(57)【要約】  本発明は多様な実験を通じて強力な抗炎症効果を表すホオズキ（Ｐｈｙｓａｌｉｓ  ａｌｋｅｋｅｎｇｉ  ｖａｒ．ｆｒａｎｃｈｅｔｉ（Ｍａｓｔｅｒｓ）Ｈｏｒｔ）抽出物を含有する組成物に関し、本発明によって、炎症性疾患の治療及び予防のために効果的で、且つ安全な治療剤または保健機能食品として用いることができる。すなわち、本発明は、有効成分としてホオズキ抽出物を薬理学的に許容される担体とともに含有する炎症性疾患の予防または治療用薬理学的組成物に関する。【特許請求の範囲】
【請求項１】
有効成分としてホオズキ抽出物を薬理学的に許容される担体とともに含有する炎症性疾患の予防または治療用薬理学的組成物。
【請求項２】
前記抽出物は植物性物質を水、メタノール、エタノールなどの低級アルコールまたはこれらの混合溶媒で抽出させて製造した請求項１に記載の薬理学的組成物。
【請求項３】
前記ホオズキ抽出物がホオズキの果実、根、葉または全体である請求項１に記載の薬理学的組成物。
【請求項４】
前記炎症性疾患が、炎症性高熱、扁桃炎、胃炎、大腸炎、関節炎、腎臓炎、肝炎、結膜炎、アトピー性皮膚炎、鼻炎、高血圧、糖尿病、癌、喘息、尿道炎、膀胱炎、アテローム性動脈硬化、アレルギー疾患、鼻炎、喘息、急性疼痛疾患、慢性疼痛疾患、歯周炎、歯肉炎、炎症性腸疾患、通風、心筋梗塞、うっ血性心不全、狭心症、胃潰瘍、虚血性発作、敗血症、やけどまたは膵臓炎から選択される請求項１に記載の薬理学的組成物。
【請求項５】
人間または哺乳動物の炎症性疾患を治療または予防するのに用いられる薬物を製造するためのホオズキ抽出物の用途。
【請求項６】
有効量のホオズキ抽出物をその薬理学的に許容される担体とともに人間または哺乳動物に投与する段階を含む前記人間または哺乳動物での炎症性疾患を治療する方法。
【請求項７】
有効成分として炎症性疾患を予防または治療するためのホオズキ抽出物を前記疾患を予防及び改善するのに有効な量で、食品学的に許容される添加剤とともに含有する保健機能食品。
【請求項８】
前記保健機能食品が粉剤、顆粒剤、錠剤、カプセル剤または飲料形態で提供される請求項７に記載の保健機能食品。
【請求項９】
ホオズキを乾燥、カッティングして、薄く切った後、１〜２０倍、好ましくは、約１〜１０倍容積の蒸溜水、Ｃ１〜Ｃ４低級アルコールまたはこれらの混合溶媒を添加して、１０℃〜８０℃範囲の温度で、６〜７２時間１次抽出を行う第１段階と；
１０℃〜１００℃の範囲の温度で１〜２０時間熱水抽出、冷水抽出、還流抽出または超音波抽出を利用する抽出方法によって２次抽出を行う第２段階と；
濾過して、真空下で濃縮して乾燥させて前記ホオズキ抽出物を得る段階と；を含むホオズキ抽出物の製造方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明はホオズキ（Ｐｈｙｓａｌｉｓ  ａｌｋｅｋｅｎｇｉ  ｖａｒ．ｆｒａｎｃｈｅｔｉ（Ｍａｓｔｅｒｓ）Ｈｏｒｔ）の抽出物を有効成分として含有する炎症性疾患の予防及び治療用組成物に関する。
【背景技術】
【０００２】
炎症は組織傷害または細菌、真菌、ウイルスのような多様な汚染物質による汚染原因になる多様な刺激に対する生体の障壁反応であり、これは損傷を損傷された部位または傷ついた部位に制限するために初期保護役割を果たす。大体、これら炎症性反応は、先天性免疫因子を用いて病因的要素を除去し、特異的後天性免疫などを誘導する（Ｈａｗｉｇｅｒ  Ｊ．，Ｉｎｎａｔｅ  Ｉｍｍｕｎｉｔｙ  ａｎｄ  ｉｎｆｌａｍｍａｔｉｏｎ：Ａ  Ｔｒａｎｓｃｒｉｐｔｉｏｎａｌ  Ｐａｒａｄｉｇｍ、Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｉｃ  Ｒｅｓｅａｒｃｈ、２３、ｐｐ．９９−１０９、２００１）。
【０００３】
炎症性反応は炎症部位で炎症性メディエータ（ｉｎｆｌａｍｍａｔｏｒｙ  ｍｅｄｉａｔｏｒ）、サイトカインなどの作用によって原因となるフォーカス血流（ｆｏｃａｌ  ｂｌｏｏｄ  ｆｌｏｗ）の増加及び血液速度の減少；増加された血液透過性による血漿成分の増加された流出、循環免疫細胞に血液内皮細胞の増加された接着能力による免疫細胞の増加された流出、及び化学走性などによって原因となる感染部位に増加された移動のような連続的な免疫反応が発生されるようにする発赤、腫瘍、熱、疼痛などと関連されている（Ｇａｌｌｏ  ＲＬ  ｅｔ  ａｌ．，Ｂｉｏｌｏｇｙ  ａｎｄ  Ｃｌｉｎｉｃａｌ  Ｒｅｌｅｖａｎｃｅ  ｏｆ  ｎａｔｕｒａｌｌｙ  ｏｃｃｕｒｒｉｎｇ  ａｎｔｉｍｉｃｒｏｂｉａｌ  ｐｅｐｔｉｄｅｓ、Ｊ．Ａｌｌｅｒｇｙ  Ｃｌｉｎ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．，１１０、ｐｐ．８２３−８３１、２００２；Ｇｒａｅｍｅ  Ｂ  ｅｔ  ａｌ．，Ａｃｕｔｅ  Ｉｎｆｌａｍｍａｔｉｏｎ、Ａｍｅｒｉｃａｎ  Ｊｏｕｒｎａｌ  ｏｆ  Ｐａｔｈｏｌｏｇｙ、８６（１）、ｐｐ．１８５−２７４、１９７７）。
【０００４】
感染部位で炎症性反応は、ＲＯＳ（活性酸素種）、ＲＮＳ（活性窒素種）、プロスタグランジン、ロイコトリエンなどのような外側（ｏｕｔｅｒ）細菌及び炎症性メディエータに対するマクロファージ反応を始めるだけでなく、ＴＮＦ−α、ＩＬ−６、ＩＬ−１βなどのような炎症誘発サトカインが炎症性反応に関与すると報告されている（Ｒｅｎａｕｌｄ  ＪＣ、Ｎｅｗ  Ｉｎｓｉｇｈｔｓ  ｉｎｔｏ  ｔｈｅ  ｒｏｌｅ  ｏｆ  ｃｙｔｏｋｉｎｅｓ  ｉｎ  ａｓｔｈｍａ、Ｊ．Ｃｌｉｎ．Ｐａｔｈｏｌ．，５４、ｐｐ．５７７−５８９、２００１；  Ｂｌａｋｅ  ＧＪ  ｅｔ  ａｌ．，Ｔｕｍｏｒ  ｎｅｃｒｏｓｉｓ  ｆａｃｔｏｒ−α、ｉｎｆｌａｍｍａｔｏｒｙ  ｂｉｏｍａｒｋｅｒｓ  ａｎｄ  ａｔｈｅｒｏｇｅｎｅｓｉｓ、Ｅｕｒ．Ｈｅａｒｔ  Ｊ．，２３、ｐｐ．３４５−３４７、２００２）。ＮＦ−κＢの活性化、炎症性メディエータの遺伝子表現（ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ）を誘導する転写因子はマクロファージの炎症関連反応で重要な役割を果たす。マクロファージ細胞でｉＮＯＳ（誘導型一酸化窒素合成酵素）、シクロオキシゲナーゼ（ＣＯＸ−２）、ＴＮＦ−α、ＩＬ−６、ＩＬ−１βなどのような炎症に関する遺伝子はＮＦ−κＢに転写される。
【０００５】
ＮＯ（一酸化窒素）、即ち、短い半減期を有するフリーラジカルはＮＯＳ（一酸化窒素合成酵素）の触媒作用によってＬ−アルギニンのＬ−シトルリンへの酸化反応中に生成されると報告された。これは生体内で多様な免疫関連機能を表す（Ｍｏｎｃａｄａ  Ｓ．ｅｔ  ａｌ．，Ｎｉｔｒｉｃ  ｏｘｉｄｅ：  Ｐｈｙｓｉｏｌｏｇｙ、Ｐａｔｈｏｌｏｇｙ  ａｎｄ  Ｐｈａｍａｒｃｏｌｏｇｙ．Ｐｈａｒｍａｃｏｌ．Ｒｅｖ．，４３、ｐｐ．１０９−１４２、１９９１）。しかし、ＮＯの過剰生産は宿主細胞及び組織の損傷に原因となる細胞毒性を表す場合もあり、また、アテローム性動脈硬化、発癌などのような多様な病理学的症侯群に含まれる場合がある（Ｍｏｒｄａｎ  ＬＪ、ｅｔ  ａｌ．，Ｉｎｈｉｂｉｔｏｒｓ  ｏｆ  ｅｎｄｏｇｅｎｅｏｕｓ  ｎｉｔｒｏｇｅｎ  ｏｘｉｄｅ  ｆｏｒｍａｔｉｏｎ  ｂｌｏｃｋ  ｔｈｅ  ｐｒｏｍｏｔｉｏｎ  ｏｆ  ｎｅｏｐｌａｓｔｉｃ  ｔｒａｎｓｆｏｒｍａｔｉｏｎ  ｉｎ  Ｃ３Ｈ１０Ｔ１／２  ｆｉｂｒｏｂｌａｓｔｓ、Ｃａｒｃｉｎｏｇｅｎｅｓｉｓ、１４、ｐｐ．１５５５−１５５９、１９９３；  Ｌｉｒｋ  Ｐ．ｅｔ  ａｌ．，Ｉｎｄｕｃｉｂｌｅ  ｎｉｔｒｉｃ  ｏｘｉｄｅ  ｓｙｎｔｈａｓｅ、Ｔｉｍｅ  ｆｏｒ  ｒｅａｐｐｒａｉｓａｌ、Ｃｕｒｒｅｎｔ．Ｄｒｕｇ．Ｔａｒｇｅｔｓ．Ｉｎｆｌａｍｍ．Ａｌｌｅｒｇｙ、１、ｐｐ．８９−１０８、２００２）。ここには、ＮＯ再生産を触媒する３種類のＮＯＳが存在し、また、ｎＮＯＳ（ニューロンＮＯＳ、ＮＯＳ１１）及びｅＮＯＳ（内皮型ＮＯＳ、ＮＯＳ３）は常に本質的に表現する一方、ｉＮＯＳは、ただ転写因子、ＬＰＳ（リポ多糖）によって活性化されたＮＦ−κＢ、細菌内毒素によって転写される。
【０００６】
転写因子、ＩκＢと結合するＮＦ−κＢ、その抑制剤はマクロファージ内に不活性型で存在し、一方、ＮＦ−κＢは細菌ＬＰＳが細胞の表面上にＴｏｌｌ様受容体（Ｔｏｌｌ−ｌｉｋｅ  ｒｅｃｅｐｔｏｒ）に結合する場合、誘導された信号伝達経路の作用によってＩκＢのリン酸化を通じて活性化され、これは生体沈澱の溶解プロセスの作用によるＩκＢの放出及び除去をもたらす。その結果、ＮＦ−κＢは炎症関連遺伝子の転写を誘導するために核に移動され、またＮＦ−κＢ活性化は、Ａｋｔ信号伝達経路（Ｈａｔｔｏｒｉ  Ｙ．ｅｔ  ａｌ、ｌｉｐｏｐｏｌｙｓａｃｃｈａｒｉｄｅ  ａｃｔｉｖａｔｅ  Ａｋｔ  ｉｎ  ｖａｓｃｕｌａｒ  ｓｍｏｏｔｈ  ｍｕｓｃｌｅ  ｃｅｌｌｓ  ｒｅｓｕｌｔｉｎｇ  ｉｎ  ｉｎｄｕｃｔｉｏｎ  ｏｆ  ｉｎｄｕｃｉｂｌｅ  ｎｉｔｒｉｃ  ｏｘｉｄｅ  ｓｙｎｔｈａｓｅ  ｔｈｒｏｕｇｈ  ｎｕｃｌｅａｒ  ｆａｃｔｏｒ−ｋａｐｐａ  Ｂ  ａｃｔｉｖａｔｉｏｎ、Ｅｕｒ．Ｊ．Ｐｈａｒｍａｃｏｌ．，４８１、ｐｐ．１５３−１５８、２００３）は勿論、ＥＲＫ、ｃ−ｊｕｎ及びｐ３８−ＭＡＰＫの信号伝達経路（Ｋｉｍ  ＳＨ、ｅｔ  ａｌ．，Ｓｅｌｅｎｉｕｍ  ａｔｔｅｎｕａｔｅｓ  ｌｉｐｏｐｏｌｙｓａｃｃｈａｒｉｄｅ−ｉｎｄｕｃｅｄ  ｏｘｉｄａｔｉｖｅ  ｓｔｒｅｓｓ  ｒｅｓｐｏｎｓｅｓ  ｔｈｒｏｕｇｈ  ｍｏｄｕｌａｔｉｏｎ  ｏｆ  ｐ３８  ＭＡＰＫ  ａｎｄ  ＮＦ−κＢ  ｓｉｇｎａｌｉｎｇ  ｐａｔｈｗａｙｓ、Ｅｘｐ．Ｂｉｏｌ．Ｍｅｄｉｃｉｎｅ、ｐｐ５６５−７０１、２００４；  Ｒｏｂｉｎｓｏｎ  ＭＪ  ｅｔ  ａｌ、ｍｉｔｏｇｅｎ−ａｃｔｉｖａｔｅｄ  ｐｒｏｔｅｉｎ  ｋｉｎａｓｅ  ｐａｔｈｗａｙｓ、Ｃｕｒ．Ｏｐｉ．Ｃｅｌｌ  Ｂｉｏｌ．，９、ｐｐ．１８０−１８６、１９９７）に関するものと報告されている。
【０００７】
炎症反応に関して、ｉＮＯＳ転写段階において遺伝子表現の調節は、主にＮＯの持続期間及び再生産レベルを決めるのに重要である。従って、ｉＮＯＳ表現及びｉＮＯＳの酵素活性の調節メカニズムは慢性炎症性疾患を改善または治療するための新規抗炎症剤を研究するためのメインターゲットとして用いられて来た。
【０００８】
ホオズキ（Ｐｈｙｓａｌｉｓ  ａｌｋｅｋｅｎｇｉ  ｖａｒ．ｆｒａｎｃｈｅｔｉ（Ｍａｓｔｅｒｓ）Ｈｏｒｔ）の果実は韓国の各地で栽培される多年生草本で、フィサリンＡ、Ｂ、Ｃ（ｐｈｙｓａｌｉｎ  Ａ、Ｂ、Ｃ）、サポニン（ｓａｐｏｎｉｎ）、フラボノイド（ｆｌａｖｏｎｏｉｄ）、アルカロイド（ａｌｋａｌｏｉｄ）、カロチノイド（ｃａｒｏｔｅｎｏｉｄ）、樹脂、ペクチン、タンニン、ケルセチン（ｑｕｅｒｃｅｔｉｎ）、コーヒー酸、けい皮酸、フェルラ酸、アリザリン、ルベリトリン酸（ｒｕｂｉｅｒｙｔｈｒｉｃ  ａｃｉｄ）、プルプリン（ｐｕｒｐｕｒｉｎ）、キサントプルプリン酸（ｘａｎｔｈｏｐｕｒｐｕｒｉｎ）、ムンジスチン（ｍｕｎｊｉｓｔｉｎ）、シュードプルプリン（ｐｓｅｕｄｏｐｕｒｐｕｒｉｎ）などが含有されていると報告された。
【０００９】
しかし、本明細書で参考として引用されている上記引用文献のどこにもホオズキ抽出物の抗炎症作用に対しては報告または記述されなかった。
【００１０】
従って、本発明者は多様な実験を通じてホオズキ抽出物が強力な抗炎症効果、即ち、ＮＯ再生産及びＬＰＳ処理によって誘導されるＮＯＳ、ＣＯＸ−２、ＴＮＦ−α、ＩＬ−６及びＩＬ−１βのような炎症誘発サイトカインの再生産に対する抑制効果は勿論、ＲＡＷ２６４．７細胞株を用いてｐ−ＩκＢα、ｉＮＯＳ及びＣＯＸ−２タンパク質の減少効果を表し、従って、これは関節炎疾患の治療及び予防のための効果的で安全な治療剤または健康食品として用いることができることが確認された。
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【００１１】
本発明の一態様によれば、本発明はホオズキ抽出物を含有する炎症性疾患の予防及び治療用組成物を提供する。
【課題を解決するための手段】
【００１２】
従って、本発明の目的は、有効成分として、ホオズキ抽出物を薬理学的に許容される担体とともに含有する炎症性疾患の予防または治療用薬理学的組成物を提供することにある。
【００１３】
本発明のまた他の目的は、人間または哺乳動物の炎症性疾患を治療または予防するのに用いられる薬物を製造するためのホオズキ抽出物の用途を提供することにある。
【００１４】
本発明の他の目的は、有効量のホオズキ抽出物をその薬理学的に許容される担体とともに人間または哺乳動物に投与することを含む上記人間または哺乳動物における炎症性疾患を治療する方法を提供することにある。
【００１５】
本発明の一態様によれば、有効成分として炎症性疾患を予防または治療するためのホオズキ抽出物を上記疾患を予防及び改善するのに有効な量で、食品学的に許容される添加剤と一緒に含有する保健機能食品を提供する。
【００１６】
本明細書で用いられる用語「抽出物」は植物性物質を水、メタノール、エタノールなどの低級アルコールまたはこれらの混合溶媒、好ましくは水で抽出させて製造した抽出物を含む。
【００１７】
本明細書で用いられる用語「ホオズキ抽出物」（Ｐｈｙｓａｌｉｓ  ａｌｋｅｋｅｎｇｉ  ｖａｒ．ｆｒａｎｃｈｅｔｉ  Ｈｏｒｔ）は、ホオズキの果実、根、葉及び全体、好ましくはホオズキの果実を含む。
【００１８】
本明細書で用いられる用語「炎症性疾患の治療及び予防」はＮＯ再生産及びｉＮＯＳ、ＣＯＸ−２、ＴＮＦ−α、ＩＬ−６及びＩＬ−１βなどの炎症誘発サイトカインの再生産を抑制するとともに、ｐ−ＩκＢα、ｉＮＯＳ及びＣＯＸ−２タンパク質の遺伝子表現を減少させる方式で行う。
【００１９】
本明細書で用いられる用語「炎症性疾患」は炎症性高熱、扁桃炎、胃炎、大腸炎、関節炎、腎臓炎、肝炎、結膜炎、アトピー性皮膚炎、鼻炎、高血圧、糖尿病、癌、喘息、尿道炎、膀胱炎、アテローム性動脈硬化、アレルギー疾患、鼻炎、喘息、急性疼痛疾患、慢性疼痛疾患、歯周炎、歯肉炎、炎症性腸疾患、通風、心筋梗塞、うっ血性心不全、狭心症、胃潰瘍、虚血性発作、敗血症、やけどまたは膵臓炎、好ましくは、炎症性高熱、扁桃炎、胃炎、大腸炎、関節炎、腎炎、肝炎、結膜炎、アトピー性皮膚炎、さらに好ましくは、炎症性高熱または扁桃炎を含み、これはＮＯの過剰生産及びｉＮＯＳ、ＣＯＸ−２、ＴＮＦ−α、ＩＬ−６及びＩＬ−１βのような炎症誘発サイトカインの過剰生産によって発生される。
【００２０】
意図する疾患を治療するための薬理学的組成物は、組成物の総量に対して０．０１〜９５重量％、好ましくは０．５〜５０重量％の本発明の抽出物または化合物を含有することができる。
【００２１】
以下、本発明を詳しく説明する。
【００２２】
本発明のホオズキ抽出物は以下のような過程によって製造することができる。
【００２３】
例えば、ホオズキの果実を乾燥して薄く切った後、１〜２０倍、好ましくは約１〜１０倍容積の蒸溜水、Ｃ１〜Ｃ４低級アルコールまたはこれらの混合溶媒、好ましくは蒸溜水を添加して１０℃〜８０℃の範囲の温度、好ましくは室温で６〜７２時間、好ましくは１２〜３６時間１次抽出を行い、得られた溶液は１０℃〜１００℃、好ましくは５０℃〜９０℃の範囲の温度で１〜２０時間、好ましくは５〜１５時間熱水抽出、冷水抽出、還流抽出または超音波抽出、好ましくは熱水抽出を利用する抽出方法によって２次抽出を行い、続いて、上記抽出物を濾過収集して、減圧下で濃縮して乾燥させて、本発明の抽出物を得る。
【００２４】
さらに、本発明の目的はホオズキ抽出物を製造する方法を提供することであって、ホオズキを乾燥して、薄く切った後、１〜２０倍、好ましくは約１〜１０倍容積の蒸溜水、Ｃ１〜Ｃ４低級アルコールまたはこれらの混合溶媒、好ましくは蒸溜水を添加して１０℃〜８０℃の範囲の温度、好ましくは室温で６〜７２時間、好ましくは１２〜３６時間１次抽出を行う第１段階と；１０℃〜１００℃、好ましくは５０℃〜９０℃の範囲の温度で１〜２０時間、好ましくは  ５〜１５時間熱水抽出、冷水抽出、還流抽出または超音波抽出、好ましくは熱水抽出を利用する抽出方法によって２次抽出を行う第２段階と；濾過して、真空下で濃縮して乾燥させて、本発明のホオズキ抽出物を得る段階とを含むホオズキ抽出物の製造方法を提供する。
【００２５】
また、上述した過程は本発明が属する技術分野で既知の過程、例えば文献（Ｈａｒｂｏｒｎｅ  Ｊ．Ｂ．Ｐｈｙｔｏｃｈｅｍｉｃａｌ  ｍｅｔｈｏｄｓ：Ａ  ｇｕｉｄｅ  ｔｏ  ｍｏｄｅｒｎ  ｔｅｃｈｎｉｑｕｅｓ  ｏｆ  ｐｌａｎｔ  ａｎａｌｙｓｉｓ，３ｒｄＥｄ．ｐｐ．６−７，１９９８）に記述された過程によってさらに強力な分画または化合物を分画したり分離するための追加段階に変形したり処理することができる。
【００２６】
従って、本発明は炎症性疾患の治療または予防用有効成分として、上述した方法によって製造されたホオズキ抽出物を薬理学的に許容される担体とともに含有する薬理学的組成物を提供する。
【００２７】
本発明は人間または哺乳動物で炎症性疾患を予防及び治療するための治療剤を製造するために上述した方法によって製造されたホオズキ抽出物の用途を提供する。
【００２８】
本発明の目的は人間または哺乳動物の炎症性疾患を治療または予防する方法を提供することであって、ここで上記方法が有効成分として上述した方法によって製造された治療学的に有効量のホオズキ抽出物をその薬理学的に許容される担体と一緒に投与することを含む方法を提供する。
【００２９】
上述した方法によって製造された本発明のホオズキ抽出物は、多様な実験を通じて強力な抗炎症効果、即ちＬＰＳ処理によって誘導されるＮＯ再生産及びｉＮＯＳ、ＣＯＸ−２、ＴＮＦ−α、ＩＬ−６及びＩＬ−１β等の炎症誘発サイトカインの再生産に対する抑制効果は勿論、ＲＡＷ２６４．６細胞株を用いてＱｒａｐ−ＩκＢα、ｉＮＯＳ及びＣＯＸ−２タンパク質の遺伝子表現に対する減少効果を表わすことが確認された。
【００３０】
炎症性疾患を治療及び予防するための本発明の組成物は、組成物の総量に対して０．１〜５０重量％の上述したホオズキ抽出物を含有することができる。
【００３１】
本発明の組成物は本発明が属する技術分野で既知の方法によって通常の担体、補助剤または希釈剤をさらに含むことができる。上記担体は用法及び適用方法によって適切な物質として用いることが好ましいが、これに制限されるのではない。適切な希釈剤はレミントンの製薬科学（Ｍａｃｋ  Ｐｕｂｌｉｓｈｉｎｇ  Ｃｏ．，ＥａｓｔｏｎＰＡ）の教材に記載されている。
【００３２】
以下、以下の剤形方法及び賦形剤は例示に過ぎず、本発明を制限するのではない。
【００３３】
本発明による組成物は、薬理学的に許容される担体、補助剤または希釈剤、例えばラクトース、デキストロース、スクロース、ソルビトール、マンニトール、キシリトール、エリトリトール、マルチトール、澱粉、アカシアゴム、アルギン酸塩、ゼラチン、リン酸カルシウム、ケイ酸カルシウム、セルロース、メチルセルロース、ポリビニルピロリドン、水、メチルヒドロキシ安息香酸、プロピルヒドロキシ安息香酸、タルク、ステアリン酸マグネシウム及び鉱油を含む薬理学的組成物で提供されることができる。本剤形は充填剤、抗凝集剤（ａｎｔｉ−ａｇｇｌｕｔｉｎａｔｉｎｇ  ａｇｅｎｔ）、潤滑剤、湿潤剤、香味剤、乳化剤、保存剤などをさらに含むことができる。本発明の組成物は、本発明が属する技術分野で周知のものの中の何れかを用いて上記組成物を患者に投与した後、活性成分の迅速、持続または遅延放出を提供するように剤形化されることができる。
【００３４】
例えば、本発明の組成物は、注射液を製造するために通常用いられるオイル、プロピレングリコールまたは他の溶媒の中で溶解されることができる。担体の適切な例は、生理食塩水、ポリエチレングリコール、エタノール、植物性油、イソプロピルミリステートなどを挙げることができるが、これらに制限されない。部分的に投与する場合、本発明のホオズキ抽出物は軟膏及びクリーム形態に剤形化されることができる。
【００３５】
本組成物を含有する薬理学的製剤は、何れの剤形、例えば経口投与剤形（粉剤、錠剤、カプセル剤、軟質カプセル剤、水性薬物、シロップ、エリクシール剤、丸薬、粉剤、香嚢、顆粒）または局所剤形（クリーム、軟膏、ローション、ゲル、香油、パッチ、ペースト（ｐａｓｔｅ）、散布（ｓｐｒａｙ）液、エアロゾルなど）または注射用製剤（溶液、懸濁剤、エマルション）で製造することができる。
【００３６】
薬理学的投与剤形で本発明の組成物は、これらの薬理学的に許容される塩の形態で用いることができ、単独または適切な組み合わせで用いることができるだけではなく、他の薬理学的に許容される担体と組み合わされて用いる。
【００３７】
本発明の抽出物または組成物の好ましい投与量は、対象体の症状及び体重、重症度、薬物剤形、投与経路及び投与期間に応じて異なり、また、当該技術分野における技術者によって選択することができる。しかし、好ましい効果を得るため、概して本発明の抽出物は０．１〜１０００ｍｇ／ｋｇ／日、好ましくは、１〜１００ｍｇ／ｋｇ／日の範囲の量で投与することが好ましい。本投与量は一日一回投与することも可能であり、一日数回分けて投与することも可能である。本組成物において、本抽出物の量は組成物の総量に対して、０．０１〜５０重量％、好ましくは０．５〜４０重量％含まれる必要がある。
【００３８】
本発明の薬理学的組成物は、哺乳動物（ラット、マウス、家畜または人間）などの対象動物に多様な経路を通じて投与することができる。投与の全ての方式が予想可能であるが、例えば経口、直腸、静脈内、筋肉内、皮下、皮内、くも膜腔内、硬膜外または脳室内注射で投与することができる。
【００３９】
従って、本発明の目的は、有効成分としてホオズキ抽出物を含有する炎症性疾患の改善及び予防用保健機能食品を提供することにある。
【００４０】
本明細書で定義された用語「保健機能食品」は「人間または哺乳動物で目的たる疾患を予防または改善するための通常の食品に本発明の抽出物を添加することによって物理的機能性または生理的機能性のような改善された機能性を有する機能食品」である。
【００４１】
本発明の他の目的は、目的たる疾患の予防及び軽減用食品学的に許容される添加剤と一緒にホオズキ抽出物を含有する健康管理食品を提供することにある。
【００４２】
本明細書で定義される用語「健康管理食品」（ｈｅａｌｔｈ  ｃａｒｅ  ｆｏｏｄ）は、「添加剤として少量で、カプセル剤、丸薬、錠剤などの形態では、全量で特有の目的効果は表わさないが、一般的な目的効果を発揮する本発明の抽出物を含有する食品である。
【００４３】
本明細書で定義される用語「食品学的に許容される添加剤」は「直接的または間接的に一成分となるまたは影響を及ぼすあるいは及ぼすと合理的に予想される物質、例えば当該技術分野で既知の増粘剤、熟成剤、漂白剤、捕捉剤、保湿剤、固化防止剤、清澄剤、硬化剤、乳化剤、安定化剤、シックナー（ｔｈｉｃｋｎｅｒ）、塩基及び酸、起泡剤、栄養剤、着色剤、風味剤、甘味料、防腐剤、酸化防止剤などである。
【００４４】
特定物質が上記食品に特殊用途の食品に添加される場合には、直接添加剤と言い、また間接食品添加剤はその包装、保存または他の取り扱いのために微量で食品の一部になる。
【００４５】
上述した健康食品は食品、健康飲料、食事療法などに含まれてもよく、また目的たる疾患を予防または改善するための粉剤、顆粒、錠剤、噛むタイプの錠剤、カプセル、飲料などの形態で用いてもよい。
【００４６】
また、本発明の抽出物は目的たる疾患の予防及び改善用食品または飲料に添加することができる。保健機能食品または健康管理食品として食品または飲料における本発明の抽出物の量は、一般的に保健機能食品組成物の総重量の約０．０１〜１００重量％の範囲であってもよい。特に、保健機能食品、健康管理食品または特殊栄養食品における本発明の抽出物の好ましい量は、各食品の意図する目的によって異なってもよいが、食品組成物の１００％割合に対して麺類のような食品で約０．０１〜５％の範囲、健康管理食品で４０〜１００％の範囲の量で本発明の抽出物を添加剤として用いることが一般的に好ましい。
【００４７】
本発明の健康飲料組成物が必須成分として本発明の抽出物を上記指定割合で含有する場合には、他の液体成分に対して特に制限はなく、ここで、上記他の成分は多様な防臭剤（ｄｅｏｄｏｒａｎｔ）または天然炭水化物など、例えば通常の飲料であってもよい。上述した天然炭水化物の例としては、グルコース、フルクトースなどの単糖類；マルトース、スクロースなどの二糖類；デキストリン、シクロデキストリンなどの通常の糖；及びキシリトール、エリトリトールなどの糖アルコールがある。上述した以外の他の防臭剤として、タウマチンなどの天然防臭剤、レバウジオサイド（ｌｅｖａｕｄｉｏｓｉｄｅ）Ａ、グリチルリチン（ｇｌｙｃｙｒｒｈｉｚｉｎ）などのステビア抽出物（ｓｔｅｖｉａ  ｅｘｔｒａｃｔ）、及びサッカリン、アスパルテームなどの合成防臭剤が有利に用いられることができる。上述した天然炭水化物の量は、一般的に本飲料組成物の１００ｍｌの割合で約１〜２０ｇ、好ましくは５〜１２ｇの範囲である。
【００４８】
上述した組成物の以外に他の成分は多様な栄養素、ビタミン、ミネラルまたは電解質、合成香味剤、着色剤、及びチーズ、チョコレートなどの場合に、改良剤、ペクチン酸及びその塩、アルギン酸及びその塩、有機酸、保護コロイド接着剤、ｐＨ調節剤、安定剤、保存剤、グリセリン、アルコール、炭酸飲料などに用いられる炭化剤（ｃａｒｂｏｎｉｚｉｎｇ  ａｇｅｎｔ）を含む。上述した以外の他の成分は、天然果汁、果汁飲料及び植物性飲料を製造するための果汁であることができ、ここで、上記成分は独立的または組み合わせて用いることができる。上記成分の割合はそれほど重要ではないが、一般的に、本組成物１００重量％当たり約０〜２０重量％の範囲である。ここで、上述した抽出物を含有する添加可能な食品の例は、多様な食品、飲料、ガム、複合ビタミン、健康増進食品などを含む。
【００４９】
本発明の精神または範囲を逸脱しない範囲内で、本発明の組成物、用途及び製剤に対して多様に改質及び変化することができることは当該技術分野における技術者にとって明白である。
【００５０】
以下の実施例によって本発明をより具体的に説明するが、本発明がこれらの実施例によって制限されるものに理解してはならない。
【発明の効果】
【００５１】
本発明のホオズキ抽出物は多様な実験を通じて強力な抗炎症効果、即ちＬＰＳ処理によって誘導されるＮＯ再生産及びｉＮＯＳ、ＣＯＸ−２、ＴＮＦ−α、ＩＬ−６及びＩＬ−１βなどの炎症誘発サイトカインの再生産に対する抑制効果は勿論、ＲＡＷ２６４．６細胞株を用いてＱｒａｐ−ＩκＢα、ｉＮＯＳ及びＣＯＸ−２タンパク質の遺伝子表現に対する減少効果を表わし、従って、これは炎症性疾患の治療及び予防のために効果的で安全な治療剤または保健機能食品として用いることができる。
【００５２】
以下の図面及び実施例を参照して本発明について具体的に説明するが、本発明はこれらの実施例に制限されるものと理解してはならない。
【図面の簡単な説明】
【００５３】
【図１】ホオズキ抽出物の細胞毒性を示す。
【図２】ＬＰＳを利用した炎症性反応でＩＬ−１β遺伝子表現に対する抑制効果を示す。
【図３】ＬＰＳを利用した炎症性反応でＴＮＦ−α遺伝子表現に対する抑制効果を示す。
【図４】ｉＮＯＳのｍＲＮＡレベルのＲＴ−ＰＣＲ分析を示す。
【図５】ＣＯＸ−２のｍＲＮＡレベルのＲＴ−ＰＣＲ分析を示す。
【図６】ＬＰＳ−誘導されたコルチコステロンに対する本発明の抽出物の抑制効果を示す。
【発明を実施するための形態】
【００５４】
本発明の上記及び他の目的、特徴及び他の利点は添付された図面を通じて以下の詳細な説明からより明確に理解される。
【００５５】
本発明の精神または範囲を逸脱しないで、本発明の組成物、用途及び製剤に対して多様に改質及び変化することができることは当該技術分野における技術者にとって明白である。
【００５６】
以下の実施例によって本発明をさらに具体的に説明するが、本発明がこれらの実施例によって制限されるものと理解してはならない。
【００５７】
＜発明の態様＞
以下の参考例、実施例及び実験例は本発明をさらに例示的に説明するためのものであり、本発明の内容がこれによって限定されるのではない。
【００５８】
実施例１．ホオズキ抽出物の製造
韓国細胞株銀行（ｈｔｔｐ：／／ｃｅｌｌｂａｎｋ．ｓｎｕ．ａｃ．ｋｒ／）で分譲されホオズキの乾燥果実２８０ｇを薄く切って室温で２．８Ｌの水に２４時間浸け、得られた溶液は９０℃で撹拌しながら２時間熱水抽出させた。残留物を濾過して抽出過程を４回繰り返した。濾過物を収集して、真空下で濃縮して凍結乾燥させて、ホオズキの水溶性抽出物２３ｇ（収率８．２％、以下「ＰＡ」と言う）を得た。
【００５９】
参考例１．実験材料の準備
ＲＰＭＩ−１６４０培地、ＤＭＥＭ（ダルベッコ改変イーグル培地）、１０％（ｖ／ｖ）牛胎児血清（ＦＢＳ）、ペニシリン（ｐｅｎｉｃｉｌｌｉｎ）、ストレプトマイシン（ｓｔｒｅｐｔｏｍｙｃｉｎｅ）などは市販会社（Ｗｅｌｇｅｎｅ  Ｃｏ．，Ｌｔｄ．，ＬＳ２０２−０２、Ｓ−００１−０４、ＬＭ００１−０１、韓国）で購入し、試薬ＥｚｃｙｔｏｘはＤａｅｉｌ  ｌａｂ社（ｅｚ３０００、韓国）で購入し、ロータリー・エバポレーター（Ｒｏｔａｒｙ  ｅｖａｐｏｒａｔｏｒ）はＢＵＣＨＩ社（Ｒ−１２４、ドイツ）で購入し、凍結乾燥器はＩｉｓｈｉｎ社（ＦＤＵ−２２００、韓国）で購入し、ＴＲＩｚｏｌＴＭ  はＧＩＢＣＯ  ＢＲＬ社（ＭＤ、米国）で、ＥＬＩＳＡリーダーはＡｎｔｈｏｓ（Ｍｕｌｔｉｒｅａｄ  ４００、オーストリア）で、分光光度計（Ｓｐｅｃｔｒｏｐｈｏｔｏｍｅｔｅｒ）は、ＧＥヘルスケアライフサイエンス株式会社（ＧＥ  ｈｅａｌｔｈｃａｒｅ  Ｌｉｆｅ  ｓｃｉｅｎｃｅｓ）（Ｕｌｔｒａｓｐｅｃ  ２１００  ｐｒｏ、スウェーデン）で、逆転写酵素（Ｐｒｉｍｅａｃｒｉｐｔ  Ｒｔａｓｅ）はタカラ（ＴａＫａＲａ）社（滋賀、日本）で、ＰＴＣ−１００プログラマブルサーマルコントローラー（Ｐｒｏｇｒａｍｍａｂｌｅ  Ｔｈｅｒｍａｌ  ＣｏｎｔｒｏｌｌｅｒＴＭ）はＭＪ  Ｒｅｓｅａｒｃｈ  Ｗａｌｔｈａｍ社（ＭＡ、米国）で、イメージ分析ソフト（ＩｍａｇｅＭａｓｔｅｒ  ＴｏｔａｌＬａｂＴＭ）はＡｍｅｒｓｈａｍ  Ｂｉｏｓｃｅｉｎｃｅｓ社（Ｐｉｓｃａｔａｗａｙ、ＮＪ、米国）で購入した。
【００６０】
実験で用いられた全ての試薬は分析等級より高い等級であった。
【００６１】
参考例２．細胞培養
ラットマクロファージ細胞株（韓国細胞株銀行；ｈｔｔｐ：／／ｃｅｌｌｂａｎｋ．ｓｎｕ．ａｃ．ｋｒ）は加湿した（ｈｕｍｉｄｉｆｉｅｄ）５％ＣＯ２の培養器で、３７℃で、１０％ＦＢＳ（牛胎児血清）とストレプトマイシン（ｓｔｒｅｐｔｏｍｙｃｉｎ）１００μｇ／ｍｌが追加された高グルコースＤＭＥＭ培地（ダルベッコ改変イーグル培地）で培養した後実験に用いた。
【００６２】
実験例１．細胞毒性
上記実施例で得た抽出物の細胞毒性を測定するために、文献（Ｈｗａｎｇ  ＨＪ  ｅｔ  ａｌ．，Ｉｎｈｉｂｉｔｏｒｙ  Ｅｆｆｅｃｔ  ｏｆ  ａｍｙｇｄａｌｉｎ  ｏｎ  ｐｏｌｙｓａｃｃｈａｒｉｄｅ−ｉｎｄｕｃｉｂｌｅ  ＴＮＦ−ａｌｐｈａ  ａｎｄ  ＩＬ−１  ｂｅｔａ  ｍＲＮＡ  ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ  ａｎｄ  ｃａｒｒａｇｅｅｎａｎ−ｉｎｄｕｃｅｄ  ｒａｔ  ａｒｔｈｒｉｔｉｓ．Ｊ．Ｍｉｃｒｏｂｉｏｌ．Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌ．，１８（１０）、ｐｐ．１６４１−１６４７、２００８）に開示された方法によってＭＴＴ分析を行った。
【００６３】
ＲＡＷ２６４．７細胞は、細胞濃度を１０４細胞／ウェルに調節し、９６ウェルプレートに植え付けて２４時間培養した後、ＦＢＳが含まれない最小培地に４時間適応させた。実施例１で得た０．１ｍｇ／ｍｌ及び１ｍｇ／ｍｌの試験試料を添加し２４時間処理した。これに１μｇ／ｍｌのＬＰＳを添加して２４時間培養し、Ｅｚｃｙｔｏｘ試薬を各ウェル当たり１０μｌずつ添加してさらに１時間培養した。培養終了後、ＥＬＩＳＡリーダー（Ｖａｒｉｏｋａｎ、Ｔｈｅｒｍｏ  Ｅｌｅｔｒｏｎ）を用いて４５０ｎｍで吸光度を測定した。
【００６４】
その結果、試験試料で処理したグループは、図１に示すように、投与量依存方式で細胞生存率を顕著に増加された。
【００６５】
実験例２．炎症誘発サイトカインに対する効果
上記実施例で得た抽出物のＲＡＷ２６４．７細胞株を用いてＩＬ−１β、ＴＮＦ−α、ｉＮＯＳ及びＣＯＸ−２タンパク質等の多様なサイトカインの遺伝子表現に対する効果を確認するために、文献（Ｈｗａｎｇ  ＨＪ  ｅｔ  ａｌ．，Ｉｎｈｉｂｉｔｏｒｙ  Ｅｆｆｅｃｔ  ｏｆ  ａｍｙｇｄａｌｉｎ  ｏｎ  ｐｏｌｙｓａｃｃｈａｒｉｄｅ−ｉｎｄｕｃｉｂｌｅ  ＴＮＦ−ａｌｐｈａ  ａｎｄ  ＩＬ−１  ｂｅｔａ  ｍＲＮＡ  ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ  ａｎｄ  ｃａｒｒａｇｅｅｎａｎ−ｉｎｄｕｃｅｄ  ｒａｔ  ａｒｔｈｒｉｔｉｓ．Ｊ．Ｍｉｃｒｏｂｉｏｌ．Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌ．，１８（１０）：ｐｐ．１６４１−１６４７、２００８）に開示された方法によって下記のような分析を行った。
【００６６】
２−１．ＩＬ−１β  遺伝子表現効果
ＲＡＷ２６４．７細胞は、細胞濃度を５×１０６細胞／ウェルに調節し、９６ウェルプレートに植え付けて２４時間培養した後、ＦＢＳが含まれない最小培地に４時間適応させた。実施例１で得た０．１ｍｇ／ｍｌ及び１ｍｇ／ｍｌの試験試料を添加し２４時間処理した。これに１μｇ／ｍｌのＬＰＳを添加して２４時間培養して次の過程で用いた。
【００６７】
得られた細胞の総ＲＮＡはＴＲＩｚｏｌｅＴＭ（ＧＩＢＣＯ  ＢＲＬ、ＭＤ、米国）を用いて抽出し、分光光度計（Ｓｐｅｃｔｒｏｐｈｏｔｏｍｅｔｅｒ）で２６０ｎｍで定量した後、−８０℃で保管した。１μｇの総ＲＮＡを６５℃で１０分間変性させた後、逆転写酵素（Ｐｒｉｍｅａｃｒｉｐｔ  Ｒｔａｓｅ）０．２μｌ（タカラ、滋賀、日本）を用いて最終嵩が２０μｌである反応混合液で逆転写反応を行ってｃＤＮＡ混合物（ｍｉｘｔｕｒｅ）が得られた。ｃＤＮＡは１０×ＰＣＲバッファーと各プライマーと０．５Ｕ  Ｔａｑ  ポリメラーゼ（タカラ、滋賀、日本）を含む２０μｌの反応混合液でＰＴＣ−１００プログラマブルサーマルコントローラー（Ｐｒｏｇｒａｍｍａｂｌｅ  Ｔｈｅｒｍａｌ  ＣｏｎｔｒｏｌｌｅｒＴＭ）（ＭＪ  Ｒｅｓｅａｒｃｈ、Ｗａｌｔｔｈａｍ、ＭＡ、米国）を用いて増幅された。それぞれのプライマーはジェンバンク（Ｇｅｎｂａｎｋ）に記録された最適塩基配列を選択して製作し、ＰＣＲ反応は表１に示すように行った。増幅されたＤＮＡは１．２％アガロースゲルで電気泳動して確認した。ゲル上の帯（ｂａｎｄ）強度はイメージ分析ソフト（Ｉｍａｇｅ  Ｍａｓｔｅｒ  ＴｏｔａｌＬａｂＴＭ）（Ａｍｅｒｓｈａｍ  Ｂｉｏｓｃｅｉｎｃｅｓ、Ｐｉｓｃａｔａｗａｙ、ＮＪ）を利用して分析し、内部標準物質としてグリセルアルデヒド−３−リン酸デヒドロゲナーゼ（ＧＡＰＤＨ）を用いて遺伝子の定量的表現レベルを補正した。
【００６８】
【表１】
2013530159.tif 000002
【００６９】
その結果、ＬＰＳで処理されたＲＡＷ２６４．７細胞では、ＩＬ−１β遺伝子のｍＲＮＡ表現が増加されるが、ＬＰＳで処理された細胞及び試験試料では、ＩＬ−１β遺伝子のｍＲＮＡ表現が投与量依存方式で顕著に減少する（図２参照）。
【００７０】
２−２．ＴＮＦ−α遺伝子表現効果
上記実施例で得られた抽出物のＲＡＷ２６４．７細胞株を利用して、ＴＮＦ−α遺伝子表現に対する効果は、実験例２−１に記述された方法と類似する方法で実験した。
【００７１】
その結果、ＬＰＳで処理されたＲＡＷ２６４．７細胞では、ＴＮＦ−α遺伝子のｍＲＮＡ表現が増加されるが、ＬＰＳで処理された細胞及び試験試料では、ＴＮＦ−α遺伝子のｍＲＮＡ表現が投与量依存方式で顕著に減少する（図３参照）。
【００７２】
２−３．ｉＮＯＳ遺伝子表現効果
上記実施例で得られた抽出物のＲＡＷ２６４．７細胞株を利用して、ｉＮＯＳ遺伝子表現に対する効果は、実験例２−１に記述された方法と類似する方法で実験した。
【００７３】
その結果、ＬＰＳで処理されたＲＡＷ２６４．７細胞では、ｉＮＯＳ遺伝子のｍＲＮＡ表現が増加されるが、ＬＰＳで処理された細胞及び試験試料では、ｉＮＯＳ遺伝子のｍＲＮＡ表現が投与量依存方式で顕著に減少する（図４参照）。
【００７４】
２−４．ＣＯＸ−２酵素ｍＲＮＡ遺伝子表現効果
上記実施例で得られた抽出物のＲＡＷ２６４．７細胞株を利用して、ＣＯＸ−２酵素ｍＲＮＡ遺伝子表現に対する効果を実験例２−１に記述された方法と類似する方法で実験した。
【００７５】
その結果、ＬＰＳで処理されたＲＡＷ２６４．７細胞ではＣＯＸ−２酵素のｍＲＮＡ表現が増加されるが、ＬＰＳで処理された細胞及び試験試料では、ＣＯＸ−２酵素のｍＲＮＡ表現が投与量依存方式で顕著に減少する（図５参照）。
【００７６】
従って、試験試料の抑制効果は、ＴＮＦ−α、ｉＮＯＳ及びＩＬ−１βの減少されたレベル、ＮＦ−κＢ活性化によって誘導された炎症誘発因子によって立証された。
【００７７】
実験例３．ラットモデルでＬＰＳ−誘導性コルチコステロンに及ぼす作用
上記実施例で得られた抽出物のＬＰＳ−誘導性コルチコステロンに及ぼす作用を実験するために、文献（Ｏｈ  ＪＫ  ｅｔ  ａｌ、Ａｎｔｉｄｅｐｒｅｓｓａｎｔ  ｅｆｆｅｃｔｓ  ｏｆ  Ｓｏｙｏ−ｓａｎ  ｏｎ  Ｉｍｍｏｂｉｌｉｚａｔｉｏｎ  ｓｔｒｅｓｓ  ｉｎ  ｏｖａｒｉｅｃｔｏｍｉｚｅｄ  ｆｅｍａｌｅ  ｒａｔｓ．Ｂｉｏｌ．Ｐｈａｒｍ．Ｂｕｌｌ．，３０（８）、ｐｐ．１４２２−１４２６、２００７）に記述された方法によって次のように分析を行った。
【００７８】
ＬＰＳで処理して採取した血液試料を４０００ｒｐｍの速度で４℃で１５分間遠心分離して５０μｌの血漿を得た。上記血漿を試験管に移して、５ｍｌの塩化メチレンを加えて混合した後、室温に１０分間放置した。上記血漿を他の試験管に移して、蛍光試薬（Ｆｌｕｏｒｅｓｃｅｎｔ  ｒｅａｇｅｎｔ）２．５ｍｌを入れて３０分間混ぜた（ｖｏｒｔｅｘｉｎｇ）後、２０００ｒｐｍの速度で５分間遠心分離して上澄液を捨てた。残留物の吸光度は分光蛍光分析機（ｓｐｅｃｔｒｏｆｌｕｏｒｏｍｅｔｅｒ）（励起：４７５ｎｍ、発光（ｅｍｉｓｓｉｏｎ）：５３０ｎｍ）で測定した。測定値は濃度別に作成された標準曲線と比較して定量した。蛍光試薬（ｆｌｕｏｒｅｓｃｅｎｃｅ  ｒｅａｇｅｎｔ）は硫酸とエタノール（７：３）の混合物を用いた。
【００７９】
その結果、試験試料はＬＰＳ単独で処理された対照群に比べて増加されたコルチコステロン（ｃｏｒｔｉｃｏｓｔｅｒｏｎｅ）レベルを強力に抑制した（図６参照）。
【００８０】
以下、剤形化方法及び賦形剤の種類を説明するが、本発明はこれに制限されない。代表的な製造例は次の通りである。
【００８１】
注射液の製造
ＰＡ抽出物            １００ｍｇ
ピロ亜硫酸ナトリウム  ３．０ｍｇ
メチルパラベン        ０．８ｍｇ
プロピルパラベン      ０．１ｍｇ
注射用蒸溜水          適量
【００８２】
注射剤形は、通常の注射液の製造方法に従って、活性成分を溶解して、ｐＨを約７．５に調節して、全ての成分を２ｍｌのアンプルに充填した後、滅菌させて製造した。
【００８３】
粉剤の製造
ＰＡ抽出物            ５００ｍｇ
とうもろこし澱粉      １００ｍｇ
ラクトース            １００ｍｇ
タルク                １０ｍｇ
【００８４】
上記成分を混合して気密布に充填して粉剤を製造した。
【００８５】
錠剤の製造
ＰＡ抽出物                  ２００ｍｇ
とうもろこし澱粉            １００ｍｇ
ラクトース                  １００ｍｇ
ステアリン酸マグネシウム    適量
【００８６】
上記成分を混合して打錠して錠剤剤形を製造した。
【００８７】
カプセル剤の製造
ＰＡ抽出物                  １００ｍｇ
ラクトース                  ５０ｍｇ
とうもろこし澱粉            ５０ｍｇ
タルク                      ２ｍｇ
ステアリン酸マグネシウム    適量
【００８８】
通常のゼラチン製造方法に従って上記成分を混合してゼラチンカプセルを充填してカプセル剤を製造した。
【００８９】
液剤の製造
ＰＡ抽出物          １０００ｍｇ
糖                  ２０ｇ
多糖                ２０ｇ
レモン調味料        ２０ｇ
【００９０】
通常の液剤の製造方法によって上記成分を溶解した後、全ての成分を１０００ｍｌのアンプルに充填して滅菌させて液剤を製造した。
【００９１】
健康管理食品の製造
ＰＡ抽出物              １０００ｍｇ
ビタミン混合物          適量
ビタミンＡアセテート    ７０μｇ
ビタミンＥ              １．０ｍｇ
ビタミンＢ１            ０．１３ｍｇ
ビタミンＢ２            ０．１５ｍｇ
ビタミンＢ６            ０．５ｍｇ
ビタミンＢ１２          ０．２μｇ
ビタミンＣ              １０ｍｇ
ビオチン                １０μｇ
ニコチン酸アミド        １．７ｍｇ
葉酸                    ５０μｇ
パントテン酸カルシウム  ０．５ｍｇ
無機質混合物            適量
硫酸第一鉄              １．７５ｍｇ
酸化亜鉛                ０．８２ｍｇ
炭酸マグネシウム        ２５．３ｍｇ
第１リン酸カリウム      １５ｍｇ
第２リン酸カルシウム    ５５ｍｇ
クエン酸カリウム        ９０ｍｇ
炭酸カルシウム          １００ｍｇ
塩化マグネシウム        ２４．８ｍｇ
【００９２】
上記言及されたビタミン及びミネラル混合物は様々な方法で変化することができる。このような変化は本発明の精神及び範囲に属するものと見なす。
【００９３】
健康飲料の製造
ＰＡ抽出物  １０００ｍｇ
クエン酸    １０００ｍｇ
オリゴ糖    １００ｇ
梅濃縮液    ２ｇ
タウリン    １ｇ
精製水      ９００ｍｌ
【００９４】
通常の健康飲料の製造方法によって上記活性成分を溶解して混合し、８５℃で１時間撹拌して濾過した後、全ての成分をｌ０００ｍｌのアンプルに充填して滅菌させて健康飲料組成物を製造した。
【００９５】
上記のように記述された本発明は多様な方法によって変化することができることは自明である。このような変化は本発明の精神及び範囲に属するものと理解すべきである。また、本発明の技術分野における技術者にとってこのような全ての変化は特許請求の範囲に含まれるものと理解すべきである。
【産業上の利用可能性】
【００９６】
本発明で記述されたように、ホオズキ抽出物を含有する本発明の組成物は多様な実験を通じて強力な抗炎症効果を表し、従って、これは炎症性疾患の治療及び予防のために効果的で、且つ安全な治療剤または保健機能食品として用いることができる。
【配列表フリーテキスト】
【００９７】
SEQ.I.D.1  5'-tgcagagttccccaactggtacatc-3'
SEQ.I.D.2  5'-gtgctgcctaatgtccccttgaatc-3'
SEQ.I.D.3  5'-cctgtagcccacgtcgtagc-3'
SEQ.I.D.4  5'-ttgacctcagcgctgagttg-3'
SEQ.I.D.5  5'-atcccatcaccatcttccag-3'
SEQ.I.D.6  5'-cctgcttcaccaccttcttg-3'
【図１】
2013530159.tif 000003
【図２】
2013530159.tif 000004
【図３】
2013530159.tif 000005
【図４】
2013530159.tif 000006
【図５】
2013530159.tif 000007
【図６】
2013530159.tif 000008
【配列表】
2013530159000001.app
【国際調査報告】
2013530159.tif 000009
2013530159.tif 000010
2013530159.tif 000011