(57)【要約】  本発明は、（ａ）触媒作用のあるホスファチジルイノシトール−３−キナーゼ（ＰＩ３Ｋ）およびイミダゾキノリン誘導体であるｍＴＯＲ阻害剤化合物などの触媒作用のあるｍＴＯＲ阻害剤と、（ｂ）少なくとも１つのアロステリックｍＴＯＲ阻害剤化合物と、任意選択により少なくとも１つの薬学的に許容される担体とを含む、特に、ラパマイシン（ｍＴＯＲ）キナーゼ依存性増殖性疾患の哺乳動物標的を治療するために同時に、別個に、または逐次的に使用するための併用医薬；ならびにｍＴＯＲキナーゼ依存性増殖性疾患の治療における、かかる併用医薬の使用；かかる併用医薬を含む医薬組成物；増殖性疾患を治療する医薬を調製するための、かかる併用医薬の使用；かかる併用医薬を、同時に、別個に、または逐次的に使用するための組み合わせた調製物として含む、市販のパッケージまたは製品；ならびに温血動物、特にヒトを治療する方法に関する。【特許請求の範囲】
【請求項１】
ａ）式（Ｉ）の化合物
【化５】
2013538876.tif 000006
［式中、
Ｒ１は、ナフチルまたはフェニルであり、前記フェニルは、ハロゲン；非置換の低級アルキル、またはハロゲン、シアノ、イミダゾリルもしくはトリアゾリルによって置換されている低級アルキル；シクロアルキル；低級アルキル、低級アルキルスルホニル、低級アルコキシおよび低級アルコキシ低級アルキルアミノからなる群から独立に選択される１つまたは２つの置換基によって置換されているアミノ；非置換のピペラジニル、または低級アルキルおよび低級アルキルスルホニルからなる群から独立に選択される１つもしくは２つの置換基によって置換されているピペラジニル；２−オキソ−ピロリジニル；低級アルコキシ低級アルキル；イミダゾリル；ピラゾリル；ならびにトリアゾリルからなる群から独立に選択される１つまたは２つの置換基によって置換されており、
Ｒ２は、ＯまたはＳであり、
Ｒ３は、低級アルキルであり、
Ｒ４は、非置換のピリジル、またはハロゲン、シアノ、低級アルキル、低級アルコキシ、もしくは非置換のピペラジニルもしくは低級アルキルによって置換されているピペラジニルによって置換されているピリジル；非置換のピリミジニル、または低級アルコキシによって置換されているピリミジニル；非置換のキノリニル、またはハロゲンによって置換されているキノリニル；キノキサリニル；あるいはアルコキシで置換されているフェニルであり、
Ｒ５は、水素またはハロゲンであり、
ｎは、０または１であり、
Ｒ６は、オキシドであり、
但しｎ＝１である場合、基Ｒ６を有するＮ原子は、正電荷を有し、
Ｒ７は、水素またはアミノである］
またはその互変異性体、または薬学的に許容される塩、またはその水和物もしくは溶媒和物と、
ｂ）少なくとも１つのアロステリックｍＴＯＲ阻害剤化合物と、任意選択により少なくとも１つの薬学的に許容される担体と
を含む、増殖性疾患の治療において使用するための併用医薬であって、式（Ｉ）の化合物が、それを必要としている対象に、１日用量当たり約１ｎＭから約１００ｎＭの間、または約９．５×１０−８から約９．５×１０−６モル／ｋｇの間、または約３〜約３１５ｍｇ／対象の間の量で投与される、前記併用医薬。
【請求項２】
式（Ｉ）の化合物が、２−メチル−２−［４−（３−メチル−２−オキソ−８−キノリン−３−イル−２，３−ジヒドロ−イミダゾ［４，５−ｃ］キノリン−１−イル）−フェニル］−プロピオニトリル（化合物Ａ）およびそのモノトシル酸塩である、請求項１に記載の併用医薬。
【請求項３】
式（Ｉ）の化合物が、８−（６−メトキシ−ピリジン−３−イル）−３−メチル−１−（４−ピペラジン−１−イル−３−トリフルオロメチル−フェニル）−１，３−ジヒドロ−イミダゾ［４，５−ｃ］キノリン−２−オン（化合物Ｂ）である、請求項１に記載の併用医薬。
【請求項４】
アロステリックｍＴＯＲ阻害剤化合物が、ＲＡＤラパマイシン（シロリムス）、ならびにエベロリムス（またはＲＡＤ００１）、ＣＣＩ−７７９およびＤｅｆｏｒｏｌｉｍｕｓ（ＡＰ−２３５７３／ＭＫ−８６６９）を含むその誘導体／類似体から選択される、請求項１から３のいずれか１項に記載の併用医薬。
【請求項５】
アロステリックｍＴＯＲ阻害剤化合物が、それを必要としている対象に、１日用量当たり約０．００１ｎＭから約１７．８ｎＭ、または約８．５×１０−１２モル／ｋｇから約１．５×１０−７モル／ｋｇ、または約０．０００５６ｍｇ／対象から約１０ｍｇ／対象の量で投与されるエベロリムス（ＲＡＤ００１）である、請求項４に記載の併用医薬。
【請求項６】
増殖性疾患が、ｍＴＯＲキナーゼ依存性増殖性疾患である、請求項１に記載の併用医薬。
【請求項７】
増殖性疾患が、良性もしくは悪性腫瘍、脳腫瘍、腎臓癌、肝臓癌、副腎癌、膀胱癌、胃癌、卵巣癌、結腸癌、直腸癌、膵臓癌、肺癌（例えば、非小細胞肺がん）、子宮内膜癌、非ホジキンＢ細胞リンパ腫、膣癌もしくは甲状腺癌、肉腫、神経膠芽腫、多発性骨髄腫、または胃もしくは消化管がん、特に結腸癌もしくは結腸直腸腺腫、または頭頸部の腫瘍、表皮の過剰増殖、乾癬、前立腺過形成、神経内分泌、新生物、上皮型新生物、リンパ腫、乳癌、または白血病である、請求項１に記載の併用医薬。
【請求項８】
ａ）式（Ｉ）の化合物
【化６】
2013538876.tif 000007
［式中、
Ｒ１は、ナフチルまたはフェニルであり、前記フェニルは、ハロゲン；非置換の低級アルキル、またはハロゲン、シアノ、イミダゾリルもしくはトリアゾリルによって置換されている低級アルキル；シクロアルキル；低級アルキル、低級アルキルスルホニル、低級アルコキシおよび低級アルコキシ低級アルキルアミノからなる群から独立に選択される１つまたは２つの置換基によって置換されているアミノ；非置換のピペラジニル、または低級アルキルおよび低級アルキルスルホニルからなる群から独立に選択される１つもしくは２つの置換基によって置換されているピペラジニル；２−オキソ−ピロリジニル；低級アルコキシ低級アルキル；イミダゾリル；ピラゾリル；ならびにトリアゾリルからなる群から独立に選択される１つまたは２つの置換基によって置換されており、
Ｒ２は、ＯまたはＳであり、
Ｒ３は、低級アルキルであり、
Ｒ４は、非置換のピリジル、またはハロゲン、シアノ、低級アルキル、低級アルコキシ、もしくは非置換のピペラジニルもしくは低級アルキルによって置換されているピペラジニルによって置換されているピリジル；非置換のピリミジニル、または低級アルコキシによって置換されているピリミジニル；非置換のキノリニル、またはハロゲンによって置換されているキノリニル；キノキサリニル；あるいはアルコキシで置換されているフェニルであり、
Ｒ５は、水素またはハロゲンであり、
ｎは、０または１であり、
Ｒ６は、オキシドであり、
但しｎ＝１である場合、基Ｒ６を有するＮ原子は、正電荷を有し、
Ｒ７は、水素またはアミノである］
またはその互変異性体、または薬学的に許容される塩、またはその水和物もしくは溶媒和物と、
ｂ）少なくとも１つのアロステリックｍＴＯＲ阻害剤化合物と、任意選択により少なくとも１つの薬学的に許容される担体と
を含む、ｍＴＯＲキナーゼ依存性増殖性疾患の標的を治療および予防する医薬を製造するための、併用医薬の使用であって、式（Ｉ）の化合物が、それを必要としている対象に、１日用量当たり約１ｎＭから約１００ｎＭの間、または約９．５×１０−８から約９．５×１０−６モル／ｋｇの間、または約３〜約３１５ｍｇ／対象の量で投与される、前記使用。
【請求項９】
式（Ｉ）の化合物が、２−メチル−２−［４−（３−メチル−２−オキソ−８−キノリン−３−イル−２，３−ジヒドロ−イミダゾ［４，５−ｃ］キノリン−１−イル）−フェニル］−プロピオニトリル（化合物Ａ）およびそのモノトシル酸塩である、請求項８に記載の使用。
【請求項１０】
式（Ｉ）の化合物が、８−（６−メトキシ−ピリジン−３−イル）−３−メチル−１−（４−ピペラジン−１−イル−３−トリフルオロメチル−フェニル）−１，３−ジヒドロ−イミダゾ［４，５−ｃ］キノリン−２−オンである、請求項８に記載の使用。
【請求項１１】
ｍＴＯＲ阻害剤が、ＲＡＤラパマイシン（シロリムス）、ならびにエベロリムス（またはＲＡＤ００１）、ＣＣＩ−７７９およびＤｅｆｏｒｏｌｉｍｕｓ（ＡＰ−２３５７３／ＭＫ−８６６９）を含むその誘導体／類似体から選択される、請求項８、９または１０のいずれか１項に記載の使用。
【請求項１２】
アロステリックｍＴＯＲ阻害剤化合物が、それを必要としている対象に、１日用量当たり約０．００１ｎＭから約１７．８ｎＭ、または約８．５×１０−１２モル／ｋｇから約１．５×１０−７モル／ｋｇ、または約０．０００５６ｍｇ／対象から約１０ｍｇ／対象の量で投与されるエベロリムス（ＲＡＤ００１）である、請求項８に記載の使用。
【請求項１３】
請求項１、２、３、４または５のいずれか１項に記載の併用医薬を含む、医薬組成物。
【請求項１４】
２−メチル−２−［４−（３−メチル−２−オキソ−８−キノリン−３−イル−２，３−ジヒドロ−イミダゾ［４，５−ｃ］キノリン−１−イル）−フェニル］−プロピオニトリル（化合物Ａ）と、ＲＡＤラパマイシン（シロリムス）およびエベロリムス（またはＲＡＤ００１）などのその誘導体／類似体；ＣＣＩ−７７９ならびにＤｅｆｏｒｏｌｉｍｕｓ（ＡＰ−２３５７３／ＭＫ−８６６９）からなる群から選択されるｍＴＯＲ阻害剤と、任意選択により少なくとも１つの薬学的に許容される担体とを含む、良性もしくは悪性腫瘍、脳腫瘍、腎臓癌、肝臓癌、副腎癌、膀胱癌、胃癌、卵巣癌、結腸癌、直腸癌、膵臓癌、肺癌（例えば、非小細胞肺がん）、子宮内膜癌、非ホジキンＢ細胞リンパ腫、膣癌もしくは甲状腺癌、肉腫、神経膠芽腫、多発性骨髄腫、または胃もしくは消化管がん、特に結腸癌もしくは結腸直腸腺腫、または頭頸部の腫瘍、表皮の過剰増殖、乾癬、前立腺過形成、神経内分泌、新生物、上皮型新生物、リンパ腫、乳癌、または白血病を治療するために同時に、別個に、または逐次的に使用するための併用医薬であって、活性成分が、各場合、遊離形態または薬学的に許容される塩の形態で存在し、化合物Ａが、それを必要としている対象に、１日用量当たり約１ｎＭから約１００ｎＭの間、または約９．５×１０−８から約９．５×１０−６モル／ｋｇの間、または約３〜約３１５ｍｇ／対象の量で投与される、前記併用医薬。
【請求項１５】
アロステリックｍＴＯＲ阻害剤化合物が、それを必要としている対象に、１日用量当たり約０．００１ｎＭから約１７．８ｎＭ、または約８．５×１０−１２モル／ｋｇから約１．５×１０−７モル／ｋｇ、または約０．０００５６ｍｇ／対象から約１０ｍｇ／対象の量で投与されるエベロリムス（ＲＡＤ００１）である、請求項１４に記載の併用医薬。
【請求項１６】
式（Ｉ）の化合物またはその互変異性体、または薬学的に許容される塩、またはその水和物もしくは溶媒和物と、少なくとも１つのアロステリックｍＴＯＲ阻害剤化合物とを含む組合せを、それを必要としている対象に投与するステップを含む、ラパマイシン（ｍＴＯＲ）キナーゼ依存性増殖性疾患の標的の治療効率を改善する方法であって、
式（Ｉ）の化合物が、それを必要としている対象に、１日用量当たり約１ｎＭから約１００ｎＭの間、または約９．５×１０−８から約９．５×１０−６モル／ｋｇの間、または約３〜約３１５ｍｇ／対象の量で投与される、
前記方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、（ａ）触媒作用のあるホスファチジルイノシトール−３−キナーゼ（ＰＩ３Ｋ）／式（Ｉ）のイミダゾキノリン誘導体であるラパマイシン（ｍＴＯＲ）阻害剤化合物の哺乳動物標的と、（ｂ）少なくとも１つのアロステリックｍＴＯＲ阻害剤化合物と、任意選択により少なくとも１つの薬学的に許容される担体とを含む、同時に、別個に、または逐次的に使用するための併用医薬；ならびに増殖性疾患、より特定すればｍＴＯＲキナーゼ依存性増殖性疾患の治療における、かかる併用医薬の使用；かかる併用医薬を含む医薬組成物；増殖性疾患、より特定すればｍＴＯＲキナーゼ依存性増殖性疾患を治療する医薬を調製するための、かかる併用医薬の使用；それを必要としている対象、特にヒトを治療する方法；ならびにかかる併用医薬を、同時に、別個に、または逐次的に使用するための組み合わせた調製物として含む、市販のパッケージまたは製品に関する。
【背景技術】
【０００２】
哺乳動物細胞では、ラパマイシン（ｍＴＯＲ）キナーゼの標的は、ｍＴＯＲＣ１複合体またはｍＴＯＲＣ２複合体として説明される多タンパク質複合体として存在し、この多タンパク質複合体は、栄養分およびエネルギーの利用状況を感知し、増殖因子およびストレスシグナル伝達からのインプットを統合する。ｍＴＯＲＣ１複合体は、アロステリックｍＴＯＲ阻害剤化合物（ラパマイシンなど）に対して感受性があり、ｍＴＯＲ、ＧβＬ、およびｍＴＯＲの制御上関連するタンパク質（ｒａｐｔｏｒ：regulatory associated proteins of mTOR）から構成され、ペプチジル−プロリルイソメラーゼＦＫＢＰ１２タンパク質（ＦＫ５０６−結合タンパク質１Ａ、１２ｋＤａ）に結合する。それとは対照的に、ｍＴＯＲＣ２複合体は、ｍＴＯＲ、ＧβＬ、およびラパマイシン非感受性ｍＴＯＲの仲間のタンパク質（ｒｉｃｔｏｒ：rapamycin-insensitive companion proteins of mTOR）から構成され、インビトロではＦＫＢＰ１２タンパク質に結合しない。
【０００３】
ｍＴＯＲＣ１複合体は、タンパク質翻訳制御に関与し、成長制御および増殖制御のための増殖因子および栄養感受性の装置として働くことが示されている。ｍＴＯＲＣ１は、Ｓ６キナーゼ（リボソームタンパク質Ｓ６をリン酸化する）と、真核生物の翻訳開始因子である４Ｅ結合タンパク質１（４ＥＢＰ１）（ｅＩＦ４Ｅ制御によるキャップ依存性翻訳の調節において非常に重要な役割を果たす）の２つの非常に重要な下流基質によって、タンパク質翻訳を制御する。ｍＴＯＲＣ１複合体は、細胞のエネルギーおよび栄養の恒常性に応答して、細胞の増殖を制御し、ｍＴＯＲＣ１複合体の制御解除は、多種多様なヒトのがんに共通している。ｍＴＯＲＣ２の機能には、Ａｋｔのリン酸化による細胞生存の制御（Sarbassovら、Science、2005年、307:1098〜1101頁）、およびアクチン細胞骨格の動態の調節が含まれる（Jacintoら、Nat. Cell. Biol.、2004年、6: 1122〜1128頁）。
【０００４】
ＦＫＢＰ１２と細胞内複合体を形成し、ｍＴＯＲのＦＫＢＰ１２−ラパマイシン結合（ＦＲＢ）ドメインと結合する、アロステリックｍＴＯＲ阻害剤化合物の作用機序に主に起因して、ｍＴＯＲＣ１複合体は、ラパマイシンおよびその誘導体などのアロステリックｍＴＯＲ阻害剤化合物に対して感受性がある（Choiら、Science、1996年、273:239〜242頁）。これによりｍＴＯＲＣ１の立体構造変化が生じるが、この変化は、ｍＴＯＲＣ１の足場タンパク質であるｒａｐｔｏｒとの相互作用を変化させ、弱め、Ｓ６Ｋ１などの基質がｍＴＯＲに接触せず、リン酸化されないようにすると考えられる（Haraら、Cell、2002年、110(2): 177〜89頁；Kimら、Cell、2002年、110(2): 163〜75頁；Oshiroら、Genes Cells、2004年、9(4): 359〜66頁）。ラパマイシンおよびＲＡＤ００１またはＣＣＩ−７７９などのラパログは、良性および悪性増殖障害の両方に関連するｍＴＯＲの過剰活性化を阻害するという臨床的な関連性があるとされている（Dancey、Nature Reviews Clinical Oncology、2010年、7: 209〜219頁；Hidalgo and Rowinsky、Oncogene、2000年、19:6680〜6686頁）。
【０００５】
エベロリムス（Ａｆｉｎｉｔｏｒ（登録商標）、Ｎｏｖａｒｔｉｓ）は、進行性腎臓がんを治療するためのＦＤＡ承認薬物であり、腫瘍のいくつかの他のＩＩＩ相臨床試験においてさらに研究されている。エベロリムスは、おそらくはラパマイシン感受性ｍＴＯＲＣ１機能の抑制によって、インビトロおよびインビボの両方で多種多様な腫瘍細胞株の増殖を阻害できることが、前臨床研究によって示されている。ラパマイシンの誘導体としてのエベロリムスは、ｍＴＯＲＣ１機能の一部、すなわちＳ６キナーゼ（Ｓ６Ｋ）および下流Ｓ６Ｋ基質Ｓ６を強力に阻害するアロステリックｍＴＯＲ阻害剤化合物である。しかし、エベロリムス（および他のラパマイシン類似体）は、近年、Hsiehら、Cancer Cell、17(3): 249〜261頁 (2010年)において、腫瘍発生および維持に非常に重要な駆動要素として関係があるとされている４ＥＢＰ１（Ｔ３７／４６）におけるプライミングリン酸化事象の阻害において、ほとんどまたは全く効果がない。さらに、エベロリムス（および他のラパマイシン類似体）のようなアロステリックｍＴＯＲ阻害剤化合物は、ｍＴＯＲＣ２経路または結果として生じるそのＡｋｔシグナル伝達の活性化の阻害において、ほとんどまたは全く効果がない。
【０００６】
それとは対照的に、触媒作用のあるＡＴＰ競合的ｍＴＯＲ阻害剤化合物は、ｍＴＯＲキナーゼドメインを直接的に標的にし、ｍＴＯＲＣ１およびｍＴＯＲＣ２の両方を標的にすることが見出されている（Feldmanら、PLoS Biology、2009年、7(2): e1000038；Garcia-Martinezら、Biochem. J.、2009年、421(Pt. 1): 29〜42頁；Thoreenら、J. Biol. Chem.、2009年、284: 8023〜8032頁；Yuら、Cancer Res.、2009年、69: 6232頁）。これらの阻害剤化合物は、４ＥＢＰ１−Ｔ３７／４６リン酸化およびキャップ依存性翻訳などのラパマイシン耐性ｍＴＯＲＣ１のアウトプットを調節することから、ラパマイシンなどのかかるアロステリックｍＴＯＲ阻害剤化合物よりもｍＴＯＲＣ１の有効な阻害剤である。
【０００７】
特異的なイミダゾキノリン誘導体およびそれらの調製物は、ＷＯ２００６／１２２８０６に記載されており、式（Ｉ）の化合物
【０００８】
【化１】
2013538876.tif 000002
［式中、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５、ｎ、Ｒ６およびＲ７は、本明細書で前述の通り定義される］、またはその互変異性体、または薬学的に許容される塩、またはその水和物もしくは溶媒和物を含む。８−（６−メトキシ−ピリジン−３−イル）−３−メチル−１−（４−ピペラジン−１−イル−３−トリフルオロメチル−フェニル）−１，３−ジヒドロ−イミダゾ［４，５−ｃ］キノリン−２−オン（「化合物Ａ」）などのかかるイミダゾキノリン誘導体は、例えば、ＷＯ２００８／１０３６３６およびMairaら、Mol. Cancer Ther.、7(7): 1851〜1863頁(2008年7月)において、有効なＰＩ３Ｋ／ｍＴＯＲ阻害剤であることが証明されており、培養されたヒトがん細胞株の大きな一団に対して幅広い活性を示す。
【０００９】
イミダゾキノリン誘導体化合物である２−メチル−２−［４−（３−メチル−２−オキソ−８−キノリン−３−イル−２，３−ジヒドロ−イミダゾ［４，５−ｃ］キノリン−１−イル）−フェニル］−プロピオニトリルは、触媒作用のあるＰＩ３Ｋ／ｍＴＯＲ阻害剤として作用する場合、ラパマイシン感受性（Ｓ６Ｋのリン酸化、およびその後のＳ６のリン酸化）およびラパマイシン非感受性（４ＥＢＰ１のリン酸化）機能の両方を含む、ｍＴＯＲＣ１複合体の完全な機能を停止させることができる。イミダゾキノリン誘導体化合物である２−メチル−２−［４−（３−メチル−２−オキソ−８−キノリン−３−イル−２，３−ジヒドロ−イミダゾ［４，５−ｃ］キノリン−１−イル）−フェニル］−プロピオニトリルは、使用される薬物濃度に応じて特異な効果を有し、それによって低濃度（１００ｎｍｏｌ／Ｌ未満）ではｍＴＯＲの阻害が優勢であるが、相対的に高い濃度では（約５００ｎｍｏｌ／Ｌ）、ＰＩ３Ｋ／ｍＴＯＲの二重阻害が観測される。（例えば、Serraら、Cancer Res.、68(19): 8022〜8030頁 (2008年10月1日)）。
【００１０】
増殖性疾患の患者に対する数々の治療選択肢があるものの、治療剤を必要としている対象に低用量で投与することができる、有効で安全な治療剤が未だ必要であり、併用療法においてこの治療剤が優先的に使用されることが必要である。驚くべきことに、少量の式（Ｉ）の化合物と、少量のエベロリムスなどのアロステリックｍＴＯＲ阻害剤化合物との組合せは、腫瘍疾患の治療において予期しない改善をもたらすことが発見された。式（Ｉ）の化合物およびアロステリックｍＴＯＲ阻害剤化合物は、同時に、逐次的に、または別個に投与される場合、相乗的に相互作用して、細胞増殖を阻害する。この予期しない相乗的相互作用によって、各化合物の必要用量を低減することができ、したがって化合物および治療の副作用が低減され、臨床的な有効性が強化される。
【発明の概要】
【課題を解決するための手段】
【００１１】
本発明は、ａ）式（Ｉ）の化合物
【００１２】
【化２】
2013538876.tif 000003
［式中、
Ｒ１は、ナフチルまたはフェニルであり、前記フェニルは、ハロゲン；非置換の低級アルキル、またはハロゲン、シアノ、イミダゾリルもしくはトリアゾリルによって置換されている低級アルキル；シクロアルキル；低級アルキル、低級アルキルスルホニル、低級アルコキシおよび低級アルコキシ低級アルキルアミノからなる群から独立に選択される１つまたは２つの置換基によって置換されているアミノ；非置換のピペラジニル、または低級アルキルおよび低級アルキルスルホニルからなる群から独立に選択される１つもしくは２つの置換基によって置換されているピペラジニル；２−オキソ−ピロリジニル；低級アルコキシ低級アルキル；イミダゾリル；ピラゾリル；ならびにトリアゾリルからなる群から独立に選択される１つまたは２つの置換基によって置換されており、
Ｒ２は、ＯまたはＳであり、
Ｒ３は、低級アルキルであり、
Ｒ４は、非置換のピリジル、またはハロゲン、シアノ、低級アルキル、低級アルコキシ、もしくは非置換のピペラジニルもしくは低級アルキルによって置換されているピペラジニルによって置換されているピリジル；非置換のピリミジニル、または低級アルコキシによって置換されているピリミジニル；非置換のキノリニル、またはハロゲンによって置換されているキノリニル；キノキサリニル；あるいはアルコキシで置換されているフェニルであり、
Ｒ５は、水素またはハロゲンであり、
ｎは、０または１であり、
Ｒ６は、オキシドであり、
但しｎ＝１である場合、基Ｒ６を有するＮ原子は、正電荷を有し、
Ｒ７は、水素またはアミノである］
またはその互変異性体、または薬学的に許容される塩、またはその水和物もしくは溶媒和物と、
（ｂ）少なくとも１つのアロステリックｍＴＯＲ阻害剤化合物と、任意選択により少なくとも１つの薬学的に許容される担体と
を含む、特に増殖性疾患、より特定すればラパマイシン（ｍＴＯＲ）キナーゼ依存性増殖性疾患の哺乳動物標的を治療するために同時に、別個に、または逐次的に使用するための、新規な併用医薬であって、前記式（Ｉ）の化合物が、それを必要としている対象に、１日用量当たり約１ｎＭから約１００ｎＭの間、または約９．５×１０−８から約９．５×１０−６モル／ｋｇの間、または約３〜約３１５ｍｇ／対象の量で投与される、併用医薬に関する。
【００１３】
好ましい一実施形態では、本発明の組合せは、（ａ）化合物２−メチル−２−［４−（３−メチル−２−オキソ−８−キノリン−３−イル−２，３−ジヒドロ−イミダゾ［４，５−ｃ］キノリン−１−イル）−フェニル］−プロピオニトリル（本明細書では「化合物Ａ」と呼ばれる）またはそのモノトシル酸塩と、（ｂ）アロステリックｍＴＯＲ阻害剤化合物であるエベロリムス（ＲＡＤ００１）とを含む、ｍＴＯＲキナーゼ依存性増殖性疾患を治療するための併用医薬であって、化合物Ａが、１日用量当たり約１ｎＭから約１００ｎＭの間、または約９．５×１０−８から約９．５×１０−６モル／ｋｇの間、または約３〜約３１５ｍｇ／対象の量で投与される、併用医薬に関する。さらなる一実施形態では、併用されるアロステリックｍＴＯＲ阻害剤化合物であるエベロリムス（ＲＡＤ００１）は、１日用量当たり約０．００１ｎＭから約１７．８ｎＭ、または約８．５×１０−１２モル／ｋｇから約１．５×１０−７モル／ｋｇ、または約０．０００５６ｍｇ／対象から約１０ｍｇ／対象の治療上有効な量で投与される。
【００１４】
一態様では、本発明は、（ａ）式（Ｉ）の化合物、またはその互変異性体、または薬学的に許容される塩、またはその水和物もしくは溶媒和物と、（ｂ）少なくとも１つのアロステリックｍＴＯＲ阻害剤化合物と、任意選択により少なくとも１つの薬学的に許容される担体とを含む、ｍＴＯＲキナーゼ依存性増殖性疾患を治療および予防する医薬を製造するための、併用医薬の使用であって、式（Ｉ）の化合物が、それを必要としている対象に、１日用量当たり約１ｎＭから約１００ｎＭの間、または約９．５×１０−８から約９．５×１０−６モル／ｋｇの間、または約３〜約３１５ｍｇ／対象の量で投与される、使用を提供する。
【００１５】
好ましい一実施形態では、本発明は、（ａ）化合物Ａまたはそのモノトシル酸塩と、（ｂ）アロステリックｍＴＯＲ阻害剤化合物であるエベロリムス（ＲＡＤ００１）とを含む、ｍＴＯＲキナーゼ依存性増殖性疾患を治療するための併用医薬の使用であって、化合物Ａが、１日用量当たり約１ｎＭから約１００ｎＭの間、または約９．５×１０−８から約９．５×１０−６モル／ｋｇの間、または約３〜約３１５ｍｇ／対象の量で投与される、使用に関する。さらなる一実施形態では、アロステリックｍＴＯＲ阻害剤化合物であるエベロリムス（ＲＡＤ００１）は、１日用量当たり約０．００１ｎＭから約１７．８ｎＭ、または約８．５×１０−１２モル／ｋｇから約１．５×１０−７モル／ｋｇ、または約０．０００５６ｍｇ／対象から約１０ｍｇ／対象の治療上有効な量で投与される。
【００１６】
別の態様では、本発明は、（ａ）治療有効量の式（Ｉ）の化合物、またはその互変異性体、または薬学的に許容される塩、またはその水和物もしくは溶媒和物と、（ｂ）治療有効量の少なくとも１つのアロステリックｍＴＯＲ阻害剤化合物と、任意選択により少なくとも１つの薬学的に許容される担体とを、それを必要としている対象に投与するステップを含む、増殖性疾患を治療または予防する方法であって、式（Ｉ）の化合物が、１日用量当たり約１ｎＭから約１００ｎＭの間、または約９．５×１０−８から約９．５×１０−６モル／ｋｇの間、または約３〜約３１５ｍｇ／対象の量で投与される、方法を提供する。好ましくは、式（Ｉ）の化合物は、化合物Ａである。
【００１７】
一態様では、本発明は、（ａ）式（Ｉ）の化合物、またはその互変異性体、または薬学的に許容される塩、またはその水和物もしくは溶媒和物と、（ｂ）少なくとも１つのアロステリックｍＴＯＲ阻害剤化合物と、任意選択により少なくとも１つの薬学的に許容される担体とを、それを必要としている対象に投与することによって、ｍＴＯＲキナーゼ依存性増殖性疾患の治療効率を改善する方法であって、式（Ｉ）の化合物が、それを必要としている対象に、１日用量当たり約１ｎＭから約１００ｎＭの間、または約９．５×１０−８から約９．５×１０−６モル／ｋｇの間、または約３〜約３１５ｍｇ／対象の量で投与される、方法を提供する。好ましくは、式（Ｉ）の化合物は、化合物Ａである。
【００１８】
本発明の一態様では、本発明は、（ａ）式（Ｉ）の化合物と、（ｂ）少なくとも１つのアロステリックｍＴＯＲ阻害剤化合物と、任意選択により少なくとも１つの薬学的に許容される担体とを含む、特にｍＴＯＲキナーゼ依存性増殖性疾患を治療するために同時に、別個に、または逐次的に使用するための、組み合わせた調製物または医薬組成物などの併用医薬であって、式（Ｉ）の化合物が、それを必要としている対象に、１日用量当たり約１ｎＭから約１００ｎＭの間、または約９．５×１０−８から約９．５×１０−６モル／ｋｇの間、または約３〜約３１５ｍｇ／対象の量で投与される、併用医薬に関する。好ましくは、式（Ｉ）の化合物は、化合物Ａである。
【００１９】
本発明はさらに、活性成分としての本発明の組合せを、増殖性疾患の進行の遅延または治療において同時に、別個に、または逐次的に使用するための指示と一緒に含む、市販のパッケージを提供する。
【図面の簡単な説明】
【００２０】
【図１】Ｔ３７／４６リン酸化特異的抗体（phospho-specific antibody）を用いる免疫蛍光系染色ならびに自動化イメージングおよび定量化（高含量ｐ４ＥＢＰ１  Ｔ３７／４６アッセイの読取り）による、ＮＣＩ−Ｈ２３（ＫＲＡＳおよびＬＫＢ１変異体）ヒト非小細胞肺がん細胞モデルにおける４ＥＢＰ１のリン酸化に対する、単剤および併用のエベロリムス（ＲＡＤ００１またはＰＫＦ−２２２−６６６６−ＮＸ−２）および／または触媒作用のあるＰＩ３Ｋ／ｍＴＯＲ阻害剤化合物である２−メチル−２−［４−（３−メチル−２−オキソ−８−キノリン−３−イル−２，３−ジヒドロ−イミダゾ［４，５−ｃ］キノリン−１−イル）−フェニル］−プロピオニトリル（化合物Ａ）処理の効果を示す図である。
【図２】ＮＣＩ−Ｈ２３ヒト非小細胞肺がん細胞モデルにおけるｐ−４ＥＢＰ１の高含量分析による全用量マトリックスデータを示す図である。
【図３】高含量ｐＳ６  Ｓ２４０／２４４アッセイの読取りを使用する、ＮＣＩ−Ｈ２３（ＫＲＡＳおよびＬＫＢ１変異体）ヒト非小細胞肺がん細胞モデルにおけるＳ６のリン酸化に対する、単剤および併用のエベロリムス（ＲＡＤ００１）および／または化合物Ａ処理の効果を示す図である。
【図４】ＮＣＩ−Ｈ２３ヒト非小細胞肺がん細胞モデルにおけるｐＳ６の高含量分析による全用量マトリックスデータを示す図である。
【図５】ＮＣＩ−Ｈ２３ヒト非小細胞肺がん細胞モデルにおける単剤および併用のエベロリムス（ＲＡＤ００１）および／または化合物Ａの処理による全用量マトリックス細胞増殖データを示す図である。
【図６】ＮＣＩ−Ｈ２３ヒト非小細胞肺がん細胞モデルの増殖に対する、少量のエベロリムス（ＲＡＤ００１）および化合物Ａの用量の組合せの効果を示す図である。この拡張用量マトリックスでは、化合物ＡのＩＣ５０をシフトするために、わずか１ｐＭのエベロリムスで十分である。
【図７】ＭＦＥ２９６（ＰＩＫ３ＣＡおよびＰＴＥＮ変異体）ヒト子宮内膜がん細胞モデルにおける４ＥＢＰ１のリン酸化に対する、単剤および併用のエベロリムス（ＲＡＤ００１）および／または化合物Ａの処理に関して、高含量の読取りを使用した全用量マトリックスデータを示す図である。
【図８】ＭＦＥ２９６（ＰＩＫ３ＣＡおよびＰＴＥＮ変異体）ヒト子宮内膜がん細胞モデルに関する拡張用量マトリックス細胞増殖データを示す図である。
【図９】ＡＮ３  ＣＡ（ＦＧＦＲ２およびＰＴＥＮ変異体）ヒト子宮内膜がん細胞モデルに関する拡張用量マトリックス細胞増殖データを示す図である。
【図１０】ＧＡ−１０ヒト非ホジキンリンパ腫がん細胞モデルに関する拡張用量マトリックス細胞増殖データを示す図である。
【図１１】ＲＰＭＩ８２２６ヒト多発性骨髄腫がん細胞モデルに関する拡張用量マトリックス細胞増殖データを示す図である。
【図１２】ＫＭＳ−１１（ＦＧＦＲ３変異体）ヒト多発性骨髄腫がん細胞モデルに関する拡張用量マトリックス細胞増殖データを示す図である。
【発明を実施するための形態】
【００２１】
本明細書を通して、また以下の請求項において、別段明確に記載されない限り、以下の用語は以下の意味を有すると定義される。
【００２２】
用語「含む」および「含まれる」は、本明細書ではオープンで非限定的な意味で使用される。
【００２３】
化合物、塩等に対して複数形が使用されている場合、単一の化合物、塩等も意味するとみなされる。
【００２４】
用語「組合せ（併用）」は、併用投与のための、１つの単位剤形中の固定の組合せまたは非固定の組合せ（またはキットオブパーツ）のいずれかを指すために定義され、この場合、式（Ｉ）の化合物および組合せパートナーは、組合せパートナーが協同効果、例えば相乗効果を示すことができるような時間間隔で同時にまたは別個に、独立に投与することができる。本明細書で利用される用語「併用投与」等は、選択された組合せパートナーの、それを必要としている単一の対象（例えば患者）への投与を包含することを意味し、複数の薬剤が必ずしも同じ投与経路によってまたは同時に投与される必要がない治療レジメンを含むものとする。用語「固定の組合せ（併用）」は、活性成分、例えば式（Ｉ）の化合物および組合せパートナーの両方が、単一の実体または単一の投与量の形態で患者に同時に投与されることを意味する。用語「非固定の組合せ（併用）」は、活性成分、例えば式（Ｉ）の化合物および組合せパートナーの両方が、同時に、一緒に、または特別の時間制限なしに逐次的に、別個の実体として患者に投与されることを意味し、この場合、かかる投与は、患者の体内で２種類の化合物の治療上有効なレベルをもたらす。後者は、カクテル療法、例えば３種類以上の活性成分の投与にも適用される。
【００２５】
用語「触媒作用のあるＰＩ３Ｋ／ｍＴＯＲ阻害剤」は、本明細書では、ＰＩ３Ｋおよび／またはｍＴＯＲ酵素のＡＴＰ結合間隙と結合することによって、これらの酵素の触媒作用活性／機能を標的にし、低減し、または阻害する化合物と定義される。
【００２６】
用語「アロステリックｍＴＯＲ阻害剤化合物」は、本明細書では、ｍＴＯＲＣ１複合体のアロステリック結合部位、好ましくはＦＫＢＰ１２−ラパマイシン結合部位（ＦＲＢ）と結合することによって、ｍＴＯＲキナーゼの活性／機能を標的にし、低減し、または阻害する化合物と定義される。
【００２７】
用語「対象」は、動物を含むものとする。対象の例には、哺乳動物、例えば、ヒト、イヌ、ウシ、ウマ、ブタ、ヒツジ、ヤギ、ネコ、マウス、ウサギ、ラット、およびヒト以外の遺伝子導入動物が含まれる。特定の実施形態では、対象はヒトであり、例えば脳腫瘍疾患に罹患しているか、罹患する危険性があるか、または潜在的に罹患する可能性があるヒトである。
【００２８】
用語「ｍｇ／対象」は、本明細書では、それを必要としている体重約７０ｋｇの対象に対して推定される参照化合物の量（ミリグラム）であると定義される。この用語は、体重約７０ｋｇの対象には限定されず、言及される量（ミリグラム）は、対象の実際の体重においてこの比率に等しくなるように当業者によって調整され得ることを理解されたい。
【００２９】
特定の薬物用量に関連する用語「約」は、名目上の薬物用量のプラス／マイナス１０％ｗ／ｗ、好ましくはプラス／マイナス５％ｗ／ｗ以下の範囲の薬物用量という意味を有するものとする。例えば、活性成分約０．０１ｍｇの名目上の薬物用量は、１用量当たり０．００９〜０．０１１ｍｇ、好ましくは０．００９５〜０．０１０５ｍｇの活性成分を含有することができる。
【００３０】
用語「医薬組成物」は、本明細書では、哺乳動物に影響を及ぼす特定の疾患または状態を予防、治療または制御するために、哺乳動物、例えばヒトに投与される、少なくとも１つの治療化合物を含有する混合物または溶液を指すと定義される。
【００３１】
用語「薬学的に許容される」は、本明細書では、良好な医学的判断の範囲内で、過度の毒性、刺激、アレルギー反応および他の問題となる合併症なしに、哺乳動物、特にヒトの組織と接触させるのに適した、妥当な損益比に見合う化合物、材料、組成物および／または剤形を指すと定義される。
【００３２】
用語「組み合わせた調製物」は、本明細書で使用される場合、先に定義の組合せパートナー（ａ）および（ｂ）が、独立に投与され得るか、または区別された量の組合せパートナー（ａ）および（ｂ）の様々な固定の組合せを使用することによって投与され得る、すなわち同時に、または様々な時点で投与され得るという意味で、特に「キットオブパーツ（kit of parts）」を定義する。次に、キットオブパーツの各部分は、例えば同時にまたは経時的に時差を設けて、すなわちキットオブパーツの任意の部分について様々な時点で、等しいまたは様々な時間間隔で投与することができる。組み合わせた調製物として投与される組合せパートナー（ａ）と組合せパートナー（ｂ）の総量の比は、例えば治療を受ける患者の亜集団の必要または単一患者の必要に対処するために変わり得る。
【００３３】
用語「医薬組成物」は、本明細書で使用される場合、例えば、ｍＴＯＲキナーゼ依存性増殖性疾患を治療するために、哺乳動物、例えばヒトに投与される、薬学的に許容される担体における特定量の治療化合物、例えばある量の治療化合物を含有する混合物を指すものとする。
【００３４】
用語「治療する」または「治療」は、本明細書で使用される場合、疾患の進行を遅延させる治療を含む。用語「進行を遅延させる」とは、本明細書で使用される場合、治療を受ける増殖性疾患の前段階または初期にある患者に、組合せを投与することを意味し、これらの段階の患者では、対応する疾患が予め形成されると診断され、または患者は、例えば医学的治療中の状態もしくは事故から生じた状態にあり、その状態では、対応する疾患が発症する可能性が高い。
【００３５】
用語「ｍＴＯＲキナーゼ依存性増殖性疾患」は、本明細書で使用される場合、本明細書で言及される任意の増殖性疾患または障害を指すと定義され、特に、ｍＴＯＲキナーゼ経路を阻害する、特にがんまたは腫瘍疾患から選択される増殖性疾患を阻害する、言及される化合物に応答する任意の増殖性疾患を意味する。
【００３６】
「治療上有効な」または「臨床上有効な」は、好ましくは、増殖性疾患の進行に対して治療上有効な量に関し、またはより広範な意味では、予防上有効な量にも関する。
【００３７】
「共同で治療上活性な」または「共同の治療効果」は、化合物が、好ましくは、治療を受ける温血動物、特にヒトにおいても（好ましくは相乗的）相互作用（共同の治療効果）を示すような時間間隔で、化合物が別個に（常習的に時差方式で、特に順序による方式で）投与され得ることを意味する。これに該当するかどうかは、中でも、両方の化合物が、少なくとも特定の時間間隔の間に治療を受けるヒトの血中に存在することを示す血中レベルに従って決定され得る。
【００３８】
本発明は、（ａ）式（Ｉ）の化合物、またはその互変異性体、または薬学的に許容される塩、またはその水和物もしくは溶媒和物と、（ｂ）少なくとも１つのアロステリックｍＴＯＲ阻害剤化合物と、任意選択により少なくとも１つの薬学的に許容される担体とを含む、特に増殖性疾患、より特定すればｍＴＯＲキナーゼ依存性増殖性疾患を治療するために同時に、別個に、または逐次的に使用するための、新規な併用医薬であって、式（Ｉ）の化合物が、それを必要としている対象に、１日用量当たり約１ｎＭから約１００ｎＭの間、または約９．５×１０−８から約９．５×１０−６モル／ｋｇの間、または約３〜約３１５ｍｇ／対象の量で投与される、併用医薬に関する。
【００３９】
（ａ）式（Ｉ）の化合物、またはその互変異性体、または薬学的に許容される塩、またはその水和物もしくは溶媒和物と、（ｂ）少なくとも１つのアロステリックｍＴＯＲ阻害剤化合物と、任意選択により少なくとも１つの薬学的に許容される担体とを含む組合せ（併用医薬）であって、式（Ｉ）の化合物が、それを必要としている対象に、１日用量当たり約１ｎＭから約１００ｎＭの間、または約９．５×１０−８から約９．５×１０−６モル／ｋｇの間、または約３〜約３１５ｍｇ／対象の量で投与される、組合せ（併用医薬）を、以下、本発明の組合せ（併用医薬）と呼ぶことにする。
【００４０】
驚くべきことに、少量（約１ｎＭから約１００ｎＭ、または約９．５×１０−８から約９．５×１０−６モル／ｋｇ、または約３〜約３１５ｍｇ／ヒト）の式（Ｉ）の化合物と、少量（０．００１ｎＭから約１７．８ｎＭ、または約８．５×１０−１２モル／ｋｇから約１．５×１０−７モル／ｋｇ、または約０．０００５６ｍｇ／対象から約１０ｍｇ／対象）のエベロリムスなどの少なくとも１つのアロステリックｍＴＯＲ阻害剤化合物との組合せは、増殖性疾患、特にｍＴＯＲキナーゼ依存性増殖性疾患の治療において予期しない改善をもたらすことが発見された。式（Ｉ）の化合物およびアロステリックｍＴＯＲ阻害剤化合物は、同時に、逐次的に、または別個に投与される場合、相乗的に相互作用して、４ＥＢＰ１のリン酸化および細胞増殖を阻害する。この予期しない相乗的相互作用によって、各化合物の必要用量を低減することができ、したがって化合物および治療の副作用が低減され、臨床的な有効性が強化される。先の本発明の組合せは、がん細胞の増殖阻害を、単剤としての高用量（約２５０ｎＭから約１０００ｎＭ、または約２．４×１０−５から９．５×１０−５モル／ｋｇ、または約７８４〜３１３６ｍｇ／対象）の式（Ｉ）の化合物だけで初めて達成され得る範囲まで強化することができる。
【００４１】
１つまたは複数の成分の間の相乗的相互作用を決定する場合、効果のための最適な範囲および効果のための各成分の絶対的用量は、治療を必要としている患者に、異なるｗ／ｗ比の範囲および用量にわたって成分を投与することによって決定的に測定することができる。ヒトについては、患者に対して臨床研究を実施する複雑度および費用により、相乗作用に関する一次モデルとしてこの試験形態を使用することは非現実的である。しかし、ある種における相乗作用の観測により、本明細書に記載の存在する他の種および動物モデルにおける効果を予測して、相乗効果を測定することができ、かかる研究の結果を使用して、薬物動態／薬力学的方法を適用することによって、他の種に必要な有効用量、および血漿濃度比の範囲、および絶対的用量、および血漿濃度を予測することもできる。ヒトに見られる腫瘍モデルと効果の間で確立されている相関は、動物における相乗作用が、以下の実施例に記載の通り、例えばＮＣＩ−Ｈ２３ヒト非小細胞肺がん腫瘍モデル、ＭＦＥ２９６ヒト子宮内膜がん細胞モデル（ＰＩＫ３ＣＡおよびＰＴＥＮ変異の両方を有する）およびＡＮ３ＣＡ子宮内膜がん細胞モデル、ＫＭＳ１１およびＲＰＭＩ８２２６骨髄腫がん細胞モデル、ならびにＧＡ−１０非ホジキンＢ細胞リンパ腫がん細胞モデルにおいて実証され得ることを示唆している。
【００４２】
本発明の組合せは、触媒作用のあるＰＩ３Ｋ／ｍＴＯＲ阻害剤を含む。本発明に適した触媒作用のあるＰＩ３Ｋ／ｍＴＯＲ阻害剤化合物は、式（Ｉ）の化合物
【００４３】
【化３】
2013538876.tif 000004
［式中、
Ｒ１は、ナフチルまたはフェニルであり、前記フェニルは、ハロゲン；非置換の低級アルキル、またはハロゲン、シアノ、イミダゾリルもしくはトリアゾリルによって置換されている低級アルキル；シクロアルキル；低級アルキル、低級アルキルスルホニル、低級アルコキシおよび低級アルコキシ低級アルキルアミノからなる群から独立に選択される１つまたは２つの置換基によって置換されているアミノ；非置換のピペラジニル、または低級アルキルおよび低級アルキルスルホニルからなる群から独立に選択される１つもしくは２つの置換基によって置換されているピペラジニル；２−オキソ−ピロリジニル；低級アルコキシ低級アルキル；イミダゾリル；ピラゾリル；ならびにトリアゾリルからなる群から独立に選択される１つまたは２つの置換基によって置換されており、
Ｒ２は、ＯまたはＳであり、
Ｒ３は、低級アルキルであり、
Ｒ４は、非置換のピリジル、またはハロゲン、シアノ、低級アルキル、低級アルコキシ、もしくは非置換のピペラジニルもしくは低級アルキルによって置換されているピペラジニルによって置換されているピリジル；非置換のピリミジニル、または低級アルコキシによって置換されているピリミジニル；非置換のキノリニル、またはハロゲンによって置換されているキノリニル；キノキサリニル；あるいはアルコキシで置換されているフェニルであり、
Ｒ５は、水素またはハロゲンであり、
ｎは、０または１であり、
Ｒ６は、オキシドであり、
但しｎ＝１である場合、基Ｒ６を有するＮ原子は、正電荷を有し、
Ｒ７は、水素またはアミノである］
またはその互変異性体、または薬学的に許容される塩、またはその水和物もしくは溶媒和物を含む。本発明に適したこれらの特異的なイミダゾキノリン誘導体、それらの調製物およびこの調製物を含有する適切な医薬製剤は、全体が参照によって本明細書に組み込まれるＷＯ２００６／１２２８０６に記載されている。
【００４４】
式（Ｉ）の化合物の定義において使用される基および記号は、ＷＯ２００６／１２２８０６に開示されている意味を有する。本明細書では、別段特定されない限り、以下の一般的な定義が適用されるものとする。
【００４５】
「低級」は、最大７個以下、特に最大４個以下の炭素原子を有する基を指し、当該の基は、直鎖であり、または単一もしくは複数の分岐を伴って分岐している。
【００４６】
好ましい一実施形態では、アルキルは、最大１２個の炭素原子を有し、特に低級アルキルである。
【００４７】
「低級アルキル」は、好ましくは、１個以上７個以下、好ましくは１個以上４個以下の炭素原子を有するアルキルであり、直鎖または分岐であり、好ましくは、低級アルキルは、ｎ−ブチル、ｓｅｃ−ブチル、イソブチル、ｔｅｒｔ−ブチルなどのブチル、ｎ−プロピルもしくはイソプロピルなどのプロピル、エチル、または好ましくはメチルである。
【００４８】
「シクロアルキル」は、好ましくは、環において３個以上６個以下の炭素原子を有するシクロアルキルであり、シクロアルキルは、好ましくはシクロプロピル、シクロブチル、シクロペンチル（cyclopently）またはシクロヘキシルである。
【００４９】
ハロゲンによって置換されている「アルキル」は、好ましくはトリフルオロメチルなどのパーフルオロアルキルである。
【００５０】
「ハロゲン」は、特にフッ素、塩素、臭素またはヨウ素、特にフッ素、塩素または臭素である。
【００５１】
式（Ｉ）の化合物の塩は、本発明に従って使用することができる。かかる塩は、例えば、塩基性窒素原子を有する式（Ｉ）の化合物から、好ましくは有機酸または無機酸を用いて酸付加塩として、特に薬学的に許容される塩として形成される。適切な無機酸は、例えば、塩酸、硫酸またはリン酸などのハロゲン酸である。適切な有機酸は、例えば、カルボン酸、ホスホン酸、スルホン酸またはスルファミン酸、例えば、酢酸、プロピオン酸、オクタン酸、デカン酸、ドデカン酸、グリコール酸、乳酸、フマル酸、コハク酸、マロン酸、アジピン酸、ピメリン酸、スベリン酸、アゼライン酸、リンゴ酸、酒石酸、クエン酸、グルタミン酸もしくはアスパラギン酸などのアミノ酸、マレイン酸、ヒドロキシマレイン酸、メチルマレイン酸、シクロヘキサンカルボン酸、アダマンタンカルボン酸、安息香酸、サリチル酸、４−アミノサリチル酸、フタル酸、フェニル酢酸、マンデル酸、ケイ皮酸、メタン−もしくはエタン−スルホン酸、２−ヒドロキシエタンスルホン酸、エタン−１，２−ジスルホン酸、ベンゼンスルホン酸、４−トルエンスルホン酸、２−ナフタレンスルホン酸、１，５−ナフタレン−ジスルホン酸、２−もしくは３−メチルベンゼンスルホン酸、メチル硫酸、エチル硫酸、ドデシル硫酸、Ｎ−シクロヘキシルスルファミン酸、Ｎ−メチル−、Ｎ−エチル−もしくはＮ−プロピル−スルファミン酸、またはアスコルビン酸などの他の有機プロトン酸である。
【００５２】
本発明の好ましい化合物は、以下からなる群から選択される、ＷＯ２００６／１２２８０６に記載の化合物
２−メチル−２−［４−（３−メチル−２−オキソ−８−ピリジン−４−イル−２，３−ジヒドロ−イミダゾ［４，５−ｃ］キノリン−１−イル）−フェニル］−プロピオニトリル；
２−メチル−２−［４−（３−メチル−２−オキソ−８−ピリジン−３−イル−２，３−ジヒドロ−イミダゾ［４，５−ｃ］キノリン−１−イル）−フェニル］−プロピオニトリル；
２−｛４−［８−（６−メトキシ−ピリジン−３−イル）−３−メチル−２−オキソ−２，３−ジヒドロ−イミダゾ［４，５−ｃ］キノリン−１−イル］−フェニル｝−２−メチル−プロピオニトリル；
２−｛４−［８−（５−メトキシ−ピリジン−３−イル）−３−メチル−２−オキソ−２，３−ジヒドロ−イミダゾ［４，５−ｃ］キノリン−１−イル］−フェニル｝−２−メチル−プロピオニトリル；
２−メチル−２−｛４−［３−メチル−２−オキソ−８−（６−ピペラジン−１−イル−ピリジン−３−イル）−２，３−ジヒドロ−イミダゾ［４，５−ｃ］キノリン−１−イル］−フェニル｝−プロピオニトリル；
２−メチル−２−（４−｛３−メチル−８−［２−（４−メチル−ピペラジン−１−イル）−ピリジン−４−イル］−２−オキソ−２，３−ジヒドロ−イミダゾ［４，５−ｃ］キノリン−１−イル｝−フェニル）−プロピオニトリル；
２−メチル−２−［４−（３−メチル−２−オキソ−８−キノリン−３−イル−２，３−ジヒドロ−イミダゾ［４，５−ｃ］キノリン−１−イル）−フェニル］−プロピオニトリル；
２−｛４−［８−（２−フルオロ−キノリン−３−イル）−３−メチル−２−オキソ−２，３−ジヒドロ−イミダゾ［４，５−ｃ］キノリン−１−イル］−フェニル｝−２−メチル−プロピオニトリル；
２−メチル−２−［４−（３−メチル−２−オキソ−８−キノリン−６−イル−２，３−ジヒドロ−イミダゾ［４，５−ｃ］キノリン−１−イル）−フェニル］−プロピオニトリル；
２−メチル−２−［４−（３−メチル−２−オキソ−８−キノリン−５−イル−２，３−ジヒドロ−イミダゾ［４，５−ｃ］キノリン−１−イル）−フェニル］−プロピオニトリル；
２−メチル−２−［４−（３−メチル−２−オキソ−８−キノキサリン−６−イル−２，３−ジヒドロ−イミダゾ［４，５−ｃ］キノリン−１−イル）−フェニル］−プロピオニトリル；
２−エチル−２−［４−（３−メチル−２−オキソ−８−ピリジン−３−イル−２，３−ジヒドロ−イミダゾ［４，５−ｃ］キノリン−１−イル）−フェニル］−ブチロニトリル；
２−エチル−２−［４−（３−メチル−２−オキソ−８−キノリン−３−イル−２，３−ジヒドロ−イミダゾ［４，５−ｃ］キノリン−１−イル）−フェニル］−ブチロニトリル；
１−［３−フルオロ−４−（２−オキソ−ピロリジン−１−イル）−フェニル］−３−メチル−８−ピリジン−３−イル−１，３−ジヒドロ−イミダゾ［４，５−ｃ］キノリン−２−オン；
１−［３−フルオロ−４−（２−オキソ−ピロリジン−１−イル）−フェニル］−３−メチル−８−キノリン−３−イル−１，３−ジヒドロ−イミダゾ［４，５−ｃ］キノリン−２−オン；
３−メチル−１−［４−（２−オキソ−ピロリジン−１−イル）−フェニル］−８−ピリジン−３−イル−１，３−ジヒドロ−イミダゾ［４，５−ｃ］キノリン−２−オン；
３−メチル−１−［４−（２−オキソ−ピロリジン−１−イル）−フェニル］−８−キノリン−３−イル−１，３−ジヒドロ−イミダゾ［４，５−ｃ］キノリン−２−オン；
１−｛４−［ビス−（２−メトキシ−エチル）−アミノ］−３−フルオロ−フェニル｝−３−メチル−８−ピリジン−３−イル−１，３−ジヒドロ−イミダゾ［４，５−ｃ］キノリン−２−オン；
１−｛４−［ビス−（２−メトキシ−エチル）−アミノ］−３−フルオロ−フェニル｝−３−メチル−８−キノリン−３−イル−１，３−ジヒドロ−イミダゾ［４，５−ｃ］キノリン−２−オン；
１−｛４−［ビス−（２−メトキシ−エチル）−アミノ］−フェニル｝−３−メチル−８−ピリジン−３−イル−１，３−ジヒドロ−イミダゾ［４，５−ｃ］キノリン−２−オン；
１−｛４−［ビス−（２−メトキシ−エチル）−アミノ］−フェニル｝−３−メチル−８−キノリン−３−イル−１，３−ジヒドロ−イミダゾ［４，５−ｃ］キノリン−２−オン；
３−メチル−１−ナフタレン−２−イル−８−ピリジン−３−イル−１，３−ジヒドロ−イミダゾ［４，５−ｃ］キノリン−２−オン；
３−メチル−１−ナフタレン−２−イル−８−キノリン−３−イル−１，３−ジヒドロ−イミダゾ［４，５−ｃ］キノリン−２−オン；
１−（２−クロロ−フェニル）−３−メチル−８−ピリジン−３−イル−１，３−ジヒドロ−イミダゾ［４，５−ｃ］キノリン−２−オン；
１−（２−クロロ−フェニル）−３−メチル−８−キノリン−３−イル−１，３−ジヒドロ−イミダゾ［４，５−ｃ］キノリン−２−オン；
３−メチル−８−ピリジン−３−イル−１−ｏ−トリル−１，３−ジヒドロ−イミダゾ［４，５−ｃ］キノリン−２−オン；
３−メチル−８−キノリン−３−イル−１−ｏ−トリル−１，３−ジヒドロ−イミダゾ［４，５−ｃ］キノリン−２−オン；
１−（２−エチル−フェニル）−３−メチル−８−ピリジン−３−イル−１，３−ジヒドロ−イミダゾ［４，５−ｃ］キノリン−２−オン；
１−（２−エチル−フェニル）−３−メチル−８−キノリン−３−イル−１，３−ジヒドロ−イミダゾ［４，５−ｃ］キノリン−２−オン；
３−メチル−８−ピリジン−３−イル−１−（２−トリフルオロメチル−フェニル）−１，３−ジヒドロ−イミダゾ［４，５−ｃ］キノリン−２−オン；
３−メチル−８−キノリン−３−イル−１−（２−トリフルオロメチル−フェニル）−１，３−ジヒドロ−イミダゾ［４，５−ｃ］キノリン−２−オン；
１−（４−フルオロ−２−メチル−フェニル）−３−メチル−８−キノリン−３−イル−１，３−ジヒドロ−イミダゾ［４，５−ｃ］キノリン−２−オン；
１−（４−フルオロ−２−メチル−フェニル）−３−メチル−８−キノリン−３−イル−１，３−ジヒドロ−イミダゾ［４，５−ｃ］キノリン−２−オン；
１−（２−クロロ−４−フルオロ−フェニル）−３−メチル−８−ピリジン−３−イル−１，３−ジヒドロ−イミダゾ［４，５−ｃ］キノリン−２−オン；
１−（２−クロロ−４−フルオロ−フェニル）−３−メチル−８−キノリン−３−イル−１，３−ジヒドロ−イミダゾ［４，５−ｃ］キノリン−２−オン；
１−（３−クロロ−フェニル）−３−メチル−８−ピリジン−３−イル−１，３−ジヒドロ−イミダゾ［４，５−ｃ］キノリン−２−オン；
１−（３−クロロ−フェニル）−３−メチル−８−キノリン−３−イル−１，３−ジヒドロ−イミダゾ［４，５−ｃ］キノリン−２−オン；
３−メチル−８−ピリジン−３−イル−１−（３−トリフルオロメチル−フェニル）−１，３−ジヒドロ−イミダゾ［４，５−ｃ］キノリン−２−オン；
３−メチル−８−キノリン−３−イル−１−（３−トリフルオロメチル−フェニル）−１，３−ジヒドロ−イミダゾ［４，５−ｃ］キノリン−２−オン；
１−（４−メトキシメチル−フェニル）−３−メチル−８−ピリジン−３−イル−１，３−ジヒドロ−イミダゾ［４，５−ｃ］キノリン−２−オン；
１−（４−メトキシメチル−フェニル）−３−メチル−８−キノリン−３−イル−１，３−ジヒドロ−イミダゾ［４，５−ｃ］キノリン−２−オン；
１−［２−クロロ−４−（２−メトキシ−エチル）−フェニル］−３−メチル−８−ピリジン−３−イル−１，３−ジヒドロ−イミダゾ［４，５−ｃ］キノリン−２−オン；
１−［２−クロロ−４−（２−メトキシ−エチル）−フェニル］−３−メチル−８−キノリン−３−イル−１，３−ジヒドロ−イミダゾ［４，５−ｃ］キノリン−２−オン；
１−［４−（２−メトキシ−エチル）−フェニル］−３−メチル−８−キノリン−３−イル−１，３−ジヒドロ−イミダゾ［４，５−ｃ］キノリン−２−オン；
１−［４−（２−メトキシ−エチル）−フェニル］−３−メチル−８−ピリジン−３−イル−１，３−ジヒドロ−イミダゾ［４，５−ｃ］キノリン−２−オン；
２−メチル−２−［４−（３−メチル−２−オキソ−５−オキシ−８−ピリジン−３−イル−２，３−ジヒドロ−イミダゾ［４，５−ｃ］キノリン−１−イル）−フェニル］−プロピオニトリル；
２−メチル−２−［４−（３−メチル−２−オキソ−５−オキシ−８−キノリン−３−イル−２，３−ジヒドロ−イミダゾ［４，５−ｃ］キノリン−１−イル）−フェニル］−プロピオニトリル；
２−［４−（７−フルオロ−３−メチル−２−オキソ−８−ピリジン−３−イル−２，３−ジヒドロ−イミダゾ［４，５−ｃ］キノリン−１−イル）−フェニル］−２−メチル−プロピオニトリル；
２−［４−（７−フルオロ−３−メチル−２−オキソ−８−キノリン−３−イル−２，３−ジヒドロ−イミダゾ［４，５−ｃ］キノリン−１−イル）−フェニル］−２−メチル−プロピオニトリル；
Ｎ−メチル−Ｎ−［４−（３−メチル−２−オキソ−８−ピリジン−３−イル−２，３−ジヒドロ−イミダゾ［４，５−ｃ］キノリン−１−イル）−フェニル］−メタンスルホンアミド；
メチル−［４−（３−メチル−２−オキソ−８−ピリジン−３−イル−２，３−ジヒドロ−イミダゾ［４，５−ｃ］キノリン−１−イル）−フェニル］−カルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステル；
エタンスルホン酸メチル−［４−（３−メチル−２−オキソ−８−ピリジン−３−イル−２，３−ジヒドロ−イミダゾ［４，５−ｃ］キノリン−１−イル）−フェニル］−アミド；
エタンスルホン酸メチル−［４−（３−メチル−２−オキソ−８−キノリン−３−イル−２，３−ジヒドロ−イミダゾ［４，５−ｃ］キノリン−１−イル）−フェニル］−アミド；
Ｎ−エチル−Ｎ−［４−（３−メチル−２−オキソ−８−ピリジン−３−イル−２，３−ジヒドロ−イミダゾ［４，５−ｃ］キノリン−１−イル）−フェニル］−メタンスルホンアミド；
Ｎ−エチル−Ｎ−［４−（３−メチル−２−オキソ−８−キノリン−３−イル−２，３−ジヒドロ−イミダゾ［４，５−ｃ］キノリン−１−イル）−フェニル］−メタンスルホンアミド；
２−［４−（３−エチル−２−オキソ−８−ピリジン−３−イル−２，３−ジヒドロ−イミダゾ［４，５−ｃ］キノリン−１−イル）−フェニル］−２−メチル−プロピオニトリル；
１−［３−フルオロ−４−（４−メタンスルホニル−ピペラジン−１−イル）−フェニル］−３−メチル−８−キノリン−３−イル−１，３−ジヒドロ−イミダゾ［４，５−ｃ］キノリン−２−オン；
１−［３−フルオロ−４−（４−メタンスルホニル−ピペラジン−１−イル）−フェニル］−３−メチル−８−ピリジン−３−イル−１，３−ジヒドロ−イミダゾ［４，５−ｃ］キノリン−２−オン；
１−（３−フルオロ−４−ピペラジン−１−イル−フェニル）−３−メチル−８−キノリン−３−イル−１，３−ジヒドロ−イミダゾ［４，５−ｃ］キノリン−２−オン；
１−（３−フルオロ−４−ピペラジン−１−イル−フェニル）−３−メチル−８−ピリジン−３−イル−１，３−ジヒドロ−イミダゾ［４，５−ｃ］キノリン−２−オン；
３−メチル−１−［４−（４−メチル−ピペラジン−１−イル）−フェニル］−８−キノリン−３−イル−１，３−ジヒドロ−イミダゾ［４，５−ｃ］キノリン−２−オン；
３−メチル−１−［４−（４−メチル−ピペラジン−１−イル）−フェニル］−８−ピリジン−３−イル−１，３−ジヒドロ−イミダゾ［４，５−ｃ］キノリン−２−オン；
１−［２−クロロ−４−（４−メチル−ピペラジン−１−イル）−フェニル］−３−メチル−８−キノリン−３−イル−１，３−ジヒドロ−イミダゾ［４，５−ｃ］キノリン−２−オン；
１−［２−クロロ−４−（４−メチル−ピペラジン−１−イル）−フェニル］−３−メチル−８−ピリジン−３−イル−１，３−ジヒドロ−イミダゾ［４，５−ｃ］キノリン−２−オン；
１−［３−クロロ−４−（４−メチル−ピペラジン−１−イル）−フェニル］−３−メチル−８−キノリン−３−イル−１，３−ジヒドロ−イミダゾ［４，５−ｃ］キノリン−２−オン；
１−［３−クロロ−４−（４−メチル−ピペラジン−１−イル）−フェニル］−３−メチル−８−ピリジン−３−イル−１，３−ジヒドロ−イミダゾ［４，５−ｃ］キノリン−２−オン；
１−（４−イミダゾール−１−イル−２−メチル−フェニル）−３−メチル−８−キノリン−３−イル−１，３−ジヒドロ−イミダゾ［４，５−ｃ］キノリン−２−オン；
１−（４−イミダゾール−１−イル−２−メチル−フェニル）−３−メチル−８−ピリジン−３−イル−１，３−ジヒドロ−イミダゾ［４，５−ｃ］キノリン−２−オン；
３−メチル−１−（４−ピラゾール−１−イル−フェニル）−８−キノリン−３−イル−１，３−ジヒドロ−イミダゾ［４，５−ｃ］キノリン−２−オン；
３−メチル−１−（４−ピラゾール−１−イル−フェニル）−８−ピリジン−３−イル−１，３−ジヒドロ−イミダゾ［４，５−ｃ］キノリン−２−オン；
３−メチル−８−キノリン−３−イル−１−（４−［１，２，４］トリアゾール−１−イル−フェニル）−１，３−ジヒドロ−イミダゾ［４，５−ｃ］キノリン−２−オン；
３−メチル−８−ピリジン−３−イル−１−（４−［１，２，４］トリアゾール−１−イル−フェニル）−１，３−ジヒドロ−イミダゾ［４，５−ｃ］キノリン−２−オン；
３−メチル−１−［４−（４−メチル−ピペラジン−１−イル）−３−トリフルオロメチル−フェニル］−８−キノリン−３−イル−１，３−ジヒドロ−イミダゾ［４，５−ｃ］キノリン−２−オン；
３−メチル−１−［４−（４−メチル−ピペラジン−１−イル）−３−トリフルオロメチル−フェニル］−８−ピリジン−３−イル−１，３−ジヒドロ−イミダゾ［４，５−ｃ］キノリン−２−オン；
１−（３−クロロ−４−ピペラジン−１−イル−フェニル）−３−メチル−８−キノリン−３−イル−１，３−ジヒドロ−イミダゾ［４，５−ｃ］キノリン−２−オン；
１−（３−クロロ−４−ピペラジン−１−イル−フェニル）−３−メチル−８−ピリジン−３−イル−１，３−ジヒドロ−イミダゾ［４，５−ｃ］キノリン−２−オン；
１−（３−クロロ−４−ピペラジン−１−イル−フェニル）−８−（６−メトキシ−ピリジン−３−イル）−３−メチル−１，３−ジヒドロ−イミダゾ［４，５−ｃ］キノリン−２−オン；
１−（３−クロロ−４−ピペラジン−１−イル−フェニル）−８−（５−メトキシ−ピリジン−３−イル）−３−メチル−１，３−ジヒドロ−イミダゾ［４，５−ｃ］キノリン−２−オン；
８−（６−メトキシ−ピリジン−３−イル）−３−メチル−１−［４−（４−メチル−ピペラジン−１−イル）−３−トリフルオロメチル−フェニル］−１，３−ジヒドロ−イミダゾ［４，５−ｃ］キノリン−２−オン；
８−（５−メトキシ−ピリジン−３−イル）−３−メチル−１−［４−（４−メチル−ピペラジン−１−イル）−３−トリフルオロメチル−フェニル］−１，３−ジヒドロ−イミダゾ［４，５−ｃ］キノリン−２−オン；
１−［２−クロロ−４−（４−メチル−ピペラジン−１−イル）−フェニル］−８−（６−メトキシ−ピリジン−３−イル）−３−メチル−１，３−ジヒドロ−イミダゾ［４，５−ｃ］キノリン−２−オン；
１−［２−クロロ−４−（４−メチル−ピペラジン−１−イル）−フェニル］−８−（５−メトキシ−ピリジン−３−イル）−３−メチル−１，３−ジヒドロ−イミダゾ［４，５−ｃ］キノリン−２−オン；
１−（３−クロロ−４−ピペラジン−１−イル−フェニル）−３−メチル−８−キノキサリン−６−イル−１，３−ジヒドロ−イミダゾ［４，５−ｃ］キノリン−２−オン；
３−メチル−１−（４−ピペラジン−１−イル−３−トリフルオロメチル−フェニル）−８−キノリン−３−イル−１，３−ジヒドロ−イミダゾ［４，５−ｃ］キノリン−２−オン；
３−メチル−１−（４−ピペラジン−１−イル−３−トリフルオロメチル−フェニル）−８−ピリジン−３−イル−１，３−ジヒドロ−イミダゾ［４，５−ｃ］キノリン−２−オン；
８−（６−メトキシ−ピリジン−３−イル）−３−メチル−１−（４−ピペラジン−１−イル−３−トリフルオロメチル−フェニル）−１，３−ジヒドロ−イミダゾ［４，５−ｃ］キノリン−２−オン；
８−（５−メトキシ−ピリジン−３−イル）−３−メチル−１−（４−ピペラジン−１−イル−３−トリフルオロメチル−フェニル）−１，３−ジヒドロ−イミダゾ［４，５−ｃ］キノリン−２−オン；
３−メチル−１−（４−ピペラジン−１−イル−３−トリフルオロメチル−フェニル）−８−キノキサリン−６−イル−１，３−ジヒドロ−イミダゾ［４，５−ｃ］キノリン−２−オン；
１−［３−クロロ−４−（ｃｉｓ−３，５−ジメチル−ピペラジン−１−イル）−フェニル］−３−メチル−８−ピリジン−３−イル−１，３−ジヒドロ−イミダゾ［４，５−ｃ］キノリン−２−オン；
１−［３−クロロ−４−（ｃｉｓ−３，５−ジメチル−ピペラジン−１−イル）−フェニル］−３−メチル−８−キノリン−３−イル−１，３−ジヒドロ−イミダゾ［４，５−ｃ］キノリン−２−オン；
１−［３−クロロ−４−（４−エチル−ピペラジン−１−イル）−フェニル］−３−メチル−８−ピリジン−３−イル−１，３−ジヒドロ−イミダゾ［４，５−ｃ］キノリン−２−オン；
１−［３−クロロ−４−（４−エチル−ピペラジン−１−イル）−フェニル］−３−メチル−８−キノリン−３−イル−１，３−ジヒドロ−イミダゾ［４，５−ｃ］キノリン−２−オン；
１−［３−クロロ−４−（４−イソプロピル−ピペラジン−１−イル）−フェニル］−３−メチル−８−ピリジン−３−イル−１，３−ジヒドロ−イミダゾ［４，５−ｃ］キノリン−２−オン；
１−［３−クロロ−４−（４−イソプロピル−ピペラジン−１−イル）−フェニル］−３−メチル−８−キノリン−３−イル−１，３−ジヒドロ−イミダゾ［４，５−ｃ］キノリン−２−オン；
１−［３−クロロ−４−（４−イソプロピル−ピペラジン−１−イル）−フェニル］−３−メチル−８−キノリン−３−イル−１，３−ジヒドロ−イミダゾ［４，５−ｃ］キノリン−２−オン；
１−［３−クロロ−４−（４−イソプロピル−ピペラジン−１−イル）−フェニル］−３−メチル−８−キノリン−３−イル−１，３−ジヒドロ−イミダゾ［４，５−ｃ］キノリン−２−オン；
１−［４−（４−エチル−ピペラジン−１−イル）−３−トリフルオロメチル−フェニル］−３−メチル−８−ピリジン−３−イル−１，３−ジヒドロ−イミダゾ［４，５−ｃ］キノリン−２−オン；
１−［４−（４−エチル−ピペラジン−１−イル）−３−トリフルオロメチル−フェニル］−３−メチル−８−キノリン−３−イル−１，３−ジヒドロ−イミダゾ［４，５−ｃ］キノリン−２−オン；
１−［４−（４−エチル−ピペラジン−１−イル）−３−トリフルオロメチル−フェニル］−３−メチル−８−ピリジン−３−イル−１，３−ジヒドロ−イミダゾ［４，５−ｃ］キノリン−２−オン；
１−［４−（４−エチル−ピペラジン−１−イル）−３−トリフルオロメチル−フェニル］−３−メチル−８−キノリン−３−イル−１，３−ジヒドロ−イミダゾ［４，５−ｃ］キノリン−２−オン；
３−メチル−８−（６−ピペラジン−１−イル−ピリジン−３−イル）−１−（３−トリフルオロメチル−フェニル）−１，３−ジヒドロ−イミダゾ［４，５−ｃ］キノリン−２−オン；
８−（６−メトキシ−ピリジン−３−イル）−３−メチル−１−（３−トリフルオロメチル−フェニル）−１，３−ジヒドロ−イミダゾ［４，５−ｃ］キノリン−２−オン；
８−（６−メトキシ−ピリジン−３−イル）−３−メチル−１−（３−トリフルオロメチル−フェニル）−１，３−ジヒドロ−イミダゾ［４，５−ｃ］キノリン−２−オン；
１−（３−クロロ−４−イミダゾール−１−イル−フェニル）−３−メチル−８−ピリジン−３−イル−１，３−ジヒドロ−イミダゾ［４，５−ｃ］キノリン−２−オン；
１−（３−クロロ−４−イミダゾール−１−イル−フェニル）−３−メチル−８−キノリン−３−イル−１，３−ジヒドロ−イミダゾ［４，５−ｃ］キノリン−２−オン；
２−メチル−２−［４−（３−メチル−８−キノリン−３−イル−２−チオキソ−２，３−ジヒドロ−イミダゾ［４，５−ｃ］キノリン−１−イル）−フェニル］−プロピオニトリル；
２−メチル−２−｛４−［３−メチル−８−（２−メチル−ピリジン−４−イル）−２−オキソ−２，３−ジヒドロ−イミダゾ［４，５−ｃ］キノリン−１−イル］−フェニル｝−プロピオニトリル；
５−｛１−［４−（シアノ−ジメチル−メチル）−フェニル］−３−メチル−２−オキソ−２，３−ジヒドロ−１Ｈ−イミダゾ［４，５−ｃ］キノリン−８−イル｝−ピリジン−２−カルボニトリル；
２−［４−（４−アミノ−３−メチル−２−オキソ−８−キノリン−３−イル−２，３−ジヒドロ−イミダゾ［４，５−ｃ］キノリン−１−イル）−フェニル］−２−メチル−プロピオニトリル；
１−［４−（３−メチル−２−オキソ−８−ピリジン−３−イル−２，３−ジヒドロ−イミダゾ［４，５−ｃ］キノリン−１−イル）−フェニル］−シクロプロパンカルボニトリル；
１−［４−（３−メチル−２−オキソ−８−キノリン−３−イル−２，３−ジヒドロ−イミダゾ［４，５−ｃ］キノリン−１−イル）−フェニル］−シクロプロパンカルボニトリル；
１−｛４−［８−（６−メトキシ−ピリジン−３−イル）−３−メチル−２−オキソ−２，３−ジヒドロ−イミダゾ［４，５−ｃ］キノリン−１−イル］−フェニル｝−シクロプロパンカルボニトリル；
１−［３−クロロ−４−（４−メチル−ピペラジン−１−イル）−フェニル］−８−（６−メトキシ−ピリジン−３−イル）−３−メチル−１，３−ジヒドロ−イミダゾ［４，５−ｃ］キノリン−２−オン；
１−［３−クロロ−４−（４−メチル−ピペラジン−１−イル）−フェニル］−８−（５−メトキシ−ピリジン−３−イル）−３−メチル−１，３−ジヒドロ−イミダゾ［４，５−ｃ］キノリン−２−オン；
１−［３−クロロ−４−（４−メチル−ピペラジン−１−イル）−フェニル］−３−メチル−８−キノキサリン−６−イル−１，３−ジヒドロ−イミダゾ［４，５−ｃ］キノリン−２−オン；
１−（３−クロロ−４−ピペラジン−１−イル−フェニル）−８−（２−メトキシ−ピリミジン−５−イル）−３−メチル−１，３−ジヒドロ−イミダゾ［４，５−ｃ］キノリン−２−オン；
１−（３−クロロ−４−ピペラジン−１−イル−フェニル）−３−メチル−８−ピリミジン−５−イル−１，３−ジヒドロ−イミダゾ［４，５−ｃ］キノリン−２−オン；
１−（３−クロロ−４−ピペラジン−１−イル−フェニル）−８−（２−メトキシ−ピリミジン−５−イル）−３−メチル−１，３−ジヒドロ−イミダゾ［４，５−ｃ］キノリン−２−オン；
１−（３−クロロ−４−ピペラジン−１−イル−フェニル）−３−メチル−８−ピリミジン−５−イル−１，３−ジヒドロ−イミダゾ［４，５−ｃ］キノリン−２−オン；
１−（３−クロロ−４−ピペラジン−１−イル−フェニル）−３−メチル−８−（２−メチル−ピリジン−４−イル）−１，３−ジヒドロ−イミダゾ［４，５−ｃ］キノリン−２−オン；
１−［３−クロロ−４−（ｃｉｓ−３，５−ジメチル−ピペラジン−１−イル）−フェニル］−８−（６−メトキシ−ピリジン−３−イル）−３−メチル−１，３−ジヒドロ−イミダゾ［４，５−ｃ］キノリン−２−オン；
１−［３−クロロ−４−（ｃｉｓ−３，５−ジメチル−ピペラジン−１−イル）−フェニル］−８−（５−メトキシ−ピリジン−３−イル）−３−メチル−１，３−ジヒドロ−イミダゾ［４，５−ｃ］キノリン−２−オン；
１−［４−（ｃｉｓ−３，５−ジメチル−ピペラジン−１−イル）−３−トリフルオロメチル−フェニル］−８−（６−メトキシ−ピリジン−３−イル）−３−メチル−１，３−ジヒドロ−イミダゾ［４，５−ｃ］キノリン−２−オン；
１−［４−（ｃｉｓ−３，５−ジメチル−ピペラジン−１−イル）−３−トリフルオロメチル−フェニル］−８−（５−メトキシ−ピリジン−３−イル）−３−メチル−１，３−ジヒドロ−イミダゾ［４，５−ｃ］キノリン−２−オン；
８−（２−メトキシ−ピリミジン−５−イル）−３−メチル−１−（４−ピペラジン−１−イル−３−トリフルオロメチル−フェニル）−１，３−ジヒドロ−イミダゾ［４，５−ｃ］キノリン−２−オン；
３−メチル−１−（４−ピペラジン−１−イル−３−トリフルオロメチル−フェニル）−８−ピリミジン−５−イル−１，３−ジヒドロ−イミダゾ［４，５−ｃ］キノリン−２−オン；
５−［３−メチル−２−オキソ−１−（４−ピペラジン−１−イル−３−トリフルオロメチル−フェニル）−２，３−ジヒドロ−１Ｈ−イミダゾ［４，５−ｃ］キノリン−８−イル］−ピリジン−２−カルボニトリル；
３−メチル−８−（２−メチル−ピリジン−４−イル）−１−（４−ピペラジン−１−イル−３−トリフルオロメチル−フェニル）−１，３−ジヒドロ−イミダゾ［４，５−ｃ］キノリン−２−オン；
８−（３，４−ジメトキシ−フェニル）−３−メチル−１−（４−ピペラジン−１−イル−３−トリフルオロメチル−フェニル）−１，３−ジヒドロ−イミダゾ［４，５−ｃ］キノリン−２−オン；
３−メチル−８−ピリジン−３−イル−１−（４−［１，２，４］トリアゾール−１−イル−３−トリフルオロメチル−フェニル）−１，３−ジヒドロ−イミダゾ［４，５−ｃ］キノリン−２−オン；
３−メチル−８−キノリン−３−イル−１−（４−［１，２，４］トリアゾール−１−イル−３−トリフルオロメチル−フェニル）−１，３−ジヒドロ−イミダゾ［４，５−ｃ］キノリン−２−オン；
８−（６−メトキシ−ピリジン−３−イル）−３−メチル−１−（４−［１，２，４］トリアゾール−１−イル−３−トリフルオロメチル−フェニル）−１，３−ジヒドロ−イミダゾ［４，５−ｃ］キノリン−２−オン；
８−（５−メトキシ−ピリジン−３−イル）−３−メチル−１−（４−［１，２，４］トリアゾール−１−イル−３−トリフルオロメチル−フェニル）−１，３−ジヒドロ−イミダゾ［４，５−ｃ］キノリン−２−オン；
５−［３−メチル−２−オキソ−１−（４−［１，２，４］トリアゾール−１−イル−３−トリフルオロメチル−フェニル）−２，３−ジヒドロ−１Ｈ−イミダゾ［４，５−ｃ］キノリン−８−イル］−ピリジン−２−カルボニトリル；
８−（６−フルオロ−ピリジン−３−イル）−３−メチル−１−（４−［１，２，４］トリアゾール−１−イル−３−トリフルオロメチル−フェニル）−１，３−ジヒドロ−イミダゾ［４，５−ｃ］キノリン−２−オン；
８−（２，６−ジメトキシ−ピリジン−３−イル）−３−メチル−１−（４−［１，２，４］トリアゾール−１−イル−３−トリフルオロメチル−フェニル）−１，３−ジヒドロ−イミダゾ［４，５−ｃ］キノリン−２−オン；
３−メチル−８−ピリミジン−５−イル−１−（４−［１，２，４］トリアゾール−１−イル−３−トリフルオロメチル−フェニル）−１，３−ジヒドロ−イミダゾ［４，５−ｃ］キノリン−２−オン；
８−（２−メトキシ−ピリミジン−５−イル）−３−メチル−１−（４−［１，２，４］トリアゾール−１−イル−３−トリフルオロメチル−フェニル）−１，３−ジヒドロ−イミダゾ［４，５−ｃ］キノリン−２−オン；
８−（２，４−ジメトキシ−ピリミジン−５−イル）−３−メチル−１−（４−［１，２，４］トリアゾール−１−イル−３−トリフルオロメチル−フェニル）−１，３−ジヒドロ−イミダゾ［４，５−ｃ］キノリン−２−オン；
３−メチル−１−（４−ピラゾール−１−イル−３−トリフルオロメチル−フェニル）−８−ピリジン−３−イル−１，３−ジヒドロ−イミダゾ［４，５−ｃ］キノリン−２−オン；
３−メチル−１−（４−ピラゾール−１−イル−３−トリフルオロメチル−フェニル）−８−キノリン−３−イル−１，３−ジヒドロ−イミダゾ［４，５−ｃ］キノリン−２−オン；
８−（６−メトキシ−ピリジン−３−イル）−３−メチル−１−（４−ピラゾール−１−イル−３−トリフルオロメチル−フェニル）−１，３−ジヒドロ−イミダゾ［４，５−ｃ］キノリン−２−オン；
８−（５−メトキシ−ピリジン−３−イル）−３−メチル−１−（４−ピラゾール−１−イル−３−トリフルオロメチル−フェニル）−１，３−ジヒドロ−イミダゾ［４，５−ｃ］キノリン−２−オン；
１−（３−クロロ−４−［１，２，４］トリアゾール−１−イル−フェニル）−３−メチル−８−ピリジン−３−イル−１，３−ジヒドロ−イミダゾ［４，５−ｃ］キノリン−２−オン；
１−（３−クロロ−４−［１，２，４］トリアゾール−１−イル−フェニル）−３−メチル−８−キノリン−３−イル−１，３−ジヒドロ−イミダゾ［４，５−ｃ］キノリン−２−オン；
１−（４−イミダゾール−１−イル−３−トリフルオロメチル−フェニル）−３−メチル−８−ピリジン−３−イル−１，３−ジヒドロ−イミダゾ［４，５−ｃ］キノリン−２−オン；
１−（４−イミダゾール−１−イル−３−トリフルオロメチル−フェニル）−３−メチル−８−キノリン−３−イル−１，３−ジヒドロ−イミダゾ［４，５−ｃ］キノリン−２−オン；
１−（４−イミダゾール−１−イル−３−トリフルオロメチル−フェニル）−８−（６−メトキシ−ピリジン−３−イル）−３−メチル−１，３−ジヒドロ−イミダゾ［４，５−ｃ］キノリン−２−オン；
１−（４−イミダゾール−１−イル−３−トリフルオロメチル−フェニル）−８−（５−メトキシ−ピリジン−３−イル）−３−メチル−１，３−ジヒドロ−イミダゾ［４，５−ｃ］キノリン−２−オン；
３−メチル−８−ピリジン−３−イル−１−（４−［１，２，４］トリアゾール−１−イルメチル−フェニル）−１，３−ジヒドロ−イミダゾ［４，５−ｃ］キノリン−２−オン；
３−メチル−８−キノリン−３−イル−１−（４−［１，２，４］トリアゾール−１−イルメチル−フェニル）−１，３−ジヒドロ−イミダゾ［４，５−ｃ］キノリン−２−オン；
１−（４−イミダゾール−１−イルメチル−フェニル）−３−メチル−８−ピリジン−３−イル−１，３−ジヒドロ−イミダゾ［４，５−ｃ］キノリン−２−オン；および
１−（４−イミダゾール−１−イルメチル−フェニル）−３−メチル−８−キノリン−３−イル−１，３−ジヒドロ−イミダゾ［４，５−ｃ］キノリン−２−オン；
またはその互変異性体、または薬学的に許容される塩、またはその水和物もしくは溶媒和物である。
【００５３】
本発明の式（Ｉ）の非常に好ましい化合物は、２−メチル−２−［４−（３−メチル−２−オキソ−８−キノリン−３−イル−２，３−ジヒドロ−イミダゾ［４，５−ｃ］キノリン−１−イル）−フェニル］−プロピオニトリル（本明細書では「化合物Ａ」と呼ばれる）およびそのモノトシル酸塩である。２−メチル−２−［４−（３−メチル−２−オキソ−８−キノリン−３−イル−２，３−ジヒドロ−イミダゾ［４，５−ｃ］キノリン−１−イル）−フェニル］−プロピオニトリルおよびそのモノトシル酸塩の合成は、例えばＷＯ２００６／１２２８０６において、それぞれ実施例７および１５２−３として記載されている。
【００５４】
本発明の式（Ｉ）の別の非常に好ましい化合物は、８−（６−メトキシ−ピリジン−３−イル）−３−メチル−１−（４−ピペラジン−１−イル−３−トリフルオロメチル−フェニル）−１，３−ジヒドロ−イミダゾ［４，５−ｃ］キノリン−２−オン（本明細書では「化合物Ｂ」と呼ばれる）である。８−（６−メトキシ−ピリジン−３−イル）−３−メチル−１−（４−ピペラジン−１−イル−３−トリフルオロメチル−フェニル）−１，３−ジヒドロ−イミダゾ［４，５−ｃ］キノリン−２−オンの合成は、例えばＷＯ２００６／１２２８０６において、実施例８６として記載されている。
【００５５】
本明細書に記載の各実施形態では、本発明の組合せは、増殖性疾患、より特定すればｍＴＯＲキナーゼ依存性増殖性疾患を治療するために、１日用量当たり約１ｎＭから約１００ｎＭ、または約９．５×１０−８から約９．５×１０−６モル／ｋｇ、または約３〜約３１５ｍｇ／対象の範囲の量の、式（Ｉ）の化合物、またはその互変異性体、または薬学的に許容される塩、またはその水和物もしくは溶媒和物、好ましくは化合物Ａを含む。本発明の組合せは、１日用量当たり約１０から３１５ｍｇ／対象、１００から３１５ｍｇ／対象、または２００から３１５ｍｇ／対象の範囲の量の式（Ｉ）の化合物を含むことができる。
【００５６】
したがって、式（Ｉ）の化合物、またはその互変異性体、または薬学的に許容される塩、またはその水和物もしくは溶媒和物、好ましくは化合物Ａの、それを必要としている対象における用量は、１日用量当たり約１ｎＭから約１００ｎＭ、１日用量当たり約５ｎＭから約７８ｎＭ、１日用量当たり約８ｎＭから約６２ｎＭ、または１日用量当たり約１６ｎＭから約５０ｎＭの用量に相当する。
【００５７】
一実施形態では、式（Ｉ）の化合物、またはその互変異性体、または薬学的に許容される塩、またはその水和物もしくは溶媒和物、好ましくは化合物Ａの量は、１日用量当たり約９．５×１０−８モル／ｋｇから約９．５×１０−６モル／ｋｇ、約４．８×１０−７モル／ｋｇから約７．４×１０−６モル／ｋｇ、約７．６×１０−７モル／ｋｇから約５．９×１０−６モル／ｋｇ、または約１．５×１０−６モル／ｋｇから約４．７×１０−６モル／ｋｇであり得る。
【００５８】
代替の一実施形態では、式（Ｉ）の化合物、またはその互変異性体、または薬学的に許容される塩、またはその水和物もしくは溶媒和物、好ましくは化合物Ａの、それを必要としている対象のための量は、１日用量当たり約３ｍｇ／対象から約３１５ｍｇ／対象、１日用量当たり約１５ｍｇ／対象から約２４５ｍｇ／対象、１日用量当たり約２５ｍｇ／対象から約１９５ｍｇ／対象、または１日用量当たり約５０ｍｇ／対象から約１５７ｍｇ／対象であり得る。それを必要としている対象は、好ましくはヒトである。
【００５９】
代替の一実施形態では、式（Ｉ）の化合物、またはその互変異性体、または薬学的に許容される塩、またはその水和物もしくは溶媒和物、好ましくは化合物Ａの、それを必要としている対象（対象は、約７０ｋｇであると推定される）のための量は、１日用量当たり約１０から３１５ｍｇ／対象、１００から３１５ｍｇ／対象、または２００から３１５ｍｇ／対象であり得る。
【００６０】
本発明の組合せは、ｍＴＯＲＣ１複合体のアロステリック結合部位との結合を介して、ｍＴＯＲキナーゼの活性／機能を標的にし、低減し、または阻害する化合物を含む。かかる化合物は、「アロステリックｍＴＯＲ阻害剤化合物」と呼ばれる。適切なアロステリックｍＴＯＲ阻害剤には、例えば、以下が含まれる。
【００６１】
Ｉ．ストレプトマイセス・ハイグロスコピカス（Streptomyces hygroscopicus）によって産生される免疫抑制ラクタムマクロライドであるラパマイシン。
【００６２】
ＩＩ．ラパマイシン誘導体、例えば、
ａ．置換ラパマイシン、例えば、すべて参照によって本明細書に組み込まれるＵＳ５，２５８，３８９、ＷＯ９４／０９０１０、ＷＯ９２／０５１７９、ＵＳ５，１１８，６７７、ＵＳ５，１１８，６７８、ＵＳ５，１００，８８３、ＵＳ５，１５１，４１３、ＵＳ５，１２０，８４２、ＷＯ９３／１１１３０、ＷＯ９４／０２１３６、ＷＯ９４／０２４８５およびＷＯ９５／１４０２３に記載の、例えば４０−Ｏ置換−ラパマイシン。
ｂ．例えば、内容が参照によって本明細書に組み込まれるＷＯ９４／０２１３６、ＷＯ９５／１６６９１およびＷＯ９６／４１８０７に開示されている１６−Ｏ−置換ラパマイシン。
ｃ．例えば、参照によって本明細書に組み込まれるＷＯ９６／４１８０７およびＵＳ５，２５６，７９０に記載の３２−水素化ラパマイシン。
ｄ．好ましいラパマイシン誘導体は、式（ＩＩ）の化合物
【００６３】
【化４】
2013538876.tif 000005
［式中、
Ｒ１は、ＣＨ３またはＣ３〜６アルキニルであり、
Ｒ２は、Ｈ、または−ＣＨ２−ＣＨ２−ＯＨ、３−ヒドロキシ−２−（ヒドロキシメチル）−２−メチル−プロパノイルもしくはテトラゾリルであり、Ｘは、＝Ｏ、（Ｈ，Ｈ）または（Ｈ，ＯＨ）であり、
但し、Ｘが＝Ｏであり、Ｒ１がＣＨ３である場合、Ｒ２はＨ以外である］
またはそのプロドラッグ（Ｒ２が−ＣＨ２−ＣＨ２−ＯＨである場合）、例えばその生理的加水分解性エーテルである。
【００６４】
式（ＩＩ）の化合物は、例えば、参照によって本明細書に組み込まれるＷＯ９４／０９０１０、ＷＯ９５／１６６９１またはＷＯ９６／４１８０７に開示されている。式（ＩＩ）の化合物は、これらの参考文献に開示されている通り調製することができ、またはこれらに記載の手順に類似の手順によって調製することができる。
【００６５】
好ましい化合物は、３２−デオキソラパマイシン、１６−ペンタ−２−イニルオキシ−３２−デオキソラパマイシン、１６−ペンタ−２−イニルオキシ−３２（Ｓ）−ジヒドロ−ラパマイシン、１６−ペンタ−２−イニルオキシ−３２（Ｓ）−ジヒドロ−４０−Ｏ−（２−ヒドロキシエチル）−ラパマイシンであり、より好ましくは、ＷＯ９４／０９０１０の実施例８に開示されている４０−Ｏ−（２−ヒドロキシエチル）−ラパマイシンである。
【００６６】
特に好ましい式（ＩＩ）のラパマイシン誘導体は、４０−Ｏ−（２−ヒドロキシエチル）−ラパマイシン、４０−［３−ヒドロキシ−２−（ヒドロキシメチル）−２−メチルプロパノエート］−ラパマイシン（ＣＣＩ７７９とも呼ばれる）、４０−エピ−（テトラゾリル）−ラパマイシン（ＡＢＴ５７８とも呼ばれる）、３２−デオキソラパマイシン、１６−ペンタ−２−イニルオキシ−３２（Ｓ）−ジヒドロラパマイシン、またはＴＡＦＡ−９３である。
【００６７】
ｅ．ラパマイシン誘導体はまた、例えば、ＷＯ９８／０２４４１およびＷＯ０１／１４３８７、例えばＡＰ２３５７３、ＡＰ２３４６４またはＡＰ２３８４１に開示されているいわゆるラパログを含む。
【００６８】
ラパマイシンおよびその誘導体は、観測される活性に基づいて、例えばＷＯ９４／０９０１０、ＷＯ９５／１６６９１またはＷＯ９６／４１８０７に記載の、例えばマクロフィリン（macrophilin）−１２（ＦＫ−５０６結合タンパク質またはＦＫＢＰ−１２としても公知）との結合に基づいて、例えば免疫抑制剤として、例えば急性の同種移植拒絶反応の治療において有用であることが見出されている。
【００６９】
ＩＩＩ．ＦＫ５０６のエチル類似体であるアスコマイシン。
【００７０】
ＩＶ．酵素のＡＴＰ結合間隙との直接結合によって、ｍＴＯＲのキナーゼ活性を阻害する化合物であるＡＺＤ０８０５５およびＯＳＩ１２７。
【００７１】
本発明の一実施形態では、本発明の組合せは、シロリムス（ラパマイシン、ＡＹ−２２９８９、Ｗｙｅｔｈ）、エベロリムス（ＲＡＤ００１、Ｎｏｖａｒｔｉｓ））、４０−［３−ヒドロキシ−２−（ヒドロキシメチル）−２−メチルプロパノエート］−ラパマイシン（テムシロリムスまたはＣＣＩ−７７９（Ｗｙｅｔｈ）とも呼ばれる）、Ｄｅｆｏｒｏｌｉｍｕｓ（ＡＰ−２３５７３／ＭＫ−８６６９、Ａｒｉａｄ／Ｍｅｒｃｋ  ＆  Ｃｏ）または薬学的に許容されるその塩からなる群から選択される少なくとも１つのアロステリックｍＴＯＲ阻害剤化合物を含む。
【００７２】
本発明の好ましい実施形態では、本発明の組合せは、アロステリックｍＴＯＲ阻害剤化合物であるエベロリムスから構成される。エベロリムス（本明細書では「ＲＡＤ００１」または「ＰＫＦ−２２２−６６６６−ＮＸ−２」と呼ばれる）は、化学名（１Ｒ，９Ｓ，１２Ｓ，１５Ｒ，１６Ｅ，１８Ｒ，１９Ｒ，２１Ｒ，２３Ｓ，２４Ｅ，２６Ｅ，２８Ｅ，３０Ｓ，３２Ｓ、３５Ｒ）−１，１８−ジヒドロキシ−１２−｛（１Ｒ）−２−［（１Ｓ，３Ｒ，４Ｒ）−４−（２−ヒドロキシエトキシ）−３−メトキシシクロヘキシル］−１−メチルエチル｝−１９，３０−ジメトキシ−１５，１７，２１，２３，２９，３５−ヘキサメチル−１１，３６−ジオキサ−４−アザ−トリシクロ［３０．３．１．０４，９］ヘキサトリアコンタ−１６，２４、２６，２８−テトラエン−２，３，１０，１４，２０−ペンタオンまたは４０−Ｏ−（２−ヒドロキシエチル）−ラパマイシンを有する。エベロリムスおよび類似体は、全体が参照によって本明細書に組み込まれる米国特許第５，６６５，７７２号、カラム１、３９行からカラム３、１行に記載されている。エベロリムスは、この参考文献に開示されている通り調製することができ、またはこれに記載の手順に類似の手順によって調製することができる。
【００７３】
コード番号、一般名または商標によって識別される活性剤の構造は、標準概論「Ｔｈｅ  Ｍｅｒｃｋ  Ｉｎｄｅｘ」の実際版から、またはデータベース、例えば国際特許文書（例えば、ＩＭＳ  Ｗｏｒｌｄ  Ｐｕｂｌｉｃａｔｉｏｎｓ）から得ることができる。その対応する内容は、参照によって本明細書に組み込まれる。
【００７４】
同様に、それらの文書に開示されている、薬学的に許容されるその塩、対応するラセミ体、ジアステレオ異性体、鏡像異性体、互変異性体、ならびに存在する場合には、上記開示の化合物の対応する結晶変態、例えば溶媒和物、水和物および多形も含まれる。本発明の組合せにおいて活性成分として使用される化合物は、引用した文書に記載の通り、それぞれ調製され、投与され得る。本発明の範囲には、前述の３種類以上の別個の活性成分の組合せも含まれ、すなわち、本発明の範囲の薬学的な組合せには、３種類またはそれ以上の活性成分が含まれ得る。
【００７５】
驚くべきことには、低用量の式（Ｉ）の化合物が、アロステリックｍＴＯＲ阻害剤と組み合わされる場合、式（Ｉ）の化合物とアロステリックｍＴＯＲ阻害剤、特にＲＡＤ００１との間に、予期しない相乗的相互作用が達成されることが発見された。本発明の組合せは、１日用量当たり１０ｍｇ以下／対象（例えば、８ｍｇ／対象、５ｍｇ／対象、２．５ｍｇ／対象、１ｍｇ／対象）を含む用量のエベロリムス（ＲＡＤ００１）を含むことができる。
【００７６】
本発明の組合せは、増殖性疾患を治療するために、１日用量当たり約０．００１ｎＭから約１７．８ｎＭ、または約８．５×１０−１２モル／ｋｇから約１．５×１０−７モル／ｋｇ、または約０．０００５６ｍｇ／対象から約１０ｍｇ／対象である用量のアロステリックｍＴＯＲ阻害剤化合物、特にエベロリムス（ＲＡＤ００１）を含むことができる。
【００７７】
したがって、アロステリックｍＴＯＲ阻害剤化合物、特にエベロリムス（ＲＡＤ００１）の、それを必要としている対象に投与される用量は、１日用量当たり０．００１ｎＭから約１７．８ｎＭ、１日用量当たり約０．００１ｎＭから約１０ｎＭ、または１日用量当たり約０．００１ｎＭから約１ｎＭの用量に相当する。最も好ましくは、アロステリックｍＴＯＲ阻害剤化合物の用量は、１日用量当たり約０．００１ｎＭから約１ｎＭである。
【００７８】
一実施形態では、アロステリックｍＴＯＲ阻害剤化合物、特にエベロリムス（ＲＡＤ００１）の用量は、１日用量当たり約８．５×１０−１２モル／ｋｇから約１．５×１０−７モル／ｋｇ、１日用量当たり約８．５×１０−１２モル／ｋｇから約８．５×１０−８モル／ｋｇ、または１日用量当たり約８．５×１０−１２モル／ｋｇから約８．５×１０−９モル／ｋｇであり得る。最も好ましくは、アロステリックｍＴＯＲ阻害剤化合物の用量は、１日用量当たり約８．５×１０−１２モル／ｋｇから約８．５×１０−９モル／ｋｇである。
【００７９】
代替の一実施形態では、アロステリックｍＴＯＲ阻害剤化合物、特にエベロリムス（ＲＡＤ００１）の、それを必要としている対象に投与される用量は、１日用量当たり約０．０００５６ｍｇ／対象から約１０ｍｇ／対象、１日用量当たり約０．０００５６ｍｇ／対象から約５．６ｍｇ／対象、または１日用量当たり約０．０００５６ｍｇ／対象から約０．５６ｍｇ／対象であり得る。最も好ましくは、アロステリックｍＴＯＲ阻害剤化合物の用量は、１日用量当たり約０．０００５６ｍｇ／対象から約０．５６ｍｇ／対象である。それを必要としている対象は、好ましくはヒトである。
【００８０】
好ましい一実施形態では、本発明の組合せは、（ａ）化合物Ａまたはそのモノトシル酸塩と、（ｂ）アロステリックｍＴＯＲ阻害剤化合物であるエベロリムス（ＲＡＤ００１）とを含む、ｍＴＯＲキナーゼ依存性増殖性疾患を治療するための併用医薬であって、化合物Ａが、１日用量当たり約１ｎＭから約１００ｎＭの間、または約９．５×１０−８から約９．５×１０−６モル／ｋｇの間、または約３〜約３１５ｍｇ／対象の量で提供される、併用医薬に関する。さらなる一実施形態では、アロステリックｍＴＯＲ阻害剤化合物は、１日用量当たり約０．００１ｎＭから約１７．８ｎＭ、または約８．５×１０−１２モル／ｋｇから約１．５×１０−７モル／ｋｇ、または約０．０００５６ｍｇ／対象から約１０ｍｇ／対象の治療上有効な量で提供される。
【００８１】
さらなる一実施形態では、化合物Ａの用量は、１日用量当たり約１ｎＭから約１００ｎＭ、１日用量当たり約５ｎＭから約７８ｎＭ、１日用量当たり約８ｎＭから約６２ｎＭ、または１日用量当たり約１６ｎＭから約５０ｎＭの用量に相当する。
【００８２】
さらなる一実施形態では、化合物Ａの用量は、１日用量当たり約９．５×１０−８モル／ｋｇから約９．５×１０−６モル／ｋｇ、約４．８×１０−７モル／ｋｇから約７．４×１０−６モル／ｋｇ、約７．６×１０−７モル／ｋｇから約５．９×１０−６モル／ｋｇ、または約１．５×１０−６モル／ｋｇから約４．７×１０−６モル／ｋｇであり得る。
【００８３】
代替の一実施形態では、化合物Ａの用量は、１日用量当たり約３ｍｇ／対象から約３１５ｍｇ／対象、１日用量当たり約１５ｍｇ／対象から約２４５ｍｇ／対象、１日用量当たり約２５ｍｇ／対象から約１９５ｍｇ／対象、または１日用量当たり約５０ｍｇ／対象から約１５７ｍｇ／対象であり得る。それを必要としている対象は、好ましくはヒトである。
【００８４】
代替の一実施形態では、化合物Ａの用量は、１日用量当たり約１０〜３１５ｍｇ／対象、１００〜３１５ｍｇ／対象、または２００から３１５ｍｇ／対象であり得る。
【００８５】
さらなる一実施形態では、アロステリックｍＴＯＲ阻害剤化合物であるエベロリムス（ＲＡＤ００１）の、それを必要としている対象に投与される用量は、１日用量当たり約０．００１ｎＭから約約１７．８ｎＭ、１日用量当たり約０．００１ｎＭから約１０ｎＭ、または１日用量当たり約０．００１ｎＭから約１ｎＭの用量に相当する。最も好ましくは、アロステリックｍＴＯＲ阻害剤化合物の用量は、１日用量当たり約０．００１ｎＭから約１ｎＭである。
【００８６】
一実施形態では、アロステリックｍＴＯＲ阻害剤化合物であるエベロリムス（ＲＡＤ００１）の用量は、１日用量当たり約８．５×１０−１２モル／ｋｇから約１．５×１０−７モル／ｋｇ、１日用量当たり約８．５×１０−１２モル／ｋｇから約８．５×１０−８モル／ｋｇ、または１日用量当たり約８．５×１０−１２モル／ｋｇから約８．５×１０−９モル／ｋｇであり得る。最も好ましくは、アロステリックｍＴＯＲ阻害剤化合物の用量は、１日用量当たり約８．５×１０−１２モル／ｋｇから約８．５×１０−９モル／ｋｇである。
【００８７】
代替の一実施形態では、アロステリックｍＴＯＲ阻害剤化合物であるエベロリムス（ＲＡＤ００１）の、それを必要としている対象（対象は、約７０ｋｇであると推定される）における用量は、１日用量当たり約０．０００５６ｍｇ／対象から約１０ｍｇ／対象、１日用量当たり約０．０００５６ｍｇ／対象から約５．６ｍｇ／対象、または１日用量当たり約０．０００５６ｍｇ／対象から約０．５６ｍｇ／対象であり得る。最も好ましくは、アロステリックｍＴＯＲ阻害剤化合物の用量は、１日用量当たり約０．０００５６ｍｇ／対象から約０．５６ｍｇ／対象である。それを必要としている対象は、好ましくはヒトである。
【００８８】
本発明によれば、本発明の組合せは、増殖性疾患、特にｍＴＯＲキナーゼ依存性増殖性疾患を治療するために使用することができる。
【００８９】
「ｍＴＯＲキナーゼ依存性増殖性疾患」には、それに限定されるものではないが、病理学的なｍＴＯＲシグナル伝達カスケードに関連するがんおよび他の関連悪性腫瘍を含む増殖性疾患が含まれる。病理学的なｍＴＯＲシグナル伝達カスケードに関連するがんの非限定的な一覧には、非小細胞肺がん、子宮内膜がん、多発性骨髄腫、非ホジキンＢ細胞リンパ腫、結腸直腸がん、乳がん、腎細胞癌、胃の腫瘍、神経内分泌腫瘍、リンパ腫および前立腺がんが含まれる。
【００９０】
好ましいｍＴＯＲキナーゼ依存性増殖性疾患は、乳癌、神経膠芽腫、非小細胞肺がん、子宮内膜がん、多発性骨髄腫、および非ホジキンＢ細胞リンパ腫である。
【００９１】
増殖性疾患のさらなる例は、例えば、良性もしくは悪性腫瘍、脳腫瘍、腎臓癌、肝臓癌、副腎癌、膀胱癌、胃癌、卵巣癌、結腸癌、直腸癌、膵臓癌、肺癌（例えば、非小細胞肺がん）、子宮内膜癌、非ホジキンＢ細胞リンパ腫、膣癌もしくは甲状腺癌、肉腫、神経膠芽腫、多発性骨髄腫、または胃もしくは消化管がん、特に結腸癌もしくは結腸直腸腺腫、または頭頸部の腫瘍、表皮の過剰増殖、乾癬、前立腺過形成、神経内分泌、新生物、上皮型新生物、リンパ腫、乳癌、または白血病である。
【００９２】
一実施形態では、本発明は、（ａ）式（Ｉ）の化合物、またはその互変異性体、または薬学的に許容される塩、またはその水和物もしくは溶媒和物と、（ｂ）少なくとも１つのアロステリックｍＴＯＲ阻害剤化合物と、任意選択により少なくとも１つの薬学的に許容される担体とを含む、増殖性疾患、特にｍＴＯＲキナーゼ依存性増殖性疾患を治療または予防するための併用医薬の使用であって、式（Ｉ）の化合物が、それを必要としている対象に、１日用量当たり約１ｎＭから約１００ｎＭの間、または約９．５×１０−８から約９．５×１０−６モル／ｋｇの間、または約３〜約３１５ｍｇ／対象の量で投与される、使用に関する。
【００９３】
別の実施形態では、本発明は、（ａ）式（Ｉ）の化合物、またはその互変異性体、または薬学的に許容される塩、またはその水和物もしくは溶媒和物と、（ｂ）少なくとも１つのアロステリックｍＴＯＲ阻害剤化合物と、任意選択により少なくとも１つの薬学的に許容される担体とを含む、増殖性疾患、特にｍＴＯＲキナーゼ依存性増殖性疾患を治療または予防する医薬を製造するための、併用医薬の使用であって、式（Ｉ）の化合物が、それを必要としている対象に、１日用量当たり約１ｎＭから約１００ｎＭの間、または約９．５×１０−８から約９．５×１０−６モル／ｋｇの間、または約３〜約３１５ｍｇ／対象の量で投与される、使用に関する。
【００９４】
別の態様では、本発明は、（ａ）治療有効量の式（Ｉ）の化合物、またはその互変異性体、または薬学的に許容される塩、またはその水和物もしくは溶媒和物と、（ｂ）治療有効量の少なくとも１つのアロステリックｍＴＯＲ阻害剤化合物と、任意選択により少なくとも１つの薬学的に許容される担体とをそれを必要としている対象に投与するステップを含む、増殖性疾患を治療または予防する方法であって、式（Ｉ）の化合物が、１日用量当たり約１ｎＭから約１００ｎＭの間、または約９．５×１０−８から約９．５×１０−６モル／ｋｇの間、または約３〜約３１５ｍｇ／対象の量で投与される、方法を提供する。
【００９５】
別の態様では、本発明は、（ａ）式（Ｉ）の化合物、またはその互変異性体、または薬学的に許容される塩、またはその水和物もしくは溶媒和物と、（ｂ）ＲＡＤラパマイシン（シロリムス）、ならびにエベロリムス（またはＲＡＤ００１）、ＣＣＩ−７７９およびＤｅｆｏｒｏｌｉｍｕｓ（ＡＰ−２３５７３／ＭＫ−８６６９）を含むその誘導体／類似体、または薬学的に許容されるそれらの塩からなる群から選択される少なくとも１つのアロステリックｍＴＯＲ阻害剤化合物と、任意選択により少なくとも１つの薬学的に許容される担体とを含む、増殖性疾患を治療するために同時に、別個に、または逐次的に使用するための組合せであって、式（Ｉ）の化合物が、それを必要としている対象に、１日用量当たり約１ｎＭから約１００ｎＭの間、または約９．５×１０−８から約９．５×１０−６モル／ｋｇの間、または約３〜約３１５ｍｇ／対象の量で投与される、組合せを提供する。
【００９６】
さらなる一態様では、本発明は、（ａ）式（Ｉ）の化合物、またはその互変異性体、または薬学的に許容される塩、またはその水和物もしくは溶媒和物と、（ｂ）少なくとも１つのアロステリックｍＴＯＲ阻害剤化合物と、任意選択により少なくとも１つの薬学的に許容される担体とを、それを必要としている対象に投与することによって、ｍＴＯＲキナーゼ依存性増殖性疾患の治療効率を改善する方法であって、式（Ｉ）の化合物が、それを必要としている対象に、１日用量当たり約１ｎＭから約１００ｎＭの間、または約９．５×１０−８から約９．５×１０−６モル／ｋｇの間、または約３〜約３１５ｍｇ／対象の量で投与される、方法を提供する。
【００９７】
さらなる一態様では、本発明は、（ａ）約０．３１％から約３１％、約１．６％から約２４．４％、約２．５％から約１９．４％、または約５．０％から約１５．６％の最大耐性量（ＭＴＤ）の前述の式（Ｉ）の化合物、またはその互変異性体、または薬学的に許容される塩、またはその水和物もしくは溶媒和物と、（ｂ）約０．００６％から１００％、約０．００６％から約５６．３％、約０．００６％から約５．６％のＭＴＤの少なくとも１つのアロステリックｍＴＯＲ阻害剤化合物とを含む、ヒトに投与するための併用医薬を提供する。好ましい一実施形態では、式（Ｉ）の化合物は、約３０％のＭＴＤで投与される化合物Ａであり、アロステリックｍＴＯＲ阻害剤化合物は、約５．６％のＭＴＤで投与される。最も好ましい実施形態では、式（Ｉ）の化合物は、約３０％のＭＴＤで投与される化合物Ａであり、アロステリックｍＴＯＲ阻害剤化合物は、５．６％のＭＴＤで投与されるエベロリムス（ＲＡＤ００１）である。ＭＴＤは、許容されない副作用なしに投与され得る医薬の最大用量に相当する。ＭＴＤの決定は、当技術分野で知られている。例えばＭＴＤは、適切には、用量制限毒性を特徴付けるための用量漸増、および生物学的に活性な耐性量レベルの決定を含むＩ相研究において決定することができる。
【００９８】
本発明の一態様では、本発明は、（ａ）式（Ｉ）の化合物と、（ｂ）少なくとも１つのアロステリックｍＴＯＲ阻害剤化合物と、任意選択により少なくとも１つの薬学的に許容される担体とを含む、特にラパマイシン（ｍＴＯＲ）キナーゼ依存性増殖性疾患の哺乳動物標的を治療するために同時に、別個に、または逐次的に使用するための、組み合わせた調製物または医薬組成物などの併用医薬であって、式（Ｉ）の化合物が、それを必要としている対象に、１日用量当たり約１ｎＭから約１００ｎＭの間、または約９．５×１０−８から約９．５×１０−６モル／ｋｇの間、または約３〜約３１５ｍｇ／対象の量で投与される、併用医薬に関する。
【００９９】
好ましい一実施形態では、式（Ｉ）の化合物は、２−メチル−２−［４−（３−メチル−２−オキソ−８−キノリン−３−イル−２，３−ジヒドロ−イミダゾ［４，５−ｃ］キノリン−１−イル）−フェニル］−プロピオニトリル（化合物Ａ）またはそのモノトシル酸塩である。
【０１００】
さらなる一実施形態では、式（Ｉ）の化合物は、８−（６−メトキシ−ピリジン−３−イル）−３−メチル−１−（４−ピペラジン−１−イル−３−トリフルオロメチル−フェニル）−１，３−ジヒドロ−イミダゾ［４，５−ｃ］キノリン−２−オン（化合物Ｂ）である。
【０１０１】
本発明のさらなる一実施形態では、アロステリックｍＴＯＲ阻害剤化合物は、ＲＡＤラパマイシン（シロリムス）、ならびにエベロリムス（またはＲＡＤ００１）、ＣＣＩ−７７９およびＤｅｆｏｒｏｌｉｍｕｓ（ＡＰ−２３５７３／ＭＫ−８６６９）を含むその誘導体／類似体、または薬学的に許容されるその塩からなる群から選択される。特に好ましい本発明のアロステリックｍＴＯＲ阻害剤化合物は、エベロリムスである。
【０１０２】
本発明の好ましい一実施形態では、式（Ｉ）の化合物は、２−メチル−２−［４−（３−メチル−２−オキソ−８−キノリン−３−イル−２，３−ジヒドロ−イミダゾ［４，５−ｃ］キノリン−１−イル）−フェニル］−プロピオニトリル（化合物Ａ）またはそのモノトシル酸塩であり、アロステリックｍＴＯＲ阻害剤化合物は、エベロリムス（ＲＡＤ００１）である。
【０１０３】
本発明の医薬組成物または組合せは、臨床研究で試験することができる。適切な臨床研究は、増殖性疾患の患者における、例えば、非盲検用量漸増研究であり得る。かかる研究により、特に、本発明の組合せの活性成分の相乗作用が証明される。増殖性疾患に対する有益な効果、例えば相乗作用は、当業者にそれ自体知られているこれらの研究の結果によって、直接決定することができる。かかる研究は、特に、活性成分および本発明の組合せを使用して単剤療法の効果を比較するのに適している場合がある。各患者は、１日１回または間欠的に、薬剤（ａ）の用量を投与され得る。治療効率は、かかる研究において、例えば１２、１８または２４週間後に、症候スコア評価によって６週間毎に決定することができる。
【０１０４】
本発明の併用医薬の投与は、例えば、症候の緩和、症候の進行の遅延、または症候の阻害に関して有益な効果、例えば相乗的な治療効果をもたらし得るだけでなく、本発明の組合せにおいて使用される薬学的に活性な成分の１種だけを適用する単剤療法と比較して、さらなる驚くべき有益な効果、例えば副作用がほとんどないこと、生活の質の改善、または罹患率の低下をもたらすこともできる。
【０１０５】
本発明の一目的は、ｍＴＯＲキナーゼ依存性増殖性疾患を標的にするか、または予防するのに、共同で治療上有効となり得る量の本発明の組合せを含む医薬組成物を提供することである。この組成物では、薬剤（ａ）および薬剤（ｂ）は、組み合わせた１つの単位剤形として、または２つの別個の単位剤形として一緒に、順々に、または別個に投与することができる。単位剤形は、固定された組合せであってもよい。
【０１０６】
組合せパートナー（ａ）および組合せパートナー（ｂ）を別個に投与するための、または固定された組合せとして投与するための医薬組成物、すなわち本発明の少なくとも２種類の組合せパートナー（ａ）および（ｂ）を含む単一の製剤組成物（galenical composition）は、本発明に従って、それ自体知られている方式で調製することができ、ヒトを含む哺乳動物（温血動物）への経口または直腸などの経腸投与、および非経口投与に適した組成物であり、この組成物は、ある量の、例えば先に示した少なくとも１つの薬理学的に活性な組合せパートナーだけを含み、またはこのパートナーを、特に経腸もしくは非経口適用に適した１つもしくは複数の薬学的に許容される担体もしくは賦形剤と組み合わせて含む。
【０１０７】
併用療法のための、経腸または非経口投与用の医薬調製物は、例えば、糖衣錠、錠剤、カプセル剤もしくは坐剤、またはアンプル剤などの、単位剤形の調製物である。これらの調製物は、別段示されない限り、それ自体知られている方式で、例えば従来の混合法、造粒法、糖類コーティング法、溶解法または凍結乾燥法を用いて調製される。必要な有効量は、複数の投与単位の投与によって達成され得るので、各剤形の個々の用量に含有されている組合せパートナーの単位含量は、それ自体で有効量を構成する必要がないことを理解されよう。
【０１０８】
経口投与形態用の組成物の調製では、任意の一般的な薬学的に許容される担体または添加剤を、組成物の成分に添加することができ、この組成物は、固体であっても液体であってもよい。固体形態の調製物は、例えば、散剤、カプセル剤および錠剤を含む。薬学的に許容される担体の例には、水、グリコール、油、アルコール、香味剤、保存剤、着色剤；または経口固体調製物の場合には、デンプン、糖類、微結晶性セルロース、賦形剤、造粒剤、滑沢剤、結合剤、崩壊剤などの担体が含まれ、液体調製物よりも、固体経口調製物の方が好ましい。錠剤およびカプセル剤は投与が容易であるため、最も有利な経口単位剤形であり、この場合、明らかに固体医薬担体が用いられる。式（Ｉ）の触媒作用のあるＰＩ３Ｋ／ｍＴＯＲ阻害剤化合物、最も好ましくは化合物Ａを、少なくとも１つの薬学的に許容される担体と共に含む医薬組成物は、従来の方式で、薬学的に許容される担体と共に混合することによって製造することができる。
【０１０９】
液体形態の調製物は、液剤、懸濁剤および乳剤を含む。液体組成物は、活性成分を水に溶解し、所望に応じて適切な着色剤、香味剤、安定剤および増粘剤を添加することによって、液剤に製剤化することができる。経口使用のための水性懸濁剤は、微粉砕した活性成分を、天然または合成ガム、樹脂、メチルセルロース、および医薬製剤分野で知られている他の懸濁化剤などの粘性材料と一緒に水に分散させることによって生成され得る。
【０１１０】
特に、任意量の本発明の組合せの組合せパートナーのそれぞれは、同時にまたは逐次的に、任意の順序で投与することができ、各成分は、別個にまたは固定された組合せとして投与することができる。例えば、本発明に従ってｍＴＯＲキナーゼ依存性増殖性疾患を予防または治療する方法は、本明細書に記載の量に相当する共同の量、好ましくは相乗的に有効な量の、例えば１日投与量または間欠的な投与量の、（ｉ）遊離形態または薬学的に許容される塩の形態の組合せパートナー（ａ）と、（ｉｉ）遊離形態または薬学的に許容される塩の形態の組合せパートナー（ｂ）とを、同時にまたは逐次的に任意の順序で投与するステップを含むことができる。本発明の組合せの個々の組合せパートナーは、療法中の異なる時間に別個に投与することができ、または分割されたもしくは単一の組合せ形態で同時に投与することができる。さらに、「投与する」という用語は、組合せパートナーそれ自体にインビボで変形する、組合せパートナーのプロドラッグの使用も包含する。したがって本発明は、かかるすべての同時または交互治療レジメンを包含すると理解されるべきであり、「投与する」という用語は、このように解釈されるべきである。さらに「１日用量」という用語は、療法中の異なる時間に別個に、または分割されたもしくは単一の投与単位形態で同時に投与される、任意の２４時間の間で特定される量と等しいまたは等価な、本発明の組合せの個々の組合せパートナーの量を包含する。
【０１１１】
本発明の組合せで用いられる組合せパートナーのそれぞれの有効な投与量は、用いられる特定の化合物または医薬組成物、投与方法、治療を受ける状態、治療を受ける状態の重症度に応じて変わり得る。したがって、本発明の組合せの投与レジメンは、投与経路、ならびに患者の腎臓および肝臓機能を含む様々な因子に応じて選択される。臨床医または医師は、状態を緩和し、状態に対抗し、状態の進行を停止させるのに必要な単一活性成分の有効用を容易に決定し、処方することができる。毒性なしに効率をもたらす範囲内で活性成分の濃度を達成するのに最適な精度には、標的部位に対する活性成分の利用能の動態に基づくレジメンが必要である。
【０１１２】
別の実施形態では、本発明は、（ａ）式（Ｉ）の化合物と、（ｂ）少なくとも１つのアロステリックｍＴＯＲ阻害剤化合物とを含む医薬組成物を、該医薬組成物の投与方法に関する指示と一緒に含むキットオブパーツであって、式（Ｉ）の化合物が、それを必要としている対象に、１日用量当たり約１ｎＭから約１００ｎＭの間、または約９．５×１０−８から約９．５×１０−６モル／ｋｇの間、または約３〜約３１５ｍｇ／対象の量で投与される、キットオブパーツに関する。これらの指示は、組合せを投与すべき方法に関する投与レジメンを詳説する。
【０１１３】
一実施形態では、本発明は、化合物Ａおよび少なくとも１つのアロステリックｍＴＯＲ阻害剤化合物、好ましくはエベロリムス（ＲＡＤ００１）を含む医薬組成物を、該医薬組成物の投与方法に関する指示と一緒に含むキットオブパーツであって、化合物Ａが、それを必要としている対象に、１日用量当たり約１ｎＭから約１００ｎＭの間、または約９．５×１０−８から約９．５×１０−６モル／ｋｇの間、または約３〜約３１５ｍｇ／対象の量で投与される、キットオブパーツに関する。これらの指示は、組合せを投与すべき方法に関する投与レジメンを詳説する。
【０１１４】
本発明はさらに、活性成分としての本発明の組合せを、ｍＴＯＲキナーゼ依存性増殖性疾患の進行の遅延または治療において同時に、別個に、または逐次的に使用するための指示と一緒に含む、市販のパッケージを提供する。
【０１１５】
以下の実施例により、前述の本発明を例示するが、これらの実施例は、いかなる方式でも本発明の範囲を制限するものではない。本発明の併用医薬の有益な効果は、当業者にそれ自体知られている他の試験モデルによって決定することもできる。
【実施例１】
【０１１６】
材料および方法
この研究で使用した、非小細胞肺がん細胞株ＮＣＩ−Ｈ２３（ＫＲＡＳおよびＬＫＢ１変異の両方を有する）、子宮内膜腫瘍細胞株ＭＦＥ２９６（ＰＩＫ３ＣＡおよびＰＴＥＮ変異の両方を有する）およびＡＮ３ＣＡ（ＦＧＦＲ２およびＰＴＥＮ変異の両方を有する）、多発性骨髄腫細胞株ＫＭＳ１１（ＦＧＦＲ３変異を有する）、ならびにＲＰＭＩ８２２６、非ホジキンＢ細胞リンパ腫株ＧＡ−１０を含む細胞株は、Ａｍｅｒｉｃａｎ  Ｔｙｐｅ  Ｃｅｌｌ  Ｃｏｌｌｅｃｔｉｏｎから購入した。すべての細胞株を、３７℃の５％ＣＯ２インキュベーター中、１０％ウシ胎児血清、２ｍｍｏｌ／Ｌグルタミンおよび１％ピルビン酸ナトリウムを補充したＲＰＭＩ１６４０（ＡＴＣＣ＃３０−２００１）培地で培養した。
【０１１７】
細胞増殖アッセイ：細胞生存率を、ＣｅｌｌＴｉｔｅｒ−Ｇｌｏ（登録商標）発光細胞生存率アッセイ（Ｐｒｏｍｅｇａ＃Ｇ７５７３）を使用して、製造者のプロトコールに従って細胞のＡＴＰ含量を測定することによって決定した。簡潔には、１５００〜５００００個の細胞を、３８４ウェルプレートまたは９６ウェルプレートのいずれかの、３０μｌ（３８４ウェル）または１００μｌ（９６ウェル）の増殖培地に蒔き、細胞を終夜付着させ、その後、様々な濃度の薬物または薬物の組合せ（３８４ウェルプレート中、１ウェル当たり１０μｌ）を用いて７２時間インキュベートし、薬物処理の最後に、各ウェル（３８４ウェルプレート）にＣｅｌｌＴｉｔｅｒ−Ｇｌｏ試薬３０μｌを添加して、細胞を溶解し、発光シグナルをＥｎｖｉｓｉｏｎプレートリーダーで記録した。
【０１１８】
ｐＳ６  Ｓ２４０／２４４およびｐ４ＥＢＰ１  Ｔ３７／４６の自動化イメージングアッセイ（または高含量アッセイ）：処理の２４時間前に、２〜４×１０３個の細胞を、クリアボトムの３８４ウェル黒色プレート（Ｇｒｅｉｎｅｒ＃７８１０９１）中、１ウェル当たり増殖培地３０μｌに播種した。化合物を、増殖培地１０μｌ中の細胞に添加し、終夜インキュベートした。次に、１ウェル当たり１０μｌのＭｉｒｓｋｙ’ｓ  ｆｉｘａｔｉｖｅ（Ｎａｔｉｏｎａｌ  Ｄｉａｇｎｏｓｔｉｃｓ＃ＨＳ−１０２）を添加することによって、１時間かけて細胞を固定し、ＢｉｏＴｅｋプレートウォッシャーを使用して３０μｌ／ウェルのＴＢＳ緩衝液で７回洗浄し、１００μｌ／ウェルのブロッキングバッファー（０．１％ＢＳＡおよび０．１％ＴｒｉｔｏｎＸ−１００を含むＴＢＳ）でブロッキングした。次に、抗Ｓｅｒ２４０／２４４−ＲＰＳ６抗体（ＣＳＴ＃４８３８、１：１５０希釈）または抗Ｔｈｒ３７／４６−ｐ４ＥＢＰ１抗体（ＣＳＴ＃２８５５、１：１５０希釈）を、終夜４℃でインキュベートした。ＴＢＳで７回洗浄した後、細胞を、Ｃｙ５コンジュゲートヤギ抗ラビットＩｇＧ  ２次抗体（Ｍｉｌｌｉｐｏｒｅ＃ＡＰ１８７Ｓ、１：１５０希釈）およびＤＮＡ染色色素Ｈｏｅｃｈｅｓｔ  ３３３４２で、１．５時間、染色した。ＴＢＳで７回洗浄した後、リン酸化Ｓ６およびリン酸化４ＥＢＰ１シグナルを、ＩｎＣｅｌｌ  １０００  Ａｎａｌｙｚｅｒ（ＢＮ＿染色＿１０×プロトコール）を使用して、１ウェル当たり３つの視野を拡大率１０×で画像化した。Ｈｏｅｃｈｓｔ  ３３３４２シグナルについては、励起波長および発光波長は、それぞれ３６０ｎｍ（Ｄ３６０＿４０×フィルター）および４６０ｎＭ（ＨＱ４６０＿４０Ｍフィルター）であり、Ｃｙ５では、励起波長および発光波長の両方とも６２０ｎｍ（ＨＱ６２０＿６０×フィルター）であった。画像の分析は、ＩｎＣｅｌｌ  Ｉｎｖｅｓｔｉｇａｔｏｒソフトウェアを使用して実施した。
【０１１９】
組合せの効果を算出する方法：エベロリムスと化合物Ａの組合せ効果を先入観なしに評価し、すべての可能な濃度における相乗効果を同定するために、組合せ研究を「用量マトリックス」で実施し、組合せを、連続希釈したエベロリムスおよび化合物Ａの単剤用量のすべて可能な並べ替えで試験し、すべての組合せアッセイにおいて、化合物を同時に適用した。単剤の用量応答曲線、ＩＣ５０、ＩＣ９０および相乗作用を、すべてＣｈａｌｉｃｅソフトウェア（ＣｏｍｂｉｎａｔｏＲｘ、ＭＡ、ケンブリッジ）を使用して分析する。相乗作用は、薬物自体の用量相加的な参照モデルに対して、組合せの応答をその単剤の応答と比較することによって算出した。用量の相加性からの偏差は、アイソボログラムで視覚的に、またはＣｏｍｂｉｎａｔｉｏｎ  Ｉｎｄｅｘを用いて数値的に評価することができる。過剰阻害を、相加性と比較して全用量マトリックス図としてプロットして、相乗作用が生じる点をキャプチャーすることもできる。組合せ効果の全体的な強度を定量化するために、データと単剤の最高表面の間で体積スコアＶＨＳＡ＝ΣＸ，ＹＩｎｆＸＩｎｆＹ（Ｉｄａｔａ−ＩＨＳＡ）も算出し、単剤の希釈係数ｆＸ，ｆＹ［ｒｅｆ］に対して正規化する。
【０１２０】
結果
Ａ．ＮＣＩ−Ｈ２３ヒト非小細胞肺がん（ＮＳＣＬＣ）細胞モデルにおける組合せの効果
ｐ４ＥＢＰ１シグナル：ｐ４ＥＢＰ１シグナルに対する単剤および併用のエベロリムス／化合物Ａ処理の効果を、前述の高含量ｐ４ＥＢＰ１  Ｔ３７／４６アッセイを使用して評価した。細胞を、３８４ウェルプレート中１ウェル当たり３０００個の細胞で４通りに蒔き、化合物で１８時間処理した後、測定した（図１〜２）。この「用量マトリックス」研究では、エベロリムスを、５種類の用量で４×連続希釈し（高用量１．２μＭおよび低用量約５ｎＭ）、化合物Ａを、９種類の用量で２×連続希釈した（高用量１．２μＭおよび低用量約５ｎＭ）。単独の化合物Ａは、ｐ４ＥＢＰ１シグナルの濃度依存性の低下を引き起こし（ＩＣ５０＝１０ｎＭおよびＩＣ９０＝８０ｎＭ）、シグナル低下は、阻害の完了が明らかに達成される１５６ｎＭ以上の濃度で横ばいになった。単剤としてのエベロリムスは、試験したすべての濃度において、ｐ４ＥＢＰ１シグナルに対して非常に小さい効果しか発揮しなかった（５ｎＭ〜１．２μＭ、約３０％のシグナル低下）。このことは、キャップ依存性翻訳を制御するのに非常に重要な役割を果たす４ＥＢＰ１  Ｔ３７／４６残基のリン酸化が、触媒作用のあるｍＴＯＲ阻害剤によって初めて調節され得るが、エベロリムスのようなアロステリック阻害剤によっては調節されないという以前の報告と一致する。併用のエベロリムス／化合物Ａ処理は、すべての用量のエベロリムス（５ｎＭ〜１．２μＭ、または０．０４２〜１０．０８ｎＭｏｌａｒ／ｋｇ、または２．８２〜６７６．４４ｍｇ／ヒト）および準最適な用量の化合物Ａ（５ｎＭ〜７８ｎＭ、または０．４７〜７．４４ｎＭｏｌａｒ／ｋｇ、または１５．６８〜２４４．６２ｍｇ／ヒト）の両方と比較して、阻害効果を著しく強化したが、より高い化合物Ａの濃度では（１５６ｎＭ〜１．２μＭ、または１４．８８〜１１４．５０ｎＭｏｌａｒ／ｋｇ、または４８９．２４〜３７６３．４４ｍｇ／ヒト）、組合せは、最大効果に達した場合の単剤の化合物Ａ処理と比較して、追加の利益を示さなかった。このパターンに基づくと、観測された相乗作用の効果は、「全体的な効果の増進」ではなく化合物Ａの「用量の節約」と分類することができ、わずか５ｎＭのエベロリムスにより、化合物ＡのＩＣ９０を８０ｎＭから５ｎＭにシフトし、１６倍の低減を達成することができる。
【０１２１】
ｐＳ６  Ｓ２４０／２４４シグナル：ｐＳ６シグナルに対する単剤および併用のエベロリムス／化合物Ａ処理の効果を、前述の高含量ｐＳ６  Ｓ２４０／２４４アッセイを使用して評価した。実験設定は、ＮＣＩ−Ｈ２３細胞モデルで使用したｐ４ＥＢＰ１アッセイと同一である（図３〜４）。さらに、同じ「用量マトリックス」（エベロリムス：５種類の用量、４×、１．２μＭから５ｎＭ、化合物Ａ：９種類の用量、２×、１．２μＭから５ｎＭ）を適用した。単剤としての化合物Ａおよびエベロリムスの両方は、ｐ４ＥＢＰ１に対する阻害とは異なり、ｐＳ６シグナルに対して非常に強力な阻害効果を示した。化合物ＡのＩＣ５０は５ｎＭであり、ＩＣ９０は約２０ｎＭであり、エベロリムスのＩＣ５０は＜５ｎＭであり、ＩＣ９０は約１０ｎＭである。併用のエベロリムス／化合物Ａ処理では、特に、単剤のエベロリムス処理と比較して、阻害は強化されなかった。
【０１２２】
細胞増殖：細胞増殖に対する単剤および併用のエベロリムス／化合物Ａ処理の効果を、前述のｃｅｌｌ  ｔｉｔｅｒ  ｇｌｏｗ（ＣＴＧ）アッセイを使用して評価した。実験設定は、ＮＣＩ−Ｈ２３細胞モデルで使用したｐ４ＥＢＰ１高含量アッセイと同一である（図５）。さらに、同じ「用量マトリックス」（エベロリムス：５種類の用量、４×、１．２μＭから５ｎＭ、化合物Ａ：９種類の用量、２×、１．２μＭから５ｎＭ）を適用した。単独の化合物Ａは、ＩＣ５０＝７８ｎＭおよび阻害の最大割合Ａｍａｘ＝０．７（ＤＭＳＯ対照と比較して７０％の増殖阻害）で、細胞増殖の濃度依存性の阻害を引き起こし、単剤としてのエベロリムスでは、ＩＣ５０が達成されず、Ａｍａｘ＝０．３となり、細胞増殖に対してわずかな増殖阻害効果しか示さなかった。併用のエベロリムス／化合物Ａ処理は、すべての用量のエベロリムス（５ｎＭ〜１．２μＭ、または０．０４２〜１０．０８ｎＭｏｌａｒ／ｋｇ、または２．８２〜６７６．４４ｍｇ／ヒト）および準最適な用量の化合物Ａ（５ｎＭ〜７８ｎＭ、または０．４７〜７．４４ｎＭｏｌａｒ／ｋｇ、または１５．６８〜２４４．６２ｍｇ／ヒト）の両方と比較して、阻害効果を劇的に強化したが、より高い化合物Ａの濃度では（１５６ｎＭ〜１．２μＭ、または１４．８８〜１１４．５０ｎＭｏｌａｒ／ｋｇ、または４８９．２４〜３７６３．４４ｍｇ／ヒト）、組合せは、単剤の化合物Ａ処理と比較して、追加の利益を示さなかった。このパターンは、ｐ４ＥＢＰ１阻害の相乗作用パターンと非常に類似しており、組合せの利益の領域は、互いにほぼ重複しているが、このことは、ｐ４ＥＢＰ１の相乗的阻害が、増殖阻害に対して観測された相乗作用の根本的な機構の少なくとも一部である（すべてではない）ことを示している。さらに先に論じた通り、この組合せの利益は、「全体的な効果の増進」ではなく化合物Ａの「用量の節約」と分類されるべきであり、わずか５ｎＭのエベロリムスにより、ＩＣ５０を８分の１まで低減することができ（８０ｎＭから１０ｎＭまで）、組合せ効果は、すべての用量で、高濃度（１．２μＭ）における化合物Ａ単独の用量効果を超えなかった。
【０１２３】
さらにより低い濃度のエベロリムスおよび化合物Ａでの、細胞増殖に対する併用のエベロリムス／化合物Ａ処理の効果をさらに調査するため（５ｎＭのエベロリムスおよび化合物Ａの組合せは、既に、ＮＣＩ−Ｈ２３がん細胞モデルについて前述の細胞増殖結果に概説した通り、高度に相乗的であるように考えられた）、ｃｅｌｌ  ｔｉｔｅｒ  ｇｌｏｗ（ＣＴＧ）アッセイを使用して別の実験を実施して、組合せ効果を評価した。この実験中、細胞を、３８４ウェルプレート中１ウェル当たり１０００個の細胞で３通りに蒔き、化合物で７２時間処理した後、測定した（図６）。この拡張「用量マトリックス」研究では、エベロリムスを、１１種類の用量で４×連続希釈し（最大用量１ｕＭおよび低用量約１ｐＭ）、化合物Ａを、９種類の用量で４×連続希釈した（高用量１μＭおよび低用量約１６ｐＭ）。化合物Ａおよびエベロリムス両方の単剤の活性は、ＮＣＩ−Ｈ２３がん細胞モデルについて前述の細胞増殖結果で観測されたものと一致する。単独の化合物Ａは、細胞増殖の濃度依存性の阻害を引き起こしたが（ＩＣ５０＝８０ｎＭ、Ａｍａｘ＝０．７）、単剤としてのエベロリムスは、わずかな増殖阻害効果しか有していなかった（ＩＣ５０＞１μＭおよびＡｍａｘ＝０．３）。しかし、エベロリムスを低用量の化合物Ａ（１〜６２ｎＭ、または０．０９５〜５．９１ｎＭｏｌａｒ／ｋｇ、または３．１４〜１９４．４４ｍｇ／ヒト）に添加すると、化合物Ａの抗増殖剤効果を、高用量の化合物Ａ（２５０ｎＭ〜１μＭ、または２３．８５〜９５．４１ｎＭｏｌａｒ／ｋｇ、または７８４．０５〜３１３６．２０ｍｇ／ヒト）に匹敵する程度まで著しく増進することができたものの、組合せは、サブナノモル量（１６ｐＭ〜２５０ｐＭ）の化合物Ａまたは高用量（２５０〜１μＭ）の化合物Ａでは、単剤の化合物Ａと比較して利益をもたらさなかった。化合物Ａの用量節約を達成するのに必要なエベロリムスの量も、驚くほど少なく、同じ規模の化合物Ａとの相乗作用を達成することに関して、μＭ量のエベロリムスには、わずか１ｐＭ、または０．０００００８４ｎＭｏｌａｒ／ｋｇ、または０．０００５６ｍｇ／ヒトのエベロリムスが匹敵すると考えられる。このことは、実際に微量のエベロリムス（サブナノモル、またはさらにはピコモル、１ｐＭ〜１ｎＭ、または０．０００００８４〜０．００８４ｎＭｏｌａｒ／ｋｇ、または０．０００５６〜０．５６ｍｇ／ヒト）を、準最適な量の化合物Ａ（約１〜１００ｎＭ、または０．０９５〜９．５４ｎＭｏｌａｒ／ｋｇ、または３．１４〜３１３．６２ｍｇ／ヒト）に添加すると、ｍＴＯＲＣ１活性の完全な阻害に対する化合物Ａの効果、その後の増殖に対する良好な阻害を増強できることを示唆している。
【０１２４】
Ｂ．ＭＦＥ２９６ヒト子宮内膜がん細胞モデルにおける組合せの効果
ｐ４ＥＢＰ１シグナル：ｐ４ＥＢＰ１シグナルに対する単剤および併用のエベロリムス／化合物Ａ処理の効果を、前述の高含量ｐ４ＥＢＰ１  Ｔ３７／４６アッセイを使用して評価した。細胞を、３８４ウェルプレート中１ウェル当たり４０００個の細胞で２通りに蒔き、化合物で１８時間処理した後、測定した（図７）。この「用量マトリックス」研究では、ＮＣＩ−Ｈ２３がん細胞モデルで実施した「用量マトリックス」研究と同様に、エベロリムスを、１１種類の用量で４×連続希釈し（高用量５００ｎＭおよび低用量約０．２５ｐＭ）、化合物Ａを、９種類の用量で４×連続希釈した（高用量１μＭおよび低用量約１６ｐＭ）。単独の化合物Ａは、ｐ４ＥＢＰ１シグナルの濃度依存性の低下を引き起こし（ＩＣ５０＝１６ｎＭおよびＩＣ９０約１００ｎＭ）、濃度＞２５０ｕＭで完全な阻害に達したが、単剤としてのエベロリムスは、試験したすべての濃度において、ｐ４ＥＢＰ１シグナルに対して非常に小さい効果しか発揮しなかった（０．５ｐＭ〜５００ｎＭ、約２０％のシグナル低下）。併用のエベロリムス／化合物Ａ処理は、すべての用量のエベロリムス（０．５ｐＭ〜５００ｎＭ、または０．０００００４２〜４．２ｎＭｏｌａｒ／ｋｇ、または０．０００２８〜２８１．８４ｍｇ／ヒト）および準最適な用量の化合物Ａ（１６ｐＭ〜６２ｎＭ、または０．００１５〜５．９１ｎＭｏｌａｒ／ｋｇ、または０．０５０〜１９４．４４ｍｇ／ヒト）の両方と比較して、阻害効果を著しく強化し、微量のエベロリムスの存在は、化合物ＡのＩＣ５０を１６ｎＭから０．２４ｎＭに、ＩＣ９０を約１００ｎＭから４ｎＭにシフトすることができた。より高い濃度の化合物Ａでは（２５０ｎＭ〜１μＭ、または２３．８５〜９５．４１ｎＭｏｌａｒ／ｋｇ、または７８４．０５〜３１３６．２０ｍｇ／ヒト）、組合せは、単剤の化合物Ａ処理と比較して、追加の利益を示さなかった。このパターンは、相乗作用効果が観測されたことを示唆する、前述のＮＣＩ−Ｈ２３細胞で観測されたパターンと完全に一致するものであり、任意の「全体的な効果の増進」ではなく化合物Ａの「用量の節約」と分類することができる。エベロリムスおよび化合物Ａの低用量の組合せは、高度に有効なｍＴＯＲ１阻害試薬として使用することができる。
【０１２５】
細胞増殖：細胞増殖に対する単剤および併用のエベロリムス／化合物Ａ処理の効果を、前述のｃｅｌｌ  ｔｉｔｅｒ  ｇｌｏｗ（ＣＴＧ）アッセイを使用して評価した。実験設定は、ＭＦＥ２９６がん細胞モデルについて前述したｐ４ＥＢＰ１アッセイと同一である（図８）。さらに、同じ「用量マトリックス」（エベロリムス：１１種類の用量、４×、５００ｎＭから０．５ｐＭ、化合物Ａ：９種類の用量、４×、１μＭから１６ｎＭ）を適用した。単独の化合物Ａは、細胞増殖の濃度依存性の阻害を引き起こしたが（ＩＣ５０＝７８ｎＭ、Ａｍａｘ＝０．７９）、単剤としてのエベロリムスは、この細胞系では有効性がわずかに低く（Ａｍａｘ＝０．６）、但し極めて強力である（ＩＣ５０＜０．２５ｐＭ）。併用のエベロリムス／化合物Ａ処理は、すべての用量のエベロリムス（０．５ｐＭ〜５００ｎＭ、または０．０００００４２〜４．２ｎＭｏｌａｒ／ｋｇ、または０，０００２８〜２８１．８４ｍｇ／ヒト）および準最適な用量の化合物Ａ（１６ｐＭ〜６２ｎＭ、または０．００１５〜５．９１ｎＭｏｌａｒ／ｋｇ、または０．０５０〜１９４．４４ｍｇ／ヒト）の両方と比較して、阻害効果を著しく強化したが、より高い濃度の化合物Ａでは（２５０ｎＭ〜１μＭ、または２３．８５〜９５．４１ｎＭｏｌａｒ／ｋｇ、または７８４．０５〜３１３６．２０ｍｇ／ヒト）、組合せは、単剤の化合物Ａ処理と比較して、追加の利益を示さなかった。この場合の相乗作用パターンも、微量（ピコモル）のエベロリムスによって、化合物Ａの完全な有効用量を著しく低減することができた（２５０ｎＭからおよそサブナノモル範囲まで）ことを示唆した。
【０１２６】
Ｃ．ＡＮ３  ＣＡヒト子宮内膜がん細胞モデルにおける組合せの効果
細胞増殖：細胞増殖に対する単剤および併用のエベロリムス／化合物Ａ処理の効果を、前述のｃｅｌｌ  ｔｉｔｅｒ  ｇｌｏｗ（ＣＴＧ）アッセイを使用して評価した。細胞を、３８４ウェルプレート中１ウェル当たり１５００個の細胞で４通りに蒔き、化合物で７２時間処理した後、測定した（図９）。以下の「用量マトリックス」、エベロリムス：１１種類の用量、４×、５００ｎＭから０．５ｐＭ、化合物Ａ：９種類の用量、４×、１μＭから１６ｎＭを適用した。単独の化合物Ａは、細胞増殖の濃度依存性の阻害を引き起こしたが（ＩＣ５０＝５ｎＭ、Ａｍａｘ＝０．６９）、単剤としてのエベロリムスは、あまり有効ではない（Ａｍａｘ＝０．３）。併用のエベロリムス／化合物Ａ処理は、すべての用量のエベロリムス（０．５ｐＭ〜５００ｎＭ、または０．０００００４２〜４．２ｎＭｏｌａｒ／ｋｇ、または０，０００２８〜２８１．８４ｍｇ／ヒト）および準最適な用量の化合物Ａ（１６ｐＭ〜１６ｎＭ、または０．００１５〜１．５３ｎＭｏｌａｒ／ｋｇ、または０．０５０〜５０．１７ｍｇ／ヒト）の両方と比較して、阻害効果を劇的に強化したが、より高い濃度の化合物Ａでは（６４ｎＭ〜１μＭ、または５．９２〜９５．４２ｎＭｏｌａｒ／ｋｇ、または１９４．４４〜３１３６．２０ｍｇ／ヒト）、組合せは、単剤の化合物Ａ処理と比較して、追加の利益を示さなかった。この場合の相乗作用パターンも、用量節約モデルを示唆し、微量（ピコモル）のエベロリムスによって、化合物Ａの完全な有効用量を著しく低減することができた（＞６４ｎＭからおよそナノモル範囲またはサブナノモル範囲まで）。
【０１２７】
Ｄ．ＧＡ−１０ヒト非ホジキンリンパ腫がん細胞モデルにおける組合せの効果
細胞増殖：細胞増殖に対する単剤および併用のエベロリムス／化合物Ａ処理の効果を、前述のｃｅｌｌ  ｔｉｔｅｒ  ｇｌｏｗ（ＣＴＧ）アッセイを使用して評価した。細胞を、９６ウェルプレート中１ウェル当たり５００００個の細胞で３通りに蒔き、化合物で７２時間処理した後、測定した（図１０）。以下の「用量マトリックス」、エベロリムス：８種類の用量、３×、５００ｎＭから０．２３ｎＭ、化合物Ａ：８種類の用量、２×、１μＭから８ｎＭを適用した。単独の化合物Ａは、細胞増殖の濃度依存性の阻害を引き起こし、高濃度では、ほぼすべての生存細胞が排除されたが（ＩＣ５０約２５ｎＭ、ＩＣ９０＝２５０ｎＭ、Ａｍａｘ＝１）、単剤としてのエベロリムスは、あまり有効ではない（Ａｍａｘ＝０．３）。併用のエベロリムス／化合物Ａ処理は、すべての用量のエベロリムス（０．２３ｎＭ〜５００ｎＭ、または０．００１９〜４．２ｎＭｏｌａｒ／ｋｇ、または０．１３〜２８１．８４ｍｇ／ヒト）および準最適な用量の化合物Ａ（８ｎＭ〜６２ｎＭ、または０．７６〜５．９２ｎＭｏｌａｒ／ｋｇ、または２５．０９〜１９４．４４ｍｇ／ヒト）の両方と比較して、阻害効果を劇的に強化し、化合物ＡのＩＣ９０を約３００ｎＭから１６ｎＭにシフトした。より高い濃度の化合物Ａでは（２５０ｎＭ〜１μＭ、または２３．８５〜９５．４１ｎＭｏｌａｒ／ｋｇ、または７８４．０５〜３１３６．２０ｍｇ／ヒト）、組合せは、単剤の化合物Ａ処理と比較して、追加の利益を示さなかった。この場合の相乗作用パターンも、用量節約モデルを示唆し、微量（サブナノモル）のエベロリムスによって、化合物Ａの完全な有効用量を著しく低減することができた（＞２５０ｎＭから１６〜６２ｎＭまで）。
【０１２８】
Ｅ．ＫＭＳ−１１ヒト多発性骨髄腫がん細胞モデルにおける組合せの効果
細胞増殖：細胞増殖に対する単剤および併用のエベロリムス／化合物Ａ処理の効果を、前述のｃｅｌｌ  ｔｉｔｅｒ  ｇｌｏｗ（ＣＴＧ）アッセイを使用して評価した。細胞を、９６ウェルプレート中１ウェル当たり５００００個の細胞で３通りに蒔き、化合物で７２時間処理した後、測定した（図１１）。以下の「用量マトリックス」、エベロリムス：８種類の用量、３×、５００ｎＭから０．２３ｎＭ、化合物Ａ：８種類の用量、２×、１μＭから８ｎＭを適用した。単独の化合物Ａは、高濃度では細胞増殖の濃度依存性の阻害を引き起こしたが（ＩＣ５０約８０ｎＭ、Ａｍａｘ＝０．７）、単剤としてのエベロリムスは、あまり有効ではない（Ａｍａｘ＝０．２８）。併用のエベロリムス／化合物Ａ処理は、すべての用量のエベロリムス（０．２３ｎＭ〜５００ｎＭ、または０．００１９〜４．２ｎＭｏｌａｒ／ｋｇ、または０．１３〜２８１．８４ｍｇ／ヒト）および準最適な用量の化合物Ａ（８ｎＭ〜６２ｎＭ、または０．７６〜５．９２ｎＭｏｌａｒ／ｋｇ、または２５．０９〜１９４．４４ｍｇ／ヒト）の両方と比較して、阻害効果を劇的に強化し、化合物ＡのＩＣ５０を約８０ｎＭから１６ｎＭにシフトした。より高い濃度の化合物Ａでは（１２５ｎＭ〜１ｕＭ、または１１．９３〜９５．４２ｎＭｏｌａｒ／ｋｇ、または３９２．０３〜３１３６．２０ｍｇ／ヒト）、組合せは、単剤の化合物Ａ処理と比較して、追加の利益を示さなかった。この場合の相乗作用パターンも、用量節約モデルを示唆し、微量（サブナノモル）のエベロリムスによって、化合物Ａの完全な有効用量を著しく低減することができた（＞１２５ｎＭから１６〜６２ｎＭまで）。
【０１２９】
Ｆ．ＲＰＭＩ８２２６ヒト多発性骨髄腫がん細胞モデルにおける組合せの効果
細胞増殖：細胞増殖に対する単剤および併用のエベロリムス／化合物Ａ処理の効果を、前述のｃｅｌｌ  ｔｉｔｅｒ  ｇｌｏｗ（ＣＴＧ）アッセイを使用して評価した。細胞を、９６ウェルプレート中１ウェル当たり５００００個の細胞で３通りに蒔き、化合物で７２時間処理した後、測定した（図１２）。以下の「用量マトリックス」、エベロリムス：８種類の用量、３×、５００ｎＭから０．２３ｎＭ、化合物Ａ：８種類の用量、２×、１μＭから８ｎＭを適用した。単独の化合物Ａは、高濃度では細胞増殖の濃度依存性の阻害を引き起こしたが（ＩＣ５０約１２５ｎＭ、Ａｍａｘ＝０．７）、単剤としてのエベロリムスは、あまり有効ではない（Ａｍａｘ＝０．１５）。併用のエベロリムス／化合物Ａ処理は、すべての用量のエベロリムス（０．２３ｎＭ〜５００ｎＭ、または０．００１９〜４．２ｎＭｏｌａｒ／ｋｇ、または０．１３〜２８１．８４ｍｇ／ヒト）および準最適な用量の化合物Ａ（８ｎＭ〜６２ｎＭ、または０．７６〜５．９２ｎＭｏｌａｒ／ｋｇ、または２５．０９〜１９４．４４ｍｇ／ヒト）の両方と比較して、阻害効果を劇的に強化し、化合物ＡのＩＣ５０を約１２５ｎＭから１６ｎＭにシフトした。より高い濃度の化合物Ａでは（１２５ｎＭ〜１μＭ、または１１．９３〜９５．４２ｎＭｏｌａｒ／ｋｇ、または３９２．０３〜３１３６．２０ｍｇ／対象）、組合せは、単剤の化合物Ａ処理と比較して、追加の利益を示さなかった。この場合の相乗作用パターンも、用量節約モデルを示唆し、微量（サブナノモル）のエベロリムスによって、化合物Ａの完全な有効用量を著しく低減することができた（＞１２５ｎＭから１６〜６２ｎＭまで）。
【０１３０】
概要および考察
エベロリムスと化合物Ａの組合せの抗増殖剤効果を、様々な遺伝子変異を有する様々な組織分化系列からの６種類の細胞株で評価し、試験したすべての細胞株において、類似のパターンで強力な相乗作用が見出された。エベロリムスは、化合物Ａの効力を、細胞型に応じて５〜１００倍強化することができたが、その絶対的な強化レベルは、化合物Ａの最大有効性とエベロリムスの最大有効性の間の差異に依存して決まる。低用量の化合物Ａ（ｎＭ）との相乗作用をもたらすには、微量のエベロリムス（ｐＭ〜ｎＭ）で十分である。ｐ４ＥＢＰ１の低減に対する組合せ効果の評価として、ｍＴＯＲＣ１機能の非常に重要な読取りにより、抗増殖剤分析を用いて相乗作用の重複領域を同定したが、このことは、組合せの利益には、ｅＩＦ４Ｅ制御によるキャップ依存性翻訳経路の相乗的阻害が少なくとも部分的に寄与することを示唆している。臨床的に、固定の低用量のエベロリムスを最適な低用量の化合物Ａと組み合わせて、ｍＴＯＲＣ１の完全な阻害を達成することは（超ｍＴＯＲＣ１阻害剤）、非常に魅力的な選択肢になるはずである。この目的を達成するために化合物Ａを単剤として高用量で使用することと比較して、かかる組合せは、同程度のｍＴＯＲＣ１阻害を提供すると同時に、化合物Ａの潜在的な薬物生体利用能の問題を回避し、高用量の化合物Ａに関連し得る、起こり得る標的外の毒性も回避する。
【実施例２】
【０１３１】
細胞増殖に対する単剤および併用のエベロリムス／化合物Ａ処理の効果を、前述のｃｅｌｌ  ｔｉｔｅｒ  ｇｌｏｗ（ＣＴＧ）アッセイを使用して、ＳＫ−ＢＲ３ヒト乳がん細胞で評価した。細胞を、９６ウェルプレート中１ウェル当たり２０００個の細胞で３通りに蒔き、化合物で７２時間処理した後、測定した。以下の用量マトリックス：エベロリムス、８種類の用量、２×、２０００ｎＭから１５ｎＭ、化合物Ａ、８種類の用量、２×、２μＭから１５ｎＭを適用した。単独の化合物Ａは、高濃度では細胞増殖の濃度依存性の阻害を引き起こし（ＩＣ５０約３１ｎＭ、Ａｍａｘ＝０．６７）、単剤としてのエベロリムスも有効である（Ａｍａｘ＝０．５０、ＩＣ５０＜１５ｎＭ）。併用のエベロリムス／化合物Ａ処理は、すべての用量のエベロリムス（１５ｎＭ〜２μＭ）および準最適な用量の化合物Ａ（１５ｎＭ〜６０ｎＭ）の両方と比較して、阻害効果を強化し、化合物ＡのＩＣ５０を約３１ｎＭから＜１５ｎＭもの低さにシフトした。より高い濃度の化合物Ａでは（１２０ｎＭ〜２μＭ）、組合せは、単剤の化合物Ａ処理と比較して、追加の利益を示さなかった。この場合の相乗作用パターンも、用量節約モデルを示唆し、低用量のエベロリムスによって、化合物Ａの完全な有効用量を著しく低減することができる（１２０ｎＭから＜１５ｎＭまで）。
【実施例３】
【０１３２】
細胞増殖に対する単剤および併用のエベロリムス／化合物Ａ処理の効果を、前述のｃｅｌｌ  ｔｉｔｅｒ  ｇｌｏｗ（ＣＴＧ）アッセイを使用して、ＭＤＡ−ＭＢ−３６１ヒト乳がん細胞で評価した。細胞を、９６ウェルプレート中１ウェル当たり２０００個の細胞で３通りに蒔き、化合物で７２時間処理した後、測定した。以下の「用量マトリックス」、エベロリムス：８種類の用量、２×、２０００ｎＭから１５ｎＭ、化合物Ａ：８種類の用量、２×、２μＭから１５ｎＭを適用した。単独の化合物Ａは、高濃度では細胞増殖の濃度依存性の阻害を引き起こしたが（ＩＣ５０約６０ｎＭ、Ａｍａｘ＝０．８１）、単剤としてのエベロリムスは、あまり有効ではない（Ａｍａｘ＜０．５０）。併用のエベロリムス／化合物Ａ処理は、すべての用量のエベロリムス（１５ｎＭ〜２μＭ）および準最適な用量の化合物Ａ（１５ｎＭ〜６０ｎＭ）の両方と比較して、阻害効果を強化し、化合物ＡのＩＣ５０を約６０ｎＭから＜１５ｎＭもの低さにシフトした。より高い濃度の化合物Ａでは（１２０ｎＭ〜２μＭ）、組合せは、単剤の化合物Ａ処理と比較して、追加の利益を示さなかった。この場合の相乗作用パターンも、用量節約モデルを示唆し、低用量のエベロリムスによって、化合物Ａの完全な有効用量を著しく低減することができた（１２０ｎＭから＜１５ｎＭまで）。
【図１】
2013538876.tif 000008
【図２】
2013538876.tif 000009
【図３】
2013538876.tif 000010
【図４】
2013538876.tif 000011
【図５】
2013538876.tif 000012
【図６】
2013538876.tif 000013
【図７】
2013538876.tif 000014
【図８】
2013538876.tif 000015
【図９】
2013538876.tif 000016
【図１０】
2013538876.tif 000017
【図１１】
2013538876.tif 000018
【図１２】
2013538876.tif 000019
【国際調査報告】
2013538876.tif 000020
2013538876.tif 000021
2013538876.tif 000022