(57)【要約】  本明細書において、式（Ｉ）で表される神経ペプチド−２受容体アゴニストならびにその薬学的に許容しうる塩、誘導体およびフラグメントが提供される。式中、置換基は、本明細書に開示されるとおりである。これらの化合物およびこれらを含む医薬組成物は、例えば、肥満および糖尿病などの疾患の処置に有用である。
2013507414.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
式（Ｉ）：
【化６６】
2013507414.tif 000074
[式中、
ＬまたはＬ’の一方は、ポリエチレングリコール（ＰＥＧ）部分であり、もう一方は、脂質部分であるか、または存在せず；
Ｘは、（４−オキソ−６−ピペラジン−１−イル−４Ｈ−キナゾリン−３−イル）−酢酸（Ｐｑａ）であり；
Ｙは、アシル部分であるか、または存在せず；
Ｚ、Ｚ’は、スペーサー部分であるか、または存在せず；
Ｒ１は、Ｉｌｅ、Ａｌａ、（Ｄ）ＡｌｌｏＩｌｅ、（Ｄ）ＩｌｅまたはＮ−メチルＩｌｅであり；
Ｒ２は、Ｌｙｓ、Ａｌａ、（Ｄ）Ｌｙｓ、Ｎ−メチルｌｙｓ、Ｎｌｅまたは（Ｌｙｓ−Ｇｌｙ）であり；
Ｒ３は、Ａｒｇ、Ｃｉｔ、Ａｌａ、（Ｄ）Ａｒｇ、Ｎ−メチルＡｒｇまたはＰｈｅであり；
Ｒ４は、Ｈｉｓ、Ａｌａ、（Ｄ）ＨｉｓまたはＮ−メチルＨｉｓであり；
Ｒ５は、Ｔｙｒ、Ａｌａ、（Ｄ）Ｔｙｒ、Ｎ−メチルＴｙｒまたはＴｒｐであり；
Ｒ６は、Ｌｅｕ、Ｈｉｓ、Ａｌａ、（Ｄ）ＬｅｕまたはＮ−メチルＬｅｕであり；
Ｒ７は、Ａｓｎ、Ａｌａまたは（Ｄ）Ａｓｎであり；
Ｒ８は、ＬｅｕまたはＴｒｐであり；
Ｒ９は、Ｖａｌ、Ａｌａ、（Ｄ）ＶａｌまたはＮ−メチルＶａｌであり；
Ｒ１０は、Ｔｈｒ、ＡｌａまたはＮ−メチルＴｈｒであり；
Ｒ１１は、Ａｒｇ、（Ｄ）ＡｒｇまたはＮ−メチルＡｒｇであり；
Ｒ１２は、ＧｌｎまたはＡｌａであり；
Ｒ１３は、Ａｒｇ、（Ｄ）ＡｒｇまたはＮ−メチルＡｒｇであり；そして
Ｒ１４は、Ｔｙｒ、（Ｄ）Ｔｙｒ、Ｎ−メチルＴｙｒ、ＰｈｅまたはＴｒｐである]
で表される神経ペプチド−２受容体アゴニストまたはその薬学的に許容しうる塩。
【請求項２】
前記脂質部分が、カプロイル、エイコサノイル、ラウロイル、ミリストイル、パルミトイル、１６−ブロモヘキサデカノイル、２−ヘキシルデカノイルまたは１５−カルボキシ−ペンタデカノイルである、請求項１に記載の神経ペプチド−２受容体アゴニスト。
【請求項３】
前記ポリエチレングリコール部分が、式：
【化６７】
2013507414.tif 000075
[式中、ｎは、１〜３０であり、ｘは、１または２である]
である、請求項１または２に記載の神経ペプチド−２受容体アゴニスト。
【請求項４】
ｎが、１〜２４であり、ｘが、１または２である、請求項３に記載の神経ペプチド−２受容体アゴニスト。
【請求項５】
前記ポリエチレングリコール部分が、ＣＨ３−（ＯＣＨ２ＣＨ２）２−Ｏ−ＣＨ２−ＣＯ−、ＣＨ３−（ＯＣＨ２ＣＨ２）５−Ｏ−ＣＨ２−ＣＯ−、ＣＨ３−（ＯＣＨ２ＣＨ２）７−Ｏ−（ＣＨ２）２−ＣＯ−、ＣＨ３−（ＯＣＨ２ＣＨ２）１１−Ｏ−（ＣＨ２）２−ＣＯ−ＣＨ３−（ＯＣＨ２ＣＨ２）１５−Ｏ−（ＣＨ２）２−ＣＯ−またはＣＨ３−（ＯＣＨ２ＣＨ２）２３−Ｏ−（ＣＨ２）２−ＣＯ−である、請求項１〜４のいずれか一項に記載の神経ペプチド−２受容体アゴニスト。
【請求項６】
前記スペーサー部分が、Ａｈｘ、Ａｈｘ−Ａｈｘ、Ｇｌｕ−Ｇｌｕ、γＧｌｕ−γＧｌｕ、５ＡＯＰＳまたはＣｙｓ（ＳＯ３Ｈ）−Ｃｙｓ（ＳＯ３Ｈ）である、請求項１〜５のいずれか一項に記載の神経ペプチド−２受容体アゴニスト。
【請求項７】
前記アシル部分がアセチルである、請求項１〜６のいずれか一項に記載の神経ペプチド−２受容体アゴニスト。
【請求項８】
Ｚが存在しない、請求項１〜７のいずれか一項に記載の神経ペプチド−２受容体アゴニスト。
【請求項９】
Ｚ’が存在しない、請求項１〜８のいずれか一項に記載の神経ペプチド−２受容体アゴニスト。
【請求項１０】
式（ＩＩ）：
【化６８】
2013507414.tif 000076
[式中、
ＬまたはＬ’の一方は、脂質部分であり、もう一方は、ポリエチレングリコール（ＰＥＧ）部分であり；
Ｘは、（４−オキソ−６−ピペラジン−１−イル−４Ｈ−キナゾリン−３−イル）−酢酸（Ｐｑａ）であり；
Ｙは、アシル部分であるか、または存在せず；そして
Ｚ、Ｚ’は、Ａｈｘ、Ａｈｘ−Ａｈｘ、Ｇｌｕ−Ｇｌｕ、γＧｌｕ−γＧｌｕ、５ＡＯＰＳまたはＣｙｓ（ＳＯ３Ｈ）−Ｃｙｓ（ＳＯ３Ｈ）である]
を有する、請求項１に記載の神経ペプチド−２受容体アゴニスト。
【請求項１１】
前記脂質部分が、カプロイル、エイコサノイル、ラウロイル、ミリストイル、パルミトイル、１６−ブロモヘキサデカノイル、２−ヘキシルデカノイルまたは１５−カルボキシ−ペンタデカノイルである、請求項１０に記載の神経ペプチド−２受容体アゴニスト。
【請求項１２】
前記ポリエチレングリコール部分が、式：
【化６９】
2013507414.tif 000077
[式中、ｎは、１〜３０であり、ｘは、１または２である]
である、請求項１０または１１に記載の神経ペプチド−２受容体アゴニスト。
【請求項１３】
ｎが、１〜２４であり、ｘが、１または２である、請求項１０〜１３のいずれか一項に記載の神経ペプチド−２受容体アゴニスト。
【請求項１４】
前記ポリエチレングリコール部分が、ＣＨ３−（ＯＣＨ２ＣＨ２）２−Ｏ−ＣＨ２−ＣＯ−、ＣＨ３−（ＯＣＨ２ＣＨ２）５−Ｏ−ＣＨ２−ＣＯ−、ＣＨ３−（ＯＣＨ２ＣＨ２）７−Ｏ−（ＣＨ２）２−ＣＯ−、ＣＨ３−（ＯＣＨ２ＣＨ２）１１−Ｏ−（ＣＨ２）２−ＣＯ−ＣＨ３−（ＯＣＨ２ＣＨ２）１５−Ｏ−（ＣＨ２）２−ＣＯ−またはＣＨ３−（ＯＣＨ２ＣＨ２）２３−Ｏ−（ＣＨ２）２−ＣＯ−である、請求項１０に記載の神経ペプチド−２受容体アゴニスト。
【請求項１５】
Ｚ、Ｚ’が、Ａｈｘ、Ａｈｘ−Ａｈｘ、Ｇｌｕ−Ｇｌｕ、γＧｌｕ−γＧｌｕ、５ＡＯＰＳまたはＣｙｓ（ＳＯ３Ｈ）−Ｃｙｓ（ＳＯ３Ｈ）である、請求項１０〜１４のいずれか一項に記載の神経ペプチド−２受容体アゴニスト。
【請求項１６】
前記アシル部分がアセチルである、請求項１に記載の神経ペプチド−２受容体アゴニスト。
【請求項１７】
Ｚが存在しない、請求項１０〜１５のいずれか一項に記載の神経ペプチド−２受容体アゴニスト。
【請求項１８】
Ｚ’が存在しない、請求項１０〜１６のいずれか一項に記載の神経ペプチド−２受容体アゴニスト。
【請求項１９】
【化７０】
2013507414.tif 000078
2013507414.tif 000079
からなる群より選択される、請求項１に記載の神経ペプチド−２受容体アゴニストまたはその薬学的に許容しうる塩。
【請求項２０】
【化７１】
2013507414.tif 000080
2013507414.tif 000081
2013507414.tif 000082
からなる群より選択される、請求項１に記載の神経ペプチド−２受容体アゴニストまたはその薬学的に許容しうる塩。
【請求項２１】
式（ＩＩＩ）：
【化７２】
2013507414.tif 000083
[式中、
ＬまたはＬ’の一方は、脂質部分であり、もう一方は、存在せず；
ＺまたはＺ’の一方は、スペーサー部分であり、もう一方は、存在せず；
ＰＥＧまたはＰＥＧ’の一方は、ポリエテレングリコール部分−ＮＨ−ＣＨ２ＣＨ２−（ＯＣＨ２ＣＨ２）ｎ−Ｏ−（ＣＨ２）ｘ−ＣＯ−であり、もう一方は、存在せず（式中、ｎは、１〜３０であり、ｘは、１または２である）；
Ｘは、（４−オキソ−６−ピペラジン−１−イル−４Ｈ−キナゾリン−３−イル）−酢酸（Ｐｑａ）であり；そして
Ｙは、アシル部分であるか、または存在しない]
で表される神経ペプチド−２受容体アゴニストまたはその薬学的に許容しうる塩。
【請求項２２】
前記脂質部分が、カプロイル、エイコサノイル、ラウロイル、ミリストイル、パルミトイル、１６−ブロモヘキサデカノイル、２−ヘキシルデカノイルまたは１５−カルボキシ−ペンタデカノイルである、請求項２１に記載の神経ペプチド−２受容体アゴニスト。
【請求項２３】
前記スペーサー部分が、Ａｈｘ、Ａｈｘ−Ａｈｘ、Ｇｌｕ−Ｇｌｕ、γＧｌｕ−γＧｌｕ、５ＡＯＰＳまたはＣｙｓ（ＳＯ３Ｈ）−Ｃｙｓ（ＳＯ３Ｈ）である、請求項２１または２２に記載の神経ペプチド−２受容体アゴニスト。
【請求項２４】
ｎが、１〜２４であり、ｘが、１または２である、請求項２１〜２３のいずれか一項に記載の神経ペプチド−２受容体アゴニスト。
【請求項２５】
前記ポリエチレングリコール部分が、ＮＨ−ＣＨ２ＣＨ２−（ＯＣＨ２ＣＨ２）２３−Ｏ−（ＣＨ２）２−ＣＯである、請求項２１〜２４のいずれか一項に記載の神経ペプチド−２受容体アゴニスト。
【請求項２６】
前記アシル部分がアセチルである、請求項２１〜２５のいずれか一項に記載の神経ペプチド−２受容体アゴニスト。
【請求項２７】
【化７３】
2013507414.tif 000084
からなる群より選択される、請求項２１に記載の神経ペプチド−２受容体アゴニストまたはその薬学的に許容しうる塩。
【請求項２８】
治療有効量の請求項１〜２０のいずれか一項に記載の神経ペプチド−２受容体アゴニストまたはその塩および薬学的に許容しうる担体を含む、医薬組成物。
【請求項２９】
治療有効量の請求項２１〜２７のいずれか一項に記載の神経ペプチド−２受容体アゴニストまたはその塩および薬学的に許容しうる担体を含む、医薬組成物。
【請求項３０】
治療活性物質として使用するための、請求項１〜２７のいずれか一項に記載の神経ペプチド−２受容体アゴニストまたはその塩。
【請求項３１】
代謝疾患および障害の治療または予防のための、請求項１〜２７のいずれか一項に記載の化合物の使用。
【請求項３２】
代謝疾患および障害の治療または予防のための医薬を調製するための、請求項１〜２７のいずれか一項に記載の化合物の使用。
【請求項３３】
代謝疾患および障害の治療または予防のための、請求項１〜２７のいずれか一項に記載の神経ペプチド−２受容体アゴニストまたはその塩。
【請求項３４】
有効量の請求項１〜２７のいずれか一項に記載の神経ペプチド−２受容体アゴニストまたはその塩を投与することを含む、代謝疾患および障害の治療または予防のための方法。
【請求項３５】
本明細書で上述した発明。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、トランケートされたＰＹＹ３−３６のペグ化およびリピド化類似体を提供する。該類似体は、神経ペプチド−２受容体のアゴニストであり、例えば、肥満、２型糖尿病、代謝症候群、インスリン抵抗性および脂質異常症などの代謝疾患および障害の処置に有用である。
【０００２】
本発明の化合物は、好ましくは、代謝疾患および障害の処置に有用である。このような代謝疾患および障害には、例えば、肥満、糖尿病、好ましくは、２型糖尿病、代謝症候群（Ｘ症候群としても知られている）、インスリン抵抗性、脂質異常症、空腹時血糖異常および耐糖能異常が挙げられる。
【０００３】
本明細書において引用される全ての文献は、参照により明示的に本明細書に組み込まれる。
【０００４】
本発明の一実施態様においては、式（Ｉ）：
【化１】
2013507414.tif 000003
[式中、
ＬまたはＬ’の一方は、ポリエチレングリコール（ＰＥＧ）部分であり、もう一方は、脂質部分であるか、または存在せず；
Ｘは、（４−オキソ−６−ピペラジン−１−イル−４Ｈ−キナゾリン−３−イル）−酢酸（Ｐｑａ）であり；
Ｙは、アシル部分であるか、または存在せず；
Ｚ、Ｚ’は、スペーサー部分であるか、または存在せず；
Ｒ１は、Ｉｌｅ、Ａｌａ、（Ｄ）ＡｌｌｏＩｌｅ、（Ｄ）ＩｌｅまたはＮ−メチルＩｌｅであり；
Ｒ２は、Ｌｙｓ、Ａｌａ、（Ｄ）Ｌｙｓ、Ｎ−メチルｌｙｓ、Ｎｌｅまたは（Ｌｙｓ−Ｇｌｙ）であり；
Ｒ３は、Ａｒｇ、Ｃｉｔ、Ａｌａ、（Ｄ）Ａｒｇ、Ｎ−メチルＡｒｇまたはＰｈｅであり；
Ｒ４は、Ｈｉｓ、Ａｌａ、（Ｄ）ＨｉｓまたはＮ−メチルＨｉｓであり；
Ｒ５は、Ｔｙｒ、Ａｌａ、（Ｄ）Ｔｙｒ、Ｎ−メチルＴｙｒまたはＴｒｐであり；
Ｒ６は、Ｌｅｕ、Ｈｉｓ、Ａｌａ、（Ｄ）ＬｅｕまたはＮ−メチルＬｅｕであり；
Ｒ７は、Ａｓｎ、Ａｌａまたは（Ｄ）Ａｓｎであり；
Ｒ８は、ＬｅｕまたはＴｒｐであり；
Ｒ９は、Ｖａｌ、Ａｌａ、（Ｄ）ＶａｌまたはＮ−メチルＶａｌであり；
Ｒ１０は、Ｔｈｒ、ＡｌａまたはＮ−メチルＴｈｒであり；
Ｒ１１は、Ａｒｇ、（Ｄ）ＡｒｇまたはＮ−メチルＡｒｇであり；
Ｒ１２は、ＧｌｎまたはＡｌａであり；
Ｒ１３は、Ａｒｇ、（Ｄ）ＡｒｇまたはＮ−メチルＡｒｇであり；そして
Ｒ１４は、Ｔｙｒ、（Ｄ）Ｔｙｒ、Ｎ−メチルＴｙｒ、ＰｈｅまたはＴｒｐである]
で表される神経ペプチド−２受容体アゴニストまたはその薬学的に許容しうる塩が提供される。
【背景技術】
【０００５】
代謝疾患および障害は、先進国の重大な健康問題として広く認識されており、米国では蔓延レベルに達している。例えば、最近の肥満研究によれば、米国の人口の５０％以上が体重超過で、２５％以上が医学的に肥満と診断されており、心臓疾患、２型糖尿病および特定の癌の重大なリスクを有すると考えられる。この蔓延のため、米国だけで毎年、推定７００億ドル以上の肥満処置費用が予測されており、これが医療制度への大きな負担となっている。肥満を処置する戦略には、食物摂取の削減およびエネルギー消費の増強が挙げられる。
【０００６】
３６アミノ酸のペプチド神経伝達物質の神経ペプチドＹ（ＮＰＹ）は、神経伝達物質／神経ホルモンの膵臓ポリペプチドクラスのメンバーであり、末梢および中枢神経系の両方に存在することが分かっている。ＮＰＹは、最も強力な既知の食欲促進剤の１つであり、ヒトを含む動物における食物摂取の調節に主要な役割を果たすことが明らかとなった。
【０００７】
Ｙ１−、Ｙ２−、Ｙ４およびＹ５−サブタイプの４つのＮＰＹ受容体がクローン化されており、これらは、ロドプシン様Ｇタンパク質共役型の７回膜貫通型受容体（ＧＰＣＲ）に属する。ＮＰＹ  Ｙ２受容体（Ｙ２Ｒ）は、Ｇαｉを介してアデニルシクラーゼの活性化を阻害する３８１アミノ酸の受容体であり、他の既知のＮＰＹ受容体と低い相同性を示す。ラットとヒトのＹ２受容体間において、９３％アミノ酸同一性の高い保存性が存在する。
【０００８】
Ｙ２Ｒ受容体は、げっ歯類およびヒトの両方の中枢神経系内に広範に分布している。視床下部では、Ｙ２  ｍＲＮＡが、弓状核、視束前核および背内側核に局在している。ヒトの脳では、Ｙ２Ｒが、主要なＹ受容体サブタイプである。弓状核内では、ＮＰＹニューロンの８０％超が、Ｙ２Ｒ  ｍＲＮＡを共発現している。in vitroにおいて、Ｙ２選択的アゴニストの適用は、視床下部切片からのＮＰＹの放出を減少させることが示されたが、一方で、Ｙ２の非ペプチドアンタゴニストＢＩＩＥ０２４６は、ＮＰＹ放出を増加させる。これらの知見から、Ｙ２Ｒが、ＮＰＹの放出を調節するシナプス前自己受容体としての役割を担っているため、摂食の調節に関与している可能性があることが支持される（Kaga, T. et al., Peptides 22: 501-506 (2001) and King PJ et al., Eur J Pharmacol 396: R1-3 (2000)）。
【０００９】
ペプチドＹＹ３−３６（ＰＹＹ３−３６）は、神経ペプチドＹ２アゴニスト活性を有する３４アミノ酸の線状ペプチドである。ＰＹＹ３−３６の弓状核内（ＩＣ）または腹膜内（ＩＰ）注射は、ラットの摂食を低下させ、長期処置としては体重増加を減少させることが示された。ＰＹＹ３−３６の９０分間の静脈内（ＩＶ）注入（０．８pmol/kg/分）は、肥満および正常なヒト被験体において食物摂取を２４時間にわたり低下させた。これらの知見から、ＰＹＹ系が肥満処置のための治療ターゲットとなる可能性があることが示唆される（Batterham RL et al., Nature 418: 650-654 (2002); Batterham RL et al., New Engl J Med 349: 941-948 (2003)）。さらに、残基５〜２４が５〜８炭素長のメチレン鎖で置き換わったＰＹＹのＣｙｓ２−（Ｄ）Ｃｙｓ２７−環化型は、ラット空腸の電位固定粘膜試料を通過する電流を低下させることから明らかなように、腸のＰＹＹ受容体を活性化することが明らかにされた（Krstenansky, et al. in Peptides, Proceedings of the Twelfth American Peptide Symposium. J. Smith and J. Rivier Editors, ESCOM. Leiden Page 136-137）。
【００１０】
さらに、最近のデータにおいて、初期の血糖コントロールおよび長期体重維持に一部関与する可能性のあるＰＹＹレベルが、Ｒｏｕｘ−ｅｎＹ胃バイパス術患者において初期に、過剰に増加したことが示されたことから、代謝疾患の病因においてこのペプチドが重要であることが実証された。ＰＹＹの他の公知の作用には、食後の血糖コントロールの改善に関与する胃内容排出の減少および胃腸通過の遅延が挙げられる。２型糖尿病の動物モデルにおいては、ＰＹＹ３−３６の末梢投与後に、ＨｂＡ１Ｃおよびフルクトサミンなどの高血糖の指標が用量依存的な低下を呈する。従って、これらの結果から、ＰＹＹ３−３６または薬学的に関連するアゴニストが、血糖および体重コントロールに対する長期治療アプローチを提示することができることが示される（Korner et al., J Clin Endocrinol Metabol 90: 359-365 (2005); Chan JL et al., Obesity 14: 194-198 (2006); Stratis C et al., Obes Surg 16: 752-758 (2006); Borg CM et al., Br J Surg 93: 210-215 (2006);およびPittner RA et al., Int J Obes 28: 963-971 (2004)）。
【００１１】
従って、Ｙ１、Ｙ４およびＹ５受容体に対して同等以上の効力および選択性、薬物動態特性ならびに薬理学的特性を有しながら、より低分子量を有するＰＹＹの新規な改変類似体が求められている。
【００１２】
本発明の化合物は、例えば、これらがＰＹＹ３−３６のトランケート型であるという理由から有益である。より短いペプチドは、例えば、化合物の合成および精製をより容易にするだけでなく、製造手順の改善および費用の軽減ももたらされる。さらに、本発明の化合物は、好ましくは、Ｙ２−受容体と相互作用し、ＮＰＹ  Ｙ１、Ｙ４およびＹ５などの同族の受容体と相互作用しない。従って、望まないアゴニストまたはアンタゴニストの副反応が、最小限に抑えられる。トランケートされた、リピド化−ペグ化ペプチドは、また、天然ペプチドと比較して、生物学的活性および受容体特異性を保持しながら、in vivoにおいてより長い半減期および有益な薬物動態特性を示す。
【００１３】
特定の実施態様を改変することが可能であり、これが添付の特許請求の範囲に包含されうることから、本発明が、本明細書に記載される本発明の特定の実施態様に限定されないことを理解されたい。また、用いられる専門用語は、特定の実施態様を記載するためのものであり、限定することを意図するものではないことを理解されたい。その代わりに、本発明の範囲は、添付の特許請求の範囲により確定されるであろう。
【００１４】
本明細書に記載される方法、機器および材料と類似または等価な任意の方法、機器および材料を、本発明の実施および試験に使用することができるが、ここでは、好ましい方法、機器および材料が記載される。
【００１５】
本明細書において言及する全てのペプチド配列は、特に記載のない限り、通常の慣例に従って、Ｎ−末端アミノ酸を左側に、Ｃ−末端アミノ酸を右側に記述する。２つのアミノ酸残基間の短い線は、ペプチド結合を示す。アミノ酸が異性体を有する場合は、特に明示しない限り、表示されるアミノ酸はＬ型である。本発明の記載の便宜上、様々なアミノ酸に対し慣例および非慣例的な略語を使用する。これらの略語は当業者に良く知られているが、明確にするために以下に列挙する。
【００１６】
Ａｓｐ＝Ｄ＝アスパラギン酸；Ａｌａ＝Ａ＝アラニン；Ａｒｇ＝Ｒ＝アルギニン；Ａｓｎ＝Ｎ＝アスパラギン；Ｇｌｙ＝Ｇ＝グリシン；Ｇｌｕ＝Ｅ＝グルタミン酸；Ｇｌｎ＝Ｑ＝グルタミン；Ｈｉｓ＝Ｈ＝ヒスチジン；Ｉｌｅ＝Ｉ＝イソロイシン；Ｌｅｕ＝Ｌ＝ロイシン；Ｌｙｓ＝Ｋ＝リジン；Ｍｅｔ＝Ｍ＝メチオニン；Ｐｈｅ＝Ｆ＝フェニルアラニン；Ｐｒｏ＝Ｐ＝プロリン；Ｓｅｒ＝Ｓ＝セリン；Ｔｈｒ＝Ｔ＝トレオニン；Ｔｒｐ＝Ｗ＝トリプトファン；Ｔｙｒ＝Ｙ＝チロシン；Ｃｙｓ＝Ｃ＝システイン；およびＶａｌ＝Ｖ＝バリン。
【００１７】
さらに便宜上、本発明において使用される部分、試薬などを表すために、下記の略語または記号を使用する。
【００１８】
Ｐｑａは、（４−オキソ−６−ピペラジン−１−イル−４Ｈ−キナゾリン−３−イル）−酢酸であり；
６Ａｈｘは、６−アミノヘキサン酸であり；
ＡＯＰＳは、５−アミノ−３−オキサ−ペンチル−スクシンアミド酸であり；
Ｃｈａは、シクロヘキシルアラニンであり；
Ｃｉｔは、シトルリンであり；
Ｃｙｓ（ＳＯ３Ｈ）は、システイン酸（Cystic acid）であり；
γＧｌｕは、γ（ガンマ）Ｇｌｕであり；
（１）Ｎａｌは、１−ナフチルアラニンであり；
（２）Ｎａｌは、２−ナフチルアラニンであり；
Ａｌｌｏｃは、アロキシカルボニルであり；  
Ｆｍｏｃは、９−フルオレニルメチルオキシカルボニルであり；
Ｍｔｒは、４−メトキシ−２，３，６−トリメチル−ベンゼンスルホニルであり；
Ｍｔｔは、４−メチルトリチルであり；
Ｐｍｃは、２，２，５，７，８−ペンタメチルクロマン−６−スルホニルであり；
Ｐｂｆは、２，２，４，６，７−ペンタメチルジヒドロ−ベンゾフラン−５−スルホニルであり；
ＣＨ２Ｃｌ２は、塩化メチレンであり；
Ａｃ２Ｏは、無水酢酸であり；
ＣＨ３ＣＮは、アセトニトリルであり；
ＤＭＡｃは、ジメチルアセトアミドであり；
ＤＭＦは、ジメチルホルムアミドであり；
ＤＩＰＥＡは、Ｎ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミンであり；
ＴＦＡは、トリフルオロ酢酸であり；
ｉＰｒ３ＳｉＨは、トリイソプロピルシランであり；
ＨＯＢｔは、Ｎ−ヒドロキシベンゾトリアゾールであり；
ＤＩＣは、Ｎ，Ｎ’−ジイソプロピルカルボジイミドであり；
ＢＯＰは、ベンゾトリアゾール−１−イルオキシ−トリス−（ジメチルアミノ）ホスホニウムヘキサフルオロホスファートであり；
ＨＢＴＵは、２−（１Ｈ−ベンゾトリアゾール−１−イル）−１，１，３，３−テトラメチルウロニウムヘキサフルオロホスファートであり；
ＮＭＰは、１−メチル  ２−ピロリジノンであり；
ＦＡＢ−ＭＳは、高速原子衝撃質量分析であり；そして
ＥＳ−ＭＳは、エレクトロスプレー質量分析である。
【００１９】
本明細書において使用される、用語「脂質部分」は、４〜２４個の炭素原子、好ましくは、１２〜２０個の炭素原子の、場合により置換されている直鎖または分岐鎖アルカノイル基を意味する。脂質部分は、天然でも合成であってもよい。好ましい脂質部分には、カプロイル、エイコサノイル、ラウロイル、ミリストイル、パルミトイル、１６−ブロモヘキサデカノイル、２−ヘキシルデカノイル−、１５−カルボキシ−ペンタデカノイルなどが挙げられるが、これらに限定されない。
【００２０】
本明細書において使用される、用語「ポリエチレングリコール部分」は、式（Ａ）：
【化２】
2013507414.tif 000004
または、式（Ｂ）：
【化３】
2013507414.tif 000005
で表される単分散構造を意味する。式中、ｎは、１〜３０、好ましくは、１〜２４であり、ｘは、１〜２である。前記ポリエチレングリコール部分を調製する試薬は、市販されている（例えば、Quanta Biodesign, 195 W. Olentangy Street, Suite O, Powell, Ohio 43065）。本発明のポリエチレングリコール部分は、また、GB 779,829; 米国特許第 3,389,170; 米国公開出願シリアル番号第 2006/0018874; Miller et al., Bioconjugate Chem., 2006, 17, 264-267; 及び Campbell, et al., J. Phys. Chem., 1991, 95, 4647-4651に記載の一般的方法に従って調製することができる。本発明に有用な好ましいポリエチレングリコール部分の例には、ＣＨ３−（ＯＣＨ２ＣＨ２）２−Ｏ−ＣＨ２−ＣＯ−、ＣＨ３−（ＯＣＨ２ＣＨ２）５−Ｏ−ＣＨ２−ＣＯ−、ＣＨ３−（ＯＣＨ２ＣＨ２）７−Ｏ−（ＣＨ２）２−ＣＯ−、ＣＨ３−（ＯＣＨ２ＣＨ２）１１−Ｏ−（ＣＨ２）２−ＣＯ、−ＣＨ３−（ＯＣＨ２ＣＨ２）１５−Ｏ−（ＣＨ２）２−ＣＯ−およびＣＨ３−（ＯＣＨ２ＣＨ２）２３−Ｏ−（ＣＨ２）２−ＣＯ−が挙げられる。
【００２１】
本明細書において使用される、用語「スペーサー部分」は、前記脂質またはＰＥＧ部分と前記トランケートされたＰＹＹ３−３６ペプチドのアミノ酸配列との間の化学基を意味する。スペーサー部分の例には、６Ａｈｘ、６Ａｈｘ−６Ａｈｘ、Ｇｌｕ−Ｇｌｕ、γＧｌｕ−γＧｌｕ、ＡＯＰＳＡおよびＣｙｓ（ＳＯ３Ｈ）−Ｃｙｓ（ＳＯ３Ｈ）が挙げられるが、これらに限定されない。
【００２２】
本明細書において使用される、用語「アシル」は、カルボニル基を介して結合している、場合により置換されているアルキル、シクロアルキル、ヘテロシクロアルキル、アリールまたはヘテロアリール基を意味し、例えば、アセチル、プロピオニル、ベンゾイル、３−ピリジニルカルボニル、２−モルホリノカルボニル、４−ヒドロキシブタノイル、４−フルオロベンゾイル、２−ナフトイル、２−フェニルアセチル、２−メトキシアセチルなどの基が挙げられる。
【００２３】
本明細書において使用される、用語「アルキル」は、単独または他の基と組み合わされて、１〜２０個の炭素原子、好ましくは、１〜１６個の炭素原子、より好ましくは、１〜１０個の炭素原子の、１価の分岐鎖または直鎖飽和脂肪族炭化水素基を指す。
【００２４】
用語「シクロアルキル」は、３〜１０個、好ましくは、３〜６個の炭素原子の、飽和もしくは不飽和の１価の単または多炭素環式基を指す。この用語は、シクロプロピル、シクロブチル、シクロペンチル、シクロヘキシル、シクロヘプチル、ボルニル、アダマンチルなどの基によりさらに例示される。好ましい実施態様においては、「シクロアルキル」部分は、１、２、３または４個の置換基で場合により置換されていてもよいが、ただし、特に指示のない限り、前記置換基はさらに置換されてはいない。シクロアルキル部分の例には、場合により置換されているシクロプロピル、場合により置換されているシクロブチル、場合により置換されているシクロペンチル、場合により置換されているシクロペンテニル、場合により置換されているシクロヘキシル、場合により置換されているシクロヘキセン、場合により置換されているシクロヘプチルなど、または本明細書において具体的に例示されているものが挙げられるが、これらに限定されない。
【００２５】
用語「ヘテロシクロアルキル」は、炭素環原子の１、２または３個が、Ｎ、ＯもしくはＳなどのヘテロ原子で置換されている、単または多環状アルキル環を意味する。ヘテロシクロアルキル基の例には、モルホリニル、チオモルホリニル、ピペラジニル、ピペリジニル、ピロリジニル、テトラヒドロピラニル、テトラヒドロフラニル、１，３−ジオキサニルなどが挙げられるが、これらに限定されない。ヘテロシクロアルキル基は、非置換であるかまたは置換されていてもよく、結合は、必要に応じて、その炭素骨格を介してまたはそのヘテロ原子を介していてもよいが、ただし、前記置換基はさらに置換されてはいない。
【００２６】
用語「低級アルキル」は、単独または他の基と組み合わされて、１〜９個の炭素原子、好ましくは、１〜６個の炭素原子の分岐鎖または直鎖アルキル基を指す。この用語は、メチル、エチル、ｎ−プロピル、イソプロピル、ｎ−ブチル、ｓ−ブチル、イソブチル、ｔ−ブチル、ｎ−ペンチル、３−メチルブチル、ｎ−へキシル、２−エチルブチルなどの基によりさらに例示される。
【００２７】
用語「アリール」は、少なくとも１つの芳香環を有する、６〜１２個の炭素原子の芳香族単または多炭素環式基を指す。このような基の例には、フェニル、ナフチル、１，２，３，４−テトラヒドロナフタレン、１，２−ジヒドロナフタレン、インダニル、１Ｈ−インデニルなどが挙げられるが、これらに限定されない。
【００２８】
アルキル、低級アルキルおよびアリール基は、置換されていてもまたは非置換であってもよい。置換されている場合、一般的に、例えば、１〜４個の置換基が存在するが、ただし、特に指示のない限り、前記置換基はさらに置換されてはいない。これらの置換基は、場合により、これらが結合しているアルキル、低級アルキルまたはアリール基と共に環を形成してもよい。
【００２９】
用語「ヘテロアリール」は、Ｎ、ＯおよびＳから選択される１、２または３個の環ヘテロ原子を含有し、残りの環原子がＣである少なくとも１つの芳香環を有する、５〜１２個の原子の芳香族単または多環状基を指す。ヘテロアリール基の１または２個の環炭素原子は、カルボニル基で置き換わっていてもよい。
【００３０】
上述のヘテロアリール基は、１、２または３個の置換基で独立して置換されていてもよいが、ただし、特に指示のない限り、前記置換基はさらに置換されてはいない。
【００３１】
式Ｉで表される化合物は、１個以上の不斉炭素原子を有することができ、光学的に純粋なエナンチオマー、例えばラセミ化合物などのエナンチオマーの混合物、光学的に純粋なジアステレオマー、ジアステレオマーの混合物、ジアステレオマーラセミ化合物またはジアステレオマーラセミ化合物の混合物の形態で存在してもよい。この光学的に活性な形態は、例えば、ラセミ化合物の分割により、不斉合成または不斉クロマトグラフィー（キラル吸着剤または溶離剤を用いるクロマトグラフィー）により得ることができる。本発明は、これらの形態の全てならびに全ての位置異性体を包含する。
【００３２】
本発明の一実施態様においては、式（Ｉ）：
【化４】
2013507414.tif 000006
[式中、
ＬまたはＬ’の一方は、ポリエチレングリコール（ＰＥＧ）部分であり、もう一方は、脂質部分であるか、または存在せず；
Ｘは、（４−オキソ−６−ピペラジン−１−イル−４Ｈ−キナゾリン−３−イル）−酢酸（Ｐｑａ）であり；
Ｙは、アシル部分であるか、または存在せず；
Ｚ、Ｚ’は、スペーサー部分であるか、または存在せず；
Ｒ１は、Ｉｌｅ、Ａｌａ、（Ｄ）ＡｌｌｏＩｌｅ、（Ｄ）ＩｌｅまたはＮ−メチルＩｌｅであり；
Ｒ２は、Ｌｙｓ、Ａｌａ、（Ｄ）Ｌｙｓ、Ｎ−メチルｌｙｓ、Ｎｌｅまたは（Ｌｙｓ−Ｇｌｙ）であり；
Ｒ３は、Ａｒｇ、Ｃｉｔ、Ａｌａ、（Ｄ）Ａｒｇ、Ｎ−メチルＡｒｇまたはＰｈｅであり；
Ｒ４は、Ｈｉｓ、Ａｌａ、（Ｄ）ＨｉｓまたはＮ−メチルＨｉｓであり；
Ｒ５は、Ｔｙｒ、Ａｌａ、（Ｄ）Ｔｙｒ、Ｎ−メチルＴｙｒまたはＴｒｐであり；
Ｒ６は、Ｌｅｕ、Ｈｉｓ、Ａｌａ、（Ｄ）ＬｅｕまたはＮ−メチルＬｅｕであり；
Ｒ７は、Ａｓｎ、Ａｌａまたは（Ｄ）Ａｓｎであり；
Ｒ８は、ＬｅｕまたはＴｒｐであり；
Ｒ９は、Ｖａｌ、Ａｌａ、（Ｄ）ＶａｌまたはＮ−メチルＶａｌであり；
Ｒ１０は、Ｔｈｒ、ＡｌａまたはＮ−メチルＴｈｒであり；
Ｒ１１は、Ａｒｇ、（Ｄ）ＡｒｇまたはＮ−メチルＡｒｇであり；
Ｒ１２は、ＧｌｎまたはＡｌａであり；
Ｒ１３は、Ａｒｇ、（Ｄ）ＡｒｇまたはＮ−メチルＡｒｇであり；そして
Ｒ１４は、Ｔｙｒ、（Ｄ）Ｔｙｒ、Ｎ−メチルＴｙｒ、ＰｈｅまたはＴｒｐである]
で表される神経ペプチド−２受容体アゴニストまたはその薬学的に許容しうる塩が提供される。
【００３３】
好ましくは、前記脂質部分は、カプロイル、エイコサノイル、ラウロイル、ミリストイル、パルミトイル、１６−ブロモヘキサデカノイル、２−ヘキシルデカノイルまたは１５−カルボキシ−ペンタデカノイルである。
【００３４】
好ましくは、前記ポリエチレングリコール部分は、式ＣＨ３（ＯＣＨ２ＣＨ２Ｏ）ｎ（ＣＨ２）ｘＣＯ−であり、式中、ｎは、１〜３０であり、ｘは、１または２である。より好ましくは、ｎは、１〜２４であり、ｘは、１または２である。
【００３５】
好ましくは、前記ポリエチレングリコール部分は、ＣＨ３−（ＯＣＨ２ＣＨ２）２−Ｏ−ＣＨ２−ＣＯ−、ＣＨ３−（ＯＣＨ２ＣＨ２）５−Ｏ−ＣＨ２−ＣＯ−、ＣＨ３−（ＯＣＨ２ＣＨ２）７−Ｏ−（ＣＨ２）２−ＣＯ−、ＣＨ３−（ＯＣＨ２ＣＨ２）１１−Ｏ−（ＣＨ２）２−ＣＯ−、ＣＨ３−（ＯＣＨ２ＣＨ２）１５−Ｏ−（ＣＨ２）２−ＣＯ−またはＣＨ３−（ＯＣＨ２ＣＨ２）２３−Ｏ−（ＣＨ２）２−ＣＯ−である。
【００３６】
好ましくは、、前記スペーサー部分は、Ａｈｘ、Ａｈｘ−Ａｈｘ、Ｇｌｕ−Ｇｌｕ、γＧｌｕ−γＧｌｕ、５ＡＯＰＳまたはＣｙｓ（ＳＯ３Ｈ）−Ｃｙｓ（ＳＯ３Ｈ）である。
【００３７】
一実施態様においては、Ｚは存在しない。別の実施態様においては、Ｚ’は存在しない。
【００３８】
好ましくは、前記アシル部分は、アセチルである。
【００３９】
さらなる実施態様においては、式（ＩＩ）：
【化５】
2013507414.tif 000007
[式中、
ＬまたはＬ’の一方は、脂質部分であり、もう一方は、ポリエチレングリコール（ＰＥＧ）部分であり；
Ｘは、（４−オキソ−６−ピペラジン−１−イル−４Ｈ−キナゾリン−３−イル）−酢酸（Ｐｑａ）であり；
Ｙは、アシル部分であるか、または存在せず；そして
Ｚ、Ｚ’は、Ａｈｘ、Ａｈｘ−Ａｈｘ、Ｇｌｕ−Ｇｌｕ、γＧｌｕ−γＧｌｕ、５ＡＯＰＳまたはＣｙｓ（ＳＯ３Ｈ）−Ｃｙｓ（ＳＯ３Ｈ）である]
で表される神経ペプチド−２受容体アゴニストまたはその薬学的に許容しうる塩が提供される。
【００４０】
好ましくは、式（ＩＩ）で表される神経ペプチド−２受容体アゴニストの前記脂質部分は、カプロイル、エイコサノイル、ラウロイル、ミリストイル、パルミトイル、１６−ブロモヘキサデカノイル、２−ヘキシルデカノイルまたは１５−カルボキシ−ペンタデカノイルである。
【００４１】
好ましくは、式（ＩＩ）で表される神経ペプチド−２受容体アゴニストの前記ポリエチレングリコール部分は、式ＣＨ３（ＯＣＨ２ＣＨ２Ｏ）ｎ（ＣＨ２）ｘＣＯ−であり、式中、ｎは、１〜３０であり、ｘは、１または２である。好ましくは、ｎは、１〜２４であり、ｘは、１または２である。
【００４２】
好ましくは、式（ＩＩ）で表される神経ペプチド−２受容体アゴニストの前記ポリエチレングリコール部分は、ＣＨ３−（ＯＣＨ２ＣＨ２）２−Ｏ−ＣＨ２−ＣＯ−、ＣＨ３−（ＯＣＨ２ＣＨ２）５−Ｏ−ＣＨ２−ＣＯ−、ＣＨ３−（ＯＣＨ２ＣＨ２）７−Ｏ−（ＣＨ２）２−ＣＯ−、ＣＨ３−（ＯＣＨ２ＣＨ２）１１−Ｏ−（ＣＨ２）２−ＣＯ−、ＣＨ３−（ＯＣＨ２ＣＨ２）１５−Ｏ−（ＣＨ２）２−ＣＯ−またはＣＨ３−（ＯＣＨ２ＣＨ２）２３−Ｏ−（ＣＨ２）２−ＣＯ−である。
【００４３】
好ましくは、式（ＩＩ）で表される神経ペプチド−２受容体アゴニストの前記Ｚ、Ｚ’は、Ａｈｘ、Ａｈｘ−Ａｈｘ、Ｇｌｕ−Ｇｌｕ、γＧｌｕ−γＧｌｕ、５ＡＯＰＳまたはＣｙｓ（ＳＯ３Ｈ）−Ｃｙｓ（ＳＯ３Ｈ）である。
【００４４】
好ましくは、式（ＩＩ）で表される神経ペプチド−２受容体アゴニストの前記アシル部分は、アセチルである。
【００４５】
式（ＩＩ）で表される神経ペプチド−２受容体アゴニストの一実施態様においては、Ｚは存在しない。式（ＩＩ）で表される神経ペプチド−２受容体アゴニストの別の実施態様においては、Ｚ’は存在しない。
【００４６】
本発明の別の実施態様は、式（ＩＩＩ）：
【化６】
2013507414.tif 000008
[式中、
ＬまたはＬ’の一方は、脂質部分であり、もう一方は存在せず；
ＺまたはＺ’の一方は、スペーサー部分であり、もう一方は存在せず；
ＰＥＧまたはＰＥＧ’の一方は、ポリエテレングリコール部分−ＮＨ−ＣＨ２ＣＨ２−（ＯＣＨ２ＣＨ２）ｎ−Ｏ−（ＣＨ２）ｘ−ＣＯ−であり、もう一方は存在せず（式中、ｎは、１〜３０であり、ｘは、１または２である）；
Ｘは、（４−オキソ−６−ピペラジン−１−イル−４Ｈ−キナゾリン−３−イル）−酢酸（Ｐｑａ）であり；そして
Ｙは、アシル部分であるか、または存在しない]
で表される神経ペプチド−２受容体アゴニストまたはその薬学的に許容しうる塩である。
【００４７】
好ましくは、式（ＩＩＩ）で表される神経ペプチド−２受容体アゴニストにおいて、前記脂質部分は、カプロイル、エイコサノイル、ラウロイル、ミリストイル、パルミトイル、１６−ブロモヘキサデカノイル、２−ヘキシルデカノイルまたは１５−カルボキシ−ペンタデカノイルである。
【００４８】
好ましくは、式（ＩＩＩ）で表される神経ペプチド−２受容体アゴニストにおいて、前記スペーサー部分は、Ａｈｘ、Ａｈｘ−Ａｈｘ、Ｇｌｕ−Ｇｌｕ、γＧｌｕ−γＧｌｕ、５ＡＯＰＳまたはＣｙｓ（ＳＯ３Ｈ）−Ｃｙｓ（ＳＯ３Ｈ）である。
【００４９】
好ましくは、式（ＩＩＩ）で表される神経ペプチド−２受容体アゴニストの前記アシル部分は、アセチルである。
【００５０】
好ましくは、式（ＩＩＩ）で表される神経ペプチド−２受容体アゴニストにおいて、ｎは、１〜２４であり、ｘは、１または２である。
【００５１】
本発明の好ましい神経ペプチド−２受容体アゴニストは、
【化７】
2013507414.tif 000009
2013507414.tif 000010
2013507414.tif 000011
2013507414.tif 000012
またはその薬学的に許容しうる塩である。
【００５２】
本発明の代表的な化合物は、アミノ酸間でペプチド結合を形成する任意の公知の従来手順により容易に合成することができる。このような従来手順には、例えば、カルボキシル基および他の反応基が保護されたアミノ酸またはその残基の遊離のα−アミノ基と、アミノ基もしくは他の反応基が保護された別のアミノ酸またはその残基の遊離の一級カルボキシル基間で縮合を行うことができる、任意の液相手順が挙げられる。
【００５３】
本発明の新規化合物を合成するためのこのような従来手順には、例えば、任意の固相ペプチド合成法が挙げられる。このような方法において、本新規化合物の合成は、固相法の一般原理に従って、伸長するペプチド鎖に所望のアミノ酸残基を１個ずつ連続的に組み込むことにより実施することができる。このような方法は、例えば、Merrifield, R. B., J. Amer. Chem. Soc. 85, 2149-2154 (1963); Barany et al., The Peptides, Analysis, Synthesis and Biology, Vol. 2, Gross, E. and Meienhofer, J., Eds. Academic Press 1-284 (1980)に開示されており、これは参照により本明細書に組み込まれる。
【００５４】
ペプチドの化学合成に共通することは、様々なアミノ酸部分の反応性の側鎖基を適切な保護基で保護することであり、これにより、保護基が最終的に除去されるまでその部位で化学反応が起こることを防ぐ。また、一般的に共通することは、あるものがカルボキシル基で反応している間、アミノ酸またはフラグメント上のα−アミノ基を保護し、その後、その部位で後続の反応が行われるようにα−アミノ保護基を選択的に除去することである。固相合成法に関して、特定の保護基がこれまでに開示されているが、液相合成では、それぞれのアミノ酸に慣例的に使用される保護基により、それぞれのアミノ酸を保護することができることに留意すべきである。
【００５５】
α−アミノ基は、芳香族ウレタン型保護基、例えば、アリルオキシカルボニル、ベンジルオキシカルボニル（Ｚ）および置換ベンジルオキシカルボニル、例えば、ｐ−クロロベンジルオキシカルボニル、ｐ−ニトロベンジルオキシカルボニル、ｐ−ブロモベンジルオキシカルボニル、ｐ−ビフェニル−イソプロピルオキシカルボニル、９−フルオレニルメチルオキシカルボニル（Ｆｍｏｃ）およびｐ−メトキシベンジルオキシカルボニル（Ｍｏｚ）；脂肪族ウレタン型保護基、例えば、ｔ−ブチルオキシカルボニル（Ｂｏｃ）、ジイソプロピルメチルオキシカルボニルおよびイソプロピルオキシカルボニルから選択される適切な保護基により保護することができる。本明細書において、α−アミノ保護に対しては、Ｆｍｏｃが最も好ましい。
【００５６】
グアニジノ基は、ニトロ、ｐ−トルエンスルホニル（Ｔｏｓ）、（Ｚ）、２，２，４，６，７−ペンタメチルジヒドロ−ベンゾフラン−５−スルホニル（Ｐｂｆ）、ペンタメチルクロマンスルホニル（Ｐｍｃ）、４−メトキシ−２，３，６，−トリメチルベンゼンスルホニル（Ｍｔｒ）などの適切な保護基により保護することができ、アルギニン（Ａｒｇ）に対しては、（Ｐｍｃ）、（Ｍｔｒ）および（Ｐｂｆ）が最も好ましい。
【００５７】
ε−アミノ基は、２−クロロベンジルオキシカルボニル（２−Ｃｌ−Ｚ）、２−ブロモベンジルオキシカルボニル（２−Ｂｒ−Ｚ）−およびｔ−ブチルオキシカルボニル（Ｂｏｃ）などの適切な保護基により保護することができる。（Ｌｙｓ）に対しては、Ｂｏｃが最も好ましい。
【００５８】
ヒドロキシル基（ＯＨ）は、ベンジル（Ｂｚｌ）、２，６−ジクロロベンジル（２，６−ジＣｌ−Ｂｚｌ）およびtert−ブチル（ｔ−Ｂｕ）などの適切な保護基により保護することができ、（Ｔｙｒ）、（Ｓｅｒ）および（Ｔｈｒ）に対しては、（ｔ−Ｂｕ）が最も好ましい。
【００５９】
ＡｓｎおよびＧｌｎのβおよびγ−アミド基は、４−メチルトリチル（Ｍｔｔ）、２，４，６−トリメトキシベンジル（Ｔｍｏｂ）、４，４−ジメトキシジチルビス−（４−メトキシフェニル）−メチル（Ｄｏｄ）およびトリチル（Ｔｒｔ）などの適切な保護基により保護することができる。（Ａｓｎ）および（Ｇｌｎ）に対しては、Ｔｒｔが最も好ましい。
【００６０】
インドール基は、ホルミル（Ｆｏｒ）、メシチル−２−スルホニル（Ｍｔｓ）およびｔ−ブチルオキシカルボニル（Ｂｏｃ）から選択される適切な保護基により保護することができる。（Ｔｒｐ）に対しては、Ｂｏｃが最も好ましい。
【００６１】
イミダゾール基は、ベンジル（Ｂｚｌ）、ｔ−ブチルオキシカルボニル（Ｂｏｃ）およびトリチル（Ｔｒｔ）から選択される適切な保護基により保護することができる。（Ｈｉｓ）に対しては、Ｔｒｔが最も好ましい。
【００６２】
アミノ酸Ｐｑａの合成は、J. Hutchinson等により記載されている（J .Med. Chem. 1996, 39, 4583-4591）。Ｆｍｏｃ−Ｐｑａ誘導体は、NeoMPS, Inc. (San Diego CA)から購入した。
【００６３】
全ての溶媒、イソプロパノール（ｉＰｒＯＨ）、塩化メチレン（ＣＨ２Ｃｌ２）、ジメチルホルムアミド（ＤＭＦ）およびＮ−メチルピロリノン（ＮＭＰ）は、FisherまたはBurdick & Jacksonから購入し、追加の処理は行わず使用した。トリフルオロ酢酸は、HalocarbonまたはFlukaから購入し、さらに精製することなく使用した。
【００６４】
ジイソプロピルカルボジイミド（ＤＩＣ）、ジイソプロピルエチルアミン（ＤＩＰＥＡ）およびプロパンチオールは、FlukaまたはAldrichから購入し、さらに精製することなく使用した。ヒドロキシベンゾトリアゾール（ＨＯＢＴ）、ジメチルスルフィド（ＤＭＳ）および１，２−エタンジチオール（ＥＤＴ）は、Sigma Chemical Co.から購入し、さらに精製することなく使用した。保護アミノ酸は、一般的にＬ−配置であり、BachemまたはNeosystemから市販されているものを入手した。これらの試薬の純度は、使用する前に薄層クロマトグラフィー、ＮＭＲおよび融点により確認した。ベンズヒドリルアミン樹脂（ＢＨＡ）は、BachemまたはAdvanced Chemtechから入手したスチレン−１％ジビニルベンゼン（１００〜２００または２００〜４００メッシュ）のコポリマーであった。これらの樹脂の総窒素含有量は、一般的に、０．３〜１．２meq/gであった。
【００６５】
好ましい実施態様においては、ペプチドは、以前に言及したように当技術分野で公知の他の等価な化学合成を使用することもできるが、固相合成を用いて、Merrifield（J. Amer. Chem. Soc., 85, 2149 (1963)）により一般的に記載される方法により調製した。固相合成は、適切な樹脂に保護α−アミノ酸をカップリングさせることにより、ペプチドのＣ−末端から開始する。このような出発物質は、α−アミノ保護アミノ酸を、エステル結合により、ｐ−ベンジルオキシベンジルアルコール（Ｗａｎｇ）樹脂に結合させることによるか、またはｐ−（（Ｒ，Ｓ）−α−（１−（９Ｈ−フルオレン−９−イル）−メトキシホルムアミド）−２，４−ジメチルオキシベンジル）−フェノキシ酢酸（Ｒｉｎｋ  ｌｉｎｋｅｒ）などのＦｍｏｃ−Ｌｉｎｋｅｒをアミド結合によりベンズヒドリルアミン（ＢＨＡ）樹脂に結合させることにより調製することができる。ヒドロキシメチル樹脂の調製は当技術分野においてよく知られている。Ｆｍｏｃ−Ｌｉｎｋｅｒ−ＢＨＡ樹脂支持体は市販されており、一般的に、合成される所望のペプチドがＣ−末端に非置換アミドを有する場合に使用される。
【００６６】
典型的に、アミノ酸または模倣物は、Ｆｍｏｃ保護形態のアミノ酸または模倣物を使用し、２〜５当量のアミノ酸と適切なカップリング試薬を用いて、Ｆｍｏｃ−Ｌｉｎｋｅｒ−ＢＨＡ樹脂にカップリングさせる。カップリングした後、樹脂を洗浄し、真空下で乾燥させてもよい。樹脂へのアミノ酸のローディングは、Ｆｍｏｃ−アミノ酸樹脂のアリコートのアミノ酸分析により、またはＵＶ解析によるＦｍｏｃ基の測定により決定することができる。任意の未反応アミノ基は、樹脂を、塩化メチレン中、無水酢酸およびジイソプロピルエチルアミンと反応させることによりキャッピングすることができる。
【００６７】
α−アミノＦｍｏｃ保護基は、塩基性条件下で除去される。この目的に、ピペリジン、ピペラジンまたはモルホリン（２０〜４０％v/v）のＤＭＦ溶液を使用してもよい。好ましくは、４０％ピペリジン−ＤＭＦが用いられる。
【００６８】
α−アミノ保護基の除去に続き、後続の保護アミノ酸を、所望の順序で段階的にカップリングを行い中間体の保護ペプチド樹脂を得る。ペプチドの固相合成において、アミノ酸のカップリングに使用される活性化試薬は、当技術分野においてよく知られている。例えば、このような合成のための適切な試薬は、ベンゾトリアゾール−１−イル−オキシ−トリ−（ジメチルアミノ）ホスホニウムヘキサフルオロホスファート（ＢＯＰ）、ブロモ−トリス−ピロリジノ−ホスホニウムヘキサフルオロホスファート（ＰｙＢｒｏＰ）、２−（１Ｈ−ベンゾトリアゾール−１−イル）−１，１，３，３−テトラメチルウロニウムヘキサフルオロホスファート（ＨＢＴＵ）およびジイソプロピルカルボジイミド（ＤＩＣ）である。本明細書において好ましいのは、ＨＢＴＵおよびＤＩＣである。他の活性化剤は、BaranyおよびMerrifieldにより記載されており（The Peptides, Vol. 2, J. Meienhofer, ed., Academic Press, 1979, pp 1-284）、これを利用することができる。１−ヒドロキシベンゾトリアゾール（ＨＯＢＴ）、Ｎ−ヒドロキシスクシンイミド（ＨＯＳｕ）および３，４−ジヒドロ−３−ヒドロキシ−４−オキソ−１，２，３−ベンゾトリアジン（ＨＯＤｈＢＴ）などの様々な試薬を、合成サイクルを最適化するためにカップリング混合物に添加してもよい。本明細書において好ましいのは、ＨＯＢｔである。
【００６９】
Ｎ−末端アセチル誘導体の調製のために、樹脂結合ペプチドを、５％ＤＩＥＡの２０％無水酢酸−ＤＭＦで処理することによりアセチル化を実施した。他のＮ−末端アシル化については、in-situで活性化した対応するカルボン酸とＤＩＣ／ＨＯＢｔを使用して、３０分間アシル化を実施した。
【００７０】
典型的な合成サイクルのプロトコールは、以下のとおりである：
【表１】
2013507414.tif 000013
【００７１】
全ての洗浄およびカップリングの溶媒は、１０〜２０mL/g樹脂の量になるように測量した。合成を通して、Kaiserニンヒドリン試験によりカップリング反応をモニタリングし、反応の完了度を決定した（Kaiser et at. Anal.Biochem.34, 595-598 (1970)）。Ｆｍｏｃ−Ａｒｇ（Ｐｍｃ）に対して、および立体的に嵩高い酸による二級アミンへのカップリングに対して遅い反応動力学が観察された。任意の未完了のカップリング反応に関しては、新たに調製した活性化アミノ酸を用いて再カップリングするか、またはペプチド樹脂を上述したように無水酢酸で処理することによりキャッピングした。完全に構築されたペプチド樹脂は、真空下で数時間乾燥させた。
【００７２】
多くの化合物に対して、ブロッキング基を除去し、ペプチドを樹脂から切断させた。例えば、ペプチド樹脂を、室温にて、樹脂１ｇあたりエタンジチオール１００μL、ジメチルスルフィド１００μl、アニソール３００μLおよびトリフルオロ酢酸９．５mLで１８０分間処理した。あるいは、ペプチド樹脂を、室温にて、樹脂１ｇあたりトリイソプロピルシラン１．０mLおよびトリフルオロ酢酸９．５mLで１８０分間処理した。樹脂を濾別し、濾液を冷エチルエーテル中で沈殿させた。沈殿物を遠心し、エーテル層をデカントした。残渣を２または３容量のＥｔ２Ｏで洗浄し、再遠心した。粗生成物を真空下で乾燥させた。
【００７３】
粗ペプチドの精製は、好ましくは、Shimadzu LC-8Aシステムで、逆相Ｃ−１８カラム（５０×２５０mm、３００A、１０〜１５μm）の高速液体クロマトグラフィー（ＨＰＬＣ）により実施した。ペプチドを、最小容量の０．１ＡｃＯＨ／Ｈ２ＯまたはＣＨ３ＣＨ／Ｈ２Ｏでカラムに注入した。勾配溶離法は、一般的に、２０％Ｂバッファーで開始し、２０％〜８０％Ｂで、流速５０mL／分で７０分間かけて行った（バッファーＡ：０．１％ＴＦＡ／Ｈ２Ｏ、バッファーＢ：０．１％ＴＦＡ／ＣＨ３ＣＮ）。ＵＶ検出は、２２０／２８０nmで行った。生成物を含有するフラクションを分離し、その純度は、Shimadzu LC-10AT分析システムで、逆相Ace C18カラム（４．６×５０mol）を使用して、勾配（２０〜８０％）、流速２mL／分で１０分間かけて確認した（バッファーＡ：０．１％ＴＦＡ／Ｈ２Ｏ、バッファーＢ：０．１％ＴＦＡ／ＣＨ３ＣＮ）。高純度であると確認されたフラクションを集め、凍結乾燥した。
【００７４】
最終生成物の純度は、上述のように逆相カラムのＨＰＬＣ分析で確認した。全ての生成物の純度は、約９５〜９９％であると確認した。また、全ての最終生成物を、高速原子衝撃質量分析（ＦＡＢ−ＭＳ）またはエレクトロスプレー質量分析（ＥＳ−ＭＳ）に付した。全ての生成物は、許容範囲内において、予想された親のＭ＋Ｈイオンを生じた。
【００７５】
本発明のさらなる実施態様においては、治療有効量の式Ｉ、ＩＩまたはＩＩＩの神経ペプチド−２受容体アゴニストまたはその塩および薬学的に許容しうる担体を含む、医薬組成物が提供される。
【００７６】
さらに、本発明の目的は、治療活性物質として使用するための、式Ｉ、ＩＩまたはＩＩＩの神経ペプチド−２受容体アゴニストまたはその塩である。
【００７７】
さらに、本発明の目的は、代謝疾患および障害の治療または予防のための、式Ｉ、ＩＩまたはＩＩＩの神経ペプチド−２受容体アゴニストまたはその塩の使用である。
【００７８】
さらに、本発明の目的は、代謝疾患および障害の治療または予防のための医薬を調製するための、式Ｉ、ＩＩまたはＩＩＩの神経ペプチド−２受容体アゴニストまたはその塩の使用である。
【００７９】
本発明のさらなる実施態様は、代謝疾患および障害の治療または予防のための、式Ｉ、ＩＩまたはＩＩＩの神経ペプチド−２受容体アゴニストまたはその塩である。
【００８０】
本発明の別の実施態様は、有効量の式Ｉ、ＩＩまたはＩＩＩの神経ペプチド−２受容体アゴニストまたはその塩を投与することを含む、代謝疾患および障害の治療または予防のための方法である。
【００８１】
本発明の化合物は、薬学的に許容しうる塩の形態で提供することができる。好ましい塩の例は、例えば、酢酸、乳酸、マレイン酸、クエン酸、リンゴ酸、アスコルビン酸、コハク酸、安息香酸、サリチル酸、メタンスルホン酸、トルエンスルホン酸、トリフルオロ酢酸またはパモ酸およびタンニン酸またはカルボキシメチルセルロースなどのポリマー酸などの薬学的に許容しうる有機酸と形成される塩、ならびに、例えば、ハロゲン化水素酸（例えば、塩酸）、硫酸またはリン酸などの無機酸との塩である。当業者に公知の薬学的に許容しうる塩を得る任意の手順を用いることができる。
【００８２】
本発明の方法の実施において、有効量の本発明のペプチドのいずれか１つもしくは本発明のペプチドのいずれかの組み合わせ、またはその薬学的に許容しうる塩を、通常の認められる当技術分野で公知の方法のいずれかを、単独でまたは組み合わせて用いて投与する。投与は、例えば、１日に１回、３日に１回、または１週間に１回行うことができる。従って、化合物または組成物を、経口（例えば、口腔）、舌下、非経口（例えば、筋肉内、静脈内または皮下）、直腸内（例えば、坐剤または洗浄剤により）、経皮（例えば、皮膚エレクトロポレーション）または吸入により（例えば、エアロゾルにより）、錠剤および懸濁剤などの固体、液体または気体の投与剤形で投与することができる。投与は、単位投与剤形の持続的治療または単回投与治療で適宜行うことができる。治療組成物は、また、パモ酸などの脂溶性の塩と併せた、油乳剤または分散剤の形態であってもよく、あるいは皮下または筋肉内投与のための生物分解性の徐放性組成物の形態であってもよい。
【００８３】
従って、本発明の方法は、症状の軽減が特に求められるか、恐らくは緊急の場合に実施される。あるいは、本発明の方法は、連続処置または予防処置として有効に実施される。
【００８４】
本発明の組成物の調製に有用な薬学的担体は、固体、液体または気体であってもよい；従って、本組成物を、錠剤、丸剤、カプセル剤、坐剤、粉剤、腸溶性コーティング製剤または他の保護製剤（例えば、イオン交換樹脂に結合または脂質−タンパク質小胞に封入）、徐放性製剤、液剤、懸濁剤、エリキシル剤、エアロゾル剤などの形態にすることができる。担体は、石油、動物油、野菜油または合成起源のものなどの様々な油、例えば、落花生油、大豆油、鉱油、ゴマ油などから選択することができる。水、生理食塩水、デキストロース水溶液およびグリコールが、特に（血液と等張の場合の）注射剤用の好ましい液体担体である。例えば、静脈内投与用の製剤は、固体活性成分を水に溶解させて水溶液にし、その溶液を滅菌することにより調製される、活性成分の無菌水溶液を含む。適切な薬学的賦形剤には、デンプン、セルロース、タルク、グルコース、ラクトース、タルク、ゼラチン、麦芽、コメ、小麦粉、チョーク、シリカ、ステアリン酸マグネシウム、ステアリン酸ナトリウム、モノステアリン酸グリセロール、塩化ナトリウム、乾燥スキムミルク、グリセロール、プロピレングリコール、水、エタノールなどが挙げられる。本組成物に、例えば、防腐剤、安定剤、湿潤剤または乳化剤、浸透圧調整用の塩、緩衝剤などの従来の薬学的添加剤を添加してもよい。適切な薬学的担体およびその製剤は、Remington’s Pharmaceutical Sciences by E. W. Martinに記載されている。このような組成物は、いずれにおいても、受容者へ適切に投与するための適切な投与剤形を調製するために、有効量の活性化合物を適切な担体と共に含む。
【００８５】
発明の化合物の用量は、例えば、投与方法、対象の年齢および体重ならびに処置される対象の状態などの多くの要因に依存し、最終的に、主治医または獣医により決定される。主治医または獣医により決定されるこのような活性化合物の量は、本明細書および特許請求の範囲において、「有効量」と呼ぶ。例えば、鼻腔内投与用の用量は、典型的には、約０．００１〜約０．１mg/kg体重の範囲である。ヒトでは、ペプチド含有量に基づく好ましい皮下投与用量は、約０．００１mg〜約１００mg；好ましくは、約０．１mg〜約１５mgである。
【００８６】
本発明は、以下の実施例においてさらに記載されるが、これは、単に例示を意図するものであり、本発明の範囲を限定するものではない。
【実施例】
【００８７】
Ｉ．好ましい中間体の調製
実施例１
Ｆｍｏｃ−Ｌｉｎｋｅｒ−ＢＨＡ樹脂の調製
ベンズヒドリルアミンコポリスチレン−１％ジビニルベンゼン架橋樹脂（１０．０ｇ、９．３ミリ当量（mequiv）、１００〜２００ＡＳＴＭメッシュ、Advanced ChemTech）をＣＨ２Ｃｌ２１００mL中で膨張させ、濾過して、ＣＨ２Ｃｌ２、６％ＤＩＰＥＡ／ＣＨ２Ｃｌ２（２回）、ＣＨ２Ｃｌ２（２回）各１００mLで順次洗浄した。２５％ＤＭＦ／ＣＨ２Ｃｌ２１００mL中、ｐ−（（Ｒ、Ｓ）−α−（１−（９Ｈ−フルオレン−９−イル）−メトキシホルムアミド）−２，４−ジメトキシベンジル）−フェノキシ酢酸（Ｆｍｏｃ−Ｌｉｎｋｅｒ）（７．０１ｇ、１３．０mmol）、Ｎ−ヒドロキシベンゾトリアゾール（２．１６ｇ、１６．０mmol）およびＮ，Ｎ’−ジイソプロピルカルボジイミド（２．０４mL、１３．０mmol）を用いて、室温で２４時間樹脂を処理した。樹脂を濾過して、ＣＨ２Ｃｌ２（２回）、イソプロパノール（２回）、ＤＭＦおよびＣＨ２Ｃｌ２（３回）各１００mLで順次洗浄した。Kaiserニンヒドリン分析は陰性であった。樹脂を真空下で乾燥させ、Ｆｍｏｃ−Ｌｉｎｋｅｒ−ＢＨＡ樹脂１６．１２ｇを得た。この樹脂の一部（３．５mg）をＦｍｏｃ脱保護および定量ＵＶ分析に付して、この分析から、０．５６mmol/gのローディングが示された。
【００８８】
実施例２
フルオレニルメチルオキシカルボニル（Ｆｍｏｃ）化学を用いるApplied Biosystem 433Aシンセサイザーによるペプチド合成のプロトコール
Applied Biosystem 433Aシンセサイザー（Foster City, CA）による０．２５mmolスケールのペプチド合成のために、４１mLの反応容器で樹脂サンプリングまたは非樹脂サンプリングのいずれかでＦａｓｔＭｏｃ０．２５mmolサイクルを用いた。Ｆｍｏｃ−アミノ酸樹脂を、２．１ｇのＮＭＰ、２ｇの０．４５ＭのＨＯＢＴ／ＨＢＴＵ−ＤＭＦ溶液および２ＭのＤＩＥＡで懸濁した後、反応容器に移した。基本的なＦａｓｔＭｏｃカップリングサイクルは、「ＢＡＤＥＩＦＤ」により表される。ここで、各文字は、モジュール（Applied Biosystemsにより定義される）を表す。例：
【００８９】
Ｂは、２０％ピペリジン／ＮＭＰを使用したＦｍｏｃ脱保護ならびに関連する洗浄および３０分間の読み取り（ＵＶモニタリングまたは電気伝導のいずれか）のモジュールを表す；Ａは、０．４５ＭのＨＢＴＵ／ＨＯＢｔおよび２．０ＭのＤＩＥＡを用いたカートリッジ内のアミノ酸の活性化ならびにＮ２バブリングによる混合のモジュールを表す；Ｄは、反応容器中での樹脂のＮＭＰ洗浄のモジュールを表す；Ｅは、カップリングのための活性化アミノ酸の反応容器への移動のモジュールを表す；Ｉは、反応容器のボルテックスをオン、オフしながらの１０分間の待機時間のモジュールを表す；そして、Ｆは、カートリッジの清浄、約１０分間のカップリングおよび反応容器の排水のモジュールを表す。カップリングは、典型的には、モジュール「Ｉ」の１回または複数回の追加により延長した。例えば、ダブルカップリングは、手順「ＢＡＤＥＩＩＡＤＥＩＦＤ」を行うことにより実施した。ｃなどの他のモジュールは塩化メチレン洗浄に利用可能であり、「Ｃ」は無水酢酸を用いたキャッピングに利用可能である。また、移動させる溶媒または試薬の量を変更するために、例えば、移動時間などの様々な機能のタイミングを変えることにより、個々のモジュールも変更可能である。上記のサイクルは、典型的には、１個のアミノ酸をカップリングさせるために使用した。しかし、テトラペプチドを合成するために、サイクルを繰り返し、つなぎ合わせた。例えば、ＢＡＤＥＩＩＡＤＥＩＦＤを用いて第一のアミノ酸をカップリングさせ、続いて、ＢＡＤＥＩＩＡＤＥＩＦＤを用いて第二のアミノ酸をカップリングさせ、続いて、ＢＡＤＥＩＩＡＤＥＩＦＤを用いて第三のアミノ酸をカップリングさせ、続いて、ＢＡＤＥＩＩＡＤＥＩＦＤを用いて第四のアミノ酸をカップリングさせ、続いて、ＢＩＤＤｃｃを用いて最後の脱保護および洗浄を行った。
【００９０】
実施例３
Ｈ−Ｉｌｅ−Ｌｙｓ−Ｐｒｏ−Ｇｌｕ−Ａｌａ−Ｐｒｏ−Ｇｌｙ−Ｇｌｕ−Ａｓｐ−Ａｌａ−Ｓｅｒ−Ｐｒｏ−Ｇｌｕ−Ｇｌｕ−Ｌｅｕ−Ａｓｎ−Ａｒｇ−Ｔｙｒ−Ｔｙｒ−Ａｌａ−Ｓｅｒ−Ｌｅｕ−Ａｒｇ−Ｈｉｓ−Ｔｙｒ−Ｌｅｕ−Ａｓｎ−Ｌｅｕ−Ｖａｌ−Ｔｈｒ−Ａｒｇ−Ｇｌｎ−Ａｒｇ−Ｔｙｒ−ＮＨ２（ＰＹＹ３−３６）の調製
【化８】
2013507414.tif 000014
Ｆｍｏｃ化学を用いて、Applied Biosystem 433Aシンセサイザーで上記ペプチドを合成した。実施例２に記載のモジュールを使用して、ダブルカップリング用にシンセサイザーをプログラムした。実施例１のＦｍｏｃ−Ｌｉｎｋｅｒ−ＢＨＡ樹脂（４５０mg、０．２５mmol）を使用して、０．２５mmolスケールで合成を実施した。合成の終了後、切断のために樹脂を振とう機上の反応容器に移した。９７％ＴＦＡ／３％Ｈ２Ｏ１３．５mLおよびトリイソプロピルシラン１．５mLを使用して、室温で１８０分間かけて、ペプチドを樹脂から切断した。脱保護溶液を、冷ＥＴ２Ｏ１００mLに添加し、ＴＦＡ１mLおよび冷Ｅｔ２Ｏ３０mLで洗浄してペプチドを沈殿させた。２×５０mLポリプロピレンチューブでペプチドを遠心した。それぞれのチューブの沈殿物を１個のチューブにまとめ、冷ＥＴ２Ｏで３回洗浄して、実験室の真空管につないだデシケーター内で乾燥させた。
【００９１】
粗物質を、Pursuit C18−カラム（２５０×５０mm、粒径１０μm）の分取ＨＰＬＣにより精製し、２〜９９％Ｂ（バッファーＡ：０．１％ＴＦＡ／Ｈ２Ｏ；バッファーＢ：０．１％ＴＦＡ／ＣＨ３ＣＮ）の直線勾配にて、流速６０mL／分で、９０分間溶離させた。２２０／２８０nmで検出。フラクションを回収し、ＨＰＬＣ分析により確認した。純粋な生成物を含有するフラクションを合わせ、凍結乾燥して、白色の無定形粉末１５１mg（１８％）を得た。（ＥＳ）＋−ＬＣＭＳ  ｍ／ｅ、Ｃ１８０Ｈ２７９Ｎ５３Ｏ５４の計算値４０４９．５５、実測値４０５０．２０。
【００９２】
実施例４
Ａｃ−Ｉｌｅ−Ｌｙｓ−Ｐｑａ−Ａｒｇ−Ｈｉｓ−Ｔｙｒ−Ｌｅｕ−Ａｓｎ−Ｔｒｐ−Ｖａｌ−Ｔｈｒ−Ａｒｇ−Ｇｌｎ−（ＮＭｅ）Ａｒｇ−Ｔｙｒ−ＮＨ２の調製
【化９】
2013507414.tif 000015
実施例３の手順に従って、実施例１のＦｍｏｃ−Ｌｉｎｋｅｒ−ＢＨＡ樹脂（４５０mg、０．２５mmol）を固相合成に付し、粗ペプチドを精製して、白色の無定形粉末６８mg（１５％）を得た。（ＥＳ）＋−ＬＣＭＳ  ｍ／ｅ、Ｃ１０６Ｈ１５６Ｎ３４Ｏ２２の計算値２２５７．２１、実測値２２５７．１９。
【００９３】
実施例５
Ｂｏｃ−Ｉｌｅ−Ｌｙｓ（ＴＦＡ塩）−Ｐｑａ−Ａｒｇ（Ｐｂｆ）−Ｈｉｓ（Ｔｒｔ）−Ｔｙｒ（ｔＢｕ）−Ｌｅｕ−Ａｓｎ（Ｔｒｔ）−Ｔｒｐ−Ｖａｌ−Ｔｈｒ（ｔＢｕ）−Ａｒｇ（Ｐｂｆ）−Ｇｌｎ（Ｔｒｔ）−ＮＭｅ−Ａｒｇ（Ｍｔｒ）−Ｔｙｒ（ｔＢｕ）−Ｒｉｎｋアミド樹脂の調製
ベンズヒドリルアミンコポリスチレン−１％ジビニルベンゼン架橋樹脂（５０．０ｇ、５５．０ミリ当量、１００〜２００ＡＳＴＭメッシュ、Advanced ChemTech cat #SB5003）をＣＨ２Ｃｌ２４００mL中で膨張させ、濾過して、ＣＨ２Ｃｌ２、６％ＤＩＰＥＡ／ＣＨ２Ｃｌ２（２回）、ＣＨ２Ｃｌ２（２回）各１００mLで順次洗浄した。ＤＭＦ４００mL中、ｐ−［（Ｒ、Ｓ）−α−［１−（９Ｈ−フルオレン−９−イル）−メトキシホルムアミド］−２，４−ジメトキシベンジル］−フェノキシ酢酸（Ｆｍｏｃ−Ｌｉｎｋｅｒ）（３７．１ｇ、６９．０mmol）、Ｎ−ヒドロキシベンゾトリアゾール（９．３５６ｇ、６９．０mmol）およびＮ，Ｎ’−ジイソプロピルカルボジイミド（５５．０mL、３００mmol）を用いて室温で２４時間樹脂を処理した。
【００９４】
樹脂を濾過して、ＣＨ２Ｃｌ２（２回）、イソプロパノール（２回）、ＤＭＦおよびＣＨ２Ｃｌ２（３回）各４００mLで順次洗浄した。Kaiserニンヒドリン分析は陰性であった。Ｆｍｏｃ除去および洗浄の後、Ｆｍｏｃ−Ｔｙｒ（Ｂｕｔ）−ＯＨ（４１．４０ｇ、９０mmol）、Ｎ−ヒドロキシベンゾトリアゾール（１２．２ｇ、９０．０mmol）およびＮ，Ｎ’−ジイソプロピルカルボジイミド（５５．０mL、３００mmol）のＤＭＦ（４００mL）溶液を添加し、室温で２４時間反応を行った。反応が完了していなかったため、ＤＩＥＡ２５．０mLを添加し、反応をさらに１．５時間続けた。カップリングがまだ完了していなかったため、２５％Ａｃ２Ｏ、５％ＤＩＥＡのＤＭＦ溶液で３／４時間アセチル化を行ったところ、ニンヒドリン陰性になった（反応の完了）。洗浄およびＦｍｏｃ除去の後、Ｆｍｏｃ−ＮＭｅＡｒｇ（Ｍｔｒ）−ＯＨ（４３．０ｇ、６９．０mmol）、Ｎ−ヒドロキシベンゾトリアゾール（９．３５６ｇ、６９．０mmol）およびＮ，Ｎ’−ジイソプロピルカルボジイミド（１１０．０mL、６３０mmol）のＤＭＦ（４００mL）溶液を添加し、反応を２４時間行うことにより反応が完了した。洗浄およびＦｍｏｃ除去の後、Ｆｍｏｃ−Ｇｌｎ（Ｔｒｔ）−ＯＨ（５５．０ｇ、９０．０mmol）、Ｎ−ヒドロキシベンゾトリアゾール（１２．２ｇ、９０．０mmol）およびＮ，Ｎ’−ジイソプロピルカルボジイミド（５５．０mL、３００mmol）のＤＭＦ（４００mL）溶液を添加し、反応を２４時間行った。クロラニルテストで反応の完了が決定された。
【００９５】
樹脂を洗浄および乾燥させて、２５．０ｇ（１８．４％）を様々な類似体用に保存した。残りの樹脂１１０．０ｇ（４４．６mmol）を繰り越し、１．５５当量のＦｍｏｃ−Ａｒｇ（Ｐｂｆ）−ＯＨ（４５．０ｇ、７３．５mmol）、Ｎ−ヒドロキシベンゾトリアゾール（９．９５ｇ、７３．５mmol）およびＮ，Ｎ’−ジイソプロピルカルボジイミド（５５．０mL、３３０mmol）のＤＭＦ（４００mL）溶液を添加し、反応を室温で２４時間行ったところ、ニンヒドリン試験から反応の完了が確認された。洗浄およびＦｍｏｃ除去の後、Ｆｍｏｃ−Ｔｈｒ（Ｂｕｔ）−ＯＨ（２７．４０ｇ、７３．５mmol）、Ｎ−ヒドロキシベンゾトリアゾール（９．９５ｇ、７３．５mmol）およびＮ，Ｎ’−ジイソプロピルカルボジイミド（５５mL、３００mmol）のＤＭＦ（４００mL）溶液を添加し、反応を室温で２４時間行ったところ、ニンヒドリン試験により反応の完了が決定された。洗浄およびＦｍｏｃ除去の後、Ｆｍｏｃ−Ｖａｌ−ＯＨ（２３．６ｇ、７３．５mmol）、Ｎ−ヒドロキシベンゾトリアゾール（９．９５ｇ、７３．５mmol）およびＮ，Ｎ’−ジイソプロピルカルボジイミド（５５．０mL、３００mmol）のＤＭＦ（４００）溶液を添加し、反応を室温で６時間行ったところ、反応が完了した。
【００９６】
洗浄およびＦｍｏｃの除去の後、Ｆｍｏｃ−Ｔｒｐ−ＯＨ（２９．５０ｇ、７３．５mmol）、Ｎ−ヒドロキシベンゾトリアゾール（９．９５ｇ、７３．５mmol）およびＮ，Ｎ’−ジイソプロピルカルボジイミド（５５．０mL、３００mmol）のＤＭＦ（４００mL）溶液を添加した。６時間後に反応が完了した。洗浄およびＦｍｏｃ除去の後、Ｆｍｏｃ−Ａｓｎ（Ｔｒｔ）−ＯＨ（４１．４ｇ、７３．５mmol）、Ｎ−ヒドロキシベンゾトリアゾール（９．９５ｇ、７３．５mmol）およびＮ，Ｎ’−ジイソプロピルカルボジイミド（５５mL、３００mmol）のＤＭＦ（４００mL）溶液を添加し、反応を室温で１８時間行ったところ、反応が完了した。
【００９７】
洗浄およびＦｍｏｃ除去の後、Ｆｍｏｃ−Ｌｅｕ−ＯＨ（３３．４ｇ、７３．５mmol）、Ｎ−ヒドロキシベンゾトリアゾール（９．９５ｇ、７３．５mmol）およびＮ，Ｎ’−ジイソプロピルカルボジイミド（５５．０mL、３００mmol）のＤＭＦ（６００mL）溶液を添加し、反応を６時間行った。洗浄およびＦｍｏｃの除去の後、Ｆｍｏｃ−Ｔｙｒ（Ｂｕｔ）−ＯＨ（４１．４０ｇ、７３．５mmol）、Ｎ−ヒドロキシベンゾトリアゾール（９．９５ｇ、７３．５mmol）およびＮ，Ｎ’−ジイソプロピルカルボジイミド（５５．０mL、３００mmol）のＤＭＦ（５００mL）溶液を添加した。１８時間後に反応が完了した。
【００９８】
洗浄およびＦｍｏｃ除去の後、Ｆｍｏｃ−Ｈｉｓ（Ｔｒｔ）−ＯＨ（５５．５ｇ、７３．５mmol）、Ｎ−ヒドロキシベンゾトリアゾール（９．９５ｇ、７３．５mmol）およびＮ，Ｎ’−ジイソプロピルカルボジイミド（５５．０mL、３００mmol）のＤＭＦ（４００mL）溶液を添加した。２０時間後に反応が完了した。洗浄および乾燥の後、類似体合成用にペプチド樹脂４０．０ｇを取り出し保存した。次に、ＣＨ２Ｃｌ２、ＤＭＦで樹脂を洗浄し、Ｆｍｏｃを除去して、ＤＭＦで再度洗浄した後、Ｆｍｏｃ−Ａｒｇ（Ｐｂｆ）−ＯＨ（５８．４ｇ、７３．５mmol）、Ｎ−ヒドロキシベンゾトリアゾール（９．９５ｇ、７３．５mmol）およびＮ，Ｎ’−ジイソプロピルカルボジイミド（５５．０mL、３００mmol）を添加した。１８時間後に反応が完了した。
【００９９】
洗浄およびＦｍｏｃの除去の後、Ｆｍｏｃ−Ｐｑａ−ＯＨ（２１．４ｇ、７３．５mmol）、Ｎ−ヒドロキシベンゾトリアゾール（５．７ｇ、４２．０５mmol）およびＮ，Ｎ’−ジイソプロピルカルボジイミド（５５．０mL、３００mmol）のＤＭＦ（５００mL）溶液を添加した。１６時間後に反応が完了した。洗浄およびＦｍｏｃ除去の後、Ｆｍｏｃ−Ｌｙｓ（Ａｌｌｏｃ）−ＯＨ（１８．５ｇ、７３．５mmol）、Ｎ−ヒドロキシベンゾトリアゾール（９．９５ｇ、７３．５mmol）およびＮ，Ｎ’−ジイソプロピルカルボジイミド（５５．０mL、３００mmol）のＤＭＦ（５００mL）溶液を添加した。２０時間後、クロラニルテストにより反応の完了が決定された。洗浄およびＦｍｏｃの除去の後、Ｆｍｏｃ−Ｉｌｅ−ＯＨ（２６．１ｇ、７３．５mmol）、Ｎ−ヒドロキシベンゾトリアゾール（９．９５ｇ、７３．５mmol）およびＮ，Ｎ’−ジイソプロピルカルボジイミド（５５．０mL、３００mmol）のＤＭＦ（５００mL）溶液を添加した。２０時間後に反応が完了した。樹脂を濾過して、ＣＨ２Ｃｌ２（２回）、イソプロパノール（２回）、ＤＭＦおよびＣＨ２Ｃｌ２（３回）各６００mLで順次洗浄した。真空下で乾燥させた後、０．２１mm/gのローディングのペプチド樹脂２１０．０ｇを得た。
【０１００】
実施例６
Ｆｍｏｃ−Ｉｌｅ−Ｌｙｓ（Ａｌｌｏｃ）−Ｐｑａ−Ａｒｇ（Ｐｂｆ）−Ｈｉｓ（Ｔｒｔ）−Ｔｙｒ（ｔＢｕ）−Ｌｅｕ−Ａｓｎ（Ｔｒｔ）−Ｔｒｐ−Ｖａｌ−Ｔｈｒ（ｔＢｕ）−Ａｒｇ（Ｐｂｆ）−Ｇｌｎ（Ｔｒｔ）−ＮＭｅ−Ａｒｇ（Ｍｔｒ）−Ｔｙｒ（ｔＢｕ）−Ｒｉｎｋアミド樹脂の調製
実施例５のＦｍｏｃ−Ｈｉｓ（Ｔｒｔ）−Ｔｙｒ（ｔＢｕ）−Ｌｅｕ−Ａｓｎ（Ｔｒｔ）−Ｔｒｐ−Ｖａｌ−Ｔｈｒ（ｔＢｕ）−Ａｒｇ（Ｐｂｆ）−Ｇｌｎ（Ｔｒｔ）−ＮＭｅ−Ａｒｇ（Ｍｔｒ）−Ｔｙｒ（ｔＢｕ）−Ｒｉｎｋアミド樹脂４０．０ｇを、ＣＨ２Ｃｌ２（３回）およびＤＭＦ（２回）で洗浄し膨張させて、Ｆｍｏｃ除去を行った。ＤＭＦ（４回）で洗浄した後、Ｆｍｏｃ−Ａｒｇ（Ｐｄｆ）（９．８６ｇ、１４．０mmol）、Ｎ−ヒドロキシベンゾトリアゾール（５．９５ｇ、４４．０mmol）およびＮ，Ｎ’−ジイソプロピルカルボジイミド（４５．０mL、２５０mmol）のＤＭＦ（３００mL）溶液を添加した。２０時間後に反応が完了した。洗浄およびＦｍｏｃの除去の後、Ｆｍｏｃ−Ｐｑａ−ＯＨ（４．２ｇ、２０．５mmol）、Ｎ−ヒドロキシベンゾトリアゾール（２．７ｇ、２０．５mmol）およびＮ，Ｎ’−ジイソプロピルカルボジイミド（４５．０mL、２５０mmol）のＤＭＦ（２５０mL）溶液を添加した。１８時間後に反応が完了した。洗浄およびＦｍｏｃの除去の後、Ｆｍｏｃ−Ｌｙｓ（Ａｌｌｏｃ）−ＯＨ（６．３ｇ、１４．０mmol）、Ｎ−ヒドロキシベンゾトリアゾール（５．９５ｇ、４４．０mmol）およびＮ，Ｎ’−ジイソプロピルカルボジイミド（４５．０mL、２５０mmol）を添加し、反応を５時間行って、黄色クロニル（yellow chloronil）テストにより反応の完了を確認した。Ｆｍｏｃ除去および洗浄の後、Ｆｍｏｃ−Ｉｌｅ−ＯＨ（５．０ｇ、１４．０mmol）、Ｎ−ヒドロキシベンゾトリアゾール（２．７ｇ、２０．５mmol）およびＮ，Ｎ’−ジイソプロピルカルボジイミド（４５．０mL、２５０mmol）のＤＭＦ（２５０mL）溶液を添加した。１８時間後に反応が完了した。ＤＭＦで４回、ＣＨ２Ｃｌ２で３回、ＭｅＯＨで３回、ＣＨ２Ｃｌ２で３回、そして、ＭｅＯＨで４回ペプチド樹脂を順次洗浄し、真空下で乾燥させて、０．２２mm/gのローディングの保護ペプチド樹脂４１．６ｇを得た。
【０１０１】
実施例６Ａ
Ｆｍｏｃ−Ｉｌｅ−Ｌｙｓ（Ａｌｌｏｃ）−Ｐｑａ−Ｃｉｔ−Ｈｉｓ（Ｔｒｔ）−Ｔｙｒ（ｔＢｕ）−Ｌｅｕ−Ａｓｎ（Ｔｒｔ）−Ｔｒｐ−Ｖａｌ−Ｔｈｒ（ｔＢｕ）−Ａｒｇ（Ｐｂｆ）−Ｇｌｎ（Ｔｒｔ）−ＮＭｅ−Ａｒｇ（Ｍｔｒ）−Ｔｙｒ（ｔＢｕ）−Ｒｉｎｋアミド樹脂の調製
実施例５のＦｍｏｃ−Ｈｉｓ（Ｔｒｔ）−Ｔｙｒ（ｔＢｕ）−Ｌｅｕ−Ａｓｎ（Ｔｒｔ）−Ｔｒｐ−Ｖａｌ−Ｔｈｒ（ｔＢｕ）−Ａｒｇ（Ｐｂｆ）−Ｇｌｎ（Ｔｒｔ）−ＮＭｅ−Ａｒｇ（Ｍｔｒ）−Ｔｙｒ（ｔＢｕ）−Ｒｉｎｋアミド樹脂４０．０ｇを、ＣＨ２Ｃｌ２（３回）およびＤＭＦ（２回）で洗浄し膨張させて、Ｆｍｏｃ除去を行った。ＤＭＦ（４回）で洗浄した後、Ｆｍｏｃ−Ｃｉｔ（４．４ｇ、１４．０mmol）、Ｎ−ヒドロキシベンゾトリアゾール（５．９５ｇ、４４．０mmol）およびＮ，Ｎ’−ジイソプロピルカルボジイミド（４５．０mL、２５０mmol）のＤＭＦ（３００mL）溶液を添加した。２０時間後に反応が完了した。洗浄およびＦｍｏｃの除去の後、Ｆｍｏｃ−Ｐｑａ−ＯＨ（４．２ｇ、２０．５mmol）、Ｎ−ヒドロキシベンゾトリアゾール（２．７ｇ、２０．５mmol）およびＮ，Ｎ’−ジイソプロピルカルボジイミド（４５．０mL、２５０mmol）のＤＭＦ（２５０ｍＬ）溶液を添加した。１８時間後に反応が完了した。洗浄およびＦｍｏｃの除去の後、Ｆｍｏｃ−Ｌｙｓ（Ａｌｌｏｃ）−ＯＨ（６．３ｇ、１４．０mmol）、Ｎ−ヒドロキシベンゾトリアゾール（５．９５ｇ、４４．０mmol）およびＮ，Ｎ’−ジイソプロピルカルボジイミド（４５．０mL、２５０mmol）を添加し、反応を５時間行って、黄色クロニル試験により反応の完了を確認した。Ｆｍｏｃ除去および洗浄の後、Ｆｍｏｃ−Ｉｌｅ−ＯＨ（５．０ｇ、１４．０mmol）、Ｎ−ヒドロキシベンゾトリアゾール（２．７ｇ、２０．５mmol）およびＮ，Ｎ’−ジイソプロピルカルボジイミド（４５．０mL、２５０mmol）のＤＭＦ（２５０mL）溶液を添加した。１８時間後に反応が完了した。ＤＭＦで４回、ＣＨ２Ｃｌ２で３回、ＭｅＯＨで３回、ＣＨ２Ｃｌ２で３回、そして、ＭｅＯＨで４回ペプチド樹脂を順次洗浄し、真空下で乾燥させて、０．２２mm/gのローディングの保護ペプチド樹脂４１．６ｇを得た。
【０１０２】
ＩＩ．本発明の好ましい実施態様の調製
実施例７
ＣＨ３−（ＯＣＨ２ＣＨ２）５−Ｏ−ＣＨ２−ＣＯ−Ｉｌｅ−Ｌｙｓ（パルミトイル−６Ａｈｘ）−Ｐｑａ−Ａｒｇ−Ｈｉｓ−Ｔｙｒ−Ｌｅｕ−Ａｓｎ−Ｔｒｐ−Ｖａｌ−Ｔｈｒ−Ａｒｇ−Ｇｌｎ−（ＮＭｅ）−Ａｒｇ−Ｔｙｒ−ＮＨ２  １：３  ＴＦＡの調製
【化１０】
2013507414.tif 000016
実施例６から得られたＦｍｏｃ−Ｉｌｅ−Ｌｙｓ（Ａｌｌｏｃ）−Ｐｑａ−Ａｒｇ（Ｐｂｆ）−Ｈｉｓ（Ｔｒｔ）−Ｔｙｒ（ｔＢｕ）−Ｌｅｕ−Ａｓｎ（Ｔｒｔ）−Ｔｒｐ−Ｖａｌ−Ｔｈｒ（ｔＢｕ）−Ａｒｇ（Ｐｂｆ）−Ｇｌｎ（Ｔｒｔ）−ＮＭｅ−Ａｒｇ（Ｍｔｒ）−Ｔｙｒ（ｔＢｕ）−Ｒｉｎｋアミド樹脂１．０ｇ（０．２２mmol）を、ＤＭＦで洗浄して、脱保護および洗浄し、ＤＭＦ中、［２−（２−｛２−［２−（２−メトキシ−エトキシ）−エトキシ］−エトキシ｝−エトキシ）−エトキシ］−酢酸であるｍ−ｄＰＥＧ  ｎ＝６（Quanta Biodesign、８６mg、０．２７５mmol）；Ｎ−ヒドロキシベンゾトリアゾール（４０mg、０．３０mmol）およびジイソプロピル−カルボジイミド（１．５０ml、２．０mmol）でカップリングを行い、１８時間撹拌した。ＤＭＦで４回洗浄した後、Ａｒ雰囲気下、ＰｄＣｌ２（トリフェニルホスフィン）２５０．０mg、モルホリン５０μL、酢酸１００μLのＤＭＦ（１５mL）溶液でａｌｌｏｃ保護基を除去して、次に、Ｂｕ３ＳｎＨ５００μLを添加した。黄色の溶液が赤褐色になるまで、Ａｒでバブリングを続けた。次に、反応物を１／４時間混合し、ＤＭＦで３回洗浄した。上記手順を、１／４〜１／２時間かけて再度繰り返した（この時点で、暗褐色がほぼ黒色になる）。ＤＭＦで２回、５％ＤＩＥＡ／ＤＭＦで２回、そして、ＤＭＦで４回生成物を洗浄した。Ｆｍｏｃ−６−アミノヘキサン酸（３５５．０mg；１．０mmol）、Ｎ−ヒドロキシベンゾトリアゾール（１５０mg、１．１１０mmol）およびジイソプロピル−カルボジイミド（８７５μl、５．０mmol）のＤＭＦ（１５mL）溶液で１８時間カップリングを行った。Ｆｍｏｃ除去、ＤＭＦおよびＣＨ２Ｃｌ２による洗浄の後、Ｎ−ヒドロキシベンゾトリアゾール（４２５mg、３．１５０mmol）、ＤＩＥＡ（５００μL、３．０mmol）およびパルミトイルクロリド（２．８ml、２．７５mmol）を、ＣＨ２Ｃｌ２１５mL中で５分間反応させて、ペプチド樹脂に添加した。反応物を１８時間撹拌し、次に、ＤＭＦで２回、ＣＨ２Ｃｌ２で３回洗浄した後、ＴＦＡ１７mL、ｉＰｒＳｉＨ４００μLおよびプロパンチオール８００μLで６時間かけて切断し、Ｅｔ２Ｏ１００．０mL中で沈殿させ、遠心し、洗浄して、真空下で乾燥させた。実施例３の手順に従って粗ペプチドを精製して、白色の無定形粉末７０mg（１２％）を得た。（ＥＳ）＋−ＬＣＭＳ  ｍ／ｅ、Ｃ１３９Ｈ２１９Ｎ３５Ｏ３０の計算値２８５８．６７、実測値２８５８．６５。
【０１０３】
実施例８
ＣＨ３−（ＯＣＨ２ＣＨ２）７−Ｏ−（ＣＨ２）２−ＣＯ−Ｉｌｅ−Ｌｙｓ（パルミトイル−６Ａｈｘ）−Ｐｑａ−Ａｒｇ−Ｈｉｓ−Ｔｙｒ−Ｌｅｕ−Ａｓｎ−Ｔｒｐ−Ｖａｌ−Ｔｈｒ−Ａｒｇ−Ｇｌｎ−（ＮＭｅ）−Ａｒｇ−Ｔｙｒ−ＮＨ２  １：３  ＴＦＡの調製
【化１１】
2013507414.tif 000017
実施例６から得られたＦｍｏｃ−Ｉｌｅ−Ｌｙｓ（Ａｌｌｏｃ）−Ｐｑａ−Ａｒｇ（Ｐｂｆ）−Ｈｉｓ（Ｔｒｔ）−Ｔｙｒ（ｔＢｕ）−Ｌｅｕ−Ａｓｎ（Ｔｒｔ）−Ｔｒｐ−Ｖａｌ−Ｔｈｒ（ｔＢｕ）−Ａｒｇ（Ｐｂｆ）−Ｇｌｎ（Ｔｒｔ）−ＮＭｅ−Ａｒｇ（Ｍｔｒ）−Ｔｙｒ（ｔＢｕ）−Ｒｉｎｋアミド樹脂１．０ｇ（０．２２mmol）を、ＤＭＦで洗浄して、脱保護、洗浄して、ＤＭＦ中、ｍ−ｄＰＥＧ  ｎ＝８（Quanta Biodesign、１１４mg、０．２７５mmol）；Ｎ−ヒドロキシベンゾトリアゾール（４０mg、０．３０mmol）およびジイソプロピル−カルボジイミド（１．５０ml、２．０mmol）で１８時間カップリングを行った。ＤＭＦで４回洗浄した後、Ａｒ雰囲気下、ＰｄＣｌ２（トリフェニルホスフィン）２５０．０mg、モルホリン５０μL、酢酸１００μLのＤＭＦ（１５mL）溶液でａｌｌｏｃ保護基を除去して、次に、Ｂｕ３ＳｎＨ５００μLを添加した。黄色の溶液が赤褐色になるまで、Ａｒでバブリングを続けた。次に、反応物を１／４時間混合し、ＤＭＦで３回洗浄した。上記手順を、１／４〜１／２時間かけて再度繰り返した（この時点で、暗褐色がほぼ黒色になる）。ＤＭＦで２回、５％ＤＩＥＡ／ＤＭＦで２回、そして、ＤＭＦで４回生成物を洗浄した。Ｆｍｏｃ−６−アミノヘキサン酸（３５５．０mg；１．０mmol）、Ｎ−ヒドロキシベンゾトリアゾール（１５０mg、１．１１０mmol）およびジイソプロピル−カルボジイミド（８７５μl、５．０mmol）のＤＭＦ（１５mL）溶液で１８時間カップリングを行った。Ｆｍｏｃ除去、ＤＭＦおよびＣＨ２Ｃｌ２による洗浄の後、Ｎ−ヒドロキシベンゾトリアゾール（４２５mg、３．１５０mmol）、ＤＩＥＡ（５００μL、３．０mmol）およびパルミトイルクロリド（２．８ml、２．７５mmol）を、ＣＨ２Ｃｌ２１５mL中で５分間反応させて、ペプチド樹脂に添加した。反応物を１８時間撹拌して、ＤＭＦで２回、ＣＨ２Ｃｌ２で３回洗浄した後、ＴＦＡ１７mL、ｉＰｒＳｉＨ４００μLおよびプロパンチオール８００μLで６時間かけて切断し、Ｅｔ２Ｏ１００．０mL中で沈殿させ、遠心し、洗浄して、真空下で乾燥させた。実施例３の手順に従って粗ペプチドを精製して、白色の無定形粉末１４３mg（２４％）を得た。（ＥＳ）＋−ＬＣＭＳ  ｍ／ｅ、Ｃ１４４Ｈ２２９Ｎ３５Ｏ３２の計算値２９６０．７４、実測値２９６０．７３。
【０１０４】
実施例９
ＣＨ３−（ＯＣＨ２ＣＨ２）１１−Ｏ−（ＣＨ２）２−ＣＯ−Ｉｌｅ−Ｌｙｓ（パルミトイル−６Ａｈｘ）−Ｐｑａ−Ａｒｇ−Ｈｉｓ−Ｔｙｒ−Ｌｅｕ−Ａｓｎ−Ｔｒｐ−Ｖａｌ−Ｔｈｒ−Ａｒｇ−Ｇｌｎ−（ＮＭｅ）−Ａｒｇ−Ｔｙｒ−ＮＨ２  １：３  ＴＦＡの調製
【化１２】
2013507414.tif 000018
実施例６から得られたＦｍｏｃ−Ｉｌｅ−Ｌｙｓ（Ａｌｌｏｃ）−Ｐｑａ−Ａｒｇ（Ｐｂｆ）−Ｈｉｓ（Ｔｒｔ）−Ｔｙｒ（ｔＢｕ）−Ｌｅｕ−Ａｓｎ（Ｔｒｔ）−Ｔｒｐ−Ｖａｌ−Ｔｈｒ（ｔＢｕ）−Ａｒｇ（Ｐｂｆ）−Ｇｌｎ（Ｔｒｔ）−ＮＭｅ−Ａｒｇ（Ｍｔｒ）−Ｔｙｒ（ｔＢｕ）−Ｒｉｎｋアミド樹脂１．０ｇ（０．２２mmol）を、ＤＭＦで洗浄して、脱保護、洗浄して、ＤＭＦ中、ｍ−ｄＰＥＧ  ｎ＝１２  ＮＨＳエステル（Quanta Biodesign、１８９mg、０．２７５mmol）；Ｎ−ヒドロキシベンゾトリアゾール（４０mg、０．３０mmol）およびジイソプロピル−カルボジイミド（３２０μＬ、２．０mmol）で１８時間カップリングを行った。ＤＭＦで４回洗浄した後、Ａｒ雰囲気下、ＰｄＣｌ２（トリフェニルホスフィン）２５０．０mg、モルホリン５０μL、酢酸１００μLのＤＭＦ（１５mL）溶液でａｌｌｏｃ保護基を除去して、次に、Ｂｕ３ＳｎＨ５００μLを添加した。黄色の溶液が赤褐色になるまで、Ａｒでバブリングを続けた。次に、反応物を１／４時間混合し、ＤＭＦで３回洗浄した。上記手順を、１／４〜１／２時間かけて再度繰り返した（この時点で、暗褐色がほぼ黒色になる）。ＤＭＦで２回、５％ＤＩＥＡ／ＤＭＦで２回、そして、ＤＭＦで４回生成物を洗浄した。Ｆｍｏｃ−６−アミノヘキサン酸（３５５．０mg；１．０mmol）、Ｎ−ヒドロキシベンゾトリアゾール（１５０mg、１．１１０mmol）およびジイソプロピル−カルボジイミド（８７５μl、５．０mmol）のＤＭＦ（１５mL）溶液で１８時間カップリングを行った。Ｆｍｏｃ除去、ＤＭＦおよびＣＨ２Ｃｌ２による洗浄の後、Ｎ−ヒドロキシベンゾトリアゾール（４２５mg、３．１５０mmol）、ＤＩＥＡ（５００μL、３．０mmol）およびパルミトイルクロリド（２．８ml、２．７５mmol）を、ＣＨ２Ｃｌ２１５mL中で５分間反応させて、ペプチド樹脂に添加した。反応物を１８時間撹拌して、ＤＭＦで２回、ＣＨ２Ｃｌ２で３回洗浄した後、ＴＦＡ１７mL、ｉＰｒＳｉＨ４００μLおよびプロパンチオール８００μLで６時間かけて切断し、Ｅｔ２Ｏ１００．０mL中で沈殿させ、遠心し、洗浄して、真空下で乾燥させた。実施例３の手順に従って粗ペプチドを精製して、白色の無定形粉末５４mg（９％）を得た。（ＥＳ）＋−ＬＣＭＳ  ｍ／ｅ、Ｃ１５２Ｈ２４５Ｎ３５Ｏ３６の計算値３１３６．８４、実測値３１３６．８３。
【０１０５】
実施例１０
ＣＨ３−（ＯＣＨ２ＣＨ２）１５−Ｏ−（ＣＨ２）２−ＣＯ−Ｉｌｅ−Ｌｙｓ（パルミトイル−６Ａｈｘ）−Ｐｑａ−Ａｒｇ−Ｈｉｓ−Ｔｙｒ−Ｌｅｕ−Ａｓｎ−Ｔｒｐ−Ｖａｌ−Ｔｈｒ−Ａｒｇ−Ｇｌｎ−（ＮＭｅ）−Ａｒｇ−Ｔｙｒ−ＮＨ２  １：３  ＴＦＡの調製
【化１３】
2013507414.tif 000019
実施例６から得られたＦｍｏｃ−Ｉｌｅ−Ｌｙｓ（Ａｌｌｏｃ）−Ｐｑａ−Ａｒｇ（Ｐｂｆ）−Ｈｉｓ（Ｔｒｔ）−Ｔｙｒ（ｔＢｕ）−Ｌｅｕ−Ａｓｎ（Ｔｒｔ）−Ｔｒｐ−Ｖａｌ−Ｔｈｒ（ｔＢｕ）−Ａｒｇ（Ｐｂｆ）−Ｇｌｎ（Ｔｒｔ）−ＮＭｅ−Ａｒｇ（Ｍｔｒ）−Ｔｙｒ（ｔＢｕ）−Ｒｉｎｋアミド樹脂１．０ｇ（０．２２mmol）を、ＤＭＦで洗浄して、脱保護および洗浄し、ＤＭＦ中、ｍ−ｄＰＥＧ  ｎ＝１６  ＮＨＳエステル（Quanta Biodesign、２３８mg、０．２７５mmol）；Ｎ−ヒドロキシベンゾトリアゾール（４０mg、０．３０mmol）およびジイソプロピル−カルボジイミド（３２０μl、２．０mmol）で１８時間カップリングを行った。ＤＭＦで４回洗浄した後、Ａｒ雰囲気下、ＰｄＣｌ２（トリフェニルホスフィン）２５０．０mg、モルホリン５０μL、酢酸１００μLのＤＭＦ（１５mL）溶液でａｌｌｏｃ保護基を除去して、次に、Ｂｕ３ＳｎＨ５００μLを添加した。黄色の溶液が赤褐色になるまで、Ａｒでバブリングを続けた。次に、反応物を１／４時間混合し、ＤＭＦで３回洗浄した。上記手順を、１／４〜１／２時間かけて再度繰り返した（この時点で、暗褐色がほぼ黒色になる）。ＤＭＦで２回、５％ＤＩＥＡ／ＤＭＦで２回、そして、ＤＭＦで４回生成物を洗浄した。Ｆｍｏｃ−６−アミノヘキサン酸（３５５．０mg；１．０mmol）、Ｎ−ヒドロキシベンゾトリアゾール（１５０mg、１．１１０mmol）およびジイソプロピル−カルボジイミド（８７５μl、５．０mmol）のＤＭＦ（１５mL）溶液で１８時間カップリングを行った。Ｆｍｏｃ除去、ＤＭＦおよびＣＨ２Ｃｌ２による洗浄の後、Ｎ−ヒドロキシベンゾトリアゾール（４２５mg、３．１５０mmol）、ＤＩＥＡ（５００μL、３．０mmol）およびパルミトイルクロリド（２．８ml、２．７５mmol）を、ＣＨ２Ｃｌ２１５mL中で５分間反応させて、ペプチド樹脂に添加した。反応物を１８時間撹拌して、ＤＭＦで２回、ＣＨ２Ｃｌ２で３回洗浄した後、ＴＦＡ１７mL、ｉＰｒＳｉＨ４００μLおよびプロパンチオール８００μLで６時間かけて切断し、Ｅｔ２Ｏ１００．０mL中で沈殿させ、遠心し、洗浄して、真空下で乾燥させた。実施例３の手順に従って粗ペプチドを精製して、白色の無定形粉末６７mg（１０％）を得た。（ＥＳ）＋−ＬＣＭＳ  ｍ／ｅ、Ｃ１６０Ｈ２６１Ｎ３５Ｏ４０の計算値３３１２．９５、実測値３３１２．９５。
【０１０６】
実施例１１
ＣＨ３−（ＯＣＨ２ＣＨ２）２３−Ｏ−（ＣＨ２）２−ＣＯ−Ｉｌｅ−Ｌｙｓ（パルミトイル−６Ａｈｘ）−Ｐｑａ−Ａｒｇ−Ｈｉｓ−Ｔｙｒ−Ｌｅｕ−Ａｓｎ−Ｔｒｐ−Ｖａｌ−Ｔｈｒ−Ａｒｇ−Ｇｌｎ−（ＮＭｅ）−Ａｒｇ−Ｔｙｒ−ＮＨ２  １：３  ＴＦＡの調製
【化１４】
2013507414.tif 000020
実施例６から得られたＦｍｏｃ−Ｉｌｅ−Ｌｙｓ（Ａｌｌｏｃ）−Ｐｑａ−Ａｒｇ（Ｐｂｆ）−Ｈｉｓ（Ｔｒｔ）−Ｔｙｒ（ｔＢｕ）−Ｌｅｕ−Ａｓｎ（Ｔｒｔ）−Ｔｒｐ−Ｖａｌ−Ｔｈｒ（ｔＢｕ）−Ａｒｇ（Ｐｂｆ）−Ｇｌｎ（Ｔｒｔ）−ＮＭｅ−Ａｒｇ（Ｍｔｒ）−Ｔｙｒ（ｔＢｕ）−Ｒｉｎｋアミド樹脂１．０ｇ（０．２２mmol）を、ＤＭＦで洗浄して、脱保護、洗浄して、ＤＭＦ中、ｍ−ｄＰＥＧｎ＝２４酸（Quanta Biodesign、３０８mg、０．２７５mmol）；Ｎ−ヒドロキシベンゾトリアゾール（４０mg、０．３０mmol）およびジイソプロピル−カルボジイミド（３２０μｌ、２．０mmol）で１８時間カップリングを行った。ＤＭＦで４回洗浄した後、Ａｒ雰囲気下、ＰｄＣｌ２（トリフェニルホスフィン）２５０．０mg、モルホリン５０μL、酢酸１００μLのＤＭＦ（１５mL）溶液でａｌｌｏｃ保護基を除去して、次に、Ｂｕ３ＳｎＨ５００μLを添加した。黄色の溶液が赤褐色になるまで、Ａｒでバブリングを続けた。次に、反応物を１／４時間混合し、ＤＭＦで３回洗浄した。上記手順を、１／４〜１／２時間かけて再度繰り返した（この時点で、暗褐色がほぼ黒色になる）。ＤＭＦで２回、５％ＤＩＥＡ／ＤＭＦで２回、そして、ＤＭＦで４回生成物を洗浄した。Ｆｍｏｃ−６−アミノヘキサン酸（３５５．０mg；１．０mmol）、Ｎ−ヒドロキシベンゾトリアゾール（１５０mg、１．１１０mmol）およびジイソプロピル−カルボジイミド（８７５μl、５．０mmol）のＤＭＦ（１５．０mL）溶液で１８時間カップリングを行った。Ｆｍｏｃ除去、ＤＭＦおよびＣＨ２Ｃｌ２による洗浄の後、Ｎ−ヒドロキシベンゾトリアゾール（４２５mg、３．１５０mmol）、ＤＩＥＡ（５００μL、３．０mmol）およびパルミトイルクロリド（２．８ml、２．７５mmol）を、ＣＨ２Ｃｌ２１５mL中で５分間反応させて、ペプチド樹脂に添加した。反応物を１８時間撹拌して、ＤＭＦで２回、ＣＨ２Ｃｌ２で３回洗浄した後、ＴＦＡ１７mL、ｉＰｒＳｉＨ４００μLおよびプロパンチオール８００μLで６時間かけて切断し、Ｅｔ２Ｏ１００．０mL中で沈殿させ、遠心し、洗浄して、真空下で乾燥させた。実施例３の手順に従って粗ペプチドを精製して、白色の無定形粉末４０mg（６％）を得た。（ＥＳ）＋−ＬＣＭＳ  ｍ／ｅ、Ｃ１７６Ｈ２９３Ｎ３５Ｏ４８の計算値３６６５．１６、実測値３６６５．１５。
【０１０７】
実施例１２
ＣＨ３−（ＯＣＨ２ＣＨ２）５−Ｏ−ＣＨ２−ＣＯ−Ｉｌｅ−Ｌｙｓ（パルミトイル−５ＡＯＰＳ）−Ｐｑａ−Ａｒｇ−Ｈｉｓ−Ｔｙｒ−Ｌｅｕ−Ａｓｎ−Ｔｒｐ−Ｖａｌ−Ｔｈｒ−Ａｒｇ−Ｇｌｎ−（ＮＭｅ）−Ａｒｇ−Ｔｙｒ−ＮＨ２  １：３  ＴＦＡの調製
【化１５】
2013507414.tif 000021
実施例６から得られたＦｍｏｃ−Ｉｌｅ−Ｌｙｓ（Ａｌｌｏｃ）−Ｐｑａ−Ａｒｇ（Ｐｂｆ）−Ｈｉｓ（Ｔｒｔ）−Ｔｙｒ（ｔＢｕ）−Ｌｅｕ−Ａｓｎ（Ｔｒｔ）−Ｔｒｐ−Ｖａｌ−Ｔｈｒ（ｔＢｕ）−Ａｒｇ（Ｐｂｆ）−Ｇｌｎ（Ｔｒｔ）−ＮＭｅ−Ａｒｇ（Ｍｔｒ）−Ｔｙｒ（ｔＢｕ）−Ｒｉｎｋアミド樹脂１．０ｇ（０．２２mmol）を、ＤＭＦで洗浄して、脱保護、洗浄して、ＤＭＦ中、［２−（２−｛２−［２−（２−メトキシ−エトキシ）−エトキシ］−エトキシ｝−エトキシ）−エトキシ］−酢酸（ｍ−ｄＰＥＧｎ＝６）（Quanta Biodesign、８６mg、０．２７５mmole）；Ｎ−ヒドロキシベンゾトリアゾール（４０mg、０．３０mmol）およびジイソプロピル−カルボジイミド（１．５０ml、２．０mmol）でカップリングを行い、１８時間撹拌した。ＤＭＦで４回洗浄した後、Ａｒ雰囲気下、ＰｄＣｌ２（トリフェニルホスフィン）２５０．０mg、モルホリン５０μL、酢酸１００μLのＤＭＦ（１５mL）溶液でａｌｌｏｃ保護基を除去して、次に、Ｂｕ３ＳｎＨ５００μLを添加した。黄色の溶液が赤褐色になるまで、Ａｒでバブリングを続けた。次に、反応物を１／４時間混合し、ＤＭＦで３回洗浄した。上記手順を、１／４〜１／２時間かけて再度繰り返した（この時点で、暗褐色がほぼ黒色になる）。ＤＭＦで２回、５％ＤＩＥＡ／ＤＭＦで２回、そして、ＤＭＦで４回生成物を洗浄した。Ｆｍｏｃ−５ＡＯＰＳ（１１８．０mg；０．２７５mmol）、Ｎ−ヒドロキシベンゾトリアゾール（１５０mg、１．１１０mmol）およびジイソプロピル−カルボジイミド（８７５μl、５．０mmol）のＤＭＦ（１５．０mL）溶液で１８時間カップリングを行った。Ｆｍｏｃ除去、ＤＭＦおよびＣＨ２Ｃｌ２による洗浄の後、Ｎ−ヒドロキシベンゾトリアゾール（４２５mg、３．１５０mmol）、ＤＩＥＡ（５００μL、３．０mmol）およびパルミトイルクロリド（２．８ml、２．７５mmol）を、ＣＨ２Ｃｌ２１５mL中で５分間反応させて、ペプチド樹脂に添加した。反応物を１８時間撹拌して、ＤＭＦで２回、ＣＨ２Ｃｌ２で３回洗浄した後、ＴＦＡ１７mL、ｉＰｒＳｉＨ４００μLおよびプロパンチオール８００μLで６時間かけて切断し、Ｅｔ２Ｏ１００．０mL中で沈殿させ、遠心し、洗浄して、真空下で乾燥させた。実施例３の手順に従って粗ペプチドを精製して、白色の無定形粉末７３mg（１３％）を得た。（ＥＳ）＋−ＬＣＭＳ  ｍ／ｅ、Ｃ１４１Ｈ２２２Ｎ３６Ｏ３２の計算値２９３１．６９、実測値２９３１．７０。
【０１０８】
実施例１３
ＣＨ３−（ＯＣＨ２ＣＨ２）１１−Ｏ−（ＣＨ２）２−ＣＯ−Ｉｌｅ−Ｌｙｓ（パルミトイル−５ＡＯＰＳ）−Ｐｑａ−Ａｒｇ−Ｈｉｓ−Ｔｙｒ−Ｌｅｕ−Ａｓｎ−Ｔｒｐ−Ｖａｌ−Ｔｈｒ−Ａｒｇ−Ｇｌｎ−（ＮＭｅ）−Ａｒｇ−Ｔｙｒ−ＮＨ２  １：３  ＴＦＡの調製
【化１６】
2013507414.tif 000022
実施例６から得られたＦｍｏｃ−Ｉｌｅ−Ｌｙｓ（Ａｌｌｏｃ）−Ｐｑａ−Ａｒｇ（Ｐｂｆ）−Ｈｉｓ（Ｔｒｔ）−Ｔｙｒ（ｔＢｕ）−Ｌｅｕ−Ａｓｎ（Ｔｒｔ）−Ｔｒｐ−Ｖａｌ−Ｔｈｒ（ｔＢｕ）−Ａｒｇ（Ｐｂｆ）−Ｇｌｎ（Ｔｒｔ）−ＮＭｅ−Ａｒｇ（Ｍｔｒ）−Ｔｙｒ（ｔＢｕ）−Ｒｉｎｋアミド樹脂１．０ｇ（０．２２mmol）を、ＤＭＦで洗浄して、脱保護および洗浄し、ＤＭＦ中、ｍ−ｄＰＥＧｎ＝１２  ＮＨＳエステル（Quanta Biodesign、１８９mg、０．２７５mmol）；Ｎ−ヒドロキシベンゾトリアゾール（４０mg、０．３０mmol）およびジイソプロピル−カルボジイミド（１．５０ml、２．０mmol）でカップリングを行い、１８時間撹拌した。ＤＭＦで４回洗浄した後、Ａｒ雰囲気下、ＰｄＣｌ２（トリフェニルホスフィン）２５０．０mg、モルホリン５０μL、酢酸１００μLのＤＭＦ（１５mL）溶液でａｌｌｏｃ保護基を除去して、次に、Ｂｕ３ＳｎＨ５００μLを添加した。黄色の溶液が赤褐色になるまで、Ａｒでバブリングを続けた。次に、反応物を１／４時間混合し、ＤＭＦで３回洗浄した。上記手順を、１／４〜１／２時間かけて再度繰り返した（この時点で、暗褐色がほぼ黒色になる）。ＤＭＦで２回、５％ＤＩＥＡ／ＤＭＦで２回、そして、ＤＭＦで４回生成物を洗浄した。Ｆｍｏｃ−５ＡＯＰＳ（１１８．０mg；０．２７５mmol）、Ｎ−ヒドロキシベンゾトリアゾール（１５０mg、１．１１０mmol）およびジイソプロピル−カルボジイミド（８７５μl、５．０mmol）のＤＭＦ（１５．０mL）溶液で１８時間カップリングを行った。Ｆｍｏｃ除去、ＤＭＦおよびＣＨ２Ｃｌ２による洗浄の後、Ｎ−ヒドロキシベンゾトリアゾール（４２５mg、３．１５０mmol）、ＤＩＥＡ（５００μL、３．０mmol）およびパルミトイルクロリド（２．８ml、２．７５mmol）を、ＣＨ２Ｃｌ２１５mL中で５分間反応させて、ペプチド樹脂に添加した。反応物を１８時間撹拌して、ＤＭＦで２回、ＣＨ２Ｃｌ２で３回洗浄した後、ＴＦＡ１７mL、ｉＰｒＳｉＨ４００μLおよびプロパンチオール８００μLで６時間かけて切断し、Ｅｔ２Ｏ１００．０mL中で沈殿させ、遠心し、洗浄して、真空下で乾燥させた。実施例３の手順に従って粗ペプチドを精製して、白色の無定形粉末８３mg（１３％）を得た。（ＥＳ）＋−ＬＣＭＳ  ｍ／ｅ、Ｃ１５４Ｈ２４８Ｎ３６Ｏ３８の計算値３２０９．８６、実測値３２０９．８５。
【０１０９】
実施例１４
ＣＨ３−（ＯＣＨ２ＣＨ２）１５−Ｏ−（ＣＨ２）２−ＣＯ−Ｉｌｅ−Ｌｙｓ（パルミトイル−５ＡＯＰＳ）−Ｐｑａ−Ａｒｇ−Ｈｉｓ−Ｔｙｒ−Ｌｅｕ−Ａｓｎ−Ｔｒｐ−Ｖａｌ−Ｔｈｒ−Ａｒｇ−Ｇｌｎ−（ＮＭｅ）−Ａｒｇ−Ｔｙｒ−ＮＨ２  １：３  ＴＦＡの調製
【化１７】
2013507414.tif 000023
実施例６から得られたＦｍｏｃ−Ｉｌｅ−Ｌｙｓ（Ａｌｌｏｃ）−Ｐｑａ−Ａｒｇ（Ｐｂｆ）−Ｈｉｓ（Ｔｒｔ）−Ｔｙｒ（ｔＢｕ）−Ｌｅｕ−Ａｓｎ（Ｔｒｔ）−Ｔｒｐ−Ｖａｌ−Ｔｈｒ（ｔＢｕ）−Ａｒｇ（Ｐｂｆ）−Ｇｌｎ（Ｔｒｔ）−ＮＭｅ−Ａｒｇ（Ｍｔｒ）−Ｔｙｒ（ｔＢｕ）−Ｒｉｎｋアミド樹脂１．０ｇ（０．２２mmol）を、ＤＭＦで洗浄して、脱保護および洗浄し、ＤＭＦ中、ｍ−ｄＰＥＧｎ＝１６  ＮＨＳエステル（Quanta Biodesign、２３８mg、０．２７５mmol）；Ｎ−ヒドロキシベンゾトリアゾール（４０mg、０．３０mmol）およびジイソプロピル−カルボジイミド（３２０μｌ、２．０mmol）でカップリングを行い、１８時間撹拌した。ＤＭＦで４回洗浄した後、Ａｒ雰囲気下、ＰｄＣｌ２（トリフェニルホスフィン）２５０．０mg、モルホリン５０μL、酢酸１００μLのＤＭＦ（１５mL）溶液でａｌｌｏｃ保護基を除去して、次に、Ｂｕ３ＳｎＨ５００μLを添加した。黄色の溶液が赤褐色になるまで、Ａｒでバブリングを続けた。次に、反応物を１／４時間混合し、ＤＭＦで３回洗浄した。上記手順を、１／４〜１／２時間かけて再度繰り返した（この時点で、暗褐色がほぼ黒色になる）。ＤＭＦで２回、５％ＤＩＥＡ／ＤＭＦで２回、そして、ＤＭＦで４回生成物を洗浄した。Ｆｍｏｃ−５ＡＯＰＳ（１１８．０mg；０．２７５mmol）、Ｎ−ヒドロキシベンゾトリアゾール（１５０mg、１．１１０mmol）およびジイソプロピル−カルボジイミド（８７５μl、５．０mmol）のＤＭＦ（１５．０mL）溶液で１８時間カップリングを行った。Ｆｍｏｃ除去、ＤＭＦおよびＣＨ２Ｃｌ２による洗浄の後、Ｎ−ヒドロキシベンゾトリアゾール（４２５mg、３．１５０mmol）、ＤＩＥＡ（５００μL、３．０mmol）およびパルミトイルクロリド（２．８ml、２．７５mmol）を、ＣＨ２Ｃｌ２１５mL中で５分間反応させて、ペプチド樹脂に添加した。反応物を１８時間撹拌して、ＤＭＦで２回、ＣＨ２Ｃｌ２で３回洗浄した後、ＴＦＡ１７mL、ｉＰｒＳｉＨ４００μLおよびプロパンチオール８００μLで６時間かけて切断し、Ｅｔ２Ｏ１００．０mL中で沈殿させ、遠心し、洗浄して、真空下で乾燥させた。実施例３の手順に従って粗ペプチドを精製して、白色の無定形粉末４３．５mg（６％）を得た。（ＥＳ）＋−ＬＣＭＳ  ｍ／ｅ、Ｃ１６２Ｈ２６４Ｎ３６Ｏ４２の計算値３３８５．９６、実測値３３８５．９６。
【０１１０】
実施例１５
ＣＨ３−（ＯＣＨ２ＣＨ２）２３−Ｏ−（ＣＨ２）２−ＣＯ−Ｉｌｅ−Ｌｙｓ（パルミトイル−５ＡＯＰＳ）−Ｐｑａ−Ａｒｇ−Ｈｉｓ−Ｔｙｒ−Ｌｅｕ−Ａｓｎ−Ｔｒｐ−Ｖａｌ−Ｔｈｒ−Ａｒｇ−Ｇｌｎ−（ＮＭｅ）−Ａｒｇ−Ｔｙｒ−ＮＨ２  １：３  ＴＦＡの調製
【化１８】
2013507414.tif 000024
実施例６から得られたＦｍｏｃ−Ｉｌｅ−Ｌｙｓ（Ａｌｌｏｃ）−Ｐｑａ−Ａｒｇ（Ｐｂｆ）−Ｈｉｓ（Ｔｒｔ）−Ｔｙｒ（ｔＢｕ）−Ｌｅｕ−Ａｓｎ（Ｔｒｔ）−Ｔｒｐ−Ｖａｌ−Ｔｈｒ（ｔＢｕ）−Ａｒｇ（Ｐｂｆ）−Ｇｌｎ（Ｔｒｔ）−ＮＭｅ−Ａｒｇ（Ｍｔｒ）−Ｔｙｒ（ｔＢｕ）−Ｒｉｎｋアミド樹脂１．０ｇ（０．２２mmol）を、ＤＭＦで洗浄して、脱保護および洗浄し、ＤＭＦ中、ｍ−ｄＰＥＧｎ＝２４酸（Quanta Biodesign、３０８mg；０．２７５mmol）；Ｎ−ヒドロキシベンゾトリアゾール（４０mg、０．３０mmol）およびジイソプロピル−カルボジイミド（３２０μl、２．０mmol）でカップリングを行い、１８時間撹拌した。ＤＭＦで４回洗浄した後、Ａｒ雰囲気下、ＰｄＣｌ２（トリフェニルホスフィン）２５０．０mg、モルホリン５０μL、酢酸１００μLのＤＭＦ（１５mL）溶液でａｌｌｏｃ保護基を除去して、次に、Ｂｕ３ＳｎＨ５００μLを添加した。黄色の溶液が赤褐色になるまで、Ａｒでバブリングを続けた。次に、反応物を１／４時間混合し、ＤＭＦで３回洗浄した。上記手順を、１／４〜１／２時間かけて再度繰り返した（この時点で、暗褐色がほぼ黒色になる）。ＤＭＦで２回、５％ＤＩＥＡ／ＤＭＦで２回、そして、ＤＭＦで４回生成物を洗浄した。Ｆｍｏｃ−５ＡＯＰＳ（１１８．０mg；０．２７５mmol）、Ｎ−ヒドロキシベンゾトリアゾール（１５０mg、１．１１０mmol）およびジイソプロピル−カルボジイミド（８７５μl、５．０mmol）のＤＭＦ（１５．０mL）溶液で１８時間カップリングを行った。Ｆｍｏｃ除去、ＤＭＦおよびＣＨ２Ｃｌ２による洗浄の後、Ｎ−ヒドロキシベンゾトリアゾール（４２５mg、３．１５０mmol）、ＤＩＥＡ（５００μL、３．０mmol）およびパルミトイルクロリド（２．８ml、２．７５mmol）を、ＣＨ２Ｃｌ２１５mL中で５分間反応させて、ペプチド樹脂に添加した。反応物を１８時間撹拌して、ＤＭＦで２回、ＣＨ２Ｃｌ２で３回洗浄した後、ＴＦＡ１７mL、ｉＰｒＳｉＨ４００μLおよびプロパンチオール８００μLで６時間かけて切断し、Ｅｔ２Ｏ１００．０mL中で沈殿させ、遠心し、洗浄して、真空下で乾燥させた。実施例３の手順に従って粗ペプチドを精製して、白色の無定形粉末６３mg（８％）を得た。（ＥＳ）＋−ＬＣＭＳ  ｍ／ｅ、Ｃ１７８Ｈ２９６Ｎ３６Ｏ５０の計算値３７３８．１７、実測値３７３８．１７。
【０１１１】
実施例１６
ＣＨ３−（ＯＣＨ２ＣＨ２）２３−Ｏ−（ＣＨ２）２−ＣＯ−Ｉｌｅ−Ｌｙｓ（パルミトイル−５ＡＯＰＳ）−Ｐｑａ−Ｃｉｔ−Ｈｉｓ−Ｔｙｒ−Ｌｅｕ−Ａｓｎ−Ｔｒｐ−Ｖａｌ−Ｔｈｒ−Ａｒｇ−Ｇｌｎ−（ＮＭｅ）−Ａｒｇ−Ｔｙｒ−ＮＨ２  １：２  ＴＦＡの調製
【化１９】
2013507414.tif 000025
実施例６Ａから得られたＦｍｏｃ−Ｉｌｅ−Ｌｙｓ（Ａｌｌｏｃ）−Ｐｑａ−Ｃｉｔ−Ｈｉｓ（Ｔｒｔ）−Ｔｙｒ（ｔＢｕ）−Ｌｅｕ−Ａｓｎ（Ｔｒｔ）−Ｔｒｐ−Ｖａｌ−Ｔｈｒ（ｔＢｕ）−Ａｒｇ（Ｐｂｆ）−Ｇｌｎ（Ｔｒｔ）−ＮＭｅ−Ａｒｇ（Ｍｔｒ）−Ｔｙｒ（ｔＢｕ）−Ｒｉｎｋアミド樹脂１．０ｇ（０．２２mmol）を、ＤＭＦで洗浄して、脱保護および洗浄し、ＤＭＦ中、ｍ−ｄＰＥＧ  ｎ＝２４酸（Quanta Biodesign、３０８mg；０．２７５mmol）；Ｎ−ヒドロキシベンゾトリアゾール（４０mg、０．３０mmol）およびジイソプロピル−カルボジイミド（３２０μｌ、２．０mmol）でカップリングを行い、１８時間撹拌した。ＤＭＦで４回洗浄した後、Ａｒ雰囲気下、ＰｄＣｌ２（トリフェニルホスフィン）２５０．０mg、モルホリン５０μL、酢酸１００μLのＤＭＦ（１５mL）溶液でａｌｌｏｃ保護基を除去して、次に、Ｂｕ３ＳｎＨ５００μLを添加した。黄色の溶液が赤褐色になるまで、Ａｒでバブリングを続けた。次に、反応物を１／４時間混合し、ＤＭＦで３回洗浄した。上記手順を、１／４〜１／２時間かけて再度繰り返した（この時点で、暗褐色がほぼ黒色になる）。ＤＭＦで２回、５％ＤＩＥＡ／ＤＭＦで２回、そして、ＤＭＦで４回生成物を洗浄した。Ｆｍｏｃ−５ＡＯＰＳ（１１８．０mg；０．２７５mmol）、Ｎ−ヒドロキシベンゾトリアゾール（１５０mg、１．１１０mmol）およびジイソプロピル−カルボジイミド（８７５μl、５．０mmol）のＤＭＦ（１５．０mL）溶液で１８時間カップリングを行った。Ｆｍｏｃ除去、ＤＭＦおよびＣＨ２Ｃｌ２による洗浄の後、Ｎ−ヒドロキシベンゾトリアゾール（４２５mg、３．１５０mmol）、ＤＩＥＡ（５００μL、３．０mmol）およびパルミトイルクロリド（２．８ml、２．７５mmol）を、ＣＨ２Ｃｌ２１５mL中で５分間反応させて、ペプチド樹脂に添加した。反応物を１８時間撹拌して、ＤＭＦで２回、ＣＨ２Ｃｌ２で３回洗浄した後、ＴＦＡ１７mL、ｉＰｒＳｉＨ４００μLおよびプロパンチオール８００μLで６時間かけて切断し、Ｅｔ２Ｏ１００．０mL中で沈殿させ、遠心し、洗浄して、真空下で乾燥させた。実施例３の手順に従って粗ペプチドを精製して、白色の無定形粉末７６mg（１０％）を得た。（ＥＳ）＋−ＬＣＭＳ  ｍ／ｅ、Ｃ１７８Ｈ２９５Ｎ３５Ｏ５１の計算値３７３９．１６、実測値３７３９．１６。
【０１１２】
実施例１７
ＣＨ３−（ＯＣＨ２ＣＨ２）７−Ｏ−（ＣＨ２）２−ＣＯ−６Ａｈｘ−Ｉｌｅ−Ｌｙｓ−Ｐｑａ−Ａｒｇ−Ｈｉｓ−Ｔｙｒ−Ｌｅｕ−Ａｓｎ−Ｔｒｐ−Ｖａｌ−Ｔｈｒ−Ａｒｇ−Ｇｌｎ−（ＮＭｅ）−Ａｒｇ−Ｔｙｒ−ＮＨ２  １：３  ＴＦＡの調製
【化２０】
2013507414.tif 000026
実施例６から得られたＦｍｏｃ−Ｉｌｅ−Ｌｙｓ（Ａｌｌｏｃ）−Ｐｑａ−Ａｒｇ（Ｐｂｆ）−Ｈｉｓ（Ｔｒｔ）−Ｔｙｒ（ｔＢｕ）−Ｌｅｕ−Ａｓｎ（Ｔｒｔ）−Ｔｒｐ−Ｖａｌ−Ｔｈｒ（ｔＢｕ）−Ａｒｇ（Ｐｂｆ）−Ｇｌｎ（Ｔｒｔ）−ＮＭｅ−Ａｒｇ（Ｍｔｒ）−Ｔｙｒ（ｔＢｕ）−Ｒｉｎｋアミド樹脂１．０ｇ（０．２２mmol）を、ＤＭＦで洗浄して、脱保護および洗浄し、ＤＭＦ中、Ｆｍｏｃ−６−アミノヘキサン酸（３５５．０mg；１．０mmol）、Ｎ−ヒドロキシベンゾトリアゾール（１５０mg、１．１１０mmol）およびジイソプロピル−カルボジイミド（８７５μl、５．０mmol）のＤＭＦ（１５mL）溶液で１８時間カップリングを行った。Ｆｍｏｃ除去の後、ｍ−ｄＰＥＧｎ＝８（Quanta Biodesign、１１４mg、０．２７５mmol）；Ｎ−ヒドロキシベンゾトリアゾール（４０mg、０．３０mmol）およびジイソプロピル−カルボジイミド（３２０μl、２．０mmol）でカップリングを行い、１８時間撹拌した。ＤＭＦで４回洗浄した後、Ａｒ雰囲気下、ＰｄＣｌ２（トリフェニルホスフィン）２５０．０mg、モルホリン５０μL、酢酸１００μLのＤＭＦ（１５mL）溶液でａｌｌｏｃ保護基を除去して、次に、Ｂｕ３ＳｎＨ５００μLを添加した。黄色の溶液が赤褐色になるまで、Ａｒでバブリングを続けた。次に、反応物を１／４時間混合し、ＤＭＦで３回洗浄した。上記手順を、１／４〜１／２時間かけて再度繰り返した（この時点で、暗褐色がほぼ黒色になる）。ＤＭＦで２回、５％ＤＩＥＡ／ＤＭＦで２回、ＤＭＦで４回、そして、ＣＨ２Ｃｌ２で４回生成物を洗浄した後、ＴＦＡ１７mL、ｉＰｒＳｉＨ４００μLおよびプロパンチオール８００μLで６時間かけて切断し、Ｅｔ２Ｏ１００．０mL中で沈殿させ、遠心し、洗浄して、真空下で乾燥させた。実施例３の手順に従って粗ペプチドを精製して、白色の無定形粉末８５mg（１６％）を得た。（ＥＳ）＋−ＬＣＭＳ  ｍ／ｅ、Ｃ１２８Ｈ１９９Ｎ３５Ｏ３１の計算値２７２２．５１、実測値２７２２．５０。
【０１１３】
実施例１８
ＣＨ３−（ＯＣＨ２ＣＨ２）１１−Ｏ−（ＣＨ２）２−ＣＯ−６Ａｈｘ−Ｉｌｅ−Ｌｙｓ−Ｐｑａ−Ａｒｇ−Ｈｉｓ−Ｔｙｒ−Ｌｅｕ−Ａｓｎ−Ｔｒｐ−Ｖａｌ−Ｔｈｒ−Ａｒｇ−Ｇｌｎ−（ＮＭｅ）−Ａｒｇ−Ｔｙｒ−ＮＨ２  １：３  ＴＦＡの調製
【化２１】
2013507414.tif 000027
実施例６から得られたＦｍｏｃ−Ｉｌｅ−Ｌｙｓ（Ａｌｌｏｃ）−Ｐｑａ−Ａｒｇ（Ｐｂｆ）−Ｈｉｓ（Ｔｒｔ）−Ｔｙｒ（ｔＢｕ）−Ｌｅｕ−Ａｓｎ（Ｔｒｔ）−Ｔｒｐ−Ｖａｌ−Ｔｈｒ（ｔＢｕ）−Ａｒｇ（Ｐｂｆ）−Ｇｌｎ（Ｔｒｔ）−ＮＭｅ−Ａｒｇ（Ｍｔｒ）−Ｔｙｒ（ｔＢｕ）−Ｒｉｎｋアミド樹脂１．０ｇ（０．２２mmol）を、ＤＭＦで洗浄して、脱保護および洗浄し、ＤＭＦ中、Ｆｍｏｃ−６−アミノヘキサン酸（３５５．０mg；１．０mmol）、Ｎ−ヒドロキシベンゾトリアゾール（１５０mg、１．１１０mmol）およびジイソプロピル−カルボジイミド（８７５μl、５．０mmol）のＤＭＦ（１５mL）溶液で１８時間カップリングを行った。Ｆｍｏｃ除去の後、ｍ−ｄＰＥＧｎ＝１２  ＮＨＳエステル（Quanta Biodesign、１８９mg、０．２７５mmol）；Ｎ−ヒドロキシベンゾトリアゾール（４０mg、０．３０mmol）およびジイソプロピル−カルボジイミド（３２０μｌ、２．０mmol）でカップリングを行い、１８時間撹拌した。ＤＭＦで４回洗浄した後、Ａｒ雰囲気下、ＰｄＣｌ２（トリフェニルホスフィン）２５０．０mg、モルホリン５０μL、酢酸１００μLのＤＭＦ（１５mL）溶液でａｌｌｏｃ保護基を除去して、次に、Ｂｕ３ＳｎＨ５００μLを添加した。黄色の溶液が赤褐色になるまで、Ａｒでバブリングを続けた。次に、反応物を１／４時間混合し、ＤＭＦで３回洗浄した。上記手順を、１／４〜１／２時間かけて再度繰り返した（この時点で、暗褐色がほぼ黒色になる）。ＤＭＦで２回、５％ＤＩＥＡ／ＤＭＦで２回、ＤＭＦで４回、そして、ＣＨ２Ｃｌ２で４回生成物を洗浄した後、ＴＦＡ１７mL、ｉＰｒＳｉＨ４００μLおよびプロパンチオール８００μLで６時間かけて切断し、Ｅｔ２Ｏ１００．０mL中で沈殿させ、遠心し、洗浄して、真空下で乾燥させた。実施例３の手順に従って粗ペプチドを精製して、白色の無定形粉末９０mg（１６％）を得た。（ＥＳ）＋−ＬＣＭＳ  ｍ／ｅ、Ｃ１３６Ｈ２１５Ｎ３５Ｏ３５の計算値２８９８．６１、実測値２８９８．６０。
【０１１４】
実施例１９
ＣＨ３−（ＯＣＨ２ＣＨ２）１５−Ｏ−（ＣＨ２）２−ＣＯ−６Ａｈｘ−Ｉｌｅ−Ｌｙｓ−Ｐｑａ−Ａｒｇ−Ｈｉｓ−Ｔｙｒ−Ｌｅｕ−Ａｓｎ−Ｔｒｐ−Ｖａｌ−Ｔｈｒ−Ａｒｇ−Ｇｌｎ−（ＮＭｅ）−Ａｒｇ−Ｔｙｒ−ＮＨ２  １：３  ＴＦＡの調製
【化２２】
2013507414.tif 000028
実施例６から得られたＦｍｏｃ−Ｉｌｅ−Ｌｙｓ（Ａｌｌｏｃ）−Ｐｑａ−Ａｒｇ（Ｐｂｆ）−Ｈｉｓ（Ｔｒｔ）−Ｔｙｒ（ｔＢｕ）−Ｌｅｕ−Ａｓｎ（Ｔｒｔ）−Ｔｒｐ−Ｖａｌ−Ｔｈｒ（ｔＢｕ）−Ａｒｇ（Ｐｂｆ）−Ｇｌｎ（Ｔｒｔ）−ＮＭｅ−Ａｒｇ（Ｍｔｒ）−Ｔｙｒ（ｔＢｕ）−Ｒｉｎｋアミド樹脂１．０ｇ（０．２２mmol）を、ＤＭＦで洗浄して、脱保護および洗浄し、ＤＭＦ中、Ｆｍｏｃ−６−アミノヘキサン酸（３５５．０mg；１．０mmol）、Ｎ−ヒドロキシベンゾトリアゾール（１５０mg、１．１１０mmol）およびジイソプロピル−カルボジイミド（８７５μl、５．０mmol）のＤＭＦ（１５mL）溶液で１８時間カップリングを行った。Ｆｍｏｃ除去の後、ｍ−ｄＰＥＧｎ＝１６  ＮＨＳエステル（Quanta Biodesign、２３８mg、０．２７５mmol）；Ｎ−ヒドロキシベンゾトリアゾール（４０mg、０．３０mmol）およびジイソプロピル−カルボジイミド（３２０μL、２．０mmole）でカップリングを行い、１８時間撹拌した。ＤＭＦで４回洗浄した後、Ａｒ雰囲気下、ＰｄＣｌ２（トリフェニルホスフィン）２５０．０mg、モルホリン５０μL、酢酸１００μLのＤＭＦ（１５mL）溶液でａｌｌｏｃ保護基を除去して、次に、Ｂｕ３ＳｎＨ５００μLを添加した。黄色の溶液が赤褐色になるまで、Ａｒでバブリングを続けた。次に、反応物を１／４時間混合し、ＤＭＦで３回洗浄した。上記手順を、１／４〜１／２時間かけて再度繰り返した（この時点で、暗褐色がほぼ黒色になる）。ＤＭＦで２回、５％ＤＩＥＡ／ＤＭＦで２回、ＤＭＦで４回、そして、ＣＨ２Ｃｌ２で４回生成物を洗浄した後、ＴＦＡ１７mL、ｉＰｒＳｉＨ４００μLおよびプロパンチオール８００μLで６時間かけて切断し、Ｅｔ２Ｏ１００．０mL中で沈殿させ、遠心し、洗浄して、真空下で乾燥させた。実施例３の手順に従って粗ペプチドを精製して、白色の無定形粉末９２mg（１５％）を得た。（ＥＳ）＋−ＬＣＭＳ  ｍ／ｅ、Ｃ１４４Ｈ２３１Ｎ３５Ｏ３９の計算値３０７４．７２、実測値３０７４．７２。
【０１１５】
実施例２０
ＣＨ３−（ＯＣＨ２ＣＨ２）２３−Ｏ−（ＣＨ２）２−ＣＯ−６Ａｈｘ−Ｉｌｅ−Ｌｙｓ−Ｐｑａ−Ａｒｇ−Ｈｉｓ−Ｔｙｒ−Ｌｅｕ−Ａｓｎ−Ｔｒｐ−Ｖａｌ−Ｔｈｒ−Ａｒｇ−Ｇｌｎ−（ＮＭｅ）−Ａｒｇ−Ｔｙｒ−ＮＨ２  １：３  ＴＦＡの調製
【化２３】
2013507414.tif 000029
実施例６から得られたＦｍｏｃ−Ｉｌｅ−Ｌｙｓ（Ａｌｌｏｃ）−Ｐｑａ−Ａｒｇ（Ｐｂｆ）−Ｈｉｓ（Ｔｒｔ）−Ｔｙｒ（ｔＢｕ）−Ｌｅｕ−Ａｓｎ（Ｔｒｔ）−Ｔｒｐ−Ｖａｌ−Ｔｈｒ（ｔＢｕ）−Ａｒｇ（Ｐｂｆ）−Ｇｌｎ（Ｔｒｔ）−ＮＭｅ−Ａｒｇ（Ｍｔｒ）−Ｔｙｒ（ｔＢｕ）−アミドＲｉｎｋ樹脂１．０ｇ（０．２２mmol）を、ＤＭＦで洗浄して、脱保護および洗浄し、ＤＭＦ中、Ｆｍｏｃ−６−アミノヘキサン酸（３５５．０mg；１．０mmol）、Ｎ−ヒドロキシベンゾトリアゾール（１５０mg、１．１１０mmol）およびジイソプロピル−カルボジイミド（８７５μl、５．０mmol）のＤＭＦ（１５mL）溶液で１８時間カップリングを行った。Ｆｍｏｃ除去の後、ｍ−ｄＰＥＧｎ＝２４（Quanta Biodesign、３０８mg、０．２７５mmol）；Ｎ−ヒドロキシベンゾトリアゾール（４０mg、０．３０mmol）およびジイソプロピル−カルボジイミド（３２０μl、２．０mmol）でカップリングを行い、１８時間撹拌した。ＤＭＦで４回洗浄した後、Ａｒ雰囲気下、ＰｄＣｌ２（トリフェニルホスフィン）２５０．０mg、モルホリン５０μL、酢酸１００μLのＤＭＦ（１５mL）溶液でａｌｌｏｃ保護基を除去して、次に、Ｂｕ３ＳｎＨ５００μLを添加した。黄色の溶液が赤褐色になるまで、Ａｒでバブリングを続けた。次に、反応物を１／４時間混合し、ＤＭＦで３回洗浄した。上記手順を、１／４〜１／２時間かけて再度繰り返した（この時点で、暗褐色がほぼ黒色になる）。ＤＭＦで２回、５％ＤＩＥＡ／ＤＭＦで２回、ＤＭＦで４回、そして、ＣＨ２Ｃｌ２で４回生成物を洗浄した後、ＴＦＡ１７mL、ｉＰｒＳｉＨ４００μLおよびプロパンチオール８００μLで６時間かけて切断し、Ｅｔ２Ｏ１００．０mL中で沈殿させ、遠心し、洗浄して、真空下で乾燥させた。実施例３の手順に従って粗ペプチドを精製して、白色の無定形粉末８９mg（１３％）を得た。（ＥＳ）＋−ＬＣＭＳ  ｍ／ｅ、Ｃ１６０Ｈ２６３Ｎ３５Ｏ４７の計算値３４２６．９３、実測値３４２６．９３。
【０１１６】
実施例２１
Ａｃ−Ｉｌｅ−Ｌｙｓ［ＣＨ３−（ＯＣＨ２ＣＨ２）２３−Ｏ−（ＣＨ２）２−ＣＯ］−Ｐｑａ−Ａｒｇ−Ｈｉｓ−Ｔｙｒ−Ｌｅｕ−Ａｓｎ−Ｔｒｐ−Ｖａｌ−Ｔｈｒ−Ａｒｇ−Ｇｌｎ−（ＮＭｅ）−Ａｒｇ−Ｔｙｒ−ＮＨ２  １：３  ＴＦＡの調製
【化２４】
2013507414.tif 000030
実施例６から得られたＦｍｏｃ−Ｉｌｅ−Ｌｙｓ（Ａｌｌｏｃ）−Ｐｑａ−Ａｒｇ（Ｐｂｆ）−Ｈｉｓ（Ｔｒｔ）−Ｔｙｒ（ｔＢｕ）−Ｌｅｕ−Ａｓｎ（Ｔｒｔ）−Ｔｒｐ−Ｖａｌ−Ｔｈｒ（ｔＢｕ）−Ａｒｇ（Ｐｂｆ）−Ｇｌｎ（Ｔｒｔ）−ＮＭｅ−Ａｒｇ（Ｍｔｒ）−Ｔｙｒ（ｔＢｕ）−Ｒｉｎｋアミド樹脂１．０ｇ（０．２２mmol）を、ＤＭＦで洗浄して、脱保護し、アセチル化した。ＤＭＦで４回洗浄した後、Ａｒ雰囲気下、ＰｄＣｌ２（トリフェニルホスフィン）２５０．０mg、モルホリン５０μL、酢酸１００μLのＤＭＦ（１５mL）溶液でａｌｌｏｃ保護基を除去して、次に、Ｂｕ３ＳｎＨ５００μLを添加した。黄色の溶液が赤褐色になるまで、Ａｒでバブリングを続けた。次に、反応物を１／４時間混合し、ＤＭＦで３回洗浄した。上記手順を、１／４〜１／２時間かけて再度繰り返した（この時点で、暗褐色がほぼ黒色になる）。ＤＭＦで２回、５％ＤＩＥＡ／ＤＭＦで２回、そして、ＤＭＦで４回生成物を洗浄し、ｍ−ｄＰＥＧｎ＝２４（Quanta Biodesign、３０８mg、０．２７５mmol）；Ｎ−ヒドロキシベンゾトリアゾール（４０mg、０．３０mmol）およびジイソプロピル−カルボジイミド（３２０μl、２．０mmol）でカップリングを行い、１８時間撹拌した。ペプチド樹脂をＣＨ２Ｃｌ２で４回洗浄した後、ＴＦＡ１７mL、ｉＰｒＳｉＨ４００μLおよびプロパンチオール８００μLで６時間かけて切断し、Ｅｔ２Ｏ１００．０mL中で沈殿させ、遠心し、洗浄して、真空下で乾燥させた。実施例３の手順に従って粗ペプチドを精製して、白色の無定形粉末６６mg（１０％）を得た。（ＥＳ）＋−ＬＣＭＳ  ｍ／ｅ、Ｃ１５６Ｈ２５４Ｎ３４Ｏ４７の計算値３３５５．８５、実測値３３５５．８４。
【０１１７】
実施例２２
ＣＨ３−（ＯＣＨ２ＣＨ２）２−Ｏ−ＣＨ２−ＣＯ−Ｉｌｅ−Ｌｙｓ（エイコサノイル−γＧｌｕ−γＧｌｕ）−Ｐｑａ−Ａｒｇ−Ｈｉｓ−Ｔｙｒ−Ｌｅｕ−Ａｓｎ−Ｔｒｐ−Ｖａｌ−Ｔｈｒ−Ａｒｇ−Ｇｌｎ−（ＮＭｅ）−Ａｒｇ−Ｔｙｒ−ＮＨ２  １：２  ＴＦＡの調製
【化２５】
2013507414.tif 000031
実施例６から得られたＦｍｏｃ−Ｉｌｅ−Ｌｙｓ（Ａｌｌｏｃ）−Ｐｑａ−Ａｒｇ（Ｐｂｆ）−Ｈｉｓ（Ｔｒｔ）−Ｔｙｒ（ｔＢｕ）−Ｌｅｕ−Ａｓｎ（Ｔｒｔ）−Ｔｒｐ−Ｖａｌ−Ｔｈｒ（ｔＢｕ）−Ａｒｇ（Ｐｂｆ）−Ｇｌｎ（Ｔｒｔ）−ＮＭｅ−Ａｒｇ（Ｍｔｒ）−Ｔｙｒ（ｔＢｕ）−Ｒｉｎｋアミド樹脂１．０ｇ（０．２２mmol）を、ＤＭＦで洗浄して、脱保護および洗浄し、ＤＭＦ中、２−［２−（２−メトキシ−エトキシ）−エトキシ］−酢酸（ｍ−ｄＰＥＧｎ＝３）（Quanta Biodesign、１７８mg；１．０mmol）；Ｎ−ヒドロキシベンゾトリアゾール（１３５mg、１．００mmol）およびジイソプロピル−カルボジイミド（３．０ml、４．０mmol）でカップリングを行い、１８時間撹拌した。ＤＭＦで４回洗浄した後、Ａｒ雰囲気下、ＰｄＣｌ２（トリフェニルホスフィン）２５０．０mg、モルホリン５０μL、酢酸１００μLのＤＭＦ（１５mL）溶液でａｌｌｏｃ保護基を除去して、次に、Ｂｕ３ＳｎＨ５００μLを添加した。黄色の溶液が赤褐色になるまで、Ａｒでバブリングを続けた。次に、反応物を１／４時間混合し、ＤＭＦで３回洗浄した。上記手順を、１／４〜１／２時間かけて再度繰り返した（この時点で、暗褐色がほぼ黒色になる）。ＤＭＦで２回、５％ＤＩＥＡ／ＤＭＦで２回、そして、ＤＭＦで４回生成物を洗浄した。Ｆｍｏｃ−Ｇｌｕ−ＯｔＢｕ（４２６．０mg；０１．０mmol）、Ｎ−ヒドロキシベンゾトリアゾール（１５０mg、１．１０mmol）およびジイソプロピル−カルボジイミド（８７５μl、５．０mmol）のＤＭＦ（１５．０mL）溶液で１８時間カップリングを行った。Ｆｍｏｃ除去の後、Ｆｍｏｃ−Ｇｌｕ−ＯｔＢｕ（４２６．０mg；０１．０mmol）、Ｎ−ヒドロキシベンゾトリアゾール（１５０mg、１．１０mmol）およびジイソプロピル−カルボジイミド（８７５μl、５．０mmol）のＤＭＦ（１５．０mL）溶液で１８時間カップリングを行った。Ｆｍｏｃ除去の後、エイコサン酸３１３．０mg（１．０mmol）、Ｎ−ヒドロキシベンゾトリアゾール（１５０mg、１．１０mmol）およびジイソプロピル−カルボジイミド（８７５μl、５．０mmol）のＤＭＦ（１５．０mL）溶液で１８時間カップリングを行った。ＭｅＯＨおよびＣＨ２Ｃｌ２で交互に４回、最後にＣＨ２Ｃｌ２で４回樹脂を洗浄した後、ＴＦＡ１７mL、ｉＰｒＳｉＨ４００μLおよびプロパンチオール８００μLで６時間かけて切断し、Ｅｔ２Ｏ１００．０mL中で沈殿させ、遠心し、洗浄して、真空下で乾燥させた。実施例３の手順に従って粗ペプチドを精製して、白色の無定形粉末３１mg（５％）を得た。（ＥＳ）＋−ＬＣＭＳ  ｍ／ｅ、Ｃ１４１Ｈ２１８Ｎ３６Ｏ３２の計算値２９２７．６５、実測値２９２７．６６。
【０１１８】
実施例２３
ＣＨ３−（ＯＣＨ２ＣＨ２）７−Ｏ−（ＣＨ２）２−ＣＯ−Ｉｌｅ−Ｌｙｓ（エイコサノイル−γＧｌｕ−γＧｌｕ）−Ｐｑａ−Ａｒｇ−Ｈｉｓ−Ｔｙｒ−Ｌｅｕ−Ａｓｎ−Ｔｒｐ−Ｖａｌ−Ｔｈｒ−Ａｒｇ−Ｇｌｎ−（ＮＭｅ）−Ａｒｇ−Ｔｙｒ−ＮＨ２  １：２  ＴＦＡの調製
【化２６】
2013507414.tif 000032
実施例６から得られたＦｍｏｃ−Ｉｌｅ−Ｌｙｓ（Ａｌｌｏｃ）−Ｐｑａ−Ａｒｇ（Ｐｂｆ）−Ｈｉｓ（Ｔｒｔ）−Ｔｙｒ（ｔＢｕ）−Ｌｅｕ−Ａｓｎ（Ｔｒｔ）−Ｔｒｐ−Ｖａｌ−Ｔｈｒ（ｔＢｕ）−Ａｒｇ（Ｐｂｆ）−Ｇｌｎ（Ｔｒｔ）−ＮＭｅ−Ａｒｇ（Ｍｔｒ）−Ｔｙｒ（ｔＢｕ）−Ｒｉｎｋアミド樹脂１．０ｇ（０．２２mmol）を、ＤＭＦで洗浄して、脱保護および洗浄し、ＤＭＦ中、ｍ−ｄＰＥＧｎ＝８（Quanta Biodesign、１１４mg、０．２７５mmol）；Ｎ−ヒドロキシベンゾトリアゾール（４０mg、０．３０mmol）およびジイソプロピル−カルボジイミド（３２０μl、２．０mmol）でカップリングを行い、１８時間撹拌した。ＤＭＦで４回洗浄した後、Ａｒ雰囲気下、ＰｄＣｌ２（トリフェニルホスフィン）２５０．０mg、モルホリン５０μL、酢酸１００μLのＤＭＦ（１５mL）溶液でａｌｌｏｃ保護基を除去して、次に、Ｂｕ３ＳｎＨ５００μLを添加した。黄色の溶液が赤褐色になるまで、Ａｒでバブリングを続けた。次に、反応物を１／４時間混合し、ＤＭＦで３回洗浄した。上記手順を、１／４〜１／２時間かけて再度繰り返した（この時点で、暗褐色がほぼ黒色になる）。ＤＭＦで２回、５％ＤＩＥＡ／ＤＭＦで２回、そして、ＤＭＦで４回生成物を洗浄した。Ｆｍｏｃ−Ｇｌｕ−ＯｔＢｕ（４２６．０mg；０１．０mmol）、Ｎ−ヒドロキシベンゾトリアゾール（１５０mg、１．１０mmol）およびジイソプロピル−カルボジイミド（８７５μl、５．０mmol）のＤＭＦ（１５．０mL）溶液で１８時間カップリングを行った。Ｆｍｏｃ除去の後、Ｆｍｏｃ−Ｇｌｕ−ＯｔＢｕ（４２６．０mg；０１．０mmol）、Ｎ−ヒドロキシベンゾトリアゾール（１５０mg、１．１０mmol）およびジイソプロピル−カルボジイミド（８７５μl、５．０mmol）のＤＭＦ（１５．０mL）溶液で１８時間カップリングを行った。Ｆｍｏｃ除去の後、エイコサン酸３１３．０mg（１．０mmol）、Ｎ−ヒドロキシベンゾトリアゾール（１５０mg、１．１０mmol）およびジイソプロピル−カルボジイミド（８７５μl、５．０mmol）のＤＭＦ（１５．０mL）溶液で１８時間カップリングを行った。ＭｅＯＨおよびＣＨ２Ｃｌ２で交互に４回、最後にＣＨ２Ｃｌ２で４回樹脂を洗浄した後、ＴＦＡ１７mL、ｉＰｒＳｉＨ４００μLおよびプロパンチオール８００μLで６時間かけて切断し、Ｅｔ２Ｏ１００．０mL中で沈殿させ、遠心し、洗浄して、真空下で乾燥させた。実施例３の手順に従って粗ペプチドを精製して、白色の無定形粉末６７mg（１１％）を得た。（ＥＳ）＋−ＬＣＭＳ  ｍ／ｅ、Ｃ１５２Ｈ２４０Ｎ３６Ｏ３７の計算値３１６１．８０、実測値３１６１．７９。
【０１１９】
実施例２４
ＣＨ３−（ＯＣＨ２ＣＨ２）１１−Ｏ−（ＣＨ２）２−ＣＯ−Ｉｌｅ−Ｌｙｓ（エイコサノイル−γＧｌｕ−γＧｌｕ）−Ｐｑａ−Ａｒｇ−Ｈｉｓ−Ｔｙｒ−Ｌｅｕ−Ａｓｎ−Ｔｒｐ−Ｖａｌ−Ｔｈｒ−Ａｒｇ−Ｇｌｎ−（ＮＭｅ）−Ａｒｇ−Ｔｙｒ−ＮＨ２  １：２  ＴＦＡの調製
【化２７】
2013507414.tif 000033
実施例６から得られたＦｍｏｃ−Ｉｌｅ−Ｌｙｓ（Ａｌｌｏｃ）−Ｐｑａ−Ａｒｇ（Ｐｂｆ）−Ｈｉｓ（Ｔｒｔ）−Ｔｙｒ（ｔＢｕ）−Ｌｅｕ−Ａｓｎ（Ｔｒｔ）−Ｔｒｐ−Ｖａｌ−Ｔｈｒ（ｔＢｕ）−Ａｒｇ（Ｐｂｆ）−Ｇｌｎ（Ｔｒｔ）−ＮＭｅ−Ａｒｇ（Ｍｔｒ）−Ｔｙｒ（ｔＢｕ）−アミドＲｉｎｋ樹脂１．０ｇ（０．２２mmol）を、ＤＭＦで洗浄して、脱保護および洗浄し、ＤＭＦ中、ｍ−ｄＰＥＧｎ＝１２  ＮＨＳエステル（Quanta Biodesign、１８９mg、０．２７５mmol）；Ｎ−ヒドロキシベンゾトリアゾール（４０mg、０．３０mmol）およびジイソプロピル−カルボジイミド（３２０μL、２．０mmol）でカップリングを行い、１８時間撹拌した。ＤＭＦで４回洗浄した後、Ａｒ雰囲気下、ＰｄＣｌ２（トリフェニルホスフィン）２５０．０mg、モルホリン５０μL、酢酸１００μLのＤＭＦ（１５mL）溶液でａｌｌｏｃ保護基を除去して、次に、Ｂｕ３ＳｎＨ５００μLを添加した。黄色の溶液が赤褐色になるまで、Ａｒでバブリングを続けた。次に、反応物を１／４時間混合し、ＤＭＦで３回洗浄した。上記手順を、１／４〜１／２時間かけて再度繰り返した（この時点で、暗褐色がほぼ黒色になる）。ＤＭＦで２回、５％ＤＩＥＡ／ＤＭＦで２回、そして、ＤＭＦで４回生成物を洗浄した。Ｆｍｏｃ−Ｇｌｕ−ＯｔＢｕ（４２６．０mg；０１．０mmol）、Ｎ−ヒドロキシベンゾトリアゾール（１５０mg、１．１０mmol）およびジイソプロピル−カルボジイミド（８７５μl、５．０mmol）のＤＭＦ（１５．０mL）溶液で１８時間カップリングを行った。Ｆｍｏｃ除去の後、Ｆｍｏｃ−Ｇｌｕ−ＯｔＢｕ（４２６．０mg；０１．０mmol）、Ｎ−ヒドロキシベンゾトリアゾール（１５０mg、１．１０mmol）およびジイソプロピル−カルボジイミド（８７５μl、５．０mmol）のＤＭＦ（１５．０mL）溶液で１８時間カップリングを行った。Ｆｍｏｃ除去の後、エイコサン酸３１３．０mg（１．０mm）、Ｎ−ヒドロキシベンゾトリアゾール（１５０mg、１．１０mmol）およびジイソプロピル−カルボジイミド（８７５μl、５．０mmol）のＤＭＦ（１５．０mL）溶液で１８時間カップリングを行った。ＭｅＯＨおよびＣＨ２Ｃｌ２で交互に４回、最後にＣＨ２Ｃｌ２で４回樹脂を洗浄した後、ＴＦＡ１７mL、ｉＰｒＳｉＨ４００μLおよびプロパンチオール８００μLで６時間かけて切断し、Ｅｔ２Ｏ１００．０mL中で沈殿させ、遠心し、洗浄して、真空下で乾燥させた。実施例３の手順に従って粗ペプチドを精製して、白色の無定形粉末６６mg（１１％）を得た。（ＥＳ）＋−ＬＣＭＳ  ｍ／ｅ、Ｃ１４６Ｈ２３２Ｎ３６Ｏ３４の計算値３０３３．７５、実測値３０３３．７６。
【０１２０】
実施例２５
ＣＨ３−（ＯＣＨ２ＣＨ２）１５−Ｏ−（ＣＨ２）２−ＣＯ−Ｉｌｅ−Ｌｙｓ（エイコサノイル−γＧｌｕ−γＧｌｕ）−Ｐｑａ−Ａｒｇ−Ｈｉｓ−Ｔｙｒ−Ｌｅｕ−Ａｓｎ−Ｔｒｐ−Ｖａｌ−Ｔｈｒ−Ａｒｇ−Ｇｌｎ−（ＮＭｅ）−Ａｒｇ−Ｔｙｒ−ＮＨ２  １：２  ＴＦＡの調製
【化２８】
2013507414.tif 000034
実施例６から得られたＦｍｏｃ−Ｉｌｅ−Ｌｙｓ（Ａｌｌｏｃ）−Ｐｑａ−Ａｒｇ（Ｐｂｆ）−Ｈｉｓ（Ｔｒｔ）−Ｔｙｒ（ｔＢｕ）−Ｌｅｕ−Ａｓｎ（Ｔｒｔ）−Ｔｒｐ−Ｖａｌ−Ｔｈｒ（ｔＢｕ）−Ａｒｇ（Ｐｂｆ）−Ｇｌｎ（Ｔｒｔ）−ＮＭｅ−Ａｒｇ（Ｍｔｒ）−Ｔｙｒ（ｔＢｕ）−Ｒｉｎｋアミド樹脂１．０ｇ（０．２２mmol）を、ＤＭＦで洗浄して、脱保護および洗浄し、ＤＭＦ中、ｍ−ｄＰＥＧｎ＝１６  ＮＨＳエステル（Quanta Biodesign、２３８mg、０．２７５mmol）；Ｎ−ヒドロキシベンゾトリアゾール（４０mg、０．３０mmol）およびジイソプロピル−カルボジイミド（３２０μL、２．０mmol）でカップリングを行い、１８時間撹拌した。ＤＭＦで４回洗浄した後、Ａｒ雰囲気下、ＰｄＣｌ２（トリフェニルホスフィン）２５０．０mg、モルホリン５０μL、酢酸１００μLのＤＭＦ（１５mL）溶液でａｌｌｏｃ保護基を除去して、次に、Ｂｕ３ＳｎＨ５００μLを添加した。黄色の溶液が赤褐色になるまで、Ａｒでバブリングを続けた。次に、反応物を１／４時間混合し、ＤＭＦで３回洗浄した。上記手順を、１／４〜１／２時間かけて再度繰り返した（この時点で、暗褐色がほぼ黒色になる）。ＤＭＦで２回、５％ＤＩＥＡ／ＤＭＦで２回、そして、ＤＭＦで４回生成物を洗浄した。Ｆｍｏｃ−Ｇｌｕ−ＯｔＢｕ（４２６．０mg；０１．０mmol）、Ｎ−ヒドロキシベンゾトリアゾール（１５０mg、１．１０mmol）およびジイソプロピル−カルボジイミド（８７５μl、５．０mmol）のＤＭＦ（１５．０mL）溶液で１８時間カップリングを行った。Ｆｍｏｃ除去の後、Ｆｍｏｃ−Ｇｌｕ−ＯｔＢｕ（４２６．０mg；０１．０mmol）、Ｎ−ヒドロキシベンゾトリアゾール（１５０mg、１．１０mmol）およびジイソプロピル−カルボジイミド（８７５μl、５．０mmol）のＤＭＦ（１５．０mL）溶液で１８時間カップリングを行った。Ｆｍｏｃ除去の後、エイコサン酸３１３．０mg（１．０mmol）、Ｎ−ヒドロキシベンゾトリアゾール（１５０mg、１．１０mmol）およびジイソプロピル−カルボジイミド（８７５μl、５．０mmol）のＤＭＦ（１５．０mL）溶液で１８時間カップリングを行った。ＭｅＯＨおよびＣＨ２Ｃｌ２で交互に４回、最後にＣＨ２Ｃｌ２で４回樹脂を洗浄した後、ＴＦＡ１７mL、ｉＰｒＳｉＨ４００μLおよびプロパンチオール８００μLで６時間かけて切断し、Ｅｔ２Ｏ１００．０mL中で沈殿させ、遠心し、洗浄して、真空下で乾燥させた。実施例３の手順に従って粗ペプチドを精製して、白色の無定形粉末６７mg（１０％）を得た。（ＥＳ）＋−ＬＣＭＳ  ｍ／ｅ、Ｃ１６８Ｈ２７２Ｎ３６Ｏ４５の計算値３５１４．０１、実測値３５１３．９９。
【０１２１】
実施例２６
ＣＨ３−（ＯＣＨ２ＣＨ２）２３−Ｏ−（ＣＨ２）２−ＣＯ−Ｉｌｅ−Ｌｙｓ（エイコサノイル−γＧｌｕ−γＧｌｕ）−Ｐｑａ−Ａｒｇ−Ｈｉｓ−Ｔｙｒ−Ｌｅｕ−Ａｓｎ−Ｔｒｐ−Ｖａｌ−Ｔｈｒ−Ａｒｇ−Ｇｌｎ−（ＮＭｅ）−Ａｒｇ−Ｔｙｒ−ＮＨ２  １：２  ＴＦＡの調製
【化２９】
2013507414.tif 000035
実施例６から得られたＦｍｏｃ−Ｉｌｅ−Ｌｙｓ（Ａｌｌｏｃ）−Ｐｑａ−Ａｒｇ（Ｐｂｆ）−Ｈｉｓ（Ｔｒｔ）−Ｔｙｒ（ｔＢｕ）−Ｌｅｕ−Ａｓｎ（Ｔｒｔ）−Ｔｒｐ−Ｖａｌ−Ｔｈｒ（ｔＢｕ）−Ａｒｇ（Ｐｂｆ）−Ｇｌｎ（Ｔｒｔ）−ＮＭｅ−Ａｒｇ（Ｍｔｒ）−Ｔｙｒ（ｔＢｕ）−Ｒｉｎｋアミド樹脂１．０ｇ（０．２２mmol）を、ＤＭＦで洗浄して、脱保護および洗浄し、ＤＭＦ中、ｍ−ｄＰＥＧｎ＝２４（Quanta Biodesign、３０８mg、０．２７５mmol）；Ｎ−ヒドロキシベンゾトリアゾール（４０mg、０．３０mmol）およびジイソプロピル−カルボジイミド（３２０μl、２．０mmol）でカップリングを行い、１８時間撹拌した。ＤＭＦで４回洗浄した後、Ａｒ雰囲気下、ＰｄＣｌ２（トリフェニルホスフィン）２５０．０mg、モルホリン５０μL、酢酸１００μLのＤＭＦ（１５mL）溶液でａｌｌｏｃ保護基を除去して、次に、Ｂｕ３ＳｎＨ５００μLを添加した。黄色の溶液が赤褐色になるまで、Ａｒでバブリングを続けた。次に、反応物を１／４時間混合し、ＤＭＦで３回洗浄した。上記手順を、１／４〜１／２時間かけて再度繰り返した（この時点で、暗褐色がほぼ黒色になる）。ＤＭＦで２回、５％ＤＩＥＡ／ＤＭＦで２回、そして、ＤＭＦで４回生成物を洗浄した。Ｆｍｏｃ−Ｇｌｕ−ＯｔＢｕ（４２６．０mg；０１．０mmol）、Ｎ−ヒドロキシベンゾトリアゾール（１５０mg、１．１０mmol）およびジイソプロピル−カルボジイミド（８７５μl、５．０mmol）のＤＭＦ（１５．０mL）溶液で１８時間カップリングを行った。Ｆｍｏｃ除去の後、Ｆｍｏｃ−Ｇｌｕ−ＯｔＢｕ（４２６．０mg；０１．０mmol）、Ｎ−ヒドロキシベンゾトリアゾール（１５０mg、１．１０mmol）およびジイソプロピル−カルボジイミド（８７５μl、５．０mmol）のＤＭＦ（１５．０mL）溶液で１８時間カップリングを行った。Ｆｍｏｃ除去の後、エイコサン酸３１３．０mg（１．０mm）、Ｎ−ヒドロキシベンゾトリアゾール（１５０mg、１．１０mmol）およびジイソプロピル−カルボジイミド（８７５μl、５．０mmol）のＤＭＦ（１５．０mL）溶液で１８時間カップリングを行った。ＭｅＯＨおよびＣＨ２Ｃｌ２で交互に４回、最後にＣＨ２Ｃｌ２で４回樹脂を洗浄した後、ＴＦＡ１７mL、ｉＰｒＳｉＨ４００μLおよびプロパンチオール８００μLで６時間かけて切断し、Ｅｔ２Ｏ１００．０mL中で沈殿させ、遠心し、洗浄して、真空下で乾燥させた。実施例３の手順に従って粗ペプチドを精製して、白色の無定形粉末３４mg（４．４％）を得た。（ＥＳ）＋−ＬＣＭＳ  ｍ／ｅ、Ｃ１８４Ｈ３０４Ｎ３６Ｏ５３の計算値３８６６．２２、実測値３８６６．２１。
【０１２２】
実施例２７
ＣＨ３−（ＯＣＨ２ＣＨ２）２３−Ｏ−（ＣＨ２）２−ＣＯ−Ｉｌｅ−Ｌｙｓ（エイコサノイル−Ｃｙｓ｛ＳＯ３｝−Ｃｙｓ｛ＳＯ３｝）−Ｐｑａ−Ａｒｇ−Ｈｉｓ−Ｔｙｒ−Ｌｅｕ−Ａｓｎ−Ｔｒｐ−Ｖａｌ−Ｔｈｒ−Ａｒｇ−Ｇｌｎ−（ＮＭｅ）−Ａｒｇ−Ｔｙｒ−ＮＨ２  １：３  ＴＦＡの調製
【化３０】
2013507414.tif 000036
実施例６から得られたＦｍｏｃ−Ｉｌｅ−Ｌｙｓ（Ａｌｌｏｃ）−Ｐｑａ−Ａｒｇ（Ｐｂｆ）−Ｈｉｓ（Ｔｒｔ）−Ｔｙｒ（ｔＢｕ）−Ｌｅｕ−Ａｓｎ（Ｔｒｔ）−Ｔｒｐ−Ｖａｌ−Ｔｈｒ（ｔＢｕ）−Ａｒｇ（Ｐｂｆ）−Ｇｌｎ（Ｔｒｔ）−ＮＭｅ−Ａｒｇ（Ｍｔｒ）−Ｔｙｒ（ｔＢｕ）−Ｒｉｎｋアミド樹脂１．０ｇ（０．２２mmol）を、ＤＭＦで洗浄して、脱保護および洗浄し、ＤＭＦ中、ｍ−ｄＰＥＧｎ＝２４（Quanta Biodesign、３０８mg、０．２７５mmol）；Ｎ−ヒドロキシベンゾトリアゾール（４０mg、０．３０mmol）およびジイソプロピル−カルボジイミド（３２０μl、２．０mmol）でカップリングを行い、１８時間撹拌した。ＤＭＦで４回洗浄した後、Ａｒ雰囲気下、ＰｄＣｌ２（トリフェニルホスフィン）２５０．０mg、モルホリン５０μL、酢酸１００μLのＤＭＦ（１５mL）溶液でａｌｌｏｃ保護基を除去して、次に、Ｂｕ３ＳｎＨ５００μLを添加した。黄色の溶液が赤褐色になるまで、Ａｒでバブリングを続けた。次に、反応物を１／４時間混合し、ＤＭＦで３回洗浄した。上記手順を、１／４〜１／２時間かけて再度繰り返した（この時点で、暗褐色がほぼ黒色になる）。ＤＭＦで２回、５％ＤＩＥＡ／ＤＭＦで２回、そして、ＤＭＦで４回生成物を洗浄した。洗浄後、Ｆｍｏｃ−Ｃｙｓ（ＳＯ３）Ｎａ２（４７０．０mg；０１．０mmol）、Ｎ−ヒドロキシベンゾトリアゾール（１５０mg、１．１０mmol）およびジイソプロピル−カルボジイミド（８７５μl、５．０mmol）のＤＭＦ（１５．０mL）溶液で１８時間カップリングを行った。Ｆｍｏｃ除去の後、Ｆｍｏｃ−Ｃｙｓ（ＳＯ３）Ｎａ２（４７０．０mg；０１．０mmol）、Ｎ−ヒドロキシベンゾトリアゾール（１５０mg、１．１０mmol）およびジイソプロピル−カルボジイミド（８７５μl、５．０mmol）のＤＭＦ（１５．０mL）溶液で１８時間カップリングを行った。ニンヒドリンが赤紫色になり、Ｆｍｏｃ−Ｃｙｓ（ＳＯ３）Ｎａ２（４７０．０mg；０１．０mm）、Ｎ−ヒドロキシベンゾトリアゾール（１５０mg、１．１０mmol）およびジイソプロピル−カルボジイミド（８７５μl、５．０mmol）のＤＭＦ（１５．０mL）溶液で６時間カップリングを行った。Ｆｍｏｃ除去の後、エイコサン酸３１３．０mg（１．０mmol）、Ｎ−ヒドロキシベンゾトリアゾール（１５０mg、１．１０mmol）およびジイソプロピル−カルボジイミド（８７５μl、５．０mmol）のＤＭＦ（１５．０mL）溶液で１８時間カップリングを行った。ＭｅＯＨおよびＣＨ２Ｃｌ２で交互に４回、最後にＣＨ２Ｃｌ２で４回樹脂を洗浄した後、ＴＦＡ１７mL、ｉＰｒＳｉＨ４００μLおよびプロパンチオール８００μLで６時間かけて切断し、Ｅｔ２Ｏ１００．０mL中で沈殿させ、遠心し、洗浄して、真空下で乾燥させた。実施例３の手順に従って粗ペプチドを精製して、白色の無定形粉末２８．４mg（４％）を得た。（ＥＳ）＋−ＬＣＭＳ  ｍ／ｅ、Ｃ１８２Ｈ３０４Ｎ３６Ｏ５５Ｓ２の計算値３９３８．１５、実測値３９３８．１４。
【０１２３】
実施例２８
ＣＨ３−（ＯＣＨ２ＣＨ２）２３−Ｏ−（ＣＨ２）２−ＣＯ−Ｉｌｅ−Ｌｙｓ（エイコサノイル−Ｃｙｓ｛ＳＯ３｝−Ｃｙｓ｛ＳＯ３｝）−Ｐｑａ−Ｃｉｔ−Ｈｉｓ−Ｔｙｒ−Ｌｅｕ−Ａｓｎ−Ｔｒｐ−Ｖａｌ−Ｔｈｒ−Ａｒｇ−Ｇｌｎ−（ＮＭｅ）−Ａｒｇ−Ｔｙｒ−ＮＨ２  １：２  ＴＦＡの調製
【化３１】
2013507414.tif 000037
実施例６Ａから得られたＦｍｏｃ−Ｉｌｅ−Ｌｙｓ（Ａｌｌｏｃ）−Ｐｑａ−Ｃｉｔ−Ｈｉｓ（Ｔｒｔ）−Ｔｙｒ（ｔＢｕ）−Ｌｅｕ−Ａｓｎ（Ｔｒｔ）−Ｔｒｐ−Ｖａｌ−Ｔｈｒ（ｔＢｕ）−Ａｒｇ（Ｐｂｆ）−Ｇｌｎ（Ｔｒｔ）−ＮＭｅ−Ａｒｇ（Ｍｔｒ）−Ｔｙｒ（ｔＢｕ）−Ｒｉｎｇアミド樹脂１．０ｇ（０．２２mmol）を、ＤＭＦで洗浄して、脱保護および洗浄し、ＤＭＦ中、ｍ−ｄＰＥＧｎ＝２４（Quanta Biodesign、３０８mg、０．２７５mmol）；Ｎ−ヒドロキシベンゾトリアゾール（４０mg、０．３０mmol）およびジイソプロピル−カルボジイミド（３２０μl、２．０mmol）でカップリングを行い、１８時間撹拌した。ＤＭＦで４回洗浄した後、Ａｒ雰囲気下、ＰｄＣｌ２（トリフェニルホスフィン）２５０．０mg、モルホリン５０μL、酢酸１００μLのＤＭＦ（１５mL）溶液でａｌｌｏｃ保護基を除去して、次に、Ｂｕ３ＳｎＨ５００μLを添加した。黄色の溶液が赤褐色になるまで、Ａｒでバブリングを続けた。次に、反応物を１／４時間混合し、ＤＭＦで３回洗浄した。上記手順を、１／４〜１／２時間かけて再度繰り返した（この時点で、暗褐色がほぼ黒色になる）。ＤＭＦで２回、５％ＤＩＥＡ／ＤＭＦで２回、そして、ＤＭＦで４回生成物を洗浄した。洗浄後、Ｆｍｏｃ−Ｃｙｓ（ＳＯ３）Ｎａ２（４７０．０mg；０１．０mmol）、Ｎ−ヒドロキシベンゾトリアゾール（１５０mg、１．１０mmol）およびジイソプロピル−カルボジイミド（８７５μl、５．０mmol）のＤＭＦ（１５．０mL）溶液で１８時間カップリングを行った。Ｆｍｏｃ除去の後、Ｆｍｏｃ−Ｃｙｓ（ＳＯ３）Ｎａ２（４７０．０mg；０１．０mmol）、Ｎ−ヒドロキシベンゾトリアゾール（１５０mg、１．１０mmol）およびジイソプロピル−カルボジイミド（８７５μl、５．０mmol）のＤＭＦ（１５．０mL）溶液で１８時間カップリングを行った。ニンヒドリンが赤紫色になり、Ｆｍｏｃ−Ｃｙｓ（ＳＯ３）Ｎａ２（４７０．０mg；０１．０mmol）、Ｎ−ヒドロキシベンゾトリアゾール（１５０mg、１．１０mmol）およびジイソプロピル−カルボジイミド（８７５μl、５．０mmol）のＤＭＦ（１５．０mL）溶液で６時間カップリングを行った。Ｆｍｏｃ除去の後、エイコサン酸３１３．０mg（１．０mmol）、Ｎ−ヒドロキシベンゾトリアゾール（１５０mg、１．１０mmol）およびジイソプロピル−カルボジイミド（８７５μl、５．０mmol）のＤＭＦ（１５．０mL）溶液で１８時間カップリングを行った。ＭｅＯＨおよびＣＨ２Ｃｌ２で交互に４回、最後にＣＨ２Ｃｌ２で４回樹脂を洗浄した後、ＴＦＡ１７mL、ｉＰｒＳｉＨ４００μLおよびプロパンチオール８００μLで６時間かけて切断し、Ｅｔ２Ｏ１００．０mL中で沈殿させ、遠心し、洗浄して、真空下で乾燥させた。実施例３の手順に従って粗ペプチドを精製して、白色の無定形粉末５１mg（６％）を得た。（ＥＳ）＋−ＬＣＭＳ  ｍ／ｅ、Ｃ１８２Ｈ３０３Ｎ３５Ｏ５６Ｓ２の計算値３９３９．１４、実測値３９３９．１４。
【０１２４】
実施例２９
ＣＨ３−（ＯＣＨ２ＣＨ２）２３−Ｏ−（ＣＨ２）２−ＣＯ−Ｉｌｅ−Ｌｙｓ（パルミトイル−Ｃｙｓ｛ＳＯ３｝−Ｃｙｓ｛ＳＯ３｝）−Ｐｑａ−Ａｒｇ−Ｈｉｓ−Ｔｙｒ−Ｌｅｕ−Ａｓｎ−Ｔｒｐ−Ｖａｌ−Ｔｈｒ−Ａｒｇ−Ｇｌｎ−（ＮＭｅ）−Ａｒｇ−Ｔｙｒ−ＮＨ２  １：３  ＴＦＡの調製
【化３２】
2013507414.tif 000038
実施例６から得られたＦｍｏｃ−Ｉｌｅ−Ｌｙｓ（Ａｌｌｏｃ）−Ｐｑａ−Ａｒｇ（Ｐｂｆ）−Ｈｉｓ（Ｔｒｔ）−Ｔｙｒ（ｔＢｕ）−Ｌｅｕ−Ａｓｎ（Ｔｒｔ）−Ｔｒｐ−Ｖａｌ−Ｔｈｒ（ｔＢｕ）−Ａｒｇ（Ｐｂｆ）−Ｇｌｎ（Ｔｒｔ）−ＮＭｅ−Ａｒｇ（Ｍｔｒ）−Ｔｙｒ（ｔＢｕ）−Ｒｉｎｋアミド樹脂１．０ｇ（０．２２mmol）を、ＤＭＦで洗浄して、脱保護および洗浄し、ＤＭＦ中、ｍ−ｄＰＥＧｎ＝２４（Quanta Biodesign、３０８mg、０．２７５mmol）；Ｎ−ヒドロキシベンゾトリアゾール（４０mg、０．３０mmol）およびジイソプロピル−カルボジイミド（３２０μl、２．０mmol）でカップリングを行い、１８時間撹拌した。ＤＭＦで４回洗浄した後、Ａｒ雰囲気下、ＰｄＣｌ２（トリフェニルホスフィン）２５０．０mg、モルホリン５０μL、酢酸１００μLのＤＭＦ（１５mL）溶液でａｌｌｏｃ保護基を除去して、次に、Ｂｕ３ＳｎＨ５００μLを添加した。黄色の溶液が赤褐色になるまで、Ａｒでバブリングを続けた。次に、反応物を１／４時間混合し、ＤＭＦで３回洗浄した。上記手順を、１／４〜１／２時間かけて再度繰り返した（この時点で、暗褐色がほぼ黒色になる）。ＤＭＦで２回、５％ＤＩＥＡ／ＤＭＦで２回、そして、ＤＭＦで４回生成物を洗浄した。洗浄後、Ｆｍｏｃ−Ｃｙｓ（ＳＯ３）Ｎａ２（４７０．０mg；０１．０mmol）、Ｎ−ヒドロキシベンゾトリアゾール（１５０mg、１．１０mmol）およびジイソプロピル−カルボジイミド（８７５μl、５．０mmol）のＤＭＦ（１５．０mL）溶液で１８時間カップリングを行った。Ｆｍｏｃ除去の後、Ｆｍｏｃ−Ｃｙｓ（ＳＯ３）Ｎａ２（４７０．０mg；０１．０mmol）、Ｎ−ヒドロキシベンゾトリアゾール（１５０mg、１．１０mmol）およびジイソプロピル−カルボジイミド（８７５μl、５．０mmol）のＤＭＦ（１５．０mL）溶液で１８時間カップリングを行った。ニンヒドリンが赤紫色になり、Ｆｍｏｃ−Ｃｙｓ（ＳＯ３）Ｎａ２（４７０．０mg；０１．０mmol）、Ｎ−ヒドロキシベンゾトリアゾール（１５０mg、１．１０mmol）およびジイソプロピル−カルボジイミド（８７５μl、５．０mmol）のＤＭＦ（１５．０mL）溶液で６時間カップリングを行った。Ｆｍｏｃ除去、ＤＭＦおよびＣＨ２Ｃｌ２による洗浄の後、Ｎ−ヒドロキシベンゾトリアゾール（４２５mg、３．１５０mmol）、ＤＩＥＡ（５００μL、３．０mmol）およびパルミトイルクロリド（２．８ml、２．７５mmol）を、ＣＨ２Ｃｌ２１５mL中で５分間反応させて、ペプチド樹脂に添加した。反応物を１８時間撹拌して、ＤＭＦで２回、ＣＨ２Ｃｌ２で３回洗浄した後、ＴＦＡ１７mL、ｉＰｒＳｉＨ４００μLおよびプロパンチオール８００μLで６時間かけて切断し、Ｅｔ２Ｏ１００．０mL中で沈殿させ、遠心し、洗浄して、真空下で乾燥させた。実施例３の手順に従って粗ペプチドを精製して、白色の無定形粉末４４mg（６％）を得た。（ＥＳ）＋−ＬＣＭＳ  ｍ／ｅ、Ｃ１７８Ｈ２９６Ｎ３６Ｏ５５Ｓ２の計算値３８８２．０、実測値３８８１．９８。
【０１２５】
実施例３０
パルミトイル−６Ａｈｘ−Ｉｌｅ−Ｌｙｓ［ＣＨ３−（ＯＣＨ２ＣＨ２）７−Ｏ−（ＣＨ２）２−ＣＯ］−Ｐｑａ−Ｃｉｔ−Ｈｉｓ−Ｔｙｒ−Ｌｅｕ−Ａｓｎ−Ｔｒｐ−Ｖａｌ−Ｔｈｒ−Ａｒｇ−Ｇｌｎ−（ＮＭｅ）−Ａｒｇ−Ｔｙｒ−ＮＨ２  １：２  ＴＦＡの調製
【化３３】
2013507414.tif 000039
実施例６Ａから得られたＦｍｏｃ−Ｉｌｅ−Ｌｙｓ（Ａｌｌｏｃ）−Ｐｑａ−Ｃｉｔ−Ｈｉｓ（Ｔｒｔ）−Ｔｙｒ（ｔＢｕ）−Ｌｅｕ−Ａｓｎ（Ｔｒｔ）−Ｔｒｐ−Ｖａｌ−Ｔｈｒ（ｔＢｕ）−Ａｒｇ（Ｐｂｆ）−Ｇｌｎ（Ｔｒｔ）−ＮＭｅ−Ａｒｇ（Ｍｔｒ）−Ｔｙｒ（ｔＢｕ）−Ｒｉｎｋアミド樹脂１．０ｇ（０．２２mmol）を、ＤＭＦで洗浄して、脱保護および洗浄し、ＤＭＦ中、Ｆｍｏｃ−６−アミノヘキサン酸（３５５．０mg；１．０mmol）、Ｎ−ヒドロキシベンゾトリアゾール（１５０mg、１．１１０mmol）およびジイソプロピル−カルボジイミド（８７５μl、５．０mmol）のＤＭＦ（１５mL）溶液で１８時間カップリングを行った。Ｆｍｏｃ除去、ＤＭＦおよびＣＨ２Ｃｌ２による洗浄の後、Ｎ−ヒドロキシベンゾトリアゾール（４２５mg、３．１５０mmol）、ＤＩＥＡ（５００μL、３．０mmol）およびパルミトイルクロリド（２．８ml、２．７５mmol）を、ＣＨ２Ｃｌ２１５mL中で５分間反応させて、ペプチド樹脂に添加した。反応物を１８時間撹拌した。ＤＭＦで４回洗浄した後、Ａｒ雰囲気下、ＰｄＣｌ２（トリフェニルホスフィン）２５０．０mg、モルホリン５０μL、酢酸１００μLのＤＭＦ（１５mL）溶液でａｌｌｏｃ保護基を除去して、次に、Ｂｕ３ＳｎＨ５００μLを添加した。黄色の溶液が赤褐色になるまで、Ａｒでバブリングを続けた。次に、反応物を１／４時間混合し、ＤＭＦで３回洗浄した。上記手順を、１／４〜１／２時間かけて再度繰り返した（この時点で、暗褐色がほぼ黒色になる）。ＤＭＦで２回、５％ＤＩＥＡ／ＤＭＦで２回、そして、ＤＭＦで４回生成物を洗浄し、ＤＭＦ中、ｍ−ｄＰＥＧｎ＝１２  ＮＨＳエステル（Quanta Biodesign、１８９mg、０．２７５mmol）；Ｎ−ヒドロキシベンゾトリアゾール（４０mg、０．３０mmol）およびジイソプロピル−カルボジイミド（１．５０ml、２．０mmol）でカップリングを行い、１８時間撹拌した。ＤＭＦで２回、ＣＨ２Ｃｌ２で３回樹脂を洗浄した後、ＴＦＡ１７mL、ｉＰｒＳｉＨ４００μLおよびプロパンチオール８００μLで６時間かけて切断し、Ｅｔ２Ｏ１００．０mL中で沈殿させ、遠心し、洗浄して、真空下で乾燥させた。実施例３の手順に従って粗ペプチドを精製して、白色の無定形粉末７３mg（１２％）を得た。（ＥＳ）＋−ＬＣＭＳ  ｍ／ｅ、Ｃ１４４Ｈ２２８Ｎ３４Ｏ３３の計算値２９６１．７２、実測値２９６１．７０。
【０１２６】
実施例３１
パルミトイル−６Ａｈｘ−Ｉｌｅ−Ｌｙｓ［ＣＨ３−（ＯＣＨ２ＣＨ２）１１−Ｏ−（ＣＨ２）２−ＣＯ］−Ｐｑａ−Ｃｉｔ−Ｈｉｓ−Ｔｙｒ−Ｌｅｕ−Ａｓｎ−Ｔｒｐ−Ｖａｌ−Ｔｈｒ−Ａｒｇ−Ｇｌｎ−（ＮＭｅ）−Ａｒｇ−Ｔｙｒ−ＮＨ２  １：２  ＴＦＡの調製
【化３４】
2013507414.tif 000040
実施例６Ａから得られたＦｍｏｃ−Ｉｌｅ−Ｌｙｓ（Ａｌｌｏｃ）−Ｐｑａ−Ｃｉｔ−Ｈｉｓ（Ｔｒｔ）−Ｔｙｒ（ｔＢｕ）−Ｌｅｕ−Ａｓｎ（Ｔｒｔ）−Ｔｒｐ−Ｖａｌ−Ｔｈｒ（ｔＢｕ）−Ａｒｇ（Ｐｂｆ）−Ｇｌｎ（Ｔｒｔ）−ＮＭｅ−Ａｒｇ（Ｍｔｒ）−Ｔｙｒ（ｔＢｕ）−Ｒｉｎｋアミド樹脂１．０ｇ（０．２２mmol）を、ＤＭＦで洗浄して、脱保護および洗浄し、ＤＭＦ中、Ｆｍｏｃ−６−アミノヘキサン酸（３５５．０mg；１．０mmol）、Ｎ−ヒドロキシベンゾトリアゾール（１５０mg、１．１１０mmol）およびジイソプロピル−カルボジイミド（８７５μl、５．０mmol）のＤＭＦ（１５mL）溶液で１８時間カップリングを行った。Ｆｍｏｃ除去、ＤＭＦおよびＣＨ２Ｃｌ２による洗浄の後、Ｎ−ヒドロキシベンゾトリアゾール（４２５mg、３．１５０mmol）、ＤＩＥＡ（５００μL、３．０mmol）およびパルミトイルクロリド（２．８ml、２．７５mmol）を、ＣＨ２Ｃｌ２１５mL中で５分間反応させて、ペプチド樹脂に添加した。反応物を１８時間撹拌した。ＤＭＦで４回洗浄した後、Ａｒ雰囲気下、ＰｄＣｌ２（トリフェニルホスフィン）２５０．０mg、モルホリン５０μL、酢酸１００μLのＤＭＦ（１５mL）溶液でａｌｌｏｃ保護基を除去して、次に、Ｂｕ３ＳｎＨ５００μLを添加した。黄色の溶液が赤褐色になるまで、Ａｒでバブリングを続けた。次に、反応物を１／４時間混合し、ＤＭＦで３回洗浄した。上記手順を、１／４〜１／２時間かけて再度繰り返した（この時点で、暗褐色がほぼ黒色になる）。ＤＭＦで２回、５％ＤＩＥＡ／ＤＭＦで２回、そして、ＤＭＦで４回生成物を洗浄し、ＤＭＦ中、ｍ−ｄＰＥＧｎ＝１２  ＮＨＳエステル（Quanta Biodesign、１８９mg、０．２７５mmol）；Ｎ−ヒドロキシベンゾトリアゾール（４０mg、０．３０mmol）およびジイソプロピル−カルボジイミド（１．５０ml、２．０mmol）でカップリングを行い、１８時間撹拌した。ＤＭＦで２回、ＣＨ２Ｃｌ２で３回樹脂を洗浄した後、ＴＦＡ１７mL、ｉＰｒＳｉＨ４００μLおよびプロパンチオール８００μLで６時間かけて切断し、Ｅｔ２Ｏ１００．０mL中で沈殿させ、遠心し、洗浄して、真空下で乾燥させた。実施例３の手順に従って粗ペプチドを精製して、白色の無定形粉末４６mg（１６％）を得た。（ＥＳ）＋−ＬＣＭＳ  ｍ／ｅ、Ｃ１５２Ｈ２４４Ｎ３４Ｏ３７の計算値３１３７．８３、実測値３１３７．８３。
【０１２７】
実施例３２
パルミトイル−６Ａｈｘ−Ｉｌｅ−Ｌｙｓ［ＣＨ３−（ＯＣＨ２ＣＨ２）１５−Ｏ−（ＣＨ２）２−ＣＯ］−Ｐｑａ−Ｃｉｔ−Ｈｉｓ−Ｔｙｒ−Ｌｅｕ−Ａｓｎ−Ｔｒｐ−Ｖａｌ−Ｔｈｒ−Ａｒｇ−Ｇｌｎ−（ＮＭｅ）−Ａｒｇ−Ｔｙｒ−ＮＨ２  １：２  ＴＦＡの調製
【化３５】
2013507414.tif 000041
実施例６Ａから得られたＦｍｏｃ−Ｉｌｅ−Ｌｙｓ（Ａｌｌｏｃ）−Ｐｑａ−Ｃｉｔ−Ｈｉｓ（Ｔｒｔ）−Ｔｙｒ（ｔＢｕ）−Ｌｅｕ−Ａｓｎ（Ｔｒｔ）−Ｔｒｐ−Ｖａｌ−Ｔｈｒ（ｔＢｕ）−Ａｒｇ（Ｐｂｆ）−Ｇｌｎ（Ｔｒｔ）−ＮＭｅ−Ａｒｇ（Ｍｔｒ）−Ｔｙｒ（ｔＢｕ）−Ｒｉｎｋアミド樹脂１．０ｇ（０．２２mmol）を、ＤＭＦで洗浄して、脱保護および洗浄し、ＤＭＦ中、Ｆｍｏｃ−６−アミノヘキサン酸（３５５．０mg；１．０mmol）、Ｎ−ヒドロキシベンゾトリアゾール（１５０mg、１．１１０mmol）およびジイソプロピル−カルボジイミド（８７５μl、５．０mmol）のＤＭＦ（１５mL）溶液で１８時間カップリングを行った。Ｆｍｏｃ除去、ＤＭＦおよびＣＨ２Ｃｌ２による洗浄の後、Ｎ−ヒドロキシベンゾトリアゾール（４２５mg、３．１５０mmol）、ＤＩＥＡ（５００μL、３．０mmol）およびパルミトイルクロリド（２．８ml、２．７５mmol）を、ＣＨ２Ｃｌ２１５mL中で５分間反応させて、ペプチド樹脂に添加した。反応物を１８時間撹拌した。ＤＭＦで４回洗浄した後、Ａｒ雰囲気下、ＰｄＣｌ２（トリフェニルホスフィン）２５０．０mg、モルホリン５０μL、酢酸１００μLのＤＭＦ（１５mL）溶液でａｌｌｏｃ保護基を除去して、次に、Ｂｕ３ＳｎＨ５００μLを添加した。黄色の溶液が赤褐色になるまで、Ａｒでバブリングを続けた。次に、反応物を１／４時間混合し、ＤＭＦで３回洗浄した。上記手順を、１／４〜１／２時間かけて再度繰り返した（この時点で、暗褐色がほぼ黒色になる）。ＤＭＦで２回、５％ＤＩＥＡ／ＤＭＦで２回、そして、ＤＭＦで４回生成物を洗浄し、ＤＭＦ中、ｍ−ｄＰＥＧｎ＝１６  ＮＨＳエステル（Quanta Biodesign、２３８mg、０．２７５mmol）；Ｎ−ヒドロキシベンゾトリアゾール（４０mg、０．３０mmol）およびジイソプロピル−カルボジイミド（３２０μl、２．０mmol）でカップリングを行い、１８時間撹拌した。ＤＭＦで２回、ＣＨ２Ｃｌ２で３回樹脂を洗浄した後、ＴＦＡ１７mL、ｉＰｒＳｉＨ４００μLおよびプロパンチオール８００μLで６時間かけて切断し、Ｅｔ２Ｏ１００．０mL中で沈殿させ、遠心し、洗浄して、真空下で乾燥させた。実施例３の手順に従って粗ペプチドを精製して、白色の無定形粉末３２mg（５％）を得た。（ＥＳ）＋−ＬＣＭＳ  ｍ／ｅ、Ｃ１６０Ｈ２６０Ｎ３４Ｏ４の計算値３３１３．９３、実測値３３１３．９３。
【０１２８】
実施例３３
エイコサノイル−６Ａｈｘ−Ｉｌｅ−Ｌｙｓ［ＣＨ３−（ＯＣＨ２ＣＨ２）２３−Ｏ−（ＣＨ２）２−ＣＯ］−Ｐｑａ−Ｃｉｔ−Ｈｉｓ−Ｔｙｒ−Ｌｅｕ−Ａｓｎ−Ｔｒｐ−Ｖａｌ−Ｔｈｒ−Ａｒｇ−Ｇｌｎ−（ＮＭｅ）−Ａｒｇ−Ｔｙｒ−ＮＨ２  １：２  ＴＦＡの調製
【化３６】
2013507414.tif 000042
実施例６Ａから得られたＦｍｏｃ−Ｉｌｅ−Ｌｙｓ（Ａｌｌｏｃ）−Ｐｑａ−Ｃｉｔ−Ｈｉｓ（Ｔｒｔ）−Ｔｙｒ（ｔＢｕ）−Ｌｅｕ−Ａｓｎ（Ｔｒｔ）−Ｔｒｐ−Ｖａｌ−Ｔｈｒ（ｔＢｕ）−Ａｒｇ（Ｐｂｆ）−Ｇｌｎ（Ｔｒｔ）−ＮＭｅ−Ａｒｇ（Ｍｔｒ）−Ｔｙｒ（ｔＢｕ）−アミド樹脂１．０ｇ（０．２２mmol）を、ＤＭＦで洗浄して、脱保護および洗浄し、ＤＭＦ中、Ｆｍｏｃ−６−アミノヘキサン酸（３５５．０mg；１．０mmol）、Ｎ−ヒドロキシベンゾトリアゾール（１５０mg、１．１１０mmol）およびジイソプロピル−カルボジイミド（８７５μl、５．０mmol）のＤＭＦ（１５mL）溶液で１８時間カップリングを行った。Ｆｍｏｃ除去の後、エイコサン酸３１３．０mg（１．０mmol）、Ｎ−ヒドロキシベンゾトリアゾール（１５０mg、１．１０mmol）およびジイソプロピル−カルボジイミド（８７５μl、５．０mmol）のＤＭＦ（１５．０mL）溶液でカップリングを行い、１８時間撹拌した。ＤＭＦで４回洗浄した後、Ａｒ雰囲気下、ＰｄＣｌ２（トリフェニルホスフィン）２５０．０mg、モルホリン５０μL、酢酸１００μLのＤＭＦ（１５mL）溶液でａｌｌｏｃ保護基を除去して、次に、Ｂｕ３ＳｎＨ５００μLを添加した。黄色の溶液が赤褐色になるまで、Ａｒでバブリングを続けた。次に、反応物を１／４時間混合し、ＤＭＦで３回洗浄した。上記手順を、１／４〜１／２時間かけて再度繰り返した（この時点で、暗褐色がほぼ黒色になる）。ＤＭＦで２回、５％ＤＩＥＡ／ＤＭＦで２回、そして、ＤＭＦで４回生成物を洗浄し、ＤＭＦ中、ｍ−ｄＰＥＧｎ＝２４（Quanta Biodesign、３０８mg、０．２７５mmol）；Ｎ−ヒドロキシベンゾトリアゾール（４０mg、０．３０mmol）およびジイソプロピル−カルボジイミド（３２０μl、２．０mmol）でカップリングを行い、１８時間撹拌した。ＤＭＦで２回、ＣＨ２Ｃｌ２で３回樹脂を洗浄した後、ＴＦＡ１７mL、ｉＰｒＳｉＨ４００μLおよびプロパンチオール８００μLで６時間かけて切断し、Ｅｔ２Ｏ１００．０mL中で沈殿させ、遠心し、洗浄して、真空下で乾燥させた。実施例３の手順に従って粗ペプチドを精製して、白色の無定形粉末６４mg（９％）を得た。（ＥＳ）＋−ＬＣＭＳ  ｍ／ｅ、Ｃ１８０Ｈ３００Ｎ３４Ｏ４９の計算値３７２２．２０、実測値３７２２．１９。
【０１２９】
実施例３４
パルミトイル−６Ａｈｘ−Ｉｌｅ−Ｌｙｓ［ＣＨ３−（ＯＣＨ２ＣＨ２）２３−Ｏ−（ＣＨ２）２−ＣＯ］−Ｐｑａ−Ａｒｇ−Ｈｉｓ−Ｔｙｒ−Ｌｅｕ−Ａｓｎ−Ｔｒｐ−Ｖａｌ−Ｔｈｒ−Ａｒｇ−Ｇｌｎ−（ＮＭｅ）−Ａｒｇ−Ｔｙｒ−ＮＨ２  １：３  ＴＦＡの調製
【化３７】
2013507414.tif 000043
実施例６から得られたＦｍｏｃ−Ｉｌｅ−Ｌｙｓ（Ａｌｌｏｃ）−Ｐｑａ−Ａｒｇ（Ｐｂｆ）−Ｈｉｓ（Ｔｒｔ）−Ｔｙｒ（ｔＢｕ）−Ｌｅｕ−Ａｓｎ（Ｔｒｔ）−Ｔｒｐ−Ｖａｌ−Ｔｈｒ（ｔＢｕ）−Ａｒｇ（Ｐｂｆ）−Ｇｌｎ（Ｔｒｔ）−ＮＭｅ−Ａｒｇ（Ｍｔｒ）−Ｔｙｒ（ｔＢｕ）−Ｒｉｎｇアミド樹脂１．０ｇ（０．２２mmol）を、ＤＭＦで洗浄して、脱保護および洗浄し、ＤＭＦ中、Ｆｍｏｃ−６−アミノヘキサン酸（３５５．０mg；１．０mmol）、Ｎ−ヒドロキシベンゾトリアゾール（１５０mg、１．１１０mmol）およびジイソプロピル−カルボジイミド（８７５μl、５．０mmol）のＤＭＦ（１５mL）溶液で１８時間カップリングを行った。Ｆｍｏｃ除去、ＤＭＦおよびＣＨ２Ｃｌ２による洗浄の後、Ｎ−ヒドロキシベンゾトリアゾール（４２５mg、３．１５０mmol）、ＤＩＥＡ（５００μL、３．０mmol）およびパルミトイルクロリド（２．８ml、２．７５mmol）を、ＣＨ２Ｃｌ２１５mL中で５分間反応させて、ペプチド樹脂に添加した。反応物を１８時間撹拌した。ＤＭＦで４回洗浄した後、Ａｒ雰囲気下、ＰｄＣｌ２（トリフェニルホスフィン）２５０．０mg、モルホリン５０μL、酢酸１００μLのＤＭＦ（１５mL）溶液でａｌｌｏｃ保護基を除去して、次に、Ｂｕ３ＳｎＨ５００μLを添加した。黄色の溶液が赤褐色になるまで、Ａｒでバブリングを続けた。次に、反応物を１／４時間混合し、ＤＭＦで３回洗浄した。上記手順を、１／４〜１／２時間かけて再度繰り返した（この時点で、暗褐色がほぼ黒色になる）。ＤＭＦで２回、５％ＤＩＥＡ／ＤＭＦで２回、そして、ＤＭＦで４回生成物を洗浄し、ＤＭＦ中、ｍ−ｄＰＥＧｎ＝２４（Quanta Biodesign、３０８mg、０．２７５mmol）；Ｎ−ヒドロキシベンゾトリアゾール（４０mg、０．３０mmol）およびジイソプロピル−カルボジイミド（３２０μL、２．０mmol）でカップリングを行い、１８時間撹拌した。ＤＭＦで２回、ＣＨ２Ｃｌ２で３回樹脂を洗浄した後、ＴＦＡ１７mL、ｉＰｒＳｉＨ４００μLおよびプロパンチオール８００μLで６時間かけて切断し、Ｅｔ２Ｏ１００．０mL中で沈殿させ、遠心し、洗浄して、真空下で乾燥させた。実施例３の手順に従って粗ペプチドを精製して、白色の無定形粉末６６mg（９％）を得た。（ＥＳ）＋−ＬＣＭＳ  ｍ／ｅ、Ｃ１７６Ｈ２９３Ｎ３５Ｏ４８の計算値３６６５．１６、実測値３６６５．１５。
【０１３０】
実施例３５
エイコサノイル−６Ａｈｘ−Ｉｌｅ−Ｌｙｓ［ＣＨ３−（ＯＣＨ２ＣＨ２）２３−Ｏ−（ＣＨ２）２−ＣＯ］−Ｐｑａ−Ａｒｇ−Ｈｉｓ−Ｔｙｒ−Ｌｅｕ−Ａｓｎ−Ｔｒｐ−Ｖａｌ−Ｔｈｒ−Ａｒｇ−Ｇｌｎ−（ＮＭｅ）−Ａｒｇ−Ｔｙｒ−ＮＨ２  １：３  ＴＦＡの調製
【化３８】
2013507414.tif 000044
実施例６から得られたＦｍｏｃ−Ｉｌｅ−Ｌｙｓ（Ａｌｌｏｃ）−Ｐｑａ−Ａｒｇ（Ｐｂｆ）−Ｈｉｓ（Ｔｒｔ）−Ｔｙｒ（ｔＢｕ）−Ｌｅｕ−Ａｓｎ（Ｔｒｔ）−Ｔｒｐ−Ｖａｌ−Ｔｈｒ（ｔＢｕ）−Ａｒｇ（Ｐｂｆ）−Ｇｌｎ（Ｔｒｔ）−ＮＭｅ−Ａｒｇ（Ｍｔｒ）−Ｔｙｒ（ｔＢｕ）−Ｒｉｎｇアミド樹脂１．０ｇ（０．２２mmol）を、ＤＭＦで洗浄して、脱保護および洗浄し、ＤＭＦ中、Ｆｍｏｃ−６−アミノヘキサン酸（３５５．０mg；１．０mmol）、Ｎ−ヒドロキシベンゾトリアゾール（１５０mg、１．１１０mmol）およびジイソプロピル−カルボジイミド（８７５μl、５．０mmol）のＤＭＦ（１５mL）溶液で１８時間カップリングを行った。Ｆｍｏｃ除去の後、エイコサン酸３１３．０mg（１．０mmol）、Ｎ−ヒドロキシベンゾトリアゾール（１５０mg、１．１０mmol）およびジイソプロピル−カルボジイミド（８７５μl、５．０mmol）のＤＭＦ（１５．０mL）溶液でカップリングを行い、１８時間撹拌した。ＤＭＦで４回洗浄した後、Ａｒ雰囲気下、ＰｄＣｌ２（トリフェニルホスフィン）２５０．０mg、モルホリン５０μL、酢酸１００μLのＤＭＦ（１５mL）溶液でａｌｌｏｃ保護基を除去して、次に、Ｂｕ３ＳｎＨ５００μLを添加した。黄色の溶液が赤褐色になるまで、Ａｒでバブリングを続けた。次に、反応物を１／４時間混合し、ＤＭＦで３回洗浄した。上記手順を、１／４〜１／２時間かけて再度繰り返した（この時点で、暗褐色がほぼ黒色になる）。ＤＭＦで２回、５％ＤＩＥＡ／ＤＭＦで２回、そして、ＤＭＦで４回生成物を洗浄し、ＤＭＦ中、ｍ−ｄＰＥＧｎ＝２４（Quanta Biodesign、３０８mg、０．２７５mmol）；Ｎ−ヒドロキシベンゾトリアゾール（４０mg、０．３０mmol）およびジイソプロピル−カルボジイミド（３２０μl、２．０mmol）でカップリングを行い、１８時間撹拌した。ＤＭＦで２回、ＣＨ２Ｃｌ２で３回樹脂を洗浄した後、ＴＦＡ１７mL、ｉＰｒＳｉＨ４００μLおよびプロパンチオール８００μLで６時間かけて切断し、Ｅｔ２Ｏ１００．０mL中で沈殿させ、遠心し、洗浄して、真空下で乾燥させた。実施例３の手順に従って粗ペプチドを精製して、白色の無定形粉末８６mg（１２％）を得た。（ＥＳ）＋−ＬＣＭＳ  ｍ／ｅ、Ｃ１８０Ｈ３０１Ｎ３５Ｏ４８の計算値３７２１．２２、実測値３７２１．２１。
【０１３１】
実施例３６
ラウロイル−６Ａｈｘ−Ｉｌｅ−Ｌｙｓ［ＣＨ３−（ＯＣＨ２ＣＨ２）２３−Ｏ−（ＣＨ２）２−ＣＯ］−Ｐｑａ−Ｃｉｔ−Ｈｉｓ−Ｔｙｒ−Ｌｅｕ−Ａｓｎ−Ｔｒｐ−Ｖａｌ−Ｔｈｒ−Ａｒｇ−Ｇｌｎ−（ＮＭｅ）−Ａｒｇ−Ｔｙｒ−ＮＨ２  １：２  ＴＦＡの調製
【化３９】
2013507414.tif 000045
実施例６Ａから得られたＦｍｏｃ−Ｉｌｅ−Ｌｙｓ（Ａｌｌｏｃ）−Ｐｑａ−Ｃｉｔ−Ｈｉｓ（Ｔｒｔ）−Ｔｙｒ（ｔＢｕ）−Ｌｅｕ−Ａｓｎ（Ｔｒｔ）−Ｔｒｐ−Ｖａｌ−Ｔｈｒ（ｔＢｕ）−Ａｒｇ（Ｐｂｆ）−Ｇｌｎ（Ｔｒｔ）−ＮＭｅ−Ａｒｇ（Ｍｔｒ）−Ｔｙｒ（ｔＢｕ）−Ｒｉｎｇアミド樹脂１．０ｇ（０．２２mmol）を、ＤＭＦで洗浄して、脱保護および洗浄し、ＤＭＦ中、Ｆｍｏｃ−６−アミノヘキサン酸（３５５．０mg；１．０mmol）、Ｎ−ヒドロキシベンゾトリアゾール（１５０mg、１．１１０mmol）およびジイソプロピル−カルボジイミド（８７５μl、５．０mmol）のＤＭＦ（１５mL）溶液で１８時間カップリングを行った。Ｆｍｏｃ除去の後、ラウリン酸２２０．０mg（１．０mmol）、Ｎ−ヒドロキシベンゾトリアゾール（１５０mg、１．１０mmol）およびジイソプロピル−カルボジイミド（８７５μl、５．０mmol）のＤＭＦ（１５．０mL）溶液でカップリングを行い、１８時間撹拌した。ＤＭＦで４回洗浄した後、Ａｒ雰囲気下、ＰｄＣｌ２（トリフェニルホスフィン）２５０．０mg、モルホリン５０μL、酢酸１００μLのＤＭＦ（１５mL）溶液でａｌｌｏｃ保護基を除去して、次に、Ｂｕ３ＳｎＨ５００μLを添加した。黄色の溶液が赤褐色になるまで、Ａｒでバブリングを続けた。次に、反応物を１／４時間混合し、ＤＭＦで３回洗浄した。上記手順を、１／４〜１／２時間かけて再度繰り返した（この時点で、暗褐色がほぼ黒色になる）。ＤＭＦで２回、５％ＤＩＥＡ／ＤＭＦで２回、そして、ＤＭＦで４回生成物を洗浄し、ＤＭＦ中、ｍ−ｄＰＥＧｎ＝２４（Quanta Biodesign、３０８mg、０．２７５mmol）；Ｎ−ヒドロキシベンゾトリアゾール（４０mg、０．３０mmol）およびジイソプロピル−カルボジイミド（３２０μl、２．０mmol）でカップリングを行い、１８時間撹拌した。ＤＭＦで２回、ＣＨ２Ｃｌ２で３回樹脂を洗浄した後、ＴＦＡ１７mL、ｉＰｒＳｉＨ４００μLおよびプロパンチオール８００μLで６時間かけて切断し、Ｅｔ２Ｏ１００．０mL中で沈殿させ、遠心し、洗浄して、真空下で乾燥させた。実施例３の手順に従って粗ペプチドを精製して、白色の無定形粉末６３mg（９％）を得た。（ＥＳ）＋−ＬＣＭＳ  ｍ／ｅ、Ｃ１７２Ｈ２８４Ｎ３４Ｏ４９の計算値３６１０．０８、実測値３６１０．０７。
【０１３２】
実施例３７
ミリストイル−６Ａｈｘ−Ｉｌｅ−Ｌｙｓ［ＣＨ３−（ＯＣＨ２ＣＨ２）２３−Ｏ−（ＣＨ２）２−ＣＯ］−Ｐｑａ−Ｃｉｔ−Ｈｉｓ−Ｔｙｒ−Ｌｅｕ−Ａｓｎ−Ｔｒｐ−Ｖａｌ−Ｔｈｒ−Ａｒｇ−Ｇｌｎ−（ＮＭｅ）−Ａｒｇ−Ｔｙｒ−ＮＨ２  １：２  ＴＦＡの調製
【化４０】
2013507414.tif 000046
実施例６Ａから得られたＦｍｏｃ−Ｉｌｅ−Ｌｙｓ（Ａｌｌｏｃ）−Ｐｑａ−Ｃｉｔ−Ｈｉｓ（Ｔｒｔ）−Ｔｙｒ（ｔＢｕ）−Ｌｅｕ−Ａｓｎ（Ｔｒｔ）−Ｔｒｐ−Ｖａｌ−Ｔｈｒ（ｔＢｕ）−Ａｒｇ（Ｐｂｆ）−Ｇｌｎ（Ｔｒｔ）−ＮＭｅ−Ａｒｇ（Ｍｔｒ）−Ｔｙｒ（ｔＢｕ）−Ｒｉｎｇアミド樹脂１．０ｇ（０．２２mmol）を、ＤＭＦで洗浄して、脱保護および洗浄し、ＤＭＦ中、Ｆｍｏｃ−６−アミノヘキサン酸（３５５．０mg；１．０mmol）、Ｎ−ヒドロキシベンゾトリアゾール（１５０mg、１．１１０mmol）およびジイソプロピル−カルボジイミド（８７５μl、５．０mmol）のＤＭＦ（１５mL）溶液で１８時間カップリングを行った。Ｆｍｏｃ除去の後、ミリスチン酸２５２０．０mg（１．０mmol）、Ｎ−ヒドロキシベンゾトリアゾール（１５０mg、１．１０mmol）およびジイソプロピル−カルボジイミド（８７５μl、５．０mmol）のＤＭＦ（１５．０mL）溶液でカップリングを行い、１８時間撹拌した。ＤＭＦで４回洗浄した後、Ａｒ雰囲気下、ＰｄＣｌ２（トリフェニルホスフィン）２５０．０mg、モルホリン５０μL、酢酸１００μLのＤＭＦ（１５mL）溶液でａｌｌｏｃ保護基を除去して、次に、Ｂｕ３ＳｎＨ５００μLを添加した。黄色の溶液が赤褐色になるまで、Ａｒでバブリングを続けた。次に、反応物を１／４時間混合し、ＤＭＦで３回洗浄した。上記手順を、１／４〜１／２時間かけて再度繰り返した（この時点で、暗褐色がほぼ黒色になる）。ＤＭＦで２回、５％ＤＩＥＡ／ＤＭＦで２回、そして、ＤＭＦで４回生成物を洗浄し、ＤＭＦ中、ｍ−ｄＰＥＧｎ＝２４（Quanta Biodesign、３０８mg、０．２７５mmol）；Ｎ−ヒドロキシベンゾトリアゾール（４０mg、０．３０mmol）およびジイソプロピル−カルボジイミド（３２０μl、２．０mmol）でカップリングを行い、１８時間撹拌した。ＤＭＦで２回、ＣＨ２Ｃｌ２で３回樹脂を洗浄した後、ＴＦＡ１７mL、ｉＰｒＳｉＨ４００μLおよびプロパンチオール８００μLで６時間かけて切断し、Ｅｔ２Ｏ１００．０mL中で沈殿させ、遠心し、洗浄して、真空下で乾燥させた。実施例３の手順に従って粗ペプチドを精製して、白色の無定形粉末４３mg（６％）を得た。（ＥＳ）＋−ＬＣＭＳ  ｍ／ｅ、Ｃ１７４Ｈ２８８Ｎ３４Ｏ４９の計算値３６３８．１１、実測値３６３８．１０。
【０１３３】
実施例３８
パルミトイル−６Ａｈｘ−ＮＨ−ＣＨ２ＣＨ２−（ＯＣＨ２ＣＨ２）２３−Ｏ−（ＣＨ２）２−ＣＯ−Ｉｌｅ−Ｌｙｓ−Ｐｑａ−Ａｒｇ−Ｈｉｓ−Ｔｙｒ−Ｌｅｕ−Ａｓｎ−Ｔｒｐ−Ｖａｌ−Ｔｈｒ−Ａｒｇ−Ｇｌｎ−（ＮＭｅ）−Ａｒｇ−Ｔｙｒ−ＮＨ２  １：３  ＴＦＡの調製
【化４１】
2013507414.tif 000047
実施例６から得られたＦｍｏｃ−Ｉｌｅ−Ｌｙｓ（Ａｌｌｏｃ）−Ｐｑａ−Ａｒｇ（Ｐｂｆ）−Ｈｉｓ（Ｔｒｔ）−Ｔｙｒ（ｔＢｕ）−Ｌｅｕ−Ａｓｎ（Ｔｒｔ）−Ｔｒｐ−Ｖａｌ−Ｔｈｒ（ｔＢｕ）−Ａｒｇ（Ｐｂｆ）−Ｇｌｎ（Ｔｒｔ）−ＮＭｅ−Ａｒｇ（Ｍｔｒ）−Ｔｙｒ（ｔＢｕ）−Ｒｉｎｇアミド樹脂１．０ｇ（０．２２mmol）を、ＤＭＦで洗浄して、脱保護および洗浄し、ＤＭＦ中、Ｆｍｏｃ−Ｎ−ｄＰｅｇ（ｎ＝２４）（Quanta Biodesign、３３３mg、０．９０mmol）、Ｎ−ヒドロキシベンゾトリアゾール（１５０mg、１．１１０mmol）およびジイソプロピル−カルボジイミド（８７５μl、５．０mmol）のＤＭＦ（１５mL）溶液で１８時間カップリングを行った。Ｆｍｏｃ除去およびＤＭＦによる洗浄の後、Ｆｍｏｃ−６−アミノヘキサン酸（３５５．０mg；１．０mmol）、Ｎ−ヒドロキシベンゾトリアゾール（１５０mg、１．１１０mmol）およびジイソプロピル−カルボジイミド（８７５μl、５．０mmol）のＤＭＦ（１５mL）溶液で１８時間カップリングを行った。Ｆｍｏｃ除去、ＤＭＦおよびＣＨ２Ｃｌ２による洗浄の後、Ｎ−ヒドロキシベンゾトリアゾール（４２５mg、３．１５０mmol）、ＤＩＥＡ（５００μL、３．０ｍ）およびパルミトイルクロリド（２．８ml、２．７５ｍ）を、ＣＨ２Ｃｌ２１５mL中で５分間反応させて、ペプチド樹脂に添加した。反応物を１８時間撹拌した。ＤＭＦで４回洗浄した後、Ａｒ雰囲気下、ＰｄＣｌ２（トリフェニルホスフィン）２５０．０mg、モルホリン５０μL、酢酸１００μLのＤＭＦ（１５mL）溶液でａｌｌｏｃ保護基を除去して、次に、Ｂｕ３ＳｎＨ５００μLを添加した。黄色の溶液が赤褐色になるまで、Ａｒでバブリングを続けた。次に、反応物を１／４時間混合し、ＤＭＦで３回洗浄した。上記手順を、１／４〜１／２時間かけて再度繰り返した（この時点で、暗褐色がほぼ黒色になる）。ＤＭＦで２回、５％ＤＩＥＡ／ＤＭＦで２回、そして、ＤＭＦで４回生成物を洗浄し、ＤＭＦ中、ｍ−ｄＰＥＧｎ＝２４（Quanta Biodesign、３０８mg、０．２７５mmol）；Ｎ−ヒドロキシベンゾトリアゾール（４０mg、０．３０mmol）およびジイソプロピル−カルボジイミド（３２０μl、２．０mmol）でカップリングを行い、１８時間撹拌した。
【０１３４】
ＤＭＦで２回、ＣＨ２Ｃｌ２で３回樹脂を洗浄した後、ＴＦＡ１７mL、ｉＰｒＳｉＨ４００μLおよびプロパンチオール８００μLで６時間かけて切断し、Ｅｔ２Ｏ１００．０mL中で沈殿させ、遠心し、洗浄して、真空下で乾燥させた。実施例３の手順に従って粗ペプチドを精製して、白色の無定形粉末５５mg（７％）を得た。（ＥＳ）＋−ＬＣＭＳ  ｍ／ｅ、Ｃ１７７Ｈ２９６Ｎ３６Ｏ４８の計算値３６９４．１８、実測値３６９４．１９。
【０１３５】
実施例３９
Ａｃ−Ｉｌｅ−Ｌｙｓ［パルミトイル−６Ａｈｘ−ＮＨ−ＣＨ２ＣＨ２−（ＯＣＨ２ＣＨ２）２３−Ｏ−（ＣＨ２）２−ＣＯ］−Ｐｑａ−Ａｒｇ−Ｈｉｓ−Ｔｙｒ−Ｌｅｕ−Ａｓｎ−Ｔｒｐ−Ｖａｌ−Ｔｈｒ−Ａｒｇ−Ｇｌｎ−（ＮＭｅ）−Ａｒｇ−Ｔｙｒ−ＮＨ２  １：３  ＴＦＡの調製
【化４２】
2013507414.tif 000048
実施例６から得られたＦｍｏｃ−Ｉｌｅ−Ｌｙｓ（Ａｌｌｏｃ）−Ｐｑａ−Ａｒｇ（Ｐｂｆ）−Ｈｉｓ（Ｔｒｔ）−Ｔｙｒ（ｔＢｕ）−Ｌｅｕ−Ａｓｎ（Ｔｒｔ）−Ｔｒｐ−Ｖａｌ−Ｔｈｒ（ｔＢｕ）−Ａｒｇ（Ｐｂｆ）−Ｇｌｎ（Ｔｒｔ）−ＮＭｅ−Ａｒｇ（Ｍｔｒ）−Ｔｙｒ（ｔＢｕ）−Ｒｉｎｇアミド樹脂１．０ｇ（０．２２mmol）を、ＤＭＦで洗浄して、脱保護し、アセチル化した。ＤＭＦで４回洗浄した後、Ａｒ雰囲気下、ＰｄＣｌ２（トリフェニルホスフィン）２５０．０mg、モルホリン５０μL、酢酸１００μLのＤＭＦ（１５mL）溶液でａｌｌｏｃ保護基を除去して、次に、Ｂｕ３ＳｎＨ５００μLを添加した。黄色の溶液が赤褐色になるまで、Ａｒでバブリングを続けた。次に、反応物を１／４時間混合し、ＤＭＦで３回洗浄した。上記手順を、１／４〜１／２時間かけて再度繰り返した（この時点で、暗褐色がほぼ黒色になる）。ＤＭＦで２回、５％ＤＩＥＡ／ＤＭＦで２回、そして、ＤＭＦで４回生成物を洗浄し、ＤＭＦ中、ｍ−ｄＰＥＧｎ＝２４（Quanta Biodesign、３０８mg、０．２７５mmol）；Ｎ−ヒドロキシベンゾトリアゾール（４０mg、０．３０mmol）およびジイソプロピル−カルボジイミド（３２０μl、２．０mmol）でカップリングを行い、１８時間撹拌し、ＤＭＦで洗浄して、脱保護および洗浄し、ＤＭＦ中、Ｆｍｏｃ−Ｎ−ｄＰｅｇ（ｎ＝２４）（Quanta Biodesign、３３３mg、０．９０mmol）、Ｎ−ヒドロキシベンゾトリアゾール（１５０mg、１．１１０mmol）およびジイソプロピル−カルボジイミド（８７５μl、５．０mmole）のＤＭＦ（１５mL）溶液で１８時間カップリングを行った。Ｆｍｏｃ除去およびＤＭＦによる洗浄の後、Ｆｍｏｃ−６−アミノヘキサン酸（３５５．０mg；１．０mmol）、Ｎ−ヒドロキシベンゾトリアゾール（１５０mg、１．１１０mmol）およびジイソプロピル−カルボジイミド（８７５μl、５．０mmol）のＤＭＦ（１５mL）溶液で１８時間カップリングを行った。Ｆｍｏｃ除去、ＤＭＦおよびＣＨ２Ｃｌ２による洗浄の後、Ｎ−ヒドロキシベンゾトリアゾール（４２５mg、３．１５０mmol）、ＤＩＥＡ（５００μL、３．０mmol）およびパルミトイルクロリド（２．８ml、２．７５mmol）を、ＣＨ２Ｃｌ２１５mL中で５分間反応させて、ペプチド樹脂に添加した。反応物を１８時間撹拌した。ＣＨ２Ｃｌ２で４回樹脂を洗浄した後、ＴＦＡ１７mL、ｉＰｒＳｉＨ４００μLおよびプロパンチオール８００μLで６時間かけて切断し、Ｅｔ２Ｏ１００．０mL中で沈殿させ、遠心し、洗浄して、真空下で乾燥させた。実施例３の手順に従って粗ペプチドを精製して、白色の無定形粉末５８mg（８％）を得た。（ＥＳ）＋−ＬＣＭＳ  ｍ／ｅ、Ｃ１７９Ｈ２９８Ｎ３６Ｏ４９の計算値３７３６．１９、実測値３７３６．２０。
【０１３６】
実施例４０
パルミトイル−６Ａｈｘ−６Ａｈｘ−Ｉｌｅ−Ｌｙｓ［ＣＨ３−（ＯＣＨ２ＣＨ２）１１−Ｏ−（ＣＨ２）２−ＣＯ］−Ｐｑａ−Ａｒｇ−Ｈｉｓ−Ｔｙｒ−Ｌｅｕ−Ａｓｎ−Ｔｒｐ−Ｖａｌ−Ｔｈｒ−Ａｒｇ−Ｇｌｎ−（ＮＭｅ）−Ａｒｇ−Ｔｙｒ−ＮＨ２  １：３  ＴＦＡの調製
【化４３】
2013507414.tif 000049
実施例６から得られたＦｍｏｃ−Ｉｌｅ−Ｌｙｓ（Ａｌｌｏｃ）−Ｐｑａ−Ａｒｇ（Ｐｂｆ）−Ｈｉｓ（Ｔｒｔ）−Ｔｙｒ（ｔＢｕ）−Ｌｅｕ−Ａｓｎ（Ｔｒｔ）−Ｔｒｐ−Ｖａｌ−Ｔｈｒ（ｔＢｕ）−Ａｒｇ（Ｐｂｆ）−Ｇｌｎ（Ｔｒｔ）−ＮＭｅ−Ａｒｇ（Ｍｔｒ）−Ｔｙｒ（ｔＢｕ）−Ｒｉｎｇアミド樹脂１．０ｇ（０．２２mmol）を、ＤＭＦで洗浄して、脱保護および洗浄し、ＤＭＦ中、Ｆｍｏｃ−６−アミノヘキサン酸（３５５．０mg；１．０mmol）、ＨＣＴＵ（４１３．７；１．０mmol）およびＮＭＭ（２５０μl；２．２７mmol）で７時間カップリングを行った。Ｆｍｏｃ脱保護およびＤＭＦによる洗浄の後、Ｆｍｏｃ−６−アミノヘキサン酸（３５５．０mg；１．０mmol）、Ｎ−ヒドロキシベンゾトリアゾール（１５０mg、１．１１０mmol）およびジイソプロピル−カルボジイミド（８７５μl、５．０mmol）のＤＭＦ（１５mL）溶液で１８時間カップリングを行った。Ｆｍｏｃ除去、ＤＭＦおよびＣＨ２Ｃｌ２による洗浄の後、Ｎ−ヒドロキシベンゾトリアゾール（４２５mg、３．１５０mmol）、ＤＩＥＡ（５００μL、３．０mmol）およびパルミトイルクロリド（２．８ml、２．７５mmol）を、ＣＨ２Ｃｌ２１５mL中で５分間反応させて、ペプチド樹脂に添加した。反応物を１８時間撹拌した。ＤＭＦで４回洗浄した後、Ａｒ雰囲気下、ＰｄＣｌ２（トリフェニルホスフィン）２５０．０mg、モルホリン５０μL、酢酸１００μLのＤＭＦ（１５mL）溶液でａｌｌｏｃ保護基を除去して、次に、Ｂｕ３ＳｎＨ５００μLを添加した。黄色の溶液が赤褐色になるまで、Ａｒでバブリングを続けた。次に、反応物を１／４時間混合し、ＤＭＦで３回洗浄した。上記手順を、１／４〜１／２時間かけて再度繰り返した（この時点で、暗褐色がほぼ黒色になる）。ＤＭＦで２回、５％ＤＩＥＡ／ＤＭＦで２回、そして、ＤＭＦで４回生成物を洗浄し、ＤＭＦ中、ｍ−ｄＰＥＧｎ＝１２  ＮＨＳエステル（Quanta Biodesign、１８９mg、０．２７５mmol）；Ｎ−ヒドロキシベンゾトリアゾール（４０mg、０．３０mmol）およびジイソプロピル−カルボジイミド（３２０μl、２．０mmole）でカップリングを行い、１８時間撹拌した。ＤＭＦで２回、ＣＨ２Ｃｌ２で３回樹脂を洗浄した後、ＴＦＡ１７mL、ｉＰｒＳｉＨ４００μLおよびプロパンチオール８００μLで６時間かけて切断し、Ｅｔ２Ｏ１００．０mL中で沈殿させ、遠心し、洗浄して、真空下で乾燥させた。実施例３の手順に従って粗ペプチドを精製して、白色の無定形粉末１００mg（１５％）を得た。（ＥＳ）＋−ＬＣＭＳ  ｍ／ｅ、Ｃ１５８Ｈ２５６Ｎ３６Ｏ３７の計算値３２４９．９３、実測値３２４９．９２。
【０１３７】
実施例４１
パルミトイル−６Ａｈｘ−６Ａｈｘ−Ｉｌｅ−Ｌｙｓ［ＣＨ３−（ＯＣＨ２ＣＨ２）１５−Ｏ−（ＣＨ２）２−ＣＯ］−Ｐｑａ−Ａｒｇ−Ｈｉｓ−Ｔｙｒ−Ｌｅｕ−Ａｓｎ−Ｔｒｐ−Ｖａｌ−Ｔｈｒ−Ａｒｇ−Ｇｌｎ−（ＮＭｅ）−Ａｒｇ−Ｔｙｒ−ＮＨ２  １：３  ＴＦＡの調製
【化４４】
2013507414.tif 000050
実施例６から得られたＦｍｏｃ−Ｉｌｅ−Ｌｙｓ（Ａｌｌｏｃ）−Ｐｑａ−Ａｒｇ（Ｐｂｆ）−Ｈｉｓ（Ｔｒｔ）−Ｔｙｒ（ｔＢｕ）−Ｌｅｕ−Ａｓｎ（Ｔｒｔ）−Ｔｒｐ−Ｖａｌ−Ｔｈｒ（ｔＢｕ）−Ａｒｇ（Ｐｂｆ）−Ｇｌｎ（Ｔｒｔ）−ＮＭｅ−Ａｒｇ（Ｍｔｒ）−Ｔｙｒ（ｔＢｕ）−Ｒｉｎｇアミド樹脂１．０ｇ（０．２２mmol）を、ＤＭＦで洗浄して、脱保護および洗浄し、ＤＭＦ中、Ｆｍｏｃ−６−アミノヘキサン酸（３５５．０mg；１．０mmol）、ＨＣＴＵ（４１３．７；１．０mmol）およびＮＭＭ（２５０μl；２．２７mmol）で７時間カップリングを行った。Ｆｍｏｃ脱保護およびＤＭＦによる洗浄の後、Ｆｍｏｃ−６−アミノヘキサン酸（３５５．０mg；１．０mmol）、Ｎ−ヒドロキシベンゾトリアゾール（１５０mg、１．１１０mmol）およびジイソプロピル−カルボジイミド（８７５μl、５．０mmol）のＤＭＦ（１５mL）溶液で１８時間カップリングを行った。Ｆｍｏｃ除去、ＤＭＦおよびＣＨ２Ｃｌ２による洗浄の後、Ｎ−ヒドロキシベンゾトリアゾール（４２５mg、３．１５０mmol）、ＤＩＥＡ（５００μL、３．０mmol）およびパルミトイルクロリド（２．８ml、２．７５mmol）を、ＣＨ２Ｃｌ２１５mL中で５分間反応させて、ペプチド樹脂に添加した。反応物を１８時間撹拌した。ＤＭＦで４回洗浄した後、Ａｒ雰囲気下、ＰｄＣｌ２（トリフェニルホスフィン）２５０．０mg、モルホリン５０μL、酢酸１００μLのＤＭＦ（１５mL）溶液でａｌｌｏｃ保護基を除去して、次に、Ｂｕ３ＳｎＨ５００μLを添加した。黄色の溶液が赤褐色になるまで、Ａｒでバブリングを続けた。次に、反応物を１／４時間混合し、ＤＭＦで３回洗浄した。上記手順を、１／４〜１／２時間かけて再度繰り返した（この時点で、暗褐色がほぼ黒色になる）。ＤＭＦで２回、５％ＤＩＥＡ／ＤＭＦで２回、そして、ＤＭＦで４回生成物を洗浄し、ＤＭＦ中、ｍ−ｄＰＥＧｎ＝１６  ＮＨＳエステル（Quanta Biodesign、２３８mg、０．２７５mmol）；Ｎ−ヒドロキシベンゾトリアゾール（４０mg、０．３０mmol）およびジイソプロピル−カルボジイミド（３２０μl、２．０mmol）でカップリングを行い、１８時間撹拌した。ＤＭＦで２回、ＣＨ２Ｃｌ２で３回樹脂を洗浄した後、ＴＦＡ１７mL、ｉＰｒＳｉＨ４００μLおよびプロパンチオール８００μLで６時間かけて切断し、Ｅｔ２Ｏ１００．０mL中で沈殿させ、遠心し、洗浄して、真空下で乾燥させた。実施例３の手順に従って粗ペプチドを精製して、白色の無定形粉末５４mg（８％）を得た。（ＥＳ）＋−ＬＣＭＳ  ｍ／ｅ、Ｃ１６６Ｈ２７２Ｎ３６Ｏ４１の計算値３４２６．０３、実測値３４２６．０２。
【０１３８】
実施例４２
パルミトイル−６Ａｈｘ−６Ａｈｘ−Ｉｌｅ−Ｌｙｓ［ＣＨ３−（ＯＣＨ２ＣＨ２）２３−Ｏ−（ＣＨ２）２−ＣＯ］−Ｐｑａ−Ａｒｇ−Ｈｉｓ−Ｔｙｒ−Ｌｅｕ−Ａｓｎ−Ｔｒｐ−Ｖａｌ−Ｔｈｒ−Ａｒｇ−Ｇｌｎ−（ＮＭｅ）−Ａｒｇ−Ｔｙｒ−ＮＨ２  １：３  ＴＦＡの調製
【化４５】
2013507414.tif 000051
実施例６から得られたＦｍｏｃ−Ｉｌｅ−Ｌｙｓ（Ａｌｌｏｃ）−Ｐｑａ−Ａｒｇ（Ｐｂｆ）−Ｈｉｓ（Ｔｒｔ）−Ｔｙｒ（ｔＢｕ）−Ｌｅｕ−Ａｓｎ（Ｔｒｔ）−Ｔｒｐ−Ｖａｌ−Ｔｈｒ（ｔＢｕ）−Ａｒｇ（Ｐｂｆ）−Ｇｌｎ（Ｔｒｔ）−ＮＭｅ−Ａｒｇ（Ｍｔｒ）−Ｔｙｒ（ｔＢｕ）−Ｒｉｎｇアミド樹脂１．０ｇ（０．２２mmol）を、ＤＭＦで洗浄して、脱保護および洗浄し、ＤＭＦ中、Ｆｍｏｃ−６−アミノヘキサン酸（３５５．０mg；１．０mmol）、ＨＣＴＵ（４１３．７；１．０mmol）およびＮＭＭ（２５０μl；２．２７mmol）で７時間カップリングを行った。Ｆｍｏｃ脱保護およびＤＭＦによる洗浄の後、Ｆｍｏｃ−６−アミノヘキサン酸（３５５．０mg；１．０mmol）、Ｎ−ヒドロキシベンゾトリアゾール（１５０mg、１．１１０mmol）およびジイソプロピル−カルボジイミド（８７５μl、５．０mmol）のＤＭＦ（１５mL）溶液で１８時間カップリングを行った。Ｆｍｏｃ除去、ＤＭＦおよびＣＨ２Ｃｌ２による洗浄の後、Ｎ−ヒドロキシベンゾトリアゾール（４２５mg、３．１５０mmol）、ＤＩＥＡ（５００μL、３．０mmol）およびパルミトイルクロリド（２．８ml、２．７５mmol）を、ＣＨ２Ｃｌ２１５mL中で５分間反応させて、ペプチド樹脂に添加した。反応物を１８時間撹拌した。ＤＭＦで４回洗浄した後、Ａｒ雰囲気下、ＰｄＣｌ２（トリフェニルホスフィン）２５０．０mg、モルホリン５０μL、酢酸１００μLのＤＭＦ（１５mL）溶液でａｌｌｏｃ保護基を除去して、次に、Ｂｕ３ＳｎＨ５００μLを添加した。黄色の溶液が赤褐色になるまで、Ａｒでバブリングを続けた。次に、反応物を１／４時間混合し、ＤＭＦで３回洗浄した。上記手順を、１／４〜１／２時間かけて再度繰り返した（この時点で、暗褐色がほぼ黒色になる）。ＤＭＦで２回、５％ＤＩＥＡ／ＤＭＦで２回、そして、ＤＭＦで４回生成物を洗浄し、ＤＭＦ中、ｍ−ｄＰＥＧｎ＝２４（Quanta Biodesign、３０８mg、０．２７５mmol）；Ｎ−ヒドロキシベンゾトリアゾール（４０mg、０．３０mmol）およびジイソプロピル−カルボジイミド（３２０μl、２．０mmol）でカップリングを行い、１８時間撹拌した。ＤＭＦで２回、ＣＨ２Ｃｌ２で３回樹脂を洗浄した後、ＴＦＡ１７mL、ｉＰｒＳｉＨ４００μLおよびプロパンチオール８００μLで６時間かけて切断し、Ｅｔ２Ｏ１００．０mL中で沈殿させ、遠心し、洗浄して、真空下で乾燥させた。実施例３の手順に従って粗ペプチドを精製して、白色の無定形粉末５６mg（７％）を得た。（ＥＳ）＋−ＬＣＭＳ  ｍ／ｅ、Ｃ１８２Ｈ３０４Ｎ３６Ｏ４９の計算値３７７８．２４、実測値３７７８．２５。
【０１３９】
実施例４３
パルミトイル−６Ａｈｘ−６Ａｈｘ−（Ｄ）ａｌｌｏＩｌｅ−Ｌｙｓ［ＣＨ３−（ＯＣＨ２ＣＨ２）２３−Ｏ−（ＣＨ２）２−ＣＯ］−Ｐｑａ−Ａｒｇ−Ｈｉｓ−Ｔｙｒ−Ｌｅｕ−Ａｓｎ−Ｔｒｐ−Ｖａｌ−Ｔｈｒ−Ａｒｇ−Ｇｌｎ−（ＮＭｅ）−Ａｒｇ−Ｔｙｒ−ＮＨ２  １：３  ＴＦＡの調製
【化４６】
2013507414.tif 000052
実施例６から得られたＦｍｏｃ−Ｌｙｓ（Ａｌｌｏｃ）−Ｐｑａ−Ａｒｇ（Ｐｂｆ）−Ｈｉｓ（Ｔｒｔ）−Ｔｙｒ（ｔＢｕ）−Ｌｅｕ−Ａｓｎ（Ｔｒｔ）−Ｔｒｐ−Ｖａｌ−Ｔｈｒ（ｔＢｕ）−Ａｒｇ（Ｐｂｆ）−Ｇｌｎ（Ｔｒｔ）−ＮＭｅ−Ａｒｇ（Ｍｔｒ）−Ｔｙｒ（ｔＢｕ）−Ｒｉｎｇアミド樹脂１．０ｇ（０．２２mmol）を、ＤＭＦで洗浄して、脱保護および洗浄し、ＤＭＦ中、Ｆｍｏｃ−（Ｄ）ａｌｌｏＩｌｅ（１１０mg、０．３０２mmol）；Ｎ−ヒドロキシベンゾトリアゾール（４０mg、０．３０mmol）およびジイソプロピル−カルボジイミド（１．５０ml、２．０mmol）でカップリングを行い、１８時間撹拌した。洗浄、Ｆｍｏｃ脱保護およびＤＭＦによる４回の洗浄の後、ＤＭＦ中、Ｆｍｏｃ−６−アミノヘキサン酸（３５５．０mg；１．０mmol）、ＨＣＴＵ（４１３．７；１．０mmol）およびＮＭＭ（２５０μl；２．２７mmol）で７時間カップリングを行った。Ｆｍｏｃ脱保護およびＤＭＦによる洗浄の後、Ｆｍｏｃ−６−アミノヘキサン酸（３５５．０mg；１．０mmol）、Ｎ−ヒドロキシベンゾトリアゾール（１５０mg、１．１１０mmol）およびジイソプロピル−カルボジイミド（８７５μl、５．０mmol）のＤＭＦ（１５mL）溶液で１８時間カップリングを行った。Ｆｍｏｃ除去、ＤＭＦおよびＣＨ２Ｃｌ２による洗浄の後、Ｎ−ヒドロキシベンゾトリアゾール（４２５mg、３．１５０mmol）、ＤＩＥＡ（５００μL、３．０mmol）およびパルミトイルクロリド（２．８ml、２．７５mmol）を、ＣＨ２Ｃｌ２１５mL中で５分間反応させて、ペプチド樹脂に添加した。反応物を１８時間撹拌した。ＤＭＦで４回洗浄した後、Ａｒ雰囲気下、ＰｄＣｌ２（トリフェニルホスフィン）２５０．０mg、モルホリン５０μL、酢酸１００μLのＤＭＦ（１５mL）溶液でａｌｌｏｃ保護基を除去して、次に、Ｂｕ３ＳｎＨ５００μLを添加した。黄色の溶液が赤褐色になるまで、Ａｒでバブリングを続けた。次に、反応物を１／４時間混合し、ＤＭＦで３回洗浄した。上記手順を、１／４〜１／２時間かけて再度繰り返した（この時点で、暗褐色がほぼ黒色になる）。ＤＭＦで２回、５％ＤＩＥＡ／ＤＭＦで２回、そして、ＤＭＦで４回生成物を洗浄し、ＤＭＦ中、ｍ−ｄＰＥＧｎ＝２４（Quanta Biodesign、３０８mg、０．２７５mmol）；Ｎ−ヒドロキシベンゾトリアゾール（４０mg、０．３０mmol）およびジイソプロピル−カルボジイミド（３２０μl、２．０mmol）でカップリングを行い、１８時間撹拌した。ＤＭＦで２回、ＣＨ２Ｃｌ２で３回樹脂を洗浄した後、ＴＦＡ１７mL、ｉＰｒＳｉＨ４００μLおよびプロパンチオール８００μLで６時間かけて切断し、Ｅｔ２Ｏ１００．０mL中で沈殿させ、遠心し、洗浄して、真空下で乾燥させた。実施例３の手順に従って粗ペプチドを精製して、白色の無定形粉末８５mg（１１％）を得た。（ＥＳ）＋−ＬＣＭＳ  ｍ／ｅ、Ｃ１８２Ｈ３０４Ｎ３６Ｏ４９の計算値３７７８．２４、実測値３７７８．２３。
【０１４０】
実施例４４
エイコサノイル−Ｇｌｕ−Ｇｌｕ−Ｉｌｅ−Ｌｙｓ［ＣＨ３−（ＯＣＨ２ＣＨ２）７−Ｏ−（ＣＨ２）２−ＣＯ］−Ｐｑａ−Ｃｉｔ−Ｈｉｓ−Ｔｙｒ−Ｌｅｕ−Ａｓｎ−Ｔｒｐ−Ｖａｌ−Ｔｈｒ−Ａｒｇ−Ｇｌｎ−（ＮＭｅ）−Ａｒｇ−Ｔｙｒ−ＮＨ２  １：２  ＴＦＡの調製
【化４７】
2013507414.tif 000053
実施例６Ａから得られたＦｍｏｃ−Ｉｌｅ−Ｌｙｓ（Ａｌｌｏｃ）−Ｐｑａ−Ｃｉｔ−Ｈｉｓ（Ｔｒｔ）−Ｔｙｒ（ｔＢｕ）−Ｌｅｕ−Ａｓｎ（Ｔｒｔ）−Ｔｒｐ−Ｖａｌ−Ｔｈｒ（ｔＢｕ）−Ａｒｇ（Ｐｂｆ）−Ｇｌｎ（Ｔｒｔ）−ＮＭｅ−Ａｒｇ（Ｍｔｒ）−Ｔｙｒ（ｔＢｕ）−アミドＲｉｎｇ樹脂１．０ｇ（０．２２mmol）を、ＤＭＦで洗浄して、脱保護および洗浄し、ＤＭＦ中、Ｆｍｏｃ−Ｇｌｕ（ＯＢｕｔ）−ＯＨ（４２６．０mg；１．０mmol）、ＨＣＴＵ（４１３．７；１．０mmol）およびＮＭＭ（２５０μl；２．２７mmol）で７時間カップリングを行った。洗浄、Ｆｍｏｃ脱保護およびＤＭＦによる４回の洗浄の後、Ｆｍｏｃ−Ｇｌｕ（ＯＢｕｔ）−ＯＨ（４２６．０mg；１．０mmol）、１．０mm）、Ｎ−ヒドロキシベンゾトリアゾール（１５０mg、１．１０mmol）およびジイソプロピル−カルボジイミド（８７５μl、５．０mmol）のＤＭＦ（１５．０mL）溶液でカップリングを行い、１８時間撹拌した。Ｆｍｏｃ除去および洗浄の後、エイコサン酸３１３．０mg（１．０mmol）、Ｎ−ヒドロキシベンゾトリアゾール（１５０mg、１．１０mmol）およびジイソプロピル−カルボジイミド（８７５μl、５．０mmol）のＤＭＦ（１５．０mL）溶液でカップリングを行い、１８時間撹拌した。ＤＭＦで４回洗浄した後、Ａｒ雰囲気下、ＰｄＣｌ２（トリフェニルホスフィン）２５０．０mg、モルホリン５０μL、酢酸１００μLのＤＭＦ（１５mL）溶液でａｌｌｏｃ保護基を除去して、次に、Ｂｕ３ＳｎＨ５００μLを添加した。黄色の溶液が赤褐色になるまで、Ａｒでバブリングを続けた。次に、反応物を１／４時間混合し、ＤＭＦで３回洗浄した。上記手順を、１／４〜１／２時間かけて再度繰り返した（この時点で、暗褐色がほぼ黒色になる）。ＤＭＦで２回、５％ＤＩＥＡ／ＤＭＦで２回、そして、ＤＭＦで４回生成物を洗浄し、ＤＭＦ中、ｍ−ｄＰＥＧｎ＝８（Quanta Biodesign、１１５mg、０．２７５mmol）；Ｎ−ヒドロキシベンゾトリアゾール（４０mg、０．３０mmol）およびジイソプロピル−カルボジイミド（３２０μl、２．０mmol）でカップリングを行い、１８時間撹拌した。ＤＭＦで２回、ＣＨ２Ｃｌ２で３回樹脂を洗浄した後、ＴＦＡ１７mL、ｉＰｒＳｉＨ４００μLおよびプロパンチオール８００μLで６時間かけて切断し、Ｅｔ２Ｏ１００．０mL中で沈殿させ、遠心し、洗浄して、真空下で乾燥させた。実施例３の手順に従って粗ペプチドを精製して、白色の無定形粉末５３mg（８％）を得た。（ＥＳ）＋−ＬＣＭＳ  ｍ／ｅ、Ｃ１５２Ｈ２３９Ｎ３５Ｏ３８の計算値３１６２．７８、実測値３１６２．７７。
【０１４１】
実施例４５
エイコサノイル−Ｇｌｕ−Ｇｌｕ−Ｉｌｅ−Ｌｙｓ［ＣＨ３−（ＯＣＨ２ＣＨ２）１１−Ｏ−（ＣＨ２）２−ＣＯ］−Ｐｑａ−Ｃｉｔ−Ｈｉｓ−Ｔｙｒ−Ｌｅｕ−Ａｓｎ−Ｔｒｐ−Ｖａｌ−Ｔｈｒ−Ａｒｇ−Ｇｌｎ−（ＮＭｅ）−Ａｒｇ−Ｔｙｒ−ＮＨ２  １：２  ＴＦＡの調製
【化４８】
2013507414.tif 000054
実施例６Ａから得られたＦｍｏｃ−Ｉｌｅ−Ｌｙｓ（Ａｌｌｏｃ）−Ｐｑａ−Ｃｉｔ−Ｈｉｓ（Ｔｒｔ）−Ｔｙｒ（ｔＢｕ）−Ｌｅｕ−Ａｓｎ（Ｔｒｔ）−Ｔｒｐ−Ｖａｌ−Ｔｈｒ（ｔＢｕ）−Ａｒｇ（Ｐｂｆ）−Ｇｌｎ（Ｔｒｔ）−ＮＭｅ−Ａｒｇ（Ｍｔｒ）−Ｔｙｒ（ｔＢｕ）−Ｒｉｎｇアミド樹脂１．０ｇ（０．２２mmol）を、ＤＭＦで洗浄して、脱保護および洗浄し、ＤＭＦ中、Ｆｍｏｃ−Ｇｌｕ（ＯＢｕｔ）−ＯＨ（４２６．０mg；１．０mm）、ＨＣＴＵ（４１３．７；１．０mmol）およびＮＭＭ（２５０μl；２．２７mmol）で７時間カップリングを行った。Ｆｍｏｃ除去およびＤＭＦによる洗浄の後、Ｆｍｏｃ−Ｇｌｕ（ＯＢｕｔ）−ＯＨ（４２６．０mg；１．０mmol）、Ｎ−ヒドロキシベンゾトリアゾール（１５０mg、１．１０mmol）およびジイソプロピル−カルボジイミド（８７５μl、５．０mmol）のＤＭＦ（１５．０mL）溶液でカップリングを行い、１８時間撹拌した。Ｆｍｏｃ除去および洗浄の後、エイコサン酸３１３．０mg（１．０mmol）、Ｎ−ヒドロキシベンゾトリアゾール（１５０mg、１．１０mmol）およびジイソプロピル−カルボジイミド（８７５μl、５．０mmol）のＤＭＦ（１５．０mL）溶液でカップリングを行い、１８時間撹拌した。ＤＭＦで４回洗浄した後、Ａｒ雰囲気下、ＰｄＣｌ２（トリフェニルホスフィン）２５０．０mg、モルホリン５０μL、酢酸１００μLのＤＭＦ（１５mL）溶液でａｌｌｏｃ保護基を除去して、次に、Ｂｕ３ＳｎＨ５００μLを添加した。黄色の溶液が赤褐色になるまで、Ａｒでバブリングを続けた。次に、反応物を１／４時間混合し、ＤＭＦで３回洗浄した。上記手順を、１／４〜１／２時間かけて再度繰り返した（この時点で、暗褐色がほぼ黒色になる）。ＤＭＦで２回、５％ＤＩＥＡ／ＤＭＦで２回、そして、ＤＭＦで４回生成物を洗浄し、ＤＭＦ中、ｍ−ｄＰＥＧｎ＝１２  ＮＨＳエステル（Quanta Biodesign、１８９mg、０．２７５mmol）；Ｎ−ヒドロキシベンゾトリアゾール（４０mg、０．３０mmol）およびジイソプロピル−カルボジイミド（３２０μl、２．０mmol）でカップリングを行い、１８時間撹拌した。ＤＭＦで２回、ＣＨ２Ｃｌ２で３回樹脂を洗浄した後、ＴＦＡ１７mL、ｉＰｒＳｉＨ４００μLおよびプロパンチオール８００μLで６時間かけて切断し、Ｅｔ２Ｏ１００．０mL中で沈殿させ、遠心し、洗浄して、真空下で乾燥させた。実施例３の手順に従って粗ペプチドを精製して、白色の無定形粉末３２mg（５％）を得た。（ＥＳ）＋−ＬＣＭＳ  ｍ／ｅ、Ｃ１６０Ｈ２５５Ｎ３５Ｏ４２の計算値３３３８．８９、実測値３３３８．９０。
【０１４２】
実施例４６
エイコサノイル−Ｇｌｕ−Ｇｌｕ−Ｉｌｅ−Ｌｙｓ［ＣＨ３−（ＯＣＨ２ＣＨ２）１１−Ｏ−（ＣＨ２）２−ＣＯ］−Ｐｑａ−Ａｒｇ−Ｈｉｓ−Ｔｙｒ−Ｌｅｕ−Ａｓｎ−Ｔｒｐ−Ｖａｌ−Ｔｈｒ−Ａｒｇ−Ｇｌｎ−（ＮＭｅ）−Ａｒｇ−Ｔｙｒ−ＮＨ２  １：３  ＴＦＡの調製
【化４９】
2013507414.tif 000055
実施例６から得られたＦｍｏｃ−Ｉｌｅ−Ｌｙｓ（Ａｌｌｏｃ）−Ｐｑａ−Ａｒｇ（Ｐｂｆ）−Ｈｉｓ（Ｔｒｔ）−Ｔｙｒ（ｔＢｕ）−Ｌｅｕ−Ａｓｎ（Ｔｒｔ）−Ｔｒｐ−Ｖａｌ−Ｔｈｒ（ｔＢｕ）−Ａｒｇ（Ｐｂｆ）−Ｇｌｎ（Ｔｒｔ）−ＮＭｅ−Ａｒｇ（Ｍｔｒ）−Ｔｙｒ（ｔＢｕ）−Ｒｉｎｇアミド樹脂１．０ｇ（０．２２mmol）を、ＤＭＦで洗浄して、脱保護および洗浄し、ＤＭＦ中、Ｆｍｏｃ−Ｇｌｕ（ＯＢｕｔ）−ＯＨ（４２６．０mg；１．０mmol）、ＨＣＴＵ（４１３．７；１．０mmol）およびＮＭＭ（２５０μl；２．２７mmol）で７時間カップリングを行った。Ｆｍｏｃ除去およびＤＭＦによる洗浄の後、Ｆｍｏｃ−Ｇｌｕ（ＯＢｕｔ）−ＯＨ（４２６．０mg；１．０mmol）、Ｎ−ヒドロキシベンゾトリアゾール（１５０mg、１．１０mmol）およびジイソプロピル−カルボジイミド（８７５μl、５．０mmol）のＤＭＦ（１５．０mL）溶液でカップリングを行い、１８時間撹拌した。Ｆｍｏｃ除去および洗浄の後、エイコサン酸３１３．０mg（１．０mmol）、Ｎ−ヒドロキシベンゾトリアゾール（１５０mg、１．１０mmol）およびジイソプロピル−カルボジイミド（８７５μl、５．０mmol）のＤＭＦ（１５．０mL）溶液でカップリングを行い、１８時間撹拌した。ＤＭＦで４回洗浄した後、Ａｒ雰囲気下、ＰｄＣｌ２（トリフェニルホスフィン）２５０．０mg、モルホリン５０μL、酢酸１００μLのＤＭＦ（１５mL）溶液でａｌｌｏｃ保護基を除去して、次に、Ｂｕ３ＳｎＨ５００μLを添加した。黄色の溶液が赤褐色になるまで、Ａｒでバブリングを続けた。次に、反応物を１／４時間混合し、ＤＭＦで３回洗浄した。上記手順を、１／４〜１／２時間かけて再度繰り返した（この時点で、暗褐色がほぼ黒色になる）。ＤＭＦで２回、５％ＤＩＥＡ／ＤＭＦで２回、そして、ＤＭＦで４回生成物を洗浄し、ＤＭＦ中、ｍ−ｄＰＥＧｎ＝１２  ＮＨＳエステル（Quanta Biodesign、１８９mg、０．２７５mmol）；Ｎ−ヒドロキシベンゾトリアゾール（４０mg、０．３０mmol）およびジイソプロピル−カルボジイミド（３２０μl、２．０mmol）でカップリングを行い、１８時間撹拌した。ＤＭＦで２回、ＣＨ２Ｃｌ２で３回樹脂を洗浄した後、ＴＦＡ１７mL、ｉＰｒＳｉＨ４００μLおよびプロパンチオール８００μLで６時間かけて切断し、Ｅｔ２Ｏ１００．０mL中で沈殿させ、遠心し、洗浄して、真空下で乾燥させた。実施例３の手順に従って粗ペプチドを精製して、白色の無定形粉末１８mg（３％）を得た。（ＥＳ）＋−ＬＣＭＳ  ｍ／ｅ、Ｃ１６０Ｈ２５６Ｎ３６Ｏ４１の計算値３３３７．９１、実測値３３３７．８９。
【０１４３】
実施例４７
エイコサノイル−Ｇｌｕ−Ｇｌｕ−Ｉｌｅ−Ｌｙｓ［ＣＨ３−（ＯＣＨ２ＣＨ２）１５−Ｏ−（ＣＨ２）２−ＣＯ］−Ｐｑａ−Ｃｉｔ−Ｈｉｓ−Ｔｙｒ−Ｌｅｕ−Ａｓｎ−Ｔｒｐ−Ｖａｌ−Ｔｈｒ−Ａｒｇ−Ｇｌｎ−（ＮＭｅ）−Ａｒｇ−Ｔｙｒ−ＮＨ２  １：２  ＴＦＡの調製
【化５０】
2013507414.tif 000056
実施例６Ａから得られたＦｍｏｃ−Ｉｌｅ−Ｌｙｓ（Ａｌｌｏｃ）−Ｐｑａ−Ｃｉｔ−Ｈｉｓ（Ｔｒｔ）−Ｔｙｒ（ｔＢｕ）−Ｌｅｕ−Ａｓｎ（Ｔｒｔ）−Ｔｒｐ−Ｖａｌ−Ｔｈｒ（ｔＢｕ）−Ａｒｇ（Ｐｂｆ）−Ｇｌｎ（Ｔｒｔ）−ＮＭｅ−Ａｒｇ（Ｍｔｒ）−Ｔｙｒ（ｔＢｕ）−Ｒｉｎｇアミド樹脂１．０ｇ（０．２２mmol）を、ＤＭＦで洗浄して、脱保護および洗浄し、ＤＭＦ中、Ｆｍｏｃ−Ｇｌｕ（ＯＢｕｔ）−ＯＨ（４２６．０mg；１．０mmol）、ＨＣＴＵ（４１３．７；１．０mmol）およびＮＭＭ（２５０μl；２．２７mmol）で７時間カップリングを行った。Ｆｍｏｃ除去およびＤＭＦによる洗浄の後、Ｆｍｏｃ−Ｇｌｕ（ＯＢｕｔ）−ＯＨ（４２６．０mg；１．０mmol）、Ｎ−ヒドロキシベンゾトリアゾール（１５０mg、１．１０mmol）およびジイソプロピル−カルボジイミド（８７５μl、５．０mmol）のＤＭＦ（１５．０mL）溶液でカップリングを行い、１８時間撹拌した。Ｆｍｏｃ除去および洗浄の後、エイコサン酸３１３．０mg（１．０mmol）、Ｎ−ヒドロキシベンゾトリアゾール（１５０mg、１．１０mmol）およびジイソプロピル−カルボジイミド（８７５μl、５．０mmol）のＤＭＦ（１５．０mL）溶液でカップリングを行い、１８時間撹拌した。ＤＭＦで４回洗浄した後、Ａｒ雰囲気下、ＰｄＣｌ２（トリフェニルホスフィン）２５０．０mg、モルホリン５０μL、酢酸１００μLのＤＭＦ（１５mL）溶液でａｌｌｏｃ保護基を除去して、次に、Ｂｕ３ＳｎＨ５００μLを添加した。黄色の溶液が赤褐色になるまで、Ａｒでバブリングを続けた。次に、反応物を１／４時間混合し、ＤＭＦで３回洗浄した。上記手順を、１／４〜１／２時間かけて再度繰り返した（この時点で、暗褐色がほぼ黒色になる）。ＤＭＦで２回、５％ＤＩＥＡ／ＤＭＦで２回、そして、ＤＭＦで４回生成物を洗浄し、ＤＭＦ中、ｍ−ｄＰＥＧｎ＝１６  ＮＨＳエステル（２３８mg、０．２７５mmol）；Ｎ−ヒドロキシベンゾトリアゾール（Quanta Biodesign、４０mg、０．３０mmol）およびジイソプロピル−カルボジイミド（３２０μl、２．０mmol）でカップリングを行い、１８時間撹拌した。ＤＭＦで２回、ＣＨ２Ｃｌ２で３回樹脂を洗浄した後、ＴＦＡ１７mL、ｉＰｒＳｉＨ４００μLおよびプロパンチオール８００μLで６時間かけて切断し、Ｅｔ２Ｏ１００．０mL中で沈殿させ、遠心し、洗浄して、真空下で乾燥させた。実施例３の手順に従って粗ペプチドを精製して、白色の無定形粉末３２mg（５％）を得た。（ＥＳ）＋−ＬＣＭＳ  ｍ／ｅ、Ｃ１６８Ｈ２７１Ｎ３５Ｏ４６の計算値３５１４．９９、実測値３５１４．９７。
【０１４４】
実施例４８
エイコサノイル−Ｇｌｕ−Ｇｌｕ−Ｉｌｅ−Ｌｙｓ［ＣＨ３−（ＯＣＨ２ＣＨ２）１５−Ｏ−（ＣＨ２）２−ＣＯ］−Ｐｑａ−Ａｒｇ−Ｈｉｓ−Ｔｙｒ−Ｌｅｕ−Ａｓｎ−Ｔｒｐ−Ｖａｌ−Ｔｈｒ−Ａｒｇ−Ｇｌｎ−（ＮＭｅ）−Ａｒｇ−Ｔｙｒ−ＮＨ２  １：３  ＴＦＡの調製
【化５１】
2013507414.tif 000057
実施例６から得られたＦｍｏｃ−Ｉｌｅ−Ｌｙｓ（Ａｌｌｏｃ）−Ｐｑａ−Ａｒｇ（Ｐｂｆ）−Ｈｉｓ（Ｔｒｔ）−Ｔｙｒ（ｔＢｕ）−Ｌｅｕ−Ａｓｎ（Ｔｒｔ）−Ｔｒｐ−Ｖａｌ−Ｔｈｒ（ｔＢｕ）−Ａｒｇ（Ｐｂｆ）−Ｇｌｎ（Ｔｒｔ）−ＮＭｅ−Ａｒｇ（Ｍｔｒ）−Ｔｙｒ（ｔＢｕ）−Ｒｉｎｇアミド樹脂１．０ｇ（０．２２mmol）を、ＤＭＦで洗浄して、脱保護および洗浄し、ＤＭＦ中、Ｆｍｏｃ−Ｇｌｕ（ＯＢｕｔ）−ＯＨ（４２６．０mg；１．０mmol）、ＨＣＴＵ（４１３．７；１．０mmol）およびＮＭＭ（２５０μl；２．２７mmol）で７時間カップリングを行った。Ｆｍｏｃ除去およびＤＭＦによる洗浄の後、Ｆｍｏｃ−Ｇｌｕ（ＯＢｕｔ）−ＯＨ（４２６．０mg；１．０mmol）、１Ｎ−ヒドロキシベンゾトリアゾール（１５０mg、１．１０mmol）およびジイソプロピル−カルボジイミド（８７５μl、５．０mmol）のＤＭＦ（１５．０mL）溶液でカップリングを行い、１８時間撹拌した。Ｆｍｏｃ除去および洗浄の後、エイコサン酸３１３．０mg（１．０mmol）、Ｎ−ヒドロキシベンゾトリアゾール（１５０mg、１．１０mmol）およびジイソプロピル−カルボジイミド（８７５μl、５．０mmole）のＤＭＦ（１５．０mL）溶液でカップリングを行い、１８時間撹拌した。ＤＭＦで４回洗浄した後、Ａｒ雰囲気下、ＰｄＣｌ２（トリフェニルホスフィン）２５０．０mg、モルホリン５０μL、酢酸１００μLのＤＭＦ（１５mL）溶液でａｌｌｏｃ保護基を除去して、次に、Ｂｕ３ＳｎＨ５００μLを添加した。黄色の溶液が赤褐色になるまで、Ａｒでバブリングを続けた。次に、反応物を１／４時間混合し、ＤＭＦで３回洗浄した。上記手順を、１／４〜１／２時間かけて再度繰り返した（この時点で、暗褐色がほぼ黒色になる）。ＤＭＦで２回、５％ＤＩＥＡ／ＤＭＦで２回、そして、ＤＭＦで４回生成物を洗浄し、ＤＭＦ中、ｍ−ｄＰＥＧｎ＝１６  ＮＨＳエステル（Quanta Biodesign、２３８mg、０．２７５mmol）；Ｎ−ヒドロキシベンゾトリアゾール（４０mg、０．３０mmol）およびジイソプロピル−カルボジイミド（３２０μl、２．０mmol）でカップリングを行い、１８時間撹拌した。ＤＭＦで２回、ＣＨ２Ｃｌ２で３回樹脂を洗浄した後、ＴＦＡ１７mL、ｉＰｒＳｉＨ４００μLおよびプロパンチオール８００μLで６時間かけて切断し、Ｅｔ２Ｏ１００．０mL中で沈殿させ、遠心し、洗浄して、真空下で乾燥させた。実施例３の手順に従って粗ペプチドを精製して、白色の無定形粉末１７mg（２％）を得た。（ＥＳ）＋−ＬＣＭＳ  ｍ／ｅ、Ｃ１６８Ｈ２７２Ｎ３６Ｏ４５の計算値（「calcd」）３５１４．０１、実測値３５１３．９９。
【０１４５】
実施例４９
エイコサノイル−Ｇｌｕ−Ｇｌｕ−Ｉｌｅ−Ｌｙｓ［ＣＨ３−（ＯＣＨ２ＣＨ２）２３−Ｏ−（ＣＨ２）２−ＣＯ］−Ｐｑａ−Ｃｉｔ−Ｈｉｓ−Ｔｙｒ−Ｌｅｕ−Ａｓｎ−Ｔｒｐ−Ｖａｌ−Ｔｈｒ−Ａｒｇ−Ｇｌｎ−（ＮＭｅ）−Ａｒｇ−Ｔｙｒ−ＮＨ２  １：２  ＴＦＡの調製
【化５２】
2013507414.tif 000058
実施例６Ａから得られたＦｍｏｃ−Ｉｌｅ−Ｌｙｓ（Ａｌｌｏｃ）−Ｐｑａ−Ｃｉｔ−Ｈｉｓ（Ｔｒｔ）−Ｔｙｒ（ｔＢｕ）−Ｌｅｕ−Ａｓｎ（Ｔｒｔ）−Ｔｒｐ−Ｖａｌ−Ｔｈｒ（ｔＢｕ）−Ａｒｇ（Ｐｂｆ）−Ｇｌｎ（Ｔｒｔ）−ＮＭｅ−Ａｒｇ（Ｍｔｒ）−Ｔｙｒ（ｔＢｕ）−Ｒｉｎｇアミド樹脂１．０ｇ（０．２２mmol）を、ＤＭＦで洗浄して、脱保護および洗浄し、ＤＭＦ中、Ｆｍｏｃ−Ｇｌｕ（ＯＢｕｔ）−ＯＨ（４２６．０mg；１．０mmol）、ＨＣＴＵ（４１３．７；１．０mmol）およびＮＭＭ（２５０μl；２．２７mmol）で７時間カップリングを行った。Ｆｍｏｃ除去およびＤＭＦによる洗浄の後、Ｆｍｏｃ−Ｇｌｕ（ＯＢｕｔ）−ＯＨ（４２６．０mg；１．０mmol）、Ｎ−ヒドロキシベンゾトリアゾール（１５０mg、１．１０mmol）およびジイソプロピル−カルボジイミド（８７５μl、５．０mmol）のＤＭＦ（１５．０mL）溶液でカップリングを行い、１８時間撹拌した。Ｆｍｏｃ除去および洗浄の後、エイコサン酸３１３．０mg（１．０mmol）、Ｎ−ヒドロキシベンゾトリアゾール（１５０mg、１．１０mmol）およびジイソプロピル−カルボジイミド（８７５μl、５．０mmol）のＤＭＦ（１５．０mL）溶液でカップリングを行い、１８時間撹拌した。ＤＭＦで４回洗浄した後、Ａｒ雰囲気下、ＰｄＣｌ２（トリフェニルホスフィン）２５０．０mg、モルホリン５０μL、酢酸１００μLのＤＭＦ（１５mL）溶液でａｌｌｏｃ保護基を除去して、次に、Ｂｕ３ＳｎＨ５００μLを添加した。黄色の溶液が赤褐色になるまで、Ａｒでバブリングを続けた。次に、反応物を１／４時間混合し、ＤＭＦで３回洗浄した。上記手順を、１／４〜１／２時間かけて再度繰り返した（この時点で、暗褐色がほぼ黒色になる）。ＤＭＦで２回、５％ＤＩＥＡ／ＤＭＦで２回、そして、ＤＭＦで４回生成物を洗浄し、ｍ−ｄＰＥＧｎ＝２４（Quanta Biodesign、３０８mg、０．２７５mmol）；Ｎ−ヒドロキシベンゾトリアゾール（４０mg、０．３０mmol）およびジイソプロピル−カルボジイミド（３２０μｌ、２．０mmol）でカップリングを行い、１８時間撹拌した。ＤＭＦで２回、ＣＨ２Ｃｌ２で３回樹脂を洗浄した後、ＴＦＡ１７mL、ｉＰｒＳｉＨ４００μLおよびプロパンチオール８００μLで６時間かけて切断し、Ｅｔ２Ｏ１００．０mL中で沈殿させ、遠心し、洗浄して、真空下で乾燥させた。実施例３の手順に従って粗ペプチドを精製して、白色の無定形粉末４９mg（６％）を得た。（ＥＳ）＋−ＬＣＭＳ  ｍ／ｅ、Ｃ１８４Ｈ３０３Ｎ３５Ｏ５４の計算値３８６７．２０、実測値３８６７．１９。
【０１４６】
実施例５０
エイコサノイル−Ｇｌｕ−Ｇｌｕ−Ｉｌｅ−Ｌｙｓ［ＣＨ３−（ＯＣＨ２ＣＨ２）２３−Ｏ−（ＣＨ２）２−ＣＯ］−Ｐｑａ−Ｃｉｔ−Ｈｉｓ−Ｔｙｒ−Ｌｅｕ−Ａｓｎ−Ｔｒｐ−Ｃ−αＭｅＶａｌ−Ｔｈｒ−Ａｒｇ−Ｇｌｎ−（ＮＭｅ）−Ａｒｇ−Ｔｙｒ−ＮＨ２  １：２  ＴＦＡの調製
【化５３】
2013507414.tif 000059
Ｆｍｏｃ−Ｇｌｕ（ＯＢｕｔ）−Ｇｌｕ（ＯＢｕｔ）−Ｉｌｅ−Ｌｙｓ（Ａｌｌｏｃ）−Ｐｑａ−Ｃｉｔ−Ｈｉｓ（Ｔｒｔ）−Ｔｙｒ（ｔＢｕ）−Ｌｅｕ−Ａｓｎ（Ｔｒｔ）−Ｔｒｐ−Ｃ−α−ＭｅＶａｌ−Ｔｈｒ（ｔＢｕ）−Ａｒｇ（Ｐｂｆ）−Ｇｌｎ（Ｔｒｔ）−ＮＭｅ−Ａｒｇ（Ｍｔｒ）−Ｔｙｒ（ｔＢｕ）−Ｒｉｎｇアミド樹脂を、５５５mg（０．２５mmol）の樹脂から、標準プロトコールに従ってＡＢＩシンセサイザーで合成した。樹脂を洗浄し、エイコサン酸３１３．０mg（１．０mmol）、Ｎ−ヒドロキシベンゾトリアゾール（１５０mg、１．１０mmol）およびジイソプロピル−カルボジイミド（８７５μl、５．０mmol）のＤＭＦ（１５．０mL）溶液でカップリングを行い、１８時間撹拌した。ＤＭＦで４回洗浄した後、Ａｒ雰囲気下、ＰｄＣｌ２（トリフェニルホスフィン）２５０．０mg、モルホリン５０μL、酢酸１００μLのＤＭＦ（１５mL）溶液でａｌｌｏｃ保護基を除去して、次に、Ｂｕ３ＳｎＨ５００μLを添加した。黄色の溶液が赤褐色になるまで、Ａｒでバブリングを続けた。次に、反応物を１／４時間混合し、ＤＭＦで３回洗浄した。上記手順を、１／４〜１／２時間かけて再度繰り返した（この時点で、暗褐色がほぼ黒色になる）。ＤＭＦで２回、５％ＤＩＥＡ／ＤＭＦで２回、そして、ＤＭＦで４回生成物を洗浄し、ｍ−ｄＰＥＧｎ＝２４（Quanta Biodesign、３０８mg、０．２７５mmol）；Ｎ−ヒドロキシベンゾトリアゾール（４０mg、０．３０mmol）およびジイソプロピル−カルボジイミド（３２０μl、２．０mmol）でカップリングを行い、１８時間撹拌した。ＤＭＦで２回、ＣＨ２Ｃｌ２で３回樹脂を洗浄した後、ＴＦＡ１７mL、ｉＰｒＳｉＨ４００μLおよびプロパンチオール８００μLで６時間かけて切断し、Ｅｔ２Ｏ１００．０mL中で沈殿させ、遠心し、洗浄して、真空下で乾燥させた。実施例３の手順に従って粗ペプチドを精製して、白色の無定形粉末７０mg（９％）を得た。（ＥＳ）＋−ＬＣＭＳ  ｍ／ｅ、Ｃ１８５Ｈ３０５Ｎ３５Ｏ５４の計算値３８８１．２２、実測値３８８１．２０。
【０１４７】
実施例５１
エイコサノイル−Ｇｌｕ−Ｇｌｕ−Ｉｌｅ−Ｌｙｓ［ＣＨ３−（ＯＣＨ２ＣＨ２）２３−Ｏ−（ＣＨ２）２−ＣＯ］−Ｐｑａ−Ｃｉｔ−Ｈｉｓ−Ｔｙｒ−Ｌｅｕ−Ａｓｎ−Ｔｒｐ−Ｖａｌ−Ｔｈｒ−Ａｒｇ（ＣＯ）−Ｇｌｎ−（ＮＭｅ）−Ａｒｇ−Ｔｙｒ−ＮＨ２  １：２  ＴＦＡの調製
【化５４】
2013507414.tif 000060
Ｆｍｏｃ−Ｇｌｕ（ＯＢｕｔ）−Ｇｌｕ（ＯＢｕｔ）−Ｉｌｅ−Ｌｙｓ（Ａｌｌｏｃ）−Ｐｑａ−Ｃｉｔ−Ｈｉｓ（Ｔｒｔ）−Ｔｙｒ（ｔＢｕ）−Ｌｅｕ−Ａｓｎ（Ｔｒｔ）−Ｔｒｐ−Ｖａｌ−Ｔｈｒ（ｔＢｕ）−Ｇｌｕ（２Ｐｉｐ）−Ｇｌｎ（Ｔｒｔ）−ＮＭｅ−Ａｒｇ（Ｍｔｒ）−Ｔｙｒ（ｔＢｕ）−Ｒｉｎｋアミド樹脂を、５５５mg（０．２５mmol）の樹脂から、標準プロトコールに従ってＡＢＩシンセサイザーで合成した。樹脂を洗浄し、エイコサン酸３１３．０mg（１．０mmol）、Ｎ−ヒドロキシベンゾトリアゾール（１５０mg、１．１０mmol）およびジイソプロピル−カルボジイミド（８７５μl、５．０mmol）のＤＭＦ（１５．０mL）溶液でカップリングを行い、１８時間撹拌した。ＤＭＦで４回、ＣＨ２Ｃｌ２で４回洗浄した後、２％ＴＦＡのＣＨ２Ｃｌ溶液で５回、２分間かけて２Ｐｉｐを除去した。次に、ＤＭＦで２回、ＣＨ２Ｃｌ２で２回樹脂を洗浄し、２×５％ＤＩＥＡのＤＭＦ溶液で中和して、最後に、ＤＭＦで４回洗浄した。ＤＭＦ中、Ｂｏｃ−グアニジン（Guandine）（CAS 219511-71-4）（１．５ｇ、０．９４mmol）、ＨＡＴＵ（１．４ｇ、３．６mmol）およびＮＭＭ（１５mL、１３．６mmol）で１８時間カップリングを行った。ＤＭＦで４回洗浄した後、Ａｒ雰囲気下、ＰｄＣｌ２（トリフェニルホスフィン）２５０．０mg、モルホリン５０μL、酢酸１００μLのＤＭＦ（１５mL）溶液でａｌｌｏｃ保護基を除去して、次に、Ｂｕ３ＳｎＨ５００μLを添加した。黄色の溶液が赤褐色になるまで、Ａｒでバブリングを続けた。次に、反応物を１／４時間混合し、ＤＭＦで３回洗浄した。上記手順を、１／４〜１／２時間かけて再度繰り返した（この時点で、暗褐色がほぼ黒色になる）。ＤＭＦで２回、５％ＤＩＥＡ／ＤＭＦで２回、そして、ＤＭＦで４回生成物を洗浄し、ｍ−ｄＰＥＧｎ＝２４（Quanta Biodesign、３０８mg、０．２７５mmol）；Ｎ−ヒドロキシベンゾトリアゾール（４０mg、０．３０mmol）およびジイソプロピル−カルボジイミド（３２０μl、２．０mmol）でカップリングを行い、１８時間撹拌した。ＤＭＦで２回、ＣＨ２Ｃｌ２で３回樹脂を洗浄した後、ＴＦＡ１７mL、ｉＰｒＳｉＨ４００μLおよびプロパンチオール８００μLで６時間かけて切断し、Ｅｔ２Ｏ１００．０mL中で沈殿させ、遠心し、洗浄して、真空下で乾燥させた。実施例３の手順に従って粗ペプチドを精製して、白色の無定形粉末５４mg（７％）を得た。（ＥＳ）＋−ＬＣＭＳ  ｍ／ｅ、Ｃ１８５Ｈ３０５Ｎ３５Ｏ５４の計算値３８８１．２２、実測値３８８１．２０。
【０１４８】
実施例５２
エイコサノイル−Ｇｌｕ−Ｇｌｕ−Ｉｌｅ−Ｌｙｓ［ＣＨ３−（ＯＣＨ２ＣＨ２）２３−Ｏ−（ＣＨ２）２−ＣＯ］−Ｐｑａ−Ａｒｇ−Ｈｉｓ−Ｔｙｒ−Ｌｅｕ−Ａｓｎ−Ｔｒｐ−Ｖａｌ−Ｔｈｒ−Ａｒｇ−Ｇｌｎ−（ＮＭｅ）−Ａｒｇ−Ｔｙｒ−ＮＨ２  １：３  ＴＦＡの調製
【化５５】
2013507414.tif 000061
実施例６から得られたＦｍｏｃ−Ｉｌｅ−Ｌｙｓ（Ａｌｌｏｃ）−Ｐｑａ−Ａｒｇ（Ｐｂｆ）−Ｈｉｓ（Ｔｒｔ）−Ｔｙｒ（ｔＢｕ）−Ｌｅｕ−Ａｓｎ（Ｔｒｔ）−Ｔｒｐ−Ｖａｌ−Ｔｈｒ（ｔＢｕ）−Ａｒｇ（Ｐｂｆ）−Ｇｌｎ（Ｔｒｔ）−ＮＭｅ−Ａｒｇ（Ｍｔｒ）−Ｔｙｒ（ｔＢｕ）−Ｒｉｎｋアミド樹脂１．０ｇ（０．２２mmol）を、ＤＭＦで洗浄して、脱保護および洗浄し、ＤＭＦ中、Ｆｍｏｃ−Ｇｌｕ（ＯＢｕｔ）−ＯＨ（４２６．０mg；１．０mmol）、ＨＣＴＵ（４１３．７；１．０mmol）およびＮＭＭ（２５０μl；２．２７mmol）で７時間カップリングを行った。Ｆｍｏｃ除去およびＤＭＦによる洗浄の後、Ｆｍｏｃ−Ｇｌｕ（ＯＢｕｔ）−ＯＨ（４２６．０mg；１．０mmol）、Ｎ−ヒドロキシベンゾトリアゾール（１５０mg、１．１０mmol）およびジイソプロピル−カルボジイミド（８７５μl、５．０mmol）のＤＭＦ（１５．０mL）溶液でカップリングを行い、１８時間撹拌した。Ｆｍｏｃ除去および洗浄の後、エイコサン酸３１３．０mg（１．０mmol）、Ｎ−ヒドロキシベンゾトリアゾール（１５０mg、１．１０mmol）およびジイソプロピル−カルボジイミド（８７５μl、５．０mmol）のＤＭＦ（１５．０mL）溶液でカップリングを行い、１８時間撹拌した。ＤＭＦで４回洗浄した後、Ａｒ雰囲気下、ＰｄＣｌ２（トリフェニルホスフィン）２５０．０mg、モルホリン５０μL、酢酸１００μLのＤＭＦ（１５mL）溶液でａｌｌｏｃ保護基を除去して、次に、Ｂｕ３ＳｎＨ５００μLを添加した。黄色の溶液が赤褐色になるまで、Ａｒでバブリングを続けた。次に、反応物を１／４時間混合し、ＤＭＦで３回洗浄した。上記手順を、１／４〜１／２時間かけて再度繰り返した（この時点で、暗褐色がほぼ黒色になる）。ＤＭＦで２回、５％ＤＩＥＡ／ＤＭＦで２回、そして、ＤＭＦで４回生成物を洗浄し、ｍ−ｄＰＥＧｎ＝２４（Quanta Biodesign、３０８mg、０．２７５mmol）；Ｎ−ヒドロキシベンゾトリアゾール（４０mg、０．３０mmol）およびジイソプロピル−カルボジイミド（３２０μl、２．０mmol）でカップリングを行い、１８時間撹拌した。ＤＭＦで２回、ＣＨ２Ｃｌ２で３回樹脂を洗浄した後、ＴＦＡ１７mL、ｉＰｒＳｉＨ４００μLおよびプロパンチオール８００μLで６時間かけて切断し、Ｅｔ２Ｏ１００．０mL中で沈殿させ、遠心し、洗浄して、真空下で乾燥させた。実施例３の手順に従って粗ペプチドを精製して、白色の無定形粉末５３mg（７％）を得た。（ＥＳ）＋−ＬＣＭＳ  ｍ／ｅ、Ｃ１８４Ｈ３０１Ｎ３５Ｏ５５の計算値３８８１．１８、実測値３８８１．１９。
【０１４９】
実施例５３
エイコサノイル−Ｇｌｕ−Ｇｌｕ−（Ｄ）ａｌｌｏＩｌｅ−Ｌｙｓ［ＣＨ３−（ＯＣＨ２ＣＨ２）２３−Ｏ−（ＣＨ２）２−ＣＯ］−Ｐｑａ−Ａｒｇ−Ｈｉｓ−Ｔｙｒ−Ｌｅｕ−Ａｓｎ−Ｔｒｐ−Ｖａｌ−Ｔｈｒ−Ａｒｇ−Ｇｌｎ−（ＮＭｅ）−Ａｒｇ−Ｔｙｒ−ＮＨ２  １：３  ＴＦＡの調製
【化５６】
2013507414.tif 000062
実施例６から得られたＦｍｏｃ−Ｌｙｓ（Ａｌｌｏｃ）−Ｐｑａ−Ａｒｇ（Ｐｂｆ）−Ｈｉｓ（Ｔｒｔ）−Ｔｙｒ（ｔＢｕ）−Ｌｅｕ−Ａｓｎ（Ｔｒｔ）−Ｔｒｐ−Ｖａｌ−Ｔｈｒ（ｔＢｕ）−Ａｒｇ（Ｐｂｆ）−Ｇｌｎ（Ｔｒｔ）−ＮＭｅ−Ａｒｇ（Ｍｔｒ）−Ｔｙｒ（ｔＢｕ）−Ｒｉｎｇアミド樹脂１．０ｇ（０．２２mmol）を、ＤＭＦで洗浄して、脱保護および洗浄し、ＤＭＦ中、Ｆｍｏｃ−（Ｄ）ａｌｌｏＩｌｅ（１１０mg、０．３０２mmol）；Ｎ−ヒドロキシベンゾトリアゾール（４０mg、０．３０mmol）およびジイソプロピル−カルボジイミド（３２０μl、２．０mmol）でカップリングを行い、１８時間撹拌した。脱保護および洗浄の後、ＤＭＦ中、Ｆｍｏｃ−Ｇｌｕ（ＯＢｕｔ）−ＯＨ（４２６．０mg；１．０mmol）、ＨＣＴＵ（４１３．７；１．０mmol）およびＮＭＭ（２５０μl；２．２７mmol）で７時間カップリングを行った。洗浄および脱保護の後、Ｆｍｏｃ−Ｇｌｕ（ＯＢｕｔ）−ＯＨ（４２６．０mg；１．０mmol）、Ｎ−ヒドロキシベンゾトリアゾール（１５０mg、１．１０mmol）およびジイソプロピル−カルボジイミド（８７５μl、５．０mmol）のＤＭＦ（１５．０mL）溶液でカップリングを行い、１８時間撹拌した。Ｆｍｏｃ除去および洗浄の後、エイコサン酸３１３．０mg（１．０mmol）、Ｎ−ヒドロキシベンゾトリアゾール（１５０mg、１．１０mmol）およびジイソプロピル−カルボジイミド（８７５μl、５．０mmole）のＤＭＦ（１５．０mL）溶液でカップリングを行い、１８時間撹拌した。ＤＭＦで４回洗浄した後、Ａｒ雰囲気下、ＰｄＣｌ２（トリフェニルホスフィン）２５０．０mg、モルホリン５０μL、酢酸１００μLのＤＭＦ（１５mL）溶液でａｌｌｏｃ保護基を除去して、次に、Ｂｕ３ＳｎＨ５００μLを添加した。黄色の溶液が赤褐色になるまで、Ａｒでバブリングを続けた。次に、反応物を１／４時間混合し、ＤＭＦで３回洗浄した。上記手順を、１／４〜１／２時間かけて再度繰り返した（この時点で、暗褐色がほぼ黒色になる）。ＤＭＦで２回、５％ＤＩＥＡ／ＤＭＦで２回、そして、ＤＭＦで４回生成物を洗浄し、ＤＭＦ中、ｍ−ｄＰＥＧｎ＝２４（Quanta Biodesign、３０８mg、０．２７５mmol）；Ｎ−ヒドロキシベンゾトリアゾール（４０mg、０．３０mmol）およびジイソプロピル−カルボジイミド（３２０μl、２．０mmol）を用いて撹拌しながら１８時間カップリングを行った。ＤＭＦで２回、ＣＨ２Ｃｌ２で３回樹脂を洗浄した後、ＴＦＡ１７mL、ｉＰｒＳｉＨ４００μLおよびプロパンチオール８００μLで６時間かけて切断し、Ｅｔ２Ｏ１００．０mL中で沈殿させ、遠心し、洗浄して、真空下で乾燥させた。実施例３の手順に従って粗ペプチドを精製して、白色の無定形粉末９０mg（１２％）を得た。（ＥＳ）＋−ＬＣＭＳ  ｍ／ｅ、Ｃ１８４Ｈ３０４Ｎ３６Ｏ５３の計算値３８６６．２２、実測値３８６６．２２。
【０１５０】
実施例５４
１５−カルボキシ−ペンタデカノイル−Ｇｌｕ−Ｇｌｕ−Ｉｌｅ−Ｌｙｓ［ＣＨ３−（ＯＣＨ２ＣＨ２）１５−Ｏ−（ＣＨ２）２−ＣＯ］−Ｐｑａ−Ａｒｇ−Ｈｉｓ−Ｔｙｒ−Ｌｅｕ−Ａｓｎ−Ｔｒｐ−Ｖａｌ−Ｔｈｒ−Ａｒｇ−Ｇｌｎ−（ＮＭｅ）−Ａｒｇ−Ｔｙｒ−ＮＨ２  １：３  ＴＦＡの調製
【化５７】
2013507414.tif 000063
実施例６から得られたＦｍｏｃ−Ｉｌｅ−Ｌｙｓ（Ａｌｌｏｃ）−Ｐｑａ−Ａｒｇ（Ｐｂｆ）−Ｈｉｓ（Ｔｒｔ）−Ｔｙｒ（ｔＢｕ）−Ｌｅｕ−Ａｓｎ（Ｔｒｔ）−Ｔｒｐ−Ｖａｌ−Ｔｈｒ（ｔＢｕ）−Ａｒｇ（Ｐｂｆ）−Ｇｌｎ（Ｔｒｔ）−ＮＭｅ−Ａｒｇ（Ｍｔｒ）−Ｔｙｒ（ｔＢｕ）−Ｒｉｎｇアミド樹脂１．０ｇ（０．２２mmol）を、ＤＭＦで洗浄し、脱保護および洗浄して、ピリジン（１５．０mL）中、ヘキサデカン二酸（２９０．０mg；１．０mmol）、ＨＡＴＵ（５７０．０mg、１．５mmol）およびＤＩＥＡ（９５０μL、５．４mmol）で６時間カップリングを行った。ＤＭＦで洗浄した後、ＬｉＯＨ・Ｈ２Ｏ（１００μL、３．７mmol）、Ｈ２Ｏ５．０mL、１，４−ジオキサン１６．０mLおよびＤＭＦ４．０mLを２４時間撹拌した。ＤＭＦで４回洗浄した後、Ａｒ雰囲気下、ＰｄＣｌ２（トリフェニルホスフィン）２５０．０mg、モルホリン５０μL、酢酸１００μLのＤＭＦ（１５mL）溶液でａｌｌｏｃ保護基を除去して、次に、Ｂｕ３ＳｎＨ５００μLを添加した。黄色の溶液が赤褐色になるまで、Ａｒでバブリングを続けた。次に、反応物を１／４時間混合し、ＤＭＦで３回洗浄した。上記手順を、１／４〜１／２時間かけて再度繰り返した（この時点で、暗褐色がほぼ黒色になる）。ＤＭＦで２回、５％ＤＩＥＡ／ＤＭＦで２回、そして、ＤＭＦで４回生成物を洗浄し、ＤＭＦ中、ｍ−ｄＰＥＧｎ＝１６  ＮＨＳエステル（Quanta Biodesign、２３８mg、０．２７５mmol）、Ｎ−ヒドロキシベンゾトリアゾール（４０mg、０．３０mmol）およびジイソプロピル−カルボジイミド（３２０μl、２．０mmol）を用いて撹拌しながら１８時間カップリングを行った。ＤＭＦで２回、ＣＨ２Ｃｌ２で３回樹脂を洗浄した後、ＴＦＡ１７mL、ｉＰｒＳｉＨ４００μLおよびプロパンチオール８００μLで６時間かけて切断し、Ｅｔ２Ｏ１００．０mL中で沈殿させ、遠心し、洗浄して、真空下で乾燥させた。実施例３の手順に従って粗ペプチドを精製して、白色の無定形粉末４３mg（６％）を得た。（ＥＳ）＋−ＬＣＭＳ  ｍ／ｅ、Ｃ１６４Ｈ２６２Ｎ３６Ｏ４７の計算値３４８７．９２、実測値３４８７．９１。
【０１５１】
実施例５５
エイコサノイル−Ｇｌｕ−Ｇｌｕ−Ｉｌｅ−Ｌｙｓ［ＣＨ３−（ＯＣＨ２ＣＨ２）１１−Ｏ−（ＣＨ２）２−ＣＯ］−Ｐｑａ−Ａｒｇ−Ｈｉｓ−Ｔｙｒ−Ｈｉｓ−Ａｓｎ−Ｔｒｐ−Ｖａｌ−Ｔｈｒ−Ａｒｇ−Ｇｌｎ−Ａｒｇ−Ｔｙｒ−ＮＨ２  １：３  ＴＦＡの調製
【化５８】
2013507414.tif 000064
Ｆｍｏｃ−Ｇｌｕ（ＯＢｕｔ）−Ｇｌｕ（ＯＢｕｔ）−Ｉｌｅ−Ｌｙｓ（Ａｌｌｏｃ）−Ｐｑａ−Ａｒｇ（Ｐｂｆ）−Ｈｉｓ（Ｔｒｔ）−Ｔｙｒ（ｔＢｕ）−Ｈｉｓ（Ｔｒｔ）−Ａｓｎ（Ｔｒｔ）−Ｔｒｐ−Ｖａｌ−Ｔｈｒ（ｔＢｕ）−Ａｒｇ（Ｐｂｆ）−Ｇｌｎ（Ｔｒｔ）−Ａｒｇ（Ｐｂｆ）−Ｔｙｒ（ｔＢｕ）−Ｒｉｎｋアミド樹脂を、５５５mg（０．２５mmol）の樹脂から、標準プロトコールに従ってＡＢＩシンセサイザーで合成した。樹脂を洗浄し、エイコサン酸３１３．０mg（１．０mmol）、Ｎ−ヒドロキシベンゾトリアゾール（１５０mg、１．１０mmol）およびジイソプロピル−カルボジイミド（８７５μl、５．０mmol）のＤＭＦ（１５．０mL）溶液でカップリングを行い、１８時間撹拌した。ＤＭＦで４回洗浄した後、Ａｒ雰囲気下、ＰｄＣｌ２（トリフェニルホスフィン）２５０．０mg、モルホリン５０μL、酢酸１００μLのＤＭＦ（１５mL）溶液でａｌｌｏｃ保護基を除去して、次に、Ｂｕ３ＳｎＨ５００μLを添加した。黄色の溶液が赤褐色になるまで、Ａｒでバブリングを続けた。次に、反応物を１／４時間混合し、ＤＭＦで３回洗浄した。上記手順を、１／４〜１／２時間かけて再度繰り返した（この時点で、暗褐色がほぼ黒色になる）。ＤＭＦで２回、５％ＤＩＥＡ／ＤＭＦで２回、そして、ＤＭＦで４回生成物を洗浄し、ＤＭＦ中、ｍ−ｄＰＥＧｎ＝１２  ＮＨＳエステル（Quanta Biodesign、１８９mg、０．２７５mmol）；Ｎ−ヒドロキシベンゾトリアゾール（４０mg、０．３０mmol）およびジイソプロピル−カルボジイミド（３２０μl、２．０mmol）でカップリングを行い、１８時間撹拌した。ＤＭＦで２回、ＣＨ２Ｃｌ２で３回樹脂を洗浄した後、ＴＦＡ１７mL、ｉＰｒＳｉＨ４００μLおよびプロパンチオール８００μLで６時間かけて切断し、Ｅｔ２Ｏ１００．０mL中で沈殿させ、遠心し、洗浄して、真空下で乾燥させた。実施例３の手順に従って粗ペプチドを精製して、白色の無定形粉末２８３mg（４３％）を得た。（ＥＳ）＋−ＬＣＭＳ  ｍ／ｅ、Ｃ１５９Ｈ２５０Ｎ３８Ｏ４１の計算値３３４７．８６、実測値３３４７．８５。
【０１５２】
実施例５６
エイコサノイル−Ｇｌｕ−Ｇｌｕ−Ｉｌｅ−Ｌｙｓ［ＣＨ３−（ＯＣＨ２ＣＨ２）１５−Ｏ−（ＣＨ２）２−ＣＯ］−Ｐｑａ−Ａｒｇ−Ｈｉｓ−Ｔｙｒ−Ｈｉｓ−Ａｓｎ−Ｔｒｐ−Ｖａｌ−Ｔｈｒ−Ａｒｇ−Ｇｌｎ−Ａｒｇ−Ｔｙｒ−ＮＨ２  １：３  ＴＦＡの調製
【化５９】
2013507414.tif 000065
Ｆｍｏｃ−Ｇｌｕ（ＯＢｕｔ）−Ｇｌｕ（ＯＢｕｔ）−Ｉｌｅ−Ｌｙｓ（Ａｌｌｏｃ）−Ｐｑａ−Ａｒｇ（Ｐｂｆ）−Ｈｉｓ（Ｔｒｔ）−Ｔｙｒ（ｔＢｕ）−Ｈｉｓ（Ｔｒｔ）−Ａｓｎ（Ｔｒｔ）−Ｔｒｐ−Ｖａｌ−Ｔｈｒ（ｔＢｕ）−Ａｒｇ（Ｐｂｆ）−Ｇｌｎ（Ｔｒｔ）−Ａｒｇ（Ｐｂｆ）−Ｔｙｒ（ｔＢｕ）−Ｒｉｎｇアミド樹脂を、５５５mg（０．２５mmol）の樹脂から、標準プロトコールに従ってＡＢＩシンセサイザーで合成した。樹脂を洗浄し、エイコサン酸３１３．０mg（１．０mmol）、Ｎ−ヒドロキシベンゾトリアゾール（１５０mg、１．１０mmol）およびジイソプロピル−カルボジイミド（８７５μl、５．０mmol）のＤＭＦ（１５．０mL）溶液でカップリングを行い、１８時間撹拌した。ＤＭＦで４回洗浄した後、Ａｒ雰囲気下、ＰｄＣｌ２（トリフェニルホスフィン）２５０．０mg、モルホリン５０μL、酢酸１００μLのＤＭＦ（１５mL）溶液でａｌｌｏｃ保護基を除去して、次に、Ｂｕ３ＳｎＨ５００μLを添加した。黄色の溶液が赤褐色になるまで、Ａｒでバブリングを続けた。次に、反応物を１／４時間混合し、ＤＭＦで３回洗浄した。上記手順を、１／４〜１／２時間かけて再度繰り返した（この時点で、暗褐色がほぼ黒色になる）。ＤＭＦで２回、５％ＤＩＥＡ／ＤＭＦで２回、そして、ＤＭＦで４回生成物を洗浄し、ＤＭＦ中、ｍ−ｄＰＥＧｎ＝１６  ＮＨＳエステル（２３８mg、０．２７５mmol）；Ｎ−ヒドロキシベンゾトリアゾール（４０mg、０．３０mmol）およびジイソプロピル−カルボジイミド（３２０μl、２．０mmol）でカップリングを行い、１８時間撹拌した。ＤＭＦで２回、ＣＨ２Ｃｌ２で３回樹脂を洗浄した後、ＴＦＡ１７mL、ｉＰｒＳｉＨ４００μLおよびプロパンチオール８００μLで６時間かけて切断し、Ｅｔ２Ｏ１００．０mL中で沈殿させ、遠心し、洗浄して、真空下で乾燥させた。実施例３の手順に従って粗ペプチドを精製して、白色の無定形粉末３４０mg（４９％）を得た。（ＥＳ）＋−ＬＣＭＳ  ｍ／ｅ、Ｃ１６７Ｈ２６６Ｎ３８Ｏ４５の計算値３５２３．９７、実測値３５２３．９６。
【０１５３】
実施例５７
エイコサノイル−Ｇｌｕ−Ｇｌｕ−Ｉｌｅ−Ｌｙｓ［ＣＨ３−（ＯＣＨ２ＣＨ２）２３−Ｏ−（ＣＨ２）２−ＣＯ］−Ｐｑａ−Ａｒｇ−Ｈｉｓ−Ｔｙｒ−Ｈｉｓ−Ａｓｎ−Ｔｒｐ−Ｖａｌ−Ｔｈｒ−Ａｒｇ−Ｇｌｎ−Ａｒｇ−Ｔｙｒ−ＮＨ２  １：３  ＴＦＡの調製
【化６０】
2013507414.tif 000066
Ｆｍｏｃ−Ｇｌｕ（ＯＢｕｔ）−Ｇｌｕ（ＯＢｕｔ）−Ｉｌｅ−Ｌｙｓ（Ａｌｌｏｃ）−Ｐｑａ−Ａｒｇ（Ｐｂｆ）−Ｈｉｓ（Ｔｒｔ）−Ｔｙｒ（ｔＢｕ）−Ｈｉｓ（Ｔｒｔ）−Ａｓｎ（Ｔｒｔ）−Ｔｒｐ−Ｖａｌ−Ｔｈｒ（ｔＢｕ）−Ａｒｇ（Ｐｂｆ）−Ｇｌｎ（Ｔｒｔ）−Ａｒｇ（Ｐｂｆ）−Ｔｙｒ（ｔＢｕ）−Ｒｉｎｇアミド樹脂を、５５５mg（０．２５mmol）の樹脂から、標準プロトコールに従ってＡＢＩシンセサイザーで合成した。樹脂を洗浄し、エイコサン酸３１３．０mg（１．０mmol）、Ｎ−ヒドロキシベンゾトリアゾール（１５０mg、１．１０mmol）およびジイソプロピル−カルボジイミド（８７５μl、５．０mmol）のＤＭＦ（１５．０mL）溶液でカップリングを行い、１８時間撹拌した。ＤＭＦで４回洗浄した後、Ａｒ雰囲気下、ＰｄＣｌ２（トリフェニルホスフィン）２５０．０mg、モルホリン５０μL、酢酸１００μLのＤＭＦ（１５mL）溶液でａｌｌｏｃ保護基を除去して、次に、Ｂｕ３ＳｎＨ５００μLを添加した。黄色の溶液が赤褐色になるまで、Ａｒでバブリングを続けた。次に、反応物を１／４時間混合し、ＤＭＦで３回洗浄した。上記手順を、１／４〜１／２時間かけて再度繰り返した（この時点で、暗褐色がほぼ黒色になる）。ＤＭＦで２回、５％ＤＩＥＡ／ＤＭＦで２回、そして、ＤＭＦで４回生成物を洗浄し、ＤＭＦ中、ｍ−ｄＰＥＧｎ＝２４（３０８mg、０．２７５mmol）；Ｎ−ヒドロキシベンゾトリアゾール（４０mg、０．３０mmol）およびジイソプロピル−カルボジイミド（３２０μl、２．０mmol）でカップリングを行い、１８時間撹拌した。ＤＭＦで２回、ＣＨ２Ｃｌ２で３回樹脂を洗浄した後、ＴＦＡ１７mL、ｉＰｒＳｉＨ４００μLおよびプロパンチオール８００μLで６時間かけて切断し、Ｅｔ２Ｏ１００．０mL中で沈殿させ、遠心し、洗浄して、真空下で乾燥させた。実施例３の手順に従って粗ペプチドを精製して、白色の無定形粉末４９０mg（７０％）を得た。（ＥＳ）＋−ＬＣＭＳ  ｍ／ｅ、Ｃ１８３Ｈ２９８Ｎ３８Ｏ５３の計算値３８７６．１８、実測値３８７７．２。
【０１５４】
実施例５８
エイコサノイル−γＧｌｕ−γＧｌｕ−Ｉｌｅ−Ｌｙｓ［ＣＨ３−（ＯＣＨ２ＣＨ２）１１−Ｏ−（ＣＨ２）２−ＣＯ］−Ｐｑａ−Ａｒｇ−Ｈｉｓ−Ｔｙｒ−Ｌｅｕ−Ａｓｎ−Ｔｒｐ−Ｖａｌ−Ｔｈｒ−Ａｒｇ−Ｇｌｎ−（ＮＭｅ）−Ａｒｇ−Ｔｙｒ−ＮＨ２  １：３  ＴＦＡの調製
【化６１】
2013507414.tif 000067
実施例６から得られたＦｍｏｃ−Ｉｌｅ−Ｌｙｓ（Ａｌｌｏｃ）−Ｐｑａ−Ａｒｇ−Ｈｉｓ（Ｔｒｔ）−Ｔｙｒ（ｔＢｕ）−Ｌｅｕ−Ａｓｎ（Ｔｒｔ）−Ｔｒｐ−Ｖａｌ−Ｔｈｒ（ｔＢｕ）−Ａｒｇ（Ｐｂｆ）−Ｇｌｎ（Ｔｒｔ）−ＮＭｅ−Ａｒｇ（Ｍｔｒ）−Ｔｙｒ（ｔＢｕ）−Ｒｉｎｇアミド樹脂１．０ｇ（０．２２mmol）を、ＤＭＦで洗浄して、脱保護および洗浄し、ＤＭＦ中、Ｆｍｏｃ−Ｇｌｕ−ＯＢｕｔ−ＯＨ（４２６．０mg；１．０mmol）、ＨＣＴＵ（４１３．７；１．０mmol）およびＮＭＭ（２５０μl；２．２７mmol）で７時間カップリングを行った。Ｆｍｏｃ除去およびＤＭＦによる洗浄の後、Ｆｍｏｃ−Ｇｌｕ−ＯＢｕｔ−ＯＨ（４２６．０mg；１．０mmol）、Ｎ−ヒドロキシベンゾトリアゾール（１５０mg、１．１０mmol）およびジイソプロピル−カルボジイミド（８７５μl、５．０mmol）のＤＭＦ（１５．０mL）溶液でカップリングを行い、１８時間撹拌した。Ｆｍｏｃ除去および洗浄の後、エイコサン酸３１３．０mg（１．０mmol）、Ｎ−ヒドロキシベンゾトリアゾール（１５０mg、１．１０mmol）およびジイソプロピル−カルボジイミド（８７５μl、５．０mmol）のＤＭＦ（１５．０mL）溶液でカップリングを行い、１８時間撹拌した。ＤＭＦで４回洗浄した後、Ａｒ雰囲気下、ＰｄＣｌ２（トリフェニルホスフィン）２５０．０mg、モルホリン５０μL、酢酸１００μLのＤＭＦ（１５mL）溶液でａｌｌｏｃ保護基を除去して、次に、Ｂｕ３ＳｎＨ５００μLを添加した。黄色の溶液が赤褐色になるまで、Ａｒでバブリングを続けた。次に、反応物を１／４時間混合し、ＤＭＦで３回洗浄した。上記手順を、１／４〜１／２時間かけて再度繰り返した（この時点で、暗褐色がほぼ黒色になる）。ＤＭＦで２回、５％ＤＩＥＡ／ＤＭＦで２回、そして、ＤＭＦで４回生成物を洗浄し、ＤＭＦ中、ｍ−ｄＰＥＧｎ＝１２  ＮＨＳエステル（１８９mg、０．２７５mmol）；Ｎ−ヒドロキシベンゾトリアゾール（４０mg、０．３０mmol）およびジイソプロピル−カルボジイミド（３２０μl、２．０mmol）でカップリングを行い、１８時間撹拌した。ＤＭＦで２回、ＣＨ２Ｃｌ２で３回樹脂を洗浄した後、ＴＦＡ１７mL、ｉＰｒＳｉＨ４００μLおよびプロパンチオール８００μLで６時間かけて切断し、Ｅｔ２Ｏ１００．０mL中で沈殿させ、遠心し、洗浄して、真空下で乾燥させた。実施例３の手順に従って粗ペプチドを精製して、白色の無定形粉末８６mg（１３％）を得た。（ＥＳ）＋−ＬＣＭＳ  ｍ／ｅ、Ｃ１６０Ｈ２５６Ｎ３６Ｏ４１の計算値３３３７．９１、実測値３３３７．９０。
【０１５５】
実施例５９
エイコサノイル−γＧｌｕ−γＧｌｕ−Ｉｌｅ−Ｌｙｓ［ＣＨ３−（ＯＣＨ２ＣＨ２）１５−Ｏ−（ＣＨ２）２−ＣＯ］−Ｐｑａ−Ａｒｇ−Ｈｉｓ−Ｔｙｒ−Ｌｅｕ−Ａｓｎ−Ｔｒｐ−Ｖａｌ−Ｔｈｒ−Ａｒｇ−Ｇｌｎ−（ＮＭｅ）−Ａｒｇ−Ｔｙｒ−ＮＨ２  １：３  ＴＦＡの調製
【化６２】
2013507414.tif 000068
実施例６から得られたＦｍｏｃ−Ｉｌｅ−Ｌｙｓ（Ａｌｌｏｃ）−Ｐｑａ−Ａｒｇ−Ｈｉｓ（Ｔｒｔ）−Ｔｙｒ（ｔＢｕ）−Ｌｅｕ−Ａｓｎ（Ｔｒｔ）−Ｔｒｐ−Ｖａｌ−Ｔｈｒ（ｔＢｕ）−Ａｒｇ（Ｐｂｆ）−Ｇｌｎ（Ｔｒｔ）−ＮＭｅ−Ａｒｇ（Ｍｔｒ）−Ｔｙｒ（ｔＢｕ）−Ｒｉｎｇアミド樹脂１．０ｇ（０．２２mmol）を、ＤＭＦで洗浄して、脱保護および洗浄し、ＤＭＦ中、Ｆｍｏｃ−Ｇｌｕ−ＯＢｕｔ−ＯＨ（４２６．０mg；１．０mmol）、ＨＣＴＵ（４１３．７；１．０mmol）およびＮＭＭ（２５０μl；２．２７mmol）で７時間カップリングを行った。Ｆｍｏｃ除去およびＤＭＦによる洗浄の後、Ｆｍｏｃ−Ｇｌｕ−ＯＢｕｔ−ＯＨ（４２６．０mg；１．０mmol）、１．０mm）、Ｎ−ヒドロキシベンゾトリアゾール（１５０mg、１．１０mmol）およびジイソプロピル−カルボジイミド（８７５μl、５．０mmol）のＤＭＦ（１５．０mL）溶液でカップリングを行い、１８時間撹拌した。Ｆｍｏｃ除去および洗浄の後、エイコサン酸３１３．０mg（１．０mmol）、Ｎ−ヒドロキシベンゾトリアゾール（１５０mg、１．１０mmol）およびジイソプロピル−カルボジイミド（８７５μl、５．０mmol）のＤＭＦ（１５．０mL）溶液でカップリングを行い、１８時間撹拌した。ＤＭＦで４回洗浄した後、Ａｒ雰囲気下、ＰｄＣｌ２（トリフェニルホスフィン）２５０．０mg、モルホリン５０μL、酢酸１００μLのＤＭＦ（１５mL）溶液でａｌｌｏｃ保護基を除去して、次に、Ｂｕ３ＳｎＨ５００μLを添加した。黄色の溶液が赤褐色になるまで、Ａｒでバブリングを続けた。次に、反応物を１／４時間混合し、ＤＭＦで３回洗浄した。上記手順を、１／４〜１／２時間かけて再度繰り返した（この時点で、暗褐色がほぼ黒色になる）。ＤＭＦで２回、５％ＤＩＥＡ／ＤＭＦで２回、そして、ＤＭＦで４回生成物を洗浄し、ＤＭＦ中、ｍ−ｄＰＥＧｎ＝１６  ＮＨＳエステル（２３８mg、０．２７５mmol）；Ｎ−ヒドロキシベンゾトリアゾール（４０mg、０．３０mmol）およびジイソプロピル−カルボジイミド（３２０μl、２．０mmol）でカップリングを行い、１８時間撹拌した。ＤＭＦで２回、ＣＨ２Ｃｌ２で３回樹脂を洗浄した後、ＴＦＡ１７mL、ｉＰｒＳｉＨ４００μLおよびプロパンチオール８００μLで６時間かけて切断し、Ｅｔ２Ｏ１００．０mL中で沈殿させ、遠心し、洗浄して、真空下で乾燥させた。実施例３の手順に従って粗ペプチドを精製して、白色の無定形粉末４２mg（６％）を得た。（ＥＳ）＋−ＬＣＭＳ  ｍ／ｅ、Ｃ１６８Ｈ２７２Ｎ３６Ｏ４５の計算値３５１４．０１、実測値３５１３．９８。
【０１５６】
実施例６０
エイコサノイル−γＧｌｕ−γＧｌｕ−Ｉｌｅ−Ｌｙｓ［ＣＨ３−（ＯＣＨ２ＣＨ２）２３−Ｏ−（ＣＨ２）２−ＣＯ］−Ｐｑａ−Ａｒｇ−Ｈｉｓ−Ｔｙｒ−Ｌｅｕ−Ａｓｎ−Ｔｒｐ−Ｖａｌ−Ｔｈｒ−Ａｒｇ−Ｇｌｎ−（ＮＭｅ）−Ａｒｇ−Ｔｙｒ−ＮＨ２  １：３  ＴＦＡの調製
【化６３】
2013507414.tif 000069
実施例６から得られたＦｍｏｃ−Ｉｌｅ−Ｌｙｓ（Ａｌｌｏｃ）−Ｐｑａ−Ａｒｇ−Ｈｉｓ（Ｔｒｔ）−Ｔｙｒ（ｔＢｕ）−Ｌｅｕ−Ａｓｎ（Ｔｒｔ）−Ｔｒｐ−Ｖａｌ−Ｔｈｒ（ｔＢｕ）−Ａｒｇ（Ｐｂｆ）−Ｇｌｎ（Ｔｒｔ）−ＮＭｅ−Ａｒｇ（Ｍｔｒ）−Ｔｙｒ（ｔＢｕ）−Ｒｉｎｇアミド樹脂１．０ｇ（０．２２mmol）を、ＤＭＦで洗浄して、脱保護および洗浄し、ＤＭＦ中、Ｆｍｏｃ−Ｇｌｕ−ＯＢｕｔ−ＯＨ（４２６．０mg；１．０mmol）、ＨＣＴＵ（４１３．７；１．０mmol）およびＮＭＭ（２５０μl；２．２７mmol）で７時間カップリングを行った。Ｆｍｏｃ除去およびＤＭＦによる洗浄の後、Ｆｍｏｃ−Ｇｌｕ−ＯＢｕｔ−ＯＨ（４２６．０mg；１．０mmol）、Ｎ−ヒドロキシベンゾトリアゾール（１５０mg、１．１０mmol）およびジイソプロピル−カルボジイミド（８７５μl、５．０mmol）のＤＭＦ（１５．０mL）溶液でカップリングを行い、１８時間撹拌した。Ｆｍｏｃ除去および洗浄の後、エイコサン酸３１３．０mg（１．０mmol）、Ｎ−ヒドロキシベンゾトリアゾール（１５０mg、１．１０mmol）およびジイソプロピル−カルボジイミド（８７５μl、５．０mmol）のＤＭＦ（１５．０mL）溶液でカップリングを行い、１８時間撹拌した。ＤＭＦで４回洗浄した後、Ａｒ雰囲気下、ＰｄＣｌ２（トリフェニルホスフィン）２５０．０mg、モルホリン５０μL、酢酸１００μLのＤＭＦ（１５mL）溶液でａｌｌｏｃ保護基を除去して、次に、Ｂｕ３ＳｎＨ５００μLを添加した。黄色の溶液が赤褐色になるまで、Ａｒでバブリングを続けた。次に、反応物を１／４時間混合し、ＤＭＦで３回洗浄した。上記手順を、１／４〜１／２時間かけて再度繰り返した（この時点で、暗褐色がほぼ黒色になる）。ＤＭＦで２回、５％ＤＩＥＡ／ＤＭＦで２回、そして、ＤＭＦで４回生成物を洗浄し、ＤＭＦ中、ｍ−ｄＰＥＧｎ＝２４（３０８mg、０．２７５mmol）；Ｎ−ヒドロキシベンゾトリアゾール（４０mg、０．３０mmol）およびジイソプロピル−カルボジイミド（３２０μl、２．０mmol）でカップリングを行い、１８時間撹拌した。ＤＭＦで２回、ＣＨ２Ｃｌ２で３回樹脂を洗浄した後、ＴＦＡ１７mL、ｉＰｒＳｉＨ４００μLおよびプロパンチオール８００μLで６時間かけて切断し、Ｅｔ２Ｏ１００．０mL中で沈殿させ、遠心し、洗浄して、真空下で乾燥させた。実施例３の手順に従って粗ペプチドを精製して、白色の無定形粉末３３mg（４％）を得た。（ＥＳ）＋−ＬＣＭＳ  ｍ／ｅ、Ｃ１８４Ｈ３０４Ｎ３６Ｏ５３の計算値３８６６．２２、実測値３８６６．２１。
【０１５７】
実施例６１
エイコサノイル−γＧｌｕ−γＧｌｕ−Ｉｌｅ−Ｌｙｓ［ＣＨ３−（ＯＣＨ２ＣＨ２）２３−Ｏ−（ＣＨ２）２−ＣＯ］−Ｐｑａ−Ｃｉｔ−Ｈｉｓ−Ｔｙｒ−Ｌｅｕ−Ａｓｎ−Ｔｒｐ−Ｖａｌ−Ｔｈｒ−Ａｒｇ−Ｇｌｎ−（ＮＭｅ）−Ａｒｇ−Ｔｙｒ−ＮＨ２  １：２  ＴＦＡの調製
【化６４】
2013507414.tif 000070
実施例６Ａから得られたＦｍｏｃ−Ｉｌｅ−Ｌｙｓ（Ａｌｌｏｃ）−Ｐｑａ−Ｃｉｔ−Ｈｉｓ（Ｔｒｔ）−Ｔｙｒ（ｔＢｕ）−Ｌｅｕ−Ａｓｎ（Ｔｒｔ）−Ｔｒｐ−Ｖａｌ−Ｔｈｒ（ｔＢｕ）−Ａｒｇ（Ｐｂｆ）−Ｇｌｎ（Ｔｒｔ）−ＮＭｅ−Ａｒｇ（Ｍｔｒ）−Ｔｙｒ（ｔＢｕ）−Ｒｉｎｇアミド樹脂１．０ｇ（０．２２mmol）を、ＤＭＦで洗浄して、脱保護および洗浄し、ＤＭＦ中、Ｆｍｏｃ−Ｇｌｕ（ＯＢｕｔ）−ＯＨ（４２６．０mg；１．０mmol）、ＨＣＴＵ（４１３．７；１．０mmol）およびＮＭＭ（２５０μl；２．２７mmol）で７時間カップリングを行った。ＤＭＦ中、Ｆｍｏｃ−Ｇｌｕ−ＯＢｕｔ−ＯＨ（４２６．０mg；１．０mmol）、ＨＣＴＵ（４１３．７；１．０mmol）およびＮＭＭ（２５０μl；２．２７mmol）で７時間カップリングを行った。洗浄後、Ｆｍｏｃ−γＧｌｕ−ＯＢｕｔ−ＯＨ（４２６．０mg；１．０mmol）、１．０mmol）、Ｎ−ヒドロキシベンゾトリアゾール（１５０mg、１．１０mmol）およびジイソプロピル−カルボジイミド（８７５μl、５．０mmol）のＤＭＦ（１５．０mL）溶液でカップリングを行い、１８時間撹拌した。Ｆｍｏｃ除去および洗浄の後、エイコサン酸３１３．０mg（１．０mmol）、Ｎ−ヒドロキシベンゾトリアゾール（１５０mg、１．１０mmol）およびジイソプロピル−カルボジイミド（８７５μl、５．０mmol）のＤＭＦ（１５．０mL）溶液でカップリングを行い、１８時間撹拌した。ＤＭＦで４回洗浄した後、Ａｒ雰囲気下、ＰｄＣｌ２（トリフェニルホスフィン）２５０．０mg、モルホリン５０μL、酢酸１００μLのＤＭＦ（１５mL）溶液でａｌｌｏｃ保護基を除去して、次に、Ｂｕ３ＳｎＨ５００μLを添加した。黄色の溶液が赤褐色になるまで、Ａｒでバブリングを続けた。次に、反応物を１／４時間混合し、ＤＭＦで３回洗浄した。上記手順を、１／４〜１／２時間かけて再度繰り返した（この時点で、暗褐色がほぼ黒色になる）。ＤＭＦで２回、５％ＤＩＥＡ／ＤＭＦで２回、そして、ＤＭＦで４回生成物を洗浄し、ｍ−ｄＰＥＧｎ＝２４（３０８mg、０．２７５mmol）；Ｎ−ヒドロキシベンゾトリアゾール（４０mg、０．３０mmol）およびジイソプロピル−カルボジイミド（３２０μl、２．０mmol）でカップリングを行い、１８時間撹拌した。ＤＭＦで２回、ＣＨ２Ｃｌ２で３回樹脂を洗浄した後、ＴＦＡ１７mL、ｉＰｒＳｉＨ４００μLおよびプロパンチオール８００μLで６時間かけて切断し、Ｅｔ２Ｏ１００．０mL中で沈殿させ、遠心し、洗浄して、真空下で乾燥させた。実施例３の手順に従って粗ペプチドを精製して、白色の無定形粉末８１mg（１１％）を得た。（ＥＳ）＋−ＬＣＭＳ  ｍ／ｅ、Ｃ１８４Ｈ３０３Ｎ３５Ｏ５４の計算値３８６７．２０、実測値３８６７．１９。
【０１５８】
実施例６２
エイコサノイル−Ｃｙｓ（ＳＯ３）−Ｃｙｓ（ＳＯ３）−Ｇｌｕ−Ｉｌｅ−Ｌｙｓ［ＣＨ３−（ＯＣＨ２ＣＨ２）２３−Ｏ−（ＣＨ２）２−ＣＯ］−Ｐｑａ−Ｃｉｔ−Ｈｉｓ−Ｔｙｒ−Ｌｅｕ−Ａｓｎ−Ｔｒｐ−Ｖａｌ−Ｔｈｒ−Ａｒｇ−Ｇｌｎ−（ＮＭｅ）−Ａｒｇ−Ｔｙｒ−ＮＨ２  １：３  ＴＦＡの調製
【化６５】
2013507414.tif 000071
実施例６Ａから得られたＦｍｏｃ−Ｉｌｅ−Ｌｙｓ（Ａｌｌｏｃ）−Ｐｑａ−Ｃｉｔ−Ｈｉｓ（Ｔｒｔ）−Ｔｙｒ（ｔＢｕ）−Ｌｅｕ−Ａｓｎ（Ｔｒｔ）−Ｔｒｐ−Ｖａｌ−Ｔｈｒ（ｔＢｕ）−Ａｒｇ（Ｐｂｆ）−Ｇｌｎ（Ｔｒｔ）−ＮＭｅ−Ａｒｇ（Ｍｔｒ）−Ｔｙｒ（ｔＢｕ）−Ｒｉｎｇアミド樹脂１．０ｇ（０．２２mmol）を、ＤＭＦで洗浄して、脱保護および洗浄し、ＤＭＦ中、Ｆｍｏｃ−Ｃｙｓ（ＳＯ３）Ｎａ２（４７０．０mg；０１．０mmol）、Ｎ−ヒドロキシベンゾトリアゾール（１５０mg、１．１０mmol）およびジイソプロピル−カルボジイミド（８７５μl、５．０mmol）のＤＭＦ（１５．０mL）溶液で１８時間カップリングを行った。Ｆｍｏｃ除去の後、Ｆｍｏｃ−Ｃｙｓ（ＳＯ３）Ｎａ２（４７０．０mg；０１．０mmol）、Ｎ−ヒドロキシベンゾトリアゾール（１５０mg、１．１０mmol）およびジイソプロピル−カルボジイミド（８７５μl、５．０mmol）のＤＭＦ（１５．０mL）溶液で１８時間カップリングを行った。ニンヒドリンが赤紫色になり、Ｆｍｏｃ−Ｃｙｓ（ＳＯ３）Ｎａ２（４７０．０mg；０１．０mmol）、Ｎ−ヒドロキシベンゾトリアゾール（１５０mg、１．１０mmol）およびジイソプロピル−カルボジイミド（８７５μl、５．０mmol）のＤＭＦ（１５．０mL）溶液で６時間カップリングを行った。Ｆｍｏｃ除去および洗浄の後、エイコサン酸３１３．０mg（１．０mmol）、Ｎ−ヒドロキシベンゾトリアゾール（１５０mg、１．１０mmol）およびジイソプロピル−カルボジイミド（８７５μl、５．０mmol）のＤＭＦ（１５．０mL）溶液でカップリングを行い、１８時間撹拌した。ＤＭＦで４回洗浄した後、Ａｒ雰囲気下、ＰｄＣｌ２（トリフェニルホスフィン）２５０．０mg、モルホリン５０μL、酢酸１００μLのＤＭＦ（１５mL）溶液でａｌｌｏｃ保護基を除去して、次に、Ｂｕ３ＳｎＨ５００μLを添加した。黄色の溶液が赤褐色になるまで、Ａｒでバブリングを続けた。次に、反応物を１／４時間混合し、ＤＭＦで３回洗浄した。上記手順を、１／４〜１／２時間かけて再度繰り返した（この時点で、暗褐色がほぼ黒色になる）。ＤＭＦで２回、５％ＤＩＥＡ／ＤＭＦで２回、そして、ＤＭＦで４回生成物を洗浄し、ｍ−ｄＰＥＧｎ＝２４（３０８mg、０．２７５mmol）；Ｎ−ヒドロキシベンゾトリアゾール（４０mg、０．３０mmol）およびジイソプロピル−カルボジイミド（３２０μl、２．０mmol）でカップリングを行い、１８時間撹拌した。ＤＭＦで２回、ＣＨ２Ｃｌ２で３回樹脂を洗浄した後、ＴＦＡ１７mL、ｉＰｒＳｉＨ４００μLおよびプロパンチオール８００μLで６時間かけて切断し、Ｅｔ２Ｏ１００．０mL中で沈殿させ、遠心し、洗浄して、真空下で乾燥させた。実施例３の手順に従って粗ペプチドを精製して、白色の無定形粉末３７mg（４％）を得た。（ＥＳ）＋−ＬＣＭＳ  ｍ／ｅ、Ｃ１８２Ｈ３０３Ｎ３５Ｏ５６Ｓ２の計算値３９３９．１４、実測値３９３９．１３。
【０１５９】
実施例６３
ｃＡＭＰアゴニストアッセイ
この実施例において、下記の物質を使用した：３８４ウェルプレート；Tropix cAMP-Screen Kit；cAMP ELISA System（Applied Biosystems, cat#T1505; CS20000）；Forskolin（Calbiochem, cat#344270）；細胞：ＨＥＫ２９３／ｈＮＰＹ２Ｒ；増殖培地：ダルベッコ修飾イーグル培地（Ｄ−ＭＥＭ, Gibco）；１０％ウシ胎仔血清（ＦＢＳ, Gibco）、熱非働化；１％ペニシリン／ストレプトマイシン（ペニシリン１００００ユニット／mL：ストレプトマイシン１００００mg/mL, Gibco）；５００mg/mLＧ４１８（Geneticin, Gibco cat. #11811-031）；およびプレーティング培地：ＤＭＥＭ／Ｆ１２w/oフェノールレッド（Gibco）；１０％ＦＢＳ（Gibco, cat#10082-147）、熱非働化；１％ペニシリン／ストレプトマイシン（Gibco, cat#15140-122）；５００mg/mLＧ４１８（Geneticin, Gibco, cat#11811-031）
【０１６０】
１日目に培地を廃棄して、１フラスコ（Ｔ２２５）当たりＰＢＳ１０mlで単層細胞を洗浄した。ＰＢＳを含む上清をデカントした後、ＶＥＲＳＥＮＥ（Gibco, cat#1504006）５mLを使用して、細胞を剥離した（３７℃で５分間）。フラスコを軽くたたき、細胞懸濁液を集めた。プレーティング培地１０mLで各フラスコをリンスして、１０００rpmで５分間遠心した。懸濁液を集め、カウントした。懸濁液を、２．０×１０５細胞／mL（ＨＥＫ２９３／ｈＮＰＹ２Ｒ）の密度でプレーティング培地に再懸濁した。マルチドロップディスペンサーを使用して、細胞（ＨＥＫ２９３／ｈＮＰＹ２Ｒ−１０，０００細胞／ウェル）５０μlを３８４ウェルプレートに移した。プレートを３７℃で一晩インキュベートした。２日目に、細胞が７５〜８５％コンフルエンスに達したことを確認した。培地および試薬を室温にした。希釈液を調製する前に、ジメチルスルホキシド（ＤＭＳＯ, Sigma, cat#D2650）に溶かした刺激化合物のストック溶液を３２℃で５〜１０分間温めた。０．５mMの３−イソブチル−１−メチルキサンチン（ＩＢＭＸ, Calbiochem, cat#410957）および０．５mg/mLのＢＳＡを加えたＤＭＥＭ／Ｆ１２で、希釈液を調製した。刺激培地の最終ＤＭＳＯ濃度は１．１％であり、Forskolin濃度は５μMであった。細胞プレートを静かに裏返し、たたいて細胞培地をペーパータオル上に捨てた。１ウェルにつき、刺激培地を５０μL入れた（各濃度を４連で行った）。プレートを室温で３０分間インキュベートし、細胞の毒性を顕微鏡で調べた。処理の３０分後、刺激培地を廃棄して、１ウェルにつき、アッセイライシスバッファー（Tropixキットに含まれる）を５０mL添加した。プレートを３７℃で４５分間インキュベートした。ライセート２０μLを刺激プレートからTropixキットのプレコート抗体プレート（３８４ウェル）に移した。ＡＰコンジュゲート１０μLおよび抗−ｃＡＭＰ抗体２０μLを添加した。プレートを振とうしながら、室温で１時間インキュベートした。次に、プレートを洗浄バッファーで５回洗浄した（１回の洗浄で１ウェルあたり７０μL）。プレートをたたいて乾燥させた。１ウェルにつき、CSPD/Saphire-II RTU基質／エンハンサー溶液を３０μL添加し、室温で４５分間インキュベートした（振とう）。ルミノメーター（VICTOR-V）で１秒／ウェルのシグナルを測定した。
【０１６１】
実施例６４
ＣａＦｌｕｘアッセイ
ＨＥＫ−２９３細胞を、Ｇタンパク質キメラＧαｑｉ９およびハイグロマイシンＢ耐性遺伝子で安定的にトランスフェクションし、ヒトＮＰＹ２受容体およびＧ４１８抗生物質セレクションでさらにトランスフェクションした。ハイグロマイシンＢおよびＧ４１８の両方のセレクションに続いて、個々のクローンについて、ＰＹＹに対する応答をアッセイした。１０％ウシ胎仔血清、５０μg/mLハイグロマイシンＢ、２mMグルタミン、１００U/mLペニシリン、１００μg/mLストレプトマイシンおよび２５０μg/mLＧ４１８を補充したＤＭＥＭ培地でトランスフェクションした細胞を培養した。トリプシン−ＥＤＴＡで細胞を回収し、ViaCount試薬を使用して計測した。完全増殖培地で細胞懸濁液の量を４．８×１０５細胞／mLに調整した。３８４ウェルのポリＤリジンコート黒色／透明マイクロプレート（Falcon）にアリコート２５μLを分注して、マイクロプレートを３７℃のＣＯ２インキュベーターで一晩放置した。２０mMＨＥＰＥＳおよび５mMプロベネシドを含有するハンクス平衡塩溶液１０００mLに１バイアル（Express Kit）の内容物を溶解して、ローディングバッファー（Calcium-3 Assay Kit, Molecular Devices）を調製した。希釈した色素のアリコート２５μLを細胞プレートに分注して、次に、プレートを３７℃で１時間インキュベートした。インキュベート中、ＨＢＳＳ（２０mMＨＥＰＥＳ）／０．０５％ＢＳＡ／１％ＤＭＳＯに試験化合物を３．５×所望の濃度で調製し、ＦＬＩＰＲで使用するために３８４ウェルプレートに移した。インキュベート後、細胞および化合物プレートの両方をＦＬＩＰＲに入れ、ＦＬＩＰＲにより希釈化合物２０μLを細胞プレートに移した。アッセイの間、細胞プレートの全３８４ウェルの蛍光を、１．５秒毎に同時に読み取った。５回の読み取りを行い、安定なベースラインを確立した後、細胞プレートの各ウェルに試料２０μLを素早く（３０μL／秒）、同時に添加した。総経過時間１００秒にわたり、試料添加の前、間、後の蛍光を連続してモニタリングした。添加後の各ウェルの応答（ピーク蛍光の増加）を測定した。リガンド刺激前に、各ウェルの初期の読み取り蛍光をそのウェルのデータについてのゼロベースライン値として使用した。応答を、陽性対照の最大応答の％として表す。
【０１６２】
本発明の化合物は、ｃＡＭＰアッセイおよびＣａＦｌｕｘアッセイ（ＦＬＩＰＲ）で実証されたように、in vitroにおいて、選択的な神経ペプチド−２受容体活性を示した。in vitroの結果の本発明の代表的な化合物のＥＣ５０値の概要を以下の表１に示す：
【表２】
2013507414.tif 000072
2013507414.tif 000073
【国際調査報告】
2013507414.tif 000085
2013507414.tif 000086
2013507414.tif 000087
2013507414.tif 000088
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