皮バリアを介して化合物の制御放出を可能にし得る、パッチにおける適用のためのマトリックスベース中に挿入され得る。軟膏形態に製剤されるとき、有効成分は、パラフィン性または水性の混合可能な軟膏基剤と共に使用され得る。あるいは、有効成分は、油中水クリーム基剤と共にクリームに製剤され得る。眼への局所投与に適する製剤には、有効成分が溶解されるか、または好適な担体、とりわけ有効成分用の水性溶媒中に懸濁される点眼剤が含まれる。口への局所投与に適する製剤には、風味基剤、通常スクロースおよびアカシアまたはトラガカント中に有効成分を含むロゼンジ；ゼラチンおよびグリセリン、またはスクロースおよびアカシアのような不活性基剤中に有効成分を含むトローチ；ならびに、好適な液体担体中に有効成分を含むマウスウォッシュが含まれる。
【０１２６】
“固体投与形態”は、本明細書に記載の治療剤の投与形態が固体形態、例えばカプセル剤、錠剤、丸剤、粉剤、糖衣錠または顆粒であることを意味する。かかる固体投与形態において、本発明の化合物は、クエン酸ナトリウムまたはリン酸二カルシウムのような少なくとも１種の不活性な慣習的な賦形剤（または担体）、または（ａ）充填剤もしくは増量剤、例えば、デンプン、ラクトース、スクロース、グルコース、マンニトールおよびケイ酸、（ｂ）結合剤、例えば、カルボキシメチルセルロース、アルギネート類（alignate）、ゼラチン、ポリビニルピロリドン、スクロースおよびアカシア、（ｃ）湿潤剤、例えば、グリセロール、（ｄ）崩壊剤、例えば、寒天−寒天、炭酸カルシウム、ジャガイモまたはタピオカデンプン、アルギン酸、任意のケイ酸塩および炭酸ナトリウムの混合物、（ｅ）溶液抑制剤、例えばパラフィン、（ｆ）吸収促進剤、例えば、第四級アンモニウム化合物、（ｇ）湿潤剤、例えば、セチルアルコールおよびモノステアリン酸グリセロール、（ｈ）吸着剤、例えば、カオリンおよびベントナイト、（ｉ）潤滑剤、例えば、タルク、ステアリン酸カルシウム、ステアリン酸マグネシウム、固体ポリエチレングリコール、ラウリル硫酸ナトリウム、（ｊ）乳白剤、（ｋ）緩衝剤、および腸管のある部分で本発明の化合物を遅延放出する薬剤と混合される。
【０１２７】
担体および／または賦形剤と結合されて単一投与形態を製造し得る有効な治療剤の量は、処置される宿主および特定の投与方法によって変わり得る。典型的な製剤は、約５％ないし約９５％の有効治療剤（ｗ／ｗ）を含み得る。好ましくは、かかる製剤は、治療剤を約２０％ないし約８０％含む。
【０１２８】
製剤は、薬剤学分野で周知の何れかの方法により単位投与形態で製造され得る。そのような方法には、有効成分を１個以上の補助成分を構成する担体と合わせる工程が含まれる。一般的に、該製剤は、有効成分を液体担体または微細に分割した固体担体またはその両方と合わせて、その後、必要であれば、製品を成形して、均一かつ密に結合して製造される。
【０１２９】
製剤は、単一用量または複数用量の容器、例えば弾性ストッパーを有する密閉アンプルおよびバイアル中に存在し得て、使用直前に滅菌液体担体、例えば注射用水の添加のみを要する凍結乾燥状態で貯蔵され得る。即時調製の注射溶液および懸濁液は、上記の種類の滅菌粉末、顆粒および錠剤から製造され得る。
【０１３０】
本明細書に記載の医薬組成物および用量製剤は、好ましくはインビボでの使用のためのものである。それにも関わらず、何れかの目的のための医薬組成物および用量製剤の使用に限定されることを意図しない。例えば、本明細書に記載の医薬組成物で予め処理された生物学的物質もまた、本発明に使用され得る。かかる生物学的物質には、血液およびその成分、例えば血漿、血小板、血液細胞の亜集団など；腎臓、肝臓、心臓、肺などのような臓器；精子および卵子；骨髄およびその成分、ならびに食塩水、デキストロースなどのような患者に注入される他の液体が含まれるが、これらに限定されない。
【０１３１】
何れかの特定の患者に対する特定の投与量および処置レジメンが、用いる特定の化合物の活性、年齢、体重、一般的健康状態、性別、食事、投与時間、排泄速度、混合薬、担当医の判断、および処置すべき特定の疾患の重症度、これまでの治療歴、共存疾患または併用薬、ベースラインのウイルス量、人種、疾患の期間、肝機能の状態および肝線維症／肝硬変の程度、ならびに治療目標（移植によるウイルス循環の排除またはウイルスの根絶)を含む、様々な因子によって変わり得ることも理解されるべきである。有効成分の量は、特定の記載した化合物、ならびに組成物中のさらなる抗ウイルス剤の存在または不存在、および性質によっても変わり得る。
【０１３２】
本発明の処置レジメンおよび用量形態に従い、ＶＸ−９５０およびインターフェロンの共投与は、サンプルまたは患者における、ウイルスの生活環に必要なＮＳ３／４Ａセリンプロテアーゼをコードする（または、本発明の実施に有効な量の）ウイルスを有効に減少させる。従って、本発明はまた、ウイルスの生活環に必要なＮＳ３／４Ａセリンプロテアーゼをコードするウイルスにより特徴付けられるウイルスに感染した患者の、上記のＶＸ−９５０およびインターフェロン（および、所望により１種以上のさらなる治療剤）の投与による処置方法を提供する。
【０１３３】
本発明において、本発明に用いられる各活性治療剤は、独立して、食事の有無で患者に投与され得る。いくつかの態様において、ＶＸ−２２２および／または何れかのさらなるＨＣＶ薬は独立して、食事と共に投与される。本明細書で用いる用語“食事と組み合わせて”は、有効治療剤（複数可）が食事の食べ終わり約９０分以内、例えば、食事後の約９０分以内および食事前の約９０分以内に投与されることを意味する。いくつかの態様において、有効治療剤（複数可）は、食事の食べ終わり前約３０分まで、または食べ終わり後３０分までに投与される。必要ではないが、全ての種類の食品（高脂肪および低脂肪食）が摂取され得て、高脂肪食は、より低脂肪食と比較して、改善された吸収を提供し得る。本明細書で用いる“高脂肪”は、約３０％以上のカロリーが脂肪により提供される食事を意味する。任意の態様において、食事は、少なくとも約５０カロリーを有する。他の任意の態様において、食事は、少なくとも約１００カロリーである。さらに他の任意の態様において、食事は、少なくとも約５０−１００カロリーないし約３，０００カロリーまで、約２，０００カロリーまで、または約１，０００カロリーまでである。さらに他の任意の態様において、食事には、脂肪からの、その総カロリーの少なくとも約３０％が含まれる。
【０１３４】
一般に、本発明において、有効治療応答が達成されるように、処置はＨＣＶウイルス感染を完全に根絶するか、またはその重症度を低減させ得る。有効治療応答は、例えば、ａ）継続的なウイルス応答を達成している；およびｂ）血漿中、検出不可能なＨＣＶ ＲＮＡを少なくとも約１２週間（約１２週間またはそれ以上）達成しているの、一方または両方であり得る。用語“検出不可能な”は、上記に定義の通りである。
【０１３５】
他の態様において、本発明の方法は、投与後の患者のＨＣＶ ＲＮＡレベルが、処置前よりも少なくとも約２ｌｏｇ１０（例えば、少なくとも約４ｌｏｇ１０）低下するように、ＨＣＶに感染した患者を処置する。
【０１３６】
いくつかの態様において、ウイルス血漿濃度の比較的迅速な低下は、患者に負荷用量の投与を行うことにより得られ得る。一態様において、該負荷用量は、約１２５０ｍｇのＶＸ−９５０である。
【０１３７】
いくつかの態様において、本発明の方法は、４週目のＲＶＲおよび１２週目の検出不可能な状態を達成できる。
【０１３８】
一般に、本発明において、“患者”には、哺乳動物、特にヒトが含まれる。
【０１３９】
ある態様において、本発明の方法は、遺伝子型１型Ｃ型肝炎ウイルスに感染した患者の処置を提供する。遺伝子型１型ＨＣＶ感染は、アメリカ合衆国において、処置の最も困難なＨＣＶ株であり、最も蔓延している株である。
【０１４０】
有利には、両ＨＣＶ未処置の患者および以前に処置された患者は、本発明の方法に有益である。誤解を避けるために、本発明の方法で処置され得る患者には、ＨＣＶ処置が、試されなかった患者か、または、非応答、リバウンド、再発および進行した患者を含む、処置に失敗した患者が含まれる。任意の態様において、本発明の方法は、ＨＣＶ未処置の患者を処置する。本明細書で用いる“ＨＣＶ未処置”患者は、アメリカ食品医薬品局（ＦＤＡ）または他のアメリカの機関もしくはＦＤＡと同等の国際的機関によって承認されたか、または承認申請中の薬剤で以前にＨＣＶ処置を行なわれていないことを意味する。
【０１４１】
本発明の方法は、長期または短期療法として用いられ得る。本発明の方法が、患者を予防的に処置するのに使用され、該患者がＣ型肝炎ウイルスに感染した患者となるとき、該方法は、その後、感染を処置し得ることは、当業者に容易に明らかであり得る。故に、本発明の一態様は、患者におけるＣ型肝炎感染の処置または予防のための方法を提供する。
【０１４２】
患者の血漿中のＶＸ−２２２およびＶＸ−９５０濃度を決定するためのアッセイは、当技術分野で公知の方法により行った。例えば, Wasley, A. Et al., Semin. Liver Dis., 20: 1−16, 2000; Alter, H.J. et al., Semin. Liver dis., 20: 17−35, 2000; Brown, R.S. Jr. et al., Liver Transpl., 9: S10−S13, 2003; Defrancesco, R. et al., Nature, 436(7053): 953−960, 2005; Bowen, D.G. et al., J. Hepatol., 42: 408−417, 2005; Hoofnagle, J.H., Hepatology, 36: S21−S29, 2002, Brown, R.S. Jr. et al., Nature, 436 (7053): 973−978, 2005; および、Chisari, F.V., Nature, 436(7053): 930−932, 2005を参照のこと。
【０１４３】
本発明に関係する投与を、長期または短期療法として用い得る。単一投与形態を製造するために担体物質と併用され得る有効成分の量は、処置される宿主および特定の投与方法によって変わり得る。典型的に製剤は、約５％ないし約９５％の有効化合物（ｗ／ｗ）を含み得る。好ましくは、かかる製剤は、約２０％ないし約８０％の有効化合物を含み得る。
【０１４４】
患者の状態の改善後は、必要ならば、本発明の化合物、組成物または組み合わせの維持量が投与され得る。次いで、投与の量あるいは頻度、または両方を、その症状の関数として、症状が所望のレベルに軽減され、処置を終えるべきときに、改善された状態が維持されるレベルに減らし得る。しかしながら、患者は、何らかの疾患症状の再発により長期的に断続的な処置を必要とし得る。
【０１４５】
何れかの特定の患者に対する特定の投与量および処置レジメンが、用いる特定の化合物の活性、年齢、体重、一般的健康状態、性別、食事、投与時間、排泄速度、混合薬、担当医の判断、および処置すべき特定の疾患の重症度、これまでの治療歴、共存疾患または併用薬、ベースラインのウイルス量、人種、疾患の期間、肝機能の状態および肝線維症／肝硬変の程度、ならびに治療目標（移植によるウイルス循環の排除またはウイルスの根絶)を含む、様々な因子によって変わり得ることも理解されるべきである。有効成分の量は、特定の記載した化合物、ならびに組成物中のさらなる抗ウイルス剤の存在または不存在、および性質によっても変わり得る。
【０１４６】
他の態様によれば、本発明は、本発明の薬学的に許容される組成物を該患者に投与することにより、ウイルスの生活環に必要なＮＳ３／４Ａセリンプロテアーゼをコードするウイルスにより特徴付けられるウイルスに感染した患者の処置方法を提供する。好ましくは、本発明の方法は、ＨＣＶ感染を有する患者の処置に用いられる。かかる処置は、ウイルス感染を完全に根絶するか、またはその重症度を低減し得る。好ましくは、該患者は哺乳動物である。より好ましくは、該患者はヒトである。
【０１４７】
本明細書に記載の投与量は、好ましくはインビボでの使用用である。それにもかかわらず、これは目的に応じてこれらの量の、例えばＶＸ−２２２またはＶＸ−９５０の使用に限定することを意図していない。さらに別の態様において、本発明は、生物学的物質と、本発明の化合物を含む薬学的に許容される組成物を合わせる段階を含む、患者に投与することを目的として該生物学的物質を前処理する方法を提供する。かかる生物学的物質には、血液および血漿、血小板、血液細胞の亜集団などのその成分；腎臓、肝臓、心臓、肺などの臓器；精子および卵子；骨髄およびその成分、ならびに食塩水、デキストロースなどのような患者に注入される他の液体が含まれるが、それらに限定されない。
【０１４８】
本発明はまた、ＶＸ−２２２、ＶＸ−９５０、および薬学的に許容される担体、アジュバント、またはビヒクルを組み合わせる工程を含む、ＶＸ−２２２、ＶＸ−９５０、および薬学的に許容される担体、アジュバント、またはビヒクルを含む組成物を製造するための方法を提供する（ここで、組成物中のＶＸ−２２２およびＶＸ−９５０の投与量は、本発明の何れかの態様に従う。）。本発明の別の態様は、該組成物が、本明細書に記載の１個以上のさらなる薬剤を含む方法を提供する。
【０１４９】
医薬組成物はまた、単一パッケージ、通常ブリスターパッケージに一連の処置全体を含む“患者パック（patient pack）”で患者に処方され得る。患者パックには、従来の処方薬には通常添付されていない添付文書が含まれていて患者がいつでも利用できる点で、薬剤師が、大量供給物（bulk supply）から患者への薬剤分配を行なう従来の処方よりも有利である。添付文書の包含は、患者に医者の指示の順守を改善させることが証明されている。
【０１５０】
患者が本発明の正しい使用をするように指示する添付文書を包含する単一の患者パック、または各製剤の患者パックを用いる本発明の併用投与は、本発明の望ましいさらなる特徴であることが理解され得る。
【０１５１】
さらなる一面によれば、本発明は、ＶＸ−２２２（本発明の投与量）および本発明の併用使用の指示書を含む添付情報を含むパッケージである。全ての組成物、投与形態、治療レジメンまたは本発明の他の態様は、医薬パッケージ中に存在し得る。本発明の別の態様において、該医薬パッケージは、本明細書に記載の１個以上のさらなる薬剤をさらに含む。さらなる薬剤または複数の薬剤は、同一のパッケージまたは異なるパッケージで提供され得る。
【０１５２】
本発明の他の一面は、単一または複数の各医薬成分の製剤；貯蔵中および投与前に製剤（複数可）を保存する容器；ならびに、ＨＣＶ感染の処置または予防のための有効な方法で薬剤投与を行うための指示書を含む、ＨＣＶ感染の処置またはＨＣＶ感染の予防における使用のための（または、本発明の他の方法における使用のための）患者用のパッケージ化されたキットを含む。
【０１５３】
従って、本発明は、ＶＸ−２２２（および、所望によりさらなる薬剤）の用量の同時または連続投与のためのキットを提供する。典型的に、そのようなキットは、例えば、薬学的に許容される担体中（および、単一または複数の製剤中）、各化合物の組成物および任意のさらなる薬剤（複数可）、ならびに同時または連続投与のための指示書を含み得る。
【０１５４】
別の態様において、パッケージキットは、自己投与のための１個以上の投与形態；貯蔵中および使用前に該投与形態を保存するための、好ましくは密閉された容器；および、薬剤投与を行うための患者への指示書を包含して提供される。該指示書は、一般的に、添付文書、ラベル、および／またはキットの他の成分の指示が記載され、投与形態または複数の投与形態が、本明細書中に記載されている。各投与形態は、一枚の金属箔−プラスチック薄板で形成される個々の空間（cell）または半球形（bubble）中に、他から分離されたそれぞれの投与形態を包含させるか、または投与形態は、プラスチック容器のような単一の容器中に包含され得る。本発明のキットはまた、典型的には、個々のキット成分をパッケージングするための手段、すなわち、投与形態、容器手段、および使用のための指示書を含み得る。そのようなパッケージング手段は、段ボール箱または紙箱、プラスチック容器または金属箔容器などの形態であり得る。
【０１５５】
本発明のキットは、何れかの組成物、投与形態、治療レジメンまたは医薬パッケージのような、本発明のいずれかの一面を具現化し得る。
【０１５６】
本発明のパッケージおよびキットは、所望により、複数の組成物または投与形態を含む。従って、１個の組成物または２個以上の組成物を含むパッケージおよびキットは、本発明の範囲内に包含され得る。
【０１５７】
ある例示的態様は、以下に説明され、記載されているが、本発明の化合物が、当業者に一般的に利用可能な適当な出発物質を用いて、一般に上記の方法に従い製造され得ることは、当然のことである。
【０１５８】
ＶＸ−２２２は、一般的に、当業者に周知の方法で製造され得る（例えば、ＷＯ２００２／１００８５１およびＷＯ２００８／０５８３９３を参照のこと）。当技術分野で周知の全ての好適な製剤が、本発明において使用され得る。例えば、ＷＯ２００２／１００８５１およびＷＯ２００８／０５８３９３に記載の製剤が、本発明で使用され得る。本発明で使用され得る１つの特定の例には、ＶＸ−２２２の遊離酸形； Avicel PH 101；ラクトース一水和物；Poloxamer 188；ラウリル硫酸ナトリウム；プロビドンＫ２９／３２； Avicel PH 102；ラクトース一水和物；クロスカルメロースナトリウム；ステアリン酸マグネシウムが含まれる。本発明で用いられ得る特定の製剤は、実施例５に例示される。
【０１５９】
本発明の一態様は、ＶＸ−２２２の遊離酸形（構造式（Ｉ）で示される化合物）； Avicel PH 101；ラクトース一水和物； Poloxamer （例えば、Polxamer 188）；ラウリル硫酸ナトリウム；プロビドン Ｋ２９／３２； Avicel PH 102；ラクトース一水和物；クロスカルメロースナトリウム；ならびに、ステアリン酸マグネシウムを含むＶＸ−２２２の製剤である。特定の態様において、製剤は、約４５−６０重量％のＶＸ−２２２の遊離酸形；約５−２０重量％のAvicel PH 101；約１０−２０重量％のラクトース一水和物；約１−１０重量％のPoloxamer（例えば、Polxamer 188）；約１−５重量％のラウリル硫酸ナトリウム；約１−１０重量％のProvidone （例えば、プロビドンＫ２９／３２）；約１−１０重量％のAvicel PH 102；約１−１０重量％のラクトース一水和物；約１−１０重量％のクロスカルメロースナトリウム；ならびに、約０．１−５重量％のステアリン酸マグネシウムを含む。実施例５に記載の製剤はまた、本発明に包含される。
【０１６０】
ＶＸ−９５０は、一般的に、当業者に周知の方法で製造され得る（例えば、ＷＯ０２／１８３６９を参照のこと）。当技術分野で周知の全ての好適な製剤が、本発明において使用され得る。例えば、ＷＯ２００５／１２３０７５、ＷＯ２００７／１０９６０４、ＷＯ２００７／１０９６０５およびＷＯ２００８／０８０１６７に記載の製剤が本発明で使用され得る。本発明で使用され得る特定の製剤は、実施例４に例示される。他の具体的な例は、以下を含む：
【表１】
2013518124.tif 000005
【表２】
2013518124.tif 000006
【表３】
2013518124.tif 000007
【表４】
2013518124.tif 000008
ここで、ＨＰＭＣ（ヒドロキシプロピルメチルセルロース ６０ＳＨ ５０ｃＰ (Biddle SawyerまたはShin−Etsu Metolose, HPMC60SH50）（Hypromellose Acetate Succinate, HG grade, Shin−Etsu Chemical Co.）、ＨＰＣ（ヒドロキシプロピルセルロース）、ＰＶＰ（ポリビニルピロリドン）およびＳＬＳ（ラウリル硫酸ナトリウム）は、ＷＯ２００５／１２３０７５に記載されている。任意の態様において、上記の固体分散体は、１％ＨＰＭＣ、０．００２％シメチコン溶液（１重量％のＨＰＭＣ、０．００２重量％のシメチコンおよび９９重量％の水）に懸濁され得る。さらなる例には、１：１ ＶＸ９５０：ＰＶＰＫ３０、１重量％のＳＬＳ（Refreshed Tox.）；Ｎｉｒｏ−４９重量％ ＨＰＭＣＡＳ／１重量％ ＳＬＳ／１重量％ ＳＤＢＳ／４９％ＶＸ−９５０；４０．５重量％ ＰＶＰ−ＶＡ／１０重量％ ＥＴＰＧＳ／４９．５重量％ ＶＸ−９５０；４０．５重量％ ＨＰＭＣ／１０重量％ ＥＴＰＧＳ／４９．５重量％ ＶＸ−９５０；４９重量％ ＶＸ９５０、４９重量％ ＨＰＭＣＡＳ、１重量％ ＳＬＳ、１重量％ ＳＤＢＳ；および、４９重量％ ＶＸ９５０、１６重量％ ＨＰＰｈ、３３重量％ ＨＰＣ、１重量％ ＳＬＳ、□重量％ ＳＤＢＳ(ここで、ＰＶＰＫ３０（ポリビニルピロリドンＫ３０）、ＳＤＢＳ（ドデシルベンゼンスルホン酸ナトリウム）、ＨＰＭＣＡＳ（ヒドロキシプロピルメチルセルロースアセテートサクシネート）、ビタミンＥＴＰＧＳ、ＰＶＰ（ポリビニルピロリドン）およびＳＬＳ（ラウリル硫酸ナトリウム）、ならびにこれらの製剤の製造の詳細は、ＷＯ２００５／１２３０７５に見出され得る）を含む。さらなる例には、ＷＯ２００７／１０９６０４に記載のものが含まれる：
【０１６１】
５５重量％ ＶＸ−９５０、２４．４重量％ ＨＰＭＣＡＳ−ＨＧ（ヒドロキシプロピルメチルセルロースアセテートサクシネート）、ＪＰＥ（Biddle SawyerまたはShin−Etsu HPMCAS−HG グレード）、１９．６重量％ ＨＰＭＣ−６０ＳＨ（ヒドロキシプロピルメチルセルロース ６０ＳＨ ５０ｃＰ（Biddle SawyerまたはShin−Etsu Metolose, HPMC60SH50）、および１重量％ ラウリル硫酸ナトリウム（ＳＬＳ）を含む固体分散体；
５５重量％ ＶＸ−９５０、１４．７重量％ ＨＰＭＣＡＳ−ＨＧ（ヒドロキシプロピルメチルセルロースアセテートサクシネート）、ＪＰＥ（Biddle SawyerまたはShin−Etsu HPMCAS−HG グレード）、２９．３重量％ ＨＰＭＣ−６０ＳＨ（ヒドロキシプロピルメチルセルロース６０ＳＨ ５０ｃＰ（Biddle SawyerまたはShin−Etsu Metolose, HPMC60SH50）、および１重量％ラウリル硫酸ナトリウム（ＳＬＳ）を含む固体分散体；
６０重量％ ＶＸ−９５０、２４．４重量％ＨＰＭＣＡＳ−ＨＧ（ヒドロキシプロピルメチルセルロースアセテートサクシネート）、ＪＰＥ（Biddle SawyerまたはShin−Etsu HPMCAS−HG グレード）、１４．６重量％ＨＰＭＣ−６０ＳＨ（ヒドロキシプロピルメチルセルロース６０ＳＨ ５０ｃＰ（Biddle SawyerまたはShin−Etsu Metolose, HPMC60SH50）、および１重量％ ラウリル硫酸ナトリウム（ＳＬＳ）を含む固体分散体；
６５重量％ＶＸ−９５０、１７重量％ ＨＰＭＣＡＳ−ＨＧ（ヒドロキシプロピルメチルセルロースアセテートサクシネート）、ＪＰＥ（Biddle SawyerまたはShin−Etsu HPMCAS−HG グレード）、１７重量％ ＨＰＭＣ−６０ＳＨ（ヒドロキシプロピルメチルセルロース ６０ＳＨ ５０ｃＰ（Biddle SawyerまたはShin−Etsu Metolose, HPMC60SH50）、および１重量％ラウリル硫酸ナトリウム（ＳＬＳ）を含む固体分散体；
７０重量％ ＶＸ−９５０、９．７重量％ＨＰＭＣＡＳ−ＨＧ（ヒドロキシプロピルメチルセルロースアセテートサクシネート）、ＪＰＥ（Biddle SawyerまたはShin−Etsu HPMCAS−HG グレード）、１９．３重量％ ＨＰＭＣ−６０ＳＨ（ヒドロキシプロピルメチルセルロース ６０ＳＨ ５０ｃＰ （Biddle SawyerまたはShin−Etsu Metolose, HPMC60SH50）、および１重量％ ラウリル硫酸ナトリウム（ＳＬＳ）を含む固体分散体；
【０１６２】
６０重量％ ＶＸ−９５０、３９重量％ＨＰＭＣＡＳ−ＨＧ（ヒドロキシプロピルメチルセルロースアセテートサクシネート）、ＪＰＥ（Biddle SawyerまたはShin−Etsu HPMCAS−HG グレード）、および１重量％ラウリル硫酸ナトリウム（ＳＬＳ）を含む固体分散体；
４９．５重量％ ＶＸ−９５０、２４．５重量％ＨＰＭＣＡＳ−ＨＧ（ヒドロキシプロピルメチルセルロースアセテートサクシネート）、ＪＰＥ（Biddle SawyerまたはShin−Etsu HPMCAS−HG グレード）、２４．５重量％ＨＰＭＣ−６０ＳＨ（ヒドロキシプロピルメチルセルロース ６０ＳＨ ５０ｃＰ（Biddle SawyerまたはShin−Etsu Metolose, HPMC60SH50）、および１重量％ラウリル硫酸ナトリウム（ＳＬＳ）を含む固体分散体；
８３重量％ ＶＸ−９５０、８重量％ＨＰＭＣＡＳ−ＨＧ（ヒドロキシプロピルメチルセルロースアセテートサクシネート）、ＪＰＥ（Biddle SawyerまたはShin−Etsu HPMCAS−HG グレード）、８重量％ＨＰＭＣ−６０ＳＨ（ヒドロキシプロピルメチルセルロース６０ＳＨ ５０ｃＰ（Biddle SawyerまたはShin−Etsu Metolose, HPMC60SH50）、および１重量％ラウリル硫酸ナトリウム（ＳＬＳ）を含む固体分散体；
４９．５重量％ＶＸ−９５０、２４．５重量％ＨＰＭＣＡＳ−ＨＧ（ヒドロキシプロピルメチルセルロースアセテートサクシネート）、ＪＰＥ（Biddle SawyerまたはShin−Etsu HPMCAS−HG グレード）、２４．５重量％ＨＰＭＣ−６０ＳＨ（ヒドロキシプロピルメチルセルロース ６０ＳＨ ５０ｃＰ（Biddle SawyerまたはShin−Etsu Metolose, HPMC60SH50）、および１重量％ラウリル硫酸ナトリウム（ＳＬＳ）を含む固体分散体；
７０重量％ＶＸ−９５０、１４．５重量％ＨＰＭＣＡＳ−ＨＧ（ヒドロキシプロピルメチルセルロースアセテートサクシネート）、ＪＰＥ（Biddle SawyerまたはShin−Etsu HPMCAS−HG グレード）、１４．５重量％ＨＰＭＣ−６０ＳＨ（ヒドロキシプロピルメチルセルロース ６０ＳＨ ５０ｃＰ（Biddle SawyerまたはShin−Etsu Metolose, HPMC60SH50）、および１重量％ラウリル硫酸ナトリウム（ＳＬＳ）を含む固体分散体；
【０１６３】
６５重量％ＶＸ−９５０、１４．６重量％ＨＰＭＣＡＳ−ＨＧ（ヒドロキシプロピルメチルセルロースアセテートサクシネート）、ＪＰＥ（Biddle SawyerまたはShin−Etsu HPMCAS−HG グレード）、１９．４重量％ＨＰＭＣ−６０ＳＨ（ヒドロキシプロピルメチルセルロース ６０ＳＨ ５０ｃＰ（Biddle SawyerまたはShin−Etsu Metolose, HPMC60SH50）、および１重量％ラウリル硫酸ナトリウム（ＳＬＳ）を含む固体分散体；
６５重量％ＶＸ−９５０、９．７重量％ＨＰＭＣＡＳ−ＨＧ（ヒドロキシプロピルメチルセルロースアセテートサクシネート）、ＪＰＥ（Biddle SawyerまたはShin−Etsu HPMCAS−HG グレード）、２４．３重量％ＨＰＭＣ−６０ＳＨ（ヒドロキシプロピルメチルセルロース ６０ＳＨ ５０ｃＰ（Biddle SawyerまたはShin−Etsu Metolose, HPMC60SH50）、および１重量％ラウリル硫酸ナトリウム（ＳＬＳ）を含む固体分散体；
６０重量％ＶＸ−９５０、１９．５重量％ＨＰＭＣＡＳ−ＨＧ（ヒドロキシプロピルメチルセルロースアセテートサクシネート）、ＪＰＥ（Biddle SawyerまたはShin−Etsu HPMCAS−HG グレード）、１９．５重量％ＨＰＭＣ−６０ＳＨ（ヒドロキシプロピルメチルセルロース ６０ＳＨ ５０ｃＰ（Biddle SawyerまたはShin−Etsu Metolose, HPMC60SH50）、および１重量％ラウリル硫酸ナトリウム（ＳＬＳ）を含む固体分散体；
６０重量％ＶＸ−９５０、１４．６重量％ＨＰＭＣＡＳ−ＨＧ（ヒドロキシプロピルメチルセルロースアセテートサクシネート）、ＪＰＥ（Biddle SawyerまたはShin−Etsu HPMCAS−HG グレード）、２４．４重量％ＨＰＭＣ−６０ＳＨ（ヒドロキシプロピルメチルセルロース ６０ＳＨ ５０ｃＰ（Biddle SawyerまたはShin−Etsu Metolose, HPMC60SH50）、および１重量％ラウリル硫酸ナトリウム（ＳＬＳ）を含む固体分散体；
【０１６４】
７０重量％ＶＸ−９５０、９．７重量％ＨＰＭＣＡＳ−ＨＧ（ヒドロキシプロピルメチルセルロースアセテートサクシネート）、ＪＰＥ（Biddle SawyerまたはShin−Etsu HPMCAS−HG グレード）、１９．３重量％ＨＰＭＣ−６０ＳＨ（ヒドロキシプロピルメチルセルロース ６０ＳＨ ５０ｃＰ（Biddle SawyerまたはShin−Etsu Metolose, HPMC60SH50）、および１重量％ラウリル硫酸ナトリウム（ＳＬＳ）を含む固体分散体；
４９．５重量％ＶＸ−９５０、２４．５重量％ＨＰＭＣＡＳ−ＨＧ（ヒドロキシプロピルメチルセルロースアセテートサクシネート）、ＪＰＥ（Biddle SawyerまたはShin−Etsu HPMCAS−HG グレード）、２４．５重量％ＨＰＭＣ−６０ＳＨ（ヒドロキシプロピルメチルセルロース ６０ＳＨ ５０ｃＰ（Biddle SawyerまたはShin−Etsu Metolose, HPMC60SH50）、および１重量％ラウリル硫酸ナトリウム（ＳＬＳ）を含む固体分散体；
８３重量％ＶＸ−９５０、８重量％ＨＰＭＣＡＳ−ＨＧ（ヒドロキシプロピルメチルセルロースアセテートサクシネート）、ＪＰＥ（Biddle SawyerまたはShin−Etsu HPMCAS−HG グレード）、８重量％ＨＰＭＣ−６０ＳＨ（ヒドロキシプロピルメチルセルロース６０ＳＨ ５０ｃＰ（Biddle SawyerまたはShin−Etsu Metolose, HPMC60SH50）、および１重量％ラウリル硫酸ナトリウム（ＳＬＳ）を含む固体分散体；
４９．５重量％ＶＸ−９５０、４９．５重量％ＨＰＭＣＡＳ−ＨＧ（ヒドロキシプロピルメチルセルロースアセテートサクシネート）、ＪＰＥ（Biddle SawyerまたはShin−Etsu HPMCAS−HG グレード）、および１重量％ラウリル硫酸ナトリウム（ＳＬＳ）を含む固体分散体；
【０１６５】
８３重量％ＶＸ−９５０、１６重量％ＨＰＭＣＡＳ−ＨＧ（ヒドロキシプロピルメチルセルロースアセテートサクシネート）、ＪＰＥ（Biddle SawyerまたはShin−Etsu HPMCAS−HG グレード）、および１重量％ラウリル硫酸ナトリウム（ＳＬＳ）を含む固体分散体；
８２．４４重量％ＶＸ−９５０、１５．８９重量％ＨＰＭＣＡＳ−ＨＧ（ヒドロキシプロピルメチルセルロースアセテートサクシネート）、ＪＰＥ（Biddle SawyerまたはShin−Etsu HPMCAS−HG グレード）、および１．６７重量％ラウリル硫酸ナトリウム（ＳＬＳ）を含む固体分散体；
４９．５重量％ＶＸ−９５０、２４．７５重量％ＨＰＭＣＡＳ−ＨＧ（ヒドロキシプロピルメチルセルロースアセテートサクシネート）、ＪＰＥ（Biddle SawyerまたはShin−Etsu HPMCAS−HG グレード）、２４．７５重量％ＨＰＭＣ−６０ＳＨ（ヒドロキシプロピルメチルセルロース ６０ＳＨ ５０ｃＰ（Biddle SawyerまたはShin−Etsu Metolose, HPMC60SH50）、および１重量％ラウリル硫酸ナトリウム（ＳＬＳ）を含む固体分散体；
６０重量％ＶＸ−９５０、２４．６重量％ＨＰＭＣＡＳ−ＨＧ（ヒドロキシプロピルメチルセルロースアセテートサクシネート）、ＪＰＥ（Biddle SawyerまたはShin−Etsu HPMCAS−HG グレード），１４．４重量％ＨＰＭＣ−６０ＳＨ（ヒドロキシプロピルメチルセルロース ６０ＳＨ ５０ｃＰ（Biddle SawyerまたはShin−Etsu Metolose, HPMC60SH50）、および１重量％ラウリル硫酸ナトリウム（ＳＬＳ）を含む固体分散体；
【０１６６】
６０重量％ＶＸ−９５０、３９重量％ＨＰＭＣＡＳ−ＨＧ（ヒドロキシプロピルメチルセルロースアセテートサクシネート）、ＪＰＥ（Biddle SawyerまたはShin−Etsu HPMCAS−HG グレード）、および１重量％ラウリル硫酸ナトリウム（ＳＬＳ）を含む固体分散体；ならびに、
４９．５重量％ＶＸ−９５０、４９．５重量％ＨＰＭＣＡＳ−ＨＧ（ヒドロキシプロピルメチルセルロースアセテートサクシネート）、ＪＰＥ（Biddle SawyerまたはShin−Etsu HPMCAS−HG グレード）、および１重量％ラウリル硫酸ナトリウム（ＳＬＳ）を含む固体分散体。
【０１６７】
これらの固体分散体の製造の詳細は、ＷＯ２００７／１０９６０４に記載されている。さらなる具体例には、ＷＯ２００７／１０９６０４に記載のＶＸ−９５０のスプレー乾燥分散体を含む錠剤製剤が含まれる：
【表５】
2013518124.tif 000009
【０１６８】
さらなる具体例には、ＷＯ２００８／０８０１６７に記載の錠剤製剤が含まれる：
【表６】
2013518124.tif 000010
【表７】
2013518124.tif 000011
【０１６９】
【表８】
2013518124.tif 000012
【表９】
2013518124.tif 000013
【表１０】
2013518124.tif 000014
【０１７０】
全ての引用文献は、引用により本明細書中に包含される。
【０１７１】
本発明をより十分に理解するために、以下の製造例および実験例を記載する。これらの実施例は、説明のみを目的とし、いかなる点でも本発明の範囲を限定するものと解釈してはならない。
【実施例】
【０１７２】
実施例
以下の実施例において、ＶＸ−２２２は化合物１を、ＶＸ−９５０は化合物２を意味する。
実施例１：ＨＣＶ レプリコン細胞アッセイプロトコール
Ｃ型肝炎ウイルス（ＨＣＶ）レプリコンを含む細胞を、１０％ウシ胎仔血清（ＦＢＳ）、０．２５mg／mLのＧ４１８、適当な添加剤を含むＤＭＥＭ（媒体Ａ）中で維持した。
【０１７３】
１日目に、レプリコン細胞単層を、トリプシン：ＥＤＴＡ混合物で処理し、除去し、その後、媒体Ａを最終濃度１００，０００細胞／mLまで希釈した。１０，０００細胞／１００μLを、９６ウェル組織培養プレートの各ウェル中に播種し、３７℃にて、組織培養インキュベーター中で一晩培養した。
【０１７４】
２日目、化合物（１００％ＤＭＳＯ中）を、２％ＦＢＳ、０．５％ＤＭＳＯ、適当な添加剤を含むＤＭＥＭ（媒体Ｂ）中に連続的に希釈した。ＤＭＳＯの最終濃度を、一連の希釈を通して０．５％に維持した。
【０１７５】
レプリコン細胞単層上の媒体Ａを除去し、その後、種々の濃度の化合物を含む媒体Ｂを添加した。化合物を含まない媒体Ｂを、対照として他のウェルに添加した。
【０１７６】
細胞を、３７℃の組織培養インキュベーター中、媒体Ｂ中化合物または０．５％ＤＭＳＯを、４８時間インキュベートした。４８時間のインキュベーションの最後に、媒体Ｂを除去し、レプリコン細胞単層をＰＢＳで一度洗浄し、ＲＮＡ抽出前に−８０℃で貯蔵した。
【０１７７】
処理したレプリコン細胞単層を含む培養プレートを解凍し、一定量のウシウイルス性下痢ウイルス（ＢＶＤＶ）のような別のＲＮＡウイルスを、各ウェルにて細胞に添加した。ＲＮＡ抽出試薬（ＲＮｅａｓｙキットの試薬のような）を、ＲＮＡ分解を避けるために細胞に直ちに添加した。全ＲＮＡを、抽出効率および一貫性を改善するための改良を伴う、製造業者の指示書に従って抽出した。最後に、ＨＣＶレプリコンＲＮＡを含む全細胞ＲＮＡを溶出させ、さらなる処理まで−８０℃で貯蔵した。
【０１７８】
TaqmanリアルタイムＲＴ−ＰＣＲ定量アッセイを、特定のプライマーおよびプローブの２個のセットを用いて行った。１つは、ＨＣＶについて、もう１つは、ＢＶＤＶについて行った。処理したＨＣＶレプリコン細胞由来の全ＲＮＡ抽出物を、同じＰＣＲウェル中に、ＨＣＶおよびＢＶＤＶ ＲＮＡの両方の定量のために、ＰＣＲ反応に追加した。実験的失敗に印をつけ、各ウェル中のＢＶＤＶ ＲＮＡレベルを基に却下した。各ウェル中のＨＣＶ ＲＮＡレベルを、同じＰＣＲプレートで実行する標準曲線に従い計算した。ＶＸ−９５０処理によるＨＣＶ ＲＮＡレベルの阻害または減少の割合を、ＤＭＳＯを用いて計算し、ＶＸ−９５０不含有対照を０％阻害とした。ＩＣ５０（ＨＣＶ ＲＮＡレベルの５０％阻害が見られる濃度）を、いずれかのＶＸ−９５０濃度の滴定曲線から計算した。
【０１７９】
ＶＸ−９５０は、レプリコンアッセイにおいて顕著な活性を有することが示された。ＶＸ−９５０は、２４０ng／mLのＩＣ５０および４７６ng／mLのＩＣ９０を有した。
【０１８０】
実施例２：ＨＣＶ Ｋｉ アッセイプロトコール
５ＡＢ基質および生成物の単離のためのＨＰＬＣマイクロボア法
基質：
ＮＨ２−Ｇｌｕ−Ａｓｐ−Ｖａｌ−Ｖａｌ−（α）Ａｂｕ−Ｃｙｓ−Ｓｅｒ−Ｍｅｔ−Ｓｅｒ−Ｔｙｒ−ＣＯＯＨ（配列番号１）
【０１８１】
２０ｍＭ ５ＡＢ（または、各自の選択濃度）の原液を、ＤＭＳＯおよび０．２Ｍ ＤＴＴで作製した。これを−２０℃にてアリコートで貯蔵した。
緩衝液：５０ｍＭ ＨＥＰＥＳ、ｐＨ７．８；２０％グリセロール；１００ｍＭ ＮａＣｌ。
【０１８２】
総アッセイ容量は、１００μlであった：
【表１１】
2013518124.tif 000015
【０１８３】
緩衝液、ＫＫ４Ａ、ＤＴＴ、およびｔＮＳ３を合わせ；９６ウェルプレートの各ウェルに各７８μＬずつ分配した。これを、３０℃で約５分ないし１０分間インキュベートした。２．５μＬの適当な濃度の試験化合物を、ＤＭＳＯ中に溶解し（ＤＭＳＯのみを対照とする）、各ウェルに添加した。これを、室温で１５分間インキュベートした。２０μＬの２５０μＭ ５ＡＢ基質の添加により反応を開始させた（２５μＭ濃度は、５ＡＢのＫｍ値と等しいか、わずかに低い）。得られた混合物を３０℃で２０分間インキュベートし、その後、２５μＬの１０％ＴＦＡを添加して反応を終了させ、そして分析のために混合物をＨＰＬＣバイアルに移した（１２０μＬアリコート）。ＳＭＳＹ産物を、以下の方法により、基質およびＫＫ４Ａから単離した：
【０１８４】
マイクロボア単離法
装置：Ａｇｉｌｅｎｔ １１００
Ｄｅｇａｓｓｅｒ Ｇ１３２２Ａ
Ｂｉｎａｒｙ ｐｕｍｐ Ｇ１３１２Ａ
Ａｕｔｏｓａｍｐｌｅｒ Ｇ１３１３Ａ
Ｃｏｌｕｍｎ ｔｈｅｒｍｏｓｔａｔｅｄ ｃｈａｍｂｅｒ Ｇ１３１６Ａ
Ｄｉｏｄｅ ａｒｒａｙ ｄｅｔｅｃｔｏｒ Ｇ１３１５Ａ
カラム：
Ｐｈｅｎｏｍｅｎｅｘ Ｊｕｐｉｔｅｒ；５マイクロン Ｃ１８；３００オングストローム；１５０×２ｍｍ；Ｐ／Ｏ ００Ｆ−４０５３−Ｂ０
カラムサーモスタット：４０℃
注入量：１００μＬ
溶媒Ａ＝ＨＰＬＣ等級純水＋０．１％ＴＦＡ
溶媒Ｂ＝ＨＰＬＣ等級アセトニトリル＋０．１％ＴＦＡ
【０１８５】
【表１２】
2013518124.tif 000016
【０１８６】
実施例３
ＶＸ−９５０を、無作為化、二重盲検、プラセボ−対照の単回用量漸増試験において試験した。２５名の健康な男性ボランティアが登録された。各対象は、ＶＸ−９５０の複数の単回用量を少なくとも７日間、３種の用量のＶＸ−９５０を増加用量レベルで投与され、ならびに１用量のプラセボを投与された。
【０１８７】
２５mgないし１２５０mgの用量を評価した。２倍ずつ増量しながら、より低用量範囲で攻撃的であり、より高用量範囲で保守的になるようにフィボナッチ数を改変した、用量漸増スキームを用いた。
【０１８８】
ＶＸ−９５０は、全ての用量レベルで良好な耐容性であるという結果を示した。重大な有害事象は試験中には報告されなかった。そして、用量レベルの増加により有害事象が増大することはなかった。
【０１８９】
薬物動態分析を、統計学的モーメント手法を用いて行った。薬物動態分析は、ＶＸ−９５０が、３時間の平均ｔｍａｘで吸収されたことを示した。２％未満のＶＸ−９５０は尿中で変化なく除かれ、薬剤が、主に代謝経路から排泄されることを示した。
【０１９０】
実施例４
経口投与製剤を下記の通りに製造した。ＶＸ−９５０およびpovidone Ｋ２９／３２を塩化メチレン中に溶解し、次いでラウリル硫酸ナトリウムを添加し、溶液中に分散させて、均一な懸濁液を形成した。この懸濁液を、９０℃の入口温度および５６℃の出口温度を用いてスプレー乾燥させて、生成物をサイクロンから集めた。スプレー乾燥分散体を、７５℃にて８時間、流動床乾燥させた。得られた粉末を、ガラスバイアル中で予め測定し、投与直前に、対象への投与のために水（３０ｍＬ）に懸濁した。投与に関して、各バイアルを、全量が９０ｍＬである水の３分割量で洗浄した。
【表１３】
2013518124.tif 000017
【０１９１】
実施例５
ＶＸ−２２２（本明細書中、化合物１）の２つの異なる経口投与形態を以下の通りに製造した。
【表１４】
2013518124.tif 000018
【表１５】
2013518124.tif 000019
【０１９２】
ＶＸ−２２２（本明細書中、化合物１）のフォームＡの任意の特性は以下の通りである：
【表１６】
2013518124.tif 000020
【０１９３】
ＸＲＰＤパターンを、密封チューブ源およびHi−Star 領域検出器を備えるBruker D8 Discover 回折計（Asset Tag V012842）（Bruker AXS, Madison, WI）を、室温にて、反射モードで用いることにより得ることができる。Ｘ線発生器を、４０ｋＶおよび３５ｍＡの電圧で操作した。該粉末サンプルを、アルミニウムホルダー上に置いた。２個のフレームを、フレーム当たり１２０秒の露光時間で記録した。データを０．０２ｏ ２θの刻み幅の４ｏ−４０ｏ ２θの範囲で統合し、１つの連続したパターンにまとめた。
【０１９４】
ＶＸ−２２２のフォームＡを、以下に記載の工程に従い製造し得る：
−１０ｇのＶＸ−２２２（ＷＯ２００８／０５８３９３に記載の通りに製造した化合物１）を反応器に入れる。
−２０ｇのメタノールを加え、６０℃まで加熱して溶解させる。
−１０℃まで冷却し、固体が形成するまで待つ。
−固体を濾過する。
−２０ｇのアセトンを２５℃で添加する。
−１時間撹拌する。
−固体を濾過する。
−７５℃で１２時間乾燥させる。
【０１９５】
実施例６：実験ＶＸ−２２２−００２からの薬物動態データ：ＶＸ−２２２およびＶＸ−９５０の併用処置
ＶＸ−２２２について実施例５に記載の製剤を用いた。実験において、２０名の健康な対象をコホート１またはコホート２（１コホート当たり１０名の対象）に登録した。コホート１およびコホート２の対象は、実験の３つの期間の全て、処置期間１、処置期間２および処置期間３を完了した。処置期間１において、対象は、ＶＸ−２２２またはＶＸ−２２２プラセボを食事と共に１０日間投与された。処置期間２において、対象は、ＶＸ−９５０またはＶＸ−９５０プラセボを食事と共に１０日間投与された。処置期間３において、対象は、同時に、ＶＸ−２２２およびＶＸ−９５０の両方またはＶＸ−２２２プラセボおよびＶＸ−９５０プラセボの両方を食事と共に１０日間投与された。ＶＸ−２２２を処置期間１に投与し、ＶＸ−９５０を処置期間２に投与するために、処置期間１および処置期間２を７日間のウォッシュアウト期間で分けた。コホート１の対象に、処置期間１および３中、４００ｍｇのＶＸ−２２２またはＶＸ−２２２プラセボを１２時間毎（ｑ１２ｈ）に投与した。コホート２の対象に、処置期間１および３中、１，０００ｍｇのＶＸ−２２２またはＶＸ−２２２プラセボをｑ１２ｈに投与した。コホート１およびコホート２の対象に、処置期間２および３中、１１２５ｍｇのＶＸ−９５０またはＶＸ−９５０プラセボをｑ１２ｈに投与した。この実験の実験デザインを図１に示す：
【表１７】
2013518124.tif 000021
【０１９６】
予備安全解析報告は、処置期間３において、重症化または重篤な有害事象(SAE)は報告されなかったことを示した。主な報告された有害事象は、軽度のものであり、予期しない有害事象の出現または傾向はなかった。下痢、食欲減退、掻痒、鼻血および鼻づまりを含むいくつかの有害事象は、処置期間１および処置期間３と比較して、処置期間３においてより多く見られた。
【０１９７】
薬物動態学的評価を以下の通りに行った：
ＶＣＨ−２２２血漿：
−期間１
１日目：０（投与前）、投与後０．５、１、１．５、２、４、６、８および１２時間
３日目、５日目、７日目、８日目および９日目：０（投与前）
１０日目：０（投与前）、投与後０．５、１、１．５、２、４、６、８、１２、２４、４８および７２時間
−期間３
３１日目および３３日目：０（投与前）
３７日目：０（投与前）、投与後０．５、１、１．５、２、４、６、８、１２および２４時間
ＶＸ−９５０（および代謝物）血漿：
−期間２
２２日目、２４日目および２６日目：０（投与前）
２７日目：０（投与前）、投与後０．５、１、１．５、２、４、６、８および１２時間
−期間３
３１日目および３３日目：０（投与前）
３７日目：０（投与前）、投与後０．５、１、１．５、２、４、６、８および１２時間
ＶＣＨ−２２２ 尿中：
−１０日目および３７日目：投与後０ないし４、４ないし８、８ないし１２および１２ないし２４（１０日目のみ）時間。
【０１９８】
以下の表１は、この実験の予備的薬物動態学的（ｐｋ）結果を提供する。表に示す通り、ＶＸ−２２２血漿暴露は、増加した。
【表１８】
2013518124.tif 000022
【０１９９】
実施例７．パートＡにおける実験ＶＸ−２２２−１０２からの薬物動態データ：ＶＸ−２２２処置
ＶＸ−２２２について実施例５に記載の製剤を用いた。実験１０２のパートＡにおいて、対象をＶＸ−２２２またはプラセボ ６：２（ＶＸ−２２２：プラセボ）の割当比で無作為化し、コホート１、コホート２、コホート３またはコホート４とした。コホート１、コホート２およびコホート３に登録された対象は、２５０ｍｇ、５００ｍｇまたは７５０ｍｇのＶＸ−２２２またはプラセボを１日２回（ＢＩＤ）、それぞれ３日間投与された。コホート４に登録された対象は、１，５００ｍｇのＶＸ−２２２またはプラセボを１日１回（ＱＤ）、３日間投与された。標準的ケア処置について、医師により適当と判断されたとき、ｐｅｇ−ｉｆｎ−アルファ−２ａおよびＲＢＶが４８週間までの一部にて投与の最後に対象に供された。
【０２００】
Ａ．予備的結果
予備的安全性解析報告：遺伝子型１型慢性Ｃ型肝炎に感染した対象は、ＶＸ−２２２またはプラセボを２５０ｍｇ（コホート１）、５００ｍｇ（コホート２）、または７５０ｍｇ（コホート３）（ＢＩＤ）で３日間、多数回投与された。予備的安全性解析報告は、重症化または重篤な有害事象は報告されなかったことを示した。主な報告された有害事象は、軽度のものであり、予期しない有害事象の出現または傾向はなかった。
【０２０１】
予備的薬物動態学的（ＰＫ）分析：コホート１、コホート２およびコホート３からの予備的ｐｋパラメーターのまとめを、表２に示す。
【表１９】
2013518124.tif 000023
【０２０２】
予備的ＨＣＶ ＲＮＡ分析：コホート１、コホート２およびコホート３からの予備的ＨＣＶ ＲＮＡ分析のまとめを表３に提供する。コホート１、コホート２およびコホート３における遺伝子型１型ＨＣＶに感染した対象についての４日目の平均ｌｏｇ ＨＣＶ ＲＮＡ減少は、それぞれ３．１、３．４および３．２であった。１，５００ｍｇのＶＸ−２２２を１日１回投与された、コホート４における遺伝子型１型ＨＣＶに感染した対象についての４日目の平均ｌｏｇ ＨＣＶ ＲＮＡ減少は、３．６であった。
【表２０】
2013518124.tif 000024
【０２０３】
Ｂ．さらなる結果
実験ＶＸ−２２２−１０２のさらなる結果を図２−８に示す：
２５０ｍｇのＶＸ−２２２ ＢＩＤ、５００ｍｇのＶＸ−２２２ ＢＩＤ、７５０ｍｇのＶＸ−２２２ ＢＩＤ、および１，５００ｍｇのＶＸ−２２２ ＱＤを投与された各用量群における６名の患者を含む、３２名の慢性遺伝子型１型ＨＣＶに感染した未処置患者をこの臨床試験に登録した。４種の用量群にて２名の患者がプラセボを投与され、全部で８名の患者がプラセボ投与された。試験のパートＡを、アメリカ合衆国、カナダおよびアルゼンチンの１０施設で行った。試験に登録された患者のうち、２４名の患者が遺伝子型１ａ型ＨＣＶ感染を有し、８名の患者が遺伝子型１ｂ型ＨＣＶ感染を有した。試験に登録された６名の患者は、アフリカ系アメリカ人であり、２５名が白人であり、１名がインド人／アラスカ系であった。
【０２０４】
試験デザインａおよび人種
多施設、無作為化、二重盲検、プラセボ対照、漸増用量試験
−−ＨＣＶ遺伝子型１型に感染した患者
・肝硬変の発現なし
・ＡＬＴ値＜５ｘＵＬＭ
・スクリーニングで血漿 ＨＣＶ ＲＮＡレベル≧５ｌｏｇ１０ ＩＵ／ｍＬ
−−４群の比較実験（ＶＸ−２２２：プラセボ  ６：２無作為化）
−−この漸増用量試験に登録された順
・２５０ｍｇ ＢＩＤ、３日間
・５００ｍｇ ＢＩＤ、３日間
・７５０ｍｇ ＢＩＤ、３日間
・１５００ｍｇ ＱＤ、３日間。
【０２０５】
ベースライン特性を図３にまとめた。ＨＣＶ ＲＮＡ変化を図４−６に示す。図７は、ＶＸ−２２２薬物動態を示す。図７に示す通り、Ｔｍａｘには投与後２−６時間で達し、ＶＸ−２２２暴露は、およそ用量比例的に増大した。図８は、３日目におけるＶＸ−２２２薬物動態のまとめを示す。
【０２０６】
ウイルス動態結果
ＶＸ−２２２での処置は、４種のＶＸ−２２２用量群で血漿ＨＣＶ ＲＮＡの３ ｌｏｇ１０以上の平均減少という結果となった。さらに、漸増用量応答が、５００ｍｇ、７５０ｍｇおよび１，５００ｍｇ用量群で非常に似た結果で４種の用量群で観察された。２５０ｍｇ ＢＩＤ、５００ｍｇ ＢＩＤおよび７５０ｍｇ ＢＩＤのＶＸ−２２２を投与した３日後に達成された平均ＨＣＶ ＲＮＡ減少は、それぞれ３．１ ｌｏｇ１０（範囲：２．０ないし４．２）、３．４ ｌｏｇ１０（範囲：３．２ないし３．６）、および３．２ ｌｏｇ１０（範囲：２．３ないし３．８）であった。１，５００ｍｇ ＱＤのＶＸ−２２２を投与した３日後に達成されたは、３．４ ｌｏｇ１０（範囲：３．１ないし３．９）であった。プラセボを受容する患者において、特記すべきＨＣＶ ＲＮＡの減少は観察されなかった。同様のウイルス減少が、遺伝子型１ａおよび１ｂ型に感染した患者で観察された。
【０２０７】
本試験のパートＡのこれらの結果は、ＶＸ−２２２の７５０ｍｇ ＢＩＤで、予め３日間処置された５名の患者のウイルス薬物動態実験からの発見と一致する。
【０２０８】
安全性および耐容性結果
この試験のパートＡで集められた安全性および耐容性の情報は伏せられたままであり、故に、本発明で供される安全性の情報には、プラセボまたはＶＸ−２２２の投与後の患者についての収集データが含まれる。プラセボまたはＶＸ−２２２は、４種の用量群の全てで良好な耐容性であって、重症化または重篤な有害事象は報告されず、処置の中止も生じなかった。プラセボまたはＶＸ−２２２の投与後に報告された全ての有害事象は、軽度または中等症であった。用量群あたり少なくとも２名の患者に生じた最も多く報告された有害事象は、下痢、頭痛、悪心、無力症および発熱であった。
【０２０９】
実施例８．パートＣにおける実験ＶＸ−２２２−１０２からの薬物動態データ：ＶＸ−２２２での処置
実験１０１のパートＣにおいて、ＶＸ−２２２を、未処置の慢性Ｃ型肝炎を有する対象に７５０ｍｇ ｂ．ｉ．ｄ．の複数用量で３日間投与した。さらに、実験１０２のパートＡにおいて、ＶＸ−２２２を、未処置の慢性Ｃ型肝炎を有する対象に２５０ｍｇないし７５０ｍｇ ＢＩＤ複数用量および１５００ｍｇを１日１回、３日間投与した。
【０２１０】
実験１０１（最終データ）および実験１０２（予備データ）にて評価されたＶＸ−２２２のＰＫパラメーターを以下に概説する：
・ＡＵＣの蓄積指数は１．９０倍であり、Ｃｍａｘのそれは、１．７５倍であった。
・反復測定分析は、安定状態が処置の３日以内に達成されたことを示唆した。
・ＶＸ−２２２暴露は、平均Ｃｍａｘ、ＡＵＣτおよびＣτにおける増加により示される通り、用量増加に伴い増加した。ＶＸ−２２２暴露は、２５０ないし７５０ｍｇ ｂ．ｉ．ｄの範囲の用量でおよそ用量に比例して増加した。
・ＶＸ−２２２吸収はゆっくりであり、２ないし６時間の範囲の安定状態での平均ｔｍａｘであった。
・蓄積指数は、ＢＩＤレジメンに関して約２倍であった。ＱＤレジメンに関して、３日目の１５００ｍｇ ＶＸ−２２２への暴露は、１日目に観察されたものと同様であった。
・平均ｔ１／２は、全ての用量で変化しなかった。
・ＶＸ−２２２ ｔ１／２は約５時間であった。
・投与間隔の最後でのＶＸ−２２２濃度は、全ての対象についてインビトロでのＩＣ９０（３１９ｎｇ／ｍＬ）より高かった。
・一般に、対象におけるＶＸ−２２２暴露は、健康な対象と比較して未処置ＨＣＶ対象にて約２倍高かった。
【０２１１】
パートＣにおけるＶＸ−２２２臨床試験効果
実験１０１のパートＣの主目的は、遺伝子型１型慢性Ｃ型肝炎感染を有する未処置対象におけるＶＸ−２２２の薬理作用を評価することであった。７５０ｍｇ ｂ．ｉ．ｄ．で連続３日間投与したＶＸ−２２２の最終的な薬力学的パラメーターを以下に概説する：
・平均未変換ベースライン（１日目）ＨＣＶ血漿ＲＮＡレベルは、４９６２６００ＩＵ／ｍＬ（ｌｏｇ１０＝６．４９２７）であった。
・２ないし４日目のｌｏｇ１０投与前ＨＣＶ血漿ＲＮＡを用いて測定したベースラインからの平均最大減少は、−３．６７８４であった。投与前ＲＮＡレベルとｌｏｇ１０ＨＣＶ ＲＮＡにおける減少のの振幅との相関は、比較的低かった。
これらの結果は健康な対象と一致し、ＶＸ−２２２とＶＸ−９５０の共投与がＶＸ−２２２単独投与よりも２倍高かった。
【０２１２】
実施例９：薬物併用アッセイ：ＶＸ−９５０およびＶＸ−２２２
材料および方法
細胞
レプリコン細胞株Ｈｕｈ−７、Ｈｕｈ−７肝細胞癌細胞株由来のＥＴ細胞を、Ralf bartenschlager 博士(Bartenschlager, R.  Innovation: Hepatitis C virus replicons: potential role for drug development.  Nat. Rev. Drug Discov.  2002, 1, 911−916. Krieger, N.; Lohmann, V.; Bartenschlager, R.  Enhancement of hepatitis C virus RNA replication by cell culture−adaptive mutations.  J. Virol.  2001, 75, 4614−4624. Lohmann, V.; Korner, F.; Koch, J.−O.; Herian, U.; Theilmann, L.; Bartenschlager, R.  Replication of subgenomic hepatitis C virus RNAs in a hepatoma cell line.  Science.  1999, 285, 110−113.) (Reblikon GmbH, Gau−Odernheim, Germany）から入手した。該Ｈｕｈ−７ ＥＴ細胞株は、ネオマイシン遺伝子に加えて、ホタルルシフェラーゼ遺伝子に融合されたコピーを担持する、高度に細胞培養に適合したレプリコンｉ３８９Ｌｕｃ−ＵＢＩ−ｎｅｏ／ＮＳ３−３’／５．１コンストラクト（ＨＣＶ ＮＳ３およびＮＳ５遺伝子内の３つの適応変異の存在によっても特徴付けられる）を含む（Vrolijk, J.M.; Kaul, A.; Hansen, B.E.; Lohmann, V., Haagmans, B.L.; Schalm, S.W.; Bartenschlager, R.  A replicon−based bioassay for the measurement of interferons in patients with chronic hepatitis C.  Journal of Virol. Methods.  2003, 110, 201−209）。この細胞株は、ルシフェラーゼ活性を測定することにより、ＨＣＶ ＲＮＡ複製および形質転換の測定が可能である。ルシフェラーゼ活性は、これらの細胞におけるレプリコンＲＮＡレベルに密接に従うことが既報である（j. Virol.  2001, 75, 4614−4624, journal of virol. Methods.  2003, 110, 201−209）。ＤＭＥＭ（wisent inc., st−bruno, qc, canada）からなる細胞培養に用いられる培地に、ｓｕｐｐｌｅｍｅｎｔｅｄ  ｗｉｔｈ  最終濃度、１０％ウシ胎仔血清と１％ペニシリン／ストレプトマイシン、１％グルタミン、１％ピルビン酸ナトリウム、１％非必須アミノ酸および１８０μｇ／ｍｌのジェネテシン（Ｇ４１８）（invitrogen, burlington, on, canada）を補った。細胞を、３７℃、５％ＣＯ２雰囲気下でインキュベートし、サブコンフルエンスで週２回継代した。
【０２１３】
レプリコン細胞株Ｈｕｈ−７、Ｈｕｈ−７肝細胞癌細胞株由来の９−１３細胞を、Ralf bartenschlager 博士（reblikon gmbh, gau−odernheim, germany）から入手した。Ｈｕｈ−７、９−１３細胞株は、ＨＣＶサブゲノム レプリコンｐｆｋ ｉ３７７／ｎｓ３−３’／ｗｔを含み（Koutsoudakis, G.; Kaul, A.; Steinmann, E.; Kallis, S.; Lohmann, V.; Pietschmann, T.; Bartenschlager, R.  Characterization of the Early Steps of Hepatitis C Virus Infection by Using Luciferase Reporter Viruses.  J Virol. 2006, 80, 5308−5320）、リアルタイムＰＣＲアッセイに用いられる。定量的リアルタイムＰＣＲアッセイ（taqman）は、基本的に、レポーター色素およびクエンチャー色素がそれに結合される蛍光オリゴヌクレオチドプローブの使用と組み合わせた標準的ＰＣＲである。ＰＣＲ中に、該プローブは、プライマー部位の上流と下流の間の標的にアニーリングする。各伸張反応中、プローブは、Ｔａｑ ＤＮＡ ポリメラーゼの５’ヌクレアーゼ活性により切断される。これは、クエンチャー色素からレポーター色素を分離させ、レポーター色素の蛍光強度を増大させる。蛍光強度は、標的ＤＮＡの存在量に比例する。
【０２１４】
薬物併用アッセイ
ルシフェラーゼアッセイ（MacSynergy分析を用いる４日目の実験）。Ｈｕｈ−７、ＥＴレプリコン細胞を、乳白色の９６ウェル細胞培養マイクロタイタープレート中、１００μｌ培地中にサブコンフルエント密度（３ｘ１０３ 細胞／ウェル）で播種した。アッセイに用いる細胞培養培地は、Ｇ４１８とフェノールレッドを含まないこと以外は、上記と同様である。チオフェンと種々の濃度の異なる抗ＨＣＶ薬との組み合わせを含むストック溶液のマトリックスを深い９６ウェルプレートに製造した。３−４時間、３７℃でインキュベート後、該マトリックスストック溶液プレートからの化合物（１００μｌ）を、最終容量２００μｌを細胞に添加し、ここで、ある化合物は水平方向に増量させ、ある化合物は垂直方向に増量される。少なくとも４個の細胞プレートが各薬物−薬物相互作用試験に用いられ、各併用が少なくとも２回行われる。次いで、細胞はさらに、３７℃、５％ＣＯ２雰囲気下で４日間インキュベートされる。その後、培養培地を除去し、細胞を９５μｌのルシフェラーゼ緩衝液（緩衝洗浄液中のルシフェリン基質）の添加により細胞溶解させた。細胞溶解物を少なくとも１０分間室温でインキュベートし、直接照明から保護する。プレートを、照度計（Wallac Microbeta Trilux, Perkin Elmer（商標）, MA, USA）を用いてルシフェラーゼ数を読み出す。
【０２１５】
化合物の併用が相加的、相乗的または拮抗的であるかどうかを決定するために、チオフェンと他の各薬物との４日間の処置の薬物併用効果を、MacSynergy II（商標） program (Prichard, M.N.; Prichard, L.E.; Shipman, C. Strategic design and three−dimensional analysis of antiviral drug combinations.  Antimicrob. Agents Chemother.  1993, 37:540−545. Prichard, M.N. and Shipman, C.  A three−dimensional model to analyze drug−drug interactions.  Antiviral Res. 1990, 14:181−205）により計算する。この方法は、統計的確率に基づくＢｌｉｓｓの独立ヌル・モデルを用いて薬物の組合せを試験し、２つの薬物が複製を阻害するのに独立して作用すると仮定する。この方法を用いて、理論的相加相互作用が、単独で作用する個々の薬物の用量応答曲線から計算される。その後、予測された相加効果は、用量応答曲線における相違を明らかにするため、実験的に決定された効果から差し引かれる。相互作用が相加的であるとき、結果として得られる曲線は０％差の水平面で現される。平面よりも高いピークは全て、予想を上回る効果（相乗効果）を示す。反対に、平面より低いピークは、期待された効果未満（拮抗作用）を示す。実験的用量応答曲線周辺の信頼区間は、統計学的にデータを評価するのに用いられピークの面積は、もたらされる相乗効果または拮抗作用を定量するために計算される。
【０２１６】
単独で試験されるとき、全ての薬物の阻害作用の５０％阻害濃度（ＩＣ５０）もまた、１化合物当たり７ないし９種の濃度を用いて用量応答曲線から決定される。曲線は、非線形回帰分析法を用いるデータ点に適合され、ＩＣ５０は、GraphPad Prism software, version 2.0 （GraphPad Software Inc., San Diego, CA, USA）を用いて得られる曲線から補間される：
≦２５ｕＭ２％：相乗作用ほとんどなし
２５ｕＭ２％−５０ｕＭ２％：わずかな相乗作用
５０ｕＭ２％−１００ｕＭ２％：中程度の相乗作用
≧１００ｕＭ２％：強い相乗作用。
【０２１７】
リアルタイムＰＣＲアッセイ（ＨＣＶレプリコンウイルスＲＮＡ排除およびリバウンド実験）。
レプリコン細胞株Ｈｕｈ−７、９−１３細胞を、１２ウェル培養ディッシュ中、１ｍｌ容量で、各ウェル当たり３ｘ１０４細胞密度で播種する。該アッセイに用いる細胞培養培地は、１０％ウシ胎仔血清、１％ペニシリン／ストレプトマイシン、１％グルタミン、１％ピルビン酸ナトリウムおよび１％非必須アミノ酸を補ったＤＭＥＭである。３ないし４時間インキュベート後、化合物を、最終容量２ｍｌで種々の濃度で添加する。その後、細胞を３７℃、５％ＣＯ２雰囲気下でさらに１４日間インキュベートする。細胞を３ないし４日毎に剥がし、培地および阻害剤を補充し、細胞のサンプルをリアルタイムＰＣＲによりＲＮＡ定量のために集める。１４日間のインキュベート後、細胞を剥がし、抗ウイルス化合物を含まない新鮮な培地中に播く。１８日目に、細胞を剥がし、０．２５ｍｇ／ｍｌのＧ４１８抗生物質を含む新鮮な選択培地に播く。培養をＧ４１８の存在下で４２日目まで行い、細胞を３ないし４日毎に剥がし、該細胞サンプルを、リアルタイムＰＣＲによりＲＮＡ定量を行う。全ＲＮＡ（細胞およびウイルス起源）を、製造業者のプロトコールに従いQiagen RNeasy reagent (Qiagen Inc., Mississauga, ON, Canada, kit: 74106)を用いて抽出し、MMLV RT酵素を用いてｃＤＮＡ合成を行う。この工程は、ＰＣＲのリアルタイム検出のためのABI PRISM(登録商標) 7700 Sequence Detection System (Applied Biosystems, Foster City, CA, USA)で適当なオリゴヌクレオチド、ＴａｑｍａｎプローブおよびＤＮＡ ｔａｑ ポリメラーゼを用いてＰＣＲ反応により行われる。１８Ｓ ＲＮＡレベルが、各ウェルにおける総ＲＮＡ量の標準化に用いられる。
【０２１８】
単独で試験されるとき、全ての薬剤の阻害効果のための５０％および９０％阻害濃度（ＩＣ５０およびＩＣ９０）もまた、１化合物当たりデュプリケートで６種の濃度を用いる用量応答曲線から決定される。曲線は、非線形回帰分析法を用いるデータ点に適合され、ＩＣ５０およびＩＣ９０は、GraphPad Prism software, version 2.0 （GraphPad Software Inc., San Diego, CA, USA）を用いて得られる曲線から補間される。
【０２１９】
チオフェン化合物とウイルスプロテアーゼ阻害剤の併用実験
選択されたチオフェン化合物の併用実験では、上記の材料および方法を用いた。試験のために選択したＨＣＶ ＮＳ３ プロテアーゼ阻害剤はＶＸ−９５０である。Ｍａｃｓｙｎｅｒｇｙ（商標）ソフトウェアを用いるこれらの化合物の相乗効果の結果を、表４に記載する。
【表２１】
2013518124.tif 000025
【０２２０】
実施例１０：化合物１の任意のプロドラッグの合成
本明細書で用いる用語“ＲＴ（分）”は、化合物と関連するＬＣＭＳ保持時間（分）を意味する。ある特定の化合物のＮＭＲおよび質量分析データを、表５にまとめる。
化合物Ａの製造
【化４】
2013518124.tif 000026
５−（３，３−ジメチルブト−１−イニル）−３−［（トランス−４−ヒドロキシシクロヘキシル）−（４−トランス メチルシクロヘキサンカルボニル）アミノ］チオフェン−２−カルボン酸（化合物（１）、３００ｍｇ、０．６７ｍｍｏｌ）を、ジクロロメタン（ＤＣＭ、１５ｍＬ）に溶解した。これに、（２Ｓ）−２−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ）−３−メチル−ブタン酸 Ｂｏｃ−Ｌ−バリン（１７６ｍｇ、０．８１ｍｍｏｌ）、Ｎ，Ｎ−ジメチルピリジン−４−アミン（ＤＭＡＰ、８．２２ｍｇ、０．０６７ｍｍｏｌ）、トリエチルアミン（Ｅｔ３Ｎ、１３６ｍｇ、１８７μＬ、１．３５ｍｍｏｌ）、および３−（エチルイミノメチレンアミノ）−Ｎ，Ｎ−ジメチル−プロパン−１−アミン塩酸塩（ＥＤＣ、１２９ｍｇ、０．６７ｍｍｏｌ）を添加した。反応物を一晩撹拌した。次いで、反応混合物を濃縮し、酢酸エチル（ＥｔＯＡｃ）で希釈し、水で洗浄し、合わせた有機相を塩水で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥させた。濾過し、濃縮して黄色油状物を得て、それをカラムクロマトグラフィーにより精製した。次いで、得られた生成物を、ジオキサン中、４Ｎ ＨＣｌ（１５ｍＬ）で処理して、所望の化合物ＡをＨＣｌ塩として得た（１００ｍｇ、２６％）：ＭＳ：ｍ／ｚ（ｏｂｓ．）：５４５．４［Ｍ＋Ｈ］＋；保持時間：３．４５分；1H NMR (300 MHz, MeOH) δ 7.04 (s, 1H), 4.75−4.58 (m, 1H), 4.39 (dt, J＝14.5, 9.4 Hz, 1H), 3.85 (d, J＝4.4 Hz, 1H), 3.80−3.68 (m, 1H), 3.61−3.51 (m, 1H), 2.24 (dt, J＝14.0, 6.9 Hz, 1H), 2.01 (dd, J＝15.2, 7.3 Hz, 6H), 1.60 (dd, J＝28.5, 14.8 Hz, 9H), 1.34 (s, 9H), 1.18−0.99 (m, 3H), 0.81 (d, J＝6.5 Hz, 3H), 0.66 (dd, J＝25.3, 12.9 Hz, 1H)。
【０２２１】
化合物Ｂの製造
【化５】
2013518124.tif 000027
５−（３，３−ジメチルブト−１−イニル）−３−［（トランス ４−ヒドロキシシクロヘキシル）−（トランス ４−メチルシクロヘキサンカルボニル）アミノ］チオフェン−２−カルボン酸（化合物（１）、１００ｍｇ、０．１２ｍｍｏｌ）を、ジクロロメタン（ＤＣＭ、１０．０ｍＬ）に溶解し、０℃まで冷却した。テトラゾール（４．０ｍｇ、０．０５８ｍｍｏｌ）を添加し、次いでＮ−（ジ−ｔｅｒｔ−ブトキシホスファニル）−Ｎ−エチル−エタナミン（２８８ｍｇ、３２２μＬ、１．１６ｍｍｏｌ）を添加した。反応物を室温で一晩撹拌し、次いで−７８℃まで冷却した。３−クロロベンゼンカルボペルオキソ酸（3−Chlorobenzenecarboperoxoic acid）（ＭＣＰＢＡ）（９９．７ｍｇ、０．５８ｍｍｏｌ）を添加し、反応物を２時間撹拌し、次いでＮａ２ＳＯ３水溶液でクエンチした。混合物を酢酸エチルで抽出し、抽出物を水で洗浄した。有機相を集め、無色油状物を得て、それをＩＳＣＯシリカゲルクロマトグラフィーにより精製して、次工程に直接用いた。生成物にＣＨ２Ｃｌ２（５ｍＬ）および２，２，２−トリフルオロ酢酸（ＴＦＡ）（５ｍＬ）を添加した。反応物を２時間撹拌し、次いで濃縮し、生成物ＢをＨＰＬＣにより精製した：ＭＳ：ｍ／ｚ（ｏｂｓ．）：５２６．３９［Ｍ＋Ｈ］＋；保持時間：６．５１分；1H NMR (300 MHz, d6−DMSO) δ 7.18 (s, 1H), 4.29 (t, J＝11.8 Hz, 1H), 3.83 (s, 1H), 2.53 (d, J＝8.2 Hz, 3H), 1.84 (s, 2H), 1.75−1.33 (m, 7H), 1.30 (s, 9H), 1.27−1.09 (m, 3H), 0.90 (d, J＝12.9 Hz, 2H), 0.76 (d, J＝6.5 Hz, 2H), 0.70−0.47 (m, 2H); 31P NMR (121.5 MHz, d6−DMSO) δ −2.01 (s)。
【０２２２】
化合物Ｃの製造
【化６】
2013518124.tif 000028
ＣＨ２Ｃｌ２（１５ｍＬ）中、５−（３，３−ジメチルブト−１−イニル）−３−［（４−トランス−ヒドロキシシクロヘキシル）−（４−トランス−メチルシクロヘキサンカルボニル）アミノ］チオフェン−２−カルボン酸（化合物（１）、７５ｍｇ、０．１７ｍｍｏｌ）およびＮ−Ｂｏｃ−グリシン（４４．２ｍｇ、０．２５ｍｍｏｌ）の溶液に、３−（エチルイミノメチレンアミノ）−Ｎ，Ｎ−ジメチル−プロパン−１−アミン塩酸塩（ＥＤＣ）（３２．２ｍｇ、０．１７ｍｍｏｌ）、Ｎ，Ｎ−ジメチルピリジン−４−アミン（ＤＭＡＰ）（１０．３ｍｇ、０．０８４ｍｍｏｌ）およびＥｔ３Ｎ（３４ｍｇ、０．３３ｍｍｏｌ）を添加した。反応混合物を環境温度で一晩撹拌し、次いで反応混合物を蒸発させ、ＩＳＣＯシリカゲルクロマトグラフィーにより精製して、化合物（ｂ４）、［Ｏ−（Ｎ−ｔ−ブトキシカルボニル）−グリシル］−５−（３，３−ジメチルブト−１−イニル）−３−［（４−トランス−ヒドロキシシクロヘキシル）−（４−トランス−メチルシクロヘキサンカルボニル）アミノ］チオフェン−２−カルボン酸を得た：ＭＳ：ｍ／ｚ（ｏｂｓ．）：６０３．１７［Ｍ＋Ｈ］＋；保持時間：２．３１分。
【０２２３】
【化７】
2013518124.tif 000029
［Ｏ−（Ｎ−ｔ−ブトキシカルボニル）−グリシル］−５−（３，３−ジメチルブト−１−イニル）−３−［（４−トランス−ヒドロキシシクロヘキシル）−（４−トランス−メチルシクロヘキサンカルボニル）アミノ］チオフェン−２−カルボン酸（化合物（ｂ４）、４０ｍｇ、０．０６６ｍｍｏｌ）を、ジオキサン中、４Ｎ ＨＣｌ（１ｍＬ）で処理し、室温で一晩撹拌した。次いで、反応混合物を濃縮し、ＨＰＬＣにより精製して、化合物Ｃを得た（１１ｍｇ）：ＭＳ：ｍ／ｚ（ｏｂｓ．）：５０３．３５［Ｍ＋Ｈ］＋；保持時間：２．２４分。
【０２２４】
化合物Ｄの製造
【化８】
2013518124.tif 000030
化合物（ａ５）、［Ｏ−（Ｎ−ｔ−ブトキシカルボニル）−Ｄ−イソロイシル］−５−（３，３−ジメチルブト−１−イニル）−３−［（４−トランス−ヒドロキシシクロヘキシル）−（４−トランス−メチルシクロヘキサンカルボニル）アミノ］チオフェン−２−カルボン酸（Ｂｏｃ−Ｄ−イソロイシンから上記の化合物１および４に記載の通りに製造）を、ジオキサン中、４Ｎ ＨＣｌ（１０ｍＬ）で処理し、室温で一晩撹拌した。次いで、反応混合物を濃縮し、ＨＰＬＣにより精製して化合物Ｄを得た：ＭＳ：ｍ／ｚ（ｏｂｓ．）：５５９．４［Ｍ＋Ｈ］＋；保持時間：２．３９分。
【０２２５】
化合物Ｅの製造
【化９】
2013518124.tif 000031
化合物（ａ６）、［Ｏ−（Ｎ−ｔ−ブトキシカルボニル）−Ｄ−バリニル］−５−（３，３−ジメチルブト−１−イニル）−３−［（４−トランス−ヒドロキシシクロヘキシル）−（４−トランス−メチルシクロヘキサンカルボニル）アミノ］チオフェン−２−カルボン酸（３０ｍｇ）（Ｂｏｃ−Ｄ−バリンから上記の化合物１および４に記載の通りに製造）を、ジオキサン中、４Ｎ ＨＣｌ（１０ｍＬ）で処理し、室温で一晩撹拌した。次いで、反応混合物を濃縮し、ＨＰＬＣにより精製して化合物Ｅを得た：ＭＳ：ｍ／ｚ（ｏｂｓ．）：５４５．３９［Ｍ＋Ｈ］＋；保持時間：２．３５分。
【０２２６】
化合物Ｆの製造
【化１０】
2013518124.tif 000032
化合物（ａ８）、（Ｏ−（Ｎ−ｔ−ブトキシカルボニル）−Ｌ−イソロイシル）−５−（３，３−ジメチルブト−１−イニル）−３−［（４−トランス−ヒドロキシシクロヘキシル）−（４−トランス−メチルシクロヘキサンカルボニル）アミノ］チオフェン−２−カルボン酸（Ｂｏｃ−Ｌ−イソロイシンから上記化合物ＡおよびＣに記載の通りに製造）（３５ｍｇ）を、ジオキサン中、４Ｎ ＨＣｌ（１０ｍＬ）で処理し、室温で一晩撹拌した。次いで、反応混合物を濃縮し、ＨＰＬＣにより精製して、化合物８を得た：ＭＳ：ｍ／ｚ（ｏｂｓ．）：５５９．４７［Ｍ＋Ｈ］＋；保持時間：３．２分。
【０２２７】
化合物Ｇの製造
【化１１】
2013518124.tif 000033
化合物（ａ９）、（Ｏ−（Ｎ−ｔ−ブトキシカルボニル）−Ｌ−アラニル）−５−（３，３−ジメチルブト−１−イニル）−３−［（４−トランス−ヒドロキシシクロヘキシル）−（４−トランス−メチルシクロヘキサンカルボニル）アミノ］チオフェン−２−カルボン酸（Ｂｏｃ−Ｌ−アラニンから上記化合物ＡおよびＣに記載の通りに製造）（２５ｍｇ）を、ジオキサン中、４Ｎ ＨＣｌで処理し、室温で一晩撹拌した。次いで、反応混合物を濃縮し、ＨＰＬＣにより精製して化合物Ｇを得た：ＭＳ：ｍ／ｚ（ｏｂｓ．）：５１７．４３［Ｍ＋Ｈ］＋；保持時間：２．９９分。
【０２２８】
化合物Ｈの製造
【化１２】
2013518124.tif 000034
化合物（ａ１０）、（Ｏ−（Ｎ−ｔ−ブトキシカルボニル）−Ｄ−アラニル）−５−（３，３−ジメチルブト−１−イニル）−３−［（４−トランス−ヒドロキシシクロヘキシル）−（４−トランス−メチルシクロヘキサンカルボニル）アミノ］チオフェン−２−カルボン酸（Ｂｏｃ−Ｄ−アラニンから上記化合物１および４に記載の通りに製造）（３５ｍｇ、０．０５８ｍｍｏｌ）を、ジオキサン中、４Ｎ ＨＣｌ（１０ｍＬ）で処理し、室温で一晩撹拌した。次いで、反応混合物を濃縮し、ＨＰＬＣにより精製して化合物Ｈを得た：ＭＳ：ｍ／ｚ（ｏｂｓ．）：５１７．４３［Ｍ＋Ｈ］＋；保持時間：３．０分。
【０２２９】
【表２２】
2013518124.tif 000035
【０２３０】
実施例１０：化合物１のプロドラッグのＰＫパラメーター
ＰＫパラメーターが決定されるべきプロドラッグは、０．５％ｍｃ／０．５％トゥイーン ８０／９９％水中の溶液として製剤され得て、３ｍｇ／ｋｇ用量でラットに強制経口される。実験の前日にラットを計測する。ラットの血漿を、Instech自動血液サンプリング装置を用いて、投与前、および投与後１５分、３０分、１時間、２時間、３時間、４時間、６時間、８時間、１２時間および２４時間にサンプル採取する。血液をＫ２−ＥＤＴＡを含むチューブに集め、１１０μｌの血漿を分析のために抽出する。ラットは自由に餌を摂り、標準的なIACUCおよびSOPプロトコールが適用される。血漿サンプルおよび用量サンプルは、プロドラッグ化合物および活性代謝産物の両方に関してＬＣ／ＭＳ／ＭＳを用いて分析される。各対象に関する両分析物のＰＫパラメーターを、プロドラッグの定量した用量を用いて計算する。
【０２３１】
化合物Ｈ（図９にて“化合物１０”と称される、化合物１のプロドラッグ）のＰＫパラメーターを、上記の通りに測定し、図９に記載した。図９に示す通り、化合物ＨのＯ−アラニル基は、インビボで、ＯＨ活性代謝産物に変換される。
【図１】
2013518124.tif 000036
【図２】
2013518124.tif 000037
【図３】
2013518124.tif 000038
【図４】
2013518124.tif 000039
【図５】
2013518124.tif 000040
【図６】
2013518124.tif 000041
【図７】
2013518124.tif 000042
【図８】
2013518124.tif 000043
【図９】
2013518124.tif 000044
【手続補正書】
【提出日】平成24年10月25日(2012.10.25)
【手続補正１】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】配列表
【補正方法】追加
【補正の内容】
【配列表】
2013518124000001.app
【国際調査報告】
2013518124.tif 000045
2013518124.tif 000046
2013518124.tif 000047