(57)【要約】  Ｇタンパク質共役受容体ＧＰＲ１１９の活性を調節する化合物および動物においてＧタンパク質共役受容体ＧＰＲ１１９の調節に関連している疾患を治療する際のその使用が本明細書において記載されている。【特許請求の範囲】
【請求項１】
下記からなる群から選択される化合物または薬学的に許容できるその塩：
イソプロピル４−｛５−シアノ−４−［（２，４−ジフルオロフェノキシ）メチル］−１Ｈ−ピラゾール−１−イル｝ピペリジン−１−カルボキシレート；
イソプロピル４−｛５−シアノ−４−［（２−メチルフェノキシ）メチル］−１Ｈ−ピラゾール−１−イル｝ピペリジン−１−カルボキシレート；
１−メチルシクロプロピル４−｛５−シアノ−４−［（２，５−ジフルオロフェノキシ）メチル］−１Ｈ−ピラゾール−１−イル｝ピペリジン−１−カルボキシレート；
１−メチルシクロプロピル４−｛５−シアノ−４−［（２，３−ジフルオロフェノキシ）メチル］−１Ｈ−ピラゾール−１−イル｝ピペリジン−１−カルボキシレート；
１−メチルシクロプロピル４−｛４−［（４−カルバモイル−２−フルオロフェノキシ）メチル］−５−シアノ−１Ｈ−ピラゾール−１−イル｝ピペリジン−１−カルボキシレート；
１−メチルシクロプロピル４−｛４−［（４−カルバモイルフェノキシ）メチル］−５−シアノ−１Ｈ−ピラゾール−１−イル｝ピペリジン−１−カルボキシレート；
１−メチルシクロプロピル４−（５−シアノ−４−（（４−シアノフェノキシ）メチル）−１Ｈ−ピラゾール−１−イル）ピペリジン−１−カルボキシレート；
イソプロピル４−（４−（（４−（１Ｈ−ピラゾール−１−イル）フェノキシ）メチル）−５−シアノ−１Ｈ−ピラゾール−１−イル）ピペリジン−１−カルボキシレート；
イソプロピル４−（５−シアノ−４−（（２−フルオロ−４−（１Ｈ−テトラゾール−５−イル）フェノキシ）メチル）−１Ｈ−ピラゾール−１−イル）ピペリジン−１−カルボキシレートおよびイソプロピル４−（５−シアノ−４−（（２−フルオロ−４−（２Ｈ−テトラゾール−５−イル）フェノキシ）メチル）−１Ｈ−ピラゾール−１−イル）ピペリジン−１−カルボキシレート；
イソプロピル４−（５−シアノ−４−（（２−フルオロ−４−（１−メチル−１Ｈ−テトラゾール−５−イル）フェノキシ）メチル）−１Ｈ−ピラゾール−１−イル）ピペリジン−１−カルボキシレート；
イソプロピル４−（５−シアノ−４−（（２−フルオロ−４−（２−メチル−２Ｈ−テトラゾール−５−イル）フェノキシ）メチル）−１Ｈ−ピラゾール−１−イル）ピペリジン−１−カルボキシレート；
イソプロピル４−（５−シアノ−４−（（２−フルオロ−４−（２−（２−ヒドロキシエチル）−２Ｈ−テトラゾール−５−イル）フェノキシ）メチル）−１Ｈ−ピラゾール−１−イル）ピペリジン−１−カルボキシレート；
イソプロピル４−（５−シアノ−４−（（２−フルオロ−４−（１−（２−ヒドロキシエチル）−１Ｈ−テトラゾール−５−イル）フェノキシ）メチル）−１Ｈ−ピラゾール−１−イル）ピペリジン−１−カルボキシレート；
１−メチルシクロプロピル４−（５−シアノ−４−｛［２−フルオロ−４−（１−メチル−１Ｈ−テトラゾール−５−イル）フェノキシ］メチル｝−１Ｈ−ピラゾール−１−イル）ピペリジン−１−カルボキシレート；
１−メチルシクロプロピル４−（５−シアノ−４−｛［４−（１−メチル−１Ｈ−テトラゾール−５−イル）フェノキシ］メチル｝−１Ｈ−ピラゾール−１−イル）ピペリジン−１−カルボキシレート；
１−メチルシクロプロピル４−（４−（（４−カルバモイル−３−フルオロフェノキシ）メチル）−５−シアノ−１Ｈ−ピラゾール−１−イル）ピペリジン−１−カルボキシレート；
イソプロピル４−（５−シアノ−４−｛１−［２−フルオロ−４−（メチルスルホニル）フェノキシ］エチル｝−１Ｈ−ピラゾール−１−イル）ピペリジン−１−カルボキシレート；
イソプロピル４−（５−シアノ−４−｛１−［（２−メチルピリジン−３−イル）オキシ］エチル｝−１Ｈ−ピラゾール−１−イル）ピペリジン−１−カルボキシレート；
イソプロピル４−（５−シアノ−４−｛２−［２−フルオロ−４−（メチルスルホニル）フェニル］プロピル｝−１Ｈ−ピラゾール−１−イル）ピペリジン−１−カルボキシレート；
１−メチルシクロプロピル４−（５−シアノ−４−｛［（２−メチルピリジン−３−イル）オキシ］メチル｝−１Ｈ−ピラゾール−１−イル）ピペリジン−１−カルボキシレート；
１−メチルシクロプロピル４−｛５−シアノ−４−［（２，３，６−トリフルオロフェノキシ）メチル］−１Ｈ−ピラゾール−１−イル｝ピペリジン−１−カルボキシレート；
イソプロピル４−｛５−シアノ−４−［（２，３，６−トリフルオロフェノキシ）メチル］−１Ｈ−ピラゾール−１−イル｝ピペリジン−１−カルボキシレート；
イソプロピル４−（５−シアノ−４−｛［２−フルオロ−４−（１−メチル−１Ｈ−イミダゾール−２−イル）フェノキシ］メチル｝−１Ｈ−ピラゾール−１−イル）ピペリジン−１−カルボキシレート；
イソプロピル４−（５−シアノ−４−｛［２−フルオロ−４−（１−メチル−１Ｈ−イミダゾール−５−イル）フェノキシ］メチル｝−１Ｈ−ピラゾール−１−イル）ピペリジン−１−カルボキシレート；
イソプロピル４−［５−シアノ−４−（｛［２−メチル−６−（１Ｈ−１，２，４−トリアゾール−１−イル）ピリジン−３−イル］オキシ｝メチル）−１Ｈ−ピラゾール−１−イル］ピペリジン−１−カルボキシレート；
イソプロピル４−［５−シアノ−４−（｛［２−メチル−６−（１Ｈ−１，２，４−トリアゾール−１−イル）ピリジン−３−イル］アミノ｝メチル）−１Ｈ−ピラゾール−１−イル］ピペリジン−１−カルボキシレート；
イソプロピル４−［５−シアノ−４−（｛［２−メチル−６−（メチルスルホニル）ピリジン−３−イル］アミノ｝メチル）−１Ｈ−ピラゾール−１−イル］ピペリジン−１−カルボキシレート；
１−メチルシクロプロピル４−（５−シアノ−４−｛［４−（１Ｈ−テトラゾール−１−イル）フェノキシ］メチル｝−１Ｈ−ピラゾール−１−イル）ピペリジン−１−カルボキシレート；
１−［１−（５−エチルピリミジン−２−イル）ピペリジン−４−イル］−４−｛［４−（１Ｈ−テトラゾール−１−イル）フェノキシ］メチル｝−１Ｈ−ピラゾール−５−カルボニトリル；
イソプロピル４−｛５−シアノ−４−［（３−シアノフェノキシ）メチル］−１Ｈ−ピラゾール−１−イル｝ピペリジン−１−カルボキシレート；
イソプロピル４−｛５−シアノ−４−［（４−シアノ−３−メチルフェノキシ）メチル］−１Ｈ−ピラゾール−１−イル｝ピペリジン−１−カルボキシレート；
イソプロピル４−｛５−シアノ−４−［（４−シアノフェノキシ）メチル］−１Ｈ−ピラゾール−１−イル｝ピペリジン−１−カルボキシレート；
４−［（４−シアノ−２−フルオロフェノキシ）メチル］−１−［１−（５−エチルピリミジン−２−イル）ピペリジン−４−イル］−１Ｈ−ピラゾール−５−カルボニトリル；
ｔｅｒｔ−ブチル４−｛５−シアノ−４−［（４−シアノ−２−フルオロフェノキシ）メチル］−１Ｈ−ピラゾール−１−イル｝ピペリジン−１−カルボキシレート；
イソプロピル４−｛５−シアノ−４−［（２−シアノ−４−フルオロフェノキシ）メチル］−１Ｈ−ピラゾール−１−イル｝ピペリジン−１−カルボキシレート；
イソプロピル４−（５−シアノ−４−｛［４−（ジメチルカルバモイル）−２−フルオロフェノキシ］メチル｝−１Ｈ−ピラゾール−１−イル）ピペリジン−１−カルボキシレート；
１−メチルシクロプロピル４−（５−シアノ−４−｛［４−（ジメチルカルバモイル）−２−フルオロフェノキシ］メチル｝−１Ｈ−ピラゾール−１−イル）ピペリジン−１−カルボキシレート；
１−メチルシクロプロピル４−（５−シアノ−４−｛［２−フルオロ−４−（メチルカルバモイル）フェノキシ］メチル｝−１Ｈ−ピラゾール−１−イル）ピペリジン−１−カルボキシレート；
４−（｛５−シアノ−１−［１−（５−エチルピリミジン−２−イル）ピペリジン−４−イル］−１Ｈ−ピラゾール−４−イル｝メトキシ）−３−フルオロ−Ｎ，Ｎ−ジメチルベンズアミド；
１−メチルシクロプロピル４−｛５−シアノ−４−［（４−シアノ−２−フルオロフェノキシ）メチル］−１Ｈ−ピラゾール−１−イル｝ピペリジン−１−カルボキシレート；
ｔｅｒｔ−ブチル（３Ｓ，４Ｓ）−４−（５−シアノ−４−｛［２−フルオロ−４−（メチルカルバモイル）フェノキシ］メチル｝−１Ｈ−ピラゾール−１−イル）−３−フルオロピペリジン−１−カルボキシレート；
ｔｅｒｔ−ブチル（３Ｒ，４Ｓ）−４−（５−シアノ−４−｛［２−フルオロ−４−（メチルカルバモイル）フェノキシ］メチル｝−１Ｈ−ピラゾール−１−イル）−３−フルオロピペリジン−１−カルボキシレート；
１−メチルシクロプロピル（３Ｓ，４Ｓ）−４−（５−シアノ−４−｛［２−フルオロ−４−（メチルカルバモイル）フェノキシ］メチル｝−１Ｈ−ピラゾール−１−イル）−３−フルオロピペリジン−１−カルボキシレート；
１−メチルシクロプロピル（３Ｒ，４Ｒ）−４−（５−シアノ−４−｛［２−フルオロ−４−（メチルカルバモイル）フェノキシ］メチル｝−１Ｈ−ピラゾール−１−イル）−３−フルオロピペリジン−１−カルボキシレート；
ｔｅｒｔ−ブチル（３Ｓ，４Ｓ）−４−（５−シアノ−４−｛［（２−メチルピリジン−３−イル）オキシ］メチル｝−１Ｈ−ピラゾール−１−イル）−３−フルオロピペリジン−１−カルボキシレート；
ｔｅｒｔ−ブチル（３Ｓ，４Ｒ）−４−（５−シアノ−４−｛［（２−メチルピリジン−３−イル）オキシ］メチル｝−１Ｈ−ピラゾール−１−イル）−３−フルオロピペリジン−１−カルボキシレート；
１−メチルシクロプロピル（３Ｓ，４Ｒ）−４−（５−シアノ−４−｛［（２−メチルピリジン−３−イル）オキシ］メチル｝−１Ｈ−ピラゾール−１−イル）−３−フルオロピペリジン−１−カルボキシレート；
１−メチルシクロプロピル（３Ｓ，４Ｒ）−４−（５−シアノ−４−｛［（２−メチルピリジン−３−イル）オキシ］メチル｝−１Ｈ−ピラゾール−１−イル）−３−フルオロピペリジン−１−カルボキシレート；
１−メチルシクロプロピル（３Ｒ，４Ｓ）−４−（５−シアノ−４−｛［（２−メチルピリジン−３−イル）オキシ］メチル｝−１Ｈ−ピラゾール−１−イル）−３−フルオロピペリジン−１−カルボキシレート；
ｔｅｒｔ−ブチル４−（５−シアノ−４−｛［４−（１Ｈ−１，２，３−トリアゾール−１−イル）フェノキシ］メチル｝−１Ｈ−ピラゾール−１−イル）ピペリジン−１−カルボキシレート；
ｔｅｒｔ−ブチル４−（５−シアノ−４−｛［４−（２Ｈ−１，２，３−トリアゾール−２−イル）フェノキシ］メチル｝−１Ｈ−ピラゾール−１−イル）ピペリジン−１−カルボキシレート；
１−メチルシクロプロピル４−（４−（（４−（１Ｈ−１，２，３−トリアゾール−１−イル）フェノキシ）メチル）−５−シアノ−１Ｈ−ピラゾール−１−イル）ピペリジン−１−カルボキシレート；
１−メチルシクロプロピル４−（４−（（４−（２Ｈ−１，２，３−トリアゾール−２−イル）フェノキシ）メチル）−５−シアノ−１Ｈ−ピラゾール−１−イル）ピペリジン−１−カルボキシレート；
ｔｅｒｔ−ブチル４−［５−シアノ−４−（｛［１−（メチルスルホニル）ピペリジン−４−イル］オキシ｝メチル）−１Ｈ−ピラゾール−１−イル］ピペリジン−１−カルボキシレート；
ｔｅｒｔ−ブチル４−［５−シアノ−４−（｛２−フルオロ−４−［（２−ヒドロキシエチル）（メチル）カルバモイル］フェノキシ｝メチル）−１Ｈ−ピラゾール−１−イル］ピペリジン−１−カルボキシレート；
ｔｅｒｔ−ブチル４−［５−シアノ−４−（｛２−フルオロ−４−［（３−ヒドロキシピロリジン−１−イル）カルボニル］フェノキシ｝メチル）−１Ｈ−ピラゾール−１−イル］ピペリジン−１−カルボキシレート；
ｔｅｒｔ−ブチル４−（４−｛［４−（アゼチジン−１−イルカルボニル）−２−フルオロフェノキシ］メチル｝−５−シアノ−１Ｈ−ピラゾール−１−イル）ピペリジン−１−カルボキシレート；
１−メチルシクロプロピル４−［５−シアノ−４−（｛［１−（メチルスルホニル）ピペリジン−４−イル］オキシ｝メチル）−１Ｈ−ピラゾール−１−イル］ピペリジン−１−カルボキシレート；
１−メチルシクロプロピル４−（５−シアノ−４−（（２−フルオロ−４−（１Ｈ−１，２，３−トリアゾール−１−イル）フェノキシ）メチル）−１Ｈ−ピラゾール−１−イル）ピペリジン−１−カルボキシレート；
イソプロピル４−（５−シアノ−４−（（２−フルオロ−４−（１Ｈ−１，２，３−トリアゾール−１−イル）フェノキシ）メチル）−１Ｈ−ピラゾール−１−イル）ピペリジン−１−カルボキシレート；
１−（１−（５−エチルピリミジン−２−イル）ピペリジン−４−イル）−４−（（２−フルオロ−４−（１Ｈ−１，２，３−トリアゾール−１−イル）フェノキシ）メチル）−１Ｈ−ピラゾール−５−カルボニトリル；
イソプロピル４−（４−（（４−（１Ｈ−１，２，３−トリアゾール−１−イル）フェノキシ）メチル）−５−シアノ−１Ｈ−ピラゾール−１−イル）ピペリジン−１−カルボキシレート；
４−（（４−（１Ｈ−１，２，３−トリアゾール−１−イル）フェノキシ）メチル）−１−（１−（５−エチルピリミジン−２−イル）ピペリジン−４−イル）−１Ｈ−ピラゾール−５−カルボニトリル；
イソプロピル４−（４−（（４−（２Ｈ−１，２，３−トリアゾール−２−イル）フェノキシ）メチル）−５−シアノ−１Ｈ−ピラゾール−１−イル）ピペリジン−１−カルボキシレート；
４−（（４−（２Ｈ−１，２，３−トリアゾール−２−イル）フェノキシ）メチル）−１−（１−（５−エチルピリミジン−２−イル）ピペリジン−４−イル）−１Ｈ−ピラゾール−５−カルボニトリル；
１−メチルシクロプロピル４−（５−シアノ−４−（（２−フルオロ−４−（２Ｈ−１，２，３−トリアゾール−２−イル）フェノキシ）メチル）−１Ｈ−ピラゾール−１−イル）ピペリジン−１−カルボキシレート；
イソプロピル４−（５−シアノ−４−（（２−フルオロ−４−（２Ｈ−１，２，３−トリアゾール−２−イル）フェノキシ）メチル）−１Ｈ−ピラゾール−１−イル）ピペリジン−１−カルボキシレート；
１−（１−（５−エチルピリミジン−２−イル）ピペリジン−４−イル）−４−（（２−フルオロ−４−（２Ｈ−１，２，３−トリアゾール−２−イル）フェノキシ）メチル）−１Ｈ−ピラゾール−５−カルボニトリル；
１−メチルシクロプロピル４−（４−（（５−（１Ｈ−１，２，３−トリアゾール−１−イル）ピリジン−２−イルオキシ）メチル）−５−シアノ−１Ｈ−ピラゾール−１−イル）ピペリジン−１−カルボキシレート；
イソプロピル４−（４−（（５−（１Ｈ−１，２，３−トリアゾール−１−イル）ピリジン−２−イルオキシ）メチル）−５−シアノ−１Ｈ−ピラゾール−１−イル）ピペリジン−１−カルボキシレート；
１−メチルシクロプロピル４−（５−シアノ−４−（（３−フルオロ−４−（１Ｈ−テトラゾール−１−イル）フェノキシ）メチル）−１Ｈ−ピラゾール−１−イル）ピペリジン−１−カルボキシレート；
イソプロピル４−（５−シアノ−４−（（３−フルオロ−４−（１Ｈ−テトラゾール−１−イル）フェノキシ）メチル）−１Ｈ−ピラゾール−１−イル）ピペリジン−１−カルボキシレート；
１−（１−（５−エチルピリミジン−２−イル）ピペリジン−４−イル）−４−（（３−フルオロ−４−（１Ｈ−テトラゾール−１−イル）フェノキシ）メチル）−１Ｈ−ピラゾール−５−カルボニトリル；
４−（（５−（１Ｈ−１，２，３−トリアゾール−１−イル）ピリジン−２−イルオキシ）メチル）−１−（１−（５−エチルピリミジン−２−イル）ピペリジン−４−イル）−１Ｈ−ピラゾール−５−カルボニトリル；
１−（１−（５−エチルピリミジン−２−イル）ピペリジン−４−イル）−４−（（２−メチル−６−（１Ｈ−１，２，３−トリアゾール−１−イル）ピリジン−３−イルオキシ）メチル）−１Ｈ−ピラゾール−５−カルボニトリル；
イソプロピル４−（５−シアノ−４−（（２−メチル−６−（１Ｈ−１，２，３−トリアゾール−１−イル）ピリジン−３−イルオキシ）メチル）−１Ｈ−ピラゾール−１−イル）ピペリジン−１−カルボキシレート；
１−メチルシクロプロピル４−（５−シアノ−４−（（２−メチル−６−（１Ｈ−１，２，３−トリアゾール−１−イル）ピリジン−３−イルオキシ）メチル）−１Ｈ−ピラゾール−１−イル）ピペリジン−１−カルボキシレート；
１−（１−（５−エチルピリミジン−２−イル）ピペリジン−４−イル）−４−（（２−フルオロ−４−（１−メチル−１Ｈ−テトラゾール−５−イル）フェノキシ）メチル）−１Ｈ−ピラゾール−５−カルボニトリル；
１−メチルシクロプロピル４−（４−（（４−（アゼチジン−１−カルボニル）−２−フルオロフェノキシ）メチル）−５−シアノ−１Ｈ−ピラゾール−１−イル）ピペリジン−１−カルボキシレート；
イソプロピル４−（４−（（４−（アゼチジン−１−カルボニル）−２−フルオロフェノキシ）メチル）−５−シアノ−１Ｈ−ピラゾール−１−イル）ピペリジン−１−カルボキシレート；および
４−（（４−（アゼチジン−１−カルボニル）−２−フルオロフェノキシ）メチル）−１−（１−（５−エチルピリミジン−２−イル）ピペリジン−４−イル）−１Ｈ−ピラゾール−５−カルボニトリル。
【請求項２】
下記からなる群から選択される化合物または薬学的に許容できるその塩：
１−メチルシクロプロピル４−（５−シアノ−４−｛［２−フルオロ−４−（１−メチル−１Ｈ−テトラゾール−５−イル）フェノキシ］メチル｝−１Ｈ−ピラゾール−１−イル）ピペリジン−１−カルボキシレート；
１−メチルシクロプロピル４−（５−シアノ−４−｛［４−（１Ｈ−テトラゾール−１−イル）フェノキシ］メチル｝−１Ｈ−ピラゾール−１−イル）ピペリジン−１−カルボキシレート；
１−［１−（５−エチルピリミジン−２−イル）ピペリジン−４−イル］−４−｛［４−（１Ｈ−テトラゾール−１−イル）フェノキシ］メチル｝−１Ｈ−ピラゾール−５−カルボニトリル；
４−［（４−シアノ−２−フルオロフェノキシ）メチル］−１−［１−（５−エチルピリミジン−２−イル）ピペリジン−４−イル］−１Ｈ−ピラゾール−５−カルボニトリル；および
１−メチルシクロプロピル４−｛５−シアノ−４−［（４−シアノ−２−フルオロフェノキシ）メチル］−１Ｈ−ピラゾール−１−イル｝ピペリジン−１−カルボキシレート。
【請求項３】
治療有効量で存在する請求項１または２のいずれかに記載の化合物を、少なくとも１種の薬学的に許容できる賦形剤と混合された形で含む医薬組成物。
【請求項４】
抗肥満薬および抗糖尿病薬からなる群から選択される少なくとも１種の追加の薬剤をさらに含む、請求項３に記載の組成物。
【請求項５】
前記抗肥満薬が、ジルロタピド、ミトラタピド、インプリタピド、Ｒ５６９１８（ＣＡＳ番号４０３９８７）、ＣＡＳ番号９１３５４１−４７−６、ロルカセリン、セチリスタット、ＰＹＹ３−３６、ナルトレキソン、オレオイル−エストロン、オビネピチド、プラムリンチド、テソフェンシン、レプチン、リラグルチド、ブロモクリプチン、オルリスタット、エキセナチド、ＡＯＤ−９６０４（ＣＡＳ番号２２１２３１−１０−３）およびシブトラミンからなる群から選択される、請求項４に記載の組成物。
【請求項６】
前記抗糖尿病薬が、メトホルミン、アセトヘキサミド、クロルプロパミド、ダイアビニーズ、グリベンクラミド、グリピジド、グリブリド、グリメピリド、グリクラジド、グリペンチド、グリキドン、グリソラミド、トラザミド、トルブタミド、テンダミスタット、トレスタチン、アカルボース、アジポシン、カミグリボース、エミグリテート、ミグリトール、ボグリボース、プラディマイシン−Ｑ、サルボスタチン、バラグリタゾン、シグリタゾン、ダルグリタゾン、エングリタゾン、イサグリタゾン、ピオグリタゾン、ロシグリタゾン、トログリタゾン、エキセンジン−３、エキセンジン−４、トロズスクエミン、レセルバトロール、ヒルチオサール抽出物、シタグリプチン、ビルダグリプチン、アログリプチンおよびサクサグリプチンからなる群から選択される、請求項４に記載の組成物。
【請求項７】
糖尿病を治療する方法であって、有効量の請求項１または２に記載の化合物の、それを必要とする患者への投与を含む方法。
【請求項８】
代謝性または代謝関連の疾患、状態または障害を治療する方法であって、患者に治療有効量の請求項１または２に記載の化合物を投与するステップを含む方法。
【請求項９】
高脂血症、Ｉ型糖尿病、ＩＩ型糖尿病、特発性Ｉ型糖尿病（Ｉｂ型）、成人潜在性自己免疫性糖尿病、早発性２型糖尿病、若年性非定型糖尿病、若年成人発症型糖尿病、栄養不良関連糖尿病、妊娠糖尿病、冠状動脈性心疾患、虚血性脳卒中、血管形成後の再狭窄、末梢血管疾患、間欠性跛行、心筋梗塞（例えば、壊死およびアポトーシス）、脂質異常症、食後高脂血症、耐糖能障害状態、空腹時血漿グルコース異常状態、代謝性アシドーシス、ケトーシス、関節炎、肥満、骨粗鬆症、高血圧、うっ血性心不全、左室肥大、末梢動脈疾患、糖尿病性網膜症、黄斑変性、白内障、糖尿病性腎症、糸球体硬化症、慢性腎不全、糖尿病性神経障害、代謝症候群、Ｘ症候群、月経前症候群、冠状動脈性心疾患、狭心症、血栓症、アテローム硬化症、心筋梗塞、一過性脳虚血発作、脳卒中、血管再狭窄、高血糖、高インスリン血症、高脂血症、高トリグリセリド血症、インスリン抵抗性、グルコース代謝障害、耐糖能障害状態、空腹時血漿グルコース異常状態、肥満、勃起機能不全、皮膚および結合組織の障害、足部潰瘍および潰瘍性大腸炎、内皮機能不全および血管コンプライアンス障害、高アポＢリポタンパク質血症、アルツハイマー病、統合失調症、認知障害、炎症性腸疾患、潰瘍性大腸炎、クローン病ならびに過敏性腸症候群からなる群から選択される状態を治療する方法であって、有効量の請求項１または２に記載の化合物の投与を含む方法。
【請求項１０】
代謝性または代謝関連の疾患、状態または障害を治療する方法であって、そのような治療を必要とする患者に、
（ｉ）請求項３に記載の第１の組成物と、
（ｉｉ）抗肥満薬および抗糖尿病薬からなる群から選択される少なくとも１種の追加の薬剤ならびに少なくとも１種の薬学的に許容できる賦形剤を含む第２の組成物と
を含む２種の別々の医薬組成物を投与するステップを含む方法。
【請求項１１】
前記第１の組成物および前記第２の組成物を同時に投与する、請求項１０に記載の方法。
【請求項１２】
前記第１の組成物および前記第２の組成物を順次に、任意の順序で投与する、請求項１０に記載の方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、新たなクラスのシアノピラゾール、それらの化合物を含有する医薬組成物およびＧタンパク質共役受容体ＧＰＲ１１９の活性を調節するためのその使用に関する。
【背景技術】
【０００２】
糖尿病は、異常なグルコースホメオスターシスの結果として高レベルの血糖が生じる障害である。最も一般的な形態の糖尿病はＩ型糖尿病（インスリン依存型糖尿病とも称される）およびＩＩ型糖尿病（非インスリン依存型糖尿病とも称される）である。全ての糖尿病性症例のうちのほぼ９０％を占めるＩＩ型糖尿病は、微小血管性合併症（網膜障害、神経障害および腎障害を包含）、さらに大血管性合併症（加速化アテローム硬化症、冠状動脈性心疾患および脳卒中を包含）をもたらす重篤な進行性疾患である。
【０００３】
現在、糖尿病の治療薬は存在しない。その疾患のための標準的な治療は限られており、血糖値を管理して、合併症を最小限に抑える、または遅らせることに重点を置いている。現行の治療は、インスリン抵抗性（メトホルミン、チアゾリジンジオン）またはβ細胞からのインスリン放出（スルホニル尿素、エキセナチド）のいずれかを標的化している。β細胞の脱分極を介して働くスルホニル尿素および他の化合物は、循環グルコース濃度に左右されることなくインスリン分泌を刺激するので、低血糖を促進する。認可されている薬物の１種であるエキセナチドは、高グルコースの存在下でのみインスリン分泌を刺激するが、経口生物学的利用能を欠くので、注射しなければならない。ジペプチジルペプチダーゼＩＶ阻害薬であるシタグリプチンは、インクレチンホルモンの血中レベルを上昇させる新しい薬物であり、そのインクレチンホルモンは、インスリン分泌を増加させ、グルカゴン分泌を減少させることができ、十分には特徴付けられていない他の作用も有し得る。しかしながら、シタグリプチンおよび他のジペプチジルペプチダーゼＩＶ阻害薬は、他のホルモンおよびペプチドの組織レベルにも影響を及ぼすことがあり、この比較的広範な作用による長期的な結果については、完全には調査されていない。
【０００４】
ＩＩ型糖尿病では、筋細胞、脂肪細胞および肝細胞がインスリンに正常に反応できない。この状態（インスリン抵抗性）は、細胞のインスリン受容体数の減少、細胞のシグナル伝達経路の破断またはその両方のためであり得る。初めはβ細胞は、インスリン産生量を増やすことによってインスリン抵抗性を補う。しかしながら最終的には、β細胞は、正常なグルコースレベル（正常血糖）を維持するのに十分なインスリンを産生できなくなり、このことは、ＩＩ型糖尿病への進行を示す。
【０００５】
ＩＩ型糖尿病では、β細胞の機能不全と組み合わさったインスリン抵抗性によって、空腹時高血糖が生じる。β細胞異常機能不全には２つの態様が存在する。即ち、１）（非刺激性の低グルコース濃度で起こる）基礎インスリン放出の増加（これは、肥満のインスリン抵抗性前糖尿病段階で、さらにＩＩ型糖尿病で観察される）、および２）高血糖攻撃に反応して、インスリン放出が、すでに上昇している基礎レベルを上回って増加しないこと（これは、前糖尿病段階では起こらず、正常血糖のインスリン抵抗性段階からＩＩ型糖尿病へと移行する前兆となることがある）。後者の態様を治療するための現行の療法には、内因性の貯蔵インスリンの放出を誘発するためのβ細胞のＡＴＰ感受性カリウムチャネルの阻害薬および外因性インスリンの投与が包含される。どちらも血糖値の正確な正常化を達成するものではなく、低血糖を惹起するリスクを有する。
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００６】
したがって、グルコース依存的に機能する作用物質の発見に対して、多大な関心が存在する。このように機能する生理学的なシグナル伝達経路は、腸管ペプチドであるＧＬＰ−１およびＧＩＰを含めてよく知られている。それらのホルモンは、同種のＧタンパク質共役受容体を介してシグナル伝達して、膵臓β細胞におけるｃＡＭＰの産生を刺激する。空腹時または食前状態の間は、ｃＡＭＰが増加しても、インスリン放出は刺激されないようである。しかしながら、ＡＴＰ感受性カリウムチャネル、電位感受性カリウムチャネルおよび開口分泌機構を包含するｃＡＭＰのいくつかの生化学的標的は、食後のグルコース刺激によるインスリン分泌が顕著に増強されるように調節される。したがって、同様に機能する新規なβ細胞ＧＰＣＲ（ＧＰＲ１１９を包含）のアゴニスト調節薬もまた、ＩＩ型糖尿病患者において、内因性インスリンの放出を刺激し、グルコースレベルの正常化を促進するであろう。例えばＧＬＰ−１刺激の結果としてｃＡＭＰが増加すると、β細胞増殖が促進され、β細胞死が阻害され、したがって膵島質量が向上することも示されている。β細胞質量に対するこのプラスの効果は、不十分なインスリンしか産生されないＩＩ型糖尿病において有益であるはずである。
【０００７】
代謝性疾患が他の生理系に不利な作用を有することはよく知られており、多発性疾患の状態（例えば、「Ｘ症候群」におけるＩ型糖尿病、ＩＩ型糖尿病、不十分な耐糖能、インスリン抵抗性、高血糖症、高脂血症、高トリグリセリド血症、高コレステロール血症、脂質異常症、肥満または心臓血管疾患）または腎疾患および末梢神経障害などの、糖尿病に続いて生じる二次疾患が多くの場合に同時に出現する。したがって、糖尿病状態の治療は、そのような相互に関連した病態に対して有益であるはずである。
【課題を解決するための手段】
【０００８】
本発明によって、新たなクラスのＧＰＲ１１９調節薬が発見された。これらの化合物には、下記の化合物または薬学的に許容できるそれらの塩が包含される：
イソプロピル４−｛５−シアノ−４−［（２，４−ジフルオロフェノキシ）メチル］−１Ｈ−ピラゾール−１−イル｝ピペリジン−１−カルボキシレート；
イソプロピル４−｛５−シアノ−４−［（２−メチルフェノキシ）メチル］−１Ｈ−ピラゾール−１−イル｝ピペリジン−１−カルボキシレート；
１−メチルシクロプロピル４−｛５−シアノ−４−［（２，５−ジフルオロフェノキシ）メチル］−１Ｈ−ピラゾール−１−イル｝ピペリジン−１−カルボキシレート；
１−メチルシクロプロピル４−｛５−シアノ−４−［（２，３−ジフルオロフェノキシ）メチル］−１Ｈ−ピラゾール−１−イル｝ピペリジン−１−カルボキシレート；
１−メチルシクロプロピル４−｛４−［（４−カルバモイル−２−フルオロフェノキシ）メチル］−５−シアノ−１Ｈ−ピラゾール−１−イル｝ピペリジン−１−カルボキシレート；
１−メチルシクロプロピル４−｛４−［（４−カルバモイルフェノキシ）メチル］−５−シアノ−１Ｈ−ピラゾール−１−イル｝ピペリジン−１−カルボキシレート；
１−メチルシクロプロピル４−（５−シアノ−４−（（４−シアノフェノキシ）メチル）−１Ｈ−ピラゾール−１−イル）ピペリジン−１−カルボキシレート；
イソプロピル４−（４−（（４−（１Ｈ−ピラゾール−１−イル）フェノキシ）メチル）−５−シアノ−１Ｈ−ピラゾール−１−イル）ピペリジン−１−カルボキシレート；
イソプロピル４−（５−シアノ−４−（（２−フルオロ−４−（１Ｈ−テトラゾール−５−イル）フェノキシ）メチル）−１Ｈ−ピラゾール−１−イル）ピペリジン−１−カルボキシレートおよびイソプロピル４−（５−シアノ−４−（（２−フルオロ−４−（２Ｈ−テトラゾール−５−イル）フェノキシ）メチル）−１Ｈ−ピラゾール−１−イル）ピペリジン−１−カルボキシレート；
イソプロピル４−（５−シアノ−４−（（２−フルオロ−４−（１−メチル−１Ｈ−テトラゾール−５−イル）フェノキシ）メチル）−１Ｈ−ピラゾール−１−イル）ピペリジン−１−カルボキシレート；
イソプロピル４−（５−シアノ−４−（（２−フルオロ−４−（２−メチル−２Ｈ−テトラゾール−５−イル）フェノキシ）メチル）−１Ｈ−ピラゾール−１−イル）ピペリジン−１−カルボキシレート；
イソプロピル４−（５−シアノ−４−（（２−フルオロ−４−（２−（２−ヒドロキシエチル）−２Ｈ−テトラゾール−５−イル）フェノキシ）メチル）−１Ｈ−ピラゾール−１−イル）ピペリジン−１−カルボキシレート；
イソプロピル４−（５−シアノ−４−（（２−フルオロ−４−（１−（２−ヒドロキシエチル）−１Ｈ−テトラゾール−５−イル）フェノキシ）メチル）−１Ｈ−ピラゾール−１−イル）ピペリジン−１−カルボキシレート；
１−メチルシクロプロピル４−（５−シアノ−４−｛［２−フルオロ−４−（１−メチル−１Ｈ−テトラゾール−５−イル）フェノキシ］メチル｝−１Ｈ−ピラゾール−１−イル）ピペリジン−１−カルボキシレート；
１−メチルシクロプロピル４−（５−シアノ−４−｛［４−（１−メチル−１Ｈ−テトラゾール−５−イル）フェノキシ］メチル｝−１Ｈ−ピラゾール−１−イル）ピペリジン−１−カルボキシレート；
１−メチルシクロプロピル４−（４−（（４−カルバモイル−３−フルオロフェノキシ）メチル）−５−シアノ−１Ｈ−ピラゾール−１−イル）ピペリジン−１−カルボキシレート；
イソプロピル４−（５−シアノ−４−｛１−［２−フルオロ−４−（メチルスルホニル）フェノキシ］エチル｝−１Ｈ−ピラゾール−１−イル）ピペリジン−１−カルボキシレート；
イソプロピル４−（５−シアノ−４−｛１−［（２−メチルピリジン−３−イル）オキシ］エチル｝−１Ｈ−ピラゾール−１−イル）ピペリジン−１−カルボキシレート；
イソプロピル４−（５−シアノ−４−｛２−［２−フルオロ−４−（メチルスルホニル）フェニル］プロピル｝−１Ｈ−ピラゾール−１−イル）ピペリジン−１−カルボキシレート；
１−メチルシクロプロピル４−（５−シアノ−４−｛［（２−メチルピリジン−３−イル）オキシ］メチル｝−１Ｈ−ピラゾール−１−イル）ピペリジン−１−カルボキシレート；
１−メチルシクロプロピル４−｛５−シアノ−４−［（２，３，６−トリフルオロフェノキシ）メチル］−１Ｈ−ピラゾール−１−イル｝ピペリジン−１−カルボキシレート；
イソプロピル４−｛５−シアノ−４−［（２，３，６−トリフルオロフェノキシ）メチル］−１Ｈ−ピラゾール−１−イル｝ピペリジン−１−カルボキシレート；
イソプロピル４−（５−シアノ−４−｛［２−フルオロ−４−（１−メチル−１Ｈ−イミダゾール−２−イル）フェノキシ］メチル｝−１Ｈ−ピラゾール−１−イル）ピペリジン−１−カルボキシレート；
イソプロピル４−（５−シアノ−４−｛［２−フルオロ−４−（１−メチル−１Ｈ−イミダゾール−５−イル）フェノキシ］メチル｝−１Ｈ−ピラゾール−１−イル）ピペリジン−１−カルボキシレート；
イソプロピル４−［５−シアノ−４−（｛［２−メチル−６−（１Ｈ−１，２，４−トリアゾール−１−イル）ピリジン−３−イル］オキシ｝メチル）−１Ｈ−ピラゾール−１−イル］ピペリジン−１−カルボキシレート；
イソプロピル４−［５−シアノ−４−（｛［２−メチル−６−（１Ｈ−１，２，４−トリアゾール−１−イル）ピリジン−３−イル］アミノ｝メチル）−１Ｈ−ピラゾール−１−イル］ピペリジン−１−カルボキシレート；
イソプロピル４−［５−シアノ−４−（｛［２−メチル−６−（メチルスルホニル）ピリジン−３−イル］アミノ｝メチル）−１Ｈ−ピラゾール−１−イル］ピペリジン−１−カルボキシレート；
１−メチルシクロプロピル４−（５−シアノ−４−｛［４−（１Ｈ−テトラゾール−１−イル）フェノキシ］メチル｝−１Ｈ−ピラゾール−１−イル）ピペリジン−１−カルボキシレート；
１−［１−（５−エチルピリミジン−２−イル）ピペリジン−４−イル］−４−｛［４−（１Ｈ−テトラゾール−１−イル）フェノキシ］メチル｝−１Ｈ−ピラゾール−５−カルボニトリル；
イソプロピル４−｛５−シアノ−４−［（３−シアノフェノキシ）メチル］−１Ｈ−ピラゾール−１−イル｝ピペリジン−１−カルボキシレート；
イソプロピル４−｛５−シアノ−４−［（４−シアノ−３−メチルフェノキシ）メチル］−１Ｈ−ピラゾール−１−イル｝ピペリジン−１−カルボキシレート；
イソプロピル４−｛５−シアノ−４−［（４−シアノフェノキシ）メチル］−１Ｈ−ピラゾール−１−イル｝ピペリジン−１−カルボキシレート；
４−［（４−シアノ−２−フルオロフェノキシ）メチル］−１−［１−（５−エチルピリミジン−２−イル）ピペリジン−４−イル］−１Ｈ−ピラゾール−５−カルボニトリル；
ｔｅｒｔ−ブチル４−｛５−シアノ−４−［（４−シアノ−２−フルオロフェノキシ）メチル］−１Ｈ−ピラゾール−１−イル｝ピペリジン−１−カルボキシレート；
イソプロピル４−｛５−シアノ−４−［（２−シアノ−４−フルオロフェノキシ）メチル］−１Ｈ−ピラゾール−１−イル｝ピペリジン−１−カルボキシレート；
イソプロピル４−（５−シアノ−４−｛［４−（ジメチルカルバモイル）−２−フルオロフェノキシ］メチル｝−１Ｈ−ピラゾール−１−イル）ピペリジン−１−カルボキシレート；
１−メチルシクロプロピル４−（５−シアノ−４−｛［４−（ジメチルカルバモイル）−２−フルオロフェノキシ］メチル｝−１Ｈ−ピラゾール−１−イル）ピペリジン−１−カルボキシレート；
１−メチルシクロプロピル４−（５−シアノ−４−｛［２−フルオロ−４−（メチルカルバモイル）フェノキシ］メチル｝−１Ｈ−ピラゾール−１−イル）ピペリジン−１−カルボキシレート；
４−（｛５−シアノ−１−［１−（５−エチルピリミジン−２−イル）ピペリジン−４−イル］−１Ｈ−ピラゾール−４−イル｝メトキシ）−３−フルオロ−Ｎ，Ｎ−ジメチルベンズアミド；
１−メチルシクロプロピル４−｛５−シアノ−４−［（４−シアノ−２−フルオロフェノキシ）メチル］−１Ｈ−ピラゾール−１−イル｝ピペリジン−１−カルボキシレート；
ｔｅｒｔ−ブチル（３Ｓ，４Ｓ）−４−（５−シアノ−４−｛［２−フルオロ−４−（メチルカルバモイル）フェノキシ］メチル｝−１Ｈ−ピラゾール−１−イル）−３−フルオロピペリジン−１−カルボキシレート；
ｔｅｒｔ−ブチル（３Ｒ，４Ｓ）−４−（５−シアノ−４−｛［２−フルオロ−４−（メチルカルバモイル）フェノキシ］メチル｝−１Ｈ−ピラゾール−１−イル）−３−フルオロピペリジン−１−カルボキシレート；
１−メチルシクロプロピル（３Ｓ，４Ｓ）−４−（５−シアノ−４−｛［２−フルオロ−４−（メチルカルバモイル）フェノキシ］メチル｝−１Ｈ−ピラゾール−１−イル）−３−フルオロピペリジン−１−カルボキシレート；
１−メチルシクロプロピル（３Ｒ，４Ｒ）−４−（５−シアノ−４−｛［２−フルオロ−４−（メチルカルバモイル）フェノキシ］メチル｝−１Ｈ−ピラゾール−１−イル）−３−フルオロピペリジン−１−カルボキシレート；
ｔｅｒｔ−ブチル（３Ｓ，４Ｓ）−４−（５−シアノ−４−｛［（２−メチルピリジン−３−イル）オキシ］メチル｝−１Ｈ−ピラゾール−１−イル）−３−フルオロピペリジン−１−カルボキシレート；
ｔｅｒｔ−ブチル（３Ｓ，４Ｒ）−４−（５−シアノ−４−｛［（２−メチルピリジン−３−イル）オキシ］メチル｝−１Ｈ−ピラゾール−１−イル）−３−フルオロピペリジン−１−カルボキシレート；
１−メチルシクロプロピル（３Ｓ，４Ｒ）−４−（５−シアノ−４−｛［（２−メチルピリジン−３−イル）オキシ］メチル｝−１Ｈ−ピラゾール−１−イル）−３−フルオロピペリジン−１−カルボキシレート；
１−メチルシクロプロピル（３Ｓ，４Ｒ）−４−（５−シアノ−４−｛［（２−メチルピリジン−３−イル）オキシ］メチル｝−１Ｈ−ピラゾール−１−イル）−３−フルオロピペリジン−１−カルボキシレート；
１−メチルシクロプロピル（３Ｒ，４Ｓ）−４−（５−シアノ−４−｛［（２−メチルピリジン−３−イル）オキシ］メチル｝−１Ｈ−ピラゾール−１−イル）−３−フルオロピペリジン−１−カルボキシレート；
ｔｅｒｔ−ブチル４−（５−シアノ−４−｛［４−（１Ｈ−１，２，３−トリアゾール−１−イル）フェノキシ］メチル｝−１Ｈ−ピラゾール−１−イル）ピペリジン−１−カルボキシレート；
ｔｅｒｔ−ブチル４−（５−シアノ−４−｛［４−（２Ｈ−１，２，３−トリアゾール−２−イル）フェノキシ］メチル｝−１Ｈ−ピラゾール−１−イル）ピペリジン−１−カルボキシレート；
１−メチルシクロプロピル４−（４−（（４−（１Ｈ−１，２，３−トリアゾール−１−イル）フェノキシ）メチル）−５−シアノ−１Ｈ−ピラゾール−１−イル）ピペリジン−１−カルボキシレート；
１−メチルシクロプロピル４−（４−（（４−（２Ｈ−１，２，３−トリアゾール−２−イル）フェノキシ）メチル）−５−シアノ−１Ｈ−ピラゾール−１−イル）ピペリジン−１−カルボキシレート；
ｔｅｒｔ−ブチル４−［５−シアノ−４−（｛［１−（メチルスルホニル）ピペリジン−４−イル］オキシ｝メチル）−１Ｈ−ピラゾール−１−イル］ピペリジン−１−カルボキシレート；
ｔｅｒｔ−ブチル４−［５−シアノ−４−（｛２−フルオロ−４−［（２−ヒドロキシエチル）（メチル）カルバモイル］フェノキシ｝メチル）−１Ｈ−ピラゾール−１−イル］ピペリジン−１−カルボキシレート；
ｔｅｒｔ−ブチル４−［５−シアノ−４−（｛２−フルオロ−４−［（３−ヒドロキシピロリジン−１−イル）カルボニル］フェノキシ｝メチル）−１Ｈ−ピラゾール−１−イル］ピペリジン−１−カルボキシレート；
ｔｅｒｔ−ブチル４−（４−｛［４−（アゼチジン−１−イルカルボニル）−２−フルオロフェノキシ］メチル｝−５−シアノ−１Ｈ−ピラゾール−１−イル）ピペリジン−１−カルボキシレート；
１−メチルシクロプロピル４−［５−シアノ−４−（｛［１−（メチルスルホニル）ピペリジン−４−イル］オキシ｝メチル）−１Ｈ−ピラゾール−１−イル］ピペリジン−１−カルボキシレート；
１−メチルシクロプロピル４−（５−シアノ−４−（（２−フルオロ−４−（１Ｈ−１，２，３−トリアゾール−１−イル）フェノキシ）メチル）−１Ｈ−ピラゾール−１−イル）ピペリジン−１−カルボキシレート；
イソプロピル４−（５−シアノ−４−（（２−フルオロ−４−（１Ｈ−１，２，３−トリアゾール−１−イル）フェノキシ）メチル）−１Ｈ−ピラゾール−１−イル）ピペリジン−１−カルボキシレート；
１−（１−（５−エチルピリミジン−２−イル）ピペリジン−４−イル）−４−（（２−フルオロ−４−（１Ｈ−１，２，３−トリアゾール−１−イル）フェノキシ）メチル）−１Ｈ−ピラゾール−５−カルボニトリル；
イソプロピル４−（４−（（４−（１Ｈ−１，２，３−トリアゾール−１−イル）フェノキシ）メチル）−５−シアノ−１Ｈ−ピラゾール−１−イル）ピペリジン−１−カルボキシレート；
４−（（４−（１Ｈ−１，２，３−トリアゾール−１−イル）フェノキシ）メチル）−１−（１−（５−エチルピリミジン−２−イル）ピペリジン−４−イル）−１Ｈ−ピラゾール−５−カルボニトリル；
イソプロピル４−（４−（（４−（２Ｈ−１，２，３−トリアゾール−２−イル）フェノキシ）メチル）−５−シアノ−１Ｈ−ピラゾール−１−イル）ピペリジン−１−カルボキシレート；
４−（（４−（２Ｈ−１，２，３−トリアゾール−２−イル）フェノキシ）メチル）−１−（１−（５−エチルピリミジン−２−イル）ピペリジン−４−イル）−１Ｈ−ピラゾール−５−カルボニトリル；
１−メチルシクロプロピル４−（５−シアノ−４−（（２−フルオロ−４−（２Ｈ−１，２，３−トリアゾール−２−イル）フェノキシ）メチル）−１Ｈ−ピラゾール−１−イル）ピペリジン−１−カルボキシレート；
イソプロピル４−（５−シアノ−４−（（２−フルオロ−４−（２Ｈ−１，２，３−トリアゾール−２−イル）フェノキシ）メチル）−１Ｈ−ピラゾール−１−イル）ピペリジン−１−カルボキシレート；
１−（１−（５−エチルピリミジン−２−イル）ピペリジン−４−イル）−４−（（２−フルオロ−４−（２Ｈ−１，２，３−トリアゾール−２−イル）フェノキシ）メチル）−１Ｈ−ピラゾール−５−カルボニトリル；
１−メチルシクロプロピル４−（４−（（５−（１Ｈ−１，２，３−トリアゾール−１−イル）ピリジン−２−イルオキシ）メチル）−５−シアノ−１Ｈ−ピラゾール−１−イル）ピペリジン−１−カルボキシレート；
イソプロピル４−（４−（（５−（１Ｈ−１，２，３−トリアゾール−１−イル）ピリジン−２−イルオキシ）メチル）−５−シアノ−１Ｈ−ピラゾール−１−イル）ピペリジン−１−カルボキシレート；
１−メチルシクロプロピル４−（５−シアノ−４−（（３−フルオロ−４−（１Ｈ−テトラゾール−１−イル）フェノキシ）メチル）−１Ｈ−ピラゾール−１−イル）ピペリジン−１−カルボキシレート；
イソプロピル４−（５−シアノ−４−（（３−フルオロ−４−（１Ｈ−テトラゾール−１−イル）フェノキシ）メチル）−１Ｈ−ピラゾール−１−イル）ピペリジン−１−カルボキシレート；
１−（１−（５−エチルピリミジン−２−イル）ピペリジン−４−イル）−４−（（３−フルオロ−４−（１Ｈ−テトラゾール−１−イル）フェノキシ）メチル）−１Ｈ−ピラゾール−５−カルボニトリル；
４−（（５−（１Ｈ−１，２，３−トリアゾール−１−イル）ピリジン−２−イルオキシ）メチル）−１−（１−（５−エチルピリミジン−２−イル）ピペリジン−４−イル）−１Ｈ−ピラゾール−５−カルボニトリル；
１−（１−（５−エチルピリミジン−２−イル）ピペリジン−４−イル）−４−（（２−メチル−６−（１Ｈ−１，２，３−トリアゾール−１−イル）ピリジン−３−イルオキシ）メチル）−１Ｈ−ピラゾール−５−カルボニトリル；
イソプロピル４−（５−シアノ−４−（（２−メチル−６−（１Ｈ−１，２，３−トリアゾール−１−イル）ピリジン−３−イルオキシ）メチル）−１Ｈ−ピラゾール−１−イル）ピペリジン−１−カルボキシレート；
１−メチルシクロプロピル４−（５−シアノ−４−（（２−メチル−６−（１Ｈ−１，２，３−トリアゾール−１−イル）ピリジン−３−イルオキシ）メチル）−１Ｈ−ピラゾール−１−イル）ピペリジン−１−カルボキシレート；
１−（１−（５−エチルピリミジン−２−イル）ピペリジン−４−イル）−４−（（２−フルオロ−４−（１−メチル−１Ｈ−テトラゾール−５−イル）フェノキシ）メチル）−１Ｈ−ピラゾール−５−カルボニトリル；
１−メチルシクロプロピル４−（４−（（４−（アゼチジン−１−カルボニル）−２−フルオロフェノキシ）メチル）−５−シアノ−１Ｈ−ピラゾール−１−イル）ピペリジン−１−カルボキシレート；
イソプロピル４−（４−（（４−（アゼチジン−１−カルボニル）−２−フルオロフェノキシ）メチル）−５−シアノ−１Ｈ−ピラゾール−１−イル）ピペリジン−１−カルボキシレート；および
４−（（４−（アゼチジン−１−カルボニル）−２−フルオロフェノキシ）メチル）−１−（１−（５−エチルピリミジン−２−イル）ピペリジン−４−イル）−１Ｈ−ピラゾール−５−カルボニトリル。
【０００９】
これらの化合物は、Ｇタンパク質共役受容体の活性を調節する。より詳細には、化合物は、ＧＰＲ１１９を調節する。したがって、前記化合物は、ＧＰＲ１１９の活性が疾患の病理または症状に寄与する糖尿病などの疾患を治療するために有用である。そのような状態の例には、高脂血症、Ｉ型糖尿病、ＩＩ型糖尿病、特発性Ｉ型糖尿病（Ｉｂ型）、成人潜在性自己免疫性糖尿病（ＬＡＤＡ）、早発性２型糖尿病（ＥＯＤ）、若年性非定型糖尿病（ＹＯＡＤ）、若年成人発症型糖尿病（ＭＯＤＹ）、栄養不良関連糖尿病、妊娠糖尿病、冠状動脈性心疾患、虚血性脳卒中、血管形成後の再狭窄、末梢血管疾患、間欠性跛行、心筋梗塞（例えば、壊死およびアポトーシス）、脂質異常症、食後高脂血症、耐糖能障害（ＩＧＴ）状態、空腹時血漿グルコース異常（ｉｍｐａｉｒｅｄ  ｆａｓｔｉｎｇ  ｐｌａｓｍａ  ｇｌｕｃｏｓｅ）状態、代謝性アシドーシス、ケトーシス、関節炎、肥満、骨粗鬆症、高血圧、うっ血性心不全、左室肥大、末梢動脈疾患、糖尿病性網膜症、黄斑変性、白内障、糖尿病性腎症、糸球体硬化症、慢性腎不全、糖尿病性神経障害、代謝症候群、Ｘ症候群、月経前症候群、冠状動脈性心疾患、狭心症、血栓症、アテローム硬化症、一過性脳虚血発作、脳卒中、血管再狭窄、高血糖、高インスリン血症、高脂血症、高トリグリセリド血症、インスリン抵抗性、グルコース代謝障害、耐糖能障害状態、空腹時血漿グルコース異常状態、肥満、勃起機能不全、皮膚および結合組織の障害、足部潰瘍および潰瘍性大腸炎、内皮機能不全ならびに血管コンプライアンス障害が包含される。化合物は、アルツハイマー病、統合失調症および認知障害などの神経障害を治療するために使用することができる。化合物はまた、炎症性腸疾患、潰瘍性大腸炎、クローン病、過敏性腸症候群などの胃腸疾患においても有益であろう。上述のとおり、化合物はまた、肥満患者、特に糖尿病に罹患している肥満患者において体重減少を刺激するために使用することもできる。
【００１０】
本発明のさらなる実施形態は、本発明の化合物を含有する医薬組成物を対象とする。そのような製剤は典型的には、本発明の化合物を少なくとも１種の薬学的に許容できる賦形剤と混和された形で含有する。そのような製剤はまた、少なくとも１種の追加の薬剤を含有してもよい。そのような薬剤の例には、抗肥満薬および／または抗糖尿病薬が包含される。本発明の追加の態様は、糖尿病および本明細書に記載されているとおりの関連状態を治療するための医薬を調製する際の本発明の化合物の使用に関する。
【００１１】
前述の概要および下記の詳細な説明は両方とも、例示および説明のためのものにすぎず、特許請求の範囲に記載されている本発明を限定するものではないと理解すべきである。
【発明を実施するための形態】
【００１２】
本発明は、本発明の例示的な実施形態についての下記の詳細な記述およびその中に包含される実施例を参照することによって、さらにより容易に理解することができる。
【００１３】
本発明は、製造の特定の合成方法に限定されず、当然ながら、変化し得ることを理解すべきである。本明細書で使用されている専門用語は、特定の実施形態を記載することを目的としたものにすぎず、限定的であることを意図されたものではないことも理解すべきである。複数形および単数形は、数を示す以外には、互換的として扱われるべきである：
ａ．「ハロゲン」は、塩素、フッ素、ヨウ素または臭素原子を指す；
ｂ．「Ｃ１〜Ｃ４アルキル」は、メチル、エチル、ｎ−プロピル、イソプロピル、ｎ−ブチル、イソブチルなどの１から４個の炭素原子を含有する分岐または直鎖アルキル基を指す；
ｃ．「Ｃ１〜Ｃ４アルコキシ」は、メトキシ、エトキシ、ｎ−プロポキシ、イソプロポキシ、ｎ−ブトキシ、イソブトキシなどの１から４個の炭素原子を含有する直鎖または分岐鎖アルコキシ基を指す；
ｄ．「Ｃ３〜Ｃ６シクロアルキル」は、完全に水素化され、単環として存在する非芳香族の環を指す。そのような炭素環の例には、シクロプロピル、シクロブチル、シクロペンチルおよびシクロヘキシルが包含される；
ｅ．「Ｃ１〜Ｃ４ハロアルキル」は、１から４個の炭素を含有し、１個または複数のハロゲン原子で置換されている直鎖または分岐鎖アルキル基を指す；
ｆ．「Ｃ１〜Ｃ４ハロアルコキシ」は、１から４個の炭素原子を含有し、１個または複数のハロゲン原子で置換されている直鎖または分岐鎖アルコキシ基を指す；
ｇ．「５員から１０員のヘテロアリール」は、合計５から１０個の環原子を有し、酸素、窒素および硫黄から独立に選択される１、２、３または４個のヘテロ原子を含有し、かつ縮合していてもよい１、２または３個の環を有する炭素環式芳香族系を意味する。「縮合」という用語は、第１の環と共通の（即ち、共有されている）２個の隣接する原子を有することによって、第２の環が存在する（即ち、付着されているか、または形成されている）ことを意味する。「縮合している（ｆｕｓｅｄ）」という用語は、「縮合している（ｃｏｎｄｅｎｓｅｄ）」という用語と等しい。「ヘテロアリール」という用語は、ピリジン、ピリダジン、ピラジン、ピリミジン、イミダゾ［１，２−ａ］ピリジン、イミダゾ［１，５−ａ］ピリジン、［１，２，４］トリアゾロ［４，３−ａ］ピリジン、［１，２，４］トリアゾロ［４，３−ｂ］ピリダジン、［１，２，４］トリアゾロ［４，３−ａ］ピリミジンおよび［１，２，４］トリアゾロ［１，５−ａ］ピリジンなどの芳香族基を包含する；
ｈ．「治療有効量」は、（ｉ）特定の疾患、状態もしくは障害を治療もしくは予防するか、（ｉｉ）特定の疾患、状態もしくは障害の１つもしくは複数の症状を緩和、改善もしくは除去するか、または（ｉｉｉ）本明細書に記載されている特定の疾患、状態もしくは障害の１つもしくは複数の症状の発症を予防もしくは遅延させる本発明の化合物の量を意味する；
ｉ．「患者」は、例えばモルモット、マウス、ラット、アレチネズミ、ネコ、ウサギ、イヌ、サル、チンパンジーおよびヒトなどの温血動物を指す；
ｊ．「治療する」は、防止的（ｐｒｅｖｅｎｔａｔｉｖｅ）、即ち予防的（ｐｒｏｐｈｙｌａｃｔｉｃ）および姑息的治療の両方、即ち、患者の疾患（もしくは状態）または疾患に関連する任意の組織損傷を軽減し、緩和し、またはその進行を緩慢にすることを包含する；
ｋ．「調節される」、「調節すること」または「調節する」という用語は、本明細書で使用される場合、別段に示されていない限り、本発明の化合物を用いてＧタンパク質共役受容体ＧＰＲ１１９を活性化することを指す；
ｌ．「薬学的に許容できる」は、その物質または組成物が、製剤を構成する他の成分および／またはそれで治療をされる哺乳動物と化学的および／または毒物学的に適合性でなければならないことを示している。
ｍ．「塩」は、薬学的に許容できる塩および化合物の調製などの工業的プロセスでの使用に適した塩を指すことが意図されている。
ｎ．「薬学的に許容できる塩」は、化合物の実際の構造に応じて、「薬学的に許容できる酸付加塩」または「薬学的に許容できる塩基付加塩」のいずれかを指すことが意図されている。
ｏ．「薬学的に許容できる酸付加塩」は、塩基化合物または任意のその中間体の任意の非毒性の有機酸または無機酸付加塩に当てはまることが意図されている。適切な塩を形成する無機酸の実例には、塩酸、臭化水素酸、硫酸およびリン酸ならびにオルトリン酸一水素ナトリウムおよび硫酸水素カリウムなどの酸金属塩が包含される。適切な塩を形成する有機酸の実例には、モノ−、ジ−およびトリカルボン酸が包含される。そのような酸の実例は例えば、酢酸、グリコール酸、乳酸、ピルビン酸、マロン酸、コハク酸、グルタル酸、フマル酸、リンゴ酸、酒石酸、クエン酸、アスコルビン酸、マレイン酸、ヒドロキシマレイン酸、安息香酸、ヒドロキシ−安息香酸、フェニル酢酸、ケイ皮酸、サリチル酸、２−フェノキシ安息香酸、ｐ−トルエンスルホン酸ならびにメタンスルホン酸および２−ヒドロキシエタンスルホン酸などのスルホン酸である。そのような塩は、水和した形態または実質的に無水の形態のいずれで存在してもよい。一般に、これらの化合物の酸付加塩は、水および様々な親水性有機溶媒に可溶性である。
ｐ．「薬学的に許容できる塩基付加塩」は、化合物または任意のその中間体の任意の非毒性の有機または無機塩基付加塩に当てはまることが意図されている。適切な塩を形成する塩基の実例には、ナトリウム、カリウム、カルシウム、マグネシウム、バリウムの水酸化物などのアルカリ金属またはアルカリ土類金属の水酸化物；アンモニアならびにメチルアミン、ジメチルアミン、トリメチルアミンおよびピコリンなどの脂肪族、脂環式または芳香族有機アミンが包含される。
ｑ．「異性体」は、以下で定義されるとおりの「立体異性体」および「幾何異性体」を意味する。「立体異性体」は、１つまたは複数のキラル中心を有し、それぞれの中心が、ＲまたはＳ立体配置で存在し得る化合物を指す。立体異性体には、全てのジアステレオ異性体、鏡像異性体およびエピマー形態、さらにはそのラセミ化合物および混合物が包含される。「幾何異性体」は、シス、トランス、アンチ、シン、エントゲーゲン（Ｅ）およびツザンメン（Ｚ）の形態で、さらにはその混合物で存在し得る化合物を指す。
【００１４】
ある種の本発明の化合物は、幾何異性体として存在し得る。化合物は、１つまたは複数の不斉中心を有し、したがって２種以上の立体異性体形態として存在することがある。本発明は、本発明の化合物の全ての個々の立体異性体および幾何異性体ならびにそれらの混合物を包含する。個々の鏡像異性体は、キラル分離によって、または合成の際に関連する鏡像異性体を使用することによって得ることができる。上述のとおり、化合物の一部は、異性体として存在する。これらの異性体混合物は、その物理化学的差異に基づき、クロマトグラフィーおよび／または分別結晶化などの当業者によく知られている方法によって、その個々の異性体に分離することができる。光学的に活性な適切な化合物（例えば、キラルアルコールまたはＭｏｓｈｅｒ酸塩化物などのキラル補助剤）と反応させることによって、鏡像異性体混合物をジアステレオ異性体混合物に変換し、ジアステレオ異性体を分離し、個々のジアステレオ異性体を対応する純粋な鏡像異性体に変換する（例えば、加水分解する）ことによって、鏡像異性体は分離することができる。鏡像異性体はまた、キラルＨＰＬＣカラムを使用することによって分離することもできる。別法では、光学的に活性な出発物質の使用、光学的に活性な試薬、基質、触媒もしくは溶媒を使用しての不斉合成、または不斉転位による一方の立体異性体から他方への変換によって、特定の立体異性体を合成することもできる。
【００１５】
本発明はまた、原子質量または質量数が自然界で通常見出される原子質量または質量数と異なっている原子によって、１個または複数の原子が置き換えられているという事実を除いて、本明細書に列挙されているものと同一である同位体標識されている本発明の化合物も包含する。本発明の化合物に組み込むことができる同位体の例には、それぞれ２Ｈ、３Ｈ、１１Ｃ、１３Ｃ、１４Ｃ、１３Ｎ、１５Ｎ、１５Ｏ、１７Ｏ、１８Ｏ、３１Ｐ、３２Ｐ、３５Ｓ、１８Ｆ、１２３Ｉ、１２５Ｉおよび３６Ｃｌなどの水素、炭素、窒素、酸素、リン、硫黄、フッ素、ヨウ素および塩素の同位体が包含される。
【００１６】
ある種の同位体標識されている本発明の化合物（例えば、３Ｈおよび１４Ｃで標識されている化合物）は、化合物および／または基質の組織分布アッセイにおいて有用である。トリチウム、１４Ｃ、３５Ｓ、および１２５Ｉを包含するある種の同位体標識されているリガンドは、放射リガンド結合アッセイにおいて有用となり得るであろう。トリチウム化（即ち３Ｈ）および炭素１４（即ち１４Ｃ）同位体は、調製の容易さおよび検出性によって特に好ましい。さらに、ジュウテリウム（即ち２Ｈ）などのより重い同位体での置換は、比較的高い代謝安定性から生じるある種の治療上の利点（例えば、インビボ半減期の延長または投薬必要量の減少）をもたらすことがあり、したがって、状況によっては好ましいことがある。１５Ｏ、１３Ｎ、１１Ｃおよび１８Ｆなどの陽電子放射同位体は、受容体占有率を調べるための陽電子放射断層撮影（ＰＥＴ）研究に有用である。一般に、スキームおよび／または本明細書中で下記に記載されている実施例に開示されている手順と類似の手順に従って、同位体標識されていない試薬の代わりに同位体標識されている試薬を用いることによって、同位体標識されている本発明の化合物は調製することができる。
【００１７】
ある種の本発明の化合物は、複数の結晶形で存在することがある（一般に「多形体」と称される）。様々な条件下での結晶化によって、例えば、再結晶化のために種々の溶媒もしくは種々の溶媒混合物を使用し；種々の温度で結晶化させ；かつ／または結晶化の間に非常に急速な冷却から非常に緩慢な冷却までの範囲の様々なモードで冷却することによって、多形体を調製することができる。他にも、本発明の化合物を加熱または溶融し、続いて、徐々にまたは急速に冷却することによって、多形体を得ることもできる。固体プローブＮＭＲ分光法、ＩＲ分光法、示差走査熱分析、粉末Ｘ線回折または他のそのような技術によって、多形体の存在を決定することができる。
【００１８】
加えて、本発明の化合物は、溶媒和していない形態でも、水、エタノールなどの薬学的に許容できる溶媒と溶媒和した形態でも存在してよい。一般に本発明の目的では、溶媒和した形態は、溶媒和していない形態と同等であるとみなされる。化合物は、１種または複数の結晶状態で、即ち、共結晶、多形体として存在することもあるか、または非晶質固体として存在することもある。そのような形態全てが、本発明および特許請求の範囲に包含される。
【００１９】
本発明の組成物における一実施形態では、組成物は、抗肥満薬および抗糖尿病薬からなる群から選択される少なくとも１種の追加の薬剤をさらに包含する。抗肥満薬の例には、ジルロタピド、ミトラタピド、インプリタピド、Ｒ５６９１８（ＣＡＳ番号４０３９８７）、ＣＡＳ番号９１３５４１−４７−６、ロルカセリン、セチリスタット、ＰＹＹ３−３６、ナルトレキソン、オレオイル−エストロン、オビネピチド（ｏｂｉｎｅｐｉｔｉｄｅ）、プラムリンチド、テソフェンシン、レプチン、リラグルチド、ブロモクリプチン、オルリスタット、エキセナチド、ＡＯＤ−９６０４（ＣＡＳ番号２２１２３１−１０−３）およびシブトラミンが包含される。抗糖尿病薬の例には、メトホルミン、アセトヘキサミド、クロルプロパミド、ダイアビニーズ、グリベンクラミド、グリピジド、グリブリド、グリメピリド、グリクラジド、グリペンチド、グリキドン、グリソラミド、トラザミド、トルブタミド、テンダミスタット、トレスタチン、アカルボース、アジポシン、カミグリボース、エミグリテート、ミグリトール、ボグリボース、プラディマイシン−Ｑ、サルボスタチン、バラグリタゾン、シグリタゾン、ダルグリタゾン、エングリタゾン、イサグリタゾン、ピオグリタゾン、ロシグリタゾン、トログリタゾン、エキセンジン−３、エキセンジン−４、トロズスクエミン、レセルバトロール（ｒｅｓｅｒｖａｔｒｏｌ）、ヒルチオサール抽出物、シタグリプチン、ビルダグリプチン、アログリプチンおよびサクサグリプチンが包含される。
【００２０】
本発明の方法の他の実施形態では、本発明の化合物または組成物を、高脂血症、Ｉ型糖尿病、ＩＩ型糖尿病、特発性Ｉ型糖尿病（Ｉｂ型）、成人潜在性自己免疫性糖尿病（ＬＡＤＡ）、早発性２型糖尿病（ＥＯＤ）、若年性非定型糖尿病（ＹＯＡＤ）、若年成人発症型糖尿病（ＭＯＤＹ）、栄養不良関連糖尿病、妊娠糖尿病、冠状動脈性心疾患、虚血性脳卒中、血管形成後の再狭窄、末梢血管疾患、間欠性跛行、心筋梗塞（例えば、壊死およびアポトーシス）、脂質異常症、食後高脂血症、耐糖能障害（ＩＧＴ）状態、空腹時血漿グルコース異常状態、代謝性アシドーシス、ケトーシス、関節炎、肥満、骨粗鬆症、高血圧、うっ血性心不全、左室肥大、末梢動脈疾患、糖尿病性網膜症、黄斑変性、白内障、糖尿病性腎症、糸球体硬化症、慢性腎不全、糖尿病性神経障害、代謝症候群、Ｘ症候群、月経前症候群、冠状動脈性心疾患、狭心症、血栓症、アテローム硬化症、心筋梗塞、一過性脳虚血発作、脳卒中、血管再狭窄、高血糖、高インスリン血症、高脂血症、高トリグリセリド血症、インスリン抵抗性、グルコース代謝障害、耐糖能障害状態、空腹時血漿グルコース異常状態、肥満、勃起機能不全、皮膚および結合組織の障害、足部潰瘍および潰瘍性大腸炎、内皮機能不全および血管コンプライアンス障害、高アポＢリポタンパク質血症、アルツハイマー病、統合失調症、認知障害、炎症性腸疾患、潰瘍性大腸炎、クローン病ならびに過敏性腸症候群からなる群から選択される状態を治療するために有効量で投与することができる。
【００２１】
さらなる実施形態では、方法は、抗肥満薬および抗糖尿病薬からなる群から選択される少なくとも１種の追加の薬剤ならびに少なくとも１種の薬学的に許容できる賦形剤を含む第２の組成物を投与するステップをさらに包含する。この方法は、それらの組成物を同時または順次に、任意の順序で投与するために使用することができる。
【００２２】
さらに他の実施形態では、本発明の化合物は、Ｇタンパク質共役受容体ＧＰＲ１１９の活性を調節する疾患、状態または障害を治療するための医薬を製造する際に有用である。さらに、化合物は、糖尿病または前記糖尿病に随伴する病的状態を治療するための医薬を調製する際に有用である。
【００２３】
合成
例示を目的として、下記に図示されている反応スキームでは、本発明の化合物、さらに重要な中間体を合成することが可能な経路を示す。個々の反応ステップのより詳細な説明については、下記の実施例の部を参照されたい。当業者であれば、本発明の化合物を合成するために他の合成経路を使用してもよいことは認めるであろう。具体的な出発物質および試薬をスキームで示し、下記で論じるが、他の出発物質および試薬に容易に置き換えて、様々な誘導体および／または反応条件を提供することができる。加えて、下記に記載されている方法によって調製される化合物のうち多くは、当業者によく知られている通常の化学を使用し、この開示に照らしてさらに改変することができる。
【００２４】
本発明の化合物は、化学分野でよく知られている方法と類似の方法を包含する合成経路によって、特に本明細書に収められている記載に照らして、合成することができる。出発物質は、Ａｌｄｒｉｃｈ  Ｃｈｅｍｉｃａｌｓ（Ｍｉｌｗａｕｋｅｅ、ＷＩ）などの市場の供給元から一般に入手可能であるか、または当業者に知られている方法を使用して容易に調製される（例えば、Ｌｏｕｉｓ  Ｆ．ＦｉｅｓｅｒおよびＭａｒｙ  Ｆｉｅｓｅｒ、Ｒｅａｇｅｎｔｓ  ｆｏｒ  Ｏｒｇａｎｉｃ  Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ、ｖ．１〜１９、Ｗｉｌｅｙ、Ｎｅｗ  Ｙｏｒｋ（１９６７〜１９９９年版）またはＢｅｉｌｓｔｅｉｎｓ  Ｈａｎｄｂｕｃｈ  ｄｅｒ  ｏｒｇａｎｉｓｃｈｅｎ  Ｃｈｅｍｉｅ、第４版、Ｓｐｒｉｎｇｅｒ−Ｖｅｒｌａｇ編、Ｂｅｒｌｉｎ（付録を含めて）（Ｂｅｉｌｓｔｅｉｎオンラインデータベースからも入手可能）に一般に記載されている方法によって調製される）。
【００２５】
本発明の化合物は、エーテルを生成するために当分野で同様に知られている方法を使用して調製することができる。読者は、そうした反応についてより詳細に記載している１）Ｈｕｇｈｅｓ，Ｄ．Ｌ．、Ｏｒｇａｎｉｃ  Ｒｅａｃｔｉｏｎｓ  １９９２、４２、Ｈｏｂｏｋｅｎ、ＮＪ、米国、２）Ｔｉｋａｄ，Ａ．；Ｒｏｕｔｉｅｒ，Ｓ．；Ａｋｓｓｉｒａ，Ｍ．；Ｌｅｇｅｒ，Ｊ．−Ｍ．ｌ；Ｊａｒｒｙ，Ｃ．；Ｇｕｉｌｌａｕｍｅｔ，Ｇ．；Ｓｙｎｌｅｔｔ  ２００６、１２、１９３８〜４２および３）Ｌｏｋｓｈａ，Ｙ．Ｍ．；Ｇｌｏｂｉｓｃｈ，Ｄ．；Ｐｅｄｅｒｓｅｎ，Ｅ．Ｂ．；Ｌａ  Ｃｏｌｌａ，Ｐ．；Ｃｏｌｌｕ，Ｇ．；Ｌｏｄｄｏ，Ｒ．Ｊ．Ｈｅｔ．Ｃｈｅｍ．２００８、４５、１１６１〜６などの教本に注意を払う。
【００２６】
【化１】
2013543885.tif 000002
スキーム１は、式Ｎの化合物を調製するために使用することができる
［式中、
Ｘは、
【００２７】
【化２】
2013543885.tif 000003
であり、
Ｚは、−Ｃ（Ｏ）−Ｏ−Ｒ６またはＣ１〜Ｃ４アルキル、ＣＦ３、ハロゲン、シアノ、Ｃ３〜Ｃ６シクロアルキルもしくはＣ３〜Ｃ６シクロアルキルで置換されているピリミジンであり、ここで、前記シクロアルキル部分の１個の炭素原子は、メチルまたはエチルで置換されていてもよく、
ｍは、１、２または３であり、
ｎは、０、１または２であり、
Ｒ１は、水素、Ｃ１〜Ｃ４アルキルまたはＣ３〜Ｃ６シクロアルキルであり、
Ｒ２ａは、水素、フルオロまたはＣ１〜Ｃ４アルキルであり、
Ｒ３はそれぞれ個別に、ヒドロキシ、ハロゲン、シアノ、Ｃ１〜Ｃ４アルキル、Ｃ１〜Ｃ４アルコキシ、Ｃ１〜Ｃ４ハロアルキル、Ｃ１〜Ｃ４ハロアルコキシ、−ＳＯ２−Ｒ７、−Ｐ（Ｏ）（ＯＲ８）（ＯＲ９）、−Ｃ（Ｏ）−ＮＲ８Ｒ９、−Ｎ（ＣＨ３）−ＣＯ−Ｏ−（Ｃ１〜Ｃ４）アルキル、−ＮＨ−ＣＯ−Ｏ−（Ｃ１〜Ｃ４）アルキル、−ＮＨ−ＣＯ−（Ｃ１〜Ｃ４）アルキル、−Ｎ（ＣＨ３）−ＣＯ−（Ｃ１〜Ｃ４）アルキル、−ＮＨ−（ＣＨ２）２−ＯＨならびに酸素、窒素および硫黄からそれぞれ独立に選択される１、２、３または４個のヘテロ原子を含有する５員から６員のヘテロアリール基からなる群から選択され、ここで、前記ヘテロアリール基上の炭素原子は、Ｒ４ａで置換されていてもよいか、または前記ヘテロアリール基上の窒素原子は、Ｒ４ｂで置換されていてもよく、
Ｒ４ａは、水素、Ｃ１〜Ｃ４アルキル、Ｃ１〜Ｃ４アルコキシ、Ｃ１〜Ｃ４ハロアルキルまたはハロゲンであり、ここで、前記アルキルは、ヒドロキシルまたはＣ１〜Ｃ４アルコキシで置換されていてもよく、
Ｒ４ｂは、水素、Ｃ１〜Ｃ４アルキル、−ＣＨ２−Ｃ１〜Ｃ３ハロアルキル、−Ｃ２〜Ｃ４アルキル−ＯＨまたは−ＣＨ２−Ｃ１〜Ｃ４アルコキシであり、
Ｒ５は水素であるか、またはＲ１が水素である場合には、Ｒ５は水素またはＣ１〜Ｃ４アルキルであり、
Ｒ６は、Ｃ１〜Ｃ４アルキルまたはＣ３〜Ｃ６シクロアルキルであり、ここで、前記シクロアルキル部分の１個の炭素原子は、メチルまたはエチルで置換されていてもよく、
Ｒ７は、Ｃ１〜Ｃ４アルキル、Ｃ３〜Ｃ６シクロアルキル、ＮＨ２または−（ＣＨ２）２−ＯＨによって表され、
Ｒ８は、水素またはＣ１〜Ｃ４アルキルによって表され、
Ｒ９は、水素、Ｃ１〜Ｃ４アルキル、Ｃ３〜Ｃ６シクロアルキル、−（ＣＨ２）２−ＯＨ、−（ＣＨ２）２−Ｏ−ＣＨ３、−（ＣＨ２）３−ＯＨ、−（ＣＨ２）３−Ｏ−ＣＨ３、３−オキセタニルまたは３−ヒドロキシシクロブチルによって表されるか、または
Ｒ３が−Ｃ（Ｏ）−ＮＲ８Ｒ９である場合、Ｒ８およびＲ９は、それらが結合している窒素原子と一緒になって、アゼチジン、ピロリジン、ピペリジンまたはモルホリン環を形成していてもよい］。
【００２８】
ステップ１において、これらに限られないが、エタノール、トルエンおよびアセトニトリルを包含する多様な溶媒中、利用される溶媒に応じて２２℃から１３０℃までの範囲の温度で１から７２時間、式Ａの化合物および市販の化合物Ｂ（Ｓｉｇｍａ−Ａｌｄｒｉｃｈ）を縮合反応させることを介して、式Ｃの化合物を調製することができる。式Ａの化合物が塩化水素またはトリフルオロ酢酸塩である場合、酢酸ナトリウムまたは重炭酸ナトリウムなどの塩基調節剤を１から３当量で加えて、塩を中和することができる。メタノールおよびエタノールなどの極性プロトン性溶媒中、２２℃から８５℃までの範囲の温度で、反応を行うことができる。この変換に典型的な条件には、エタノール中、８５℃で加熱しながら３時間、３当量の酢酸ナトリウムを使用することが包含される。
【００２９】
置換または非置換４−ピペリジノン塩酸塩（Ｊ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．、２００４、４７、２１８０）から出発する４ステップ手順を介して、式Ａの化合物は調製することができる。初めに、過剰の塩基の存在下で、これらの塩を適切なクロロギ酸アルキルまたは二炭酸ビス（アルキル）で処理して、対応するカルバミン酸アルキルを形成する。次いで、ケトン基をｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルヒドラジドと縮合させて、対応するＮ−（ｔｅｒｔ−ブトキシ）カルボニル（ＢＯＣ）保護されているヒドラゾン誘導体を形成する。その後、これを、シアノ水素化ホウ素ナトリウムまたはトリアセトキシ水素化ホウ素ナトリウムなどの還元剤を使用して、対応するＢＯＣ保護されているヒドラジン誘導体に還元する。最後に、トリフルオロ酢酸または塩酸などの酸性条件下で、Ｎ−（ｔｅｒｔ−ブトキシ）カルボニル基を切断して、式Ａの化合物を得、これを典型的には単離し、対応する塩（例えば、二塩酸塩）として使用する。
【００３０】
ステップ２では、ザントマイヤー反応（Ｃｏｍｐ．Ｏｒｇ．Ｓｙｎｔｈ．、１９９１、６、２０３）を介して中間体であるジアゾニウム塩を形成することを介して、式Ｄの化合物を式Ｃの化合物から調製することができる。これらの塩は、亜硝酸ナトリウムと、単独か、または組合せでの塩酸、臭化水素酸、硫酸、硝酸、リン酸および酢酸などの酸水溶液とを用いて式Ｃの化合物をジアゾ化することを介して、調製することができる。この反応を典型的には、水中、０℃から１００℃で実施する。別法では、０℃から９５℃までの範囲の温度で、亜硝酸ｔｅｒｔ−ブチルなどの亜硝酸アルキルをアセトニトリルなどの溶媒と共に使用する無水条件を利用することができる（Ｊ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．２００６、４９、１５６２）。次いで、これらのジアゾニウム中間体を臭化銅（ＩＩ）、臭化銅（Ｉ）などの銅塩またはトリブロモメタンと反応させて、式Ｄの化合物を形成する。この変換に典型的な条件には、アセトニトリル中、６５℃で３０分間、亜硝酸ｔｅｒｔ−ブチル、臭化銅（ＩＩ）を使用することが包含される。
【００３１】
ステップ３では、式Ｄの化合物から、テトラヒドロフラン、ジエチルエーテル、１，４−ジオキサンまたは１，２−ジメトキシエタンなどの極性非プロトン性溶媒中、０℃から１１０℃までの範囲の温度で１から２４時間、水素化アルミニウムリチウム、ホウ水素化ナトリウム、ホウ水素化リチウム、ジメチル硫化ボラン、ボラン−テトラヒドロフランなどの還元剤を使用することを介して、式Ｅの化合物を調製することができる。典型的な条件には、テトラヒドロフラン中、７０℃で１４時間、ジメチル硫化ボランを使用することが包含される。
【００３２】
式Ｅの化合物から式Ｆの化合物を調製するために、シアノ基を導入しなければならない（ステップ４）。このことは、広い条件を介して達成することができる。シアノ基を導入する方法の１つは、Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（ＤＭＦ）、Ｎ−メチルピロリジノン（ＮＭＰ）、Ｎ，Ｎ−ジメチルアセトアミド（ＤＭＡ）などの極性非プロトン性溶媒中、２２℃から２００℃までの範囲の温度で、１から２４時間、シアン化銅などの銅塩を使用することであってよい。１６５℃で５時間、Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド中のシアン化銅を加熱することが、この変換のための典型的なプロトコールである。
【００３３】
別法ではステップ４で、アセトニトリルおよびジメチルスルホキシドなどの極性非プロトン性溶媒中、２２℃から１００℃までの範囲の温度で、シアン化カリウムまたはシアン化ナトリウムなどのアルカリ金属シアン化塩を１８−クラウン−６（ＵＳ２００５０２０５６４）およびまたは臭化テトラブチルアンモニウム（Ｊ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．２００３、４６、１１４４）などの触媒と一緒に使用して、このテンプレートにシアノ基を付加することができる。
【００３４】
結局、金属触媒作用の使用が、ステップ４において示された変換で共通している。触媒手順において使用される共通のシアン化塩には、シアン化亜鉛、シアン化銅、シアン化ナトリウムおよびヘキサシアノ鉄（ＩＩ）酸カリウムが包含される。金属触媒は、ヨウ化銅などの銅触媒およびまたはトリス（ジベンジリデンアセトン）ジパラジウム（Ｐｄ２（ｄｂａ）３）、パラジウムテトラキス−トリフェニルホスフィン（Ｐｄ（ＰＰｈ３）４）またはジクロロ（ジフェニル−ホスフィノフェロセン）−パラジウム（Ｐｄ（ｄｐｐｆ）Ｃｌ２）などのパラジウム触媒であってよい。これらの触媒は単独で、または上記のシアン化塩のうちの任意のものと組み合わせて使用することができる。これらの反応物に、１，１’−ビス（ジフェニルホスフィノ）−フェロセン（ｄｐｐｆ）などのリガンドまたは亜鉛もしくは銅金属などの金属添加剤を加えてもよい。ＮＭＰ、ＤＭＦ、ＤＭＡなどの極性非プロトン性溶媒中、添加剤としての水を用いて、または用いずに、反応を実施する。反応は、通常の加熱またはマイクロ波加熱を介して２２℃から１５０℃までの範囲の温度で、１から４８時間実施し、密閉または非密閉反応容器中で行うことができる。ステップ４に典型的な条件には、マイクロ波中で１２０℃で加熱されたＤＭＡ中、１時間、シアン化亜鉛、Ｐｄ２（ｄｂａ）３、ｄｐｐｆおよび亜鉛ダストを使用することが包含される（Ｊ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．２００５、４８、１１３２）。
【００３５】
ステップ５では、式Ｆの化合物から光延反応を介して、式Ｇの化合物を合成することができる。光延反応は、合成に関する文献（例えば、Ｃｈｅｍ．Ａｓｉａｎ．Ｊ．２００７、２、１３４０；Ｅｕｒ．Ｊ．Ｏｒｇ．Ｃｈｅｍ．２００４、２７６３；Ｓ．Ｃｈｅｍ．Ｅｕｒ．Ｊ．２００４、１０、３１３０）に概説されており、これらの概説において列挙されている合成プロトコールのうちの多くを使用することができる。ジエチルアゾジカルボキシレート（ＤＥＡＤ）、ジ−ｔｅｒｔ−ブチルアゾジカルボキシレート（ＴＢＡＤ）、ジイソプロピルアゾジカルボキシレート（ＤＩＡＤ）などのアゾジカルボキシレートならびにトリフェニルホスフィン（ＰＰｈ３）、トリブチルホスフィン（ＰＢｕ３）およびポリマー担持されているトリフェニルホスフィン（ＰＳ−ＰＰｈ３）などのホスフィン試薬を利用する光延反応プロトコールの使用を、式Ｆの化合物および一般構造Ｘ−ＯＨの化合物と組み合わせる。この反応で利用される溶媒には、利用される溶媒およびアゾジカルボキシレートに応じて０℃から１３０℃までの範囲の温度のトルエン、ベンゼン、ＴＨＦ、１，４−ジオキサンおよびアセトニトリルなどの非プロトン性溶媒が包含され得る。この変換のための典型的な条件は、１，４−ジオキサン中、２２℃で１５時間、ＤＥＡＤをＰＳ−ＰＰｈ３と共に使用することである。
【００３６】
式Ｇの化合物を調製するための光延反応に代わる選択肢は、トリエチルアミンまたはピリジンなどの塩基の存在下で、塩化メタンスルホニルまたは塩化パラ−トルエンスルホニルをそれぞれ使用して、式Ｆの化合物を対応するメタンスルホネートまたはパラ−トルエンスルホネート誘導体に変換することである。次いで、炭酸カリウム、水素化ナトリウムまたはカリウムｔｅｒｔ−ブトキシドなどの塩基の存在下で、中間体であるスルホネートエステルを一般式Ｘ−ＯＨの化合物と組み合わせて、式Ｇの化合物を得る。
【００３７】
式Ｆの化合物から、３ステップで、即ち、１）第一級アルコールを酸化させて、対応する式Ｈのアルデヒドにするステップ（ステップ６、スキーム１）と、２）式Ｈのアルデヒド中間体を式Ｒ１Ｍ（式中、Ｍはリチウム（Ｌｉ）またはマグネシウムハロゲン化物（ＭｇＣｌ、ＭｇＢｒまたはＭｇＩ）である）の有機金属試薬と反応させて、Ｒ１がＣ１〜Ｃ４アルキルまたはＣ３〜Ｃ６シクロアルキルである式Ｊの第二級アルコールを得るステップ（ステップ７）と、３）光延反応条件下で、その式Ｊの第二級アルコールを式Ｘ−ＯＨのフェノールと反応させるステップ（ステップ８）で、Ｒ１がＣ１〜Ｃ４アルキルまたはＣ３〜Ｃ６シクロアルキルである式Ｋの化合物を調製することができる。
【００３８】
ステップ６（スキーム１）では、これらに限られないが、ジクロロメタン、アセトニトリル、ヘキサンまたはアセトンを単独で、または組合せで包含する溶媒中、２２℃から８０℃で１から７２時間、１から２０当量の活性化二酸化マンガンを使用することを包含する酸化手順を介して、式Ｈの化合物を形成することができる。別法では、この酸化は、１から３当量のトリクロロイソシアン尿酸を用いて、０．１から１当量の２，２，６，６−テトラメチルピペリジン−１−オキシル（ＴＥＭＰＯ）の存在下、ジクロロメタンまたはクロロホルム中、０℃から２２℃までの範囲の温度で０．１から１２時間行うことができる。この変換に典型的な条件は、０．１当量のＴＥＭＰＯの存在下、ジクロロメタン中、２２℃で１時間、トリクロロイソシアン尿酸を使用することである。
【００３９】
ＹがＮＲ５である本発明の化合物の調製もまた、スキーム１には示されている。中間体である式Ｈの化合物（スキーム１）から、還元アミノ化条件下で、式Ｘ−ＮＨ−Ｒ５のアミノ化合物と反応させることによって（ステップ９）、式Ｌの化合物を調製することができる（Ｊ．Ｏｒｇ．Ｃｈｅｍ．、１９９６、６１、３８４９；Ｏｒｇ．Ｒｅａｃｔ．２００２、５９、１）。同様に、２ステップで、Ｒ１がＣ１〜Ｃ４アルキルまたはＣ３〜Ｃ６シクロアルキルである式Ｊの中間体から、１）対応する式Ｍのケトンを酸化させるステップ（ステップ１０）と、２）還元アミノ化条件下で、式Ｍのケトンを式Ｘ−ＮＨ−Ｒ５のアミノ化合物と反応させるステップ（ステップ１１）とによって、Ｒ１がＣ１〜Ｃ４アルキルまたはＣ３〜Ｃ６シクロアルキルである式Ｎの化合物も調製することができる。別法では、Ｒ５がＨである式Ｌの対応する化合物またはＲ５がＨである式Ｎの対応する化合物から、塩基の存在下で、式（Ｃ１〜Ｃ４）−Ｃｌ、（Ｃ１〜Ｃ４）−Ｂｒまたは（Ｃ１〜Ｃ４）−Ｉのアルキルハロゲン化物を用いるアルキル化によって、Ｒ５がＣ１〜Ｃ４アルキルである式Ｌおよび式Ｎの化合物を調製することができる。
【００４０】
他にも、スキーム２および３に示されているとおりに、本発明の化合物を調製することもでき、その際、Ｘ、Ｚ、Ｒ１、Ｒ２ａ、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５、Ｒ６、Ｒ７、Ｒ８およびＲ９は、スキーム１において記載されているのと同じである。詳細には、スキーム２に示されているとおりに、式Ｒの化合物を調製することができる。
【００４１】
【化３】
2013543885.tif 000004
スキーム２のステップ１で、式Ｈのアルデヒド（スキーム１も参照されたい）から、メタノール、エタノールまたはテトラヒドロフランを包含する溶媒中、−７８℃から２２℃までの範囲の温度で０．１から２４時間、ジメチル（ジアゾメチル）ホスホネートまたはジメチル−１−ジアゾ−２−オキソプロピルホスホネートのいずれかおよび炭酸カリウムまたはカリウムｔｅｒｔ−ブトキシドなどの塩基を使用することを介して、式Ｏの化合物を形成することができる。この変換に典型的な条件には、メタノール中、２２℃で０．７５時間、ジメチル−１−ジアゾ−２−オキソプロピルホスホネートおよび２当量の炭酸カリウムを使用することが包含される。
【００４２】
ステップ２で、式Ｏの化合物から、一般構造Ｘ−Ｐ（ここで、Ｐはハライドまたはトリフルオロメタンスルホネート（トリフラート）である）の化合物を用いる、金属に触媒される薗頭カップリング法を介して、式Ｑの化合物を形成することができる。薗頭反応は広く概説されており（Ｃｈｅｍ．Ｒｅｖ．２００７、１０７、８７４；Ａｎｇｅｗ．Ｃｈｅｍ．Ｉｎｔ．２００７版、４６、８３４；Ａｎｇｅｗ．Ｃｈｅｍ．Ｉｎｔ．２００８版、４７、６９５４）、それらの概説に列挙されている合成プロトコールのうちの多くを、式Ｑの化合物を合成するために使用することができる。典型的には、この反応における金属触媒の使用は、ヨウ化銅などの銅触媒およびまたはＰｄ２（ｄｂａ）３、Ｐｄ（ＰＰｈ３）４、Ｐｄ（ｄｐｐｆ）Ｃｌ２またはＰｄ（ＰＰｈ３）２Ｃｌ２などのパラジウム触媒であってよい。これらの触媒は単独で、または任意に組み合わせて使用することができる。典型的には、塩基添加剤をこの反応では使用し、それらには、ジエチルアミン、トリエチルアミン、ジイソプロピルエチルアミンもしくはピロリジンなどのアミン塩基または炭酸カリウムまたはフッ化カリウムなどの無機塩基が包含され得る。ジクロロメタン、クロロホルム、アセトニトリル、ＤＭＦ、トルエンまたは１，４−ジオキサンなどの溶媒中、添加剤として水を用いて、または用いずに反応を実施する。溶媒に応じて０℃から１５０℃までの範囲の温度で０．１から４８時間までの範囲の時間、反応を実施する。この変換に典型的な条件には、ＤＭＦ中、９０℃で２時間、ＣｕＩおよびＰｄ（ＰＰｈ３）２Ｃｌ２を使用することが包含される。
【００４３】
最後にステップ３で、式Ｑの化合物から、遷移金属触媒の存在下で水素化することを介して、式Ｒの化合物を形成することができる。共通の触媒には、炭素上５〜２０％のパラジウムまたは炭素上５〜２０％の水酸化パラジウムの使用が包含される。Ｐａｒｒシェーカー装置またはＨ−Ｃｕｂｅフロー式水素化リアクター（ＴｈａｌｅｓＮａｎｏ、Ｕ．Ｋ．）中、１から５０ｐｓｉの範囲の水素圧力下、テトラヒドロフラン、酢酸エチル、メタノールまたはエタノールなどの極性溶媒中、２２℃から５０℃の温度で０．１から２４時間までの範囲の時間、これらの反応を行うことができる。ステップ３に典型的な条件には、酢酸エチル中、炭素上１０％のパラジウムカートリッジを介して１ｍＬ／分の流速で、「完全水素」設定に設定されているＨ−Ｃｕｂｅフロー式装置上で、式Ｑの化合物を使用することが包含される。
【００４４】
スキーム３は、式Ｗの化合物を調製する方法を示している。
【００４５】
【化４】
2013543885.tif 000005
【００４６】
スキーム３のステップ１で、式Ｆの化合物（スキーム２も参照されたい）を三臭化リンまたは四臭化炭素およびトリフェニルホスフィンなどの試薬で処理して、式Ｓの化合物を得ることができる。次いで、ステップ２で、ジクロロメタン、クロロホルム、トルエン、ベンゼン、テトラヒドロフラン（ＴＨＦ）またはアセトニトリルなどの溶媒中で、式Ｓの化合物をトリフェニルホスフィンと反応させて、式Ｔのトリフェニルホスホニウム塩を得る。次いで、ｎ−ブチルリチウム、ナトリウムビス（トリメチルシリル）アミド、リチウムビス（トリメチルシリル）アミド、カリウムビス（トリメチルシリル）アミドまたはリチウムジイソプロピルアミドなどの塩基の存在下、ＴＨＦ、ジエチルエーテルまたは１，４−ジオキサンなどの溶媒中で、式Ｔの塩を式Ｕのカルボニル化合物と組み合わせて、式Ｖのアルケン化合物を得、これを典型的には、ＥおよびＺ幾何異性体の混合物として単離する（ステップ３）。ウィティッヒオレフィン化反応として一般に知られているこの反応は、広く文献に概説されている（Ｃｈｅｍ．Ｒｅｖ．１９８９、８９、８６３；Ｍｏｄｅｒｎ  Ｃａｒｂｏｎｙｌ  Ｏｌｅｆｉｎａｔｉｏｎ  ２００４、１〜１７；Ｌｉｅｂｉｇｓ  Ａｎｎ．Ｃｈｅｍ．１９９７、１２８３）。
【００４７】
ステップ４で、式Ｖの化合物から、遷移金属触媒の存在下での水素化を介して、式Ｗの化合物を形成する。共通の触媒には、炭素上５〜２０％のパラジウムまたは炭素上５〜２０％の水酸化パラジウムの使用が包含される。スキーム２のステップ３について記載されているのと同様の様式で、これらの反応を行うことができる。
【００４８】
別法では、式Ｈのアルデヒドから、式ＡＡのトリフェニルホスホニウム塩を用いるウィティッヒ反応を介して、式Ｗの化合物を調製することができる（ステップ５、スキーム３）。ステップ３に関する限り、この反応によって、式Ｖのアルケン化合物が生じ、これをこの場合にも典型的には、ＥおよびＺ幾何異性体の混合物として単離し、水素化によって、式Ｗの化合物に変換することができる。式Ｔの塩を調製するために使用された様式と同様の様式で、対応するアルコールを臭化物に変換し、続いてトリフェニルホスフィンと反応させることを介して、式ＡＡの塩を得る。
【００４９】
式Ｊの第二級アルコール（スキーム２を参照されたい）または式Ｍのケトン（スキーム２を参照されたい）から、スキーム３に示されている反応シークエンスと同様の反応シークエンスを介して、Ｘ、Ｚ、Ｒ１およびＲ２ａがスキーム１において定義されているとおりである下記に示されている式ＢＢの化合物を調製することができる。式Ｊの化合物から対応する臭化物への変換、続く一般式Ｘ−ＣＨＯのアルデヒドを用いてのウィティッヒオレフィン化によって、式ＣＣのアルケンを得る。他にも、式Ｍのケトンを一般構造Ｘ−ＣＨ２−ＰＰｈ３＋Ｂｒ−の塩とウィティッヒ反応させることを介して、式ＣＣのアルケンを得ることができる。次いで、水素化によって、式ＣＣのアルケンを、式ＢＢの化合物に変換する。
【００５０】
【化５】
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【００５１】
ある種の場合には、スキーム１、２および３に示されているステップの順番を変えることができる。例えばスキーム１では、最後のステップとして、ピラゾール環上にシアノ基を導入すること、即ち、ステップ４および５を実施する順番を逆にすることが時には可能である。他にもある種の場合には、合成の後半で、最後のステップとしてでも、基Ｘ上に置換基Ｒ３を導入するか、または修飾することが好ましい。例えば、Ｒ３がＳＯ２Ｒ７である場合、一般式Ｓ−Ｒ７の置換基を持つ対応する化合物を酸化させることによって、ＳＯ２Ｒ７基を最後のステップで形成することができる。
【００５２】
スキーム１、２および３に示されているシークエンスと同様のシークエンスに従って、３，３−ジフルオロ−４，４−ジヒドロキシ１−ピペリジンカルボン酸１，１−ジメチルエチルエステル（ＷＯ２００８１２１６８７）から出発して、本発明の化合物を調製することができる。スキーム１中の式Ａの中間体を調製するために記載されている様式と同様の様式で、この物質を式ＤＤのヒドラジン誘導体に変換することができ、次いでこれを、スキーム１中の式Ａの中間体と同様に使用する。
【００５３】
【化６】
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【００５４】
当業者には容易に分かるとおり、中間体の遠位官能基（例えば、第一級または第二級アミン）を保護することが必要なことがある。そのような保護の必要性は、その遠位官能基の性質および調製方法の条件に応じて変動するはずである。適切なアミノ保護基（ＮＨ−Ｐｇ）には、アセチル、トリフルオロアセチル、ｔ−ブトキシカルボニル（ＢＯＣ）、ベンジルオキシカルボニル（ＣＢＺ）および９−フルオレニルメチレンオキシカルボニル（Ｆｍｏｃ）が包含される。同様に、「ヒドロキシ保護基」は、ヒドロキシ官能基をブロックまたは保護するヒドロキシ基の置換基を指す。適切なヒドロキシル保護基（Ｏ−Ｐｇ）には例えば、アリル、アセチル、シリル、ベンジル、パラ−メトキシベンジル、トリチルなどが包含される。そのような保護の必要性は、当業者によって容易に決定される。保護基およびその使用に関する総説については、Ｔ．Ｗ．Ｇｒｅｅｎｅ、Ｐｒｏｔｅｃｔｉｖｅ  Ｇｒｏｕｐｓ  ｉｎ  Ｏｒｇａｎｉｃ  Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ、Ｊｏｈｎ  Ｗｉｌｅｙ＆Ｓｏｎｓ、Ｎｅｗ  Ｙｏｒｋ、１９９１を参照されたい。
【００５５】
上述のとおり、本発明の化合物のうちの一部は酸性であり、薬学的に許容できるカチオンと塩を形成する。本発明の化合物のうちの一部は塩基性であり、薬学的に許容できるアニオンと塩を形成する。そのような塩は全て、本発明の範囲内であり、適切に水性、非水性または部分的に水性の媒質中で、酸性実体と塩基性実体とを通常は化学量論的比で組み合わせるなどの通常の方法によって、調製することができる。適切に濾過、非溶媒での沈殿に続く濾過、溶媒の蒸発または水溶液の場合には凍結乾燥によって、塩を回収する。エタノール、ヘキサン、水／エタノール混合物などの適切な溶媒（複数可）に溶解させることなどによる当分野で知られている手順に従って、化合物を結晶の形で得る。
【００５６】
医学的使用
本発明の化合物は、Ｇタンパク質共役受容体ＧＰＲ１１９の活性を調節する。したがって前記化合物は、ＧＰＲ１１９の活性がそれらの疾患の病理学または症状に寄与する糖尿病などの疾患を予防および治療するために有用である。その結果、本発明の他の態様は、個体において代謝性疾患および／または代謝関連障害を治療する方法であって、そのような治療を必要とする個体に、治療有効量の本発明の化合物、前記化合物の塩またはそのような化合物を含有する医薬組成物を投与するステップを含む方法を包含する。代謝性疾患および代謝関連障害は、これらに限られないが、高脂血症、Ｉ型糖尿病、ＩＩ型糖尿病、特発性Ｉ型糖尿病（Ｉｂ型）、成人潜在性自己免疫性糖尿病（ＬＡＤＡ）、早発性２型糖尿病（ＥＯＤ）、若年性非定型糖尿病（ＹＯＡＤ）、若年成人発症型糖尿病（ＭＯＤＹ）、栄養不良関連糖尿病、妊娠糖尿病、冠状動脈性心疾患、虚血性脳卒中、血管形成後の再狭窄、末梢血管疾患、間欠性跛行、心筋梗塞（例えば、壊死およびアポトーシス）、脂質異常症、食後高脂血症、耐糖能障害（ＩＧＴ）状態、空腹時血漿グルコース異常状態、代謝性アシドーシス、ケトーシス、関節炎、肥満、骨粗鬆症、高血圧、うっ血性心不全、左室肥大、末梢動脈疾患、糖尿病性網膜症、黄斑変性、白内障、糖尿病性腎症、糸球体硬化症、慢性腎不全、糖尿病性神経障害、代謝症候群、Ｘ症候群、月経前症候群、冠状動脈性心疾患、狭心症、血栓症、アテローム硬化症、心筋梗塞、一過性脳虚血発作、脳卒中、血管再狭窄、高血糖、高インスリン血症、高脂血症、高トリグリセリド血症、インスリン抵抗性、グルコース代謝障害、耐糖能障害状態、空腹時血漿グルコース異常状態、肥満、勃起機能不全、皮膚および結合組織の障害、足部潰瘍、内皮機能不全、高アポＢリポタンパク質血症ならびに血管コンプライアンス障害から選択される。加えて、本化合物は、アルツハイマー病、統合失調症および認知障害などの神経障害を治療するために使用することができる。本化合物はまた、炎症性腸疾患、潰瘍性大腸炎、クローン病、過敏性腸症候群などの胃腸疾患においても有益となる。上述のとおり、本化合物は、肥満患者、特に糖尿病に罹患している肥満患者において体重減少を刺激するためにも使用することができる。
【００５７】
前述によって、本発明は、それを必要とする対象において、上記の疾患または障害のうちのいずれかの症状を予防または改善する方法であって、対象に治療有効量の本発明の化合物を投与するステップを含む方法をさらに提供する。本発明のさらなる態様は、糖尿病およびその関連併存症を治療するための医薬の調製を包含する。
【００５８】
上記の治療特性を示すためには、化合物を、Ｇタンパク質共役受容体ＧＰＲ１１９の活性化を調節するのに十分な量で投与する必要がある。この量は、治療される特定の疾患／状態、患者の疾患／状態の重症度、患者、投与される特定の化合物、投与経路および患者内の他の基礎病態の存在などに応じて変動し得る。全身投与される場合、本化合物は典型的には、上記で挙げた疾患または状態のうちのいずれについても、約０．１ｍｇ／ｋｇ／日から約１００ｍｇ／ｋｇ／日の投薬量範囲でその効果を示す。毎日の反復投与が望ましいことがあり、上記で概略を述べた状態によって変動するはずである。
【００５９】
本発明の化合物は、様々な経路によって投与することができる。本発明の化合物は、経口投与することができる。本発明の化合物は、非経口（即ち、皮下、静脈内、筋肉内、腹腔内または髄腔内）で、直腸で、または局所に投与することもできる。
【００６０】
同時投与
本発明の化合物は、本明細書に記載されている疾患、状態および／または障害を治療するための他の薬剤と共に使用することもできる。したがって、本発明の化合物を他の薬剤と組み合わせて投与するステップを包含する治療方法も提供する。本発明の化合物と組み合わせて使用することのできる適切な薬剤には、抗肥満薬（食欲抑制薬を包含）、抗糖尿病薬、抗高血糖薬、脂質低下薬および抗高血圧薬が包含される。
【００６１】
適切な抗糖尿病薬には、アセチル−ＣｏＡカルボキシラーゼ２（ＡＣＣ−２）阻害薬、ジアシルグリセロールＯ−アシル転移酵素１（ＤＧＡＴ−１）阻害薬、ホスホジエステラーゼ（ＰＤＥ）−１０阻害薬、スルホニル尿素（例えば、アセトヘキサミド、クロルプロパミド、ダイアビニーズ、グリベンクラミド、グリピジド、グリブリド、グリメピリド、グリクラジド、グリペンチド（ｇｌｉｐｅｎｔｉｄｅ）、グリキドン、グリソラミド、トラザミドおよびトルブタミド）、メグリチニド、α−アミラーゼ阻害薬（例えば、テンダミスタット、トレスタチンおよびＡＬ−３６８８）、α−グルコシドヒドロラーゼ阻害薬（例えば、アカルボース）、α−グルコシダーゼ阻害薬（例えば、アジポシン、カミグリボース、エミグリテート、ミグリトール、ボグリボース、プラディマイシン−Ｑおよびサルボスタチン）、ＰＰＡＲγアゴニスト（例えば、バラグリタゾン、シグリタゾン、ダルグリタゾン、エングリタゾン、イサグリタゾン、ピオグリタゾン、ロシグリタゾンおよびトログリタゾン）、ＰＰＡＲα／γアゴニスト（例えば、ＣＬＸ−０９４０、ＧＷ−１５３６、ＧＷ−１９２９、ＧＷ−２４３３、ＫＲＰ−２９７、Ｌ−７９６４４９、ＬＲ−９０、ＭＫ−０７６７およびＳＢ−２１９９９４）、ビグアニド（例えば、メトホルミン）、グルカゴン様ペプチド１（ＧＬＰ−１）アゴニスト（例えば、エキセンジン３およびエキセンジン４）、タンパク質チロシンホスファターゼ１Ｂ（ＰＴＰ−１Ｂ）阻害薬（例えば、トロズスクエミン、ヒルチオサール抽出物およびＺｈａｎｇ，Ｓ．ら、Ｄｒｕｇ  Ｄｉｓｃｏｖｅｒｙ  Ｔｏｄａｙ、１２（９／１０）、３７３〜３８１（２００７）に開示されている化合物）、ＳＩＲＴ−１阻害薬（例えば、レセルバトロール）、ジペプチジルペプチダーゼＩＶ（ＤＰＰ−ＩＶ）阻害薬（例えば、シタグリプチン、ビルダグリプチン、アログリプチンおよびサクサグリプチン）、インスリン分泌刺激物質、脂肪酸酸化阻害薬、Ａ２アンタゴニスト、ｃ−ｊｕｎアミノ末端キナーゼ（ＪＮＫ）阻害薬、インスリン、インスリン模倣物、グリコーゲンホスホリラーゼ阻害薬、ＶＰＡＣ２受容体アゴニストおよびＳＧＬＴ２阻害薬（ダパグリフロジンなどのナトリウム依存性グルコース輸送体阻害薬）が包含される。好ましい抗糖尿病薬は、メトホルミンおよびＤＰＰ−ＩＶ阻害薬（例えば、シタグリプチン、ビルダグリプチン、アログリプチンおよびサクサグリプチン）である。
【００６２】
適切な抗肥満薬には、１１β−ヒドロキシステロイドデヒドロゲナーゼ１（１１β−ＨＳＤ１型）阻害薬、ステアロイル−ＣｏＡデサチュラーゼ１（ＳＣＤ−１）阻害薬、ＭＣＲ−４アゴニスト、コレシストキニンＡ（ＣＣＫ−Ａ）アゴニスト、モノアミン再取込み阻害薬（シブトラミンなど）、交感神経様作用薬、β３アドレナリンアゴニスト、ドーパミンアゴニスト（ブロモクリプチンなど）、メラノサイト刺激ホルモン類似体、５ＨＴ２ｃアゴニスト、メラニン凝集ホルモンアンタゴニスト、レプチン（ＯＢタンパク質）、レプチン類似体、レプチンアゴニスト、ガラニンアンタゴニスト、リパーゼ阻害薬（テトラヒドロリプスタチン、即ち、オルリスタットなど）、食欲抑制薬（ボンベシンアゴニストなど）、神経ペプチドＹアンタゴニスト（例えば、ＮＰＹ  Ｙ５アンタゴニスト）、ＰＹＹ３−３６（その類似体を包含）、甲状腺模倣薬（ｔｈｙｒｏｍｉｍｅｔｉｃ  ａｇｅｎｔ）、デヒドロエピアンドロステロンまたはその類似体、グルココルチコイドアゴニストまたはアンタゴニスト、オレキシンアンタゴニスト、グルカゴン様ペプチド−１アゴニスト、毛様体神経栄養因子（Ｒｅｇｅｎｅｒｏｎ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｓ，Ｉｎｃ．、Ｔａｒｒｙｔｏｗｎ、ＮＹおよびＰｒｏｃｔｅｒ  ＆  Ｇａｍｂｌｅ  Ｃｏｍｐａｎｙ、Ｃｉｎｃｉｎｎａｔｉ、ＯＨから入手可能なＡｘｏｋｉｎｅ（商標）など）、ヒトアグーチ関連タンパク質（ＡＧＲＰ）阻害薬、グレリンアンタゴニスト、ヒスタミン３アンタゴニストまたはインバースアゴニスト、ニューロメジンＵアゴニスト、ＭＴＰ／ＡｐｏＢ阻害薬（例えば、ジルロタピド（ｄｉｒｌｏｔａｐｉｄｅ）などの腸選択的ＭＴＰ阻害薬）、オピオイドアンタゴニスト、オレキシンアンタゴニストなどが包含される。
【００６３】
本発明の組合せ態様で使用するのに好ましい抗肥満薬には、腸選択的ＭＴＰ阻害薬（例えば、ジルロタピド、ミトラタピドおよびインプリタピド、Ｒ５６９１８（ＣＡＳ番号４０３９８７）およびＣＡＳ番号９１３５４１−４７−６）、ＣＣＫａアゴニスト（例えば、ＰＣＴ公開ＷＯ２００５／１１６０３４号または米国特許出願公開第２００５−０２６７１００（Ａ１）号に記載されているＮ−ベンジル−２−［４−（１Ｈ−インドール−３−イルメチル）−５−オキソ−１−フェニル−４，５−ジヒドロ−２，３，６，１０ｂ−テトラアザ−ベンゾ［ｅ］アズレン−６−イル］−Ｎ−イソプロピル−アセトアミド）、５ＨＴ２ｃアゴニスト（例えば、ロルカセリン）、ＭＣＲ４アゴニスト（例えば、ＵＳ６，８１８，６５８に記載されている化合物）、リパーゼ阻害薬（例えば、Ｃｅｔｉｌｉｓｔａｔ）、ＰＹＹ３−３６（本明細書で使用される場合、「ＰＹＹ３−３６」には、ペグ化ＰＹＹ３−３６（例えば、米国特許出願公開第２００６／０１７８５０１号に記載されているもの）などの類似体が包含される）、オピオイドアンタゴニスト（例えば、ナルトレキソン）、オレオイル−エストロン（ＣＡＳ番号１８０００３−１７−２）、オビネピチド（ｏｂｉｎｅｐｉｔｉｄｅ）（ＴＭ３０３３８）、プラムリンチド（Ｓｙｍｌｉｎ（登録商標））、テソフェンシン（ＮＳ２３３０）、レプチン、リラグルチド、ブロモクリプチン、オルリスタット、エキセナチド（Ｂｙｅｔｔａ（登録商標））、ＡＯＤ−９６０４（ＣＡＳ番号２２１２３１−１０−３）およびシブトラミンが包含される。好ましくは、本発明の化合物および併用療法を、運動および賢明な食事と合わせて投与する。
【００６４】
上記で引用された米国特許および公開は全て、参照によって本明細書に組み込まれる。
【００６５】
医薬製剤
本発明はまた、治療有効量の化合物または薬学的に許容できるその塩を少なくとも１種の薬学的に許容できる賦形剤と混合された形で含む医薬組成物も提供する。その医薬組成物には、経口、局所または非経口の使用に適合させた形態の組成物が包含され、上記のとおりの糖尿病および関連状態を治療するために使用することができる。
【００６６】
その組成物は、真皮下、吸入、経口、局所、非経口などの当分野で知られている任意の経路による投与用に製剤化することができる。その医薬組成物は、これらに限られないが、錠剤、カプセル剤、散剤、顆粒剤、トローチ剤または経口もしくは滅菌非経口の液剤もしくは懸濁剤などの液体製剤を包含する、当分野で知られている任意の形態であってよい。
【００６７】
経口投与用の錠剤およびカプセル剤は、単位用量提示形態であってよく、結合剤、例えばシロップ、アラビアゴム、ゼラチン、ソルビトール、トラガカントまたはポリビニルピロリドン；充填剤、例えばラクトース、糖、トウモロコシデンプン、リン酸カルシウム、ソルビトール、グリシン；打錠滑沢剤、例えばステアリン酸マグネシウム、タルク、ポリエチレングリコールまたはシリカ；崩壊剤、例えばバレイショデンプン；またはラウリル硫酸ナトリウムなどの許容できる湿潤剤などの通常の賦形剤を含有してよい。錠剤は、標準の薬務でよく知られている方法に従ってコーティングされていてもよい。
【００６８】
経口液体製剤は、例えば水性もしくは油性の懸濁剤、液剤、乳剤、シロップ剤またはエリキシル剤の形であってよいか、または使用前に水もしくは適切な他のビヒクルで再構成する乾燥製品として提示してもよい。そのような液体製剤は、懸濁化剤、例えばソルビトール、メチルセルロース、グルコースシロップ、ゼラチン、ヒドロキシエチルセルロース、カルボキシメチルセルロース、ステアリン酸アルミニウムゲル、水素添加食用脂、乳化剤、例えばレシチン、モノオレイン酸ソルビタン、アラビアゴム；非水性ビヒクル（食用油を含めてもよい）、例えば扁桃油、グリセリンなどの油性エステル、プロピレングリコールまたはエチルアルコール；保存剤、例えばｐ−ヒドロキシ安息香酸メチルもしくはプロピルまたはソルビン酸および所望の場合には、通常の香味剤または着色剤などの通常の添加剤を含有してよい。
【００６９】
非経口投与では、化合物および無菌ビヒクル（水が好ましい）を利用して、流動性の単位剤形を調製する。化合物は、使用されるビヒクルおよび濃度に応じて、ビヒクルまたは適切な他の溶媒に懸濁または溶解させることができる。溶液の調製では、化合物を注射用の水に溶解させ、濾過滅菌し、その後、適切なバイアルまたはアンプルに充填し、密封することができる。有利には、局所麻酔剤、保存剤および緩衝剤などの作用物質をビヒクルに溶解させることができる。安定性を高めるために、組成物をバイアルに充填した後に凍結させ、真空中で水を除去することができる。次いで、その無水凍結乾燥させた粉末をバイアルに密閉し、使用前に液体を再構成するために、付属のバイアルの注射用水を供給することができる。非経口懸濁剤は、化合物をビヒクルに溶解させる代わりに懸濁させること、および滅菌が濾過によっては実現できないことを除いて、実質的に同じ様式で調製する。無菌ビヒクルに懸濁させる前にエチレンオキシドに曝露することによって、化合物を滅菌することができる。有利には、界面活性剤または湿潤剤を組成物に包含させて、化合物の均一な分布を促進する。
【００７０】
組成物は、投与方法に応じて、例えば約０．１重量％から約９９重量％の活性物質を含有してよい。組成物が投薬量単位を構成する場合、各単位は、例えば活性成分約０．１から９００ｍｇ、より典型的には１ｍｇから２５０ｍｇを含有するはずである。
【００７１】
本発明の化合物は、他の抗糖尿病薬との類推によって、ヒト医学または獣医学で使用するための任意の簡便な方法で投与用に製剤化することができる。そのような方法は当分野で知られており、上記でまとめられている。そのような製剤の調製に関するより詳細な検討に関しては、読者は、Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ  ｏｆ  ｔｈｅ  Ｓｃｉｅｎｃｅｓ  ｉｎ  ＰｈｉｌａｄｅｌｐｈｉａによるＲｅｍｉｎｇｔｏｎ”ｓ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｓｃｉｅｎｃｅｓ、第２１版に注意を払う。
【００７２】
下記の実施例によって、本発明の実施形態を例示する。しかしながら、当業者には、本開示に照らして、それらの他の変形形態が分かるかまたは明白になるため、本発明の実施形態は、これらの実施例の具体的な詳細に限定されないことを理解されたい。
【実施例】
【００７３】
別段に指定されていない限り、出発物質は一般に、Ａｌｄｒｉｃｈ  Ｃｈｅｍｉｃａｌｓ  Ｃｏ．（Ｍｉｌｗａｕｋｅｅ、ＷＩ）、Ｌａｎｃａｓｔｅｒ  Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ，Ｉｎｃ．（Ｗｉｎｄｈａｍ、ＮＨ）、Ａｃｒｏｓ  Ｏｒｇａｎｉｃｓ（Ｆａｉｒｌａｗｎ、ＮＪ）、Ｍａｙｂｒｉｄｇｅ  Ｃｈｅｍｉｃａｌ  Ｃｏｍｐａｎｙ，Ｌｔｄ．（Ｃｏｒｎｗａｌｌ、英国）、Ｔｙｇｅｒ  Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ（Ｐｒｉｎｃｅｔｏｎ、ＮＪ）およびＡｓｔｒａＺｅｎｅｃａ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｓ（Ｌｏｎｄｏｎ、英国）、Ｍａｌｌｉｎｃｋｒｏｄｔ  Ｂａｋｅｒ（Ｐｈｉｌｌｉｐｓｂｕｒｇ  ＮＪ）；ＥＭＤ（Ｇｉｂｂｓｔｏｗｎ、ＮＪ）などの市販品供給元から入手可能である。
【００７４】
一般実験手順
プロトン分析では、Ｖａｒｉａｎ  Ｕｎｉｔｙ（商標）４００（ＤＧ４００−５プローブ）または５００（ＤＧ５００−５プローブ）（両方ともＶａｒｉａｎ  Ｉｎｃ．、Ｐａｌｏ  Ａｌｔｏ、ＣＡから入手可能）を用い、室温で、それぞれ４００ＭＨｚまたは５００ＭＨｚで、ＮＭＲスペクトルを記録した。化学シフトは、内部標準としての残存溶媒に対して百万分率（δ）で表示する。ピーク形状は、次のとおりに表記する。即ち、ｓ：一重線、ｄ：二重線、ｄｄ：二重二重線、ｔ：三重線、ｑ：四重線、ｍ：多重線、ｂｓ：ブロード一重線、２ｓ：２本の一重線。
【００７５】
Ｗａｔｅｒｓ（商標）分光計（Ｍｉｃｒｏｍａｓｓ  ＺＭＤ、キャリヤーガス：窒素）（Ｗａｔｅｒｓ  Ｃｏｒｐ．、Ｍｉｌｆｏｒｄ、ＭＡ、米国から入手可能）で、０．３ｍＬ／分の流速で、５０：５０の水／アセトニトリル溶離剤系を利用して、大気圧化学イオン化質量スペクトル（ＡＰＣＩ）を得た。Ｗａｔｅｒｓ（商標）（Ｍｉｃｒｏｍａｓｓ  ＺＱまたはＺＭＤ機器（キャリヤーガス：窒素）（Ｗａｔｅｒｓ  Ｃｏｒｐ．、Ｍｉｌｆｏｒｄ、ＭＡ、米国）の液体クロマトグラフィー質量分析計で、各溶媒に０．０１％のギ酸を加えた９５：５〜０：１００のアセトニトリル中の水の勾配を利用して、エレクトロスプレーイオン化質量スペクトル（ＥＳ）を得た。これらの機器は、流速１ｍＬ／分で３．７５分間または２ｍＬ／分で１．９５分間、Ｖａｒｉａｎ  Ｐｏｌａｒｉｓ  ５  Ｃ１８−Ａ２０×２．０ｍｍカラム（Ｖａｒｉａｎ  Ｉｎｃ．、Ｐａｌｏ  Ａｌｔｏ、ＣＡ）を利用した。
【００７６】
シリカゲルを使用し、Ｆｌａｓｈ  ４０  Ｂｉｏｔａｇｅ（商標）カラム（ＩＳＣ，Ｉｎｃ．、Ｓｈｅｌｔｏｎ、ＣＴ）またはＢｉｏｔａｇｅ（商標）ＳＮＡＰカートリッジＫＰｓｉｌまたはＲｅｄｉｓｅｐ  Ｒｆシリカ（Ｔｅｌｅｄｙｎｅ  Ｉｓｃｏ  Ｉｎｃ製）のいずれかを用いて窒素圧下で、カラムクロマトグラフィーを行った。フォトダイオードアレイ（Ｗａｔｅｒｓ  ２９９６）および質量分析計（Ｗａｔｅｒｓ／Ｍｉｃｒｏｍａｓｓ  ＺＱ）検出スキームを備えたＷａｔｅｒｓ  ＦｒａｃｔｉｏｎＬｙｎｘシステムを使用して、分取ＨＰＬＣを行った。フォトダイオードアレイ、単一四極子型質量検出および蒸発光散乱検出スキームを備えたＷａｔｅｒｓ  ２７９５  Ａｌｌｉａｎｃｅ  ＨＰＬＣまたはＷａｔｅｒｓ  ＡＣＱＵＩＴＹ  ＵＰＬＣを用いて、分析ＨＰＬＣ作業を行った。
【００７７】
真空中での濃縮は、回転蒸発器を使用して、減圧下で溶媒を蒸発させることを指す。
【００７８】
別段に述べられていない限り、化学反応は室温（摂氏約２３度）で行った。また、別段に述べられていない限り、化学反応は窒素雰囲気下で進めた。
【００７９】
薬理学的データ
本発明の化合物を用いて、Ｇタンパク質共役受容体ＧＰＲ１１９のアゴニスト活性化によって調節される疾患を治療する本発明の実施は、本明細書において下記に記載されている機能アッセイのうちの１つまたは複数における活性によって証明することができる。供給元は括弧内に示す。
【００８０】
インビトロ機能アッセイ
β−ラクタマーゼ：
ＧＰＲ１１９アゴニストについてのアッセイでは、ヒトＧＰＲ１１９のアゴニスト活性化が、環状ＡＭＰ反応要素（ＣＲＥ）を介してβ−ラクタマーゼ産生と合体している細胞ベースの（ｈＧＰＲ１１９  ＨＥＫ２９３−ＣＲＥ  β−ラクタマーゼ）レポーター構築物を利用する。そしてＦＲＥＴが可能なβ−ラクタマーゼ基質であるＣＣＦ４−ＡＭ（Ｌｉｖｅ  Ｂｌａｚｅｒ  ＦＲＥＴ−Ｂ／Ｇ  Ｌｏａｄｉｎｇキット、Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎカタログ番号Ｋ１０２７）を利用して、ＧＰＲ１１９活性を測定する。詳細には、ｈＧＰＲ１１９−ＨＥＫ−ＣＲＥ−β−ラクタマーゼ細胞（Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ  ２．５×１０７／ｍＬ）を液体窒素貯蔵庫から取り出し、プレーティング培地（ダルベッコ変法イーグル培地高グルコース（ＤＭＥＭ、Ｇｉｂｃｏカタログ番号１１９９５−０６５）、１０％熱不活性化ウシ胎児血清（ＨＩＦＢＳ、Ｓｉｇｍａカタログ番号Ｆ４１３５）、１×ＭＥＭ非必須アミノ酸（Ｇｉｂｃｏカタログ番号１５６３０−０８０）、２５ｍＭのＨＥＰＥＳ  ｐＨ７．０（Ｇｉｂｃｏカタログ番号１５６３０−０８０）、２００ｎＭのクラブラン酸カリウム（Ｓｉｇｍａカタログ番号Ｐ３４９４）中で希釈した。細胞プレーティング培地を使用して細胞濃度を調節し、この細胞懸濁液（１２．５×１０４生細胞）５０μＬを、ポリ−ｄ−リシンでコーティングされた黒色透明底３８４ウェルプレート（Ｇｒｅｉｎｅｒ  Ｂｉｏ−Ｏｎｅカタログ番号７８１９４６）の各ウェルに加え、５％の二酸化炭素を含有する加湿環境において摂氏３７度でインキュベートした。４時間後、プレーティング培地を除去し、アッセイ培地４０μＬ（アッセイ培地は、クラブラン酸カリウムおよびＨＩＦＢＳを含有しないプレーティング培地である）と入れ替えた。次いで、様々な濃度の各被験化合物を、１０μＬの体積（最終ＤＭＳＯ≦０．５％）で加え、５％の二酸化炭素を含有する加湿環境で、細胞を摂氏３７度で１６時間インキュベートした。プレートをインキュベーターから取り出し、約１５分間かけて室温と平衡させた。１０μＬの６×ＣＣＦ４／ＡＭ作用色素溶液（Ｌｉｖｅ  Ｂｌａｚｅｒ  ＦＲＥＴ−Ｂ／Ｇ  Ｌｏａｄｉｎｇキット（Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎカタログ番号Ｋ１０２７）内の説明書に従って調製）をウェル毎に加え、暗所、室温で２時間インキュベートした。ＥｎＶｉｓｉｏｎ蛍光定量プレートリーダー（励起４０５ｎｍ、発光４６０ｎｍ／５３５ｎｍ）で、蛍光を測定した。４パラメータロジスティック用量反応方程式を使用する曲線フィッティングプログラムで分析されたアゴニスト反応曲線から、ＥＣ５０を決定した。
【００８１】
ｃＡＭＰ：
他にも、細胞中のｃＡＭＰレベルを測定するＨＴＲＦ（均一時間分解蛍光）ｃＡＭＰ検出キット（ｃＡＭＰ  ｄｙｎａｍｉｃ２アッセイキット；Ｃｉｓ  Ｂｉｏカタログ番号６２ＡＭ４ＰＥＣ）を利用する細胞ベースのアッセイで、ＧＰＲ１１９アゴニスト活性を決定した。その方法は、細胞によって産生される自然なｃＡＭＰと、色素ｄ２で標識されているｃＡＭＰとの競合イムノアッセイである。トレーサー結合を、クリプテートで標識されているＭａｂ抗ｃＡＭＰによって可視化する。特異的シグナル（即ち、エネルギー移動）は、標準またはサンプル中のｃＡＭＰの濃度に反比例する。
【００８２】
詳細には、ｈＧＰＲ１１９  ＨＥＫ−ＣＲＥ  β−ラクタマーゼ細胞（Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ  ２．５×１０７／ｍＬ；上記のβ−ラクタマーゼアッセイで使用されたのと同じ細胞系）を凍結保存から取り出し、増殖培地（ダルベッコ変法イーグル培地高グルコース（ＤＭＥＭ、Ｇｉｂｃｏカタログ番号１１９９５−０６５）、１％チャコールデキストラン処理ウシ胎児血清（ＣＤ血清、ＨｙＣｌｏｎｅカタログ番号ＳＨ３００６８．０３）、１×ＭＥＭ非必須アミノ酸（Ｇｉｂｃｏカタログ番号１５６３０−０８０）および２５ｍＭのＨＥＰＥＳ  ｐＨ７．０（Ｇｉｂｃｏカタログ番号１５６３０−０８０））中で希釈する。細胞濃度を１．５×１０５細胞／ｍＬに調節し、この懸濁液３０ｍＬをＴ−１７５フラスコに加え、５％二酸化炭素の加湿環境において摂氏３７度でインキュベートした。１６時間（一晩）後、細胞をＴ−１７５フラスコから（フラスコの側面を叩くことで）取り出し、８００×ｇで遠心分離し、次いでアッセイ培地（１×ＨＢＳＳ＋ＣａＣｌ２＋ＭｇＣｌ２（Ｇｉｂｃｏカタログ番号１４０２５−０９２）および２５ｍＭのＨＥＰＥＳ  ｐＨ７．０（Ｇｉｂｃｏカタログ番号１５６３０−０８０））に再懸濁させた。アッセイ培地を用いて、細胞濃度を６．２５×１０５細胞／ｍＬに調節し、この細胞懸濁液８μｌ（５０００細胞）を、Ｇｒｅｉｎｅｒ３８４ウェル白色小体積アッセイプレート（ＶＷＲカタログ番号８２０５１−４５８）の各ウェルに加えた。
【００８３】
様々な濃度の各被験化合物を３−イソブチル−１−メチルキサンチン（ＩＢＭＸ、Ｓｉｇｍａカタログ番号Ｉ５８７９）を含有するアッセイ緩衝液中で希釈し、２μＬの体積でアッセイプレートウェルに加えた（最終ＩＢＭＸ濃度は４００μＭであり、最終ＤＭＳＯ濃度は０．５８％であった）。室温での３０分間のインキュベートに続いて、標識されているｄ２ｃＡＭＰ  ５μＬおよび抗ｃＡＭＰ抗体５μＬ（両方とも細胞溶解緩衝液中で１：２０希釈、製造者のアッセイプロトコールに記載されているとおり）をアッセイプレートの各ウェルに加えた。次いで、プレートを室温でインキュベートし、６０分後に、Ｅｎｖｉｓｉｏｎ  ２１０４マルチラベルプレートリーダーで、励起波長３３０ｎｍならびに発光波長６１５ｎｍおよび６６５ｎｍを使用して、ＨＴＲＦシグナルの変化を読み取った。ｃＡＭＰ標準曲線からの内挿によって、生データをｎＭ  ｃＡＭＰに変換し（製造者のアッセイプロトコールに記載されているとおり）、４パラメータロジスティック用量反応式を使用して曲線適合プログラムで分析されたアゴニスト反応曲線から、ＥＣ５０を決定した。
【００８４】
ＧＰＲ１１９の活性化によるｃＡＭＰ反応は、ここで使用された特定の細胞系以外の細胞でも発生し得るであろうことが認められている。
【００８５】
β−アレスチン：
他にも、ＤｉｓｃｏｖｅｒＸ  ＰａｔｈＨｕｎｔｅｒ  β−アレスチン細胞アッセイ技術およびそのＵ２ＯＳ  ｈＧＰＲ１１９  β−アレスチン細胞系（ＤｉｓｃｏｖｅｒＸカタログ番号９３−０３５６Ｃ３）を利用する細胞ベースのアッセイで、ＧＰＲ１１９アゴニスト活性を決定した。このアッセイでは、アゴニストによって誘発されるβ−アレスチンと活性化ＧＰＲ１１９との相互作用を測定することによって、アゴニスト活性化を決定する。ＰｒｏＬｉｎｋと呼ばれる小さい４２アミノ酸酵素断片を、ＧＰＲ１１９のＣ末端に付加した。アレスチンを、ＥＡ（酵素アクセプター）と称されるより大きい酵素断片に融合させた。ＧＰＲ１１９の活性化はアレスチンの結合を刺激し、２つの酵素断片が相補せざるを得なくし、その結果、基質を加水分解し、化学発光シグナルを発生させることのできる機能性β−ガラクトシダーゼ酵素が生成する。
【００８６】
詳細には、Ｕ２ＯＳ  ｈＧＰＲ１１９  β−アレスチン細胞（ＤｉｓｃｏｖｅｒＸ  １×１０７／ｍＬ）を凍結保存から取り出し、増殖培地（最小必須培地（ＭＥＭ、Ｇｉｂｃｏカタログ番号１１０９５−０８０）、１０％熱不活化ウシ胎児血清（ＨＩＦＢＳ、Ｓｉｇｍａカタログ番号Ｆ４１３５−１００）、１００ｍＭのピルビン酸ナトリウム（Ｓｉｇｍａカタログ番号Ｓ８６３６）、５００μｇ／ｍＬのＧ４１８（Ｓｉｇｍａカタログ番号Ｇ８１６８）および２５０μｇ／ｍＬのハイグロマイシンＢ（Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎカタログ番号１０６８７−０１０）中で希釈する。細胞濃度を１．６６×１０５細胞／ｍＬに調節し、この懸濁液３０ｍＬをＴ−１７５フラスコに加え、５％二酸化炭素の加湿環境において摂氏３７度でインキュベートした。４８時間後、酵素不含の細胞解離緩衝液（Ｇｉｂｃｏカタログ番号１３１５１−０１４）を用いて細胞をＴ−１７５フラスコから取り出し、８００×ｇで遠心分離し、次いでプレーティング培地（Ｏｐｔｉ−ＭＥＭＩ（Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ／ＢＲＬカタログ番号３１９８５−０７０）および２％チャコールデキストラン処理ウシ胎児血清（ＣＤ血清、ＨｙＣｌｏｎｅカタログ番号ＳＨ３００６８．０３））に再懸濁させた。プレーティング培地を用いて、細胞濃度を２．５×１０５細胞／ｍＬに調節し、この細胞懸濁液１０μＬ（２５００細胞）を、Ｇｒｅｉｎｅｒ３８４ウェル白色小体積アッセイプレート（ＶＷＲカタログ番号８２０５１−４５８）の各ウェルに加え、プレートを５％二酸化炭素の加湿環境において摂氏３７度でインキュベートした。
【００８７】
１６時間（一晩）後、インキュベーターからアッセイプレートを取り出し、様々な濃度の各被験化合物（アッセイ緩衝液（１×ＨＢＳＳ＋ＣａＣｌ２＋ＭｇＣｌ２（Ｇｉｂｃｏカタログ番号１４０２５−０９２）、２０ｍＭのＨＥＰＥＳ  ｐＨ７．０（Ｇｉｂｃｏカタログ番号１５６３０−０８０）および０．１％のＢＳＡ（Ｓｉｇｍａカタログ番号Ａ９５７６）中で希釈）を２．５μＬの体積でアッセイプレートウェルに加えた（最終ＤＭＳＯ濃度は０．５％であった）。５％二酸化炭素の加湿環境において摂氏３７度で９０分間インキュベートした後、Ｇａｌａｃｔｏｎ  Ｓｔａｒ  β−ガラクトシダーゼ基質７．５μＬ（ＰａｔｈＨｕｎｔｅｒ  Ｄｅｔｅｃｔｉｏｎ  Ｋｉｔ（ＤｉｓｃｏｖｅＲｘカタログ番号９３−０００１）、製造者のアッセイプロトコールに記載に記載されているとおりに調製）をアッセイプレートの各ウェルに加えた。プレートを室温でインキュベートし、６０分後に、Ｅｎｖｉｓｉｏｎ２１０４マルチラベルプレートリーダーを用い、１ウェルあたり０．１秒で、発光の変化を読み取った。４パラメータロジスティック用量反応式を使用する曲線適合プログラムで分析されたアゴニスト反応曲線から、ＥＣ５０を決定した。
【００８８】
ＢａｃＭａｍを使用してのＧＰＲ１１９の発現およびＧＰＲ１１９結合アッセイ
ポリメラーゼ連鎖反応（ＰＣＲ）（Ｐｆｕ  Ｔｕｒｂｏ  Ｍａｔｅｒ  Ｍｉｘ、Ｓｔｒａｔａｇｅｎｅ、Ｌａ  Ｊｏｌｌａ、ＣＡ）を介して、テンプレートとしてのｐＩＲＥＳ−ｐｕｒｏ−ｈＧＰＲ１１９および次のプライマーを使用して、野生型ヒトＧＰＲ１１９（ＰＣＴ特許公開第２０１０／１０６４５７号で公開）を増幅した：
ｈＧＰＲ１１９  ＢａｍＨ１、上流
５’−ＴＡＡＡＴＴＧＧＡＴＣＣＡＣＣＡＴＧＧＡＡＴＣＡＴＣＴＴＴＣＴＣＡＴＴＴＧＧＡＧ−３’
（５'末端にＢａｍＨＩ部位を挿入）
ｈＧＰＲ１１９  ＥｃｏＲＩ、下流
５’−ＴＡＡＡＴＴＧＡＡＴＴＣＴＴＡＴＣＡＧＣＣＡＴＣＡＡＡＣＴＣＴＧＡＧＣ−３’
（３'末端にＥｃｏＲＩ部位を挿入）
【００８９】
製造者のプロトコールに従って、増幅産物を精製し（Ｑｉａｑｕｉｃｋ  Ｋｉｔ、Ｑｉａｇｅｎ、Ｖａｌｅｎｃｉａ、ＣＡ）、ＢａｍＨ１およびＥｃｏＲＩ（Ｎｅｗ  Ｅｎｇｌａｎｄ  ＢｉｏＬａｂｓ、Ｉｐｓｗｉｃｈ、ＭＡ）で消化した。ベクターｐＦＢ−ＶＳＶＧ−ＣＭＶ−ポリ（ＰＣＴ特許公開第２０１０／１０６４５７号に公開）をＢａｍＨＩおよびＥｃｏＲＩ（Ｎｅｗ  Ｅｎｇｌａｎｄ  ＢｉｏＬａｂｓ、Ｉｐｓｗｉｃｈ、ＭＡ）で消化した。消化されたＤＮＡを１％アガロースゲル上での電気泳動によって分離し；断片をゲルから切り出し、精製した（Ｑｉａｑｕｉｃｋ  Ｋｉｔ、Ｑｉａｇｅｎ、Ｖａｌｅｎｃｉａ、ＣＡ）。ベクターと遺伝子断片とを連結し（Ｒａｐｉｄ  Ｌｉｇａｓｅ  Ｋｉｔ、Ｒｏｃｈｅ、Ｐｌｅａｓａｎｔｏｎ、ＣＡ）、ＯｎｅＳｈｏｔ  ＤＨ５α  Ｔ１Ｒ細胞（Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ、Ｃａｒｌｓｂａｄ、ＣＡ）に形質転換した。８つのアンピシリン耐性コロニー（「クローン１−８」）をミニプレップ（Ｑｉａｇｅｎ  Ｍｉｎｉｐｒｅｐ  Ｋｉｔ、Ｑｉａｇｅｎ、Ｖａｌｅｎｃｉａ、ＣＡ）用に増殖させ、配列決定して、同一性および正しい挿入方向を確認した。
【００９０】
製造者のプロトコールに従って、ｐＦＢ−ＶＳＶＧ−ＣＭＶ−ポリ−ｈＧＰＲ１１９構築物（クローン＃１）をＯｎｅＳｈｏｔ  ＤＨ１０Ｂａｃ細胞（Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ、Ｃａｒｌｓｂａｄ、ＣＡ）に形質転換した。８つの陽性（即ち白色）のコロニーを再画線して、「陽性」であることを確認し、続いて、バクミド単離のために増殖させた。組み換えｈＧＰＲ１１９バクミドは、Ｑｉａｇｅｎ  Ｍｉｎｉｐｒｅｐ  Ｋｉｔ（Ｑｉａｇｅｎ、Ｖａｌｅｎｃｉａ、ＣＡ）からの緩衝液を使用する変法アルカリ溶解手順を介して単離した。簡単には、ペレット化された細胞を緩衝液Ｐ１に溶解させ、緩衝液Ｐ２中で中和し、緩衝液Ｎ３で沈殿させた。沈殿物を遠心分離（１７，９００×ｇで１０分間）を介してペレット化し、上清をイソプロパノールと合わせて、ＤＮＡを沈殿させた。ＤＮＡを遠心分離（１７，９００×ｇで３０分間）を介してペレット化し、７０％エタノールで１回洗浄し、緩衝液ＥＢ５０μＬ（Ｔｒｉｓ−ＨＣＬ、ｐＨ８．５）に再懸濁させた。市販のプライマー（Ｍ１３Ｆ、Ｍ１３Ｒ、Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ、Ｃａｒｌｓｂａｄ、ＣＡ）を用いるポリメラーゼ連鎖反応（ＰＣＲ）を使用して、バクミド中にｈＧＰＲ１１９挿入物が存在することを確認した。
【００９１】
ｈＧＰＲ１１９組み換えバキュロウイルスの生成
Ｐ０ウイルスストックの作製
製造者のプロトコール（Ｃｅｌｌｆｅｃｔｉｎ、Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ、Ｃａｒｌｓｂａｄ、ＣＡ）に従って、Ｓｆ９００ＩＩ培地（Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ、Ｃａｒｌｓｂａｄ、ＣＡ）中で増殖させた、懸濁液に適合させたＳｆ９細胞に、ｈＧＰＲ１１９バクミドＤＮＡ１０μＬをトランスフェクトした。５日間インキュベートした後、調整培地（即ち「Ｐ０」ウイルスストック）を遠心分離し、０．２２μｍフィルター（Ｓｔｅｒｉｆｌｉｐ、Ｍｉｌｌｉｐｏｒｅ、Ｂｉｌｌｅｒｉｃａ、ＭＡ）で濾過した。
【００９２】
凍結ウイルス（ＢＩＩＣ）ストックの作製
長期間のウイルス貯蔵および作業（即ち「Ｐ１」）ウイルスストック生成のために、凍結ＢＩＩＣ（バキュロウイルス感染させた昆虫細胞）ストックを下記のとおりに作製した。懸濁液に適合させたＳｆ９細胞をＳｆ９００ＩＩ培地（Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ、Ｃａｒｌｓｂａｄ、ＣＡ）中で増殖させ、ｈＧＰＲ１１９  Ｐ０ウイルスストックで感染させた。２４時間増殖させた後、感染細胞を穏やかに遠心分離し（約１００×ｇ）、凍結用培地（Ｓｆ９００ＩＩ培地中１０％のＤＭＳＯ、１％のアルブミン）に再懸濁させて、１×１０７細胞／ｍＬの最終密度にし、標準の凍結用プロトコールに従って、１ｍＬアリコートで凍結させた。
【００９３】
作業（「Ｐ１」）ウイルスストックの作製
Ｓｆ９００ＩＩ培地（Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ、Ｃａｒｌｓｂａｄ、ＣＡ）で増殖させた、懸濁液に適合させたＳｆ９細胞を、解凍したｈＧＰＲ１１９  ＢＩＩＣストックの１：１００希釈物で感染させ、数日間インキュベートした（摂氏２７度で振盪しながら）。細胞の生存率が７０％に到達したら、調整培地を遠心分離によって回収し、ＥＬＩＳＡ（ＢａｃｕｌｏＥｌｉｓａ  Ｋｉｔ、Ｃｌｏｎｔｅｃｈ、Ｍｏｕｎｔａｉｎ  Ｖｉｅｗ、ＣＡ）によって、ウイルス力価を決定した。
【００９４】
懸濁液に適合させたＨＥＫ２９３ＦＴ細胞におけるｈＧＰＲ１１９の過剰発現
ＨＥＫ２９３ＦＴ細胞（Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ、Ｃａｒｌｓｂａｄ、ＣＡ）を振盪フラスコ内で、５０μｇ／ｍＬのネオマイシンおよび１０ｍＭのＨＥＰＥＳを補足されている２９３Ｆｒｅｅｓｔｙｌｅ培地（Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ）中で増殖させた（３７Ｃ、８％二酸化炭素、振盪）。細胞を穏やかに遠心分離し（約５００×ｇ、１０分）、ペレットを、１８％ウシ胎児血清（Ｓｉｇｍａ  Ａｌｄｒｉｃｈ）を補足されているダルベッコＰＢＳ（Ｍｇ＋＋／−Ｃａ＋＋不含）とＰ１ウイルスの混合物に再懸濁させて、感染多重度（ＭＯＩ）が１０になり、最終細胞密度が１．３×１０６／ｍＬ（合計体積２．５リットル）になるようにした。細胞を５リットルのＷａｖｅ  Ｂｉｏｒｅａｃｔｏｒ  Ｗａｖｅｂａｇ（Ｗａｖｅ  Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ、ＭＡ）に移し、摂氏２７度で４時間インキュベートし（１７振動（ｒｏｃｋ）／分、プラットフォーム角度７°）、インキュベート期間の終了時に、３０ｍＭの酪酸ナトリウム（Ｓｉｇｍａ  Ａｌｄｒｉｃｈ）を補足されている等体積（２．５リットル）の２９３Ｆｒｅｅｓｔｙｌｅ培地を加え（最終濃度＝１５ｍＭ）、細胞を２０時間増殖させた（摂氏３７度、８％ＣＯ２［０．２リットル／分｝、２５振動／分、プラットフォーム角度７°）。細胞を遠心分離（３，０００×ｇ、１０分）を介して収集し、ＤＰＢＳ（Ｃａ＋＋／Ｍｇ＋＋不含）で１回洗浄し、０．２５Ｍのスクロース、２５ｍＭのＨＥＰＥＳ、０．５ｍＭのＥＤＴＡ、ｐＨ７．４に再懸濁させ、摂氏−８０度で凍結させた。
【００９５】
放射リガンド結合アッセイのための膜調製
凍結細胞を氷上で解凍し、７００×ｇ（１４００ｒｐｍ）で摂氏４℃で１０分間、遠心分離した。細胞ペレットをリン酸緩衝溶液２０ｍＬに再懸濁させ、１４００ｒｐｍで１０分間遠心分離した。次いで、細胞ペレットをホモジナイズ緩衝液（１０ｍＭのＨＥＰＥＳ（Ｇｉｂｃｏ  ＃１５６３０）、ｐＨ７．５、１ｍＭのＥＤＴＡ（ＢｉｏＳｏｌｕｔｉｏｎｓ、＃ＢＩＯ２６０−１５）、１ｍＭのＥＧＴＡ（Ｓｉｇｍａ、＃Ｅ−４３７８）、０．０１ｍｇ／ｍＬのベンズアミジン（Ｓｉｇｍａ  ＃Ｂ６５０６）、０．０１ｍｇ／ｍＬのバシトラシン（Ｓｉｇｍａ  ＃Ｂ０１２５）、０．００５ｍｇ／ｍＬのロイペプチン（Ｓｉｇｍａ  ＃Ｌ８５１１）、０．００５ｍｇ／ｍＬのアプロチニン（Ｓｉｇｍａ  ＃Ａ１１５３））に再懸濁させ、氷上で１０分間インキュベートした。次いで、細胞を、タイトフィット型ガラス製Ｄｏｕｎｃｅホモジナイザーでの１５回の穏やかなストロークで溶解させた。ホモジネートを１０００×ｇ（２２００ｒｐｍ）で摂氏４度で１０分間遠心分離した。上清を氷上の新たな遠心管に移した。細胞ペレットをホモジナイズ緩衝液に再懸濁させ、１０００×ｇ（２２００ｒｐｍ）で摂氏４度で１０分間、再び遠心分離し、その後、上清を取り出し、ペレットをホモジナイズ緩衝液に再懸濁させた。このプロセスを３回目も繰り返し、その後、上清を合わせ、Ｂｅｎｚｏｎａｓｅ（Ｎｏｖａｇｅｎ  ＃７１２０６）およびＭｇＣｌ２（Ｆｌｕｋａ  ＃６３０２０）を加えて、それぞれ１Ｕ／ｍＬおよび６ｍＭの最終濃度にし、氷上で１時間インキュベートした。次いで溶液を２５，０００×ｇ（１５０００ｒｐｍ）で摂氏４度で２０分間、遠心分離し、上清を廃棄し、ペレットを新鮮なホモジナイズ緩衝液（ＢｅｎｚｏｎａｓｅおよびＭｇＣｌ２不含）に再懸濁させた。２５，０００×ｇでの遠心分離ステップを繰り返した後、最終膜ペレットをホモジナイズ緩衝液に再懸濁させ、摂氏−８０度で凍結させた。ＰｉｅｒｃｅＢＣＡタンパク質アッセイキット（Ｐｉｅｒｃｅ試薬  Ａ＃２３２２３およびＢ＃２３２２４）を使用して、タンパク質濃度を決定した。
【００９６】
［３Ｈ］−化合物Ａの合成および精製
【００９７】
【化７】
2013543885.tif 000008
化合物Ａ（上記に示されているとおりのイソプロピル４−（１−（４−（メチルスルホニル）フェニル）−３ａ，７ａ−ジヒドロ−１Ｈ−ピラゾロ［３，４−ｄ］ピリミジン−４−イルオキシ）ピペリジン−１−カルボキシレート）（４ｍｇ、０．００９ｍｍｏｌ）をジクロロメタン０．５ｍＬに溶解させ、生じた溶液を（１，５−シクロオクタジエン）（ピリジン）（トリシクロヘキシルホスフィン）−イリジウム（Ｉ）ヘキサフルオロホスフェート（Ｊ．Ｏｒｇａｎｏｍｅｔａｌ．Ｃｈｅｍ．１９７９、１６８、１８３）（５ｍｇ、０．００６ｍｍｏｌ）で処理した。反応容器を密封し、溶液をトリチウムガス雰囲気中で１７時間撹拌した。減圧下で反応溶媒を除去し、生じた残渣をエタノールに溶解させた。以下の条件を使用する分取ＨＰＬＣによって、粗製［３Ｈ］−化合物Ａの精製を行った。
カラム：Ａｔｌａｎｔｉｓ、４．６×１５０ｍｍ、５μｍ
移動相Ａ：水／アセトニトリル／ギ酸（９８／２／０．１）
移動相Ｂ：アセトニトリル
勾配：時間      Ｂの％
０．００    ３０．０
１．００    ３０．０
１３．００  ８０．０
ランタイム：１６分
ポストタイム：５分
流速：１．５ｍＬ／分
注入体積：２０〜５０μＬ
注入溶媒：ＤＭＳＯ
検出：２１０ｎｍおよび２４５ｎｍでのＵＶ
【００９８】
精製された［３Ｈ］−化合物Ａの比活性は、質量分析によって、７０Ｃｉ／ｍｍｏｌと決定された。
【００９９】
別法で、結合アッセイを［３Ｈ］−化合物Ｂで行うことができる。
【０１００】
［３Ｈ］−化合物Ｂの合成および精製
【０１０１】
【化８】
2013543885.tif 000009
化合物Ｂ（上記で示されているとおりのｔｅｒｔ−ブチル４−（１−（４−（メチルスルホニル）フェニル）−１Ｈ−ピラゾロ［３，４−ｄ］ピリミジン−４−イルオキシ）ピペリジン−１−カルボキシレート）（５ｍｇ、１０．６μｍｏｌ）をジクロロメタン１．０ｍＬに溶解させ、生じた溶液をクラブトリー触媒（５ｍｇ、６．２μｍｏｌ）で処理した。反応容器を密封し、溶液をトリチウムガス雰囲気下で１７時間撹拌した。減圧下で反応溶媒を除去し、生じた残渣をエタノールに溶解させた。７０％ヘキサン／３０％酢酸エチルで溶離するシリカゲルフラッシュカラムクロマトグラフィーによって、続いて、６０％石油エーテル／４０％酢酸エチルで溶離するシリカゲルフラッシュカラムクロマトグラフィーによって、粗製［３Ｈ］−化合物Ｂの精製を行った。
【０１０２】
精製された［３Ｈ］−化合物Ｂの比活性は、質量分析によって５７．８Ｃｉ／ｍｍｏｌであると決定された。
【０１０３】
ＧＰＲ１１９放射リガンド結合アッセイ
被験化合物を１００％ＤＭＳＯ（Ｊ．Ｔ．Ｂａｋｅｒ  ＃９２２４０１）中で連続希釈した。各希釈液２μＬを９６ウェルプレートの適切なウェルに加えた（各濃度で三重に）。未標識化合物Ａ（または化合物Ｂ）を最終濃度１０μＭで使用して、非特異的結合を決定した。［３Ｈ］−化合物Ａ（または［３Ｈ］−化合物Ｂ）を結合緩衝液（５０ｍＭのＴｒｉｓ−ＨＣｌ、ｐＨ７．５（Ｓｉｇｍａ  ＃Ｔ７４４３）、１０ｍＭのＭｇＣｌ２（Ｆｌｕｋａ６３０２０）、１ｍＭのＥＤＴＡ（ＢｉｏＳｏｌｕｔｉｏｎｓ  ＃ＢＩＯ２６０−１５）、０．１５％のウシ血清アルブミン（Ｓｉｇｍａ＃Ａ７５１１）、０．０１ｍｇ／ｍＬのベンズアミジン（Ｓｉｇｍａ  ＃Ｂ６５０６）、０．０１ｍｇ／ｍＬのバシトラシン（Ｓｉｇｍａ  ＃Ｂ０１２５）、０．００５ｍｇ／ｍＬのロイペプチン（Ｓｉｇｍａ  ＃Ｌ８５１１）、０．００５ｍｇ／ｍＬのアプロチニン（Ｓｉｇｍａ  ＃Ａ１１５３））中で希釈して、６０ｎＭの濃度にし、９６ウェルプレート（Ｎａｌｇｅ  Ｎｕｎｃ  ＃２６７２４５）のすべてのウェルに１００μＬを加えた。ＧＰＲ１１９を発現する膜を解凍し、結合緩衝液中で１ウェル当たり２０μｇ／１００μＬの最終濃度まで希釈し、希釈された膜１００μＬを９６ウェルプレートの各ウェルに加えた。
【０１０４】
プレートを振盪しながら室温（摂氏約２５度）で６０分間インキュベートした。Ｐａｃｋａｒｄハーベスターを使用して、０．３％ポリエチレンアミンに予浸させたＧＦ／Ｃフィルタープレート（Ｐａｃｋａｒｄ  ＃６００５１７４）での真空濾過によって、アッセイを終結させた。次いで、洗浄緩衝液（５０ｍＭのＴｒｉｓ−ＨＣｌ、ｐＨ７．５、摂氏４度で保持）を使用して、フィルターを６回洗浄した。次いで、フィルタープレートを室温で一晩風乾させた。シンチレーション液３０μｌ（Ｒｅａｄｙ  Ｓａｆｅ、Ｂｅｃｋｍａｎ  Ｃｏｕｌｔｅｒ  ＃１４１３４９）を各ウェルに加え、プレートを密封し、Ｗａｌｌａｃ  Ｔｒｉｌｕｘ  ＭｉｃｒｏＢｅｔａプレートベースのシンチレーションカウンターを使用して、各フィルターに付随する放射能を測定した。
【０１０５】
一部位双曲線（Ｇｒａｐｈ  Ｐａｄ  Ｐｒｉｓｍ）に適合させる非線形回帰によるデータ解析を用いて、飽和結合を実施することによって［３Ｈ］−化合物Ａ（または［３Ｈ］−化合物Ｂ）のＫｄを求めた。専有の曲線適合プログラム（ＳＩＧＨＴＳ）および４パラメータロジスティック用量反応式を用いて分析される競合曲線から、ＩＣ５０を決定した。Ｃｈｅｎｇ−Ｐｒｕｓｏｆｆ式を使用して、ＩＣ５０値からＫｉ値を算出した。
【０１０６】
β−ラクタマーゼ、β−アレスチン、ｃＡＭＰおよび結合アッセイについて、次の結果が得られた：
【０１０７】
【表１−１】
2013543885.tif 000010
【０１０８】
【表１−２】
2013543885.tif 000011
【０１０９】
空欄の記入箇所は、その実施例について試験が行われなかったことを示していることに注意されたい。
【０１１０】
（Ｓ）−１−メチルシクロプロピル４−（１−フルオロ−２−（２−（２，３，６−トリフルオロフェニル）アセトアミド）エチル）ピペリジン−１−カルボキシレートの構造＊＊＊
【０１１１】
【化９】
2013543885.tif 000012
＊＊＊２０１０年９月２８日火曜日に、オレゴン州ポートランドでのＳＭＡＳＨワークショップ「ＮＭＲ、Ｉｔ’ｓ  Ｎｏｔ  Ｊｕｓｔ  Ｆｏｒ  Ｓｔｒｕｃｔｕｒｅｓ：Ｄｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎ  ｏｆ  Ｐｈｙｓｉｃｏｃｈｅｍｉｃａｌ  Ｐｒｏｐｅｒｔｉｅｓ」で公開された。Ｋａｔｈｌｅｅｎ  Ｆａｒｌｅｙによる「Ｔｈｅ  Ｇａｕｃｈｅ  ｅｆｆｅｃｔ：Ｕｓｉｎｇ  Ｃｏｎｆｏｒｍａｔｉｏｎａｌ  Ｒｅｓｔｒｉｃｔｉｏｎ  ｏｆ  ａ  Ｅｔｈｙｌ  Ａｍｉｄｅ  Ｓｅｒｉｅｓ  ｔｏ  Ｉｍｐｒｏｖｅ  ｔｈｅ  Ｐｈｙｓｉｃａｌ  Ｐｒｏｐｅｒｔｉｅｓ  ｏｆ  Ａｎａｌｏｇｕｅｓ」。
【０１１２】
インビボデータ
全てのインビボプロトコールが、Ｐｆｉｚｅｒ動物愛護委員会によって承認された。ナイーブな雄のＷｉｓｔａｒラット（受け取り時の体重２００〜２５０ｇ）をＨａｒｌａｎ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓ（Ｉｎｄｉａｎａｐｏｌｉｓ、ＩＮ）から得、懸垂型プラスチック製ケージ内、Ｓａｎｉ−チップス（Ｓａｎｉ−ｃｈｉｐｓ）おが屑床敷上で２匹ずつ飼育し、Ｐｕｒｉｎａ  ５００１固形飼料を自由に食べさせた。制御された光サイクル（午前６時から午後６時まで点灯）下、制御された温度および湿度条件でラットを飼育した。研究の前に少なくとも１週間は、ラットを施設に順応させた。
【０１１３】
化合物製剤
０．５％メチルセルロースおよび０．５％ＨＰＭＣＡＳ−ＨＦと共に、ビヒクルである２０ｍＭのトリス緩衝液（ｐＨ７．４）中１０％のＳＤＤとして、実施例５０を製剤化した。用量（７５ｍｇ／ｋｇ）を５ｍＬ／ｋｇで投与するために１５ｍｇ／ｍＬで処方し、必要なバルクを乳鉢に加え、少量のビヒクルと共に乳棒で摩砕して、滑らかなペーストにし、混合物が流動化するまで追加のビヒクルを加え、流動化したら、それを撹拌容器に移し、乳鉢を残量のビヒクルで数回すすぎ、封をして蒸発を防いだ。化合物を投薬日に製剤化し、投薬手順前と、その間には磁気撹拌棒を用いて絶えず撹拌した。
【０１１４】
経口ブドウ糖負荷試験（ＯＧＴＴ）プロトコール
４つの投薬量群、即ち、グルコースの９０分前もしくは３０分前にビヒクル（２０ｍＭのトリス緩衝液（ｐＨ７．４）を０．５％メチルセルロースおよび０．５％ヒドロキシプロピルメチルセルロースアセテートスクシネートハイグレード微粒子（ＨＰＭＣＡＳ−ＨＦ）と共に投薬する群またはグルコースの９０分前もしくは３０分前に７５ｍｇ／ｋｇの実施例５０を投薬する群のうちの１つにラットを分類した（ｎ＝８／群）。１日目での体重に従って、各群が均等な群平均体重値を有することを保証するように、分類を行った。経口ブドウ糖負荷試験の前に、清潔なケージ内で一晩（約１５時間）、ラットを絶食させた。用量体積を算出するために、研究当日（絶食後）の朝に体重を記録した。全てのラットからその尾静脈を介して血液試料を採取し、その後、経口胃管を介してビヒクルまたは被験化合物を投薬した（５ｍＬ／ｋｇ）。９０分後または３０分後にラットから採血し、直ちに、グルコース（２ｇ／ｋｇ）の経口用量を投薬した。グルコース負荷の１５、３０、６０および１２０分後に、ラットから再採血した。アプロチニン／ＤＰＰＩＶｉ（全血１ｍＬ当たり０．６ＴＩＵ／２０マイクロリットル）を含むＥＤＴＡ管に、血液試料（約２５０マイクロリットル／１時点）を回収した。回収の直後に血液管を複数回反転させ、氷上に置き、次いで冷却遠心分離器内、１４，０００ｒｐｍで５分間回転させた。Ｒｏｃｈｅ  ｃ３１１臨床生化学検査分析機を使用して、グルコースレベルについて血漿試料を分析し、Ａｌｐｃｏ  Ｕｌｔｒａ−Ｓｅｎｓｉｔｉｖｅ  Ｉｎｓｕｌｉｎ  Ｒａｔ  ＥＬＩＳＡを使用して、血漿インスリン濃度を決定し、ＭＳＤ  ＥＬＩＳＡキットを使用して、全アミドＧＬＰ−１濃度を決定した。
【０１１５】
別段に述べられていない限り、結果を平均＋／−ＳＥＭ（標準誤差）として表す。時間が一致するビヒクルと処理群との間での一元分散分析（ＡＮＯＶＡ）を適切な事後分析と共に使用して、データの統計学的評価を実施した。未調整Ｔ検定を使用して、Ｐ＜０．０５でビヒクルと比較される差違を統計学的に有意とみなした。
【０１１６】
【表２】
2013543885.tif 000013
【０１１７】
出発物質の調製
調製１：イソプロピル４−ヒドラジノピペリジン−１−カルボキシレート二塩酸塩
【０１１８】
【化１０】
2013543885.tif 000014
イソプロピル４−｛２−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）ヒドラジニル｝ピペリジン−１−カルボキシレート（ＷＯ２００８１３７４３６に記載されているとおりに得られるもの）（２０．２ｇ、６７．０２ｍｍｏｌ）を無水エタノール（２５０ｍＬ）に溶かし、その溶液を窒素下、室温で撹拌した。濃塩酸水溶液（２７．９ｍＬ、３３５ｍｍｏｌ）を徐々に加えた。溶液を窒素下、室温で４時間撹拌した。反応物を濃縮して、多少の出発物質を含有する白色の固体にした。固体を１，４−ジオキサン中４Ｍの塩化水素溶液（１００ｍＬ、４００ｍｍｏｌ）で処理し、生じた混合物を室温で１４時間撹拌した。次いで、反応物を減圧下で濃縮して、白色の固体を得、これをヘプタン（１００ｍＬ）で処理し、再び濃縮して、表題化合物を白色の固体（１５ｇ、８１％）として得た。1H NMR(400MHz, メタノール-d4) δ 4.9(m, 1H), 4.1(m, 2H),
3.2(m, 1H), 2.9(m, 2H), 2.0(m, 2H), 1.4(m, 2H), 1.2,(d, 6H); LCMS(ES+):
202(M+1).
【０１１９】
調製２：イソプロピル４−［５−アミノ−４−（エトキシカルボニル）−１Ｈ−ピラゾール−１−イル］−ピペリジン−１−カルボキシレート
【０１２０】
【化１１】
2013543885.tif 000015
イソプロピル４−ヒドラジノピペリジン−１−カルボキシレート二塩酸塩（７．０８ｇ、２５．８ｍｍｏｌ）、エチル２−シアノ−３−エトキシアクリレート（４．８１ｇ、２８．４ｍｍｏｌ）、酢酸ナトリウム（６．４９ｇ、７７．５ｍｍｏｌ）およびエタノール（８０ｍＬ）の混合物を８５℃で３時間撹拌した。混合物を濃縮して、当初体積の約１／３にした。水（５０ｍＬ）、飽和重炭酸ナトリウム（５０ｍＬ）およびブライン（５０ｍＬ）を加えた。生じた混合物を酢酸エチル（２×５０ｍＬ）で抽出した。合わせた有機抽出物をブラインで洗浄し、硫酸マグネシウム上で乾燥させた。混合物を濾過し、濾液を真空下で濃縮して、粗製の表題化合物を薄黄色の固体（９．８ｇ）として得、これを精製することなく、次のステップで使用した。シリカゲル上、ヘプタン中３０％から６０％の酢酸エチル溶液で溶離するクロマトグラフィーを介して精製することによって、分析試料を調製した。1H NMR(500MHz, 重水素化クロロホルム) δ 1.26(d, 6H) 1.35(t, 3H) 1.86-1.95(m, 2H)
2.04-2.17(m, 2H) 2.84-2.96(m, 2H) 3.89-3.98(m, 1H) 4.28(q, 2H) 4.25-4.40(m, 2H)
4.89-4.97(m, 1H) 5.06(s, 2H) 7.64(s, 1H); LCMS(ES+): 325.1(M+1).
【０１２１】
調製３：イソプロピル４−［５−ブロモ−４−（エトキシカルボニル）−１Ｈ−ピラゾール−１−イル］ピペリジン−１−カルボキシレート
【０１２２】
【化１２】
2013543885.tif 000016
希釈されていない亜硝酸ｔｅｒｔ−ブチル（４．８ｍＬ、３９．３ｍｍｏｌ）を撹拌されているイソプロピル４−［５−アミノ−４−（エトキシカルボニル）−１Ｈ−ピラゾール−１−イル］−ピペリジン−１−カルボキシレート（調製２）（８．５ｇ、２６．２ｍｍｏｌ）および臭化銅（ＩＩ）（３．７ｇ、１６ｍｍｏｌ）のアセトニトリル（１００ｍＬ）中の混合物に室温で徐々に加えた。かなりの発熱作用が観察され、その際、混合物が約５０℃まで加温した。６５℃で３０分間加熱を続けた後に、反応物を室温に冷却し、次いで真空下で濃縮した。過剰の１０％アンモニア水を加え、混合物を酢酸エチルで抽出した。有機相を水およびブラインで洗浄し、真空下で濃縮した。シリカゲル上、ヘプタン中３０％から７０％酢酸エチルで溶離するクロマトグラフィーによって残渣を精製して、表題化合物を黄色のオイルとして得たが、これは、ＮＭＲおよびＬＣＭＳによると純度約７０％であった。物質をさらに精製することなく、次のステップで使用した。1H NMR(400MHz, 重水素化クロロホルム) δ 1.23(d, 6H) 1.34(t, 3H) 1.84-1.95(m, 2H)
2.01-2.15(m, 2H) 2.82-2.98(m, 2H) 4.25-4.36(m, 2H) 4.30(q, 2H) 4.45-4.56(m, 1H)
4.86-4.96(m, 1H) 7.95(s, 1H); LCMS(ES+): 387.9(M+1).
【０１２３】
調製４：イソプロピル４−［５−ブロモ−４−（ヒドロキシメチル）−１Ｈ−ピラゾール−１−イル］ピペリジン−１−カルボキシレート
【０１２４】
【化１３】
2013543885.tif 000017
０℃に冷却されているイソプロピル４−［５−ブロモ−４−（エトキシカルボニル）−１Ｈ−ピラゾール−１−イル］ピペリジン−１−カルボキシレート（３．５９ｇ、６．５ｍｍｏｌ）のテトラヒドロフラン（３２ｍＬ）中の溶液に、テトラヒドロフラン中２Ｍのボラン−硫化メチル複合体溶液（１４．６ｍＬ、２９．２ｍｍｏｌ）を加えた。反応混合物を２１時間還流加熱し、次いで室温で４時間撹拌した。混合物を０℃に冷却し、メタノールを加えた。生じた溶液を室温に加温し、１０分間撹拌した。溶液を０℃に再冷却し、２Ｍの水酸化ナトリウム水溶液（１０ｍＬ）を滴下添加した。生じた混合物を酢酸エチルで希釈し、３０分間激しく撹拌した。層を分離し、水性相を酢酸エチルで２回抽出した。合わせた有機層を水およびブラインで順次洗浄し、次いで硫酸マグネシウム上で乾燥させた。混合物を濾過し、濾液を真空下で濃縮した。シリカゲル上、ヘプタン中５５％から７０％の酢酸エチルで溶離するクロマトグラフィーによって、表題化合物をオイル（１．８９ｇ、８４％）として得た。1H NMR(400MHz, 重水素化クロロホルム) δ 1.23(d, 6H), 1.87-1.95(br m, 3H),
2.06(qd, 2H), 2.89(br t, 2H), 4.29(br s, 2H), 4.39(tt, 1H), 4.50(d, 2H),
4.90(m, 1H), 7.58(s, 1H); LCMS(ES+) 348.0(M+1).
【０１２５】
調製５：イソプロピル４−［５−シアノ−４−（ヒドロキシメチル）−１Ｈ−ピラゾール−１−イル］ピペリジン−１−カルボキシレート
【０１２６】
【化１４】
2013543885.tif 000018
イソプロピル４−［５−ブロモ−４−（ヒドロキシメチル）−１Ｈ−ピラゾール−１−イル］ピペリジン−１−カルボキシレート（１．４２ｇ、４．１０ｍｍｏｌ）、トリス−（ジベンジリデンアセトン）ジパラジウム（１５６ｍｇ、０．１７０ｍｍｏｌ）、１−１’−ビス−（ジフェニルホスフィノ）フェロセン（１９２ｍｇ、０．３４６ｍｍｏｌ）、亜鉛ダスト（６８．８ｍｇ、１．０６ｍｍｏｌ）、シアン化亜鉛（４９７ｍｇ、４．２３ｍｍｏｌ）およびＮ，Ｎ−ジメチルアセトアミド（２０ｍＬ）をマイクロ波バイアル内で合わせた。バイアルを窒素でフラッシュし、密閉し、マイクロ波反応器（Ｂｉｏｔａｇｅ  Ｉｎｉｔｉａｔｏｒ  ２．２）内、１２０℃で１時間加熱した。反応混合物をＦｌｏｒｉｓｉｌ（商標）のパッドに通し、酢酸エチルで希釈し、次いで水を加えた。水性相を酢酸エチルで３回抽出し、合わせた有機層を硫酸マグネシウム上で乾燥させた。混合物を濾過し、濾液を真空下で蒸発させた。シリカゲル上、ヘプタン中５５％から７０％の酢酸エチルで溶離するクロマトグラフィーによって表題化合物を緑色のオイルとして得たが、これは放置すると固化した（１．０６ｇ、８８％）。1H NMR(400MHz, 重水素化クロロホルム) δ 1.24(d, 6H), 1.99(br d, 2H),
2.06-2.17(m, 3H), 2.93(br t, 2H), 4.31(br s, 2H), 4.48(tt, 1H), 4.71(d, 2H),
4.92(m, 1H), 7.60(s, 1H); LCMS(ES+): 293.1(M+H).
【０１２７】
調製６：２−フルオロ−４−［（２−ヒドロキシエチル）チオ］フェノール
【０１２８】
【化１５】
2013543885.tif 000019
４−ブロモ−２−フルオロフェノール（０．７５ｍＬ、６．８ｍｍｏｌ）およびジイソプロピルエチルアミン（３．５ｍＬ、２０．０９ｍｍｏｌ）の１，４−ジオキサン（３５ｍＬ）中の溶液に、９，９−ジメチル−４，５−ビス（ジフェニルホスフィノ）キサンテン（４１５ｍｇ、０．７１７ｍｍｏｌ）、ビス（ジベンジリデンアセトン）パラジウム（３２２ｍｇ、０．３５１ｍｍｏｌ）および２−メルカプトエタノール（０．４６ｍＬ、６．８６ｍｍｏｌ）を加え、暗茶色の反応溶液を１１０℃で１６時間加熱した。反応物を室温に冷却し、水で希釈し、酢酸エチルで４回抽出した。有機抽出物を合わせ、硫酸マグネシウム上で乾燥させた。混合物を濾過し、濾液を減圧下で濃縮して、栗色のオイルを得、これを、シリコンゲル上でのクロマトグラフィーによって精製して、表題化合物（９８５ｍｇ、７６％）を栗色の固体として得た。1H NMR(400MHz, 重水素化クロロホルム) δ 3.00(t, 2H, J=5.95Hz) 3.69(d, 2H,
J=3.71Hz) 6.89-6.95(m, 1H) 7.11(ddd, 1H, J=8.39, 2.15, 1.17Hz) 7.17(dd, 1H,
J=10.54, 2.15Hz).
【０１２９】
調製７：４−［（２−｛［ｔｅｒｔ−ブチル（ジメチル）シリル］オキシ｝エチル）チオ］−２−フルオロフェノール
【０１３０】
【化１６】
2013543885.tif 000020
２−フルオロ−４−［（２−ヒドロキシエチル）チオ］フェノール（９８５ｍｇ、５．２４ｍｍｏｌ）およびイミダゾール（３７１ｍｇ、５．３０ｍｍｏｌ）のＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（５ｍＬ）中の溶液に、ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリルクロリド（８１４ｍｇ、５．２４ｍｍｏｌ）を少量ずつ加え、反応物を室温で４時間撹拌した。反応物を減圧下で濃縮し、残渣を水で希釈し、続いて酢酸エチルで３回抽出した。合わせた有機抽出物をブラインで洗浄し、硫酸マグネシウム上で乾燥させた。混合物を濾過し、濾液を減圧下で濃縮して、表題化合物をオレンジ色のオイル（１．４３ｇ、９０％）として得、これをさらに精製することなく使用した。
ＬＣＭＳ（ＥＳ＋）：３０１．１（Ｍ−１）。
【０１３１】
調製８：１−［４−（ベンジルオキシ）−３−フルオロフェニル］−１Ｈ−テトラゾール
【０１３２】
【化１７】
2013543885.tif 000021
４−（ベンジルオキシ）−３−フルオロアニリン（１．０４ｇ、４．８ｍｍｏｌ）（ＷＯ２００５０３０１４０）の懸濁液に窒素雰囲気下で、酢酸（２．３ｍＬ、３８．３ｍｍｏｌ）、オルトギ酸トリエチル（２．４４ｍＬ、１４．４ｍｍｏｌ）およびアジ化ナトリウム（０．３４ｇ、５．３ｍｍｏｌ）を加え、反応混合物を９５℃で２．５時間加熱した。次いで、溶液を室温に冷却し、水を加え、続いて酢酸エチルで３回抽出した。抽出物を合わせ、ブラインで洗浄し、硫酸マグネシウム上で乾燥させた。混合物を濾過し、減圧下で濃縮し、シリコンゲル上でのクロマトグラフィー（ヘプタン中２０〜４０％の酢酸エチル）によって粗製物質を精製して、表題化合物を白色の固体（１．１２ｇ、８６％）として得た。1H NMR(400MHz, 重水素化メタノール) δ 9.65(s, 1H), 7.73-7.68(dd, 1H, J=11,
2.5Hz), 7.60-7.57(m, 1H)  7.47-7.45(m, 2H), 7.40-7.30(m, 5H), 5.24(s, 2H);
LCMS(ES+): 271.1(M+1).
【０１３３】
調製９：２−フルオロ−４−（１Ｈ−テトラゾール−１−イル）フェノール
【０１３４】
【化１８】
2013543885.tif 000022
Ｐａｒｒシェーカーフラスコ内の１−［４−（ベンジルオキシ）−３−フルオロフェニル］−１Ｈ−テトラゾール（１．１２ｇ、４．１４ｍｍｏｌ）にエタノール（４０ｍＬ）を加え、溶液を窒素ガスでパージした。炭素上１０％のパラジウム（０．３０ｇ）を加え、Ｐａｒｒシェーカー装置で、水素４０ｐｓｉで３０分間、反応物を水素化した。次いで、混合物を精密濾過フィルターで濾過し、濾液を減圧下で濃縮して、表題化合物を白色の固体（０．６７ｇ、９０％）として得、これを精製することなく使用した。1H NMR(400MHz, 重水素化メタノール) δ 9.62(s, 1H), 7.65-7.62(dd, 1H, J=11,
2.5Hz), 7.50-7.46(m, 1H)  7.47-7.45(dd, 1H, J=9.0, 9.0Hz); LCMS(ES+):
181.1(M+1).
【０１３５】
調製１０：イソプロピル４−（５−シアノ−４−（（メチルスルホニルオキシ）メチル）−１Ｈ−ピラゾール−１−イル）ピペリジン−１−カルボキシレート
【０１３６】
【化１９】
2013543885.tif 000023
イソプロピル４−（５−シアノ−４−（ヒドロキシメチル）−１Ｈ−ピラゾール−１−イル）ピペリジン−１−カルボキシレート（調製５）（７５ｍｇ、０．２４ｍｍｏｌ）を無水ジクロロメタン１ｍＬに溶かし、トリエチルアミン（０．１ｍＬ、０．７４ｍｍｏｌ）を加えた。反応混合物を氷浴中で冷却し、次いで、メタンスルホン酸無水物（６２ｍｇ、０．３４ｍｍｏｌ）を加えた。溶液を氷浴から取り出し、３０分間撹拌した。飽和重炭酸ナトリウム水溶液を加えることによって、反応物をクエンチし、層を分離した。水性層をジクロロメタンでさらに３回抽出した。有機抽出物を合わせ、ブラインで洗浄し、硫酸ナトリウム上で乾燥させ、濾過し、濾液を濃縮して、オイル（７５ｍｇ、収率１００％）を得た。粗製物質をさらに精製することなく後続のステップで使用した。
【０１３７】
調製１１：ｔｅｒｔ−ブチル４−ヒドラジノピペリジン−１−カルボキシレート塩酸塩
【０１３８】
【化２０】
2013543885.tif 000024
オートクレーブ内のｔｅｒｔ−ブチル４−オキソピペリジン−１−カルボキシレート（５０ｇ、０．２５ｍｍｏｌ）のメタノール（５００ｍＬ）中の溶液に、水（１００ｍＬ）中の一塩酸ヒドラジン（１７．２ｇ、０．２５ｍｍｏｌ）を加えた。白色の混合物をアルゴン下で撹拌し、続いて、炭素上５％の白金（７５０ｍｇ）を水中のスラリーとして加えた。オートクレーブを密閉し、６０気圧まで水素を供給し、反応を１５時間撹拌した。完了したら、反応物をＣｅｌｉｔｅ（登録商標）で濾過し、パッドをメタノールで洗浄した。この調製を６回実施した。合わせた濾液を減圧下で濃縮し、生じた白色の沈澱物（ジ−ｔｅｒｔ−ブチル−４，４’−ヒドラジン−１，２−ジイルジピペリジン−１−カルボキシレート）副生成物を濾過によって回収し、水で数回洗浄した。次いで、水性濾液を減圧下で濃縮して、所望の生成物（２２１ｇ、５９％）を無色の固体として得た。1H NMR(400MHz, 重水素化クロロホルム) δ 4.13(br s, 2H), 3.32(br t, 1H), 2.77(br
t, 2H), 2.16(m, 2H), 1.66(m, 2H), 1.43(s, 9H).
【０１３９】
調製１２：ｔｅｒｔ−ブチル４−［５−アミノ−４−（エトキシカルボニル）−１Ｈ−ピラゾール−１−イル］ピペリジン−１−カルボキシレート
【０１４０】
【化２１】
2013543885.tif 000025
ｔｅｒｔ−ブチル４−ヒドラジノピペリジン−１−カルボキシレート塩酸塩（２２１ｇ、８８０ｍｍｏｌ）、エチル２−シアノ−３−エトキシアクリレート（１５３ｇ、８８０ｍｍｏｌ）、酢酸ナトリウム三水和物（４７７ｇ、３５２ｍｍｏｌ）およびエタノール（２０００ｍＬ）の混合物を摂氏８５度で８時間撹拌した。混合物を減圧下で濃縮し、残渣を酢酸エチルおよび水に溶かした。層を分離し、水性層を酢酸エチルで抽出した。次いで、合わせた有機抽出物を硫酸マグネシウム上で乾燥させた。混合物を濾過し、濾液を減圧下で濃縮した。ヘプタン中４０％の酢酸エチルで溶離するシリカゲルの短いプラグでの濾過によって、粗製物質を精製して、生成物を淡黄色の固体（２１４ｇ、７２％）として製造した。1H NMR(500MHz, 重水素化クロロホルム) δ 7.60(s, 1H), 5.27(br s, 2H), 4.23(br q,
4H), 3.91(m, 1H), 2.81(br s, 2H), 2.04(m, 2H), 1.86(m, 2H), 1.44(s, 9H),
1.29(t, 3H).
【０１４１】
調製１３：ｔｅｒｔ−ブチル４−［５−ブロモ−４−（エトキシカルボニル）−１Ｈ−ピラゾール−１−イル］ピペリジン−１−カルボキシレート
【０１４２】
【化２２】
2013543885.tif 000026
臭化銅（ＩＩ）（１．６９ｇ、７７０ｍｍｏｌ）のアセトニトリル（１０００ｍＬ）中の溶液に、亜硝酸ｔｅｒｔ−ブチル（１１２ｍＬ、９６０ｍｍｏｌ）を徐々に加え、溶液を摂氏６５度に加熱した。これに、ｔｅｒｔ−ブチル４−［５−アミノ−４−（エトキシカルボニル）−１Ｈ−ピラゾール−１−イル］ピペリジン−１−カルボキシレート（２１５ｇ、６４０ｍｍｏｌ）のアセトニトリル（６５０ｍＬ）中の溶液を３０分かけて滴下添加した。４時間後、反応物を室温に冷却し、次いで氷中２Ｍの塩酸（１５００ｍＬ）に注いだ。混合物を酢酸エチルで３回抽出し、合わせた有機抽出物を飽和重炭酸ナトリウム水溶液で洗浄し、次いで硫酸マグネシウム上で乾燥させた。混合物を濾過し、濾液を減圧下で濃縮した。当初はジクロロメタン中１０％のヘプタンで、続いてジクロロメタンで溶離するシリカゲルの短いプラグでの濾過によって、生じた残渣を精製して、表題化合物（１３７ｇ、５３％）を黄色のオイルとして得たが、これは放置すると固化した。1H NMR(400MHz, 重水素化クロロホルム) δ 7.95(s, 1H), 4.48(m, 1H), 4.28(br q,
4H), 2.86(br s, 2H), 2.06(m, 2H), 1.90(m, 2H), 1.44(s, 9H), 1.34(t, 3H).
【０１４３】
調製１４：ｔｅｒｔ−ブチル４−［５−ブロモ−４−（ヒドロキシメチル）−１Ｈ−ピラゾール−１−イル］ピペリジン−１−カルボキシレート
【０１４４】
【化２３】
2013543885.tif 000027
摂氏０度に冷却されているｔｅｒｔ−ブチル４−［５−ブロモ−４−（エトキシカルボニル）−１Ｈ−ピラゾール−１−イル］ピペリジン−１−カルボキシレート（１３７ｇ、０．３４ｍｏｌ）のテトラヒドロフラン（１３００ｍＬ）中の溶液に、ボラン−硫化メチル（９７ｍＬ、１．０２ｍｏｌ）を徐々に加えた。溶液を室温に加温し、次いで１５時間還流加熱した。次いで、反応物を氷浴中で冷却し、メタノール（４０ｍＬ）を滴下添加した。次いで、溶液を室温で２０分間撹拌した。２Ｍの水酸化ナトリウム水溶液（１２００ｍＬ）を加え、層を分離した。水性層を酢酸エチルで抽出し、合わせた有機層をブラインで洗浄し、硫酸マグネシウム上で乾燥させ、溶媒を減圧下で除去した。ヘプタン中３０％の酢酸エチルで溶離してシリカゲルの短いプラグで濾過することによって、生じた残渣を精製して、表題化合物を無色の固体（６１．４ｇ、５０％）として生じさせた。上記のクロマトグラフィー手順を介して、この精製に由来する不純な物質をさらに精製して、第２のバッチの表題化合物（２２ｇ、１８％）を無色の固体として得た。1H NMR(400MHz, 重水素化クロロホルム) δ 7.59(s, 1H), 4.52(s, 2H), 4.37(m, 1H),
4.25(br s, 2H), 2.86(br s, 2H), 2.06(m br s, 2H), 1.89(m, 2H), 1.45(s, 9H).
【０１４５】
調製１５：ｔｅｒｔ−ブチル４−［５−シアノ−４−（ヒドロキシメチル）−１Ｈ−ピラゾール−１−イル］ピペリジン−１−カルボキシレート
【０１４６】
【化２４】
2013543885.tif 000028
シアン化銅（Ｉ）（２．９７ｇ、３３．３ｍｍｏｌ）を、撹拌されているｔｅｒｔ−ブチル４−［５−ブロモ−４−（ヒドロキシメチル）−１Ｈ−ピラゾール−１−イル］ピペリジン−１−カルボキシレート（１０ｇ、２７．８ｍｍｏｌ）の脱気ジメチルホルムアミド（１００ｍＬ）中の溶液に加えた。次いで、反応物を摂氏１６５度で４時間加熱し、室温に冷却した。これを氷浴中でさらに冷却し、エチレンジアミン（５．５ｍＬ）の水（２０ｍＬ）中の溶液を加え、続いて、さらなる水（７０ｍＬ）で希釈した。次いで、混合物を酢酸エチルで抽出し、層を分離した。有機層を水およびブラインで順次洗浄し、次いで硫酸マグネシウム上で乾燥させた。混合物を濾過し、濾液を減圧下で濃縮した。この手順を８バッチで実施した。最終の粗製残渣を合わせ、ヘプタン中４０％の酢酸エチルで溶離するシリカゲルカラムクロマトグラフィーを繰り返すことによって精製して、表題化合物（１１．６ｇ、１７％）を無色の固体として得た。1H NMR(400MHz, 重水素化クロロホルム) 7.59(s, 1H), 4.71(s, 2H), 4.45(m, 1H), 4.26(br s, 2H), 2.88(br t,
2H), 2.08(m, 2H), 1.98(m, 2H), 1.48(s, 9H); LCMS(ES+): 207.1(M-Boc+H).
【０１４７】
ｔｅｒｔ−ブチル４−［５−シアノ−４−（ヒドロキシメチル）−１Ｈ−ピラゾール−１−イル］ピペリジン−１−カルボキシレートの別の合成については、実施例５０を参照されたい。
【０１４８】
調製１６：ｔｅｒｔ−ブチル４−（５−シアノ−４−（（メチルスルホニルオキシ）メチル）−１Ｈ−ピラゾール−１−イル）ピペリジン−１−カルボキシレート
【０１４９】
【化２５】
2013543885.tif 000029
撹拌されているｔｅｒｔ−ブチル４−（５−シアノ−４−（ヒドロキシメチル）−１Ｈ−ピラゾール−１−イル）ピペリジン−１−カルボキシレート（２０２ｍｇ、０．６５９ｍｍｏｌ）のジクロロメタン（６．６ｍＬ）中の溶液に、トリエチルアミン（０．１８ｍＬ、１．３２ｍｍｏｌ）を、続いてメタンスルホン酸無水物（１８９ｍｇ、１．１ｍｍｏｌ）を室温で加えた。混合物を４．５時間撹拌し、その後、これをジクロロメタンおよび飽和重炭酸塩水溶液で希釈した。層を分離し、水性層をジクロロメタンで抽出した。合わせた有機抽出物をブラインで洗浄し、硫酸マグネシウム上で乾燥させ、濾過し、濾液を真空濃縮して、ｔｅｒｔ−ブチル４−（５−シアノ−４−（（メチルスルホニルオキシ）メチル）−１Ｈ−ピラゾール−１−イル）ピペリジン−１−カルボキシレートをオイルとして得、これをさらに精製することなく使用した。
【０１５０】
調製１７：２−フルオロ−４−（１−（（２−（トリメチルシリル）エトキシ）メチル）−１Ｈ−テトラゾール−５−イル）フェノールおよび２−フルオロ−４−（２−（（２−（トリメチルシリル）エトキシ）メチル）−２Ｈ−テトラゾール−５−イル）フェノール
【０１５１】
【化２６】
2013543885.tif 000030
Ａ）４−（ベンジルオキシ）−３−フルオロベンゾニトリル
撹拌されている３−フルオロ−４−ヒドロキシベンゾニトリル（１．００ｇ、７．３０ｍｍｏｌ）のアセトニトリル２０ｍＬ中の溶液に、炭酸カリウム（２．０２ｇ、１４．６ｍｍｏｌ）を少量ずつ加えた。生じた混合物を１０分間撹拌し、その後、臭化ベンジル（１．３３ｍＬ、１０．９ｍｍｏｌ）を加えた。混合物を室温で７０時間撹拌し、その後、酢酸エチルおよび水で希釈した。有機相を分離し、水、ブラインで洗浄し、硫酸マグネシウム上で乾燥させ、濾過し、濾液を真空濃縮した。ヘプタン中５から２０％の酢酸エチルの勾配で溶離するフラッシュクロマトグラフィーによって残渣を精製して、４−（ベンジルオキシ）−３−フルオロベンゾニトリルを白色の固体（１．３３ｇ）として得た。
【０１５２】
Ｂ）５−（４−（ベンジルオキシ）−３−フルオロフェニル）−１Ｈ−テトラゾールおよび５−（４−（ベンジルオキシ）−３−フルオロフェニル）−２Ｈ−テトラゾール
４−（ベンジルオキシ）−３−フルオロベンゾニトリル（２５０ｍｇ、１．１０ｍｍｏｌ）、アジ化ナトリウム（２１４ｍｇ、３．３０ｍｍｏｌ）、塩化アンモニウム（１７６ｍｇ、３．３０ｍｍｏｌ）およびＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド３ｍＬを入れたバイアルを摂氏１１０度で１８時間加熱した。反応混合物を室温に冷却し、水および酢酸エチルで希釈し、１Ｎの塩酸水溶液を使用してｐＨを３に調節した。有機相を分離し、ブラインで洗浄し、硫酸マグネシウム上で乾燥させ、濾過し、濾液を真空濃縮して、表題化合物を白色の固体（２７０ｍｇ）として得た。この物質を精製することなく、後続のステップで使用した。
【０１５３】
Ｃ）５−（４−（ベンジルオキシ）−３−フルオロフェニル）−１−（（２−（トリメチルシリル）エトキシ）メチル）−１Ｈ−テトラゾールおよび５−（４−（ベンジルオキシ）−３−フルオロフェニル）−２−（（２−（トリメチルシリル）エトキシ）メチル）−２Ｈ−テトラゾール
テトラヒドロフラン中に溶けている５−（４−（ベンジルオキシ）−３−フルオロフェニル）−１Ｈ−テトラゾールおよび５−（４−（ベンジルオキシ）−３−フルオロフェニル）−２Ｈ−テトラゾール（２７０ｍｇ、１ｍｍｏｌ）の溶液に、水素化ナトリウム（４４ｍｇ、１．１ｍｍｏｌ）を４回に分けて加え、生じた混合物を室温で１５分間撹拌した。次いで、（２−（クロロメトキシ）エチル）トリメチルシラン（０．１９ｍＬ、１．０ｍｍｏｌ）を加え、反応混合物を室温で１６時間撹拌した。水を加えることによって、反応物をクエンチし、酢酸エチルを加えた。有機相を分離し、水性相を酢酸エチルで２回抽出した。合わせた有機抽出物をブラインで洗浄し、硫酸マグネシウム上で乾燥させ、濾過し、濾液を減圧下で濃縮した。酢酸エチルおよびヘプタンの勾配（５〜２０％の酢酸エチル）で溶離するフラッシュクロマトグラフィーによって精製して、所望の生成物を白色の固体（２７０ｍｇ、収率６７％）として得た。
【０１５４】
Ｄ）２−フルオロ−４−（１−（（２−（トリメチルシリル）エトキシ）メチル）−１Ｈ−テトラゾール−５−イル）フェノールおよび２−フルオロ−４−（２−（（２−（トリメチルシリル）エトキシ）メチル）−２Ｈ−テトラゾール−５−イル）フェノール
エタノール２ｍＬおよびテトラヒドロフラン２ｍＬの混合物中に溶けた５−（４−（ベンジルオキシ）−３−フルオロフェニル）−１−（（２−（トリメチルシリル）エトキシ）メチル）−１Ｈ−テトラゾールおよび５−（４−（ベンジルオキシ）−３−フルオロフェニル）−２−（（２−（トリメチルシリル）エトキシ）メチル）−２Ｈ−テトラゾール（１４０ｍｇ、０．３５ｍｍｏｌ）の溶液に、パラジウムブラック（５６ｍｇ、０．５３ｍｍｏｌ）およびギ酸（０．１４ｍＬ、３．５ｍｍｏｌ）を加えた。生じた混合物を室温で４時間撹拌し、その後、Ｃｅｌｉｔｅ（登録商標）のパッドで濾過した。濾液を減圧下で濃縮し、生じた粗製物質をさらに精製することなく、後続のステップで使用した。
【０１５５】
調製１８：５−（４−（ベンジルオキシ）−３−フルオロフェニル）−１−（２−（トリメチルシリルオキシ）エチル）−１Ｈ−テトラゾールおよび５−（４−（ベンジルオキシ）−３−フルオロフェニル）−２−（２−（トリメチルシリルオキシ）エチル）−２Ｈ−テトラゾール
【０１５６】
【化２７】
2013543885.tif 000031
Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（８ｍＬ）中に溶けている５−（４−（ベンジルオキシ）−３−フルオロフェニル）−１Ｈ−テトラゾールおよび５−（４−（ベンジルオキシ）−３−フルオロフェニル）−２Ｈ−テトラゾール（調製１７、ステップＢ）（５５０ｍｇ、２ｍｍｏｌ）の溶液に、水素化ナトリウム（１６３ｍｇ、４ｍｍｏｌ）を２回に分けて加え、生じた混合物を室温で５分間撹拌した。次いで、（２−ブロモエトキシ）トリメチルシラン（１．３ｍＬ、６ｍｍｏｌ）を加え、反応混合物を摂氏７０度で１６時間撹拌し、その後、室温に冷却した。水を加えることによって、反応物をクエンチし、酢酸エチルを加えた。有機相を分離し、水性相を酢酸エチルで２回抽出した。合わせた有機抽出物をブラインで洗浄し、硫酸マグネシウム上で乾燥させ、濾過し、減圧下で濃縮した。酢酸エチルおよびヘプタンの勾配（５から３０％の酢酸エチル）で溶離するフラッシュクロマトグラフィーによって残渣を精製して、５−（４−（ベンジルオキシ）−３−フルオロフェニル）−１−（２−（トリメチルシリルオキシ）エチル）−１Ｈ−テトラゾール（１００ｍｇ、収率１２％）および５−（４−（ベンジルオキシ）−３−フルオロフェニル）−２−（２−（トリメチルシリルオキシ）エチル）−２Ｈ−テトラゾール（６００ｍｇ、収率６９％）を得た。
【０１５７】
調製１９：２−フルオロ−４−（２−（２−（トリメチルシリルオキシ）エチル）−２Ｈ−テトラゾール−５−イル）フェノール
【０１５８】
【化２８】
2013543885.tif 000032
エタノール６ｍＬおよびテトラヒドロフラン６ｍＬの混合物中に溶けている５−（４−（ベンジルオキシ）−３−フルオロフェニル）−２−（２−（トリメチルシリルオキシ）エチル）−２Ｈ−テトラゾール（調製１８）（２３０ｍｇ、０．５４ｍｍｏｌ）の溶液に、パラジウムブラック（８６ｍｇ、０．８０６ｍｍｏｌ）およびギ酸（０．２１５ｍＬ、５．４ｍｍｏｌ）を加えた。生じた混合物を室温で４時間撹拌し、その後、セライト（登録商標）のパッドで濾過した。濾液を減圧下で濃縮し、生じた粗製物質（１８０ｍｇ）をさらに精製することなく、後続のステップで使用した。
【０１５９】
調製２０：２−フルオロ−４−（１−（２−（トリメチルシリルオキシ）エチル）−１Ｈ−テトラゾール−５−イル）フェノール
【０１６０】
【化２９】
2013543885.tif 000033
エタノール２ｍＬおよびテトラヒドロフラン２ｍＬの混合物中に溶けた５−（４−（ベンジルオキシ）−３−フルオロフェニル）−１−（２−（トリメチルシリルオキシ）エチル）−１Ｈ−テトラゾール（調製１８）（１３０ｍｇ、０．３０ｍｍｏｌ）の溶液に、パラジウムブラック（４８ｍｇ、０．４５ｍｍｏｌ）およびギ酸（０．１２ｍＬ、３ｍｍｏｌ）を加えた。生じた混合物を室温で４時間撹拌し、その後、セライト（登録商標）のパッドで濾過した。濾液を減圧下で濃縮し、生じた粗製物質（９４ｍｇ）をさらに精製することなく、後続のステップで使用した。
【０１６１】
調製２１：２−フルオロ−４−（１−メチル−１Ｈ−テトラゾール−５−イル）フェノール
【０１６２】
【化３０】
2013543885.tif 000034
Ａ）５−（４−（ベンジルオキシ）−３−フルオロフェニル）−１−メチル−１Ｈ−テトラゾールおよび５−（４−（ベンジルオキシ）−３−フルオロフェニル）−２−メチル−２Ｈ−テトラゾール
撹拌されている５−（４−（ベンジルオキシ）−３−フルオロフェニル）−１Ｈ−テトラゾールおよび５−（４−（ベンジルオキシ）−３−フルオロフェニル）−２Ｈ−テトラゾール（調製１７、ステップＢ）（１．５０ｇ、５．５５ｍｍｏｌ）のテトラヒドロフラン３０ｍＬ中の溶液に、水素化ナトリウム（４４４ｍｇ、１１．１ｍｍｏｌ）を２回に分けて室温で加えた。５分後に、ヨードメタン（１．０４ｍＬ、１６．６ｍｍｏｌ）を加え、反応物を窒素雰囲気下、室温で１５時間撹拌した。混合物を水で希釈し、酢酸エチルで２回抽出した。合わせた有機抽出物をブラインで洗浄し、硫酸マグネシウムで乾燥させ、濾過し、濾液を真空濃縮した。ヘプタン中１０〜４０％の酢酸エチルで溶離するフラッシュクロマトグラフィーによって残渣を精製して、５−（４−（ベンジルオキシ）−３−フルオロフェニル）−２−メチル−２Ｈ−テトラゾールを白色の固体（１．１ｇ）として、および５−（４−（ベンジルオキシ）−３−フルオロフェニル）−１−メチル−１Ｈ−テトラゾールを白色の固体（４５０ｍｇ）として得た。
５−（４−（ベンジルオキシ）−３−フルオロフェニル）−１−メチル−１Ｈ−テトラゾール。1H NMR(400MHz, 重水素化クロロホルム) δ 4.15(s, 3H) 5.23(s, 2H) 7.15(t,
J=8.39Hz, 1H) 7.31-7.48(m, 6H) 7.52(dd, J=11.13, 2.15Hz, 1H). LCMS(M+1) 285.1.
【０１６３】
Ｂ）２−フルオロ−４−（１−メチル−１Ｈ−テトラゾール−５−イル）フェノール
エタノール６ｍＬおよびテトラヒドロフラン６ｍＬ中の５−（４−（ベンジルオキシ）−３−フルオロフェニル）−１−メチル−１Ｈ−テトラゾール（５００ｍｇ、１．７６ｍｍｏｌ）の溶液に、ギ酸（０．７ｍＬ、１７．６ｍｍｏｌ）を、続いてパラジウムブラック（２８１ｍｇ、２．６４ｍｍｏｌ）を加えた。反応混合物を室温で４時間撹拌した。反応混合物をＣｅｌｉｔｅ（登録商標）で濾過し、濾液を真空濃縮して、２−フルオロ−４−（１−メチル−１Ｈ−テトラゾール−５−イル）フェノールを白色の固体（３３０ｍｇ）として得、それをさらに精製することなく、後続の反応で使用した。
【０１６４】
調製２２：４−（１−メチル−１Ｈ−テトラゾール−５−イル）フェノール
【０１６５】
【化３１】
2013543885.tif 000035
Ａ）４−（ベンジルオキシ）−Ｎ−メチルベンズアミド
塩化チオニル（０．３５ｍＬ、４．８２ｍｍｏｌ）を入れたフラスコに、市販の４−ベンジルオキシ安息香酸（１．００ｇ、４．３８ｍｍｏｌ）のジクロロメタン１０ｍＬおよびＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド０．０１ｍＬ中の溶液を摂氏０度で撹拌しながら加えた。氷浴を外し、溶液を室温で４時間撹拌した。混合物を真空濃縮して、白色の固体を得た。この固体をメチルアミン１０ｍＬ（テトラヒドロフラン中２Ｍ）に入れ、生じた溶液を室温で７０時間撹拌した。混合物を酢酸エチルおよび水で希釈し、有機層を分離し、硫酸マグネシウム上で乾燥させ、濾過し、濾液を真空濃縮して、白色の固体を得た。この固体を酢酸エチルおよびヘプタンから再結晶化させて、４−（ベンジルオキシ）−Ｎ−メチルベンズアミドを白色の針状物（８５０ｍｇ）として得た。
【０１６６】
Ｂ）５−（４−（ベンジルオキシ）フェニル）−１−メチル−１Ｈ−テトラゾール
還流凝縮器を頂部に備えたフラスコ内で撹拌されている４−（ベンジルオキシ）−Ｎ−メチルベンズアミド（２００ｍｇ、０．８２９ｍｍｏｌ）のアセトニトリル３ｍＬおよびＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド１滴中の溶液に、トリエチルアミン（０．１２ｍＬ）を窒素雰囲気下で加えた。反応混合物を１０分間撹拌し、その後、塩化チオニル（０．０７８ｍＬ、１．０８ｍｍｏｌ）を滴下添加した。黄色の反応混合物を室温、窒素雰囲気下で１時間撹拌した。次いで、トリエチルアミン（０．３６ｍＬ）を、続いてテトラブチルアンモニウムクロリド（３７．４ｍｇ、０．１２ｍｍｏｌ）およびアジ化ナトリウム（６１１ｍｇ、１．８２ｍｍｏｌ）を徐々に加えた。生じた黄色の懸濁液を室温、窒素雰囲気下で７０時間、激しく撹拌した。混合物を水および酢酸エチルで希釈した。有機層を分離し、ブラインで洗浄し、硫酸マグネシウム上で乾燥させ、濾過し、濾液を真空濃縮した。ヘプタン中１０から４０％の酢酸エチルの勾配で溶離するフラッシュクロマトグラフィーによって残渣を精製して、５−（４−（ベンジルオキシ）フェニル）−１−メチル−１Ｈ−テトラゾールを白色の固体（１８０ｍｇ）として得た。
【０１６７】
Ｃ）４−（１−メチル−１Ｈ−テトラゾール−５−イル）フェノール
撹拌されている５−（４−（ベンジルオキシ）フェニル）−１−メチル−１Ｈ−テトラゾール（１８０ｍｇ、０．６７６ｍｍｏｌ）のエタノール３ｍＬおよびテトラヒドロフラン３ｍＬ中の溶液に、ギ酸（０．２７ｍＬ、６．７６ｍｍｏｌ）を、続いてパラジウムブラック（１０８ｍｇ、１．０１ｍｍｏｌ）を加えた。混合物を室温で４時間撹拌した。反応混合物をＣｅｌｉｔｅ（登録商標）で濾過し、濾液を濃縮して、４−（１−メチル−１Ｈ−テトラゾール−５−イル）フェノールを白色の固体（１１０ｍｇ）として得、これをさらに精製することなく、後続の反応で使用した。
【０１６８】
調製２３：３−フルオロ−４−ヒドロキシベンズアミド
【０１６９】
【化３２】
2013543885.tif 000036
市販の３−フルオロ−４−ヒドロキシベンゾニトリル（５００ｍｇ、３．６５ｍｍｏｌ）および水酸化カリウム（１．０２ｇ、１８．２ｍｍｏｌ）の８０％エタノール１０ｍＬ中の混合物を１６時間、還流加熱した。室温に冷却した後に、混合物を真空濃縮し、残渣を水に入れ、酢酸で酸性化し、酢酸エチルで抽出した。合わせた有機抽出物を硫酸マグネシウム上で乾燥させ、濾過し、濾液を真空濃縮した。ヘプタン中２０から６０％の酢酸エチルの勾配で溶離するフラッシュクロマトグラフィーによって残渣を精製して、３−フルオロ−４−ヒドロキシベンズアミドを白色の固体（２１０ｍｇ）として得た。
【０１７０】
別法では、３−フルオロ−４−ヒドロキシベンズアミドは、次のとおりに調製することができる：
撹拌されている過酸化尿素（４．２ｇ、４３．８ｍｍｏｌ）の水１２ｍＬ中の溶液に、固体の水酸化ナトリウム（１．０４ｇ、２５．５ｍｍｏｌ）を加えた。生じた溶液を氷浴中で冷却し、その後、３−フルオロ−４−ヒドロキシベンゾニトリル（１．００ｇ、７．２９ｍｍｏｌ）のエタノール５ｍＬ中の溶液を加えた。混合物を室温で２時間激しく撹拌し、その後、それを水（１００ｍＬ）および酢酸エチル（１００ｍＬ）で希釈した。混合物を５分間撹拌し、その後、ｐＨ４になるまで、１Ｍの塩酸を加えた。水性層を分離し、酢酸エチル（３×１００ｍＬ）で抽出した。合わせた有機層を硫酸マグネシウム上で乾燥させ、濾過し、濾液を濃縮して、白色の固体を得た。この固体をジエチルエーテルおよびヘプタン（２：１、９０ｍＬ）と共に１時間摩砕し、その後、濾過して、３−フルオロ−４−ヒドロキシベンズアミドを白色の固体（１．０５ｇ）として得た。1H NMR(400MHz, 重水素化ジメチルスルホキシド) δ 6.93(t, J=8.69Hz, 1H) 7.19(br. s., 1H)
7.53(dd, J=8.39, 1.95Hz, 1H) 7.62(dd, J=12.40, 2.05Hz, 1H) 7.77(br. s., 1H)
10.39(s, 1H). LCMS (ES) 156.0(M+1).
【０１７１】
調製２４：２−フルオロ−４−ヒドロキシベンズアミド
【０１７２】
【化３３】
2013543885.tif 000037
撹拌されている過酸化尿素（２．１ｇ、２１．９ｍｍｏｌ）の水６ｍＬ中の溶液に、固体の水酸化ナトリウム（５２１ｍｇ、１２．８ｍｍｏｌ）を加えた。生じた溶液を氷浴中で冷却し、その後、２−フルオロ−４−ヒドロキシベンゾニトリル（５００ｍｇ、３．６５ｍｍｏｌ）のエタノール２ｍＬ中の溶液を加えた。混合物を室温で２時間激しく撹拌し、その後、水（１００ｍＬ）および酢酸エチル（１００ｍＬ）で希釈した。混合物を５分間撹拌し、その後、ｐＨ＝４になるまで、１Ｍの塩酸を加えた。水性層を分離し、酢酸エチル（３×５０ｍＬ）で抽出した。合わせた有機層を硫酸マグネシウム上で乾燥させ、濾過し、濾液を濃縮して、２−フルオロ−４−ヒドロキシベンズアミドを白色の固体として得た。
【０１７３】
調製２５：イソプロピル４−（５−シアノ−４−（１−ヒドロキシエチル）−１Ｈ−ピラゾール−１−イル）ピペリジン−１−カルボキシレート
【０１７４】
【化３４】
2013543885.tif 000038
イソプロピル４−（５−シアノ−４−ホルミル−１Ｈ−ピラゾール−１−イル）ピペリジン−１−カルボキシレート（実施例９、ステップＡ）（５１ｍｇ、０．１８ｍｍｏｌ）を無水テトラヒドロフラン２ｍＬに溶かし、摂氏−７８度に窒素雰囲気下で冷却した。次いで、臭化メチルマグネシウム（０．０７０ｍＬ、０．２１ｍｍｏｌ、ジエチルエーテル中３Ｍ）を滴下添加した。冷浴を外し、混合物を室温で１時間撹拌した。混合物を１Ｍの重硫酸カリウム水溶液で希釈し、酢酸エチルで３回抽出した。合わせた有機抽出物をブラインで洗浄し、硫酸ナトリウム上で乾燥させ、濾過し、濾液を真空濃縮した。ヘプタン中の酢酸エチルの勾配（２０から１００％の酢酸エチル）で溶離するフラッシュクロマトグラフィーによって残渣を精製して、イソプロピル４−（５−シアノ−４−（１−ヒドロキシエチル）−１Ｈ−ピラゾール−１−イル）ピペリジン−１−カルボキシレートを白色の固体（３３ｍｇ）として得、それを精製することなく、後続のステップで使用した。
【０１７５】
調製２６：１−メチルシクロプロピル４−ニトロフェニルカルボネート
【０１７６】
【化３５】
2013543885.tif 000039
Ａ）１−メチルシクロプロパノール
１Ｌフラスコに、チタンメトキシド（１００ｇ）、シクロヘキサノール（２３２ｇ）およびトルエン（４６１ｍＬ）を入れた。フラスコに、Ｄｅａｎ−Ｓｔａｒｋトラップおよび凝縮器を装備させた。メタノールが除去されるまで、混合物を摂氏１４０度で加熱した。トルエンを摂氏１８０度で除去した。さらなるトルエンを加え、このプロセスを２回繰り返した。全てのトルエンを除去した後に、フラスコを高真空下で乾燥させた。ジエチルエーテル（５８０ｍＬ）をフラスコに加えて、ジエチルエーテル中１Ｍの溶液を調製した。５Ｌ三つ口フラスコに、オーバーヘッド攪拌機、不活性ガス入口および均圧付加漏斗を装備させた。フラスコを窒素ガスでフラッシュし、酢酸メチル（６０．１ｍＬ、７５６ｍｍｏｌ）、チタンシクロヘキシルオキシド（エーテル中１Ｍの溶液７５．６ｍＬ）およびジエチルエーテル（１５００ｍＬ）を入れた。溶液を撹拌したが、その間、反応フラスコを室温の水浴中に保持した。付加漏斗に３Ｍのエチルマグネシウムブロミド溶液（５５４ｍＬ、１．６６ｍｏｌｅ）を入れた。グリニャール試薬を室温で３時間にわたって滴下添加した。混合物は薄黄色の溶液になり、次いで徐々に、沈澱物が形成され、これは最終的に、暗緑色／茶色／黒色の混合物になった。グリニャールの追加に続いてさらに１５分間撹拌した後に、混合物を水１Ｌ中の１０％濃硫酸の混合物に慎重に注いだ。固体が全て溶けるまで、生じた混合物を撹拌した。水性層を分離し、ジエチルエーテル２×５００ｍＬで抽出した。合わせた有機抽出物を水、ブラインで順次洗浄し、炭酸カリウム（５００ｇ）上で３０分間乾燥させ、濾過し、濾液を真空濃縮してオイルにした。重炭酸ナトリウム（２００ｍｇ）を加え、粗製物質を蒸留し、摂氏１００度付近で沸騰する画分を回収して、表題化合物（２３グラム）を少量の不純物としてのメチルエチルケトンおよび２−ブタノールと共に得た。1H NMR(500MHz, 重水素化クロロホルム) δ 0.45(見かけt,
J=6.59Hz, 2H), 0.77(見かけt, J=5.61Hz, 2H), 1.46(s, 3H).表題化合物の調製は他にも、ＷＯ０９１０５７１７に記載されている。
【０１７７】
Ｂ）１−メチルシクロプロピル４−ニトロフェニルカルボネート
１−メチルシクロプロパノール（１０ｇ、１３７ｍｍｏｌ）、クロロギ酸４−ニトロフェニル（３２ｇ、１５２ｍｍｏｌ）および数個の４−ジメチルアミノピリジンの結晶（１５０ｍｇ、１．２ｍｍｏｌ）のジクロロメタン（４６２ｍＬ）中の溶液を摂氏０度まで冷却した。トリエチルアミン（３６．５ｇ、３６１ｍｍｏｌ）を滴下添加した。１０分後に、氷浴を除去し、反応物を室温で１４時間撹拌した。反応混合物を飽和炭酸ナトリウム水溶液で２回洗浄した。水性相をジクロロメタンで抽出した。合わせた有機抽出物を水で洗浄し、硫酸マグネシウム上で乾燥させ、濾過し、濾液を真空濃縮した。ヘプタン中の酢酸エチルの勾配混合物（最初に１０分かけて０から５％の酢酸エチル、次いで、ヘプタンに対して５％の酢酸エチルで定組成）で溶離するフラッシュシリカゲルクロマトグラフィーによって残渣を精製して、所望のカルボネート２０．８ｇを透明なオイルとして得た。このオイルは、放置すると固化した。
1H
NMR(500MHz, 重水素化クロロホルム) δ 0.77(見かけt, J=6.59Hz, 2H), 1.09(見かけt, J=7.07Hz, 2H),
1.67(s, 3H), 7.40(見かけdt, J=9.27, 3.17Hz, 2H), 8.29(見かけdt, J=9.27, 3.17Hz, 2H).
【０１７８】
別法では、１−メチルシクロプロパノールは次のとおり調製することができる：
１−メチルシクロプロパノール
２０００ｍＬ四つ口フラスコに、機械攪拌機、不活性ガス入口、温度計および２個の均圧付加漏斗を装備させた。フラスコを窒素でフラッシュし、ジエチルエーテル４９０ｍＬを、続いてチタンテトラ（２−エチルヘキシルオキシド）１８．２ｍＬ（３０ｍｍｏｌ）を入れた。１個の付加漏斗に、エーテル１２０ｍＬで希釈された酢酸メチル２８．６ｍＬ（３６０ｍｍｏｌ）から調製された溶液を入れた。第２の付加漏斗にエーテル中３Ｍのエチルマグネシウムブロミド溶液２００ｍＬを入れた。反応フラスコを氷水浴中で冷却して、摂氏１０度以下の内部温度を維持した。酢酸メチル溶液４０ミリリットルをフラスコに加えた。次いで、グリニャール試薬を付加漏斗から、毎秒約２滴の速度で、１分当たり２ｍＬ以下の速さで滴下添加した。第１のグリニャール試薬４０ｍＬを加えた後に、酢酸メチルのエーテル中の溶液２０ｍＬの分量をさらに加えた。第２のグリニャール試薬４０ｍＬを加えた後に、酢酸メチルのジエチルエーテル中の溶液２０ｍＬの分量をさらに加えた。第３のグリニャール試薬４０ｍＬを加えた後に、エーテル中の酢酸メチル２０ｍＬの分量をさらに加えた。第４のグリニャール試薬４０ｍＬを加えた後に、酢酸メチルのエーテル中の溶液２０ｍＬの分量を最後に加えた。
【０１７９】
グリニャール試薬の添加が完了した後に、混合物をさらに１５分間撹拌した。次いで、全ての固体が溶解するように迅速に撹拌しながら、混合物を、氷６６０ｇおよび濃硫酸６０ｍＬの混合物に注いだ。相を分離し、水性相をジエチルエーテル５０ｍＬで再び抽出した。合わせたエーテル抽出物を１０％炭酸ナトリウム水溶液１５ｍＬ、ブライン１５ｍＬで洗浄し、硫酸マグネシウム３０グラム上で撹拌しながら１時間乾燥させた。次いで、エーテル溶液を濾過した。トリ−ｎ−ブチルアミン（１４．３ｍＬ、６０ｍｍｏｌ）およびメシチレン（１０ｍＬを加えた。２．５ｃｍ×３０ｃｍジャケット付きＶｉｇｒｅｕｘカラムを使用する大気圧での蒸留によって、大部分のジエチルエーテルを除去した。移送を簡単にするために２つのヘキサン１０ｍＬの分量を使用して、残りの液体をより小さな蒸留フラスコに移した。大気圧での蒸留を２ｃｍ×２０ｃｍジャケット付きＶｉｇｒｅｕｘカラムで続けた。９８〜１０５℃で蒸留される液体を回収して、表題化合物１４ｇを無色の液体として得た。1H NMR(400MHz, 重水素化クロロホルム) δ 0.42-0.48(m, 2H), 0.74-0.80(m, 2H),
1.45(s, 3H), 1.86(br. s., 1H).
【０１８０】
調製２７：２−フルオロ−４−（１−メチル−１Ｈ−イミダゾール−５−イル）フェノール
【０１８１】
【化３６】
2013543885.tif 000040
Ａ）５−（３−フルオロ−４−メトキシフェニル）−１−メチル−１Ｈイミダゾール
２−フルオロ−４−ブロモアニソール（０．２１６ｍＬ、１．６３ｍｍｏｌ）、トリ（２−フリル）ホスフィン（２５．９ｍｇ、０．１０８ｍｍｏｌ）および炭酸カリウム（３００ｍｇ、２．１７ｍｍｏｌ）をマイクロ波バイアルに入れ、無水Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（４．８ｍＬ）に溶かした。混合物を窒素ガス流で１０分間脱気し、１−メチルイミダゾール（０．０８７ｍＬ、１．１ｍｍｏｌ）および酢酸パラジウム（ＩＩ）（１２．４ｍｇ、０．０５４ｍｍｏｌ）を加え、混合物をさらに１０分間脱気した。容器をマイクロ波反応器内に摂氏１４０度で２時間入れた。混合物を酢酸エチルで希釈し、セライト（登録商標）で濾過し、濾液を減圧下で濃縮した。ヘプタン中２５から１００％の酢酸エチルで、次いでジクロロメタン中０から１０％のメタノールの勾配で溶離するクロマトグラフィーによって粗製物質を精製して、表題化合物を黄色のオイル（２１０ｍｇ）として得た。1H NMR(500MHz, 重水素化クロロホルム) δ 3.57(s, 3H), 3.85(s, 3H), 6.95-6.98(m,
2H), 7.00-7.07(m, 2H), 7.42(s, 1H).７．４２でのプロトンシフトは、文献（Ｅｕｒ．Ｊ．Ｏｒｇ．ｃｈｅｍ．、２００８、５４３６およびＥｕｒ．Ｊ．Ｏｒｇ．、２００６、１３７９）と比較すると所望のイミダゾール異性体を示すものである。
【０１８２】
Ｂ）２−フルオロ−４−（１−メチル−１Ｈ−イミダゾール−５−イル）フェノール
５−（３−フルオロ−４−メトキシフェニル）−１−メチル−１Ｈイミダゾール（１０１．８ｍｇ、０．４９４ｍｍｏｌ）のジクロロメタン（２．０ｍＬ）中の溶液に、臭化ホウ素溶液（ＩＩＩ）（０．５０ｍＬ、ヘプタン中１．０Ｍの溶液）を摂氏−３０度で加えた。混合物を室温で２０時間撹拌した。次いで、混合物を摂氏−３０度に冷却し、メタノール（２ｍＬ）を混合物に加えた。混合物を真空濃縮し、残渣を水に溶かし、１Ｍの水酸化ナトリウムで中和した。溶液を濃縮して、表題化合物を黄色の固体（９０ｍｇ）として得た。この化合物を精製することなく、さらに使用した。
【０１８３】
調製２８：２−フルオロ−４−（１−メチル−１Ｈ−イミダゾール−２−イル）フェノール
【０１８４】
【化３７】
2013543885.tif 000041
Ａ）２−（３−フルオロ−４−メトキシフェニル）−１−メチル−１Ｈイミダゾール
２−フルオロ−４−ブロモアニソール（０．２５６ｍＬ、１．９３ｍｍｏｌ）およびヨウ化銅（Ｉ）（３７５ｍｇ、１．９３ｍｍｏｌ）をマイクロ波バイアル内に入れ、Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（４．８ｍＬ）に溶かした。混合物を窒素ガス流で１０分間脱気し、１−メチルイミダゾール（０．０７８ｍＬ、０．９６ｍｍｏｌ）および酢酸パラジウム（ＩＩ）（１１ｍｇ、０．０４８ｍｍｏｌ）を加え、混合物をさらに１０分間脱気した。容器をマイクロ波反応器内に、摂氏１４０度で２時間入れた。混合物を酢酸エチル（３ｍＬ）で希釈し、飽和塩化アンモニウム水溶液に注ぎ、オープンエアで３０分間撹拌し、酢酸エチルで２回抽出した。合わせた有機相を水で洗浄し、硫酸ナトリウム上で乾燥させ、濾過し、濾液を真空濃縮した。酢酸エチルからヘプタンへの勾配混合物（２５から１００％酢酸エチル／ヘプタン、次いでジクロロメタン中０から１０％のメタノール）で溶離するクロマトグラフィーによって粗製物質を精製して、２−（３−フルオロ−４−メトキシフェニル）−１−メチル−１Ｈイミダゾールを黄色のオイル（３５．８ｍｇ）として得た。1H NMR(400MHz, 重水素化クロロホルム) δ 3.66(s, 3H), 3.88(s, 3H), 6.90(s, 1H),
6.96(m 1H), 7.10(s, 1H), 7.24-7.33(m, 2H).プロトンＮＭＲは、５−（３−フルオロ−４−メトキシフェニル）−１−メチル−１Ｈイミダゾール（調製２７）のプロトンＮＭＲおよび文献Ｅｕｒ．Ｊ．Ｏｒｇ．ｃｈｅｍ．、２００８、５４３６およびＥｕｒ．Ｊ．Ｏｒｇ．、２００６、１３７９）と比較すると、所望のイミダゾール異性体を示している。
【０１８５】
Ｂ）２−フルオロ−４−（１−メチル−１Ｈ−イミダゾール−２−イル）フェノール
調製２７（Ｂ）においての手順と同様の手順に従って、２−（３−フルオロ−４−メトキシフェニル）−１−メチル−１Ｈイミダゾールから、２−フルオロ−４−（１−メチル−１Ｈ−イミダゾール−２−イル）フェノールを調製して、表題化合物を茶色の固体（３３．４ｍｇ）として得た。粗製物質を精製することなくさらに使用した。
【０１８６】
調製２９：２−フルオロ−４−（メチルスルホニル）−１−（プロパ−１−エン−２−イル）ベンゼン
【０１８７】
【化３８】
2013543885.tif 000042
１−ブロモ−２−フルオロ−４−（メチルスルホニル）ベンゼン（１９９ｍｇ、０．７９０ｍｍｏｌ）およびカリウムイソプロペニルトリフルオロボレート（３００ｍｇ、２．５７ｍｍｏｌ）の２−プロパノール（１０ｍＬ）中の溶液に、触媒１，１’−ビス−（ジフェニルホスフィノ）−フェロセンパラジウムジクロリド（６７ｍｇ、０．０８９ｍｍｏｌ）およびトリエチルアミン（０．１７ｍＬ、１．２０ｍｍｏｌ）を順次加えた。反応物を摂氏９０度で１５時間加熱し、次いで反応物を室温で４８時間撹拌した。次いで、水および酢酸エチルを加え、層を分離した。水性層を酢酸エチルで抽出した。有機抽出物を合わせ、ブラインで洗浄し、硫酸ナトリウム上で乾燥させた。混合物を濾過し、濾液を減圧下で濃縮した。シリカゲルクロマトグラフィー（ヘプタン中１０から１００％の酢酸エチル）によって残渣を精製して、表題化合物を白色の固体（１３０ｍｇ、８０％）として得た。1H NMR(500MHz, 重水素化クロロホルム) δ 2.17(s, 3H), 3.08(s, 3H), 5.29-5.43(m,
2H), 7.51(t, J=7.56Hz, 1H), 7.64(dd, J=9.88, 1.59Hz, 1H), 7.70(dd, J=8.05,
1.71Hz, 1H).
【０１８８】
調製３０：４−ヒドロキシ−２−メチルベンゾニトリル
【０１８９】
【化３９】
2013543885.tif 000043
ジクロロメタン中の三塩化ホウ素（６１．２ｍＬ、１Ｍ）をジクロロメタン（９３ｍＬ）に徐々に加え、および摂氏−７８度に冷却した。これに、４−メトキシ−２−メチルベンゾニトリル（３．００ｇ、２０．４ｍｍｏｌ）およびヨウ化テトラブチルアンモニウム（７．１７ｇ、６１．２ｍｍｏｌ）のジクロロメタン（２０ｍＬ）中の溶液を加えた。反応混合物を摂氏−７８度で５分間撹拌した。次いで、反応混合物を室温に徐々に加温し、２時間撹拌した。氷スラリーを徐々に加えて、反応物をクエンチした。反応物を３０分間撹拌し、層を分離した。水性層をジクロロメタン（２×）で抽出し、合わせた有機抽出物を相分離カートリッジに通し、真空濃縮した。ペンタン中０％から６０％の酢酸エチルで溶離するフラッシュクロマトグラフィーによって粗製混合物を精製して、目的化合物を黄色の固体（１．８５ｇ、６８％）として得た。1H NMR 重水素化メタノール δ ppm 7.40(d, 1H), 6.80(s,
1H), 6.70(d, 1H), 2.40(s, 3H); GCMS(CI方法) ES+=133 [M]
AP+=133 [M].
【０１９０】
調製３１Ａ：３−フルオロ−４−ヒドロキシ−Ｎ−メチルベンズアミド
【０１９１】
【化４０】
2013543885.tif 000044
Ａ）ベンジル４−（ベンジルオキシ）−３−フルオロベンゾエート
３−フルオロ−４−ヒドロキシ安息香酸（５．００ｇ、３２．０６ｍｍｏｌ）、臭化ベンジル（８．２２ｍＬ、６７．３ｍｍｏｌ）および炭酸カリウム（１３．３ｇ、９６．２４ｍｍｏｌ）をアセトン中で合わせ、１８時間還流加熱した。溶液を室温に冷却し、固体を濾過し、濾液を酢酸エチルで希釈した。有機相を飽和ブライン水溶液で洗浄し、硫酸マグネシウム上で乾燥させ、濾過し、濾液を減圧下で濃縮して、所望の生成物であるベンジル４−（ベンジルオキシ）−３−フルオロベンゾエートを得た。1H NMR(500MHz, 重水素化クロロホルム) δ ppm 5.22(s, 2H) 5.36(s, 2H) 7.03(t, J=8.42Hz, 1H) 7.29-7.52(m, 10H)
7.76-7.89(m, 2H); LCMS(ES+)=381.2(M+45)
【０１９２】
Ｂ）４−（ベンジルオキシ）−３−フルオロ安息香酸
ベンジル４−（ベンジルオキシ）−３−フルオロベンゾエート（１１．６ｇ、３４．２ｍｍｏｌ）をテトラヒドロフラン（５０ｍＬ）およびメタノール（５０ｍＬ）に溶かした。水酸化ナトリウム水溶液（７０ｍＬ、１Ｍ）を反応混合物に加え、１８時間撹拌した。反応物を氷浴中で冷却し、１Ｍの塩酸水溶液を慎重に加えることによって、ｐＨ３まで酸性化した。白色の固体が沈澱し、それを濾過し、一晩乾燥させて、所望の生成物である４−（ベンジルオキシ）−３−フルオロ安息香酸を白色の固体（７．６ｇ、９０％）として得た。1H NMR(500MHz, 重水素化ジメチルスルホキシド) δ ppm 3.32(br. s., 1H) 5.27(s, 2H) 7.34-7.39(m, 2H) 7.42(t, J=7.44Hz,
2H) 7.45-7.50(m, 2H) 7.68(dd, J=11.83, 2.07Hz, 1H) 7.75(d, J=8.78Hz, 1H)
【０１９３】
Ｃ）４−（ベンジルオキシ）−３−フルオロ−Ｎ−メチルベンズアミド
塩化チオニル（２．７ｍＬ、３７ｍｍｏｌ）を４−（ベンジルオキシ）−３−フルオロ安息香酸のジメチルホルムアミド（０．０４８ｍＬ、０．６１７ｍｍｏｌ）およびジクロロメタン（１００ｍＬ）中の溶液に摂氏０度で加え、生じた溶液を室温で２０時間撹拌した。反応物を減圧下で濃縮し、高真空下で２時間乾燥させた。生じた黄色の固体をテトラヒドロフラン（６０ｍＬ）に溶かし、テトラヒドロフラン中２Ｍのメチルアミン溶液（３５ｍＬ）を加え、反応物を室温で１８時間撹拌した。反応混合物を減圧下で濃縮して元の体積の半分にすると、白色の固体が沈澱した。固体を濾別し、水で洗浄し、真空炉内で一晩乾燥させて、所望の生成物を白色の固体（６．００ｇ、７０％）として得た。1H NMR(500MHz, 重水素化ジメチルスルホキシド) δ ppm 2.76(d, J=4.39Hz, 3H) 5.24(s, 2H) 7.30-7.38(m, 2H) 7.41(t,
J=7.32Hz, 2H) 7.45-7.50(m, 2H) 7.58-7.75(m, 2H) 8.37(d, J=4.39Hz, 1H)
【０１９４】
Ｄ）３−フルオロ−４−ヒドロキシ−Ｎ−メチルベンズアミド
４−（ベンジルオキシ）−３−フルオロ−Ｎ−メチルベンズアミド（１．０３ｇ、３．９７ｍｍｏｌ）をエタノール（２０ｍＬ）中にＰａｒｒボトル内で懸濁させた。水約１．５ｍＬ中の炭素上１０％のパラジウム（８０ｍｇ）を常の窒素流下で加えた。反応物を水素５０ｐｓｉ雰囲気下、室温で６４時間振盪した。Ｃｅｌｉｔｅ（登録商標）のパッドで、多量の酢酸エチルで洗浄しながら反応混合物を慎重に濾過した。濾液を減圧下で濃縮して、所望の生成物（６２８ｍｇ、９３％）を薄茶色の黄色の固体として得た。1H NMR(500MHz, 重水素化クロロホルム) δ ppm 3.02(d, J=4.88Hz, 3H) 7.05(t, J=8.42Hz, 1H) 7.44(d, J=9.76Hz,
1H) 7.60(dd, J=11.10, 2.07Hz, 1H)
【０１９５】
調製３１Ｂ：３−フルオロ−４−ヒドロキシ−Ｎ，Ｎ−ジメチルベンズアミド
【０１９６】
【化４１】
2013543885.tif 000045
３−フルオロ−４−ヒドロキシ安息香酸（２．００ｇ、１２．８ｍｍｏｌ）、塩酸ジメチルアミン（４．２８ｇ、２０．５ｍｍｏｌ）、１−ヒドロキシベンゾトリアゾール一水和物（１．９６ｇ、１２．８ｍｍｏｌ）およびジイソプロピルエチルアミン（４．５ｍＬ、２６ｍｍｏｌ）をジクロロメタン中で合わせた。１−エチル−３−（３−ジメチルアミノプロピル）カルボジイミドヒドロクロリド（３．９３ｇ、２０．５ｍｍｏｌ）を加え、反応容器を窒素でフラッシュし、封をし、室温で一晩撹拌した。反応物をジクロロメタンおよび１Ｍのリン酸で希釈した。形成した沈澱物を濾別し、ジクロロメタン層を希重炭酸ナトリウム水溶液およびブラインで洗浄し、硫酸ナトリウム上で乾燥させ、濾過し、濾液を減圧下で濃縮した。ヘプタン中６５％の酢酸エチルで溶離するフラッシュクロマトグラフィーによって残渣を精製して、所望の生成物（２１８ｍｇ、９％）を得た。ＬＣ／ＭＳ（ＥＳ＋）：１８４．１（Ｍ＋１）
【０１９７】
調製３２：ｔｅｒｔ−ブチル３−ヒドロキシ−４，４−ジメトキシピペリジン−１−カルボキシレート
【０１９８】
【化４２】
2013543885.tif 000046
ｔｅｒｔ−ブチル４−オキソ−１−ピペリジンカルボキシレート（２．００ｇ、１０ｍｍｏｌ）をメタノール（２０ｍＬ）に溶かし、摂氏０度に冷却した。粉末化水酸化カリウム（１．２６ｇ、２２．１ｍｍｏｌ）を加えた。ヨウ素（２．８ｇ、１１ｍｍｏｌ）をメタノール（２５ｍＬ）に溶かし、反応物に４５分かけて滴下添加した。次いで、反応物を室温に徐々に加温し、１６時間撹拌した。反応物を濃縮し、トルエン（５０ｍＬ）を加えた。生じた固体を濾別し、トルエンで洗浄した。濾液を減圧下で濃縮し、ヘプタン中３０％から１００％の酢酸エチルの勾配で溶離するフラッシュクロマトグラフィーによって残渣を精製して、ｔｅｒｔ−ブチル３−ヒドロキシ−４，４−ジメトキシピペリジン−１−カルボキシレート（１．８９ｇ、７２％）を得た。1H NMR(重水素化メタノール, 400MHz) δ ppm 4.06-4.00(m, 1H),
3.99-3.91(m, 1H), 3.80-3.73(m, 1H), 3.29(s, 3H), 3.28(s, 3H), 3.22-3.10(br m,
1H), 2.95-2.80(br m, 1H), 1.91-1.77(m, 2H), 1.50(s, 9H).
【０１９９】
調製３３：ｔｅｒｔ−ブチル３−ヒドロキシ−４−オキソピペリジン−１−カルボキシレート
【０２００】
【化４３】
2013543885.tif 000047
ｔｅｒｔ−ブチル３−ヒドロキシ−４，４−ジメトキシピペリジン−１−カルボキシレート（６．７０ｇ、２６ｍｍｏｌ）をアセトン（１３５ｍＬ）に溶かし、ｐ−トルエンスルホン酸（２４４ｍｇ、１．２８ｍｍｏｌ）を加えた。反応物を室温で１６時間撹拌した。混合物を濃縮し、生じた残渣をｔｅｒｔ−ブチルメチルエーテルに溶かし、飽和重炭酸ナトリウム水溶液で洗浄した。有機層を硫酸ナトリウム上で乾燥させ、濾過し、濾液を減圧下で濃縮して、ｔｅｒｔ−ブチル３−ヒドロキシ−４−オキソピペリジン−１−カルボキシレートをオイル（４．６７ｇ、６９％）として得た。ＧＣ／ＭＳ（方法１）：Ｒ，＝４．９５分；ＭＳ（ＥＳＩｐｏｓ）：ｍ／ｚ＝１５９［Ｍ−ｔＢｕ］＋。
【０２０１】
調製３４：ｔｅｒｔ−ブチル４−ヒドラジノ−３−ヒドロキシピペリジン−１−カルボキシレート
【０２０２】
【化４４】
2013543885.tif 000048
ｔｅｒｔ−ブチル３−ヒドロキシ−４−オキソピペリジン−１−カルボキシレート（５．５０ｇ、２６ｍｍｏｌ）をメタノール（１２０ｍＬ）に溶かし、窒素流で、封をしたＰａｒｒ  Ｓｈａｋｅｒボトル内で脱気した。塩酸ヒドラジン（１．４４ｍｇ、２１ｍｍｏｌ）を水（２０ｍＬ）に溶かし、反応物に加えた。フラスコを水５ｍＬですすぎ、それをまた反応物に加えた。炭素上１０％の白金触媒（５００ｍｇ）を水中でスラリー化し、反応混合物に加えた。水素５０ｐｓｉ雰囲気、室温で１６時間、混合物を振盪した。反応物を、メタノールで洗浄してＣｅｌｉｔｅ（登録商標）のパッドで濾過した。濾液を減圧下で濃縮し、次いでヘプタンで希釈し、減圧下で濃縮して、所望の生成物であるｔｅｒｔ−ブチル４−ヒドラジノ−３−ヒドロキシピペリジン−１−カルボキシレートを得た。
【０２０３】
調製３５：ｔｅｒｔ−ブチル４−［５−アミノ−４−（エトキシカルボニル）−１Ｈ−ピラゾール−１−イル］−３−ヒドロキシピペリジン−１−カルボキシレート
【０２０４】
【化４５】
2013543885.tif 000049
ｔｅｒｔ−ブチル４−ヒドラジノ−３−ヒドロキシピペリジン−１−カルボキシレート（５．３０ｇ、２０ｍｍｏｌ）およびエチル（エトキシメチレン）シアノアセテート（３．４２ｇ、１９．８ｍｍｏｌ）を無水エタノール（１７０ｍＬ）中で合わせた。酢酸ナトリウム三水和物（１０．９０ｇ、７９．２ｍｍｏｌ）を加え、反応混合物を４時間還流加熱した。反応物を室温に冷却し、減圧下で濃縮し、生じた残渣を水および酢酸エチルで希釈した。有機層を硫酸ナトリウム上で乾燥させ、濾過し、濾液を減圧下で濃縮した。ヘプタン中１０％から１００％の酢酸エチルの勾配で溶離するフラッシュクロマトグラフィーによって粗製のオイルを精製して、ｔｅｒｔ−ブチル４−［５−アミノ−４−（エトキシカルボニル）−１Ｈ−ピラゾール−１−イル］−３−ヒドロキシピペリジン−１−カルボキシレートを得た。
【０２０５】
調製３６：ｔｅｒｔ−ブチル４−［５−アミノ−４−（エトキシカルボニル）−１Ｈ−ピラゾール−１−イル］−３−フルオロピペリジン−１−カルボキシレート
【０２０６】
【化４６】
2013543885.tif 000050
ｔｅｒｔ−ブチル４−［５−アミノ−４−（エトキシカルボニル）−１Ｈ−ピラゾール−１−イル］−３−ヒドロキシピペリジン−１−カルボキシレート（１．７１ｇ、４．８２ｍｍｏｌ）をジクロロメタン（５０ｍＬ）に溶かし、摂氏−７８度に冷却した。ジエチルアミノ硫黄トリフルオリド（０．７１０ｍＬ、０．５８ｍｍｏｌ）を滴下添加し、次いで、摂氏０度に２５分間加温した。反応溶液を摂氏−７８度に冷却し、メタノール（１０ｍＬ）を慎重に加えた。反応物を減圧下で濃縮し、ヘプタン中１０％から１００％の酢酸エチルの勾配で溶離するフラッシュクロマトグラフィーによって残渣を精製して、ｔｅｒｔ−ブチル４−［５−アミノ−４−（エトキシカルボニル）−１Ｈ−ピラゾール−１−イル］−３−フルオロピペリジン−１−カルボキシレートを得た。
【０２０７】
調製３７：ｔｅｒｔ−ブチル４−［５−ブロモ−４−（エトキシカルボニル）−１Ｈ−ピラゾール−１−イル］−３−フルオロピペリジン−１−カルボキシレート
【０２０８】
【化４７】
2013543885.tif 000051
ｔｅｒｔ−ブチル４−［５−アミノ−４−（エトキシカルボニル）−１Ｈ−ピラゾール−１−イル］−３−フルオロピペリジン−１−カルボキシレート（７１０ｍｇ、１．９９ｍｍｏｌ）をアセトニトリル（２５ｍＬ）に溶かした。臭化銅（ＩＩ）（５３９ｍｇ、２．３９ｍｍｏｌ）を加え、反応物を摂氏６０度に加熱した。ｔｅｒｔ−ブチルニトリル（０．３１５ｍＬ、２．９ｍｍｏｌ）を滴下添加し、混合物を摂氏６５度で１５分間加熱した。反応物を室温に冷却し、冷たい１Ｎの塩酸に注ぎ、酢酸エチル（２×）で抽出した。合わせた有機抽出物を飽和重炭酸ナトリウム水溶液およびブラインで洗浄し、硫酸ナトリウム上で乾燥させ、濾過し、濾液を減圧下で濃縮した。ヘプタン中１０％から５０％の酢酸エチルの勾配で溶離するフラッシュクロマトグラフィーによって粗製残渣を精製して、ｔｅｒｔ−ブチル４−［５−ブロモ−４−（エトキシカルボニル）−１Ｈ−ピラゾール−１−イル］−３−フルオロピペリジン−１−カルボキシレート（３２０ｍｇ、３８％）を得た。1H NMR(500MHz, 重水素化クロロホルム) δ ppm 1.37(t, 3H) 1.49(s, 9H) 1.98(d, J=13.42Hz, 1H) 2.12-2.26(m, 1H)
2.90(br. s., 2H) 4.18(br. s., 1H) 4.33(q, J=7.24Hz, 2H) 4.44-4.70(m, 2H)
4.85-5.05(m, 1H) 8.04(s, 1H)
【０２０９】
調製３８：エチル５−シアノ−１−（３−フルオロピペリジン−４−イル）−１Ｈ−ピラゾール−４−カルボキシレート
【０２１０】
【化４８】
2013543885.tif 000052
ｔｅｒｔ−ブチル４−［５−ブロモ−４−（エトキシカルボニル）−１Ｈ−ピラゾール−１−イル］−３−フルオロピペリジン−１−カルボキシレート（１８５ｍｇ、０．３１ｍｍｏｌ）、１，１’ビス（ジフェニルホスフィノ）フェロセン（１８ｍｇ、０．０３２ｍｍｏｌ）、亜鉛ダスト（１８ｍｇ、０．２７ｍｍｏｌ）、シアン化亜鉛（３９．１ｍｇ、０．３３ｍｍｏｌ）および１０％パラジウムブラック（１９．２ｍｇ、０．０２１ｍｍｏｌ）をジメチルアセトアミド（３ｍＬ）中、マイクロ波バイアル内で合わせた。反応混合物を窒素で脱気し、摂氏１７０度で４．５時間加熱した。反応混合物を室温に冷却し、酢酸エチルで希釈した。反応物をＣｅｌｉｔｅ（登録商標）のパッドで濾過し、濾液を水で希釈し、酢酸エチル（２×）で抽出した。合わせた有機抽出物を水で、次いでブラインで洗浄し、硫酸ナトリウム上で乾燥させ、濾過し、濾液を減圧下で濃縮した。ヘプタン中１０％から１００％の酢酸エチルの勾配で溶離するフラッシュクロマトグラフィーによって粗製の残渣を精製して、エチル５−シアノ−１−（３−フルオロピペリジン−４−イル）−１Ｈ−ピラゾール−４−カルボキシレート（８０ｍｇ、９８％）を得た。
【０２１１】
調製３９：ｔｅｒｔ−ブチル４−［５−シアノ−４−（エトキシカルボニル）−１Ｈ−ピラゾール−１−イル］−３−フルオロピペリジン−１−カルボキシレート
【０２１２】
【化４９】
2013543885.tif 000053
エチル５−シアノ−１−（３−フルオロピペリジン−４−イル）−１Ｈ−ピラゾール−４−カルボキシレート（６０ｍｇ、０．２２ｍｍｏｌ）をテトラヒドロフラン（３ｍＬ）に溶かし、トリエチルアミン（４０ｕＬ、０．２７ｍｍｏｌ）を加えた。二炭酸ジ−ｔｅｒｔ−ブチル（５０ｍｇ、０．２２５ｍｍｏｌ）を加え、反応物を室温、窒素下で３時間撹拌した。反応物を減圧下で濃縮し、ヘプタン中１０％から１００％の酢酸エチルの勾配で溶離するフラッシュクロマトグラフィーによって残渣を精製して、ｔｅｒｔ−ブチル４−［５−シアノ−４−（エトキシカルボニル）−１Ｈ−ピラゾール−１−イル］−３−フルオロピペリジン−１−カルボキシレートをオイル（５２ｍｇ、６３％）として得た。
【０２１３】
調製４０：１−［１−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−３−フルオロピペリジン−４−イル］−５−シアノ−１Ｈ−ピラゾール−４−カルボン酸
【０２１４】
【化５０】
2013543885.tif 000054
ｔｅｒｔ−ブチル４−［５−シアノ−４−（エトキシカルボニル）−１Ｈ−ピラゾール−１−イル］−３−フルオロピペリジン−１−カルボキシレート（８０ｍｇ、０．２２ｍｍｏｌ）をテトラヒドロフラン（２．５ｍＬ）、水（１．５ｍＬ）およびメタノール（０．４ｍＬ）に溶かした。溶液を摂氏０度に冷却し、水酸化リチウム一水和物（１９ｍｇ、０．４３６ｍｍｏｌ）を加えた。反応物を２．５時間かけて室温に徐々に加温した。反応混合物を濃縮し；残渣を水に溶かし、酢酸エチルおよびメチルｔｅｒｔ−ブチルエーテルで抽出した。有機層を水で抽出した。１Ｎの重硫酸ナトリウム水溶液を用いて、合わせた水性抽出物をｐＨ２まで酸性化した。酸性溶液を酢酸エチル（３×）で抽出し、抽出物をブラインで洗浄し、硫酸ナトリウム上で乾燥させ、濾過し、濾液を減圧下で濃縮して、１−［１−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−３−フルオロピペリジン−４−イル］−５−シアノ−１Ｈ−ピラゾール−４−カルボン酸を白色の固体として得た。
【０２１５】
調製４１：ｔｅｒｔ−ブチル４−［５−シアノ−４−（ヒドロキシメチル）−１Ｈ−ピラゾール−１−イル］−３−フルオロピペリジン−１−カルボキシレート
【０２１６】
【化５１】
2013543885.tif 000055
新たに再結晶化（ヘプタンから）させた塩化シアヌル（７８ｍｇ、０．４１４ｍｍｏｌ）をジメトキシエタン（２ｍＬ）に溶かし、４−メチル−モルホリン（０．０２０ｍＬ、０．２１５ｍｍｏｌ）を加えた。このゴム状の溶液に、ジメトキシエタン（２ｍＬ）に溶けた１−［１−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−３−フルオロピペリジン−４−イル］−５−シアノ−１Ｈ−ピラゾール−４−カルボン酸（７０ｍｇ、０．２１ｍｍｏｌ）を加えた。反応物を摂氏６０度で３時間加熱した。反応物を室温に冷却し、ジメトキシエタンで洗浄してＣｅｌｉｔｅ（登録商標）のパッドで濾過した。濾液を摂氏０度に冷却し、水（０．４ｍＬ）に溶けたホウ水素化ナトリウム（１７ｍｇ、０．４７４ｍｍｏｌ）の溶液を非常にゆっくりと加えた（滴下添加）。添加が完了したら、反応物を室温に２．５時間加温した。反応溶液を水でさらに希釈し、１Ｍの重硫酸ナトリウムを使用して、ｐＨ２．５に酸性化した。水性層を酢酸エチル（２×）で抽出し、合わせた有機層を硫酸ナトリウム上で乾燥させ、濾過し、濾液を減圧下で濃縮した。ヘプタン中１０％から１００％の酢酸エチルの勾配で溶離するフラッシュクロマトグラフィーによって粗製の残渣を精製して、ｔｅｒｔ−ブチル４−［５−シアノ−４−（ヒドロキシメチル）−１Ｈ−ピラゾール−１−イル］−３−フルオロピペリジン−１−カルボキシレートをオイル（２８ｍｇ、４２％）として得た。
【０２１７】
調製４２：ｔｅｒｔ−ブチル４−（５−シアノ−４−｛［（メチルスルホニル）オキシ］メチル｝−１Ｈ−ピラゾール−１−イル）−３−フルオロピペリジン−１−カルボキシレート
【０２１８】
【化５２】
2013543885.tif 000056
ｔｅｒｔ−ブチル４−［５−シアノ−４−（ヒドロキシメチル）−１Ｈ−ピラゾール−１−イル］−３−フルオロピペリジン−１−カルボキシレート（２８ｍｇ、０．０８６ｍｍｏｌ）をジクロロメタン（３ｍＬ）に溶かした。トリエチルアミン（０．０３６ｍＬ、０．２５８ｍｍｏｌ）を加え、混合物を摂氏０度に冷却した。メタンスルホン酸無水物（２０ｍｇ、０．１１２ｍｍｏｌ）を滴下添加し、２時間かけて室温に徐々に加温した。ジクロロメタンおよび飽和重炭酸ナトリウム水溶液を反応溶液に加え、二相溶液を分離した。水性層をジクロロメタン（２×）で抽出し、合わせた有機抽出物を綿プラグに通した。濾液を減圧下で濃縮して、ｔｅｒｔ−ブチル４−（５−シアノ−４−｛［（メチルスルホニル）オキシ］メチル｝−１Ｈ−ピラゾール−１−イル）−３−フルオロピペリジン−１−カルボキシレートをオイル（３３ｍｇ、９５％）として得た。1H NMR(500MHz, 重水素化クロロホルム) δ ppm 1.25-1.30(m, 2H) 1.50(s, 9H) 2.01-2.06(m, 1H) 2.75-2.85(m, 2H)
3.08(s, 3H) 4.64-4.74(m, 1H) 4.79-4.98(m, 2H) 5.26(s, 2H) 7.75(s, 1H)
【０２１９】
調製４３：ｔｅｒｔ−ブチル−３−フルオロ−４−ヒドロキシピペリジン−１−カルボキシレートの異性体（ＢおよびＣ）
実験の詳細は、下記のスキーム４に詳細に記載されている。
【０２２０】
【化５３】
2013543885.tif 000057
【０２２１】
ステップＡ）ｔｅｒｔ−ブチル−４−［（トリメチルシリル）オキシ］−３，６−ジヒドロピリジン−１（２Ｈ）−カルボキシレート
【０２２２】
【化５４】
2013543885.tif 000058
Ｎ−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル−４−ピペリドン（３０．０ｇ、０．１５ｍｏｌ）の無水Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（３００ｍＬ）中の溶液に室温で、塩化トリメチルシリル（２２．９ｍＬ、０．１８ｍｏｌ）およびトリエチルアミン（５０．４ｍＬ、０．３６ｍｏｌ）を連続的に付加漏斗を介して加えた。生じた溶液を摂氏８０℃で一晩加熱し、次いで室温に冷却した。反応混合物を水およびヘプタンで希釈した。層を分離し、水性層をヘプタンで抽出した。合わせたヘプタン層を水およびブラインで順次洗浄し、次いで硫酸マグネシウム上で乾燥させた。混合物を濾過し、濾液を減圧下で濃縮して、粗製の生成物を黄色のオイルとして得た。９：１のヘプタン／酢酸エチルで溶離するシリカゲルのプラグに通すことによって、そのオイルを精製して、表題化合物を無色のオイル（３３．６ｇ、８２％）として得た。1H NMR(400MHz, 重水素化クロロホルム) δ 4.78(br s, 1H), 3.86(br s, 2H), 3.51(t,
2H), 2.09(br s, 2H), 1.45(s, 9H), 0.18(s, 9H).
【０２２３】
ステップＢ）ｔｅｒｔ−ブチル−３−フルオロ−４−オキソピペリジン−１−カルボキシレート
【０２２４】
【化５５】
2013543885.tif 000059
撹拌されているｔｅｒｔ−ブチル−４−［（トリメチルシリル）オキシ］−３，６−ジヒドロピリジン−１（２Ｈ）−カルボキシレート（２８．８ｇ、０．１１ｍｏｌ）のアセトニトリル（３００ｍＬ）中の溶液に室温で、Ｓｅｌｅｃｔｆｌｕｏｒ（商標）（４１．４ｇ、０．１２ｍｏｌ）を加えた。生じた淡黄色の懸濁液を室温で１．５時間撹拌した。飽和重炭酸ナトリウム水溶液（３００ｍＬ）および酢酸エチル（３００ｍＬ）を加え、層を分離した。水性層を酢酸エチルで２回抽出し、全ての有機層を合わせ、飽和重炭酸ナトリウム水溶液およびブラインで順次洗浄し、次いで硫酸マグネシウム上で乾燥させた。混合物を濾過し、濾液を減圧下で濃縮して、粗製の生成物を淡黄色のオイルとして得た。シリカゲル上でヘプタン／酢酸エチル勾配（２：１から１：１）を用いるカラムクロマトグラフィーを繰り返すことによって、この物質を精製して、表題化合物を白色の固体（１５．５ｇ、６７％）として得た。1H NMR(400MHz, 重水素化クロロホルム): δ 4.88(dd, 0.5H), 4.77(dd, 0.5H), 4.47(br
s, 1H), 4.17(ddd, 1H), 3.25(br s, 1H), 3.23(ddd, 1H), 2.58(m, 1H), 2.51(m, 1H),
1.49(s, 9H).
【０２２５】
別法では、ステップＢを次のとおりに行って、ケトンの水和物を単離することができる。
【０２２６】
撹拌されているｔｅｒｔ−ブチル−４−［（トリメチルシリル）オキシ］−３，６−ジヒドロピリジン−１（２Ｈ）−カルボキシレート（４１．３ｇ、０．１５ｍｏｌ）のアセトニトリル（５００ｍＬ）中の溶液に室温で、Ｓｅｌｅｃｔｆｌｕｏｒ（商標）（５６．９ｇ、０．１６ｍｏｌ）を加えた。生じた淡黄色の懸濁液を室温で４時間１０分撹拌した。飽和重炭酸ナトリウム水溶液および酢酸エチルを加え、層を分離した。水性層を酢酸エチルで２回抽出し、全ての有機層を合わせ、飽和重炭酸ナトリウム水溶液およびブラインで順次洗浄し、次いで硫酸マグネシウム上で乾燥させた。混合物を濾過し、濾液を減圧下で濃縮して、粗製のｔｅｒｔ−ブチル−３−フルオロ−４−オキソピペリジン−１−カルボキシレートを白色の固体として得た。粗製のｔｅｒｔ−ブチル−３−フルオロ−４−オキソピペリジン−１−カルボキシレートをテトラヒドロフラン（１２０ｍＬ）に懸濁させ、水（１２０ｍＬ）を加えた。生じた溶液を室温で５．５時間撹拌し、次いで減圧下で濃縮した。残渣を高真空下で乾燥させ、エルレンマイヤーフラスコに移し、ジクロロメタン（２５０ｍＬ）に懸濁させた。生じた懸濁液を５分間撹拌し、焼結ガラス漏斗を使用する濾過によって、固体を回収した。生じたフィルターケーキをジクロロメタン（２００ｍＬ）、ジクロロメタン（２００ｍＬ）およびヘプタン（１００ｍＬ）の１：１混合物で徹底的に洗浄した。次いで、固体を高真空下で乾燥させて、ｔｅｒｔ−ブチル３−フルオロ−４，４−ジヒドロキシピペリジン−１−カルボキシレート（２６．４ｇ）を得た。1H NMR(500MHz, 重水素化ジメチルスルホキシド) δ 1.38(s, 9H), 1.49-1.52(m, 1H), 1.63-1.68(m, 1H), 2.82 -3.20(m, 2H)
3.75(br, 1H), 3.97(br, 1H), 4.12(d, J=45, 1H), 5.92(s, 1H), 5.97(s, 1H).
【０２２７】
ステップＣ）（Ｒ＊）−ｔｅｒｔ−ブチル−３−（Ｓ）−フルオロ−４−（Ｒ）−ヒドロキシピペリジン−１−カルボキシレート（ラセミ）の異性体
【０２２８】
【化５６】
2013543885.tif 000060
ｔｅｒｔ−ブチル−３−フルオロ−４−オキソピペリジン−１−カルボキシレート（１５．５ｇ、７１．３ｍｍｏｌ）のメタノール（１５０ｍＬ）中の溶液に摂氏０度で、ホウ水素化ナトリウム（３．５１ｇ、９３．７ｍｍｏｌ）を加えた。生じた混合物を摂氏０度で２時間撹拌し、次いで室温に加温した。飽和塩化アンモニウム水溶液（２００ｍＬ）を加え、混合物を酢酸エチルで３回抽出した。合わせた抽出物をブラインで洗浄し、硫酸マグネシウム上で乾燥させた。混合物を濾過し、濾液を減圧下で濃縮して、粗製の生成物混合物を得、これをシリカゲル上、ヘプタン−酢酸エチル（３：２〜１：１）で溶離するカラムクロマトグラフィーによって精製して、第１の溶離生成物であるｔｅｒｔ−ブチル−（３，４−トランス）−３−フルオロ−４−ヒドロキシピペリジン−１−カルボキシレート（化合物Ｃ、スキーム４）（３．８１ｇ、２４％）を淡黄色のオイルとして得たが、これは、放置すると固化して白色の固体になった。1H NMR(400MHz, 重水素化クロロホルム) δ 4.35(ddd, 0.5H), 4.18(ddd, 0.5H), 4.15(br s, 1H), 3.89-3.74(m, 2H),
2.97(br s, 1H), 2.93(ddd, 1H), 2.47(s, 1H), 2.05-1.92(m, 1H), 1.58-1.46(m, 1H),
1.44(s, 9H).
【０２２９】
次いで、第２の溶離化合物であるｔｅｒｔ−ブチル−（３，４−ｃｉｓ）−３−フルオロ−４−ヒドロキシ−ピペリジン−１−カルボキシレート（化合物Ｂ、スキーム４）（１０．５７ｇ、６８％）を白色の固体として単離した。1H NMR(400MHz, 重水素化クロロホルム) δ 4.69-4.65(m, 0.5H), 4.53-4.49(m, 0.5H), 3.92-3.86(m, 2H), 3.69(br
s, 1H), 3.39(br s, 1H), 3.16(br s, 1H), 2.13(s, 1H), 1.88-1.73(m, 2H), 1.44(s,
9H).
【０２３０】
別法では、水和物のｔｅｒｔ−ブチル３−フルオロ−４，４−ジヒドロキシピペリジン−１−カルボキシレート（ステップ２）から出発して次のとおりに、ステップＣを行うことができる。
【０２３１】
撹拌されているｔｅｒｔ−ブチル３−フルオロ−４，４−ジヒドロキシピペリジン−１−カルボキシレート（２０．０ｇ、８５ｍｍｏｌ）のテトラヒドロフラン（５００ｍＬ）中の溶液に摂氏−３５度で、Ｌ−Ｓｅｌｅｃｔｒｉｄｅ（登録商標）のテトラヒドロフラン中の溶液（１７０ｍＬ、１Ｍ、１７０ｍｍｏｌ）を３０分かけて滴下添加した。反応混合物を摂氏０℃に１．５時間かけて加温した。反応混合物を飽和塩化アンモニウム水溶液（１５０ｍＬ）でクエンチし、１５分間激しく撹拌した。この摂氏０度の混合物に、ｐＨ７のリン酸塩緩衝液（１５０ｍＬ）を加え、続いて、３５％過酸化水素水溶液（１５０ｍＬ）を滴下添加した。生じた混合物を３０分間撹拌し、酢酸エチルで希釈した。有機層を分離し、順次、水、飽和チオ硫酸ナトリウム水溶液およびブラインで洗浄した。次いで、有機層を無水硫酸マグネシウム上で乾燥させ、濾過し、濾液を減圧下で濃縮して、粗製の生成物混合物を得、これを、シリカゲル［コンビフラッシュＩＳＣＯ  ３３０ｇカラム］上、ヘプタン−酢酸エチル（１０から６０％の勾配）で溶離するカラムクロマトグラフィーによって精製して、ｔｅｒｔ−ブチル−（３，４−シス）−３−フルオロ−４−ヒドロキシピペリジン−１−カルボキシレート（１３．９ｇ）を得た。
【０２３２】
ステップＤ）ｔｅｒｔ−ブチル−（３，４−シス）−３−フルオロ−４−ヒドロキシ−ピペリジン−１−カルボキシレートの鏡像異性体
それぞれ９０：１０の二酸化炭素およびエタノールの移動相を流速１０ｍＬ／分で用いるＣｈｉｒａｌｐａｋ  ＡＤ−Ｈカラム（１０×２５０ｍｍ）を利用する分取高圧液体クロマトグラフィーを介して、ラセミのｔｅｒｔ−ブチル−（３，４−シス）−３−フルオロ−４−ヒドロキシ−ピペリジン−１−カルボキシレートの試料１グラムをその鏡像異性体に精製した。分離を監視する波長は２１０ｎＭであった。それぞれ９０：１０の二酸化炭素およびエタノールの定組成移動相を流速２．５ｍＬ／分で用いるＣｈｉｒａｌｐａｋ  ＡＤ−Ｈ（４．６ｍｍ×２５ｃｍ）カラムを使用する分析用高圧クロマトグラフィーを使用して、各鏡像異性体の分析純度を決定した。ピークを監視する波長は２１０ｎｍであった。次の２種の異性体が得られた：
化合物Ｅ、スキーム４）（３Ｓ，４Ｒ）−ｔｅｒｔ−ブチル３−フルオロ−４−ヒドロキシピペリジン−１−カルボキシレート、鏡像異性体１（３６３ｍｇ）：Ｒｔ＝２．６７分（１００％ｅｅ）（ジクロロメタン中での旋光性＝＋２１．２度）および
【０２３３】
【化５７】
2013543885.tif 000061
化合物Ｄ、スキーム４）（３Ｒ，４Ｓ）−ｔｅｒｔ−ブチル３−フルオロ−４−ヒドロキシピペリジン−１−カルボキシレート、鏡像異性体２（４０３ｍｇ）：Ｒｔ＝２．９９分（８８％ｅｅ）。
【０２３４】
【化５８】
2013543885.tif 000062
上記鏡像異性体１を使用して調製される５−（６−（（３Ｓ，４Ｒ）−３−フルオロピペリジン−４−イルオキシ）−５−メチルピリミジン−４−イル）−１−メチル−１，４，５，６−テトラヒドロピロロ［３，４−ｃ］ピラゾールの（１Ｓ）−（＋）−カンファースルホン酸塩を製造することによって（類推で、下記のラセミ体の調製を参照されたい）、ｔｅｒｔ−ブチル−（３，４−シス）−３−フルオロ−４−ヒドロキシ−ピペリジン−１−カルボキシレート異性体の絶対立体化学を決定した。
【０２３５】
【化５９】
2013543885.tif 000063
【０２３６】
５−（６−｛［（３，４−シス）−３−フルオロピペリジン−４−イル］オキシ｝−５−メチルピリミジン−４−イル）−１−メチル−１，４，５，６−テトラヒドロピロロ［３，４−ｃ］ピラゾール（ラセミ）の調製
Ａ．５−（６−クロロ−５−メチルピリミジン−４−イル）−１−メチル−１，４，５，６−テトラヒドロピロロ［３，４−ｃ］ピラゾールの調製
【０２３７】
【化６０】
2013543885.tif 000064
１−メチル−１，４，５，６−テトラヒドロピロロ［３，４−ｃ］ピラゾールビス−塩酸塩（２．００ｇ、１０．２ｍｍｏｌ）および４，６−ジクロロ−５−メチルピリミジン（１．６６ｇ、１０．２ｍｍｏｌ）をテトラヒドロフラン（５１ｍＬ）に室温で懸濁させた。これに、トリエチルアミン（４．４１ｍＬ、３１．６ｍｍｏｌ）を加えると、混合物が濁り、茶色の固体がフラスコ壁に粘着した。この混合物を室温で４時間撹拌し、次いで摂氏５０度でさらに１９時間加熱した。反応混合物を室温に冷却し、水（１００ｍＬ）で希釈した。この混合物を酢酸エチル（３×１００ｍＬ）で抽出した。有機抽出物を貯留し、ブラインで洗浄し、硫酸ナトリウム上で乾燥させ、濾過した。濾液を真空下で乾燥するまで減らして、表題化合物を薄茶色の固体（１．９５ｇ、７８％）として得、これをさらに精製することなく、次のステップで使用した。
1H
NMR(500MHz, 重水素化クロロホルム) δ
2.54(s, 3H) 3.88(s, 3H) 4.90(見かけd, J=3.66Hz, 4H)
7.28(s, 1H) 8.29(s, 1H).
【０２３８】
Ｂ．ｔｅｒｔ−ブチル（３，４−シス）−３−フルオロ−４−｛［５−メチル−６−（１−メチル−４，６−ジヒドロピロロ［３，４−ｃ］ピラゾール−５（１Ｈ）−イル）ピリミジン−４−イル］オキシ｝ピペリジン−１−カルボキシレート（ラセミ）の調製
【０２３９】
【化６１】
2013543885.tif 000065
ｔｅｒｔ−ブチル（３，４−シス）−３−フルオロ−４−ヒドロキシピペリジン−１−カルボキシレート（１．６７ｇ、７．６２ｍｍｏｌ）および上記で調製された５−（６−クロロ−５−メチルピリミジン−４−イル）−１−メチル−１，４，５，６−テトラヒドロピロロ［３，４−ｃ］ピラゾール（９００ｍｇ、３．６０ｍｍｏｌ）の混合物を１，４−ジオキサン（２０ｍＬ）に溶かし、摂氏１０５度に加熱した。１０分間加熱した後に、全ての物質が溶液になり、ナトリウムビス（トリメチルシリル）アミド（４．３ｍＬ、４．３ｍｍｏｌ、トルエン中１Ｍ）を混合物に迅速に加えると、濁った黄色の混合物が生じ、次いでそれを摂氏１０５度で２時間撹拌した。次いで、反応物を室温に冷却し、水および飽和重炭酸ナトリウム水溶液の等体積の混合物を加えることによってクエンチした。混合物を酢酸エチル（３×１５ｍＬ）で抽出した。合わせた有機抽出物をブラインで洗浄し、硫酸ナトリウム上で乾燥させ、濾過した。濾液を真空下で濃縮して、黄色の残渣を得、それを、シリカゲル上、ヘプタン中６０から１００％の酢酸エチルで溶離するカラムクロマトグラフィーによって精製した。表題化合物および出発５−（６−クロロ−５−メチルピリミジン−４−イル）−１−メチル−１，４，５，６−テトラヒドロピロロ［３，４−ｃ］ピラゾールの混合物を白色の固体（１．２０ｇ）として単離し、さらに精製することなく、後続の反応で使用した。
【０２４０】
同じ条件下で進めた分離反応からの粗製のｔｅｒｔ−ブチル（３，４−シス）−３−フルオロ−４−｛［５−メチル−６−（１−メチル−４，６−ジヒドロピロロ［３，４−ｃ］ピラゾール−５（１Ｈ）−イル）ピリミジン−４−イル］オキシ｝ピペリジン−１−カルボキシレートのバッチをＨＰＬＣによって精製した。粗製の試料（９．５ｍｇ）をジメチルスルホキシド（１ｍＬ）に溶かし、Ｗａｔｅｒｓ  ＸＢｒｉｄｇｅ  Ｃ１８  １９×１００ｍｍ、０．００５ｍｍカラムで、８．５分で８０％水／アセトニトリル（０．０３％の水酸化アンモニウム調節剤）から０％水／アセトニトリルへの直線状勾配、続いて１．５分間の０％水／アセトニトリルで流速２５ｍＬ／分で溶離する分取逆相ＨＰＬＣによって精製した。こうして表題化合物（５ｍｇ）を得た。分析ＬＣＭＳ：保持時間２．８１分（Ｗａｔｅｒｓ  ＸＢｒｉｄｇｅ  Ｃ１８  ４．６×５０ｍｍ、０．００５ｍｍカラム；４．０分かけて９０％水／アセトニトリルから直線状勾配で５％水／アセトニトリルへ、続いて１分間の５％水／アセトニトリル；０．０３％水酸化アンモニウム調節剤；流速：２．０ｍＬ／分）；ＬＣＭＳ（ＥＳ＋）４３３．２（Ｍ＋１）。
【０２４１】
Ｃ．５−（６−｛［（３，４−シス）−３−フルオロピペリジン−４−イル］オキシ｝−５−メチルピリミジン−４−イル）−１−メチル−１，４，５，６−テトラヒドロピロロ［３，４−ｃ］ピラゾール（ラセミ）の調製
【０２４２】
【化６２】
2013543885.tif 000066
上記で調製された粗製のｔｅｒｔ−ブチル（３，４−シス）−３−フルオロ−４−｛［５−メチル−６−（１−メチル−４，６−ジヒドロピロロ［３，４−ｃ］ピラゾール−５（１Ｈ）−イル）ピリミジン−４−イル］オキシ｝ピペリジン−１−カルボキシレート（１．２０ｇ）をジクロロメタン（１２ｍＬ）に溶かし、この溶液に、トリフルオロ酢酸（５ｍＬ）を加えた。反応物を室温で１時間撹拌した。溶媒を真空下で除去し、残渣を水（５０ｍＬ）および１Ｎの塩酸水溶液（１０ｍＬ）に溶かした。混合物をジクロロメタン（１０×３０ｍＬ）で抽出した。次いで、１Ｎの水酸化ナトリウム水溶液（２０ｍＬ）を加えることによって、水性層をｐＨ１２にし、ジクロロメタン（４０ｍＬ）で３回抽出した。合わせた有機抽出物をブラインで洗浄し、硫酸ナトリウム上で乾燥させ、濾過した。濾液を減圧下で濃縮して、５−（６−｛［（３，４−シス）−３−フルオロピペリジン−４−イル］オキシ｝−５−メチルピリミジン−４−イル）−１−メチル−１，４，５，６−テトラヒドロピロロ［３，４−ｃ］ピラゾール（０．７２ｇ、２ステップで６０％）を白色の固体として得、それを追加的に精製することなく使用した。
1H
NMR(500MHz, 重水素化クロロホルム) δ
1.84-2.08(m, 2H) 2.33(s, 3H) 2.69-2.84(m, 1H) 2.83-3.01(m, 1H) 3.16(d,
J=13.66Hz, 1H) 3.27-3.44(m, 1H) 3.86(s, 3H) 4.78-4.91(m, 1H) 4.86(d, J=1.95Hz,
2H) 4.88(d, J=1.95Hz, 2H) 5.21-5.32(m, 1H) 7.26(s, 1H) 8.18(s, 1H); LCMS(ES+)
333.4(M+1).
【０２４３】
実施例番号が１１で始まることに注意されたい。
【０２４４】
（実施例１１）
イソプロピル４−｛５−シアノ−４−［（２，４−ジフルオロフェノキシ）メチル］−１Ｈ−ピラゾール−１−イル｝ピペリジン−１−カルボキシレート
【０２４５】
【化６３】
2013543885.tif 000067
イソプロピル４−（５−シアノ−４−（（メチルスルホニルオキシ）メチル）−１Ｈ−ピラゾール−１−イル）ピペリジン−１−カルボキシレート（調製１０）（１６６．５ｍｇ、０．４４９ｍｍｏｌ）、２，４−ジフルオロフェノール（０．０５２ｍＬ、０．５３９ｍｍｏｌ）および炭酸セシウム（２９３ｍｇ、０．８９８ｍｍｏｌ）をマイクロ波バイアルに入れ、アセトニトリル（３ｍＬ）に溶かし、マイクロ波反応器内、摂氏１１０度で２０分間加熱した。混合物を室温に冷却し、真空下で濃縮し、１Ｎの水酸化ナトリウム溶液で希釈し、ジクロロメタンで３回抽出した。合わせた有機抽出物をブラインで洗浄し、硫酸ナトリウム上で乾燥させ、濾過し、濾液を真空下で濃縮した。Ｗａｔｅｒｓ  Ａｔｌａｎｔｉｓ  Ｃ１８カラム４．６×５０ｍｍ、０．００５ｍｍで、アセトニトリル中の水の勾配（０．０５％トリフルオロ酢酸調節剤）で溶離する分取逆相ＨＰＬＣによって粗製物質を精製して、イソプロピル４−｛５−シアノ−４−［（２，４−ジフルオロフェノキシ）メチル］−１Ｈ−ピラゾール−１−イル｝ピペリジン−１−カルボキシレートを得た。分析ＬＣＭＳ：保持時間：３．６２分（Ｗａｔｅｒｓ  Ａｔｌａｎｔｉｓ  Ｃ１８  ４．６×５０ｍｍ、０．００５ｍｍ；４．０分かけて９５％水／アセトニトリルから直線状勾配で５％水／アセトニトリルへ；０．０５％トリフルオロ酢酸調節剤；流速２．０ｍＬ／分）；ＬＣＭＳ（ＥＳ＋）：４０５．１８（Ｍ＋Ｈ）。
【０２４６】
（実施例１２）
イソプロピル４−｛５−シアノ−４−［（２−メチルフェノキシ）メチル］−１Ｈ−ピラゾール−１−イル｝ピペリジン−１−カルボキシレート
【０２４７】
【化６４】
2013543885.tif 000068
撹拌されているオルト−クレゾール（２１ｍｇ、０．１９ｍｍｏｌ）およびイソプロピル４−（５−シアノ−４−（（メチルスルホニルオキシ）メチル）−１Ｈ−ピラゾール−１−イル）ピペリジン−１−カルボキシレート（調製１０）（６０ｍｇ、０．１６ｍｍｏｌ）のアセトニトリル（１．６ｍＬ）中の溶液に、炭酸セシウム（１０６ｍｇ、０．３２ｍｍｏｌ）を加えた。混合物を１５時間還流加熱した。室温に冷却した後に、粗製物質を真空中で乾燥するまで濃縮し、残渣を水に入れ、酢酸エチル（各抽出２０ｍＬ）で３回抽出した。合わせた有機抽出物をブラインで洗浄し、硫酸ナトリウム上で乾燥させ、濾過し、濾液を真空下で乾燥するまで濃縮して、淡褐色の残渣（０．０６５ｇ、１００％）を得た。粗製の試料をジメチルスルホキシド（１ｍＬ）に溶かし、Ｗａｔｅｒｓ  Ｓｕｎｆｉｒｅ  Ｃ１８  １９×１００ｍｍ、０．００５ｍｍカラム上、８．５分で８０％水／アセトニトリルから０％水／アセトニトリルへの直線状勾配で、続いて１．５分間は０％水／アセトニトリル（０．０５％トリフルオロ酢酸調節剤）で流速：２５ｍＬ／分で溶離する分取逆相ＨＰＬＣによって精製した。分析ＬＣＭＳ：保持時間３．８２分（Ｗａｔｅｒｓ  Ａｔｌａｎｔｉｓ  Ｃ１８  ４．６×５０ｍｍ、０．００５ｍｍカラム；４．０分かけて９５％水／アセトニトリルから直線状勾配で５％水／アセトニトリルへ、続いて１分間の５％水／アセトニトリル；０．０５％トリフルオロ酢酸調節剤；流速：２．０ｍＬ／分）；ＬＣＭＳ（ＥＳ＋）３８３．２（Ｍ＋１）。
【０２４８】
（実施例１３）
１−メチルシクロプロピル４−｛５−シアノ−４−［（２，５−ジフルオロフェノキシ）メチル］−１Ｈ−ピラゾール−１−イル｝ピペリジン−１−カルボキシレート
【０２４９】
【化６５】
2013543885.tif 000069
Ａ）ｔｅｒｔ−ブチル４−（５−シアノ−４−（（２，５−ジフルオロフェノキシ）メチル）−１Ｈ−ピラゾール−１−イル）ピペリジン−１−カルボキシレート
撹拌されている２，５−ジフルオロフェノール（５４ｍｇ、０．３９ｍｍｏｌ）およびｔｅｒｔ−ブチル４−（５−シアノ−４−（（メチルスルホニルオキシ）メチル）−１Ｈ−ピラゾール−１−イル）ピペリジン−１−カルボキシレート（調製１６）（１２６ｍｇ、０．３３ｍｍｏｌ）のアセトニトリル３ｍＬ中の溶液に、炭酸セシウム（２１４ｍｇ、０．６６ｍｍｏｌ）を加えた。混合物を１５時間還流加熱した。混合物を室温に冷却し、酢酸エチルおよび水で希釈した。層を分離し、水性相を酢酸エチルで抽出した。合わせた有機相をブラインで洗浄し、硫酸マグネシウム上で乾燥させ、濾過し、濾液を真空濃縮して、ｔｅｒｔ−ブチル４−（５−シアノ−４−（（２，５−ジフルオロフェノキシ）メチル）−１Ｈ−ピラゾール−１−イル）ピペリジン−１−カルボキシレートを得、これを精製することなく、次のステップで使用した。
【０２５０】
Ｂ）４−（（２，５−ジフルオロフェノキシ）メチル）−１−（ピペリジン−４−イル）−１Ｈ−ピラゾール−５−カルボニトリル
ｔｅｒｔ−ブチル４−（５−シアノ−４−（（２，５−ジフルオロフェノキシ）メチル）−１Ｈ−ピラゾール−１−イル）ピペリジン−１−カルボキシレート（１３７ｍｇ、０．３３ｍｍｏｌ）のジクロロメタン５ｍＬ中の溶液に、塩酸０．８２ｍＬ（１，４−ジオキサン中４Ｍ）を加えた。混合物を室温で２時間撹拌し、その後、混合物を真空濃縮して、４−（（２，５−ジフルオロフェノキシ）メチル）−１−（ピペリジン−４−イル）−１Ｈ−ピラゾール−５−カルボニトリルを得、これを精製することなく、次のステップで使用した。
【０２５１】
Ｃ）１−メチルシクロプロピル４−｛５−シアノ−４−［（２，５−ジフルオロフェノキシ）メチル］−１Ｈ−ピラゾール−１−イル｝ピペリジン−１−カルボキシレート
撹拌されている４−（（２，５−ジフルオロフェノキシ）メチル）−１−（ピペリジン−４−イル）−１Ｈ−ピラゾール−５−カルボニトリル（１０４ｍｇ、０．３３ｍｍｏｌ）のジクロロメタン３．３ｍＬ中の溶液に、トリエチルアミン（０．１８ｍＬ、１．３ｍｍｏｌ）を、続いて１−メチルシクロプロピル４−ニトロフェニルカルボネート（調製２６およびＷＯ０９１０５７１７を参照されたい）（１７１ｍｇ、０．７２ｍｍｏｌ）を室温で加えた。生じた明黄色の混合物を窒素雰囲気下で１５時間撹拌した。反応混合物をジクロロメタンおよび水で希釈した。層を分離し、水性相をジクロロメタンで抽出した。合わせた有機相を飽和重炭酸ナトリウム水溶液、ブラインで洗浄し、硫酸マグネシウム上で乾燥させ、濾過し、濾液を真空濃縮して、粗製物質２２５ｍｇを得た。この物質のうちの一部（４５ｍｇ）をジメチルスルホキシド（０．９ｍＬ）に溶かし、Ｗａｔｅｒｓ  ＸＢｒｉｄｇｅ  Ｃ１８カラム  １９×１００ｍｍ、０．００５カラムで、アセトニトリル中の水の勾配（０．０３％水酸化アンモニウム調節剤）で溶離する分取逆相ＨＰＬＣによって精製した。分析ＬＣＭＳ：保持時間３．６０分（Ａｔｌａｎｔｉｓ  Ｃ１８  ４．６×５０ｍｍ、５マイクロメートルカラム；４分かけて９５％水／アセトニトリルから直線状勾配で５％水／アセトニトリルへ；０．０５％トリフルオロ酢酸調節剤；流速２．０ｍＬ／分；ＬＣＭＳ（ＥＳ＋）：４１７．１（Ｍ＋１）。
【０２５２】
（実施例１４）
１−メチルシクロプロピル４−｛５−シアノ−４−［（２，３−ジフルオロフェノキシ）メチル］−１Ｈ−ピラゾール−１−イル｝ピペリジン−１−カルボキシレート
【０２５３】
【化６６】
2013543885.tif 000070
実施例１３と同様の手順に従って、市販の２，３−ジフルオロフェノールを使用し、表題化合物を調製した。粗製物質（４９ｍｇ）をジメチルスルホキシド（０．９ｍＬ）に溶かし、Ｗａｔｅｒｓ  ＸＢｒｉｄｇｅ  Ｃ１８カラム  １９×１００ｍｍ、０．００５カラムで、アセトニトリル中の水の勾配（０．０３％水酸化アンモニウム調節剤）で溶離する分取逆相ＨＰＬＣによって精製した。分析ＬＣＭＳ：保持時間３．６２分（Ａｔｌａｎｔｉｓ  Ｃ１８  ４．６×５０ｍｍ、５マイクロメートルカラム；４分かけて９５％水／アセトニトリルから直線状勾配で５％水／アセトニトリルへ；０．０５％トリフルオロ酢酸調節剤；流速２．０ｍＬ／分；ＬＣＭＳ（ＥＳ＋）：４１７．２（Ｍ＋Ｈ）。
【０２５４】
（実施例１５）
１−メチルシクロプロピル４−｛４−［（４−カルバモイル−２−フルオロフェノキシ）メチル］−５−シアノ−１Ｈ−ピラゾール−１−イル｝ピペリジン−１−カルボキシレート
【０２５５】
【化６７】
2013543885.tif 000071
Ａ）ｔｅｒｔ−ブチル４−（４−（（４−カルバモイル−２−フルオロフェノキシ）メチル）−５−シアノ−１Ｈ−ピラゾール−１−イル）ピペリジン−１−カルボキシレート
撹拌されているｔｅｒｔ−ブチル４−（５−シアノ−４−（ヒドロキシメチル）−１Ｈ−ピラゾール−１−イル）ピペリジン−１−カルボキシレート（調製１５）（２００ｍｇ、０．６５ｍｍｏｌ）、３−フルオロ−４−ヒドロキシベンズアミド（調製２３）（１００ｍｇ、０．６４ｍｍｏｌ）およびトリフェニルホスフィン（１８８ｍｇ、０．７２ｍｍｏｌ）の１，４−ジオキサン３ｍＬ中の溶液に、ジエチルアゾジカルボキシレート（０．１１ｍＬ、０．６９ｍｍｏｌ）を滴下添加した。生じた混合物を室温で一晩撹拌し、その後、混合物を真空濃縮した。残渣をヘプタン中３０から７０％の酢酸エチルの勾配で溶離するフラッシュクロマトグラフィーによって精製して、ｔｅｒｔ−ブチル４−（４−（（４−カルバモイル−２−フルオロフェノキシ）メチル）−５−シアノ−１Ｈ−ピラゾール−１−イル）ピペリジン−１−カルボキシレートを白色の固体（２１５ｍｇ）として得た。
【０２５６】
Ｂ）４−（（５−シアノ−１−（ピペリジン−４−イル）−１Ｈ−ピラゾール−４−イル）メトキシ）−３−フルオロベンズアミド
撹拌されているｔｅｒｔ−ブチル４−（４−（（４−カルバモイル−２−フルオロフェノキシ）メチル）−５−シアノ−１Ｈ−ピラゾール−１−イル）ピペリジン−１−カルボキシレート（２１５ｍｇ、０．４８ｍｍｏｌ）のジクロロメタン２ｍＬ中の溶液に、トリフルオロ酢酸１ｍＬを室温で加えた。１時間後に、溶液を真空濃縮した。２％アンモニア水）を含有するジクロロメタン中１から１５％のメタノールの勾配混合物で溶離するフラッシュクロマトグラフィーによって残渣を精製して、４−（（５−シアノ−１−（ピペリジン−４−イル）−１Ｈ−ピラゾール−４−イル）メトキシ）−３−フルオロベンズアミドを白色の固体（１５０ｍｇ）として得た。
【０２５７】
Ｃ）１−メチルシクロプロピル４−｛４−［（４−カルバモイル−２−フルオロフェノキシ）メチル］−５−シアノ−１Ｈ−ピラゾール−１−イル｝ピペリジン−１−カルボキシレート
撹拌されている４−（（５−シアノ−１−（ピペリジン−４−イル）−１Ｈ−ピラゾール−４−イル）メトキシ）−３−フルオロベンズアミド（４０ｍｇ、０．１２ｍｍｏｌ）のジクロロメタン１ｍＬ中の溶液に、トリエチルアミン（０．０３６ｍＬ、０．２６ｍｍｏｌ）を、続いて１−メチルシクロプロピル４−ニトロフェニルカルボネート（調製２６およびＷＯ０９１０５７１７）（６０ｍｇ、０．２６ｍｍｏｌ）を室温で加えた。生じた明黄色の混合物を窒素雰囲気下、摂氏６５度で２時間撹拌した。反応物を室温に冷却し、水で希釈し、ジクロロメタンで２回抽出した。合わせた有機抽出物を飽和重炭酸ナトリウムで洗浄し、硫酸ナトリウム上で乾燥させ、濾過し、濾液を真空濃縮した。ヘプタン中４０から９０％の酢酸エチルの勾配で溶離するフラッシュクロマトグラフィーによって残渣を精製して、１−メチルシクロプロピル４−｛４−［（４−カルバモイル−２−フルオロフェノキシ）メチル］−５−シアノ−１Ｈ−ピラゾール−１−イル｝ピペリジン−１−カルボキシレートを白色の固体（３４ｍｇ）として得た。1H NMR(400MHz, 重水素化クロロホルム) δ 0.59-0.67(m, 2H), 0.83-0.92(m, 2H),
1.54(s, 3H), 2.02(d, J=4.10Hz, 2H), 2.04-2.22(m, 2H), 2.91(br. s., 2H),
4.11-4.43(m, 2H), 4.44-4.55(m, 1H), 5.15(s, 2H), 7.03-7.10(m, 1H), 7.52-7.62(m,
2H), 7.68(s, 1H).１Ｈ  ＮＭＲは、１０％未満の対応するイソプロピルカルバメート誘導体であると考えられるもの（１−メチルシクロプロピル４−ニトロフェニルカルボネートに混入しているイソプロピル４−ニトロフェニルカルボネートに由来）の存在を示した。ＬＣＭＳ（ＥＳ）４４２．４（Ｍ＋１）。
【０２５８】
（実施例１６）
１−メチルシクロプロピル４−｛４−［（４−カルバモイルフェノキシ）メチル］−５−シアノ−１Ｈ−ピラゾール−１−イル｝ピペリジン−１−カルボキシレート
【０２５９】
【化６８】
2013543885.tif 000072
実施例１５と同様の手順に従って、市販の４−ヒドロキシベンズアミドを使用し、表題化合物を調製した。1H NMR(400MHz, 重水素化クロロホルム) δ 0.57-0.67(m, 2H), 0.84-0.91(m, 2H),
1.56(s, 3H), 1.93-2.05(m, 2H), 2.05-2.19(m, 2H), 2.91(t, J=15.62Hz, 2H),
4.26(br. s., 2H), 4.44-4.55(m, 1H), 5.09(s, 2H), 6.96-7.04(m, 2H), 7.66(s, 1H),
7.75-7.82(m, 2H).１Ｈ  ＮＭＲは、１０％未満の対応するイソプロピルカルバメート誘導体であると考えられるもの（１−メチルシクロプロピル４−ニトロフェニルカルボネートに混入しているイソプロピル４−ニトロフェニルカルボネートに由来）の存在を示した。ＬＣＭＳ（ＥＳ）４２４．４（Ｍ＋１）。
【０２６０】
（実施例１７）
１−メチルシクロプロピル４−（５−シアノ−４−（（４−シアノフェノキシ）メチル）−１Ｈ−ピラゾール−１−イル）ピペリジン−１−カルボキシレート
【０２６１】
【化６９】
2013543885.tif 000073
実施例１５と同様の手順に従って、市販の４−ヒドロキシベンゾニトリルを使用し、表題化合物を調製した。ヘプタン中の酢酸エチルの勾配混合物（０から１００％酢酸エチル）で溶離するフラッシュクロマトグラフィーによって粗製の反応混合物の精製を行った。1H NMR(500MHz, 重水素化クロロホルム) δ 0.60-0.70(m, 2H), 0.84-0.94(m, 2H), 1.23-1.31(m, 1H), 1.56(s, 3H),
2.01-2.15(m, 4H), 2.93(m, 2H), 4.11-4.37(m, 1H), 4.49-4.55(m, 1H), 5.10(s, 2H),
7.03(d, J=8.78Hz, 2H), 7.63(d, J=8.78Hz, 2H), 7.67(s, 1H).
【０２６２】
（実施例１８）
イソプロピル４−（４−（（４−（１Ｈ−ピラゾール−１−イル）フェノキシ）メチル）−５−シアノ−１Ｈ−ピラゾール−１−イル）ピペリジン−１−カルボキシレート
【０２６３】
【化７０】
2013543885.tif 000074
実施例１２と同様の手順に従って、４−（１Ｈ−ピラゾール−１−イル）フェノール（ＷＯ２００３０７２５４７）を使用して、表題化合物を調製した。ヘプタン中の酢酸エチルの勾配混合物（０から１００％酢酸エチル）で溶離するフラッシュクロマトグラフィーによって、粗製の反応混合物の精製を行った。1H NMR(500MHz, 重水素化クロロホルム) δ 1.28(d, J=6.34Hz, 6H), 2.01-2.09(m, 2H), 2.17(m, 2H), 2.91-2.99(m,
2H), 4.37(m, 2H), 4.50-4.58(m, 1H), 4.93-4.98(m, 1H), 5.11(s, 2H), 6.47(t,
J=2.07Hz, 1H), 7.07(d, J=9.03Hz, 2H), 7.64(d, J=9.03Hz, 2H), 7.70(s, 1H),
7.72(d, J=1.71Hz, 1H), 7.86(d, J=2.44Hz, 1H). LCMS (ES) 435.4(M+1).
【０２６４】
（実施例１９）
イソプロピル４−（５−シアノ−４−（（２−フルオロ−４−（１Ｈ−テトラゾール−５−イル）フェノキシ）メチル）−１Ｈ−ピラゾール−１−イル）ピペリジン−１−カルボキシレートおよびイソプロピル４−（５−シアノ−４−（（２−フルオロ−４−（２Ｈ−テトラゾール−５−イル）フェノキシ）メチル）−１Ｈ−ピラゾール−１−イル）ピペリジン−１−カルボキシレート
【０２６５】
【化７１】
2013543885.tif 000075
Ａ）イソプロピル４−（５−シアノ−４−（（２−フルオロ−４−（１−（（２−（トリメチルシリル）エトキシ）メチル）−１Ｈ−テトラゾール−５−イル）フェノキシ）メチル）−１Ｈ−ピラゾール−１−イル）ピペリジン−１−カルボキシレートおよびイソプロピル４−（５−シアノ−４−（（２−フルオロ−４−（２−（（２−（トリメチルシリル）エトキシ）メチル）−２Ｈ−テトラゾール−５−イル）フェノキシ）メチル）−１Ｈ−ピラゾール−１−イル）ピペリジン−１−カルボキシレート
撹拌されているイソプロピル４−（５−シアノ−４−（ヒドロキシメチル）−１Ｈ−ピラゾール−１−イル）ピペリジン−１−カルボキシレート（９４ｍｇ、０．３２２ｍｍｏｌ）、２−フルオロ−４−（１−（（２−（トリメチルシリル）エトキシ）メチル）−１Ｈ−テトラゾール−５−イル）フェノールおよび２−フルオロ−４−（２−（（２−（トリメチルシリル）エトキシ）メチル）−２Ｈ−テトラゾール−５−イル）フェノール（調製１７）（１００ｍｇ、０．３２２ｍｍｏｌ）およびトリフェニルホスフィン（１１０ｍｇ、０．４２ｍｍｏｌ）の１，４−ジオキサン５ｍＬ中の溶液に、ジエチルアゾジカルボキシレート（０．０６０ｍＬ、０．３９ｍｍｏｌ）を加えた。生じた混合物を室温で一晩撹拌し、その後、混合物を真空濃縮した。ヘプタン中１０から４０％の酢酸エチルの勾配で溶離するフラッシュクロマトグラフィーによって残渣を精製して、イソプロピル４−（５−シアノ−４−（（２−フルオロ−４−（１−（（２−（トリメチルシリル）エトキシ）メチル）−１Ｈ−テトラゾール−５−イル）フェノキシ）メチル）−１Ｈ−ピラゾール−１−イル）ピペリジン−１−カルボキシレートおよびイソプロピル４−（５−シアノ−４−（（２−フルオロ−４−（２−（（２−（トリメチルシリル）エトキシ）メチル）−２Ｈ−テトラゾール−５−イル）フェノキシ）メチル）−１Ｈ−ピラゾール−１−イル）ピペリジン−１−カルボキシレート（１４０ｍｇ、収率７４％）を得た。
イソプロピル４−（５−シアノ−４−（（２−フルオロ−４−（２−（（２−（トリメチルシリル）エトキシ）メチル）−２Ｈ−テトラゾール−５−イル）フェノキシ）メチル）−１Ｈ−ピラゾール−１−イル）ピペリジン−１−カルボキシレート。1H NMR(400MHz, 重水素化クロロホルム) δ -0.05-0.01(m, 9H), 0.90-1.00(m, 2H),
1.18-1.27(m, 6H), 2.02(br. s., 2H), 2.13(m, 2H) 2.93(br. s., 2H), 3.65-3.78(m,
2H), 4.30(d, J=7.22Hz, 2H), 4.46-4.58(m, 1H), 4.86-4.98(m, 1H), 5.16(s, 2H),
5.89(s, 2H), 7.09-7.18(m, 1H), 7.69(s, 1H), 7.88-7.96(m, 2H). LCMS (ES)
585.1(M+1).
【０２６６】
Ｂ）イソプロピル４−（５−シアノ−４−（（２−フルオロ−４−（１Ｈ−テトラゾール−５−イル）フェノキシ）メチル）−１Ｈ−ピラゾール−１−イル）ピペリジン−１−カルボキシレートおよびイソプロピル４−（５−シアノ−４−（（２−フルオロ−４−（２Ｈ−テトラゾール−５−イル）フェノキシ）メチル）−１Ｈ−ピラゾール−１−イル）ピペリジン−１−カルボキシレート
イソプロピル４−（５−シアノ−４−（（２−フルオロ−４−（１−（（２−（トリメチルシリル）エトキシ）メチル）−１Ｈ−テトラゾール−５−イル）フェノキシ）メチル）−１Ｈ−ピラゾール−１−イル）ピペリジン−１−カルボキシレートおよびイソプロピル４−（５−シアノ−４−（（２−フルオロ−４−（２−（（２−（トリメチルシリル）エトキシ）メチル）−２Ｈ−テトラゾール−５−イル）フェノキシ）メチル）−１Ｈ−ピラゾール−１−イル）ピペリジン−１−カルボキシレート（２２０ｍｇ、０．３８ｍｍｏｌ）をエタノール（３ｍＬ）に溶かし、２Ｍの塩酸水溶液（３ｍＬ）を滴下添加した。生じた混合物を摂氏５０度で４時間撹拌し、その後、室温に冷却し、濾過した。生じた白色の固体を酢酸エチルおよびヘプタン（１／１の体積）で洗浄し、減圧下で乾燥させて、表題化合物（８０ｍｇ、収率４７％）を得た。1H NMR(400MHz, 重水素化ジメチルスルホキシド) δ 1.16(d, J=6.25Hz, 6H), 1.76-1.90(m, 2H),
1.98(dd, J=14.45, 3.12Hz, 2H), 2.99(br. s., 2H), 4.04(d, J=15.81Hz, 2H),
4.59-4.71(m, 1H), 4.70-4.82(m, 1H), 5.27(s, 2H), 7.47-7.57(m, 1H), 7.80-7.83(m,
1H), 7.83-7.87(m, 1H), 7.90(s, 1H). LCMS (ES) 455.0(M+1).
【０２６７】
（実施例２０）
イソプロピル４−（５−シアノ−４−（（２−フルオロ−４−（１−メチル−１Ｈ−テトラゾール−５−イル）フェノキシ）メチル）−１Ｈ−ピラゾール−１−イル）ピペリジン−１−カルボキシレートおよび
（実施例２１）
イソプロピル４−（５−シアノ−４−（（２−フルオロ−４−（２−メチル−２Ｈ−テトラゾール−５−イル）フェノキシ）メチル）−１Ｈ−ピラゾール−１−イル）ピペリジン−１−カルボキシレート
【０２６８】
【化７２】
2013543885.tif 000076
室温のイソプロピル４−（５−シアノ−４−（（２−フルオロ−４−（１Ｈ−テトラゾール−５−イル）フェノキシ）メチル）−１Ｈ−ピラゾール−１−イル）ピペリジン−１−カルボキシレートおよびイソプロピル４−（５−シアノ−４−（（２−フルオロ−４−（２Ｈ−テトラゾール−５−イル）フェノキシ）メチル）−１Ｈ−ピラゾール−１−イル）ピペリジン−１−カルボキシレート（７０ｍｇ、０．１５ｍｍｏｌ）のテトラヒドロフラン（２ｍＬ）中の溶液に、水素化ナトリウム（１４ｍｇ、０．３１ｍｍｏｌ）を２回に分けて加え、生じた混合物を５分間撹拌した。次いで、ヨードメタン（０．０３ｍＬ、０．４６ｍｍｏｌ）を加え、反応混合物を室温でさらに１６時間撹拌した。水を加えることによって反応物をクエンチし、混合物を酢酸エチルで希釈した。有機相を分離し、水性相を酢酸エチルで２回抽出した。合わせた有機抽出物をブラインで洗浄し、硫酸マグネシウム上で乾燥させ、濾過し、濾液を真空濃縮した。ヘプタン中の酢酸エチルの勾配混合物（３０から６０％酢酸エチル）で溶離するフラッシュシリカゲルクロマトグラフィーによって残渣を精製して、イソプロピル４−（５−シアノ−４−（（２−フルオロ−４−（１−メチル−１Ｈ−テトラゾール−５−イル）フェノキシ）メチル）−１Ｈ−ピラゾール−１−イル）ピペリジン−１−カルボキシレート（１０ｍｇ、収率１４％）およびイソプロピル４−（５−シアノ−４−（（２−フルオロ−４−（２−メチル−２Ｈ−テトラゾール−５−イル）フェノキシ）メチル）−１Ｈ−ピラゾール−１−イル）ピペリジン−１−カルボキシレート（３０ｍｇ、収率４２％）を得た。
イソプロピル４−（５−シアノ−４−（（２−フルオロ−４−（１−メチル−１Ｈ−テトラゾール−５−イル）フェノキシ）メチル）−１Ｈ−ピラゾール−１−イル）ピペリジン−１−カルボキシレート（実施例２０）。1H NMR(400MHz, 重水素化クロロホルム) δ 1.18-1.28(m, 6H), 1.95-2.06(m, 2H),
2.13(m, 2H), 2.85-3.02(m, 2H), 4.17(s, 3H), 4.36(d, J=10.15Hz, 2H),
4.46-4.57(m, 1H) 4.92(七重線, 1H), 5.19(s, 2H),
7.17-7.24(m, 1H), 7.48-7.58(m, 2H), 7.70(s, 1H). LCMS (ES) 469.0(M+1).
イソプロピル４−（５−シアノ−４−（（２−フルオロ−４−（２−メチル−２Ｈ−テトラゾール−５−イル）フェノキシ）メチル）−１Ｈ−ピラゾール−１−イル）ピペリジン−１−カルボキシレート（実施例２１）。1H NMR(400MHz, 重水素化クロロホルム) δ 1.24(d, J=6.25Hz, 6H) 1.95-2.05(m, 2H)
2.13(m, 2H) 2.93(t, J=12.59Hz, 2H) 4.31(br. s., 2H) 4.37(s, 3H) 4.51(m, 1H) 4.92(m,
1H) 5.16(s, 2H) 7.09-7.16(m, 1H) 7.69(s, 1H) 7.83-7.87(m, 1H) 7.87-7.90(m, 1H).
LCMS (ES) 469.0(M+1).
【０２６９】
（実施例２２）
イソプロピル４−（５−シアノ−４−（（２−フルオロ−４−（２−（２−ヒドロキシエチル）−２Ｈ−テトラゾール−５−イル）フェノキシ）メチル）−１Ｈ−ピラゾール−１−イル）ピペリジン−１−カルボキシレート
【０２７０】
【化７３】
2013543885.tif 000077
Ａ）イソプロピル４−（５−シアノ−４−（（２−フルオロ−４−（２−（２−（トリメチルシリルオキシ）エチル）−２Ｈ−テトラゾール−５−イル）フェノキシ）メチル）−１Ｈ−ピラゾール−１−イル）ピペリジン−１−カルボキシレート
撹拌されているイソプロピル４−（５−シアノ−４−（ヒドロキシメチル）−１Ｈ−ピラゾール−１−イル）ピペリジン−１−カルボキシレート（調製５）（７８ｍｇ、０．２６６ｍｍｏｌ）、２−フルオロ−４−（２−（２−（トリメチルシリルオキシ）エチル）−２Ｈ−テトラゾール−５−イル）フェノール（調製１９）（９０ｍｇ、０．２７ｍｍｏｌ）およびトリフェニルホスフィン（７７ｍｇ、０．２９ｍｍｏｌ）の１，４−ジオキサン５ｍＬ中の溶液に、ジエチルアゾジカルボキシレート（０．０４６ｍＬ、０．２８ｍｍｏｌ）を滴下添加した。生じた混合物を室温で１５時間撹拌し、その後、混合物を真空濃縮した。ヘプタン中５から４０％の酢酸エチルの勾配で溶離するフラッシュクロマトグラフィーによって残渣を精製して、イソプロピル４−（５−シアノ−４−（（２−フルオロ−４−（２−（２−（トリメチルシリルオキシ）エチル）−２Ｈ−テトラゾール−５−イル）フェノキシ）メチル）−１Ｈ−ピラゾール−１−イル）ピペリジン−１−カルボキシレート（１４０ｍｇ、収率８６％）を得た。
【０２７１】
Ｂ）イソプロピル４−（５−シアノ−４−（（２−フルオロ−４−（２−（２−ヒドロキシエチル）−２Ｈ−テトラゾール−５−イル）フェノキシ）メチル）−１Ｈ−ピラゾール−１−イル）ピペリジン−１−カルボキシレート
イソプロピル４−（５−シアノ−４−（（２−フルオロ−４−（２−（２−（トリメチルシリルオキシ）エチル）−２Ｈ−テトラゾール−５−イル）フェノキシ）メチル）−１Ｈ−ピラゾール−１−イル）ピペリジン−１−カルボキシレート（１４０ｍｇ、０．２２８ｍｍｏｌ）をメタノール（２ｍＬ）に溶かし、１，４−ジオキサン中４Ｍの塩酸溶液（１ｍＬ）を滴下添加した。生じた混合物を室温で２時間撹拌し、その後、減圧下で濃縮した。残渣（１６０ｍｇ）を分け、粗製物のうちの約５０ｍｇを逆相ＨＰＬＣによって精製して、表題化合物（３０ｍｇ、２６％）を得た（カラム：Ｗａｔｅｒｓ  ＸＢｒｉｄｇｅ  Ｃ１８  １９×１００、５マイクロメートル；移動相Ａ：水中０．０３％の水酸化アンモニウム（ｖ／ｖ）；移動相Ｂ：アセトニトリル中０．０３％の水酸化アンモニウム（ｖ／ｖ）；勾配：８．５分で８５％水／１５％アセトニトリルから直線状に０％水／１００％アセトニトリルへ、１０．０分まで０％水／１００％アセトニトリルで保持。流速：２５ｍＬ／分。検出：２１５ｎｍ。ＬＣＭＳ（ＥＳ＋）：４９９．５（Ｍ＋１）。
【０２７２】
（実施例２３）
イソプロピル４−（５−シアノ−４−（（２−フルオロ−４−（１−（２−ヒドロキシエチル）−１Ｈ−テトラゾール−５−イル）フェノキシ）メチル）−１Ｈ−ピラゾール−１−イル）ピペリジン−１−カルボキシレート
【０２７３】
【化７４】
2013543885.tif 000078
Ａ）イソプロピル４−（５−シアノ−４−（（２−フルオロ−４−（１−（２−（トリメチルシリルオキシ）エチル）−１Ｈ−テトラゾール−５−イル）フェノキシ）メチル）−１Ｈ−ピラゾール−１−イル）ピペリジン−１−カルボキシレート
撹拌されているイソプロピル４−（５−シアノ−４−（ヒドロキシメチル）−１Ｈ−ピラゾール−１−イル）ピペリジン−１−カルボキシレート（４３ｍｇ、０．１５ｍｍｏｌ）、２−フルオロ−４−（１−（２−（トリメチルシリルオキシ）エチル）−１Ｈ−テトラゾール−５−イル）フェノール（調製２０）（５０ｍｇ、０．１５ｍｍｏｌ）およびトリフェニルホスフィン（４３ｍｇ、０．１６ｍｍｏｌ）の１，４−ジオキサン３ｍＬ中の溶液に、ジエチルアゾジカルボキシレート（０．０２５ｍＬ、０．１６ｍｍｏｌ）を滴下添加した。生じた混合物を室温で一晩撹拌し、その後、混合物を真空濃縮した。ヘプタン中３０から７０％の酢酸エチルの勾配で溶離するフラッシュクロマトグラフィーによって残渣を精製して、イソプロピル４−（５−シアノ−４−（（２−フルオロ−４−（１−（２−（トリメチルシリルオキシ）エチル）−１Ｈ−テトラゾール−５−イル）フェノキシ）メチル）−１Ｈ−ピラゾール−１−イル）ピペリジン−１−カルボキシレート（５０ｍｇ、収率５５％）を得た。
【０２７４】
Ｂ）イソプロピル４−（５−シアノ−４−（（２−フルオロ−４−（１−（２−ヒドロキシエチル）−１Ｈ−テトラゾール−５−イル）フェノキシ）メチル）−１Ｈ−ピラゾール−１−イル）ピペリジン−１−カルボキシレート
イソプロピル４−（５−シアノ−４−（（２−フルオロ−４−（１−（２−（トリメチルシリルオキシ）エチル）−１Ｈ−テトラゾール−５−イル）フェノキシ）メチル）−１Ｈ−ピラゾール−１−イル）ピペリジン−１−カルボキシレート（５０ｍｇ、０．０８２ｍｍｏｌ）をメタノール（２ｍＬ）に溶かし、１，４−ジオキサン中４Ｍの塩酸溶液（１ｍＬ）を滴下添加した。生じた混合物を室温で２時間撹拌し、その後、減圧下で濃縮した。残渣（６０ｍｇ）を逆相ＨＰＬＣによって精製して、表題化合物（２０ｍｇ、収率４９％）を得た（カラム：Ｗａｔｅｒｓ  ＸＢｒｉｄｇｅ  Ｃ１８  １９×１００、５マイクロメートル；移動相Ａ：水中０．０３％の水酸化アンモニウム（ｖ／ｖ）；移動相Ｂ：アセトニトリル中０．０３％の水酸化アンモニウム（ｖ／ｖ）；勾配：８．５分で８０％水／２０％アセトニトリルから直線状に０％水／１００％アセトニトリルへ、１０．０分まで０％水／１００％アセトニトリルで保持。流速：２５ｍＬ／分。検出：２１５ｎｍ
ＬＣＭＳ（ＥＳ＋）：４９９．４（Ｍ＋１）。
【０２７５】
（実施例２４）
１−メチルシクロプロピル４−（５−シアノ−４−｛［２−フルオロ−４−（１−メチル−１Ｈ−テトラゾール−５−イル）フェノキシ］メチル｝−１Ｈ−ピラゾール−１−イル）ピペリジン−１−カルボキシレート
【０２７６】
【化７５】
2013543885.tif 000079
実施例１５と同様の手順に従って、２−フルオロ−４−（１−メチル−１Ｈ−テトラゾール−５−イル）フェノール（調製２１）を使用して、表題化合物を調製した。1H NMR(400MHz, 重水素化クロロホルム) δ 0.58-0.67(m, 2H), 0.83-0.92(m, 2H),
1.57(s, 3H), 1.94-2.05(m, 2H), 2.05-2.21(m, 2H), 2.92(t, J=12.98Hz, 2H),
4.17(s, 3H), 4.32(br. s., 2H), 4.43-4.56(m, 1H), 5.19(s, 2H), 7.17-7.24(m, 1H),
7.48-7.58(m, 2H), 7.70(s, 1H).１Ｈ  ＮＭＲは、１０％未満の対応するイソプロピルカルバメート誘導体であると考えられるもの（１−メチルシクロプロピル４−ニトロフェニルカルボネートに混入しているイソプロピル４−ニトロフェニルカルボネートに由来）の存在を示した。ＬＣＭＳ（ＥＳ）４８１．６（Ｍ＋１）。
【０２７７】
（実施例２５）
１−メチルシクロプロピル４−（５−シアノ−４−｛［４−（１−メチル−１Ｈ−テトラゾール−５−イル）フェノキシ］メチル｝−１Ｈ−ピラゾール−１−イル）ピペリジン−１−カルボキシレート
【０２７８】
【化７６】
2013543885.tif 000080
実施例１５と同様の手順に従って、４−（１−メチル−１Ｈ−テトラゾール−５−イル）フェノール（調製２２）を使用して、表題化合物を調製した。
1H
NMR(400MHz, 重水素化クロロホルム) δ
0.60-0.67(m, 2H), 0.83-0.91(m, 2H), 1.58(s, 3H), 1.96-2.06(m, 2H), 2.06-2.21(m,
2H), 2.84-3.00(m, 2H), 4.16(s, 3H), 4.33(br. s., 2H), 4.45-4.57(m, 1H), 5.12(s,
2H), 7.10-7.15(m, 2H), 7.68(s, 1H), 7.69-7.74(m, 2H).１Ｈ  ＮＭＲは、１０％未満の対応するイソプロピルカルバメート誘導体であると考えられるもの（１−メチルシクロプロピル４−ニトロフェニルカルボネートに混入しているイソプロピル４−ニトロフェニルカルボネートに由来）の存在を示した。ＬＣＭＳ（ＥＳ）４６３．５（Ｍ＋１）。
【０２７９】
（実施例２６）
１−メチルシクロプロピル４−（４−（（４−カルバモイル−３−フルオロフェノキシ）メチル）−５−シアノ−１Ｈ−ピラゾール−１−イル）ピペリジン−１−カルボキシレート
【０２８０】
【化７７】
2013543885.tif 000081
実施例１３と同様の手順に従って、２−フルオロ−４−ヒドロキシベンズアミド（調製２４）を使用して、表題化合物を調製した。1H NMR(400MHz, 重水素化クロロホルム) δ 0.57-0.65(m, 2H), 0.82-0.89(m, 2H),
1.53(s, 3H), 1.92-2.04(m, 2H), 2.10(qd, J=12.14, 4.20Hz, 2H), 2.90(br. s., 2H),
4.32(br. s., 2H), 4.49(tt, J=11.25, 4.37Hz, 1H), 5.02-5.09(m, 2H), 6.00(br. s.,
1H), 6.51-6.64(m, 1H), 6.69(dd, J=13.66, 2.54Hz, 1H), 6.84(dd, J=8.78, 2.54Hz,
1H), 7.64(s, 1H), 8.07(t, J=9.08Hz, 1H).１Ｈ  ＮＭＲは、１０％未満の対応するイソプロピルカルバメート誘導体であると考えられるもの（１−メチルシクロプロピル４−ニトロフェニルカルボネートに混入しているイソプロピル４−ニトロフェニルカルボネートに由来）の存在を示した。ＬＣＭＳ（ＥＳ）４４２．４（Ｍ＋１）。
【０２８１】
（実施例２７）
イソプロピル４−（５−シアノ−４−｛１−［２−フルオロ−４−（メチルスルホニル）フェノキシ］エチル｝−１Ｈ−ピラゾール−１−イル）ピペリジン−１−カルボキシレート
【０２８２】
【化７８】
2013543885.tif 000082
実施例１５と同様の手順に従って、２−フルオロ−４−（メチルスルホニル）フェノールおよびイソプロピル４−（５−シアノ−４−（１−ヒドロキシエチル）−１Ｈ−ピラゾール−１−イル）ピペリジン−１−カルボキシレート（調製２５）を使用して、表題化合物を調製した。試料を逆相ＨＰＬＣによって精製した（カラム：Ｗａｔｅｒｓ  ＸＢｒｉｄｇｅ  Ｃ１８  １９×１００、５マイクロメートル；移動相Ａ：水中０．０３％の水酸化アンモニウム（ｖ／ｖ）；移動相Ｂ：アセトニトリル中０．０３％の水酸化アンモニウム（ｖ／ｖ）；勾配：８．５分で８０％水／２０％アセトニトリルから直線状に０％水／１００％アセトニトリルへ、１０．０分まで０％水／１００％アセトニトリルで保持。流速：２５ｍＬ／分。ＬＣＭＳ（ＥＳ＋）：４７９．２  Ｍ＋１）。
【０２８３】
（実施例２８）
イソプロピル４−（５−シアノ−４−｛１−［（２−メチルピリジン−３−イル）オキシ］エチル｝−１Ｈ−ピラゾール−１−イル）ピペリジン−１−カルボキシレート
【０２８４】
【化７９】
2013543885.tif 000083
実施例１５と同様の手順に従って、２−メチルピリジン−３−オールおよびイソプロピル４−（５−シアノ−４−（１−ヒドロキシエチル）−１Ｈ−ピラゾール−１−イル）ピペリジン−１−カルボキシレート（調製２５）を使用して、表題化合物を調製した。試料を逆相ＨＰＬＣによって精製した（カラム：Ｗａｔｅｒｓ  ＸＢｒｉｄｇｅ  Ｃ１８  １９×１００、５マイクロメートル；移動相Ａ：水中０．０３％の水酸化アンモニウム（ｖ／ｖ）；移動相Ｂ：アセトニトリル中０．０３％の水酸化アンモニウム（ｖ／ｖ）；勾配：８．５分で８５％水／１５％アセトニトリルから直線状に０％水／１００％アセトニトリルへ、１０．０分まで０％水／１００％アセトニトリルで保持。流速：２５ｍＬ／分。ＬＣＭＳ（ＥＳ＋）：３９８．２  Ｍ＋１）。
【０２８５】
（実施例２９）
イソプロピル４−（５−シアノ−４−｛２−［２−フルオロ−４−（メチルスルホニル）フェニル］プロピル｝−１Ｈ−ピラゾール−１−イル）ピペリジン−１−カルボキシレート
【０２８６】
【化８０】
2013543885.tif 000084
Ａ）イソプロピル４−（５−シアノ−４−ビニル−１Ｈ−ピラゾール−１−イル）ピペリジン−１−カルボキシレート
撹拌されている（メチル）−トリフェニルホスホニウムブロミド（３２３ｍｇ、０．８８ｍｍｏｌ）のテトラヒドロフラン（５ｍＬ）中の混合物に摂氏−７８度で、ｎ−ブチルリチウム（０．３６０ｍＬ、０．８９ｍｍｏｌ、ヘキサン中２．５Ｍ）を滴下添加した。生じた黄色の混合物を摂氏−７８度で３０分間撹拌し、次いで、イソプロピル４−（５−シアノ−４−ホルミル−１Ｈ−ピラゾール−１−イル）ピペリジン−１−カルボキシレート（実施例９、ステップＡ）（１７１ｍｇ、０．５９ｍｍｏｌ）のテトラヒドロフラン（２．５ｍＬ）中の溶液を加えた。冷却浴を除去し、反応混合物を室温で３．７５時間撹拌した。飽和塩化アンモニウム水溶液で、反応物をクエンチし、混合物を酢酸エチルで２回抽出した。合わせた抽出物を水およびブラインで順次洗浄し、次いで硫酸ナトリウム上で乾燥させた。混合物を濾過し、濾液を真空濃縮した。ヘプタン中の酢酸エチルの勾配混合物（１０から１００％）で溶離するシリカゲルクロマトグラフィーによって残渣を精製して、表題化合物を透明なオイル（１１６ｍｇ、６８％）として得た。1H NMR(500MHz, 重水素化クロロホルム) δ  0.88(d, J=6.10Hz, 6H), 1.55-1.67(m,
2H), 1.68-1.84(m, 2H), 2.43-2.73(m, 2H), 3.95(br. s., 2H), 4.04-4.21(m, 1H)
4.44-4.67(m, 1H), 5.02(d, J=11.22Hz, 1H), 5.43(d, J=17.81Hz, 1H), 6.20(dd,
J=17.81, 11.22Hz, 1H), 7.27(s, 1H).
【０２８７】
Ｂ）（Ｅ，Ｚ）−イソプロピル４−（５−シアノ−４−（２−（２−フルオロ−４−（メチルスルホニル）フェニル）プロパ−１−エニル）−１Ｈ−ピラゾール−１−イル）ピペリジン−１−カルボキシレート
イソプロピル４−（５−シアノ−４−ビニル−１Ｈ−ピラゾール−１−イル）ピペリジン−１−カルボキシレート（１１６ｍｇ、０．４ｍｍｏｌ）および２−フルオロ−４−（メチルスルホニル）−１−（プロパ−１−エン−２−イル）ベンゼン（調製２９）（４３ｍｇ、０．２０ｍｍｏｌ）の無水ジクロロメタン（２ｍＬ）中の溶液に、第二世代ホベイダ−グラブス触媒（Ａｌｄｒｉｃｈから市販）（１２．５ｍｇ、０．０２０ｍｍｏｌ）を加えた。緑色の溶液を摂氏４０度で７２時間加熱し、定期的にジクロロメタンを加えた。物質を減圧下で濃縮し、シリカゲルクロマトグラフィー（ヘプタン中１０から１００％の酢酸エチル）によって残渣を精製して、生成物を不純なオイル（８ｍｇ、８％）として得た。この物質をそのまま使用した。ＬＣＭＳ（ＡＰＣＩ）：４７３．２（Ｍ−１）。
【０２８８】
Ｃ）イソプロピル４−（５−シアノ−４−｛２−［２−フルオロ−４−（メチルスルホニル）フェニル］プロピル｝−１Ｈ−ピラゾール−１−イル）ピペリジン−１−カルボキシレート
Ｈ−Ｃｕｂｅ（商標）で「完全水素」設定で、炭素上１０％のパラジウムカートリッジを流速１ｍＬ／分で使用して、（Ｅ，Ｚ）−イソプロピル４−（５−シアノ−４−（２−（２−フルオロ−４−（メチルスルホニル）−フェニル）プロパ−１−エニル）−１Ｈ−ピラゾール−１−イル）ピペリジン−１−カルボキシレート（８ｍｇ、０．０２ｍｍｏｌ）の酢酸エチル（３ｍＬ）中の溶液を水素化した。物質を真空濃縮し、残渣（４ｍｇ）を逆相ＨＰＬＣ（カラム：Ｗａｔｅｒｓ  ＸＢｒｉｄｇｅ  Ｃ１８  １９×１００、５マイクロメートル；移動相Ａ：水中０．０３％の水酸化アンモニウム（ｖ／ｖ）；移動相Ｂ：アセトニトリル中０．０３％の水酸化アンモニウム（ｖ／ｖ）；勾配：８．５分で８０％水／２０％アセトニトリルから直線状に０％水／１００％アセトニトリルへ、１０．０分まで０％水／１００％アセトニトリルで保持。流速：２５ｍＬ／分）によって精製して、表題化合物（１．９ｍｇ、２３％）を得た：ＬＣＭＳ（ＥＳ＋）：４７７．２（Ｍ＋１）。
【０２８９】
（実施例３０）
１−メチルシクロプロピル４−（５−シアノ−４−｛［（２−メチルピリジン−３−イル）オキシ］メチル｝−１Ｈ−ピラゾール−１−イル）ピペリジン−１−カルボキシレート
【０２９０】
【化８１】
2013543885.tif 000085
実施例１３と同様の手順に従って、２−メチルピリジン−３−オールを使用して、表題化合物を調製した。ヘプタン中の酢酸エチルの勾配混合物（６０から１００％酢酸エチル）で溶離するフラッシュクロマトグラフィーによって粗製物質を精製して、表題化合物７７ｍｇを白色の固体として得た。1H NMR(400MHz, 重水素化クロロホルム) δ 0.60-0.66(m, 2H), 0.83-0.90(m, 2H),
1.55(s, 3H), 1.96-2.05(m, 2H), 2.05-2.20(m, 2H), 2.49(s, 3H), 2.84-2.98(m, 2H),
4.11-4.42(m, 2H), 4.46-4.55(m, 1H), 5.04(s, 2H), 7.06-7.16(m, 2H), 7.65(s, 1H),
8.12(dd, J=4.49, 1.56Hz, 1H).
【０２９１】
（実施例３１）
１−メチルシクロプロピル４−｛５−シアノ−４−［（２，３，６−トリフルオロフェノキシ）メチル］−１Ｈ−ピラゾール−１−イル｝ピペリジン−１−カルボキシレート
【０２９２】
【化８２】
2013543885.tif 000086
Ａ）ｔｅｒｔ−ブチル４−（５−シアノ−４−（（２，３，６−トリフルオロフェノキシ）メチル）−１Ｈ−ピラゾール−１−イル）ピペリジン−１−カルボキシレート
ｔｅｒｔ−ブチル４−（５−シアノ−４−（（メチルスルホニルオキシ）メチル）−１Ｈ−ピラゾール−１−イル）ピペリジン−１−カルボキシレート（調製１６）（８７．８ｍｇ、０．２２８ｍｍｏｌ）、２，３，６−トリフルオロフェノール（５１．７ｍｇ、０．３４２ｍｍｏｌ）および炭酸セシウム（１４９ｍｇ、０．４５６ｍｍｏｌ）をマイクロ波バイアル内に入れ、アセトニトリル（３ｍＬ）に溶かした。バイアルをマイクロ波反応器内、摂氏１１０度で２０分間加熱した。混合物を減圧下で濃縮し、残渣を１Ｎの水酸化ナトリウム溶液（５ｍＬ）に入れ、ジクロロメタンで３回抽出した。合わせた有機抽出物をブラインで洗浄し、硫酸ナトリウム上で乾燥させ、濾過し、濾液を減圧下で濃縮した。ヘプタン中０から３０％の酢酸エチル勾配で溶離するクロマトグラフィーによって粗製物質を精製して、ｔｅｒｔ−ブチル４−（５−シアノ−４−（（２，３，６−トリフルオロフェノキシ）メチル）−１Ｈ−ピラゾール−１−イル）ピペリジン−１−カルボキシレート３６．２ｍｇを透明なオイルとして得た。
【０２９３】
Ｂ）１−メチルシクロプロピル４−｛５−シアノ−４−［（２，３，６−トリフルオロフェノキシ）メチル］−１Ｈ−ピラゾール−１−イル｝ピペリジン−１−カルボキシレート
実施例１３と同様の手順（ＢおよびＣ）に従って、市販の２，３，６−トリフルオロフェノールを使用して、１−メチルシクロプロピル４−｛５−シアノ−４−［（２，３，６−トリフルオロフェノキシ）メチル］−１Ｈ−ピラゾール−１−イル｝ピペリジン−１−カルボキシレートを調製した。Ｓｅｐａｘ  ２−エチルピリジンンカラム２５０×２１．２ｍｍ、０．００５で、ヘプタン中のエタノールの勾配で溶離する分取逆相ＨＰＬＣによって、粗製物質（１７．１ｍｇ）を精製した。分析ＬＣＭＳ：保持時間１１．７６９分（Ｐｈｅｎｏｍｅｎｅｘ  Ｌｕｎａ（２）Ｃ１８  １５０×３．０ｍｍ、５マイクロメートルカラム；１２．５分かけて９５％水／メタノールから直線状勾配で１００％メタノールへ；０．１％ギ酸調節剤；流速０．７５ｍＬ／分；LCMS (ES+): 456.9(M+Na).  1H NMR(500MHz, 重水素化クロロホルム) δ 0.64-0.66(m, 2H), 0.88-0.91(m, 2H),
1.57(s, 3H), 2.00(d, J=10.49Hz, 2H), 2.07-2.18(m, 2H), 2.91-2.95(m, 2H),
4.18(br. s., 1H), 4.36(br. s., 1H), 4.50(tt, J=11.34, 4.15Hz, 1H), 5.19(s, 2H),
6.83-6.90(m, 2H), 7.67(s, 1H).
【０２９４】
（実施例３２）
イソプロピル４−｛５−シアノ−４−［（２，３，６−トリフルオロフェノキシ）メチル］−１Ｈ−ピラゾール−１−イル｝ピペリジン−１−カルボキシレート
【０２９５】
【化８３】
2013543885.tif 000087
実施例１１と同様の手順に従って、市販の２，３，６−トリフルオロフェノールを使用して、表題化合物を調製した。ヘプタン中０から２５％の酢酸エチル勾配で溶離するカラムクロマトグラフィーによって粗製物質を精製して、イソプロピル４−｛５−シアノ−４−［（２，３，６−トリフルオロフェノキシ）メチル］−１Ｈ−ピラゾール−１−イル｝ピペリジン−１−カルボキシレートを透明なオイルとして得た。1H NMR(500MHz, 重水素化クロロホルム) δ 1.26(d, J=6.10Hz, 6H), 2.01(d,
J=11.22Hz, 2H) 2.13(qd, J=12.28, 4.64Hz, 2H), 2.88-3.01(m, 2H), 4.32(br. s.,
2H) 4.51(tt, J=11.34, 4.15Hz, 1H), 4.90-4.98(m,1H), 5.18(s, 2H), 6.82-6.92(m,
2H), 7.67(s, 1H); LCMS(ES+): 423.4( M +H).
【０２９６】
（実施例３３）
イソプロピル４−（５−シアノ−４−｛［２−フルオロ−４−（１−メチル−１Ｈ−イミダゾール−２−イル）フェノキシ］メチル｝−１Ｈ−ピラゾール−１−イル）ピペリジン−１−カルボキシレート
【０２９７】
【化８４】
2013543885.tif 000088
実施例１１と同様の手順に従って、２−フルオロ−４−（１−メチル−１Ｈ−イミダゾール−２−イル）フェノール（調製２８）およびイソプロピル４−（５−シアノ−４−（（メチルスルホニルオキシ）メチル）−１Ｈ−ピラゾール−１−イル）ピペリジン−１−カルボキシレート（調製１０）から、表題化合物を調製した。Ｓｅｐａｘシリカ２５０×２１．２ｍｍ、０．００５ｍｍで、ヘプタン中のエタノールの勾配で溶離する分取逆相ＨＰＬＣによって、粗製物質を精製した。分析ＬＣＭＳ：保持時間８．５９８分（Ｐｈｅｎｏｍｅｎｅｘ  Ｌｕｎａ（２）Ｃ１８  １５０×３．０ｍｍ、５マイクロメートルカラム；１２．５分かけて９５％水／メタノールから直線状勾配で１００％メタノールへ；０．１％ギ酸調節剤；流速０．７５ｍＬ／分；LCMS(ES +): 467.0(M +H). 1H NMR(500MHz, 重水素化クロロホルム) δ 1.27(d, J=6.10Hz, 6H), 1.97-2.09(m, 2H),
2.16(m, 2H), 2.93-2.98(m, 2H), 3.76(s, 3H) 4.25-4.43(m, 2H), 4.50-4.57(m, 1H),
4.91-4.99(m, 1H), 5.17(s, 2H), 6.97(s, 1H), 7.11(s, 1H), 7.12-7.15(m, 1H), 7.42(dd,
J=11.71, 1.95Hz, 1H), 7.38-7.44(m, 1H), 7.72(s, 1H).
【０２９８】
（実施例３４）
イソプロピル４−（５−シアノ−４−｛［２−フルオロ−４−（１−メチル−１Ｈ−イミダゾール−５−イル）フェノキシ］メチル｝−１Ｈ−ピラゾール−１−イル）ピペリジン−１−カルボキシレート
【０２９９】
【化８５】
2013543885.tif 000089
実施例１１と同様の手順に従って、２−フルオロ−４−（１−メチル−１Ｈ−イミダゾール−５−イル）フェノール（調製２７）およびイソプロピル４−（５−シアノ−４−（（メチルスルホニルオキシ）メチル）−１Ｈ−ピラゾール−１−イル）ピペリジン−１−カルボキシレート（調製１０）から、表題化合物を調製した。Ｓｅｐａｘ  シリカ  ２５０×２１．２ｍｍ、０．００５で、ヘプタン中のエタノールの勾配で溶離する分取逆相ＨＰＬＣによって、粗製物質を精製した。分析ＬＣＭＳ：保持時間８．７９７分（Ｐｈｅｎｏｍｅｎｅｘ  Ｌｕｎａ（２）Ｃ１８  １５０×３．０ｍｍ、５マイクロメートルカラム；１２．５分かけて９５％水／メタノールから直線状勾配で１００％メタノールへ；０．１％ギ酸調節剤；流速０．７５ｍＬ／分；LCMS(ES +): 467.0(M +H). 1H NMR(500MHz, 重水素化クロロホルム) δ 1.27(d, J=6.34Hz, 6H), 2.03(d,
J=11.22Hz, 2H), 2.11-2.20(m, 2H), 2.95(br. s., 2H), 3.66(s, 3H), 4.34(br. s.,
2H), 4.50-4.57(m,1H), 4.94(dt, J=12.44, 6.22Hz, 1H), 5.15(s, 2H), 7.07(s, 1H),
7.10-7.17(m, 3H), 7.51(s, 1H), 7.71(s, 1H).
【０３００】
（実施例３５）
イソプロピル４−［５−シアノ−４−（｛［２−メチル−６−（１Ｈ−１，２，４−トリアゾール−１−イル）ピリジン−３−イル］オキシ｝メチル）−１Ｈ−ピラゾール−１−イル］ピペリジン−１−カルボキシレート
【０３０１】
【化８６】
2013543885.tif 000090
実施例１２と同様の手順に従って、２−メチル−６−（１Ｈ−１，２，４−トリアゾール−１−イル）ピリジン−３−オールを使用して、表題化合物を調製した。逆相ＨＰＬＣ（カラム：Ｗａｔｅｒｓ  ＸＢｒｉｄｇｅ  Ｃ１８  １９×１００、５マイクロメートル；移動相Ａ：水中０．０３％の水酸化アンモニウム（ｖ／ｖ）；移動相Ｂ：アセトニトリル中０．０３％の水酸化アンモニウム（ｖ／ｖ）；勾配：８．０分で８０％水／２０％アセトニトリルから直線状に０％水／１００％アセトニトリルへ、次いで、９．５分まで０％水／１００％アセトニトリルで保持。流速：２５ｍＬ／分によって、試料を精製した。ＬＣＭＳ（ＭＳ  ＥＳ＋：４５１．１）。
【０３０２】
（実施例３６）
イソプロピル４−［５−シアノ−４−（｛［２−メチル−６−（１Ｈ−１，２，４−トリアゾール−１−イル）ピリジン−３−イル］アミノ｝メチル）−１Ｈ−ピラゾール−１−イル］ピペリジン−１−カルボキシレート
【０３０３】
【化８７】
2013543885.tif 000091
撹拌されているイソプロピル４−（５−シアノ−４−（（メチルスルホニルオキシ）メチル）−１Ｈ−ピラゾール−１−イル）ピペリジン−１−カルボキシレート（調製１０）（４４ｍｇ、０．１２ｍｍｏｌ）のテトラヒドロフラン０．７５ｍＬ中の溶液に、Ｎ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン（０．０４２ｍＬ、０．２４ｍｍｏｌ）を、続いて２−メチル−６−（１Ｈ−１，２，４−トリアゾール−１−イル）ピリジン−３−アミン（２１ｍｇ、０．１２ｍｍｏｌ）を加えた。反応混合物を摂氏６０度で１６時間加熱し、その後、室温に冷却し、水およびブラインで希釈した。次いで、混合物を酢酸エチル１５ｍＬで３回抽出した。合わせた有機抽出物をブラインで洗浄し、硫酸ナトリウム上で乾燥させ、濾過し、濾液を真空濃縮して、黄色の泡５２ｍｇを得た。逆相ＨＰＬＣ（カラム：Ｗａｔｅｒｓ  Ｓｕｎｆｉｒｅ  Ｃ１８  １９×１００、５マイクロメートル；移動相Ａ：水中の０．０５％のトリフルオロ酢酸（ｖ／ｖ）；移動相Ｂ：アセトニトリル中０．０５％のトリフルオロ酢酸（ｖ／ｖ））；勾配：８．５分で９０％水／１０％アセトニトリルから直線状に０％水／１００％アセトニトリルへ、１０．０分まで０％水／１００％アセトニトリルで保持。流速：２５ｍＬ／分によって、試料を精製した。ＬＣＭＳ（ＭＳ  ＥＳ＋：４５０．１）。
【０３０４】
（実施例３７）
イソプロピル４−［５−シアノ−４−（｛［２−メチル−６−（メチルスルホニル）ピリジン−３−イル］アミノ｝メチル）−１Ｈ−ピラゾール−１−イル］ピペリジン−１−カルボキシレート
【０３０５】
【化８８】
2013543885.tif 000092
実施例３６と同様の手順に従って、２−メチル−６−（メチルスルホニル）ピリジン−３−アミンを使用して、表題化合物を調製した。逆相ＨＰＬＣ（カラム：Ｗａｔｅｒｓ  ＸＢｒｉｄｇｅ  Ｃ１８  １９×１００、５マイクロメートル；移動相Ａ：水中０．０３％の水酸化アンモニウム（ｖ／ｖ）；移動相Ｂ：アセトニトリル中０．０３％の水酸化アンモニウム（ｖ／ｖ）；勾配：８５％水／８．５分で１５％アセトニトリルから直線状に０％水／１００％アセトニトリルへ、１０．０分まで０％水／１００％アセトニトリルで保持。流速：２５ｍＬ／分によって、試料を精製した。ＬＣＭＳ（ＥＳ＋）：４６１．０（Ｍ＋１）。
【０３０６】
（実施例３８）
１−メチルシクロプロピル４−（５−シアノ−４−｛［４−（１Ｈ−テトラゾール−１−イル）フェノキシ］メチル｝−１Ｈ−ピラゾール−１−イル）ピペリジン−１−カルボキシレート
【０３０７】
【化８９】
2013543885.tif 000093
実施例１５と同様の手順に従って、市販の４−テトラゾール−１−イル−フェノールを使用して、表題化合物を調製した。ヘプタン中０％から７５％の酢酸エチルの勾配で溶離するフラッシュクロマトグラフィーによって、粗製物質を精製した。
1H
NMR(400MHz, 重水素化クロロホルム) δ ppm
0.60-0.66(m, 2H) 0.84-0.90(m, 2H) 1.19(t, J=7.03Hz, 1H) 1.55(s, 3H) 2.03(br.
s., 2H) 2.06-2.19(m, 2H) 2.92(br. s., 2H) 3.46(q, J=7.09Hz, 1H) 4.46-4.56(m,
1H) 5.11(s, 2H) 7.11-7.16(m, 2H) 7.60-7.65(m, 2H) 7.68(s, 1H) 8.90(s, 1H)
【０３０８】
（実施例３９）
１−［１−（５−エチルピリミジン−２−イル）ピペリジン−４−イル］−４−｛［４−（１Ｈ−テトラゾール−１−イル）フェノキシ］メチル｝−１Ｈ−ピラゾール−５−カルボニトリル
【０３０９】
【化９０】
2013543885.tif 000094
Ａ）ｔｅｒｔ−ブチル４−（５−シアノ−４−｛［４−（１Ｈ−テトラゾール−１−イル）フェノキシ］メチル｝−１Ｈ−ピラゾール−１−イル）ピペリジン−１−カルボキシレート
撹拌されている冷たい（摂氏０度）トリフェニルホスフィン（２８３ｍｇ、１．０８ｍｍｏｌ）のテトラヒドロフラン（２ｍＬ）中の溶液に、ジエチルアゾジカルボキシレート（０．１７ｍＬ、１．１ｍｍｏｌ）を滴下添加した。冷たい反応混合物を２０分間撹拌し、その後、４−テトラゾール−１−イル−フェノール（１６５．５ｍｇ、１．０２１ｍｍｏｌ）のテトラヒドロフラン溶液を加えた。３５分後に、ｔｅｒｔ−ブチル４−（５−シアノ−４−（ヒドロキシメチル）−１Ｈ−ピラゾール−１−イル）ピペリジン−１−カルボキシレート（調製１５）（３００ｍｇ、０．９７９ｍｍｏｌ）のテトラヒドロフラン中の溶液を加え、反応物を室温に一晩かけて徐々に加温した。反応物を減圧下で濃縮し、ヘプタン中０％から８０％の酢酸エチルの勾配で溶離するフラッシュクロマトグラフィーによって残渣を精製して、表題化合物を白色のふわふわした固体（３０４ｍｇ、６８％）として得た。1H NMR(400MHz, 重水素化クロロホルム) δ ppm 1.46(s, 9H) 2.03(s, 2H) 2.06-2.20(m,
2H) 2.90(br. s., 2H) 4.28(br. s., 2H) 4.46-4.56(m, 1H) 5.12(s, 2H) 7.10-7.18(m,
2H) 7.59-7.66(m, 2H) 8.90(s, 1H); LCMS (ES) 451.1(M+1)
【０３１０】
Ｂ）１−ピペリジン−４−イル−４−｛［４−（１Ｈ−テトラゾール−１−イル）フェノキシ］メチル｝−１Ｈ−ピラゾール−５−カルボニトリル
ｔｅｒｔ−ブチル４−（５−シアノ−４−｛［４−（１Ｈ−テトラゾール−１−イル）フェノキシ］メチル｝−１Ｈ−ピラゾール−１−イル）ピペリジン−１−カルボキシレート（２９８ｍｇ、０．６６３ｍｍｏｌ）をジクロロメタン（１．６ｍＬ）に溶かした。トリフルオロ酢酸（０．１５ｍＬ）を加え、反応物を室温、窒素下で１．５時間撹拌した。反応物を濃縮し、さらに精製することなく次のステップでそのまま使用した。ＬＣＭＳ（ＥＳ＋）３５１．１（Ｍ＋１）
【０３１１】
Ｃ）１−メチルシクロプロピル４−（５−シアノ−４−｛［４−（１Ｈ−テトラゾール−１−イル）フェノキシ］メチル｝−１Ｈ−ピラゾール−１−イル）ピペリジン−１−カルボキシレート
１−ピペリジン−４−イル−４−｛［４−（１Ｈ−テトラゾール−１−イル）フェノキシ］メチル｝−１Ｈ−ピラゾール−５−カルボニトリル（３０ｍｇ、０．０８６ｍｍｏｌ）およびジイソプロピルエチルアミン（０．１２ｍｌ、０．６８８ｍｍｏｌ）をアセトニトリル（２ｍＬ）に密閉管中で溶かした。２−クロロ−５−エチルピリミジン（０．０２０ｍＬ、０．２ｍｍｏｌ）を加え、反応物を摂氏１２０度で１８時間および室温で３６時間加熱した。反応混合物を減圧下で濃縮し、ヘプタン中０％から７０％の酢酸エチルの勾配で溶離するフラッシュクロマトグラフィーによって粗製物質を精製して、茶色の固体を得た。最小量のエーテルで固体を摩砕して、表題化合物を薄茶色の固体（３ｍｇ、８％）として得た。LCMS(ES+) 457.1(M+1) 1H NMR(400MHz, 重水素化クロロホルム) δ ppm 1.16-1.22(m, 3H) 2.10(br. s., 2H)
2.13-2.25(m, 2H) 2.43-2.50(m, 2H) 3.00-3.10(m, 2H) 3.43-3.50(m, 1H)
4.88-4.96(m, 2H) 5.12(s, 2H) 7.10-7.16(m, 2H) 7.60-7.64(m, 2H) 7.66(s, 1H)
8.12-8.24(m, 2H) 8.90(s, 1H)
【０３１２】
（実施例４０）
イソプロピル４−｛５−シアノ−４−［（３−シアノフェノキシ）メチル］−１Ｈ−ピラゾール−１−イル｝ピペリジン−１−カルボキシレート
【０３１３】
【化９１】
2013543885.tif 000095
実施例１２と同様の手順に従って、市販の３−シアノフェノールを使用して、表題化合物を調製した。ヘプタン中０％から４０％の酢酸エチルの勾配で溶離するフラッシュクロマトグラフィーによって粗製物質を精製して、表題化合物１６．４ｍｇ（６２％）を透明な無色の残渣として得た。1H NMR(400MHz, 重水素化クロロホルム) δ ppm 1.28(d, J=6.25Hz, 6H) 1.99-2.09(m, 2H) 2.10-2.24(m, 2H)
2.88-3.06(m, 2H) 4.35(br. s., 2H) 4.48-4.60(m, 1H) 4.90-5.01(m, 1H) 5.08(s, 2H)
7.19-7.25(m, 2H) 7.32(d, J=7.82Hz, 1H) 7.39-7.47(m, 1H) 7.68(s, 1H)
【０３１４】
（実施例４１）
イソプロピル４−｛５−シアノ−４−［（４−シアノ−３−メチルフェノキシ）メチル］−１Ｈ−ピラゾール−１−イル｝ピペリジン−１−カルボキシレート
【０３１５】
【化９２】
2013543885.tif 000096
実施例１２と同様の手順に従って、４−ヒドロキシ−２−メチルベンゾニトリルを使用して、表題化合物を調製した。ヘプタン中０％から４０％の酢酸エチルの勾配で溶離するフラッシュクロマトグラフィーによって粗製物質を精製して、表題化合物１８．８ｍｇ（６９％）を透明な残渣として得た。1H NMR(400MHz, 重水素化クロロホルム) δ ppm 1.27(d, J=6.25Hz, 6H) 1.96-2.08(m, 2H) 2.09-2.23(m, 2H) 2.54(s,
3H) 2.96(t, J=12.51Hz, 2H) 4.35(br. s., 2H) 4.54(tt, J=11.29, 4.15Hz, 1H) 4.95(七重線, J=6.25Hz, 1H) 5.09(s, 2H) 6.85(dd, J=8.60, 2.35Hz, 1H) 6.90(s, 1H)
7.57(d, J=8.60Hz, 1H) 7.67(s, 1H)
【０３１６】
（実施例４２）
イソプロピル４−｛５−シアノ−４−［（４−シアノフェノキシ）メチル］−１Ｈ−ピラゾール−１−イル｝ピペリジン−１−カルボキシレート
【０３１７】
【化９３】
2013543885.tif 000097
実施例１２と同様の手順に従って、市販の４−シアノフェノールを使用して、表題化合物を調製した。ヘプタン中０％から４０％の酢酸エチルの勾配で溶離するフラッシュクロマトグラフィーによって粗製物質を精製して、表題化合物１４．７ｍｇ（５６％）を粘着性の白色の固体として得た。1H NMR(400MHz, 重水素化クロロホルム) δ ppm 1.27(d, J=6.25Hz, 6H) 1.95-2.08(m, 2H) 2.16(m, 2H) 2.85-3.08(m,
2H) 4.35(br. s., 2H) 4.54(tt, J=11.29, 4.15Hz, 1H) 4.95(dt, J=12.51, 6.25Hz, 1H)
5.11(s, 2H) 7.04(d, J=8.99Hz, 2H) 7.64(d, J=8.99Hz, 2H) 7.68(s, 1H)
【０３１８】
（実施例４３）
４−［（４−シアノ−２−フルオロフェノキシ）メチル］−１−［１−（５−エチルピリミジン−２−イル）ピペリジン−４−イル］−１Ｈ−ピラゾール−５−カルボニトリル
【０３１９】
【化９４】
2013543885.tif 000098
実施例３９と同様の手順に従って、市販の４−シアノ−２−フルオロフェノールを使用して、表題化合物を調製した。ジクロロメタン中０％から１．５％のメタノールの勾配で溶離するフラッシュクロマトグラフィーによって、粗製物質を精製した。１０％メタノール／酢酸エチルからの再結晶化を介して、生じた固体をさらに精製して、清浄な生成物３．６７ｇ（６０％）をほぼ白色の固体として得た。1H NMR(500MHz, 重水素化クロロホルム) δ ppm 1.22(t, J=7.56Hz, 3H) 2.07-2.15(m,
2H) 2.15-2.28(m, 2H) 2.50(q, J=7.56Hz, 2H) 3.03-3.13(m, 2H) 4.66(tt, J=11.44,
4.18Hz, 1H) 4.95(d, J=13.66Hz, 2H) 5.19(s, 2H) 7.13(t, J=8.17Hz, 1H) 7.42(dd,
J=10.37, 1.83Hz, 1H) 7.47(d, J=8.29Hz, 1H) 7.70(s, 1H) 8.21(s, 2H)
【０３２０】
（実施例４４）
ｔｅｒｔ−ブチル４−｛５−シアノ−４−［（４−シアノ−２−フルオロフェノキシ）メチル］−１Ｈ−ピラゾール−１−イル｝ピペリジン−１−カルボキシレート
【０３２１】
【化９５】
2013543885.tif 000099
実施例１５と同様の手順に従って、市販の４−シアノ−２−フルオロフェノールを使用し、表題化合物を調製した。ヘプタン中１０％から４０％の酢酸エチルの勾配で溶離するフラッシュクロマトグラフィーによって粗製物質を精製して、表題化合物（２１ｇ、１００％）を得た。1H NMR(重水素化クロロホルム) δ
ppm 7.71(s, 1H), 7.44-7.48(m, 1H), 7.40-7.43(m, 1H), 7.09-7.15(m, 1H), 5.18(s,
2H), 4.48-4.56(m, 1H), 4.22-4.38(m, 2H), 2.84-3.01(m, 2H), 2.09-2.19(m, 2H),
1.99-2.06(m, 2H), 1.49(s, 9H)
【０３２２】
（実施例４５）
イソプロピル４−｛５−シアノ−４−［（２−シアノ−４−フルオロフェノキシ）メチル］−１Ｈ−ピラゾール−１−イル｝ピペリジン−１−カルボキシレート
【０３２３】
【化９６】
2013543885.tif 000100
実施例１５と同様の手順に従って、市販の２−シアノ−４−フルオロフェノールを使用して、表題化合物を調製した。ＨＰＬＣ（カラム  Ｗａｔｅｒｓ  Ａｔｌａｎｔｉｓ  ｄＣ１８  ４．６×５０ｍｍ、５マイクロメートル；調節剤：０．０５％トリフルオロ酢酸；勾配：４．０分かけて９５％水／５％アセトニトリルから直線状に５％水／９５％アセトニトリルへ、５．０分まで５％水／９５％アセトニトリルで保持；流速：２．０ｍＬ／分）によって粗製物質を精製して、表題化合物３５．８ｍｇ（７３％）を得た。ＬＣＭＳ（ＥＳ＋）：４１２．０（Ｍ＋１）
【０３２４】
（実施例４６）
イソプロピル４−（５−シアノ−４−｛［４−（ジメチルカルバモイル）−２−フルオロフェノキシ］メチル｝−１Ｈ−ピラゾール−１−イル）ピペリジン−１−カルボキシレート
【０３２５】
【化９７】
2013543885.tif 000101
実施例１５と同様の手順に従って、３−フルオロ−４−ヒドロキシ−Ｎ，Ｎ−ジメチルベンズアミド（調製３１Ｂ）を使用して、表題化合物を調製した。ＨＰＬＣ（カラム  Ｗａｔｅｒｓ  Ａｔｌａｎｔｉｓ  ｄＣ１８  ４．６×５０ｍｍ、５マイクロメートル；調節剤：０．０５％トリフルオロ酢酸；勾配：４．０分かけて９５％水／５％アセトニトリルから直線状に５％水／９５％アセトニトリルへ、５．０分まで５％水／９５％アセトニトリルで保持；流速：２．０ｍＬ／分）によって粗製物質を精製して、表題化合物６．８ｍｇ（１２％）を得た。ＬＣ／ＭＳ（ＥＳ＋）：４５８．０（Ｍ＋１）
【０３２６】
（実施例４７）
１−メチルシクロプロピル４−（５−シアノ−４−｛［４−（ジメチルカルバモイル）−２−フルオロフェノキシ］メチル｝−１Ｈ−ピラゾール−１−イル）ピペリジン−１−カルボキシレート
【０３２７】
【化９８】
2013543885.tif 000102
実施例１５と同様の手順に従って、３−フルオロ−４−ヒドロキシ−Ｎ，Ｎ−ジメチルベンズアミド（調製３１Ｂ）を使用して、表題化合物を調製した。ＨＰＬＣ（カラム  Ｗａｔｅｒｓ  Ａｔｌａｎｔｉｓ  ｄＣ１８  ４．６×５０ｍｍ、５マイクロメートル；調節剤：０．０５％トリフルオロ酢酸；勾配：４．０分かけて９５％水／５％アセトニトリルから直線状に５％水／９５％アセトニトリルへ、５．０分まで５％水／９５％アセトニトリルで保持；流速：２．０ｍＬ／分）によって、粗製物質を精製して、表題化合物２８．７ｍｇ（５１％）を得た。ＬＣ／ＭＳ（ＥＳ＋）：４７０．１（Ｍ＋１）
【０３２８】
（実施例４８）
１−メチルシクロプロピル４−（５−シアノ−４−｛［２−フルオロ−４−（メチルカルバモイル）フェノキシ］メチル｝−１Ｈ−ピラゾール−１−イル）ピペリジン−１−カルボキシレート
【０３２９】
【化９９】
2013543885.tif 000103
実施例１５と同様の手順に従って、３−フルオロ−４−ヒドロキシ−Ｎ−メチルベンズアミド（調製３１Ａ）を使用して、表題化合物を調製した。ＨＰＬＣ（カラム  Ｗａｔｅｒｓ  Ａｔｌａｎｔｉｓ  ｄＣ１８  ４．６×５０ｍｍ、５マイクロメートル；調節剤：０．０５％トリフルオロ酢酸；勾配：４．０分かけて９５％水／５％アセトニトリルから直線状に５％水／９５％アセトニトリルへ、５．０分まで５％水／９５％アセトニトリルで保持；流速：２．０ｍＬ／分）によって粗製物質を精製して、表題生成物３５．６ｍｇ（６５％）を得た。ＬＣ／ＭＳ（ＥＳ＋）：４５６．０（Ｍ＋１）
【０３３０】
（実施例４９）
４−（｛５−シアノ−１−［１−（５−エチルピリミジン−２−イル）ピペリジン−４−イル］−１Ｈ−ピラゾール−４−イル｝メトキシ）−３−フルオロ−Ｎ，Ｎ−ジメチルベンズアミド
【０３３１】
【化１００】
2013543885.tif 000104
実施例３９と同様の手順に従って、３−フルオロ−４−ヒドロキシ−Ｎ，Ｎ−ジメチルベンズアミド（調製３１Ｂ）を使用して、表題化合物を調製した。ＨＰＬＣ（カラム  Ｗａｔｅｒｓ  Ａｔｌａｎｔｉｓ  ｄＣ１８  ４．６×５０ｍｍ、５マイクロメートル；調節剤：０．０５％トリフルオロ酢酸；勾配：４．０分かけて９５％水／５％アセトニトリルから直線状に５％水／９５％アセトニトリルへ、５．０分まで５％水／９５％アセトニトリルで保持；流速：２．０ｍＬ／分）によって、粗製物質を精製して、表題生成物２６．７ｍｇを得た。ＬＣ／ＭＳ（ＥＳ＋）：４７８．０（Ｍ＋１）
【０３３２】
（実施例５０）
１−メチルシクロプロピル４−｛５−シアノ−４−［（４−シアノ−２−フルオロフェノキシ）メチル］−１Ｈ−ピラゾール−１−イル｝ピペリジン−１−カルボキシレート
【０３３３】
【化１０１】
2013543885.tif 000105
合成は、下記のスキーム５に概略されている。
【０３３４】
【化１０２】
2013543885.tif 000106
【０３３５】
Ａ）ｔｅｒｔ−ブチル４−［５−シアノ−４−（エトキシカルボニル）−１Ｈ−ピラゾール−１−イル］ピペリジン−１−カルボキシレート
【０３３６】
【化１０３】
2013543885.tif 000107
エチル５−シアノ−１Ｈ−ピラゾール−４−カルボキシレート（Ｊｕｂｉｌａｎｔ  Ｃｈｅｍｓｙｓ  Ｌｔｄ．  Ｄ−１２、Ｓｅｃｔｏｒ−５９、２０１  ３０１、Ｎｏｉｄａ、Ｕ．Ｐ．Ｉｎｄｉａ）（５０ｇ、３００ｍｍｏｌ）、ｔｅｒｔ−ブチル４−ヒドロキシピペリジン−１−カルボキシレート（６７ｇ、３３３ｍｍｏｌ）およびトリフェニルホスフィン（１１１ｇ、４２０ｍｍｏｌ）を２−メチルテトラヒドロフラン（２００ｍＬ）に溶かし、摂氏０度に冷却した。トルエン中４０％のジエチルアゾジカルボキシレート溶液（７６．５ｍＬ、４２０ｍｍｏｌ）を滴下添加した。添加が完了したら、反応物を１時間かけて室温に加温し、次いで、室温で１８時間撹拌した。激しく撹拌しながら、ヘプタン（１４００ｍＬ）を慎重に加えると、１時間後に懸濁液が形成した。固体を濾別し、濾液をヘプタン（４００ｍＬ）および酢酸エチル（２００ｍＬ）の混合物で洗浄した。次いで、濾液を濃縮し、ヘプタン中２５％の酢酸エチルで溶離するフラッシュクロマトグラフィーによって残渣を精製し、次いで酢酸エチル−ヘプタンから再結晶化させて、所望の生成物（３５．２ｇ、３３％）を得た。1H NMR(重水素化クロロホルム) δ
ppm 7.97(s, 1H), 4.49-4.59(m, 1H), 4.36(q, J=7.1Hz, 2H), 4.22-4.30(m, 2H),
2.80-2.99(m, 2H), 2.06-2.19(m, 2H), 1.93-2.02(m, 2H), 1.46(s, 9H), 1.37(t,
J=7.1Hz, 3H)
【０３３７】
Ｂ）：ｔｅｒｔ−ブチル４−［５−シアノ−４−（ヒドロキシメチル）−１Ｈ−ピラゾール−１−イル］ピペリジン−１−カルボキシレート
【０３３８】
【化１０４】
2013543885.tif 000108
ｔｅｒｔ−ブチル４−［５−シアノ−４−（エトキシカルボニル）−１Ｈ−ピラゾール−１−イル］ピペリジン−１−カルボキシレート（４５．５ｇ、１３１ｍｍｏｌ）をテトラヒドロフラン（３５０ｍＬ）に溶かし、摂氏−７８度に冷却した。内部温度を摂氏−６５度から摂氏−６０度の間に維持しながら、トルエン中１．５Ｍのジイソブチルアルミニウムヒドリド溶液（５０ｇ、３５０ｍｍｏｌ）を７５分かけて滴下添加した。添加が完了したら、反応混合物を摂氏−１０度に９０分間加温した。摂氏−１０度の温度を維持しながら、４Ｍの水酸化カリウム水溶液（３５０ｍＬ、１０．７当量）を慎重に滴下添加した。添加が完了したら、激しく撹拌しながら、反応混合物を徐々に室温にし、次いで室温で２０時間撹拌した。メチルｔｅｒｔ−ブチルエーテル（２００ｍＬ）およびヘプタン（４００ｍＬ）を加え、有機相を分離した。有機相を１Ｍの硫酸水素カリウム水溶液、ブラインで洗浄し、硫酸マグネシウムおよびシリカゲル３０ｇの混合物上で乾燥させた。固体を濾別し、濾液を減圧下で濃縮した。濃縮すると、沈澱物が形成し始めた。生じた湿潤な残渣をヘプタン中１０％のメチルｔｅｒｔ−ブチルエーテル５００ｍＬと共に摂氏６０度で１時間摩砕し、懸濁液を撹拌しながら、徐々に室温に冷却した。生じた固体を濾別し、摂氏４０度に設定された真空炉中で乾燥させて、ｔｅｒｔ−ブチル４−［５−シアノ−４−（ヒドロキシメチル）−１Ｈ−ピラゾール−１−イル］ピペリジン−１−カルボキシレート（３１．２ｇ、７８％）を得た。1H NMR(重水素化クロロホルム) δ
ppm 7.59(s, 1H), 4.70(d, J=5.5Hz, 2H), 4.41-4.51(m, 1H), 4.17-4.32(m, 2H),
2.81-2.96(m, 2H), 2.01-2.16(m, 3H), 1.94-2.00(m, 2H), 1.45(s, 9H)
【０３３９】
Ｃ）ｔｅｒｔ−ブチル４−｛５−シアノ−４−［（４−シアノ−２−フルオロフェノキシ）メチル］−１Ｈ−ピラゾール−１−イル｝ピペリジン−１−カルボキシレート
【０３４０】
【化１０５】
2013543885.tif 000109
４Ｌボトルに、ｔｅｒｔ−ブチル４−［５−シアノ−４−（ヒドロキシメチル）−１Ｈ−ピラゾール−１−イル］ピペリジン−１−カルボキシレート（３３６ｇ、１．１０ｍｏｌｅ）、トリフェニルホスフィン（３５９．５８ｇ、１．３７ｍｏｌｅ）、４−シアノ−２−フルオロフェノール（１５７．８９ｇ、１．１５ｍｏｌｅ）および２−メチルテトラヒドロフラン（２．０２Ｌ、２０．１０ｍｏｌｅ）を入れた。混合物を撹拌して溶液にし、窒素下、室温で保持した。別の４Ｌボトルに、ジエチルジアゼンジカルボキシレートのトルエン中の溶液（５６４．３３ｍＬ、６２０．７６ｇ、１．４３ｍｏｌｅ）および２−メチルテトラヒドロフラン（２．１２Ｌ、２１．１１ｍｏｌｅ）を入れた。混合物を撹拌して、完全な溶液を保証し、窒素下、室温で保持した。単一のぜん動ポンプを使用して（供給管は２つ）、合わせて２０ｍＬ／分の流速で２つの流れをＴ継手（ステンレス製）に、続いてコイル体積１００ｍＬ（１／８インチ、続いて１／４インチ  ＩＤ  ＰＴＥ管）にポンプ供給した。フローの８時間後に、供給ボトルは空になり、メチルテトラヒドロフラン２×２５ｍＬを使用して、ボトルをすすぎ、それを、管を介してポンプ供給した。生成物流をそのまま、次の反応で使用した。
【０３４１】
Ｄ）４−［（４−シアノ−２−フルオロフェノキシ）メチル］−１−ピペリジン−４−イル−１Ｈ−ピラゾール−５−カルボニトリルトシル酸塩
【０３４２】
【化１０６】
2013543885.tif 000110
ステップＣで回収されたｔｅｒｔ−ブチル４−｛５−シアノ−４−［（４−シアノ−２−フルオロフェノキシ）メチル］−１Ｈ−ピラゾール−１−イル｝ピペリジン−１−カルボキシレートの流を２つの５Ｌ一つ口フラスコに分けた。ｐ−トルエンスルホン酸一水和物（３４４．２２ｇ、１．８１ｍｏｌｅ）を混合物に分割して入れて、フラスコを、摂氏７５度に維持されている回転蒸発器浴を使用して８時間加熱した。反応物を室温に冷却し、一晩粗砕した。混合物を濾過し、真空下で３時間吸引乾燥（ｐｕｌｌｅｄ  ｄｒｙ）させて、目的生成物をトシル酸塩（４８０ｇ、２ステップで８８％）として得た。
【０３４３】
Ｅ）１−メチルシクロプロピル４−｛５−シアノ−４−［（４−シアノ−２−フルオロフェノキシ）メチル］−１Ｈ−ピラゾール−１−イル｝ピペリジン−１−カルボキシレート
【０３４４】
【化１０７】
2013543885.tif 000111
４−［（４−シアノ−２−フルオロフェノキシ）メチル］−１−ピペリジン−４−イル−１Ｈ−ピラゾール−５−カルボニトリル（４７８ｇ、９６０．７１ｍｍｏｌｅ）のトシル酸塩を２−メチルテトラヒドロフラン（２．３９Ｌ、２３．８３ｍｏｌｅ）および水（４７８．００ｍＬ）に４Ｌボトル内で溶かした。トリエチルアミン（２００．８６ｍＬ、１．４４ｍｏｌｅ）および１−メチルシクロプロピル４−ニトロフェニルカルボネート（調製２６）（２２９．８３ｇ、９６０．７１ｍｍｏｌｅ）を加え、４８時間撹拌した。反応混合物を１Ｎの水酸化ナトリウム水溶液（１Ｌ）で洗浄した。混合物を撹拌し、層を分離した。有機層を１Ｎ水酸化ナトリウム水溶液（１Ｌ）で複数回洗浄し、硫酸マグネシウム上で乾燥させ、濾過し、濾液を減圧下で濃縮して、明黄色の固体を得た。これらの固体を酢酸エチル中で室温で一晩スラリー化した。固体を濾過し、生じた淡黄色の固体を酢酸エチル（３体積）で再びスラリー化し、濾過し、真空下で吸引乾燥させて、目的化合物をオフホワイト色の固体（３１３ｇ、２つのバッチで、７７％）を得た。
1H
NMR(400MHz, 重水素化クロロホルム) δ ppm
0.60-0.66(m, 2H) 0.84-0.90(m, 2H) 1.55(s, 3H) 1.96-2.04(m, 2H) 2.11(qd,
J=12.10, 4.68Hz, 2H) 2.92(br. s., 2H) 4.07-4.41(m, 2H) 4.50(tt, J=11.27,
4.15Hz, 1H) 5.16(s, 2H) 7.09(t, J=8.20Hz, 1H) 7.36-7.46(m, 2H) 7.68(s, 1H).
融点＝摂氏１４４．６度
Ｃ２２Ｈ２２ＦＮ５Ｏ３についての燃焼分析（Ｑｕａｎｔｉｔａｔｉｖｅ  Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ  Ｉｎｃ．（ＱＴＩ）
２９１  Ｒｏｕｔｅ  ２２  Ｅａｓｔ  
Ｓａｌｅｍ  Ｉｎｄ．  Ｐａｒｋ−Ｂｌｄｇ  ５  
Ｗｈｉｔｅｈｏｕｓｅ  ＮＪ  ０８８８８−０４７０
Ｃ２２Ｈ２２ＦＮ５Ｏ３
Ｃ（理論＝６２．４０％）
６２．２８％
６２．２９％
Ｈ（理論＝５．２４％）
５．１７％
５．１３％
Ｎ（理論＝１６．５４％）
１６．４２％
１６．５０％
【０３４５】
（実施例５１）
ｔｅｒｔ−ブチル（３Ｓ，４Ｓ）−４−（５−シアノ−４−｛［２−フルオロ−４−（メチルカルバモイル）フェノキシ］メチル｝−１Ｈ−ピラゾール−１−イル）−３−フルオロピペリジン−１−カルボキシレート
【０３４６】
【化１０８】
2013543885.tif 000112
Ａ）ｔｅｒｔ−ブチル（３Ｓ，４Ｓ）−４−［５−シアノ−４−（エトキシカルボニル）−１Ｈ−ピラゾール−１−イル］−３−フルオロピペリジン−１−カルボキシレート
ｔｅｒｔ−ブチル４−［５−シアノ−４−（エトキシカルボニル）−１Ｈ−ピラゾール−１−イル］ピペリジン−１−カルボキシレート（実施例５０、ステップＡ）の調製について記載された様式と同様の様式で、エチル５−シアノ−１Ｈ−ピラゾール−４−カルボキシレートおよび（３Ｓ，４Ｒ）−ｔｅｒｔ−ブチル３−フルオロ−４−ヒドロキシピペリジン−１−カルボキシレート（調製４３Ｂ）から、ｔｅｒｔ−ブチル（３Ｓ，４Ｓ）−４−［５−シアノ−４−（エトキシカルボニル）−１Ｈ−ピラゾール−１−イル］−３−フルオロピペリジン−１−カルボキシレートを調製した。ヘプタン中０％から３０％の酢酸エチルの勾配で溶離するフラッシュクロマトグラフィーによって粗製物質を精製して、所望の生成物を濃厚な透明なオイル（１４９．４ｍｇ、３２％）として得た。
【０３４７】
Ｂ）ｔｅｒｔ−ブチル（３Ｓ，４Ｓ）−４−［５−シアノ−４−（ヒドロキシメチル）−１Ｈ−ピラゾール−１−イル］−３−フルオロピペリジン−１−カルボキシレート
ｔｅｒｔ−ブチル４−［５−シアノ−４−（ヒドロキシメチル）−１Ｈ−ピラゾール−１−イル］ピペリジン−１−カルボキシレート（実施例５０、ステップＢ）の調製について記載された様式と同様の様式で、ｔｅｒｔ−ブチル（３Ｓ，４Ｓ）−４−［５−シアノ−４−（エトキシカルボニル）−１Ｈ−ピラゾール−１−イル］−３−フルオロピペリジン−１−カルボキシレートから、ｔｅｒｔ−ブチル（３Ｓ，４Ｓ）−４−［５−シアノ−４−（ヒドロキシメチル）−１Ｈ−ピラゾール−１−イル］−３−フルオロピペリジン−１−カルボキシレートを調製した。ヘプタン中５％から５０％の酢酸エチルの勾配で溶離するフラッシュクロマトグラフィーによって粗製の生成物を精製して、所望の生成物を濃厚な透明なオイルとして得たが、これは放置すると固化した（７４ｍｇ、５６％）。
【０３４８】
Ｃ）ｔｅｒｔ−ブチル（３Ｓ，４Ｓ）−４−（５−シアノ−４−｛［２−フルオロ−４−（メチルカルバモイル）フェノキシ］メチル｝−１Ｈ−ピラゾール−１−イル）−３−フルオロピペリジン−１−カルボキシレート
実施例５０と同様の手順に従って、３−フルオロ−４−ヒドロキシ−Ｎ−メチルベンズアミド（調製３１Ａ）を使用して、表題化合物を調製した。ＨＰＬＣ（カラム：Ｗａｔｅｒｓ  Ｘｂｒｉｄｇｅ  Ｃ１２  ４．６×５０ｍｍ、５マイクロメートル；調節剤：０．０５％水酸化アンモニウム；勾配：４．０分かけて９５％水／５％アセトニトリルから直線状に５％水／９５％アセトニトリルへ、５．０分まで５％水／９５％アセトニトリルで保持；流速：２．０ｍＬ／分）によって、粗製物質を精製して、所望の生成物を得た。ＬＣ／ＭＳ（ＥＳ＋）：４７６．４（Ｍ＋１）
【０３４９】
（実施例５２）
ｔｅｒｔ−ブチル（３Ｒ，４Ｓ）−４−（５−シアノ−４−｛［２−フルオロ−４−（メチルカルバモイル）フェノキシ］メチル｝−１Ｈ−ピラゾール−１−イル）−３−フルオロピペリジン−１−カルボキシレート
【０３５０】
【化１０９】
2013543885.tif 000113
実施例５１と同様の手順に従って、３−フルオロ−４−ヒドロキシ−Ｎ−メチルベンズアミド（調製３１Ａ）を使用して、表題化合物を調製した。ＨＰＬＣ（カラム：Ｗａｔｅｒｓ  Ｘｂｒｉｄｇｅ  Ｃ１２  ４．６×５０ｍｍ、５マイクロメートル；調節剤：０．０５％水酸化アンモニウム；勾配：４．０分かけて９５％水／５％アセトニトリルから直線状に５％水／９５％アセトニトリルへ、５．０分まで５％水／９５％アセトニトリルで保持；流速：２．０ｍＬ／分）によって粗製物質を精製して、所望の生成物を得た。ＬＣ／ＭＳ（ＥＳ＋）：４７６．４（Ｍ＋１）
【０３５１】
（実施例５３）
１−メチルシクロプロピル（３Ｓ，４Ｓ）−４−（５−シアノ−４−｛［２−フルオロ−４−（メチルカルバモイル）フェノキシ］メチル｝−１Ｈ−ピラゾール−１−イル）−３−フルオロピペリジン−１−カルボキシレート
【０３５２】
【化１１０】
2013543885.tif 000114
実施例５０および５１と同様の手順に従って、３−フルオロ−４−ヒドロキシ−Ｎ−メチルベンズアミド（調製３１Ａ）を使用して、表題化合物を調製した。ＨＰＬＣ（カラム：Ｐｒｉｎｃｅｔｏｎ  ２−エチルピリジン２５０×２１．２ｍｍ  ５マイクロメートル；勾配：１．５分間の９５％ヘプタン／５％エタノールから直線状に１０分かけて０％ヘプタン／１００％エタノールへ、５．０分まで１分間０％ヘプタン／１００％エタノールで保持および直線状に９５％ヘプタン／５％エタノールへ；流速：２８ｍＬ／分）を介して粗製物質を精製して、所望の生成物を得た。ＬＣ／ＭＳ（ＥＳ＋）：４７３．９（Ｍ＋１）
【０３５３】
（実施例５４）
１−メチルシクロプロピル（３Ｒ，４Ｒ）−４−（５−シアノ−４−｛［２−フルオロ−４−（メチルカルバモイル）フェノキシ］メチル｝−１Ｈ−ピラゾール−１−イル）−３−フルオロピペリジン−１−カルボキシレート
【０３５４】
【化１１１】
2013543885.tif 000115
実施例５０および５１と同様の手順に従って、３−フルオロ−４−ヒドロキシ−Ｎ−メチルベンズアミド（調製３１Ａ）を使用して、表題化合物を調製した。ＨＰＬＣ（カラム：Ｐｒｉｎｃｅｔｏｎ  ２−エチルピリジン２５０×２１．２ｍｍ、５マイクロメートル；勾配：１．５分間の９５％ヘプタン／５％エタノールから直線状に１０分かけて０％ヘプタン／１００％エタノールへ、５．０分まで１分間０％ヘプタン／１００％エタノールで保持し、直線状に９５％ヘプタン／５％エタノールへ；流速：２８ｍＬ／分）を介して粗製物質を精製して、所望の生成物を得た。
ＬＣ／ＭＳ（ＥＳ＋）：４７３．９（Ｍ＋１）
【０３５５】
（実施例５５）
ｔｅｒｔ−ブチル（３Ｓ，４Ｓ）−４−（５−シアノ−４−｛［（２−メチルピリジン−３−イル）オキシ］メチル｝−１Ｈ−ピラゾール−１−イル）−３−フルオロピペリジン−１−カルボキシレート
【０３５６】
【化１１２】
2013543885.tif 000116
ｔｅｒｔ−ブチル４−（５−シアノ−４−｛［（メチルスルホニル）オキシ］メチル｝−１Ｈ−ピラゾール−１−イル）−３−フルオロピペリジン−１−カルボキシレート（調製４２）（３３ｍｇ、０．０８２ｍｍｏｌ）をアセトニトリル（３ｍＬ）に溶かし、炭酸セシウム（５３ｍｇ、０．１６４ｍｍｏｌ）および３−ヒドロキシ−２−メチルピリジン（９ｍｇ、０．０８２ｍｍｏｌ）を加えた。反応混合物を摂氏８０度に１．５時間加熱した。反応物を室温に冷却し、減圧下で濃縮した。粗製の残渣を水で希釈し、酢酸エチル（３×）で抽出した。合わせた有機抽出物を０．５Ｎの水酸化ナトリウム水溶液、水およびブラインで洗浄し、硫酸ナトリウム上で乾燥させ、濾過し、濾液を減圧下で濃縮した。ヘプタン中３０％から１００％の酢酸エチルの勾配で溶離するフラッシュクロマトグラフィーによって粗製の残渣を精製して、ラセミ生成物をコハク色のオイル（３０ｍｇ、７０％）として得た。1H NMR(500MHz, 重水素化クロロホルム) δ ppm 1.50(s, 9H) 2.11(m, 1H) 2.25-2.39(m, 1H) 2.53(s, 3H) 2.93(br.
s., 2H) 4.30(br. s., 1H) 4.43-4.71(m, 2H) 4.72-4.91(m, 1H) 5.09(s, 2H)
7.09-7.20(m, 2H) 7.75(s, 1H) 8.16(d, J=3.90Hz, 1H)
【０３５７】
（実施例５６）
ｔｅｒｔ−ブチル（３Ｓ，４Ｒ）−４−（５−シアノ−４−｛［（２−メチルピリジン−３−イル）オキシ］メチル｝−１Ｈ−ピラゾール−１−イル）−３−フルオロピペリジン−１−カルボキシレート
【０３５８】
【化１１３】
2013543885.tif 000117
実施例５５と同様の手順に従って、市販の３−ヒドロキシ−２−メチルピリジンを使用して、表題化合物を調製した。ヘプタン中３０％から１００％の酢酸エチルの勾配で溶離するフラッシュクロマトグラフィーによって粗製物質を精製して、所望の生成物をコハク色のオイルとして得た。1H NMR(500MHz, 重水素化クロロホルム) δ ppm 1.50(s, 9H), 2.01-2.08(m, 1H) 2.52(s, 3H) 2.74-2.88(m, 1H)
2.94-3.14(m, 1H) 3.14-3.34(m, 1H) 4.27-4.57(m, 2H) 4.61-4.75(m, 1H)
4.80-5.01(m, 1H) 5.09(s, 2H) 7.10-7.18(m, 2H) 7.73(s, 1H) 8.15(d, J=3.66Hz, 1H)
【０３５９】
（実施例５７）
１−メチルシクロプロピル（３Ｓ，４Ｒ）−４−（５−シアノ−４−｛［（２−メチルピリジン−３−イル）オキシ］メチル｝−１Ｈ−ピラゾール−１−イル）−３−フルオロピペリジン−１−カルボキシレート
【０３６０】
【化１１４】
2013543885.tif 000118
実施例５５と同様の手順に従って、市販の３−ヒドロキシ−２−メチルピリジンを使用して、表題化合物を調製した。ヘプタン中４０％から１００％の酢酸エチルの勾配で溶離するフラッシュクロマトグラフィーによって粗製物質を精製して、所望のラセミ生成物を白色の固体として得た。1H NMR(400MHz, 重水素化クロロホルム) δ ppm 0.66(br. s., 2H) 0.91(br. s., 2H) 1.57(s, 3H) 2.05(d,
J=12.10Hz, 1H) 2.52(s, 3H) 2.82(br. d, J=9.00Hz, 1H) 3.05(br. d, J=9.00Hz, 1H)
3.15-3.40(m, 1H) 4.20-4.60(m, 2H) 4.60-4.77(m, 1H) 4.77-5.03(m, 1H) 5.09(s, 2H)
7.06-7.21(m, 2H) 7.73(s, 1H) 8.16(d, J=4.29Hz, 1H)
【０３６１】
（実施例５８）
１−メチルシクロプロピル（３Ｓ，４Ｒ）−４−（５−シアノ−４−｛［（２−メチルピリジン−３−イル）オキシ］メチル｝−１Ｈ−ピラゾール−１−イル）−３−フルオロピペリジン−１−カルボキシレート
【０３６２】
【化１１５】
2013543885.tif 000119
実施例５５と同様の手順に従って、市販の３−ヒドロキシ−２−メチルピリジンを使用して、表題化合物を調製した。ヘプタン中４０％から１００％の酢酸エチルの勾配で溶離するフラッシュクロマトグラフィーによって粗製物質を精製して、ラセミ生成物を得、これを、次の条件：カラム：キラルセル  ＯＪ−Ｈ  ４．６ｍｍ×２５ｃｍ；移動相：８５／１５の二酸化炭素／メタノール、調節剤：０．２％イソプロピルアミン；流速：２．５ｍＬ／分でのキラルＨＰＬＣによってさらに精製して、表題化合物を得た。ＬＣ／ＭＳ（ＥＳ＋）：４１４．１（Ｍ＋１）
【０３６３】
（実施例５９）
１−メチルシクロプロピル（３Ｒ，４Ｓ）−４−（５−シアノ−４−｛［（２−メチルピリジン−３−イル）オキシ］メチル｝−１Ｈ−ピラゾール−１−イル）−３−フルオロピペリジン−１−カルボキシレート
【０３６４】
【化１１６】
2013543885.tif 000120
実施例５５と同様の手順に従って、市販の３−ヒドロキシ−２−メチルピリジンを使用して、表題化合物を調製した。ヘプタン中４０％から１００％の酢酸エチルの勾配で溶離するフラッシュクロマトグラフィーによって粗製物質を精製して、ラセミ生成物を得、これを、次の条件：カラム：キラルセル  ＯＪ−Ｈ  ４．６ｍｍ×２５ｃｍ；移動相：８５／１５の二酸化炭素／メタノール、調節剤：０．２％イソプロピルアミン；流速：２．５ｍＬ／分でのキラルＨＰＬＣによってさらに精製して、表題化合物を得た。ＬＣ／ＭＳ（ＥＳ＋）：４１４．１（Ｍ＋１）
【０３６５】
（実施例６０）
ｔｅｒｔ−ブチル４−（５−シアノ−４−｛［４−（１Ｈ−１，２，３−トリアゾール−１−イル）フェノキシ］メチル｝−１Ｈ−ピラゾール−１−イル）ピペリジン−１−カルボキシレート
【０３６６】
【化１１７】
2013543885.tif 000121
実施例１５と同様の手順に従って、４−（１Ｈ−１，２，３−トリアゾール−１−イル）フェノール（米国特許出願公開ＰＣＴ／ＵＳ２００９／０３８３１５号、公報番号ＷＯ２００９／１２９０３６（Ａ１）号）を使用して、表題化合物を調製した。ＨＰＬＣ（カラム：Ｐｈｅｎｏｍｅｎｅｘ  Ｇｅｍｉｎｉ  Ｃ１８  ２５０×２１．２ｍｍ、８マイクロメートル；移動相：水（アンモニアｐＨ１０）中５０％のアセトニトリル（アンモニアｐＨ１０）から水（アンモニアｐＨ１０）中５５％のアセトニトリル（アンモニアｐＨ１０）へ；流速：２５ｍＬ／分；波長：２２０ｎｍ）によって粗製物質を精製して、表題化合物を得た。ＬＣ／ＭＳ（ＥＳ＋）：４５０．１（Ｍ＋１）
【０３６７】
（実施例６１）
ｔｅｒｔ−ブチル４−（５−シアノ−４−｛［４−（２Ｈ−１，２，３−トリアゾール−２−イル）フェノキシ］メチル｝−１Ｈ−ピラゾール−１−イル）ピペリジン−１−カルボキシレート
【０３６８】
【化１１８】
2013543885.tif 000122
実施例１５と同様の手順に従って、４−（２Ｈ−１，２，３−トリアゾール−２−イル）フェノール（米国特許出願公開第ＰＣＴ／ＵＳ２００９／０３８３１５号、公報番号ＷＯ２００９／１２９０３６（Ａ１）号）を使用して、表題化合物を調製した。ＨＰＬＣ（カラム：Ｐｈｅｎｏｍｅｎｅｘ  Ｇｅｍｉｎｉ  Ｃ１８  ２５０×２１．２ｍｍ、８マイクロメートル；移動相：水（アンモニアｐＨ１０）中６３％のアセトニトリル（アンモニアｐＨ１０）；流速：２５ｍＬ／分；波長：２２０ｎｍ）によって粗製物質を精製して、表題化合物を得た。ＬＣ／ＭＳ（ＥＳ＋）：４５０．１（Ｍ＋１）
【０３６９】
（実施例６２）
１−メチルシクロプロピル４−（４−（（４−（１Ｈ−１，２，３−トリアゾール−１−イル）フェノキシ）メチル）−５−シアノ−１Ｈ−ピラゾール−１−イル）ピペリジン−１−カルボキシレート
【０３７０】
【化１１９】
2013543885.tif 000123
実施例６０と同様の様式で、実施例６０から出発して、表題化合物を調製した。逆相ＨＰＬＣによって、粗製物質を精製した：
カラム：Ｋｒｏｍａｓｉｌ  Ｅｔｅｒｎｉｔｙ−５−Ｃ１８  １５０×３０ｍｍ×５マイクロメートル
移動相：水（０．２２５％ギ酸）中３８％のアセトニトリル（０．２２５％ギ酸）から水（０．２２５％ギ酸）中５８％のアセトニトリル（０．２２５％ギ酸）へ
流速：３０ｍＬ／分
波長：２２０ｎｍ
1H NMR(400MHz, 重水素化クロロホルム): δ ppm 7.92(s, 1H), 7.84(s, 1H), 7.68(d,
3H), 7.11(t, 2H), 5.11(s, 2H), 4.53(m, 1H), 4.26(m, 2H), 2.93(s, 2H), 2.12(t,
2H), 2.03(d, 2H) 1.56(s, 3H), 0.88(t, 2H), 0.64(t, 2H)
【０３７１】
（実施例６３）
１−メチルシクロプロピル４−（４−（（４−（２Ｈ−１，２，３−トリアゾール−２−イル）フェノキシ）メチル）−５−シアノ−１Ｈ−ピラゾール−１−イル）ピペリジン−１−カルボキシレート
【０３７２】
【化１２０】
2013543885.tif 000124
実施例６１と同様の様式で、実施例６１から出発して、表題化合物を調製した。粗製の残渣を分取ＨＰＬＣによって精製して、表題化合物５０ｍｇ（３９％）を白色の固体として得た：
カラム：Ｂｏｓｔｏｎ  Ｓｙｍｍｅｔｒｉｘ  ＯＤＳ−Ｈ  １５０×３０ｍｍ×５マイクロメートル
移動相：水（０．２２５％ギ酸）中５０％のアセトニトリル（０．２２５％ギ酸）から水（０．２２５％ギ酸）中７０％のアセトニトリル（０．２２５％ギ酸）へ
流速：３０ｍＬ／分
波長：２２０ｎｍ
1H
NMR(400MHz, 重水素化クロロホルム): δ ppm
8.01(d, 2H), 7.78(s, 2H), 7.69(s, 1H), 7.07(d, 2H), 5.10(s, 2H), 4.51(m, 1H),
4.33(m, 2H), 2.93(s, 2H), 2.11(t, 2H), 2.03(d, 2H) 1.56(s, 3H), 0.80(s, 2H),
0.65(d, 2H).
【０３７３】
（実施例６４）
ｔｅｒｔ−ブチル４−［５−シアノ−４−（｛［１−（メチルスルホニル）ピペリジン−４−イル］オキシ｝メチル）−１Ｈ−ピラゾール−１−イル］ピペリジン−１−カルボキシレート
【０３７４】
【化１２１】
2013543885.tif 000125
実施例１３と同様の様式で、表題化合物を調製した。石油エーテルおよび酢酸エチルの１：４混合物を使用するシリカゲルクロマトグラフィーによって、粗製の化合物を精製した。
1H
NMR(400MHz, 重水素化クロロホルム): δ ppm
7.54(s, 1H), 4.53(s, 2H), 4.48(m, 1H), 4.28(br, 2H), 3.69(m, 1H), 3.31(m, 4H),
2.90(m, 2H), 2.79(s, 3H), 2.11(m, 2H), 1.88-2.00(m, 6H), 1.47(s, 9H).
【０３７５】
（実施例６５）
ｔｅｒｔ−ブチル４−［５−シアノ−４−（｛２−フルオロ−４−［（２−ヒドロキシエチル）（メチル）カルバモイル］フェノキシ｝メチル）−１Ｈ−ピラゾール−１−イル］ピペリジン−１−カルボキシレート
【０３７６】
【化１２２】
2013543885.tif 000126
実施例４６と同様の様式で、表題化合物を調製した。逆相ＨＰＬＣによって、粗製物質を精製した：
カラム：Ｐｈｅｎｏｍｅｎｅｘ  Ｇｅｍｉｎｉ  Ｃ１８  ２５０×２１．２ｍｍ×８マイクロメートル
移動相：水（アンモニアｐＨ１０）中４０％のアセトニトリル（アンモニアｐＨ１０）から水（アンモニアｐＨ１０）中６０％のアセトニトリル（アンモニアｐＨ１０）へ
流速：２５ｍＬ／分
波長：２２０ｎｍ
1H
NMR(400MHz, 重水素化クロロホルム): δ ppm
7.69(s, 1H), 7.28(d, 1H), 7.24(s, 1H), 7.05(d, 1H), 5.18(s, 2H), 4.50(q, 1H) ,
4.29(d, 2H)，3.90(s, 2H), 3.71(s, 2H), 3.10(s, 3H),
2.91(s, 2H), 2.14(q, 2H), 1.99(s, 2H), 1.48(s, 9H).
【０３７７】
（実施例６６）
ｔｅｒｔ−ブチル４−［５−シアノ−４−（｛２−フルオロ−４−［（３−ヒドロキシピロリジン−１−イル）カルボニル］フェノキシ｝メチル）−１Ｈ−ピラゾール−１−イル］ピペリジン−１−カルボキシレート
【０３７８】
【化１２３】
2013543885.tif 000127
実施例４６と同様の様式で、表題化合物を調製した。逆相ＨＰＬＣによって、粗製物質を精製した：
カラム：Ｐｈｅｎｏｍｅｎｅｘ  Ｇｅｍｉｎｉ  Ｃ１８  ２５０×２１．２ｍｍ×８マイクロメートル
移動相：水（アンモニアｐＨ１０）中４０％のアセトニトリル（アンモニアｐＨ１０）から水（アンモニアｐＨ１０）中６０％のアセトニトリル（アンモニアｐＨ１０）へ
流速：２５ｍＬ／分
波長：２２０ｎｍ
1H
NMR(400MHz, 重水素化クロロホルム): δ ppm
7.69(s, 1H), 7.32(d, 2H), 7.05(t, 1H), 5.14(s, 2H), 4.52(q, 2H) , 4.29(s, 2H)，3.78(d, 2H), 3.64(d, 1H), 3.45(d, 1H), 2.90(s, 2H), 2.14(q, 2H),
2.00(d, 4H), 1.47(s, 9H).
【０３７９】
（実施例６７）
ｔｅｒｔ−ブチル４−（４−｛［４−（アゼチジン−１−イルカルボニル）−２−フルオロフェノキシ］メチル｝−５−シアノ−１Ｈ−ピラゾール−１−イル）ピペリジン−１−カルボキシレート
【０３８０】
【化１２４】
2013543885.tif 000128
実施例４６と同様の様式で、表題化合物を調製した。逆相ＨＰＬＣによって、粗製物質を精製した：
カラム：Ｐｈｅｎｏｍｅｎｅｘ  Ｇｅｍｉｎｉ  Ｃ１８  ２５０×２１．２ｍｍ×８マイクロメートル
移動相：水（アンモニアｐＨ１０）中４０％のアセトニトリル（アンモニアｐＨ１０）から水（アンモニアｐＨ１０）中６０％のアセトニトリル（アンモニアｐＨ１０）へ
流速：２５ｍＬ／分
波長：２２０ｎｍ
1H
NMR(400MHz, 重水素化クロロホルム): δ ppm
7.69(s, 1H), 7.43(d, 1H), 7.41(s, 1H), 7.04(t, 1H), 5.14(s, 2H), 4.50(q, 1H) ,
4.31(d, 6H)，2.90(d, 2H), 2.38(q, 2H), 2.15(q, 2H),
2.08(d, 2H), 1.47(s, 9H).
【０３８１】
（実施例６８）
１−メチルシクロプロピル４−［５−シアノ−４−（｛［１−（メチルスルホニル）ピペリジン−４−イル］オキシ｝メチル）−１Ｈ−ピラゾール−１−イル］ピペリジン−１−カルボキシレート
【０３８２】
【化１２５】
2013543885.tif 000129
実施例６４と同様の様式で、表題化合物を調製した。逆相ＨＰＬＣによって、粗製物質を精製した：
カラム：Ｐｈｅｎｏｍｅｎｅｘ  Ｓｙｎｅｒｇｉ  Ｃ１８  １５０×３０ｍｍ×４マイクロメートル
移動相：水（０．２２５％ギ酸）中４３％のアセトニトリル（０．２２５％ギ酸）から水（０．２２５％ギ酸）中５３％のアセトニトリル（０．２２５％ギ酸）へ
流速：３０ｍＬ／分
1H NMR(400MHz, 重水素化クロロホルム): δ ppm 7.54(s, 1H), 4.53(s, 2H), 4.48(m,
1H), 4.35(d, 2H), 3.69(m, 1H), 3.31(m, 4H), 2.91(m, 2H), 2.78(s, 3H), 2.12(m,
2H), 1.87-1.98(m, 6H), 1.56(s, 3H), 0.88(t, 2H), 0.66(t, 2H).
【０３８３】
本出願を通じて、様々な刊行物を参照している。それらの刊行物の開示はその全体が、あらゆる目的について参照によって本出願に組み込まれる。
【０３８４】
本発明の範囲および精神から逸脱することなく、本発明を様々に変更および変化させることができることは、当業者には明らかであろう。本発明の他の実施形態は、本明細書を検討し、本明細書に開示されている本発明を実践することで、当業者には明らかになるであろう。本明細書および実施例は単なる例示とみなされ、本発明の真の範囲および意図は、以下の特許請求の範囲によって示されていることが意図されている。
【国際調査報告】
2013543885.tif 000130
2013543885.tif 000131