【事件の表示】
　特許第２６２８４２１号「診断試験用キットおよびこれを用いる方法」の請求項１ないし２７に係る特許に対する特許異議の申立てについて、次のとおり決定する。
【結論】
　訂正を認める。
　特許第２６２８４２１号の請求項１ないし１３に係る特許を維持する。
【理由】
１．手続の経緯
　本件特許第２，６２８，４２１号の発明は、平成３年１０月９日（パリ条約による優先権主張、１９９０年１０月１２日、カナダ）に特許出願され、平成９年４月１８日にその特許の設定登録がされた。
　その後、本件特許について申立人ヤマサ醤油株式会社および申立人青木幾雄から特許異議の申立があり、取消理由が通知され、それに対して、平成１０年１０月５日に意見書および訂正請求書が提出された。この訂正請求に対し訂正拒絶理由が通知され、上記訂正請求書の補正書が平成１１年９月１４日付で提出された。
２．訂正の適否の検討
（１）訂正事項
　平成１１年９月１４日付補正書により補正された訂正請求による明細書の訂正事項は、次のとおりである。
　訂正事項ａ：請求項の削除、整列
　第３、６、８、９、１１、１２、１６、１７、２０、２１、２２、２５、２６、２７項を削除。
　残りの項番号を整列、即ち第４、５、７、１０、１３、１４、１５、１８、１９、２３、２４項を夫々第３〜１３項に訂正
　訂正事項ｂ：請求項１
　請求項１に「患者の胸痛が心臓異常に因るか否かを決定する場合、」を挿入
　訂正事項ｃ：請求項１、請求項１０（旧１８項）
　請求項１および請求項１０（旧１８項）に、「更に別の少くとも１つの抗体」が「胸痛の初期兆候において狭心症と心筋梗塞とを識別するマーカータンパク質に合致」するものであることを挿入
　訂正事項ｄ：請求項１
　請求項１の「３以上の単クローン性抗体または多クローン性抗体」を「３以上の単クローン性抗体または多クローン性抗体対」に訂正。
　訂正事項ｅ：請求項２
　請求項２の「合致するタンパク質と反応する各抗体に応じて該試薬によりもたらされる応答が可視色変化示される」を「複合体の生成が可視色変化から明白である」に訂正。
　訂正事項ｆ：請求項１
　請求項１の「検知」を「検出」に訂正する。
　訂正事項ｇ：請求項１
　請求項１の「単体」を「担体」に訂正する。
　訂正事項ｈ：請求項４（旧５項）
　請求項４（旧５項）の「キャリヤー」を「担体」に訂正する。
　訂正事項ｉ：請求項７（旧１３項）
　「低分子量心タンパク質であって」を「低分子量心タンパク質に合致するものであって」に訂正。
　訂正事項ｊ：請求項１２（旧２３項）
　「低分子量心筋タンパク質」を「低分子量心タンパク質」に訂正
　訂正事項ｋ：【発明の詳細な説明】
　【０００２】第３行目、「抹消」を「末消」と訂正。
　【００１２】第６行目、「ヤコワスキー」を「ジャックオースキー」と訂正。
　【００１３】第４行目、「胸痛」を「心臓痛」と訂正、第６行目、「指示剤」を「指標」と訂正。
　【００１４】第３−４行目、「トロオースＰイソメラーゼ」を「トリオース−Ｐ−イソメラーゼ」と訂正し、
　第５行目、「筋細胞膜」の次に「（筋線維膜）」を加入する。
　【００１７】第７行目、「Ｃｈｉｎ．」を「Ｃｌｉｎ．」と訂正。
　【００２１】第３行、「キャリヤー」の後に「（担体）」を加入。
　【００２４】第８行目、「抗体２４」を「抗体２６」と訂正。
　第９行目、「酵素抱合体２６」を「酵素抱合体２４」と訂正し、「抱合体２６」を「抱合体２４」と訂正し、「抗体２４」を「抗体２６」と訂正。
　第１０行目、「抗体２４」を「抗体２６」と訂正。
　第１０−１１行目、「ミオシン」を「ミオグロビン」と訂正。
　第１１行目、「抗体２８」を「抗体３０」と訂正し、「対応試薬３０」を「対応試薬２８」と訂正。
　第１２行目、「抗体２８」を「抗体３０」と訂正し、「抗体３２」を「抗体３４」と訂正し、「試薬３４」を「試薬３２」と訂正。
　第１３行目、「抗体３２」を「抗体３４」と訂正し、「抗体３６」を「抗体３８」と訂正。
　第１４行目、「抗体３６」を「抗体３８」と訂正し、「試薬３８」を「試薬３６」と訂正。
　【００２６】第６行目、「ウインドウ」を「ウインドー」と訂正。
　第７行目、「抗体」を「試薬」と訂正し、「試薬」を「抗体」と訂正。
　【００３０】第４行目、第５行目、「識別」を「鑑別」と訂正。
　【００３３】最下行、「が」を「か」と訂正。
　【００３６】第１−２行目、「トロポニ−Ｃ」を「トロポニン−Ｃ」と訂正し、
　第３−４行目、「または」を「もしくは」と訂正。
　【００３７】第１行目、「実施例」を「実験例」、「補促」を「捕捉」と夫々訂正し、「抗体１２４」を「抗体１２６」と訂正し、「対応試薬１２６」を「対応試薬１２４」と訂正。
　第２行目、「抗体」を「対応試薬」と訂正し、「対応試薬」を「抗体」と訂正。
　【００３８】第１行目、「吸収性材」を「吸収性材料」と訂正、「吸収材」を「吸収性材料」と訂正。
　訂正事項１：【図面の簡単な説明】
　「２４固定捕捉抗体」を「２６固定捕捉抗体」と訂正し、
　「２６抗体−酵素抱合体（試薬）」を「２４抗体−酵素抱合体（試薬）」と訂正し、
　「２８，３２，３６，１２８，１３２抗体」を「２８，３２，３６，１２８，１３２試薬」と訂正し、
　「３０，３４，３８，１２６，１３４試薬」を「３０，３４，３８，１２６，１３４抗体」と訂正。
（２）訂正の目的
　上記訂正事項ａは、特許請求の範囲の減縮を目的とするものといえる。
　上記訂正事項ｂ〜ｅは、明りょうでない記載の釈明を目的とするものものといえる。
　上記訂正事項ｆ〜ｌは、誤記の訂正を目的とするものといえる。
（３）明細書の記載事項の範囲内
　上記訂正事項ａ〜訂正事項ｌは、本件特許明細書の記載事項の範囲内であることは明らかである。
（４）拡張・変更
　上記訂正事項ａ〜訂正事項ｌは、いずれも、特許請求の範囲を拡張するものでなく、また、変更するものでもない。
（５）訂正適否の検討結果
　以上検討したとおり、本件訂正は、特許法１２０条の４、２項および３項の規定に適合する。
３．本件発明
　本件特許の請求項１〜請求項１３の発明は、本件訂正明細書の特許請求の範囲の各請求項に記載された事項により構成される。
　本件訂正明細書の特許請求の範囲は次のとおりである。
　【特許請求の範囲】
　【請求項１】
　患者の胸痛が心臓異常に因るか否かを決定する場合、不定狭心症と心筋梗塞症との間の鑑別診断をするための診断用キットにおいて、
　（ｉ）　血液または血清試料を保持する容器と、
　（ｉｉ）　該容器に連結する検出手段であって、
　ａ）　互いに所定の位置にある固体担体上に別々に支持された３以上の単クローン性抗体または多クローン性抗体対で、各々の抗体対は心筋の損傷に際し心筋から放出される夫々異なったマーカータンパク質に合致する抗体であり、かつ試料に接触し得る各々の抗体は、少なくとも１つの抗体対が狭心症に特異的なマーカータンパク質に合致し、また少なくとも別の１つの抗体が心筋梗塞に特異的なマーカータンパク質に合致し、また更に別の少くとも１つの抗体は胸痛の初期兆候において狭心症と心筋梗塞とを識別するマーカータンパク質に合致し、而も
　ｂ）　抗体／タンパク質結合体が生成した場合夫々に独立して反応性があり、かつ不安定狭心症または心筋梗塞のいずれであるかを指示する応答をひとまとめにして提示するに必要な試薬とを有する不安定狭心症と心筋梗塞との間の鑑別診断をするための診断用キット。
　【請求項２】
　複合体の生成が可視色変化から明白である請求項１記載の診断用キット。
　【請求項３】
　試料を受け入れる試料ウインドーおよび試薬を表示するための表示ウインドーを有する正面パネル、裏面パネルおよび検出手段を正面パネルと裏面パネルとの間に挟んで一体化ユニットを形成する正面パネルと裏面パネルとを保護するための封入手段を有し、カード形態の請求項１記載の診断用キット。
　【請求項４】
　抗体の担体が乾燥化学膜である請求項３記載の診断用キット。
　【請求項５】
　膜が試料ウインドーから表示ウインドーへ延在しており、抗体と対応試薬とが表示ウインドー内の試料ウインドーから隔てられた位置に配置されている請求項３記載の診断用キット。
　【請求項６】
　容器が封止可能な透明容器であり、そして検出手段が容器の側面に設置されている請求項１記載の診断用キット。
　【請求項７】
　該抗体がつぎの３以上のタンパク質または酵素、即ちクレアチンキナーゼ、ミオグロビン、ミオシンＬ鎖タンパク質、ミオシンＨ鎖タンパク質、トロポミオシン、トロポニン、トロポニン−Ｉ、トロポニン−Ｃ、トロポニン−Ｔ、筋線維膜タンパク質、トリオースＰ−イソメラーゼ、またはクレアチンキナーゼ、ミオグロビンもしくはミオシンＬ鎖タンパク質の特徴および特性を有する低分子量心タンパク質に合致するものであって、一つがミオグロビンに合致し、他の一つがミオシンＬ鎖に合致するものである、請求項１ないし６記載の診断用キット。
　【請求項８】
　３つの抗体がクレアチンキナーゼ、ミオグロビンおよびミオシンＬ鎖タンパク質のいずれかに夫々合致するものである、請求項７記載の診断用キット。
　【請求項９】
　検出手段が血清中に通常見い出されるタンパク質と合致する対照抗体、および合致するタンパク質と反応する対照抗体に反応する試薬に対応し、それによって試験が機能していることを示しているものである請求項１ないし８のいずれか１つに記載の診断用キット。
　【請求項１０】
　互いに所定の位置にある担体上または担体内に支持された３以上の単クローン性抗体または多クローン性抗体を含有し、各々の抗体が心筋の損傷時に心筋から放出される少なくとも３つのマーカータンパク質の異なった１つに合致するものである診断検出手段に、血液または血清試料を接触させ、次にそれらタンパク質の夫々がそれらタンパク質に対する夫々の抗体と結合する場合に、少なくともそれら抗体の１つが狭心症に特異的なマーカータンパク質に合致する抗体であり、また別の抗体の少なくとも１つが心筋梗塞に特異的なマーカータンパク質に合致する抗体であり、更に別の抗体の少くとも１つが胸痛の初期兆候において狭心症と心筋梗塞とを識別するマーカータンパク質に合致する抗体であるようにし、抗体と結合するか否かを検出する方法。
　【請求項１１】
　マーカータンパク質と、それらの抗体との結合が可視的に検出される請求項１０記載の方法。
　【請求項１２】
　複数の単クローン性抗体または多クローン性抗体に合致するマーカータンパク質がクレアチンキナーゼ、ミオグロビン、ミオシンＬ鎖タンパク質、ミオシンＨ鎖タンパク質、トロポミオシン、トロポニン−Ｉ、トロポニン−Ｃ、トロポニン−Ｔ、筋細胞膜タンパク質、トリオース−Ｐ−イソメラーゼ、またはクレアチンキナーゼ、ミオグロビンあるいはミオシンＬ鎖タンパク質の特質および特性を有する低分子量心タンパク質の少なくとも３つを含有し、その少なくとも１つはミオグロビンであり、他の１つはミオシンＬ鎖である請求項１０または１１記載の診断用キット。
　【請求項１３】
　該３つのマーカータンパク質がクレアチンキナーゼ、ミオグロビンおよびミオシンＬ鎖である請求項１２に記載の方法。
４．特許異議の申し立て
４．１　特許法２９条違反の申立
　申立人ヤマサ醤油株式会社および申立人青木幾雄は、本件特許が、下記の理由で特許法２９条の規定に違反してされたものである、と主張している。
　（下記刊行物に付記した記号「ヤ甲２」などは、申立人の頭文字と証拠番号である。たとえば、「ヤ甲２」は、申立人ヤマサ醤油株式会社提出の甲第２号証を意味する。）
引用刊行物
刊行物１：（ヤ甲２）（青甲６）
　Ｅｕｒｏｐｅａｎ　Ｈｅａｒｔ　Ｊｏｕｒｎａｌ，（１９８７），８，ｐ．９８９−９９４
刊行物２：（青甲１０）
　欧州特許公開第３８４１３０号Ａ２明細書
刊行物３：（青甲１）
　ソビエト連邦特許第１５１１６９０号Ａ１明細書
刊行物４：（ヤ甲１）
　Ｃｉｒｃｕｌａｔｉｏｎ　Ｓｕｐｐｌ．，（１９８９），８０，ｐ．３５５（ａｂｓｔｒａｃｔ　＃　１４１６）
刊行物５：（青甲７）
　特開平１−２６２４７１号公報
刊行物６：（青甲８）
　特開平１−３０２１６２号公報
刊行物７：（青甲９）
　特開平１−２３３２９８号公報
刊行物８：（青甲１１）
　Ｊａｐａｎ　Ｈｅａｒｔ　Ｊｏｕｒｎａｌ，（１９８１），Ｊｕｌｙ，ｐ．６５３−６６４
刊行物９：（青甲１２）
　Ｃｌｉｍｃａｌ　Ｓｃｉｅｎｃｅ，（１９８１），６０，ｐ．２５１−２５９
刊行物１０：（青甲１３）
　Ａｍｅｒｉｃａｎ　Ｈｅａｒｔ　Ｊｏｕｒｎａｌ，（１８９７），Ｊｕｎｅ，ｌ１３（６），ｐ．１３３３−１３４４
刊行物１１：（青甲１４）
　Ｊ．Ｍｏｌ．Ｃｅｌｌ　Ｃａｒｄｉｏｌ，（１９８９），２１，ｐ．１３４９−１３５３
刊行物１２：（青甲１５）
　特開昭６０−２０１２６０号公報
刊行物１３：（ヤ甲３）
　特開昭６３−１４２２６７号公報
刊行物１４：（ヤ甲４）
　特開昭６３−２６９０５６号公報
刊行物１５：（ヤ甲５）
　特開平１−３１３７６０号公報
刊行物１６：（青甲２）
　特開昭６４−５９０６９号公報
刊行物１７：（青甲３）
　特開昭６４−６１６６４号公報
刊行物１８：（青甲４）
　特開昭６１−１４２４６３号公報
刊行物１９：（青甲５）
　特開昭６４−６３８６５号公報
（１）　申立人ヤマサ醤油株式会社の申立理由
　本件特許の旧請求項１〜旧請求項２７の発明（本件請求項１〜請求項１３の発明）は、出願前に頒布された上記の刊行物４（ヤ甲１）、刊行物１（ヤ甲２）および刊行物１３（ヤ甲３）〜刊行物１５（ヤ甲５）に記載された発明に基づいて当業者が容易に発明をすることができたものである。
（２）　申立人青木幾雄の申立理由
　▲１▼　旧請求項１（本件請求項１）、旧請求項１８（本件請求項１０）の発明について
　旧請求項１（本件請求項１）および旧請求項１８（本件請求項１０）の発明は、出願前に頒布された上記の刊行物３（青甲１）、刊行物１６〜１９（青甲２〜青甲５）に記載された発明に基づいて当業者が容易に発明をすることができたものである。
　▲２▼　旧請求項１４（本件請求項８）および旧請求項２４（本件請求項１３）の発明について
　旧請求項１４（本件請求項８）および旧請求項２４（本件請求項１３）の発明は、出願前に頒布された上記の刊行物３（青甲１）、刊行物１６〜１９（青甲２〜青甲５）、刊行物１（青甲６）、刊行物５〜７（青甲７〜青甲９）、刊行物２（青甲１０）に記載された発明に基づいて当業者が容易に発明をすることができたものである。
　▲３▼　旧請求項１３（本件請求項７）および旧請求項２３（本件請求項１２）の発明について
　旧請求項１３（本件請求項７）および旧請求項２３（本件請求項１２）の発明は、出願前に頒布された上記の刊行物３（青甲１）、刊行物１６〜１９（青甲２〜青甲５）、刊行物１（青甲６）、刊行物５〜７（青甲７〜青甲９）、刊行物２（青甲１０）、および、刊行物８〜１２（青甲１１〜青甲１５）に記載された発明に基づいて当業者が容易に発明をすることができたものである。
　▲４▼　旧請求項２（本件請求項２）および旧請求項１９（本件請求項１１）の発明について
　旧請求項２（本件請求項２）および旧請求項１９（本件請求項１１）の発明は、出願前に頒布された上記の刊行物３（青甲１）、刊行物１６〜１９（青甲２〜青甲５）に記載された発明に基づいて当業者が容易に発明をすることができたものである。
　▲５▼　その他の請求項
　本件特許のその他の請求項の発明は、出願前に頒布された上記の刊行物３（青甲１）、刊行物１６〜１９（青甲２〜青甲５）、刊行物１（青甲６）、刊行物５〜７（青甲７〜青甲９）、刊行物２（青甲１０）、および、刊行物８〜１２（青甲１１〜青甲１５）に記載された発明に基づいて当業者が容易に発明をすることができたものである。
４．２　特許法２９条の２違反の申立
　引用先願明細書：（青甲１６）
　特許国際公開ＷＯ９１／０１４９８号パンフレット
　申立人青木幾雄は、本件発明の特許が、次の理由で特許法２９条の２の規定に違反してされたものである、と主張している。
（申立人青木幾雄の申立理由）
　本件特許の旧請求項１〜旧請求項２７の発明（本件請求項１〜請求項１３の発明）は、上記先願明細書に記載された発明と同一である。
４．３　特許法３６条違反の申立
　申立人青木幾雄は、本件特許が、下記の理由で、特許法３６条に規定する要件を満たしていない特許出願に対してされたものである、と主張する。
（申立人青木幾雄の申立理由）
　本件特許請求の範囲には、少なくとも１つの抗体が「狭心症に特異的なマーカータンパク質」に合致するものとしているが、本件明細書の発明の詳細な説明の項には、「狭心症に特異的なマーカータンパク質」に合致する抗体について記載されていない。
５．　引用刊行物の記載事項
（１）　刊行物１（ヤ甲２）（青甲６）の記載事項
　刊行物１は、表題「ミオグロビン、クレアチンキナーゼＢアイソザイム、ミオシン軽鎖が不安定狭心症の患者血中にリリースされている」の学術論文である。次の事項が記載されている。
（１ａ）　要約：
「　安静時狭心症患者２７人の７回連続の血清サンプル中の通常の血中クレアチンキナーゼ（ＣＫ）活性、心筋ミオシン軽鎖（ＣＭ−ＬＣ）、ミオグロビン（ＭＧ）およびＣＫ−Ｂアイソザイムをラジオイムノアッセイにより測定した。ＣＭ−ＬＣの測定可能な量が１３人の患者のサンプルの少なくとも１つで検出された。それらの患者において、ＭＧは９人、ＣＫ−Ｂは８人において上昇しているのが分かった。１８９の血清サンプルにおいて、ＣＭ−ＬＣ（２１．７％）がＭＧ（１３．２％，Ｐ＜０．０５）又はＣＫ−Ｂ（１２．２％，Ｐ＜０．０５）より高い頻度で検出された。冠動脈造影図が２７人中２１人で得られた。マーカータンパク質濃度の上昇は、少なくとも一つの冠動脈の≧７０％が冠動脈狭窄である患者にのみ見られた。３種のマーカータンパク質のいずれかの血中濃度が上昇する率は、１つまたは２つの血管疾患を持つ患者より３つの血管疾患を持つ患者の方が高く（３３．９％ｖｓ１５．６％，Ｐ＜０．０５）、以前に心筋梗塞の経歴のない患者より経歴のある患者の方が高かった（３４．５％ｖｓ　１１．４％，Ｐ＜０．００１）。
　これらのことは、急性心筋梗塞の証拠が無いが安静時狭心症患者のサブグループにおいて、心筋の小さな領域の虚血によるダメージが高感度の血清学的アッセイにより検出されうろことを示している。検討したマーカータンパク質の中で、ＣＭ−ＬＣがもっとも感度か良いことか示された。」
（１ｂ）　不安定狭心症
　刊行物１のＴａｂｌｅ　１及び２には、不安定狭心症患者における血清中のミオグロビン、ＣＫ−Ｍ、Ｂ及びミオシンＬ鎖の測定値が開示されている。
　また、不安定・狭心症患者（以前に心筋梗塞を患った人も患っていない人も含めて）の血清中において、正常値以上のミオグロビンとクレアチンキナーゼ値、及び、健常人では、検出されないミオシンＬ鎖が検出されることが示されている。
（２）　刊行物２（青甲１０）の記載事項
　刊行物２には、試料中にＣＫ−ＭＢが検出されれば心筋梗塞を意味することが開示されている。
（３）　刊行物３（青甲１）の記載事項
　刊行物３には、血清中のミオグロビン濃度、ミオグロビン抗体濃度及び循環免疫複合体レベルという３つの濃度をそれぞれ測定し、その測定値によって急性心筋梗塞であるか不安定狭心症であるかを鑑別診断する方法が開示されている。
（４）　刊行物４（ヤ甲１）の記載事項
　刊行物４は、表題「新規なミオシン軽鎖アッセイを用いた心筋梗塞及び不安定狭心症の迅速診断」の学術論文である。次の事項が記載されている。
（４ａ）　心臓特異的なエンザイムイムノアッセイ
「　数分間で終了する高感度の心臓特異的なエンザイムイムノアッセイ（ＥＩＡ）を６８人の患者の心室筋ミオシン軽鎖１（ＨＶＬＣ１）の定量に用いた。６８人のうち５０人は心筋梗塞（ＭＩ）で、１８人は不安定狭心症（ＵＡ）であった。２００人の健常人において、９６％はＨＶＬＣ１が０．７５ｎｇ／ｍｌ以下であった。患者の８７％は胸痛（ＣＰ）発作の６時間前に現れた。ＨＶＬＣｌはＭＩの患者の胸痛後１時間で５７％、４時間で６５％、８時間で７６％に上昇した。ＣＫ、ＣＫ−ＭＢ、ＡＳＴは１時間で０％、４時間で５．３％、８時間で７５％に上昇した。
（４ｂ）　不安定狭心症（ＵＡ）の患者
　ＵＡの患者の８３％で入院時にＨＶＬＣ１が上昇していた。合併症が起こったり、緊急インターベンションが要求されたのは、ＨＶＬＣ１が持続的に上昇した（ｍ＝６．１８ｎｇ／ｍｌ，ＳＤ＝６．０７ｎｇ／ｍｌ，ｎ＝６）患者の８３％であったのに対し、低値（ｍ＝２．４３ｎｇ／ｍｌ，ＳＤ＝２．１６ｎｇ／ｍｌ，ｎ＝１２）であるか最初の２４時間以上低下したレベルの場合では１６．７％であった。これらの差異は統計学的に有意であると認められた（ｔ＝１．９６，ｄｆ＝１６，ｐ＝０．０３）。」
（４ｃ）　刊行物４論文の結論
「　我々の迅速なミオシン軽鎖のアッセイは、ＭＩまたは不安定狭心症の早期及び後期の確定の手助けとなり、不安定狭心症患者の治療において予後の目安となる。」
（５）　刊行物５（青甲７）の記載事項
　刊行物５には、ＣＫ−ＭＢが心臓疾患のマーカーであることが示されている。
（６）　刊行物６（青甲８）の記載事項
　刊行物６には、ミオグロビンが心臓疾患のマーカーであることが示されている。
（７）　刊行物７（青甲９）の記載事項
　刊行物７には、ミオシンＬ鎖が心臓疾患のマーカーであることが示されている。
（８）　刊行物８（青甲１１）の記載事項
　刊行物８には、ミオシンＨ鎖タンパク質、トロポニン−Ｔが心筋損傷マーカーとなり得ることが示されている。
（９）　刊行物９（青甲１２）の記載事項
　刊行物９には、トロポミオシンが心筋損傷マーカーとなり得ることが示されている。
（１０）　刊行物１０（青甲１３）の記載事項
　刊行物１０には、トロポミオシン、トロポニン−Ｉが心筋損傷マーカーとなり得ることが示されている。
（ｌｌ）　刊行物１１（青甲１４）の記載事項
　刊行物１１には、トロポニン−Ｔが心筋損傷マーカーとなり得ることが示されている。
（１２）　刊行物１２（青甲１５）の記載事項
　刊行物１２には、ミオシンＨ鎖タンパク質が心筋損傷マーカーとなり得ることが示されている。
（１３）〜（１５）　刊行物１３（ヤ甲３）〜刊行物１５（ヤ甲５）の記載事項
　刊行物１３〜刊行物１５には、短時間高速アッセイのための方法と装置（キット）が記載されている。
（１６）　刊行物１６（青甲２）の記載事項
　刊行物１６には、次の事項が記載されている。
（１６ａ）　測定装置（５頁右下欄、１１行〜１７行）
　特異的な結合検定法を用いて分析物の存否又は量を測定するための方法および装置を提供する。この装置は、その表面に液体試料を受け入れるための試料アプリケーション領域と、該表面のアプリケーション領域から横方向に距離をおいて存在する少なくとも１つの表示領域とを有する非吸収性の側方流動性膜を包含しており、表示領域には結合対の一方の成分が付着されている。
（１６ｂ）　結合対（８頁右下欄６行〜１２行）
　結合対としては特異的な抗原−抗体対が開示されている。
（１６ｃ）　複数の表示領域（６頁左下欄９行〜１２行）
　上記の膜は、対照領域および参照領域と共に、１つより多くの表示領域を含みうる。多重表示領域は、種々の分析物を検出するか、あるいは分析物を定量するように設計される。
（１６ｄ）　多重表示領域とアプリケーション領域（６頁左下欄１２行〜１５行）
　膜自体は試料の流れに対して障壁を与えないので、多重表示領域はアプリケーション領域と間隔を置いた関係にある。
（１６ｅ）　１つ又はそれ以上の表示領域（７頁右下欄１３行〜１６行）
　血液試料はアプリケーション領域に添加され、そして膜を通って１つ又はそれ以上の表示領域へ流れていくことができる。
（１６ｆ）　検出（６頁右下欄７行〜１１行）
　検出は、たとえば直接的な視覚観察、色の顕示・・・あらゆる他の多くの技術による。
（１７）　刊行物１７（青甲３）の記載事項
　刊行物１７には、臨床試料から幾つかの異なった抗原に対する抗体の存在を同時に検出する酵素結合ドットブロット（ｄｏｔ　ｂｌｏｔ）免疫検定技術が記載されている（６頁左下欄１６行〜１８行参照）。
（１８）　刊行物１８（青甲４）の記載事項
　刊行物１８には、イムノアッセイにパネルフォーマットを用いることが示されている。
（１９）　刊行物１９（青甲５）の記載事項
　刊行物１９には、イムノアツセイにパネルフォーマットを用いることが示されている。
６．特許法２９条違反の申立についての検討
６．１　請求項
　特許された全２７項の内、訂正により削除された１４項については、訂正により削除された結果、取消理由としての対象でなくなった。
　訂正されて残留している、本件請求項１〜１３の各発明に係る特許について、前記申立を検討する。
６．２　ヤマサ醤油株式会社の申立４．１（１）について
（１）　本件発明の特徴
　本件請求項１〜請求項１３の発明の診断試験用キットまたはこれを用いる方法は、
（Ａ）心筋梗塞と不安定狭心症とを鑑別するものであること、
（Ｂ）その鑑別のために、心筋の損傷により放出される３種以上のマーカータンパク質を測定するものであること、
（Ｃ）マーカーの測定のために、各マーカーに合致する抗体を使用すること、そして
（Ｄ）その３種以上の抗体は、固体担体上に支持されること
を必須の構成要素としている。
　そして、本件請求項１〜請求項１３の発明は、心筋の損傷により放出されるマーカー単独の使用では従来問題があったところ、少なくとも３種の異なる心筋損傷マーカーを組み合わせ測定することにより、不安定狭心症と心筋梗塞の早期段階において使用できるという、明細書記載の顕著な効果を奏するものと認めれる。
（２）　主引用刊行物の記載事項
　これに対して、刊行物４（ヤ甲１）には、「新規なミオシン軽鎖アッセイを用いた心筋梗塞及び不安定狭心症の迅速診断」が記載されている。そして、マーカーとしてミオシン軽鎖以外に、ＣＫ、ＣＫ−ＭＢ、ＡＳＴを用いた測定が記載されているが、これらと比較してミオシン軽鎖アッセイが優れているとしているもので、３種以上のマーカーの測定値の組合せにより心筋梗塞であるか不安定狭心症であるかの鑑別を行うことは記載されていない。
　そして、刊行物４（ヤ甲１）には、固体担体上に３種以上の抗体を有するキットについて記載されていない。
（３）他の引用刊行物の記載事項
　刊行物１（ヤ甲２）には、心筋梗塞の兆候のない不安定狭心症の患者におけるＭＹＯ、ＣＫ−Ｂ、ＭＬＣの個々のマーカーの値の関係を示しているが、ＭＬＣが最も優れていることを示すもので、３つのマーカーの組合せにおいて、心筋梗塞と不安定狭心症とを鑑別することは開示されていない。
　そして、刊行物１（ヤ甲２）には、固体担体上に３対以上の抗体を有するキットについて記載されていない。
　また、刊行物１３〜刊行物１５（ヤ甲３〜ヤ甲５）には、免疫測定装置が記載されているが、固体担体上に３対以上の抗体を有するものではない。そして、心筋梗塞と不安定狭心症とを鑑別することも開示されていない。
（４）　検討結果
　したがって、本件請求項１〜請求項１３の発明は、刊行物４（ヤ甲１）、刊行物１（ヤ甲２）および刊行物１３（ヤ甲３）〜刊行物１５（ヤ甲５）に記載された発明に基づいて当業者が容易に発明をすることができたものということはできない。
６．３　青木幾雄の申立４．１（２）について
（１）　本件発明の特徴
　本件発明の特徴については、前記６．２の（１）で述べたとおりである。
（２）　主引用刊行物の記載事項
　これに対して、刊行物３（青甲１）には、血清中のミオグロビン濃度、ミオグロビン抗体濃度及び循環免疫複合体レベルという３つの濃度をそれぞれ測定し、その測定値によって急性心筋梗塞であるか不安定狭心症であるかを鑑別診断する方法が開示されている。
　刊行物３（青甲１）の「３つの分析体」の内の後の２つの分析体は、心臓障害の経過において心筋より遊離されるマーカータンパク質ではない点で、刊行物３の発明は、本件請求項１〜請求項１３の発明と本質的に異なる。そして、刊行物３（青甲１）には、３種のマーカーに対応する３種以上の抗体を有する固体担体についても記載されていない。
（３）　他の引用刊行物の記載事項
　刊行物１６〜刊行物１８（青甲２〜青甲５）には、固体担体上に被検体抗原に対応する抗体を担持する分析装置が開示されている。複数の被検体に対して複数の抗体を担持することが示されている。しかし、心筋梗塞と不安定狭心症とを鑑別するためのキットないし方法は開示されていない。
　刊行物１（青甲６）には、ミオグロビン、クレアチンキナーゼＢアイソザイム、ミオシン軽鎖が、不安定狭心症のタンパクマーカーであることが記載されている。しかし、刊行物１（青甲６）では、各マーカーが単独で測定されるものであり、３種類のマーカーを組み合わせて単一のキットで測定するものではない。
　刊行物２（青甲１０）には、心筋梗塞のマーカーとしてＣＫ−ＭＢが開示されている。しかしながら、刊行物２（青甲１０）には、心筋梗塞と不安定狭心症とを鑑別するために３種以上のマーカーを測定することは記載されていない。
　刊行物５〜刊行物７（青甲７〜青甲９）には、心臓疾患のマーカーが記載されているが、心筋梗塞と不安定狭心症とを鑑別するために３種以上のマーカーを測定することは記載されていない。
　刊行物８〜刊行物１２（青甲１１〜青甲１５）には、心筋損傷のマーカーが記載されているが、心筋梗塞と不安定狭心症とを鑑別するために３種以上のマーカーを測定することは記載されていない。
（４）　検討結果
　したがって、本件請求項１〜請求項１３の発明は、刊行物３（青甲１）、刊行物１６〜刊行物１８（青甲２〜青甲５）、刊行物１（青甲６）、刊行物５〜刊行物７（青甲７〜青甲９）、刊行物２（青甲１０）および刊行物８〜刊行物１２（青甲１１〜青甲１５）に記載された発明に基づいて当業者が容易に発明をすることができたものということはできない。
６．４　特許法２９条違反の申立の検討結果
　そうすると、本件特許についての特許法２９条違反の申立は、いずれも理由がない。
７．特許法２９条の２違反の申立４．２について
　先願として引用された上記国際出願は、優先日が１９８９年７月２１日であり、その優先日は、本件特許の優先日よりも前である。そして、その公開日が１９９１年２月７日であり、本件特許の優先日より後である。
　しかしながら、この引用国際出願は、外国語でされた国際出願であるのに、特許法１８４条１項の規定による翻訳文が提出されていないので、この引用国際出願は、特許法１８４条の４、３項の規定により、取り下げられたものとみなされる。
　そうすると、この引用国際出願は、特許法１８４条の１３の規定により、特許法２９条の２の「他の出願」としては扱われない。
　したがって、特許法２９条の２違反の申立は理由がない。
８．特許法３６条違反の申立４．３について
　本件発明は、心筋損傷により放出される、少なくとも３種のマーカーを組合せ測定することにより、不安定狭心症と心筋梗塞とを鑑別することに関するものである（【００１９】〜【００２０】参照）。１種のマーカーによって、この鑑別をすることはできないことを前提とするものである。そうすると、本件明細書において、用語「狭心症に特異的なマーカー」は、単独で、不安定狭心症と心筋梗塞とを特異的に識別するマーカーを意味するものでないことはあきらかである。
　そうすると、本件明細書の発明の詳細な説明【００３１】には、ＭＬＣが狭心症の特異マーカーであることが示されているといえる。
　そうすると、本件特許は、特許法３６条に違反する特許出願に対してされたものということはできない。
９．申立理由についての検討結果
　前記６．〜８．で検討したように、本件特許異議申立の理由によっては、本件請求項１〜請求項１３の各発明に係る特許を取り消すことができない。
１０．むすび
　前記２．で述べたとおり、本件訂正は、特許法１２０条の４、２項および３項の規定に適合する。
　前記９．で述べたように、本件特許異議申立の理由によっては、本件請求項１〜請求項１３の各発明に係る特許を取り消すことができない。
　また、他に本件請求項１〜請求項１３の各発明に係る特許を取り消すべき理由を発見しない。
　よって、結論のとおり決定する。
【異議決定日】
平成１１年９月３０日（１９９９．９．３０）
【訂正の要旨】
訂正の要旨
（１）　特許請求の範囲の減縮を目的として、下記訂正事項ａについて訂正する。
（２）　明りょうでない記載の釈明を目的として、下記訂正事項ｂ〜ｅについて訂正する。
（３）　誤記の訂正を目的として、下記訂正事項ｆ〜ｌについて訂正する。
　訂正事項ａ：請求項の削除、整列
　第３、６、８、９、１１、１２、１６、１７、２０、２１、２２、２５、２６、２７項を削除。
　残りの項番号を整列、即ち第４、５、７、１０、１３、１４、１５、１８、１９、２３、２４項を夫々第３〜１３項に訂正
　訂正事項ｂ：請求項１
　請求項１に「患者の胸痛が心臓異常に因るか否かを決定する場合、」を挿入
　訂正事項ｃ：請求項１、請求項１０（旧１８項）
　請求項１および請求項１０（旧１８項）に、「更に別の少くとも１つの抗体」が「胸痛の初期兆候において狭心症と心筋梗塞とを識別するマーカータンパク質に合致」するものであることを挿入
　訂正事項ｄ：請求項１
　請求項１の「３以上の単クローン性抗体または多クローン性抗体」を「３以上の単クローン性抗体または多クローン性抗体対」に訂正。
　訂正事項ｅ：請求項２
　請求項２の「合致するタンパク質と反応する各抗体に応じて該試薬によりもたらされる応答が可視色変化示される」を「複合体の生成が可視色変化から明白である」に訂正。
　訂正事項ｆ：請求項１
　請求項１の「検知」を「検出」に訂正する。
　訂正事項ｇ：請求項１
　請求項１の「単体」を「担体」に訂正する。
　訂正事項ｈ：請求項４（旧５項）
　請求項４（旧５項）の「キャリヤー」を「担体」に訂正する。
　訂正事項ｉ：請求項７（旧１３項）
「低分子量心タンパク質であって」を「低分子量心タンパク質に合致するものであって」に訂正。
　訂正事項ｊ：請求項１２（旧２３項）
「低分子量心筋タンパク質」を「低分子量心タンパク質」に訂正
　訂正事項ｋ：【発明の詳細な説明】
　【０００２】第３行目、「抹消」を「末消」と訂正。
　【００１２】第６行目、「ヤコワスキー」を「ジャックオースキー」と訂正。
　【００１３】第４行目、「胸痛」を「心臓痛」と訂正、
　第６行目、「指示剤」を「指標」と訂正。
　【００１４】第３−４行目、「トロオースＰイソメラーゼ」を「トリオース−Ｐ−イソメラーゼ」と訂正し、
　第５行目、「筋細胞膜」の次に「（筋線維膜）」を加入する。
　【００１７】第７行目、「Ｃｈｉｎ」を「Ｃｌｉｎ」と訂正。
　【００２１】第３行、「キャリヤー」の後に「（担体）」を加入。
　【００２４】第８行目、「抗体２４」を「抗体２６」と訂正。
　第９行目、「酵素抱合体２６」を「酵素抱合体２４」と訂正し、「抱合体２６」を「抱合体２４」と訂正し、「抗体２４」を「抗体２６」と訂正。
　第１０行目、「抗体２４」を「抗体２６」と訂正。
　第１０−ｌ１行目、「ミオシン」を「ミオグロビン」と訂正。
　第１１行目、「抗体２８」を「抗体３０」と訂正し、「対応試薬３０」を「対応試薬２８」と訂正。
　第１２行目、「抗体２８」を「抗体３０」と訂正し、「抗体３２」を「抗体３４」と訂正し、「試薬３４」を「試薬３２」と訂正。
　第１３行目、「抗体３２」を「抗体３４」と訂正し、「抗体３６」を「抗体３８」と訂正。
　第１４行目、「抗体３６」を「抗体３８」と訂正し、「試薬３８」を「試薬３６」と訂正。
　【００２６】第６行目、「ウインドウ」を「ウインドー」と訂正。第７行目、「抗体」を「試薬」と訂正し、「試薬」を「抗体」と訂正。
　【００３０】第４行目、第５行目、「識別」を「鑑別」と訂正。
　【００３３】最下行、「が」を「か」と訂正。
　【００３６】第１−２行目、「トロポニ−Ｃ」を「トロポニン−Ｃ」と訂正し、
　第３−４行目、「または」を「もしくは」と訂正。
　【００３７】第１行目、「実施例」を「実験例」、「補促」を「捕捉」と夫々訂正し、「抗体１２４」を「抗体１２６」と訂正し、「対応試薬１２６」を「対応試薬１２４」と訂正。
　第２行目、「抗体」を「対応試薬」と訂正し、「対応試薬」を「抗体」と訂正。
　【００３８】第１行目、「吸収性材」を「吸収性材料」と訂正、「吸収材」を「吸収性材料」と訂正。
　訂正事項１：【図面の簡単な説明】の【符号の説明】
　「２４　固定捕捉抗体」を「２６　固定捕捉抗体」と訂正し、
　「２６　抗体−酵素抱合体（試薬）」を「２４　抗体−酵素抱合体（試薬）」と訂正し、
　「２８，３２，３６，１２８，１３２　抗体」を「２８，３２，３６，１２８，１３２　試薬」と訂正し、
　「３０，３４，３８，１２６，１３４　試薬」を「３０，３４，３８，１２６，１３４　抗体」と訂正。
（５４）【発明の名称】
診断試験用キットおよびこれを用いる方法
（５７）【特許請求の範囲】
　【請求項１】　患者の胸痛か心臓異常に因るか否かを決定する場合、不定狭心症と心筋梗塞症との間の鑑別診断をするための診断用キットにおいて、
　　（ｉ）　血液または血清試料を保持する容器と、
　（ｉｉ）　該容器に連結する検出手段であって、ａ）互いに所定の位置にある固体担体上に別々に支持された３以上の単クローン性抗体または多クローン性抗体対で、各々の抗体対は心筋の損傷に際し心筋から放出される夫々異なったマーカータンパク質に合致する抗体であり、かつ試料に接触し得る各々の抗体は、少なくとも１つの抗体対か狭心症に特異的なマーカータンパク質に合致し、また少なくとも別の１つの抗体か心筋梗塞に特異的なマーカータンパク質に合致し、また更に別の少くとも１つの抗体は胸痛の初期兆候において狭心症と心筋梗塞とを識別するマーカータンパク質に合致し、而もｂ）抗体／タンパク質結合体が生成した場合夫々に独立して反応性があり、かつ不安定狭心症または心筋梗塞のいずれであるかを指示する応答をひとまとめにして提示するに必要な試薬とを有する不安定狭心症と心筋梗塞との間の鑑別診断をするための診断用キット。
　【請求項２】　複合体の生成か可視色変化から明白である請求項１記載の診断用キット。
　【請求項３】　試料を受け入れる試料ウインドーおよび試薬を表示するための表示ウインドーを有する正面パネル、裏面パネルおよび検出手段を正面パネルと裏面パネルとの間に挾んで一体化ユニットを形成する正面パネルと裏面パネルとを保護するための封入手段を有し、カート形態の請求項１記載の診断用キット。
　【請求項４】　抗体の担体か乾燥化学膜である請求項３記載の診断用キット。
　【請求項５】　膜が試料ウインドーから表示ウインドーへ延在しており、抗体と対応試薬とが表示ウインドー内の試料ウインドーから隔てられた位置に配置されている請求項３記載の診断用キット。
　【請求項６】　容器か封止可能な透明容器であり、そして検出手段が容器の側面に設置されている請求項１記載の診断用キット。
　【請求項７】　該抗体かつぎの３以上のタンパク質または酵素、即ちクレアチンキナーゼ、ミオグロビン、ミオシンＬ鎖タンパク質、ミオシンＨ鎖タンパク質、トロポミオシン、トロポニン、トロポニン−Ｉ、トロポニン−Ｃ、トロポニン−Ｔ、筋線維膜タンパク質、トリオースＰ−イソメラーゼ、またはクレアチンキナーゼ、ミオグロビンもしくはミオシンＬ鎖タンパク質の特徴および特性を有する低分子量心タンパク質に合致するものであって、一つかミオグロビンに合致し、他の一つかミオシンＬ鎖に合致するものである、請求項１ないし６記載の診断用キット。
　【請求項８】　３つの抗体かクレアチンキナーゼ、ミオグロビンおよびミオシンＬ鎖タンパク質のいずれかに夫々合致するものである、請求項７記載の診断用キット。
　【請求項９】　検出手段が血清中に通常見い出されるタンパク質と合致する対照抗体、および合致するタンパク質と反応する対照抗体に反応する試薬に対応し、それによって試験か機能していることを示しているものである請求項１ないし８のいずれか１つに記載の診断用キット。
　【請求項１０】　互いに所定の位置にある担体上または担体内に支持された３以上の単クローン性抗体または多クローン性抗体を含有し、各々の抗体が心筋の損傷時に心筋から放出される少なくとも３つのマーカータンパク質の異なった１つに合致するものである診断検出手段に、血液または血清試料を接触させ、次にそれらタンパク質の夫々かそれらタンパク質に対する夫々の抗体と結合する場合に、少なくともそれら抗体の１つが狭心症に特異的なマーカータンパク質に合致する抗体であり、また別の抗体の少なくとも１つか心筋梗塞に特異的なマーカータンパク質に合致する抗体であり、更に別の抗体の少くとも１つか胸痛の初期兆候において狭心症と心筋梗塞とを識別するマーカータンパク質に合致する抗体であるようにし、抗体と結合するか否かを検出する方法。
　【請求項１１】　マーカータンパク質と、それらの抗体との結合が可視的に検出される請求項１０記載の方法。
　【請求項１２】　複数の単クローン性抗体または多クローン性抗体に合致するマーカータンパク質かクレアチンキナーゼ、ミオグロビン、ミオシンＬ鎖タンパク質、ミオシンＨ鎖タンパク質、卜ロポミオシン、卜ロポニン−Ｉ、トロポニン−Ｃ、トロポニン−Ｔ、筋細胞膜タンパク質、トリオース−Ｐ−イソメラーゼ、またはクレアチンキナーゼ、ミオグロビンあるいはミオシンＬ鎖タンパク質の特質および特性を有する低分子量心タンパク質の少なくとも３つを含有し、その少なくとも１つはミオグロビンであり、他の１つはミオシンＬ鎖である請求項１０または１１記載の診断用キット。
　【請求項１３】　該３つのマーカータンパク質がクレアチンキナーゼ、ミオグロビンおよびミオシンＬ鎖である請求項１２に記載の方法。
【発明の詳細な説明】
　【０００１】
　【産業上の利用分野】　本発明は、患者の胸痛か心臓性（ｃａｒｄｉｃ）の原因によるか評価し、さらに患者の胸痛の初期兆候において不安定狭心症（アンギナ）と心筋梗塞（「ＭＩ」）とを識別するための正確、簡単、迅速、かつ携帯可能な診断方法として用いられる、パネル形態の新規な一段診断試験に関する。特に、パネル試験は、酵素免疫サンドイッチ乾燥化学フォーマット（ｅｎｚｙｍｅ　ｉｍｍｕｎｏａｓｓａｙ　ｓａｎｄｗｉｃｈ　ｄｒｙ　ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ　ｆｏｒｍａｔ）を用いて、羅患中あるいは羅患痕の血清または血漿中に見出される３種のマーカーの血清または血漿レベルを同時に評価する。本発明の具体例としては、マーカーをクレアチンキナーゼ（ＣＫ）、ミオグロビンおよびミオシンＬ鎖（ＭＬＣ）としている。
　【０００２】
　【従来の技術】　心筋梗塞の早期診断は、医師の診断能力と、患者の症状、例えば、腕から頚に広がることもある　胸痛や胸部圧迫感、疲労感、死の恐怖、息切れ、蒼白、冷感、末梢チアノーゼまたは細脈（ｒａｐｉｄ　ｔｈｒｅａｄｙ　ｐｕｌｓｅ）のよう患者の症状とに頼っている。
　【０００３】　北米では胸痛を感じた患者のほとんどが、胸痛の発症後６時間以内に医師または緊急病院に出向いている。それ故、ＭＩの初期段階において効果的な診断を行なうことが重要である。各種の心試験（ｃａｒｄｉａｃ　ｔｅｓｔ）がＭＩの診断に用いられている。これらの試験としては、ＥＣＧ、ＳＧＯＴ／ＡＳＴ、ＬＤＨ、ＣＫ−ＭＢ免疫検定、ＮＡラテックス　ミオグロビン粒子強化検定（Ｌａｔｅｘ　Ｍｙｏｇｌｏｂｉｎ　Ｐａｒｔｉｃｌｅ　Ｅｎｈａｎｃｅｄ　Ａｓｓａｙ）か挙げられる。しかし、救急班の医師が心臓由来の胸痛か否かを特定することができる単一の酵素心試験（ｅｎｚｙｍｅ　ｃａｒｄｉａｃ　ｔｅｓｔ）は存在しない。また、心筋梗塞か確認されはじめ血栓阻止治療を開始することができる。治療の開始が早ければ早いほど、患者の全快可能性が高く、少なくとも心筋障害を最小に止めることができる。このために、医師にとって胸痛か心臓由来か否かを特定することか重要である。
　【０００４】　ＭＩの診断に心電図（ＥＣＧ）を用いることかできる。しかしＥＣＧでは、心臓が著しい障害を受けるまで診断ができない。胸痛の初期段階におけるＥＣＧの診断特定率は僅か５１％にすぎない。従って、ＥＣＧはＭＩの初期診断には不適当である。血清グルタミンオキサルトランスアミナーゼ／アスパラギン酸トランスフェラーゼ（ＳＧＯＴ／ＡＳＴ）は心筋中に高濃度で見い出される特徴的な酵素である。ＳＧＯＴのレベルを測定する血清試験を心筋梗塞の診断に用いることかできる。しかし、ＳＧＯＴのレベルは、胸痛の発症から８〜１０時間後にはじめて上昇し始め、２４〜３６時間で最高値となり、５〜７日後に平常値に戻る。胸痛の初期段階の緊急時においては、心筋梗塞の診断にＳＧＯＴはあまり有用でない。また、ＳＧＯＴは心筋に特異的でない。ＳＧＯＴは骨格筋や肝臓、腎臓などの多くの組織に存在し、筋肉注射やショックにより放出され、肝臓疾患や肝性うっ血の羅患中にも放出される。このため、特定の心臓組織の損傷の診断には有用性が少ない。
　【０００５】　乳酸脱水素酵素（ＬＤＨ〉は心臓や骨格筋、肝臓などの多くの組織中に高濃度で見出される酵素である。血清中のＬＤＨの存在を検出する試験は心筋梗塞の診断に用いられている。ＬＤＨには５つのコモンイソタイプがあり、心臓には主としてＬＤＨ１およびＬＤＨ２が含まれている。ＬＤＨレベルは、胸痛の発症後２４〜３６時間で上昇し始め、４８〜７２時間後に最高値となり、４〜８日後に正常値に戻る。それ故、ＬＤＨは患者の胸痛の早期段階におけるＭＩの指示例としては有用ではない。更に、ＬＤＨは心臓障害に特異的でなく、肺動脈塞栓症、ヘモリシス（ｈａｅｍｏｌｙｓｉｓ）、肝性うっ血、腎疾病および骨格筋損傷により放出される。このように心臓に特異的でないので、ＬＤＨの有用性が低くなる。
　【０００６】　クレアチンキナーゼ（ＣＫ）は筋肉組織中に見出される酵素である。ＣＫは、クレアチンとアデノシン三リン酸（ＡＴＰ）をホスホクレアチンとアデノシン二リン酸（ＡＤＰ）に転化する触媒作用を有する。数種のＣＫイソエンザイムのうちＣＫ−ＭＢか心臓組織において見出される。ＣＫ−ＭＢは、障害を受けた心筋組織から放出されるので、心筋梗塞の診断に敏感なマーカーである。ＣＫ−ＭＢは放出された患者の血清中に残存する。図１は時間に関する患者血清中のＣＫ濃度を示している（リーＴ．Ｈ．氏ほか「Ａｎｎ．Ｉｎｔｅｒｎ．Ｍｅｄ．」１０５，２２１〜２３３（１９８６））。
　【０００７】ＣＫ−ＭＢ免疫検定は心筋梗塞の標準的な診断試験法である。ＣＫ−ＭＢを用いた診断方法は「ＣＫ−ＭＭ心筋梗塞免疫検定」と題する米国特許第４，９００，６６２号明細書に開示されている。上記米国特許第４，９００，６６２号明細書には心筋梗塞後の患者血清中のＣＫ−ＭＭ−ａ、ＣＫ−ＭＭのイソフォーム、およびＣＫ−ＭＭ−ａおよびＣＫ−ＭＭ−ｂの初期の濃度レベル上昇を同時に測定する方法が開示されている。この方法によると、梗塞発症時点を正確に評価することができる。血清中のＣＫ−ＭＭ−ａとＣＫ−ＭＭ−ｂの混合濃度、およびＣＫ−ＭＭ−ａの濃度を測定することにより心筋梗塞の急性期の時点が測定できる。試薬として、ＣＫ−ＭＢやＣＫ−ＭＭ−ｂ、ＣＫ−ＭＭ−ｃとほとんど結合しないＣＫ−ＭＭ−ａの新規な多クローン性および単クローン性抗体；ＣＫ−ＭＢやＣＫ−ＭＭ−ａ、ＣＫ−ＭＭ−ｃとほとんど結合しないアンチ−ＣＫ−ＭＭ−ｂ抗体；ＣＫ−ＭＭ−ａとＣＫ−ＭＭ−ｂには結合するが、ＣＫ−ＭＢまたはＣＫ−ＭＭ−ｃとはほとんど結合しないアンチ−ＣＫ−ＭＭ−ａ＋ｂ抗体；これらの抗体の標識誘導体；これらの抗体を付着する不溶性支持体；および１または２種以上の上記の試薬からなるキットが挙げられている。酵素標識および放射性標識（ｒａｄｉｏｌａｂｅｌｌｅｄ）されたＣＫ試薬が特に有用である。
　【０００８】
　【発明が解決しようとする課題】　ＣＫ−ＭＢを単独で診断マーカーとして用いるには問題がある。第１に、ＣＫ−ＭＢの血清レベルは心筋梗塞発症後６〜８時間まで上昇せず、最高値となるのは１２時間後である。このため初期の緊急診断、治療を行うことができない。第２に、ＣＫ−ＭＢ試験は熟練した研究技術者によって研究室にて行なわれる必要がある。郊外では早急に試験を行い結果を判読することが困難であり、診断の遅れや受診を待つ患者のための医療費の増大を招いている。
　【０００９】　第３に、ＣＫ−ＭＢは通常の骨格筋組織中にも存在する。従って、試験は心臓に特異的でなく、診断は確かでない。ミオグロビンは骨格筋または心筋細胞膜の近くに存在する他のタンパク質である。細胞膜が異常に浸透性を増したとき、例えば、心筋虚血羅患中に可逆状態となったとき、ミオグロビンは細胞から容易に放出される。ミオグロビンは、胸痛の発症から１．５時間以内で血清中に検出できる。ミオグロビンは心筋壊死により放出されるので、心筋損傷の初期マーカーとして有用であると、医学研究団体は考えている。図２は時間に対する血清中のミオグロビンの濃度を示している（グレナディアーＥ氏ほか「Ａｍ．Ｈｅａｒｔ　Ｊ．」１０４，４０８〜４１６（１９８１）；セグインＪ．氏ほか「Ｊ．Ｔｈｏｒａｃ．Ｃａｒｄｉｏｖａｓｃ．Ｓｕｒｇ．」９５，２９４〜２９７（１９８８））。
　【００１０】　胸痛の原因を診断する場合、血清ミオグロビンの増加が胸痛の発症後２〜３時間のうちに検出されない場合には、心筋梗塞は否定できる。ＮＡラテックス　ミオグロビン粒子強化検定はミオグロビンの検定用の一般に入手しうる検定キットである。検定は、ヒト体液に存在する抗原とポリスチレン粒子に共有結合したアンチミオグロビン抗体との反応に基づく。試料、Ｎミオグロビン試薬、非特異性反応を除去する溶液およびＮ反応緩衝液をピペットでキュベットに自動的に移す。１２時間温めた後、光錯乱を比濁手段で測定し、ミオグロビン濃度を検量線から算出する。
　【００１１】　また、ミオグロビンは放射線免疫検定を用いて検定することもできるが、酵素結合免疫吸着剤検定（ＥＬＩＳＡ）フォーマットはまだ利用されていない。診断マーカーとしてミオグロビンを単独で用いるには問題がある。ミオグロビンによっては心筋梗塞などの心筋損傷のタイプを特定できない。ミオグロビンはまた、ショックや腎疾病、横紋筋融解症、ミオパシーなどの種々の条件で放出される。更に、血清や血漿中のミオグロビン濃度は、一般に年令や性別によって異なり、通常健康人でも広範囲にわたって変化する。健康人では一般に９０μｇ／ｌの血清中濃度が上限とされている。従って、ある個人について通常のレベルが他の個人については容易にならぬ事態を示唆しているかもしれず、所望の診断精度が得られない。
　【００１２】　ミオシンＬ鎖（ＭＬＣ）はミオシン筋原線維の一部分であるが、この機能は、まだ明らかでない。ＭＬＣは緩急の心房および心室の筋肉に存在する。ＭＬＣは心筋虚血に対して極めて敏感であることが知られている。ＭＬＣは血清中に速やかに生じ、そのレベルは心筋壊死後１０日までの間、高いレベルで残留する。図３は時間に対する患者血清中のＭＬＣの濃度を示している（ワングＪ氏ほか「Ｃｌｉｎ．Ｃｈｉｍｉｃａ．Ａｃｔａ」１８１，３２５〜３３６（１９８９）；ジャックオースキーＧ氏およびシメスＪ．Ｃ氏ほか「Ｃｉｒｃｕｌａｔｉｏｎ　Ｓｕｐｐｌ．」１１８０，３５５（１９８９））。また、ＭＬＣは血栓治療の測定の予後値を示す。ＭＬＣの高い値は悪い予後を指示し、また著しい梗塞に相当する。数日にわたるレベルの降下は患者の回復傾向を指示するのに対して、スパイキングまたはスタジコパターンは梗塞傾向を示し治療（ｉｎｔｅｒｖｅｎｔｉｏｎ）の必要性を指示する。
　【００１３】　ＭＬＣには主にＭＬＣ１とＭＬＣ２として知られる２つの主要タイプがある。これらは、梗塞細胞の細胞形質中の可溶性プール（ｓｏｌｕｂｌｅ　ｐｏｏｌ）として存在し、またミオシン筋原線維と一体化している。心室筋中では、ＭＬＣ２、そしておそらくはＭＬＣ１も緩骨格筋中にあるイソタイプと同一である。ＭＬＣ１は心臓痛を覚えた患者の８０〜８５％で上昇が見られる。ＭＬＣ１は不安定狭心症や虚血性心臓疾患に極めて敏感な指標である。
　【００１４】　他の心マーカー（ｃａｒｄｉａｃｍａｒｋｅｒｓ）としては、低分子量心タンパク質（ＬＭＷＣＰ）がある。この心マーカーの例としては、収縮性器官の成分、すなわち、卜ロポニン、トロポニン−Ｔ、卜ロポニン−Ｉおよびトロポニン−Ｃ、トリオース−Ｐ−イソメラーゼ等のミトコンドリア酵素、心臓から放出されやすい低分子量ポリペプチド、並びに虚血発症後すぐに放出される筋細胞膜タンパク質またはタンパク質フラグメント、特に心特異性の１５ｋｄ筋細胞タンパク質および１００ｋｄ複合糖タンパク質を挙げることができる。
　【００１５】　心イソタイプ（ｃａｒｄｉａｃ　ｉｓｏｔｙｐｅ）トロポニン−Ｉは、心筋の収縮間の休止期間中、アクチン分子とミオシン分子との相互反応を抑制する。トロポニン−ＩはＭＩ発症後４〜６時間で患者の血清中に現れ、７〜８日にわたり高い割合で残留する。図４は時間に対するトロポニン−Ｉの濃度を示している（クミンスＢ．；アウクランドＭ．Ｌ．；およびクミンスＰ．氏「Ａｍ．ＨｅａｒｔＪ．」１１３，１３３３〜１３４４（１９８７））。トロポニン−Ｉは心特異性であり、心筋損傷が骨格筋損傷かを鑑定するうえで他のマーカーに比べ極めて敏感である。
　【００１６】　トロポニン−Ｔは細いフィラメントのトロポニン−トロポミオシン複合体の一部であり、トロポミオシン骨格とトロポニン−Ｉ−卜ロポニン−Ｃ複合体との間の結合剤として作用する。トロポニン−Ｔは塩基性タンパク質であり、心筋、および緩急の骨格筋中にイソタイプがある。トロポニン−ＴはＭＩ後血清中に３時間のうちに生じ、少なくとも１０日にわたって高い割合で残留する。図５は時間に対するトロポニン−Ｔの濃度を示している（カツＨ．Ａ氏ほか「Ｊ．Ｍｏｌ．Ｃｅｌｌ　Ｃａｒｄｉｏｌ．」２１，１３４９〜１３５３（１９８９））。トポニン−Ｔは二相放出パターン（ｂｉｐｈａｓｉｃ　ｒｅｌｅａｓｅ　ｐａｔｔｅｒｎ）に従う。トロポニン−Ｔは心特異性で、ＭＩに極めて敏感である。
　【００１７】　ミオシンＨ鎖（ＭＨＣ）およびトロポミオシンは心マーカーとして用いられる高分子量タンパク質である。ＭＨＣは筋肉の主要な収縮性タンパク質の一つである。ＭＨＣのフラグメントは、心筋細胞壊死やその後の不可逆性膜の損傷により心室から血清中に放出される。ＭＨＣフラグメントは心筋細胞壊死直後には血清中に出現しないが、ＭＨＣはＭＩ発症後少なくとも１０日間は高濃度で残留する。ＭＨＣの最高値はＭＩ発症後４日後に観察される。図６は時間に対するＭＨＣ濃度を示している。（レガーＪ．Ｏ．Ｃ．氏ほか「Ｅｕｒ．Ｊ．ｏｆ　Ｃｌｉｎ．Ｉｎｖｅｔ．」１５，４２２〜４２９（１９８５）；セグウインＪ．Ｒ．氏ほか「Ｊ．Ｔｈｏｒａｃ．Ｃａｒｄｉｏｖａｓｃ．Ｓｕｒｇ．」９８，３９７〜４０１（１９８９））。ＭＨＣ放出曲線下の面積は心筋細胞の損傷の広まりと極めてよく相関する。しかし、ＭＨＣのレベルはＭＩの進行中にはあまり臨床的に有用でない。
　【００１８】　トロポミオシンは、筋収縮における調製システムの部分である２種のポリペプチドから形成した二量体である。トロポミオシンは、心筋梗塞後、約７〜８時間で血清中に検出され、ＣＫ−ＭＢと同様、心筋梗塞に極めて敏感である。図７は時間に対するトロポミオシン濃度を示している（クミンスＰ氏ほか「Ｃｌｉｎ．Ｓｃｉ．」６０，２５１〜２５９（１９８１））。しかしながら、トロポミオシは骨格筋損傷でも高値を示し特異的ではない。
　【００１９】　現在の標準的な心筋梗塞診断方法には限界がある。胸痛の発症後すぐに、翌えば救急車や病院で実施できる高感度で正確、迅速、簡単な診断試験は開発されていない。本発明は、胸痛の発症後早期に患者の血液や血漿中に現れる、少なくとも３種の異なる心筋損傷マーカーを組合わせ測定することにより、不安定狭心症とＭＩの早期段階において使用できる心筋梗塞の改良診断方法を提供するものである。
　【００２０】
　【課題を解決するための手段】　本発明は従来技術の欠点を解決するために、患者の血清中の少なくとも３種の心筋損傷により摘出されるマーカーを検出する、緊急時に用いる一段階で、正確、迅速かつ携帯できるパネル診断試験を提供するものである。試験結果から、患者が不安定狭心症にかかっているか否か、または心筋梗塞か否かを鑑別できる。ＭＩの早期診断は血栓阻止治療を早期に始めることを可能とする。それ故、心臓損傷を最小に止めることができ、患者の生存率を高めることができる。パネル試験の結果により、初期症状から数日後でも、不安定狭心症と心筋梗塞とを識別することができる。パネル試験は酵素免疫検定サンドイッチドライケミストリー（以下乾燥化学という〉フォーマットを利用する。パネルによる一連の測定により、医師は、心筋損傷の範囲および血栓阻止の成功に関する予後を知ることができる。本発明の具体例としては、３種のマーカーはクレアチンキナーゼ（ＣＫ）、ミオグロビンおよびミオシンＬ鎖（ＭＬＣ）である。
　【００２１】　本発明を利用することにより、心筋梗塞を患者の胸痛の早期兆候において検出する試験診断用キットが得られる。試験用キットは、血液または血清を保持する容器と、試料に連結する検出手段とからなる。検出手段は、キャリヤー（担体）に担持されている少なくとも３種の単クローン性抗体または多クローン性抗体であって、各々が心筋梗塞の初期段階に心筋により放出される異なるタンパク質に相補（以下合致という）する抗体と、合致タンパク質と反応する各抗体に各々応答する対応試薬とを含んでいる。
　【００２２】
　【実験例】　次に、本発明を添付図面に基づいて説明する。本発明の概要を図８に示す。好適例では、本発明のキットはパネルフォーマット１からなる。パネルフォーマットとしては公知の市販のものを用いることができる。このパネルフォーマットは妊娠試験に一般に用いられているフォーマットと似たもので、商標登録「ＢＩＯＳＩＧＮ」として一般に入手できる。
　【００２３】　パネルは正面パネル１０および裏面パネル１２を有するポリプロピレン　カードからなる。図９に示すように、正面パネル１０は各心マーカーについての表示ウインドー１４および試料ウインドー１６を有している。正面パネル１０の下には露出乾燥化学膜１８があり、この膜１８は正面パネル１０の背後に適当な手段で固定されている。裏面パネル１２にはリップ２０が設けられている。このリップ２０は正面パネル１０をスナップ止めできるように裏面パネル１２の周辺に延在し、これにより膜１８を正面パネルと裏面パネルとの間にシールしている。
　【００２４】　正面パネルおよび裏面パネルは共にスナップ止めするように記載しているが、当業技術者に知られている両パネルを接合する他の多くの適当な方法を用いることができる。正面パネル１０には患者の氏名や身元を記載するための領域１３を設けることもできる。更に試験結果を記載できるスペースもある。図１０に示すように、膜１８は単クローン性または多クローン性抗体のキャリヤーである。好適例においては、血液または血漿は一端から他端に矢印で示すように流れる。端部２２は試料ウインドー１６と一列に並んでいる。固定捕捉された抗体２６は抗体一酵素抱合体２４と積層または結合されている。この抱合体２４は抗体２６により認識される以外の抗原の異なるエピトープに対して選ばれる。抗体２６はミオグロビンタンパク質に合致（ｃｏｍｐｌｅｍｅｎｔａｒｙ）する。同様に、抗体３０は対応試薬２８に積層されている。抗体３０はＣＫ−ＭＢに合致する。同様に、抗体３４は試薬３２に積層されている。抗体３４はミオシンＬ鎖に合致する。抗体３８は正常な血清または血液に見出されるいかなるタンパク質にも合致する。抗体３８は試薬３６に積層されている。
　【００２５】　単クローン性および多クローン性抗体は、多クローン性抗体の生成に用いられる任意の哺乳動物を用いた通常の方法によって生成することができる。好適例では、標識試薬を用いる。抗体標識は標識化され、または識別可能なモイエティー（ｍｏｉｅｔｙ）と化学的に結合される。モイエティーは、血清や血液中または乾燥化学膜上の抗体の存在を確認し定量するために観測・計量できるものである。診断具として用いられる本発明の抗体と結合するリガンドや基は、それらと結合する抗体から識別できるような物理的化学的性質を有する元素、化合物または生物学的物質を含んでいる。
　【００２６】　各心マーカー毎に、モノ／ポリ、ウサギ／ポリ、ヤギ／ポリの少なくとも２種の抗体が必要である。抗体をその特異的心免疫原に対して親和精製（ａｆｆｉｎｉｔｙ　ｐｕｒｉｆｉｅｄ）し、次いで非関連種に対して交差吸収することにより更に精製して、非特異的免疫グロブリンを除去する。使用の際には、診断医、例えば医師や救急技師、看護婦が患者の血清または血液を３滴または１００ｍｌ以下試料ウインドー１６に加える。試料は、毛細管現象により膜１８に沿って移動し、試薬と抗体の対２４と２６、２８と３０、３２と３４、３６と３８に順次接触する。
　【００２７】　特定のマーカーが試料中に存在する場合、そのマーカーは膜に固定された抗体に結合する。また、対応試薬にも反応し、試薬の色の変化によって視覚化される。色の変化は試料におけるマーカーの濃度に比例する。それ故、試験用キットを時間において用いる場合には、マーカー濃度の増減を測定することができ、診断に用いることができる。試験は３〜５分内で完了する。
　【００２８】　好適例では、試料中に存在する各心マーカーを青色バンドによって示す。バンドの色の強度は反射計によって定量できる。これにより色の強度と特定マーカーの濃度レベルとを対応付ける。反射計にはマイクロプロセッサーを設け、パネル中の各心マーカーの定量結果を患者別に各マーカーの濃度としてプリントアウトすることができる。
　【００２９】　試験は、３滴または１００μｌ未満の血清または血漿を用い、試験間の精度計数の変化と試料間の精度計数の変化が１５％以下で、０．５ｎｇ／ｍｌ〜２５ｎｇ／ｍｌのマーカー濃度に敏感となるようにすることが好ましい。マーカーの特性によって試験に用いられる心マーカーが選ばれる。好適例では、図８に示すように、ミオグロビン、ＭＬＣおよびＣＫ−ＭＢを有するパネルが用いられている。
　【００３０】　ミオグロビンは心筋細胞から極めて容易に放出され、心特異的ではないが、心筋梗塞つまり心筋壊死に極めて高い敏感さを有しており、壊死が起こらない程度の酸素欠乏によっては放出されない。ＭＬＣは心特異的であり、胸痛が心臓由来か否かの鑑別を可能とし、容易に放出される。しかし、ミオグロビンほど容易に放出されない。ＣＫ−ＭＢは心筋梗塞と狭心症とを鑑別できるが、胸痛の発症後約６時間経過しないと検出できず、このために緊急診断試験として、単独で用いることができない。
　【００３１】　図１、２および３に示すように、使用する心マーカーがＣＫ−ＭＢ、ミオグロビンおよびＭＬＣである場合には、以下の試験結果の解釈により診断できる。パネル試験結果がＭＬＣについてポジティブでありミオグロビンおよびＣＫ−ＭＢについてネガティブである場合、患者の胸痛が心臓由来のものであり不安定狭心症が原因であることを示唆する。
　【００３２】　ミオグロビンおよびＭＬＣがポジティブであり、ＣＫ−ＭＢがネガティブである場合には、初期の心筋梗塞の進行を示唆し、治療を開始することができる。３種のマーカーすべてがポジティブである場合には、心筋梗塞を示唆する。
　【００３３】　ＭＬＣおよびＣＫ−ＭＢがポジティブで、ミオグロビンがネガティブである場合には、心筋梗塞を示唆する。ミオグロビンおよびＣＫ−ＭＢがポジティブでありＭＬＣがネガティブである場合には、患者は骨格筋損傷を有する（偽陽性）か心筋梗塞に羅患している。
　【００３４】　ＭＬＣ放出曲線が時々僅かな下降を有しているため、患者が僅かな心内膜下梗塞を有している場合であっても「下降（ｄｉｐ）」時に試験された可能性があるので、この場合試験は偽陽性と「僅かな」心筋梗塞とを識別することができない。梗塞が僅かな場合には、「下降」はほとんど正常レベルにまで下がり、それ故、患者はＭＬＣについてネガティブを示すことがある。ＣＫ−ＭＢの存在によってポジティブ診断を行うことととなる。
　【００３５】　患者が著しい心筋梗塞を有する場合には、ＭＬＣレベルにおける「下降」は正常レベルにまで下がるほど大きくはなく、それ故ＭＬＣはそのまま検出される。他の実験例では、試験パネルとして同様のフォーマットで異なる抗体の組み合わせを用い、異なる心マーカーを評価することができる。パネル試験により、患者の胸痛の初期段階における心臓組織の損傷を検出できるようにするため、ＣＫ、ミオシンＬ鎖またはミオグロビンのような心筋障害の初期段階において多量に摘出されるマーカーに対応する少なくとも１種の抗体を用いる必要がある。また、ＣＫ、ミオシンＬ鎖またはミオグロビンの特質および特性を有する低分子量心タンパク質をキットに用いることもできる。
　【００３６】　適当なタンパク質および酵素としては、卜ロポニン、トロポニン−Ｉ、トロポニン−Ｃ、トロポニン−Ｔおよび筋細胞膜タンパク質、トリオースフォスフェート（以下Ｐ−という）イソメラーゼ、またはクレアチンキナ−ゼ、ミオグロビンもしくはミオシンＬ鎖の特質および特性を有する任意の高分子量心タンパク質から選択することができる。また、トロポミオシンおよびミオシンＨ鎖のような他のタンパク質をキットに加えることができる。この場合、胸痛から長時間を経過したＭＩの後期段階であってもキットをＭＩの診断に用いることができる。
　【００３７】　第２実験例では、膜１８に補捉された抗体１２６と対応試薬１２４の層を設けることができる。同様に、各マーカーを検出することができるように、対応試薬と抗体の対１２８と１３０、１３２と１３４、および対照対１３６と１３８を設ける。使用の際には、上述のように試料を各対に接触させてその結果を読み取る。
　【００３８】　乾燥化学膜１１８は吸収性材料１２０により支持することもできる。吸収性材料１２０により膜を通る血清の摘出が向上する。試験キットの他の実験例として、一般に用いられている血液試料管が用いられる。管の内壁を単クローン性および多クローン性抗体と試薬の支持体として用いることができる。試験者が単に管を振るだけで抗体と血液とを反応させることができる。血液中に心臓性タンパク質がある場合、上述のように色の変化が生じる。
　【００３９】　上述において、本発明の好適例を記載したが、本発明はこれらの具体例に限定されるものではない。本明細書および特許請求の範囲に記載された発明の本旨を逸脱しない限り、様々な変更を行うことができる。
【図面の簡単な説明】
　【図１】　時間に対する血清中のＣＫのレベルを示すグラフである。
　【図２】　時間に対する血清中のミオグロビンのレベルを示すグラフである。
　【図３】　時間に対する血清中のＭＬＣのレベルを示すグラフである。
　【図４】　時間に対する血清中のトロポニン−Ｉのレベルを示すグラフである。
　【図５】　時間に対する血清中のトロポニン−Ｔのレベルを示すグラフである。
　【図６】　時間に対する血清中のＭＨＣのレベルを示すグラフである。
　【図７】　時間に対する血清中のトロポミオシンのレベルを示すグラフである。
　【図８】　本発明の診断試験キットの１例構造を示す表面図である。
　【図９】　図８に示す構造の分解図である。
　【図１０】　図８に示すキット構造の膜の斜視図である。
　【図１１】　図１０に示す膜の変形構造の斜視図である。
　【符号の説明】
　１　パネル　フォーマット
１０　正面パネル
１２　裏面パネル
１４　表示ウインドー
１６　試料ウインドー　１８　膜
２０　リップ
２２　端部
２４　抗体−酵素抱合体（試薬）
２６　固定捕捉抗体
３０，３４，３８，１２６，１３４　抗体
２８，３２，３６，１２８，１３２　試薬
１１８　膜
１２０　吸収性材料
１３６，１３８　対照対