(57)【要約】  粒子状プロテアーゼ含有洗浄剤組成物にプロテアーゼ阻害剤を添加することは、その洗浄力を改善でき、および阻害剤は、洗浄剤溶液中のプロテアーゼの洗浄中安定性を改善することができる。【特許請求の範囲】
【請求項１】
界面活性剤および／または助剤、プロテアーゼ、およびプロテアーゼ阻害剤を含む、粉末状洗浄剤組成物。
【請求項２】
洗浄力または前記洗浄剤溶液中の前記プロテアーゼの洗浄中の安定性の増加のために効果的な量の阻害剤を含む、請求項１に記載の洗浄剤組成物。
【請求項３】
助剤を含む食器洗浄洗浄剤である、請求項１または２に記載の洗浄剤組成物。
【請求項４】
５％超の前記助剤を含む、請求項３に記載の洗浄剤組成物。
【請求項５】
前記助剤がＣａおよびＭｇとの水溶性複合体を形成するキレート剤であり、およびＣａおよび／またはＭｇとの当該複合体が、ｌｏｇＫ＝３‐８の範囲の安定定数を有する、請求項１‐４のいずれか一項に記載の洗浄剤組成物。
【請求項６】
前記助剤がアミノ基、特に一、二または三個のアミノ基を含む、請求項１‐５のいずれか一項に記載の洗浄剤組成物。
【請求項７】
前記助剤がＭＧＤＡ、ＧＬＤＡ、ＮＴＡまたはＤＴＰＡである、請求項３または４に記載の洗浄剤組成物。
【請求項８】
１、２、３，４または５ｇ／Ｌの水性溶液中で測定された６‐１１の範囲のｐＨを有する、請求項１‐７のいずれか一項に記載の洗浄剤組成物。
【請求項９】
前記プロテアーゼがサブチリシンまたは１０Ｒプロテアーゼである、請求項１‐８のいずれか一項に記載の洗浄剤組成物。
【請求項１０】
前記阻害剤が、１Ｅ‐０９−２Ｅ‐０３；１Ｅ‐０８−８Ｅ‐０４；１Ｅ‐０７−５Ｅ‐０４；または５Ｅ‐０７−１．５Ｅ‐０４の洗浄剤中の濃度（ｍｏｌ／ｋｇ  ｄｅｔ）で存在する、請求項１‐９のいずれか一項に記載の洗浄剤組成物。
【請求項１１】
前記阻害剤が１Ｅ‐１２‐１Ｅ‐０３；１Ｅ‐１１‐１Ｅ‐０４；１Ｅ‐１０‐１Ｅ‐０５；１Ｅ‐１０‐１Ｅ‐０６；１Ｅ‐１２−９．９９Ｅ‐９；または１Ｅ‐０９−１Ｅ‐０７のプロテアーゼＫｉ（Ｍ、ｍｏｌ／Ｌ）の阻害定数を有する、請求項１‐１０のいずれか一項に記載の洗浄剤組成物。
【請求項１２】
前記阻害定数（Ｋｉ、Ｍ）（Ｌ／ｋｇ）によって割られた阻害剤濃度（ｍｏｌ／ｋｇ  ｄｅｔ）が、０．０１‐１Ｅ＋０８；０．１‐２Ｅ＋０７；１‐２Ｅ＋０６；または５‐２Ｅ＋０５である、請求項１‐１１のいずれか一項に記載の洗浄剤組成物。
【請求項１３】
前記阻害剤が、ペプチドアルデヒド、ペプチドまたはタンパク質タイプまたはボロン酸誘導体のプロテアーゼ阻害剤である、請求項１‐１２のいずれか一項に記載の洗浄剤組成物。
【請求項１４】
前記阻害剤が、式Ｂ2‐Ｂ1‐Ｂ0‐Ｒ：
［式中、
Ｒが、水素、ＣＨ3、ＣＸ3、ＣＨＸ2、またはＣＨ2Ｘ、ここでＸが、ハロゲン原子であり；
Ｂ0が、単一アミノ酸残基であり；
Ｂ1が、単一アミノ酸残基であり；および
Ｂ2が、場合により、Ｎ末端保護基を含む、一またはそれ以上のアミノ酸残基からなる（好ましくは、一または二）。］
を有するペプチドアルデヒドである、請求項１‐１３のいずれか一項に記載の洗浄剤組成物。
【請求項１５】
前記阻害剤が、式Ｐ‐Ｏ‐（Ａi‐Ｘ’）n‐Ａn+1‐Ｑ：
［式中、
Ｑが、水素、ＣＨ3、ＣＸ3、ＣＨＸ2、またはＣＨ2Ｘであり、ここでＸが、ハロゲン原子であり；
一のＸ’が、「二重Ｎ‐キャッピング基」ＣＯ、ＣＯ‐ＣＯ、ＣＳ，ＣＳ‐ＣＳ、またはＣＳ‐ＣＯ、もっとも好ましいウリド（ＣＯ）、および他のＸ’はなく；
ｎ＝１‐１０、好ましくは２‐５、もっとも好ましくは２であり；
ＡiおよびＡn+1のそれぞれが、Ｘ＝‐ＣＯ‐の右の方の残基について‐ＮＨ‐ＣＲ‐ＣＯ‐構造、またはＸ＝‐ＣＯ‐の左の方の残基について‐ＣＯ‐ＣＲ‐ＮＨ‐構造を有するアミノ酸残基であり；
Ｒが、Ｈ‐、または場合によりヘテロ原子を含んでもよく、および場合によりＮ原子と結合してもよい場合により置換されたアルキルまたはアルキルアリール基であり、および
Ｐが、水素または任意のＣ末端保護基である。］
を有するペプチドアルデヒドである、請求項１‐１４のいずれか一項に記載の洗浄剤組成物。
【請求項１６】
前記阻害剤が、Ｚ‐ＲＡＹ‐Ｈ、Ａｃ‐ＧＡＹ‐Ｈ、Ｚ‐ＧＡＹ‐Ｈ、Ｚ‐ＧＡＬ‐Ｈ、Ｚ‐ＶＡＬ‐Ｈ、Ｚ‐ＶＡＬ‐ＣＦ3、Ｚ‐ＧＡＦ‐Ｈ、Ｚ‐ＧＡＦ‐ＣＦ3、Ｚ‐ＧＡＶ‐Ｈ、Ｚ‐ＧＧＹ‐Ｈ、Ｚ‐ＧＧＦ‐Ｈ、Ｚ‐ＲＶＹ‐Ｈ、Ｚ‐ＬＶＹ‐Ｈ、Ａｃ‐ＬＧＡＹ‐Ｈ、Ａｃ‐ＦＧＡＹ‐Ｈ、Ａｃ‐ＹＧＡＹ‐Ｈ、Ａｃ‐ＦＧＡＬ‐Ｈ、Ａｃ‐ＦＧＡＦ‐Ｈ、Ａｃ‐ＦＧＶＹ‐Ｈ、Ａｃ‐ＦＧＡＭ‐Ｈ、Ａｃ‐ＷＬＶＹ‐Ｈ、ＭｅＯ‐ＣＯ‐ＶＡＬ‐Ｈ、ＭｅＮＣＯ‐ＶＡＬ‐Ｈ、ＭｅＯ‐ＣＯ‐ＦＧＡＬ‐Ｈ、ＭｅＯ‐ＣＯ‐ＦＧＡＦ‐Ｈ、ＭｅＳＯ2‐ＦＧＡＬ‐Ｈ、ＭｅＳＯ2‐ＶＡＬ‐Ｈ、ＰｈＣＨ2Ｏ（ＯＨ）（Ｏ）Ｐ‐ＶＡＬ‐Ｈ、Ｅｔ‐ＳＯ2‐ＦＧＡＬ‐Ｈ、ＰｈＣＨ2ＳＯ2‐ＶＡＬ‐Ｈ、ＰｈＣＨ2Ｏ（ＯＨ）（Ｏ）Ｐ‐ＬＡＬ‐Ｈ、ＰｈＣＨ2Ｏ（ＯＨ）（Ｏ）Ｐ‐ＦＡＬ‐Ｈ、ＭｅＯ（ＯＨ）（Ｏ）Ｐ‐ＬＧＡＬ‐Ｈ、α‐ＭＡＰＩ、β‐ＭＡＰＩ、Ｆ‐ウレア‐ＲＶＹ‐Ｈ、Ｆ‐ウレア‐ＧＧＹ‐Ｈ、Ｆ‐ウレア‐ＧＡＦ‐Ｈ、Ｆ‐ウレア‐ＧＡＹ‐Ｈ、Ｆ‐ウレア‐ＧＡＬ‐Ｈ、Ｆ‐ウレア‐ＧＡ‐Ｎｖａ‐Ｈ、Ｆ‐ウレア‐ＧＡ‐Ｎｌｅ‐Ｈ、Ｙ‐ウレア‐ＲＶＹ‐Ｈ、Ｙ‐ウレア‐ＧＡＹ‐Ｈ、Ｆ‐ＣＳ‐ＲＶＦ‐Ｈ、Ｆ‐ＣＳ‐ＲＶＹ‐Ｈ、Ｆ‐ＣＳ‐ＧＡＹ‐Ｈ、アンチペイン、ＧＥ２０３７２Ａ、ＧＥ２０３７２Ｂ、キモスタシンＡ、キモスタシンＢ、またはキモスタシンＣである、請求項１‐１５のいずれか一項に記載の洗浄剤組成物。
【請求項１７】
界面活性剤を含む洗濯洗浄剤である、請求項１‐１６のいずれか一項に記載の洗浄剤組成物。
【請求項１８】
前記助剤が、強助剤、特に、ＭＧＤＡ、ＧＬＤＡ、ＮＴＡまたはＤＴＰＡ，ＡＳＭＡ、ＡＳＤＡ、ＡＳＭＰ、ＩＤＡ、ＳＭＡＳ、ＳＥＡＳ、ＳＭＧＬ、ＳＥＧＬ、ＭＩＤＡ、α‐ＡＬＤＡ、ＳＥＤＡ、ＩＳＤＡ、ＰＨＤＡ、ＡＮＤＡ、ＳＬＤＡ，ＴＵＤＡまたはＳＭＤＡである、請求項１‐１７のいずれか一項に記載の洗浄剤組成物。
【請求項１９】
汚れた物品の洗浄のための、請求項１‐１８のいずれか一項に記載の洗浄剤組成物の使用。
【請求項２０】
界面活性剤および／または助剤およびプロテアーゼを含む粒子状洗浄剤組成物を提供し、並びに
洗浄力を増加するために効果的である量の洗浄剤組成物にプロテアーゼ阻害剤を添加すること
を含む、請求項１‐１８のいずれか一項に記載の洗浄剤組成物の調製方法。
【請求項２１】
洗浄剤組成物の調製方法であって、
前記プロテアーゼ阻害剤を含むおよび含まない前記プロテアーゼを含有する洗浄剤組成物の洗浄力を決定することにより、少なくとも一のプロテアーゼおよび少なくとも一のプロテアーゼ阻害剤を試験し、
前記阻害剤ありの洗浄力が、前記阻害剤なしの洗浄力よりも高いようなプロテアーゼおよびプロテアーゼ阻害剤を選択し、および
前記選択されたプロテアーゼおよび前記選択された阻害剤を含む洗浄剤組成物を調製すること
を含む、方法。
【請求項２２】
前記洗浄剤組成物が、液体または顆粒形態である、請求項２１に記載の方法。
【請求項２３】
汚れた物品から卵含有汚れを除去する方法であって、洗浄力を増加するために効果的である量のプロテアーゼおよびプロテアーゼ阻害剤を含む洗浄剤で前記物品を洗浄することを含む、方法。
【請求項２４】
前記物品が、食器または布地である、請求項２３に記載の方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、粒子性洗浄剤組成物およびプロテアーゼに関し、そのような組成物を調製するための方法に関し、および汚れた物品から卵含有汚れを除去するための方法に関する。
【背景技術】
【０００２】
洗濯洗浄および／または自動食器洗浄（ＡＤＷ）についての洗浄力の改善のために洗浄剤組成物中にプロテアーゼを組み込むことは、よく知られている。プロテアーゼは、いくつかの液体洗浄剤中で、乏しい長期間保存安定性を示す傾向にあるかもしれず、およびペプチドアルデヒドのような可逆的プロテアーゼ阻害剤の添加が、ＷＯ９４／０４６５１、ＷＯ９５／２５７９１、ＷＯ９８／１３４５８、ＷＯ９８／１３４５９、ＷＯ９８／１３４６０、ＷＯ９８／１３４６２、ＷＯ０７／１４１７３６、ＷＯ０７／１４５９６３およびＷＯ０９／１０２８５４において開示されている。
【発明の概要】
【０００３】
本発明者らは、プロテアーゼ含有洗浄剤組成物にプロテアーゼ阻害剤の添加が、その洗浄力を改善することを見出した。従って、本発明は、粒子性洗浄剤組成物、プロテアーゼ、およびプロテアーゼ阻害剤を提供する。本発明は、また汚れた物品の洗浄のための粒子性洗浄剤組成物の使用を提供する。
【０００４】
本発明は、また粒子性洗浄剤組成物を調製するための方法を提供し、以下の：
ａ）粒子性洗浄剤組成物およびプロテアーゼを提供すること、および
ｂ）洗浄力を増加するために効果的な量について、プロテアーゼ阻害剤を洗浄剤組成物に添加すること
を含む。
【０００５】
添加の順は、任意であり、およびプロテアーゼ、阻害剤および洗浄剤組成物の別々または混合添加を含む。
【０００６】
さらに、本発明は、洗浄剤組成物を調製するための方法を提供し、以下の：
ａ）プロテアーゼ阻害剤を伴うおよび伴わないプロテアーゼを含む洗浄剤組成物の洗浄力を決定するために少なくとも一つのプロテアーゼおよび少なくとも一つのプロテアーゼ阻害剤を試験すること、
ｂ）阻害剤なしの洗浄力よりも阻害剤ありの洗浄力のほうが高いようなプロテアーゼおよびプロテアーゼ阻害剤を選択すること、および
ｃ）選択されたプロテアーゼおよび選択された阻害剤を含む洗浄剤組成物を調製すること
を含む。
【０００７】
最後に、本発明は、プロテアーゼおよびプロテアーゼ阻害剤を含む洗浄剤溶液で物品を洗浄することを含み、汚れた物品から卵含有汚れを除去するための方法を提供する。
【発明を実施するための形態】
【０００８】
発明の詳細な説明
プロテアーゼ
プロテアーゼは、化学的または遺伝的改変された変異体を含む、動物、植物または微生物由来であってもよい。それは、セリンプロテアーゼ、例えば、１０Ｒプロテアーゼ；Ｓ１Ａプロテアーゼ、またはメタロプロテアーゼ、例えばアルカリ微生物プロテアーゼまたはトリプシン様プロテアーゼであってもよい。アルカリプロテアーゼの例は、スブチリシン、特にバチルス由来のそれら、例えば、スブチリシン  ノボ、スブチリシン  カールスバーグ、スブチリシン  ＢＰＮ’、スブチリシン  ３０９、スブチリシン  １４７、およびスブチリシン  １６８（ＷＯ８９／０６２７９に記載）およびプロテアーゼ  ＰＤ１３８（ＷＯ９３／１８１４０）である。例は、ＷＯ９８／０２０１１５、ＷＯ０１／４４４５２、ＷＯ０１／５８２７５、ＷＯ０１／５８２７６、ＷＯ０３／００６６０２およびＷＯ０４／０９９４０１に記載されている。トリプシン様プロテアーゼは、トリプシン（例えば、ブタまたはウシ由来）およびＷＯ８９／０６２７０およびＷＯ９４／２５５８３に記載されたフザリウムプロテアーゼである。他の例は、ＷＯ９２／１９７２９、ＷＯ９８／２０１１５、ＷＯ９８／２０１１６、ＷＯ９８／３４９４６、ＥＰ０９１７１３０８．１の特許出願に記載のバリアント、およびプロテアーゼ混合物である。
【０００９】
市販のプロテアーゼ（ペプチダーゼ）の例は、カンナーゼ（Ｋａｎｎａｓｅ）（商標）、エバラーゼ（Ｅｖｅｒｌａｓｅ）（商標）、エスペラーゼ（Ｅｓｐｅｒａｓｅ）（商標）、アルカラーゼ（Ａｌｃａｌａｓｅ）（商標）、ニュートラーゼ（Ｎｅｕｔｒａｓｅ）（商標）、デュラザイム（Ｄｕｒａｚｙｍ）（商標）、サビナーゼ（Ｓａｖｉｎａｓｅ）（商標）、オボザイム（Ｏｖｏｚｙｍｅ）（商標）、リカナーゼ（Ｌｉｑｕａｎａｓｅ）（商標）、コロナーゼ（Ｃｏｒｏｎａｓｅ）（商標）、ポラザイム（Ｐｏｌａｒｚｙｍｅ）、ピラーゼ（Ｐｙｒａｓｅ）（商標）、パンクレアティック  トリプシン  ノボ（Ｐａｎｃｒｅａｔｉｃ  Ｔｒｙｐｓｉｎ  ＮＯＶＯ）（ＰＴＮ）、バイオ‐フィード（Ｂｉｏ‐Ｆｅｅｄ）（商標）プロおよびクリアーレンズ（Ｃｌｅａｒ‐Ｌｅｎｓ）（商標）プロ（Ｎｏｖｏｚｙｍｅｓ  Ａ／Ｓ、Ｂａｇｓｖａｅｒｄ，Ｄｅｎｍａｒｋからすべて購入できる）を含む。他の市販のプロテアーゼは、ロノザイム（Ｒｏｎｏｚｙｍｅ）（商標）プロ、マクサターゼ（Ｍａｘａｔａｓｅ）（商標）、マクサカル（Ｍａｘａｃａｌ）（商標）、マクサペン（Ｍａｘａｐｅｍ）（商標）、オプティクリーン（Ｏｐｔｉｃｌｅａｎ）（商標）、プロペラーゼ（Ｐｒｏｐｅｒａｓｅ）（商標）、ピュラフェクト（Ｐｕｒａｆｅｃｔ）（商標）、ピュラフェクトＯＸ（商標）、ピュラフェクト  プライム（商標）、エクセラーゼ（Ｅｘｃｅｌｌａｓｅ）（商標）、ＦＮ２（商標）、ＦＮ３（商標）およびＦＮ４（商標）（Ｇｅｎｅｎｃｏｒ  Ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ  Ｉｎｃ．，Ｇｉｓｔ‐Ｂｒｏｃａｄｅｓ，ＢＡＳＦ，ＤＳＭから購入できる）を含む。他の例は、プライマーゼ（Ｐｒｉｍａｓｅ）（商標）およびデュララーゼ（Ｄｕｒａｌａｓｅ）（商標）である。Ｈｅｎｋｅｌから購入できるＢｌａｐ  Ｒ、Ｂｌａｐ  Ｓ、およびＢｌａｐ  Ｘもまた、例である。
【００１０】
スブチリシン  ３０９のいくつかの具体的なバリアントは、ＢＰＭプライムに従った番号付けを使用し、以下にリスト化したアミノ酸残基の修飾を含んでもよい。
【００１１】
【表１】
2013506021.tif 000002
【００１２】
【表２】
2013506021.tif 000003
【００１３】
一般的に選択された酵素の特徴は、選択された洗浄剤と適合性があるべきであり（すなわち、至適ｐＨ、他の酵素および非酵素成分との適合性など）、および酵素は、有効量が存在すべきである。
【００１４】
阻害剤
阻害剤は、阻害定数、１Ｅ‐１２‐１Ｅ‐０３；１Ｅ‐１１‐１Ｅ‐０４；１Ｅ‐１０‐１Ｅ‐０５；１Ｅ‐１０‐１Ｅ‐０６；１Ｅ‐１２−９．９９Ｅ‐９；１Ｅ‐０９−１Ｅ‐０７のＫｉ（Ｍ、ｍｏｌ／Ｌ）を有してもよい。プロテアーゼ阻害剤は、ペプチドアルデヒド、ペプチドまたはタンパク質タイプまたはボロン酸誘導体のプロテアーゼ阻害剤であってもよい。ペプチドアルデヒドは、好ましくは、それぞれのプロテアーゼの活性部位のために、特別に設計される。ペプチドアルデヒドは、２、３，４，５または６アミノ酸残基を含んでもよい。ペプチドアルデヒドのＮ末端は、Ｈでもよく、または、好ましくは、ホルミル、アセチル、ベンゾイル、トリフルオロアセチル、フルオロメトキシ  カルボニル、メトキシスクシニル、芳香族および脂肪族ウレタン保護基、ベンジルオキシカルボニル、ｔ‐ブチルオキシカルボニル、アダマンチルオキシカルボニル、ｐ‐メトキシベンジルカルボニル（ＭＯＺ）、ベンジル（Ｂｎ）、ｐ‐メトキシベンジル（ＰＭＢ）またはｐ‐メトキシフェニル（ＰＭＰ）、メチルカルバメートまたはメチルウレア基から選択されるＮ末端保護基によって保護されてもよい。
【００１５】
従って、ペプチドアルデヒドは、式Ｂ2‐Ｂ1‐Ｂ0‐Ｒを有してもよく、ここで：
Ｒは、水素、ＣＨ3、ＣＸ3、ＣＨＸ2、またはＣＨ2Ｘ、ここでＸは、ハロゲン原子である；
Ｂ0は、一のアミノ酸残基である；
Ｂ1は、一のアミノ酸残基である；および
Ｂ2は、一またはそれ以上のアミノ酸残基からなり（好ましくは一または二）、場合により、Ｎ末端保護基を含む。
【００１６】
上の式において、Ｂ0は、場合により脂肪族または芳香族側鎖、好ましくはＤ‐またはＬ‐チロシン（ｐ‐チロシン）、ｍ‐チロシン、３，４‐ジヒドロキシフェニルアラニン、ロイシン、フェニルアラニン、バリン、メチオニン、ノルバリンまたはノルロイシンＬまたはＤ‐アミノ酸で置換されたＬまたはＤ‐アミノ酸であってもよい。
【００１７】
Ｂ1は、場合により、脂肪族側鎖、好ましくはアラニン、システイン、グリシン、プロリン、セリン、スレオニン、バリン、ノルバリンまたはノルロイシンで置換された小さな残基でもよい。
【００１８】
Ｂ2は、小さな脂肪族側鎖（好ましくは、グリシン、アラニン、スレオニン、バリンもしくはロイシン）またはアルギニンもしくはグルタミンのいずれか；場合により、以下に記載された「アロメート（ａｒｏｍａｔｅ）」又は「小さな（ｓｍａｌｌ）」保護基から選択される、Ｎ末端保護基を含む一のＢ２残基でもよく；または、Ｂ２が、Ｂ３‐Ｂ２’の二残基でもよく、ここでＢ２’が、上のＢ２同様であり、およびＢ３が、場合により、以下に記載された「小さな」保護基から選択されるＮ‐保護基を含む疎水性または芳香族側鎖（好ましくは、フェニルアラニン、チロシン、トリプトファン、ｍ‐チロシン、３，４‐ジハイドロキシフェニルアラニン、フェニルグリシン、ロイシン、バリン、ノルバリン、ノルロイシン、またはイソロイシン）残基である。もっとも好ましいＢ２は、アルデヒドから起算して「四番目の位置」に、芳香族または疎水性システムを位置することを許容し、これは、Ｎ‐（アロメート）‐Ｂ２であり、ここでＢ２は、上記同様で、および（アロメート）保護基は、ベンジルオキシカルボニル（Ｃｂｚ）、ｐ‐メトキシベンジルカルボニル（ＭＯＺ）、ベンジル（Ｂｎ）、ベンゾイル（Ｂｚ）、ｐ‐メトキシベンジル（ＰＭＢ）またはｐ‐メトキシフェニル（ＰＭＰ）などの芳香族または疎水性基を含む。代替的に、もっとも好ましくは、Ｂ2は、Ｎ‐「小さな」‐Ｂ３‐Ｂ２’形のジペプチドでもよく、ここで、Ｂ２’およびＢ３は、上記のようにホルミル、アセチル、メチロキシ、またはメチロキシカルボニルのような結合された「小さな」Ｎ末端保護基を有する。
【００１９】
代替的に、ペプチドアルデヒドは、ＷＯ９８／１３４５９に記載されたような式：
Ｚ‐Ｂ‐ＮＨ‐ＣＨ（Ｒ）‐Ｃ（Ｏ）Ｈ、ここで
Ｂは、１〜５のアミノ酸部分を含むペプチド鎖；
Ｚは、ホスホロアミダート［（Ｒ’’Ｏ）2（Ｏ）Ｐ‐］、スルフェンアミド［（ＳＲ’’）2‐］、スルホンアミド［Ｒ’’（Ｏ）2Ｓ‐］、スルホン酸［ＳＯ3Ｈ］、ホスフィンアミド［（Ｒ’’）2（Ｏ）Ｐ‐］、スルファモイル誘導体［Ｒ’’Ｏ（Ｏ）2Ｓ‐］、チオウレア［（Ｒ’’）2Ｎ（Ｏ）Ｃ‐］、チオカルバメート［Ｒ’’Ｏ（Ｓ）Ｃ‐］、ホスホネート［Ｒ’’‐Ｐ（Ｏ）ＯＨ］、アミドホスフェート［Ｒ’’Ｏ（ＯＨ）（Ｏ）Ｐ‐］、カルバメート（Ｒ’Ｏ（Ｏ）Ｃ‐）、及びウレア（Ｒ’’ＮＨ（Ｏ）Ｃ‐）からなる群から選択されるＮキャッピング部分であり、ここで、それぞれのＲ’’は、直鎖または分枝のＣ1‐Ｃ6の非置換型アルキル、フェニル、Ｃ7‐Ｃ9アルキル、およびシクロアルキル部分からなる群から独立して選択され、ここでシクロアルキル環は、Ｃ4‐Ｃ8の範囲でよく、およびＯ、Ｎ、およびＳからなる群から選択される一またはそれ以上のヘテロ原子（好ましいＲ’’は、メチル、エチル、ベンジルからなる群から選択される）；およびＲは、直鎖または分枝のＣ1‐Ｃ6の非置換型アルキル、フェニル、およびＣ7−Ｃ9アルキルアリール部分からなる群から選択される。
【００２０】
好ましいＲ部分は、メチル、イソ‐プロピル、ｓｅｃ‐ブチル、イソ‐ブチル、‐Ｃ6Ｈ5、‐ＣＨ2‐Ｃ6Ｈ5、および‐ＣＨ2ＣＨ2‐Ｃ6Ｈ5からなる群から選択され、そしてそれは、カルボン酸基をアルデヒド基に変換することにより、それぞれアミノ酸アラニン、バリン、Ｈｅ、ロイシン、フェニルグリシン、フェニルアラニン、およびホモフェニルアラニンに由来してもよい。一方では、そのような部分は、そのため、アミノ酸ではなく（およびそれらは、アミノ酸の前駆体から合成されてもよく、されなくてもよい）、そこで有用な阻害剤の例示の単純化の目的で、阻害剤のアルデヒドの一部は、類似のアミノ酸後、「Ｈ」の追加によりアミノ酸由来として示される（例えば、「‐ＡｌａＨ」は、化学成分「‐ＮＨＣＨ（ＣＨ3）Ｃ（Ｏ）Ｈ」を示す）。
【００２１】
好ましいＢペプチド鎖は、一般式：
Ｚ‐Ａ5‐Ａ4‐Ａ3‐Ａ2‐Ａ1‐ＮＨ‐ＣＨ（Ｒ）‐Ｃ（Ｏ）Ｈ
に従ったアミノ酸配列を有するペプチド鎖からなる群から選択され、以下のようなアミノ酸が存在する場合：
Ａ1は、アラニン、グリシンから選択され；
Ａ2は、仮に存在するなら、バリン、アラニン、グリシン、イソロイシンから選択され；
Ａ3は、仮に存在するなら、フェニルアラニン、ロイシン、バリン、イソロイシンから選択され；
Ａ4は、仮に存在するなら、任意のアミノ酸、しかし好ましくは、グリシン、アラニンから選択され；
Ａ5は、仮に存在するなら、任意のアミノ酸、しかし好ましくは、グリシン、アラニン、ロイシン
である。
【００２２】
アルデヒドは、対応するアミノ酸から調製されてもよく、それによって前記アミノ酸のＣ末端は、カルボキシル基からアルデヒド基に変換される。そのようなアルデヒドは、例えば、ＵＳ５０１５６２７、ＥＰ１８５９３０、ＥＰ５８３５３４、およびＤＥ３２００８１２において記載されているような既知のプロセスよって、調製されてもよい。
【００２３】
前記プロテアーゼ阻害剤のＮ末端は、カルバメート、ウレア、スルホンアミド、ホスホンアミド、チオウレア、スルフェンアミド、スルホン酸、ホスフィンアミド、チオカルバメート、アミドホスフェート、およびホスホンアミドからなる群から選択されるＮキャッピング部分保護基の一つによって保護される。しかしながら、本発明の一つの実施態様において、前記プロテアーゼ阻害剤のＮ末端は、メチル、エチル、またはベンジルカルバメート［ＣＨ3Ｏ‐（Ｏ）Ｃ‐；ＣＨ3ＣＨ2Ｏ‐（Ｏ）Ｃ‐；またはＣ6Ｈ5ＣＨ2Ｏ‐（Ｏ）Ｃ‐］、メチル、エチルまたはベンジルウレア［ＣＨ3ＮＨ‐（Ｏ）Ｃ‐；ＣＨ3ＣＨ2ＮＨ‐（Ｏ）Ｃ‐；またはＣ6Ｈ5ＣＨ  ＮＨ‐（Ｏ）Ｃ‐］、メチル、エチルまたはベンジルスルフォンアミド［ＣＨ3ＳＯ2‐；ＣＨ3ＣＨ2ＳＯ2‐；またはＣ6Ｈ5ＣＨ2ＳＯ2‐］およびメチル、エチルまたはベンジルアミドフォスフェート［ＣＨ3Ｏ（ＯＨ）（Ｏ）Ｐ‐；ＣＨ3ＣＨ2Ｏ（ＯＨ）（Ｏ）Ｐ‐；またはＣ6Ｈ5ＣＨ2Ｏ（ＯＨ）（Ｏ）Ｐ‐］基により、保護される。
【００２４】
さらに特に、ペプチドアルデヒドは、Ｚ‐ＲＡＹ‐Ｈ、Ａｃ‐ＧＡＹ‐Ｈ、Ｚ‐ＧＡＹ‐Ｈ、Ｚ‐ＧＡＬ‐Ｈ、Ｚ‐ＶＡＬ‐Ｈ、Ｚ‐ＶＡＬ‐ＣＦ3、Ｚ‐ＧＡＦ‐Ｈ、Ｚ‐ＧＡＦ‐ＣＦ3、Ｚ‐ＧＡＶ‐Ｈ、Ｚ‐ＧＧＹ‐Ｈ、Ｚ‐ＧＧＦ‐Ｈ、Ｚ‐ＲＶＹ‐Ｈ、Ｚ‐ＬＶＹ‐Ｈ、Ａｃ‐ＬＧＡＹ‐Ｈ、Ａｃ‐ＦＧＡＹ‐Ｈ、Ａｃ‐ＹＧＡＹ‐Ｈ、Ａｃ‐ＦＧＡＬ‐Ｈ、Ａｃ‐ＦＧＡＦ‐Ｈ、Ａｃ‐ＦＧＶＹ‐Ｈ、Ａｃ‐ＦＧＡＭ‐Ｈ、Ａｃ‐ＷＬＶＹ‐Ｈ、ＭｅＯ‐ＣＯ‐ＶＡＬ‐Ｈ、ＭｅＮＣＯ‐ＶＡＬ‐Ｈ、ＭｅＯ‐ＣＯ‐ＦＧＡＬ‐Ｈ、ＭｅＯ‐ＣＯ‐ＦＧＡＦ‐Ｈ、ＭｅＳＯ2‐ＦＧＡＬ‐Ｈ、ＭｅＳＯ2‐ＶＡＬ‐Ｈ、ＰｈＣＨ2Ｏ（ＯＨ）（Ｏ）Ｐ‐ＶＡＬ‐Ｈ、ＥｔＳＯ2‐ＦＧＡＬ‐Ｈ、ＰｈＣＨ2ＳＯ2‐ＶＡＬ‐Ｈ、ＰｈＣＨ2Ｏ（ＯＨ）（Ｏ）Ｐ‐ＬＡＬ‐Ｈ、ＰｈＣＨ2Ｏ（ＯＨ）（Ｏ）Ｐ‐ＦＡＬ‐Ｈ、およびＭｅＯ（ＯＨ）（Ｏ）Ｐ‐ＬＧＡＬ‐Ｈでもよく、ここで、アミノ酸は、一文字表記により表示され（例、Ｆ＝フェニルアラニン、Ｙ＝チロシン、Ｌ＝ロイシンなど）、Ｚは、ベンジルオキシカルボニル、Ｍｅは、メチル、Ｅｔは、エチル、およびＡｃはアセチルである。
【００２５】
代替的に、ペプチドアルデヒドは、ＰＣＴ／ＥＰ２００９／０６４９７２に記載されたような式を有してもよい：
Ｐ‐Ｏ‐（Ａi‐Ｘ’）n‐Ａn+1‐Ｑ
ここで、Ｑは、水素、ＣＨ3、ＣＸ3、ＣＨＸ2、またはＣＨ2Ｘ、ここでＸは、ハロゲン原子；ここで一のＸ’は、「二重Ｎキャッピング基」ＣＯ、ＣＯ‐ＣＯ、ＣＳ、ＣＳ‐ＣＳまたはＣＳ‐ＣＯ、もっとも好ましいウリド（ＣＯ）、および他のＸ’はなく、ここで、ｎ＝１‐１０、好ましくは２‐５、もっとも好ましくは２、ここで、ＡiおよびＡn+1のそれぞれは、以下の構造：
Ｘ＝‐ＣＯ‐の右の方の残基について‐ＮＨ‐ＣＲ‐ＣＯ‐
Ｘ＝‐ＣＯ‐の左の方の残基について‐ＣＯ‐ＣＲ‐ＮＨ‐
を有するアミノ酸残基であり、
ここでＲは、Ｈ‐または場合により置換されるアルキル、またはアルキルアリール基、そしてそれは、場合によりヘテロ原子を含んでもよく、および場合によりＮ原子と結合してもよく、および
ここで、Ｐは、水素または任意のＣ末端保護基である。
【００２６】
そのようなペプチドアルデヒドの例は、α‐ＭＡＰＩ、β‐ＭＡＰＩ、Ｆ‐ウレア‐ＲＶＹ‐Ｈ、Ｆ‐ウレア‐ＧＧＹ‐Ｈ、Ｆ‐ウレア‐ＧＡＦ‐Ｈ、Ｆ‐ウレア‐ＧＡＹ‐Ｈ、Ｆ‐ウレア‐ＧＡＬ‐Ｈ、Ｆ‐ウレア‐ＧＡ‐Ｎｖａ‐Ｈ、Ｆ‐ウレア‐ＧＡ‐Ｎｌｅ‐Ｈ、Ｙ‐ウレア‐ＲＶＹ‐Ｈ、Ｙ‐ウレア‐ＧＡＹ‐Ｈ、Ｆ‐ＣＳ‐ＲＶＦ‐Ｈ、Ｆ‐ＣＳ‐ＲＶＹ‐Ｈ、Ｆ‐ＣＳ‐ＧＡＹ‐Ｈ、アンチペイン（Ａｎｔｉｐａｉｎ）、ＧＥ２０３７２Ａ、ＧＥ２０３７２Ｂ、キモスタチンＡ、キモスタチンＢ、およびキモスタチンＣを含む。さらに、ペプチドアルデヒドの例は、ＥＰ０８１６９０６３．８およびＰＣＴ／ＥＰ２００９／０５３５８０、ＷＯ９４／０４６５１、ＷＯ９８／１３４５９、ＷＯ９８／１３４６１、ＷＯ９８／１３４６２、ＷＯ０７／１４５９６３、（Ｐ＆Ｇ）であり、参照によって明細書に組み込まれる。
【００２７】
ペプチドまたはタンパク質タイプのプロテアーゼ阻害剤は、ＲＡＳＩ、ＢＡＳＩ、ＷＡＳＩ（米、大麦および小麦の二官能基αアミラーゼ／スブチリシン阻害剤）またはＣＩ２またはＳＳＩ、または少なくとも８０％、８５％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、または９９％アミノ酸配列相同性であるポリペプチドであってもよい。
【００２８】
ボロン酸誘導体は、式Ｂ（ＯＨ）2‐Ｃ6Ｈ4‐ＣＯ‐Ｒを有してもよく、ここで‐Ｃ6Ｈ4‐は、ｍ‐またはｐ‐位について付着する結合を有し、およびＲは、水素、ヒドロキシ、Ｃ1‐Ｃ6アルキル置換Ｃ1‐Ｃ6アルキル、Ｃ1‐Ｃ6アルケニルおよび置換Ｃ1‐Ｃ6アルケニル、例えば、４‐ホルミル‐フェニル‐ボロン酸（４‐ＦＰＢＡ）を有する。他の例は、ＷＯ９６／０４１８５９において開示され、参照により明細書に組み込まれる。
プロテアーゼ、阻害剤および洗浄剤成分は、個別に処方されまたは組み合わせて処方される。
【００２９】
用量
洗浄剤を洗浄中に添加してもよい（ｇ  ｄｅｔ／Ｌ  ｗａｓｈ（洗浄溶液または洗浄剤溶液））：０．０１‐１００；もっとも好ましくは：１‐１５である。
【００３０】
プロテアーゼは、１Ｅ‐０９−２Ｅ‐０３；１Ｅ‐０９−５Ｅ‐０４；１Ｅ‐０８−３Ｅ‐０４；１Ｅ‐０８−８Ｅ‐０４；１Ｅ‐０７−５Ｅ‐０４；１Ｅ‐０７−２Ｅ‐０４；または５Ｅ‐０７−１．５Ｅ‐０４の洗浄剤濃度（ｍｏｌ／ｋｇ  ｄｅｔ）で存在してもよい。または、プロテアーゼは、０．０００１％‐５０％；０．００１％‐２５％；０．０１％‐２０％；または０．０５％‐１５％の洗浄剤中のサビナーゼ（商標）１２Ｔに相当する濃度（Ｗ％）で存在してもよい。ＡＤＷについては、範囲は、１Ｅ‐０７−２Ｅ‐０３；２Ｅ‐０７−８Ｅ‐０４；４Ｅ‐０７−５Ｅ‐０４；または１Ｅ‐０６−５Ｅ‐０４（ｍｏｌ／ｋｇ  ｄｅｔ）であってもよい。ＡＤＷにおいて、０．００１％‐５０％；０．０１％‐２５％；０．０２％‐２０％；または０．１％‐１５％洗浄剤中のサビナーゼ１２Ｔに相当する。洗濯において、０．０００１％‐５０％；０．００１％‐２０％；０．０１％‐１５％；または０．０５％‐１０％洗浄剤中のサビナーゼ１２Ｔに相当する。
【００３１】
プロテアーゼは、０．１‐２０００；；０．１‐１０００；０．１‐７００、０．２‐７５０または０．２‐５００の洗浄中の濃度（ｎＭ）で、存在してもよい。ＡＤＷのための範囲は、５‐２０００；；１０‐１０００；または２０‐７５０（ｎＭ）であってもよい。洗濯の範囲は、０．１‐２００；；０．１‐１５０；または０．２‐１００（ｎＭ）であってもよい。
【００３２】
阻害剤とプロテアーゼの比率は、０．１‐１０００；０．１‐５００；０．２‐５０；０．２‐２５、例えば、０．５‐１５または１．５‐５（ｍｏｌ  阻害剤／ｍｏｌ  プロテアーゼ）である。
【００３３】
洗浄剤中の阻害剤の濃度は、１Ｅ‐１０−１；１Ｅ‐０９−０．０１；１Ｅ‐０８‐１Ｅ‐０３；１Ｅ‐０７‐１Ｅ‐０３；または１Ｅ‐０６‐５Ｅ‐０４（ｍｏｌ／ｋｇ  ｄｅｔ）である。ＡＤＷのための範囲は、１Ｅ‐０８−１；２Ｅ‐０８−０．５；５Ｅ‐０８−０．０１；１Ｅ‐０７‐５Ｅ‐０３；または５Ｅ‐０７‐５Ｅ‐０４（ｍｏｌ／ｋｇ  ｄｅｔ）である。洗濯のため、範囲は、１Ｅ‐１０−１；１Ｅ‐０９−０．１；１Ｅ‐０８−０．０１；２Ｅ‐０８‐１Ｅ‐０３；または１Ｅ‐０８‐１Ｅ‐０４（ｍｏｌ／ｋｇ  ｄｅｔ）であってもよい。または阻害剤様ペプチドアルデヒドは、１Ｅ‐０５‐５Ｅ＋０５または１Ｅ‐０５−１Ｅ＋０５；１Ｅ‐０４−２．５Ｅ＋０５または１Ｅ‐０４‐１０００；２Ｅ‐０３‐５０００または０．０１‐５００；０．０２‐５０００または０．１‐５００；０．１‐１５００または１‐２５０の洗浄剤中の濃度（ｐｐｍ）で存在してもよい。ＡＤＷのための範囲は、１Ｅ‐０３‐５Ｅ＋０５；１Ｅ‐０３−２．５Ｅ＋０．５；０．０１‐５０００；０．０２‐２５００；または０．２‐１５００（ｐｐｍ）であってもよい。洗濯の範囲は、１Ｅ‐０５‐５Ｅ＋０５；１Ｅ‐０４−５Ｅ＋０４；２Ｅ‐０３‐５０００；０．０１‐５００；または０．１‐２５０（ｐｐｍ）であってもよい。
【００３４】
阻害定数（ｋｉ、Ｍ）（Ｌ／ｋｇ）で割った洗浄剤中の阻害剤の濃度（ｍｏｌ／ｋｇ  ｄｅｔ）は、０．０１‐１Ｅ＋０８；：０．１‐２Ｅ＋０７；１‐２Ｅ＋０６または０．１‐１Ｅ＋０６；１‐１Ｅ＋０６、１０‐１Ｅ＋０５または５‐２Ｅ＋０５（Ｌ／ｋｇ）である。ＡＤＷのための範囲は、０．５‐１Ｅ＋０８；：１‐２Ｅ＋０７；１０‐２Ｅ＋０６；または２５‐１Ｅ＋０６（Ｌ／ｋｇ）であってもよい。洗濯のための範囲は、０．０１‐１Ｅ＋０８；：０．１‐２Ｅ＋０７；１‐１Ｅ＋０６；または５‐２Ｅ＋０５（Ｌ／ｋｇ）であってもよい。
【００３５】
洗浄剤組成物
粒子性洗浄剤組成物は、顆粒または粉末、または粉末／顆粒を圧縮した錠剤、ブリケット（ｂｒｉｑｕｅｔｔｅ）ソープバー（ｓｏａｐｂａｒ）などであってもよい。プロテアーゼおよび阻害剤は、洗浄剤に別々に添加してもよく、またはそれらが同じ顆粒中に含まれる共造粒（ｃｏ‐ｇｒａｎｕｌａｔｅ）として添加してもよい。阻害剤は、また溶液または分散液として、例えば非イオン性界面活性剤中に、粉末上に噴霧でき、また他の方法で洗浄剤に添加できる。
【００３６】
本組成物は、錠剤、バーまたは多区画（ｍｕｌｔｉ‐ｃｏｍｐａｒｔｍｅｎｔ）パウチを含むパウチ形態であってもよい。組成物は、粉末、例えば、凝集粒子のような、自由流動性粉末（ｆｒｅｅ‐ｆｌｏｗｉｎｇ  ｐｏｗｄｅｒ）、スプレードライ粉末、カプセル封入体（ｅｎｃａｐｓｕｌａｔｅ）、押出成形物（ｅｘｔｒｕｄａｔｅ）、針状晶、ヌードル、フレーク、または任意のそれらの組み合わせの形態であってもよい。
【００３７】
場合により洗浄剤成分を含む、プロテアーゼおよび／または阻害剤の非粉塵性造粒は、例えば、ＵＳ４１０６９９１およびＵＳ４６６１４５２中に記載されたように、製造されてもよい。それらは、例えば、ＷＯ００／０１７９３、ＷＯ０１／０２５４１２、ＷＯ０１／２５４１１、ＷＯ０１／０４２７９、ＷＯ０４／０６７７３９およびＷＯ０４／００３１８８中に記載されたように、当業者に知られた方法により被覆されてもよい。
【００３８】
水中に１、２、３、４または５ｇ／Ｌの濃度で溶解した時、洗浄剤溶液は、ｐＨ６‐１１を示し、特に洗濯用７‐９およびＡＤＷ用７‐１１である。
【００３９】
洗浄剤組成物は、手洗いまたは機械洗浄のための洗濯または食器洗浄洗浄剤として処方されてもよい。いくつかの実施態様において、それは液体または顆粒洗浄剤であってもよい。
洗浄剤組成物は、界面活性剤および／または洗浄助剤（ｂｕｉｌｄｅｒ）、典型的に両方を含む。
【００４０】
洗浄剤組成物について、プロテアーゼは、０．００１‐１００ｍｇ／Ｌ；０．０２‐５０ｍｇ／Ｌ；０．０５‐２５ｍｇ／Ｌに相当する量（１Ｌ洗浄あたりのｍｇ酵素タンパク質）について存在してもよい。ＡＤＷのための範囲は、０．１‐１００ｍｇ／Ｌ；０．２‐５０ｍｇ／Ｌ；または０．５‐２５ｍｇ／Ｌであってもよい。洗濯のための範囲は、０．００１‐１００ｍｇ／Ｌ：０．００２‐２０ｍｇ／Ｌ、または０．００５‐１０ｍｇ／Ｌであってもよい。
【００４１】
洗浄剤は、ＷＯ０９／０９２６９９、ＥＰ１７０５２４１、ＥＰ１３８２６６８、ＷＯ０７／００１２６２、ＵＳ６４７２３６４、ＷＯ０４／０７４４１９またはＷＯ０９／１０２８５４中に記載されたような処方でもよい。
【００４２】
他の有用な洗浄剤処方は、ＷＯ０９／１２４１６２、ＷＯ０９／１２４１６３、ＷＯ０９／１１７３４０、ＷＯ０９／１１７３４１、ＷＯ０９／１１７３４２、ＷＯ０９／０７２０６９、ＷＯ０９／０６３３５５、ＷＯ０９／１３２８７０、ＷＯ０９／１２１７５７、ＷＯ０９／１１２２９６、ＷＯ０９／１１２２９８、ＷＯ０９／１０３８２２、ＷＯ０９／０８７０３３、ＷＯ０９／０５００２６、ＷＯ０９／０４７１２５、ＷＯ０９／０４７１２６、ＷＯ０９／０４７１２７、ＷＯ０９／０４７１２８、ＷＯ０９／０２１７８４、ＷＯ０９／０１０３７５、ＷＯ０９／０００６０５、ＷＯ０９／１２２１２５、ＷＯ０９／０９５６４５、ＷＯ０９／０４０５４４、ＷＯ０９／０４０５４５、ＷＯ０９／０２４７８０、ＷＯ０９／００４２９５、ＷＯ０９／００４２９４、ＷＯ０９／１２１７２５、ＷＯ０９／１１５３９１、ＷＯ０９／１１５３９２、ＷＯ０９／０７４３９８、ＷＯ０９／０７４４０３、ＷＯ０９／０６８５０１、ＷＯ０９／０６５７７０、ＷＯ０９／０２１８１３、ＷＯ０９／０３０６３２、およびＷＯ０９／０１５９５１中に記載される。
【００４３】
他の洗浄剤組成物
洗浄剤は、例えば、ＷＯ０９／１０２８５４に記載されたような、ベンザトリオール、金属塩並びに複合体、およびケイ酸塩のような金属保護剤を含んでもよい。
【００４４】
洗浄剤組成物は、少なくとも一のグリコシルヒドロラーゼファミリー６１（ＧＨ６１）ポリペプチドを含み、ここで洗浄剤組成物は、そのような洗濯、特に、家庭洗濯、食器洗浄または硬質表面のクリーニングの特定の使用のために適合されてもよい。洗浄剤組成物は、少なくとも一のＧＨ６１ポリペプチドを含み、ここで前記洗浄剤の酵素洗浄力利益は、ＧＨ６１ポリペプチドなしの洗浄剤と比較して、少なくとも１のデルタリミッションユニット（ｄｅｌｔａ  ｒｅｍｉｓｓｉｏｎ  ｕｎｉｔ）により増強される。試験材料のリミッション（Ｒ）は、Ｚｅｉｓｓ  ＭＣＳ５２１  ＶＩＳ  分光光度計を使用して、４６０ｎｍで測定した。測定は、製造者プロトコールに従って行った。リミッション値は、リファレンスと選択された波長におけるサンプルの差異として計算される：
ｄｅｌｔａ＿Ｒ＝Ｒsample‐Ｒref
【００４５】
洗浄剤は、「洗浄力酵素（ｄｅｔｅｒｇｅｎｃｙ  ｅｎｚｙｍｅ）」の段落において記載された酵素の一またはそれ以上を含む。
【００４６】
洗浄剤は、一またはそれ以上のポリマーを含む。例は、カルボキシメチルセルロースなどの修飾ポリサッカライド、エチル（ヒドロキシエチル）セルロース、カルボキシメチルイヌリン、グラフト化スターチコポリマー、ポリ（ビニルピロリドン）、ポリ（エチレングリコール）、ポリ（プロピレングリコール）、ポリ（ビニルアルコール）、ポリ（ビニルピリジン‐Ｎ‐オキシド）、ポリ（ビニルイミダゾール）、ポリアクリレートなどのポリカルボキシレート、マレイン／アクリルおよび２‐アクリルアミド‐２‐メチルプロパンスルホン酸コポリマーおよびラウリルメタクリレート／アクリル酸コポリマーである。
【００４７】
洗浄剤は、漂白システムを含んでもよい。漂白システムは、塩素または臭素放出剤に基づいてもよく、そしてそれは、洗浄剤の１‐５ｗｔ％存在してもよい。もし、必要ならば、マンガン複合体などの漂白触媒、例えば、ＥＰ４５８３９７に記載されたようなＭｎ‐Ｍｅ  ＴＡＣＮ、または、ＵＳ５０４１２３２およびＵＳ５０４７１６３のスルホンイミンを、組み込んでもよい。これは、過炭酸塩漂白顆粒から離れてカプセル化した形態で存在する。コバルト触媒もまた、使用される。また、漂白システムは、過ホウ酸塩または過炭酸塩などのＨ2Ｏ2源を含み、そしてそれはテトラアセチルエチレンジアミン、またはノナノイルオキシベンゼンスルホネートなどの過酸成形（ｐｅｒａｃｉｄ‐ｆｏｒｍｉｎｇ）漂白活性剤と組み合わせてもよい。代替的に、漂白システムは、例えば、アミド、イミド、またはスルホンタイプの過酸を含む。食器洗浄洗浄剤は、典型的に１０‐３０％の漂白システムを含む。
【００４８】
本発明の洗浄剤組成物は、一またはそれ以上の漂白剤を含んでもよい。特定の粉末洗浄剤は、一またはそれ以上の漂白剤を含んでもよい。適当な漂白剤は、他の光漂白、予備成形（ｐｒｅ‐ｆｏｒｍｅｄ）過酸、過酸化水素源、漂白活性剤、過酸化水素、漂白触媒およびそれらの混合物を含む。一般的に、漂白剤を使用されるとき、本発明の組成物は、対象洗浄組成の、約０．１重量％から約５０重量％またはさらに約０．１重量％から約２５重量％漂白剤を含んでもよい。適当な漂白剤の例は：
（１）他の光漂白は、例えばビタミンＫ３である；
（２）予備成形過酸：適当な予備成形過酸は、これらに限定されないが、過カルボン酸および塩、過炭酸および塩、ペルイミド酸および塩、過硫酸および塩、例えば、オキソン、およびそれらの混合物からなる群から選択される化合物を含む。適当な過カルボン酸は、式、Ｒ‐（Ｃ＝Ｏ）Ｏ‐Ｏ‐Ｍを有する疎水性および親水性過酸を含み、ここで、Ｒはアルキル基、場合により分枝し、過酸が疎水性のとき、６から１４炭素原子、または８から１２炭素原子を有し、および過酸が親水性のとき、６未満の炭素原子、さらに４未満の炭素原子であり、およびＭは、カウンターイオン、例えば、ナトリウム、カリウム、または水素である；
（３）過酸化水素源、例えば、過ホウ酸のナトリウム塩（通常、一または四水和物）、過炭酸塩、過硫酸塩、過リン酸塩、ケイ酸塩およびそれらの混合物などのアルカリ金属塩を含む無機過酸化水素化物塩である。本発明の一つの態様において、無機過酸化水素化物塩は、過ホウ酸のナトリウム塩、過炭酸塩およびそれらの混合物からなる群から選択される。無機過酸化水素化物塩それが使用される場合には、典型的にすべての組成物の０．０５％‐４０ｗｔ％の量、または１‐３０ｗｔ％の量で存在し、および典型的に、被覆されてもよい結晶性の固体のような組成物として組み込まれる。好適な被覆は、アルカリ金属ケイ酸塩、炭酸塩またはホウ酸塩またはそれらの混合物などの無機塩、または水溶性または分散ポリマー、ワックス、オイル、または脂肪石鹸（ｆａｔｔｙ  ｓｏａｐ）などの有機材料を含む。有用な漂白組成物は、ＵＳ５５７６２８２およびＵＳ６３０６８１２中に記載されている；
（４）漂白活性剤は、Ｒ‐（Ｃ＝Ｏ）‐Ｌを有し、ここでＲは、アルキル基、場合により分枝し、漂白活性剤が疎水性のとき、６‐１４炭素原子、または８‐１２炭素原子を有し、漂白活性剤が親水性のとき、６未満の炭素原子、またはさらに４未満の炭素原子を有し、およびＬは、脱離基である。適当な脱離基の例は、安息香酸、およびその誘導体‐特に、ベンゼンスルホネートである。適当な漂白活性剤は、ドデカノイルオキシベンゼンスルホネート、デカノイルオキシベンゼンスルホネート、デカノイルオキシ安息香酸またはそれらの塩、３，５，５‐トリメチルヘキサノイルオキシベンゼンスルホネート、テトラアセチルエチレンジアミン（ＴＡＥＤ）、ノナノイルオキシベンゼンスルホネート（ＮＯＢＳ）、ノナノイルオキシベンゼンスルホネートナトリウム（ＳＮＯＢＳ）、ベンゾイルオキシベンゼンスルホネートナトリウム（ＳＢＯＢＳ）およびＵＳ４７５１０１５中に記載されたカチオン性過酸前駆体（ＳＰＣＣ）を含む。適当な漂白活性剤は、またＷＯ９８／１７７６７中に開示される。任意の漂白活性剤が、使用されてもよい一方、本発明の一つの態様において、対象となる洗浄組成物は、ＮＯＢＳ、ＴＡＥＤまたはそれらの混合物を含み；および
（５）過酸から酸素原子を許容できおよび酸化される基質に酸素原子を転移できる漂白触媒が、ＷＯ０８／００７３１９に記載されている（参照によりここで取り込まれる）。適当な漂白触媒は、これに限定されないが、イミニウムカチオンおよびポリイオン；イミニウム両性イオン；修飾アミン；修飾アミンオキシド；Ｎ‐スルホニルイミン；Ｎ‐ホスホニルイミン；Ｎ‐アシルイミン；チアジアゾールジオキシド；ペルフルオロイミン；環状糖ケトン（ｃｙｃｌｉｃ  ｓｕｇｅｒ  ｋｅｔｏｎｅ）およびそれらの混合物を含む。いくつかの実施態様において、漂白触媒は、以下の式：
【００４９】
【化１】
2013506021.tif 000004
【００５０】
（ｉｉｉ）およびそれらの混合物
を有する有機触媒からなる群から選択される有機触媒であってもよい。ここで、それぞれのＲ1は、独立して、９‐２４炭素を含む分枝アルキル基または１１‐２４炭素を含む直鎖アルキル基、好ましくはそれぞれのＲ1は、独立して、９‐１８炭素を含む分枝アルキル基または１１‐１８炭素を含む直鎖アルキル基、より好ましくは、それぞれのＲ1は、独立して、２‐プロピルヘプチル、２‐ブチルオクチル、２‐ペンチルノニル、２‐ヘキシルデシル、ｎ‐ドデシル、ｎ‐テトラデシル、ｎ‐ヘキサデシル、ｎ‐オクタデシル、イソ‐ノニル、イソ‐デシル、イソ‐トリデシルおよびイソペンタデシルである。漂白触媒は、特に、０．０００５重量％‐０．２重量％、０．００１重量％‐０．１重量％、または０．００５重量％‐０．０５重量％のレベルで洗浄剤組成物を含むであろう。
【００５１】
過酸および／または漂白活性剤それが存在する場合には、一般的に組成物に基づいて約０．１‐６０ｗｔ％、約０．５‐４０ｗｔ％または０．６‐１０ｗｔ％の量で組成物中に存在する。一またはそれ以上の疎水性過酸またはその前駆体は、一またはそれ以上の疎水性過酸またはその前駆体との組み合わせで使用されてもよい。
【００５２】
過酸化水素源および過酸または漂白活性剤の量は、利用できる（過酸源由来の）酸素と過酸との分子比が、１：１から３５：１、または２：１から１０：１のように、選択されてもよい。
【００５３】
洗浄剤は、ＷＯ０７／００１２６２に記載された３，４‐ジハイドロイソキノリンの両イオン硫酸塩誘導体のような有機触媒を含んでもよい。
【００５４】
洗浄剤は、粘土、起泡力増進剤、泡抑制因子、耐食剤、汚染懸濁剤（ｓｏｉｌ‐ｓｕｓｐｅｎｄｉｎｇ  ａｇｅｎｔ）、再汚染防止剤（ａｎｔｉ‐ｓｏｉｌ  ｒｅｄｅｐｏｓｉｔｉｏｎ  ａｇｅｎｔ）、染料、殺菌剤、蛍光増白剤、ヒドロトロープ、防さび剤、カルシウム源、または香料を含む柔軟仕上げ剤などの他の通常の洗浄剤成分を含んでもよい。
【００５５】
助剤（ｂｕｉｌｄｅｒ）
洗浄剤は、ａ）少なくとも約１０％、好ましくは、アニオン性界面活性剤、非イオン性界面活性剤、石鹸およびそれらの混合物から選択される界面活性剤の組成物の１５‐６０重量％；ｂ）助剤の構成物の約１０‐８０重量％、好ましくは２０％‐６０％、ここで助剤は、ｉ）リン酸助剤、全助剤の好ましくは２０％未満、より好ましくは１０％未満、より好ましくは、５％未満が、リン酸助剤であり；ｉｉ）ゼオライト助剤、全助剤の好ましくは２０％未満、より好ましくは１０％未満、より好ましくは、５％未満が、ゼオライト助剤であり；ｉｉｉ）クエン酸塩、好ましくは全助剤の０‐５％が、クエン酸塩助剤であり；ｉｖ）ポリカルボキシレート、好ましくは全助剤の０‐５％が、ポリカルボキシレート助剤であり；ｖ）カルボネート、好ましくは全助剤の０‐３０％が、カルボネート助剤であり、およびｖｉ）ケイ酸ナトリウム、好ましくは全助剤の０‐２０％が、ケイ酸ナトリウム助剤である、から選択される助剤の混合物であってもよく；ｃ）硫酸塩などの充填剤の組成物の約０重量％‐２５重量％、好ましくは、充填剤の組成物の１重量％‐１５重量％、より好ましくは２重量％‐１０重量％、より好ましくは３重量％‐５重量％、を含む小型顆粒（粉末）洗浄剤であってもよい。
【００５６】
洗浄剤は、洗浄剤助剤を含んでもよい。量は、５％超、１０％超、２０％超、３０％超、４０％超、５０％超でもよく、および８０％未満、６５％未満であってもよい。食器洗浄洗浄剤において、助剤のレベルは、典型的に４０‐６５％、特に５０‐６５％である。
【００５７】
助剤は、特に、ＣａおよびＭｇを含む水溶性複合体を形成するキレート剤であってもよい。助剤とＣａ++および／またはＭｇ++の間の形成された複合体の強度は、ｌｏｇＫ値（平衡もしくは安定度定数として与えられ、または与えられたｐＨでの条件安定度定数としてのいずれか）として表され、３‐８の範囲、特に５‐８の範囲であってもよい。安定度定数は、２５℃およびイオン強度０．１Ｍで測定されてもよく、および条件安定度定数は、ｐＨ８．５または９で同様の条件で測定されてもよい。
【００５８】
助剤は、アミノ基を含んでもよく、および例えば、アミノカルボキシレート、アミノポリカルボキシレートまたはホスホネートでもよい。一、二、または三個のアミノ基（典型的に、第二級または第三級アミノ基）を含むモノマー分子であってもよく、および二、三、四または五カルボキシル基を含んでもよい。適当な助剤の例は、メチルグリシン二酢酸（ＭＧＤＡ），グルタミン酸Ｎ，Ｎ‐二酢酸（Ｎ，Ｎ‐ジカルボキシメチルグルタミン酸テトラナトリウム塩、ＧＬＤＡ）、ニトリロ三酢酸（ＮＴＡ）、ジエチレントリアミノ五酢酸（ＤＴＰＡ）、エチレンジアミン四酢酸（ＥＤＴＡ）、エチレンジアミン‐Ｎ，Ｎ’‐二コハク酸（ＥＤＤＳ），Ｎ‐（１，２‐ジカルボキシエチル）‐Ｄ，Ｌ‐アスパラギン酸（ＩＤＳ）およびＮ‐（２‐ヒドロキシエチル）イミノ二酢酸（ＥＤＧ）、およびそれらの塩である。
【００５９】
助剤は、好ましくは、４超の緩衝能（また、アルカリ保持性と呼ばれる）を有する（緩衝定数において酸および塩の全量を保持し、緩衝液の１ＬのｐＨを１単位だけ変化するために必要とされる強酸の当量の数）。
【００６０】
助剤は、例えば、ＷＯ０９／１０２８５４に記載されたような環境上やさしい捕捉剤であってもよい。適当な環境上やさしい捕捉剤は、一またはそれ以上のアミノ酸捕捉剤、コハク酸塩に基づく捕捉剤、クエン酸およびそれらの塩を含む。
【００６１】
適当なアミノ酸に基づく化合物の例は、ＭＧＤＡ（メチル‐グリシン‐二酢酸）、および塩およびそれの誘導体ならびにＧＬＤＡ（グルタミン‐Ｎ，Ｎ‐二酢酸）および塩およびその誘導体を含む。他の適当な助剤は、ＵＳ６４２６２２９に記載される。特に適当な助剤は、例えば、アスパラギン酸‐Ｎ‐一酢酸（ＡＳＭＡ）、アスパラギン酸‐Ｎ，Ｎ‐二酢酸（ＡＳＤＡ）、アスパラギン酸‐Ｎ‐モノプロピオン酸（ＡＳＭＰ）、イミノ二コハク酸（ＩＤＡ）、Ｎ‐（２−スルホメチル）アスパラギン酸（ＳＭＡＳ）、Ｎ‐（２−スルホエチル）アスパラギン酸（ＳＥＡＳ）、Ｎ‐（２−スルホメチル）グルタミン酸（ＳＭＧＬ）、Ｎ‐（２‐スルホエチル）グルタミン酸（ＳＥＧＬ）、Ｎ‐メチルイミノ二酢酸（ＭＩＤＡ）、α‐アラニン‐Ｎ，Ｎ‐二酢酸（α‐ＡＬＤＡ）、セリン‐Ｎ，Ｎ‐二酢酸（ＳＥＤＡ）、イソセリン‐Ｎ，Ｎ‐二酢酸（ＩＳＤＡ）、フェニルアラニン‐Ｎ，Ｎ‐二酢酸（ＰＨＤＡ）、アントラニル酸‐Ｎ，Ｎ‐二酢酸（ＡＮＤＡ）、スルファニル酸‐Ｎ，Ｎ‐二酢酸（ＳＬＤＡ）、タウリン‐Ｎ，Ｎ‐二酢酸（ＴＵＤＡ）およびスルホメチル‐Ｎ，Ｎ‐二酢酸（ＳＭＤＡ）、およびそれらのアルカリ金属塩またはアンモニウム塩を含む。一つの態様において、ＧＬＤＡ塩およびその誘導体が、使用されてもよい。一つの態様において、ＧＬＤＡの四ナトリウム塩が、使用されてもよい。
【００６２】
さらに、適当な助剤の例は、Ｎ‐（ヒドロキシエチル）‐エチリデンジアミントリアセテート（ＨＥＤＴＡ）、ジエタノールグリシン（ＤＥＧ）、１‐ヒドロキシエチリデン‐１，１‐ジホスホン酸（ＨＥＤＰ）、ジエチレントリアミンペンタ（メチレンホスホン酸）（ＤＴＰＭＰ）、エチレンジアミンテトラ（メチレンホスホン酸）（ＥＤＴＭＰＡ）およびアミノトリス（メチレンホスホン酸）（ＡＴＭＰ）を含む。
【００６３】
適当なコハク酸塩化合物の例は、ＵＳ５９７７０５３中に記載される。一つの態様において、適当なコハク酸塩化合物は、イミノコハク酸四ナトリウムである。
【００６４】
仮想的洗浄剤における重量％助剤とした場合に、０．２００％で添加される仮定の洗浄剤の溶液中の２００ｐｐｍ（ＣａＣＯ3として）‐１０ｐｐｍまでｐＨ１０．５での水の硬度を下げることが求められる最小助剤量を決定するために、助剤は、Ｍ．Ｋ．Ｎａｇａｒａｊａｎ  ｅｔ  ａｌ．，ＪＡＯＣＳ，Ｖｏｌ．６１，ｎｏ．９（Ｓｅｐｔｅｍｂｅｒ  １９８４），ｐｐ．１４７５‐１４７８により記載された試験によって分類されてもよい。代替的に、決定は、典型的な現代の洗濯洗浄剤のより低いｐＨを反映するために、ｐＨ８．５でなされてもよい。いずれかのｐＨでのこの方法の使用は、必要量が、０‐２５％（強）、２５‐３５％（中）または＞３５％（弱）であってもよい。より好ましくは、強および中助剤を含む組成物であり、もっとも好ましくは、強助剤の組成物である。
【００６５】
助剤は、メチルグリシン二酢酸（ＭＧＤＡ）またはＮ，Ｎ‐ジカルボキシメチルグルタミン酸四ナトリウム塩（ＧＬＤＡ）などの強助剤であってもよく；トリ‐ポリ‐リン酸ナトリウム（ＳＴＰＰ）などの中助剤であってもよく、またはクエン酸ナトリウムなどの弱助剤であってもよい。より好ましくは、強および中助剤を含む組成物であり、もっとも好ましくは、強助剤の組成物である。助剤の他の例は、ゼオライト、二リン酸、三リン酸、ホスホネート、カルボネート、ニトリロ三酢酸、エチレンジアミン四酢酸（ＥＤＴＡ）、ジエチレントリアミンペンタ酢酸、アルキル‐またはアルケニルコハク酸、可溶性ケイ酸塩および層状ケイ酸塩（例えば、ＨｏｅｃｈｓｔからのＳＫＳ‐６）である。
【００６６】
界面活性剤
洗浄剤組成は、一またはそれ以上の界面活性剤を含み、そしてそれは非イオン性（半極性を含む）および／または陰イオン性および／または陽イオン性および／または両イオン性であってもよい。界面活性剤は、典型的に０．１重量％‐６０重量％の量で存在する。食器洗浄洗浄剤において、典型的に、０．１‐３０％、特に２‐１２％である。
【００６７】
その中に含まれる場合、洗浄剤は、通常、約１％‐約４０％の直鎖アルキルベンゼンスルホン酸塩、α‐オレフィンスルホン酸塩、アルキル硫酸塩（脂肪アルコール硫酸）、アルコールエトキシ硫酸塩、第二級アルカンスルホン酸塩、α‐スルホ脂肪酸メチルエステル、アルキル‐またはアルケニルコハク酸または石鹸などの陰イオン性界面活性剤を含む。
【００６８】
その中に含まれる場合、通常、約０．２％‐約４０％のアルコールエトキシレート、ノニルフェノールエトキシレート、アルキルポリグリコシド、アルキルジメチルアミンオキシド、エトキシ化脂肪酸モノエタノールアミド、脂肪酸モノエタノールアミド、ポリヒドロキシアルキル脂肪酸アミド、またはグルコサミンのＮ−アシルＮ−アルキル誘導体（グルカミド）などの非イオン性界面活性剤を含む。食器洗浄洗浄剤において、非イオン性界面活性剤の量は、典型的に、２‐１２％である。
【００６９】
典型的に、洗浄剤組成物は、組成物の０重量％‐５０重量％、２重量％‐４０重量％、５重量％‐３５重量％、７重量％‐３０重量％、１０重量％‐２５重量％、または１５重量％‐２０重量％の範囲において、一またはそれ以上の界面活性剤を含む。組成物は、１％‐１５％、２％‐１２％、３％‐１０％、４％‐８％、または４％‐６％の一またはそれ以上の界面活性剤を含む。界面活性剤は、陰イオン性界面活性剤、非イオン性界面活性剤、陽イオン性界面活性剤、両イオン性界面活性剤、両性界面活性剤、およびそれらの混合物であってもよい。いくつかの実施態様において、界面活性剤の大部分は、陰イオン性である。適当な陰イオン性界面活性剤は、当該技術分野において周知であり、および脂肪酸カルボキシレート（石鹸）、分枝鎖、直鎖およびランダム鎖アルキル硫酸塩または脂肪アルコール硫酸塩、または第一級アルコール硫酸塩、またはＬＡＳおよびＬＡＢなどのアルキルベンゼンスルホネート、またはフェニルアルカンスルホネート、またはアルケニルスルホネート、アルケニルベンゼンスルホネートまたはアルキルエトキシ硫酸塩、または脂肪アルコールエーテル硫酸塩、またはα‐オレフィンスルホネート、またはドデセニル／テトラデセニルコハク酸を含んでもよい。洗浄剤組成物は、１ｗｔ％‐１０ｗｔ％の非イオン性界面活性剤、２ｗｔ％‐８ｗｔ％、３ｗｔ％‐７ｗｔ％、または５ｗｔ％未満の非イオン性界面活性剤を、また含んでもよい。適当な非イオン性界面活性剤は、当該技術分野において周知であり、およびアルコールエトキシレート、および／またはアルキルエトキシレート、および／またはアルキルフェノールエトキシレート、および／または脂肪酸Ｎ‐グルコシルＮ‐メチルアミドなどのグルカミド、および／またはアルキルポリグルコシドおよび／またはモノ‐またはジエタノールアミドまたは脂肪酸アミドを含んでもよい。洗浄剤組成物は、０ｗｔ％‐１０ｗｔ％の陽イオン性界面活性剤、０．１ｗｔ％‐８ｗｔ％、０．５ｗｔ％‐７ｗｔ％、または５ｗｔ％未満の陽イオン性界面活性剤を含んでもよい。適当な陽イオン性界面活性剤は、当該技術分野において周知であり、およびアルキル第四級アンモニウム化合物、および／またはアルキルピリジニウム化合物および／またはアルキル第四級ホスホニウム化合物および／またはアルキル三元スルホニウム化合物を含んでもよい。いくつかの実施態様において、組成物は、洗濯工程の間、洗浄溶液中に、１００ｐｐｍ‐５０００ｐｐｍの界面活性剤を供給するための量の界面活性剤を含む。水と接触する組成物上は、典型的に、０．５ｇ／Ｌ‐１０ｇ／Ｌ洗浄剤組成物を含む洗浄溶液を形成する。多くの適当な界面活性化合物が利用でき、および例えば、「Ｓｕｒｆａｃｅ‐Ａｃｔｉｖｅ  Ａｇｅｎｔｓ  ａｎｄ  Ｄｅｔｅｒｇｅｎｔｓ，Ｖｏｌｕｍｅｓ１  ａｎｄ  １１，ｂｙ  Ｓｃｈｗａｒｔｚ，Ｐｅｒｒｙ  ａｎｄ  Ｂｅｒｃｈ」において、文献中に十分記載されている。
【００７０】
洗浄力
洗浄力（洗浄性能）は、例えば以下に記載されたＡＭＳＡ方法、ここで食器または布地などの汚れた物が、洗浄剤溶液で洗浄される通常の方法で決定できる。汚れは、タンパク質、特に、血液、ココア、ミルク、卵または草、およびそれらの混合物を含む。洗浄は、新たに準備された洗浄剤溶液で行ってもよく、または溶液は、プロテアーゼの洗浄中の安定性を示すように洗浄のために使用される前に、インキュベートしてもよい。
【００７１】
任意の追加酵素
プロテアーゼに加えて、洗浄剤は、場合により一またはそれ以上の追加の酵素、特に、アミラーゼ、リパーゼ、セルラーゼ、マンナナーゼ、オキシドレダクターゼ、リアーゼまたはそれらの混合物を含んでもよい。
【００７２】
材料および方法
洗濯またはＡＤＷ洗浄剤のための自動機械的ストレスアッセイ（Ａｕｔｏｍａｔｉｃ  Ｍｅｃｈａｎｉｃａｌ  Ｓｔｒｅｓｓ  Ａｓｓｅｙ）（ＡＭＳＡ）
洗浄実験は、洗濯または食器洗浄洗浄剤組成物について洗浄性能を評価するために行われる。本適用のプロテアーゼは、自動機械的ストレスアッセイ（ＡＭＳＡ）を使用して試験される。ＡＭＳＡで、大量の少容量酵素‐洗浄剤溶液の洗浄性能を、測定することができる。ＡＭＳＡプレートは、試験溶液のための多数のスロット、および全てのスロット開口部に対して洗浄される布地、洗濯サンプルをしっかりと絞るふたを有する。洗浄時間中、プレート、試験溶液、布地およびふたは激しく振とうされ、試験溶液を布地に接触させ、機械的ストレスを加える。さらなる記載は、ＷＯ０２／４２７４０、特に２３〜２４頁の「Ｓｐｅｃｉａｌ  ｍｅｔｈｏｄ  ｅｍｂｏｄｉｍｅｎｔｓ」の段落を参照のこと。
【００７３】
洗濯実験は、以下に特定された実験条件下で行われる。
【００７４】
【表３】
2013506021.tif 000005
【００７５】
洗濯のためのモデル洗浄剤および試験材料を以下に示す。
【００７６】
【表４】
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【００７７】
水の硬度は、試験システムにＣａＣｌ2、ＭｇＣｌ2、およびＮａＨＣＯ3（Ｃａ2+：Ｍｇ2+＝４：１：７．５）の添加により１５°ｄＨに調整した。洗浄後、布地は、水道水で流し、および乾燥した。
【００７８】
洗浄性能は、洗浄された布地の色の輝度として測定する。輝度は、白色光を照射したとき、サンプルから反射される光の強さとして、また示すことができる。サンプルが汚れたとき、反射される光の強さは、きれいなサンプルの強さよりもより低い。従って、反射される光の強さは、洗浄性能を測定することに使用できる。
【００７９】
色彩測定は、プロフェッショナル  フラットベッド  スキャナー（Ｋｏｄａｋ  ｉＱｓｍａｒｔ，Ｋｏｄａｋ，Ｍｉｄｔａｇｅｒ２９，ＤＫ‐２６０５  Ｂｒｏｎｄｂｙ，Ｄｅｎｍａｒｋ）で行い、そしてそれは洗浄された布地の画像を取り込むために使用される。
【００８０】
スキャンされた画像から光の強度のための値を抽出するために、画像から２４‐ビットピクセル値を、赤、緑、および青（ＲＧＢ）用の値に変換した。ベクターとしてＲＧＢ値をともに加え、次いで得られたベクターの長さをとることにより、強度値（Ｉｎｔ）を算出する。
【００８１】
【数１】
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【００８２】
ＡＤＷ実験は、以下の特定された実験条件下、行われる。
【００８３】
【表５】
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【００８４】
洗浄剤の以下のモデルは、ＡＤＷ実験に使用される。
【００８５】
【表６】
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【００８６】
水の硬度を、試験システムにＣａｃｌ2、ＭｇＣｌ2、およびＮａＨＣＯ3（Ｃａ2+：Ｍｇ2+＝４：１：１０）の添加により、１７°ｄＨに調整した。洗浄したのち、卵黄メラミンタイルを水道水で流し、乾燥させた。
性能は、洗濯のために上に記載されたように決定した。
【実施例】
【００８７】
参照実施例：Ｋｉの決定
サビナーゼ（商標）（Ｎｏｖｏｚｙｍｅｓ  Ａ／Ｓの製品）の阻害のための阻害定数Ｋｉを、以下の条件下、標準方法を使用して決定した。
基質：スクシニル‐アラニン‐アラニン‐プロリン‐フェニルアラニン‐パラ‐ニトロ‐アニリド（ＳｕｃＡＡＰＦ‐ｐＮＡ、ＳｉｇｍａＳ７３８８から入手）。
阻害剤：Ｚ‐ＧＡＹ‐Ｈを、カスタム合成により調整した。阻害剤を、１００％純度であると仮定し、および分子濃度を、秤量数および分子量を使用して決定した。
緩衝液：０．１Ｍ  トリス（Ｔ‐１５０３）＋１．５ｍｌ  ＢＲＩＪ溶液（１５％）／Ｌ、ｐＨ９．０。
アッセイ中の酵素濃度：サビナーゼ：１Ｅ‐１０−１Ｅ‐０９Ｍ。特定の実験用：［Ｅ］0＝６Ｅ‐０９Ｍ。
【００８８】
基質加水分解の初速度を、３Ｅ‐０５から６Ｅ‐０４Ｍの範囲について、１０基質濃度および阻害剤を含まない二回の決定で、自動分光光度計を使用して、決定した（２５℃でＥＬＩＳＡ測定）。阻害剤濃度［Ｉ］0のフラクションとして自由酵素の濃度（Ｅ＝デルタ吸光度）を有する得られた曲線を、式Ｅ＝０．５*（［Ｅ］0‐［Ｉ］0−Ｋｉ＋ＳＱＲＴ（（［Ｅ］0＋［Ｉ］0＋Ｋｉ）2‐４*［Ｅ］0*［Ｉ］0）にフィットさせ、サビナーゼおよびＺ‐ＧＡＹ‐Ｈの間の阻害定数、Ｋｉ値＝７．４ｎＭの特定のケースを得た。
【００８９】
実施例１：粉末洗浄剤中のさまざまな安定剤で洗浄力は増加する
洗浄力を、さまざまな阻害剤および３０ｎＭプロテアーゼと一緒に、上記のように洗濯洗浄剤のためのＡＭＳＡにより決定した。洗浄を、試験布見本ＥＭＰ１１７ＥＨおよびＣＳ‐３７について、４０℃および水の硬度１５°ｄＨで、行った。プロテアーゼは、サビナーゼ、サビナーゼバリアントＹ１６７Ａ＋Ｒ１７０Ｓ＋Ａ１９４Ｐ、およびアルカラーゼを試験した。
【００９０】
【表７】
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【００９１】
【表８】
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【００９２】
【表９】
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【００９３】
実施例２：液体洗浄剤中のさまざまな安定剤で洗浄力は増加する
洗浄力を、３０ｎＭプロテアーゼ（サビナーゼ）を伴う洗濯液体モデル洗浄剤中にさまざまな阻害剤で決定した。洗浄は、試験布見本ＥＭＰＡ１１７ＥＨで、２０℃および水の硬度１５°ｄＨで行った。
【００９４】
【表１０】
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【００９５】
実施例３：さまざまな助剤の効果
洗浄試験を、卵黄メラミンプレート（煮沸）を使用して、上記のＡＭＳＡ方法により４の異なるＡＤＷ洗浄剤について行った。４の洗浄剤は、２の強助剤（ＭＧＤＡおよびＧＬＤＡ）、中助剤（ＳＴＰＰ）および弱助剤（Ｎａ‐クエン酸）をそれぞれ含む。試験を、１１ｍｇＥＰ／Ｌの３の異なるプロテアーゼおよびプロテアーゼ阻害剤で行った。試験したプロテアーゼは、サビナーゼ（商標）およびサビナーゼ（商標）バリアント、Ｓ９Ｒ＋Ａ１５Ｔ＋Ｖ６８Ａ＋Ｑ２４５Ｒを伴うバリアント１、およびＳ９Ｒ＋Ａ１５Ｔ＋Ｇ６１Ｅ＋Ｖ６８Ａ＋Ａ９８Ｓ＋Ｓ９９Ｇ＋Ｎ２１８Ｄ＋Ｑ２４５Ｒを伴うバリアント２である。プロテアーゼ阻害剤は、５：１の分子比ではＺ‐ＧＡＹ‐Ｈである。洗浄力試験は、洗浄前に、プロテアーゼおよび阻害剤を伴う洗浄剤溶液の１０分のプレインキュベーションを伴って、および伴わずに行った。それぞれの洗浄剤溶液のｐＨは、１０．０５‐１０．２の範囲であると判明した。
【００９６】
【表１１】
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【００９７】
【表１２】
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【００９８】
【表１３】
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【００９９】
【表１４】
2013506021.tif 000017
【０１００】
結果は、ほとんどすべてのケースについて、阻害剤が洗浄力を増加したことを示す。洗浄力増加は、特に、強度助剤を伴う洗浄剤についてプレインキュベーション後、判断される。
【０１０１】
実施例４：洗浄力はさまざまなプロテアーゼおよび阻害剤比で増加する
洗浄試験を、プロテアーゼおよび阻害剤を伴う洗浄剤について行った。洗浄条件は、２０℃および１５°ｄＨで２０分間洗浄した。プロテアーゼは、３０ｎＭのサビナーゼ（商標）であった。阻害剤は、さまざまな分子比の阻害剤Ｚ‐ＧＡＹ‐Ｈであった。結果を、阻害剤なしの同一条件での洗浄剤と比例して阻害剤を伴う洗浄剤として示した。
【０１０２】
市販液体洗浄剤
イギリスで購入した市販の液体洗浄剤を、５：１の阻害剤：プロテアーゼ分子比で試験した。プロテアーゼ１０Ｒは、ＷＯ８８／０３９４７において記載されている。プロテアーゼＰＤ１３８は、ＷＯ９３／１８１４０において記載されている。
【０１０３】
【表１５】
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【０１０４】
粉末洗浄剤２
洗浄剤は、２．５ｇ／Ｌの以下の組成の粉末洗浄剤であった。
２０．０５ｇ  Ｎａ‐クエン酸二水和物
１５．０１ｇ  Ｎａ‐ＬＡＳ
２０．０１ｇ  ＳＬＳ
３．９８ｇ  ネオドール２５‐７
３．０２ｇ  Ｎａ‐硫酸塩
【０１０５】
【表１６】
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【０１０６】
液体洗浄剤
ＡＭＳＡアッセイ下、記載された液体洗浄剤を使用した。
【０１０７】
【表１７】
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【０１０８】
粉末洗浄剤１
ＡＭＳＡアッセイ下、記載された粉末洗浄剤を使用した。
【０１０９】
【表１８】
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【国際調査報告】
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