(57)【要約】  本発明は、(５Ｒ,８Ｓ)−７−[(２Ｓ)−２−{[(２Ｓ)−２−シクロヘキシル−２−({[(２Ｓ)−１−イソプロピルピペリジン−２−イル]カルボニル}アミノ)アセチル]アミノ}−３,３−ジメチルブタノイル]−Ｎ−{(１Ｒ,２Ｒ)−２−エチル−１−[(ピロリジン−１−イルスルホニル)カルバモイル]シクロプロピル}−１０,１０−ジメチル−７−アザジスピロ[３.０.４.１]デカン−８−カルボキサミド(ここでは化合物Ｘと呼ぶ)の新規塩類および多形、それらを含む医薬組成物ならびにそれらの製造および治療における使用のための方法を提供する。【特許請求の範囲】
【請求項１】
(５Ｒ,８Ｓ)−７−[(２Ｓ)−２−{[(２Ｓ)−２−シクロヘキシル−２−({[(２Ｓ)−１−イソプロピルピペリジン−２−イル]カルボニル}アミノ)アセチル]アミノ}−３,３−ジメチルブタノイル]−Ｎ−{(１Ｒ,２Ｒ)−２−エチル−１−[(ピロリジン−１−イルスルホニル)カルバモイル]シクロプロピル}−１０,１０−ジメチル−７−アザジスピロ[３.０.４.１]デカン−８−カルボキサミド塩酸塩またはその薬学的に許容される誘導体。
【請求項２】
(５Ｒ,８Ｓ)−７−[(２Ｓ)−２−{[(２Ｓ)−２−シクロヘキシル−２−({[(２Ｓ)−１−イソプロピルピペリジン−２−イル]カルボニル}アミノ)アセチル]アミノ}−３,３−ジメチルブタノイル]−Ｎ−{(１Ｒ,２Ｒ)−２−エチル−１−[(ピロリジン−１−イルスルホニル)カルバモイル]シクロプロピル}−１０,１０−ジメチル−７−アザジスピロ[３.０.４.１]デカン−８−カルボキサミドヘミ塩酸塩またはその薬学的に許容される誘導体。
【請求項３】
(５Ｒ,８Ｓ)−７−[(２Ｓ)−２−{[(２Ｓ)−２−シクロヘキシル−２−({[(２Ｓ)−１−イソプロピルピペリジン−２−イル]カルボニル}アミノ)アセチル]アミノ}−３,３−ジメチルブタノイル]−Ｎ−{(１Ｒ,２Ｒ)−２−エチル−１−[(ピロリジン−１−イルスルホニル)カルバモイル]シクロプロピル}−１０,１０−ジメチル−７−アザジスピロ[３.０.４.１]デカン−８−カルボキサミドメタンスルホン酸塩またはその薬学的に許容される誘導体。
【請求項４】
少なくとも次の特徴的Ｘ線粉末回折ピーク(２θ度で示す)：７.７、８.９、１１.８、１５.５および１８.０を示す、(５Ｒ,８Ｓ)−７−[(２Ｓ)−２−{[(２Ｓ)−２−シクロヘキシル−２−({[(２Ｓ)−１−イソプロピルピペリジン−２−イル]カルボニル}アミノ)アセチル]アミノ}−３,３−ジメチルブタノイル]−Ｎ−{(１Ｒ,２Ｒ)−２−エチル−１−[(ピロリジン−１−イルスルホニル)カルバモイル]シクロプロピル}−１０,１０−ジメチル−７−アザジスピロ[３.０.４.１]デカン−８−カルボキサミド塩酸塩の結晶形態(形態Ａ)。
【請求項５】
少なくとも次の特徴的Ｘ線粉末回折ピーク(２θ度で示す)：７.８、８.６、１１.３、１５.８および１８.２を示す、(５Ｒ,８Ｓ)−７−[(２Ｓ)−２−{[(２Ｓ)−２−シクロヘキシル−２−({[(２Ｓ)−１−イソプロピルピペリジン−２−イル]カルボニル}アミノ)アセチル]アミノ}−３,３−ジメチルブタノイル]−Ｎ−{(１Ｒ,２Ｒ)−２−エチル−１−[(ピロリジン−１−イルスルホニル)カルバモイル]シクロプロピル}−１０,１０−ジメチル−７−アザジスピロ[３.０.４.１]デカン−８−カルボキサミド塩酸塩の結晶形態(形態Ｂ)。
【請求項６】
少なくとも次の特徴的Ｘ線粉末回折ピーク(２θ度で示す)：９.２、１４.４、１５.３、１７.７および２０.０を示す、(５Ｒ,８Ｓ)−７−[(２Ｓ)−２−{[(２Ｓ)−２−シクロヘキシル−２−({[(２Ｓ)−１−イソプロピルピペリジン−２−イル]カルボニル}アミノ)アセチル]アミノ}−３,３−ジメチルブタノイル]−Ｎ−{(１Ｒ,２Ｒ)−２−エチル−１−[(ピロリジン−１−イルスルホニル)カルバモイル]シクロプロピル}−１０,１０−ジメチル−７−アザジスピロ[３.０.４.１]デカン−８−カルボキサミド塩酸塩の結晶形態(形態Ｃ)。
【請求項７】
少なくとも次の特徴的Ｘ線粉末回折ピーク(２θ度で示す)：８.０、８.３、１４.３、１５.９および１８.２を示す、(５Ｒ,８Ｓ)−７−[(２Ｓ)−２−{[(２Ｓ)−２−シクロヘキシル−２−({[(２Ｓ)−１−イソプロピルピペリジン−２−イル]カルボニル}アミノ)アセチル]アミノ}−３,３−ジメチルブタノイル]−Ｎ−{(１Ｒ,２Ｒ)−２−エチル−１−[(ピロリジン−１−イルスルホニル)カルバモイル]シクロプロピル}−１０,１０−ジメチル−７−アザジスピロ[３.０.４.１]デカン−８−カルボキサミド塩酸塩の結晶形態(形態Ｄ)。
【請求項８】
少なくとも次の特徴的Ｘ線粉末回折ピーク(２θ度で示す)：７.５、８.８、９.２、１５.６および１７.８を示す、(５Ｒ,８Ｓ)−７−[(２Ｓ)−２−{[(２Ｓ)−２−シクロヘキシル−２−({[(２Ｓ)−１−イソプロピルピペリジン−２−イル]カルボニル}アミノ)アセチル]アミノ}−３,３−ジメチルブタノイル]−Ｎ−{(１Ｒ,２Ｒ)−２−エチル−１−[(ピロリジン−１−イルスルホニル)カルバモイル]シクロプロピル}−１０,１０−ジメチル−７−アザジスピロ[３.０.４.１]デカン−８−カルボキサミド塩酸塩の結晶形態(形態Ｅ)。
【請求項９】
少なくとも次の特徴的Ｘ線粉末回折ピーク(２θ度で示す)：６.９、１１.３、１４.８、１６.０および１８.２を示す、(５Ｒ,８Ｓ)−７−[(２Ｓ)−２−{[(２Ｓ)−２−シクロヘキシル−２−({[(２Ｓ)−１−イソプロピルピペリジン−２−イル]カルボニル}アミノ)アセチル]アミノ}−３,３−ジメチルブタノイル]−Ｎ−{(１Ｒ,２Ｒ)−２−エチル−１−[(ピロリジン−１−イルスルホニル)カルバモイル]シクロプロピル}−１０,１０−ジメチル−７−アザジスピロ[３.０.４.１]デカン−８−カルボキサミドヘミ塩酸塩の結晶形態(形態Ｆ)。
【請求項１０】
少なくとも次の特徴的Ｘ線粉末回折ピーク(２θ度で示す)：５.８、６.５、７.８、１０.４および１５.７を示す、(５Ｒ,８Ｓ)−７−[(２Ｓ)−２−{[(２Ｓ)−２−シクロヘキシル−２−({[(２Ｓ)−１−イソプロピルピペリジン−２−イル]カルボニル}アミノ)アセチル]アミノ}−３,３−ジメチルブタノイル]−Ｎ−{(１Ｒ,２Ｒ)−２−エチル−１−[(ピロリジン−１−イルスルホニル)カルバモイル]シクロプロピル}−１０,１０−ジメチル−７−アザジスピロ[３.０.４.１]デカン−８−カルボキサミドメタンスルホン酸塩の結晶形態(形態Ｇ)。
【請求項１１】
少なくとも次の特徴的Ｘ線粉末回折ピーク(２θ度で示す)：５.７、６.９、７.８、１４.４および１８.５を示す、(５Ｒ,８Ｓ)−７−[(２Ｓ)−２−{[(２Ｓ)−２−シクロヘキシル−２−({[(２Ｓ)−１−イソプロピルピペリジン−２−イル]カルボニル}アミノ)アセチル]アミノ}−３,３−ジメチルブタノイル]−Ｎ−{(１Ｒ,２Ｒ)−２−エチル−１−[(ピロリジン−１−イルスルホニル)カルバモイル]シクロプロピル}−１０,１０−ジメチル−７−アザジスピロ[３.０.４.１]デカン−８−カルボキサミドの結晶形態(形態Ｈ)。
【請求項１２】
少なくとも次の特徴的Ｘ線粉末回折ピーク(２θ度で示す)：９.５、１３.３、１４.５、１９.０および１９.７を示す、(５Ｒ,８Ｓ)−７−[(２Ｓ)−２−{[(２Ｓ)−２−シクロヘキシル−２−({[(２Ｓ)−１−イソプロピルピペリジン−２−イル]カルボニル}アミノ)アセチル]アミノ}−３,３−ジメチルブタノイル]−Ｎ−{(１Ｒ,２Ｒ)−２−エチル−１−[(ピロリジン−１−イルスルホニル)カルバモイル]シクロプロピル}−１０,１０−ジメチル−７−アザジスピロ[３.０.４.１]デカン−８−カルボキサミドの結晶形態(形態Ｉ)。
【請求項１３】
少なくとも次の特徴的Ｘ線粉末回折ピーク(２θ度で示す)：６.９、８.３、１２.５、１３.６、１６.０、１６.８および１７.１を示す、(５Ｒ,８Ｓ)−７−[(２Ｓ)−２−{[(２Ｓ)−２−シクロヘキシル−２−({[(２Ｓ)−１−イソプロピルピペリジン−２−イル]カルボニル}アミノ)アセチル]アミノ}−３,３−ジメチルブタノイル]−Ｎ−{(１Ｒ,２Ｒ)−２−エチル−１−[(ピロリジン−１−イルスルホニル)カルバモイル]シクロプロピル}−１０,１０−ジメチル−７−アザジスピロ[３.０.４.１]デカン−８−カルボキサミドの結晶形態(形態Ｊ)。
【請求項１４】
少なくとも次の特徴的Ｘ線粉末回折ピーク(２θ度で示す)：６.１、７.４、８.３、２２.１、２３.７、２４.１および２４.６を示す、(５Ｒ,８Ｓ)−７−[(２Ｓ)−２−{[(２Ｓ)−２−シクロヘキシル−２−({[(２Ｓ)−１−イソプロピルピペリジン−２−イル]カルボニル}アミノ)アセチル]アミノ}−３,３−ジメチルブタノイル]−Ｎ−{(１Ｒ,２Ｒ)−２−エチル−１−[(ピロリジン−１−イルスルホニル)カルバモイル]シクロプロピル}−１０,１０−ジメチル−７−アザジスピロ[３.０.４.１]デカン−８−カルボキサミドの結晶形態(形態Ｋ)。
【請求項１５】
少なくとも次の特徴的Ｘ線粉末回折ピーク(２θ度で示す)：５.７、８.２、１６.９、１８.４および１８.５を示す、(５Ｒ,８Ｓ)−７−[(２Ｓ)−２−{[(２Ｓ)−２−シクロヘキシル−２−({[(２Ｓ)−１−イソプロピルピペリジン−２−イル]カルボニル}アミノ)アセチル]アミノ}−３,３−ジメチルブタノイル]−Ｎ−{(１Ｒ,２Ｒ)−２−エチル−１−[(ピロリジン−１−イルスルホニル)カルバモイル]シクロプロピル}−１０,１０−ジメチル−７−アザジスピロ[３.０.４.１]デカン−８−カルボキサミドの結晶形態(形態Ｌ)。
【請求項１６】
少なくとも次の特徴的Ｘ線粉末回折ピーク(２θ度で示す)：６.７、７.６、７.７、９.５および１９.０を示す、(５Ｒ,８Ｓ)−７−[(２Ｓ)−２−{[(２Ｓ)−２−シクロヘキシル−２−({[(２Ｓ)−１−イソプロピルピペリジン−２−イル]カルボニル}アミノ)アセチル]アミノ}−３,３−ジメチルブタノイル]−Ｎ−{(１Ｒ,２Ｒ)−２−エチル−１−[(ピロリジン−１−イルスルホニル)カルバモイル]シクロプロピル}−１０,１０−ジメチル−７−アザジスピロ[３.０.４.１]デカン−８−カルボキサミドの結晶形態(形態Ｍ)。
【請求項１７】
少なくとも次の特徴的Ｘ線粉末回折ピーク(２θ度で示す)：６.３、７.７、８.７、１６.０、１８.１および２０.５を示す、(５Ｒ,８Ｓ)−７−[(２Ｓ)−２−{[(２Ｓ)−２−シクロヘキシル−２−({[(２Ｓ)−１−イソプロピルピペリジン−２−イル]カルボニル}アミノ)アセチル]アミノ}−３,３−ジメチルブタノイル]−Ｎ−{(１Ｒ,２Ｒ)−２−エチル−１−[(ピロリジン−１−イルスルホニル)カルバモイル]シクロプロピル}−１０,１０−ジメチル−７−アザジスピロ[３.０.４.１]デカン−８−カルボキサミドの結晶形態(形態Ｎ)。
【請求項１８】
請求項１〜３のいずれかに記載の(５Ｒ,８Ｓ)−７−[(２Ｓ)−２−{[(２Ｓ)−２−シクロヘキシル−２−({[(２Ｓ)−１−イソプロピルピペリジン−２−イル]カルボニル}アミノ)アセチル]アミノ}−３,３−ジメチルブタノイル]−Ｎ−{(１Ｒ,２Ｒ)−２−エチル−１−[(ピロリジン−１−イルスルホニル)カルバモイル]シクロプロピル}−１０,１０−ジメチル−７−アザジスピロ[３.０.４.１]デカン−８−カルボキサミド塩または請求項４〜１７のいずれかに記載のその結晶形態を、薬学的に許容されるアジュバント、希釈剤または担体と共に含む、医薬組成物。
【請求項１９】
治療に使用するための、請求項１〜３のいずれかに記載の(５Ｒ,８Ｓ)−７−[(２Ｓ)−２−{[(２Ｓ)−２−シクロヘキシル−２−({[(２Ｓ)−１−イソプロピルピペリジン−２−イル]カルボニル}アミノ)アセチル]アミノ}−３,３−ジメチルブタノイル]−Ｎ−{(１Ｒ,２Ｒ)−２−エチル−１−[(ピロリジン−１−イルスルホニル)カルバモイル]シクロプロピル}−１０,１０−ジメチル−７−アザジスピロ[３.０.４.１]デカン−８−カルボキサミド塩または請求項４〜１７のいずれかに記載のその結晶形態。
【請求項２０】
治療がＨＣＶ関連障害の処置である、請求項１４に記載の(５Ｒ,８Ｓ)−７−[(２Ｓ)−２−{[(２Ｓ)−２−シクロヘキシル−２−({[(２Ｓ)−１−イソプロピルピペリジン−２−イル]カルボニル}アミノ)アセチル]アミノ}−３,３−ジメチルブタノイル]−Ｎ−{(１Ｒ,２Ｒ)−２−エチル−１−[(ピロリジン−１−イルスルホニル)カルバモイル]シクロプロピル}−１０,１０−ジメチル−７−アザジスピロ[３.０.４.１]デカン−８−カルボキサミド塩またはその結晶形態。
【請求項２１】
ＨＣＶ関連障害がＨＣＶ感染、肝硬変、慢性肝疾患、肝細胞癌、クリオグロブリン血症、非ホジキンリンパ腫、肝線維症および先天性細胞内免疫応答抑制から成る群から選択される、請求項１５に記載の(５Ｒ,８Ｓ)−７−[(２Ｓ)−２−{[(２Ｓ)−２−シクロヘキシル−２−({[(２Ｓ)−１−イソプロピルピペリジン−２−イル]カルボニル}アミノ)アセチル]アミノ}−３,３−ジメチルブタノイル]−Ｎ−{(１Ｒ,２Ｒ)−２−エチル−１−[(ピロリジン−１−イルスルホニル)カルバモイル]シクロプロピル}−１０,１０−ジメチル−７−アザジスピロ[３.０.４.１]デカン−８−カルボキサミド塩またはその結晶形態。
【請求項２２】
ＨＣＶ関連障害処置用医薬の製造における、請求項１〜３のいずれかに記載の(５Ｒ,８Ｓ)−７−[(２Ｓ)−２−{[(２Ｓ)−２−シクロヘキシル−２−({[(２Ｓ)−１−イソプロピルピペリジン−２−イル]カルボニル}アミノ)アセチル]アミノ}−３,３−ジメチルブタノイル]−Ｎ−{(１Ｒ,２Ｒ)−２−エチル−１−[(ピロリジン−１−イルスルホニル)カルバモイル]シクロプロピル}−１０,１０−ジメチル−７−アザジスピロ[３.０.４.１]デカン−８−カルボキサミド塩または請求項４〜１７のいずれかに記載のその結晶形態の使用。
【請求項２３】
ＨＣＶ関連障害がＨＣＶ感染、肝硬変、慢性肝疾患、肝細胞癌、クリオグロブリン血症、非ホジキンリンパ腫、肝線維症および先天性細胞内免疫応答抑制から成る群から選択される、請求項１７に記載の使用。
【請求項２４】
処置を必要とする対象に治療有効量の請求項１〜３のいずれかに記載の(５Ｒ,８Ｓ)−７−[(２Ｓ)−２−{[(２Ｓ)−２−シクロヘキシル−２−({[(２Ｓ)−１−イソプロピルピペリジン−２−イル]カルボニル}アミノ)アセチル]アミノ}−３,３−ジメチルブタノイル]−Ｎ−{(１Ｒ,２Ｒ)−２−エチル−１−[(ピロリジン−１−イルスルホニル)カルバモイル]シクロプロピル}−１０,１０−ジメチル−７−アザジスピロ[３.０.４.１]デカン−８−カルボキサミド塩または請求項４〜１７のいずれかに記載のその結晶形態を投与することを含む、処置方法。
【請求項２５】
ＨＣＶ関連障害の処置のための、請求項１９に記載の方法。
【請求項２６】
ＨＣＶ関連障害がＨＣＶ感染、肝硬変、慢性肝疾患、肝細胞癌、クリオグロブリン血症、非ホジキンリンパ腫、肝線維症および先天性細胞内免疫応答抑制から成る群から選択される、請求項１９に記載の方法。
【請求項２７】
(５Ｒ,８Ｓ)−７−[(２Ｓ)−２−{[(２Ｓ)−２−シクロヘキシル−２−({[(２Ｓ)−１−イソプロピルピペリジン−２−イル]カルボニル}アミノ)アセチル]アミノ}−３,３−ジメチルブタノイル]−Ｎ−{(１Ｒ,２Ｒ)−２−エチル−１−[(ピロリジン−１−イルスルホニル)カルバモイル]シクロプロピル}−１０,１０−ジメチル−７−アザジスピロ[３.０.４.１]デカン−８−カルボキサミドの結晶形態Ａ、Ｂ、Ｃ、Ｄ、Ｅ、Ｆ、Ｇ、Ｈ、Ｉ、Ｊ、Ｋ、Ｌ、ＭまたはＮの製造方法であって、(５Ｒ,８Ｓ)−７−[(２Ｓ)−２−{[(２Ｓ)−２−シクロヘキシル−２−({[(２Ｓ)−１−イソプロピルピペリジン−２−イル]カルボニル}アミノ)アセチル]アミノ}−３,３−ジメチルブタノイル]−Ｎ−{(１Ｒ,２Ｒ)−２−エチル−１−[(ピロリジン−１−イルスルホニル)カルバモイル]シクロプロピル}−１０,１０−ジメチル−７−アザジスピロ[３.０.４.１]デカン−８−カルボキサミドの溶液からの該形態の結晶化を含む、方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、(５Ｒ,８Ｓ)−７−[(２Ｓ)−２−{[(２Ｓ)−２−シクロヘキシル−２−({[(２Ｓ)−１−イソプロピルピペリジン−２−イル]カルボニル}アミノ)アセチル]アミノ}−３,３−ジメチルブタノイル]−Ｎ−{(１Ｒ,２Ｒ)−２−エチル−１−[(ピロリジン−１−イルスルホニル)カルバモイル]シクロプロピル}−１０,１０−ジメチル−７−アザジスピロ[３.０.４.１]デカン−８−カルボキサミドの塩類および多形、それらを含む医薬組成物および治療におけるそれらの使用に関する。
【背景技術】
【０００２】
背景
慢性Ｃ型肝炎ウイルス(ＨＣＶ)感染は世界的に主要な健康上の関心事であり、世界で１億７千万人が感染し、さらに毎年３００〜４００万人の感染者が増えていると推定されている(例えばWorld Health Organization Fact Sheet No.164. October 2000参照)。新規感染の２５％は症候性であるが、患者の６０〜８０％は慢性肝疾患を発症し、そのうち２０％が硬変に進行し、肝細胞癌を発症する年間リスクは１〜４％と推定される(例えばWorld Health Organization Guide on Hepatitis C. 2002; Pawlotsky, J-M. (2006) Therapy of Hepatitis C: From Empiricism to Eradication. Hepatology 43: S207-S220参照)。全体に、先進国で全肝癌症例の５０〜７６％、そして全肝移植の２／３がＨＣＶに起因する(例えばWorld Health Organization Guide on Viral Cancers. 2006参照)。そして最終的に、感染患者の５〜７％はＨＣＶ感染の結果として死亡する(例えばWorld Health Organization Guide on Hepatitis C. 2002参照)。
【０００３】
ＨＣＶ感染の現在の標準的治療はペグ化インターフェロンアルファ(ＩＦＮ−α)とリバビリンの組み合わせである。しかしながら、遺伝子型１ウイルスの患者の５０％までしかこのインターフェロンベースの治療は成功しない。さらに、インターフェロンおよびリバビリンの組合せは、インターフェロンでの処置に由来するインフルエンザ様症状(発熱および疲労)、血液学的合併症(白血球減少症、血小板減少症)、精神神経科学的症状(鬱症状、不眠症、易怒性)、体重減少および自己免疫性機能不全(甲状腺機能低下症、糖尿病)から、リバビリンでの処置に由来する著しい溶血性貧血にわたる重篤な有害効果を発現し得る。それ故に、より有効で、より耐容性のある薬物に対する多大な要求がまだある。
【０００４】
約７０kDaタンパク質であるＮＳ３は２個の特徴的ドメインを有し、それらは１８０アミノ酸(ＡＡ)のＮ末端セリンプロテアーゼドメインおよびＣ末端ヘリカーゼ／ＮＴＰａｓｅドメイン(ＡＡ１８１〜６３１)である。ＮＳ３プロテアーゼはタンパク質配列、全体三次元構造および触媒機構の類似性のために、キモトリプシンファミリーと考えられている。ＨＣＶ  ＮＳ３セリンプロテアーゼはＮＳ３／ＮＳ４Ａ、ＮＳ４Ａ／ＮＳ４Ｂ、ＮＳ４Ｂ／ＮＳ５ＡおよびＮＳ５Ａ／ＮＳ５Ｂ接合部でポリタンパク質のタンパク質切断を担う(例えばBartenschlager, R., L. et al. (1993) J. Virol. 67: 3835-3844; Grakoui, A. et al. (1993) J. Virol. 67: 2832-2843; Tomei, L. et al. (1993) J. Virol. 67: 4017-4026参照)。５４ＡＡの約６kDaタンパク質であるＮＳ４Ａは、ＮＳ３のセリンプロテアーゼ活性についての補助因子である(例えばFailla, C. et al. (1994) J. Virol. 68: 3753-3760; Tanji, Y. et al. (1995) J. Virol. 69: 1575-1581参照)。ＮＳ３／ＮＳ４Ａ接合部のＮＳ３／ＮＳ４Ａセリンプロテアーゼによる自己切断は分子内で起こるが(すなわち、ｃｉｓ)、他の切断部位は分子間で処理される(すなわち、ｔｒａｎｓ)。ＨＣＶ  ＮＳ３プロテアーゼがウイルス複製に必須であり、故に抗ウイルス化学療法の魅力的な標的であることが証明されている。
【０００５】
ＨＣＶ感染、ならびにＨＣＶ関連障害のための新規処置および治療への希求が存続している。ＨＣＶの１種以上の症状の処置または予防または改善に有用な化合物に対する要求、ならびにＨＣＶの１種以上の症状の処置または予防または改善のための方法についての要求もある。さらに、ＨＣＶ−セリンプロテアーゼ類、特にＨＣＶ  ＮＳ３／ＮＳ４ａセリンプロテアーゼの活性を調節できる新規化合物およびＨＣＶ感染の処置、予防または改善のための該化合物の使用についての要求がある。
【０００６】
未公開特許出願ＰＣＴ／ＩＢ２０１０／０００７８４は、ＨＣＶ関連障害処置に有用な新規化合物群を記載する。当該化合物の一つは、下記構造を有する(５Ｒ,８Ｓ)−７−[(２Ｓ)−２−{[(２Ｓ)−２−シクロヘキシル−２−({[(２Ｓ)−１−イソプロピルピペリジン−２−イル]カルボニル}アミノ)アセチル]アミノ}−３,３−ジメチルブタノイル]−Ｎ−{(１Ｒ,２Ｒ)−２−エチル−１−[(ピロリジン−１−イルスルホニル)カルバモイル]シクロプロピル}−１０,１０−ジメチル−７−アザジスピロ[３.０.４.１]デカン−８−カルボキサミドである。この化合物を本明細書では化合物Ｘと呼ぶ。
【化１】
2013543500.tif 000002
【０００７】
医薬製剤の製造において、商業的に有用な製造法を確立するために、活性化合物が好都合に取り扱いおよび加工できる形態であることが重要である。従って、活性化合物の化学的安定性および物理的安定性は重要な因子である。活性化合物およびそれを含む製剤は、活性化合物の物理化学的特性(例えば化学組成、密度、吸湿性および溶解性)に顕著な変化を示すことなく、適当な期間有効に保存できなければならない。
【０００８】
さらに、活性化合物を錠剤のような経口用の投与形態に含有させるとき、製造上の便宜性のために活性化合物が容易に微粉化され、良好な流動特性を有する粉末となることが望ましい。
【０００９】
一般的に医薬成分を特定の固体状態形態に製造することが有利であることが知られており、このことは“Handbook of Pharmaceutical Salts; Properties, Selection and Use”, P. Heinrich Stahl, Camille G. Wermuth (Eds.) (Verlag Helvetica Chimica Acta, Zurich). Methods of manufacturing solid-state forms are also described in “Practical Process Research and Development”, Neal G. Anderson (Academic Press, San Diego)および“Polymorphism: In the Pharmaceutical Industry”, Rolf Hilfiker (Ed) (Wiley VCH)に記載されている。
【発明の概要】
【００１０】
本発明者らは化合物Ｘの多くの塩類および結晶多形を発見した。塩および結晶形態は、得られた新規物理的形態が有機溶媒に低い溶解性を示し得るため、収率が改善する可能性がある。これは製造工程の改善をもたらし得る。さらに、塩類は単離および精製が容易であり得る。それ故に、一つの面において、本発明は化合物Ｘ塩酸塩またはその薬学的に許容される誘導体を提供する。一つの態様において、塩の純度は少なくとも９８％である。他の態様において、塩の純度は少なくとも９９％である。他の面において、本発明は化合物Ｘヘミ塩酸塩またはその薬学的に許容される誘導体を提供する。他の面において、本発明は化合物Ｘメタンスルホン酸塩またはその薬学的に許容される誘導体を提供する。さらに別の面において、本発明は化合物Ｘコハク酸塩またはその薬学的に許容される誘導体を提供する。
【００１１】
さらに、本発明によって、化合物Ｘおよびその塩類の多くの結晶多形が提供される。
【００１２】
それ故に、一つの面において、本発明は、少なくとも次の特徴的Ｘ線粉末回折ピーク(２θ度で示す)：７.７、８.９、１１.８、１５.５および１８.０を示す、化合物Ｘ塩酸塩の結晶形態(形態Ａ)を提供する。一つの態様において、形態Ａは少なくとも次の特徴的Ｘ線粉末回折ピーク：７.７、８.９、１１.８、１５.５、１７.３、１８.０および１９.９を示す。他の態様において、形態Ａは少なくとも表Ａに示す特徴的Ｘ線粉末回折ピークを示す。さらに別の態様において、形態Ａは図１に示すものと実質的に同じＸ線粉末回折パターンを示す。
【００１３】
他の面において、本発明は、少なくとも次の特徴的Ｘ線粉末回折ピーク(２θ度で示す)：７.８、８.６、１１.３、１５.８および１８.２を示す化合物Ｘ塩酸塩の結晶形態(形態Ｂ)を提供する。一つの態様において、形態Ｂは少なくとも次の特徴的Ｘ線粉末回折ピーク：７.８、８.６、９.５、１１.３、１４.８、１５.８および１８.２を示す。他の態様において、形態Ｂは少なくとも表Ｂに示す特徴的Ｘ線粉末回折ピークを示す。さらに別の態様において、形態Ｂは図２に示すものと実質的に同じＸ線粉末回折パターンを示す。
【００１４】
他の面において、本発明は、少なくとも次の特徴的Ｘ線粉末回折ピーク(２θ度で示す)：９.２、１４.４、１５.３、１７.７および２０.０を示す化合物Ｘ塩酸塩の結晶形態(形態Ｃ)を提供する。一つの態様において、形態Ｃは少なくとも次の特徴的Ｘ線粉末回折ピーク：８.０、９.２、１４.４、１５.３、１７.７、１９.３および２０.０を示す。他の態様において、形態Ｃは少なくとも表Ｃに示す特徴的Ｘ線粉末回折ピークを示す。さらに別の態様において、形態Ｃは図３に示すものと実質的に同じＸ線粉末回折パターンを示す。
【００１５】
他の面において、本発明は、少なくとも次の特徴的Ｘ線粉末回折ピーク(２θ度で示す)：８.０、８.３、１４.３、１５.９および１８.２を示す化合物Ｘ塩酸塩の結晶形態(形態Ｄ)を提供する。一つの態様において、形態Ｄは少なくとも次の特徴的Ｘ線粉末回折ピーク：８.０、８.３、９.１、１０.０、１０.７、１４.３、１４.８、１５.９、１７.２および１８.２を示す。他の態様において、形態Ｄは少なくとも表Ｄに示す特徴的Ｘ線粉末回折ピークを示す。さらに別の態様において、形態Ｄは図４に示すものと実質的に同じＸ線粉末回折パターンを示す。
【００１６】
他の面において、本発明は、少なくとも次の特徴的Ｘ線粉末回折ピーク(２θ度で示す)：７.５、８.８、９.２、１５.６および１７.８を示す化合物Ｘ塩酸塩の結晶形態(形態Ｅ)を提供する。一つの態様において、形態Ｅは少なくとも次の特徴的Ｘ線粉末回折ピーク：７.５、８.８、９.２、１５.６、１７.８、１８.２および１９.５を示す。他の態様において、形態Ｅは少なくとも表Ｅに示す特徴的Ｘ線粉末回折ピークを示す。さらに別の態様において、形態Ｅは図５に示すものと実質的に同じＸ線粉末回折パターンを示す。
【００１７】
他の面において、本発明は、少なくとも次の特徴的Ｘ線粉末回折ピーク(２θ度で示す)：６.９、１１.３、１４.８、１６.０および１８.２を示す化合物Ｘヘミ塩酸塩の結晶形態(形態Ｆ)を提供する。一つの態様において、形態Ｆは少なくとも次の特徴的Ｘ線粉末回折ピーク：６.９、７.８、９.１、１１.３、１４.８、１６.０、１７.４および１８.２を示す。他の態様において、形態Ｆは少なくとも表Ｆに示す特徴的Ｘ線粉末回折ピークを示す。さらに別の態様において、形態Ｆは図６に示すものと実質的に同じＸ線粉末回折パターンを示す。
【００１８】
他の面において、本発明は、少なくとも次の特徴的Ｘ線粉末回折ピーク(２θ度で示す)：５.８、６.５、７.８、１０.４および１５.７を示す化合物Ｘメタンスルホン酸塩の結晶形態(形態Ｇ)を提供する。一つの態様において、形態Ｇは少なくとも次の特徴的Ｘ線粉末回折ピーク：５.８、６.５、７.８、１０.４、１２.９、１５.７および１７.２を示す。他の態様において、形態Ｇは少なくとも表Ｇに示す特徴的Ｘ線粉末回折ピークを示す。さらに別の態様において、形態Ｇは図７に示すものと実質的に同じＸ線粉末回折パターンを示す。
【００１９】
他の面において、本発明は、少なくとも次の特徴的Ｘ線粉末回折ピーク(２θ度で示す)：５.７、６.９、７.８、１４.４および１８.５を示す化合物Ｘの結晶形態(形態Ｈ)を提供する。一つの態様において、形態Ｈは少なくとも次の特徴的Ｘ線粉末回折ピーク：５.７、６.９、７.８、９.２、１０.３、１２.４、１４.４、１５.５、１６.３、１６.７および１８.５を示す。他の態様において、形態Ｈは少なくとも表Ｈに示す特徴的Ｘ線粉末回折ピークを示す。さらに別の態様において、形態Ｈは図８に示すものと実質的に同じＸ線粉末回折パターンを示す。
【００２０】
他の面において、本発明は、少なくとも次の特徴的Ｘ線粉末回折ピーク(２θ度で示す)：９.５、１３.３、１４.５、１９.０および１９.７を示す化合物Ｘの結晶形態(形態Ｉ)を提供する。一つの態様において、形態Ｉは少なくとも次の特徴的Ｘ線粉末回折ピーク：６.８、７.４、７.９、９.５、１３.３、１４.０、１４.５、１６.１、１７.９、１９.０および１９.７を示す。他の態様において、形態Ｉは少なくとも表Ｉに示す特徴的Ｘ線粉末回折ピークを示す。さらに別の態様において、形態Ｉは図９に示すものと実質的に同じＸ線粉末回折パターンを示す。
【００２１】
他の面において、本発明は、少なくとも次の特徴的Ｘ線粉末回折ピーク(２θ度で示す)：６.９、８.３、１２.５、１３.６、１６.０、１６.８および１７.１を示す化合物Ｘの結晶形態(形態Ｊ)を提供する。一つの態様において、形態Ｊは少なくとも次の特徴的Ｘ線粉末回折ピーク：６.９、８.３、９.２、１２.５、１３.６、１６.０、１６.８、１７.１、１９.８および２０.９を示す。他の態様において、形態Ｊは少なくとも表Ｊに示す特徴的Ｘ線粉末回折ピークを示す。さらに別の態様において、形態Ｊは図１０に示すものと実質的に同じＸ線粉末回折パターンを示す。
【００２２】
他の面において、本発明は、少なくとも次の特徴的Ｘ線粉末回折ピーク(２θ度で示す)：６.１、７.４、８.３、２２.１、２３.７、２４.１および２４.６を示す化合物Ｘの結晶形態(形態Ｋ)を提供する。一つの態様において、形態Ｋは少なくとも次の特徴的Ｘ線粉末回折ピーク：５.２、６.１、７.４、８.３、９.７、１８.２、１９.６、２２.１、２３.２、２３.７、２４.１および２４.６を示す。他の態様において、形態Ｋは少なくとも表Ｋに示す特徴的Ｘ線粉末回折ピークを示す。さらに別の態様において、形態Ｋは図１１に示すものと実質的に同じＸ線粉末回折パターンを示す。
【００２３】
他の面において、本発明は、少なくとも次の特徴的Ｘ線粉末回折ピーク(２θ度で示す)：５.７、８.２、１６.９、１８.４および１８.５を示す化合物Ｘの結晶形態(形態Ｌ)を提供する。一つの態様において、形態Ｌは少なくとも次の特徴的Ｘ線粉末回折ピーク：５.７、７.０、８.２、１５.４、１６.０、１６.９、１８.４および１８.５を示す。他の態様において、形態Ｌは少なくとも表Ｌに示す特徴的Ｘ線粉末回折ピークを示す。さらに別の態様において、形態Ｌは図１２に示すものと実質的に同じＸ線粉末回折パターンを示す。
【００２４】
他の面において、本発明は、少なくとも次の特徴的Ｘ線粉末回折ピーク(２θ度で示す)：６.７、７.６、７.７、９.５および１９.０を示す化合物Ｘの結晶形態(形態Ｍ)を示す。一つの態様において、形態Ｍは少なくとも次の特徴的Ｘ線粉末回折ピーク：６.７、７.６、７.７、９.５、１３.１、１４.４、１５.４、１６.０、１７.８、１８.３、１９.０および１９.６を示す。他の態様において、形態Ｍは少なくとも表Ｍに示す特徴的Ｘ線粉末回折ピークを示す。さらに別の態様において、形態Ｍは図１３に示すものと実質的に同じＸ線粉末回折パターンを示す。
【００２５】
他の面において、本発明は、少なくとも次の特徴的Ｘ線粉末回折ピーク(２θ度で示す)：６.３、７.７、８.７、１６.０、１８.１および２０.５を示す化合物Ｘの結晶形態(形態Ｎ)を提供する。一つの態様において、形態Ｎは少なくとも次の特徴的Ｘ線粉末回折ピーク：６.３、７.７、８.７、１０.２、１１.４、１３.８、１６.０、１７.２、１８.１、１８.６、１９.０および２０.５を示す。他の態様において、形態Ｎは少なくとも表Ｎに示す特徴的Ｘ線粉末回折ピークを示す。さらに別の態様において、形態Ｎは図１４に示すものと実質的に同じＸ線粉末回折パターンを示す。
【００２６】
本発明の一つの面において、本発明の多形は結晶特性を示す、好ましくは少なくとも５０％結晶性、より好ましくは少なくとも６０％結晶性、さらに好ましくは少なくとも７０％結晶性および最も好ましくは少なくとも８０％結晶性である。結晶化度は慣用のＸ線回折または赤外線分光の技法により推定できる。
【００２７】
本発明の一つの面において、本発明の多形は５０％、６０％、７０％、８０％または９０％から９５％、９６％、９７％、９８％、９９％または１００％結晶性である。
【００２８】
本明細書において、Ｘ線粉末回折ピーク(２θ度で示す)は、１.５４０６Å(アルファ１)および１.５４４４Å(アルファ２)の波長の銅Ｘ線を使用して測定する。
【００２９】
本発明の結晶形態は溶媒和されていないおよび溶媒和されたいずれの形態でも存在できる。用語‘溶媒和物’は、ここでは、本発明の化合物および一定量の１種以上の薬学的に許容される溶媒を含む分子複合体を記載するために使用する。薬学的に許容される溶媒の例はエタノールおよび水を含む。溶媒が水であるとき、用語‘水和物’を使用する。
【００３０】
一つの面において、本発明は、治療に使用するためのここに定義する塩または結晶形態を提供する。他の面において、本発明は、処置を必要とする対象に薬学的に許容される量の本発明の塩または結晶形態を投与することを含む、治療による処置方法を提供する。
【００３１】
一つの面において、本発明は、治療に使用するための医薬の製造におけるここに定義する塩または結晶形態の使用を提供する。
【００３２】
一つの態様において、治療はＨＣＶ関連障害の処置である。他の態様において、治療はＨＩＶ感染の処置である。他の態様において、治療はＨＣＶ活性の処置、阻害または予防である。他の態様において、治療はＮＳ２プロテアーゼ、ＮＳ３プロテアーゼ、ＮＳ３ヘリカーゼ、ＮＳ５ａタンパク質、および／またはＮＳ５ｂポリメラーゼの活性の阻害である。他の態様において、治療はＮＳ３プロテアーゼとＮＳ４Ａ補助因子の相互作用の破壊である。他の態様において、治療はＨＣＶのＮＳ４Ａ−ＮＳ４Ｂ、ＮＳ４Ｂ−ＮＳ５ＡおよびＮＳ５Ａ−ＮＳ５Ｂ接合部の１個以上の切断の予防または変更である。他の態様において、治療はセリンプロテアーゼ活性の阻害である。他の態様において、治療は対象におけるＨＣＶ  ＲＮＡ負荷の減少である。
【００３３】
一つの面において、本発明の塩類および結晶形態はＨＣＶプロテアーゼ活性を示す。一つの態様において、本塩類および結晶形態はＨＣＶ  ＮＳ３−４Ａプロテアーゼ阻害剤である。
【００３４】
一つの面において、本発明は、細胞と本発明の塩または結晶形態を接触させることを含む、該細胞内のＣ型肝炎ウイルス複製を阻害する方法を提供する。
【００３５】
他の面において、本発明は、ＨＣＶ関連障害を処置するための有効量の該塩または結晶形態の使用のための指示とパッケージ化された本発明の塩または結晶形態を含む、パッケージ化ＨＣＶ関連障害処置を提供する。
【００３６】
ある態様において、ＨＣＶ関連障害はＨＣＶ感染、肝硬変、慢性肝疾患、肝細胞癌、クリオグロブリン血症、非ホジキンリンパ腫、肝線維症および先天性細胞内免疫応答抑制から成る群から選択される。
【００３７】
他の態様において、本発明は、処置を必要とする対象に薬学的に許容される量の本発明の塩または結晶形態を投与することを含む、該対象におけるＨＣＶ感染、肝硬変、慢性肝疾患、肝細胞癌、クリオグロブリン血症、非ホジキンリンパ腫、肝線維症および／または先天性細胞内免疫応答抑制の処置方法を提供する。
【００３８】
一つの態様において、選択するＨＣＶはあらゆるＨＣＶ遺伝子型から選択される。他の態様において、ＨＣＶはＨＣＶ遺伝子型１、２および／または３から選択される。
【００３９】
ＨＣＶ関連状態は、ＨＣＶポリタンパク質を機能性小タンパク質へ変化させるいくつかの過程に関与するＨＣＶのＮＳ３セリンプロテアーゼとしばしば関係する。ＮＳ３プロテアーゼは、酵素活性を亢進する必須補助因子であるＮＳ４Ａタンパク質とヘテロ二量体複合体を形成し、ＨＣＶを小胞体に固着させるのを助けると信じられている。ＮＳ３は最初にＮＳ３−ＮＳ４Ａ接合部の加水分解を自己触媒し、次いでＨＣＶポリタンパク質を、ＮＳ４Ａ−ＮＳ４Ｂ、ＮＳ４Ｂ−ＮＳ５ＡおよびＮＳ５Ａ−ＮＳ５Ｂ接合部で分子間切断する。この過程は、宿主におけるＨＣＶの複製と関連する。ＮＳ３タンパク質、ＮＳ４Ａタンパク質、ＮＳ４Ｂタンパク質、ＮＳ５Ａタンパク質およびＮＳ５Ｂタンパク質の１個以上の活性の阻害または調節は、宿主におけるＨＣＶ複製を阻害または調節し、それによりＨＣＶ関連状態を予防または処置する。特定の態様において、ＨＣＶ関連状態はＮＳ３プロテアーゼの活性と関連する。他の特定の態様において、ＨＣＶ関連状態はＮＳ３−ＮＳ４Ａヘテロ二量体複合体の活性と関連する。
【００４０】
本発明はまたここに記載する結晶形態の製造方法も提供する。それ故に、一つの面において、本発明は、形態Ａ、Ｂ、Ｃ、Ｄ、Ｅ、Ｆ、Ｇ、ＨおよびＩのいずれかの製造方法であって、化合物Ｘの溶液から該形態を結晶化することを含む、方法を提供する。
【００４１】
本発明の文脈において、異なる特定の指示がない限り、用語“処置”は、治療的、対症的および予防的処置を含む。用語“治療”、“治療的”および“治療的に”も同様に解釈すべきである。
【００４２】
本発明の塩類および結晶形態は単独でまたは１種以上の他の薬剤と組み合わせて投与してよい。一般的に、それらは、１種以上の薬学的に許容される添加物と関連した製剤として投与される。用語“添加物”は、ここでは、製剤に機能的(すなわち、薬剤放出速度制御)および／または非機能的(すなわち、加工助剤または希釈剤)特徴を付与し得る、本発明の化合物以外のあらゆる成分を記載するために使用する。添加物の選択は大部分特定の投与形式、溶解性および安定性に対する添加物の影響および投与形態の性質による。
【００４３】
本発明の塩類および結晶形態の送達に適する医薬組成物およびそれらの製造方法は、当業者に明らかである。このような組成物およびそれらの製造方法は、例えば、Remington's Pharmaceutical Sciences, 19th Edition (Mack Publishing Company, 1995)に見ることができる。
【００４４】
ヒト患者への投与のために、本塩または結晶形態の総１日投与量は、当然投与形式によって、典型的に０.０１mg〜１０００mgまたは０.１mg〜２５０mgまたは１mg〜５０mgである。総１日投与量を１回でまたは分割投与で投与してよく、医師の判断によっては、ここに記載する典型的範囲から逸脱してよい。これらの投与量は、約６０kg〜７０kgの体重の標準的ヒト対象に基づいている。医師は、乳児および高齢者のような体重がこの範囲外である対象に対する投与量を容易に決定できる。
【００４５】
医薬組成物を局所的に(例えば皮膚または肺および／または気道に)、例えば、クリーム剤、溶液剤、懸濁液剤、ヘプタフルオロアルカン(ＨＦＡ)エアロゾル剤および乾燥粉末製剤の形で；または全身的に、例えば、錠剤、カプセル剤、シロップ剤、散剤または顆粒剤の形で経口投与により；または溶液または懸濁液の形態の非経腸投与により；または皮下投与により；または直腸投与により坐薬の形態で；または経皮的に投与してよい。
【００４６】
本発明の一つの態様において、活性成分を経口で投与する。経口投与は、本化合物が消化管に入るような嚥下および／または化合物が口腔から血流に直接入る頬側、舌または舌下投与を含み得る。
【００４７】
経口投与に適する製剤は、固体プラグ、固体微粒子、半固体および液体(多相または分散系)、例えば錠剤；多粒子またはナノ粒子、液体、エマルジョンまたは粉末を含む軟または硬カプセル；ロゼンジ(液体充填のものを含む)；咀嚼錠；ゲル；速分散性投与形態；フィルム；卵形錠(ovules)；スプレー；および頬側／粘膜付着性パッチを含む。
【００４８】
経口投与に適する製剤はまた、即放性方法でまたは、放出プロファイルが遅延、間欠、制御、持続または遅延かつ持続であるかまたは活性剤の治療効果を最適かする方法で修飾されている徐放性手段で塩類および結晶形態を投与するように設計してよい。化合物を徐放性態様で送達する手段は当分野で知られており、放出を制御するために該化合物と制御できる持続放出ポリマー類を含む。
【００４９】
徐放性ポリマー類は、該化合物を拡散または拡散とポリマー侵食により有利するために使用できる分解性および非分解性ポリマー類を含む。徐放性ポリマー類の例は、ヒドロキシプロピルメチルセルロース、ヒドロキシプロピルセルロース、メチルセルロース、エチルセルロース、カルボキシメチルセルロースナトリウム、ポリビニルアルコール、ポリビニルピロリドン、キサンタンゴム、ポリメタクリレート類、ポリエチレンオキシドおよびポリエチレングリコールを含む。
【００５０】
液体(多相および分散系を含む)製剤はエマルジョン剤、懸濁液剤、溶液剤、シロップ剤およびエリキシル剤を含む。このような製剤を、軟または硬カプセル(例えば、ゼラチンまたはヒドロキシプロピルメチルセルロース製)中の充填剤として定義でき、典型的に担体、例えば、水、エタノール、ポリエチレングリコール、プロピレングリコール、メチルセルロースまたは適当な油および１種以上の乳化剤および／または懸濁化剤を含む。液体製剤はまた、例えば、小袋からの固体を再構成することにより製剤してもよい。
【００５１】
本発明の塩類および結晶形態はまたLiang and Chen, Expert Opinion in Therapeutic Patents, 2001, 11 (6), 981-986に記載のもののような速溶性、速崩性投与形態で使用してもよい。
【００５２】
錠剤の製剤はPharmaceutical Dosage Forms: Tablets, Vol. 1, by H. Lieberman and L. Lachman (Marcel Dekker, New York, 1980)に記載されている。
【００５３】
図面の簡単な説明
本発明を、ここで、次の非限定的実施例により説明する。実施例中、次の図面ｇあ示される：
【図面の簡単な説明】
【００５４】
【図１】ここに定義する形態ＡのＸ線粉末回折パターンである。
【図２】ここに定義する形態ＢのＸ線粉末回折パターンである。
【図３】ここに定義する形態ＣのＸ線粉末回折パターンである。
【図４】ここに定義する形態ＤのＸ線粉末回折パターンである。
【図５】ここに定義する形態ＥのＸ線粉末回折パターンである。
【図６】ここに定義する形態ＦのＸ線粉末回折パターンである。
【図７】ここに定義する形態ＧのＸ線粉末回折パターンである。
【図８】ここに定義する形態ＨのＸ線粉末回折パターンである。
【図９】ここに定義する形態ＩのＸ線粉末回折パターンである。
【図１０】ここに定義する形態ＪのＸ線粉末回折パターンである。
【図１１】ここに定義する形態ＫのＸ線粉末回折パターンである。
【図１２】ここに定義する形態ＬのＸ線粉末回折パターンである。
【図１３】ここに定義する形態ＭのＸ線粉末回折パターンである。
【図１４】ここに定義する形態ＮのＸ線粉末回折パターンである。
【発明を実施するための形態】
【００５５】
実験の一般的説明
【表１】
2013543500.tif 000003
【表２】
2013543500.tif 000004
【００５６】
Ｘ線粉末回折(ＸＲＰＤ)パターンは、ＸＲＰＤゼロバックグラウンドの単一斜め切りシリカサンプルホルダー上に軽く圧縮した重量約２〜１０mgのサンプルを使用して取得した。サンプルを次いでBruker GADDSに充填し、次の実験条件を使用して分析した：
管陽極：(Ｃｕ)
発電機電圧：４０kV
管電流：４０mA
開始角[２θ]：３
最終角[２θ]：４
走査時間２分間
【００５７】
本発明の化合物の合成に使用する全出発物質、中間材、反応材、酸、塩基、脱水剤、溶媒および触媒は市販されているか、または当業者に知られた有機合成法により製造できる(Houben-Weyl 4th Ed. 1952, Methods of Organic Synthesis, Thieme, Volume 21)。さらに、本発明の化合物を、次の実施例に示す当業者に知られた有機合成法により製造できる。
【００５８】
方法Ｂ：
ＨＰＬＣ
装置：Agilentシステム
カラム：Waters Symmetry C18、３.５マイクロメーター、２.１×５０mm、流速０.６mL／分
溶媒：ＣＨ３ＣＮ(０.１％ＣＦ３ＣＯ２Ｈ)、Ｈ２Ｏ(０.１％ＣＦ３ＣＯ２Ｈ)
勾配：０〜３.５分：２０〜９５％ＣＨ３ＣＮ、３.５〜５分：９５％ＣＨ３ＣＮ、５.５〜５.５５分  ９５％〜２０％ＣＨ３ＣＮ
【００５９】
方法Ｇ：
ＬＣＭＳ
装置：Agilentシステム
カラム：Halo C18、２.７マイクロメーター、２.１×３０mm、流速１.１mL／分
溶媒：ＣＨ３ＣＮ(０.１％ＨＣＯ２Ｈ)、Ｈ２Ｏ(０.１％ＨＣＯ２Ｈ)
勾配：０〜２分：５〜９５％ＣＨ３ＣＮ、２〜２.６分：９５％ＣＨ３ＣＮ、２.６〜２.６５分  ９５％〜５％ＣＨ３ＣＮ、２.６５〜３分  ５％ＣＨ３ＣＮ
【００６０】
方法Ｊ：
ＭＳ
装置：Agilentシステム
方法：フローインジェクション
検出：ＡＰＩ−ＥＳ、陽／陰
【００６１】
化合物Ｘ
未公開特許出願ＰＣＴ／ＩＢ２０１０／０００７８４に記載の(５Ｒ,８Ｓ)−７−[(２Ｓ)−２−{[(２Ｓ)−２−シクロヘキシル−２−({[(２Ｓ)−１−イソプロピルピペリジン−２−イル]カルボニル}アミノ)アセチル]アミノ}−３,３−ジメチルブタノイル]−Ｎ−{(１Ｒ,２Ｒ)−２−エチル−１−[(ピロリジン−１−イルスルホニル)カルバモイル]シクロプロピル}−１０,１０−ジメチル−７−アザジスピロ[３.０.４.１]デカン−８−カルボキサミドの製造を下に詳述する。
【００６２】
反応材Ａの製造
工程１ａ：
【化２】
2013543500.tif 000005
Winum et al (Organic Letters 2001, 3, 2241)の方法に従い製造したＮ−(ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル)−Ｎ−[４−(ジメチルアザニウムイリデン)−１,４−ジヒドロピリジン−１−イルスルホニル]アザニド(３ｇ；９.９５５mmol)のＤＣＭ(２４mL)懸濁液をピロリジン(０.８６４mL；１０.４５３mmol)で処理し、ｒｔで２４時間撹拌した。反応混合物をシリカゲルＦＣによるクロマトグラフィーに付して(溶離剤：ＣＨ２Ｃｌ２／ＥｔＯＡｃ  １００：１)、[Ｎ−(ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル)]−ピロリジン−１−スルホン酸アミドを得た。TLC: Rf (DCM/EtOAc 100: 1) = 0.40。[Ｎ−(ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル)]−ピロリジン−１−スルホン酸アミド(５７.０９ｇ；２２３mmol)のＤＣＭ(４５０mL)溶液をＴＦＡ(１２０mL；１.５６mol)で処理し、ｒｔで７時間撹拌した。反応混合物を真空で濃縮し、残存油状物をジイソプロピルエーテルで摩砕した。得られた粉末をジイソプロピルエーテルで洗浄し、高真空下で乾燥させて、化合物１ａを得た。TLC: Rf (DCM/EtOAc 50: 1) = 0.10
【００６３】
工程１ｂ：
【化３】
2013543500.tif 000006
ＷＯ２０００／０９５５８に記載の方法により製造した(１Ｒ,２Ｓ)−１−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ−２−ビニル−シクロプロパンカルボン酸(８.２４ｇ；３６.３mmol)のＴＨＦ(１６０mL)溶液をＣＤＩ(９.０９ｇ；５４.４mmol)で処理し、１時間加熱還流した。得られた反応混合物をｒｔに冷却し、化合物１ａ(７.６２ｇ；５０.８mmol)、ＤＢＵ(８.２８ｇ；５４.４mmol)で処理した。１６時間後、ｒｔで反応混合物を濃縮し、残渣をＤＣＭに溶解し、飽和ＫＨＳＯ４水溶液(３×)で洗浄した。水相をＤＣＭで抽出し、有機相を併せ、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、真空で濃縮した。残渣をシリカゲルクロマトグラフィーに付して(溶離剤：ヘキサン／ＥｔＯＡｃ  ４：１)、化合物１ｂを得た。LCMS (方法F) Rt = 3.21 min; MS (方法J): M/z = 358 [M-1]
【００６４】
工程１ｃ：
【化４】
2013543500.tif 000007
化合物１ｂ(７.８４ｇ；２１.８１mmol)を４Ｎ  ＨＣｌのジオキサン溶液(８４mL)でｒｔで処理した。１.５時間後、反応混合物を減圧下濃縮して、化合物１ｃをその塩酸塩として得た。LCMS (方法E) Rt = 1.10 min; MS (方法J): M/z = 260 [M+1]
【００６５】
中間体IIの製造：
【化５】
2013543500.tif 000008
【００６６】
工程２ａ：
【化６】
2013543500.tif 000009
(５Ｒ,８Ｓ)−１０,１０−ジメチル−７−アザ−ジスピロ[３.０.４.１]デカン−７,８−ジカルボン酸７−ｔｅｒｔ−ブチルエステル(３２.８４ｇ；１０６mmol  −  ＷＯ２００９／０４７２６４に記載の方法により製造)のＤＭＦ(１Ｌ)溶液をＫ２ＣＯ３(２２.００ｇ；１５９mmol)、ヨウ化メチル(９.９３mL；１５９mmol)で処理した。反応混合物をｒｔで１８時間撹拌し、真空で濃縮した。得られた残渣を水およびＥｔＯＡｃに分配し、ＥｔＯＡｃで抽出した。有機相を併せ、塩水で洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、濃縮した。残渣をシリカゲルクロマトグラフィーに付して(溶離剤ＤＣＭ／エチルエーテル  １２０：１)、化合物２ａを得た。TLC: Rf (DCM/エチルエーテル 120: 1) = 0.22; MS (方法J): M/z = 346 [M+Na]
【００６７】
工程２ｂ：
【化７】
2013543500.tif 000010
化合物２ｂ塩酸塩を化合物２ａ(６.３ｇ；１９.４８mmol)から４Ｎ  ＨＣｌのジオキサン溶液(８４mL)でｒｔで処理することにより得た。１.５時間後、反応混合物を減圧下濃縮して、化合物２ｂをその塩酸塩として得た。MS (方法J): M/z = 224 [M+1]
【００６８】
工程２ｃ：
【化８】
2013543500.tif 000011
化合物２ｃを、０℃に冷却し、ＤＩＰＥＡ(０.４６mL；２.６８mmol)およびＨＡＴＵ(０.６１１ｇ；１.６０８mmol)で処理した化合物２ｂ塩酸塩(７.３３ｇ；２７.９３mmol)およびＢＯＣ−Ｌ−ｔｅｒｔ−ロイシン(０.２４８ｇ；１.０７２mmol)のＤＣＭ(１５mL)溶液から得た。反応混合物をｒｔで２０時間撹拌し、真空で濃縮し、残渣を分取ＨＰＬＣで精製した(方法Ｋ)。後処理後(後処理２)フラクションをＮａＨＣＯ３で処理し、濃縮した；残渣を水およびＥｔＯＡｃに分配し、ＥｔＯＡｃで抽出した；有機相を併せ、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、濃縮した。  TLC: Rf (ヘキサン/EtOAc 4: 1) = 0.37; MS (方法J): M/z = 437 [M+1]
【００６９】
工程２ｄ：
【化９】
2013543500.tif 000012
化合物２ｄ塩酸塩を、化合物２ｃ(１０.５５ｇ；２４.１６mmol)から４Ｎ  ＨＣｌのジオキサン溶液(８４mL)でｒｔで処理することにより得た。１.５時間後、反応混合物を減圧下濃縮して、化合物２ｄ塩酸塩を得た。TLC: Rf (DCM/MeOH 95: 5) = 0.39; MS (方法J): M/z = 337 [M+1]
【００７０】
工程２ｅ：
【化１０】
2013543500.tif 000013
化合物２ｅを、０℃に冷却し、ＤＩＰＥＡ(２.６８mL；１５.３７mmol)、ＨＡＴＵ(３.５１ｇ；９.２２mmol)で処理した化合物２ｄ(０.２ｇ；０.４５６mmol)およびＢＯＣ−Ｌ−シクロヘキシルグリシン(１.５８２ｇ；６.１５mmol)のＤＣＭ(６５mL)溶液から得た。ｒｔで１６時間経過後、反応混合物をＤＣＭおよび１Ｎ  ＨＣｌに分配し、有機相を飽和ＮａＨＣＯ３水溶液で抽出し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、濃縮した。分取ＨＰＬＣ(方法Ｋ)による精製、後処理(後処理２)により、化合物２ｅを得た。LC-MS (方法G): Rt = 2.21 min; M/z = 598 [M+Na]
【００７１】
工程２ｆ：
【化１１】
2013543500.tif 000014
化合物２ｅ(１.１３６ｇ；１.９７３mmol)およびＬｉＯＨ.Ｈ２Ｏ(０.０９ｇ；２.１７mmol)のＴＨＦ／ＭｅＯＨ／水(６mL；２：１：１)中の混合物を、ｒｔで１６時間撹拌した。反応混合物を水およびＥｔＯＡｃに分配した。水相を１Ｎ  ＨＣｌで酸性化し、ＥｔＯＡＣで抽出した。有機相を併せ、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、濃縮して残渣を得て、それをシリカゲルクロマトグラフィーに付して(ＤＣＭ／ＭｅＯＨ  １００％〜９：１)、化合物２ｆを得た。LC-MS (方法G): Rt = 1.99 min; M/z = 562 [M+1]
【００７２】
工程２ｇ：
【化１２】
2013543500.tif 000015
化合物２ｆ(０.０５０ｇ；０.０８９mmol)およびピロリジン−１−スルホン酸((１Ｒ,２Ｒ)−１−アミノ−２−エチル−シクロプロパンカルボニル)−アミド  −  反応材Ａ(０.０３０ｇ；０.０９３mmol  −  ここに記載の方法により製造)のＤＣＭ(２mL)溶液を０℃に冷却し、ＤＩＰＥＡ(０.０７８mL；０.４４５mmol)およびＨＡＴＵ(０.１０２ｇ；０.２６７mmol)で処理した。反応混合物をｒｔで２時間撹拌し、ＤＣＭおよび１Ｎ  ＨＣｌに分配した。有機相を飽和ＮａＨＣＯ３水溶液で洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、真空で濃縮して残渣を得て、それを分取ＨＰＬＣで精製した。後処理後化合物２ｇを得た。LC-MS (方法G): Rt = 2.25 min; M/z = 828 [M+Na]
【００７３】
工程２ｈ：
【化１３】
2013543500.tif 000016
中間体II塩酸塩を、化合物２ｇ(０.０２ｇ；０.０２５mmol)から４Ｎ  ＨＣｌのジオキサン溶液(８４mL)でｒｔで処理することにより得た。１.５時間後、反応混合物を減圧下濃縮して、中間体II塩酸塩を得た。LC-MS (方法G): Rt = 1.59 min; M/z = 706 [M+1]
【００７４】
化合物Ｘの合成
【化１４】
2013543500.tif 000017
(Ｓ)−１−イソプロピル−ピペリジン−２−カルボン酸(１.３９ｇ；８.１１mmol)のＤＭＦ(１５０mL)懸濁液をＨＡＴＵ(３.８６ｇ；１０.１４mmol)およびＤＩＰＥＡ(３.５４mL；２０.２９mmol)で処理し、ＲＴで撹拌した。得られた溶液を中間体II塩酸塩(０.２８ｇ；０.３７８mmol)で処理し、ＲＴでアルゴン下、１時間撹拌した。反応混合物をＥｔＯＡｃに溶解し、水で洗浄した。水性相をＥｔＯＡｃで抽出した。有機相を併せ、飽和ＮａＨＣＯ３水溶液で洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、濃縮して、褐色油状物を得た。シリカゲルＦＣ(溶離剤：シクロヘキサン〜シクロヘキサン／アセトン３：２)で精製して、化合物Ｘ塩酸塩を得た。HPLC(方法B): Rt = 3.70 min; MS (方法J) M/z = 858 [M+1]
1H-NMR (400 MHz, メタノール-d4): δ (ppm) = 8.4 (d, 1H), 4.75 (d, 1H), 4.3 (d, 1H), 4.2 (t, 1H), 3.95 (bs, 1H), 3.4-3.7 (m, 9H), 3.0 (m, 1H), 2.15 (m, 1H), 1.05-2.1 (m, 43H), 1.05 (s, 9H), 0.9 (s, 3H), 0.95 (s, 3H)
【００７５】
化合物Ｘ ＨＣｌ塩(形態Ａ)
遊離塩基をＩＰＡに溶解し、１当量ＨＣｌを添加する。ＩＰＡを蒸発させ、固体をアセトニトリルで室温で平衡化して、二水和物形態を得る。本結晶形態(ここでは形態Ａと呼ぶ)は、下の表Ａに示すＸ線粉末回折ピークを示した。図１は形態ＡのＸ線粉末回折パターンを示す。
【表３】
2013543500.tif 000018
【００７６】
化合物Ｘ ＨＣｌ塩(形態Ｂ)
６００mgの遊離塩基を３mlの酢酸エチル／アセトニトリル(２：１)に溶解し、７００μlの６Ｎ  ＨＣｌを添加する。溶液を１時間平衡化し、蒸発させた。固体をアセトニトリルに再懸濁し、１時間スラリー化し、単離して、無水形態を得た。本結晶形態(ここでは形態Ｂと呼ぶ)は、下の表Ｂに示すＸ線粉末回折ピークを示した。図２は形態ＢのＸ線粉末回折パターンを示す。
【表４】
2013543500.tif 000019
【００７７】
化合物Ｘ ＨＣｌ塩(形態Ｃ)
２.５４ｇの遊離塩基を３mlアセトンに溶解する。１.０７５mlの２.７５Ｎ  ＨＣｌを原体溶液に添加する。この溶液を２時間平衡化し、固体を濾過により回収して、無水物を得た。本結晶形態(ここでは形態Ｃと呼ぶ)は、下の表Ｃに示すＸ線粉末回折ピークを示した。図３は形態ＣのＸ線粉末回折パターンを示す。
【表５】
2013543500.tif 000020
【００７８】
化合物Ｘ ＨＣｌ塩(形態Ｄ)
ＨＣｌ塩(形態Ｃ)を酢酸エチル中で７２時間平衡化して、二水和物形態を得た。本結晶形態(ここでは形態Ｄと呼ぶ)は、下の表Ｄに示すＸ線粉末回折ピークを示した。図４は形態ＤのＸ線粉末回折パターンを示す。
【表６】
2013543500.tif 000021
【００７９】
化合物Ｘ ＨＣｌ塩(形態Ｅ)
ＨＣｌ塩を、形態Ｂを水中で７２時間平衡化後に単離して、三水和物形態を得た。本結晶形態(ここでは形態Ｅと呼ぶ)は、下の表Ｅに示すＸ線粉末回折ピークを示した。図５は形態ＥのＸ線粉末回折パターンを示す。
【表７】
2013543500.tif 000022
【００８０】
化合物ＸヘミＨＣｌ塩(形態Ｆ)
９１mgの遊離塩基を０.５mlのＴＨＦに溶解し、５３μlの６Ｎ  ＨＣｌを添加した。２mlアセトニトリルを添加し、システムを４時間平衡化して、固体を回収して、二水和物を得た。本結晶形態(ここでは形態Ｆと呼ぶ)は、下の表Ｆに示すＸ線粉末回折ピークを示した。図６は形態ＦのＸ線粉末回折パターンを示す。
【表８】
2013543500.tif 000023
【００８１】
化合物Ｘ ＭｅＳＯ３Ｈ塩(形態Ｇ)
５０mgの遊離塩基をメチルｉ−ブチルケトンに溶解し、１当量メタンスルホン酸を添加し、２時間平衡化し、固体を回収した。本結晶形態(ここでは形態Ｇと呼ぶ)は、下の表Ｇに示すＸ線粉末回折ピークを示した。図７は形態ＧのＸ線粉末回折パターンを示す。
【表９】
2013543500.tif 000024
【００８２】
化合物Ｘ遊離塩基(形態Ｈ)
化合物Ｘ遊離塩基は、酢酸イソプロピル(透明溶液)から、ＣＨ３ＣＮ(懸濁液)への溶媒交換および２０℃で２４時間の撹拌中に沈殿する。最終原体をＣＨ３ＣＮの懸濁液から回収し、ＣＨ３ＣＮで洗浄して、無水形態を得た。本結晶形態(ここでは形態Ｈと呼ぶ)は、下の表Ｈに示すＸ線粉末回折ピークを示した。図８は形態ＨのＸ線粉末回折パターンを示す。
【表１０】
2013543500.tif 000025
【００８３】
化合物Ｘ(形態Ｉ)
形態Ｉを、原体をエタノールに溶解し、水を最終比率１：１で用いて沈殿させて、一水和物形態を得ることにより製造する。本結晶形態(ここでは形態Ｉと呼ぶ)は、下の表Ｉに示すＸ線粉末回折ピークを示した。図９は形態ＩのＸ線粉末回折パターンを示す。
【表１１】
2013543500.tif 000026
【００８４】
化合物Ｘ(形態Ｊ)
形態Ｊを、形態Ｈを５０℃で平衡化させることによりメタノールから得た。固体を濾過により回収し、５０℃で乾燥させる。
【表１２】
2013543500.tif 000027
【００８５】
化合物Ｘ(形態Ｋ)
形態Ｋは、アセトニトリルの添加後に、エタノール(１００％)から結晶化した。固体を遠心分離により回収し、窒素流下に乾燥させた。
【表１３】
2013543500.tif 000028
【００８６】
化合物Ｘ(形態Ｌ)
形態Ｌは、アセトニトリルから製造した形態Ｈの水和形態であり、固体を５０℃で乾燥させる。固体を高湿度に曝すことにより、形態Ｌを生じる。
【表１４】
2013543500.tif 000029
【００８７】
化合物Ｘ(形態Ｍ)
形態Ｍを、エタノールから水での沈殿により単離する。固体を濾過により単離し、５０℃で乾燥させる。固体を高湿度に曝すことにより、形態Ｍを生じる。
【表１５】
2013543500.tif 000030
【００８８】
化合物Ｘ(形態Ｎ)
形態Ｎは、アセトニトリルの添加後に、エタノール(１００％)から結晶化した。固体を遠心分離により回収し、窒素流下に乾燥させた。
【表１６】
2013543500.tif 000031
【００８９】
生物学的活性
ＨＣＶ  ＮＳ３−４Ａプロテアーゼアッセイ
化合物ＸのＨＣＶ  ＮＳ３−４Ａセリンプロテアーゼに対する阻害活性を、Taliani, M., et al. 1996 Anal. Biochem. 240: 60-67(これは、その全体を引用により本明細書に包含させる)に記載のとおり完全長ＮＳ３−４Ａタンパク質(遺伝子型１ａ、株ＨＣＶ−１)および市販の自己消光蛍光性ペプチド基質を使用する均質アッセイで測定する。
【００９０】
ルシフェラーゼに基づくＨＣＶレプリコンアッセイ
化合物Ｘの抗ウイルス活性および細胞毒性を、発現がＨＣＶ  ＲＮＡ複製および翻訳の制御下にあるルシフェラーゼレポーター遺伝子を含むサブゲノム遺伝子型１ｂ  ＨＣＶレプリコン細胞株(Ｈｕｈ−Ｌｕｃ／ｎｅｏ−ＥＴ)を使用して決定する。簡単に言うと、５,０００レプリコン細胞を９６ウェル組織培養プレートの各ウェルに播種し、Ｇ４１８不含完全培養培地に一夜付着させる。翌日、培養培地を、１０％ＦＢＳおよび０.５％ＤＭＳＯ存在下に連続希釈した化合物Ｘを含む培地に換える。化合物で４８時間処置後、細胞に残ったルシフェラーゼ活性をBriteLite試薬(Perkin Elmer, Wellesley, Massachusetts)とLMaxIIプレートリーダー(Molecular Probe, Invitrogen)を使用して決定する。各データ点は４回繰り返した細胞培養の平均を表す。ＩＣ５０は、レプリコン細胞のルシフェラーゼ活性が５０％低下する化合物濃度である。化合物の細胞毒性をＭＴＳに基づく細胞生存能アッセイにより評価する。
【００９１】
化合物Ｘを上記プロテアーゼアッセイで試験した。ＩＣ５０値を下に示す。化合物Ｘをまた上記レプリコンアッセイで試験し、約１００nM以下のＩＣ５０を示す。
【表１７】
2013543500.tif 000032
【図１】
2013543500.tif 000033
【図２】
2013543500.tif 000034
【図３】
2013543500.tif 000035
【図４】
2013543500.tif 000036
【図５】
2013543500.tif 000037
【図６】
2013543500.tif 000038
【図７】
2013543500.tif 000039
【図８】
2013543500.tif 000040
【図９】
2013543500.tif 000041
【図１０】
2013543500.tif 000042
【図１１】
2013543500.tif 000043
【図１２】
2013543500.tif 000044
【図１３】
2013543500.tif 000045
【図１４】
2013543500.tif 000046
【国際調査報告】
2013543500.tif 000047
2013543500.tif 000048
2013543500.tif 000049
2013543500.tif 000050