(57)【要約】  本発明は、生きている、収穫された海藻からフコイダン及びラミナリンのうち少なくとも１つを得るための方法に関し、該方法は、（ｉ）フコイダン及びラミナリンを含む海藻を収穫して、生きている、収穫された海藻を得る工程、ここで、生きている、収穫された海藻は、滲出して、滲出液を形成する；（ｉｉ）生きている、収穫された海藻から滲出液を収集する工程、ここで、フコイダン及びラミナリンは、滲出液に溶解されている；並びに（ｉｉｉ）滲出液からフコイダン又はラミナリンのうち少なくとも１つを分離する工程、を含む、ことを特徴とする【選択図】なし【特許請求の範囲】
【請求項１】
生きている、収穫された海藻からフコイダン及びラミナリンのうち少なくとも１つを得るための方法であって、
（ｉ）フコイダン及びラミナリンを含む海藻を収穫して、前記生きている、収穫された海藻を得る工程であって、前記生きている、収穫された海藻は、滲出して、滲出液を形成する、当該工程；
（ｉｉ）前記滲出液を収集する工程であって、ここで、前記フコイダン及びラミナリンは、前記滲出液に溶解されている、当該工程；並びに
（ｉｉｉ）前記滲出液からフコイダン及びラミナリンのうち少なくとも１つを分離する工程、
を含むことを特徴とする方法。
【請求項２】
前記フコイダンは、前記滲出液中２ｇ／リットルより多く前記滲出液から得られる、
ことを特徴とする請求項１に記載の方法。
【請求項３】
前記フコイダンは、前記滲出液中４ｇ／リットルより多く前記滲出液から得られる、
ことを特徴とする請求項１に記載の方法。
【請求項４】
前記ラミナリンは、前記滲出液中０．０１ｇ／リットルより多く前記滲出液から得られる、
ことを特徴とする請求項１に記載の方法。
【請求項５】
前記ラミナリンは、前記滲出液中０．５ｇ／リットルより多く前記滲出液から得られる、
ことを特徴とする請求項１に記載の方法。
【請求項６】
生きている、収穫された海藻１トンにつき全量で３０−１１０リットルの滲出液が、工程（ｉｉ）で収集される、
ことを特徴とする請求項１に記載の方法。
【請求項７】
フコイダンが、前記滲出液から分離され、生きている、収穫された海藻中、６０ｇ−３，８５０ｇフコイダン／トンの量で得られる、
ことを特徴とする請求項１に記載の方法。
【請求項８】
フコイダンが、前記滲出液から分離され、生きている、収穫された海藻中、２２０ｇ−１，０５０ｇフコイダン／トンの量で得られる、
ことを特徴とする請求項１に記載の方法。
【請求項９】
ラミナリンが、前記滲出液から分離され、生きている、収穫された海藻中、０．３ｇ−３，３００ｇ／トンの量で得られる、
ことを特徴とする請求項１に記載の方法。
【請求項１０】
ラミナリンが、前記滲出液から分離され、生きている、収穫された海藻中、１１ｇ−９００ｇ／トンの量で得られる、
ことを特徴とする請求項１に記載の方法。
【請求項１１】
前記滲出液は、滲出１２時間後に収集される、
ことを特徴とする請求項１に記載の方法。
【請求項１２】
前記工程（ｉｉｉ）は、アルコール沈殿を用いて、前記滲出液から、前記フコイダン又は前記フコイダン及びラミナリンを分離することを含む、
ことを特徴とする請求項１に記載の方法。
【請求項１３】
前記工程（ｉｉｉ）は、限外ろ過を用いて、前記滲出液から、前記フコイダン又は前記ラミナリンのうち少なくとも１つを分離することを含む、
ことを特徴とする請求項１に記載の方法。
【請求項１４】
前記工程（ｉｉｉ）は、前記滲出液から固体の破片を除去する第一のろ過工程と、その後の、前記ラミナリンから前記フコイダンを分離する第二のろ過工程と、を含む、
ことを特徴とする請求項１に記載の方法。
【請求項１５】
前記第二のろ過工程は、１０ｋＤａより大きい分画分子量を有するフィルターにより前記滲出液を限外ろ過して、濃縮液として前記フコイダン及び前記ろ液中の前記ラミナリンを得ることと、その後、前記フコイダンを乾燥させることと、を含む、
ことを特徴とする請求項１４に記載の方法。
【請求項１６】
前記第二のろ過工程において得られた前記ろ液中の前記ラミナリンは、１ｋＤａ又はそれ未満の分画分子量を有するフィルターに前記ろ液を通過させることでナノろ過されて、濃縮液として前記ラミナリンが得られ、その後前記ラミナリンは乾燥される、
ことを特徴とする請求項１５に記載の方法。
【請求項１７】
前記乾燥工程は、噴霧乾燥を含む、
ことを特徴とする請求項１５又は１６に記載の方法。
【請求項１８】
前記海藻は、藻類の綱である、褐藻綱（ｐｈａｅｏｐｈｙｃｅａｅ）由来である、
ことを特徴とする請求項１に記載の方法。
【請求項１９】
前記海藻は、藻類の目である、コンブ目（Ｌａｍｉｎａｒｉａｌｅｓ）、ヒバマタ目（Ｆｕｃａｌｅｓ）、Ｄｕｒｖｉｌｌａｅａｃｅａｅ、シオミドロ目（Ｅｃｔｏｃａｒｐａｌｅｓ）、アミジグサ目（Ｄｉｃｔｙｏｔａｌｅｓ）、カヤモノリ目（Ｓｃｙｔｏｓｉｐｈｏｎａｌｅｓ）及びウルシグサ目（Ｄｅｓｍａｒｅｓｔｉａｌｅｓ）由来の海藻を含む、
ことを特徴とする請求項１に記載の方法。
【請求項２０】
前記海藻は、藻類の科である、コンブ科（Ｌａｍｉｎａｒｉａｃｅａｅ）、レッソニア科（Ｌｅｓｓｏｎｉａｃｅａｅ）、チガイソ科（Ａｌａｒｉａｃｅａｅ）、ツルモ科（Ｃｈｏｒｄａｃｅａｅ）、ヒバマタ科（Ｆｕｃａｃｅａｅ）、ホンダワラ科（Ｓａｒｇａｓｓａｃｅａｅ）、Ｈｉｍａｎｔｈａｌｉａｃｅａｅ、ナガマツモ科（Ｃｈｏｒｄａｒｉａｃｅａｅ）、Ａｄｅｎｏｃｙｓｔａｃｅａｅ、アミジグサ科（Ｄｉｃｔｙｏｔａｃｅａｅ）、カヤモノリ科（Ｓｃｙｔｏｓｉｐｈｏｎａｃｅａｅ）、及びウルシモク科（Ｄｅｓｍａｒｅｓｔｉａｃｅａｅ）由来の海藻を含む、
ことを特徴とする請求項１に記載の方法。
【請求項２１】
前記海藻は、藻類の属である、コンブ属（Ｌａｍｉｎａｒｉａ）、Ｄｕｒｖｉｌｌａｅａ、ネコアシコンブ属（Ａｒｔｈｒｏｔｈａｍｎｕｓ）、マクロシスチス属（Ｍａｃｒｏｃｙｓｔｉｓ）、Ｎｅｒｅｏｃｙｓｔｉｓ、Ｓａｃｃｈａｒｉｎａ、エクロニア属（Ｅｃｋｌｏｎｉａ）、Ｌｅｓｓｏｎｉａ、Ｅｌｓｅｎｉａ、チガイソ属（Ａｌａｒｉａ）、ワカメ属（Ｕｎｄａｒｉａ）、ナガマツモ属（Ｃｈｏｒｄａ）、アスコフィルム属（Ａｓｃｏｐｈｙｌｌｕｍ）、ヒバマタ属（Ｆｕｃｕｓ）、エゾイシゲ属（Ｓｉｌｖｅｔｉａ）、Ｐｅｌｖｅｔｉａ、ホンダワラ属（Ｓａｒｇａｓｓｕｍ）、ヒジキ属（Ｈｉｚｉｋｉａ）、Ｂｉｆｕｒｃａｒｉａ、ヒマンタリア属（Ｈｉｍａｎｔｈａｌｉａ）、オキナワモズク属（Ｃｌａｄｏｓｉｐｈｏｎ）、モズク属（Ｎｅｍａｃｙｓｔｕｓ）、ウイキョウモ属（Ｄｉｃｔｙｏｓｉｐｈｏｎ）、ナガマツモ属（Ｃｈｏｒｄａｒｉａ）、モツキチャソウメン属（Ｓａｕｎｄｅｒｓｅｌｌａ）、Ａｄｅｎｏｃｙｓｔｉｓ、コモングサ属（Ｓｐａｔｏｇｌｏｓｓｕｍ）、アミジグサ属（Ｄｉｃｔｙｏｔａ）、ウミウチワ属（Ｐａｄｉｎａ）、カヤモノリ属（Ｓｃｙｔｏｓｉｐｈｏｎ）、セイヨウハバノリ属（Ｐｅｔａｌｏｎｉａ）及びウルシグサ属（Ｄｅｓｍａｒｅｓｔｉａ）由来の海藻を含む、
ことを特徴とする請求項１に記載の方法。
【請求項２２】
前記海藻は、藻類の種である、Ｌａｍｉｎａｒｉａ  ｄｉｇｉｔａｔａ、ケルプ（Ｌａｍｉｎａｒｉａ  ｈｙｐｅｒｂｏｒｅａ）、マコンブ（Ｌａｍｉｎａｒｉａ  ｊａｐｏｎｉｃａ）、ミツイシコンブ（Ｌａｍｉｎａｒｉａ  ａｎｇｕｓｔａｔａ）、Ｌａｍｉｎａｒｉａ  ｂｒａｓｉｌｌｉｅｎｓｉｓ、チヂミコンブ（Ｌａｍｉｎａｒｉａ  ｃｉｃｈｏｒｉｏｉｄｅｓ，）  ネコシアコンブ（Ａｒｔｈｒｏｔｈａｍｎｕｓ  ｂｉｆｉｄｕｓ）、オオウキモ（Ｍａｃｒｏｃｙｓｔｉｓ  ｐｙｒｉｆｅｒａ）、ジャイアントケルプ（Ｎｅｒｅｏｃｙｓｔｉｓ  ｌｕｅｔｋｅａｎａ）、Ｓａｃｃｈａｒｉｎａ  ｌｏｎｇｉｃｒｕｒｉｓ  （Ｌａｍｉｎａｒｉａ  ｌｏｎｇｇｉｃｒｕｒｉｓ）、Ｓａｃｃｈａｒｉｎａ  ｓｃｕｌｐｅｒａ  （ガゴメ（Ｋｊｅｌｌｍａｎｉｅｌｌａ  ｃｒａｓｓｉｆｏｌｉａ））、Ｅｃｋｌｏｎｉａ  ｍａｘｉｍａ、カジメ（Ｅｃｋｌｏｎｉａ  ｃａｖａ）、クロメ（Ｅｃｋｌｏｎｉａ  ｋｕｒｏｍｅ）、Ｌｅｓｓｏｎｉａ  ｎｉｇｒｅｓｃｅｎｓ、Ｌｅｓｓｏｎｉａ  ｖａｄｏｓａ、Ｅｌｓｅｎｓｉａ  ｂｉｃｙｃｌｉｓ、クシロワカメ（Ａｌａｒｉａ  ｍａｒｇｉｎａｔａ）、ワカメ（Ｕｎｄａｒｉａ  ｐｉｎｎａｔｉｆｉｄａ）、ツルモ（Ｃｈｏｒｄａ  ｆｉｌｕｍ）、Ａｓｃｏｐｈｙｌｌｕｍ  ｎｏｄｏｓｕｍ、Ｆｕｃｕｓ  ｖｅｓｉｃｕｌｏｓｕｓ、ヒバマタ（Ｆｕｃｕｓ  ｄｉｓｔｉｃｈｕｓ）、ヒバマタ（Ｆｕｃｕｓ  ｅｖａｎｅｓｃｅｎｓ）、Ｆｕｃｕｓ  ｓｅｒｒａｔｕｓ、Ｆｕｃｕｓ  ｓｐｉｒａｌｉｓ、エゾイシゲ（Ｓｉｌｖｅｔｉａ  ｂａｂｉｎｇｔｏｎｉｉ）、Ｐｅｌｖｅｔｉａ  ｃａｎａｌｉｃｕｌａｔａ、ヒジキ（Ｓａｒｇａｓｓｕｍ  ｆｕｓｉｆｏｒｍｅ）、アカモク（Ｓａｒｇａｓｓｕｍ  ｈｏｒｎｅｒｉ）、タマハハキモク（Ｓａｒｇａｓｓｕｍ  ｍｕｔｉｃｕｍ）、Ｓａｒｇａｓｓｕｍ  ｓｔｅｎｏｐｈｙｌｌｕｍ、ヒジキ（Ｈｉｚｉｋｉａ  ｆｕｓｉｆｏｒｍｉｓ）  （Ｈｉｚｉｋｉａ  ｆｕｓｉｆｏｒｍｅ）、Ｂｉｆｕｒｃａｒｉａ  ｂｉｆｕｒｃａｔａ、Ｈｉｍａｎｔｈａｌｉａ  ｅｌｏｎｇａｔａ  （Ｈｉｍａｎｔｈａｌｉａ  ｌｏｒｅａ）、オキナワモズク（Ｃｌａｄｏｓｉｐｈｏｎ  ｏｋａｍｕｒａｎｕｓ）、Ｎｅｍａｃｙｓｔｕｓ  ｄｅｃｉｐｉｅｎｓ、ウイキョウモ（Ｄｉｃｔｙｏｓｉｐｈｏｎ  ｆｏｅｎｉｃｕｌａｃｅｕｓ）、ナガマツモ（Ｃｈｏｒｄａｒｉａ  ｆｌａｇｅｌｌｉｆｏｒｍｉｓ）、Ｃｈｏｒｄａｒｉａ  ｇｒａｃｉｌｉｓ、モツキチャソウメン（Ｓａｕｎｄｅｒｓｅｌｌａ  ｓｉｍｐｌｅｘ）、Ａｄｅｎｏｃｙｓｔｉｓ  ｕｔｒｉｃｕｌａｒｉｓ、Ｓｐａｔｏｇｌｏｓｓｕｍ  ｓｃｈｒｏｅｄｅｒｉ、アミジグサ（Ｄｉｃｔｙｏｔａ  ｄｉｃｈｏｔｏｍａ）、Ｄｉｃｔｙｏｔａ  ｍｅｎｓｔｒｕａｌｉｓ、Ｐａｄｉｎａ  ｐａｖｏｎｉｃａ、カヤモノリ（Ｓｃｙｔｏｓｉｐｈｏｎ  ｌｏｍｅｎｔａｒｉａ）、セイヨウハバノリ（Ｐｅｔａｌｏｎｉａ  ｆａｓｃｉａ）、Ｄｕｒｖｉｌｌａｅａ  ａｎｔａｒｔｉｃａ、Ｄｕｒｖｉｌｌａｅａ  ｐｏｔａｔｏｒｕｍ及びＤｅｓｍａｒｅｓｔｉａ  ｉｎｔｅｒｍｅｄｉａ由来の海藻を含む、
ことを特徴とする請求項１に記載の方法。
【請求項２３】
前記海藻は、ケルプ（Ｌａｍｉｎａｒｉａ  ｈｙｐｅｒｂｏｒｅａ）である、
ことを特徴とする請求項１に記載の方法。
【請求項２４】
抗菌薬を含む防腐剤が、工程（ｉ）における海藻、工程（ｉ）における滲出液、又は工程（ｉｉ）における滲出液のうち少なくとも１つに加えられる、
ことを特徴とする請求項１に記載の方法。
【請求項２５】
前記防腐剤は、ホルムアルデヒドである、
ことを特徴とする請求項２４に記載の方法。
【請求項２６】
工程（ｉ）における前記海藻は、１ｃｍ以上の片にカットされる、
ことを特徴とする請求項１に記載の方法。
【請求項２７】
工程（ｉ）における前記海藻は、挽かれていない、又は粉末にされていない、請求項１に記載の方法。
【請求項２８】
工程（ｉｉｉ）において得られた前記フコイダン及びラミナリンのうち少なくとも９５％は、解重合されていない、
ことを特徴とする請求項１に記載の方法。
【請求項２９】
工程（ｉｉ）の前の前記海藻は、３０℃より高い温度での熱処理、酸処理、又はアルカリ処理により分解されていない、
ことを特徴とする請求項１に記載の方法。
【請求項３０】
前記生きている、収穫された海藻は、前記滲出液の収集後、水リンスに供され、前記水リンスは、逆流リンスを含み、前記フコイダン又はラミナリンは、前記リンスの水から分離される、
ことを特徴とする請求項１に記載の方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、生きている、収穫された海藻の滲出液からフコイダン及びラミナリンのうち少なくとも１つ得るための方法に関する。
【背景技術】
【０００２】
フコイダン及びラミナリンは、ワカメ（ｂｒｏｗｎ  ｓｅａｗｅｅｄ）（褐藻類（ｐｈａｅｏｐｈｙｃｅａｅ））の細胞外マトリックスに存在する、天然のポリサッカライドである。フコイダンは主に、Ｌ−フコース及びエステル硫酸の基を含有し、ガラクトース、グルコース、マンノース、キシロース、及びアラビノースといった他のモノサッカライド；グルクロン酸といったウロン酸；ナトリウム、カリウム、カルシウム及びマグネシウムといったカチオン；並びにタンパク質の含有量は少ない。ラミナリンは、直鎖のグルカンである（すなわち、グルコースに基づくポリサッカライドである）。フコイダンの他の名称は、フコイディン（ｄｕｃｏｉｄｉｎ）、フカン（ｆｕｃａｎ）、フコサン（ｆｕｃｏｓａｎ）及び硫酸化フカン（ｓｕｌｐｈａｔｅｄ  ｆｕｃａｎ））を含み；ラミナリンの他の名称は、ラミナラン（ｌａｍｉｎａｒａｎ）、貯蔵グルカン（ｓｔｏｒａｇｅ  ｇｌｕｃａｎ）及びベータグルカン（ｂｅｔａ  ｇｌｕｃａｎ）を含む。
【０００３】
フコイダンの分子構造は、藻（ａｌｇａｅ）に依存していくらか変わり得る。各々の海藻の種は、独自の個別のフコイダンを含むが、すべてのフコイダンが共通して有する、少なくとも１つの重要な組成上の特徴が存在する；すなわち、主要成分は、Ｌ−フコースと、通常ポリフカン分子骨格上にあるエステル硫酸の残基を有するエステル硫酸である。製造方法に依存して、硫酸化ポリフカン以外の成分にはしばしば、フコイダンが含まれる。このような付加的な成分は、ガラクトース、グルコース、マンノース、キシロース、アラビノース及びラムノースといった中性のモノサッカライド；グルクロン酸といったウロン酸；ナトリウム、カリウム、カルシウム及びマグネシウムといったカチオン；並びにタンパク質を含む。フコイダン分子の分子骨格は、直鎖のα−Ｌ−フコースであるが、全体の構造は、大きく分岐しており、前述の他の成分に加えて、付加的なＬ−フコースを含み得る。エステル硫酸の基は、Ｌ−フコースユニット上にあるが、すべてのＬ−フコースユニットが硫酸化されているわけではなく、これらのエステル硫酸の分布は、種により、地域により、及び季節により変化する。同様に、いくつかのフコイダンは、フコース骨格上で部分的にアセチル化されており、これらのＯ−アセチル基の分布は、種により、地域により、及び季節により変化し得る。
【０００４】
ラミナリンの分子構造は、フコイダンより複雑ではなく、それらは、ほとんど１−３結合を含み、完全に直鎖になるのを遮断するように時折１−６結合を含む。ラミナリンの構造は、種により、地域により、及び季節により変化する。
【０００５】
フコイダン及びラミナリンは、抗凝固剤、抗血栓剤、抗ウイルス剤、抗腫瘍剤、抗補体、免疫調整剤、抗炎症剤、血中脂質低下剤、抗酸化剤、肝障害、尿路疾患及び腎障害に対する活性、消化管保護効果、並びに術中の治療ポテンシャルを含む、生物学的活性に対して広範囲に研究されてきた。
【０００６】
海藻からフコイダンを抽出するための伝統的なプロセスは、滲出液を利用しないが、代わりに、クリティカルであると言われる、複雑な化学的及び機械的抽出工程を含む。例えば、非特許文献１は、適切な量の構造的分類上のフコイダンを得るための、クリティカルな、乾燥された海藻からの化学的及び機械的抽出工程の使用を教示している。
【０００７】
特許文献１は、海藻からフコイダンを得るための、化学的抽出、精製及び分画工程を教示している。例えば、水、希釈された酸又は塩化カルシウム溶液が、海藻に加えられ、その後、水酸化鉛、水酸化アルミニウム、エタノール、第四アンモニウム塩又はカチオン性界面活性剤が加えられて、フコイダンを沈殿させる。粗フコイダンはしばしば、アルギン酸塩、タンパク質、ラミナリン、及び顔料を含む。そのようなものとして、粗フコイダンはさらに、塩化マグネシウムの存在下で熱水及びエタノールで抽出される。
【０００８】
特許文献２は、モズク（ｃｌａｄｏｓｉｐｈｏｎ）の加工していない藻体にエタノールを加え、エタノールを除去し、その後、十分な量の水及び水酸化物を抽出物に加えることを含む、熱水抽出を開示している。熱水抽出の温度は好ましくは、０．５〜２時間で７０〜１００℃である。この工程におけるエタノールの使用により、新鮮な海藻を脱水し、脱色する。エタノールは海藻の構造及び“孔”を堅く締めて滲出を防ぐため、このような工程において滲出は起こらない。熱水は、堅く締められた海藻の構造を壊すことにより、溶液中にフコイダンを放出するのに必要である。
【先行技術文献】
【特許文献】
【０００９】
【特許文献１】米国特許出願公開第２００９／０１７０８１０号明細書
【特許文献２】米国特許出願公開第２００９／０１０５１９０号明細書
【非特許文献】
【００１０】
【非特許文献１】Ｈｏｌｔｃａｍｐ，ｅｔ  ａｌ，ＡＰＰＬ  Ｍｉｃｒｏｂｉｏｌ  Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌ（２００９），８２，１−１１
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【００１１】
純粋な形態での（すなわち、酸処理、アルカリ処理又は熱処理により壊されておらず、解重合されていないフコイダン及びラミナリン）、商業ベースの量のフコイダン及びラミナリンを製造する、海藻からフコイダン及びラミナリンを単離するためのより簡単な工程を使用することが求められている。
【００１２】
本発明は、商業上の製造に適した純度及び収率レベルでの生きている、収穫された海藻の滲出液からフコイダン及びラミナリンを得るため、従来知られ、用いられた著しくより複雑な、コストのかかる化学的抽出方法は、必要ではなく、又は所望されない。
【課題を解決するための手段】
【００１３】
本発明は、生きている、収穫された海藻の滲出液から、商業ベースでの量及び純度のレベルでのフコイダン及びラミナリンを得るための、簡単かつ経済的な方法を提供することが見出される。
【００１４】
より具体的には、本発明は、生きている、収穫された海藻から、フコイダン及びラミナリンのうち少なくとも１つを得るための方法に関し、該方法は、（ｉ）フコイダン及びラミナリンを含有する海藻を収穫して、生きている、収穫された海藻を得る工程、ここで生きている、収穫された海藻は滲出して、滲出液を形成する；（ｉｉ）生きている、収穫された海藻から滲出液を収集する工程、ここで、フコイダン及びラミナリンは、滲出液中に溶解されている；並びに（ｉｉｉ）滲出液からフコイダン及びラミナリンのうち少なくとも１つを分離する工程を含む。
【発明を実施するための形態】
【００１５】
本発明の方法における工程（ｉ）は、フコイダン及びラミナリンを含有する海藻を収穫して、生きている、収穫された海藻を得ることを含み、ここで、生きている、収穫された海藻は滲出して、滲出液を形成する。海藻が工程（ｉ）において収穫され、生きている状態の場合、海藻は、自然の滲出プロセスを経験する。この滲出プロセスは、能動的な生理学的プロセスであり、それにより、植物細胞は、滲出液として、植物体から海藻表面に、内部でフコイダン及びラミナリンを移送する。滲出液は典型的には、フコイダン及びラミナリンや、海水、タンパク質、海塩、及びマンニトールといったいくつかの他のマイナーな低分子量の成分を含有する。この滲出プロセスは、収穫されることに対して反応する、治癒的及び防衛的作用である。液体のゆっくりとした放出（“ｓａｐ”）は、孔を介した管及び細胞膜の裂け目から生じる。滲出の作用は、発汗と似ており、植物においては、孔及び切れ目を介した、水分、ガム、ジュース等の分泌を含み得る。
【００１６】
本明細書において用いられるように、“生きている、収穫された”海藻は、滲出する能力により示唆される、収穫後もいまだ生きている状態の、海洋の底生性の大型藻類（”Ｋｅｌｐ”）を意味する。生きている、収穫された海藻と明確に区別して、乾燥している海藻は、死んでおり、もはや滲出することはできない。滲出することのできる海藻は、呼吸といった生物学的活性をもはや持たない、死んでいる植物とは対照的に、生きて呼吸している植物である。
【００１７】
下記は、本発明において用いられ得るフコイダン及びラミナリンの両方を含む典型的な海藻の種の分類学上のリストである。藻類の綱は、褐藻綱（ｐｈａｅｏｐｈｙｃｅａｅ）である。藻類の目は、コンブ目（Ｌａｍｉｎａｒｉａｌｅｓ）、ヒバマタ目（Ｆｕｃａｌｅｓ）、Ｄｕｒｖｉｌｌａｅａｃｅａｅ、シオミドロ目（Ｅｃｔｏｃａｒｐａｌｅｓ）、アミジグサ目（Ｄｉｃｔｙｏｔａｌｅｓ）、カヤモノリ目（Ｓｃｙｔｏｓｉｐｈｏｎａｌｅｓ）及びウルシグサ目（Ｄｅｓｍａｒｅｓｔｉａｌｅｓ）である。藻類の科は、コンブ科（Ｌａｍｉｎａｒｉａｃｅａｅ）、レッソニア科（Ｌｅｓｓｏｎｉａｃｅａｅ）、チガイソ科（Ａｌａｒｉａｃｅａｅ）、ツルモ科（Ｃｈｏｒｄａｃｅａｅ）、ヒバマタ科（Ｆｕｃａｃｅａｅ）、ホンダワラ科（Ｓａｒｇａｓｓａｃｅａｅ）、Ｈｉｍａｎｔｈａｌｉａｃｅａｅ、ナガマツモ科（Ｃｈｏｒｄａｒｉａｃｅａｅ）、Ａｄｅｎｏｃｙｓｔａｃｅａｅ、アミジグサ科（Ｄｉｃｔｙｏｔａｃｅａｅ）、カヤモノリ科（Ｓｃｙｔｏｓｉｐｈｏｎａｃｅａｅ）、及びウルシモク科（Ｄｅｓｍａｒｅｓｔｉａｃｅａｅ）である。藻類の属は、コンブ属（Ｌａｍｉｎａｒｉａ）、Ｄｕｒｖｉｌｌａｅａ、ネコアシコンブ属（Ａｒｔｈｒｏｔｈａｍｎｕｓ）、マクロシスチス属（Ｍａｃｒｏｃｙｓｔｉｓ）、Ｎｅｒｅｏｃｙｓｔｉｓ、Ｓａｃｃｈａｒｉｎａ、エクロニア属（Ｅｃｋｌｏｎｉａ）、Ｌｅｓｓｏｎｉａ、Ｅｌｓｅｎｉａ、チガイソ属（Ａｌａｒｉａ）、ワカメ属（Ｕｎｄａｒｉａ）、ナガマツモ属（Ｃｈｏｒｄａ）、アスコフィルム属（Ａｓｃｏｐｈｙｌｌｕｍ）、ヒバマタ属（Ｆｕｃｕｓ）、エゾイシゲ属（Ｓｉｌｖｅｔｉａ）、Ｐｅｌｖｅｔｉａ、ホンダワラ属（Ｓａｒｇａｓｓｕｍ）、ヒジキ属（Ｈｉｚｉｋｉａ）、Ｂｉｆｕｒｃａｒｉａ、ヒマンタリア属（Ｈｉｍａｎｔｈａｌｉａ）、オキナワモズク属（Ｃｌａｄｏｓｉｐｈｏｎ）、モズク属（Ｎｅｍａｃｙｓｔｕｓ）、ウイキョウモ属（Ｄｉｃｔｙｏｓｉｐｈｏｎ）、ナガマツモ属（Ｃｈｏｒｄａｒｉａ）、モツキチャソウメン属（Ｓａｕｎｄｅｒｓｅｌｌａ）、Ａｄｅｎｏｃｙｓｔｉｓ、コモングサ属（Ｓｐａｔｏｇｌｏｓｓｕｍ）、アミジグサ属（Ｄｉｃｔｙｏｔａ）、ウミウチワ属（Ｐａｄｉｎａ）、カヤモノリ属（Ｓｃｙｔｏｓｉｐｈｏｎ）、セイヨウハバノリ属（Ｐｅｔａｌｏｎｉａ）及びウルシグサ属（Ｄｅｓｍａｒｅｓｔｉａ）である。藻類の種は、Ｌａｍｉｎａｒｉａ  ｄｉｇｉｔａｔａ、ケルプ（Ｌａｍｉｎａｒｉａ  ｈｙｐｅｒｂｏｒｅａ）、マコンブ（Ｌａｍｉｎａｒｉａ  ｊａｐｏｎｉｃａ）、ミツイシコンブ（Ｌａｍｉｎａｒｉａ  ａｎｇｕｓｔａｔａ）、Ｌａｍｉｎａｒｉａ  ｂｒａｓｉｌｌｉｅｎｓｉｓ、チヂミコンブ（Ｌａｍｉｎａｒｉａ  ｃｉｃｈｏｒｉｏｉｄｅｓ，）  ネコシアコンブ（Ａｒｔｈｒｏｔｈａｍｎｕｓ  ｂｉｆｉｄｕｓ）、オオウキモ（Ｍａｃｒｏｃｙｓｔｉｓ  ｐｙｒｉｆｅｒａ）、ジャイアントケルプ（Ｎｅｒｅｏｃｙｓｔｉｓ  ｌｕｅｔｋｅａｎａ）、Ｓａｃｃｈａｒｉｎａ  ｌｏｎｇｉｃｒｕｒｉｓ  （Ｌａｍｉｎａｒｉａ  ｌｏｎｇｇｉｃｒｕｒｉｓ）、Ｓａｃｃｈａｒｉｎａ  ｓｃｕｌｐｅｒａ  （ガゴメ（Ｋｊｅｌｌｍａｎｉｅｌｌａ  ｃｒａｓｓｉｆｏｌｉａ））、Ｅ���ｋｌｏｎｉａ  ｍａｘｉｍａ、カジメ（Ｅｃｋｌｏｎｉａ  ｃａｖａ）、クロメ（Ｅｃｋｌｏｎｉａ  ｋｕｒｏｍｅ）、Ｌｅｓｓｏｎｉａ  ｎｉｇｒｅｓｃｅｎｓ、Ｌｅｓｓｏｎｉａ  ｖａｄｏｓａ、Ｅｌｓｅｎｓｉａ  ｂｉｃｙｃｌｉｓ、クシロワカメ（Ａｌａｒｉａ  ｍａｒｇｉｎａｔａ）、ワカメ（Ｕｎｄａｒｉａ  ｐｉｎｎａｔｉｆｉｄａ）、ツルモ（Ｃｈｏｒｄａ  ｆｉｌｕｍ）、Ａｓｃｏｐｈｙｌｌｕｍ  ｎｏｄｏｓｕｍ、Ｆｕｃｕｓ  ｖｅｓｉｃｕｌｏｓｕｓ、ヒバマタ（Ｆｕｃｕｓ  ｄｉｓｔｉｃｈｕｓ）、ヒバマタ（Ｆｕｃｕｓ  ｅｖａｎｅｓｃｅｎｓ）、Ｆｕｃｕｓ  ｓｅｒｒａｔｕｓ、Ｆｕｃｕｓ  ｓｐｉｒａｌｉｓ、エゾイシゲ（Ｓｉｌｖｅｔｉａ  ｂａｂｉｎｇｔｏｎｉｉ）、Ｐｅｌｖｅｔｉａ  ｃａｎａｌｉｃｕｌａｔａ、ヒジキ（Ｓａｒｇａｓｓｕｍ  ｆｕｓｉｆｏｒｍｅ）、アカモク（Ｓａｒｇａｓｓｕｍ  ｈｏｒｎｅｒｉ）、タマハハキモク（Ｓａｒｇａｓｓｕｍ  ｍｕｔｉｃｕｍ）、Ｓａｒｇａｓｓｕｍ  ｓｔｅｎｏｐｈｙｌｌｕｍ、ヒジキ（Ｈｉｚｉｋｉａ  ｆｕｓｉｆｏｒｍｉｓ）  （Ｈｉｚｉｋｉａ  ｆｕｓｉｆｏｒｍｅ）、Ｂｉｆｕｒｃａｒｉａ  ｂｉｆｕｒｃａｔａ、Ｈｉｍａｎｔｈａｌｉａ  ｅｌｏｎｇａｔａ  （Ｈｉｍａｎｔｈａｌｉａ  ｌｏｒｅａ）、オキナワモズク（Ｃｌａｄｏｓｉｐｈｏｎ  ｏｋａｍｕｒａｎｕｓ）、Ｎｅｍａｃｙｓｔｕｓ  ｄｅｃｉｐｉｅｎｓ、ウイキョウモ（Ｄｉｃｔｙｏｓｉｐｈｏｎ  ｆｏｅｎｉｃｕｌａｃｅｕｓ）、ナガマツモ（Ｃｈｏｒｄａｒｉａ  ｆｌａｇｅｌｌｉｆｏｒｍｉｓ）、Ｃｈｏｒｄａｒｉａ  ｇｒａｃｉｌｉｓ、モツキチャソウメン（Ｓａｕｎｄｅｒｓｅｌｌａ  ｓｉｍｐｌｅｘ）、Ａｄｅｎｏｃｙｓｔｉｓ  ｕｔｒｉｃｕｌａｒｉｓ、Ｓｐａｔｏｇｌｏｓｓｕｍ  ｓｃｈｒｏｅｄｅｒｉ、アミジグサ（Ｄｉｃｔｙｏｔａ  ｄｉｃｈｏｔｏｍａ）、Ｄｉｃｔｙｏｔａ  ｍｅｎｓｔｒｕａｌｉｓ、Ｐａｄｉｎａ  ｐａｖｏｎｉｃａ、カヤモノリ（Ｓｃｙｔｏｓｉｐｈｏｎ  ｌｏｍｅｎｔａｒｉａ）、セイヨウハバノリ（Ｐｅｔａｌｏｎｉａ  ｆａｓｃｉａ）、Ｄｕｒｖｉｌｌａｅａ  ａｎｔａｒｔｉｃａ、Ｄｕｒｖｉｌｌａｅａ  ｐｏｔａｔｏｒｕｍ及びＤｅｓｍａｒｅｓｔｉａ  ｉｎｔｅｒｍｅｄｉａである。
【００１８】
該方法の工程（ｉｉ）において滲出液を収集する前に、海藻を分解してそれにより滲出プロセスを妨げる又は完全に終結させる処理に海藻をさらさないことが望ましい。このような望ましくないプロセスは、３０℃を越える熱処理、酸処理又はアルカリ処理を含む。好ましくは、工程（ｉｉ）の前に、海藻は、０℃、２℃及び３℃を越え、３０℃、２５℃、２４℃、２３℃、２２℃、２１℃及び２０℃未満の温度で維持される。
【００１９】
さらに、滲出液中のフコイダン及びラミナリンの収率を向上させるために、海藻の乾燥を促進させない条件といった、所望される限り進行する滲出プロセスに理想的な条件において、工程（ｉｉ）の前、海藻を維持することが好ましい。理想的な条件は、海藻が一緒に積まれた領域を日陰にすることを含む。
【００２０】
本発明の方法における工程（ｉｉ）は、生きている、収穫された海藻から滲出液を収集する。フコイダン及びラミナリンは、滲出液に溶解している。結果として、フコイダン及びラミナリンは、滲出液から、本発明の方法において得られる。滲出液を収集するいかなる方法も、本発明において用いられ得る。滲出液は、滲出が始まった後、いつでも収集され得る。
【００２１】
（工程（ｉｉ）の収集前の）滲出の典型的な時間は、種、収穫の季節、滲出温度及び湿潤条件により変化する。概して、滲出の時間は、１２時間から植物が死ぬまでであり、１２時間より長く、１日間より長く、及び２日間より長く、にすることができる。滲出の典型的な時間は、１２時間から３週間、１日間から２週間、１日間から１週間、１日間から５日間、１日間から４日間、２日間から３週間、２日間から２週間、２日間から１週間、２日間から５日間、及び２日間から４日間であり得る。
【００２２】
工程（ｉｉ）における滲出液の収集前に、本発明の生きている、収穫された海藻は、海藻がまだ生きていて、滲出することができる場合には、全体でもよく、カット又は機械的に処理されていてもよい。例えば、５ｍｍ未満のサイズにカットされた海藻は、滲出プロセスに悪影響を与える。結果として、海藻を挽いたり粉砕することは望ましくないが、１ｃｍ以上のサイズの片に海藻をカットすることが望ましい。滲出液が収集されると、本発明の抽出プロセスは、自然のプロセスであるため、残された海藻は、依然として、植物学及び分類学上の海藻として認識される。
【００２３】
滲出液が収集されると、フコイダン及びラミナリンのうち少なくとも１つが、工程（ｉｉｉ）における滲出液から分離される。滲出液からのフコイダン及びラミナリンの分離は、いかなる公知の分離技術を用いても行われ得る。例えば、滲出液は、固体の破片を含み得るため、第一のろ過工程は、滲出液から固体の破片を分離及び取り除くために行われ得る（しかし、必ずしも必要とされない）。
【００２４】
滲出液からのフコイダン及びラミナリンの分離は、アルコール沈殿により行われてもよい（例えば、アルコール：フコイダン及びラミナリンの溶液＝約２：１）。フコイダンがまず分離され、溶液からろ過され得る。ラミナリンは、長時間にわたって滲出液／アルコール溶液に残り、固まった後に取り除かれ得る。イソプロピルアルコールは、フコイダン及びラミナリンの両方を沈殿させるように用いられ得るアルコールの一例である。
【００２５】
滲出液からフコイダン及びラミナリンの両方を分離するために用いられ得る他の技術は、限外ろ過である。限外ろ過は、成分のサイズ及び分子量に基づき、滲出液中の種々の成分を分離する。フコイダン及びラミナリンの分子量は、海藻の種及び収穫の季節に依存して変化し得る。結果として、限外ろ過及び分離に対して選択される膜の分画分子量（“ＭＷＣＯ”）は、使われる海藻中のフコイダン及びラミナリンの分子量及び両者間の所望の分離レベルに依存する。
【００２６】
例えば、ラミナリンは典型的には、フコイダンよりも低い分子量を有する。海藻中のフコイダン及びラミナリンの分子量に依存して、必要に応じてラミナリンからフコイダンを分離するように、少なくとも１０ｋＤａ、２０ｋＤａ、３０ｋＤａ、５０ｋＤａ、８０ｋＤａ、１００ｋＤａ又は０．１μのＭＷＣＯが用いられ得る。このような分離により、フコイダンは濃縮液で見出され、ラミナリンはろ液で見出される。どの点についても、滲出液はまた、低分子量の成分からフコイダン及び／又はラミナリンを分離するように、例えば１ｋＤａ又はそれ未満のＭＷＣＯといった、適切なＭＷＣＯを用いてナノろ過され得る。限外ろ過後、フコイダン及びラミナリンは透析され、噴霧乾燥、ドラム乾燥又は凍結乾燥といった伝統的な手法により乾燥され得る。
【００２７】
フコイダン及びラミナリンは、必要に応じて又は所望に応じて、任意の順番で滲出液から分離され得る。
【００２８】
本発明において得られたフコイダン及びラミナリンは、フコイダン及びラミナリンを分解（及び解重合）する化学抽出及び熱分解技術を利用する伝統的なプロセスとは明確に区別して、植物中に存在する“天然の”フコイダン及びラミナリン（すなわち、解重合されていないフコイダン及びラミナリン）であることが見出された。例えば、海藻の予期できない少量のアルギン酸塩、顔料、ポリフェノール類、プロテアーゼ、酸及び他の成分が、従来の化学的及び機械的な抽出技術とは対照的に、本発明より得られたフコイダン及びラミナリン中に見られる。したがって、本発明の工程（ｉｉｉ）で得られたフコイダン及びラミナリンの少なくとも９０％、９５％、９８％、９９％又は１００％は、解重合されていない。
【００２９】
滲出液をろ過及び乾燥して滲出液からフコイダンを分離した後、フコイダンを含有する粉末が得られる。この粉末は概して、Ｍａｒｉｎｏｖａ法で測定した場合、約７０−９０ｗｔ％のフコイダン、より典型的には、約７３−８５ｗｔ％のフコイダンを含む。例えば、ケルプ（Ｌａｍｉｎａｒｉａ  ｈｙｐｅｒｂｏｒｅａ）由来の乾燥粉末中に見出されるフコイダンの量は、タンパク質、無機塩及び水を含むバランスで、７４−８５ｗｔ％の量で見出される。
【００３０】
本発明において収集され得る、生きている、収穫された海藻１トンあたりの滲出液の量（リットル）は、３０リットル／トン、４０リットル／トン、５０リットル／トン及び５５リットル／トンより多い。より具体的には、生きている、収穫された海藻１トンあたり、全量で３０−１１０リットル、４０−１１０リットル、５０−１１０リットル及び５５−１１０リットルの滲出液が、本発明の滲出プロセスにおいて収集され得る。
【００３１】
フコイダンは、本発明の滲出液から、滲出液中２ｇ／Ｌ、好ましくは、滲出液中４ｇ／Ｌ、滲出液中６ｇ／Ｌ、滲出液中１０ｇ／Ｌ、滲出液中１５ｇ／Ｌ、滲出液中２０ｇ／Ｌ、滲出液中２５ｇ／Ｌより多い量で得られ得る。いくつかの実施態様において、フコイダンの収率は、滲出液中２ｇ−３５ｇ／Ｌのフコイダン、より好ましくは滲出液中４ｇ−３５ｇ／Ｌ、滲出液中６ｇ−３５ｇ／Ｌ、滲出液中１０ｇ−３５ｇ／Ｌ及び滲出液中１５ｇ−３５ｇ／Ｌである。いくつかの実施態様において、本発明の滲出プロセスにおいて海藻から得られるフコイダンの量は、生きている、収穫された海藻中６０ｇ／トン、より具体的には、生きている、収穫された海藻中８０ｇ／トン；生きている、収穫された海藻中１００ｇ／トン；生きている、収穫された海藻中１２０ｇ／トン；生きている、収穫された海藻中１５０ｇ／トン；生きている、収穫された海藻中１８０ｇ／トン；生きている、収穫された海藻中２２０ｇ／トン；生きている、収穫された海藻中３００ｇ／トン；生きている、収穫された海藻中４００ｇ／トン；生きている、収穫された海藻中５００ｇ／トン；生きている、収穫された海藻中６００ｇ／トン；及び生きている、収穫された海藻中７００ｇ／トンより多い。例えば、本発明において得られるフコイダンの量は、生きている、収穫された海藻中６０−３，８５０ｇ／トンのフコイダン、より具体的には、生きている、収穫された海藻中２２０−１，０５０ｇ／トンのフコイダン；並びにケルプ（Ｌａｍｉｎａｒｉａ  Ｈｙｐｅｒｂｏｒｅａ）の滲出液からのフコイダンは、生きている、収穫されたケルプ（Ｌａｍｉｎａｒｉａ  Ｈｙｐｅｒｂｏｒｅａ）中４００ｇ／トン、生きている、収穫されたケルプ（Ｌａｍｉｎａｒｉａ  Ｈｙｐｅｒｂｏｒｅａ）中５００ｇ／トン、及び生きている、収穫されたケルプ（Ｌａｍｉｎａｒｉａ  Ｈｙｐｅｒｂｏｒｅａ）中６００ｇ／トンより多い量で得られ得る。
【００３２】
本発明における滲出液から得られるラミナリンは概して、滲出液中０．０１ｇ／Ｌ、滲出液中０．１ｇ／Ｌ、滲出液中０．５ｇ／Ｌ、滲出液中１ｇ／Ｌ、滲出液中２ｇ／Ｌ、滲出液中４ｇ／Ｌ、滲出液中６ｇ／Ｌ、滲出液中８ｇ／Ｌ、滲出液中１０ｇ／Ｌ、滲出液中１５ｇ／Ｌ、及び滲出液中２０ｇ／Ｌより多いラミナリンの量で存在する。いくつかの実施態様において、ラミナリンは、滲出液中０．０１ｇ−３０ｇ／Ｌ、滲出液中０．１ｇ−３０ｇ／Ｌ、滲出液中０．５ｇ−３０ｇ／Ｌ、滲出液中１ｇ−３０ｇ／Ｌ、滲出液中２ｇ−３０ｇ／Ｌ、及び滲出液中４ｇ−３０ｇ／Ｌの量で滲出液から得られる。いくつかの実施態様において、本発明の滲出プロセスにおいて海藻から得られるラミナリンの量は、生きている、収穫された海藻中０．３ｇ／トン；生きている、収穫された海藻中３ｇ／トン；生きている、収穫された海藻中１５ｇ／トン；生きている、収穫された海藻中３０ｇ／トン；生きている、収穫された海藻中６０ｇ／トン；生きている、収穫された海藻中１２０ｇ／トン；生きている、収穫された海藻中１８０ｇ／トン；生きている、収穫された海藻中２４０ｇ／トン；生きている、収穫された海藻中３００ｇ／トン；及び生きている、収穫された海藻中５００ｇ／トンより多い。より具体的には、ラミナリンは、生きている、収穫された海藻中０．３ｇ−３，３００ｇ／トン、より具体的には、生きている、収穫された海藻中１１ｇ−９００ｇ／トンの量で得られ得る。
【００３３】
いくつかの状況において、生きている、収穫された海藻からの滲出液は、相対的に粘着性があり、生きている、収穫された海藻は、通常の状況においてよりもゆっくりと滲出する可能性があり、このような状況は最終収率に影響を与える可能性がある。このような状況において、滲出プロセスの効率を高め、それによりフコイダン及びラミナリンの収率を上げるために、生きている、新鮮な海藻を、（典型的には、滲出溶液の最初の収集後）少なくとも１回、２回又は３回、水でリンスすることができ、この水リンスを、バッチ又は逆流リンスシステムで行うことができる。有用な逆流リンスシステムは、海藻とリンス水が互いに逆方向に動いているものである。リンス水は、付加的な滲出物を有し、工程（ｉｉ）（ただし工程（ｉｉｉ）の前）において収集された滲出液に加えられ得、又はフコイダン若しくはラミナリンは、リンス水から直接的に分離され得る。リンスの温度は、＜１００℃、好ましくは、＜３０℃であり得る（熱による分解を回避するため）。
【００３４】
滲出物の収率はさらに、種々の機械的手段により滲出している海藻を押す又は絞ることで向上され得る。
【００３５】
防腐剤が、バクテリア及び微生物の含量を減らし、それにより滲出プロセスを支援するように、滲出プロセスの間、海藻に加えられ得る。海藻に防腐剤が加えられる場合、防腐剤は、海藻中１ｗｔ％までの量で用いられ得るが、より高い量が望まれ得る。防腐剤はまた、滲出液中０．５ｗｔ％までの量で滲出液に加えられ得る。防腐剤は典型的には、抗菌剤である。好ましい防腐剤の一つは、ホルムアルデヒドである。
【００３６】
本発明で得られたフコイダンは、栄養補助食品（ｄｉｅｔａｒｙ  ｓｕｐｐｌｅｍｅｎｔｓ）又は“栄養補給食品（ｎｕｔｒｉｃｅｕｔｉｃａｌｓ）”、化粧用サプリメント又は“美容食品（ｃｏｓｍｅｃｅｙｔｉｃａｌ）”、軟膏といった外から塗布する医薬適用、ステントといった植え込み型装置の補助具、及び機能性食品を含む、種々の製品において有用である。
【００３７】
本発明において得られるラミナリンは、栄養補助食品（ｄｉｅｔａｒｙ  ｓｕｐｐｌｅｍｅｎｔｓ）又は“栄養補給食品（ｎｕｔｒｉｃｅｕｔｉｃａｌｓ）”、化粧用サプリメント又は“美容食品（ｃｏｓｍｅｃｅｙｔｉｃａｌ）”、軟膏といった外から塗布する医薬適用、及び機能性食品を含む、種々の製品において有用である。
【００３８】
本発明は、下記の実施例を参照することにより詳細に記載されるが、本発明がそれに限定されるように解釈されないと理解されるべきである。本明細書において他に示唆されない限り、全ての部、パーセント、比率及び同様物は、重量によるものである。
【実施例】
【００３９】
（実施例１）
生きている、新鮮な収穫されたケルプ（Ｌａｍｉｎａｒｉａ  ｈｙｐｅｒｂｏｒｅａ）を収集し、およそ１０ｃｍ片にカットした。収穫された又はカットされた海藻には水を加えず、気温にて維持した。生きている、新鮮な収穫された海藻（収穫の間海藻に付いた海水量のみ含む）を３０℃未満の温度で滲出させ、約３日後には、海藻中滲出液が約６０リットル／トン収集された。
【００４０】
９５０リットルの滲出液をその後取り分けておき、１リットルの滲出液を、アルコール沈殿を用いて滲出液における最初のフコイダン収率を決定するために用いた。滲出液は、１１．７ｃｐｓの粘度（室温で、６０ｒｐｍ、ＬＶアダプター、スピンドル６１で、Ｂｒｏｏｋｆｉｅｌｄ  Ｖｉｓｃｏｍｅｔｅｒを用いた）、ｐＨ５．７５、ＴＢＵ（濁り単位）６０ＮＴＵ、及び４．４％の乾燥物（１０５℃で一晩乾燥させた後測定した）を有することが確認された。滲出液を室温でかき混ぜながらイソプロピルアルコールに加え（滲出液：イソプロピルアルコール＝１：２）、フコイダンを長い繊維中に沈殿させ、フコイダンを８０メッシュにて収集し、乾燥させ、圧縮して、一晩凍結乾燥させ（１０５℃）、収率を測定した。１リットルの滲出液サンプル中のフコイダンの収率は、約１６．４ｇフコイダン／Ｌ（滲出液）であった。
【００４１】
前述の通りアルコール沈殿を用いて滲出液中のフコイダンの収率を測定した後、ろ過助剤の援助（重さ２２．５Ｋｇの熱した石）のもと、残りの滲出液（約９４９リットル）を、２回のサイクルで、Ｐｌａｔｅ＆Ｆｒａｍｅ  ｐｒｅｓｓｕｒｅ  ｆｉｌｔｅｒによりろ過して（約５００リットル／サイクル；各々１時間）、海藻から大きな固体の破片を取り除いた。ろ液は、４．４ｃｐｓの粘度（室温で、６０ｒｐｍ、ＬＶアダプター、スピンドル００によるＢｒｏｏｋｆｉｅｌｄ  ＬＶ  Ｖｉｓｃｏｍｅｔｅｒ）、ＴＢＵ  ４６  ＮＴＵ、及び１２．２ｇフコイダン／Ｌ（ろ液）の濃度を有していた。防腐剤（ホルマリン）をその後加え（ろ液中０．３重量％）、ろ液を約０℃で１９日間保存した。ろ液をその後、１０ｋＤａのＭＷＣＯを用いて（Ｐｒｏｓｔａｋ  ｓｙｓｔｅｍ（Ｍｉｌｌｉｐｏｒｅ））、限外ろ過し、濃縮した。限外ろ過及び（容量を約５分の１に）濃縮後、溶液を同重量部の水で各３回透析した。最後に、濃縮液を、空気中２３５℃の入口及び空気中約１００℃の出口の高圧ノズルを用いて、並流噴射で噴霧乾燥させた。噴霧乾燥後、フコイダンを含む茶色の粉末が得られた。茶色の粉末は、１％水溶液にて７．３ｃｐｓの粘度（室温で、６０ｒｐｍ、ＬＶアダプター、スピンドル００を有するＢｒｏｏｋｆｉｅｌｄ  ＬＶ  Ｖｉｓｃｏｍｅｔｅｒ）、及びｐＨ６．８９のｐＨを有していた。乾燥粉末中の水分は、６．８４％であった。収率は、約９５０リットルの滲出液から７．３ｋｇの粉末であった。この粉末の約８５ｗｔ％がフコイダンであり、約７ｗｔ％が水分、２ｗｔ％が塩、及び４ｗｔ％がタンパク質であった。
【００４２】
（実施例２）
生きている、新鮮な収穫されたケルプ（Ｌａｍｉｎａｒｉａ  ｈｙｐｅｒｂｏｒｅａ）を、船上で、およそ１−２０ｃｍ片にカットした。船の底から収集した滲出液を、容器に汲み上げた。収穫された又はカットされた海藻には水を加えず、３０℃未満に維持した。生きている、新鮮な収穫された海藻（収穫の間海藻に付いた海水量のみ含む）を３０℃未満の温度で滲出させ、約７日後には、約１，６５０リットルの滲出液が収集された。０．３％ホルマリンを、保存のためにこの滲出液に加えた。滲出液（１００ｍＬ）の一部を、アルコール沈殿させ（イソプロピルアルコール：滲出液＝２：１）、２．６ｇ／Ｌのフコイダン含量の滲出液を得た。１０５℃で一晩乾燥後の滲出液の乾燥物は、５．７％であった。
【００４３】
前述の通りアルコール沈殿を用いて滲出液におけるフコイダンの収率を測定した後、残っている滲出液（アルコール沈殿に用いた１００ｍＬを差し引いた約１，６５０リットル）を、ろ過助剤の援助（重さ２２．５Ｋｇの熱した石）のもと、３回のサイクルで、Ｐｌａｔｅ＆Ｆｒａｍｅ  ｐｒｅｓｓｕｒｅ  ｆｉｌｔｅｒによりろ過して（約５００リットル／サイクル；各々１時間）、海藻から大きな固体の破片を取り除いた。ろ液をその後、約２−７℃で１日間保存した。限外ろ過を向上させるために、溶液をチューブ熱交換器で約６５℃に加熱した。保存時間は、熱交換器により約２分間とした。溶液をその後、１００ｋＤａのＭＷＣＯを用いて（Ａｌｆａ  Ｌａｖａｌからのらせん状の膜）濃縮した。限外ろ過後、溶液を同重量部の水で各３回透析した。最後に、濃縮液を、空気中２３８℃の入口及び空気中約１０５℃の出口の高圧ノズル１８０バーを用いて、並流噴射で噴霧乾燥させた。粉末の収率は、約５．２８ｋｇ／１，６５０リットル（滲出液）であった。乾燥粉末は、１％水溶液にて２６．０ｃｐｓの粘度（室温で、６０ｒｐｍ、ＬＶアダプター、スピンドル００を有するＢｒｏｏｋｆｉｅｌｄ  ＬＶ  Ｖｉｓｃｏｍｅｔｅｒ）、及びｐＨ６．８９のｐＨを有していた。乾燥粉末中の水分は、４．４０％であった。この粉末の約８５ｗｔ％がフコイダンであり、約６ｗｔ％がタンパク質であった。
【００４４】
（実施例３）
生きている、新鮮な収穫されたケルプ（Ｌａｍｉｎａｒｉａ  ｈｙｐｅｒｂｏｒｅａ）を、およそ１０ｃｍの海藻片にカットした。海藻に水を加えず、海藻は気温にて維持した。生きている、新鮮な収穫された海藻を室温で滲出させ、約３日後には、約９，０００リットルの滲出液が収集された。９，０００リットルの滲出液をその後、Ｐｌａｔｅ＆Ｆｒａｍｅ  ｐｒｅｓｓｕｒｅ  ｆｉｌｔｅｒによりろ過して、海藻から大きな固体の破片を取り除き、加熱及び吸引により容量を４，０００リットルに減らした。
【００４５】
１０ｍＬの容量低減させたろ液を、その後分析した結果、ｐＨ６のｐＨ、３−４％の乾燥物、及び４−５のＢｒｉｘ単位を有していた。２００ｍＬの容量低減させたろ液を、その後、実施例１に記載の通り、アルコール沈殿（イソプロピルアルコールを用いた）に供し、ろ液からフコイダンを取り除いた。アルコール沈殿及びフコイダンの除去後、ろ液を一晩置いた。ラミナリンをろ液から沈殿させ、ろ過により回収した。ラミナリンは、０．０４４ｇ／Ｌ（滲出液）に対応して、０．１ｇ（ラミナリン）／１（ろ液）（ろ液中のアルコールの量は含まない）の量でろ液より得られた。
【００４６】
別途、４，０００リットルの容量低減されたろ液（Ｐｌａｔｅ＆Ｆｒａｍｅ  ｐｒｅｓｓｕｒｅ  ｆｉｌｔｅｒによるろ過の前述の工程後に得られた）からの約１，０００リットルを、２０ｋＤａのＭＷＣＯのらせん状膜を用いた限外ろ過に供し、滲出液からフコイダンを分離し、ろ液（ラミナリンを含む）を収集して、８６０リットルのろ液を得た。このろ液１Ｌをその後分析し、１．２２ｃｐｓの粘度（室温で、６０ｒｐｍ、ＬＶアダプター、スピンドル００で、Ｂｒｏｏｋｆｉｅｌｄ  ＬＶ  Ｖｉｓｃｏｍｅｔｅｒ）及び４．８５％の乾燥物を有することを確認した。その後、ろ液は、２．１６ｇラミナリン／Ｌ（ろ液）のラミナリン含量を有することが確認された（アルコール：ろ液＝２：１で一晩のアルコール沈殿を用いた（１００ｍＬのろ液が用いられた））。ろ液を１ｋＤａのＭＷＣＯのらせん状膜を用いて６．１倍に濃縮して１４０リットルとし（１３−１４ｇのラミナリン／リットル（濃縮液）の濃度を有する）、その後、１ｋＤａのＭＷＣＯのらせん状膜を用いて６００Ｌの水で透析した。透析後のろ液の最終伝導率は、３５８ミクロンシーメンスであった。濃縮液は６５リットルに濃縮され、２２ｇラミナリン／リットル（濃縮液）及び１．３０ｃｐｓの粘度（室温で、６０ｒｐｍ、ＬＶアダプター、スピンドル００で、Ｂｒｏｏｋｆｉｅｌｄ  ＬＶ  Ｖｉｓｃｏｍｅｔｅｒ）を有していた。濃縮液の約５５リットルはその後噴霧乾燥され、３．４５ｗｔ％の乾燥物を有することが確認された。噴霧乾燥の条件は、１ｍｍノズル、１．５ｋｐ／ｃｍ２、空気温度は入口で１４７−１７７℃、出口で約１００−１０６℃であった。収率は、約１．３ｋｇラミナリン（８６０リットルの容量低減されたろ液から得られた）であった。
【００４７】
本発明は、詳細に、特定の実施態様を参照して記載されたが、種々の変更及び修正が本発明の精神及び範囲から逸脱することなくなされ得ることが当業者にとって明白である。
【国際調査報告】
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