(57)【要約】  少なくとも１つの医薬活性成分の放出のための医薬投与形態がクレームされる。医薬投与形態は、ポリマーマトリックス、マトリックス内に組込まれるポリマー−脂質ナノ粒子、および、医薬活性成分を含む。ポリマーマトリックスは、たとえば、オイドラギット（登録商標）Ｅ１００およびカルボキシメチルセルロースナトリウムなどの、少なくとも２つの架橋したカチオン性ポリマーおよびアニオン性ポリマーから形成される。ポリマーマトリックスは、ローカストビーンに由来するものなど、中性ポリマーも含み得る。ポリマー−脂質ナノ粒子は、オイドラギット（登録商標）Ｅ１００および／またはキトサンなどの少なくとも１つのポリマー、ならびに、レシチンなどの少なくとも１つのリン脂質から形成される。ポリマーおよびリン脂質は、トリポリリン酸ナトリウムなどのキレート剤により架橋される。活性成分は、任意の医薬活性化合物であり得、特に、パーキンソン病の治療のためのレボドパなど、吸収の悪い化合物であり得る。【特許請求の範囲】
【請求項１】
少なくとも１つの医薬活性成分の放出のための医薬投与形態であって、前記医薬投与形態は、
少なくとも２つの架橋したポリマーから形成されるポリマーマトリックスと、
少なくとも１つのポリマーおよび少なくとも１つのリン脂質から形成され、前記ポリマーマトリックス内に組込まれるポリマー−脂質ナノ粒子と、
少なくとも１つの医薬活性成分とを含有する、医薬投与形態。
【請求項２】
前記ポリマー−脂質ナノ粒子は、前記医薬活性成分を含む、請求項１に記載の医薬投与形態。
【請求項３】
前記ポリマーマトリックスは、前記医薬活性成分を含む、請求項１に記載の医薬投与形態。
【請求項４】
前記２つの架橋したポリマーは、カチオン性ポリマーおよびアニオン性ポリマーである、請求項１から３のいずれかに記載の医薬投与形態。
【請求項５】
前記カチオン性ポリマーは、ポリ（ブチルメタクリレート−co−（２−ジメチルアミノエチル）メタクリレート−co−メチルメタクリレート）１：２：１である、請求項４に記載の医薬投与形態。
【請求項６】
前記アニオン性ポリマーは、カルボキシメチルセルロースナトリウムである、請求項４または５のいずれかに記載の医薬投与形態。
【請求項７】
前記ポリマーマトリックスは、追加的に、中性ポリマーである第３のポリマーから形成される、請求項１から６のいずれかに記載の医薬投与形態。
【請求項８】
前記ポリマーの組合せにより、前記医薬投与形態が胃保持性となる、請求項７に記載の医薬投与形態。
【請求項９】
前記中性ポリマーは、ガラクトマンナンポリマーである、請求項７または８に記載の医薬投与形態。
【請求項１０】
前記中性ガラクトマンナンポリマーは、ローカストビーンに由来する、請求項９に記載の医薬投与形態。
【請求項１１】
前記ポリマー−脂質ナノ粒子中の前記ポリマーは、メタクリレート−co−（２−ジメチルアミノエチル）メタクリレート−co−メチルメタクリレート  １：２：１である、請求項１から１０のいずれかに記載の医薬投与形態。
【請求項１２】
前記ポリマー−脂質ナノ粒子中の前記ポリマーは、キトサンである、請求項１から１０のいずれかに記載の医薬投与形態。
【請求項１３】
前記ポリマー−脂質ナノ粒子中の前記ポリマーは、メタクリレート−co−（２−ジメチルアミノエチル）メタクリレート−co−メチルメタクリレート  １：２：１およびキトサンである、請求項１から１０のいずれかに記載の医薬投与形態。
【請求項１４】
前記ポリマー−脂質ナノ粒子中の前記リン脂質は、レシチンである、請求項１から１３のいずれかに記載の医薬投与形態。
【請求項１５】
前記ポリマー−脂質ナノ粒子は、前記ポリマーおよび前記リン脂質をキレート剤により架橋することにより形成される、請求項１から１４のいずれかに記載の医薬投与形態。
【請求項１６】
前記キレート剤は、トリポリリン酸ナトリウムである、請求項１５に記載の医薬投与形態。
【請求項１７】
前記ポリマーマトリックスは、摂取されると、制御された態様で膨張し、前記医薬活性成分を放出する、請求項１から１６のいずれかに記載の医薬投与形態。
【請求項１８】
前記ポリマーマトリックスは、前記マトリックスの膨張する能力を増加させる少なくとも１つの添加剤をさらに含む、請求項１から１７のいずれかに記載の医薬投与形態。
【請求項１９】
前記添加剤は、多糖類ポリマーである、請求項１８に記載の医薬投与形態。
【請求項２０】
前記多糖類ポリマーは、プルランである、請求項１９に記載の医薬投与形態。
【請求項２１】
前記ポリマーマトリックスは、少なくとも１つの賦形剤をさらに含む、請求項１から２０のいずれかに記載の医薬投与形態。
【請求項２２】
前記医薬活性成分は、レボドパである、請求項１から２１のいずれかに記載の医薬投与形態。
【請求項２３】
２つの医薬活性成分を含み、第１の医薬活性成分は、前記ポリマー−脂質ナノ粒子内に組込まれ、第２の医薬活性成分は、前記ポリマーマトリックス内に組込まれる、請求項１から２２のいずれかに記載の医薬投与形態。
【請求項２４】
パーキンソン病の治療における使用のための、請求項１から２３のいずれかに記載の医薬投与形態。
【請求項２５】
医薬活性成分の放出のための医薬投与形態を調製する方法であって、前記方法は、
少なくとも２つのポリマーを架橋することによりポリマーマトリックスを合成するステップと、
少なくとも１つのポリマーおよび少なくとも１つのリン脂質からポリマー−脂質ナノ粒子を合成するステップと、
前記ポリマー−脂質ナノ粒子を前記ポリマーマトリックス内に組込むステップとを含み、
前記医薬活性成分は、前記ポリマーマトリックスおよび／または前記ポリマー−脂質ナノ粒子のいずれかに添加される、方法。
【請求項２６】
前記医薬活性成分は、前記ポリマー−脂質ナノ粒子に添加される、請求項２５に記載の方法。
【請求項２７】
前記医薬活性成分は、前記ポリマーマトリックスに添加される、請求項２５に記載の方法。
【請求項２８】
前記２つの架橋したポリマーは、カチオン性ポリマーおよびアニオン性ポリマーである、請求項２５から２７のいずれかに記載の方法。
【請求項２９】
前記カチオン性ポリマーは、メタクリレート−co−（２−ジメチルアミノエチル）メタクリレート−co−メチルメタクリレート  １：２：１である、請求項２８に記載の方法。
【請求項３０】
前記アニオン性ポリマーは、カルボキシメチルセルロースナトリウムである、請求項２８または２９に記載の方法。
【請求項３１】
前記メタクリレート−co−（２−ジメチルアミノエチル）メタクリレート−co−メチルメタクリレート  １：２：１：カルボキシメチルセルロースナトリウムの比は、０．５：１である、請求項３０に記載の方法。
【請求項３２】
前記ポリマーマトリックスを合成するために、中性ポリマーも用いられる、請求項２５から３１のいずれかに記載の方法。
【請求項３３】
前記中性ポリマーは、ガラクトマンナンポリマーである、請求項３２に記載の方法。
【請求項３４】
前記中性ガラクトマンナンポリマーは、ローカストビーンに由来する、請求項３３に記載の方法。
【請求項３５】
前記ポリマー−脂質ナノ粒子を合成するために用いられる前記ポリマーは、メタクリレート−co−（２−ジメチルアミノエチル）メタクリレート−co−メチルメタクリレート  １：２：１である、請求項２５から３４のいずれかに記載の方法。
【請求項３６】
前記ポリマー−脂質ナノ粒子を合成するために用いられる前記ポリマーは、キトサンである、請求項２５から３４のいずれかに記載の方法。
【請求項３７】
前記ポリマー−脂質ナノ粒子を合成するために用いられる前記ポリマーは、メタクリレート−co−（２−ジメチルアミノエチル）メタクリレート−co−メチルメタクリレート  １：２：１およびキトサンである、請求項２５から３４のいずれかに記載の方法。
【請求項３８】
前記ポリマー−脂質ナノ粒子を合成するために用いられる前記リン脂質は、レシチンである、請求項２５から３７のいずれかに記載の方法。
【請求項３９】
前記ポリマーおよび前記リン脂質を架橋するために、キレート剤が用いられる、請求項２５から３８のいずれかに記載の方法。
【請求項４０】
前記キレート剤は、トリポリリン酸ナトリウムである、請求項３９に記載の方法。
【請求項４１】
前記マトリックスの膨張を増加させる能力を有する少なくとも１つの添加剤が、前記ポリマーマトリックス内に組込まれる、請求項２５から４０のいずれかに記載の方法。
【請求項４２】
前記添加剤は、多糖類ポリマーである、請求項４１に記載の方法。
【請求項４３】
前記多糖類ポリマーは、プルランである、請求項４２に記載の方法。
【請求項４４】
少なくとも１つの賦形剤が、前記ポリマーマトリックス内にさらに組込まれる、請求項２５から４３のいずれかに記載の方法。
【請求項４５】
前記医薬活性成分は、レボドパである、請求項２５から４４のいずれかに記載の方法。
【請求項４６】
少なくとも２つの医薬活性成分が前記医薬投与形態内に組込まれ、第１の医薬活性成分は、前記ポリマー−脂質ナノ粒子内に組込まれ、第２の医薬活性成分は、前記ポリマーマトリックス内に組込まれる、請求項２５から４５のいずれかに記載の方法。
【請求項４７】
請求項１から２４のいずれかに記載の医薬投与形態を含有し、前記医薬活性成分は、治療上有効な量で含まれる、医薬組成物。
【請求項４８】
前記医薬活性成分は、レボドパである、請求項４７に記載の医薬組成物。
【請求項４９】
治療上有効な量の少なくとも１つの医薬活性成分を、それを必要とする患者に投与するステップを含み、前記医薬活性成分は、請求項１から２４のいずれかに記載の医薬投与形態の一部である、パーキンソン病を治療する方法。
【請求項５０】
前記医薬活性成分は、レボドパである、請求項４９に記載の方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
発明の分野
本発明は、医薬投与形態に関し、より特定的には、吸収の悪い医薬活性成分をヒトまたは動物に送達するための医薬投与形態に関する。
【背景技術】
【０００２】
発明の背景
パーキンソン病（ＰＤ）の管理および治療の成功は、疾患の何年も前の発見にもかかわらず、難題であり続けている。抗コリン作用薬は、ＰＤの対症療法で使用された初めの薬であった。しかしながら、１９６０年に、ＰＤ患者の線条体からドパミンが欠乏していることが発見された。その後、患者に経口ドパミン治療が施されたが、これは結局、血液脳関門（ＢＢＢ）を超えることができないためより効力が低いことが分かった。
【０００３】
臨床研究により、最終的にドパミンの前駆体であるレボドパ（Ｌ−ドパ）が発見され、１９６１年に初めてＰＤ患者に投与された。しかしながら、バイオアベイラビリティおよび結果的に治療の効力は、主に脱カルボキシル化、ｏ−メチル化、アミノ基転移、および酸化を介したＬ−ドパの広い代謝により、著しく減少されることがわかった。カルビドパおよびベンセラジドなどの芳香族Ｌアミノ酸デカルボキシラーゼ阻害剤とＬ−ドパとを組合せることにより形成される生成物は、代謝または用量を減少させることにより、Ｌ−ドパの副作用を軽減することが示された。このようなすべての欠点、および、ＰＤの管理のための治療剤がいくつか存在するという事実にもかかわらず、Ｌ−ドパは、未だ初期治療のための最も標準的かつ最も有効な薬剤のままである。
【０００４】
Ｌ−ドパの欠点およびバイオアベイラビリティを改善させるために、いくつかの薬剤送達系が開発されている。Ｌ−ドパの最初の即時放出型薬剤送達系は、カルビドパと組合せたＬ−ドパからなる錠剤（Sinemet（登録商標）、Merck & Co., Inc.、米国、ニュージャージー州、ホワイトハウスステーション）であった。カルビドパは、末梢ドパデカルボキシラーゼ（ＤＤＣ）阻害剤である。ベンセラジドは、Madopar（登録商標）（Madopar（登録商標）、F. Hoffmann-La Roche Ltd、スイス、バーゼル）として、Ｌ−ドパと併用して用いられる別のデカルボキシラーゼ阻害剤である。Sinemet（登録商標）およびMadopar（登録商標）のこれらの合剤は、Ｌ−ドパの末梢代謝、ならびに、吐き気および嘔吐などの副作用を軽減し得るが、Ｌ−ドパの長期使用に関連するジスキネジアおよび運動振戦を制御するには有効でない。Stalevo（登録商標）（Orion Pharma、フィンランド、エスポー）として知られる、Ｌ−ドパ、カルビドパおよびエンタカポンの３種類を一つの錠剤とした合剤が、２００３年に米国食品医薬品局（ＦＤＡ）により承認された。しかしながら、エンタカポンは、ジスキネジアなどのドパミンによる副作用を増加させるため、Ｌ−ドパの用量を低減させる必要がある。
【０００５】
即時放出型薬剤送達系に起きる臨床応答の短縮された持続時間を補うために、２００４年に口腔内崩壊錠剤が導入された。Ｌ−ドパ口腔内崩壊錠剤（ＯＤＴｓ）により、患者がより少ない用量をより頻繁に摂取でき、投与量を個々の患者のニーズに合わせることが可能である。市販のＯＤＴであるParcopa（登録商標）（Schwarz Pharma, Inc.、米国、ウィスコンシン州、ミルウォーキー）が２００４年に米国ＦＤＡにより承認された。しかしながら、服用の頻度が高いため、患者の服用の非遵守につながり、所望の一定の送達が達成できないおそれがある。
【０００６】
液体Ｌ−ドパ製剤は、即効性を促すために導入されたが、これらの効果は非常に短期間しか持続しないことが観察された。患者は、５分以内に１〜２時間の持続時間しか液体Ｌ−ドパ製剤からの効果を得られないことが観察された(Stacy,2000)。したがって、Ｌ−ドパ液体製剤は、徐放型（ＣＲ）製剤により増すことが観察されている、効果の「開始（on）」状態の遅れを軽減するために与えられる。しかしながら、Ｌ−ドパ液体製剤は、胃が空になる速度には依存しないであろうが、所望の一定の送達の代わりに拍動性の送達がしばしば得られ、高い投与頻度のため、服用の非遵守の問題があることも観察されている。
【０００７】
徐放型製剤の投与によりＬ−ドパの服用間隔を短くすることは、Ｌ−ドパで遭遇する「消耗（wearing off）」の問題を解決するために利用されるアプローチの１つであった。ＣＲ製剤は、変動的なバイオアベイラビリティおよびその結果、変動的な有効性の問題としばしば関連付けられる。投与後約２〜４時間以内でピーク血漿中濃度に達し、ピーク濃度は、即時放出型（ＩＲ）製剤で得られるよりも低い可能性がある。このため、即効性を得るためには、患者は午前中にＩＲ製剤を服用し、日中にＣＲ製剤またはＩＲおよびＣＲの組合せを服用する必要性が生じ得る（Gasser et al., 1998)。Sinemet（登録商標）ＣＲ（Ｌ−ドパ／カルビドパ；Merck & Co., Inc.、米国、ニュージャージー州、ホワイトハウスステーション）およびMadopar（登録商標）ＨＢＳ（Ｌ−ドパ／ベンセラジド；F.Hoffmann-La Roche Ltd、スイス、バーゼル）は、現在市販されている２つの主要な従来のＣＲ製剤である。
【０００８】
徐放型薬剤送達系の遅延作用を克服するために、二重放出型（ＤＲ）製剤が導入された（Rubin, 2000）。Madopar（登録商標）ＤＲ（SkyePharma、英国、ロンドン）は、現在市販されているＬ−ドパおよびベンセラジドを含有するＤＲ製剤であり、Ｌ−ドパ／ベンセラジドの４：１の比で開発されている。Madopar（登録商標）ＤＲは、即効性と持続的効果との利点を組合せている。ＤＲ製剤をＣＲ製剤と比較すると、平均ジスキネジア評価尺度重症度は、いずれの製剤についても同様であり（２．８±２．５対２．７±３．１）、これは、ＤＲ製剤でもバイオアベイラビリティが変動的であり得ることを暗示している。
【０００９】
多ユニット徐放型浮遊性ミニ錠剤（multiple-unit sustained release floating minitabs）を含む、胃保持性薬剤送達系も開発されている。浮遊性ミニ錠剤は、１２分後にインビトロで浮遊し、＞１３時間浮遊したままであり、８時間にわたり「突発的効果」なしで徐放が得られることが示されている。この製剤の改善により、２０時間を超える徐放が得られた。しかしながら、浮遊性ミニ錠剤の有効性は、水力学的平衡系（ＨＢＳ）とさほど変わらない可能性がある。
【００１０】
Ｌ−ドパが担持された展開性多層状送達系（unfolding multilayer delivery system）が開発され、ビーグル犬に投与された。胃内視鏡により、展開性多層状送達系は投与後１５分でその拡大サイズに展開し、少なくとも２時間その拡大サイズを維持することが示された。全体として、研究により、展開性ＣＲ胃保持性薬剤送達製剤は、Ｌ−ドパの延長された吸収および持続的な血中濃度を達成できることが示された。しかしながら、展開系は人の胃領域内に必要以上に長く滞留するリスクがあり、慢性的な療法には有効でない。
【００１１】
Ｌ−ドパは、すべてのＰＤ患者に結局は必要とされる最も有効な抗パーキンソン病薬剤であるが、これらの送達系は、最適な吸収および後の中枢神経系（ＣＮＳ）でのバイオアベイラビリティにつながるような、延長された期間にわたる一定かつ持続的なＬ−ドパの送達を得ることができないため、最適な臨床応答が得られない。さらに、Ｌ−ドパの代替的な投与の経路が探求されてきた（肺、直腸、静脈内、経皮および十二指腸など）が、経口経路は、慢性的な薬剤療法のために最も簡便な投与経路のままである。
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【００１２】
したがって、Ｌ−ドパ、カルビドパと併用されるＬ−ドパ、または、ベンセラジドと併用されるＬ−ドパの一定の治療的血漿中濃度により、吸収および後のバイオアベイラビリティを改善させる経口製剤を使用した、より簡易化された治療様式の開発が必要とされる。
【課題を解決するための手段】
【００１３】
発明の概要
本発明の第１の局面に従うと、少なくとも１つの医薬活性成分の放出のための医薬投与形態（医薬剤形）であって、
少なくとも２つの架橋したポリマーから形成されるポリマーマトリックスと、
マトリックス内に組込まれ、少なくとも１つのポリマーおよび少なくとも１つのリン脂質から形成されるポリマー−脂質ナノ粒子と、
少なくとも１つの医薬活性成分とを含有する、医薬投与形態が提供される。
【００１４】
医薬活性成分は、ポリマー−脂質ナノ粒子中に含まれてもよく、および／または、ポリマーマトリックス中に含まれてもよい。たとえば、１つの医薬活性成分はポリマー−脂質ナノ粒子中に含まれてもよく、別の医薬活性成分は、ポリマーマトリックス中に含まれてもよい。医薬活性成分の１つは、ヒトまたは動物の小腸内での放出を目的とされてもよく、別の医薬活性成分は、胃領域内での放出を目的とされてもよい。
【００１５】
ポリマーマトリックスを構成する２つの架橋したポリマーは、カチオン性ポリマーおよびアニオン性ポリマーであってもよい。カチオン性ポリマーは、酸可溶性であってもよく、ポリ（ブチルメタクリレート−co−（２−ジメチルアミノエチル）メタクリレート−co−メチルメタクリレート）１：２：１であってもよい。アニオン性ポリマーは水溶性であってもよく、カルボキシメチルセルロースナトリウムであってもよい。
【００１６】
ポリマーマトリックスを構成するために、中性ポリマーを用いてもよい。中性ポリマーは、ガラクトマンナンポリマーであってもよく、ローカストビーンに由来してもよい。
【００１７】
ポリマーの組合せにより、投与形態を胃保持性としてもよい。
ポリマー−脂質ナノ粒子を形成するために用いられるポリマーは、ポリ（ブチルメタクリレート−co−（２−ジメチルアミノエチル）メタクリレート−co−メチルメタクリレート）であってもよい。代替的には、ポリマーはキトサンであってもよく、さらに代替的には、ポリマーは、ポリ（ブチルメタクリレート−co−（２−ジメチルアミノエチル）メタクリレート−co−メチルメタクリレート）およびキトサンの組合せであってもよい。ポリマー−脂質ナノ粒子中のリン脂質は、レシチンであってもよい。
【００１８】
ポリマー−脂質ナノ粒子を形成するためにキレート剤を用いてもよく、キレート剤は、トリポリリン酸ナトリウムであってもよい。
【００１９】
医薬投与形態のポリマーマトリックスは、摂取されると、制御された態様で膨張することが可能であってもよく、この膨張により、マトリックス外への拡散による医薬活性成分の放出を引起してもよい。医薬活性成分の拡散は、ゼロ次形態で行われてもよい。ポリマーマトリックスは、マトリックスの膨張する能力をさらに増加させるために、添加剤を含んでもよい。この添加剤は多糖類ポリマーであってもよく、特に、この多糖類ポリマーはプルランであってもよい。
【００２０】
医薬活性成分はＬ−ドパであってもよく、Ｌ−ドパおよびカルビドパの組合せであってもよく、Ｌ−ドパおよびベンセラジドの組合せ、または、Ｌ−ドパ、カルビドパおよびベンセラジドの組合せであってもよい。
【００２１】
医薬投与形態は、パーキンソン病の治療における使用のためであってもよい。
本発明の第２の局面に従うと、実質的に上に記載したような医薬投与形態（医薬剤形）を調製する方法であって、
少なくとも２つのポリマーを架橋させることによりポリマーマトリックスを合成するステップと、
少なくとも１つのポリマーおよび少なくとも１つのリン脂質からポリマー−脂質ナノ粒子を合成するステップと、
ポリマー−脂質ナノ粒子をポリマーマトリックス内に組込むステップと、
少なくとも１つの医薬活性成分をポリマーマトリックスまたはポリマー−脂質ナノ粒子内に組込むステップとを含む方法が提供される。
【００２２】
本発明の第３の局面に従うと、上に記載したような医薬投与形態（医薬剤形）の、疾患または病状を治療する方法において使用するための医薬を製造する方法における使用が提供される。医薬活性成分は、Ｌ−ドパであってもよく、Ｌ−ドパおよびカルビドパの組合せであってもよく、Ｌ−ドパおよびベンセラジドの組合せ、または、Ｌ−ドパ、カルビドパおよびベンセラジドの組合せであってもよい。疾患はパーキンソン病であってもよい。
【００２３】
本発明の第４の局面に従うと、パーキンソン病を治療する方法であって、実質的に上に記載したような投与形態（剤形）を、それを必要とする患者に投与するステップを含み、投与形態は、治療上有効な量のＬ−ドパ、Ｌ−ドパおよびカルビドパ、Ｌ−ドパおよびベンセラジド、または、Ｌ−ドパ、カルビドパおよびベンセラジドを含有する方法が提供される。
【図面の簡単な説明】
【００２４】
【図１】ａ）天然キトサン（ＣＨＴ）、ｂ）天然オイドラギット（ＥＵＤ）、ｃ）ＥＵＤ／ＣＨＴナノ粒子およびｄ）ＥＵＤナノ粒子のＦＴＩＲスペクトルを示す図である。
【図２】レボドパが担持されたポリメタクリレートコポリマー／キトサン  ポリ−リポナノ粒子の（ａ）拡大率×５０００および（ｂ）拡大率×５５００の走査型電子顕微鏡画像である。
【図３】ａ）レシチンで架橋したＥＵＤ／ＣＨＴおよびｂ）多重架橋したＥＵＤナノ粒子（×３２）の画像を示す図であり、ｃ）ポリマー−脂質ナノ粒子（×８０００）およびｄ）ポリマー−脂質ナノ粒子（×２０００）のＴＥＭ画像を示す図である。
【図４】マトリックス成分の顆粒およびレボドパの結晶を示す、直接圧縮されたＩＰＢマトリックスの表面形態を示す、ａ）拡大率×１７３およびｂ）拡大率×１０，１７８の図であり、ｃ）凍結乾燥中の水分子の昇華後に残されたポアを示す、ＩＰＢマトリックスの水和化および凍結乾燥物の表面形態を示す、拡大率×１６８の図である。
【図５】インターポリマーブレンドの窒素吸着（＋−赤色）および脱着（0−ワインレッド色）等温線である、直線等温線グラフを示す図である。
【図６Ａ】少なくとも２つのポリマーを架橋することによる本発明に従って形成されるインターポリマーブレンド（ＩＰＢｓ）についてのＦＴＩＲスペクトルを示し、ａ）天然ＬＢ、ＥＵＤおよびＣＭＣ、ｂ）製剤Ｅ１〜Ｅ１０、ｃ）製剤Ｅ１〜Ｅ３を示す図である。
【図６Ｂ】ｄ）異なる規定度の酢酸中の製剤Ｅ１およびｅ）異なる規定度の酢酸中の製剤Ｅ３のＩＰＢｓについてのＦＴＩＲスペクトルを示す図である。
【図７】ａ）マトリックス硬度および変形エネルギ、ならびに、ｂ）マトリックス弾性を測定するためのＩＰＢｓの典型的な力−距離プロファイルおよび力−時間プロファイルを示す図である。
【図８】溶解研究後にｐＨが４．５に増加するにつれて、ａ）インターポリマー錠剤マトリックスが（ｂ）その三次元形状を失うことを示す図である。
【図９】ポリマーナノ粒子がインターポリマー錠剤マトリックス内に組込まれるとき、（ａ）インターポリマー錠剤マトリックス形状が、（ｂ）ｐＨ４．５でその三次元形状を保持したことを示す図である。
【図１０】（Ａ）ｐＨ１．５でのインターポリマーブレンド内に組込まれたナノ粒子、（Ｂ）ｐＨ４．５でのナノ粒子を含有しないインターポリマーブレンドマトリックス、（Ｃ）０、３、６、９および１２時間でのｐＨ４．５でのインターポリマーブレンド内に組込まれたナノ粒子の、異なるｐＨでのマトリックスの機械的挙動変化の磁気共鳴画像を示す図である。
【図１１】ＩＰＢマトリックスの典型的な胃付着性の力−距離プロファイルを示す図である。
【図１２】１Ｎの付与力を使用した、異なる規定度の酢酸中の製剤Ｅ３の胃付着性プロファイル化を示す図である。
【図１３】１Ｎの付与力を使用した、製剤Ｅ１〜Ｅ１０の胃付着性プロファイル化を示す図である。
【図１４】０．５Ｎの付与力を使用した、異なる規定度の酢酸中の製剤Ｅ３についての胃付着性プロファイル化を示す図である。
【図１５】０．５Ｎの付与力を使用した、異なる規定度の酢酸中の製剤Ｅ１の上皮付着性プロファイル化を示す図である。
【図１６】０．５Ｎの付与力を使用した、異なる規定度の酢酸中の製剤Ｅ１の上皮付着性プロファイル化を示す図である。
【図１７】異なる規定度の酢酸中の製剤Ｅ3についての膨張度のプロファイルを示す図である。
【図１８】溶解媒体として０．１Ｎ  ＨＣｌを使用した、製剤Ｅ１〜Ｅ１０についての薬剤放出プロファイルを示す図である。
【図１９】溶解媒体として０．１Ｎ  ＨＣｌを使用した、異なる規定度の酢酸中の製剤Ｅ１についての薬剤放出プロファイルを示す図である。
【図２０】溶解媒体として０．１Ｎ  ＨＣｌを使用した、異なる規定度の酢酸中の製剤Ｅ３についての薬剤放出プロファイルを示す図である。
【図２１】溶解媒体としてバッファｐＨ１．５（標準バッファＫＣｌ／ＨＣｌ）を使用した、異なる規定度の酢酸中の製剤Ｅ３についての薬剤放出プロファイルを示す図である。
【図２２】溶解媒体としてバッファｐＨ４．５（０．０２５Ｍ  ＫＨ２ＰＯ４／Ｈ２ＰＯ４）を使用した、異なる規定度の酢酸中の製剤Ｅ３についての薬剤放出プロファイルを示す図である。
【図２３】ＩＰＢマトリックス、Madopar（登録商標）ＨＢＳカプセル剤およびSinemet（登録商標）ＣＲからのレボドパの比較用薬剤放出プロファイルを示す図である。
【図２４】溶解媒体としてバッファｐＨ１．５（標準バッファＫＣｌ／ＨＣｌ）を使用した、ＩＰＢマトリックス内に埋込まれたポリマー−脂質ナノ粒子の薬剤放出プロファイルを示す図である。
【図２５】溶解媒体としてバッファｐＨ４．５（０．０２５Ｍ  ＫＨ２ＰＯ４／Ｈ２ＰＯ４）を使用した、ＩＰＢマトリックス内に埋込まれたポリマー−脂質ナノ粒子の薬剤放出プロファイルを示す図である。
【発明を実施するための形態】
【００２５】
発明の詳細な説明
本発明は、少なくとも１つの医薬活性化合物または成分の放出のための医薬投与形態または医薬組成物を提供する。医薬投与形態は、ポリマーマトリックス、マトリックス内に組込まれたポリマー−脂質ナノ粒子および医薬活性成分を含む。
【００２６】
ポリマーマトリックスは、典型的には、少なくとも２つの架橋したポリマーから形成されるインターポリ電解質複合体である。ポリマーの１つは、カチオン性ポリマーであり得、典型的には、オイドラギット（登録商標）Ｅ１００として市販の、ジメチルアミノエチルメタクリレート、ブチルメタクリレートおよびメチルメタクリレート（たとえば、ポリ（ブチルメタクリレート−co−（２−ジメチルアミノエチル）メタクリレート−co−メチルメタクリレート）１：２：１を主体とするものなど、酸可溶性ポリマーである。別のポリマーは、たとえば、カルボキシメチルセルロースナトリウムなど、好ましくは水溶性のアニオン性ポリマーであり得る。典型的には、ローカストビーンに由来のものなどのガラクトマンナンポリマーである中性ポリマーをポリマーマトリックス内に組込むこともできる。
【００２７】
カチオン性ポリマーおよびアニオン性ポリマーは、典型的には、約０．５：１の割合で配合されて、徐々に分解可能なゲル状の構造またはハイドロゲルが得られる。
【００２８】
ポリマー−脂質ナノ粒子は、少なくとも１つのポリマーおよび少なくとも１つのリン脂質から形成される。好適なポリマーは、ポリ（ブチルメタクリレート−co−（２−ジメチルアミノエチル）メタクリレート−co−メチルメタクリレート）１：２：１（オイドラギットＥ１００）などのカチオン性アクリレート型ポリマーであるか、または、キトサンなどのカチオン性多糖類型ポリマーであるか、またはこれらの組合せである。好適なリン脂質は、レシチンである。ナノ粒子は、ポリマーおよびリン脂質を混合し、トリポリリン酸ナトリウムなどのキレート剤によりそれらを架橋することにより形成される。塩または捕捉剤（sequestrator）などの他の架橋剤も使用することができる。形成されるポリマー−脂質ナノ粒子は、一般的には、内側コアおよび外側コアを有する球状である。ナノ粒子は、中空球状ナノカプセル剤であり得る。
【００２９】
１以上の医薬活性成分をポリマーおよびリン脂質溶液内に組込み、活性成分を担持したナノ粒子を生成することができる。
【００３０】
ナノ粒子および／または医薬活性成分は、ポリマーマトリックスと混合させるか、または、マトリックスが形成する前に、少なくとも２つのポリマーの混合物に添加することができる。同様に、１以上の医薬活性化合物、組成物または成分は、ポリマーマトリックスと混合させるか、または、マトリックスが形成する前に、２以上のポリマーの混合物に添加することもできる。特に、投与形態が、異なる速度または異なる部位での放出のために２つ以上の医薬活性成分を含有する場合、ナノ粒子に１つの活性成分を担持し、ポリマーマトリックスに別の活性成分を担持することができる。たとえば、ポリマー−脂質ナノ粒子内に組込まれる活性医薬成分は、対象の小腸内に放出されることを目的とする化合物であり得、ポリマーマトリックス内に組込まれる別の活性医薬成分は、対象の胃領域内で放出されることを目的とする化合物であり得る。
【００３１】
活性成分は、任意の医薬活性化合物であり得、典型的には、狭い窓の吸収の薬剤など、ヒトまたは動物の体による吸収の悪い化合物である。
【００３２】
医薬投与形態は、さまざまな活性医薬成分の、速度調節され、かつ部位特異的な送達のために、経口、皮下、膣、直腸または経皮経路のいずれか１つを介して投与可能であるように形成することができる。
【００３３】
特定の実施形態では、投与形態は、ポリマーマトリックス、ナノ粒子、ならびに、随意に賦形剤および添加剤などの追加の活性成分を混合し、配合して、混合物を圧縮することにより調製され得、高密度、膨張性および生体付着性の、ポリマー−脂質ナノ粒子が担持された徐放型胃保持性薬剤送達系（ＣＲ−ＧＲＤＤＳ）が製造される。
【００３４】
本発明の同一または異なる実施形態では、投与形態は、パーキンソン病の治療のための抗パーキンソン病薬剤の放出を制御し、標的とする薬剤送達系であり得る。薬剤は、レボドパ（Ｌ−ドパ）、Ｌ−ドパおよびカルビドパ、Ｌ−ドパおよびベンセラジド、または、Ｌ−ドパ、カルビドパおよびベンセラジドであり得る。
【００３５】
一実施形態では、投与形態は、活性成分としてＬ−ドパを含有し、ＰＤの治療用である。別の実施形態では、投与形態は、カルビドパと併用してＬ−ドパを含有する。さらに別の実施形態では、投与形態は、ベンセラジドと併用してＬ−ドパを含有する。ＣＲ−ＧＲＤＤＳは、本発明のためには、Ｌ−ドパなどの吸収の部位が制限される薬剤用の従来の投与形態に好ましい。吸収についての部位特異性は、下部消化管（ＧＩＴ）に存在するｐＨでの薬剤の低溶解性、酵素分解、大腸内のミクロフローラによる薬剤分解、薬剤の化学的不安定性、および、ＧＩＴの内容物への薬剤の結合による。本発明のＣＲ−ＧＲＤＤＳは、これらの薬剤の吸収窓を超える延長された期間にわたり胃中に当該薬剤を保持することが可能であり、好適な吸収およびバイオアベイラビリティを確保し、胃または近接する小腸で必要とされる薬剤を標的とし、薬剤の不規則な濃度または悪影響を減少させ、治療の有効性を向上させる。したがって、服用頻度を減らすことができ、患者の治療計画に対する遵守がより起きやすい。
【００３６】
ポリマーマトリックスは、変更可能な物理化学特性および物理機械特性を有することができ、これにより、ナノ粒子の速度調節された拡散、機械的導入および放出が可能となり、その中に封入された医薬活性成分が放出される。ポリマーマトリックスは、膨張調節などのメカニズムにより、延長された期間にわたり、速度調節された動態で、好ましくはゼロ次放出動態で、活性医薬成分の放出を制御することが可能である。ポリマーマトリックスは、頑強な機械的強度により、その三次元ネットワークおよび形状を保持することも可能である。
【００３７】
ポリマーマトリックスは、摂取されると、制御された態様で膨張することができ、この膨張により、ナノ粒子のマトリックスの外への拡散による放出が行なわれた後、医薬活性成分が放出される。マトリックスは、元のサイズの４倍より大きなサイズに膨張することができ、たとえば、１時間後に＞１００重量％、１２時間後に＞３５０％、２４時間後に＞４５０％まで膨張できる。
【００３８】
マトリックス中のポリマーナノ粒子は、さもなければ三次元ネットワークが失われてしまう４．５および６．８などのより高いｐＨ値で、マトリックスの機械的強度を向上させる。
【００３９】
本発明の投与形態の物理化学的特性および物理機械的特性の解明を以下の実施例で記載する。一定速度の送達で延長された期間にわたりＬ−ドパの吸収およびバイオアベイラビリティを改善させるために、出願人は、三重のメカニズムのアプローチにより新規のポリマー−脂質ナノ粒子がその中に組込まれた、新規のＣＲ−ＧＲＤＤＳを開発した。脂質成分としてのリン脂質との相互作用において混合可能なポリマーが、第１の架橋剤、および随意に、第２の架橋剤としての捕捉剤により多重架橋されて、ポリマー−脂質ナノ粒子が作製される。ポリマー−脂質ナノ粒子は、２つのポリマーを含有し、随意に、第３のポリマーが組込まれてもよいインターポリ電解質複合体を合成することにより生成されたインターポリマーブレンド（ＩＰＢ）中に埋込まれる。ＩＰＢは、塩生成により促進される均質な混合の後に、凍結乾燥および粉砕を伴う、簡便かつ効率的かつ複製可能な技術により生成される。ポリマー−脂質ナノ粒子は、ＩＰＢ内に組込まれ、他の添加剤または賦形剤とともに直接圧縮されて、高密度、膨張性および生体付着性の、ポリ−リポナノ粒子担持ＣＲ−ＧＲＤＤＳが生成される。
【００４０】
本発明の投与形態は、膨張のため胃保持性である、ゼロ次放出を有する、リポナノ粒子のために優先的な吸収を有する、という三重の作用メカニズムを有する。
【００４１】
マトリックスは、ナノ粒子も保護する。
本発明に従って調製される投与形態の物理化学特性および物理機械特性を研究した。
【００４２】
以下の実施例では、一定速度の送達で延長された期間にわたり活性成分の吸収およびバイオアベイラビリティが得られるＣＲ−ＧＲＤＤＳを設計するために、好適な活性成分の一例としてＬ−ドパを使用した。しかしながら、本発明の投与形態では、他の活性化合物を用いることができ、Ｌ−ドパ、Ｌ−ドパ／カルビドパ、Ｌ−ドパ／ベンセラジドおよびＬ−ドパ／カルビドパ／ベンセラジドは、ここの一例に過ぎないことが当業者には明らかとなるであろう。ポリマー−マトリックスおよびポリマー−脂質ナノ粒子を形成するために、他のポリマーおよびリン脂質を使用することも可能であり、ここに示されるもののみに限定されない。
【実施例】
【００４３】
材料および方法
材料
オイドラギットＥ１００（登録商標）（ＥＵＤ）（Evonik Rohm GmbH & Co. KG、ドイツ、ダルムシュタット）、カルボキシメチルセルロースナトリウム（ＣＭＣ）（Sigma-Aldrich Chemie GmbH、スイス、ブーフス（Buchs））、３−（３，４−ジヒドロキシフェニル）−Ｌ−アラニン(Sigma-Aldrich Inc、ドイツ、シュタインハイム）、氷酢酸（Rochelle Chemicals、南アフリカ）、塩酸（ＨＣｌ）（Rochelle Chemicals、南アフリカ）、Ceratonia siliqua種子由来のローカストビーン（Sigma-Aldrich Inc、ドイツ、シュタインハイム）、硫酸バリウム（ＢａＳＯ４）、一塩基性リン酸カリウム（ＫＨ２ＰＯ４）、Aureobasidium pullulans由来のプルラン（Sigma-Aldrich Inc、ドイツ、シュタインハイム）、水酸化ナトリウム（ＮａＯＨ）、クロロホルム（Rochelle Chemicals、南アフリカ）、シリカ、塩化カリウム（ＫＣｌ）（Saarchem、南アフリカ）、ステアリン酸マグネシウム（Merck Chemicals (Pty) Ltd.、南アフリカ）、オルトリン酸（BDH Chemicals、英国、プール）、キトサン（ＣＨＴ）(食品グレード  Wellable group、中国、福建省）、トリポリリン酸ナトリウム（ＴＰＰ）（Sigma-Aldrich Inc、ドイツ、シュタインハイム）、および、レシチン（リポイドＥＰＣＳ、リポイドＡＧ、ドイツ、ルートヴィヒスハーフェン）。
【００４４】
ポリマー−脂質ナノ粒子の合成
秤量した量のＥＵＤおよび異なる量のＣＨＴ含有ＥＵＤを１０ｍＬの０．２Ｎ  ＨＣｌに溶解し、１００ｍｇのＬ−ドパをポリマー溶液中に添加した。リポイドＥＰＣＳ（１００ｍｇ）を１ｍＬのクロロホルムに溶解し、１０分間の機械的撹拌下でＬ−ドパを担持したポリマー溶液に添加した。０．２Ｎ酢酸に溶解した異なる濃度のＴＰＰをさらに１０分間の撹拌下で添加し、その後４８時間凍結乾燥した。
【００４５】
ポリマー−脂質ナノ粒子の粒子径および表面電荷の分析
１７３°の角度に設置した非侵入性後方散乱技術を備えるZetaSizer NanoZS（Malvern Instruments、英国、マルバーン）機器を用いて、ナノ粒子径、粒子分布プロファイルおよびゼータ電位を発生させた。ナノ粒子径およびゼータ電位は、レシチンの添加後、次にＴＰＰの添加後、最後に凍結乾燥後にプロファイル化した。
【００４６】
ポリマー−脂質ナノ粒子の化学構造変異の分析
PerkinElmer分光計（PerkinElmer Spectrum 100、英国、ビーコンズフィールド）を用いて、使用した天然ポリマーおよびポリマー−脂質ナノ粒子について、４０００〜６５０ｃｍ-1の範囲にわたるＦＴＩＲスペクトルを得て、ナノ形成中に生じた化学構造遷移を解明した。
【００４７】
ポリ−リポナノ粒子の形成中のｐＨおよび吸光度変化の計算モデル化、測定
ポリマーと架橋剤との間の相互作用およびナノ粒子形成のメカニズムを解説するために、計算モデル化を行なった。ACD/l-Lab, V5.11（アドオン）ソフトウェア（Advanced Chemistry Development Inc.、カナダ、トロント、２０００）を用いて、相互作用のメカニズムを描写するモデルおよびグラフィックスを得た一方で、いくつかの一般的な化学的概念および計量化学的モデル化概念を用いることにより、可能な相互作用を評価した。HyberChem（登録商標）8.0.8分子モデル化システム（Hypercube Inc.、米国、フロリダ州、ゲインズビル）およびChemBio3T Ultra 11.0（CambridgeSoft Corporation、英国、ケンブリッジ）を用いて、真空内での分子力学計算を行なった。ｐＨおよび吸光度の変化は、ポリ−リポナノ粒子の形成のための方法論に記載されるように、物質の組込みの各段階で測定した。ｐＨおよび吸光度は、ポリマーを０．２Ｎ  ＨＣｌに添加し、その後、レシチンおよびＴＰＰを添加したときに測定した。吸光度はＬ−ドパの不在下で得られた。
【００４８】
ポリマー−脂質ナノ粒子の表面形態の評価
ポリマー−脂質ナノ粒子の表面形態分析は、デジタル顕微鏡観察を行なうことにより行なった。合成後のポリマー−脂質ナノ粒子のデジタル顕微鏡画像は、オリンパス製デジタル顕微鏡、オリンパスＳＺＸ−ＩＬＬＤ２−２００（Olympus Corporation、日本、東京）を用いて得られた。粒子形状は、より高い精度および解像度を得るために、透過型電子顕微鏡（ＴＥＭ）（Jeol 1200 Ex, 120 keV TEM、日本、東京）でさらに観察した。
【００４９】
ポリマー−脂質ナノ粒子の薬剤担持効率および薬剤封入効率の測定
百分率での薬剤担持効率を重量測定により求め、ナノ粒子中に担持される薬剤の量についてナノ粒子の能力を評価した。薬剤担持率は、式１を用いて、組込まれた薬剤およびナノ粒子の重量に基づき計算した。
【００５０】
【数１】
2013543886.tif 000002
【００５１】
薬剤封入効率は、ポリマー−脂質ナノ粒子を０．１Ｎ  ＨＣｌ中に分散させることにより測定し、媒体中の薬剤の量は分光測定により評価し、式２を使用して、製剤中で用いた薬剤の量に対するポリマー−脂質ナノ粒子中の薬剤の量を求めた。
【００５２】
【数２】
2013543886.tif 000003
【００５３】
レボドパを担持したポリ−リポナノ粒子の顕微鏡分析
凍結乾燥させたポリ−リポナノ粒子をカーボンテープ上に薄く広げて、金−パラジウムでコーティングした。電圧１５ＫｅＶおよび電流６×１０-10ＡｍｐでＳＥＭ（JEOL-JEM 840走査型電子顕微鏡、日本、東京）下でナノ粒子を観察した。
【００５４】
胃保持性薬剤送達系のポリマーマトリックス用のインターポリマーブレンド（ＩＰＢ）の合成
ＥＵＤを粉砕して、５０ｍＬの０．１Ｎ酢酸中に溶解し、ＣＭＣを５０ｍＬの蒸留水に溶解した。透明なＥＵＤ溶液を透明なＣＭＣ溶液中に添加し、環境温度で３時間激しい撹拌下で撹拌した。３時間後、ＬＢを添加し、１５〜２０分間撹拌した。形成されたインターポリマーブレンド（ＩＰＢ）を４８時間凍結乾燥させ、粉砕し、直接的圧縮に使用した。ＩＰＢ内のポリマーの比を表１に示す。ＥＵＤ−ＣＭＣを１：０．５および０．５：１の比でそれぞれ含有するＩＰＢ  Ｅ１およびＥ３を、０．２Ｎ、０．４Ｎ、０．６Ｎ、０．８Ｎおよび１．０Ｎの酢酸中でさらに合成した。
【００５５】
【表１】
2013543886.tif 000004
【００５６】
インターポリマーブレンド（ＩＰＢ）の化学構造変異の分析
PerkinElmer分光計（PerkinElmer Spectrum 100、英国、ビーコンズフィールド）を用いて、天然ポリマーおよびＩＰＢについて、４０００〜６５０ｃｍ-1の範囲にわたりＦＴＩＲスペクトルを得、天然ポリマーからのＩＰＢの構造変化を解明した。
【００５７】
インターポリマーブレンドのマトリックスへの直接的圧縮
３トンでCarverプレス機（Carver Industries、米国）を用いて、表２に列挙するような添加剤および賦形剤とともにＩＰＢを直接圧縮した。成分の混合は、次の順序で行なった。１）一定量のＩＰＢを添加し、賦形剤と交互に混合した。２）まず、二酸化ケイ素をある量のＩＰＢと混合し、次にＬ−ドパと混合し、その後プルランおよびＢａＳＯ4と混合し、ステアリン酸マグネシウムを最後に添加し、その後２分間連続的に混合した。
【００５８】
【表２】
2013543886.tif 000005
【００５９】
マトリックスの密度の測定
０〜１５０ｍｍの電子デジタルノギスを用いて直径および厚さを求めることにより、各マトリックスの体積を求め、重量を重量測定により確認した。このように重量および体積を得て、各マトリックスについての密度を計算した。
【００６０】
マトリックスの物理機械的強度の評価
テクスチャ分析器（ＴＡ）（TA.XTplus、Stable Microsystems、英国）を用いて、力−距離プロファイルによりマトリックスの物理機械的強度を測定した。２ｍｍの先端が平坦なスチール製プローブを用いてマトリックス硬度および変形エネルギを測定し、ＴＡに取付けた３６ｍｍの円筒状プローブを用いてマトリックス弾性を測定した。データは、Texture Exponent Software（Ｖ３．２）により組込んだ。使用したパラメータ設定を表３に示す。
【００６１】
【表３】
2013543886.tif 000006
【００６２】
磁気共鳴画像法によるマトリックスの機械的挙動の評価
３７℃に安定化させた小型０．５テスラ永久磁石および溶解フロースルーセルを備えたデジタルＭＡＲＡＮ  ＤＲＸコンソール（Oxford Instruments、英国、オックスフォードシャー）を有する磁気共鳴システム（ＭＡＲＡＮ−ＩＰ）を用いて、マトリックスの機械的挙動を観察した。ガラスビーズを用いてセルの円錐状下部を満たし、使用した溶媒の１６ｍＬ／分の層流を得た。マトリックスをセル内に設置し、次に、セルをシステムの磁気孔内に配置した。磁気共鳴画像の取得は、別々に行われたバッファｐＨ１．５およびｐＨ４．５による連続的な溶媒フロー条件下で、Maran−iソフトウェアにより１２時間にわたり１時間毎に行なった。画像取得パラメータを表４に示す。
【００６３】
【表４】
2013543886.tif 000007
【００６４】
ＩＰＢマトリックスの表面形態分析
ＩＰＢマトリックスの表面形態を評価するために、マトリックスサンプルをカーボンペーストを用いてアルミニウムスタブ上に設置した。その後、マトリックスに金−パラジウムをスパッタリングによりコーティングし、次に、Quanta（登録商標）走査型電子顕微鏡（FEI Quanta 400 FEG (ESEM) FEI Company、オランダ、アイントホーフェン）下で観察した。非水和化および水和化ＩＰＢマトリックスを顕微鏡下で見た。水和化ＩＰＢマトリックスをバッファｐＨ１．５中に２４時間放置し、−７０℃でさらに１日冷凍し、凍結乾燥させた後、Quanta（登録商標）走査型電子顕微鏡下で見た。
【００６５】
ＩＰＢマトリックスの多孔度測定分析
多孔度測定分析器（ASAP 2020、Micromeritics、米国、ジョージア州、ノークロス）を用いてＩＰＢマトリックスの表面積および多孔度分析を行なった。サンプル管（内径＝９．５３ｍｍ）内に嵌まるサイズを秤量し、脱気のためにサンプル管内に挿入した。サンプル管内へのガラスフィラーロッドの挿入は、全フリースペース体積を減少させることにより脱気時間の短縮を助けるために行なった。脱気条件は、排気期および加熱期を含むように設定した。使用したパラメータを表５に示す。脱気の約２１時間後、サンプル管を分析口に移動し、ＢＥＴおよびＢＪＨ分析に従って、表面積、多孔径および体積を測定した。分析は約５時間かかり、分析条件を表６に示す。
【００６６】
【表５】
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【００６７】
【表６】
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【００６８】
マトリックスの胃付着性試験
屠殺した豚から切除したばかりの胃組織を得て、０．１Ｎ  ＨＣｌで平衡化した。テクスチャ分析器（TA.XTplus、Stable Microsystems、英国）を用いて胃付着性強度を測定した。パラメータ設定を表７に示す。データはTexture Exponent Software（Ｖ３．２）により組込んだ。ピーク力および付着仕事量を用いてマトリックスの胃付着性を評価した。ピーク力は、マトリックスから組織を除去するために必要な最大力であり、付着仕事量は、力−距離プロファイルから測定した。
【００６９】
【表７】
2013543886.tif 000010
【００７０】
マトリックスの膨張の測定
マトリックスの膨張を０．１Ｎ  ＨＣｌで行なった。マトリックスを秤量し、ワイヤバスケットに入れ、１００ｍＬの媒体に沈ませ、３７℃の振とう槽（オービタルシェーカーインキュベータ、LM-530、Laboratory and Scientific Equipment Co、南アフリカ）に入れた。質量の増加を２４時間にわたり間隔をおいて重量測定により求めた。膨張度を式３を用いて求めた。
【００７１】
【数３】
2013543886.tif 000011
【００７２】
式中、Ｗｔはｔ時点でのマトリックスの重量であり、Ｗｏはゼロ時点でのマトリックスの重量である。
【００７３】
インビトロでの薬剤放出研究
ＵＳＰ３２装置ＩＩ溶解システム（Erweka DT 700、Erweka GmbH、ドイツ、ホイゼンシュタム）を用いて薬剤放出を評価した。温度および撹拌速度をそれぞれ３７±０．５℃および５０ｒｐｍとし、溶解媒体を０．１Ｎ  ＨＣｌ、バッファｐＨ１．５および４．５とした。サンプルを一定間隔で取出し、同量の新たな媒体と交換し、ＵＶ分光器を用いて放出されたＬ−ドパの量を定量化した。異なる規定度の酢酸中のＩＰＢから製剤化されたＥ３マトリックスについてもインビトロの薬剤放出研究を行なった。バッファｐＨ１．５（標準バッファＫＣｌ／ＨＣｌ）、ｐＨ４．５（０．０２５Ｎ  ＫＨ2ＰＯ4／Ｈ2ＰＯ4）およびｐＨ６．８（標準バッファＫＨ2ＰＯ4／ＮａＯＨ）を使用して、マトリックスの挙動を観察したが、モデル薬剤であるＬ−ドパは、このようなｐＨ値では不安定であるため、薬剤放出については使用しなかった。
【００７４】
比較用インビトロ薬剤放出研究および分析法
ＩＰＢ、ならびに、従来の製品であるSinemet（登録商標）ＣＲおよびMadopar（登録商標）ＨＢＳについて、９００ｍＬのバッファｐＨ１．５中で、３７±０．５℃および５０ｒｐｍでＵＳＰ装置ＩＩ溶解システム（Erweka DT 700、Erweka GmbH、ドイツ、ホイゼンシュタム）を用いて、比較用インビトロ薬剤放出研究を行なった。サンプルを２４時間にわたり間隔をおいて取出した。取出す度に同量の新たな媒体を各容器に加えてシンク条件を維持し、メチル−ドパを内部標準として用いて、Acquity（登録商標）超高速液体クロマトグラフィ（UPLC、Waters（登録商標）、英国、マンチェスター）を用いて、Ｌ−ドパ、ベンセラジドおよびカルビドパの濃度を定量化した。水およびアセトニトリルを移動相として、０．５００ｍＬ／分の流量で、９８％Ａ（水）、９５％Ａで０．５０分、５％Ａで０．７０分、９５％で１．００分で流して、勾配法を使用した。Ｌ−ドパ／ベンセラジドの操作時間は１．００分、Ｌ−ドパ／カルビドパの操作時間は１．２０分であった。カラムは、Acquity UPLC（登録商標） BEH shield RP18 1.7 mm, 2.1 x l00 mmであった。使用した波長は２１０ｎｍ、注入量は１．２μｌ、温度は２５℃であった。
【００７５】
ポリマー−脂質ナノ粒子のインターポリマーブレンド内への組込み
ＩＰＢ内へのポリマー−脂質ナノ粒子の組込みは、先に記載したように、直接的圧縮を介して行なった。しかしながら、Ｌ−ドパ単独の代わりに、Ｌ−ドパを担持したポリマー−脂質ナノ粒子を組込み、先に記載したように、インビトロでの薬剤放出を評価した。ＩＰＢ内への組込みに利用したナノ粒子の典型的な組成を表８に示す。
【００７６】
【表８】
2013543886.tif 000012
【００７７】
結果および考察
ポリマー−脂質ナノ粒子の調製
レシチンおよびＴＰＰの存在下で、白色ＥＵＤナノ粒子およびクリーム状ＥＵＤ／ＣＨＴを形成した。ＥＵＤとＣＨＴとの間にポリマー混和性が観察されたが、これは、ＥＵＤおよびＣＨＴがともにカチオン性ポリマーであるため、相互作用がまったく観察されなかったことによるためであり得る。しかしながら、配合を介したポリマーの個々の特性の向上が予想される。ＥＵＤはＣＨＴほど粘稠性はなく、ＥＵＤ単独ではＬ−ドパのカプセル化はより低いであろうと予想された。表面吸着は、ＥＵＤ単独ではより高く、Ｌ−ドパの急速な放出につながる可能性がある。しかしながら、混合によりナノ粒子からの薬剤放出が調節されることが予測された。レシチンの添加の際、色変化（コロイド状分散）が観察され、レシチン（リン脂質）とポリマー溶液との間の相互作用の存在が示された。レシチンは、アニオン性リン脂質であり、カチオン性ＥＵＤとＥＵＤ／ＣＨＴポリマー溶液とを架橋させて、ポリマー−脂質ナノ粒子を生成する表面活性剤である。ＴＰＰを添加することにより、架橋度が増加し、ポリマー−脂質ナノ粒子からの薬剤放出速度に影響が及ぼされる。
【００７８】
ポリマー−脂質ナノ粒子のサイズおよび表面電荷の評価
レシチンの添加後のナノ粒子についての平均粒子径は、ＥＵＤ単独では１５２ｎｍ〜ＥＵＤ／ＣＨＴブレンドについては３２１ｎｍの範囲であり、ゼータ電位は、１５．８〜４３．３ｍＶの範囲であった。ＣＨＴの量が増加するにつれ、粒子径が増加した。さらに、架橋度がＴＰＰの添加により増加するにつれ、粒子径は４２４ｎｍに増加した。多分散指数は、０．１９〜０．６１の範囲であった。
【００７９】
ポリマー−脂質ナノ粒子の化学構造変位の評価
図１に示すようなＦＴＩＲスペクトルは、多重架橋によるナノ形成の間に生じた化学構造遷移を示した。天然ポリマーのスペクトルと比較して、ナノ粒子のスペクトルは、たとえば、ＥＵＤについての２７６９．７４ｃｍ-1および１２６８．７３ｃｍ-1でのピーク；ＣＨＴについての３３５７．５１ｃｍ-1、１５９０．６６ｃｍ-1および１０２４．６６ｃｍ-1でのピークなど、天然ポリマーに見られたいくつかのピークの不在を示し、たとえば、ＥＵＤナノ粒子およびブレンド（ＥＵＤ／ＣＨＴ）で見られた１６０５ｃｍ-1でのピーク；各ナノ粒子製剤における架橋度により決定されると想定される、ブレンドにおいて１５１８．７５〜１５２２．２４ｃｍ-1に若干移行したＥＵＤにおける１５１９ｃｍ-1でのピークなど、架橋後に新たなピークの出現を示した。さらに、たとえば、ＥＵＤにおける２９４９．１１ｃｍ-1が２９２３．９１ｃｍ-1に移行し、１７２２．３９ｃｍ-1が１７２４．８６ｃｍ-1に移行し、ＣＨＴにおける８９１．８０ｃｍ-1が８８９．７９ｃｍ-1に移行したなど、未だ存在すると考えられ得る天然ポリマーにおけるピークが若干移行した。
【００８０】
レボドパを担持したポリ−リポナノ粒子の顕微鏡分析
走査型電子顕微鏡法により、中空カプセル剤が、予想かつモデル化されたように（図２）確認される。
【００８１】
インシリコのモデル化、ポリ−リポナノ粒子の形成中のｐＨおよび吸光度変化
メタクリレートコポリマー（オイドラギットＥ１００）の化学構造は、混入される物質に対してキトサンよりも多くの余地を所有するため、ＴＰＰ架橋をより必要とする。（混入される物質である、ポリマーマトリックス内に組込まれるレシチン、レボドパおよびＴＰＰによる）ナノ粒子合成が追従し得るパターンは、空間、初めに形成される粒子のサイズ、および、乱流の存在の有無に依存して、７つのうちいずれかが存在する。これらのパターンは、木の枝分かれ、節点空間充填、円錐アレイ形成、混合三角形形成、直線パターン、カオス状パターンおよび混合パターンである。本研究で起きたナノ粒子形成は、混合三角形形成または混合パターンであったと想定される。７つのパターンの説明は、本発明者らにより公表された論文で説明されている（Ngwuluka et al, 2011）。刊行物にはさらに、ポリ−リポナノ粒子の合成中に起きた相互作用メカニズムの予測のための静力格子原子シミュレーション（インシリコ）が記載されている。レシチンはアニオン性リン脂質であり、静電気的相互作用によりカチオン性メタクリレートコポリマーまたはメタクリレートコポリマー／キトサンポリマー溶液と架橋し、ポリマー−脂質（ポリ−リポ）ナノ粒子を生成する表面活性剤である。他の研究により、キトサンとリン脂質（レシチン）との間の相互作用が確認された（Grant et al. 2005, Hafner et al. 2009, Ho et al. 2005, Lim Soo et al. 2008, Sonvico et al. 2006, Zahedi et al. 2009）一方で、本研究では、メタクリレートコポリマーとレシチンとの間の相互作用が観察された。ＴＰＰの捕捉および架橋の機能は、さらに成分をナノ粒子状複合体に結合させる。ＴＰＰの添加により架橋度が増加し、ポリ−リポナノ粒子からの薬剤放出速度に影響が及ぼされた。ポリマーおよびＴＰＰの濃度の増加により、ナノ懸濁液のｐＨが増加した（表９）。ポリメタクリレートコポリマー／キトサンブレンドについては、より多くの成分が添加されるにつれｐＨが増加した。しかしながら、ｐＨの増加は、ＴＰＰが添加されたときにより顕著であった。さらに、メタクリレートコポリマー単独、すなわち、Ｂ９では、Ｌ−ドパの添加からレシチンの添加まで、ｐＨの変化はなかった。
【００８２】
【表９】
2013543886.tif 000013
【００８３】
ポリマー溶液へのレシチンの添加の際、色変化（コロイド状分散）が観察され、レシチン（リン酸脂質）とポリマー溶液との間の相互作用の可能性が示された。色変化は、カプセル状の壁の形成または表面活性によるものであり得るとも想定された。さらに、色変化は、インシリコのモデル化によって裏付けられたエネルギ撹乱を表わし得る。酸素励起により色変化が生じ、すなわち、プロトンが吸収されて、残りの可視スペクトル波長は反射し返される。配合されたポリマー溶液（メタクリレートコポリマーおよびキトサン）へのＴＰＰの添加により、酸素関連機能（より高い度合いの励起可能な酸素原子、共役化酸素を含有する基が、キトサンおよびＴＰＰに存在する）のため、よりクリーム状の色が生じた。吸光度により示されるような可視光の強度は、レシチンおよびＴＰＰがポリマー溶液に添加されるにつれて増加する（表１０）が、これは、色変化、および、ポリマー溶液とイオン剤（レシチンおよびＴＰＰ）との間のその後の相互作用も示している。しかしながら、メタクリレートコポリマー−レシチンブレンドへのＴＰＰの添加により、吸光度が減少することが観察される。これは、十分な粒子状複合体形成を達成するために、利用されたよりも多い量のＴＰＰを必要とする、メタクリレートコポリマーの化学的基盤のためである。
【００８４】
【表１０】
2013543886.tif 000014
【００８５】
ポリマー−脂質ナノ粒子の表面形態
凍結乾燥前にデジタル顕微鏡およびＴＥＭ下で見ると、球状構造のナノ粒子が観察された。図３は、レシチン単独で架橋したＥＵＤ／ＣＨＴおよび多重架橋したＥＵＤナノ粒子のデジタル画像を示す。
【００８６】
ＣＨＴとのブレンドと比較してＥＵＤナノ粒子のより小さなサイズが、デジタル画像によりさらに確認された。ＴＥＭ画像により、粒子の球状な性質がさらに確認され、粒子がナノカプセル状であることも示され、拡大（×２００００）ＴＥＭ画像は、内側コアと外側コアとを示した。
【００８７】
ＩＰＢマトリックスの表面形態分析
非水和化および水和化ＩＰＢポリマーマトリックスのQuanta（登録商標）走査型電子顕微鏡画像を図４ａ、図４ｂおよび図４ｃに示す。ポアは非水和化マトリックスでは不可視である。ポアは、溶媒浸透および薬剤溶解により形成され、可視となっている。溶解媒体またはバッファがマトリックス中の初期の空隙を埋めるにつれ、Ｌ−ドパが溶解し、溶媒のマトリックス内への浸透により形成されたポアを介して外に拡散する。ポアの形成は、プルランなどの他の成分の溶解にも関与すると想定される。図４ｃの顕微鏡画像により、ＩＰＢマトリックスは、多孔性かつ膨張可能な放出系であることが確認される。他のメカニズムの中でも、ポアは、マトリックスからのＬ−ドパの拡散、および、放出の拡散制御されたメカニズムに寄与する。図４ｃに示すようなポアは均一でなく、さらに、マトリックスからのＬ−ドパの放出は、ポアを介する薬剤溶解および拡散ならびにマトリックスの膨張のためであり得る。
【００８８】
ＩＰＢマトリックスの多孔度測定分析
図５は、得られた直線等温線グラフを示し、これは、ヒステリシスループ（おそらくＨ２）が、通常メソポアで生じる毛管凝縮に関連する、物理吸着等温線型ＩＶに特有の等温線である。脱着分岐に沿って吸着された体積の急激な低下のため、吸着および脱着等温線の強制的な閉鎖（引張り強度効果）が０．３０〜０．３５のＰ／Ｐｏの範囲で起きた。表１１は、直線等温線グラフを裏付ける、得られた結果の概要であり、ＩＰＢマトリックスが主にメソポアであることを示している。ポアの約９２％がメソポアである。ミクロポアの不在がｔ−プロットにより確認された。ｔ−プロットは、ミクロポア径を求めるためには使用されないが、ミクロポア体積に関する情報を提供する。ＩＰＢのミクロポア体積はマイナス（−０．０００６７３ｃｍ3／ｇ）であり、その結果、ミクロポア面積は測定され得なかった。したがって、ＩＰＢマトリックスは主にメソポア状であり、ＩＰＢからの薬剤放出の可能なメカニズムの１つが拡散であることを示している。
【００８９】
【表１１】
2013543886.tif 000015
【００９０】
ポリマー−脂質ナノ粒子の薬剤担持効率
薬剤担持効率は９３％であることがわかった。ポリマー−脂質ナノ粒子は、８５％の高い薬剤封入効果を有していた。形成は段階的であったが、洗浄、遠心分離またはデカンテーションはなかった。ナノ粒子内への薬剤の組込みは、カプセル封入および表面吸着の組合せであることが想定される。
【００９１】
インターポリマーブレンドの合成
透明なＥＵＤのＣＭＣ溶液への添加の際、ＥＵＤおよびＣＭＣそれぞれの１：０．５および１：１の混合比について、ＣＭＣゲル内で白色筋（white strands）が見られ、このような比での不完全な相互作用が示された。したがって、３時間後に、生成物は白色筋を有する縺れたゲルとして出現した。しかしながら、ＥＵＤおよびＣＭＣそれぞれの０．５：１の比では、不溶性の均質な白色ブレンドが形成された。０．５：１の比では、ＥＵＤ、カチオン性ポリマーおよびＣＭＣ、アニオン性ポリマーは相互作用し、インターポリ電解質複合体を形成した。この複合体形成に関与した相互作用は、強いイオン会合、水素結合および親水性相互作用であった。ＥＵＤは酢酸イオンと相互作用することにより、ポリマーのアンモニウムカチオンを安定化させる。ＥＵＤがＣＭＣに添加されるにつれて、２つのポリマー間の架橋を向上させる酢酸ナトリウムが生成された。撹拌が起きるにつれて、水の存在下で、酢酸分子および水が親水性相互作用により保持されて、酢酸ナトリウムが生成された。ＥＵＤおよびＣＭＣが完全に中和化するには、閾架橋を得るために十分な塩を生成するのに、過剰なＣＭＣが必要とされた。白色の不溶性インターポリ電解質複合体が、より粘度の低いブレンドでは明確な０．５：１の比（ＥＵＤ：ＣＭＣ）で形成された。インターポリ電解質複合体の最終粘度は、ＣＭＣの初期粘度および酢酸の規定度に依存していた。酢酸の規定度が０．１〜１．０Ｎに移行するにつれて、インターポリ電解質複合体の粘度は低下した。粘度の増加以外に、ＬＢの添加により観察されるブレンドの大幅な変化はなかった。これは、ＬＢが中性ガラクトマンナンポリマーであるためと予想された(Alves et al. 1999; Camacho et al. 2005; Sittikijyothin et al. 2005)。ＬＢの親水性基は、存在する水分子と会合し、ＬＢが膨張するにつれて粘度はさらに増加する。ＩＰＢ内に保持された水分子は、凍結乾燥中に昇華され、乾燥した多孔ＩＰＢが得られる。しかしながら、多孔度は、酢酸の規定度の増加とともに増加した。
【００９２】
インターポリマーブレンドの化学構造変異の分析
天然ポリマーのスペクトルを図６Ａ（ａ）に示し、製剤についての化学構造遷移を図６Ａ（ｂ−ｃ）および６Ｂ（ｄ−ｅ）に示す。
【００９３】
ＥＵＤについて特徴的なピークは、２８２１．４２ｃｍ−１、２７６９．８４ｃｍ−１、１７２５ｃｍ−１、１２７０．３８ｃｍ−１、１２３９．５６ｃｍ−１、１１４３．６９ｃｍ−１、９６２．０５ｃｍ−１、８４２．４９ｃｍ−１、および７４７．８１ｃｍ−１で見られ、ＣＭＣの特徴的なピークは、３２１０．０４ｃｍ−１、１５８７．１８ｃｍ−１、１４１１．７７ｃｍ−１、１３２１．８６ｃｍ−１、および１０１９．５９ｃｍ−１に存在していた。ＥＵＤとＣＭＣとのブレンドは化学的相互作用であったが、ＬＢの組込みは物理的相互作用であると予想された。ＥＵＤとＣＭＣとの間の化学的相互作用は、製剤Ｅ３に見られるような、０．５：１の均質な比でのＥＵＤの特徴的ピークの消失または衰弱につながった。２８２１．４２ｃｍ-1および２７６９．８４ｃｍ-1でのＥＵＤの脂肪族アルデヒドピークは、製剤Ｅ３では消失していたが、製剤Ｅ１（比１：０．５）およびＥ２（１：１）には未だ存在していた。他の製剤は、ＥＵＤ：ＣＭＣそれぞれの同じ比１：０．５、１：１、０．５：１を主体としていた。したがって、注目されるのは、初めの３つのＥ１、Ｅ２およびＥ３であろう。Ｅ１およびＥ２に存在していた７４７ｃｍ-1でのＥＵＤのピークは、Ｅ３では消失した。しかしながら、１７２５ｃｍ-1での明らかなカルボニルピークは、Ｅ３では衰弱していたが、Ｅ２およびＥ３では未だ顕著であった。これは、いくつかのカルボニル基が相互作用に関与していたであろうが、脂肪族アルデヒド基は、凍結乾燥中に昇華した脂肪族アルコールに変換されていたであろうことが示され得る。ＥＵＤの１１４３．６９ｃｍ-1のピークは、１１４５．５９ｃｍ-1と些細に移行したが、Ｅ１およびＥ２では明確なままであり、Ｅ３では、１０１９．５９ｃｍ-1から移行した１０１９．１２ｃｍ-1のＣＭＣの特徴的なピークへの肩ピークとして出現した。図６ｂでは、青色スペクトルはＥ１０であり、ＣＭＣのより高い濃度を有しているため、ＣＭＣの特徴的ピークは、１５８７．１８ｃｍ-1、１４１１．７７ｃｍ-1、１３２１．８６ｃｍ-1および１０１９．５９ｃｍ-1でより顕著であった。化学的構造変化に対するＬＢの影響力は、ＬＢに特徴的な８６８．０６ｃｍ-1でのピークを有していたＥ１のスペクトルを除いて、スペクトルからは見られなかった。これも、Ｅ１がより異種性のブレンドであることによる。さらに、Ｅ３の均質性により、さまざまな周波数またはピークでの吸光度に若干の差異しかないほぼ重なり合ったスペクトルが得られ（図６ｅ）、１．０Ｎ酢酸中のＥ３は、１７２５ｃｍ-1、１５８９ｃｍ-1、１４０８ｃｍ-1、１２６８．５０ｃｍ-1および１０１９ｃｍ-1のピークに最も高い吸光度を有していた。しかしながら、Ｅ１スペクトルは、各スペクトルの吸光度の差異が明確であったため、重なり合っていなかった。
【００９４】
インターポリマーブレンドのマトリックスへの直接的圧縮
ＩＰＢは直接的に圧縮可能であり、脆弱ではなかったが、これは、緻密性を向上させるために賦形剤が必要ないであろうことを示している。本研究で添加された賦形剤は、密度向上剤（ＢａＳＯ4）、流動特性を向上させるための滑剤（シリカ）および潤滑剤（ステアリン酸マグネシウム）であり、プルランを生体付着剤として用いた。直接的圧縮は、必要とされる賦形剤および操作工程がより少ないため、費用効果が高い。直接的圧縮は、湿度に敏感なＬ−ドパなどの安定性が課題の薬剤に好適である。実際、それは、熱不安定性かつ湿度敏感性薬剤用に選択される錠剤化方法として見なされる(Jivraj, et al. 2000)。ＩＰＢは、２および３トンの圧縮で優れた適合性を示し、脆弱性、キャップ形成または積層形成は一切見られず、モデル薬剤のＬ−ドパと適合可能であることがわかった。
【００９５】
マトリックスの密度の評価
表１２に示される、各製剤からのマトリックスの密度間の差異はわずかであった。密度は１．４３〜１．５４ｇ／ｃｍ3の間の範囲であった。得られた密度は、胃の胃内容物よりも著しく密度が高いため、マトリックスの胃腔に沈む能力を示していた。延長された胃滞留時間を確保するために、２．４ｇ／ｃｍ3を超える密度が高密度送達系のために提唱されているが、ＩＰＢマトリックスは、高密度、膨張性および胃付着性の３つの胃保持のアプローチを使用しているため、推奨されるより低い密度でも胃滞留が得られると予想される。過去の生理学的研究から、非崩壊性単一ユニット薬剤送達系は、摂食期において胃内に残留し、ハウスキーピング波により空になるであろうことが言える(Davis et al. 1986)。送達系は、ハウスキーピング波のため、摂食状態よりも絶食状態での方が胃からなくなりやすい。したがって、１．４ｇ／ｃｍ3の密度を有し、胃ｐＨで非崩壊性のＩＰＢマトリックスは、摂取されると、胃腔に沈み、ハウスキーピング波の間のみ空になるであろう。さらに、延長された胃滞留時間を確保するためには、摂食状態の間に服用され得る。
【００９６】
【表１２】
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【００９７】
マトリックスの物理機械的強度分析
マトリックス硬度（ＭＨ）およびマトリックス弾性（ＭＲ）は、マトリックスの安定性、および、圧縮中に圧力に耐える能力、および、テクスチャ分析中に加えられる圧縮応力後に元の寸法に回復する能力を示すため、物理機械的強度分析が行なわれた。ＭＲは、薬剤放出動態にも影響を及ぼす。ＭＨおよびＭＲは、溶解媒体のマトリックス内への浸透速度に影響を及ぼすことによりマトリックスからの薬剤放出プロファイルに影響を及ぼす、マトリックスの密度および多孔度を示す（Nur, 2000）。より少ないＭＨおよびＭＲは、応力を加えると崩壊する空隙の存在を示し得る。多孔度も、必要となる変形エネルギの量を決定する。マトリックスが硬いほど、吸収されるエネルギはより少なく、変形エネルギがより多いため、ＭＲにも影響が及ぼされる。マトリックスの製剤化に利用されるポリマー固有の特性もＭＨの度合を決定する。本研究では、凍結乾燥はポリマーの物理機械的特性も強化し得、天然ポリマーにその三次元ネットワークを保持させることが観察された。表１３に示されるような異なる製剤は、３４．７２０〜３９．７０７Ｎ／ｍｍの範囲のより優れたＭＨを示し、変形エネルギは０．０１２〜０．０１４Ｎｍの範囲であり、ＭＲは４４．２５〜４７．６５％の範囲であった。したがって、すべての製剤は、より優れた物理機械的強度を有し、処理ストレス要因に耐えることが可能であろう。得られた典型的な力−距離プロファイルおよび力−時間プロファイルを図７に示す。図７ａは、マトリックス硬度および変形エネルギを示し、図７ｂは、ＩＰＢのマトリックス弾性を示す。
【００９８】
【表１３】
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【００９９】
ポリマーナノ粒子はマトリックスの機械的強度を向上させる
インターポリマーブレンドは、ｐＨ１．５ではその三次元ネットワークを維持するｐＨ反応性材料であるが、４．５などのより高いｐＨでは表面侵食が起こる。しかしながら、ポリ−リポナノ粒子は、ポリマーブレンド内に組込まれ、圧縮され、三次元ネットワークは、２４時間の薬剤放出研究にわたりいずれのバッファ型でも維持される。研究により、マトリックスの機械的強度を向上させるためにナノ粒子を使用できることが分かった（Beun et al. 2007, Gojny et al. 2005, Gomoll et al. 2008, Park, Jana 2003, Rapoport et al. 2004, Saha, Kabir & Jeelani 2008, Zhang et al. 2003）。これらの研究では、機械的特性を向上させるために無機ナノ粒子を用いた。しかしながら、本研究では、ポリマーナノ粒子がポリマーマトリックスの機械的強度を向上させ、より高いｐＨでのポリマーマトリックスの侵食性応答を防止した。インターポリマーブレンドマトリックスの機械的強度に対するナノ粒子の影響力の画像図を図８および図９に示す。
【０１００】
磁気共鳴画像法を用いて、ポリ−リポナノ粒子の不在下および存在下で、インターポリマーブレンドの機械的挙動を確認した。図１０Ａは、ナノ粒子がポリマーブレンド内に組込まれたときにｐＨ１．５で得られた画像を示す。図１０Ｂは、ｐＨ４．５でのナノ粒子を含まないインターポリマーブレンドの漸進的な侵食を示し、図１０Ｃは、ｐＨ４．５でのナノ粒子の組込みの際のマトリックスの向上を示す。０、３、６、９および１２時間で得られた画像を図１０に示す。マトリックスの周りを囲んでいるのは溶解媒体であり（灰色部分）、錠剤マトリックス内の黒色部分は、錠剤の非水和化部分であり、白色部分は、水和化、膨張化およびゲル化部分を示す。マトリックスが水和化するにつれ、マトリックスが完全に水和化されるまで白色部分の厚みが時間とともに増加する。ｐＨ４．５でのインターポリマーブレンド中のナノ粒子の存在により表面侵食が防止された。図１０Ａの画像と比較して、白色部分の厚みがより小さくなるにつれて、マトリックス内への溶媒のより少ない浸透が図１０Ｃで観察され、したがって、膨張およびゲル化はより少ない。より少ない水の浸透は、インターポリマーブレンドのｐＨ応答性にも一部原因がある。錠剤マトリックス中のナノ粒子の存在により、侵食が防止され、ナノ粒子とインターポリマーブレンドとの間の静電気的相互作用のため、マトリックスの三次元ネットワークが保持されたと予想される。
【０１０１】
マトリックスの胃付着性試験
さまざまな濃度のポリマーおよび規定度の酢酸のＩＰＢマトリックスは、図１２〜図１６に示されるように、胃付着性であることがわかり、図１１は、得られた典型的な胃付着性の力−距離プロファイルを示す。胃粘膜表面と、生体付着性ポリマーから製剤化された薬剤送達系との間の相互作用は、共有結合、水素結合、ファンデルワールス力などの静電気力、鎖連結および疎水性相互作用を含み（Lee et al., 2000; Thirawong et al., 2008; Woodley 2001)、これらの相互作用は、ｐＨおよびイオン条件により規制される。ポリマーと粘膜との間の相互作用の度合は、粘膜粘度、縺れ度合および水含有率にも依存する(Lee et al., 2000)。付与力が０．５Ｎ〜１Ｎに増加するにつれ、ピーク付着力および付着仕事量は増加した。付与力が増加すると、粘膜と薬剤送達系との間の界面に粘弾性変形が生じることにより、密着性が増加する(Lee et al., 2000)。使用した接触時間は５秒であったが、胃付着性の結果は胃付着性強度と釣り合っており、胃付着性強度は、接触時間が増加するにつれて増加し、その後、ポリマー鎖の相互浸透を増加させる。ピーク付着力および付着仕事量は、ＩＰＢマトリックスが胃上皮に付着するとより高くなることがわかった。これは、マトリックス中のAureobasidium pullulansに由来するプルランである微生物付着剤の存在により向上された可能性がある。微生物付着は、上皮への粘膜付着を増加させる能力を有すると仮定される(Vasir et al. 2003)。
【０１０２】
マトリックス膨張の評価
ポリマーマトリックスからの薬剤放出動態は、ネットワークの構造的特徴、水和化のプロセス、ポリマーの膨張および分解により影響される（O'Brien et al., 2009)。溶解媒体がマトリックスにより吸収されるにつれ、膨張が生じ、組込まれた薬剤は溶解し、ポアを介してマトリックスの外部に拡散する。拡散速度は膨張度に依存することにより、時間とともに放出される薬剤の量に影響を及ぼす。膨張は、ポリマー−溶媒相互作用、薬剤の存在、および架橋度に影響される(Kim, Bae et al., 1992)。架橋度を増加させると、膨張度が低下することにより、水分含有率および、後のハイドロゲルからの薬剤の拡散が減少する(Wise, 1995)。ＥＵＤ単独により製剤化されたマトリックスは、酸性媒体に溶解し、ＣＭＣ単独では、その三次元ネットワークが失われるとともに、元のサイズの３８４％に膨張する。しかしながら、形成されたＥＵＤ／ＣＭＣブレンドは、ＣＭＣよりもずっと大きく膨張する。ＬＢの添加の際、その親水性基は、ＥＵＤ／ＣＭＣブレンドの水分保持能力と関連することにより、ブレンドの膨張度を３００％未満に低下させる。表１４は、ｔ＝２４時間でのさまざまな製剤の膨張度を示す。しかしながら、日中に時間間隔をおいた膨張度を測定するためには、Ｅ３が選ばれた。製剤Ｅ３が選ばれたのは、インター−ポリ電解質複合体が（０．５ＥＵＤ：１．０ＣＭＣ）の比で得られたためであり、図１７は、２４時間にわたる膨張度のプロファイルを図示する。酢酸の規定度が２２９％の０．１Ｎ酢酸〜２０２％の１．０Ｎ酢酸に増加するにつれて、膨張度が減少することが観察された。
【０１０３】
【表１４】
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【０１０４】
インビトロの薬剤放出研究
薬剤放出プロファイルが得られ、マトリックスの三次元ネットワークが２４時間の期間にわたり保持された。しかしながら、水和化マトリックスの物理的接触の際の溶解後、Ｅ５が最も軟らかいことが観察された。これは、より強い相互作用を得るためにより多くのＣＭＣが必要とされたため、弱い会合を有するＣＭＣの濃度よりも３倍より高い、ＥＵＤのより高い濃度のためである。崩壊するのに接触の際圧力が少し必要であったのは、Ｅ３、Ｅ７、およびＥ１０であり、これは、ＥＵＤよりもＣＭＣが製剤中により多く存在するためである。図１８において、製剤Ｅ３、Ｅ７およびＥ１０の薬剤放出プロファイルは異なっていた。弱い相互作用およびＩＰＢの合成中の最小限の塩生成のため、並んだプロファイルにおける架橋度はほとんどないか全くなかった可能性がある。マトリックスはその三次元ネットワークを保持していたため、薬剤放出のメカニズムは明らかに膨張および拡散によるものであった。Ｅ１を選び、異なる規定度の酢酸で合成した。しかしながら、図１９に示されるように、プロファイルは実質的に互いに並びあっていたため、それほど大きな差異は観察されなかった。規定度が増加するにつれて酢酸イオンはより増加したが、ＣＭＣのより低い濃度のため、閾架橋のために必要な塩は生成されなかった。しかしながら、Ｅ３を選んだとき（図２０）には、薬剤放出に差異が見られた。プロファイルの差異は、酢酸の規定度が異なると架橋度も異なることを示す。溶解媒体０．１Ｎ  ＨＣｌおよびバッファｐＨ１．５（標準バッファＫＣｌ／ＨＣｌ）中のマトリックスは、それぞれ図２０および図２１の薬剤放出プロファイルを生成し、それでもなお三次元ネットワークを保持した。したがって、これらの媒体に関与する薬剤放出のメカニズムは、マトリックスの膨張、溶解、次に、マトリックスからの薬剤の同時の拡散であった。興味深いことに、ｐＨが４．５に増加するにつれ、マトリックスは時間とともに膨張したが、２４時間の期間を通して漸進的な表面侵食があった。これは、ＩＰＢからの薬剤放出パターンのパターンが、ｐＨ依存的であり得ることを示す。結果的に、図２２に示されるようなｐＨ４．５での薬剤放出プロファイルは、ｐＨ１．５または０．１Ｎ  ＨＣｌで得られる薬剤放出プロファイルとは異なっていた。侵食速度が水和化速度よりも大きいとき、表面侵食が起き、マトリックスの膨張（溶解媒体の吸収の速度）が一定速度で起き、侵食の再現可能な動態、および、通常ゼロ次である薬剤放出が得られる(Pillai, 2001; Faisant et al., 2002; Burkersroda et al., 2002; Siepmann, 2001)。したがって、ｐＨ４．５での薬剤放出のメカニズムは、主に、表面侵食、次にマトリックスの膨張、溶解、そして後のマトリックスからの薬剤の拡散であり、ゼロ次放出動態が得られる。マトリックスは、２４時間後完全に侵食しないことが分かった。しかしながら、酢酸の規定度が増加するとともに侵食の度合が減少し、これにより、図２２に示されるように、薬剤放出プロファイルに影響が及ぼされた。他の製剤よりも大きく侵食した０．１Ｎ酢酸中のＥ３について、より直線的な薬剤放出プロファイル（ゼロ次）が得られ、これは、侵食が放出の主要なメカニズムであったであろうことを示す。ｐＨ６．８で��解が行なわれたが、注目すべきは薬剤放出ではなく、ｐＨ６．８でのマトリックスの挙動であった。これは、使用されたモデル薬剤がｐＨ６．８で不安定であるため、薬剤放出率が得られなかったためである。しかしながら、マトリックスには表面侵食も起きたことが分かった。
【０１０５】
比較用インビトロ薬剤放出研究
図２３は、ＩＰＢマトリックス、ならびに、従来の投与形態であるMadopar（登録商標）ＨＰＳおよびSinemet（登録商標）ＣＲの比較用薬剤放出プロファイルを示す。ＩＰＢマトリックスでは、より直線的なプロファイルが得られた。従来の投与形態と比較して、インターポリマーブレンドは、一定の治療的血中濃度により、Ｌ−ドパ／カルビドパの吸収および後のバイオアベイラビリティを改善させ得る経口送達系としての見込みを示す。
【０１０６】
密度およびインターポリマーブレンド中に埋込まれたポリマー−脂質ナノ粒子からのインビトロでの薬剤放出
Ｌ−ドパが担持されたＩＰＢの薬剤放出プロファイルと比較して、ＩＰＢマトリックス内に埋込まれた、Ｌ−ドパが担持されたポリマー−脂質ナノ粒子は、２４時間の期間にわたり薬剤放出率を減少させた。図２４および図２５に図示する。Ｌ−ドパが担持されたＩＰＢからの溶解媒体ｐＨ１．５中での最も低い薬剤放出率は、０．８９１１であり、ＩＰＢマトリックス内に埋込まれたＬ−ドパ  ポリマー−脂質ナノ粒子の最も低い薬剤放出率は、０．６８９６であった。ｐＨ４．５での減少した水和率のため、Ｌ−ドパ担持ＩＰＢからの最も低い薬剤放出率は、０．６４４５であった。しかしながら、ＩＰＢマトリックス内に埋込まれたＬ−ドパ担持ポリマー−脂質ナノ粒子からの薬剤放出は、ｐＨ４．５ではずっと低かった。これは、ナノ粒子の存在による、ＩＰＢのさらに低下した水和率および膨張率によるものであった。ＩＰＢは、ｐＨ４．５でのポリマー−脂質ナノ粒子の存在下では侵食しないことも観察された。ナノ粒子とＩＰＢとの間の相互作用は、ｐＨ４．５で生じ、マトリックスの表面侵食を予防した可能性があることが予想される。したがって、表面侵食、より低い水和化率および膨張率の不在下では、およそ５０％のＬ−ドパが、２４時間後に、ＩＰＢマトリックス内に埋込まれたＬ−ドパ担持ポリマー−脂質ナノ粒子から放出された。しかしながら、架橋度によりＬ−ドパの放出率が低下した可能性があることも観察された。さらに、ポリマーの量および架橋剤の量を減少させることにより薬剤担持効率を改善させると、ＩＰＢマトリックス内のポリマー−脂質ナノ粒子からの薬剤放出率が増加し得る。
【０１０７】
結論
高い薬剤封入が可能であり、薬剤放出率を調節することの可能な、多重架橋したポリマー−脂質ナノ粒子が合成された。インター−ポリ電解質複合体は、０．５：１（ＥＵＤ：ＣＭＣ）の化学量論比で形成された。Ｌ−ドパなどの狭い吸収窓の薬剤の吸収およびバイオアベイラビリティを改善させる潜在性を有する、三重メカニズムの胃保持性薬剤送達系が設計、開発された。さらに、胃腔で保持されて、連続的な放出を促進し、延長された期間にわたって一定かつ持続的な速度でのＬ−ドパの放出を調節し、吸収およびその後のバイオアベイラビリティを向上させることにより、効果的な治療予後を達成するポリマー−脂質ナノ粒子状胃保持性マトリックスが設計された。
【０１０８】
引用文献
【０１０９】
【表１５】
2013543886.tif 000019
【０１１０】
【表１６】
2013543886.tif 000020
【０１１１】
【表１７】
2013543886.tif 000021
【０１１２】
【表１８】
2013543886.tif 000022

【図１（ａ）】
2013543886.tif 000023
【図１（ｂ）】
2013543886.tif 000024
【図１（ｃ）】
2013543886.tif 000025
【図１（ｄ）】
2013543886.tif 000026
【図２（ａ）】
2013543886.tif 000027
【図２（ｂ）】
2013543886.tif 000028
【図３（ａ）】
2013543886.tif 000029
【図３（ｂ）】
2013543886.tif 000030
【図３（ｃ）】
2013543886.tif 000031
【図３（ｄ）】
2013543886.tif 000032
【図４（ａ）】
2013543886.tif 000033
【図４（ｂ）】
2013543886.tif 000034
【図４（ｃ）】
2013543886.tif 000035
【図６Ｂ】
2013543886.tif 000036
【図８】
2013543886.tif 000037
【図９】
2013543886.tif 000038
【図１０】
2013543886.tif 000039
【図５】
2013543886.tif 000040
【図６Ａ】
2013543886.tif 000041
【図７】
2013543886.tif 000042
【図１１】
2013543886.tif 000043
【図１２】
2013543886.tif 000044
【図１３】
2013543886.tif 000045
【図１４】
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【図１５】
2013543886.tif 000047
【図１６】
2013543886.tif 000048
【図１７】
2013543886.tif 000049
【図１８】
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【図１９】
2013543886.tif 000051
【図２０】
2013543886.tif 000052
【図２１】
2013543886.tif 000053
【図２２】
2013543886.tif 000054
【図２３】
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【図２４】
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【図２５】
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【手続補正書】
【提出日】平成25年7月25日(2013.7.25)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
少なくとも１つの医薬活性成分の放出のための医薬投与形態であって、前記医薬投与形態は、
少なくとも２つの架橋したポリマーから形成されるポリマーマトリックスと、
少なくとも１つのポリマーおよび少なくとも１つのリン脂質から形成され、前記ポリマーマトリックス内に組込まれるポリマー−脂質ナノ粒子と、
少なくとも１つの医薬活性成分とを含有する、医薬投与形態。
【請求項２】
前記ポリマー−脂質ナノ粒子は、前記医薬活性成分を含む、請求項１に記載の医薬投与形態。
【請求項３】
前記ポリマーマトリックスは、前記医薬活性成分を含む、請求項１に記載の医薬投与形態。
【請求項４】
前記２つの架橋したポリマーは、カチオン性ポリマーおよびアニオン性ポリマーである、請求項１から３のいずれかに記載の医薬投与形態。
【請求項５】
前記カチオン性ポリマーは、ポリ（ブチルメタクリレート−co−（２−ジメチルアミノエチル）メタクリレート−co−メチルメタクリレート）１：２：１である、請求項４に記載の医薬投与形態。
【請求項６】
前記アニオン性ポリマーは、カルボキシメチルセルロースナトリウムである、請求項４または５のいずれかに記載の医薬投与形態。
【請求項７】
前記ポリマーマトリックスは、追加的に、中性ポリマーである第３のポリマーから形成される、請求項１から６のいずれかに記載の医薬投与形態。
【請求項８】
前記ポリマーの組合せにより、前記医薬投与形態が胃保持性となる、請求項７に記載の医薬投与形態。
【請求項９】
前記中性ポリマーは、ガラクトマンナンポリマーである、請求項７または８に記載の医薬投与形態。
【請求項１０】
前記中性ガラクトマンナンポリマーは、ローカストビーンに由来する、請求項９に記載の医薬投与形態。
【請求項１１】
前記ポリマー−脂質ナノ粒子中の前記ポリマーは、メタクリレート−co−（２−ジメチルアミノエチル）メタクリレート−co−メチルメタクリレート  １：２：１である、請求項１から１０のいずれかに記載の医薬投与形態。
【請求項１２】
前記ポリマー−脂質ナノ粒子中の前記ポリマーは、キトサンである、請求項１から１０のいずれかに記載の医薬投与形態。
【請求項１３】
前記ポリマー−脂質ナノ粒子中の前記ポリマーは、メタクリレート−co−（２−ジメチルアミノエチル）メタクリレート−co−メチルメタクリレート  １：２：１およびキトサンである、請求項１から１０のいずれかに記載の医薬投与形態。
【請求項１４】
前記ポリマー−脂質ナノ粒子中の前記リン脂質は、レシチンである、請求項１から１３のいずれかに記載の医薬投与形態。
【請求項１５】
前記ポリマー−脂質ナノ粒子は、前記ポリマーおよび前記リン脂質をキレート剤により架橋することにより形成される、請求項１から１４のいずれかに記載の医薬投与形態。
【請求項１６】
前記キレート剤は、トリポリリン酸ナトリウムである、請求項１５に記載の医薬投与形態。
【請求項１７】
前記ポリマーマトリックスは、摂取されると、制御された態様で膨張し、前記医薬活性成分を放出する、請求項１から１６のいずれかに記載の医薬投与形態。
【請求項１８】
前記ポリマーマトリックスは、前記マトリックスの膨張する能力を増加させる少なくとも１つの添加剤をさらに含む、請求項１から１７のいずれかに記載の医薬投与形態。
【請求項１９】
前記添加剤は、多糖類ポリマーである、請求項１８に記載の医薬投与形態。
【請求項２０】
前記多糖類ポリマーは、プルランである、請求項１９に記載の医薬投与形態。
【請求項２１】
前記ポリマーマトリックスは、少なくとも１つの賦形剤をさらに含む、請求項１から２０のいずれかに記載の医薬投与形態。
【請求項２２】
前記医薬活性成分は、レボドパである、請求項１から２１のいずれかに記載の医薬投与形態。
【請求項２３】
２つの医薬活性成分を含み、第１の医薬活性成分は、前記ポリマー−脂質ナノ粒子内に組込まれ、第２の医薬活性成分は、前記ポリマーマトリックス内に組込まれる、請求項１から２２のいずれかに記載の医薬投与形態。
【請求項２４】
パーキンソン病の治療における使用のための、請求項１から２３のいずれかに記載の医薬投与形態。
【請求項２５】
医薬活性成分の放出のための医薬投与形態を調製する方法であって、前記方法は、
少なくとも２つのポリマーを架橋することによりポリマーマトリックスを合成するステップと、
少なくとも１つのポリマーおよび少なくとも１つのリン脂質からポリマー−脂質ナノ粒子を合成するステップと、
前記ポリマー−脂質ナノ粒子を前記ポリマーマトリックス内に組込むステップとを含み、
前記医薬活性成分は、前記ポリマーマトリックスおよび／または前記ポリマー−脂質ナノ粒子のいずれかに添加される、方法。
【請求項２６】
前記医薬活性成分は、前記ポリマー−脂質ナノ粒子に添加される、請求項２５に記載の方法。
【請求項２７】
前記医薬活性成分は、前記ポリマーマトリックスに添加される、請求項２５に記載の方法。
【請求項２８】
前記２つの架橋したポリマーは、カチオン性ポリマーおよびアニオン性ポリマーである、請求項２５から２７のいずれかに記載の方法。
【請求項２９】
前記カチオン性ポリマーは、メタクリレート−co−（２−ジメチルアミノエチル）メタクリレート−co−メチルメタクリレート  １：２：１である、請求項２８に記載の方法。
【請求項３０】
前記アニオン性ポリマーは、カルボキシメチルセルロースナトリウムである、請求項２８または２９に記載の方法。
【請求項３１】
前記メタクリレート−co−（２−ジメチルアミノエチル）メタクリレート−co−メチルメタクリレート  １：２：１：カルボキシメチルセルロースナトリウムの比は、０．５：１である、請求項３０に記載の方法。
【請求項３２】
前記ポリマーマトリックスを合成するために、中性ポリマーも用いられる、請求項２５から３１のいずれかに記載の方法。
【請求項３３】
前記中性ポリマーは、ガラクトマンナンポリマーである、請求項３２に記載の方法。
【請求項３４】
前記中性ガラクトマンナンポリマーは、ローカストビーンに由来する、請求項３３に記載の方法。
【請求項３５】
前記ポリマー−脂質ナノ粒子を合成するために用いられる前記ポリマーは、メタクリレート−co−（２−ジメチルアミノエチル）メタクリレート−co−メチルメタクリレート  １：２：１である、請求項２５から３４のいずれかに記載の方法。
【請求項３６】
前記ポリマー−脂質ナノ粒子を合成するために用いられる前記ポリマーは、キトサンである、請求項２５から３４のいずれかに記載の方法。
【請求項３７】
前記ポリマー−脂質ナノ粒子を合成するために用いられる前記ポリマーは、メタクリレート−co−（２−ジメチルアミノエチル）メタクリレート−co−メチルメタクリレート  １：２：１およびキトサンである、請求項２５から３４のいずれかに記載の方法。
【請求項３８】
前記ポリマー−脂質ナノ粒子を合成するために用いられる前記リン脂質は、レシチンである、請求項２５から３７のいずれかに記載の方法。
【請求項３９】
前記ポリマーおよび前記リン脂質を架橋するために、キレート剤が用いられる、請求項２５から３８のいずれかに記載の方法。
【請求項４０】
前記キレート剤は、トリポリリン酸ナトリウムである、請求項３９に記載の方法。
【請求項４１】
前記マトリックスの膨張を増加させる能力を有する少なくとも１つの添加剤が、前記ポリマーマトリックス内に組込まれる、請求項２５から４０のいずれかに記載の方法。
【請求項４２】
前記添加剤は、多糖類ポリマーである、請求項４１に記載の方法。
【請求項４３】
前記多糖類ポリマーは、プルランである、請求項４２に記載の方法。
【請求項４４】
少なくとも１つの賦形剤が、前記ポリマーマトリックス内にさらに組込まれる、請求項２５から４３のいずれかに記載の方法。
【請求項４５】
前記医薬活性成分は、レボドパである、請求項２５から４４のいずれかに記載の方法。
【請求項４６】
少なくとも２つの医薬活性成分が前記医薬投与形態内に組込まれ、第１の医薬活性成分は、前記ポリマー−脂質ナノ粒子内に組込まれ、第２の医薬活性成分は、前記ポリマーマトリックス内に組込まれる、請求項２５から４５のいずれかに記載の方法。
【請求項４７】
請求項１から２４のいずれかに記載の医薬投与形態を含有し、前記医薬活性成分は、治療上有効な量で含まれる、医薬組成物。
【請求項４８】
前記医薬活性成分は、レボドパである、請求項４７に記載の医薬組成物。
【国際調査報告】
2013543886.tif 000058
2013543886.tif 000059