(57)【要約】  本発明は、増殖性腫瘍、特に固形腫瘍、例えば結腸直腸癌、黒色腫および甲状腺癌などの患者を治療するための、プロパン-１-スルホン酸{３-[５-(４-クロロ-フェニル)-１Ｈ-ピロロ[２,３-ｂ]ピリジン-３-カルボニル]-２,４-ジフルオロ-フェニル}-アミドまたはその薬学的に許容される塩とＥＧＦＲ阻害剤の併用療法に関する。【特許請求の範囲】
【請求項１】
プロパン-１-スルホン酸{３-[５-(４-クロロ-フェニル)-１Ｈ-ピロロ[２,３-ｂ]ピリジン-３-カルボニル]-２,４-ジフルオロ-フェニル}-アミド（化合物Ｉ）またはその薬学的に許容される塩を活性剤として含んでなる第１の成分（Ａ）と、ＥＧＦＲ阻害剤を活性剤として含んでなる第２の成分（Ｂ）を、Ｖ６００変異を有するｂ-Ｒａｆを含む増殖性疾患、特に癌、より詳細には結腸直腸癌、黒色腫および甲状腺癌の治療に同時または順次使用する併用調製剤として含んでなる、医薬品。
【請求項２】
Ｖ６００Ｅ変異を有するｂ-Ｒａｆを含む結腸直腸癌、黒色腫および甲状腺癌の治療用の請求項１に記載の医薬品。
【請求項３】
前記ＥＧＦＲ阻害剤がエルロチニブまたはその薬学的に許容される塩である請求項１または２に記載の医薬品。
【請求項４】
前記ＥＧＦＲ阻害剤がセツキシマブである請求項１または２に記載の医薬品。
【請求項５】
トポイソメラーゼ阻害剤、特にＩ型トポイソメラーゼ阻害剤を活性剤として含んでなる第３の成分（Ｃ）をさらに含んでなる請求項１から４のいずれか一項に記載の医薬品。
【請求項６】
前記トポイソメラーゼ阻害剤がイリノテカンまたはその薬学的に許容される塩である請求項５に記載の医薬品。
【請求項７】
プロパン-１-スルホン酸{３-[５-(４-クロロ-フェニル)-１Ｈ-ピロロ[２,３-ｂ]ピリジン-３-カルボニル]-２,４-ジフルオロ-フェニル}-アミドまたはその薬学的に許容される塩が非晶質の形態または実質的に非晶質の形態である請求項１から６のいずれか一項に記載の医薬品。
【請求項８】
プロパン-１-スルホン酸{３-[５-(４-クロロ-フェニル)-１Ｈ-ピロロ[２,３-ｂ]ピリジン-３-カルボニル]-２,４-ジフルオロ-フェニル}-アミドまたはその薬学的に許容される塩を活性剤として含んでなる第１の成分（Ａ）と、ＥＧＦＲ阻害剤を活性剤として含んでなる第２の成分（Ｂ）を含んでなるキット。
【請求項９】
トポイソメラーゼ阻害剤、特にイリノテカンを活性剤として含んでなる第３の成分をさらに含んでなる請求項８に記載のキット。
【請求項１０】
Ｖ６００Ｅ変異を有するｂ-Ｒａｆを含む増殖性疾患、特に癌、より詳細には結腸直腸癌、黒色腫および甲状腺癌の治療に使用される請求項８または９に記載のキット。
【請求項１１】
前記プロパン-１-スルホン酸{３-[５-(４-クロロ-フェニル)-１Ｈ-ピロロ[２,３-ｂ]ピリジン-３-カルボニル]-２,４-ジフルオロ-フェニル}-アミドまたはその薬学的に許容される塩が、１日２回、約８５０ｍｇから約１０５０ｍｇの量で投与され、前記エルロチニブまたはその薬学的に許容される塩が、毎日約１００ｍｇから約２００ｍｇの量で投与される請求項３に記載の医薬品。
【請求項１２】
前記プロパン-１-スルホン酸｛３-[５-（４-クロロ-フェニル）-１Ｈ-ピロロ[２，３-ｂ]ピリジン-３-カルボニル]-２，４-ジフルオロフェニル｝-アミドまたはその薬学的に許容される塩が、１日２回、約８５０ｍｇから約１０５０ｍｇの量で投与され、前記セツキシマブが、初回投与は約４００ｍｇ／ｍ２から約５００ｍｇ／ｍ２の量、次回以降の投与は約２００ｍｇ／ｍ２から約３００ｍｇ／ｍ２の量で毎週投与される請求項４に記載の医薬品。
【請求項１３】
イリノテカンまたはその薬学的に許容される塩をさらに含んでなる請求項１１および１２に記載の医薬品。
【請求項１４】
前記イリノテカンまたはその薬学的に許容される塩が、毎週約５０ｍｇ／ｍ２から約２００ｍｇ／ｍ２の量で投与される請求項１３に記載の医薬品。
【請求項１５】
イリノテカンまたはその薬学的に許容される塩が、６週サイクルで投与され、最初の４週間は毎週約７５から約１７５ｍｇ／ｍ２の量で投与される請求項１３に記載の医薬品。
【請求項１６】
イリノテカンまたはその薬学的に許容される塩が、３週おきに約３００から約４００ｍｇ／ｍ２投与され、または２週おきに約１３０から約２３０ｍｇ／ｍ２投与される請求項１３に記載の医薬品。
【請求項１７】
化合物Ｉまたはその薬学的に許容される塩を活性剤として含んでなる第１の成分（Ａ）と、エルロチニブまたはその薬学的に許容される塩を活性剤として含んでなる第２の成分（Ｂ）を、Ｖ６００Ｅ変異を有するｂ-Ｒａｆを含む増殖性疾患、特に癌、より詳細には結腸直腸癌、黒色腫および甲状腺癌の治療に同時または順次使用する併用調製剤として含んでなる医薬品であって、（Ａ）が約２００ｍｇ／日から約３０００ｍｇ／日、約１０００ｍｇ／日から約２５００ｍｇ／日、約１７００ｍｇ／日から約２１００ｍｇ／日または約１９２０ｍｇ／日の量で投与され、（Ｂ）が約２０ｍｇ／日から約５００ｍｇ／日、約１００ｍｇ／日から約４００ｍｇ／日または約１００ｍｇ／日から約２００ｍｇ／日の量で投与される、医薬品。
【請求項１８】
化合物Ｉまたはその薬学的に許容される塩を活性剤として含んでなる第１の成分（Ａ）と、セツキシマブを活性剤として含んでなる第２の成分（Ｂ）を、増殖性疾患の治療に同時または順次使用する併用調製剤として含んでなる医薬品であって、（Ａ）が約２００ｍｇ／日から約３０００ｍｇ／日、約１０００ｍｇ／日から約２５００ｍｇ／日、約１７００ｍｇ／日から約２１００ｍｇ／日または約１９２０ｍｇ／日の量で投与され、（Ｂ）が約５０ｍｇ／ｍ２／週から約７００ｍｇ／ｍ２／週、約１００ｍｇ／ｍ２／週から約６００ｍｇ／ｍ２／週または約２００ｍｇ／ｍ２／週から約５００ｍｇ／ｍ２／週の量で投与される、医薬品。
【請求項１９】
化合物Ｉまたはその薬学的に許容される塩を活性剤として含んでなる第１の成分（Ａ）と、セツキシマブを活性剤として含んでなる第２の成分（Ｂ）と、イリノテカンまたはその薬学的に許容される塩を活性剤として含んでなる第３の成分（Ｃ）を、増殖性疾患の治療に同時または順次使用する併用調製剤として含んでなる医薬品であって、（Ａ）が約２００ｍｇ／日から約３０００ｍｇ／日、約１０００ｍｇ／日から約２５００ｍｇ／日、約１７００ｍｇ／日から約２１００ｍｇ／日または約１９２０ｍｇ／日の量で投与され、（Ｂ）が約５０ｍｇ／ｍ２／週から約７００ｍｇ／ｍ２／週、約１００ｍｇ／ｍ２／週から約６００ｍｇ／ｍ２／週または約２００ｍｇ／ｍ２／週から約５００ｍｇ／ｍ２／週の量で投与され、（Ｃ）が約１から約２５０ｍｇ／ｍ２／週、約５０から約２００ｍｇ／ｍ２／週または１２５ｍｇ／ｍ２／週の量で投与される、医薬品。
【請求項２０】
プロパン-１-スルホン酸{３-[５-(４-クロロ-フェニル)-１Ｈ-ピロロ[２,３-ｂ]ピリジン-３-カルボニル]-２,４-ジフルオロ-フェニル}-アミドまたはその薬学的に許容される塩と、ＥＧＦＲ阻害剤の、すべてＶ６００変異を、特にＶ６００Ｅ変異を有するｂ-Ｒａｆを含む癌などの増殖性疾患、より詳細には結腸直腸癌、黒色腫および甲状腺癌の治療用医薬の製造への使用。
【請求項２１】
本明細書に実質的に記載された新規の調製剤、キットおよび使用。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、プロパン-１-スルホン酸{３-[５-(４-クロロ-フェニル)-１Ｈ-ピロロ[２,３-ｂ]ピリジン-３-カルボニル]-２,４-ジフルオロ-フェニル}-アミドとＥＧＦＲ阻害剤を患者に投与することを含む、増殖性疾患、特に固形腫瘍、例えば結腸直腸癌、黒色腫および甲状腺癌の患者を治療するための併用療法に関する。
【背景技術】
【０００２】
正常に機能するｂ-Ｒａｆは、細胞膜から核へのシグナルのリレーに関与するキナーゼであり、このようなシグナルのリレーに必要なときのみ活性である。しかし、Ｖ６００Ｅ変異を有する変異型ｂ-Ｒａｆは常に活性であるので、腫瘍の発達において所定の役割を果たしている。このような変異型ｂ-Ｒａｆは様々な腫瘍、例えば結腸直腸癌、黒色腫および甲状腺癌などに関連づけられる。
【０００３】
プロパン-１-スルホン酸{３-[５-(４-クロロ-フェニル)-１Ｈ-ピロロ[２,３-ｂ]ピリジン-３-カルボニル]-２,４-ジフルオロ-フェニル}-アミド（以後「化合物Ｉ」とも呼ぶ）は、Ｖ６００Ｅ変異を有する変異型ｂ-Ｒａｆを特異的に標的とするｂ-Ｒａｆキナーゼ阻害剤である。この化合物は国際公開第２００７／００２３２５号に記載されている。したがって、このような阻害剤は、Ｖ６００変異、好ましくはＶ６００Ｅ変異を有するｂ-Ｒａｆを含む腫瘍、特に固形腫瘍、例えば結腸直腸癌、黒色腫および甲状腺癌の阻害に使用される。
【０００４】
プロテインチロシンキナーゼ（ＰＴＫ）は、細胞増殖と分化の制御に関与する様々なタンパク質のチロシル残基のリン酸化を触媒する（Wilksら、Progress in Growth Factor Research 97 (1990) 2；Chan, A. C. およびShaw, A. S., Curr. Opin. Immunol. 8 (1996) 394-401）。このようなＰＴＫは、受容体チロシンキナーゼ（例えばＥＧＦＲ／ＨＥＲ-１、ｃ-ｅｒｂＢ-２／ＨＥＲ-２、ｃ-ｍｅｔ、ＰＤＧＦｒ、ＦＧＦｒ）と非受容体チロシンキナーゼ（例えばｓｒｃやｌｃｋ）に分けられる。
ＨＥＲ-２やＥＧＦＲ（ＨＥＲ-１）のようなＨＥＲファミリーの受容体チロシンキナーゼは、乳癌、消化器系の癌（結腸、直腸または胃癌）、甲状腺、白血病、卵巣、気管支および膵臓癌や黒色腫などの一般的なヒトの癌によく異常発現することが知られている。これらのレセプターが高レベルであることは、予後および治療への反応の悪さと相関している（Wright, C.ら, Br. J. Cancer 65 (1992) 118-121）。
【０００５】
ＰＴＫ阻害剤、特にＥＧＦＲ阻害剤は開発されている。しかし、Ｖ６００Ｅ変異を有するｂ-Ｒａｆを含む腫瘍は、ＥＧＦＲ阻害剤を使用する治療に対し回復力がある(resilient)ことが知られている。Prewett らのClin.Cancer Res.(2002), 8:994-1003およびOuchiらのCancer Chemother.Pharmacol.(2006), 57:693-702を参照されたい。しかし、出願人らは、思いがけないことに、化合物ＩとＥＧＦＲ阻害剤の併用療法がこのような回復力を低減できるだけでなく、各化合物を単独で使用して得られる結果を有意に上回る優れた抗悪性腫瘍効果が毒性を有意に増加させることなく得られることを発見した。
【０００６】
ＥＧＦＲ阻害剤に加えて、トポイソメラーゼ阻害剤も抗増殖剤である。しかし、Ｖ６００Ｅ変異を含む腫瘍は、トポイソメラーゼ阻害剤を使用する治療に対し回復力があることも知られている。PrewettらのClin.Cancer Res.(2002), 8:994-1003およびAbalらのOncogene (2004), 23:1737-44を参照されたい。しかし、出願人らは、思いがけないことに、化合物ＩとＥＧＦＲ阻害剤およびトポイソメラーゼ阻害剤の併用がこのような回復力を低減できるだけでなく、各化合物の単独使用で、または前述の化合物ＩとＥＧＦＲ阻害剤の併用療法で得られる結果を有意に上回る優れた抗悪性腫瘍効果が、毒性を有意に増加させることなく得られることを発見した。
【発明の概要】
【０００７】
本発明は、プロパン-１-スルホン酸{３-[５-(４-クロロ-フェニル)-１Ｈ-ピロロ[２,３-ｂ]ピリジン-３-カルボニル]-２,４-ジフルオロ-フェニル}-アミドまたはその薬学的に許容される塩を活性剤として含んでなる第１の成分（コンポーネント）（Ａ）と、ＥＧＦＲ阻害剤を活性剤として含んでなる第２の成分（コンポーネント）（Ｂ）を、Ｖ６００変異、特にＶ６００Ｅ変異を有するｂ-Ｒａｆを含む増殖性疾患、特に癌、より詳細には結腸直腸癌、黒色腫および甲状腺癌の治療に同時または順次使用する併用調製剤として含んでなる医薬品に関する。
【０００８】
本発明はさらに上述の併用剤を患者に投与することを含んでなる増殖性疾患患者の治療法に関する。
【０００９】
本発明はまた化合物Ｉまたはその薬学的に許容される塩を活性剤として含んでなる第１の成分（Ａ）と、ＥＧＦＲ阻害剤を活性剤として含んでなる第２の成分（Ｂ）を含んでなるキットに関する。
【００１０】
本発明はさらに化合物Ｉまたはその薬学的に許容される塩を活性剤として含んでなる第１の成分（Ａ）と、ＥＧＦＲ阻害剤を活性剤として含んでなる第２の成分（Ｂ）と、トポイソメラーゼ阻害剤またはその薬学的に許容される塩を含んでなる随意の第３の成分（Ｃ）を、Ｖ６００変異、特にＶ６００Ｅ変異を有するｂ-Ｒａｆを含む増殖性疾患、特に癌、より詳細には結腸直腸癌、黒色腫および甲状腺癌の治療に同時または順次使用する併用調製剤として含んでなる医薬品に関する。
【００１１】
加えて、本発明は、増殖性疾患の治療への化合物Ｉまたはその薬学的に許容される塩とＥＧＦＲ阻害剤の使用に関する。
【００１２】
本発明のさらなる態様は、増殖性疾患の治療用の薬物を調製するための化合物Ｉまたはその薬学的に許容される塩とＥＧＦＲ阻害剤の使用に関する。
【図面の簡単な説明】
【００１３】
【図１】図１は化合物Ｉを７５ｍｇ／ｋｇ ｂｉｄの単剤療法、エルロチニブ塩酸塩を６７ｍｇ／ｋｇ ｑｄの単剤療法、エルロチニブ塩酸塩を１００ｍｇ／ｋｇ ｑｄの単剤療法、および化合物Ｉを７５ｍｇ／ｋｇ ｂｉｄとエルロチニブ塩酸塩を６７ｍｇ／ｋｇ ｑｄの併用療法の耐容性を体重変化（％）によって証明して示している。
【図２】図２は化合物Ｉを７５ｍｇ／ｋｇ ｂｉｄの単剤療法、エルロチニブ塩酸塩を６７ｍｇ／ｋｇ ｑｄの単剤療法、エルロチニブ塩酸塩を１００ｍｇ／ｋｇ ｑｄの単剤療法、および化合物Ｉを７５ｍｇ／ｋｇ ｂｉｄとエルロチニブ塩酸塩を６７ｍｇ／ｋｇ ｑｄの併用療法の抗腫瘍活性を腫瘍平均体積の経時変化によって証明して示している。
【図３】図３は化合物Ｉを７５ｍｇ／ｋｇ ｂｉｄの単剤療法、エルロチニブ塩酸塩を６７ｍｇ／ｋｇ ｑｄの単剤療法、エルロチニブ塩酸塩を１００ｍｇ／ｋｇ ｑｄの単剤療法、および化合物Ｉを７５ｍｇ／ｋｇ ｂｉｄとエルロチニブ塩酸塩を６７ｍｇ／ｋｇ ｑｄの併用療法の生存効果をマウスの経時残存パーセントによって証明して示している。
【図４】図４は化合物Ｉを７５ｍｇ／ｋｇ ｂｉｄの単剤療法、化合物Ｉを２５ｍｇ／ｋｇ ｂｉｄの単剤療法、セツキシマブを４０ｍｇ／ｋｇ ２×／ｗｋの単剤療法、化合物Ｉを２５ｍｇ／ｋｇ ｂｉｄとセツキシマブを４０ｍｇ／ｋｇ ２×／ｗｋの併用療法、および化合物Ｉを７５ｍｇ／ｋｇ ｂｉｄとセツキシマブを４０ｍｇ／ｋｇ ２×／ｗｋの併用療法の耐容性を体重変化（％）によって証明して示している。
【図５】図５は化合物Ｉを７５ｍｇ／ｋｇ ｂｉｄの単剤療法、化合物Ｉを２５ｍｇ／ｋｇ ｂｉｄの単剤療法、セツキシマブを４０ｍｇ／ｋｇ ２×／ｗｋの単剤療法、化合物Ｉを２５ｍｇ／ｋｇ ｂｉｄとセツキシマブを４０ｍｇ／ｋｇ ２×／ｗｋの併用療法、および化合物Ｉを７５ｍｇ／ｋｇ ｂｉｄとセツキシマブを４０ｍｇ／ｋｇ ２×／ｗｋの併用療法の抗腫瘍活性を腫瘍平均体積の経時変化によって証明して示している。
【図６】図６は化合物Ｉを７５ｍｇ／ｋｇ ｂｉｄの単剤療法、化合物Ｉを２５ｍｇ／ｋｇ ｂｉｄの単剤療法、セツキシマブを４０ｍｇ／ｋｇ ２×／ｗｋの単剤療法、化合物Ｉを２５ｍｇ／ｋｇ ｂｉｄとセツキシマブを４０ｍｇ／ｋｇ ２×／ｗｋの併用療法、および化合物Ｉを７５ｍｇ／ｋｇ ｂｉｄとセツキシマブを４０ｍｇ／ｋｇ ２×／ｗｋの併用療法の生存効果をマウスの経時残存パーセントによって証明して示している。
【図７】図７は化合物Ｉを２５ｍｇ／ｋｇ ｂｉｄの単剤療法、セツキシマブを４０ｍｇ／ｋｇ ２×／ｗｋの単剤療法、イリノテカンＨＣｌを４０ｍｇ／ｋｇ ｑ４ｄ×５の単剤療法、化合物Ｉを２５ｍｇ／ｋｇ ｂｉｄとイリノテカンＨＣｌを４０ｍｇ／ｋｇ ｑ４ｄ×５の併用療法、セツキシマブを４０ｍｇ／ｋｇ ２×／ｗｋとイリノテカンＨＣｌを４０ｍｇ／ｋｇ ｑ４ｄ×５の併用療法、化合物Ｉを２５ｍｇ／ｋｇ ｂｉｄとセツキシマブを４０ｍｇ／ｋｇ ２×／ｗｋの併用療法、化合物Ｉを２５ｍｇ／ｋｇ ｂｉｄとセツキシマブを４０ｍｇ／ｋｇ ２×／ｗｋとイリノテカンＨＣｌを４０ｍｇ／ｋｇ ｑ４ｄ×５の併用療法の耐容性を体重変化（％）によって証明して示している。
【図８】図８は化合物Ｉを２５ｍｇ／ｋｇ ｂｉｄの単剤療法、セツキシマブを４０ｍｇ／ｋｇ ２×／ｗｋの単剤療法、イリノテカンＨＣｌを４０ｍｇ／ｋｇ ｑ４ｄ×５の単剤療法、化合物Ｉを２５ｍｇ／ｋｇ ｂｉｄとイリノテカンＨＣｌを４０ｍｇ／ｋｇ ｑ４ｄ×５の併用療法、セツキシマブを４０ｍｇ／ｋｇ ２×／ｗｋとイリノテカンＨＣｌを４０ｍｇ／ｋｇ ｑ４ｄ×５の併用療法、化合物Ｉを２５ｍｇ／ｋｇ ｂｉｄとセツキシマブを４０ｍｇ／ｋｇ ２×／ｗｋの併用療法、化合物Ｉを２５ｍｇ／ｋｇ ｂｉｄとセツキシマブを４０ｍｇ／ｋｇ ２×／ｗｋとイリノテカンＨＣｌを４０ｍｇ／ｋｇ ｑ４ｄ×５の併用療法の抗癌作用を腫瘍平均体積の経時変化によって証明して示している。
【図９】図９は化合物Ｉを２５ｍｇ／ｋｇ ｂｉｄの単剤療法、セツキシマブを４０ｍｇ／ｋｇ ２×／ｗｋの単剤療法、イリノテカンＨＣｌを４０ｍｇ／ｋｇ ｑ４ｄ×５の単剤療法、化合物Ｉを２５ｍｇ／ｋｇ ｂｉｄとイリノテカンＨＣｌを４０ｍｇ／ｋｇ ｑ４ｄ×５の併用療法、セツキシマブを４０ｍｇ／ｋｇ ２×／ｗｋとイリノテカンＨＣｌを４０ｍｇ／ｋｇ ｑ４ｄ×５の併用療法、化合物Ｉを２５ｍｇ／ｋｇ ｂｉｄとセツキシマブを４０ｍｇ／ｋｇ ２×／ｗｋの併用療法、化合物Ｉを２５ｍｇ／ｋｇ ｂｉｄとセツキシマブを４０ｍｇ／ｋｇ ２×／ｗｋとイリノテカンＨＣｌを４０ｍｇ／ｋｇ ｑ４ｄ×５の併用療法の生存効果をマウスの経時残存パーセントによって証明して示している。
【発明を実施するための形態】
【００１４】
上述したように、本明細書では、「化合物Ｉ」はプロパン-１-スルホン酸{３-[５-(４-クロロ-フェニル)-１Ｈ-ピロロ[２,３-ｂ]ピリジン-３-カルボニル]-２,４-ジフルオロ-フェニル}-アミドを指す。これは以下の構造を有する化合物である。
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化合物Ｉは、Ｖ６００Ｅ変異を有するｂ-Ｒａｆを特異的に標的とするｂ-Ｒａｆキナーゼ阻害剤である。
ｂ-Ｒａｆの「Ｖ６００Ｅ」変異は、本明細書では、ｂ-Ｒａｆタンパク質の変異を指し、バリン残基はｂ-Ｒａｆの６００位でグルタミン酸により置換される。
本明細書でＨＥＲ-２やＥＧＦＲ（ＨＥＲ-１）のようなＨＥＲファミリーの「受容体チロシンキナーゼ」を指すとき、「ＨＥＲ」という頭字語は、ヒト上皮受容体を指し、頭字語「ＥＧＦＲ」は上皮増殖因子受容体を指す。
【００１５】
本明細書では、「併用調製剤」という語は、同時または順次使用する併用剤を指す。この併用剤に使用される活性剤は、例えば化合物Ｉ、または例えばイリノテカンなどのトポイソメラーゼ阻害剤、またはエルロチニブまたは薬学的に許容される塩、またはセツキシマブなどのＥＧＦＲ阻害剤を、選択した活性成分の性質に応じて、例えば錠剤、カプセル剤、溶液、懸濁液など使用可能な任意の投与形態で使用できる。化合物Ｉまたはその薬学的に許容される塩は、例えば、経口投与されうる。エルロチニブまたはその薬学的に許容される塩は、例えば、経口投与されうる。セツキシマブは、例えば、腹腔内または静脈内投与されうる。イリノテカンＨＣｌまたはその薬学的に許容される塩は、例えば、腹腔内または静脈内投与されうる。本明細書で開示される特定の併用は、相加的より大なる（相乗的）治療効果を示す場合がある。
【００１６】
本明細書では、「薬学的に許容される担体」という語は、当該担体が、適度に慎重な医師が、治療すべき疾患や状態および投与の各経路を考慮したうえで、患者への投与を避ける原因となるような特性がないことを示す。
【００１７】
本明細書では、ある化合物の「薬学的に許容される塩」という語は、その化合物の生物学的効果および性質を保持し、適切な非毒性の有機酸もしくは無機酸または有機塩基もしくは無機塩基から形成される任意の一般的な塩または塩基付加塩を指す。本明細書では「治療効果がある」という語は、例えば癌性腫瘍の増殖を食い止めまたは収縮させるか、または患者の寿命を延ばすなど、患者への投与で望ましい治療効果を産むのに有効な薬物、併用剤または組成物の量を意味する。
【００１８】
「細胞増殖性疾患」及び「増殖性疾患」という語は、ある程度の異常な細胞増殖に関連する疾患を指す。一実施態様では、細胞増殖性疾患は癌である。
【００１９】
「癌」及び「癌性」という語は、調節されない細胞成長／細胞増殖を典型的に特徴とする、哺乳動物における生理学的状態を指すかまたは記述する。癌の例として、限定ではないが、結腸直腸癌、黒色腫および甲状腺癌が含まれる。
【００２０】
「結腸直腸腫瘍」または「結腸直腸癌」という語は、結腸（盲腸から直腸までの大腸）および直腸を含む大腸の任意の腫瘍または癌を指し、例えば、腺癌や、リンパ腫や扁平上皮癌などのより罹患率の低い形態を含む。
【００２１】
「細胞の成長及び増殖の阻害」は、細胞の成長及び増殖を少なくとも、１０％、２０％、３０％、４０％、５０％、６０％、７０％、８０％、９０％、９５％、又は１００％減少させることを意味し、かつ細胞死を誘導することを含む。
【００２２】
本明細書で使用される「実質的に減少した」または「実質的に異なる」という語句は、２つの数値間（一般的に、ある分子に関連づけられる数値と、参照／コンパレーター分子に関連づけられる数値）の差が十分に大きいことを指し、当業者であれば、その２つの数値間の差が、これらの数値で測定される生物学的特徴のコンテキスト内で統計学的に有意であると思料しよう。
【００２３】
「腫瘍」という語は、悪性又は良性に関わらず、すべての新生細胞成長および増殖、およびすべての前癌性および癌性の細胞及び組織を意味する。「癌」、「癌性」、「細胞増殖性疾患」、「増殖性疾患」および「腫瘍」という語は、本明細書では相互排他的ではない。
【００２４】
腫瘍の「退縮」は、治療後、前記腫瘍の体積が減少したとき生じるとされている。腫瘍が依然として存在するが（腫瘍体積＞０ｍｍ３）、その体積は治療開始時よりも減少している場合、「部分退縮」（ＰＲ）が生じているとされる。治療後、腫瘍が触診で存在しない場合、「完全退縮」（ＣＲ）が生じたとされる。
【００２５】
本明細書で使用する「小分子」という語は、分子量が１０００ｇ／ｍｏｌよりも小さい、好ましくは７００ｇ／ｍｏｌよりも小さい化学的化合物である。本発明による小分子は、有機化学および／または医薬化学の当業者に知られている化学反応により得られる。小分子の例は、限定ではなく、化合物Ｉまたはエルロチニブとして知られる化合物、好ましくはエルロチニブ塩酸塩でありうる。
【００２６】
本明細書で使用する「大分子」という語は、分子量が１０００ｇ／ｍｏｌよりも大きい化学的化合物を指す。好ましくは、大分子は発酵などのバイオ技術の製造法により得られる化合物である。より好ましくは、「大分子」という語は、例えば抗体、より具体的にはモノクロナール抗体などのポリペプチドを指す。本発明による大分子の一例は、セツキシマブである。
【００２７】
本発明は、化合物Ｉまたはその薬学的に許容される塩を活性剤として含んでなる第１の成分（Ａ）と、ＥＧＦＲ阻害剤を活性剤として含んでなる第２の成分（Ｂ）を含んでなる医薬品に関し、前記活性剤の量は、その併用が前記増殖性疾患の治療において治療効果があるような量である。本発明はさらに、Ｖ６００Ｅ変異を有するｂ-Ｒａｆを含む増殖性疾患、特に癌、より詳細には特に結腸直腸癌、黒色腫、および／または甲状腺癌などの固形癌の治療に同時または順次使用する併用調製剤としての上述の医薬品に関する。
【００２８】
本発明はさらに、患者に上述の併用調製剤または薬学的調製剤を投与することを含んでなる増殖性疾患患者の治療法に関する。
「増殖性疾患の治療」は、腫瘍の大きさを維持または減少させること、腫瘍の（部分的または完全な）退縮を誘導すること、腫瘍増殖を阻害すること、および／または前記疾患患者の寿命を延長することを含むと理解されたい。
【００２９】
本発明はまた、化合物Ｉまたはその薬学的に許容される塩を活性剤として含んでなる第１の成分（Ａ）と、ＥＧＦＲ阻害剤を活性剤として含んでなる第２の成分（Ｂ）を含んでなるキットまたは組成物に関する。キットまたは組成物は、例えば増殖性疾患の治療に使用されうる。
【００３０】
本発明の一実施態様では、増殖性疾患は固形癌、より詳細には結腸直腸癌、黒色腫および／または甲状腺癌である。
本発明の別の実施態様では、増殖性疾患はＶ６００変異を、好ましくはＶ６００Ｅ変異を有するｂ-Ｒａｆを含む腫瘍である。
本発明の別の実施態様では、増殖性疾患は結腸直腸癌、黒色腫および甲状腺癌からなる群より選択され、この癌はＶ６００変異を、好ましくはＶ６００Ｅ変異を有するｂ-Ｒａｆを有する腫瘍を含む。
本発明のさらに別の実施態様では、増殖性疾患はＶ６００変異を、好ましくはＶ６００Ｅ変異を有するｂ-Ｒａｆを含む固形腫瘍である。
本発明のさらに別の実施態様では、増殖性疾患は結腸直腸癌である。
本発明のさらに別の実施態様では、増殖性疾患はＶ６００変異を、好ましくはＶ６００Ｅ変異を有するｂ-Ｒａｆを有する腫瘍を含む結腸直腸癌である。
【００３１】
本発明のさらに別の実施態様では、ＥＧＦＲ阻害剤は小分子のＥＧＦＲ阻害剤である。このような実施態様の一つでは、ＥＧＦＲ阻害剤はエルロチニブまたはその薬学的に許容される塩、例えばエルロチニブ塩酸塩（エルロチニブＨＣｌ）である。エルロチニブＨＣｌはまたその商品名タルセバ（登録商標）で知られており、例えば米国ではジェネンテック社（South San Francisco, U.S.A.）が販売している。
本発明のさらに別の実施態様では、ＥＧＦＲ阻害剤は大分子のＥＧＦＲ阻害剤であり、例えばＥＧＦＲを標的とする抗体である。このような実施態様の一つでは、ＥＧＦＲ阻害剤はＥＧＦＲを標的とするモノクロナール抗体であり得、例えばセツキシマブである。セツキシマブはまた、その商品名アービタックス（Ｅｒｂｉｔｕｘ）（登録商標）で知られており、例えば米国ではインクローンシステムズ社（New York, U.S.A.）が販売している。
【００３２】
ある実施態様では、本発明は、化合物Ｉまたはその薬学的に許容される塩を活性剤として含んでなる第１の成分（Ａ）と、エルロチニブまたはその薬学的に許容される塩を活性剤として含んでなる第２の成分（Ｂ）を含んでなる、Ｖ６００Ｅ変異を有するｂ-Ｒａｆを有する腫瘍を含む結腸直腸癌の治療のための医薬品に関し、前記活性剤の量は、その併用が前記癌の治療において治療効果があるような量である。
本発明の別の実施態様では、化合物Ｉまたはその薬学的に許容される塩を活性剤として含んでなる第１の成分（Ａ）と、セツキシマブを活性剤として含んでなる第２の成分（Ｂ）を含んでなる、増殖性疾患はＶ６００Ｅ変異を含むｂ-Ｒａｆを有する腫瘍を含む結腸直腸癌の治療のための医薬品に関し、前記活性剤の量は、その併用が前記癌の治療において治療効果があるような量である。
この併用剤または組成物により投与される各成分の量は、それ自体が治療効果があってもよいが必要ではない。つまり、本発明は特に、併用における化合物Ｉまたはその薬学的に許容される塩の量、および／またはＥＧＦＲ阻害剤の量が、これらの薬剤をそれぞれ単剤療法で投与したときに治療効果がある場合よりも少量でもよい併用剤を企図している。
本発明の第１の成分（Ａ）と第２の成分（Ｂ）は、その併用量が増殖性疾患の治療に効果がある任意の量および任意の期間投与される。
【００３３】
本発明のある実施態様では、化合物Ｉまたはその薬学的に許容される塩を、約２００ｍｇ／日から約３０００ｍｇ／日、約１０００ｍｇ／日から約２５００ｍｇ／日または約１７００ｍｇ／日から約２１００ｍｇ／日の量を投与する。さらに別の実施態様では、投与量は約１９２０ｍｇ／日である。
本発明の別の実施態様では、化合物Ｉまたはその薬学的に許容される塩の前述の量は、１日単回投与または例えば（ただし必要ではないが）等量に分割し１日２回（ｂｉｄ）に分けて投与してよい。例えば、化合物Ｉまたはその薬学的に許容される塩は、約１００ｍｇから約１５００ｍｇ ｂｉｄ、約５００ｍｇから約１２５０ｍｇ ｂｉｄ、約５００ｍｇから約１２５０ｍｇ ｂｉｄ、約８５０ｍｇから約１０５０ｍｇ ｂｉｄまたは約９６０ｍｇ ｂｉｄの量を投与してよい。
本発明の一実施態様では、化合物Ｉまたはその薬学的に許容される塩の投与は、疾患の増悪または忍容不能な毒性の発現まで発生する。
【００３４】
本発明のある実施態様では、エルロチニブまたはその薬学的に許容される塩を、約２０ｍｇ／日から約５００ｍｇ／日、約１００ｍｇ／日から約４００ｍｇ／日または約１００ｍｇ／日から約２００ｍｇ／日の投与量を投与する。
本発明の一実施態様では、エルロチニブまたはその薬学的に許容される塩の投与は、疾患の増悪または忍容不能な毒性の発現まで発生する。
【００３５】
本発明のさらに別の実施態様では、セツキシマブを、約５０ｍｇ／ｍ２／週から約７００ｍｇ／ｍ２／週、約１００ｍｇ／ｍ２／週から約６００ｍｇ／ｍ２／週または約２００ｍｇ／ｍ２／週から約５００ｍｇ／ｍ２／週の投与量を投与する。
さらに別の実施態様では、セツキシマブを、初回投与量は約４００ｍｇ／ｍ２から約５００ｍｇ／ｍ２、その後の各投与量は約２００ｍｇ／ｍ２から約３００ｍｇ／ｍ２で毎週投与する。
さらに別の実施態様では、セツキシマブを、初回投与量は約４５０ｍｇ／ｍ２、その後の各投与量は約２５０ｍｇ／ｍ２で毎週投与する。
本発明のさらに別の実施態様では、セツキシマブの投与は、疾患の増悪または忍容不能な毒性の発現まで発生する。
【００３６】
したがって、別の実施態様では、本発明は、増殖性疾患の治療に同時または順次使用する併用調製剤として、化合物Ｉまたはその薬学的に許容される塩を活性剤として含んでなる第１の成分（Ａ）と、エルロチニブまたはその薬学的に許容される塩を活性剤として含んでなる第２の成分（Ｂ）を含んでなる医薬品を提供し、ここで（Ａ）は約２００ｍｇ／日から約３０００ｍｇ／日、約１０００ｍｇ／日から約２５００ｍｇ／日、約１７００ｍｇ／日から約２１００ｍｇ／日または約１９２０ｍｇ／日の量投与され、（Ｂ）は約２０ｍｇ／日から約５００ｍｇ／日、約１００ｍｇ／日から約４００ｍｇ／日または約１００ｍｇ／日から約２００ｍｇ／日の量投与される。
この実施態様では、化合物Ｉまたはその薬学的に許容される塩は１日２回投与してよい。このようにして治療される増殖性疾患は、Ｖ６００Ｅ変異を有するｂ-Ｒａｆを含む固形腫瘍、より詳細には結腸直腸癌、黒色腫および甲状腺癌である。より詳細には、増殖性疾患は、Ｖ６００Ｅ変異を有するｂ-Ｒａｆを有する腫瘍を含む結腸直腸癌である。
また、本発明の医薬品のこの実施態様は、化合物Ｉまたはその薬学的に許容される塩を１日２回約８５０ｍｇから１日２回約１０５０ｍｇまたは１日２回約９６０ｍｇの投与量を経口投与することと、エルロチニブまたはその薬学的に許容される塩を約１００ｍｇ／日から約４００ｍｇ／日または約１００ｍｇ／日から約２００ｍｇ／日の投与量を経口投与することを含んでよい。例えば、いずれの薬剤も疾患の増悪または忍容不能な毒性の発現まで投与してよい。
【００３７】
本発明はまた、増殖性疾患の治療に同時または順次使用する併用調製剤として、化合物Ｉまたはその薬学的に許容される塩を活性剤として含んでなる第１の成分（Ａ）と、セツキシマブを活性剤として含んでなる第２の成分（Ｂ）を含んでなる医薬品を提供し、ここで（Ａ）は約２００ｍｇ／日から約３０００ｍｇ／日、約１０００ｍｇ／日から約２５００ｍｇ／日、約１７００ｍｇ／日から約２１００ｍｇ／日または約１９２０ｍｇ／日の量で投与され、（Ｂ）は約５０ｍｇ／ｍ２／週から約７００ｍｇ／ｍ２／週、約１００ｍｇ／ｍ２／週から約６００ｍｇ／ｍ２／週または約２００ｍｇ／ｍ２／週から約５００ｍｇ／ｍ２／週の量で投与される。
この実施態様では、このようにして治療する増殖性疾患はＶ６００Ｅ変異を有するｂ-Ｒａｆを含む固形腫瘍、より詳細には結腸直腸癌、黒色腫および甲状腺癌である。より詳細には、増殖性疾患はＶ６００Ｅ変異を有するｂ-Ｒａｆを有する腫瘍を含む結腸直腸癌である。
また、本発明の医薬品のこの実施態様は、化合物Ｉまたはその薬学的に許容される塩を１日２回約８５０ｍｇから１日２回約１０５０ｍｇまたは１日２回約９６０ｍｇの投与量を経口投与することと、セツキシマブを約２００ｍｇ／ｍ２／ｗｋから約５００ｍｇ／ｍ２／ｗｋの投与量を静脈内投与することを含んでよい。一実施態様では、セツキシマブは最初１２０分の静脈注射として４００ｍｇ／ｍ２の量で投与され、１週間後からは２５０ｍｇ／ｍ２の量を一週間に一度、６０分かけて静脈内注射で投与される。例えば、いずれの薬剤も疾患の増悪または忍容不能な毒性の発現まで投与されうる。
【００３８】
本発明はさらに化合物Ｉまたはその薬学的に許容される塩を活性剤として含んでなる第１の成分（Ａ）と、エルロチニブまたはその薬学的に許容される塩またはプロドラッグを活性剤として含んでなる第２の成分（Ｂ）を含んでなるキットまたは組成物を提供する。
本発明はまた化合物Ｉまたはその薬学的に許容される塩を活性剤として含んでなる第１の成分（Ａ）と、セツキシマブを活性剤として含んでなる第２の成分（Ｂ）を含んでなるキットまたは組成物を提供する。
本発明の別の態様では、上述の成分（Ａ）と成分（Ｂ）を含んでなる医薬品は、放射線療法との組み合わせおよび／または別の活性剤投与との組み合わせで投与する。
【００３９】
このように、本発明のある実施態様では、Ｖ６００変異を、好ましくはＶ６００Ｅ変異を有するｂ-Ｒａｆを含む固形腫瘍などの増殖性疾患の治療に同時または順次使用する併用調製剤として、上述の成分（Ａ）および成分（Ｂ）、およびトポイソメラーゼ阻害剤を活性剤として含んでなる第３の成分（Ｃ）を含んでなる医薬品を提供する。前述したように、この併用剤で投与される各成分の量は、それ自体が治療効果があってもよいが必要ではなく、本発明は、これらの薬剤をそれぞれ単剤療法で投与したときに治療効果がある場合よりも少量でよい併用剤を企図している。
本発明の一実施態様では、トポイソメラーゼ阻害剤は、Ｉ型トポイソメラーゼの阻害剤である。本発明の一実施態様では、トポイソメラーゼ阻害剤は、イリノテカンまたはその薬学的に許容される塩、例えばイリノテカン塩酸塩（イリノテカンＨＣｌ）である。イリノテカンＨＣｌはカンプトサール（Ｃａｍｐｔｏｓａｒ）（登録商標）としてファイザー社（New York, U.S.A.）が販売している。イリノテカンまたはその薬学的に許容される塩は、例えば、腹腔内または静脈内投与してよい。
本発明の一実施態様では、イリノテカンまたはその薬学的に許容される塩を約１から約４００ｍｇ／ｍ２／週または約から約２５０ｍｇ／ｍ２／週の量を投与する。別の実施態様では、イリノテカンまたはその薬学的に許容される塩を約から約２００ｍｇ／ｍ２／週の投与量を投与する。さらに別の実施態様では、イリノテカンまたはその薬学的に許容される塩を約１２５ｍｇ／ｍ２／週の投与量を投与する。
さらに別の実施態様では、イリノテカンまたはその薬学的に許容される塩を、毎週約７５ｍｇ／ｍ２から約１７５ｍｇ／ｍ２を６週サイクルで、例えば最初の４週間は毎週約１２５ｍｇ／ｍ２を、例えば１日目、８日目、１５日目および２２日目に投与する。さらに別の実施態様では、イリノテカンを、毎週約１３０から約２３０ｍｇ／ｍ２を６週サイクルで、例えば１週目から２週おきに、約１８０ｍｇ／ｍ２を、例えば１日目、１５日目および２９日目に投与する。さらに別の実施態様では、イリノテカンを３週間に一度、約３００から約４００ｍｇ／ｍ２を、例えば約３５０ｍｇ／ｍ２投与する。さらに別の実施態様では、イリノテカンを２週間に一度、約１３０から約２３０ｍｇ／ｍ２を、例えば約１８０ｍｇ／ｍ２投与する。例えば、約９０分かけて注入により投与してよい。治療は疾患の増悪または忍容不能な毒性の発現まで行ってよい。
成分（Ａ）、（Ｂ）または（Ｃ）の各投与レベルは、医師により、患者の必要性および患者の治療への反応に応じて、本明細書に記載されるよりも低レベルまたは高レベルに調整してよい。投与量は、患者の必要に応じて医師により決定された任意の投与スケジュールに応じて投与してよい。例えば、各成分の投与量は、単回または数日に分けて、または隔日などのスケジュールで投与してよい。
【００４０】
本発明はまた、増殖性疾患の治療に同時または順次使用する併用調製剤として、化合物Ｉまたはその薬学的に許容される塩を活性剤として含んでなる第１の成分（Ａ）と、セツキシマブを活性剤として含んでなる第２の成分（Ｂ）と、イリノテカンまたはその薬学的に許容される塩を活性剤として含んでなる第３の成分（Ｃ）を含んでなる医薬品を提供し、（Ａ）を約２００ｍｇ／日から約３０００ｍｇ／日、約１０００ｍｇ／日から約２５００ｍｇ／日、約１７００ｍｇ／日から約２１００ｍｇ／日または約１９２０ｍｇ／日の量を投与し、（Ｂ）を約５０ｍｇ／ｍ２／週から約７００ｍｇ／ｍ２／週、約１００ｍｇ／ｍ２／週から約６００ｍｇ／ｍ２／週または約２００ｍｇ／ｍ２／週から約５００ｍｇ／ｍ２／週の量を投与し、（Ｃ）を約１から約２５０ｍｇ／ｍ２／週、約５０から約２００ｍｇ／ｍ２／週または約１２５ｍｇ／ｍ２／週の量を投与する。
この実施態様では、このようにして治療する増殖性疾患はＶ６００Ｅ変異を有するｂ-Ｒａｆを含む固形腫瘍、より詳細には結腸直腸癌、黒色腫および甲状腺癌である。より詳細には、増殖性疾患はＶ６００Ｅ変異を有するｂ-Ｒａｆを有する腫瘍を含む結腸直腸癌である。
また、この実施態様では、本発明の医薬品は、化合物Ｉまたはその薬学的に許容される塩を１日２回約８５０ｍｇから１日２回約１０５０ｍｇまたは１日２回約９６０ｍｇの投与量を経口投与することと、セツキシマブを約２００ｍｇ／ｍ２／週から約５００ｍｇ／ｍ２／週の投与量を静脈内投与することと、イリノテカンを約５０ｍｇ／ｍ２／週から約２００ｍｇ／ｍ２／週または約１２５ｍｇ／ｍ２／週の投与量を静脈内投与することを含んでなる。例えば、いずれの薬剤も疾患の増悪または忍容不能な毒性の発現まで投与してよい。
【００４１】
本発明はさらに、化合物Ｉまたはその薬学的に許容される塩を活性剤として含んでなる第１の成分（Ａ）と、セツキシマブを活性剤として含んでなる第２の成分（Ｂ）と、イリノテカンまたはその薬学的に許容される塩を活性剤として含んでなる第３の成分（Ｃ）を含んでなるキットまたは組成物を提供する。
【００４２】
化合物Ｉは自然の状態では結晶の形態で存在する。しかし、この化合物の非晶質の形態は結晶の形態と比べて水溶性が高いので溶出速度も速く、したがって結晶の形態と比べてバイオアベイラビリティーも高い。したがって、この化合物の非晶質の形態が好ましい。したがって、本発明の方法およびキットの好ましい実施態様では、化合物Ｉは実質的に非晶質の形態であり、より好ましくは非晶質の形態である。本明細書では、「実質的に非晶質の」物質という語は、結晶化度が約１０％以下の物質を指し、「非晶質の」物質は結晶化度が約２％以下の物質を指す。
本発明の一実施態様では、化合物Ｉはヒドロキシプロピルメチルセルロースアセテートサクシネート（ＨＰＭＣ-ＡＳ）で形成される固形の分子複合体に含まれる。本明細書では、「固形の分子複合体」という語は化合物ＩがＨＰＭＣ-ＡＳにより形成されたマトリックス内にランダムに分布した（「分子的に分散した」）組成物を意味する。好ましくは化合物ＩとＨＰＭＣ-ＡＳのこのような構造は一相系を形成し、化合物Ｉの結晶形態に関連する結晶シグナルが実質的にない、またはないＸ線粉末回折パターンにより特徴づけられる。ある実施態様では、化合物Ｉは再分割の最終段階のポリマー中に存在する。ある実施態様では、化合物ＩはＨＰＭＣ-ＡＳマトリックス内で分子的に分散して、その非晶質の形態に固定化される。「固定化される」とは、化合物Ｉの分子がＨＰＭＣ-ＡＳの分子と相互作用して前述のマトリックスに保持され、可動性がないので結晶核形成が阻止されることを意味する。いくつかの実施態様では、ポリマーは、化合物Ｉの分子間の水素結合、または２つ若しくはそれ以上の分子間の弱い分散力を阻止できる。
いくつかの実施態様では、固形の分子複合体中の化合物ＩのＨＰＭＣ-ＡＳに対する比率は、重量基準量で約１：９から約５：５である。一実施態様では、前記比率は約２：８から約４：６である。別の実施態様では、前記比率は約３：７である。
【００４３】
本発明の方法およびキットのある実施態様では、第１の成分は、コロイド状二酸化ケイ素と混合された前述の化合物ＩとＨＰＭＣ-ＡＳの固形の分子複合体を含んでなる。ある実施態様では、混合は少なくとも二酸化ケイ素０．５重量％である。本発明の一実施態様では、混合は約９７％の複合体と約３％の二酸化ケイ素である。
別の実施態様では、第１の成分は、上述のように二酸化ケイ素との混合または非混合の、前述の固形の分子複合体を含む組成物と、薬学的に許容される担体を含む。ある実施態様では、前述の複合体またはこれを含む混合物を担体に懸濁する。担体の一例は、ヒドロキシプロピルセルロース（ＨＰＣ）である。一実施態様では、ビヒクルは約２重量％のＨＰＣを含む。
各成分はまた、保存剤、溶解剤、安定剤、湿潤剤、乳化剤、甘味剤、着色剤、香味剤、浸透圧を変えるための塩、バッファー、被覆材および酸化防止剤などの添加剤を含んでよい。
【００４４】
ある実施態様では、第１の成分は、コロイド状二酸化ケイ素、ヒドロキシルプロピルセルロース、クロスポビドン（崩壊剤）、ステアリン酸マグネシウム（錠剤やカプセル化の工程で使用されうる潤滑剤）および／またはクロスカルメロースナトリウム（崩壊剤）と混合された、化合物ＩとＨＰＭＣ-ＡＳの固形の分子複合体を含んでよい。
一実施態様では、第１の成分は、コロイド状二酸化ケイ素、ヒドロキシルプロピルセルロース、ステアリン酸マグネシウムおよびクロスカルメロースナトリウムと混合された、化合物ＩとＨＰＭＣ-ＡＳの固形の分子複合体を含む硬質ゼラチンカプセルである。
一実施態様では、第１の成分は、化合物Ｉまたはその薬学的に許容される塩を含む錠剤である。一実施態様では、錠剤は、化合物Ｉまたはその薬学的に許容される塩とＨＰＭＣ-ＡＳの固形の分子複合体を含む。例えば、複合体は、コロイド状二酸化ケイ素、ヒドロキシルプロピルセルロース、ステアリン酸マグネシウムおよびクロスカルメロースナトリウムと混合してよい。例えば、錠剤は、フィルム状コーティングでコーティングしてよい。例えば、フィルム状コーティングは、ポリビニルアルコール、二酸化チタン、ポリスチレングリコール３３５０、タルクおよび赤色酸化鉄を含んでよい。
【００４５】
ある実施態様では、第２の成分は溶液中にセツキシマブを含んでよい。一実施態様では、溶液は２ｍｇ／ｍｌセツキシマブ溶液である。
ある実施態様では、第２の成分は、エルロチニブまたは例えばエルロチニブ塩酸塩などその薬学的に許容される塩を含む錠剤を含んでよい。
【００４６】
ある実施態様では、第３の成分は、イリノテカンまたは例えばイリノテカン塩酸塩などその薬学的に許容される塩を含む溶液を含んでよい。一実施態様では、溶液は約５％のブドウ糖溶液である。一実施態様では、溶液の各ｍｌは、イリノテカン塩酸塩約２０ｍｇ、ソルビトール約４５ｍｇおよび乳酸約０．９ｍｇを含む。一実施態様では、溶液は約３．０から約３．８、例えば約３．５のｐＨを有する。
【００４７】
加えて、本発明は、すべてＶ６００Ｅ変異を有するｂ-Ｒａｆを含む増殖性疾患、特に固形腫瘍、より詳細には結腸直腸癌、黒色腫および／または甲状腺癌などの治療用の化合物Ｉまたはその薬学的に許容される塩とＥＧＦＲ阻害剤、また、随意トポイソメラーゼ阻害剤との組み合わせの使用を提供する。
【００４８】
本発明はさらに、すべてＶ６００Ｅ変異を有するｂ-Ｒａｆを含む増殖性疾患、特に固形腫瘍、より詳細には結腸直腸癌、黒色腫および／または甲状腺癌などの治療用薬物を調整するための、化合物Ｉまたはその薬学的に許容される塩とＥＧＦＲ阻害剤、また、随意トポイソメラーゼ阻害剤との組み合わせの使用を提供する。
【００４９】
本発明はさらに、すべてＶ６００Ｅ変異を有するｂ-Ｒａｆを含む増殖性疾患、特に固形腫瘍、より詳細には結腸直腸癌、黒色腫および／または甲状腺癌などの患者の治療法を提供し、前記患者に、本明細書で前述した用量または用量スキームとともに、（Ａ）と（Ｂ）または（Ａ）と（Ｂ）と（Ｃ）の任意の組み合わせを投与することを含む。
【００５０】
出願人らは、ヒト結腸直腸癌の異種移植片を含むマウスを使用して研究を行った。出願人らは、化合物Ｉを７５ｍｇ／ｋｇ ｂｉｄとエルロチニブ塩酸塩を６７ｍｇ／ｋｇ ｑｄの併用により、ｐ＜０．０５での相関的な単剤療法の結果およびエルロチニブ塩酸塩を１００ｍｇ／ｋｇ ｑｄの単剤療法の結果よりも有意によい腫瘍増殖阻害（ＴＧＩ）と延長寿命（ＩＬＳ）の結果を得られることを発見した。加えて、併用療法を受けた１０匹のマウスのうち９匹に部分退縮が認められたが、単剤療法群はいずれも（部分的または完全）退縮は観察されなかった。これらの研究は、化合物Ｉとエルロチニブ塩酸塩を組み合わせて患者を治療することは、これらの薬剤の単剤療法よりも優れていることを示している。これらの研究はさらに、２つの薬剤を組み合わせることで、少なくともエルロチニブ塩酸塩の投与量を減少させても同等またはよりよい結果を得られることを示している。
【００５１】
出願人らはまた、化合物Ｉを２５ｍｇ／ｋｇ ｂｉｄとセツキシマブを４０ｍｇ／ｋｇ ２×／ｗｋの併用により、ｐ＜０．０５での相関的な単剤療法の結果および化合物Ｉを７５ｍｇ／ｋｇ ｂｉｄの単剤療法の結果よりも有意によい腫瘍増殖阻害（ＴＧＩ）と延長寿命（ＩＬＳ）の結果が得られることを発見した。出願人らはまた、化合物Ｉを７５ｍｇ／ｋｇ ｂｉｄとセツキシマブを４０ｍｇ／ｋｇ ２×／ｗｋの併用により、ｐ＜０．０５での相関的な単剤療法の結果および化合物Ｉを２５ｍｇ／ｋｇ ｂｉｄの単剤療法の結果よりも有意によいＴＧＩとＩＬＳの結果が得られることを発見した。加えて、化合物Ｉを２５ｍｇ／ｋｇ ｂｉｄとセツキシマブを４０ｍｇ／ｋｇ ２×／ｗｋの併用療法を受けた９匹のマウスのうち７匹に部分退縮が認められ、化合物Ｉを７５ｍｇ／ｋｇ ｂｉｄとセツキシマブを４０ｍｇ／ｋｇ ２×／ｗｋの併用療法を受けた１０匹のマウスのうち１０匹が退縮を示し、このうち７匹は部分退縮であり、３匹は完全退縮であった。これに対し、いずれの単剤療法群にも（部分または完全）退縮は観察されなかった。
【００５２】
上記に加えて、出願人らは、化合物Ｉを２５ｍｇ／ｋｇ ｂｉｄとセツキシマブを４０ｍｇ／ｋｇ ２×／ｗｋとイリノテカン塩酸塩を４０ｍｇ／ｋｇ ｑ４ｄ×５の併用により、ｐ＜０．０５での相関的な単剤療法の結果および化合物Ｉを２５ｍｇ／ｋｇ ｂｉｄとイリノテカン塩酸塩を４０ｍｇ／ｋｇ ｑ４ｄ×５の併用療法および化合物Ｉを２５ｍｇ／ｋｇ ｂｉｄとセツキシマブを４０ｍｇ／ｋｇ ２×／ｗｋの併用療法の結果よりも有意によい腫瘍増殖阻害（ＴＧＩ）と延長寿命（ＩＬＳ）の結果が得られることを発見した。この研究では、化合物Ｉを２５ｍｇ／ｋｇ ｂｉｄとイリノテカン塩酸塩を４０ｍｇ／ｋｇ ｑ４ｄ×５の併用療法では１０中４の部分退縮が得られ、完全退縮はなく、化合物Ｉを２５ｍｇ／ｋｇ ｂｉｄとセツキシマブを４０ｍｇ／ｋｇ ２×／ｗｋの併用療法では１０中５の部分退縮が得られ、完全退縮はなかった。セツキシマブを４０ｍｇ／ｋｇ ２×／ｗｋとイリノテカンを４０ｍｇ／ｋｇ ｑ４ｄ×５の併用療法および相関的な化合物Ｉ、セツキシマブおよびイリノテカン塩酸塩の単剤療法では、退縮は得られなかった。一方、化合物Ｉを２５ｍｇ／ｋｇ ｂｉｄとセツキシマブを４０ｍｇ／ｋｇ ２×／ｗｋとイリノテカン塩酸塩を４０ｍｇ／ｋｇ ｑ４ｄ×５の治療では、１０中１０の退縮が得られ、このうち９は部分退縮で１は完全退縮であった。
【００５３】
これらの研究は、化合物Ｉとセツキシマブを組み合わせて患者を治療することは、これらの薬剤の単剤療法よりも優れていることを示している。これらの研究はさらに、２つの薬剤を組み合わせることで、少なくとも化合物Ｉの投与量を減少させても同等またはよりよい結果を得られることを示している。加えて、これらの研究は、化合物Ｉ、セツキシマブおよびイリノテカン塩酸塩を組み合わせて患者の治療を行うことで、さらに優れた結果が得られることを示している。
【実施例】
【００５４】
本発明は以下の実施例を参照することにより、さらに十分に理解されるであろう。しかし、それらは本発明の範囲を限定するものと解釈されるべきではない。
本明細書で使用される略語は以下のとおりである。
ｑ．ｓ．    必要量だけ
×          回数
ｐｏ        経口
ｉｐ        腹腔内
ｂｉｄ      １日２回
ｗｋ        週
ｑｄ        １日１回
ｑ４ｄ×５  ４日おきに合計５回投与
ＢＷＬ      体重減少
【００５５】
以下の実施例では、体重減少は式：（（Ｗ−Ｗ０）／Ｗ０）×１００を使用して群平均体重のパーセント変化として図示した。Ｗは特定の日の治療群の平均体重を表し、Ｗ０は同じ治療群の治療開始時の平均体重を表す。最高体重減少も上記の式を使用して表し、特定の群の実験全体の間任意の時に観察された最高体重減少を示した。
【００５６】
有効性データを腫瘍平均体積±平均値標準誤差（ＳＥＭ）として図示した。加えて、治療群の腫瘍体積は式１００×（（Ｔ−Ｔ０）／（Ｃ−Ｃ０））を使用して対照群の腫瘍体積のパーセント（％Ｔ／Ｃ）として示した。Ｔは実験の間特定の日の治療群の腫瘍平均体積を表し、Ｔ０は同じ治療群の治療初日の腫瘍平均体積を表し、Ｃは実験の間特定の日の対照群の腫瘍平均体積を表し、Ｃ０は同じ治療群の治療初日の腫瘍平均体積を表した。
【００５７】
腫瘍体積（立方ミリメートル）は楕円体の式：（Ｄ×（ｄ２））／２を使用して計算した。Ｄは腫瘍の大径を表し、ｄは小径を表す。
また、腫瘍の退縮および／または腫瘍体積のパーセント変化は式：（（Ｔ−Ｔ０）／Ｔ０）×１００を使用して計算した。Ｔは特定の日の治療群の腫瘍平均体積を表し、Ｔ０は同じ治療群の治療開始時の腫瘍平均体積を表す。
【００５８】
統計分析は、順位和検定、一元配置分散分析および事後Ｂｏｎｆｅｒｒｏｎｉ ｔ検定によって決定した（SigmaStat, version 2.0, Jandel Scientific社, San Francisco, CA, USA）。群間の差は、確率値（ｐ）が≦０．０５のとき有意とした。
【００５９】
生存評価では、延長寿命（ＩＬＳ）のパーセントは１００×［（治療群の生存日の中央値−対照群の生存日の中央値）／対照群の生存日の中央値］として計算した。生存中間値はカプランマイヤー生存分析法を使用して決定した。治療群の生存をビヒクル群と統計学的に比較し、ログランク検定を使用して群間の生存比較を行った（グラフパッドプリズム、La Jolla, CA, USA）。群間の差は、確率値（ｐ）が≦０．０５のとき有意とした。
【００６０】
実施例１
この実施例は化合物Ｉを含む懸濁液の形成について記述する。
化合物Ｉとヒドロキシプロピルメチルセルロースアセテートスクシネート（ＨＰＭＣ-ＡＳ）の固形の分子複合体を形成した。
化合物ＩとＨＰＭＣ-ＡＳをおよそ３：７の比率でジメチルアセトアミド（ＤＭＡ）に溶解させた。次いで、得られた溶液を撹拌しながら非常に冷たい希釈塩酸に加えると、化合物ＩとＨＰＭＣ-ＡＳが固形の分子複合体として共沈し、化合物Ｉはナノ粒子サイズ範囲で存在した。ＤＭＡの酸に対する比率は、１：５から１：１０の範囲であった。
次いで、評価に先立ち、共沈物を水で洗ってＤＭＡを除去し、濾過し、＜２％水分含有量まで乾燥し、＃３０メッシュスクリーンにかけた。得られた固形の分子複合体は化合物Ｉが３０重量％、ＨＰＭＣが７０重量％であった。
次いで複合体をコロイド状二酸化ケイ素（アエロジル（登録商標）２００としてEvonik Industries AG, Essen, Germanyから入手可能）と混合し、１００ｇの混合当たり９７ｇの複合体と３ｇのコロイド状二酸化ケイ素となるようにした。
次いで２％のヒドロキシプロピルセルロース（クルーセル（登録商標）ＬＦとしてAqualon社, Wilmington, Delaware, USAから入手可能）と、ｐＨ調整のためｐＨ４になる適量の１Ｎ ＨＣｌとを含む水性ビヒクルを調製した。
ビヒクル２３．２ｍｌを室温に平衡化し、前述の混合物７７３．２ｍｇにゆっくり移した。次いで、得られた調製物を均質の懸濁液が得られるまでゆっくり撹拌した。得られた懸濁液は化合物Ｉを９．３７５ｍｇ／ｍｌ含有した。懸濁液は２〜８℃で遮光保存した。
【００６１】
実施例２
マウスにヒトＨＴ-２９細胞の異種移植片を移植した。細胞株を使用したマウスと移植を以下に記述する。
雌の無胸腺Crl:NU-Foxn1nuマウスを有効性試験に使用した（Charles River, Wilmington, MA, USA）。マウスは１０〜１２週齢、体重２３〜２５グラムであった。マウスの健康評価は、観察および同ラックのセンチネル動物から採取した血液サンプルの分析により毎日行った。すべての動物に順化のため、および輸送関連のストレスからの回復のため一週間与えた。オートクレーブ処理した水と照射食（5058-ms Pico Lab マウスチャウ、Purina Mills社 Richmond, IN, USA）を適宜与え、動物を１２時間の明暗サイクルに置いた。ケージ、寝床および水ボトルは使用前にオートクレーブ処理し、毎週取り替えた。全ての動物実験は、「実験動物の管理及び使用に関する指針（Guide for the Care and Use of Laboratory Animals）」、地方条例および当社のAAALAC認可設備のRoche Animal Care and Use Committeeが承認したプロトコールに準拠して実施した。
ＨＴ-２９細胞（American Type Culture Collection, Rockville, MD）を１０％のウシ胎児血清（ＦＢＳ）と１％の ２００ｎＭのＬ-グルタミンを添加したＭｃＣｏｙ-５培地で成長させ、スケールアップ、ハーベストを行い、各マウスが、カルシウムとマグネシウムを含まない０．２ｍｌのリン酸緩衝食塩水（ＰＢＳ）中３×１０６個の細胞を受けるように調整した。細胞は各マウスの右側腹部に皮下移植した。
【００６２】
実施例３
この実施例はエルロチニブ塩酸塩の懸濁液の調製について記述する。
およそ９５０ｍｌの水にツイーン８０を１グラム加えた。高速撹拌しながら３グラムのナトリウムカルボキシメチルセルロースを溶液に加えた。ナトリウムカルボキシメチルセルロースが完全に溶解するまで撹拌を続けた。次いで、水を全体で１リットルになるまで加えた。次いで、１２．５グラムのエルロチニブ塩酸塩（ジェネンテック社からタルセバ（登録商標）として入手可能）を溶液に懸濁させ、溶解機にかけた。次いで、溶液を窒素で脱気した。
最終的な懸濁液の成分は以下の通りである。
成分                                        量
エルロチニブ塩酸塩                        １２．５ｇ
ナトリウムカルボキシメチルセルロース      ３ｇ
ツイーン８０                              １ｇ
注射用水                                  全体で１リットル
こうして１２．５ｍｇ／ｍｌエルロチニブ塩酸塩溶液を得た。溶液は２〜８℃で保存した。
【００６３】
実施例４
実施例１で記述したように化合物Ｉを含む懸濁液を生成した。
１２．５ｍｇ／ｍｌエルロチニブ塩酸塩溶液を実施例３で記述したように作製した。さらに、エルロチニブ塩酸塩を１２．５ｇではなく８．３０ｇ使用したことを除き実施例３と同様の方法で、８．３０ｍｇ／ｍｌの溶液を作製した。
実施例２に記述の方法で生産したＨＴ-２９異種移植片を含むマウスを腫瘍体積に応じて各１０匹の群にランダムに振り分け、すべての群において開始時の腫瘍平均体積が同様であるようにした。この研究の開始時腫瘍平均体積は、およそ１３６ｍｍ３であった。
【００６４】
マウスの治療は細胞移植後１２日目に開始し、細胞移植後２９日目に終了した。各群は以下のとおり異なる治療を受けた。
（１）化合物Ｉビヒクルｂｉｄ ｐｏとエルロチニブ塩酸塩ビヒクルｑｄ ｐｏを受けるマウス；
（２）化合物Ｉを７５ｍｇ／ｋｇ ｂｉｄ ｐｏで受けるマウス；
（３）エルロチニブ塩酸塩を６７ｍｇ／ｋｇ ｑｄ ｐｏで受けるマウス；
（４）エルロチニブ塩酸塩を１００ｍｇ／ｋｇ ｑｄ ｐｏで受けるマウス；
（５）化合物Ｉを７５ｍｇ／ｋｇ ｂｉｄ ｐｏとエルロチニブ塩酸塩を６７ｍｇ／ｋｇ ｑｄ ｐｏで受けるマウス。
【００６５】
化合物Ｉの懸濁液とそれに対するビヒクルを滅菌１ｃｃシリンジと１８-ゲージの給餌針（０．２ｍｌ／動物）を使用して１日２回投与した。エルロチニブ塩酸塩の溶液とそれに対するビヒクルを滅菌１ｃｃシリンジと１８-ゲージの給餌針（０．２ｍｌ／動物）を使用して１日１回、移植後１２日目から２９日目まで投与した。１２．５ｍｇ／ｍｌ溶液をエルロチニブ塩酸塩１００ｍｇ／ｋｇ群に使用し、８．３０ｍｇ／ｍｌ溶液をエルロチニブ塩酸塩６７ｍｇ／ｋｇ ｑｄ群に使用した。用量はすべてマウスの平均体重２５グラムを基にした。
腫瘍の測定は週１回または２回行った。すべての動物を実験の間個別にフォローした。
【００６６】
毒性
一般に、体重変化の測定や個々の動物の全体的な観察で評価し記述したこの研究のどの投与群にも毒性の主な兆候は認められなかった。エルロチニブ塩酸塩100ｍｇ／ｋｇ ｑｄの併用での耐容性は従来良好ではないので（Higginsら, Anticancer Drugs, 15:503-12 (2004)）、耐容性を確保するため併用アームに６７ｍｇ／ｋｇ ｑｄを使用した。エルロチニブ塩酸塩１００ｍｇ／ｋｇ ｑｄを比較のため単剤療法アームとして含めた。しかし、化合物Ｉは耐容性が非常に良好で、エルロチニブ塩酸塩との併用でも７５ｍｇ／ｋｇ ｂｉｄで投与した。エルロチニブ塩酸塩で治療したマウスには、継続治療下にあっても、ＥＦＧＲ阻害剤関連の自己制限的性質の皮疹が一般にみられた。表１および図１を参照されたい。
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【００６７】
腫瘍増殖阻害（ＴＧＩ）
化合物Ｉの単剤療法を７５ｍｇ／ｋｇ ｂｉｄで受けた群は９１％のＴＧＩを示したが、エルロチニブ塩酸塩を１００ｍｇ／ｋｇ ｑｄで受けた群は５１％のＴＧＩを示し、エルロチニブ塩酸塩を６７ｍｇ／ｋｇ ｑｄで受けた群は３８％のＴＧＩを示した。前述のどの群にも腫瘍退縮は観察されなかった。化合物Ｉを７５ｍｇ／ｋｇ ｂｉｄとエルロチニブ塩酸塩を６７ｍｇ／ｋｇ ｑｄの併用療法を受けた群は、１００％を上回るＴＧＩを示し、１０のうち９は部分退縮（ＰＲ）であった。表２および図２を参照されたい。
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【００６８】
生存評価
化合物Ｉを７５ｍｇ／ｋｇの単剤療法を受けた群の延長寿命（ＩＬＳ）は１００％を示した。エルロチニブ塩酸塩を１００ｍｇ／ｋｇ ｑｄの単剤療法を受けた群は３８％のＩＬＳを示した。エルロチニブ塩酸塩を６７ｍｇ／ｋｇ ｑｄの単剤療法を受けた群は３５％のＩＬＳを示した。化合物Ｉを７５ｍｇ／ｋｇ ｂｉｄとエルロチニブ塩酸塩を６７ｍｇ／ｋｇ ｑｄの併用療法を受けた群は１４２％のＩＬＳを示した。表４および図３を参照されたい。
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【００６９】
統計学的分析 
化合物Ｉを７５ｍｇ／ｋｇ ｂｉｄとエルロチニブ塩酸塩の６７ｍｇ／ｋｇ ｑｄの併用療法のＴＧＩ（％）はすべての単剤療法アームよりも統計学的に優れていた（ｐ＜０．０５）。化合物Ｉを７５ｍｇ／ｋｇ ｂｉｄとエルロチニブ塩酸塩の６７ｍｇ／ｋｇ ｑｄの併用療法のＩＬＳ（％）もまた、実験したすべての単剤療法アームよりも統計学的に優れていた（比較はすべてｐ＜０．０５）。表５を参照されたい。
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【００７０】
実施例５
ビヒクル１９．４ｍｌと混合６４４ｍｇを使用して９．３７５ｍｇ／ｍｌ懸濁液２０ｍｌを作製し、ビヒクル１９．８ｍｌと混合２１４．８ｍｇを使用して３．１２５ｍｇ／ｍｌ懸濁液２０ｍｌを作製したことを除き、実施例１と同様の方法で化合物Ｉを含む２つの懸濁液を作製した。
セツキシマブはインクローンシステムズ社（アービタックス（登録商標））から２ｍｇ／ｍｌ溶液として購入した。
実施例２に記述の方法で生産したＨＴ-２９異種移植片を含むマウスを腫瘍体積に応じて各１０匹の群にランダムに振り分け、すべての群において開始時の腫瘍平均体積が同様であるようにした。この研究の開始時腫瘍平均体積は、およそ１３５ｍｍ３であった。
【００７１】
治療は細胞移植後１２日目に開始し、細胞移植後３４日目に終了した。各群は以下のとおり異なる治療を受けた。
（１）化合物Ｉビヒクルｂｉｄ ｐｏとセツキシマブビヒクル２×／ｗｋ ｉｐを受けるマウス；
（２）セツキシマブを４０ｍｇ／ｋｇ ２×／ｗｋ ｉｐで受けるマウス；
（３）化合物Ｉを２５ｍｇ／ｋｇ ｂｉｄ ｐｏで受けるマウス；
（４）化合物Ｉを７５ｍｇ／ｋｇ ｂｉｄ ｐｏで受けるマウス；
（５）化合物Ｉを２５ｍｇ／ｋｇ ｂｉｄ ｐｏとセツキシマブを４０ｍｇ／ｋｇ ２×／ｗｋ ｉｐで受けるマウス；
（６）化合物Ｉを７５ｍｇ／ｋｇ ｂｉｄ ｐｏとセツキシマブを４０ｍｇ／ｋｇ ２×／ｗｋ ｉｐで受けるマウス。
【００７２】
化合物Ｉの懸濁液とそれに対するビヒクルを滅菌１ｃｃシリンジと１８-ゲージの給餌針（０．２ｍｌ／動物）を使用して１日２回投与した。９．３７５ｍｇ／ｍｌ懸濁液を化合物Ｉ７５ｍｇ／ｋｇ ｂｉｄ群に使用し、３．１２５ｍｇ／ｍｌ懸濁液を化合物Ｉ２５ｍｇ／ｋｇ ｂｉｄ群に使用した。セツキシマブとそれに対するビヒクルを滅菌１ｃｃシリンジと２６-ゲージの給餌針（０．５ｍｌ／動物）を使用して週２回、月曜日／木曜日または火曜日／金曜日のスケジュールで腹腔内投与した。用量はすべてマウスの平均体重２５グラムを基にした。
腫瘍の測定は週１回または２回行った。すべての動物を実験の間個別にフォローした。
【００７３】
毒性
一般に、体重変化の測定や個々の動物の全体的な観察で評価し記述したこの研究のどの投与群にも毒性の主な兆候は認められなかった。表６および図７を参照されたい。セツキシマブで治療したマウスには、継続治療下にあっても、ＥＦＧＲ阻害剤関連の自己制限的性質の皮疹が一般にみられた。皮疹の後遺症として細菌感染したらしきマウス１匹は進行性の体重減少＞２０％となったため、安楽死が必要であった。このマウスは全体的な腫瘍増殖阻害および生存の分析から除外した。
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【００７４】
腫瘍増殖阻害（ＴＧＩ）
化合物Ｉを２５ｍｇ／ｋｇ ｂｉｄの単剤療法を受けた群は７４％のＴＧＩを示し、化合物Ｉを７５ｍｇ／ｋｇ ｂｉｄの単剤療法を受けた群は９３％のＴＧＩを示した。セツキシマブを４０ｍｇ／ｋｇ ２×／ｗｋ受けた群のＴＧＩは５１％であった。前述のどの群にも腫瘍退縮は観察されなかった。しかし、いずれの併用療法群も＞１００％のＴＧＩを示した。化合物Ｉを２５ｍｇ／ｋｇ ｂｉｄとセツキシマブを４０ｍｇ／ｋｇ ２×／ｗｋ受けた群は、１０のうち７が部分退縮（ＰＲ）を示したが、完全退縮（ＣＲ）はなかった。化合物Ｉを７５ｍｇ／ｋｇ ｂｉｄとセツキシマブを４０ｍｇ／ｋｇ ２×／ｗｋ受けた群は、１０のうち７がＰＲで、１０のうち３がＣＲを示した。
表７および表８ならびに図５を参照されたい。
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【００７５】
生存評価
化合物Ｉを２５ｍｇ／ｋｇ ｂｉｄの単剤療法を受けた群は４４％のＩＬＳを示し、化合物Ｉを７５ｍｇ／ｋｇ ｂｉｄの単剤療法を受けた群は７５％のＩＬＳを示した。セツキシマブを４０ｍｇ／ｋｇ ２×／ｗｋ受けた群のＩＬＳは１６％であった。化合物Ｉを２５ｍｇ／ｋｇ ｂｉｄとセツキシマブを４０ｍｇ／ｋｇ ２×／ｗｋ受けた群は９７％のＩＬＳを示した。化合物Ｉを７５ｍｇ／ｋｇ ｂｉｄとセツキシマブを４０ｍｇ／ｋｇ ２×／ｗｋ受けた群は１２２％のＩＬＳを示した。表９および図６を参照されたい。
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【００７６】
統計学的分析 
化合物Ｉを２５ｍｇ／ｋｇ ｂｉｄとセツキシマブを４０ｍｇ／ｋｇ ２×／ｗｋの併用療法と化合物Ｉを７５ｍｇ／ｋｇ ｂｉｄとセツキシマブを４０ｍｇ／ｋｇ ２×／ｗｋの併用療法のＴＧＩ（％）はいずれも単剤療法アームのそれよりも統計学的に優れていた（ｐ＜０．０５）。両方の単剤療法で得られたＩＬＳ（％）もまた、実験したすべての単剤療法アームよりも統計学的に優れていた（比較はすべてｐ＜０．０５）。表１０を参照されたい。
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【００７７】
実施例６
ビヒクル３９．６ｍｌと混合４２９．６ｍｇを使用して３．１２５ｍｇ／ｍｌ懸濁液を４０ｍｌ作製したことを除き、実施例１と同様の方法で化合物Ｉを含む懸濁液を作製した。
セツキシマブはインクローンシステムズ社（アービタックス（登録商標））から２ｍｇ／ｍｌ溶液として購入した。イリノテカンＨＣｌ塩酸塩はファイザー社（カンプトサール（登録商標）として入手可能）から２０ｍｇ／ｍｌ滅菌原液として購入し、必要に応じて滅菌食塩水で２ｍｇ／ｍｌまで希釈した。
実施例２に記述の方法で生産したＨＴ-２９異種移植片を含むマウスを腫瘍体積に応じて各１０匹の群にランダムに振り分け、すべての群において開始時の腫瘍平均体積が同様であるようにした。この研究の開始時腫瘍平均体積は、およそ１３５ｍｍ３であった。
【００７８】
治療は細胞移植後１１日目に開始し、細胞移植後３２日目に終了した。各群は以下のとおり異なる治療を受けた。
（１）化合物Ｉビヒクルｂｉｄ ｐｏとセツキシマブビヒクル２×／ｗｋ ｉｐとイリノテカンＨＣｌビヒクル ｑ４ｄ ×５ ｉｐで受けるマウス；
（２）イリノテカンＨＣｌを４０ｍｇ／ｋｇ ｑ４ｄ ×５ ｉｐで受けるマウス；
（３）化合物Ｉを２５ｍｇ／ｋｇ ｂｉｄ ｐｏで受けるマウス；
（４）セツキシマブを４０ｍｇ／ｋｇ ２×／ｗｋ ｉｐで受けるマウス；
（５）化合物Ｉを２５ｍｇ／ｋｇ ｂｉｄ ｐｏとイリノテカンＨＣｌを４０ｍｇ／ｋｇ ｑ４ｄ ×５ ｉｐで受けるマウス；
（６）セツキシマブを４０ｍｇ／ｋｇ ２×／ｗｋ ｉｐとイリノテカンＨＣｌを４０ｍｇ／ｋｇ ｑ４ｄ ×５ ｉｐで受けるマウス；
（７）化合物Ｉを２５ｍｇ／ｋｇ ｂｉｄ ｐｏとセツキシマブを４０ｍｇ／ｋｇ ２×／ｗｋ ｉｐで受けるマウス；
（８）化合物Ｉを２５ｍｇ／ｋｇ ｂｉｄ ｐｏとセツキシマブを４０ｍｇ／ｋｇ ２×／ｗｋ ｉｐとイリノテカンＨＣｌを４０ｍｇ／ｋｇ ｑ４ｄ ×５ ｉｐで受けるマウス。
化合物Ｉの懸濁液とそれに対するビヒクルを滅菌１ｃｃシリンジと１８-ゲージの給餌針（０．２ｍｌ／動物）を使用して１日２回投与した。セツキシマブとそれに対するビヒクルを滅菌１ｃｃシリンジと２６-ゲージの給餌針（０．２ｍｌ／動物）を使用して週２回、月曜日／木曜日または火曜日／金曜日のスケジュールで腹腔内投与した。イリノテカンＨＣｌとそれに対するビヒクルを滅菌１ｃｃシリンジと２６-ゲージの給餌針（０．２ｍｌ／動物）を使用してｑ４ｄ ×５のスケジュールで腹腔内投与した。用量はすべてマウスの平均体重２５グラムを基にした。
腫瘍の測定は週１回または２回行った。すべての動物を実験の間個別にフォローした。
【００７９】
毒性
一般に、体重変化の測定や個々の動物の全体的な観察で評価し記述したこの研究のどの投与群にも毒性の主な兆候は認められなかった。表１１および図７を参照されたい。セツキシマブで治療したマウスには、継続治療下にあっても、ＥＦＧＲ阻害剤関連の自己制限的性質の皮疹が一般にみられた。
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【００８０】
腫瘍増殖阻害（ＴＧＩ）
化合物Ｉを２５ｍｇ／ｋｇ ｂｉｄの単剤療法を受けた群は７６％のＴＧＩを示した。セツキシマブを４０ｍｇ／ｋｇ ２×／ｗｋの単剤療法を受けた群は５８％のＴＧＩを示した。イリノテカンＨＣｌを４０ｍｇ／ｋｇ ｑ４ｄ×５の単剤療法を受けた群は５９％のＴＧＩを示した。化合物Ｉを２５ｍｇ／ｋｇ ｂｉｄとイリノテカンＨＣｌを４０ｍｇ／ｋｇ ｑ４ｄ×５で受けた群は９８％のＴＧＩを示した。セツキシマブを４０ｍｇ／ｋｇ ２×／ｗｋとイリノテカンＨＣｌを４０ｍｇ／ｋｇ ｑ４ｄ×５で受けた群は９２％のＴＧＩを示した。化合物Ｉを２５ｍｇ／ｋｇ ｂｉｄとセツキシマブを４０ｍｇ／ｋｇ ２×／ｗｋで受けた群は＞１００％のＴＧＩを示した。化合物Ｉを２５ｍｇ／ｋｇ ｂｉｄとセツキシマブを４０ｍｇ／ｋｇ ２×／ｗｋとイリノテカンＨＣｌを４０ｍｇ／ｋｇ ｑ４ｄ×５で受けた群は＞１００％のＴＧＩを示した。どの単剤療法群にも腫瘍退縮は観察されなかった。化合物Ｉを２５ｍｇ／ｋｇ ｂｉｄとセツキシマブを４０ｍｇ／ｋｇ ２×／ｗｋで受けた群は、１０のうち５が部分退縮（ＰＲ）を示したが、完全退縮（ＣＲ）はなかった。化合物Ｉを２５ｍｇ／ｋｇ ｂｉｄとセツキシマブを４０ｍｇ／ｋｇ ２×／ｗｋとイリノテカンＨＣｌを４０ｍｇ／ｋｇ ｑ４ｄ×５で受けた群は、１０のうち９がＰＲで、１０のうち１がＣＲを示した。
表１２および表１３ならびに図８を参照されたい。
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【００８１】
生存評価
化合物Ｉを２５ｍｇ／ｋｇ ｂｉｄの単剤療法を受けた群は８０％のＩＬＳを示した。セツキシマブを４０ｍｇ／ｋｇ ２×／ｗｋの単剤療法を受けた群は２７％のＩＬＳを示した。イリノテカンＨＣｌを４０ｍｇ／ｋｇ ｑ４ｄ×５の単剤療法を受けた群は１７％のＩＬＳを示した。化合物Ｉを２５ｍｇ／ｋｇ ｂｉｄとイリノテカンＨＣｌを４０ｍｇ／ｋｇ ｑ４ｄ×５で受けた群は１６３％のＩＬＳを示した。セツキシマブを４０ｍｇ／ｋｇ ２×／ｗｋとイリノテカンＨＣｌを４０ｍｇ／ｋｇ ｑ４ｄ×５で受けた群は８０％のＩＬＳを示した。化合物Ｉを２５ｍｇ／ｋｇ ｂｉｄとセツキシマブを４０ｍｇ／ｋｇ ２×／ｗｋで受けた群は１２７％のＩＬＳを示した。化合物Ｉを２５ｍｇ／ｋｇ ｂｉｄとセツキシマブを４０ｍｇ／ｋｇ ２×／ｗｋとイリノテカンＨＣｌを４０ｍｇ／ｋｇ ｑ４ｄ×５で受けた群は２５９％のＩＬＳを示した。表１４および図９を参照されたい。
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【００８２】
統計学的分析
化合物Ｉ／セツキシマブ、化合物Ｉ／イリノテカンＨＣｌおよび化合物Ｉ／セツキシマブ／イリノテカンＨＣｌの併用療法のＴＧＩ（％）は、すべての単剤療法アームよりも統計学的に優れていた（ｐ＜０．０５）。化合物Ｉ／セツキシマブ／イリノテカンＨＣｌの併用療法のＴＧＩ（％）はまた、化合物Ｉ／イリノテカンＨＣｌおよびセツキシマブ／イリノテカンＨＣｌの併用療法のそれよりも統計学的に優れていた（ｐ＜０．０５）。
化合物Ｉ／セツキシマブ、化合物Ｉ／イリノテカンＨＣｌおよび化合物Ｉ／セツキシマブ／イリノテカンＨＣｌの併用療法のＩＬＳ（％）は、すべての単剤療法アームよりも統計学的に優れていた（比較はすべてｐ＜０．０５）。化合物Ｉ／セツキシマブ／イリノテカンＨＣｌの併用療法のＩＬＳ（％）はまた、化合物Ｉ／イリノテカンＨＣｌおよび化合物Ｉ／セツキシマブの併用療法のそれよりも統計学的に優れていた。
表１５を参照されたい。
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【図１】
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【図２】
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【図３】
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【図４】
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【図５】
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【図６】
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【図７】
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【図８】
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【図９】
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【国際調査報告】
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