(57)【要約】 18Ｆ−標識化プローブを合成する方法。この方法は、或る量の18Ｆを、所定量の水及び少なくとも一種の有機溶媒を含有する第一の溶媒で溶離する工程を含む。この工程において、前記18Ｆは、18Ｆ溶液として溶離する。この方法は、また、前記18Ｆ溶液を使用して、少なくとも一種の標識化試薬及び少なくとも一種の相転移触媒の存在下に、18Ｆ標識化を行なって、18Ｆ−標識化プローブを生成させる工程を含む。この方法においては、前記溶離工程が行なわれる時に始まって前記18Ｆ−標識化工程が行なわれるときに終わる間、18Ｆを乾燥させる工程はない。【選択図】図１
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【特許請求の範囲】
【請求項１】
或る量の18Ｆを、所定量の水及び少なくとも一種の有機溶媒を含有してなる第一の溶媒で、18Ｆ溶液として溶離する工程；及び
前記18Ｆ溶液を用いて、少なくとも一種の標識化試薬及び少なくとも一種の相転移触媒の存在下で、18Ｆ−標識化を行なって18Ｆ−標識化プローブを生成させる工程；
を備えてなる、18Ｆ−標識化プローブを合成する方法であって、
溶離工程が行なわれる時から始まって18Ｆ−標識化工程が行なわれるときに終わる18Ｆ乾燥工程が存在しない方法。
【請求項２】
前記第一の溶媒が、更に、前記少なくとも一種の標識化試薬及び前記少なくとも一種の相転移触媒を含有してなるものである請求項１に記載の方法。
【請求項３】
前記18Ｆ溶液中の合計水量が約０．１％〜約５．０％の範囲にある請求項１に記載の方法。
【請求項４】
前記18Ｆ−標識化工程が、約０．１％〜約２．０％の範囲の合計水量を有する18Ｆ−標識化溶液が得られるように、前記18Ｆ溶液をプローブ前駆体と合一する工程を備えるものである請求項１に記載の方法。
【請求項５】
前記18Ｆ−標識化工程が、前記18Ｆ溶液及び前記プローブ前駆体が合一されたときに、前記18Ｆ−標識化溶液の合計水量が約０．１％〜約２．０％の範囲内になるように、前記18Ｆ溶液及び前記プローブ前駆体の少なくとも一方を有機溶媒で希釈する工程を、更に備えるものである請求項４に記載の方法。
【請求項６】
前記少なくとも一種の標識化試薬が、Ｋ2ＣＯ3、ＫＨＣＯ3，Ｃｓ2ＣＯ3、メシル酸カリウム、シュウ酸カリウム及び重炭酸テトラブチルアンモニウムからなる群から選ばれるものである、請求項１に記載の方法。
【請求項７】
前記少なくとも一種の相転移触媒がクリプトフィックスＫ２２２である請求項１に記載の方法。
【請求項８】
前記有機溶媒が極性非プロトン性溶媒を含有するものである請求項１の方法。
【請求項９】
前記極性非プロトン性溶媒が、アセトニトリル、ジメチルスルホキシド（「ＤＭＳＯ」）、テトラヒドロフラン（「ＴＨＦ」）、ジメチルホルムアミド（「ＤＭＦ」）、Ｎ−メチルピロリドン（「ＮＭＰ」）及びジオキサンからなる群から選ばれるものである請求項８に記載の方法。
【請求項１０】
前記有機溶媒が極性プロトン性溶媒を含有するものである請求項１に記載の方法。
【請求項１１】
前記極性プロトン性溶媒がｔＢｕＯＨ及びｔ−アミルアルコールからなる群から選ばれるものである請求項１０に記載の方法。
【請求項１２】
前記生成された18Ｆ−標識化プローブが18Ｆ−ＦＤＧ、18Ｆ−ＨＸ４、18Ｆ−ＦＬＴ、18Ｆ−ＭＩＳＯ、18Ｆ−ＦＡＺＡ、18Ｆ−Ｆａｌｌｙｐｒｉｄｅ、18Ｆ−ＦＨＢＧ、18Ｆ−ＦＨＰＧ、18Ｆ−４−フルオロベンズアルデヒド、18Ｆ−４−フルオロエチルベンゾエート、18Ｆ−フルオロメチルベンゾエート、18Ｆ−フルオロエチルアジド及び18Ｆ−Ｗ３７２からなる群から選ばれるものである請求項１に記載の方法。
【請求項１３】
前記生成された18Ｆ−標識化プローブが18Ｆ−ＶＭ４−０３７である請求項１に記載の方法。
【請求項１４】
18Ｆ−標識化プローブの合成のために使用される溶液であって、或る量の18Ｆ、水及び少なくとも一種の有機溶媒を含んでなり、それに含まれる合計水量が約０．１％〜約５．０％の範囲内にある溶液。
【請求項１５】
少なくとも一種の標識化試薬及び少なくとも一種の相転移触媒を更に含んでなる請求項１３に記載の溶液。
【請求項１６】
プローブ前駆体を更に含んでなり、それに含まれる合計水量が約０．１％〜約２．０％の範囲内にある請求項１４に記載の溶液。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、２０１０年４月８日に出願した米国仮特許出願ＮＯ．６１／３２２，０７４に基づく優先権を主張し、前記出願の開示全体を参照によって本明細書に組み入れる。
【０００２】
本発明は、陽電子放射断層撮影（「ＰＥＴ」）のための18Ｆ標識化プローブの合成に関する。より詳しくは、少なくとも一種の有機溶媒中に所定量の水を含有する溶媒を、ａ）アニオン交換カートリッジから18Ｆ−フッ化物を溶出し、ｂ）少なくとも一種の標識化試薬及び少なくとも一種の相転移触媒の存在下で、18Ｆ−フッ化物を乾燥させることなく、18Ｆ−標識化を達成するために、用いる18Ｆ−標識化プローブの合成方法が開示される。
【背景技術】
【０００３】
陽電子放射断層撮影（「ＰＥＴ」）のための18Ｆ−標識化プローブの合成は、異常な生化学的機能をインビボで首尾よく検知する放射性医薬品に対する要求が増加しつつあるので、過去１０年間に亘って、ものすごく増加してきた。その独特の物理化学的特性により、ＰＥＴトレーサーは、病気の早期検知及び段階付け、特定の治療に応答し又は応答しない患者の処置の監視及び層別といった、幾つかの造影用途に理想的に適している。
【０００４】
これらの放射標識化分子の合成は、疑いもなく、時間が掛かり、大きな労力を要し、時に信頼性がない。これらの製造上の問題を最小限にするために、放射化学者たちは、標識化プロセスを短縮して、最も簡単で最も迅速で最も信頼性のある方式にすることを試みてきた。これらのプロセスの改善にも拘わらず、放射標識化プロセスは、未だ、本来的な非効率性を有しており、更に化学的及びプロセス的な改善により恩恵を受けるであろう。
【０００５】
18Ｆ−標識化のための従来の手段には、「活性化された」又は「裸にした」フッ化物、即ち、ほぼ水分を含まず、それにより放射標識化に適しているフッ化物、の生成が必要である。よく知られていることだが、フッ化物の脱溶媒により、その親核性が増大する（非特許文献１）。
これらの従来の標識化方式において、数ミリリットルの18Ｏ−水から痕跡量の18Ｆフッ化物がアニオン交換カラムに捕捉される。この後、前記18Ｆ−フッ化物イオンは、水に溶解した、Ｋ2ＣＯ3のような、塩を使用することにより、アニオン交換カラムから溶離される。無水アセトニトリルに溶解したカリウムクラウンエーテルクリプトフィックス（Ｋｒｙｐｔｏｆｉｘ）Ｋ２２２のような添加物を、Ｋ2ＣＯ3水溶液とともに使用して18Ｆ−フッ化物の溶離を促進してもよく、又は、所望により、Ｋ2ＣＯ3による溶離後に反応容器に添加してもよい。
溶離工程後、試薬Ｋ2ＣＯ3及びクリプトフィックスＫ２２２がアセトニトリルの高含水溶液に溶解しているので、徹底的な乾燥方式が必要である。この乾燥工程により、Ｋ2ＣＯ3、クリプトフィックスＫ２２２及び18Ｆ−フッ化物の活性化された混合物が生じる。乾燥プロセスは、高められた温度で、しばしば、反応容器からの水の蒸発を助けるために減圧下に、共沸混合物を蒸発させることから始まる。この最初の乾燥は、乾燥の効率によるが、完了するのに最大３０分要する。最初の蒸発の後、18Ｆ−フッ化物が標識化に満足すべき程度に水分を含まないようにするために、十分な量の水を効果的に除去すべく更に蒸発を行なうことが必要となる可能性がある。
【０００６】
この18Ｆフッ素化のための活性試薬の生成のためのアプローチには、いくつかの本来的な問題がある。第一に、最初の乾燥工程の後に存在する水の量が、真空度、ガス流量、バルブの管理及び温度制御における機械的な相違により、操業ごとに変動する。いずれの単一の機械的な問題にしても又はその組み合わせにしても、乾燥効率に、従って標識化の結果に、不利な影響を与える。残存する水の量が操業ごとに非常に大きく変動し得るので、放射標識化の結果もばらつき、放射性トレーサーを信頼性よく生産することが困難になる。また、フッ化物を成功裡に乾燥するのに要する時間が与えられたとして、全合成時間のうちのかなりの部分が乾燥工程に費やされる。最後に、反応液中の残存水を心配するがゆえに、オペレーターがフッ素化に先立って反応混合物を過度に乾燥する可能性がある。この場合、試薬を余り長い間乾燥すると、試薬の乾燥不足（乾燥不足とは、18Ｆ−フッ素化のための試薬から十分に水分を除去することに失敗することである。）の場合と同様に害がある。例えば、クリプトフィックスＫ２２２の分解は、乾燥の時間及び温度と直接的に関連する。即ち、高温での長時間乾燥は、クリプトフィックスＫ２２２の完全性及び機能を危うくする。この問題に対処するために、乾燥時間を最小限にし、操業ごとの水分量を正確に制御することができる方法があれば、それは、現在の放射性標識化業務を実質的に改善することになる。
【０００７】
（アセトニトリルのような）無水有機溶媒に溶解した添加物を使用して18Ｆ−フッ化物をアニオン交換樹脂から溶離するか（非特許文献２、特許文献１）又は無水アセトニトリルに溶解したイオン性液体を使用する（非特許文献３）ことにより、乾燥工程の必要性をなくすることを試みて、代替法が開発されている。
毒性についての情報が知られていない化合物を用いるこれらのタイプの溶離については、注射又は造影に先立って、最終生成物中のこれらの添加物の分析が要求されると思われ、これにより、製造ワークフローが決定的に複雑なものになる。
【０００８】
水性アルコール（即ち、プロトン性溶媒）共混合物の使用により、標準単一溶媒による18Ｆ−標識化条件よりも、18Ｆ−標識化収率が改善されることが報告されている。（非特許文献４）。収量の増加は18Ｆ−フッ化物と前駆体上の恐らく脱離基との間の独特の相互作用の結果であると信じられるが、ｔ−アミルアルコールのような、水性アルコール溶媒を使用することは、最終生成物中においてそれを分析しなければならないので、実際的ではない。更に、これらの嵩高い溶媒の低極性によって、標識化反応に使用できる前駆体の溶解性が妨げられ、その結果、放射標識化の収率を低下させる。
【先行技術文献】
【特許文献】
【０００９】
【特許文献１】国際特許出願ＷＯ２００９／００３２５１
【非特許文献】
【００１０】
【非特許文献１】Ｖ．Ｍ．Ｖｌａｓｏｖ，「芳香族の親核置換反応における親核試薬及び脱離基としてのフッ化物イオン」。Ｊ．ｏｆ  Ｆｌｕｏｒｉｎｅ  Ｃｈｅｍ．，第６１巻、１９３−２１６頁（１９９３）
【非特許文献２】Ｊｏｏｅｌ  Ａｅｒｔｓら、「脂肪族及び芳香族親核放射標識化のための高度濃縮活性［18Ｆ］フッ化物の高速生産。Ｔｅｔｒａｈｅｄｒｏｎ  Ｌｅｔｔｅｒｓ、第５１巻、６４−６６頁（２００９）
【非特許文献３】Ｈｙｕｎｇ  Ｗｏｏ  Ｋｉｍら、「イオン性液体を用いた、蒸発工程のない［18Ｆ］ＦＤＧの高速合成」。Ａｐｐｌｉｅｄ  Ｒａｄｉａｔｉｏｎ  ａｎｄ  Ｉｓｏｔｏｐｅｓ、第６１巻、１２４１−１２４６頁（２００４）
【非特許文献４】Ｄｏｎｇ  Ｗｏｏｋ  Ｋｉｍら、「プロトン性溶媒に触媒された新しい種類のＳN２反応：診断用分子の同位体標識化のための容易なフッ素化」。Ｊ．Ａｍ．Ｃｈｅｍ．Ｓｏｃ．第１２８巻、第５０号、１６３９４−１６３９７頁（２００６年１１月２３日）
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【００１１】
標識化のための理想的なプロセスは、標識化収率に利する添加物を必要とするものであり、トレーサー生産のために現在行なわれている以上に付加的な検査を必要とせず、乾燥工程を不要とし、各操業において、各反応において存在する水の厳密な量を考慮するものである。
【課題を解決するための手段】
【００１２】
このことを念頭において、本発明の一つの実施態様は、18Ｆ−標識化プローブの合成方法に関する。この方法は、所定量の水及び少なくとも一種の有機溶媒を含む第一の溶媒で或る量の18Ｆを溶離する工程を含む。この工程において、18Ｆは、18Ｆ溶液として溶離する。また、この方法は、前記18Ｆ溶液を使用して、少なくとも一種の標識化試薬及び少なくとも一種の相転移触媒の存在下に、18Ｆ−標識化を実施して18Ｆ−標識化プローブを生成させる工程を含む。この方法において、溶離工程が行なわれる時から始まって18Ｆ−標識化工程が行なわれるときに終了する18Ｆ乾燥工程はない。
【００１３】
18Ｆ−標識化プローブを合成する際に使用される溶液も、また、提供される。この溶液は、或る量の18Ｆ、水、及び少なくとも一種の有機溶媒を含む。この溶液における水の合計量は、約０．１％〜約５．０％の範囲内である。この溶液は、また、少なくとも一種の標識化試薬及び少なくとも一種の相転移触媒を含む。更に、この溶液は、プローブ前駆体を含んでいてもよく、その水の合計量は、約０．１％〜約２．０％の範囲内である。
【図面の簡単な説明】
【００１４】
【図１】図１は、フルオロデオキシグルコース（18Ｆ）（「ＦＤＧ」又は「18Ｆ−ＦＤＧ」）合成（ラン番号１）におけるフッ素化後の粗生成物の放射性薄層クロマトグラフィー（放射性−ＴＬＣ）の例を示す。領域１は、18Ｆ−フッ化物である。領域２は、18Ｆ−ＦＤＧである。領域３は、未知の18Ｆ−標識化副生成物である。領域４は、テトラアセチル18Ｆ−ＦＤＧである。
【００１５】
【図２】図２は、18Ｆ−ＦＤＧ合成（ラン番号２）におけるフッ素化後の粗生成物の放射性−ＴＬＣの例を示す。領域１は、18Ｆ−フッ化物である。領域２は、テトラアセチル18Ｆ−ＦＤＧである。
【００１６】
【図３】図３は、放射性−ＴＬＣで測定した、精製した18Ｆ−ＦＤＧの放射性−ＴＬＣの例である。18Ｆ−ＦＤＧの純度は、９８％を超える。
【００１７】
【図４】図４は、［18Ｆ］−フルオロデオキシチミジン（「18Ｆ−ＦＬＴ」）合成）におけるフッ素化後の粗生成物の放射性−ＴＬＣの例を示す。領域１は、18Ｆ−フッ化物である。領域２は、ビス  Ｂｏｃ  18Ｆ−ＦＬＴである。
【００１８】
【図５】図５は、18Ｆ−ＦＬＴ合成における加水分解後の粗生成物の放射性高速液体クロマトグラフィー（「放射性−ＨＰＬＣ」）の例を示す。ピーク２及びピーク３は、18Ｆ−フッ化物である。ピーク４は、18Ｆ−ＦＬＴである。
【００１９】
【図６】図６は、［18Ｆ］−３−フルオロ−２−（４−（（２−ニトロ−１Ｈ−イミダゾール−１−イル）メチル）−１Ｈ−１，２，３−トリアゾール−１−イル）プロパン−１−オール（「18Ｆ−ＨＸ４」）合成における加水分解後の粗生成物の放射性−ＨＰＬＣを示す。ピーク１は、18Ｆ−フッ化物である。ピーク２は、18Ｆ−ＨＸ４と18Ｆ−ＨＸ４アセテートとの混合物である。
【００２０】
【図７】図７は、18Ｆ−ＨＸ４合成における18Ｆフッ素化後の粗生成物の放射性−ＨＰＬＣを示す。ピーク１は、18Ｆ−フッ化物である。ピーク２は、18Ｆ−ＨＸ４−ＯＡｃである。
【００２１】
【図８】図８は、18Ｆ−ＨＸ４合成における脱保護後の粗生成物の放射性−ＨＰＬＣを示す。ピーク１は、放射分解により生成された18Ｆ−フッ化物である。ピーク２は、18Ｆ−ＨＸ４であり、ピーク３は、18Ｆ−ＨＸ４−ＯＡｃである。ピーク１は、18Ｆ−ＨＸ４−ＯＡｃの18Ｆ−ＨＸ４への転化率の計算において考慮しなかった。
【発明を実施するための形態】
【００２２】
本発明の図及び記述は、本発明を明確に理解するための重要な要素を例証するために、当技術分野において通常的である多くの他の要素を明確化のために省略することによって、単純化されていると理解されたい。当業者は、他の要素が本発明を実施するために望ましいと認識するであろう。しかしながら、そのような要素は、当業界においてよく知られており、本発明のよりよい理解に資するわけではないので、そのような要素についての議論はここでは行なわない。
【００２３】
以下、実施例に基づいて、本発明を詳細に説明する。
本発明において、18Ｆ−標識化は、長々とした乾燥工程を用いることなく、水の量を厳密に制御して、高収率で起きる。より具体的には、少なくとも一種の有機溶媒中に所定量の水を溶解した溶媒を用いて、ａ）アニオン交換樹脂から18Ｆ−フッ化物を溶離し、そして、ｂ）18Ｆ−フッ素化を、18Ｆ−フッ化物を乾燥させることなく、少なくとも一種の標識化試薬及び少なくとも一種の相転移触媒の存在下に、実施する。適切であれば、いかなる標識化試薬及び相転移触媒をも使用することができる。
適切な標識化試薬の例としては、Ｋ2ＣＯ3、ＫＨＣＯ3、Ｃｓ2ＣＯ3、メシル酸カリウム、シュウ酸カリウム及び重炭酸テトラブチルアンモニウムが挙げられる。適切な相転移触媒の例としては、クリプトフィックスＫ２２２が挙げられる。
有機溶媒としては、例えば、アセトニトリル、ジメチルスルホキシド（「ＤＭＳＯ」）、テトラヒドロフラン（「ＴＨＦ」）、ジメチルホルムアミド（「ＤＭＦ」）、Ｎ−メチルピロリドン（「ＮＭＰ」）及びジオキサン並びにその他の、極性非プロトン性溶媒が挙げられる。有機溶媒としては、また、例えば、ｔ−ＢｕＯＨ及びｔ−アミルアルコール並びにその他の、極性プロトン性溶媒が挙げられる。
【００２４】
水の量は、全溶媒に対する百分率で、約０．１％〜約２％の範囲であってよい。しかしながら、アニオン交換カートリッジからの溶離のための水は、約０．１％〜約５％の範囲である。塩基（例えば、Ｋ2ＣＯ3）の量は、約０．１〜約５０ｍｇ／ｍＬである。水の量は、フッ化物の溶離によって制御されるので、水の百分率は、各操業に亘って同じに保たれ、放射化学をより首尾一貫したものにする。また、フッ素化は、少量の水の存在には耐え得るので、フッ化物を乾燥させる必要はない。乾燥工程を省略することの有利な結果として、クリプトフィックスＫ２２２や重炭酸テトラブチルアンモニウム（「ＴＢＡＢ」）のような温度感受性試薬の分解を最小限にすることができる。更に、反応が短期間で完了するので、その結果、収率がより高くなり、より有用な生成物を手に入れることができる。機械系の一部は、もはや、乾燥には使用しないので、機器の機械的な磨耗は少なくなる。18Ｆ−フッ化物の乾燥の結果として、通常、放射能の損失が報告されているのとは異なり、この方法は、そのような放射能の損失を蒙らない。最後に、各反応において通常存在する固定量の水による標識化の失敗の機会がより少なくなる。
【００２５】
本発明の方法によって生成される18Ｆ−標識化ＰＥＴプローブの例としては、これらに限られないが、［18Ｆ］−３−フルオロ−２−（４−（（２−ニトロ−１Ｈ−イミダゾール−１−イル）メチル）−１Ｈ−１，２，３−トリアゾール−１−イル）プロパン−１−オール（「ＨＸ４」又は「18Ｆ−ＨＸ４」）、フルオロデオキシチミジン（「ＦＬＴ」）、１−［18Ｆ］フルオロ−３−（２−ニトロ−１Ｈ−イミダゾール−１−イル）プロパン−２−オール（「Ｆ-ＭＩＳＯ」）、［18Ｆ］−フルオロアゾマイシンアラビノフラノシド（「ＦＡＺＡ」）、５−［３−（18Ｆ）フルオロプロピル］−２，３−ジメトキシ−Ｎ−｛［（２Ｓ）−ｌ−（プロパ−２−エン−ｌ−イル）ピロリジン−２−イル］メチル｝ベンズアミド（「Ｆａｌｌｙｐｒｉｄｅ」）、９−（４−［18Ｆ］フルオロ−３−ヒドロキシメチルブチル）グアニン（「ＦＨＢＧ」）、９−［（３−［18Ｆ］−フルオロ−１−ヒドロキシ−２−プロポキシ）メチル］グアニン（「ＦＨＰＧ」）、（18Ｆ）フルオロエチルアジド、18Ｆ−４−フルオロベンズアルデヒド、18Ｆ−４−フルオロエチルベンゾエート、18Ｆ−４−フルオロメチルベンゾエート及び７−メトキシ−２−（６−［18Ｆ］フルオロピリジン−３−イル）イミダゾ［２，ｌ−ｂ］−８−ピリジノチアゾール（「18Ｆ−Ｗ３７２」）が挙げられる。本発明の方法によって生成できる18Ｆ−標識化ＰＥＴプローブの他の例としては、これらに限られないが、２’−デオキシ−２’−［18Ｆ］フルオロ−５−フルオロ−１−β−Ｄ−アラビノフラノシルウラシル（「ＦＦＡＵ」）並びに下表にリストアップした化合物が挙げられる。
【００２６】
【表１】
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2013529186.tif 000004
2013529186.tif 000005
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【００２７】
特定の機構又は理論に束縛される意図はないが、18Ｆ−フッ化物アニオンは、トシレート、メシレート、トリフレート、ノシレート、ブロシレート、トリアルキルアンモニウム塩、スルフォネートエステル、ハロゲン及びニトロ基を始めとする（これらに限定されるものではないが）脱離基を、約０．１％〜約２．０％の水の存在を含む溶媒中で、18Ｆ−フッ化物によって、置換され得る。
【００２８】
一般的に、18Ｆ−標識化プローブの生成プロセスは、或る量の18Ｆをアニオン交換カートリッジに充填する工程を含む。アニオン交換カートリッジとは、18Ｆを吸着するのに適した、任意の手近なアニオン交換樹脂又は他の材料を収納した任意の容器を意味する。アニオン交換樹脂に充填された18Ｆは、次に、溶離に備えられる。この準備には、有機溶媒（例えば、無水アセトニトリル）でカートリッジを洗浄し、次いで、（例えば、カートリッジに不活性ガスを通すことにより）カートリッジを乾燥することを含む。
【００２９】
次に、例えば、水、有機溶媒、標識化試薬及び相転移触媒を含有する溶液をカートリッジに通すことにより、18Ｆをカートリッジから溶離して、18Ｆ、水、有機溶媒、標識化試薬及び相転移触媒を含有する18Ｆ溶液を得る。この時点で、18Ｆ溶液中の水の量は、０．１％〜５．０％の範囲である。次に、プローブ前駆体を18Ｆ溶液と合一して水の量が０．１％〜２．０％の18Ｆ−標識化溶液を得る。これは、例えば、プローブ前駆体と18Ｆ溶液のいずれか又は両方を適当な量の有機溶媒で希釈することによって達成できる。これにより、溶離した18Ｆ溶液を乾燥させることなく18Ｆ−標識化溶液を生成させることができる。
【００３０】
18Ｆ−標識化溶液は０．１〜２．０％の水を含有するのがよいが、水の量は０．５〜１．５％であることが好ましく、約１．０％であることがより好ましい。
【実施例】
【００３１】
標識化の結果のまとめ
【００３２】
【表２】
2013529186.tif 000007
【００３３】
Ｋ2ＣＯ3／クリプトフィックスＫ２２２溶離溶媒の調製
【００３４】
Ｋ2ＣＯ3（１１ｍｇ）を水（０．１ｍＬ）に溶解した。クリプトフィックスＫ２２２（１００ｍｇ）をアセトニトリル（１．９ｍＬ）に溶解した。両溶液を混合して、０．４ｍＬを又は０．２ｍＬを２回使用して、アニオン交換カートリッジから18Ｆ−フッ化物を溶離した。
【００３５】
アニオン交換カートリッジの充填及び乾燥
【００３６】
活性化したアニオン交換カートリッジ（ＱＭＡ  ｌｉｔｅ、重炭酸塩形）に18Ｏ−水に溶解した18Ｆ−フッ化物を投入した。次いで、カートリッジを無水アセトニトリル（３×１ｍＬ）で洗浄して、カートリッジ中の残存水分を除去した。次に、カートリッジに（Ｈｅ等の）不活性ガスを約３０〜９０秒間通して、カートリッジを更に乾燥した。
【００３７】
アニオン交換カートリッジからの18Ｆ−フッ化物の溶離
【００３８】
18Ｆ−フッ化物の18Ｏ−水溶液を（１ラン当り５０ｍＣｉまで）イオン交換カラムに通した後、アニオン交換カートリッジに、Ｋ2ＣＯ3／クリプトフィックスＫ２２２溶液（０．４ｍＬ又は０．２ｍＬを２回）を通して、乾燥した反応容器に受け入れた。追加の無水アセトニトリル（０．６ｍＬ）を反応容器に添加した。この最終工程により、放射標識化に適した、18Ｆ−フッ化物の含水有機溶媒溶液が形成される。
【００３９】
18Ｆ−ＦＤＧの合成（実験番号１、２及び３）
【化１】
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【００４０】
アセトニトリル（１．０ｍＬ）に溶解したフルオロデオキシグルコース（18Ｆ）（「ＦＤＧ」又は「18Ｆ−ＦＤＧ」）前駆体（マンノース  トリフレート、５０ｍｇ）を、活性化18Ｆ−フッ化物を含有する反応容器に添加した。反応液を４５秒間、９０℃に加熱する。放射性薄層クロマトグラフィー（“「放射性−ＴＬＣ」）により、18Ｆ−フッ化物の（18Ｆ−ＦＤＧ  テトラアセテート＋18Ｆ−ＦＤＧ）への転化率が９５％を超えることが示された（図１）。この反応シークエンスをもう一度繰り返したところ、18Ｆ−フッ化物の（18Ｆ−ＦＤＧ  テトラアセテート＋18Ｆ−ＦＤＧ）への転化率は、９５％を超えた（図２）。５％の水を含有する溶液中で標識化を行なった場合（実験番号３）は、標識化が観察されなかった。
【００４１】
18Ｆ−ＦＤＧの合成（実験番号４）
【化２】
2013529186.tif 000009
【００４２】
アセトニトリル（１．０ｍＬ）に溶解したＦＤＧ前駆体（マンノース  トリフレート、５０ｍｇ）を、活性化18Ｆ−フッ化物（９８５  ｍＣｉ）を含有する反応容器に添加した。反応液を４５秒間、９０℃に加熱する。ＭｅＣＮを加熱減圧下に除去した。ＨＣｌ（２Ｍ、１ｍＬ）を添加し、反応液を１００℃で４８０秒間加熱した。粗反応混合物を水で希釈し、一連のカートリッジ（Ａｌ2Ｏ3、Ｃ１８、ＩＣＨ−ＨＣＯ3）を通過させて、ＥＯＢ後６５分で、４４５ｍＣｉ（６０％収率、崩壊補正済）を得た。放射性−ＴＬＣにより、18Ｆ−ＦＤＧの純度が９５％を超えることが示された（図３）。
【００４３】
18Ｆ−ＦＬＴの合成（実験番号５）
【化３】
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【００４４】
アセトニトリル（１．０ｍＬ）に溶解したフルオロデオキシチミジン（18Ｆ）（「ＦＬＴ」又は「18Ｆ−ＦＬＴ」）前駆体（Ｂｏｃ−Ｂｏｃ−Ｎｏｓ、１８．５±１．５ｍｇ）を、反応容器に添加する。反応液を１３５℃に３秒間加熱する。放射性−ＴＬＣにより、18Ｆ−フッ化物の18Ｆ−ジ−Ｂｏｃ  ＦＬＴへの転化率が９０％を超えることが示された（図４）。ＭｅＣＮを加熱減圧下に除去した。粗材料を、脱保護条件下（ＨＣｌ、１Ｎ、１０５℃で５分間）に置いた。ＨＰＬＣ分析（１０％ＥＴＯＨ：水）により、９６％を超える純度の18Ｆ−ＦＬＴの存在が明らかとなった（図５）。
【００４５】
18Ｆ−ＨＸ４  アセテート及び18Ｆ−ＨＸ４の合成（実験番号６及び７）
【化４】
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【００４６】
アセトニトリル（１．０ｍＬ）に溶解した［18Ｆ］−３−フルオロ−２−（４−（（２−ニトロ−１Ｈ−イミダゾール−１−イル）メチル）−１Ｈ−１，２，３−トリアゾール−１−イル）プロパン−１−オール（「ＨＸ４」又は「18Ｆ−ＨＸ４」）前駆体（１８．５±１．５ｍｇ）を反応容器に添加する。反応液を１１０℃に１０分間加熱する。放射性−ＴＬＣにより、18Ｆ−フッ化物の18Ｆ−ＨＸ４及び18Ｆ−ＨＸ４  アセテートへの転化率が９０％を超えることが示された（図６）。第２のランで、反応を繰り返し、標識化効率を放射性ＨＰＬＣで監視した。フッ素化工程後、９０％を超える18Ｆ−フッ化物が標識化中間体18Ｆ−ＨＸ４−ＯＡｃに転化されていた（図７）。ＭｅＣＮを加熱減圧下に除去した。混合物を、更に、Ｋ2ＣＯ3（１Ｍ）と共に、１００℃で３００秒間、加熱して、脱保護工程を完了させた。18Ｆ−ＨＸ４−ＯＡｃの18Ｆ−ＨＸ４への転化率は、放射性ＨＰＬＣにより、７０％を超えることが測定された（図８）。
【００４７】
ここまで、本発明を上記に概要を示した特定の実施態様に関連させて説明してきたが、明らかなように、多くの代替、修飾及び変化が当業者には明らかである。従って、上述の本発明の好ましい態様は、例示的なものであり、限定的であることを意図していない。上述の態様の種々の修飾が、明細書の開示から当業者には明らかであろう。従って、本発明は、本発明の精神及び基本的な特質から乖離することなく、他の特定の形態で実施され得る。以下の請求項に定義した本発明の精神及び範囲から乖離することなく、多様な変更がなされ得る。
【図１】
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【図２】
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【図３】
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【図４】
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【図５】
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【図６】
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【図７】
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【図８】
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【手続補正書】
【提出日】平成25年3月27日(2013.3.27)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
或る量の18Ｆを、所定量の水及び少なくとも一種の有機溶媒を含有してなる第一の溶媒で、18Ｆ溶液として溶離する工程；及び
前記18Ｆ溶液を用いて、少なくとも一種の標識化試薬及び少なくとも一種の相転移触媒の存在下で、18Ｆ−標識化を行なって18Ｆ−標識化プローブを生成させる工程；
を備えてなる、18Ｆ−標識化プローブを合成する方法であって、
溶離工程が行なわれる時から始まって18Ｆ−標識化工程が行なわれるときに終わる18Ｆ乾燥工程が存在しない方法。
【請求項２】
前記第一の溶媒が、更に、前記少なくとも一種の標識化試薬及び前記少なくとも一種の相転移触媒を含有してなるものである請求項１に記載の方法。
【請求項３】
前記18Ｆ溶液中の合計水量が０．１％〜５．０％の範囲にある請求項１に記載の方法。
【請求項４】
前記18Ｆ−標識化工程が、０．１％〜２．０％の範囲の合計水量を有する18Ｆ−標識化溶液が得られるように、前記18Ｆ溶液をプローブ前駆体と合一する工程を備えるものである請求項１に記載の方法。
【請求項５】
前記18Ｆ−標識化工程が、前記18Ｆ溶液及び前記プローブ前駆体が合一されたときに、前記18Ｆ−標識化溶液の合計水量が０．１％〜２．０％の範囲内になるように、前記18Ｆ溶液及び前記プローブ前駆体の少なくとも一方を有機溶媒で希釈する工程を、更に備えるものである請求項４に記載の方法。
【請求項６】
前記少なくとも一種の標識化試薬が、Ｋ2ＣＯ3、ＫＨＣＯ3，Ｃｓ2ＣＯ3、メシル酸カリウム、シュウ酸カリウム及び重炭酸テトラブチルアンモニウムからなる群から選ばれるものである、請求項１に記載の方法。
【請求項７】
前記少なくとも一種の相転移触媒がクリプトフィックスＫ２２２である請求項１に記載の方法。
【請求項８】
前記有機溶媒が極性非プロトン性溶媒を含有するものである請求項１の方法。
【請求項９】
前記極性非プロトン性溶媒が、アセトニトリル、ジメチルスルホキシド（「ＤＭＳＯ」）、テトラヒドロフラン（「ＴＨＦ」）、ジメチルホルムアミド（「ＤＭＦ」）、Ｎ−メチルピロリドン（「ＮＭＰ」）及びジオキサンからなる群から選ばれるものである請求項８に記載の方法。
【請求項１０】
前記有機溶媒が極性プロトン性溶媒を含有するものである請求項１に記載の方法。
【請求項１１】
前記極性プロトン性溶媒がｔＢｕＯＨ及びｔ−アミルアルコールからなる群から選ばれるものである請求項１０に記載の方法。
【請求項１２】
前記生成された18Ｆ−標識化プローブが18Ｆ−ＦＤＧ、18Ｆ−ＨＸ４、18Ｆ−ＦＬＴ、18Ｆ−ＭＩＳＯ、18Ｆ−ＦＡＺＡ、18Ｆ−Ｆａｌｌｙｐｒｉｄｅ、18Ｆ−ＦＨＢＧ、18Ｆ−ＦＨＰＧ、18Ｆ−４−フルオロベンズアルデヒド、18Ｆ−４−フルオロエチルベンゾエート、18Ｆ−フルオロメチルベンゾエート、18Ｆ−フルオロエチルアジド及び18Ｆ−Ｗ３７２からなる群から選ばれるものである請求項１に記載の方法。
【請求項１３】
前記生成された18Ｆ−標識化プローブが18Ｆ−ＶＭ４−０３７である請求項１に記載の方法。
【請求項１４】
18Ｆ−標識化プローブの合成のために使用される溶液であって、或る量の18Ｆ、水及び少なくとも一種の有機溶媒を含んでなり、それに含まれる合計水量が０．１％〜５．０％の範囲内にある溶液。
【請求項１５】
少なくとも一種の標識化試薬及び少なくとも一種の相転移触媒を更に含んでなる請求項１３に記載の溶液。
【請求項１６】
プローブ前駆体を更に含んでなり、それに含まれる合計水量が０．１％〜２．０％の範囲内にある請求項１４に記載の溶液。
【国際調査報告】
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