(57)【要約】  本発明は、単独治療または他のがん治療と組み合わせたポリマー結合インターフェロンβの使用方法に関する。【選択図】  なし【特許請求の範囲】
【請求項１】
対象におけるメラノーマの治療方法であって、
メラノーマと診断される対象を特定し、
Ｒａｓ−Ｒａｆ−ＭＥＫ−ＥＲＫ経路におけるプロテインキナーゼの阻害剤を前記対象に投与し、
該対象にインターフェロンβを投与する前記方法。
【請求項２】
前記阻害剤は、ＭＥＫ阻害剤である請求項１に記載の方法。
【請求項３】
前記阻害剤は、Ｎ−［（２Ｒ）−２，３−ジヒドロキシプロポキシ］−３，４−ジフルオロ−２−［（２−フルオロ−４−ヨード−フェニル）アミノ］ベンズアミドである請求項１に記載の方法。
【請求項４】
前記インターフェロンβは、インターフェロンβ１ａである請求項１に記載の方法。
【請求項５】
前記インターフェロンβ１ａは、ペグ化インターフェロンβ１ａである請求項４に記載の方法。
【請求項６】
前記インターフェロンβは、インターフェロンβ１ｂである請求項１に記載の方法。
【請求項７】
前記インターフェロンβ１ａは、ペグ化インターフェロンβ１ｂである請求項６に記載の方法。
【請求項８】
対象におけるメラノーマの治療方法であって、
メラノーマと診断される対象を特定し、
アルキル化薬を前記対象に投与し、
該対象にインターフェロンβを投与する前記方法。
【請求項９】
前記アルキル化薬は、４−メチル−５−オキソ−２，３，４，６，８−ペンタザビシクロ［４．３．０］ノナ−２，７，９−トリエン−９−カルボキサミドである請求項８に記載の方法。
【請求項１０】
前記インターフェロンβは、インターフェロンβ１ａである請求項８に記載の方法。
【請求項１１】
前記インターフェロンβ１ａは、ペグ化インターフェロンβ１ａである請求項１０に記載の方法。
【請求項１２】
前記インターフェロンβは、インターフェロンβ１ｂである請求項８に記載の方法。
【請求項１３】
前記インターフェロンβ１ａは、ペグ化インターフェロンβ１ｂである請求項１２に記載の方法。
【請求項１４】
対象における腎細胞癌の治療方法であって、
腎細胞癌と診断される対象を特定し、
抗ＶＥＧＦ抗体を前記対象に投与し、
該対象にインターフェロンβを投与する前記方法。
【請求項１５】
前記抗ＶＥＧＦ抗体は、ヒト化モノクローナル抗ＶＥＧＦ−Ａ抗体である請求項１４に記載の方法。
【請求項１６】
前記インターフェロンβは、インターフェロンβ１ａである請求項１４に記載の方法。
【請求項１７】
前記インターフェロンβ１ａは、ペグ化インターフェロンβ１ａである請求項１４に記載の方法。
【請求項１８】
前記インターフェロンβは、インターフェロンβ１ｂである請求項１４に記載の方法。
【請求項１９】
前記インターフェロンβ１ａは、ペグ化インターフェロンβ１ｂである請求項１８に記載の方法。
【請求項２０】
対象における腎細胞癌の治療方法であって、
腎細胞癌と診断される対象を特定し、
ｍＴＯＲ阻害剤を前記対象に投与し、
該対象にインターフェロンβを投与する前記方法。
【請求項２１】
前記ｍＴＯＲ阻害剤は、テムシロリムスである請求項２０に記載の方法。
【請求項２２】
前記インターフェロンβは、インターフェロンβ１ａである請求項２０に記載の方法。
【請求項２３】
前記インターフェロンβ１ａは、ペグ化インターフェロンβ１ａである請求項２２に記載の方法。
【請求項２４】
前記インターフェロンβは、インターフェロンβ１ｂである請求項２０に記載の方法。
【請求項２５】
前記インターフェロンβ１ａは、ペグ化インターフェロンβ１ｂである請求項２４に記載の方法。
【請求項２６】
対象における腎細胞癌の治療方法であって、
腎細胞癌と診断される対象を特定し、
Ｒａｆ−１阻害剤を前記対象に投与し、
該対象にインターフェロンβを投与する前記方法。
【請求項２７】
前記Ｒａｆ−１阻害剤は、４−［４−［［４−クロロ−３−（トリフルオロメチル）フェニル］カルバモイルアミノ］フェノキシ］−Ｎ−メチル−ピリジン−２−カルボキシアミドである請求項２６に記載の方法。
【請求項２８】
前記インターフェロンβは、インターフェロンβ１ａである請求項２６に記載の方法。
【請求項２９】
前記インターフェロンβ１ａは、ペグ化インターフェロンβ１ａである請求項２８に記載の方法。
【請求項３０】
前記インターフェロンβは、インターフェロンβ１ｂである請求項２６に記載の方法。
【請求項３１】
前記インターフェロンβ１ａは、ペグ化インターフェロンβ１ｂである請求項３０に記載の方法。
【請求項３２】
対象における結腸癌の治療方法であって、
結腸癌と診断される対象を特定し、
抗ＶＥＧＦ抗体を前記対象に投与し、
該対象にインターフェロンβを投与する前記方法。
【請求項３３】
前記抗ＶＥＧＦ抗体は、ヒト化モノクローナル抗ＶＥＧＦ−Ａ抗体である請求項３２に記載の方法。
【請求項３４】
前記インターフェロンβは、インターフェロンβ１ａである請求項３２に記載の方法。
【請求項３５】
前記インターフェロンβ１ａは、ペグ化インターフェロンβ１ａである請求項３４に記載の方法。
【請求項３６】
前記インターフェロンβは、インターフェロンβ１ｂである請求項３２に記載の方法。
【請求項３７】
前記インターフェロンβ１ａは、ペグ化インターフェロンβ１ｂである請求項３６に記載の方法。
【請求項３８】
対象における乳癌の治療方法であって、
乳癌と診断される対象を特定し、
有糸分裂阻害剤を前記対象に投与し、
該対象にインターフェロンβを投与する前記方法。
【請求項３９】
前記有糸分裂阻害剤は、パクリタキセルである請求項３８に記載の方法。
【請求項４０】
前記インターフェロンβは、インターフェロンβ１ａである請求項３８に記載の方法。
【請求項４１】
前記インターフェロンβ１ａは、ペグ化インターフェロンβ１ａである請求項４０に記載の方法。
【請求項４２】
前記インターフェロンβは、インターフェロンβ１ｂである請求項３８に記載の方法。
【請求項４３】
前記インターフェロンβ１ａは、ペグ化インターフェロンβ１ｂである請求項４２に記載の方法。
【請求項４４】
対象における乳癌の治療方法であって、
乳癌と診断される対象を特定し、
該対象にインターフェロンβを投与する前記方法。
【請求項４５】
前記インターフェロンβは、インターフェロンβ１ａである請求項４４に記載の方法。
【請求項４６】
前記インターフェロンβ１ａは、ペグ化インターフェロンβ１ａである請求項４５に記載の方法。
【請求項４７】
前記インターフェロンβは、インターフェロンβ１ｂである請求項４４に記載の方法。
【請求項４８】
前記インターフェロンβ１ａは、ペグ化インターフェロンβ１ｂである請求項４７に記載の方法。
【請求項４９】
対象におけるメラノーマの治療方法であって、
メラノーマと診断される対象を特定し、
該対象にインターフェロンβを投与する前記方法。
【請求項５０】
前記インターフェロンβは、インターフェロンβ１ａである請求項４９に記載の方法。
【請求項５１】
前記インターフェロンβ１ａは、ペグ化インターフェロンβ１ａである請求項５０に記載の方法。
【請求項５２】
前記インターフェロンβは、インターフェロンβ１ｂである請求項４９に記載の方法。
【請求項５３】
前記インターフェロンβ１ａは、ペグ化インターフェロンβ１ｂである請求項５２に記載の方法。
【請求項５４】
対象における腎細胞癌の治療方法であって、
腎細胞癌と診断される対象を特定し、
該対象にインターフェロンβを投与する前記方法。
【請求項５５】
前記インターフェロンβは、インターフェロンβ１ａである請求項５４に記載の方法。
【請求項５６】
前記インターフェロンβ１ａは、ペグ化インターフェロンβ１ａである請求項５５に記載の方法。
【請求項５７】
前記インターフェロンβは、インターフェロンβ１ｂである請求項５４に記載の方法。
【請求項５８】
対象における結腸癌の治療方法であって、
結腸癌と診断される対象を特定し、
該対象にインターフェロンβを投与する前記方法。
【請求項５９】
前記インターフェロンβは、インターフェロンβ１ａである請求項５８に記載の方法。
【請求項６０】
前記インターフェロンβ１ａは、ペグ化インターフェロンβ１ａである請求項５９に記載の方法。
【請求項６１】
前記インターフェロンβは、インターフェロンβ１ｂである請求項５８に記載の方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
優先権の主張
本出願に係る請求項は、２０１０年１０月１日に提出した米国仮出願第６１／３８９，００９号に基づく優先権を享受するものであり、該仮出願は、参照によりその全体が本明細書に取り込まれる。
【０００２】
本発明は、単独治療または他のがん治療と組み合わせたポリマー結合インターフェロンβの使用方法に関する。
【背景技術】
【０００３】
ヒトでは、増加した細胞代謝および増殖率、血管形成の刺激による腫瘍への血液供給の増加、並びに、シグナル経路および腫瘍抑制の調節異常を含むがこれらに限定されない多くのメカニズムによる主要な遺伝子事象後に、がんが形成される。さらに、細胞からの薬物の排出、ターゲットに対する薬物の結合を妨げる変異の発生、並びに、遺伝子のさらなる変異および薬物のターゲットに関係のないそれらのタンパク生成物の発生、を含むがこれらに限定されない多くのメカニズムによる抗がん剤に対する耐性を、腫瘍は有するかもしれない。がん治療は、一般的には、効果を得るために薬物を組み合わせて用いており、長期にわたる予後不良を有する多くのがんにおけるよりよい治療を提供する必要性が残る。
【発明の概要】
【０００４】
本発明の一態様では、対象におけるメラノーマの治療方法が、メラノーマと診断される対象を特定し、Ｒａｓ−Ｒａｆ−ＭＥＫ−ＥＲＫ経路におけるプロテインキナーゼの阻害剤を前記対象に投与し、該対象にインターフェロンβを投与することを含む。前記阻害剤は、ＭＥＫ阻害剤であることとしてもよい。前記阻害剤は、メラノーマ治療に対し、薬理学的に有効な量を投与することとしてもよい。前記阻害剤は、Ｎ−［（２Ｒ）−２，３−ジヒドロキシプロポキシ］−３，４−ジフルオロ−２−［（２−フルオロ−４−ヨード−フェニル）アミノ］ベンズアミドであることとしてもよい。前記インターフェロンβは、インターフェロンβ１ａであることとしてもよい。前記インターフェロンβ１ａは、ペグ化インターフェロンβ１ａであることとしてもよい。前記インターフェロンβは、インターフェロンβ１ｂであることとしてもよい。前記インターフェロンβ１ａは、ペグ化インターフェロンβ１ｂであることとしてもよい。インターフェロンβまたはペグ化インターフェロンβは、メラノーマ治療に対し、薬理学的に有効な量を投与することとしてもよい。
【０００５】
本発明の他の態様では、対象におけるメラノーマの治療方法は、メラノーマと診断される対象を特定し、アルキル化薬を前記対象に投与し、該対象にインターフェロンβを投与することを含む。前記アルキル化薬は、メラノーマ治療に対し、薬理学的に有効な量を投与することとしてもよい。前記アルキル化薬は、４−メチルｌ−５−オキソ−２，３，４，６，８−ペンタザビシクロ［４．３．０］ノナ−２，７，９−トリエン−９−カルボキサミドであることとしてもよい。前記インターフェロンβは、インターフェロンβ１ａであることとしてもよい。前記インターフェロンβ１ａは、ペグ化インターフェロンβ１ａであることとしてもよい。前記インターフェロンβは、インターフェロンβ１ｂであることとしてもよい。前記インターフェロンβ１ａは、ペグ化インターフェロンβ１ｂであることとしてもよい。
【０００６】
本発明の他の態様では、対象における腎細胞癌の治療方法は、腎細胞癌と診断される対象を特定し、抗ＶＥＧＦ抗体を前記対象に投与し、該対象にインターフェロンβを投与することを含む。前記抗ＶＥＧＦ抗体は、腎細胞癌治療に対し、薬理学的に有効な量を投与することとしてもよい。前記抗ＶＥＧＦ抗体は、ヒト化モノクローナル抗ＶＥＧＦ−Ａ抗体であることとしてもよい。前記インターフェロンβは、インターフェロンβ１ａであることとしてもよい。前記インターフェロンβ１ａは、ペグ化インターフェロンβ１ａであることとしてもよい。前記インターフェロンβは、インターフェロンβ１ｂであることとしてもよい。前記インターフェロンβ１ａは、ペグ化インターフェロンβ１ｂであることとしてもよい。インターフェロンβまたはペグ化インターフェロンβは、腎細胞癌に対し、薬理学的に有効な量を投与することとしてもよい。
【０００７】
本発明の他の態様では、対象における腎細胞癌の治療方法は、腎細胞癌と診断される対象を特定し、ｍＴＯＲ阻害剤を前記対象に投与し、該対象にインターフェロンβを投与することを含む。前記ｍＴＯＲ阻害剤は、腎細胞癌治療に対し、薬理学的に有効な量を投与することとしてもよい。前記ｍＴＯＲ阻害剤は、テムシロリムスであることとしてもよい。前記インターフェロンβは、インターフェロンβ１ａであることとしてもよい。前記インターフェロンβ１ａは、ペグ化インターフェロンβ１ａであることとしてもよい。前記インターフェロンβは、インターフェロンβ１ｂであることとしてもよい。前記インターフェロンβ１ａは、ペグ化インターフェロンβ１ｂであることとしてもよい。
【０００８】
本発明の他の態様では、対象における腎細胞癌の治療方法は、腎細胞癌と診断される対象を特定し、Ｒａｆ−１阻害剤を前記対象に投与し、該対象にインターフェロンβを投与することを含む。前記Ｒａｆ−１阻害剤は、腎細胞癌治療に対し、薬理学的に有効な量を投与することとしてもよい。前記Ｒａｆ−１阻害剤は、４−［４−［［４−クロロ−３−（トリフルオロメチル）フェニル］カルバモイルアミノ］フェノキシ］−Ｎ−メチル−ピリジン−２−カルボキシアミドであることとしてもよい。前記インターフェロンβは、インターフェロンβ１ａであることとしてもよい。前記インターフェロンβ１ａは、ペグ化インターフェロンβ１ａであることとしてもよい。前記インターフェロンβは、インターフェロンβ１ｂであることとしてもよい。前記インターフェロンβ１ａは、ペグ化インターフェロンβ１ｂであることとしてもよい。
【０００９】
本発明の他の態様では、対象における結腸癌の治療方法は、結腸癌と診断される対象を特定し、抗ＶＥＧＦ抗体を前記対象に投与し、該対象にインターフェロンβを投与することを含む。前記抗ＶＥＧＦ抗体は、結腸癌治療に対し、薬理学的に有効な量を投与することとしてもよい。前記抗ＶＥＧＦ抗体は、ヒト化モノクローナル抗ＶＥＧＦ−Ａ抗体であることとしてもよい。前記インターフェロンβは、インターフェロンβ１ａであることとしてもよい。前記インターフェロンβ１ａは、ペグ化インターフェロンβ１ａであることとしてもよい。前記インターフェロンβは、インターフェロンβ１ｂであることとしてもよい。前記インターフェロンβ１ａは、ペグ化インターフェロンβ１ｂであることとしてもよい。インターフェロンβまたはペグ化インターフェロンβは、結腸癌治療に対し、薬理学的に有効な量を投与することとしてもよい。
【００１０】
本発明の他の態様では、対象における乳癌の治療方法は、乳癌と診断される対象を特定し、有糸分裂阻害剤を前記対象に投与し、該対象にインターフェロンβを投与することを含む。前記有糸分裂阻害剤は、結腸癌治療に対し、薬理学的に有効な量を投与することとしてもよい。前記有糸分裂阻害剤は、パクリタキセルであることとしてもよい。前記インターフェロンβは、インターフェロンβ１ａであることとしてもよい。前記インターフェロンβ１ａは、ペグ化インターフェロンβ１ａであることとしてもよい。前記インターフェロンβは、インターフェロンβ１ｂであることとしてもよい。前記インターフェロンβ１ａは、ペグ化インターフェロンβ１ｂであることとしてもよい。インターフェロンβまたはペグ化インターフェロンβは、乳癌治療に対し、薬理学的に有効な量を投与することとしてもよい。
【００１１】
本発明の他の態様では、対象における乳癌の治療方法は、乳癌と診断される対象を特定し、該対象にインターフェロンβを投与することを含む。前記インターフェロンβは、インターフェロンβ１ａであることとしてもよい。前記インターフェロンβ１ａは、ペグ化インターフェロンβ１ａであることとしてもよい。前記インターフェロンβは、インターフェロンβ１ｂであることとしてもよい。前記インターフェロンβ１ａは、ペグ化インターフェロンβ１ｂであることとしてもよい。
【００１２】
本発明の他の態様では、対象におけるメラノーマの治療方法は、メラノーマと診断される対象を特定し、該対象にインターフェロンβを投与することを含む。前記インターフェロンβは、インターフェロンβ１ａであることとしてもよい。前記インターフェロンβ１ａは、ペグ化インターフェロンβ１ａであることとしてもよい。前記インターフェロンβは、インターフェロンβ１ｂであることとしてもよい。前記インターフェロンβ１ａは、ペグ化インターフェロンβ１ｂであることとしてもよい。
【００１３】
本発明の他の態様では、対象における腎細胞癌の治療方法は、腎細胞癌と診断される対象を特定し、該対象にインターフェロンβを投与することを含む。前記インターフェロンβは、インターフェロンβ１ａであることとしてもよい。前記インターフェロンβ１ａは、ペグ化インターフェロンβ１ａであることとしてもよい。前記インターフェロンβは、インターフェロンβ１ｂであることとしてもよい。前記インターフェロンβ１ａは、ペグ化インターフェロンβ１ｂであることとしてもよい。
【００１４】
本発明の他の態様では、対象における結腸癌の治療方法は、結腸癌と診断される対象を特定し、該対象にインターフェロンβを投与することを含む。前記インターフェロンβは、インターフェロンβ１ａであることとしてもよい。前記インターフェロンβ１ａは、ペグ化インターフェロンβ１ａであることとしてもよい。前記インターフェロンβは、インターフェロンβ１ｂであることとしてもよい。前記インターフェロンβ１ａは、ペグ化インターフェロンβ１ｂであることとしてもよい。
【００１５】
他の特徴部分は、その様々な実施形態を例示する以下の添付の図面に関する詳細な説明から明らかである。
【図面の簡単な説明】
【００１６】
【図１】図１は、２×１０６個のＳＫ−ＭＥＬ−１ヒトメラノーマ細胞を移植したヌードマウスにおける、腫瘍誘発血管形成に対するコントロール、インターフェロンβ１ａ、ペグ化インターフェロンβ１ａの効果を示すグラフである。
【００１７】
【図２】図２は、ＳＫ−ＭＥＬ−１ヒトメラノーマ細胞を移植したヌードマウスにおける、ＳＫ−ＭＥＬ−１腫瘍量に対する、投与量を変化させたＭＥＫ阻害剤ＰＤ３２５９０１の効果を示すグラフである。
【００１８】
【図３】図３は、ＳＫ−ＭＥＬ−１ヒトメラノーマ細胞を移植したヌードマウスにおける、ＳＫ−ＭＥＬ−１腫瘍量に対する、溶媒対照、ＰＤ３２５９０１、ペグ化インターフェロンβ１ａ、ペグ化インターフェロンβ１ａおよびＰＤ３２５９０１の効果を示すグラフである。
【００１９】
【図４】図４は、ＳＫ−ＭＥＬ−１腫瘍のＥＲＫリン酸化における、溶媒対照、ＰＤ３２５９０１、ペグ化インターフェロンβ１ａ、ペグ化インターフェロンβ１ａおよびＰＤ３２５９０１の効果を示すウェスタンブロットである。
【００２０】
【図５】図５は、溶媒対照、ペグ化インターフェロンβ１ａ単体、テモゾロミド単体、および、テモゾロミドとペグ化インターフェロンβ１ａとの組合せ、による治療後のヌードマウスにおけるヒトＡ−３７５メラノーマの腫瘍量を示すグラフである。
【００２１】
【図６Ａ】図６Ａは、溶媒対照、０．８ｍｇ／ｋｇまたは１．６ｍｇ／ｋｇペグ化インターフェロンβ１ａ治療後のＳＣＩＤマウスにおけるヒトＳＮ１２Ｃ腎細胞癌の腫瘍量を示すグラフである。
【図６Ｂ】図６Ｂは、溶媒対照、０．８ｍｇ／ｋｇまたは１．６ｍｇ／ｋｇペグ化インターフェロンβ１ａ治療後のＳＣＩＤマウスにおけるヒトＳＮ１２Ｃ腎細胞癌の％Ｔ／Ｃを示すグラフである。
【００２２】
【図７Ａ】図７Ａは、溶媒対照、ベバシズマブ単体、ペグ化インターフェロンβ１ａ単体、および、ベバシズマブとペグ化インターフェロンβ１ａとの組合せ治療後のＳＣＩＤマウスにおけるヒトＳＮ１２Ｃ腎細胞癌の腫瘍量を示すグラフである。
【図７Ｂ】図７Ｂは、溶媒対照、ベバシズマブ単体、ペグ化インターフェロンβ１ａ単体、および、ベバシズマブとペグ化インターフェロンβ１ａとの組合せ治療後のＳＣＩＤマウスにおけるヒトＳＮ１２Ｃ腎細胞癌の％Ｔ／Ｃを示すグラフである。
【００２３】
【図８Ａ】図８Ａは、溶媒対照、ソラフェニブ単体、ペグ化インターフェロンβ１ａ単体、および、併用投与スケジュールによるソラフェニブとペグ化インターフェロンβ１ａとの組合せ治療後のＳＣＩＤマウスにおけるヒトＳＮ１２Ｃ腎細胞癌の腫瘍量を示すグラフである。
【図８Ｂ】図８Ｂは、溶媒対照、ソラフェニブ単体、ペグ化インターフェロンβ１ａ単体、および、逐次投与スケジュールによるソラフェニブとペグ化インターフェロンβ１ａとの組合せ治療後のＳＣＩＤマウスにおけるヒトＳＮ１２Ｃ腎細胞癌の腫瘍量を示すグラフである。
【００２４】
【図９Ａ】図９Ａは、溶媒対照、テムシロリムス単体、ペグ化インターフェロンβ１ａ単体、および、テムシロリムスとペグ化インターフェロンβ１ａとの組合せ治療後のＳＣＩＤマウスにおけるヒトＳＮ１２Ｃ腎細胞癌の腫瘍量を示すグラフである。
【図９Ｂ】図９Ｂは、溶媒対照、テムシロリムス単体、ペグ化インターフェロンβ１ａ単体、および、テムシロリムスとペグ化インターフェロンβ１ａとの組合せ治療後のＳＣＩＤマウスにおけるヒトＳＮ１２Ｃ腎細胞癌の％Ｔ／Ｃを示すグラフである。
【００２５】
【図１０】図１０は、溶媒対照、および、異なる投与量のペグ化インターフェロンβ１ａ治療後のヌードマウスにおけるヒトＳＷ−６２０結腸癌の腫瘍量を示すグラフである。
【００２６】
【図１１】図１１は、溶媒対照、アバスチン（ベバシズマブ）単体、イリノテカン単体、ペグ化インターフェロンβ１ａ単体、アバスチンとペグ化インターフェロンβ１ａとの組合せ、および、イリノテカンとペグ化インターフェロンβ１ａとの組合せによる治療後のヌードマウスにおけるヒトＳＷ−６２０結腸癌の腫瘍量を示すグラフである。
【００２７】
【図１２】図１２は、溶媒対照、および、パクリタキセル治療後のＳＣＩＤマウスにおけるヒトＭＤＡ−ＭＢ−２３１乳癌腫瘍の腫瘍量を示すグラフである。
【００２８】
【図１３Ａ】図１３Ａは、溶媒対照、および、異なる投与量のペグ化インターフェロンβ１ａ治療後のＳＣＩＤマウスにおけるヒトＭＤＡ−ＭＢ−２３１乳癌腫瘍の腫瘍量を示すグラフである。
【図１３Ｂ】図１３Ｂは、溶媒対照、および、異なる投与量のペグ化インターフェロンβ１ａ治療後のＳＣＩＤマウスにおけるヒトＭＤＡ−ＭＢ−２３１乳癌腫瘍の％Ｔ／Ｃを示すグラフである。
【図１３Ｃ】図１３Ｃは、溶媒対照、インターフェロンβ１ａ、または、ペグ化インターフェロンβ１ａ治療後のヌードマウスにおけるヒトＭＤＡ−ＭＢ−４６８乳癌腫瘍の腫瘍量を示すグラフである。
【００２９】
【図１４Ａ】図１４Ａは、溶媒対照、ペグ化インターフェロンβ１ａ単体、パクリタキセル単体、および、ペグ化インターフェロンβ１ａとパクリタキセルとの組合せ治療後のＳＣＩＤマウスにおけるヒトＭＤＡ−ＭＢ−２３１乳癌腫瘍の腫瘍量を示すグラフである。
【図１４Ｂ】図１４Ｂは、溶媒対照、ペグ化インターフェロンβ１ａ単体、パクリタキセル単体、および、ペグ化インターフェロンβ１ａとパクリタキセルとの組合せ治療後のＳＣＩＤマウスにおけるヒトＭＤＡ−ＭＢ−２３１乳癌腫瘍の％Ｔ／Ｃを示すグラフである。図１４Ａおよび図１４Ｂで使用されたペグ化インターフェロンβ１ａの投与量は０．８ｍｇ／ｋｇである。
【００３０】
【図１５Ａ】図１５Ａは、溶媒対照、ペグ化インターフェロンβ１ａ単体、パクリタキセル単体、および、ペグ化インターフェロンβ１ａとパクリタキセルとの組合せ治療後のＳＣＩＤマウスにおけるヒトＭＤＡ−ＭＢ−２３１乳癌腫瘍の腫瘍量を示すグラフである。
【図１５Ｂ】図１５Ｂは、溶媒対照、ペグ化インターフェロンβ１ａ単体、パクリタキセル単体、および、ペグ化インターフェロンβ１ａとパクリタキセルとの組合せ治療後のＳＣＩＤマウスにおけるヒトＭＤＡ−ＭＢ−２３１乳癌腫瘍の％Ｔ／Ｃを示すグラフである。図１５Ａおよび図１５Ｂで使用されたペグ化インターフェロンβ１ａの濃度は１．６ｍｇ／ｋｇである。
【００３１】
【図１６】図１６は、０．１ｍｇ／ｋｇ、０．２ｍｇ／ｋｇ、０．４ｍｇ／ｋｇおよび０．８ｍｇ／ｋｇペグ化インターフェロンβ１ａ治療後のヌードマウスにおけるヒトＷＭ−２６６−４メラノーマ腫瘍の腫瘍量を示すグラフである。
【００３２】
【図１７Ａ】図１７Ａから図１７Ｃは、溶媒対照、０．４ｍｇ／ｋｇ、０．８ｍｇ／ｋｇ、または１．６ｍｇ／ｋｇペグ化インターフェロンβ１ａを週1回（ＱＷ）、週２回（ＢＩＷ）、または週３回（ＴＩＷ）投与した治療後のヌードマウスにおけるヒトＷＭ−２６６−４メラノーマ腫瘍の腫瘍量を示すグラフである。
【図１７Ｂ】同上。
【図１７Ｃ】同上。
【００３３】
【図１８】図１８は、０．８ｍｇ／ｋｇおよび１．６ｍｇ／ｋｇペグ化インターフェロンβ１ａ治療後のヌードマウスにおける大型ヒトＷＭ−２６６−４メラノーマ腫瘍の腫瘍量を示すグラフである。
【００３４】
【図１９Ａ】図１９Ａは、ペグ化インターフェロンβ１ａ治療後４８時間のＷＭ−２６６−４メラノーマ細胞におけるカスパーゼ活性およびＰＡＲＰ切断の効果を示すウェスタンブロットである。
【図１９Ｂ】図１９Ｂおよび図１９Ｃは、ＷＭ−２６６−４メラノーマ細胞における、ペグ化インターフェロンβ１ａ治療後４８時間の折り畳まれたカスパーゼ３およびＰＡＲＰ誘導をそれぞれ示すグラフである。
【図１９Ｃ】同上。
【発明を実施するための形態】
【００３５】
インターフェロンβは現在、多発性硬化症の処置に使用されている。例えばインターフェロンβ−１ａは、米国でアボネックス（商標）（バイオジェン・アイデック・ＭＡ  インコーポレイテッド）の商品名で市販され、レビフ（商標）（ＥＭＤセローノ）およびインターフェロンβ−１ｂは、米国でベタセロン（商標）（バーレックス）およびイクスタビア（商標）（ノバルティス）として市販されている。
【００３６】
本明細書で使用される用語「インターフェロン」または「ＩＦＮ」は、ウイルス複製および細胞増殖を阻害し、免疫反応を調節する、相同性の高い種特異的タンパク質のファミリーを意味する。ヒトインターフェロンは、２つのクラスである、α−インターフェロンおよびβ−インターフェロンを含むＩ型と、γ−インターフェロンのみで表されるＩＩ型に分類される。各群の組み換え型が開発されており、市販されている。各群の亜型は、抗原／構造特性に基づいている。本明細書で使用されるインターフェロンの例として、残基８０（Ａｓｎ８０）でグリコシル化され、組み換えＤＮＡ技術により得られるヒトインターフェロンβがある。本明細書で使用されるインターフェロンのさらなる例として、Ｎ末端αアミノ基にて、単一の、直鎖状の２０ｋＤａのｍＰＥＧ−Ｏ−２−メチルプロピオンアルデヒド基で修飾されるペグ化化インターフェロンβ−１ａがある。
【００３７】
このグリコシル化インターフェロンβもまた「インターフェロンβ−１ａ」または「ＩＦＮβ−１ａ」あるいは「インターフェロン  ベータ  １ａ」として知られ、全て同じ意味で使用される。用語「インターフェロンβ−１ａ」もまたその突然変異体を包含することを意味するが、但し、このような突然変異体も残基８０（Ａｓｎ８０）でグリコシル化されている。インターフェロンを含むタンパク質を生成する組み換えＤＮＡ法が知られている。例えば、米国特許第４３９９２１６号、同５１４９６３６号、同５１７９０１７号（Ａｘｅｌら）および米国特許第４４７０４６１号（Ｋａｕｆｍａｎ）を参照のこと。使用することができるインターフェロンの別の例として、インターフェロンβ−１ｂがある。インターフェロンβ−１ｂを、アミノ酸位１７で遺伝子操作されたシステイン−セリン置換を含有し、かつ非グリコシル化され得る修飾ヒト遺伝子配列を使用して大腸菌内で産生することができる。
【００３８】
インターフェロンβ−１ａの突然変異体を使用することができる。突然変異は、当業者に公知である、従来の特異的突然変異誘発方法を使用して発生させ、機能的に等しいインターフェロンβ−１ａポリペプチドをコードする機能的に等しいインターフェロンβ−１ａポリヌクレオチドを含むことができる。
【００３９】
ヒト線維芽細胞インターフェロンの少なくとも一部をコードする配列を含有する組み換えＤＮＡプラスミドの構造と、ヒト線維芽細胞インターフェロンの免疫活性または生物活性を有するポリペプチドの発現についても検討されている。様々な亜型配列の組み合わせを含有するハイブリッドβ−インターフェロン遺伝子の構造を当業者に公知の技法により獲得することができる。
【００４０】
インターフェロン−βタンパク質は、Ｃ１−Ｃ４アルキルポリアルキレングリコールのポリアルキレングリコール残基、好ましくはポリエチレングリコール（ＰＥＧ）またはこのようなグリコールのポリ（オキシ）アルキレングリコール残基にコンジュゲートすることができる。そのため、タンパク質に結合するポリマーは、ポリエチレングリコール（ＰＥＧ）のホモポリマーであってよく、またはポリオキシエチレン化ポリオールであり、但し、全ての場合においてポリマーは室温で水溶性である。このようなポリマーの非限定的例として、ＰＥＧまたはポリプロピレングリコールなどのポリアルキレンオキシドホモポリマー、ポリオキシエチレン化グリコール、そのコポリマーおよびそのブロックコポリマーがあり、但し、ブロックコポリマーの水溶性は維持される。ポリオキシエチレン化ポリオールの例として、例えば、ポリオキシエチレン化グリセロール、ポリオキシエチレン化ソルビトール、ポリオキシエチレン化グルコースなどがある。ポリオキシエチレン化グリセロールのグリセロール骨格は、例えば、動物およびヒトに天然に生じる、モノグリセリド、ジグリセリドおよびトリグリセリドの骨格と同じである。それゆえ、この分岐は体内の異物として必ずしも認められるものではない。
【００４１】
ポリアルキレンオキシドの代替物として、デキストラン、ポリビニルピロリドン、ポリアクリルアミド、ポリビニルアルコール、炭水化物系ポリマーなどを使用することができる。当業者であれば、前記の一覧が単なる例示であり、本明細書に記載の性質を有する全てのポリマー材料を検討することが認識されるだろう。ポリマーは任意の特定の分子量を有する必要はないが、約３００〜１０００００、より好ましくは１００００〜４００００の分子量が好ましい。具体的には、２００００以上の大きさが、腎臓の濾過によるタンパク質漏出を防ぐには最もよい。
【００４２】
ポリアルキレングリコール誘導体化は、ポリアルキレングリコール誘導体の以下の性質、水溶性の改善と同時に抗原反応または免疫原性反応の非誘発、高度の生適合性、生体内のポリアルキレングリコール誘導体の生分解の欠如および生体による排出しやすさと関連するとして、ポリマーインターフェロンβ  １ａコンジュゲートの作製において多くの有利な性質を有する。本明細書に記載の組成物に使用することができるペグ化インターフェロンβ−１ａの例として、Ｎ末端α−アミノ基にて、単一の、直鎖状の２０ｋＤａのｍＰＥＧ−Ｏ−２−メチルプロピオンアルデヒド基で修飾されたインターフェロンβ−１ａを含むことができる（参照により本明細書に組み込まれる、Baker DP et al 2006, Bioconjugate Chem. 17, 179-188を参照）。インターフェロンβとｍＰＥＧ−プロピオンアルデヒドを含むＰＥＧへのコンジュゲートについてはさらに、参照によりそれぞれが本明細書に組み込まれる、米国特許第７４４６１７３号および米国特許出願第２００５０１０７２７７号に記載されている。
【００４３】
本明細書に記載の組成物を水性医薬組成物としてまたは凍結乾燥の形態で作製することができる。インターフェロンβの安定した組成物は、凝集、断片化、脱アミド化、酸化または長期間、例えば、１２カ月、２４カ月、３６カ月以上にわたる生物活性の変化のいずれか１つ以上の徴候をほとんどまたは全く示さない。例えば、一実施形態において、組成物の１０％未満が凝集し、断片化し、または酸化する。凝集、沈降および／または変性は、公知の方法、例えば色および／または透明度の視覚検査により、またはＵＶ光散乱あるいはサイズ排除クロマトグラフィーにより評価することができる。タンパク質がその生物活性を保持する能力を、タンパク質の化学的に変化した形態を検出および定量することにより評価することができる。サイズ変更（例えば、クリッピング）をサイズ排除クロマトグラフィー、ＳＤＳ−ＰＡＧＥおよび／またはマトリックス支援レーザー脱離イオン化法／飛行時間型質量分析計（ＭＡＬＤＩ／ＴＯＦ  ＭＳ）あるいはエンドプロテイナーゼ処理したタンパク質のペプチドマッピングなどを使用して評価することができる。他の化学変化の種類として、電荷変化（例えば、脱アミド化の結果として生じる）があり、これはイオン交換クロマトグラフィーなどにより評価することができる。タンパク質が製剤中にその生物活性を保持するが、例えばアッセイで決定されたように、所与の時間のタンパク質の生物活性は、製剤が調製された時に示された生物活性の約１０％以内である。
【００４４】
例えば、インターフェロンβもしくはインターフェロンβ−１ａあるいはペグ化インターフェロンβ−１ａを約０．１ｍｇ／ｍｌ〜約５ｍｇ／ｍｌ、約０．１ｍｇ／ｍｌ〜約１ｍｇ／ｍｌ、約０．１ｍｇ／ｍｌ〜約０．５ｍｇ／ｍｌ、約０．１ｍｇ／ｍｌ〜約０．３ｍｇ／ｍｌまたは約０．１ｍｇ／ｍｌ〜約０．２ｍｇ／ｍｌの濃度で緩衝溶液中に含むことができる。インターフェロンβ−１ａを、０．２５ｍｇ／ｍｌの濃度で緩衝溶液中に含むことができる。組成物を２〜２５℃、５℃、１０℃、１５℃、２０℃または２５℃で保存することができる。組成物を室温にて１、２、３、４または５日以上安定させることができる。室温は約１８℃、１９℃、２０℃、２１℃、２２℃、２３℃、２４℃または２５℃であってよい。組成物を、例えば約１〜５日間、第１の低温、例えば１８℃未満または約凍結温度以上であるが、１５℃、１０℃もしくは４℃でまたはそれ以下で保存することができ、かつ第２の高温、例えば冷蔵温度以外または室温で保存することができる。
【００４５】
医薬組成物は、製造および保存の状態下において無菌であり、安定している。医薬組成物を、投与のための規制および工業基準を満たすことを確かめるため試験することもできる。
【００４６】
インターフェロンで処置することができる病態の例として、癌、多発性硬化症およびウイルス感染を含む細胞増殖障害を含むがそれらに限定されない。限定されないが、インターフェロンでの処置は、インターフェロン感受性ウイルスの複製を阻害することが有効であると思われる病態を処置するために使用することができる。がんは、副腎癌、肛門がん、膀胱がん、脳腫瘍、神経膠腫、乳癌、カルチノイド腫瘍、子宮頸がん、結腸癌、子宮体がん、食道がん、肝臓外胆管がん、ユーイング肉腫、頭蓋外胚細胞腫瘍、眼のがん、胆嚢がん、胃がん、胚細胞腫瘍、 妊娠性絨毛腫瘍、頭頚部がん、下咽頭がん、膵島細胞癌、腎臓がん、喉頭がん、白血病、口唇がんおよび口腔がん、肝がん、肺癌、リンパ腫、黒色腫、中皮腫、メルケル細胞癌、転移性扁平頭頚部がん、骨髄腫、新生物、鼻咽頭がん、神経芽細胞腫、口腔がん、口腔咽頭がん、骨肉腫、卵巣がん、膵臓がん、副鼻腔がん、副甲状腺がん、陰茎がん、褐色細胞腫、下垂体がん、形質細胞性新生物、前立腺がん、横紋筋肉腫、直腸がん、腎細胞癌、唾液腺がん、皮膚がん、カポジ肉腫、Ｔ細胞リンパ腫、軟部組織肉腫、胃がん、精巣がん、胸腺腫、甲状腺がん、尿道がん、子宮がん、膣がん、外陰がんまたはウィルムス腫瘍を含むことができる。
【００４７】
ＩＦＮ−βまたはペグ化ＩＦＮ−βを、上記の病態のいずれかを処置するために薬理学的に有効な量で投与することができる。用語「薬理学的に有効な量」は、研究者または臨床医が求めている、組織、系、動物またはヒトの生物反応または医学的反応を誘発する薬物または薬剤の量を意味する。臨床的な好反応に大きく影響するが、副作用を軽減するレベルを維持するのに十分な量である。例えばペグ化ＩＦＮβの量は、それを必要とする対象に投与されることができるが、０．０１〜１０００μｇ／ｋｇまたはより好ましくは０．０１〜１００μｇ／ｋｇである。インターフェロンβ−１ａまたはペグ化インターフェロンβ−１ａを、０．１〜５ｍｇ／ｍｌ、またはより好ましくは０．２５〜１ｍｇ／ｍｌの濃度で緩衝溶液中に含むことができ、単回または分割用量で投与することができる。用語「対象」は、例えば哺乳類動物、ヒトまたは非ヒトの任意の動物を指す。対象の例として、ヒト、非ヒト霊長類、マウス、ラット、モルモット、ウシ、ヒツジ、ヤギ、ブタ、イヌ、ネコ、鳥類、シカ、ヘラジカ、ウサギ、トナカイ、シカおよびウマを含むがそれらに限定されない。
【００４８】
記載の用量の投与は、１日おきであってよいが、好ましくは、１週間に１回または隔週に１回行う。用量を注射により少なくとも２４週間にわたり投与することができる。本明細書に記載の組成物を利用する投与計画は、患者の種類、人種、年齢、体重、性別および病状、処置される病態の重症度、投与経路、患者の腎機能および肝機能および使用される特定の化合物またはその塩などの種々の因子に従い選択される。インターフェロンβの活性および患者の副作用に対する感受性もまた考慮される。当業者である医師または獣医師であれば、病状の進行を防ぎ、遅らせまたは停止させるのに必要な有効量の薬物を容易に決定し、処方することができる。
【００４９】
さらに別の実施形態において、組成物は、皮下投与または筋肉内投与に適している。また別の実施形態において、組成物は、ＩＶ投与に適している。本明細書に記載の組成物を非経口様式（例えば、皮下、腹腔内または筋肉内注射）により投与することができる。本明細書で使用される句「非経口投与」および「非経口投与される」は、通常、腸内投与および局所投与以外の注射による投与様式を意味し、皮下または筋肉内投与ならびに静脈内、嚢内、眼窩内、心内、皮内、腹腔内、経気管、表皮下、被膜下、くも膜下、髄腔内、硬膜外および胸骨内注射および注入を含む。用量の投与法は、静脈内、皮下、筋肉内または任意の他の許容される系の方法であってよい。主治医の判断に基づき、投与される薬物の量および使用される処置計画は、当然ながら処置される患者の年齢、性別および既往歴、好中球数（例えば、好中球減少症の重症度）、特異疾患状態の重症度、および局所の毒性および全身の副作用により明らかである、処置に対する患者の耐性に依存するだろう。
【００５０】
一般に、非経口注射による投与法は、皮下、筋肉内または静脈内注射および注入に使用される。例えば、皮下注射を使用して、０．０１〜１０００μｇ／ｋｇ、またはより好ましくは０．０１〜１００μｇ／ｋｇを送達することができる。インターフェロンβ−１ａまたはペグ化インターフェロンβ−１ａは、０．１〜５ｍｇ／ｍｌまたはより好ましくは０．２５〜１ｍｇ／ｍｌの濃度で緩衝溶液に含むことができる。さらに、非経口投与の一手法として、緩効性または徐放性システムのインプラントを使用するが、参照により本明細書に組み込まれる、米国特許第３７１０７９５号によると、これにより一定のレベルの用量が確実に維持される。
【００５１】
注射のための凍結乾燥組成物を、例えば溶解、分散により調製することができる。活性化合物を、医薬的に純粋な溶剤、例えば水、生理食塩水、デキストローズ水溶液、グリセロール、エタノールなどに溶解し、または混合し、注射用の溶液または懸濁液を形成する。さらに、注射の前に液体に溶解させるのに適した固体／凍結乾燥形態を作製することができる。注射用の組成物は、好ましくは水性等張液または懸濁液である。組成物は滅菌され、かつ／または防腐剤、安定剤、湿潤剤または乳化剤などの補助剤、溶液促進剤、浸透圧を調節する塩および／または緩衝液を含有することができる。さらに、組成物は、他の治療的に価値のある物質も含有することができる。
【００５２】
医薬組成物を、医療用デバイスを用いて投与することができる。例えば、医薬組成物を無針皮下注射デバイス、例えば米国特許第５３９９１６３号、同第５３８３８５１号、同第５３１２３３５号、同第５０６４４１３号、同第４９４１８８０号、同第４７９０８２４号または同第４５９６５５６号に開示のデバイスを用いて投与することができる。公知のインプラントおよびモジュールの例として、割合を制御して医薬を分注するインプラント型微小注入ポンプについて開示している米国特許第４４８７６０３号、皮膚を介して医薬品を投与する治療用デバイスについて開示している米国特許第４４８６１９４号、正確な注入量の医薬を送達する医薬注入ポンプについて開示している米国特許第４４４７２３３号、連続薬物送達のための可変流量のインプラント型注入装置について開示している米国特許第４４４７２２４号、マルチチャンバーコンポーネントを有する浸透圧性薬物送達システムについて開示している米国特許第４４３９１９６号がある。治療組成物も皮下または筋肉内投与のための生分解性または非生分解性徐放製剤の形態であってよい。米国特許第３７７３９１９号および同第４７６７６２８号ならびにＰＣＴ出願国際公開第９４／１５５８７号を参照のこと。連続投与もインプラント型ポンプまたは外部ポンプを使用してなされることができる。投与は、毎日の単回注射などの間欠的または徐放製剤などの低用量で連続して行うこともできる。送達デバイスをインターフェロンβの投与に適宜適用されるよう修正することができる。例えば、シリンジをインターフェロンβの保存および送達に最適な範囲にシリコン処理することができる。当然ながら、インプラント、送達システムおよびモジュールなどの他の多くのものも知られている。
【００５３】
別の実施形態において、ＩＦＮβまたはペグ化ＩＦＮβを、上記の病態のいずれかを処置する薬学的に有効な量で第２の治療剤と組み合わせて投与する。がんの増殖を阻害し、または対象のがんを処置する方法には、がんと診断された対象を特定することを含むことができる。がんと診断された対象を特定することには、自己特定、診断による特定、医師からの照会による特定または機関からの照会による特定を含むことができる。診断による特定には、生検、画像試験、検査試験、ゲノム試験または触診を含むことができる。照会機関はクリニック、病院、代理店またはサポート団体であってよい。
【００５４】
がんの増殖を阻害することには、がん細胞が有糸分裂を行う速度を遅らせることを含むことができる。対象のがんを処置することには、がんの増殖を阻害し、対象の病状全体を改善することを含むことができる。
【００５５】
対象を、単剤治療としてペグ化インターフェロンβ−１ａのみで、またはがんの種類に応じて本明細書に記載の他の適切な薬物と組み合わせて処置することができる。薬物を所定の順となり得る連続投与または同時投与することができる。対象のがんを処置する方法には、処置が有効であるかを決定するため、特定のがんの徴候または症状が阻害されているかどうかの、ペグ化インターフェロンβ−１ａのみまたは組み合わせて投与した後の十分な時期を決定することを含むことができる。対象のがんの増殖を阻害する方法には、処置が有効であるかを決定するため、特定のがんの徴候または症状が阻害されているかどうかの、ペグ化インターフェロンβ−１ａのみまたは組み合わせて投与した後の十分な時期を決定することを含むことができる。十分な時期は、少なくとも１日、少なくとも１週間、少なくとも２週間、少なくとも３週間、少なくとも１カ月間、少なくとも２カ月間、少なくとも３ヵ月間、少なくとも６カ月間、少なくとも１年間、少なくとも２年間、少なくとも５年間または５年以上後であってよい。時期をペグ化インターフェロンβ−１ａのみ、もしくは第２の薬物と組み合わせて、あるいは第２の薬物のいずれかを投与する場合の時期から測定することができる。
【００５６】
がんの徴候または症状は腫瘍の大きさを含むことができる。腫瘍の大きさを腫瘍の小径、腫瘍の大径を測定することにより、または腫瘍の体積を算出することにより測定することができる。腫瘍の大きさを、触診、ｘ線、コンピュータ断層スキャン、磁気共鳴画像、陽電子放射断層撮影法または骨スキャンなどにより決定することができる。
【００５７】
細胞の変化はがんの徴候または症状となりうる。細胞の変化を腫瘍の生検により、および腫瘍を検査するための組織学的技法を使用して決定することができる。細胞の変化には、細胞増殖の増加率、細胞死の減少率または付着の必要性の低下を含むことができる。徴候または症状には、タンパク質発現の変化を含むことができる。これには、タンパク質の発現の誤調節または無調節を含むことができる。タンパク質発現の変化には、過小発現、過剰発現または翻訳後修飾の変化を含むことができる。タンパク質発現の変化には、タンパク質が通常存在しない領域のタンパク質の存在またはタンパク質が通常存在する領域のタンパク質の非存在を含むことができる。タンパク質発現の変化には、タンパク質に関連したタイミングの変化も含むことができる。例えば、タンパク質は、通常存在しない発達の段階、細胞サイクルの段階または信号変換の段階に存在し、または通常存在する時に存在しない。タンパク質発現の変化は、タンパク質の活性の変更を生じ得る。タンパク質がより活性し、または活性が少なくなり得る。活性が存在しなくなる可能性があり、新たな活性が発達する可能性があり、または活性の特異性が変化し得る。タンパク質は発達の段階、細胞サイクルの段階または信号変換の段階の誤った時期に活性化または不活性化され得る。
【００５８】
がんの徴候または症状には、ほくろ、シミ、ソバカス、潰瘍、瘤、傷跡または潰瘍の属性などの皮膚の属性を含むことができる。属性には、形状、ほくろの色または大きさ、シミ、ソバカス、傷跡または潰瘍を含むことができる。形状は、非対称、不規則、凹凸のある、キザギザした、またはぼやけていてよい。色は不均一であってよく、黒色、茶色、赤色、桃色、青色または白色を含むことができる。大きさは４ｍｍ以上、５ｍｍ以上または６ｍｍ以上であってよい。ほくろ、シミ、ソバカス、瘤、傷跡または潰瘍の数も黒色腫の徴候または症状となり得る。ほくろ、シミ、ソバカス、瘤、傷跡または潰瘍が存在していた期間が黒色腫の徴候または症状となり得る。別の徴候または症状として、治癒せず、または大きさおよび重症度が増加するほくろ、シミ、ソバカス、瘤、傷跡または潰瘍があり得る。皮膚の感覚の変化、例えば、圧痛、かゆみまたは疼痛は、黒色腫の徴候または症状となり得る。さらに、ほくろ、シミ、ソバカス、瘤、傷跡または潰瘍の表面の変化は徴候または症状となり得る。例えば、変化には、鱗状、溢出、出血または他の外観の変化を含むことができる。
【００５９】
阻害されるとは、徴候または症状が減少し、あるいは徴候または症状の数が減少することを意味する。徴候または症状の数の減少には、様々な徴候または症状の発生の総数あるいは同じ徴候または症状の発生の総数を含むことができる。例えば、腫瘍体積が減少し得、または腫瘍数が減少し得る。別の実施例には、過小発現のタンパク質の徴候を含むことができる。この徴候の減少が発現の増加となり得る。同様に、タンパク質の活性の低下を含む徴候の減少は、タンパク質の活性の増加となり得る。
【００６０】
黒色腫（メラノーマ）
【００６１】
がんは黒色腫を含むことができる。黒色腫は、表層に広がる黒色腫、結節型黒色腫、悪性ほくろ型黒色腫または末端性ほくろ性黒色腫であってよい。黒色腫には、ＢＲＡＦ突然変異体を含むことができる。ＢＲＡＦ突然変異体はＢＲＡＦ  Ｖ６００Ｅ突然変異体であってよい。
【００６２】
がんの増殖を阻害し、または対象の黒色腫を含むことができるがんを処置する方法には、ＩＦＮ−βまたはペグ化ＩＦＮ−βと組み合わせてタンパク質キナーゼの阻害剤を対象に投与することを含むことができる。タンパク質キナーゼは、Ｒａｓ−Ｒａｆ−ＭＥＫ−ＥＲＫ経路内にあってよい。Ｒａｓ−Ｒａｆ−ＭＥＫ−ＥＲＫ経路内のタンパク質キナーゼの阻害剤は、ＥＧＦＲ、Ｒａｓ、Ｂ−Ｒａｆ、ＭＥＫまたはＥＲＫの阻害剤であってよい。阻害剤は、セツキシマブ、エルロチニブ、トラスツズマブ、イマチニブまたはオブリメルセンであってよい。阻害剤は、ファルネシルトランスフェラーゼ阻害剤またはファルネシルチオサリチル酸であってよい。阻害剤はまた、ＧＷ５０７４（グラクソ・ウェルカム・インコーポレイテッド）、ＢＡＹ４３−９００６（バイエルＡＧ）、Ｒｏ０９−２２１０（ロッシュ・プロダクツ・リミテッド）、Ｌ−７８３２７７（メルク）、ＰＤ１６９３１６（カルバイオケム）、ＳＢ２０３５８０（カルバイオケム）、Ｕ０１２６（カルバイオケム）、ＰＤ９８０５９（カルバイオケム）、ＰＤ１８４３５２（ユナイテッド・ステイツ・バイオロジカル）、ＰＤ０３２５９０１またはＡＺＤ８３３０（アストラゼネカ）、ＦＲ１８０２０４（カルバイオケム）あるいはカルペプチンであってよい。阻害剤は、Ｎ−［（２Ｒ）−２，３−ジヒドロキシプロポキシ］−３，４−ジフルオロ−２−［（２−フルオロ−４−ヨード−フェニル）アミノ］ベンズアミド（ＰＤ０３２５９０１）であってよい。
【００６３】
対象に投与されるタンパク質キナーゼの阻害剤の用量は、１０μｇ未満、２５μｇ未満、５０μｇ未満、７５μｇ未満、０．１０ｍｇ未満、０．２５ｍｇ未満、０．５ｍｇ未満、１ｍｇ未満、２．５ｍｇ未満、５ｍｇ未満、１０ｍｇ未満、１５ｍｇ未満、２０ｍｇ未満、５０ｍｇ未満、７５ｍｇ未満、１００ｍｇ未満、２００ｍｇ未満、３００ｍｇ未満、４００ｍｇ未満、５００ｍｇ未満、７５０ｍｇ未満、１ｇ未満、２ｇ未満または５ｇ未満であってよい。
【００６４】
別の実施形態において、がんの増殖を阻害し、または対象の黒色腫を含むことができるがんを処置する方法には、ＩＦＮ−βまたはペグ化ＩＦＮ−βと組み合わせてアルキル化ＤＮＡ剤またはメチル化ＤＮＡ剤を対象に投与することを含むことができる。アルキル化剤は、アルキル基（ＣｎＨ２ｎ＋１）をＤＮＡに結合させる薬剤であり得る。アルキル基がイミダゾール環の７番の窒素原子でＤＮＡのグアニン塩基に結合する。アルキル化剤は、４−メチル−５−オキソ−２，３，４，６，８−ペンタアザビシクロ［４．３．０］ノナ−２，７，９−トリエン−９−カルボキサミド（テモゾロミド、テモダール（登録商標）としても知られる）を含むことができる。
【００６５】
対象に投与されるアルキル化ＤＮＡ剤またはメチル化ＤＮＡ剤、例えばテモゾロミドの用量は、５０ｍｇ／ｍ２〜２００ｍｇ／ｍ２であってよい。テモゾロミドを期間にわたり、約５０ｍｇ／ｍ２、７５ｍｇ／ｍ２、９０ｍｇ／ｍ２、１００ｍｇ／ｍ２、１３５ｍｇ／ｍ２、１７５ｍｇ／ｍ２、２００ｍｇ／ｍ２以上の用量で対象に投与することができる。テモゾロミドを１日１回、５日間、１０日間、１５日間、２０日間、２５日間、３０日間、３５日間、４０日間または５０日間以上投与することができる。テモゾロミドを錠剤形態または注射により投与することができる。テモゾロミドを必要に応じて、２８日サイクルを１サイクル、２サイクル、３サイクル、４サイクル、５サイクル、６サイクル以上投与することができる。テモゾロミドを６０分以下、９０分、１２０分、１５０分以上にわたり静脈内投与することができる。テモゾロミドを最初の処置サイクルに続くさらなる維持相において投与することができる。ＩＦＮ−βまたはペグ化ＩＦＮ−βと組み合わせて使用するテモゾロミドの他の適切な用量および投与期間を当業者に公知の方法により決定することができる。
【００６６】
腎細胞癌
【００６７】
がんは腎細胞癌を含むことができる。腎細胞癌（腎腺癌または副腎腫としても知られる）は腎臓がんの一種であり、この場合、がん細胞は腎臓の非常に小さな管（細管）の内膜に認められる。腎細胞癌は、淡明細胞である腎細胞癌、乳頭状腎細胞癌、嫌色素性腎細胞癌、集合管腎細胞癌および未分類の腎細胞癌を含むことができる。
【００６８】
さらなる実施形態において、がんの増殖を阻害し、または対象の腎細胞癌などの癌を処置する方法には、ペグ化ＩＦＮ−βを対象に投与することを含むことができる。別の実施形態において、がんの増殖を阻害し、または対象の腎細胞癌などのがんを処置する方法には、ＩＦＮ−βまたはペグ化ＩＦＮ−βと組み合わせて抗ＶＥＧＦ抗体を対象に投与することを含むことができる。抗体は、モノクローナル抗体もしくはポリクローナル抗体またはその断片であってよい。抗体は、ベバシズマブ（アバスチン（商標）、ジェネンテック／ロシュ）などのヒト化モノクローナル抗体であってよい。
【００６９】
対象に投与する抗ＶＥＧＦ抗体の用量は、０．５ｍｇ／ｋｇ〜２０ｍｇ／ｋｇであってよい。例えば、ベバシズマブを一定の期間に１ｍｇ／ｋｇ、２．５ｍｇ／ｋｇ、５ｍｇ／ｋｇ、７．５ｍｇ／ｋｇ、１０ｍｇ／ｋｇ、１２．５ｍｇ／ｋｇまたは１５ｍｇ／ｋｇの用量で静脈内投与することができる。期間は、毎週、２週間毎、３週間毎または毎月を含むことができる。ＩＦＮ−βまたはペグ化ＩＦＮ−βと組み合わせて使用するベバシズマブの他の適切な用量および投与期間は、当業者に公知の方法により決定することができる。
【００７０】
別の実施形態において、がんの増殖を阻害し、または対象の腎細胞癌などのがんを処置する方法には、ＩＦＮ−βまたはペグ化ＩＦＮ−βと組み合わせて哺乳類動物標的のラパマイシン（ｍＴＯＲ）阻害剤を対象に投与することを含むことができる。ｍＴＯＲ阻害剤はテムシロリムス（トーリセル（商標）、ワイス）を含むことができる。
【００７１】
対象に投与されるｍＴＯＲ阻害剤、例えばテムシロリムスの用量は、１０ｍｇ〜６０ｍｇ、１５ｍｇ〜５５ｍｇ、２０ｍｇ〜５０ｍｇ、２５ｍｇ〜４５ｍｇであってよい。テムシロリムスを一定期間にわたり２５ｍｇの注入用量で対象に投与することができる。期間は、１週間に１回、１週間に数回、隔週に１回または隔週に数回１０〜１２０分間または３０〜６０分間であってよい。ＩＦＮ−βまたはペグ化ＩＦＮ−βと組み合わせて使用するテムシロリムスの他の適切な用量および投与期間は、当業者に公知の方法により決定することができる。
【００７２】
別の実施形態において、がんの増殖を阻害し、または対象の腎細胞癌などのがんを処置する方法には、ＩＦＮ−βまたはペグ化ＩＦＮ−βと組み合わせてセリン／トレオニンまたはチロシンタンパク質キナーゼ阻害剤を対象に投与することを含むことができる。セリン／トレオニンまたはチロシンタンパク質キナーゼ阻害剤は、Ｒａｆ−１の阻害剤などのＲａｓ／Ｒａｆ／Ｍｅｋ／Ｅｒｋ経路の阻害剤を含むことができる。Ｒａｆ−１の阻害剤は、４−［４−［［４−クロロ−３−（トリフルオロメチル）フェニル］カルバモイルアミノ］フェノキシ］−Ｎ−メチル−ピリジン−２−カルボキサミド（ソラフェニブ、ネクサバール（登録商標）しても知られる）を含むことができる。
【００７３】
対象に投与されるＲａｆ−１阻害剤、例えばソラフェニブの用量は、２００〜８００ｍｇであってよい。ソラフェニブを、錠剤の形態において１日１回、１日２回、１日３回または１日４回、２００ｍｇ、４００ｍｇまたは８００ｍｇで投与することができる。ＩＦＮ−βまたはペグ化ＩＦＮ−βと組み合わせて使用するソラフェニブの他の適切な用量および投与期間は、当業者に公知の方法により決定することができる。
【００７４】
結腸癌
【００７５】
がんは大腸のがんである結腸癌を含むことができる。結腸癌は、結腸癌に進行し得る腺腫性ポリープと呼ばれる小さな非癌性（良性）の細胞塊として発生し得る。肛門がんは結腸の最後の数インチのがんであり、多くの場合、結腸癌とともに発症し得る（大腸がんとしても知られている）。
【００７６】
さらなる実施形態において、がんの増殖を阻害し、または対象の結腸癌などのがんを処置する方法には、ペグ化ＩＦＮ−βを対象に投与することを含むことができる。別の実施形態において、がんの増殖を阻害し、または対象の結腸癌などのがんを処置する方法には、ＩＦＮ−βまたはペグ化ＩＦＮ−βと組み合わせて抗ＶＥＧＦ抗体を対象に投与することを含むことができる。抗体はモノクローナル抗体もしくはポリクローナル抗体またはその断片であってよい。抗体は、ベバシズマブ（アバスチン（商標）、ジェネンテック／ロシュ）などのヒト化モノクローナル抗体であってよい。
【００７７】
乳癌
【００７８】
乳がんは乳房の組織に発生し、腺管癌および小葉癌を含むことができる癌である。稀な例として、乳がんは乳房以外の領域で発生し得る。乳がんは、エストロゲンに感受性があり得る。乳がんはＨＥＲ２陽性であり得る。乳がんの現在の処置として、エストロゲンの作用を遮断するタモキシフェンまたはハーセプチンを含む標的治療を含むことができる。
【００７９】
さらなる実施形態において、がんの増殖を阻害し、または対象の乳癌などのがんを処置する方法には、ペグ化ＩＦＮ−βを対象に投与することを含むことができる。別の実施形態において、がんの増殖を阻害し、または対象の乳癌などのがんを処置する方法には、ＩＦＮ−βまたはペグ化ＩＦＮ−βと組み合わせて有糸分裂阻害剤を対象に投与することを含むことができる。有糸分裂阻害剤はタキソール（パクリタキセル）を含むことができる。
【００８０】
対象に投与されるパクリタキセルの用量は、５ｍｇ／ｍ２〜２００ｍｇ／ｍ２であってよい。パクリタキセルは、一定期間にわたり約５０ｍｇ／ｍ２、９０ｍｇ／ｍ２、１００ｍｇ／ｍ２、１３５ｍｇ／ｍ２、または１７５ｍｇ／ｍ２の用量で静脈内投与することができる。パクリタキセルを１週間毎、２週間毎、３週間毎、１カ月以上で１時間、２時間、３時間、４時間、５時間、１０時間、１５時間、２０時間または２４時間以上にわたり投与することができる。ＩＦＮ−βまたはペグ化ＩＦＮ−βと組み合わせて使用するパクリタキセルの他の適切な用量および投与期間は、当業者に公知の方法により決定することができる。
【実施例】
【００８１】
実施例１
【００８２】
ペグ化インターフェロン-β-１ａの抗血管新生効果
【００８３】
胸腺欠損ヌードマウスは２Ｘ１０６のＳＫ-ＭＥＬ-１ヒトメラノーマ細胞（１側腹部あたり１注入、１マウスあたり１注入）を接種され、腫瘍（１００〜２００立方ｍｍ）が確立した。単一用量試験では、ＳＫ-ＭＥＬ-１ヒトメラノーマ腫瘍を有する４個体のマウスの群は、ビヒクル対照、５μｇ（１ＭＵ）のＩＦＮ-β-１ａまたは１０μｇ（１ＭＵ）のペグ化ＩＦＮ-β-１ａを第１日目に１回受けた。ペグ化インターフェロン-β-１ａは本明細書に記載の実施例全体に渡って使用されるとき、Ｎ末端α-アミノ基で、単一の直鎖２０ｋＤａのｍＰＥＧ-Ｏ-２-メチルプロピオンアルデヒド基で修飾される。複数用量試験では、ＳＫ-ＭＥＬ-１ヒトメラノーマ腫瘍を有する３個体のマウスの群は、第１日目のみ１回のビヒクル対照、第１日目のみ１回の１０μｇ（１ＭＵ）のペグ化ＩＦＮ-β-１ａ、第１〜９日目のビヒクル対照、または第１〜９日目の５μｇ（１ＭＵ）のＩＦＮ-β-１ａを受けた。マウスはその後、第１０日目に屠殺され、腫瘍の末梢に進入している管の数を数えた。血管新生の査定者は治療群について知らされていなかった。
【００８４】
結果。ヌードマウスのペグ化ＩＦＮ-β-１ａの半減期は約１０時間であった。図１は、対照、ＩＦＮ-β-１ａ、およびペグ化ＩＦＮ-β-１ａがＳＫ-ＭＥＬ-１ヒトメラノーマ細胞を接種されたヌードマウスの血管に誘導された腫瘍の形成に及ぼす効果を説明する。ペグ化ＩＦＮ-β-１ａのほうが、血管に誘導された腫瘍の形成を有意に効果的に減じた。さらに、第１日目に一回与えられたペグ化ＩＦＮ-β-１ａのほうが、第１日目に一回与えられたＩＦＮ-β-１ａより効果的であった。図１Ａを参照のこと。第１日目に一回与えられたペグ化ＩＦＮ-β-１ａは、第１〜９日目に毎日与えられたＩＦＮ-β-１ａと差がなかった（わずかに優位であった）。図１Ｂを参照のこと。ヒトＩＦＮ-β-１ａは、マウスのＩＦＮ-βの全活性に必要とされるものより１０倍の濃度でもマウス（Ｌ９２９）細胞に活性しない（すなわち種特異性が必要とされる）ため、ヒトタンパク質はマウスの血管細胞に作用するということはないだろう。ペグ化ＩＦＮ-β-１ａのほうが、前血管新生因子の産生を特異的に阻害するか腫瘍の成長を阻害するかのいずれか、その結果、前血管新生因子の産生を間接的に阻害することによって、腫瘍そのものに作用しそうである。
【００８５】
ＭＥＫ阻害剤ＰＤ３２５９０１の抗血管新生効果
【００８６】
胸腺欠損ヌードマウスは２Ｘ１０６のＳＫ-ＭＥＬ-１ヒトメラノーマ細胞（１側腹部あたり１注入、１マウスあたり２注入）を接種され、１００〜２００立方ｍｍの腫瘍が確立した。マウス（１群あたり５個体）を無作為に割り付け、０、１、５、１０および２０ｍｇ／ｋｇのＰＤ３２５９０１をＰＥＧ４００ ＰＯ(経口投与)で１日１回（ＱＤ）、１４日間治療した。腫瘍はキャリパーを用いて３日毎に計測し、体積は以下の式に定義される扁長回転楕円体について計算した。
Ｖ＝（ｐｉ＊Ｌ＊Ｗ２）／６
式中、Ｌは外径を、Ｗは小径を表す。
【００８７】
結果。図２は、様々な用量のＰＤ３２５９０１がＳＫ-ＭＥＬ-１ヒトメラノーマ細胞を接種されたヌードマウスのＳＫ-ＭＥＬ-１腫瘍の体積に及ぼす効果を説明する。本実験から、ＰＤ３２５９０１の用量１５ｍｇ／ｋｇが最適以下の用量として選ばれた。
【００８８】
ＳＫ-ＭＥＬ-１ヒトメラノーマ腫瘍を有するヌードマウスにおけるペグ化インターフェロン-β-１ａおよびキナーゼ阻害剤ＰＤ３２５９０１の併用の有効性
【００８９】
胸腺欠損ヌードマウスは２Ｘ１０６のＳＫ-ＭＥＬ-１ヒトメラノーマ細胞（１側腹部あたり１注入、１マウスあたり１注入）を接種され、１００〜２００立方ｍｍの腫瘍が確立した。ｐＨ４．８の２０ｍＭの酢酸／酢酸ナトリウムおよびヒト血清アルブミン（ＨＳＡ）を１５ｍｇ／ｍＬ含有する１５０ｍＭのアルギニン／ＨＣｌ中にペグ化ＩＦＮ-β-１ａを供給した。ＨＳＡは対照として用い、１５ｍｇ／ｍＬの濃度で投与した。マウス（１群あたり１０個体）は無作為に割り付け、以下のいずれかで治療した。
ｉ．ＰＥＧ４００（１日１回（ＱＤ）、１４日間）およびペグ化インターフェロン-β-１ａ（１０μｇを週に１回（ＱＷ）、３週間）
ｉｉ．ＰＤ３２５９０１（１５ｍｇ／ｋｇを１日１回（ＱＤ）、１４日間）およびペグ化インターフェロン-β-１ａ（１０μｇを週に１回（ＱＷ）、３週間）
ｉｉｉ．ＰＥＧ４００（１日１回（ＱＤ）、１４日間）およびＨＳＡ（週に１回（ＱＷ）、３週間）
ｉｖ．ＰＤ３２５９０１（１５ｍｇ／ｋｇを１日１回（ＱＤ）、１４日間）およびＨＳＡ（週に１回（ＱＷ）、３週間）
【００９０】
腫瘍はキャリパーを用いて３日毎に計測し、体積は扁長回転楕円体について計算した。ペグ化インターフェロン-β-１ａビヒクル（ＨＳＡ）についてのビヒクル対照およびペグ化インターフェロン-β-１ａの特定は知らされてなかった。腫瘍は最後の投与量の後に切除し、ＥＲＫリン酸化分析のために凍結した。
【００９１】
結果。図３は、ビヒクル対照、ＰＤ３２５９０１、ペグ化インターフェロン-β-１ａ、ならびにペグ化インターフェロン-β-１ａおよびＰＤ３２５９０１がＳＫ-ＭＥＬ-１ヒトメラノーマ細胞を接種されたヌードマウスのＳＫ-ＭＥＬ-１腫瘍の体積に及ぼす効果を説明する。図３は、全治療群とビヒクル対照群間の有意差を説明する。図３はまた、ペグ化インターフェロン-β-１ａとＰＤ３２５９０１の両方で治療した場合と、いずれか単一の薬剤で治療した場合のマウスの腫瘍の体積の有意差を説明する。治療群とビヒクル対照群間の最小二乗平均の推定値の差は、ペグ化インターフェロン-β-１ａおよびＰＤ３２５９０１：ＰＤ３２５９０１（-４．５２）、ペグ化インターフェロン-β-１ａ（-４．７７）およびペグ化インターフェロン-β-１ａ、ならびにＰＤ３２５９０１（-８．６３）の相加効果を示唆する。ＰＤ３２５９０１治療群と、ペグ化インターフェロン-β-１ａおよびＰＤ３２５９０１治療群は、ビヒクルおよびペグ化インターフェロン-β-１ａ治療群と比べて、ＥＲＫリン酸化の有意な阻害を示した。図４を参照のこと。
【００９２】
ヒトＡ-３７５メラノーマ腫瘍を有するヌードマウスにおけるペグ化インターフェロン-β-１ａ単独およびテモゾロミドとの併用の有効性
【００９３】
８〜１０週齢のヌードマウス（Ｃｈａｒｌｅｓ  Ｒｉｖｅｒ  Ｌａｂｓより）は、側腹部領域に５０％のマトリゲルで２Ｘ１０６のＡ３７５ヒトメラノーマ細胞を皮下に接種された。平均の腫瘍体積が約２００ｍｍ３に達したとき、腫瘍を持つマウスは治療群に無作為に割り付けた。ペグ化ＩＦＮ-β-１ａは、ｐＨ４．８の２０ｍＭの酢酸／酢酸ナトリウムおよび１５０ｍＭのアルギニン／ＨＣｌ中（４．８Ａバッファ）に供給した。ｐＨ４．８の２０ｍＭの酢酸／酢酸ナトリウムおよび１５０ｍＭのアルギニン／ＨＣｌ（４．８Ａバッファ）はビヒクル対照として用いた。テモゾロミドは、０．２％ヒドロキシルプロピルメチルセルロース（ＨＰＭＣ）緩衝液中に供給した。ＨＰＭＣバッファはビヒクル対照として用いた。
【００９４】
マウス（１群あたり７〜９個体）を無作為に割り付け、表１に要約したように治療した。
【００９５】
【表１】
2013538856.tif 000002
【００９６】
結果。図５は、ビヒクル対照、ペグ化インターフェロン-β-１ａ単独、テモゾロミド単独、ならびにテモゾロミドと併用したペグ化インターフェロン-β-１ａで治療した後のヒトＡ-３７５メラノーマ腫瘍を有するヌードマウスの腫瘍の体積を説明する。観察したように、ペグ化インターフェロン-β-１ａとテモゾロミドの併用のほうが、薬剤単独またはビヒクル単独のいずれかで治療したマウスに比べて、腫瘍の成長をかなり阻害したことを示した。
【００９７】
０．１、０．２、０．４、０．８または１．６ｍｇ／ｋｇのペグ化インターフェロン-β-１ａで治療したマウスについての腫瘍の成長曲線は、用量が増加するにつれて腫瘍の成長阻害が増加することを明らかにした（データ示さず）。しかし、０．４または０．８ｍｇ／ｋｇのペグ化インターフェロン-β-１ａで治療したマウスでは、腫瘍の成長阻害はほぼ同じであった（データ示さず）。さらに、１．６ｍｇ／ｋｇのペグ化インターフェロン-β-１ａで治療したマウスのほうが、０．４または０．８ｍｇ／ｋｇのペグ化インターフェロン-β-１ａで治療したマウスより、腫瘍の成長阻害がもっと大きいことを示した（データ示さず）。
【００９８】
実施例２
【００９９】
ＳＮ１２Ｃ腎癌腫瘍を有するＳＣＩＤマウスにおけるペグ化インターフェロン-β-１ａ単独およびソラフェニブ、ベバシズマブまたはテムシロリムスとの併用の有効性
【０１００】
８〜１０週齢のＳＣＩＤマウス（Ｃｈａｒｌｅｓ  Ｒｉｖｅｒ  Ｌａｂｓより）は、側腹部領域に５０％のマトリゲルで２Ｘ１０６のＳＮ１２Ｃ腎癌腫瘍細胞を皮下に接種された。平均の腫瘍体積が約２５０ｍｍ３に達したとき、腫瘍を持つマウスは治療群に無作為に割り付けた。ペグ化ＩＦＮ-β-１ａは、ｐＨ４．８の２０ｍＭの酢酸／酢酸ナトリウムおよび１５０ｍＭのアルギニン／ＨＣｌ中（４．８Ａバッファ）に供給した。ソラフェニブはＣｒｅｍｏｐｈｏｒエタノール食塩水混合物（ＣＥＳバッファ）中に供給された。ベバシズマブはリン酸塩緩衝食塩水（ＰＢＳ）バッファ中に供給された。テムシロリムスは０．９％ＮａＣｌを含有するバッファ中に供給された。
【０１０１】
マウス（１群あたり９〜１０個体）を無作為に割り付け、表２に要約したように治療した。
【０１０２】
【表２】
2013538856.tif 000003
【０１０３】
結果。図６Ａは、ビヒクル対照、０．８ｍｇ／ｋｇまたは１．６ｍｇ／ｋｇのペグ化インターフェロン-β-１ａで治療した後のヒトＳＮ１２Ｃ腎癌腫瘍を有するＳＣＩＤマウスの腫瘍の体積を説明する。図６Ｂは、ビヒクル対照、０．８ｍｇ／ｋｇまたは１．６ｍｇ／ｋｇのペグ化インターフェロン-β-１ａで治療した後のヒトＳＮ１２Ｃ腎癌腫瘍を有するＳＣＩＤマウスの％Ｔ／Ｃを説明する。観察したように、ペグ化インターフェロン-β-１ａで治療したマウスは腫瘍の成長阻害を示した。このことはＤｕｎｎｅｔｔポストテストの後の反復測定分散分析（Ａｎｏｖａ-Ｄｕｎｎｅｔｔ）統計的分析結果によって確認し、ペグ化インターフェロン-β-１ａ治療マウス（０．８ｍｇ／ｋｇ）対ビヒクル治療マウスにおける腫瘍の成長阻害についてはｐ＜０．０５、およびペグ化インターフェロン-β-１ａ治療マウス（１．６ｍｇ／ｋｇ）対ビヒクル治療マウスにおける腫瘍の成長阻害についてはｐ＜０．００１というｐ値を示す。ペグ化インターフェロン-β-１ａはそのビヒクルに比べて、０．８ｍｇ／ｋｇおよび１．６ｍｇ／ｋｇの用量で投与したときに、用量依存様式で統計的に有意な腫瘍の成長阻害を示した。
【０１０４】
図７Ａは、ビヒクル対照、ベバシズマブ単独４ｍｇ／ｋｇ、０．８ｍｇ／ｋｇのペグ化インターフェロン-β-１ａ、およびベバシズマブとペグ化インターフェロン-β-１ａの併用で治療した後のヒトＳＮ１２Ｃ腎癌腫瘍を有するＳＣＩＤマウスの腫瘍の体積を説明する。図７Ｂは、ビヒクル対照、ベバシズマブ単独４ｍｇ／ｋｇ、０．８ｍｇ／ｋｇのペグ化インターフェロン-β-１ａ、およびベバシズマブとペグ化インターフェロン-β-１ａの併用で治療した後のヒトＳＮ１２Ｃ腎癌腫瘍を有するＳＣＩＤマウスの％Ｔ／Ｃを説明する。観察したように、０．８ｍｇ／ｋｇのペグ化インターフェロン-β-１ａとベバシズマブ４ｍｇ／ｋｇの併用で治療したマウスのほうが腫瘍の成長阻害が大きいことを示した。このことはＤｕｎｎｅｔｔポストテストの後の反復測定分散分析（Ａｎｏｖａ-Ｄｕｎｎｅｔｔ）統計的分析結果によって確認し、ペグ化インターフェロン-β-１ａとベバシズマブ治療マウス対ペグ化インターフェロン-β-１ａ治療マウスにおける腫瘍の成長阻害についてはｐ＜０．０１、ペグ化インターフェロン-β-１ａとベバシズマブ治療マウス対ベバシズマブ治療マウスにおける腫瘍の成長阻害についてはｐ＜０．００１、およびペグ化インターフェロン-β-１ａとベバシズマブ治療マウス対ビヒクル対照治療マウスにおける腫瘍の成長阻害についてはｐ＜０．００１というｐ値を示す。ベバシズマブ４ｍｇ／ｋｇを併用した０．８ｍｇ／ｋｇのペグ化インターフェロン-β-１ａは、いずれかの薬剤単独に比べて、統計的に有意な腫瘍の成長阻害を示した。
【０１０５】
図８Ａは、ビヒクル対照、ソラフェニブ６０ｍｇ／ｋｇ、０．８ｍｇ／ｋｇのペグ化インターフェロン-β-１ａ、および並行投与スケジュールにおけるソラフェニブとペグ化インターフェロン-β-１ａの併用で治療した後のヒトＳＮ１２Ｃ腎癌腫瘍を有するＳＣＩＤマウスの腫瘍の体積を説明する。観察したように、ソラフェニブとペグ化インターフェロン-β-１ａの併用で治療したマウスのほうが腫瘍の成長阻害が大きいことを示した。このことはＤｕｎｎｅｔｔポストテストの後の反復測定分散分析（Ａｎｏｖａ-Ｄｕｎｎｅｔｔ）統計的分析結果によって確認し、ソラフェニブとペグ化インターフェロン-β-１ａの併用治療マウス対ペグ化インターフェロン-β-１ａ単独治療マウスにおける腫瘍の成長阻害についてはｐ＜０．０５、ソラフェニブとペグ化インターフェロン-β-１ａの併用治療マウス対ソラフェニブ単独治療マウスにおける腫瘍の成長阻害についてはｐ＜０．０１、ソラフェニブとペグ化インターフェロン-β-１ａの併用治療マウス対ビヒクル単独治療マウスにおける腫瘍の成長阻害についてはｐ＜０．００１というｐ値を示す。ペグ化インターフェロン-β-１ａとのソラフェニブの並行投与のほうが、単一薬剤での治療より有意に優れていた。
【０１０６】
図８Ｂは、ビヒクル対照、ソラフェニブ単独、ペグ化インターフェロン-β-１ａ単独、および並行投与スケジュールにおけるソラフェニブとペグ化インターフェロン-β-１ａの併用で治療した後のヒトＳＮ１２Ｃ腎癌腫瘍を有するＳＣＩＤマウスの腫瘍の体積を説明する。観察したように、ソラフェニブとペグ化インターフェロン-β-１ａの併用で治療したマウスのほうが腫瘍の成長阻害が大きいことを示した。このことはＤｕｎｎｅｔｔポストテストの後の反復測定分散分析（Ａｎｏｖａ-Ｄｕｎｎｅｔｔ）統計的分析結果によって確認し、ソラフェニブとペグ化インターフェロン-β-１ａの併用治療マウス対ソラフェニブ単独治療マウスにおける腫瘍の成長阻害についてはｐ＜０．０１、およびソラフェニブとペグ化インターフェロン-β-１ａの併用治療マウス対ビヒクル単独治療マウスにおける腫瘍の成長阻害についてはｐ＜０．００１というｐ値を示す。ソラフェニブの後のペグ化インターフェロン-β-１ａの連続投与のほうが、ソラフェニブ単独治療より統計的に優れていたが、ペグ化インターフェロン-β-１ａ単独とは差がなかった。
【０１０７】
図９Ａは、ビヒクル対照、テムシロリムス単独５０ｍｇ／ｋｇ、ペグ化インターフェロン-β-１ａ単独０．８ｍｇ／ｋｇ、およびテムシロリムスとペグ化インターフェロン-β-１ａの併用で治療した後のヒトＳＮ１２Ｃ腎癌腫瘍を有するＳＣＩＤマウスの腫瘍の体積を説明する。図９Ｂは、ビヒクル対照、テムシロリムス単独５０ｍｇ／ｋｇ、０．８ｍｇ／ｋｇのペグ化インターフェロン-β-１ａ、およびテムシロリムスとペグ化インターフェロン-β-１ａの併用で治療した後のヒトＳＮ１２Ｃ腎癌腫瘍を有するＳＣＩＤマウスの％Ｔ／Ｃを示す。観察したように、０．８ｍｇ／ｋｇのインターフェロン-β-１ａとテムシロリムス５０ｍｇ／ｋｇの併用で治療したマウスのほうが腫瘍の成長阻害が大きいことを示した。このことはＤｕｎｎｅｔｔポストテストの後の反復測定分散分析（Ａｎｏｖａ-Ｄｕｎｎｅｔｔ）統計的分析結果によって確認し、ペグ化インターフェロン-β-１ａおよびテムシロリムス治療マウス対ビヒクル対照治療マウスにおける腫瘍の成長阻害についてはｐ＜０．００１、ペグ化インターフェロン-β-１ａおよびテムシロリムス治療マウス対ペグ化インターフェロン-β-１ａ治療マウスにおける腫瘍の成長阻害についてはｐ＜０．００１、ペグ化インターフェロン-β-１ａおよびテムシロリムス治療マウス対テムシロリムス治療マウスにおける腫瘍の成長阻害についてはｐ＜０．００１というｐ値を示す。テムシロリムスと併用したペグ化インターフェロン-β-１ａ（０．８ｍｇ／ｋｇ）で治療したマウスのほうが、単一薬剤で治療したマウスに比べて、腫瘍の成長阻害が有意に優れることを示した。
【０１０８】
実施例３
【０１０９】
ヒトＳＷ-６２０結腸癌腫瘍を有するヌードマウスにおけるペグ化インターフェロン-β-１ａ単独およびアバスチン（ベバシズマブ）またはイリノテカンとの併用の有効性
【０１１０】
８〜１０週齢のヌードマウス（Ｃｈａｒｌｅｓ  Ｒｉｖｅｒ  Ｌａｂｓより）は、側腹部領域に５０％のマトリゲルで１Ｘ１０６のＳＷ６２０結腸癌細胞を皮下に接種された。平均の腫瘍体積が約２００ｍｍ３に達したとき、腫瘍を持つマウスは治療群に無作為に割り付けた。ペグ化ＩＦＮ-β-１ａは、ｐＨ４．８の２０ｍＭの酢酸／酢酸ナトリウムおよび１５０ｍＭのアルギニン／ＨＣｌ中（４．８Ａバッファ）に供給した。マウスは無作為に割り付け、表３に要約したように治療した。
【０１１１】
【表３】
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【０１１２】
結果。図１０は、ビヒクル対照（４．８Ａバッファ）、およびの濃度が０．４ｍｇ／ｋｇ、０．８ｍｇ／ｋｇおよび１．６ｍｇ／ｋｇであるペグ化ＩＦ-β-１ａで治療した後のヒトＳＷ-６２０結腸癌腫瘍を有するヌードマウスの腫瘍の体積を説明する。マウスは週に２回（ＢＩＷ）、４週間皮下に注入された。観察したように、腫瘍成長の阻害は用量依存的であった。図１１は、ビヒクル対照、アバスチン（ベバシズマブ）単独、イリノテカン単独、ペグ化インターフェロン-β-１ａ単独、アバスチンとペグ化インターフェロン-β-１ａの併用、ならびにイリノテカンとペグ化インターフェロン-β-１ａの併用で治療した後のヒトＳＷ-６２０結腸癌腫瘍を有するヌードマウスの腫瘍の体積を説明する。観察したように、０．８ｍｇ／ｋｇのペグ化インターフェロン-β-１ａとアバスチン４ｍｇ／ｋｇで治療したマウスのほうが、いずれかの薬剤単独で治療したマウスに比べて、腫瘍の成長阻害が大きいことを示した。対照的に、０．８ｍｇ／ｋｇのペグ化インターフェロン-β-１ａとイリノテカン１０ｍｇ／ｋｇは、イリノテカン単独で治療したマウスと同じ腫瘍の成長阻害であった。
【０１１３】
実施例４
【０１１４】
ヒトＭＤＡ-ＭＢ-２３１乳癌腫瘍を有するＳＣＩＤマウスにおけるペグ化インターフェロン-β-１ａ単独およびパクリタキセルとの併用の有効性
【０１１５】
８〜１０週齢のヌードマウス（Ｃｈａｒｌｅｓ  Ｒｉｖｅｒ  Ｌａｂｓより）は、側腹部領域に５０％のマトリゲルで５Ｘ１０６のＭＤＡ-ＭＢ-２３１乳癌細胞を皮下に接種された。平均の腫瘍体積が約２００ｍｍ３に達したとき、腫瘍を持つマウスは治療群に無作為に割り付けた。ペグ化ＩＦＮ-β-１ａは、ｐＨ４．８の２０ｍＭの酢酸／酢酸ナトリウムおよび１５０ｍＭのアルギニン／ＨＣｌ中（４．８Ａバッファ）に供給した。パクリタキセルはＣｒｅｍｏｐｈｏｒエタノール食塩水混合物（ＣＥＳバッファ）中に供給した。
【０１１６】
マウス（１群あたり１０個体）を無作為に割り付け、表４に要約したように治療した。
【０１１７】
【表４】
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【０１１８】
結果。図１２はビヒクル対照およびパクリタキセルで治療したヒトＭＤＡ-ＭＢ-２３１乳癌腫瘍を有するＳＣＩＤマウスの腫瘍の体積を説明する。観察したように、パクリタキセルで治療したマウスのほうがビヒクル対照で治療したマウスに比べて、腫瘍の成長阻害が大きいことを示した。図１３Ａは、ビヒクル対照および用量が０．４ｍｇ／ｋｇ、０．８ｍｇ／ｋｇおよび１．６ｍｇ／ｋｇのペグ化ＩＦＮ-β-１ａで治療したヒトＭＤＡ-ＭＢ-２３１乳癌腫瘍を有するＳＣＩＤマウスの腫瘍の体積を説明する。図１３Ｂは、ビヒクル対照および用量が０．４ｍｇ／ｋｇ、０．８ｍｇ／ｋｇおよび１．６ｍｇ／ｋｇのペグ化ＩＦＮ-β-１ａで治療したヒトＭＤＡ-ＭＢ-２３１乳癌腫瘍を有するＳＣＩＤマウスの％Ｔ／Ｃを要約する。観察したように、０．４〜１．６ｍｇ／ｋｇの範囲のペグ化インターフェロン-β-１ａで治療したマウスのほうが、いずれかのビヒクル対照で治療したマウスに比べて、腫瘍の成長阻害が大きいことを示した。図１３Ｃは、ビヒクル対照、ＩＦＮ-β-１ａ、またはペグ化ＩＦＮ-β-１ａで治療したヒトＭＤＡ-ＭＢ-２３１乳癌腫瘍を有するヌードマウスの腫瘍の体積を説明する。観察したように、ペグ化ＩＦＮ-β-１ａで治療したマウスのほうが、ＩＦＮ-β-１ａまたはビヒクル対照で治療したマウスに比べて、腫瘍の成長阻害が大きいことを示した。
【０１１９】
図１４Ａは、ビヒクル対照、ペグ化ＩＦＮ-β-１ａ単独０．８ｍｇ／ｋｇ、パクリタキセル単独２５ｍｇ／ｋｇ、および０．８ｍｇ／ｋｇのペグ化ＩＦＮ-β-１ａとパクリタキセル２５ｍｇ／ｋｇの併用で治療したヒトＭＤＡ-ＭＢ-２３１乳癌腫瘍を有するＳＣＩＤマウスの腫瘍の体積を説明する。図１４Ｂは、ビヒクル対照、ペグ化ＩＦＮ-β-１ａ単独０．８ｍｇ／ｋｇ、パクリタキセル単独２５ｍｇ／ｋｇ、および０．８ｍｇ／ｋｇのペグ化ＩＦＮ-β-１ａとパクリタキセル２５ｍｇ／ｋｇの併用で治療したヒトＭＤＡ-ＭＢ-２３１乳癌腫瘍を有するＳＣＩＤマウスの％Ｔ／Ｃを要約する。図１５Ａは、ビヒクル対照、ペグ化ＩＦＮ-β-１ａ単独１．６ｍｇ／ｋｇ、パクリタキセル単独２５ｍｇ／ｋｇ、および１．６ｍｇ／ｋｇのペグ化ＩＦＮ-β-１ａとパクリタキセル２５ｍｇ／ｋｇの併用で治療したヒトＭＤＡ-ＭＢ-２３１乳癌腫瘍を有するＳＣＩＤマウスの腫瘍の体積を説明する。図１５Ｂは、ビヒクル対照、ペグ化ＩＦＮ-β-１ａ単独１．６ｍｇ／ｋｇ、パクリタキセル単独２５ｍｇ／ｋｇ、および１．６ｍｇ／ｋｇのペグ化ＩＦＮ-β-１ａとパクリタキセル２５ｍｇ／ｋｇの併用で治療したヒトＭＤＡ-ＭＢ-２３１乳癌腫瘍を有するＳＣＩＤマウスの％Ｔ／Ｃを要約する。図１４および図１５に観察したように、０．８ｍｇ／ｋｇまたは１．６ｍｇ／ｋｇのいずれかのペグ化インターフェロン-β-１ａとパクリタキセルの併用のほうが、単一薬剤での治療に比べて、腫瘍の成長阻害が統計的に優れていた。このことはＤｕｎｎｅｔｔポストテストの後の反復測定分散分析（Ａｎｏｖａ-Ｄｕｎｎｅｔｔ）統計的分析結果によって確認し、ペグ化インターフェロン-β-１ａとパクリタキセルの治療マウス対パクリタキセル治療マウスにおける腫瘍の成長阻害についてはｐ＜０．００１、およびペグ化インターフェロン-β-１ａとパクリタキセルの治療マウス対ペグ化インターフェロン-β-１ａ治療マウスにおける腫瘍の成長阻害についてはｐ＜０．０００１というｐ値を示す。
【０１２０】
実施例５
【０１２１】
ヒトＷＭ-２６６-４メラノーマを有するヌードマウスにおけるペグ化ＩＦＮ-β-１ａの有効性
【０１２２】
８〜１０週齢のヌードマウス（Ｃｈａｒｌｅｓ  Ｒｉｖｅｒ  Ｌａｂｓより）は、側腹部領域に５０％のマトリゲルで２Ｘ１０６のＷＭ-２６６-４メラノーマ細胞を皮下に接種された。平均の腫瘍体積が約４００ｍｍ３に達したとき、腫瘍を持つマウスは治療群に無作為に割り付けた。ＷＭ-２６６-４腫瘍のヌードマウス（４００立方ｍｍ）はビヒクル対照、０．１、０．２、０．４、または、０．８ｍｇ／ｋｇのＰＥＧ  ＩＦＮ  β-１ａの皮下注射(ＳＣ)を週に２回（ＢＩＷ）、投与後フォローアップ付きの４週間投与された。マウスはフォローアップの間に用量依存の腫瘍阻害／退縮について検討された。もう１つ別の実験では、ＷＭ-２６６-４腫瘍のヌードマウス（２００ｍｍ３）は、ビヒクル対照、０．４、０．８、または１．６ｍｇ／ｋｇのＰＥＧ  ＩＦＮ  β-１ａ皮下注射(ＳＣ)を週に１回（ＱＷ）、週に２回(ＢＩＷ)、または週に３回（ＴＩＷ）、４週間投与された。同じ試験では、ビヒクル治療対照の腫瘍は平均２０００ｍｍ３まで成長した。マウスはその後、第４６日目に０．８または１．６ｍｇ／ｋｇのＰＥＧ  ＩＦＮ  β-１ａの皮下注射(ＳＣ)を週に２回、４週間（ＢＩＷＸ４）治療した。
【０１２３】
結果。図１６は、ビヒクル対照、および０．１ｍｇ／ｋｇ、０．２ｍｇ／ｋｇ、０．４ｍｇ／ｋｇおよび０．８ｍｇ／ｋｇのペグ化インターフェロン-β-１ａで治療したヒトＷＭ-２６６-４メラノーマ腫瘍を有するヌードマウスの腫瘍の体積を説明する。観察したように、ビヒクル治療マウスと用量０．２〜０．８ｍｇ／ｋｇで治療したマウスとの間の腫瘍阻害に有意差がある（ｐ＜０．００１）。マウスはまた、薬物および腫瘍の再成長に用量依存的な腫瘍阻害／退縮を表した。
【０１２４】
図１７Ａ〜Ｃは、ビヒクル対照、０．４ｍｇ／ｋｇ、０．８ｍｇ／ｋｇまたは１．６ｍｇ／ｋｇのペグ化インターフェロン-β-１ａで週に１回（ＱＷ）、週に２回（ＢＩＷ）、または週に３回（ＴＩＷ）治療したヒトＷＭ-２６６-４メラノーマ腫瘍を有するヌードマウスの腫瘍の体積を説明する。マウスは薬物および腫瘍の再成長に用量依存的な腫瘍阻害／退縮を表した。大きな腫瘍（２０００〜２４００立方ｍｍ）の腫瘍退縮がこの実験でも認められた。図１８を参照のこと。図１９Ａ〜Ｃは、ペグ化インターフェロン-β-１ａで４８時間治療を受けたＷＭ-２６６-４メラノーマ腫瘍細胞内のカスパーゼ活性およびＰＡＲＰ切断への影響を説明する。
【０１２５】
上述の種々の実施形態は説明のためだけに提供され、請求の発明を制限すると解釈されないものである。当業者は、本明細書に説明および記載された以下の実施形態および用途なしに、および以下の請求項に記載の請求の発明の精神および範囲から逸脱することなく、請求の発明に様々な修正および変更がなされることを容易に認識するだろう。
【図１】
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【図２】
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【図３】
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【図４】
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【図５】
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【図６Ａ−Ｂ】
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【図７Ａ−Ｂ】
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【図８Ａ】
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【図８Ｂ】
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【図９Ａ−Ｂ】
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【図１０】
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【図１１】
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【図１２】
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【図１３Ａ−Ｂ】
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【図１３Ｃ】
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【図１４Ａ−Ｂ】
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【図１５Ａ−Ｂ】
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【図１６】
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【図１７Ａ】
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【図１７Ｂ】
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【図１７Ｃ】
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【図１８】
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【図１９Ａ−Ｃ】
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【国際調査報告】
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