【事件の表示】
　　特許第２８１９０７２号「犬の加齢による認知機能障害を治療する方法」の特許に対する特許異議の申立てについて、次のとおり決定する。
【結　論】
　訂正を認める。
　特許第２８１９０７２号の特許を維持する。
【理　由】
１．経緯
　本件特許第１８１９０７２号は、平成３年４月２２日の出願（優先権主張、1990年8月31日、1991月1月18日、米国）に係り、平成１０年８月２８日に設定登録された後、異議申立てがあり、取消理由通知に対して、平成１２年２月２９日付で訂正請求がなされたものである。
２．訂正の適否
　本件訂正請求に係る訂正事項は、特許明細書の請求項１における「犬の加齢による認知機能障害を治療する方法であって、　L-デプレニル或いは製薬上許容可能なその塩及び製剤上許容される担体からなる薬剤を、週少なくとも１乃至５回、犬の体重１ｋｇ当たり０．１乃至５．０ｍｇ投与することを特徴とする犬の加齢による認知傷害を治療する方法。」なる記載を、「犬の加齢による認知機能障害を治療する方法であって、　L-デプレニル或いは製薬上許容可能なその塩及び製剤上許容される担体からなる薬剤を、中年期から始めて週少なくとも１乃至５回、犬の体重１ｋｇ当たり０．１乃至５．０ｍｇ投与することを特徴とする犬の加齢による認知傷害を治療する方法。」に訂正するものである。
　そこで、上記訂正の適否を検討するに、この訂正は、犬の加齢による認知傷害の治療方法において、投薬開始時期を中年期に限定するものであるから、特許請求の範囲をさらに減縮するものである。しかも、投薬開始時期については、本件特許明細書第６欄段落番号[0035]において「中年期から開始するという投薬水準がもっとも好適である。」と記載されていたものであるから、この訂正は、願書に添付された明細書に記載された事項の範囲内の訂正である。
　さらに、この訂正は、特許請求の範囲を実質的に拡張又は変更するものでもなく、また、後記することから明らかなように、訂正後の特許請求の範囲に記載された事項により特定される発明は、特許出願の際独立して特許を受けることができないものともいえないものである。
　したがって、本件訂正請求は、特許法第１２０条の４第２項及び第３項において準用する特許法第１２６条第２−４項の規定に適合するので当該訂正を認める。
３．異議申し立てについて、
本件異議申立人の主張の概要は以下のとおりである。
（１）本件発明は、甲第１号証に記載された発明であるか、あるいは甲第１〜甲第１０号に記載された発明に基づいて当業者が容易に発明できたものであるから、本件特許は特許法第２９条第１項第３号、又は同法第２９条第２項の規定に違反してなされたものである。　そして、この主張に関して甲第１１、１３〜１５号証が提示されている。
（２）本件請求項１に記載された「認知機能障害」なる用語は明確ではなく、本件特許は、特許法第３６条に規定する要件を満たしていない出願に対してなされたものである。
　そして,この主張に関して、甲第１２、１６及び１７号証が提示されている。
　証拠方法
甲第１号証；「The Mount Sinai Journal of Medicine」vol.55,No.1(1988) P.67-74
甲第２号証；「Functional Neurology」vol.1,No.2(1986) P.165-174
甲第４号証；「Neuropharmacology」vol.26,No78(1987) P.887-892
甲第５号証；「MEZZ Document 28 of 90」
甲第６号証；「Acta Neurol.Scand.」126(1989) P.83-91
甲第７号証；「Pol.J.Pharmacol.」40(1988) P.659-666
甲第８号証；「Life Science」vol.47,No.5(1990) P.415-420
甲第９号証；「Mechanisms of Ageing and Development」30(1985)  p.109-122
甲第１０号証；「Nnature」vol.286,10July(1980)P.150-151
甲第１１号証；本件特許出願の対応欧州出願（EP出願番号91302820.5-2107)の審査において提出された1995年10月16日付け書類の写し
甲第１２号証；同1995年3月7日付け書類の写し
甲第１３号証；本件特許出願の対応米国出願（出願番号07/576,011)の審査において提出されたBoultonnのデクラレーション
甲第１４号証；同Bruyetteのデクラレーション
甲第１５号証；同対応米国出願（出願番号07/576,011)の審査において提出された1992年5月14日受け入れの意見書
甲第１６号証；「Stedmann's MEDICAL DICTIONARY」25版（1990) P.325
甲第１７号証；「AMERICAN VETERINARY SOCIETYU OF ANIMAL BEHAVIA」Vol.15,No.1(1993.4)
  そこで、本件訂正後の発明について、本件異議申立人の主張が採用できいるか否かを以下検討する。
（１）の主張について、
i）甲第１号証には、（−）デプレニル(L-デプレニルと同じ）はMAO-Bのインヒビターであり、脳内のMAO-B 活性をマウス、ラット、猫及び犬の４種においてインビトロで選択的にブロックできたこと、及びラットにおいてMAO-A活性に影響を与えずにMAO-B活性を抑制するデプレニルの投与量は0.25−0.5mg/kgであり、デプレニル0.25mg/kgの２１日間の毎日の投与はMAO-B活性の選択性を変化させないことを示す記載があり、また、 黒質線状体のドーパミン作動性ニューロンは脳内で最も早く加齢するニューロンである旨記載され、さらに、MAO-Bは動物およびヒトのニューログリアに多く分布す旨、ニューロンの喪失は常にグリア細胞の増殖により補償されるので、加齢脳でのニューロン喪失は、加齢に伴うMAO-B活性の増加を説明する旨、及びグリア細胞のMAO-Bがドーパミンの非シナプスニューロン間伝達を妨げ、ドーパミンによる化学伝達の効率に悪影響を与える旨の記載がある。
　しかし、甲第１号証においては、L-デプレニルが犬の加齢による認知機能障害の治療に有効であることを示す具体的な記載はないし、また、本件訂正後の発明における、L-デプレニルの投与開始を中年期から始めるという点については全く記載がないものであるから、本件訂正後の発明は甲第１号証に記載された発明とはいえない。
ii)甲第１号証の記載は上記のとおりであり、特に本件訂正後発明の上記L-デプレニル投与開始時期については示唆がない。
　甲第２号証においては、加齢ラットにL-デプレニルを投与して、ラットの能動的回避行動及び受動的回避行動を試験した結果が示され、デプレニルが加齢ラットの学習及び記憶力を改善させることを示す記載がある。さらに、加齢動物の認知機能障害は、中枢のカテコールアミン神経伝達の喪失が一因となっているらしいこと、加齢ラットにおけるデプレニル投与後の脳内カテコールアミンの増加は、これら動物の学習及び記憶の促進に関連していると考えられること、デプレニルの行動に対する効果は、多分大脳のMAO-B の抑制に関連しているらしいこと、及び本報告のデータは老人の行動欠陥に対するデプレニルの臨床的使用を強く示唆すること等の記載がある。
　しかし、甲第２号証の上記試験においては、試験開始のわずか１時間前であって、本件訂正後の発明の投与開始時期とは全く異なるものであり、甲第２号証においては、本件訂正発明の投与開始時期を示唆する記載はない。
　甲第３、６、７、８及び９号証においては、L-デプレニルによる、脳内ドーパミン作動性ニューロン乃至システムの活性化、MAO-Bの抑制および延命効果、デプレニルの塩酸塩あるいは該薬剤の投与量等について記載されているが、甲第３，６，７，８及び９号証においては、加齢による認知機能傷害の治療において、L-デプレニルの投薬開始時期を中年期とすることについて示唆する記載は全くない。さらにいうと、このうち、甲第３、７、８及び９号証においては、認知機能障害の治療についてさえ具体的な記載がないものであり、また、甲第６号証について異議申立人は、加齢ラットへのL-デプレニル投与による学習及び記憶維持について記載されている旨主張するが、甲第６号証における、学習能力の増進試験は、加齢ラットではなく、３−８月齢の若いラットからランダムに選択された群に対して行っているものであって、この甲第６号証の試験結果は、加齢による認知機能傷害の治療にデプレニルが有効であることを示すものとまではいえない。
　甲第１０号証においては、ドーパミン作動性A10ニューロンと認知機能の関連を示す記載はあるが、加齢動物の認知機能障害の治療およびデプレニルの投与について記載はなく、甲第１０号証は、加齢による認知機能傷害の治療において、L-デプレニルの投薬開始時期を中年期とすることについて示唆すものではない。
　甲第４号証においては、ラット、犬及び霊長類が中枢神経系の研究においてモデル動物として用いられることが記載され、また、甲第５号証においては、マフォプラジンが、ラットと犬の攻撃的行動を抑制する旨の記載があるが、これら甲号証も加齢による認知機能障害についての記載はなく、当然、加齢による認知機能傷害の治療において、L-デプレニルの投薬開始時期を中年期とすることについて何ら示唆するものではない。
　してみると、甲第１〜１０号証のいずれにおいても、加齢動物による認知機能傷害の治療において、L-デプレニルの投薬開始時期を中年期とすることについて記載がなく、当然、本件補正後の発明におけるように、犬の加齢による認知機能傷害治療において投薬開始時期を中年期とすることは示されてはいない。
　一方、本件明細書の実施例においては、ラットを用いた水中迷路試験において、L-デプレニルの投与した結果についての記載がある。そして、２６月齢（L-デプレニルの投与３カ月目）のラットに効果みられないのに対し、２９月齢（L-デプレニルの投与６カ月目）のラットは有意 に優れた学習力を示しており、これは、加齢動物の認知機能障害に対するL-デプレニルの投与は、高齢に達する相当以前から開始し、継続する必要性があることを示す。また、他の実施例においては、ビーグル犬に対するL-デプレニルの投与を、４〜７歳の時点からはじめて、２〜５年後の被験動物を調べた結果が記載されており、加齢に対して特に脆弱な領域である海馬のCA1領域の衰退細胞の数は、プラシーボ投与の群に対して著しく多数である旨の記載もある。したがって、これらの点からみれば、L-デプレニルの投薬開始時期を本件訂正後の発明のように中年期とすることの有効性は明らかであって、この効果は甲第１〜１０号証の記載からでは予測できるとはいえない。
　してみると、以上の点からみて、本件訂正後の発明は甲第１〜１０号証に記載された発明からでは当業者においてが容易に発明できたものとすることはできない。
　なお、甲第１１、１３及び１４号証は、出願人自身もラットに対する結果から、L-デプレニルが犬の認知機能障害の治療に効果があることを予想できると認識していたことを明らかにしようとするものであるが、本件訂正後の発明が、当業者においてが容易に発明できない旨の上記判断は、認知機能障害の治療において、ラットに対する結果が犬に対して類推できないことをその理由とするものではないから、この甲第１１、１３及び１４号証は、上記判断を左右するものではない。
（２）の主張について、
　本件異議申立人は、この主張の根拠として(a)甲第１６号証によれば、認知とは、「１．知の質を包含する一般用語であり、知覚、認識、想像、判断、理解、推理、概念を含む。２．人が知識を獲得する過程」であって、この定義は人を対象としてされており、このような広い定義を動物に当てはめることはできない旨指摘し、さらに、(b)甲第１７号証においては犬の認知障害の正式な定義は獣医学の分野にも存在しない旨記載され、また、甲第１２号証によれば、出願人自身でさえ獣医学の分野では、認知機能障害は認識されてもいないし、定義もされてはいないと述べている点を挙げている。
　しかし、本件明細書の実施例においては、上記ラットの水中迷路試験の結果が記載され、これによれば、L-デプレニルの学習力ないしは習得力の向上効果は明確に示され、またこれらの能力は問題解決能力に関連することを示す記載もある。一方、動物であっても学習ないしは習得力の低下は、単にその能力自体の低下にとどまらず、認識、判断等を含む問題解決能力の低下となって表れ、これに伴い、正常な行動をとりえないことは常識であり、学習ないしは習得力は、その行動を支配する認識あるいは判断等種々の知的要素に対し影響を及ぼし、これらは密接に関連しているということができる。このことは、犬においても同様であり、犬の「認知機能」とは、このような学習ないしは習得力、及びこれに起因する様々な知的要素を含む総合的な知的能力と解しても特段不合理ではない。してみれば、人と犬とでは認知機能が同じではないかもしれないが、これのみで犬の「認知機能」について、学習ないしは習得力あるいは記憶力のみに限定しなければならないとすることはできず、また、該用語が特に意味不明であるとまではいえない。さらに、甲第１２及び１７号証は、犬の認知機能障害の定義が獣医学の分野では従来存在しないというものではあるが、獣医学の分野においては正式な定義はないとしても、本件明細書の記載及び常識からみれば本件訂正後の請求項１の犬の「認知機能」の意味は特段不明確とはいえず、単に獣医学の分野で正確な定義がないのみで本件明細書の記載が不備であるとすることもできない。
　したがって、この主張（２）も採用できない。
４．むすび
　以上のとおりであるから、結局、本件訂正請求は認めることができ、また、異議申立て人の主張及び立証によっては、本件特許を取り消すことができない。
　さらに、他に本件特許を取消すべき理由を発見しない。
　よって、結論のとおり決定する。
【異議決定日】
平成１２年４月７日（２０００．４．７）
【訂正の要旨】
　請求項１の減縮目的として【請求項１】の欄の記載を、
「犬の加齢による認知機能障害を治療する方法であって、Ｌ−デプレニル或いは製薬上許容可能なその塩及び製剤上許容される担体から成る薬剤を、中年期から始めて週少なくとも１乃至５回、犬の体重１ｋｇ当り０．１ｍｇ乃至５．０ｍｇ投与することを特徴とする犬の加齢による認知機能障害を治療する方法。」と訂正する。
（５４）【発明の名称】
犬の加齢による認知機能障害を治療する方法
（５７）【特許請求の範囲】
　【請求項１】　犬の加齢による認知機能障害を治療する方法であって、Ｌ−デプレニル或いは製薬上許容可能なその塩及び製剤上許容される担体から成る薬剤を、
中年期から始めて
【発明の詳細な説明】
　【０００１】
　【産業上の利用分野】
　本発明は、犬の加齢による認知機能障害を治療する方法に関する。より詳細に述べれば、本発明は、公知化合物であるＬ−デプレニルから成る薬剤を一定量投与することを特徴とする犬の加齢による認知機能障害を治療する方法に関する。
　本発明で使用する用語“認知機能障害を治療する方法”は、“認知機能の減退を抑制する方法”、或いは“認機能を正常に維持する方法”等と同義である。
　【０００２】
　【従来の技術】
　Ｌ−デプレニルは、モノアミン酸化酵素Ｂ（ＭＡＯ−Ｂ）の選択的阻害剤であって、パーキンソン病の治療の際の佐剤として広く用いられている。Ｌ−デプレニルの最も一般的な用途はパーキンソン病の治療であるが、本来は、抗鬱病剤として開発されたものである。ところが、最近の試験によれば、Ｌ−デプレニルには、加齢中の動物の性的応答に対して何らかの作用があるらしいこと、また、少なくともラットにおいて、自然寿命の延命作用もあるらしいことが示された。しかし現在のところ、Ｌ−デプレニルは、パーキンソン病の補助的治療剤としての用途のみが、医薬管理当局によって医学的に承認されているにすぎない。
　【０００３】
　本発明の特に重要な点は、加齢中の犬の認知機能を正常に維持するか或いは認知機能障害を治療することである。Ｌ−デプレニルの生理的作用は、広範囲にわたる可能性があり、本発明およびその母体となる出願の対象とするところ以外の他の身体的機能に影響を及ぼす可能性もある。その例としては、唾液腺、あるいはその他の外分泌腺、例えば消化管に付属する膵臓の分泌作用があるものと思われる。心循環機能、あるいは正常な創傷治癒力の保持も別の例と考えられる。
　【０００４】
　共同発明者であるミルグラムによる母体となる米国出願では、加齢による認知機能の減退の抑制を目的とするＬ−デプレニルの特定の用途が開示されている。これを改善した本発明によれば、Ｌ−デプレニルは、後述の投与量を用いた場合は、加齢中の犬の正常な認知機能の減退を抑制する効果があることが発見された。
　【０００５】
　Ｌ−デプレニルは公知化合物ではあるが、犬の加齢による正常な認知機能の減退を抑制する目的で使用されることはなかった。ほとんどの薬品と同様に、Ｌ−デプレニルは、投与量に完全に依存する多様な生理的作用を有することが可能である。
　【０００６】
　本発明によれば、Ｌ−デプレニルは、本明細書に記載の投与量で、かつ本明細書に記載の時間による周期的間隔で投与されるならば、本明細書に列挙の所望の生理的作用をもたらす治療法に用いて奏功することが可能である。投与量および治療水準が異なる場合は、本明細書に記載の結果が得られない可能性があることは明白である。より高い投与量では、行動上の副作用が生じることがある。
　【０００７】
　【発明が解決しようとする課題】
　発明が解決しようとする課題は、犬の加齢による認知機能障害を治療することができなかったことである。
　【０００８】
　【課題を解決するための手段】
　課題を解決するための手段は、Ｌ−デプレニル或いは製薬上許容可能なその塩及び製剤上許容される担体から成る薬剤を、週少なくとも１乃至５回、犬の体重１ｋｇ当り０．１ｍｇ乃至５．０ｍｇ投与することである。
　【０００９】
　前述のとおり、本発明の方法、あるいは投与計画に有用な化合物は、Ｌ−デプレニルとして公知の化合物である。Ｌ−デプレニルは、（−）−Ｎ−ａ−ジメチル−Ｎ−２−プロピニルベンゼン＝エタンアミンなる構造式を有する。これは、下記の次式のように表される。
　【００１０】
　【化１】
　時には、Ｌ−デプレニルは、左旋性異性体であることを示すために、（−）デプレニルと称されることもあるが、これが、パーキンソン病の治療に活性のある形態なのである。一般的には、製薬上許容可能なその塩、たとえば塩酸塩の形態で供される。
　【００１１】
　本明細書に用いられる限りで、製薬上許容可能なその塩とは、下記のものを意味する。すなわち、製薬または獣医業界での使用が許容可能であって、毒性がなく、あるいは製薬または獣医学上許容不能ではないこと。許容可能なその塩とは、無機酸、例えば塩酸、臭化水素酸、硫酸、硝酸、リン酸その他はもとより、有機酸、例えば酢酸、プロピオン酸、グリコール酸、ピルビン酸、シュウ酸、リンゴ酸、マロン酸、コハク酸、マレイン酸、フマール酸、酒石酸、クエン酸、安息香酸、ケイ皮酸、マンデル酸等々を用いて形成される塩を意味する。
　【００１２】
　予防的活性のある化合物としてのＬ−デプレニルを投与して、本発明の生理的結果を得るには、全身的活性物質に対する許容されたいかなる投与方式を介することも可能である。この種の方法としては、経口的、非経口的、およびその他の全身的投与、エアゾール、および局所的投与形態はもとより、持続的放出方式等々がある。
　【００１３】
　本発明の組成物は、何らかの特定の状況下で必要とされる投与方法および投与量に適当であれば、製薬および獣医業界に公知のいかなる組成物であってもよい。製薬・獣医双方の業界に適用する事例の場合、上記組成物としては、錠剤、丸薬、カプセル、粉末、エアゾール、坐薬、貼り薬、非経口剤、および、油水懸濁液、溶液、乳濁液などの経口剤が挙げられる。長期作用性の注射可能薬、および持続的放出手段をこれに含めることもできる。
　【００１４】
　固形の調剤を行なう場合は、固形の製薬用担体、例えば澱粉、砂糖、タルク、マンニトール、ポビドン（ポリビニルピロリドン）・ステアリン酸マグネシウム、その他を用いて粉末を形成することもできる。乳糖、およびマンノースが好適な固形担体である。粉末は、例えば患者への直接投与にこれを用いることもできるが、これに代えて、適切な食品、および水などの液体に添加して投与効果を高めることもできる。粉末はまた、錠剤を製造するのにも、あるいはゼラチンカプセルに充填するのにも用いることができる。適切な潤滑剤、例えばステアリン酸マグネシウム、結合剤、例えばゼラチン、および崩壊剤、例えばクエン酸と併用した炭酸ナトリウムを用いて錠剤を形成することもできる。
　【００１５】
　単位投与薬の形態、例えば錠剤またはカプセルは、適切な所定量のＬ−デプレニルを、望ましくは無害な酸付加塩としてこれに含有させることができ、また、後述の定期的間隔を置いて、１回に１服またはそれ以上投与することもできる。しかし、この種の単位投与薬の形態は、犬の体重１ｋｇあたり０．１〜５．０ｍｇの濃度の一種またはそれ以上の形態の活性Ｌ−デプレニルを、広範囲の指針に基づいて含有するようにしなければならない。
　【００１６】
　体重２５ｋｇのイヌに対する本明細書記載の特定用途のための典型的な錠剤の組成は、下記のとおりとすることができる（単位はｍｇ）。
▲１▼Ｌ−デプレニル　　　　　　　　２５
▲２▼マンニトール　　　　　　　　１００
▲３▼ステアリン酸　　　　　　　　　　３
マンニトールによって顆粒化がなされる。顆粒を乾燥させるために、もう一方の成分を添加し、次いで打錠する。
　【００１７】
　これとは別に、下記の組成の錠剤を製造することもできる。
ａ　Ｌ−デプレニル　　　　　　　　２５
ｂ　米国薬局方澱粉　　　　　　　　５７
ｃ　米国薬局方乳糖　　　　　　　　７３
ｄ　米国薬局方タルク　　　　　　　　９
ｅ　ステアリン酸　　　　　　　　　　６
ａ、ｂ、およびｃの粉末を打ち砕き、次いで顆粒化してから、４および５の成分と混合し、打錠するのである。
　【００１８】
　カプセルを調剤するには、下記の成分を完全に混合し、これを、３番硬質ゼラチンに充填する。
１．Ｌ−デプレニル　　　　　　　　２５
２．米国薬局方乳糖　　　　　　　２００
３．米国薬局方澱粉　　　　　　　　１６
４．米国薬局方タルク　　　　　　　　８
　前述のとおり、本明細書記載の治療法に影響される生理的機能は、投与量に不可避的に左右される。
　【００１９】
　哺乳類の加齢と甲状腺機能、副腎機能、認知機能等は微妙に関連しているので以下それらについて解説する。加齢は、ストレスに対する適応性の減退に付随するものと、長期間考えられてきた〔セリエ（Ｓｅｌｙｅ）およびツフウェーバー（Ｔｕｃｈｗｅｂｅｒ）：「加齢および疾病との関係におけるストレス（Ｓｔｒｅｓｓ　ｉｎ　Ｒｅｌａｔｉｏｎ　ｔｏ　Ａｇｉｎｇ　ａｎｄ　Ｄｉｓｅａｓｅ）」、視床下部、脳下垂体、および加齢（Ｈｙｐｏｔｈａｌａｍｕｓ，Ｐｉｔｕｉｔａｒｙ，ａｎｄ　Ａｇｉｎｇ）、１９７６年発行、５５７〜５７３ページ〕。例えば、基礎体温は、若者と高齢者の双方についてほぼ同じであるが、高齢者の方が、寒暑にさらされた場合の体温の調節能カに劣る〔ショック（Ｓｈｏｃｋ）：「全身的統合（Ｓｙｓｔｅｍｓ　Ｉｎｔｅｇｒａｔｉｏｎ）」、加齢の生物学総覧（Ｈａｎｄｂｏｏｋ　ｏｆ　ｔｈｅ　Ｂｉｏｌｏｇｙ　ｏｆ　Ａｇｉｎｇ）、１９７７年ニューヨーク発行より〕。また、ストレス自体が、加齢に関するある特定の生体指標を増進させるという証拠もある〔カーチス（Ｃｕｒｔｉｓ）：「加齢過程を操る生物学的機構（Ｂｉｏｌｏｇｉｃａｌ　Ｍｅｃｈａｎｉｓｍｓ　Ｕｎｄｅｒｌｙｉｎｇ　ｔｈｅ　Ａｇｉｎｇ　Ｐｒｏｃｅｓｓ）」、サイエンス（Ｓｃｉｅｎｃｅ）、第１４１巻（１９６３年）６８６ベージ；ペア（Ｐａｒｅ）：「ラットの成熟前の加齢に対する慢性的環境ストレスの作用（Ｔｈｅ　Ｅｆｆｅｃｔ　ｏｆ　Ｃｈｒｏｎｉｃ　Ｅｎｖｉｒｏｎｍｅｎｔａｌ　Ｓｔｒｅｓｓ　ｏｎ　Ｐｒｅｍａｔｕｒｅ　Ａｇｉｎｇ　ｉｎ　ｔｈｅ　Ｒａｔ）」、ジャーナル・オブ・ジェロントロジー（Ｊ．Ｇｅｒｏｎｔｏｌ．）、第２０巻（１９６５年）７８ページ〕。サポルスキー（Ｓａｐｏｌｓｋｙ）のグループ、およびランドフィールド（Ｌａｎｄｆｉｅｌｄ）のグループによる研究は、「グルココルチコイドカスケード」の概念を支持する〔サポルスキーら：「ストレスおよび加齢の神経内分泌学：グルココルチコイドカスケード仮説（Ｔｈｅ　Ｎｅｕｒｏｅｎｄｏｃｒｉｎｏｌｏｇｙ　ｏｆ　Ｓｔｒｅｓｓ　ａｎｄ　Ａｇｉｎｇ：Ｔｈｅ　Ｇｌｕｃｏｃｏｒｔｉｃｏｉｄ　Ｃａｓｃａｄｅ　Ｈｙｐｏｔｈｅｓｉｓ）」、エンドクライン・レビューズ（Ｅｎｄｏｃｒｉｎｅ　Ｒｅｖ．）、第７巻（１９８６年）２８４〜３０１ページ〕。それによると、加齢およびストレスはともに、ストレス応答終了の時点で副腎皮質のストレスホルモン（グルココルチコイド）の分泌を終結させる能力を低下させる。脳の一領域である海馬は、正常な場合は、グルココルチコイドの放出を阻害するが、グルココルチコイドとの持続的な接触によって、退化的変化が生じる。次いで、この退化は、脳のストレス応答を終結させる能力を一層低下させ、その結果、一層の障害をもたらし、かつ、高齢者においては重大な病態生理学的結果となり得る前倒しのカスケードを効果的に形成することになる。例えば、長期的なストレスやカッシング症候群に認められるようなグルココルチコイドの過剰は、筋疾患、ステロイド性糖尿病、高血圧、免疫抑制、不妊、および成長阻害を生起し得る〔マンク（Ｍｕｎｃｋ）ら：「ストレス時のグルココルチコイドの生理的機能、および薬理作用とのそれらの関係（Ｐｈｙｓｉｏｌｏｇｉｃａｌ　Ｆｕｎｃｔｉｏｎｓ　ｏｆ　Ｇｌｕｃｏｃｏｒｔｉｃｏｉｄｓ　ｄｕｒｉｎｇ　Ｓｔｒｅｓｓ　ａｎｄ　Ｔｈｅｉｒ　Ｒｅｌａｔｉｏｎ　ｔｏ　Ｐｈａｒｍａｃｏｌｏｇｉｃａｌ　Ａｃｔｉｏｎｓ）」、エンドクライン・レビューズ、第５巻（１９８４年）２５〜４９ページ；クリー　ガー（Ｋｒｉｅｇｅｒ）：「カッシング症候群（Ｋｕｓｈｉｎｇ’ｓ　Ｓｙｎｄｒｏｍｅ）」、モノグラフズ・オ　ン・エンドクリノロジー（Ｍｏｎｏｇｒ．Ｅｎｄｏｃｒｉｎｏｌ．）、第２２巻（１９８２年）１〜１２２ページ〕。
　【００２０】
　甲状腺は、その主要なホルモンであるＴ３およびＴ４を老年期の間、正常な範囲内に維持する能力を充分備えているが、ストレスの結果、あるいは甲状腺ホルモンがおそらく生物学的に有効でないことの結果として、年齢に関係する甲状腺機能不全が間欠的に発生するとの示唆もある〔モース（Ｄ．Ｒ．Ｍｏｒｓｅ）：「加齢：原因および制御（Ａｇｉｎｇ：Ｃａｕｓｅｓ　ａｎｄ　Ｃｏｎｔｒｏｌ）」、インターナショナル・ジャーナル・オブ・サイコソマトロジー（Ｉｎｔ．Ｊ．Ｐｓｙｃｈｏｓｏｍａｔｏｌ．）、第３５巻（１９８８年）１２〜４２ページ〕。同様に、脳下垂体から分泌される甲状腺刺激ホルモン（ＴＳＨ）は、その一部が、ドーパミン作動性ニューロンの刺激的影響下で働く、視床下部と連動する負のフィードバック制御機構のもとで機能する。加齢に伴って、黒質線状体のドーパミン分泌ニューロンは退化し、その起こり得る結果として、視床下部−下垂体系の混乱が生じるが、これもまた、老年期の甲状腺の制御の衰退を予測させる。
　【００２１】
　免疫反応には、３種類のリンパ球下位集団、すなわちＴリンパ球、Ｂリンパ球、および抗原提示細胞の協調的な活躍が必要である。免疫機能は年齢とともに衰退すること、およびＴ細胞機能の障害の大部分が、この衰退に起因する可能性があることの有力な証拠が（主としてヒトおよびラットについて）存在する。Ｂリンパ球についても、若干の変化が報告されているが、それらの影響を、併発するＴ細胞の変化と区別するのは困難である。また、抗原提示細胞の年齢的変化を支持する証拠は、ほとんどまたは全く報告されていない。
　【００２２】
　一方、Ｔ細胞の機能的尺度のほとんどが、年齢とともに大きく衰退することは、多数の研究者によって示されている。免疫的要素のうちで最もよく調べられているのは、リンパ球の増殖である。ＴおよびＢ両細胞の増殖能は、年齢とともに大幅に衰退することが知られている〔モーガン（Ｍｏｒｇａｎ）ら：「加齢したＣ５７ＢＬ／６系マウスにおける免疫応答その１、Ｆｃフラグメントを介したポリクローナル抗体応答を利用した加齢マウスのＢ細胞およびＴ細胞分画の病変の評価（Ｔｈｅ　Ｉｍｍｕｎｅ　Ｒｅｓｐｏｎｓｅ　ｉｎ　ａｇｅｄ　Ｃ５７ＢＬ／６　ｍｉｃｅ．　Ｉ．　Ａｓｓｅｓｓｍｅｎｔ　ｏｆ　Ｌｅｓｉｏｎｓ　ｉｎ　ｔｈｅ　Ｆｃ　Ｆｒａｇｍｅｎｔ−ｍｅｄｉａｔｅｄ　Ｐｏｌｙｃｌｏｎａｌ　Ａｎｔｉｂｏｄｙ　Ｒｅｓｐｏｎｓｅ）」、セルラー・イミュノロジー（Ｃｅｌｌｕｌａｒ　Ｉｍｍｕｎｏｌ．）・第６３巻（１９８１年）１６〜２７ページ；アブラハム（Ａｂｒａｈａｍ）ら、「老齢マウスにおけるコンカナバリンＡおよびリポ多糖類に対する低下した生体外応答：数が減少した応答細胞の機能（Ｒｅｄｕｃｅｄ　ｉｎ　ｖｉｔｒｏ　Ｒｅｓｐｏｎｓｅ　ｔｏ　Ｃｏｎｃａｎａｖａｌｉｎ　Ａ　ａｎｄ　Ｌｉｐｏｐｏｌｙｓａｃｃｈａｒｉｄｅ　ｉｎ　Ｓｅｎｅｓｃｅｎｔ　Ｍｉｃｅ：　Ａ　Ｆｕｎｃｔｉｏｎ　ｏｆ　Ｒｅｄｕｃｅｄ　Ｎｕｍｂｅｒｏｆ　Ｒｅｓｐｏｎｄｉｎｇ　Ｃｅｌｌｓ）」、ユーロピアン・ジャーナル・オブ・イミュノロジー（Ｅｕｒ．Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．）、第７巻（１９７７年）３０１〜３０４ページ；ヘフトン（Ｈｅｆｔｏｎ）ら、「加齢に関する免疫学的研究その５、ＰＨＡ応答性ヒト培養リンパ球の増殖障害（Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｉｃ　Ｓｔｕｄｉｅｓ　ｏｆ　Ａｇｉｎｇ．Ｖ．Ｉｍｐａｉｒｅｄ　Ｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｏｎ　ｏｆ　ＰＨＡ　Ｒｅｓｐｏｎｓｉｖｅ　ＨｕｍａｎＬｙｍｐｈｏｃｙｔｅｓ　ｉｎ　Ｃｕｌｔｕｒｅ）」、ジャーナル・オブ・イミュノロジー（Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．）、第１２５巻（１９８０年）１，００７〜１，０１０ページ］。これらの研究は、脾細胞を利用しており、これに、トリチウムチミジンまたはブロモデオキシウリジン（ＢｒｄＵ）の存在下で、植物凝血素（ＰＨＡ）またはコンカナバリンＡを用いた生体外での分裂促進因子による攻撃試験が行われた。次いで、この細胞によるチミジンまたはＢｒｄＵの取り込みが測定され、これが、細胞分裂を生じた細胞数を反映すると見なされている。また、分裂促進因子または抗原に活性化されると、Ｔ細胞は、一群の抗原非特異的な成長および成熟因子を分泌するが、これらはまとめてリンホカイン類とよばれる。その一種であるインターロキン２（ＩＬ−２）は、Ｔ細胞の分裂に必要とされ、かつＢ細胞の増殖にも一定の役割を果すものと考えられている。
　【００２３】
　老齢のマウスやヒトのＴ細胞は、分裂促進因子、同種抗原、あるいは異種抗原に触発された場合に、ＩＬ−２の分泌量が減少することが知られている〔ギリス（Ｇｉｌｌｉｓ）ら：「加齢の免疫学的研究：高齢のヒトから得られたリンパ球によるＴ細胞成長因子の産生と同因子に対する応答との低下（Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｉｃａｌ　Ｓｔｕｄｉｅｓ　ｏｆ　Ａｇｉｎｇ．Ｄｅｃｒｅａｓｅｄ　Ｐｒｏｄｕｃｔｉｏｎ　ｏｆ　ａｎｄ　Ｒｅｓｐｏｎｓｅ　ｔｏ　Ｔ　Ｃｅｌｌ　Ｇｒｏｗｔｈ　Ｆａｃｔｏｒ　ｂｙ　Ｌｙｍｐｈｏｃｙｔｅｓ　ｆｒｏｍ　Ａｇｅｄ　Ｈｕｍａｎｓ）」、ジャーナル・オブ・クリニカル・インベステイゲーション（Ｊ．Ｃｌｉｎ．Ｉｎｖｅｓｔ．）、第６７巻（１９８１年）９３７〜９４２ページ；ミラー（Ｍｉｌｌｅｒ）およびスタットマン（Ｓｔｕｔｍａｎ）：「Ｌｙｔ−２およびＩＬ−２産生ヘルパー細胞機能の喪失に起因するＴ細胞の抗ＴＮＰ細胞毒性応答の加齢中のマウスにおける衰退（Ｄｅｃｌｉｎｅ，ｉｎ　Ａｇｉｎｇ　Ｍｉｃｅ，ｏｆ　ｔｈｅ　Ａｎｔｉ−ＴＮＰ　Ｃｙｔｏｔｏｘｉｃ　Ｔ　Ｃｅｌｌ　Ｒｅｓｐｏｎｓｅ　Ａｔｔｒｉｂｕｔａｂｌｅ　ｔｏ　Ｌｏｓｓ　ｏｆ　Ｌｙｔ−２，ＩＬ−２　Ｐｒｏｄｕｃｉｎｇ　Ｈｅｌｐｅｒ　Ｃｅｌｌ　Ｆｕｎｃｔｉｏｎ）」、ユーロピアン・ジャーナル・オブ・イミュノロジー、第１１巻（１９８１年）７５１〜７５６ページ；ナーゲル（Ｎａｇｅ１）ら：「植物凝血素で刺激された高齢供与者の細胞における増殖インターロイキン２の合成とインターロイキン２受容体発現との低下は、ｍＲＮＡ発現の低下を伴う（Ｄｅｃｒｅａｓｅｄ　ｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｏｎ　ｉｎｔｅｒｌｅｕｋｉｎ　２　ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ，ａｎｄ　ｉｎｔｅｒｌｅｕｋｉｎ　２　ｒｅｃｅｐｔｏｒ　ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ　ａｒｅ　ａｃｃｏｍｐａｎｉｅｄ　ｂｙ　ｄｅｃｒｅａｓｅｄ　ｍＲＮＡ　ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ　ｉｎ　ｐｈｙｔｏｈｅｍａｇｇｌｕｔｉｎｉｎ−ｓｔｉｍｕｌａｔｅｄ　ｃｅｌｌｓ　ｆｒｏｍ　ｅｌｄｅｒｌｙ　ｄｏｎｏｒｓ）」、ジャーナル・オブ・クリニカル・インベスティゲーション、第８１巻（１９８８年）１，０９６〜１，１０２ページ；トーマン（Ｔｈｏｍａｎ）およびウェーグル（Ｗｅｉｇｌｅ）：「高齢マウスのリンパ球におけるホルボールミリス．テートアセテートおよびイオノマイシンによるコンカナバリンＡ誘発性増殖、ＩＬ−２受容体発現、およびＩＬ−２合成の部分的回復（Ｐａｒｔｉａｌ　Ｒｅｓｔｏｒａｔｉｏｎ　ｏｆ　Ｃｏｎ　Ａ−ｉｎｄｕｃｅｄ　Ｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｏｎ，ＩＬ−２　Ｒｅｃｅｐｔｏｒ　Ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ，ａｎｄ　ＩＬ−２　Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ　ｉｎ　Ａｇｅｄ　Ｍｕｒｉｎｅ　Ｌｙｍｐｈｏｃｙｔｅｓ　ｂｙ　Ｐｈｏｒｂｏｌ　Ｍｙｒｉｓｔａｔｅ　Ａｃｅｔａｔｅ　ａｎｄ　Ｉｏｎｏｍｙｃｉｎ）」、セルラー・イミュノロジー、第１１４巻（１９８８年）１〜１１ページ］。
　【００２４】
　更に、加齢は、ＩＬ−２産生の低下ばかりか、この成長因子に対する応答性の減衰をも招くことを示す研究もある。したがって、外部からのＩＬ−２の添加は、老齢動物における免疫細胞の機能を部分的に回復させるにすぎない〔ギリスら：前出；ギルマン（Ｇｉｌｍａｎ）ら：「幼若および高齢ラットのＴリンパ球その２、インターロイキン２の機能的欠陥およびその役割（Ｔ　Ｌｙｍｐｈｏｃｙｔｅｓ　ｏｆ　Ｙｏｕｎｇ　ａｎｄ　Ａｇｅｄ　Ｒａｔｓ．ＩＩ．Ｆｕｎｃｔｉｏｎａｌ　Ｄｅｆｅｃｔｓ　ａｎｄ　ｔｈｅ　Ｒｏｌｅ　ｏｆ　Ｉｎｔｅｒｌｅｕｋｉｎ−２）」、ジャーナル・オブ・イミュノロジー、第１２８巻（１９８２年）６４４〜６５０ページ；ゴットスマン（Ｇｏｔｔｏｓｍａｎ）ら：「加齢中のマウスにおける増殖的および細胞毒性免疫機能その３、外来インターロイキン２に富む上清は生体外での同種反応性を部分的に回復するにすぎない（Ｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｖｅ　ａｎｄ　Ｃｙｔｏｔｏｘｉｃ　Ｉｍｍｕｎｅ　Ｆｕｎｃｔｉｏｎｓ　ｉｎ　Ａｇｉｎｇ　Ｍｉｃｅ．ＩＩＩ．Ｅｘｏｇｅｎｏｕｓ　ｉｎｔｅｒｌｅｕｋｉｎ−２　ｒｉｃｈ　ｓｕｐｅｒｎａｔａｎｔ　ｏｎｌｙ　ｐａｒｔｉａｌｌｙ　ｒｅｓｔｏｒｅｓ　ａｌｌｏｒｅａｃｔｉｖｉｔｙ　ｉｎ　ｖｉｔｒｏ）」、メカニズムス・オブ・エイジング・アンド・デベロップメント（Ｍｅｃｈａｎｉｓｍｓ　ｏｆ　Ａｇｉｎｇ　ａｎｄ　Ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔ）、第３１巻（１９８５年）１０３〜１１３ページ〕。
　【００２５】
　また、ヒトおよびラットでは、分裂促進性薬剤による刺激を受けてＩＬ−２受容体を発現できるＴ細胞の数も、年齢とともに減少する〔ネゴロ（Ｎｅｇｏｒｏ）ら：「Ｔ細胞の抗原特異的増殖応答における年齢に関連した低下の機構：精製ＴＡＣ陽性Ｔ細胞のＩＬ−２受容体発現および組換えＩＬ−２誘発性増殖応答（Ｎｅｃｈａｎｉｓｍｓ　ｏｆ　Ａｇｅ−ｒｅｌａｔｅｄ　Ｄｅｃｌｍｅｉｎ　Ａｎｔｉｇｅｎ−ｓｐｅｃｉｆｉｃ　Ｔ　Ｃｅｌｌ　Ｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｖｅ　Ｒｅｓｐｏｎｓｅ：ＩＬ−２　Ｒｅｃｅｐｔｏｒ　Ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ　ａｎｄ　Ｒｅｃｏｍｂｉｎａｎｔ　ＩＬ−２−ｉｎｄｕｃｅｄ　Ｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｖｅ　Ｒｅｓｐｏｎｓｅ　ｏｆ　Ｐｕｒｉｆｉｅｄ　ＴＡＣ−ｐｏｓｉｔｉｖｅ　Ｔ　Ｃｅｌｌｓ）」、メカニズムス・オブ・エイジング・アンド・デベロップメント、第３６巻（１９８６年）２２３〜２４１ページ；ヴィー（Ｖｉｅ）およびミラー（Ｍｉｌｌｅｒ）：「分裂促進因子による刺激後にＩＬ−２受容体を発現するマウス丁細胞の比率の年齢による低下（Ｄｅｃｌｉｎｅ，ｗｉｔｈ　Ａｇｅ，ｉｎ　ｔｈｅ　Ｐｒｐｐｏｒｔｉｏｎ　ｏｆ　Ｍｏｕｓｅ　Ｔ　Ｃｅｌｌｓ　Ｔ　ｈａｔ　Ｅｘｐｒｅｓｓ　ＩＬ−２　Ｒｅｃｅｐｔｏｒｓ　ａｆｔｅｒ　Ｍｉｔｏｇｅｎ　Ｓｔｉｍｕｌａｔｉｏｎ）」、メカニズムス・オブ・エイジング・アンド・デベロップメント、第３３巻（１９８６年）３１３〜３２２ページ〕。したがって、加齢は、ＩＬ−２の産生とそれに対する応答との双方を招来する。
　【００２６】
　成長ホルモン（ＧＨ）の濃度も、オスおよびメスのラットでは、月齢とともに低下することが知られている。メスのラットでは、１１ヵ月齢でＧＨ分泌の５０％の低下を証明できるが、これは、ほぼこの時期に生じる身体的成長の停滞に起因するものと思われる〔タカハシ（Ｓ．Ｔａｋａｈａｓｈｉ）、ゴヤ（Ｒ．Ｇｏｙａ）、およびメイツ（Ｊ．Ｍｅｉｔｅｓ）：「幼若、中年期、および老齢のメスのラットにおける成長ホルモンの分泌形態（Ｇｒｏｗｔｈ　Ｈｏｒｍｏｎｅ　Ｓｅｃｒｅｔｏｒｙ　Ｐａｔｔｅｒｎｓ　ｉｎ　Ｙｏｕｎｇ，Ｍｉｄｄｌｅ−ａｇｅｄ，ａｎｄ　Ｏｌｄ　ＦｅｍａｌｅＲａｔｓ）」、ニューロエンドクリノロジー（Ｎｅｕｒｏｅｎｄｏｃｒｉｎｏｌｏｇｙ）、第４６巻（１９８７年）１３７〜１４２ページ〕。加齢中のオスのラットは、ＧＨ分泌の顕著な減少を示すが、減少の時間的経過は不明である〔ゾンターク（Ｓｏｎｎｔａｇ）ら：「老齢オスラットにおける成長ホルモンの脈動的放出の低下（Ｄｅｃｒｅａｓｅｄ　Ｐｕｌｓａｔｉｌｅ　Ｒｅｌｅａｓｅ　ｏｆ　Ｇｒｏｗｔｈ　Ｈｏｒｍｏｎｅ　ｉｎ　Ｏｌｄ　Ｍａｌｅ　Ｒａｔｓ）」、エンドクリノロジー（Ｅｎｄｏｃｒｉｎｏｌｏｇｙ）、第１０７巻（１９８０年）１，８７５〜１，８７９ページ〕。ＧＨの制御下にあるソマトメジン（ＳＭ）の循環血中濃度もまた年齢とともに著しく低下する。ＧＨおよびＳＭ分泌のこのような低下は、高齢の生物が体成分組成やホメオスタシスを維持する能力に対して非常に深い意味を持つと思われる、年齢に関連する蛋白質合成の減退を生起し得ることから、特別に重大である。
　【００２７】
　ヒトの体内の総蛋白質量は、４０才を過ぎると年齢とともに減少するが、これは、主として骨格筋の重さの減少による〔ヤング（Ｙｏｕｎｇ）ら：「ヒトの加齢：蛋白質およびアミノ酸の必要量（Ｈｕｍａｎ　Ａｇｉｎｇ：Ｐｒｏｔｅｉｎ　ａｎｄ　Ａｍｉｎｏ　Ａｃｉｄ　Ｒｅｑｕｉｒｅｍｅｎｔｓ）」、加齢研究における栄養学的アプローチ（Ｎｕｔｒｉｔｉｏｎａｌ　Ａｐｐｒｏａｃｈｅｓ　ｔｏ　Ａｇｉｎｇ　Ｒｅｓｅａｒｃｈ）、第４７巻（１９８２年）、シーアールシープレス発行〕。この減少は、蛋白質合成の減退によるものと思われ、各種生物で年齢とともに生じることが知られている。体内水分も、ヒトでは年齢とともに減少するが、これは出生時から始まり、一生を通じ　て、ほとんど一定の速度で進行する〔ショックら：「男子の基礎酸素消費との関係における体内含水量の年齢差（Ａｇｅ　Ｄｉｆｆｅｒｅｎｃｅｓ　ｉｎ　ｔｈｅ　Ｗａｔｅｒ　Ｃｏｎｔｅｎｔ　ｏｆ　ｔｈｅ　Ｂｏｄｙ　Ａｓ　Ｒｅｌａｔｅｄ　ｔｏ　Ｂａｓａｌ　Ｏｘｙｇｅｎ　Ｃｏｎｓｕｍｐｔｉｏｎ　ｉｎ　Ｍａｌｅｓ）」、ジャーナル・オブ・ジェロントロジー、第１８巻（１９６３年）１ページ；ティミラス（Ｔｉｍｉｒａｓ）著：「発生生理学と加齢（Ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔａｌ　Ｐｈｙｓｉｏｌｏｇｙ　ａｎｄ　Ａｇｉｎｇ）」、マクミラン社（ニューヨーク）１９７２年発行〕。
　【００２８】
　ヒトの体内総脂肪は、少なくとも５０才代までは増加するので、高齢のヒトに関するデータには矛盾がある〔メニーリー（Ｍｅｎｅｅｌｙ）ら：「正常被験者９１５例におけるカリウム含量から測定された、体成分組成に作用する因子の解析（Ａｎａｌｙｓｉｓ　ｏｆ　Ｆａｃｔｏｒｓ　Ａｆｆｅｃｔｉｎｇ　Ｂｏｄｙ　Ｃｏｍｐｏｓｉｔｉｏｎ　Ｄｅｔｅｒｍｉｎｅｄ　ｆｒｏｍ　Ｐｏｔａｓｓｉｕｍ　Ｃｏｎｔｅｎｔ　ｉｎ　９１５　Ｎｏｒｍａｌ　Ｓｕｂｊｅｃｔｓ）」、アナルス・オブ・ザ・ニューヨーク・アカデミー・オブ・サイェンセズ（Ａｎｎ．Ｎ．Ｙ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．）、第１１０巻（１９６３年）２７１ページ；フォーブス（Ｆｏｒｂｅｓ）およびレイナ（Ｒｅｉｎａ）：「年齢に応じた成人痩身体重：長期的観察の数例（Ａｄｕｌｔ　Ｌｅａｎ　Ｂｏｄｙ　Ｍａｓｓ　ｗｉｔｈ　Ａｇｅ：Ｓｏｍｅ　Ｌｏｎｇｉｔｕｄｉｎａｌ　Ｏｂｓｅｒｖａｔｉｏｎｓ）」、メタボリズム（Ｍｅｔａｂｏｌｉｓｍ）、第１９巻（１９７０年）６５３ページ；ミューア（Ｍｙｈｒｅ）およびケスラー（Ｋｅｓｓｌｅｒ）：「年齢との関係における体密度および体成分組成中のカリウム４０の測定（Ｂｏｄｙ　Ｄｅｎｓｉｔｙ　ａｎｄ　Ｐｏｔａｓｓｉｕｍ　４０　Ｍｅａｓｕｒｅｍｅｎｔｓ　ｏｆ　Ｂｏｄｙ　Ｃｏｍｐｏｓｉｔｉｏｎ　ＡｓＲｅｌａｔｅｄ　ｔｏ　Ａｇｅ）」・ジャーナル・オブ・アプライド・フィジオロジー（Ｊ．ＡＰＰｌ．Ｐｈｙｓｉｏｌ．）、第２１巻（１９６６年）１，２５１ページ；ノバク（Ｎｏｖａｋ）：「１８〜８５才の年齢の間の男子および女子における加齢、体内総カリウム量、および脂肪以外の重量（Ａｇｉｎｇ，Ｔｏｔａｌ　Ｂｏｄｙ　Ｐｏｔａｓｓｉｕｍ，Ｆａｔ−ｆｒｅｅ　Ｍａｓｓ　ｉｎ　Ｍａｌｅｓ　ａｎｄ　Ｆｅｍａｌｅｓ　ｂｅｔｗｅｅｎ　ｔｈｅ　Ａｇｅｓ　ｏｆ　１８　ａｎｄ　８５　Ｙｅａｒｓ）」、ジャーナル・オブ・ジェロントロジー、第２７巻（１９７２年）４３８ページ〕。
　【００２９】
　これに対して、フィッシャー３４４系のラットでは、体内総脂肪は、寿命の約７５％までは増加するが、その後は減少する〔バートランド（Ｂｅｒｔｒａｎｄ）ら：「随意給餌または延命的制限給餌によるラットの成体期間中における脂肪組織の重量および細胞性の変化（Ｃｈａｎｇｅｓ　ｉｎ　Ａｄｉｐｏｓｅ　Ｍａｓｓ　ａｎｄ　Ｃｅｌｌｕｌａｒｉｔｙ　ｔｈｒｏｕｇｈｏｕｔ　ｔｈｅ　Ａｄｕｌｔ　Ｌｉｆｅ　ｏｆ　Ｒａｔｓ　Ｆｅｄ　ａｄ　ｌｉｂｉｔｕｍ　ｏｒ　ａ　Ｌｉｆｅ−ｐｒｏｌｏｎｇｉｎｇ　Ｒｅｓｔｒｉｃｔｅｄ　Ｄｉｅｔ）」、ジャーナル・オブ・ジェロントロジー、第３５巻（１９８０年）８２７ページ〕。年齢に関連する血清脂質の特異的変化は、全身の脂肪、運動および食事に左右されるため、確定するのが困難であり、得られるデータには矛盾がある。同様に、年齢に応じた血清リポ蛋白質の測定値の変化も，多数の因子に影響され、年齢はもとより、健康状態、および習慣とも関連があるとは思われない。
　【００３０】
　ヒトの血清アルブミン濃度は、年齢には影響されないものと思われる。ラットでは、アルブミン濃度は、系統と、フィッシャー３４４系ラットにおけるように慢性的腎障害の一般的な有無に左右されるものと思われる。この系統には、腎障害があり、それとともに血清アルブミン濃度が低下するのである〔ハイス（Ｈｅｉｓｓ）ら：「血漿ＨＤＬ−コレステロール濃度の疫学：脂質研究診療機関の有病率調査、要約（Ｔｈｅ　Ｅｐｉｄｅｍｉｏｌｏｇｙ　ｏｆ　Ｐｌａｓｍａ　ＨＤＬ−ｃｈｏｌｅｓｔｅｒｏｌ　Ｌｅｖｅｌｓ：Ｔｈｅ　Ｌｉｐｉｄ　Ｒｅｓｅａｒｃｈ　Ｃｌｉｎｉｃ　Ｐｒｅｖａｌｅｎｃｅ　Ｓｔｕｄｙ，Ｓｕｍｍａｒｙ）」、サーキュレーション（Ｃｉｒｃｕｌａｔｉｏｎ）、第６２巻（増刊４号）（１９８０年）１１６ページ〕。
　【００３１】
　年齢に応じた結合組織の変化も共通する。年齢とともに、主要蛋白質成分であるコラーゲンが、次第に不溶性に、強固に、かつ酵素の消化作用を受けにくくなるのである〔ハムリン（Ｈａｍｌｉｎ）およびコーン（Ｋｏｈｎ）：「成熟後のヒトコラーゲンにおける年齢関連の漸進的な構造変化の証拠（Ｅｖｉｄｅｎｃｅ　ｆｏｒ　Ｐｒｏｇｒｅｓｓｉｖｅ　Ａｇｅ−ｒｅｌａｔｅｄ　Ｓｔｒｕｃｔｕｒａｌ　Ｃｈａｎｇｅｓ　ｉｎ　Ｐｏｓｔｍａｔｕｒｅ　Ｈｕｍａｎ　Ｃｏｌｌａｇｅｎ）」、ビオヒミカ・エト・ビオフィジカ・アクタ（Ｂｉｏｃｈｉｍ．Ｂｉｏｐｈｙｓ．Ａｃｔａ）、第２３６巻（１９７１年）４５８ページ；エベリット（Ｅｖｅｒｉｔｔ）およびデルブリッジ（Ｄｅｌｂｒｉｄｇｅ）：「脳下垂体切除ラットの尾腱におけるコラーゲンの加齢の二面（Ｔｗｏ　Ｆａｃｅｓ　ｏｆ　Ｃｏｌｌａｇｅｎ　Ａｇｅｉｎｇ　ｉｎ　ｔｈｅＴａｉｌ　Ｔｅｎｄｏｎ　ｏｆ　Ｈｙｐｏｐｈｙｓｅｃｔｏｍｉｚｅｄ　Ｒａｔｓ）」、エクスペリメンタル・ジェロントロジー（Ｅｘｐ．Ｇｅｒｏｎｔｏｌ．）、第７巻（１９７２年）４５ページ〕。
　【００３２】
　しかし、幼若な、または加齢中のオスおよびメスのウィスター系ラットでは、コラーゲンは、年齢に応じて変化することがない〔ポルタら（Ｐｏｒｔａ）：「発生および加齢の際のウィスター系オスラットにおけるビタミンＥの濃度が２様である食餌脂肪の形態の影響その２、脳の生化学的および体型測定法的要因（Ｅｆｆｅｃｔｓ　ｏｆ　ｔｈｅ　Ｔｙｐｅ　ｏｆ　Ｄｉｅｔａｒｙ　Ｆａｔ　ａｔ　Ｔｗｏ　Ｌｅｖｅｌｓ　ｏｆ　Ｖｉｔａｍｉｎ　Ｅ　ｉｎ　Ｗｉｓｔａｒ　Ｍａｌｅ　Ｒａｔｓｄｕｒｉｎｇ　Ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔ　ａｎｄ　Ａｇｉｎｇ．ＩＩ．Ｂｉｏｃｈｅｍｉｃａｌ　ａｎｄ　Ｍｏｒｐｈｏｍｅｔｒｉｃ　Ｐａｒａｍｅｔｅｒｓ　ｏｆ　ｔｈｅ　Ｂｒａｉｎ）」、メカニズムス・オブ・エイジング・アンド・デベロップメント、第１３巻（１９８０年）３１９ページ；同じく：「発生および加齢の際のウィスタ−系オスラットにおけるビタミンＥの濃度が２様である食餌脂肪の形態の影響その３、肝臓の生化学的および体型測定法的要因（Ｅｆｆｅｃｔｓ　ｏｆ　ｔｈｅ　Ｔｙｐｅ　ｏｆ　Ｄｉｅｔａｒｙ　Ｆａｔ　ａｔ　Ｔｗｏ　Ｌｅｖｅｌｓ　ｏｆ　Ｖｉｔａｍｉｎ　Ｅ　ｉｎ　Ｗｉｓｔａｒ　Ｍａｌｅ　Ｒａｔｓ　ｄｕｒｉｎｇ　Ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔ　ａｎｄ　Ａｇｉｎｇ．ＩＩＩ．Ｂｉｏｃｈｅｍｉｃａｌ　ａｎｄ　Ｍｏｒｐｈｏｍｅｔｒｉｃ　Ｐａｒａｍｅｔｅｒｓ　ｏｆ　ｔｈｅ　Ｌｉｖｅｒ）」、メカニズムス・オブ・エイジング・アンド・デベロップメント、第１５巻（１９８１年）２９７ページ；同じく：「発生および加齢の際のウィスター系オスラットにおけるビタミンＥの濃度が２様である食餌脂肪の形態の影響その４、心臓の生化学的および体型測定法的要因（Ｅｆｆｅｃｔｓ　ｏｆ　ｔｈｅ　Ｔｙｐｅ　ｏｆ　Ｄｉｅｔａｒｙ　Ｆａｔ　ａｔ　Ｔｗｏ　Ｌｅｖｅｌｓ　ｏｆ　Ｖｉｔａｍｉｎ　Ｅ　ｉｎ　Ｗｉｓｔａｒ　Ｍａｌｅ　Ｒａｔｓ　ｄｕｒｉｎｇ　Ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔ　ａｎｄ　Ａｇｉｎｇ．ＩＶ．Ｂｉｏｃｈｅｍｉｃａｌ　ａｎｄ　Ｍｏｒｐｈｏｍｅｔｒｉｃ　Ｐａｒａｍｅｔｅｒｓ　ｏｆ　ｔｈｅ　Ｈｅａｒｔ）」、メカニズムス・オブ・エイジング・アンド・デベロップメント、第１８巻（１９８２年）１５９ベージ〕。
　したがって、種の差異を超えた年齢に応じた体成分組成の確実な変化は、体内総蛋白質量および水分含有量の減少に限定されるものと思われる。
　【００３３】
　上記の説明から、年齢は、犬が老化するにつれて、副腎、甲状腺、免疫系、および体成分組成の機能のそれぞれに悪影響を及ぼすことがわかる。ここにおいて、後述の調剤を用いると、老齢の犬における認知機能を比較的長期間にわたって、正常な水準に維持することができるのである。
　【００３４】
　犬の認知機能の減退は、犬の性格を変化させ、飼い主の犬に対する愛情が薄れることにもなる。従って、犬の認知機能の減退を抑制することができるならば、それは飼い主にとっても嬉しいことである。
　本発明によれば、少量ではあるが、予防的有効量のＬ−デプレニルを定期的に犬に投与した場合、犬の認知機能の減退を相対的長期間にわたって抑制することが可能である。
　【００３５】
　後述のとおり、上記の望ましい結果を得るための投与処方は、パーキンソン病の治療に用いられる投与処方とは著しく異なり、また、ミルグラムによる母体となる出願（１９９０年８月３１日付け第０７／５７６，０１１号）に記載の投与水準とも、量および頻度が異なることがある。本明細書に開示の用途に推奨される最高投与量の場合、その水準は、パーキンソン病の治療に用いられる量の２分の１を下回る。特に、本発明の場合、体重１ｋｇあたり０．１〜５．０ｍｇを週１〜５回という水準で用いることを明示しているが、隔日に投与するのが好ましい。体重１ｋｇあたり１〜２ｍｇを週２回、中年期から開始するという投与水準が最も好適である。
　当然、持続的放出方式を用いて、より低頻度の投与で所要の投与水準を達成するのが可能なことは、当業界の技術の習熟者には公知であると思われる。
　【００３６】
　本発明によって、加齢の犬の認知機能障害が治療或いは抑制される理論的根拠は不明であり、本発明者は如何なる作業理論にも拘束されることを好まないが、Ｌ−デプレニルが脳のみに化学的に作用するのではなく、関連諸器官に直接的に作用する可能性があると考えられる。この作用は、血圧降下作用である可能性があ
る。
　以下、ラットによる参考例を述べる。参考例で説明するとおり、血清の化学的分析によれば、Ｌ−デプレニルは、特定の器官に直接作用すると考えられる。
　【００３７】
　【実施例】
　以下の実施例では、ハーラン・スプレイグ・ドーリー（Ｈａｒｌａｎ　Ｓｐｒａｇｕｅ　Ｄａｗｌｅｙ）社から入手のフィッシャー系ラットのオスが用いられている。この動物は、２１〜２３ヵ月齢のときに入手したものである。飼料および水は自由に摂取させ、隔日ごとに体重を測定した。
　【００３８】
　Ｌ−デプレニルの投与は、２４〜２５ヵ月齢で開始する。死亡し、あるいは実験から除外するまで、体重１ｋｇあたり０．２５ｍｇを隔日に皮下に投与する。デプレニルは、食塩水に溶解させておく。
　【００３９】
　２回の機会、すなわち実験開始、および投与の３ヵ月後に血清の分析を実施した。血液試料は眼窩内から採取したが、それには動物を麻酔せざるを得なかった。麻酔剤としては、ケタミンとアトラビンの等容混合液を用いたが、それは、幼若ラットではこの併用が毒性が低く、かつ作用の持続が短期であるからである。基線試験では、０．２ｍｌの投与量を用いたが、この投与量では、麻酔の持続が所期よりも著しく長時間となったため、３ヵ月後の試験では０．０８ｍｌまで投与量を減らした。
　【００４０】
　試料を、直ちにカナダ国内のビタテック（Ｖｉｔａ−Ｔｅｃｈ）社まで送付し、同社で、グルコース、クレアチニン、ビリルビン（総量）、血中尿素窒素（ＢＵＮ）、ＳＧＯＴ、ＳＧＰＴ、総蛋白質、およびアルブミンについて生化学的検定が実施された。
　血液学的分析の目的には、ヘモグロビン、ヘマトクリット、赤血球数、白血球数、ＭＣＨ、好中球、リンパ球、単核球、好酸球、好塩基球、および好中赤血球について測定した。血清の生化学的および血液学的採集および分析に際しては、二重盲検法に従った。血清の分析結果を表１に示す。３ヵ月後の時点での対照群と、Ｌ−デプレニル投与群との間の有意差は、ＢＵＮの測定値に認められたのみであった。クレアチニン（Ｐ＝０．１２９）、アルブミン（Ｐ＝０．１１７）、およびＡ／Ｇ比（Ｐ＝０．１５１）の比較は有意水準に近かったが、ビリルビン（Ｐ＝０．８２６）、ＳＧＯＴ（Ｐ＝０．９９０）、およびＳＧＰＴ（Ｐ＝０．６６７）については明らかに差がなかった。表１には、各測定値と生存率との相関関係も示した。ＢＵＮ、ＳＧＯＴ、およびビリルビンの測定値にはすべて、有意な相関関係が認められる。
　【００４１】
　【表１】
　【００４２】　
　血液化学のデータは充分詳細であり、Ｌ−デプレニルを投与した動物が、対照動物よりも長期間生存することの考え得る理由を示している。２６ヵ月齢では、ＢＵＮなる尺度に有意な差が存在し、デプレニル投与群は対照群よりも評点が低い。ＢＵＮは、腎臓が体内から排出する老廃物の尺度である。したがって、この測定値が高いことは、腎機能が効果的でないことを示す。デプレニル投与群と対照群間の腎機能の差異は、クレアチニン量の差からも示される（デプレニル投与群の方が対照群よりも低い）が、その差は、ＢＵＮについて算定された統計的有意差の水準に達していない。
　【００４３】
　２３ヵ月齢と２６ヵ月齢の動物間の比較では、２６ヵ月齢の方が、ＢＵＮ、クレアチニンともに有意に高いことが判明した。他の動物と同様にラットは、月齢が進むにつれて、腎機能の顕著な低下を示すことが知られているので、このような結果は予想外であった。したがって、この有意な薬効は、Ｌ−デプレニルの投与が腎機能を保護することを示している。このような保護が生存に関連することは、２６ヵ月齢群におけるＢＵＮなる尺度と、生存日数との間の有意な相関関係からも示される
　【００４４】
　他の生化学的尺度に関して、デプレニル投与群と対照群との間に差がないのは、デプレニルは、他の末梢器官に対するよりも大きく腎臓に作用すること示すと思われるが、投与開始時点でラットが高齢過ぎていたこと、投与量が不充分なまでに少なかったこと、あるいはＬ−デプレニルが検査した要因に作用しなかったことなどの可能性もある。
　【００４５】　
　認知能力については、下記のようにして測定した。
　まず、高さ１７．７５ｃｍの透明な架台の表面をわずかに越える深さに水を満たした円形の水槽で構成された水中迷路を用意する。各試験期間の開始時にラットを、架台の中心から、ほぼ１メートルの無作為に決定した地点で、外側表面向きに水槽内に置く。定位および架台登攀のために９０秒の時間を与える。３０秒後にラットを架台から排除する。補正措置も講じた。もし架台を見付けられなかった場合は、試行期間の終わりに、ラットを穏やかにこれに導き、３０秒後に排除する。
　試験は、連続する５回の試行のうち、４回で２５秒以内に架台へ逃れるという基準を達成するか、３０回の試行を終えるかするまで続ける。最高１０回の試行を毎日行なわせ、各試行の間には３０分の休止期間を置く。試行はすべてビデオテープにも収録しておく。　【００４６】
　最終の習得試行の５日後に、架台を取り除いた迷路内で、ラットに９０秒間の試行を行なわせることによって、記憶保持を試験した。記憶保持の尺度としては、以前に架台が置かれていた迷路の領域で費やされた時間を記録した。次いで、２回目の習得試行試験を、架台を別の位置に移動させたこと以外は、最初の訓練と同じ要領で実施した。習得およびそれに続く記憶保持の試行を重ねた後、３回目の試行試験を、やはり架台を別の位置に移動させて実施した。上記により、ラットにはすべて、独立した３回の機会に習得と記憶保持の双方に関して試験を施したことになる。
　【００４７】
　前述の水中迷路試験において、Ｌ−デプレニル投与動物および対照群の認知能力の変化を調べた。
　【００４８】
　２６ヵ月齢のラット１６匹（デプレニル投与群８匹、対照群８匹）を用いて、水中迷路の習得を試験する。デプレニル投与群の試験は、薬物投与の３ヵ月目の間に実施した。その他３匹の動物について試験を開始したが、満足に泳げる能力が無かったため脱落した。２９ヵ月齢の時点では、９匹（デプレニル投与群５匹、対照群４匹）について水中迷路の試験を実施した。デプレニル投与群は、薬物投与の６ヵ月目にあたる。その他５匹のラットは、泳げないか、試験開始の時点で瀕死の状態であった。
　【００４９】
　水中迷路の習得の解析は、基準に達するのに要した試行の数に基づく。試験期間である３日間以内に課題を学習できなかった場合は、３３という最大評点が与えられた。結果を表２に要約する。主効果としての月齢および試行期間に関する分散分析から、月齢効果は、より高齢のラットの学習能力が低いことを有意に反映していること〔Ｆ（２，５８）＝１０．５、Ｐ＝０．００〕、および、試行期間の効果は、試験の反復の間に学習が改善されたことを有意に反映していること〔Ｆ（２，５８）：１１．１２、ｐ＝０．００〕が示された。また、より若年のラットの方が、改善の度合が大きい傾向があるが、試行期間による月齢の交互作用は、有意ではなかった〔Ｆ（６，５８）＝１．６４、ｐ＝０．１５２〕。
　【００５０】
　習得における薬物の作用を調べるため、２６ヵ月齢および２９ヵ月齢のラットを、月齢、群、および試行期間を主効果とする３元配置の分散分析を用いて比較した。月齢、および試行期間については、有意な主効果が存在した〔それぞれＦ（１，２１）＝４．６２、ｐ＝１．４３、およびＦ（２，４２）＝２．５５、ｐ＝０．２９〕。群効果は有意ではなかったが、群による月齢の交互作用は高度に有意であった〔Ｆ（２，４２）＝１２．２、ｐ＝０．００２〕。表２に示したとおり、上記の知見は、２６ヵ月齢で調べた場合には、デプレニル投与群の挙動が劣り、２８〜２９ヵ月齢で調べた場合には、対照群よりも優れていることに起因する。
　【００５１】
　一方、記憶保持の試験の結果からは、群あるいは月齢について、一貫性のある効果は全く示されなかった。
　【００５２】
　【表２】
　【００５３】
　対照群のラットは、２６ヵ月齢では、デプレニル投与群よりも優れた習得力を示したが、２９ヵ月齢では、結果が逆転し、デプレニル投与群の方が、学習能力に優れているのが示される。２６ヵ月齢のデプレニル投与ラットに見られる習得力の劣性は、主として逆転、すなわち架台の位置が変化した後で課題を学習し直すことが困難なことによる。２９ヵ月齢では、対照群の能力不足は、総体的停滞の反映であって、そのことは問題解決の無能力さに示され、重篤な認知能力の障害となって現れる。
　【００５４】
　２６ヵ月齢の群がら得られた結果に対する明確な説明は存在しないが、デプレニルが一過性の認知の混乱を引き起こす可能性を排除することはできない。
　この薬剤に関しては、動物がそれに対する調整を完全に行うには、ある程度の期間が必要なことも充分あり得る。しかし、上記のデータから、この能力不足は永続的ではないと結論することもできよう。これに対し、デプレニルを投与した２９ヵ月齢のラットは、対照群よりも有意に優れた学習力を示す。
　【００５５】
　食塩水投与の対照群と比較した場合、Ｌ−デプレニルを投与したラットの方が、２９ヵ月齢では、長期間、見かけ上健康的に生存し、より多くの探索行動を示し、知力の停滞の証拠が少ない。更に、この投与群は、体重の損失も少ないが、それは、食物消費量の差によるものではない。
　【００５６】
　【実施例】
　以下、ビーグル犬を用いて参考例と同じ手順で犬の認知機能の減退を抑制する試験を行った。
　オスおよびメスのビーグル犬に、４〜７才の時点から始めて、Ｌ−デプレニルまたはプラシーボを投与した。２〜５年後に、被験動物が（１）長期間の大きな騒音、（２）寒気との接触、および（３）不動化に対するストレス応答を終結させ得る能力を、血流中のコルチコステロンについて、基線濃度とストレス直後から２４時間の間の誘発濃度とを、対比して測定することによって評価する。Ｌ−デプレニル投与のイヌは、プラシーボを投与した対照群のイヌよりも著しく効果的にコルチコステロンの分泌を終結させることができ、そのため、循環グルココルチコイドの基線濃度への復帰が速やかであった。その後、イヌを屠殺し、加齢およびストレスに対して特に脆弱な領域である海馬のＣＡ１領域の錐体細胞の数を定量した。Ｌ−デプレニル投与のイヌでは、プラシーボを投与した対照群よりも著しく多数のこれらのニューロンが維持され、認知作用上重要な脳の領域における加齢またはストレスで誘発される退化が少ないことが示される。Ｌ−デプレニルの投与量の水準は、数カ月ないし数年間にわたり、体重１ｋｇあたり０．１〜５ｍｇとし、錠剤で投与した。投与頻度は、週少なくとも１乃至５回とした。
　【００５７】
　【発明の効果】
　以上詳述したように、本発明によって、犬の加齢による認知機能障害が治療或いは抑制されることが明らかである。