(57)【要約】  本発明は、アミロイドタンパク質に関連する障害および異常の群、ならびにアミロイド様タンパク質に関連する疾患または状態の群の治療において用いられ得る、2,6-ジアミノピリジン化合物に関する。本発明の化合物は、視覚系の組織における病理学的異常/変化に関連する眼疾患の治療においても使用され得る。【特許請求の範囲】
【請求項１】
一般式(I)を有する化合物
【化１】
2013507428.tif 000035
[式中、
ピリジン環A、BおよびCは、独立に、非置換である、または、C1〜6-アルキレン-C(=NR13)-NHR14、C1〜6-アルキレン-C(O)-NH-CN、C1〜6-アルキレン-C(O)-NR16-C1〜6-アルキレン-NR14R15、C1〜6-アルキレン-C(O)-NR14R15、C1〜6-アルキレン-C(O)-OR13、C1〜6-アルキレン-NR16-C(=NR13)-NR14R15、C1〜6-アルキレン-NR16-C(O)-NR14R15、C1〜6-アルキレン-NR16-C(O)-OR14、C1〜6-アルキレン-NR16-C(O)-R14、C1〜6-アルキレン-NR14R15、C1〜6-アルキレン-NR16-SO2-NR14R15、C1〜6-アルキレン-NR16-SO2R14、C(=NR13)-NHR14、C(O)-NH-CN、C(O)-NR16-C1〜6-アルキレン-NR14R15、C(O)-NR16-NR14R15、C(O)-NR14R15、C(O)-OH、C(O)-OR13、C(O)-R13、CHal3、CN、Hal、NO2、NR13-C(=NR13)-NR14R15、NR16-C(O)-NR14R15、NR16-C(O)-OR14、NR16-C(O)-R14、NR14R15、NR16-SO2-NR14R15、NR16-SO2R14、O-C1〜6-アルキレン-C(O)-NR14R15、O-C(O)-NR14R15、O-C(O)-R13、OR13、S(O)t-C1〜6-アルキレン-C(O)-NR14R15、S(O)t-C(O)-OR13、S(O)tR13、SO2-NR14R15、C1〜6-アルキル、C5〜10-シクロアルキル、C5〜10-シクロアルキル-C1〜6-アルキレン、5から10員のヘテロシクロアルキル、1から6個の炭素原子を有するハロアルキル、6から10員のヘテロシクロアルキル-C1〜6-アルキレン、C2〜6-アルケニル、C2〜6-アルキニル、C5〜10-アリール、5から10員のヘテロアリール、C5〜10-アリール-C1〜6-アルキレン、5から10員のヘテロアリール-C1〜6-アルキレン、C1〜6-アルコキシ-C1〜6-アルキレンおよびアミノアルキレン{ここで、前記アルキレン基は、1から6個の炭素原子を有する}からなる群から独立に選択される1個または複数の置換基によって置換されており、ここで、アルキル、シクロアルキル、シクロアルキルアルキレン、ヘテロシクロアルキレン、ヘテロシクロアルキルアルキレン、アルケニル、アルキニル、アリール、ヘテロアリール、アリールアルキレン、ヘテロアリールアルキレン、アルコキシアルキレンおよびアミノアルキレンは、場合により置換されていてよく、
L1およびL2は、式(a)または(b)を有する部分
【化２】
2013507428.tif 000036
から独立に選択され、ここで、L1またはL2の少なくとも一方は式(b)を有し、
R1およびR2は、水素、C1〜6-アルキル、C5〜10-シクロアルキル、C5〜10-シクロアルキル-C1〜6-アルキル、5から10員のヘテロシクロアルキル、1から6個の炭素原子を有するハロアルキル、C5〜10-ヘテロシクロアルキル-C1〜6-アルキル、C2〜6-アルキニル、C5〜10-アリール、5から10員のヘテロアリール、C5〜10-アリール-C1〜6-アルキル、5から10員のヘテロアリール-C1〜6-アルキルまたはアミノアルキル{ここで、前記アルキル基は、1から6個の炭素原子を有する}からなる群から独立に選択され、ここで、アルキル、シクロアルキル、シクロアルキルアルキル、ヘテロシクロアルキル、ハロアルキル、ヘテロシクロアルキルアルキル、アルケニル、アルキニル、アリール、ヘテロアリール、アリールアルキル、ヘテロアリールアルキルおよびアミノアルキルは、場合により置換されていてよく、あるいは、R1およびR2は、それらが結合している窒素と一緒になった場合に、O、SまたはNR3から選択される1個または複数の追加のヘテロ原子を場合により含有してよい3から8員環を形成することができ、ここで、前記3から8員環は、場合により置換されていてよく、
R3、R12およびR16は、C(=NOR13)-R14、C(=NR13)-NR14R15、C(O)-C(=NR13)-NR14R15、C(O)-NR14R15、C(O)-OR13、R13、S(O)tNR14R15およびS(O)tR13からなる群から独立に選択され、
R4、R5、R6、R7、R8、R9、R10およびR11は、水素、C1〜6-アルキレン-C(=NR13)NHR14、C1〜6-アルキレン-C(O)-NH-CN、C1〜6-アルキレン-C(O)-NR16-C1〜6-アルキレン-NR14R15、C1〜6-アルキレン-C(O)-NR16-NR14R15、C1〜6-アルキレン-C(O)-NR14R15、C1〜6-アルキレン-C(O)-OR13、C1〜6-アルキレン-NR16C(=NR13)NR14R15、C1〜6-アルキレン-NR16-C(O)-NR14R15、C1〜6-アルキレン-NR16-C(O)OR14、C1〜6-アルキレン-NR16-C(O)R14、C1〜6-アルキレン-NR14R15、C1〜6-アルキレン-NR16-SO2-NR14R15、C1〜6-アルキレン-NR16-SO2-R14、C(=NR13)NHR14、C(O)-NH-CN、C(O)-NR16-C1〜6-アルキレン-NR14R15、C(O)-NR16-NR14R15、C(O)-NR14R15、C(O)-OH、C(O)-OR16、CHal3、CN、CO-NR14R15、CO-R13、Hal、NO2、NR16C(=NR13)NR14R15、NR16-C(O)-NR14R15、NR16-C(O)-OR14、NR16-C(O)-R14、NR14R15、NR16-SO2-NR14R15、NR16-SO2-R13、O-C1〜6-アルキレン-C(O)-NR14R15、O-C(O)-NR14R15、OC(O)-R13、OR13、S(O)t-C1〜6-アルキレン-C(O)-NR14R15、S(O)t-C1〜6-アルキレン-C(O)-OR13、S(O)t-C(O)-NR14R15、S(O)t-C(O)-OR13、S(O)tR13、SO2-NR14R15、およびSO2OR13;からなる群から独立に選択され、
R13、R14、R15は、水素、C1〜6-アルキル、C5〜10-シクロアルキル、C5〜10-シクロアルキル-C1〜6-アルキル、5から10員のヘテロシクロアルキル、1から6個の炭素原子を有するハロアルキル、5から10員のヘテロシクロアルキル-C1〜6-アルキル、C2〜6-アルキニル、C5〜10-アリール、5から10員のヘテロアリール、C5〜10-アリール-C1〜6-アルキル、5から10員のヘテロアリール-C1〜6-アルキルまたはアミノアルキル{ここで、前記アルキル基は、1から6個の炭素原子を有する}からなる群から独立に選択され、ここで、アルキル、シクロアルキル、シクロアルキルアルキル、ヘテロシクロアルキル、ハロアルキル、ヘテロシクロアルキルアルキル、アルケニル、アルキニル、アリール、ヘテロアリール、アリールアルキル、ヘテロアリールアルキルおよびアミノアルキルは、場合により置換されていてよく、あるいは、NR14R15の事例において、R14およびR15は、それらが結合している窒素と一緒になった場合に、O、SまたはNR3から選択される1個または複数の追加のヘテロ原子を場合により含有してよい3から8員環を形成することができ、ここで、前記3から8員環は、場合により置換されていてよく、
tは1または2であり、
pは1または2であり、
qは、0、1または2であり、
Halは、F、Cl、BrおよびIからなる群から選択される]
または薬学的に許容されるその塩。
【請求項２】
ピリジン環A、BおよびCが、独立に、非置換である、または1個もしくは複数のアルキル基もしくはハロゲン原子によって置換されている、請求項1に記載の化合物。
【請求項３】
R1およびR2が、水素およびアルキルから独立に選択される、請求項1または2に記載の化合物。
【請求項４】
R4、R5、R6、R7、R8、R9、R10およびR11が、ハロゲンおよび水素から独立に選択される、請求項1から3のいずれかに記載の化合物。
【請求項５】
【化３】
2013507428.tif 000037
から選択される、請求項1から4のいずれかに記載の化合物、または薬学的に許容されるその塩。
【請求項６】
請求項1から5のいずれか一項に記載の化合物を含む、医薬組成物。
【請求項７】
薬学的に許容される担体または添加剤をさらに含む、請求項6に記載の医薬組成物。
【請求項８】
アミロイドおよび/またはアミロイド様タンパク質に関連する疾患または状態を治療または予防するための薬剤の調製のための、請求項1から5のいずれか一項に記載の化合物の使用。
【請求項９】
前記疾患または状態が眼疾患または状態であり、好ましくは、前記疾患が、緑内障、特に、慢性(特発性)開放隅角緑内障、瞳孔ブロック緑内障、発育異常緑内障、他の眼障害に伴う緑内障、上強膜静脈圧上昇に伴う緑内障、炎症および外傷に伴う緑内障、眼内手術後の緑内障、高眼圧緑内障、正常眼圧緑内障、急性閉塞隅角緑内障、亜急性閉塞隅角緑内障、慢性閉塞隅角緑内障、複合型緑内障、先天性(幼児)緑内障、若年性緑内障、無虹彩症、角膜内皮の障害に伴う緑内障、虹彩および毛様体の障害に伴う緑内障、水晶体の障害に伴う緑内障、網膜、脈絡膜および硝子体の障害に伴う緑内障、網膜剥離および硝子体網膜の異常に伴う緑内障、血管新生緑内障、色素性緑内障、落屑症候群、水晶体起因性開放隅角緑内障、水晶体の膨張および脱臼に伴う緑内障、角膜炎、上強膜炎および強膜炎に伴う緑内障、毛様体ブロック(悪性)緑内障、無水晶体眼および偽水晶体眼の緑内障、上皮、線維および内皮の増殖、角膜手術に伴う緑内障、ならびに硝子体網膜手術に伴う緑内障である、請求項8に記載の使用。
【請求項１０】
アミロイドおよび/またはアミロイド様タンパク質に関連する疾患または状態を治療または予防する方法であって、そのような治療を必要としている対象に、有効量の請求項1から5のいずれか一項に記載の化合物を投与するステップを含む方法。
【請求項１１】
前記疾患または状態が眼疾患または状態であり、好ましくは、前記疾患が、緑内障、特に、慢性(特発性)開放隅角緑内障、瞳孔ブロック緑内障、発育異常緑内障、他の眼障害に伴う緑内障、上強膜静脈圧上昇に伴う緑内障、炎症および外傷に伴う緑内障、眼内手術後の緑内障、高眼圧緑内障、正常眼圧緑内障、急性閉塞隅角緑内障、亜急性閉塞隅角緑内障、慢性閉塞隅角緑内障、複合型緑内障、先天性(幼児)緑内障、若年性緑内障、無虹彩症、角膜内皮の障害に伴う緑内障、虹彩および毛様体の障害に伴う緑内障、水晶体の障害に伴う緑内障、網膜、脈絡膜および硝子体の障害に伴う緑内障、網膜剥離および硝子体網膜の異常に伴う緑内障、血管新生緑内障、色素性緑内障、落屑症候群、水晶体起因性開放隅角緑内障、水晶体の膨張および脱臼に伴う緑内障、角膜炎、上強膜炎および強膜炎に伴う緑内障、毛様体ブロック(悪性)緑内障、無水晶体眼および偽水晶体眼の緑内障、上皮、線維および内皮の増殖、角膜手術に伴う緑内障、ならびに硝子体網膜手術に伴う緑内障である、請求項10に記載の方法。
【請求項１２】
アミロイドおよび/またはアミロイド様タンパク質に関連する疾患または状態を治療または予防するための、請求項1から5のいずれか一項に記載の化合物。
【請求項１３】
前記疾患または状態が眼疾患または状態であり、好ましくは、前記疾患が、緑内障、特に、慢性(特発性)開放隅角緑内障、瞳孔ブロック緑内障、発育異常緑内障、他の眼障害に伴う緑内障、上強膜静脈圧上昇に伴う緑内障、炎症および外傷に伴う緑内障、眼内手術後の緑内障、高眼圧緑内障、正常眼圧緑内障、急性閉塞隅角緑内障、亜急性閉塞隅角緑内障、慢性閉塞隅角緑内障、複合型緑内障、先天性(幼児)緑内障、若年性緑内障、無虹彩症、角膜内皮の障害に伴う緑内障、虹彩および毛様体の障害に伴う緑内障、水晶体の障害に伴う緑内障、網膜、脈絡膜および硝子体の障害に伴う緑内障、網膜剥離および硝子体網膜の異常に伴う緑内障、血管新生緑内障、色素性緑内障、落屑症候群、水晶体起因性開放隅角緑内障、水晶体の膨張および脱臼に伴う緑内障、角膜炎、上強膜炎および強膜炎に伴う緑内障、毛様体ブロック(悪性)緑内障、無水晶体眼および偽水晶体眼の緑内障、上皮、線維および内皮の増殖、角膜手術に伴う緑内障、ならびに硝子体網膜手術に伴う緑内障である、請求項12に記載の化合物。
【請求項１４】
請求項1から5のいずれか一項に記載の化合物、ならびに場合により少なくとも一種のさらなる生物活性化合物ならびに/または薬学的に許容される担体および/もしくは賦形剤および/もしくは添加剤を含む混合物。
【請求項１５】
前記さらなる生物活性化合物が、アミロイドーシスおよび/または眼圧の治療において使用される化合物である、請求項14に記載の混合物。
【請求項１６】
視覚系の組織における病理学的異常/変化に関連する、特に、視覚系の組織におけるアミロイドベータが関係する病理学的異常/変化に関連する眼疾患または状態であって、好ましくは、緑内障、ニューロン分解、皮質性視覚欠損、ベータアミロイド沈着による白内障、眼アミロイドーシス、原発性網膜変性、黄斑変性、例えば加齢性黄斑変性、視神経ドルーゼン、視神経症、視神経炎および格子状ジストロフィーからなる群から選択される前記眼疾患または状態を治療または予防するための薬剤の調製のための、請求項1から5のいずれか一項に記載の化合物の使用。
【請求項１７】
視覚系の組織における病理学的異常/変化に関連する、特に、視覚系の組織におけるアミロイドベータが関係する病理学的異常/変化に関連する眼疾患または状態を治療または予防する方法であって、そのような治療を必要としている対象に、有効量の請求項1から5のいずれか一項に記載の化合物を投与するステップを含み、前記眼疾患または状態が、好ましくは、緑内障、ニューロン分解、皮質性視覚欠損、ベータアミロイド沈着による白内障、眼アミロイドーシス、原発性網膜変性、黄斑変性、例えば加齢性黄斑変性、視神経ドルーゼン、視神経症、視神経炎および格子状ジストロフィーからなる群から選択される、方法。
【請求項１８】
視覚系の組織における病理学的異常/変化に関連する、特に、視覚系の組織におけるアミロイドベータが関係する病理学的異常/変化に関連する眼疾患または状態であって、好ましくは、緑内障、ニューロン分解、皮質性視覚欠損、ベータアミロイド沈着による白内障、眼アミロイドーシス、原発性網膜変性、黄斑変性、例えば加齢性黄斑変性、視神経ドルーゼン、視神経症、視神経炎および格子状ジストロフィーからなる群から選択される前記眼疾患または状態を治療または予防するための、請求項1から5のいずれかに記載の化合物。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、アミロイドタンパク質に関連する障害および異常、特に、緑内障または加齢性黄斑変性(AMD)等の眼障害の群、ならびにアミロイド様タンパク質に関連する疾患または状態の群の治療において用いられ得る、新規化合物に関する。本発明はさらに、これらの化合物を含む医薬組成物、およびアミロイドまたはアミロイド様タンパク質に関連する疾患または状態の治療用の薬剤の調製のための、これらの化合物の使用に関する。アミロイドまたはアミロイド様タンパク質に関連する疾患または状態を治療する方法も開示される。
【０００２】
本発明の化合物は、視覚系の組織における病理学的異常/変化に関連する、特に、ニューロン分解等、視覚系の組織におけるアミロイドベータが関係する病理学的異常/変化に関連する眼疾患の治療または予防においても使用され得る。前記病理学的異常は、例えば、皮質性視覚欠損につながる視覚野;緑内障につながる前房および視神経;ベータアミロイド沈着による白内障につながる水晶体;眼アミロイドーシスにつながる硝子体;原発性網膜変性および黄斑変性、例えば加齢性黄斑変性につながる網膜;視神経ドルーゼン、視神経症および視神経炎につながる視神経;ならびに格子状ジストロフィーにつながる角膜等、目の様々な組織において発生し得る。
【背景技術】
【０００３】
加齢に伴う多くの疾患は、アミロイドまたはアミロイド様タンパク質に基づくか、または関連しており、該疾患の発生病理および進行に寄与するアミロイドまたはアミロイド様物質の細胞外沈着物の堆積によって一部特徴付けられる。
【０００４】
それらの神経変性疾患は、中枢神経系障害および末梢神経系障害の両方、特に眼障害を包含する。
【０００５】
そのような障害は、アルツハイマー病(AD)等の神経学的障害;例えば、軽度認知障害(MCI)、レヴィー小体認知症、ダウン症候群、遺伝性アミロイド性脳出血(オランダ型)等、認知記憶能力の喪失を特徴とする疾患または状態;グアムパーキンソン認知症複合を包含するがこれらに限定されない。アミロイド様タンパク質に基づくまたは関連する他の障害は、進行性核上麻痺、多発性硬化症;クロイツフェルト(Creutzfeld)・ヤコブ病、パーキンソン病、HIV関連認知症、ALS(筋萎縮性(amyotropic)側索硬化症)、封入体筋炎(IBM)、成人発症型糖尿病;老人性心アミロイドーシス;内分泌腫瘍、ならびに、以下のもの等、目の様々な組織を標的とするアミロイド関連眼疾患を包含する他の疾患である:視覚野(皮質性視覚欠損を包含する);前房および視神経(緑内障を包含する);水晶体(ベータアミロイド沈着による白内障を包含する);硝子体(眼アミロイドーシスを包含する);網膜(原発性網膜変性および黄斑変性、特に加齢性黄斑変性を包含する);視神経(視神経ドルーゼン、視神経症および視神経炎を包含する);および、角膜(格子状ジストロフィーを包含する)。
【０００６】
ベータアミロイド(Aβ)は、アルツハイマー病(AD)における老人斑の主要構成要素である。それらの斑は、アミロイド前駆体タンパク質(APP)の異常プロセシングによって引き起こされ、AD神経症に関わるとされてきた。最近では、Aβは、網膜神経節細胞(RGC)アポトーシスを介する緑内障等の眼障害の発症にも関与するとされている。緑内障とADとの間の関連性はいくつかの研究において実証され、AD患者は、視神経症および視覚機能障害等の典型的な緑内障性変化に関連するRGC喪失も示した。
【０００７】
緑内障は、視神経症の特徴的パターンである網膜神経節細胞(RGC)の喪失が関わる、視神経の疾患群である。緑内障は、常にではないが多くの場合、房水循環の遮断またはその排液の結果であり得る眼圧増大を伴う。
【０００８】
眼圧上昇は緑内障を発症させる重大な危険因子であるが、緑内障を引き起こすのに決定的となる眼圧の閾値を定義することはできない。
【０００９】
損傷は、生体の視神経線維への血液供給不良、神経の構造における脆弱性、および/または神経線維自体の健康における問題によっても引き起こされ得る。
【００１０】
未治療の緑内障は、視神経の永久的な損傷および結果として生じる視野喪失につながり、これは失明に進み得る。
【００１１】
RGCは、視覚信号を目から脳へ伝達する神経細胞である。アポトーシス過程における2つの主要な酵素であるカスパーゼ-3およびカスパーゼ-8は、RGCのアポトーシスにつながる過程において活性化される。カスパーゼ-3は、アミロイド前駆体タンパク質(APP)を切断して、アミロイドβを包含する神経毒性断片を生成する。APPの保護効果がなければ、網膜神経節細胞層におけるアミロイドβ蓄積は、RGCの死および不可逆的な視力喪失をもたらす。
【００１２】
様々な種類の緑内障は、状態が慢性であれば開放隅角緑内障、または急性緑内障が突然発生するならば閉塞隅角緑内障として分類される。緑内障は通常、両目を侵すが、該疾患は、一方の目において他方より急速に進むことがある。
【００１３】
原発性開放隅角緑内障(POAG)としても公知である慢性開放隅角緑内障(COAG)は、最も一般的な種類の緑内障である。COAGは、シュレム管への房水流出の排液を減少させ、眼圧(IOP)を上昇させる、小柱網における微視的な遮断によって引き起こされる。POAGは通常、両目を侵し、年齢および家族歴陽性に強く関連する。目の排液機構は加齢とともに次第に詰まってしまうことがあるため、高齢者においてその頻度は増大する。慢性開放隅角緑内障に侵された対象における眼圧の増大は、視覚野中心部において喪失が感じられるまで、症状を伴わない。
【００１４】
急性閉塞隅角緑内障(AACG)または閉塞隅角緑内障は、激痛および不可逆的な視力喪失につながる35から80mmHgへの眼圧の突然の増大を特徴とする、比較的まれな種類の緑内障である。突然の圧力増大は、濾過隅角(filtering angle)の閉塞および排液チャネルの遮断によって引き起こされる。隅角が狭い個体は、隅角の突然の閉塞に対する危険性が高い。AACGは通常片目に発生するが、危険性は両目に存在する。年齢、白内障および偽落屑も、水晶体の腫大および隅角の密集または狭小化に関連するため、危険因子である。突然の緑内障発作は、激しい眼痛および頭痛、目の炎症、悪心、嘔吐、ならびに視界のかすみを伴うことがある。
【００１５】
混合型または複合型緑内障は、開放および閉塞隅角緑内障の混合または組合せである。該緑内障は、レーザー虹彩切開術後に隅角が開放するが、IOP制御のための投薬法を必要とし続ける急性ACG患者、および隅角の狭小化を次第に発症するPOAGまたは偽落屑緑内障患者を侵す。
【００１６】
低眼圧緑内障(LTG)としても公知である正常眼圧緑内障(NTG)は、他の種類の緑内障において見られるものと同様の進行性視神経損傷および周辺視野の喪失を特徴とするが、眼圧は正常範囲であるか、またはさらには正常を下回る。
【００１７】
先天性(幼児)緑内障は、比較的まれな、遺伝する種類の開放隅角緑内障である。排液エリアの不十分な発達は、視神経損傷による視力喪失および目の拡大につながり得る目の圧力増大をもたらす。早期診断および治療は、該疾患に侵されている幼児および小児において視力を保護するために重要である。
【００１８】
続発性緑内障は、眼傷害、目の虹彩における炎症(虹彩炎)、糖尿病、白内障、またはステロイド感受性の個体におけるステロイドの使用によって生じ得る。続発性緑内障は、網膜剥離または網膜静脈閉塞もしくは遮断にも関連し得る。
【００１９】
色素性緑内障は、虹彩からの色素顆粒の剥離を特徴とする。顆粒は、目の排液系の遮断を引き起こし、これが眼圧上昇および視神経への損傷につながる。
【００２０】
落屑緑内障(偽落屑)は、前嚢上および目の隅角内における鱗状物質の沈着物を特徴とする。鱗状物質の蓄積は、排液系を遮断し、眼圧を上昇させる。
【００２１】
緑内障の診断は、種々の試験を使用して為され得る。眼圧測定法は、目の表面の緊張または堅さを計測することにより、目における圧力を決定する。この試験には、数種類の眼圧計が利用可能であり、最も一般的なのは、圧平眼圧計である。パキメトリーは、角膜の厚さを決定し、これにより今度は眼圧を計測する。隅角鏡検査法は、目の濾過隅角および排液エリアの検査を可能にする。隅角鏡検査法は、異常血管が目からの房水の排液を遮断し得るか否かを決定することもできる。検眼鏡検査法(ophtalmoscopy)は、視神経の検査を可能にし、眼圧増大または軸索脱落によって引き起こされ得る、視神経乳頭における神経線維層の脱落もしくは変化、またはこの構造の圧入(陥凹)を検出することができる。隅角鏡検査法は、血流不良または眼圧増大による神経への損傷を評価する際にも有用である。視野試験は、視野を主観的にマッピングし、これにより、視神経への緑内障性損傷の兆候を検出することができる。これは、視野喪失の特異的パターンによって表される。神経線維層喪失の客観的尺度である眼の干渉断層撮影法は、損傷した軸索組織を通る光透過率の差によって視神経線維層(緑内障で変質したもの)の厚さを調べることによって行われる。
【００２２】
黄斑変性は、網膜(感光性細胞が視覚信号を脳に送る、目の背面にある紙のように薄い組織)の中心エリアである黄斑の劣化を引き起こす、一般的な目の疾患である。鋭敏で明瞭な「真っすぐな」視界は、黄斑によって処理される。黄斑への損傷は、盲点および視界のかすみまたは歪みの発症をもたらす。加齢性黄斑変性(AMD)は、米国における視覚障害の主要原因であり、65歳を超える人について、白人の間での法的盲の主因である。およそ180万人の40歳以上のアメリカ人が進行性AMDを患っており、中間型AMに罹患しているさらに730万人は、視力喪失のかなりの危険性がある。政府は、進行性AMDに罹患している人は2020年までに290万人になるであろうと推定している。AMDの犠牲者は、この失明状態の原因および治療についてほとんど知られていないことが分かると、多くの場合、驚き、失望する。
【００２３】
2つの形態の黄斑変性:萎縮型黄斑変性および滲出型黄斑変性がある。黄斑の細胞がゆっくり崩壊し始める萎縮型は、黄斑変性症例の85パーセントにおいて診断されている。通常は両目が萎縮型AMDによって侵されるが、一方の目が視力を喪失しても、他方の目は侵されないままの場合がある。網膜下の黄色の沈着物であるドルーゼンは、萎縮型AMDの一般的な初期兆候である。ドルーゼンの数またはサイズが増大するにつれて、進行性萎縮型AMDまたは滲出型AMDを発症する危険性が増大する。萎縮型AMDが進行して、該疾患の滲出型になることなく視力喪失を引き起こすこともあるが、初期段階の萎縮型AMDが滲出型に突然変化することもある。
【００２４】
滲出型は、症例の15パーセントを占めているにすぎないが、失明の90パーセントをもたらし、進行性AMDであるとみなされる(滲出型AMDの初期または中間段階はない)。滲出型AMDは、常に該疾患の萎縮型より先に現れる。萎縮型が悪化するにつれて、黄斑の裏側に成長する異常血管を有し始める人もいる。これらの血管は非常にもろく、体液および血液を漏出させ(それ故「滲出型」黄斑変性)、黄斑への急速な損傷を引き起こすことになる。
【００２５】
AMDの萎縮型は、多くの場合、最初に視界のわずかなかすみを引き起こす。次いで、特に視界の中心がかすみ始めることがあり、この領域は疾患が進むにつれて大きく成長する。一方の目のみが侵されている場合、症状に気付かないことがある。滲出型AMDでは、直線が波状に見えることがあり、中心視界の喪失は急速に発生する可能性がある。
【００２６】
黄斑変性の診断には、典型的には、拡張した目の検査、視力試験、およびAMDを診断するのに役立つ眼底検査法と呼ばれる手順を使用して目の背面を見ることを伴い、滲出型AMDが疑われる場合には、蛍光眼底血管造影法も実施され得る。萎縮型AMDが進行した段階に到達していれば、現在のところ視力喪失を予防するための治療はない。しかしながら、特定の高用量処方の酸化防止剤および亜鉛は、中間型AMDが進行した段階に進むのを遅延させるまたは予防することができる。Macugen(登録商標)(ペガプタニブナトリウム注射)、レーザー光凝固術および光線力学的療法は、黄斑における異常血管成長および出血を制御することができ、滲出型AMDを有する一部の人には有益であるが、既に喪失した視力がこれらの技術によって回復することはない。視力を既に喪失している場合、生活の質を改善するのに役立ち得る低視力補助器具が存在する。
【００２７】
加齢性黄斑変性(AMD)の初期兆候の1つは、網膜色素上皮(RPE)の基底膜とブルッフ膜(BM)との間における、ドルーゼンとして公知である細胞外沈着物の蓄積である。Andersonらによって行われた最近の研究では、ドルーゼンがアミロイドベータを含有することを確認した(Experimental Eye Research 78(2004) 243〜256)。
【００２８】
プリオンは、ヒツジにおけるスクレイピー、ウシにおける牛海綿状脳症、およびヒトにおけるクロイツフェルト・ヤコブ病等の神経変性疾患を引き起こす。該粒子の唯一公知である成分は、タンパク質のスクレイピーアイソフォーム、PrPScである。プリオンは増殖するが、それらが核酸を含有するという証拠はない。PrPScは、PrPCが根本的なコンホメーション変化を受ける翻訳後プロセシングによって、非感染性の細胞タンパク質PrPCから誘導される。
【００２９】
スクレイピータンパク質PrPScは、神経変性において重要な役割を有し、疾患の発症中に次のような三段階移行をする:PrPC(タンパク質の正常細胞アイソフォーム)-PrPSc:感染型(タンパク質のスクレイピーアイソフォーム)-タンパク質PrP27〜30。
【００３０】
そのような一連の事象は、クロイツフェルト・ヤコブ病(CJD)、クールー、ゲルストマン・ストロイスラー・シャインカー症候群(GSS)、ヒトにおける致死性家族性不眠症、ヒツジおよびヤギにおけるスクレイピー、ミンクにおける脳症、ならびにウシにおける牛海綿状脳症の発症中に発生する。
【００３１】
細胞の非毒性タンパク質(PrPC)は、ニューロンにおいて主に発現される、分子量33000から35000のシアロ糖タンパク質である。上述した疾患において、PrPCは変質形態(PrPSc)に変換され、これは、プロテアーゼ消化に対するその相対的な抵抗性によってその正常な同族体から識別可能である。PrPScは、侵された動物および個体の中枢神経系において蓄積し、そのプロテアーゼ耐性コアは細胞外で凝集する。
【００３２】
アミロイドーシスは、単一の疾患エンティティーではなく、むしろ、1つまたは複数の臓器または体系において蓄積する、アミロイドと呼ばれるワックス状のデンプン様タンパク質の細胞外組織沈着物を特徴とする、進行性疾患過程の多様な群である。アミロイド沈着物が堆積すると、該沈着物は臓器または体系の正常機能を妨害し始める。少なくとも15の異なる種類のアミロイドーシスがある。主要な形態は、原因が不明の原発性アミロイドーシス、他の何らかの状態後の続発性アミロイドーシス、および遺伝性アミロイドーシスである。
【００３３】
続発性アミロイドーシスは、結核、家族性地中海熱と呼ばれる細菌感染、骨感染(骨髄炎)、関節リウマチ、小腸の炎症(肉芽腫性回腸炎)、ホジキン病、およびハンセン病等の慢性感染症または炎症性疾患を有する人において発生する。
【００３４】
視神経ドルーゼンは、軸索神経線維層を侵している先天的に変質した血管構造を通る分泌物であると考えられる、タンパク質およびカルシウム塩の球状結石である。これらの蓄積は、乳頭周囲の神経線維層において発生し、圧迫によって直接的に、または神経線維層への血管供給の破壊を介して間接的にのいずれかで、神経線維層を損傷すると考えられる。該蓄積は通常、侵された個体において生後10年経過後に可視的となる。該蓄積は、ほとんどの場合、両目において発生するが、一方の目を侵すこともあり、長年にわたる周辺視野の軽度喪失を引き起こし得る。
【００３５】
視神経症は、脱髄、血液供給の遮断、栄養欠乏または毒素によって引き起こされる視神経への損傷を特徴とする疾患である。脱髄性視神経症(以下の視神経炎を参照)は、典型的には、多発性硬化症等の基礎となる脱髄過程によって引き起こされる。虚血性視神経症として公知である血液供給の遮断は、視神経細胞の死または機能不全につながり得る。非動脈炎性虚血性視神経症は通常、中年者において発生する。危険因子は、高血圧、糖尿病およびアテローム性動脈硬化症を包含する。動脈炎性虚血性視神経症は通常、高齢者において、動脈の炎症(動脈炎)、特に側頭動脈の炎症(側頭動脈炎)の後に発生する。視力喪失は、急速であるか、または2から7日間かけて次第に発症し得、損傷は片目または両目となり得る。毒素へのまたは栄養欠乏への暴露によって視神経症が引き起こされた人においては、通常両目が侵される。
【００３６】
非動脈炎性虚血性視神経症者の約40%は、時間とともに自然に改善する。非動脈炎性虚血性視神経症は、血圧、糖尿病およびコレステロールレベルを制御することによって治療される。動脈炎性虚血性視神経症は、もう片方の目における視力喪失を予防するために、高用量のコルチコステロイドを用いて治療される。
【００３７】
視神経炎は、一方または両方の目における軽度または重度の視力喪失に関連し、全身性脱髄過程(上記参照)、ウイルス感染、ワクチン接種、髄膜炎、梅毒、多発性硬化症および眼内炎(ブドウ膜炎)によって引き起こされ得る。眼球運動は有痛であることがあり、視力はエピソードを繰り返して劣化し得る。診断には、瞳孔の反応の検査および視神経円板が腫れているか否かを決定することを伴う。核磁気共鳴画像法(MRI)は、多発性硬化症、またはまれに、視神経を圧迫する腫瘍の証拠を示すことがあり、その症例において、腫瘍による圧迫が緩和されると視力が改善する。視神経炎のほとんどの症例は、治療なしで数か月で改善する。いくつかの症例では、静脈内コルチコステロイドによる治療が必要となり得る。
【００３８】
白内障は、目の水晶体において、またはその包膜において発症する混濁である。白内障は、典型的には進行性視力喪失を引き起こし、治療しないまま放置すると、失明を引き起こし得る。モルガーニ白内障において、白内障皮質は次第に液化して乳白色の流体を形成し、水晶体嚢が破れて漏出すると、重度の炎症を引き起こし得る。治療しないまま放置すると、白内障は水晶体形態性緑内障も引き起こし得る。白内障は、事実上先天性であることもあり、または、遺伝的要因、高齢、長期にわたる紫外線暴露、放射線への暴露、糖尿病、目の傷害もしくは身体的外傷によって引き起こされこともある。
【００３９】
嚢外(ECCE)手術は、白内障を治療するための最も有効な治療である。該手術において、水晶体は除去されるが、水晶体嚢の大部分は無傷のままである。角膜側の小切開である水晶体超音波乳化吸引術は、典型的には、摘出前に水晶体を粉砕するために使用される。
【００４０】
眼アミロイドーシスは、I型家族性アミロイド多発性神経症(FAP)に関連する遺伝性障害であり、異常な結膜血管、乾性角結膜炎、瞳孔異常、ならびにいくつかの症例では硝子体混濁および続発性緑内障を特徴とする。I型FAPは、トランスサイレチン(TTR)における突然変異、肝臓において合成される四量体血漿タンパク質(プレアルブミン)、網膜色素上皮2および脳の脈絡叢に関連する。異なる突然変異が、トランスサイレチンをアミロイド原線維のプリーツ構造と重合させて、遺伝性アミロイドーシスを招く。最も頻度の高い突然変異は、メチオニンがトランスサイレチンの30位のバリンを置き換えるTTR-met303である。
【００４１】
IV型FAPは、格子状角膜変性症(LCD)に関連する。格子状角膜変性症は、角膜実質における、二重輪郭線を持つ屈折性格子線の存在を特徴とする、遺伝性、原発性の、通常は両側性の角膜アミロイドーシスである。LCD I型(ビーバー・ハーブ・ディマー)は、中央部実質の表面および中間層における、白点および淡い濁りを持つ多数の半透明の微細な格子線の存在を特徴とする、常染色体優性の左右対称性角膜障害である。症状は、生後10年または20年の間に開始し、進行性視力喪失を引き起こす。多くの患者は、40歳までに角膜移植を必要とする。LCD II型は、全身性アミロイドーシス(メレトヤ症候群(Meretoja's syndrome))に関連し、縁、角膜中央および実質における太い格子線の存在を特徴とする。中年期以降まで視覚は侵されない。LCD III型は、中年者を侵し、縁から縁へ伸展する太い格子線の存在を特徴とする。LCD III A型は、実質におけるアミロイド沈着物の蓄積および実質とボーマン層との間におけるアミロイドのリボンの存在を特徴とし、LCD III A型は、角膜びらんの存在、白人における発生、および常染色体優性遺伝パターンのために、LCD III型とは異なる。
【００４２】
緑内障の治癒法はない。緑内障の多くの治療は、視覚情報を脳へ伝達する視神経を損傷し得る眼圧(IOP)を低下させ、かつ/または制御するように設計されている。緑内障点眼剤は、多くの場合、緑内障手術に優る第一選択肢であり、眼損傷を保護するためにIOPを制御する上で極めて有効となり得る。緑内障の治療のための投薬法は、それらの活性化学化合物ごとに分類され、下記のカテゴリーに収載することができる(現在承認されている薬物は、括弧内に示すものが承認されている):
-ベータ遮断薬(チモプティック、ベトプティック、イスタロール、チモロール)は、目における流体(房水)の生成を減少させることによって働く。
-炭酸脱水酵素阻害剤(トルソプト、エイゾプト、ダイアモックス、ネプタザン(Naptazane)、ダラナイド)は、房水生成の速度を減少させる。
-アルファ-アドレナリンアゴニスト(アルファガン、アルファガン-P、アイオピディン)も、房水生成の速度を減少させる。
-プロスタグランジン(キサラタン、ルミガン、トラバタンZ、レスキュラ)は、目の背面にある異なる経路を介して房水の排液を方向転換し、それにより、眼圧の増強を低減させる。
-副交感神経作用薬(カルバコール、ピロカルピン)は、目からの房水の流出を増大させることによって働き、それにより、眼内液の排液を増大させる。
-エピネフリンは、房水生成の速度を減少させ、目からの房水の流出を増大させる。
【００４３】
IOPを制御することを狙いとした投薬法の他に、ある特定の調査中の緑内障治療は、視神経を保護することに重点を置いている。アルツハイマー病薬物メマンチンは、神経保護剤としての緑内障適応について現在調査されている。しかしながら、開放隅角緑内障におけるN-メチル-d-アスパルテート(NMDA)アンタゴニストメマンチンの無作為化臨床研究は、有意な効能を示さなかった。
【００４４】
さらなる緑内障治療は、房水をより効率的に目から出させるのに役立つ手順である線維柱帯形成術を包含する、レーザー手術である。緑内障財団(Glaucoma Foundation)によれば、患者の80%近くが、さらなる手術を遅延させるまたは回避するための手順に十分良好に応答している。しかしながら、国立眼学研究所によれば、レーザー手術後2年以内に、全患者の半数の目において再度圧力が増大する。切開手術は、投薬法および最初のレーザー治療が眼内の圧力を低減させることに成功しない場合に実施される。手術の一種である柵状織切除術は、房水が排液できるような開口部を目の壁面に作る。しかしながら、緑内障財団によれば、柵状織切除術患者の約3分の1は、5年以内に白内障を発症する。柵状織切除術が失敗の場合、追加の切開手順は、目の角膜と虹彩との間に排液管を入れること、および目の中の房水を作製する組織を破壊するためのレーザーまたは凍結治療の使用を包含する。手術は、患者において残っている視力を温存することはできるが、視覚を改善させない。視力は、実際には手術後悪化していることがある。
【００４５】
緑内障の治療のための現在の療法は、眼圧を低下させかつ制御することにより、視野喪失の進行を減速させようと努めている。上述した通り、これは、IOP低下薬を用いてまたはレーザー線維柱帯形成術によってのいずれかで為される。IOPを低下させることの効果についての長期にわたる研究は、一部の患者において疾患進行を減速させる際に有効であることを示した。残念なことに、IOPを低下させたにもかかわらず、視野を喪失し続ける患者、またはIOP低下薬に対して全く応答しない患者がいる。したがって、眼圧とは異なる形質を標的とする新たな治療を開発する必要がある。そのような新たな標的は、RGCの神経保護である。
【００４６】
加齢性黄斑変性(AMD)は、65歳を超える白人の間における失明の主要原因である。最近、黄斑変性研究においては大きな進歩がみられるが、該疾患の経過中に発生する神経細胞死を救済する治療はない。皮質性視覚欠損、視神経ドルーゼン、視神経症、視神経炎、眼アミロイドーシスおよび格子状ジストロフィー等、アミロイドベータが関係するニューロン分解に関連する他の眼疾患についても、決定的な治療はない。
【００４７】
アミロイド沈着物は、典型的には3つの成分を含有する。アミロイド物質の約90%を占めるアミロイドタンパク質原線維は、異なる数種類のタンパク質のうちの1つを含む。これらのタンパク質は、フォールディングして、アミロイドタンパク質の独特の染色特性をもたらすコンゴレッドのための結合部位を呈する独特のタンパク質の立体配置である、いわゆる「ベータプリーツ」シート原線維となることができる。加えて、アミロイド沈着物は、正常血清アミロイドP(SAP)に関係する糖タンパク質であるアミロイドP(五角形)成分(AP)、および結合組織の複合炭水化物である硫酸化グリコサミノグリカン(GAG)と、密接に関連している。
【００４８】
アミロイドタンパク質に関連する障害および異常、またはアルツハイマー病およびプリオン病等のアミロイド様タンパク質に関連する状態の治療を目指す1つの開発は、AβおよびPrPの異常なβ-シートコンホメーションとそれぞれ結合し、それによってこれらの分子の凝集を予防する分子の設計であった。ペプチドのβ-シートコンホメーションは、水素結合が、隣接するアミノ酸鎖の間に規則的なパターンで形成されることを特徴とする。この配置は、安定な三次元構造をもたらす。H結合受容体(C=O基)およびH結合供与体(NH基)は、自然発生のβ-シートペプチドにおいて、ほぼ1列になって結合される原子と交互になっている。各アミノ酸鎖内において、隣接するH結合供与体とH結合受容体との間の距離は、特定の範囲内に収まる。特に、1個のアミノ酸残基内のH結合供与体(NH基)とH結合受容体(C=O基)との間の距離は、3.5から4.0Åまでである。1個のアミノ酸残基のH結合受容体(C=O基)と鎖間結合を担う下記のアミノ酸残基のH結合供与体(NH基)との間の距離は、2.6から2.9Åまでである。換言すると、1本のアミノ酸鎖内の隣接するH結合供与体とH結合受容体との間の距離は、下記の範囲内で交互になっている:
H結合供与体(アミノ酸1)〜H結合受容体(アミノ酸1)=3.5から4.0Å;
H結合受容体(アミノ酸1)〜H結合供与体2(アミノ酸2)=2.6から2.9Å。
【００４９】
β-シートと結合するように設計されたリガンドは、理想的には、β-シートのアミノ酸鎖におけるH結合供与体およびH結合受容体の順序と相補的な、H結合供与体およびH結合受容体の順序を有する。
【００５０】
WO 03/095429およびRzepeckiら、Synthesis(2003) 12、1815〜1826において、AβまたはPrPのβ-コンホメーションと結合し、それによってそれらの凝集を保護すると言われている合成分子が記述されている。この目的を達成するために、カルボニル基含有リンカーによって連結された2個以上のアミノピラゾール部分を含有するある特定の分子、例えば「AmpOx」および「トライマー」が合成された。
【００５１】
【化１】
2013507428.tif 000002
【００５２】
WO 03/095429において記述されている分子のいくつかは、2つの生物物理学的アッセイにおいて、Aβの凝集体形成に対する阻害効果を有すると言われている。Rzepeckiら、Synthesis(2003) 12、1815〜1826によれば、その中に記述されている分子の1つは、溶液中の組換えPrPCの凝集を低減させることができた。しかしながら、これらの研究において、物理化学的特性は調査されなかった。
【００５３】
WO 2008/061795は、アミロイドまたはアミロイド様タンパク質に関連する疾患を治療するのに適切なある特定の複素環式化合物について記述している。
【００５４】
物理化学的特性は、神経治療による血液脳関門の透過において中心的な役割を果たす。CNS薬物の成功に関する要因が総説されている(H. PajouheshおよびG. R. Lenz、NeuroRx(登録商標): J. Am. Soc. Exp. Neurother.(2005) 2巻、541)。これらは、水とn-オクタノールとの間の分配係数(LogP)、すなわち、基本的には化合物の親油性を包含する。WO 03/095429およびRzepeckiら、Synthesis(2003) 12、1815〜1826において記述されている化合物のいくつかは、好ましくない算出LogPを有し、したがって、血液脳関門を通過しないと予想される。特に、「AmpOx」は、ゼロ未満の算出LogPを有する。
【００５５】
上記の文献において記述されている他の化合物は、それらの有害な副作用により、患者への投与が不適切となる特性を有する。例えば、「トライマー」は、変異原性、発癌性かつ代謝的に不安定である。
【先行技術文献】
【特許文献】
【００５６】
【特許文献１】WO 03/095429
【特許文献２】WO 2008/061795
【特許文献３】国際出願第PCT/US2007/073504号
【特許文献４】国際出願公開第WO 2007/068412号
【特許文献５】国際出願公開第WO 2007/068411号
【特許文献６】MaertensおよびStuyverによるWO 96/13590
【特許文献７】WO 96/29605
【非特許文献】
【００５７】
【非特許文献１】Experimental Eye Research 78(2004) 243〜256
【非特許文献２】Rzepeckiら、Synthesis(2003) 12、1815〜1826
【非特許文献３】H. PajouheshおよびG. R. Lenz、NeuroRx(登録商標): J. Am. Soc. Exp. Neurother.(2005) 2巻、541
【非特許文献４】Remington's Pharmaceutical Sciences、第15版、Mack Publishing Co.、New Jersey(1991)
【非特許文献５】Rzepeckiら、J. Biol. Chem.、2004、279(46)、47497〜47505
【非特許文献６】HarlowおよびLane、Antibodies: A Laboratory Manual(Cold Spring Harbor Laboratory、New York、1988、555から612
【非特許文献７】Kennedy, J. H.ら、1976(Clin. Chim. Acta 70:1〜31)
【非特許文献８】Schurs, A. H. W. M.ら、1977(Clin. Chim Acta 81:1〜40)
【非特許文献９】Ding, J. -D.ら、「Targeting age-related macular degeneration with Alzheimer's disease based immunotherapies: Anti-amyloid-b antibody attenuates pathologies in an age-related macular degeneration mouse model」、Vision Research(2007)、doi:10.1016/j.visres.2007.07.025
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【００５８】
本発明の目的は、アミロイドーシスを包含するアミロイドまたはアミロイド様タンパク質に関連する疾患または状態であるが特に緑内障等の眼疾患の治療において用いられ得る化合物を提供することであった。該化合物は、血液脳関門を通過することが可能であるべきである。さらに、該化合物は、薬学的に許容されるべきであり、特に、変異原性特性も発癌性特性も有するべきではなく、代謝的に不安定であるべきではない。該化合物は、その生物学的活性を維持しながら、適度に高い水溶性を有するべきである。
【００５９】
本発明のさらなる目的は、視覚系の組織における病理学的異常/変化に関連する、特に、例えばニューロン分解等、視覚系の組織におけるアミロイドベータが関係する病理学的異常/変化に関連する、眼疾患に侵されている対象のための改善された治療選択肢を提供することである。前記病理学的異常は、例えば、以下のもの等、目の様々な組織において発生し得る:視覚野(皮質性視覚欠損につながる);前房および視神経(緑内障につながる);水晶体(ベータアミロイド沈着による白内障につながる);硝子体(眼アミロイドーシスにつながる);網膜(原発性網膜変性および黄斑変性、例えば加齢性黄斑変性につながる);視神経(視神経ドルーゼン、視神経症および視神経炎につながる);ならびに角膜(格子状ジストロフィーにつながる)。
【課題を解決するための手段】
【００６０】
本発明者らは、驚くべきことに、これらの目的が、以後記述する一般式(I)の化合物によって達成され得ることを見出した。したがって、本発明は、一般式(I)の化合物に関する。
【００６１】
さらなる態様において、本発明は、一般式(I)の化合物を含む医薬組成物に関する。
【００６２】
本発明のまた別の態様は、アミロイドーシスを包含するアミロイドまたはアミロイド様タンパク質に関連する疾患または状態の治療用の薬剤の調製のための、一般式(I)の化合物の使用に関する。
【００６３】
本明細書において、アミロイドまたはアミロイド様タンパク質に関連する疾患または状態を治療する方法であって、そのような治療を必要としている対象に、有効量の一般式(I)の化合物を投与するステップを含む方法も開示されている。
【００６４】
好ましい実施形態において、疾患または状態は、眼疾患または状態である。より好ましくは、疾患は緑内障であり、さらに一層好ましくは、疾患は、慢性(特発性)開放隅角緑内障、瞳孔ブロック緑内障、発育異常緑内障、他の眼障害に伴う緑内障、上強膜静脈圧上昇に伴う緑内障、炎症および外傷に伴う緑内障、眼内手術後の緑内障、高眼圧緑内障、正常眼圧緑内障、急性閉塞隅角緑内障、亜急性閉塞隅角緑内障、慢性閉塞隅角緑内障、複合型緑内障、先天性(幼児)緑内障、若年性緑内障、無虹彩症、角膜内皮の障害に伴う緑内障、虹彩および毛様体の障害に伴う緑内障、水晶体の障害に伴う緑内障、網膜、脈絡膜および硝子体の障害に伴う緑内障、網膜剥離および硝子体網膜の異常に伴う緑内障、血管新生緑内障、色素性緑内障、落屑症候群、水晶体起因性開放隅角緑内障、水晶体の膨張および脱臼に伴う緑内障、角膜炎、上強膜炎および強膜炎に伴う緑内障、毛様体ブロック(悪性)緑内障、無水晶体眼および偽水晶体眼の緑内障、上皮、線維および内皮の増殖、角膜手術に伴う緑内障、ならびに硝子体網膜手術に伴う緑内障からなる群から選択される。
【００６５】
本発明のまた別の態様は、視覚系の組織における病理学的異常/変化に関連する眼疾患を治療するまたはその影響を軽減するための薬剤の調製のための、一般式(I)の化合物の使用に関する。
【００６６】
本明細書において、視覚系の組織における病理学的異常/変化に関連する眼疾患を治療するまたはその影響を軽減する方法であって、そのような治療を必要としている対象に、有効量の一般式(I)の化合物を投与するステップを含む方法も開示されている。
【００６７】
視覚系の組織における病理学的異常/変化に関連する眼疾患は、例えばニューロン分解等、視覚系の組織におけるアミロイドベータが関係する病理学的異常/変化に特に関連する。前記病理学的異常は、例えば、皮質性視覚欠損につながる視覚野;緑内障につながる前房および視神経;ベータアミロイド沈着による白内障につながる水晶体;眼アミロイドーシスにつながる硝子体;原発性網膜変性および黄斑変性、例えば加齢性黄斑変性につながる網膜;視神経ドルーゼン、視神経症および視神経炎につながる視神経;ならびに格子状ジストロフィーにつながる角膜等、目の様々な組織において発生し得る。
【００６８】
1つの好ましい実施形態において、眼疾患または状態は、緑内障、ニューロン分解、皮質性視覚欠損、ベータアミロイド沈着による白内障、眼アミロイドーシス、原発性網膜変性、黄斑変性、例えば加齢性黄斑変性、視神経ドルーゼン、視神経症、視神経炎および格子状ジストロフィーからなる群から選択される。
【００６９】
さらなる態様において、本発明は、本発明による化合物、ならびに場合により少なくとも一種のさらなる生物活性化合物ならびに/または薬学的に許容される担体および/もしくは賦形剤および/もしくは添加剤を含む混合物(医薬組成物等)に関する。さらなる生物活性物質は、アミロイドまたはアミロイド様タンパク質によって引き起こされる、またはそれらに関連する疾患および障害の投薬法において使用される公知の化合物であってよい。
【００７０】
一実施形態において、さらなる生物活性化合物は、好ましくは、ベータ遮断薬、炭酸脱水酵素阻害剤、アルファ-またはベータ-アドレナリンアゴニスト、プロスタグランジン、副交感神経作用薬(parasymphomimetic)、コリンエステラーゼ阻害剤、アセチルコリン合成、貯蔵または放出増強剤、アセチルコリンシナプス後受容体アゴニスト、N-メチル-D-アスパルテートグルタミン酸受容体アンタゴニスト、アミロイドーシスの治療において使用される化合物、酸化ストレスに対抗する化合物、抗アポトーシス化合物、金属キレート剤、ピレンゼピンおよび代謝産物等のDNA修復の阻害剤、3-アミノ-1-プロパンスルホン酸(3APS)、1,3-プロパンジスルホネート(1,3PDS)、α-セクレターゼ活性剤、β-およびγ-セクレターゼ阻害剤、神経伝達物質、β-シートブレーカー、アミロイドベータ除去/枯渇細胞成分の誘引物質、ピログルタミン酸化アミロイドベータ3〜42を包含するN末端切断型アミロイドベータの阻害剤、抗炎症性分子、またはタクリン、リバスティグミン、ドネペジルおよび/もしくはガランタミン等のコリンエステラーゼ阻害剤(ChEI)、M1アゴニスト、任意のアミロイド修飾薬および栄養補助剤を包含する他の薬物、抗体、ワクチンからなる群から選択される。
【００７１】
別の好ましい実施形態において、さらなる生物活性化合物は、チモプティック、ベトプティック、イスタロール、チモロール、トルソプト、エイゾプト、ダイアモックス、ネプタザン、ダラナイド、アルファガン、アルファガン-p、アイオピディン、キサラタン、ルミガン、トラバタンZ、レスキュラ、カルバコール、ピロカルピン、エピネフリンおよびメマンチンからなる群から選択される。
【００７２】
さらに好ましい実施形態において、さらなる生物活性化合物は、任意の機能的に同等の抗体またはその機能部分を包含する抗体、好ましくはモノクローナル抗体である。好ましくは、抗体、より好ましくはモノクローナル抗体は、任意の機能的に同等の抗体またはその機能部分を包含し得、アミロイドβと結合する抗体である。好ましくは、任意の機能的に同等の抗体またはその機能部分を包含し得る抗体、より好ましくはモノクローナル抗体は、アミロイド単量体および/または重合体可溶性アミロイドペプチドとの、例えば、Aβ単量体ペプチド1〜39、1〜40、1〜41もしくは1〜42等のβ-アミロイド単量体ペプチドおよび/または複数のAβ単量体ユニットを含む重合体可溶性β-アミロイドペプチドとのであるが、とりわけAβ1〜42単量体および/または複数のAβ1〜42単量体ユニットを含むAβ重合体可溶性アミロイドペプチドとの共インキュベーション時に、Aβ単量体の高分子重合体原線維またはフィラメントへの凝集を阻害し、加えて、アミロイド単量体ペプチド、特に、例えばAβ単量体ペプチド1〜39、1〜40、1〜41または1〜42等のβ-アミロイド単量体ペプチドであるが、とりわけAβ1〜42単量体ペプチドの凝集によって形成された事前形成の高分子重合体アミロイド原線維またはフィラメントとの共インキュベーション時に、事前形成の重合体原線維またはフィラメントを脱凝集させることができる抗体である。一実施形態において、抗体は、キメラ抗体もしくはその機能部分、またはヒト化抗体もしくはその機能部分であってよい。別の実施形態において、抗体は、ハイブリドーマ細胞株:
a) DSM ACC2752として2005年12月1日および2005年12月9日にそれぞれ寄託したFP 12H3;
b) DSM ACC2750として2005年12月1日および2005年12月9日にそれぞれ寄託したFP 12H3-C2;
c) DSM ACC2751として2005年12月1日および2005年12月9日にそれぞれ寄託したFP 12H3-G2;
d) DSM ACC2755として2005年12月8日に寄託したET 7E3;および
e) DSM ACC2756として2005年12月8日に寄託したEJ 7H3
によって生成される抗体の特徴的特性を有する抗体の群から選択されるモノクローナル抗体であってよい。
【００７３】
さらなる実施形態において、抗体は、国際出願第PCT/US2007/073504号のSEQ ID No. 2およびSEQ ID No. 4に描写されている通りの軽鎖および重鎖を呈するヒト化抗体であってよい。
【００７４】
また別の実施形態において、抗体は、国際出願第PCT/US2007/073504号のSEQ ID No. 1およびSEQ ID No. 3に描写されている通りの軽鎖可変領域および重鎖可変領域を呈するヒト化抗体であってよい。
【００７５】
さらなる実施形態において、さらなる生物活性化合物は、単一の、またはAβペプチドのN末端部分由来の反復する一続きの複数の連続的なアミノ酸残基、特に、13から15の間の一続きの連続的なアミノ酸残基からなるAβ抗原性ペプチド断片であってよい。Aβ抗原性ペプチド断片は、リポソーム中に再構成されたペプチドの各端において、特に2から4個の間の共有結合しているパルミトイル残基、より詳細には4個の残基によって修飾されたパルミトイル化Aβ1〜15ペプチド抗原等、Aβ1〜15ペプチド抗原であってよい。
【００７６】
さらなる生物活性物質または化合物は、本発明による化合物と同じもしくは同様の機序によって、または無関係の作用機序によって、または多様な関係するおよび/もしくは無関係の作用機序によって、その生物学的効果を発揮し得る。
【００７７】
本発明のすべての実施形態において、本発明の化合物および/またはさらなる生物活性化合物は、好ましくは、治療有効量で用いられる。
【００７８】
試料または患者におけるアミロイド関連疾患または状態の診断のためのデータを収集する方法であって、
(a)アミロイドタンパク質を含有することが疑われる試料または特定の身体部分もしくは身体エリアを、本発明による化合物と接触させるステップと、
(b)該化合物を該アミロイドタンパク質と結合させるステップと、
(c)該タンパク質と結合した該化合物を検出するステップと、
(d)場合により、該アミロイドタンパク質と結合している化合物の存在または非存在を、該試料または特定の身体部分もしくはエリアにおけるアミロイドタンパク質の存在または非存在と相関させるステップと
を含む方法も開示される。
【００７９】
本発明の別の実施形態は、組織および/または体液におけるアミロイド原性プラーク負荷の程度を決定する方法であって、
(a)調査中の組織および/または体液を代表する試料を準備するステップと、
(b)本発明による化合物を用い、アミロイドタンパク質の存在について該試料を試験するステップと、
(c)該アミロイドタンパク質と結合した化合物の量を決定するステップと、
(d)該組織および/または体液における該プラーク負荷を算出するステップと
を含む方法である。
【００８０】
好ましい実施形態において、ステップ(c)における決定は、アミロイドタンパク質と結合している化合物の存在または非存在が、アミロイドタンパク質の存在または非存在と相関するように行われる。
【００８１】
さらなる態様は、本発明による化合物とアミロイドタンパク質との特異的結合を、試料中またはインサイチュで検出するステップを含む、患者におけるアミロイド関連疾患または状態に対する素因を決定するためのデータを収集する方法であって、
(a)アミロイドタンパク質を含有することが疑われる試料または特定の身体部分もしくは身体エリアを、本発明による化合物と接触させ、その化合物が該アミロイドタンパク質と特異的に結合するステップと、
(b)該化合物を該アミロイドタンパク質と結合させて、化合物/タンパク質複合体を形成するステップと、
(c)該化合物/タンパク質複合体の形成を検出するステップと、
(d)場合により、該化合物/タンパク質複合体の存在または非存在を、該試料または特定の身体部分もしくはエリアにおけるアミロイドタンパク質の存在または非存在と相関させるステップと、
(e)場合により、該化合物/タンパク質複合体の量を、正常対照値と比較するステップと
を含む方法に関する。
【００８２】
本発明のまた別の態様は、抗体またはワクチン組成物による治療後の患者において微小残存病変をモニターするためのデータを収集する方法であって、
(a)アミロイドタンパク質を含有することが疑われる試料または特定の身体部分もしくは身体エリアを、本発明による化合物と接触させ、その化合物は該アミロイドタンパク質と特異的に結合するステップと、
(b)該化合物を該アミロイドタンパク質と結合させて、化合物/タンパク質複合体を形成するステップと、
(c)該化合物/タンパク質複合体の形成を検出するステップと、
(d)場合により、該化合物/タンパク質複合体の存在または非存在を、該試料または特定の身体部分もしくは身体エリアにおけるアミロイドタンパク質の存在または非存在と相関させるステップと、
(e)場合により、該化合物/タンパク質複合体の量を、正常対照値と比較するステップと
を含む方法である。
【００８３】
抗体またはワクチン組成物で治療されている患者の応答性を予測するためのデータを収集する方法であって、
(a)アミロイドタンパク質を含有することが疑われる試料または特定の身体部分もしくは身体エリアを、本発明による化合物と接触させ、その化合物は該アミロイドタンパク質と特異的に結合するステップと、
(b)該化合物を該アミロイドタンパク質と結合させて、化合物/タンパク質複合体を形成するステップと、
(c)該化合物/タンパク質複合体の形成を検出するステップと、
(d)場合により、該化合物/タンパク質複合体の存在または非存在を、該試料または特定の身体部分もしくは身体エリアにおけるアミロイドタンパク質の存在または非存在と相関させるステップと、
(e)場合により、該化合物/タンパク質複合体の量を、正常対照値と比較するステップと
を含む方法も記述される。
【００８４】
本発明のさらなる態様は、本発明による化合物を含む、アミロイド関連疾患または状態の検出および診断のための試験キットである。好ましくは、該試験キットは、1つまたは複数の本発明による化合物を収容する容器と、化合物/タンパク質複合体の存在または非存在がアミロイドタンパク質の存在または非存在と相関するように、アミロイドタンパク質と結合させて化合物/タンパク質複合体を形成する目的で該化合物を使用し、該化合物/タンパク質複合体の形成を検出するための取扱説明書とを含む。
【発明を実施するための形態】
【００８５】
定義
本願の意味内において、下記の定義が当てはまる。
【００８６】
「アルキル」は、炭素および水素原子からなる飽和有機部分を指す。適切なアルキル基の例は、1から6個の炭素原子、好ましくは1から4個の炭素原子を有し、メチル、エチル、プロピルおよびブチルを包含する。
【００８７】
「アルキレン」は、二価アルキル基を指す。「アルキル」についての上記の注釈は、この実施形態に類似的に当てはまる。
【００８８】
「シクロアルキル」は、炭素および水素原子からなる環式有機部分を指す。適切なアルキル基の例は、5から10個の炭素原子、好ましくは5または6個の炭素原子を有し、シクロペンチルおよびシクロヘキシルを包含する。
【００８９】
「ヘテロシクロアルキル」は、炭素原子の1つが、例えばN、OもしくはSから選択されるヘテロ原子、またはヘテロ原子(例えば、N、Oおよび/もしくはS)含有部分によって置き換えられた、上記で定義された通りのシクロアルキル基を指す。可能なヘテロシクロアルキル基の例は、ピロリジン、テトラヒドロフラン、ピペリジン等を包含する。
【００９０】
「アルケニル」は、少なくとも1個の二重結合を包含する炭素および水素原子からなる有機部分を指す。適切なアルケニル基の例は、2から6個の炭素原子、好ましくは2から4個の炭素原子を有し、プロペニルおよびブテニルを包含する。
【００９１】
「アルキニル(Alkinyl)」は、少なくとも1個の三重結合を包含する炭素および水素原子からなる有機部分を指す。適切なアルキニル基の例は、2から6個の炭素原子、好ましくは2から4個の炭素原子を有し、プロピニル(propinyl)およびブチニル(butinyl)を包含する。
【００９２】
「アリール」は、好ましくは5から10個の炭素原子、より好ましくは5または6個の炭素原子を有する、炭素および水素原子からなる芳香族有機部分を指す。例は、フェニル環である。
【００９３】
「ヘテロアリール」は、炭素原子の1つが、例えばN、OもしくはSから選択されるヘテロ原子、またはヘテロ原子(例えば、N、Oおよび/もしくはS)含有部分によって置き換えられた、上記で定義された通りのアリール基を指す。可能なヘテロアリール基の例は、ピリジン等を包含する。
【００９４】
「アルコキシ」は、基-O-アルキルを指す。
【００９５】
「アミノアルキレン」は、基-アルキレン-NR14R15を指す。
【００９６】
ある基が「場合により置換されている」として定義される場合、該基は、Hal、C1〜6アルキルまたはC1〜6アルコキシから選択される1個または複数の置換基を有し得る。
【００９７】
「Hal」は、F、Cl、BrおよびIを指す。好ましいHalは、FおよびCl、より好ましくはFである。
【００９８】
1個または複数の光学活性炭素を有する本発明の化合物は、ラセミ体およびラセミ混合物、ジアステレオマー混合物および個々のジアステレオマー、鏡像異性体混合物および単一の鏡像異性体、互変異性体、アトロプ異性体、ならびに回転異性体として存在し得る。異性形態はすべて本発明に包含される。オレフィン二重結合を含有する本発明において記述されている化合物は、EおよびZ幾何異性体を包含する。すべての塩形態、多形、水和物および溶媒和物も本発明に包含される。
【００９９】
「定義」の項において記されている好ましい定義は、別段の規定がない限り、以下に記述する実施形態のすべてに当てはまる。
【０１００】
発明の詳細な説明
第一の実施形態において、本発明は、一般式(I)の化合物
【０１０１】
【化２】
2013507428.tif 000003
【０１０２】
に関する。
【０１０３】
ピリジン環A、BおよびCは、独立に、非置換である、または、C1〜6-アルキレン-C(=NR13)-NHR14、C1〜6-アルキレン-C(O)-NH-CN、C1〜6-アルキレン-C(O)-NR16-C1〜6-アルキレン-NR14R15、C1〜6-アルキレン-C(O)-NR14R15、C1〜6-アルキレン-C(O)-OR13、C1〜6-アルキレン-NR16-C(=NR13)-NR14R15、C1〜6-アルキレン-NR16-C(O)-NR14R15、C1〜6-アルキレン-NR16-C(O)-OR14、C1〜6-アルキレン-NR16-C(O)-R14、C1〜6-アルキレン-NR14R15、C1〜6-アルキレン-NR16-SO2-NR14R15、C1〜6-アルキレン-NR16-SO2R14、C(=NR13)-NHR14、C(O)-NH-CN、C(O)-NR16-C1〜6-アルキレン-NR14R15、C(O)-NR16-NR14R15、C(O)-NR14R15、C(O)-OH、C(O)-OR13、C(O)-R13、CHal3、CN、Hal、NO2、NR13-C(=NR13)-NR14R15、NR16-C(O)-NR14R15、NR16-C(O)-OR14、NR16-C(O)-R14、NR14R15、NR16-SO2-NR14R15、NR16-SO2R14、O-C1〜6-アルキレン-C(O)-NR14R15、O-C(O)-NR14R15、O-C(O)-R13、OR13、S(O)t-C1〜6-アルキレン-C(O)-NR14R15、S(O)t-C(O)-OR13、S(O)tR13、SO2-NR14R15、C1〜6-アルキル、C5〜10-シクロアルキル、C5〜10-シクロアルキル-C1〜6-アルキレン、5から10員のヘテロシクロアルキル、1から6個の炭素原子を有するハロアルキル、6から10員のヘテロシクロアルキル-C1〜6-アルキレン、C2〜6-アルケニル、C2〜6-アルキニル、C5〜10-アリール、5から10員のヘテロアリール、C5〜10-アリール-C1〜6-アルキレン、5から10員のヘテロアリール-C1〜6-アルキレン、C1〜6-アルコキシ-C1〜6-アルキレンおよびアミノアルキレン{ここで、該アルキレン基は、1から6個の炭素原子を有する}からなる群から独立に選択される1個または複数の置換基によって置換されており、ここで、アルキル、シクロアルキル、シクロアルキルアルキレン、ヘテロシクロアルキレン、ヘテロシクロアルキルアルキレン、アルケニル、アルキニル、アリール、ヘテロアリール、アリールアルキレン、ヘテロアリールアルキレン、アルコキシアルキレンおよびアミノアルキレンは、場合により置換されていてよい。好ましい実施形態において、ピリジン環A、BおよびCは、独立に、非置換である、または、1もしくは2個の置換基によって置換されている。好ましい実施形態において、置換基は、C1〜6-アルキル、1から6個の炭素原子を有するハロアルキル、HalまたはOR13からなる群から独立に選択され、その上それらは、C1〜6-アルキルまたはOHからなる群から独立に選択される。最も好ましくは、ピリジン環A、BおよびCは、非置換である。
【０１０４】
L1およびL2は、式(a)または(b)を有する部分
【０１０５】
【化３】
2013507428.tif 000004
【０１０６】
[式中、L1またはL2の少なくとも一方は、式(b)を有する]から独立に選択される。これは、一般式(I)を有する化合物が、2,6-ジアミノピリジン部分を包含することを確実にする。
【０１０７】
式(a)において、R3は、C(=NOR13)-R14、C(=NR13)-NR14R15、C(O)-C(=NR13)-NR14R15、C(O)-NR14R15、C(O)-OR13、R13、S(O)tNR14R15およびS(O)tR13からなる群から選択される。好ましい実施形態において、R3はR13である。より好ましい実施形態において、R3は、水素およびC1〜6-アルキルからなる群から選択される。さらに一層好ましい実施形態において、R3は水素である。
【０１０８】
R4、R5、R6およびR7は、水素、C1〜6-アルキレン-C(=NR13)NHR14、C1〜6-アルキレン-C(O)-NH-CN、C1〜6-アルキレン-C(O)-NR16-C1〜6-アルキレン-NR14R15、C1〜6-アルキレン-C(O)-NR16-NR14R15、C1〜6-アルキレン-C(O)-NR14R15、C1〜6-アルキレン-C(O)-OR13、C1〜6-アルキレン-NR16C(=NR13)NR14R15、C1〜6-アルキレン-NR16-C(O)-NR14R15、C1〜6-アルキレン-NR16-C(O)OR14、C1〜6-アルキレン-NR16-C(O)R14、C1〜6-アルキレン-NR14R15、C1〜6-アルキレン-NR16-SO2-NR14R15、C1〜6-アルキレン-NR16-SO2-R14、C(=NR13)NHR14、C(O)-NH-CN、C(O)-NR16-C1〜6-アルキレン-NR14R15、C(O)-NR16-NR14R15、C(O)-NR14R15、C(O)-OH、C(O)-OR16、CHal3、CN、CO-NR14R15、CO-R13、Hal、NO2、NR16C(=NR13)NR14R15、NR16-C(O)-NR14R15、NR16-C(O)-OR14、NR16-C(O)-R14、NR14R15、NR16-SO2-NR14R15、NR16-SO2-R13、O-C1〜6-アルキレン-C(O)-NR14R15、O-C(O)-NR14R15、OC(O)-R13、OR13、S(O)t-C1〜6-アルキレン-C(O)-NR14R15、S(O)t-C1〜6-アルキレン-C(O)-OR13、S(O)t-C(O)-NR14R15、S(O)t-C(O)-OR13、S(O)tR13、SO2-NR14R15および SO2OR13からなる群から独立に選択される。好ましい実施形態において、R4、R5、R6およびR7は、水素およびC1〜6-アルキルからなる群から独立に選択される。さらに一層好ましい実施形態において、R4、R5、R6およびR7は、水素である。
【０１０９】
pは、1または2である。好ましい実施形態において、pは1である。
【０１１０】
式(b)において、R12は、C(=NOR13)-R14、C(=NR13)-NR14R15、C(O)-C(=NR13)-NR14R15、C(O)-NR14R15、C(O)-OR13、R13、S(O)tNR14R15およびS(O)tR13からなる群から選択される。好ましい実施形態において、R12はR13である。より好ましい実施形態において、R12は、水素およびC1〜6-アルキルからなる群から選択される。さらに一層好ましい実施形態において、R12は水素である。
【０１１１】
R8、R9、R10およびR11は、水素、C1〜6-アルキレン-C(=NR13)NHR14、C1〜6-アルキレン-C(O)-NH-CN、C1〜6-アルキレン-C(O)-NR16-C1〜6-アルキレン-NR14R15、C1〜6-アルキレン-C(O)-NR16-NR14R15、C1〜6-アルキレン-C(O)-NR14R15、C1〜6-アルキレン-C(O)-OR13、C1〜6-アルキレン-NR16C(=NR13)NR14R15、C1〜6-アルキレン-NR16-C(O)-NR14R15、C1〜6-アルキレン-NR16-C(O)OR14、C1〜6-アルキレン-NR16-C(O)R14、C1〜6-アルキレン-NR14R15、C1〜6-アルキレン-NR16-SO2-NR14R15、C1〜6-アルキレン-NR16-SO2-R14、C(=NR13)NHR14、C(O)-NH-CN、C(O)-NR16-C1〜6-アルキレン-NR14R15、C(O)-NR16-NR14R15、C(O)-NR14R15、C(O)-OH、C(O)-OR16、CHal3、CN、CO-NR14R15、CO-R13、Hal、NO2、NR16C(=NR13)NR14R15、NR16-C(O)-NR14R15、NR16-C(O)-OR14、NR16-C(O)-R14、NR14R15、NR16-SO2-NR14R15、NR16-SO2-R13、O-C1〜6-アルキレン-C(O)-NR14R15、O-C(O)-NR14R15、OC(O)-R13、OR13、S(O)t-C1〜6-アルキレン-C(O)-NR14R15、S(O)t-C1〜6-アルキレン-C(O)-OR13、S(O)t-C(O)-NR14R15、S(O)t-C(O)-OR13、S(O)tR13、SO2-NR14R15および SO2OR13からなる群から独立に選択される。好ましい実施形態において、R8、R9、R10およびR11は、水素およびC1〜6-アルキルからなる群から独立に選択される。さらに一層好ましい実施形態において、R8、R9、R10およびR11は、水素である。
【０１１２】
qは、0、1または2である。好ましい実施形態において、これらの化合物は、qが2である化合物と比較して溶解性が改善されているという理由から、qは1である。
【０１１３】
tは1または2である。
【０１１４】
R1およびR2は、水素、C1〜6-アルキル、C5〜10-シクロアルキル、C5〜10-シクロアルキル-C1〜6-アルキル、5から10員のヘテロシクロアルキル、1から6個の炭素原子を有するハロアルキル、C5〜10-ヘテロシクロアルキル-C1〜6-アルキル、C2〜6-アルキニル、C5〜10-アリール、5から10員のヘテロアリール、C5〜10-アリール-C1〜6-アルキル、5から10員のヘテロアリール-C1〜6-アルキルまたはアミノアルキル{ここで、該アルキル基は、1から6個の炭素原子を有する}からなる群から独立に選択され、ここで、アルキル、シクロアルキル、シクロアルキルアルキル、ヘテロシクロアルキル、ハロアルキル、ヘテロシクロアルキルアルキル、アルケニル、アルキニル、アリール、ヘテロアリール、アリールアルキル、ヘテロアリールアルキルおよびアミノアルキルは、場合により置換されていてよく、あるいは、R1およびR2は、それらが結合している窒素と一緒になった場合に、O、SまたはNR3から選択される1個または複数の追加のヘテロ原子を場合により含有してよい3から8員環を形成することができ、ここで、該3から8員環は、場合により置換されていてよい。好ましい実施形態において、R1およびR2は、水素、C1〜6-アルキル、C5〜10-シクロアルキルおよびC5〜10-アリールからなる群から独立に選択される。より好ましい実施形態において、R1およびR2は、水素、C1〜6-アルキルおよびフェニルからなる群から独立に選択される。最も好ましくは、R1およびR2は、水素およびC1〜6-アルキルからなる群から独立に選択される。さらに一層好ましくは、R1は水素であり、R2はメチルである。
【０１１５】
R16は、C(=NOR13)-R14、C(=NR13)-NR14R15、C(O)-C(=NR13)-NR14R15、C(O)-NR14R15、C(O)-OR13、R13、S(O)tNR14R15およびS(O)tR13からなる群から独立に選択される。好ましい実施形態において、R16はR13である。より好ましい実施形態において、R16は、水素およびC1〜6-アルキルからなる群から選択される。さらに一層好ましい実施形態において、R16は水素である。
【０１１６】
R13は、水素、C1〜6-アルキル、C5〜10-シクロアルキル、C5〜10-シクロアルキル-C1〜6-アルキル、5から10員のヘテロシクロアルキル、1から6個の炭素原子を有するハロアルキル、5から10員のヘテロシクロアルキル-C1〜6-アルキル、C2〜6-アルキニル、C5〜10-アリール、5から10員のヘテロアリール、C5〜10-アリール-C1〜6-アルキル、5から10員のヘテロアリール-C1〜6-アルキルまたはアミノアルキル{ここで、該アルキル基は、1から6個の炭素原子を有する}からなる群から独立に選択され、ここで、アルキル、シクロアルキル、シクロアルキルアルキル、ヘテロシクロアルキル、ハロアルキル、ヘテロシクロアルキルアルキル、アルケニル、アルキニル、アリール、ヘテロアリール、アリールアルキル、ヘテロアリールアルキルおよびアミノアルキルは、場合により置換されていてよい。好ましい実施形態において、R13は、水素、C1〜6-アルキルおよびC5〜10-アリールからなる群から独立に選択される。より好ましい実施形態において、R13は、水素、C1〜6-アルキルおよびフェニルから、さらに一層好ましくは、水素およびC1〜6-アルキルから独立に選択される。
【０１１７】
R14およびR15は、水素、C1〜6-アルキル、C5〜10-シクロアルキル、C5〜10-シクロアルキル-C1〜6-アルキル、5から10員のヘテロシクロアルキル、1から6個の炭素原子を有するハロアルキル、5から10員のヘテロシクロアルキル-C1〜6-アルキル、C2〜6-アルキニル、C5〜10-アリール、5から10員のヘテロアリール、C5〜10-アリール-C1〜6-アルキル、5から10員のヘテロアリール-C1〜6-アルキルまたはアミノアルキル{ここで、該アルキル基は、1から6個の炭素原子を有する}からなる群から独立に選択され、ここで、アルキル、シクロアルキル、シクロアルキルアルキル、ヘテロシクロアルキル、ハロアルキル、ヘテロシクロアルキルアルキル、アルケニル、アルキニル、アリール、ヘテロアリール、アリールアルキル、ヘテロアリールアルキルおよびアミノアルキルは、場合により置換されていてよい。好ましい実施形態において、R14およびR15は、水素、C1〜6-アルキルおよびC5〜10-アリールからなる群から独立に選択される。より好ましい実施形態において、R14およびR15は、水素、C1〜6-アルキルおよびフェニルから、さらに一層好ましくは、水素およびC1〜6-アルキルから独立に選択される。
【０１１８】
NR14R15の事例において、R14およびR15は、それらが結合している窒素と一緒になった場合に、O、SまたはNR3から選択される1個または複数の追加のヘテロ原子を場合により含有してよい3から8員環を形成することができ、ここで、該3から8員環は、場合により置換されていてよい。この実施形態において、3から8員環は、例えば、ピロリジン、ピロール、ピペリジンまたはピリジンであってよい。
【０１１９】
本発明の好ましい化合物は、
【０１２０】
【化４】
2013507428.tif 000005
【０１２１】
である。
【０１２２】
一般式(I)を有する本発明の化合物は、良好な薬学的活性および良好な溶解性を同時に有する。これは、3個のピリジン環の存在および2,6-ジアミノピリジン基礎構造による。
【０１２３】
本発明の化合物は、例えばWO 2008/061795において開示されているものと同様の、従来の方法に従って調製され得る。
【０１２４】
本発明の化合物は、スキーム1から8に示される一般的方法によって合成され得る。これらの方法は、例証的な例として記されるものであり、限定ではない。
【０１２５】
x=1または2である2個のピリジル部分を含有するアミンビルディングブロックの調製のための一般的合成スキーム
【０１２６】
【化５】
2013507428.tif 000006
【０１２７】
市販の2-ブロモ-6-メチル-ピリジンを、-78℃の適切な溶媒中のリチウムジイソプロピルアミンで処理して、対応するアニオンを生じさせた。-78℃のアニオンとジメチルホルムアミドとの反応、および反応混合物の水素化ホウ素ナトリウムでの処理により、精製後に、側鎖が伸びた1個の炭素原子を持つ、対応するヒドロキシル誘導体を生じた。適切な溶媒中のトリイソプロピルシリルクロリドでの、適切な塩基を使用する、ヒドロキシル部分の保護により、精製後に、保護されたアルコールを得た。保護されたアルコールのブロモ置換基と適当なアミンとの、バックワルドアミノ化条件(Pd-触媒、リガンド、塩基および溶媒)を用いる反応により、精製後に、カップリング生成物を得た。アミン部分のBoc保護は、出発物質を二炭酸ジ-tert-ブチルとともに加熱すること、およびその後の精製によって達成した。シリル保護基をフッ化テトラ-n-ブチルアンモニウムによって除去して、精製後に、ヒドロキシ誘導体を得た。適切な溶媒中のメチルスルホニルクロリドでの、適切な塩基を使用する、ヒドロキシル部分の活性化後、中間体メチルスルホニル誘導体を、適切な溶媒中でアジ化ナトリウムとともに加熱することにより、対応するアジド誘導体に変換した。精製により、所望のアジド誘導体を得た。シュタウディンガー反応条件を用いてアジド誘導体をトリフェニルホスフィンで処理して、対応するアミンを生じた。精製により、所望のアミンビルディングブロックを得た。
【０１２８】
C2-リンカーを持つ2個のピリジル部分を含有するアミンビルディングブロックの代替的調製のための一般的合成スキーム
【０１２９】
【化６】
2013507428.tif 000007
【０１３０】
適切な溶媒中のトリイソプロピルシリルクロリドでの、適切な塩基を使用する、市販の(6-ブロモピリジン-2-イル)メタノールのヒドロキシル部分の保護により、精製後に、保護されたアルコールを得た。保護されたアルコールのブロモ置換基と適当なアミンとの、バックワルドアミノ化条件(Pd-触媒、リガンド、塩基および溶媒)を用いる反応により、精製後に、カップリング生成物を得た。アミン部分のBoc保護は、出発物質を二炭酸ジ-tert-ブチルとともに加熱すること、およびその後の精製によって達成した。シリル保護基をフッ化テトラ-n-ブチルアンモニウムによって除去して、精製後に、ヒドロキシ誘導体を得た。適切な溶媒中のメチルスルホニルクロリドでの、適切な塩基を使用する、ヒドロキシル部分の活性化後、中間体メチルスルホニル誘導体を、適切な溶媒中でシアン化ナトリウムとともに加熱することにより、対応するニトリル誘導体に変換した。精製により、所望のニトリル誘導体を得た。適切な溶媒中のニトリル誘導体の塩化ニッケル(II)および水素化ホウ素ナトリウムでの処理、続いて精製により、所望のアミンビルディングブロックを得た。
【０１３１】
C3-リンカーを持つ2個のピリジル部分を含有するアミンビルディングブロックの調製のための一般的合成スキーム
【０１３２】
【化７】
2013507428.tif 000008
【０１３３】
市販の3-(ピリジン-2-イル)プロパン-1-オールを、フタルイミドを用いる光延反応、続いて、適切な溶媒中のヒドラジン水和物での精製した中間体の処理により、対応するアミン誘導体に変換した。精製により、C3-リンカーを持つ所望のアミンを得た。市販の2,6-ジブロモピリジンを、適切な溶媒中のアリルアルコール(allyalcohol)および9-BBNの付加生成物と、適当な溶媒混合物中の適切なPd-触媒を用いて反応させて、精製後に、所望のアルキル化生成物を得た。適切な溶媒中のトリイソプロピルシリルクロリドでの、適切な塩基を使用する、ヒドロキシル部分の保護により、精製後に、保護されたアルコールを得た。保護されたアルコールのブロモ置換基と適当なアミンとの、バックワルドアミノ化条件(Pd-触媒、リガンド、塩基および溶媒)を用いる反応により、精製後に、カップリング生成物を得た。アミン部分のBoc保護は、出発物質を二炭酸ジ-tert-ブチルとともに加熱すること、およびその後の精製によって達成した。シリル保護基をフッ化テトラ-n-ブチルアンモニウムによって除去して、精製後に、ヒドロキシ誘導体を得た。ヒドロキシ誘導体を、フタルイミドを用いる光延反応、続いて、適切な溶媒中のヒドラジン水和物での精製した中間体の処理により、対応するアミン誘導体に変換した。精製により、C3-リンカーを持つ所望のアミンビルディングブロックを得た。
【０１３４】
1個のピリジル部分を包含するアミンビルディングブロックの調製のための一般的合成スキーム
【０１３５】
【化８】
2013507428.tif 000009
【０１３６】
市販の2-アミノ-6-メチル-ピリジンを、二炭酸ジ-tert-ブチルとともに加熱して、精製後に、モノ-Boc保護誘導体を得た。Boc誘導体を、-78℃の適切な溶媒中のリチウムジイソプロピルアミンで処理して、対応するアニオンを生じさせた。-78℃のアニオンとジメチルホルムアミドとの反応、および反応混合物の水素化ホウ素ナトリウムでの処理により、精製後に、側鎖が伸びた1個の炭素原子を持つ、対応するヒドロキシル誘導体を生じた。適切な溶媒中のメチルスルホニルクロリドでの、適切な塩基を使用する、ヒドロキシル部分の活性化後、中間体メチルスルホニル誘導体を、適切な溶媒中でアジ化ナトリウムとともに加熱することにより、対応するアジド誘導体に変換した。精製により、所望のアジド誘導体を得た。アジド誘導体のモノ-Boc-アミノ置換基を、適切な溶媒中の水素化ナトリウムで処理し、続いてヨウ化メチルと反応させて、精製後に、N-メチル化アジド誘導体を得た。N-メチル化アジド誘導体を、シュタウディンガー反応条件を用いてトリフェニルホスフィンで処理して、対応するアミンを生じた。精製により、所望のアミンビルディングブロックを得た。
【０１３７】
1個のピリジル部分を含有するブロモビルディングブロックの調製のための一般的合成スキーム
【０１３８】
【化９】
2013507428.tif 000010
【０１３９】
市販の2-アミノ-6-ブロモ-ピリジンを、適当な溶媒中の、二炭酸ジ-tert-ブチル、適切な塩基および4-ジメチルアミノピリジンで処理して、精製後に、モノ-Boc誘導体を得た。適切な溶媒中の水素化ナトリウムでのモノ-Boc誘導体の処理、続いてヨウ化メチルとの反応により、精製後に、所望のブロモビルディングブロックを得た。
【０１４０】
2個のピリジル部分を含有するブロモビルディングブロックの調製のための一般的合成スキーム
【０１４１】
【化１０】
2013507428.tif 000011
【０１４２】
市販の2,6-ジブロモピリジンを、適切な溶媒中で適当なアミンおよび適切な塩基とともに加熱して、精製後に、モノ-アミノ化生成物を得た。該アミノ化生成物を二炭酸ジ-tert-ブチルとともに加熱することにより、精製後に、所望のブロモビルディングブロックを得た。
【０１４３】
x=1、2または3かつy=1または2である化合物の調製のための一般的合成スキーム
【０１４４】
【化１１】
2013507428.tif 000012
【０１４５】
バックワルド条件(Pd-触媒、リガンド、塩基、溶媒)を用いるPd-触媒アミノ化反応において、適当なアミンおよび上記からのブロモビルディングブロックを使用して、精製後に、所望のアミノ化生成物を取得した。適切な溶媒中の酸でのBoc保護基の切断により、凍結乾燥後に、所望の最終化合物を得た。
【０１４６】
本発明の化合物の調製のための一般的合成スキーム
【０１４７】
【化１２】
2013507428.tif 000013
【０１４８】
バックワルド条件(Pd-触媒、リガンド、塩基、溶媒)を用いるPd-触媒アミノ化反応において、適当なアミンおよび上記からのブロモビルディングブロックを使用して、精製後に、所望のアミノ化生成物を取得した。適切な溶媒中の酸でのBoc保護基の切断により、凍結乾燥後に、所望の最終化合物を得た。
【０１４９】
本発明の化合物を単独で投与することは可能であるが、標準的な医薬実務に従ってそれらを医薬組成物に製剤化する方が好ましい。故に、本発明は、治療有効量の式(I)の化合物を薬学的に許容される添加剤と混合して含む、医薬組成物も提供する。
【０１５０】
薬学的に許容される添加剤は、薬学分野において周知であり、例えば、Remington's Pharmaceutical Sciences、第15版、Mack Publishing Co.、New Jersey(1991)において記述されている。医薬添加剤は、意図されている投与経路および標準的な医薬実務に関連して選択され得る。添加剤は、そのレシピエントに有害でないという意味で、許容されるものでなくてはならない。
【０１５１】
本発明の医薬組成物の製剤において使用され得る薬学的に有用な添加剤は、例えば、担体、ビヒクル、賦形剤、溶媒(エタノール、イソプロパノール等の一価アルコール;およびグリコール等の多価アルコール;ならびに大豆油、ココナツ油、オリーブ油、サフラワー油、綿実油等の食用油;オレイン酸エチル、ミリスチン酸イソプロピル等の油状エステル等)、結合剤、アジュバント、可溶化剤、増粘剤、安定剤、崩壊剤、流動促進剤、滑沢剤、緩衝剤、乳化剤、湿潤剤、懸濁化剤、甘味剤、着色剤、香味剤、コーティング剤、保存剤、酸化防止剤、処理剤、薬物送達調節剤および増強剤(リン酸カルシウム、ステアリン酸マグネシウム、タルク、単糖、二糖、デンプン、ゼラチン、セルロース、メチルセルロース、カルボキシルメチルセルロースナトリウム、デキストロース、ヒドロキシプロピル-β-シクロデキストリン、ポリビニルピロリドン、低融点ワックスおよびイオン交換樹脂等)を含み得る。
【０１５２】
本発明の化合物の投与(送達)経路は、経口(例えば、錠剤、カプセル剤として、または摂取可能な溶液として)、局所、粘膜(例えば、鼻腔用スプレーまたは吸入用エアゾールとして)、経鼻、非経口(例えば、注射剤形態によって)、胃腸、髄腔内、腹腔内、筋肉内、静脈内、子宮内、眼内、皮内、頭蓋内、気管内、膣内、脳室内、脳内、皮下、点眼(硝子体内または腔内を包含する)、経皮、経直腸、口腔、硬膜外および舌下の1つまたは複数を包含するがこれらに限定されない。
【０１５３】
点眼投与において、化合物は、例えば点眼剤の形態で投与され得る。
【０１５４】
例えば、化合物は、即時、遅延、調節、持続、パルスまたは制御放出用途のために、香味剤または着色剤を含有し得る、錠剤、カプセル剤、オビュール剤、エリキシル剤、液剤または懸濁剤の形態で経口投与され得る。
【０１５５】
錠剤は、微結晶性セルロース、ラクトース、クエン酸ナトリウム、炭酸カルシウム、第二リン酸カルシウムおよびグリシン等の添加剤、デンプン(好ましくは、トウモロコシ、バレイショまたはタピオカデンプン)、グリコール酸(glycollate)デンプンナトリウム、クロスカルメロースナトリウムおよびある種の複合ケイ酸塩等の崩壊剤、ならびに、ポリビニルピロリドン、ヒドロキシプロピルメチルセルロース(HPMC)、ヒドロキシプロピルセルロース(HPC)、スクロース、ゼラチンおよびアカシア等の顆粒化結合剤を含有し得る。加えて、ステアリン酸マグネシウム、ステアリン酸、ベヘン酸グリセリルおよびタルク等の平滑剤を包含してもよい。同様の種類の固体組成物が、ゼラチンカプセルにおいて充填剤として用いられ得る。この点で好ましい添加剤は、ラクトース、デンプン、セルロース、乳糖または高分子量ポリエチレングリコールを包含する。水性懸濁剤および/またはエリキシル剤では、作用物質は、種々の甘味もしくは香味剤、着色物質または染料と、乳化および/または懸濁化剤と、ならびに水、エタノール、プロピレングリコールおよびグリセリン等の賦形剤、ならびにそれらの組合せと組み合わせられ得る。
【０１５６】
本発明の化合物が非経口で投与される場合、そのような投与の例は、化合物を、静脈内に、動脈内に、腹腔内に、鞘内に、脳室内に、尿道内に、胸骨内に、頭蓋内に、筋肉内にもしくは皮下に、および/または注入技術を使用することによって投与することの1つまたは複数を包含する。非経口投与では、化合物は、他の物質、例えば溶液を血液と等張にするために十分な塩またはグルコースを含有し得る滅菌水溶液の形態で使用されるのが最良である。水溶液は、必要に応じて適切に(好ましくは3から9までのpHに)緩衝されるべきである。滅菌条件下における適切な非経口製剤の調製は、当業者に周知の標準的な薬学的技術によって容易に遂行される。
【０１５７】
示した通り、本発明の化合物は、鼻腔内にまたは吸入によって投与され得、好都合なことに、適切な噴射剤、例えば、ジクロロジフルオロメタン、トリクロロフルオロメタン、ジクロロテトラフルオロエタン、1,1,1,2-テトラフルオロエタン(HFA 134AT)もしくは1,1,1,2,3,3,3-ヘプタフルオロプロパン(HFA 227EA)等のヒドロフルオロアルカン、二酸化炭素または他の適切なガスを使用して、ドライパウダー吸入器の形態、または加圧容器、ポンプ、スプレーもしくはネブライザーからのエアゾールスプレー提示の形態で送達される。加圧エアゾールの事例において、投薬量単位は、計算された量を送達するための弁を設けることによって決定され得る。加圧容器、ポンプ、スプレーまたはネブライザーは、例えば、滑沢剤、例えばソルビタントリオレエートを追加で含有し得る、エタノールと噴射剤との混合物を溶媒として使用して、活性化合物の溶液または懸濁液を含有し得る。吸入器または通気器において使用するためのカプセルおよびカートリッジ(例えばゼラチン製)は、本発明の化合物とラクトースまたはデンプン等の適切な粉末基剤との混合粉体を含有して製剤化され得る。
【０１５８】
代替として、本発明の化合物を、坐剤もしくはペッサリーの形態で投与してよく、または、ゲル剤、ヒドロゲル剤、ローション剤、液剤、クリーム剤、軟膏剤もしくは散布剤の形態で局所的に塗布してよい。本発明の化合物を、例えば皮膚パッチ剤の使用によって、皮膚にまたは経皮的に投与してもよい。
【０１５９】
本発明の化合物を、経肺または経直腸経路によって投与してもよい。該化合物を、眼内経路によって投与してもよい。眼科使用では、化合物は、等張性のpH調整した滅菌生理食塩水中の微粒化懸濁液として、または、好ましくは、等張性のpH調整した滅菌生理食塩水中の溶液として、塩化ベンジルアルコニウム等の保存剤と場合により組み合わせて製剤化され得る。代替として、化合物は、ワセリン等の軟膏剤に製剤化され得る。
【０１６０】
皮膚への局所的な塗布では、本発明の化合物は、例えば、下記:鉱油、流動ワセリン、白色ワセリン、プロピレングリコール、乳化ワックスおよび水の1つまたは複数との混合物に懸濁または溶解された活性化合物を含有する適切な軟膏剤として製剤化され得る。代替として、該化合物は、例えば、下記:鉱油、モノステアリン酸ソルビタン、ポリエチレングリコール、流動パラフィン、ポリソルベート60、セチルエステルワックス、セテアリルアルコール、2-オクチルドデカノール、ベンジルアルコールおよび水の1つまたは複数の混合物に懸濁または溶解された適切なローション剤またはクリーム剤として製剤化され得る。
【０１６１】
本発明の化合物は、それらの高い溶解性により、化合物が液体媒質中で送達される投与経路に特に適切である。例は、点眼剤および他の液剤である。
【０１６２】
典型的には、医師が、個々の対象に最も適切であろう実際の投薬量を決定することになる。任意の特定の個体のための特定の用量レベルおよび投薬頻度は変動し得、用いられる特定化合物の活性、その化合物の代謝安定性および作用長さ、年齢、体重、全般的健康、性別、食習慣、投与モードおよび投与時期、排泄率、薬物組合せ、特定の状態の重症度、ならびに療法を受けている個体を包含する様々な要因によって決まることになる。
【０１６３】
(体重およそ70kgの)ヒトへの投与のための、本発明による化合物の提案される用量は、単位用量当たり0.1mgから1g、好ましくは1mgから500mgの活性成分である。単位用量は、例えば、1日当たり1から4回投与され得る。該用量は、投与経路によって決まることになる。患者の年齢および体重ならびに治療される状態の重症度に応じて、投薬量を常法に従って変動させることが必要となり得ることが理解されよう。正確な用量および投与経路は、最終的に担当医または獣医の裁量によることになる。
【０１６４】
本発明の化合物を、他の治療剤と組み合わせて使用してもよい。本発明の化合物が、同じ疾患に対して活性な第二の治療剤と組み合わせて使用される場合、各化合物の用量は、該化合物が単独で使用される場合と異なっていてよい。
【０１６５】
上記で言及した組合せは、好都合には、医薬製剤の形態で使用するために提示され得る。そのような組合せの個々の成分は、別個のまたは合わせた医薬製剤中、任意の好都合な経路によって、順次にまたは同時にのいずれかで投与され得る。投与が順次である場合、本発明の化合物または第二の治療剤のいずれかが最初に投与され得る。投与が同時である場合、組合せが同じまたは異なる医薬組成物中のいずれかで投与され得る。同じ製剤中で合わせられる場合、2つの化合物は、安定であり、かつ互いにおよび製剤の他の成分と適合しなくてはならないことが理解されよう。別個に製剤化される場合、化合物は、好都合なことに、当技術分野においてそのような化合物について公知であるように、任意の好都合な製剤で提供され得る。
【０１６６】
本発明の医薬組成物は、Remington's Pharmaceutical Sciences、第15版、Mack Publishing Co.、New Jersey(1991)において記述されているように、それ自体が当業者に公知のように生成され得る。
【０１６７】
本発明の化合物で治療することができる疾患は、異常なタンパク質構造、特に異常なβ-シート構造の形成に関連し得る。本発明の状況において、異常なタンパク質構造は、タンパク質またはペプチドが、概して健康な個体において見られる三次元構造から病的状態に関連する異なる三次元構造へリフォールディングする際に生じるタンパク質構造である。同様に、異常なβシート構造は、本発明の状況において、タンパク質またはペプチドが、概して健康な個体において見られる三次元構造から病的状態に関連するβシート構造へリフォールディングする際に生じるβシート構造である。
【０１６８】
特に、一実施形態において、本発明の化合物で治療することができる疾患は、アミロイドまたはアミロイド様タンパク質に関連する疾患または状態である。
【０１６９】
この疾患および障害群は、以下のもの等、目の様々な組織を標的とするアミロイド関連眼疾患を包含する:視覚野(皮質性視覚欠損を包含する);前房および視神経(緑内障を包含する);水晶体(ベータアミロイド沈着による白内障を包含する);硝子体(眼アミロイドーシスを包含する);網膜(原発性網膜変性および黄斑変性、特に加齢性黄斑変性を包含する);視神経(視神経ドルーゼン、視神経症および視神経炎を包含する);ならびに角膜(格子状ジストロフィーを包含する)。
【０１７０】
Aβの凝集を阻害する化合物の能力は、例えば、Rzepeckiら、J. Biol. Chem.、2004、279(46)、47497〜47505において記述されている通りの蛍光相関分光法を使用して、またはチオフラビンT蛍光分光アッセイを使用することによって、決定され得る。
【０１７１】
別の実施形態において、本発明の化合物は、視覚系の組織における病理学的異常/変化に関連する、特に、例えばニューロン分解等、視覚系の組織におけるアミロイドベータが関係する病理学的異常/変化に関連する眼疾患を治療するまたはその影響を軽減するために使用され得る。前記病理学的異常は、例えば、以下のもの等、目の様々な組織において発生し得る:視覚野(皮質性視覚欠損につながる);前房および視神経(緑内障につながる);水晶体(ベータアミロイド沈着による白内障につながる);硝子体(眼アミロイドーシスにつながる);網膜(原発性網膜変性および黄斑変性、例えば加齢性黄斑変性につながる);視神経(視神経ドルーゼン、視神経症および視神経炎につながる);ならびに角膜(格子状ジストロフィーにつながる)。本発明の化合物は、緑内障を治療または予防するために特に適切であることが証明されている。
【０１７２】
本発明による化合物は、少なくとも一種のさらなる生物活性化合物ならびに/または薬学的に許容される担体および/もしくは賦形剤および/もしくは添加剤との混合物の形態で提供されてもよい。化合物および/またはさらなる生物活性化合物は、好ましくは、治療有効量で存在する。
【０１７３】
さらなる生物活性化合物の性質は、意図されている混合物の使用によって決まることになる。さらなる生物活性物質または化合物は、本発明による化合物と同じもしくは同様の機序によって、または無関係の作用機序によって、または多様な関係するおよび/もしくは無関係の作用機序によって、その生物学的効果を発揮し得る。
【０１７４】
概して、さらなる生物活性化合物は、ベータ遮断薬、炭酸脱水酵素阻害剤、アルファ-もしくはベータ-アドレナリンアゴニスト、プロスタグランジン、副交感神経作用薬(parasympahomimetics)、コリンエステラーゼ阻害剤、アセチルコリン合成、貯蔵もしくは放出増強剤、アセチルコリンシナプス後受容体アゴニスト、またはN-メチル-D-アスパルテートグルタミン酸受容体アンタゴニストを包含し得る。特に、さらなる生物活性化合物は、アミロイドーシスの治療において使用される化合物、酸化ストレスに対抗する化合物、抗アポトーシス化合物、金属キレート剤、ピレンゼピンおよび代謝産物等のDNA修復の阻害剤、3-アミノ-1-プロパンスルホン酸(3APS)、1,3-プロパンジスルホネート(1,3PDS)、α-セクレターゼ活性剤、β-およびγ-セクレターゼ阻害剤、神経伝達物質、β-シートブレーカー、アミロイドベータ除去/枯渇細胞成分の誘引物質、ピログルタミン酸化アミロイドベータ3〜42を包含するN末端切断型アミロイドベータの阻害剤、抗炎症性分子、またはタクリン、リバスティグミン、ドネペジルおよび/もしくはガランタミン等のコリンエステラーゼ阻害剤(ChEI)、M1アゴニスト、任意のアミロイド修飾薬および栄養補助剤を包含する他の薬物、任意の機能的に同等の抗体またはその機能部分を包含する抗体、単一の、またはAβペプチドのN末端部分からの反復する一続きの複数の連続的なアミノ酸残基からなるAβ抗原性ペプチド断片からなる群から選択され得る。
【０１７５】
さらなる実施形態において、本発明による混合物は、本発明による化合物、ならびに場合により、薬学的に許容される担体および/または賦形剤および/または添加剤と一緒に、メマンチンを含み得る。
【０１７６】
本発明のさらに別の実施形態において、本発明による化合物、ならびに場合により、薬学的に許容される担体および/または賦形剤および/または添加剤と一緒に、さらなる生物活性化合物として眼圧降下剤を含む混合物が提供される。
【０１７７】
1つの好ましい実施形態において、さらなる生物活性化合物は、任意の機能的に同等の抗体またはその機能部分を包含する抗体である。抗体は、好ましくは、モノクローナル、キメラまたはヒト化抗体であってよい。
【０１７８】
本発明のさらなる態様において、本発明の化合物に加えて、その機能部分を包含する抗体、または、より詳細には、その機能部分を包含するモノクローナル抗体を含み、アミロイドβ(Aβ)、特に、アミロイドβの未変性コンホメーション、すなわち、アミロイドオリゴマーおよび線維を認識しそれと結合するが、直鎖状になっていない(not linearized)アミロイド種とは結合しない混合物が提供される。
【０１７９】
特に、前記抗体は、アミロイド原性単量体ペプチドの、具体的には、例えば、Aβ単量体ペプチド1〜39、1〜40、1〜41、1〜42または1〜43等のβ-アミロイド単量体ペプチドであるが、とりわけAβ1〜42単量体ペプチドの、高分子重合体アミロイド原線維またはフィラメントへの凝集を、インビトロおよびインビボで阻害することができる。アミロイド原性単量体ペプチドの凝集の阻害を通して、これらの抗体は、アミロイドプラークの形成、特に、二次コンホメーションの変化によって不溶性になること、罹患した動物またはヒトの脳におけるアミロイドプラークの主要部分であることが知られているアミロイド形態(1〜42)の形成を予防するまたは減速させることができる。
【０１８０】
本発明の別の態様(apect)において、混合物は、アミロイド単量体ペプチド、特に、例えばAβ単量体ペプチド1〜39、1〜40、1〜41、1〜42または1〜43等のβ-アミロイド単量体ペプチドであるが、とりわけAβ1〜42単量体ペプチドの凝集によって形成された事前形成の高分子重合体アミロイド原線維またはフィラメントとの共インキュベーション時に、前記高分子重合体アミロイド原線維またはフィラメントを脱凝集させることができる抗体を含む。アミロイド原性重合体原線維またはフィラメントの脱凝集を通して、これらの抗体は、アミロイドプラークの形成を予防するまたは減速させることができ、疾患に関連する症状の軽減およびその進行の遅延または後退につながる。
【０１８１】
本発明のさらに別の態様において、混合物は、抗体であるがとりわけモノクローナル抗体またはその機能部分を含み、該抗体は、本明細書において先に定義した通りの凝集阻害特性および脱凝集特性の両方を、特に高度のコンホメーション感受性と併せて呈するという点で、二官能性または二重特異性である。
【０１８２】
一実施形態において、混合物は、コンホメーションエピトープ、特にアミロイドβペプチドのN末端部分に存在する、特にアミロイドβペプチドのN末端部分の下記のコア領域:
Val-His-His-Gln-Lys-Leu-Val-Phe-Phe-Ala-Glu-Asp-
12  13  14  15  16  17  18  19  20  21  22  23
に埋め込まれたコンホメーションエピトープを認識しそれと結合する抗体を含む。
【０１８３】
特に、アミノ酸残基12から24の間、特に残基14から23の間、より詳細にはアミノ酸残基14から20の間のβ-アミロイドタンパク質の領域に局在するエピトープは、その残基がβ-アミロイドタンパク質の結合に主に関わっており、16、17位、ならびに19および20位、ならびに14位にそれぞれ位置する3つの異なる認識および結合部位を含む。
【０１８４】
特定の実施形態において、本発明の混合物は、本発明の化合物に加えて、抗体、特に二官能性抗体であるがとりわけモノクローナル抗体、特に、任意の機能的に同等の抗体またはその機能部分を包含する二官能性モノクローナル抗体を含み、該抗体は、それぞれDSM ACC2752、DSM ACC 2750およびDSM ACC2751として2005年12月1日および2005年12月9日にそれぞれ寄託されたFP 12H3、FP 12H3-C2およびFP 12H3-G2、DSM ACC2755として2005年12月8日に寄託されたET 7E3、ならびにDSM ACC2756として2005年12月8日に寄託されたEJ 7H3からなる群から選択されるハイブリドーマ細胞株によって生成される抗体の特徴的特性を有する。
【０１８５】
より詳細には、本発明は、それぞれDSM ACC2752、DSM ACC 2750およびDSM ACC2751として2005年12月1日および2005年12月9日にそれぞれ寄託されたFP 12H3、FP 12H3-C2およびFP 12H3-G2、DSM ACC2755として2005年12月8日に寄託されたET 7E3、ならびにDSM ACC2756として2005年12月8日に寄託されたEJ 7H3からなる群から選択されるハイブリドーマ細胞株によって生成される任意の機能的に同等の抗体またはその機能部分を包含する抗体に関する。
【０１８６】
上記の抗体は、国際出願公開第WO 2007/068412号において記述されており、該出願は参照により本明細書に組み込まれる。
【０１８７】
さらなる態様において、本発明による混合物に含まれる抗体は、キメラ抗体もしくはその断片、またはヒト化抗体もしくはその断片である。これらおよび本発明による混合物内で適切に使用され得るさらなる抗体は、例えば、2007年7月13日に出願された国際出願第PCT/US2007/073504号において記述されている。
【０１８８】
抗体がヒト化抗体である場合、好ましくは、国際出願第PCT/US2007/073504号のSEQ ID No. 2およびSEQ ID No. 4に描写されている通りの軽鎖および重鎖を呈する、または国際出願第PCT/US2007/073504号のSEQ ID No. 1およびSEQ ID No. 3に描写されている通りの軽鎖可変領域および重鎖可変領域を呈する。これらの配列は、添付の配列表にも示されている。
【０１８９】
本発明のさらに別の態様において、本発明による本明細書において先に記述した通りの化合物に加えて、AβペプチドのN末端部分からのペプチド断片、特に、単一の、またはAβペプチドのN末端部分からの13から15の間の反復する一続きの連続的なアミノ酸残基からなるAβペプチド断片であるが、特に、AβペプチドのN末端部分からの残基1〜15、1〜14および1〜13、より詳細にはその機能的に同等の断片を包含する残基1〜15からなる群から選択されるアミノ酸残基からなるAβペプチド断片であるが、とりわけ、例えばリポソーム等の担体粒子/アジュバントに結合している、またはその中に組み込まれたもしくは再構成された、本明細書において先に述べた通りのAβペプチド断片を含む混合物が提供される。ペプチド断片は、ワクチン組成物に含まれていてよい。特に、ペプチド抗原は、リポソーム担体/免疫アジュバントの脂質二重層への挿入を容易にする親油性または疎水性部分によって、特に、リポソーム二重層中のペプチドのアンカーとして機能し、ペプチドをリポソーム表面にごく接近して位置させ、かつ安定化させる寸法を有する親油性または疎水性部分によって修飾される。
【０１９０】
本発明のさらなる実施形態において、親油性または疎水性部分は、脂肪酸、トリグリセリドまたはリン脂質であるが、とりわけ、脂肪酸、トリグリセリドまたはリン脂質である。特に、疎水性部分はパルミチン酸であり、加えて、リポソーム調製物は、例えば、脂質A、ミョウバン、リン酸カルシウム、インターロイキン1、ならびに/または多糖およびタンパク質のマイクロカプセル等のアジュバントであるが、特に、モノホスホリルもしくはジホスホリル脂質A等の解毒化(detoxified)脂質A、またはミョウバンを含有し得る。
【０１９１】
これらおよび本発明の混合物において適切に使用され得るさらなる組成物は、例えば、国際出願公開第WO 2007/068411号において記述されている。
【０１９２】
患者におけるアミロイド関連疾患もしくは状態の、またはアミロイド関連疾患もしくは状態に対する素因の診断は、本発明による化合物とアミロイドタンパク質との特異的結合を、試料中またはインサイチュで検出することによって達成でき、これは、アミロイド抗原を含有することが疑われる試料または特定の身体部分もしくは身体エリアを、アミロイドタンパク質と結合している本発明の化合物と接触させること、本発明の化合物を該アミロイドタンパク質と結合させて、化合物/タンパク質複合体を形成すること、該化合物/タンパク質複合体の形成を検出すること、ならびに、該化合物/タンパク質複合体の存在または非存在を、該試料または特定の身体部分もしくはエリアにおけるアミロイドタンパク質の存在または非存在と相関させること、場合により、前記化合物/タンパク質複合体の量を、正常対照値と比較することを包含し、ここで、正常対照値と比較した前記凝集体の量の増大は、前記患者がアミロイド関連疾患または状態に罹っている、またはそれを発症する危険性があることを示し得る。
【０１９３】
本発明による化合物または混合物で治療後の患者において微小残存病変をモニターすることは、本発明による化合物とアミロイドタンパク質との特異的結合を、試料中またはインサイチュで検出することによって達成でき、これは、アミロイド抗原を含有することが疑われる試料または特定の身体部分もしくはエリアを、アミロイドタンパク質と結合している本発明の化合物と接触させること、該化合物を該アミロイドタンパク質と結合させて、化合物/タンパク質複合体を形成すること、該化合物/タンパク質複合体の形成を検出すること、ならびに、該化合物/タンパク質複合体の存在または非存在を、該試料または特定の身体部分もしくはエリアにおけるアミロイドタンパク質の存在または非存在と相関させること、場合により、前記化合物/タンパク質複合体の量を、正常対照値と比較することを包含し、ここで、正常対照値と比較した前記凝集体の量の増大は、前記患者が依然として微小残存病変に罹っている可能性があることを示し得る。
【０１９４】
本発明による化合物または組成物または混合物での治療に対する患者の応答性を予測することは、本発明による化合物とアミロイドタンパク質との特異的結合を、試料中またはインサイチュで検出することによって達成でき、これは、アミロイドタンパク質を含有することが疑われる試料または特定の身体部分もしくは身体エリアを、アミロイドタンパク質と結合している本発明の化合物と接触させること、該化合物を該アミロイドタンパク質と結合させて、化合物/タンパク質複合体を形成すること、該化合物/タンパク質複合体の形成を検出すること、ならびに、該化合物/タンパク質複合体の存在または非存在を、該試料または特定の身体部分もしくはエリアにおけるアミロイドタンパク質の存在または非存在と相関させること、場合により、治療開始の前後で前記化合物/タンパク質複合体の量を比較することを包含し、ここで、前記凝集体の量の減少は、前記患者が該治療に対して応答性である可能性が高いことを示し得る。
【０１９５】
アミロイド関連疾患または状態の診断において、アミロイド関連疾患または状態に対する素因を診断するため、あるいは患者において微小残存病変をモニターするため、あるいは本発明による本明細書において先に記述した通りの化合物または組成物または混合物での治療に対する患者の応答性を予測するために使用され得る生物学的試料は、例えば、血清、血漿、唾液、胃液分泌、粘液、脳脊髄液、リンパ液等の体液、または神経、脳、心臓もしくは血管組織等の生物から取得される組織もしくは細胞試料である。試料におけるアミロイドタンパク質の存在または非存在を決定するために、例えば、検出用の二次試薬を使用する間接的検出法を利用するアッセイ、ELISA、ならびに免疫沈降および凝集アッセイ等、当業者に公知の任意のイムノアッセイ(HarlowおよびLane、Antibodies: A Laboratory Manual(Cold Spring Harbor Laboratory、New York、1988、555から612を参照)が使用され得る。これらのアッセイの詳細な説明は、例えば、MaertensおよびStuyverによるWO 96/13590、Zreinら(1998)ならびにWO 96/29605において記されている。
【０１９６】
インサイチュ診断では、本発明による本明細書において先に記述した通りの化合物または組成物または混合物は、例えば、静脈内、鼻腔内、腹腔内、脳内、動脈内注射等、本発明による化合物とアミロイド抗原との間に特異的結合が発生し得るような当技術分野において公知の方法によって、診断する生物に投与され得る。化合物/タンパク質複合体は、化合物に結合している標識によって検出され得る。
【０１９７】
診断的用途において、あるいは、アミロイド関連疾患もしくは状態に対する素因を診断するため、または患者において微小残存病変をモニターするため、または本発明による本明細書において先に記述した通りの化合物もしくは組成物もしくは混合物での治療に対する患者の応答性を予測するための用途において使用されるイムノアッセイは、典型的には、標識抗原、抗体、または検出用の二次試薬に依存する。これらのタンパク質または試薬は、酵素、放射性同位体、ならびに、コロイド金およびラテックスビーズ等の着色粒子を包含する蛍光性、発光性および発色性物質を包含する、概して当業者に公知の化合物で標識されていてよい。これらのうち、放射性標識は、ほぼ全種類のアッセイに、ほとんどの変形形態とともに使用され得る。酵素共役標識は、放射能を回避しなくてはならない場合、または迅速な結果が必要な場合に特に有用である。蛍光色素は、その使用には高価な機器を必要とするが、感受性の高い検出方法を提供する。これらのアッセイにおいて有用な抗体は、モノクローナル抗体、ポリクローナル抗体、および親和性精製したポリクローナル抗体を包含する。
【０１９８】
代替として、本発明の化合物を、タンパク質AもしくはGまたは二次抗体等、免疫グロブリンに対する親和性を有する標識物質との反応によって間接的に標識してよい。抗体を第二の物質と共役させ、抗体と共役した第二の物質に対する親和性を有する標識された第三の物質で検出してよい。例えば、抗体をビオチンと共役させ、標識アビジンまたはストレプトアビジンを使用して抗体-ビオチン共役体を検出してよい。同様に、抗体をハプテンと共役させ、標識された抗ハプテン抗体を使用して抗体-ハプテン共役体を検出してよい。
【０１９９】
当業者であれば、これらおよび本発明に従って用いられ得る他の適切な標識について知っているであろう。これらの標識と抗体またはその断片との結合は、当業者に一般に知られている標準的な技術を使用して遂行され得る。典型的な技術は、Kennedy, J. H.ら、1976(Clin. Chim. Acta 70:1〜31)およびSchurs, A. H. W. M.ら、1977(Clin. Chim Acta 81:1〜40)によって記述されている。後者で述べられているカップリング技術は、グルタルアルデヒド法、過ヨウ素酸法、ジマレイミド法等であり、それらはいずれも、参照により本明細書に組み込まれる。
【０２００】
現在のイムノアッセイは、分析物の存在を検出するために二重抗体法を利用し、ここで、抗体は、検出可能な標識で標識された二次抗体との反応性によって間接的に標識される。二次抗体は、好ましくは、モノクローナル抗体の由来源である動物の抗体と結合するものである。換言すると、モノクローナル抗体がマウス抗体であれば、標識された二次抗体は抗マウス抗体である。後述するアッセイにおいて使用されるモノクローナル抗体では、この標識は、好ましくは抗体コーティングビーズ、特に磁気ビーズである。本明細書において記述されているイムノアッセイに用いられるポリクローナル抗体では、標識は、好ましくは、放射性、蛍光性または電気化学発光性物質等の検出可能な分子である。
【０２０１】
分析物の存在の迅速決定に採用されることから高速フォーマットシステム(fast format systems)と称されることが多い代替的な二重抗体システムを、本発明の範囲内で用いてもよい。該システムは、抗体と分析物との間の高親和性を必要とする。本発明の一実施形態によれば、アミロイド抗原の存在は、それぞれがアミロイド抗原に特異的な抗体対を使用して決定される。前記抗体対の一方は、本明細書において「検出抗体」と称され、前記抗体対の他方は、本明細書において「捕捉抗体」と称される。モノクローナル抗体は、捕捉抗体または検出抗体のいずれかとして使用され得る。モノクローナル抗体を、捕捉および検出抗体の両方として、単一のアッセイにおいて一緒に使用してもよい。故に、本発明の一実施形態では、生体液の試料中のアミロイド抗原を検出するために、二重抗体サンドイッチ法を使用する。この方法において、分析物(アミロイド抗原)は検出抗体と捕捉抗体との間に挟まれ、捕捉抗体は固体支持体上に不可逆的に固定される。検出抗体は、抗体-分析物サンドイッチの存在、故に分析物の存在を同定するために、検出可能な標識を含有し得る。
【０２０２】
例示的な固相物質は、ラジオイムノアッセイおよび酵素イムノアッセイの分野において周知である、マイクロタイタープレート、ポリスチレンの試験管、磁気、プラスチックまたはガラスのビーズおよびスライドを包含するがこれらに限定されない。抗体を固相とカップリングするための方法も、当業者には周知である。ごく最近では、ナイロン、ニトロセルロース、酢酸セルロース、ガラス繊維および他の多孔質ポリマー等、複数の多孔質材料が固体支持体として用いられている。
【０２０３】
組織および/または体液(動物、特に哺乳動物であるが、とりわけ、視覚系の組織における病理学的異常/変化に関連する、特に視覚系の組織におけるアミロイドベータが関係する病理学的異常/変化に関連する眼疾患に罹っているヒトの、網膜神経節細胞層等)中のプラーク負荷は、Ding, J. -D.ら、「Targeting age-related macular degeneration with Alzheimer's disease based immunotherapies: Anti-amyloid-b antibody attenuates pathologies in an age-related macular degeneration mouse model」、Vision Research(2007)、doi:10.1016/j.visres.2007.07.025において開示されているもの等、当技術分野において公知の方法によって算出され得る。
【０２０４】
本発明による化合物は、アミロイドタンパク質を検出するための試験キットにも組み込まれ得る。試験キットは、典型的には、1つまたは複数の本発明による化合物を収容する容器と、化合物/タンパク質複合体の存在または非存在がアミロイドタンパク質の存在または非存在と相関するように、アミロイドタンパク質と結合させて化合物/タンパク質複合体を形成する目的で該化合物を使用し、化合物/タンパク質複合体の形成を検出するための取扱説明書とを含む。
用語「試験キット」は、概して、当技術分野において公知である任意の診断キットを指す。より具体的には、後者の用語は、Zreinら(1998)において記述されている通りの診断キットを指す。
【図面の簡単な説明】
【０２０５】
【図１】図1は、本願発明の化合物が神経防護作用性であることを示す結果である。
【０２０６】
(実施例)
Ab1〜42の凝集を阻害する本発明の化合物の合成およびそれらの生物学的活性アッセイを、何ら限定を意図しない下記の実施例において記述する。
【０２０７】
本発明の化合物によるAb1〜42の凝集の阻害は、当技術分野において公知である任意の適切なアッセイを使用して計測され得る。凝集の阻害を計測するための標準的なインビトロアッセイを記述する。
【０２０８】
調製実施例
すべての試薬および溶媒は、商業的供給源から入手し、さらに精製することなく使用した。プロトン(1H)スペクトルは、重水素化溶媒中、400MHz NMR分光計で記録した。質量スペクトル(MS)は、Finnigan MAT TSQ 7000分光計で記録した。クロマトグラフィーは、シリカゲル(Fluka:シリカゲル60、0.063〜0.2mm)および具体的な実施例において指示される通りの適切な溶媒を使用して実施した。薄層クロマトグラフィー(TLC)は、UV検出器付きのシリカゲルプレート上で行った。分取薄層クロマトグラフィー(分取TLC)は、0.5mmまたは1mmのシリカゲルプレート(Analtech:ユニプレート、F254)および具体的な実施例において指示される溶媒を用いて行った。
【０２０９】
調製実施例1(化合物5および化合物13):
【０２１０】
【化１３】
2013507428.tif 000014
【０２１１】
ステップA
市販の2アミノ-6-ピコリン(10.8g、100mmol)を、ジクロロメタン(100mL)中の二炭酸ジ-tert-ブチル(26.2g、120mmol)の溶液で処理した。溶媒を真空除去し、残留物を砂浴中約70℃で終夜加熱した。混合物を酢酸エチル(150mL)で希釈し、有機相を、10%クエン酸溶液(70mL)、飽和重炭酸ナトリウム(70mL)およびブライン(70mL)で洗浄した。有機相を分離し、Na2SO4で乾燥させ、濾過し、溶媒を除去した。過剰試薬を溶離するための酢酸エチル/石油エーテル(10/90)、続いて酢酸エチル/石油エーテル(20/80)を使用するシリカ上でのクロマトグラフィーによって残留物を精製して、所望の化合物を、室温で静置することによって白色固体となる無色油(19g、91%)として得た。
1H-NMR (400MHz, CDCl3): d=1.53 (s, 9H)、2.44 (s, 3H)、6.82 (d, 1H)、7.27 (br-s, 1H)、7.55 (t, 1H)、7.72 (d, 1H)
【０２１２】
ステップB
水素化ナトリウム(0.84g、35mmol)をN,N'-ジメチルホルムアミド(50mL)に懸濁させ、混合物を0℃に冷却した。0℃で、N,N'-ジメチルホルムアミド(20mL)中の上記ステップAの表題化合物(6g、28.8mmol)の溶液を5分間かけて添加した。添加が完了した後、反応混合物を、0℃で15分間、次いで室温で60分間撹拌した。次いで、ヨウ化メチル(2.39mL、38.5mmol)を一度に添加し、反応混合物を室温で終夜撹拌した。反応混合物を、酢酸エチル(150mL)および10%クエン酸溶液(150mL)で希釈した。有機相を分離し、水相を酢酸エチル(2×100mL)で抽出した。合わせた有機相を、10%クエン酸溶液(80mL)、飽和重炭酸ナトリウム(80mL)およびブライン(80mL)で洗浄した。有機相を分離し、Na2SO4で乾燥させ、濾過し、溶媒を除去した。酢酸エチル/石油エーテル(10/90)を使用するシリカ上でのクロマトグラフィーによって残留物を精製して、所望の化合物を淡黄色油(4.75g、74%)として得た。
1H-NMR (400MHz, CDCl3): d=1.53 (s, 9H)、2.48 (s, 3H)、3.38 (s, 3H)、6.87 (d, 1H)、7.40 (d, 1H)、7.52 (t, 1H)
【０２１３】
ステップC
0℃のn-ブチルリチウムの2M溶液(12mL、24mmol)を、テトラヒドロフラン(60mL)中のN,N'-ジイソプロピルアミン(4mL、28.8mmol)の撹拌溶液に添加することにより、LDAの溶液を調製した。混合物を0℃で1時間撹拌し、次いで-78℃に冷却した。-78℃で、テトラヒドロフラン(15mL)中の上記ステップBの表題化合物(2.13g、9.6mmol)の溶液を5分間かけて添加した。混合物を-78℃で45分間撹拌し、-50℃に加温させた。次いで、混合物を-78℃に冷却し、N,N'-ジメチルホルムアミド(0.76mL、10.3mmol)を添加した。-78℃で15分後、メタノール(8.4mL)および酢酸(0.59mL、12,8mmol)を添加した。次いで、水素化ホウ素ナトリウム(0.34g、9.4mmol)を-78℃で添加し、混合物を終夜撹拌し、室温に到達させた。反応混合物を酢酸エチル(80mL)で希釈し、10%クエン酸溶液(50mL)およびブライン(50mL)で洗浄した。有機相を分離し、Na2SO4で乾燥させ、濾過し、溶媒を除去した。出発物質(0.7g、35%回収率)を溶離するための酢酸エチル/石油エーテル(20/80)、続いて酢酸エチル/石油エーテル(60/40)を使用するシリカ上でのクロマトグラフィーによって残留物を精製して、表題化合物を淡橙色油(1.08g、44%)として得た。
1H-NMR (400MHz, CDCl3): d=1.56 (s, 9H)、2.98 (t, 2H)、3.37 (s, 3H)、4.05 (t, 2H)、6.88 (d, 1H)、7.53〜7.60 (m, 2H)
【０２１４】
ステップD
上記ステップCの表題化合物(1.07g、4.27mmol)をジクロロメタン(10mL)に溶解し、トリエチルアミン(1.32mL、9.4mmol)を添加した。メタンスルホニルクロリド(0.66mL、8.5mmol)の添加後、反応混合物を室温で1時間撹拌した。混合物をジクロロメタン(50mL)で希釈し、10%クエン酸溶液(20mL)、飽和重炭酸ナトリウム(20mL)およびブライン(20mL)で洗浄した。有機相を分離し、Na2SO4で乾燥させ、濾過し、溶媒を除去した。酢酸エチル/石油エーテル(50/50)を使用するシリカ上でのクロマトグラフィーによって残留物を精製して、表題化合物を淡黄色油(0.93g、65%)として得た。
1H-NMR (400MHz, CDCl3): d=1.52 (s, 9H)、2.90 (t, 3H)、3.15 (t, 3H)、3.40 (s, 3H)、4.68 (t, 2H)、6.90 (t, 1H)、7.53〜7.60 (m, 2H)
【０２１５】
ステップE
上記ステップDの表題化合物(0.93g、2.8mmol)をN,N'-ジメチルアセトアミド(10mL)に溶解し、アジ化ナトリウム(0.91g、14mmol)を添加した。混合物を砂浴中約75℃で16時間加熱した。混合物を酢酸エチル(80mL)および10%クエン酸溶液(30mL)で希釈した。有機相を分離し、飽和重炭酸ナトリウム(25mL)およびブライン(25mL)で洗浄した。有機相をNa2SO4で乾燥させ、濾過し、溶媒を除去した。酢酸エチル/石油エーテル(20/80)を使用するシリカ上でのクロマトグラフィーによって残留物を精製して、表題化合物を淡黄色油(0.69g、89%)として得た。
1H-NMR (400MHz, CDCl3): d=1.55 (s, 9H)、3.00 (t, 3H)、3.40 (s, 3H)、3.71 (t, 2H)、6.88〜6.92 (m, 1H)、7.53〜7.60 (m, 2H)
【０２１６】
ステップF
上記ステップEの表題化合物(0.69g、2.5mmol)をテトラヒドロフラン(20mL)に溶解し、トリフェニルホスフィン(0.79g、3mmol)を添加した。混合物を室温で18時間撹拌し、水(10mL)を添加した。撹拌を5時間続け、溶媒を除去した。非極性副産物を溶離するためのジクロロメタン/メタノール(95/5)、続いてメタノール(500mL当たり10mL)の7Mアンモニアを含有するジクロロメタン/メタノール(1/1)を使用するシリカ上でのクロマトグラフィーによって残留物を精製して、表題化合物を淡黄色油(0.52g、82%)として得た。
1H-NMR (400MHz, CDCl3): d=1.52 (s, 9H)、1.68 (br-s, 2H)、2.88 (t, 2H)、3.11 (t, 2H)、3.40 (s, 3H)、6.88 (d, 1H)、7.50 (d, 1H)、7.53 (t, 1H)
【０２１７】
ステップG
0℃のヘキサン中n-ブチルリチウムの1.6M溶液(51mL、81.2mmol)を、テトラヒドロフラン(60mL)中のN,N'-ジイソプロピルアミン(13.5mL、97.4mmol)の撹拌溶液に添加することにより、LDAの溶液を調製した。混合物を0℃で15分間撹拌し、次いで、テトラヒドロフラン(90mL)中の市販の2-ブロモ-6-メチル-ピリジン(5g、29.1mmol)の溶液を-78℃で添加した。混合物を-78℃で25分間撹拌し、次いでN,N'-ジメチルホルムアミド(7.9mL、107mmol)を添加した。-78℃で30分後、メタノール(80mL)および酢酸(6.1mL、132mmol)を添加した。次いで、水素化ホウ素ナトリウム(1.1g、28mmol)を-78℃で添加し、混合物を終夜撹拌し、室温に到達させた。反応混合物を酢酸エチル(150mL)で希釈し、10%クエン酸溶液(80mL)およびブライン(80mL)で洗浄した。有機相を分離し、水相を酢酸エチル(2×150mL)で抽出した。合わせた有機相をNa2SO4で乾燥させ、濾過し、溶媒を除去した。ジクロロメタン/アセトン(95/5)を使用するシリカ上でのクロマトグラフィーによって残留物を精製して、表題化合物を淡黄色油(5g、85%)として得た。
1H-NMR (400MHz, CDCl3): d=3.01 (t, 2H)、3.09 (t, 1H)、4.02 (q, 2H)、7.16 (d, 1H)、7.34 (d, 1H)、7.43 (t, 1H)
【０２１８】
ステップH
上記ステップGの表題化合物(5g、24.75mmol)をN,N'-ジメチルホルムアミド(100mL)に溶解し、イミダゾール(4.84mL、74.25mmol)を添加した。クロロトリイソプロピルシラン(7.92mL、37.1mmol)の添加後、混合物を室温で16時間撹拌した。反応混合物をジエチルエーテル(300mL)で希釈し、10%クエン酸溶液(3×40mL)およびブライン(100mL)で洗浄した。有機相を分離し、Na2SO4で乾燥させ、濾過し、溶媒を除去した。酢酸エチル/ n-ヘプタン(5/95)を使用するシリカ上でのクロマトグラフィーによって残留物を精製して、表題化合物を無色液体(7.36g、83%)として得た。
1H-NMR (400MHz, CDCl3): d=0.92〜1.13 (m, 21H)、3.00 (t, 2H)、4.08 (q, 2H)、7.22 (d, 1H)、7.33 (d, 1H)、7.45 (t, 1H)
【０２１９】
ステップI
上記ステップHの表題化合物(0.21g、0.6mmol)および上記ステップFの表題化合物(0.16g、0.63mmol)をトルエン(11mL)に溶解し、2,2-ビス-(ジフェニルホスフィノ)-1,1-ナフタレン(0.082g、0.12mmol)およびナトリウムtert-ブチレート(0.16g、1.63mmol)で処理した。次いで、反応混合物にアルゴンを吹き込んで発泡させることによって反応混合物を脱気し、続いてトリス(ジベンジリデンアセトン)ジパラジウムクロロホルム錯体(0.054g、0.06mmol)を添加した。反応槽を密閉し、混合物を砂浴中約80から85℃で45分間加熱した。反応混合物を酢酸エチル(60mL)および水(20mL)で希釈した。有機相を飽和重炭酸ナトリウム(20mL)およびブライン(20mL)で洗浄した。有機相を分離し、Na2SO4で乾燥させ、濾過し、溶媒を除去した。非極性不純物を溶離するためのジクロロメタン/アセトン(95/5)、続いて酢酸エチル/n-ヘプタン(20/80)を使用するシリカ上でのクロマトグラフィーによって残留物を精製して、表題化合物を淡黄色油(0.26g、78%)として得た。
1H-NMR (400MHz, CDCl3): d=0.92〜1.13 (m, 21H)、1.52 (s, 9H)、2.83 (t, 2H)、3.03 (t, 2H)、3.42 (s, 3H)、3.66 (q, 2H)、4.02 (t, 2H)、4.95 (br-s, 1H)、6.26 (d, 1H)、6.49 (d, 1H)、6.88 (dd, 1H)、7.31 (t, 1H)、7.54〜7.57 (m, 2H)
【０２２０】
ステップJ
上記ステップIの表題化合物(0.26g、0.53mmol)をテトラヒドロフラン(1mL)に溶解し、二炭酸ジ-tert-ブチル(0.17g、0.84mmol)を添加した。4-ジメチルアミノピリジン(0.006g、0.05mmol)の添加後、混合物を砂浴中約65℃で終夜加熱した。別バッチの二炭酸ジ-tert-ブチル(0.17g、0.84mmol)および4-ジメチルアミノピリジン(0.006g、0.05mmol)を添加し、加熱を約75℃で12時間続けた。次いで、残りの溶媒を除去し、二炭酸ジ-tert-ブチル(0.17g、0.84mmol)の添加後、約75℃での加熱を終夜続けた。過剰な二炭酸ジ-tert-ブチルを溶離するためのn-ヘプタン、続いて酢酸エチル/n-ヘプタン(10/90)を使用するシリカ上でのクロマトグラフィーによって残留物を精製して、表題化合物を無色油(0.27g、80%)として得た。
1H-NMR (400MHz, CDCl3): d=0.92〜1.13 (m, 21H)、1.47 (s, 9H)、1.52 (s, 9H)、2.97 (t, 2H)、3.09 (t, 2H)、3.38 (s, 3H)、4.06 (t, 2H)、4.31 (t, 2H)、6.83〜6.87 (m, 1H)、6.93 (d, 1H)、7.35 (d, 1H)、7.47〜7.52 (m, 3H)
【０２２１】
ステップK
上記ステップJの表題化合物(0.27g、0.428mmol)をアセトニトリル(5mL)に溶解し、テトラヒドロフラン中テトラブチルアンモニウムフルオリドの1M溶液(2.14mL、2.14mmol)を添加した。混合物を室温で週末にわたって撹拌し、溶媒を除去した。酢酸エチル/n-ヘプタン(60/40)を使用するシリカ上でのクロマトグラフィーによって残留物を精製して、表題化合物を無色油(0.19g、92%)として得た。
1H-NMR (400MHz, CDCl3): d=1.51 (s, 9H)、1.53 (s, 9H)、2.98 (t, 2H)、3.07 (t, 2H)、3.35 (s, 3H)、3.78 (br-s, 1H)、3.98〜4.04 (m, 2H)、4.28 (t, 2H)、6.86〜6.88 (m, 2H)、7.39 (d, 1H)、7.45〜7.57 (m, 3H)
【０２２２】
ステップL
上記ステップKの表題化合物(0.19g、0.396mmol)をジクロロメタン(2mL)に溶解し、トリエチルアミン(0.12mL、0.9mmol)を添加した。メタンスルホニルクロリド(0.06mL、0.8mmol)の添加後、混合物を室温で1時間撹拌した。混合物を濃縮し、酢酸エチル/n-ヘプタン(50/50)を使用するシリカ上でのクロマトグラフィーによって残留物を精製して、表題化合物を淡黄色油(0.2g、90%)として得た。
1H-NMR (400MHz, CDCl3): d=1.51 (s, 9H)、1.53 (s, 9H)、2.90 (s, 3H)、3.09 (t, 2H)、3.15 (t, 2H)、3.37 (s, 3H)、4.31 (t, 2H)、4.68 (t, 2H)、6.86 (d, 1H)、6.91 (d, 1H)、7.47〜7.59 (m, 4H)
【０２２３】
ステップM
上記ステップLの表題化合物(0.2g、0.36mmol)をN,N'-ジメチルアセトアミド(1.3mL)に溶解し、アジ化ナトリウム(0.12g、1.8mmol)を添加した。混合物を砂浴中約75℃で終夜加熱した。混合物を酢酸エチル(25mL)および10%クエン酸(10mL)で希釈した。有機相を分離し、ブライン(10mL)で洗浄し、Na2SO4で乾燥させ、濾過し、溶媒を除去した。酢酸エチル/n-ヘプタン(20/80)を使用するシリカ上でのクロマトグラフィーによって残留物を精製して、表題化合物を無色油(0.16g、92%)として得た。
1H-NMR (400MHz, CDCl3): d=1.51 (s, 9H)、1.53 (s, 9H)、3.01 (t, 2H)、3.10 (t, 2H)、3.37 (s, 3H)、3.73 (t, 2H)、4.32 (t, 2H)、6.84 (dd, 1H)、6.90 (d, 1H)、7.46〜7.55 (m, 4H)
【０２２４】
ステップN
上記ステップMの表題化合物(0.16g、0.33mmol)をテトラヒドロフラン(4mL)に溶解し、トリフェニルホスフィン(0.1g、0.39mmol)を添加した。反応混合物を室温で30時間撹拌し、次いで水(2mL)を添加した。撹拌を14時間続け、溶媒を真空除去した。ジクロロメタン/メタノール(95/5)、続いてジクロロメタン/メタノール(1/1、メタノール500mL当たり10mLの7Mアンモニアを含有)を使用するシリカ上でのクロマトグラフィーによって残留物を精製して、表題化合物を無色油(0.13g、85%)として得た。
1H-NMR (400MHz, CDCl3): d=1.51 (s, 9H)、1.53 (s, 9H)、2.90 (t, 1H)、3.08 (t, 2H)、3.14 (t, 2H)、3.37 (s, 3H)、4.32 (t, 2H)、6.85〜6.89 (m, 2H)、7.39 (d, 1H)、7.44〜7.55 (m, 3H)
【０２２５】
ステップO
上記ステップNの表題化合物(0.13g、0.28mmol)および2-ブロモピリジン(0.043g、0.27mmol)をトルエン(4.8mL)に溶解し、2,2-ビス-(ジフェニルホスフィノ)-1,1-ナフタレン(0.034g、0.059mmol)およびナトリウムtert-ブチレート(0.082g、0.853mmol)で処理した。次いで、反応混合物にアルゴンを吹き込んで発泡させることによって反応混合物を脱気し、続いてトリス(ジベンジリデンアセトン)ジパラジウムクロロホルム錯体(0.025g、0.027mmol)を添加した。反応槽を密閉し、混合物を砂浴中約80から85℃で45分間加熱した。反応混合物を酢酸エチル(30mL)および水(10mL)で希釈した。有機相を飽和重炭酸ナトリウム(10mL)およびブライン(10mL)で洗浄した。有機相を分離し、Na2SO4で乾燥させ、濾過し、溶媒を除去した。非極性不純物を溶離するためのジクロロメタン/アセトン(95/5)、続いて反応生成物の混合物を溶離するための酢酸エチル/n-ヘプタン(60/40)を使用するシリカ上でのクロマトグラフィーによって残留物を精製した。酢酸エチル/n-ヘプタン(70/30)を移動相として使用する分取TLCプレート(Analtech、0.5mm)によって低極性生成物を高極性生成物から分離して、表題化合物を得た。
低極性:(0.029g、淡黄色油、16%)
1H-NMR (400MHz, CDCl3): d=1.49 (s, 9H)、1.51 (s, 9H)、3.19 (t, 2H)、3.32 (s, 3H)、4.30 (t, 2H)、4.59 (t, 2H)、6.81〜6.88 (m, 4H)、7.07〜7.09 (m, 2H)、7.34 (d, 1H)、7.43〜7.51 (m, 5H)、8.30〜8.32 (m, 2H)
高極性:(0.035g、淡黄色油、22%)
1H-NMR (400MHz, CDCl3): d=1.50 (s, 18H)、3.03 (t, 2H)、3.10 (t, 2H)、3.32 (s, 3H)、3.68〜3.74 (m, 2H)、4.32 (t, 2H)、5.00 (br-s, 1H)、6.34 (d, 1H)、6.51〜6.56 (m, 1H)、6.82〜6.89 (m, 2H)、7.31〜7.53 (m, 5 H)、8.08 (br-s, 1H)
【０２２６】
ステップP
上記ステップOからの高極性生成物(0.035g、0.06mmol)をクロロホルム(1.1mL)に溶解し、ジエチルエーテル中塩化水素の2M溶液(1.1mL)で処理した。反応混合物を室温で終夜撹拌し、シリンジを使用して溶媒を除去した。固体材料を水(2mL)に溶解し、0.2μmのフィルターカートリッジに通して濾過した。濾液を収集し、溶媒を蒸発させて、表題化合物を橙色ガラス(0.026g、90%)として得た。
1H-NMR (400MHz, D2O): d=2.92 (s, 3H)、3.03〜3.09 (m, 4H)、3.68〜3.76 (m, 4H)、6.63 (d, 1H)、6.73 (d, 1H)、6.79〜6.87 (m, 3H)、6.92 (d, 1H)、7.68〜7.85 (m, 4H)
(MS (ESI); m/z=349.52 (MH+)
【０２２７】
ステップQ
上記ステップOからの低極性生成物(0.029g、0.046mmol)をクロロホルム(0.8mL)に溶解し、ジエチルエーテル中塩化水素の2M溶液(0.8mL)で処理した。反応混合物を室温で終夜撹拌し、シリンジを使用して溶媒を除去した。固体材料を水(2mL)に溶解し、0.2μmのフィルターカートリッジに通して濾過した。濾液を収集し、溶媒を蒸発させて、表題化合物を橙色ガラス(0.024g、97%)として得た。
1H-NMR (400MHz, D2O): d=2.91 (s, 3H)、3.00 (t, 2H)、3.21 (t, 2H)、3.63 (t, 2H)、4.49 (t, 2H)、6.60〜6.64 (m, 2H)、6.70 (d, 1H)、6.81 (d, 1H)、7.26 (t, 2H)、7.38 (d, 2H)、7.62 (t, 1H)、7.70 (t, 1H)、7.99〜8.04 (m, 2H)、8.13 (d, 2H)
MS (ESI); m/z=426.42 (MH+)
【０２２８】
調製実施例2(化合物1):
【０２２９】
【化１４】
2013507428.tif 000015
【０２３０】
ステップA
実施例1ステップHの表題化合物(0.9g、2.51mmol)および市販の2(2-アミノエチル) -ピリジン(0.34g、2.78mmol)をトルエン(45mL)に溶解し、2,2-ビス-(ジフェニルホスフィノ)-1,1-ナフタレン(0.33g、0.48mmol)およびナトリウムtert-ブチレート(0.63g、6.6mmol)で処理した。次いで、反応混合物にアルゴンを吹き込んで発泡させることによって反応混合物を脱気し、続いてトリス(ジベンジリデン-アセトン)ジパラジウム(0.22g、0.024mmol)を添加した。反応槽を密閉し、混合物を砂浴中約80から85℃で45分間加熱した。反応混合物を酢酸エチル(150mL)、水(30mL)およびブライン(30mL)で希釈した。有機相を分離し、Na2SO4で乾燥させ、濾過し、溶媒を除去した。非極性不純物を溶離するためのジクロロメタン/アセトン(95/5)、続いて酢酸エチルを使用するシリカ上でのクロマトグラフィーによって残留物を精製して、表題化合物を暗黄色油として得た。さらに3回の実行により、合計3.4g(84%)を生じた。
1H-NMR (400MHz, CDCl3): d=0.98〜1.10 (m, 21H)、2.85 (t, 2H)、3.10 (t, 2H)、3.68 (q, 2H)、4.03 (t, 2H)、4.81 (br-s, 1H)、6.24 (d, 1H)、6.50 (d, 1H)、7.13〜7.18 (m, 2H)、7.32 (t, 1H)、7.60 (t, 1H)、8.58 (d, 1H)
【０２３１】
ステップB
上記ステップAの表題化合物(1.7g、4.26mmol)をジクロロメタン(dichoromethane)(30mL)に溶解し、二炭酸ジ-tert-ブチル(4.75g、21.3mmol)を添加した。溶媒を除去し、油性残留物を砂浴中約75℃で、TLCが出発物質の消費を指示するまで18から36時間加熱した。次いで、過剰な二炭酸ジ-tert-ブチルを除去するための酢酸エチル/n-ヘプタン(10/90)、続いて酢酸エチル/n-ヘプタン(30/70)を使用するシリカ上でのクロマトグラフィーによって混合物を精製して、表題化合物を淡黄色油として得た。2回の実行により、合計3.6g(86%)を生じた。
1H-NMR (400MHz, CDCl3): d=0.98〜1.10 (m, 21H)、1.42 (s, 9H)、2.92 (t, 2H)、3.11 (t, 2H)、4.01 (t, 2H)、4.30 (t, 2H)、6.90 (d, 1H)、7.07〜7.10 (m, 1H)、7.12 (d, 1H)、7.36 (d, 1H)、7.46〜7.56 (m, 2H)、8.49 (d, 1H)
【０２３２】
ステップC
上記ステップBの表題化合物(3.9g、7.81mmol)をアセトニトリル(100mL)に溶解し、テトラヒドロフラン中テトラブチルアンモニウムフルオリドの1M溶液(30mL、30mmol)で処理した。混合物を室温で終夜撹拌し、溶媒を除去した。酢酸エチルを使用するシリカ上でのクロマトグラフィーによって残留物を精製して、表題化合物を淡黄色油(2.57g、95%)として得た。
1H-NMR (400MHz, CDCl3): d=1.49 (s, 9H)、2.98 (t, 2H)、3.11 (t, 2H)、4.04 (t, 2H)、4.30 (t, 2H)、6.85 (d, 1H)、7.06〜7.10 (m, 1H)、7.16 (d, 1H)、7.38 (d, 1H)、7.48〜7.57 (m, 2H)、8.46 (d, 1H)
【０２３３】
ステップD
上記ステップCの表題化合物(2.57g、7.49mmol)をジクロロメタン(45mL)に溶解し、トリエチルアミン(2.33mL、16.9mmol)を添加した。混合物を0℃に冷却し、メタンスルホニルクロリド(1.17mL、15mmol)を添加した。添加が完了した後、混合物を、0℃で5分間、次いで室温で1時間撹拌した。溶媒を蒸発させ、酢酸エチルを使用するシリカ上でのクロマトグラフィーによって残留物を精製して、表題化合物を淡黄色油(3.1g、98%)として得た。
1H-NMR (400MHz, CDCl3): d=1.49 (s, 9H)、2.91 (s, 3H)、3.11〜3.17 (m, 4H)、4.30 (t, 2H)、4.66 (t, 2H)、6.89 (d, 1H)、7.08〜7.11 (m, 1H)、7.15 (d, 1H)、7.46 (d, 1H)、7.53 (t, 1H)、7.56 (dt, 1H)、8.49 (d, 1H)
【０２３４】
ステップE
上記ステップDの表題化合物(1.57g、3.73mmol)をN,N'-ジメチルアセトアミド(17.5mL)に溶解し、アジ化ナトリウム(1.22g、18.6mmol)を添加した。混合物を砂浴中約75℃で終夜加熱した。混合物を酢酸エチル(150mL)および水(40mL)で希釈した。有機相を分離し、ブライン(40mL)で洗浄し、Na2SO4で乾燥させ、濾過し、溶媒を除去した。酢酸エチル/n-ヘプタン(60/40)を使用するシリカ上でのクロマトグラフィーによって残留物を精製して、表題化合物を無色油として得た。2回の実行により、合計2.4g、87%を生じた。
1H-NMR (400MHz, CDCl3): d=1.43 (s, 9H)、2.97 (t, 2H)、3.12 (t, 2H)、3.69 (t, 2H)、4.31 (t, 2H)、6.87 (d, 1H)、7.07〜7.10 (m, 1H)、7.12 (d, 1H)、7.46 (d, 1H)、7.51〜7.58 (m, 2H)、8.50 (d, 1H)
【０２３５】
ステップF
上記ステップEの表題化合物(2.4g、6.52mmol)をテトラヒドロフラン(60mL)に溶解し、トリフェニルホスフィン(2.15g、8．17mmol)を添加した。反応混合物を室温で48時間撹拌し、次いで水(30mL)を添加した。撹拌を16時間続け、溶媒を真空除去した。非極性副産物を除去するためのジクロロメタン/メタノール(95/5)、続いてジクロロメタン/メタノール(1/1、メタノール500mL当たり10mLの7Mアンモニアを含有)を使用するシリカ上でのクロマトグラフィーによって残留物を精製して、表題化合物を淡黄色油(2.1g、95%)として得た。
1H-NMR (400MHz, CDCl3): d=1.43 (s, 9H)、2.83 (t, 2H)、3.06〜3.14 (m, 4H)、4.31 (t, 2H)、6.84 (d, 1H)、7.05〜7.09 (m, 1H)、7.12 (d, 1H)、7.37 (d, 1H)、7.48 (t, 1H)、7.52 (dt, 1H)、8.47 (d, 1H)
【０２３６】
ステップG
市販の2-アミノ-6-ブロモ-ピリジン(4.25g、24.6mmol)をジクロロメタン(50mL)に溶解し、N,N'-ジイソプロピルエチルアミン(5.25mL、30.7mmol)および4-ジメチルアミノピリジン(0.15g、1.23mmol)を添加した。ジクロロメタン(15mL)中の二炭酸ジ-tert-ブチル(5.9g、27mmol)の溶液を添加後、混合物を室温で終夜撹拌した。混合物をジクロロメタン(100mL)で希釈し、10%クエン酸(50mL)およびブライン(50mL)で洗浄した。有機相を分離し、Na2SO4で乾燥させ、濾過し、溶媒を除去した。酢酸エチル/n-ヘプタン(5/95)を使用するシリカ上でのクロマトグラフィーによって残留物を精製して、表題化合物を白色固体(2.15g、32%)として得た。カラムを酢酸エチル/n-ヘプタン(10/90)で洗浄することにより、対応するビス-Boc誘導体を白色固体(1.95g、21%)として得た。
1H-NMR (400MHz, CDCl3): d=1.52 (s, 9H)、7.13 (d, 1H)、7.27 (br-s, 1H)、7.51 (t, 1H)、7.90 (d, 1H)
ビス-Boc誘導体:
1H-NMR (400MHz, CDCl3): d=1.48 (s, 18H)、7.27 (d, 1H)、7.40 (d, 1H)、7.60 (t, 1H)
【０２３７】
ステップH
水素化ナトリウム(0.18g、7．38mmol)をN,N'-ジメチルアセタミド(10mL)に懸濁させ、混合物を0℃に冷却した。0℃で、N,N'-ジメチルアセタミド(5mL)中の上記ステップGの表題化合物(1．66g、6.1mmol)の溶液を5分間かけて添加した。添加が完了した後、反応混合物を、0℃で5分間、次いで室温で60分間撹拌した。次いで、ヨウ化メチル(0.5mL、8.12mmol)を一度に添加し、反応混合物を室温で終夜撹拌した。反応混合物を、酢酸エチル(100mL)および10%クエン酸溶液(30mL)で希釈し、10%クエン酸溶液(30mL)、飽和重炭酸ナトリウム(30mL)およびブライン(30mL)で洗浄した。有機相を分離し、Na2SO4で乾燥させ、濾過し、溶媒を除去した。酢酸エチル/n-ヘプタン(5/95)を使用するシリカ上でのクロマトグラフィーによって残留物を精製して、所望の化合物を無色液体(1.54g、90%)として得た。
1H-NMR (400MHz, CDCl3): d=1.52 (s, 9H)、3.40 (s, 3H)、7.17 (d, 1H)、7.47 (t, 1H)、7.74 (d, 1H)
【０２３８】
ステップI
上記ステップFの表題化合物(0.525g、1.54mmol)および上記ステップHの表題化合物(0.423g、1.53mmol)をトルエン(24mL)に溶解し、2,2-ビス-(ジフェニルホスフィノ)-1,1-ナフタレン(0.186g、0.3mmol)およびナトリウムtert-ブチレート(0.383g、3.98mmol)で処理した。次いで、反応混合物にアルゴンを吹き込んで発泡させることによって反応混合物を脱気し、続いてトリス(ジベンジリデンアセトン)ジパラジウム(0.133g、0.15mmol)を添加した。反応槽を密閉し、混合物を砂浴中約110℃で45分間加熱した。反応混合物を酢酸エチル(100mL)、水(20mL)およびブライン(20mL)で希釈した。有機相を分離し、Na2SO4で乾燥させ、濾過し、溶媒を除去した。非極性不純物を溶離するためのジクロロメタン/アセトン(95/5)、続いて酢酸エチル/n-ヘプタン(60/40)を使用するシリカ上でのクロマトグラフィーによって残留物を精製して、所望の化合物を溶離した。4回の実行からの粗表題化合物を、酢酸エチル/n-ヘプタン(60/40)を使用するシリカ上でのクロマトグラフィーによってさらに精製して、表題化合物を淡橙色油(3g、89%)として得た。
1H-NMR (400MHz, CDCl3): d=1.50 (s, 9H)、1.52 (s, 9H)、3.02 (t, 2H)、3.18 (t, 2H)、3.32 (s, 3H)、3.70〜3.74 (m, 2H)、4.38 (t, 2H)、5.20 (br-s, 1H)、6.13 (d, 1H)、6.83〜6.88 (m, 2H)、7.06〜7.09 (m, 1H)、7.13 (d, 1H)、7.31 (t, 1H)、7.40 (d, 1H)、7.50 (t, 1H)、7.53 (dt, 1H)、8.48 (d, 1H)
【０２３９】
ステップJ
上記ステップIの表題化合物(3g、5.47mmol)をジクロロメタン(50mL)に溶解し、ジエチルエーテル中塩化水素の2M溶液(50mL)で処理した。反応混合物を室温で終夜撹拌し、シリンジを使用して溶媒を除去した。残留物を水(30mL)に溶解し、0.2μmのフィルターカートリッジに通して濾過した(カートリッジ当たり10mL)。3つのカートリッジを水(5mL)で洗浄した。合わせた濾液を収集し、凍結乾燥機を使用して溶媒を蒸発させて、表題化合物を淡橙色の泡状物(2.2g、88%)として得た。
1H-NMR (400MHz, D2O): d=2.79 (s, 3H)、3.02 (t, 2H)、3.33 (t, 2H)、3.57 (t, 2H)、3.81 (t, 2H)、5.81 (d, 1H)、5.92 (d, 1H)、6.71 (d, 1H)、6.81 (d, 1H)、7.50 (t, 1H)、7.78 (t, 1H)、7.83〜7.91 (m, 2H)、8.42 (t, 1H)、8.59 (d, 1H)
MS (ESI); m/z=349.42 (MH+)
【０２４０】
調製実施例3(化合物1の代替合成スキーム):
【０２４１】
【化１５】
2013507428.tif 000016
【０２４２】
ステップA
市販の(6-ブロモピリジン-2-イル)-メタノール(1g、5.3mmol)をN,N'-ジメチルホルムアミド(20mL)に溶解し、イミダゾール(0.97g、14.85mmol)を添加した。トリイソプロピルシリルクロリド(1.58mL、7.42mmol)の添加後、混合物を室温で週末にわたって撹拌した。混合物をジエチルエーテル(80mL)で希釈し、10%クエン酸溶液(25mL)およびブライン(25mL)で洗浄した。有機相を分離し、Na2SO4で乾燥させ、濾過し、溶媒を除去した。酢酸エチル/n-ヘプタン(5/95)を使用するシリカ上でのクロマトグラフィーによって残留物を精製した。保護されたアルコールを含有する画分を収集し、溶媒を蒸発させて、無色液体(1.7g、92%)を生じた。保護されたアルコール(0.85g、2.47mmol)および市販の2-(2-アミノエチル)-ピリジン(0.35g、2.78mmol)をトルエン(45mL)に溶解し、2,2-ビス-(ジフェニルホスフィノ)-1,1-ナフタレン(0.33g、0.48mmol)およびナトリウムtert-ブチレート(0.63g、6.625mmol)で処理した。次いで、反応混合物にアルゴンを吹き込んで発泡させることによって反応混合物を脱気し、続いてトリス(ジベンジリデンアセトン)ジパラジウム(0.22g、0.24mmol)を添加した。反応槽を密閉し、混合物を砂浴中約80から85℃で45分間加熱した。反応混合物を酢酸エチル(1000mL)、水(20mL)およびブライン(20mL)で希釈した。有機相を分離し、Na2SO4で乾燥させ、濾過し、溶媒を除去した。非極性不純物を溶離するためのジクロロメタン/アセトン(95/5)、続いて酢酸エチルを使用するシリカ上でのクロマトグラフィーによって残留物を精製して、表題化合物を褐色油として得た。2回の実行により、合計1.6g(84%)を生じた。
1H-NMR (400MHz, CDCl3): d=1.06〜1.08 (m, 18H)、1.13〜1.24 (m, 3H)、3.07 (t, 2H)、3.64〜3.69 (m, 2H)、4.72 (s, 2H)、4.81 (br-s, 1H)、6.28 (d, 1H)、6.86 (d, 1H)、7.12〜7.18 (m, 2H)、7.43 (t, 1H)、7.59 (dt, 1H)、8.56 (d, 1H)
【０２４３】
ステップB
上記ステップAの表題化合物(1.6g、4.15mmol)をジクロロメタン(30mL)に溶解し、二炭酸ジ-tert-ブチル(4.75g、21.3mmol)を添加した。溶媒を除去し、油性残留物を砂浴中約75℃で、TLCが出発物質の消費を指示するまで24時間加熱した。次いで、過剰な二炭酸ジ-tert-ブチルを除去するための酢酸エチル/n-ヘプタン(10/90)、続いて酢酸エチル/n-ヘプタン(30/70)を使用するシリカ上でのクロマトグラフィーによって混合物を精製して、表題化合物を淡黄色油(1.75g、86%)として得た。
1H-NMR (400MHz, CDCl3): d=1.06〜1.08 (m, 18H)、1.13〜1.24 (m, 3H)、1.44 (s, 9H)、3.10 (t, 2H)、4.31 (t, 2H)、4.80 (s, 2H)、7.05〜7.08 (m, 1H)、7.12 (d, 1H)、7.25〜7.33 (m, 2H)、7.53 (dt, 1H)、7.60 (t, 1H)、8.48 (d, 1H)
【０２４４】
ステップC
上記ステップBの表題化合物(1.75g、3.6mmol)をアセトニトリル(45mL)に溶解し、テトラヒドロフラン中テトラブチルアンモニウムフルオリドの1M溶液(13mL、13mmol)で処理した。混合物を室温で終夜撹拌し、溶媒を除去した。酢酸エチルを使用するシリカ上でのクロマトグラフィーによって残留物を精製して、表題化合物を淡橙色油(1.16g、97%)として得た。
1H-NMR (400MHz, CDCl3): d=1.52 (s, 9H)、3.18 (t, 2H)、4.31 (t, 2H)、4.40〜4.52 (br-s, 1H)、4.70 (s, 2H)、6.87〜6.90 (m, 1H)、7.08〜7.16 (m, 2H)、7.54〜7.62 (m, 3H)、8.55 (d, 1H)
【０２４５】
ステップD
上記ステップCの表題化合物(0.33g、1mmol)をジクロロメタン(5mL)に溶解し、トリエチルアミン(0.28mL、2mmol)を添加した。混合物を0℃に冷却し、メタンスルホニルクロリド(0.13mL、1．7mmol)を添加した。添加が完了した後、混合物を、0℃で5分間、次いで室温で1時間撹拌した。溶媒を蒸発させ、酢酸エチル/n-ヘプタン(60/40)を使用するシリカ上でのクロマトグラフィーによって残留物を精製して、表題化合物を淡黄色油(0.31g、75%)として得た。
1H-NMR (400MHz, CDCl3): d=1.46 (s, 9H)、3.07 (s, 3H)、3.11 (t, 2H)、4.33 (t, 2H)、5.22 (s, 2H)、7.07〜7.16 (m, 3H)、7.53〜7.66 (m, 3H)、8.48 (d, 1H)
【０２４６】
ステップE
上記ステップDの表題化合物(0.3g、0.75mmol)をエタノール(17.5mL)に溶解し、シアン化カリウム(0.24g、3.75mmol)を添加した。混合物を砂浴中約85℃で1時間加熱した。溶媒を除去し、残留物を酢酸エチル(30mL)および水(5mL)で溶解した。有機相を分離し、ブライン(5mL)で洗浄し、Na2SO4で乾燥させ、濾過し、溶媒を除去した。酢酸エチル/n-ヘプタン(60/40)を使用するシリカ上でのクロマトグラフィーによって残留物を精製して、表題化合物を淡黄色油(0.118g、46%)として得た。
1H-NMR (400MHz, CDCl3): d=1.47 (s, 9H)、3.17 (t, 2H)、3.83 (s, 2H)、4.34 (t, 2H)、7.04〜7.11 (m, 2H)、7.18 (d, 1H)、7.56 (dt, 1H)、7.60〜7.63 (m, 2H)、8.49 (d, 1H)
【０２４７】
ステップF
上記ステップEの表題化合物(0.118g、0.35mmol)を乾燥エタノール(1.2mL)に溶解し、塩化ニッケル(II)を添加した(0.045g、0.35mmol)。反応混合物に、水素化ホウ素ナトリウム(0.04g、1.05mmol)を小分けにして添加した(発熱性)。添加が完了した後、黒色反応混合物を室温で、すべての出発物質が消費されるまで2時間撹拌した。黒色反応混合物をセライトのパッドに通して濾過し、パッドをエタノール(25mL)で洗浄した。淡黄色の濾液を蒸発させ、非極性副産物を除去するためのジクロロメタン/メタノール(9/1)、続いてジクロロメタン/メタノール(1/1、メタノール500mL当たり10mLの7Mアンモニアを含有)を使用するシリカ上でのクロマトグラフィーによって残留物を精製して、表題化合物を黄色油(0.084g、70%)として得た。
1H-NMR (400MHz, CDCl3): d=1.51 (s, 9H)、3.03 (t, 2H)、3.16 (t, 2H)、3.30 (t, 2H)、3.12〜3.48 (br-s, 2H)、4.32 (t, 2H)、6.88 (d, 1H)、7.07〜7.12 (m, 1H)、7.17 (d, 1H)、7.42 (d, 1H)、7.53 (t, 1H)、7.58 (dt, 1H)、8.57 (d, 1H)
MS (ESI); m/z=342.98 (MH+)
【０２４８】
ステップG
上記ステップFの表題化合物(0.084g、0.245mmol)および調製実施例2ステップIの表題化合物(0.068g、0.245mmol)をトルエン(4mL)に溶解し、2,2-ビス-(ジフェニルホスフィノ)-1,1-ナフタレン(0.03g、0.048mmol)およびナトリウムtert-ブチレート(0.062g、0.64mmol)で処理した。次いで、反応混合物にアルゴンを吹き込んで発泡させることによって反応混合物を脱気し、続いてトリス(ジベンジリデンアセトン)ジパラジウム(0.021g、0.024mmol)を添加した。反応槽を密閉し、混合物を砂浴中約110℃で45分間加熱した。反応混合物を酢酸エチル(30mL)、水(5mL)およびブライン(5mL)で希釈した。有機相を分離し、Na2SO4で乾燥させ、濾過し、溶媒を除去した。非極性不純物を溶離するためのジクロロメタン/アセトン(95/5)、続いて所望の化合物を溶離するための酢酸エチルを使用するシリカ上でのクロマトグラフィーによって残留物を精製した。酢酸エチル/n-ヘプタン(60/40)を使用するPREP-TLCによって粗表題化合物をさらに精製して、表題化合物を淡黄色油(0.04g、29%)として得た。
1H-NMR (400MHz, CDCl3): d=1.48 (s, 9H)、1.50 (s, 9H)、3.02 (t, 2H)、3.16 (t, 2H)、3.31 (s, 3H)、3.70 (t, 2H)、4.38 (t, 2H)、5.17〜5.27 (br-s, 1H)、6.11 (d, 1H)、6.81〜6.86 (m, 2H)、7.06〜7.09 (m, 1H)、7.13 (d, 1H)、7.29 (t, 1H)、7.38 (d, 1H)、7.48 (t, 1H)、7.52 (dt, 1H)、8.48 (d, 1H)
【０２４９】
ステップH
上記ステップGの表題化合物(0．075g、0.137mmol)をジクロロメタン(2mL)に溶解し、ジエチルエーテル中塩化水素の2M溶液(2mL)で処理した。反応混合物を室温で終夜撹拌し、シリンジを使用して溶媒を除去した。残留物を水(5mL)に溶解し、0.2μmのフィルターカートリッジに通して濾過した。濾液を収集し、凍結乾燥機を使用して溶媒を蒸発させて、表題化合物を淡橙色の泡状物(0.045g、72%)として得た。
1H-NMR (400MHz, D2O): d=2.79 (s, 3H)、3.02 (t, 2H)、3.33 (t, 2H)、3.57 (t, 2H)、3.81 (t, 2H)、5.81 (d, 1H)、5.92 (d, 1H)、6.71 (d, 1H)、6.81 (d, 1H)、7.50 (t, 1H)、7.78 (t, 1H)、7.83〜7.91 (m, 2H)、8.42 (t, 1H)、8.59 (d, 1H)
MS (ESI); m/z=349.42 (MH+)
【０２５０】
調製実施例4(化合物2):
【０２５１】
【化１６】
2013507428.tif 000017
【０２５２】
ステップA
実施例1ステップHの表題化合物(0.35g、0.95mmol)および市販の2-アミノメチル-ピリジン(0.108g、1mmol)をトルエン(17mL)に溶解し、2,2-ビス-(ジフェニルホスフィノ)-1,1-ナフタレン(0.13g、0.19mmol)およびナトリウムtert-ブチレート(0.245g、2.58mmol)で処理した。次いで、反応混合物にアルゴンを吹き込んで発泡させることによって反応混合物を脱気し、続いてトリス(ジベンジリデンアセトン)ジパラジウムクロロホルム錯体(0.086g、0.095mmol)を添加した。反応槽を密閉し、混合物を砂浴中約80から85℃で45分間加熱した。反応混合物を酢酸エチル(40mL)、水(10mL)およびブライン(10mL)で希釈した。有機相を分離し、Na2SO4で乾燥させ、濾過し、溶媒を除去した。非極性不純物を溶離するためのジクロロメタン/アセトン(95/5)、続いて生成物を溶離するための酢酸エチルを使用するシリカ上でのクロマトグラフィーによって残留物を精製した。酢酸エチル/n-ヘプタン(80/20)を使用するシリカ上でのクロマトグラフィーによって粗材料を再度精製して、表題化合物を淡橙色油(0.28g、75%)として得た。
1H-NMR (400MHz, CDCl3): d=0.98〜1.10 (m, 21H)、2.88 (t, 2H)、4.02 (t, 2H)、4.65 (d, 2H)、5.51 (br-s, 1H)、6.28 (d, 1H)、6.53 (d, 1H)、7.16〜7.20 (m, 1H)、7.30〜7.38 (m, 2H)、7.63 (dt, 1H)、8.58 (d, 1H)
【０２５３】
ステップB
上記ステップAの表題化合物(0.28g、0.73mmolをジクロロメタン(5mL)に溶解し、二炭酸ジ-tert-ブチル(0.8g、3.65mmol)を添加した。溶媒を除去し、油性残留物を砂浴中約75℃で3日間加熱した。次いで、過剰な二炭酸ジ-tert-ブチルを除去するための酢酸エチル/n-ヘプタン(10/90)、続いて酢酸エチル/n-ヘプタン(30/70)を使用するシリカ上でのクロマトグラフィーによって混合物を精製して、表題化合物を淡黄色油(0.32g、91%)として得た。
1H-NMR (400MHz, CDCl3): d=0.85〜1.10 (m, 21H)、1.38 (s, 9H)、2.88 (t, 2H)、3.90 (t, 2H)、5.31 (s, 2H)、6.91 (d, 1H)、7.12〜7.17 (m, 1H)、7.28 (d, 1H)、7.54〜7.62 (m, 2H)、7.67 (d, 1H)、8.54 (d, 1H)
【０２５４】
ステップC
上記ステップBの表題化合物(0.32g、0.66mmol)をアセトニトリル(8mL)に溶解し、テトラヒドロフラン中テトラブチルアンモニウムフルオリドの1M溶液(3．3mL、3．3mmol)で処理した。混合物を室温で終夜撹拌し、溶媒を除去した。酢酸エチルを使用するシリカ上でのクロマトグラフィーによって残留物を精製して、表題化合物を淡橙色油(0.18g、84%)として得た。
1H-NMR (400MHz, CDCl3): d=1.42 (s, 9H)、2.91 (t, 2H)、3.69 (br-s, 1H)、3.88 (t, 2H)、5.27 (s, 2H)、6.88 (d, 1H)、7.15〜7.20 (m, 1H)、7.30 (d, 1H)、7.59 (t, 1H)、7.63〜7.67 (m, 2H)、8.54 (d, 1H)
【０２５５】
ステップD
上記ステップCの表題化合物(0.18g、0.56mmol)をジクロロメタン(3mL)に溶解し、トリエチルアミン(0.17mL、1,26mmol)を添加した。混合物を0℃に冷却し、メタンスルホニルクロリド(0.09mL、1.12mmol)を添加した。次いで、反応混合物を室温で1時間撹拌した。次いで、酢酸エチルで平衡化したシリカカラムに混合物を載せた。カラムを酢酸エチルで展開して、表題化合物を淡黄色油(0.22g、96%)として得た。
1H-NMR (400MHz, CDCl3): d=1.42 (s, 9H)、2.82 (s, 3H)、3.07 (t, 2H)、4.43 (t, 2H)、5.30 (s, 2H)、6.91 (d, 1H)、7.18〜7.23 (m, 1H)、7.29 (d, 1H)、7.61 (t, 1H)、7.69 (dt, 1H)、7.78 (d, 1H)、8.57 (d, 1H)
【０２５６】
ステップE
上記ステップDの表題化合物(0.22g、0.54mmol)をN,N'-ジメチルアセトアミド(2.1mL)に溶解し、アジ化ナトリウム(0.18g、2.7mmol)を添加した。混合物を砂浴中約75℃で終夜加熱した。混合物を酢酸エチル(25mL)および水(10mL)で希釈した。有機相を分離し、ブライン(10mL)で洗浄し、Na2SO4で乾燥させ、濾過し、溶媒を除去した。酢酸エチル/n-ヘプタン(60/40)を使用するシリカ上でのクロマトグラフィーによって残留物を精製して、表題化合物を無色油(0.15g、78%)として得た。
1H-NMR (400MHz, CDCl3): d=1.42 (s, 9H)、2.88 (t, 2H)、3.49 (t, 2H)、5.30 (s, 2H)、6.90 (d, 1H)、7.13〜7.18 (m, 1H)、7.22 (d, 1H)、7.59〜7.66 (m, 2H)、7.77 (d, 1H)、8.55 (d, 1H)
【０２５７】
ステップF
上記ステップEの表題化合物(0.15g、0.41mmol)をテトラヒドロフラン(4mL)に溶解し、トリフェニルホスフィン(0.13g、0．5mmol)を添加した。反応混合物を室温で24時間撹拌し、次いで水(2mL)を添加した。撹拌を週末にわたって続け、溶媒を真空除去した。ジクロロメタン/メタノール(95/5)、続いてジクロロメタン/メタノール(1/1、メタノール500mL当たり10mLの7Mアンモニアを含有)を使用するシリカ上でのクロマトグラフィーによって残留物を精製して、表題化合物を無色油(0.135g、98%)として得た。
1H-NMR (400MHz, CDCl3): d=1.42 (s, 9H)、2.79 (t, 2H)、2.94 (t, 2H)、5.30 (s, 2H)、6.88 (d, 1H)、7.12〜7.16 (m, 1H)、7.26 (d, 1H)、7.58 (t, 1H)、7.61 (dt, 1H)、7.70 (d, 1H)、8.54 (d, 1H)
【０２５８】
ステップG
上記調製ステップFの表題化合物(0.135g、0.41mmol)および調製実施例2ステップHの表題化合物(0.085g、0.4mmol)をトルエン(7．2mL)に溶解し、2,2-ビス-(ジフェニルホスフィノ)-1,1-ナフタレン(0.05g、0.08mmol)およびナトリウムtert-ブチレート(0.125g、1.25mmol)で処理した。次いで、反応混合物にアルゴンを吹き込んで発泡させることによって反応混合物を脱気し、続いてトリス(ジベンジリデンアセトン)ジパラジウムクロロホルム錯体(0.037g、0.04mmol)を添加した。反応槽を密閉し、混合物を砂浴中約110℃で45分間加熱した。反応混合物を酢酸エチル(40mL)、飽和重炭酸ナトリウム(10mL)およびブライン(10mL)で希釈した。有機相を分離し、Na2SO4で乾燥させ、濾過し、溶媒を除去した。低極性副産物を溶離するためのジクロロメタン/メタノール(95/5)、続いてTLC(ジクロロメタン/メタノール(9/1))によって判断された通りの2化合物の混合物を溶離するためのジクロロメタン/メタノール(9/1)を使用するシリカ上でのクロマトグラフィーによって残留物を精製した。溶媒を除去し、粗混合物(合わせて87mg、46%)を次のステップに直接使用した。
【０２５９】
ステップE
上記ステップBの表題化合物(0.06g、0.183mmol)および上記ステップDの表題化合物(0.048g、0.167mmol)をトルエン(3mL)に溶解し、2,2-ビス-(ジフェニルホスフィノ)-1,1-ナフタレン(0.021g、0.034mmol)およびナトリウムtert-ブチレート(0.049g、0.51mmol)で処理した。次いで、反応混合物にアルゴンを吹き込んで発泡させることによって反応混合物を脱気し、続いてトリス(ジベンジリデンアセトン)ジパラジウムクロロホルム錯体(0.015g、0.0167mmol)を添加した。反応槽を密閉し、混合物を砂浴中約110℃で45分間加熱した。反応混合物を酢酸エチル(20mL)、水(5mL)およびブライン(5mL)で希釈した。有機相を分離し、Na2SO4で乾燥させ、濾過し、溶媒を除去した。非極性不純物を溶離するためのジクロロメタン/アセトン(95/5)、続いて酢酸エチル/n-ヘプタン(70/30)を使用するシリカ上でのクロマトグラフィーによって残留物を精製して、所望の化合物を溶離した。残りの不純物を除去するために、ジクロロメタン/メタノール(95/5)を移動相として使用する分取TLC(Analtech、0.5mm)によって粗生成物をさらに精製して、表題化合物を暗黄色油(0.023g、25%)として得た。
1H-NMR (400MHz, CDCl3): d=1.40 (s, 9H)、1.50 (s, 9H)、2.92 (t, 2H)、3.30 (s, 3H)、3.50〜3.54 (m, 2H)、4.69 (br-s, 1H)、5.31 (s, 2H)、5.92 (d, 1H)、6.82〜6.88 (m, 2H)、7.11〜7.14 (m, 1H)、7.27〜7.30 (m, 2H)、7.55〜7.62 (m, 2H)、7.70 (d, 1H)、8.53 (d, 1H)
【０２６０】
ステップF
上記ステップEの表題化合物(0.023g、0.04mmol)をクロロホルム(0.8mL)に溶解し、ジエチルエーテル中塩化水素の2M溶液(0.8mL)で処理した。反応混合物を室温で終夜撹拌し、シリンジを使用して溶媒を除去した。固体材料を水(2mL)に溶解し、0.2μmのフィルターカートリッジに通して濾過した。濾液を収集し、溶媒を蒸発させて、表題化合物を暗橙色ガラス(0.016g、84%)として得た。
1H-NMR (400MHz, D2O): d=2.79 (s, 3H)、3.07 (t, 2H)、3.58 (t, 2H)、5.00 (s, 2H)、5.81 (d, 1H)、5.92 (d, 1H)、6.82 (d, 1H)、6.89 (d, 1H)、7.51 (t, 1H)、7.83〜7.91 (m, 3H)、8.43 (t, 1H)、8.63 (d, 1H)
MS (ESI); m/z=335.44 (MH+)
【０２６１】
調製実施例5(化合物6):
【０２６２】
【化１７】
2013507428.tif 000018
【０２６３】
ステップA
市販の2-(2-アミノエチル)-ピリジン-2-イル(0.037g、0.3mmol)および調製実施例2ステップHの表題化合物(0.072g、0.25mmol)をトルエン(4．5mL)に溶解し、2,2-ビス-(ジフェニルホスフィノ)-1,1-ナフタレン(0.031g、0.05mmol)およびナトリウムtert-ブチレート(0.075g、0.78mmol)で処理した。次いで、反応混合物にアルゴンを吹き込んで発泡させることによって反応混合物を脱気し、続いてトリス(ジベンジリデンアセトン)ジパラジウムクロロホルム錯体(0.023g、0.025mmol)を添加した。反応槽を密閉し、混合物を砂浴中約110℃で45分間加熱した。反応混合物を酢酸エチル(20mL)、水(5mL)およびブライン(5mL)で希釈した。有機相を分離し、Na2SO4で乾燥させ、濾過し、溶媒を除去した。非極性不純物を溶離するためのジクロロメタン/アセトン(95/5)、続いて酢酸エチル/n-ヘプタン(80/20)を使用するシリカ上でのクロマトグラフィーによって残留物を精製して、所望の化合物を溶離した。残りの不純物を除去するために、酢酸エチル/n-ヘプタン(80/20)を使用するシリカ上でのクロマトグラフィーによって粗生成物をさらに精製して、表題化合物を淡黄色油(0.07g、85%)として得た。
1H-NMR (400MHz, CDCl3): d=1.51 (s, 9H)、3.14 (t, 2H)、3.36 (s, 3H)、3.66〜3.76 (m, 2H)、4.81 (br-s, 1H)、6.11 (d, 1H)、6.88 (d, 1H)、7.13〜7.19 (m, 2H)、7.36 (t, 1H)、7.61 (dt, 1H)、8.56 (d, 1H)
【０２６４】
ステップB
上記ステップAの表題化合物(0.062g、0.189mmol)をクロロホルム(2.75mL)に溶解し、ジエチルエーテル中塩化水素の2M溶液(2.75mL)で処理した。反応混合物を室温で終夜撹拌し、シリンジを使用して溶媒を除去した。固体材料を水(5mL)に溶解し、0.2μmのフィルターカートリッジに通して濾過した。濾液を収集し、溶媒を蒸発させて、表題化合物を暗橙色ガラス(0.047g、84%)として得た。
1H-NMR (400MHz, D2O): d=2.78 (s, 3H)、3.28 (t, 2H)、3.67 (t, 2H)、5.80 (d, 1H)、5.91 (d, 1H)、7.50 (t, 1H)、7.82 (t, 1H)、7.86 (d, 1H)、8.40 (t, 1H)、8.56 (d, 1H)
MS (ESI); m/z=229.30 (MH+)
【０２６５】
調製実施例6(化合物7):
【０２６６】
【化１８】
2013507428.tif 000019
【０２６７】
ステップA
実施例1ステップFの表題化合物(0.075g、0.3mmol)および実施例2ステップHの表題化合物(0.072g、0．25mmol)をトルエン(4．5mL)に溶解し、2,2-ビス-(ジフェニルホスフィノ)-1,1-ナフタレン(0.031g、0.05mmol)およびナトリウムtert-ブチレート(0.075g、0.78mmol)で処理した。次いで、反応混合物にアルゴンを吹き込んで発泡させることによって反応混合物を脱気し、続いてトリス(ジベンジリデンアセトン)ジパラジウムクロロホルム錯体(0.023g、0.025mmol)を添加した。反応槽を密閉し、混合物を砂浴中約110℃で45分間加熱した。反応混合物を酢酸エチル(20mL)、水(5mL)およびブライン(5mL)で希釈した。有機相を分離し、Na2SO4で乾燥させ、濾過し、溶媒を除去した。非極性不純物を所望の化合物(0.098g)と一緒に溶離するためのジクロロメタン/アセトン(95/5)を使用するシリカ上でのクロマトグラフィーによって残留物を精製した。酢酸エチル/n-ヘプタン(30/70)を使用するシリカ上でのクロマトグラフィーによって生成物をさらに精製して、表題化合物を淡黄色油(0.09g、78%)として得た。
1H-NMR (400MHz, CDCl3): d=1.51 (s, 9H)、1.54 (s, 9H)、3.04 (t, 2H)、3.33 (s, 3H)、3.44 (s, 3H)、3.64〜3.70 (m, 2H)、5.02 (br-s, 1H)、6.12 (d, 1H)、6.86〜6.90 (m, 2H)、7.37 (t, 1H)、7.53〜7.57 (m, 2H)
【０２６８】
ステップB
上記ステップAの表題化合物(0.09g、0.196mmol)をクロロホルム(2.9mL)に溶解し、ジエチルエーテル中塩化水素の2M溶液(2.9mL)で処理した。反応混合物を室温で終夜撹拌し、シリンジを使用して溶媒を除去した。固体材料を水(5mL)に溶解し、0.2μmのフィルターカートリッジに通して濾過した。濾液を収集し、溶媒を蒸発させて、表題化合物を暗橙色ガラス(0.057g、80%)として得た。
1H-NMR (400MHz, D2O): d=2.78 (s, 3H)、2.89 (s, 3H)、2.98 (t, 2H)、3.57 (t, 2H)、5.80 (d, 1H)、5.90 (d, 1H)、6.63 (d, 1H)、6.77 (d, 1H)、7.50 (t, 1H)、7.68 (t, 1H)
MS (ESI); m/z=258.28 (MH+)
【０２６９】
調製実施例7(化合物4):
【０２７０】
【化１９】
2013507428.tif 000020
【０２７１】
ステップA
トリフェニルホスフィン(3.8g、14.4mmol)およびフタルイミド(1.08g、7.4mmol)をテトラヒドロフラン(20mL)に溶解し、混合物を0℃に冷却した。0℃で、テトラヒドロフラン(10mL)中の市販の2-ピリジン-1-プロパノール(1g、7.4mmol)の混合物およびトルエン中アゾジカルボン酸ジエチルの40%溶液(6mL、14.4mmol)を5分間かけて添加した。混合物を終夜撹拌し、室温に到達させた。溶媒を除去し、酢酸エチル/n-ヘプタン(60/40)を使用するシリカ上でのクロマトグラフィーによって残留物を精製して、表題化合物を赤色油(1.9g、98%)として得た。
1H-NMR (400MHz, CDCl3): d=2.13〜2.21 (m, 2H)、2.87 (t, 2H)、3.80 (t, 2H)、7.07〜7.11 (m, 1H)、7.20 (d, 1H)、7.58 (dt, 1H)、7.69〜7.72 (m, 2H)、7.83〜7.86 (m, 2H)、8.50 (d, 1H)
【０２７２】
ステップB
上記ステップAの表題化合物(1.9g、7mmol)をメタノール(50mL)に溶解し、水中ヒドラジンの50%溶液(1.4mL、14mmol)で処理した。混合物を室温で終夜撹拌し、溶媒を除去した。固体をジクロロメタン(100mL)で処理し、5分間音波破砕してスラリーを取得し、これを室温で30分間撹拌した。混合物を濾過し、沈殿物を30mLのジクロロメタンで洗浄した。濾液を濃縮し、有色不純物を溶離するためのジクロロメタン/メタノール(9/1)、続いてメタノール500mL当たり10mLの7Mアンモニアを含有するジクロロメタン/メタノール(1:1)を使用するシリカ上でのクロマトグラフィーによって残留物を精製して、表題化合物を褐色液体(0.69g、70%)として得た。
1H-NMR (400MHz, CDCl3): d=1.43 (br-s, 2H)、1.85〜1.92 (m, 2H)、2.74 (t, 2H)、2.83 (t, 2H)、7.08〜7.12 (m, 1H)、7.16 (d, 1H)、7.59 (dt, 1H)、8.52 (d, 1H)
【０２７３】
ステップC
アリルアルコール(0.087mL、1.5mmol)をテトラヒドロフラン(3mL)に溶解し、混合物を0℃に冷却した。0℃で、ヘキサン中9-ボラビシクロ[3.3.1]ノナンの0.4M溶液(11.25mL、4.5mmol)を添加し、0℃での撹拌を15分間続けた。次いで、混合物を室温で4時間撹拌し、溶媒を蒸発させた。残留物をテトラヒドロフラン(8mL)に溶解し、水酸化ナトリウムの3M水溶液(2mL、6mmol)を添加した。N,N'-ジメチルアセトアミド(10mL)中の市販の2,6-ジブロモ-ピリジン(0.46g、1.95mmol)の溶液の添加後、アルゴン流を混合物に吹き込んで発泡させながら、混合物を5分間音波破砕した。次いで、テトラキス(トリフェニルホスフィン)パラジウム(0)(0.17g、0.156mmol)を添加し、混合物を砂浴中約95℃で90分間加熱した。混合物を酢酸エチル(50mL)で希釈し、10%クエン酸(20mL)およびブライン(15mL)で洗浄した。有機相を分離し、Na2SO4で乾燥させ、濾過し、溶媒を除去した。有色不純物を溶離するための酢酸エチル/n-ヘプタン(30/70)、続いて酢酸エチル/n-ヘプタン(60/40)を使用するシリカ上でのクロマトグラフィーによって残留物を精製して、粗生成物を得た。この実行および2回のさらなる実行からの粗生成物を合わせたものを、酢酸エチル/n-ヘプタン(50/50)を使用するシリカ上でのクロマトグラフィーによってさらに精製して、表題化合物を淡黄色油(0.48g、49%)として得た。
1H-NMR (400MHz, CDCl3): d=1.97〜2.03 (m, 2H)、2.92 (t, 2H)、3.68〜3.73 (m, 2H)、7.12 (d, 1H)、7.34 (d, 1H)、7.42 (t, 1H)
注記: 1H-NMRは、少量の9-BBNの分解生成物の存在を示したが、該物質は次のステップにおいて使用するのに十分純粋である。
【０２７４】
ステップD
上記ステップCの表題化合物(0.48g、2.23mmol)をN,N'-ジメチルホルムアミド(10mL)に溶解し、イミダゾール(0.3mL、4.46mmol)を添加した。クロロトリイソプロピルシラン(0.43mL、2.23mmol)の添加後、混合物を室温で16時間撹拌した。反応混合物を酢酸エチル(60mL)で希釈し、10%クエン酸溶液(3×15mL)およびブライン(15mL)で洗浄した。有機相を分離し、Na2SO4で乾燥させ、濾過し、溶媒を除去した。酢酸エチル/ n-ヘプタン(5/95)を使用するシリカ上でのクロマトグラフィーによって残留物を精製して、表題化合物を無色液体(0.66g、79%)として得た。
1H-NMR (400MHz, CDCl3): d=1.05〜1.14 (m, 21H)、1.94〜2.01 (m, 2H)、2.88 (t, 2H)、3.72 (t, 2H)、7.14 (d, 1H)、7.31 (d, 1H)、7.45 (t, 1H)
【０２７５】
ステップE
上記ステップBの表題化合物(0.136g、1mmol)および上記ステップDの表題化合物(0.35g、0.95mmol)をトルエン(17mL)に溶解し、2,2-ビス-(ジフェニルホスフィノ)-1,1-ナフタレン(0.13g、0.19mmol)およびナトリウムtert-ブチレート(0.25g、2.58mmol)で処理した。次いで、反応混合物にアルゴンを吹き込んで発泡させることによって反応混合物を脱気し、続いてトリス(ジベンジリデンアセトン)ジパラジウムクロロホルム錯体(0.086g、0.095mmol)を添加した。反応槽を密閉し、混合物を砂浴中約85℃で45分間加熱した。反応混合物を酢酸エチル(80mL)、水(20mL)およびブライン(20mL)で希釈した。有機相を分離し、Na2SO4で乾燥させ、濾過し、溶媒を除去した。非極性不純物を溶離するためのジクロロメタン/アセトン(95/5)、続いて酢酸エチル/n-ヘプタン(80/20)を使用するシリカ上でのクロマトグラフィーによって残留物を精製して、所望の化合物を溶離した。酢酸エチル/n-ヘプタン(80/20)を使用するシリカ上でのクロマトグラフィーによって粗生成物を再度精製して、表題化合物を暗黄色油(0.34g、83%)として得た。
1H-NMR (400MHz, CDCl3): d=1.05〜1.14 (m, 21H)、1.92〜1.97 (m, 2H)、2.05〜2.12 (m, 2H)、2.68 (t, 2H)、2.91 (t, 2H)、3.27〜3.33 (m, 2H)、3.74 (t, 2H)、4.60〜4.63 (br-s, 1H)、6.18 (d, 1H)、6.46 (d, 1H)、7.10〜7.13 (m, 1H)、7.17 (d, 1H)、7.32 (t, 1H)、7.60 (dt, 1H)、8.52 (d, 1H)
【０２７６】
ステップF
上記ステップEの表題化合物(0.34g、0.79mmol)をジクロロメタン(5mL)に溶解し、二炭酸ジ-tert-ブチル(0.86g、3.95mmol)を添加した。溶媒を除去し、油性残留物を砂浴中約75℃で、すべての出発物質が消失したとTLCによって判断されるまで3日間加熱した。次いで、過剰の二炭酸ジ-tert-ブチルを溶離するための酢酸エチル/n-ヘプタン(10/90)、続いて酢酸エチル/n-ヘプタン(30/70)を使用するシリカ上でのクロマトグラフィーによって混合物を精製して、表題化合物を橙色油(0.38g、92%)として得た。
1H-NMR (400MHz, CDCl3): d=1.05〜1.14 (m, 21H)、1.49 (s, 9H)、1.99〜1.96 (m, 2H)、2.05〜2.12 (m, 2H)、2.74〜2.84 (m, 4H)、3.72 (t, 2H)、4.01 (t, 2H)、6.88 (d, 1H)、7.07〜7.10 (m, 1H)、7.12 (d, 1H)、7.39 (d, 1H)、7.52 (t, 1H)、7.58 (dt, 1H)、8.51 (d, 1H)
【０２７７】
ステップG
上記ステップFの表題化合物(0.38g、0.72mmol)をアセトニトリル(8mL)に溶解し、テトラヒドロフラン中テトラブチルアンモニウムフルオリドの1M溶液(3．6mL、3．6mmol)を添加した。混合物を室温で終夜撹拌し、溶媒を除去した。酢酸エチルを使用するシリカ上でのクロマトグラフィーによって残留物を精製して、表題化合物を淡黄色油(0.25g、94%)として得た。
1H-NMR (400MHz, CDCl3): d=1.49 (s, 9H)、2.00〜2.11 (m, 4H)、2.81〜2.89 (m, 4H)、3.68 (t, 2H)、4.02 (t, 2H)、6.88 (d, 1H)、7.08〜7.12 (m, 1H)、7.16 (d, 1H)、7.41 (d, 1H)、7.52 (t, 1H)、7.59 (t, 1H)、8.47 (d, 1H)
【０２７８】
ステップH
トリフェニルホスフィン(0.35g、1.36mmol)およびフタルイミド(0.1g、0.68mmol)をテトラヒドロフラン(3mL)に溶解し、混合物を0℃に冷却した。0℃で、テトラヒドロフラン(2mL)中の上記ステップGの表題化合物(0.25g、0.68mmol)の混合物およびトルエン中アゾジカルボン酸ジエチルの40%溶液(0.55mL、1.36mmol)を5分間かけて添加した。混合物を終夜撹拌し、室温に到達させた。溶媒を除去し、酢酸エチル/n-ヘプタン(60/40)を使用するシリカ上でのクロマトグラフィーによって残留物を精製して、表題化合物を橙色油(382mg)として得た。
1H-NMR (400MHz, CDCl3): d=1.49 (s, 9H)、2.00〜2.17 (m, 4H)、2.77 (t, 2H)、2.81 (t, 2H)、3.76 (t, 2H)、4.03 (t, 2H)、6.88 (d, 1H)、7.04〜7.08 (m, 1H)、7.14 (d, 1H)、7.38 (d, 1H)、7.48 (t, 1H)、7.55 (t, 1H)、7.69〜7.72 (m, 2H)、7.82〜7.86 (m, 2H)、8.48 (d, 1H)
注記: 1H-NMRは、少量のジエチルヒドラジン-1,2-ジカルボキシレートの存在を示したが、該物質は次のステップにおいて使用するのに十分純粋である。
【０２７９】
ステップI
上記ステップHの表題化合物(0.34g、0．68mmol)をメタノール(7mL)に溶解し、水中ヒドラジンの50%溶液(0.14mL、1．36mmol)で処理した。混合物を室温で終夜撹拌し、溶媒を除去した。固体をジクロロメタン(20mL)で処理し、5分間音波破砕してスラリーを取得し、これを室温で30分間撹拌した。混合物を濾過し、沈殿物を10mLのジクロロメタンで洗浄した。濾液を濃縮し、有色不純物を溶離するためのジクロロメタン/メタノール(9/1)、続いてメタノール500mL当たり10mLの7Mアンモニアを含有するジクロロメタン/メタノール(1:1)を使用するシリカ上でのクロマトグラフィーによって残留物を精製して、表題化合物を淡黄色液体(0.16g、62%)として得た。
1H-NMR (400MHz, CDCl3): d=1.52 (s, 9H)、1.86 (q, 2H)、2.08 (q, 2H)、2.70〜2.76 (m, 4H)、2.83 (t, 2H)、4.04 (t, 2H)、6.85 (d, 1H)、7.08〜7.11 (m, 1H)、7.14 (d, 1H)、7.40 (d, 1H)、7.52 (t, 1H)、7.57 (t, 1H)、8.51 (d, 1H)
【０２８０】
ステップJ
上記ステップIの表題化合物(0.075g、0.2mmol)および実施例2ステップHの表題化合物(0.055g、0.193mmol)をトルエン(3．1mL)に溶解し、2,2-ビス-(ジフェニルホスフィノ)-1,1-ナフタレン(0.024g、0.039mmol)およびナトリウムtert-ブチレート(0.05g、0.52mmol)で処理した。次いで、反応混合物にアルゴンを吹き込んで発泡させることによって反応混合物を脱気し、続いてトリス(ジベンジリデンアセトン)ジパラジウムクロロホルム錯体(0.017g、0.019mmol)を添加した。反応槽を密閉し、混合物を砂浴中約110℃で45分間加熱した。反応混合物を酢酸エチル(20mL)、水(5mL)およびブライン(5mL)で希釈した。有機相を分離し、Na2SO4で乾燥させ、濾過し、溶媒を除去した。非極性不純物を溶離するためのジクロロメタン/アセトン(95/5)、続いて所望の化合物を溶離するための酢酸エチル/n-ヘプタン(60/40)を使用するシリカ上でのクロマトグラフィーによって残留物を精製した。酢酸エチル/n-ヘプタン(60/40)を使用するシリカ上でのクロマトグラフィーによって粗生成物を再度精製して、表題化合物を淡黄色油(0.094g、89%)として得た。
1H-NMR (400MHz, CDCl3): d=1.50 (s, 9H)、1.52 (s, 9H)、2.00〜2.12 (m, 4H)、2.78〜2.84 (m, 4H)、3.27〜3.33 (m, 5H)、4.02 (t, 2H)、4.70 (br-s, 1H)、6.08 (d, 1H)、6.86 (d, 2H)、7.08〜7.13 (m, 2H)、7.34 (t, 1H)、7.40 (d, 1H)、7.48〜7.57 (m, 2H)、8.50 (d, 1H)
【０２８１】
ステップK
上記ステップJの表題化合物(0.094g、0.16mmol)をクロロホルム(2.3mL)に溶解し、ジエチルエーテル中塩化水素の2M溶液(2.3mL)で処理した。反応混合物を室温で終夜撹拌し、シリンジを使用して溶媒を除去した。固体材料を水(5mL)に溶解し、0.2μmのフィルターカートリッジに通して濾過した。濾液を収集し、溶媒を蒸発させて、表題化合物を橙色ガラス(0.06g、76%)として得た。
1H-NMR (400MHz, D2O): d=1.97 (q, 2H)、2.06 (q, 2H)、2.73〜2.79 (m, 5H)、3.07 (t, 2H)、3.25 (t, 2H)、3.36 (t, 2H)、5.82〜5.87 (m, 2H)、6.66 (d, 1H)、6.73 (d, 1H)、7.50 (t, 1H)、7.72 (t, 1H)、7.78 (t, 1H)、7.83 (d, 1H)、8.39 (t, 1H)、8.51 (d, 1H)
MS (ESI); m/z=377.17 (MH+)
【０２８２】
調製実施例8(化合物3)
【０２８３】
【化２０】
2013507428.tif 000021
【０２８４】
ステップA
市販の2,6-ジブロモピリジン(0.5g、2.1mmol)をN,N'-ジメチルアセトアミド(5mL)に溶解し、市販の2-ピリジル-エチルアミン(0.26g、2.1mmol)を添加した。重炭酸カリウム(0.23g、2.3mmol)の添加後、混合物を砂浴中約110℃で5時間加熱した。混合物を酢酸エチル(80mL)で希釈し、水83×20mLで洗浄した。有機相を分離し、Na2SO4で乾燥させ、濾過し、溶媒を除去した。酢酸エチルを使用するシリカ上でのクロマトグラフィーによって残留物を精製して、表題化合物を橙色油(0.13g、21%)として得た。
1H-NMR (400MHz, CDCl3): d=3.07 (t, 2H)、3.68 (m, 2H)、5.17 (br-s, 1H)、6.30 (d, 1H)、6.70 (d, 1H)、7.10〜7.21 (m, 3H)、7.58 (t, 1H)、8.52 (d, 1H)
【０２８５】
ステップB
上記ステップAの表題化合物(0.13g、0.46mmol)をジクロロメタン(3mL)に溶解し、二炭酸ジ-tert-ブチル(0.5g、2.32mmol)を添加した。溶媒を除去し、油性残留物を砂浴中約75℃で3日間加熱した。次いで、過剰の二炭酸ジ-tert-ブチルを溶離するための酢酸エチル/n-ヘプタン(20/80)、続いて酢酸エチル/n-ヘプタン(40/60)を使用するシリカ上でのクロマトグラフィーによって混合物を精製して、表題化合物を淡黄色油(0.095g、53%)として得た。
1H-NMR (400MHz, CDCl3): d=1.49 (s, 9H)、3.18 (t, 2H)、4.38 (t, 2H)、7.11〜7.14 (m, 1H)、7.18 (d, 1H)、7.23 (d, 1H)、7.48 (t, 1H)、7.59〜7.67 (m, 2H)、8.52 (d, 1H)
【０２８６】
ステップC
上記ステップBの表題化合物(0.09g、0.238mmol)および実施例1ステップFの表題化合物(0.07g、0.27mmol)をトルエン(4．25mL)に溶解し、2,2-ビス-(ジフェニルホスフィノ)-1,1-ナフタレン(0.032g、0.048mmol)およびナトリウムtert-ブチレート(0.061g、0.65mmol)で処理した。次いで、反応混合物にアルゴンを吹き込んで発泡させることによって反応混合物を脱気し、続いてトリス(ジベンジリデンアセトン)ジパラジウムクロロホルム錯体(0.021g、0.024mmol)を添加した。反応槽を密閉し、混合物を砂浴中約110℃で45分間加熱した。反応混合物を酢酸エチル(20mL)、水(5mL)およびブライン(5mL)で希釈した。有機相を分離し、Na2SO4で乾燥させ、濾過し、溶媒を除去した。非極性不純物を溶離するためのジクロロメタン/アセトン(95/5)、続いて酢酸エチル/n-ヘプタン(60/40)を使用するシリカ上でのクロマトグラフィーによって残留物を精製して、所望の化合物を溶離した。酢酸エチル/n-ヘプタン(60/40)を使用するシリカ上でのクロマトグラフィーによって粗生成物を再度精製して、表題化合物を淡黄色油(0.12g、94%)として得た。
1H-NMR (400MHz, CDCl3): d=1.42 (s, 9H)、1.53 (s, 9H)、3.04 (t, 2H)、3.18 (t, 2H)、3.43 (s, 3H)、3.68〜3.73 (m, 2H)、4.30 (t, 2H)、5.00 (br-s, 1H)、6.14 (d, 1H)、6.83 (d, 1H)、6.86〜6.89 (m, 1H)、7.09〜7.11 (m, 1H)、7.16 (d, 1H)、7.38 (t, 1H)、7.53〜7.58 (m, 3H)、8.51 (d, 1H)
【０２８７】
ステップD
上記ステップCの表題化合物(0.12g、0.22mmol)をクロロホルム(3.1mL)に溶解し、ジエチルエーテル中塩化水素の2M溶液(3.1mL)で処理した。反応混合物を室温で終夜撹拌し、シリンジを使用して溶媒を除去した。固体材料を水(5mL)に溶解し、0.2μmのフィルターカートリッジに通して濾過した。濾液を収集し、溶媒を蒸発させて、表題化合物を橙色ガラス(0.074g、74%)として得た。
1H-NMR (400MHz, D2O): d=2.90 (s, 3H)、3.00 (t, 2H)、3.31 (t, 2H)、3.58 (t, 2H)、3.69 (t, 2H)、5.88〜5.93 (m, 2H)、6.61〜6.65 (m, 1H)、6.79 (d, 1H)、7.50〜7.73 (m, 1H)、7.70 (t, 1H)、7.84〜7.91 (m, 2H)、8.42 (t, 1H)、8.58 (d, 1H)
MS (ESI); m/z=349.49 (MH+)
【０２８８】
調製実施例9(化合物9):
【０２８９】
【化２１】
2013507428.tif 000022
【０２９０】
ステップA
市販の2-アミノ-6-メチルピリジン(25.46g、235mmol)に、アクリル酸エチル(26mL、239mmol)および酢酸(6mL、105mmol)を添加した。この混合物を、砂浴中約150℃で50時間加熱した。混合物を室温に冷却し、6Nの水酸化ナトリウム(120mL、720mmol)を添加した。次いで、混合物を砂浴中約120℃で1時間加熱した。混合物を室温に冷却し、濃塩酸を、pHがおよそ4〜5に到達するまで氷冷しながら添加した。ポリマー沈殿物が形成され、混合物を濾過した。濾液を蒸発させ、残留物をメタノール(100mL)で処理した。得られたスラリーを室温で30分間撹拌し、濾過した。沈殿物をメタノール(30mL)で洗浄し、合わせた濾液を蒸発させると、帯褐色の粘着性塊が残った。この粗材料をジクロロメタン(400mL)に溶解し、溶液を氷浴に入れた。次いで、クロロスルホン酸(162mL、2430mmol)を滴下添加した。添加が完了した後、混合物を室温で2時間撹拌した。次いで、混合物を氷浴に戻し入れ、水(800mL)を慎重に添加した。添加が完了した後、水酸化ナトリウムを添加することによって酸性溶液をpH約6までアルカリ性にした。次いで、炭酸ナトリウムを添加して、pHを約10から11に調整した。沈殿物が形成され、混合物を酢酸エチル(3×400mL)で抽出した。有機相を分離し、Na2SO4で乾燥させ、濾過し、溶媒を除去した。非極性不純物を溶離するための酢酸エチル/n-ヘプタン(75/25)、続いて酢酸エチルを使用するシリカ上でのクロマトグラフィーによって残留物を精製して、表題化合物を黄色固体(12.2g、32%)として得た。
1H-NMR (400MHz, CDCl3): d=2.40 (s, 3H)、2.69 (t, 2H)、3.58〜3.62 (m, 2H)、5.31 (br-s, 1H)、6.58 (d, 1H)、7.97 (d, 1H)
【０２９１】
ステップB
上記ステップAの表題化合物(7g、43.2mmol)をメタノール(170mL)に懸濁させ、水素化ホウ素ナトリウム(2.94g、77.7mmol)を小分けにして添加した。添加が完了した後、混合物を室温で1時間撹拌すると、透明な溶液になった。次いで、酢酸(21mL)を添加し、溶媒を除去した。残留物を水(250mL)に溶解し、水相をジクロロメタン(2×100mL)で洗浄した。炭酸ナトリウムを添加することによって水相をアルカリ性(pH約10)にし、酢酸エチル(6×150mL)で抽出した。合わせた有機相をNa2SO4で乾燥させ、濾過し、溶媒を除去して、表題化合物をオフホワイトの固体(6.39g、90%)として得た。
1H-NMR (400MHz, CDCl3): d=1.82〜1.90 (m, 1H)、1.95〜2.01 (m, 1H)、2.30 (s, 3H)、3.10 (br-s, 1H)、3.31〜3.36 (m, 1H)、3.48 (dt, 1H)、4.72 (t, 1H)、5.32 (br-s, 1H)、6.38 (d, 1H)、7.32 (d, 1H)
【０２９２】
ステップC
上記ステップBの表題化合物(6.39g、38.9mmol)を、メタノール(130mL)および酢酸(65mL)に溶解した。10%パラジウム炭素触媒(1.6g)の添加後、混合物を3日間水素化した。混合物を濾過し、触媒をメタノール(50mL)で洗浄し、合わせた濾液を蒸発させた。酢酸塩を水(200mL)に溶解し、炭酸ナトリウムを添加することによってpHをpH約10に調整した。水相をジクロロメタン(3×150mL)で抽出した。合わせた有機相をNa2SO4で乾燥させ、濾過し、溶媒を除去して、遊離アミンを白色固体(4.42g、76%)として得た。
1H-NMR (400MHz, CDCl3): d=1.86〜1.92 (m, 2H)、2.30 (s, 3H)、2.68 (t, 2H)、3.37〜3.41 (m, 2H)、4.80 (br-s, 1H)、6.34 (d, 1H)、7.03 (d, 1H)
【０２９３】
ステップD
上記ステップCの表題化合物(7.42g、50.13mmol)に、ジクロロメタン(100mL)中の二炭酸ジ-tert-ブチル(33.7g、150.4mmol)の溶液を添加した。溶媒を除去し、油性残留物を砂浴中約75℃で18時間加熱した。過剰な二炭酸ジ-tert-ブチルを除去するための酢酸エチル/n-ヘプタン(10/90)、続いて酢酸エチル/n-ヘプタン(40/60)を使用するシリカ上でのクロマトグラフィーによって反応混合物を精製して、表題化合物を白色固体(11.2g、90%)として得た。
1H-NMR (400MHz, CDCl3): d=1.52 (s, 9H)、1.87〜1.93 (m, 2H)、2.46 (s, 3H)、2.70 (t, 2H)、3.72 (t, 2H)、6.80 (d, 1H)、7.24 (d, 1H)
【０２９４】
ステップE
0℃のn-ブチルリチウムの1.6M溶液(39.24mL、62.82mmol)を、テトラヒドロフラン(45mL)中のN,N'-ジイソプロピルアミン(9.9mL、75.4mmol)の撹拌溶液に添加することによって、LDAの溶液を調製した。混合物を0℃で15分間撹拌した。次いで、LDA溶液を、テトラヒドロフラン(72mL)中の上記ステップDの表題化合物(5.6g、22.56mmol)および炭酸ジエチル(10.08mL、83.1mmol)の溶液に、-78℃で滴下添加した。混合物を-78℃で40分間撹拌した。飽和塩化アンモニウムの溶液(100mL)を-8℃で添加することによって反応物をクエンチした。混合物を室温に到達させ、酢酸エチル(200mL)で希釈した。有機相を分離し、Na2SO4で乾燥させ、濾過し、溶媒を除去した。酢酸エチル/n-ヘプタン(50/50)を使用するシリカ上でのクロマトグラフィーによって残留物を精製して、表題化合物を黄色油として得、これを室温で静置することによって固体になった(7g、96%)。
1H-NMR (400MHz, CDCl3): d=1.25 (t, 3H)、1.51 (s, 9H)、1.88〜1.93 (m, 2H)、2.72 (t, 2H)、3.71〜3.75 (m, 4H)、4.13 (q, 2H)、6.96 (d, 1H)、7.34 (d, 1H)
【０２９５】
ステップF
上記ステップEの表題化合物(2g、6.25mmol)をテトラヒドロフラン(40mL)に溶解し、水素化ホウ素リチウム(0.18g、8.14mmol)を小分けにして添加した。反応混合物を室温で終夜撹拌した。次いで、水(25mL)を添加し、混合物を室温で10分間撹拌した。酢酸エチル(150mL)の添加後、有機相を分離し、水相を酢酸エチル(50mL)で抽出した。合わせた有機相をNa2SO4で乾燥させ、濾過し、溶媒を除去した。酢酸エチルを使用するシリカ上でのクロマトグラフィーによって残留物を精製して、表題化合物を無色油(1.48g、85%)として得、続いてジクロロメタン/メタノール(4/1)を使用して、N-Boc脱保護生成物を黄色油(0.13g、11%)として得た。
表題化合物:
1H-NMR (400MHz, CDCl3): d=1.51 (s, 9H)、1.88〜1.93 (m, 2H)、2.70 (t, 2H)、2.92 (t, 2H)、3.77 (t, 2H)、3.98 (t, 2H)、5.53 (br-s, 1H)、6.75 (d, 1H)、7.30 (d, 1H)
N-Boc脱保護生成物:
1H-NMR (400MHz, CDCl3): d=1.87〜1.93 (m, 2H)、2.03 (s, 1H)、2.68 (t, 2H)、2.80 (t, 2H)、3.40 (t, 2H)、3.89 (t, 2H)、6.32 (d, 1H)、6.48 (br-s, 1H)、7.10 (d, 1H)
【０２９６】
ステップG
上記ステップFの表題化合物(822mg、2.95mmol)をジクロロメタン(15mL)に溶解し、トリエチルアミン(0.9mL、6.5mmol)を添加した。メタン-スルホニルクロリド(0.46mL、5.87mmol)の添加後、反応混合物を室温で1時間撹拌した。混合物をジクロロメタン(50mL)で希釈し、10%クエン酸溶液(20mL)、飽和重炭酸ナトリウム(20mL)およびブライン(20mL)で洗浄した。有機相を分離し、Na2SO4で乾燥させ、濾過し、溶媒を除去した。酢酸エチル/n-ヘプタン(80/20)を使用するシリカ上でのクロマトグラフィーによって残留物を精製して、表題化合物を無色油(0.83g、78%)として得た。
1H-NMR (400MHz, CDCl3): d=1.51 (s, 9H)、1.88〜1.93 (m, 2H)、2.72 (t, 2H)、2.92 (s, 3H)、3.12 (t, 2H)、3.74 (t, 2H)、4.65 (t, 2H)、6.86 (d, 1H)、7.32 (d, 1H)
【０２９７】
ステップH
上記ステップGの表題化合物(0.83g、2.22mmol)をN,N'-ジメチルアセトアミド(5．5mL)に溶解し、アジ化ナトリウム(0.76g、11．65mmol)を添加した。混合物を砂浴中約75℃で16時間加熱した。混合物を酢酸エチル(55mL)および10%クエン酸溶液(15mL)で希釈した。有機相を分離し、飽和重炭酸ナトリウム(15mL)およびブライン(15mL)で洗浄した。有機相をNa2SO4で乾燥させ、濾過し、溶媒を除去した。酢酸エチル/n-ヘプタン(40/60)を使用するシリカ上でのクロマトグラフィーによって残留物を精製して、表題化合物を淡黄色油(0.6g、84%)として得た。
1H-NMR (400MHz, CDCl3): d=1.51 (s, 9H)、1.88〜1.93 (m, 2H)、2.72 (t, 2H)、2.98 (t, 2H)、3.69 (t, 2H)、3.74 (t, 2H)、6.84 (d, 1H)、7.32 (d, 1H)
【０２９８】
ステップI
上記ステップHの表題化合物(0.6g、1.98mmol)をテトラヒドロフラン(8mL)に溶解し、トリフェニルホスフィン(0.63g、2.38mmol)を添加した。反応混合物を室温で20時間撹拌し、次いで水(4mL)を添加した。撹拌を終夜続け、溶媒を真空除去した。ジクロロメタン/メタノール(95/5)、続いてジクロロメタン/メタノール(1/1、メタノール500mL当たり10mLの7Mアンモニアを含有)を使用するシリカ上でのクロマトグラフィーによって残留物を精製して、表題化合物を淡黄色油(0.5g、91%)として得た。
1H-NMR (400MHz, CDCl3): d=1.52 (s, 9H)、1.66 (br-s, 2H)、1.89〜1.96 (m, 2H)、2.72 (t, 2H)、2.87 (t, 2H)、3.11 (t, 2H)、3.78 (t, 2H)、6.80 (d, 1H)、7.25 (d, 1H)
【０２９９】
ステップJ
実施例8ステップBの表題化合物(0.090g、0.238mmol)および上記ステップIの表題化合物(0.075g、0.27mmol)をトルエン(4．25mL)に溶解し、2,2-ビス-(ジフェニルホスフィノ)-1,1-ナフタレン(0.032g、0.048mmol)およびナトリウムtert-ブチレート(0.061g、0.65mmol)で処理した。次いで、反応混合物にアルゴンを吹き込んで発泡させることによって反応混合物を脱気し、続いてトリス(ジベンジリデンアセトン)ジパラジウムクロロホルム錯体(0.021g、0.024mmol)を添加した。反応槽を密閉し、混合物を砂浴中約110℃で45分間加熱した。反応混合物を酢酸エチル(20mL)、水(5mL)およびブライン(5mL)で希釈した。有機相を分離し、Na2SO4で乾燥させ、濾過し、溶媒を除去した。酢酸エチル/n-ヘプタン(60/40)を使用するシリカ上でのクロマトグラフィーによって残留物を精製し、粗表題化合物を得た。酢酸エチル/n-ヘプタン(80/20)を使用するシリカ上でのクロマトグラフィーによって粗材料を再度精製して、表題化合物を黄色油(0.58g、42%)として得た。
1H-NMR (400MHz, CDCl3): d=1.40 (s, 9H)、1.52 (s, 9H)、1.86〜1.92 (m, 2H)、2.67〜2.71 (m, 2H)、2.93〜2.99 (m, 2H)、3.10〜3.17 (m, 2H)、3.68〜3.73 (m, 2H)、3.73〜3.80 (m, 2H)、4.23〜4.27 (m, 2H)、6.40 (d, 1H)、6.68 (d, 1H)、6.80 (d, 1H)、7.06〜7.09 (m, 1H)、7.12 (d, 1H)、7.23〜7.29 (m, 2H)、7.50〜7.56 (m, 1H)、8.50〜8.53 (m, 1H)
【０３００】
ステップK
上記ステップJの表題化合物(0.058g、0.1mmol)をクロロホルム(1.6mL)に溶解し、ジエチルエーテル中塩化水素の2M溶液(1.6mL)で処理した。反応混合物を室温で終夜撹拌し、シリンジを使用して溶媒を除去した。固体材料を水(4mL)に溶解し、0.2μmのフィルターカートリッジに通して濾過した。濾液を収集し、溶媒を蒸発させて、表題化合物を暗橙色ガラス(0.042g、86%)として得た。
1H-NMR (400MHz, D2O): d=1.71〜1.78 (m, 2H)、2.57〜2.61 (m, 2H)、2.79〜2.84 (m, 2H)、3.22〜3.30 (m, 4H)、3.47〜3.50 (m, 2H)、3.59〜3.63 (m, 2H)、5.80 (d, 1H)、6.44 (d, 1H)、7.33 (d, 1H)、7.42〜7.83 (m, 4H)、8.35 (t, 1H)、8.51 (d, 1H)
MS (ESI); m/z=375.29 (MH+)
【０３０１】
調製実施例10(化合物10):
【０３０２】
【化２２】
2013507428.tif 000023
【０３０３】
ステップA
カリウムビス(トリメチルシリル)アミド(5.99g、30mmol)をテトラヒドロフラン(90mL)に溶解し、溶液を-78℃に冷却した。-78℃で、実施例9ステップEの表題化合物(3.2g、10mmol)を一度に添加し、混合物を-78℃で45分間撹拌した。臭化マンガン(II)(4.3g、20mmol)を一度に添加し、-78℃での撹拌を30分間続けた。次いで、N-フルオロベンゼンスルホンイミド(8.9g、28.2mmol)を-78℃で一度に添加した。混合物を-78℃で30分間撹拌し、室温に終夜加温させた。混合物を飽和重炭酸ナトリウム(250mL)および酢酸エチル(300mL)で希釈した。有機相を分離し、Na2SO4で乾燥させ、濾過し、溶媒を除去した。酢酸エチル/n-ヘプタン(40/60)を使用するシリカ上でのクロマトグラフィーによって残留物を精製して、表題化合物を淡橙色油(2.15g、60%)として得た。
1H-NMR (400MHz, CDCl3): d=1.30 (m, 3H)、1.50 (s, 9H)、1.88〜1.96 (m, 2H)、2.77〜2.82 (m, 2H)、3.73〜3.78 (m, 2H)、4.30〜4.36 (m, 2H)、7.31〜7.34 (m, 1H)、7.48〜7.51 (m, 1H)
【０３０４】
ステップB
上記ステップAの表題化合物(2.15g、6mmol)をエタノール(8mL)に溶解し、混合物を0℃に冷却した。次いで、水素化ホウ素ナトリウム(0.23g、6mmol)を小分けにして10分間かけて添加した。添加が完了した後、混合物を終夜撹拌し、室温に到達させた。混合物を、酢酸エチル(80mL)、水(10mL)および10%クエン酸溶液(5mL)で希釈した。有機相を分離し、Na2SO4で乾燥させ、濾過し、溶媒を除去した。酢酸エチル/n-ヘプタン(40/60)を使用するシリカ上でのクロマトグラフィーによって残留物を精製して、表題化合物をオフホワイトの固体(1.08g、57%)として得た。
1H-NMR (400MHz, CDCl3): d=1.50 (s, 9H)、1.92〜1.98 (m, 2H)、2.76〜2.80 (m, 2H)、3.77〜3.82 (m, 2H)、4.14 (t, 2H)、5.28 (br-s, 1H)、7.30〜7.38 (m, 1H)、7.52〜7.56 (m, 1H)
【０３０５】
ステップC
上記ステップBの表題化合物(1.08g、3.44mmol)をアセトニトリル(6mL)に溶解し、ピリジン(0.36mL、5.4mmol)を添加した。混合物を0℃に冷却し、トリフルオロメタンスルホン酸無水物(0.63mL、3.77mmol)を滴下添加した。添加が完了した後、混合物を0℃で30分間撹拌した。混合物をジエチルエーテル(100mL)で希釈し、10%クエン酸(10mL)およびブライン(10mL)で洗浄した。有機相を分離し、Na2SO4で乾燥させ、濾過し、溶媒を除去して、粗トリフレートを橙色油として得た。粗トリフレートをN,N'-ジメチルアセトアミド(7.5mL)に溶解し、アジ化ナトリウム(1.1g、17.2mmol)を添加した。混合物を砂浴中約75℃で3時間加熱した。混合物をジエチルエーテル(100mL)で希釈し、水(20mL)およびブライン(20mL)で洗浄した。有機相を分離し、Na2SO4で乾燥させ、濾過し、溶媒を除去した。酢酸エチル/n-ヘプタン(30/70)を使用するシリカ上でのクロマトグラフィーによって残留物を精製して、表題化合物を、室温で静置することによって固体になる淡黄色油として得た(0.87g、742%)。
1H-NMR (400MHz, CDCl3): d=1.50 (s, 9H)、1.92〜1.98 (m, 2H)、2.79 (t, 2H)、3.78 (t, 2H)、3.97 (t, 2H)、7.36 (d, 1H)、7.51 (d, 1H)
【０３０６】
ステップD
上記ステップCの表題化合物(0.87g、2.58mmol)をテトラヒドロフラン(10mL)に溶解し、トリフェニルホスフィン(0.81g、3.1mmol)を添加した。反応混合物を室温で20時間撹拌し、次いで水(10mL)を添加した。撹拌を終夜続け、溶媒を真空除去した。ジクロロメタン/メタノール(98/2)、続いてジクロロメタン/メタノール(95/5)を使用するシリカ上でのクロマトグラフィーによって残留物を精製して、粗表題化合物を得た。ジクロロメタン/メタノール(99/1)、続いてジクロロメタン/メタノール(9/1)を使用するシリカ上でのクロマトグラフィーによって粗材料を再度精製して、表題化合物を、室温で静置することによって固体/ワックスになる黄色液体として得た(0.79g、98%)。表題化合物は、微量のトリフェニルホスフィンオキシドを含有する。
1H-NMR (400MHz, CDCl3): d=1.50 (s, 9H)、1.70 (br-s, 2H)、1.90〜1.97 (m, 2H)、2.74〜2.79 (m, 2H)、3.40 (t, 2H)、3.74〜3.79 (m, 2H)、7.31 (d, 1H)、7.48 (d, 1H)
【０３０７】
ステップE
実施例8ステップBの表題化合物(0.09g、0.238mmol)および上記ステップDの表題化合物(0.085g、0.27mmol)をトルエン(4．25mL)に溶解し、2,2-ビス-(ジフェニルホスフィノ)-1,1-ナフタレン(0.032g、0.048mmol)およびナトリウムtert-ブチレート(0.061g、0.65mmol)で処理した。次いで、反応混合物にアルゴンを吹き込んで発泡させることによって反応混合物を脱気し、続いてトリス(ジベンジリデンアセトン)ジパラジウムクロロホルム錯体(0.021g、0.024mmol)を添加した。反応槽を密閉し、混合物を砂浴中約115℃で45分間加熱した。反応混合物を酢酸エチル(20mL)、水(5mL)およびブライン(5mL)で希釈した。有機相を分離し、Na2SO4で乾燥させ、濾過し、溶媒を除去した。酢酸エチル/n-ヘプタン(40/60)を使用するシリカ上でのクロマトグラフィーによって残留物を精製して、表題化合物を暗黄色ワックス(0.62g、43%)として得た。
1H-NMR (400MHz, CDCl3): d=1.42 (s, 9H)、1.57 (s, 9H)、1.92〜1.98 (m, 2H)、2.76〜2.80 (m, 2H)、3.13〜3.18 (m, 2H)、3.77〜3.82 (m, 2H)、4.22〜4.32 (m, 4H)、6.38 (d, 1H)、6.52 (br-s, 1H)、6.82 (d, 1H)、7.06〜7.09 (m, 1H)、7.17〜7.20 (m, 1H)、7.26〜7.31 (m, 2H)、7.47〜7.56 (m, 2H)、8.51 (m, 1H)
【０３０８】
ステップF
上記ステップEの表題化合物(0.06g、0.1mmol)をクロロホルム(1.6mL)に溶解し、ジエチルエーテル中塩化水素の2M溶液(1.6mL)で処理した。反応混合物を室温で終夜撹拌し、シリンジを使用して溶媒を除去した。固体材料を水(4mL)に溶解し、0.2μmのフィルターカートリッジに通して濾過した。濾液を収集し、溶媒を蒸発させて、表題化合物を暗橙色ガラス(0.039g、74%)として得た。
1H-NMR (400MHz, D2O): d=1.73〜1.81 (m, 2H)、2.67〜2.71 (m, 2H)、3.23〜3.28 (m, 2H)、3.32〜3.38 (m, 2H)、3.62〜3.67 (m, 2H)、3.97 (t, 2H)、5.90〜5.93 (m, 1H)、6.80〜6.83 (m, 1H)、7.44〜7.83 (m, 5H)、8.38 (t, 1H)、8.50〜8.53 (m, 1H)
MS (ESI); m/z=411.45 (MH+)
【０３０９】
調製実施例11(化合物12):
【０３１０】
【化２３】
2013507428.tif 000024
【０３１１】
ステップA
銅粉(4.5g、70.8mmol)をN,N'-ジメチルホルムアミド(22.5mL)に懸濁させ、2-ブロモピリジン(4.5g、28.5mmol)および2-ブロモ-2,2-ジフルオロアセテート(6g、29.6mmol)を添加した。混合物を砂浴中約72℃で終夜加熱した。混合物を酢酸エチル(60mL)で希釈し、水(50mL)中のリン酸二水素カリウム(8.58g、63mmol)の溶液を添加した。混合物を室温で30分間撹拌し、濾過した。沈殿物を酢酸エチル(30mL)で洗浄し、有機相を濾液から分離した。有機相を水(2×20mL)で洗浄し、Na2SO4で乾燥させ、濾過し、溶媒を除去した。酢酸エチル/n-ヘプタン(20/80)を使用するシリカ上でのクロマトグラフィーによって残留物を精製して、表題化合物を黄色油(3.17g、55%)として得た。
1H-NMR (400MHz, CDCl3): d=1.33 (t, 3H)、4.38 (q, 2H)、7.40〜7.45 (m, 1H)、7.72 (d, 1H)、7.86 (t, 1H)、8.66 (d, 1H)
【０３１２】
ステップB
上記ステップAの表題化合物(3.17g、15.8mmol)をエタノール(18mL)に溶解し、フラスコを水浴で囲んだ。次いで、水素化ホウ素ナトリウム(0.6g、16mmol)を小分けにして10分間かけて添加した。添加が完了した後、混合物を室温で90分間撹拌した。混合物を酢酸エチル(60mL)で希釈し、混合物の発泡が停止するまで10%クエン酸溶液を添加した。追加の水(25mL)を添加し、有機相を分離し、Na2SO4で乾燥させ、濾過し、溶媒を除去した。ジクロロメタン/メタノール(95/5)を使用するシリカ上でのクロマトグラフィーによって残留物を精製して、表題化合物をオフホワイトの固体(2g、79%)として得た。
1H-NMR (400MHz, CDCl3): d=3.52 (br-s, 1H)、4.23 (t, 2H)、7.40〜7.45 (m, 1H)、7.72 (d, 1H)、7.87 (t, 1H)、8.61 (d, 1H)
【０３１３】
ステップC
上記ステップBの表題化合物(1.8g、11.3mmol)をアセトニトリル(18mL)に溶解し、ピリジン(1.18mL、17.8mmol)を添加した。混合物を0℃に冷却し、トリフルオロメタンスルホン酸無水物(2.09mL、12.4mmol)を滴下添加した。添加が完了した後、混合物を0℃で30分間撹拌した。混合物をジエチルエーテル(200mL)で希釈し、10%クエン酸(60mL)およびブライン(60mL)で洗浄した。有機相を分離し、Na2SO4で乾燥させ、濾過し、溶媒を除去して、粗トリフレートを褐色油として得た。粗トリフレートをN,N'-ジメチルアセトアミド(25mL)に溶解し、アジ化ナトリウム(3.69g、56.7mmol)を添加した。混合物を砂浴中約75℃で3時間加熱した。混合物をジエチルエーテル(200mL)で希釈し、10%クエン酸(60mL)およびブライン(60mL)で洗浄した。有機相を分離し、Na2SO4で乾燥させ、濾過し、溶媒を除去した。酢酸エチル/n-ヘプタン(30/70)を使用するシリカ上でのクロマトグラフィーによって残留物を精製して、表題化合物を無色液体(1.29g、62%)として得た。
1H-NMR (400MHz, CDCl3): d=4.02 (t, 2H)、7.39〜7.45 (m, 1H)、7.72 (d, 1H)、7.86 (t, 1H)、8.68 (d, 1H)
【０３１４】
ステップD
上記ステップCの表題化合物(1.4g、7.6mmol)をテトラヒドロフラン(30mL)に溶解し、トリフェニルホスフィン(2.4g、9.1mmol)を添加した。反応混合物を室温で48時間撹拌し、次いで水(15mL)を添加した。撹拌を終夜続け、溶媒を真空除去した。ジクロロメタン/メタノール(98/2)、続いてジクロロメタン/メタノール(95/5)を使用するシリカ上でのクロマトグラフィーによって残留物を精製して、表題化合物を淡黄色液体(1.05g、87%)として得た。
1H-NMR (400MHz, CDCl3): d=1.42 (s, 2H)、3.42 (t, 2H)、7.35〜7.40 (m, 1H)、7.68 (d, 1H)、7.82 (t, 1H)、8.65 (d, 1H)
【０３１５】
ステップE
市販の2,6-ジブロモピリジン(0.5g、2.1mmol)をN,N'-ジメチルアセトアミド(5mL)に溶解し、上記ステップDの表題化合物を添加した(0.31g、2.1mmol)。重炭酸カリウム(0.23g、2.3mmol)の添加後、混合物を砂浴中約145℃で8時間加熱した。混合物を酢酸エチル(100mL)で希釈し、水(30mL)およびブライン(30mL)で洗浄した。有機相を分離し、Na2SO4で乾燥させ、濾過し、溶媒を除去した。酢酸エチル/n-ヘプタン(30/70)を使用するシリカ上でのクロマトグラフィーによって残留物を精製して、表題化合物を橙色油(0.13g、20%)として得た。
1H-NMR (400MHz, CDCl3): d=4.20 (dt, 2H)、5.08 (br-s, 1H)、6.42 (d, 1H)、6.71 (d, 1H)、7.20 (d, 1H)、7.35〜7.39 (m, 1H)、7.66 (d, 1H)、7.79 (t, 1H)、8.63 (d, 1H)
【０３１６】
ステップF
上記ステップEの表題化合物(0.12g、0.39mmol)および実施例10ステップDの表題化合物(0.14g、0.44mmol)をトルエン(7mL)に溶解し、2,2-ビス-(ジフェニルホスフィノ)-1,1-ナフタレン(0.053g、0.078mmol)およびナトリウムtert-ブチレート(0.1g、1.06mmol)で処理した。次いで、反応混合物にアルゴンを吹き込んで発泡させることによって反応混合物を脱気し、続いてトリス(ジベンジリデンアセトン)ジパラジウムクロロホルム錯体(0.035g、0.039mmol)を添加した。反応槽を密閉し、混合物を砂浴中約115℃で45分間加熱した。反応混合物を酢酸エチル(20mL)、水(5mL)およびブライン(5mL)で希釈した。有機相を分離し、Na2SO4で乾燥させ、濾過し、溶媒を除去した。ジクロロメタン/アセトン(95/5)を使用するシリカ上でのクロマトグラフィーによって残留物を精製し、粗表題化合物を得た。酢酸エチル/n-ヘプタン(50/50)を使用するシリカ上でのクロマトグラフィーによって粗材料を再度精製して、表題化合物を暗黄色油(0.62g、29%)として得た。
1H-NMR (400MHz, CDCl3): d=1.56 (s, 9H)、1.90〜1.97 (m, 2H)、2.74〜2.80 (m, 2H)、3.78〜3.82 (m, 2H)、4.13〜4.27 (m, 4H)、4.50 (br-s, 1H)、5.68〜5.70 (m, 1H)、5.92〜5.98 (m, 2H)、7.10 (t, 1H)、7.26〜7.32 (m, 2H)、7.45〜7.50 (m, 1H)、7.63〜7.68 (m, 1H)、7.73〜7.79 (m, 1H)、8.63〜8.67 (m, 1H)
【０３１７】
ステップG
上記ステップFの表題化合物(0.06g、0.11mmol)をクロロホルム(1.6mL)に溶解し、ジエチルエーテル中塩化水素の2M溶液(1.6mL)で処理した。反応混合物を室温で終夜撹拌し、シリンジを使用して溶媒を除去した。固体材料を水(4mL)に溶解し、0.2μmのフィルターカートリッジに通して濾過した。濾液を収集し、溶媒を蒸発させて、表題化合物を暗橙色ガラス(0.048g、77%)として得た。
1H-NMR (400MHz, D2O): d=1.71〜1.78 (m, 2H)、2.63〜2.69 (m, 2H)、3.30〜3.36 (m, 2H)、3.90〜4.02 (m, 4H)、5.81〜8.48 (m, 9H)
MS (ESI); m/z=447.38 (MH+)
【０３１８】
調製実施例12(化合物11):
【０３１９】
【化２４】
2013507428.tif 000025
【０３２０】
ステップA
実施例11ステップEの表題化合物(0.13g、0.42mmol)および実施例9ステップIの表題化合物(0.13g、0.48mmol)をトルエン(7．6mL)に溶解し、2,2-ビス-(ジフェニルホスフィノ)-1,1-ナフタレン(0.058g、0.084mmol)およびナトリウムtert-ブチレート(0.11g、1.15mmol)で処理した。次いで、反応混合物にアルゴンを吹き込んで発泡させることによって反応混合物を脱気し、続いてトリス(ジベンジリデンアセトン)ジパラジウムクロロホルム錯体(0.038g、0.042mmol)を添加した。反応槽を密閉し、混合物を砂浴中約115℃で45分間加熱した。反応混合物を酢酸エチル(20mL)、水(5mL)およびブライン(5mL)で希釈した。有機相を分離し、Na2SO4で乾燥させ、濾過し、溶媒を除去した。酢酸エチル/n-ヘプタン(70/30)を使用するシリカ上でのクロマトグラフィーによって残留物を精製し、粗表題化合物を得た。酢酸エチル/n-ヘプタン(70/30)を使用するシリカ上でのクロマトグラフィーによって粗材料を再度精製して、表題化合物を灰色の泡状物(0.07g、32%)として得た。
1H-NMR (400MHz, CDCl3): d=1.54 (s, 9H)、1.86〜2.04 (m, 2H)、2.66〜2.74 (m, 2H)、2.93〜3.08 (m, 2H)、3.48〜3.66 (m, 2H)、3.72〜3.80 (m, 2H)、4.18 (t, 2H)、4.5 (br-s, 1H)、5.65〜5.98 (m, 2H)、6.21〜6.40 (m, 1H)、6.76〜6.83 (m, 1H)、7.10 (t, 1H)、7.25〜7.36 (m, 2H)、7.61〜7.68 (m, 1H)、7.72〜7.77 (m, 1H)、8.60〜8.64 (m, 1H)
【０３２１】
ステップB
上記ステップAの表題化合物(0.07g、0.14mmol)をクロロホルム(2mL)に溶解し、ジエチルエーテル中塩化水素の2M溶液(2mL)で処理した。反応混合物を室温で終夜撹拌し、シリンジを使用して溶媒を除去した。固体材料を水(4mL)に溶解し、0.2μmのフィルターカートリッジに通して濾過した。濾液を収集し、溶媒を蒸発させて、表題化合物を暗橙色ガラス(0.063g、88%)として得た。
1H-NMR (400MHz, D2O): d=1.63〜1.75 (m, 2H)、2.44〜2.59 (m, 2H)、2.73〜2.85 (m, 2H)、3.18〜3.28 (m, 2H)、3.41〜3.49 (m, 2H)、3.93 (t, 2H)、5.73〜5.80 (m, 1H)、6.38〜6.43 (m, 1H)、7.25〜7.50 (m, 4H)、7.61〜7.65 (m, 1H)、7.85〜7.90 (m, 1H)、8.42〜8.48 (m, 1H)
MS (ESI); m/z=411.45 (MH+)
【０３２２】
調製実施例13(化合物8):
化合物8は、WO 2008/061795において記述されている通りに調製した。
【０３２３】
実験結果
溶解性を計測するための方法:
1.材料、試薬および機器
プレートシェーカー、遠心分離機(Eppendorf、半径8cm)、HPLC(Dionex P580)、カラム: AgilentゾルバックスエクリプスXDB-C18ラピッドレゾリューション(4.6×50mm、3.5mM、Agilent)、無色のマイクロチューブ1.5mL(Eppendorf、1.5mL)、マイクロピペット100〜1000mL、マイクロピペット10〜100mL、ダルベッコリン酸緩衝液、DMSO、ギ酸アンモニウム、ギ酸98〜100%、UP-H2O、アセトニトリルHPLCグレード、メタノールGR分析、PVDF膜フィルター。
【０３２４】
2.方法
2.1. 分析用のPBS 5x(4℃で貯蔵)およびPBS 1xの調製
PBS 5x
全含量のPBS塩(D-5652-10L)を2LのUP-H2Oに溶解する。
PBS 1x
分析前に、30mLのPBS 1xを調製するためにPBS 5xを5倍希釈し、シリンジおよび任意の親水性膜、例えばPVDF膜を使用して溶液を濾過する。
【０３２５】
2.2. HPLC溶媒(室温で貯蔵)の調製
溶媒A: 13.3mMのギ酸アンモニウム/6.5mMのギ酸/UP-水
820  ±1mgのギ酸アンモニウムおよび245μLのギ酸を1000mLのUP-H2Oに溶解する。
溶媒B: 6.0mMのギ酸アンモニウム/2.9mMのギ酸/90%アセトニトリル/10% UP-水
378  ±1mgのギ酸アンモニウムおよび110μLのギ酸を900mLのアセトニトリルおよび100mLのUP-H2Oに溶解する。
【０３２６】
2.3. 化合物のストック溶液の調製
化合物を25mMの濃度で(最小50mL)DMSOに溶解する。
【０３２７】
2.4. 標準曲線の調製
15mLのメタノール/H2O(6/4)を調製する。
5つの標準較正物質:メタノール/H2O(6/4)中250μM、200μM、50μM、12.5μMおよび3.13μMを調製する。
1.5マイクロチューブ中にそれぞれ標準濃度の調製物を作製する。
【０３２８】
【表１】
2013507428.tif 000026
【０３２９】
250〜300μLを各マイクロチューブからHPLCバイアルへ直接移す。
下記の条件を使用して、HPLC(マイクロチューブ6番から1番まで)を実行する:
C18カラム、0.7mL/分、20℃、254nmにおけるUV検出、容量注射: 20μLおよび下記の勾配の1つ。
【０３３０】
非常に高極性/親水性化合物の勾配
【０３３１】
【表２】
2013507428.tif 000027
【０３３２】
低極性/親油性化合物の勾配
【０３３３】
【表３】
2013507428.tif 000028
【０３３４】
2.5. 水溶性のための試料の調製
化合物の試料を三通り調製する。
【０３３５】
【表４】
2013507428.tif 000029
【０３３６】
室温で24時間、穏やかに(350rpm)振とうする。
インキュベーション時間後、2500g(5500rpm)で30分間遠心分離する。
2.4.において記述したのと同じ条件を使用して、HPLC分析のために200μLの上清を試料採取する。
【０３３７】
2.6. データ処理
254nmにおける各標準点のピーク面積を積分する。
該面積対理論上の濃度をプロットすることにより、化合物の標準曲線を決定する。線形回帰(切片0、R2≧0.90)に基づいて標準曲線方程式を確立する。
y(面積)=傾き×x(濃度)
水相において調製された三通りそれぞれの平均面積を算出する。
上清中の化合物の濃度を、下記の式によって決定する。
【０３３８】
【数１】
2013507428.tif 000030
【０３３９】
化合物の溶解性を、下記の式によって決定する。
【０３４０】
【数２】
2013507428.tif 000031
【０３４１】
実施例:アミロイドベータ(Ab) 1〜42ペプチド凝集の阻害(ThTアッセイ)
チオフラビンT蛍光分光アッセイを使用して、複数の低分子を、アミロイドベータ(Ab) 1〜42ペプチドの凝集を阻害するそれらの能力について試験した。
【０３４２】
Abペプチドフィルムの調製
Ab1〜42凍結乾燥粉末(Bachem)をヘキサフルオロイソプロパノール(HFIP)中で1mMに再構成した。ペプチド溶液を室温で15分間音波破砕し、終夜かき混ぜ、アリコートを非シリコン化微小遠心管に入れた。次いで、アルゴン流下でHFIPを蒸発させた。得られたペプチドフィルムを真空下で10分間乾燥させ、厳重に密閉し、使用するまで-80℃で貯蔵した。
【０３４３】
Ab1〜42凝集の阻害
Ab1〜42凝集の低分子媒介性阻害についてアッセイするために、低分子を各実験の前に無水ジメチルスルホキシド(DMSO、Sigma-Aldrich)に溶解して、7.4mMの濃度に到達させた。Ab1〜42ペプチドフィルムをDMSOに溶解して、400μMに到達させた。PBS緩衝液中のアッセイ溶液を非シリコン化インキュベーション管内に調製して、下記の濃度に到達させた: 330mMの低分子、33mMのAb1〜42、10μMのチオフラビンT(ThT)および12.8% DMSO。したがって、低分子対Ab1〜42の最終モル比は、10:1であった。最大RFUを計測するために、低分子のない陽性対照を調製した。各低分子について、Ab1〜42のない陰性対照を調製した。すべてのアッセイにおいて3-アミノピラゾール三量体(トライマー)を試験して、独立した実験間の再現性を確かめた。溶液を37℃で24時間インキュベートし、蛍光分光(相対蛍光単位; RFU)を、黒色384ウェルアッセイプレート(Perkin-Elmer)中での6回の再現において、Perkin-Elmerフルオロカウント蛍光分光計で読み取った。凝集の阻害は、下記の方程式に従って、平均阻害%または±1標準偏差(SD)として表現する。
【０３４４】
【数３】
2013507428.tif 000032
【０３４５】
機能分子の選択についてのカットオフ基準を、50%阻害能として定義した。70%を超える阻害能を示す分子は、非常に強力な候補とみなされた。
【０３４６】
IC50を決定するために、上述したThTアッセイにおいて下記の化合物希釈物を使用した:
330μM、82.50μM、20.63μM、5.16μM、1.29μM、0.32μMおよび0.08μM。
【０３４７】
実施例:慢性高眼圧症/緑内障のラットモデルにおける本発明の化合物の効果
ダークアグーチラットの一方の目の強膜上静脈に高張食塩水を注射することによって、慢性高眼圧症(OHT)/緑内障のラットモデルを作出した。18匹のラットのOHTの目に、74mg/Lの濃度で5μLの体積の化合物1(ACI-260)を含有する硝子体内注射を投与した。18匹のラットを陰性対照として5μlの生理食塩水を投与し、18匹のラットを陽性対照として6μLのコンゴレッド(1.46mg/mL)を投与した。処置の3、8および16週間後、6匹/時点を安楽死させた。
【０３４８】
トノペンを使用して、投薬後の4週間に1回および屠殺前(3日以内)に、眼圧(IOP)を計測した。屠殺の5から7日前、動物に、5μLの4%フルオロゴールドを脳内注射して、網膜神経節細胞(RGC)に標識した。生存RGCを定量化するために、画像解析ソフトウェアの特定のシステムを使用して画像を処理し、生存RGCを平方ミリメートルで表現した。
【０３４９】
3週間で、眼圧の低減は動物のいずれにも観察されなくなった。しかしながら、化合物1で処置した群(p < 0.001)およびコンゴレッド群(p < 0.001)では、対照群と比較して生存RGCの数が有意に増大した。8および16週間で、これらの結果が確認され、化合物1が神経防護作用性であることを示唆していた。結果を図1に示す。
【０３５０】
【表５】
2013507428.tif 000033
【０３５１】
本発明による化合物(化合物1、2、3および4)を用いて取得された結果を比較すると分かるように、リンカーが長くなるほど溶解性が減少する。
【０３５２】
化合物5(本発明によるものではない)は、2,6-ジアミノピリジン部分を有さない。以上のように、生物学的活性は有意に減少している。
【０３５３】
【表６】
2013507428.tif 000034
【０３５４】
化合物6(本発明によるものではない)は、ピリジン環を2個しか有さない。化合物7(本発明によるものではない)は、ピリジン環を2個しか有さない。これらの化合物はいずれも、化合物1(本発明による)と比較して有意に低減した活性を有する。
【０３５５】
2,5-ジアミノピリジン部分を有する化合物8(本発明によるものではない)の溶解性は、2,6-ジアミノピリジン部分を有する化合物1(本発明による)の溶解性よりも有意に劣っている。
【０３５６】
化合物9、10および11は、化合物1に匹敵する活性を有するが、溶解性は劣っている。化合物12についてのみ、溶解性および活性の両方が化合物1と比較して劣っている。
【図１】
2013507428.tif 000038
【配列表】
2013507428000001.app
【国際調査報告】
2013507428.tif 000039
2013507428.tif 000040
2013507428.tif 000041
2013507428.tif 000042