(57)【要約】本発明は、ＰＰＡＲδアゴニスト（ａｇｏｎｉｓｔ）の新たな用途に関し、具体的には、ＰＰＡＲδアゴニストの胎児再プログラミング（ｆｅｔａｌ  ｒｅｐｒｏｇｒａｍｍｉｎｇ）効能に関する。本発明によると、ＰＰＡＲδアゴニストは、胎児発生または初期発育の時期にカルシウムイオンを調節して遅筋線維を増加させて筋持久力を向上させ、これにより脂質および糖代謝能力を向上させ、全身の代謝を再プログラミング（ｍｅｔａｂｏｌｉｃ  ｒｅｐｒｏｇｒａｍｍｉｎｇ）して成人または成体における高脂肪食および運動不足による肥満、糖尿などの代謝性疾患の発病を予防／抑制し、記憶力を増進させる。また、ＰＰＡＲδアゴニストを用いた胎児再プログラミングは、糖尿疾患モデルマウスにおいても糖尿の発病を予防／抑制させる。したがって、ＰＰＡＲδアゴニストは、胎児再プログラミングによるヒトおよび動物の持久力増進、肥満、糖尿、動脈硬化、脂肪肝などの代謝性疾患の予防／抑制、記憶力増進を目的とする医薬組成物、妊婦用補助剤、食品添加剤、機能性食品補助剤または機能性飲料組成物、動物用医薬組成物、動物用持久力増進剤、粉ミルクおよび離乳食組成物、動物飼料組成物などに用いることができる。【選択図】図１
2013538215.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
有効成分としてペルオキシゾーム増殖因子活性化受容体δ（ｐｅｒｏｘｉｓｏｍｅ  ｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｏｒ  ａｃｔｉｖａｔｅｄ  ｒｅｃｅｐｔｏｒδ、ＰＰＡＲδ）アゴニスト（ａｇｏｎｉｓｔ）を含む、哺乳動物の胎児再プログラミング（ｆｅｔａｌ  ｒｅｐｒｏｇｒａｍｍｉｎｇ）用組成物。
【請求項２】
胎児再プログラミング方法によって出産または生成された個体の筋持久力向上、代謝性疾患予防、または記憶力増進をもたらす、請求項１に記載の哺乳動物の胎児再プログラミング用組成物。
【請求項３】
代謝性疾患が、肥満、糖尿、高脂血症、動脈硬化または脂肪肝である、請求項２に記載の哺乳動物の胎児再プログラミング用組成物。
【請求項４】
子孫または子の出産率増大、病気に対する抵抗性増進、または寿命延長をもたらす、請求項１に記載の哺乳動物の胎児再プログラミング用組成物。
【請求項５】
哺乳動物が、ヒトである、請求項１に記載の哺乳動物の胎児再プログラミング用組成物。
【請求項６】
哺乳動物が、ヒト以外の哺乳動物である、請求項１に記載の哺乳動物の胎児再プログラミング用組成物。
【請求項７】
妊娠期、授乳期または妊娠授乳期の母体や、その子孫または子に投与するためのものである、請求項１に記載の哺乳動物の胎児再プログラミング用組成物。
【請求項８】
ＰＰＡＲδアゴニストが化学式Ｉで表される、請求項１から請求項７の何れか一項に記載の哺乳動物の胎児再プログラミング用組成物。
［化学式Ｉ］
【化１】
2013538215.tif 000081
［前記化学式Ｉ中、Ａは、酸素（Ｏ）、窒素（ＮＨ）、硫黄（Ｓ）またはセレン（Ｓｅ）であり；Ｂは、
【化２】
2013538215.tif 000082
であり；
Ｒ１は、下記構造から選択され、
【化３】
2013538215.tif 000083
Ｒ２は、水素、Ｃ１‐Ｃ５アルキル基、
【化４】
2013538215.tif 000084
または、下記構造から選択され；
【化５】
2013538215.tif 000085
Ｘは、硫黄（Ｓ）またはセレン（Ｓｅ）であり；
Ｙは、炭素（ＣＨ）または窒素（Ｎ）であり；
Ｒ３は、水素、Ｃ１‐Ｃ８のアルキルまたはハロゲンであり；
Ｒ４およびＲ５は、互いに独立して、水素、ハロゲンまたはＣ１‐Ｃ８のアルキルであり；
Ｒ６は、水素、Ｃ１‐Ｃ８のアルキル、Ｃ２‐Ｃ７のアルケニル、アルカリ金属、アルカリ土類金属または有機酸であり；
Ｒ１１およびＲ１２は、互いに独立して、水素、ハロゲン、Ｃ１‐Ｃ８のアルキルまたはＣ１‐Ｃ８のアルコキシであり；
Ｒ２１は、水素、ハロゲン、Ｃ１‐Ｃ７のアルキル、ヘテロ環基、Ｃ１‐Ｃ７のアルコキシ、ハロゲンで置換されたＣ１‐Ｃ５のアルキルまたはハロゲンで置換されたフェニルであり；
ｍおよびｎは、互いに独立して、１〜４の整数であり；
ｐは、１〜５の整数であり；
ｑは、１〜４の整数であり；
ｒは、１〜３の整数であり；
ｓは、１〜５の整数であり；
前記Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５、Ｒ６、Ｒ１１、Ｒ１２およびＲ２１のアルキルおよびアルコキシは、一つ以上のハロゲンまたはＣ１‐Ｃ５のアルキルアミンでさらに置換されていてもよい。］
【請求項９】
ＰＰＡＲδアゴニストが化学式ＩＩで表される、請求項８に記載の哺乳動物の胎児再プログラミング用組成物。
［化学式ＩＩ］
【化６】
2013538215.tif 000086
［前記化学式Ｉ中、Ａは、硫黄（Ｓ）またはセレン（Ｓｅ）であり；Ｂは
【化７】
2013538215.tif 000087
であり；
Ｒ１は、下記構造から選択され；
【化８】
2013538215.tif 000088
Ｒ２は、水素、Ｃ１‐Ｃ５アルキル基、
【化９】
2013538215.tif 000089
または、下記構造から選択され；
【化１０】
2013538215.tif 000090
Ｘは、硫黄（Ｓ）またはセレン（Ｓｅ）であり；
Ｙは、炭素（ＣＨ）または窒素（Ｎ）であり；
Ｒ３は、水素、Ｃ１‐Ｃ５のアルキルまたはハロゲンであり；
Ｒ４およびＲ５は、互いに独立して、水素またはＣ１‐Ｃ５のアルキルであり；
Ｒ６は、水素、Ｃ１‐Ｃ５のアルキル、Ｃ２‐Ｃ５のアルケニル、アルカリ金属またはアルカリ土類金属であり；
Ｒ１１は、水素、ハロゲン、Ｃ１‐Ｃ５のアルキルまたはＣ１‐Ｃ５のアルコキシであり；
Ｒ２１は、水素、ハロゲン、Ｃ１‐Ｃ５のアルキル、ヘテロ環基、Ｃ１‐Ｃ５のアルコキシ、ハロゲンで置換されたＣ１‐Ｃ５のアルキルまたはハロゲンで置換されたフェニルであり；
ｍは、１〜４の整数であり；
ｐは、１〜５の整数であり；
ｑは、１〜４の整数であり；
ｓは、１〜５の整数であり；
前記Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５、Ｒ６、Ｒ１１およびＲ２１のアルキルおよびアルコキシは、一つ以上のハロゲンまたはＣ１‐Ｃ５のアルキルアミンでさらに置換されていてもよい。］
【請求項１０】
ＰＰＡＲδアゴニストが化学式ＩＩＩで表される、請求項８に記載の哺乳動物の胎児再プログラミング用組成物。
［化学式ＩＩＩ］
【化１１】
2013538215.tif 000091
［前記化学式ＩＩＩ中、Ａは、それぞれ独立して硫黄（Ｓ）またはセレン（Ｓｅ）であり、Ｂは、
【化１２】
2013538215.tif 000092
であり；
Ｒ２は、水素、Ｃ１‐Ｃ５アルキル基、
【化１３】
2013538215.tif 000093
または、下記構造から選択され；
【化１４】
2013538215.tif 000094
Ｘは、硫黄（Ｓ）またはセレン（Ｓｅ）であり；
Ｙは、炭素（ＣＨ）または窒素（Ｎ）であり；
Ｒ３は、水素、Ｃ１‐Ｃ５のアルキルまたはハロゲンであり；
Ｒ４およびＲ５は、互いに独立して、水素またはＣ１‐Ｃ５のアルキルであり；
Ｒ６は、水素、Ｃ１‐Ｃ５のアルキル、Ｃ２‐Ｃ５のアルケニル、アルカリ金属またはアルカリ土類金属であり；
Ｒ１１は、水素、ハロゲン、Ｃ１‐Ｃ５のアルキルまたはＣ１‐Ｃ５のアルコキシであり；
Ｒ２１は、水素、ハロゲン、Ｃ１‐Ｃ５のアルキル、ヘテロ環基、Ｃ１‐Ｃ５のアルコキシ、ハロゲンで置換されたＣ１‐Ｃ５のアルキルまたはハロゲンで置換されたフェニルであり；
ｍは、１〜４の整数であり；
ｐは、１〜５の整数であり；
ｑは、１〜４の整数であり；
ｓは、１〜５の整数であり；
前記Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５、Ｒ６、Ｒ１１およびＲ２１のアルキルおよびアルコキシは、一つ以上のハロゲンまたはＣ１‐Ｃ５のアルキルアミンでさらに置換されていてもよい。］
【請求項１１】
ＰＰＡＲδアゴニストが化学式ＩＶで表される、請求項８に記載の哺乳動物の胎児再プログラミング用組成物。
［化学式ＩＶ］
【化１５】
2013538215.tif 000095
［前記化学式ＩＶ中、Ａは、それぞれ独立して硫黄（Ｓ）またはセレン（Ｓｅ）であり；
Ｒ２は、水素、Ｃ１‐Ｃ５アルキル基、
【化１６】
2013538215.tif 000096
または、下記構造から選択され；
【化１７】
2013538215.tif 000097
Ｘは、硫黄（Ｓ）またはセレン（Ｓｅ）であり；
Ｙは、炭素（ＣＨ）または窒素（Ｎ）であり；
Ｒ１１は、水素、ハロゲン、Ｃ１‐Ｃ５のアルキルまたはＣ１‐Ｃ５のアルコキシであり；
Ｒ２１は、水素、ハロゲン、Ｃ１‐Ｃ５のアルキル、ヘテロ環基、Ｃ１‐Ｃ５のアルコキシ、ハロゲンで置換されたＣ１‐Ｃ５のアルキルまたはハロゲンで置換されたフェニルであり；
ｐは、１〜５の整数であり；
ｑは、１〜４の整数であり；
ｓは、１〜５の整数であり；
前記Ｒ１１およびＲ２１のアルキルおよびアルコキシは、一つ以上のハロゲンまたはＣ１‐Ｃ５のアルキルアミンでさらに置換されていてもよい。］
【請求項１２】
ＰＰＡＲδアゴニストが化学式Ｖで表される、請求項８に記載の哺乳動物の胎児再プログラミング用組成物。
［化学式Ｖ］
【化１８】
2013538215.tif 000098
［前記化学式Ｖ中、Ａは、それぞれ独立して硫黄（Ｓ）またはセレン（Ｓｅ）であり；
Ｒ２は、下記構造から選択され；
【化１９】
2013538215.tif 000099
Ｘは、硫黄（Ｓ）またはセレン（Ｓｅ）であり；
Ｒ１１は、水素、ハロゲン、Ｃ１‐Ｃ５のアルキルまたはＣ１‐Ｃ５のアルコキシであり；
ｐは、１〜５の整数であり；
ｑは、１〜４の整数であり；
前記Ｒ１１のアルキルおよびアルコキシは、一つ以上のハロゲンまたはＣ１‐Ｃ５のアルキルアミンでさらに置換されていてもよい。］
【請求項１３】
ＰＰＡＲδアゴニストが化学式ＶＩで表される、請求項８に記載の哺乳動物の胎児再プログラミング用組成物。
［化学式ＶＩ］
【化２０】
2013538215.tif 000100
［前記化学式ＶＩ中、Ａは、それぞれ独立して硫黄（Ｓ）またはセレン（Ｓｅ）であり；
Ｒ２は、下記構造から選択され；
【化２１】
2013538215.tif 000101
Ｘは、硫黄（Ｓ）またはセレン（Ｓｅ）であり；
Ｒ１１は、水素、Ｃ１‐Ｃ３のアルキルまたはハロゲンであり；
ｐは、１〜５の整数であり；
ｑは、１〜４の整数であり；
前記Ｒ１１のアルキルは、一つ以上のハロゲンまたはＣ１‐Ｃ５のアルキルアミンでさらに置換されていてもよい。］
【請求項１４】
ＰＰＡＲδアゴニストが下記構造の化合物から選択される、請求項８に記載の哺乳動物の胎児再プログラミング用組成物。
【化２２】
2013538215.tif 000102
2013538215.tif 000103
2013538215.tif 000104
2013538215.tif 000105
【請求項１５】
化学式Ｖで表される、誘導体、その水和物、その溶媒和物、その立体異性体またはその薬学的に許容される塩。
［化学式Ｖ］
【化２３】
2013538215.tif 000106
［前記化学式Ｖ中、Ａは、それぞれ独立して硫黄（Ｓ）またはセレン（Ｓｅ）であり；
Ｒ２は、下記構造から選択され；
【化２４】
2013538215.tif 000107
Ｘは、硫黄（Ｓ）またはセレン（Ｓｅ）であり；
Ｒ１１は、水素、ハロゲン、Ｃ１‐Ｃ５のアルキルまたはＣ１‐Ｃ５のアルコキシであり；
ｐは、１〜５の整数であり；
ｑは、１〜４の整数であり；
前記Ｒ１１のアルキルおよびアルコキシは、一つ以上のハロゲンまたはＣ１‐Ｃ５のアルキルアミンでさらに置換されていてもよい。］
【請求項１６】
化学式ＶＩで表される、請求項１５に記載の誘導体、その水和物、その溶媒和物、その立体異性体またはその薬学的に許容される塩。
［化学式ＶＩ］
【化２５】
2013538215.tif 000108
［前記化学式ＶＩ中、Ａは、それぞれ独立して硫黄（Ｓ）またはセレン（Ｓｅ）であり；
Ｒ２は、下記構造から選択され；
【化２６】
2013538215.tif 000109
Ｘは、硫黄（Ｓ）またはセレン（Ｓｅ）であり；
Ｒ１１は、水素、Ｃ１‐Ｃ３のアルキルまたはハロゲンであり；
ｐは、１〜５の整数であり；
ｑは、１〜４の整数であり；
前記Ｒ１１のアルキルは、一つ以上のハロゲンまたはＣ１‐Ｃ５のアルキルアミンでさらに置換されていてもよい。］
【請求項１７】
下記構造の化合物から選択される、請求項１６に記載の誘導体、その水和物、その溶媒和物、その立体異性体またはその薬学的に許容される塩。
【化２７】
2013538215.tif 000110
2013538215.tif 000111
2013538215.tif 000112
2013538215.tif 000113
【請求項１８】
請求項１５に記載の化学式Ｖで表される誘導体、その水和物、その溶媒和物、その立体異性体またはその薬学的に許容される塩を有効成分として含む、動脈硬化症または高脂血症の治療および予防用、高コレステロール症の治療および予防用、脂肪肝の治療および予防用、糖尿病の治療および予防用、肥満の治療および予防用、筋肉強化用、筋疾患の治療および予防用、持久力増進用、記憶力増進用、痴呆症またはパーキンソン病の治療および予防用の医薬組成物。
【請求項１９】
請求項１５に記載の化学式Ｖで表される誘導体、その水和物、その溶媒和物、その立体異性体またはその薬学的に許容される塩を有効成分として含む、機能性食品補助剤、機能性飲料、食品添加物および動物飼料用組成物。
【請求項２０】
請求項１５に記載の化学式Ｖで表される誘導体、その水和物、その溶媒和物、その立体異性体またはその薬学的に許容される塩を有効成分として含む、肥満の予防および改善、脂肪肝の予防および改善、筋肉強化、筋疾患の予防および改善または持久力増進のための機能性化粧品組成物。
【請求項２１】
ヒト以外の哺乳動物にＰＰＡＲδアゴニストを投与する段階を含む、ヒト以外の哺乳動物の胎児再プログラミング方法。
【請求項２２】
胎児再プログラミング方法によって生成された個体の筋持久力向上、代謝性疾患予防、または記憶力増進をもたらす、請求項２１に記載のヒト以外の哺乳動物の胎児再プログラミング方法。
【請求項２３】
代謝性疾患が、肥満、糖尿、高脂血症、動脈硬化または脂肪肝である、請求項２２に記載のヒト以外の哺乳動物の胎児再プログラミング方法。
【請求項２４】
子孫または子の出産率増大、病気に対する抵抗性増進、または寿命延長をもたらす、請求項２１に記載のヒト以外の哺乳動物の胎児再プログラミング方法。
【請求項２５】
妊娠期、授乳期または妊娠授乳期の母体や、その子にＰＰＡＲδアゴニストを投与する、請求項２１に記載のヒト以外の哺乳動物の胎児再プログラミング方法。
【請求項２６】
ＰＰＡＲδアゴニストが化学式Ｉで表される、請求項２１から請求項２５の何れか一項に記載のヒト以外の哺乳動物の胎児再プログラミング方法。
［化学式Ｉ］
【化２８】
2013538215.tif 000114
［前記化学式Ｉ中、Ａは、酸素（Ｏ）、窒素（ＮＨ）、硫黄（Ｓ）またはセレン（Ｓｅ）であり；Ｂは、
【化２９】
2013538215.tif 000115
であり；
Ｒ１は、下記構造から選択され、
【化３０】
2013538215.tif 000116
Ｒ２は、水素、Ｃ１‐Ｃ５アルキル基、
【化３１】
2013538215.tif 000117
または、下記構造から選択され；
【化３２】
2013538215.tif 000118
Ｘは、硫黄（Ｓ）またはセレン（Ｓｅ）であり；
Ｙは、炭素（ＣＨ）または窒素（Ｎ）であり；
Ｒ３は、水素、Ｃ１‐Ｃ８のアルキルまたはハロゲンであり；
Ｒ４およびＲ５は、互いに独立して、水素、ハロゲンまたはＣ１‐Ｃ８のアルキルであり；
Ｒ６は、水素、Ｃ１‐Ｃ８のアルキル、Ｃ２‐Ｃ７のアルケニル、アルカリ金属、アルカリ土類金属または有機酸であり；
Ｒ１１およびＲ１２は、互いに独立して、水素、ハロゲン、Ｃ１‐Ｃ８のアルキルまたはＣ１‐Ｃ８のアルコキシであり；
Ｒ２１は、水素、ハロゲン、Ｃ１‐Ｃ７のアルキル、ヘテロ環基、Ｃ１‐Ｃ７のアルコキシ、ハロゲンで置換されたＣ１‐Ｃ５のアルキルまたはハロゲンで置換されたフェニルであり；
ｍおよびｎは、互いに独立して、１〜４の整数であり；
ｐは、１〜５の整数であり；
ｑは、１〜４の整数であり；
ｒは、１〜３の整数であり；
ｓは、１〜５の整数であり；
前記Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５、Ｒ６、Ｒ１１、Ｒ１２およびＲ２１のアルキルおよびアルコキシは、一つ以上のハロゲンまたはＣ１‐Ｃ５のアルキルアミンでさらに置換されていてもよい。］
【請求項２７】
ＰＰＡＲδアゴニストが化学式ＩＩで表される、請求項２６に記載のヒト以外の哺乳動物の胎児再プログラミング方法。
［化学式ＩＩ］
【化３３】
2013538215.tif 000119
［前記化学式Ｉ中、Ａは、硫黄（Ｓ）またはセレン（Ｓｅ）であり；Ｂは
【化３４】
2013538215.tif 000120
であり；
Ｒ１は、下記構造から選択され；
【化３５】
2013538215.tif 000121
Ｒ２は、水素、Ｃ１‐Ｃ５アルキル基、
【化３６】
2013538215.tif 000122
または、下記構造から選択され；
【化３７】
2013538215.tif 000123
Ｘは、硫黄（Ｓ）またはセレン（Ｓｅ）であり；
Ｙは、炭素（ＣＨ）または窒素（Ｎ）であり；
Ｒ３は、水素、Ｃ１‐Ｃ５のアルキルまたはハロゲンであり；
Ｒ４およびＲ５は、互いに独立して、水素またはＣ１‐Ｃ５のアルキルであり；
Ｒ６は、水素、Ｃ１‐Ｃ５のアルキル、Ｃ２‐Ｃ５のアルケニル、アルカリ金属またはアルカリ土類金属であり；
Ｒ１１は、水素、ハロゲン、Ｃ１‐Ｃ５のアルキルまたはＣ１‐Ｃ５のアルコキシであり；
Ｒ２１は、水素、ハロゲン、Ｃ１‐Ｃ５のアルキル、ヘテロ環基、Ｃ１‐Ｃ５のアルコキシ、ハロゲンで置換されたＣ１‐Ｃ５のアルキルまたはハロゲンで置換されたフェニルであり；
ｍは、１〜４の整数であり；
ｐは、１〜５の整数であり；
ｑは、１〜４の整数であり；
ｓは、１〜５の整数であり；
前記Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５、Ｒ６、Ｒ１１およびＲ２１のアルキルおよびアルコキシは、一つ以上のハロゲンまたはＣ１‐Ｃ５のアルキルアミンでさらに置換されていてもよい。］
【請求項２８】
ＰＰＡＲδアゴニストが化学式ＩＩＩで表される、請求項２６に記載のヒト以外の哺乳動物の胎児再プログラミング方法。
［化学式ＩＩＩ］
【化３８】
2013538215.tif 000124
［前記化学式ＩＩＩ中、Ａは、それぞれ独立して硫黄（Ｓ）またはセレン（Ｓｅ）であり、Ｂは、
【化３９】
2013538215.tif 000125
であり；
Ｒ２は、水素、Ｃ１‐Ｃ５アルキル基、
【化４０】
2013538215.tif 000126
または、下記構造から選択され；
【化４１】
2013538215.tif 000127
Ｘは、硫黄（Ｓ）またはセレン（Ｓｅ）であり；
Ｙは、炭素（ＣＨ）または窒素（Ｎ）であり；
Ｒ３は、水素、Ｃ１‐Ｃ５のアルキルまたはハロゲンであり；
Ｒ４およびＲ５は、互いに独立して、水素またはＣ１‐Ｃ５のアルキルであり；
Ｒ６は、水素、Ｃ１‐Ｃ５のアルキル、Ｃ２‐Ｃ５のアルケニル、アルカリ金属またはアルカリ土類金属であり；
Ｒ１１は、水素、ハロゲン、Ｃ１‐Ｃ５のアルキルまたはＣ１‐Ｃ５のアルコキシであり；
Ｒ２１は、水素、ハロゲン、Ｃ１‐Ｃ５のアルキル、ヘテロ環基、Ｃ１‐Ｃ５のアルコキシ、ハロゲンで置換されたＣ１‐Ｃ５のアルキルまたはハロゲンで置換されたフェニルであり；
ｍは、１〜４の整数であり；
ｐは、１〜５の整数であり；
ｑは、１〜４の整数であり；
ｓは、１〜５の整数であり；
前記Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５、Ｒ６、Ｒ１１およびＲ２１のアルキルおよびアルコキシは、一つ以上のハロゲンまたはＣ１‐Ｃ５のアルキルアミンでさらに置換されていてもよい。］
【請求項２９】
ＰＰＡＲδアゴニストが化学式ＩＶで表される、請求項２６に記載のヒト以外の哺乳動物の胎児再プログラミング方法。
［化学式ＩＶ］
【化４２】
2013538215.tif 000128
［前記化学式ＩＶ中、Ａは、それぞれ独立して硫黄（Ｓ）またはセレン（Ｓｅ）であり；
Ｒ２は、水素、Ｃ１‐Ｃ５アルキル基、
【化４３】
2013538215.tif 000129
または、下記構造から選択され；
【化４４】
2013538215.tif 000130
Ｘは、硫黄（Ｓ）またはセレン（Ｓｅ）であり；
Ｙは、炭素（ＣＨ）または窒素（Ｎ）であり；
Ｒ１１は、水素、ハロゲン、Ｃ１‐Ｃ５のアルキルまたはＣ１‐Ｃ５のアルコキシであり；
Ｒ２１は、水素、ハロゲン、Ｃ１‐Ｃ５のアルキル、ヘテロ環基、Ｃ１‐Ｃ５のアルコキシ、ハロゲンで置換されたＣ１‐Ｃ５のアルキルまたはハロゲンで置換されたフェニルであり；
ｐは、１〜５の整数であり；
ｑは、１〜４の整数であり；
ｓは、１〜５の整数であり；
前記Ｒ１１およびＲ２１のアルキルおよびアルコキシは、一つ以上のハロゲンまたはＣ１‐Ｃ５のアルキルアミンでさらに置換されていてもよい。］
【請求項３０】
ＰＰＡＲδアゴニストが化学式Ｖで表される、請求項２６に記載のヒト以外の哺乳動物の胎児再プログラミング方法。
［化学式Ｖ］
【化４５】
2013538215.tif 000131
［前記化学式Ｖ中、Ａは、それぞれ独立して硫黄（Ｓ）またはセレン（Ｓｅ）であり；
Ｒ２は、下記構造から選択され；
【化４６】
2013538215.tif 000132
Ｘは、硫黄（Ｓ）またはセレン（Ｓｅ）であり；
Ｒ１１は、水素、ハロゲン、Ｃ１‐Ｃ５のアルキルまたはＣ１‐Ｃ５のアルコキシであり；
ｐは、１〜５の整数であり；
ｑは、１〜４の整数であり；
前記Ｒ１１のアルキルおよびアルコキシは、一つ以上のハロゲンまたはＣ１‐Ｃ５のアルキルアミンでさらに置換されていてもよい。］
【請求項３１】
ＰＰＡＲδアゴニストが化学式ＶＩで表される、請求項２６に記載のヒト以外の哺乳動物の胎児再プログラミング方法。
［化学式ＶＩ］
【化４７】
2013538215.tif 000133
［前記化学式ＶＩ中、Ａは、それぞれ独立して硫黄（Ｓ）またはセレン（Ｓｅ）であり；
Ｒ２は、下記構造から選択され；
【化４８】
2013538215.tif 000134
Ｘは、硫黄（Ｓ）またはセレン（Ｓｅ）であり；
Ｒ１１は、水素、Ｃ１‐Ｃ３のアルキルまたはハロゲンであり；
ｐは、１〜５の整数であり；
ｑは、１〜４の整数であり；
前記Ｒ１１のアルキルは、一つ以上のハロゲンまたはＣ１‐Ｃ５のアルキルアミンでさらに置換されていてもよい。］
【請求項３２】
ＰＰＡＲδアゴニストが下記化合物から選択される、請求項２６に記載のヒト以外の哺乳動物の胎児再プログラミング方法。
【化４９】
2013538215.tif 000135
2013538215.tif 000136
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【請求項３３】
ＰＰＡＲδアゴニストを含む、ヒトを含む哺乳動物の胎児再プログラミング方法によって生成された個体の筋持久力向上、代謝性疾患予防、または記憶力増進用の食品添加剤、機能性食品補助剤または機能性飲料組成物。
【請求項３４】
代謝性疾患が、肥満、糖尿、高脂血症、動脈硬化または脂肪肝である、請求項３３に記載の哺乳動物の筋持久力向上、代謝性疾患予防、または記憶力増進用の食品添加剤、機能性食品補助剤または機能性飲料組成物。
【請求項３５】
妊娠期、授乳期または妊娠授乳期の哺乳動物や、その子孫または子に投与するためのものである、請求項３３に記載の哺乳動物の筋持久力向上、代謝性疾患予防、または記憶力増進用の食品添加剤、機能性食品補助剤または機能性飲料組成物。
【請求項３６】
添加剤としてＰＰＡＲδアゴニストを含む、哺乳動物の胎児再プログラミング方法によって生成された個体の筋持久力向上、代謝性疾患予防、または記憶力増進用の飼料組成物。
【請求項３７】
代謝性疾患が、肥満、糖尿、高脂血症、動脈硬化または脂肪肝である、請求項３６に記載の哺乳動物の筋持久力向上、代謝性疾患予防、または記憶力増進用の飼料組成物。
【請求項３８】
妊娠期、授乳期または妊娠授乳期の哺乳動物や、その子に投与するためのものである、請求項３６に記載の哺乳動物の筋持久力向上、代謝性疾患予防、または記憶力増進用の飼料組成物。
【請求項３９】
添加剤としてＰＰＡＲδアゴニストを含む、哺乳動物の胎児再プログラミング方法によって生成された個体の筋持久力向上、代謝性疾患予防、または記憶力増進用の粉ミルクまたは離乳食組成物。
【請求項４０】
代謝性疾患が、肥満、糖尿、高脂血症、動脈硬化または脂肪肝である、請求項３９に記載の哺乳動物の筋持久力向上、代謝性疾患予防、または記憶力増進用の粉ミルクまたは離乳食組成物。
【請求項４１】
哺乳動物が、ヒトである、請求項３９に記載の哺乳動物の胎児再プログラミング用の粉ミルクまたは離乳食組成物。
【請求項４２】
哺乳動物が、ヒト以外の哺乳動物である、請求項３９に記載の哺乳動物の胎児再プログラミング用の粉ミルクまたは離乳食組成物。
【請求項４３】
有効成分としてＰＰＡＲδアゴニストを含む、ヒトを含む哺乳動物の胎児再プログラミング方法によって生成された個体の持久力増進剤。
【請求項４４】
有効成分としてＰＰＡＲδアゴニストを含む、ヒト以外の哺乳動物の胎児再プログラミング方法によって生成された個体の持久力増進剤。
【請求項４５】
ＰＰＡＲδアゴニスト（ａｇｏｎｉｓｔ）の胎児再プログラミング（ｆｅｔａｌ  ｒｅｐｒｏｇｒａｍｍｉｎｇ）の用途。
【請求項４６】
ＰＰＡＲδアゴニストの人を含む哺乳動物の胎児プログラミング調節による筋持久力向上、肥満、糖尿、高脂血症、動脈硬化および脂肪肝を含む代謝性疾患の予防および記憶力増進の用途。
【請求項４７】
ヒト胎児再プログラミングにより根持久力増進、肥満、糖尿、高脂血症、動脈硬化および脂肪肝を含む代謝性疾患の予防および治療、および記憶力を増進させるＰＰＡＲδアゴニスト（ａｇｏｎｉｓｔ）の用途。
【請求項４８】
動物胎児再プログラミングにより肥満、糖尿、高脂血症、動脈硬化および脂肪肝を含む代謝性疾患の予防および治療、および記憶力を増進させるＰＰＡＲδアゴニスト（ａｇｏｎｉｓｔ）の用途。
【請求項４９】
動物の胎児再プログラミングにより根持久力を向上させるＰＰＡＲδアゴニスト（ａｇｏｎｉｓｔ）の用途。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、ピーピーエーアールデルタ（ＰＰＡＲδ）アゴニスト（ａｇｏｎｉｓｔ）の胎児再プログラミング（ｆｅｔａｌ  ｒｅｐｒｏｇｒａｍｍｉｎｇ）効能に関し、より詳細には、胎児発生または初期発育の時期にカルシウムイオンを調節して遅筋線維を増加させて筋持久力を向上させ、これにより脂質および糖代謝能力を向上させ、全身の代謝を再プログラミング（ｍｅｔａｂｏｌｉｃ  ｒｅｐｒｏｇｒａｍｍｉｎｇ）して成人または成体における高脂肪食および運動不足による肥満、糖尿などの代謝性疾患の発病を予防／抑制し、記憶力を増進させるＰＰＡＲδアゴニストの新たな用途に関する。本発明によると、ＰＰＡＲδアゴニストは、正常マウスにおける胎児再プログラミングだけでなく、先天的に糖尿疾患を有しているマウスにおいても糖尿の発病を予防／抑制することにより、ヒトおよび動物において、胎児再プログラミングによる肥満、糖尿などの代謝性疾患の予防および早産児の治療に効果的であり、ヒトおよび動物の持久力および記憶増進に効果的である。
【背景技術】
【０００２】
骨格筋（Ｓｋｅｌｅｔａｌ  ｍｕｓｃｌｅ）は、収縮速度と代謝特性によって遅筋と速筋とに分けられる（Ｓｃｈｉａｆｆｉｎｏ＆Ｒｅｇｇｉａｎｉ  Ｐｈｙｓｉｏｌ．Ｒｅｖ．，１９９６，７６，３７１‐４２３）。速筋であるＩＩ型筋線維（Ｔｙｐｅ  ＩＩ  ｍｕｓｃｌｅ）は、ブドウ糖をエネルギー源として用いており、短距離走のように速い動きを要する筋肉に多く存在する。これと異なり遅筋は、脂肪を主なエネルギー源として用いており、継続して運動する筋肉に多く存在する。遅筋は速筋より多くのミトコンドリアを有しているため速筋に比べて赤く見え、運動時に乳酸による疲労に対して抵抗性を有しており持久力を要する運動に適する（Ｃｏｓｔｉｌｌ、ＤＬ．ｅｔ  ａｌ．，Ｊ．Ａｐｐｌ．Ｐｙｓｉｏｌ．，１９７６，４０，１４９‐１５４；Ｓａｌｔｉｎ  Ｂ  ｅｔ  ａｌ．，Ａｎｎ．Ｎ．Ｙ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．，１９７７，３０１，３‐４４）。また、遅筋は速筋に比べて脂肪酸の酸化能力およびインスリン感受性が大きいため、高脂肪（体積比３５％脂肪）の飼料を摂取しても肥満および糖尿のような代謝性疾患の発病が著しく抑制された（Ｗａｎｇ，ＹＸ．ｅｔ  ａｌ．，ＰｌｏｓＢｉｏｌ．，２００４，２，ｅ２９４；Ｖｉｈａｎｇ  Ａ．Ｎａｒｋａｒ  ｅｔ  ａｌ，Ｃｅｌｌ，２００８，１３４，４０５‐４１５）。
【０００３】
速筋の遅筋化（Ｆａｓｔ‐ｔｏ‐ｓｌｏｗ  ｍｕｓｃｌｅ  ｆｉｂｅｒ  ｔｒａｎｓｆｏｒｍａｔｉｏｎ）に係る遺伝子としては、カルシニューリン（Ｃａｌｃｉｎｅｕｒｉｎ）（Ｓｅｒｒａｎｏ，ＡＬ．ｅｔ  ａｌ．，Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ．，２００１，９８，１３１０８‐１３１１３）、カルモジュリン依存性キナーゼ（ｃａｌｍｏｄｕｌｉｎ‐ｄｅｐｅｎｄｅｎｔ  ｋｉｎａｓｅ）（Ｗｕ，Ｈ．ｅｔ  ａｌ．，Ｓｃｉｅｎｃｅ．，２００２，２９６，３４９‐３５２）、ＰＧＣ‐１α（Ｌｉｎ、Ｊ．ｅｔ  ａｌ．，Ｎａｔｕｒｅ．，２００２，４１８，７９７‐８０１）、ＡＭＰＫ（Ｖｉｈａｎｇ  Ａ．Ｎａｒｋａｒ  ｅｔ  ａｌ．，Ｃｅｌｌ、２００８，１３４：４０５‐４１５）、サーチュイン１（Ｓｉｒｔ１）およびアディポネクチン（Ａｄｉｐｏｎｅｃｔｉｎ）（Ｍａｓａｔｏ  Ｉｗａｂｕ  ｅｔ  ａｌ．，Ｎａｔｕｒｅ，２０１０，４６４，１３１３‐１３１９）、ＰＰＡＲδ（Ｗａｎｇ，ＹＸ．ｅｔ  ａｌ．，ＰｌｏｓＢｉｏｌ．，２００４，２，ｅ２９４）などが知られている。そのうち、ＰＰＡＲδは、過剰発現やこの遺伝子の選択的な除去研究により、この遺伝子が速筋の遅筋化に非常に重要な調節因子であることが公知されている。ＰＰＡＲδは、遅筋に多く発現するリガンド（ｌｉｇａｎｄ）依存的転写因子である。筋特異的なＰＰＡＲδ形質転換マウス（ｔｒａｎｓｇｅｎｉｃ  ｍｉｃｅ）の場合、遅筋線維の生成が著しく増加しており、これにより走行する時間と距離がそれぞれ６７％と９２％増加するという結果が報告されている（Ｗａｎｇ，ＹＸ．ｅｔ  ａｌ．，ＰｌｏｓＢｉｏｌ．，２００４，２．ｅ２９４）。反面、ＰＰＡＲδ遺伝子が選択的に除去されたマウスの場合、正常マウスに比べて走行する時間が６２％減少しており、走行距離もまた６６％減少するということが報告された（Ｗａｎｇ，ＹＸ．ｅｔ  ａｌ．，ＰｌｏｓＢｉｏｌ．，２００４、２．ｅ２９４）。したがって、ＰＰＡＲδが遅筋生成および運動能力調節に重要な遺伝子であることが分かる。
【０００４】
しかし、ＰＰＡＲδのアゴニスト（ａｇｏｎｉｓｔ）を用いた研究結果では、従来研究による予測とは全く異なる結果が報告された。ＧＷ５０１５１６は、現在まで文献に報告されたＰＰＡＲδアゴニストのうち最も優れた効能を有する物質である（Ｗｉｌｌｉａｍ  Ｒ．Ｏｌｉｖｅｒ，Ｊｒ．ｅｔ  ａｌ．，Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ．，２００１，９８，５３０６‐５３１１）。この物質を用いた実験で従来のＰＰＡＲδ形質転換マウスを用いた結果とは異なる結果が報告された。すなわち、成体にＧＷ５０１５１６の単独投与のみでは遅筋および持久力の向上効果が現れず、運動とＧＷ５０１５１６投与を同時に組み合わせた場合にのみ遅筋生成および持久力が増進した（Ｖｉｈａｎｇ  Ａ．Ｎａｒｋａｒ  ｅｔ  ａｌ，Ｃｅｌｌ，２００８，１３４，４０５‐４１５）。したがって、現在までＰＰＡＲδアゴニスト（ａｇｏｎｉｓｔ）だけで持久力向上効能を立証した例がない。
【０００５】
胎児プログラミング（ｆｅｔａｌ  ｐｒｏｇｒａｍｍｉｎｇ）とは、妊娠期に胎児に露出された環境が胎児と成人の健康を決定するというものであり、イギリスのサウサンプトンとキングスカレッジで初めて論議された学説であり、現在、発達プログラミング（ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔａｌ  ｐｒｏｇｒａｍｍｉｎｇ）、胎児発達プログラミング（ｆｅｔａｌ  ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔａｌ  ｐｒｏｇｒａｍｍｉｎｇ）という用語と混用している。より詳細に定義すると、発生過程で胎児に露出された環境が胎児の器官および臓器の形成に影響を及ぼすことになり、このような変化が人生の全般にわたって影響を及ぼすことを意味する（Ｍｃ‐Ｍｉｌｌｅｎ  ａｎｄ  Ｒｏｂｉｎｓｏｎ，Ｐｈｙｓｉｏｌ  Ｒｅｖ．，２００５、８５、５７１‐６３３；Ｐｌａｇｅｍａｎｎ、Ｈｏｒｍ  Ｒｅｓ．，２００６，６５，８３８９；Ｔａｙｌｏｒ  ａｎｄ  Ｐｏｓｔｏｎ，Ｅｘｐ  Ｐｈｙｓｉｏｌ，２００７，９２，２８７２９８）。疫学調査結果によると、胎児プログラミング時期に適正な栄養分より過剰供給されるか少なく供給されると、成体になった時に肥満、心血管疾患、糖尿、高血圧、動脈硬化、癌などの深刻な疾患の発病が増加するということが報告されている。したがって、現在、これを予防するために様々な研究が行われており、代表的な例としてはタウリン（ｔａｕｒｉｎｅ）などが挙げられる。発生期間中にタウリンを摂取すると糖尿の発病が抑制されることが知られており（Ｃｈｅｒｉｆ  ｅｔ  ａｌ．，Ｊ  Ｅｎｄｏｃｒｉｎｏｌ．，１９９８，１５９，３４１‐３４８）、アルギニン（ａｒｇｉｎｉｎｅ）の場合、糖尿と心血管系障害（ｃａｒｄｉｏｖａｓｃｕｌａｒ  ｄｉｓｏｒｄｅｒ）を改善すると知られている（Ｗｕ  ｅｔ  ａｌ．，Ｊ  Ｎｕｔｒ．，２００４，１３４，２１６９‐２１７２）。また、流産を抑制するために妊婦が多く服用している葉酸（ｆｏｌｉｃ  ａｃｉｄ）もまた糖尿の予防に効果的であると知られている（Ｌｉｌｌｙｃｒｏｐ  ｅｔ  ａｌ．，Ｊ  Ｎｕｔｒ．，２００５，１３５，１３８２‐１３８６）。興味深いことに、ＧＬＰ‐１のアゴニストとして糖尿治療効果を有しているｅｘｅｄｉｎ‐４をラット（ｒａｔ）の発生期間に投与すると、酸化ストレス（ｏｘｉｄａｔｉｖｅ  ｓｔｒｅｓｓ）が減少し、これによって胎児の糖尿を予防できることが報告された（Ｓｔｏｆｆｅｒｓ  ＤＡ  ｅｔ  ａｌ．，Ｄｉａｂｅｔｅｓ．２００３，５２，７３４‐７４０；Ｒａａｂ  ＥＬ  ｅｔ  ａｌ．，Ａｍ．Ｊ．Ｐｈｙｓｉｏｌ．Ｒｅｇｕｌ．Ｉｎｔｅｇｒ．Ｃｏｍｐ．Ｐｈｙｓｉｏｌ．，２００９、２９７、１７８５‐１７９４）。
【０００６】
本発明者らは、ＰＰＡＲδアゴニスト（ａｇｏｎｉｓｔ）の胎児再プログラミング効能を立証し、本発明を完成した。本発明では、妊娠期および授乳期に母体にアゴニストを投与する方法（ｍａｔｅｒｎａｌ  ｔｒｅａｔｍｅｎｔ）を用いてＰＰＡＲδの効能を確認した。その結果、ＰＰＡＲδのアゴニストだけでもカルシウムイオンを調節して遅筋生成が増加した。ＰＰＡＲδアゴニストによって胎児再プログラミングされた子マウスは、成体に成長した後、それ以上ＰＰＡＲδアゴニストを投与したり運動させなかったにもかかわらず持久力が大幅に向上した。また、高脂肪摂取および運動不足による肥満および糖尿と代謝性疾患の発病が著しく予防または抑制され、記憶力を増進させる新たな効能が立証された。さらに、正常マウスだけでなく、先天性糖尿疾患モデルであるｄｂ／ｄｂマウスにおいても、ＰＰＡＲδのアゴニストだけで胎児の出生後に成体における糖尿発病が予防／抑制されることを立証した。
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００７】
本発明は、ＰＰＡＲδアゴニストの胎児再プログラミング効能に関し、ヒトおよび動物の発生過程で化合物を用いてＰＰＡＲδタンパク質の活性を増加させて遅筋線維を増加させ持久力を増加させることにより代謝性疾患の発病を根本的に予防または減少させ、記憶力を増進させるものである。本発明では、運動することなく単にＰＰＡＲδアゴニストのみを用いてヒトや動物の遅筋線維を増加させて持久力を大きく向上させ、全身の代謝を再プログラミングして代謝性疾患（ｍｅｔａｂｏｌｉｃ  ｄｉｓｅａｓｅｓ）の発病を根本的に予防または抑制しており、記憶力を増進したことが従来発明（ＷＯ２００９／０８６５２６、ＷＯ２００８／０８３３３０）で報告されたものと完全に差別化している。さらに進歩したことは、ＰＰＡＲδの胎児再プログラミング効能が先天的に糖尿疾患を有して生まれるマウスにおいても正常マウスと同様に現れるということである。
【０００８】
すなわち、本発明の目的は、有効成分としてペルオキシゾーム増殖因子活性化受容体δ（ｐｅｒｏｘｉｓｏｍｅ  ｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｏｒ  ａｃｔｉｖａｔｅｄ  ｒｅｃｅｐｔｏｒδ、ＰＰＡＲδ）アゴニスト（ａｇｏｎｉｓｔ）を含む、哺乳動物の胎児再プログラミング（ｆｅｔａｌ  ｒｅｐｒｏｇｒａｍｍｉｎｇ）用組成物を提供することにある。
【０００９】
本発明の他の目的は、ヒト以外の哺乳動物にＰＰＡＲδアゴニストを投与する段階を含む、ヒト以外の哺乳動物の胎児再プログラミング方法を提供することにある。
【００１０】
本発明の他の目的は、ＰＰＡＲδアゴニストを含む、ヒトを含む哺乳動物の胎児再プログラミング方法によって生成された個体の筋持久力向上、代謝性疾患予防、または記憶力増進用の食品添加剤、機能性食品補助剤または機能性飲料組成物を提供することにある。
【００１１】
本発明の他の目的は、添加剤としてＰＰＡＲδアゴニストを含む、哺乳動物の胎児再プログラミング方法によって生成された個体の筋持久力向上、代謝性疾患予防、または記憶力増進用の飼料組成物を提供することにある。
【００１２】
本発明の他の目的は、添加剤としてＰＰＡＲδアゴニストを含む、哺乳動物の胎児再プログラミング方法によって生成された個体の筋持久力向上、代謝性疾患予防、または記憶力増進用の粉ミルクまたは離乳食組成物を提供することにある。
【００１３】
本発明の他の目的は、有効成分としてＰＰＡＲδアゴニストを含む、ヒトを含む哺乳動物の胎児再プログラミング方法によって生成された個体の持久力増進剤を提供することにある。
【００１４】
本発明の他の目的は、有効成分としてＰＰＡＲδアゴニストを含む、ヒト以外の哺乳動物の胎児再プログラミング方法によって生成された個体の持久力増進剤を提供することにある。
【００１５】
本発明の他の目的は、新規のＰＰＡＲδアゴニスト、その水和物、その溶媒和物、その立体異性体またはその薬学的に許容される塩を提供することにあり、さらに他の目的は、前記新規のＰＰＡＲδアゴニストを有効成分として含む動脈硬化症または高脂血症の治療および予防用、高コレステロール症の治療および予防用、脂肪肝の治療および予防用、糖尿病の治療および予防用、肥満の治療および予防用、筋肉強化用、筋疾患の治療および予防用、持久力増進用、記憶力増進用、痴呆症またはパーキンソン病の治療および予防用の医薬組成物を提供することにある。
【００１６】
本発明の他の目的は、前記新規のＰＰＡＲδアゴニストを有効成分として含む機能性食品補助剤、機能性飲料、食品添加物および動物飼料用組成物を提供することにある。
【００１７】
本発明の他の目的は、前記新規のＰＰＡＲδアゴニストを有効成分として含む肥満の予防および改善、脂肪肝の予防および改善、筋肉強化、筋疾患の予防および改善、または持久力増進のための機能性化粧品組成物を提供することにある。
【課題を解決するための手段】
【００１８】
以下、本発明を詳細に説明する。
【００１９】
本発明は、哺乳動物の発生時期におけるＰＰＡＲδアゴニストの胎児再プログラミング効能に関し、ヒトをはじめ全ての動物の発生時期にＰＰＡＲδアゴニストによる胎児再プログラミングにより、根持久力増進、肥満、糖尿、動脈硬化、脂肪肝などの代謝性疾患予防および抑制、記憶力増進効能に関する。
【００２０】
本発明者らは、妊娠中の母体に薬物を投与する方法（ｍａｔｅｒｎａｌ  ｔｒｅａｔｍｅｎｔ）および授乳時期に母体に投与する方法を用いた。しかし、本発明は、前記二つの方法に限定されず、本発明で用いた投与方法以外の他の経路によるＰＰＡＲδ胎児再プログラミング方法を全て含む。例えば、母体を介して胎児のＰＰＡＲδ発現と活性を増加させる方法と、粉ミルクと離乳食などの形態で胎児に直接ＰＰＡＲδの発現と活性を増加させる方法と、を全て含む。また、本発明に用いられたアゴニスト［ＣＭＤＤ１１１１、１１１２、１２２６］だけでなく、ＰＰＡＲδアゴニストを有効成分とする妊娠中の動物の母体および妊婦用注射剤、服用剤、皮膚透過用軟膏製剤、ＰＰＡＲδアゴニストを含む飲料、食品を用いたＰＰＡＲδ胎児再プログラミングを全て含む。
【００２１】
従来の研究結果では、成体にＰＰＡＲδのアゴニストを経口投与した後、筋線維の変化を確認したが、遅筋生成が増加しなかった（Ｖｉｈａｎｇ  Ａ．Ｎａｒｋａｒ  ｅｔ  ａｌ、Ｃｅｌｌ，２００８，１３４，４０５‐４１５）。本発明では、妊娠中にＰＰＡＲδのアゴニストを母体にのみ投与するか授乳時期に母体に投与したにもかかわらず、生まれた胎児の遅筋が大きく増加した。したがって、ＰＰＡＲδによる胎児再プログラミングの結果は主に遅筋の増加として現れ、最も重要な作用時期は筋形成期（ｍｙｏｇｅｎｅｓｉｓ）であることが分かる。
【００２２】
遅筋は、脂肪酸酸化、ミトコンドリア生合成、スローミオシン重鎖（ｓｌｏｗ  ｍｙｏｓｉｎ  ｈｅａｖｙ  ｃｈａｉｎ）およびｓｌｏｗ  ｃｏｎｔｒａｃｔｉｏｎに係るタンパク質が増加していることを特徴とする。ＰＰＡＲδによって胎児再プログラミングがなされたマウスは、前記全ての遺伝子群の発現が増加した。また、筋肉の外形比較および組織染色の結果からもＰＰＡＲδアゴニストによって遅筋の形成が増加したことを確認することができた。前記二つの実験をまとめると、ＰＰＡＲδアゴニストによる胎児再プログラミングは、遅筋形成を促進させることができることが分かる。
【００２３】
カルシウムは、速筋の遅筋化を促進させる主な調節因子として知られている。本発明者の研究結果によると、ＰＰＡＲδアゴニストによる胎児再プログラミングの結果、マウスの筋肉で細胞質カルシウム濃度を調節するＲＹＲ、ＡＴＰ２Ａ２、ＰＬＮなどの遺伝子発現が著しく増加しており、これにより細胞質内カルシウムイオンの持続時間が大幅に増加した。このような細胞内カルシウムイオンの増加はカルシウム信号を活性化させて遅筋の生成を増加させた。
【００２４】
本発明で遅筋が増加したマウスは、対照群のマウスに比べて運動時間が２．９倍増加した。作用機序を明らかにするために骨格筋組織を用いた遺伝子分析（ｍｉｃｒｏａｒｒａｙ）実験を行った。その結果、投与群のマウスグループで心筋に多く発現すると知られているＲＹＲ２、ＡＴＰ２Ａ２、ＰＬＮ、ＭＹＢＰＣ３などの遺伝子発現が著しく増加したことを確認した。前記結果をまとめると、ＰＰＡＲδアゴニストによる胎児再プログラミングは、マウスにおける筋機能改善だけでなく、心臓機能の改善も同時にもたらした。
【００２５】
本発明の最大の利点は、ＰＰＡＲδ活性化合物による胎児再プログラミングにより成長後、ヒトや動物の健康と生活の質を向上させることができるということである。ＰＰＡＲδによって胎児再プログラミングされたマウスは、成体になった後にＰＰＡＲδ活性化合物を投与したり運動させなかったにもかかわらず、成体になった時に遅筋発生および持久力が著しく増加し、高脂肪および運動不足による肥満および糖尿疾患のような代謝症候群の発病が著しく抑制された。
【００２６】
肥満は、単に糖尿だけでなく、高脂血症、動脈硬化、心筋梗塞のような代謝性疾患の直接的な発病原因である。したがって、本発明は、ＰＰＡＲδアゴニストによる胎児再プログラミングにより脂肪代謝能力が増加したマウスは、肥満だけでなく、全ての代謝症候群（ｍｅｔａｂｏｌｉｃ  ｓｙｎｄｒｏｍｅ）に対する予防効果をもたらすことができる。
【００２７】
遅筋は速筋より多くのミトコンドリアを含有している。ミトコンドリアは母系遺伝する特性を有している。したがって、ＰＰＡＲδアゴニストにより胎児再プログラミングがなされてミトコンドリアが増加したマウスは、次世代のミトコンドリア形成に影響を及ぼすことができ、ＰＰＡＲδアゴニストを全く投与していない後世の持久力を増加させ代謝症候群の発病を予め防止することができる。
【００２８】
すなわち、本発明は、有効成分としてペルオキシゾーム増殖因子活性化受容体δ（ｐｅｒｏｘｉｓｏｍｅ  ｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｏｒ  ａｃｔｉｖａｔｅｄ  ｒｅｃｅｐｔｏｒδ、ＰＰＡＲδ）アゴニスト（ａｇｏｎｉｓｔ）を含む、哺乳動物の胎児再プログラミング（ｆｅｔａｌ  ｒｅｐｒｏｇｒａｍｍｉｎｇ）用組成物を提供する。また、本発明は、ヒト以外の哺乳動物にＰＰＡＲδアゴニストを投与する段階を含む、ヒト以外の哺乳動物の胎児再プログラミング方法を提供する。また、本発明は、ＰＰＡＲδアゴニストを含む、ヒトを含む哺乳動物の胎児再プログラミング方法によって生成された個体の筋持久力向上、代謝性疾患予防、または記憶力増進用の食品添加剤、機能性食品補助剤または機能性飲料組成物を提供する。また、本発明は、添加剤としてＰＰＡＲδアゴニストを含む、哺乳動物の胎児再プログラミング方法によって生成された個体の筋持久力向上、代謝性疾患予防、または記憶力増進用の飼料組成物を提供する。また、本発明は、添加剤としてＰＰＡＲδアゴニストを含む、哺乳動物の胎児再プログラミング方法によって生成された個体の筋持久力向上、代謝性疾患予防、または記憶力増進用の粉ミルクまたは離乳食組成物を提供する。また、本発明は、有効成分としてＰＰＡＲδアゴニストを含む、ヒトを含む哺乳動物の胎児再プログラミング方法によって生成された個体の持久力増進剤を提供する。また、本発明は有効成分としてＰＰＡＲδアゴニストを含む、ヒト以外の哺乳動物の胎児再プログラミング方法によって生成された個体の持久力増進剤を提供する。
【００２９】
本発明で言及するＰＰＡＲδアゴニストを例示すると、以下のとおりである。しかし、本発明は以下に例示された物質に限定されず、全てのＰＰＡＲδアゴニストに適用される［ＰＰＡＲδアゴニスト例：ＷＯ２０１０／０３９７８９、ＷＯ２０１０／０２８７６１、ＷＯ２０１０／０２３５７２、ＷＯ２０１０／００９２１５、ＷＯ２０１０／００９２１２、ＷＯ２０１０／００９２１０、ＷＯ２０１０／００８２９９、ＷＯ２００９／１５５７０９、ＷＯ２００９／１４０３４２、ＷＯ２００９／１３６２９０、ＷＯ２００９／１１４１７３、ＷＯ２００９／０９８０００、ＷＯ２００９／０９７９９９、ＷＯ２００９／０９７９９８、ＷＯ２００９／０９７９９７、ＷＯ２００９／０９７９９５、ＷＯ２００９／０９１５５０、ＷＯ２００９／０７８９８１、ＷＯ２００９／０３９９４４、ＷＯ２００９／０３９９４３、ＷＯ２００９／０３９９４２、ＷＯ２００９／０２７７８５、ＷＯ２００９／０２４２８７、ＷＯ２００９／０１６２１６、ＷＯ２００９／００６４８３、ＷＯ２００８／１４４９２５、ＷＯ２００８／１３５１４１、ＷＯ２００８／１２２０１４、ＷＯ２００８／１１５５７４、ＷＯ２００８／１０４５５７、ＷＯ２００８／０８９８９２、ＷＯ２００８／０８５３１６、ＷＯ２００８／０７９２９３、ＷＯ２００８／０７０１５０、ＷＯ２００８／０６０４７６、ＷＯ２００８／０５８６３１、ＷＯ２００８／０５８６３０、ＷＯ２００８／０５８６２９、ＷＯ２００８／０５８６２８、ＷＯ２００８／０５２６５８、ＷＯ２００８／０１７３８１、ＷＯ２００８／０００４８４、ＷＯ２００７／１３１６２２、ＷＯ２００７／１３１６２１、ＷＯ２００７／１３１６２０、ＷＯ２００７／１３１６１９、ＷＯ２００７／１３００７５、ＷＯ２００７／１２１４３２、ＷＯ２００７／１１０２１６、ＷＯ２００７／１１０２１５、ＷＯ２００７／１０７８６９、ＷＯ２００７／１０５０５０、ＷＯ２００７／１０５０４９、ＷＯ２００７／０８９８５７、ＷＯ２００７／０８９６６７、ＷＯ２００７／０８７４４８、ＷＯ２００７／０８７２０４、ＷＯ２００７／０５９８７１、ＷＯ２００７／０５６４９６、ＷＯ２００７／０５６２１０、ＷＯ２００７／０４７４３２、ＷＯ２００７／０３３２３１、ＷＯ２００７／０１６５３８、ＷＯ２００６／１３７７９６、ＷＯ２００６／１３７７９５、ＷＯ２００６／１２４４９０、ＷＯ２００６／１２３１８５、ＷＯ２００６／１２３１８４、ＷＯ２００６／１２３１８３、ＷＯ２００６／１２３１８２、ＷＯ２００６／１１３９１９、ＷＯ２００６／１１１３２１、ＷＯ２００６／１１１２６１、ＷＯ２００６／１０４８２６、ＷＯ２００６／１０２０６７、ＷＯ２００６／０９８９１２、ＷＯ２００６／０９７２２０、ＷＯ２００６／０９２５０７、ＷＯ２００６／０９１５０６、ＷＯ２００６／０８７６３０、ＷＯ２００６／０８４１７６、ＷＯ２００６／０８３６４５、ＷＯ２００６／０７８６０５、ＷＯ２００６／０７８５７５、ＷＯ２００６／０７６６８１、ＷＯ２００６／０５６８５４、ＷＯ２００６／０５５１８７、ＷＯ２００６／０４１１９７、ＷＯ２００６／０４０００２、ＷＯ２００６／０３４１２８、ＷＯ２００６／０３３００４、ＷＯ２００６／０３３０６２、ＷＯ２００６／０３２９８７、ＷＯ２００６／０３２３８４、ＷＯ２００６／０３２０２３、ＷＯ２００６／０３１９６９、ＷＯ２００６／０１８１７４、ＷＯ２００６／０１７０５５、ＷＯ２００５／１１５９８３、ＷＯ２００５／１１３５０６、ＷＯ２００５／１０５７５４、ＷＯ２００５／１０５７３６、ＷＯ２００５／１０５７２６、ＷＯ２００５／１０３０２２、ＷＯ２００５／０９７７８４、ＷＯ２００５／０９２３１７、ＷＯ２００５／０９２３１６、ＷＯ２００５／０９１８５７、ＷＯ２００５／０７７９２５、ＷＯ２００５／０６６１３６、ＷＯ２００５／０６５６８３、ＷＯ２００５／０６３７６２、ＷＯ２００５／０６３７６１、ＷＯ２００５／０６０９５８、ＷＯ２００５／０４１９５９、ＷＯ２００５／０３７７６３、ＷＯ２００５／０３７１９９、ＷＯ２００５／０３０６９４、ＷＯ２００５／００７６２８、ＷＯ２００５／００７１１１、ＷＯ２００４／１０１７５２、ＷＯ２００４／０９６１３７、ＷＯ２００４／０９３７９９、ＷＯ２００４／０９２１１７、ＷＯ２００４／０７３６０６、ＷＯ２００４／０６７４８２、ＷＯ２００４／０６６９２９、ＷＯ２００４／０６３１８４、ＷＯ２００４／０６３１６６、ＷＯ２００４／０６３１６５、ＷＯ２００４／０６３１５５、ＷＯ２００４／０３３４３８、ＷＯ２００４／０３３４１６、ＷＯ２００４／０１８４２１、ＷＯ２００４／００７４３０、ＷＯ２００３／０９４８４５、ＷＯ２００３／０７４４９５、ＷＯ２００３／０７２１００、ＷＯ２００３／０４８１０８、ＷＯ２００２／１０２８１３、ＷＯ２００２／０９２５９０、ＷＯ２００１／０７０７５４、ＷＯ２００１／０７０７５３、ＷＯ１９９８／０４９５５５、ＷＯ１９９８／２７９７４、ＷＯ１９９７／２８１４９、ＷＯ１９９７／２８１１５、ＷＯ１９９７／２７８５７、ＷＯ１９９７／２７８４７、ＷＯ１９９７／２８１３７、ＷＯ１９９６／００１３１７など］。
【００３０】
前記ＰＰＡＲδアゴニストの一部は下記化学式Ｉで表される。
【００３１】
［化学式Ｉ］
【化１】
2013538215.tif 000003
【００３２】
［前記化学式Ｉ中、Ａは、酸素（Ｏ）、窒素（ＮＨ）、硫黄（Ｓ）またはセレン（Ｓｅ）であり；Ｂは、
【化２】
2013538215.tif 000004
であり；
【００３３】
Ｒ１は、下記構造から選択され、
【００３４】
【化３】
2013538215.tif 000005
【００３５】
Ｒ２は、水素、Ｃ１‐Ｃ５アルキル基、
【化４】
2013538215.tif 000006
または、下記構造から選択され；
【００３６】
【化５】
2013538215.tif 000007
【００３７】
Ｘは、硫黄（Ｓ）またはセレン（Ｓｅ）であり；
【００３８】
Ｙは、炭素（ＣＨ）または窒素（Ｎ）であり；
【００３９】
Ｒ３は、水素、Ｃ１‐Ｃ８のアルキルまたはハロゲンであり；
【００４０】
Ｒ４およびＲ５は、互いに独立して、水素、ハロゲンまたはＣ１‐Ｃ８のアルキルであり；
【００４１】
Ｒ６は、水素、Ｃ１‐Ｃ８のアルキル、Ｃ２‐Ｃ７のアルケニル、アルカリ金属、アルカリ土類金属または有機酸であり；
【００４２】
Ｒ１１およびＲ１２は、互いに独立して、水素、ハロゲン、Ｃ１‐Ｃ８のアルキルまたはＣ１‐Ｃ８のアルコキシであり；
【００４３】
Ｒ２１は、水素、ハロゲン、Ｃ１‐Ｃ７のアルキル、ヘテロ環基、Ｃ１‐Ｃ７のアルコキシ、ハロゲンで置換されたＣ１‐Ｃ５のアルキルまたはハロゲンで置換されたフェニルであり；
【００４４】
ｍおよびｎは、互いに独立して、１〜４の整数であり；
【００４５】
ｐは、１〜５の整数であり；
【００４６】
ｑは、１〜４の整数であり；
【００４７】
ｒは、１〜３の整数であり；
【００４８】
ｓは、１〜５の整数であり；
【００４９】
前記Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５、Ｒ６、Ｒ１１、Ｒ１２およびＲ２１のアルキルおよびアルコキシは、一つ以上のハロゲンまたはＣ１‐Ｃ５のアルキルアミンでさらに置換されていてもよい。］
【００５０】
前記ＰＰＡＲδアゴニストの一部は下記化学式ＩＩで表される。
【００５１】
［化学式ＩＩ］
【化６】
2013538215.tif 000008
【００５２】
［前記化学式Ｉ中、Ａは、硫黄（Ｓ）またはセレン（Ｓｅ）であり；Ｂは
【化７】
2013538215.tif 000009
であり；
【００５３】
Ｒ１は、下記構造から選択され；
【００５４】
【化８】
2013538215.tif 000010
【００５５】
Ｒ２は、水素、Ｃ１‐Ｃ５アルキル基、
【化９】
2013538215.tif 000011
または、下記構造から選択され；
【００５６】
【化１０】
2013538215.tif 000012
【００５７】
Ｘは、硫黄（Ｓ）またはセレン（Ｓｅ）であり；
【００５８】
Ｙは、炭素（ＣＨ）または窒素（Ｎ）であり；
【００５９】
Ｒ３は、水素、Ｃ１‐Ｃ５のアルキルまたはハロゲンであり；
【００６０】
Ｒ４およびＲ５は、互いに独立して、水素またはＣ１‐Ｃ５のアルキルであり；
【００６１】
Ｒ６は、水素、Ｃ１‐Ｃ５のアルキル、Ｃ２‐Ｃ５のアルケニル、アルカリ金属またはアルカリ土類金属であり；
【００６２】
Ｒ１１は、水素、ハロゲン、Ｃ１‐Ｃ５のアルキルまたはＣ１‐Ｃ５のアルコキシであり；
【００６３】
Ｒ２１は、水素、ハロゲン、Ｃ１‐Ｃ５のアルキル、ヘテロ環基、Ｃ１‐Ｃ５のアルコキシ、ハロゲンで置換されたＣ１‐Ｃ５のアルキルまたはハロゲンで置換されたフェニルであり；
【００６４】
ｍは、１〜４の整数であり；
【００６５】
ｐは、１〜５の整数であり；
【００６６】
ｑは、１〜４の整数であり；
【００６７】
ｓは、１〜５の整数であり；
【００６８】
前記Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５、Ｒ６、Ｒ１１およびＲ２１のアルキルおよびアルコキシは、一つ以上のハロゲンまたはＣ１‐Ｃ５のアルキルアミンでさらに置換されていてもよい。］
【００６９】
前記ＰＰＡＲδアゴニストの一部は下記化学式ＩＩＩで表される。
【００７０】
［化学式ＩＩＩ］
【化１１】
2013538215.tif 000013
【００７１】
［前記化学式ＩＩＩ中、Ａは、それぞれ独立して硫黄（Ｓ）またはセレン（Ｓｅ）であり、Ｂは、
【化１２】
2013538215.tif 000014
であり；
【００７２】
Ｒ２は、水素、Ｃ１‐Ｃ５アルキル基、
【化１３】
2013538215.tif 000015
または、下記構造から選択され；
【００７３】
【化１４】
2013538215.tif 000016
【００７４】
Ｘは、硫黄（Ｓ）またはセレン（Ｓｅ）であり；
【００７５】
Ｙは、炭素（ＣＨ）または窒素（Ｎ）であり；
【００７６】
Ｒ３は、水素、Ｃ１‐Ｃ５のアルキルまたはハロゲンであり；
【００７７】
Ｒ４およびＲ５は、互いに独立して、水素またはＣ１‐Ｃ５のアルキルであり；
【００７８】
Ｒ６は、水素、Ｃ１‐Ｃ５のアルキル、Ｃ２‐Ｃ５のアルケニル、アルカリ金属またはアルカリ土類金属であり；
【００７９】
Ｒ１１は、水素、ハロゲン、Ｃ１‐Ｃ５のアルキルまたはＣ１‐Ｃ５のアルコキシであり；
【００８０】
Ｒ２１は、水素、ハロゲン、Ｃ１‐Ｃ５のアルキル、ヘテロ環基、Ｃ１‐Ｃ５のアルコキシ、ハロゲンで置換されたＣ１‐Ｃ５のアルキルまたはハロゲンで置換されたフェニルであり；
【００８１】
ｍは、１〜４の整数であり；
【００８２】
ｐは、１〜５の整数であり；
【００８３】
ｑは、１〜４の整数であり；
【００８４】
ｓは、１〜５の整数であり；
【００８５】
前記Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５、Ｒ６、Ｒ１１およびＲ２１のアルキルおよびアルコキシは、一つ以上のハロゲンまたはＣ１‐Ｃ５のアルキルアミンでさらに置換されていてもよい。］
【００８６】
前記ＰＰＡＲδアゴニストの一部は下記化学式ＩＶで表される。
【００８７】
［化学式ＩＶ］
【化１５】
2013538215.tif 000017
【００８８】
［前記化学式ＩＶ中、Ａは、それぞれ独立して硫黄（Ｓ）またはセレン（Ｓｅ）であり；
【００８９】
Ｒ２は、水素、Ｃ１‐Ｃ５アルキル基、
【化１６】
2013538215.tif 000018
または、下記構造から選択され；
【００９０】
【化１７】
2013538215.tif 000019
【００９１】
Ｘは、硫黄（Ｓ）またはセレン（Ｓｅ）であり；
【００９２】
Ｙは、炭素（ＣＨ）または窒素（Ｎ）であり；
【００９３】
Ｒ１１は、水素、ハロゲン、Ｃ１‐Ｃ５のアルキルまたはＣ１‐Ｃ５のアルコキシであり；
【００９４】
Ｒ２１は、水素、ハロゲン、Ｃ１‐Ｃ５のアルキル、ヘテロ環基、Ｃ１‐Ｃ５のアルコキシ、ハロゲンで置換されたＣ１‐Ｃ５のアルキルまたはハロゲンで置換されたフェニルであり；
【００９５】
ｐは、１〜５の整数であり；
【００９６】
ｑは、１〜４の整数であり；
【００９７】
ｓは、１〜５の整数であり；
【００９８】
前記Ｒ１１およびＲ２１のアルキルおよびアルコキシは、一つ以上のハロゲンまたはＣ１‐Ｃ５のアルキルアミンでさらに置換されていてもよい。］
【００９９】
前記ＰＰＡＲδアゴニストのうち新規化合物は、下記化学式Ｖで表される。
【０１００】
［化学式Ｖ］
【化１８】
2013538215.tif 000020
【０１０１】
［前記化学式Ｖ中、Ａは、それぞれ独立して硫黄（Ｓ）またはセレン（Ｓｅ）であり；
【０１０２】
Ｒ２は、下記構造から選択され；
【０１０３】
【化１９】
2013538215.tif 000021
【０１０４】
Ｘは、硫黄（Ｓ）またはセレン（Ｓｅ）であり；
【０１０５】
Ｒ１１は、水素、ハロゲン、Ｃ１‐Ｃ５のアルキルまたはＣ１‐Ｃ５のアルコキシであり；
【０１０６】
ｐは、１〜５の整数であり；
【０１０７】
ｑは、１〜４の整数であり；
【０１０８】
前記Ｒ１１のアルキルおよびアルコキシは、一つ以上のハロゲンまたはＣ１‐Ｃ５のアルキルアミンでさらに置換されていてもよい。］
【０１０９】
より具体的に、前記ＰＰＡＲδアゴニストのうち新規物質は、下記化学式ＶＩで表される。
【０１１０】
［化学式ＶＩ］
【化２０】
2013538215.tif 000022
【０１１１】
［前記化学式ＶＩ中、Ａは、それぞれ独立して硫黄（Ｓ）またはセレン（Ｓｅ）であり；
【０１１２】
Ｒ２は、下記構造から選択され；
【０１１３】
【化２１】
2013538215.tif 000023
【０１１４】
Ｘは、硫黄（Ｓ）またはセレン（Ｓｅ）であり；
【０１１５】
Ｒ１１は、水素、Ｃ１‐Ｃ３のアルキルまたはハロゲンであり；
【０１１６】
ｐは、１〜５の整数であり；
【０１１７】
ｑは、１〜４の整数であり；
【０１１８】
前記Ｒ１１のアルキルは、一つ以上のハロゲンまたはＣ１‐Ｃ５のアルキルアミンでさらに置換されていてもよい。］
【０１１９】
前記ＰＰＡＲδアゴニストのうち新規物質は、より具体的には、下記化合物のとおりである。
【０１２０】
【化２２】
2013538215.tif 000024
【０１２１】
【化２３】
2013538215.tif 000025
【０１２２】
【化２４】
2013538215.tif 000026
【０１２３】
【化２５】
2013538215.tif 000027
【０１２４】
【化２６】
2013538215.tif 000028
【０１２５】
【化２７】
2013538215.tif 000029
【０１２６】
【化２８】
2013538215.tif 000030
【０１２７】
【化２９】
2013538215.tif 000031
【０１２８】
【化３０】
2013538215.tif 000032
【０１２９】
【化３１】
2013538215.tif 000033
【０１３０】
【化３２】
2013538215.tif 000034
【０１３１】
【化３３】
2013538215.tif 000035
【０１３２】
【化３４】
2013538215.tif 000036
【０１３３】
【化３５】
2013538215.tif 000037
【０１３４】
【化３６】
2013538215.tif 000038
【０１３５】
【化３７】
2013538215.tif 000039
【０１３６】
また、本発明は、前記化学式Ｖで表されるＰＰＡＲδアゴニストを有効成分として含む動脈硬化症または高脂血症の治療および予防用、高コレステロール症の治療および予防用、脂肪肝の治療および予防用、糖尿病の治療および予防用、肥満の治療および予防用、筋肉強化用、筋疾患の治療および予防用、持久力増進用、記憶力増進用、痴呆症またはパーキンソン病の治療および予防用の医薬組成物を提供する。また、本発明は、前記新規のＰＰＡＲδアゴニストを有効成分として含む機能性食品補助剤、機能性飲料、食品添加物および動物飼料用の組成物を提供する。また、本発明は、前記新規のＰＰＡＲδアゴニストを有効成分として含む肥満の予防および改善、脂肪肝予防および改善、筋肉強化、筋疾患予防および改善または持久力増進のための機能性化粧品組成物を提供する。
【０１３７】
本発明による治療学的効果を達成するために用いられるＰＰＡＲδアゴニストの量は、特定化合物、投与方法、治療する対象、および治療する疾患によって異なるか、通常の医薬の投与量に依存するが、より好ましくは、前記ＰＰＡＲδアゴニストの有効投与量は、１〜１００ｍｇ／ｋｇ（体重）／１日の範囲内で投与される。また、１日有効投与量の範囲内で一日に一回または一日に数回分けて投与する。また、剤形によって経口投与または局所投与用の両方が可能である。本発明による薬剤学的組成物の経口投与の場合、従来の全ての様々な形態に製造することができ、例えば、錠剤、粉末剤、乾燥シロップ、咀嚼錠、顆粒剤、チュアブル錠、カプセル剤、ソフトカプセル剤、丸剤、ドリンク剤、舌下錠などの様々な形態で存在することができる。本発明による錠剤は、有効量で生物学的利用能を有する任意の形態または方式、すなわち、経口経路で患者に投与されることができ、治療または予防しようとする疾病状態の特性、疾病の段階、およびその他の関連事情によって適した投与形態または方式を容易に選択することができ、本発明による組成物が錠剤である場合、一つ以上の薬学的に許容される賦形剤を含むことができ、このような賦形剤の割合および性質は、選択される錠剤の溶解度および化学的特性、選択される投与経路および標準薬務によって決定されることができる。
【発明の効果】
【０１３８】
本発明によると、ＰＰＡＲδアゴニストは、胎児発生または初期発育の時期にカルシウムイオンを調節して遅筋線維を増加させて筋持久力を向上させ、これにより脂質および糖代謝能力を向上させ、全身の代謝を再プログラミング（ｍｅｔａｂｏｌｉｃ  ｒｅｐｒｏｇｒａｍｍｉｎｇ）して成人または成体における高脂肪食および運動不足による肥満、糖尿などの代謝性疾患の発病を予防／抑制し、記憶力を増進させる。したがって、ＰＰＡＲδアゴニストは、胎児再プログラミングによるヒトおよび動物の持久力増進、肥満、糖尿、動脈硬化、脂肪肝などの代謝性疾患予防／抑制、記憶力増進を目的とする医薬組成物、妊婦用補助剤、動物用医薬組成物、動物用持久力増進剤、粉ミルクおよび離乳食組成物、動物飼料組成物などに用いることができる。
【図面の簡単な説明】
【０１３９】
【図１】実施例１の実験過程の模式図［ａ．妊娠期間と授乳期間に同時に投与、ｂ．妊娠期間に投与、ｃ．授乳期間に投与］である。
【図２】妊娠中の母体に投与されたＰＰＡＲδアゴニストが胎盤を通過したか否かを確認するために行った薬物動態学的実験の結果を示すものである。
【図３】図１の方法によって行われた実験でＰＰＡＲδアゴニストによって胎児再プログラミングされたマウス胎児の出生直後の体重測定結果（ｎ＝８）を示すものである。
【図４】図１の方法によって行われた実験で胎児の体重変化を２週間観察した結果（ｎ＝８）を示すものである。
【図５】図１の方法によって行われた実験で胎児が６週まで成長した時の体重を比較した結果（ｎ＝８）を示すものである。
【図６】図１の方法によって行われた実験で骨格発生に異常があるか否かを確認するために胎児の骨格を染色した写真である。
【図７】図１の方法によって行われた実験で胎児再プログラミングされた胎児の成長後、筋線維のタイプの分析結果であり、（Ａ、Ｂ）は、背中側部位の皮膚と前肢を切除した後に筋肉の変化を観察した結果を示すものであり、（Ｃ、Ｄ）は、後肢を切除した後にメタクロマチック（ｍｅｔａｃｈｒｏｍａｔｉｃ）染色および免疫染色法（ｉｍｍｕｎｏｈｉｓｔｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ）により腓腹筋（Ｇａｓｔｒｏｃｎｅｍｉｕｓ）における遅筋線維の変化を観察した結果を示すものである。
【図８】図１の方法によって行われた実験でマイクロアレイ（ｍｉｃｒｏ‐ａｒｒａｙ）結果を整理した表である。
【図９】図１の方法によって行われた実験でリアルタイムＰＣＲ（ｒｅａｌ‐ｔｉｍｅ  ＰＣＲ）分析法を用いて筋肉における脂肪酸酸化と熱発生（ｔｈｅｒｍｏｇｅｎｅｓｉｓ）に重要な遺伝子の発現を比較した結果（＊＊、Ｐ＜０．０１；＊＊＊、Ｐ＜０．００１）を示すものである。
【図１０】図１の方法によって行われた実験でリアルタイムＰＣＲ（ｒｅａｌ‐ｔｉｍｅ  ＰＣＲ）分析法を用いて遅筋の発生に重要な遺伝子の発現を比較した結果（＊、Ｐ＜０．０５；＊＊、Ｐ＜０．０１；＊＊＊、Ｐ＜０．００１）を示すものである。
【図１１】図１の方法によって行われた実験でリアルタイムＰＣＲ（ｒｅａｌ‐ｔｉｍｅ  ＰＣＲ）分析法を用いて遅筋の機能に重要な遺伝子の発現を比較したグラフ（＊、Ｐ＜０．０５；＊＊＊、Ｐ＜０．００１）である。
【図１２】図１の方法によって行われた胎児再プログラミング実験の結果がＰＰＡＲδ依存的であることを立証するためにＰＰＡＲδが欠如した筋細胞の遺伝子発現をリアルタイムＰＣＲ（ｒｅａｌ‐ｔｉｍｅ  ＰＣＲ）を用いて分析した結果（＊、Ｐ＜０．０５；＊＊、Ｐ＜０．０１；＊＊＊、Ｐ＜０．００１）を示すものである。
【図１３】図１の方法によって行われた胎児再プログラミング実験でＰＰＡＲδによる細胞質内カルシウムイオンの量的変化を確認するために共焦点顕微鏡（ｃｏｎｆｏｃａｌ  ｍｉｃｒｏｓｃｏｐｅ）を用いた実験の結果（＊、Ｐ＜０．０５）を示すものである。
【図１４】図１の方法によって行われた胎児再プログラミング実験でＰＰＡＲδによって遅筋が増加した雄（ｍａｌｅ）マウスの持久力をトレッドミル（ｔｒｅａｄｍｉｌｌ）を用いて測定した結果（＊＊＊、Ｐ＜０．００１、ｎ＝４‐５）を示すものである。
【図１５】図１の方法によって行われた胎児再プログラミング実験でＰＰＡＲδによって遅筋が増加した雌（ｆｅｍａｌｅ）マウスの持久力をトレッドミル（ｔｒｅａｄｍｉｌｌ）を用いて測定した結果（＊＊＊、Ｐ＜０．００１、ｎ＝４‐５）を示すものである。
【図１６】図１の方法によって行われた実験でオキシマックス（ｏｘｉｍａｘ）を用いて呼吸交換率を測定した結果（＊＊、Ｐ＜０．０１、ｎ＝４）を示すものである。
【図１７】図１６の結果を面積値に換算して比較した結果（＊＊、Ｐ＜０．０１、ｎ＝４）を示すものである。
【図１８】図１の方法によって行われた胎児再プログラミング実験で脂肪が３５％である高脂肪飼料を摂取させて体重増加推移を記録した結果（＊、Ｐ＜０．０５、ｎ＝５）を示すものである。
【図１９】図１の方法によって行われた胎児再プログラミング実験で高脂肪摂取によって糖尿が誘発されたマウスのブドウ糖抵抗性テストを行った結果（＊＊、Ｐ＜０．０１、ｎ＝６）を示すものである。
【図２０】図１の方法によって行われた胎児再プログラミング実験で高脂肪摂取によって糖尿が誘発されたマウスのインスリン感受性テストを行った結果（＊＊＊、Ｐ＜０．００１、ｎ＝６）を示すものである。
【図２１】図１の方法によって行われた胎児再プログラミング実験でＣＭＤＤ１２２６効能立証結果（＊＊、Ｐ＜０．０１、ｎ＝４）を示すものである。
【図２２】図１の方法によって行われた胎児再プログラミング実験でＧＷ５０１５１６の投与時期（１：Ｖｅｈｉｃｌｅ  ｔｒｅａｔｍｅｎｔ  ｏｆ  ｐｒｅｇｎａｎｔ  ｍｉｃｅ  ｄｕｒｉｎｇ  ｇｅｓｔａｔｉｏｎ  ａｎｄ  ｌａｃｔａｔｉｏｎ  ｐｅｒｉｏｄ；２：ＧＷ５０１５１６ｔｒｅａｔｍｅｎｔ  ｏｆ  ｐｒｅｇｎａｎｔ  ｍｉｃｅ  ｄｕｒｉｎｇ  ｌａｃｔａｔｉｏｎ；３：ＧＷ５０１５１６ｔｒｅａｔｍｅｎｔ  ｏｆ  ｐｒｅｇｎａｎｔ  ｍｉｃｅ  ｄｕｒｉｎｇ  ｇｅｓｔａｔｉｏｎ；４：ＧＷ５０１５１６ｔｒｅａｔｍｅｎｔ  ｏｆ  ｐｒｅｇｎａｎｔ  ｍｉｃｅ  ｄｕｒｉｎｇ  ｇｅｓｔａｔｉｏｎ  ａｎｄ  ｌａｃｔａｔｉｏｎ  ｐｅｒｉｏｄ）による持久力増加効能の差を比較した実験の結果（＊＊、Ｐ＜０．０１；＊＊＊、Ｐ＜０．００１、ｎ＝４）を示すものである。
【図２３】図１の方法によって行われた胎児再プログラミング実験でＣＭＤＤ１１１２の投与濃度と性別（ｍａｌｅ）による持久力増強効能の差（＊＊＊、Ｐ＜０．００１、ｎ＝４）を示すものである。
【図２４】図１の方法によって行われた胎児再プログラミング実験でＣＭＤＤ１１１２の投与濃度と性別（ｆｅｍａｌｅ）による持久力増強効能の差（＊＊＊、Ｐ＜０．００１、ｎ＝４）を示すものである。
【図２５】２型糖尿病モデルを用いた実験過程の模式図である。
【図２６】図２５の方法によって行われた実験で２型糖尿病モデルマウスのブドウ糖抵抗性テストを行った結果（＊、Ｐ＜０．０５、ｎ＝６〜９）を示すものである。
【発明を実施するための形態】
【０１４０】
以下、本発明を実施例により詳細に説明する。
【０１４１】
ただし、下記実施例は、本発明を例示するものにすぎず、本発明の内容は下記実施例に限定されるものではない。
【０１４２】
１．ＰＰＡＲδアゴニストによる胎児再プログラミング効能
【０１４３】
下記実施例で用いられたＰＰＡＲδアゴニストの構造は下記のとおりである。
【０１４４】
【化３８】
2013538215.tif 000040
【０１４５】
【化３９】
2013538215.tif 000041
【０１４６】
＜実施例１＞ＰＰＡＲδアゴニストを用いたマウスの胎児再プログラミング
【０１４７】
本発明者らは、哺乳動物発生過程でＰＰＡＲδの胎児再プログラミングに対する役割を究明するために、妊娠期の母体にＰＰＡＲδアゴニストを投与する方法（ｍａｔｅｒｎａｌ  ｔｒｅａｔｍｅｎｔ）を用いた。胎児再プログラミングのために妊娠中の雌マウスにＰＰＡＲδアゴニストを毎日１０ｍｇ／ｋｇの濃度で経口投与し、具体的な実験方法は、図１に整理した。
【０１４８】
（１）ＰＰＡＲδアゴニストが胎盤を通過したか否かの確認
【０１４９】
本研究に用いられたＰＰＡＲδアゴニストであるＣＭＤＤ１１１１が胎盤を通過したか否かを確認するために、薬物動態学（Ｐｈａｒｍａｃｏｋｉｎｅｔｉｃｓ）実験を行った。妊娠後１６日が経過したマウスにＣＭＤＤ１１１１を１０ｍｇ／ｋｇの濃度で経口投与した後、２４時間母体動物と胎児の血液に分布する化合物の濃度を分析した。その結果、母体の最高血中濃度（Ｃｍａｘ）が３８μＭであり、最高血中濃度に逹する時間（Ｔｍａｘ）が１時間であり、半減期（ｔ１／２）が９時間であった。胎児の場合には母体と異なり、時間の経過につれて血中濃度が増加する傾向を示し、最高血中濃度が８．９μＭであった。この濃度は胎児においてＰＰＡＲδを十分に活性化させることができる濃度であり、本実施例に用いられた化合物は胎盤を通過する物質であることを確認した（図２）。
【０１５０】
（２）妊娠中の母体にＰＰＡＲδアゴニストを投与（Ｍａｔｅｒｎａｌ  ｔｒｅａｔｍｅｎｔ）することによるマウス胎児の再プログラミング
【０１５１】
可妊期の雌マウスと雄マウスを交配した後、プラグ（ｐｌｕｇ）確認により妊娠したか否かを確認した。妊娠が確認された雌マウスに６週間（妊娠期間および授乳期間）、ＣＭＤＤ１１１１を１０ｍｇ／ｋｇの濃度で毎日１回経口投与した。妊娠期間中に投与物質による副作用は観察することができなかった。妊娠期間中にＶｅｈｉｃｌｅを投与した胎児グループの重量は、１．３３±０．１１グラムであり、ＣＭＤＤ１１１１を投与した胎児グループの重量は、１．３７±０．０９グラムであり、両グループ間の重量差はなかった（図３）。また、３週間胎児の成長速度を比較した結果でも投与物質による成長阻害や促進は観察されず（図４）、成体になった時にも二つの群の間に体重差が現れず（図５）、アリザリンレッドＳ（Ａｌｉｚａｒｅｎ  ｒｅｄ  Ｓ）とアルシアンブルー（Ａｌｉｃｉａｎ  ｂｌｕｅ）染色薬を用いた骨格染色結果でも投与物質による奇形を観察することができなかった（図６）。
【０１５２】
＜実施例２＞ＰＰＡＲδの活性化により胎児再プログラミングされたマウスの遅筋線維増加効能立証
【０１５３】
遅筋は酸素伝達タンパク質であるミオグロビンを多く有しているため速筋より赤く見える。胎児の皮膚を除去して筋肉を観察した結果、投与群のマウスがより赤い筋肉を有していることが分かった（図７のＡおよびＢ）。投与物質（ＣＭＤＤ１１１１）による遅筋の生成が増加したかを確認するために胎児の後肢を摘出した後、ＯＣＴに入れて凍結させた。凍結した筋肉組織は凍結薄片器（ｃｒｙｏｔｏｍｅ）を用いて８ｍｍの厚さに切断した後、スライドに製作し、これを用いてメタクロマチック（ｍｅｔａｃｈｒｏｍａｔｉｃ）染色を行った。遅筋は、メタクロマチック（ｍｅｔａｃｈｒｏｍａｔｉｃ）染色を行うと速筋より濃い青色に染色される。図７のＣから確認できるように、投与物質（ＣＭＤＤ１１１１）によって腓腹筋（Ｇａｓｔｒｏｃｎｅｍｉｕｓ）で濃い青色の筋線維の生成が増加したことを確認することができる。筋線維の区分はミオシン重鎖（ｍｙｏｓｉｎ  ｈｅａｖｙ  ｃｈａｉｎ；ＭＨＣ）のｉｓｏｆｏｒｍ抗体を用いた免疫染色によっても可能である。本発明者らは、投与物質（ＣＭＤＤ１１１１）による遅筋の筋線維の増加を再度確認するためにｓｌｏｗ  ｔｙｐｅ  ＭＨＣを用いた免疫染色を行った。その結果、図７のＤから分かるように、投与群の腓腹筋（Ｇａｓｔｒｏｃｎｅｍｉｕｓ）でｓｌｏｗ  ｔｙｐｅ  ＭＨＣに反応を示す筋線維が増加したことが分かった。この結果はメタクロマチック（ｍｅｔａｃｈｒｏｍａｔｉｃ）染色結果と同一の形態を示し、この二つの実験結果、投与物質（ＣＭＤＤ１１１１）によって遅筋の生成が増加したことを確認することができた。
【０１５４】
＜実施例３＞カルシウムイオン調節による遅筋線維増加効能立証
【０１５５】
本発明者らは、ＰＰＡＲδ活性化によって胎児再プログラミングされたマウスにおける遅筋生成増加の原因を明かすために遺伝子発現分析を行った。
【０１５６】
（１）マイクロアレイ（Ｍｉｃｒｏａｒｒａｙ）を用いた遺伝子発現分析
【０１５７】
ＰＰＡＲδアゴニスト（ＣＭＤＤ１１１１）によって胎児再プログラミングされた３週令マウスの腓腹筋（Ｇａｓｔｒｏｃｎｅｍｉｕｓ）を摘出した後、トリゾール（Ｔｒｉｚｏｌ）試薬（Ｇｉｂｃｏ）を用いて全ＲＮＡ（ｔｏｔａｌ  ＲＮＡ）を抽出した。分離したＲＮＡは定量および純度検証過程を経た後、Ｍｏｕｓｅ４３０２．０（Ａｆｆｉｍａｔｒｉｘ）チップを用いた遺伝子発現分析のために用いた。
【０１５８】
通常、遅筋は速筋より多くのミトコンドリアを有しており、脂肪酸酸化が増加しており、ｃｏｎｔｒａｃｔｉｏｎ速度が遅いという特徴を有している。分析結果、前記三つの調節に係る遺伝子発現が全て増加したことを確認した（図８）。
【０１５９】
脂肪酸酸化とミトコンドリア呼吸のための必須の酵素であるパントテン酸キナーゼ１（Ｐａｎｔｏｔｈｅｎａｔｅ  ｋｉｎａｓｅ１）（ＰＡＮＫ１：２．４倍）、カルニチンパルミトイルトランスフェラーゼ１ａ（ｃａｒｎｉｔｉｎｅ  ｐａｌｍｉｔｏｙｌ  ｔｒａｎｓｆｅｒａｓｅ１ａ）（ＣＰＴ‐１ａ：１．４倍）、アシル‐ＣｏＡデヒドロゲナーゼ（ａｃｙｌ  ＣｏＡ  ｄｅｈｙｄｒｏｇｅｎａｓｅ）（ＡＣＡＤ：１．７倍）、アシルＣｏＡシンテターゼ（ａｃｙｌ  ＣｏＡ  ｓｙｎｔｈｅｔａｓｅ）（ＡＣＳＬ：１．５倍）、チトクローム８ａ（ｃｙｔｏｃｈｒｏｍｅ８ａ）（ＣＯＸ８Ａ：１．７倍）、ユビキノン（ｕｂｉｑｕｉｎｏｎｅ）（２．０倍）、および脱共役タンパク質２，３（ｕｎｃｏｕｐｌｉｎｇ  ｐｒｏｔｅｉｎ２，３）（ＵＣＰ２，３：１．５倍、２．３倍）の発現が増加した。
【０１６０】
遅筋の発生を増加させると知られているＰＰＡＲγ転写共役因子１ａ（ＰＰＡＲγ  ｃｏａｃｔｉｖａｔｏｒ１ａ）（１．７倍）、ＣａｍＩＩｂ（１．４倍）、ＣａｍＩＩｄ（１．８倍）、Ｍｅｆ２ａ（１．４倍）の発現が増加し、負調節因子（ｎｅｇａｔｉｖｅ  ｒｅｇｕｌａｔｏｒ）として知られているＨＤＡＣ４（‐１．５倍）の発現は減少した。
【０１６１】
遅筋は速筋より多くのカルシウムを有しており、ｓｌｏｗ  ｓｕｂｔｙｐｅのカルシウム調節タンパク質を有している。おもしろいことに、本発明によって遅筋が増加したマウスは、ミオシン結合タンパク質Ｃ３（ｍｙｏｓｉｎ  ｂｉｎｄｉｎｇ  ｐｒｏｔｅｉｎ  Ｃ３）（ＭＹＢＰＣ３：２．８倍）、トロポニンＴ２（Ｔｒｏｐｏｎｉｎ  Ｔ２）（２．３倍）、トロポニンＩ（Ｔｒｏｐｏｎｉｎ  Ｉ）（３．２倍）、ミオシン重鎖６（ｍｙｏｓｉｎ  ｈｅａｖｙ  ｃｈａｉｎ６）（Ｍｙｈ６：２．７倍）、ミオシン軽鎖７（ｍｙｏｓｉｎ  ｌｉｇｈｔ  ｃｈａｉｎ７）（Ｍｙｌ７：２．９倍）のようなｓｌｏｗ  ｔｙｐｅのカルシウム調節タンパク質の発現だけでなく、細胞質のカルシウム濃度調節因子であるリアノジン受容体２，３（ｒｙａｎｏｄｉｎｅ  ｒｅｃｅｐｔｏｒ２，３）（ＲＹＲ２、３：２．８倍、２．０倍）、アデノシントリホスファターゼ（ＡＴＰａｓｅ）、Ｃａ２＋  ｔｒａｎｓｐｏｒｔｉｎｇ（ＳＥＲＣＡ：１．４倍）、ホスホランバン（ｐｈｏｓｐｈｏｌａｍｂａｎ）（ＰＬＮ：２．８倍）の発現が増加した。
【０１６２】
（２）リアルタイムＰＣＲ（ｒｅａｌ‐ｔｉｍｅ  ＰＣＲ）を用いた遺伝子発現分析
マイクロアレイ（Ｍｉｃｒｏａｒｒａｙ）分析結果をさらに検証するためにリアルタイムＰＣＲ（ｒｅａｌ‐ｔｉｍｅ  ＰＣＲ）を用いた遺伝子発現分析実験を行った。筋肉の発生期間中にＰＰＡＲδアゴニスト（ＣＭＤＤ１１１１）を投与して胎児再プログラミングされたマウスグループは、カルニチンパルミトイルトランスフェラーゼ１ａ（ｃａｒｎｉｔｉｎｅ  ｐａｌｍｉｔｏｙｌ  ｔｒａｎｓｆｅｒａｓｅ１ａ）（ＣＰＴ‐１ａ：１．５倍）、アンカップリングタンパク質３（Ｕｎｃｏｕｐｌｉｎｇ  ｐｒｏｔｅｉｎ３）（ＵＣＰ３：４．２倍）、アシルＣｏＡシンテターゼ（Ａｃｙｌ  ＣｏＡ  ｓｙｎｔｈｅｔａｓｅ）（ＡＣＳＬ：１．４倍）、アシルＣｏＡデヒドロゲナーゼ（Ａｃｙｌ  ＣｏＡ  ｄｅｈｙｄｒｏｇｅｎａｓｅ）（ＡＣＡＤ１０：２．０倍）、およびＮＤＵＦＡ１２（１．３倍）のように、脂肪酸酸化と熱発生（ｔｈｅｒｍｏｇｅｎｅｓｉｓ）に核心調節因子の発現が増加した。また、遅筋で多く発現し、筋肉で脂肪酸の酸化を増加させて糖尿を改善させると知られているアディポネクチン（ａｄｉｐｏｎｅｃｔｉｎ）（ＡＤＩＰＯＱ：２．５倍）の発現が著しく増加した（図９）。
【０１６３】
ＰＧＣ‐１αは、脂肪酸酸化の補活性化因子（ｃｏ‐ａｃｔｉｖａｔｏｒ）だけでなく、ミトコンドリア生合成と遅筋の発生を増加させる核心調節因子として知られている遺伝子である。この遺伝子の発現がＰＰＡＲδアゴニスト（ＣＭＤＤ１１１１）によって１．６倍増加した。また、筋肉のリモデリング（ｒｅｍｏｄｅｌｉｎｇ）過程で速筋の遅筋化を増加させると知られているＣａＭＫＩＩｂ、ｄの発現もまたそれぞれ４．５倍、３．２倍増加した。一方、すでに機能欠損研究（ｌｏｓｓ  ｏｆ  ｆｕｎｃｔｉｏｎ  ｓｔｕｄｙ）により遅筋生成を抑制させると知られているＨＤＡＣ４の発現は０．６倍減少した（図１０）。
【０１６４】
骨格筋における細胞質のカルシウム濃度は、興奮収縮連関（ｅｘｃｉｔａｔｉｏｎ‐ｃｏｎｔｒａｃｔｉｏｎ  ｃｏｕｐｌｉｎｇ）に必須であり、それ自体が筋肉の柔軟性（ｐｌａｓｔｉｃｉｔｙ）を調節する重要調節因子である。本発明において遅筋が増加したマウスは、筋細胞のサイトゾルカルシウム（ｃｙｔｏｓｏｌｉｃ  ｃａｌｃｉｕｍ）を調節すると知られている因子（ｆａｃｔｏｒ）の発現が増加した。ＲＹＲ２およびＲＹＲ３は、ｓａｒｃｏｐｌａｓｍｉｃ  ｍｅｍｂｒａｎｅでカルシウムの流出（ｅｆｆｌｕｘ）を調節する遺伝子として対照群に比べてそれぞれ２．２倍、３．６倍増加した。ＡＴＰ２Ａ２は、カルシウムを細胞質（ｃｙｔｏｐｌａｓｍ）から筋小胞体（ｓａｒｃｏｐｌａｓｍｉｃ  ｒｅｔｉｃｕｌｕｍ）に流入（ｉｎｆｌｕｘ）する遺伝子として発現が２．２倍増加しており、この遺伝子の活性を調節して遅筋特異的な遺伝子であるホスホランバン（ｐｈｏｓｐｈｏｌａｍｂａｎ）の発現が３．２倍増加した。また、遅筋（ｓｌｏｗ  ｍｕｓｃｌｅ）でカルシウムと結合して筋肉の収縮に係るＴＮＮＩ３（５．８倍）、ＭＹＨ６（６．８倍）、およびＭｙｌ７（４．８倍）の発現が増加した（図１１）。
【０１６５】
（３）初代細胞培養（Ｐｒｉｍａｒｙ  ｃｅｌｌ  ｃｕｌｔｕｒｅ）および遺伝子発現分析
【０１６６】
マイクロアレイ（Ｍｉｃｒｏａｒｒａｙ）分析とリアルタイムＰＣＲ（ｒｅａｌ‐ｔｉｍｅ  ＰＣＲ）分析によりＰＰＡＲδアゴニスト（ＣＭＤＤ１１１１）によって胎児再プログラミングされたマウスにおいて細胞質のカルシウム濃度調節の核心遺伝子であるＲＹＲ３、ＡＴＰ２Ａ２、ＰＬＮの発現が大幅に増加したことが分かった。しかし、この三つの遺伝子のプロモータ（ｐｒｏｍｏｔｅｒ）にＰＰＲＥ（ＰＰＡＲｓ  ｒｅｓｐｏｎｓｅ  ｅｌｅｍｅｎｔ）が報告されたことがない。したがって、本発明者らは、前記三つの遺伝子の発現がＰＰＡＲδ依存的に増加するか否かを確認するために、ＰＰＡＲδ遺伝子が除去されたマウスの筋肉を摘出して初代培養（ｐｒｉｍａｒｙ  ｃｕｌｔｕｒｅ）を行った。生後５日目である胎児の後肢を摘出した後、Ｒａｎｄｏなどによって開発された方法と同一の方法で初代培養（ｐｒｉｍａｒｙ  ｃｕｌｔｕｒｅ）を行った（Ｒａｎｄｏ  ｅｔ  ａｌ，Ｊ．Ｃｅｌｌ．Ｂｉｏｌ．，１９９４，１２５，１２７５‐１２８７）。筋芽細胞（Ｍｙｏｂｌａｓｔ）の培養後、６ウェルプレート（６ｗｅｌｌ  ｐｌａｔｅ）に移してＰＰＡＲδアゴニスト（ＣＭＤＤ１１１１）を３００ｎＭの濃度で処理して筋管（ｍｙｏｔｕｂｅ）に分化した。分化した筋管（ｍｙｏｔｕｂｅ）に２日間３００ｎＭのＰＰＡＲδアゴニスト（ＣＭＤＤ１１１１）をさらに処理した後、トリゾール（ＴＲＩｚｏｌ）試薬（Ｇｉｂｃｏ）を用いて全ＲＮＡ（ｔｏｔａｌ  ＲＮＡ）を抽出した。抽出したＲＮＡは、逆転写（ｒｅｖｅｒｓｅ  ｔｒａｎｓｃｒｉｐｔｉｏｎ）過程を経てｃＤＮＡに合成した後、リアルタイムＰＣＲ（ｒｅａｌ‐ｔｉｍｅ  ＰＣＲ）分析のためのｔｅｍｐｌａｔｅとして用いた。
【０１６７】
リアルタイムＰＣＲ（ｒｅａｌ  ｔｉｍｅ  ＰＣＲ）の分析結果、ＰＰＡＲδによって直接調節されると知られているＰＤＫ４とＣＰＴ‐１の発現がそれぞれ２．２倍、１．５倍増加した。しかし、ＰＰＡＲδが欠如した細胞では変化がなかった。これはＰＤＫ４とＣＰＴ‐１の発現がＰＰＡＲδに依存的に調節されるということを意味する。このような傾向は図１２から分かるように、ＲＹＲ（２．２倍）、ＰＬＮ（１．７倍）、ＴＮＮＩ３（１．７倍）、ＡＴＰ２Ａ２（４．３倍）の遺伝子にも同様に現れた。したがって、ＰＰＡＲδは細胞質でカルシウム濃度を調節する遺伝子の発現を直接制御する。
【０１６８】
（４）心筋細胞の再生効能立証
【０１６９】
ＰＰＡＲδアゴニスト（ＣＭＤＤ１１１１）によって胎児再プログラミングされたマウス群において心筋に多く発現すると知られているＲＹＲ２、ＡＴＰ２Ａ２、ＰＬＮなどの遺伝子発現が著しく増加したことを確認した。
【０１７０】
（５）細胞質内カルシウム分析
【０１７１】
ＲＹＲ、ＳＥＲＣＡ、ＰＬＮの変化が細胞質のカルシウム濃度に及ぼす影響を確認するために、カルシウム特異的な染色試料であるＦｌｏｕ４（分子プローブ；Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  ｐｒｏｂｅ）を用いた実験を行った。実験方法は次のとおりである。初代培養（Ｐｒｉｍａｒｙ  ｃｕｌｔｕｒｅ）により分離した筋細胞をガラススライドが取り付けられた培養用プレートで培養した後、ＰＰＡＲδアゴニスト（ＣＭＤＤ１１１１）を３００ｎＭの濃度で処理して筋管（ｍｙｏｔｕｂｅ）に分化した。分化した筋細胞にＦｌｏｕ４（最終濃度：５μＭ）染色試薬を入れた後、３０分間培養した。細胞質内のカルシウム変化を測定するためにカルシウムのないＫｒｅｂ溶液を培養液として用いており、カルシウムチャネルを活性化させるために１０ｍＭのカフェインを処理した。細胞内カルシウムイオンの変化を共焦点顕微鏡を用いて測定した。測定結果、ＰＰＡＲδアゴニスト（ＣＭＤＤ１１１１）を入れた筋細胞において細胞質内のカルシウムの滞留時間が４３％増加（５９２±６０ｖｅｒｓｕｓ８４７±７７ｓｅｃ）した（図１３）。これは、ｓａｒｃｏｐｌａｓｍｉｃ  ｍｅｍｂｒａｎｅでカルシウムの流出（ｅｆｆｌｕｘ）を調節するＲＹＲとカルシウムの流入（ｉｎｆｌｕｘ）を抑制するＰＬＮの発現がＰＰＡＲδによって増加したためである。筋細胞において細胞質内のカルシウムイオン濃度は力を生成するか疲労を抑制させるなどの効果を有しており、特に、筋肉のリモデリング（ｒｅｍｏｄｅｌｉｎｇ）過程では遅筋生成を促進させるということが公知されている。したがって、本発明においてＰＰＡＲδ活性化により胎児再プログラミングされたマウスは、細胞質内の増加したカルシウムイオンの影響により遅筋の生成が増加したと考えられる。
【０１７２】
＜実施例４＞ＰＰＡＲδ活性化による胎児再プログラミングマウスの持久力増強効能立証
【０１７３】
遅筋は脂肪分解能が大きく、運動による疲労に対して抵抗性を有するため、マラソンのように持久力を要する運動に適する。本発明者らは、ＰＰＡＲδアゴニストによって胎児再プログラミングされたマウスの持久力増強効果を測定するためにトレッドミル（ｔｒｅａｄｍｉｌｌ）を用いた実験を行った。
【０１７４】
実験を行う前にマウスが運動器具に適応する時間を与えるために、２日間７ｍｅｔｅｒ／ｍｉｎの速度で５分間運動させた。３日目に本実験を行い、実験方法は、１０ｍｅｔｅｒ／ｍｉｎの速度で６０分間走行させた後、それから最大速度が１５ｍｅｔｅｒ／ｍｉｎになるまで１５分に一回、１ｍｅｔｅｒ／ｍｉｎの速度で増加させた。雄の場合、ＰＰＡＲδアゴニスト（ＣＭＤＤ１１１１）投与群グループのマウスの走行時間が対照群グループのマウスより２．９倍（２３５±２６ｖｅｒｓｕｓ６７７±７８ｍｉｎ、Ｐ＜０．０００１、ｎ＝６）増加し、走行距離は３．０倍（９９２７±１１６８ｖｅｒｓｕｓ３３０３±３９４ｍ、Ｐ＜０．０００１）増加した。雌の場合、走行時間は２．０倍（３７６±１９ｖｅｒｓｕｓ７６１±１７ｍｉｎ、Ｐ＜０．０００１、ｎ＝４）増加し、走行距離もまた２．１倍（５４１９±２９１ｖｅｒｓｕｓ１１１９４±２６１ｍ、Ｐ＜０．０００１）増加して、雄と同一の傾向の結果が観察された（図１４、図１５）。
【０１７５】
＜実施例５＞ＰＰＡＲδ活性化による胎児再プログラミングマウスの呼吸交換率［ｒｅｓｐｉｒａｔｏｒｙ  ｅｘｃｈａｎｇｅ  ｒａｔｉｏ（ＲＥＲ）］測定
【０１７６】
ＲＥＲは、呼吸に用いられる酸素と排出される二酸化炭素の量を比較した値である。ＲＥＲ値は、生物がエネルギー生成のために主に炭水化物を用いる場合には１．０の値を有し、脂肪を用いる場合には０．７の値を有する。本発明において胎児再プログラミングマウスの遅筋の生成が増加した。このような遅筋の増加がマウスのエネルギー代謝に実際影響を及ぼしたかに対する評価を行うためにオキシマックス（ｏｘｉｍａｘ）（Ｃｏｌｕｍｂｕｓ）を用いたＲＥＲ実験を行った。その結果、Ｖｅｈｉｃｌｅを投与したマウスのグループに比べてＰＰＡＲδアゴニスト（ＣＭＤＤ１１１１）を投与したマウスのグループがより小さいＲＥＲ値を有することから見て、炭水化物より脂肪を多く用いることが分かった（図１６）。ＲＥＲは時間の経過による周期値を有するため、この二つのグループのＲＥＲの差をより明確に確認するためにＡＵＬを用いて比較した。対照群のＡＵＬの平均値は１０７．４±１．４である反面、胎児再プログラミングされたマウスグループのＡＵＬの平均値は１０２．２±２．８であり、対照群マウスより低いＲＥＲ値を有する（図１７）。
【０１７７】
本発明者らは、下記の式を用いて両グループ間の脂肪酸化能力の差を確認した。
【０１７８】
Ｃａｒｂｏｈｙｄｒａｔｅ  ｏｘｉｄａｔｉｏｎ＝（４．５１・ＲＥＲ−３．１８）・ＶＯ２
【０１７９】
Ｌｉｐｉｄ  ｏｘｉｄａｔｉｏｎ＝１．６７・（１−ＲＥＲ）・ＶＯ２
【０１８０】
計算結果、胎児プログラミング時期にＰＰＡＲδアゴニスト（ＣＭＤＤ１１１１）を投与したマウスグループがｖｅｈｉｃｌｅを投与した対照群マウスに比べて脂肪を平均４４％多く用いる（６．６ｍｇ／ｋｇｍｉｎ  ｖｓ．９．５ｍｇ／ｋｇｍｉｎ）反面、炭水化物は２０％少なく用いることが分かった（４８ｍｇ／ｋｇｍｉｎ  ｖｓ．３８ｍｇ／ｋｇｍｉｎ）。したがって、本発明において、胎児のプログラミング期間中にＰＰＡＲδを活性化させたマウスは、単に遅筋が増加しただけでなく、これにより脂肪代謝が増加していることが分かる。
【０１８１】
＜実施例６＞ＰＰＡＲδ活性化により胎児再プログラミングされたマウスの肥満および糖尿の予防／抑制効能立証
【０１８２】
本発明によりＰＰＡＲδによって胎児再プログラミングされたマウスは、単に妊娠と授乳期間にのみＰＰＡＲδ活性化合物を投与したにもかかわらず、成体になった時にも脂肪代謝能力の増加が維持された。脂肪代謝は肥満と糖尿の発病と深く関係している。したがって、本発明者らは、ＰＰＡＲδの胎児再プログラミングが成体の代謝症候群の発病に及ぼす影響を確認した。１３週令の対照群と投与群のマウスに総８４日間高脂肪飼料（脂肪含量：３５％）を摂取させて一週に一回体重を測定した。その結果、図１８から分かるように、ＰＰＡＲδ活性化合物（ＣＭＤＤ１１１１）による胎児再プログラミングマウスの体重増加が対照群より８％抑制されることが分かった。
【０１８３】
また、本研究者らは、マウスに１７週間高脂肪飼料を摂取させて糖尿を誘発した後、ブドウ糖抵抗性テスト（ＧＴＴ：ｇｌｕｃｏｓｅ  ｔｏｌｅｒａｎｃｅ  ｔｅｓｔ）を行った。実験方法は、Ｋｅｌｌｙによって提案された方法によって行っており、筋肉における役割を確認するためにｏｖｅｒ‐ｎｉｇｈｔ  ｆａｓｔｉｎｇをさせた。腹腔注射を用いてブドウ糖（１ｍｇ／ｋｇ）を投与した後、２時間血糖の変化を測定した。その結果、投与群のマウスが対照群のマウスに比べて空腹時血糖が低いだけでなく最高血中濃度も低く、グルコースクリアランス（ｇｌｕｃｏｓｅ  ｃｌｅａｒａｎｃｅ）が現れる時間もより短かった（図１９）。インスリン抵抗性実験も同時に行った（図２０）。前記の結果をまとめると、ＰＰＡＲδによって胎児再プログラミングされた動物は、遅筋増加による持久力増強効果を有するだけでなく、高脂肪食による肥満、糖尿の発病が予防および抑制されることが分かった。
【０１８４】
＜実施例７＞ＰＰＡＲδ活性化を介する胎児再プログラミングマウスの記憶力増進効能立証
【０１８５】
本発明においてＰＰＡＲδアゴニストによる胎児再プログラミングマウスの記憶力増進効能を検証するために動物実験を行った。脳の生成段階における発明物質の効能を立証するために、妊娠中のマウスに妊娠期間および授乳期間中にＰＰＡＲδアゴニストであるＣＭＤＤ１１１１を１０ｍｇ／ｋｇ／ｄａｙの濃度で経口投与した。胎児が８週令の成体になった時にモリス水迷路（Ｍｏｒｒｉｓ  ｗａｔｅｒ  ｍａｚｅ）テストを行って対照群と投与群の記憶力を比較した。この方法は、空間学習および記憶を確認するためのテスト方法であり、脳内における主に海馬依存的な遂行方法である。実験結果、プラットホームを探すためにかかる平均時間が対照群の場合には２６秒、２２秒（雄、雌）であり、投与群の場合には９秒、６秒（雄、雌）であった。したがって、ＰＰＡＲδの活性化物質は、胎児プログラミング時期に記憶力増進効果があることを立証し、この効果は成体になるまで維持された。
【０１８６】
【表１】
2013538215.tif 000042
水迷路テストの結果
【０１８７】
＜実施例８＞構造が異なるＰＰＡＲδアゴニストに対する胎児プログラミング効能検証
【０１８８】
本発明を完成するために、前記で言及したＣＭＤＤ１１１１と化学構造が異なるＰＰＡＲδアゴニストに対する胎児プログラミング効能を確認した。
【０１８９】
（１）ＰＰＡＲδアゴニストＣＭＤＤ１２２６を用いた胎児再プログラミング効能立証
【０１９０】
ＣＭＤＤ１２２６の胎児再プログラミングによる持久力増進効能を立証するために、妊娠中のＣ５７ＢＬ／６マウスを用いた実験を行った。妊娠マウスの妊娠期間と授乳期間中にＣＭＤＤ１２２６を１０ｍｇ／ｋｇ／ｄａｙの濃度で毎日経口投与した後、７週令の成体になった胎児の持久力をトレッドミルを用いて測定した。その結果、胎児再プログラミングされたグループの走行時間が対照群より１．９倍増加し、走行距離は２．０倍増加して、ＰＰＡＲδアゴニストによる持久力増加効能を立証することができた（図２１）。
【０１９１】
（２）ＧＷ５０１５１６を用いた胎児プログラミング（効能立証および最適の投与時期決定）
【０１９２】
ＧＷ５０１５１６の胎児再プログラミング効能を確認し、最適の投与時期を決定するための実験を行った。実験方法は図１と同様であり、投与時期を三つ（妊娠期、授乳期、妊娠期および授乳期）に分けて実験を行った。実験結果、妊娠期にのみＰＰＡＲδアゴニストを投与した群は対照群に比べて走行時間と走行距離がそれぞれ２．６倍と３．２倍増加し、授乳期にのみＰＰＡＲδアゴニストを投与した群は対照群に比べて走行時間と走行距離が２．４倍と３．０倍増加した。持久力が最も著しく増加した群は、妊娠期および授乳期の両方にＰＰＡＲδアゴニストを投与した群であり、対照群に比べて走行時間と走行距離がそれぞれ５．１倍、６．６倍増加した（図２２）。
【０１９３】
（３）ＰＰＡＲδアゴニストＣＭＤＤ１１１２を用いた胎児再プログラミング（効能立証および最適の投与濃度決定）
【０１９４】
ＧＷ５０１５１６に比べてＰＰＡＲδに選択性に優れたＣＭＤＤ１１１２物質の胎児再プログラミング効能を立証し、ＰＰＡＲδアゴニストの最適の投与濃度を決定するために、四つの濃度（１ｍｇ／ｋｇ／ｄａｙ、２ｍｇ／ｋｇ／ｄａｙ、５ｍｇ／ｋｇ／ｄａｙ、１０ｍｇ／ｋｇ／ｄａｙ）を用いた実験を行った。実験結果、１ｍｇ／ｋｇ／ｄａｙおよび２ｍｇ／ｋｇ／ｄａｙの濃度では持久力向上の効果が現れず、５ｍｇ／ｋｇ／ｄａｙ以上でのみ持久力（走行時間：１．４倍、走行距離：１．５倍）が増加することを確認した（図２３、図２４）。
【０１９５】
本発明では、ＰＰＡＲδアゴニストによる動物の胎児再プログラミング結果、持久力向上効能を確認するために構造が互いに異なる三つの物質に対する実験を行った。実験結果、三つのＰＰＡＲδアゴニストの全てが持久力向上効能を示すことから見て、全てのＰＰＡＲδ活性化物質は、遅筋発生増加、持久力向上、肥満、糖尿、動脈硬化、脂肪肝などの代謝症候群予防、記憶力増進の効果を有することができる。ＧＷ５０１５１６を用いた実験結果、妊娠期と授乳期の両方にＰＰＡＲδ活性化物質を投与した場合、優れた効能を確認することができた。また、ＣＭＤＤ１１１２を用いた実験結果、胎児再プログラミング過程中に５ｍｇ／ｋｇ／ｄａｙ以上の濃度でのみ効能が観察された。しかし、全ての活性化物質の活性濃度が異なるため、構造が異なる物質の場合より低い活性濃度を有することができる。
【０１９６】
＜実施例９＞２型糖尿病モデルマウスにおける胎児再プログラミングによる糖尿疾患予防／抑制効能立証
【０１９７】
本発明により開発されたＰＰＡＲδの胎児再プログラミング方法は、遺伝的な欠陥によって先天的に糖尿が誘発されるｄｂ／ｄｂマウスにおいても糖尿の発病が予防／抑制されることを確認した。本研究者らは、レプチン受容体（Ｌｅｐｔｉｎ  ｒｅｃｅｐｔｏｒ）が欠如したマウス（ｄｂ／ｄｂ）を用いてＰＰＡＲδの胎児再プログラミング効能を確認した。ヘテロタイプの雌と雄を交配した後、授乳期間にのみＰＰＡＲδアゴニスト（ＣＭＤＤ１１１１）を雌マウスに投与した。遺伝子分析と血糖分析により糖尿が誘発されたホモ雄胎児のみを用いてブドウ糖抵抗性テスト（ＧＴＴ）を行った。その結果、図２６から分かるように、ＰＰＡＲδの胎児再プログラミングによってブドウ糖抵抗性が改善した。
【０１９８】
＜実施例１０＞胎児再プログラミングのための新規のＰＰＡＲδアゴニスト開発
【０１９９】
上述したように、ＰＰＡＲδを活性化させる物質（ａｇｏｎｉｓｔｓ）は、ヒトを含む哺乳動物を胎児再プログラミングして胎児の遅筋発生を増加させ、持久力を向上させ、肥満、糖尿、動脈硬化、脂肪肝などの代謝症候群を予め防止し、記憶力を増進させることができる。
【０２００】
また、本発明では、哺乳動物の胎児再プログラミングのための新たなＰＰＡＲδアゴニストを開発しており、この物質に対するｉｎ  ｖｉｔｒｏおよびｉｎ  ｖｉｖｏ効能を立証した。
【０２０１】
２．ＰＰＡＲδ活性化物質開発
【０２０２】
本発明では、胎児再プログラミングをより効率的に達成するために下記化学式Ｖで表される新規のＰＰＡＲδアゴニストを開発した。
【０２０３】
［化学式Ｖ］
【化４０】
2013538215.tif 000043
【０２０４】
［前記化学式Ｖ中、Ａは、それぞれ独立して硫黄（Ｓ）またはセレン（Ｓｅ）であり；
【０２０５】
Ｒ２は、下記構造から選択され；
【０２０６】
【化４１】
2013538215.tif 000044
【０２０７】
Ｘは、硫黄（Ｓ）またはセレン（Ｓｅ）であり；
【０２０８】
Ｒ１１は、水素、ハロゲン、Ｃ１‐Ｃ５のアルキルまたはＣ１‐Ｃ５のアルコキシであり；
【０２０９】
ｐは、１〜５の整数であり；
【０２１０】
ｑは、１〜４の整数であり；
【０２１１】
前記Ｒ１１のアルキルおよびアルコキシは、一つ以上のハロゲンまたはＣ１‐Ｃ５のアルキルアミンでさらに置換されていてもよい。］
【０２１２】
以下、本発明を実施例により詳細に説明する。
【０２１３】
ただし、下記実施例は本発明を例示するものにすぎず、本発明の内容が下記実施例に限定されない。
【０２１４】
＜実施例１１＞化合物１の製造
【０２１５】
【化４２】
2013538215.tif 000045
【０２１６】
従来方法（ＷＯ２００６／０９１０４７）を用いて得られた化合物
【化４３】
2013538215.tif 000046
（）
５００ｍｇ（１．２６ｍｍｏｌ）とイミダゾール１７２ｍｇ（２．０当量）をジメチルホルムアミド２０ｍｌに完全に溶解する。ｔｅｒｔ‐ブチルジメチルシリルクロリド２１０ｍｇ（１．１当量）を徐々に添加し室温で４時間撹拌させる。反応終了後、塩化アンモニウム水溶液とエチルアセテートを用いて抽出し、硫酸マグネシウムを用いて有機層から水分を除去する。シリカゲルカラムを用いて精製した後、溶媒を減圧蒸留して標記化合物を得た。
【０２１７】
＜実施例１２＞化合物２の製造
【０２１８】
【化４４】
2013538215.tif 000047
【０２１９】
前記実施例１１で製造された化合物１  ５００ｍｇ（０．９８ｍｍｏｌ）を無水テトラヒドロフラン２０ｍｌに溶解し、温度を‐７８℃に下げる。これにリチウムジイソプロピルアミド（ＬＤＡ）１．１ｍｌ（１．８Ｍ、２．０当量）を徐々に添加する。その後、反応溶液に４‐フェニルベンジルクロリド１９９ｍｇ（０．９８ｍｍｏｌ）を入れて反応温度を徐々に室温に上げる。３０分間さらに反応させた後、塩化アンモニウム水溶液で反応を終了させ、エチルアセテートと塩水溶液を用いて有機溶媒を抽出し、硫酸マグネシウムを用いて有機層の水分を除去する。濾過後、溶媒を減圧蒸留し、残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィーで精製して標記化合物を得た。
【０２２０】
１Ｈ  ＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ７．９８（ｔ，２Ｈ），７．６５（ｔ，２Ｈ），７．５２〜７．２３（ｍ，６Ｈ），７．１４（ｔ，２Ｈ），７．０５（ｔ，２Ｈ），６．６３（ｔ，１Ｈ），４．５４（ｍ，１Ｈ），３．４０（ｍ，１Ｈ），３．１４（ｍ，１Ｈ），２．１１（ｓ，３Ｈ），１．８９（ｓ，３Ｈ），０．９９（ｓ，９Ｈ），０．１８（ｓ，６Ｈ）
【０２２１】
＜実施例１３＞化合物３の製造
【０２２２】
【化４５】
2013538215.tif 000048
【０２２３】
前記実施例１２で製造された化合物２  ５００ｍｇ（０．７４ｍｍｏｌ）をテトラヒドロフラン１０ｍｌに完全に溶解する。室温でテトラブチルアンモニウムフロリド（ＴＢＡＦ）１．８ｍｌ（１Ｍ‐テトラヒドロフラン溶液、２．５当量）を徐々に添加する。３０分間反応させた後、塩化アンモニウム水溶液とエチルアセテートを用いて抽出し、硫酸マグネシウムを用いて有機層から水分を除去する。濾過後、溶媒を減圧蒸留し、残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィーで精製して標記化合物を得た。
【０２２４】
１Ｈ  ＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ７．９８（ｔ，２Ｈ），７．６５（ｔ，２Ｈ），７．５４〜７．３１（ｍ，６Ｈ），７．１７（ｔ，３Ｈ），７．０７（ｔ，１Ｈ），６．６１（ｔ，１Ｈ），４．９５（ｓ，１Ｈ），４．５４（ｍ，１Ｈ），３．４０（ｍ，１Ｈ），３．１３（ｍ，１Ｈ），２．１７（ｓ，３Ｈ），１．８９（ｓ，３Ｈ）
【０２２５】
＜実施例１４＞化合物４の製造
【０２２６】
【化４６】
2013538215.tif 000049
【０２２７】
前記実施例１３で製造された化合物３  ３００ｍｇ（０．５３ｍｍｏｌ）と５％の水を含むアセトン１０ｍｌ、炭酸カリウム１８５ｍｇ（０．５３ｍｍｏｌ、２．５当量）を室温で均一に混ぜる。ブロモ酢酸エチルエステル７１μｌ（０．６４ｍｍｏｌ、１．２当量）を添加して、４時間強烈に撹拌する。反応終了後、塩水溶液とエチルアセテートを用いて抽出し、硫酸マグネシウムを用いて水分を除去する。濾過後、溶媒を減圧蒸留し、残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィーで精製して標記化合物を得た。
【０２２８】
１Ｈ  ＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ７．９８（ｄ，２Ｈ），７．６５（ｄ，２Ｈ），７．５４〜７．２３（ｍ，６Ｈ），７．１８（ｔ，２Ｈ），７．０５（ｔ，２Ｈ），６．６２（ｔ，１Ｈ），４．６０（ｓ，２Ｈ），４．２４（ｑ，２Ｈ），４．１２（ｑ，１Ｈ），３．４３（ｄ，１Ｈ），３．１４（ｄ，１Ｈ），２．２１（ｓ，３Ｈ），２．０６（ｓ，３Ｈ），１．２５（ｔ，３Ｈ）
【０２２９】
＜実施例１５＞化合物５の製造
【０２３０】
【化４７】
2013538215.tif 000050
【０２３１】
前記実施例１４で製造された化合物４  ３００ｍｇ（０．４６ｍｍｏｌ）をＴＨＦ１５ｍｌおよび水１０ｍｌに均一に混ぜた後、０℃で６０分間さらに撹拌してから反応が終了すると、０．５Ｍ  ＮａＨＳＯ４  ２．５ｍｌを加えた後、塩水溶液とエチルアセテートを用いて抽出し濾過した後、溶媒を減圧蒸留し、ＬＨ‐２０カラムクロマトグラフィーで精製して標記化合物を得た。
【０２３２】
１Ｈ  ＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ７．９５（ｄ，２Ｈ），７．６６（ｄ，２Ｈ），７．５３（ｄ，２Ｈ），７．４６（ｄ，２Ｈ），７．４１（ｔ，２Ｈ），７．３９（ｔ，１Ｈ），７．２６（ｄ，３Ｈ），７．０５（ｄ，１Ｈ），６．５２（ｄ，１Ｈ），４．５６（ｍ，３Ｈ），３．４０（ｑ，１Ｈ），３．１２（ｑ，１Ｈ），２．１５（ｓ，３Ｈ），１．７９（ｓ，３Ｈ）
【０２３３】
＜実施例１６＞化合物６の製造
【０２３４】
【化４８】
2013538215.tif 000051
【０２３５】
前記実施例１１で製造された化合物１  ５００ｍｇ（０．９８ｍｍｏｌ）を無水テトラヒドロフラン２０ｍｌに溶解し、温度を‐７８℃に下げる。これにリチウムジイソプロピルアミド（ＬＤＡ）１．１ｍｌ（１．８Ｍ、２．０当量）を徐々に添加する。その後、反応溶液に４‐（４‐フルオロフェニル）‐ベンジルクロリド２１６ｍｇ（０．９８ｍｍｏｌ）を入れて反応温度を徐々に室温に上げる。３０分間さらに反応させた後、塩化アンモニウム水溶液で反応を終了させ、エチルアセテートと塩水溶液を用いて有機溶媒を抽出し、硫酸マグネシウムを用いて有機層の水分を除去する。濾過後、溶媒を減圧蒸留し、残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィーで精製して標記化合物を得た。
【０２３６】
１Ｈ  ＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ７．９６（ｄ，２Ｈ），７．６６（ｄ，２Ｈ），７．４５（ｍ，２Ｈ），７．３８（ｄ，２Ｈ），７．１３〜７．０６（ｍ，６Ｈ），６．６４（ｔ，１Ｈ），４．５４（ｍ，１Ｈ），３．４２（ｍ，１Ｈ），３．１３（ｍ，１Ｈ），２．１５（ｓ，３Ｈ），１．８７（ｓ，３Ｈ），０．９７（ｓ，９Ｈ），０．１６（ｓ，６Ｈ）
【０２３７】
＜実施例１７＞化合物７の製造
【０２３８】
【化４９】
2013538215.tif 000052
【０２３９】
前記実施例１６で製造された化合物６  ５００ｍｇ（０．７２ｍｍｏｌ）をテトラヒドロフラン１０ｍｌに完全に溶解する。室温でテトラブチルアンモニウムフロリド（ＴＢＡＦ）１．８ｍｌ（１Ｍ‐テトラヒドロフラン溶液、２．５当量）を徐々に添加する。３０分間反応させた後、塩化アンモニウム水溶液とエチルアセテートを用いて抽出し、硫酸マグネシウムを用いて有機層から水分を除去する。濾過後、溶媒を減圧蒸留し、残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィーで精製して標記化合物を得た。
【０２４０】
１Ｈ  ＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ７．８０（ｄ，２Ｈ），７．６７（ｄ，２Ｈ），７．５０（ｍ，２Ｈ），７．４１（ｄ，２Ｈ），７．１７〜７．０５（ｍ，６Ｈ），６．６３（ｔ，１Ｈ），４．９５（ｓ，１Ｈ），４．５４（ｍ，１Ｈ），３．４０（ｍ，１Ｈ），３．１３（ｍ，１Ｈ），２．１７（ｓ，３Ｈ），１．８９（ｓ，３Ｈ）
【０２４１】
＜実施例１８＞化合物８の製造
【０２４２】
【化５０】
2013538215.tif 000053
【０２４３】
前記実施例１７で製造された化合物７  ３００ｍｇ（０．５２ｍｍｏｌ）と５％の水を含むアセトン１０ｍｌ、炭酸カリウム１７９ｍｇ（１．２９ｍｍｏｌ、２．５当量）を室温で均一に混ぜる。ブロモ酢酸エチルエステル６９μｌ（０．６２ｍｍｏｌ、１．２当量）を添加して、４時間強烈に撹拌する。反応終了後、塩水溶液とエチルアセテートを用いて抽出し、硫酸マグネシウムを用いて水分を除去する。濾過後、溶媒を減圧蒸留し、残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィーで精製して標記化合物を得た。
【０２４４】
１Ｈ  ＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ７．８０（ｄ，２Ｈ），７．６７（ｄ，２Ｈ），７．５０（ｍ，２Ｈ），７．４１（ｄ，２Ｈ），７．１７〜７．０５（ｍ，６Ｈ），６．６３（ｔ，１Ｈ），４．５９（ｓ，２Ｈ），４．５５（ｑ，１Ｈ），４．２３（ｑ，２Ｈ），３．４０（ｑ，１Ｈ），３．１１（ｑ，１Ｈ），２．２０（ｓ，３Ｈ），１．８７（ｓ，３Ｈ），１．２６（ｔ，３Ｈ）
【０２４５】
＜実施例１９＞化合物９の製造
【０２４６】
【化５１】
2013538215.tif 000054
【０２４７】
前記実施例１８で製造された化合物８  ３００ｍｇ（０．４５ｍｍｏｌ）をＴＨＦ１５ｍｌおよび水１０ｍｌに均一に混ぜた後、０℃で６０分間さらに撹拌してから反応が終了すると、０．５Ｍ  ＮａＨＳＯ４  ２．５ｍｌを加えた後に塩水溶液とエチルアセテートを用いて抽出し濾過した後、溶媒を減圧蒸留し、ＬＨ‐２０カラムクロマトグラフィーで精製して標記化合物を得た。
【０２４８】
１Ｈ  ＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ７．７６（ｄ，２Ｈ），７．４６（ｄ，２Ｈ），７．３７（ｍ，２Ｈ），７．３１（ｄ，２Ｈ），７．０４〜６．８８（ｍ，６Ｈ），６．３５（ｔ，１Ｈ），４．５０（ｔ，１Ｈ），３．９１（Ｓ，２Ｈ），３．３０（ｑ，１Ｈ），３．０１（ｑ，１Ｈ），１．８４（Ｓ，３Ｈ），１．７０（Ｓ，３Ｈ）
【０２４９】
＜実施例２０＞化合物１０の製造
【０２５０】
【化５２】
2013538215.tif 000055
【０２５１】
前記実施例１１で製造された化合物１  ５００ｍｇ（０．９８ｍｍｏｌ）を無水テトラヒドロフラン２０ｍｌに溶解し、温度を‐７８℃に下げる。これにリチウムジイソプロピルアミド（ＬＤＡ）１．１ｍｌ（１．８Ｍ、２．０当量）を徐々に添加する。その後、反応溶液に４‐（３、４、５‐トリフルオロフェニル）ベンジルクロリド２５２ｍｇ（０．９８ｍｍｏｌ）を入れて反応温度を徐々に室温に上げる。３０分間さらに反応させた後、塩化アンモニウム水溶液で反応を終了させ、エチルアセテートと塩水溶液を用いて有機溶媒を抽出し、硫酸マグネシウムを用いて有機層の水分を除去する。濾過後、溶媒を減圧蒸留し、残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィーで精製して標記化合物を得た。
【０２５２】
１Ｈ  ＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ７．９８（ｄ，２Ｈ），７．６６（ｄ，２Ｈ），７．３８（ｄ，２Ｈ），７．１８〜７．０４（ｍ，６Ｈ），６．６３（ｔ，１Ｈ），４．５４（ｍ，１Ｈ），３．４１（ｑ，１Ｈ），３．１３（ｑ，１Ｈ），２．１１（ｓ，３Ｈ），１．８８（ｓ，３Ｈ），０．９９（ｓ，９Ｈ），０．１８（ｓ，６Ｈ）
【０２５３】
＜実施例２１＞化合物１１の製造
【０２５４】
【化５３】
2013538215.tif 000056
【０２５５】
前記実施例２０で製造された化合物１０  ５００ｍｇ（０．６９ｍｍｏｌ）をテトラヒドロフラン１０ｍｌに完全に溶解する。室温でテトラブチルアンモニウムフロリド（ＴＢＡＦ）１．７ｍｌ（１Ｍ‐テトラヒドロフラン溶液、２．５当量）を徐々に添加する。３０分間反応させた後、塩化アンモニウム水溶液とエチルアセテートを用いて抽出し、硫酸マグネシウムを用いて有機層から水分を除去する。濾過後、溶媒を減圧蒸留し、残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィーで精製して標記化合物を得た。
【０２５６】
１Ｈ  ＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ７．９８（ｄ，２Ｈ），７．６６（ｄ，２Ｈ），７．３８（ｄ，２Ｈ），７．１８〜７．０４（ｍ，６Ｈ），６．６３（ｔ，１Ｈ），５．０１（ｓ，１Ｈ），４．５３（ｍ，１Ｈ），３．４１（ｑ，１Ｈ），３．１３（ｑ，１Ｈ），２．１５（ｓ，３Ｈ），１．８６（ｓ，３Ｈ）
【０２５７】
＜実施例２２＞化合物１２の製造
【０２５８】
【化５４】
2013538215.tif 000057
【０２５９】
前記実施例２１で製造された化合物１１  ３００ｍｇ（０．４９ｍｍｏｌ）と５％の水を含むアセトン１０ｍｌ、炭酸カリウム１４６ｍｇ（１．２９ｍｍｏｌ、２．５当量）を室温で均一に混ぜる。ブロモ酢酸エチルエステル６５μｌ（０．５８ｍｍｏｌ、１．２当量）を添加して、４時間強烈に撹拌する。反応終了後、塩水溶液とエチルアセテートを用いて抽出し、硫酸マグネシウムを用いて水分を除去する。濾過後、溶媒を減圧蒸留し、残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィーで精製して標記化合物を得た。
【０２６０】
１Ｈ  ＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ７．９８（ｄ，２Ｈ），７．６６（ｄ，２Ｈ），７．３８（ｄ，２Ｈ），７．１７〜７．０６（ｍ，６Ｈ），６．５５（ｔ，１Ｈ），４．５７（ｓ，２Ｈ），４．５３（ｑ，１Ｈ），４．２３（ｑ，２Ｈ），３．４１（ｑ，１Ｈ），３．１３（ｑ，１Ｈ），２．２０（ｓ，３Ｈ），１．８８（ｓ，３Ｈ），１．２５（ｔ，３Ｈ）
【０２６１】
＜実施例２３＞化合物１３の製造
【０２６２】
【化５５】
2013538215.tif 000058
【０２６３】
前記実施例２２で製造された化合物１２  ３００ｍｇ（０．４３ｍｍｏｌ）をＴＨＦ１５ｍｌおよび水１０ｍｌに均一に混ぜた後、０℃で６０分間さらに撹拌してから反応が終了すると、０．５Ｍ  ＮａＨＳＯ４  ２．５ｍｌを加えた後に塩水溶液とエチルアセテートを用いて抽出し濾過した後、溶媒を減圧蒸留し、ＬＨ‐２０カラムクロマトグラフィーで精製して標記化合物を得た。
【０２６４】
１Ｈ  ＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ７．９８（ｄ，２Ｈ），７．６６（ｄ，２Ｈ），７．３８（ｄ，２Ｈ），７．１７〜７．０６（ｍ，６Ｈ），６．５５（ｔ，１Ｈ），４．５７（ｓ，２Ｈ），４．５１（ｔ，１Ｈ），４．２０（ｓ，２Ｈ），３．３３（ｑ，１Ｈ），３．０６（ｑ，１Ｈ），１．９６（ｓ，３Ｈ），１．７２（ｓ，３Ｈ）
【０２６５】
＜実施例２４＞化合物１４の製造
【０２６６】
【化５６】
2013538215.tif 000059
【０２６７】
前記実施例１１で製造された化合物１  ５００ｍｇ（０．９８ｍｍｏｌ）を無水テトラヒドロフラン２０ｍｌに溶解し、温度を‐７８℃に下げる。これにリチウムジイソプロピルアミド（ＬＤＡ）１．１ｍｌ（１．８Ｍ、２．０当量）を徐々に添加する。その後、反応溶液に４‐（４‐トリフルオロメチル）フェニルベンジルクロリド２６５ｍｇ（０．９８ｍｍｏｌ）を入れて反応温度を徐々に室温に上げる。３０分間さらに反応させた後、塩化アンモニウム水溶液で反応を終了させ、エチルアセテートと塩水溶液を用いて有機溶媒を抽出し、硫酸マグネシウムを用いて有機層の水分を除去する。濾過後、溶媒を減圧蒸留し、残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィーで精製して標記化合物を得た。
【０２６８】
＜実施例２５＞化合物１５の製造
【０２６９】
【化５７】
2013538215.tif 000060
【０２７０】
前記実施例２４で製造された化合物１４  ５００ｍｇ（０．６７ｍｍｏｌ）をテトラヒドロフラン１０ｍｌに完全に溶解する。室温でテトラブチルアンモニウムフロリド（ＴＢＡＦ）１．６８ｍｌ（１Ｍ‐テトラヒドロフラン溶液、２．５当量）を徐々に添加する。３０分間反応させた後、塩化アンモニウム水溶液とエチルアセテートを用いて抽出し、硫酸マグネシウムを用いて有機層から水分を除去する。濾過後、溶媒を減圧蒸留し、残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィーで精製して標記化合物を得た。
【０２７１】
＜実施例２６＞化合物１６の製造
【０２７２】
【化５８】
2013538215.tif 000061
【０２７３】
前記実施例２５で製造された化合物１５  ３００ｍｇ（０．４８ｍｍｏｌ）と５％の水を含むアセトン１０ｍｌ、炭酸カリウム１６４ｍｇ（１．１９ｍｍｏｌ、２．５当量）を室温で均一に混ぜる。ブロモ酢酸エチルエステル６３μｌ（０．５７ｍｍｏｌ、１．２当量）を添加して、４時間強烈に撹拌する。反応終了後、塩水溶液とエチルアセテートを用いて抽出し、硫酸マグネシウムを用いて水分を除去する。濾過後、溶媒を減圧蒸留し、残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィーで精製して標記化合物を得た。
【０２７４】
＜実施例２７＞化合物１７の製造
【０２７５】
【化５９】
2013538215.tif 000062
【０２７６】
前記実施例２６で製造された化合物１６  ３００ｍｇ（０．４２ｍｍｏｌ）をＴＨＦ１５ｍｌおよび水１０ｍｌに均一に混ぜた後、０℃で６０分間さらに撹拌してから反応が終了すると、０．５Ｍ  ＮａＨＳＯ４  ２．５ｍｌを加えた後に塩水溶液とエチルアセテートを用いて抽出し濾過した後、溶媒を減圧蒸留し、ＬＨ‐２０カラムクロマトグラフィーで精製して標記化合物を得た。
【０２７７】
１Ｈ  ＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ７．７７（ｄ，２Ｈ），７．５９（ｄ，２Ｈ），７．５０（ｍ，４Ｈ），７．３８（ｄ，２Ｈ），７．１０（ｄ，２Ｈ），６．９０（ｍ，２Ｈ），６．３８（ｔ，１Ｈ），４．５０（ｔ，１Ｈ），４．０７（ｓ，２Ｈ），３．３３（ｑ，１Ｈ），３．０６（ｑ，２Ｈ），１．６９（ｓ，３Ｈ），１．２４（ｓ，３Ｈ）
【０２７８】
＜実施例２８＞化合物１８の製造
【０２７９】
【化６０】
2013538215.tif 000063
【０２８０】
前記実施例１１で製造された化合物１  ５００ｍｇ（０．９８ｍｍｏｌ）を無水テトラヒドロフラン２０ｍｌに溶解し、温度を‐７８℃に下げる。これにリチウムジイソプロピルアミド（ＬＤＡ）１．１ｍｌ（１．８Ｍ、２．０当量）を徐々に添加する。その後、反応溶液に５‐（クロロメチル）‐２‐（４‐（トリフルオロメチル）フェニル）ピリジン２６６ｍｇ（０．９８ｍｍｏｌ）を入れて反応温度を徐々に室温に上げる。３０分間さらに反応させた後、塩化アンモニウム水溶液で反応を終了させ、エチルアセテートと塩水溶液を用いて有機溶媒を抽出し、硫酸マグネシウムを用いて有機層の水分を除去する。濾過後、溶媒を減圧蒸留し、残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィーで精製して標記化合物を得た。
【０２８１】
＜実施例２９＞化合物１９の製造
【０２８２】
【化６１】
2013538215.tif 000064
【０２８３】
前記実施例２８で製造された化合物１８  ５００ｍｇ（０．６７ｍｍｏｌ）をテトラヒドロフラン１０ｍｌに完全に溶解する。室温でテトラブチルアンモニウムフロリド（ＴＢＡＦ）１．６８ｍｌ（１Ｍ‐テトラヒドロフラン溶液、２．５当量）を徐々に添加する。３０分間反応させた後、塩化アンモニウム水溶液とエチルアセテートを用いて抽出し、硫酸マグネシウムを用いて有機層から水分を除去する。濾過後、溶媒を減圧蒸留し、残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィーで精製して標記化合物を得た。
【０２８４】
＜実施例３０＞化合物２０の製造
【０２８５】
【化６２】
2013538215.tif 000065
【０２８６】
前記実施例２９で製造された化合物１９  ３００ｍｇ（０．４８ｍｍｏｌ）と５％の水を含むアセトン１０ｍｌ、炭酸カリウム１６４ｍｇ（１．１９ｍｍｏｌ、２．５当量）を室温で均一に混ぜる。ブロモ酢酸エチルエステル６３μｌ（０．５７ｍｍｏｌ、１．２当量）を添加して、４時間強烈に撹拌する。反応終了後、塩水溶液とエチルアセテートを用いて抽出し、硫酸マグネシウムを用いて水分を除去する。濾過後、溶媒を減圧蒸留し、残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィーで精製して標記化合物を得た。
【０２８７】
＜実施例３１＞化合物２１の製造
【０２８８】
【化６３】
2013538215.tif 000066
【０２８９】
前記実施例３０で製造された化合物２０  ３００ｍｇ（０．４２ｍｍｏｌ）をＴＨＦ１５ｍｌおよび水１０ｍｌに均一に混ぜた後、０℃で６０分間さらに撹拌してから反応が終了すると、０．５Ｍ  ＮａＨＳＯ４  ２．５ｍｌを加えた後に塩水溶液とエチルアセテートを用いて抽出し濾過した後、溶媒を減圧蒸留し、ＬＨ‐２０カラムクロマトグラフィーで精製して標記化合物を得た。
【０２９０】
１Ｈ  ＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ８．３８（ｓ，１Ｈ），７．９４（ｄ，２Ｈ），７．７８（ｄ，２Ｈ），７．６１〜７．４７（ｍ，５Ｈ），７．３３（ｄ，１Ｈ），６．８９（ｄ，２Ｈ），６．３８（ｔ，１Ｈ），４．４６（ｔ，１Ｈ），４．０４（ｓ，２Ｈ），３．２７（ｑ，１Ｈ），３．０２（ｑ，２Ｈ），１．８４（ｓ，３Ｈ），１．７５（ｓ，３Ｈ）
【０２９１】
＜実施例３２＞化合物２２の製造
【０２９２】
【化６４】
2013538215.tif 000067
【０２９３】
前記実施例１１で製造された化合物１  ５００ｍｇ（０．９８ｍｍｏｌ）を無水テトラヒドロフラン２０ｍｌに溶解し、温度を‐７８℃に下げる。これにリチウムジイソプロピルアミド（ＬＤＡ）１．１ｍｌ（１．８Ｍ、２．０当量）を徐々に添加する。その後、反応溶液に４‐（３‐トリフルオロメチル）フェニルベンジルクロリド２６６ｍｇ（０．９８ｍｍｏｌ）を入れて反応温度を徐々に室温に上げる。３０分間さらに反応させた後、塩化アンモニウム水溶液で反応を終了させ、エチルアセテートと塩水溶液を用いて有機溶媒を抽出し、硫酸マグネシウムを用いて有機層の水分を除去する。濾過後、溶媒を減圧蒸留し、残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィーで精製して標記化合物を得た。
【０２９４】
＜実施例３３＞化合物２３の製造
【０２９５】
【化６５】
2013538215.tif 000068
【０２９６】
前記実施例３２で製造された化合物２２  ５００ｍｇ（０．６７ｍｍｏｌ）をテトラヒドロフラン１０ｍｌに完全に溶解する。室温でテトラブチルアンモニウムフロリド（ＴＢＡＦ）１．６８ｍｌ（１Ｍ‐テトラヒドロフラン溶液、２．５当量）を徐々に添加する。３０分間反応させた後、塩化アンモニウム水溶液とエチルアセテートを用いて抽出し、硫酸マグネシウムを用いて有機層から水分を除去する。濾過後、溶媒を減圧蒸留し、残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィーで精製して標記化合物を得た。
【０２９７】
＜実施例３４＞化合物２４の製造
【０２９８】
【化６６】
2013538215.tif 000069
【０２９９】
前記実施例３３で製造された化合物２３  ３００ｍｇ（０．４８ｍｍｏｌ）と５％の水を含むアセトン１０ｍｌ、炭酸カリウム１６４ｍｇ（１．１９ｍｍｏｌ、２．５当量）を室温で均一に混ぜる。ブロモ酢酸エチルエステル６３μｌ（０．５７ｍｍｏｌ、１．２当量）を添加して、４時間強烈に撹拌する。反応終了後、塩水溶液とエチルアセテートを用いて抽出し、硫酸マグネシウムを用いて水分を除去する。濾過後、溶媒を減圧蒸留し、残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィーで精製して標記化合物を得た。
【０３００】
＜実施例３５＞化合物２５の製造
【０３０１】
【化６７】
2013538215.tif 000070
【０３０２】
前記実施例３４で製造された化合物２４  ３００ｍｇ（０．４２ｍｍｏｌ）をＴＨＦ１５ｍｌおよび水１０ｍｌに均一に混ぜた後、０℃で６０分間さらに撹拌してから反応が終了すると、０．５Ｍ  ＮａＨＳＯ４  ２．５ｍｌを加えた後に塩水溶液とエチルアセテートを用いて抽出し濾過した後、溶媒を減圧蒸留し、ＬＨ‐２０カラムクロマトグラフィーで精製して標記化合物を得た。
【０３０３】
１Ｈ  ＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ７．９６（ｄ，２Ｈ），７．７８（ｓ，１Ｈ），７．６８（ｍ，３Ｈ），７．５８〜７．４５（ｍ，４Ｈ），７．２０（ｄ，３Ｈ），７．０７（ｔ，１Ｈ），６．５７（ｔ，１Ｈ），４．７０（ｓ，２Ｈ），４．５７（ｔ，１Ｈ），３．４３（ｑ，１Ｈ），３．１５（ｑ，１Ｈ），２．１８（ｓ，３Ｈ），１．８１（ｓ，３Ｈ）
【０３０４】
＜実施例３６＞化合物２６の製造
【０３０５】
【化６８】
2013538215.tif 000071
【０３０６】
前記実施例１１で製造された化合物１  ５００ｍｇ（０．９８ｍｍｏｌ）を無水テトラヒドロフラン２０ｍｌに溶解し、温度を‐７８℃に下げる。これにリチウムジイソプロピルアミド（ＬＤＡ）１．１ｍｌ（１．８Ｍ、２．０当量）を徐々に添加する。その後、反応溶液に４‐（３‐クロロ‐４‐トリフルオロメチル）フェニルベンジルクロリド２５０ｍｇ（０．９８ｍｍｏｌ）を入れて反応温度を徐々に室温に上げる。３０分間さらに反応させた後、塩化アンモニウム水溶液で反応を終了させ、エチルアセテートと塩水溶液を用いて有機溶媒を抽出し、硫酸マグネシウムを用いて有機層の水分を除去する。濾過後、溶媒を減圧蒸留し、残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィーで精製して標記化合物を得た。
【０３０７】
＜実施例３７＞化合物２７の製造
【０３０８】
【化６９】
2013538215.tif 000072
【０３０９】
前記実施例３６で製造された化合物２６  ５００ｍｇ（０．６９ｍｍｏｌ）をテトラヒドロフラン１０ｍｌに完全に溶解する。室温でテトラブチルアンモニウムフロリド（ＴＢＡＦ）１．７２ｍｌ（１Ｍ‐テトラヒドロフラン溶液、２．５当量）を徐々に添加する。３０分間反応させた後、塩化アンモニウム水溶液とエチルアセテートを用いて抽出し、硫酸マグネシウムを用いて有機層から水分を除去する。濾過後、溶媒を減圧蒸留し、残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィーで精製して標記化合物を得た。
【０３１０】
１Ｈ  ＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ７．９６（ｄ，２Ｈ），７．６７（ｄ，２Ｈ），７．５６（ｑ，１Ｈ），７．３７（ｍ，３Ｈ），７．２２〜７．０５（ｍ，５Ｈ），６．５８（ｔ，１Ｈ），５．１７（ｓ，１Ｈ），４．５４（ｑ，１Ｈ），３．４２（ｑ，１Ｈ），３．１３（ｑ，１Ｈ），２．１７（ｓ，３Ｈ），１．８７（ｓ，３Ｈ）
【０３１１】
＜実施例３８＞化合物２８の製造
【０３１２】
【化７０】
2013538215.tif 000073
【０３１３】
前記実施例３７で製造された化合物２７  ３００ｍｇ（０．４９ｍｍｏｌ）と５％の水を含むアセトン１０ｍｌ、炭酸カリウム１６９ｍｇ（１．１９ｍｍｏｌ、２．５当量）を室温で均一に混ぜる。ブロモ酢酸エチルエステル６５μｌ（０．５９ｍｍｏｌ、１．２当量）を添加して、４時間強烈に撹拌する。反応終了後、塩水溶液とエチルアセテートを用いて抽出し、硫酸マグネシウムを用いて水分を除去する。濾過後、溶媒を減圧蒸留し、残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィーで精製して標記化合物を得た。
【０３１４】
＜実施例３９＞化合物２９の製造
【０３１５】
【化７１】
2013538215.tif 000074
【０３１６】
前記実施例３８で製造された化合物２８  ３００ｍｇ（０．４３ｍｍｏｌ）をＴＨＦ１５ｍｌおよび水１０ｍｌに均一に混ぜた後、０℃で６０分間さらに撹拌してから反応が終了すると、０．５Ｍ  ＮａＨＳＯ４  ２．５ｍｌを加えた後に塩水溶液とエチルアセテートを用いて抽出し濾過した後、溶媒を減圧蒸留し、ＬＨ‐２０カラムクロマトグラフィーで精製して標記化合物を得た。
【０３１７】
１Ｈ  ＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ７．９６（ｄ，２Ｈ），７．６７（ｄ，２Ｈ），７．５６（ｑ，１Ｈ），７．３７（ｍ，３Ｈ），７．２２〜７．０５（ｍ，５Ｈ），６．５８（ｔ，１Ｈ），４．６２（ｓ，２Ｈ），４．５６（ｑ，１Ｈ），３．４２（ｑ，１Ｈ），３．１４（ｑ，１Ｈ），２．１９（ｓ，３Ｈ），１．８１（ｓ，３Ｈ）
【０３１８】
＜実施例４０＞化合物３０の製造
【０３１９】
【化７２】
2013538215.tif 000075
【０３２０】
前記実施例１１で製造された化合物１  ５００ｍｇ（０．９８ｍｍｏｌ）を無水テトラヒドロフラン２０ｍｌに溶解し、温度を‐７８℃に下げる。これにリチウムジイソプロピルアミド（ＬＤＡ）１．１ｍｌ（１．８Ｍ、２．０当量）を徐々に添加する。その後、反応溶液に５‐（クロロメチル）‐３‐（４‐（トリフルオロメチル）フェニル）イソオキサゾール２５７ｍｇ（０．９８ｍｍｏｌ）を入れて反応温度を徐々に室温に上げる。３０分間さらに反応させた後、塩化アンモニウム水溶液で反応を終了させ、エチルアセテートと塩水溶液を用いて有機溶媒を抽出し、硫酸マグネシウムを用いて有機層の水分を除去する。濾過後、溶媒を減圧蒸留し、残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィーで精製して標記化合物を得た。
【０３２１】
＜実施例４１＞化合物３１の製造
【０３２２】
【化７３】
2013538215.tif 000076
【０３２３】
前記実施例４０で製造された化合物３０  ５００ｍｇ（０．７２ｍｍｏｌ）をテトラヒドロフラン１０ｍｌに完全に溶解する。室温でテトラブチルアンモニウムフロリド（ＴＢＡＦ）１．８０ｍｌ（１Ｍ‐テトラヒドロフラン溶液、２．５当量）を徐々に添加する。３０分間反応させた後、塩化アンモニウム水溶液とエチルアセテートを用いて抽出し、硫酸マグネシウムを用いて有機層から水分を除去する。濾過後、溶媒を減圧蒸留し、残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィーで精製して標記化合物を得た。
【０３２４】
＜実施例４２＞化合物３２の製造
【０３２５】
【化７４】
2013538215.tif 000077
【０３２６】
前記実施例４１で製造された化合物３１  ３００ｍｇ（０．５３ｍｍｏｌ）と５％の水を含むアセトン１０ｍｌ、炭酸カリウム１８２ｍｇ（１．１９ｍｍｏｌ、２．５当量）を室温で均一に混ぜる。ブロモ酢酸エチルエステル７０μｌ（０．６３ｍｍｏｌ、１．２当量）を添加して、４時間強烈に撹拌する。反応終了後、塩水溶液とエチルアセテートを用いて抽出し、硫酸マグネシウムを用いて水分を除去する。濾過後、溶媒を減圧蒸留し、残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィーで精製して標記化合物を得た。
【０３２７】
１Ｈ  ＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ７．９６（ｄ，２Ｈ），７．６６（ｍ，２Ｈ），７．２０〜７．０８（ｍ，４Ｈ），６．５８（ｔ，１Ｈ），６．２２（ｓ，１Ｈ），４．６１（ｓ，２Ｈ），４．５７（ｔ，１Ｈ），４．２５（ｍ，２Ｈ），３．４２（ｑ，１Ｈ），３．１４（ｑ，１Ｈ），１．８８（ｓ，３Ｈ），１．５７（ｓ，３Ｈ），１．２７（ｔ，３Ｈ）
【０３２８】
＜実施例４３＞化合物３３の製造
【０３２９】
【化７５】
2013538215.tif 000078
【０３３０】
前記実施例３４で製造された化合物３２  ３００ｍｇ（０．４６ｍｍｏｌ）をＴＨＦ１５ｍｌおよび水１０ｍｌに均一に混ぜた後、０℃で６０分間さらに撹拌してから反応が終了すると、０．５Ｍ  ＮａＨＳＯ４  ２．５ｍｌを加えた後に塩水溶液とエチルアセテートを用いて抽出し濾過した後、溶媒を減圧蒸留し、ＬＨ‐２０カラムクロマトグラフィーで精製して標記化合物を得た。
【０３３１】
１Ｈ  ＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ７．９６（ｄ，２Ｈ），７．６６（ｍ，２Ｈ），７．２０〜７．０８（ｍ，４Ｈ），６．５８（ｔ，１Ｈ），６．２２（ｓ，１Ｈ），４．７０（ｑ，１Ｈ），４．６３（ｓ，２Ｈ），３．４４（ｑ，１Ｈ），３．２５（ｑ，１Ｈ），２．２１（ｓ，３Ｈ），２．０２（ｓ，３Ｈ）
【０３３２】
＜実施例４４＞開発物質のｉｎ  ｖｉｔｒｏ活性検定（Ｔｒａｎｓｆｅｃｔｉｏｎ  ａｓｓａｙ）
【０３３３】
ＣＶ‐１細胞を用いてａｓｓａｙを行った。細胞培養は、５％の二酸化炭素が含まれた３７℃の培養器で１０％ＦＢＳ、ＤＢＳ（ｄｅｌｉｐｉｄａｔｅｄ）と１％ペニシリン／ストレプトマイシンを入れたＤＭＥＭ培地を用いて９６ウェルプレートで行った。実験は、細胞接種、トランスフェクション、開発物質処理、結果確認の４段階に分けて行った。ＣＶ‐１細胞を９６ウェルプレートに５，０００ｃｅｌｌ／ｗｅｌｌに接種して、２４時間後にトランスフェクションを行った。ＰＰＡＲｓプラスミドＤＮＡとレポーターＤＮＡ（ｒｅｐｏｒｔｅｒ  ＤＮＡ）、β‐ガラクトシダーゼＤＮＡ（β‐ｇａｌａｃｔｏｓｉｄａｓｅ  ＤＮＡ）をトランスフェクション試薬（Ｔｒａｎｓｆｅｃｔｉｏｎ  ｒｅａｇｅｎｔ）と混合して細胞に処理した。開発物質をジメチルスルホキシド（ＤＭＳＯ）に溶解した後、ｍｅｄｉａを用いて様々な濃度で細胞に処理した。２４時間インキュベーターで培養した後、ｌｙｓｉｓ  ｂｕｆｆｅｒを用いて細胞を溶解し、ルミノメーター（ｌｕｍｉｎｏｍｅｔｅｒ）とマイクロプレートリーダー（ｍｉｃｒｏｐｌａｔｅ  ｒｅａｄｅｒ）を用いてルシフェラーゼ（ｌｕｃｉｆｅｒａｓｅ）とβ‐ガラクトシダーゼ（β‐ｇａｌａｃｔｏｓｉｄａｓｅ）活性を測定した。測定されたルシフェラーゼ（ｌｕｃｉｆｅｒａｓｅ）値は、β‐ガラクトシダーゼ（β‐ｇａｌａｃｔｏｓｉｄａｓｅ）値を用いて補正し、この値を用いてグラフを作成し、ＥＣ５０値を求めた。
【０３３４】
【表２】
2013538215.tif 000079
ＥＣ５０データ
【０３３５】
前記表２から分かるように、本発明による化合物はＰＰＡＲδに対して非常に選択的であり、ＰＰＡＲδに対して２〜２００ｎＭの活性を有している。
【０３３６】
＜実施例４５＞開発物質のｉｎ  ｖｉｖｏ活性検定
【０３３７】
Ｉｎ  ｖｉｔｒｏ実験結果、優れたＰＰＡＲδ活性を示す化合物５および化合物９に対するｉｎ  ｖｉｖｏ活性を確認するために動物実験を行った。
【０３３８】
（１）肥満抑制効能検証
【０３３９】
本発明による物質に対するｉｎ  ｖｉｖｏ効果を検定するためにマウスを用いた実験を行った。８週令のＣ５７ＢＬ／６マウスを用いて、肥満を誘導するために３５％の脂肪が含有された飼料を使用した。６０日間高脂肪を摂取させながらｖｅｈｉｃｌｅと化合物５、化合物９（１０ｍｇ／ｋｇ／ｄａｙ）を経口投与した。実験結果、化合物５を投与したグループはｖｅｈｉｃｌｅを投与した対照群グループに比べて３５％の肥満抑制効果があり、化合物９を投与した群は３３％の抑制効能があることを立証した。
【０３４０】
（２）糖尿改善効果検証
【０３４１】
本発明による物質に対する糖尿改善効果を検証するためにブドウ糖抵抗性テスト（ＧＴＴ：ｇｌｕｃｏｓｅ  ｔｏｌｅｒａｎｃｅ  ｔｅｓｔ）を行った。７０日間薬物を経口投与した高脂肪誘導糖尿マウスにブドウ糖（１．５ｇ／Ｋｇ）を腹腔投与した後、２時間血糖変化を測定した。その結果、化合物５および化合物９（１０ｍｇ／ｋｇ／ｄａｙ）を投与した群は対照群に比べて２０〜４０分の間に血糖が急速に減少し、１００分後にはグルコースクリアランスが完全に生じた。しかし、ｖｅｈｉｃｌｅを投与した対照群マウスのグループは、１２０分後にも正常血糖を維持することができなかった。このような結果から開発物質である化合物５および化合物９に糖尿改善効果があることを立証した。
【０３４２】
（３）高脂血症
【０３４３】
高密度コレステロール（ＨＤＬ）は体内で表皮細胞のコレステロール数値を低め、炎症反応を緩和するなどの役割を行うとともに、動脈硬化、高脂血症のような脂肪代謝性疾患を治療するために重要な役割を行うと知られている。本発明の開発物質である化合物５および化合物９の高密度コレステロール増加効果を確認するために、１０％の脂肪が含まれた飼料を６週間摂取させたマウスの血清を分離した。血清内の高密度コレステロール（ＨＤＬ）の濃度を分析した結果、ＧＷ５０１５１６を投与したグループは２９％の高濃度コレステロールが増加し、化合物５および化合物９を投与したグループは、それぞれ６８％、６２％が増加した。
【０３４４】
（４）動脈硬化の予防および治療効能
【０３４５】
本発明の開発物質である化合物５および化合物９の動脈硬化の予防および治療効能を検証するために、ＡｐｏＥ‐／‐マウスを用いたｉｎ  ｖｉｖｏ実験を行った。動脈硬化疾患モデルであるＡｐｏＥ‐／‐マウスに高濃度コレステロール飼料（２１％の高脂肪、１．２５％の高コレステロール飼料）を１４週間摂取させて動脈硬化を誘発した後、最後の４週間化合物５および化合物９を投与した。薬物を処理する方式を選択した。マウスの動脈を摘出してｅｎ  ｆａｃｅ方法で分析した結果、動脈硬化の発病が化合物５および化合物９によってそれぞれ２３％、１８％減少したことを確認した。
【０３４６】
（５）筋持久力増進効能立証
【０３４７】
本発明による物質に対する筋持久力強化および筋機能増進効果を検証するために動物実験を行った。胎児再プログラミング効能を確認するために化合物５および化合物９を１０ｍｇ／ｋｇ／ｄａｙの濃度で経口投与した。皮膚を除去してから筋肉を観察した結果、投与群が対照群より赤いことが観察された。このような筋線維の変化が筋持久力および筋機能改善効果に及ぼす影響を確認するためにトレッドミル（ｔｒｅａｄｍｉｌｌ）を用いた実験を行った。その結果、以下の結果のように開発物質において走行時間と走行距離が著しく増加したことを確認し、これから開発物質の持久力増進効能を立証した。
【０３４８】
【表３】
2013538215.tif 000080
トレッドミル（Ｔｒｅａｄｍｉｌｌ）を用いた持久力テスト結果
【０３４９】
また、開発物質の筋持久力強化および筋機能増進の効果が立証された。１０週令のＣ５７ＢＬ／６マウスに開発物質を１０ｍｇ／ｋｇ／ｄａｙの濃度で経口投与しながら運動させた。運動は、３０日間、一日に一回、３０分ずつトレッドミル（ｔｒｅａｄｍｉｌｌ）を用いて行われた。運動条件は、２ｍｅｔｅｒ／ｍｉｎの速度で５分、５ｍｅｔｅｒ／ｍｉｎの速度で５分、８ｍｅｔｅｒ／ｍｉｎの速度で５分、２０ｍｅｔｅｒ／ｍｉｎの速度で５分間運動させた。実験終了時点でトレッドミル（ｔｒｅａｄｍｉｌｌ）を用いて筋持久力強化および筋機能増進の効果をテストした。その結果、対照群に比べて処理群の運動時間（化合物５：１．７倍、化合物９：１．５倍）および運動距離（化合物５：１．８倍、化合物９：１．５倍）の両方が増加した。
【０３５０】
（６）記憶力増進効能立証
【０３５１】
本発明による物質の記憶力増進効能を検証するために動物実験を行った。胎児再プログラミング期間中に開発物質の化合物５および化合物９を１０ｍｇ／ｋｇ／ｄａｙの濃度で母体に経口投与した。モリス水迷路（Ｍｏｒｒｉｓ  ｗａｔｅｒ  ｍａｚｅ）テストを用いて対照群と投与群との脳機能の差を確認した。その結果、開発物質を投与したグループ（化合物５：８．２秒、化合物９：９．７秒）の記憶力が対照群グループ（Ｖｅｈｉｃｌｅ：２８秒）に比べて著しく増加した。
【０３５２】
＜実施例４６＞ＰＰＡＲδアゴニストを有効成分とする製剤の製造
【０３５３】
本発明のＰＰＡＲδアゴニストは、ヒトを含む哺乳動物に経口的または非経口的に投与することができる。ＰＰＡＲδアゴニストを有効成分とする組成物は特定の製剤に限定されず、経口投与剤、点滴液剤、錠剤、粉剤、液剤、座薬、外用剤、貼付剤、静脈注射液、散剤、顆粒剤、糖衣錠、カプセル剤、丸薬、懸濁剤、液剤、アンプル、注射液などに調剤することができ、その他に何れの形状の医薬品にも応用することができる。
【０３５４】
製造例１：錠剤の製造
【０３５５】
下記成分を混合して通常の方法で錠剤を製造した。
【０３５６】
化学式Ｉの化合物（例：化合物５および化合物９）１５ｍｇ
【０３５７】
乳糖９５ｍｇ
【０３５８】
ヒドロキシプロピルセルロース３ｍｇ
【０３５９】
カルシウムカルボキシメチルセルロース８ｍｇ
【０３６０】
ステアリン酸マグネシウム０．５ｍｇ
【０３６１】
製造例２：散剤の製造
【０３６２】
下記成分を混合して通常の方法で散剤を製造した。
【０３６３】
化学式Ｉの化合物（例：化合物５および化合物９）３０ｍｇ
【０３６４】
乳糖２０ｍｇ
【０３６５】
デンプン１５ｍｇ
【０３６６】
ステアリン酸マグネシウム適量
【０３６７】
製造例３．カプセル剤の製造
【０３６８】
下記成分を混合して通常の方法でハードカプセルを製造した。
【０３６９】
化学式Ｉの化合物（例：化合物５および化合物９）８０ｍｇ
【０３７０】
乳糖３０ｍｇ
【０３７１】
デンプン２５ｍｇ
【０３７２】
タルク２ｍｇ
【０３７３】
ステアリン酸マグネシウム適量
【０３７４】
製造例４．ソフトカプセル剤の製造
【０３７５】
下記成分を混合して通常の方法でソフトカプセルの内容物を準備した。１つのカプセル当たりに、ゼラチン１３２ｍｇ、濃グリセリン５０ｍｇ、７０％ジソルビトール液６ｍｇ、および着香剤としてエチルバニリン適量、コーティング基剤としてカルナウバロウを用いて通常の方法でソフトカプセルを製造した。
【０３７６】
化学式Ｉの化合物（例：化合物５および化合物９）８０ｍｇ
【０３７７】
ポリエチレングリコール４００  ４００ｍｇ
【０３７８】
濃グリセリン５０ｍｇ
【０３７９】
精製水３５ｍｇ
【０３８０】
製造例５．懸濁剤の製造
【０３８１】
下記成分を混合して通常の方法で懸濁剤を製造した。
【０３８２】
化学式Ｉの化合物（例：化合物５および化合物９）５０ｍｇ
【０３８３】
異性化糖１０ｇ
【０３８４】
砂糖２５ｍｇ
【０３８５】
カルシウムカルボキシメチルセルロース５０ｍｇ
【０３８６】
レモンフレーバー適量
【０３８７】
精製水を用いて総製造容量を１００ｍｌに合わせる。
【０３８８】
製造例６．注射剤の製造
【０３８９】
下記成分を混合して通常の方法で１アンプル当たり（２ｍｌ）下記の成分含量で製造した。
【０３９０】
化学式Ｉの化合物（例：化合物５および化合物９）２０ｍｇ
【０３９１】
マンニトール１８０ｍｇ
【０３９２】
注射用滅菌蒸留水２９７４ｍｇ
【０３９３】
第二リン酸ナトリウム２６ｍｇ
【０３９４】
製造例７．軟膏剤の製造
【０３９５】
下記成分を混合して通常の方法で軟膏剤（例示１〜３）を製造した。
【０３９６】
［例示１］
【０３９７】
化学式Ｉの化合物（例：化合物５および化合物９）０．５ｗｔ％
【０３９８】
白色ペトロラタム７０ｗｔ％
【０３９９】
鉱油５ｗｔ％
【０４００】
ポリオキシルステアリルエーテル５ｗｔ％
【０４０１】
ポリエチレングリコール（例：ＰＥＧ４００またはＵＳＰ）１９．２ｗｔ％
【０４０２】
ブチルヒドロキシアニソール０．３ｗｔ％
【０４０３】
［例示２］
【０４０４】
化学式Ｉの化合物（例：化合物５および化合物９）０．５ｗｔ％
【０４０５】
白色ペトロラタム７０ｗｔ％
【０４０６】
鉱油５ｗｔ％
【０４０７】
ポリオキシルステアリルエーテル５ｗｔ％
【０４０８】
ポリエチレングリコール（例：ＰＥＧ４００またはＵＳＰ）１９．２ｗｔ％
【０４０９】
ブチルヒドロキシアニソール０．２ｗｔ％
【０４１０】
パラベン（例：メチルパラベンまたはプロピルパラベン）０．１ｗｔ％
【０４１１】
［例示３］
【０４１２】
化学式Ｉの化合物（例：化合物５および化合物９）０．０１〜２ｗｔ％
【０４１３】
白色ペトロラタム３０〜７５ｗｔ％
【０４１４】
鉱油２〜１０ｗｔ％
【０４１５】
ポリオキシルステアリルエーテル０．３〜１０ｗｔ％
【０４１６】
ポリエチレングリコール（例：ＰＥＧ４００またはＵＳＰ）２〜４５ｗｔ％
【０４１７】
ブチルヒドロキシアニソール０ｗｔ％または０．００２〜２．５ｗｔ％
【０４１８】
パラベン（例：メチルパラベンまたはプロピルパラベン）０ｗｔ％または０．０１〜１．５ｗｔ％
【０４１９】
製造例８．クリーム剤の製造
【０４２０】
下記成分を混合して通常の方法で外部局所用クリーム剤（例示１〜２）を製造した。
【０４２１】
［例示１］
【０４２２】
化学式Ｉの化合物（例：化合物５および化合物９）０．１ｗｔ％
【０４２３】
白色ペトロラタム４０ｗｔ％
【０４２４】
鉱油１１ｗｔ％
【０４２５】
ポリオキシルステアリルエーテル８．５ｗｔ％
【０４２６】
プロピレングリコール１８ｗｔ％
【０４２７】
ブチルヒドロキシアニソール０．０２ｗｔ％
【０４２８】
精製水適量（２２．３８ｗｔ％）
【０４２９】
［例示２］
【０４３０】
化学式Ｉの化合物（例：化合物５および化合物９）０．０１〜３ｗｔ％
【０４３１】
白色ペトロラタム３０〜７５ｗｔ％
【０４３２】
鉱油２〜１０ｗｔ％
【０４３３】
ポリオキシルステアリルエーテル０．３〜１０ｗｔ％
【０４３４】
プロピレングリコール０．３〜４５ｗｔ％
【０４３５】
ブチルヒドロキシアニソール０．００２〜２．５ｗｔ％
【０４３６】
パラベン（例：メチルパラベンまたはプロピルパラベン）０．０１〜３．５ｗｔ％
【０４３７】
精製水適量（２〜３０ｗｔ％）
【０４３８】
製造例９．飲料の製造
【０４３９】
下記成分に精製水を適量混合して通常の方法で総１００ｍＬになるように飲料を製造した。
【０４４０】
化学式Ｉの化合物（例：化合物５および化合物９）２ｍｇ
【０４４１】
クエン酸９ｇ
【０４４２】
白糖９ｇ
【０４４３】
ブドウ糖２．８ｇ
【０４４４】
ＤＬ‐リンゴ酸０．２５ｇ
【０４４５】
精製水適量
【０４４６】
製造例９．食品の製造
【０４４７】
９‐１．料理用調味料の製造
【０４４８】
化学式Ｉの化合物（例：化合物５および化合物９）を０．００１〜０．２重量部として健康増進用料理用調味料を製造した。
【０４４９】
９‐２．粉食の製造
【０４５０】
化学式Ｉの化合物（例：化合物５および化合物９）を０．００１〜０．２重量部で小麦粉に添加し、これを用いてパン、ケーキ、クッキー、クラッカーおよび麺類を製造して健康増進用食品を製造した。
【０４５１】
９‐３．乳製品（ｄａｉｒｙ  ｐｒｏｄｕｃｔｓ）の製造
【０４５２】
化学式Ｉの化合物（例：化合物５および化合物９）を０．００１〜０．２重量部で牛乳に添加し、前記牛乳を用いてバター、アイスクリーム、粉ミルクおよび離乳食のような様々な乳製品を製造した。
【０４５３】
９‐４．ジュースの製造
【０４５４】
化学式Ｉの化合物（例：化合物５および化合物９）を０．００１〜０．２重量部でトマト、ニンジンなどの野菜や、リンゴ、ブドウ、オレンジ、パイナップルなどの果物ジュース１，０００ｍｌに加えて健康増進用ジュースを製造した。
【０４５５】
製造例１０．動物飼料の製造
【０４５６】
下記成分を混合して通常の方法で動物用飼料１ｋｇを製造した。
【０４５７】
化学式Ｉの化合物（例：化合物５および化合物９）０．１ｇ
【０４５８】
カゼイン２００ｇ
【０４５９】
トウモロコシデンプン（ｃｏｒｎｓｔａｒｃｈ）４００ｇ
【０４６０】
ジイエトロズ（ｄｙｅｔｒｏｓｅ）１３０ｇ
【０４６１】
砂糖１００ｇ
【０４６２】
セルロース５０ｇ
【０４６３】
大豆油（ｓｏｙｂｅａｎ  ｏｉｌ）７０ｇ
【０４６４】
抗酸化剤（例：ｔ‐ｂｕｔｙｌｈｙｄｒｏｑｕｉｎｏｎｅ）０．０２ｇ
【０４６５】
無機物（例：ｓａｌｔ  ｍｉｘ）３５ｇ
【０４６６】
ビタミン（例：ｖｉｔａｍｉｎ  ｍｉｘ）１０ｇ
【０４６７】
Ｌ‐シスチン（Ｌ‐ｃｙｓｔｉｎｅ）３ｇ
【０４６８】
重酒石酸コリン（ｃｈｏｌｉｎｅ  ｂｉｔａｒｔｒａｔｅ）２ｇ
【産業上の利用可能性】
【０４６９】
本発明によると、ＰＰＡＲδアゴニストは、胎児発生または初期発育の時期にカルシウムイオンを調節して遅筋線維を増加させて筋持久力を向上させ、これにより脂質および糖代謝能力を向上させ、全身の代謝を再プログラミング（ｍｅｔａｂｏｌｉｃ  ｒｅｐｒｏｇｒａｍｍｉｎｇ）して成人または成体における高脂肪食および運動不足による肥満、糖尿などの代謝性疾患の発病を予防／抑制し、記憶力を増進させる。したがって、ＰＰＡＲδアゴニストは、胎児再プログラミングによるヒトおよび動物の持久力増進、肥満、糖尿、動脈硬化、脂肪肝などの代謝性疾患予防／抑制、記憶力増進を目的とする医薬組成物、妊婦用補助剤、動物用医薬組成物、動物用持久力増進剤、粉ミルクおよび離乳食組成物、動物飼料組成物などに用いることができる。
【図１】
2013538215.tif 000140
【図２】
2013538215.tif 000141
【図３】
2013538215.tif 000142
【図４】
2013538215.tif 000143
【図５】
2013538215.tif 000144
【図６】
2013538215.tif 000145
【図７Ａ】
2013538215.tif 000146
【図７Ｂ】
2013538215.tif 000147
【図７Ｃ】
2013538215.tif 000148
【図７Ｄ】
2013538215.tif 000149
【図８】
2013538215.tif 000150
【図９】
2013538215.tif 000151
【図１０】
2013538215.tif 000152
【図１１】
2013538215.tif 000153
【図１２】
2013538215.tif 000154
【図１３】
2013538215.tif 000155
【図１４】
2013538215.tif 000156
【図１５】
2013538215.tif 000157
【図１６】
2013538215.tif 000158
【図１７】
2013538215.tif 000159
【図１８】
2013538215.tif 000160
【図１９】
2013538215.tif 000161
【図２０】
2013538215.tif 000162
【図２１】
2013538215.tif 000163
【図２２】
2013538215.tif 000164
【図２３】
2013538215.tif 000165
【図２４】
2013538215.tif 000166
【図２５】
2013538215.tif 000167
【図２６】
2013538215.tif 000168
【手続補正書】
【提出日】平成25年3月1日(2013.3.1)
【手続補正１】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】０４４６
【補正方法】変更
【補正の内容】
【０４４６】
製造例１０．食品の製造
【手続補正２】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】０４４７
【補正方法】変更
【補正の内容】
【０４４７】
１０‐１．料理用調味料の製造
【手続補正３】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】０４４９
【補正方法】変更
【補正の内容】
【０４４９】
１０‐２．粉食の製造
【手続補正４】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】０４５１
【補正方法】変更
【補正の内容】
【０４５１】
１０‐３．乳製品（ｄａｉｒｙ  ｐｒｏｄｕｃｔｓ）の製造
【手続補正５】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】０４５３
【補正方法】変更
【補正の内容】
【０４５３】
１０‐４．ジュースの製造
【手続補正６】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】０４５５
【補正方法】変更
【補正の内容】
【０４５５】
製造例１１．動物飼料の製造
【手続補正７】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】請求項９
【補正方法】変更
【補正の内容】
【請求項９】
ＰＰＡＲδアゴニストが化学式ＩＩで表される、請求項８に記載の哺乳動物の胎児再プログラミング用組成物。
［化学式ＩＩ］
【化６】
2013538215.tif 000169
［前記化学式ＩＩ中、Ａは、硫黄（Ｓ）またはセレン（Ｓｅ）であり；Ｂは
【化７】
2013538215.tif 000170
であり；
Ｒ１は、下記構造から選択され；
【化８】
2013538215.tif 000171
Ｒ２は、水素、Ｃ１‐Ｃ５アルキル基、
【化９】
2013538215.tif 000172
または、下記構造から選択され；
【化１０】
2013538215.tif 000173
Ｘは、硫黄（Ｓ）またはセレン（Ｓｅ）であり；
Ｙは、炭素（ＣＨ）または窒素（Ｎ）であり；
Ｒ３は、水素、Ｃ１‐Ｃ５のアルキルまたはハロゲンであり；
Ｒ４およびＲ５は、互いに独立して、水素またはＣ１‐Ｃ５のアルキルであり；
Ｒ６は、水素、Ｃ１‐Ｃ５のアルキル、Ｃ２‐Ｃ５のアルケニル、アルカリ金属またはアルカリ土類金属であり；
Ｒ１１は、水素、ハロゲン、Ｃ１‐Ｃ５のアルキルまたはＣ１‐Ｃ５のアルコキシであり；
Ｒ２１は、水素、ハロゲン、Ｃ１‐Ｃ５のアルキル、ヘテロ環基、Ｃ１‐Ｃ５のアルコキシ、ハロゲンで置換されたＣ１‐Ｃ５のアルキルまたはハロゲンで置換されたフェニルであり；
ｍは、１〜４の整数であり；
ｐは、１〜５の整数であり；
ｑは、１〜４の整数であり；
ｓは、１〜５の整数であり；
前記Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５、Ｒ６、Ｒ１１およびＲ２１のアルキルおよびアルコキシは、一つ以上のハロゲンまたはＣ１‐Ｃ５のアルキルアミンでさらに置換されていてもよい。］
【手続補正８】
【補正対象書類名】図面
【補正対象項目名】図２
【補正方法】変更
【補正の内容】
【図２】
2013538215.tif 000174
【手続補正９】
【補正対象書類名】図面
【補正対象項目名】図６
【補正方法】変更
【補正の内容】
【図６】
2013538215.tif 000175
【手続補正１０】
【補正対象書類名】図面
【補正対象項目名】図７
【補正方法】変更
【補正の内容】
【図７】
2013538215.tif 000176
【手続補正１１】
【補正対象書類名】図面
【補正対象項目名】図９
【補正方法】変更
【補正の内容】
【図９】
2013538215.tif 000177
【手続補正１２】
【補正対象書類名】図面
【補正対象項目名】図１１
【補正方法】変更
【補正の内容】
【図１１】
2013538215.tif 000178
【手続補正１３】
【補正対象書類名】図面
【補正対象項目名】図１２
【補正方法】変更
【補正の内容】
【図１２】
2013538215.tif 000179
【手続補正１４】
【補正対象書類名】図面
【補正対象項目名】図１４
【補正方法】変更
【補正の内容】
【図１４】
2013538215.tif 000180
【手続補正１５】
【補正対象書類名】図面
【補正対象項目名】図１５
【補正方法】変更
【補正の内容】
【図１５】
2013538215.tif 000181
【手続補正１６】
【補正対象書類名】図面
【補正対象項目名】図２１
【補正方法】変更
【補正の内容】
【図２１】
2013538215.tif 000182
【手続補正１７】
【補正対象書類名】図面
【補正対象項目名】図２２
【補正方法】変更
【補正の内容】
【図２２】
2013538215.tif 000183
【国際調査報告】
2013538215.tif 000184
2013538215.tif 000185
2013538215.tif 000186
2013538215.tif 000187
2013538215.tif 000188
2013538215.tif 000189