(57)【要約】本発明は、コウゾ抽出物を含有する皮膚美白用の組成物に係り、さらに詳しくは、チョウセンアサノハカエデ、ハダカアサノハカエデ、キガンピ、チョウセンミネカエデ、ミツマタ、タイセイカジノキ、テリハカジノキ、チョウセンナニワズまたはヒメコウゾ抽出物を含有して皮膚に副作用なしに安全に使用することができ、しかも、メラニン生成を抑えて色素沈着を阻害する効果に優れた皮膚美白用の組成物に関する。【選択図】なし【特許請求の範囲】
【請求項１】
チョウセンアサノハカエデ、ハダカアサノハカエデ、キガンピ、チョウセンミネカエデ、ミツマタ、タイセイカジノキ、テリハカジノキ、チョウセンナニワズおよびヒメコウゾの抽出物よりなる群から選ばれる１種以上を有効成分として含有する皮膚美白用の組成物。
【請求項２】
前記チョウセンアサノハカエデ、ハダカアサノハカエデ、キガンピ、チョウセンミネカエデ、ミツマタ、タイセイカジノキ、テリハカジノキ、チョウセンナニワズまたはヒメコウゾの抽出物は、組成物の総重量に対して０．０００１〜９０重量％含有されることを特徴とする請求項１に記載の皮膚美白用の組成物。
【請求項３】
前記組成物は、美白用の化粧品、医薬品または食品に剤形化されることを特徴とする請求項１に記載の皮膚美白用の組成物。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、コウゾ抽出物を含有する皮膚美白用の組成物に係り、さらに詳しくは、チョウセンアサノハカエデ、ハダカアサノハカエデ、キガンピ、チョウセンミネカエデ、ミツマタ、タイセイカジノキ、テリハカジノキ、チョウセンナニワズまたはヒメコウゾ抽出物を含有して皮膚に副作用なしに安全に使用することができ、しかも、メラニン生成を抑えて色素沈着を阻害する効果に優れた皮膚美白用の組成物に関する。
【背景技術】
【０００２】
人間の皮膚色は、メラニン色素を生成するメラノサイトの活動性、血管の分布、皮膚の厚さおよびカロチノイド、ビリルビンなど人体内外の色素含有の有無など種々の要因によって決定される。特に、メラノサイトにおいてチロシナーゼなどの各種の酵素が作用して生成されるメラニンという黒色色素が最も重要な要因である。メラニン色素の形成には、遺伝的な要因、ホルモン分泌、ストレスなどと関わる生理的要因および紫外線照射などの環境的な要因が影響を及ぼす。メラニンは皮膚に存在して紫外線などから身体を保護する重要な機能をするが、メラニンが過剰生産されることにより色素沈着および皮膚老化を促し、しかも、皮膚癌の誘発にも主な作用をすると知られている。
【０００３】
皮膚色素異常沈着症状と紫外線露出などに起因して発生した過度なメラニン色素沈着を治療または軽減するために、従来より、アスコルビン酸、コウジ酸、アルブチン、ヒドロキノン、グルタチオンまたはこれらの誘導体、チロシナーゼ阻害活性を有する物質を化粧料や医薬品に配合して使用してきたが、これらは、不十分な美白効果、皮膚に対する安全性の問題および化粧料への配合時における剤形内での安定性問題などによってその使用が制限されている。
【０００４】
これらの既存の美白物質の限界を克服することができ、しかも、美白効果に優れた原料物質を見出すための研究が盛んに行われている。例えば、大韓民国登録特許公報特１９９３−００１０５４８号には、コウゾまたはカジノキ抽出物の美白効果が開示されており、大韓民国特許公報第２００６−０１２１４９６号には、エギダクナム（Ｂｒｏｕｓｓｏｎｅｔｉａ  ｋａｚｉｎｏｋｉ  ｖａｒ．  ｈｕｍｉｌｉｓ  Ｕｙｅｋｉ）抽出物の美白効果が開示されている。しかしながら、本発明の前に、チョウセンアサノハカエデ、ハダカアサノハカエデ、キガンピ、チョウセンミネカエデ、ミツマタ、タイセイカジノキ、テリハカジノキ、チョウセンナニワズおよびヒメコウゾの美白効果については開示されていない。
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００５】
そこで、本発明者らは、美白効果を有する天然物について鋭意研究し、チョウセンアサノハカエデ、ハダカアサノハカエデ、キガンピ、チョウセンミネカエデ、ミツマタ、タイセイカジノキ、テリハカジノキ、チョウセンナニワズおよびヒメコウゾの抽出物が美白効果を有し、しかも、コウゾ、カジノキおよびエギダクナムなどに比べて卓越した美白効果を提供することを見出し、本発明を完成するに至った。
【０００６】
したがって、本発明の目的は、皮膚に副作用がなく、安全である他、優れた美白効果を示す皮膚美白用の組成物を提供することである。
【課題を解決するための手段】
【０００７】
上述した目的を達成するために、本発明は、チョウセンアサノハカエデ、ハダカアサノハカエデ、キガンピ、チョウセンミネカエデ、ミツマタ、タイセイカジノキ、テリハカジノキ、チョウセンナニワズおよびヒメコウゾの抽出物よりなる群から選ばれるいずれか一種以上を有効成分として含有する皮膚美白用の組成物を提供する。
【発明の効果】
【０００８】
本発明に係る皮膚美白用の組成物は、チロシナーゼ活性抑制およびメラニン生成阻害効果に優れており、しかも、皮膚安定性にも優れている。
【発明を実施するための形態】
【０００９】
本発明は、チョウセンアサノハカエデ、ハダカアサノハカエデ、キガンピ、チョウセンミネカエデ、ミツマタ、タイセイカジノキ、テリハカジノキ、チョウセンナニワズまたはヒメコウゾ抽出物を有効成分として含有することにより、皮膚に副作用が無く，安全に使用することができる他、メラニン生成を抑えて色素沈着を阻害する効果に優れた皮膚美白用の組成物に関する。
【００１０】
本発明において使用するチョウセンアサノハカエデ（Ａｃｅｒ ｂａｒｂｉｎｅｒｖｅ Ｍａｘ．）は、葉が対生し、広い卵形または円形であり、漸尖頭であり、亜心臟底または截底であり、長さ５〜１０ｃｍ、幅４〜７ｃｍであって、周縁が５つに分岐し、表面に毛がなく、若木のときには裏面に毛が生えているが、次第に無くなって葉脈にのみ毛が残り、周縁に複鋸歯があり、裂片の先端に鋸歯がなく、葉柄は長さ４〜１３ｃｍであって、細毛がある。花は二家花であって６月に咲き、４−７個の花が枝の先端に頂生する総状花序につき、花梗に毛が産生する。雌花は新枝の頂端から出、花梗は長さ１〜２ｃｍであり、雄花は前年度の枝の先端に出、花葉は４枚であり、倒卵状の楕円状であり、黄緑色である。実は翅果であり、鈍角または直角に広がり、長さ３〜３．５ｃｍ、幅８〜１２ｍｍであり、しわが多く、１０月に熟し、羽根が披針形であり、小果梗は長さ１．５〜２ｃｍである。実は５−７個が集まって付き、小堅果は球状である。樹皮は灰褐色であり、平滑であり、素地は黄色みがかかっているが、しばしば紅色であるものもあり、毛がある。
【００１１】
本発明において使用するハダカアサノハカエデ（Ａｃｅｒ ｂａｒｂｉｎｅｒｖｉｓ ｖａｒ．ｇｌａｂｒｅｓｃｅｎｓ）は、高さ３〜１０ｍであり、山地に生える。樹皮は滑らかであり、灰色みがかかった褐色であり、若い枝は黄色または赤色である。葉は対生し、広い卵形または円形であり、長さ５〜１０ｃｍである。手のひらのように５つに分岐し、表面には毛がほとんどなく、裏面には僅かに毛があるか全くない。分岐の断片は尖っており、複鋸歯があり、先端部には鋸歯がない。葉柄は長くて細毛が生える。花は雌雄異体であり、５〜６月に咲くが、枝の先端に４〜７輪ずつ総状花序につく。花托の周縁が環状となる。雄花は雄しべ４つ、柱頭２つである。実は翅果であり、披針形の羽根があり、１０月に熟し、直角や鈍角に広がる。韓国特産植物であり、江原道と平安北道、地異山に分布する。
【００１２】
本発明において使用するキガンピ（Ｗｉｋｓｔｒｏｅｍｉａ ｔｒｉｃｈｏｔｏｍａ）は、双葉植物桃金孃目ジンチョウゲ科の落葉灌木であり、山地において生育し、高さは約１ｍである。小さい枝には毛がなく、赤い褐色である。葉は対生し、卵形であり、長さ３〜４ｃｍ、幅１〜３ｃｍである。先端は鈍く、基部は鈍状または先鋭状であり、両面に毛がなく、周縁が平べったい。裏面は白色であり、葉柄は長さ約２ｍｍである。花は両性花であり、７〜８月に黄色で咲き、総状花序に、７〜１５個付く。花床筒は長さ７〜８ｍｍであり、先端が４つに分岐して横に広がる。雄しべは８個であり、２行に並び、雌しべは１つである。子房は倒卵状であり、茎がある。実は乾果であり、卵形の長い楕円状であり、長さは約５ｍｍである。両先端が狭く、毛がなく、９〜１０月に成熟する。樹皮で韓紙や紐を作る。韓国（全羅南道・慶尚南道・仁川広域市）・日本に分布する。葉が互生し、花が枝の先端に丸く集まって付くものを雁皮（Ｗ．ｓｉｋｏｋｉａｎａ）と呼ぶが、樹皮で紙を作り、日本の中部以南において生育する。
【００１３】
本発明において使用するチョウセンミネカエデ（Ａｃｅｒ ｔｓｃｈｏｎｏｓｋｉｉｖａｒ．ｒｕｂｒｉｐｅｓ）は、深い山において生育し、高さは約１０ｍである。樹皮は灰色みのかかった色であるが、若い枝は紫色である。葉は対生し、卵形であり、長さは５〜９ｃｍである。先端が尖っており、基部は心臓状であり、裏面脈に褐色の毛が密につく。周縁が３〜５つに分岐し、分岐の断片の周縁に波状の鋸歯があり、葉柄は長さ２〜５ｃｍであり、赤色である。花は雌雄同体であり、６月に黄色で咲き、枝の先端に総状花序に５〜１０個の花が付く。花序は長さ６〜８ｃｍである。花葉と萼片はそれぞれ５枚である。実は翅果であり、１０月に熟し、羽根は披針形であり、幅は約５ｍｍである。庭木として植え、木材は工業用に用いる。韓国・日本・中国等地に分布する。
【００１４】
本発明において使用するミツマタ（Ｅｄｇｅｗｏｒｔｈｉａ ｃｈｒｙｓａｎｔｈａ）は、落葉が舞い落ちる広葉灌木であり、高さは約２ｍである。ミツマタという名前は、枝が三つに分岐するということに以来する。葉は約１０ｃｍとなる長い披針形であり、互生し、質が薄い。花は黄色であり、葉が出る前である早春に葉腋から下に向かって球状の頭状花序に付く。一方、それぞれの花は、長さが約１ｃｍの長い筒状であり、先端は４つに分岐し、内側は橙黄色であり、外側には白い毛が密についている。雄しべは８個であるが、これらのうち４つは花床筒の上側について葯筒の外部に延び出る。中国が原産地であり、主として穏やかな個所において生育し、韓国においては済州道等地に分布している。樹皮はかつてから紙を作る原料として使用されてきている。
【００１５】
本発明において使用するタイセイカジノキ（Ｂｒｏｕｓｓｏｎｅｔｉａ ｐａｐｙｒｉｆｅｒａ ｆｏｒ． ｏｐｐｏｓｉｔｉｆｏｌｉａ）は、双葉植物イラクサ目桑科の落葉広葉喬木であり、対生カジノキとも呼ばれる。海抜１００〜７００ｍの日当たりのよい山すそにおいて生育する。高さは１２ｍ内外である。樹皮は暗い灰色であり、小さい枝に毛が密に付く。葉は対生し、広い卵形または円形である。長さは７〜２０ｃｍであり、先端がまるで尻尾のように長くて深く食い込まれた形状である。両面に毛がつき、荒くて周縁に鋸歯がある。葉柄は約３〜１０ｃｍであって、毛がある。托葉は紫色であり、卵形であり、早期に落ちる。花は単性花であり、５〜６月に緑色みのかかった褐色で咲くが、雄花穂は円柱状であり、葉腋から出て垂れ下がる。雌花穂は円形である。雄花の花被は４つに分岐し、雄しべは４つである。雌花の花被は筒状であり、３〜４つに分岐する。実は丸い核果であり、９月に熟する。外果皮は赤い色であり、内果皮は硬くて褐色である。若い葉と実は食用であり、樹皮は製紙用である。漢方においては、樹皮と実を強壮・利尿・中風・鎮咳などに薬材として用いる。播種や挿し木・株分けで繁殖する。カジノキの一品種であり、葉が対生することが特徴である。韓国（全域）・日本・中国等地に分布する。
【００１６】
本発明において使用するテリハカジノキ（Ｂｒｏｕｓｓｏｎｅｔｉａ ｐａｐｙｒｉｆｅｒａ ｆｏｒ． ｌｕｃｉｄａ）は、双葉植物イラクサ目桑科の落葉広葉喬であり、海抜１００〜７００ｍの山すその日当たりのよい個所において生育する。高さは１２ｍ内外である。樹皮は暗い灰色であり、小さな枝に毛が密に付く。葉は広い卵形または円形であり、互生する。長さ７〜２０ｃｍであって、表面は濃い緑色であり、毛がなく、光沢がある。周縁に鋸歯があり、先端はまるで尻尾のように長くて深く食い込まれた形状である。葉柄は３〜１０ｃｍであり、毛がある。托葉は紫色であり、卵形であり、早期に落ちる。花は単性花であり、５〜６月に葉と一緒に緑褐色で咲くが、雄花穂は円柱状であり、新たに生えた枝の葉腋から出て垂れ下がる。雄花の花被は４つに分岐し、４つの雄しべがある。雌花穂は円形である。雌花の花被は３〜４つに分岐し、雌しべ柱はまるで糸のように細い。実は丸い核果であり、外果皮は赤い色であり、内果皮は硬くて褐色であり、９月に熟する。若い葉と実は食用であり、樹皮は製紙用であって、韓紙を作るのに用いる。韓方においては樹皮と実を強壮・利尿・中風・鎮咳などに薬材として用いる。播種や挿し木・株分けで繁殖する。カジノキの一品種であり、葉が濃い緑色であり、毛が生えず、光沢があることが特徴である。韓国（全域）・日本・中国等地に分布する。
【００１７】
本発明において使用するチョウセンナニワズ（Ｄａｐｈｎｅ ｋａｍｔｓｃｈｔｉｃａ）は、双葉植物桃金孃目ジンチョウゲ科の落葉広葉灌木であり、深い山の木の下において生育する。高さは３０〜４０ｃｍであり、枝に毛がない。葉は互生し、長い倒卵状または倒披針形であり、先端は尖鋭状または鈍状であり、長さは、４．０〜８．５ｃｍである。葉の前面は青緑色であり、裏面は僅かに粉白色がかかっており、鋸歯がなく、葉柄の長さは５〜７ｍｍである。総状花序は前年の枝の先端の葉腋から発達し、上側は黄色、下側は緑色花が２〜５つつく。花は二家花であり、雌花が小さく、花被は黄色であり、卵形または披針形であり、先端が尖っている。雄しべは８個であり、実は漿果であって球状であり、秋に赤く熟する。樹皮は、紙の原料、紐の代わりに用いられる。韓国（全羅南道・江原道・平安北道・咸鏡北道）・サハリン・カムチャツカ・アムール・ウスリー等地に分布する。
【００１８】
本発明において使用するヒメコウゾ（Ｂｒｏｕｓｓｏｎｅｔｉａ ｋａｚｉｎｏｋｉＳｉｅｂｏｌｄ）は、高さ２〜５ｍの桑科落葉灌木であり、樹皮は黄褐色を帯び、分布地域は東南アジアであり、韓国の全域において栽培される。韓紙の原料として用いられる。
【００１９】
本発明において使用するチョウセンアサノハカエデ、ハダカアサノハカエデ、キガンピ、チョウセンミネカエデ、ミツマタ、タイセイカジノキ、テリハカジノキ、チョウセンナニワズおよびヒメコウゾの抽出物は、各木の幹、根、葉、花または実を浸出、煎出して得た浸出液だけではなく、浸出液をさらに一部または全部濃縮して得た濃縮物または上記の濃縮物をさらに乾燥させて製造した針体、拡展剤、チンキ剤、流動エキスおよび前記木中に含有されて主効果を発揮する化学物質はもちろん、植物そのものを全て含む。
【００２０】
本発明に係るチョウセンアサノハカエデ、ハダカアサノハカエデ、キガンピ、チョウセンミネカエデ、ミツマタ、タイセイカジノキ、テリハカジノキ、チョウセンナニワズおよびヒメコウゾ抽出物は、公知の方法により当業者が容易に製造することができる。例えば、チョウセンアサノハカエデ、ハダカアサノハカエデ、キガンピ、チョウセンミネカエデ、ミツマタ、タイセイカジノキ、テリハカジノキ、チョウセンナニワズおよびヒメコウゾの幹、根、葉、花または実を自然乾燥または強制乾燥など任意の方法により乾燥して細かく切った後、水、エタノール、ブタノール、アセトンなどの極性溶媒、エーテル、ヘキサン、ベンゼン、クロロホルム、エチルアセテートなどの非極性溶媒、前記非極性溶媒と極性溶媒との混合溶媒、アルカリ水などの溶媒、または大豆油、ゴマ油などの植物油などを用いて、冷浸、パーコレーション、温浸などの任意の方法によって浸出処理して有効成分を含有する浸出物を得る。浸出処理は、冷浸およびパーコレーションの場合に約１２〜９６時間、温浸の場合には使用する溶媒などの種類および温度に応じて異なるが、好ましくは、溶媒の還流温度に近い温度で約０．５〜２４時間行うことが好ましい。特に、含水アルコールに浸出したチンキ剤や流動エキスまたはエキスのものを用いることが好ましい。
【００２１】
本発明に係る皮膚美白用の組成物は、前記チョウセンアサノハカエデ、ハダカアサノハカエデ、キガンピ、チョウセンミネカエデ、ミツマタ、タイセイカジノキ、テリハカジノキ、チョウセンナニワズまたはヒメコウゾ抽出物を、各々組成物の総重量に対して０．０００１〜９０重量％、より好ましくは、０．０００１〜５０重量％含有する。これは、０．０００１重量％未満であれば美白効果を期待することができず、９０重量％を超えると皮膚安全性または剤形上の問題があるためである。
【００２２】
本発明に係る皮膚美白用の組成物は、美白用の化粧品、医薬品、食品などに応用することができ、経口用（内用）であってもよく、非経口用（外用）であってもよい。
【００２３】
また、本発明に係る皮膚美白用の組成物は、チョウセンアサノハカエデ、ハダカアサノハカエデ、キガンピ、チョウセンミネカエデ、ミツマタ、タイセイカジノキ、テリハカジノキ、チョウセンナニワズおよびヒメコウゾ抽出物に加えて、本発明が目的とする美白効果を損なわない範囲内において、好ましくは、前記美白効果に相昇効果を与え得る他の美白成分などを含有しても構わない。このような美白成分としては、アルブチン、アスコルビン酸誘導体などが挙げられる。
【００２４】
本発明に係る組成物は、化粧品学または皮膚科学的に許容可能な媒質または基剤を含有する。これは、局所適用に適したあらゆる剤形であり、例えば、溶液、ゲル、固体、固練り無水生成物、水相に油相を分散させて得たエマルジョン、懸濁液、マイクロエマルジョン、マイクロカプセル、微細顆粒球もしくはイオン型（リポーソム）および非イオン型の小嚢分散剤の形で、もしくはクリーム、スキン、ローション、パウダー、軟膏、スプレーまたはスティックコンシーラーの形で提供可能である。なお、本発明に係る組成物は、フォームの形でまたは圧縮された推進剤をさらに含有するエアロゾール組成物の形でも使用可能である。これら組成物は、当該分野における通常の方法により製造可能である。
【００２５】
さらに、本発明に係る皮膚美白用の組成物は、脂肪物質、有機溶媒、溶解剤、濃縮剤、ゲル化剤、軟化剤、抗酸化剤、懸濁化剤、安定化剤、発泡剤、芳香剤、界面活性剤、水、イオン型もしくは非イオン型乳化剤、充填剤、金属イオン封鎖剤、キレート化剤、保存剤、ビタミン、遮断剤、湿潤化剤、必須オイル、染料、顔料、親水性もしくは親油性活性剤、脂質小嚢または化粧品に通常用いられる任意の他の成分などの化粧品学もしくは皮膚科学分野において通常用いられる補助剤を含有してもよい。これらの補助剤は、化粧品学または皮膚科学分野において通常用いられる量で取り込まれる。
【実施例】
【００２６】
以下、試験例および実施例を挙げて本発明についてより具体的に説明する。しかしながら、これらの実施例は本発明についての理解への一助となるために例示の目的だけで提供されたものであり、本発明の範ちゅうおよび範囲がこれに制限されるものではなく、当業界における周知の変形、置換および挿入などを行うことができ、これに関するものも本発明の範囲に含まれる。
【００２７】
［実施例１〜９］
乾燥されたチョウセンアサノハカエデ、ハダカアサノハカエデ、キガンピ、チョウセンミネカエデ、ミツマタ、タイセイカジノキ、テリハカジノキ、チョウセンナニワズおよびヒメコウゾ全草１ｋｇをそれぞれ精製水１０Ｌに加え、沸騰するまで加熱した後、１０分間さらに加熱した。次いで、水を除去して洗浄し、別途に精製水１０Ｌを加えて再び洗浄した。残渣を風乾し、７０％エタノール２０Ｌに加えた後、還流装置を連結して加温して２４時間還流抽出した。８０網目の篩体を用いて固形分を除去し、残ったろ液を再びろ過した後、減圧濃縮器を用いてろ液中の溶媒を留去して各抽出物の固形分を得た。
【００２８】
［比較例１〜３］
コウゾ、カジノキおよびエギダクナムをそれぞれ前記実施例１〜９の方法と同様にして抽出して各抽出物の固形分を得た。
【００２９】
［試験例１］チロシナーゼ阻害効果
酵素チロシナーゼは、キノコ（Ｍｕｓｈｒｏｏｍ）から抽出されたものであり、シグマ社製のものを使用した。先ず、基質となるチロシンを蒸留水に溶解させて０．３ｍｇ／ｍｌの溶液にして、その溶液を１．０ｍｌずつ試験管に入れ、ここにポタシウム−ホスファート緩衝溶液（０．１モル濃度、ｐＨ６．８）１．０ｍｌおよび蒸留水０．７ｍｌを添加した。
【００３０】
実施例１〜９、比較例１〜３の各抽出物をエタノール溶液に適宜な濃度で混合して準備した各抽出物試料液０．２ｍｌ（それぞれ１０μｇ／ｍｌ）を反応液に入れた後、３７℃の恒温槽において１０分間反応させた。このとき、対照群としては、各抽出物の代わりに溶媒のみを０．２ｍｌ入れたものを準備し、陽性対照群としては、コウジ酸４０μｇ／ｍｌを使用した。この反応液に２５００ユニット／ｍｌのチロシナーゼ溶液０．１ｍｌずつを入れて、さらに３７℃の恒温槽において１０分間反応させた。この反応液が入れられている試験管を氷水中に入れて急冷させて反応を中止し、光電分光分析計を用いて波長４７５ｎｍにおける吸光度を測定した。その結果を下記表１に示す。各抽出物のチロシナーゼ阻害効果は、下記の数学式１により算出した。
【００３１】
［数学式１］
チロシナーゼ阻害率（％）＝１００−（各抽出物の反応吸光度／対照群の反応吸光度×１００）
【００３２】
【表１】
2013530218.tif 000002
【００３３】
前記表１の結果から、本発明に係るチョウセンアサノハカエデ、ハダカアサノハカエデ、キガンピ、チョウセンミネカエデ、ミツマタ、タイセイカジノキ、テリハカジノキ、チョウセンナニワズおよびヒメコウゾの各抽出物は、チロシナーゼ抑制率が高くて美白効果に優れていることが分かる。
【００３４】
［試験例２］Ｂ１６／Ｆ１０メラノーマ細胞を用いたメラニン生成抑制能の評価
実施例１〜９、比較例１〜３をそれぞれ０．００１重量％含有する試料とアルブチン５０μｇ／ｍｌを試験物質として所定の濃度でＢ１６／Ｆ１０メラノーマ細胞（韓国細胞株銀行）の培養液に添加して３日間培養した後、培養液を除去し、ＰＢＳにより洗浄し、１Ｎ-ＮａＯＨに細胞を溶かして４０５ｎｍにおける吸光度を測定した。試験物質を添加していない細胞を対照群として対照群におけるメラニン含量と比較して各試験物質のメラニン生成阻害度を測定して美白効果を測定した。数学式２に従いメラニン生成抑制率を計算してその結果を表２に示す。
【００３５】
［数学式２］
メラニン生成抑制率（％）＝１００−（各試験物質の吸光度／対照群の吸光度×１００）
【００３６】
【表２】
2013530218.tif 000003
【００３７】
前記表２の結果から、チョウセンアサノハカエデ、ハダカアサノハカエデ、キガンピ、チョウセンミネカエデ、ミツマタ、タイセイカジノキ、テリハカジノキ、チョウセンナニワズおよびヒメコウゾの各抽出物は、メラニン生成抑制率が高くて美白効果に優れていることが分かる。
【００３８】
［剤形例１〜９］栄養化粧水（ミルクローション）
下記の表３および表４に記載の組成に従い、通常の方法により剤形例１〜９の栄養化粧水を製造した（単位：重量％）。
【００３９】
【表３】
2013530218.tif 000004
【００４０】
【表４】
2013530218.tif 000005
【００４１】
［試験例３］人体皮膚に対する美白効果の実験
健常人男性１２名を対象として被検者の上腕部位に横、縦それぞれ１．５ｃｍの正方形の穴付き不透明テープを貼り付けた後、各被検者の最小紅斑量の約１．５〜２倍の紫外線（ＵＶＢ）を照射して皮膚の黒化を誘導した。
【００４２】
照射後に試験物質としての前記剤形例１〜９および比較剤形例１を塗り、一箇所には何も塗っていない対照群部位を設けて６週後の状態変化を観察した。皮膚の色を色差計ＣＲ２００２（日本ミノルタ社製）により測定した。塗布開始時点と塗布完了時点における皮膚色の差分（ΔＬ*）を下記の数学式３に従い計算し、その結果を表５に示す。美白効果は、試料塗布部位と対照群部位とのΔＬ*の比較により判定した。
【００４３】
［数学式３］
ΔＬ*＝測定時点におけるＬ*値−測定初期の黒化誘発後のＬ*値
【００４４】
【表５】
2013530218.tif 000006
【００４５】
前記表５の結果から明らかなように、本発明に係る皮膚美白用の化粧料は、高い美白効果を示す。
【００４６】
一方、本発明の剤形例を含有する皮膚美白用の化粧料の剤形は任意に選択することができ、従来の化粧料剤形である栄養クリーム、栄養ローション、マッサージクリーム、栄養エッセンス、柔軟化粧水など種々の剤形に製造することができる。
【００４７】
また、各剤形の化粧料において、前記コウゾ抽出物以外の他の成分をその他の化粧料の剤形または使用目的などに応じて当業者が簡単に適宜に選定して配合することができる。
【００４８】
［剤形例１０］柔軟化粧水（スキンローション）
下記の表６に記載の組成に従い、通常の方法により剤形例１０の柔軟化粧水を製造した（単位：重量％）。
【００４９】
【表６】
2013530218.tif 000007
【００５０】
［剤形例１１］栄養クリーム
下記の表７に記載の組成に従い、通常の方法により剤形例１１の栄養クリームを製造した（単位：重量％）。
【００５１】
【表７】
2013530218.tif 000008
【００５２】
［剤形例１２］マッサージクリーム
下記の表８に記載の組成に従い、通常の方法により剤形例１２のマッサージクリームを製造した（単位：重量％）。
【００５３】
【表８】
2013530218.tif 000009
【００５４】
［剤形例１３］パック
下記の表９に記載の組成に従い、通常の方法により剤形例１３のパックを製造した（単位：重量％）。
【００５５】
【表９】
2013530218.tif 000010
【００５６】
［剤形例１４］ゲル
下記の表１０に記載の組成に従い、通常の方法により剤形例１４のゲルを製造した（単位：重量％）。
【００５７】
【表１０】
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【国際調査報告】
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