(57)【要約】  本発明は、対象物を清浄するための方法であって、（ａ）少なくとも一つの界面活性剤と少なくとも一つの酵素を含む第一の浸漬溶液を対象物に分散させ、続いて第一の浸漬期間を行なう工程（ここで少なくとも一つの界面活性剤と少なくとも一つの酵素の濃度は、次の洗浄溶液中のこれらの濃度と比較して高い）；（ｂ）さらに対象物に水を添加して洗浄溶液を得て、続いて洗浄期間を行なう工程；及び（ｃ）対象物をリンスする行程を含み、ここで前記方法は、（ｉ）少なくとも１の相対的洗浄性能（ＲＷＰ）；（ｉｉ）１超の方法相関清浄指数（ＰＲＣＩ）；又は（ｉｉｉ）少なくとも１の相対的洗浄性能（ＲＷＰ）かつ１超の方法相関清浄指数（ＰＲＣＩ）のいずれかに対応する洗浄性能を有する方法に関する。【特許請求の範囲】
【請求項１】
対象物を清浄するための方法であって、
ａ．少なくとも一つの界面活性剤と少なくとも一つの酵素を含む第一の浸漬溶液を対象物に分散させ、続いて第一の浸漬期間であって、少なくとも一つの界面活性剤と少なくとも一つの酵素の濃度が次の洗浄溶液中のこれらの濃度と比較して高い浸漬期間、を行なう工程；
ｂ．さらに対象物に水を添加して洗浄溶液を得て、続いて洗浄期間を行なう工程；及び
ｃ．対象物をリンスする行程
を含み、
ここで、前記方法は、（ｉ）少なくとも１の相対的洗浄性能（ＲＷＰ）；（ｉｉ）１超の方法相関清浄指数（ＰＲＣＩ）；又は（ｉｉｉ）少なくとも１の相対的洗浄性能（ＲＷＰ）かつ１超の方法相関清浄指数（ＰＲＣＩ）のいずれかに対応する洗浄性能を有する、方法。
【請求項２】
前記浸漬溶液を対象物に分散させ、そして湿潤させる目的の最初の撹拌後、浸漬期間中に、撹拌又は他の機械的作用を施用しない、請求項１に記載の方法。
【請求項３】
撹拌又は他の機械的作用を、洗浄期間中に施用する、請求項１又は２に記載の方法。
【請求項４】
前記洗浄溶液中の少なくとも一つの前記酵素の濃度が、少なくとも１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９又は２０倍に前記浸漬溶液を希釈することにより得られる、請求項１〜３のいずれか１項に記載の方法。
【請求項５】
前記浸漬期間が、１〜１２０分；２〜６０分；３〜３０分；４〜１５分；又は５〜１０分である、請求項１〜４のいずれか１項に記載の方法。
【請求項６】
前記洗浄期間が、５〜１２０分；５〜９０分；１０〜６０分；１０〜３０分；又は１５〜２０分である、請求項１〜５のいずれか１項に記載の方法。
【請求項７】
前記浸漬期間における温度が、３５℃未満である、請求項１〜６のいずれか１項に記載の方法。
【請求項８】
前記洗浄期間における温度が、３５℃未満である、請求項１〜７のいずれか１項に記載の方法。
【請求項９】
少なくとも一つの前記酵素が、ヘミセルラーゼ、ペルオキシダーゼ、プロテアーゼ、セルラーゼ、キシラナーゼ、リパーゼ、ホスホリパーゼ、エステラーゼ、クチナーゼ、ペクチナーゼ、マンナナーゼ、ペクチン酸リアーゼ、ケラチナーゼ、レダクターゼ、オキシダーゼ、フェノールオキシダーゼ、リポキシゲナーゼ、リグニナーゼ、プルラナーゼ、タンナーゼ、ペントサナーゼ、マラナーゼ、ベータ−グルカナーゼ、アラビノシダーゼ、ヒアルロニダーゼ、コンドロイチナーゼ、ラッカーゼ、及びアミラーゼからなる群から選択される、あるいはこれらの任意の組み合わせである、請求項１〜８のいずれか１項に記載の方法。
【請求項１０】
少なくとも一つの前記酵素が、アミラーゼ、セルラーゼ、リパーゼ及びプロテアーゼからなる混合物である、請求項９に記載の方法。
【請求項１１】
少なくとも一つの前記酵素が、布地１ｇあたり、０〜２０、０．００００１〜１０、０．０００１〜５、０．０００１〜２．５、０．００１〜２、０．０１〜１、０．１〜０．５ミリグラム酵素タンパク質の量において用いることができる、請求項１〜１０のいずれか１項に記載の方法。
【請求項１２】
少なくとも一つの前記界面活性剤が、陰イオン性界面活性剤；陽イオン性界面活性剤；双性イオン性界面活性剤；両性界面活性剤；非イオン性界面活性剤からなる群から選択される、あるいはこれらの任意の組み合わせである、請求項１〜１１のいずれか１項に記載の方法。
【請求項１３】
少なくとも一つの前記界面活性剤の濃度が、布地１ｇあたり、０〜５００、０．００００１〜１００、０．０００１〜５０、０．０００１〜４０、０．００１〜３０、０．０１〜２０、０．１〜１５、１〜１０ミリグラムである、請求項１〜１２のいずれか１項に記載の方法。
【請求項１４】
前記対象物が織物／布地である、請求項１〜１３のいずれか１項に記載の方法。
【請求項１５】
洗濯物を清浄するための、請求項１〜１４のいずれか１項に記載の方法の使用。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
発明の分野
本発明は、冷水洗浄のための洗浄方法に関する。特に本発明は、少なくとも一つの酵素及び少なくとも一つの界面活性剤を含む濃縮液体浸漬洗浄方法に関する。
【背景技術】
【０００２】
関連技術の説明
過去１０年間、当該産業分野において、多くの労力が低温洗浄条件に好適な洗剤組成物を開発することに費やされてきた。洗浄温度が低い場合に直面するいくつかの課題は、とりわけ多くの界面活性剤が冷水に溶解しづらいことであり、従って布地を湿潤させることはより困難になる。入手可能な多種多様の洗剤組成物成分、例えば界面活性剤は、洗剤製剤の分野における当業者のために存在するが、しかしながら、これらの多くは、日常的な使用、特に、例えば家庭用洗濯製品などの低価格製品に適さない特殊化学薬品である。
【０００３】
低温域用の洗剤組成物製品の開発における別の課題においては、過度な期待のために温洗浄条件と冷洗浄条件の双方において、洗剤成分が最適に機能する必要がある。それ故、これらの機能が温度変化に対して頑強である化学薬品のみが、かかる製品化への道を発見する。
【０００４】
現在入手可能な洗剤組成物製品は、２０℃と比較して４０℃において高い洗浄性能を有し、温度が２０℃から１０℃に下がる場合、洗剤力はより悪くなる。従って、化学的性質単独により洗浄温度の低下に伴う洗浄力の減少を補うことは、これまで不可能であった。
【０００５】
特定の種類の汚れや染みは、通常の洗浄方法おいて除去することが困難であり、個別の染み除去手段、例えば事前の染み抜きが場合によっては行なわれる。しかしながら、かかる処理は、清浄される対象物を別々に取り扱うことを必要とし、追加の清浄工程を課す。現在用いられる洗浄方法を強化及び／又は変化させる例を、下記に列挙する。
【０００６】
国際公開第０７／００８７７６号は、市販の織物ケア製品や食器ケア製品の性能を増大及び／又は補足し、そして清浄便益を提供するための、単回用量酵素錠剤に関する。かかる便益は、通常及び／又は標準的な洗浄温度や従来の洗浄サイクル時間を用いた場合に実現され、その洗浄性能を改善させる。
【０００７】
国際公開第０８／１０１９５８号は、酵素を含む泡組成物が織物上に分散する、織物を洗濯するための方法に関する。保持期間後、水と任意で洗剤組成物を添加し、織物を通常の洗浄条件下で洗浄する。
【０００８】
米国特許出願第２００８／０２７６９７２号は、酸化剤についての洗浄サイクルに関し、ここで第一の洗浄液と続く第二の洗浄液は洗浄区域に分注される。前記洗浄液は、洗剤洗浄液又は酸化洗浄液のいずれかである。
【０００９】
洗浄温度を低下させ、同時に少なくとも同レベルの洗浄性能を維持するという要望は、従って、洗剤組成物を製剤化する方法を探索することのみにより適わない、あるいは満たされないが、現在の洗浄方法の再考及び変換を考慮しなければならない。
【００１０】
特定の洗剤組成物成分の活性は、温度が低下すると著しく減少し、洗浄温度よりも高い温度における温度活性化が必要となる。
【００１１】
当該技術分野において、洗浄方法を最適化することは有利であり、それにより、同時に清浄効率を減少させることなく、特に全体のエネルギー消費を減少したいという要望の高まりを考慮しつつ、染み除去能を改善することができる。
【発明の概要】
【課題を解決するための手段】
【００１２】
発明の概要
発明者らは、最初に濃縮界面活性剤及び酵素浸漬、その後に主洗浄を含む洗浄方法を開発し、驚くべきことにこの濃縮液体浸漬洗浄方法が、大変広範な範囲の染みに関する染み除去能の有意な増加、及び改善された一般的な洗浄性能を示すことを発見した。変更した洗浄方法と組み合わせた、洗剤組成物のための選択された化学薬品の使用は、広範な温度、特に低温又は冷温において洗浄性能が改善したことを示した。低温濃縮浸漬洗浄方法の清浄効率は、現在用いられる温水洗浄方法に適合するレベルまで増加した。
【００１３】
多くの染みは、除去するために様々な種類の清浄化学薬品及び清浄方法を必要とする。多くの様々な種類の汚れ（soling）は、しばしば同一のウォッシュロード（wash load）が寄せ集められているので、これはジレンマを与える。通常の洗浄のための洗剤は、同一の時間、同一の方法において多くの様々な染みの種類を清浄することに関する妥協策として製剤化されている。
【００１４】
通常の洗浄方法では、用いられる化学薬品の量は、洗浄性能の増加と同時に増加し得る。特定のレベルにおいて、費用−便益バランスがもはや好ましくなくなる、あるいは更なる染み除去能が観察されないプラトーに達する、あるいは洗浄力は減少しさえする。それ故、添加する化学薬品の使用を最適化することは、望ましい。濃縮浸漬洗浄方法は、この上限を引き上げ、特に低温洗浄条件における優れた洗浄性能について開拓する。この洗浄方法では、現在用いられている化学薬品、例えば酵素を含む、あるいは含まずに製剤化される市販の洗剤が用いられ、そして増加した洗浄性能をもたらすことができる。
【００１５】
第一の態様では、本発明は、対象物を清浄するための方法であって、（ａ）少なくとも一つの界面活性剤と少なくとも一つの酵素を含む第一の浸漬溶液を対象物に分散させ、続いて第一の浸漬期間を行ない（ここで、少なくとも一つの界面活性剤と少なくとも一つの酵素の濃度は、次の洗浄溶液中のこれらの濃度と比較して高い）；（ｂ）さらに対象物に水を添加して洗浄溶液を得て、続いて洗浄期間を行ない；及び（ｃ）対象物をリンスする行程を含み、ここで、前記方法が（ｉ）少なくとも１の相対的洗浄性能（ＲＷＰ）；（ｉｉ）１超の方法相関清浄指数（ＰＲＣＩ）；又は（ｉｉｉ）少なくとも１の相対的洗浄性能（ＲＷＰ）かつ１超の方法相関清浄指数（ＰＲＣＩ）のいずれかに対応する洗浄性能を有する方法に関する。
【００１６】
第二の態様では、本発明は洗濯物を清浄するための方法の使用に関する。
【発明を実施するための形態】
【００１７】
発明の詳細な説明
本発明は、通常の洗浄方法と比較して改善された洗浄性能を有し、同時に低温及び／又は冷温で洗浄するための、かつ少ない洗剤と水を用いるための手段を提供する新規洗浄方法に関し、それ故、全体のエネルギー消費を減少させることができる。
【００１８】
洗浄方法は、同一の温度において行なわれる通常の洗浄と比較して改善された清浄効果を示すだけでなく、驚くべきことに、２０℃で行なわれる場合に、４０℃における「通常の強力な洗浄」のレベルと一致する全体的な洗浄性能を示す。この効果は、低下した温度、又は低い温度において通常物理的状態が変化する染み、例えばラードや皮脂、及び冷たい条件において硬くなり、結晶化し、温かい条件（４０℃以上）において溶解する他の脂肪質などにおいてさえ観察された。
【００１９】
本明細書に記載する方法には、多くの便益が存在する。濃縮液体浸漬洗浄方法は、低温における改善された洗浄力に起因する、通常の洗浄方法と比較して減少したエネルギー消費により特徴付けられる。洗浄水を加熱するためのエネルギーは、これまで、洗浄方法の最もエネルギーを消費する部分である。撹拌又は他の機械的作用を含む期間が短い濃縮浸漬期間に起因して、全体的な洗浄時間を削ることができ、水の総消費量は減少し、対象物の機械的摩耗は軽減される。
【００２０】
定義
ベンチマーク：本発明の方法に関して、用語「ベンチマーク」又は「ベンチマーク清浄」とは、同一温度における通常の洗浄において、問題となる方法に用いられるように、同一の洗剤／洗浄溶液を用いることに起因する清浄性能を意味するものとして、双方ともに本明細書で定義される。これは、デルタ減少値として表される（下記の定義を参照のこと）。本実施例では、多くの場合、列ａにおいて、ベンチマークに関する結果を示す。
【００２１】
濃縮浸漬洗浄方法：用語「濃縮浸漬洗浄」、「濃縮浸漬洗浄方法」、「２段階洗浄方法」、及び「液体濃縮浸漬洗浄」は、同義語として本明細書で定義される。用語「液体」は、浸漬が、非液体組成物、例えば泡ではなく、溶液組成物を対象物に施用することにより行なわれることを強調するために、例えば「液体濃縮浸漬洗浄」に含まれてもよい。
【００２２】
デルタ減少値（ΔＲｅｍ）：用語「デルタ減少」又は「デルタ減少値」とは、４６０ｎｍにおける反射又は減少測定の結果として本明細書で定義される。材料標本は、バックグラウンドとして同様の色の一つの材料標本、好ましくは、繰り返し洗浄からの材料標本とともに測定される。各材料標本種類を代表する材料標本は、洗浄の前に測定される。デルタ減少は、未洗浄の材料標本の減少値を引いた、洗浄した材料標本の減少値である。
【００２３】
酵素関連清浄指数（ＥＲＣＩ）：用語「酵素関連清浄指数」（所定の温度における）とは、以下の式：［ＥＲＣＩ（Ｘ℃）＝追加の酵素を含む洗浄方法のΔＲｅｍ（Ｘ℃）／追加の酵素を含まない同一の洗浄方法のΔＲｅｍ（Ｘ℃）］に従って、同一の温度（Ｘ℃）で追加の酵素を含まない同一の洗剤を用いた同一の洗浄方法の清浄性能と比較した、追加の酵素の存在下の洗浄方法の清浄性能として、本明細書で定義される。
【００２４】
通常の洗浄方法：用語「通常の洗浄」又は「通常の洗浄方法」とは、撹拌の間、対象物を洗浄溶液中に沈め、続いてリンスすることにより、対象物を清浄する、１行程の洗浄方法として、本明細書で定義する。
【００２５】
方法相関清浄指数（ＰＲＣＩ）：用語「方法相関清浄指数」（所定の温度における）とは、ベンチマークの清浄性能と比較した、その温度における本発明による洗浄方法の清浄性能として本明細書で定義される。所定の温度（Ｘ℃）における、用いられる洗剤成分を用いた本発明による洗浄方法の清浄性能は、以下の式：［ＰＲＣＩ（Ｘ℃）＝本発明による洗浄方法のΔＲｅｍ（Ｘ℃）／通常の洗浄方法のΔＲｅｍ（Ｘ℃）］に従って、同一の温度（Ｘ℃）で同一のレベルの洗浄溶液において施用される同一の洗剤成分を用いて行なわれる通常の洗浄方法の清浄性能と比較される。
【００２６】
相対的洗浄性能（ＲＷＰ）：用語「相対的洗浄性能」とは、同一のレベルの洗浄溶液において同一の洗剤成分を用いた４０℃における通常の洗浄方法の洗浄性能と比較して、所定の温度（Ｘ℃）で行なわれる本発明による洗浄方法の洗浄性能として、本明細書で定義される。ＲＷＰは、以下の式：［ＲＷＰ（Ｘ℃）＝本発明による洗浄方法のΔＲｅｍ（Ｘ℃）／通常の洗浄方法のΔＲｅｍ（４０℃）］に従って計算される。
【００２７】
発明の方法
本発明は、対象物を清浄するための方法であって、（ａ）少なくとも一つの界面活性剤と少なくとも一つの酵素を含む第一の浸漬溶液を対象物に分散させ、続いて第一の浸漬期間を行なう工程（ここで、少なくとも一つの界面活性剤と少なくとも一つの酵素の濃度は、次の洗浄溶液中のこれらの濃度と比較して高い）；（ｂ）さらに対象物に水を添加して洗浄溶液を得て、続いて洗浄期間を行なう工程；及び（ｃ）対象物をリンスする行程を含み、ここで、前記方法は（ｉ）少なくとも１の相対的洗浄性能（ＲＷＰ）；（ｉｉ）１超の方法相関清浄指数（ＰＲＣＩ）；又は（ｉｉｉ）少なくとも１の相対的洗浄性能（ＲＷＰ）かつ１超の方法相関清浄指数（ＰＲＣＩ）のいずれかに対応する洗浄性能を有する方法に関する。
【００２８】
実施形態によっては、本発明は、前記対象物が織物／布地である方法に関する。
【００２９】
前記洗浄方法は、清浄される対象物、並びに浸漬溶液及び洗浄溶液が適合し得る容器又は任意の好適な洗浄デバイス中で、手動で又は機械的に行なわれてもよい。
【００３０】
浸漬
清浄される対象物及び浸漬溶液を、好適な容器又は洗浄デバイスに添加し、第一の工程において、対象物を浸漬溶液に浸漬する。該浸漬溶液は、少なくとも一つの界面活性剤と少なくとも一つの酵素を含む水性溶液である。少なくとも一つの界面活性剤と少なくとも一つの酵素を、別々に、あるいは混合物として添加してもよい。これらを、完全に製剤化された洗剤組成物に含んで添加してもよい。少なくとも一つの酵素を、洗剤組成物が酵素を含む、あるいは含まないで製剤化され得る洗剤組成物と一緒に更に添加してもよい。
【００３１】
本洗浄方法は、少なくとも一つの酵素が浸漬溶液中に存在することを要求する。実施形態によっては、浸漬溶液中に少なくとも２、少なくとも３、少なくとも４、少なくとも５、少なくとも６、少なくとも７、少なくとも８、少なくとも９、又は少なくとも１０の酵素が存在してもよい。典型的には、選択される酵素の混合物が用いられる。浸漬溶液中に含まれる酵素の選択は、処理される染みの種類に依存する。実施形態によっては、本発明は、少なくとも一つの前記酵素が、ヘミセルラーゼ、ペルオキシダーゼ、プロテアーゼ、セルラーゼ、キシラナーゼ、リパーゼ、ホスホリパーゼ、エステラーゼ、クチナーゼ、ペクチナーゼ、マンナナーゼ、ペクチン酸リアーゼ、ケラチナーゼ、レダクターゼ、オキシダーゼ、フェノールオキシダーゼ、リポキシゲナーゼ、リグニナーゼ、プルラナーゼ、タンナーゼ、ペントサナーゼ、マラナーゼ、ベータ−グルカナーゼ、アラビノシダーゼ、ヒアルロニダーゼ、コンドロイチナーゼ、ラッカーゼ、及びアミラーゼからなる群から選択される、あるいはこれらの任意の組み合わせである方法に関する。
【００３２】
他の実施形態では、本発明は、少なくとも一つの酵素が、アミラーゼ、セルラーゼ、リパーゼ及びプロテアーゼを含む、あるいはアミラーゼ、セルラーゼ、リパーゼ及びプロテアーゼからなる混合物である方法に関する。
【００３３】
ヘミセルラーゼ：ヘミセルラーゼは、植物の細胞壁中の非でんぷん性多糖類の最も複雑な群である。これらは、しばしば高度に分岐し、他の細胞壁構造と結合する、キシロース、アラビノース、ガラクトース、マンノース及び／又はグルコースのポリマーからなる。本発明のヘミセルラーゼは、それ故、キシラン分解活性、アラビノース分解（arabinolytic）活性、ガラクトース分解（galactolytic）活性及び／又はマンノース分解（mannolytic）活性を有する酵素を含む。本発明のヘミセルラーゼは、例えば、キシラナーゼ（ＥＣ３．２．１．８、ＥＣ３．２．１．３２、及びＥＣ３．２．１．１３６）、キシログルカナーゼ（ＥＣ３．２．１．４及びＥＣ３．２．１．１５１）、アラビノフラノシダーゼ（ＥＣ３．２．１．５５）、アセチルキシランエステラーゼ（ＥＣ３．１．１．７２）、グルクロニダーゼ（ＥＣ３．２．１．３１、ＥＣ３．２．１．５６、ＥＣ３．２．１．１２８及びＥＣ３．２．１．１３９）、グルカノヒドラーゼ（ＥＣ３．２．１．１１、ＥＣ３．２．１．８３及びＥＣ３．２．１．７３）、フェルラ酸エステラーゼ（ＥＣ３．１．１．７３）、クマリン酸エステラーゼ（ＥＣ３．１．１．７３）、マンナナーゼ（ＥＣ３．２．１．２５；ＥＣ３．２．１．７８及びＥＣ３．２．１．１０１）、アラビノシダーゼ（ＥＣ３．２．１．８８）、アラビナナーゼ（ＥＣ３．２．１．９９）、ガラクタナーゼ（ＥＣ３．２．１．８９、ＥＣ３．２．１．２３及びＥＣ３．２．１．１６４）及びリケナーゼ（ＥＣ３．２．１．７３）から選択されてもよい。しかしながら、これは、全てを列挙したリストとして解釈されない。
【００３４】
マンナナーゼは、本発明に関する好ましいヘミセルラーゼである。マンナナーゼは、ガラクトマンナンで構成されているバイオポリマーを加水分解する。マンナンを含む染みは、しばしばグアーガムやローカストビーンガムを含み、これは食品や化粧品中の安定剤として広く用いられる。好適なマンナナーゼは、細菌起源又は真菌起源のものを含む。化学的に又は遺伝子的に改変された変異体は、含まれる。好ましい実施形態では、マンナナーゼは、バチルス属（Bacillus）の株、特に国際公開第９９／６４６１９号（参照により本明細書に組み込まれる）の配列番号２又は配列番号５の位置３１−３３０に開示されるバチルス属種（Bacillus sp）Ｉ６３３、又はバチルス・アガラドハエレンス（Bacillus agaradhaerens）、例えばＤＳＭ８７２１株種に由来する。好適な市販のマンナナーゼは、Novozymes A/Sにより製造されるＭａｎｎａｗａｙ（登録商標）、又はGenencor a Danisco divisionにより製造されるＰｕｒａｂｒｉｔｅ（商標）である。キシラナーゼは、本発明に関する好ましいヘミセルラーゼである。好適な市販のキシラナーゼは、Ｐｕｌｐｚｙｍｅ（登録商標）ＨＣ（Novozymes A/Sから入手可能）である。
【００３５】
ペクチナーゼ：ペクチナーゼ又はペクチン分解酵素なる用語は、ペクチナーゼがグリコシド結合の切断を触媒する酵素の群である、当該技術により定義される任意のペクチナーゼ酵素を含むことを意図する。基本的には、ペクチン分解酵素の３つの種類として、ペクチンからメトキシル残基の除去のみをするペクチンエステラーゼ、広い範囲の脱ポリマー酵素、及びプロトペクチンを可溶化し、ペクチンを形成するプロトペクチナーゼ（Sakai et al., (1993) Advances in Applied Microbiology vol.39 pp213-294）が存在する。本発明に有用なペクチナーゼ又はペクチン分解酵素の例としては、ペクチン酸リアーゼ（ＥＣ４．２．２．２及びＥＣ４．２．２．９）、ポリガラクツロナーゼ（ＥＣ３．２．１．１５及びＥＣ３．２．１．６７）、ポリメチルガラクツロナーゼ、ペクチンリアーゼ（ＥＣ４．２．２．１０）、ガラクタナーゼ（ＥＣ３．２．１．８９）、アラビナナーゼ（ＥＣ３．２．１．９９）及び／又はペクチンエステラーゼ（ＥＣ３．１．１．１１）が挙げられる。ペクチン性の汚れ又は染みは、他のペクチン含む物質を排除することなく、例えばペクチン酸、ポリガラクツロン酸、及び／又は高度又は低度にエステル化し得るペクチンからなる。これらの基質は、一般的に、草、野菜（例えばホウレンソウ、ビート、ニンジン、トマト）、果物（例えばサクランボ及び液果類の全ての種類、モモ、アプリコット、マンゴー、バナナ、及びブドウ）を含む植物由来の汚れ、並びに植物原料由来の飲み物（例えばワイン、ビール、フルーツジュース）、加えて、トマトソース、ゼリー、又はジャムに由来するの染みに存在する。
【００３６】
好適なペクチン分解酵素は、国際公開第９９／２７０８３号、国際公開第９９／２７０８４号、国際公開第００／５５３０９号及び国際公開第０２／０９２７４１号に記載されるものを含む。好適なペクチン酸リアーゼは、細菌由来又は真菌由来のものを含む。化学的又は遺伝子的に改変された変異体を含む。好ましい実施形態では、ペクチン酸リアーゼは、バチルス属（Bacillus）の株、特にバチルス・サブチリス（Bacillus substilis）の株、特に国際公開第０２／０９２７４１号（参照により本明細書に組み込まれる）の配列番号２に開示されるバチルス・サブチリス（Bacillus subtilis）ＤＳＭ１４２１８若しくは実施例６に開示されるその変異体、又は国際公開第０３／０９５６３８号（参照により本明細書に組み込まれる）開示される変異体に由来する。あるいは、ペクチン酸リアーゼは、バチルス・リケニホルミス（Bacillus licheniformis）の株由来、特に国際公開第９９／２７０８３号（参照により本明細書に組み込まれる）中の配列番号８として開示されるペクチン酸リアーゼ、又は国際公開第０２／０６４４２号に記載されるこの変異体である。好適な市販のペクチン酸リアーゼとしては、Novozymes A/Sにより製造されるＰｅｃｔａｗａｙ（登録商標）又はＰｅｃｔａｗａｓｈ（登録商標）が挙げられる。
【００３７】
アミラーゼ：一般的なでんぷんを含む染みとしては、他のでんぷんを含む物質を排除することなく、例えばコメ、ジャガイモ、シリアル、麺類、パスタ及び／又はポリッジが挙げられる。でんぷんの染みは、通常肉眼で見ることはできないが、でんぷんの染みは、洗浄溶液中で粒子状汚れに対して糊のように作用する傾向がある。アミラーゼは、織物上での変色や皿上でのでんぷんフィルム形成を引き起こすでんぷん沈着の蓄積を予防する。アミラーゼとしては、例えば細菌又は真菌由来のアルファ−アミラーゼ（ＥＣ３．２．１．１）、ベータ−アミラーゼ（ＥＣ３．２．１．２）及び／又はグルコアミラーゼ（ＥＣ３．２．１．３）が挙げられる。かかるアミラーゼの化学的又は遺伝子的に改変された変異体は、これに関連して含まれる。アルファ−アミラーゼは、本発明に関して好ましい。関連するアルファ−アミラーゼとしては、例えば英国特許第１２９６８３９号に詳述されるバチルス属（Ｂａｃｉｌｌｕｓ）種、特にＢ．リケニフォルミス（B. licheniformis）の特別な株から得られるα−アミラーゼが挙げられる。
【００３８】
有用なアミラーゼの例としては、国際公開第９４／０２５９７号、国際公開第９４／１８３１４号、国際公開第９６／２３８７３号及び国際公開第９７／４３４２４号に記載される変異体、特に１又はそれ以上の以下の位置：１５、２３、１０５、１０６、１２４、１２８、１３３、１５４、１５６、１８１、１８８、１９０、１９７、２０２、２０８、２０９、２４３、２６４、３０４、３０５、３９１、４０８及び４４４に置換を有する変異体が挙げられる。更なる有用なアミラーゼの例としては、バチルス属種由来のアルファ−アミラーゼ、国際公開第００／６００６０号（参照により本明細書に組み込まれる）の配列番号２として開示されるバチルス属種ＤＳＭ１２６４９由来のＡＡ５６０アルファ−アミラーゼ、及び実施例７及び８（参照により本明細書に組み込まれる）に開示されるＡＡ５６０変異体を含む、ＡＡ５６０アルファ−アミラーゼの変異体である。関連する市販のアミラーゼとしては、Ｎａｔａｌａｓｅ（登録商標）、Ｓｔａｉｎｚｙｍｅ（登録商標）、Ｄｕｒａｍｙｌ（登録商標）、Ｔｅｒｍａｍｙｌ（登録商標）、Ｔｅｒｍａｍｙｌ（商標）Ｕｌｔｒａ、Ｆｕｎｇａｍｙｌ（登録商標）及びＢＡＮ（登録商標）（Novozymes A/S, Bagsvaerd, Denmarkから全て入手可能）、並びにＲａｐｉｄａｓｅ（登録商標）及びＭａｘａｍｙｌ（登録商標）Ｐ（DSM, Hollandから入手可能）、並びにＰｕｒａｓｔａｒ（登録商標）、Ｐｕｒａｓｔａｒ  ＯｘＡｍ及びＰｏｗｅｒａｓｅ（商標）（Danisco A/Sから入手可能）が挙げられる。他の有用なアミラーゼとしては、ＣＧＴａｓｅｓ（シクロデキストリングルカノトランスフェラーゼ、ＥＣ２．４．１．１９）、例えばバチルス属、サーモアナエロバクター属（Thermoanaerobactor）又はサーモアナエロバクテリウム属（Thermoanaerobacterium）から得られるものが挙げられる。
【００３９】
セルラーゼ：セルラーゼは、主に、布地ケア、例えば綿織物からのケバや毛玉の除去又は減少、柔軟化、色彩明確化（color clarification）、粒子汚れ除去、染料移動予防、及び洗浄中綿織物上の汚れの再付着防止のために用いられる。好適なセルラーゼとしては、再付着防止効果を有する、細菌又は真菌由来の完全なセルラーゼ又はモノコンパートメントエンドグルカナーゼが挙げられる。化学的又は遺伝子的に改変された変異体は、含まれる。該セルラーゼは、例えば、モノコンパートメント又はモノコンパートメント  エンド−１，４−ベータ−グルカナーゼ（しばしば単にエンドグルカナーゼ（ＥＣ３．２．１．４）と称される）の混合物であってもよい。いくつかのキシログルカナーゼはまた、エンドグルカナーゼ活性を有してもよく、また本発明の好適なセルラーゼとして考慮される。好適なセルラーゼは、米国特許第４，４３５，３０７号に開示され、それはフミコラ・インソレンス（Humicola insolens）から産生される真菌性セルラーゼを開示する。本発明に特に好適なセルラーゼは、再付着防止効果を有するセルラーゼである。
【００４０】
好適なモノコンパートメントエンドグルカナーゼは、１又はそれ以上の以下の種：エクシディア・グランドゥロサ（Exidia glandulosa）、クリニペリス・スカベラ（Crinipellis scabella）、ホーメス・ホメンタリウス（Fomes fomentarius）、スポンジペリス属種（Spongipellis sp.）、リゾフリクティス・ローセア（Rhizophlyctis rosea）、リゾムコール・プシルス（Rhizomucor pusillus）、フィコマイセス・ニテンス（Phycomyces nitens）、及びケトスティラム・フレセニ（Chaetostylum fresenii）、ジプロジア・ゴシピナ（Diplodia gossypina）、ミクロスフェロプシス属種（Microsphaeropsis sp.）、ウロスポラ・ビルグラミ（Ulospora bilgramii）、アウレオバシジウム属種（Aureobasidium sp.）、マクロフォミア・ファセオリナ（Macrophomina phaseolina）、アスコボラス・スティクトイデス（Ascobolus stictoides）、サコボラス・ディルテルス（Saccobolus dilutellus）、ペジザ（Peziza）、ペニシリウム・ベルクロサム（Penicillium verruculosum）、ペニシリウム・クリゾゲナム（Penicillium chrysogenum）、及びサーモミセス・ベルコサス（Thermomyces verrucosus）、トリコデルマ・リーセイ  アカ（Trichoderma reesei aka）、ハイポクレア・ジェコリーナ（Hypocrea jecorina）、ジアポルテ・シンゲネシア（Diaporthe syngenesia）、コレトトリウム・ラゲナリウム（Colletotrichum lagenarium）、キラリア・ヒポキシロン（Xylaria hypoxylon）、ニグロスポラ属種（Nigrospora sp.）、ノデュリオスポリウム属種（Nodulisporum sp.）、及びポロニア・プンクタータ（Poronia punctata）、シリンドロカルポン属種（Cylindrocarpon sp.)、ネクトリア・ピネア(Nectria pinea）、ボルテラ・コレトトリコイデス（Volutella colletotrichoides）、ソルダリア・フィミコーラ（Sordaria fimicola）、ソルダリア・マクロスポラ（Sordaria macrospora）、チエラビア・サーモフィラ（Thielavia thermophila）、シスパストスポラ・ボニネンシス（Syspastospora boninensis）、クラドリナム・フォエクンジシマム（Cladorrhinum foecundissimum）、ケトミウム・ムロルム（Chaetomium murorum）、ケトミウム・ビレッセンス（Chaetomium virescens）、ケトミウム・ブラシリエンシス（Chaetomium brasiliensis）、ケトミウム・クニコロラム（Chaetomium cunicolorum）、ミセリオフトラ・サーモフィラ（Myceliophthora thermophila）、グリオクラジウム・カテヌラタム（Gliocladium catenulatum）、シタリディウム・サーモフィラ（Scytalidium thermophila）、アクレモニウム種（Acremonium sp.）、フザリウム・ソラニ（Fusarium solani）、フザリウム・アングイオイデス（Fusarium anguioides）、フザリウム・ポアエ（Fusarium poae）、フザリウム・オキシスポラム亜種リコペルシシ（Fusarium oxysporum ssp. lycopersici）、フザリウム・オキシスポラム亜種パッシフローラ（Fusarium oxysporum ssp. passiflora）、フミコラ・ニグレッセンス（Humicola nigrescens）、フミコラ・グリセア（Humicola grisea）、フザリウム・オキシスポラム（Fusarium oxysporum）、チエラビア・テレストリス（Thielavia terrestris）、又はフミコラ・インソレンス（Humicola insolens）から得てもよい。一つの好ましいエンドグルカナーゼは、配列番号９として国際公開第９６／２９３９７号（参照により本明細書に組み込まれる）に開示されるもの又はこれらと少なくとも７０％の同一性を有する酵素、及び国際公開第９８／１２３０７号の実施例１に開示されるこれらの変異体である。別の好ましいエンドグルカナーゼは、国際公開第９１／０１７２４３���（配列番号２）に開示されるもの、又は国際公開第９４／００７９９８号に開示されるようなエンドグルカナーゼ変異体である。
【００４１】
再付着防止効果を有するエンドグルカナーゼは、多数の細菌供給源から糖結合モジュール（ＣＢＭ）を欠損した真菌性エンドグルカナーゼから得てもよい。いくつかの供給源としては、フミコラ・インソレンス（Humicola insolens）、ＤＳＭ１２６４８として寄託されたバシラス属種（Bacillus sp.）、ＦＥＲＭ  Ｐ−１６０６７として寄託されたバシラス属種（Bacillus sp.）ＫＳＭＳ２３７、パニバチルス・ポリミキサ（Panibacillus polymyxa）、及びパニバチルス・パブリ（Panibacillus pabuli）が挙げられる。特定の再付着防止エンドグルカナーゼは、国際公開第９１／１７２４４号（参照により本明細書に援用される）、国際公開第０４／０５３０３９号（配列番号２）（参照により本明細書に援用される）、特開２０００−２１００８１（配列番号１の位置１〜８２４）（参照により本明細書に援用される）に開示される。
【００４２】
再付着防止効果を有するキシログルカナーゼは、多数の細菌供給源から得てもよい。いくつかの供給源としては、バシラス・リケニホルミス（Bacillus licheniformis）、バシラス・アガラドハエレンス（Bacillus agaradhaerens）、（国際公開第９９／０２６６３号）パニバチルス・ポリミキサ（Panibacillus polymyxa）、及びパニバチルス・パブリ（Panibacillus pabuli）（国際公開第０１／６２９０３号）が挙げられる。キシログルカナーゼの好適な変異体はまた、ＰＣＴ／ＥＰ２００９／０５６８７５に記載される。市販のキシログルカナーゼとしては、Ｗｈｉｔｅｚｙｍｅ（登録商標）（Novozymes A/S）が挙げられる。
【００４３】
市販のセルラーゼとしては、トリコデルマ・リーセイ（Trichoderma reesei）から産生されるＣｅｌｌｕｃｌａｓｔ（登録商標）、フミコラ・インソレンス（Humicola insolens）から産生されるＣｅｌｌｕｚｙｍｅ（登録商標）が挙げられる。市販のエンドグルカナーゼとしては、Ｃａｒｅｚｙｍｅ（登録商標）、Ｒｅｎｏｚｙｍｅ（登録商標）、Ｅｎｄｏｌａｓｅ（登録商標）、及びＣｅｌｌｕｃｌｅａｎ（登録商標）（Novozymes A/S）、並びにＫＡＣ−５００（Ｂ）（商標）（Kao Corporation）、並びにＣｌａｚｉｎａｓｅ（商標）、Ｐｕｒａｄａｘ（商標）ＥＧ  Ｌ及びＰｕｒａｄａｘ  ＨＡ（Danisco A/S）が挙げられる。
【００４４】
リパーゼ：リパーゼ又は脂肪分解酵素は、脂質や油を含む汚れに関して改善された洗浄力を提供する。一般的な脂質及び／又は油を含む染みとしては、他の油及び／又は脂質を含む物質を排除することなく、例えば、身体の汚れ（皮脂）、口紅、マヨネーズ、マスタード、サラダドレッシング、植物脂質及び／又は植物性油、動物性脂質（例えば、バター及び肉汁）、ワックス、及び鉱物油が挙げられる。アルカリ溶液中での使用に好適な任意のリパーゼを用いることができる。好適なリパーゼは、細菌又は真菌由来のものを含む。かかるリパーゼの化学的又は遺伝子的に改変された変異体は、これに関連して含まれる。該リパーゼは、例えば、トリアシルグリセロールリパーゼ（ＥＣ３．１．１．３）、ホスホリパーゼＡ２（ＥＣ３．１．１．４）、リゾホスホリパーゼ（ＥＣ３．１．１．５）、モノグリセリドリパーゼ（ＥＣ３．１．１．２３）、ガラクトリパーゼ（ＥＣ３．１．１．２６）、ホスホリパーゼＡ１（ＥＣ３．１．１．３２）、リポタンパク質リパーゼ（ＥＣ３．１．１．３４）でもよい。有用なリパーゼの例としては、フミコラ・ラヌジノサ（Humicola lanuginosa）リパーゼ、例えば欧州特許第２５８０６８号及び欧州特許第３０５２１６号に記載される；リゾムコール・ミエヘイ（Rhizomucor miehei）リパーゼ、例えば欧州特許第２３８０２３号明細書に記載されるもの、又は国際公開第９６／１３５８０号に記載されるＨ．インソレンス（H. insolens）由来のもの；カンジダ属（Candida）リパーゼ、例えばＣ．アンタルクティカ（C. antarctica）リパーゼ、例えば欧州特許第２１４７６１号に記載されるＣ．アンタルクティカ（C. antarctica）リパーゼＡ又はＢ；シュードモナス属（Pseudomonas）リパーゼ、例えば欧州特許第７２１９８１号（例えば寄託登録番号ＦＥＲＭ  ＢＰ−４７７２を有するシュードモナス属種（Pseudomonas sp.）ＳＤ７０５株から得られるリパーゼ）、ＰＣＴ／ＪＰ９６／００４２６、ＰＣＴ／ＪＰ９６／００４５４（例えばＰ．ソラナセアラム（P. solanacearum）リパーゼ）、欧州特許第５７１９８２号、又は国際公開第９５／１４７８３号（例えばＰ．メンドシナ（P. mendocina）リパーゼ）に記載されるもの、例えば欧州特許第２１８２７２号に記載されるＰ．アルカリゲネス（P. alcaligenes）若しくはＰ．シュードアルカリゲネス（P. pseudoalcaligenes）リパーゼ、例えば欧州特許第３３１３７６号明細書に記載されるＰ．セパシア（P. cepacia）リパーゼ、例えば英国特許第１，３７２，０３４号明細書に記載されるＰ．スタッツェリ（P. stutzeri）リパーゼ、又はＰ．フルオレッセンス（P. fluorescens）リパーゼ；バシラス属（Bacillus）リパーゼ、例えばＢ．サブチリス（B. subtilis）リパーゼ（Dartois et al. (1993)Biochemica et Biophysica Acta 1131:253-260）、Ｂ．ステアロサーモフィルス（B. stearothermophilus）リパーゼ（ＪＰ６４／７４４９９２号）、及びＢ．プミルス（B. pumilus）リパーゼ（国際公開第９１／１６４２２号）が挙げられる。他の例としては、例えば国際公開第９２／０５２４９号、国際公開第９４／０１５４１号、ＥＰ４０７２２５、ＥＰ２６０１０５、国際公開第９５／３５３８１号、国際公開第９６／００２９２号、国際公開第９５／３０７４４号、国際公開第９４／２５５７８号、国際公開第９５／１４７８３号、国���公開第９５／２２６１５号、国際公開第９７／０４０７９号及び国際公開第９７／０７２０２号に記載されるものなどのリパーゼ変異体が挙げられる。好ましいリパーゼ変異体は、国際公開第００／６００６３号に開示されるフミコラ・ラヌジノサ（Humicola lanuginosa）ＤＳＭ４１０９のものである。改良された第一の洗浄性能を有する、国際公開第００／６００６３号の実施例に開示される変異体、即ちＴ２３１Ｒ＋Ｎ２３３Ｒ；Ｇ９１Ａ＋Ｄ９６Ｗ＋Ｅ９９Ｋ＋Ｇ２６３Ｑ＋Ｌ２６４Ａ＋Ｉ２６５Ｔ＋Ｇ２６６Ｄ＋Ｔ２６７Ａ＋Ｌ２６９Ｎ＋Ｒ２０９Ｐ＋Ｔ２３１Ｒ＋Ｎ２３３Ｒ；Ｎ３３Ｑ＋Ｄ９６Ｓ＋Ｔ２３１Ｒ＋Ｎ２３３Ｒ＋Ｑ２４９Ｒ；Ｅ９９Ｎ＋Ｎ１０１Ｓ＋Ｔ２３１Ｒ＋Ｎ２３３Ｒ＋Ｑ２４９Ｒ；Ｅ９９Ｎ＋Ｎ１０１Ｓ＋Ｔ２３１Ｒ＋Ｎ２３３Ｒ＋Ｑ２４９Ｒは、特に好ましい。
【００４５】
市販の好適なリパーゼとしては、Ｌｉｐｅｘ（登録商標）、Ｌｉｐｏｌａｓｅ（登録商標）及びＬｉｐｏｌａｓｅ  Ｕｌｔｒａ（登録商標）、Ｌｉｐｏｌｅｘ（登録商標）、Ｌｉｐｏｃｌｅａｎ（登録商標）（Novozymes A/Sから入手可能）、Ｍ１  Ｌｉｐａｓｅ（商標）及びＬｉｐｏｍａｘ（商標）（Genencor Inc.から入手可能）、並びにＬｉｐａｓｅ  Ｐ”Ａｍａｎｏ”（Amano Pharmaceutical Co. Ltd.から入手可能）が挙げられる。市販のクチナーゼは、Genencor Inc.製のＬｕｍａｆａｓｔ（商標）を含む。
【００４６】
クチナーゼ：脂肪分解酵素の潜在的に有用な種類としては、クチナーゼ（ＥＣ３．１．１．７４）、例えば国際公開第８８／０９３６７号に記載されるシュードモナス・メンドシナ（Pseudomonas mendocina）由来のクチナーゼ、又はフザリウム・ソラニ  ピシ（Fusarium solani pisi）由来のクチナーゼ（例えば国際公開第９０／０９４４６号に記載される）が挙げられる。クチナーゼの脂肪分解活性のために、これらは、リパーゼとして同様の株に対して有効であり得る。市販のクチナーゼとしては、Genencor Inc.製のＬｕｍａｆａｓｔ（商標）が挙げられる。
【００４７】
ペルオキシダーゼ／オキシダーゼ：好適なペルオキシダーゼ／オキシダーゼとしては、植物、細菌又は真菌起源のものが挙げられる。化学的に改変された、又はタンパク質工学的に操作された変異体は、含まれる。有用なペルオキシダーゼの例としては、コプリナス属（Coprinus）由来、例えばＣ．シネレウス（C. cinereus）由来のペルオキシダーゼ、並びに国際公開第９３／２４６１８号、国際公開第９５／１０６０２号、及び国際公開第９８／１５２５７号に記載されるこれらの変異体が挙げられる。市販のペルオキシダーゼとしては、Ｇｕａｒｄｚｙｍｅ（商標）（Novozymes A/S）が挙げられる。
【００４８】
プロテアーゼ：プロテアーゼは、タンパク質を含む染み、例えば血液、乳製品、身体の汚れ（皮脂）、粉ミルク、泥、草、卵、及び離乳食などの除去に用いられる。アルカリ溶液中での使用に好適な任意のプロテアーゼを用いることができる。好適なプロテアーゼとしては、動物、植物、又は微生物起源のものが挙げられる。微生物起源は好ましい。化学的に修飾された、又はタンパク質工学的に操作された変異体を含む。該プロテアーゼとしては、例えばメタロプロテアーゼ（ＥＣ３．４．１７又はＥＣ３．４．２４）、又はセリンプロテアーゼ（ＥＣ３．４．２１）、好ましくはアルカリ微生物プロテアーゼ、又はトリプシン様プロテアーゼが挙げられる。アルカリプロテアーゼの例としては、サブチリシン（ＥＣ３．４．２１．６２）、特にバシラス属（Ｂａｃｉｌｌｕｓ）由来のもの、例えば、サブチリシンＮｏｖｏ、サブチリシンＣａｒｌｓｂｅｒｇ、サブチリシン３０９、サブチリシン１４７、及びサブチリシン１６８（国際公開第８９／０６２７９号に記載される）が挙げられる。トリプシン様プロテアーゼの例としては、（例えばブタ、又はウシ由来の）トリプシン、及び国際公開第８９／０６２７０号及び国際公開第９４／２５５８３号に記載されるフザリウム属（Fusarium）プロテアーゼが挙げられる。有用なプロテアーゼの例としては、国際公開第９２／１９７２９号、国際公開第９８／２０１１５号、国際公開第９８／２０１１６号、及び国際公開第９８／３４９４６号に記載される変異体、特に１又はそれ以上の以下の位置：２７、３６、５７、７６、８７、９７、１０１、１０４、１２０、１２３、１６７、１７０、１９４、２０６、２１８、２２２、２２４、２３５、及び２７４に置換を有する変異体である。市販のプロテアーゼ酵素としては、Ａｌｃａｌａｓｅ（登録商標）、Ｓａｖｉｎａｓｅ（登録商標）、Ｐｒｉｍａｓｅ（登録商標）、Ｄｕｒａｌａｓｅ（登録商標）、Ｅｓｐｅｒａｓｅ（登録商標）、及びＫａｎｎａｓｅ（登録商標）（Novozymes A/S）、Ｍａｘａｔａｓｅ（登録商標）、Ｍａｘａｃａｌ（登録商標）、Ｍａｘａｐｅｍ（登録商標）、Ｐｒｏｐｅｒａｓｅ（登録商標）、Ｐｕｒａｆｅｃｔ（登録商標）、Ｐｕｒａｆｅｃｔ  ＯｘＰ（登録商標）、ＦＮ２（商標）、及びＦＮ３（商標）（Genencor International Inc.）が挙げられる。
【００４９】
実施形態によっては、本発明は、本発明による洗剤組成物に加えて、少なくとも一つの該酵素が、組成物の重量で、０．０００００１％〜１０％、０．００００１％〜５％、０．０００１％〜２．５％、０．００１％〜２％、０．０１％〜１．５％、又は０．１％〜１％の酵素タンパク質のレベルで用いることができる方法に関する。
【００５０】
実施形態によっては、本発明は、本発明による洗剤組成物に加えて、少なくとも一つの該酵素が、布地１ｇあたり、０〜２０、０．００００１〜１０、０．０００１〜５、０．０００１〜２．５、０．００１〜２、０．０１〜１、０．１〜０．５ミリグラムの酵素タンパク質の量で用いることができる方法に関する。
【００５１】
実施形態によっては、本発明は、本発明による洗剤組成物に加えて、少なくとも一つの酵素が、浸漬溶液１リットルあたり、０〜５０００、０．００１〜１００、０．０１〜５０、又は０．１〜１０ミリグラムの酵素タンパク質の濃度で用いることができる方法に関する。
【００５２】
完全に製剤化された洗剤、例えば市販の洗剤が用いられる場合、かかる洗剤は、既に酵素を含んでいてもよい。該洗剤により提供されるこれらの酵素は、添加される酵素タンパク質の量又は少なくとも一つの酵素に関する計算に入れられるべきである。前記の少なくとも一つの酵素は、一般的に別々の酵素として理解されてもよく、あるいはそれは添加される別々の酵素の全ての合計、即ち酵素混合物でもよい。実施形態によっては、本発明は、組成物の重量での酵素タンパク質のレベルが、添加される少なくとも一つの酵素のうちの別々に添加される酵素の量に関する方法に関する。他の実施形態では、本発明は、組成物の重量での酵素タンパク質のレベルが、添加される少なくとも一つの酵素のうちの全ての添加される酵素の量、即ち添加される酵素の合計量に関する方法に関する。
【００５３】
酵素に基づく洗浄性能は、酵素により提供される清浄効果であり、これは、上述のように酵素関連清浄指数（ＥＲＣＩ）として表すことができる。実施例３−ＩＩＩは、同一の量の酵素を洗浄方法に添加することが、通常の洗浄方法と比較して、本発明のいくつかの実施形態の洗浄方法について高いＥＲＣＩをもたらすことを示す。実施形態によっては、本発明は、２段階方法についてのＥＲＣＩが、通常の洗浄方法に対応するＥＲＣＩよりも高い方法に関する。用語「対応する」は、洗浄条件が、例えば温度、合計の洗浄時間、添加される洗剤成分等の洗浄方法を除く全てが可能な限り同一であるべきである、として理解されるべきである。
【００５４】
濃縮浸漬洗浄方法はまた、少なくとも一つの界面活性剤の存在を要求する。実施形態によっては、本発明は、存在する前記界面活性剤が、陰イオン性界面活性剤；陽イオン性界面活性剤；双性イオン性界面活性剤；両性非イオン性界面活性剤；又はこれらの任意の組み合わせからなる群から選択される方法に関する。
【００５５】
好適な陰イオン性界面活性剤は、石鹸及び硫酸基又はスルホン酸基を含むものである。考慮されるスルホン酸型の界面活性剤は、（Ｃ９−Ｃ１３−アルキル）ベンゼンスルホナート、及びオレフィンスルホナート、ここで後者は、例えば、末端又は内部に位置する二重結合を有するＣ１２−Ｃ１８モノオレフィンのスルホン化により得られるような、アルケンスルホナート、及びヒドロキシアルカンスルホナート、及び−ジスルホナートの混合物であるとして理解される。（Ｃ１２−Ｃ１８）アルカンスルホネート、及びアルファ−スルホ脂肪酸のエステル（スルホン酸エステル）、例えば水素添加されたココナッツ油、パームカーネル油又は獣脂脂肪酸のアルファ−スルホン酸メチルエステルは好適であり、ＭＥＳのサポニン化に起因するアルファ−スルホカルボン酸を用いることができる。
【００５６】
さらに好適な陰イオン性界面活性剤は、モノ、ジ、及びトリエステルを含むスルホン化脂肪酸グリセロールエステル、並びにこれらの混合物である。
【００５７】
性能を与えるアルキ（ケニ）ル硫酸塩は、Ｃ１２−Ｃ１８脂肪アルコール（例えばココナッツ油脂肪アルコール、獣脂脂肪アルコール、ラウリルアルコール、ミリスチルアルコール、セチルアルコール、又はステアリルアルコール）又はＣ１０−Ｃ２０オキソアルコールの硫酸モノエステル、並びにその鎖長を有する第二級アルコールの硫酸モノエステルのアルカリ金属塩及びナトリウム塩である。洗浄技術の観点から、Ｃ１２−Ｃ１６アルキル硫酸塩、Ｃ１２−Ｃ１５アルキル硫酸塩、及びＣ１４−Ｃ１５アルキル硫酸塩は特に優先される。好適な陰イオン性界面活性剤はまた、例えば米国特許第３，２３４，２５８号又は米国特許第５，０７５，０４１号に従って調製されるアルカン−２，３−ジイルビス（サルフェート）である。
【００５８】
１〜６モルのエチレンオキシドでエトキシル化された直鎖又は分岐鎖のＣ７−Ｃ２１アルコール、例えば平均３．５モルのエチレンオキシド（ＥＯ）を有する２−メチル−分岐Ｃ９−Ｃ１１アルコール又は１〜４のＥＯを有するＣ１２−Ｃ１８脂肪アルコールの硫酸モノエステルはまた、好ましい。これらの高い泡形成特性のために、これらは、比較的低いレベル、例えば１重量％〜５重量％のレベルにおいてのみ、洗浄組成物及び清浄組成物に通常用いられる。
【００５９】
陰イオン性界面活性剤としてはまた、ジエステル、及び／又はモノエステルの塩、Ｃ８−Ｃ１８脂肪アルコール残基を有するスルホコハク酸の塩、又はこれらの混合物が挙げられる。脂肪アルコール残基が狭い鎖長分布を有するスルホコハク酸塩は特に優先される。それは、同様にアルキ（ケニ）ル鎖中に好ましくは、８〜１８個のＣ原子を有するスルホコハク酸アルキ（ケニ）ル又はこれらの塩を使用することを可能にする。
【００６０】
考慮される更なる陰イオン性界面活性剤は、アミノ酸、例えば、メチルタウリン（タウリド）、及び／又はメチルグリシン（サルコシド）の脂肪酸誘導体である。考慮される更なる陰イオン性界面活性剤は、石鹸である。飽和脂肪酸石鹸、例えばラウリン酸、ミリスチン酸、パルミチン酸、ステアリン酸、水素化エルカ酸、及びベヘン酸の塩、並びに天然脂肪酸、例えばココナッツ油、パームカーネル油、又は獣脂脂肪酸由来の石鹸混合物である。石鹸を含む陰イオン性界面活性剤は、これらのナトリウム塩、カリウム塩又はアンモニウム塩の形態で、そして有機塩基、例えばモノエタノールアミン、ジエタノールアミン、又はトリエタノールアミンの可溶性塩の形態で、存在してもよい。該陰イオン性界面活性剤は、これらのナトリウム塩又はカリウム塩の形態で存在してもよい。
【００６１】
他の実施形態では、本発明は、該陰イオン性界面活性剤が、直鎖アルキルベンゼンスルホネート；アルファ−オレフィンスルホネート；アルキルサルフェート（脂肪アルコールサルフェート）；アルコールエトキシサルフェート；第二級アルカンスルホネート；アルファ−スルホ脂肪酸メチルエステル；アルキルコハク酸又はアルケニルコハク酸；石鹸；又はこれらの任意の組み合わせである方法に関する。
【００６２】
非イオン性界面活性剤として、好ましくはアルコキシル化された、有利にエトキシル化、及び／又はプロポキシル化された、８〜１８個のＣ原子、並びに平均で１モルのアルコールあたり、１〜１２モルのエチレンオキシド（ＥＯ）、及び／又は１〜１０モルのプロピレンオキシド（ＰＯ）を有する特に第一級アルコールが用いられる。Ｃ８−Ｃ１６アルコールアルコキシレート、有利にはエトキシル化及び／又はプロポキシル化Ｃ１０−Ｃ１５アルコールアルコキシレート、特に２〜１０若しくは３〜８のエトキシル化度、及び／又は１〜６若しくは１．５〜５のプロポキシル化度を有するＣ１２−Ｃ１４アルコールアルコキシレートは特に優先される。アルコール残基は、好ましくは直鎖、又は特に２位のメチル−分岐であってもよく、あるいはオキソアルコール中に通常存在するように、直鎖及びメチル−分岐鎖の混合物を含んでもよい。しかしながら、１モルのアルコールあたり、平均で２〜８のＥＯを有する、１２〜１８個のＣ原子を含む天然由来の直鎖アルコール、例えばココナッツ油、パーム油及び獣脂アルコール、又はオレイルアルコール由来のアルコールエトキシレートは特に優先される。エトキシル化アルコールとしては、例えば、３ＥＯ又は４ＥＯを有するＣ１２−Ｃ１４アルコール、７ＥＯを有するＣ９−Ｃ１１アルコール、３ＥＯ、５ＥＯ、７ＥＯ又は８ＥＯを有するＣ１３−Ｃ１５アルコール、３ＥＯ、５ＥＯ又は７ＥＯを有するＣ１２−１８アルコール、これらの混合物、例えば３ＥＯを有するＣ１２−Ｃ１４アルコールと５ＥＯを有するＣ１２−Ｃ１８アルコールの混合物が挙げられる。言及されるエトキシル化度及びプロポキシル化度は、統計的平均を表し、それは、特定の製品について、整数又は小数であり得る。好ましいアルコールエトキシレート、及びプロポキシレートは、限定された同族体分布を有する（狭い範囲のエトキレート／プロポキシレート、ＮＲＥ／ＮＲＰ）。これらの非イオン性界面活性剤に加えて、１２超のＥＯを有する脂肪アルコールエトキシレートを用いることができる。これらの例としては、１４ＥＯ、２５ＥＯ、３０ＥＯ又は４０ＥＯを有する獣脂脂肪アルコールエトキシレートである。
【００６３】
エトキシル化、及び／又はプロポキシル化されたアルコキシル化アミン、特に１アルキル鎖あたり１〜１８個のＣ原子、並びに１モルのアミンあたり、平均で、１〜１２モルのエチレンオキシド（ＥＯ）及び／又は１〜１０モルのプロピレンオキシド（ＰＯ）を有する第一級、及び第二級アミンはまた、好ましい。
【００６４】
加えて、更なる非イオン性界面活性剤として、一般式Ｒ1Ｏ（Ｇ）xのアルキルポリグリコシドが用いられてもよく、ここでＲ1は、第一級の直鎖又はメチル分岐（特に２位におけるメチル−分岐）した８〜２２個、好ましくは１２〜１８個のＣ原子を有するアルキル基であり、記号「Ｇ」は、５又は６個のＣ原子を有するグリコース（単糖）単位を指し；好ましくは、Ｇはグルコースである。グリコース単位の平均数を指すオリゴマー化の程度ｘは、一般的に、１〜１０の間にあり、好ましくは、ｘは、１．２〜１．４である。
【００６５】
非イオン性界面活性剤単独で、あるいは他の非イオン性界面活性剤と組み合わせて用いられる、非イオン性界面活性剤の更なるクラスとしては、アルキル鎖中に１〜４個のＣ原子を有する、アルコキシル化、好ましくはエトキシル化、又はエトキシル化及びプロポキシル化脂肪酸アルキルエステル、特に、例えば特開昭５８／２１７５９８号に記載される脂肪酸メチルエステルが挙げられる。
【００６６】
アミンオキシド型の非イオン性界面活性剤、例えばＮ−（ココアルキル）−Ｎ，Ｎ−ジメチルアミンオキシド、及びＮ−（獣脂−アルキル）−Ｎ，Ｎ−ビス（２−ヒドロキシエチル）アミンオキシド、及び脂肪酸アルカノールアミド、又はエトキシル化脂肪酸アルカノールアミド型はまた、好適である。
【００６７】
実施形態によっては、本発明は、該非イオン性界面活性剤が、アルコールエトキシレート；ノニルフェノールエトキシレート；アルキルポリグリコシド；アルキルジメチルアミンオキシド；エトキシル化脂肪酸モノエタノールアミド；脂肪酸モノエタノールアミド；脂肪酸（ポリヒドロキシアルカノール）アミド；グルコサミン（「グルカミド」）のＮ−アシル−Ｎ−アルキル誘導体；又はこれらの任意の組み合わせである方法に関する。
【００６８】
実施形態によっては、本発明は、少なくとも一つ界面活性剤の濃度が、布地１ｇあたり、０〜５００、０．００００１〜１００、０．０００１〜５０、０．０００１〜４０、０．００１〜３０、０．０１〜２０、０．１〜１５、又は１〜１０ミリグラムである方法に関する。
【００６９】
実施形態によっては、本発明は、少なくとも一つ界面活性剤の濃度が、浸漬溶液１Ｌあたり、０〜５０、０．０００１〜４０、０．００１〜３０、０．０１〜２０、０．１〜１０、又は１〜５ｇである方法に関する。
【００７０】
少なくとも一つの酵素と少なくとも一つの界面活性剤の濃度は、次の洗浄溶液中のこれらの濃度と比較して高い。
【００７１】
実施形態によっては、本発明は、洗浄溶液中の少なくとも一つ酵素の濃度が、少なくとも１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９又は２０倍に浸漬溶液を希釈することにより得られる方法に関する。
【００７２】
実施形態によっては、本発明は、洗浄溶液中の少なくとも一つ界面活性剤の濃度が、少なくとも１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９又は２０倍に浸漬溶液を希釈することにより得られる方法に関する。
【００７３】
洗浄
洗浄期間は、増加した水のレベルにより特徴付けられ、浸漬された材料に水を添加することにより開始され、それにより浸漬溶液を希釈する。材料と水の重量対重量比は、１：３．５〜１：６．５、１：４〜１：５、又は１：４〜１：２のレベルまで増加する。
【００７４】
通常の洗浄と同様に、撹拌又は機械的作用を施用する。布地と洗浄溶液との最大の相互作用を確実にするために、洗浄期間の間、中〜高程度の撹拌の利用は好ましい。実施形態によっては、本発明は、洗浄期間中に撹拌又は他の機械的作用が施用される方法に関する。
【００７５】
これは、先のステップにおいて布地の上に蓄積した分解した染み物質及び界面活性剤の可溶化を増大させることが観察される。短い洗浄時間についての消費者ニーズと十分な洗浄性能についてのニーズとの間で妥協はなされるべきである。実施形態によっては、本発明は、該洗浄期間が５〜１２０分、５〜９０分、１０〜６０分、１０〜３０分、５〜２０分、５〜１５分、又は１０〜１５分である方法に関する。
【００７６】
濃縮２回浸漬洗浄方法は、減少した温度において特に改良された清浄効果を示し、従って、実施形態によっては、本発明は、洗浄期間中の温度が、約３５℃；約３０℃；約２５℃；約２４℃；約２３℃；約２２℃；約２１℃；約２０℃；約１９℃；約１８℃；約１７℃；約１６℃；約１５℃；約１４℃；約１３℃；約１２℃；約１１℃；約１０℃；約９℃；約８℃；約７℃；約６℃；又は約５℃である方法に関する。別の実施形態では、本発明は、洗浄期間中の温度が、３５℃未満；３０℃未満；２５℃未満；２４℃未満；２３℃未満；２２℃未満；２１℃未満；２０℃未満；１９℃未満；１８℃未満；１７℃未満；１６℃未満；１５℃未満；１４℃未満；１３℃未満；１２℃未満；１１℃未満；１０℃未満；９℃未満；８℃未満；７℃未満；６℃未満又は５℃未満である方法に関する。
【００７７】
実施形態によっては、本発明は、第一の浸漬期間及び／又は第二の浸漬期間及び／又は洗浄期間の間の温度が、それぞれ同一又は異なって選択される方法に関する。
【００７８】
リンス
次のステップは、水を流し、対象物をリンスするための準備である。リンスは、通常のリンス方法に従って行なうことができる。洗浄デバイスが用いられる場合、存在するリンスプログラムを用いることができる。洗剤の量が減少した濃縮２回浸漬洗浄方法が施用される場合、洗剤残余物の十分な除去に必要なリンス水の量を、減少させることができる。
【００７９】
使用
本方法は、家庭用ケア清浄の分野及び工業清浄の分野内において、対象物を清浄するために施用されてもよい。実施形態によっては、本発明は、織物及び／又は布地を清浄するための方法の使用に関する。他の実施形態では、本発明は、洗濯物を清浄するための方法の使用に関する。
【００８０】
該方法の使用は、酵素及び／洗剤の量の減少が望まれる場合、さらに有利である。実施例３−ＩＩに示すように、本発明のいくつかの実施形態の洗浄方法において、１００％のレベルから、少なくとも９０％、少なくとも８０％、少なくとも７０％、少なくとも６０％、又は少なくとも５０％のレベルまで、従って少なくとも９５％、少なくとも８５％、少なくとも７５％、少なくとも６５％、又は少なくとも５５％のレベルまで、洗剤の量を減少させることは可能である。実施例３−ＩＩＩは、本発明のいくつかの実施形態の洗浄方法に添加される酵素が、酵素関連清浄指数（ＥＲＣＩ）から明らかな通常の洗浄方法において得られるものと比較して、改善された酵素に基づく清浄をもたらすことを示す。
【００８１】
本発明は、以下の実施例によりさらに記載され、これは本発明の範囲を限定するものとして解釈されるべきではない。
【実施例】
【００８２】
実施例
材料
バッファ及び基質として用いられる化学薬品は、少なくとも試薬グレードの市販品である。
【００８３】
洗剤及び酵素
下記の表に示す洗剤組成物では、洗濯洗剤を製剤化する場合、界面活性剤は、当該技術分野において一般的に用いられるような鎖長分布及びエトキシル化度を有する様々な市販品の形態で添加された。酵素は、多くの場合、示されるように、製剤化された洗剤に含まれた。
【００８４】
洗剤酵素のクラス：プロテアーゼ、アミラーゼ、リパーゼ、セルラーゼ、マンナナーゼ、及びペクチナーゼは、それぞれ市販の製剤化された液体又は顆粒製品として、様々に添加された。酵素（全てNovozymes A/S, Denmarkから得られる）は、以下の実施例において、洗剤に加えて用いられた。
【００８５】
材料標本
下記の表Ｉに列挙する以下の実施例において用いられた染みの付いた材料標本を、Center for Testmaterials BV, Vlaardingen, the Netherlandsから得た。これらは、最も一般的な染みの染み除去を目的とするために選択された。材料標本を、染みの性質及びこれらの主な感受性（界面活性剤感受性の染み；プロテアーゼ、リパーゼ、セルラーゼ、マンナナーゼ又はアミラーゼ等の酵素特異的感受性の染み；漂白感受性の染み）及び再付着に感受性の追跡材料標本によって、グループに分けることができる。
【００８６】
小スケール（Terg-o-tometer, TOM）のため、１回の洗浄のあたり、選択されたそれぞれの染みが付いた材料標本の一つと、最大２０ｇの５０％綿（Ｗｆｋ  １０Ａ）と５０％ポリエステル（Ｗｆｋ  ３０Ａ）バラストを用いた。実施例１の材料標本サイズは、３．５ｘ３．５ｃｍであり、実施例２の材料標本サイズは、５ｘ５ｃｍである。
【００８７】
表Ｉ：染みの付いた材料標本
【表１】
2013541356.tif 000002
【００８８】
水硬度
以下の実験に用いられる溶液の水硬度は、他に指定の無い限り６°ｄＨに調整された。水硬度は、以下の二つのストック溶液を適用添加することにより、調整された。（Ａ）Ｃａ／Ｍｇ  ２：１  ６０００°ｄＨ／Ｌストック溶液：塩化カルシウム無水物１０５ｇ／Ｌ＋塩化マグネシウム無水物：７２．６ｇ／Ｌ。１ｍｌ／Ｌ＝６°ｄＨ使用。（Ｂ）０．５３５Ｍ炭酸水素ナトリウムストック溶液：４５ｇ／Ｌは、２００ｍｌ中９ｇに対応する。６°ｄＨのために３ｍｌ／Ｌ使用。
【００８９】
Terg-O-tometer（ＴＯＭ）における２段階洗浄方法
１．１００ｍｌビーカーに洗剤と４０ｍｌの６°ｄＨ水を添加する。
２．２分間撹拌し、任意で酵素を添加する。
３．４０ｍｌの浸漬溶液をＴＯＭビーカーに移す。
４．７０ｒｐｍにおいて撹拌を開始する。
５．ビーカーに材料標本を入れ、これらをしっかりと湿潤させる。
６．バラスト負荷（load）を添加し、３０秒間７０ｒｐｍで撹拌する。
７．４分間停止する。
８．５６０ｍｌの６°ｄＨ水を添加し、３０秒間７０ｒｐｍで撹拌する。
９．撹拌を１２０ｒｐｍに変え、１５分間洗浄する。
１０．撹拌を停止する。
１１．洗浄負荷をＴＯＭビーカーからざるに移し、冷たい水道水でリンスする。
１２．手で水を絞り取り、洗浄負荷を１Ｌの冷たい水道水の入ったビーカーに移す。
１３．工程１２を繰り返し、手で水を絞り取る。
１４．染みの付いた材料標本をバラスト負荷から分ける。染みの付いた材料標本を、冷たい水道水を流している５Ｌビーカーに移す。不活性化するために、バラスト負荷を別に保管する。
１５．５分間タイマーを設定する。
１６．手で水を絞り出し、染みの付いた材料標本を紙で覆われたトレイの上に置く。材料標本の上に別の紙を加える。
１７．材料標本を一晩乾燥させ、その後下記に記載されるColor Eyeで測定する。
【００９０】
Terg-O-tometer（ＴＯＭ）における通常の洗浄方法
１．ＴＯＭビーカーに洗剤と６００ｍｌの６°ｄＨ水を添加する。
２．１２０ｒｐｍで撹拌を開始し、任意でビーカーに酵素を添加する。
３．ビーカーに材料標本を入れ、その後バラストを入れる。
４．材料標本とバラストをビーカーに添加するときに、時間測定を開始する。
５．２０分間洗浄する。
６．撹拌を停止する。
７．洗浄負荷をＴＯＭビーカーからざるに移し、冷たい水道水でリンスする。
８．手で水を絞り取り、洗浄負荷を１Ｌの冷たい水道水の入ったビーカーに移す。
９．工程７を繰り返し、手で水を絞り取る。
１０．染みの付いた材料標本をバラスト負荷から分ける。染みの付いた材料標本を、冷たい水道水を流している５Ｌビーカーに移す。不活性化するために、バラスト負荷を別に保管する。
１１．５分間タイマーを設定する。
１２．手で水を絞り出し、染みの付いた材料標本を紙で覆われたトレイの上に置く。材料標本の上に別の紙を加える。
１３．材料標本を一晩乾燥させ、その後下記に記載されるColor Eyeで測定する。
【００９１】
染みの評価
洗浄性能は、デルタ減少値（ΔＲｅｍ）で表す。洗浄及びリンス後、材料標本を、平らに広げ、室温で一晩空気乾燥させた。材料標本の光反射率評価を、非常に小さい開口部を有するMacbeth Color Eye 7000反射率計を用いて行った。測定は、入射光においてＵＶを除いて行い、４６０ｎｍにおける減少を抽出した。測定は、未洗浄と洗浄した材料標本に関して行った。測定される試験材料標本を、同一の種類及び同一の色の別の材料標本（二つの材料標本）の上に置いた。１つのビーカーにつき、各種類一つの材料標本のみが存在するので、再現洗浄からの材料標本を、この方法により用いた。個別の材料標本についての減少値を、洗浄された材料標本の減少値から未洗浄の材料標本の減少値を引くことにより計算した。それぞれの染みの付いた材料標本セットについての全ての洗浄性能を、個別のΔＲｅｍの合計として計算した。
【００９２】
他に指定のない限り、以下の実施例中の洗浄を、上記で概説したＴＯＭにおける小スケール方法に従って行う。下記のすべての実施例において、可視的な再付着は、追跡材料標本上で検出され、２段階洗浄方法に起因する再付着のレベルは、通常の洗浄方法のものと比較して同等のレベルであった。
【００９３】
実施例１：洗剤１を用いた洗浄
洗剤１は、酵素を含むｐＨ約８．５の液体製剤である。各洗浄について、下記に挙げられる０．３３３ｇの量の洗剤組成物を用いた。
【００９４】
表１Ａ：洗剤１の組成
【表２】
2013541356.tif 000003
【００９５】
表１Ｂ：用いられる界面活性剤及び酵素の量
【表３】
2013541356.tif 000004
【００９６】
表１Ｃ：洗剤１中で洗浄された材料標本について計算されたΔＲｅｍ
【表４】
2013541356.tif 000005
【００９７】
列１ｂは、洗剤１を用いた２０℃における通常の洗浄の結果を示す。
列１ｃは、洗剤１＋酵素を用いた２０℃における通常の洗浄の結果を示す。
列１ｄは、洗剤１を用いた２０℃における２段階洗浄の結果を示す。
列１ｅは、洗剤１＋酵素を用いた２０℃における２段階洗浄の結果を示す。
【００９８】
結論：２段階洗浄方法は、更なる酵素の存在又は不存在に関わらず、ベンチマークと比較して改善した清浄を提供する。これは、それぞれ酵素の不存在下において１．３７、酵素の存在下において１．２９である、方法相関清浄指数（ＰＲＣＩ）から明らかである。
【００９９】
実施例２：洗剤２を用いた洗浄
洗剤２は、酵素を含むｐＨ約７．９〜８．０の液体製剤である。各洗浄について、下記に挙げられる０．６００ｇの量の洗剤組成物を用いた。
【０１００】
表２Ａ：洗剤２の組成
【表５】
2013541356.tif 000006
【０１０１】
表２Ｂ：用いられる界面活性剤及び酵素の量
【表６】
2013541356.tif 000007
【０１０２】
表２Ｃ：洗剤２中で洗浄された材料標本について計算されたΔＲｅｍ
【表７】
2013541356.tif 000008
【０１０３】
列２ａは、洗剤２を用いた４０℃における通常の洗浄の結果を示す。
列２ｂは、洗剤２を用いた２０℃における通常の洗浄の結果を示す。
列２ｃは、洗剤２＋酵素を用いた２０℃における通常の洗浄の結果を示す。
列２ｄは、洗剤２を用いた２０℃における２段階洗浄の結果を示す。
列２ｅは、洗剤２＋酵素を用いた２０℃における２段階洗浄の結果を示す。
【０１０４】
結論：結果は、２０℃における酵素を含む２段階洗浄方法の全体的な（合計）洗浄性能（列ｅ）は、４０℃における通常の洗浄（列ａ）と比較して高いことを示す。２段階洗浄方法は、更なる酵素の存在又は不存在に関わらず、ベンチマークと比較して改善した清浄を提供する。これは、それぞれ酵素の不存在下において１．０７、酵素の存在下において１．２２である、方法相関清浄指数（ＰＲＣＩ）から明らかである。
【０１０５】
実施例３：洗剤３を用いた洗浄
洗剤３は、酵素を含むｐＨ約８．０〜８．１の液体製剤である。各洗浄について、下記に挙げられる０．７５０ｇの量の洗剤組成物を用いた。
【０１０６】
表３Ａ：洗剤３の組成
【表８】
2013541356.tif 000009
【０１０７】
表３Ｂ：用いられる界面活性剤及び酵素の量
【表９】
2013541356.tif 000010
【０１０８】
表３Ｃ：洗剤３中で洗浄された材料標本について計算されたΔＲｅｍ
【表１０】
2013541356.tif 000011
【０１０９】
列３ａは、洗剤３を用いた４０℃における通常の洗浄の結果を示す。
列３ｂは、洗剤３を用いた２０℃における通常の洗浄の結果を示す。
列３ｃは、洗剤３＋酵素を用いた２０℃における通常の洗浄の結果を示す。
列３ｄは、洗剤３を用いた２０℃における２段階洗浄の結果を示す。
列３ｅは、洗剤３＋酵素を用いた２０℃における２段階洗浄の結果を示す。
【０１１０】
結論：結果は、２０℃における酵素を含む２段階洗浄方法の全体的な（合計）洗浄性能（列ｅ）は、４０℃における通常の洗浄（列ａ）と比較して高いことを示す。２段階洗浄方法は、更なる酵素の存在又は不存在に関わらず、ベンチマークと比較して改善した清浄を提供する。これは、それぞれ酵素の不存在下において１．１６、酵素の存在下において１．２２である、方法相関清浄指数（ＰＲＣＩ）から明らかである。
【０１１１】
実施例３−ＩＩ：様々な量の洗剤３を用いた洗浄
【０１１２】
表３−ＩＩＢ：用いられる界面活性剤及び酵素の量
【表１１】
2013541356.tif 000012
【０１１３】
表３−ＩＩＣ：様々な量の洗剤３中で洗浄された材料標本について計算されたΔＲｅｍ
【表１２】
2013541356.tif 000013
【０１１４】
【表１３】
2013541356.tif 000014
【０１１５】
【表１４】
2013541356.tif 000015
【０１１６】
【表１５】
2013541356.tif 000016
【０１１７】
列３ＩＩａは、１００％洗剤３を用いた４０℃における通常の洗浄の結果を示す。
列３ＩＩｂは、１００％洗剤３を用いた２０℃における通常の洗浄の結果を示す。
列３ＩＩｃは、９０％洗剤３を用いた２０℃における通常の洗浄の結果を示す。
列３ＩＩｄは、８０％洗剤３を用いた２０℃における通常の洗浄の結果を示す。
列３ＩＩｅは、７０％洗剤３を用いた２０℃における通常の洗浄の結果を示す。
列３ＩＩｆは、６０％洗剤３を用いた２０℃における通常の洗浄の結果を示す。
列３ＩＩｇは、５０％洗剤３を用いた２０℃における通常の洗浄の結果を示す。
【０１１８】
列３ＩＩｈは、１００％洗剤３＋２1/2用量の酵素混合物を用いた２０℃における通常の洗浄の結果を示す。
列３ＩＩｉは、９０％洗剤３＋２1/2用量の酵素混合物を用いた２０℃における通常の洗浄の結果を示す。
列３ＩＩｊは、８０％洗剤３＋２1/2用量の酵素混合物を用いた２０℃における通常の洗浄の結果を示す。
列３ＩＩｋは、７０％洗剤３＋２1/2用量の酵素混合物を用いた２０℃における通常の洗浄の結果を示す。
列３ＩＩｌは、６０％洗剤３＋２1/2用量の酵素混合物を用いた２０℃における通常の洗浄の結果を示す。
列３ＩＩｍは、５０％洗剤３＋２1/2用量の酵素混合物を用いた２０℃における通常の洗浄の結果を示す。
【０１１９】
列３ＩＩｎは、１００％洗剤３を用いた２０℃における２段階洗浄の結果を示す。
列３ＩＩｏは、９０％洗剤３を用いた２０℃における２段階洗浄の結果を示す。
列３ＩＩｐは、８０％洗剤３を用いた２０℃における２段階洗浄の結果を示す。
列３ＩＩｑは、７０％洗剤３を用いた２０℃における２段階洗浄の結果を示す。
列３ＩＩｒは、６０％洗剤３を用いた２０℃における２段階洗浄の結果を示す。
列３ＩＩｓは、５０％洗剤３を用いた２０℃における２段階洗浄の結果を示す。
【０１２０】
列３ＩＩｔは、１００％洗剤３＋２1/2用量の酵素混合物を用いた２０℃における２段階洗浄の結果を示す。
列３ＩＩｕは、９０％洗剤３＋２1/2用量の酵素混合物を用いた２０℃における２段階洗浄の結果を示す。
列３ＩＩｖは、８０％洗剤３＋２1/2用量の酵素混合物を用いた２０℃における２段階洗浄の結果を示す。
列３ＩＩｗは、７０％洗剤３＋２1/2用量の酵素混合物を用いた２０℃における２段階洗浄の結果を示す。
列３ＩＩｘは、６０％洗剤３＋２1/2用量の酵素混合物を用いた２０℃における２段階洗浄の結果を示す。
列３ＩＩｙは、５０％洗剤３＋２1/2用量の酵素混合物を用いた２０℃における２段階洗浄の結果を示す。
【０１２１】
結論：結果は、２０℃における酵素及び少なくとも８０％の洗剤用量を含む２段階洗浄方法の全体的な（合計）洗浄性能（列ｔ−ｖ）は、４０℃における通常の洗浄（列ａ）と比較して高いことを示す。２段階洗浄方法は、洗剤用量が少なくとも７０％（列ｎ−ｑ）である場合、更なる酵素の不存在下において、ベンチマークと比較して改善した清浄を提供し、これは方法相関清浄指数（ＰＲＣＩ）から明らかである。酵素の存在下において、２段階洗浄方法は、試験された全ての洗剤用量について、即ち少なくとも５０％（列ｔ−ｙ）において、ベンチマークと比較して改善した清浄を提供する。
【０１２２】
実施例３−ＩＩＩ：洗剤３及び様々な量の酵素を用いた洗浄
【０１２３】
表３−ＩＩＩＢ：用いられる界面活性剤及び酵素の量
【表１６】
2013541356.tif 000017
【０１２４】
【表１７】
2013541356.tif 000018
【０１２５】
表３−ＩＩＩＣ：様々な量の酵素を含む洗剤３中で洗浄された材料標本について計算されたΔＲｅｍ
【表１８】
2013541356.tif 000019
【０１２６】
【表１９】
2013541356.tif 000020
【０１２７】
【表２０】
2013541356.tif 000021
【０１２８】
【表２１】
2013541356.tif 000022
【０１２９】
列３ＩＩＩａは、洗剤３を用いた４０℃における通常の洗浄の結果を示す。
列３ＩＩＩｂは、洗剤３を用いた２０℃における通常の洗浄の結果を示す。
列３ＩＩＩｃは、洗剤３＋1/4用量の酵素混合物を用いた２０℃における通常の洗浄の結果を示す。
列３ＩＩＩｄは、洗剤３＋1/2用量の酵素混合物を用いた２０℃における通常の洗浄の結果を示す。
列３ＩＩＩｅは、洗剤３＋１用量の酵素混合物を用いた２０℃における通常の洗浄の結果を示す。
列３ＩＩＩｆは、洗剤３＋１1/2用量の酵素混合物を用いた２０℃における通常の洗浄の結果を示す。
列３ＩＩＩｇは、洗剤３＋２用量の酵素混合物を用いた２０℃における通常の洗浄の結果を示す。
列３ＩＩＩｈは、洗剤３＋２1/2用量の酵素混合物を用いた２０℃における通常の洗浄の結果を示す。
列３ＩＩＩｉは、洗剤３＋３用量の酵素混合物を用いた２０℃における通常の洗浄の結果を示す。
【０１３０】
列３ＩＩＩｊは、洗剤３を用いた２０℃における２段階洗浄の結果を示す。
列３ＩＩＩｋは、洗剤３＋1/4用量の酵素混合物を用いた２０℃における２段階洗浄の結果を示す。
列３ＩＩＩｌは、洗剤３＋1/2用量の酵素混合物を用いた２０℃における２段階洗浄の結果を示す。
列３ＩＩＩｍは、洗剤３＋１用量の酵素混合物を用いた２０℃における２段階洗浄の結果を示す。
列３ＩＩＩｎは、洗剤３＋１1/2用量の酵素混合物を用いた２０℃における２段階洗浄の結果を示す。
列３ＩＩＩｏは、洗剤３＋２用量の酵素混合物を用いた２０℃における２段階洗浄の結果を示す。
列３ＩＩＩｐは、洗剤３＋２1/2用量の酵素混合物を用いた２０℃における２段階洗浄の結果を示す。
列３ＩＩＩｑは、洗剤３＋３用量の酵素混合物を用いた２０℃における２段階洗浄の結果を示す。
【０１３１】
結論：結果は、２０℃における酵素を含む２段階洗浄方法の全体的な（合計）洗浄性能（列ｋ−ｑ）は、４０℃における通常の洗浄（列ａ）と比較して高いことを示す。２段階洗浄方法を用いて得られる相対的洗浄性能（ＲＷＰ）は、酵素の量の増加に伴い増加する。２段階洗浄方法は、更なる酵素の存在又は不存在に関わらず、ベンチマークと比較して改善した清浄を提供する。これは、それぞれ酵素の不存在下において１．０５（列ｊ）、酵素の存在下において１．１３〜１．２２（列ｋ−ｑ）である、方法相関清浄指数（ＰＲＣＩ）から明らかである。２段階洗浄方法は、同一の温度における通常の洗浄と比較して、改善した酵素に基づく清浄を提供し、これは酵素関連清浄指数（ＥＲＣＩ）から明らかである。
【０１３２】
実施例４：洗剤４を用いた洗浄
洗剤４は、酵素を含まないｐＨ約８．２５〜８．３０の液体製剤である。各洗浄について、下記に挙げられる０．５８０ｇの量の洗剤組成物を用いた。
【０１３３】
表４Ａ：洗剤４の組成
【表２２】
2013541356.tif 000023
【０１３４】
表４Ｂ：用いられる界面活性剤及び酵素の量
【表２３】
2013541356.tif 000024
【０１３５】
表４Ｃ：洗剤４中で洗浄された材料標本について計算されたΔＲｅｍ
【表２４】
2013541356.tif 000025
【０１３６】
【表２５】
2013541356.tif 000026
【０１３７】
【表２６】
2013541356.tif 000027
【０１３８】
列４ａは、洗剤４を用いた４０℃における通常の洗浄の結果を示す。
列４ｂは、洗剤４を用いた２０℃における通常の洗浄の結果を示す。
列４ｃは、洗剤４＋酵素を用いた２０℃における通常の洗浄の結果を示す。
列４ｄは、洗剤４を用いた２０℃における２段階洗浄の結果を示す。
列４ｅは、洗剤４＋酵素を用いた２０℃における２段階洗浄の結果を示す。
列４ｆは、洗剤４を用いた１５℃における通常の洗浄の結果を示す。
列４ｇは、洗剤４＋酵素を用いた１５℃における通常の洗浄の結果を示す。
列４ｈは、洗剤４を用いた１５℃における２段階洗浄の結果を示す。
列４ｉは、洗剤４＋酵素を用いた１５℃における２段階洗浄の結果を示す。
列４ｊは、洗剤４を用いた１０℃における通常の洗浄の結果を示す。
列４ｋは、洗剤４＋酵素を用いた１０℃における通常の洗浄の結果を示す。
列４ｌは、洗剤４を用いた１０℃における２段階洗浄の結果を示す。
列４ｍは、洗剤４＋酵素を用いた１０℃における２段階洗浄の結果を示す。
【０１３９】
結論：結果は、２０℃（列ｅ）、１５℃（列ｉ）及び１０℃（列ｍ）における酵素を含む２段階洗浄方法の全体的な（合計）洗浄性能は、４０℃における通常の洗浄（列ａ）と比較して高いことを示す。２段階洗浄方法は、更なる酵素の存在又は不存在に関わらず、ベンチマークと比較して改善した清浄を提供する。これは、酵素の不存在又は存在下で、それぞれ２０℃において１．１７と１．１６、１５℃において１．０６と１．２５、１０℃において１．０５と１．３８である方法相関清浄指数（ＰＲＣＩ）から明らかである。
【０１４０】
実施例５：洗剤５を用いた洗浄
洗剤５は、酵素を含まないｐＨ約１０．７〜１１．１の液体製剤である。各洗浄について、下記に挙げられる０．６１０ｇの量の洗剤組成物を用いた。
【０１４１】
表５Ａ：洗剤５の組成
【表２７】
2013541356.tif 000028
【０１４２】
表５Ｂ：用いられる界面活性剤及び酵素の量
【表２８】
2013541356.tif 000029
【０１４３】
表５Ｃ：洗剤５中で洗浄された材料標本について計算されたΔＲｅｍ
【表２９】
2013541356.tif 000030
【０１４４】
列５ａは、洗剤５を用いた４０℃における通常の洗浄の結果を示す。
列５ｂは、洗剤５を用いた２０℃における通常の洗浄の結果を示す。
列５ｃは、洗剤５＋酵素を用いた２０℃における通常の洗浄の結果を示す。
列５ｄは、洗剤５を用いた２０℃における２段階洗浄の結果を示す。
列５ｅは、洗剤５＋酵素を用いた２０℃における２段階洗浄の結果を示す。
【０１４５】
結論：結果は、２０℃における酵素を含む２段階洗浄方法の全体的な（合計）洗浄性能（列ｅ）は、４０℃における通常の洗浄（列ａ）と比較して高いことを示す。２段階洗浄方法は、更なる酵素の存在又は不存在に関わらず、ベンチマークと比較して改善した清浄を提供する。これは、それぞれ酵素の不存在下において１．０６、酵素の存在下において１．１４である方法相関清浄指数（ＰＲＣＩ）から明らかである。
【０１４６】
実施例６：洗剤６を用いた洗浄
洗剤６は、酵素を含まないが漂白剤（過炭酸塩）を含むｐＨ約１１．０〜１１．５の粉末製剤である。各洗浄について、下記に挙げられる１．２９０ｇの量の洗剤組成物を用いた。
【０１４７】
表６Ａ：洗剤６の組成
【表３０】
2013541356.tif 000031
【０１４８】
表６Ｂ：用いられる界面活性剤及び酵素の量
【表３１】
2013541356.tif 000032
【０１４９】
表６Ｃ：洗剤６中で洗浄された材料標本について計算されたΔＲｅｍ
【表３２】
2013541356.tif 000033
【０１５０】
列６ａは、洗剤６を用いた４０℃における通常の洗浄の結果を示す。
列６ｂは、洗剤６を用いた２０℃における通常の洗浄の結果を示す。
列６ｃは、洗剤６＋酵素を用いた２０℃における通常の洗浄の結果を示す。
列６ｄは、洗剤６を用いた２０℃における２段階洗浄の結果を示す。
列６ｅは、洗剤６＋酵素を用いた２０℃における２段階洗浄の結果を示す。
【０１５１】
結論：結果は、２０℃における酵素を含む２段階洗浄方法の全体的な（合計）洗浄性能（列ｅ）は、４０℃における通常の洗浄（列ａ）と比較して高いことを示す。２段階洗浄方法は、更なる酵素の存在又は不存在に関わらず、ベンチマークと比較して改善した清浄を提供する。これは、それぞれ酵素の不存在下において１．０８、酵素の存在下において１．０９である、方法相関清浄指数（ＰＲＣＩ）から明らかである。
【０１５２】
実施例７：洗剤７を用いた洗浄
洗剤７は、酵素を含むｐＨ約８．０〜８．２の液体製剤である。各洗浄について、下記に挙げられる０．５８０ｇの量の洗剤組成物を用いた。
【０１５３】
表７Ａ：洗剤７の組成
【表３３】
2013541356.tif 000034
【０１５４】
表７Ｂ：用いられる界面活性剤及び酵素の量
【表３４】
2013541356.tif 000035
【０１５５】
表７Ｃ：洗剤７中で洗浄された材料標本について計算されたΔＲｅｍ
【表３５】
2013541356.tif 000036
【０１５６】
列７ａは、洗剤７を用いた４０℃における通常の洗浄の結果を示す。
列７ｂは、洗剤７を用いた２０℃における通常の洗浄の結果を示す。
列７ｃは、洗剤７＋酵素を用いた２０℃における通常の洗浄の結果を示す。
列７ｄは、洗剤７を用いた２０℃における２段階洗浄の結果を示す。
列７ｅは、洗剤７＋酵素を用いた２０℃における２段階洗浄の結果を示す。
【０１５７】
結論：結果は、２０℃における酵素を含む２段階洗浄方法の全体的な（合計）洗浄性能（列ｅ）は、４０℃における通常の洗浄（列ａ）と比較して高いことを示す。２段階洗浄方法は、更なる酵素の存在又は不存在に関わらず、ベンチマークと比較して改善した清浄を提供する。これは、それぞれ酵素の不存在下において１．１５、酵素の存在下において１．１７である、方法相関清浄指数（ＰＲＣＩ）から明らかである。
【０１５８】
実施例８：洗剤８を用いた洗浄
洗剤８は、酵素を含むｐＨ約９．１〜９．２の液体製剤である。各洗浄について、下記に挙げられる０．５７０ｇの量の洗剤組成物を用いた。
【０１５９】
表８Ａ：洗剤８の組成
【表３６】
2013541356.tif 000037
【０１６０】
表８Ｂ：用いられる界面活性剤及び酵素の量
【表３７】
2013541356.tif 000038
【０１６１】
表８Ｃ：洗剤８中で洗浄された材料標本について計算されたΔＲｅｍ
【表３８】
2013541356.tif 000039
【０１６２】
列８ａは、洗剤８を用いた４０℃における通常の洗浄の結果を示す。
列８ｂは、洗剤８を用いた２０℃における通常の洗浄の結果を示す。
列８ｃは、洗剤８＋酵素を用いた２０℃における通常の洗浄の結果を示す。
列８ｄは、洗剤８を用いた２０℃における２段階洗浄の結果を示す。
列８ｅは、洗剤８＋酵素を用いた２０℃における２段階洗浄の結果を示す。
【０１６３】
結論：結果は、２０℃における酵素を含む２段階洗浄方法の全体的な（合計）洗浄性能（列ｅ）は、４０℃における通常の洗浄（列ａ）と比較して高いことを示す。２段階洗浄方法は、更なる酵素の存在又は不存在に関わらず、ベンチマークと比較して改善した清浄を提供する。これは、それぞれ酵素の不存在下において１．１３、酵素の存在下において１．０７である、方法相関清浄指数（ＰＲＣＩ）から明らかである。
【０１６４】
実施例９：洗剤９を用いた洗浄
洗剤９は、酵素を含まず、低レベルの界面活性剤を含む、ｐＨ約１０．６〜１０．８の液体製剤である。各洗浄について、下記に挙げられる０．５８０ｇの量の洗剤組成物を用いた。
【０１６５】
表９Ａ：洗剤９の組成
【表３９】
2013541356.tif 000040
【０１６６】
表９Ｂ：用いられる界面活性剤及び酵素の量
【表４０】
2013541356.tif 000041
【０１６７】
表９Ｃ：洗剤９中で洗浄された材料標本について計算されたΔＲｅｍ
【表４１】
2013541356.tif 000042
【０１６８】
列９ａは、洗剤９を用いた４０℃における通常の洗浄の結果を示す。
列９ｂは、洗剤９を用いた２０℃における通常の洗浄の結果を示す。
列９ｃは、洗剤９＋酵素を用いた２０℃における通常の洗浄の結果を示す。
列９ｄは、洗剤９を用いた２０℃における２段階洗浄の結果を示す。
列９ｅは、洗剤９＋酵素を用いた２０℃における２段階洗浄の結果を示す。
【０１６９】
結論：結果は、２０℃における酵素を含む２段階洗浄方法の全体的な（合計）洗浄性能（列ｅ）は、４０℃における通常の洗浄（列ａ）と比較して高いことを示す。２段階洗浄方法は、更なる酵素の存在又は不存在に関わらず、ベンチマークと比較して改善した清浄を提供する。これは、それぞれ酵素の不存在下において１．１４、酵素の存在下において１．２７である、方法相関清浄指数（ＰＲＣＩ）から明らかである。
【０１７０】
実施例１０：洗剤１０を用いた洗浄
洗剤１０は、酵素を含まず、低レベルの界面活性剤を含む、ｐＨ約８．１〜８．３の液体製剤である。各洗浄について、下記に挙げられる０．５６０ｇの量の洗剤組成物を用いた。
【０１７１】
表１０Ａ：洗剤１０の組成
【表４２】
2013541356.tif 000043
【０１７２】
表１０Ｂ：用いられる界面活性剤及び酵素の量
【表４３】
2013541356.tif 000044
【０１７３】
表１０Ｃ：洗剤１０中で洗浄された材料標本について計算されたΔＲｅｍ
【表４４】
2013541356.tif 000045
【０１７４】
列１０ａは、洗剤１０を用いた４０℃における通常の洗浄の結果を示す。
列１０ｂは、洗剤１０を用いた２０℃における通常の洗浄の結果を示す。
列１０ｃは、洗剤１０＋酵素を用いた２０℃における通常の洗浄の結果を示す。
列１０ｄは、洗剤１０を用いた２０℃における２段階洗浄の結果を示す。
列１０ｅは、洗剤１０＋酵素を用いた２０℃における２段階洗浄の結果を示す。
【０１７５】
結論：結果は、２０℃における酵素を含む２段階洗浄方法の全体的な（合計）洗浄性能（列ｅ）は、４０℃における通常の洗浄（列ａ）と比較して高いことを示す。２段階洗浄方法は、更なる酵素の存在又は不存在に関わらず、ベンチマークと比較して改善した清浄を提供する。これは、それぞれ酵素の不存在下において１．１４、酵素の存在下において１．０７である、方法相関清浄指数（ＰＲＣＩ）から明らかである。
【０１７６】
実施例１１：洗剤１１を用いた洗浄
洗剤１１は、酵素を含まず、低レベルの界面活性剤を含む、ｐＨ約１１．２〜１１．４の液体製剤である。各洗浄について、下記に挙げられる０．５８０ｇの量の洗剤組成物を用いた。
【０１７７】
表１１Ａ：洗剤１１の組成
【表４５】
2013541356.tif 000046
【０１７８】
表１１Ｂ：用いられる界面活性剤及び酵素の量
【表４６】
2013541356.tif 000047
【０１７９】
表１１Ｃ：洗剤１１中で洗浄された材料標本について計算されたΔＲｅｍ
【表４７】
2013541356.tif 000048
【０１８０】
列１１ａは、洗剤１１を用いた４０℃における通常の洗浄の結果を示す。
列１１ｂは、洗剤１１を用いた２０℃における通常の洗浄の結果を示す。
列１１ｃは、洗剤１１＋酵素を用いた２０℃における通常の洗浄の結果を示す。
列１１ｄは、洗剤１１を用いた２０℃における２段階洗浄の結果を示す。
列１１ｅは、洗剤１１＋酵素を用いた２０℃における２段階洗浄の結果を示す。
【０１８１】
結論：結果は、２０℃における酵素を含む２段階洗浄方法の全体的な（合計）洗浄性能（列ｅ）は、４０℃における通常の洗浄（列ａ）と比較して高いことを示す。２段階洗浄方法は、更なる酵素の存在又は不存在に関わらず、ベンチマークと比較して改善した清浄を提供する。これは、それぞれ酵素の不存在下において１．０９、酵素の存在下において１．０７である、方法相関清浄指数（ＰＲＣＩ）から明らかである。
【０１８２】
実施例１２：洗剤１２を用いたＴＯＭ洗浄及び大スケールフロントロード式洗浄
洗剤１２は、酵素を含まないｐＨ約１０．７の粉末製剤である。小スケール洗浄について０．５８０ｇの量の、各大スケール洗浄について６５ｇの量の下記に挙げられる洗剤組成物を用いた。
【０１８３】
表１２Ａａ：小スケール洗浄のための洗剤１２の組成
【表４８】
2013541356.tif 000049
【０１８４】
表１２Ａｂ：大スケール洗浄のための洗剤１２の組成
【表４９】
2013541356.tif 000050
【０１８５】
表１２Ｂａ：小スケール洗浄に用いられる界面活性剤及び酵素の量
【表５０】
2013541356.tif 000051
【０１８６】
表１２Ｂｂ：大スケール洗浄に用いられる界面活性剤及び酵素の量
【表５１】
2013541356.tif 000052
【０１８７】
大スケールフロントロード式洗浄デバイスの説明
バラスト：合計重量２．６ｋｇの６つの綿Ｔシャツ、８つのシャツ、及び１つのｔ−タオルをバラスト織物として用いた。バラストを、ＥＵフロントロード機械において水道水中で洗浄プログラム：４０℃「ｋｏｇｅ／ｋｕｌｏｒｔ」を用い、酵素を含まない５ｇ／Ｌの液体の「中性」である市販の洗剤を用いて、予め洗浄した。１００ｍＬの５％酢酸を、リンスに添加した。第二のリンスをプログラム「ＳＴＩＶＥＬＳＥ」を用いて水道水中で行い、その後、バラストをタンブル乾燥した。試験洗浄後、バラストを、ＥＵフロントロード機械を用いて９５℃において水道水中で不活性化した。
【０１８８】
染みの付いた材料標本：洗浄の間、染みの付いた材料標本のうちの二つを、二つのｔ−タオルに取り付けた。洗浄後、全ての材料標本を、ｔ−タオルから除去し、濾紙の上に置き、暗所で一晩乾燥させた。材料標本を評価し、上述のようにデルタ減少値を計算した。
【０１８９】
酵素：以下の酵素：アミラーゼ、Ｃｅｌｌｕｃｌｅａｎ、Ｌｉｐｅｘ、Ｓａｖｉｎａｓｅを、表ＩＩに示す濃度で用いた。Ｃｅｌｌｕｃｌｅａｎを洗剤とともに添加し、１０分間撹拌した。液体酵素を、使用の直前に、浸漬又は洗浄容量に添加した。
【０１９０】
洗剤：洗剤１２を、１洗浄あたり６５ｇに対応する５ｇ／Ｌ洗浄溶液の用量で用いた。
【０１９１】
水：水を所望の温度に加熱後、２．５ｍｌ／のＣａ／Ｍｇ  ４：１  ６０００°ｄＨ／Ｌストック溶液、及び７．５ｍｌ／Ｌの０．５３５Ｍ炭酸水素ナトリウムストック溶液の添加により、水硬度を１５°ｄＨに調整した。
【０１９２】
フロントロード式洗浄デバイス：Miele Profitronic PW 61601は、少ない水の容量、例えば濃縮浸漬洗浄を用いた洗浄のために設計されていない。好適な洗浄プログラムを、Profitronic M 1.1.214ソフトウェアを用いて設計した。通常の洗浄方法、及び濃縮浸漬洗浄のためのプログラム、並びにリンス１及びリンス２の濃縮浸漬洗浄のためのプログラムを、下記の表に概説する。冷たい水道水（２２°ｄＨ）を用いた二つのリンスプログラムを、全ての洗浄方法に施用した。
【０１９３】
Miele Profitronic PW6101洗浄プログラム
【表５２】
2013541356.tif 000053
【０１９４】
【表５３】
2013541356.tif 000054
【０１９５】
通常の洗浄方法（大スケール）：汚れた試験材料標本とともに、乾燥したバラスト織物と２つのｔ-タオルをMiele Profitronic PW6101に入れた。水温を、使用の前に２０℃に調節する。水硬度溶液を、洗剤１２を添加した４０００ｍｌの２０℃の脱イオン水の入ったビーカーに添加し、１０分間撹拌した。酵素が必要とされる場合、Ｃｅｌｌｕｃｌｅａｎを洗剤と共に添加し、他の酵素をMiele Profitronic PW6101に洗浄溶液を注ぐ直前にビーカーに添加した。１５°ｄＨの水硬度を有する２０℃の２ｘ４５００ｍＬの脱イオン水を作った。４０℃洗浄が設定される場合、水の温度は、約５５℃であるべきである。洗剤ディスペンサーに全ての３ビーカーの洗浄溶液を加え、プログラム１を開始する。
【０１９６】
２段階洗浄方法（大スケール）：使用の前に、水温を２０℃に調節した。水硬度溶液を、洗剤１２を添加した４０００ｍＬの２０℃の脱イオン水の入ったビーカーに添加し、１０分間撹拌した。酵素が必要とされる場合、Ｃｅｌｌｕｃｌｅａｎを洗剤と共に添加し、他の酵素をMiele Profitronic PW6101に洗浄溶液を注ぐ直前にビーカーに添加した。
【０１９７】
浸漬：乾燥したバラスト織物を３つの部分に分ける。１００Ｌの透明なプラスチックバッグに一つの部分を置き、汚れた試験材料標本とともに第一のｔ−タオルを上に置き、２Ｌの浸漬溶液を注ぐ。バラスト織物の第二の部分を上に加え、汚れた試験材料標本とともに第二のｔ−タオルをその上に置き、１．５Ｌの浸漬溶液を注ぐ。バラスト織物の第三の部分を加え、最後の１Ｌの浸漬溶液で湿潤させる。電工（electrician）プラスチックストリップでバッグをしっかりと閉じ、浸漬中に負荷を混合することが可能であるように、バッグ中に幾らかの空気を残した。Miele Profitronic PW6101中にバッグを置き、プログラム２を開始する。９分後にプログラムは停止する。
【０１９８】
洗浄：プラスチックバッグを切り開く。負荷を含むが上部が切り開かれたプラスチックバッグは、Miele Profitronic PW6101に残される。１５°ｄＨの水硬度を有する１ｘ４０００ｍｌ及び１ｘ５０００ｍｌの２０℃の脱イオン水を加える。プログラム２を継続する。
【０１９９】
表１２Ｃ：洗剤１２中で洗浄された材料標本について計算されたΔＲｅｍ
【表５４】
2013541356.tif 000055
【０２００】
【表５５】
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【０２０１】
列１２ａは、洗剤１２を用いた４０℃における通常の洗浄の結果を示す。
列１２ｂは、洗剤１２を用いた２０℃における通常の洗浄の結果を示す。
列１２ｃは、洗剤１２＋酵素を用いた２０℃における通常の洗浄の結果を示す。
列１２ｄは、洗剤１２を用いた２０℃における２段階洗浄の結果を示す。
列１２ｅは、洗剤１２＋酵素を用いた２０℃における２段階洗浄の結果を示す。
列１２ｆは、洗剤１２を用いた４０℃における通常の洗浄の結果を示す。
列１２ｇは、洗剤１２を用いた２０℃における通常の洗浄の結果を示す。
列１２ｈは、洗剤１２＋酵素を用いた２０℃における通常の洗浄の結果を示す。
列１２ｉは、洗剤１２を用いた２０℃における２段階洗浄の結果を示す。
列１２ｊは、洗剤１２＋酵素を用いた２０℃における２段階洗浄の結果を示す。
【０２０２】
結論：小スケールＴＯＭ洗浄についての結果（列ａ〜ｅ）は、２０℃における酵素を含む２段階洗浄方法の全体的な（合計）洗浄性能（列ｅ）は、４０℃における通常の洗浄（列ａ）と比較して高いことを示す。２段階洗浄方法は、更なる酵素の存在又は不存在に関わらず、ベンチマークと比較して改善した清浄を提供する。これは、それぞれ酵素の不存在下において１．１５、酵素の存在下において１．１１である、方法相関清浄指数（ＰＲＣＩ）から明らかである。
【０２０３】
大スケールフロントロード式洗浄についての結果（列ｆ〜ｊ）は、２０℃における酵素を含む２段階洗浄方法の全体的な（合計）洗浄性能（列ｊ）は、４０℃における通常の洗浄（列ｆ）と比較して高いことを示す。２段階洗浄方法は、更なる酵素の存在又は不存在に関わらず、ベンチマークと比較して改善した清浄を提供する。これは、それぞれ酵素の不存在下において１．６８、酵素の存在下において１．３９である、方法相関清浄指数（ＰＲＣＩ）から明らかである。
【０２０４】
ＴＯＭにおいて得られる洗浄データの比較は、大スケール洗浄のデータを代表する。
【０２０５】
実施例１３−洗剤１３を用いた大スケールトップロード式洗浄
洗剤１３Ａ及び洗剤１３Ｂは、ｐＨ約９．８の粉末製剤である。これらの洗剤は、洗剤１３Ａ中のプロテアーゼの存在を除いて同一である。前記酵素は、電子レンジでの処理により不活性化させた。各洗浄について、５０ｇの量の下記に挙げられる洗剤組成物を用いた。
【０２０６】
表１３Ａ：洗剤１３Ａと１３Ｂの組成
【表５６】
2013541356.tif 000057
【０２０７】
表１３Ｂ：用いられる界面活性剤及び酵素の量
【表５７】
2013541356.tif 000058
【０２０８】
大スケールトップロード式洗浄についての条件の説明
【表５８】
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【０２０９】
トップローダー洗浄デバイス：Royalstar XPB60-801Sトップローディング半自動洗浄機は、二つの洗浄ドラムを有する。一つは、洗浄方法のための大きなサイズであり、他方は、回転のための小さいサイズである。３つの制御ノブを、正面のパネル上に見つけることができる。ノブのうちの２つは、洗浄時間及び開店時間をそれぞれ制御するために設計される。中央の一つは、強力、通常の洗浄、及び排水オプションの間のスイッチとして設計される。従って、この種類の洗浄機の操作は、非常に単純である。水レベル（０〜６５リットル）、洗浄時間（０〜１５分）、浸漬時間、及び回転時間を、様々な洗浄条件に従って、手動で調整する。内部の撹拌器のエンジンを、水を投入することなく開始することができる。
【０２１０】
洗浄方法：浸漬溶液のための２４グラムの洗剤１３、洗浄溶液のための２６グラムの洗剤１３を、ビーカーに別々に入れた。洗剤に含まれる酵素を、電子レンジで粉末を加熱することにより不活性化し、施用の前に室温に冷ました。３Ｌの水を各ビーカーに添加した。バラストと材料標本を大きなプラスチックバッグに置き、３Ｌの浸漬溶液をバッグに注ぎ、それを密閉し、しっかりと閉じた。プラスチックバッグを水の入っていない洗浄ドラムに置き、５分間の撹拌を施用した。３分の保持時間後、バッグを開き、水を合計で３８リットルまで洗浄ドラムに添加した。洗浄ドラムに洗浄溶液を添加し、１０分間の洗浄のために撹拌を開始した。この後、２回リンスし（５分、３８リットル）、最後に回転させた（５分）。試験材料標本をティータオルから取り除き、暗所、室温で乾燥のために一晩、濾紙の上に置いた。材料標本を上述のように評価した。
【０２１１】
表１３Ｃ：洗剤１３Ａ又は１３Ｂ中で洗浄された材料標本について計算されたΔＲｅｍ
【表５９】
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【０２１２】
列１３ａは、５０ｇ洗剤１３Ａを用いた４０℃における通常の洗浄の結果を示す。
列１３ｂは、５０ｇ洗剤１３Ａを用いた２０℃における通常の洗浄の結果を示す。
列１３ｃは、５０ｇ洗剤１３Ｂを用いた２０℃における通常の洗浄の結果を示す。
列１３ｄは、５０ｇ洗剤１３Ｂ＋酵素を用いた２０℃における通常の洗浄の結果を示す。
列１３ｅは、２０℃における２４ｇ（浸漬溶液中）＋２６ｇ（洗浄溶液中）の洗剤１３Ｂを用いた２段階洗浄の結果を示す。
列１３ｆは、２０℃における２４ｇ（浸漬溶液中）＋２６ｇ（洗浄溶液中）の洗剤１３Ｂ＋酵素を用いた２段階洗浄の結果を示す。
列１３ｇは、２０℃における２４ｇ（浸漬溶液中）＋０ｇ（洗浄溶液中）の洗剤１３Ｂを用いた２段階洗浄の結果を示す。
列１３ｈは、２０℃における２４ｇ（浸漬溶液中）＋０ｇ（洗浄溶液中）の洗剤１３Ｂ＋酵素を用いた２段階洗浄の結果を示す。
【０２１３】
結論：結果は、２段階洗浄方法における洗剤の量を初期量の約半分まで減少させた場合、通常の洗浄と少なくとも同レベルで洗浄性能が維持されることを示す（列ｃとｇ、及び列ｄとｈを比較）。この効果は、洗剤が洗浄溶液中から除かれた場合に得られ、これは洗浄方法が、浸漬溶液中に存在する洗剤＋／−酵素のみで有効であることを示す。
【０２１４】
これらの態様は、本発明のいくつかの態様の例証として意図されるので、本明細書で記載され、請求される本発明は、本明細書で開示される特定の態様により範囲を限定するものではない。任意の同等の態様は、本発明の範囲内であることを意図する。実際、本明細書に示され、記載されるものに加えて、本発明の様々な改変は、上述の記載から当業者に明らかになる。かかる改変はまた、特許請求の範囲内であることを意図する。矛盾する場合、定義を含む本開示が支配する。
【国際調査報告】
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