(57)【要約】【課題】【解決手段】血液産物の成分を分離するための遠心血液成分分離システムを制御するための方法であって、当該分離システムは、遠心機、分離バッグ及び少なくとも１つの移送バッグを含む。当該方法は、名目ヘマトクリット値を、実際のヘマトクリット値が前記名目ヘマトクリット値よりも小さいことが予想されるように選択する工程と、ある量の複合液を含有する分離バッグを、少なくとも第１成分及び第２成分の沈降を引き起こすように遠心分離する工程と、前記第１成分の一部を第１移送バッグに移送する工程と、分離バッグ内の予め選択された位置において赤血球界面の通過時間を検出する工程と、予測処理時間を前記赤血球界面の通過時間に基づいて調整する工程とを含む。【選択図】図１
2013530789.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
血液を少なくとも第１成分及び第２成分に分離する方法であって、
ある量の全血を遠心血液分離装置に設ける工程と、
前記ある量の全血の予測処理時間を計算する工程と、
前記全血を含有する分離バッグを、少なくとも第１成分及び第２成分の沈降を引き起こすように遠心分離する工程と、
前記第１成分の一部を第１移送バッグに移送する工程と、
前記分離バッグ内の予め選択された位置において赤血球界面の通過時間を検出する工程と、
前記予測処理時間を前記赤血球界面の前記通過時間に基づいて調整する工程と、
を含む方法。
【請求項２】
請求項１記載の方法において、
前記全血の名目ヘマトクリット値を、実際のヘマトクリット値が前記名目ヘマトクリット値よりも小さいことが予想されるように選択する工程と、
前記予測処理時間を、少なくとも部分的に、前記名目ヘマトクリット値から計算する工程と、
を更に含むことを特徴とする方法。
【請求項３】
請求項３記載の方法において、
前記名目ヘマトクリット値から、詰め込み率（ｐａｃｋｉｎｇ  ｆａｃｔｏｒ）を計算する工程を更に含むことを特徴とする方法。
【請求項４】
請求項３記載の方法において、
前記詰め込み率Ｆｐは、
Ｆｐ＝５Ｈｏ／（１１（１−Ｈ）2）−Ｈｏ／（３（１−Ｈ））−１６Ｈｏ2＋８Ｈｏ＋１．１
〔式中、
Ｈｏは、出発ヘマトクリット値と等しく、
Ｈは、濃厚赤血球ヘマトクリット値と等しい〕
として計算されることを特徴とする方法。
【請求項５】
請求項４記載の方法において、
前記詰め込み率は、遠心分離過程中に、初期名目値から、供血者のヘマトクリット値の測定に基づいた計算値に修正されることを特徴とする方法。
【請求項６】
請求項５記載の方法において、
前記赤血球界面はフォトセンサにより検出されることを特徴とする方法。
【請求項７】
請求項６記載の方法において、
前記フォトセンサは、前記分離バッグを収容するための分離チャンバ内に配置され、前記赤血球界面が前記フォトセンサに到達するときの前記ヘマトクリット値が８０以上であることが予想されるであろう位置に配置されることを特徴とする方法。
【請求項８】
請求項７記載の方法において、
遠心分離の開始後に前記赤血球界面が前記フォトセンサに到達する予想時間は、予想総沈降時間の約半分であることを特徴とする方法。
【請求項９】
請求項１記載の方法において、
前記予測処理時間を計算する工程は、予測沈降時間から部分的に前記処理時間を計算する工程を含むことを特徴とする方法。
【請求項１０】
請求項９記載の方法において、
前記沈降時間Ｔｓは、以下の式：
Ｔｓ＝ＣＫ（Ｄｓ／Ｒｓ）Ｆｐ／（ＶｓＮ2）
〔式中、
Ｔｓは、回転時間、
Ｆｐは、詰め込み率、
Ｎは、遠心分離速度、
Ｋ＝（３０／π）2ｇ、すなわち、８．９５×１０4ｒｐｍ2−ｃｍ、
Ｃは、校正係数、
Ｄｓは、特性沈降距離、
Ｒｓは、試料量の平均回転半径、
Ｖｓは、１ｇにおける平均ＲＢＣ沈降速度である〕に従って前記コントローラにより計算されることを特徴とする方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、ある量の複合生体液又は血液産物を少なくとも２つの成分に分離する方法に関する。当該方法は、血液のような生体液を分離する遠心分離装置における最小分離時間のために分離工程を最適化する。
【背景技術】
【０００２】
本発明の装置及び方法は、水性成分及び１つ以上の細胞成分を含む生体液の分離に特に適している。例えば、本発明の潜在的な使用としては、全血量から、血漿成分、血小板を含む第１細胞成分、単核細胞を含む第２細胞成分、並びに赤血球及び顆粒球を含む第３細胞成分を抽出することが挙げられる。
【０００３】
米国特許出願第１１／９３１，５８２号（２００７年１０月３１日出願）では、全血量を種々の分離プロトコルに従って少なくとも２つの成分に分離する方法及び装置が記載されている。例えば、一つのプロトコルは、全血量からの血漿成分、血小板成分及び赤血球成分の分離を提供する。該装置は、種々のバッグセット、特に全血の環状分離バッグを含むバッグセットと共に作動するように適合されている遠心機を含み、これには、血小板成分バッグ、血漿成分バッグ及び赤血球成分バッグが連結されている。遠心機は、分離バッグを回転し、それに含有されている全血を遠心分離するロータであって、分離バッグを支持する回転台と、分離バッグに連結している成分バッグを収容する中央区画とを有するロータ；分離バッグを絞り、分離バッグから血漿成分を血漿成分バッグへ、赤血球成分を赤血球成分バッグへ、血小板成分を血小板成分バッグへ移送させる絞りシステムを含む。ロータライナー（ｒｏｔｏｒ  ｌｉｎｅｒ）及び移送バッグクレードル（ｔｒａｎｓｆｅｒ  ｂａｇ  ｃｒａｄｌｅ）を収容する中央チャンバを持つロータを有する遠心装置も、米国特許出願第１２／０６３，１６３号に開示されている。
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００４】
本発明の一つの目的は、ある量の複合液を含有する分離バッグを、少なくとも第１成分及び第２成分の沈降を引き起こすように遠心分離することを含む、複合液を少なくとも第１成分及び第２成分に分離する遠心装置を提供することである。本発明は、ある条件の予想品質からの条件の逸脱又は条件の変動に応じて、或いはある条件が変化した時点に応じて、動作条件を連続的に調整することによって、血液分離工程における遠心分離時間を低減する。特に、遠心血液分離装置の効率は処理時間を調整することにより改善できることが、本明細書において認識される。一般に、１単位の全血を成分部分に分離するのに予測される処理時間は、特定のパラメータにおける不確実性のために不正確になりうる。例えば、実際の量の血液単位は、名目値から１０％ほど変わることがある。沈降速度も、処理時間に影響を及ぼし、異なる血液単位で変動する。血液処理機は、他の血液処理機と異なっており、市販の同じ型式の血液処理機間でも異なる。異なる血液単位のヘマトクリット値も、１０％のオーダーで変動する。特定の血液単位のヘマトクリット値を正確に知ることができない場合がある。血液単位のヘマトクリット値が高いと仮定する場合（完全な処理を確実にするため）、処理時間は、一般に、必要以上に長くなり、全体的な分離工程の効率は低くなるであろう。この非効率性の度合は、多くの異なる装置において処理される多くの血液単位にわたって強まるであろう。
【課題を解決するための手段】
【０００５】
従って、本発明の目的は、処理時間を低減することにより、遠心血液処理装置の効率を改善することである。特に、本発明は、処理時間を補正するため反復方法を使用する。この方法は、赤血球の界面がいつ検出場所に到達する又は検出場所を横切るかを決定することにより、予測回転時間を補正する回帰分析を用いる。この方法は、初期ヘマトクリット推定値を高い値に設定すること；検出器を血液処理装置内の選択した位置に配置すること；血液成分の界面の前記選択した位置への到着を検出すること；前記界面の到着時間から予想される処理時間を再決定すること；及び血液を分離し続けることを含むことができる。好ましくは、界面の到着を検出するセンサは、名目回転時間のほぼ半分の位置、すなわち、ＲＢＣ（赤血球）の界面が、予想処理時間の約半分の遠心分離の後に、位置するであろう位置の近くに配置される。ＲＢＣ界面の検出によって、該装置は、予想ＲＢＣ界面到着時間と実際のＲＢＣ界面到着時間の差から調整処理時間を予測することが可能になる。
【０００６】
本発明の他の特徴及び利点は、例示のみとして考慮されるべきである以下の記載及び添付図面から明らかとなるであろう。
【図面の簡単な説明】
【０００７】
【図１】図１は、本発明の分離装置と共に作動するように設計されたバッグのセットの概略図である。
【図２】図２は、図１のバッグのセットの分離バッグの上面図である。
【図３】図３は、ロータを含む遠心分離装置の、一部を断面図で示した概略図である。
【図４】図４は、図３のロータの上面図である。
【図５】図５は、図３のロータに使用されるロータライナーの斜視図である。
【図６】図６は、図５のロータライナーに使用されるバッグクレードルの斜視図である。
【図７】図７は、図６のバッグクレードルと使用されるバッグホルダの斜視図である。
【発明を実施するための形態】
【０００８】
明瞭さのために、本発明は、特定の使用、すなわち全血の４つの成分への、すなわち血漿成分、血小板成分、単核球成分及び赤血球成分への分離に関して説明される。しかしながら、この特定の使用は例示のためだけであることが理解されるべきである。該原理を、少なくとも２つの成分を収集するために使用できることも、理解されるべきである。
【０００９】
図１及び図２は、全血を血漿成分（基本的に血漿を含む）、血小板成分（基本的に血小板を含む）、単核球成分（単球、リンパ球及びいくらかの赤血球を含む）、並びに赤血球成分（基本的に赤血球及び顆粒球を含む）に分離するように適合されたバッグのセットの一例を示す。このバッグセットは、可塑性の分離バッグ１及びそれに連結されている４つの可塑性の移送バッグ２、３、４、５を含む。分離バッグ１は、一般に円形外側縁及び円形内側縁７、８を有する環状分離チャンバ６を含む。分離チャンバ６の外側円形縁７及び内側円形縁８は、略同心円である。分離チャンバ６は、分離チャンバ６の内容物を移送バッグ５に排出するのを助けるため、外側縁７から外側に突出している第１の鋭角漏斗状延長部９を含む。分離チャンバ６は、分離成分を第１、第２及び第３移送バッグ２、３、４に注ぐのを助けるため、内側縁８からバッグ１の中心に向かって突出している第２の鈍角漏斗状延長部１０も含む。
【００１０】
分離バッグ１は、環状チャンバ５の内側縁８に接続された半可塑性（ｓｅｍｉ−ｆｌｅｘｉｂｌｅ）のディスク形状接続部１１を更に含む。ディスク形状接続部１１は、後に説明される遠心機のロータの３つのピンチバルブ部材（図２に点線で図式的に示されている）を部分的に囲むように、第２の漏斗状延長部１０に面して内側縁に３つの丸みを帯びた凹部を含む。ディスク形状接続部１１は、分離バッグ１を遠心機のロータに連結する一連の孔１３を含む。
【００１１】
移送バッグ２は、２つの目的を有しており、全血収集バッグ及び単核球成分バッグとして連続的に使用される。移送バッグ２は、分離過程の前に供血者からある体積（通常は約４５０ｍｌ）の全血を最初に収容し、分離過程の際には、単核球成分を収容するようになっている。移送バッグ２は、平らで略矩形であり、上側角部に２つの補強用耳部を有する。補強用耳部には、バッグを吊るすための孔１４が設けられる。移送バッグ２は、移送チューブ２０によって分離バッグ１に接続される。移送チューブ２０の第１端部が、移送バッグ２の上端部に接続され、移送チューブ２０の第２端部は、内側円形縁８に近接して第２の漏斗状延長部１０に接続される。移送バッグ２は、ある量の抗凝固溶液（典型的には、約４５０ｍｌの供血あたり約６３ｍｌのクエン酸リン酸デキストロース溶液）を含有する。移送チューブ２０に備え付けられている破壊可能なコネクタ２１は、移送チューブ２０の中を通る液体流を阻止し、抗凝固溶液が移送バッグ２から分離バッグ１に流れるのを防止する。更に、バッグセットは、一端が移送バッグ２の上端部に接続され、他端にシース（ｓｈｅａｔｈ）２３で保護されている針を有する収集チューブ２２を備える。収集チューブ２２にはクランプ２４が取り付けられている。
【００１２】
移送バッグ３は、血漿成分を収容することが意図される。移送バッグ３は、平らで略矩形であり、上側角部に２つの補強用耳部を有する。補強用耳部は、バッグを吊るすための孔１４を有する。移送バッグ３は、移送チューブ２５により分離バッグ１に接続されている。移送チューブ２５は、移送バッグ３の上端部に接続されている第１端部及び内側円形縁８に近接して、第２の漏斗状延長部１０の先端に対して、第１移送チューブ２０の第２端部の反対側において第２の漏斗状延長部１０に接続されている第２端部を有する。
【００１３】
移送バッグ４は、血小板成分を収容することが意図される。平らで略矩形であり、上側角部に２つの補強用耳部を有する。補強用耳部には、バッグを吊るすための孔１４が設けられる。移送バッグ４は、移送チューブ２６により分離バッグ１に接続されている。移送チューブ２６は、移送バッグ４の上端部に接続されている第１端部及び第２の漏斗状延長部１０の先端に連結している第２端部を有する。
【００１４】
移送バッグ５は、赤血球成分を収容することが意図される。平らで略矩形であり、上側角部に２つの補強用耳部を有する。補強用耳部には、バッグを吊るすための孔１４が設けられる。移送バッグ５は、移送チューブ２７により分離バッグ１に接続されている。移送チューブ２７は、移送バッグ５の上端部に接続されている第１端部及び第１の漏斗状延長部９の先端に接続されている第２端部を有する。移送チューブ２７は、２つのチューブ部分を備え、白血球除去（ｌｅｕｋｏｒｅｄｕｃｔｉｏｎ）フィルタ２８の入口及び出口にそれぞれ接続されている。分離バッグ１に接続されているチューブ部分には、クランプ２４が取り付けられている。移送バッグ５に接続されているチューブ部分には、破壊可能なコネクタ２９が取り付けられており、破壊されると、分離バッグ１と移送バッグ５の間で液体の流れを可能にする。フィルタには、例えば、ポール社（Ｐａｌｌ  Ｃｏｒｐｏｒａｔｉｏｎ）製のＲＣ２Ｄ型のフィルタを使用することができる。そのようなフィルタは、径方向の入口及び反対径方向の出口が接続されたディスク形状ケーシングを含む。該ケーシングは、ポリカーボネート製（ＧＥ  ＬＥＸＡＮ（商標）ＨＦ１１４０）であり、約３３ｍｌの内部体積を有する。ケーシングには、多層のポリエステル繊維（直径約２ミクロン）の不織布ウエブから構成される濾過材が充填されている。しかしながら、他の製造会社の他のフィルタを使用できることも理解されよう。移送バッグ５は、ある体積の赤血球用貯蔵液を含有する。
【００１５】
分離バッグ１の変形例としては、偏心している外側円形縁７及び／又は内側円形縁８を有する分離チャンバ６を含んでもよい。あるいは、分離チャンバ６は、チャンバ６が環状ではなくＣ形状になるように、内側縁８から外側縁７へ径方向に延在する壁を含んでもよい。内側縁及び外側縁（分離バッグが遠心機のロータに備え付けられている場合、内側縁は外側縁よりも遠心機のロータ軸に近接している）を含む任意の形状、例えば横方向に延在し且つ半径方向の２つの縁部により区切られている環の一部の形状又は矩形の形状を有する分離チャンバ６を使用してもよい。この変形例において、全ての移送バッグを、分離バッグの内側縁に接続することができる。また、分離バッグ１を、遠心機のロータの平坦支持表面又は切頭円錐支持表面のいずれかに合うように成形してもよい。図１、図２及び図３に示されているバッグセットのバッグ及びチューブは、全て、血液及び血液成分と接触するのに適した軟質プラスチック材料から作製される。
【００１６】
図４及び図５は、遠心分離によりある体積量の血液を分離する装置の実施形態を示す。装置は、図１、図２及び図３に示されている分離バッグのセットを収容するように適合された遠心機、並びに分離された成分を移送バッグに移送させる成分移送手段を含む。遠心機は、ロータ１６を含む。ロータ１６は、垂直中心軸３１を中心に回転できるように、ベアリング組立体３０により支持されている。ロータ１６は、第１上部３２及び第２下部３３を含む円筒形ロータシャフトを含み；シャフトの上部３２は、ベアリング組立体３０を部分的に通過して延在している；プーリ３４は、シャフトの上部３２の下端部に接続されている；ロータ１６はまた、ロータシャフト３２、３３にその上端部で接続されている、移送バッグを収容するための中央区画３５；中央区画内の決められた位置において少なくとも１つの移送バッグを支持するための、中央区画３４内に嵌合する支持部材３６；分離バッグを支持するための円形回転台３７；並びに回転台３７に固定されているバランス用組立体３８を含む。回転台３７は、区画３５の上端部において接続されており、ロータシャフト３２、３３、区画３５及び回転台３７の中心軸は、回転軸３１に一致している。遠心機は、ロータ１６が中心垂直軸３１を中心に回転するように、プーリ３４の溝に係合しているベルト４１によりロータ１６と結合しているモータ４０を更に含む。
【００１７】
分離装置は、ロータ１６に備え付けられたピンチバルブ部材４２、４３、４４を更に含む。ピンチバルブ部材４２、４３、４４は、軟質プラスチックチューブの中の液体を選択的に阻止したり、流したりすることが可能であり、更に、プラスチックチューブを選択的に封止及び切断する。各ピンチバルブ部材４２、４３、４４は、長尺な円筒体と、溝を有するヘッド部を有する。該溝は、固定上顎部と、開放位置と閉鎖位置との間で移動可能な下顎部とにより形成される。該溝は、図１、図２及び図３に示されているバッグセットの移送チューブ２０、２５、２６のうちの１つが、下顎部が開放位置のときにきちんと係合できる寸法になっている。長尺体は、下顎部を動かす機構を含有し、プラスチックチューブの封止及び切断に必要なエネルギーを供給する無線周波発生器に接続されている。ピンチバルブ部材４２、４３、４４は、縦軸が同一平面上にあり且つロータ１６の中心軸３１と平行であり、これらのヘッド部が中央区画３５のリムより上に突出するように、中央区画３５の周辺部に備え付けられている。分離バッグ１が回転台３７に備え付けられている場合の、分離バッグ１及びそれに連結している移送チューブ２０、２５、２６に対するピンチバルブ部材４２、４３、４４の位置は、図３に点線で示されている。電力は、ロータシャフトの下部３３の周りに備え付けられているスリップリングアレイ４５を通して、ピンチバルブ部材４２、４３、４４に供給される。
【００１８】
支持部材３６は、一般に、ロータ１６の回転軸３１に対して傾斜している壁４６の一部を含む。傾斜壁４６の上側部分に上部が固定されている移送バッグは、ロータ１６の回転の際に遠心力により傾斜壁４６に押し付けられ、移送バッグの下部は、上部よりも回転の軸に近接している。その結果、支持された移送バッグに含有される液体は、遠心力により支持された移送バッグから分離バッグに排出される。
【００１９】
回転台３７は、中央切頭円錐部分４７を有し、その上側の小さい縁部は、区画３５のリムに接続されている。回転台３７は更に、切頭円錐部分４７の下側の大きな縁部に接続されている環状平坦部分４８と、環状部分４８の外側周辺部から上方に延在する外側円筒形フランジ４９とを備える。回転台３５は、開放と閉鎖の位置の間で枢動するようにヒンジでフランジ４９に固定されている、アーチ型円形蓋５１を更に含む。蓋５１を閉鎖位置で封鎖することができる。蓋５１が閉鎖位置にあるとき、蓋５１は、回転台３７の切頭円錐部分４７及び環状平坦部分４８と共同して、略平行四辺形の形状を有する半径方向断面を有する環状区画５２を形成する。固定体積を有する環状区画５２（以降、「分離区画」）は、図１及び図２に示されている分離バッグ１を収容することが意図される。
【００２０】
一般にリングの形状を有するバランス用組立体３８は、中央区画３５の上端部と回転台３７の切頭円錐壁４７との間を延在する空間内のロータ１６に備え付けられている。バランス用組立体３８は、半径方向面に沿った断面が一般に矩形である空洞を画定しているリング形状ハウジング５３を含む。バランス用組立体は、ハウジング５３の空洞の径方向の深さよりも僅かに小さい直径を有する複数の重いボール５４を更に含む。ボール５４が互いに接触するとき、ボール５４は、ハウジング５３の約１８０度分の扇形区域を占める。
【００２１】
成分移送手段は、分離区画内の分離バッグを絞り、分離成分を移送バッグに移送させる絞りシステムを含む。絞りシステムは、回転台３７のフラスト円錐部分４７及び環状平坦部分４８を覆うように形成された軟質環状ダイアフラム５５を含み、小さい円形端部及び大きい円形端部に沿って固定される。絞りシステムは、軟質ダイアフラム５５と回転台３７との間に画定されている膨張可能な液圧又は絞りチャンバ５６に対して、液圧液を、ロータシャフトの下部３３の下端部からロータ１６を通って回転台３７へ延びているダクト５７を介して、ポンピングする液圧ポンプステーション６０を更に含む。ポンプステーション６０は、回転流体継手５８を介してロータダクト５７に流体的に連結された液圧シリンダ６２において移動可能なピストン６１を有するピストンポンプを含む。ピストン６１は、ピストンロッド６１に結合している送りねじ６４を動かすステッピングモータ６３により作動される。ステッピングモータ６３は、離散変化量又は離散ステップで制御することができ、各ステップは、モータ６３の軸の回転の何分の１、ピストン６１の小さな直線変位量、及び液圧チャンバ５６へ又は液圧チャンバ５６からポンピングされた決められた少量の液体に対応する。液圧シリンダ６２は、液圧液タンク６５にも接続されている。液圧液タンク６５は、液圧シリンダ６２、ロータダクト５７及び膨張可能な液圧チャンバ５６を含む液圧回路への液圧液の導入及び液圧回路からの液圧液の引き出しを選択的に可能にするバルブ６６により制御されるアクセスを有する。圧力計６７が、液圧を測定するために流体回路に接続される。
【００２２】
分離装置は、装置が稼働している際に分離バッグ１内で生じる分離過程の特性を検出するためのセンサ６９を更に含む。センサは、ロータ１６の回転軸３１から異なる間隔で蓋に埋め込まれている。蓋が閉じられている場合、センサは分離バッグ１に向かい合い、ガス／液体の界面、血漿と血小板／単核球層との界面又は多血小板血漿と単核球、及び赤血球との界面を検出する。各センサとしては、赤外線ＬＥＤ及び光検出器を含むフォトセルを使用することができる。
【００２３】
分離装置は、制御ユニット（マイクロプロセッサ）と、種々の分離プロトコル及びそのような分離プロトコルに従う装置の動作に関する情報及びプログラムされた命令をマイクロプロセッサに供給するメモリとを含むコントローラ８０を更に含む。特に、マイクロプロセッサは、ロータ１６を分離過程の種々の段階において回転させる際の遠心分離速度に関する情報及び分離成分を分離バッグ１から移送バッグ２、３、４へ移送する際の種々の移送流量に関する情報を受け取るようにプログラムされる。種々の移送流量に関する情報は、例えば、液圧回路における液圧液流量として、又は液圧ポンプステーション６０のステッピングモータ６３の回転速度として表現することができる。更に、マイクロプロセッサは、圧力計６７及び蓋のセンサからの情報を直接的に又はメモリを介して受け取るために、並びに遠心モータ４０、ステッピングモータ６３及びピンチバルブ部材４２、４３、４４を制御して、選択された分離プロトコルに沿って分離装置を稼働させるために、プログラムされる。また、制御ユニット８０は、分離手順の際に分離された成分の実際の量、並びに分離バッグ１に最初に含有されていた複合液（例えば、全血）の実際の量を決定し、分離装置のスクリーン８１に表示するためにプログラムされる。
【００２４】
ロータ１６は、図５及び図６に示されているロータライナー１００及びバッグクレードル１０１を収容するために、図３に示されている中央区画９９を更に含む。バッグクレードル１０１は、少なくとも１つのサテライト（ｓａｔｅｌｌｉｔｅ）バッグを、ロータ１６の中央区画９９に対して装填／取り出しを行うバッグ装填手段として機能する。ロータライナー１００は、バッグクレードル１０１を中央区画９９に挿入したり、中央区画９９から取り出したりする際、中央区画９９内でバッグクレードル１０１をガイドし、ロータ１６内の決められた位置にバッグクレードル１０１を位置決めする。
【００２５】
ロータライナー１００は、底壁１０２及び側壁１０３、並びにフランジ１０４を有する容器１２０を含む。フランジ１０４は、側壁１０３の上部リムの僅か下方で容器１２０と連結している。円形に配列された一連の丸みのあるピン１０５は、フランジ１０４から上方に突出している。ピン１０５の大きさ及び位置は、分離バッグ１の孔の大きさ及び位置に対応する。ピン１０５は、分離バッグ１をロータ１６に位置決めするのに役立ち、ロータ１５が回転するとき、分離バッグ１がロータ１６に対して移動することを防止する。ロータライナー１００の側壁１０３の平坦部分に沿って、フランジ１０４は、３つの整列された円筒形開口部１０６を含む。ロータライナー１００がロータ１６の中央区画９９に完全に挿入された場合、ピンチバルブ部材４２、４３、４４は、開口部１０６を通って延在して、ピンチバルブ部材のヘッド部がフランジ１０４を越えて突出する。いくらか複雑な幾何学的形状の３つのガイド部材１２６、１２８、１２９は、３つの開口部１０６を部分的に囲み、３つの狭いゲート１０７を画定する。該ゲート１０７によって、ピンチバルブ部材４２、４３、４４に係合するチューブは、決められた方向に沿って中央区画９９の中を誘導することができる。バッグクレードル１０１は、更に、上部に固定手段を有する。該固定手段は、内面に開口している２つの側凹部１０８を含む。該側凹部１０８は、後で説明されるバッグホルダ１０１の相補関係にあるロック部材の端部を取り外し可能に受容し係止する。狭い舌部の形態のガイド１０９が、バッグホルダ１００を所定の位置に設定するのを助けるために、凹部１０８の底部からクレードル１０１の側端部に向かって延在する。
【００２６】
クレードル１０１は装填機能を果たし、これは、クレードル１０１内におけるバッグ、移送チューブ及び場合によっては白血球除去フィルタの横方向配置を容易にし、また、バッグホルダ１１０のペグ（ｐｅｇ）１１１、１１２の、凹部１０８への横方向係合を容易にする。図８に示されているバッグホルダ１１０は、遠心機の作動の際にバッグ２、３、４を決められた位置でクレードル１０１に固定する。バッグホルダ１１０は、長尺な平面体１１３を含み、その中央には平面Ｕ字形ハンドリング用付属物１１４が、バッグホルダ１１０がクレードル１０１に備え付けられた際に上向きに突出するように接続されている。長尺な平面体１１３は、各側に２つの平行な溝状ガイド１１５、１１６を有する。溝状ガイド１１５、１１６は、チューブ２０、２２、２５、２６をちょうどよく係合できる寸法になっている。
【００２７】
バッグホルダ１１０は、クレードル１０１においてバッグ２、３、４の少なくとも１つを吊り下げる、長尺な平面体１１３に接続された第１対のペグ１１１、１１２の形態をとる吊り下げ手段を更に含む。２つのペグ１１１、１１２の間の間隔は、バッグ２、３、４の孔１４の間の間隔と略同一である。ペグ１１１、１１２の断面は、孔１３に略嵌合する。ペグ１１１、１１２は、バッグホルダ１１０をクレードル１０１に固定するためにも使用される。このために、２つのペグ１１１、１１２の間の間隔は、クレードル１０１の上側部分の２つの係止用の凹部１０８の間の間隔と略同一である。バッグホルダ１０１は、バッグ２、３、４を取り外し可能に固定するための、長尺な平面体１０１に接続された第２対のペグ１１７、１１８を更に含む。長尺な平面体１１３、並びに第１及び第２対のペグ１１１、１１２、１１７、１１８によって、ペグに係合された産物バッグ２、３、４は、クレードル１０１がロータライナー１００の残りの部分に組み付けられる場合、ロータ１６の中央区画９９における決められた位置を占める。
【００２８】
供血された全血から４つの血液成分、すなわち血漿成分、血小板成分、単核球成分及び赤血球成分を調製することを目的とする第１分離プロトコルの例を、以下に説明する。あるいは、該プロトコルを、単核球を廃棄して３成分を収集するために、更には、少なくとも２成分収集のために使用することができる。第１分離プロトコルに従った分離装置の動作は以下のとおりである。
【００２９】
第１段階：移送バッグ２がある体積の全血を含有する図１に示されているバッグセットを、（図３に示されている）遠心機のロータ１６の所定の場所に設置する。
【００３０】
第１段階の開始時には、図１のバッグセットの移送バッグ２は、ある量の抗凝固処理全血（通常は約５００ｍｌ）を含有する。収集チューブ２２を封止し、移送バッグ２の近傍で切断する。移送バッグ５と分離バッグ１とを接続する移送チューブ２７のクランプ２４を閉じる。４つの移送バッグ２、３、４、５を、スタックを形成するように互いに積み重ね、移送バッグ２がバッグ装填器３６の傾斜壁４６に隣接するように該スタックをバッグ装填器３６に挿入する。移送バッグ２、３、４、５を、傾斜壁４６の上方で、バッグ装填器３６の上側部分に上側耳部により固定する。この位置で、これらは、ロータ１６の回転軸３１を含む平面の一方の側に略位置し、全血を含有する移送バッグ２の下部は、上部よりも回転軸３１に近接している。
【００３１】
次に分離バッグ１を回転台３７に置き、中央区画３５の開口部の周りで回転台３７から突出しているピン（示されず）を、分離バッグ１のディスク形状接続部１１の孔１３に係合させる。移送バッグ２と分離バッグ１とを接続する移送チューブ２０を、ピンチバルブ部材４２に係合させ、移送バッグ３と分離バッグ１とを接続する移送チューブ２５を、ピンチバルブ部材４３に係合させ、移送バッグ４と分離バッグ１とを接続する移送チューブ２６を、ピンチバルブ部材４４に係合させる。移送バッグ２と分離バッグ１との連通を阻止している破壊可能なコネクタ２１を破壊する。ロータ１５の蓋５０を閉じる。
【００３２】
血液のヘマトクリット値は、不明であるか又は正確には分からない。該装置は、ヘマトクリット値を名目高ヘマトクリット値（ｎｏｍｉｎａｌ  ｈｉｇｈ  ｖａｌｕｅ）、例えば５０％に設定するようにプログラムされる。実際のヘマトクリット値は、該名目値よりも少ないと予想される。下記の第４段階で使用される予測沈降時間を、以下の式：
Ｔｓ＝ＣＫ（Ｄｓ／Ｒｓ）Ｆｐ／（ＶｓＮ2）
〔式中、
Ｔｓ＝回転時間（秒）、
Ｆｐ＝詰め込み率（ｐａｃｋｉｎｇ  ｆａｃｔｏｒ）（無次元）、
Ｎ＝遠心分離速度（ｒｐｍ）、
Ｋ＝（３０／π）2ｇ＝８．９５×１０4ｒｐｍ2−ｃｍ、
Ｃ＝校正係数（無次元）、
Ｄｓ＝特性沈降距離（ｃｍ）、
Ｒｓ＝試料量の平均回転半径（ｃｍ）、
Ｖｓ＝１ｇにおける平均ＲＢＣ沈降速度（ｃｍ／秒）である〕
によって導かれる工程に従ってコントローラ８０で計算する。
この式は以下のように書き換えることができる：
Ｔｓ＝ＢＦｖＦｐ
〔式中、
Ｂ＝ＣＫ／（ＶｓＮ2）、
Ｆｖ＝Ｄｓ／Ｒｓである〕。
遠心分離速度Ｎが固定値であると、Ｂは一定である。Ｆｖは、異なる血液単位間における量の変動を表す。血液単位の量は、手作業により又は装置により自動的に測定することができる。
【００３３】
詰め込み率Ｆｐは、血液のヘマトクリット値に依存する。本発明の目的は、血液単位の処理におけるプロセスパラメータを調整することによりこの率の変動を説明して、処理時間を最小化することにある。Ｆｐは、以下のようにヘマトクリット値と関連している。
Ｆｐ＝５Ｈｏ／（１１（１−Ｈ）2）−Ｈｏ／（３（１−Ｈ））−１６Ｈｏ2＋８Ｈｏ＋１．１      ‥（１）
〔式中、
Ｈｏ＝出発ヘマトクリット値（１０進法数）、
Ｈ＝ＰＲＢＣ（濃厚赤血球）ヘマトクリット値（１０進法数）である。〕
下記に説明するように、最初に選択されるＨｏの名目値（本明細書では以降、「Ｈｏｎ」と呼ぶ）に対してＨｏを補正することにより、遠心分離工程の最中に、Ｆｐは、Ｆｐの名目値（本明細書以降、「Ｆｐｎ」と呼ぶ）から修正される。
【００３４】
第２段階：移送バッグ２に含有された抗凝固処理全血を分離バッグ１に移送する。
【００３５】
第２段階の開始時に、ピンチバルブ部材４２を開き、ピンチバルブ部材４３、４４を閉じる。ロータ１６を遠心機モータ４０により作動させ、その回転速度を第１遠心分離速度（例えば、約１５００ＲＰＭ）に達するまで一定に増加させる。第１遠心分離速度は、移送バッグ２の内容物を遠心力下で分離バッグ１に移送させる際に全ての移送が短時間で行える程度に十分に高く、同時に、移送バッグ２内の圧力が、決められた圧力閾値（該閾値を超えると溶血が生じる）を実質的に越えない程度に十分に低く、更に、分離バッグ１に進入する血液流において、溶血を引き起こす剪断力を生じない程度に十分に低くなるように選択される。移送バッグ２において溶血が生じる前記圧力閾値は、約１０ＰＳＩであること、並びにそのような圧力閾値に達することなく、且つ分離バッグに進入する血液流における剪断力が溶血を引き起こさないような最大回転速度は、約１８００ＲＰＭであることが決定された。約１５００ＲＰＭの回転速度では、約５００ｍｌの抗凝固処理血を移送バッグ２から分離バッグ１に移送するのに約１分間かかる。外部セル７１が血液を検出すると、移送バッグ３（後に血漿成分が移送される）に接続している移送チューブ２５の中の流体の流れを制御するバルブ部材４３を、血液が注がれる際に分離バッグ１から空気をベントするため、所定の時間（例えば、約３０秒間）開く。外部セル７１が遠心分離過程の開始後の所定の時間内に血液を検出しない場合、制御ユニット８０はロータ１６を停止させ、アラームを発生させる。これは、破壊可能なコネクタ２１が何らかの理由で破壊されなかった場合に特に生じる可能性がある。
【００３６】
第３段階：分離バッグ１に存在する空気を、単核球成分が後に移送される移送バッグ２にパージする。
【００３７】
第３段階の開始時、移送バッグ２の全含有量が分離バッグ１に移送されており、ピンチバルブ部材４２は開いており、ピンチバルブ部材４４は閉じている。ロータ１６は、第１回転速度（約１５００ＲＰＭ）で回転する。ポンプステーション６０を作動させ、液圧液を液圧チャンバ５６に一定流量（例えば、約２４０ｍｌ／分）でポンプにより送って、分離バッグ１を絞る。分離バッグ１に存在する空気は、単核球成分のための移送バッグ２に排出される。センサ７０による空気／液体の界面の検出から所定時間経過した後、ポンプステーション６０を停止し、ピンチバルブ部材４２を閉じる。少量の残留空気は分離バッグ１に残る。
【００３８】
第４段階：分離チャンバ内の血液を所望のレベルに沈降させる。
【００３９】
この段階の開始時、ピンチバルブ部材４２及び４３は閉じている。ロータ１６の速度を第２高速遠心分離速度（例えば、約３２００ＲＰＭ、いわゆる「ハードスピン」）に達するまで一定に増加させる。第２高速遠心分離速度において、血液成分は所望のレベルに沈降する。ピンチバルブ部材４４を開けることにより、あらゆる追加の空気を血小板バッグ４に排出することができる。空気を排出するために、ポンプステーションを作動して、液圧流体を一定流量で液圧チャンバにポンプで送り、分離バッグ１を絞る。液圧が、下記で説明する一定圧から所定の変量になるまで、絞りは続けられる。
【００４０】
従来技術では、ロータ１６は、所定の時間又は「沈降時間」（例えば、約２２０秒）第２遠心分離速度で回転させていた。この時間は、分離チャンバ１に最初に移送された全血のヘマトクリット値がどのようなものであれ、血液が該時間の終了時において、外側環状赤血球層のヘマトクリット値が約９０であり且つ内側環状血漿層に細胞（ｃｅｌｌｓ）が略なくなる時点まで沈降するように選択される。対照的に、本発明の方法では、ロータは第２回転速度で回転を開始する。血液は沈降を始め、異なる層になる。ＲＢＣ界面が形成し始め、回転の中心から外側半径方向に向かって移動する。センサ６９は、ＲＢＣ界面の通過を検出する。センサは、赤血球が８５％のヘマトクリット値で詰められたと予想される場所に配置されることが好ましい。８５％のヘマトクリット値に赤血球を詰めることは、通常、沈降時間の約半分の時間がかかる。ＲＢＣ界面が予測沈降時間の半分よりも早く検出される場合、沈降時間を短縮することができる。
【００４１】
Ｆｐは、最初に選択されたＨｏの名目値（本明細書では以降、「Ｈｏｎ」と呼ぶ）に対してＨｏを補正することにより、遠心分離工程の際に、Ｆｐの名目値（本明細書以降、「Ｆｐｎ」）から修正される。従って、回転時間の初期推定値又は名目回転時間（本明細書以降、「Ｔｓｎ」）を、下記のように表すことができる。
Ｔｓｎ＝ＢＦｖｎＦｐｎ
血液単位の量のより正確な値は、手動測定（例えば、体積計算による計量）により又は遠心装置の自動測定により得ることができる。詰め込み率Ｆｐのより正確な値は、下記に説明されるように、遠心分離の開始から光学センサへの赤血球界面の到着までの経過時間Ｔｄから得られる。補正回転時間は、以下の補正回転時間の式によって与えられるであろう。
Ｔｓ＝（Ｆｖ／Ｆｖｎ）（Ｆｐ／Ｆｐｎ）Ｔｓｎ      ‥（２）
Ｆｐｎは、経過時間Ｔｄに基づいてＨｏｎをＨｏに補正することによって、実際のＦｐに補正される。上記に示されているように、回転時間は、ヘマトクリット値だけでなく沈降速度Ｖｓにも依存する。しかしながら、Ｖｓを直接決定することができないので、Ｖｓは、値Ｂの一部として、固定値として取り扱われる。Ｖｓの変動は、経過時間Ｔｄがヘマトクリット値と沈降速度の両方に依存するので、Ｈｏの補正に含まれる。
【００４２】
ＲＢＣ界面検出器又はフォトセンサ６９は、遠心機の回転中心から半径Ｒｄに配置される。選択された遠心速度を含む名目条件下では、センサ６９へのＲＢＣ界面の予想又は名目到着時間Ｔｄｎは、
Ｔｄｎ＝Ｂ（Ｆｖｎ）（Ｆｐｄｎ）
である。ここで、Ｆｐｄｎは、半径Ｒｄに位置するフォトセンサでの予想又は名目詰め込み率である。該名目詰め込み率は、当然のことながら最終詰め込み率よりも小さく、すなわち、血液単位の最初のヘマトクリット値は、ＲＢＣ界面がフォトセンサ６９に到着するときのヘマトクリット値よりも小さく、到着する時のヘマトクリット値は、分離工程の終了時の最終ヘマトクリット値よりも小さい。測定された量及びＲＢＣ界面の測定された到着時間Ｔｄによって、該装置は、以下のように、最初のヘマトクリット値Ｈｏの補正値を計算することができる。
Ｈｏ＝Ｈｏｎ＋［（Ｆｖｎ／Ｆｖ）（Ｔｄ／Ｔｄｎ）−１］Ｆｐｄｎ／［（Ｆｐｄ−Ｆｐｄｎ）／（Ｈｏ−Ｈｏｎ）］      ‥（３）
そして、ヘマトクリット値の補正値を式（１）に使用して、補正詰め込み率Ｆｐを得ることができる。補正回転時間Ｔｓは、式（２）を使用して計算される。
【００４３】
フォトセンサ６９の径方向位置は、［（Ｆｐｄ−Ｆｐｄｎ）／（Ｈｏ−Ｈｏｎ）］の値がゼロより大きく（上記の式（３）を参照）、Ｈｏが良好に識別できる程度に十分に大きいように選択されることが好ましい。好ましくは、Ｒｄは、ＲＢＣ界面がフォトセンサに到着するときのヘマトクリット値が約８０以上であると予想されるように選択されるべきである。次に、Ｒｄは、Ｔｄが約Ｔｓ／２であるように選択されるべきである。これは、ＲＢＣ界面がセンサに到着する際、Ｈｏの正確な計算のために十分な詰め込みがなされているが、補正のための十分な時間が許容されるために十分な処理時間が残っていることを意味する。例えば、８０のＨｄｎが選択され、Ｈｏが実際には３０〜５０の間にあるとすると、Ｆｐｎは５〜６となり、［（Ｆｐｄ−Ｆｐｄｎ）／（Ｈｏ−Ｈｏｎ）］は１を越えるであろう。Ｔｄは、８５の最終産物ヘマトクリット値のためのＴｓの６０％〜６５％であり、９０の最終産物ヘマトクリット値に対しては、３０％〜３５％であると予想されるであろう。
【００４４】
より詳細には、この沈降段階の結果から、分離バッグ１は４つの層：主に血漿を含む第１内側層、主に血小板を含む第２中間層、主に白血球（リンパ球、単球及び顆粒球）を含む第３中間層及び主に赤血球を含む第４外側層を示す。ここで、第３及び第４層は部分的に重複している（顆粒球は、第４層に部分的に埋め込まれている）。
【００４５】
第５段階：血漿成分を移送バッグ３に移送する。
【００４６】
この段階の開始時、ピンチバルブ部材４２及び４３は閉じられている。ピンチバルブ部材４４は開いたままである。ロータ１６は、沈降段階と同じ高い遠心分離速度で回転し続ける。センサ７２が、所定の沈降時間の終了時の前に発生しうる、外側に移動する血漿／血球の界面を検出した後の所定の時間の後、移送バッグ３へのアクセスを制御するピンチバルブ部材４３を開ける。ポンプステーション６０を作動させて、液圧液を液圧チャンバ５６に、一定流量（例えば、約１５０〜２２０ｍｌ／分）でポンプにより送る。膨張する液圧チャンバ５６は、分離バッグ１を絞り、移送バッグ３への血漿の移送及び移送チューブ２６への一部の血漿の移送を引き起こす。ピンチバルブ４４を、下記に説明されるように、圧力増加が圧力一定に転換する時点で閉じる。従って、大部分の血漿がバッグ３に移送する。中間体センサ７０による内側に移動する血漿と血小板（又は単核球）の界面の検出から所定の時間が経過した後に、ピンチバルブ部材４３を閉じる。この段階の終了時には、血漿の総量の第１大量画分がバッグ３の中にあり、血漿の総量の第２少量画分が分離バッグ１に残り、血漿の総量の第３少量画分が移送チューブ２６に進入する。血漿成分の移送流量（液圧流体又は液体の流量に直接関連する）は、血漿成分を血小板で汚染するのを避けるために、血小板層を乱すことなく、可能な限り高くなるように設定される。
【００４７】
制御ユニット８０は、移送バッグ３に移送した血漿の量を以下のように決定する：第１に、いつ血漿が移送バッグ３に実際に注ぎ始められるかを決定する；第２に、血漿が移送バッグ３に実際に注ぎ始められる時間と、センサ７０が血漿と血小板／単球の界面を検出した後、ポンプステーション６０が液圧液を液圧チャンバ５６にポンプで送るのを停止した時間との間で、ステッピングモータ６３により行われたステップの数を数え；最後に、制御ユニット８０は、数えたステップの数及び一つのステップに関連付けられた所定の小体積分から、この段階において液圧チャンバ５６にポンプで送られた液圧液の総量を計算する。この総量が移送バッグ３における血漿の量に相当する。
【００４８】
制御ユニット８０は、いつ血漿が実際に移送バッグ３に注ぎ始められるかを以下のように決定する：圧力センサ６７により測定された液圧液の圧力の値を逐次、継続的に記録し、同時に、新たな圧力値が記録されるたびに、最後の４回の測定値の平均から、時間に対する圧力の変化を表す曲線の傾きを計算し、そのように計算された一連の傾きを比較することによって、圧力がどのように変化していくかを分析する。そして、制御ユニット８０は、一定に圧力が増加する第１相と圧力が略一定の第２相との間の大きな転換点に相当するとして、血漿が移送バッグ３に注ぎ始める時点を決定する。圧力計３７により決定されるこの一定圧は、圧力Ｐとしてコントローラに記録される。この転換点は、バルブ４４を閉じるための制御ユニット８０の信号でもある。制御ユニット８０は、移送バッグ３における血漿の実際の量をスクリーン８１に表示するようにプログラムされることができる。
【００４９】
制御ユニット８０は、第２段階において分離バッグ１に移送された抗凝固処理全血量も以下のように決定する：第１に、上記において決定されたように、ポンプステーション６０が第３段階で液圧液を液圧チャンバ５６にポンプで送り始める（移送バッグ２への空気の移送）時点と、血漿を移送バッグ３に実際に注ぎ始める時点との間で、ステッピングモータ６３により行われたステップの数を数え；第２に、制御ユニット８０は、数えたステップの数及び一つのステップに関連付けられた小体積分から、分離区画５２が空気を含有しなくなるまでポンプで液圧チャンバ５６に送られた液圧液の総量を計算し；最後に、制御ユニット８０は、制御ユニット８０のメモリに記憶されたある固定量から、上述のように計算された液圧液の量を差し引くことによって、分離チャンバ１にある抗凝固処理血量を計算する。この固定量は、分離区画５２の固定体積から、ダイアフラム５５の体積を引き、分離チャンバ６を構成する２つのプラスチックシートの重なったリングの体積を引き、液圧チャンバ５６における液圧液の固定残留体積を引いた量に相当する。制御ユニット８０は、分離バッグ１における抗凝固処理血液の実際の量をスクリーン８１に表示することができる。
【００５０】
第６段階：血小板成分を移送バッグ４に移送する。
【００５１】
移送バッグ４へのアクセスを制御するピンチバルブ部材４４を開き、ピンチバルブ部材４２、４３を閉じたままにする。ロータ１６は、３２００ｒｐｍで回転し続ける。ポンプステーション６０を作動させ、液圧液を第１血小板流量により液圧チャンバ５６にポンプで送って、分離バッグ１を絞り、移送バッグ４への血小板成分及びチューブ２６における少量画分の血漿成分の移送を引き起こす。血小板の第１血小板流量（例えば、約１５ｍｌ／分）は、第５段階において血漿成分が移送バッグ３に移送する流量（例えば、約１５０〜２２０ｍｌ／分）よりもかなり低い。血小板成分の第１移送流量（液圧流体の第１流量と直接関連する）は、懸濁血小板が沈降するのを防ぐ程度に十分な流量に、同時に、血小板の活性化を誘発しない程度に選択される。所定量の血小板が下記に説明されるように収集され、センサ７３が懸濁血小板と単核球／赤血球との間の界面を検出した後、ポンプステーションは停止し、そして、ピンチバルブ部材４４を閉じる。
【００５２】
制御ユニット８０は、該手順のこの時点で移送バッグ４に移送された血小板成分の量を以下のように決定する：第１に、ピンチバルブ部材４４を開いた後にポンプステーション６０が液圧流体を液圧チャンバ５６にポンプで送り始める時点と、センサ７３が懸濁血小板と単核球／赤血球との間の界面を検出した後、ポンプステーション６０が停止した時点との間で、ステッピングモータ６３により行われたステップの数を数え；第２に、制御ユニット８０は、数えたステップの数及び一つのステップに関連付けられた所定の小体積分から、この段階で液圧チャンバ５６にポンプで送られた液圧液の総量を計算する。この総量が、移送バッグ４に移送された血小板成分の量に相当する。この量は制御ユニット８０のメモリに記憶される。
【００５３】
第７段階：液圧流体の流れを逆流させる。
【００５４】
ピンチバルブ部材４４を閉じた後、ロータ１６は、およそ９００ｒｍｐまで速度を落とされる。液圧システムを逆作動させて、量Ｖｘの液圧流体を液圧又は絞りチャンバ５６から引き出して、分離バッグ１の絞り圧の一部を放出する。液圧流体のこの逆流の際に、分離は、分離バッグ１における任意の血小板、赤血球及び単核球層の間で維持される。Ｖｘは、最終の所望血小板量に基づいてコントローラにより選択され、これは下記において血小板の絞り出し又は噴出に関してより完全に説明される。Ｖｘは、最終血小板産物における最終血漿濃度を示すことができる。Ｖｘの変動を使用して、血漿含有量を変えること及び血漿リッチ血小板（ｐｌａｓｍａ  ｒｉｃｈ  ｐｌａｔｅｌｅｔｓ）を提供することができる。
【００５５】
第８段階：血漿成分を分離バッグ１に戻す（再混合）。
【００５６】
液圧ポンプステーション６０の逆転ポンプ送りを停止させ、ロータ速度を３２００に増加し、ピンチバルブ４３を開ける。これにより、取り出された量Ｖｘの液圧液に対応する量Ｖｘの血漿が移送バッグ３から引き出される。何故なら、血漿の移送量は、液圧チャンバ５６から取り出された液圧流体の移送量と直接関連しているからである。戻された血漿は、血小板及び赤血球と再混合して、残留している血小板を赤血球から確実に分離させる。このハードスピンでは、赤血球は、素早く、赤血球層へと沈降していく。
【００５７】
第９段階：液圧チャンバ５６の液圧流体を増加させ、全てのバルブを閉じて分離バッグ１の圧力を増加させる。
【００５８】
全てのバルブ４２、４３及び４４を閉じる。ロータ１６は、ハードスピン又は約３２００ｒｐｍで回転し続ける。液圧ポンプステーション６０を作動して、液圧流体を液圧又は絞りチャンバ５６に戻す。液圧チャンバ５６は、分離バッグ１に作用する圧力が圧力Ｐ＋ΔＰになるまで、液圧流体を受容する。すなわち、該圧力は、絞り出しのための一定圧力よりも高く上昇して、分離バッグ１が急速絞り出し又は噴出の圧力になることを確実にする。これは下記においてより完全に説明される。
【００５９】
第１０段階：血小板ラインが一掃される。
【００６０】
液圧チャンバ５６が上記の第９段階に記載されたように液圧流体で充填された後、ピンチバルブ部材４４を開き、一方、ピンチバルブ４２及び４３は閉じたままである。ロータ１６は、３２００ｒｐｍで回転し続ける。分離バッグ１からの一部の残留血小板及び血漿は、液圧チャンバ５６にかかる過剰圧力により、移送バッグ３に接続している移送チューブ２６に急速に絞り出される或いは噴出させられる。上記の絞り出しは全て、液圧チャンバ５６に既に存在する液圧流体からの累積圧力の結果であるので、この急速絞り出し又は噴出期間中は、液圧ポンプステーション６０は静止している。この噴出絞り出しは、移送ライン２６から、第６段階の血小板絞り出しにより含有されたあらゆる残留血小板を一掃する。
【００６１】
制御ユニット８０は、手順のこの時点で移送バッグ４に移送された噴出血小板及び血漿成分の量を以下のように決定する：第１に、ポンプステーション６０が、分離バッグ１の圧力がＰ及びΔＰになるまで液圧流体を液圧チャンバ５６にポンプで送り始める時点と、ピンチバルブ部材４４を開く時点との間で、ステッピングモータ６３により行われたステップの数を数える。制御ユニット８０は、数えたステップの数及び一つのステップに関連付けられた所定の小体積分から、この段階で液圧チャンバ５６にポンプで送られた液圧液の総量を計算し、これは、この段階で移送バッグ４に急速絞り出しされた又は移送されたあらゆる血漿成分を有する血小板の量に相当する。この量は制御ユニット８０のメモリに記憶される。
【００６２】
第１１段階：残った血小板を収集する。
【００６３】
ピンチバルブ４４は開いたままである。液圧ポンプステーション６０は、赤血球層の最上部が内部フォトセル７３により検出された後の所定時間まで、残った血小板／血漿又は血漿リッチ血小板の流量を約１５ｍｌ／分の低い流量とする。該所定時間により、最大数の血小板が確実に収集されるであろう。遠心機又はロータ１６は、３２００ｒｐｍで回転し続ける。該所定時間の後、ピンチバルブ４４を閉じて、血小板の収集を完了する。
【００６４】
制御ユニット８０は、この段階で移送バッグ４に移送された血小板成分の量を以下のように決定する：第１に、ポンプステーション６０がポンプ速度を上げていって、液圧流体を液圧チャンバ５６にポンプで送り始める時点と、センサ７３が懸濁血小板と単核球／赤血球の間の界面を検出した後、ポンプステーション６０が停止した時点との間で、ステッピングモータ６３により行われたステップ数を数え；第２に、制御ユニット８０は、数えたステップ数及び一つのステップに関連付けられた所定の小体積量から、この段階で液圧チャンバ５６にポンプで送られた液圧液の総量を計算し、この総量が、この段階において移送バッグ４に移送された血小板成分の量に相当する。血小板の総量を決定するために、制御ユニット８０は、第６、第１０及び第１１段階における血小板収集からの決定量を読み出し、追加する。制御ユニット８０は、この総量をスクリーン８１に表示するようにプログラムされることができる。
【００６５】
第１２段階：単核球成分を移送バッグ２に移送する。
【００６６】
第１２段階は、第１１段階の終了時にピンチバルブ部材４４を閉じると直ぐに開始することができる。この第１２段階の開始時に、３つのピンチバルブ部材４２、４３及び４４を閉じる。ロータ１６は、流量が液圧ポンプステーション６０により調整されて、前述と同じ遠心分離速度で回転する。移送バッグ２へのアクセスを制御するピンチバルブ部材４２を開き、液圧ポンプステーション６０を作動させて、液圧液が一定の流量（例えば、約６０ｍｌ／分）で液圧チャンバ５６にポンプで送られるようにする。膨張する液圧チャンバ５６は、分離バッグ１を絞り、第１移送バッグ２への、リンパ球、単球及び少量の赤血球を含む単核球成分の移送を引き起こす。所定量（例えば、１０〜２０ｍｌ）が移送バッグ２に移送された後、ポンプシステム６０を停止し、ピンチバルブ部材４２を閉じる。ロータ１６は、３２００ｒｐｍで回転し続けて、赤血球と単核球の層の分離を維持する。
【００６７】
制御ユニット８０は、移送バッグ２に実際に移送された単核球成分の量（この量は、ピンチバルブ部材４２の開放と閉鎖との間においてステッピングモータにより行われたステップ数に相当する）を、制御ユニットのメモリに記憶されている、移送バッグ２に残っている全血の実験的に決められた量に加えることによって、移送バッグ２における単核球成分の実際の量を決定する。制御ユニット８０は、移送バッグ２における単核球成分の実際の量をスクリーン８１に表示することができる。
【００６８】
第１３段階：遠心分離工程を終了する。
【００６９】
ロータ１６の回転速度を落とし、ロータ１６を停止させ、ポンプシステム６０を作動及び逆動させて、高流量（例えば、約８００ｍｌ／分）で液圧チャンバ５６から液圧液をポンプで引き出し、液圧チャンバ５６を略空にし、ピンチバルブ部材４２、４３、４４を動作させて、移送チューブ２０、２５、２６を封止及び切断する。赤血球は、分離バッグ１に残る。
【００７０】
第１４段階：赤血球成分を移送バッグ５に移送する。
【００７１】
制御ユニット８０は、前に確定された抗凝固処理全血の量から、前に確定された血漿成分、血小板成分及び単核球成分の量を差し引くことによって、分離バッグ１に残っている赤血球の量を決定する。ロータ１６の蓋５０を開き、移送バッグ５に接続されている分離バッグ１を取り出す。移送チューブ２７のクランプ２４を開く。移送バッグ５と白血球除去フィルタ２８との連通を阻止している破壊可能なコネクタ２９を破壊する。移送バッグ５に含有されている貯蔵溶液は、重力によりフィルタ２８を通って分離バッグ１の中に流れ込み、そこで粘度を下げるために赤血球と混合される。次に分離バッグ１の内容物は、重力により、フィルタ２８を通って移送バッグ５に注がれる。白血球（顆粒球、並びに残留した単球及びリンパ球）は、フィルタ２８に捕捉され、それによってバッグ５における最終濃厚赤血球成分は、白血球を略含有しない。
【００７２】
制御ユニット８０は、第１分離プロトコルの第１４段階の結果、続いて行われた、分離バッグ１から移送バッグ５への赤血球の実際の移送によって生じる移送バッグ５における赤血球の量を決定することもできる。制御ユニット８０は、前に確定した抗凝固処理全血の量から、前に確定した血漿成分、血小板成分、単核球成分の量及び白血球除去フィルタ２８の内部量を差し引き、その得られた量に対して、移送バッグ５に含有されている赤血球貯蔵溶液の既知の量を加えることによって、赤血球の量を計算する。制御ユニット８０は、分離バッグ１の赤血球成分の実際の量又は移送バッグ５の赤血球成分の実際量のいずれか１つ又はその両方を、決定された際に、スクリーン８１に表示させるようにプログラムされることができる。
【００７３】
過剰圧力による絞り出しが、特に血小板の収集に関連して記載されてきたが、同様の絞り出しシステムを他の血液成分に使用できることは理解される。本発明は、移送バッグから分離容器への血漿成分の移送に関連して記載されてきたが、同様の原理を、収集量を最大にするために２つの段階で１つの成分を収集したい場合に又は成分を混合したい場合に、他の成分を収集するために使用することができる。上記のプロトコルは、４成分の収集、すなわち、第１成分の血漿、第２成分の血小板、第３成分の単核球及び第４成分の赤血球に関して記載されてきた。しかしながら、本発明の概念は、少なくとも２成分収集又は３成分収集に使用できることが理解される。第１及び第２などの指定するために用いられる数字の使用は、説明の目的のためだけであり、数字は、必ずしも何らかの特定の順番を意味するものではないことも、更に理解される。
【００７４】
種々の変更を本明細書に記載されている装置及び方法に対して行えることは、当業者には明白であろう。従って、本発明は明細書に記載されている主題に限定されないことが理解されるべきである。むしろ、本発明は変更及び変形を網羅することが意図される。
【図１】
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【図２】
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【図３】
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【図４】
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【図５】
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【図６】
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【図７】
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【国際調査報告】
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