(57)【要約】  本発明は、ａ）前立腺特異的抗原に対する活性化増強型抗体と、ｂ）内皮ＮＯ合成酵素に対する活性化増強型抗体とを含む医薬組成物を提供する。種々の実施形態及び変形が提供される。  本発明は、良性前立腺肥大症及び勃起不全を治療する方法並びにａ）前立腺特異的抗原に対する活性化増強型抗体と、ｂ）内皮ＮＯ合成酵素に対する活性化増強型抗体とを含む医薬組成物を投与することを含む種々の投与方法を提供する。【特許請求の範囲】
【請求項１】
ａ）前立腺特異的抗原に対する活性化増強型抗体と、ｂ）内皮ＮＯ合成酵素に対する活性化増強型抗体とを含むことを特徴とする医薬組成物。
【請求項２】
前立腺特異的抗原に対する活性化増強型抗体及び内皮ＮＯ合成酵素に対する活性化増強型抗体を浸透させた固体担体を更に含む請求項１に記載の組み合わせ医薬組成物。
【請求項３】
錠剤の形態である請求項２に記載の組み合わせ医薬組成物。
【請求項４】
前立腺特異的抗原に対する活性化増強型抗体が、Ｃ１２、Ｃ３０及びＣ２００ホメオパシー希釈物の混合物の形態である請求項１に記載の組み合わせ医薬組成物。
【請求項５】
Ｃ１２、Ｃ３０及びＣ２００ホメオパシー希釈物の混合物を固体担体に浸透させている請求項４に記載の組み合わせ医薬組成物。
【請求項６】
内皮ＮＯ合成酵素に対する活性化増強型抗体が、Ｃ１２、Ｃ３０、及びＣ２００ホメオパシー希釈物の混合物の形態である請求項１に記載の組み合わせ医薬組成物。
【請求項７】
Ｃ１２、Ｃ３０及びＣ２００ホメオパシー希釈物の混合物を固体担体に浸透させている請求項６に記載の組み合わせ医薬組成物。
【請求項８】
前立腺特異的抗原に対する活性化増強型抗体が、モノクローナル抗体、ポリクローナル抗体、又は天然の抗体である請求項１に記載の組み合わせ医薬組成物。
【請求項９】
前立腺特異的抗原に対する活性化増強型抗体が、ポリクローナル抗体である、請求項８に記載の組み合わせ医薬組成物。
【請求項１０】
内皮ＮＯ合成酵素に対する活性化増強型抗体が、モノクローナル抗体、ポリクローナル抗体又は天然の抗体である請求項１に記載の組み合わせ医薬組成物。
【請求項１１】
内皮ＮＯ合成酵素に対する活性化増強型抗体が、ポリクローナル抗体である請求項１０に記載の組み合わせ医薬組成物。
【請求項１２】
内皮ＮＯ合成酵素に対する活性化増強型抗体が、配列番号１又は配列番号２の配列を有する内皮ＮＯ合成酵素の分子全体に対するものである請求項１に記載の組み合わせ医薬組成物。
【請求項１３】
内皮ＮＯ合成酵素に対する活性化増強型抗体が、配列番号３、配列番号４、配列番号５、配列番号６、配列番号７、及び配列番号８からなる群から選択される配列を有するＮＯ合成酵素の断片に対するものである請求項１に記載の組み合わせ医薬組成物。
【請求項１４】
前立腺特異的抗原に対する活性化増強型抗体が、配列番号１０、配列番号１１、配列番号１１、配列番号１２、配列番号１３、配列番号１４、配列番号１５、配列番号１６、配列番号１７、配列番号１８、及び配列番号１９からなる群から選択される配列を有する請求項１に記載の組み合わせ医薬組成物。
【請求項１５】
前立腺特異的抗原に対する活性化増強型抗体が、配列番号９を有する分子全体に対するものである請求項１に記載の組み合わせ医薬組成物。
【請求項１６】
活性化増強型抗体が、希釈するごとに振とうしながら連続的に１００倍希釈（ｃｅｎｔｅｓｉｍａｌ  ｄｉｌｕｔｉｏｎ）することにより調製される請求項１に記載の組み合わせ医薬組成物。
【請求項１７】
良性前立腺肥大症を治療する方法であって、請求項１に記載の医薬組成物を、それを必要とする患者に投与することを含むことを特徴とする方法。
【請求項１８】
勃起不全を治療する方法であって、請求項１に記載の医薬組成物を、それを必要とする患者に投与することを含むことを特徴とする方法。
【請求項１９】
併発した良性前立腺肥大症及び勃起不全を治療する方法であって、請求項１に記載の医薬組成物を、それを必要とする患者に投与することを含むことを特徴とする方法。
【請求項２０】
慢性前立腺炎を治療する方法であって、請求項１に記載の医薬組成物を、それを必要とする患者に投与することを含むことを特徴とする方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、組み合わせ医薬組成物及び泌尿生殖器系障害を治療する方法に関する。
【背景技術】
【０００２】
本発明は、医学の分野を参照し、Ｉ及びＩＩ度の良性前立腺肥大症、急性及び慢性前立腺炎、並びに種々の起源の勃起不全を含めた前立腺障害を含めた泌尿生殖器系障害を治療するために用いることができる。
【０００３】
一酸化窒素（ＮＯ）は、種々の生物学的プロセスのシグナル伝達において作用することが示されている気体分子である。内皮由来のＮＯは、血管緊張の調節において重要な分子であり、それと血管疾患との関連性は長く認識されてきた。ＮＯは、単球接着、血小板凝集及び血管平滑筋細胞の増殖を含めた、動脈硬化巣の形成に関与することが知られている多くのプロセスを阻害する。内皮ＮＯの別の重要な役割は、血管壁を、それ自体の代謝生成物、及び脂質及びリポタンパク質の酸化生成物によって誘導される酸化ストレスから防御することである。アテローム性動脈硬化症の非常に早い段階で内皮の機能不全が生じる。したがって、局所的なＮＯの利用ができないことが、ヒトにおけるアテローム発生を加速する最終的な一般的な経路になり得る可能性がある。血管内皮におけるその役割に加えて、ＮＯの利用可能性によってリポタンパク質の代謝が調節されることが示されている。ＮＯ代謝生成物の血漿中濃度と、血漿中の総コレステロールレベル及び低密度リポタンパク質［ＬＤＬ］コレステロールレベルとの間には負の相関が報告されているが、高密度リポタンパク質［ＨＤＬ］は高コレステロール血症の対象における血管の機能を改善する。ＮＯの損失は、疾患の発生にかなりの影響を及ぼす。糖尿病は、主にアテローム動脈硬化性疾患の発生が加速することによって引き起こされる罹患率及び死亡率の上昇を伴う。更に、報告により、糖尿病患者の肺機能が損なわれることが示されている。インスリン抵抗性により気道炎症が導かれることが提唱されている。非特許文献１。
【０００４】
一酸化窒素は、内皮でＬ−アルギニンから一酸化窒素合成酵素（ＮＯ合成酵素）によって合成される。ＮＯ合成酵素は、構成型（ｃＮＯＳ）及び誘導型（ｉＮＯＳ）を含めた種々のアイソフォームで生じる。構成型は、正常な内皮細胞、ニューロン及びいくつかの他の組織に存在する。
【０００５】
前立腺特異的抗原（ＰＳＡ）は、１９７０年代に発見され、約１５年前に泌尿器科の診療に導入された抗原である。ＰＳＡは、これまでに、ヒト前立腺がんの進行並びに療法に対する応答についてスクリーニング、診断及びモニタリングするために利用可能な最も感度のよいマーカーとして広く使用されているが、過去１０年の間の発見により、元の抗原ＰＳＡはもはや前立腺特異的でないことが明確に示され、それによりこの「新規の」セリンプロテアーゼの多機能性の挙動が明らかになっている。腺性カリクレイン遺伝子ファミリーは３つの遺伝子で構成され、染色体１９ｑ１３．３−ｑ１３．４に局在している；ＫＬＫ−３遺伝子座は、ヒト腺性カリクレイン３（ｈＫ３）とも称されている細胞外セリンプロテアーゼＰＳＡをコードする。前立腺において、ＰＳＡの発現は、腺上皮の分化した分泌性の円柱細胞に局在している。生化学的には、ＰＳＡは、その完全なタンパク質分解活性のために翻訳後プロセシングを必要とするキモトリプシン様活性を有する３３ｋＤａの単鎖糖タンパク質である。
【０００６】
ＰＳＡは、前立腺の上皮細胞により、比較的大量に産生され、その調節はアンドロゲン及びプロゲスチンの制御下にあるが、この分子がなぜそのように大量に発現されるのか、及びそれが前立腺の生理においてどんな役割を果たすのかは十分に理解されていない。
【０００７】
現在最も広く認められているＰＳＡの生理機能は、その、精漿中に高濃度で存在する（精嚢が産生する）セミノジェリン（ｓｅｍｉｎｏｇｅｌｉｎ）及びフィブロネクチンを消化し、したがって射精直後に精液塊を液化する能力に関する。セミノジェリンが切断されることの生理的影響は知られていないが、このプロセスにより、精子細胞の運動性が増す。他の研究者は、ＰＳＡは、精嚢液中に存在する糖タンパク質を消化することによって平滑筋収縮を刺激するキニン様物質を放出することができることを報告している。一部の研究者は、ＰＳＡを細胞の成長阻害剤、抗癌性／抗血管新生分子、又はアポトーシスの誘導因子と説明している。ＰＳＡは、組織レベルでは「がんと闘うもの」、また、体循環のレベルでは「有益なメッセンジャー」（指標）とみなされるべきであり、がんを検出することか、又はモニターすることに用いることができる。２、３の他の報告により、ＰＳＡは、そのタンパク質分解作用により、以前はＩＧＦＢＰ−３に結合していた遊離の生理活性インスリン様成長因子Ｉ（ＩＧＦ−Ｉ）を放出させるインスリン様成長因子結合タンパク質−３（ＩＧＦＢＰ−３）プロテアーゼであることが示唆されている。ＩＧＦ−Ｉは、多くの細胞型の公知の有糸分裂促進因子であり、前立腺及び乳癌の発生に対する危険因子である。ＰＳＡは、潜在的な形質転換成長因子−βを活性化し得る、又は副甲状腺ホルモン関連ペプチドを切断し得ることが示唆されている（非特許文献２）。
【０００８】
超低用量の、前立腺特異的抗原に対する抗体に基づいて前立腺障害を治療することは当技術分野で公知である（特許文献１）。しかし、この薬物では、種々の起源の勃起の問題（勃起不全）を伴う泌尿生殖器系障害の治療における十分な治療有効性が保証されない。
【０００９】
ホメオパシーの技術によって増強された極度に希釈された型（又は超低型）の抗体（活性化増強型）の治療効果が、Ｄｒ．Ｏｌｅｇ  Ｉ．Ｅｐｓｈｔｅｉｎにより発見された。例えば、特許文献２には、ホメオパシーによる活性型の前立腺特異的抗原（ＰＳＡ）に対する抗体を投与することによって良性前立腺肥大症又は前立腺炎を治療するための医薬品が開示されている。超低用量の、ガンマインターフェロンに対する抗体が、ウイルス性病因の疾患を治療するための治療及び予防法において有用であることが示されている。その全体が参照により本明細書に組み込まれる特許文献３を参照されたい。
【先行技術文献】
【特許文献】
【００１０】
【特許文献１】米国特許第７，５８２，２９４号明細書
【特許文献２】米国特許第７，５７２，４４１号明細書
【非特許文献】
【００１１】
【非特許文献１】Ｈａｂｉｂら、Ｎｉｔｒｉｃ  Ｏｘｉｄｅ  Ｍｅａｓｕｒｅｍｅｎｔ  Ｆｒｏｍ  Ｂｌｏｏｄ  Ｔｏ  Ｌｕｎｇｓ、Ｉｓ  Ｔｈｅｒｅ    Ｌｉｎｋ？  Ｐａｋ  Ｊ  Ｐｈｙｓｉｏｌ  ２００７年；３巻（１号）
【非特許文献２】Ｄｉａｍａｎｄｉｓ  ＥＰ．  Ｐｒｏｓｔａｔｅ−ｓｐｅｃｉｆｉｃ  ａｎｔｉｇｅｎ：ａ  ｃａｎｃｅｒ  ｆｉｇｈｔｅｒ  ａｎｄ  ａ  ｖａｌｕａｂｌｅ  ｍｅｓｓｅｎｇｅｒ？  Ｃｌｉｎ  Ｃｈｅｍ．  ２０００年７月；４６巻（７号）：８９６〜９００年
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【００１２】
本発明は、組み合わせ医薬組成物、並びにＩ及びＩＩ度の良性前立腺肥大症、急性及び慢性前立腺炎、及び種々の起源の勃起不全を含めた泌尿生殖器系障害の治療におけるその使用方法を対象とする。
【００１３】
現存する問題の解決法が、泌尿生殖器系障害の治療及び予防法のための、前立腺特異的抗原（ＰＳＡ）に対する活性化増強型抗体と内皮ＮＯ合成酵素に対する活性化増強型抗体とを含む組み合わせ医薬組成物の形態で示されている。
【課題を解決するための手段】
【００１４】
一態様では、本発明は、ａ）前立腺特異的抗原に対する活性化増強型抗体と、ｂ）内皮ＮＯ合成酵素に対する活性化増強型抗体とを含む組み合わせ医薬組成物を提供する。ある実施形態では、組み合わせ医薬組成物は、前記前立腺特異的抗原に対する活性化増強型抗体及び前記内皮ＮＯ合成酵素に対する活性化増強型抗体を浸透させた固体担体を更に含む。ある変形では、組み合わせ医薬組成物は、錠剤の形態である。
【００１５】
組み合わせ医薬組成物は、前記前立腺特異的抗原に対する活性化増強型抗体をＣ１２、Ｃ３０及びＣ２００ホメオパシー希釈物の混合物の形態で含むことが好ましい。具体的には、前記Ｃ１２、Ｃ３０及びＣ２００ホメオパシー希釈物の混合物を固体担体に浸透させることが意図されている。
【００１６】
組み合わせ医薬組成物は、前記内皮ＮＯ合成酵素に対する活性化増強型抗体をＣ１２、Ｃ３０及びＣ２００ホメオパシー希釈物の混合物の形態で含むことが好ましい。具体的には、前記Ｃ１２、Ｃ３０及びＣ２００ホメオパシー希釈物の混合物を固体担体に浸透させることが意図されている。
【００１７】
前立腺特異的抗原に対する活性化増強型抗体は、モノクローナル抗体、ポリクローナル抗体又は天然の抗体であってよい。具体的には、前立腺特異的抗原に対する活性化増強型抗体がポリクローナル抗体であることが意図されている。内皮ＮＯ合成酵素に対する活性化増強型抗体は、モノクローナル抗体、ポリクローナル抗体又は天然の抗体であってよい。具体的には、内皮ＮＯ合成酵素に対する活性化増強型抗体がポリクローナル抗体であることが意図されている。本発明は、本明細書に記載されている配列及び添付の特許請求の範囲において特許請求されている配列を有する抗原（複数可）に対する活性化増強型抗体を提供する。
【００１８】
ある変形では、組み合わせ医薬組成物は、希釈するごとに振とうしながら連続的に１００倍希釈することによって調製した前立腺特異的抗原に対する活性化増強型抗体を含む。ある変形では、組み合わせ医薬組成物は、希釈するごとに振とうしながら連続的に１００倍希釈することによって調製した内皮ＮＯ合成酵素に対する活性化増強型抗体を含む。具体的には、垂直方向の振とうが意図されている。
【００１９】
別の態様では、本発明は、泌尿生殖器系障害を治療する方法であって、ａ）前立腺特異的抗原に対する活性化増強型抗体及びｂ）内皮ＮＯ合成酵素に対する活性化増強型抗体を組み合わせ医薬組成物の形態で、それを必要とする患者に投与することを含む方法を提供する。
【００２０】
ある実施形態では、組み合わせ医薬組成物を、薬学的に許容される担体、並びに前記担体に浸透させた前記前立腺特異的抗原に対する活性化増強型抗体、及び前記担体に浸透させた前記内皮ＮＯ合成酵素に対する活性化増強型抗体を含む経口用固体剤形の形態で投与する。ある変形では、前記経口用固体剤形は錠剤である。変形及び実施形態が提供される。
【００２１】
本発明の方法態様によれば、組み合わせ医薬組成物は１つから４つの単位剤形で投与することができ、各剤形は１日１回から１日６回投与される。本発明の方法態様によれば、組み合わせ医薬組成物は、以下の通り投与することができる：
−１日当たり丸剤１粒を１回；
−１日当たり丸剤１粒を２回；
−１日当たり丸剤１粒を３回；
−１日当たり丸剤１粒を４回；
−１日当たり丸剤１粒を５回；
−１日当たり丸剤１粒を６回；
−１日当たり丸剤２粒を１回；
−１日当たり丸剤２粒を２回；
−１日当たり丸剤２粒を３回；
−１日当たり丸剤２粒を４回；
−１日当たり丸剤２粒を５回；
−１日当たり丸剤２粒を６回；
−１日当たり丸剤３粒を１回；
−１日当たり丸剤３粒を２回；
−１日当たり丸剤３粒を３回；
−１日当たり丸剤３粒を４回；
−１日当たり丸剤４粒を１回；
−１日当たり丸剤４粒を２回；
−１日当たり丸剤４粒を３回。
【００２２】
本発明の組成物の態様に関して記載されている全ての変形及び実施形態は、本発明の方法態様と一緒に使用することができる。
【００２３】
組み合わせ医薬組成物を追加的な活性成分と同時投与することが具体的に意図されている。ある変形では、追加的な活性成分は、泌尿生殖器系障害の治療について認可されている。変形及び実施形態が意図されている。
【発明を実施するための形態】
【００２４】
本発明は、添付の特許請求の範囲と関連して定義される。特許請求の範囲に関して、以下の用語解説によって関連する定義がもたらされる。
【００２５】
「抗体」という用語は、本明細書で使用される場合、別の分子の特定の空間的な極性の構成に特異的に結合し、それにより、それと相補的であると定義される免疫グロブリンを意味するものとする。特許請求の範囲において列挙されている抗体は、天然、ポリクローナル又はモノクローナルであってよい完全な免疫グロブリン又はその断片を含んでよく、それらとしては、例えば、ＩｇＡ、ＩｇＤ、ＩｇＥ、ＩｇＧ１、ＩｇＧ２ａ、ＩｇＧ２ｂ及びＩｇＧ３、ＩｇＭなどの種々のクラス及びアイソタイプを挙げることができる。その断片としては、Ｆａｂ、Ｆｖ及びＦ（ａｂ’）２、Ｆａｂ’などを挙げることができる。単数形の「抗体（ａｎｔｉｂｏｄｙ）」は、複数形の「抗体（ａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ）」を含む。
【００２６】
「活性化増強型」又は「増強型」という用語はそれぞれ、本明細書において列挙されている抗体に関しては、任意の抗体の最初の溶液のホメオパシーポテンタイゼーション（ｐｏｔｅｎｔｉｚａｔｉｏｎ）の生成物を示すために使用される。「ホメオパシーポテンタイゼーション」とは、ホメオパシーの方法を用いて最初の関連物質の溶液にホメオパシーポーテンシーを付与することを示す。そのように限定するものではないが、「ホメオパシーポテンタイゼーション」は、例えば、連続した希釈を、外部からの処理、特に垂直方向の（機械的な）振とうと組み合わせて繰り返すことを伴ってよい。言い換えれば、ホメオパシーの技術に従って、抗体の最初の溶液を連続して繰り返し希釈し、得られた溶液をそれぞれ多数回、垂直方向に振とうする。溶媒、好ましくは水又は水とエチルアルコールの混合物中の抗体の最初の溶液の好ましい濃度は、約０．５ｍｇ／ｍｌから約５．０ｍｇ／ｍｌまでにわたる。各成分、すなわち、抗体溶液を調製するための好ましい手順は、それぞれ１００倍単位ホメオパシー希釈物（Ｃ１２、Ｃ３０、及びＣ２００）に相当する、抗体の一次マトリックス溶液（母液）を１００１２倍希釈、１００３０倍希釈及び１００２００倍希釈した３種の水希釈物若しくは水−アルコール希釈物の混合物を使用すること、又は、それぞれ１００倍単位ホメオパシー希釈物（Ｃ１２、Ｃ３０及びＣ５０）に相当する抗体の一次マトリックス溶液を１００１２倍希釈、１００３０倍希釈及び１００５０倍希釈した３種の水希釈物若しくは水−アルコール希釈物の混合物を使用することである。ホメオパシーポテンタイゼーションの例は、その全体が参照により明示された目的で本明細書に組み込まれる、米国特許第７，５７２，４４１号及び同第７，５８２，２９４号に記載されている。特許請求の範囲では「活性化増強型」という用語が使用され、実施例では「超低用量」という用語が使用される。「超低用量」という用語は、ホメオパシーにより希釈され、増強された型の物質の研究及び使用によって創出された技術分野における専門用語になった。「超低用量（ｕｌｔｒａ−ｌｏｗ  ｄｏｓｅ）」又は「超低用量（ｕｌｔｒａ−ｌｏｗ  ｄｏｓｅｓ）」という用語は、特許請求の範囲において使用される「活性化増強」型という用語を完全に支持し、それと主に同義であるものとする。
【００２７】
言い換えれば、抗体は、３つの因子が存在すれば、「活性化増強」型又は「増強」型である。第１に、「活性化増強」型抗体は、ホメオパシーの技術分野では広く受け入れられている調製プロセスの生成物である。第２に、「活性化増強」型抗体は、現代薬理学において広く受け入れられている方法によって決定される生物活性を有さなければならない。第３に、「活性化増強」型抗体により示される生物活性は、ホメオパシーのプロセスの最終生成物に分子型抗体が存在することによっては説明することができない。
【００２８】
例えば、活性化増強型抗体は、最初の、単離された分子型抗体を、機械的な振とうなどの外部からの衝撃と併せて連続して多数回希釈することによって調製することができる。濃度低下の過程における外部からの処理は、例えば、超音波、電磁気、又は他の物理的因子に曝露させることによって実現することもできる。その全体が参照により明示された目的で本明細書に組み込まれるＶ．  Ｓｃｈｗａｂｅ  「Ｈｏｍｅｏｐａｔｈｉｃ  ｍｅｄｉｃｉｎｅｓ」、Ｍ．、１９６７年、米国特許第７，２２９，６４８号及び同第４，３１１，８９７号には、ホメオパシーの技術分野において広く受け入れられているホメオパシー増強の方法であるそのようなプロセスが記載されている。この手順により、最初の分子型抗体の分子濃度が均一に低下する。所望のホメオパシーポーテンシーが得られるまでこの手順を繰り返す。個々の抗体について、所要のホメオパシーポーテンシーは、中間希釈物を所望の薬理学的モデルにおいて生物学的試験に供することによって決定することができる。そのように限定するものではないが、「ホメオパシーポテンタイゼーション」は、例えば、外部からの処理、特に垂直方向の（機械的な）振とうと組み合わせて連続した希釈を繰り返すことを伴ってよい。言い換えれば、ホメオパシーの技術に従って、抗体の最初の溶液を連続して繰り返し希釈し、得られた溶液をそれぞれ多数回、垂直方向に振とうする。溶媒、好ましくは水又は水とエチルアルコールの混合物中の抗体の最初の溶液の好ましい濃度は、約０．５ｍｇ／ｍｌから約５．０ｍｇ／ｍｌにわたる。各成分、すなわち、抗体溶液を調製するための好ましい手順は、それぞれ１００倍単位ホメオパシー希釈物Ｃ１２、Ｃ３０及びＣ２００に相当する、抗体の一次マトリックス溶液（母液）を１００１２倍希釈、１００３０倍希釈及び１００２００倍希釈した３種の水希釈物若しくは水−アルコール希釈物の混合物を使用すること、又は、それぞれ１００倍単位ホメオパシー希釈物Ｃ１２、Ｃ３０及びＣ５０に相当する、抗体の一次マトリックス溶液（母液）を１００１２倍希釈、１００３０倍希釈及び１００５０倍希釈した３種の水希釈物若しくは水−アルコール希釈物の混合物を使用することである。所望のポーテンシーをどのように得るかの例も、例えば、明示された目的で参照により組み込まれる、米国特許第７，２２９，６４８号及び同第４，３１１，８９７号において提供される。本明細書に記載の「活性化増強」型抗体に適用可能な手順は、下に詳しく記載されている。
【００２９】
ヒト対象のホメオパシー治療に関してはかなりの量の議論がなされてきた。本発明は、「活性化増強」型抗体を得るために、受け入れられているホメオパシーのプロセスに依拠するが、本発明は、活性を証明するためにはヒト対象におけるホメオパシー単独に依拠するのではない。驚くべきことに、本願の発明者は、認められている薬理学的モデルにおいて、出発分子型抗体を連続して多数回希釈することから最終的に得られた溶媒が、標的希釈物中に分子型抗体の痕跡が存在することとは無関係の決定的な活性を有することを発見し、十分に実証した。本明細書で提供される「活性化増強」型抗体を、生物活性について、広く受け入れられている活性の薬理学的モデルにおいて、適切なｉｎ  ｖｉｔｒｏ実験において、又は適切な動物モデルにおいてｉｎ  ｖｉｖｏで試験した。該実験により、更に以下に提供される、そのようなモデルにおける生物活性の証拠がもたらされた。ヒト臨床試験によって、ヒト療法に首尾よく変換される、動物モデルにおいて観察された活性の証拠ももたらされる。ヒト研究によって、医科学において病的状態として広く認められている特定のヒト疾患又は障害を治療するための、本明細書に記載の「活性化増強」型の利用可能性の証拠ももたらされている。
【００３０】
また、特許請求された「活性化増強」型抗体は、その生物活性が、最初の出発溶液から残っている分子型抗体が存在することによっては説明することができない溶液又は固体調製物のみを包含する。言い換えれば、「活性化増強」型抗体は、最初の分子型抗体の痕跡を含有してよいことが意図されているが、連続して希釈した後に残った分子型抗体は非常に低濃度であるので、当業者は、認められている薬理学的モデルにおいて観察される生物活性が、いかなる程度の妥当性でも残りの分子型抗体に起因すると考えることができない。本発明は特定の理論に限定されるものではないが、本発明の「活性化増強」型抗体の生物活性は、最初の分子型抗体には起因しない。その中に含まれる分子型抗体の濃度が、認められている分析的な技法、例えば、キャピラリー電気泳動及び高速液体クロマトグラフィーなどの検出限界を下回る、液体又は固体の形態の「活性化増強」型抗体が好ましい。その中に含まれる分子型抗体の濃度がアボガトロ数未満である液体又は固体の形態の「活性化増強」型抗体が特に好ましい。分子型の治療用物質の薬理学において、薬理学的反応のレベルが、対象に投与される、又はｉｎ  ｖｉｔｒｏで試験される活性薬物の濃度に対してプロットされた用量反応曲線を作成することは一般的である。任意の検出可能な反応を生じる薬物の最小レベルは、閾値用量として公知である。「活性化増強」型抗体は、もしあれば、分子抗体を、所与の生物学的モデルにおける分子型抗体の閾値用量を下回る濃度で含有することが具体的に意図されており、それが好ましい。
【００３１】
一態様では、本発明は、ａ）前立腺特異的抗原に対する活性化増強型抗体と、ｂ）内皮ＮＯ合成酵素に対する活性化増強型抗体とを含む組み合わせ医薬組成物を提供する。本明細書において上記されている通り、組み合わせの個々の成分のそれぞれは、それ自体の個々の医学的使用について一般に公知である。しかし、本特許出願の発明者らは、驚いたことに、組み合わせを投与することにより、泌尿生殖器系障害の治療の有効性が著しく増大することを発見した。血管化の改善、抗腺腫（抗増殖）効果の増大及び抗炎症効果の増大からなる、適切な実験モデル及び臨床試験による確認の通り、特許請求された、前立腺特異的抗原（ＰＳＡ）に対する活性化増強型抗体及び内皮ＮＯ合成酵素に対する活性化増強型抗体を混合した組み合わせ医薬組成物により、予想外の相乗治療効果が確実になる。提案された医薬製品は、前立腺及び尿路下部の機能的状態の正常化、尿力学的機能（ｕｒｉｄｉｎａｍｉｃ  ｆｕｎｃｔｉｏｎ）の改善及び勃起不全の減少に寄与し、かつＰＳＡレベルの正常化に寄与する。提案された製品は、保存療法の間だけではなく、前立腺のサイズを縮小するために外科的手順を受けた良性前立腺過形成の患者において再生−修復プロセスを活性化するため、及び良性前立腺肥大症を治療するために外科的な手順を受けた患者において外科手術後の合併症の可能性を減らすためにも使用することができる。更に、提案された技術的解決法により、良性前立腺肥大症（ＢＰＨ）、前立腺炎及び他の前立腺障害の患者の生活の質が改善し、泌尿障害の出現が減少し、自律神経（ｖｅｇｅｔａｔｉｖｅ）の安定化効果が生じ、精子産生性が改善される。この技術的結果は、内皮ＮＯ合成酵素に対する活性化増強型抗体の、それらを同時に組み合わせて特に包括的な薬剤として使用する間の伝達細胞内シグナルに対する効果に起因するＰＳＡに対する活性化増強型抗体の抗増殖性活性及び抗炎症活性を高める、内皮ＮＯ合成酵素に対する活性化された非常に強力な型の抗体の内皮保護的性質により正当化される。
【００３２】
同時に、提案された発明は、広範囲の治療有効性を特徴とし、前立腺の問題及び勃起不全を伴う種々の泌尿生殖器系障害の治療、並びに複合療法の一部に用いることができる。
【００３３】
本発明の医薬組成物により、泌尿生殖器系障害の治療及び予防法のために利用可能な調製物の集積が拡大する。
【００３４】
別の態様では、本発明は、泌尿生殖器系障害を治療する方法であって、ａ）前立腺特異的抗原に対する活性化増強型抗体及びｂ）内皮ＮＯ合成酵素に対する活性化増強型抗体を組み合わせ医薬組成物の形態でそれを必要とする患者に投与することを含む方法を提供する。
【００３５】
１つの変形では、泌尿生殖器系障害は、Ｉ及びＩＩ度の良性前立腺肥大症、急性及び慢性前立腺炎、並びに種々の起源の勃起不全を含めた前立腺障害を含む。
【００３６】
１つの変形では、泌尿生殖器系障害は前立腺障害である。
【００３７】
本発明のこの態様の１つの変形では、前立腺障害は良性前立腺肥大症である。
【００３８】
本発明のこの態様の別の変形では、前立腺障害はＩＩ度の良性前立腺肥大症である。
【００３９】
本発明のこの態様の別の変形では、前立腺障害は急性前立腺炎又は慢性前立腺炎である。
【００４０】
別の変形では、泌尿生殖器系障害は種々の起源の勃起不全である。
【００４１】
本発明の方法態様によれば、組み合わせ医薬組成物は１つから４つの単位剤形で投与することができ、各剤形は１日１回から１日６回投与される。本発明の方法態様によれば、組み合わせ医薬組成物は、以下の通り投与することができる：
−１日当たり丸剤１粒を１回；
−１日当たり丸剤１粒を２回；
−１日当たり丸剤１粒を３回；
−１日当たり丸剤１粒を４回；
−１日当たり丸剤１粒を５回；
−１日当たり丸剤１粒を６回；
−１日当たり丸剤２粒を１回；
−１日当たり丸剤２粒を２回；
−１日当たり丸剤２粒を３回；
−１日当たり丸剤２粒を４回；
−１日当たり丸剤２粒を５回；
−１日当たり丸剤２粒を６回；
−１日当たり丸剤３粒を１回；
−１日当たり丸剤３粒を２回；
−１日当たり丸剤３粒を３回；
−１日当たり丸剤３粒を４回；
−１日当たり丸剤４粒を１回；
−１日当たり丸剤４粒を２回；
−１日当たり丸剤４粒を３回。
【００４２】
泌尿生殖器系障害を治療するための本発明の医薬組成物は、活性成分を主に１：１の体積比で含有する。
【００４３】
医薬製品は主に以下の通りに調製する。
【００４４】
本発明による組み合わせ医薬組成物は、液体の形態であっても固体の形態であってもよい。医薬組成物中に含まれる活性化増強型の抗体のそれぞれは、最初の分子型抗体から、ホメオパシーの技術分野で受け入れられているプロセスによって調製される。出発抗体は、公知のプロセスに従って、例えば、どちらも参照により本明細書に組み込まれる、Ｉｍｍｕｎｏｔｅｃｈｎｉｑｕｅｓ、Ｇ．  Ｆｒｉｍｅｌ，  Ｍ．、「Ｍｅｄｉｔｓｙｎａ」、１９８７年、９〜３３頁；「Ｈｕｍ．  Ａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ．  Ｍｏｎｏｃｌｏｎａｌ  ａｎｄ  ｒｅｃｏｍｂｉｎａｎｔ  ａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ，  ３０  ｙｅａｒｓ  ａｆｔｅｒ」、Ｌａｆｆｌｙ  Ｅ．、Ｓｏｄｏｙｅｒ  Ｒ．、２００５年、１４巻、１〜２号、３３〜５５頁に記載の通り調製されたモノクローナル抗体、又はポリクローナル抗体であってよい。
【００４５】
モノクローナル抗体は、例えば、ハイブリドーマ技術によって得ることができる。このプロセスの最初の段階は、ポリクローナル抗血清の調製の過程においてすでに開発された原理に基づいた免疫化を含む。研究のさらなる段階は、同一の特異性を有する抗体のクローンを生成するハイブリッド細胞の作製を伴う。それらの別々の単離は、ポリクローナル抗血清を調製する場合と同じ方法を使用して実施する。
【００４６】
ポリクローナル抗体は、動物の能動免疫によって得ることができる。この目的で、例えば、適切な動物（例えば、ウサギ）に、適切な抗原：前立腺特異的抗原及び内皮ＮＯ合成酵素の一連の注射を受けさせる。動物の免疫系により、対応する抗体が生成し、それを公知の様式で動物から採取する。この手順により、単一特異性の抗体が豊富な血清を調製することが可能になる。
【００４７】
所望であれば、抗体を含有する血清は、例えば、アフィニティークロマトグラフィー、塩析による分画、又はイオン交換クロマトグラフィーを使用して精製することができる。得られた精製抗体濃縮血清を、活性化増強型の抗体を調製するための出発材料として使用することができる。得られた、溶媒、好ましくは水又は水とエチルアルコールの混合物中の抗体の最初の溶液の好ましい濃度は、約０．５ｍｇ／ｍｌから約５．０ｍｇ／ｍｌまでにわたる。
【００４８】
各成分を調製するための好ましい手順は、それぞれ１００倍単位ホメオパシー希釈物Ｃ１２、Ｃ３０及びＣ２００に相当する、抗体の一次マトリックス溶液を１００１２倍希釈、１００３０倍希釈及び１００２００倍希釈した３種の水−アルコール希釈物の混合物を使用することである。固体剤形を調製するために、固体担体を、ホメオパシーのプロセスによって得られた所望の希釈物で処理する。本発明の組み合わせの固体単位剤形を得るために、担体集団に各希釈物を浸透させる。どちらの浸透の階数も、所望の組み合わせ剤形を調製するために適している。
【００４９】
好ましい実施形態では、本発明の組み合わせを含む活性化増強型を調製するための出発材料は、前立腺特異的抗原に対するポリクローナル抗体及び内皮ＮＯ合成酵素に対するポリクローナル抗体である。その後の活性化増強型を調製するために０．５〜５．０ｍｇ／ｍｌの濃度の最初の（マトリックス）溶液を使用する。
【００５０】
医薬組成物を調製するために前立腺特異的抗原に対するポリクローナル抗体及び内皮ＮＯ合成酵素に対するポリクローナル抗体を使用することが好ましい。
【００５１】
内皮ＮＯ合成酵素に対するポリクローナル抗体は、ウサギの免疫化のための免疫原（抗原）としてのアジュバント及び以下の配列のウシの内皮ＮＯ合成酵素の全分子を用いて得られる：
配列番号１
2013538791.tif 000002
2013538791.tif 000003
2013538791.tif 000004
2013538791.tif 000005
2013538791.tif 000006
【００５２】
内皮ＮＯ合成酵素に対するポリクローナル抗体は、以下の配列のヒト内皮ＮＯ合成酵素の全分子を用いて得ることができる：
配列番号２
2013538791.tif 000007
2013538791.tif 000008
2013538791.tif 000009
2013538791.tif 000010
2013538791.tif 000011
【００５３】
内皮ＮＯ合成酵素に対するポリクローナル抗体を得るためには、例えば、以下の配列から選択された内皮ＮＯ合成酵素の断片を用いることも可能である：
配列番号３
2013538791.tif 000012
配列番号４
2013538791.tif 000013
配列番号５
2013538791.tif 000014
配列番号６
2013538791.tif 000015
配列番号７
2013538791.tif 000016
配列番号８
2013538791.tif 000017
【００５４】
ＮＯ合成酵素に対する出発ポリクローナル抗体を調製するための例示的な手順は、以下の通り説明することができる：血液試料を採取する７〜９日前に、ウサギに１〜３回静脈内注射して、ウサギの血流中のポリクローナル抗体のレベルを上昇させる。免疫化したら、抗体レベルを検査するために血液試料を取得する。一般には、可溶性抗原の免疫応答の最大レベルは、最初に注射した後４０〜６０日以内に到達される。第１の免疫化サイクルの終了後、ウサギを３０日のリハビリテーション期間におき、その後、更に１〜３回静脈内注射して再免疫化を実施する。
【００５５】
所望の抗体を含有する抗血清を得るために、ウサギから、免疫化されたウサギの血液を採取し、５０ｍｌの遠心管に入れる。管の側面に形成された生成物である血餅を木べらで除去し、管の中心の血餅にロッドを入れる。次いで、血液を冷蔵庫に約４０℃の温度で一晩置く。次の日に、へらの上の血餅を除去し、残りの液体を１分当たり１３，０００回転で１０分間遠心分離する。上清の流体が標的抗血清である。得られた抗血清は一般には黄色である。抗血清に、２０％のＮａＮ３（重量濃度）を最終濃度が０．０２％になるまで加え、使用する前に、−２０℃の温度で凍結した状態で（又は、ＮａＮ３の添加なしで−７０℃の温度で）保管する。内皮ＮＯ合成酵素に対する標的抗体を抗血清から分離するためには、以下の固相吸収の連続が適している：
（ａ）ウサギの抗血清１０ｍｌを０．１５ＭのＮａＣｌで２倍希釈し、その後、６．２６ｇのＮａ２ＳＯ４を加え、混合し、４℃で約１２〜１６時間インキュベートする；
（ｂ）沈渣を遠心分離によって除去し、リン酸緩衝液１０ｍｌ中に溶解し、同じ緩衝液に対して室温で一晩にわたって透析する；
（ｃ）遠心分離によって沈渣を除去した後、溶液をリン酸緩衝液によって平衡させたＤＥＡＥ−セルロースのカラムにのせる；
（ｄ）溶出液の２８０ナノメートルにおける光学濃度を測定することによって抗体画分を決定する。
【００５６】
単離された粗製の抗体を、アフィニティークロマトグラフィー法を使用し、得られた抗体を、クロマトグラフィー媒体の不溶性マトリックス上にある内皮ＮＯ合成酵素に付着させることによって精製し、その後濃縮した水性塩類溶液により溶出させる。
【００５７】
得られた緩衝溶液を、活性化増強型の抗体を調製するために用いるホメオパシー希釈プロセスの最初の溶液として使用する。内皮ＮＯ合成酵素に対する抗原精製ポリクローナルウサギ抗体の最初のマトリックス溶液の好ましい濃度は０．５〜５．０ｍｇ／ｍｌ、好ましくは、２．０〜３．０ｍｇ／ｍｌである。
【００５８】
前立腺特異的抗原に対するポリクローナル抗体は、アジュバントを使用して、内皮ＮＯ合成酵素抗体に関して記載されている方法と同様の方法によって得ることもできる。以下の配列のヒト前立腺特異的抗原の分子全体を、ウサギを免疫化するための免疫原（抗原）として使用することができる：
配列番号９
2013538791.tif 000018
【００５９】
前立腺特異的抗原に対するポリクローナル抗体を得るために、例えば、以下の配列から選択される前立腺特異的抗原の断片を使用することも可能である：
配列番号１０
2013538791.tif 000019
配列番号１１
2013538791.tif 000020
配列番号１２
2013538791.tif 000021
配列番号１３
2013538791.tif 000022
配列番号１４
2013538791.tif 000023
配列番号１５
2013538791.tif 000024
配列番号１６
2013538791.tif 000025
配列番号１７
2013538791.tif 000026
配列番号１８
2013538791.tif 000027
配列番号１９
2013538791.tif 000028
【００６０】
組み合わせの各成分の活性化増強型は、最初の溶液から、ホメオパシーポテンタイゼーションによって、好ましくは、約０．５ｍｇ／ｍｌから約５．０ｍｇ／ｍｌまでの、溶媒、好ましくは水又は水とエチルアルコールの混合物中の抗体の最初の溶液の濃度から出発して、（最初の溶液から開始する）前の溶液のそれぞれ１部を９部（１０倍希釈（ｄｅｃｉｍａｌ  ｄｉｌｕｔｉｏｎ））、又は９９部（１００倍希釈）、又は９９９部（１，０００倍希釈（ｍｉｌｌｅｓｉｍａｌ  ｄｉｌｕｔｉｏｎ））の中性の溶媒に入れて段階希釈することによる比例的な濃度低下の方法を外部からの衝撃と併せて用いて調製することができる。外部からの衝撃は、各希釈物を多数回垂直方向に振とうすること（ダイナマイゼーション）を伴うことが好ましい。その後の、所要のポーテンシーレベル、又は希釈因子に至るまでの希釈のそれぞれには別々の容器を使用することが好ましい。この方法は、ホメオパシーの技術分野では広く受け入れられている。例えば、明示された目的で参照により本明細書に組み込まれるＶ．  Ｓｃｈｗａｂｅ  「Ｈｏｍｅｏｐａｔｈｉｃ  ｍｅｄｉｃｉｎｅｓ」、Ｍ．、１９６７年、１４〜２９頁を参照されたい。
【００６１】
例えば、１２−１００倍希釈物（Ｃ１２と示される）を調製するために、３．０ｍｇ／ｍｌの濃度の前立腺特異的抗原に対する抗体の最初のマトリックス溶液１部を、中性の、水を含む又は水−アルコールを含む溶媒（好ましくは、１５％エチルアルコール）９９部中に希釈し、次いで何回も（１０回以上）垂直方向に振とうして、第１の１００倍単位希釈物（Ｃ１と示される）を創出する。第１の１００倍希釈物Ｃ１から第２の１００倍単位希釈物（Ｃ２）を調製する。この手順を１１回繰り返して第１２の１００倍単位希釈物Ｃ１２を調製する。したがって、第１２の１００倍単位希釈物Ｃ１２は、異なる容器内で、３．０ｍｇ／ｍｌの濃度の抗体の最初のマトリックス溶液１部を中性の溶媒９９部中に１２回段階希釈することによって得られる溶液を表し、１００倍単位ホメオパシー希釈物Ｃ１２に相当する。関連する希釈因子を用いて同様の手順を実施して所望の希釈物を得る。中間希釈物を所望の生物学的モデルにおいて試験して活性を確認することができる。本発明の組み合わせを含む抗体の好ましい活性化増強型は、各活性化増強型についてＣ１２希釈物、Ｃ３０希釈物及びＣ２００希釈物である。活性な物質の種々のホメオパシー希釈物（主に１００倍単位希釈物）の混合物を生物活性のある液体成分として使用する場合、組成物（例えば、Ｃ１２、Ｃ３０、Ｃ５０、Ｃ２００）の各成分は、上記の手順に従って、最後から二番目の希釈物が得られるまで（例えば、それぞれＣ１１、Ｃ２９、及びＣ１９９まで）別々に調製し、次いで各成分１部を、混合物の組成に従って１つの容器に加え、所要量（例えば、１００倍希釈するためには９７部）の溶媒と混合する。
【００６２】
活性な物質を種々のホメオパシー希釈物、例えば、１０倍希釈物及び／又は１００倍希釈物（Ｄ２０、Ｃ３０、Ｃ１００又はＣ１２、Ｃ３０、Ｃ５０又はＣ１２、Ｃ３０、Ｃ２００など）の混合物として使用することが可能であり、その効率は、希釈物を適切な生物学的モデル、例えば、本明細書の実施例に記載のモデルにおいて試験することによって実験的に決定される。
【００６３】
増強及び濃度低下の過程では、垂直方向の振とうを、超音波、電磁場への外部からの曝露又はホメオパシーの技術分野で受け入れられている任意の同様の外部からの衝撃手順と置き換えることができる。
【００６４】
本発明の医薬組成物の固体単位剤形は、薬学的に許容される固体担体に、主に１：１：１の比率で混合し、液体剤形で用いる、活性化増強型、活性成分の水溶液又は水−アルコール溶液の混合物を浸透させるによって調製することができる。或いは、必要な希釈物のそれぞれを継続的に担体に浸透させることができる。
【００６５】
好ましくは、固体単位剤形の医薬組成物は、活性化増強型抗体の水希釈物又は水−アルコール希釈物を予め染み込ませた薬学的に許容される担体の顆粒剤から調製する。固体剤形は、錠剤、カプセル剤、ロゼンジ、及びその他を含めた製薬技術分野で公知の任意の形態であってよい。不活性な医薬成分として、医薬品の製造において使用されるグルコース、スクロース、マルトース、デンプン、イソマルトース、イソマルト及び他の単糖、オリゴ糖及び多糖、並びに上記の不活性な医薬成分と、潤滑剤、崩壊剤、結合剤及び着色料を含めた他の薬学的に許容される賦形剤、例えば、イソマルト、クロスポビドン、シクラミン酸ナトリウム、サッカリンナトリウム、無水クエン酸など）との技術的混合物を使用することができる。好ましい担体は、ラクトース及びイソマルトである。薬剤剤形は、標準の製薬用賦形剤、例えば、結晶セルロース及びステアリン酸マグネシウムを更に含んでよい。
【００６６】
固体単位剤形の調製物の例は下に記載されている。経口用の固体形態を調製するために、ラクトースの顆粒１００〜３００μｍを、前立腺特異的抗原に対する活性化増強型抗体及び内皮ＮＯ合成酵素に対する活性化増強型抗体の水溶液又は水−アルコール溶液に、ラクトース５ｋｇ又は１０ｋｇに対して抗体溶液１ｋｇ（１：５〜１：１０）の比率で浸透させる。浸透に影響を及ぼすために、ラクトース顆粒を、煮沸ベッドプラント（例えば、Ｈｕｔｔｌｉｎ  ＧｍｂＨの「Ｈｕｔｔｌｉｎ  Ｐｉｌｏｔｌａｂ」）中の流動煮沸ベッド中で染み込ませるための注水に曝露させ、その後、４０℃未満の加熱した空気の流れによって乾燥する。活性化増強型抗体を染み込ませた乾燥顆粒（１０〜３４重量部）の推定量をミキサーに入れ、２５〜４５重量部の「染み込ませていない」純粋なラクトース（処理効率を低下させることなく技術的なプロセスの費用を縮小し、それを単純化及び加速するために使用する）と、０．１〜１重量部のステアリン酸マグネシウム、及び３〜１０重量部の結晶セルロースと一緒に混合する。得られた錠剤集団を均一に混合し、（例えば、Ｋｏｒｓｃｈ−ＸＬ４００打錠機において）直接乾式プレスすることによって錠剤化して、１５０〜５００ｍｇ、好ましくは、３００ｍｇの丸剤を形成する。錠剤化した後、活性化増強型抗体の組み合わせの水−アルコール溶液（丸剤１粒当たり３．０〜６．０ｍｇ）を染み込ませた丸剤３００ｍｇを得る。担体に浸透させるために使用する組み合わせの各成分は、１００倍単位ホメオパシー希釈物、好ましくは、Ｃ１２、Ｃ３０及びＣ２００の混合物の形態である。
【００６７】
本発明はいかなる特定の理論にも限定されるものではないが、本明細書に記載の活性化増強型抗体は、分子型抗体を、そのような分子型に帰する生物活性を有するのに十分な量では含有しないと考えられる。本発明の組み合わせ薬物（組み合わせ医薬組成物）の生物活性は、添付の実施例において十分に実証されている。
【実施例】
【００６８】
添付の非限定的な実施例を参照して本発明を更に例示する。
【００６９】
実施例１
ラットにおける良性前立腺肥大症（ＢＰＨ）のモデルにおける、最初のマトリックス溶液（濃度２．５ｍｇ／ｍｌ）を１００１２倍、１００３０倍、１００２００倍に限外希釈することによって得られ、１００倍単位ホメオパシー希釈物Ｃ１２、Ｃ３０、Ｃ２００の混合物に相当する、超低用量（ＵＬＤ）の、抗原に対してアフィニティー精製した、前立腺特異的抗原に対する活性化増強型のウサギポリクローナル抗体（抗ＰＳＡ）及び内皮ＮＯ合成酵素に対する活性化増強型のウサギポリクローナル抗体（抗ｅＮＯＳ）（ＵＬＤの抗ＰＳＡ＋抗ｅＮＯＳ）の有効性について考察した実験的試験。
【００７０】
ＢＰＨは、男性において広範に広まっている泌尿器障害の１つである。この障害が発生する危険性は、年齢とともに増加する：４０歳超の男性のおよそ１０％がＢＰＨを有する；６０歳を過ぎると、その数は３０〜４０％に至るまで増加する。良性前立腺肥大症は、排尿に関する問題（排尿頻度の増加、偽尿意（ｆａｌｓｅ  ｕｒｇｅｓ）、夜間頻尿、尿の流れが弱いこと又は断続的であること、及び残尿感（ｓｅｎｓａｔｉｏｎ  ｏｆ  ｉｎｃｏｍｐｌｅｔｅ  ｂｌａｄｄｅｒ  ｅｍｐｔｙｉｎｇ）を含む）を伴う前立腺組織の過形成と定義することができる。ＢＰＨの症状は、患者の生活の質に著しく影響を及ぼす。これは、進行性疾患であり、適切な治療をしなければ、急性の尿閉、排尿周期（ｖｏｉｄｉｎｇ  ｃｙｃｌｅ）の混乱、腎不全などの重篤な合併症につながる恐れがある。
【００７１】
げっ歯類におけるＢＰＨモデルの１つは、前立腺の肥大を引き起こすホルモン誘導性前立腺炎である。これを実現するために、げっ歯類において、６０日間にわたり、げっ歯類にスルピリドを４０ｍｇ／ｋｇの量で腹腔内に注射することによって高プロラクチン血症を誘導する（Ｃｏｐｐｅｎｏｌｌｅ  Ｖ．Ｆ．ら  Ｅｆｆｅｃｔｓ  ｏｆ  ｈｙｐｅｒｐｒｏｌａｃｔｉｎｅｍｉａ  ｏｎ  ｒａｔ  ｐｒｏｓｔａｔｅ  ｇｒｏｗｔｈ：ｅｖｉｄｅｎｃｅ  ｏｆ  ａｎｄｒｏｇｅｎｏ−ｄｅｐｅｎｄｅｎｃｅ  ／／  Ａｍ．  Ｊ．  Ｐｈｙｓｉｏｌ．  Ｅｎｄｏｃｒｉｎｏｌ．  Ｍｅｔａｂ．  ２００１年、２８０巻：Ｅ１２０〜Ｅ１２９頁）。
【００７２】
ラットにおけるこの良性前立腺過形成（ＢＰＨ）のモデルにおける超低用量の抗ＰＳＡ＋抗ｅＮＯＳの有効性についての試験期間中、雄のｗｉｓｔａｒラット３０匹（８ヶ月、体重６００〜６５０ｇ）を用いた。ラット１０匹をインタクトとした。残りのラットに、前立腺肥大を誘導し（６０日間にわたり、スルピリドを４０ｍｇ／ｋｇの量で腹腔内に注射した）、同時に、スルピリド蒸留水（対照群、ｎ＝１０；１０ｍｌ／ｋｇ）又は超低用量の抗ＰＳＡ＋抗ｅＮＯＳ（ｎ＝１０；１０ｍｌ／ｋｇ）を胃内に加えた。
【００７３】
６０日の間に、前立腺の重量係数（前立腺の重量とげっ歯類の体重の比率）、前立腺の体積及び密度、前立腺における間質／上皮比（ｓｔｒｏｍａｌ−ｅｐｉｔｈｅｌｉａｌ  ｒａｔｉｏ）（臓器内の結合組織と分泌組織の比率を示す値）、並びにプロラクチン受容体の血中濃度（高プロラクチン血症の間接的な指標）を測定した。
【００７４】
スルピリドを注射した結果として、ラットにおいて高プロラクチン血症が発生し（プロラクチン及び成長ホルモンを制御しているプロラクチン受容体のレベルが、対照群において、インタクト群と比較して８３．３％上昇した）、これにより、対照群と比較して、前立腺の重量係数が５１．９％増加し（ｐ＜０．０５）また、その体積が３３．３％増加した（ｐ＜０．０５）（表１）。同時に、分泌組織の結合性組織への置き換えが起こり（間質／上皮比が２９．６％減少する、ｐ＜０．０５）、これは炎症を示している。
【００７５】
前立腺肥大のラットに超低用量の抗ＰＳＡ＋抗ｅＮＯＳを導入することにより、プロラクチン受容体のレベルが低下し（４０．６％、ｐ＜０．０５、対照群と比較して）、前立腺の重量係数及び体積が減少し（それぞれ２２．０％及び４１．７％、ｐ＜０．０５）、炎症も消失した（間質／上皮比はインタクトラットと異ならなかった）。
【００７６】
【表１】
2013538791.tif 000029
注：＊−差異対インタクトはｐ＜０．０５で有意である
＃−差異対対照はｐ＜０．０５で有意である
表１．ホルモン誘導性前立腺肥大の条件下における、前立腺に対する超低用量の抗ＰＳＡ＋抗ｅＮＯＳの効果
【００７７】
したがって、提案された超低用量の抗ＰＳＡ＋抗ｅＮＯＳの医薬製品は、良性前立腺肥大症の実験モデル（ホルモン誘導性炎症）の条件下で有効である。
【００７８】
実施例２
良性前立腺過形成の患者の治療における提唱された医薬組成物の性質を試験するために、最初のマトリックス溶液を１００１２倍、１００３０倍、１００２００倍に限外希釈（ｕｌｔｒａ  ｄｉｌｕｔｉｏｎ）することによって作製され、１００倍単位ホメオパシー希釈物Ｃ１２、Ｃ３０、Ｃ２００の混合物に相当する、超低用量（ＵＬＤ）の、前立腺特異的抗原に対する活性化増強型のポリクローナルアフィニティー精製ウサギ抗体（抗ＰＳＡ）及び内皮ＮＯ合成酵素に対する活性化増強型のポリクローナルアフィニティー精製ウサギ抗体（抗ｅＮＯＳ）（ＵＬＤの抗ＰＳＡ＋抗ｅＮＯＳ）の水−アルコール溶液を含有する医薬組成物を染み込ませた丸剤（丸剤１粒当たり６ｍｇ）３００ｍｇ、及び、最初のマトリックス溶液を１００１２倍、１００３０倍、１００２００倍に限外希釈することによって得られ、１００倍単位ホメオパシー希釈物Ｃ１２、Ｃ３０、Ｃ２００の混合物に相当する、超低用量（ＵＬＤ）の、前立腺特異的抗原に対する活性化増強型のポリクローナルアフィニティー精製ウサギ抗体（ＵＬＤの抗ＰＳＡ）の水−アルコール溶液を含有する医薬組成物を染み込ませた丸剤（丸剤１粒当たり３ｍｇ）３００ｍｇを使用した。
【００７９】
良性前立腺過形成（ＢＰＨ）は、男性において最も頻繁に起こる障害の１つである（Ｂｒｕｓｋｅｗｉｔｚ  Ｒ．Ｃ．、２００３年；Ｒｏｓｅｎ  Ｒ．、２００３年）：一方では、Ｒｕｓｓｉａで行われた疫学調査により、ＢＰＨの頻度が４０〜４９歳における１１．３％から８０歳における８１．４％まで段階的に増加することが指摘されており（Ｇｏｒｉｌｏｖｓｋｉｙ、Ｌ．Ｍ．、１９９９年）；他方では、ＷＨＯによって行われた人口統計調査により、６０歳を超える集団において有意に増加し、他のいずれの年齢群の増大にも勝ることが確認されている。
【００８０】
良性前立腺過形成の主要な症状は、下部尿路の症状であり、これは、著しい不快感及び生活の質の低下を引き起こす恐れがある（Ｂｒｕｓｋｅｗｉｔｚ  Ｒ．Ｃ．、２００３年；Ｌｅｐｏｒ  Ｈ．、２００４年；Ｏ’Ｌｅａｒｙ  Ｍ．Ｐ．、２００５年）。重篤な場合、この疾患は、急性の尿閉、尿路感染症、赤尿症、腎不全などの合併症を伴う恐れがある（Ｓｔｅｐａｎｏｖ、Ｖ．Ｎ．、１９９９年；Ｊａｃｏｂｓｅｎ  Ｓ．Ｊ．、１９９７年；Ｌｅｐｏｒ  Ｈ．、２００４年）。ＢＰＨはまた、患者における勃起不全の発生にも関連する（Ｂｒｕｓｋｅｗｉｔｚ  Ｒ．Ｃ．、２００３年；Ｄａｌｙ  ＭＰ、２００５年）。
【００８１】
良性前立腺肥大（ＢＰＨ）によって引き起こされる排尿障害の改善におけるＵＬＤの抗ＰＳＡ＋ＵＬＤの抗ｅＮＯＳを含有する医薬組成物及びＵＬＤの抗ＰＳＡを含有する医薬組成物の有効性及び安全性の非盲検比較並行群試験に、組み入れ／除外基準に従って選択された患者４０人を含めた。患者を２群に無作為化し、一方の群（ｎ＝２１）は、１２週間の間、ＵＬＤの抗ＰＳＡ＋抗ｅＮＯＳの丸剤１粒を１日３回受け、他方の群（ｎ＝１９）は、１２週間の間、ＵＬＤの抗ＰＳＡの丸剤１粒を１日３回受けた。これらの群では、年齢、ＢＰＨの症状の重症度、排尿パラメータ及び前立腺体積は同程度であった。
【００８２】
試験には、６ヶ月以上、ＩＰＳＳ≧１３、経直腸超音波検査による前立腺体積≧３０ｃｍ３、最大の尿流速度≧４ｍｌ／秒かつ≦１５ｍｌ／秒及び最小残尿体積が１２５ｍｌに相当する、ＰＳＡレベル≦４ｎｇ／ｍｌに対応する下部尿路の症状を伴うＢＰＨの病歴を有する４５歳を超える患者を含めた。必要な組み入れ基準は、医療記録に以下の薬剤の摂取が存在しないことである：フィナステリド、デュタステリド、又は他の実験的な薬物、この試験に組み入れられる前の６ヶ月、α１−アドレナリン受容体遮断薬及び薬草剤、この試験に組み入れられる前の４週間、ホスホジエステラーゼ５型の任意の阻害剤及び他の勃起不全治療、この試験に組み入れられる前の４週間。
【００８３】
この試験には、経尿道前立腺切除術、温熱療法、経尿道的ニードルアブレーション法、ステント血管新生術及び他のものを含めたＢＰＨの浸潤性の治療方法を受けた患者；悪性腫瘍性疾患、急性排尿遅延、膀胱結石、尿道狭窄、マリョン病、活動性炎症の段階にある泌尿生殖器系感染症及びその他を有する患者は含めなかった。
【００８４】
医薬組成物の臨床的な有効性を、ＩＰＳＳ質問表（Ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ  Ｐｒｏｓｔａｔｅ  Ｓｙｍｐｔｏｍ  Ｓｃｏｒｅ）を用いて評価した下部尿路の臨床症状の改善、排尿パラメータ（最大尿流速度及び平均尿流速度、排尿体積、残尿体積）、及び経尿道の超音波（ＴＵ）のデータに基づく前立腺体積によって評価し、また、勃起機能も、ＩＩＥＦ質問表（Ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ  Ｉｎｄｅｘ  ｏｆ  Ｅｒｅｃｔｉｌｅ  Ｆｕｎｃｔｉｏｎ）から得られたデータに基づいて評価した。試験の結果が表２及び３に示されている。
【００８５】
【表２】
2013538791.tif 000030
１−分子は、改善を示している患者数（ｎ）であり、分母はこの試験の患者の総数（Ｎ）である。
【００８６】
【表３】
2013538791.tif 000031
＊−ベースラインに対してｐ＜０．０５；＊＊−ベースラインに対してｐ＜０．０１；＊＊＊−ベースラインに対してｐ＜０．００１
＃＃−ＵＬＤの抗ＰＳＡに対してｐ＜０，０１
２は、ベースラインと比較した低下を％で示す、平均の群値
表３．  閉塞性症状及び刺激性症状の下位尺度のダイナミクス、及びＩＰＳＳ質問表の質問７
【００８７】
所与のデータにより、ＵＬＤの抗ＰＳＡと、ＵＬＤの抗ＰＳＡ＋ＵＬＤの抗ｅＮＯＳはどちらを使用しても、患者の下部尿路の症状が有効に治療され、平均尿流速度及び最大尿流速度が増大し、生活の質が改善したことが確認される（表２２）。期間は長くなかったので（１２週間）、前立腺体積の減少はいずれの試験群においても観察されなかった。排尿体積は５２．６％の患者においてのみ増加し、その群の平均では、ベースライン値と比較して１１．８ｍｌ（５．４％）の排尿体積のいくらかの統計的に有意でない減少が示され、ＵＬＤの抗ＰＳＡは排尿体積に影響を及ぼさなかった。同時に、ＵＬＤの抗ＰＳＡ＋ＵＬＤの抗ｅＮＯＳで治療した患者では、７１．４％において排尿体積の増加が示され、平均では、体積の増加はベースラインと比較して４８．３ｍｌ（２３．７％）であった。
【００８８】
ＩＰＳＳ下位尺度による閉塞性症状及び刺激性症状のダイナミクスの分析並びに夜間頻尿のエビデンス（ＩＰＳＳの質問７）により、どちらの医薬組成物も、閉塞症及び刺激性症状の減少、同様に夜間頻尿症状の減少に寄与することが示された。同時に、ＵＬＤの抗ＰＳＡ＋抗ｅＮＯＳは、ＵＬＤの抗ＰＳＡと比較して、下部尿路の刺激性症状の減少（２８．２％対４０．３％、ｐ＜０．０５）及び夜間排尿衝動の減少（２．０％対３７．７％）においてより有効であった。
【００８９】
ＵＬＤの抗ＰＳＡ＋ＵＬＤの抗ｅＮＯＳは、患者における勃起機能の改善においても、ＵＬＤの抗ＰＳＡと比較してより有効であることに留意すべきである。ＵＬＤの抗ＰＳＡ＋ＵＬＤの抗ｅＮＯＳ群では、総ＩＩＥＦ（勃起不全の国際的な指数（Ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ  Ｉｎｄｅｘ  ｏｆ  Ｅｒｅｃｔｉｌｅ  Ｄｙｓｆｕｎｃｔｉｏｎ））スコアは、患者において１９％増加し（ＵＬＤの抗ＰＳＡ群では１０．５％）、ＩＩＥＦスコアの増加の平均はＵＬＤの抗ＰＳＡ＋ＵＬＤの抗ｅＮＯＳ群においては８％であったのに対し、ＵＬＤの抗ＰＳＡ群では４．５％であった。
【００９０】
医薬組成物により、優れた安全性プロファイルが示され、試験期間中に、投与した薬剤に関連する有害作用は観察されなかった。
【００９１】
したがって、良性前立腺過形成によって引き起こされる排尿問題の治療において示されたＵＬＤの抗ＰＳＡ＋ＵＬＤの抗ｅＮＯＳの有効性はＵＬＤの抗ＰＳＡの有効性と比較して優れていた。更に、患者の勃起機能に対して、ＵＬＤの抗ＰＳＡと比較してＵＬＤの抗ＰＳＡ＋ＵＬＤの抗ｅＮＯＳのより大きな正の効果が明らかになった。
【００９２】
実施例３
ラットにおける慢性前立腺炎のモデルにおける、最初のマトリックス溶液（濃度２．５ｍｇ／ｍｌ）を１００１２倍、１００３０倍、１００２００倍に限外希釈することによって得られ、１００倍単位ホメオパシー希釈物Ｃ１２、Ｃ３０、Ｃ２００の混合物に相当する、超低用量（ＵＬＤ）の、抗原に対してアフィニティー精製した、前立腺特異的抗原に対する活性化増強型のウサギポリクローナル抗体（抗ＰＳＡ）及び内皮ＮＯ合成酵素に対する活性化増強型のウサギポリクローナル抗体（抗ｅＮＯＳ）（ＵＬＤの抗ＰＳＡ＋抗ｅＮＯＳ）の有効性について考察した実験的試験。
【００９３】
ラットにおける前立腺炎のモデルにおける有効性
前立腺の炎症性疾患は最も重要な尿路疾患の１つである［Ｍａｚｏ  ＥＢ、Ｄｍｉｔｒｉｅｖ  ＤＧ、２００１年；Ｓｃｈｅｐｌｅｖ  ＰＡら、２００７年］。それらのうち最も一般的なのは前立腺炎である。非細菌性型前立腺炎は、細菌性型前立腺炎の８倍の頻度で起こる［ＶＡ  Ｓｍｉｒｎｏｖ、２００６年］。４０歳〜５０歳の男性における慢性前立腺炎、非尿道感染症及び他の泌尿器疾患の発生率は３０〜４０％である。この疾患は、主観的な症状が消失し、検査による炎症の徴候が軽減した場合でさえ、腺組織及び前立腺間質における形態学的な変化が依然として存在するので、どちらかといえば治療することが難しい［ＶＡ  Ｓｍｉｒｎｏｖ、２００６年］。
【００９４】
絹糸結紮を適用することによる部分的な前立腺閉塞症である非細菌性前立腺炎の動物モデルを使用した。
【００９５】
この試験にはＷｉｓｔａｒの雄のラット６０匹（２ヶ月齢、体重２５０ｇ）を含めた。ラット１２匹をインタクトとした。前立腺炎を誘導するために、他のラットの前立腺を全身麻酔（チオペンタール６０ｍｇ／ｋｇ、腹腔内）下、絹糸で縫った。ラットに、ＵＬＤの抗ＰＳＡ＋抗ｅＮＯＳ（５ｍｌ／ｋｇ、７．５ｍｌ／ｋｇ又は１０ｍｌ／ｋｇ）又は蒸留水（対照、１０ｍｌ／ｋｇ）を、外科手術の１ヶ月後に開始し、１．５ヶ月にわたって投与した。前立腺炎を誘導した２．５ヶ月後に、前立腺を秤量し、前立腺係数を算出し；前立腺の体積及び密度を評価した。各群の動物６匹からの前立腺について組織学的試験を実施した：結合組織内のコラーゲン線維の面積（Ｓｃ、腺における硬化性過程の指数）、前立腺上皮腺房の面積（Ｓｅ、腺における萎縮性過程の指数）、腺房の内腔の面積（Ｓｌ、腺の分泌活性の指数）。
【００９６】
ラットの前立腺に絹糸結紮を適用した後、前立腺において炎症が発生し、これにより、インタクトな動物と比較して、２５％において前立腺の重量係数の有意増加が、１４％において前立腺の密度の有意な増加が、前立腺組織において硬化性の変化が導かれた（Ｓｃが３．１倍に増加した）（表４）。ＵＬＤの抗ＰＳＡ＋抗ｅＮＯＳを投与することでは、全ての用量で、前立腺の重量係数及び前立腺の密度の有意な低下は導かれなかったが、コラーゲン線維の面積が有意に減少し（ほぼインタクトな動物まで）、これにより、腺における炎症過程が減少したことが示された（表４）。更に、１０ｍｌ／ｋｇの用量のＵＬＤの抗ＰＳＡ＋抗ｅＮＯＳにより、腺房の内腔の面積が増加し、したがって、前立腺の分泌活性が増加したことが示されている（１９．５％において、ｐ＝０．０５５、表１）。
【００９７】
したがって、ＵＬＤの抗ＰＳＡ＋抗ｅＮＯＳは、ラットにおける非細菌性前立腺炎のモデルにおいて抗炎症活性を発揮した。
【００９８】
【表４】
2013538791.tif 000032
注：*−インタクトに対する差異はｐ＜０．０５で有意である；
：＃、＃＃＃−対照に対する差異はそれぞれｐ＜０．０５；−ｐ＜０．００１で有意である
【００９９】
参考文献：
１．  Ｍａｚｏ  ＥＢ，  Ｄｍｉｔｒｉｅｖ  ＤＧ  Ｔｈｅ  ｃｌｉｎｉｃａｌ  ｅｆｆｅｃｔ  ｏｆ  ｔｈｅ  ｄｒｕｇ  “Ｐｒｏｓｔａｍｏｌ  Ｕｎｏ”  ｉｎ  ｐａｔｉｅｎｔｓ  ｗｉｔｈ  ｂｅｎｉｇｎ  ｐｒｏｓｔａｔｉｃ  ｈｙｐｅｒｐｌａｓｉａ  ａｎｄ  ｃｈｒｏｎｉｃ  ｐｒｏｓｔａｔｉｔｉｓ  ／／  Ｕｒｏｌｏｇｙ．  −  ２００１．  −  Ｎｏ．  ５．  −  Ｐ．３８−４１．
２．  Ｓｍｉｒｎｏｖ  ＶＡ  Ｄｒｕｇ  ｔｈｅｒａｐｙ  ｉｓ  ｔｈｅ  ｃｈｒｏｎｉｃ  ｐｒｏｓｔａｔｉｔｉｓ  ／／  Ｆａｒｍｉｎｄｅｋｓ−Ｐｒａｋｔｉｋ．  −  ２００６．  −  Ｉｓｓｕｅ  １０．  −  Ｐ．４６−５５．
３．  Ｓｃｈｅｐｌｅｖ  ＰＡ  Ｓｔｒａｃｈｉｎｓｋｙ  ＬＳ，  Ｒａｆａｌｓｋｙ  Ｖ．  Ｐｒｏｓｔａｔｉｔｉｓ  ／／  Ｍ．：  Ｍｅｄｐｒｅｓｓ−ｉｎｆｏｒｍ，  ２００７．  −  ２２４  ｐｐ．  
【配列表】
2013538791000001.app
【国際調査報告】
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2013538791.tif 000034
2013538791.tif 000035