(57)【要約】  本発明は、新規式Ｉ2013518904.tif 000031(式中、Ａ、Ｙ、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４およびＲ５は発明の概要において定義したとおりである)の化合物群、かかる化合物を含む医薬組成物および異常なまたは脱制御されたキナーゼ活性と関連する疾患または障害、特にＢ−Ｒａｆの異常な活性化が関与する疾患または障害の処置または予防のためにかかる化合物を使用する方法に関する。
2013518904.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
式Ｉ：
【化１】
2013518904.tif 000027
〔式中、Ａはａおよびｂ：
【化２】
2013518904.tif 000028
から選択され、
ここで、
Ｇ１はＮまたはＣＲ８から選択され；Ｒ８は水素、ハロ、シアノならびに場合によりヒドロキシ、ハロ、シアノ、オキソ、Ｃ１−４アルキル、ハロ置換Ｃ１−４アルキル、Ｃ１−４アルコキシ、ハロ置換Ｃ１−４アルコキシおよびＮＨＣ(Ｏ)ＯＲ９から独立して選択される１〜３個の基で置換されていてよいＣ１−４アルキルから選択され；ここで、Ｒ９は場合によりヒドロキシ、ハロ、シアノ、Ｃ１−４アルキル、ハロ置換Ｃ１−４アルキル、Ｃ１−４アルコキシおよびハロ置換Ｃ１−４アルコキシから独立して選択される１〜３個の基で置換されていてよいＣ１−４アルキルであり；
ｎは０、１および２から選択され；
Ｒ１は水素、Ｃ１−４アルキルおよび−ＮＨＲ２０から選択され、ここで、Ｒ２０は水素ならびに場合によりヒドロキシ、ハロ、シアノ、Ｃ１−４アルキル、ハロ置換Ｃ１−４アルキル、Ｃ１−４アルコキシ、ハロ置換Ｃ１−４アルコキシ、ＮＨＣ(Ｏ)ＯＲ１０およびＳ(Ｏ)０−２Ｒ１０から独立して選択される１〜３個の基で置換されていてよいＣ１−４アルキルから選択され；ここで、Ｒ１０は場合によりヒドロキシ、ハロ、シアノ、Ｃ１−４アルキル、ハロ置換Ｃ１−４アルキル、Ｃ１−４アルコキシおよびハロ置換Ｃ１−４アルコキシから独立して選択される１〜３個の基で置換されていてよいＣ１−４アルキルであり；
Ｒ２およびＲ３は独立して水素、ハロ、シアノ、Ｃ１−４アルキル、ハロ置換Ｃ１−４アルキル、Ｃ１−４アルコキシおよびハロ置換Ｃ１−４アルコキシから選択され；
Ｒ４はＣ１−６アルキル、Ｃ３−８シクロアルキル、Ｃ３−８ヘテロシクロアルキル、Ｃ６−１０アリールならびにＮ、ＯおよびＳから選択される１〜３個のヘテロ原子を含む５〜８員ヘテロアリールから選択され；ここで、該アルキル、シクロアルキル、ヘテロシクロアルキル、アリールまたはヘテロアリールは、場合によりハロ、シアノ、Ｃ１−４アルキル、ハロ置換Ｃ１−４アルキル、Ｃ１−４アルコキシおよびハロ置換Ｃ１−４アルコキシから独立して選択される１〜３個の基で置換されていてよく；
Ｒ５は水素、ハロ、シアノ、Ｃ１−４アルキル、ハロ置換Ｃ１−４アルキル、Ｃ１−４アルコキシおよびハロ置換Ｃ１−４アルコキシから選択され；
Ｒ６は水素ならびに場合によりＣ６−１０アリールおよびＣ３−８シクロアルキルから選択される１個の基で置換されていてよいＣ１−４アルキルから選択され；ここで、Ｒ６の該アルキル、シクロアルキルまたはアリール基は場合によりヒドロキシ、ハロ、シアノおよびＣ１−４アルコキシから独立して選択される１〜３個の基で置換されていてよい。〕
の化合物またはその薬学的に許容される塩。
【請求項２】
式Ｉａ：
【化３】
2013518904.tif 000029
〔式中：
ｎは０、１および２から選択され；
Ｒ２０は場合によりヒドロキシ、ハロ、シアノ、Ｃ１−４アルキル、ハロ置換Ｃ１−４アルキル、Ｃ１−４アルコキシ、ハロ置換Ｃ１−４アルコキシ、ＮＨＣ(Ｏ)ＯＲ１０およびＳ(Ｏ)０−２Ｒ１０から独立して選択される１〜３個の基で置換されていてよいＣ１−４アルキルから選択され；ここで、Ｒ１０は場合によりヒドロキシ、ハロ、シアノ、Ｃ１−４アルキル、ハロ置換Ｃ１−４アルキル、Ｃ１−４アルコキシおよびハロ置換Ｃ１−４アルコキシから独立して選択される１〜３個の基で置換されていてよいＣ１−４アルキルであり；
Ｒ２およびＲ３は独立して水素、ハロ、シアノ、Ｃ１−４アルキル、ハロ置換Ｃ１−４アルキル、Ｃ１−４アルコキシおよびハロ置換Ｃ１−４アルコキシから選択され；
Ｒ４はＣ１−６アルキル、Ｃ３−８シクロアルキル、Ｃ３−８ヘテロシクロアルキル、Ｃ６−１０アリールならびにＮ、ＯおよびＳから選択される１〜３個のヘテロ原子を含む５〜８員ヘテロアリールから選択され；ここで、該アルキル、シクロアルキル、ヘテロシクロアルキル、アリールまたはヘテロアリールは、場合によりハロ、シアノ、Ｃ１−４アルキル、ハロ置換Ｃ１−４アルキル、Ｃ１−４アルコキシおよびハロ置換Ｃ１−４アルコキシから独立して選択される１〜３個の基で置換されていてよく；
Ｒ５は水素、ハロ、シアノ、Ｃ１−４アルキル、ハロ置換Ｃ１−４アルキル、Ｃ１−４アルコキシおよびハロ置換Ｃ１−４アルコキシから選択され；
Ｒ６は水素ならびに場合によりＣ６−１０アリールおよびＣ３−８シクロアルキルから選択される１個の基で置換されていてよいＣ１−４アルキルから選択され；ここで、Ｒ６の該アルキル、シクロアルキルまたはアリール基は場合によりヒドロキシ、ハロ、シアノおよびＣ１−４アルコキシから独立して選択される１〜３個の基で置換されていてよい。〕
である、請求項１記載の化合物。
【請求項３】
ｎが０であり；
Ｒ２０がメチルおよびエチルから選択され；ここで、該メチルおよびエチルは、場合によりシアノ、トリフルオロメチル、メチル−スルホニル、ハロおよびメチルから独立して選択される１〜３個の基で置換されていてよく；
Ｒ２がフルオロであり；
Ｒ３が水素であり；
Ｒ４がプロピルおよび３,３,３−トリフルオロプロピルから選択され；
Ｒ５がフルオロおよびクロロから選択される、
請求項２に記載の化合物。
【請求項４】
Ｎ−(４−(３−(６−(エチルアミノ)ピリミジン−４−イル)ピラジン−２−イルアミノ)−３,５−ジフルオロピリジン−２−イル)プロパン−１−スルホンアミド；Ｎ−(４−(３−(６−(２−シアノエチルアミノ)ピリミジン−４−イル)ピラジン−２−イルアミノ)−３,５−ジフルオロピリジン−２−イル)プロパン−１−スルホンアミド；Ｎ−(３,５−ジフルオロ−４−(３−(６−(３,３,３−トリフルオロプロピルアミノ)ピリミジン−４−イル)ピラジン−２−イルアミノ)ピリジン−２−イル)プロパン−１−スルホンアミド；Ｎ−(４−(３−(６−(２,２−ジフルオロエチルアミノ)ピリミジン−４−イル)ピラジン−２−イルアミノ)−３,５−ジフルオロピリジン−２−イル)プロパン−１−スルホンアミド；Ｎ−(３,５−ジフルオロ−４−(３−(６−(メチルアミノ)ピリミジン−４−イル)ピラジン−２−イルアミノ)ピリジン−２−イル)プロパン−１−スルホンアミド；Ｎ−(３−クロロ−４−(３−(６−(エチルアミノ)ピリミジン−４−イル)ピラジン−２−イルアミノ)−５−フルオロピリジン−２−イル)プロパン−１−スルホンアミド；Ｎ−(３,５−ジフルオロ−４−(３−(６−(２,２,２−トリフルオロエチルアミノ)ピリミジン−４−イル)ピラジン−２−イルアミノ)ピリジン−２−イル)プロパン−１−スルホンアミド；Ｎ−(３,５−ジフルオロ−４−(３−(６−(２−(メチルスルホニル)エチルアミノ)ピリミジン−４−イル)ピラジン−２−イルアミノ)ピリジン−２−イル)プロパン−１−スルホンアミド；およびＮ−(４−((３−(６−((２−シアノエチル)アミノ)ピリミジン−４−イル)ピラジン−２−イル)アミノ)−３−フルオロピリジン−２−イル)プロパン−１−スルホンアミド
から選択される、請求項３に記載の化合物。
【請求項５】
式Ｉｂ：
【化４】
2013518904.tif 000030
〔式中：
Ｇ１はＮまたはＣＲ８から選択され；Ｒ８は水素ならびに場合によりヒドロキシ、ハロ、シアノ、Ｃ１−４アルキル、ハロ置換Ｃ１−４アルキル、Ｃ１−４アルコキシ、ハロ置換Ｃ１−４アルコキシおよびＮＨＣ(Ｏ)ＯＲ９から独立して選択される１〜３個の基で置換されていてよいＣ１−４アルキルから選択され；ここで、Ｒ９は場合によりヒドロキシ、ハロ、シアノ、Ｃ１−４アルキル、ハロ置換Ｃ１−４アルキル、Ｃ１−４アルコキシおよびハロ置換Ｃ１−４アルコキシから独立して選択される１〜３個の基で置換されていてよいＣ１−４アルキルであり；
Ｒ２０は場合によりヒドロキシ、ハロ、シアノ、Ｃ１−４アルキル、ハロ置換Ｃ１−４アルキル、Ｃ１−４アルコキシ、ハロ置換Ｃ１−４アルコキシ、ＮＨＣ(Ｏ)ＯＲ１０およびＳ(Ｏ)０−２Ｒ１０から独立して選択される１〜３個の基で置換されていてよいＣ１−４アルキルであり；ここで、Ｒ１０は場合によりヒドロキシ、ハロ、シアノ、Ｃ１−４アルキル、ハロ置換Ｃ１−４アルキル、Ｃ１−４アルコキシおよびハロ置換Ｃ１−４アルコキシから独立して選択される１〜３個の基で置換されていてよいＣ１−４アルキルであり；
Ｒ２およびＲ３は独立して水素、ハロ、シアノ、Ｃ１−４アルキル、ハロ置換Ｃ１−４アルキル、Ｃ１−４アルコキシおよびハロ置換Ｃ１−４アルコキシから選択され；
Ｒ４はＣ１−６アルキル、Ｃ３−８シクロアルキル、Ｃ３−８ヘテロシクロアルキル、Ｃ６−１０アリールならびにＮ、ＯおよびＳから選択される１〜３個のヘテロ原子を含む５〜８員ヘテロアリールから選択され；ここで、該アルキル、シクロアルキル、ヘテロシクロアルキル、アリールまたはヘテロアリールは、場合によりハロ、シアノ、Ｃ１−４アルキル、ハロ置換Ｃ１−４アルキル、Ｃ１−４アルコキシおよびハロ置換Ｃ１−４アルコキシから独立して選択される１〜３個の基で置換されていてよく；
Ｒ５は水素、ハロ、シアノ、Ｃ１−４アルキル、ハロ置換Ｃ１−４アルキル、Ｃ１−４アルコキシおよびハロ置換Ｃ１−４アルコキシから選択され；
Ｒ６は水素および場合によりＣ６−１０アリールおよびＣ３−８シクロアルキルから選択される１個の基で置換されていてよいＣ１−４アルキルから選択され；ここで、Ｒ６の該アルキル、シクロアルキルまたはアリール基は場合によりヒドロキシ、ハロ、シアノおよびＣ１−４アルコキシから独立して選択される１〜３個の基で置換されていてよい。〕
である、請求項１に記載の化合物。
【請求項６】
Ｇ１がＮまたはＣＨから選択され；
Ｒ２０がメチルおよびエチルから選択され；ここで、該メチルおよびエチルは、場合によりシアノ、トリフルオロメチル、メトキシ−カルボニル−アミノ、ハロおよびメチルから独立して選択される１〜３個の基で置換されていてよく；
Ｒ２がフルオロであり；
Ｒ３が水素であり；
Ｒ４がプロピルまたは場合によりトリフルオロメチルで置換されていてよいエチルであり；
Ｒ５がフルオロおよびクロロから選択され；
Ｒ６がメチルである、
請求項５に記載の化合物。
【請求項７】
Ｎ−(４−(７−(エチルアミノ)−１−メチル−２−オキソ−１,２−ジヒドロ−１,６−ナフチリジン−３−イル)−３,５−ジフルオロピリジン−２−イル)プロパン−１−スルホンアミド；Ｎ−(３,５−ジフルオロ−４−(８−メチル−２−(メチルアミノ)−７−オキソ−７,８−ジヒドロピリド[２,３−ｄ]ピリミジン−６−イル)ピリジン−２−イル)プロパン−１−スルホンアミド；Ｎ−(３−フルオロ−４−(８−メチル−２−(メチルアミノ)−７−オキソ−７,８−ジヒドロピリド[２,３−ｄ]ピリミジン−６−イル)ピリジン−２−イル)プロパン−１−スルホンアミド；１−(６−(３,５−ジフルオロ−２−(プロピルスルホンアミド)ピリジン−４−イル)−８−メチル−７−オキソ−７,８−ジヒドロピリド[２,３−ｄ]ピリミジン−２−イルアミノ)プロパン−２−イルカルバミン酸(Ｓ)−メチル；Ｎ−(４−(７−(エチルアミノ)−１−メチル−２−オキソ−１,２−ジヒドロ−１,６−ナフチリジン−３−イル)−３,５−ジフルオロピリジン−２−イル)プロパン−１−スルホンアミド；Ｎ−(３,５−ジフルオロ−４−(８−メチル−２−(メチルアミノ)−７−オキソ−７,８−ジヒドロピリド[２,３−ｄ]ピリミジン−６−イル)ピリジン−２−イル)−３,３,３−トリフルオロプロパン−１−スルホンアミド；Ｎ−(４−(７−(２−シアノエチルアミノ)−１−メチル−２−オキソ−１,２−ジヒドロ−１,６−ナフチリジン−３−イル)−３,５−ジフルオロピリジン−２−イル)プロパン−１−スルホンアミドおよびＮ−(５−クロロ−４−(７−(エチルアミノ)−１−メチル−２−オキソ−１,２−ジヒドロ−１,６−ナフチリジン−３−イル)−３−フルオロピリジン−２−イル)プロパン−１−スルホンアミド
から選択される、請求項６に記載の化合物。
【請求項８】
請求項１に記載の化合物を少なくとも１種の薬学的に許容される添加物と共に含む、医薬組成物。
【請求項９】
添加物がコーンデンプン、ポテトデンプン、タピオカデンプン、デンプンペースト、アルファ化デンプン、糖類、ゼラチン、天然ゴム、合成ゴム、アルギン酸ナトリウム、アルギン酸、トラガカント、グアーガム、セルロース、エチルセルロース、酢酸セルロース、カルボキシメチルセルロースカルシウム、ナトリウムカルボキシメチルセルロース、メチルセルロース、ヒドロキシプロピルメチルセルロース、微結晶性セルロース、ケイ酸アルミニウム・マグネシウム、ポリビニルピロリドン、タルク、炭酸カルシウム、粉末セルロース、デキストレート類、カオリン、マンニトール、ケイ酸、ソルビトール、寒天、炭酸ナトリウム、クロスカルメロースナトリウム、クロスポビドン、ポラクリリンカリウム、デンプングリコール酸ナトリウム、クレイ類、ステアリン酸ナトリウム、ステアリン酸カルシウム、ステアリン酸マグネシウム、ステアリン酸、鉱油、軽油、グリセリン、ソルビトール、マンニトール、ポリエチレングリコール、他のグリコール類、ラウリル硫酸ナトリウム、水素化植物油、ピーナツ油、綿実油、ヒマワリ油、ゴマ油、オリーブ油、コーン油、ダイズ油、ステアリン酸亜鉛、オレイン酸ナトリウム、オレイン酸エチル、ラウリン酸エチル、シリカおよびこれらの組合せから成る群から選択される、請求項８に記載の医薬組成物。
【請求項１０】
さらに付加的治療剤を含む、請求項８に記載の医薬組成物。
【請求項１１】
付加的治療剤が抗癌化合物、鎮痛剤、制吐剤、抗鬱剤および抗炎症剤から選択される、請求項１０に記載の医薬組成物。
【請求項１２】
癌の処置用の請求項１に記載の化合物。
【請求項１３】
癌が肺癌、膵臓癌、膀胱癌、結腸癌、骨髄障害、前立腺癌、甲状腺癌、黒色腫ならびに卵巣、眼、肝臓、胆管および神経系の腺腫および癌腫から選択される、請求項１２に記載の化合物。
【請求項１４】
処置を必要とする対象に有効量の請求項１の化合物または請求項８の医薬組成物を投与することを含む、癌の処置方法。
【請求項１５】
癌が肺癌、膵臓癌、膀胱癌、結腸癌、骨髄障害、前立腺癌、甲状腺癌、黒色腫ならびに卵巣、眼、肝臓、胆管および神経系の腺腫および癌腫から選択される、請求項１４に記載の方法。
【請求項１６】
さらに対象に付加的治療剤を投与することを含む、請求項１５に記載の方法。
【請求項１７】
付加的治療剤が抗癌剤、鎮痛剤、制吐剤、抗鬱剤または抗炎症剤を含む、請求項１６に記載の方法。
【請求項１８】
付加的治療剤が異なるＲａｆキナーゼ阻害剤もしくはＭＥＫ、ｍＴＯＲ、ＨＳＰ９０、ＡＫＴ、ＰＩ３Ｋ、ＣＤＫ９、ＰＡＫ、タンパク質キナーゼＣ、ＭＡＰキナーゼ、ＭＡＰＫキナーゼまたはＥＲＫの阻害剤である、請求項１７に記載の方法。
【請求項１９】
付加的治療剤を対象に本化合物と同時に投与する、請求項１８に記載の方法。
【請求項２０】
処置を必要とする対象に有効量の請求項１の化合物または請求項８の医薬組成物を投与することを含む、Ｒａｆキナーゼが仲介する状態の処置方法。
【請求項２１】
Ｒａｆキナーゼが変異ｂ−Ｒａｆキナーゼである、請求項２０に記載の方法。
【請求項２２】
変異ｂ−Ｒａｆキナーゼがｂ−Ｒａｆ(Ｖ６００Ｅ)である、請求項２１に記載の方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
発明の背景
発明の分野
本発明は新規化合物群、かかる化合物を含む医薬組成物および異常なまたは脱制御されたキナーゼ活性と関連する疾患または障害、特にＢ−Ｒａｆの異常な活性化が関与する疾患または障害の処置または予防のためのかかる化合物の使用方法に関する。
【背景技術】
【０００２】
背景
タンパク質キナーゼ類は、広範な細胞過程の制御および細胞機能制御の維持に中心的役割を有するタンパク質の大きなファミリーを代表する。これらのキナーゼ類の一部についての非限定的なリストは次のものを含む：受容体チロシンキナーゼ類、例えば血小板由来増殖因子受容体キナーゼ(ＰＤＧＦ−Ｒ)、神経増殖因子受容体、ｔｒｋＢ、Ｍｅｔおよび線維芽細胞増殖因子受容体、ＦＧＦＲ３；非受容体チロシンキナーゼ類、例えばＡｂｌおよび融合キナーゼＢＣＲ−Ａｂｌ、Ｌｃｋ、Ｃｓｋ、Ｆｅｓ、Ｂｍｘおよびｃ−ｓｒｃ；およびセリン／スレオニンキナーゼ類、例えばＢ−Ｒａｆ、ｓｇｋ、ＭＡＰキナーゼ類(例えば、ＭＫＫ４、ＭＫＫ６など)およびＳＡＰＫ２α、ＳＡＰＫ２βおよびＳＡＰＫ３。異常キナーゼ活性は、良性および悪性増殖性障害ならびに免疫および神経系の不適切な活性化に起因する疾患を含む多くの疾患状態で観察されている。
【０００３】
本発明の新規化合物は、Ｂ−Ｒａｆまたはその変異形態(例えばＶ６００Ｅ)の活性を阻害し、それ故に、Ｂ−Ｒａｆ関連疾患の処置に有用であると期待される。
【発明の概要】
【０００４】
発明の要約
一面において、本発明は、式Ｉ：
【化１】
2013518904.tif 000003
〔式中、Ａはａおよびｂ：
【化２】
2013518904.tif 000004
から選択され、
ここで、
Ｇ１はＮまたはＣＲ８から選択され；Ｒ８は水素、ハロ、シアノならびに場合によりヒドロキシ、ハロ、シアノ、オキソ、Ｃ１−４アルキル、ハロ置換Ｃ１−４アルキル、Ｃ１−４アルコキシ、ハロ置換Ｃ１−４アルコキシおよびＮＨＣ(Ｏ)ＯＲ９から独立して選択される１〜３個の基で置換されていてよいＣ１−４アルキルから選択され；ここで、Ｒ９は場合によりヒドロキシ、ハロ、シアノ、Ｃ１−４アルキル、ハロ置換Ｃ１−４アルキル、Ｃ１−４アルコキシおよびハロ置換Ｃ１−４アルコキシから独立して選択される１〜３個の基で置換されていてよいＣ１−４アルキルであり；
ｎは０、１および２から選択され；
Ｒ１は水素、Ｃ１−４アルキルおよび−ＮＨＲ２０から選択され、ここで、Ｒ２０は水素ならびに場合によりヒドロキシ、ハロ、シアノ、Ｃ１−４アルキル、ハロ置換Ｃ１−４アルキル、Ｃ１−４アルコキシ、ハロ置換Ｃ１−４アルコキシ、ＮＨＣ(Ｏ)ＯＲ１０およびＳ(Ｏ)０−２Ｒ１０から独立して選択される１〜３個の基で置換されていてよいＣ１−４アルキルから選択され；ここで、Ｒ１０は場合によりヒドロキシ、ハロ、シアノ、Ｃ１−４アルキル、ハロ置換Ｃ１−４アルキル、Ｃ１−４アルコキシおよびハロ置換Ｃ１−４アルコキシから独立して選択される１〜３個の基で置換されていてよいＣ１−４アルキルであり；ここで、Ｒ１のいずれのアルキルも場合によりヒドロキシ、ハロ、シアノ、Ｃ１−４アルキル、ハロ置換Ｃ１−４アルキル、Ｃ１−４アルコキシおよびハロ置換Ｃ１−４アルコキシから独立して選択される１〜３個の基で置換されていてよく；
Ｒ２およびＲ３は独立して水素、ハロ、シアノ、Ｃ１−４アルキル、ハロ置換Ｃ１−４アルキル、Ｃ１−４アルコキシおよびハロ置換Ｃ１−４アルコキシから選択され；
Ｒ４はＣ１−６アルキル、Ｃ３−８シクロアルキル、Ｃ３−８ヘテロシクロアルキル、Ｃ６−１０アリールならびにＮ、ＯおよびＳから選択される１〜３個のヘテロ原子を含む５〜８員ヘテロアリールから選択され；ここで、該アルキル、シクロアルキル、ヘテロシクロアルキル、アリールまたはヘテロアリールは、場合によりハロ、シアノ、Ｃ１−４アルキル、ハロ置換Ｃ１−４アルキル、Ｃ１−４アルコキシおよびハロ置換Ｃ１−４アルコキシから独立して選択される１〜３個の基で置換されていてよく；
Ｒ５は水素、ハロ、シアノ、Ｃ１−４アルキル、ハロ置換Ｃ１−４アルキル、Ｃ１−４アルコキシおよびハロ置換Ｃ１−４アルコキシから選択され；
Ｒ６は水素ならびに場合によりＣ６−１０アリールおよびＣ３−８シクロアルキルから選択される１個の基で置換されていてよいＣ１−４アルキルから選択され；ここで、Ｒ６の該アルキル基、シクロアルキル基またはアリール基は場合によりヒドロキシ、ハロ、シアノおよびＣ１−４アルコキシから独立して選択される１〜３個の基で置換されていてよい。〕
の化合物およびそのＮ−オキシド誘導体、プロドラッグ誘導体、被保護誘導体、互変異性体、個々の異性体および異性体混合物；およびかかる化合物の薬学的に許容される塩類および溶媒和物(例えば水和物)に関する。
【０００５】
第二の面において、本発明は、式Ｉの化合物またはそのＮ−オキシド誘導体、個々の異性体または異性体混合物；またはその薬学的に許容される塩を、１種以上の適当な添加物と共に含む医薬組成物を提供する。
【０００６】
第三の面において、本発明は、動物におけるキナーゼ活性、特にＢ−Ｒａｆ活性の阻害が疾患の病状および／または症状を予防、阻止または軽減できる疾患を処置する方法であって、該動物に治療有効量の式Ｉの化合物またはそのＮ−オキシド誘導体、個々の異性体または異性体混合物またはその薬学的に許容される塩を投与することを含む、方法を提供する。
【０００７】
第四の面において、本発明は、動物における、キナーゼ活性、特にＢ−Ｒａｆ活性、特に変異Ｂ−ｒａｆ(例えばＶ６００Ｅ)が疾患の病状および／または症状に関与する疾患の処置用医薬の製造における、式Ｉの化合物の使用を提供する。
【０００８】
第五の面において、本発明は、式Ｉの化合物およびそのＮ−オキシド誘導体、プロドラッグ誘導体、被保護誘導体、個々の異性体および異性体混合物およびその薬学的に許容される塩類の製造方法を提供する。
【０００９】
発明の詳細な記載
定義
基としておよび他の基、例えばハロ置換アルキルおよびアルコキシの構成要素としての“アルキル”は、直鎖でも分枝鎖でもよい。Ｃ１−４−アルコキシは、メトキシ、エトキシなどを含む。ハロ置換Ｃ１−４アルキルは、水素のいずれかがハロゲンで置換されていてよいアルキル基(分枝鎖または非分枝鎖)を意味する。例えば、ハロ置換Ｃ１−４アルキルはトリフルオロメチル、ジフルオロエチル、ペンタフルオロエチルなどであり得る。同様に、ヒドロキシ置換Ｃ１−６アルキルは、水素のいずれかがヒドロキシルで置換されていてよいアルキル基(分枝鎖または非分枝鎖)を意味する。例えば、ヒドロキシ置換Ｃ１−６アルキルは２−ヒドロキシエチルなどを含む。同様に、シアノ置換Ｃ１−６アルキルは、水素のいずれかがシアノで置換されていてよいアルキル基(分枝鎖または非分枝鎖)を意味する。
【００１０】
“アリール”は、６〜１０個の環炭素原子を含む単環式または縮合二環式芳香環を意味する。例えば、アリールはフェニルまたはナフチル、好ましくはフェニルであり得る。“アリーレン”はアリール基由来の二価基を意味する。
【００１１】
“シクロアルキル”は、示す数の環原子を含む飽和または部分的不飽和の、単環式、縮合二環式または架橋多環式環を意味する。例えば、Ｃ３−１０シクロアルキルは、シクロプロピル、シクロブチル、シクロペンチル、シクロヘキシルなどを含む。
【００１２】
“ヘテロアリール”は、環員の１個以上がヘテロ原子であるときの上でアリールについて定義したとおりである。例えば、ヘテロアリールはピリジル、インドリル、インダゾリル、キノキサリニル、キノリニル、ベンゾフラニル、ベンゾピラニル、ベンゾチオピラニル、ベンゾ[１,３]ジオキソール、イミダゾリル、ベンゾ−イミダゾリル、ピリミジニル、フラニル、オキサゾリル、イソオキサゾリル、トリアゾリル、テトラゾリル、ピラゾリル、チエニルなどを含む。
【００１３】
“ヘテロシクロアルキル”は、示す環炭素の１個以上が−Ｏ−、−Ｎ＝、−ＮＲ−、−Ｃ(Ｏ)−、−Ｓ−、−Ｓ(Ｏ)−または−Ｓ(Ｏ)２−(ここで、Ｒは水素、Ｃ１−４アルキルまたは窒素保護基である)から選択される基で置換されている限り、本明細書で定義したシクロアルキルである。例えば、本発明の化合物を記載するために本明細書で使用するＣ３−８ヘテロシクロアルキルは、２Ｈ−ピラン、４Ｈ−ピラン、ピペリジン、１,４−ジオキサン、モルホリン、１,４−ジチアン、チオモルホリノ、イミダゾリジン−２−オン、テトラヒドロフラン、ピペラジン、１,３,５−トリチアン、ピロリジン、ピロリジニル−２−オン、ピペリジン、ピペリジノン、１,４−ジオキサ−８−アザ−スピロ[４,５]デク−８−イルなどを含む。
【００１４】
“ハロゲン”(またはハロ)はクロロ、フルオロ、ブロモまたはヨードを意味する。
【００１５】
“処置”、“処置する”および“処置し”は、疾患および／またはその随伴症状を軽減または寛解する方法を意味する。
【発明を実施するための形態】
【００１６】
好ましい態様の記載
本発明は、キナーゼ関連疾患、特にＢ−Ｒａｆキナーゼ関連疾患の処置のための化合物、組成物およびを提供する。例えば、転移黒色腫、固形腫瘍、脳腫瘍、例えば多形神経膠芽腫(ＧＢＭ)、急性骨髄性白血病(ＡＭＬ)、乳頭状甲状腺癌、低悪性度卵巣癌および結腸直腸癌。
【００１７】
一つの態様において、式Ｉの化合物について、式Ｉａ：
【化３】
2013518904.tif 000005
〔式中、
ｎは０、１および２から選択され；
Ｒ２０は水素ならびに場合によりヒドロキシ、ハロ、シアノ、Ｃ１−４アルキル、ハロ置換Ｃ１−４アルキル、Ｃ１−４アルコキシ、ハロ置換Ｃ１−４アルコキシ、ＮＨＣ(Ｏ)ＯＲ１０およびＳ(Ｏ)０−２Ｒ１０から独立して選択される１〜３個の基で置換されていてよいＣ１−４アルキルから選択され；ここで、Ｒ１０は場合によりヒドロキシ、ハロ、シアノ、Ｃ１−４アルキル、ハロ置換Ｃ１−４アルキル、Ｃ１−４アルコキシおよびハロ置換Ｃ１−４アルコキシから独立して選択される１〜３個の基で置換されていてよいＣ１−４アルキルであり；
Ｒ２およびＲ３は独立して水素、ハロ、シアノ、Ｃ１−４アルキル、ハロ置換Ｃ１−４アルキル、Ｃ１−４アルコキシおよびハロ置換Ｃ１−４アルコキシから選択され；
Ｒ４はＣ１−６アルキル、Ｃ３−８シクロアルキル、Ｃ３−８ヘテロシクロアルキル、Ｃ６−１０アリールならびにＮ、ＯおよびＳから選択される１〜３個のヘテロ原子を含む５〜８員ヘテロアリールから選択され；ここで、該アルキル、シクロアルキル、ヘテロシクロアルキル、アリールまたはヘテロアリールは、場合によりハロ、シアノ、Ｃ１−４アルキル、ハロ置換Ｃ１−４アルキル、Ｃ１−４アルコキシおよびハロ置換Ｃ１−４アルコキシから独立して選択される１〜３個の基で置換されていてよく；
Ｒ５は水素、ハロ、シアノ、Ｃ１−４アルキル、ハロ置換Ｃ１−４アルキル、Ｃ１−４アルコキシおよびハロ置換Ｃ１−４アルコキシから選択され；
Ｒ６は水素ならびに場合によりＣ６−１０アリールおよびＣ３−８シクロアルキルから選択される１個の基で置換されていてよいＣ１−４アルキルから選択され；ここで、Ｒ６の該アルキル、シクロアルキルまたはアリール基は場合によりヒドロキシ、ハロ、シアノおよびＣ１−４アルコキシから独立して選択される１〜３個の基で置換されていてよい。〕
の化合物である。
【００１８】
他の態様において、ｎは０であり；Ｒ２０はメチルおよびエチルから選択され；ここで、該メチルおよびエチルは、場合によりシアノ、トリフルオロメチル、メチル−スルホニル、ハロおよびメチルから独立して選択される１〜３個の基で置換されていてよく；Ｒ２はフルオロであり；Ｒ３は水素であり；Ｒ４はプロピルから選択され；Ｒ５はフルオロおよびクロロから選択される。
【００１９】
さらなる態様は、次のものから選択される化合物である：Ｎ−(４−(３−(６−(エチルアミノ)ピリミジン−４−イル)ピラジン−２−イルアミノ)−３,５−ジフルオロピリジン−２−イル)プロパン−１−スルホンアミド；Ｎ−(４−(３−(６−(２−シアノエチルアミノ)ピリミジン−４−イル)ピラジン−２−イルアミノ)−３,５−ジフルオロピリジン−２−イル)プロパン−１−スルホンアミド；Ｎ−(３,５−ジフルオロ−４−(３−(６−(３,３,３−トリフルオロプロピルアミノ)ピリミジン−４−イル)ピラジン−２−イルアミノ)ピリジン−２−イル)プロパン−１−スルホンアミド；Ｎ−(４−(３−(６−(２,２−ジフルオロエチルアミノ)ピリミジン−４−イル)ピラジン−２−イルアミノ)−３,５−ジフルオロピリジン−２−イル)プロパン−１−スルホンアミド；Ｎ−(３,５−ジフルオロ−４−(３−(６−(メチルアミノ)ピリミジン−４−イル)ピラジン−２−イルアミノ)ピリジン−２−イル)プロパン−１−スルホンアミド；Ｎ−(３−クロロ−４−(３−(６−(エチルアミノ)ピリミジン−４−イル)ピラジン−２−イルアミノ)−５−フルオロピリジン−２−イル)プロパン−１−スルホンアミド；Ｎ−(３,５−ジフルオロ−４−(３−(６−(２,２,２−トリフルオロエチルアミノ)ピリミジン−４−イル)ピラジン−２−イルアミノ)ピリジン−２−イル)プロパン−１−スルホンアミド；Ｎ−(３,５−ジフルオロ−４−(３−(６−(２−(メチルスルホニル)エチルアミノ)ピリミジン−４−イル)ピラジン−２−イルアミノ)ピリジン−２−イル)プロパン−１−スルホンアミド；Ｎ−(４−((３−(６−((２−シアノエチル)アミノ)ピリミジン−４−イル)ピラジン−２−イル)アミノ)−３−フルオロピリジン−２−イル)プロパン−１−スルホンアミドおよびＮ−(４−(３−(６−(２−シアノプロピルアミノ)ピリミジン−４−イル)ピラジン−２−イルアミノ)−３,５−ジフルオロピリジン−２−イル)プロパン−１−スルホンアミド。
【００２０】
さらなる態様において、下の実施例および表から選択される化合物である。
【００２１】
他の態様において、式Ｉの化合物について、式Ｉｂ：
【化４】
2013518904.tif 000006
〔式中、
Ｇ１はＮまたはＣＲ８から選択され；Ｒ８は水素、シアノ、ハロならびに場合によりヒドロキシ、ハロ、オキソ、シアノ、Ｃ１−４アルキル、ハロ置換Ｃ１−４アルキル、Ｃ１−４アルコキシ、ハロ置換Ｃ１−４アルコキシおよびＮＨＣ(Ｏ)ＯＲ９から独立して選択される１〜３個の基で置換されていてよいＣ１−４アルキルから選択され；ここで、Ｒ９は場合によりヒドロキシ、ハロ、シアノ、Ｃ１−４アルキル、ハロ置換Ｃ１−４アルキル、Ｃ１−４アルコキシおよびハロ置換Ｃ１−４アルコキシから独立して選択される１〜３個の基で置換されていてよいＣ１−４アルキルであり；
Ｒ２０は水素ならびに場合によりヒドロキシ、ハロ、シアノ、Ｃ１−４アルキル、ハロ置換Ｃ１−４アルキル、Ｃ１−４アルコキシ、ハロ置換Ｃ１−４アルコキシ、ＮＨＣ(Ｏ)ＯＲ１０およびＳ(Ｏ)０−２Ｒ１０から独立して選択される１〜３個の基で置換されていてよいＣ１−４アルキルから選択され；ここで、Ｒ１０は場合によりヒドロキシ、ハロ、シアノ、Ｃ１−４アルキル、ハロ置換Ｃ１−４アルキル、Ｃ１−４アルコキシおよびハロ置換Ｃ１−４アルコキシから独立して選択される１〜３個の基で置換されていてよいＣ１−４アルキルであり；
Ｒ２およびＲ３は独立して水素、ハロ、シアノ、Ｃ１−４アルキル、ハロ置換Ｃ１−４アルキル、Ｃ１−４アルコキシおよびハロ置換Ｃ１−４アルコキシから選択され；
Ｒ４はＣ１−６アルキル、Ｃ３−８シクロアルキル、Ｃ３−８ヘテロシクロアルキル、Ｃ６−１０アリールならびにＮ、ＯおよびＳから選択される１〜３個のヘテロ原子を含む５〜８員ヘテロアリールから選択され；ここで、該アルキル、シクロアルキル、ヘテロシクロアルキル、アリールまたはヘテロアリールは、場合によりハロ、シアノ、Ｃ１−４アルキル、ハロ置換Ｃ１−４アルキル、Ｃ１−４アルコキシおよびハロ置換Ｃ１−４アルコキシから独立して選択される１〜３個の基で置換されていてよく；
Ｒ５は水素、ハロ、シアノ、Ｃ１−４アルキル、ハロ置換Ｃ１−４アルキル、Ｃ１−４アルコキシおよびハロ置換Ｃ１−４アルコキシから選択され；
Ｒ６は水素ならびに場合によりＣ６−１０アリールおよびＣ３−８シクロアルキルから選択される１個の基で置換されていてよいＣ１−４アルキルから選択され；ここで、Ｒ６の該アルキル、シクロアルキルまたはアリール基は場合によりヒドロキシ、ハロ、シアノおよびＣ１−４アルコキシから独立して選択される１〜３個の基で置換されていてよい。〕
の化合物である。
【００２２】
他の態様において、Ｇ１はＮまたはＣＨから選択され；Ｒ２０はメチルおよびエチルから選択され；ここで、該メチルおよびエチルは、場合によりシアノ、トリフルオロメチル、メトキシ−カルボニル−アミノ、ハロおよびメチルから独立して選択される１〜３個の基で置換されていてよく；Ｒ２はフルオロであり；Ｒ３は水素であり；Ｒ４はプロピルおよび３,３,３−トリフルオロプロピルから選択され；Ｒ５はフルオロおよびクロロから選択され；およびＲ６はメチルである。
【００２３】
他の態様において、化合物は次のものから選択される：Ｎ−(４−(７−(エチルアミノ)−１−メチル−２−オキソ−１,２−ジヒドロ−１,６−ナフチリジン−３−イル)−３,５−ジフルオロピリジン−２−イル)プロパン−１−スルホンアミド；Ｎ−(３,５−ジフルオロ−４−(８−メチル−２−(メチルアミノ)−７−オキソ−７,８−ジヒドロピリド[２,３−ｄ]ピリミジン−６−イル)ピリジン−２−イル)プロパン−１−スルホンアミド；Ｎ−(３−フルオロ−４−(８−メチル−２−(メチルアミノ)−７−オキソ−７,８−ジヒドロピリド[２,３−ｄ]ピリミジン−６−イル)ピリジン−２−イル)プロパン−１−スルホンアミド；１−(６−(３,５−ジフルオロ−２−(プロピルスルホンアミド)ピリジン−４−イル)−８−メチル−７−オキソ−７,８−ジヒドロピリド[２,３−ｄ]ピリミジン−２−イルアミノ)プロパン−２−イルカルバミン酸(Ｓ)−メチル；Ｎ−(４−(７−(エチルアミノ)−１−メチル−２−オキソ−１,２−ジヒドロ−１,６−ナフチリジン−３−イル)−３,５−ジフルオロピリジン−２−イル)プロパン−１−スルホンアミド；Ｎ−(３,５−ジフルオロ−４−(８−メチル−２−(メチルアミノ)−７−オキソ−７,８−ジヒドロピリド[２,３−ｄ]ピリミジン−６−イル)ピリジン−２−イル)−３,３,３−トリフルオロプロパン−１−スルホンアミド；Ｎ−(４−(７−(２−シアノエチルアミノ)−１−メチル−２−オキソ−１,２−ジヒドロ−１,６−ナフチリジン−３−イル)−３,５−ジフルオロピリジン−２−イル)プロパン−１−スルホンアミドおよびＮ−(５−クロロ−４−(７−(エチルアミノ)−１−メチル−２−オキソ−１,２−ジヒドロ−１,６−ナフチリジン−３−イル)−３−フルオロピリジン−２−イル)プロパン−１−スルホンアミド。
【００２４】
本発明はまた、本発明の化合物またはその薬学的に許容される塩類の全ての適当な同位体標識体(isotopic variations)も含む。本発明の化合物またはその薬学的に許容される塩の同位体標識体は、少なくとも１個の原子が、同じ原子番号を有するが、原子質量が通常天然で見られる原子質量と異なる原子で置換されているものを含む。本発明の化合物およびその薬学的に許容される塩類に取り込み得る同位体の例は水素、炭素、窒素および酸素の同位体、例えば２Ｈ、３Ｈ、１１Ｃ、１３Ｃ、１４Ｃ、１５Ｎ、１７Ｏ、１８Ｏ、３５Ｓ、１８Ｆ、３６Ｃｌおよび１２３Ｉを含むが、これらに限定されない。本発明の化合物およびその薬学的に許容される塩類のある種の同位体標識体、例えば、放射性同位体、例えば３Ｈまたは１４Ｃが取り込まれているものは、薬物および／または基質組織分布試験に有用である。具体例として、３Ｈおよび１４Ｃ同位体が、その製造の容易さおよび検出能のために使用され得る。他の例として、２Ｈのような同位体での置換は、大きな代謝安定性に起因するある種の治療利益、例えばインビボ半減期延長または必要投与量減少をもたらし得る。本発明の化合物またはその薬学的に許容される塩類の同位体標識体は、一般的に適当な反応材の適当な同位体標識体を使用する、慣用法により製造できる。
【００２５】
薬理学および有用性
本発明の化合物はキナーゼ類の活性を調節し、そのようなものとして、キナーゼ類が疾患の病状および／または症状に関与する疾患または障害の処置に有用である。ここに記載する化合物および組成物により阻害され、ここに記載する方法の対象として有用であるキナーゼ類の例は、Ｂ−Ｒａｆの変異型を含むＢ−Ｒａｆを含み、これらに限定されない。
【００２６】
Ｒａｓ−Ｒａｆ−ＭＥＫ−ＥＲＫシグナル伝達経路は、細胞表面受容体から核にシグナルを伝達し、細胞増殖および生存に重要である。ヒト癌の１０〜２０％が発癌性Ｒａｓ変異を担持し、多くのヒト癌が活性化された増殖因子受容体を有するため、この経路は理想的な介入標的である。
【００２７】
セリン／スレオニンキナーゼのＲａｆファミリーは３種のメンバー：Ｃ−Ｒａｆ(またはＲａｆ−１)、Ｂ−ＲａｆおよびＡ−Ｒａｆを含む。多くのシグナル伝達経路におけるＲａｆの必須の役割および位置の両方ともが、哺乳動物細胞における脱制御されたおよびドミナント阻害Ｒａｆ変異体を使用した試験から、ならびにモデル生物に生化学および遺伝子技術を用いた試験から証明されている。従来、抗腫瘍剤標的としてのＲａｆは、主にＲａｓの下流エフェクターとしてのその機能により注目されていた。しかしながら、最近の発見は、Ｒａｆが発癌性Ｒａｓ対立遺伝子を必要としないある種の腫瘍の形成に顕著な役割を有し得ることを示唆する。特に、Ｂ−Ｒａｆの活性化対立遺伝子は黒色腫の〜７０％、乳頭状甲状腺癌の４０％、低悪性度卵巣癌の３０％および結腸直腸癌の１０％で同定されている。ほとんどのＢ−Ｒａｆ変異がキナーゼドメイン内で発見され、一置換(Ｖ６００Ｅ)が８０％を占める。変異したＢ−Ｒａｆタンパク質は、ＭＥＫに対する上昇したキナーゼ活性を介してまたはＣ−Ｒａｆの活性化を介して、Ｒａｆ−ＭＥＫ−ＥＲＫ経路を活性化させる。
【００２８】
それ故に、Ｂ−Ｒａｆに対するキナーゼ阻害剤の開発は、多くのタイプのヒト癌、特に転移黒色腫、固形腫瘍、脳腫瘍、例えば多形神経膠芽腫(ＧＢＭ)、急性骨髄性白血病(ＡＭＬ)、乳頭状甲状腺癌、低悪性度卵巣癌および結腸直腸癌の処置の新しい治療機会を提供する。数種のＲａｆキナーゼ阻害剤が、インビトロおよび／またはインビボアッセイで腫瘍細胞増殖を阻害する効果を示すと記載されている(例えば、米国特許６,３９１,６３６、６,３５８,９３２、６,０３７,１３６、５,７１７,１００、６,４５８,８１３、６,２０４,４６７および６,２６８,３９１参照)。他の特許および特許出願は、白血病の処置(例えば、米国特許６,２６８,３９１、６,２０４,４６７、６,７５６,４１０および６,２８１,１９３；および放棄された米国特許出願２００２０１３７７７４および２００１０００６９７５参照)または乳癌の処置(例えば、米国特許６,３５８,９３２、５,７１７,１００、６,４５８,８１３、６,２６８,３９１、６,２０４,４６７および６,９１１,４４６参照)に対するＲａｆキナーゼ阻害剤の使用を示唆する。
【００２９】
本発明の化合物は、Ｂ−Ｒａｆキナーゼが関与する細胞過程を、これらの癌細胞のシグナルカスケードを遮断し、最終的に細胞静止および／または死を誘発することにより阻害する。
【００３０】
前記によって、本発明は、さらに、肺癌、膵臓癌、膀胱癌、結腸癌、骨髄障害、前立腺癌、甲状腺癌、黒色腫ならびに卵巣、眼、肝臓、胆管および神経系の腺腫および癌腫の予防または処置方法を提供する。さらに、本発明は、かかる処置を必要とする対象における上に記載した疾患または障害の予防または処置方法であって、該対象に治療有効量(下の“投与および医薬組成物”参照)の式Ｉの化合物またはその薬学的に許容される塩を投与することを含む、方法をさらに提供する。上記使用のいずれかにおいて、必要とされる投与量は投与方式、処置する特定の状態および所望の効果により変わる。
【００３１】
投与および医薬組成物
一般に、本発明の化合物は、当分野で既知の通常のおよび許容される方式により、単独でまたは１種以上の治療剤と組み合わせて治療有効量を投与される。治療有効量は、疾患の重症度、対象の年齢および相対的健康、使用する化合物の効力および他の因子により広範囲に変わり得る。一般に、満足のいく結果が、全身的に、約０.０３〜３０mg／kg体重の１日投与量で得られることが示される。大型哺乳動物、例えばヒトにおいて指示される１日量は、約０.５mg〜訳２０００mgの範囲であり、簡便には、例えば１日４回までの分割用量でまたは遅延形態で投与する。経口投与のための適当な単位投与形態は、約１〜５００mg活性成分を含む。
【００３２】
本発明の化合物を、医薬組成物として、任意慣用の経路で、特に経腸的に、例えば、経口的に、例えば、錠剤またはカプセルの形でまたは非経腸的に、例えば、注射用溶液または懸濁液の形で、局所的に、例えば、ローション、ゲル、軟膏またはクリームの形でまたは経鼻または坐薬形態で投与できる。遊離形態態または薬学的に許容される塩形態の本発明の化合物を少なくとも１種の薬学的に許容される担体または希釈剤と共に含む医薬組成物は、混合法、造粒法またはコーティング法による慣用の手段により製造できる。例えば、経口組成物は、活性成分をａ)希釈剤、例えば、ラクトース、デキストロース、スクロース、マンニトール、ソルビトール、セルロースおよび／またはグリシン；ｂ)滑剤、例えば、シリカ、タルク、ステアリン酸、そのマグネシウム塩またはカルシウム塩および／またはポリエチレングリコール；錠剤についてはまたｃ)結合剤、例えば、ケイ酸アルミニウム・マグネシウム、デンプンペースト、ゼラチン、トラガカント、メチルセルロース、ナトリウムカルボキシメチルセルロースおよびまたはポリビニルピロリドン；所望によりｄ)崩壊剤、例えば、デンプン類、寒天、アルギン酸またはそのナトリウム塩または起沸性混合物；および／またはｅ)吸収剤、着色剤、香味剤および甘味剤と共に含む錠剤またはゼラチンカプセル剤である。注射用組成物は水性等張性溶液または懸濁液であってよく、坐薬は脂肪エマルジョンまたは懸濁液から製造できる。組成物を滅菌してよくおよび／またはアジュバント、例えば防腐剤、安定化剤、湿潤剤または乳化剤、溶解促進剤、浸透圧調整用塩類および／または緩衝剤を含んでよい。加えて、それらはまた他の治療的に価値ある物質を含み得る。経皮適用に適当な製剤は、有効量の本発明の化合物と担体を含む。担体は、宿主の皮膚の通過を助けるための吸収性の薬理学的に許容される溶媒を含む。例えば、経皮デバイスは、裏打ち部材、化合物を所望により担体と共に含む貯蔵部、場合により本化合物を宿主の皮膚に制御されかつ予定された速度で長時間にわたり送達するための速度制御バリアおよび該デバイスを皮膚に固定するための手段を含むバンデージの形である。マトリックス経皮製剤も使用してよい。例えば、皮膚および眼への局所適用に適当な製剤は、好ましくは当分野で既知の水溶液、軟膏、クリームまたはゲルである。それらは可溶化剤、安定化剤、張性増加剤、緩衝剤および防腐剤を含んでよい。
【００３３】
本発明の化合物は、治療有効量を１種以上の治療剤と組み合わせて投与できる(組合せ医薬)。例えば、他の抗腫瘍剤または抗増殖剤、例えば、有糸分裂阻害剤、アルキル化剤、代謝拮抗剤、挿入抗生物質、増殖因子阻害剤、細胞サイクル阻害剤、酵素類、トポイソメラーゼ阻害剤、生物学的応答修飾物質、抗体、細胞毒性剤、抗ホルモン剤、抗アンドロゲン、抗血管形成剤、キナーゼ阻害剤、汎キナーゼ阻害剤または増殖因子阻害剤と相乗効果が起こり得る。
【００３４】
本発明の化合物を、治療有効量でコーンデンプン、ポテトデンプン、タピオカデンプン、デンプンペースト、アルファ化デンプン、糖類、ゼラチン、天然ゴム、合成ゴム、アルギン酸ナトリウム、アルギン酸、トラガカント、グアーガム、セルロース、エチルセルロース、酢酸セルロース、カルボキシメチルセルロースカルシウム、ナトリウムカルボキシメチルセルロース、メチルセルロース、ヒドロキシプロピルメチルセルロース、微結晶性セルロース、ケイ酸アルミニウム・マグネシウム、ポリビニルピロリドン、タルク、炭酸カルシウム、粉末セルロース、デキストレート類、カオリン、マンニトール、ケイ酸、ソルビトール、寒天、炭酸ナトリウム、クロスカルメロースナトリウム、クロスポビドン、ポラクリリンカリウム、デンプングリコール酸ナトリウム、クレイ類、ステアリン酸ナトリウム、ステアリン酸カルシウム、ステアリン酸マグネシウム、ステアリン酸、鉱油、軽油、グリセリン、ソルビトール、マンニトール、ポリエチレングリコール、他のグリコール類、ラウリル硫酸ナトリウム、水素化植物油、ピーナツ油、綿実油、ヒマワリ油、ゴマ油、オリーブ油、コーン油、ダイズ油、ステアリン酸亜鉛、オレイン酸ナトリウム、オレイン酸エチル、ラウリン酸エチル、シリカおよびこれらの組合せから選択される１種以上の適当な添加物と投与できる。
【００３５】
本発明の一態様は、さらに付加的治療剤を対象に投与することを含む、方法である。付加的治療剤は抗癌剤、鎮痛剤、制吐剤、抗鬱剤または抗炎症剤を含む。さらに、付加的治療剤は異なるＲａｆキナーゼ阻害剤もしくはＭＥＫ、ｍＴＯＲ、ＨＳＰ９０、ＡＫＴ、ＰＩ３Ｋ、ＣＤＫ９、ＰＡＫ、タンパク質キナーゼＣ、ＭＡＰキナーゼ、ＭＡＰＫキナーゼまたはＥＲＫの阻害剤であり、対象に本発明の化合物と同時に投与する。
【００３６】
本発明の化合物を他の治療剤と共に投与するとき、併用化合物の投与量は、当然、用いる併用剤のタイプ、処置する状態などにより変わる。
【００３７】
本発明はまた、ａ)遊離形態または薬学的に許容される塩形態のここに開示する本発明の化合物である第一剤およびｂ)少なくとも１種の併用剤を含む、組合せ医薬、例えばキットも提供する。キットはその投与のための指示を含み得る。
【００３８】
本明細書に使用する用語“共投与”または“組合せ投与”などは、選択した複数治療剤の一患者への投与を包含することを意図し、これらの治療剤を必ずしも同じ投与型路でまたは同時に投与するものではない処置レジメンを含むことを意図する。
【００３９】
ここで使用する用語“組合せ医薬”は、１種を超える活性成分の混合または組合せにより生じる製品を意味し、これら活性成分の固定されたおよび固定されていない両方の組合せを含む。用語“固定された組合せ”は、複数活性成分、例えば式Ｉの化合物と併用剤を両方とも一患者に一つの物または投与形態として投与することを意味する。用語“固定されていない組合せ”は、複数活性成分、例えば式Ｉの化合物と併用剤を、両方とも一患者に別の物として、同時に、一緒にまたは特定の時間制限なしに連続的に投与することを意味し、ここで、かかる投与は、患者体内に２化合物の治療有効レベルを提供する。後者はまたカクテル療法、例えば３種以上の活性成分の投与にも適用される。
【００４０】
本発明の化合物の製造方法
本発明はまた本発明の化合物の製造方法も含む。記載する反応において、反応性官能基、例えばヒドロキシ基、アミノ基、イミノ基、チオ基またはカルボキシ基を、それらが最終産物において望まれるとき、反応への望まない関与を避けるために保護する必要があるかもしれない。慣用の保護基を標準法に従い使用でき、例えば、T.W. Greene and P. G. M. Wuts in “Protective Groups in Organic Chemistry”, John Wiley and Sons, 1991を参照のこと。
【００４１】
式Ｉａの化合物を、次の反応スキームＩのとおりに進行させて製造できる：
【化５】
2013518904.tif 000007
〔式中、Ｘは臭素、塩素またはヨウ素であり；Ｍはスズ、ホウ素および亜鉛の群から選択される金属であり、各場合、適当なリガンドを担持し；Ｘ’はハロゲン、アミノもしくはハロゲンまたはアミノに変換できる基から選択され；Ｒ２０、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５およびＲ６は発明の概要において定義したとおりである〕。式Ｉａの化合物は、式２の化合物と式Ｒ２０ＮＨ２のアミンを、溶媒、例えばイソプロパノール、ＤＭＦ、ＤＭＳＯまたはNMＰ中、場合により塩基、例えば炭酸ナトリウムまたはトリエチルアミンの存在下で、おおよそ室温から約１３０℃の温度で反応させることにより合成できる。アミンとの反応前に、式２の化合物のスルフィド基を、適当な酸化剤、例えばｍ−ＣＰＢＡを、不活性溶媒、例えばジクロロメタン中、約−７８℃からおおよそ室温までの温度で使用して、場合により対応するスルホキシドまたはスルホンに酸化してよい。
【００４２】
式２の化合物を、次に、式３の化合物とスルホニル化剤Ｒ４ＳＯ２Ｃｌを、適当な塩基(例えば、ピリジン、トリエチルアミン、４−(Ｎ,Ｎ−ジメチルアミノ)ピリジンなど)および適当な溶媒(例えばピリジン、ジクロロメタンなど)の存在下で反応させることにより製造できる。本反応は約２０℃〜約１００℃の温度範囲で進行し、完了まで最大約２４時間かかり得る。ある例では、スルホニル化剤を、ビス−スルホニル誘導体を製造するために２回反応させてよい。この場合、ビス−スルホニル化合物を、プロトン性溶媒、例えばメタノールまたは水の存在下、場合により共溶媒、例えばトルエンの存在下、適当な塩基(例えば、ナトリウムまたは炭酸カリウム)で処理して、式２の化合物に変換できる。本反応は約２０℃〜約１００℃の温度範囲で進行し、完了まで最大約２４時間かかり得る。
【００４３】
式３の化合物は、式４の化合物の脱保護により製造でき、ここで、ＮＲ２１Ｒ２２は被保護アミノ基を意味する(例えばＲ２１およびＲ２２はそれぞれＢＯＣおよび水素であり得る；またはＲ２１およびＲ２２の両方ともＢＯＣであり得る；またはＲ２１およびＲ２２はそれぞれＳＥＭおよびＲ４ＳＯ２であり得る)。ＮＲ２１Ｒ２２がＮＲ２１ＳＯ２Ｒ４である特定の例においては、式４の化合物の脱保護は直接式２の化合物をもたらす。
【００４４】
式４の化合物は、式５の化合物と式８の化合物(式中、Ｘは塩素、臭素またはヨウ素ｃである)の、適当なリガンド、例えばXantphosと組み合わせたパラジウム触媒、例えばＰｄ２ｄｂａ３存在下、不活性溶媒、例えばジオキサンまたはトルエン中、塩基、例えば炭酸セシウムまたはナトリウムｔ−ブトキシドの存在下、おおよそ室温から約１４０℃の範囲の温度でのハートウィッグ／ブッフバルト反応により製造できる。
【００４５】
式４の化合物はまた式６の化合物と式７の化合物(式中、Ｘは塩素、臭素またはヨウ素であり、ＮＲ２１Ｒ２２はアミノ基、被保護アミノ基または式ＮＲ２１ＳＯ２Ｒ４のスルホニルアミノ基を意味し、ここで、Ｒ２１は水素または適当な保護基であり得る)の反応によっても製造できる。本反応は、上に記載したハートウィッグ／ブッフバルト条件に準ずる条件で行う。
【００４６】
式６の化合物を、式８の化合物(式中、Ｘはフッ素、塩素、臭素またはヨウ素である)とアンモニアの、溶媒、例えばアルコール、ＴＨＦ、ジオキサンまたは水中、高温および高圧での反応により製造できる。式６の化合物はまた式９の化合物(式中、Ｘ’はＮＨ２に変換できる基である；例えば、Ｘ’は被保護アミノ基、例えばＮＨＢＯＣであり得る)からも製造できる。
【００４７】
式８の化合物は、式９の化合物(式中、Ｘ’はＸに変換できる基である；例えば、Ｘ’がＮＨ２であるならば、ザントマイヤー反応条件を使用し、Ｘ’がアルコキシ基であるならば、オキシ塩化リンを高温で使用でき、場合により予め別の脱アルキル化工程を行ってよい)から製造できる。
【００４８】
式９の化合物を、式１０の化合物(式中、Ｘは塩素、臭素またはヨウ素であり、Ｘ’はハロゲンまたはハロゲンに変換できる基である)と、式１１の化合物(式中、Ｍはスズ、ホウ素および亜鉛の群から選択される金属であり、各場合、適当なリガンドを担持し；例えば、Ｍがスズであるならば、ライゲートされた基はＢｕ３ＳｎまたはＭｅ３Ｓｎであってよく、Ｍが亜鉛であるならば、ライゲートされた基はＺｎＢｒであってよく、Ｍがホウ素であるならば、ライゲートされた基はボロン酸またはボロン酸エステル基であり得る)の反応により製造できる。本反応は、適切にライゲートされたパラジウム触媒の存在下で行い、正確な条件は特定のライゲートされた金属Ｍにより、当業者に既知である。Ｘ’が塩素、臭素またはヨウ素であるならば、式１０の化合物と式１１の化合物の反応により、式８の化合物が直接もたらされる。
【００４９】
Ｒ１がＮＨＲ２０である式Ｉｂの化合物を、ＷＯ２００５／０３４８６９に開示された方法に従い、次の反応スキームIIのとおりに進行させて製造できる：
【化６】
2013518904.tif 000008
〔式中、Ｒ２０、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５、Ｒ６およびＧ１は発明の概要において定義したとおりであり、ＮＲ２１Ｒ２２は反応スキームＩに記載のとおり場合により保護されていてよいアミノ基である。〕。
【００５０】
Ｇ１がＣＲ８である式２５の化合物を、ＷＯ２００５／０３４８６９に開示された方法に従い、次の反応スキームIIIにおけるとおりに製造する：
【化７】
2013518904.tif 000009
〔式中、Ｒ６およびＲ８は発明の概要において定義したとおりである〕。
【００５１】
Ｇ１がＮである式２５の化合物は、J. Med. Chem. 2000, 4006に開示された方法に従い、次の反応スキームIVのとおりに製造できる：
【化８】
2013518904.tif 000010
〔式中、Ｒ６は発明の概要において定義したとおりである〕。
【００５２】
Ｒ２およびＲ３がフッ素であり、Ｒ２１およびＲ２２が水素である式２４の化合物は、次の反応スキームＶに示すとおり、複数の経路により、Chem. Eur. J. 2005, 11, 1903 - 1910およびJ. Chem. Soc., Perkin Trans. 1, 2001, 2788-2795に開示の一般法に従い製造できる：
【化９】
2013518904.tif 000011
【００５３】
Ｒ１がＮＨＲ２０である式Ｉｂの化合物はまた次の反応スキームVIのとおりにも製造できる：
【化１０】
2013518904.tif 000012
〔式中、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５、Ｒ６、Ｒ２０およびＧ１は発明の概要において定義したとおりであり、ＮＲ２１Ｒ２２は反応スキームＩについて記載のとおり場合により保護されていてよいアミノ基である〕。Ｇ１がＮであるならば、Ｚはメチルチオであり；Ｇ１がＣＲ８であるならば、Ｚはクロロである。Ｇ１が窒素である式１ｂの化合物は、ＷＯ２００５／０３４８６９；J. Med. Chem. 2000, 4606；およびBioorg. Med. Chem. Lett. 2005, 1931に記載の方法の組合せを使用して製造できる。
【００５４】
Ｇ１がＮまたはＣＲ８である式１ｂの化合物は、式６１の化合物とスルホニル化剤Ｒ４ＳＯ２Ｃｌを、適当な塩基(例えば、ピリジン、トリエチルアミン、４−(Ｎ,Ｎ−ジメチルアミノ)ピリジンなど)および適当な溶媒(例えばピリジン、ジクロロメタンなど)の存在下に反応させることにより、製造できる。本反応は約２０℃〜約１００℃の温度範囲で進行し、完了まで最大約２４時間かかり得る。ある例では、スルホニル化剤を、ビス−スルホニル誘導体を製造するために２回反応させてよい。この場合、ビス−スルホニル化合物を、適当な塩基(例えば、ナトリウムまたは炭酸カリウム)で、プロトン性溶媒、例えばメタノールまたは水の存在下、場合により共溶媒、例えばトルエンの存在下に処理することにより式６１の化合物に変換できる。本反応は約２０℃〜約１００℃の温度範囲で進行し、完了まで最大約２４時間かかり得る。
【００５５】
式６１の化合物を、式６２の化合物(式中、ＮＲ２１Ｒ２２は被保護アミノ基である)の脱保護により製造できる。ＮＲ２１Ｒ２２がＮＲ２１ＳＯ２Ｒ４である特定の例においては、式６２の化合物の脱保護は直接式Ｉｂの化合物をもたらす。
【００５６】
式６２の化合物は、式６３の化合物と式７の化合物(式中、Ｘは塩素、臭素またはヨウ素である)の、パラジウム触媒、例えば適当なリガンド、例えばトリフェニルアルシンと組み合わせたＰｄ２ｄｂａ３と、添加剤、例えばヨウ化銅(Ｉ)の存在下、不活性溶媒、例えばＤＭＦ中、おおよそ室温から約１００℃の範囲の温度で、約２４〜約７２時間のスティル反応により製造できる。
【００５７】
式６３の化合物は、次に、式６４の化合物(式中、Ｘは塩素、臭素またはヨウ素である)とヘキサブチルジスタンナンの、適当なパラジウム触媒、例えばＰｄ(Ｐｈ３Ｐ)４存在下、不活性溶媒、例えばＴＨＦ中、約６０〜約１００℃の温度での反応により製造できる。
【００５８】
式６４の化合物は、式６５の化合物と適当な臭素化剤の反応により製造できる。適当な臭素化条件は、ピリジン存在下、不活性溶媒、例えばジクロロメタン中、おおよそ室温から約５０℃の温度でのフェニルセレニウムブロマイドとの反応または約−７８℃からおおよそ室温の温度での臭素との反応を含む。
【００５９】
式６５の化合物は、式６６の化合物と１級アミンＲ２０ＮＨ２の、適当な溶媒、例えばNMＰまたはＮ,Ｎ−ジメチルアセトアミド中、場合によりマイクロ波照射を伴う約５０〜約２００℃の温度での反応により製造できる。Ｇ１がＮであり、Ｚがメチルチオである場合、式６６の化合物のメチルチオ基を、場合によりアミンＲ２０ＮＨ２との反応前に対応するスルホキシドまたはスルホンに酸化してよい。適当な酸化条件は、ｍＣＰＢＡとの、ＤＣＭ中、約−７８℃からおおよそ室温の温度での、場合により塩基、例えば重炭酸ナトリウム存在下の反応を含む。
【００６０】
式６６の化合物は、式２５の化合物と(カルボエトキシメチレン)トリフェニルホスホランとの反応または適当なホーナー・エモンズ試薬、例えば適当な塩基、例えばｎ−ブチルリチウムまたは水素化ナトリウムと組み合わせたトリエチルホスホノアセテートとの反応により製造できる
【００６１】
Ｒ１が水素またはＣ１−４アルキルであり、ここで、Ｒ１のいずれのアルキルも場合により水素、ハロ、シアノ、Ｃ１−４アルキル、ハロ置換Ｃ１−４アルキル、Ｃ１−４アルコキシおよびハロ置換Ｃ１−４アルコキシから独立して選択される１〜３個の基で置換されていてよい式Ｉｂの化合物は、反応スキームII〜VIに記載する方法に準じて、適切に置換されたピリジンまたはピリミジン出発物質を使用して製造できる。
【００６２】
式Ｉａの化合物およびＩｂの合成の詳細な例は、下の実施例に見ることができる。
【００６３】
本発明の化合物の製造のための付加的工程
本発明の化合物を、遊離塩基形態の化合物と薬学的に許容される無機または有機酸を反応させることにより、薬学的に許容される酸付加塩として製造できる。あるいは、本発明の化合物の薬学的に許容される塩基付加塩を、遊離酸形態の化合物と薬学的に許容される無機または有機塩基の反応により製造できる。
【００６４】
あるいは、塩形態の本発明の化合物を、出発物質または中間体の塩を使用して製造できる。
【００６５】
遊離酸または遊離塩基形態の本発明の化合物を、それぞれ対応する塩基付加塩または酸付加塩形態から製造できる。例えば酸付加塩形態の本発明の化合物を、対応する遊離塩基に、適当な塩基(例えば、水酸化アンモニウム溶液、水酸化ナトリウムなど)で処理することにより変換できる。塩基付加塩形態の本発明の化合物を、対応する遊離酸に、適当な酸(例えば、塩酸など)で処理することにより変換できる。
【００６６】
酸化されていない形態の本発明の化合物を、本発明の化合物のＮ−オキシド類から、還元剤(例えば、硫黄、二酸化硫黄、トリフェニルホスフィン、リチウムボロハイドライド、水素化ホウ素ナトリウム、リントリクロライド、トリブロマイドなど)で、適当な不活性有機溶媒(例えばアセトニトリル、エタノール、ジオキサン水溶液など)中、０〜８０℃で処理することにより製造できる。
【００６７】
本発明の化合物のプロドラッグ誘導体は、当業者に既知の方法により製造できる(例えば、さらなる詳細はSaulnier et al., (1994), Bioorganic and Medicinal Chemistry Letters, Vol. 4, p. 1985参照)。例えば、適当なプロドラッグ類を、誘導体化されていない本発明の化合物と適当なカルバミル化剤(例えば、１,１−アシルオキシアルキルカルバノクロリダート、パラ−ニトロフェニルカーボネートなど)との反応により製造できる。
【００６８】
本発明の化合物の被保護誘導体は、当業者に既知の手段により製造できる。保護基の形成およびその除去に適用可能な技術の詳細な記載はT. W. Greene, “Protecting Groups in Organic Chemistry”, 3rd edition, John Wiley and Sons, Inc., 1999に見ることができる。
【００６９】
本発明の化合物を好都合には溶媒和物(例えば、水和物)として製造できまたはそれが本発明の工程中に形成される。本発明の化合物の水和物を、好都合には水性／有機溶媒混合物から、有機溶媒、例えばジオキシン、テトラヒドロフランまたはメタノールを使用して再結晶することにより製造できる。
【００７０】
本発明の化合物は、本化合物のラセミ混合物と光学活性分割剤を反応させてジアステレオ異性体混合物を形成し、ジアステレオマーを分離し、光学上純粋な鏡像体を回収することにより個々の立体異性体として製造することができる。エナンチオマーの分割は本発明の化合物の共有結合ジアステレオマー誘導体を使用して実施できるが、解離可能な複合体(例えば結晶性ジアステレオマー塩)が好ましい。ジアステレオマーは異なる物性(例えば融点、沸点、溶解度、反応性など)を有し、これらの相違の利用により容易に分離することができる。ジアステレオマーはクロマトグラフィーによりまたは好ましくは溶解度の差異に基づく分離／分解技術によって分離できる。その後、光学的に純粋な鏡像体を、ラセミ化を生じない何らかの実際的な手段により分割剤と共に回収する。ラセミ混合物からの化合物の立体異性体の分割に適用可能な技術のより詳細な記載は、Jean Jacques, Andre Collet, Samuel H. Wilen, “Enantiomers, Racemates and Resolutions”, John Wiley And Sons, Inc., 1981に見ることができる。
【００７１】
要約として、式Ｉの化合物は次のものを含む工程により製造できる：
(ａ)  上記反応スキームのもの；および
(ｂ)  場合により本発明の化合物の薬学的に許容される塩への変換；
(ｃ)  場合により塩形態の本発明の化合物の非塩形態への変換；
(ｄ)  場合により酸化されていない形態の本発明の化合物の薬学的に許容されるＮ−オキシドへの変換；
(ｅ)  場合によりＮ−オキシド形態の本発明の化合物のその酸化されていない形態への変換；
(ｆ)  場合により異性体混合物からの本発明の化合物の個々の異性体の分割；
(ｇ)  場合により誘導体化されていない本発明の化合物の薬学的に許容されるプロドラッグ誘導体への変換；および
(ｈ)  場合により本発明の化合物のプロドラッグ誘導体のその誘導体化されていない形態への変換。
【００７２】
出発物質の製造が特に記載されていない限り、その化合物は既知であるかまたは当業者に既知の方法に準じてまたは下の実施例に記載のとおり製造できる。
【００７３】
当業者には、上記の変換は本発明の化合物の製造の単なる代表例であって、他の既知方法を同様に使用できることは当然である。
【実施例】
【００７４】
本発明を、本発明に従う式Ｉの化合物の製造を説明する次の中間体(参考例)および実施例によりさらに例示するが、限定しない。
【００７５】
使用する略語は次のとおりである：ジクロロメタン(ＤＣＭ)；Ｎ,Ｎ−ジメチルアセトアミド(ＤＭＡ)；Ｎ,Ｎ−ジメチルホルムアミド(ＤＭＦ)；Ｎ,Ｎ−ジメチルホルムアミドジメチルアセタール(ＤＭＦ  ＤＭＡ)；ジメチルスルホキシド(ＤＭＳＯ)；高速液体クロマトグラフィー(ＨＰＬＣ)；テトラヒドロフラン(ＴＨＦ)；薄層クロマトグラフィー(ＴＬＣ)；およびパラ−トルエンスルホン酸(ｐＴｓＯＨ)。
【００７６】
参考例１：Ｎ−(４−アミノ−３,５−ジフルオロピリジン−２−イル)プロパン−１−スルホンアミド
【化１１】
2013518904.tif 000013
【００７７】
工程１：３,５−ジフルオロ−４−ヨードピリジン−２−アミン
ｎ−ブチルリチウム(４１ml、１.６Ｍヘキサン溶液、６６mmol)を、２−アミノ−３,５−ジフルオロピリジン(３.４ｇ、２６mmol)のＴＨＦ(１００ml)溶液に−７８℃で滴下した。混合物をその温度で１.５時間撹拌し、ヨウ素(２０ｇ、７８mmol)のＴＨＦ(３０ml)溶液を添加した。混合物を−７８℃で１５分間撹拌し、ｒｔに温めた。飽和チオ硫酸ナトリウム水溶液を添加し、混合物を酢酸エチルで抽出した。合わせた有機層を硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過し、濃縮した。残渣をシリカゲルクロマトグラフィー(溶離剤０〜２５％酢酸エチルのヘキサン溶液)で精製して、表題化合物を得た。MS m/z: 297.9 (M+MeCN+1)。
【００７８】
工程２：３,５−ジフルオロ−Ｎ４−(４−メトキシベンジル)ピリジン−２,４−ジアミン
撹拌している３,５−ジフルオロ−４−ヨードピリジン−２−アミン(３.０ｇ、１１.７mmol)、４−メトキシベンジルアミン(１.９２ｇ、１４mmol)、Ｐｄ２ｄｂａ３(１.０７ｇ、１.２mmol)、ＢＩＮＡＰ(１.４６ｇ、２.３mmol)、ナトリウムｔ−ブトキシド(１.４６ｇ、２.３mmol)およびトルエン(６００ml)の混合物を、密閉容器中、１３０℃で１６時間撹拌しながら加熱した。重炭酸ナトリウム水溶液を添加し、混合物を酢酸エチルで抽出した。合わせた有機抽出物を硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過し、濃縮した。残渣をシリカゲル(溶離剤３０％酢酸エチルのヘキサン溶液)でクロマトグラフして、表題化合物を得た。
【００７９】
工程３：Ｎ−(３,５−ジフルオロ−４−(４−メトキシベンジルアミジン−２−イル)プロパン−１−スルホンアミド
３,５−ジフルオロ−Ｎ４−(４−メトキシベンジル)ピリジン−２,４−ジアミン(１.３ｇ、４.９mmol)、トリエチルアミン(４.１ml、２９mmol)およびＤＣＭの溶液をｎ−プロパンスルホニルクロライド(２.２ml、１９.６mmol)で０℃で処理した。混合物をｒｔに温め、２時間撹拌した。さらにｎ−プロパンスルホニルクロライド(１.１ml、９.８mmol)を添加した。１時間後、重炭酸ナトリウム水溶液を添加し、混合物をＤＣＭで抽出した。合わせた有機抽出物を硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過し、濃縮した。残渣をアセトニトリル(１０mL)に溶解し、炭酸ナトリウム水溶液(２Ｍ、１０ml)を添加した。混合物を２時間還流した。冷却した反応混合物を酢酸エチルで抽出し、塩水で洗浄し、濃縮した。残渣をシリカゲル(溶離剤２０−３０％酢酸エチルのヘキサン溶液)でクロマトグラフして、表題化合物を得た。
【００８０】
工程４：Ｎ−(４−アミノ−３,５−ジフルオロピリジン−２−イル)プロパン−１−スルホンアミド
Ｎ−(３,５−ジフルオロ−４−(４−メトキシベンジルアミノ)ピリジン−２−イル)プロパン−１−スルホンアミド(１.０５ｇ)のＤＣＭ(５０ml)およびＴＦＡ(２０ml)溶液をｒｔで１６時間撹拌した。混合物を濃縮した。残渣を重炭酸ナトリウム水溶液に溶解し、混合物をＤＣＭで抽出した。合わせた有機抽出物を硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過し、濃縮した。残渣をシリカゲル(溶離剤１０−５０％酢酸エチルのヘキサン溶液)でクロマトグラフして、表題化合物を得た。MS m/z: 251.9 (M+1)。
【００８１】
参考例２：４−(３−クロロ−ピラジン−２−イル)−６−メチルスルファニル−ピリミジン
【化１２】
2013518904.tif 000014
【００８２】
工程１：４−クロロ−６−メチルスルファニル−ピリミジン
【化１３】
2013518904.tif 000015
４,６−ジクロロ−ピリミジン(２０.９３ｇ、１４０mmol)およびナトリウムチオメトキシド(１０.３ｇ、１４７mmol)のＴＨＦ(１００mL)中の混合物を室温で１６時間撹拌し、反応混合物を濃縮した。残渣を酢酸エチルおよび塩水に分配した。有機層を分離し、塩水で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥させ、濃縮した。粗生成物残渣をヘキサン(６０mL)からの再結晶により精製して、表題化合物を得た。母液を濃縮し、残渣をシリカゲルフラッシュクロマトグラフィー(溶離剤として０〜１０％酢酸エチルのヘキサン溶液)で精製して、少量の副産物４,６−ビスメチルチオ−ピリミジンを含むさらなる化合物を得た。1H NMR 400 MHz (CDCl3) δ 8.72 (s, 1H), 7.21 (s, 1H), 2.58 (s, 3H)。
【００８３】
工程２：４−ヨード−６−メチルスルファニル−ピリミジン
【化１４】
2013518904.tif 000016
４−クロロ−６−メチルスルファニル−ピリミジン(０.５４ｇ、３.４mmol)、５７％ヨウ化水素酸溶液(２.５０mL、１９.０mmol)およびＤＣＭ(３mL)の混合物を室温で撹拌した。５時間後、得られた固体を濾過により回収し、ＤＣＭで洗浄した。ケーキを水(１０mL)に溶解し、飽和重炭酸ナトリウム水溶液でｐＨ＝８に塩基性化した。水性層をＤＣＭで抽出した(２×５０mL)。合わせた有機抽出物を塩水で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥させ、濃縮して、表題化合物を得た。
【００８４】
工程３：４−メチルスルファニル−６−トリブチルスタンナニル−ピリミジン
【化１５】
2013518904.tif 000017
イソプロピルマグネシウムクロライド(２Ｍ  ＴＨＦ溶液、５mL、１０mmol)溶液を、４−ヨード−６−メチルスルファニル−ピリミジン(２.５３ｇ、１０mol)のＴＨＦ(５０mL)溶液に−７８℃でゆっくり添加した。１０分間後、トリ−ｎ−ブチルスズクロライド(２.７５mL、１０mmol)を添加し、混合物を撹拌し、一夜でｒｔに温めた。粗生成物をシリカゲルフラッシュクロマトグラフィー(溶離剤０〜１０％酢酸エチルのヘキサン溶液)で精製して、表題化合物を得た。
【００８５】
工程４：４−(３−クロロ−ピラジン−２−イル)−６−メチルスルファニル−ピリミジン
【化１６】
2013518904.tif 000018
４−メチルスルファニル−６−トリブチルスタンナニル−ピリミジン(１.８０ｇ、４.３３mmol)、２,３−ジクロロ−ピラジン(１.９４ｇ、１３mmol)、トリフェニルホスフィン(０.９０７ｇ、３.４６mmol)、酢酸パラジウム(II)(１９４mg、０.８６６mmol)およびジオキサン(１５mL)中の混合物を脱気し、圧力管中密閉した。１２０℃で１６時間撹拌後、反応混合物を濃縮し、残留物をシリカゲルフラッシュクロマトグラフィー(溶離剤１０％〜３０％酢酸エチルのヘキサン溶液)で精製して、表題化合物を得た。1H NMR 300 MHz (CDCl3) δ 9.10 (s, 1H), 8.64 (d,  J = 2 Hz, 1H), 8.29 (d,  J = 2 Hz, 1H), 7.70 (s, 1H),  2.64 (s, 3H)。
【００８６】
参考例３：Ｎ−(３,５−ジフルオロ−４−ヨードピリジン−２−イル)−Ｎ−((２−(トリメチルシリル)エトキシ)メチル)プロパン−１−スルホンアミド
【化１７】
2013518904.tif 000019
【００８７】
工程１：Ｎ−(３,５−ジフルオロ−４−ヨードピリジン−２−イル)−Ｎ−(プロピルスルホニル)プロパン−１−スルホンアミド
撹拌中の３,５−ジフルオロ−４−ヨードピリジン−２−アミン(２００mg、０.７８mmol)およびトリエチルアミン(２４０mg、２.３４mmol)のＤＣＭ(１０ml)中の混合物に、０℃でｎ−プロパンスルホニルクロライド(０.２８ｇ、１.９５mmol)を添加した。混合物をｒｔに温め、２時間撹拌した。濃縮して粗生成物を得て、それを精製せずに次工程に使用した。MS m/z 469.1 (M + 1)。
【００８８】
工程２：Ｎ−(３,５−ジフルオロ−４−ヨードピリジン−２−イル)プロパン−１−スルホンアミド
粗Ｎ−(３,５−ジフルオロ−４−ヨードピリジン−２−イル)−Ｎ−(プロピルスルホニル)プロパン−１−スルホンアミド(工程１で得た)を５％水酸化ナトリウム水溶液(２０ml)と６０℃で１時間撹拌した。冷却した反応混合物を１０％塩酸でｐＨ＜２に酸性化し、ＤＣＭで抽出した。合わせた抽出物を硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過し、濃縮した。残渣をシリカゲル(溶離剤２０−３０％酢酸エチルのヘキサン溶液)でクロマトグラフして、表題化合物を得た。MS m/z 363.1 (M + 1)。
【００８９】
工程３：Ｎ−(３,５−ジフルオロ−４−ヨードピリジン−２−イル)−Ｎ−((２−(トリメチルシリル)エトキシ)−メチル)プロパン−１−スルホンアミド
Ｎ−(３,５−ジフルオロ−４−ヨードピリジン−２−イル)プロパン−１−スルホンアミド(０.６８ｇ、１.８８mmol)の無水ＤＭＦ(２５ml)溶液に、０℃で、水素化ナトリウム(鉱油中６０％分散、０.１５ｇ、３.８mmol)を添加した。反応混合物を１０分間撹拌し、ＳＥＭＣｌ(０.４７ｇ、２.８mmol)を添加した。混合物を１時間撹拌し、濃縮した。水を添加し、混合物を酢酸エチルで抽出した。有機層を合わせ、硫酸ナトリウムで乾燥させ、濃縮した。残渣をシリカゲル(溶離剤５〜２０％酢酸エチルのヘキサン溶液)でクロマトグラフして、表題化合物を得た。MS m/z 515.1 (M+Na)。
【００９０】
参考例４：Ｎ,Ｎ−ビス−ＢＯＣ−３,５−ジフルオロ−４−ヨードピリジン−２−アミン
【化１８】
2013518904.tif 000020
３,５−ジフルオロ−４−ヨードピリジン−２−アミン(０.２６ｇ、１mmol)およびＤＭＡＰ(１８mg、０.１５mmol)のＤＭＦ(５mL)溶液をジカルボン酸ジ−ｔ−ブチル(０.６７ｇ、３mmol)でｒｔで処理した。混合物をｒｔで１６時間撹拌し、水で希釈した。混合物を酢酸エチルで抽出し、合わせた有機抽出物を塩水で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥させ、濃縮した。残渣をシリカゲル(溶離剤５％酢酸エチルのヘキサン溶液)でクロマトグラフして、表題化合物を得た。MS (m/z) 300.9 (M+1-Boc-t-Bu)。
【００９１】
参考例５：６−クロロ−４−(メチルアミノ)ニコチンアルデヒド
【化１９】
2013518904.tif 000021
【００９２】
工程１：４,６−ジヒドロキシニコチン酸エチル
２Ｌフラスコに１,３−アセトンジカルボン酸ジエチル(１６０ｇ、０.７９mol)、オルトギ酸トリエチル(１２９ｇ、０.８７mol)および酢酸無水物(１６１ｇ、１.５８mol)を仕込んだ。得られた混合物を１２０℃で１.５時間加熱した。混合物をｒｔに冷却し、揮発物を減圧下に除去した。残渣を氷浴で冷却し、３０％アンモニア水溶液(６５mL)を添加した。反応混合物を０℃で１時間撹拌し、２Ｎ塩酸でｐＨ＜５に酸性化した。混合物を真空で濃縮した。粗残渣をシリカゲルクロマトグラフィー(溶離剤１：１  ヘキサン／酢酸エチル)で精製して、表題生成物を得た。
【００９３】
工程２：４,６−ジクロロニコチン酸エチル
４,６−ジヒドロキシニコチン酸エチルエステル(５０ｇ、０.３mol)をＰＯＣｌ３(５００mL)と２Ｌフラスコ中で撹拌し、１１０℃で３時間加熱した。反応混合物を冷却し、真空下に濃縮した。粗暗色残渣を氷−水混合物に注ぎ、混合物を飽和炭酸ナトリウム水溶液で中和した。混合物を酢酸エチルで抽出した。合わせた有機層を塩水で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過し、濃縮した。シリカゲルクロマトグラフィー(溶離剤２５％酢酸エチルのヘキサン溶液)での精製により、表題化合物を白色固体として得た。1H NMR (300MHz, CDCl3) δ 8.85 (s, 1H), 7.47 (s, 1H), 4.43 (q, J = 7.2 Hz, 2H), 1.41 (t, J = 7.2 Hz, 3H)。
【００９４】
工程３：６−クロロ−４−(メチルアミノ)ニコチン酸エチル
４,６−ジクロロニコチン酸エチルエステル(４３ｇ、１９５mmol)をアセトニトリル(６００mL)に溶解し、０℃に冷却し、メチルアミン(１２５mLの４０％水溶液、９７７mmol)をゆっくり添加した。反応混合物を０℃で３０分間撹拌し、ｒｔに３時間かけて温めた。溶媒を真空で除去し、粗生成物をシリカゲルクロマトグラフィー(溶離剤１：１  ヘキサン／酢酸エチル)を使用して精製した。表題化合物を白色固体として単離した。1H NMR (300MHz, CDCl3) δ 8.66 (s, 1H), 8.12 (bs, 1H), 6.53 (s, 1H), 4.34 (q, J = 7.2 Hz, 2H), 2.92 (s, 3H), 1.37 (t, J = 7.2 Hz, 3H)。
【００９５】
工程４：(６−クロロ−４−(メチルアミノ)ピリジン−３−イル)メタノール
６−クロロ−４−メチルアミノニコチン酸エチルエステル(３３ｇ、１５６mmol)を無水ＴＨＦ(５００mL)に溶解し、−７８℃に冷却した。この溶液に、ＬＡＨ(１２.５ｇ、３３０mmol)のＴＨＦ(５００mL)溶液をゆっくり添加した。添加完了後、反応を−７８℃で１時間維持した。混合物をｒｔに温め、少量のＭｅＯＨ／酢酸エチル(１／１)をゆっくり添加して、過剰のＬＡＨを破壊した。粗反応混合物をセライトプラグで濾過し、酢酸エチルで２回洗浄した。濾液を濃縮し、粗残渣をシリカゲルクロマトグラフィー(溶離剤１：１  ヘキサン／酢酸エチル)で精製した。表題化合物を白色固体として得た。1H NMR (300MHz, CDCl3) δ 7.36 (s, 1H), 6.48 (s, 1H), 5.55 (bs, 1H), 4.63 (s, 2H), 2.89 (d, J = 5.1 Hz, 3H)。
【００９６】
工程５：６−クロロ−４−(メチルアミノ)ニコチンアルデヒド
(６−クロロ−４−(メチルアミノ)ピリジン−３−イル)メタノール(２０ｇ、１１６mmol)をＤＣＭ(２５０mL)に溶解し、ＭｎＯ２(１００ｇ、１.１６mol)を添加した。反応混合物をｒｔで一夜撹拌し、セライトプラグで濾過し、酢酸エチルで洗浄した。濾液を濃縮して、表題化合物を得た。1H NMR (300MHz, CDCl3) δ 9.85 (s, 1H), 8.59 (bs, 1H), 8.31 (s, 1H), 6.59 (s, 1H), 2.96 (d, J = 5.1 Hz, 3H)。
【００９７】
実施例１：Ｎ−(４−(３−(６−(エチルアミノ)ピリミジン−４−イル)ピラジン−２−イルアミノ)−３,５−ジフルオロピリジン−２−イル)プロパン−１−スルホンアミド
【化２０】
2013518904.tif 000022
【００９８】
工程１：Ｎ−(３,５−ジフルオロ−４−(３−(６−(メチルチオ)ピリミジン−４−イル)ピラジン−２−イルアミノ)ピリジン−２−イル)プロパン−１−スルホンアミド
撹拌中の４−(３−クロロピラジン−２−イル)−６−(メチルチオ)ピリミジン(１４３mg、０.６mmol)、Ｎ−(４−アミノ−３,５−ジフルオロピリジン−２−イル)プロパン−１−スルホンアミド(１００mg、０.４mmol)、Ｐｄ２(ｄｂａ)３(１０９mg、０.１２mmol)、Xantphos(１３８mg、０.２４mmol)、Ｃｓ２ＣＯ３(３８９mg、１.１９mmol)、４Åモレキュラー・シーブ(５００mg)およびジオキサン(１５ml)の混合物を、撹拌しながら、密閉容器中、１５０℃で５時間加熱した。反応混合物をｒｔに冷却し、濾過した。濾液を濃縮し、残渣をシリカゲル(溶離剤１０〜３０％酢酸エチルのヘキサン溶液)でクロマトグラフして、表題化合物を得た。MS m/z 454.1 (M+1)。
【００９９】
工程２：Ｎ−(４−(３−(６−(エチルアミノ)ピリミジン−４−イル)ピラジン−２−イルアミノ)−３,５−ジフルオロピリジン−２−イル)プロパン−１−スルホンアミド
撹拌中のＮ−(３,５−ジフルオロ−４−(３−(６−(メチルチオ)ピリミジン−４−イル)ピラジン−２−イルアミノ)ピリジン−２−イル)プロパン−１−スルホンアミド(７０mg、０.１５mmol)、エチルアミン(７０％水溶液、３mL)および２−プロパノール(３mL)の混合物を、撹拌しながら１２０℃で１６時間加熱した。反応混合物をｒｔに冷却し、濃縮した。残渣をシリカゲル(溶離剤１０〜５０％酢酸エチルのヘキサン溶液)でクロマトグラフして、表題化合物を得た。
【０１００】
実施例１３：Ｎ−(４−(７−(エチルアミノ)−１−メチル−２−オキソ−１,２−ジヒドロ−１,６−ナフチリジン−３−イル)−３,５−ジフルオロピリジン−２−イル)プロパン−１−スルホンアミド
【化２１】
2013518904.tif 000023
【０１０１】
工程１：３−(６−クロロ−４−(メチルアミノ)ピリジン−３−イル)アクリル酸(Ｅ)−エチル
６−クロロ−４−(メチルアミノ)ピリジン−３−カルボキシアルデヒド(３.４１ｇ、２０mmol)のＴＨＦ(１２０mL)溶液に、(カルボエトキシメチレン)トリフェニルホスホラン(８.３５ｇ、２４mmol)を添加した。混合物を１６時間加熱還流し、冷却し、濃縮した。残渣をシリカゲル(溶離剤１２％酢酸エチルのヘキサン溶液)でクロマトグラフして、表題化合物を得た。MS (m/z) 241.0 (M+1)。
【０１０２】
工程２：７−(エチルアミノ)−１−メチル−１,６−ナフチリジン−２(１Ｈ)−オン
バイアルに３−(６−クロロ−４−(メチルアミノ)ピリジン−３−イル)アクリル酸(Ｅ)−エチル(４５mg)、７０％エチルアミン水溶液(１mL)およびNMＰ(１mL)を仕込んだ。バイアルを密閉し、マイクロ波照射で３５分間、１５０℃で加熱した。重炭酸ナトリウム水溶液を添加し、混合物をジクロロメタンで抽出した。合わせた有機抽出物を硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過し、濃縮した。残渣をシリカゲル(溶離剤５０％酢酸エチルのヘキサン溶液)でクロマトグラフして、表題化合物を得た。MS (m/z) 204.0 (M+1)。
【０１０３】
工程３：３−ブロモ−７−(エチルアミノ)−１−メチル−１,６−ナフチリジン−２(１Ｈ)−オン
７−(エチルアミノ)−１−メチル−１,６−ナフチリジン−２(１Ｈ)−オン(２０mg、０.１mmol)およびピリジン(２７μL、０.３mmol)のＤＣＭ(２mL)溶液に、フェニルセレニウムブロマイド(７２mg、０.３mmol)を添加した。混合物を３９℃で６時間加熱し、溶媒を真空下に除去した。残渣をシリカゲル(溶離剤３０％酢酸エチルのヘキサン溶液)でクロマトグラフして、表題化合物を得た。MS (m/z) 282.0 (M+1)。
【０１０４】
工程４：３−(トリブチルスタンニル)−７−(エチルアミノ)−１−メチル−１,６−ナフチリジン−２(１Ｈ)−オン
チューブに３−ブロモ−７−(エチルアミノ)−１−メチル−１,６−ナフチリジン−２(１Ｈ)−オン(４５mg、０.１６mmol)およびテトラキス(トリフェニルホスフィン)パラジウム(０)(５５mg、０.０４７mmol)を仕込んだ。チューブを脱気し、窒素ガスを再充填した。ヘキサブチルジスズ(２９３mg、０.４８mmol)およびＴＨＦ(１０mL)を添加し、チューブを密閉し、混合物を８０〜９０℃で４８時間加熱した。混合物を濃縮し、残渣をシリカゲル(溶離剤３０％酢酸エチルのヘキサン溶液)でクロマトグラフして、表題化合物を得た。MS (m/z) 490.1 (M+1)。
【０１０５】
工程５：３−(２−(Ｎ,Ｎ−ビス−(ｔ−ブトキシカルボニル)アミノ)−３,５−ジフルオロピリジン−４−イル)−７−(エチルアミノ)−１−メチル−１,６−ナフチリジン−２(１Ｈ)−オン
チューブに３−(トリブチルスタンニル)−７−(エチルアミノ)−１−メチル−１,６−ナフチリジン−２(１Ｈ)−オン(４８mg、０.１mmol)、Ｎ,Ｎ−ビス−ＢＯＣ−３,５−ジフルオロ−４−ヨードピリジン−２−アミン(５４mg、０.１２mmol)、Ｐｈ３Ａｓ(２５mg、０.０８mmol)、ＣｕＩ(７.５mg、０.０４mmol)およびＰｄ２(ｄｂａ)３(９mg、０.０１mmol)を仕込んだ。チューブを脱気し、窒素ガスを再充填した。ＤＭＦ(１０mL)を添加し、チューブを密閉し、６０℃で４８時間加熱した。重炭酸ナトリウム水溶液を添加し、混合物を酢酸エチルで抽出した。合わせた有機層を水および塩水で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過し、濃縮した。残渣をシリカゲル(溶離剤７０％酢酸エチルのヘキサン溶液)でクロマトグラフして、表題化合物を得た。MS (m/z) 533.2 (M+1)。
【０１０６】
工程６：３−(２−アミノ−３,５−ジフルオロピリジン−４−イル)−７−(エチルアミノ)−１−メチル−１,６−ナフチリジン−２(１Ｈ)−オン
３−(２−(Ｎ,Ｎ−ビス−(ｔ−ブトキシカルボニル)アミノ)−３,５−ジフルオロピリジン−４−イル)−７−(エチルアミノ)−１−メチル−１,６−ナフチリジン−２(１Ｈ)−オン(３２mg)のＤＣＭ(１０mL)溶液にトリフルオロ酢酸(５mL)を添加した。混合物を室温で１時間撹拌した。溶媒を除去し、残渣を酢酸エチルおよび重炭酸ナトリウム水溶液に分配した。有機相を塩水で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過し、濃縮した。残渣をシリカゲル(溶離剤３％メタノールのジクロロメタン溶液)でクロマトグラフして、表題化合物を得た。MS (m/z) 332.1 (M+1)。
【０１０７】
工程７：Ｎ−(４−(７−(エチルアミノ)−１−メチル−２−オキソ−１,２−ジヒドロ−１,６−ナフチリジン−３−イル)−３,５−ジフルオロピリジン−２−イル)プロパン−１−スルホンアミド
３−(２−アミノ−３,５−ジフルオロピリジン−４−イル)−７−(エチルアミノ)−１−メチル−１,６−ナフチリジン−２(１Ｈ)−オン(１５mg、０.０５mmol)、トリエチルアミン(３ml)およびＤＣＭ(１０mL)の溶液をｎ−プロパンスルホニルクロライド(０.０５ml、０.４mmol)で０℃で処理した。混合物をｒｔに温め、１６時間撹拌した。重炭酸ナトリウム水溶液を添加し、混合物を酢酸エチルで抽出した。合わせた有機抽出物を硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過し、濃縮した。残渣をメタノール(１０mL)に溶解し、炭酸カリウム(２ｇ)を添加した。混合物を室温で２時間撹拌した。水を添加し、混合物を酢酸エチルで抽出し、合わせた有機抽出物を塩水で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過し、濃縮した。残渣をシリカゲル(溶離剤２％〜３％メタノールのＤＣＭ溶液)でクロマトグラフして、表題化合物を得た。
【０１０８】
上の実施例１〜１３に概説した方法の変法を使用して、次の表１の実施例化合物を製造できる：
【表１】
2013518904.tif 000024
【表２】
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【表３】
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【０１０９】
実施例１９
(Ｂ−Ｒａｆ  Ｖ６００Ｅ／Ｍｅｋ増幅発光プロキシミティ近接アッセイ
Ｂ−Ｒａｆ(Ｖ６００Ｅ；４pM)およびビオチニル化Ｍｅｋ(キナーゼ死滅；１０nM)をアッセイ緩衝液(５０mM  Ｔｒｉｓ、ｐＨ７.５、１５mM  ＭｇＣｌ２、０.０１％ＢＳＡおよび１mM  ＤＴＴ)中最終濃度の２×で合わせ、１００％ＤＭＳＯに希釈した０.５μlの４０×本発明の化合物を含むアッセイプレート(Greiner白色３８４ウェルアッセイプレート＃781207)に１０μl／ウェルで添加した。プレートを、６０分間、室温でインキュベートした。
【０１１０】
Ｂ−Ｒａｆキナーゼ活性反応を、アッセイ緩衝液に希釈した２×ＡＴＰ(１０μM)の１０μl／ウェルの添加により開始させた。３時間後、反応を１０μlの停止試薬(６０mM  ＥＤＴＡ、０.０１％Ｔｗｅｅｎ２０)の添加により停止させた。リン酸化産物を、ウサギ抗ｐ−ＭＥＫ(Cell Signaling, #9121)抗体およびAlpha Screen IgG(プロテインＡ)検出キット(PerkinElmer #6760617R)を使用して、３０μlをビーズ緩衝液(５０mM  Ｔｒｉｓ、ｐＨ７.５、０.０１％Ｔｗｅｅｎ２０)中の抗体(１：２０００希釈)および検出ビーズ(両方のビーズについて１：１０００希釈)の混合物のウェルに添加して測定した。添加は、検出ビーズを光から保護するために暗条件下で行った。蓋をプレートの上に置き、プレートを１時間、室温でインキュベートした。発光をPerkinElmer Envision装置で読んだ。各化合物について５０％阻害濃度(ＩＣ５０)をXL Fitデータ解析ソフトウェアを使用して非線形回帰により計算した。
【０１１１】
遊離形態または薬学的に許容される塩形態の本発明の化合物は、価値ある薬理学的特性を、例えば、本明細書に記載するインビトロ試験で示されるとおり示す。例えば、本発明の化合物は、好ましくは野生型およびＶ６００Ｅ  Ｂ−Ｒａｆについて１×１０−１０から１×１０−５Ｍの範囲、好ましくは５００nM未満、２５０nM未満、１００nM未満および５０nM未満のＩＣ５０を示す。
【０１１２】
実施例２０
Ａ３７５細胞増殖アッセイ
Ａ３７５はＢ−Ｒａｆ  Ｖ６００Ｅ変異を担持する黒色腫細胞株である。ルシフェラーゼを発現するように操作したＡ３７５−ｌｕｃ細胞を３８４ウェル白色透明底プレートに、１０％ＦＢＳ含有ＤＭＥＭ中１,５００細胞／５０μl／ウェルで播種する。適当な濃度で１００％ＤＭＳＯに溶解した本発明の化合物を、細胞にロボットPin Tool(１００nl)で移す。細胞を２日間、２５℃でインキュベートし、２５μlのBrightGloTMを各ウェルに添加し、プレートを発光により読む。各化合物の５０％阻害濃度(ＩＣ５０)をXL Fitデータ解析ソフトウェアを使用して非線形回帰により計算した。
【０１１３】
遊離形態または薬学的に許容される塩形態の本発明の化合物は、価値ある薬理学的特性を、例えば、本明細書に記載するインビトロ試験で示されるとおり示す。例えば、本発明の化合物は、好ましくは実施例２０に記載するこのアッセイで５００nM未満、２５０nM未満、１００nM未満、５０nM未満および１０nM未満の範囲のＩＣ５０を示す。
【０１１４】
例えば、Ａ３７５細胞増殖アッセイにおける本発明の化合物のいくつかについてのＩＣ５０データを上の表に記載する。
【０１１５】
ここに記載する実施例および態様は説明の目的のためのみであり、それに照らした種々の修飾または変更が当業者には示唆され、本明細書の精神および範囲ならびに添付する特許請求の範囲の範囲内に入ると理解される。ここに引用する全ての刊行物、特許および特許出願を、全ての目的のために引用により本明細書に包含させる。
【国際調査報告】
2013518904.tif 000032
2013518904.tif 000033