(57)【要約】  被験体の血液中の選択された抗体の数を減らすための方法であって、被験体から血液を取ることと、囲まれた通路に沿って血液を通過させることとを備え、通路は、表面が１つ以上の中空ファイバの長さに対して実質的に垂直に位置決めされた１つ以上の膜を有する１つ以上の半透過性中空ファイバと、１つ以上の膜に固定された抗体に特異的な抗原とを備え、さらに、処理済み血液を被験体の内部循環に戻すことを備え、戻された処理済み血液は、処理前と比較して、選択された抗体の数が減っている。
2013530986.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
被験体の血液中の選択された抗体の数を減らすための方法であって、
ａ）被験体から血液を取ることと、
ｂ）囲まれた通路に沿って血液を通過させることとを備え、前記通路は、表面が１つ以上の中空ファイバの長さに対して実質的に垂直に位置決めされた１つ以上の膜を有する１つ以上の半透過性中空ファイバと、１つ以上の膜に固定された抗体に特異的な抗原とを備え、さらに
ｃ）処理済み血液を前記被験体の内部循環に戻すことを備え、戻された処理済み血液は、処理前と比較して、選択された抗体の数が減っている、方法。
【請求項２】
囲まれた通路の少なくとも一部は、ニトロセルロース、セルロース、ナイロン、プラスチック、ゴム、ポリアクリルアミド、アガロース、ポリ（ビニルアルコール−エチレンコポリマー）、およびそれらの組合せからなる群から選択された材料からなる、請求項１に記載の方法。
【請求項３】
１つ以上の半透過性中空ファイバは、１つ以上の中空ファイバ内の血液の混合を強めるために、少なくとも部分的にくぼみが設けられ、またはねじられ、これにより固定された抗原との血液の接触を増す、請求項１に記載の方法。
【請求項４】
囲まれた通路に血液を通過させるステップは、囲まれた通路を通る血液の連続的なまたは一時的に中断した通過を備える、請求項１に記載の方法。
【請求項５】
選択された抗体に特異的な抗原は、半透過性中空ファイバの壁にさらに固定される、請求項１に記載の方法。
【請求項６】
複数の膜は半透過性中空ファイバ内に設けられ、これにより、中空ファイバの長さを３つ以上の連続セクションに分割する、請求項１に記載の方法。
【請求項７】
囲まれた通路は、２つの膜によって規定される連続セクション内に捕えられる透過性担体球体をさらに備え、球体の直径は中空ファイバの直径よりも小さく、選択された抗体に特異的な抗原は球体にさらに固定される、請求項６に記載の方法。
【請求項８】
選択された抗体は、血液中に存在する過剰な抗体によって特徴付けられる疾患状態と関連付けられる抗体である、請求項１に記載の方法。
【請求項９】
選択された抗体は、抗Ａ血液タンパク抗体、抗Ｂ血液タンパク抗体、抗プロテインＡ抗体、抗プロテインＧ抗体、および大部分の組織適合複合分子に対する抗体からなる群から選択される、請求項１に記載の方法。
【請求項１０】
選択された抗体は抗Ａ血液タンパク抗体または抗Ｂ血液タンパク抗体である、請求項９に記載の方法。
【請求項１１】
抗原は、化学的修飾、共有結合、強イオン結合、水素結合、およびリンカーの利用からなる群から選択されるプロセスによって１つ以上の膜に付着される、請求項１に記載の方法。
【請求項１２】
化学的修飾は、臭化シアン、過酸化水素、過ヨウ素酸ナトリウム、エピクロロヒドリン、１，４−ブタンジオールジグリシドールエーテル、塩化シアヌル、カルボニルジイミダゾール、置換された塩化スルホニル、およびフルオロメチルピリジニウム塩からなる群から選択された化合物で処理することによってなされる、請求項１１に記載の方法。
【請求項１３】
抗原はビオチンリンカーのアビジンによって１つ以上の膜に付着される、請求項１に記載の方法。
【請求項１４】
被験体の血液中の選択された抗原の数を減らすための方法であって、
ａ）被験体から血液を取ることと、
ｂ）囲まれた通路に沿って血液を通過させることによって前記血液を処理することとを備え、前記通路は、表面が１つ以上の中空ファイバの長さに対して実質的に垂直に位置決めされた１つ以上の膜を有する１つ以上の半透過性中空ファイバと、１つ以上の膜に固定された選択された抗原に特異的な抗体とを備え、通路に沿って血液を通過させることにより、選択された抗原は固定された抗体によって分離され、さらに
ｃ）処理済み血液を前記被験体の内部循環に戻すことを備え、戻された処理済み血液は、処理前と比較して、選択された抗原の数が減っている、方法。
【請求項１５】
囲まれた通路の少なくとも一部は、ニトロセルロース、セルロース、ナイロン、プラスチック、ゴム、ポリアクリルアミド、アガロース、ポリ（ビニルアルコール−エチレンコポリマー）、およびそれらの組合せからなる群から選択された材料からなる、請求項１４に記載の方法。
【請求項１６】
１つ以上の半透過性中空ファイバは、１つ以上の中空ファイバ内の血液の混合を強めるために、少なくとも部分的にくぼみが設けられ、またはねじられ、これにより固定された抗体との血液の接触を増す、請求項１４に記載の方法。
【請求項１７】
囲まれた通路に血液を通過させるステップは、囲まれた通路を通る血液の連続的なまたは一時的に中断した通過を備える、請求項１４に記載の方法。
【請求項１８】
好ましくない抗原に特異的な抗体は、半透過性中空ファイバの壁にさらに固定される、請求項１４に記載の方法。
【請求項１９】
複数の膜は半透過性中空ファイバ内に設けられ、これにより、中空ファイバの長さを３つ以上の連続セクションに分割する、請求項１４に記載の方法。
【請求項２０】
囲まれた通路は、２つの膜によって規定される連続セクション内に捕えられる透過性担体球体をさらに備え、球体の直径は中空ファイバの直径よりも小さく、選択された抗原に特異的な抗体は球体にさらに固定される、請求項１９に記載の方法。
【請求項２１】
抗体は、化学的修飾、共有結合、強イオン結合、水素結合、およびリンカーの利用からなる群から選択されるプロセスによって１つ以上の膜に付着される、請求項１４に記載の方法。
【請求項２２】
化学的修飾は、臭化シアン、過酸化水素、過ヨウ素酸ナトリウム、エピクロロヒドリン、１，４−ブタンジオールジグリシドールエーテル、塩化シアヌル、カルボニルジイミダゾール、置換された塩化スルホニル、およびフルオロメチルピリジニウム塩からなる群から選択された化合物で処理することによってなされる、請求項２１に記載の方法。
【請求項２３】
抗体はアビジンまたはビオチンリンカーによって１つ以上の膜に付着される、請求項１４に記載の方法。
【請求項２４】
被験体の体液中の選択された分子の数を減らすための方法であって、
ａ）被験体から体液を取ることと、
ｂ）囲まれた通路に沿って体液を通過させることとを備え、前記通路は、表面が１つ以上の中空ファイバの長さに対して実質的に垂直に位置決めされた１つ以上の膜を有する１つ以上の半透過性中空ファイバと、１つ以上の膜に固定された選択された分子に特異的な結合部位とを備え、通路に沿って体液を通過させることにより、選択された分子は固定された結合部位によって分離され、これにより体液を処理し、さらに
ｃ）処理済み体液を前記被験体の内部循環に戻すことを備え、戻された処理済み体液は、処理前と比較して、選択された分子の数が減っている、方法。
【請求項２５】
ａ）鎌状赤血球症：鎌状発症の際の鎌状赤血球の減量、
ｂ）重症活動性ＳＬＥの治療：ＡＮＡ、またａＰＬ  Ａｂｓ、ｄｓＤＮＡ、ならびに活性化されたＢおよびＴ細胞の除去、
ｃ）ＨＬＡ  Ａｂｓを除去して、クロスＨＬＡ心臓、肺、および他の臓器移植を支援、
ｄ）骨髄移植（ＢＭＴ）、抗ＣＤ３４または抗ＨＬＡ抗体を介したより多数のＰＢＰＣの効率的な除去、
ｅ）タイレノールまたは他の薬剤過量後の緊急解毒、
ｆ）Ped.肝臓移植のためのＥＢＶの減量、
ｇ）たとえば薬剤不応患者におけるＨＩＶの治療のためのＨＩＶ感染Ｔ４細胞およびウィルスおよび遊離ｇｐ１２０の除去、
ｈ）ＲＡ、脳卒中、敗血症のためのＴＮＦａを含むサイトカインの除去、
ｉ）充実性腫瘍の治療としての脈管形成因子の除去、
ｊ）動脈疾患の治療としての抗脈管形成因子の除去、
ｋ）子供のＩＤＤＭの予防のためのベータ細胞に対するautoAbsの除去、
ｌ）たとえば抗敗血症治療としてのバクテリアの減量、
ｍ）Ａ型、Ｂ型、Ｃ型、およびＤ型肝炎の減量、
ｎ）ＣＤ２０陽性、Ｂ細胞非ホジキンリンパ腫の減量、
ｏ）薬剤不応超高コレステロールの治療、
ｐ）クリオグロブリン血症の治療、
ｑ）血液による転移の除去、
ｒ）異種移植を可能にするための抗体の除去、
ｓ）ＨＩＶ（ＥＢＶ、Ａ型／Ｂ型／Ｃ型／Ｄ型肝炎）検出における超高感度診断として、
ｔ）薬剤過量の除去：ジゴキシン、ヘパリン、コカイン、モルヒネなど、
ｕ）再狭窄を予防するための肥満細胞および泡沫細胞の除去、
ｖ）ＡＰＳの治療に対する抗リン脂質抗体またはインターロイキンの除去、
ｗ）抗体媒介血栓症の治療（脳卒中、ＭＩ、胎児消失、心臓血管手術後、深部静脈血栓症を治療するためのanticardiolipid Absの除去）、
ｘ）グッドパスチュア症候群の治療、
ｙ）Ｒｈ新生児溶血性疾患の治療、
ｚ）重症筋無力症（神経筋受容体抗原に対するautoAbsの除去）、
ａａ）研究および療法または診断の理由のための、ＩＬ−Ｘと略される（Ｘは１から少なくとも３５であることが分かっている）インターロイキンを含むサイトカインの制御または測定、
ｂｂ）研究および療法または診断の理由のための因子II、VII、VIII、IX、Ｘなどのさまざまな因子の制御または測定、
ｃｃ）たとえば研究および療法または診断の理由のための補体Ｙ（Ｙ＝Ｃ１からの制御または測定、
ｄｄ）細菌または化学戦攻撃（炭疽、ボッツ病など）後の超高感度診断および解毒、
ｅｅ）超高用量薬物療法（ケモ、バンコシンなど）のためのプラットフォーム、
ｆｆ）（高リスク、毒性、または致死的）免疫処置のための抗原プラットフォーム、
ｇｇ）敗血症における内毒素、リポ多糖類（ＬＰＳ）の除去、
ｈｈ）自己ワクチン開発のための野生型ＨＩＶの濃縮、
ｉｉ）ギランバレー症候群、および血漿搬出により非特異的に現在治療されている任意の他の疾患の治療、
ｊｊ）全血からの特異的細胞の除去：ＨＩＶ感染Ｔ４細胞、自己抗体産生細胞−糖尿病、リウマチ抗体など、
ｋｋ）診断のための循環腫瘍細胞（ＣＴＣ）の除去、
ｌｌ）療法効果のための循環腫瘍細胞（ＣＴＣ）の除去、
ｍｍ）たとえば手術前の、アスピリンクマジン、プラビックスなどの抗凝血剤、および他の抗凝血剤の除去、
ｎｎ）血液中に未知の病原体を治療する複数抗生物質、殺菌剤、および抗ウィルス薬を残しながら、血液から、原因不明の発熱を伴う−たとえば黄色ブドウ球菌に感染した患者からのたとえば生きているまたは死んだバクテリアなどの病原体の除去、これにより溶出および成功裡の培養の前に抗生物質から最適な生物を分離する、
という手順のうち少なくとも１つのために用いられる請求項２４に記載の方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
発明の分野
この発明は、好ましくないまたは選択された分子の存在を、宿主の血液、血漿、リンパ液、髄液、または洗浄および他の技術によって取得されるものを含む他の体液から除去するための技術に関する。好ましくない分子は、疾患状態に関する分子ならびに移植臓器および組織の拒絶反応に係る分子を含む。特に、発明は、抗Ａおよび抗Ｂ抗体のような好ましくないまたは選択された分子の存在を一段階の除去プロセスで減少させるための方法およびシステムを開示する。また、発明は、好ましくないまたは選択された抗体、抗原、薬剤、ウィルス、免疫複合体、細胞などの血液も実質的に開示する。
【背景技術】
【０００２】
発明の背景
伝統的に、臓器または組織移植は、移植片の拒絶を回避するために、ＡＢＯ血液型の適合性を要件とする。一般的に、宿主の血液は、異種の血液型抗原に対する循環抗体を含有する。ＡＢＯ血液型間の移植は、最初の２４時間以内に移植片の超急性拒絶反応を引き起こす（Kuby J: Immunology. New York, W. H. Freeman and Company, 1997）。循環抗体は、移植臓器または組織に見出される赤血球細胞、上皮細胞、および内皮細胞中に存在する血液抗原に結合する。これらの抗体−抗原複合体は、宿主の補体系を活性化させ、結果として、移植された臓器または組織への好中球が侵入する。好中球は、移植片の内皮細胞を破壊する分解酵素を放出し、血小板が付着できる傷害された組織の表面を提供する。毛細血管内部で、大量の血液ロット（blood lots）が形成し、この全体の炎症反応が血管新生を妨げる。
【０００３】
拒絶反応を低減させる最近の治療は、移植手術の前後に複数の免疫抑制剤を投与することを含む。ＡＢＯ抗原に特異的な抗体を除去する方法について研究がなされている。これらの方法は、移植された臓器または組織の超急性拒絶反応を低減することについての有益な効果も示している。これらの方法は、ドナー／レシピエントのＡＢＯ型適合の要件を緩和し、次いで生体ドナーと死体臓器または組織のプールとの両者を顕著に拡大できる可能性がある方法につながるかもしれないため、重要である。
【０００４】
ＡＢＯ抗体を除去する近年の技術は、溶解性ＡＢＯ抗原の静脈内投与と組合せた血漿交換を含む（Alexandre GPJ, et al., Neth J Med, 28:231-234, 1985）。すなわち、遠心分離または濃縮赤血球細胞を使用する免疫吸着を伴う二重ろ過血漿搬出（double filtration plasmapheresis）（ＤＦＦＰ）による全血からの血漿の分離（Slapak M, et al., Transplantation 31:4-7, 1981）と、シリカビーズに結合させたＡ抗原およびＢ抗原を用いた抗ＡおよびＢ抗体のカラム免疫吸着を伴うＤＦＰＰ（Tanabe K, et al. Transplantation Proceedings, 27(1) 1020-1023, 1995）とである。
【０００５】
これらの先行技術は、ケアの標準としての採用を妨げるという重大な問題を有する。第１に、感染のリスクがある。遠心分離による血漿交換は、血漿タンパク溶液の置換を必要とするため、ウイルス感染のリスクがある。さらに、これらの上述の技術は、最初に全血から血漿を分離することと、次にＡＢＯ抗体を血漿から除去するという追加の手順とに係る。次に、分離された血漿から、シリカビーズに結合させたＡＢＯ抗原によりカラム上で免疫吸着することにより予め存在する抗ＡおよびＢ抗体を除去することができる。
【０００６】
腎臓移植についての１つの研究は、１または２セッションのＤＦＰＰおよび３または４セッションのカラム免疫吸着を受容したＡＢＯ不適合の移植患者が、ＡＢＯ適合移植片を受容した患者と比較して、生存率に大きな差を示さないことを示している（Tanabe, supra）。さらに、突発的なＡＢＯ不適合腎臓移植に伴う超急性拒絶反応が、赤血球細胞による免疫吸着を伴う血漿搬出によって回復した症例が報告されている（Slapak, supra）。
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００７】
発明の概要
この発明は、非自己臓器または組織上または内部の異種抗原の存在によって引き起こされる、これらの臓器または組織の移植による宿主の拒絶反応を低減するための方法およびシステムを提供する。これは、異種抗原に向けられる宿主の血液中の抗体の一段階除去のための方法を提供することによって達成される。例えば、ＡＢＯ間の拒絶反応は、宿主の血液から一段階で抗Ａ抗体および／または抗Ｂ抗体を除去することによって解消され得る。これは、宿主から抽出された血液を、必要に応じて半透過性であり、通路に付着され、抗Ａ抗体および抗Ｂ抗体に結合する抗原のような当該抗体に特異的な抗原を有する通路に沿って移動させ、血液を宿主の内部循環に戻すことによってなされる。
【０００８】
他の実施形態では、この発明は、ある疾患状態時に存在するような過剰な抗体を、宿主から抽出した血液を、必要に応じて半透過性であって、通路に固定され、好ましくない抗体に特異的な抗原または抗抗体を有する通路に沿って移動させ、この血液を宿主の内部循環に戻すことによって、宿主の血液から一段階で除去するための方法を提供する。
【０００９】
さらに他の実施形態では、宿主から抽出した血液を、必要に応じて半透過性であって、通路に固定された抗原に特異的な抗体を有する通路を移動させ、その血液を宿主の内部循環に戻すことによって、宿主の血液から好ましくない抗原を一段階で除去する。
【００１０】
他の実施形態では、この発明は、抗Ａ抗体および抗Ｂ抗体のような望ましくない分子を実質的に含まない血液を提供する。なお、ＡおよびＢは血液型抗原である。望ましくない分子は、血液中に過剰な抗体を含む疾患状態に関連付けられる抗体、ウイルス、およびその他の望ましくない抗原であってもよい。
【００１１】
発明の好ましい実施態様では、中空ファイバは、血流からＡおよびＢ抗原に特異的な抗体を分離可能なＡ血液型抗原およびＢ血液型抗原を付着している。発明の他の好ましい実施態様では、抗原を付着させた中空ファイバは、血液の透析または血漿搬出が同時に起こるようにする半透過性中空部を有している。発明のさらに好ましい実施態様では、中空ファイバは複数個の膜に結合され、この複数個の膜を、ファイバー内にその長さにわたって長手方向に置くこともできる。最も好ましい実施形態では、抗原は中空ファイバの壁に沿って付着される。発明のさらなる実施態様では、中空ファイバを、血液が流れるまたは通過することのできる密閉容器内の平坦な膜によって置き換えることができる。この実施形態では、オプションの半透膜は、当該膜を介して交換しようとする、抗体のような血液成分を誘導するスラリーから血流を分けるために存在している。
【００１２】
発明は、移植された臓器または組織中に存在する異種抗原に特異的な抗体を宿主の血液から一段階で除去することにより、移植に利用可能な臓器または組織のプールを増大させる方法も提供する。
【００１３】
発明は、血液から抗原に特異的な抗体を一段階で除去するための一段階システムも提供する。
【００１４】
発明は、血液から抗原に特異的な抗体を採取するための一段階システムも提供する。
他の実施形態では、本発明は、好ましくない分子を実質的に含有しない循環血液を提供する。これらの分子は、特異的にまたは非特異的に、通路に固定可能な結合パートナーに対して結合可能である。特に、この発明は抗Ａ血液タンパクおよび抗Ｂ血液タンパク抗体を実質的に含有しない循環血液を提供する。
【図面の簡単な説明】
【００１５】
【図１】本発明の第１の実施形態に基づく抗体除去システムの長手方向に沿う断面図である。
【図２】本発明の第２の実施形態に基づく抗体除去システムの長手方向に沿う透視図である。
【図３】本発明の第３の実施形態に基づく抗体除去システムの長手方向に沿う斜視図である。
【図４】本発明の第４の実施形態に基づく抗体除去システムの長手方向に沿う斜視図である。
【図５】本発明の第５の実施形態に基づく抗体除去システムの上部斜視図である。
【図６】抗Ａ抗体および抗Ｂ抗体を血液から除去するためのこの発明の方法を用いしたアッセイ結果を示す図である。
【図７】抗Ａおよび抗Ｂ抗体を血液から除去するためのこの発明の方法を用いたアッセイ結果を示し、生成物の高い能力を示す図である。
【図８】抗Ａおよび抗Ｂ抗体を血液から除去するためのこの発明の方法を用いたアッセイ結果を示し、生成物の高い能力を示す図である。
【発明を実施するための形態】
【００１６】
好ましい実施形態の詳細な説明
この発明は、移植された臓器または組織内に存在する異種抗原に特異的な抗体を宿主の血液から一段階で除去するための方法およびシステムを提供する。これは、宿主から抽出された血液を、結合されたまたは固定された特異的抗原を有する中空ファイバまたは平板状の透析器などの囲まれた通路に沿って移動させて、その血液を宿主の内部循環に戻すことによって行なわれる。血液成分は通路の膜を通して透析される一方で、同時に、抗体は固定抗原に結合することによって血液から除去される。結合は、抗原が抗体の特異的な結合パートナーとなるように選択されている場合には特異的であり得、プロテインＡまたはプロテインＧのような一般的な結合分子が抗体との結合に用いられる場合には非特異的であり得る。
【００１７】
このように、抗体は、望ましくない小さい分子（尿素、クレアチニン、アンモニア）とともに宿主の血液から除去される。さらに、これらの抗体をそれらの結合パートナーから解放することによって、それらを収集可能である。
【００１８】
この技術についてさらに詳しく述べると、発明は、宿主の血液から他の好ましくないまたは選択された分子を除去するための手段も提供する。たとえば、宿主のウィルス感染によって血液中に存在するビリオンを、そのビリオンに対する、モノクローナル抗体またはポリクローナル抗体のいずれかである固定抗体を利用することによって除去することができる。別の例については、細胞に対する、モノクローナル抗体またはポリクローナル抗体のいずれかである固定抗体を利用することによって、宿主中の癌により血液中に存在する循環腫瘍細胞（ＣＴＣ）を除去することができる。次に、全血液体積から捕捉されたそれらのＣＴＣを分析して、より小さな部分的血液体積サンプルにわたって増大した感度を与えることができる。同様に、ウィルス、バクテリア、寄生生物、および毒素、ならびに自然発生および外来プロテアーゼ、ペプチド、サイトカイン、補体系成分、細胞を含むプロ蛋白およびタンパク質を除去し、分析することができる。細胞またはサイトカインまたは補体系成分などの有益な選択された分子を、修飾を伴ってまたは伴わずに活性化したり、拡張したり、再注入したりすることができる。血液だけでなく、この技術は、宿主の血液または洗浄および他の技術によって取得されるものを含む他の体液からの選択的除去を可能にする。
【００１９】
材料
囲まれた通路
本発明は囲まれた通路を有する。この通路は血液の流れを許し、抗体と抗原などの結合対の結合パートナーの一方を捕える。この装置は種々の物質からなることができる。これらの物質には、限定的ではないが、ニトロセルロース、セルロース、ナイロン、プラスチック、ゴム、ポリアクリルアミド、アガロース、ポリ（ビニルアルコール−エチレンコポリマー（poly(vinylalcohol-co-ethylene)）等、およびそれらの組合せが含まれる。材料は、微小分子を通路の外へ透過させることのできる半透過性のものが好ましい。
【００２０】
この装置を種々の形状に形成できる。その形状としては、限定的ではないが、平板状の透析器、半透膜、血漿搬出フィルタ、ならびにそれらの複合体および組合せが含まれる。
【００２１】
図１に示されるような好ましい実施形態は、商業透析法のための半透過性中空ファイバ１を使用している。このファイバはそのチューブの壁４に抗原３が付着されている。チューブの壁は相互に結合しているリンカー分子、たとえば、ＰＥＧ（ポリエチレングリコール）を有する場合とそうでない場合とがある。抗原が付着した透析膜を用いると、特異的抗体５の直接的な膜免疫吸着と血漿搬出とを同時に行なうことができる。
【００２２】
これに代えて、固定された結合パートナーのための別のアンカーを単独でまたは組合せて使用できる。たとえば、中空ファイバ１は複数の平板状の膜９を有することができる。これらの膜はファイバ長さに沿って長手方向に（図３）、またはファイバに垂直に置かれる（図２）。これら複数の膜９に非拡散状に付けられる抗原３は、特異的抗体５が中空ファイバ１に沿って通過するときに、それらを血液から分離する。膜９、好ましくは高流量（hi-flux）膜は、血液の細胞および成分を透過させるため、目詰まりを発生させない。チューブそれ自体に、くぼみ、ねじり、その他の変形を付与して、病原体および抗原の混合および結合を向上させてもよい。
【００２３】
図４は中空ファイバ１の別の実施形態を示す。この場合、抗原は複数の膜９の間に位置する自由浮動性の透過性球体１１に付けられる。これらの球体は、それらの大きさのために、高流量膜の間に捕えられている。球体１１上の抗原３は特異的抗体５を分離し、それによりそれらを血液から除去する。さらなる混合および結合のために、空気またはその他の無毒性ガスを微細気泡としてより低い位置から加えてもよく、そのガスはその後標準的な気泡トラップを用いてより高い位置から除去することができる（図示せず）。ガスで誘起された混合はシェル側またはチューブ（管腔）側で起こり得る。
【００２４】
図５は発明の別の実施形態を示す。この場合、抗原３は中空ファイバの代わりの平板状のプレート透析器１５の平板状の半透膜１３に付着されている。（下向きの矢印１７で示されるような）血液の血漿は対流によって膜を通過するが、特異的抗体は膜に保持される。血液は、連続的にまたは一時的な中断を伴って、図の左から右へ通路に沿って移動する。
【００２５】
結合対
任意の結合対とともにこの発明を使用可能である。結合対としては、限定的ではないが、抗原および抗体、受容体およびリガンド、抗抗体および抗体、またはこれらの分子の結合部分が含まれる。「結合部分」という用語は、パートナー分子に対して特異的または非特異的に結合して血液から除去されるか、または血液から結合パートナーを除去することができる分子の任意の部分を意味する。
【００２６】
発明の好ましい実施形態では、ＡＢＯ血液型の抗原は管腔面に結合され、それらに対応する抗体を血液から除去する。抗原／抗体対を逆にすることができ、その場合、抗体が管腔面に結合され、抗原が血液から除去される。主要な組織適合性複合体（ＭＨＣ）分子またはこれらの分子の部分などのような他の抗体、抗抗体、および抗原を、これらの分子に対して特異的な抗体を捕えるのに使用できる。抗原／抗体対は、さらに、特異的親和性を有するであろう複数組の結合対の任意のメンバーと置き換え可能である。例としては、病原体に対する何らかの特異性を有するリガンドおよび受容体がある。
【００２７】
物質ＡおよびＢ抗原はスイスのデイド・インターナショナル（Dade International）（現在はSiemensの一部）（商標名：Ｎｅｕｔｒ−ＡＢ）から調達できる。物質ＡおよびＢ抗原のこの混合物は各種の天然供給源からのものであることができる。その供給源としては、限定的ではないが、ウシ、ブタ、ウマ、およびヒトが含まれる。これらの抗原は、それらの最大還元形態である三糖類形態で人工的に製造することもできる。抗原が抗体の産生をもたらした元の抗原に一致する場合は、その抗原に対するより高い親和性が存在する。同様に、抗原が精製されるほど、反応性は高くなる。
【００２８】
より多くの抗原が存在し、管腔面に直接固定されたり、囲まれた通路内の結合分子によって付着されたりすると、それだけ多くの特異的抗体を流れる血液から除去可能である。同様に、コーティングされた膜の表面積が大きくなるほど、所望の抗体に結合する能力が高くなる。たとえば、中空ファイバに非拡散的に付けられた１００ｍｇの抗原は平均から高力価の３００から４００ｍｌの血液の抗Ａおよび抗Ｂ力価を著しく低減することができる。図６は、１００ｍｌの保存されていたヒトの血液を順次処理する、修飾された中空ファイバの能力を示す。力価は標準的な血球凝集法を用いることによって測定される。このことは、膜結合抗原が抗Ａおよび抗Ｂ抗体を特異的に除去可能であることと、この除去が、元の力価に拘わらず、最初の１５分の流動（膜に対する約３回の血液の通過）において行なわれることとを示している。これに代えて、物質ＡまたはＢなどの１つの抗原タイプを使用することができる。
【００２９】
図７は抗Ａ抗体に対するＡ抗原で修飾されたフィルタの能力を示している。図８は抗Ｂ抗体に対するＢ抗原を用いた場合の同様の能力を示している。血液の連続的なサンプルは、膜が飽和状態になるまで膜に通された。その時点では、血液サンプル中の抗体の力価はもはや膜に通しても減少しなかった。抗Ａコーティングされた膜は、およそ３００−４００ｍｌの、平均から高力価の血液の能力を有していた。抗Ｂコーティングされた膜はおよそ６００ｍｌの能力を有していた。
【００３０】
標準抗原をさらに精製することにより、抗原１ｍｇ当たりの抗Ａおよび抗Ｂ抗体を除去する能力は少なくとも６倍増大する。精製は、透析によって市販の抗原溶液から分子量が１２，０００ダルトン未満の成分を除去することによって達成される。たとえば、約４０ｍｇの精製抗原で修飾された透析フィルタの抗Ａ抗体能力は、６個の１５０ｍｌの血液サンプル各々の抗Ａ力価を２以下まで低下させた。標準的な未精製抗原修飾フィルタは最初のサンプルの抗Ａ力価を３２から８へ低下させたが、他の５つのサンプルの力価を低下させることはなかった。この結果は抗Ｂ抗体についても同様であった。したがって、１００ｍｇの精製された抗原で修飾された透析フィルタは、１．８から２．４Ｌの、平均から高力価の血液の抗Ａおよび抗Ｂ力価を著しく低下させるかもしれないことが予測される。
【００３１】
結合：囲まれた通路への結合の
抗原、抗体、結合対メンバー、リガンド、またはそれらの結合部分は、各種の標準的な結合技術によって、囲まれた通路に結合可能である。結合方法としては、限定的ではないが、化学的修飾、共有結合、強イオンまたは水素結合、リンカーの使用などが含まれる。好ましい方法は、標準的な臭化シアン（ＣＮＢｒ）結合を用いている。この結合は、囲まれた通路をＣＮＢｒで処理した後、抗原および修飾された通路をインキュベーションすることによって始まる。抗原タンパクのＮ末端は共有結合によってＣＮＢｒリンカーに付着する。囲まれた通路を処理するための別の化合物としては、限定的ではないが、過酸化水素、過ヨウ素酸ナトリウム、エピクロロヒドリン、１，４−ブタンジオールジグリシドールエーテル、塩化シアヌル、カルボニルジイミダゾール、置換塩化スルホニル、またはフルオロメチルピリジニウム塩、および同様の方法で適用された抗原が含まれる。アビジンおよびビオチンなどの標準的な化学リンカーも使用可能である。
【００３２】
プロセス
ろ過
血液からの好ましくない分子のろ過は、一方の腕から血液を採ってそれを他方の腕に戻す標準的な腎臓透析タイプの設備を用いて達成することができる。これに代えて、患者に２箇所で連結されて１箇所から血液を抜いてそれを他方に戻すいかなるポンプシステムも有効に働く。血液は、固定結合パートナーを有する囲まれた通路を通される。結合パートナーは、好ましくない分子を、それらが移動するにつれて分離する。特定の好ましくない分子を完全に除去するには、血液を通路に沿って何度も通過させることが必要であろう。
【００３３】
通路を通って移動する血液の流量は凝固を防止する程度に十分高くなければならないが、血液細胞を損傷するほど高いものであってはならない。範囲の例としては、毎分血液が約１０〜約１０００ｍｌであり、好ましくは約５０から約７５０ｍｌ／分の間であり、最も好ましくは、発明を用いた抗体の除去のための流量は約１００から約５００ｍｌ／分の間である。凝固を防止するために血液にヘパリンを添加することもできる。宿主の血液の全量（〜５Ｌ）の処理には、血液から抗体またはその他の望ましくない分子の完全な除去を達成するために、約２．５時間が必要であろう。
【００３４】
流れは連続的であり得る。これに代えて、好ましくない分子とそれらの固定結合パートナーとの相互作用を強めるために流れを中断させることができる。同様に、固定結合パートナーを有する装置の形状は、ある程度の渦および／または逆流をもたらして好ましくない分子と固定結合パートナーとの相互作用時間を増加させるようなものであり得る。
【００３５】
用途
現発明は、移植された臓器または組織に見出される外来抗原に対して特異的な抗体を除去し、そして実質的にこれらの抗体の循環血液を提供することによって、臓器または組織の移植拒絶を減少させるのに用いることができる。発明は、血液中に見出される特異的な抗体についての定量分析の一部としても用いることができる。例えば、抗Ａおよび抗Ｂ抗体の力価についての全体的な体分析を行うことができる。第１に、上述のろ過によって血液から抗体を除去できる。第２に、結合した抗体が、自由浮遊抗原またはその他の結合を防止するための非常に低いイオン強度バッファと競合することによって解放される。第３に、解放された抗体を血球凝集分析のような方法を用いて力価測定できる。
【００３６】
また、血漿瀉血の必要なく血液から特異的抗体を予め精製するのに発明を用いることができる。その工程は上述の定量分析と同様である。
【００３７】
さらに、発明を、血液中に存在する過剰な量の抗体を除去するのに用いることができる。
【００３８】
さらに、発明を、ビリオンまたはリガンドのような結合パートナーを有する他の分子を同定し、定量化し、および／または宿主の血液から除去するのに用いることができる。
【００３９】
発明の方法を、以下のうち１つ以上に使用可能である：
１．鎌状赤血球症：鎌状発症の際の鎌状赤血球の減量、
２．重症活動性ＳＬＥの治療：ＡＮＡ、またａＰＬ  Ａｂｓ、ｄｓＤＮＡ、ならびに活性化されたＢおよびＴ細胞の除去、
３．ＨＬＡ  Ａｂｓを除去して、クロスＨＬＡ心臓、肺、および他の臓器移植を支援、
４．骨髄移植（ＢＭＴ）、抗ＣＤ３４または抗ＨＬＡ抗体を介したより多数のＰＢＰＣの効率的な除去、
５．タイレノールまたは他の薬剤過量後の緊急解毒、
６．Ped.肝臓移植のためのＥＢＶの減量、
７．たとえば薬剤不応患者におけるＨＩＶの治療のためのＨＩＶ感染Ｔ４細胞およびウィルスおよび遊離ｇｐ１２０の除去、
８．ＲＡ、脳卒中、敗血症のためのＴＮＦａを含むサイトカインの除去、
９．充実性腫瘍の治療としての脈管形成因子の除去、
１０．動脈疾患の治療としての抗脈管形成因子の除去、
１１．子供のＩＤＤＭの予防のためのベータ細胞に対するautoAbsの除去、
１２．たとえば抗敗血症治療としてのバクテリアの減量、
１３．Ａ型、Ｂ型、Ｃ型、およびＤ型肝炎の減量、
１４．ＣＤ２０陽性、Ｂ細胞非ホジキンリンパ腫の減量、
１５．薬剤不応超高コレステロールの治療、
１６．クリオグロブリン血症の治療、
１７．血液による転移の除去、
１８．異種移植を可能にするための抗体の除去、
１９．ＨＩＶ（ＥＢＶ、Ａ型／Ｂ型／Ｃ型／Ｄ型肝炎）検出における超高感度診断として、
２０．薬剤過量の除去：ジゴキシン、ヘパリン（heprin）、コカイン、モルヒネなど、
２１．再狭窄を予防するための肥満細胞および泡沫細胞の除去、
２２．ＡＰＳの治療に対する抗リン脂質抗体またはインターロイキンの除去、
２３．抗体媒介血栓症の治療（脳卒中、ＭＩ、胎児消失、心臓血管手術後、深部静脈血栓症を治療するためのanticardiolipid Absの除去）、
２４．グッドパスチュア症候群の治療、
２５．Ｒｈ新生児溶血性疾患の治療、
２６．重症筋無力症（神経筋受容体抗原に対するautoAbsの除去）、
２７．研究および療法または診断の理由のための、ＩＬ−Ｘと略される（Ｘは１から少なくとも３５であることが分かっている）インターロイキンを含むサイトカイン（cytokin）の制御または測定、
２８．研究および療法または診断の理由のための因子II、VII、VIII、IX、Ｘなどのさまざまな因子の制御または測定、
２９．たとえば研究および療法または診断の理由のための補体Ｙ（Ｙ＝Ｃ１からＣ９）の制御または測定、
３０．細菌または化学戦攻撃（炭疽、ボッツ病など）後の超高感度診断および解毒、
３１．超高用量薬物療法（ケモ（chemo）、バンコシンなど）のためのプラットフォーム、
３２．（高リスク、毒性、または致死的）免疫処置のための抗原プラットフォーム、
３３．敗血症における内毒素、リポ多糖類（ＬＰＳ）の除去、
３４．自己ワクチン開発のための野生型ＨＩＶの濃縮、
３５．ギランバレー症候群、および血漿搬出により非特異的に現在治療されている任意の他の疾患の治療、
３６．全血からの特異的細胞の除去：ＨＩＶ感染Ｔ４細胞、自己抗体産生細胞−糖尿病、リウマチ抗体など、
３７．診断のための循環腫瘍細胞（ＣＴＣ）の除去、
３８．療法効果のための循環腫瘍細胞（ＣＴＣ）の除去、
３９．たとえば手術前の、アスピリンクマジン、プラビックスなどの抗凝血剤、および他の抗凝血剤の除去、
４０．血液中に未知の病原体を治療する複数抗生物質、殺菌剤、および抗ウィルス薬を残しながら、血液から、原因不明の発熱を伴う−たとえば黄色ブドウ球菌に感染した患者からのたとえば生きているまたは死んだバクテリアなどの病原体の除去、これにより溶出および成功裡の培養の前に抗生物質から最適な生物を分離する。これは、血液サンプルおよび次に培養物中に残留する抗感染療法による培養物偽陰性（false culture negative）を解消する。本発明は、一段階手順を用いた、宿主の血液からの選択された分子の濃縮のための方法と、結果的に得られる生成物とを提供する。選択された分子は、濃縮されなければ既存の方法では検出不可能な程度に低濃度であろう検体であるか、またはその濃度が望ましい血液成分のサブセットであってもよい。選択された分子は、病気を患っている宿主中に存在する循環腫瘍細胞、健常細胞、病原性抗体もしくは有益な抗体、またはビリオンであってもよい。
【００４０】
装置は、単一の工程で血液中の何かを濃縮するのに用いることができる。一旦濃縮されると、選択された分子は、（１）化学的または生物学的方法でさらに分析される、（２）活性化される、不活性化される、改良される、ろ過される、拡張される、または何らかの他のやり方で源へのまたは別の宿主への再注入のために処理される、（３）将来的な使用のために保存される、ことができる。
【００４１】
一例では、現在、７．５ｍｌの血液中に１個の細胞を見出すことができる。標準的な男性は５，０００ｃｃの血液を有するため、人は平均で血液系中に６６７個の細胞を有することになろう。そのことは、６６７よりも低濃度では、１回の採血に基づくＤｘは細胞を取り損ねて偽陰性を与えてしまうかもしれないことを意味する。人が転移性疾患を有しても発見されない。発明を用いると、５，０００ｃｃの血液供給すべてをサンプリングして、６６７個すべての細胞を捕捉して、（１）さらなる特徴付け、（２）薬物感度のための培養、および当然ながら（３）破壊のために細胞の大きなセットを提供することができる。重要なことに、人が６７個の細胞を有するならば、発明は６７個すべて（またはその大部分）を捕捉して、検出を１０倍向上させて真陽性の判定を可能にするであろう。
【００４２】
化学療法後の使用のために循環幹細胞を採取するのに装置を用いることができる。現在の検出方法よりも低い濃度レベルで、または既存の抗生物質治療によって予防され得る数を増大するための培養を要件とする現在の検出方法よりも早期に、ＨＩＶ、大腸菌、黄色ブドウ球菌、ＣＭＶ、Ｃ、Ｄ型肝炎、炭疽を検出するのに装置を用いることができる。
【図１】
2013530986.tif 000003
【図２】
2013530986.tif 000004
【図３】
2013530986.tif 000005
【図４】
2013530986.tif 000006
【図５】
2013530986.tif 000007
【図６】
2013530986.tif 000008
【図７】
2013530986.tif 000009
【図８】
2013530986.tif 000010
【手続補正書】
【提出日】平成24年2月29日(2012.2.29)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
被験体の血液中の選択された抗体の数を減らすための方法であって、
ａ）被験体から血液を取ることと、
ｂ）囲まれた通路に沿って血液を通過させることとを備え、前記通路は、表面が１つ以上の中空ファイバの長さに対して実質的に垂直に位置決めされた１つ以上の膜を有する１つ以上の半透過性中空ファイバと、１つ以上の膜に固定された抗体に特異的な抗原とを備え、さらに
ｃ）処理済み血液を前記被験体の内部循環に戻すことを備え、戻された処理済み血液は、処理前と比較して、選択された抗体の数が減っており、方法は
ａ）鎌状赤血球症：鎌状発症の際の鎌状赤血球の減量、
ｂ）重症活動性ＳＬＥの治療：ＡＮＡ、またａＰＬ  Ａｂｓ、ｄｓＤＮＡ、ならびに活性化されたＢおよびＴ細胞の除去、
ｃ）ＨＬＡ  Ａｂｓを除去して、クロスＨＬＡ心臓、肺、および他の臓器移植を支援、
ｄ）骨髄移植（ＢＭＴ）、抗ＣＤ３４または抗ＨＬＡ抗体を介したより多数のＰＢＰＣの効率的な除去、
ｅ）タイレノールまたは他の薬剤過量後の緊急解毒、
ｆ）Ped.肝臓移植のためのＥＢＶの減量、
ｇ）たとえば薬剤不応患者におけるＨＩＶの治療のためのＨＩＶ感染Ｔ４細胞およびウィルスおよび遊離ｇｐ１２０の除去、
ｈ）ＲＡ、脳卒中、敗血症のためのＴＮＦａを含むサイトカインの除去、
ｉ）充実性腫瘍の治療としての脈管形成因子の除去、
ｊ）動脈疾患の治療としての抗脈管形成因子の除去、
ｋ）子供のＩＤＤＭの予防のためのベータ細胞に対するautoAbsの除去、
ｌ）たとえば抗敗血症治療としてのバクテリアの減量、
ｍ）Ａ型、Ｂ型、Ｃ型、およびＤ型肝炎の減量、
ｎ）ＣＤ２０陽性、Ｂ細胞非ホジキンリンパ腫の減量、
ｏ）薬剤不応超高コレステロールの治療、
ｐ）クリオグロブリン血症の治療、
ｑ）血液による転移の除去、
ｒ）異種移植を可能にするための抗体の除去、
ｓ）ＨＩＶ（ＥＢＶ、Ａ型／Ｂ型／Ｃ型／Ｄ型肝炎）検出における超高感度診断として、
ｔ）薬剤過量の除去：ジゴキシン、ヘパリン、コカイン、モルヒネなど、
ｕ）再狭窄を予防するための肥満細胞および泡沫細胞の除去、
ｖ）ＡＰＳの治療に対する抗リン脂質抗体またはインターロイキンの除去、
ｗ）抗体媒介血栓症の治療（脳卒中、ＭＩ、胎児消失、心臓血管手術後、深部静脈血栓症を治療するためのanticardiolipid Absの除去）、
ｘ）グッドパスチュア症候群の治療、
ｙ）Ｒｈ新生児溶血性疾患の治療、
ｚ）重症筋無力症（神経筋受容体抗原に対するautoAbsの除去）、
ａａ）研究および療法または診断の理由のための、ＩＬ−Ｘと略される（Ｘは１から少なくとも３５であることが分かっている）インターロイキンを含むサイトカインの制御または測定、
ｂｂ）研究および療法または診断の理由のための因子II、VII、VIII、IX、Ｘなどのさまざまな因子の制御または測定、
ｃｃ）たとえば研究および療法または診断の理由のための補体Ｙ（Ｙ＝Ｃ９からの制御または測定、
ｄｄ）細菌または化学戦攻撃（炭疽、ボッツ病など）後の超高感度診断および解毒、
ｅｅ）超高用量薬物療法（ケモ、バンコシンなど）のためのプラットフォーム、
ｆｆ）（高リスク、毒性、または致死的）免疫処置のための抗原プラットフォーム、
ｇｇ）敗血症における内毒素、リポ多糖類（ＬＰＳ）の除去、
ｈｈ）自己ワクチン開発のための野生型ＨＩＶの濃縮、
ｉｉ）ギランバレー症候群、および血漿搬出により非特異的に現在治療されている任意の他の疾患の治療、
ｊｊ）全血からの特異的細胞の除去：ＨＩＶ感染Ｔ４細胞、自己抗体産生細胞−糖尿病、リウマチ抗体など、
ｋｋ）診断のための循環腫瘍細胞（ＣＴＣ）の除去、
ｌｌ）療法効果のための循環腫瘍細胞（ＣＴＣ）の除去、
ｍｍ）たとえば手術前の、アスピリンクマジン、プラビックスなどの抗凝血剤、および他の抗凝血剤の除去、
ｎｎ）血液中に未知の病原体を治療する複数抗生物質、殺菌剤、および抗ウィルス薬を残しながら、血液から、原因不明の発熱を伴う−たとえば黄色ブドウ球菌に感染した患者からのたとえば生きているまたは死んだバクテリアなどの病原体の除去、これにより溶出および成功裡の培養の前に抗生物質から最適な生物を分離する、
という手順のうち少なくとも１つのために用いられる、方法。
【請求項２】
囲まれた通路の少なくとも一部は、ニトロセルロース、セルロース、ナイロン、プラスチック、ゴム、ポリアクリルアミド、アガロース、ポリ（ビニルアルコール−エチレンコポリマー）、およびそれらの組合せからなる群から選択された材料からなる、請求項１に記載の方法。
【請求項３】
１つ以上の半透過性中空ファイバは、１つ以上の中空ファイバ内の血液の混合を強めるために、少なくとも部分的にくぼみが設けられ、またはねじられ、これにより固定された抗原との血液の接触を増す、請求項１に記載の方法。
【請求項４】
囲まれた通路に血液を通過させるステップは、囲まれた通路を通る血液の連続的なまたは一時的に中断した通過を備える、請求項１に記載の方法。
【請求項５】
選択された抗体に特異的な抗原は、半透過性中空ファイバの壁にさらに固定される、請求項１に記載の方法。
【請求項６】
複数の膜は半透過性中空ファイバ内に設けられ、これにより、中空ファイバの長さを３つ以上の連続セクションに分割する、請求項１に記載の方法。
【請求項７】
囲まれた通路は、２つの膜によって規定される連続セクション内に捕えられる透過性担体球体をさらに備え、球体の直径は中空ファイバの直径よりも小さく、選択された抗体に特異的な抗原は球体にさらに固定される、請求項６に記載の方法。
【請求項８】
選択された抗体は、血液中に存在する過剰な抗体によって特徴付けられる疾患状態と関連付けられる抗体である、請求項１に記載の方法。
【請求項９】
選択された抗体は、抗Ａ血液タンパク抗体、抗Ｂ血液タンパク抗体、抗プロテインＡ抗体、抗プロテインＧ抗体、および大部分の組織適合複合分子に対する抗体からなる群から選択される、請求項１に記載の方法。
【請求項１０】
選択された抗体は抗Ａ血液タンパク抗体または抗Ｂ血液タンパク抗体である、請求項９に記載の方法。
【請求項１１】
抗原は、化学的修飾、共有結合、強イオン結合、水素結合、およびリンカーの利用からなる群から選択されるプロセスによって１つ以上の膜に付着される、請求項１に記載の方法。
【請求項１２】
化学的修飾は、臭化シアン、過酸化水素、過ヨウ素酸ナトリウム、エピクロロヒドリン、１，４−ブタンジオールジグリシドールエーテル、塩化シアヌル、カルボニルジイミダゾール、置換された塩化スルホニル、およびフルオロメチルピリジニウム塩からなる群から選択された化合物で処理することによってなされる、請求項１１に記載の方法。
【請求項１３】
抗原はビオチンリンカーのアビジンによって１つ以上の膜に付着される、請求項１に記載の方法。
【請求項１４】
被験体の血液中の選択された抗原の数を減らすための方法であって、
ａ）被験体から血液を取ることと、
ｂ）囲まれた通路に沿って血液を通過させることによって前記血液を処理することとを備え、前記通路は、表面が１つ以上の中空ファイバの長さに対して実質的に垂直に位置決めされた１つ以上の膜を有する１つ以上の半透過性中空ファイバと、１つ以上の膜に固定された選択された抗原に特異的な抗体とを備え、通路に沿って血液を通過させることにより、選択された抗原は固定された抗体によって分離され、さらに
ｃ）処理済み血液を前記被験体の内部循環に戻すことを備え、戻された処理済み血液は、処理前と比較して、選択された抗原の数が減っており、
抗体は、化学的修飾、共有結合、強イオン結合、水素結合、およびリンカーの利用からなる群から選択されるプロセスによって１つ以上の膜に付着される、方法。
【請求項１５】
囲まれた通路の少なくとも一部は、ニトロセルロース、セルロース、ナイロン、プラスチック、ゴム、ポリアクリルアミド、アガロース、ポリ（ビニルアルコール−エチレンコポリマー）、およびそれらの組合せからなる群から選択された材料からなる、請求項１４に記載の方法。
【請求項１６】
１つ以上の半透過性中空ファイバは、１つ以上の中空ファイバ内の血液の混合を強めるために、少なくとも部分的にくぼみが設けられ、またはねじられ、これにより固定された抗体との血液の接触を増す、請求項１４に記載の方法。
【請求項１７】
囲まれた通路に血液を通過させるステップは、囲まれた通路を通る血液の連続的なまたは一時的に中断した通過を備える、請求項１４に記載の方法。
【請求項１８】
好ましくない抗原に特異的な抗体は、半透過性中空ファイバの壁にさらに固定される、請求項１４に記載の方法。
【請求項１９】
複数の膜は半透過性中空ファイバ内に設けられ、これにより、中空ファイバの長さを３つ以上の連続セクションに分割する、請求項１４に記載の方法。
【請求項２０】
囲まれた通路は、２つの膜によって規定される連続セクション内に捕えられる透過性担体球体をさらに備え、球体の直径は中空ファイバの直径よりも小さく、選択された抗原に特異的な抗体は球体にさらに固定される、請求項１９に記載の方法。
【請求項２１】
化学的修飾は、臭化シアン、過酸化水素、過ヨウ素酸ナトリウム、エピクロロヒドリン、１，４−ブタンジオールジグリシドールエーテル、塩化シアヌル、カルボニルジイミダゾール、置換された塩化スルホニル、およびフルオロメチルピリジニウム塩からなる群から選択された化合物で処理することによってなされる、請求項１４に記載の方法。
【請求項２２】
抗体はアビジンまたはビオチンリンカーによって１つ以上の膜に付着される、請求項１４に記載の方法。
【請求項２３】
被験体の体液中の選択された分子の数を減らすための方法であって、
ａ）被験体から体液を取ることと、
ｂ）囲まれた通路に沿って体液を通過させることとを備え、前記通路は、表面が１つ以上の中空ファイバの長さに対して実質的に垂直に位置決めされた１つ以上の膜を有する１つ以上の半透過性中空ファイバと、１つ以上の膜に固定された選択された分子に特異的な結合部位とを備え、通路に沿って体液を通過させることにより、選択された分子は固定された結合部位によって分離され、これにより体液を処理し、さらに
ｃ）処理済み体液を前記被験体の内部循環に戻すことを備え、戻された処理済み体液は、処理前と比較して、選択された分子の数が減っており、前記方法は、
ａ）鎌状赤血球症：鎌状発症の際の鎌状赤血球の減量、
ｂ）重症活動性ＳＬＥの治療：ＡＮＡ、またａＰＬ  Ａｂｓ、ｄｓＤＮＡ、ならびに活性化されたＢおよびＴ細胞の除去、
ｃ）ＨＬＡ  Ａｂｓを除去して、クロスＨＬＡ心臓、肺、および他の臓器移植を支援、
ｄ）骨髄移植（ＢＭＴ）、抗ＣＤ３４または抗ＨＬＡ抗体を介したより多数のＰＢＰＣの効率的な除去、
ｅ）タイレノールまたは他の薬剤過量後の緊急解毒、
ｆ）Ped.肝臓移植のためのＥＢＶの減量、
ｇ）たとえば薬剤不応患者におけるＨＩＶの治療のためのＨＩＶ感染Ｔ４細胞およびウィルスおよび遊離ｇｐ１２０の除去、
ｈ）ＲＡ、脳卒中、敗血症のためのＴＮＦａを含むサイトカインの除去、
ｉ）充実性腫瘍の治療としての脈管形成因子の除去、
ｊ）動脈疾患の治療としての抗脈管形成因子の除去、
ｋ）子供のＩＤＤＭの予防のためのベータ細胞に対するautoAbsの除去、
ｌ）たとえば抗敗血症治療としてのバクテリアの減量、
ｍ）Ａ型、Ｂ型、Ｃ型、およびＤ型肝炎の減量、
ｎ）ＣＤ２０陽性、Ｂ細胞非ホジキンリンパ腫の減量、
ｏ）薬剤不応超高コレステロールの治療、
ｐ）クリオグロブリン血症の治療、
ｑ）血液による転移の除去、
ｒ）異種移植を可能にするための抗体の除去、
ｓ）ＨＩＶ（ＥＢＶ、Ａ型／Ｂ型／Ｃ型／Ｄ型肝炎）検出における超高感度診断として、
ｔ）薬剤過量の除去：ジゴキシン、ヘパリン、コカイン、モルヒネなど、
ｕ）再狭窄を予防するための肥満細胞および泡沫細胞の除去、
ｖ）ＡＰＳの治療に対する抗リン脂質抗体またはインターロイキンの除去、
ｗ）抗体媒介血栓症の治療（脳卒中、ＭＩ、胎児消失、心臓血管手術後、深部静脈血栓症を治療するためのanticardiolipid Absの除去）、
ｘ）グッドパスチュア症候群の治療、
ｙ）Ｒｈ新生児溶血性疾患の治療、
ｚ）重症筋無力症（神経筋受容体抗原に対するautoAbsの除去）、
ａａ）研究および療法または診断の理由のための、ＩＬ−Ｘと略される（Ｘは１から少なくとも３５であることが分かっている）インターロイキンを含むサイトカインの制御または測定、
ｂｂ）研究および療法または診断の理由のための因子II、VII、VIII、IX、Ｘなどのさまざまな因子の制御または測定、
ｃｃ）たとえば研究および療法または診断の理由のための補体Ｙ（Ｙ＝Ｃ１からの制御または測定、
ｄｄ）細菌または化学戦攻撃（炭疽、ボッツ病など）後の超高感度診断および解毒、
ｅｅ）超高用量薬物療法（ケモ、バンコシンなど）のためのプラットフォーム、
ｆｆ）（高リスク、毒性、または致死的）免疫処置のための抗原プラットフォーム、
ｇｇ）敗血症における内毒素、リポ多糖類（ＬＰＳ）の除去、
ｈｈ）自己ワクチン開発のための野生型ＨＩＶの濃縮、
ｉｉ）ギランバレー症候群、および血漿搬出により非特異的に現在治療されている任意の他の疾患の治療、
ｊｊ）全血からの特異的細胞の除去：ＨＩＶ感染Ｔ４細胞、自己抗体産生細胞−糖尿病、リウマチ抗体など、
ｋｋ）診断のための循環腫瘍細胞（ＣＴＣ）の除去、
ｌｌ）療法効果のための循環腫瘍細胞（ＣＴＣ）の除去、
ｍｍ）たとえば手術前の、アスピリンクマジン、プラビックスなどの抗凝血剤、および他の抗凝血剤の除去、
ｎｎ）血液中に未知の病原体を治療する複数抗生物質、殺菌剤、および抗ウィルス薬を残しながら、血液から、原因不明の発熱を伴う−たとえば黄色ブドウ球菌に感染した患者からのたとえば生きているまたは死んだバクテリアなどの病原体の除去、これにより溶出および成功裡の培養の前に抗生物質から最適な生物を分離する、
という手順のうち少なくとも１つのために用いられる、方法。
【請求項２４】
被験体の血液中の選択された抗体の数を減らすための方法であって、
ａ）被験体から血液を取ることと、
ｂ）囲まれた通路に沿って血液を通過させることとを備え、前記通路は、表面が１つ以上の中空ファイバの長さに対して実質的に垂直に位置決めされた１つ以上の膜を有する１つ以上の半透過性中空ファイバと、１つ以上の膜に固定された抗体に特異的な抗原とを備え、さらに
ｃ）処理済み血液を前記被験体の内部循環に戻すことを備え、戻された処理済み血液は、処理前と比較して、選択された抗体の数が減っており、前記方法は、ビリオン、腫瘍細胞、ウィルス、バクテリア、痛点、毒素、プロテアーゼ、ペプチド、プロ蛋白、およびサイトカイン、補体系成分を含むタンパク質のうち１つの、血液からの除去のために用いられる、方法。
【手続補正書】
【提出日】平成25年3月28日(2013.3.28)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
被験体の体液中の選択された分子の数を減らすための方法であって、
ａ）被験体から体液を取ることと、
ｂ）囲まれた通路に沿って体液を通過させる体液に接近可能な囲まれた通路を提供し、前記通路は、表面が１つ以上の中空ファイバの長さに対して実質的に垂直に位置決めされた１つ以上の膜を有する１つ以上の半透過性中空ファイバと、１つ以上の膜に固定された特異的な結合部位を有する分子とを備え、ここにおいて、通路に沿って体液を通過させることにより選択された分子が固定された結合部位により分離され、それにより体液を処理し、
ｃ）ここにおいて、処理された体液は、処理前と比較して、減少した数の選択された分子を有する、方法。
【請求項２】
ａ）鎌状赤血球症：鎌状発症の際の鎌状赤血球の減量、
ｂ）重症活動性全身性エリテマトーデス（ＳＬＥ）、抗核抗体（ＡＮＡ）、抗リン脂質抗体（ａＰＬ）Ａｂ、ｄｓＤＮＡ、ならびに活性化されたＢおよびＴ細胞の治療、
ｃ）クロスＨＬＡ心臓、肺、および他の臓器移植を支援するためのＨＬＡ  Ａｂｓの除去、
ｄ）骨髄移植（ＢＭＴ）、抗ＣＤ３４または抗ＨＬＡ抗体を介した末梢血前駆細胞（ＰＢＰＣｓ）の効率的な除去、
ｅ）アセトアミノフェンまたは他の薬剤過量後の緊急解毒、
ｆ）Ｐｅｄ．肝臓移植のためのエプスタイン・バーウイルス（ＥＢＶ）の減量、
ｇ）ＨＩＶ感染Ｔ４細胞およびウィルス、生きているおよび死んだ、遊離ｇｐ１２０の除去、
ｈ）ＴＮＦａを含むサイトカインの除去、
ｉ）充実性腫瘍の治療としての脈管形成因子の除去、
ｊ）動脈疾患の治療としての抗脈管形成因子の除去、
ｋ）子供のＩＤＤＭの予防のためのベータ細胞に対するａｕｔｏ  Ａｂｓの除去、
ｌ）バクテリアの減量、
ｍ）Ａ型、Ｂ型、Ｃ型、およびＤ型肝炎の減量、
ｎ）ＣＤ２０陽性  Ｂ細胞の減量、
ｏ）コレステロールの除去、
ｐ）クリオグロブリンの除去、
ｑ）循環腫瘍細胞（ＣＴＣｓ）の除去、
ｒ）異種移植臓器に対する抗体の除去、
ｓ）弱まったＨＩＶ、ＥＢＶ、Ａ型／Ｂ型／Ｃ型／Ｄ型肝炎の除去、
ｔ）ジゴキシン、ヘパリン、クロピドグレル、ワルファリン、コカイン、モルヒネ、ヒドロコドン、オキシコドン、アルプラゾラム、メタドン、ジアゼパム、シタロプラム、クエチアピン、カリソプロドールおよびクロナゼパムの除去、
ｕ）再狭窄を予防するための肥満細胞および泡沫細胞の除去、
ｖ）抗リン脂質抗体またはインターロイキンの除去、
ｗ）血栓症を引き起こす抗体の除去、
ｘ）糸状体基底膜（ＧＢＭ）抗原に対する抗体の除去、
ｙ）ＲＨ新生児溶血性疾患用の抗−Ａ抗体および抗−Ｂ抗体の除去、
ｚ）神経筋受容体抗原に対するａｕｔｏ  Ａｂｓの除去、
ａａ）研究および療法および診断の理由のための、インターロイキンを含むサイトカインの制御または測定、
ｂｂ）研究および療法および診断の理由のための血小板、凝血因子、補助因子および制御因子の制御または測定、
ｃｃ）研究および療法および診断の理由のための、補体、オプソニン、マンノース結合レクチン（ＭＢＬ）およびフィコリンの制御または測定、
ｄｄ）炭疽菌、天然痘、出血熱ウイルス（ＨＦＶｓ）  Ｆｒａｎｃｉｓｅｌｌａ  ｔｕｌａｒｅｎｓｉｓ、Ｂａｃｉｌｌｕｓ  ａｎｔｈｒａｃｉｓ、Ｂｒｕｃｅｌｌａ  ｓｐｐ．、Ｂｕｒｈｏｌｄｅｒｉａ  ｍａｌｌｅｉ、Ｂｕｒｋｈｏｌｄｅｒｉａ  ｐｓｅｕｄｏｍａｌｌｅｉの制御または測定、
ｅｅ）表面部分の接触による超高用量薬物療法のためのプラットフォーム、
ｆｆ）表面部分の接触による（高リスク、毒性または致死的）免疫処置のための抗原プラットフォーム、
ｇｇ）敗血症における内毒素、リポ多糖類（ＬＰＳ）の除去、
ｈｈ）自己ワクチン開発のための野生型ＨＩＶの濃縮、
ｉｉ）ミエリンに対する抗体の除去、
ｊｊ）自己抗体産生Ｂ細胞の除去、
ｋｋ）診断のための循環腫瘍細胞（ＣＴＣｓ）の除去、
ｌｌ）療法効果のための循環腫瘍細胞（ＣＴＣｓ）の除去、
ｍｍ）抗凝血剤の除去、
ｎｎ）血液中に未知の病原体を処置する複数抗生物質、殺菌剤、および抗ウィルス薬を残しながら、血液から、原因不明の発熱を伴う患者からの生きているまたは死んだ病原体、バクテリア、内毒素、菌、ウイルス、プリオンの除去、これによる溶出および成功裡の培養の前の抗生物質からの最適な生物の分離、
から選ばれる少なくともいずれかの手順のために用いられる、請求項１に記載の方法。
【国際調査報告】
2013530986.tif 000011