(57)【要約】式Ｉ2013518076.tif 000019の化合物（Ｒ１、Ｒ２及びＲ３は本明細書中で定義される）は、Ｃ型肝炎ウイルスＮＳ５ｂポリメラーゼ阻害剤である。ＨＣＶ感染を治療し、そしてＨＣＶ複製を阻害するための組成物及び方法が更に開示される。
2013518076.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
以下の式Ｉ：
【化１】
2013518076.tif 000018
［式中：
Ｒ１及びＲ２は、（ｉ）独立に、それぞれの出現において、水素、Ｃ１−６アルキルカルボニル、Ｃ１−６アルコキシカルボニル、及びＣ１−６アミノアルキルカルボニルからなる群から選択されるか、又は（ｉｉ）Ｒ１及びＲ２分子の両方が一緒に選択されて、一緒にＣ（＝Ｏ）であり；
Ｒ３は、水素、Ｃ１−６アルキルカルボニル、Ｃ１−６アルコキシカルボニル又はＣ１−６アミノアルキルカルボニルであり、但し、Ｒ１、Ｒ２及びＲ３の少なくとも一つは、水素以外であることを条件とする］
の化合物、又は医薬的に受容可能なその塩。
【請求項２】
Ｒ１、Ｒ２及びＲ３が、Ｃ１−６アルキルカルボニルである、請求項１に記載の化合物。
【請求項３】
Ｒ１及びＲ２が、Ｃ１−６アルキルカルボニルであり、そしてＲ３が、水素である、請求項１０に記載の化合物。
【請求項４】
Ｒ１及びＲ２が、水素であり、そしてＲ３が、Ｃ１−６アルキルカルボニル、又はＣ１−６アミノアルキルカルボニルである、請求項１０に記載の化合物。
【請求項５】
プロピオン酸（２Ｒ，３Ｒ，４Ｓ，５Ｒ）−５−アジド−２−（２，４−ジオキソ−３，４−ジヒドロ−２Ｈ−ピリミジン−１−イル）−５−ヒドロキシメチル−４−プロピオニルオキシ−テトラヒドロ−フラン−３−イルエステル；
イソ酪酸（２Ｒ，３Ｒ，４Ｓ，５Ｒ）−５−アジド−２−（２，４−ジオキソ−３，４−ジヒドロ−２Ｈ−ピリミジン−１−イル）−４−イソブチリルオキシ−５−イソブチルルオキシメチル−テトラヒドロ−フラン−３−イルエステル；
プロピオン酸（２Ｒ，３Ｓ，４Ｒ，５Ｒ）−２−アジド−５−（２，４−ジオキソ−３，４−ジヒドロ−２Ｈ−ピリミジン−１−イル）−３，４−ビス−プロピオニルオキシ−テトラヒドロ−フラン−２−イルメチルエステル；
酢酸（２Ｒ，３Ｒ，４Ｓ，５Ｒ）−４−アセトキシ−５−アセトキシメチル−５−アジド−２−（２，４−ジオキソ−３，４−ジヒドロ−２Ｈ−ピリミジン−１−イル）−テトラヒドロ−フラン−３−イルエステル；
ペンタン酸（２Ｒ，３Ｓ，４Ｒ，５Ｒ）−２−アジド−５−（２，４−ジオキソ−３，４−ジヒドロ−２Ｈ−ピリミジン−１−イル）−３，４−ビス−ペンタノイルオキシ−テトラヒドロ−フラン−２−イルメチルエステル；及び、
プロピオン酸（２Ｒ，３Ｓ，４Ｒ，５Ｒ）−２−アジド−５−（２，４−ジオキソ−３，４−ジヒドロ−２Ｈ−ピリミジン−１−イル）−３，４−ジヒドロオキシ−テトラヒドロ−フラン−２−イルメチルエステル；
からなる群から選択される、請求項１に記載の化合物。
【請求項６】
治療的に有効な量の請求項１に記載の化合物により、それを必要とする患者を治療することを含んでなる、Ｃ型肝炎（ＨＣＶ）感染を治療するための方法。
【請求項７】
Ｒ１、Ｒ２及びＲ３が、Ｃ１−６アルキルカルボニルである、請求項６に記載の方法。
【請求項８】
Ｒ１及びＲ２が、Ｃ１−６アルキルカルボニルであり、そしてＲ３が、水素である、請求項６に記載の方法。
【請求項９】
Ｒ１及びＲ２が、水素であり、そしてＲ３が、Ｃ１−６アルキルカルボニル、又はＣ１−６アミノアルキルカルボニルである、請求項６に記載の方法。
【請求項１０】
更に少なくとも一つの免疫系調節剤及び／又は少なくとも一つのＨＣＶの複製を阻害する抗ウイルス剤を投与することを含んでなる、請求項７に記載の方法。
【請求項１１】
前記免疫系調節剤が、インターフェロン、インターロイキン、腫瘍壊死因子及びコロニー刺激因子からなる群から選択される、請求項１０に記載の方法。
【請求項１２】
前記免疫系調節剤が、インターフェロン又は化学的に誘導されたインターフェロンである、請求項１１に記載の方法。
【請求項１３】
更に少なくとも一つの他の抗ウイルス剤を投与することを含んでなる、請求項１０に記載の方法。
【請求項１４】
前記抗ウイルス化合物が、ＨＣＶプロテアーゼ阻害剤、もう一つのヌクレオシドＨＣＶポリメラーゼ阻害剤、非ヌクレオシドＨＣＶポリメラーゼ阻害剤、ＨＣＶヘリカーゼ阻害剤、ＨＣＶプライマーゼ阻害剤及びＨＣＶ融合阻害剤からなる群から選択される、請求項１３に記載の方法。
【請求項１５】
ＨＣＶ感染の治療のための、Ｒ１、Ｒ２及びＲ３が、請求項１において定義したとおりである式Ｉの化合物の使用。
【請求項１６】
少なくとも一つの免疫系調節剤及び／又は少なくとも一つのＨＣＶの複製を阻害する抗ウイルス剤との組合せにおける、請求項１５に記載の使用。
【請求項１７】
ＨＣＶ感染の治療のための医薬の製造のための、Ｒ１、Ｒ２及びＲ３が、請求項１において定義したとおりである式Ｉの化合物の使用。
【請求項１８】
少なくとも一つの医薬的に受容可能な担体、希釈剤又は賦形剤と混合された、治療的に有効な量の請求項１に記載の化合物を含んでなる医薬組成物。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、Ｃ型肝炎ウイルス（ＨＣＶ）のＲＮＡ依存性ＲＮＡウイルスポリメラーゼの阻害剤のプロドラッグであるアシル化ヌクレオシドを提供する。経口投与された場合、これらの化合物は、ＧＩ管から容易に吸収され、そして血液中で親ヌクレオシドに効率よく復帰する。これらのプロドラッグは、ＲＮＡ依存性ＲＮＡウイルス複製の阻害剤であり、そしてＨＣＶのＮＳ５Ｂポリメラーゼの阻害剤として、ＨＣＶ複製の阻害剤として、そして哺乳動物におけるＣ型肝炎感染の治療のために有用である。特に、本発明は、アシル化ピリミジンヌクレオシド化合物の使用に関し、これは、ヌクレオシドが経口投与された場合、改良された薬物の吸収を提供する。
【背景技術】
【０００２】
Ｃ型肝炎ウイルスは、世界中の慢性肝疾患の主要な原因である（Ｂｏｙｅｒ，Ｎ．ｅｔ  ａｌ．Ｊ．Ｈｅｐａｔｏｌ．２０００  ３２：９８−１１２）。ＨＣＶに感染した患者は、肝臓の硬変症及びその後の肝細胞の細胞腫を発症する危険性があり、そして従って、ＨＣＶは、肝臓移植の重要な指標である。
【０００３】
ＨＣＶは、ｆｌａｖｉｖｉｒｕｓｅｓ、ｐｅｓｔｉｖｉｒｕｓｅｓ、及びＣ型肝炎ウイルスを含むｈｅｐａｃｉｖｉｒｕｓｅｓ属を含む、Ｆｌａｖｉｖｉｒｉｄａｅウイルスのファミリーの一員として分類される（Ｒｉｃｅ，Ｃ．Ｍ．，Ｆｌａｖｉｖｉｒｉｄａｅ：Ｔｈｅ  ｖｉｒｕｓｅｓ  ａｎｄ  ｔｈｅｉｒ  ｒｅｐｌｉｃａｔｉｏｎ，Ｉｎ：Ｆｉｅｌｄｓ  Ｖｉｒｏｌｏｇｙ，Ｅｄｉｔｏｒｓ：Ｂ．Ｎ．Ｆｉｅｌｄｓ，Ｄ．Ｍ．Ｋｎｉｐｅａｎｄ  Ｐ．Ｍ．Ｈｏｗｌｅｙ，Ｌｉｐｐｉｎｃｏｔｔ−Ｒａｖｅｎ  Ｐｕｂｌｉｓｈｅｒｓ，Ｐｈｉｌａｄｅｌｐｈｉａ，Ｐａ．，Ｃｈａｐｔｅｒ  ３０，９３１−９５９，１９９６）。ＨＣＶは、概略９．４ｋｂのプラスセンスの一本鎖ＲＮＡゲノムを含有するエンベロープ付きウイルスである。ウイルスのゲノムは、高度に保存された５’非翻訳領域（ＵＴＲ）、概略３０１１個のアミノ酸のポリタンパク質前駆体をコードする長いオープンリーディングフレーム、及び短い３’ＵＴＲからなる。
【０００４】
ＨＣＶの遺伝子分析は、３０％を超えるＤＮＡ配列によって分岐される六つの主要な遺伝子型を確認している。３０種より多いサブタイプが識別されている。米国において、感染した個体の概略７０％が、１ａ及び１ｂ型の感染を有する。１ｂ型は、アジアにおいて最も蔓延しているサブタイプである（Ｘ．Ｆｏｒｎｓ  ａｎｄ  Ｊ．Ｂｕｋｈ，Ｃｌｉｎｉｃｓ  ｉｎ  Ｌｉｖｅｒ  Ｄｉｓｅａｓｅ  １９９９  ３：６９３−７１６；Ｊ．Ｂｕｋｈ  ｅｔ  ａｌ．，Ｓｅｍｉｎ．Ｌｉｖ．Ｄｉｓ．１９９５  １５：４１−６３）。不幸なことに、１型の感染は、療法に対して、２型又は３型遺伝子型のいずれかよりも耐性である（Ｎ．Ｎ．Ｚｅｉｎ，Ｃｌｉｎ．Ｍｉｃｒｏｂｉｏｌ．Ｒｅｖ．，２０００  １３：２２３−２３５）。
【０００５】
ウイルスの構造タンパク質は、ヌクレオカプシドコアタンパク質（Ｃ）及び二つのエンベロープ糖タンパク質Ｅ１及びＥ２を含む。ＨＣＶは、更に二つのプロテアーゼ、ＮＳ２−ＮＳ３領域によってコードされる亜鉛依存性メタロプロテイナーゼ及びＮＳ３領域でコードされるセリンプロテアーゼをコードする。これらのプロテアーゼは、前駆体ポリタンパク質の特異的領域の、成熟したペプチドへの開裂のために必要である。非構造タンパク質５、ＮＳ５Ｂのカルボキシル側半分は、ＲＮＡ依存性ＲＮＡポリメラーゼを含有する。残りの非構造タンパク質、ＮＳ４Ａ及びＮＳ４Ｂの機能、並びにＮＳ５Ａのそれ（非構造タンパク質５のアミノ末端側の半分）は、未知のままである。ＨＣＶのＲＮＡゲノムによってコードされる非構造タンパク質の殆どは、ＲＮＡ複製に関係すると信じられる。
【０００６】
現時点において、ＨＣＶ感染の治療のためにな制約された数の認可された療法が使用可能である。ＨＣＶ感染を治療するための新しい及び既存の方法、並びにＨＣＶのＮＳ５Ｂポリメラーゼ活性の阻害は：Ｒ．Ｇ．Ｇｉｓｈ，Ｓｅｍ．Ｌｉｖｅｒ．Ｄｉｓ．，１９９９  １９：５；Ｄｉ  Ｂｅｓｃｅｇｌｉｅ，Ａ．Ｍ．ａｎｄ  Ｂａｃｏｎ，Ｂ．Ｒ．，Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ  Ａｍｅｒｉｃａｎ，Ｏｃｔｏｂｅｒ：１９９９  ８０−８５；Ｇ．Ｌａｋｅ−Ｂａｋａａｒ，Ｃｕｒｒｅｎｔ  ａｎｄ  Ｆｕｔｕｒｅ  Ｔｈｅｒａｐｙ  ｆｏｒ  Ｃｈｒｏｎｉｃ  Ｈｅｐａｔｉｔｉｓ  Ｃ  Ｖｉｒｕｓ  Ｌｉｖｅｒ  Ｄｉｓｅａｓｅ，Ｃｕｒｒ．Ｄｒｕｇ  Ｔａｒｇ．Ｉｎｆｅｃｔ  Ｄｉｓ．２００３  ３（３）：２４７−２５３；Ｐ．Ｈｏｆｆｍａｎｎ  ｅｔ  ａｌ．，Ｒｅｃｅｎｔ  ｐａｔｅｎｔｓ  ｏｎ  ｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔａｌ  ｔｈｅｒａｐｙ  ｆｏｒ  ｈｅｐａｔｉｔｉｓ  Ｃ  ｖｉｒｕｓ  ｉｎｆｅｃｔｉｏｎ（１９９９−２００２），Ｅｘｐ．Ｏｐｉｎ．Ｔｈｅｒ．Ｐａｔｅｎｔｓ  ２００３  １３（１１）：１７０７−１７２３；Ｍ．Ｐ．Ｗａｌｋｅｒ  ｅｔ  ａｌ．，Ｐｒｏｍｉｓｉｎｇ  Ｃａｎｄｉｄａｔｅｓ  ｆｏｒ  ｔｈｅ  ｔｒｅａｔｍｅｎｔ  ｏｆ  ｃｈｒｏｎｉｃ  ｈｅｐａｔｉｔｉｓ  Ｃ，Ｅｘｐ．Ｏｐｉｎ．Ｉｎｖｅｓｔｉｇ．Ｄｒｕｇｓ  ２００３  １２（８）：１２６９−１２８０；Ｓ．−Ｌ．Ｔａｎ  ｅｔ  ａｌ．，Ｈｅｐａｔｉｔｉｓ  Ｃ  Ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃｓ：Ｃｕｒｒｅｎｔ  Ｓｔａｔｕｓ  ａｎｄ  Ｅｍｅｒｇｉｎｇ  Ｓｔｒａｔｅｇｉｅｓ，Ｎａｔｕｒｅ  Ｒｅｖ．Ｄｒｕｇ  Ｄｉｓｃｏｖ．２００２  １：８６７−８８１；Ｊ．Ｚ．Ｗｕ  ａｎｄ  Ｚ．Ｈｏｎｇ，Ｔａｒｇｅｔｉｎｇ  ＮＳ５Ｂ  ＲＮＡ−Ｄｅｐｅｎｄｅｎｔ  ＲＮＡ  Ｐｏｌｙｍｅｒａｓｅ  ｆｏｒ  Ａｎｔｉ−ＨＣＶ  Ｃｈｅｍｏｔｈｅｒａｐｙ，Ｃｕｒｒ．Ｄｒｕｇ  Ｔａｒｇ．−Ｉｎｆｅｃｔ．Ｄｉｓ．２００３  ３（３）：２０７−２１９によって総説されている。
【０００７】
現時点において、ＨＣＶ感染の治療のためにな制約された数の認可された療法が現時点で使用可能である。ＨＣＶを治療するための新しい及び既存の治療方法、並びにＨＣＶのＮＳ５Ｂポリメラーゼの阻害は：Ｒ．Ｇ．Ｇｉｓｈ，Ｓｅｍ．Ｌｉｖｅｒ．Ｄｉｓ．，１９９９  １９：５；Ｄｉ  Ｂｅｓｃｅｇｌｉｅ，Ａ．Ｍ．ａｎｄ  Ｂａｃｏｎ，Ｂ．Ｒ．，Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ  Ａｍｅｒｉｃａｎ，Ｏｃｔｏｂｅｒ：１９９９  ８０−８５；Ｇ．Ｌａｋｅ−Ｂａｋａａｒ，Ｃｕｒｒｅｎｔ  ａｎｄ  Ｆｕｔｕｒｅ  Ｔｈｅｒａｐｙ  ｆｏｒ  Ｃｈｒｏｎｉｃ  Ｈｅｐａｔｉｔｉｓ  Ｃ  Ｖｉｒｕｓ  Ｌｉｖｅｒ  Ｄｉｓｅａｓｅ，Ｃｕｒｒ．Ｄｒｕｇ  Ｔａｒｇ．Ｉｎｆｅｃｔ  Ｄｉｓ．２００３  ３（３）：２４７−２５３；Ｐ．Ｈｏｆｆｍａｎｎ  ｅｔ  ａｌ．，Ｒｅｃｅｎｔ  ｐａｔｅｎｔｓ  ｏｎ  ｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔａｌ  ｔｈｅｒａｐｙ  ｆｏｒ  ｈｅｐａｔｉｔｉｓ  Ｃ  ｖｉｒｕｓ  ｉｎｆｅｃｔｉｏｎ（１９９９−２００２），Ｅｘｐ．Ｏｐｉｎ．Ｔｈｅｒ．Ｐａｔｅｎｔｓ  ２００３  １３（１１）：１７０７−１７２３；Ｆ．Ｆ．Ｐｏｏｒｄａｄ  ｅｔ  ａｌ．Ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔｓ  ｉｎ  Ｈｅｐａｔｉｔｉｓ  Ｃ  ｔｈｅｒａｐｙ  ｄｕｒｉｎｇ  ２０００−２００２，Ｅｘｐ．Ｏｐｉｎ．Ｅｍｅｒｇｉｎｇ  Ｄｒｕｇｓ  ２００３  ８（１）：９−２５；Ｍ．Ｐ．Ｗａｌｋｅｒ  ｅｔ  ａｌ．，Ｐｒｏｍｉｓｉｎｇ  Ｃａｎｄｉｄａｔｅｓ  ｆｏｒ  ｔｈｅ  ｔｒｅａｔｍｅｎｔ  ｏｆ  ｃｈｒｏｎｉｃ  ｈｅｐａｔｉｔｉｓ  Ｃ，Ｅｘｐ．Ｏｐｉｎ．Ｉｎｖｅｓｔｉｇ．Ｄｒｕｇｓ  ２００３  １２（８）：１２６９−１２８０；Ｓ．−Ｌ．Ｔａｎ  ｅｔ  ａｌ．，Ｈｅｐａｔｉｔｉｓ  Ｃ  Ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃｓ：Ｃｕｒｒｅｎｔ  Ｓｔａｔｕｓ  ａｎｄ  Ｅｍｅｒｇｉｎｇ  Ｓｔｒａｔｅｇｉｅｓ，Ｎａｔｕｒｅ  Ｒｅｖ．Ｄｒｕｇ  Ｄｉｓｃｏｖ．２００２  １：８６７−８８１；Ｒ．Ｄｅ  Ｆｒａｎｃｅｓｃｏ  ｅｔ  ａｌ．Ａｐｐｒｏａｃｈｉｎｇ  ａ  ｎｅｗ  ｅｒａ  ｆｏｒ  ｈｅｐａｔｉｔｉｓ  Ｃ  ｖｉｒｕｓ  ｔｈｅｒａｐｙ：ｉｎｈｉｂｉｔｏｒｓ  ｏｆ  ｔｈｅ  ＮＳ３−４Ａ  ｓｅｒｉｎｅ  ｐｒｏｔｅａｓｅ  ａｎｄ  ｔｈｅ  ＮＳ５Ｂ  ＲＮＡ−ｄｅｐｅｎｄｅｎｔ  ＲＮＡ  ｐｏｌｙｍｅｒａｓｅ，Ａｎｔｉｖｉｒａｌ  Ｒｅｓ．２００３  ５８：１−１６；Ｑ．Ｍ．Ｗａｎｇ  ｅｔ  ａｌ．Ｈｅｐａｔｉｔｉｓ  Ｃ  ｖｉｒｕｓ  ｅｎｃｏｄｅｄ  ｐｒｏｔｅｉｎｓ：ｔａｒｇｅｔｓ  ｆｏｒ  ａｎｔｉｖｉｒａｌ  ｔｈｅｒａｐｙ，Ｄｒｕｇｓ  ｏｆ  ｔｈｅ  Ｆｕｔｕｒｅ  ２０００  ２５（９）：９３３−８−９４４；Ｊ．Ａ．Ｗｕ  ａｎｄ  Ｚ．Ｈｏｎｇ，Ｔａｒｇｅｔｉｎｇ  ＮＳ５Ｂ−Ｄｅｐｅｎｄｅｎｔ  ＲＮＡ  Ｐｏｌｙｍｅｒａｓｅ  ｆｏｒ  Ａｎｔｉ−ＨＣＶ  Ｃｈｅｍｏｔｈｅｒａｐｙ  Ｃｕｒ．Ｄｒｕｇ  Ｔａｒｇ．−Ｉｎｆ．Ｄｉｓ．２００３  ３：０７−２１９によって総説されている。総説は、現在、開発過程の各種の段階にある化合物を記述している。同一又は異なった標的に向けられた二つ又は三つの薬剤による組合せ療法は、ウイルスの耐性種の発生を回避又は緩慢化するための標準的療法となり、そして上記の総説中に開示されている化合物は、本発明の化合物と共に組合せ療法において使用することができ、そしてこれらの総説は、本明細書中に参考文献としてその全てが援用される。
【０００８】
【化１】
2013518076.tif 000003
【０００９】
リバビリン（１ａ；１−（（２Ｒ，３Ｒ，４Ｓ，５Ｒ）−３，４−ジヒドロキシ−５−ヒドロキシメチル−テトラヒドロ−フラン−２−イル）−１Ｈ−［１，２，４］トリアゾール−３−カルボン酸アミド；ビラゾール（登録商標））は、合成の非インターフェロン誘導性の広い薬効範囲の抗ウイルス性ヌクレオシド類似体である。リバビリンは、Ｆｌａｖｉｖｉｒｉｄａｅを含む幾つかのＤＮＡ及びＲＮＡウイルスに対するｉｎ  ｖｉｔｒｏの活性を有する（Ｇａｒｙ  Ｌ．Ｄａｖｉｓ，Ｇａｓｔｒｏｅｎｔｅｒｏｌｏｇｙ  ２０００  １１８：Ｓ１０４−Ｓ１１４）。単剤療法において、リバビリンは、４０％の患者において血清のアミノトランスフェラーゼレベルを正常まで減少するが、しかしこれは、ＨＣＶ−ＲＮＡの血清レベルは低下しない。リバビリンは、更に有意な毒性を示し、そして貧血を誘発することが知られている。リバビリンは、イノシン一リン酸デヒドロゲナーゼの阻害剤である。リバビリンは、ＨＣＶに対する単剤療法に対して認可されていないが、しかしこの化合物は、インターフェロンα−２ａ及びインターフェロンα−２ｂとの組合せ療法において認可されている。ビラミジン１ｂは、肝細胞中で１ａに転換されるプロドラッグである。
【００１０】
インターフェロン（ＩＦＮ）は、殆ど１０年間、慢性の肝炎の治療のために使用可能であった。ＩＦＮは、ウイルス感染に反応する免疫細胞によって産生される糖タンパク質である。二つの別個の種類のインターフェロンが認識されている：１型は、幾つかのインターフェロンアルファ及び一つのインターフェロンβを含み、２型は、インターフェロンγを含む。１型インターフェロンは、主として感染した細胞によって産生され、そして近隣の細胞を新規な感染から保護する。ＩＦＮは、ＨＣＶを含む多くのウイルスのウイルス複製を阻害し、そしてＣ型肝炎感染に対する単独の治療剤として使用された場合、ＩＦＮは、血清のＨＣＶ−ＲＮＡを検出不可能なレベルまで抑制する。更に、ＩＦＮは、血清のアミノトランスフェラーゼレベルを正常化する。不幸なことに、ＩＦＮの効果は一次的である。療法の中止は、７０％の再発率をもたらし、そして１０−１５％のみが、正常な血清アラニントランスフェラーゼレベルを伴う持続性ウイルス陰性化を示す（Ｌ−Ｂ．Ｄａｖｉｓ，上掲）。
【００１１】
初期のＩＦＮ療法の一つの制約は、血液からのタンパク質の急速な排除であった。ポリエチレングリコール（ＰＥＧ）によるＩＦＮの化学的誘導は、実質的に改良された薬物動態学的特性を持つタンパク質をもたらしている。ペガシス（登録商標）は、抱合体のインターフェロンα−２ａ及び４０ｋＤの分枝鎖のモノ−メトキシＰＥＧであり、そしてペグ−イントロン（登録商標）は、インターフェロンα−２ｂ及び１２ｋＤのモノ−メトキシＰＥＧの抱合体である（Ｂ．Ａ．Ｌｕｘｏｎ  ｅｔ  ａｌ．，Ｃｌｉｎ．Ｔｈｅｒａｐ．２００２  ２４（９）：１３６３１３８３；Ａ．Ｋｏｚｌｏｗｓｋｉ  ａｎｄ  Ｊ．Ｍ．Ｈａｒｒｉｓ，Ｊ．Ｃｏｎｔｒｏｌ．Ｒｅｌｅａｓｅ，２００１  ７２：２１７−２２４）。
【００１２】
インターフェロンα−２ａ及びインターフェロンα−２ｂは、現時点でＨＣＶの治療のための単剤療法として認可されている。ロフェロン−Ａ（登録商標）（Ｒｏｃｈｅ）は、インターフェロンα−２ａの組換え型である。ペガシス（登録商標）（Ｒｏｃｈｅ）は、インターフェロンα−２ａのペグ化（即ちポリエチレングリコールで改変された）型である。イントロン−Ａ（登録商標）（Ｓｃｈｅｒｉｎｇ  Ｃｏｒｐｏｒａｔｉｏｎ）は、インターフェロンα−２ｂの組換え型であり、そしてペグ−イントロン（登録商標）（Ｓｃｈｅｒｉｎｇ  Ｃｏｒｐｏｒａｔｉｏｎ）は、インターフェロンα−２ｂのペグ化型である。
【００１３】
インターフェロンα、並びにインターフェロンβ、γ、τ及びωの他の形態は、現時点においてＨＣＶの治療のための臨床開発中である。例えば、ＩｎｔｅｒＭｕｎｅによるＩＮＦＥＲＧＥＮ（登録商標）（インターフェロンアルファコン−１）、ＶｉｒａｇｅｎによるＯＭＮＩＦＥＲＯＮ（登録商標）（天然のインターフェロン）、Ｈｕｍａｎ  Ｇｅｎｏｍｅ  ＳｃｉｅｎｃｅｓによるＡＬＢＵＦＥＲＯＮ（登録商標）、Ａｒｅｓ−ＳｅｒｏｎｏによるＲＥＢＩＦ（登録商標）（インターフェロンβ−１ａ）、ＢｉｏＭｅｄｉｃｉｎｅによるオメガインターフェロン、Ａｍａｒｉｌｌｏ  Ｂｉｏｓｃｉｅｎｃｅｓによる経口インターフェロンアルファ、及びＩｎｔｅｒＭｕｎｅによるインターフェロンγ、インターフェロンτ、及びインターフェロンγ−１ｂは、開発中である。
【００１４】
リバビリン及びインターフェロン−αによるＨＣＶの組合せ療法は、現時点で最適な療法である。組合せたリバビリン及びＰＥＧ−ＩＮＦ（下記）は、５４−５６％の患者において持続性ウイルス陰性化をもたらす。ＳＶＲは、２及び３型ＨＣＶに対して８０％に近づく（Ｗａｌｋｅｒ、上掲）  不幸なことに、この組み合わせは、更に臨床的挑戦を中止させる副作用を生じる。鬱病、風邪様症状及び皮膚の反応が、皮下のＩＦＮ−αに伴い、そして溶血性貧血が、リバビリンによる持続治療に伴う。
【００１５】
現時点で、Ｃ型肝炎ウイルス感染の治療のための臨床前又は臨床開発中の他の高分子化合物は：Ｓｃｈｅｒｉｎｇ−Ｐｌｏｕｇｈによるインターロイキン−１０、ＩｎｔｅｍｅｕｒｏｎによるＩＰ−ＳＯ１、Ｖｅｒｔｅｘによるメリメボジブ（ＶＸ−４９７）、ＲＰＩによるＨＥＰＴＡＺＹＭＥ（登録商標）、Ｉｄｕｎ  Ｐｈａｒｍａ．によるＩＤＮ−６５５６、ＸＴＬ．によるＸＴＬ−００２、ＣｈｉｒｏｎによるＨＣＶ／ＭＦＳ９、ＮＡＢＩによるＣＩＶＡＣＩＲ（登録商標）（Ｃ型肝炎免疫グロブリン）、ＳｃｉＣｌｏｎｅによるＺＡＤＡＸＩＮ（登録商標）（チモシンα−ｌ）、ＳｃｉＣｌｏｎｅによるチモシン及びペグ化インターフェロン、ＣＥＰＬＥＮＥ（登録商標）；ＩｎｎｏｇｅｎｅｔｉｃｓによるＥ２に向けた治療ワクチン、Ｉｎｔｅｒｃｅｌｌによる治療ワクチン、Ｅｐｉｍｍｕｎｅ／Ｇｅｎｅｎｃｏｒによる治療ワクチン、Ｍｅｒｉｘによる治療ワクチン、Ｔｒｉｐｅｐによる治療ワクチンＣｈｒｏｎ−ＶａｃＣを含む。
【００１６】
他の高分子的方法は、ＨＣＶのＲＮＡを標的とするリボザイムを含む。リボザイムは、ＲＮＡの配列特異的開裂を触媒するエンドヌクレアーゼ活性を持つ短い天然に存在する分子である。別の方法は、ＲＮＡに結合し、そしてＲＮアーゼＨ仲介の開裂を刺激するアンチセンスのオリゴヌクレオチドの使用である。
【００１７】
抗ＨＣＶ治療剤としての薬物の開発のための、制約されるものではないが、ＮＳ２−ＮＳ３自己プロテアーゼ、Ｎ３プロテアーゼ、Ｎ３ヘリカーゼ及びＮＳ５Ｂポリメラーゼを含む多くの潜在的分子標的がいまや確認されている。ＲＮＡ依存性ＲＮＡポリメラーゼは、一本鎖プラスセンスのＲＮＡゲノムの複製のために絶対的に必須であり、そしてこの酵素は、医薬品化学者中で有意な興味を誘発している。
【００１８】
ヌクレオシド阻害剤は、連鎖停止剤、又はポリメラーゼに結合するヌクレオチドに干渉する競合阻害剤のいずれかとして作用することができる。連鎖停止剤として機能するために、ヌクレオシド類似体は、細胞によって取込まれ、そしてポリメラーゼヌクレオチド結合部位において基質として競合するために、ｉｎ  ｖｉｖｏでその三リン酸塩の形態に転換されなければならない。この三リン酸塩への転換は、通常、いずれものヌクレオシドに更なる構造的制約を与える細胞のキナーゼによって仲介される。ヌクレオシドポリメラーゼは、更に正常な細胞分裂において必須な成分であり、そして潜在的な毒性の副作用を制約するために、ヌクレオシド阻害剤は、本質的な細胞増殖及び宿主のポリメラーゼを阻害することによる補修を破壊することなく、ウイルスポリメラーゼを選択的に阻害しなければならない。従って、内在性キナーゼによるリン酸化、及び内在性ポリメラーゼに対する選択性に対する要求は、潜在的ヌクレオシド療法剤の構造に対する厳密な要求を課す。
【００１９】
ヌクレオシドプロドラッグ
ヌクレオシドは、しばしば強力な抗ウイルス及び化学療法剤であるが、これらの実際的用途は、二つの因子によってしばしば制約される。第一に、不良な薬物動態学的特性は、しばしば腸からのヌクレオシドの吸収を制約しそして；第二に、最適以下の物理的特性は、活性成分の供給を向上するために使用することができる処方の選択肢を制限する。
【００２０】
Ａｌｂｅｒｔは、本質的な生物学的活性に欠けるが、しかし活性な薬物物質への代謝的転換が可能である化合物を記載するためにプロドラッグの用語を導入した（Ａ．Ａｌｂｅｒｔ，Ｓｅｌｅｃｔｉｖｅ  Ｔｏｘｉｃｉｔｙ，Ｃｈａｐｍａｎ  ａｎｄ  Ｈａｌｌ，Ｌｏｎｄｏｎ，１９５１）。プロドラッグは、最近総説されている（Ｐ．Ｅｔｔｍａｙｅｒ  ｅｔ  ａｌ．，Ｊ．Ｍｅｄ  Ｃｈｅｍ．２００４  ４７（１０）：２３９３−２４０４；Ｋ．Ｂｅａｕｍｏｎｔ  ｅｔ  ａｌ．，Ｃｕｒｒ．Ｄｒｕｇ  Ｍｅｔａｂ．２００３  ４：４６１−４８５；Ｈ．Ｂｕｎｄｇａａｒｄ，Ｄｅｓｉｇｎ  ｏｆ  Ｐｒｏｄｒｕｇｓ：Ｂｉｏｒｅｖｅｒｓｉｂｌｅ  ｄｅｒｉｖａｔｉｖｅｓ  ｆｏｒ  ｖａｒｉｏｕｓ  ｆｕｎｃｔｉｏｎａｌ  ｇｒｏｕｐｓ  ａｎｄ  ｃｈｅｍｉｃａｌ  ｅｎｔｉｔｉｅｓ  ｉｎ  Ｄｅｓｉｇｎ  ｏｆ  Ｐｒｏｄｒｕｇｓ，Ｈ．Ｂｕｎｄｇａａｒｄ（ｅｄ）Ｅｌｓｅｖｉｅｒ  Ｓｃｉｅｎｃｅ  Ｐｕｂｌｉｓｈｅｒｓ，Ａｍｅｒｓｔｅｒｄａｍ  １９８５；Ｇ．Ｍ．Ｐａｕｌｅｔｔｉ  ｅｔ  ａｌ．Ａｄｖ．Ｄｒｕｇ  Ｄｅｌｉｖ．Ｒｅｖ．１９９７  ２７：２３５−２５６；Ｒ．Ｊ．Ｊｏｎｅｓ  ａｎｄ  Ｎ．Ｂｉｓｃｈｏｆｂｅｒｇｅｒ，Ａｎｔｉｖｉｒａｌ  Ｒｅｓ．１９９５  ２７；１−１５及びＣ．Ｒ．Ｗａｇｎｅｒ  ｅｔ  ａｌ．，Ｍｅｄ．Ｒｅｓ．Ｒｅｖ．２０００  ２０：４１７−４５）。代謝的転換は、特異的酵素、しばしばヒドロラーゼによって触媒することができるが、活性化合物は、更に非特異的化学過程によって再生することもできる。
【００２１】
医薬的に受容可能なプロドラッグは、宿主内で代謝されて、例えば加水分解又は酸化されて、本発明の化合物を形成する化合物を指す。生物変換は、毒物学的障害を伴う断片の形成を回避しなければならない。プロドラッグの典型的な例は、活性化合物の官能性分子に連結する生物学的に不安定な保護基を有する化合物を含む。糖分子のヒドロキシ基（単数又は複数）のアルキル化、アシル化又は他の親油性改変は、プロヌクレオチドの設計において使用されている。これらのプロヌクレオチドは、ｉｎ  ｖｉｖｏで加水分解又は脱アルキルされて、活性化合物を産生することができる。
【００２２】
経口の生体利用率をしばしば制約する因子は、消化管からの吸収並びに腸壁及び肝臓による初回通過の排出である。ＧＩ管を通る経細胞吸収の最適化は、ゼロより大きいＤ（７．４）を必要とする。然しながら、分配係数の最適化は、成功を確約しない。プロドラッグは、腸細胞中の活性な排出輸送を回避しなければならないことがあり得る。腸細胞中の細胞内代謝は、代謝産物の腸の管腔へ戻る排出ポンプによる受動輸送又は能動輸送をもたらすことができる。プロドラッグは、更に標的細胞又は受容体に到達する前に、血液中の好ましくない生体内変換に抵抗しなければならない。
【００２３】
抗ウイルス性医薬の高い循環レベルは、耐性集団を発生する危険性を最小にするために、ＡＰＩの十分に高い血液レベルを維持するためにしばしば必要である。例えば、最近の試行は、一日二回及び一日四回の１５００ｍｇ迄の投与量のイソ酪酸（２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，５Ｒ）−５−（４−アミノ−２−オキソ−２Ｈ−ピリミジン−１−イル）−４−フルオロ−２−イソブチリルオキシメチル−４−メチル−テトラヒドロ−フラン−３−イルエステルイソ酪酸（ＩＩ：Ｒ７１２８）を使用している。（Ｓ．Ｌｅ  Ｐｏｇａｍ  ｅｔ  ａｌ．，“Ｎｏ  Ｅｖｉｄｅｎｃｅ  ｏｆ  Ｒ７１２８  Ｄｒｕｇ  Ｒｅｓｉｓｔａｎｃｅ  Ａｆｔｅｒ  Ｕｐ  Ｔｏ  ４  Ｗｅｅｋｓ  Ｔｒｅａｔｍｅｎｔ  ｏｆ  ＧＴ１，２  ａｎｄ  ３  Ｈｅｐａｔｉｔｉｓ  Ｃ  Ｖｉｒｕｓ  Ｉｎｆｅｃｔｅｄ  Ｉｎｄｉｖｉｄｕａｌｓ”，４４ｔｈ  Ａｎｎｕａｌ  Ｍｅｅｔｉｎｇ  ｏｆ  ｔｈｅ  Ｅｕｒｏｐｅａｎ  Ａｓｓｏｃｉａｔｉｏｎ  ｆｏｒ  ｔｈｅ  Ｓｔｕｄｙ  ｏｆ  ｔｈｅ  Ｌｉｖｅｒ（ＥＡＳＬ），Ｃｏｐｅｎｈａｇｅｎ，Ｄｅｎｍａｒｋ，Ａｐｒ  ２２−Ａｐｒ  ２６，２００９）。これは、しばしば大きい丸薬又はカプセルの大きさを要する高い日量、或いは剤形の更に頻繁な投与をもたらす。高い投与量の活性な医薬成分が必要な場合、生体利用率を改良するために希釈剤又は賦形剤を加える機会は、しばしば制約される。従って、新規なＨＣＶポリメラーゼ阻害剤の設計は、生体利用性であり、対応する三リン酸塩に転換され、そしてＨＣＶポリメラーゼの強力な阻害剤である化合物を、確認することが必要である。
【００２４】
Ｉｎ  ｖｉｖｏのリン酸化に対する必須の要求は、最近、ヌクレオシド一リン酸に導く細胞内の酵素的活性化に対して感受性である遮蔽されたリン酸分子を含有する、ヌクレオシド一リン酸プロドラッグに対する興味に導く。ヌクレオシド三リン酸の形成における律速段階は、一リン酸塩に導く第一段階であるため、その後の第二及び第三のリン酸の添加は、この一リン酸塩から容易に形成される（例えば、Ｐ．Ｐｅｒｒｏｎｅ  ｅｔ  ａｌ．，Ｊ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．，２００７，５０（８）：１８４０；Ｓ．Ｊ．Ｈｅｃｋｅｒ  ａｎｄ  Ｍ．Ｄ．Ｅｒｉｏｎ，Ｊ．Ｍｅｄ  Ｃｈｅｍ．２００８  ５１（８）：２３２８を参照されたい）。
【００２５】
潜在的なプロドラッグを得るための活性化合物の化学的改変は、親化合物中には存在しない好ましくない物理的、化学的及び生物学的特性を示すことができる全く新しい分子成分を産生する。代謝産物の確認試験に対する法的要求事項は、多数の経路が複数の代謝産物に導く場合、挑戦を提起することができる。従って、プロドラッグの確認試験は、不確かな、そして挑戦的な課題を残す。更に、潜在的プロドラッグの薬物動力学的特性を評価することは、挑戦的であり、そして高価な努力である。動物モデルからの薬物動力学的結果を、ヒトに外挿することは困難であり得る。
【００２６】
本発明の目的は、Ｃ型肝炎ウイルスに感染した宿主の治療のための新しい化合物、方法及び組成物を提供することである。
【先行技術文献】
【非特許文献】
【００２７】
【非特許文献１】Ｂｏｙｅｒ，Ｎ．ｅｔ  ａｌ．Ｊ．Ｈｅｐａｔｏｌ．２０００  ３２：９８−１１２；
【非特許文献２】Ｒｉｃｅ，Ｃ．Ｍ．，Ｆｌａｖｉｖｉｒｉｄａｅ：Ｔｈｅ  ｖｉｒｕｓｅｓ  ａｎｄ  ｔｈｅｉｒ  ｒｅｐｌｉｃａｔｉｏｎ，Ｉｎ：Ｆｉｅｌｄｓ  Ｖｉｒｏｌｏｇｙ，Ｅｄｉｔｏｒｓ：Ｂ．Ｎ．Ｆｉｅｌｄｓ，Ｄ．Ｍ．Ｋｎｉｐｅａｎｄ  Ｐ．Ｍ．Ｈｏｗｌｅｙ，Ｌｉｐｐｉｎｃｏｔｔ−Ｒａｖｅｎ  Ｐｕｂｌｉｓｈｅｒｓ，Ｐｈｉｌａｄｅｌｐｈｉａ，Ｐａ．，Ｃｈａｐｔｅｒ  ３０，９３１−９５９，１９９６；
【非特許文献３】Ｘ．Ｆｏｒｎｓ  ａｎｄ  Ｊ．Ｂｕｋｈ，Ｃｌｉｎｉｃｓ  ｉｎ  Ｌｉｖｅｒ  Ｄｉｓｅａｓｅ  １９９９  ３：６９３−７１６；
【非特許文献４】Ｊ．Ｂｕｋｈ  ｅｔ  ａｌ．，Ｓｅｍｉｎ．Ｌｉｖ．Ｄｉｓ．１９９５  １５：４１−６３；
【非特許文献５】Ｎ．Ｎ．Ｚｅｉｎ，Ｃｌｉｎ．Ｍｉｃｒｏｂｉｏｌ．Ｒｅｖ．，２０００  １３：２２３−２３５；
【非特許文献６】Ｒ．Ｇ．Ｇｉｓｈ，Ｓｅｍ．Ｌｉｖｅｒ．Ｄｉｓ．，１９９９  １９：５；
【非特許文献７】Ｄｉ  Ｂｅｓｃｅｇｌｉｅ，Ａ．Ｍ．ａｎｄ  Ｂａｃｏｎ，Ｂ．Ｒ．，Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ  Ａｍｅｒｉｃａｎ，Ｏｃｔｏｂｅｒ：１９９９  ８０−８５；
【非特許文献８】Ｇ．Ｌａｋｅ−Ｂａｋａａｒ，Ｃｕｒｒｅｎｔ  ａｎｄ  Ｆｕｔｕｒｅ  Ｔｈｅｒａｐｙ  ｆｏｒ  Ｃｈｒｏｎｉｃ  Ｈｅｐａｔｉｔｉｓ  Ｃ  Ｖｉｒｕｓ  Ｌｉｖｅｒ  Ｄｉｓｅａｓｅ，Ｃｕｒｒ．Ｄｒｕｇ  Ｔａｒｇ．Ｉｎｆｅｃｔ  Ｄｉｓ．２００３  ３（３）：２４７−２５３；
【非特許文献９】Ｐ．Ｈｏｆｆｍａｎｎ  ｅｔ  ａｌ．，Ｒｅｃｅｎｔ  ｐａｔｅｎｔｓ  ｏｎ  ｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔａｌ  ｔｈｅｒａｐｙ  ｆｏｒ  ｈｅｐａｔｉｔｉｓ  Ｃ  ｖｉｒｕｓ  ｉｎｆｅｃｔｉｏｎ（１９９９−２００２），Ｅｘｐ．Ｏｐｉｎ．Ｔｈｅｒ．Ｐａｔｅｎｔｓ  ２００３  １３（１１）：１７０７−１７２３；
【非特許文献１０】Ｆ．Ｆ．Ｐｏｏｒｄａｄ  ｅｔ  ａｌ．Ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔｓ  ｉｎ  Ｈｅｐａｔｉｔｉｓ  Ｃ  ｔｈｅｒａｐｙ  ｄｕｒｉｎｇ  ２０００−２００２，Ｅｘｐ．Ｏｐｉｎ．Ｅｍｅｒｇｉｎｇ  Ｄｒｕｇｓ  ２００３  ８（１）：９−２５；
【非特許文献１１】Ｍ．Ｐ．Ｗａｌｋｅｒ  ｅｔ  ａｌ．，Ｐｒｏｍｉｓｉｎｇ  Ｃａｎｄｉｄａｔｅｓ  ｆｏｒ  ｔｈｅ  ｔｒｅａｔｍｅｎｔ  ｏｆ  ｃｈｒｏｎｉｃ  ｈｅｐａｔｉｔｉｓ  Ｃ，Ｅｘｐ．Ｏｐｉｎ．Ｉｎｖｅｓｔｉｇ．Ｄｒｕｇｓ  ２００３  １２（８）：１２６９−１２８０；
【非特許文献１２】Ｓ．−Ｌ．Ｔａｎ  ｅｔ  ａｌ．，Ｈｅｐａｔｉｔｉｓ  Ｃ  Ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃｓ：Ｃｕｒｒｅｎｔ  Ｓｔａｔｕｓ  ａｎｄ  Ｅｍｅｒｇｉｎｇ  Ｓｔｒａｔｅｇｉｅｓ，Ｎａｔｕｒｅ  Ｒｅｖ．Ｄｒｕｇ  Ｄｉｓｃｏｖ．２００２  １：８６７−８８１；
【非特許文献１３】Ｒ．Ｄｅ  Ｆｒａｎｃｅｓｃｏ  ｅｔ  ａｌ．Ａｐｐｒｏａｃｈｉｎｇ  ａ  ｎｅｗ  ｅｒａ  ｆｏｒ  ｈｅｐａｔｉｔｉｓ  Ｃ  ｖｉｒｕｓ  ｔｈｅｒａｐｙ：ｉｎｈｉｂｉｔｏｒｓ  ｏｆ  ｔｈｅ  ＮＳ３−４Ａ  ｓｅｒｉｎｅ  ｐｒｏｔｅａｓｅ  ａｎｄ  ｔｈｅ  ＮＳ５Ｂ  ＲＮＡ−ｄｅｐｅｎｄｅｎｔ  ＲＮＡ  ｐｏｌｙｍｅｒａｓｅ，Ａｎｔｉｖｉｒａｌ  Ｒｅｓ．２００３  ５８：１−１６；
【非特許文献１４】Ｑ．Ｍ．Ｗａｎｇ  ｅｔ  ａｌ．Ｈｅｐａｔｉｔｉｓ  Ｃ  ｖｉｒｕｓ  ｅｎｃｏｄｅｄ  ｐｒｏｔｅｉｎｓ：ｔａｒｇｅｔｓ  ｆｏｒ  ａｎｔｉｖｉｒａｌ  ｔｈｅｒａｐｙ，Ｄｒｕｇｓ  ｏｆ  ｔｈｅ  Ｆｕｔｕｒｅ  ２０００  ２５（９）：９３３−８−９４４；
【非特許文献１５】Ｊ．Ａ．Ｗｕ  ａｎｄ  Ｚ．Ｈｏｎｇ，Ｔａｒｇｅｔｉｎｇ  ＮＳ５Ｂ−Ｄｅｐｅｎｄｅｎｔ  ＲＮＡ  Ｐｏｌｙｍｅｒａｓｅ  ｆｏｒ  Ａｎｔｉ−ＨＣＶ  Ｃｈｅｍｏｔｈｅｒａｐｙ  Ｃｕｒ．Ｄｒｕｇ  Ｔａｒｇ．−Ｉｎｆ．Ｄｉｓ．２００３  ３：０７−２１９
【非特許文献１６】Ｊ．Ｚ．Ｗｕ  ａｎｄ  Ｚ．Ｈｏｎｇ，Ｔａｒｇｅｔｉｎｇ  ＮＳ５Ｂ  ＲＮＡ−Ｄｅｐｅｎｄｅｎｔ  ＲＮＡ  Ｐｏｌｙｍｅｒａｓｅ  ｆｏｒ  Ａｎｔｉ−ＨＣＶ  Ｃｈｅｍｏｔｈｅｒａｐｙ，Ｃｕｒｒ．Ｄｒｕｇ  Ｔａｒｇ．−Ｉｎｆｅｃｔ．Ｄｉｓ．２００３  ３（３）：２０７−２１９；
【非特許文献１７】Ｇａｒｙ  Ｌ．Ｄａｖｉｓ，Ｇａｓｔｒｏｅｎｔｅｒｏｌｏｇｙ  ２０００  １１８：Ｓ１０４−Ｓ１１４
【非特許文献１８】Ｂ．Ａ．Ｌｕｘｏｎ  ｅｔ  ａｌ．，Ｃｌｉｎ．Ｔｈｅｒａｐ．２００２  ２４（９）：１３６３１３８３；
【非特許文献１９】Ａ．Ｋｏｚｌｏｗｓｋｉ  ａｎｄ  Ｊ．Ｍ．Ｈａｒｒｉｓ，Ｊ．Ｃｏｎｔｒｏｌ．Ｒｅｌｅａｓｅ，２００１  ７２：２１７−２２４；
【非特許文献２０】Ａ．Ａｌｂｅｒｔ，Ｓｅｌｅｃｔｉｖｅ  Ｔｏｘｉｃｉｔｙ，Ｃｈａｐｍａｎ  ａｎｄ  Ｈａｌｌ，Ｌｏｎｄｏｎ，１９５１；
【非特許文献２１】Ｐ．Ｅｔｔｍａｙｅｒ  ｅｔ  ａｌ．，Ｊ．Ｍｅｄ  Ｃｈｅｍ．２００４  ４７（１０）：２３９３−２４０４；
【非特許文献２２】Ｋ．Ｂｅａｕｍｏｎｔ  ｅｔ  ａｌ．，Ｃｕｒｒ．Ｄｒｕｇ  Ｍｅｔａｂ．２００３  ４：４６１−４８５；
【非特許文献２３】Ｈ．Ｂｕｎｄｇａａｒｄ，Ｄｅｓｉｇｎ  ｏｆ  Ｐｒｏｄｒｕｇｓ：Ｂｉｏｒｅｖｅｒｓｉｂｌｅ  ｄｅｒｉｖａｔｉｖｅｓ  ｆｏｒ  ｖａｒｉｏｕｓ  ｆｕｎｃｔｉｏｎａｌ  ｇｒｏｕｐｓ  ａｎｄ  ｃｈｅｍｉｃａｌ  ｅｎｔｉｔｉｅｓ  ｉｎ  Ｄｅｓｉｇｎ  ｏｆ  Ｐｒｏｄｒｕｇｓ，Ｈ．Ｂｕｎｄｇａａｒｄ（ｅｄ）Ｅｌｓｅｖｉｅｒ  Ｓｃｉｅｎｃｅ  Ｐｕｂｌｉｓｈｅｒｓ，Ａｍｅｒｓｔｅｒｄａｍ  １９８５；
【非特許文献２４】Ｇ．Ｍ．Ｐａｕｌｅｔｔｉ  ｅｔ  ａｌ．Ａｄｖ．Ｄｒｕｇ  Ｄｅｌｉｖ．Ｒｅｖ．１９９７  ２７：２３５−２５６；
【非特許文献２５】Ｒ．Ｊ．Ｊｏｎｅｓ  ａｎｄ  Ｎ．Ｂｉｓｃｈｏｆｂｅｒｇｅｒ，Ａｎｔｉｖｉｒａｌ  Ｒｅｓ．１９９５  ２７；１−１５；
【非特許文献２６】Ｃ．Ｒ．Ｗａｇｎｅｒ  ｅｔ  ａｌ．，Ｍｅｄ．Ｒｅｓ．Ｒｅｖ．２０００  ２０：４１７−４５；
【非特許文献２７】Ｓ．Ｌｅ  Ｐｏｇａｍ  ｅｔ  ａｌ．，“Ｎｏ  Ｅｖｉｄｅｎｃｅ  ｏｆ  Ｒ７１２８  Ｄｒｕｇ  Ｒｅｓｉｓｔａｎｃｅ  Ａｆｔｅｒ  Ｕｐ  Ｔｏ  ４  Ｗｅｅｋｓ  Ｔｒｅａｔｍｅｎｔ  ｏｆ  ＧＴ１，２  ａｎｄ  ３  Ｈｅｐａｔｉｔｉｓ  Ｃ  Ｖｉｒｕｓ  Ｉｎｆｅｃｔｅｄ  Ｉｎｄｉｖｉｄｕａｌｓ”，４４ｔｈ  Ａｎｎｕａｌ  Ｍｅｅｔｉｎｇ  ｏｆ  ｔｈｅ  Ｅｕｒｏｐｅａｎ  Ａｓｓｏｃｉａｔｉｏｎ  ｆｏｒ  ｔｈｅ  Ｓｔｕｄｙ  ｏｆ  ｔｈｅ  Ｌｉｖｅｒ（ＥＡＳＬ），Ｃｏｐｅｎｈａｇｅｎ，Ｄｅｎｍａｒｋ，Ａｐｒ  ２２−Ａｐｒ  ２６，２００９；
【非特許文献２８】Ｐ．Ｐｅｒｒｏｎｅ  ｅｔ  ａｌ．，Ｊ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．，２００７，５０（８）：１８４０；
【非特許文献２９】Ｓ．Ｊ．Ｈｅｃｋｅｒ  ａｎｄ  Ｍ．Ｄ．Ｅｒｉｏｎ，Ｊ．Ｍｅｄ  Ｃｈｅｍ．２００８  ５１（８）：２３２８。
【発明の概要】
【００２８】
現時点で、Ｃ型肝炎ウイルス（ＨＣＶ）感染を治療するための予防的治療又は一般的に有効な療法は存在しない。現時点で、唯一ＨＣＶに対して存在する認可された療法は、制約された有効性を有し、そして重大な副作用を伴う。従って、更に少ない毒性を伴う、新しい更に有効な療法の設計及び開発は必須である。
【００２９】
本発明は、以下の式Ｉ：
【００３０】
【化２】
2013518076.tif 000004
【００３１】
［式中、Ｒ１及びＲ２は、（ｉ）独立に、それぞれの出現において、水素、Ｃ１−６アルキルカルボニル、Ｃ１−６アルコキシカルボニル、及びＣ１−６アミノアルキルカルボニルからなる群から選択されるか、又は
（ｉｉ）Ｒ１及びＲ２分子の両方が一緒に選択されて、一緒にＣ（＝Ｏ）であり、
Ｒ３は、水素、Ｃ１−６アルキルカルボニル、Ｃ１−６アルコキシカルボニル又はＣ１−６アミノアルキルカルボニルである］
の化合物、医薬的に受容可能なその塩に関し、但し、Ｒ１、Ｒ２及びＲ３の少なくとも一つは、水素以外であることを条件とする。
【００３２】
本発明は、更に疾病Ｃ型肝炎ウイルス（ＨＣＶ）感染を治療するための、治療的に有効な量の式Ｉの化合物を、それを必要とする患者に投与することによる方法を提供する。化合物は、単独で投与するか、或いは他の抗ウイルス性化合物又は免疫調節剤と共に同時投与することができる。
【００３３】
本発明は、更に細胞中のＨＣＶの複製を阻害するための、式Ｉの化合物を、ＨＣＶを阻害するために有効な量で投与することによる方法を提供する。
本発明は、更に式Ｉの化合物、及び少なくとも一つの医薬的に受容可能な担体、希釈剤又は賦形剤を含んでなる医薬組成物を提供する。
【図面の簡単な説明】
【００３４】
【図１】図１ａ(Figure 1a)は、ＨＣＶレプリコン細胞中の４’−ＡＵ（４’−アジド−ウラシル）のリン酸化特性を示す。Figure 1bは、ヒト肝細胞中の４’−ＡＵのリン酸化特性を示す。
【図２−１】図２ａ(Figure 2a)は、ＰＢＭＣ中の４’−ＡＵのリン酸化特性を示す。図２ｂ(Figure 2b)及び図２ｃ(Figure 2c)は、それぞれ１時間のインキュベーション及び１２０時間のインキュベーション後の、ＰＢＭＣ中の４’−アジド−シチジン（４’−ＡＣ）のリン酸化特性を示す。
【図２−２】同上。
【図３】図３ａ（Figure 3a）及び３ｂ(Figure 3b)は、初代ヒト肝細胞、骨髄細胞及びＰＢＭＣ中の４’−ＡＵのリン酸化特性の比較を提供する。同様な特性は、３人の提供者において得られた。
【図４】図４(Figure 4)は、ヒト肝細胞中の４’ＡＵ対４’ＡＣの効力を示す。
【発明を実施するための形態】
【００３５】
４’−アジド−シチジン（４’−ＡＣ）のトリアシル誘導体が、ＮＳ５Ｂ  ＨＣＶポリメラーゼの阻害剤として検討されている（Ｋ．  Ｋｌｕｍｐｐ  ｅｔ  ａｌ．，Ｊ．Ｂｉｏ．Ｃｈｅｍ．，２００８  ２８３（４）：２１６７−２１７６）。不幸なことに、４’−ＡＣは、ウイルス複製の強力な阻害剤であるが、受容不可能な副作用の発症により、臨床研究は中止された。関連するピリミジンヌクレオシド、４’−アジド−ウリジン（４’−ＡＵ）は、レプリコンアッセイにおいて不活性であり、これは、潜在的なポリメラーゼ阻害剤を評価するために広く使用されている。（Ｖ．Ｌｏｈｍａｎｎ  ｅｔ  ａｌ．，Ｊ．Ｖｉｒｏｌ．２００３  ７７：３００７−３０１９，Ｋ．Ｊ．Ｂｌｉｇｈｔ  ｅｔ  ａｌ．，Ｓｃｉｅｎｃｅ  ２０００  ２９０（５４９８）：１８７０−１８７１）。三リン酸塩が化学的に調製され、そしてＨＣＶポリメラーゼアッセイ中で評価された場合、これは、４’−アジド−シチジン三リン酸に対する０．０４０±２５μＭのＫｉと比較して、０．０３８±８μＭのＫｉで酵素を阻害した（Ｄ．Ｓｍｉｔｈ  ｅｔ  ａｌ．，Ｂｉｏｏｒｇ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．Ｌｅｔｔ．２００７  １７：２５７０）。従って、レプリコンアッセイにおける活性の欠如は、４’−ＡＵがｉｎ  ｖｉｖｏでリン酸化されないことを示すと想定される。この説明は、４’−ＡＣはＰＢＭＣ（末梢血単核球）によってリン酸化されるが、４’−ＡＵは対応するリン酸化ヌクレオシドに転換されなかったことの証明によって支持された。（図１）。
【００３６】
いまや、驚くべきことに、４’−ＡＵのリン酸化が、初代ヒト肝細胞中で効率よく実際に起こることが見いだされた（図２）。細胞特異的リン酸化が、ＨＣＶ複製のための標的組織中で起こるため、選択的にリン酸化するヌクレオシドによる療法の潜在性が存在し、これは、更に他の細胞中の制約されたリン酸化が、有害な毒性に対する僅かな機会をもたらすことができることを示唆する。
【００３７】
語句“ある一つの”又は“ある一個の”成分は、本明細書中で使用される場合、一つ又はそれより多いその成分を指す；例えば、ある一つの化合物は、一つ又はそれより多い化合物或いは少なくとも一つの化合物を指す。このように、用語“ある一つの（又はある一個の）”、“一つ又はそれより多い”、及び“少なくとも一つの”は、本明細書中で互換的に使用することができる。
【００３８】
語句“本明細書中で先に定義したとおりの”は、「発明の概要」中に与えられるそれぞれの基に対する最も幅広い定義又は最も幅広い特許請求項を指す。以下に提供される全ての他の態様において、それぞれの態様中に存在することができ、そして明示的に定義されていない置換基は、「発明の概要」中に提供される最も幅広い定義を保持する。
【００３９】
本明細書中で使用される場合、移行句中で又は特許請求項の本文中であるかに関わらず、用語“含んでなる”及び“含んでなり”は、無制限の意味を有すると解釈されるべきである。即ち、用語は、語句“少なくとも、有する”又は“少なくとも、含む”と同意語として解釈されるべきである。方法の文脈において使用される場合、用語“含んでなる”は、その方法が少なくとも記述した工程を含むが、しかし更なる工程を含むことができることを意味する。化合物又は組成物の文脈において使用される場合、用語“含んでなる”は、その化合物又は組成物が、少なくとも記述した特徴又は成分を含むが、しかし更に、更なる特徴又は成分を含むことができることを意味する。
【００４０】
用語“独立に”は、可変基が、同一化合物中の同一又は異なった定義を有する可変基の存在或いは非存在に関わらず、いずれもの一つの場合に適用されることを示すために、本明細書中で使用される。従って、Ｒ’’が二回現れ、そして“独立に炭素又は窒素”として定義される化合物において、両方のＲ’’は、炭素であることができ、両方のＲ’’が窒素であることができ、又は一つのＲ’’が炭素であり、そして他方が窒素であることができる。
【００４１】
いずれもの可変基（例えば、Ｒ１、Ｒ４ａ、Ａｒ、Ｘ１又はＨｅｔ）が、本発明中に使用される又は特許請求される化合物を示し、そして記載されるいずれもの分子又は式中に一回より多く出現する場合、それぞれの出現におけるその定義は、あらゆる他の出現におけるその定義とは独立である。更に、置換基及び／又は可変基の組合せは、このような化合物が安定な化合物をもたらす場合にのみ許容される。
【００４２】
結合の末端の記号“＊”又は結合を通って書かれた“−−−−”は、それぞれの官能基又は他の化学的分子の、それが一部である分子の残りへの接続の点を指す。従って、例えば：
【００４３】
【化３】
2013518076.tif 000005
【００４４】
である。
環系中へ書かれた結合（明確な頂点への接続に対して）は、その結合が適した環の原子のいずれかに接続することができることを示す。
【００４５】
用語“所望による”又は“所望により”は、本明細書中で使用される場合、その後に記載される事象又は状況が、起こることができるが、しかし起こる必要はないことを意味し、そしてその記載は、事象又は状況が起こる場合、そしてこれらが起こらない場合を含む。例えば、“所望により置換された”は、所望により置換された分子が、水素又は置換基を組込むことができることを意味する。
【００４６】
用語“約”は、概略、その辺り、大雑把に、又はその前後を意味するために本明細書中で使用される。用語“約”が、数値の範囲に関して使用された場合、これは、その範囲を、記載した数値の上及び下の境界を拡大することによって変更する。一般的に、用語“約”は、記述された値の上及び下の２０％の変動によって数値を変更するために本明細書中で使用される。
【００４７】
本明細書中で使用する場合、変数に対する数値の範囲の記述は、本発明が、その範囲の値のいずれかと等しい変数により実施することができることを伝達することを意図している。従って、本質的に離散である変数において、変数は、その範囲の終点を含む数値の範囲のいずれもの整数値と等しいことができる。同様に、本質的に連続である変数において、変数は、その範囲の終点を含む数値の範囲のいずれもの実数値と等しいことができる。例として、０ないし２間の値を有すると記載された変数は、本質的に離散である変数に対して、０、１又は２であることができ、そして本質的に連続である変数に対して、０．０、０．１、０．０１、０．００１又はいずれもの他の実数であることができる。
【００４８】
式Ｉの化合物は、互変異性を示す。互変異性化合物は、二つ又はそれより多い相互転換可能な種として存在することができる。プロトン互変異性体は、二つの原子間の共有結合した水素原子の転移から得られる。互変異性体は、一般的に平衡で存在し、そして個々の互変異性体を単離するための試みは、通常、その化学的及び物理的特性が化合物の混合物と一致した混合物を生じる。平衡の位置は、分子内の化学的特徴に依存する。例えば、アセトアルデヒドのような多くの脂肪族アルデヒド及びケトンにおいて、ケト型が優勢であり；一方フェノールにおいて、エノール型が優勢である。普通のプロトン互変異性体は、ケト／エノール：
【００４９】
【化４】
2013518076.tif 000006
【００５０】
、アミド／イミド酸：
【００５１】
【化５】
2013518076.tif 000007
【００５２】
及びアミジン：
【００５３】
【化６】
2013518076.tif 000008
【００５４】
互変異性体を含む。後者の二つは、ヘテロアリール及び複素環式環において特に普通であり、そして本発明は、この化合物の全ての互変異性の形態を包含する。
本発明の第１の態様において、Ｒ１、Ｒ２及びＲ３が、本明細書中で先に記載したとおりの式Ｉの化合物が提供される。
【００５５】
本発明の第２の態様において、Ｒ１、Ｒ２及びＲ３が、Ｃ１−６アルキルカルボニルである式Ｉの化合物が提供される。
本発明の第３の態様において、Ｒ１及びＲ２がＣ１−６アルキルカルボニルであり、そしてＲ３が水素である式Ｉの化合物が提供される。
【００５６】
本発明の第４の態様において、Ｒ１及びＲ２が水素であり、そしてＲ３がＣ１−６アルキルカルボニル、又はＣ１−６アミノアルキルカルボニルである式Ｉの化合物が提供される。
【００５７】
本発明の第５の態様において、表Ｉの化合物Ｉ−１ないしＩ−６から選択される化合物が提供される。
本発明の第６の態様において、治療的に有効な量のＲ１、Ｒ２及びＲ３が本明細書中で先に定義したとおりの式Ｉの化合物を、それを必要とする患者に投与することを含んでなるＨＣＶ感染を治療する方法が提供される。以下に提供される全ての他の態様において、それぞれの態様中に存在することができ、そして明示的に定義されていない置換基は、「発明の概要」中に提供された最も幅広い定義を保持する。
【００５８】
本発明の第７の態様において、治療的に有効な量のＲ１、Ｒ２及びＲ３がＣ１−６アルキルカルボニルである式Ｉの化合物を、それを必要とする患者に投与することを含んでなるＨＣＶ感染を治療する方法が提供される。
【００５９】
本発明の第８の態様において、治療的に有効な量のＲ１及びＲ２がＣ１−６アルキルカルボニルであり、そしてＲ３が水素である式Ｉの化合物を、それを必要とする患者に投与することを含んでなるＨＣＶ感染を治療する方法が提供される。
【００６０】
本発明の第９の態様において、治療的に有効な量のＲ１及びＲ２が水素であり、そしてＲ３がＣ１−６アルキルカルボニル、又はＣ１−６アミノアルキルカルボニルである式Ｉの化合物を、それを必要とする患者に投与することを含んでなるＨＣＶ感染を治療する方法が提供される。
【００６１】
本発明の第１０の態様において、治療的に有効な量のＲ１、Ｒ２及びＲ３が本明細書中で先に記載したとおりの式Ｉの化合物を、それを必要とする患者に投与し、そして少なくとも一つの免疫系調節剤及び／又は少なくとも一つのＨＣＶの複製を阻害する抗ウイルス剤を同時投与することを含んでなるＨＣＶ感染を治療する方法が提供される。
【００６２】
本発明の第１１の態様において、治療的に有効な量のＲ１、Ｒ２及びＲ３が本明細書中で先に記載したとおりの式Ｉの化合物を、それを必要とする患者に投与し、そしてインターフェロン、インターロイキン、腫瘍壊死因子及びコロニー刺激因子からなる群から選択される少なくとも一つの免疫系調節剤を同時投与することを含んでなるＨＣＶ感染を治療する方法が提供される。
【００６３】
本発明の第１２の態様において、治療的に有効な量のＲ１、Ｒ２及びＲ３が本明細書中で先に記載したとおりの式Ｉの化合物を、それを必要とする患者に投与し、そして少なくとも一つの免疫系調節剤を同時投与することを含んでなり、ここにおいて、この免疫系調節剤は、インターフェロン又は化学的に誘導されたインターフェロンである、ＨＣＶ感染を治療する方法が提供される。
【００６４】
本発明の第１３の態様において、治療的に有効な量のＲ１、Ｒ２及びＲ３が本明細書中で先に記載したとおりの式Ｉの化合物を、それを必要とする患者に投与し、そして少なくとも一つのＨＣＶの複製を阻害する抗ウイルス剤を同時投与することを含んでなるＨＣＶ感染を治療する方法が提供される。
【００６５】
本発明の第１４の態様において、治療的に有効な量のＲ１、Ｒ２及びＲ３が本明細書中で先に記載したとおりの式Ｉの化合物を、それを必要とする患者に投与し、そしてＨＣＶプロテアーゼ阻害剤、もう一つのヌクレオシドＨＣＶポリメラーゼ阻害剤、非ヌクレオシドＨＣＶポリメラーゼ阻害剤、ＨＣＶヘリカーゼ阻害剤、ＨＣＶプライマーゼ阻害剤及びＨＣＶ融合阻害剤からなる群から選択される少なくとも一つの抗ウイルス剤を同時投与することを含んでなるＨＣＶ感染を治療する方法が提供される。
【００６６】
本発明のもう一つの態様において、ＨＣＶ感染の治療のための、Ｒ１、Ｒ２及びＲ３が本明細書中で先に定義したとおりの式Ｉの化合物の使用が提供される。
本発明のもう一つの態様において、ＨＣＶ感染の治療のための医薬の製造のための、Ｒ１、Ｒ２及びＲ３が本明細書中で先に定義したとおりの式Ｉの化合物の使用が提供される。
【００６７】
本発明のもう一つの態様において、ＨＣＶ感染の治療のための、Ｒ１、Ｒ２及びＲ３がＣ１−６アルキルカルボニルである式Ｉの化合物の使用が提供される。
本発明のもう一つの態様において、ＨＣＶ感染の治療のための医薬の製造のための、Ｒ１、Ｒ２及びＲ３がＣ１−６アルキルカルボニルである式Ｉの化合物の使用が提供される。
【００６８】
本発明のもう一つの態様において、ＨＣＶ感染の治療のための、Ｒ１及びＲ２がＣ１−６アルキルカルボニルであり、そしてＲ３が水素である式Ｉの化合物の使用が提供される。
【００６９】
本発明のもう一つの態様において、ＨＣＶ感染の治療のための医薬の製造のための、Ｒ１及びＲ２がＣ１−６アルキルカルボニルであり、そしてＲ３が水素である式Ｉの化合物の使用が提供される。
【００７０】
本発明のもう一つの態様において、ＨＣＶ感染の治療のための、Ｒ１及びＲ２が水素であり、そしてＲ３がＣ１−６アルキルカルボニル、又はＣ１−６アミノアルキルカルボニルである式Ｉの化合物の使用が提供される。
【００７１】
本発明のもう一つの態様において、ＨＣＶ感染の治療のための医薬の製造のための、Ｒ１及びＲ２が水素であり、そしてＲ３がＣ１−６アルキルカルボニル、又はＣ１−６アミノアルキルカルボニルである式Ｉの化合物の使用が提供される。
【００７２】
本発明のもう一つの態様において、ＨＣＶ感染の治療のための、Ｒ１、Ｒ２及びＲ３が本明細書中で先に記載したとおりの式Ｉの化合物の、少なくとも一つの免疫系調節剤及び／又は少なくとも一つのＨＣＶの複製を阻害する抗ウイルス剤との組合せ中の使用が提供される。
【００７３】
本発明のもう一つの態様において、ＨＣＶ感染の治療のための、Ｒ１、Ｒ２及びＲ３が本明細書中で先に記載したとおりの式Ｉの化合物の、インターフェロン、インターロイキン、腫瘍壊死因子及びコロニー刺激因子からなる群から選択される少なくとも一つの免疫系調節剤との組合せ中の使用が提供される。
【００７４】
本発明のもう一つの態様において、ＨＣＶ感染の治療のための、Ｒ１、Ｒ２及びＲ３が本明細書中で先に記載したとおりの式Ｉの化合物の、少なくとも一つの免疫系調節剤との組合せ中の使用が提供され、ここにおいて、この免疫系調節剤は、インターフェロン又は化学的に誘導されたインターフェロンである。
【００７５】
本発明のもう一つの態様において、ＨＣＶ感染の治療のための、Ｒ１、Ｒ２及びＲ３が本明細書中で先に記載したとおりの式Ｉの化合物の、少なくとも一つのＨＣＶの複製を阻害する抗ウイルス剤との組合せ中の使用が提供される。
【００７６】
本発明のもう一つの態様において、ＨＣＶ感染の治療のための、Ｒ１、Ｒ２及びＲ３が本明細書中で先に記載したとおりの式Ｉの化合物の、ＨＣＶプロテアーゼ阻害剤、もう一つのヌクレオシドＨＣＶポリメラーゼ阻害剤、非ヌクレオシドＨＣＶポリメラーゼ阻害剤、ＨＣＶヘリカーゼ阻害剤、ＨＣＶプライマーゼ阻害剤及びＨＣＶ融合阻害剤からなる群から選択される少なくとも一つの抗ウイルス剤との組合せ中の使用が提供される。
【００７７】
本発明のもう一つの態様において、治療的に有効な量のＲ１、Ｒ２及びＲ３が本明細書中で先に記載したとおりの式Ｉの化合物を、少なくとも一つの医薬的に受容可能な担体、希釈剤又は賦形剤と混合されて含んでなる医薬組成物が提供される。
【００７８】
用語 “アルキルカルボニル”は、本明細書中で使用される場合、Ｒが本明細書中で定義されるようなアルキルである式Ｃ（＝Ｏ）Ｒの基を示す。用語Ｃ１−６アシル［又は“アルカノイル”］は、１ないし６個の炭素原子を含有する−Ｃ（＝Ｏ）Ｒ基を指す。Ｃ１アシル［又は“アルカノイル”］基は、Ｒ＝Ｈであるホルミル基であり、そしてＣ６アシル基は、アルキル鎖が分枝されていない場合、ヘキサノイルを指す。用語“アリールカルボニル”又は“アロイル”は、本明細書中で使用される場合、Ｒがアリール基である式Ｃ（＝Ｏ）Ｒの基を；用語“ベンゾイル”は、本明細書中で使用される場合、Ｒがフェニルである“アリールカルボニル”又は“アロイル”基を意味する。
【００７９】
用語“アルコキシカルボニル”及び“アリールオキシカルボニル”は、本明細書中で使用される場合、Ｒが、それぞれアルキル又はアリールであり、そしてアルキル及びアリールが本明細書中で定義されるとおりの式−Ｃ（＝Ｏ）ＯＲの基を示す。
【００８０】
用語“アミノアルキルカルボニル”は、本明細書中で使用される場合、一つの水素がアミノ基によって置換された、本明細書中で定義されたとおりのアルキルカルボニル分子を指す。用語Ｃ１−６アミノアルキルカルボニルは、Ｃ１−６アルキルカルボニル基を規定する。アミノアルキルカルボニル分子の例は、制約されるものではないが、グリシル［ＣＯＣＨ２ＮＨ２］、アラニル［ＣＯＣＨ（ＮＨ２）Ｍｅ］、バリニル［ＣＯＣＨ（ＮＨ２）ＣＨＭｅ２］、ロイシニル［ＣＯＣＨ（ＮＨ２）ＣＨ２ＣＨＭｅ２］、イソロイシニル［ＣＯＣＨ（ＮＨ２）ＣＨＭｅＥｔ］及びノルロイシニル［ＣＯＣＨ（ＮＨ２）（ＣＨ２）３Ｍｅ］等を含む。この定義は、天然に存在するアミノ酸に制約されるものではない。
【００８１】
普通に使用される略語は：アセチル（Ａｃ）、水性（ａｑ．）、４ＡＣ（４−アジドシチジン）、４ＡＵ（４−アジドウリジン）、４ＡＵ−ＭＰ（４−アジドウリジン一リン酸）、４ＡＵ−ＤＰ（４−アジドウリジン二リン酸）、４ＡＵ−ＴＰ（４−アジドウリジン三リン酸）、気圧（Ａｔｍ）、ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル（Ｂｏｃ）、ジ−ｔｅｒｔ−ブチルピロ炭酸又はｂｏｃ無水物（ＢＯＣ２Ｏ）、ベンジル（Ｂｎ）、ブチル（Ｂｕ）、ケミカルアブストラクト登録番号（ＣＡＳＲＮ）、ベンジルオキシカルボニル（ＣＢＺ又はＺ）、カルボニルジイミダゾール（ＣＤＩ）、Ｎ，Ｎ’−ジシクロヘキシルカルボジイミド（ＤＣＣ）、１，２−ジクロロエタン（ＤＣＥ）、ジクロロメタン（ＤＣＭ）、アゾジカルボン酸ジエチル（ＤＥＡＤ）、アゾジカルボン酸ジ−イソ−プロピル（ＤＩＡＤ）、水素化アルミニウムジ−イソ−ブチル（ＤＩＢＡＬ又はＤＩＢＡＬ−Ｈ）、ジ−イソ−プロピルエチルアミン（ＤＩＰＥＡ）、Ｎ，Ｎ−ジメチルアセトアミド（ＤＭＡ）、４−Ｎ，Ｎ−ジメチルアミノピリジン（ＤＭＡＰ）Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（ＤＭＦ）、ジメチルスルホキシド（ＤＭＳＯ）、エチル（Ｅｔ）、エタノール（ＥｔＯＨ）、１−（３−ジメチルアミノプロピル）−３−エチルカルボジイミド塩酸塩（ＥＤＣＩ）、酢酸エチル（ＥｔＯＡｃ）、２−エトキシ−２Ｈ−キノリン−１−カルボン酸エチルエステル（ＥＥＤＱ）、ジエチルエーテル（Ｅｔ２Ｏ）、酢酸（ＨＯＡｃ）、１−Ｎ−ヒドロキシベンゾトリアゾール（ＨＯＢｔ）、高圧液体クロマトグラフィー（ＨＰＬＣ）、イソ−プロパノール（ＩＰＡ）、メタノール（ＭｅＯＨ）、融点（ｍｐ）、ＭｅＳＯ２−（メシル又はＭｓ）、メチル（Ｍｅ）、アセトニトリル（ＭｅＣＮ）、ｍ−クロロ過安息香酸（ＭＣＰＢＡ）、質量スペクトル（ｍｓ）、メチルｔｅｒｔ−ブチルエーテル（ＭＴＢＥ）、Ｎ−メチルモルホリン（ＮＭＭ）、Ｎ−メチルピロリドン（ＮＭＰ）、フェニル（Ｐｈ）、プロピル（Ｐｒ）、イソ−プロピル（ｉ−Ｐｒ）、平方インチ当たりポンド（ｐｓｉ）、ピリジン（ｐｙｒ）、室温（ｒｔ又はＲＴ）、ｓａｔｄ．（飽和）、ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリル又はｔ−ＢｕＭｅ２Ｓｉ  （ＴＢＤＭＳ）、トリエチルアミン（ＴＥＡ又はＥｔ３Ｎ）、トリフレート又はＣＦ３ＳＯ２−（Ｔｆ）、トリフルオロ酢酸（ＴＦＡ）、テトラフルオロホウ酸Ｏ−ベンゾトリアゾール−１−イル−Ｎ，Ｎ，Ｎ’，Ｎ’−テトラメチルウロニウム（ＴＢＴＵ）、薄層クロマトグラフィー（ＴＬＣ）、テトラヒドロフラン（ＴＨＦ）、テトラメチルエチレンジアミン（ＴＭＥＤＡ）、トリメチルシリル又はＭｅ３Ｓｉ（ＴＭＳ）、ｐ−トルエンスルホン酸一水和物（ＴｓＯＨ又はｐＴｓＯＨ）、４−Ｍｅ−Ｃ６Ｈ４ＳＯ２−又はトシル（Ｔｓ）、Ｎ−ウレタン−Ｎ−カルボキシ無水物（ＵＮＣＡ）を含む。アルキル分子と共に使用される場合、接頭辞ノルマル（ｎ−）、イソ（ｉ−）、第二（ｓｅｃ−）、第三（ｔｅｒｔ−）及びｎｅｏ−を含む慣用的な命名法は、その習慣的意味を有する。（Ｊ．Ｒｉｇａｕｄｙ  ａｎｄ  Ｄ．Ｐ．Ｋｌｅｓｎｅｙ，Ｎｏｍｅｎｃｌａｔｕｒｅ  ｉｎ  Ｏｒｇａｎｉｃ  Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ，ＩＵＰＡＣ  １９７９  Ｐ��ｒｇａｍｏｎ  Ｐｒｅｓｓ，Ｏｘｆｏｒｄ）。
【００８２】
化合物及び調製
本発明によって包含され、そして本発明の範囲内である代表的な化合物の例を、以下の表に提供する。これらの例及びそれに続く調製は、当業者が本発明を更に明確に理解し、そして実施することが可能になるように提供される。これらは、本発明の範囲を制約すると考えられるべきでなく、しかし単に例示であり、そしてその代表である。
【００８３】
一般的に、本出願中で使用される命名法は、ＩＵＰＡＣ系統命名法の発生のためのＢｅｉｌｓｔｅｉｎ  Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅのコンピューター化された系ＡＵＴＯＮＯＭＴＭのｖ．４．０に基づいている。示された構造及びその構造に与えられた名称間に不一致があった場合、示された構造に更なる重みが与えられるべきである。更に、構造又は構造の一部のの立体配置が、例えば太線又は点線で示されていない場合、その構造又は構造の一部は、全てのその立体配置を包含すると解釈されるべきである。
【００８４】
【表１】
2013518076.tif 000009
【００８５】
本発明の化合物は、以下に示し、そして記載される例示的な合成反応スキームに示した各種の方法よって製造することができる。一般的に、これらの化合物の調製において使用される出発物質及び試薬は、Ａｌｄｒｉｃｈ  Ｃｈｅｍｉｃａｌ  Ｃｏ．のような商業的な供給業者から入手可能であるか、又はＦｉｅｓｅｒ  ａｎｄ  Ｆｉｅｓｅｒ’ｓ  Ｒｅａｇｅｎｔｓ  ｆｏｒ  Ｏｒｇａｎｉｃ  Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ；Ｗｉｌｅｙ  ＆  Ｓｏｎｓ：Ｎｅｗ  Ｙｏｒｋ，Ｖｏｌｕｍｅｓ  １−２１；Ｒ．Ｃ．ＬａＲｏｃｋ，Ｃｏｍｐｒｅｈｅｎｓｉｖｅ  Ｏｒｇａｎｉｃ  Ｔｒａｎｓｆｏｒｍａｔｉｏｎｓ，２ｎｄ  ｅｄｉｔｉｏｎ  Ｗｉｌｅｙ−ＶＣＨ，Ｎｅｗ  Ｙｏｒｋ  １９９９；Ｃｏｍｐｒｅｈｅｎｓｉｖｅ  Ｏｒｇａｎｉｃ  Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ，Ｂ．Ｔｒｏｓｔ  ａｎｄ  Ｉ．Ｆｌｅｍｉｎｇ（Ｅｄｓ．）ｖｏｌ．１−９  Ｐｅｒｇａｍｏｎ，Ｏｘｆｏｒｄ，１９９１；Ｃｏｍｐｒｅｈｅｎｓｉｖｅ  Ｈｅｔｅｒｏｃｙｃｌｉｃ  Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ，Ａ．Ｒ．Ｋａｔｒｉｔｚｋｙ  ａｎｄ  Ｃ．Ｗ．Ｒｅｅｓ（Ｅｄｓ）Ｐｅｒｇａｍｏｎ，Ｏｘｆｏｒｄ  １９８４，ｖｏｌ．１−９；Ｃｏｍｐｒｅｈｅｎｓｉｖｅ  Ｈｅｔｅｒｏｃｙｃｌｉｃ  Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ  ＩＩ，Ａ．Ｒ．Ｋａｔｒｉｔｚｋｙ  ａｎｄ  Ｃ．Ｗ．Ｒｅｅｓ（Ｅｄｓ）Ｐｅｒｇａｍｏｎ，Ｏｘｆｏｒｄ  １９９６，ｖｏｌ．１−１１；及びＯｒｇａｎｉｃ  Ｒｅａｃｔｉｏｎｓ，Ｗｉｌｅｙ  ＆  Ｓｏｎｓ：Ｎｅｗ  Ｙｏｒｋ，１９９１，Ｖｏｌｕｍｅｓ  １−４０のような参考文献中に記載されている方法によって当業者にとって既知の方法によって調製されるかのいずれかである。以下の合成反応スキームは、単に、それによって本発明の化合物を合成することができる幾つかの方法の例示であり、そしてこれらの合成反応スキームに対する各種の改変を行うことができ、そして本出願に含有される開示を参照して当業者に示唆されるものである。
【００８６】
合成反応スキームの出発物質及び中間体は、所望する場合、制約されるものではないが、濾過、蒸留、結晶化、クロマトグラフィー、等を含む慣用的な方法を使用して単離し、そして精製することができる。このような物質は、物理定数及びスペクトルデータを含む慣用的な手段を使用して特徴づけすることができる。
【００８７】
反対に規定されない限り、本明細書中に記載される反応は、好ましくは常圧の不活性雰囲気下で、約−７８℃ないし約１５０℃、更に好ましくは約０℃ないし約１２５℃の範囲で、そして最も好ましくは、そして好都合には概略室内（又は周囲）温度、例えば約２０℃の反応温度で行われる。
【００８８】
以下のスキーム中の幾つかの化合物は、一般化された置換基を伴って示される；然しながら、当業者は、本発明で企図される各種の化合物を得るために、Ｒ基の性質を変化することができることを直ちに認識するものである。更に、反応条件は例示的であり、そして別の条件は公知である。以下の実施例中の反応の順序は、特許請求の範囲に記載される本発明の範囲を制約することを意味していない。
【００８９】
本発明の化合物は、４−アジド−ウラシル（ＣＡＳＲＮ  １３９４４２−０１−６）又は保護されたその誘導体、例えば、２’，３’−アセトニド（ＣＡＳＲＮ  ６９０２７１−２７−３）のアシル化によって調製することができる。４’ＡＵを、酸塩化物又は酸無水物のような活性化されたカルボン酸誘導体で処理することにより、トリアシル誘導体を得る。対応するアセトニドを処理することにより、５’−アシル誘導体を得て、これはその後脱保護される。
【００９０】
用語“保護基”は、本明細書中で使用される場合、（ａ）分子中の反応性基と効率よく結合し；（ｂ）好ましくない化学反応中に反応性基が沈殿することを防止し；そして（ｃ）反応性基の保護が必要でなくなった後、容易に除去することができる化学基を指す。保護基は、これがもう一つの反応に干渉するために、官能基の特徴的化学反応を一時的に遮蔽するために合成中に使用される。保護基を導入し、そして除去するための試薬及びプロトコルは、公知であり、そして多くのテキスト中で総説されている（例えば、Ｔ．Ｗ．Ｇｒｅｅｎｅ  ａｎｄ  Ｐ．Ｇ．Ｍ．Ｗｕｔｓ，Ｐｒｏｔｅｃｔｉｖｅ  Ｇｒｏｕｐｓ  ｉｎ  Ｏｒｇａｎｉｃ  Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ，３ｒｄ  ｅｄｉｔｉｏｎ，Ｊｏｈｎ  Ｗｉｌｅｙ  ＆  Ｓｏｎｓ，Ｎｅｗ  Ｙｏｒｋ，１９９９，及びＨａｒｒｉｓｏｎ  ａｎｄ  Ｈａｒｒｉｓｏｎ  ｅｔ  ａｌ．，Ｃｏｍｐｅｎｄｉｕｍ  ｏｆ  Ｓｙｎｔｈｅｔｉｃ  Ｏｒｇａｎｉｃ  Ｍｅｔｈｏｄｓ，Ｖｏｌｓ．１−８  Ｊｏｈｎ  Ｗｉｌｅｙ  ａｎｄ  Ｓｏｎｓ，１９７１−１９９６）。当業者は、プロトコルが時々特定の分子に対して最適化されなければならないことを認識するものであり、そしてこのような最適化は、十分に当業者の能力による。
【００９１】
２’，３’−ジアシル−４’−ＡＵ誘導体は、酵素的方法によって調製された。５’−アシル−４’−ＡＵ誘導体は、４’−ＡＵの２’，３’−アセトニドのアセチル化（実施例３）によって、又は４’−ＡＵの選択的な酵素触媒のアシル化によって調製された。
【００９２】
投与量及び投与
本発明の化合物は、幅広い種類の経口投与剤形及び担体中に処方することができる。経口投与は、錠剤、被覆錠剤、糖衣錠、硬質及び軟質ゼラチンカプセル、溶液、乳液、シロップ、又は懸濁液の形態であることができる。本発明の化合物は、投与の他の経路中で、連続的（静脈内点滴）局所  非経口、筋肉内、静脈内、皮下、経皮（浸透向上剤を含むことができる）、頬側、鼻腔、吸入及び座薬投与を含む投与の他の経路によって投与された場合に効果的である。投与の好ましい様式は、一般的に、苦痛の程度及び活性成分に対する患者の反応によって調節することができる、好都合な毎日の投与計画を使用する経口である。
【００９３】
本発明の化合物又は複数の化合物、並びにその医薬的に使用可能な塩は、一つ又はそれより多い慣用的な賦形剤、担体、又は希釈剤と一緒に、医薬組成物及び単位投与量の形態に入れることができる。医薬組成物及び単位剤形は、慣用的な成分を、慣用的な比率で、更なる活性化合物或いは成分を伴って又は伴わずに含んでなることができ、そして単位剤形は、使用される意図する日量の範囲と釣合った、いずれもの適した有効な量の活性成分を含有することができる。医薬組成物は、錠剤又は充填されたカプセルのような固体、半固体、粉末、継続放出製剤、或いは溶液、懸濁液、乳液、エリキシル、又は経口使用のための充填されたカプセルのような液体；或いは直腸又は膣投与のための座薬の形態；或いは非経口使用のための滅菌注射用溶液の形態として使用することができる。典型的な製剤は、約５％ないし約９５％の活性化合物又は複数の化合物を含有するものである（重量／重量）。用語“製剤”又は“剤形”は、活性化合物の固体及び液体の製剤の両方を含むことを意図し、そして当業者は、活性成分が、標的の器官又は組織、並びに所望の投与量及び薬物動態学的パラメーターによって、異なった製剤中に存在することができることを認識するものである。
【００９４】
用語“賦形剤”は、本明細書中で使用される場合、一般的に安全な、非毒性の、そして生物学的にも他の点でも好ましい、医薬組成物の調製において有用である化合物を指し、そして獣医学での使用、並びにヒトの医薬的使用のために受容可能な賦形剤を含む。本発明の化合物は、単独で投与することができるが、しかし一般的には、意図する投与の経路及び標準的な医薬的習慣に関して選択される、一つ又はそれより多い適した医薬的賦形剤、希釈剤又は担体との混合物で投与されるものである。
【００９５】
“医薬的に受容可能な”は、これが、一般的に安全な、非毒性の、そして生物学的にも又は他の点でも好ましい医薬組成物の調製において有用であることを意味し、そしてヒトの医薬的使用のために受容可能なものを含む。
【００９６】
活性成分の“医薬的に受容可能な塩”の形態は、更に最初に、非塩の形態において非存在であった活性成分の好ましい薬物動態学的特性を与えることができ、そして身体中のその治療活性に関する活性成分の薬物動力学に、積極的に影響することさえできる。語句、化合物の“医薬的に受容可能な塩”は、医薬的に受容可能であり、そして親化合物の所望の薬理学的活性を保有する塩を意味する。このような塩は：（１）塩酸、臭化水素酸、硫酸、硝酸、リン酸、等のような無機酸と形成される；又は酢酸、プロピオン酸、ヘキサン酸、シクロペンタンプロピオン酸、グリコール酸、ピルビン酸、乳酸、マロン酸、コハク酸、リンゴ酸、マレイン酸、フマル酸、酒石酸、クエン酸、安息香酸、３−（４−ヒドロキシベンゾイル）安息香酸、ケイヒ酸、マンデリン酸、メタンスルホン酸、エタンスルホン酸、１，２−エタン−ジスルホン酸、２−ヒドロキシエタンスルホン酸、ベンゼンスルホン酸、４−クロロベンゼンスルホン酸、２−ナフタレンスルホン酸、４−トルエンスルホン酸、カンフルスルホン酸、４−メチルビシクロ［２．２．２］−オクタ−２−エン−１−カルボン酸、グルコヘプトン酸、３−フェニルプロピオン酸、トリメチル酢酸、ターシャリーブチル酢酸、ラウリル硫酸、グルコン酸、グルタミン酸、ヒドロキシナフトエ酸、サリチル酸、ステアリン酸、ムコン酸、等のような有機酸と形成される酸付加塩；或いは（２）親化合物中に存在する酸性プロトンが、金属イオン、例えばアルカリ金属イオン、アルカリ土類イオン、又はアルミニウムイオンによって置換されるか；或いはエタノールアミン、ジエタノールアミン、トリエタノールアミン、トロメタミン、Ｎ−メチルグルカミン、等のような有機塩基と配位されるかのいずれかの場合に形成される塩を含む。
【００９７】
固体の形態の製剤は、散剤、錠剤、丸薬、カプセル、カシェー、座薬、及び分散性顆粒剤を含む。固体の担体は、更に希釈剤、芳香剤、安定剤、潤滑剤、懸濁剤、結合剤、保存剤、錠剤崩壊剤、又はカプセル化物質としても作用することができる一つ又はそれより多い物質であることができる。散剤において、担体は、一般的に微細に分割された個体であり、これは、微細に分割された活性成分との混合物である。錠剤において、活性成分は、一般的に必要な結合能力を有する担体と適した比率で混合され、そして所望の形状及び大きさに圧縮される。適した担体は、制約されるものではないが、炭酸マグネシウム、ステアリン酸マグネシウム、タルク、糖、ラクトース、ペクチン、デキストリン、デンプン、ゼラチン、トラガカントゴム、メチルセルロース、カルボキシメチルセルロースナトリウム、低融点ワックス、ココアバター、等を含む。固体の形態の製剤は、活性成分に加えて、着色剤、芳香剤、安定剤、緩衝剤、人工及び天然の甘味剤、分散剤、増粘剤、可溶化剤、等を含有することができる。
【００９８】
更に、経口投与のために適した液体の製剤は、乳液、シロップ、エリキシル、水溶液、水性懸濁液を含む液体製剤を含む。これらは、使用の短時間前に液体の形態の製剤に転換されることを意図した固体の形態の製剤を含む。乳液は、溶液中で、例えば、プロピレングリコール水溶液中で調製することができ、或いはレシチン、モノオレイン酸ソルビタン、又はアラビアゴムのような乳化剤を含有することができる。水溶液は、活性成分を水中に溶解し、そして適した着色剤、芳香剤、安定剤、及び増粘剤を加えることによって調製することができる。水性懸濁液は、微細に分割された活性成分を、天然又は合成ゴム、樹脂、メチルセルロース、カルボキシメチルセルロースナトリウムのような粘性物質、及び他の公知の懸濁剤と共に水中に分散することによって調製することができる。
【００９９】
本発明の化合物は、非経口投与（例えば、注射、例えばボーラス注射又は連続注入によって）のために処方することができ、そしてアンプル、充填済みシリンジ中の単位剤形で、小容量注入又は多数回投与容器中で保存剤を加えて与えることができる。組成物は、油性又は水性ベヒクル中の懸濁液、溶液、或いは乳液、例えばポリエチレングリコール水溶液中の溶液のような形態をとることができる。油性或いは非水性担体、希釈剤、溶媒又はベヒクルの例は、プロピレングリコール、ポリエチレングリコール、植物油（例えば、オリーブ油）、及び注射用有機エステル（例えば、オレイン酸エチル）を含み、そして保存剤、湿潤剤、乳化又は懸濁剤、安定剤及び／又は分散剤のような処方剤を含有することができる。別の方法として、活性成分は、滅菌固体の無菌的単離によって、又は適したベヒクル、例えば滅菌のパイロジェンフリーの水による使用前の構成のために、溶液から凍結乾燥によって得られる粉末の形態であることができる。
【０１００】
本発明の化合物は、軟膏、クリーム又はローションとして、或いは経皮貼布として表皮への局所投与のために処方することができる。軟膏及びクリームは、例えば、水性又は油性基剤と共に、適した増粘剤及び／又はゲル化剤の添加を伴って処方することができる。ローションは、水性又は油性基剤と共に処方することができ、そして一般的に更に一つ又はそれより多い乳化剤、安定剤、分散剤、懸濁剤、増粘剤、又は着色剤を含有するものである。口内の局所投与のために適した製剤は、芳香性基剤、通常スクロース及びアラビアゴム又はトラガカントゴム中に活性剤をを含んでなるロゼンジ；活性成分をゼラチン及びグリセリン又はスクロース及びアラビアゴムのような不活性基剤中に含んでなる芳香錠；並びに活性成分を適した液体担体中に含んでなる口内洗浄剤を含む。
【０１０１】
本発明の化合物は、座薬としての投与のために処方することができる。脂肪酸グリセリド又はココアバターの混合物のような低融点ワックスを、まず溶解し、そして活性成分を、均一に、例えば撹拌によって分散する。次いで溶融した均一の混合物を好都合な大きさの金型に注ぎ、冷却させ、そして固化させる。
【０１０２】
本発明の化合物は、膣投与のために処方することができる。活性成分に加えて、適当であると当技術において知られたような担体を含有するペッサリー、タンポン、クリーム、ゲル、ペースト、フォーム又は噴霧剤。本発明の化合物は、鼻腔投与のために処方することができる。溶液又は懸濁液は、慣用的な手段、例えば、スポイト、ピペット又は噴霧によって鼻腔の空洞に直接適用される。製剤は、一回又は多数回投与形態で提供される。スポイト又はピペットによる後者の場合、これは、患者が適当な、所定の体積の溶液又は懸濁液を投与することによって達成することができる。噴霧剤の場合、これは、例えば計量霧化噴霧ポンプによって達成することができる。
【０１０３】
本発明の化合物は、特に呼吸器管へのエアゾール投与のために処方することができ、そして鼻腔内投与を含む。化合物は、一般的に小さい粒子、例えば、ほぼ五（５）ミクロン又はそれより小さい程度の大きさを有するものである。このような粒子の大きさは、当技術において既知の手段、例えば微粒子化によって得ることができる。活性成分は、クロロフルオロカーボン（ＣＦＣ）、例えば、ジクロロジフルオロメタン、トリクロロフルオロメタン、又はジクロロテトラフルオロエタン、或いは二酸化炭素又は他の適したガスのような適した噴霧剤と共に加圧式包装中で提供される。エアゾールは、好都合には更にレシチンのような界面活性剤を含有することができる。薬物の投与量は、計量弁によって制御することができる。別の方法として、活性成分は、乾燥粉末、例えばラクトース、デンプン、ヒドロキシプロピルメチルセルロースのようなデンプン誘導体、及びポリビニルピロリジン（ＰＶＰ）のような適した粉末基剤中の化合物の粉末混合物の形態で提供することができる。粉末の担体は、鼻腔空洞でゲルを形成するものである。粉末の組成物は、それから粉末を吸入器によって投与することができる単位剤形、例えばゼラチン又はブリスターパックの、例えばカプセル又はカートリッジ中で与えることができる。
【０１０４】
所望する場合、製剤は、活性成分の持続性又は制御放出投与のために適応された腸溶コーティングを伴って調製することができる。例えば、本発明の化合物は、経皮又は皮下薬物供給デバイス中に処方することができる。これらの供給系は、化合物の持続性放出が必要な場合、及び患者の投与計画の遵守が重要である場合に好都合である。経皮供給系中の化合物は、しばしば皮膚付着型支持体に接着される。興味のある化合物は、更に浸透向上剤、例えば、Ａｚｏｎｅ（１−ドデシルアザ−シクロヘプタン−２−オン）と組合せることができる。持続性放出供給系は、皮下層に手術又は注射によって皮下的に挿入される。皮下植込みは、化合物を脂質可溶性膜、例えばシリコンゴム、又は生分解性ポリマー、例えばポリ乳酸中にカプセル化される。
【０１０５】
医薬的な担体、希釈剤及び賦形剤を伴う適した製剤は、Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ：Ｔｈｅ  Ｓｃｉｅｎｃｅ  ａｎｄ  Ｐｒａｃｔｉｃｅ  ｏｆ  Ｐｈａｒｍａｃｙ  １９９５，ｅｄｉｔｅｄ  ｂｙ  Ｅ．Ｗ．Ｍａｒｔｉｎ，Ｍａｃｋ  Ｐｕｂｌｉｓｈｉｎｇ  Ｃｏｍｐａｎｙ，１９ｔｈ  ｅｄｉｔｉｏｎ，Ｅａｓｔｏｎ，Ｐｅｎｎｓｙｌｖａｎｉａ中に記載されている。当業者は、本明細書の教示内の製剤を、特定の投与の経路のための多くの製剤を提供するために、本発明の組成物を不安定にするか、又はその治療活性を損なうことなく改変することができる。
【０１０６】
例えば、本発明の化合物の、これを水又は他のベヒクル中で更に可溶性にするための改変は、小さな改変（塩の形成、エステル化、等）によって容易に達成することができ、これは、十分に当技術の通常の技術の範囲内である。患者の最大の有益な効果に対して本発明の化合物の薬物動態を管理するために、特定の化合物の投与の経路及び投与計画を改変することも更に十分に当技術の通常の技術の範囲内である。
【０１０７】
用語“治療的に有効な量”は、本明細書中で使用される場合、個体の疾病の症状を軽減するために必要な量を意味する。投与量は、それぞれの特定の場合の個々の要求に対して調節されるものである。投与量は、治療される疾病の重篤度、患者の年齢及び一般的健康状態、患者が治療されている他の医薬、投与の経路及び形態、並びに関係する医師の優先度及び経験のような多くの因子によって広い制約内で変更することができる。経口投与のために、一日当たり約０．０１ないし約１０００ｍｇ／ｋｇ体重間の日量が、単独療法及び／又は組合せ療法において適当である筈である。好ましい日量は、一日当たり、約０．１ないし約５００ｍｇ／ｋｇ体重、更に好ましくは０．１ないし約１００ｍｇ／ｋｇ体重、そして最も好ましくは１．０ないし約１０ｍｇ／ｋｇ体重である。従って、７０ｋｇのヒトに対する投与のために、投与量範囲は、一日当たり、約７ｍｇないし０．７ｇであるものである。日量は、一回投与、又は分割投与、典型的には一日当たり１ないし５回投与として投与することができる。一般的に、治療は、化合物の最適投与量より少ない、少ない投与量で開始される。その後、投与量は、個々の患者のための最適効果に達するまで、少量の増分によって増加される。本明細書中に記載される疾病を治療する当業者は、過度の実験を伴わず、そして個人の知識、本出願の実施例及び開示を信頼して、与えられた疾病及び患者のための本発明の化合物の治療的に有効な量を確認することが可能であるものである。
【０１０８】
本発明の態様において、活性化合物又は塩は、リバビリン、ヌクレオシドＨＣＶポリメラーゼ阻害剤、もう一つのＨＣＶ非ヌクレオシドポリメラーゼ阻害剤又はＨＣＶプロテアーゼ阻害剤のようなもう一つの抗ウイルス剤と組合せて投与することができる。活性化合物或いはその誘導体又は塩が、もう一つの抗ウイルス剤と組合せて投与される場合、活性は、親化合物を超えて増加することができる。治療が組合せ療法である場合、このような投与は、ヌクレオシド誘導体のそれに対して同時又は連続であることができる。従って“同時投与”は、本明細書中で使用される場合、同じ時間又は異なった時間における薬剤の投与を含む。二つ又はそれより多い薬剤の同時の投与は、二つ又はそれより多い活性成分を含有する単一の製剤によって、或いは一つの活性成分を持つ二つ又はそれより多い剤形の実質的に同時の投与によって達成することができる。
【０１０９】
本明細書中の治療に対する言及が、予防、並びに既往症状の治療に拡大されることは理解されるものである。更に、用語ＨＣＶ感染の“治療”は、本明細書中で使用される場合、更にＨＣＶ感染に伴う、若しくはそれによって仲介される疾病又は症状、或いはその臨床症状の治療或いは予防を含む。
【０１１０】
用語“治療的に有効な量”は、本明細書中で使用される場合、個体の疾病の症状を軽減するために必要な量を意味する。投与量は、それぞれの特定の場合の個々の要求に対して調節されるものである。投与量は、治療される疾病の重篤度、患者の年齢及び一般的健康状態、患者が治療されている他の医薬、投与の経路及び形態並びに関係する医師の優先度及び経験のような多くの因子によって広い制約内で変更することができる。経口投与のために、一日当たり約０．０１ないし約１０００ｍｇ／ｋｇ体重間の日量が、単独療法及び／又は組合せ療法において適当である筈である。好ましい日量は、一日当たり、約０．１ないし約５００ｍｇ／ｋｇ体重、更に好ましくは０．１ないし約１００ｍｇ／ｋｇ体重、そして最も好ましくは１．０ないし約１０ｍｇ／ｋｇ体重である。従って、７０ｋｇのヒトに対する投与のために、投与量範囲は、一日当たり、約７ｍｇないし０．７ｇであるものである。日量は、一回投与、又は分割投与で、典型的には一日当たり１ないし５回投与として投与することができる。一般的に、治療は、化合物の最適投与量より少ない、少ない投与量で開始される。その後、投与量は、個々の患者のための最適効果に達するまで、少量の増分によって増加される。本明細書中に記載される疾病を治療する当業者は、過度の実験を伴わず、そして個人の知識、本出願の実施例及び開示を信頼して、与えられた疾病及び患者のための本発明の化合物の治療的に有効な量を確認することが可能であるものである。
【０１１１】
本発明の化合物、及び所望により一つ又はそれより多い更なる抗ウイルス剤の治療的に有効な量は、ウイルス負荷を減少するか、又は治療に対する持続性ウイルス陰性化を達成するために有効な量である。持続性陰性化に対する有用な指標は、ウイルス負荷に加えて、制約されるものではないが、肝臓の線維症、血清トランスアミナーゼレベルの上昇及び肝臓の壊死性炎症性活性を含む。例示であることを意図し、そして制約されることを意図したものではないマーカーの一つの普通の例は、標準的な臨床アッセイによって測定される血清アラニントランスアミナーゼ（ＡＬＴ）である。本発明の幾つかの態様において、有効な治療計画は、ＡＬＴレベルを、約４５ＩＵ／ｍＬ血清より少なく減少するものである。
【０１１２】
本発明の化合物の、例えば、これを水又は他のベヒクル中で更に可溶性にするための改変は、小さい改変（塩の形成、エステル化、等）によって容易に達成することができ、これは、十分に当技術の通常の技術内である。患者の最大の有益な効果に対する本発明の化合物の薬物動態を管理するために、特定の化合物の投与の経路及び投与計画を改変することも更に当技術の通常の技術内である。
【０１１３】
以下の実施例は、本発明の範囲内の化合物の調製及び生物学的評価を例示する。これらの実施例及びそれに続く調製は、当業者が本発明を更に明確に理解し、そして実施することが可能になるように提供される。これらは、本発明の範囲を制約すると考えられるべきでなく、しかし単に例示であり、そしてその代表である。
【実施例】
【０１１４】
実施例１
方法Ａ：２’，３’，５’−トリアシルヌクレオシド誘導体の調製
酢酸３，４−ジアセトキシ−５−（４−アミノ−２−オキソ−２Ｈ−ピリミジン−１−イル）−テトラヒドロ−フラン−２−イルメチルエステル（２２）の調製
【０１１５】
【化７】
2013518076.tif 000010
【０１１６】
４’−アジドウリジン（０．３３０ｇ、１．１５ｍｍｏｌ）、ピリジン（２ｍＬ）及び無水酢酸（２ｍＬ）を含有する撹拌された溶液に、ＤＭＡＰ（０．０１０ｇ、０．０８ｍｍｏｌ）を加えた。１２時間後、反応混合物を減圧下で乾燥状態まで蒸発した。残渣をジクロロメタン中に溶解し、そして飽和炭酸水素ナトリウム水溶液で洗浄し、硫酸マグネシウムで乾燥し、そして乾燥状態まで蒸発して、０．４２ｇ（８８％）の２’，３’，５’−トリ−アセトキシ−４’−アジドウリジン（２２：Ｒ＝ＣＨ３、Ｉ−４）を得た。
【０１１７】
（２Ｒ，３Ｓ，４Ｒ，５Ｒ）−２−アジド−５−（２，４−ジオキソ−３，４−ジヒドロ−２Ｈ−ピリミジン−１−イル）−４−エトキシカルボニルオキシ−２−エトキシカルボニルオキシメチル−テトラヒドロ−フラン−３−イル−カルボン酸エステルエチルエステル（２２  Ｒ＝ＯＥｔ）は、無水酢酸をクロロギ酸エチルによって置換えることを除き、類似的に調製することができる。
【０１１８】
実施例２
方法Ｂ：５’−アシルヌクレオシド誘導体の調製
プロピオン酸（２Ｒ，３Ｓ，４Ｒ，５Ｒ）−２−アジド−５−（２，４−ジオキソ−３，４−ジヒドロ−２Ｈ−ピリミジン−１−イル）−３，４−ジヒドロキシ−テトラヒドロ−フラン−２−イルメチルエステル（Ｉ−６）
磁気撹拌子を備えた２５０ｍＬの丸底フラスコに、２０（５．９４ｇ）、プロピオン酸ビニル（１５ｍＬ）及びＴＨＦ（１５０ｍＬ）を入れた。Ｉｍｍｏｂｅａｄ  １５０上に不動化されたＣａｎｄｉｄａ  ａｎｔａｒｃｔｉｃａリパーゼＢ（０．７４ｇ、Ｓｉｇｍａ−Ａｌｄｒｉｃｈ、Ａｓｐｅｒｇｉｌｌｕｓ  ｏｒｙｚａｅから組換え、５８６５Ｕ／ｇ）を加え、そして反応物をアルゴン雰囲気下の６０℃で加熱した。２日後、更なるプロピオン酸ビニル（６ｍＬ）及び酵素（１．１１ｇ）を１０ｇの３Åシーブと共に加えた。更に一日後、反応物を濾過して、不動化された酵素を除去し、そして真空中で濃縮した。粗製の生成物をＳｉＯ２クロマトグラフィーによって、ＥｔＯＡｃ／ヘキサンの勾配（５０％から１００％へのＥｔＯＡｃ）で溶出して精製した。溶媒の除去及び高真空下下の乾燥後、白色の泡状物（４ｇ）を得た。この物質（３．２５ｇ）を、３／１のヘキサン／ＩＰＡ中に懸濁し、そして３時間室温で撹拌した。得られた結晶質の物質を濾過によって収集し、そして７５℃の真空オーブン中で乾燥して、３．１８ｇのＩ−６を得た：融点１４８−１５０℃。
【０１１９】
当業者は、５’−アシル誘導体を調製するためのもう一つの一般的な方法が、４’−Ｃ−アジド−２’，３’−Ｏ−（１−メチルエチリデン）−ウリジン（ＣＡＳＲＮ  ６９０２７１−２７−３）の、酸塩化物及び酸無水物によるアシル化、並びにその後のアルコール水溶液中のＨＣｌのような温和な酸性条件下の、イソプロピリデン保護基の除去を含んでなる（本明細書中に参考文献としてその全てが援用される、Ｊ．Ａ．Ｍａｒｔｉｎ  ｅｔ  ａｌ．，ＷＯ２００４／０４６１５９  ｐｕｂｌｉｓｈｅｄ  Ｊｕｎｅ  ３  ２００４）ことを認識するものである。
【０１２０】
実施例３
プロピオン酸（２Ｒ，３Ｓ，４Ｒ，５Ｒ）−２−アジド−５−（２，４−ジオキソ−３，４−ジヒドロ−２Ｈ−ピリミジン−１−イル）−３，４−ジヒドロキシ−テトラヒドロ−フラン−２−イルメチルエステル（Ｉ−６）−別法
【０１２１】
【化８】
2013518076.tif 000011
【０１２２】
気泡放出器、撹拌機、温度計及び氷冷浴を備えた三口丸底フラスコに、２４（１０ｇ、３０．７ｍｍｏｌ、当量：１．００、ＣＡＳＲＮ  １３９４４２−０１−６）、ＤＭＡＰ（３７６ｍｇ、３．０７ｍｍｏｌ、当量：０．１）、ＤＩＰＥＡ（７．９５ｇ、１０．７ｍＬ、６１．５ｍｍｏｌ、当量：２．０）、アセトニトリル（４７．２ｇ、６０．０ｍＬ、当量：−）を入れた。スラリーを０．５時間撹拌し、塩化プロピオニル（３．０５ｇ、２．８６ｍＬ、３２．３ｍｍｏｌ、当量：１．０５）を、０−１０℃で１０分かけて加えた。反応混合物は均質になり、そして室温まで温めた。反応混合物をＨ２Ｏ（３０ｍＬ）及びＥｔＯＡｃ（５０ｍＬ）間に分配し、そして有機相を２ＮのＨＣｌ（２×３０ｍＬ）、飽和ＮａＨＣＯ３水溶液（２０ｍＬ）、食塩水（１０ｍＬ）で洗浄し、乾燥し、濾過し、そして真空中で濃縮して、１５．２ｇの油状物得た。１５．２ｇ。このようにして得た生成物（５．３７ｇ）を、ＩＰＡ（２５ｍＬ）、６ＮのＨＣｌ水溶液（１２ｍＬ）及びヒドロキシルアミン塩酸塩（０．８ｇ）の溶液中に溶解した。反応混合物を室温で撹拌した。反応物を５時間撹拌し、Ｈ２Ｏ（３０ｍＬ）、ＤＣＭ（５０ｍＬ）間に分配した。有機層を飽和ＮａＨＣＯ３水溶液（３０ｍＬ）、水（１０ｍＬ）で連続して洗浄し、乾燥し  濾過し、そして真空中で濃縮した。残渣をヘプタン（３０ｍＬ）で摩砕して、１．２７ｇのＩ−６を泡状物として得た。
【０１２３】
実施例４
方法Ｃ：２’，３’−ジアシルヌクレオシド誘導体の調製
プロピオン酸（２Ｒ，３Ｒ，４Ｓ，５Ｒ）−５−アジド−２−（２，４−ジオキソ−３，４−ジヒドロ−２Ｈ−ピリミジン−１−イル）−５−ヒドロキシメチル−４−プロピオニルオキシ−テトラヒドロ−フラン−３−イルエステル（Ｉ−１）
プロピオン酸（２Ｒ，３Ｓ，４Ｒ，５Ｒ）−２−アジド−５−（２，４−ジオキソ−３，４−ジヒドロ−２Ｈ−ピリミジン−１−イル）−３，４−ビス−プロピオニルオキシ−テトラヒドロ−フラン−２−イルメチル（２８）を、無水酢酸を塩化プロピオニル又はプロピオン酸無水物で置換えたことを除き、実施例１に記載したように調製する。
【０１２４】
熱（約４０℃）ＭＴＢＥ（２０ｍＬ）中に溶解された２８（４．４２ｇ）の溶液に、リン酸緩衝液（２７ｍＬ、ｐＨ＝６．５）及び食塩水（０．５ｍＬ）を加えた。リポラーゼ（Ｌｉｐｏｌａｓｅ）酵素溶液（０．５ｍＬ）を加え、そして反応混合物を３０−３５℃で約３時間撹拌した。加水分解の速度がかなり遅いことを見出した。更なる酵素溶液（６ｍｌ）を加え、そして反応混合物を３０−３５℃で３日間撹拌して、約９５％の転換を達成した。反応混合物をＥｔＯＡｃ（３０ｍＬ）で抽出した。抽出中に乳濁液が形成し、これをメタノール（約１０ｍＬ）の添加によって溶解した。有機抽出物を食塩水及び水で洗浄し、そして次いで乾燥状態まで、５．７ｇの油状物（８９％の組成物収率、面積正規化ＨＰＬＣによって約９４％ジプロピオン酸塩）まで蒸発した。粘性の油状物を約５０℃の真空オーブン中で更に乾燥して、泡状物を得た。粗製の生成物を、ＳｉＯ２クロマトグラフィーによって、ＭｅＯＨ／ＤＣＭの勾配で溶出して更に精製して、Ｉ−１をワックス状の固体として得て、これは静置により結晶化した。
【０１２５】
実施例５
（Ｒ）−２−アミノ−３−メチル−酪酸（２Ｒ，３Ｓ，４Ｒ，５Ｒ）−２−アジド−５−（２，４−ジオキソ−３，４−ジヒドロ−２Ｈ−ピリミジン−１−イル）−３，４−ジヒドロキシ−テトラヒドロ−フラン−２−イルメチルエステル
工程１−  ２４（１．００ｇ、３．０７ｍｍｏｌ）、Ｂｏｃ−（Ｌ）−バリン（６．１４ｍｍｏｌ）及びＥＤＣＩ（６．１４ｍｍｏｌ）を含有するＤＭＦ（２０ｍＬ）中の撹拌された溶液に、ＤＭＡＰ（３．０７ｍｍｏｌ）を加える。得られた溶液を窒素の雰囲気下及び室温で撹拌する。１２時間後、反応混合物を減圧下で乾燥状態まで蒸発する。粗製の生成物を、ＳｉＯ２クロマトグラフィーによって、ＥｔＯＡｃ／ヘキサンの勾配で溶出して精製して、２４（Ｒ＝ＣＨ（ＮＨＢｏｃ）ＣＨＭｅ２）を得る。
【０１２６】
工程２−  Ｂｏｃ及びアセトニド保護基は、ＴＦＡ及びＤＣＭ或いはＨＣｌ及びジオキサン又はメタノールの溶液中で除去することができる。
実施例６
血漿薬物動態
薬物動態学的方法を、一回の経口の５ｍｇ／ｋｇの投与量のＩＩのプロドラッグの投与後の、４−アミノ−１−（（２Ｒ，３Ｒ，４Ｓ，５Ｒ）−５−アジド−３，４−ジヒドロキシ−５−ヒドロキシメチル−テトラヒドロ−フラン−２−イル）−１Ｈ−ピリミジン−２−オン（ＩＩ）の血漿レベルを決定するために使用した。製剤は、５ｍＬの適当なベヒクル中の０．０１７６ｍｍｏｌのプロドラッグを含有する溶液／懸濁液である。
【０１２７】
３匹の絶食していないオスのＣｙｎｏｍｏｌｇｕｓサル（６−９ｋｇ）に、伏在又は上腕カテーテルを取付けて、血液抜出しを容易にした。食物及び水への自由な接近は、研究中の全時間許可されるものである。研究の日に、投与前の血液試料（２−３ｍＬ）をそれぞれのサルから採取した。サルに、１ｍＬ／ｋｇの投与溶液を経口強制飼養によって投与した。投与後、次のそれぞれの時点（０．２５、０．５、１、３、５、７、１０、２４、３２、及び４８時間）で、概略０．５ｍＬの血液をリチウムヘパリン被覆管に採取するものである。血液を遠心して、血漿を得て、これを分析まで冷凍した。
【０１２８】
それぞれの血漿試料中のＩａ（Ｒ１−Ｒ４＝Ｈ）の濃度を、ＬＣ−ＭＳアッセイによって決定した。標準曲線を、白紙のサルの血漿で調製した。ＡＵＣは、時間に対する濃度のプロット下の面積の合計を表し、これは、時間の関数としての全身性循環中の薬物の濃度を説明する（Ｌ．Ｚ．Ｂｅｎｅｔ，Ｄ．Ｌ．Ｋｒｏｅｔｚ  ａｎｄ  Ｌ．Ｂ．Ｓｈｅｉｎｅｒ  Ｐｈａｒｍａｃｏｋｉｎｅｔｉｃｓ  ｉｎ  Ｇｏｏｄｍａｎ  ＆  Ｇｉｌｍａｎ’ｓ  Ｔｈｅ  Ｐｈａｒｍａｃｏｌｏｇｉｃａｌ  Ｂａｓｉｓ  ｏｆ  Ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃｓ，Ｊ．Ｇ．Ｈａｒｄｍａｎ  ＆  Ｌ．Ｅ．Ｌｉｍｂｉｒｄ  Ｅｄｓ．，９ｔｈ  Ｅｄｉｔｉｏｎ，ＭｃＧｒａｗ  Ｈｉｌｌ，Ｎｅｗ  Ｙｏｒｋ，ｐ  １７−２３）。Ｃｍａｘは、見いだされたピーク濃度である。
【０１２９】
【表２】
2013518076.tif 000012
【０１３０】
実施例７
ＨＣＶ  ＮＳ５Ｂ  ＲＮＡポリメラーゼ活性
ヌクレオシド一リン酸は、Ｍ．Ｙｏｓｈｉｋａｗａ  ｅｔ  ａｌ．，Ｔｅｔｒａｈｅｄｒｏｎ  Ｌｅｔｔ．１９６７  ５０：５０６５−５０６８によって記載された一般的方法によって調製することができる。ヌクレオシド三リン酸の調製のための方法は、更に総説されている（Ｋ．Ｂｕｒｇｅｓｓ  ａｎｄ  Ｄａｎ  Ｃｏｏｋ，Ｃｈｅｍ．Ｒｅｖ．２０００  １００：２０４７）。
【０１３１】
ＨＣＶポリメラーゼ（ＮＳ５Ｂ５７０ｎ−Ｃｏｎ１）の酵素活性を、放射線標識されたヌクレオチド一リン酸の、酸不溶性ＲＮＡ産物への組込みとして測定した。組込まれなかった放射線標識された基質を、濾過によって除去し、そして放射線標識されたＲＮＡ産物を含有する洗浄され、そして乾燥されたフィルタープレートに、シンチラント（ｓｃｉｎｔｉｌｌａｎｔ）を加えた。反応の終りに、ＮＳ５Ｂ５７０ｎ−Ｃｏｎ１によって産生されたＲＮＡ産物の量は、シンチラントによって放射された光の量に直接比例であった。
【０１３２】
酵素活性のアッセイに使用したＨＣＶポリメラーゼは、ＨＣＶ  Ｃｏｎ１、遺伝子型１ｂ（遺伝子銀行寄託番号ＡＪ２４２６５４）（ＮＳ５Ｂ５７０ｎ−Ｃｏｎ１）から誘導された、全長のＨＣＶポリメラーゼの２１アミノ酸のＣ末端欠損である。ＮＳ５Ｂ５７０ｎ−Ｃｏｎ１は、プラスミド発現構築物ｐＥＴ１７ｂのＴ７プロモーターに下流でサブクローニングされ、そしてタンパク質発現のためにＥ．ｃｏｌｉ系ＢＬ２１（ＤＥ３）ｐＬｙｓＳに形質転換された。１００μｇ／ｍＬのアムピシリンで補充されたＬＢ培地中の１０Ｌの培養物のための接種を３７℃で開始するために、単一のコロニーを使用した。６００ｎＭにおける培養物の光学密度が０．８になった時点で、タンパク質発現を、０．２５ｍＭのイソプロピル−β−チオガラクトピラノシド（ＩＰＴＧ）の添加によって誘発した。タンパク質発現の誘発は、３０℃で１６時間行われ、その後細胞を遠心によって回収した。ＮＳ５Ｂ５７０ｎ−Ｃｏｎ１を、その後のＮｉ−ＮＴＡのカラムクロマトグラフィー、ＳＰ−セファロースＨＰ及びＳｕｐｅｒｄｅｘ  ７５樹脂を含むスリーカラム精製プロトコルを使用して均一性まで精製した。
【０１３３】
ｃＩＲＥＳ  ＲＮＡテンプレート（０００４項を参照されたい）の存在中の酵素反応は、２０ｎＭのｃＩＲＥＳ  ＲＮＡ、２０ｎＭのＮＳ５Ｂ５７０ｎ−Ｃｏｎ１酵素、０．５μＣｉのトリチウム標識されたＵＴＰ（Ｐｅｒｋｉｎ  Ｅｌｍｅｒカタログ番号ＴＲＫ−４１２；比活性：３０ないし６０Ｃｉ／ｍｍｏｌ；）、それぞれ１μＭのＡＴＰ、ＣＴＰ、及びＧＴＰ、４０ｍＭのｐＨ８．０のＴｒｉｓ−ＨＣｌ、４０ｍＭのＮａＣｌ、４ｍＭのＤＴＴ（ジチオトレイトール）、４ｍＭのＭｇＣｌ２、５μｌのＤＭＳＯ中に希釈された一連の化合物、及び５０μｌの最終反応体積までのヌクレアーゼを含まない水を含んでいた。ポリＡ  ＲＮＡテンプレート（０００４項を参照されたい）の存在中の酵素反応は、２０ｎＭのポリＡ：オリゴ（ｒＵ）１６予備混合物（０００４項を参照されたい）、２０ｎＭのＮＳ５Ｂ５７０ｎ−Ｃｏｎ１酵素、１μＣｉのトリチウム標識されたＵＴＰ（Ｐｅｒｋｉｎ  Ｅｌｍｅｒカタログ番号ＴＲＫ−４１２；比活性：３０ないし６０Ｃｉ／ｍｍｏｌ）、４０ｍＭのｐＨ８．０のＴｒｉｓ−ＨＣｌ、４０ｍＭのＮａＣｌ、４ｍＭのＤＴＴ（ジチオトレイトール）、４ｍＭのＭｇＣｌ２、５μｌのＤＭＳＯ中に希釈された一連の化合物、及び５０μｌの最終反応体積までのヌクレアーゼを含まない水を含んでいた。反応混合物を９６ウェルのフィルタープレート（カタログ番号ＭＡＤＶＮ０Ｂ，Ｍｉｌｌｉｐｏｒｅ  Ｃｏ．）中に構築し、そして３０℃で２時間インキュベーとした。反応を１０（容量／容量）％の最終トリクロロ酢酸の添加によって停止し、そして４℃で４０分間インキュベートした。反応物を濾過し、反応物体積の８倍の１０（容量／容量）％のトリフルオロ酢酸、反応物体積の４倍の７０（容量／容量）％のエタノールで洗浄し、空気乾燥し、そして２５μｌのシンチラント（Ｍｉｃｒｏｓｃｉｎｔ  ２０，Ｐｅｒｋｉｎ−Ｅｌｍｅｒ）を、それぞれの反応ウェルに加えた。
【０１３４】
二つのＲＮＡテンプレートを、本明細書中に記載した化合物を分析するために使用した。ｃＩＲＥＳ  ＲＮＡテンプレートは、３７７個のヌクレオシドの長さであり、そしてコアタンパク質の部分的な相補的配列（３６個のヌクレオチド）、それに続く内部リボソーム進入部位の相補的配列の３４１個のヌクレオチドからなっていた。ポリＡ  ＲＮＡテンプレート（ＧＥ  Ａｍｅｒｓｈａｍカタログ番号２７−４１１０）は、３対１のモル比でオリゴ（ｒＵ）１６プライマーにプレアニーリングされた同種重合体のＲＮＡであった（プライマー−テンプレート）。
【０１３５】
シンチラントから放射される光の量は、Ｔｏｐｃｏｕｎｔ（登録商標）プレートリーダー（Ｐｅｒｋｉｎ−Ｅｌｍｅｒ，エネルギー範囲：低、効率モード：標準、計数時間：１分、背景雑音減算：無し、混信軽減：切断）で毎分当たり計数（ＣＰＭ）に転換された。
【０１３６】
データを、Ｅｘｃｅｌ（登録商標）（Ｍｉｃｒｏｓｏｆｔ（登録商標））及びＡｃｔｉｖｉｔｙＢａｓｅ（登録商標）（ｉｄｂｓ（登録商標））で解析した。酵素の非存在下の反応を背景信号の決定に使用し、これを酵素反応から差し引いた。正の対照の反応を化合物の非存在で行い、これから背景雑音補正した活性を、１００％ポリメラーゼ活性として設定した。全てのデータを、正の対照のパーセントとして表示した。ＲＮＡ合成の酵素で触媒された速度が５０％に減少される化合物濃度（ＩＣ５０）を、以下の等式（ｉ）：
【０１３７】
【化９】
2013518076.tif 000013
【０１３８】
に当てはめて計算し、式中“Ｙ”は、相対酵素活性（％）に対応し、“％Ｍｉｎ”は、飽和化合物濃度における残留相対的活性であり、“％Ｍａｘ”は、相対最大酵素活性であり、“Ｘ”は、化合物濃度に対応し、そして“Ｓ”は、Ｈｉｌｌ係数（又は傾斜）である。
【０１３９】
４’−ＡＵ三リン酸のＩＣ５０に対する実験値は、０．４６±０．０８８μＭであり、これは、２９±０．１３μＭである４’−ＡＣ−三リン酸と類似である。
実施例８
ヒト肝細胞、末梢血単核球細胞（ＰＢＭＣ）、及び骨髄細胞（ＢＭＣ）中の４ＡＵ−三リン酸の形成  初代ヒト肝細胞中のヌクレオシド類似体４ＡＵの取込み及びリン酸化の分析を、以前に刊行された（Ｍａ，Ｈ．ｅｔ  ａｌ．Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．２００７，２８２：２９８１２−２９８２０）ように行った。新鮮なヒト肝細胞をプレートに蒔き、そして異なった時間間隔で３Ｈで標識された４ＡＵと共にインキュベートした。細胞の回収の時点で、細胞培養培地を吸引し、そして細胞を冷リン酸緩衝生理食塩水で一回洗浄した。細胞を１ｍＬの予備冷却された１０ｍＭのＥＤＴＡを含有する６０（容量／容量）％のメタノール中に掻き出し、そしてメタノール中で−２０℃で２４時間抽出した。次いで抽出した試料を１０，０００×ｇで１５分間遠心して、細胞片を除去した。上清を新しい試験管に移し、そしてスピードバキューム中で室温で蒸発した。細胞抽出物の乾燥したペレットをＨ２Ｏ中に溶解した。ＨＰＬＣ分析の前に、細胞抽出物の試料に、標識されていない参照標準の４ＡＵ並びに４ＡＵ−一、二及び三リン酸誘導体を添加した。
【０１４０】
ヒト末梢血単核球細胞（ＰＢＭＣ）及び骨髄細胞（ＢＭＣ）中の４ＡＵの取込み並びにリン酸化を、３Ｈ−ＲＯ１０８０７１３を伴う、それぞれ２−４×１０５細胞／ｍｌ又は５−６×１０５細胞／ｍｌのＰＢＭＣ又はＢＭＣ細胞懸濁液の異なった時間の長さのインキュベーションにより行った。３Ｈ−ＲＯ１０８０７１３を含有する細胞培養培地を、２４時間毎に補充した。時点当たり２×１０６の生存細胞に相当する二重の試料を、実験の終りに回収し、５分間の遠心によってペレット化し、そして冷ＰＢＳで一回洗浄した。最終細胞ペレットをドライアイス上で瞬間冷凍し、そして抽出まで−８０℃で保存した。細胞ペレットの抽出は、初代肝細胞のためのもののように行った。
【０１４１】
４ＡＵのリン酸化誘導体を、放射線測定検出器（β−ＲＡＭ，ＩＮ／ＵＳ  Ｓｙｓｔｅｍｓ，Ｉｎｃ．）に接続されたＷｈａｔｍａｎ  Ｐａｒｔｉｓｉｌ  １０  ＳＡＸ（４．６×２５０ｍｍ）カラムを持つイオン交換ＨＰＬＣによって分離した。移動相の勾配を、９９％の緩衝液Ａ（Ｈ２Ｏ）及び１％の緩衝液Ｂ（０．５ＭのＫＨ２ＰＯ４＋０．８ＭのＫＣｌ）から１００％のＢに、４ないし１６分の間で直線的に変化させた。１００％のＢで１６分から２６分まで実行し、そして１００％のＡに１分で戻した。緩衝液Ａで３２分まで実行した。３２分までの実行中の流速は、１ｍｌ／分で一定であった。５：１のＵｌｔｉｍａ−ＦｌｏＴＭ  ＡＰ（ＰｅｒｋｉｎＥｌｍｅｒ）とカラム溶出物の比を使用した。
【０１４２】
試料中のＲＯ１０８０７１３誘導体を、ラジオクロマトグラム中の放射性代謝産物の保持時間の、試料中に添加された非放射性参照標準の保持時間との比較によって同定した。
図３は、４’−ＡＣより概略１０倍高い４’−ＡＵの効率の良いリン酸化をグラフ的に例示する。
【０１４３】
実施例９
主題の化合物の幾つかの経路による投与のための医薬組成物を、本実施例に記載するように調製した。
【０１４４】
経口投与のための組成物（Ａ）
【０１４５】
【表３】
2013518076.tif 000014
【０１４６】
成分を混合し、そしてそれぞれ約１００ｍｇを含有するカプセルに分配した；一個のカプセルは、概略全日量であるものであった。
経口投与のための組成物（Ｂ）
【０１４７】
【表４】
2013518076.tif 000015
【０１４８】
成分を混合し、そしてメタノールのような溶媒を使用して顆粒化した。次いで製剤を乾燥し、そして適当な造粒機で錠剤（約２０ｍｇの活性化合物を含有）に形成した。
経口投与のための組成物（Ｃ）
【０１４９】
【表５】
2013518076.tif 000016
【０１５０】
成分を混合して、経口投与のための懸濁液を形成した。
非経口製剤（Ｄ）
【０１５１】
【表６】
2013518076.tif 000017
【０１５２】
活性成分を注射用水の一部に溶解した。次いで十分な量の塩化ナトリウムを撹拌しながら加えて、溶液を等張にした。残りの注射用水で溶液を重量に合わせ、０．２ミクロンの濾過膜を通して濾過し、そして滅菌条件下で包装した。
【０１５３】
前述の記載、又は以下の特許請求の範囲中に開示される特徴であって、その具体的形態若しくは開示された機能を行うための手段、又は開示された結果を達成するための方法或いは過程の用語で表現されたものを、適宜に、別個で、又はこのような特徴の任意の組合せで、本発明をその多種多様な形態で現実化するために使用することができる。
【０１５４】
前述の発明は、明確さ及び理解の目的のために、例示及び実施例としてある程度詳細に記載されている。当業者にとって、変更及び改変を特許請求の範囲の範囲内で実施することができることは明白であるものである。従って、上記の記載が、例示を意図し、そして制限的ではないことは理解されるべきである。従って、本発明の範囲は、上記の記載に準拠することなく決定されるべきであり、しかし代わりに、以下の特許請求の範囲に準拠して、このような特許請求の範囲が権利を与える均等物の全ての範囲と共に、決定されるべきである。
【０１５５】
本明細書中で言及された特許、公開された出願、及び科学的文献は、当業者の知識を確立し、そしてその全てが、それぞれが、参考文献として援用されることが参考文献として具体的に、そして個々に示されるかのように、ある程度まで本明細書中に援用される。本明細書中に引用されたいずれもの参考文献、及び本明細書中の具体的な教示間のいずれもの不一致は、後者に好意的に解決されるべきである。同様に、用語及び語句の当技術において理解される定義、及び本明細書中で具体的に教示されるような用語又は語句の定義間のいずれもの不一致は、後者に好意的に解決されるべきである。
【図１】
2013518076.tif 000020
【図２−１】
2013518076.tif 000021
【図２−２】
2013518076.tif 000022
【図３】
2013518076.tif 000023
【図４】
2013518076.tif 000024
【手続補正書】
【提出日】平成24年9月6日(2012.9.6)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
以下の式Ｉ：
【化１】
2013518076.tif 000025
［式中：
Ｒ１及びＲ２は、（ｉ）独立に、それぞれの出現において、水素、Ｃ１−６アルキルカルボニル、Ｃ１−６アルコキシカルボニル、及びＣ１−６アミノアルキルカルボニルからなる群から選択されるか、又は（ｉｉ）Ｒ１及びＲ２分子の両方が一緒に選択されて、一緒にＣ（＝Ｏ）であり；
Ｒ３は、水素、Ｃ１−６アルキルカルボニル、Ｃ１−６アルコキシカルボニル又はＣ１−６アミノアルキルカルボニルであり、但し、Ｒ１、Ｒ２及びＲ３の少なくとも一つは、水素以外であることを条件とする］
の化合物であって、但し、（２Ｒ，３Ｒ，４Ｓ，５Ｒ）−４−アセトキシ−５−アセトキシメチル−５−アジド−２−（２，４−ジオキソ−３，４−ジヒドロ−２Ｈ−ピリミジン−１−イル）−テトラヒドロ−フラン−３−イル酢酸エステルではない、前記式Ｉの化合物、又は医薬的に受容可能なその塩。
【請求項２】
Ｒ１、Ｒ２及びＲ３が、Ｃ１−６アルキルカルボニルである、請求項１に記載の化合物。
【請求項３】
Ｒ１及びＲ２が、Ｃ１−６アルキルカルボニルであり、そしてＲ３が、水素である、請求項１に記載の化合物。
【請求項４】
Ｒ１及びＲ２が、水素であり、そしてＲ３が、Ｃ１−６アルキルカルボニル、又はＣ１−６アミノアルキルカルボニルである、請求項１に記載の化合物。
【請求項５】
プロピオン酸（２Ｒ，３Ｒ，４Ｓ，５Ｒ）−５−アジド−２−（２，４−ジオキソ−３，４−ジヒドロ−２Ｈ−ピリミジン−１−イル）−５−ヒドロキシメチル−４−プロピオニルオキシ−テトラヒドロ−フラン−３−イルエステル；
イソ酪酸（２Ｒ，３Ｒ，４Ｓ，５Ｒ）−５−アジド−２−（２，４−ジオキソ−３，４−ジヒドロ−２Ｈ−ピリミジン−１−イル）−４−イソブチリルオキシ−５−イソブチルルオキシメチル−テトラヒドロ−フラン−３−イルエステル；
プロピオン酸（２Ｒ，３Ｓ，４Ｒ，５Ｒ）−２−アジド−５−（２，４−ジオキソ−３，４−ジヒドロ−２Ｈ−ピリミジン−１−イル）−３，４−ビス−プロピオニルオキシ−テトラヒドロ−フラン−２−イルメチルエステル；
酢酸（２Ｒ，３Ｒ，４Ｓ，５Ｒ）−４−アセトキシ−５−アセトキシメチル−５−アジド−２−（２，４−ジオキソ−３，４−ジヒドロ−２Ｈ−ピリミジン−１−イル）−テトラヒドロ−フラン−３−イルエステル；
ペンタン酸（２Ｒ，３Ｓ，４Ｒ，５Ｒ）−２−アジド−５−（２，４−ジオキソ−３，４−ジヒドロ−２Ｈ−ピリミジン−１−イル）−３，４−ビス−ペンタノイルオキシ−テトラヒドロ−フラン−２−イルメチルエステル；及び、
プロピオン酸（２Ｒ，３Ｓ，４Ｒ，５Ｒ）−２−アジド−５−（２，４−ジオキソ−３，４−ジヒドロ−２Ｈ−ピリミジン−１−イル）−３，４−ジヒドロオキシ−テトラヒドロ−フラン−２−イルメチルエステル；
からなる群から選択される、請求項１に記載の化合物。
【請求項６】
治療的に有効な量の請求項１に記載の化合物により、それを必要とする患者を治療することを含んでなる、Ｃ型肝炎（ＨＣＶ）感染を治療するための方法。
【請求項７】
Ｒ１、Ｒ２及びＲ３が、Ｃ１−６アルキルカルボニルである、請求項６に記載の方法。
【請求項８】
Ｒ１及びＲ２が、Ｃ１−６アルキルカルボニルであり、そしてＲ３が、水素である、請求項６に記載の方法。
【請求項９】
Ｒ１及びＲ２が、水素であり、そしてＲ３が、Ｃ１−６アルキルカルボニル、又はＣ１−６アミノアルキルカルボニルである、請求項６に記載の方法。
【請求項１０】
更に少なくとも一つの免疫系調節剤及び／又は少なくとも一つのＨＣＶの複製を阻害する抗ウイルス剤を投与することを含んでなる、請求項７に記載の方法。
【請求項１１】
前記免疫系調節剤が、インターフェロン、インターロイキン、腫瘍壊死因子及びコロニー刺激因子からなる群から選択される、請求項１０に記載の方法。
【請求項１２】
前記免疫系調節剤が、インターフェロン又は化学的に誘導されたインターフェロンである、請求項１１に記載の方法。
【請求項１３】
更に少なくとも一つの他の抗ウイルス剤を投与することを含んでなる、請求項１０に記載の方法。
【請求項１４】
前記抗ウイルス剤が、ＨＣＶプロテアーゼ阻害剤、もう一つのヌクレオシドＨＣＶポリメラーゼ阻害剤、非ヌクレオシドＨＣＶポリメラーゼ阻害剤、ＨＣＶヘリカーゼ阻害剤、ＨＣＶプライマーゼ阻害剤及びＨＣＶ融合阻害剤からなる群から選択される、請求項１３に記載の方法。
【請求項１５】
ＨＣＶ感染の治療のための、Ｒ１、Ｒ２及びＲ３が、請求項１において定義したとおりである式Ｉの化合物の使用。
【請求項１６】
少なくとも一つの免疫系調節剤及び／又は少なくとも一つのＨＣＶの複製を阻害する抗ウイルス剤との組合せにおける、請求項１５に記載の使用。
【請求項１７】
ＨＣＶ感染の治療のための医薬の製造のための、Ｒ１、Ｒ２及びＲ３が、請求項１において定義したとおりである式Ｉの化合物の使用。
【請求項１８】
少なくとも一つの医薬的に受容可能な担体、希釈剤又は賦形剤と混合された、治療的に有効な量の請求項１に記載の化合物を含んでなる医薬組成物。
【国際調査報告】
2013518076.tif 000026
2013518076.tif 000027