(57)【要約】  例えばＴＨ−２８１、ＴＨ−３０２、およびＴＨ−３０８のような低酸素活性化プロドラッグは、急性白血病、慢性白血病、骨髄異形成症候群（ＭＤＳ）、進行性骨髄線維症（ＭＦ）、および多発性骨髄腫のような種々の血液癌の治療のために有用である。【特許請求の範囲】
【請求項１】
ＴＨ−２８１、ＴＨ−３０２、およびＴＨ−３０８からなる群から選択される、治療有効量の低酸素活性化プロドラッグをそれによって癌を治療するそのような治療を必要とする患者へ投与することを含む、血液癌の治療方法。
【請求項２】
前記の治療される血液癌が、多発性骨髄腫、急性白血病、進行性慢性骨髄性白血病（ＣＭＬ）、高リスク骨髄異形成症候群（ＭＤＳ）、進行性骨髄線維症（ＭＦ）、または再発性もしくは難治性の慢性リンパ性白血病（ＣＬＬ）からなる群から選択される、請求項１に記載の方法。
【請求項３】
前記の治療される血液癌が、再発性または難治性の急性白血病のどちらかである、請求項２に記載の方法。
【請求項４】
前記の治療される血液癌が、再発性もしくは難治性の急性リンパ性白血病（ＡＬＬ）または再発性もしくは難治性の急性骨髄性白血病（ＡＭＬ）のどちらかである、請求項２に記載の方法。
【請求項５】
前記患者が標準化学療法には不適応である、請求項１〜４のいずれか１項に記載の方法。
【請求項６】
前記の投与される低酸素活性化プロドラッグが、ＴＨ−３０２である、請求項１〜５のいずれかに記載の方法。
【請求項７】
ＴＨ−３０２が、２１日サイクルの連続５日間、または連続８日間のうちの５日間、単剤療法として投与され、その治療有効量が、１２０ｍｇ／ｍ２／日〜５７５ｍｇ／ｍ２／日である、請求項６に記載の方法。
【請求項８】
ＴＨ−３０２が、２１日サイクルの１日目、４日目、８日目、および１１日目に、多発性骨髄腫を治療するための単剤療法として投与され、その治療有効量が、１２０ｍｇ／ｍ２／日〜５７５ｍｇ／ｍ２／日である、請求項６に記載の方法。
【請求項９】
ＴＨ−３０２が、２１日サイクルの１日目、４日目、８日目、および１１日目に、多発性骨髄腫を治療するために、さらにボルテゾミブを含む併用療法として投与され、その治療有効量が、１２０ｍｇ／ｍ２／日〜５７５ｍｇ／ｍ２／日である、請求項６に記載の方法。
【請求項１０】
ＴＨ−３０２が、２１日サイクルの１日目、４日目、８日目、および１１日目に、多発性骨髄腫を治療するために、さらにレナリドミドおよびデキサメタゾンを含む併用療法として投与され、その治療有効量が、１２０ｍｇ／ｍ２／日〜５７５ｍｇ／ｍ２／日である、請求項６に記載の方法。
【請求項１１】
ＴＨ−３０２が、２８日サイクルの１日目、４日目、８日目、１１日目、１５日目、１８日目に、多発性骨髄腫を治療するために、さらにレナリドミドおよびデキサメタゾンを含む併用療法として投与され、その治療有効量が、１２０ｍｇ／ｍ２／日〜５７５ｍｇ／ｍ２／日である、請求項６に記載の方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本出願は、米国仮特許出願第６１／３５９，３１３号（２０１０年６月２８日出願）および同第６１／４７０，７７３号（２０１１年４月１日出願）の、米国特許法第１１９条（ｅ）項に基づく優先権を主張し、引用することによりその全体が本明細書に組み込まれる。
【０００２】
本発明は、低酸素活性化プロドラッグの投与による血液癌の治療に関し、したがって、細胞生物学、医薬品化学、医学、分子生物学、および薬学の分野に関する。
【背景技術】
【０００３】
血液癌は、血液、骨髄、および／またはリンパ系を攻撃する癌の１種を意味する。この種類の癌には、白血病や多発性骨髄腫が含まれ、これらは全て、新しい、より効果的な治療法を必要とする致命的な疾患となり得る。
【０００４】
癌細胞と腫瘍微小環境との関係は、癌細胞の増殖と生存に影響を及ぼす（参照：Ｈｉｒｕｍａら、Ｂｌｏｏｄ．２００９；１１３（２０）４８９４−４９０２、およびＰｏｄａｒら、Ｌｅｕｋｅｍｉａ．２００９；２３（１）：１０−２４、これらのそれぞれは、引用により本明細書に組み込まれる）。低酸素すなわち低い酸素レベルは、多くの固形腫瘍の微小環境の特徴であり、多くの固形腫瘍を特徴付ける乏しい血管新生から生じる。高い転移の可能性と悪い予後は、固形腫瘍での低酸素と高い相関性がある。
【０００５】
臨床研究では、長年にわたって固形腫瘍の低酸素領域への治療を対象とする試みがなされたが、注目に値する成功例はなかった。しかし、最近では、有望な新しいクラスの低酸素活性化プロドラッグが誕生し（参照：米国特許第７，５５０，４９６号。これは引用により本明細書に組み込まれる）、そのクラスの中で最も有望な化合物は、ＴＨ−３０２（参照：ＰＣＴ公開番号ＷＯ２００７／００２９３１；同２００８／０８３１０１；および同２０１０／０４８３３０。これらのそれぞれは、引用により本明細書に組み込まれる）と呼ばれ、現在、拡大臨床試験中である。
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００６】
しかし、組織に酸素を与える循環器系の重要な役割および初期の低酸素標的治療の臨床的成功例がないことを考えると、低酸素標的治療は、新しい血液癌療法の必要性を満たす可能性があるとは認識されていない。本発明は、そのような必要性を満たすものである。
【課題を解決するための手段】
【０００７】
急性白血病（ＡＭＬおよびＡＬＬ）、慢性白血病（ＣＭＬおよびＣＬＬ）、特発性骨髄線維症（ＭＦ、特発性骨髄化生またはＡＭＭとしても知られている）、リンパ腫、骨髄異形成症候群（ＭＤＳ）、および多発性骨髄腫などの様々な血液癌を治療するための方法が本明細書で提供され、前記方法は、限定されるものではないが、式（Ｉ）の化合物を含む治療有効量の低酸素活性化プロドラッグを投与することを含む：
【化１】
2013533257.tif 000002
式中、Ｙ２は、Ｏ、Ｓ、ＮＲ６、ＮＣＯＲ６、またはＮＳＯ２Ｒ６であり、ここで、Ｒ６は、（Ｃ１−Ｃ６）アルキル、Ｃ１−Ｃ６ヘテロアルキル、アリール、またはヘテロアリールであり；Ｒ３およびＲ４は、２−ハロアルキル、２−アルキルスルホニルオキシアルキル、２−ヘテロアルキルスルホニルオキシアルキル、２−アリールスルホニルオキシアルキル、および２−ヘテロアルキルスルホニルオキシアルキルからなる群から独立して選択され；Ｒ１は、式Ｌ−Ｚ３を有し；Ｌは、Ｃ（Ｚ１）２であり；各Ｚ１は、独立して、水素、ハロゲン、Ｃ１−Ｃ６アルキル、Ｃ１−Ｃ６ヘテロアルキル、アリール、ヘテロアリール、Ｃ３−Ｃ８シクロアルキル、ヘテロシクリル、Ｃ１−Ｃ６アシル、Ｃ１−Ｃ６ヘテロアシル、アロイル、またはヘテロアロイルであり；またはＬは、
【化２】
2013533257.tif 000003
であり；Ｚ３は、
【化３】
2013533257.tif 000004
から成る群から選択される式を有するバイオ還元性基であり、ここで、各Ｘ１は、
独立してＮまたはＣＲ８であり；Ｘ２は、ＮＲ７、ＳまたはＯであり；各Ｒ７は、独立して、Ｃ１−Ｃ６アルキル、Ｃ１−Ｃ６ヘテロアルキル、Ｃ３−Ｃ８シクロアルキル、ヘテロシクリル、アリールまたはヘテロアリールであり；そして、Ｒ８は、独立して、水素、ハロゲン、シアノ、ＣＨＦ２、ＣＦ３、ＣＯ２Ｈ、アミノ、Ｃ１−Ｃ６アルキル、Ｃ１−Ｃ６ヘテロアルキル、Ｃ１−Ｃ６シクロアルキル、Ｃ１−Ｃ６アルコキシ、Ｃ１−Ｃ６アルキルアミノ、Ｃ１−Ｃ６ジアルキルアミノ、アリール、ＣＯＮ（Ｒ７）２、Ｃ１−Ｃ６アシル、Ｃ１−Ｃ６ヘテロアシル、アロイルまたはヘテロアロイルであり；またはその薬学的に許容される塩である。本発明の種々の実施形態において、本発明で利用される化合物は、ＴＨ−２８１、ＴＨ−３０２、またはＴＨ−３０８（構造は、以下に示す）である式Ｉの化合物である。
【０００８】
１つの実施形態では、ＴＨ−３０２または式Ｉの別の化合物は、単剤（本明細書では、「薬剤」は、「薬物」と同義で使用される）療法として投与され、ＡＭＬ、ＡＬＬ、ＣＭＬ、ＣＬＬ、ＭＤＳ、およびＭＦ、ならびにこれらの癌の再発性または難治性の形態から成る群から選択される血液癌を治療する。１つの実施形態では、ＴＨ−３０２または式Ｉの別の化合物は、２１日サイクルのうち５日間連続して投与され、投与量は例えば、１８０、２４０、３４０、および４８０ｍｇ／ｍ２／日の投与量を含む１２０〜５７５ｍｇ／ｍ２／日である。いくつかの実施形態では、５日間の投与量は、８日間にわたり延ばされる。１つの実施形態では、ピモニダゾールは、低酸素マーカーとして使用され、骨髄生検の約１６（±６）時間前に、０．９％の食塩水に溶解した０．５ｇ／ｍ２の投与量で２０分間かけて注入される。ピモニダゾールの最大投与量は、体表面積（ＢＳＡ）＞２．０ｍ２の患者に対して１．０ｇを保持することができる。
【０００９】
本発明のこれらの方法は、臨床試験で有効であることが証明されている。１２０ｍｇ／ｍ２／日の投与量のＴＨ−３０２で治療された２人のＡＭＬ患者の病状は安定していた。１７０ｍｇ／ｍ２／日の投与量のＴＨ−３０２で治療された１人のＡＬＬ患者は、１サイクル後の骨髄生検により部分寛解を示した。２４０ｍｇ／ｍ２／日の投与量のＴＨ−３０２で治療された２人の患者（ＡＭＬ患者１名およびＡＬＬ患者１名）と３３０ｍｇ／ｍ２／日のＴＨ−３０２で治療された１人の患者では、１サイクル後に病状が安定していた。
【００１０】
１つの実施形態では、ＴＨ−３０２または式Ｉの別の化合物は、この病気の再発性または難治性の形態を含む多発性骨髄腫の治療に単剤療法として、限定されるものではないが、ボルテゾミブおよび／またはレナリドミド（またはサリドマイド）療法に失敗した患者に投与される。１つの実施形態では、ＴＨ−３０２または式Ｉの別の化合物は、２１日サイクルの１日目、４日目、８日目、および１１日目に投与され、その投与量は、例えば、１８０、２４０、３４０、および４８０ｍｇ／ｍ２／日の投与量を含む１２０〜５７５ｍｇ／ｍ２／日である。
【００１１】
１つの実施形態では、ＴＨ−３０２または式Ｉの別の化合物は、この病気の再発性または難治性の形態を含む多発性骨髄腫の治療のためにボルテゾミブとの併用療法として、限定されるものではないが、ボルテゾミブおよび／またはレナリドミド（またはサリドマイド）療法に失敗した患者に投与される。１つの実施形態では、ＴＨ−３０２または式Ｉの別の化合物は、２１日サイクルの１日目、４日目、８日目、および１１日目に投与され、その投与量は、例えば、１８０、２４０、３４０、および４８０ｍｇ／ｍ２／日の投与量を含む１２０〜５７５ｍｇ／ｍ２／日である。ボルテゾミブは、商業的に供給され、承認されている通り１．３ｍｇ／ｍ２／日の投与量または１．０ｍｇ／ｍ２／日の投与量で同じサイクルに基づいて投与される。１つの実施形態では、ＴＨ−３０２または式Ｉの別の化合物は、ボルテゾミブ投与の少なくとも２時間前に投与される。ＰＣＴ公開番号ＷＯ２０１０／０４８３３０を参照のこと。これは引用により本明細書に組み込まれる。
【００１２】
１つの実施形態では、ＴＨ−３０２または式Ｉの別の化合物は、この病気の再発性または難治性の形態を含む多発性骨髄腫の治療のためにレナリドミドおよびデキサメタゾンとの併用療法として、限定されるものではないが、ボルテゾミブおよび／またはレナリドミド（またはサリドマイド）療法に失敗した患者に投与される。１つの実施形態では、ＴＨ−３０２または式Ｉの別の化合物は、２１日サイクルの１日目、４日目、８日目、および１１日目に投与され、その投与量は、例えば、１８０、２４０、３４０、および４８０ｍｇ／ｍ２／日の投与量を含む１２０〜５７５ｍｇ／ｍ２／日である。レナリドミドは、商業的に供給され、承認されている通り１日目〜１４日目まで２５ｍｇの投与量で、そしてデキサメタゾンは、商業的に供給され、承認されている通り、同じサイクルの１日目〜４日目、９日目〜１２日目に４０ｍｇの投与量で投与される。１つの実施形態では、ＴＨ−３０２または式Ｉの別の化合物は、２８日サイクルの１日目、４日目、８日目、１１日、１５日目、および１８日目に投与され、その投与量は、例えば、１８０、２４０、３４０、および４８０ｍｇ／ｍ２／日の投与量を含む１２０〜５７５ｍｇ／ｍ２／日である。レナリドミドは、商業的に供給され、承認されている通り、１日目〜２１日目まで２５ｍｇの投与量で投与され、デキサメタドンは、商業的に供給され、承認されている通り、同じ２８日サイクルの１日目〜４日目、９日目〜１２日目、１７日目〜２０日目に４０ｍｇの投与量で投与される。
【００１３】
１つの実施形態では、ＴＨ−３０２または式Ｉの別の化合物は、凍結乾燥品として１００ｍｇのバイアルで提供され、Ｄ５Ｗ（デキストロース５％水溶液）中に溶解され、輸液ポンプを経由して約３０〜６０分かけて静脈内に投与される。注入量は、注入の過程で与えられた総投与量（ｍｇ単位で）に依存する。１０００ｍｇ未満が注入される場合は、５００ｃｃのＤ５Ｗが注入のために使用される。総投与量が、１０００を超える場合、１０００ｃｃのＤ５Ｗが注入のために使用される。
【００１４】
本発明の種々の実施形態では、低酸素のバイオマーカーは、治療患者を選別するために、および／または治療に応答する患者を識別するために使用される。
【００１５】
本発明のこれらと他の態様および実施形態は、以下にさらに詳細に説明される。
【発明を実施するための形態】
【００１６】
定義
以下の本明細書および特許請求の範囲において、以下の意味を有するように定義される多くの用語について言及する。全ての数値指定、例えば、範囲を含む、ｐＨ、温度、時間、濃度、および重量は、一般的に０．１、１．０、または１０．０刻みで（＋）または（−）に適宜変化し得る近似値である。全ての数値指定は、用語「約」が先行しているものとして理解することができる。本明細書中に記載の試薬は、例示的なものであり、それらの均等物は当該技術分野で公知であろう。
【００１７】
文脈上、そうでないとする明確な指示がない限り、単数形の「１つ“ａ”」、「１つ“ａｎ”」および「それ“ｔｈｅ”」は、複数の言及も含む。
【００１８】
用語「含む“ｃｏｍｐｒｉｓｉｎｇ”」は、任意の列挙要素が必然的に含まれており、他の要素が場合により含まれてもよいことを意味する。「から本質的になる“ｃｏｎｓｉｓｔｉｎｇ  ｅｓｓｅｎｔｉａｌｌｙ  ｏｆ”」は、任意の列挙要素が必然的に含まれており、列挙された要素の基本的かつ新規な特性に実質的に影響を与える要素は除外され、そして、他の要素は場合により含まれてもよいことを意味する。「〜からなる“ｃｏｎｓｉｓｔｉｎｇ  ｏｆ”」は、列挙された要素以外の全ての要素が除外されることを意味する。これらの用語のそれぞれによって定義される実施形態は、本発明の範囲内である。
【００１９】
式Ｉに関連する特定の用語は、以下に定義される。
【００２０】
「アシル」は、−ＣＯ−アルキルを意味し、ここでアルキルは本明細書で定義される。
【００２１】
「アロイル」は、−ＣＯ−アリールを意味し、ここでアリールは本明細書で定義される。
【００２２】
「アルコキシ」は、−Ｏ−アルキルを意味し、ここでアルキルは本明細書で定義される。
【００２３】
「アルケニル」は、接頭辞で示された炭素原子数を有し、少なくとも１個の２重結合（しかし、３個以下の２重結合）を含む直鎖状の１価炭化水素基または分岐状の１価炭化水素基を意味する。例えば、（Ｃ２−Ｃ６）アルケニルは、エテニル、プロペニル、１，３−ブタジエニルなどを含む。アルケニルは、例えば、重水素（“Ｄ”）、ヒドロキシル、アミノ、モノもしくはジ（Ｃ１−Ｃ６）アルキルアミノ、ハロ、Ｃ２−Ｃ６アルケニルエーテル、シアノ、ニトロ、エチニル、Ｃ１−Ｃ６アルコキシ、Ｃ１−Ｃ６アルキルチオ、−ＣＯＯＨ、−ＣＯＮＨ２、モノ−もしくはジ（Ｃ１−Ｃ６）アルキルカルボキサミド、−ＳＯ２ＮＨ２、−ＯＳＯ２−（Ｃ１−Ｃ６）アルキル、モノもしくはジ（Ｃ１−Ｃ６）アルキルスルホンアミド、アリール、ヘテロアリール、アルキルもしくはヘテロアルキルスルホニルオキシ、およびアリールもしくはヘテロアリールスルホニルオキシを含む置換基で場合により置換することができる。
【００２４】
「アルキル」は、接頭辞で示された炭素原子数を有する、直鎖状の飽和１価炭化水素基または分岐状の飽和１価炭化水素基を意味する。本開示で使用される場合、接頭辞（Ｃ１−Ｃｑｑ）、Ｃ１−ｑｑ，またはＣ１−Ｃｑｑ（ここで、ｑｑは２〜２０の整数である）は、同じ意味を有する。例えば、（Ｃ１−Ｃ６）アルキル、Ｃ１−６アルキル、またはＣ１−Ｃ６アルキルは、メチル、エチル、ｎ−プロピル、２−プロピル、ｎ−ブチル、２−ブチル、ｔｅｒｔ−ブチル、ペンチル、などを含む。この中の定義の各々（例えば、アルキル、アルケニル、アルコキシ、その他）は、接頭辞がアルキル部分の主鎖炭素原子の数を示すために含まれていないときは、該基またはその部分は６個以下の主鎖炭素原子を有するものとする。（Ｃ１−Ｃ６）アルキルは、例えば、重水素（“Ｄ”）、ヒドロキシル、アミノ、モノもしくはジ（Ｃ１−Ｃ６）アルキルアミノ、ハロ、Ｃ２−Ｃ６アルケニルエーテル、シアノ、ニトロ、エテニル、エチニル、Ｃ１−Ｃ６アルコキシ、Ｃ１−Ｃ６アルキルチオ、−ＣＯＯＨ、−ＣＯＮＨ２、モノ−もしくはジ（Ｃ１−Ｃ６）アルキルカルボキサミド、−ＳＯ２ＮＨ２、−ＯＳＯ２−（Ｃ１−Ｃ６）アルキル、モノもしくはジ（Ｃ１−Ｃ６）アルキルスルホンアミド、アリール、ヘテロアリール、アルキルスルホニルオキシ、ヘテロアルキルスルホニルオキシ、アリールスルホニルオキシまたはヘテロアリールスルホニルオキシを含む置換基で場合により置換することができる。
【００２５】
「アルキルアミノ」またはモノ−アルキルアミノは、−ＮＨ−アルキルを指し、該アルキルは本明細書で定義される。
【００２６】
「アルキニル」は、接頭辞で示された炭素原子数を有し、少なくとも１個の３重結合（しかし、２個以下の３重結合）を含む直鎖状の１価炭化水素基または分岐状の１価炭化水素基を意味する。例えば、（Ｃ２−Ｃ６）アルキニルは、エチニル、プロピニル、などを含む。アルキニルは、例えば、重水素（“Ｄ”）、ヒドロキシル、アミノ、モノもしくはジ（Ｃ１−Ｃ６）アルキルアミノ、ハロ、Ｃ２−Ｃ６アルケニルエーテル、シアノ、ニトロ、エテニル、Ｃ１−Ｃ６アルコキシ、Ｃ１−Ｃ６アルキルチオ、−ＣＯＯＨ、−ＣＯＮＨ２、モノ−もしくはジ（Ｃ１−Ｃ６）アルキルカルボキサミド、−ＳＯ２ＮＨ２、−ＯＳＯ２−（Ｃ１−Ｃ６）アルキル、モノもしくはジ（Ｃ１−Ｃ６）アルキルスルホンアミド、アリール、ヘテロアリール、アルキルもしくはヘテロアルキルスルホニルオキシ、およびアリールもしくはヘテロアリールスルホニルオキシを含む置換基で場合により置換することができる。
【００２７】
「アリール」は、６から１０個の環原子を有する１価の単環式または２環式芳香族炭化水素基を意味し、これは、重水素（“Ｄ”）、アルキル、シクロアルキル、シクロアルキルアルキル、ハロ、ニトロ、シアノ、ヒドロキシル、アルコキシ、アミノ、アシルアミノ、モノ−アルキルアミノ、ジ−アルキルアミノ、ハロアルキル、ハロアルコキシ、ヘテロアルキル、ＣＯＲ（ここで、Ｒは、水素、アルキル、シクロアルキル、シクロアルキル−アルキル、フェニルまたはフェニルアルキルである）、−（ＣＲ’Ｒ”）ｎ−ＣＯＯＲ（ここで、ｎは０〜５の整数であり、Ｒ’およびＲ”は、独立して水素またはアルキルであり、Ｒは、水素、アルキル、シクロアルキル、シクロアルキルアルキル、フェニルまたはフェニルアルキルである）または−（ＣＲ’Ｒ”）ｎ−ＣＯＮＲｘＲｙ（ここで、ｎは０〜５の整数であり、Ｒ’およびＲ”は、独立して水素またはアルキルであり、そして、ＲｘおよびＲｙは、水素、アルキル、シクロアルキル、シクロアルキルアルキル、フェニルまたはフェニルアルキルから独立して選択される）から選択される、１〜８個の置換基で、好ましくは、１個、２個、３個、４個、５個の置換基で、独立して置換されている。１つの実施形態では、ＲｘおよびＲｙは一緒になって、シクロアルキルまたはヘテロシクリルである。具体的には、アリールという用語は、限定されるものではないが、フェニル、ビフェニル、１−ナフチル、および２−ナフチル、ならびにそれらの置換形態を含む。
【００２８】
「シクロアルキル」は、３〜７個の環炭素の１価の環状炭化水素基を意味する。該シクロアルキル基は、１つ以上の２重結合を有することができ、アルキル、場合により置換されたフェニル、または−Ｃ（Ｏ）Ｒ２（ここで、Ｒ２は、水素、アルキル、ハロアルキル、アミノ、モノ−アルキルアミノ、ジ−アルキルアミノ、ヒドロキシル、アルコキシ、または場合により置換されたフェニルである）から選択される１個、２個、３個、または４個の置換基で独立して場合により置換されることができる。具体的には、シクロアルキルという用語は、例えば、シクロプロピル、シクロヘキシル、シクロヘキセニル、フェニルシクロヘキシル、４−カルボキシシクロヘキシル、２−カルボキサミドシクロヘキセニル、２−ジメチルアミノカルボニル−シクロヘキシル、などを含む。
【００２９】
「ジアルキルアミノ」またはジ−アルキルアミノは、−Ｎ（アルキル）２を意味し、ここで、アルキルは本明細書で定義されている。
【００３０】
「ヘテロアルキル」は、シアノ、−ＯＲｗ、−ＮＲｘＲｙ、および−Ｓ（Ｏ）ｐＲｚ（ここで、ｐは０から２の整数である）から独立して選択される１個、２個、または３個の置換基を有する、本明細書で定義されたアルキル基を意味し、ヘテロアルキル基の結合点は、該ヘテロアルキル基の炭素原子を介してであることが理解される。Ｒｗは、水素、アルキル、シクロアルキル、シクロアルキル−アルキル、アリール、アラルキル、アルコキシカルボニル、アリールオキシカルボニル、カルボキサミド、またはモノ−もしくはジ−アルキルカルバモイルであり、Ｒｘは、水素、アルキル、シクロアルキル、シクロアルキル−アルキル、アリールまたはアラルキルである。Ｒｙは、水素、アルキル、シクロアルキル、シクロアルキル−アルキル、アリール、アラルキル、アルコキシカルボニル、アリールオキシカルボニル、カルボキサミド、モノ−もしくはジ−アルキルカルバモイルまたはアルキルスルホニルである。Ｒｚは、水素（ただし、ｎは０である）、アルキル、シクロアルキル、シクロアルキル−アルキル、アリール、アラルキル、アミノ、モノ−アルキルアミノ、ジ−アルキルアミノ、またはヒドロキシアルキルである。代表的な例としては、例えば、２−ヒドロキシエチル、２，３−ジヒドロキシプロピル、２−メトキシエチル、ベンジルオキシメチル、２−シアノエチル、および２−メチルスルホニル−エチルが挙げられる。上記のそれぞれについて、Ｒｗ、Ｒｘ、Ｒｙ、およびＲｚは、アミノ、ハロ、フッ素、アルキルアミノ、ジ−アルキルアミノ、ＯＨまたはアルコキシでさらに置換されることができる。さらに、炭素原子の数を示す接頭辞（例えば、Ｃ１−Ｃ１０）は、シアノ、−ＯＲｗ，−ＮＲｘＲｙ、または−Ｓ（Ｏ）ｐＲｚ部分を除く該ヘテロアルキル基の部分の炭素原子の合計を意味する。１つの実施形態では、ＲｘとＲｙは、一緒になって、シクロアルキルまたはヘテロシクリルである。
【００３１】
「ヘテロアリール」は、Ｎ、Ｏ、またはＳから選択される１個、２個、または３個の環ヘテロ原子を含む少なくとも１つの芳香環を有し、残りの環原子はＣである、５〜１２個の環原子の１価の単環式基、２環式基または３環式基を意味し、前記ヘテロアリール基の結合点が芳香環上であることが理解される。前記ヘテロアリール環は、アルキル、シクロアルキル、シクロアルキル−アルキル、ハロ、ニトロ、シアノ、ヒドロキシル、アルコキシ、アミノ、アシルアミノ、モノ−アルキルアミノ、ジ−アルキルアミノ、ハロアルキル、ハロアルコキシ、ヘテロアルキル、−ＣＯＲ（ここで、Ｒは、水素、アルキル、フェニルまたはフェニルアルキル、−（ＣＲ’Ｒ”）ｎ−ＣＯＯＲ（ここで、ｎは０〜５の整数であり、Ｒ’およびＲ”は、独立して水素またはアルキルであり、Ｒは、水素、アルキル、シクロアルキル、シクロアルキル−アルキル、フェニルまたはフェニルアルキルである）、または−（ＣＲ’Ｒ”）ｎ−ＣＯＮＲｘＲｙ（ここで、ｎは０〜５の整数であり、Ｒ’およびＲ”は、独立して水素またはアルキルであり、そして、ＲｘおよびＲｙは、互いに独立して、水素、アルキル、シクロアルキル、シクロアルキル−アルキル、フェニルまたはフェニルアルキルである）から選択される１〜８個の置換基、好ましくは１個、２個、３個または４個の置換基で独立して場合により置換される。１つの実施形態では、ＲｘとＲｙは、一緒になってシクロアルキルまたはヘテロシクリルである。具体的には、ヘテロアリールという用語は、限定されるものではないが、ピリジル、フラニル、チエニル、チアゾリル、イソチアゾリル、トリアゾリル、イミダゾリル、イソオキサゾリル、ピロリル、ピラゾリル、ピリダジニル、ピリミジニル、ベンゾフラニル、テトラヒドロベンゾフラニル、イソベンゾフラニル、ベンゾチアゾリル、ベンゾイソチアゾリル、ベンゾトリアゾリル、インドリル、イソインドリル、ベンゾオキサゾリル、キノリル、テトラヒドロキノリニル、イソキノリル、ベンズイミダゾリル、ベンズイソオキサゾリルまたはベンゾチエニル、インダゾリル、ピロロピリミジニル、インドリジニル、ピラゾロピリジニル、トリアゾロピリジニル、ピラゾロピリミジニル、トリアゾロピリミジニル、ピロロトリアジニル、ピラゾロトリアジニル、トリアゾロトリアジニル、ピラゾロテトラジニル、ヘキサアザ−インデニル、およびヘプタアザ−インデニルならびにそれらの誘導体を含む。特に断りのない限り、環内のヘテロ原子の配置は、構成環原子の結合特性によって許されるどのような配置をも取ることができる。
【００３２】
「ヘテロシクリル」または「シクロヘテロアルキル」は、３〜８個の環原子を有する飽和または不飽和の非芳香環基を意味し、ここで、１〜４個の環原子は、Ｏ、ＮＲ（ここで、Ｒは水素、アルキル、シクロアルキル、シクロアルキルアルキル、フェニルまたはフェニルアルキルである）、Ｐ（＝Ｏ）ＯＲｗ、または−Ｓ（Ｏ）ｐ（ここで、ｐは０〜２の整数である）から選択されるヘテロ原子であり、残りの環原子は、Ｃであり、ここで１個または２個のＣ原子は、場合によりカルボニル基で置換されることができる。ヘテロシクリル環は、アルキル、アリール、アリールアルキル、ヘテロアリール、ヘテロアリールアルキル、シクロアルキル、シクロアルキルアルキル、ハロ、ニトロ、シアノ、ヒドロキシル、アルコキシ、アミノ、モノ−アルキルアミノ、ジ−アルキルアミノ、ハロアルキル、ハロアルコキシ、−ＣＯＲ（ここで、Ｒは、水素、アルキル、シクロアルキル、シクロアルキルアルキル、フェニルまたはフェニルアルキルである）、−（ＣＲ’Ｒ”）ｎ−ＣＯＯＲ（ここで、ｎは０〜５の整数であり、Ｒ’およびＲ”は、独立して水素またはアルキルであり、Ｒは、水素、アルキル、シクロアルキル、シクロアルキルアルキル、フェニルまたはフェニルアルキルである）、または−（ＣＲ’Ｒ”）ｎ−ＣＯＮＲｘＲｙ（ここで、ｎは０〜５の整数であり、Ｒ’およびＲ”は、独立して水素またはアルキルであり、ＲｘおよびＲｙは、互いに独立して、水素、アルキル、シクロアルキル、シクロアルキルアルキル、フェニルまたはフェニルアルキルである）から選択される１個、２個、３個または４個の置換基で独立して場合により置換することができる。具体的には、用語ヘテロシクリルは、限定されるものではないが、ピリジル、テトラヒドロピラニル、Ｎ−メチル−ピペリジン−３−イル、Ｎ−メチルピロリジン−３−イル、２−ピロリドン−１−イル、フリル、キノリル、チエニル、ベンゾチエニル、ピロリジニル、ピペリジニル、モルホリニル、ピロリジニル、テトラヒドロフラニル、テトラヒドロチオフラニル、１，１−ジオキソ−ヘキサヒドロ−１Δ６−チオピラン−４−イル、テトラヒドロイミダゾ［４，５−ｃ］ピリジニル、イミダゾリニル、ピペラジニル、およびピペリジン−２−オンイル、ならびにその誘導体を含む。炭素原子の数を示す接頭辞（例えば、Ｃ３−Ｃ１０）は、ヘテロ原子の数を除いたシクロヘテロアルキル基またはヘテロシクリル基の部分の炭素原子の総数を指す。
【００３３】
「ヘテロアシル」は、−ＣＯ−ヘテロアルキルを意味し、ここで、ヘテロアルキルは本明細書に定義されている通りである。
【００３４】
「ヘテロアロイル」は、−ＣＯ−ヘテロアリールを意味し、ここで、ヘテロアリールは、本明細書に定義されている通りである。
【００３５】
「Ｒｓｕｌスルホニルオキシ」は、Ｒｓｕｌ−Ｓ（＝Ｏ）２−Ｏ−を意味し、アルキルスルホニルオキシ、ヘテロアルキルスルホニルオキシ、シクロアルキルスルホニルオキシ、ヘテロシクリルスルホニルオキシ、アリールスルホニルオキシおよびヘテロアリールスルホニルオキシを含み、ここで、Ｒｓｕｌは、それぞれ、アルキル、ヘテロアルキル、シクロアルキル、ヘテロシクリル、アリールおよびヘテロアリールであって、アルキル、ヘテロアルキル、シクロアルキル、ヘテロシクリル、アリールおよびヘテロアリールは本明細書で定義した通りである。アルキルスルホニルオキシの例として、Ｍｅ−Ｓ（＝Ｏ）２−Ｏ−、Ｅｔ−Ｓ（＝Ｏ）２−Ｏ−、ＣＦ３−Ｓ（＝Ｏ）２−Ｏ−などが挙げられ、アリールスルホニルオキシの例として、
【化４】
2013533257.tif 000005
（式中、Ｒａｒは、Ｈ、メチル、または臭素である）が挙げられる。
【００３６】
「置換基」は、特に先の各基の定義において記載した置換基の他に、重水素、−ハロゲン、−ＯＲ’、−ＮＲ’Ｒ’’、−ＳＲ’、−ＳｉＲ’Ｒ’’Ｒ’’’、−ＯＣ（Ｏ）Ｒ’、−Ｃ（Ｏ）Ｒ’、−ＣＯ２Ｒ’、−ＣＯＮＲ’Ｒ’’、−ＯＣ（Ｏ）ＮＲ’Ｒ’’、−ＮＲ’’Ｃ（Ｏ）Ｒ’、−ＮＲ’−Ｃ（Ｏ）ＮＲ’’Ｒ’’’、−ＮＲ’’Ｃ（Ｏ）２Ｒ’、−ＮＨ−Ｃ（ＮＨ２）＝ＮＨ、−ＮＲ’Ｃ（ＮＨ）＝ＮＨ、−ＮＨ−Ｃ（ＮＨ２）＝ＮＲ’、−Ｓ（Ｏ）Ｒ’、−Ｓ（Ｏ）２Ｒ’、−Ｓ（Ｏ）２ＮＲ’Ｒ’’、−ＮＲ’Ｓ（Ｏ）２Ｒ’’、−ＣＮ、−ＮＯ２、−Ｒ’、−Ｎ３、パーフルオロ（Ｃ１−Ｃ４）アルコキシ、およびパーフルオロ（Ｃ１−Ｃ４）アルキルから選択される基であって、０から前記の基における開放原子価の総数までの範囲の数で置換され；そして、式中、Ｒ’、Ｒ’’およびＲ’’’は、水素、Ｃ１−８アルキル、Ｃ３−６シクロアルキル、Ｃ２−８アルケニル、Ｃ２−８アルキニル、非置換アリールおよびヘテロアリール、（非置換アリール）−Ｃ１−４アルキル、および非置換アリールオキシ−Ｃ１−４アルキル、１〜３個のハロゲンで置換されたアリール、非置換Ｃ１−８アルキル、Ｃ１−８アルコキシもしくはＣ１−８チオアルコキシ基、または非置換アリール−Ｃ１−４アルキル基から独立して選択される。Ｒ’およびＲ’’が同じ窒素原子に結合する場合、それらは、窒素原子と一緒になって、３−、４−、５−、６−、または７−員環を形成することができる。例えば、−ＮＲ’Ｒ’’は、１−ピロリジニルおよび４−モルホリニルを含むことを意味する。他の適切な置換基として、１〜４個の炭素原子のアルキレンエーテルにより、環原子に結合する前記各アリール置換基を含む。アリールまたはヘテロアリール環の隣接する原子上の２個の置換基は、場合によっては、式：−Ｔ２−Ｃ（Ｏ）−（ＣＨ２）ｑ−Ｕ３−（式中、Ｔ２およびＵ３は、独立して、−ＮＨ−、−Ｏ−、−ＣＨ２−または単結合であり、ｑは０〜２の整数である）の置換基で置換されていてもよい。あるいは、アリールまたはヘテロアリール環の隣接する原子上の２個の置換基は、場合によっては、式：−Ａ−（ＣＨ２）ｒ−Ｂ−（式中、ＡおよびＢは、独立して、−ＣＨ２−、−Ｏ−、−ＮＨ−、−Ｓ−、−Ｓ（Ｏ）−、−Ｓ（Ｏ）２−、−Ｓ（Ｏ）２ＮＲ’−または単結合であり、ｒは１〜３の整数である）の置換基で置換されていてもよい。そのように形成された新しい環の単結合の１つは、場合によっては、２重結合で置換されていてもよい。あるいは、アリールまたはヘテロアリール環の隣接する原子上の２個の置換基は、場合によっては、式：−（ＣＨ２）ｓ−Ｘ５−（ＣＨ２）ｔ−（式中、ｓおよびｔは、独立して、０〜３の整数であり、Ｘ５は、−Ｏ−、−ＮＲ’−、−Ｓ−、−Ｓ（Ｏ）−、−Ｓ（Ｏ）２−または−Ｓ（Ｏ）２ＮＲ’−である）の置換基で置換されていてもよい。−ＮＲ’−および−Ｓ（Ｏ）２ＮＲ’−中の置換基Ｒ’は、水素または非置換Ｃ１−６アルキルから選択される。
【００３７】
本発明で利用される特定の化合物は、不斉炭素原子（光学中心）または２重結合を有しており、ラセミ体、ジアステレオマー、幾何異性体、位置異性体および個々の異性体（例えば、別個の鏡像体）は全て、本発明の範囲内に包含されるものである。また、本発明の化合物は、そのような化合物を構成する１個以上の原子で、原子同位体を非天然の割合で含んでもよい。例えば、化合物は、例えば、限定されるものではないが、トリチウム（３Ｈ）、ヨウ素−１２５（１２５Ｉ）または炭素−１４（１４Ｃ）などの放射性同位元素で放射標識化されていてもよい。本発明の化合物の同位体変種は、放射性であるか、放射性でないかに関わらず、全て本発明の範囲内に包含されるものとする。
【００３８】
本発明に関連するその他の用語を以下に定義する。
【００３９】
血液癌の文脈における「急性」は、これらの癌が非常に深刻な状態となり、患者の死につながることさえある（例えば、無処置のままに放置されると、これらの癌は、わずか２、３週間で致命的となる）比較的短い時間を指し、そして、何年もの間、患者に対して非常に衰弱させる影響を及ぼさないか、あるいは何年もの間、患者の死につながらない可能性を有する「慢性」の血液癌と区別している。「急性白血病」は、ＡＬＬ、ＡＭＬ、などを意味する。「慢性白血病」には、ＣＬＬ、ＣＭＬ、骨髄線維症、などが挙げられる。
【００４０】
「急性リンパ性白血病（ＡＬＬ）」は、血液癌、特に、白血球細胞に影響を及ぼす癌を指し、リンパ芽球の過剰増殖によって特徴づけられる。ＡＬＬでは、悪性の未熟な白血球細胞が継続的に増殖し、骨髄中で過剰生産される。ＡＬＬ細胞は、骨髄中の正常な細胞を締め出し、他の臓器に転移する可能性がある。ＡＬＬは、急性リンパ性白血病と急性小児白血病として知られている。
【００４１】
「急性骨髄性白血病（ＡＭＬ）」は、「骨髄細胞」として知られている白血球が癌化する血液癌を指す。ＡＭＬにおいては、骨髄は、正常な血液細胞の異常細胞との交換をもたらし、骨髄の正常な機能を破壊する「骨髄芽球」と呼ばれる異常な血液細胞を産生する。「芽球」細胞の産生異常により、正常な血液骨髄細胞の産生が阻害され、赤血球、正常な白血球、血小板の欠乏を引き起こし、貧血、挫傷と出血に対する脆弱性、および感染症のリスクの増加、などの有害な効果につながる。
【００４２】
薬物を患者に「投与すること」または「投与」（およびこの語句の文法的相当語句）は、医療専門家による患者への投与であり得る、もしくは自己投与であり得る直接投与、および薬物を処方する行為であり得る間接投与、を指す。例えば、患者に薬物の自己投与を指示する医師、および／または患者に薬物の処方箋を渡す医師は、薬物を患者に投与している。
【００４３】
「血液癌」とは、異常な過剰増殖または血液細胞の悪性増殖および／または転移を伴う血液悪性腫瘍を指す。血液癌は、限定されないが、急性白血病（ＡＭＬとＡＬＬ）、慢性白血病（ＣＭＬとＣＬＬ）、特発性骨髄線維症（ＭＦ、また原発性骨髄線維症またはＡＭＭとして知られている）、リンパ腫、骨髄異形成症候群（ＭＤＳ）、および多発性骨髄腫を含む。
【００４４】
「骨髄幹細胞移植」は、患者の骨髄を新しい骨髄に置き換えることを意味する。これらの移植では、化学療法薬物が骨髄中の幹細胞（病的リンパ球を作っているものを含む）を殺すために使用され、次に、ドナー（同種移植）からの、あるいは患者自身の骨髄（自家移植）からの健康な成人の血液幹細胞が、血液内に注入され、そこでは、それらが骨髄に移動し、健康な血液細胞を作り始める。
【００４５】
「慢性リンパ性（あるいはリンパ系）白血病（ＣＬＬ）」は、Ｂ細胞リンパ球に影響を与える血液癌を指す。Ｂ細胞は骨髄に由来し、リンパ節で発育する。ＣＬＬでは、Ｂ細胞が制御不能な方法で増殖し、骨髄や血液中に蓄積し、そこでそれらは健康な血液細胞を締め出す。病気が進行すると、ＣＬＬは、リンパ節脾臓、肝臓の腫れをもたらす。
【００４６】
「慢性骨髄性白血病（ＣＭＬ）」は、骨髄が顆粒球を産生し、その一部は白血球に決して成熟することがない血液癌を指す。「未熟」白血球は、「芽球」白血球と呼ばれている。時間が経つにつれて、顆粒球と芽球は、制御不能で増殖し、骨髄における血小板や赤血球の不足をもたらす。ＣＭＬ患者は、「フィラデルフィア染色体」と呼ばれる遺伝子変異を有する可能性がある。この染色体は、顆粒球または芽球の発育をもたらす特定のチロシンキナーゼを骨髄が作る原因となる。一部のＣＭＬ患者は、チロシンキナーゼ阻害剤による治療に抵抗性の疾患の形態を有する。ＣＭＬは、限定するものではないが、慢性骨髄性白血病（ｃｈｒｏｎｉｃ  ｍｙｅｌｏｇｅｎｏｕｓ  ｌｅｕｋｅｍｉａ）、慢性骨髄性白血病（ｃｈｒｏｎｉｃ  ｍｙｅｌｏｉｄ  ｌｅｕｋｅｍｉａ）、慢性骨髄球性白血病、および慢性顆粒球性白血病（ＣＧＬ）を含む。
【００４７】
「併用療法」は、治療に２つ以上の薬物を使用することを指し、すなわち、癌を治療するために使用される従来の薬物と一緒に、本明細書に記載の低酸素活性化プロドラッグを使用することが併用療法である。「併用」での投与は、両方の薬理作用が同時に患者で現れる任意の方法で２つの薬剤の投与（例えば、血液癌を治療するための低酸素活性化プロドラッグと既知の薬剤）を意味する。したがって、併用での投与は、単一医薬組成物、同一の剤形、または同一の投与経路までもを両薬剤の投与のために使用すること、あるいは２つの薬剤を正確に同時に投与することを必要とはしない。例えば、限定されるものではないが、１または２以上の下記の薬剤が、併用療法で本発明の低酸素活性化プロドラッグと一緒に投与することができると考えられる。：アレムツズマブ（Ｃａｍｐａｔｈ（登録商標）、Ｇｅｎｚｙｍｅ），アムサクリン、アスパラギナーゼ（クリサンタスパーゼとも呼ばれる）、ベンダムスチン、ボルテゾミブ、ブスルファン、カルムスチン、クロラムブシル、シクロホスファミド、シタラビン（ａｒａ−Ｃ）、ダウノルビシン、デキサメタゾン、ドキソルビシン（Ａｄｒｉａｍｙｃｉｎ（登録商標）、Ｂｅｄｆｏｒｄ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓ）、エトポシド、フルダラビン、ヒドロキシ尿素、これらに限定されないが、アザシチジンやデシタビン、イダルビシンを含む低メチル化剤、限定されるものではないが、レナリドミドおよびサリドマイドを含む免疫調節剤、限定されるものではないが、抗胸腺細胞グロブリン（ＡＴＧ）およびシクロスポリンを含む免疫抑制剤、インターフェロン−α２ｂ、メルカプトプリン（６−ＭＰ）、メルファラン、メトトレキサート、オファツムマブ（Ａｒｚｅｒｒａ（登録商標）、ＧｌａｘｏＳｍｉｔｈＫｌｉｎｅおよびＧｅｎｍａｂ）、プレドニゾン、リツキシマブ（Ｒｉｔｕｘａｎ（登録商標）、Ｇｅｎｅｎｔｅｃｈ）、テニポシド、サリドマイド、チオグアニン、トポテカン、限定されるものではないが、イマチニブ、ダサチニブおよびニロチニブを含むチロシンキナーゼ阻害剤、ならびにビンクリスチン。
【００４８】
「低酸素活性化プロドラッグ」は、低酸素下または無酸素下に比べて、正常酸素下で弱い活性または非活性である薬物を指す。低酸素活性化プロドラッグは、さまざまな還元剤および還元酵素、例えば限定されないが、単一電子伝達酵素（シトクロムＰ４５０レダクターゼなど）および２電子伝達（またはヒドリド転移）酵素によって活性化される薬物が挙げられる（参照：米国特許出願公開第２００５／０２５６１９１号、同第２００７／００３２４５５号および同第２００９／０１３６５２１号、およびＰＣＴ特許出願公開番号ＷＯ２０００／０６４８６４、同ＷＯ２００４／０８７０７５および同ＷＯ２００７／００２９３１；これらは、それぞれ引用により本明細書に組み込まれる）。本発明の方法における有用な低酸素活性化プロドラッグは、式Ｉの化合物であるが、その式によって定義されるように、Ｚ３が２−ニトロイミダゾール部分である化合物を含むがこれに限定されるものではない。本発明の方法で有用な特定の低酸素活性化プロドラッグの例としては、限定するものではないが、ＴＨ−２８１、ＴＨ−３０２、およびＴＨ−３０８が挙げられる。ＴＨ−３０２および式Ｉの他の化合物の合成方法、および製剤化方法は、ＰＣＴ特許出願公開番号ＷＯ２００７／００２９３１、および同ＷＯ２００８／０８３１０１に記載されており、これらのそれぞれは、引用により本明細書に組み込まれる。
【００４９】
「多発性骨髄腫（ＭＭ）」は、骨髄中の新生物形質細胞の蓄積によって特徴付けられるクローンＢ細胞悪性腫瘍を有する血液癌を意味する。多発性骨髄腫にはいくつかの種類があり、くすぶり型多発性骨髄腫（ＳＭＭ）、形質細胞性白血病、非分泌性骨髄腫、骨硬化性骨髄腫（ＰＯＥＭＳ症候群）、孤立性形質細胞腫（骨の孤立性骨髄腫とも呼ばれる）、および髄外性形質細胞腫が含まれる。
【００５０】
「骨髄異形成症候群（ＭＤＳ）」は、骨髄が正常な血液細胞の生産を停止し、その代わりに充分に機能しない未熟な血液細胞を産生するときに発生する血液癌を意味する。これは、あまりにも多くの不完全な血液細胞と十分に健康でない血液細胞の産生をもたらす。ＭＤＳの患者では、欠陥が骨髄中の幹細胞で発生したときに障害が始まる。その幹細胞は、次に、同じ欠陥を有する血液細胞を産生する。これらの欠陥のある細胞は、増殖して健康な血液細胞の数を上回り、そしてより長く生存する。これらの欠陥のある細胞はまた、非常に早く他の幹細胞も死滅させることができ、低い血球数をもたらす。異常細胞はまた、健康な細胞を締め出す。ＭＤＳは時間の経過と共に急性骨髄性白血病に進行し得る。
【００５１】
「骨髄線維症」は、体が正常な血液細胞を生成するのを崩壊させる一種の慢性白血病を指す。骨髄線維症は、独自（原発性骨髄線維症）に発生し得るし、あるいは別の骨髄疾患（二次性骨髄線維症）の結果として発生し得る。進行した骨髄線維症は、徐々に悪化し、最終的にはより深刻な形態の白血病に発展し得る。
【００５２】
「患者」または「対象」は、哺乳動物、特にヒトを指すが、また、血液癌を患っている、サル、ウシ、ウマ、イヌ、ネコ、およびげっ歯類をも指す。
【００５３】
「再発性または難治性」は、薬剤による治療に耐性である、あるいは薬剤による治療に応答するが、その薬剤に耐性となることなく再発する、あるいは薬剤による治療に応答するが、その薬剤に耐性となり再発する、血液癌の種類を指す。
【００５４】
「単一薬剤療法」または「単剤療法」は、疾患を治療するために単剤を使用すること、すなわち血液癌を治療するための唯一の化学薬剤として、例えば、ＴＨ−３０２などの低酸素活性化プロドラッグを使用することを意味する。疾患を直接治療する以外の目的のために投与される緩和剤および／またはビタミン類および／または他の薬剤の投与は、単剤療法で投与することができる。単剤療法を受けている患者は、放射線療法および／または手術を受けてもよい。
【００５５】
「標準化学療法」は、ＦＤＡのラベル表示指示書および／または医薬品の臨床試験の実施の基準に従った薬物による治療を指す。標準化学療法は、医学分野の当業者に周知である。
【００５６】
「ＴＨ−２８１」は、式：
【化５】
2013533257.tif 000006
の化合物を意味する。
【００５７】
「ＴＨ−３０２」は、式：
【化６】
2013533257.tif 000007
の化合物を意味する。
【００５８】
「ＴＨ−３０８」は、式：
【化７】
2013533257.tif 000008
の化合物を意味する。
【００５９】
薬物または薬剤の「治療有効量」は、血液癌を有する患者に投与した場合、その患者において意図される治療効果（例えば、患者の血液癌の１つ以上の症状発現の緩和、改善、軽減または解消）を有する薬物または薬剤の量を云う。治療効果は、必ずしも１回の用量の投与ではもたらされず、一連の治療有効量を投与してからようやくもたらされるものであり得る。したがって、治療有効量は、１回または複数の投与にて投与され得る。
【００６０】
病状または患者を「治療すること」または「治療」は、臨床結果を始めとする有益な、または所望の結果を得るために取るステップをいう。本技術の目的のために、有益な、または所望の臨床結果としては、限定されないが、条件付き生存や腫瘍量または腫瘍体積の減少を含む、血液癌の１つ以上の症状の緩和もしくは改善；疾患の程度の低下；疾患進行の遅延もしくは遅滞；疾患状態の改善、軽減もしくは安定化；または他の有益な結果が挙げられる。
【００６１】
治療方法
低酸素は、正常な骨髄の造血、すなわち造血幹細胞からの血液細胞の形成に関連している可能性がある（Ｌｅｎｎｏｎら、Ｊ．Ｃｅｌｌ  Ｐｈｙｓｉｏｌ．，２００１；１８７（３）：３４５−３５５；Ｍｏｒｒｉｓｏｎら、Ｊ  Ｎｅｕｒｏｓｃｉ．，２０００；２０（１９）：７３７０−７３７６；およびＰａｒｍａｒら、Ｐｒｏｃ  Ｎａｔｌ  Ａｃａｄ  Ｓｃｉ  ＵＳＡ．２００７；１０４（１３）：５４３１−５４３６、これらの各々は、引用により本明細書に組み込まれる）。本発明は、低酸素が異常造血の病因と発病に関連しているという発見から一部は生じたが、式Ｉの低酸素活性化プロドラッグの投与は、選択的にその異常造血を標的とすることができ、白血病、リンパ腫、および多発性骨髄腫などの血液癌に対する新しい治療法を提供した。
【００６２】
１つの態様において、本発明は、治療有効量の式Ｉの低酸素活性化プロドラッグを投与することを含む、血液癌を治療する方法を提供する。種々の実施形態において、低酸素活性化プロドラッグは、ＴＨ−２８１、ＴＨ−３０２、およびＴＨ−３０８からなる群から選択される。１つの重要な実施形態において、プロドラッグは、ＴＨ−３０２である。低酸素活性化プロドラッグは、血液癌の治療を必要とする患者に治療有効量で投与され、それにより血液癌を治療する。治療を受けることができる血液癌の例としては、多発性骨髄腫、急性白血病、慢性白血病、進行性慢性骨髄性白血病（ＣＭＬ）、骨髄異形成症候群、高リスクＭＤＳ、ＭＦ、進行性骨髄線維症、慢性リンパ性白血病（ＣＬＬ）、および前述のいずれかの再発性または難治性の形態から選択されるものを含む。
【００６３】
１つの実施形態では、投与される低酸素活性化プロドラッグは、ＴＨ−３０２である。１つの実施形態では、ＴＨ−３０２または式Ｉの別の化合物は、２１日毎に５日間、毎日３０分間の静脈内注入として投与される。１つの実施形態では、ＴＨ−３０２または式Ｉの別の化合物は、５日間、毎日１日１回の投与、続いてＴＨ−３０２投与の２日間の休薬を含む１週間の投与サイクルで投与される。１つの実施形態では、ＴＨ−３０２または式Ｉの別の化合物は、３つ以上のそのようなサイクルの期間、投与される。様々な実施形態では、ＴＨ−３０２または式Ｉの別の化合物は、そのような最大約２５サイクルの期間あるいはそのような最大５０サイクルの期間、投与される。１つの実施形態では、治療有効量は、約１２０ｍｇ／ｍ２〜約４６０ｍｇ／ｍ２の１日投与量である。１つの実施形態では、ＴＨ−３０２または式Ｉの別の化合物は、週１回投与される。１つの実施形態では、治療有効量は、約５７５ｍｇ／ｍ２〜約６７０ｍｇ／ｍ２の週１回の投与量である。１つの実施形態では、治療有効量は、３週間サイクルで投与される約２４０ｍｇ／ｍ２の週１回投与量である。様々な実施形態において、治療有効量は、１回、２回、３回、またはそれより多い回数繰り返してもよい３週間サイクルの１日目と８日目に投与される約２４０ｍｇ／ｍ２〜約４８０ｍｇ／ｍ２の１日投薬量である。
【００６４】
別の実施形態では、血液癌を治療するための本技術の方法に従って、ＴＨ−３０２または式Ｉの別の化合物は、別の抗癌剤と組み合わせて投与される。１つの実施形態では、他の抗癌剤は、Ｖｅｌｃａｄｅ（登録商標）（ボルテゾミブ、Ｍｉｌｌｅｎｎｉｕｍ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｓ）またはレナリドミド（Ｒｅｖｌｉｍｉｄ（登録商標）、Ｃｅｌｌｇｅｎｅ）である。１つの実施形態では、別の抗癌剤と組み合わせて投与する場合、ＴＨ−３０２または式Ｉの別の化合物は、他の抗癌剤を投与する前に投与される。例えば、ＴＨ−３０２は、他の抗癌剤を投与する１日前に投与されるか、あるいは２つの薬剤を同日に投与する場合、そのときには、ＴＨ−３０２または式Ｉの別の化合物は、他の抗癌剤を投与する少なくとも３０分から最大４時間または８時間も前までに投与してよい。引用により本明細書に組み込まれるＰＣＴ公開番号ＷＯ２００８／０８３１０１を参照されたい。様々な実施形態では、ＴＨ−３０２または式Ｉの別の化合物は、併用療法が第２抗癌剤を投与することにより開始される前に、２サイクルの１サイクルに対して単剤療法として投与される。単剤療法および併用療法の種々の実施形態では、投与されるＴＨ−３０２または式Ｉの別の化合物の各サイクルは、５日間、毎日１日１回の投与、続いてＴＨ−３０２非投与の２日間を含む１週間の投与サイクルで投与される。
【００６５】
様々な実施形態において、本発明の方法は、治療の１次治療、２次治療、３次治療、またはそれ以降の治療として採用される。本明細書で用いる場合、「１次治療」、「２次治療」または「３次治療」は、患者が受ける別の薬での治療や他の治療の順番を意味する。１次治療投与計画は、最初に与えられる治療であるのに対して、２次治療または３次治療は、１次治療の後で、または２次治療の後でそれぞれ与えられる。したがって、１次治療は、「疾患または状態に対する最初の治療」である。癌患者では、１次治療（時々「初期療法」または「初期治療」と呼ばれる）は、手術、化学療法、放射線療法、またはこれらの治療法の組み合わせである。典型的には、患者が１次治療または２次治療に対して効果的な臨床応答を示さなかったか、またはサブ臨床応答のみを示したか、あるいは効果的な臨床応答を示したが、以前に効果的な応答を示した初期療法に対して今や耐性である疾患を後に再発した経験を有したか、のいずれかの理由から、患者はその後の化学療法投与計画（２次治療または３次治療）を受ける。
【００６６】
１つの実施形態では、ＴＨ−３０２または式Ｉの別の化合物は、これらの癌の再発性または難治性の形態を含む血液癌の治療に単剤療法として投与される。１つの実施形態では、ＴＨ−３０２または式Ｉの別の化合物は、２１日サイクルの５日間連続投与され、その投与量は、例えば、１８０、２４０、３４０、および４８０ｍｇ／ｍ２／日の投与量を含む１２０〜５７５ｍｇ／ｍ２／日である。いくつかの実施形態では、５日間の投与量は、８日間にわたり延ばされる。１つの実施形態では、ピモニダゾールまたは低酸素の他の適切なマーカーは、低酸素マーカーとして使用され、骨髄生検の約１６（±６）時間前に、０．９％の食塩水に溶解した０．５ｇ／ｍ２の投与量で２０分間かけて注入される。ピモニダゾールの最大投与量は、ＢＳＡ＞２．０の患者に対して１．０ｇを保持することができる。
【００６７】
本発明のこれらの方法は、ＡＬＬおよびＡＭＬで有効であることが実証されている。１２０ｍｇ／ｍ２／日の投与量のＴＨ−３０２で治療された２人のＡＭＬ患者の病状は安定していた。１７０ｍｇ／ｍ２／日の投与量のＴＨ−３０２で治療された１人のＡＬＬ患者は、１サイクル後の骨髄生検により測定された芽球数の正常化に基づき部分寛解であった。２４０ｍｇ／ｍ２／日の投与量のＴＨ−３０２で治療されたＡＭＬ患者１人およびＡＬＬ患者１人は、１サイクル後の病状が安定していた。３３０ｍｇ／ｍ２／日の投与量のＴＨ−３０２で治療された１人のＡＬＬ患者は、１サイクル後の病状が安定していた。
【００６８】
１つの実施形態では、本発明に従って治療される患者は、フィラデルフィア染色体を有する患者に基づいて、低酸素活性化プロドラッグを単独または他の薬剤との併用で投与することを含む治療に対して選択される；別の実施形態では、そのような患者は、ＣＭＬなどの慢性白血病またはＡＬＬもしくはＡＭＬなどの急性白血病に罹患していると診断される。フィラデルフィア染色体を検出するための適切な方法は、当業者に周知である。参照：例えば、Ｓａｗｙｅｒｓ，Ｔｈｅ  Ｎｅｗ  Ｅｎｇｌａｎｄ  Ｊｏｕｒｎａｌ  ｏｆ  Ｍｅｄｉｃｉｎｅ，１９９９，３４０（１７）：１３３０−４０、これは、引用により本明細書に組み込まれる。別の実施形態では、選択された癌患者は、治療有効量の低酸素活性化プロドラッグを投与され、それにより癌を治療する。本明細書に開示された血液癌の治療法は、そのような治療に有用である。１つの実施形態では、投与された低酸素活性化プロドラッグは、ＴＨ−３０２である。
【００６９】
低酸素活性化プロドラッグの製造法および医薬組成物、ならびに式Ｉの様々な低酸素活性化プロドラッグを投与することによる癌を治療する他の方法は、Ｄｕａｎら、Ｊ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．２００８，５１，２４１２−２４２０ならびにＰＣＴ公開番号ＷＯ２００７／００２９３１、同２００８／０８３１０１、および同２０１０／０４８３３０に記載されており、これらの各々は引用により本明細書に組み込まれる。本発明の方法と組み合わせて使用することができる血液癌を治療する他の方法は、当業者に公知であり、例えば、Ｐｈｙｓｉｃｉａｎ’ｓ  Ｄｅｓｋ  Ｒｅｆｅｒｅｎｃｅ、Ｍｅｄｉｃａｌ  Ｅｃｏｎｏｍｉｃｓ  Ｃｏｍｐａｎｙ，Ｉｎｃ．，Ｏｒａｄｅｌｌ，ＮＪの２０１０年版またはもっと最近の版で見られる製品の記述；Ｇｏｏｄｍａｎ  ａｎｄ  Ｇｉｌｍａｎ’ｓ  Ｔｈｅ  ｐｈａｒｍａｃｏｌｏｇｉｃａｌ  ｂａｓｉｓ  ｏｆ  ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃｓ．，Ｅｄｓ．Ｈａｒｄｍａｎら，ＭｃＧｒａｗ−Ｈｉｌｌ．Ｎｅｗ  Ｙｏｒｋ．（ＵＳ）２０１１，１２ｔｈ  Ｅｄ．，および米国ＦＤＡ（Ｆｏｏｄ  ａｎｄ  Ｄｒｕｇ  Ａｄｍｉｎｉｓｔｒａｔｉｏｎ）の刊行物ならびにＮＣＣＮのガイドライン（Ｎａｔｉｏｎａｌ  Ｃｏｍｐｒｅｈｅｎｓｉｖｅ  Ｃａｎｃｅｒ  Ｎｅｔｗｏｒｋ）に記載されている。このように記述された公知の方法は、本発明技術の治療方法を実施するために本開示に鑑みて当業者であれば適切に変更することができる。
【００７０】
１つの実施形態では、ＴＨ−３０２または式Ｉの別の化合物は、１００ｍｇのバイアルの凍結乾燥形態で提供され、Ｄ５Ｗに溶解され、約３０〜６０分かけて輸液ポンプを経由して静脈内に投与される。注入量は、注入の過程で与えられる総投与量（ｍｇ単位で）に依存する。１０００ｍｇ未満が注入される場合は、５００ｃｃのＤ５Ｗが注入のために使用される。総投与量が１０００を超える場合は、１０００ｃｃのＤ５Ｗが注入のために使用される。
【００７１】
本発明の方法は、今度は特定の血液癌との関連で説明される。
【００７２】
急性白血病：ＡＬＬおよびＡＭＬ
１つの実施形態では、本発明の方法に従って治療される血液癌は、急性白血病である。１つの実施形態では、急性白血病は、再発性または難治性の急性白血病である。ＡＬＬ、ＡＭＬ、他の急性白血病、および他の血液癌の治療には、ＴＨ−３０２または式Ｉの別の化合物が、本明細書に記載された頻度および量で投与される。様々な実施形態では、ＴＨ−３０２または式Ｉの別の低酸素活性化プロドラッグは、単剤として投与され、すなわち、血液癌の治療を目的とする他の薬物は同時に投与されない。様々な実施形態では、ＴＨ−３０２または式Ｉの別の低酸素活性化プロドラッグは、別の１つまたは複数の抗癌剤と組み合わせて投与される。本発明の併用療法においては、他の１つまたは複数の薬物が、従来用いられているものと同一ではないにしても実質的に類似の投与頻度、投与量、および投与経路でいくつかの実施形態では投与される。
【００７３】
１つの実施形態では、急性白血病は、急性リンパ性白血病（ＡＬＬ）である。１つの実施形態では、ＡＬＬは、再発性または難治性のＡＬＬである。１つの実施形態では、患者は、標準化学療法の治療に不適切であるか、または標準化学療法を受けることを望んでいない。１つの実施形態において、患者は、フィラデルフィア染色体（Ｐｈ）陽性である。
【００７４】
１つの実施形態では、ＴＨ−３０２または式Ｉの別の低酸素活性化プロドラッグは、ＡＬＬを治療するために従来使用された薬物療法および／または非薬物療法と組み合わせて投与される。そのような薬物の例としては、限定されないが、アレムツズマブ（Ｃａｍｐａｔｈ（登録商標）、Ｇｅｎｚｙｍｅ），アムサクリン、アスパラギナーゼ（クリサンタスパーゼとも呼ばれる）、シクロホスファミド、シタラビン（ａｒａ−Ｃ）、ダウノルビシン、ドキソルビシン（Ａｄｒｉａｍｙｃｉｎ（登録商標）、Ｂｅｄｆｏｒｄ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓ）、エトポシド、メルカプトプリン（６−ＭＰ）、メトトレキサート、オファツムマブ（Ａｒｚｅｒｒａ（登録商標）、ＧｌａｘｏＳｍｉｔｈＫｌｉｎｅおよびＧｅｎｍａｂ）、リツキシマブ（Ｒｉｔｕｘａｎ（登録商標）、Ｇｅｎｅｎｔｅｃｈ）、テニポシド、チオグアニン、およびビンクリスチンが挙げられる。適切な非薬物療法の例としては、放射線照射および／または骨髄幹細胞移植が挙げられるが、これらに限定されない。
【００７５】
１つの実施形態では、ＡＬＬ患者は、２１日サイクルの５日間連続して、ＴＨ−３０２を投与することにより治療され、その投与量は、例えば、１８０、２４０、３４０、および４８０ｍｇ／ｍ２／日の投与量を含む１２０〜５７５ｍｇ／ｍ２／日である。いくつかの実施形態では、５日間の投与量は、８日間にわたり延ばされる。
【００７６】
１つの実施形態では、急性白血病は、急性骨髄性白血病（ＡＭＬ）である。１つの実施形態では、ＡＭＬは、再発性または難治性のＡＭＬである。別の実施形態では、ＡＭＬは急性前骨髄球性白血病である。１つの実施形態では、患者は、標準化学療法には不適応であるか、あるいは標準化学療法を受けることを望んでいない。１つの実施形態では、患者は、フィラデルフィア染色体（Ｐｈ）陽性である。
【００７７】
１つの実施形態では、ＴＨ−３０２または式Ｉの別の低酸素活性化プロドラッグは、ＡＭＬを治療するために従来使用される薬物療法および／または非薬物療法と組み合わせて投与される。そのような薬物の例としては、限定されないが、シタラビン、ダウノルビシン、エトポシド、イダルビシン、チオグアニン、およびビンクリスチンが挙げられる。適切な非薬物療法の例としては、放射線照射および／または骨髄幹細胞移植が挙げられるが、これらに限定されない。
【００７８】
１つの実施形態では、前骨髄球性白血病を含むがこれに限らず、ＡＭＬ患者は２１日サイクルの５日間連続して、ＴＨ−３０２を投与することにより治療され、その投与量は、例えば、１８０、２４０、３４０、および４８０ｍｇ／ｍ２／日の投与量を含む１２０〜５７５ｍｇ／ｍ２／日である。いくつかの実施形態では、５日間の投与量は、８日間にわたり延ばされる。
【００７９】
慢性白血病：ＣＭＬ、ＣＬＬ、および骨髄線維症
別の実施形態では、治療される血液癌は、慢性白血病である。１つの実施形態では、急性白血病は再発性または難治性の慢性白血病である。ＣＬＬ、ＣＭＬ、他の慢性白血病、および他の血液癌を治療するために、ＴＨ−３０２または式Ｉの別の化合物は、本明細書に記載された投与頻度および投与量で投与される。様々な実施形態では、ＴＨ−３０２または式Ｉの別の低酸素活性化プロドラッグは、単剤として投与され、すなわち、血液癌の治療を目的とする他の薬剤は同時に投与されない。様々な実施形態では、ＴＨ−３０２または式Ｉの別の低酸素活性化プロドラッグは、別の１つまたは複数の抗癌剤と組み合わせて投与される。本発明の併用療法においては、他の１つまたは複数の薬物が、従来用いられているものと同一ではないにしても実質的に類似の投与頻度、投与量、および投与経路でいくつかの実施形態では投与される。
【００８０】
１つの実施形態では、慢性白血病は、慢性骨髄性白血病（ＣＭＬ）である。１つの実施形態では、ＣＭＬは再発性または難治性のＣＭＬである。１つの実施形態では、ＣＭＬは移行期もしくは急性転化期にあるか、および／または標準化学療法を用いた治療には不適応であるか、または標準化学療法を受けたがらない。
【００８１】
１つの実施形態では、ＴＨ−３０２または式Ｉの別の低酸素活性化プロドラッグは、ＣＭＬを治療するために従来使用された薬物療法および／または非薬物療法と組み合わせて投与される。そのような薬物の例としては、限定されないが、イマチニブ、ダサチニブ、およびニロチニブを含むチロシンキナーゼ阻害剤、ヒドロキシ尿素、インターフェロン−α２ｂ、およびブスルファンが挙げられる。適切な非薬物療法の例としては、放射線照射および／または骨髄幹細胞移植が挙げられるが、これらに限定されない。
【００８２】
１つの実施形態では、ＣＭＬ患者は、２１日サイクルの連続５日間、ＴＨ−３０２を投与することにより治療され、その投与量は、例えば、１８０、２４０、３４０、および４８０ｍｇ／ｍ２／日の投与量を含む１２０〜５７５ｍｇ／ｍ２／日である。いくつかの実施形態では、５日間の投与量は、８日間にわたり延ばされる。
【００８３】
１つの実施形態では、慢性白血病は慢性リンパ性白血病（ＣＬＬ）である。１つの実施形態では、ＣＬＬは再発性または難治性のＣＬＬである。１つの実施形態では、当該患者は標準化学療法での治療には不適応であるか、または標準化学療法を受けたがらない。
【００８４】
１つの実施形態では、ＴＨ−３０２または式Ｉの別の低酸素活性化プロドラッグは、ＣＬＬを治療するために従来使用された薬物療法および／または非薬物療法と組み合わせて投与される。そのような薬物の例としては、限定されないが、アレムツズマブ、ベンダムスチン、クロラムブシル、シクロホスファミド、フルダラビン、およびリツキシマブが挙げられる。適切な非薬物療法の例としては、放射線照射および／または骨髄幹細胞移植が挙げられるが、これらに限定されない。
【００８５】
１つの実施形態では、ＣＬＬ患者は、２１日サイクルの連続５日間、ＴＨ−３０２を投与することにより治療され、その投与量は、例えば、１８０、２４０、３４０、および４８０ｍｇ／ｍ２／日の投与量を含む１２０〜５７５ｍｇ／ｍ２／日である。いくつかの実施形態では、５日間の投与量は、８日間にわたり延ばされる。
【００８６】
１つの実施形態では、慢性白血病は、骨髄線維症（ＭＦ）である。１つの実施形態では、骨髄線維症は、進行性骨髄線維症である。１つの実施形態では、ＭＦは再発性または難治性のＭＦである。１つの実施形態では、骨髄線維症（診断されたかどうか、および／または以前に治療されたかどうかに関係なく）は、（１）１０ｇ／ｄＬ未満のヘモグロビン濃度、（２）１００×１０９／Ｌ未満の血小板数、および／または４×１０９／Ｌ未満の、または３０×１０９超の血小板数、および（３）左肋骨縁の下１０ｃｍ以上の巨脾腫、の１つ以上を有する患者によって特徴付けられる。１つの実施形態では、患者は標準化学療法を用いた治療には不適応であるか、または標準化学療法を受けたがらない。
【００８７】
１つの実施形態では、ＴＨ−３０２または別の低酸素活性化プロドラッグは、ＭＦを治療するために従来使用された薬物療法および／または非薬物療法と組み合わせて投与される。そのような薬物の例としては、限定されないが、ヒドロキシ尿素が挙げられる。適切な非薬物療法の例としては、放射線照射および／または骨髄幹細胞移植が挙げられるが、これらに限定されない。
【００８８】
骨髄異形成症候群
１つの実施形態では、本発明の方法に従って治療される血液癌は、骨髄異形成症候群（ＭＤＳ）である。１つの実施形態では、ＭＤＳは高リスクＭＤＳであり、これは、患者が高リスクではないＭＤＳに比べて、ＡＭＬを発症する可能性が高いことを意味する。１つの実施形態では、高リスクＭＤＳは、５％を超える骨髄芽球によって特徴づけられる再発性または難治性の慢性骨髄単球性白血病（ＣＭＭＬ）である。１つの実施形態では、ＭＤＳは、世界保健機関（ＷＨＯ）の分類を用いて、過剰芽細胞ＲＡＥＢ−１またはＲＡＥＢ−２で特徴づけられる難治性貧血である。ＭＤＳおよび他の血液癌の治療には、ＴＨ−３０２または式Ｉの別の化合物が、本明細書に記載された頻度および量で投与される。様々な実施形態では、ＴＨ−３０２または式Ｉの別の低酸素活性化プロドラッグは、単剤として投与され、すなわち、血液癌の治療を目的とする他の薬剤は同時に投与されない。様々な実施形態では、ＴＨ−３０２または式Ｉの別の低酸素活性化プロドラッグは、別の１つまたは複数の抗癌剤と組み合わせて投与される。本発明の併用療法においては、他の１つまたは複数の薬物が、従来用いられているものと同一ではないにしても実質的に類似の頻度、量、および経路でいくつかの実施形態では投与される。
【００８９】
１つの実施形態では、ＴＨ−３０２または式Ｉの別の低酸素活性化プロドラッグは、ＭＤＳを治療するために従来使用された薬物療法および／または非薬物療法と組み合わせて投与される。そのような薬物の例としては、限定されないが、シタラビン；イダルビシン；フルダラビン；トポテカン；アザシチジンおよびデシタビンなどの低メチル化剤；レナリドミドおよびサリドマイドなどの免疫調節剤；ならびに抗胸腺細胞グロブリン（ＡＴＧ）およびシクロスポリンなどの免疫抑制剤が挙げられる。適切な非薬物療法の例としては、放射線照射および／または骨髄幹細胞移植が挙げられるが、これらに限定されない。
【００９０】
１つの実施形態では、ＭＤＳ患者は、２１日サイクルの連続５日間、ＴＨ−３０２を投与することにより治療され、その投与量は、例えば、１８０、２４０、３４０、および４８０ｍｇ／ｍ２／日の投与量を含む１２０〜５７５ｍｇ／ｍ２／日である。いくつかの実施形態では、５日間の投与量は、８日間にわたり延ばされる。
【００９１】
多発性骨髄腫
１つの実施形態では、本発明の方法に従って治療される血液癌は、多発性骨髄腫（ＭＭ）である。１つの実施形態では、ＭＭは難治性または再発性のＭＭであり、これはレナリドミドやサリドマイドで難治性のＭＭおよびボルテゾミブで難治性のＭＭを含むが、これらに限定されない。ＭＭおよび他の血液癌を治療するために、ＴＨ−３０２または式Ｉの別の化合物は、本明細書に記載された頻度および量で投与される。様々な実施形態では、ＴＨ−３０２または式Ｉの別の低酸素活性化プロドラッグは、単剤として投与され、すなわち、血液癌の治療を目的とする他の薬物は同時に投与されない。
【００９２】
ＭＭおよび他の血液癌を治療するための本発明方法の１つの実施形態では、ＴＨ−３０２または式Ｉの別の化合物は、２１日サイクルの１日目、４日目、８日目、および１１日目に投与され、その投与量は、例えば１８０、２４０、３４０、および４８０ｍｇ／ｍ２／日の投与量を含む１２０〜５７５ｍｇ／ｍ２／日である。
【００９３】
種々の実施形態では、ＴＨ−３０２または式Ｉの別の低酸素活性化プロドラッグは、別の１つまたは複数の抗癌剤と組み合わせて投与される。本発明の併用療法においては、他の１つまたは複数の薬物が、従来用いられているものと同一ではないにしても実質的に類似の頻度、量、および経路でいくつかの実施形態では投与される。
【００９４】
１つの実施形態では、ＴＨ−３０２または式Ｉの別の低酸素活性化プロドラッグは、ＭＭを治療するために従来使用される薬物療法および／または非薬物療法と組み合わせて投与される。そのような薬物の例としては、限定されないが、ボルテゾミブ、カルムスチン、シクロホスファミド、デキサメタゾン、ドキソルビシン、イダルビシン、レナリドミド、メルファラン、プレドニゾン、サリドマイド、およびビンクリスチンが挙げられる。適切な非薬物療法の例としては、放射線照射および／または骨髄幹細胞移植が挙げられるが、これらに限定されない。
【００９５】
１つの実施形態では、ＴＨ−３０２または式Ｉの別の化合物は、ＭＭ疾患の再発性または難治性の形態を含むＭＭを治療するために、以前にボルテゾミブおよび／またはレナリドミド（またはサリドマイド）療法がうまくいかなかった患者（これらに限定されない）にボルテゾミブとの併用療法として投与される。１つの実施形態では、ＴＨ−３０２または式Ｉの別の化合物は、２１日サイクルの１日目、４日目、８日目、および１１日目に投与され、その投与量は、例えば１８０、２４０、３４０、および４８０ｍｇ／ｍ２／日の投与量を含む１２０〜５７５ｍｇ／ｍ２／日である。ボルテゾミブは、同じサイクルに基づき、１．０ｍｇ／ｍ２／日または１．３ｍｇ／ｍ２／日のＦＤＡで承認されている投与量で商業的に供給されている通りに投与される。１つの実施形態では、ＴＨ−３０２は、ボルテゾミブ投与の少なくとも３０分前から４時間前に、すなわち、少なくとも２時間前に投与される。ＰＣＴ公開番号ＷＯ２０１０／０４８３３０を参照されたい。これは引用により本明細書に組み込まれる。
【００９６】
１つの実施形態では、ＴＨ−３０２は、再発性または難治性の形態の多発性骨髄腫を含む多発性骨髄腫を治療するために、以前にボルテゾミブおよび／またはレナリドミド（またはサリドマイド）療法がうまくいかなかった患者（これらに限定されない）に、レナリドミドおよび／またはデキサメタゾンとの併用療法として投与される。１つの実施形態では、ＴＨ−３０２または式Ｉの別の化合物は、２１日サイクルの１日目、４日目、８日目、および１１日目に投与され、その投与量は、例えば１８０、２４０、３４０、および４８０ｍｇ／ｍ２／日の投与量を含む１２０〜５７５ｍｇ／ｍ２／日である。この実施形態では、レナリドミドは、１日目〜１４日目までＦＤＡで承認されている２５ｍｇの投与量で商業的に供給されている通り投与され、そしてデキサメタゾンは、ＦＤＡで承認されている４０ｍｇの投与量で同じサイクルの１日目〜４日目、９日目〜１２日目に商業的に供給されている通り投与される。別の実施形態では、ＴＨ−３０２は、２８日サイクルの１日目、４日目、８日目、１１日、１５日目、および１８日目に投与され、その投与量は、例えば、１８０、２４０、３４０、および４８０ｍｇ／ｍ２／日の投与量を含む１２０〜５７５ｍｇ／ｍ２／日である；レナリドミドは、１日目〜２１日目まで、ＦＤＡに承認された２５ｍｇの投与量で商業的に供給されている通り投与される；そして、デキサメタドンは、同じ２８日サイクルの１日目〜４日目、９日目〜１２日目、１７日目〜２０日目に、ＦＤＡに承認された４０ｍｇの投与量で商業的に供給されている通り投与される。
【００９７】
低酸素マーカー
様々な本発明の実施形態では、低酸素マーカーは、治療する患者を選択するために、および／または治療に応答している（または応答していない）患者を識別するために使用される。低酸素マーカーは、低酸素がより攻撃的な固形腫瘍の表現型を促進し、放射線照射や多くの化学療法に対する耐性のみならず、腫瘍の浸潤や悪い患者生存率の可能性を伴うことを示す研究の過程で開発されてきた。特に、＜１０ｍｍＨｇの酸素分圧における細胞は、放射線療法のイオン化効果と化学療法の細胞毒性効果に抵抗する。偽柵状構造の腫瘍細胞を有する低酸素壊死巣は、例えば、神経膠芽腫（ＧＢＭ）を定義する特徴の一つである。したがって、種々の方法が異種移植片および患者の腫瘍における低酸素の程度を評価するために考案され、本発明に従ってこれらの方法は本明細書に記載されるように適切に修正され、実施されて、患者を選択し、治療に対する応答を評価するために本発明の方法の特定の実施形態で使用される。一般に、本発明は、低酸素活性化プロドラッグでの治療に適した患者を識別するための方法を提供し、そこでは、患者の癌が低酸素であるかどうかを識別するために低酸素マーカーが使用され、そして、患者を低酸素活性化プロドラッグで治療する。すなわち、低酸素の程度が高いほど、患者は低酸素活性化プロドラッグでの治療に応答する可能性がより高くなる。当業者は、本開示を考慮して、これらの方法は血液癌だけではなく、すべての癌に有用であることを理解する。
【００９８】
伝統的に、低酸素測定のための標準基準は、ポーラログラフの酸素感受性プローブの使用であり、組織酸素分圧の直接測定を提供する。しかし、この方法には、生存巣と壊死巣とを区別することができないこと、骨髄の造血器腫瘍に関連するものを含む多くの腫瘍組織に到達しにくいこと、およびその技術を大規模に適用する実用的な手段が欠如していることなどの限界を有する。ピモニダゾールとＥＦ５（両方共２−ニトロイミダゾール化合物である）は、ピモニダゾールまたはＥＦ５のタンパク質付加物の免疫組織化学的な同定を通して、放射線生物学的に関連した低酸素の信頼できる評価をすることができる低酸素マーカーである。分子状酸素は、ピモニダゾール（およびＥＦ５）の結合が、１４マイクロモルより上の酸素濃度で効果的に阻害されるような方法で還元性均等物と競合する。この方法は、具体的に生存低酸素細胞を確実に特定する（壊死細胞は、ピモニダゾールまたはＥＦ５を代謝することができない）。
【００９９】
本発明の方法に従って使用するのに適している、前臨床試験で確認されているその他の低酸素マーカーとしては、ＧＬＵＴ−１、ＨＩＦ−１ａ、ＣＡ−ＩＸ、ＬＤＨ−Ａ、オステオポンチン、限定されないが、ｍｉＲ−２１０を含むマイクロＲＮＡマーカー、およびＶＥＧＦが挙げられる。これらのタンパク質またはＲＮＡの各々は、低酸素状態においてアップレギュレートされ、それらは腫瘍生検によって検出することができる。しかし、より好都合なことに、これらのマーカーの一部、すなわち、ＣＡ−ＩＸ、ＬＤＨ−Ａ、オステオポンチン、限定されないが、ｍｉＲ−２１０を含むマイクロＲＮＡマーカー、およびＶＥＧＦは、患者の血液、血清、または血漿で検出されて、腫瘍生検の代わりに簡単な血液検査を可能とし、低酸素活性化プロドラッグ療法のための患者を選択するために使用される。
【０１００】
また、研究では、免疫組織化学によって評価される腫瘍の低酸素と、［１８Ｆ］−ＦＤＧおよび［１８Ｆ］−ＦＭＩＳＯオートラジオグラフィーやＰＥＴイメージングの間の空間的関係を検討しており、これらの化合物および［１８Ｆ］−ＥＦ５、［１８Ｆ］−ＦＡＺＡ、および［１８Ｆ］−ＨＸ４などの同様のＰＥＴトレーサーを、本発明の方法に従って使用することができる。オートラジオグラフィーやＰＥＴイメージングに加えて、ＭＲＩイメージング、特に、動的コントラスト強調ＭＲＩ（ＤＣＥ−ＭＲＩ）は、低酸素の癌を識別するため、したがって、低酸素活性化プロドラッグでの治療のための理想的な患者を識別するために使用することができる。
【０１０１】
Ｈｙｐｏｘｙｐｒｏｂｅ（登録商標）−１（ピモニダゾール塩酸塩；Ｈｙｐｏｘｙｐｒｏｂｅ社によって市販されている）は、静脈内または経口的に投与された場合、脳を含む身体のすべての組織に送達されるが、１４マイクロモル未満の酸素濃度（摂氏３７度で１０ｍｍＨｇの酸素分圧に相当）を有する細胞内では、タンパク質付加体を形成するのみである。Ｈｙｐｏｘｙｐｒｏｂｅ−１ＭＡｂ１は、低酸素細胞におけるＨｙｐｏｘｙｐｒｏｂｅ−１のタンパク質付加体を検出するマウスＩｇＧ１モノクローナル抗体である。この試薬は、典型的には、各組織サンプルに加えられる。発色または蛍光２次抗体試薬は、次にＨｙｐｏｘｙｐｒｏｂｅ−１付加体が低酸素組織のどこで形成されたかを明らかにするために本発明に従って使用される。
【０１０２】
これらの低酸素マーカーに加えて、低酸素活性化プロドラッグ療法のための患者を選択するために使用できる他のマーカーがある。本発明の低酸素活性化プロドラッグは、レダクターゼによって活性化され、したがってＰＯＲ（Ｐ４５０オキシドレダクターゼ）、ＭＴＲＲ（メチオニンシンターゼレダクターゼ）、および／またはＮＯＳ（一酸化窒素シンターゼ）などの活性化レダクターゼの高レベルを有する患者を示す生検や血液検査は、患者が低酸素活性化プロドラッグ療法に応答する可能性が高いことを実証している。さらに、これらの低酸素活性化プロドラッグにより誘発されるＤＮＡの損傷は、ＨＤＲ（ＨＲとしても知られている）系により修復され、患者の血液または腫瘍生検における、限定はされないがＢＲＣＡ、ＦＡＮＣ、ＸＰＦ（ＥＲＣＣ４としても知られている）、ＸＲＣＣ２および／またはＸＲＣＣ３を含むこの系でのタンパク質のレベルが低いほど、低酸素活性化プロドラッグ療法に患者がより応答する可能性が高くなる。
【０１０３】
したがって、本発明の方法は、患者が本発明の治療方法に適しているかどうかを決定する、または応答しているかどうかを決定するための方法を含む。
【０１０４】
要約して、そして詳細に記述された本発明は、以下の実施例によって説明されるが、これらに限定されない。
【実施例】
【０１０５】
実施例１．骨髄中の低酸素レベルのインビボ測定
この実施例では、多発性骨髄腫の低酸素の性質は、外因性の低酸素マーカーのピモニダゾールおよび内因性低酸素マーカーの低酸素誘導因子１α（ＨＩＦ１α）でナイーブマウスと５Ｔ３３ＭＭマウスの骨髄染色により証明された。その結果は、多発性骨髄腫細胞が、より低酸素の骨髄環境内に存在することを証明している。引用により本明細書に組み込まれる文献Ｂｌｏｏｄ  １１６（９）：１５２４−１５２７、２０１０を参照されたい。インビトロでの多発性骨髄腫細胞株に対するＴＨ−３０２の効果がまた、アポトーシスおよび細胞周期、ならびに多発性骨髄腫における関連シグナル伝達経路に焦点を当てて証明された。さらに、５Ｔ３３ｖｖマウスの多発性骨髄腫の治療におけるＴＨ−３０２の治療効果もまた証明された。
【０１０６】
骨髄での造血および多発性骨髄腫の進行における低酸素の潜在的な役割を考えると、ナイーブマウスと、ヒトの病気を模倣する５Ｔ３３ＭＭマウス（参照：Ｖａｎｄｅｒｋｅｒｋｅｎら、Ｉｍｍｕｎｏｌ  Ｒｅｖ．２００３；１９４：１９６−２０６。これは、引用により本明細書に組み込まれる）の骨髄の酸素レベルは、外因性低酸素マーカーのピモニダゾールと内因性低酸素マーカーのＨＩＦ−１αを評価することによって測定された。外因性のマーカーのピモニダゾールおよび内因性低酸素マーカーのＨＩＦ１αの両方は、ナイーブマウスにおける低酸素マーカーの散発的な弱い陽性とは対照的に、５Ｔ３３ＭＭマウスの骨髄で増加したが、このことは、多発性骨髄腫細胞の大部分が広範囲に低酸素ニッチに局在していることを示している。その結果は、正常な骨髄および多発性骨髄腫の骨髄の低酸素の性質を明らかにした。また、Ｇｉｕｌｉａｎｉら、“Ｏｘｙｇｅｎ  ｔｅｎｓｉｏｎ  ｉｎ  ｔｈｅ  ｂｏｎｅ  ｍａｒｒｏｗ  （ＢＭ）  ｏｆ  ｐａｔｉｅｎｔｓ  ｗｉｔｈ  ｍａｌｉｇｎａｎｔ  ａｎｄ  ｉｎｄｏｌｅｎｔ  ｍｏｎｏｃｌｏｎａｌ  ｇａｍｍｏｐａｔｈｙ：ｒｏｌｅ  ｏｆ  ｈｙｐｏｘｉａ  ａｎｄ  ｈｙｐｏｘｉａ−ｉｎｄｕｃｉｂｌｅ  ｆａｃｔｏｒ（ＨＩＦ）−１α  ｉｎ  ｔｈｅ  ｒｅｇｕｌａｔｉｏｎ  ｏｆ  ｇｅｎｅ  ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ  ａｎｄ  ｐｒｏ−ａｎｇｉｏｇｅｎｉｃ  ｐｒｏｆｉｌｅｓ  ｏｆ  ＣＤ１３８＋  ｃｅｌｌｓ，”Ｂｌｏｏｄ．２００９；１１４（２２）：１７５−１７６を参照されたい。これは、引用により本明細書に組み込まれる。他の文献（Ｒｉａら、“Ｈｙｐｏｘｉａ−ｉｎｄｕｃｉｂｌｅ  ｆａｃｔｏｒ−１  ｉｎ  ｍｕｌｔｉｐｌｅ  ｍｙｅｌｏｍａ  ｐｒｏｇｒｅｓｓｉｏｎ，”Ｂｌｏｏｄ．２００９；１１４（２２）：７２０およびＡｚａｂら、“Ｒｏｌｅ  ｏｆ  ｈｙｐｏｘｉａ  ｉｎ  ｔｈｅ  ｐｒｏｇｒｅｓｓｉｏｎ  ａｎｄ  ｄｉｓｓｅｍｉｎａｔｉｏｎ  ｏｆ  ｍｕｌｔｉｐｌｅ  ｍｙｅｌｏｍａ，”Ｂｌｏｏｄ．２００９；１１４（２２）：１７５。これらのそれぞれは、引用により本明細書に組み込まれる）は、リンパ腫および白血病などの他の血液癌における低酸素骨髄に対する役割があるかもしれないことを報告している。
【０１０７】
ＴＨ−３０２は、低酸素選択的に５Ｔ３３ｖｔ細胞におけるＧ０／Ｇ１細胞周期停止を誘発した。ＴＨ−３０２は、下方制御されたサイクリンＤ１／２／３、ＣＤＫ４／６、ｐ２１、ｐ２７およびｐＲｂ発現に依存したＧ０／Ｇ１細胞周期停止を誘発した。ＴＨ−３０２は、低酸素下、ＬＰ−１細胞において用量依存的に特異的なアポトーシスを誘発した。ＴＨ−３０２（５μΜ）は、ＬＰ−１細胞でアポトーシスを誘発した。ＴＨ−３０２（５μΜ）は、低酸素ＲＰＭＩ−８２２６細胞内でＨＩＦ１αの蓄積を減少させた。ＶＥＧＦａの分泌は、５Ｔ３３ｖｔ細胞で、ＴＨ−３０２により減少した。２０％Ｏ２（ｎ＝３）に比べて、＊ｐ＜０．０５、＊＊ｐ＜０．０１、＊＊＊ｐ＜０．００１であった。
【０１０８】
実施例２．ＴＨ−３０２のインビトロ試験
この実施例は、多発性骨髄腫の低酸素ニッチも治療標的として役立つことができることを証明している。データは、低酸素活性化プロドラッグのＴＨ−３０２が、低酸素選択性を有する多発性骨髄腫細胞の強い用量依存性のインビトロ細胞毒性を示すことを証明している。多発性骨髄腫細胞に対するＴＨ−３０２の増殖抑制効果を実証するために、薬物治療後の細胞周期位相分布とアポトーシスを解析した。細胞周期解析では、ＴＨ−３０２がＫａｒｐａｓ−７０７、ＬＰ−１、ＭＭＳ１、およびＲＰＭＩ−８２２６細胞における低酸素条件下でＧ０／Ｇ１細胞周期停止を誘発したことを示した。ウエスタンブロット法は、ＴＨ−３０２の細胞周期機構に対する効果がサイクリンＤ１／２／３、ＣＤＫ４／６、ｐ２１ｃｉｐ−１、ｐ２７ｋｉｐ−１およびｐＲｂ発現を下方制御することによってもたらされることをさらに明らかにしたのに対して、ＲＰＭＩ−８２２６、ＬＰ−１、ＭＭＳ１およびＫａｒｐａｓ−７０７の多発性骨髄腫細胞で観察されるように、ＣＤＫ２の発現は影響を受けないでそのままであった。さらに、フローサイトメトリー分析は、低酸素状態におけるヒトおよびマウスの両方の多発性骨髄腫細胞での用量依存性のアポトーシスをＴＨ−３０２が誘導し、同様の結果がまた、ＲＰＭＩ−８２２６、５Ｔ３３ｖｔ、ＭＭＳ１、Ｋａｒｐａｓ−７０７細胞において観察されたことを明らかにした。ウエスタンブロット法は、ＴＨ−３０２活性化アポトーシスが、抗アポトーシスタンパク質ＢｃＬ−２やＢｃＬ−ｘＬの下方制御と同様に、切断されたプロアポトーシスタンパク質カスパーゼ−３、８、９およびポリＡＤＰリボースポリメラーゼ（ＰＡＲＰ）の発現の上方制御によってもたらされたことをさらに証明した。低酸素特異的な毒性とは対照的に、ＴＨ−３０２は高濃度であっても正常酸素圧条件下で非常に低い毒性を示し、同様の結果はまた、ＲＰＭＩ−８２２６、５Ｔ３３ｖｔ、ＭＭＳ１、Ｋａｒｐａｓ−７０７細胞でも見られた。加えて、低酸素応答調節因子のＨＩＦ１αの産生（Ｈｏｓｅら、“Ｉｎｄｕｃｔｉｏｎ  ｏｆ  ａｎｇｉｏｇｅｎｅｓｉｓ  ｂｙ  ｎｏｒｍａｌ  ａｎｄ  ｍａｌｉｇｎａｎｔ  ｐｌａｓｍａ  ｃｅｌｌｓ，”Ｂｌｏｏｄ．２００９；１１４（１）：１２８−１４３。これは、引用により本明細書に組み込まれる）は、ＴＨ−３０２の治療で減少したことが証明された。低酸素状態でのＨＩＦ１αの発現は、ＴＨ−３０２への曝露に従って減少し（同様の結果が５Ｔ３３ｖｔ、ＬＰ−１、Ｋａｒｐａｓ−７０７細胞でも見られた）、したがって、ＨＩＦ１αの下流の標的遺伝子であるＶＥＧＦａの分泌もまた有意に減少した。多発性骨髄腫細胞の薬物治療のための規定された混合ガスのセット（０％、１％、１．２５％、１．５％、２％、３％、２０％Ｏ２）を採用することにより、ＴＨ−３０２の酸素濃度依存性の活性化がＲＰＭＩ−８２２６、ＬＰ−１、ＭＭＳ１および５Ｔ３３ｖｔの多発性骨髄腫細胞で試験された。その結果は、これらの試験条件下では、ＴＨ−３０２を活性化するしきい値が１．５％Ｏ２未満であることが示された。Ｏ２濃度が０％に減少するにつれて、アポトーシス細胞の割合は、約７０〜７５％に増加した。
【０１０９】
実施例３．多発性骨髄腫の治療のためのＴＨ−３０２のインビボでの投与
５Ｔ３３ＭＭｖｖマウスでのＴＨ−３０２試験は、ＴＨ−３０２によるインビボでの治療が、多くの疾患のパラメータを改善したことを証明した。５Ｔ３３ＭＭｖｖマウスは、ＴＨ−３０２で３週間予防的に治療された。１日目から、以下のことが観察された。ビヒクル処置５Ｔ３３ＭＭｖｖマウスと比較して、治療５Ｔ３３ＭＭｖｖマウスの骨髄において、ＴＨ−３０２は、著しい多発性骨髄腫細胞のアポトーシス（ＴＨ−３０２の１２．５ｍｇ／ｋｇ投与：２．５倍、２５ｍｇ／ｋｇ投与：２．１倍、および５０ｍｇ／ｋｇ投与：３．１倍）を誘発し、パラプロテインの分泌を減少させ（１２．５ｍｇ／ｋｇ投与で、３２％の減少；２５ｍｇ／ｋｇ投与で、７７％の減少；および５０ｍｇ／ｋｇの投与で５４％の減少）、そして、大幅に微小血管密度（ＭＶＤ）を減少（１２．５ｍｇ／ｋｇ投与で、１９％の減少；２５ｍｇ／ｋｇ投与で、２０％の減少；および５０ｍｇ／ｋｇ投与で、２６％の減少）させた。したがって、ＴＨ−３０２の癌細胞毒性効果は、骨髄中の多発性骨髄腫細胞の低酸素の性質と関連していた。また、ＴＨ−３０２で処置されたナイーブマウスからのデータは、体重、ヘモグロビン（ＨＧＢ）、赤血球数（ＲＢＣ）、白血球数（ＷＢＣ）、ヘマトクリット（ＨＣＴ）、および微小血管密度（ＭＶＤ）の点では、ビヒクル処置ナイーブマウスと比較して、実質的な毒性を示さなかったが、さらに、ＴＨ−３０２の特異的な低酸素活性化効果および正常骨髄での限られた低酸素を示した。
【０１１０】
実施例３．ボルテゾミブとの併用によるＴＨ−３０２のインビトロ試験
この実施例は、ＴＨ−３０２とボルテゾミブの併用が、ポリ（ＡＤＰ−リボース）ポリメラーゼとカスパーゼ−３／８／９の誘導開裂によって証明されるように、相乗的にアポトーシスを誘導することを証明している。この併用によるアポトーシスの誘導のメカニズムをさらに特定するために、抗アポトーシスおよびプロアポトーシスＢｃｌ−２ファミリータンパク質についてＴＨ−３０２、ボルテゾミブおよびそれらの併用の効果が免疫ブロット法を用いて試験された。その結果は、プロアポトーシスＢＨ−３メンバーのＮｏｘａおよびＢＩＤの切断がボルテゾミブおよびＴＨ−３０２の両方によって誘導されたことを示している。また、抗アポトーシスＢｃｌ−２とＢＣＩ−ｘＬの発現は、ＴＨ−３０２とボルテゾミブの両方で減少した；しかし、抗アポトーシスＭｃｌ−１は、ボルテゾミブで蓄積したけれども、ＴＨ−３０２では減少し、このことは、ＴＨ−３０２は、Ｍｃｌ−１を標的とすることを経由してボルテゾミブに対する耐性を克服することができることを示している。
【０１１１】
実施例４．多発性骨髄腫の治療のためのボルテゾミブとの併用によるＴＨ−３０２のインビボ投与
５Ｔ３３ＭＭｖｖマウスモデルで試験されたＴＨ−３０２とボルテゾミブの併用は、インビボでの併用治療が複数の疾患パラメータの素晴らしい改善を示し、ＴＨ−３０２またはボルテゾミブ単独で治療された５Ｔ３３ＭＭｖｖマウスに比べて、有意に（ｐ＜０．０１）減少した腫瘍量、パラプロテイン分泌および微小血管密度（ＭＶＤ）を誘導したことを証明している。
【０１１２】
総合すると、この結果は、多発性骨髄腫細胞が低酸素骨髄微小環境に広範囲に存在することを実証している。単剤療法としてＴＨ−３０２での低酸素活性化治療は、インビトロおよびインビボの両方において、多発性骨髄腫の治療に有効であることを示している。この試験での所見は、低酸素骨髄ニッチを標的にすることは、多発性骨髄腫および他の血液癌に対する有用かつ新規な治療戦略を提供し、そこでは、骨髄の低酸素領域が癌幹細胞および様々な血液癌の形成につながることを示している。
【０１１３】
実施例５．進行性白血病の治療のためのＴＨ−３０２の臨床投与
臨床研究は、ＴＨ−３０２の安全性、忍容性および臨床関連疾患の応答性を決定するために急性白血病、進行性慢性骨髄性白血病（ＣＭＬ）、高リスク骨髄異形成症候群、進行性骨髄線維症または再発性／難治性の慢性リンパ性白血病（ＣＬＬ）の患者で行われた。ＴＨ−３０２は、５日間毎日３０〜６０分の静脈内注入として投与され、その後２週間は休薬とした。必要に応じて、５日間の投与は、８日間にわたり延ばすことができた。深刻な治療関連毒性または進行性疾患の所見もなしに３週間の治療サイクルを首尾よく完了した患者は、治療を継続し、最大６サイクルの治療を受けることができた。
【０１１４】
２１人の患者が、その試験において、１日投与量が１２０ｍｇ／ｍ２〜４６０ｍｇ／ｍ２の範囲のＴＨ−３０２で治療された。すべての被験者は、ＡＭＬまたはＡＬＬのどちらかに罹患しており、この試験の登録前に彼らの病気に対して複数の前治療を一般に受けていた。ＴＨ−３０２の各サイクルの後に彼らの末梢芽球数が減少し、その一方で血小板数が徐々に改善されていた場合、２サイクル後に１７０ｍｇ／ｍ２／日に投与量が増量していた１人の患者を含めて、１２０ｍｇ／ｍ２／日の投与量のＴＨ−３０２で治療したＡＭＬの２人の患者は、病状が安定していた。
【０１１５】
１７０ｍｇ／ｍ２／日の投与量のＴＨ−３０２で治療された１人のＡＬＬ患者は、１サイクル後に骨髄生検により測定された骨髄芽球数の正常化に基づく部分寛解があった。２４０ｍｇ／ｍ２／日の投与量のＴＨ−３０２で治療された１人のＡＭＬ患者と１人のＡＬＬ患者は、１サイクル後に安定した病状であった。３３０ｍｇ／ｍ２／日の投与量のＴＨ−３０２で治療された１人のＡＬＬ患者は、１サイクル後に安定した病状であった。
【０１１６】
これらの結果は、本発明の方法が血液癌の治療に有効であることを示している。
【０１１７】
特定の実施形態が、上述した実施例に説明され、記述されているが、変更および修正は、以下の特許請求の範囲で定義されているようにその広い態様において、本発明の技術から逸脱することなく当該分野の通常の技術に従って本技術を実施するために、前述の方法において行うことができることが理解されるであろう。
【０１１８】
本発明は、本明細書では広く一般的に記載されている。一般的な開示の範囲内に該当する、より狭い種や亜属グループの各々もまた、本発明の一部を形成する。このことは、摘出材料が本明細書に具体的に記載されているかどうかに関係なく、属からの任意の主題を取り除く但し書きまたは否定的な限定を有する本発明の一般的な記述を包含するものである。
【０１１９】
また、本発明の特徴または態様がマーカッシュグループの観点から記述されている場合、当業者は、本発明もまたそれによりマーカッシュグループの任意の個々のメンバーまたはメンバーのサブグループの観点から記述されることを認識するであろう。