(57)【要約】  一般式（Ｉ）のイソチオシアネート及びその誘導体を合成する方法であって、硫化炭素及び二炭酸ジ−ｔｅｒｔ−ブチルの存在下、一般式（ＩＩ）のアルキルアルキルアミンの反応により、対応する前述のイソチオシアネートを形成する工程を含む方法、本方法によって得られる化合物、及びそれらの使用。    ＳＣＮ−Ｒ１−Ｒ４−Ｒ２      （Ｉ）（式中、Ｒ１及びＲ２はそれぞれ独立してアルキル−アリール又はアリール基を表し、Ｒ４はカルボニル、スルフィニル、スルホニル基又はスルフィド基を表す）    ＮＨ２−Ｒ１−Ｒ４−Ｒ２      （ＩＩ）（式中、Ｒ１及びＲ２はそれぞれ独立してアルキル、アリール又はアルキルアリール基を表し、Ｒ４はカルボニル、スルフィニル、スルホニル又はスルフィド基を表す）【特許請求の範囲】
【請求項１】
一般式（Ｉ）のイソチオシアネート及びその誘導体を合成する方法であって、硫化炭素及び二炭酸ジ−ｔｅｒｔ−ブチルの存在下、一般式（ＩＩ）のアミンの反応により、対応する前記イソチオシアネートを形成する工程を含む方法。
ＳＣＮ−Ｒ１−Ｒ４−Ｒ２      （Ｉ）
（式中、Ｒ１及びＲ２はそれぞれ独立してアルキル、アリール又はアルキルアリール基を表し、Ｒ４はカルボニル、スルフィニル、スルホニル、スルフィド基を表す）
ＮＨ２−Ｒ１−Ｒ４−Ｒ２      （ＩＩ）
（式中、Ｒ１及びＲ２はそれぞれ独立してアルキル、アリール又はアルキルアリール基を表し、Ｒ４はカルボニル、スルフィニル、スルホニル又はスルフィド基を表す）
【請求項２】
Ｒ４がスルフィニル基であり、前記アミンがアルキルスルフィニルアルキルアミンである、請求項１に記載の方法。
【請求項３】
前記アルキルスルフィニルアルキルアミンが、トリフルオロエタノールをベースとする溶媒に溶解したアルキルチオアルキルアミンを酸化することによって得られる、請求項２に記載の方法。
【請求項４】
前記一般式（Ｉ）のアミンが４−メチルスルフィニルブチルアミンであり、前記対応する形成されたイソチオシアネートがスルフォラファンである、請求項１〜３のいずれかに記載の方法。
【請求項５】
Ｒ４がカルボニル基であり、前記アミンがケト基を含む、請求項１に記載の方法。
【請求項６】
ケト基を含む前記アミンが４−メチルケトブチルアミンであり、前記対応する形成されたイソチオシアネートが６−イソチオシアナトヘキサン−２−オンである、請求項５に記載の方法。
【請求項７】
一般式（Ｉ）の対応する前記イソチオシアネートを、第一又は第二アミンと反応させてチオ尿素を形成することを含む、請求項１〜６のいずれかに記載の方法。
【請求項８】
前記アミンが、一般式ＨＮＲ５Ｒ６（式中、Ｒ５は水素原子を表し、Ｒ６はメチルスルフィニルブチル基を表す）を有する第一アミンである、請求項７に記載の方法。
【請求項９】
前記アミンが、一般式ＨＮＲ５Ｒ６（式中、Ｒ５は水素原子を表し、Ｒ６は任意に１以上のヘテロ原子を包含する直鎖、環式又は分岐アルキル、アルケニル、アルキルアリール、アリール、アルキニル基を表す）を有する第一アミンである、請求項７に記載の方法。
【請求項１０】
前記アミンが、一般式ＨＮＲ５Ｒ６（式中、Ｒ５及びＲ６はそれぞれ独立して、任意に１以上のヘテロ原子を包含する直鎖、環式又は分岐アルキル、アルケニル、アルキルアリール、アルキニル基を表す）を有する第二アミンである、請求項７に記載の方法。
【請求項１１】
一般式（Ｉ）の前記イソチオシアネートと求核剤、特にアルコール又はチオールとの反応を含む、請求項１〜６のいずれかに記載の方法。
【請求項１２】
酸化剤、特に過安息香酸又はそのハロゲン化誘導体の１つ、を添加することにより、スルフィニル基をスルホニル基へと酸化させることを含む、請求項２〜４及び６〜１１のいずれかに記載の方法。
【請求項１３】
請求項１〜１２のいずれかに記載の方法によって得られる一般式（ＩＩＩ）の合成単離化合物。
Ｒ７−Ｒ１−Ｒ４−Ｒ２      （ＩＩＩ）
（式中、Ｒ４はカルボニル、スルフィニル又はスルホニル、スルフィド基であり、Ｒ７はアミノ、イソチオシアナト基、−ＮＨ−Ｃ（＝Ｓ）−Ｒ’（式中、Ｒ’は、アルコラート（ａｌｃｏｈｏｌｉｃ）（−ＤＲ’’）、チオラート（ＳＲ’’）、アミノ（−ＮＲ’’Ｒ’’’）型のものである）型の基を表し、Ｒ１及びＲ２はいずれもそれぞれ独立してアルキル、アリール又はアルキルアリール基を表す）
【請求項１４】
色素沈着過剰の治療における脱色素剤としての、請求項１３に記載の化合物又は請求項１〜１２のいずれかに記載の方法によって得られる化合物の使用。
【請求項１５】
抗癌治療、汚染作用からの皮膚防護における、フェーズＩＩ酵素の誘導剤、フェーズＩ酵素の阻害剤又は調節剤としての、請求項１３に記載の化合物又は請求項１〜１２のいずれかに記載の方法によって得られる化合物の使用。
【請求項１６】
白髪の治療、ＵＶ放射線又は他の放射線及びそれらの影響からの皮膚防護、例えば、光線療法、放射線療法、日光曝露、紅斑、ＤＮＡに対する損傷、修復、シグナリング及び皮膚の癌化、ルサイト（ｌｕｃｉｔｅ）の処理、炎症、特にアトピー性皮膚炎の治療における、請求項１３に記載の化合物又は請求項１〜１２のいずれかに記載の方法によって得られる化合物の使用。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、一般式（Ｉ）のイソチオシアネート及びその誘導体の合成方法に関する。
ＳＣＮ−Ｒ１−Ｒ４−Ｒ２      （Ｉ）
（式中、Ｒ１及びＲ２はそれぞれ独立してアルキル、アリール又はアルキルアリールを表し、Ｒ４はカルボニル、スルホニル、スルフィニル又はスルフィド基を表す）
【０００２】
より特定的には、本発明は、一般式（Ｉ）（式中、Ｒ１はブチル基を表し、Ｒ２はメチル基を表し、Ｒ４はスルフィニル基を表す）による特定のイソチオシアネートであるスルフォラファン及びその誘導体の合成方法に関する。
【０００３】
故に、スルフォラファンは、下記一般式（Ａ）を有する。
【化１】
2013533266.tif 000002
（式中、Ｒ１はブチル基を表し、Ｒ２はメチル基を表す）
【０００４】
本発明はまた、式（Ｂ）を有する６−イソチオシアナトヘキサン−２−オンなどのスルフォラファン類似体、すなわち、一般式（Ｉ）（式中、Ｒ１はブチル基を表し、Ｒ２はメチル基を表し、Ｒ４はカルボニル基を表す）による特定のイソチオシアネート、及びその誘導体、例えば、スルフォラファン又は６−イソチオシアナトヘキサン−２−オンから得られるチオ尿素、アルコール又はチオールとスルフォラファン及び／又は６−イソチオシアナトヘキサン−２−オンとのカップリング生成物の製造に関する。
【０００５】
【化２】
2013533266.tif 000003
【背景技術】
【０００６】
スルフォラファンは、ブロッコリーや芽キャベツなどのアブラナ科の野菜に天然に存在する分子である。当該分子は、これらの野菜を摂取することによって健康上有利な効果をもたらすので、特に抗癌剤として、１９９０年代に大きな関心を集めた。
【０００７】
今日に至るまで、攻撃や癌から細胞を保護する分野で当該分子に関する多くの研究がなされてきたが、様々な制約がいまだ取り除かれておらず、大規模研究や商業的応用への発展を妨げている。
【０００８】
実際、スルフォラファンは高値でしか市場で入手できない。このことは、当該分子が植物から抽出せざるを得ず（分解によるロスが多い）、低〜中収率を有する合成方法がほとんど記載されておらず、再現不可能であるという事実に起因している。更に、当該分子は不安定であるため、化粧品製剤又は医薬製剤に配合するのは困難である。
【０００９】
アルキルスルフィニルアルキルアミン、特に４−メチルスルフィニルブチルアミンの合成方法、並びに合成スルフォラファンが、先行文献１に記載されている。
【００１０】
この文献では、４−クロロブチロニトリルを、ナトリウム上で事前に蒸留した絶対エチルアルコールに溶解し、次いでメタンチオエートを添加する。得られた懸濁液を最終的にろ過し、ろ液を濃縮して、エチルエーテルで抽出する（ｔａｋｅ  ｕｐ）。その後、粗４−メチルチオブチロニトリルを含有するエーテル（ｅｔｈｅｒａｔｅｄ）溶液が得られ、これを他の工程に供する。
【００１１】
この合成工程において、４−メチルチオブチロニトリルの溶液を、水素化リチウムアルミニウムの懸濁液に加えることにより、メチルチオブチルアミンが得られる。次いで、アセトンの存在下、メチルチオブチルアミンを過酸化水素で酸化することにより、一晩５０℃で、スルフォラファンの前駆体、すなわち、４−メチルスルフィニルブチルアミンが得られる。
【００１２】
先行文献１による方法の後続段階において、チオホスゲン及びＮａＯＨの存在下で４−メチルスルフィニルブチルアミンが反応し、Ｄ，Ｌ−スルフォラファンが形成される。
【先行技術文献】
【特許文献】
【００１３】
【特許文献１】国際公開ＷＯ０２／０５８６６４公報
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【００１４】
残念ながら、一方では、これらの工程を用いると後続工程にとって厄介な副生成物が形成される場合が多く、全収率にマイナスの影響を及ぼす中間精製工程が必要となるため、この合成経路の収率はそれほど高くない。実際、先行文献１には、蒸留工程とイソチオシアネート生成工程とを組み合わせた場合の収率が３１％であり、これにより、先行文献１に記載される合成方法全体の全収率が１８％となることが記載されている。他方、この既知の合成経路において使用される試薬は全て高価であり、環境に有害であるか、又は毒性がある。
【００１５】
故に、スルフォラファン又はその類似体（例えば、６−イソチオシアナトヘキサン−２−オンの形態をなすもの）並びにそれらの誘導体を、クリーン且つ毒性のない方法で、良好な収率にて製造することが実際に必要とされている。
【課題を解決するための手段】
【００１６】
この目的のため、本発明の方法は、硫化炭素及び二炭酸ジ−ｔｅｒｔ−ブチルの存在下、一般式（ＩＩ）を有するアミンの反応により、一般式（Ｉ）に相当する前記イソチオシアネートを形成することを含む、最初に述べたような方法を提供する。
ＮＨ２−Ｒ１−Ｒ４−Ｒ２      （ＩＩ）
（式中、Ｒ１及びＲ２はそれぞれ独立してアルキル、アリール又はアルキルアリール基を表し、Ｒ４はカルボニル、スルフィニル、スルホニル又はスルフィド基を表す）
【００１７】
このように、スルフォラファン又は６−イソチオシアナトヘキサン−２−オンなどの一般式（Ｉ）によるイソチオシアネート化合物は、特定の毒性物質であるチオホスゲンを使用せずに、チオカルボニルジトリアゾール又はチオカルボニルジイミダゾール（ｔｈｉｏｃａｒｂｏｎｙｌｄｉｉｍａｄｏｚｌｅ）又は更にジピリジル−チオノカーボネートなどのチオホスゲンの「置換基」と行われる「チオカルボニル移動」反応を用いることなく、それらの対応するアミンから合成される。これらの置換基は、実際には有効であり得るが、原子経済的ではないので副生成物を生成し、これら副生成物は必ずしも合成終了時に除去するのが容易であるとは限らない。故に、このような方法は、収率や生産コストに弊害をもたらすクロマトグラフィー蒸留又は精製などの更なる工程を必要とし、特にスルフォラファンが熱で分解されるという事実を考慮すると、必ずしも満足いく純度が得られるとは限らない。
【００１８】
本発明の方法において、硫化炭素ＣＳ２及び二炭酸ジ−ｔｅｒｔ−ブチル（ＢＯＣ２Ｏ）を使用すると、より低コストで除去するのが簡単かつ容易である副生成物しか生成されないので、本発明の方法における収率や環境に対する影響がない。実際、本発明の方法の反応により生成される副生成物は、ＣＯ２、ＣＯＳ、ｔＢｕＯＨである。
【００１９】
前述のように、本発明の目的の１つは、化粧品又は癌治療におけるその潜在的な効果を調査するために利用可能である十分量を有する目的で、スルフォラファン又は６−イソチオシアナトヘキサン−２−オン及びそれらの誘導体又は類似体、例えば、スルフォラメート（ｓｕｌｆｏｒａｍａｔｅ）をクリーンかつ安価な方法で提供することである。
【００２０】
有利には、本発明の方法において、Ｒ４はスルフィニル基を表し、前記アミンはアルキルスルフィニルアルキルアミンである。より特定的には、前記一般式（Ｉ）のアミンは４−メチルスルフィニルブチルアミンであり、前記対応する形成されたイソチオシアネートはスルフォラファンである。
【００２１】
本発明の方法の有利な実施形態において、前記アルキルスルフィニルアルキルアミンは、トリフルオロエタノールをベースとする溶媒に溶解したアルキルチオアルキルアミンを酸化することによって得られる。
【発明の効果】
【００２２】
先の記載から分かるかもしれないが、本発明の方法は、アルキルチオアルキルアミンのアルキルスルフィニルアルキルアミンへの酸化を達成するための溶媒としてトリフルオロエタノールを使用する。溶媒としてトリフルオロエタノールを使用することにより、反応速度が速くなる（酸化剤の添加後０℃で約３０分、次いで室温で１時間）。この期間は、先行文献１のもの（溶媒としてアセトンを使用すると、５０℃で一晩）よりもはるかに短い。更に、本発明によれば、得られた生成物は純粋であり、微量のスルフィニルをも有しておらず、これは、酸化が制御されており、結果生じるスルフィニルが、形成された過酸化生成物に混入されていないことを意味する。
【００２３】
更に、本発明によれば、酸化生成物は単離した形で得られ、工程終了時には純粋である。これは、他の工程を連携させる又は当該生成物をこの形態で貯蔵するというところに、ある程度の柔軟性を持たせる。どのような場合でも、当該生成物を得るために多数の精製工程を連携させる必要はないので、収率が向上する。
【００２４】
このように、この種の合成すなわちスルフォラファンの合成に通常用いられるアセトンの使用は、酸化剤用媒体としてトリフルオロエタノールを使用することにより回避される。これにより、反応がより良好に制御され（過酸化が生じない）、収率が向上する。
【００２５】
故に、この合成工程はクリーンであるために過酸化生成物が生成されず、有利には、単純な蒸留によって、標準の溶媒よりも高価なフッ素化溶媒が回収され、本発明による方法の費用が更に低減される。
【発明を実施するための形態】
【００２６】
本発明の代替実施形態（ａｌｔｅｒｎａｔｉｖｅ）において、Ｒ４はカルボニル基を表し、前記アミンはケト基を含む。
【００２７】
より特定的には、ケト基を含む前記アミンは４−メチルケトブチルアミン又は６−イソチオシアナトヘキサン−２−オンであり、対応する形成されたイソチオシアネートは６−イソチオシアナトヘキサン−２−オンである。
【００２８】
本発明の好ましい実施形態において、当該方法はまた、一般式（Ｉ）の、スルフォラファン又はその類似体６−イソチオシアナトヘキサン−２−オンのような、前記対応するイソチオシアネートを、第一又は第二アミンと反応させることにより、スルフォラファン又は６−イソチオシアナトヘキサン−２−オン由来のチオ尿素（例として挙げる）を形成することを含む。
【００２９】
実際、これら合成のための基準分子として選択される広範な（ａ  ｗｉｄｅ  ｐａｎｅｌ  ｏｆ）アミンのカップリングを検討することが可能である。なぜならば、それらはスルフォラファンの脱色素効果並びに６−イソチオシアナトヘキサン−２−オンの潜在的効果（スルフォラファン及び６−イソチオシアナトヘキサン−２−オンのいずれもイソチオシアネートである）を強化し得る脱色素効果を有すると考えられているからである。
【００３０】
一般に、ヒトにおいて、イソチオシアネートは迅速に吸収されて、タンパク質、システイン又はグルタチオンのチオールと結合する。体内で、この結合反応は可逆的プロセスであり、付加物は解離してイソチオシアネートを再放出し得る。
【００３１】
イソチオシアネートは、グルタチオンと結合すると、メルカプツール酸の経路を通じて代謝されて、最終的には、主にＮ−アセチルシステインの付加物として尿中に排出される。
【００３２】
したがって、上述のように、スルフォラファンの代謝に関与するのはイソチオシアネート官能基（ｆｕｎｃｔｉｏｎ）である。イソチオシアネートがグルタチオン及びアミノ酸のチオールと顕著に反応するため、６−イソチオシアナトヘキサン−２−オンが付与され得る。６−イソチオシアナトヘキサン−２−オンは、その近似構造やイソチオシアネート基の存在を考えると、興味深い類似体である。
【００３３】
スルフォラファンがそれに与えられた多くの効果を誘発し得るのは、特にこの種の相互作用による（例えば、スルフォラファンとシステインのチオールとの相互作用による、フェーズＩＩ酵素の刺激、皮膚癌関与転写因子ＡＰ１の阻害）。
【００３４】
更に、スルフォラファンは、グルタチオンに共役結合した形態で細胞内に蓄積される。事実、細胞内型イソチオシアネートの主要部分は、グルタチオンに対するイソチオシアネートの反応から生じるジチオカルバメート形態である。よって、細胞内に蓄積される生成物の９５％はこの形態である。
【００３５】
更に、ジチオカルバメート形態は細胞にスルフォラファンを貯蔵する（高濃度での迅速な蓄積）ための形態であるが、この形態が、代わりに予め成形された（ｐｒｅ−ｓｈａｐｅｄ）形態で、対応するイソチオシアネートの代わりに細胞に対して既に提示されている場合、当該細胞はそれを直接吸収できないことが実証された。この場合、第一段階で、ジチオカルバメートの細胞外加水分解が行われて、遊離イソチオシアネートに戻り、次いで、その形態が細胞によって統合され、変換されて、ジチオカルバメートの形態で貯蔵され得る。
【００３６】
ジチオカルバメートの形態で貯蔵されるこれらイソチオシアネートの高濃度で迅速な蓄積は、フェーズＩＩ酵素系及び特に抗癌作用を誘発する能力において重要な役割を果たすようである。
【００３７】
上述事項から、スルフォラファンの誘導体及びおそらくは６−イソチオシアナトヘキサン−２−オンの誘導体、例えば、グルタチオンとのカップリング生成物が、直接細胞に貯蔵されず、まずインビボで開裂してスルフォラファン又は６−イソチオシアナトヘキサン−２−オンに戻り、これが細胞に貪食されて、グルタチオンとして貯蔵され得ることは明らかである。
【００３８】
よって、本発明によるアミン−スルフォラファン又はアミン−６−イソチオシアナトヘキサン−２−オンのカップリング構造もまた、ヒトにおいて代謝中に開裂し、これにより、一方では脱色素効果を有するスルフォラファン（又は６−イソチオシアナトヘキサン−２−オンを）が放出され、他方ではこれもまた脱色素剤の役割を果たす遊離アミンが放出される。結果的に、これらのスルフォラファン又は６−イソチオシアナトヘキサン−２−オン誘導体は、幾つかの作用の可能性を許容する：チオ尿素はそれ自体活性である、又は、チオ尿素は代謝されて各々が脱色素効果を有するか若しくは潜在的に脱色素効果を有する２つの分子を放出する。
【００３９】
もちろん、脱色素効果について本書に記載した事項もまた、色素沈着過度に対して、日焼け防止に対して、放射線防護に対して、抗癌作用及び上述する他の効果として適用される。本発明によれば、選択されるアミンは、このカップリング化合物に対して望まれる効果に応じて変わる。
【００４０】
例えば、ＵＶフィルタリング効果を有するべく既知のアミンをカップリングすること（例えば、パラアミノ安息香酸又はアントラニル酸塩）、又は更に、２つの「スルフォラファン」若しくは「６−イソチオシアナトヘキサン−２−オン」単位又は中心のジアミンを伴う２つのチオ尿素官能基（ｆｕｎｃｔｉｏｎｓ）を有する分子を得るべくピペラジンなどのジアミンとカップリングすることを検討することもできる。
【００４１】
本発明の方法の１つの有利な実施形態において、当該アミンは、一般式ＨＮＲ５Ｒ６（式中、Ｒ５は水素原子を表し、Ｒ６はメチルスルフィニルブチル基を表す）を有する第一アミンである。これを用いると、１，３−ビス−（４−（メチルスルフィニル）ブチル）−チオ尿素を得ることができる。
【００４２】
このスルフォラファン誘導体は、特に、先行文献１に記載されている。この文献によれば、このチオ尿素の合成には、水中でのスルフォラファンの分解プロセス（スルフォラファンが４−メチルスルフィニルブチルアミンに分解される）が用いられ、これが、依然として存在するスルフォラファンと反応してチオ尿素を形成する。本発明によれば、例えば、好適な溶媒中２つの純粋な試薬から、制御された方法で高収率にてこのチオ尿素を獲得することが目的である。故に、反応は低温（１００℃の代わりに４５℃にて短時間（２４時間の代わりに１時間））で行われ、得られた収率は約９７％であり、これにより純粋な生成物が得られ、後続の分析に使用することができる。
【００４３】
本発明の代替実施形態において、当該アミンは、一般式ＨＮＲ５Ｒ６（式中、Ｒ５は水素原子を表し、Ｒ６は任意に１以上のヘテロ原子を包含する直鎖、環式又は分岐アルキル、アルケニル、アルキルアリール、アリール、アルキニル基を表す）を有する第一アミンである。
【００４４】
本発明の別の代替実施形態において、当該アミンは、一般式ＨＮＲ５Ｒ６（式中、Ｒ５及びＲ６はそれぞれ独立して、任意に１以上のヘテロ原子を包含する直鎖、環式又は分岐アルキル、アルケニル、アルキルアリール（ａｌｋｙａｒｙｌ）、アリール、アルキニル基を表す）を有する第二アミンである。
【００４５】
本発明の代替実施形態において、スルフォラファン又は６−イソチオシアナトヘキサン−２−オンの類似体は、スルフォラファン又は６−イソチオシアナトヘキサン−２−オンと、求核剤、特にアルコール又はチオール、好ましくはエチルアルコール、との反応によって形成されるその誘導体である。
【００４６】
スルフォラファンと、チオール、例えばナトリウムメタンチオラートからインサイチュで生成されるメタンチオール、との反応により、別のスルフォラファン誘導体であるスルフォラメートを得ることができる。この合成については、下記実施例においてより詳細に記載する。
【００４７】
６−イソチオシアナトヘキサン−２−オンと、チオール、例えばナトリウムメタンチオラートからインサイチュで生成されるメタンチオール、との反応により、スルフォラメートのカルボニル等価物であるメチル−５−オキソヘキシルカルバモジチオエートを得る可能性が生じる。この合成については、下記実施例においてより詳細に記載する。
【００４８】
別の実施形態において、本発明による方法は、酸化剤、特に過安息香酸又はそのハロゲン化誘導体の１つ、特にメタクロロ過安息香酸、を添加することによってスルフィニル基をスルホニル基に酸化させることを含む。この酸化は、アミン又は求核剤の添加の反応直前にスルフォラファンで、又は、形成された類似体で直接行うことができる。
【００４９】
本発明による方法の他の実施形態は、添付の特許請求の範囲に示される。
【００５０】
本発明の目的はまた、本発明の方法により得られる一般式（ＩＩＩ）の合成単離化合物である。
【００５１】
Ｒ７−Ｒ１−Ｒ４−Ｒ２      （ＩＩＩ）
【００５２】
式中、Ｒ４はカルボニル、スルフィニル又はスルホニル又はスルフィド基であり、Ｒ７はアミノ−イソチオシアナト基、−ＮＨ−Ｃ（＝Ｓ）−Ｒ’（式中、Ｒ’は、アルコラート（−ＤＲ’’）、チオラート（ＳＲ’’）、アミノ（−ＮＲ’’Ｒ’’’）型のものである）型の基を表し、Ｒ１及びＲ２はそれぞれ独立してアルキル、アリール又はアルキルアリール基を表す。
【００５３】
特に、本発明は、特定の化合物：
−本発明の方法によって得られる合成スルフォラファン、すなわち、一般式（ＩＩＩ）（式中、Ｒ４はスルフィニル基であり、Ｒ７はイソチオシアナト基を表し、Ｒ１はブチル基を表し、Ｒ２はメチル基を表す）の化合物；
−本発明の方法によって得られる合成６−イソチオシアナトヘキサン−２−オン、すなわち、一般式（ＩＩＩ）（式中、Ｒ４はカルボニル基であり、Ｒ７はイソチオシアナト基を表し、Ｒ１はブチル基を表し、Ｒ２はメチル基を表す）の化合物；
−本発明の方法によって得られる合成チオ尿素、特に、本発明の方法によって得られる合成１，３−ビス−（４−（メチルスルフィニル）ブチル）−チオ尿素、Ｎ−４−（メチルスルフィニル）ブチル）ピペリジン−１−カルボチオアミド、４−メチル−Ｎ−４−（メチルスルフィニル）ブチル）ピペラジン−１−カルボチオアミド、Ｎ−４−（メチルスルフィニル）ブチル）モルホリン−４−カルボチオアミド、１−（ベンジルピペリジン−４−イル）−３−（４−メチルスルフィニル）ブチル）チオ尿素
に関する。
【００５４】
更に、本発明はまた、本発明の方法によって、すなわち、スルフォラファンとアルコール（例えば、エタノール）をカップリングすることによって得られる式（ＩＩＩ）（式中、Ｒ２はカルバモチオ酸Ｏ−エチル基などであるが、これに限定されない、すなわち、Ｒ７は−ＮＨ−Ｃ（＝Ｓ）−Ｒ’（式中、Ｒ’はＯＨを表す）である）の誘導体、酸化スルフォラファン（４−メチルスルホニル）ブチルイソチオシアネート（Ｒ４はスルフィニル基である）；
−酸化スルフォラファンと第一又は第二アミンをカップリングすることによって得られるチオ尿素（例えば、１−（４−（メチルスルフィニル）ブチル−３（４−メチルスルホニル）ブチル）チオ尿素及び１，３−ビス（４−（メチルスルホニル）ブチル）チオ尿素）、アルコール（又はチオール）と酸化スルフォラファンとのカップリング生成物、並びに４−メチルスルフィニルブチルアミンなどの前駆体に；
−上述のような６−イソチオシアナトヘキサン−２−オンと第一又は第二アミンをカップリングすることによって得られるチオ尿素
に関する。
【００５５】
本発明による化合物の他の実施形態は、添付の特許請求の範囲に示されている。
【００５６】
本発明はまた、色素沈着過度の治療における脱色素剤としての、抗癌治療、放射線（ＵＶ放射線及び他の放射線）からの皮膚防護、白髪の治療、ＵＶ及びそれらの影響からの皮膚防護、例えば、光線療法、放射線療法、日光曝露、紅斑、ＤＮＡに対する損傷、誘発、修復、シグナリング、癌化、炎症やアトピー性皮膚炎の治療、汚染作用からの皮膚防護並びにルサイト（ｌｕｃｉｔｅ）の処理におけるフェーズＩＩ酵素誘発剤、フェーズＩ酵素阻害剤又は調節剤としての、本発明化合物の使用に関する。
【００５７】
本発明の意味において、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ５、Ｒ６、Ｒ７、Ｒ’、Ｒ’’及びＲ’’’基は、有利には、それぞれ独立して１〜２０の炭素原子、好ましくは１〜１８の炭素原子、例えば１〜１２の炭素原子を有する。
【００５８】
本発明による使用に関する他の実施形態は、添付の特許請求の範囲に示されている。
【００５９】
本発明の他の特徴、詳細及び利点は、非限定例について言及する以下の非限定的な記載から明らかになろう。
【００６０】
故に、本発明は、４−メチルチオブチロニトリル（Ａ）を合成し、４−メチルチオブチルアミン（Ｂ）を合成し、４−メチルスルフィニルブチルアミン（Ｃ）を合成し、スルフォラファン（４−メチルスルフィニルブチルイソチオシアネート）（Ｄ）を合成するための一連の工程を主として含むスルフォラファンの合成方法に関する。これらの工程を以下に示す。
【００６１】
【化３】
2013533266.tif 000004
【００６２】
また、本発明によれば、スルフォラファンを形成したら、アミンと反応させて、スルフォラファン誘導体、例えば、１，３−ビス−（４−（メチルスルフィニル）ブチル）−チオ尿素（Ａ）を形成する。全体的な反応（Ｅ）は以下の通りである。
【００６３】
【化４】
2013533266.tif 000005
【００６４】
本発明に従って製造し得る別のスルフォラファン誘導体は、アミン、ピペリジンを添加することによって得られるＮ−４−（メチルスルフィニル）ブチル）−ピペリジン−１−カルボチオミド（ｃａｒｂｏｔｈｉｏｍｉｄｅ）である。この化合物は、式（Ｖ）を有する。
【００６５】
【化５】
2013533266.tif 000006
【００６６】
本発明に従って製造し得る別のスルフォラファン誘導体は、アミン、モルホリンを添加することによって得られるＮ−４−（メチルスルフィニル）ブチル）モルホリン−４−カルボチオアミドである。この化合物は、式（ＶＩ）を有する。
【００６７】
【化６】
2013533266.tif 000007
【００６８】
本発明に従って製造し得る更に別のスルフォラファン誘導体は、アミン、ベンジルピペリジンを添加することによって得られる１−（ベンジルピペリジン−４−イル）−３−（４−メチルスルフィニル）ブチル）チオ尿素である。この化合物は、式（ＶＩＩ）を有する。
【００６９】
【化７】
2013533266.tif 000008
【００７０】
更に、先に述べたように、本発明はまた、反応（Ｇ）による、特定のスルフォラファン誘導体、例えば、酸化型スルフォラファン誘導体の調製を提供する。
【００７１】
【化８】
2013533266.tif 000009
【００７２】
本発明の意味において、他の酸化型スルフォラファン誘導体もまた、上述の方法と同様の方法で本発明に従って得られる。酸化スルフォラファン由来のチオ尿素は、２つの可能なケース：下記式（ＶＩＩＩ）を有する１−（４−（メチルスルフィニル）ブチル−３（４−メチルスルホニル）ブチル）チオ尿素及び下記式（ＩＸ）を有する１，３−ビス（４−（メチルスルホニル）ブチル）チオ尿素である。更に、酸化スルフォラファンに環式又は非環式第一アミン又は第二アミンのいずれかをカップリングすることによって他のチオ尿素を得ることもできる。これらのアミンは、例えば、前記アミンの特性に従って選択され、これらの化合物は下記式（Ｘ）を有する。酸化スルフォラファンがアルコールとカップリングされると、式（ＸＩ）の化合物が得られる。式（ＶＩＩＩ〜ＸＩ）を表１に示す。
【００７３】
【表１】
2013533266.tif 000010
【００７４】
故に、本発明はまた、上述の合成工程（Ｈ）を含む６−イソチオシアナトヘキサン−２−オンの合成方法に関する。
【００７５】
【化９】
2013533266.tif 000011
【００７６】
本発明によって製造し得る６−イソチオシアナトヘキサン−２−オンの様々な類似体又は誘導体を以下に記載する。例えば、本発明により得られる誘導体の１つは、水中での６−イソチオシアナトヘキサン−２−オンの分解によって得られる１，３−ビス−（５−オキソヘキシル）チオ尿素である。この化合物は、式（ＸＩＩ）を有する。
【００７７】
【化１０】
2013533266.tif 000012
【００７８】
例えば、本発明により製造し得る誘導体の１つは、４−メチルスルフィニルブチルアミンを添加することによって得られる１−（４−（メチルスルフィニル）ブチル）−３（５−オキソヘキシル）チオ尿素である。この化合物は、式（ＸＩＩＩ）を有する。
【００７９】
【化１１】
2013533266.tif 000013
【００８０】
例えば、本発明により製造し得る誘導体の１つは、アミン、４−メチルスルフィニルブチルアミンを添加することによって得られる１−（４−（メチルスルフィニル）ブチル）−３（５−オキソヘキシル）チオ尿素である。この化合物は、式（ＸＩＶ）を有する。
【００８１】
【化１２】
2013533266.tif 000014
【００８２】
例えば、本発明により製造し得る誘導体の１つは、モルホリンを添加することによって得られるＮ−５−（オキソヘキシル）モルホリン−４−カルボチオアミドである。この化合物は、式（ＸＶ）を有する。
【００８３】
【化１３】
2013533266.tif 000015
【００８４】
例えば、本発明により製造し得る誘導体の１つは、アルコール（エタノール）を添加することによって得られるＯ−エチル−Ｎ−５−オキソヘキシルカルバモチオエートである。この化合物は、式（ＸＶＩ）を有する。
【００８５】
【化１４】
2013533266.tif 000016
【実施例】
【００８６】
実施例１；４−メチルチオブチロニトリルの合成
エタノール２５０ｍＬに溶解した４−クロロブチロニトリル（１当量）５３．３８ｇを等圧滴下漏斗に入れて、１ｌフラスコの上に載せる。
１．１当量のナトリウムメタンチオラートを、２１％ナトリウムメタンチオラート水溶液（Ｓｉｇｍａ−Ａｌｄｒｉｃｈ）として反応器に導入する。
氷水浴を用いてフラスコを冷却し、当該系を脱気し、次いで窒素下に置いて撹拌しながら維持する。
次いで、ニトリルを含有する溶液を約１時間以内に反応器へ注ぐ（迅速に滴下する）。
この時間が経過したら、氷浴を取り除いて室温へ戻す。次いで、更に２４時間この温度で撹拌を維持する。
反応終了時に、４００ｍＬの水並びに２００ｍＬのジクロロメタンを加える。この溶液をデカントし、再びジクロロメタンを用いて水相を２回抽出する。次いで、採取した有機相を水で洗浄し、硫酸マグネシウム上で乾燥させ、ろ過する。
最後に、回転蒸発器において溶媒を除去する。次いで、無色の液体５８．５９ｇを回収し、更なる精製を必要とすることなく次の工程に供する。収率を量的に考慮する。
【００８７】
ＴＬＣ：溶離剤：ヘキサン−Ｅｔ２Ｏ  ５０／５０；
顕色剤：リンモリブデン酸
Ｒｆ＝０．４５
１Ｈ  ＮＭＲ（３００ＭＨｚ；ＣＤＣｌ３）：
δ（ｐｐｍ）：２．６２（ｔ，２Ｈ，Ｊ＝６．６Ｈｚ，ＣＨ２ＣＮ）；２．５１（ｔ，２Ｈ，Ｊ＝７．０Ｈｚ，ＣＨ２ＳＣＨ３）；２．１０（ｓ，３Ｈ，ＣＨ２ＳＣＨ３）；１．９４（ｍ，２Ｈ，ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２）
１３Ｃ  ＮＭＲ（７５ＭＨｚ；ＣＤＣｌ３）：
δ（ｐｐｍ）：１１９．１；３２．６；２４．６；１５．８；１５．３
屈折率：ｎＤ２０＝１．４８１４
【００８８】
実施例２；４−メチルチオブチルアミンの合成
無水エーテル８０ｍＬに溶解した４−メチルチオブチロニトリル（１当量）１７．２６ｇを等圧滴下漏斗に入れて、１ｌフラスコの上に載せる。１．５当量のＬｉＡｌＨ４並びに無水ジエチルエーテル３００ｍＬを、冷媒を上に載せた反応器に導入する。
アセンブリを脱気し、次いで窒素下に置き、室温で撹拌しながら維持する。
次いで、４−メチルチオブチロニトリルをゆっくりと注ぐ。この添加により媒体が加熱され、次いで添加速度を調節して、発生させる還流を調節する。
添加した後、媒体を撹拌及び還流させながら３時間維持する。
この時間が経過したら、反応器を氷水浴で冷却し、次いで滴下漏斗を介して蒸留水１００ｍＬをゆっくりと注ぎ、過剰のＬｉＡｌＨ４を中和する。
次いで、混合物をフリットでろ過し、フィルターをエーテルで数回洗浄する。
次いで、ろ液をデカントし、有機相を炭でろ過し、フィルターを濯ぎ、収集した有機相を硫酸ナトリウムで乾燥させる。
最後に、回転蒸発器において溶媒を除去する。次いで、僅かに黄色みがかった液体１８．１０ｇを回収し、更なる精製を必要とすることなく次の工程に供する。収率を量的に考慮する。
【００８９】
ＴＬＣ：溶離剤：ヘキサン−Ｅｔ２Ｏ  ５０／５０；
顕色剤：リンモリブデン酸；
最終生成物−溶離剤：ＭｅＯＨ−５％ＨＣＯＯＨ；
顕色剤：リンモリブデン酸又はニンヒドリン
Ｒｆ＝０．５
１Ｈ  ＮＭＲ（３００ＭＨｚ；ＣＤＣｌ３）：
δ（ｐｐｍ）：２．７０（ｔ，２Ｈ，Ｊ＝７．０Ｈｚ，ＣＨ２ＮＨ２）；２．５０（ｔ，２Ｈ，Ｊ＝７．０Ｈｚ，ＣＨ２ＳＣＨ３）；２．０９（ｓ，３Ｈ，ＣＨ２ＳＣＨ３）；１．６５−１．４８（ｍ，６Ｈ，ＣＨ２（ＣＨ２）２ＣＨ２＋ＣＨ２ＮＨ２）
１Ｈ  ＮＭＲ（３００ＭＨｚ；Ｄ２Ｏ）：
δ（ｐｐｍ）：２．６４（ｔ，２Ｈ，Ｊ＝７．０Ｈｚ，ＣＨ２ＮＨ２）；２．５７（ｔ，２Ｈ，Ｊ＝７．０Ｈｚ，ＣＨ２ＳＣＨ３）；２．１１（ｓ，３Ｈ，ＣＨ２ＳＣＨ３）；１．６８−１．４７（ｍ，４Ｈ，ＣＨ２（ＣＨ２）２ＣＨ２）
１３Ｃ  ＮＭＲ（７５ＭＨｚ；ＣＤＣｌ３）：
δ（ｐｐｍ）：４１．７；３４．１；３２．８；２６．５；１５．５
１３Ｃ  ＮＭＲ（７５ＭＨｚ：Ｄ２Ｏ）：
δ（ｐｐｍ）：４０．２；３３．２；３０．８；２５．８；１４．２
屈折率；ｎＤ２０＝１．４８３１
【００９０】
実施例３；４−メチルスルフィニルブチルアミンの合成
４−メチルチオブチルアミン（１当量）１７．９８ｇを反応器に導入して０℃まで冷却する。アセンブリを脱気し、次いで、窒素下に置いて撹拌する。次いで、トリフルオロエタノール７５ｍＬをゆっくりと注ぎ、アミン溶液を形成する。この添加は、発熱（ｅｘｏｔｈｅｒｍｙ）を検出するため、０℃で遂行すべきである。
次いで、１．１当量の過酸化水素（水中３５％）を、等圧滴下漏斗を介して３０分以内で反応器内に滴下する。
添加を終えたら、反応媒体を室温まで戻し、この温度で１時間撹拌しながら維持する。
この時間が経過したら、活性炭３ｇを反応器に導入する。室温で２０分間撹拌した後、反応混合物をセライトでろ過し、１００ｍＬのエタノールでフィルターを洗浄する。
ろ液を回収し、５０℃の浴温にて回転蒸発器において濃縮する。６０ｍＬのジクロロメタンを用いて生成物を抽出し、ＭｇＳＯ４で乾燥させ、次いで、回転蒸発器を用いて溶媒を除去する。
これにより、僅かに黄色みがかった液体１８．３５ｇが９０％の収率で得られる。生成物を、更なる精製を必要とすることなく、次の工程に供する。
【００９１】
ＴＬＣ：溶離剤：ＭｅＯＨ−５％ＨＣＯＯＨ；
顕色剤：リンモリブデン酸又はニンヒドリン；
Ｒｆ＝０．４５
１Ｈ  ＮＭＲ（３００ＭＨｚ；ＣＤＣｌ３）：
δ（ｐｐｍ）：２．７９−２．６２（ｍ，４Ｈ，−Ｓ（Ｏ）−ＣＨ２−＋−ＣＨ２−ＮＨ２）；２．５６（ｓ，３Ｈ，ＣＨ３）；１．８７−１．７６（ｍ，２Ｈ，−ＣＨ２−ＣＨ２−）；１，７１−１．５９（ｍ，２Ｈ，−ＣＨ２−ＣＨ２−）；１．５７（ｂｒｏａｄピーク，２Ｈ，ＮＨ２）
１Ｈ  ＮＭＲ（３００ＭＨｚ；Ｄ２Ｏ）：
δ（ｐｐｍ）：２．９２（ｍ，２Ｈ，−Ｓ（Ｏ）−ＣＨ２−）；２．７０（ｓ，３Ｈ，ＣＨ３）；２．６８（ｔ，Ｊ＝７．０Ｈｚ，２Ｈ，−ＣＨ２−ＮＨ２）；１．８３−１．７２（ｍ，２Ｈ，−ＣＨ２−ＣＨ２−）；１．６７−１．５６（ｍ，２Ｈ，−ＣＨ２−ＣＨ２−）
１３Ｃ  ＮＭＲ（７５ＭＨｚ；ＣＤＣｌ３）：
δ（ｐｐｍ）：５４．３９（−ＣＨ２−ＮＨ２）；４１．５６（−Ｓ（Ｏ）−ＣＨ２−）；３８．５２（ＣＨ３−）；３２．５６（−ＣＨ２−ＣＨ２−ＮＨ２）；１９．９７（−Ｓ（Ｏ）−ＣＨ２−ＣＨ２−）
１３Ｃ  ＮＭＲ（７５ＭＨｚ；Ｄ２Ｏ）：
δ（ｐｐｍ）：５５．２１；４２．８１；３９．２２；３３．２９；２２．２９．
屈折率；ｎＤ２０＝１．４８５５
【００９２】
実施例４；スルフォラファンの合成
４−メチルスルフィニルブチルアミン（１当量）１８．３９ｇ並びに絶対エタノール２００ｍＬを反応器に導入し、次いで、混合物を室温で撹拌し、脱気し、窒素下に置く。
次いで、１当量のトリエチルアミンを反応器内に注ぎ、次いで、１０当量の二硫化炭素を注ぐ。ＣＳ２の添加により発熱するので、滴加すべきである。媒体により黄変する。
これにより形成された混合物を室温で３０分撹拌しながら維持し、０℃まで冷却する。
次いで、１００ｍＬの絶対エタノールに溶解した０．９９当量の二炭酸ジ−ｔｅｒｔ−ブチルを約３０分以内で等圧滴下漏斗を介して添加する。次いで、これと同じように、絶対エタノール５０ｍＬに溶解した３モル％のＤＭＡＰを添加する。
次いで、反応媒体を撹拌しながら０℃で１５分間維持し、次いで、氷浴を取り除き、反応を室温で２時間続ける。
粗反応混合物を、一口フラスコに移し、回転蒸発器内で濃縮し、次いで、３０ｍＬのジクロロメタンで抽出し、炭でろ過する。フィルターをジクロロメタンで濯ぎ、収集したろ液を再び回転蒸発器内に入れる。これにより、オレンジ色の油２３．１ｇが得られる。
原生成物は本質的に、微量の残留ＤＭＡＰを含有する。クロマトグラフィーカラムでの精製を当初考えたが、その代わりに単純な洗浄を行うのが有利であり得る。
次いで、この粗生成物を１００ｍＬのジクロロメタンで抽出し、酸洗浄を行う。次いで、得られた溶液を２００ｍＬの１Ｎ  ＨＣｌの存在下で手短に撹拌する。デカントを行った後、水相を再びジクロロメタンで一回抽出し、収集した有機相を水で洗浄し、ＭｇＳＯ４で乾燥させる。最後に、溶媒を回転蒸発器において取り除く。これにより、黄色い（油状）液体が２１．１２ｇ、すなわち８８％の収率で得られる。
故に、４工程における全体的な反応収率は７９％であり、これは、我々の知る限り、スルフォラファンに到達するための様々な経路について文献に記載される全ての収率（従来は約７−５０％）を優に上回るものである。
【００９３】
ＴＬＣ：溶離剤：ＡｃＯＥｔ−ＭｅＯＨ  ９／１；
顕色剤：リンモリブデン酸；
Ｒｆ＝０．３
１Ｈ  ＮＭＲ（３００ＭＨｚ；ＣＤＣｌ３）：
δ（ｐｐｍ）：３．６０（ｔ，２Ｈ，Ｊ＝６．１Ｈｚ，−ＣＨ２ＮＣＳ）；２．７３（ｍ，２Ｈ，−Ｓ（Ｏ）−ＣＨ２−）；２．５０（ｓ，３Ｈ，ＣＨ３）；１．８２−２．００（ｂｒｏａｄ  ｍ，４Ｈ，−ＣＨ２−ＣＨ２−）
１３Ｃ  ＮＭＲ（７５ＭＨｚ：ＣＤＣｌ３）：
δ（ｐｐｍ）：５３．４８（−ＣＨ２−ＮＣＳ）；４４．６２（−Ｓ（Ｏ）−ＣＨ２）；３８．７１（ＣＨ３−Ｓ（Ｏ）−）；２８．９７（−ＣＨ２−ＣＨ２−ＮＣＳ）；２０．０６７（−Ｓ（Ｏ）−ＣＨ２−ＣＨ２−）
ＵＶスペクトル：
λｍａｘ＝２４２ｎｍ
屈折率：ｎＤ２０＝１．３５１６
【００９４】
実施例５；スルフォラファン類似体１−（エチルスルフィニル）−４−イソチオシアナトブタンイソチオシアネートの合成
実施例１のメタンチオラートの代わりにナトリウムエタンチオラートを使用したことを除いて、実施例１〜４の手順を再現することにより、下記式により示される化合物１−（エチルスルフィニル）−４−イソチオシアナトブタンが得られる。
【００９５】
【化１５】
2013533266.tif 000017
【００９６】
二硫化炭素と二炭酸ジ−ｔｅｒｔ−ブチルの存在下、対応するアミン（４−（エチルスルフィニル）ブタンアミン）の反応により、実施例４のスルフォラファンと同じ方法でイソチオシアネートを合成する。当該アミンは、単に第一工程においてＣＨ３ＳＮａの代わりにＥｔＳＮａを使用することにより、この特許に記載されたスルフォラファン合成のための第一〜第三工程に従うことによって得られる。
４−（エチルスルフィニル）ブタンアミンは、１当量のトリエチルアミンと１０当量の二硫化炭素の存在下、エタノール中で反応する。反応後、混合物を０℃まで冷却し、０．９９当量の二炭酸ジ−ｔｅｒｔ−ブチルと、エタノールに溶解した３モル％のＤＭＡＰとをこれに加える。室温まで戻し、更に２時間反応を行った後、反応媒体に対して以下の処理を行ってもよい：溶媒の除去、塩酸溶液での洗浄、デカント及び溶媒の除去。イソチオシアネートが黄色い液体として得られ、この液体を冷却して凝固させる。この工程での収率は８７％である。
アミン合成を含むこの反応の全収率は８７％である。
【００９７】
ＴＬＣ：溶離剤：ＥｔＯＡｃ−ＭｅＯＨ  ９０／１０；
顕色剤：リンモリブデン酸；
Ｒｆ＝０．４
１Ｈ  ＮＭＲ（３００ＭＨｚ；ＣＤＣｌ３）：
δ（ｐｐｍ）：３．５７（ｔ，２Ｈ，Ｊ＝６．２Ｈｚ，ＣＨ２ＮＣＳ）；２．６８（ｍ，４Ｈ，ＣＨ２−（Ｓ＝Ｏ）−ＣＨ２）；１．９１（ｍ，４Ｈ，−ＣＨ２−ＣＨ２−）；１．３２（ｔ，２Ｈ，Ｊ＝７．５Ｈｚ，ＣＨ３ＣＨ２−（Ｓ＝Ｏ）−）
１３Ｃ  ＮＭＲ（７５ＭＨｚ；ＣＤＣｌ３）：
δ（ｐｐｍ）：５０．４４；４５．７９；４４．５７；２８．９８；２０．０７；６．６９
融点：４４℃
ＵＶスペクトル
λｍａｘ＝２４５ｎｍ
【００９８】
実施例６；スルフォラファン類似体（４−イソチオシアナトブチルスルフィニル）ベンゼンイソチオシアネートの合成
実施例１のナトリウムメタンチオラートの代わりにナトリウムチオフェノラートを使用したことを除いて、実施例１〜４の手順を再現することにより、下記式により示される化合物（４−イソチオシアナトブチルスルフィニル）ベンゼンが得られる。
【００９９】
【化１６】
2013533266.tif 000018
【０１００】
二硫化炭素と二炭酸ジ−ｔｅｒｔ−ブチルの存在下、対応するアミン（４−（フェニルスルフィニル）ブタンアミン）の反応により、スルフォラファンの場合と同じ方法でイソチオシアネートを合成する。当該アミンは、単に第一工程においてＣＨ３ＳＮａの代わりにＰｈＳＮａを使用することにより、この特許に記載された第一〜第三のスルフォラファン合成工程に従うことによって得られる。
４−（フェニルスルフィニル）ブタンアミンは、１当量のトリエチルアミンと１０当量の二硫化炭素の存在下、エタノール中で反応する。反応後、混合物を０℃まで冷却し、０．９９当量の二炭酸ジ−ｔｅｒｔ−ブチルと、エタノールに溶解した３モル％のＤＭＡＰとをこれに加える。室温まで戻し、更に２時間反応を行った後、反応媒体に対して以下の処理を行ってもよい：溶媒の除去、塩酸溶液での洗浄、デカント及び溶媒の除去。イソチオシアネートは非常に粘性のある黄色い油として収率９６％で得られる。
アミン合成を含むこの反応の全収率は５７％である。
【０１０１】
ＴＬＣ：溶離剤：ＥｔＯＡｃ−石油エーテル  ２／１；
顕色剤：リンモリブデン酸；
Ｒｆ＝０．２
１Ｈ  ＮＭＲ（３００ＭＨｚ；ＣＤＣｌ３）：
δ（ｐｐｍ）：７．４７−７．６１（ｍ，５Ｈ，Ｐｈ）；３．５１（ｍ，２Ｈ，ＣＨ２ＮＣＳ）；２．７９（ｍ，２Ｈ，ＣＨ２ＳＰｈ）；１．８４（ｍ，４Ｈ，−ＣＨ２ＣＨ２）
１３Ｃ  ＮＭＲ（７５ＭＨｚ；ＣＤＣｌ３）；
δ（ｐｐｍ）：１４３．３０；１３１．０１；１２９．２２；１２３．８１；５５．７９；４４．４８；２８．８２；１９．４０
ＵＶスペクトル
λｍａｘ＝２４１ｎｍ
【０１０２】
実施例７−；実施例６で得られた（４−イソチオシアナト−ブチルスルフィニル）ベンゼンからの１，３−ビス−（４−（フェニルスルフィニル）−ブチル）−チオ尿素の合成
実施例６の（４−イソチオシアナト−ブチルスルフィニル）ベンゼンを、水の存在下、反応器内に入れ、次いで、混合物を還流させ、この温度で２４時間維持する。溶媒を除去した後、粗反応混合物をシリカゲルクロマトグラフィーカラム（ＣＨ２Ｃｌ２／ＭｅＯＨ）で精製する。これにより、チオ尿素が、純粋かつ粘性のある油の形態にて収率９４％で得られ、これは下記式を有する。
【０１０３】
【化１７】
2013533266.tif 000019
【０１０４】
ＴＬＣ：溶離剤：ＣＨ２Ｃｌ２−ＭｅＯＨ  ９／１；
顕色剤：リンモリブデン酸；
Ｒｆ＝０．７
【０１０５】
１Ｈ  ＮＭＲ（３００ＭＨｚ；ＣＤＣｌ３）：
δ（ｐｐｍ）：７．４９−７．６０（ｍ，１０Ｈ，Ｐｈ）；６．７８（広幅ピーク，２Ｈ，−ＮＨ−）；３．４９（ｍ，４Ｈ，−ＣＨ２ＮＨ−）；２．８０（ｍ，４Ｈ，−ＣＨ２（Ｓ＝Ｏ）−）；１．６５−１．８５（ｍ，８Ｈ，−ＣＨ２−ＣＨ２−ＣＨ２−ＣＨ２）
１３Ｃ  ＮＭＲ（７５ＭＨｚ；ＣＤＣｌ３）：
δ（ｐｐｍ）：１４３．４７；１３１．１３；１２９．３１；１２３．８７；５６．３７；４３．４７；２７．９７；１９．８２
ＵＶスペクトル
λｍａｘ＝２４３ｎｍ
【０１０６】
実施例８−イソチオシアネート：５−メチルスルフィニルペンチルイソチオシアネートの合成
実施例１の４−クロロブチロニトリルの代わりに４−クロロペンタンニトリルを使用したことを除いて、実施例１〜４の手順を再現することにより、下記式により示される化合物５−メチルスルフィニルペンチルイソチオシアネートが得られる。
【０１０７】
【化１８】
2013533266.tif 000020
【０１０８】
二硫化炭素と二炭酸ジ−ｔｅｒｔ−ブチルの存在下、対応するアミン（５−（メチルスルフィニル）ペンタンアミン）の反応により、スルフォラファンと同じ方法でイソチオシアネートを合成する。当該アミンは、単にニトリルの代わりにその相同体を使用することにより、この特許に記載された第一〜第三のスルフォラファン合成工程に従うことによって得られる。
５−（メチルスルフィニル）ペンタンアミンは、１当量のトリエチルアミンと１０当量の二硫化炭素の存在下、エタノール中で反応する。反応後、混合物を０℃まで冷却し、０．９９当量の二炭酸ジ−ｔｅｒｔ−ブチルと、エタノールに溶解した３モル％のＤＭＡＰとをこれに加える。室温まで戻し、更に２時間反応を行った後、反応媒体に対して以下の処理を行ってもよい：溶媒の除去、塩酸溶液での洗浄、デカント及び溶媒の除去。イソチオシアネートは黄色い液体として得られ、本工程の収率は８８％である。
アミン合成を含むこの反応の全収率は８６％である。
【０１０９】
ＴＬＣ：溶離剤：ＥｔＯＡｃ−ＭｅＯＨ  ９０／１０；
顕色剤：リンモリブデン酸；
Ｒｆ＝０．３
１Ｈ  ＮＭＲ（３００ＭＨｚ；ＣＤＣｌ３）：
δ（ｐｐｍ）：３．５１（ｔ，２Ｈ，Ｊ＝６．４Ｈｚ，−ＣＨ２ＣＮ）；２．６６１（ｍ，２Ｈ，−ＣＨ２（Ｓ＝Ｏ）−；２．５３（ｓ，３Ｈ，ＣＨ３−（Ｓ＝Ｏ）−）；１．５１−１．６１（ｍ，４Ｈ，−ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２−）；１．６７−１．８３（ｍ，２Ｈ，−ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２−）
１３Ｃ  ＮＭＲ（７５ＭＨｚ；ＣＤＣｌ３）：
δ（ｐｐｍ）：５４．０３；４４．５７；３８．５２；２９．４０；２５．６６；２１．７７
屈折率：ｎＤ２０＝１．５５１８
ＵＶスペクトル
λｍａｘ＝２４５ｎｍ
【０１１０】
実施例９；１，３−ビス−（４−メチルスルフィニル）−ブチル）−チオ尿素の合成
実施例４で得られたスルフォラファン（１当量）４．４３ｇを、１０ｍＬのジクロロメタンに溶解し、等圧滴下漏斗に入れる。この等圧滴下漏斗を、４．７９ｇの４−メチルスルフィニルブチルアミン（１．１当量）並びに４０ｍＬのジクロロメタンを入れた反応器の上に載せる。
混合物を還流させ、１時間撹拌しながらこうして維持する。次いで、回転蒸発器において溶媒を除去し、次いで、ヘキサンを加えたジクロロメタンで粗混合物を抽出することにより、チオ尿素の沈殿物が得られる。これにより得られた固体を粉砕し、引き続いて、ジエチルエーテル及びヘキサンで洗浄し、乾燥させる。最終的に、白色粉末が７．６ｇ、すなわち、収率９７％で得られる。
【０１１１】
ＴＬＣ：溶離剤：ＣＨ２Ｃｌ２−ＭｅＯＨ  ８／２；
顕色剤：リンモリブデン酸又はニンヒドリン；
Ｒｆ＝０．４５
１Ｈ  ＮＭＲ（３００ＭＨｚ；ＣＤＣｌ３）：
δ（ｐｐｍ）：６．９１（広幅ｓ，２Ｈ，−ＮＨ−）；３．５４（ｍ，４Ｈ，−ＣＨ２−ＮＨ−）；２．７４（ｔ，Ｊ＝７．２Ｈｚ，４Ｈ，−Ｓ（Ｏ）−ＣＨ２−）；２．５７（ｓ，６Ｈ，ＣＨ３−Ｓ（Ｏ）−）；１．７０−１．８７（ｍ，８Ｈ，−ＣＨ２−ＣＨ２−）
１３Ｃ  ＮＭＲ（７５ＭＨｚ；ＣＤＣｌ３）：
δ（ｐｐｍ）：１８２．５１；５３．６０；４３．３２；３８．４９；２８．０９；１９．９８
ＵＶスペクトル；
λｍａｘ＝２３９ｎｍ  
融点；８９℃
【０１１２】
実施例１０；Ｎ−（４−メチルスルフィニル）ブチル）ピペリジン−１−カルボチオアミドの合成
実施例４で得られたスルフォラファン１当量の存在下、１．１当量のピペリジンを、ジクロロメタン中で１時間加熱しながら還流させることにより、Ｎ−（４−メチルスルフィニル）ブチル）ピペリジン−１−カルボチオアミドを合成した。反応終了時に溶媒を蒸発させる。次いで、チオ尿素を黄色みがかった固体として結晶化し、固体の洗浄水中で過剰アミンを除去する。スルフォラファンへアミンをカップリングさせるための最終工程に関する収率は９０％である。
【０１１３】
１Ｈ  ＮＭＲ（３００ＭＨｚ；ＣＤＣｌ３）：
δ（ｐｐｍ）：６．１６（ｂｒｏａｄピーク，１Ｈ，−ＮＨ−）；３．７５（ｔ，Ｊ＝５．３Ｈｚ，４Ｈ，−ＣＨ２−Ｎ−ＣＨ２  ピペリジン）；３．７０（ｍ，２Ｈ，−ＣＨ２−ＮＨ−Ｃ（Ｓ）−）；２．７３（ｔ，Ｊ＝７．４Ｈｚ，２Ｈ，−ＣＨ２−Ｓ（Ｏ）−）；２．５４（ｓ，３Ｈ，ＣＨ３−Ｓ（Ｏ）−）；１．７５−１．８８（ｍ，４Ｈ，−ＣＨ２−ＣＨ２−）；１．６７−１．５１（ｍ，６Ｈ，−ＣＨ２−ＣＨ２−ＣＨ２−ピペリジン）
１３Ｃ  ＮＭＲ（７５ＭＨｚ；ＣＤＣｌ３）：
δ（ｐｐｍ）：１８０．９４；５３．３６；４８．７４；４４．９４；３８．５５；２８．００；２５．３９；２４．２０；１９．７３
ＵＶスペクトル：
λｍａｘ＝２１８及び２４２ｎｍ
融点：９２℃
【０１１４】
実施例１１；４−メチル−Ｎ−（４−（メチルスルフィニル）ブチル）ピペラジン−１−カルボチオアミドの合成
実施例４で得られたスルフォラファン１当量の存在下、１．１当量のピペラジンを、ジクロロメタン中で１時間加熱しながら還流させることにより、４−メチル−Ｎ−（４−メチルスルフィニル）ブチル）ピペラジン−１−カルボチオアミドを合成した。反応終了時に溶媒を蒸発させる。次いで、チオ尿素をシリカゲルクロマトグラフィーカラムで粘性のある油として回収する。スルフォラファンへアミンをカップリングさせるための最終工程に関する収率は９７％である。
【０１１５】
４−メチル−Ｎ−（４−（メチルスルフィニル）ブチル）ピペラジン−１−カルボチオアミドは下記式を有する。
【化１９】
2013533266.tif 000021
【０１１６】
１Ｈ  ＮＭＲ（３００ＭＨｚ；ＣＤＣｌ３）：
δ（ｐｐｍ）：６．２４（ｂｒｏａｄピーク，１Ｈ，−ＮＨ−）；３．８４（ｔ，Ｊ＝４．９Ｈｚ，４Ｈ，−ＣＨ２−Ｎ−ＣＨ２−環）；３．７４（ｍ，２Ｈ，−ＣＨ２−ＮＨ−Ｃ（Ｓ）−）；２．７５（ｔ，Ｊ＝７．０Ｈｚ，２Ｈ，−ＣＨ２Ｓ（Ｏ）−）；２．５７（ｓ，３Ｈ，ＣＨ３−Ｓ（Ｏ）−）；２．４３（ｔ，Ｊ＝５．１Ｈｚ，４Ｈ，−ＣＨ２−Ｎ（Ｍｅ）−ＣＨ２−環）；２．３０（ｓ，３Ｈ，ＣＨ３−Ｎ環）；１．９３−１．８３（ｍ，４Ｈ，−ＣＨ２−ＣＨ２−）
１３Ｃ  ＮＭＲ（７５ＭＨｚ；ＣＤＣｌ３）：
δ（ｐｐｍ）：１８１．９１；５４．４５；５２．９９；４７．３０；４５．７９；４５．０３；３８．６１；２７．６７；１９．７９
ＵＶスペクトル：
λｍａｘ＝２１７及び２４２ｎｍ
【０１１７】
酢酸エチルからの４−メチル−Ｎ−（４−（メチルスルフィニル）−ブチル）ピペラジン−１−カルボチオアミドの結晶化／再結晶化が有利であり、それにより融点が７２℃の固体として当該化合物を得ることができる。
【０１１８】
実施例１２；Ｎ−（４−（メチルスルフィニル）ブチル）モルホリン−４−カルボチオアミドの合成
実施例４で得られたスルフォラファン１当量の存在下、１．１当量のモルホリンを、ジクロロメタン中で１時間加熱しながら還流させることにより、Ｎ−（４−（メチルスルフィニル）ブチル）モルホリン−４−カルボチオアミドを合成した。反応終了時に溶媒を蒸発させる。次いで、チオ尿素を白色固体として結晶化し、洗浄水中で当該固体から過剰アミンを除去する。スルフォラファンへアミンをカップリングさせるための最終工程に関する収率は９５％である。
【０１１９】
１Ｈ  ＮＭＲ（３００ＭＨｚ；ＣＤＣｌ３）：
δ（ｐｐｍ）：６．４６（広幅ピーク，１Ｈ，−ＮＨ−）；３．８３−３．６９（ｍ，１０Ｈ，−ＣＨ２−Ｎ−ＣＨ２−環＋−ＣＨ２−Ｏ−ＣＨ２−環＋−ＣＨ２−ＮＨ−）；２．７６（ｔ，Ｊ＝７．０Ｈｚ，２Ｈ，−ＣＨ２−Ｓ（Ｏ）−）；２．５７（ｓ，３Ｈ，ＣＨ３−Ｓ（Ｏ）−）；１．９６−１．８１（ｍ，４Ｈ，−ＣＨ２−ＣＨ２−）
１３Ｃ  ＮＭＲ（７５ＭＨｚ；ＣＤＣｌ３）：
δ（ｐｐｍ）：１８２．４３；６６．２２；５２．８４；４７．５５；４４．９７；３８．６１；２７．４９；１９．７６
ＵＶスペクトル：
λｍａｘ＝２１８及び２４２ｎｍ
融点：１０１℃
【０１２０】
実施例１３−１−（１−ベンジル−ピペリジン−４−イル）−３−４−（メチルスルフィニル）ブチルチオ尿素の合成
実施例４で得られたスルフォラファン１当量の存在下、１．１当量のベンジルピペリジンを、ジクロロメタン中で１時間加熱しながら還流させることにより、１−（１−ベンジルピペリジン−４−イル）−３−４−（メチルスルフィニル）ブチルチオ尿素を合成した。反応終了時に溶媒を蒸発させる。次いで、チオ尿素を非常に粘性のある油として回収し、これを冷蔵庫内にてシリカゲルクロマトグラフィーカラムで凝固させる。スルフォラファンへアミンをカップリングさせるための最終工程に関する収率は９３％である。
【０１２１】
１Ｈ  ＮＭＲ（３００ＭＨｚ；ＣＤＣｌ３）：
δ（ｐｐｍ）：６．６５（ｂｒｏａｄピーク，１Ｈ，−ＮＨ−）；６．３４（ｂｒｏａｄピーク，１Ｈ，−ＮＨ−）；４．０６（ｂｒｏａｄピーク，１Ｈ，−ＮＨ−ＣＨ−）；３．５６（ｂｒｏａｄバルク，２Ｈ，−ＣＨ２−ＮＨ−）；３．４８（ｓ，２Ｈ，−ＣＨ２−ｐｈ）；２．７１−２．８２（ｍ，４Ｈ，−ＣＨ２−Ｓ（Ｏ）−＋ピペリジン環）；２．５８（ｓ，３Ｈ，ＣＨ３−Ｓ（Ｏ）−）；２．１８−１．４２（ｂｕｌｋ  ｏｆ  ４  ｍｕｌｔｉｐｌｅｔｓ，１０Ｈ，−ＣＨ２−ＣＨ２−＋ピペリジン環）
１３Ｃ  ＮＭＲ（７５ＭＨｚ；ＣＤＣｌ３）：
δ（ｐｐｍ）：１８１．３３；１３８．１６；１２９．０７；１２８．１５；１２６．９７；６３．００；５３．４８；５２．１１；５１．０４；４３．４１；３８．５５；３２．０４；２８．００；２０．１３
ＵＶスペクトル：
λｍａｘ＝２４３ｎｍ
融点：１２０℃
【０１２２】
実施例１４−エタノールとスルフォラファンのカップリング生成物の合成
実施例４で得られたスルフォラファンを絶対エタノールに溶解する。それを脱気し、窒素下に置いた後、完全に変換するまで混合物を還流させる。最終的に、回転蒸発器においてエタノールを除去する。粘性のある黄色い液体が得られ、それをクロマトグラフィーカラムで精製することにより、ベージュ色の固体が収率８４％で得られる。
【０１２３】
１Ｈ  ＮＭＲ（３００ＭＨｚ；ＣＤＣｌ３）：
スルフォラメートの場合と同様、少量の互変異性体の存在を検出する（６６％／３３％）、Ｏ−エチル４−（メチルスルフィニル）ブチルカルバモチオエート。
δ（ｐｐｍ）：６．６５（広幅ピーク，１Ｈ，−ＮＨ−）；４．４５（ｑ，Ｊ＝７．１Ｈｚ，２Ｈ，−Ｏ−ＣＨ２−ＣＨ３）；３．６０（ｑ，Ｊ＝６．６Ｈｚ，２Ｈ，ＣＨ２−ＮＨ−Ｃ（Ｓ）−）；２．７５（ｍ，２Ｈ，−ＣＨ２−Ｓ（Ｏ）−）；２．５７（ｓ，３Ｈ，−ＣＨ３−Ｓ（Ｏ）−）；１．８６−１．７９（ｍ，４Ｈ，−ＣＨ２−ＣＨ２−）；１．２９（ｔ，Ｊ＝７．１Ｈｚ，３Ｈ，ＣＨ３−ＣＨ２−Ｏ−）
少量互変異性体：
δ（ｐｐｍ）：７．１０（広幅ピーク，１Ｈ，−ＮＨ−）；４．５３（ｑ，Ｊ＝７．１Ｈｚ，２Ｈ，−Ｏ−ＣＨ２−ＣＨ３）；３．３１（ｑ，Ｊ＝６．５Ｈｚ，２Ｈ，ＣＨ２−ＮＨ−Ｃ（Ｓ）−）；２．７２（ｍ，２Ｈ，−ＣＨ２−Ｓ（Ｏ）−）；２，５７（ｓ，３Ｈ，−ＣＨ３−Ｓ（Ｏ）−）；１．８０−１．７０（ｍ，４Ｈ，−ＣＨ２−ＣＨ２−）；１．３５（ｔ，Ｊ＝７．１Ｈｚ，３Ｈ，ＣＨ３−ＣＨ２−Ｏ−）
１３Ｃ  ＮＭＲ（７５ＭＨｚ；ＣＤＣｌ３）：
δ（ｐｐｍ）：１９０．５７；６６．２２；５３．６６；４４．１５；３８．５５；２８．２２；１９．８２；１４．２０
ＵＶスペクトル：
λｍａｘ＝２４２ｎｍ
融点：５８℃
【０１２４】
実施例１５；スルフォラファンの酸化
実施例４で得られたスルフォラファン（１当量）１．７７ｇ並びに１５ｍＬのジクロロメタンを反応器に導入し、次いで、混合物を脱気し、窒素下に置く。
２５ｍＬのジクロロメタンに溶解したメタクロロ過安息香酸１．６当量を等圧滴下漏斗に入れ、反応器内に室温にて滴加する（２０分以内）。この添加により発熱が生じ、酸化スルフォラファン、すなわち、１−イソチオシアナト−４−（メチルスルホニル）ブタン又は４−メチルスルホニルブチル−イソチオシアネートが生成される。
撹拌を室温で２時間維持する。白色沈殿物が形成される。
この期間の終了後、反応器を−２０℃まで冷却し、この温度で１時間維持してろ過を行う。
ろ液と固体をＮＭＲで分析する。固体はＭＣＰＢＡの誘導体を含有するが、ろ液は酸化生成物並びに微量の芳香残留物及び残留スルフォラファンを含有する。
この生成物をＮａＨＣＯ３で飽和させた最小限の溶液で洗浄することによって安息香酸を除去し、次いで、シリカゲルクロマトグラフィーに供する。溶離剤ＣＨ２Ｃｌ２１００％次いでＡｃＯＥｔＴ１００％。
溶媒の蒸発後、凝固する黄色みがかった液体１．２７ｇが収率６６％で得られる。
【０１２５】
ＴＬＣ：溶離剤：ＡｃＯＥｔ  １００％；
顕色剤：リンモリブデン酸；
Ｒｆ＝０．５
１Ｈ  ＮＭＲ（３００ＭＨｚ；ＣＤＣｌ３）：
δ（ｐｐｍ）：３．６１（ｔ，２Ｈ，−ＣＨ２−ＮＣＳ）；３．０７（ｔ，２Ｈ，−Ｓ（Ｏ）２−ＣＨ２）；２．９４（ｓ，３Ｈ，ＣＨ３−Ｓ（Ｏ）２−）；２．０７−１．８５（ｍ，４Ｈ，−ＣＨ２−ＣＨ２−）
１３Ｃ  ＮＭＲ（７５ＭＨｚ；ＣＤＣｌ３）：
δ（ｐｐｍ）：５３．６３；４４．４４；４０．７４；２８．５５；１９．７９
ＵＶスペクトル：
λｍａｘ＝２４５ｎｍ
融点：５８℃
【０１２６】
実施例１６；実施例１５で得られた酸化スルフォラファンからのチオ尿素Ｎ−（４−（メチルスルホニル）ブチル）モルホリン−４−カルボチオアミドの合成
１−イソチオシアナト−４−（メチルスルホニル）ブタンを、ジクロロメタン及び１．２当量のモルホリンの存在下で反応器に入れ、次いで、混合物を還流させ、この温度で１時間維持する。溶媒を除去した後、酢酸エチルから結晶化することにより粗反応混合物を精製する。これにより、チオ尿素が純粋な白色固体として収率９２％で得られ、これは下記式を有する。
【０１２７】
【化２０】
2013533266.tif 000022
【０１２８】
ＴＬＣ：溶離剤：ＥｔＯＡｃ；
顕色剤：リンモリブデン酸；
Ｒｆ＝０．３
１Ｈ  ＮＭＲ（３００ＭＨｚ；ＤＭＳＯ）：
δ（ｐｐｍ）：７．７３（ｂｒｏａｄピーク，１Ｈ，−ＮＨ−）；３．７３（ｍ，４Ｈ，−ＣＨ２−Ｏ−ＣＨ２−）；３．５７（ｍ，４Ｈ，ＣＨ２−Ｎ−ＣＨ２−）；３．５３（ｍ，２Ｈ，−ＣＨ２−ＮＨ−Ｃ（＝Ｓ）−）；３．１２（ｍ，２Ｈ，−ＣＨ２−（ＳＯ２）−）；２．９４（ｓ，３Ｈ，ＣＨ３−（ＳＯ２）；１．６６（ｍ，４Ｈ，−ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２−）
１３Ｃ  ＮＭＲ（７５ＭＨｚ；ＤＭＳＯ）：
δ（ｐｐｍ）：１８１．７０；６５．５８；５３．１４；４７．４５；４４．  ４５；２７．２４；１９．２８
融点：１２６℃  
ＵＶスペクトル
λｍａｘ＝２２１ｎｍ及び２４２ｎｍ
【０１２９】
実施例１７；合成チオ尿素、１，３−ビス（５−オキソヘキシル）チオ尿素の合成
６−イソチオシアナトヘキサン−２−オンを水の存在下で反応器内に入れ、混合物を還流させ、この温度で２４時間維持する。溶媒を除去した後、粗反応混合物をシリカゲルクロマトグラフィーカラム（ＣＨ２Ｃｌ２／ＭｅＯＨ）で精製する。これにより、チオ尿素が純粋な白色固体として収率７２％で得られ、これは下記式を有する。
【０１３０】
【化２１】
2013533266.tif 000023
【０１３１】
ＴＬＣ：溶離剤：ＣＨ２Ｃｌ２−ＭｅＯＨ  ４０／１；
顕色剤：リンモリブデン酸；
Ｒｆ＝０．３
１Ｈ  ＮＭＲ（３００ＭＨｚ；ＣＤＣｌ３）：
δ（ｐｐｍ）：６．１０（広幅ピーク，２Ｈ，−ＮＨ−）；３．４４（広幅ピーク，４Ｈ，−ＣＨ２ＮＨ−）；２．５０（ｍ，４Ｈ，ＣＨ２−（Ｃ＝Ｏ）−）；２．１５（ｓ，６Ｈ，ＣＨ３−（Ｃ＝Ｏ）−）；１．６１（ｍ，８Ｈ，−ＣＨ２−ＣＨ２−）
１３Ｃ  ＮＭＲ（７５ＭＨｚ；ＣＤＣｌ３）：
δ（ｐｐｍ）：２０９．００；１８１．５５；４３．８６；４２．８０．３０．００；２８．２１；２０．３４
融点：５３℃  
ＵＶスペクトル
λｍａｘ＝２４２ｎｍ
【０１３２】
実施例１８；合成チオ尿素である１−（４−（メチルスルフィニル）ブチル−３−（５−オキソヘキシル）チオ尿素の合成
６−イソチオシアナトヘキサン−２−オンを、ジクロロメタン及び２当量の４−メチルスルフィニルブタンアミン（実施例３で得られたスルフォラファンのアミン前駆体）の存在下で反応器内に入れ、次いで、混合物を還流させ、この温度で３時間維持する。溶媒を除去した後、粗反応混合物をシリカゲルクロマトグラフィーカラム（ＣＨ２Ｃｌ２／ＭｅＯＨ）で精製する。これにより、チオ尿素が純粋な薄黄色の粘性のある油として収率７４％で得られる。
【０１３３】
【化２２】
2013533266.tif 000024
【０１３４】
ＴＬＣ：溶離剤：ＣＨ２Ｃｌ２−ＭｅＯＨ  ９／１；
顕色剤：リンモリブデン酸；
Ｒｆ＝０．５
１Ｈ  ＮＭＲ（３００ＭＨｚ；ＣＤＣｌ３）：
δ（ｐｐｍ）：６．６７（広幅ピーク，２Ｈ，−ＮＨ−）；３．５５（２Ｈ，−ＣＨ２−ＮＨ−）；３．４４（２Ｈ，−ＣＨ２−ＮＨ−）；２．７５（ｔ，２Ｈ，Ｊ＝７．２Ｈｚ，−ＣＨ２（Ｓ＝Ｏ）−）；２．５９（ｓ，３Ｈ，−ＣＨ３（Ｓ＝Ｏ）−）；２．４８（ｔ，２Ｈ，Ｊ＝６．６Ｈｚ，−ＣＨ２（Ｃ＝Ｏ）−）；２．４８（ｓ，３Ｈ，−ＣＨ３（Ｃ＝Ｏ）−）；１．７５及び１．５７（ｍ，８Ｈ，−ＣＨ２−ＣＨ２−）
１３Ｃ  ＮＭＲ（７５ＭＨｚ；ＣＤＣｌ３）：
δ（ｐｐｍ）：２０９．０２；１８２．１２；５３．５１；４３．８７；４３．４４；４２．８７；３８．５５；３０．０１；２８．３４；２８．００；２０．５５；２０．０７
ＵＶスペクトル
λｍａｘ＝２４２ｎｍ
【０１３５】
実施例１９；６−イソチオシアナトヘキサン−２−オンとピペリジンとのカップリングによる合成チオ尿素の合成
６−イソチオシアナトヘキサン−２−オンを、ジクロロメタン及び１．２当量のピペリジンの存在下で反応器内に入れ、次いで、混合物を還流させ、この温度で１時間維持する。溶媒を除去した後、粗反応混合物をシリカゲルクロマトグラフィーカラム（ＣＨ２Ｃｌ２／ＭｅＯＨ）で精製する。これにより、チオ尿素が純粋な粘性のある油として収率９３％で得られ、これは下記式を有する。
【０１３６】
【化２３】
2013533266.tif 000025
【０１３７】
ＴＬＣ：溶離剤：ＣＨ２Ｃｌ２−ＭｅＯＨ  ４０／１；
顕色剤：リンモリブデン酸；
Ｒｆ＝０．５
１Ｈ  ＮＭＲ（３００ＭＨｚ；ＣＤＣｌ３）：
δ（ｐｐｍ）：５．８８（ｂｒｏａｄピーク，１Ｈ，−ＮＨ−）；３．８０（ｍ，４Ｈ，Ｎ−ＣＨ２）；３．６３（ｍ，２Ｈ，ＣＨ２ＮＨ−）；２．５１（ｍ，２Ｈ，−ＣＨ２（Ｃ＝Ｏ）−）；２．１５（ｓ，３Ｈ，ＣＨ３−（Ｃ＝Ｏ）−）；１．６２（ｍ，１０Ｈ，−ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２−及び３  ＣＨ２環）  
１３Ｃ  ＮＭＲ（７５ＭＨｚ；ＣＤＣｌ３）：
δ（ｐｐｍ）：２０９．４３；１８１．０９；４８．６８；４５．３９；４２．８４；３０．０４；２８．４０；２５．３９；２４．２９；２０．０５  
ＵＶスペクトル
λｍａｘ＝２１６ｎｍ，２４８ｎｍ
【０１３８】
実施例２０；メチル−Ｎ−（５−オキソヘキシル）−カルバモジチオエートの合成
２当量のナトリウムメタンチオラートをＤＭＦに溶解する。混合物を０℃まで冷却し、２当量の３７％ＨＣｌを添加する。混合物をこの温度で１時間維持し、次いで、１当量の６−イソチオシアナトヘキサン−２−オンを添加する。媒体をこの温度で３時間維持し、次いで、室温で数時間維持する。ジクロロメタンで抽出し、酸で洗浄した後、有機相を収集し、乾燥させて、溶媒を蒸発させる。次いで、得られた生成物をシリカゲルクロマトグラフィーカラム（ＣＨ２Ｃｌ２）で精製する。純粋な生成物が白色固体として収率４５％で得られ、これは下記式を有する。
【０１３９】
【化２４】
2013533266.tif 000026
【０１４０】
ＴＬＣ：溶離剤：ＣＨ２Ｃｌ２−ＭｅＯＨ  ９９／１；
顕色剤：リンモリブデン酸；
Ｒｆ＝０．４
１Ｈ  ＮＭＲ（３００ＭＨｚ；ＣＤＣｌ３）：
δ（ｐｐｍ）：７．３２（ｂｒｏａｄピーク，１Ｈ，−ＮＨ−）；３．７１（ｍ，２Ｈ，−ＣＨ２ＮＨ−）；２．６３（ｓ，３Ｈ，−Ｓ−ＣＨ３）；２．５１（ｍ，２Ｈ，−ＣＨ２−（Ｃ＝Ｏ））；２．１５（ｓ，３Ｈ，ＣＨ３−（Ｃ＝Ｏ）−）；１．６５（ｍ，４Ｈ−ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２−）
互変異性体（少量）：
δ（ｐｐｍ）：７．７５（ｂｒｏａｄピーク，１Ｈ，−ＮＨ−）；３．４３（ｍ，２Ｈ，−ＣＨ２ＮＨ−）；２．６７（ｓ，３Ｈ，−Ｓ−ＣＨ３）；２．５１（ｍ，２Ｈ；−ＣＨ２−（Ｃ＝Ｏ））；２．１５（ｓ，３Ｈ，ＣＨ３−（Ｃ＝Ｏ）−）；１．６５（ｍ，４Ｈ，−ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２−）
１３Ｃ  ＮＭＲ（７５ＭＨｚ；ＣＤＣｌ３）：
δ（ｐｐｍ）：２０８．９４；１９８．９６；４６．７０；４２．７８；３０．０１；２７．５１；２０．３７；１８．０６
融点：５２℃
ＵＶスペクトル：
λｍａｘ＝２２２ｎｍ；２５３ｎｍ；２７０ｎｍ
【０１４１】
実施例２１；４−メチルチオブチルイソチオシアネートの合成
実施例１及び２を再現し、実施例４を直接作成した。これは、二硫化炭素及び二炭酸ジ−ｔｅｒｔ−ブチルの存在下、対応するアミン（４−メチルチオブタンアミン）の反応により、スルフォラファンと同じ方法に従ってこのイソチオシアネートが合成されることを意味する。
当該アミンは、酸化工程を除き、この特許に記載されるスルフォラファン合成の第一工程に従うことによって得られる。
４−メチルチオブタンアミンは、１当量のトリエチルアミン及び１０当量の二硫化炭素の存在下、エタノール中で反応する。反応後、混合物を０℃まで冷却し、０．９９当量の二炭酸ジ−ｔｅｒｔ−ブチル及びエタノールに溶解した３モル％のＤＭＡＰをこれに添加する。室温に戻し、更に２時間反応させた後、反応媒体に対して以下の処理を行ってもよい：溶媒の除去、塩酸溶液での洗浄、デカント及び溶媒の除去。任意に、シリカゲルクロマトグラフィーカラムでの更なる精製を行ってもよい。イソチオシアネートが黄色い液体として得られ、この工程での収率は９２％であり、得られたイソチオシアネートは下記式を有する。
【０１４２】
【化２５】
2013533266.tif 000027
【０１４３】
アミン合成を含むこの反応の全収率は９２％である。
【０１４４】
ＴＬＣ：溶離剤：ヘキサン−ＣＨ２Ｃｌ２  ２／１；
顕色剤：リンモリブデン酸；
Ｒｆ＝０．３
１Ｈ  ＮＭＲ（３００ＭＨｚ；ＣＤＣｌ３）：
δ（ｐｐｍ）：３．５５（ｔ，２Ｈ，Ｊ＝６．４Ｈｚ，−ＣＨ２ＮＣＳ）；２．５３（ｔ，２Ｈ，Ｊ＝６．８Ｈｚ，−ＣＨ２ＳＣＨ３）；２．１０（ｓ，３Ｈ，−ＣＨ２ＳＣＨ３）；１．６７−１．８７（ｍ，４Ｈ，−ＣＨ２ＣＨ２）
１３Ｃ  ＮＭＲ（７５ＭＨｚ；ＣＤＣｌ３）：
δ（ｐｐｍ）：４４．８９；３３．２６；２８．１０；２８．８；１５．４
屈折率：ｎＤ２０＝１．５２７８
ＵＶスペクトル
λｍａｘ＝２４３ｎｍ
【０１４５】
実施例２２；実施例２１によるイソチオシアネート由来のチオ尿素１，３−ビス−（４−メチルチオ）−ブチル）チオ尿素の合成
実施例２２で得られた４−メチルチオブチルイソチオシアネートを、ジクロロメタン及び１．２当量の４−メチルチオブタンアミンの存在下で反応器に入れ、次いで、混合物を還流させ、この温度で２時間維持する。溶媒を除去した後、粗反応生成物をシリカゲルクロマトグラフィーカラム（ＣＨ２Ｃｌ２／ＭｅＯＨ）で精製する。これにより、チオ尿素が純粋な固体として収率８９％で得られ、これは下記式を有する。
【０１４６】
【化２６】
2013533266.tif 000028
【０１４７】
ＴＬＣ：溶離剤：ＣＨ２Ｃｌ２−ＭｅＯＨ  ９９／１；
顕色剤：リンモリブデン酸；
Ｒｆ＝０．２
１Ｈ  ＮＭＲ（３００ＭＨｚ；ＣＤＣｌ３）：
δ（ｐｐｍ）：５．８６（ｂｒｏａｄピーク，２Ｈ，−ＮＨ−）；３．４４（ｍ，４Ｈ，ＣＨ２−ＮＨ−）；２．５４（ｔ，４Ｈ，Ｊ＝６．８Ｈｚ；−ＣＨ２−Ｓ−）；２．０９（ｓ，６Ｈ，ＣＨ３−Ｓ−）；１．７０（ｍ，８Ｈ，−ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２−）
１３Ｃ  ＮＭＲ（７５ＭＨｚ；ＣＤＣｌ３）：
δ（ｐｐｍ）：１８１．１５；４３．４８；３３．２３；２７．３６；２５．５７；１５．０４
融点：４６℃
ＵＶスペクトル
λｍａｘ＝２４３ｎｍ
【０１４８】
実施例２３；（４−メチルスルフィニル−１−（Ｓ−メチル−ジチオカルバミル）−ブタンスルフォラメートの合成
５当量のナトリウムメタンチオラートをＤＭＦに溶解する。混合物を０℃まで冷却し、５当量の３７％ＨＣｌを添加する。混合物をこの温度で１時間維持し、次いで、実施例４に従って得られたスルフォラファン１当量を添加する。媒体を撹拌しながら維持し、次いで、温度をそのまま室温まで上昇させる。反応終了時、ジクロロメタンで抽出し、酸で洗浄した後、有機相を収集し、乾燥させて、溶媒を蒸発させる。次いで、得られた生成物を酢酸エチルから結晶化させる。純粋な生成物が白みがかった固体として得られ、これは下記式を有する。
【０１４９】
【化２７】
2013533266.tif 000029
【０１５０】
ＴＬＣ：溶離剤：ＥｔＯＡｃ／ＭｅＯＨ  ４０／２；
顕色剤：リンモリブデン酸；
Ｒｆ＝０．３
１Ｈ  ＮＭＲ（３００ＭＨｚ；ＣＤＣｌ３）：
スルフォラメート：
δ（ｐｐｍ）：８．２６（ｓ  ｌａｒｇｅ，１Ｈ，−ＣＨ２−ＮＨ−Ｃ（Ｓ）−）；３．７７（ｍ，２Ｈ，−ＣＨ２−ＮＨ−）；２．７５（ｍ，２Ｈ，−Ｓ（Ｏ）−ＣＨ２−）；２．５９（ｓ，６Ｈ，ＣＨ３−Ｓ（Ｏ）−及び−Ｓ−ＣＨ３）；１．８５（ｍ，４Ｈ，−ＣＨ２ＣＨ２−）
互変異性体（少量）：
８．４０（ｂｒｏａｄ  ｓ，１Ｈ，−ＳＨ）；３．４８（ｍ，２Ｈ，−ＣＨ２−ＮＨ−）；２．７６（ｍ，２Ｈ，−Ｓ（Ｏ）−ＣＨ２−）；２．６４（ｓ，６Ｈ，ＣＨ３−Ｓ（Ｏ）−及び−Ｓ−ＣＨ３）；２．５９  １．８５（ｍ，４Ｈ，−ＣＨ２ＣＨ２−）
１３Ｃ  ＮＭＲ（７５ＭＨｚ；ＣＤＣｌ３）：
スルフォラメート：
δ（ｐｐｍ）：１９９．０３；５３．３６；４６．２６；３８．４９；２７．１３；２０．１６；１８．００
融点：９６℃  
ＵＶスペクトル：
λｍａｘ＝２５０及び２７２ｎｍ
【０１５１】
実施例２４−合成化合物の脱色素効果
合成した様々な分子を試験して、それらの脱色素力を測定した。着想は、培養媒体中に維持されたメラノサイトによりメラニン産生に対するそれら各々の影響を評価することであった。
【０１５２】
これらの試験に関し、２系統のメラノサイト（一方はＳＫＭｅｌ型のヒトメラノサイト、他方はＢ１６Ｆ１０型のネズミ系統）を培養した。ここでは、ヒト系統に関して得られた結果のみを示す。
【０１５３】
試験すべき分子の存在下で３日間インキュベーションを行い、細胞溶解した後、吸光分光分析によってメラニン含有量を測定した。
【０１５４】
結果のヒエラルキーを作製するための基準として、周知の脱色素剤であるコウジ酸を使用する。結果を表２に示す。表２には、一方では対照培養物（細胞のみ）において産生されたメラニンの量に対する、有効成分の存在下で産生されたメラニンの量の比として算出される残留色素のパーセンテージが示され、他方では同濃度でのコウジ酸の活性に対する関連活性物質の相対活性が示されている。
【０１５５】
各々の測定に関し、分析を繰り返した。示した値は、算出した平均である。実験を繰り返すと、残留色素パーセンテージの平均変動係数は、約３％である（３つの試験で１．５％〜６％）。
【０１５６】
表２は、１組の典型的な分子に関するヒト系統ＳＫＭｅｌについて得られた結果を示しており、これで、塩基性分子由来の本特許において提案されるファミリー及び化学修飾物（スルフォラファン、他の誘導イソチオシアネート、酸化型、対称チオ尿素、他のチオ尿素、スルフォラファンのイソチオシアネート官能基に対する求核剤の添加から得られる誘導体など）全体をカバーすることができる。このリストは包括的でも制限的でもなく、他の分子に関しても同種の結果が得られた。
【０１５７】
更に、チオ尿素の構成成分である塩基性アミンも評価した。これにより、我々の構造が実際に、それらを構成する単純アミンに対し、脱色素力に関して付加価値を付与することが実証される。
【０１５８】
全分子について、ＭＴＴ試験によってそれらの細胞毒性も評価した。ここで示されるチオ尿素が無毒性である（ＩＣ５０＞１００μＭ）ことが、この試験から顕著に明らかである。故に、細胞生存に関するリスクを伴うことなく、ここで基準として取り上げた５μＭよりもはるかに高い濃度でそれらを使用してもよい。例として、コウジ酸濃度を５μＭから１００μＭまで挙げると、残留色素パーセンテージは９７％から７３％となった。１，３−ビス−（４−（メタンスルフィニル）ブチル）−チオ尿素に対して同実験を行うと、残留色素は２０％から１４％へと変動する。しかしながら、当該分子は、ここで既に最低濃度から上がっても非常に有効である。
【０１５９】
【表２】
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【０１６０】
本発明は上述の実施形態に全く限定されず、添付された請求の範囲を逸脱することなく多くの変形が可能であることがよく理解される。
【国際調査報告】
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