(57)【要約】  本発明は、ベータ部位アミロイド切断酵素、ＢＡＣＥ、ＢＡＣＥ１、Ａｓｐ２もしくはメマプシン２としても知られている、ベータ−セクレターゼの阻害剤としての新規の３−アミノ−５，６−ジヒドロ−１Ｈ−ピラジン−２−オン誘導体に関する。本発明はまた、そのような化合物を含んでなる製薬学的組成物に、そのような化合物および組成物を製造する方法に、そしてアルツハイマー病（ＡＤ）、軽度認識障害、老衰、認知症、レヴィー小体認知症、ダウン症、脳卒中と関連する認知症、パーキンソン病と関連する認知症もしくはベータ−アミロイドと関連する認知症のような、ベータ−セクレターゼが関与する疾患の防止および処置のためのそのような化合物および組成物の使用にも関する。【特許請求の範囲】
【請求項１】
式（Ｉ）
【化１】
2013529664.tif 000070
［式中、
Ｒ１は水素、Ｃ１〜３アルキル、モノ−およびポリハロ−Ｃ１〜３アルキル、アリールおよびヘテロアリールよりなる群から選択され；
Ｒ２は水素、Ｃ１〜３アルキル、モノ−およびポリハロ−Ｃ１〜３アルキル、アリールおよびヘテロアリールよりなる群から選択され；
Ｘ１、Ｘ２、Ｘ３、Ｘ４は独立してＣ（Ｒ３）もしくはＮであり、ただし、その２個以下はＮを表し；各Ｒ３は水素、ハロ、Ｃ１〜３アルキル、モノ−およびポリハロ−Ｃ１〜３アルキル、シアノ、Ｃ１〜３アルキルオキシ、モノ−およびポリハロ−Ｃ１〜３アルキルオキシよりなる群から選択され；
Ｌは結合もしくは−Ｎ（Ｒ４）ＣＯ−であり、ここで、Ｒ４は水素もしくはＣ１〜３アルキルであり；
Ａｒはホモアリールもしくはヘテロアリールであり；
ここで、ホモアリールはフェニルもしくはハロ、シアノ、Ｃ１〜３アルキル、Ｃ１〜３アルキルオキシ、モノ−およびポリハロ−Ｃ１〜３アルキルよりなる群から選択される１、２もしくは３個の置換基で置換されたフェニルであり；
ヘテロアリールは、各々場合によりハロ、シアノ、Ｃ１〜３アルキル、Ｃ１〜３アルキルオキシ、モノ−およびポリハロ−Ｃ１〜３アルキルよりなる群から選択される１、２もしくは３個の置換基で置換されていてもよい、ピリジル、ピリミジル、ピラジル、ピリダジル、フラニル、チエニル、ピロリル、ピラゾリル、イミダゾリル、トリアゾリル、チアゾリル、チアジアゾリル、オキサゾリルおよびオキサジアゾリルよりなる群から選択される］
の化合物もしくはその立体異性体；またはその付加塩もしくは溶媒和物。
【請求項２】
Ｒ１およびＲ２がＣ１〜３アルキルから独立して選択され；
Ｘ１、Ｘ２、Ｘ３、Ｘ４が独立してＣ（Ｒ３）であり、ここで、各Ｒ３が水素およびハロから選択され；
Ｌが結合もしくは−Ｎ（Ｒ４）ＣＯ−であり、ここで、Ｒ４が水素であり；
Ａｒがホモアリールもしくはヘテロアリールであり；
ここで、ホモアリールがフェニルもしくはハロ、シアノ、Ｃ１〜３アルキルおよびＣ１〜３アルキルオキシよりなる群から選択される１もしくは２個の置換基で置換されたフェニルであり；
ヘテロアリールが、各々場合によりハロ、シアノ、Ｃ１〜３アルキルおよびＣ１〜３アルキルオキシよりなる群から選択される１もしくは２個の置換基で置換されていてもよい、ピリジル、ピリミジルおよびピラジルよりなる群から選択される
請求項１に記載の化合物；またはその付加塩もしくは溶媒和物。
【請求項３】
Ｒ１およびＲ２がメチルであり；
Ｘ１、Ｘ２、Ｘ３、Ｘ４がＣＨであり；
Ｌが結合もしくは−Ｎ（Ｒ４）ＣＯ−であり、ここで、Ｒ４が水素であり；
Ａｒがホモアリールもしくはヘテロアリールであり；
ここで、ホモアリールがフェニルもしくはクロロおよびシアノから選択される１もしくは２個の置換基で置換されたフェニルであり；
ヘテロアリールが、各々場合によりクロロ、フルオロ、シアノ、メチルおよびメトキシよりなる群から選択される１もしくは２個の置換基で置換されていてもよい、ピリジル、ピリミジルおよびピラジルよりなる群から選択される
請求項１に記載の化合物；またはその付加塩もしくは溶媒和物。
【請求項４】
Ｒ１およびＲ２がメチルであり；
Ｘ１がＣＨもしくはＣＦであり；Ｘ２、Ｘ３およびＸ４がＣＨであり；
Ｌが−ＮＨＣＯ−であり；
Ａｒが５−クロロ−ピリジン−２−イルである
請求項１に記載の化合物；またはその付加塩もしくは溶媒和物。
【請求項５】
Ｒ１およびＲ２がメチルであり；
Ｘ１およびＸ３がＣＨもしくはＣＦであり；Ｘ２およびＸ４がＣＨであり；
Ｌが結合であり；
Ａｒが５−メトキシ−ピリジン−３−イルもしくはピリミジン−５−イルである
請求項１に記載の化合物；またはその付加塩もしくは溶媒和物。
【請求項６】
請求項１〜５のいずれか１項に記載の化合物の治療的に有効な量および製薬学的に許容しうる担体を含んでなる製薬学的組成物。
【請求項７】
製薬学的に許容しうる担体を請求項１〜５のいずれか１項に記載の化合物の治療的に有効な量とよく混合することを特徴とする、請求項６に記載の製薬学的組成物を製造する方法。
【請求項８】
アルツハイマー病（ＡＤ）、軽度認識障害、老衰、認知症、レヴィー小体認知症、ダウン症、脳卒中と関連する認知症、パーキンソン病と関連する認知症もしくはベータ−アミロイドと関連する認知症の処置、防止もしくは予防における使用のための請求項１〜５のいずれか１項に記載の化合物。
【請求項９】
請求項１〜５のいずれか１項に記載の化合物もしくは請求項６に記載の製薬学的組成物の治療的に有効な量を処置を必要とする患者に投与することを含んでなる、アルツハイマー病、軽度認識障害、老衰、認知症、レヴィー小体認知症、ダウン症、脳卒中と関連する認知症、パーキンソン病と関連する認知症およびベータ−アミロイドと関連する認知症よりなる群から選択される疾患を処置する方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、ベータ部位アミロイド切断酵素、ＢＡＣＥ、ＢＡＣＥ１、Ａｓｐ２もしくはメマプシン２としても知られている、ベータ−セクレターゼの阻害剤としての新規の３−アミノ−５，６−ジヒドロ−１Ｈ−ピラジン−２−オン誘導体に関する。本発明はまた、そのような化合物を含んでなる製薬学的組成物に、そのような化合物および組成物を製造する方法に、そしてアルツハイマー病（ＡＤ）、軽度認識障害、老衰、認知症、レヴィー小体認知症、ダウン症、脳卒中と関連する認知症、パーキンソン病と関連する認知症もしくはベータ−アミロイドと関連する認知症のような、ベータ−セクレターゼが関与する疾患の防止および処置のためのそのような化合物および組成物の使用にも関する。
【背景技術】
【０００２】
アルツハイマー病（ＡＤ）は老化と関連する神経変性疾患である。ＡＤ患者は、認知欠損および記憶喪失ならびに不安のような行動障害を患う。ＡＤを患っている患者の９０％以上は散発型の該疾患にかかり、一方、症例の１０％未満は家族性もしくは遺伝性である。米国において、６５歳で１０人中約１人はＡＤにかかっており、一方、８５歳では、２人に１人がＡＤを患っている。初期診断からの平均余命は７〜１０年であり、そしてＡＤ患者は非常に高価である介護付き住宅におけるかもしくは家族による広範な介護を必要とする。人口における高齢者の増加数と共に、ＡＤへの医学的関心が高まっている。ＡＤの現在利用可能な治療は単に疾患の症状を処置し、そして認識特性を改善するためのアセチルコリンエステラーゼ阻害剤ならびにこの疾患と関連する行動障害を制御するための抗不安薬および抗精神病薬を包含する。
【０００３】
ＡＤ患者の脳における顕著な病理学的特徴は、タウタンパク質の過剰リン酸化により生成される神経原線維のもつれおよびベータ−アミロイド１−４２（Ａベータ１−４２）ペプチドの凝集により生じるアミロイド斑である。Ａベータ１−４２はオリゴマーそして次に原線維を、そして最終的にアミロイド斑を形成する。オリゴマーおよび原線維は特に神経毒性であると考えられており、そしてＡＤと関連する神経学的損傷の大部分を引き起こし得る。Ａベータ１−４２の形成を妨げる薬剤は、ＡＤの処置のための病態修飾薬である可能性を有する。Ａベータ１−４２は、７７０アミノ酸を含んでなるアミロイド前駆体タンパク質（ＡＰＰ）から生成される。Ａベータ１−４２のＮ末端はベータ−セクレターゼ（ＢＡＣＥ）により切断され、そして次にガンマ−セクレターゼはＣ末端終端を切断する。Ａベータ１−４２に加えて、ガンマ−セクレターゼはまた主要な切断産物であるＡベータ１−４０ならびにＡベータ１−３８およびＡベータ１−４３も遊離させる。これらのＡベータ型はまた、凝集してオリゴマーおよび原線維を形成することもできる。従って、ＢＡＣＥの阻害剤はＡベータ１−４２ならびにＡベータ１−４０、Ａベータ１−３８およびＡベータ１−４３の形成を妨げると期待され、そしてＡＤの処置における潜在的治療薬である。
【発明の概要】
【０００４】
［発明の要約］
本発明は、式（Ｉ）
【０００５】
【化１】
2013529664.tif 000002
【０００６】
［式中、
Ｒ１は水素、Ｃ１〜３アルキル、モノ−およびポリハロ−Ｃ１〜３アルキル、アリールおよびヘテロアリールよりなる群から選択され；
Ｒ２は水素、Ｃ１〜３アルキル、モノ−およびポリハロ−Ｃ１〜３アルキル、アリールおよびヘテロアリールよりなる群から選択され；
Ｘ１、Ｘ２、Ｘ３、Ｘ４は独立してＣ（Ｒ３）もしくはＮであり、ただし、その２個以下はＮを表し；各Ｒ３は水素、ハロ、Ｃ１〜３アルキル、モノ−およびポリハロ−Ｃ１〜３アルキル、シアノ、Ｃ１〜３アルキルオキシ、モノ−およびポリハロ−Ｃ１〜３アルキルオキシよりなる群から選択され；
Ｌは結合もしくは−Ｎ（Ｒ４）ＣＯ−であり、ここで、Ｒ４は水素もしくはＣ１〜３アルキルであり；
Ａｒはホモアリールもしくはヘテロアリールであり；
ここで、ホモアリールはフェニルもしくはハロ、シアノ、Ｃ１〜３アルキル、Ｃ１〜３アルキルオキシ、モノ−およびポリハロ−Ｃ１〜３アルキルよりなる群から選択される１、２もしくは３個の置換基で置換されたフェニルであり；
ヘテロアリールは、各々場合によりハロ、シアノ、Ｃ１〜３アルキル、Ｃ１〜３アルキルオキシ、モノ−およびポリハロ−Ｃ１〜３アルキルよりなる群から選択される１、２もしくは３個の置換基で置換されていてもよい、ピリジル、ピリミジル、ピラジル、ピリダジル、フラニル、チエニル、ピロリル、ピラゾリル、イミダゾリル、トリアゾリル、チアゾリル、チアジアゾリル、オキサゾリルおよびオキサジアゾリルよりなる群から選択される］
の化合物もしくはその立体異性体；またはその付加塩もしくは溶媒和物に関する。
【０００７】
本発明の実例となるのは、製薬学的に許容しうる担体および上記の化合物のいずれかを含んでなる製薬学的組成物である。本発明の実例は、上記の化合物のいずれかおよび製薬学的に許容しうる担体を混合することにより製造される製薬学的組成物である。本発明を説明するのは、上記の化合物のいずれかおよび製薬学的に許容しうる担体を混合することを含んでなる製薬学的組成物を製造する方法である。
【０００８】
本発明を例示するのは、上記の化合物もしくは製薬学的組成物のいずれかの治療的に有効な量を処置を必要とする患者に投与することを含んでなる、ベータ−セクレターゼ酵素により媒介される疾患を処置する方法である。
【０００９】
本発明をさらに例示するのは、上記の化合物もしくは製薬学的組成物のいずれかの治療的に有効な量を阻害を必要とする患者に投与することを含んでなる、ベータ−セクレターゼ酵素を阻害する方法である。
【００１０】
本発明の実例は、上記の化合物もしくは製薬学的組成物のいずれかの治療的に有効な量を処置を必要とする患者に投与することを含んでなる、アルツハイマー病、軽度認識障害、老衰、認知症、レヴィー小体認知症、ダウン症、脳卒中と関連する認知症、パーキンソン病と関連する認知症およびベータ−アミロイドと関連する認知症よりなる群から選択さ
れる疾患、好ましくはアルツハイマー病を処置する方法である。
【００１１】
本発明の別の実例は、処置を必要とする患者において、（ａ）アルツハイマー病、（ｂ）軽度認識障害、（ｃ）老衰、（ｄ）認知症、（ｅ）レヴィー小体認知症、（ｆ）ダウン症、（ｇ）脳卒中と関連する認知症、（ｈ）パーキンソン病と関連する認知症および（ｉ）ベータ−アミロイドと関連する認知症を処置することにおける使用のための上記の化合物のいずれかである。
【発明を実施するための形態】
【００１２】
［発明の詳細な記述］
本発明は、上記に定義した通りの式（Ｉ）の化合物およびその製薬学的に許容しうる塩に関する。式（Ｉ）の化合物はベータ−セクレターゼ酵素（ベータ部位切断酵素、ＢＡＣＥ、ＢＡＣＥ１、Ａｓｐ２もしくはメマプシン２としても知られている）の阻害剤であり、そしてアルツハイマー病、軽度認識障害、老衰、認知症、脳卒中と関連する認知症、レヴィー小体認知症、ダウン症、パーキンソン病と関連する認知症およびベータ−アミロイドと関連する認知症、好ましくはアルツハイマー病、軽度認識障害もしくは認知症、より好ましくはアルツハイマー病の処置において有用である。
【００１３】
本発明の態様において、Ｒ１およびＲ２はＣ１〜３アルキルから独立して選択され；
Ｘ１、Ｘ２、Ｘ３、Ｘ４は独立してＣ（Ｒ３）であり、ここで、各Ｒ３は水素およびハロから選択され；
Ｌは結合もしくは−Ｎ（Ｒ４）ＣＯ−であり、ここで、Ｒ４は水素であり；
Ａｒはホモアリールもしくはヘテロアリールであり；
ここで、ホモアリールはフェニルもしくはハロ、シアノ、Ｃ１〜３アルキルおよび
Ｃ１〜３アルキルオキシよりなる群から選択される１もしくは２個の置換基で置換されたフェニルであり；
ヘテロアリールは、各々場合によりハロ、シアノ、Ｃ１〜３アルキルおよびＣ１〜３アルキルオキシよりなる群から選択される１もしくは２個の置換基で置換されていてもよい、ピリジル、ピリミジルおよびピラジルよりなる群から選択される；またはその付加塩もしくは溶媒和物。
【００１４】
本発明の別の態様において、Ｒ１およびＲ２はメチルであり；
Ｘ１、Ｘ２、Ｘ３、Ｘ４はＣＨであり；
Ｌは結合もしくは−Ｎ（Ｒ４）ＣＯ−であり、ここで、Ｒ４は水素であり；
Ａｒはホモアリールもしくはヘテロアリールであり；
ここで、ホモアリールはフェニルもしくはクロロおよびシアノから選択される１もしくは２個の置換基で置換されたフェニルであり；
ヘテロアリールは、各々場合によりクロロ、フルオロ、シアノ、メチルおよびメトキシよりなる群から選択される１もしくは２個の置換基で置換されていてもよい、ピリジル、ピリミジルおよびピラジルよりなる群から選択される；または
その付加塩もしくは溶媒和物。
【００１５】
本発明の別の態様において、Ｒ１およびＲ２はメチルであり；
Ｘ１はＣＨもしくはＣＦであり；Ｘ２、Ｘ３およびＸ４はＣＨであり；
Ｌは−ＮＨＣＯ−であり；
Ａｒは５−クロロ−ピリジン−２−イルである；または
その付加塩もしくは溶媒和物。
【００１６】
本発明の別の態様において、Ｒ１およびＲ２はメチルであり；
Ｘ１およびＸ３はＣＨもしくはＣＦであり；Ｘ２およびＸ４はＣＨであり；
Ｌは結合であり；
Ａｒは５−メトキシ−ピリジン−３−イルもしくはピリミジン−５−イルである；またはその付加塩もしくは溶媒和物。
【００１７】
［定義］
「ハロ」はフルオロ、クロロおよびブロモを意味するものとし；「Ｃ１〜３アルキル」は、１、２もしくは３個の炭素原子を有する直鎖状もしくは分枝鎖状飽和アルキル基、例えばメチル、エチル、１−プロピルおよび２−プロピルを意味するものとし；「Ｃ１〜３アルキルオキシ」は、Ｃ１〜３アルキルが上記に定義した通りであるエーテル基を意味するものとし；「モノ−およびポリハロＣ１〜３アルキル」は、１、２、３個もしくは可能な場合にはそれ以上の上記に定義した通りのハロ原子で置換された、上記に定義した通りのＣ１〜３アルキルを意味するものとし；「モノ−およびポリハロＣ１〜３アルキルオキシ」は、モノ−およびポリハロＣ１〜３アルキルが上記に定義した通りであるエーテル基を意味するものとし；「Ｃ３〜６シクロアルキル」はシクロプロピル、シクロブチル、シクロペンチルおよびシクロヘキシルを意味するものとし；「Ｃ３〜６シクロアルカンジイル」は、シクロプロパンジイル、シクロブタンジイル、シクロペンタンジイルおよびシクロヘキサンジイルのような２価の基を意味するものとする。
【００１８】
「患者」という用語は、本明細書において用いる場合、処置、観察もしくは実験の対象になるかもしくはなっている動物、好ましくは哺乳類、最も好ましくはヒトをさす。
【００１９】
「治療的に有効な量」は、本明細書において用いる場合、処置している疾病もしくは疾患の症状の軽減を包含する、研究者、獣医、医師もしくは他の臨床医により求められている組織系、動物もしくはヒトにおける生物学的もしくは薬剤反応を引き出す活性化合物もしくは医薬品の量を意味する。
【００２０】
本明細書において用いる場合、「組成物」という用語は、特定量の特定成分を含んでなる製品ならびに特定量の特定成分の組み合わせに直接的にもしくは間接的に由来する任意の製品を包含するものとする。
【００２１】
式（Ｉ）の化合物ならびにその付加塩、水和物および溶媒和物のあるものは１個もしくはそれ以上のキラリティー中心を含有しそして立体異性体として存在し得ることが認識される。
【００２２】
上記および下記で、「式（Ｉ）の化合物」という用語にはその付加塩、溶媒和物および立体異性体が包含されるものとする。
【００２３】
上記もしくは下記で「立体異性体」もしくは「立体化学的異性体」という用語は、同じ意味で用いられる。
【００２４】
本発明には、純粋な立体異性体としてまたは２つもしくはそれ以上の立体異性体の混合物としてのいずれかの式（Ｉ）の化合物の全ての立体異性体が包含される。
【００２５】
鏡像異性体は、互いの重ね合わせることができない鏡像である立体異性体である。１対の鏡像異性体の１：１混合物はラセミ化合物もしくはラセミ混合物である。ジアステレオマー（もしくはジアステレオ異性体）は鏡像異性体ではない立体異性体であり、すなわち、それらは鏡像として関連していない。化合物が二重結合を含有する場合、置換基はＥもしくはＺ立体配置においてであることができる。化合物が２基置換のシクロアルキル基を含有する場合、置換基はシスもしくはトランス立体配置においてであることができる。従って、本発明には鏡像異性体、ジアステレオマー、ラセミ化合物、Ｅ異性体、Ｚ異性体、
シス異性体、トランス異性体およびその混合物が包含される。
【００２６】
絶対立体配置は、カーン−インゴールド−プレローグシステムに従って特定される。不斉原子での立体配置は、ＲもしくはＳのいずれかにより特定される。その絶対立体配置が既知ではない分割化合物は、それらが平面偏光を回転させる方向により（＋）もしくは（−）で指定することができる。
【００２７】
特定の立体異性体が同定される場合、これは該立体異性体が他の異性体を実質的に含まない、すなわち、その５０％未満、好ましくは２０％未満、より好ましくは１０％未満、さらにより好ましくは５％未満、特に２％未満そして最も好ましくは１％未満と関連することを意味する。従って、式（Ｉ）の化合物が例えば（Ｒ）と特定される場合、これは該化合物が（Ｓ）異性体を実質的に含まないことを意味し；式（Ｉ）の化合物が例えばＥと特定される場合、これは該化合物がＺ異性体を実質的に含まないことを意味し；式（Ｉ）の化合物が例えばシスと特定される場合、これは該化合物がトランス異性体を実質的に含まないことを意味する。
【００２８】
さらに、本発明の化合物の結晶形態のあるものは多形体として存在することができ、そしてそのようなものとして本発明に包含されるものとする。さらに、本発明の化合物のあるものは水（すなわち、水和物）もしくは一般的な有機溶媒と溶媒和物を形成することができ、そしてそのような溶媒和物もまた本発明の範囲内に包含されるものとする。
【００２９】
薬剤における使用のために、本発明の化合物の塩は無毒の「製薬学的に許容しうる塩」をさす。しかしながら、他の塩は、本発明の化合物のもしくはそれらの製薬学的に許容しうる塩の製造において有用であり得る。化合物の適当な製薬学的に許容しうる塩には、例えば、塩酸、硫酸、フマル酸、マレイン酸、コハク酸、酢酸、安息香酸、クエン酸、酒石酸、炭酸もしくはリン酸のような製薬学的に許容しうる酸の溶液と化合物の溶液を混合することにより形成することができる酸付加塩が包含される。さらに、本発明の化合物が酸性部分を保有する場合、その適当な製薬学的に許容しうる塩にはアルカリ金属塩、例えばナトリウムもしくはカリウム塩；アルカリ土類金属塩、例えばカルシウムもしくはマグネシウム塩；および適当な有機リガンドと形成される塩、例えば第四級アンモニウム塩を包含することができる。
【００３０】
製薬学的に許容しうる塩の製造において用いることができる代表的な酸には以下のもの：酢酸、２，２−ジクロロ酢酸、アシル化アミノ酸、アジピン酸、アルギン酸、アスコルビン酸、Ｌ−アスパラギン酸、ベンゼンスルホン酸、安息香酸、４−アセトアミド安息香酸、（＋）−ショウノウ酸、カンファースルホン酸、カプリン酸、カプロン酸、カプリル酸、桂皮酸、クエン酸、シクラミン酸、エタン−１，２−ジスルホン酸、エタンスルホン酸、２−ヒドロキシエタンスルホン酸、ギ酸、フマル酸、ガラクタル酸、ゲンチシン酸、グルコヘプトン酸、Ｄ−グルコン酸、Ｄ−グルクロン酸（Ｄ−ｇｌｕｃｏｒｏｎｉｃ  ａｃｉｄ）、Ｌ−グルタミン酸、ベータ−オキソ−グルタル酸、グリコール酸、馬尿酸、臭化水素酸、塩酸、（＋）−Ｌ−乳酸、（±）−ＤＬ−乳酸、ラクトビオン酸、マレイン酸、（−）−Ｌ−リンゴ酸、マロン酸、（±）−ＤＬ−マンデル酸、メタンスルホン酸、ナフタレン−２−スルホン酸、ナフタレン−１，５−ジスルホン酸、１−ヒドロキシ−２−ナフトエ酸、ニコチン酸、硝酸、オレイン酸、オロチン酸、シュウ酸、パルミチン酸、パモン酸、リン酸、Ｌ−ピログルタミン酸、サリチル酸、４−アミノ−サリチル酸、セバシン酸、ステアリン酸、コハク酸、硫酸、タンニン酸、（＋）−Ｌ−酒石酸、チオシアン酸、ｐ−トルエンスルホン酸、トリフルオロメチルスルホン酸およびウンデシレン酸が包含されるがこれらに限定されるものではない。製薬学的に許容しうる塩の製造において使用することができる代表的な塩基には、以下のもの：アンモニア、Ｌ−アルギニン、ベネタミン、ベンザチン、水酸化カルシウム、コリン、ジメチルエタノールアミン、ジエタノー
ルアミン、ジエチルアミン、２−（ジエチルアミノ）−エタノール、エタノールアミン、エチレン−ジアミン、Ｎ−メチル−グルカミン、ヒドラバミン、１Ｈ−イミダゾール、Ｌ−リシン、水酸化マグネシウム、４−（２−ヒドロキシエチル）−モルホリン、ピペラジン、水酸化カリウム、１−（２−ヒドロキシエチル）−ピロリジン、第二級アミン、水酸化ナトリウム、トリエタノールアミン、トロメタミンおよび水酸化亜鉛が包含されるがこれらに限定されるものではない。
【００３１】
本発明の化合物の化学名は、Ｃｈｅｍｉｃａｌ  Ａｂｓｔｒａｃｔｓ  Ｓｅｒｖｉｃｅにより合意された命名規則に従ってつけられた。
【００３２】
式（Ｉ）の化合物のあるものはまた、それらの互変異性体において存在することもできる。そのような形態は、上記の式において明白に示されないが、本発明の範囲内に包含されるものとする。
【００３３】
化合物の製造
Ａ．最終化合物の製造
実験方法１
Ｌが−Ｎ（Ｒ４）ＣＯ−である式（Ｉ−ａ）の最終化合物は、反応スキーム（１）に従って式（ＩＩ−ａ）の中間化合物を式（ＩＩＩ）の化合物と反応させること、例えばＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミドのような適当な反応不活性溶媒中で、例えばＫ３ＰＯ４のような適当な塩基、例えばＣｕＩのような銅触媒および例えば（１Ｒ，２Ｒ）−（−）−１，２−ジアミノシクロヘキサンのようなジアミンの存在下で、例えばマイクロ波照射下で１３５分間、例えば１８０℃で反応混合物を加熱することのような温熱条件下で行われる反応により製造することができる。反応スキーム（Ｉ）において、全ての変記号は式（Ｉ）において定義した通りであり、そしてＷはハロである。
【００３４】
【化２】
2013529664.tif 000003
【００３５】
実験方法２
さらに、式（Ｉ−ａ）の最終化合物は、反応スキーム（２）に従って式（ＩＩ−ｂ）の中間化合物を式（ＩＶ）の化合物と反応させること、例えばジクロロメタンのような適当な反応不活性溶媒中で、例えばトリエチルアミンのような適当な塩基の存在下で、例えばＯ−（７−アザベンゾトリアゾール−１−イル）−Ｎ，Ｎ，Ｎ’，Ｎ’−テトラメチルウロニウムヘキサフルオロホスフェート［ＨＡＴＵ、ＣＡＳ  １４８８９３−１０−１］のような縮合剤の存在下で、例えば２時間、例えば２５℃で反応混合物を加熱することのような温熱条件下で行われる反応により製造することができる。反応スキーム（２）において、全ての変記号は式（Ｉ）において定義した通りである。
【００３６】
【化３】
2013529664.tif 000004
【００３７】
実験方法３
さらに、式（Ｉ−ａ）の最終化合物は、反応スキーム（３）に従って式（ＩＩ−ｂ）の中間化合物を式（Ｖ）の化合物と反応させること、例えばジクロロメタンのような適当な反応不活性溶媒中で、例えばピリジンのような適当な塩基の存在下で、例えば２時間、例えば２５℃で反応混合物を加熱することのような温熱条件下で行われる反応により製造することができる。反応スキーム（３）において、全ての変記号は式（Ｉ）において定義した通りであり、そしてＹはハロである。
【００３８】
【化４】
2013529664.tif 000005
【００３９】
実験方法４
Ｌが結合である式（Ｉ−ｂ）の最終化合物は、反応スキーム（４）に従って式（ＩＩ−ａ）の中間化合物を式（ＶＩ）の化合物と反応させること、例えば１，４−ジオキサン／エタノールのような例えば不活性溶媒の混合物のような適当な反応不活性溶媒中で、例えば水性Ｋ２ＣＯ３のような適当な塩基、例えばテトラキス−（トリフェニルホスフィン）パラジウム（０）［ＣＡＳ  １４２２１−０１−３］のようなＰｄ錯体触媒の存在下で、例えば２０時間、例えば８０℃で反応混合物を加熱することもしくは例えば、マイクロ波照射下で１０分〜３０分間、１５０℃で反応混合物を加熱することのような温熱条件下で行われる反応により製造することができる。反応スキーム（４）において、全ての変記号は式（Ｉ）において定義した通りであり、そしてＷはハロである。Ｒ５およびＲ６は水素もしくはアルキルであることができ、または一緒になって例えば式−ＣＨ２ＣＨ２−、−ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２−もしくは−Ｃ（ＣＨ３）２Ｃ（ＣＨ３）２−の２価の基を形成することができる。
【００４０】
【化５】
2013529664.tif 000006
【００４１】
前述の製造における多数の中間体および出発物質は、該もしくは同様な化合物を製造する当該技術分野で既知の方法論に従って製造することができる既知の化合物であり、そしてある中間体は新規である。多数のそのような製造方法は、以下にさらに詳細に記述される。
【００４２】
Ｂ．中間化合物の製造
実験方法５
Ｒ１およびＲ２が水素である式（ＩＩ−ａ）、（ＩＩ−ｂ）および（ＩＩ−ｃ）の中間化合物は、以下の反応スキーム（５）および（６）に示される反応段階に従って一般に製造することができる。
【００４３】
【化６】
2013529664.tif 000007
【００４４】
式（ＩＩ−ａ）、（ＩＩ−ｂ）および（ＩＩ−ｃ）の中間体は、当該技術分野で既知のメトキシイミンからアミジンへの転化方法に従うことにより式（ＶＩＩ−ａ）、（ＶＩＩ−ｂ）および（ＶＩＩ−ｃ）の対応する中間化合物から製造することができる（反応段階Ａ）。該転化は、反応スキーム（５）に従って、例えば塩化アンモニウムのような適切なアンモニア源での式（ＶＩＩ−ａ）、（ＶＩＩ−ｂ）および（ＶＩＩ−ｃ）の該中間化合物の処理、例えばエタノールのような適当な反応不活性溶媒中で、例えば１８時間、例えば７５℃で反応混合物を加熱することのような温熱条件下で行われる反応により行うことができる。
【００４５】
上記の反応スキーム（５）における式（ＶＩＩ−ａ）、（ＶＩＩ−ｂ）および（ＶＩＩ−ｃ）の中間化合物は、当該技術分野で既知のアミドからメトキシイミンへの転化方法に従って式（ＶＩＩＩ−ａ）、（ＶＩＩＩ−ｂ）および（ＶＩＩＩ−ｃ）の対応する中間化合物から製造することができる（反応段階Ｂ）。該転化は、例えばジクロロメタンのような適当な反応不活性溶媒中で、例えば３日間、例えば２５℃のような適度に高い温度で、例えばテトラフルオロホウ酸トリメチルオキソニウムのようなメチル化剤での式（ＶＩＩＩ−ａ）、（ＶＩＩＩ−ｂ）および（ＶＩＩＩ−ｃ）の対応する中間化合物の処理により都合良く行うことができる。
【００４６】
上記の反応スキーム（５）における式（ＶＩＩＩ−ａ）、（ＶＩＩＩ−ｂ）および（ＶＩＩＩ−ｃ）の中間化合物は、当該技術分野で既知の環化方法に従って式（ＩＸ−ａ）、（ＩＸ−ｂ）および（ＩＸ−ｃ）の対応する中間化合物から製造することができる（反応段階Ｃ）。該環化は、例えば１，４−ジオキサン中の塩酸のような酸性媒質中で、例えば１時間、例えば２５℃のような適度に高い温度での式（ＩＸ−ａ）、（ＩＸ−ｂ）および（ＩＸ−ｃ）の該中間化合物の処理により都合良く行うことができる。
【００４７】
【化７】
2013529664.tif 000008
【００４８】
上記の反応スキーム（６）における式（ＩＸ−ａ）、（ＩＸ−ｂ）および（ＩＸ−ｃ）の中間体は、当該技術分野で既知のＮ−アシル化方法に従って式（ＸＩ−ａ）、（ＸＩ−ｂ）および（ＸＩ−ｃ）の中間化合物を反応させることにより製造することができる（反応段階Ｄ）。該Ｎ−アシル化は、式（Ｘ）の中間化合物での式（ＸＩ−ａ）、（ＸＩ−ｂ）および（ＸＩ−ｃ）の対応する中間化合物の処理、例えばジクロロメタンのような適当な反応不活性溶媒中で、例えばトリエチルアミンのような適当な塩基の存在下で、例えば０℃のような低温で、例えば３時間行われる反応により都合良く行うことができる。反応スキーム（６）において、全ての変記号は式（Ｉ）において定義した通りであり、そしてハロはクロロもしくはブロモである。
【００４９】
上記の反応スキーム（６）における式（ＸＩ−ａ）、（ＸＩ−ｂ）および（ＸＩ−ｃ）
の中間体は、当該技術分野で既知の還元的アミノ化方法に従って式（ＸＩＩＩ−ａ）、（ＸＩＩＩ−ｂ）および（ＸＩＩＩ−ｃ）の中間化合物を反応させることにより製造することができる（反応段階Ｅ）。該還元的アミノ化は、式（ＸＩＩ）の中間化合物および例えばトリアセトキシ水素化ホウ素ナトリウムのような適当な還元剤での式（ＸＩＩＩ−ａ）、（ＸＩＩＩ−ｂ）および（ＸＩＩＩ−ｃ）の対応する中間化合物の処理、例えばジクロロメタンのような適当な反応不活性溶媒中で、例えば酢酸のような適当な酸性触媒の存在下で、例えば２５℃のような適度に高い温度で、例えば５時間行われる反応により都合良く行うことができる。反応スキーム（６）において、全ての変記号は式（Ｉ）において定義した通りである。
【００５０】
上記の反応スキーム（６）における式（ＸＩＩＩ−ａ）、（ＸＩＩＩ−ｂ）および（ＸＩＩＩ−ｃ）の中間体は、当該技術分野で既知のアルコールからアルデヒドへの酸化方法に従って式（ＸＩＶ−ａ）、（ＸＩＶ−ｂ）および（ＸＩＶ−ｃ）の中間化合物を反応させることにより製造することができる（反応段階Ｆ）。該酸化は、例えばジクロロメタンのような適当な反応不活性溶媒中で、例えば０℃のような低温で、例えば１０分間そして次に例えば２５℃のような適度に高い温度で、例えば１時間、例えばデス−マーチンペルヨージナン［ＣＡＳ：８７４１３−０９−０］のような酸化剤での式（ＸＩＶ−ａ）、（ＸＩＶ−ｂ）および（ＸＩＶ−ｃ）の対応する中間化合物の処理により都合良く行うことができる。反応スキーム（６）において、全ての変記号は式（Ｉ）において定義した通りである。
【００５１】
Ｚが例えばｔｅｒｔ−ブトキシ−カルボニル基のような適当なＮ−保護基である式（ＸＩＶ−ａ）、（ＸＩＶ−ｂ）および（ＸＩＶ−ｃ）の中間化合物は、当該技術分野で既知のストレッカー型方法に従って一般に製造することができる。
【００５２】
薬理学
本発明の化合物およびその製薬学的に許容しうる組成物はＢＡＣＥを阻害し、そしてそれ故にアルツハイマー病（ＡＤ）、軽度認識障害（ＭＣＩ）、老衰、認知症、レヴィー小体認知症、脳アミロイド血管症、多発脳梗塞性認知症、ダウン症、パーキンソン病と関連する認知症もしくはベータ−アミロイドと関連する認知症の処置もしくは防止において有用であり得る。
【００５３】
本発明は、薬剤としての使用のための一般式（Ｉ）の化合物、その立体異性体あるいはその製薬学的に許容しうる酸もしくは塩基付加塩または溶媒和物に関する。
【００５４】
本発明はまた、ＡＤ、ＭＣＩ、老衰、認知症、レヴィー小体認知症、脳アミロイド血管症、多発脳梗塞性認知症、ダウン症、パーキンソン病と関連する認知症およびベータ−アミロイドと関連する認知症よりなる群から選択される疾病もしくは症状の処置もしくは防止における使用のための一般式（Ｉ）の化合物、その立体異性体あるいはその製薬学的に許容しうる酸もしくは塩基付加塩または溶媒和物にも関する。
【００５５】
本発明はまた、上記の疾病症状のいずれか１つの処置もしくは防止用の薬剤の製造のための一般式（Ｉ）の化合物、その立体異性体あるいはその製薬学的に許容しうる酸もしくは塩基付加塩または溶媒和物の使用にも関する。
【００５６】
式（Ｉ）の化合物の有用性を考慮して、上記の疾病のいずれか１つを患っているヒトを包含する温血動物を処置する方法もしくはヒトを包含する温血動物が患うのを防ぐ方法が提供される。
【００５７】
該方法は、ヒトを包含する温血動物への式（Ｉ）の化合物、その立体異性体、その製薬
学的に許容しうる付加塩もしくは溶媒和物の有効量の投与、すなわち全身もしくは局所投与、好ましくは経口投与を含んでなる。
【００５８】
処置の方法はまた、一日あたり１〜４回の間の服用の処方計画で有効成分を投与することを包含することもできる。これらの処置の方法において、本発明の化合物は好ましくは投与の前に調合される。本明細書において以下に記載の通り、適当な製薬学的製剤は周知のそして容易に利用可能な成分を用いて既知の方法により製造される。
【００５９】
アルツハイマー病もしくはその症状を処置するかもしくは防ぐために適当であることができる本発明の化合物は、単独でまたは１つもしくはそれ以上の追加の治療薬と組み合わせて投与することができる。併用療法には、式（Ｉ）の化合物および１つもしくはそれ以上の追加の治療薬を含有する単一の製薬学的投与製剤の投与、ならびにそれ自体の別個の製薬学的投与製剤における式（Ｉ）の化合物および各々の追加の治療薬の投与が包含される。例えば、式（Ｉ）の化合物および治療薬は、錠剤もしくはカプセル剤のような単一の経口投与組成物において一緒に患者に投与することができ、または各薬剤は別個の経口投与製剤において投与することができる。
【００６０】
製薬学的組成物
本発明はまた、アルツハイマー病（ＡＤ）、軽度認識障害、老衰、認知症、レヴィー小体認知症、ダウン症、脳卒中と関連する認知症、パーキンソン病と関連する認知症およびベータ−アミロイドと関連する認知症のような、ベータ−セクレターゼの阻害が有益である疾病を防ぐかもしくは処置するための組成物も提供する。該組成物は、式（Ｉ）の化合物の治療的に有効な量および製薬学的に許容しうる担体もしくは希釈剤を含んでなる。
【００６１】
有効成分を単独で投与することは可能であるが。それを製薬学的組成物として与えることが好ましい。従って、本発明はさらに、製薬学的に許容しうる担体もしくは希釈剤と一緒に、本発明の化合物を含んでなる製薬学的組成物を提供する。担体もしくは希釈剤は、組成物の他の成分と適合しそしてそのレシピエントに有害でないという意味において「許容可能」でなければならない。
【００６２】
本発明の製薬学的組成物は、薬学の技術分野において周知である任意の方法により製造することができる。有効成分として、塩基形態（ｂａｓｅ  ｆｏｒｍ）もしくは付加塩形態における特定の化合物の治療的に有効な量を製薬学的に許容しうる担体とよく混合して合わせ、それは投与に所望される製剤の形態により多種多様な形態をとることができる。望ましくは、これらの製薬学的組成物は、好ましくは、経口、皮下もしくは非経口投与のような全身投与；または吸入、鼻用スプレー、点眼薬によるかもしくはクリーム、ゲル、シャンプーなどによるような局所投与に適当な単位投与形態物においてである。例えば、経口投与形態物における組成物を製造することにおいて、懸濁剤、シロップ剤、エリキシル剤および液剤のような経口用液状製剤の場合には例えば、水、グリコール、油、アルコールなどのような通常の製薬学的媒質のいずれかを；または散剤、丸剤、カプセル剤および錠剤の場合には澱粉、糖、カオリン、潤滑剤、結合剤、崩壊剤などのような固形担体を用いることができる。錠剤およびカプセル剤は、それらの投与の容易さのために、最も都合のよい経口投与単位形態物に相当し、この場合、固形の製薬学的担体が明らかに用いられる。非経口組成物では、例えば、溶解性を促進するために他の成分を含むことができるが、通常、担体は少なくとも大部分において滅菌水を含んでなる。例えば、注入可能な液剤を製造することができ、ここで、担体は食塩水溶液、グルコース溶液もしくは食塩水とグルコース溶液の混合物を含んでなる。注入可能な懸濁剤もまた製造することができ、この場合、適切な液状担体、懸濁化剤などを用いることができる。経皮投与に適当な組成物において、担体は、場合によりわずかな割合の任意の性質の適当な添加剤と組み合わせて、場合により浸透促進剤および／もしくは適当な湿潤剤を含んでなってもよく、これらの
添加剤は皮膚に重大な悪影響をもたらさない。該添加剤は皮膚への投与を容易にすることができ、そして／もしくは所望の組成物を製造するために役立ち得る。これらの組成物は様々な方法において、例えば経皮パッチとして、スポットオンとしてもしくは軟膏として投与することができる。
【００６３】
投与の容易さおよび投薬量の均一性のために投与単位形態物における上記の製薬学的組成物を調合することは特に好都合である。投与単位形態物は、本明細書および本明細書の請求項において用いる場合、単位投薬量として適当な物理的に別個の単位をさし、各単位は、必要とされる製薬学的担体と会合して所望の治療効果をもたらすように計算された有効成分の所定の量を含有する。そのような投与単位形態物の例は、錠剤（分割錠もしくはコート錠を包含する）、カプセル剤、丸剤、散剤パケット、カシェ剤、注入可能な液剤もしくは懸濁剤、茶さじ１杯（ｔｅａｓｐｏｏｎｆｕｌｓ）、大さじ１杯（ｔａｂｌｅｓｐｏｏｎｆｕｌｓ）およびその分離した倍量である。
【００６４】
正確な投薬量および投与の頻度は、当業者に周知であるように、使用する式（Ｉ）の特定の化合物、処置する特定の症状、処置する症状の重症度、特定の患者の年齢、体重、性別、疾患の程度および一般的な身体状態ならびに個体が服用している可能性がある他の薬剤により決まる。さらに、該有効毎日量は処置した患者の反応によりそして／もしくは本発明の化合物を処方する医師の評価により減らすかもしくは増やすことができることは明らかである。
【００６５】
投与の形態により、製薬学的組成物は０．０５〜９９重量％、好ましくは０．１〜７０重量％、より好ましくは０．１〜５０重量％の有効成分、および１〜９９．９５重量％、好ましくは３０〜９９．９重量％、より好ましくは５０〜９９．９重量％の製薬学的に許容しうる担体を含んでなり、全てのパーセンテージは組成物の総重量に基づく。
【００６６】
本発明の化合物は、経口、皮下もしくは非経口投与のような全身投与；または吸入、鼻用スプレー、点眼薬によるかもしくはクリーム、ゲル、シャンプーなどによるような局所投与に使用することができる。化合物は、好ましくは経口投与される。正確な投薬量および投与の頻度は、当業者に周知であるように、使用する式（Ｉ）の特定の化合物、処置する特定の症状、処置する症状の重症度、特定の患者の年齢、体重、性別、疾患の程度および一般的な身体状態ならびに個体が服用している可能性がある他の薬剤により決まる。さらに、該有効毎日量は処置した患者の反応によりそして／もしくは本発明の化合物を処方する医師の評価により減らすかもしくは増やすことができることは明らかである。
【００６７】
単一投与形態物を製造するために担体材料と合わせることができる式（Ｉ）の化合物の量は、処置する疾病、哺乳類種および特定の投与方法により異なる。しかしながら、一般的な指針として、本発明の化合物の適当な単位用量は、例えば、好ましくは０．１ｍｇ〜約１０００ｍｇの間の活性化合物を含有することができる。好ましい単位用量は１ｍｇ〜約５００ｍｇの間である。より好ましい単位用量は１ｍｇ〜約３００ｍｇの間である。さらにより好ましい単位用量は１ｍｇ〜約１００ｍｇの間である。そのような単位用量は、７０ｋｇの成人の総投薬量が投与当たり患者のｋｇ体重につき０．００１〜約１５ｍｇの範囲であるように、１日に１回より多く、例えば１日に２、３、４、５もしくは６回、しかし好ましくは１日に１もしくは２回投与することができる。好ましい投薬量は投与当たり患者のｋｇ体重につき０．０１〜約１．５ｍｇであり、そしてそのような治療は何週間もしくは何ヶ月、そしてある場合には何年にもわたって延長することができる。しかしながら、任意の特定の患者の特定の用量レベルは、当業者により良く理解されるように、用いる特定の化合物の活性、処置する個体の年齢、体重、一般的な健康、性別および食事；投与の期間および経路；排出の速度；これまでに投与されている他の薬剤；ならびに治療を受けている特定の疾病の重症度を包含する様々な因子により決まる。
【００６８】
典型的な投薬量は、１日１回、もしくは１日に複数回服用する１個の１ｍｇ〜約１００ｍｇ錠剤もしくは１ｍｇ〜約３００ｍｇ、または１日に１回服用しそして有効成分の比例して高い含量を含む１個の持続放出カプセル剤もしくは錠剤であることができる。持続放出効果は、異なるｐＨ値で溶解するカプセル材料により、浸透圧によりゆっくり放出するカプセル剤により、もしくは制御放出の任意の他の既知の手段により得ることができる。
【００６９】
当業者に明らかであるようにある場合にはこれらの範囲外の投薬量を使用することが必要であり得る。さらに、臨床医もしくは処置する医師は、個々の患者の反応と併せて治療をどのようにしてそしていつ開始するか、中断するか、調整するかもしくは終わらせるかを理解しているということに留意する。
【００７０】
以下の実施例は本発明を説明するものであるが、その範囲を限定するものではない。
【実施例】
【００７１】
実験部分
以下、「ｍ．ｐ．」という用語は融点を意味し、「ＴＨＦ」はテトラヒドロフランを意味し、「ＤＭＦ」はジメチルホルムアミドを意味し、「ＤＣＭ」はジクロロメタンを意味し；「ＡｃＯＥｔ」は酢酸エチルを意味し、「ＡｃＯＨ」は酢酸を意味し、「ＭｅＯＨ」はメタノールを意味し、「ＤＩＰＥＡ」は「Ｎ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン」を意味し、「ｒａｃ」はラセミ型（ｒａｃｅｍｉｃ）を意味する。
【００７２】
Ａ．中間体の製造
実施例Ａ１：ｒａｃ−２−アミノ−２−（３−ブロモ−フェニル）−プロピオニトリルの製造
【００７３】
【化８】
2013529664.tif 000009
【００７４】
ＮＨ３／ＭｅＯＨ（４００ｍＬ）中の３−ブロモ−アセトフェノン（２０ｇ、１００ｍｍｏｌ）およびＮＨ４Ｃｌ（１１ｇ、２００ｍｍｏｌ）の攪拌溶液にトリメチルシリルシアニド（２０ｇ、２００ｍｍｏｌ）を加えた。混合物を室温で４日間攪拌した。次に、溶媒を真空中で蒸発させ、そして残留物をＡｃＯＥｔ（１００ｍＬ）に溶解した。固体を濾過して分離し、そして濾液を真空中で蒸発させてｒａｃ−２−アミノ−２−（３−ブロモ−フェニル）−プロピオニトリル（２０ｇ、８６％の収率）を生成せしめ、それをさらに精製せずに次の段階において使用した。
【００７５】
実施例Ａ２：ｒａｃ−２−アミノ−２−（３−ブロモ−フェニル）−プロピオン酸メチルエステルの製造
【００７６】
【化９】
2013529664.tif 000010
【００７７】
ｒａｃ−２−アミノ−２−（３−ブロモ−フェニル）−プロピオニトリル（２０ｇ、８８．９ｍｍｏｌ）をＨＣｌ／ＭｅＯＨ（５００ｍＬ）に溶解し、そして混合物を４日間還流させた。室温まで冷却した後に、ＡｃＯＥｔ（１００ｍＬ）および水（１００ｍＬ）を加え、そして有機層の分離後に、水層をＡｃＯＥｔ（２ｘ１００ｍＬ）で洗浄した。次に、水層をｐＨ８まで水性アンモニア溶液で塩基性化し、そしてＡｃＯＥｔ（５ｘ１００ｍＬ）で抽出した。合わせた有機層を乾燥させ（Ｎａ２ＳＯ４）、濾過し、そして溶媒を真空中で蒸発させてｒａｃ−２−アミノ−２−（３−ブロモ−フェニル）−プロピオン酸メチルエステル（１０．６ｇ、４６％の収率）を油として生成せしめた。
【００７８】
実施例Ａ３：ｒａｃ−２−アミノ−２−（３−ブロモ−フェニル）−プロパン−１−オールの製造
【００７９】
【化１０】
2013529664.tif 000011
【００８０】
−１５℃でＴＨＦ（２００ｍＬ）中のｒａｃ−２−アミノ−２−（３−ブロモ−フェニル）−プロピオン酸メチルエステル（７．５ｇ、２９．１ｍｍｏｌ）の攪拌溶液に水素化アルミニウムリチウム（ＴＨＦ中１Ｍ；２２ｍＬ、２２ｍｍｏｌ）を滴下して加えた。混合物を１時間にわたって０℃までゆっくりと温めておいた。次に追加のＴＨＦ（１５０ｍＬ）を加え、そして水素が生じなくなるまで飽和Ｎａ２ＳＯ４を滴下して加えた。次に、無水Ｎａ２ＳＯ４を加え、そして室温で一晩攪拌したままにした。混合物をセライト上で濾過し、ＴＨＦですすぎ、そして溶媒を真空中で蒸発させた。粗生成物をフラッシュカラムクロマトグラフィー（シリカゲル；メタノール中のアンモニアの７Ｍ溶液／ＤＣＭ  ０／１００〜３／９７）により精製した。所望の画分を集め、そして真空中で濃縮してｒａｃ−２−アミノ−２−（３−ブロモ−フェニル）−プロパン−１−オール（５．７０ｇ、８５％の収率）を油として生成せしめた。
【００８１】
実施例Ａ４：ｒａｃ−［１−（３−ブロモ−フェニル）−２−ヒドロキシ−１−メチル−エチル］−カルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステルの製造
【００８２】
【化１１】
2013529664.tif 000012
【００８３】
０℃で飽和ＮａＨＣＯ３（１５ｍＬ）およびＴＨＦ（１５ｍＬ）の混合物中のｒａｃ−２−アミノ−２−（３−ブロモ−フェニル）−プロパン−１−オール（１．７ｇ、７．３９ｍｍｏｌ）の攪拌溶液にジ−ｔｅｒｔ−ブチルジカーボネート（４．８４ｇ、２２．１６ｍｍｏｌ）を少しずつ加えた。混合物を０℃で１０分間そして室温で１５時間攪拌した。混合物を氷水浴中で冷却し、そしてＫＨＳＯ４でｐＨ１〜２まで攪拌しながら酸性化した。有機層を分離し、そして水層をＡｃＯＥｔでさらに抽出した。合わせた有機層を分離し、乾燥させ（ＭｇＳＯ４）、濾過し、そして溶媒を真空中で蒸発させた。粗生成物をフラッシュカラムクロマトグラフィー（シリカ；ＡｃＯＥｔ／ＤＣＭ  ０／１００〜２０／
８０）により精製した。所望の画分を集め、そして真空中で濃縮してｒａｃ−［１−（３−ブロモ−フェニル）−２−ヒドロキシ−１−メチル−エチル］−カルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステル（２．３６ｇ、９３％の収率）を無色の油として生成せしめた。
【００８４】
実施例Ａ５：ｒａｃ−［１−（３−ブロモ−フェニル）−１−メチル−２−オキソ−エチル］−カルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステルの製造
【００８５】
【化１２】
2013529664.tif 000013
【００８６】
０℃で乾式ＤＣＭ中のｒａｃ−［１−（３−ブロモ−フェニル）−２−ヒドロキシ−１−メチル−エチル］−カルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステル（２．３ｇ、６．９７ｍｍｏｌ）の溶液にデス−マーチンペルヨージナン（３．５５ｇ、８．３６ｍｍｏｌ）を５分にわたって少しずつ加えた。混合物を０℃で１０分間そして室温で１時間攪拌した。反応混合物をＮａＨＣＯ３（水性飽和溶液）、続いてＮａＨＳＯ３（水性飽和溶液）でクエンチした。次にＥｔ２Ｏを加え、そして混合物を室温で３０分間攪拌した。有機層を分離し、そして水層をＥｔ２Ｏでさらに抽出した。合わせた有機層を分離し、乾燥させ（ＭｇＳＯ４）、濾過し、そして溶媒を真空中で蒸発させた。粗生成物をフラッシュカラムクロマトグラフィー（シリカゲル；ＤＣＭ）により精製した。所望の画分を集め、そして真空中で濃縮してｒａｃ−［１−（３−ブロモ−フェニル）−１−メチル−２−オキソ−エチル］−カルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステル（２ｇ、８８％の収率）を無色の油として生成せしめた。
【００８７】
実施例Ａ６：ｒａｃ−［１−（３−ブロモ−フェニル）−１−メチル−２−メチルアミノ−エチル］−カルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステルの製造
【００８８】
【化１３】
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【００８９】
ＤＣＭ（１１０ｍＬ）およびＡｃＯＨ（２．０１ｍＬ）の混合物中のｒａｃ−［１−（３−ブロモ−フェニル）−１−メチル−２−オキソ−エチル］−カルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステル（２ｇ、６．０９ｍｍｏｌ）の溶液にＴＨＦ中２Ｍメチルアミン（６．０９ｍＬ、１２．１９ｍｍｏｌ）を加えた。混合物を室温で１時間攪拌した。次に、トリアセトキシ水素化ホウ素ナトリウム（３．６２ｇ、１７．０６ｍｍｏｌ）を加え、そして混合物を室温で５時間攪拌した。混合物をＤＣＭで希釈し、そしてＮａＨＣＯ３（水性飽和溶液）に注ぎ込んだ。有機層を分離し、そして水層をＤＣＭでさらに抽出した。合わせた有機層を分離し、乾燥させ（ＭｇＳＯ４）、濾過し、そして溶媒を真空中で蒸発させてｒａｃ−［１−（３−ブロモ−フェニル）−１−メチル−２−メチルアミノ−エチル］−カルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステル（２ｇ、９７％の収率）を生成せしめ、それをさらに精製せずに次の段階において使用した。
【００９０】
実施例Ａ７：ｒａｃ−Ｎ−［２−（３−ブロモ−フェニル）−２−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ−プロピル］−Ｎ−メチル−オキサミン酸（ｏｘａｌａｍｉｃ  ａｃｉｄ）エチルエステルの製造
【００９１】
【化１４】
2013529664.tif 000015
【００９２】
ＤＣＭ（２０ｍＬ）中のｒａｃ−［１−（３−ブロモ−フェニル）−１−メチル−２−メチルアミノ−エチル］−カルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステル（２．０１ｇ、６．０９ｍｍｏｌ）の溶液にＤＩＰＥＡ（１．２７ｍＬ、７．３１ｍｍｏｌ）を加え、そして混合物を氷浴中で冷却した。次に、塩化エチルオキサリル（０．８２ｍＬ、７．３１ｍｍｏｌ）を加え、そして混合物を０℃で３時間攪拌した。混合物をＮＨ４Ｃｌ（水性飽和溶液）で希釈し、そしてＤＣＭで抽出した。有機層を分離し、乾燥させ（ＭｇＳＯ４）、濾過し、そして溶媒を真空中で蒸発させた。粗生成物をフラッシュカラムクロマトグラフィー（シリカゲル；ＡｃＯＥｔ／ＤＣＭ  ０／１００〜２０／８０）により精製した。所望の画分を集め、そして真空中で濃縮してｒａｃ−Ｎ−［２−（３−ブロモ−フェニル）−２−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ−プロピル］−Ｎ−メチル−オキサミン酸エチルエステル（２．２ｇ、８１％の収率）を無色の油として生成せしめた。
【００９３】
実施例Ａ８：ｒａｃ−５−（３−ブロモ−フェニル）−１，５−ジメチル−ピペラジン−２，３−ジオンの製造
【００９４】
【化１５】
2013529664.tif 000016
【００９５】
室温でｒａｃ−Ｎ−［２−（３−ブロモ−フェニル）−２−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ−プロピル］−Ｎ−メチル−オキサミン酸エチルエステル（２．２ｇ、４．９６ｍｍｏｌ）にジオキサン中４Ｍ塩酸（６．２０ｍＬ、２４．８１ｍｍｏｌ）を加えた。混合物を室温で１時間攪拌した。溶媒を真空中で蒸発させた。残留物をＤＣＭに懸濁し、そしてＮａＨＣＯ３（水性飽和溶液）で洗浄した。有機層を分離し、乾燥させ（ＭｇＳＯ４）、濾過し、そして溶媒を真空中で蒸発させてｒａｃ−５−（３−ブロモ−フェニル）−１，５−ジメチル−ピペラジン−２，３−ジオン（１．４５ｇ、９８％の収率）を生成せしめ、それをさらに精製せずに次の段階において使用した。
【００９６】
実施例Ａ９：ｒａｃ−５−（３−ブロモ−フェニル）−３−メトキシ−１，５−ジメチル−５，６−ジヒドロ−１Ｈ−ピラジン−２−オンの製造
【００９７】
【化１６】
2013529664.tif 000017
【００９８】
ＤＣＭ（２０ｍＬ）中のｒａｃ−５−（３−ブロモ−フェニル）−１，５−ジメチル−ピペラジン−２，３−ジオン（１．５ｇ、５．０５ｍｍｏｌ）の溶液にテトラフルオロホウ酸トリメチルオキソニウム（２．２４ｇ、１５．１４ｍｍｏｌ）を加え、そして混合物を室温で３日間攪拌した。次に、混合物をＤＣＭで希釈し、そして冷ＮａＨＣＯ３（水性飽和溶液）で洗浄した。有機層を分離し、乾燥させ（ＭｇＳＯ４）、濾過し、そして溶媒を真空中で蒸発させてｒａｃ−５−（３−ブロモ−フェニル）−３−メトキシ−１，５−ジメチル−５，６−ジヒドロ−１Ｈ−ピラジン−２−オン（１．５ｇ、９５％の収率）を生成せしめ、それをさらに精製せずに次の段階において使用した。
【００９９】
実施例Ａ１０：ｒａｃ−３−アミノ−５−（３−ブロモ−フェニル）−１，５−ジメチル−５，６−ジヒドロ−１Ｈ−ピラジン−２−オンの製造
【０１００】
【化１７】
2013529664.tif 000018
【０１０１】
ＥｔＯＨ（３０ｍＬ）中のｒａｃ−５−（３−ブロモ−フェニル）−３−メトキシ−１，５−ジメチル−５，６−ジヒドロ−１Ｈ−ピラジン−２−オン（１．５７ｇ、５．０５ｍｍｏｌ）の溶液に塩化アンモニウム（０．４０５ｇ、７．５７ｍｍｏｌ）を加え、そして混合物を７５℃で１８時間攪拌した。溶媒を真空中で除き、そして残留物をＤＣＭに溶解し、そして水で洗浄した。有機層を分離し、乾燥させ（ＭｇＳＯ４）、濾過し、そして溶媒を真空中で蒸発させた。粗生成物をフラッシュカラムクロマトグラフィ−（シリカゲル；メタノール中のアンモニアの７Ｍ溶液／ＡｃＯＥｔ  ０／１００〜２０／８０）により精製した。所望の画分を集め、そして真空中で濃縮してｒａｃ−３−アミノ−５−（３−ブロモ−フェニル）−１，５−ジメチル−５，６−ジヒドロ−１Ｈ−ピラジン−２−オン（０．７５ｇ、５０％の収率）を白色の固体として生成せしめた。
【０１０２】
実施例Ａ１１：５−メトキシピリジン−３−ボロン酸の製造
【０１０３】
【化１８】
2013529664.tif 000019
【０１０４】
この化合物は、ＷＯ  ２００５／０３７８３２に記載の方法に従うことにより製造した。
【０１０５】
実施例Ａ１２：ｒａｃ−２−アミノ−２−（３−ニトロ−フェニル）−プロピオニトリルの製造
【０１０６】
【化１９】
2013529664.tif 000020
【０１０７】
ＮＨ３／ＭｅＯＨ（８００ｍＬ）中の３−ニトロアセトフェノン（８０ｇ、４８４．８ｍｍｏｌ）およびトリメチルシリルシアニド（９６ｇ、９６９．７ｍｍｏｌ）の攪拌溶液にＮＨ４Ｃｌ（５１．４ｇ、９６９．７ｍｍｏｌ）を加えた。混合物を室温で２日間攪拌した。次に、溶媒を真空中で蒸発させ、そして残留物をＤＣＭに溶解した。固体を濾過して分離し、そして濾液を真空中で蒸発させてｒａｃ−２−アミノ−２−（３−ニトロ−フェニル）−プロピオニトリル（８９ｇ、９６％の収率）を生成せしめ、それをさらに精製せずに次の段階において使用した。
【０１０８】
実施例Ａ１３：ｒａｃ−２−アミノ−２−（３−ニトロ−フェニル）−プロピオン酸メチルエステルの製造
【０１０９】
【化２０】
2013529664.tif 000021
【０１１０】
ｒａｃ−２−アミノ−２−（３−ニトロ−フェニル）−プロピオニトリル（８９ｇ、４６５．５ｍｍｏｌ）をＨＣｌ／ＭｅＯＨ（１０００ｍＬ）に溶解し、そして混合物を２４時間還流させた。溶媒を真空中で蒸発させ、そして残留物をｐＨ９までＮａＨＣＯ３（水性飽和溶液）で塩基性化し、そしてＡｃＯＥｔ（３ｘ１００ｍＬ）で抽出した。合わせた有機層を乾燥させ（Ｎａ２ＳＯ４）、濾過し、そして溶媒を真空中で蒸発させてｒａｃ−２−アミノ−２−（３−ニトロ−フェニル）−プロピオン酸メチルエステル（４６ｇ、４４％の収率）を生成せしめた。
【０１１１】
実施例Ａ１４：ｒａｃ−２−アミノ−２−（３−ニトロ−フェニル）−プロパン−１−オールの製造
【０１１２】
【化２１】
2013529664.tif 000022
【０１１３】
ＥｔＯＨ（２００ｍｌ）中のｒａｃ−２−アミノ−２−（３−ニトロ−フェニル）−プロピオン酸メチルエステル（３０ｇ、１３３．７ｍｍｏｌ）の攪拌溶液に水素化ホウ素ナトリウム（１０．２ｇ、２６７．４ｍｍｏｌ）を加えた。混合物を室温で３時間攪拌した。溶媒を真空中で蒸発させた。次に、水（２００ｍＬ）を加え、そして混合物をＡｃＯＥｔ（３ｘ１００ｍＬ）で抽出した。合わせた有機層を乾燥させ（Ｎａ２ＳＯ４）、濾過し、そして溶媒を真空中で蒸発させた。残留物をＨＣｌ／ＤＣＭ（５００ｍＬ）に溶解し、そして混合物を室温で１時間攪拌した。混合物を濾過して分離し、そして２−メトキシ−２−メチル−プロパンで洗浄してｒａｃ−２−アミノ−２−（３−ニトロ−フェニル）−プロパン−１−オール（２７ｇ、８７％の収率）を生成せしめた。
【０１１４】
実施例Ａ１５：ｒａｃ−［２−ヒドロキシ−１−メチル−１−（３−ニトロ−フェニル）−エチル］−カルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステルの製造
【０１１５】
【化２２】
2013529664.tif 000023
【０１１６】
０℃でＮａＨＣＯ３（水性飽和溶液）（３０ｍＬ）およびＴＨＦ（３０ｍＬ）の混合物中のｒａｃ−２−アミノ−２−（３−ニトロ−フェニル）−プロパン−１−オール（３ｇ、１５．２９ｍｍｏｌ）の攪拌溶液にジ−ｔｅｒｔ−ブチルジカーボネート（１０．０１ｇ、４５．８７ｍｍｏｌ）を少しずつ加えた。混合物を０℃で１０分間そして室温で１５時間攪拌した。混合物を氷水浴中で冷却し、そしてＫＨＳＯ４でｐＨ１〜２まで攪拌しながら酸性化した。有機層を分離し、そして水層をＡｃＯＥｔでさらに抽出した。合わせた有機層を分離し、乾燥させ（ＭｇＳＯ４）、濾過し、そして溶媒を真空中で蒸発させた。粗生成物をフラッシュカラムクロマトグラフィー（シリカゲル；ＡｃＯＥｔ／ＤＣＭ  ０／１００〜１００／０）により精製した。所望の画分を集め、そして真空中で濃縮してｒａｃ−［２−ヒドロキシ−１−メチル−１−（３−ニトロ−フェニル）−エチル］−カルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステル（３．３ｇ、７３％の収率）を淡黄色の油として生成せしめ、それは静置すると凝固した。
【０１１７】
実施例Ａ１６：ｒａｃ−［１−メチル−１−（３−ニトロ−フェニル）−２−オキソ−エチル］−カルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステルの製造
【０１１８】
【化２３】
2013529664.tif 000024
【０１１９】
０℃で乾式ＤＣＭ（３５ｍＬ）中のｒａｃ−［２−ヒドロキシ−１−メチル−１−（３−ニトロ−フェニル）−エチル］−カルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステル（２．２ｇ、７．４２ｍｍｏｌ）の溶液にデス−マーチンペルヨージナン（３．７８ｇ、８．９１ｍｍｏｌ）を５分にわたって少しずつ加えた。混合物を０℃で１０分間そして室温で１時間攪拌した。反応混合物をＮａＨＣＯ３（水性飽和溶液）、続いてＮａＨＳＯ３（水性飽和溶
液）でクエンチした。次に、Ｅｔ２Ｏを加え、そして混合物を室温で３０分間攪拌した。有機層を分離し、そして水層をＥｔ２Ｏでさらに抽出した。合わせた有機層を分離し、乾燥させ（ＭｇＳＯ４）、濾過し、そして溶媒を真空中で蒸発させた。粗生成物をフラッシュカラムクロマトグラフィー（シリカゲル；ＤＣＭ）により精製した。所望の画分を集め、そして真空中で濃縮してｒａｃ−［１−メチル−１−（３−ニトロ−フェニル）−２−オキソ−エチル］−カルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステル（１．７４ｇ、８０％の収率）を無色の油として生成せしめ、それは静置すると凝固した。
【０１２０】
実施例Ａ１７：ｒａｃ−［１−メチル−２−メチルアミノ−１−（３−ニトロ−フェニル）−エチル］−カルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステルの製造
【０１２１】
【化２４】
2013529664.tif 000025
【０１２２】
ＤＣＭ（１００ｍＬ）およびＡｃＯＨ（１．９８ｍＬ）の混合物中のｒａｃ−［１−メチル−１−（３−ニトロ−フェニル）−２−オキソ−エチル］−カルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステル（１．７ｇ、５．７８ｍｍｏｌ）の溶液にＴＨＦ中２Ｍメチルアミン（５．７８ｍＬ、１１．５５ｍｍｏｌ）を加えた。混合物を室温で１時間攪拌した。次に、トリアセトキシ水素化ホウ素ナトリウム（３．４３ｇ、１６．１７ｍｍｏｌ）を加え、そして混合物を室温で２時間攪拌した。混合物をＤＣＭで希釈し、そしてＮａＨＣＯ３（水性飽和溶液）に注ぎ込んだ。有機層を分離し、そして水層をＤＣＭでさらに抽出した。合わせた有機層を分離し、乾燥させ（ＭｇＳＯ４）、濾過し、そして溶媒を真空中で蒸発させてｒａｃ−［１−メチル−２−メチルアミノ−１−（３−ニトロ−フェニル）−エチル］−カルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステル（１．７ｇ、９５％の収率）を無色の油として生成せしめ、それをさらに精製せずに次の段階において使用した。
【０１２３】
実施例Ａ１８：ｒａｃ−Ｎ−［２−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ−２−（３−ニトロ−フェニル）−プロピル］−Ｎ−メチル−オキサミン酸エチルエステルの製造
【０１２４】
【化２５】
2013529664.tif 000026
【０１２５】
ＤＣＭ（２０ｍＬ）中のｒａｃ−［１−メチル−２−メチルアミノ−１−（３−ニトロ−フェニル）−エチル］−カルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステル（１．７ｇ、５．５０ｍｍｏｌ）の溶液にＤＩＰＥＡ（１．１５ｍＬ、６．５９ｍｍｏｌ）を加え、そして混合物を氷浴中で冷却した。次に、塩化エチルオキサリル（０．７４ｍＬ、６．５９ｍｍｏｌ）を加え、そして混合物を０℃で３時間攪拌した。混合物をＮＨ４Ｃｌ（水性飽和溶液）で希釈し、そしてＤＣＭで抽出した。有機層を分離し、乾燥させ（ＭｇＳＯ４）、濾過し
、そして溶媒を真空中で蒸発させた。粗生成物をフラッシュカラムクロマトグラフィー（シリカゲル；ＡｃＯＥｔ／ＤＣＭ  ０／１００〜２０／８０）により精製した。所望の画分を集め、そして真空中で濃縮してｒａｃ−Ｎ−［２−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ−２−（３−ニトロ−フェニル）−プロピル］−Ｎ−メチル−オキサミン酸エチルエステル（２．２ｇ、９８％の収率）を無色の油として生成せしめた。
【０１２６】
実施例Ａ１９：ｒａｃ−１，５−ジメチル−５−（３−ニトロ−フェニル）−ピペラジン−２，３−ジオンの製造
【０１２７】
【化２６】
2013529664.tif 000027
【０１２８】
室温でｒａｃ−Ｎ−［２−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ−２−（３−ニトロ−フェニル）−プロピル］−Ｎ−メチル−オキサミン酸エチルエステル（２．２５ｇ、５．５ｍｍｏｌ）にジオキサン中４Ｍ塩酸（６．８８ｍＬ、２７．５ｍｍｏｌ）を加えた。混合物を室温で１時間攪拌した。溶媒を真空中で蒸発させた。残留物をＤＣＭに懸濁し、そしてＮａＨＣＯ３（水性飽和溶液）で洗浄した。有機層を分離し、乾燥させ（ＭｇＳＯ４）、濾過し、そして溶媒を真空中で蒸発させてｒａｃ−１，５−ジメチル−５−（３−ニトロ−フェニル）−ピペラジン−２，３−ジオン（１．２ｇ、８３％の収率）を生成せしめ、それをさらに精製せずに次の段階において使用した。
【０１２９】
実施例Ａ２０：ｒａｃ−３−メトキシ−１，５−ジメチル−５−（３−ニトロ−フェニル）−５，６−ジヒドロ−１Ｈ−ピラジン−２−オンの製造
【０１３０】
【化２７】
2013529664.tif 000028
【０１３１】
ＤＣＭ（１０ｍＬ）中のｒａｃ−１，５−ジメチル−５−（３−ニトロ−フェニル）−ピペラジン−２，３−ジオン（１．２ｇ、４．５６ｍｍｏｌ）の溶液にテトラフルオロホウ酸トリメチルオキソニウム（２．０２ｇ、１３．６８ｍｍｏｌ）を加え、そして混合物を室温で３日間攪拌した。次に、混合物をＤＣＭで希釈し、そして冷ＮａＨＣＯ３（水性飽和溶液）で洗浄した。有機層を分離し、乾燥させ（ＭｇＳＯ４）、濾過し、そして溶媒を真空中で蒸発させてｒａｃ−３−メトキシ−１，５−ジメチル−５−（３−ニトロ−フェニル）−５，６−ジヒドロ−１Ｈ−ピラジン−２−オン（１ｇ、７９％の収率）を白色の固体として生成せしめ、それをさらに精製せずに次の段階において使用した。
【０１３２】
実施例Ａ２１：ｒａｃ−３−アミノ−１，５−ジメチル−５−（３−ニトロ−フェニル）
−５，６−ジヒドロ−１Ｈ−ピラジン−２−オンの製造
【０１３３】
【化２８】
2013529664.tif 000029
【０１３４】
ＥｔＯＨ（３０ｍＬ）中のｒａｃ−３−メトキシ−１，５−ジメチル−５−（３−ニトロ−フェニル）−５，６−ジヒドロ−１Ｈ−ピラジン−２−オン（０．６６ｇ、２．３９ｍｍｏｌ）の溶液に塩化アンモニウム（０．１９ｇ、３．５９ｍｍｏｌ）を加え、そして混合物を７５℃で１８時間攪拌した。溶媒を真空中で除き、そして残留物をＤＣＭに溶解し、そして水で洗浄した。有機層を分離し、乾燥させ（ＭｇＳＯ４）、濾過し、そして溶媒を真空中で蒸発させた。粗生成物をフラッシュカラムクロマトグラフィー（シリカゲル；メタノール中のアンモニアの７Ｍ溶液／ＡｃＯＥｔ  ０／１００〜２０／８０）により精製した。所望の画分を集め、そして真空中で濃縮してｒａｃ−３−アミノ−１，５−ジメチル−５−（３−ニトロ−フェニル）−５，６−ジヒドロ−１Ｈ−ピラジン−２−オン（０．３１ｇ、４９％の収率）を白色の固体として生成せしめた。
【０１３５】
実施例Ａ２２：ｒａｃ−３−アミノ−５−（３−アミノ−フェニル）−１，５−ジメチル−５，６−ジヒドロ−１Ｈ−ピラジン−２−オンの製造
【０１３６】
【化２９】
2013529664.tif 000030
【０１３７】
ＥｔＯＨ（２８ｍＬ）およびＡｃＯＥｔ（１５ｍＬ）の混合物中のｒａｃ−３−アミノ−１，５−ジメチル−５−（３−ニトロ−フェニル）−５，６−ジヒドロ−１Ｈ−ピラジン−２−オン（０．３１ｇ、１．１８ｍｍｏｌ）の溶液をＨ−Ｃｕｂｅ反応器（１ｍｌ／分、３０ｍｍ  Ｐｄ／Ｃ  ５％カートリッジ、フルＨ２モード、室温、２サイクル）において水素化した。溶媒を真空中で除いてｒａｃ−３−アミノ−５−（３−アミノ−フェニル）−１，５−ジメチル−５，６−ジヒドロ−１Ｈ−ピラジン−２−オン（０．２７ｇ、９８％の収率）を白色の固体として生成せしめ、それをさらに精製せずに次の段階において使用した。
【０１３８】
実施例Ａ２３：ｒａｃ−２−アミノ−２−（５−ブロモ−２，４−ジフルオロ−フェニル）−プロピオニトリルの製造
【０１３９】
【化３０】
2013529664.tif 000031
【０１４０】
ｒａｃ−２−アミノ−２−（５−ブロモ−２，４−ジフルオロ−フェニル）−プロピオニトリルは、実施例Ａ１に記載の同様の方法に従って合成した。このようにして、市販されている５−ブロモ−２，４−ジフルオロアセトフェノン（ＣＡＳ  Ｎｒ：８６４７７３−６４−８、６０ｇ、２５５ｍｍｏｌ）から出発して、ｒａｃ−２−アミノ−２−（５−ブロモ−２，４−ジフルオロ−フェニル）−プロピオニトリルが得られた（３１ｇ、４７％の収率）。
【０１４１】
実施例Ａ２４：ｒａｃ−２−アミノ−２−（５−ブロモ−２，４−ジフルオロ−フェニル）−プロピオン酸の製造
【０１４２】
【化３１】
2013529664.tif 000032
【０１４３】
ｒａｃ−２−アミノ−２−（５−ブロモ−２，４−ジフルオロ−フェニル）−プロピオニトリル（２８ｇ、１０７．６ｍｍｏｌ）を６Ｎ  ＨＣｌ（３００ｍＬ）および酢酸（３００ｍＬ）に溶解し、そして混合物を７２時間還流させた。室温まで冷却した後に、反応混合物を真空中で濃縮した。ＡｃＯＥｔ（４００ｍＬ）および水（３００ｍＬ）を加え、有機層を分離し、そして水層をＡｃＯＥｔ（２００ｍＬ）で洗浄した。水層をｐＨ７に中和し、そしてＡｃＯＥｔ（２５０ｍＬ）で抽出した。有機層を乾燥させ（Ｎａ２ＳＯ４）、濾過し、そして溶媒を真空中で蒸発させてｒａｃ−２−アミノ−２−（５−ブロモ−２，４−ジフルオロ−フェニル）−プロピオン酸（２２ｇ、７２％の収率）を生成せしめた。
【０１４４】
実施例Ａ２５：ｒａｃ−２−アミノ−２−（５−ブロモ−２，４−ジフルオロ−フェニル）−プロピオン酸メチルエステルの製造
【０１４５】
【化３２】
2013529664.tif 000033
【０１４６】
ｒａｃ−２−アミノ−２−（５−ブロモ−２，４−ジフルオロ−フェニル）−プロピオン酸（２２ｇ、７８．５ｍｍｏｌ）を４Ｎ  ＨＣｌ／ＭｅＯＨ（４００ｍＬ）に溶解し、そして混合物を７２時間還流させた。室温まで冷却した後に、反応混合物を真空中で濃縮
した。ＡｃＯＥｔ（４００ｍＬ）および水（３００ｍＬ）を加え、そして水層をＡｃＯＥｔ（２００ｍＬ）で洗浄した。水層をｐＨ７まで中和し、そしてＡｃＯＥｔ（２５０ｍＬ）で抽出した。有機層を乾燥させ（Ｎａ２ＳＯ４）、濾過し、そして溶媒を真空中で蒸発させてｒａｃ−２−アミノ−２−（５−ブロモ−２，４−ジフルオロ−フェニル）−プロピオン酸メチルエステル（２０ｇ、８７％の収率）を生成せしめた。
【０１４７】
実施例Ａ２６：ｒａｃ−２−アミノ−２−（５−ブロモ−２，４−ジフルオロ−フェニル）−プロパン−１−オールの製造
【０１４８】
【化３３】
2013529664.tif 000034
【０１４９】
エタノール（２００ｍＬ）中のｒａｃ−２−アミノ−２−（５−ブロモ−２，４−ジフルオロ−フェニル）−プロピオン酸メチルエステル（２０ｇ、６８ｍｍｏｌ）の攪拌溶液に水素化ホウ素ナトリウム（４ｇ、１０５ｍｍｏｌ）を加え、そして混合物を１４℃で７２時間攪拌した。次に、反応混合物を真空中で濃縮した。ＡｃＯＥｔ（５００ｍＬ）を加え、そして有機層を水で洗浄し、乾燥させ（Ｎａ２ＳＯ４）、濾過し、そして溶媒を真空中で蒸発させてｒａｃ−２−アミノ−２−（５−ブロモ−２，４−ジフルオロ−フェニル）−プロパン−１−オール（１６ｇ、８８％の収率）を生成せしめた。
【０１５０】
実施例Ａ２７：ｒａｃ−［１−（５−ブロモ−２，４−ジフルオロ−フェニル）−２−ヒドロキシ−１−メチル−エチル］−カルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステルの製造
【０１５１】
【化３４】
2013529664.tif 000035
【０１５２】
ｒａｃ−［１−（５−ブロモ−２，４−ジフルオロ−フェニル）−２−ヒドロキシ−１−メチル−エチル］−カルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステルは、実施例Ａ４に記載の同様の方法に従って合成した。このようにしてｒａｃ−２−アミノ−２−（５−ブロモ−２，４−ジフルオロ−フェニル）−プロパン−１−オール（４．２ｇ、１５．７８ｍｍｏｌ）から出発して、ｒａｃ−［１−（５−ブロモ−２，４−ジフルオロ−フェニル）−２−ヒドロキシ−１−メチル−エチル］−カルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステルが得られた（５．３ｇ、９２％の収率）。
【０１５３】
実施例Ａ２８：ｒａｃ−［１−（５−ブロモ−２，４−ジフルオロ−フェニル）−１−メチル−２−オキソ−エチル］−カルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステルの製造
【０１５４】
【化３５】
2013529664.tif 000036
【０１５５】
ｒａｃ−［１−（５−ブロモ−２，４−ジフルオロ−フェニル）−１−メチル−２−オキソ−エチル］−カルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステルは、実施例Ａ５に記載の同様の方法に従って合成した。このようにしてｒａｃ−［１−（５−ブロモ−２，４−ジフルオロ−フェニル）−２−ヒドロキシ−１−メチル−エチル］−カルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステル（３．２ｇ、８．７４ｍｍｏｌ）から出発して、ｒａｃ−［１−（５−ブロモ−２，４−ジフルオロ−フェニル）−１−メチル−２−オキソ−エチル］−カルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステルが得られた（３ｇ、９４％の収率）。
【０１５６】
実施例Ａ２９：ｒａｃ−［１−（５−ブロモ−２，４−ジフルオロ−フェニル）−１−メチル−２−メチルアミノ−エチル］−カルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステルの製造
【０１５７】
【化３６】
2013529664.tif 000037
【０１５８】
ｒａｃ−［１−（５−ブロモ−２，４−ジフルオロ−フェニル）−１−メチル−２−メチルアミノ−エチル］−カルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステルは、実施例Ａ６に記載の同様の方法に従って合成した。このようにしてｒａｃ−［１−（５−ブロモ−２，４−ジフルオロ−フェニル）−１−メチル−２−オキソ−エチル］−カルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステル（３ｇ、８．２４ｍｍｏｌ）から出発して、ｒａｃ−［１−（５−ブロモ−２，４−ジフルオロ−フェニル）−１−メチル−２−メチルアミノ−エチル］−カルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステルが得られた（１．８ｇ、５８％の収率）。
【０１５９】
実施例Ａ３０：ｒａｃ−Ｎ−［２−（５−ブロモ−２，４−ジフルオロ−フェニル）−２−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ−プロピル］−Ｎ−メチル−オキサミン酸エチルエステルの製造
【０１６０】
【化３７】
2013529664.tif 000038
【０１６１】
ｒａｃ−Ｎ−［２−（５−ブロモ−２，４−ジフルオロ−フェニル）−２−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ−プロピル］−Ｎ−メチル−オキサミン酸エチルエステルは、
実施例Ａ７に記載の同様の方法に従って合成した。このようにしてｒａｃ−［１−（５−ブロモ−２，４−ジフルオロ−フェニル）−１−メチル−２−メチルアミノ−エチル］−カルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステル（１．８ｇ、４．７５ｍｍｏｌ）から出発して、ｒａｃ−Ｎ−［２−（５−ブロモ−２，４−ジフルオロ−フェニル）−２−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ−プロピル］−Ｎ−メチル−オキサミン酸エチルエステルが得られた（１．９ｇ、８４％の収率）。
【０１６２】
実施例Ａ３１：ｒａｃ−５−（５−ブロモ−２，４−ジフルオロ−フェニル）−１，５−ジメチル−ピペラジン−２，３−ジオンの製造
【０１６３】
【化３８】
2013529664.tif 000039
【０１６４】
ｒａｃ−５−（５−ブロモ−２，４−ジフルオロ−フェニル）−１，５−ジメチル−ピペラジン−２，３−ジオンは、実施例Ａ８に記載の同様の方法に従って合成した。このようにしてｒａｃ−Ｎ−［２−（５−ブロモ−２，４−ジフルオロ−フェニル）−２−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ−プロピル］−Ｎ−メチル−オキサミン酸エチルエステル（１．９ｇ、３．９６ｍｍｏｌ）から出発して、ｒａｃ−５−（５−ブロモ−２，４−ジフルオロ−フェニル）−１，５−ジメチル−ピペラジン−２，３−ジオンが得られ（１．１ｇ、８３％の収率）、そしてそのようなものとして次の反応において使用した。
【０１６５】
実施例Ａ３２：ｒａｃ−５−（５−ブロモ−２，４−ジフルオロ−フェニル）−３−メトキシ−１，５−ジメチル−５，６−ジヒドロ−１Ｈ−ピラジン−２−オンの製造
【０１６６】
【化３９】
2013529664.tif 000040
【０１６７】
ｒａｃ−５−（５−ブロモ−２，４−ジフルオロ−フェニル）−３−メトキシ−１，５−ジメチル−５，６−ジヒドロ−１Ｈ−ピラジン−２−オンは、実施例Ａ９に記載の同様の方法に従って合成した。このようにしてｒａｃ−５−（５−ブロモ−２，４−ジフルオロ−フェニル）−１，５−ジメチル−ピペラジン−２，３−ジオン（１ｇ、３ｍｍｏｌ）から出発して、ｒａｃ−５−（５−ブロモ−２，４−ジフルオロ−フェニル）−３−メトキシ−１，５−ジメチル−５，６−ジヒドロ−１Ｈ−ピラジン−２−オンが得られ（１ｇ、９９％の収率）、そしてそのようなものとして次の反応において使用した。
【０１６８】
実施例Ａ３３：ｒａｃ−３−アミノ−５−（５−ブロモ−２，４−ジフルオロ−フェニル
）−１，５−ジメチル−５，６−ジヒドロ−１Ｈ−ピラジン−２−オンの製造
【０１６９】
【化４０】
2013529664.tif 000041
【０１７０】
ｒａｃ−３−アミノ−５−（５−ブロモ−２，４−ジフルオロ−フェニル）−１，５−ジメチル−５，６−ジヒドロ−１Ｈ−ピラジン−２−オンは、実施例Ａ９に記載の同様の方法に従って合成した。このようにしてｒａｃ−５−（５−ブロモ−２，４−ジフルオロ−フェニル）−３−メトキシ−１，５−ジメチル−５，６−ジヒドロ−１Ｈ−ピラジン−２−オン（１ｇ、２．８ｍｍｏｌ）から出発して、ｒａｃ−３−アミノ−５−（５−ブロモ−２，４−ジフルオロ−フェニル）−１，５−ジメチル−５，６−ジヒドロ−１Ｈ−ピラジン−２−オンが得られた（０．６ｇ、６３％の収率）。
【０１７１】
実施例Ａ３４：ｒａｃ−２−アミノ−２−（５−ブロモ−２−フルオロ−フェニル）−プロピオニトリルの製造
【０１７２】
【化４１】
2013529664.tif 000042
【０１７３】
ｒａｃ−２−アミノ−２−（５−ブロモ−２−フルオロ−フェニル）−プロピオニトリルは、実施例Ａ１に記載の同様の方法に従って合成した。このようにして市販されている５−ブロモ−２−フルオロアセトフェノン（ＣＡＳ  Ｎｒ：１９８４７７−８９−３、２５ｇ、１１５ｍｍｏｌ）から出発して、ｒａｃ−２−アミノ−２−（５−ブロモ−２−フルオロ−フェニル）−プロピオニトリルが得られた（２８ｇ、定量的収率）。
【０１７４】
実施例Ａ３５：ｒａｃ−２−アミノ−２−（５−ブロモ−２−フルオロ−フェニル）−プロピオン酸の製造
【０１７５】
【化４２】
2013529664.tif 000043
【０１７６】
ｒａｃ−２−アミノ−２−（５−ブロモ−２−フルオロ−フェニル）−プロピオン酸は、実施例Ａ２４に記載の同様の方法に従って合成した。このようにしてｒａｃ−２−アミノ−２−（５−ブロモ−２−フルオロ−フェニル）−プロピオニトリル（２７ｇ、１１１ｍｍｏｌ）から出発して、ｒａｃ−２−アミノ−２−（５−ブロモ−２−フルオロ−フェ
ニル）−プロピオン酸が得られた（１８ｇ、６２％の収率）。
【０１７７】
実施例Ａ３６：ｒａｃ−２−アミノ−２−（５−ブロモ−２−フルオロ−フェニル）−プロピオン酸メチルエステルの製造
【０１７８】
【化４３】
2013529664.tif 000044
【０１７９】
ｒａｃ−２−アミノ−２−（５−ブロモ−２−フルオロ−フェニル）−プロピオン酸（６ｇ、２２．９ｍｍｏｌ）をＨ２ＳＯ４（２０ｍＬ）およびメタノール（２００ｍＬ）に溶解し、そして混合物を４８時間還流させた。室温まで冷却した後に、反応混合物を真空中で濃縮した。水を加え、そして水層をｐＨ８までＮａＨＣＯ３（水性飽和溶液）で塩基性化し、そしてＡｃＯＥｔで抽出した。合わせた有機層を乾燥させ（ＭｇＳＯ４）、濾過し、そして溶媒を真空中で蒸発させてｒａｃ−２−アミノ−２−（５−ブロモ−２−フルオロ−フェニル）−プロピオン酸メチルエステル（６ｇ、９５％の収率）を生成せしめた。
【０１８０】
実施例Ａ３７：ｒａｃ−２−アミノ−２−（５−ブロモ−２−フルオロ−フェニル）−プロパン−１−オールの製造
【０１８１】
【化４４】
2013529664.tif 000045
【０１８２】
ｒａｃ−２−アミノ−２−（５−ブロモ−２−フルオロ−フェニル）−プロパン−１−オールは、実施例Ａ２６記載の同様の方法に従って合成した。このようにしてｒａｃ−２−アミノ−２−（５−ブロモ−２−フルオロ−フェニル）−プロピオン酸メチルエステル（６ｇ、２１．７ｍｍｏｌ）から出発して、ｒａｃ−２−アミノ−２−（５−ブロモ−２−フルオロ−フェニル）−プロパン−１−オールが得られた（５．２ｇ、９７％の収率）。
【０１８３】
実施例Ａ３８：ｒａｃ−［１−（５−ブロモ−２−フルオロ−フェニル）−２−ヒドロキシ−１−メチル−エチル］−カルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステルの製造
【０１８４】
【化４５】
2013529664.tif 000046
【０１８５】
ｒａｃ−［１−（５−ブロモ−２−フルオロ−フェニル）−２−ヒドロキシ−１−メチ
ル−エチル］−カルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステルは、実施例Ａ４に記載の同様の方法に従って合成した。このようにしてｒａｃ−２−アミノ−２−（５−ブロモ−２−フルオロ−フェニル）−プロパン−１−オール（５．２ｇ、２０．９６ｍｍｏｌ）から出発して、ｒａｃ−［１−（５−ブロモ−２−フルオロ−フェニル）−２−ヒドロキシ−１−メチル−エチル］−カルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステルが得られた（７．３ｇ、定量的収率）。
【０１８６】
実施例Ａ３９：ｒａｃ−［１−（５−ブロモ−２−フルオロ−フェニル）−１−メチル−２−オキソ−エチル］−カルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステルの製造
【０１８７】
【化４６】
2013529664.tif 000047
【０１８８】
ｒａｃ−［１−（５−ブロモ−２−フルオロ−フェニル）−１−メチル−２−オキソ−エチル］−カルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステルは、実施例Ａ５に記載の同様の方法に従って合成した。このようにしてｒａｃ−［１−（５−ブロモ−２−フルオロ−フェニル）−２−ヒドロキシ−１−メチル−エチル］−カルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステル（７．３ｇ、２０．９６ｍｍｏｌ）から出発して、ｒａｃ−［１−（５−ブロモ−２−フルオロ−フェニル）−１−メチル−２−オキソ−エチル］−カルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステルが得られた（６ｇ、８３％の収率）。
【０１８９】
実施例Ａ４０：ｒａｃ−［１−（５−ブロモ−２−フルオロ−フェニル）−１−メチル−２−メチルアミノ−エチル］−カルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステルの製造
【０１９０】
【化４７】
2013529664.tif 000048
【０１９１】
ｒａｃ−［１−（５−ブロモ−２−フルオロ−フェニル）−１−メチル−２−メチルアミノ−エチル］−カルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステルは、実施例Ａ６に記載の同様の方法に従って合成した。このようにしてｒａｃ−［１−（５−ブロモ−２−フルオロ−フェニル）−１−メチル−２−オキソ−エチル］−カルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステル（６ｇ、１７．３ｍｍｏｌ）から出発して、ｒａｃ−［１−（５−ブロモ−２−フルオロ−フェニル）−１−メチル−２−メチルアミノ−エチル］−カルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステルが得られた（４ｇ、６４％の収率）。
【０１９２】
実施例Ａ４１：ｒａｃ−Ｎ−［２−（５−ブロモ−２−フルオロ−フェニル）−２−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ−プロピル］−Ｎ−メチル−オキサミン酸エチルエステルの製造
【０１９３】
【化４８】
2013529664.tif 000049
【０１９４】
ｒａｃ−Ｎ−［２−（５−ブロモ−２−フルオロ−フェニル）−２−ｔｅｒｔ−ブトキシ−カルボニルアミノ−プロピル］−Ｎ−メチル−オキサミン酸エチルエステルは、実施例Ａ７に記載の同様の方法に従って合成した。このようにしてｒａｃ−［１−（５−ブロモ−２−フルオロ−フェニル）−１−メチル−２−メチルアミノ−エチル］−カルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステル（４ｇ、１１．０７ｍｍｏｌ）から出発して、ｒａｃ−Ｎ−［２−（５−ブロモ−２−フルオロ−フェニル）−２−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ−プロピル］−Ｎ−メチル−オキサミン酸エチルエステルが無色の油として得られた（４．８ｇ、９３％の収率）。
【０１９５】
実施例Ａ４２：ｒａｃ−５−（５−ブロモ−２−フルオロ−フェニル）−１，５−ジメチル−ピペラジン−２，３−ジオンの製造
【０１９６】
【化４９】
2013529664.tif 000050
【０１９７】
ｒａｃ−５−（５−ブロモ−２−フルオロ−フェニル）−１，５−ジメチル−ピペラジン−２，３−ジオンは、実施例Ａ８に記載の同様の方法に従って合成した。このようにしてｒａｃ−Ｎ−［２−（５−ブロモ−２−フルオロ−フェニル）−２−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ−プロピル］−Ｎ−メチル−オキサミン酸エチルエステル（３．３ｇ、７．１５ｍｍｏｌ）から出発して、ｒａｃ−５−（５−ブロモ−２−フルオロ−フェニル）−１，５−ジメチル−ピペラジン−２，３−ジオンが得られ（２．２５ｇ、定量的収率）、そしてそのようなものとして次の反応において使用した。
【０１９８】
実施例Ａ４３：ｒａｃ−５−（５−ブロモ−２−フルオロ−フェニル）−３−メトキシ−１，５−ジメチル−５，６−ジヒドロ−１Ｈ−ピラジン−２−オンの製造
【０１９９】
【化５０】
2013529664.tif 000051
【０２００】
ｒａｃ−５−（５−ブロモ−２−フルオロ−フェニル）−３−メトキシ−１，５−ジメチル−５，６−ジヒドロ−１Ｈ−ピラジン−２−オンは、実施例Ａ９に記載の同様の方法に従って合成した。このようにしてｒａｃ−５−（５−ブロモ−２−フルオロ−フェニル）−１，５−ジメチル−ピペラジン−２，３−ジオン（３ｇ、９．５２ｍｍｏｌ）から出発して、ｒａｃ−５−（５−ブロモ−２−フルオロ−フェニル）−３−メトキシ−１，５−ジメチル−５，６−ジヒドロ−１Ｈ−ピラジン−２−オンが得られ（２．３ｇ、７３．４％の収率）、そしてそのようなものとして次の反応において使用した。
【０２０１】
実施例Ａ４４：ｒａｃ−３−アミノ−５−（５−ブロモ−２−フルオロ−フェニル）−１，５−ジメチル−５，６−ジヒドロ−１Ｈ−ピラジン−２−オンの製造
【０２０２】
【化５１】
2013529664.tif 000052
【０２０３】
ｒａｃ−３−アミノ−５−（５−ブロモ−２−フルオロ−フェニル）−１，５−ジメチル−５，６−ジヒドロ−１Ｈ−ピラジン−２−オンは、実施例Ａ９に記載の同様の方法に従って合成した。このようにしてｒａｃ−５−（５−ブロモ−２−フルオロ−フェニル）−３−メトキシ−１，５−ジメチル−５，６−ジヒドロ−１Ｈ−ピラジン−２−オン（０．９５ｇ、２．８９ｍｍｏｌ）から出発して、ｒａｃ−３−アミノ−５−（５−ブロモ−２−フルオロ−フェニル）−１，５−ジメチル−５，６−ジヒドロ−１Ｈ−ピラジン−２−オンが得られた（０．５ｇ、５５％の収率）。
【０２０４】
実施例Ａ４５：ｒａｃ−３−アミノ−５−（５−アミノ−２−フルオロ−フェニル）−１，５−ジメチル−５，６−ジヒドロ−１Ｈ−ピラジン−２−オンの製造
【０２０５】
【化５２】
2013529664.tif 000053
【０２０６】
ｒａｃ−３−アミノ−５−（５−ブロモ−２−フルオロ−フェニル）−１，５−ジメチル−５，６−ジヒドロ−１Ｈ−ピラジン−２−オン（０．５ｇ、１．５９ｍｍｏｌ）をＤＭＳＯ（２３ｍＬ）中でＮａＮ３（０．２６ｇ、３．９８ｍｍｏｌ）、ＣｕＩ（０．３７９ｇ、１．９９ｍｍｏｌ）およびＮａ２ＣＯ３（０．３３７ｇ、３．１８ｍｍｏｌ）と合わせ、そして反応物を脱気した。その後、Ｎ，Ｎ’−ジメチルエチレンジアミン（０．３ｍＬ、２．７８ｍｍｏｌ）を加え、そして約１時間、反応の完了まで混合物を１１０℃で加熱した。反応混合物をＤＣＭに注いだ。水酸化アンモニウム（水中２８％）を加え、そして有機層を分離し、そして水酸化アンモニウムで３回洗浄した。次に、有機層を乾燥させ（Ｍｇ２ＳＯ４）、濾過し、そして真空中で濃縮してｒａｃ−３−アミノ−５−（５−ブロモ−２−フルオロ−フェニル）−１，５−ジメチル−５，６−ジヒドロ−１Ｈ−ピラ
ジン−２−オンを生成せしめた（０．３８ｇ、９５％の収率）。
【０２０７】
Ｂ．最終化合物の製造
実施例Ｂ１：ｒａｃ−３’−（６−アミノ−２，４−ジメチル−５−オキソ−２，３，４，５−テトラヒドロ−ピラジン−２−イル）−ビフェニル−３−カルボニトリルの製造
【０２０８】
【化５３】
2013529664.tif 000054
【０２０９】
窒素下で室温で１，４−ジオキサン（４ｍＬ）およびＥｔＯＨ（０．４ｍＬ）中のｒａｃ−３−アミノ−５−（３−ブロモ−フェニル）−１，５−ジメチル−５，６−ジヒドロ−１Ｈ−ピラジン−２−オン（０．１３ｇ、０．４３９ｍｍｏｌ）、（３−シアノフェニル）ボロン酸（０．１９４ｇ、１．３１７ｍｍｏｌ）およびＫ２ＣＯ３（０．１８２ｇ、１．３１７ｍｍｏｌ）の攪拌懸濁液にテトラキス（トリフェニルホスフィン）パラジウム（０）（０．０１５ｇ、０．０１３ｍｍｏｌ）を加えた。混合物をマイクロ波照射下で１５０℃で２０分間攪拌した。混合物を水で希釈し、そしてＤＣＭで抽出した。有機層を分離し、乾燥させ（ＭｇＳＯ４）、濾過し、そして溶媒を真空中で蒸発させた。粗生成物をフラッシュカラムクロマトグラフィー（シリカゲル；メタノール中のアンモニアの７Ｍ溶液／ＤＣＭ  ０／１００〜３／９７）により精製した。所望の画分を集め、そして真空中で濃縮してｒａｃ−３’−（６−アミノ−２，４−ジメチル−５−オキソ−２，３，４，５−テトラヒドロ−ピラジン−２−イル）−ビフェニル−３−カルボニトリル（０．０７６ｇ、５４％の収率）を黄色がかった白色の固体として生成せしめた。
【０２１０】
実施例Ｂ２：ｒａｃ−３−アミノ−５−［３−（５−メトキシ−ピリジン−３−イル）−フェニル］−１，５−ジメチル−５，６−ジヒドロ−１Ｈ−ピラジン−２−オンの製造
【０２１１】
【化５４】
2013529664.tif 000055
【０２１２】
窒素下で室温で１，４−ジオキサン（５ｍＬ）およびＥｔＯＨ（０．５ｍＬ）中のｒａｃ−３−アミノ−５−（３−ブロモ−フェニル）−１，５−ジメチル−５，６−ジヒドロ−１Ｈ−ピラジン−２−オン（０．１ｇ、０．３３８ｍｍｏｌ）、５−メトキシピリジン−３−ボロン酸（０．０７８ｇ、０．５０６ｍｍｏｌ）およびＫ２ＣＯ３（０．１４０ｇ、１．０１３ｍｍｏｌ）の攪拌懸濁液にテトラキス（トリフェニルホスフィン）パラジウム（０）（０．０１２ｇ、０．０１０ｍｍｏｌ）を加えた。混合物をマイクロ波照射下で１５０℃で３０分間攪拌した。混合物を水で希釈し、そしてＤＣＭで抽出した。有機層を分離し、乾燥させ（ＭｇＳＯ４）、濾過し、そして溶媒を真空中で蒸発させた。粗生成物をフラッシュカラムクロマトグラフィー（シリカゲル；メタノール中のアンモニアの７Ｍ
溶液／ＤＣＭ  ０／１００〜３／９７）により精製した。所望の画分を集め、そして真空中で濃縮してｒａｃ−３−アミノ−５−［３−（５−メトキシ−ピリジン−３−イル）−フェニル］−１，５−ジメチル−５，６−ジヒドロ−１Ｈ−ピラジン−２−オン（０．０７６ｇ、６９％の収率）を黄色がかった白色の固体として生成せしめた。
【０２１３】
実施例Ｂ３：ｒａｃ−５−クロロ−ピリジン−２−カルボン酸［３−（６−アミノ−２，４−ジメチル−５−オキソ−２，３，４，５−テトラヒドロ−ピラジン−２−イル）−フェニル］−アミドの製造
【０２１４】
【化５５】
2013529664.tif 000056
【０２１５】
室温でＤＣＭ（５ｍＬ）中のｒａｃ−３−アミノ−１，５−ジメチル−５−（３−ニトロ−フェニル）−５，６−ジヒドロ−１Ｈ−ピラジン−２−オン（０．０８０ｇ、０．３４４ｍｍｏｌ）の攪拌溶液に５−クロロ−２−ピリジンカルボン酸（０．０７１ｇ、０．４４８ｍｍｏｌ）を加えた。次に、Ｎ，Ｎ−ジメチルアニリン（０．０６１ｍＬ、０．４８２ｍｍｏｌ）を加え、そして室温で５分間攪拌した後にＯ−（７−アザベンゾトリアゾール−１−イル）−Ｎ，Ｎ，Ｎ’，Ｎ’−テトラメチルウロニウムヘキサフルオロホスフェート（０．１７０ｇ、０．４４８ｍｍｏｌ）を加えた。混合物を室温で３時間攪拌した。混合物をＮａ２ＣＯ３（水性飽和溶液）で希釈し、そしてＤＣＭで抽出した。有機層を分離し、乾燥させ（Ｎａ２ＳＯ４）、濾過し、そして溶媒を真空中で蒸発させた。粗生成物をフラッシュカラムクロマトグラフィー（シリカゲル；メタノール中のアンモニアの７Ｍ溶液／ＤＣＭ  ０／１００〜４／９６）により精製した。所望の画分を集め、そして真空中で濃縮してｒａｃ−５−クロロ−ピリジン−２−カルボン酸［３−（６−アミノ−２，４−ジメチル−５−オキソ−２，３，４，５−テトラヒドロ−ピラジン−２−イル）−フェニル］−アミド（０．０２３ｇ、１８％の収率）を白色の固体として生成せしめた。
【０２１６】
実施例Ｂ４：（Ｒ）−５−クロロ−ピリジン−２−カルボン酸［３−（６−アミノ−２，４−ジメチル−５−オキソ−２，３，４，５−テトラヒドロ−ピラジン−２−イル）−フェニル］−アミドおよび（Ｓ）−５−クロロ−ピリジン−２−カルボン酸［３−（６−アミノ−２，４−ジメチル−５−オキソ−２，３，４，５−テトラヒドロ−ピラジン−２−イル）−フェニル］−アミドの製造
【０２１７】
【化５６】
2013529664.tif 000057
【０２１８】
ｒａｃ−５−クロロ−ピリジン−２−カルボン酸［３−（６−アミノ−２，４−ジメチル−５−オキソ−２，３，４，５−テトラヒドロ−ピラジン−２−イル）−フェニル］−アミド（０．２２ｇ）のサンプルを分取ＳＦＣ（ＣｈｉｒａｌｐａｋＲ  ＩＣ  ２５０ｘ２０ｍｍ、移動相６０％ＣＯ２、３６％ＥｔＯＨ、４％ＤＣＭおよび０．３％ｉＰｒＮＨ２）により精製して（Ｒ）−５−クロロ−ピリジン−２−カルボン酸［３−（６−アミノ−２，４−ジメチル−５−オキソ−２，３，４，５−テトラヒドロ−ピラジン−２−イル）−フェニル］−アミド（０．０６４ｇ、１５％）および（Ｓ）−５−クロロ−ピリジン−２−カルボン酸［３−（６−アミノ−２，４−ジメチル−５−オキソ−２，３，４，５−テトラヒドロ−ピラジン−２−イル）−フェニル］−アミド（０．０６５ｇ、１５％）を生成せしめた。
【０２１９】
実施例Ｂ５：ｒａｃ−５−アミノ−３−（２，４−ジフルオロ−５−フェニル−フェニル）−１，３−ジメチル−２Ｈ−ピラジン−６−オンの製造
【０２２０】
【化５７】
2013529664.tif 000058
【０２２１】
ｒａｃ−５−アミノ−３−（２，４−ジフルオロ−５−フェニル−フェニル）−１，３−ジメチル−２Ｈ−ピラジン−６−オンは、実施例Ｂ２に記載の同様の方法に従って合成した。このようにしてｒａｃ−３−アミノ−５−（５−ブロモ−２，４−ジフルオロ−フェニル）−１，５−ジメチル−５，６−ジヒドロ−１Ｈ−ピラジン−２−オン（０．１ｇ、０．３ｍｍｏｌ）から出発して、ｒａｃ−５−アミノ−３−（２，４−ジフルオロ−５−フェニル−フェニル）−１，３−ジメチル−２Ｈ−ピラジン−６−オンが油として得られた。ＨＣｌ（イソプロパノール中２Ｎ）を加えることよりこの油を塩酸塩に転化し、そしてＤＩＰＥおよびアセトニトリルから結晶化させて白色の固体を生成せしめた（０．０４８ｇ、４４％の収率）。
【０２２２】
実施例Ｂ６：ｒａｃ−５−アミノ−３−［２，４−ジフルオロ−５−（５−メトキシ−３−ピリジル）フェニル］−１，３−ジメチル−２Ｈ−ピラジン−６−オン、（Ｒ）−５−アミノ−３−［２，４−ジフルオロ−５−（５−メトキシ−３−ピリジル）フェニル］−１，３−ジメチル−２Ｈ−ピラジン−６−オンおよび（Ｓ）−５−アミノ−３−［２，４−ジフルオロ−５−（５−メトキシ−３−ピリジル）フェニル］−１，３−ジメチル−２Ｈ−ピラジン−６−オンの製造
【０２２３】
【化５８】
2013529664.tif 000059
【０２２４】
ｒａｃ−５−アミノ−３−［２，４−ジフルオロ−５−（５−メトキシ−３−ピリジル）フェニル］−１，３−ジメチル−２Ｈ−ピラジン−６−オンは、実施例Ｂ２に記載の同様の方法に従って合成した。このようにしてｒａｃ−３−アミノ−５−（５−ブロモ−２，４−ジフルオロ−フェニル）−１，５−ジメチル−５，６−ジヒドロ−１Ｈ−ピラジン−２−オン（０．５５ｇ、１．６６ｍｍｏｌ）から出発して、ｒａｃ−５−アミノ−３−［２，４−ジフルオロ−５−（５−メトキシ−３−ピリジル）フェニル］−１，３−ジメチル−２Ｈ−ピラジン−６−オンが固体として得られた（０．４ｇ、６７％の収率）。
【０２２５】
次に、ｒａｃ−５−アミノ−３−［２，４−ジフルオロ−５−（５−メトキシ−３−ピリジル）フェニル］−１，３−ジメチル−２Ｈ−ピラジン−６−オン（０．３２ｇ）のサンプルを分取ＳＦＣ（ＣｈｉｒａｌｐａｋＲ  Ｄｉａｃｅｌ  ＡＤ  ２０ｘ２５０ｍｍ、移動相ＣＯ２、０．２％ｉＰｒＮＨ２を有するＭｅＯＨ）により精製して（Ｒ）−５−アミノ−３−［２，４−ジフルオロ−５−（５−メトキシ−３−ピリジル）フェニル］−１，３−ジメチル−２Ｈ−ピラジン−６−オン（０．０９ｇ、１５％）および（Ｓ）−５−アミノ−３−［２，４−ジフルオロ−５−（５−メトキシ−３−ピリジル）フェニル］−１，３−ジメチル−２Ｈ−ピラジン−６−オン（０．０９２ｇ、１５％）を生成せしめた。
【０２２６】
実施例Ｂ７：ｒａｃ−５−アミノ−３−（２，４−ジフルオロ−５−ピリミジン−５−イル−フェニル）−１，３−ジメチル−２Ｈ−ピラジン−６−オン、（Ｒ）−ｒａｃ−５−アミノ−３−（２，４−ジフルオロ−５−ピリミジン−５−イル−フェニル）−１，３−ジメチル−２Ｈ−ピラジン−６−オンおよび（Ｓ）−ｒａｃ−５−アミノ−３−（２，４−ジフルオロ−５−ピリミジン−５−イル−フェニル）−１，３−ジメチル−２Ｈ−ピラジン−６−オンの製造
【０２２７】
【化５９】
2013529664.tif 000060
【０２２８】
ｒａｃ−５−アミノ−３−（２，４−ジフルオロ−５−ピリミジン−５−イル−フェニル）−１，３−ジメチル−２Ｈ−ピラジン−６−オンは、実施例Ｂ２に記載の同様の方法に従って合成した。このようにしてｒａｃ−３−アミノ−５−（５−ブロモ−２，４−ジフルオロ−フェニル）−１，５−ジメチル−５，６−ジヒドロ−１Ｈ−ピラジン−２−オン（０．６ｇ、１．８１ｍｍｏｌ）から出発して、ｒａｃ−５−アミノ−３−（２，４−ジフルオロ−５−ピリミジン−５−イル−フェニル）−１，３−ジメチル−２Ｈ−ピラジン−６−オンが固体として得られた（０．４９ｇ、８２％の収率）。
【０２２９】
次に、この生成物を分取ＳＦＣ（ＣｈｉｒａｌｐａｋＲ  Ｄｉａｃｅｌ  ＡＤ  ２０ｘ２５０ｍｍ、移動相ＣＯ２、０．２％ｉＰｒＮＨ２を有するＭｅＯＨ）により精製して（Ｒ）−５−アミノ−３−（２，４−ジフルオロ−５−ピリミジン−５−イル−フェニル）−１，３−ジメチル−２Ｈ−ピラジン−６−オン（０．０９８ｇ、１６％）および（Ｓ）−５−アミノ−３−（２，４−ジフルオロ−５−ピリミジン−５−イル−フェニル）−１，３−ジメチル−２Ｈ−ピラジン−６−オン（０．１０６ｇ、１８％）を生成せしめた。
【０２３０】
実施例Ｂ８：（Ｒ）−５−クロロ−ピリジン−２−カルボン酸［３−（６−アミノ−２，４−ジメチル−５−オキソ−２，３，４，５−テトラヒドロ−ピラジン−２−イル）−４−フルオロ−フェニル］−アミドおよび（Ｓ）−５−クロロ−ピリジン−２−カルボン酸［３−（６−アミノ−２，４−ジメチル−５−オキソ−２，３，４，５−テトラヒドロ−ピラジン−２−イル）−４−フルオロ−フェニル］−アミドの製造
【０２３１】
【化６０】
2013529664.tif 000061
【０２３２】
５−クロロ−２−ピリジンカルボン酸（０．１１３ｇ、０．７２ｍｍｏｌ）をＭｅＯＨ（１０ｍＬ）に溶解し、そして４−（４，６−ジメトキシ−１，３，５−トリアジン−２−イル）−４−メチルモルホリニウムクロリド（０．５３ｇ、１．９２ｍｍｏｌ）を加えた。混合物を５分間攪拌した後に、ＭｅＯＨ（５ｍＬ）中のｒａｃ−３−アミノ−５−（５−アミノ−２−フルオロ−フェニル）−１，５−ジメチル−５，６−ジヒドロ−１Ｈ−ピラジン−２−オン（０．６ｇ、１．８１ｍｍｏｌ）の溶液を０℃で加え、そして混合物をさらに３時間攪拌した。その後で、反応混合物を０℃でＮａＯＨ（Ｈ２Ｏ中１Ｍ）でクエンチし、そして次にＥｔＯＡｃで抽出した。有機層をブラインで洗浄し、次に分離し、乾燥させ（ＭｇＳＯ４）、そして溶媒を真空中で蒸発させた。粗物質（ｃｒｕｄｅ  ｍａｔｅｒｉａｌ）をフラッシュカラムクロマトグラフィー（シリカゲル；メタノール中のアンモニアの７Ｍ溶液／ＤＣＭ  ０／１００〜５／９５）により精製し、所望の画分を集め、そして溶媒を真空中で蒸発させてｒａｃ−５−クロロ−ピリジン−２−カルボン酸［３−（６−アミノ−２，４−ジメチル−５−オキソ−２，３，４，５−テトラヒドロ−ピラジン−２−イル）−４−フルオロ−フェニル］−アミド（０．５ｇ）を生成せしめた。
【０２３３】
次に、この生成物を分取ＳＦＣ（ＣｈｉｒａｌｐａｋＲ  Ｄｉａｃｅｌ  ＯＪ  ２０ｘ２５０ｍｍ、移動相ＣＯ２、０．２％ｉＰｒＮＨ２を有するｉＰｒＯＨ）により精製して（Ｒ）−５−クロロ−ピリジン−２−カルボン酸［３−（６−アミノ−２，４−ジメチル−５−オキソ−２，３，４，５−テトラヒドロ−ピラジン−２−イル）−４−フルオロ−フェニル］−アミド（０．０６ｇ、９．６％）および（Ｓ）−５−クロロ−ピリジン−２−カルボン酸［３−（６−アミノ−２，４−ジメチル−５−オキソ−２，３，４，５−テトラヒドロ−ピラジン−２−イル）−４−フルオロ−フェニル］−アミド（０．０６５ｇ、１０％）を生成せしめた。
【０２３４】
実施例Ｂ９：ｒａｃ−５−アミノ−１，３−ジメチル−３−（３−フェニル−フェニル）−２Ｈ−ピラジン−６−オンの製造
【０２３５】
【化６１】
2013529664.tif 000062
【０２３６】
ｒａｃ−５−アミノ−１，３−ジメチル−３−（３−フェニル−フェニル）−２Ｈ−ピラジン−６−オンは、実施例Ｂ２に記載の同様の方法に従って合成した。このようにしてｒａｃ−３−アミノ−５−（３−ブロモ−フェニル）−１，５−ジメチル−５，６−ジヒドロ−１Ｈ−ピラジン−２−オン（０．３３ｇ、１．１１ｍｍｏｌ）から出発して、ｒａｃ−５−アミノ−１，３−ジメチル−３−（３−フェニル−フェニル）−２Ｈ−ピラジン−６−オンが油として得られた。ＨＣｌ（イソプロパノール中２Ｎ）を加えることによりこの油を塩酸塩に転化し、そしてＤＩＰＥおよびアセトニトリルから結晶化させて白色の固体を生成せしめた（０．０７２ｇ、２０％の収率）。
【０２３７】
実施例Ｂ１０：ｒａｃ−５−アミノ−１，３−ジメチル−３−（３−ピリミジン−５−イルフェニル）−２Ｈ−ピラジン−６−オンの製造
【０２３８】
【化６２】
2013529664.tif 000063
【０２３９】
ｒａｃ−５−アミノ−１，３−ジメチル−３−（３−ピリミジン−５−イルフェニル）−２Ｈ−ピラジン−６−オンは、実施例Ｂ２に記載の同様の方法に従って合成した。このようにしてｒａｃ−３−アミノ−５−（３−ブロモ−フェニル）−１，５−ジメチル−５，６−ジヒドロ−１Ｈ−ピラジン−２−オン（０．１ｇ、０．３４ｍｍｏｌ）から出発して、ｒａｃ−５−アミノ−１，３−ジメチル−３−（３−ピリミジン−５−イルフェニル）−２Ｈ−ピラジン−６−オンが黄色がかった白色の固体として得られた（０．０７５ｇ、７５％の収率）。
【０２４０】
【表１】
2013529664.tif 000064
【０２４１】
Ｃ．分析部分
ＬＣＭＳ
本発明の化合物の（ＬＣ）ＭＳ−特性化には、以下の方法を使用した。
【０２４２】
一般的方法Ａ：
ＨＰＬＣ測定は、脱気装置を有するポンプ（クォータナリもしくはバイナリ）、オート
サンプラー、カラムオーブン、ダイオードアレイ検出器（ＤＡＤ）およびそれぞれの方法において特定した通りのカラムを含んでなるＨＰ１１００（Ａｇｉｌｅｎｔ  Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ）システムを用いて行った。ＭＳ検出器は、エレクトロスプレーイオン化源もしくはＥＳＣＩデュアルイオン化源（大気圧化学イオン化と組み合わせたエレクトロスプレー）のいずれかで設定した。窒素をネブライザーガスとして用いた。供給源温度を１４０℃もしくは１００℃のいずれかで維持した。データ収集は、ＭａｓｓＬｙｎｘ−ＯｐｅｎｌｙｎｘソフトウェアもしくはＣｈｅｍｓｔａｔｉｏｎ−Ａｇｉｌｅｎｔデータブラウザソフトウェアのいずれかで行った。
【０２４３】
一般的方法Ｂ：
ＵＰＬＣ（超高速液体クロマトグラフィー）測定は、サンプルオーガナイザー、脱気装置を有するバイナリポンプ、４つのカラムのオーブン、ダイオードアレイ検出器（ＤＡＤ）およびそれぞれの方法において特定した通りのカラムを含んでなるＡｃｑｕｉｔｙ  ＵＰＬＣ（Ｗａｔｅｒｓ）システムを用いて行った。ＭＳ検出器は、ＥＳＣＩデュアルイオン化源（大気圧化学イオン化と組み合わせたエレクトロスプレー）で設定した。窒素をネブライザーガスとして用いた。供給源温度を１４０℃で維持した。データ収集は、ＭａｓｓＬｙｎｘ−Ｏｐｅｎｌｙｎｘソフトウェアで行った。
【０２４４】
一般的方法Ｃ：
ＨＰＬＣ測定は、脱気装置を有するクォータナリポンプ、オートサンプラー、ダイオードアレイ検出器（ＤＡＤ）および以下のそれぞれの方法において特定した通りのカラムを含んでなるＡｌｌｉａｎｃｅ  ＨＴ  ２７９５（Ｗａｔｅｒｓ）システムを用いて行い、カラムを３０℃の温度で保った。カラムからのフローはＭＳ分光計に分けられた。ＭＳ検出器は、エレクトロスプレーイオン化源で設定した。キャピラリーニードル電圧は３ｋＶであり、そしてＬＣＴ（Ｗａｔｅｒｓからの飛行時間型ＺｓｐｒａｙＴＭ質量分析計）上で供給源温度を１００℃で維持した。窒素をネブライザーガスとして用いた。データ収集は、Ｗａｔｅｒｓ−Ｍｉｃｒｏｍａｓｓ  ＭａｓｓＬｙｎｘ−Ｏｐｅｎｌｙｎｘデータシステムで行った。
【０２４５】
一般的方法Ｄ：
ＬＣ測定は、バイナリポンプ、サンプルオーガナイザー、カラムヒーター（５５℃で設定した）、ダイオードアレイ検出器（ＤＡＤ）および以下のそれぞれの方法において特定した通りのカラムを含んでなるＡｃｑｕｉｔｙ  ＵＰＬＣ（Ｗａｔｅｒｓ）システムを用いて行った。カラムからのフローはＭＳ分光計に分けられた。ＭＳ検出器は、エレクトロスプレーイオン化源で設定した。質量スペクトルは、０．０２秒の滞留時間を用いて０．１８秒で１００〜１０００をスキャンすることにより得られた。キャピラリーニードル電圧は３．５ｋＶであり、そして供給源温度を１４０℃で維持した。窒素をネブライザーガスとして用いた。データ収集は、Ｗａｔｅｒｓ−Ｍｉｃｒｏｍａｓｓ  ＭａｓｓＬｙｎｘ−Ｏｐｅｎｌｙｎｘデータシステムで行った。
【０２４６】
方法１：
一般的方法Ａに加えて：逆相ＨＰＬＣを６０℃で１．０ｍｌ／分の流速でＡｇｉｌｅｎｔからのＥｃｌｉｐｓｅ  Ｐｌｕｓ−Ｃ１８カラム（３．５μｍ、２．１ｘ３０ｍｍ）上で実施した。使用した勾配条件は：５．０分で９５％Ａ（０．５ｇ／ｌ酢酸アンモニウム溶液＋５％アセトニトリル）、５％Ｂ（アセトニトリル）〜１００％Ｂであり、５．１５分まで維持し、そして５．３分で７．０分まで初期条件に平衡化する。注入容量２μｌ。高分解能質量スペクトル（飛行時間、ＴＯＦ検出器）は、０．３秒の滞留時間を用いて０．５秒で１００〜７５０をスキャンすることにより得られた。キャピラリーニードル電圧は、ポジティブイオン化モードでは２．５ｋＶそしてネガティブイオン化モードでは２．９ｋＶであった。コーン電圧は、ポジティブおよびネガティブイオン化モードの両方で２
０Ｖであった。ロイシン−エンケファリンは、ロックマスキャリブレーションに使用する標準物質であった。
【０２４７】
方法２：
一般的方法Ｂに加えて：逆相ＵＰＬＣをＭＳ検出器への分割なしに５０℃で１．０ｍｌ／分の流速でＷａｔｅｒｓからのＢＥＨ−Ｃ１８カラム（１．７μｍ、２．１ｘ５０ｍｍ）上で実施した。使用した勾配条件は：３．８分で９５％Ａ（０．５ｇ／ｌ酢酸アンモニウム溶液＋５％アセトニトリル）、５％Ｂ（アセトニトリル）〜４０％Ａ、６０％Ｂ、４．６分で５％Ａ、９５％Ｂまでであり、５．０分まで維持した。注入容量２μｌ。低分解能質量スペクトル（シングル四重極、ＳＱＤ検出器）は、０．０８秒のチャンネル間遅延を用いて０．１秒で１００〜１０００をスキャンすることにより得られた。キャピラリーニードル電圧は３ｋＶであった。コーン電圧は、ポジティブイオン化モードでは２５Ｖそしてネガティブイオン化モードでは３０Ｖであった。
【０２４８】
方法３：
一般的方法Ｃに加えて：逆相ＨＰＬＣを０．８ｍｌ／分の流速でＷａｔｅｒｓ  Ｘｔｅｒｒａ−ＲＰ  Ｃ１８カラム（３．５μｍ、４．６ｘ１００ｍｍ）上で実施した。２つの移動相（移動相Ａ：１００％７ｍＭ酢酸アンモニウム；移動相Ｂ：１００％アセトニトリル）を用いて４．５分で８０％Ａおよび２０％Ｂ（０．５分間保持する）から９０％Ｂまで、４分間９０％Ｂの勾配条件を行い、そして３分間初期条件で再平衡化した。５μｌの注入容量を用いた。コーン電圧はポジティブおよびネガティブイオン化モードで２０Ｖであった。質量スペクトルは、０．３秒のスキャン間遅延を用いて０．４秒で１００〜１０００をスキャンすることにより得られた。
【０２４９】
方法４：
一般的方法Ｄに加えて：逆相ＵＰＬＣ（超高速液体クロマトグラフィー）を０．８ｍｌ／分の流速で架橋エチルシロキサン／シリカハイブリッド（ＢＥＨ）Ｃ１８カラム（１．７μｍ、２．１ｘ５０ｍｍ；Ｗａｔｅｒｓ  Ａｃｑｕｉｔｙ）上で実施した。２つの移動相（移動相Ａ：Ｈ２Ｏ中０．１％のギ酸／メタノール  ９５／５；移動相Ｂ：メタノール）を用いて１．３分で９５％Ａおよび５％Ｂから５％Ａおよび９５％Ｂまでの勾配条件を行い、そして０．２分間保持した。０．５μｌの注入容量を用いた。コーン電圧は、ポジティブイオン化モードでは１０Ｖそしてネガティブイオン化モードでは２０Ｖであった。
【０２５０】
方法５：
一般的方法Ｄに加えて：逆相ＵＰＬＣ（超高速液体クロマトグラフィー）を０．８ｍｌ／分の流速で架橋エチルシロキサン／シリカハイブリッド（ＢＥＨ）Ｃ１８カラム（１．７μｍ、２．１ｘ５０ｍｍ；Ｗａｔｅｒｓ  Ａｃｑｕｉｔｙ）上で実施した。２つの移動相（Ｈ２Ｏ中２５ｍＭの酢酸アンモニウム／アセトニトリル  ９５／５；移動相Ｂ：アセトニトリル）を用いて１．３分で９５％Ａおよび５％Ｂから５％Ａおよび９５％Ｂまでの勾配条件を行い、そして０．３分間保持した。０．５μｌの注入容量を用いた。コーン電圧は、ポジティブイオン化モードでは３０Ｖそしてネガティブイオン化モードでは３０Ｖであった。
【０２５１】
融点
値はピーク値もしくは融解範囲のいずれかであり、そしてこの分析方法と一般に関連する実験不確実性で得られる。
【０２５２】
Ｍｅｔｔｌｅｒ  ＦＰ８１ＨＴ／ＦＰ９０装置（表３においてＦＰ９０により示される）
多数の化合物について、融点をＭｅｔｔｌｅｒ  ＦＰ８１ＨＴ／ＦＰ９０装置上でオープンキャピラリーチューブにおいて決定した。融点は、１、３、５もしくは１０℃／分の
温度勾配で測定した。最大温度は３００℃であった。融点はデジタル表示から読み取った。
【０２５３】
ＤＳＣ８２３ｅ（表３においてＤＳＣにより示される）
多数の化合物について、融点をＤＳＣ８２３ｅ（Ｍｅｔｔｌｅｒ−Ｔｏｌｅｄｏ）で決定した。融点は３０℃／分の温度勾配で測定した。最大温度は４００℃であった。
【０２５４】
【表２】
2013529664.tif 000065
【０２５５】
ＳＦＣＭＳ
一般的方法Ａ：
ＳＦＣ測定は、二酸化炭素（ＣＯ２）およびモディファイアを送達するためのＦＣＭ−１２００デュアルポンプ流体制御モジュール、ＣＴＣ  Ａｎａｌｙｔｉｃｓ自動液体サンプラー、室温から８０℃までのカラム加熱のためのＴＣＭ−２００００熱制御モジュールを含んでなるＢｅｒｇｅｒ  ｉｎｓｔｒｕｍｅｎｔｓ（Ｎｅｗａｒｋ，ＤＥ，ＵＳＡ）からのＡｎａｌｙｔｉｃａｌ  ＳＦＣシステムを用いて行った。４００バールまで耐える高圧フローセルを備えたＡｇｉｌｅｎｔ  １１００ＵＶ光ダイオードアレイ検出器を用いた。カラムからのフローはＭＳ分光計に分けられた。ＭＳ検出器は、大気圧イオン化源で設定した。Ｗａｔｅｒｓ  ＺＱ質量分析計の以下のイオン化パラメーターは：コロナ：９μａ、供給源温度：１４０℃、コーン：３０Ｖ、プローブ温度４５０℃、エキストラクタ３Ｖ、脱溶媒和（ｄｅｓｏｌｖａｔａｔｉｏｎ）ガス４００Ｌ／ｈｒ、コーンガス７０Ｌ／ｈｒである。窒素をネブライザーガスとして用いた。データ収集は、Ｗａｔｅｒｓ−Ｍｉ
ｃｒｏｍａｓｓ  ＭａｓｓＬｙｎｘ−Ｏｐｅｎｌｙｎｘデータシステムで行った。
【０２５６】
一般的方法Ｂ：
ＳＦＣ測定は、二酸化炭素（ＣＯ２）およびモディファイアの送達のためのデュアルポンプ制御モジュール（ＦＣＭ−１２００）、１〜１５０℃の範囲の温度制御を有するカラム加熱のための熱制御モジュール（ＴＣＭ２１００）および６つの異なるカラム用のカラム選択弁（Ｖａｌｃｏ，ＶＩＣＩ，Ｈｏｕｓｔｏｎ，ＴＸ，ＵＳＡ）を含んでなるＢｅｒｇｅｒ  ｉｎｓｔｒｕｍｅｎｔｓ（Ｎｅｗａｒｋ，ＤＥ，ＵＳＡ）からのＡｎａｌｙｔｉｃａｌ  ＳＦＣシステムを用いて行った。光ダイオードアレイ検出器（Ａｇｉｌｅｎｔ  １１００，Ｗａｌｄｂｒｏｎｎ，Ｇｅｒｍａｎｙ）に高圧フローセル（４００バールまで）を装備し、そしてＣＴＣ  ＬＣ  Ｍｉｎｉ  ＰＡＬオートサンプラー（Ｌｅａｐ  Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ，Ｃａｒｒｂｏｒｏ，ＮＣ，ＵＳＡ）で設定した。直交するＺ−エレクトロスプレーインターフェースを有するＺＱ質量分析計（Ｗａｔｅｒｓ，Ｍｉｌｆｏｒｄ，ＭＡ，ＵＳＡ）をＳＦＣシステムと連結する。測定器制御、データ収集および処理は、ＳＣＦ  ＰｒｏＮＴｏソフトウェアおよびＭａｓｓｌｙｎｘソフトウェアからなる統合プラットフォームで行った。
【０２５７】
方法１：
一般的方法Ａに加えて：ＳＦＣにおけるキラル分離を３．０ｍｌ／分の流速で３５℃でＣＨＩＲＡＬＰＡＫ  ＩＣ  ＤＡＩＣＥＬカラム（５μｍ、４．６ｘ２５０ｍｍ）上で実施した。移動相はＣＯ２、６０％エタノール（０．３％ｉＰｒＮＨ２を含有する）であり、１１分保持する。
【０２５８】
方法２：
一般的方法Ｂに加えて：ＳＦＣにおけるキラル分離を３．０ｍｌ／分の流速で５０℃でＣＨＩＲＡＬＰＡＫ  ＡＤ−Ｈカラム（４．６ｘ５００ｍｍ）上で実施した。移動相はＣＯ２、２０％ＭｅＯＨ（０．２％ｉＰｒＮＨ２を含有する）であり、１７．５２０分保持し、次に１０％の割合で２０〜５０％ＭｅＯＨ／ＣＯ２そして５０％で４．２０分保持する。
【０２５９】
方法３：
一般的方法Ｂに加えて：ＳＦＣにおけるキラル分離を３．０ｍｌ／分の流速で５０℃でＣＨＩＲＡＬＰＡＫ  ＡＤ−Ｈカラム（４．６ｘ５００ｍｍ）上で実施した。移動相はＣＯ２、２０％ＭｅＯＨ（０．２％ｉＰｒＮＨ２を含有する）であり、１５．００分保持する、イソクラチックモード。
【０２６０】
方法４：
一般的方法Ｂに加えて：ＳＦＣにおけるキラル分離を３．０ｍｌ／分の流速で５０℃でＣＨＩＲＡＬＣＥＬ  ＯＪ−Ｈカラム（４．６ｘ５００ｍｍ）上で実施した。移動相はＣＯ２、２０％ｉＰｒＯＨ（０．２％ｉＰｒＮＨ２を含有する）であり、１９．６０分保持し、次に１０％の割合で２０〜５０％ｉＰｒＯＨ（０．２％ｉＰｒＮＨ２を含有する）、そして５０％で３．０分保持する。
【０２６１】
【表３】
2013529664.tif 000066
【０２６２】
旋光度
旋光度はナトリウムランプを用いてＰｅｒｋｉｎ−Ｅｌｍｅｒ  ３４１旋光計上で測定し、そして下記の通り報告した：［α］λｔ℃（ｃｇ／１００ｍｌ、溶媒）。
【０２６３】
【表４】
2013529664.tif 000067
【０２６４】
Ｄ．薬理学的実施例
本発明において提供される化合物は、β部位ＡＰＰ切断酵素１（ＢＡＣＥ１）の阻害剤である。ＢＡＣＥ１、アスパラギン酸プロテアーゼの阻害は、アルツハイマー病（ＡＤ）の処置に適していると考えられる。β−アミロイド前駆体タンパク質（ＡＰＰ）からのβ−アミロイドペプチド（Ａβ）の生成および蓄積は、ＡＤの発症および進行において重要な役割を果たすと考えられる。Ａβは、それぞれ、β−セクレターゼおよびγ−セクレターゼによるＡβドメインのＮおよびＣ末端での逐次切断によりアミロイド前駆体タンパク質（ＡＰＰ）から生成される。
【０２６５】
式（Ｉ）の化合物は、酵素活性を阻害するそれらの能力のためにＢＡＣＥ１で実質的にそれらの効果を有すると期待される。以下に記載のそしてそのような化合物、そしてさらに特に式（Ｉ）の化合物の同定に適当である生化学的蛍光共鳴エネルギー移動（ＦＲＥＴ
）に基づくアッセイおよびＳＫＮＢＥ２細胞における細胞αｌｉｓａアッセイを用いて試験したそのような阻害剤の作用を表３に示す。
【０２６６】
生化学的ＦＲＥＴに基づくアッセイ
本アッセイは、蛍光共鳴エネルギー移動アッセイ（ＦＲＥＴ）に基づくアッセイである。このアッセイの基質は、アミロイド前駆体タンパク質（ＡＰＰ）β−セクレターゼ切断部位の「スウェーデン」Ｌｙｓ−Ｍｅｔ／Ａｓｎ−Ｌｅｕ突然変異を含有するＡＰＰ由来の１３アミノ酸ペプチドである。この基質はまた２つのフルオロフォアも含有し：（７−メトキシ−クマリン−４−イル）酢酸（Ｍｃａ）は３２０ｎｍでの励起波長および４０５ｎｍでの発光を有する蛍光ドナーであり、そして２，４−ジニトロフェニル（Ｄｎｐ）は専用（ｐｒｏｐｒｉｅｔａｒｙ）クエンチャーアクセプターである。これら２つの基の間の距離は、光励起の際に、共鳴エネルギー移動によって、ドナー蛍光エネルギーがアクセプターにより有意にクエンチされるように選択されている。ＢＡＣＥ１による切断の際に、フルオロフォアＭｃａはクエンチング基Ｄｎｐから分離され、ドナーの全蛍光収率を回復する。蛍光の増加は、タンパク質分解の割合に直線的に相関する（Ｋｏｉｋｅ  Ｈ  ｅｔ  ａｌ．Ｊ  Ｂｉｏｃｈｅｍ．１９９９，１２６，２３５−４２）。
【０２６７】
簡潔に言えば、３８４ウェルフォーマットにおいて１μｇ／ｍｌの最終濃度の組換えＢＡＣＥ１タンパク質を化合物の不在下もしくは存在下でインキュベーションバッファー（４０ｍＭクエン酸バッファーｐＨ５．０、０．０４％ＰＥＧ、４％ＤＭＳＯ）中１０μｍの基質と室温で１２０分間インキュベーションする。次に、タンパク質分解の量をＴ＝０およびＴ＝１２０での蛍光測定により直接測定する（３２０ｎｍでの励起および４０５ｎｍでの発光）。結果は、Ｔ１２０〜Ｔ０間の差として、ＲＦＵ単位で表される。
【０２６８】
最良適合曲線は、化合物濃度に対する％Ｃｏｎｔｒｏｌｍｉｎのプロットに最小二乗和法により適合させる。これからＩＣ５０値（活性の５０％阻害をもたらす阻害濃度）を得ることができる。
ＬＣ＝低コントロール値のメジアン
＝低コントロール：酵素なしの反応
ＨＣ＝高コントロール値のメジアン
＝高コントロール：酵素を有する反応
％効果＝１００−［（サンプル−ＬＣ）／（ＨＣ−ＬＣ）＊１００］
％コントロール＝（サンプル／ＨＣ）＊１００
％Ｃｏｎｔｒｏｌｍｉｎ＝（サンプル−ＬＣ）／（ＨＣ−ＬＣ）＊１００
【０２６９】
以下に例示する化合物は本質的に上記の通り試験し、そして以下の活性を示した：
【０２７０】
【表５】
2013529664.tif 000068
【０２７１】
ＳＫＮＢＥ２細胞における細胞αｌｉｓａアッセイ
２つのαｌｉｓａアッセイにおいて、ヒト神経芽細胞腫ＳＫＮＢＥ２細胞の産生されそして培地中に分泌されるＡβｔｏｔａｌおよびＡβ４２のレベルを定量する。アッセイは、野生型アミロイド前駆体タンパク質（ｈＡＰＰ６９５）を発現するヒト神経芽細胞腫ＳＫＮＢＥ２に基づく。化合物を希釈し、そしてこれらの細胞に加え、１８時間インキュベーションし、そして次にＡβ４２およびＡβｔｏｔａｌを測定する。ＡβｔｏｔａｌおよびＡβ４２は、サンドイッチαｌｉｓａにより測定する。αｌｉｓａは、ストレプトアビジン被覆ビーズに結合したビオチニル化抗体ＡｂＮ／２５ならびにそれぞれＡβｔｏｔａｌおよびＡβ４２の検出のための抗体Ａｂ４Ｇ８もしくはｃＡｂ４２／２６結合アクセプタービーズを用いるサンドイッチアッセイである。ＡβｔｏｔａｌもしくはＡβ４２の存在下で、これらのビーズは近接するようになる。ドナービーズの励起は一重項酸素分子の放出を引き起こし、それはアクセプタービーズにおける一連のエネルギー移動を引き起こし、発光をもたらす。発光は１時間のインキュベーション後に測定する（６５０ｎｍでの励起および６１５ｎｍでの発光）。
【０２７２】
最良適合曲線は、化合物濃度に対する％Ｃｏｎｔｒｏｌｍｉｎのプロットに最小二乗和法により適合させる。これからＩＣ５０値（活性の５０％阻害をもたらす阻害濃度）を得ることができる。
ＬＣ＝低コントロール値のメジアン
＝低コントロール：αｌｉｓａにおけるビオチニル化Ａｂなしに、化合物なしにプレインキュベーションした細胞
ＨＣ＝高コントロール値のメジアン
＝高コントロール：化合物なしにプレインキュベーションした細胞
％効果＝１００−［（サンプル−ＬＣ）／（ＨＣ−ＬＣ）＊１００］
％コントロール＝（サンプル／ＨＣ）＊１００
％Ｃｏｎｔｒｏｌｍｉｎ＝（サンプル−ＬＣ）／（ＨＣ−ＬＣ）＊１００
【０２７３】
以下に例示する化合物は本質的に上記の通り試験し、そして以下の活性を示した：
【０２７４】
【表６】
2013529664.tif 000069
【国際調査報告】
2013529664.tif 000071
2013529664.tif 000072