(57)【要約】式2003104198.tif 000104｛式中ｍは１または２を示し、Ｒ１は・炭素原子数３〜８個の直鎖状、分岐鎖状の飽和または不飽和のアルキル基、・炭素原子数５〜８のシクロアルキル基、・炭素原子数５〜８のシクロアルケニル基、・炭素原子数１〜６のアルキル基、炭素原子数３〜８のシクロアルキル基またはフェニル基で置換された炭素原子数５〜８のシクロアルキル基、・トリフルオロブチル基、・ペルヒドロナフチル基、・−（ＣＨ２）−Ｃ（ＣＨ３）＝ＣＨ−Ｐｈで示される基、・シンナミル基などの置換基を示し、Ｚは式2003104198.tif 000105（式中Ｒ１９は炭素原子数３〜１０のシクロアルキル基または炭素原子数３〜１０のシクロアルケニル基を示す。）で示される基などを示す。｝で表される化合物は、好酸球浸潤において重要な働きを担っているケモカイン受容体に対して高い親和性を有し、ケモカイン受容体の作用を阻害することにより、ヒト及び動物におけるケモカインの受容体が関わる疾患、例えば気管支喘息やアレルギー性結膜炎をはじめとするアレルギー性疾患に対する治療又は予防のために使用することができる。
2003104198.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
式
2003104198.tif 000090
｛式中ｍは１または２を示し、
Ｒ１は
・炭素原子数３〜８個の直鎖状、分岐鎖状のアルキル基、
・炭素原子数３〜８個の直鎖状、分岐鎖状のアルケニル基、
・炭素原子数５〜８のシクロアルキル基、
・炭素原子数５〜８のシクロアルケニル基、
・炭素原子数１〜６のアルキル基、炭素原子数３〜８のシクロアルキル基またはフェニル基で置換された炭素原子数５〜８のシクロアルキル基、
・トリフルオロブチル基、
・ペルヒドロナフチル基、
・−ＣＨ２−Ｃ（ＣＨ３）＝ＣＨ−Ｐｈで示される基、
・シンナミル基
・式
2003104198.tif 000091
（式中、ｎ２は０〜３の整数を示し、Ｒ２、Ｒ３はそれぞれ水素原子または炭素原子数１〜３のアルキル基を示し、Ｒ４はフェニル基、ナフチル基、炭素原子数１〜４の直鎖状もしくは分岐鎖状のアルキル基または炭素原子数２〜４の直鎖状もしくは分岐鎖状のアルケニル基を示し、Ｘ１は酸素原子、硫黄原子、カルボニル基またはカルボニルオキシ基を示す。）で示される基、
・式
2003104198.tif 000092
（式中ｎ３およびｎ４はそれぞれ０〜３の整数を示し、Ｒ５は水素原子、炭素原子数１〜４の直鎖状もしくは分岐鎖状のアルキル基、炭素原子数２〜４の直鎖状もしくは分岐鎖状のアルケニル基、炭素原子数１〜６のアルコキシ基、フェニル基、ハロゲンで置換されたフェニル基、または炭素原子数３〜８のシクロアルキル基を示し、環Ｃ１は「無置換または炭素原子数１〜３のアルキル基で１〜３個置換された炭素原子数３〜８のシクロアルキル基」、「炭素原子数５〜８のシクロアルケニル基」、「無置換または炭素原子数１〜３のアルコキシ基で置換されたナフチル基」、「アダマンチル基」、「式
2003104198.tif 000093
（式中、ｎ５は１または２を示し、Ａ１はメチレン基または−Ｃ（ＣＨ３）２−で示される基を示し、Ａ２はメチレン基、エチレン基、ビニレン基またはメチルメチレン基を示す。）で示される基」、「式
2003104198.tif 000094
（Ｒ６〜Ｒ１０はそれぞれ水素原子、ハロゲン原子、炭素原子数１〜６のアルキル基、炭素原子数１〜５のアルコキシ基、炭素原子数１〜３のアルキルチオ基、トリフルオロメチル基、トリフルオロメチルオキシ基、ベンジル基、フェネチル基、スチリル基、フェノキシ基、ベンジルオキシ基、フェニル基または炭素原子数２〜４のアルコキシカルボニル基を示す。）で示される基」または「式
2003104198.tif 000095
（式中、Ｒ１１とＲ１２はそれぞれ水素原子、炭素原子数１〜３のアルキル基またはフェニル基を示し、Ｘ２は窒素原子または＝ＣＨ−で示される基を示し、Ｘ３は酸素原子、硫黄原子または窒素原子を示す。）で示される基」で示される基、
・式
2003104198.tif 000096
［式中、ｎ６は１〜３の整数を示し、Ｘ４は酸素原子または硫黄原子を示し、Ｒ１３〜Ｒ１５はそれぞれ水素原子、ハロゲン原子、炭素原子数１〜３のアルコキシ基または炭素原子数１〜３のアルキル基を示し、Ａ３は−（ＣＨ２）ｎ７−（式中ｎ７は０〜５の整数を示す。）で示される基、−ＣＨ２−ＣＨ＝ＣＨ−ＣＨ２−で示される基または式
2003104198.tif 000097
（式中、ｎ８、ｎ９はそれぞれ０または１を示し、Ｒ１６は炭素原子数１〜３のアルキル基または−ＣＨ２−Ｏ−ＣＨ２−Ｐｈで示される基を示す。）で示される基を示す。］で示される基、
・式
2003104198.tif 000098
［式中、ｎ１０は０〜２の整数を示し、
2003104198.tif 000099
は式
2003104198.tif 000100
（式中、ｎ１１は１または２を示し、Ｘ５およびＸ６はそれぞれメチレン基または酸素原子を示す。）で示される基、または式
2003104198.tif 000101
（式中、ｎ１２は１〜５の整数を示し、Ｒ１７、Ｒ１８はそれぞれ水素原子または炭素原子数１〜３のアルキル基を示し、Ａ４はメチレン基または酸素原子を示す。）］で示される基を示し、
Ｚは式
2003104198.tif 000102
または式
2003104198.tif 000103
（式中Ｒ１９は炭素原子数３〜１０のシクロアルキル基または炭素原子数３〜１０のシクロアルケニル基を示し、Ｒ２０は炭素原子数１〜５のアルキル基を示し、Ｙ−は陰イオンを示す。）で示される基を示す。｝で表される化合物およびその医薬上許容される塩。
【発明の詳細な説明】
技術分野
本発明は、白血球遊走因子であるケモカインの受容体に対する拮抗作用を有する化合物に関する。
背景技術
ケモカインは主に好中球や単球に作用する因子として発見され、主に炎症性疾患における役割が研究されてきた。しかし、最近発見された新しいケモカインは、リンパ球や樹状細胞を主な標的細胞とすることが明らかになった。これらのケモカインは免疫系組織の形成、恒常性維持、免疫応答、などの役割をはたすと考えられている。さらに、ケモカインは炎症や免疫応答での細胞遊走にとどまらず、発生、分化、ウイルス感染、癌などのさまざまな分野でも重要な役割をはたしていることがわかってきた。
ケモカインの一種であるＥｏｔａｘｉｎは強い好酸球走化性を示し、骨髄から末梢血への好酸球の動員に作用するだけでなく、好酸球脱顆粒・活性酵素産生などのような好酸球の活性化を促進する。また、好酸球の接着分子受容体ＣＤ１１ｂの発現や血管内皮細胞の接着分子ＩＣＡＭ−１、ＶＣＡＭ−１の発現を誘導し、好酸球の接着を増強させる。
一方、ＣＣＲ３は好酸球よりクローニングされたＧ蛋白質共役型受容体であり、好酸球や好塩基球、Ｔｈ２細胞に発現しており、Ｅｏｔａｘｉｎと高い親和性を有するリガンドである。
したがって、ＥｏｔａｘｉｎのＣＣＲ３への結合を特異的に阻害する物質は、気管支喘息やアレルギー性結膜炎をはじめとするアレルギー性疾患などに対する治療又は予防のための医薬品として有用であると考えられる。
ケモカイン受容体の機能を阻害する物質としてはＷＯ９８／０４５５４号明細書などに記載されているが、本発明の化合物は知られていない。
本発明は、ケモカイン受容体の機能を特異的に阻害する化合物の提供を目的とする。
発明の開示
本発明者らは、課題を解決するために種々検討した結果、ある種の化合物がケモカイン受容体の機能を特異的に阻害することを見出し本発明を完成した。
すなわち本発明は、
式
2003104198.tif 000003
｛式中ｍは１または２を示し、
Ｒ１は
・炭素原子数３〜８個の直鎖状、分岐鎖状のアルキル基、
・炭素原子数３〜８個の直鎖状、分岐鎖状のアルケニル基、
・炭素原子数５〜８のシクロアルキル基、
・炭素原子数５〜８のシクロアルケニル基、
・炭素原子数１〜６のアルキル基、炭素原子数３〜８のシクロアルキル基またはフェニル基で置換された炭素原子数５〜８のシクロアルキル基、
・トリフルオロブチル基、
・ペルヒドロナフチル基、
・−ＣＨ２−Ｃ（ＣＨ３）＝ＣＨ−Ｐｈで示される基、
・シンナミル基
・式
2003104198.tif 000004
（式中、ｎ２は０〜３の整数を示し、Ｒ２、Ｒ３はそれぞれ水素原子または炭素原子数１〜３のアルキル基を示し、Ｒ４はフェニル基、ナフチル基、炭素原子数１〜４の直鎖状もしくは分岐鎖状のアルキル基または炭素原子数２〜４の直鎖状もしくは分岐鎖状のアルケニル基を示し、Ｘ１は酸素原子、硫黄原子、カルボニル基またはカルボニルオキシ基を示す。）で示される基、
・式
2003104198.tif 000005
（式中ｎ３およびｎ４はそれぞれ０〜３の整数を示し、Ｒ５は水素原子、炭素原子数１〜４の直鎖状もしくは分岐鎖状のアルキル基、炭素原子数２〜４の直鎖状もしくは分岐鎖状のアルケニル基、炭素原子数１〜６のアルコキシ基、フェニル基、ハロゲンで置換されたフェニル基、または炭素原子数３〜８のシクロアルキル基を示し、環Ｃ１は「無置換または炭素原子数１〜３のアルキル基で１〜３個置換された炭素原子数３〜８のシクロアルキル基」、「炭素原子数５〜８のシクロアルケニル基」、「無置換または炭素原子数１〜３のアルコキシ基で置換されたナフチル基」、「アダマンチル基」、「式
2003104198.tif 000006
（式中、ｎ５は１または２を示し、Ａ１はメチレン基または−Ｃ（ＣＨ３）２−で示される基を示し、Ａ２はメチレン基、エチレン基、ビニレン基またはメチルメチレン基を示す。）で示される基」、「式
2003104198.tif 000007
（Ｒ６〜Ｒ１０はそれぞれ水素原子、ハロゲン原子、炭素原子数１〜６のアルキル基、炭素原子数１〜５のアルコキシ基、炭素原子数１〜３のアルキルチオ基、トリフルオロメチル基、トリフルオロメチルオキシ基、ベンジル基、フェネチル基、スチリル基、フェノキシ基、ベンジルオキシ基、フェニル基または炭素原子数２〜４のアルコキシカルボニル基を示す。）で示される基」または「式
2003104198.tif 000008
（式中、Ｒ１１とＲ１２はそれぞれ水素原子、炭素原子数１〜３のアルキル基またはフェニル基を示し、Ｘ２は窒素原子または＝ＣＨ−で示される基を示し、Ｘ３は酸素原子、硫黄原子または窒素原子を示す。）で示される基」で示される基、
・式
2003104198.tif 000009
［式中、ｎ６は１〜３の整数を示し、Ｘ４は酸素原子または硫黄原子を示し、Ｒ１３〜Ｒ１５はそれぞれ水素原子、ハロゲン原子、炭素原子数１〜３のアルコキシ基または炭素原子数１〜３のアルキル基を示し、Ａ３は−（ＣＨ２）ｎ７−（式中ｎ７は０〜５の整数を示す。）で示される基、−ＣＨ２−ＣＨ＝ＣＨ−ＣＨ２−で示される基または式
2003104198.tif 000010
（式中、ｎ８、ｎ９はそれぞれ０または１を示し、Ｒ１６は炭素原子数１〜３のアルキル基または−ＣＨ２−Ｏ−ＣＨ２−Ｐｈで示される基を示す。）で示される基を示す。］で示される基、
・式
2003104198.tif 000011
［式中、ｎ１０は０〜２の整数を示し、
2003104198.tif 000012
は式
2003104198.tif 000013
（式中、ｎ１１は１または２を示し、Ｘ５およびＸ６はそれぞれメチレン基または酸素原子を示す。）で示される基、または式
2003104198.tif 000014
（式中、ｎ１２は１〜５の整数を示し、Ｒ１７、Ｒ１８はそれぞれ水素原子または炭素原子数１〜３のアルキル基を示し、Ａ４はメチレン基または酸素原子を示す。）］で示される基を示し、
Ｚは式
2003104198.tif 000015
または式
2003104198.tif 000016
（式中Ｒ１９は炭素原子数３〜１０のシクロアルキル基または炭素原子数３〜１０のシクロアルケニル基を示し、Ｒ２０は炭素原子数１〜５のアルキル基を示し、Ｙ−は陰イオンを示す。）で示される基を示す。｝で表される化合物およびその医薬上許容される塩である。
本発明において、直鎖状、分岐鎖状のアルキル基とは、たとえばメチル基、エチル基、ｎ−プロピル基、イソプロピル基、ｎ−ブチル基、イソブチル基、ｔｅｒｔ−ブチル基、ｎ−ペンチル基、イソペンチル基、ネオペンチル基、ｔｅｒｔ−ペンチル基、ｎ−ヘキシル基、ｎ−ヘプチル基、ｎ−オクチル基などの炭化水素基である。
本発明において、直鎖状、分岐鎖状のアルケニル基とは、たとえばビニル基、アリル基、イソプロペニル基、ブテニル基、イソブチレニル基、イソプレニル基などの炭化水素基である。
本発明においてシクロアルキル基とは、シクロプロピル基、シクロブチル基、シクロペンチル基、シクロヘキシル基、シクロヘプチル基、シクロオクチル基などの環状飽和炭化水素基である。
本発明においてシクロアルケニル基とは、シクロペンテニル基、シクロヘキセニル基、シクロヘキサジエニル基、シクロヘプテニル基、シクロオクテニル基などの環状不飽和炭化水素基である。
本発明においてアルコキシ基とはメトキシ基、エトキシ基、プロポキシ基、ブトキシ基、イソプロポキシ基、イソブトキシ基、ｓｅｃ−ブトキシ基、ｔｅｒｔ−ブトキシ基、ペンチルオキシ基、ヘキシルオキシ基、アリルオキシ基などの基である。
本発明で陰イオンとはハロゲン化物イオンなどのことであり、具体的には塩化物イオン、臭化物イオン、ヨウ化物イオン、メタンスルホネートイオン、モノメチルスルホネートイオンなどがあげられる。
本発明の化合物は、例えば以下に示す方法によって合成することができる。すなわち、下記式（ａ）
2003104198.tif 000017
で表される化合物と下記式（ｂ）
2003104198.tif 000018
（式中、Ｒ１９は前記と同義）で表される化合物を還元剤の存在下、還元的アルキル化反応を行い、下記式（ｃ）
2003104198.tif 000019
（式中、Ｒ１９は前記と同義）で表される化合物を得、更に、鉱酸、有機酸処理などの通常用いられる方法により加水分解することにより、下記式（ｄ）
2003104198.tif 000020
（式中、Ｒ１９は前記と同義）で表される化合物もしくはそれらの塩とした後、下記式（ｅ）
2003104198.tif 000021
（式中、ｍは前記と同義）で表される化合物もしくはそれらの塩を用いてアミド結合を形成する通常の方法により縮合し、下記式（ｆ）
2003104198.tif 000022
（式中、ｍ、Ｒ１９は前記と同義）で表される化合物を得、下記式（ｇ）
2003104198.tif 000023
（式中、Ｒ１は前記と同義）で表される化合物と光延反応によりエーテル結合を形成することによって、下記式（ｈ）
2003104198.tif 000024
（式中、ｍ、Ｒ１，Ｒ１９は前記と同義）で表される本発明化合物を合成することができる。
また、上記式（ｈ）で示される本発明の化合物は、上記式（ｆ）で表される化合物もしくはそれらの塩と、下記式（ｉ）
2003104198.tif 000025
（式中、Ｒ１は前記と同義であり、Ｌは脱離基を表す。ここで脱離基とは、例えば塩素原子、臭素原子、ヨウ素原子等のハロゲン原子、メタンスルホニルオキシ基、ｐ−トルエンスルホニルオキシ基等のスルホニルオキシ基などがあげられる）で表される化合物を塩基存在下反応させることによって合成することもできる。
更に、上記式（ｈ）で表される化合物と下記式（ｊ）
2003104198.tif 000026
（式中、Ｒ２０およびＹは前記と同義）で表される化合物を反応させることによって下記式（ｋ）
2003104198.tif 000027
（式中、ｍ、Ｒ１，Ｒ１９、Ｒ２０は前記と同義）で表される本発明化合物を合成することができる。この際、ピペリジンの１位と４位にｃｉｓ，ｔｒａｎｓの異性体が生じるが、便宜上、低極性の化合物をｃｉｓ体、高極性の化合物をｔｒａｎｓ体と命名する。
本発明の化合物は、その置換の態様によって、光学異性体、ジアステレオ異性体、幾何異性体等の立体異性体が存在することがあるが、本発明の化合物はこれら全ての立体異性体及びそれらの混合物をも包含する。
上記反応で塩基を用いる場合の塩基としては例えば炭酸ナトリウム、炭酸カリウム、炭酸水素ナトリウム、炭酸水素カリウム、水酸化ナトリウム、ジムシルナトリウム、水素化ナトリウム、ナトリウムアミド、ｔｅｒｔ−ブチルカリウム等のアルカリ金属塩類、トリエチルアミン、ジイソプロピルアミン、ピロリジン、ピペリジン等のアミン類、酢酸ナトリウム、酢酸カリウム等を用いることができ、鉱酸とは例えば塩酸、臭化水素酸、ヨウ化水素酸、硝酸、硫酸等であり、有機酸とは例えば、酢酸、メタンスルホン酸、ｐ−トルエンスルホン酸、トリフルオロ酢酸等であり、還元剤とは例えば水素化ホウ素ナトリウム、シアノ水素化ホウ素ナトシウム、水素化リチウムアルミニウム、トリアセトキシ水素化ホウ素ナトリウム等である。反応溶媒としては、水、メタノール、エタノール、イソプロピルアルコール、ｔｅｒｔ−ブチルアルコール等のアルコール類、ジオキサン、テトラヒドロフラン等エーテル類、ジメチルホルムアミド、ジメチルスルホキシド、ピリジン、塩化メチレン、クロロホルム、アセトン、酢酸等の反応に不活性な溶媒を用いることができる。
本発明の化合物は常用の増量剤、ｐＨ調節剤、溶解剤などを添加し、常用の製剤技術によって錠剤、顆粒剤、丸剤、カプセル剤、粉剤、液剤、懸濁剤、注射剤、点眼剤などに調整し、経口、注射、点眼などの経路で投与することができる。
本発明の化合物を、ケモカイン受容体作用阻害剤として用いる場合の投与量は、体重、年齢、性別などにより異なるが、通常成人の患者に対して１日あたり１〜１０００ｍｇを１回〜数回に分けて投与することができる。
発明を実施するための最良の形態
以下、実施例および試験例により本発明をさらに詳細に説明する。
実施例１
化合物８１，化合物８１’の合成
2003104198.tif 000028
（１）ピペリジン４−イル−カルバミックアシッドｔｅｒｔ−ブチルエステル（６．００ｇ）のテトラヒドロフラン（以下ＴＨＦと略す）（１２０ｍｌ）溶液にシクロオクト−１−エンカルバアルデヒド（４．９７ｇ）と酢酸（１．７２ｍｌ）を加え、さらにトリアセトキシ水素化ホウ素ナトリウム（８．２５ｇ）を氷冷下加え、室温で２時間攪拌した。溶媒を留去後、エーテルで希釈し、２ｍｏｌ／ｌ水酸化ナトリウム水溶液、食塩水で順次洗浄した。有機層を無水硫酸マグネシウムで乾燥後、溶媒を留去した。
得られた残渣をシリカゲルフラッシュカラムクロマトグラフィーで酢酸エチルとヘキサンの混合溶媒を用いて精製し、（１−シクロオクト−１−エニル−メチル−ピペリジン−４−イル）−カルバミックアシッドｔｅｒｔ−ブチルエステル（３．８６ｇ）を得た。
（２）（１−シクロオクト−１−エニル−メチル−ピペリジン−４−イル）−カルバミックアシッドｔｅｒｔ−ブチルエステル（３．８６ｇ）の塩化メチレン（１５ｍｌ）溶液にトリフルオロ酢酸（１５ｍｌ）を氷冷下加え、室温で２時間攪拌した。溶媒を留去後、クロロホルムで希釈し、２ｍｏｌ／ｌ水酸化ナトリウム水溶液で洗浄した。有機層を無水硫酸マグネシウムで乾燥後、溶媒を留去し、未精製の１−シクロオクト−１−エニル−メチル−ピペリジン−４−イルアミン（２．６６ｇ）を得た。
（３）１−シクロオクト−１−エニル−メチル−ピペリジン−４−イルアミン（２．６６ｇ）と２−ヒドロキシフェニル酢酸（２．１８ｇ）と１−ヒドロキシベンゾトリアゾール１水和物（２．７５ｇ）のジメチルホルムアミド（３０ｍｌ）溶液に塩酸１−エチル−３−（３−ジメチル）カルボジイミド（３．４４ｇ）を加え、８０℃で３時間攪拌した。溶媒を留去後、酢酸エチルで希釈し、食塩水で３回洗浄した。有機層を無水硫酸マグネシウムで乾燥後、溶媒を留去した。得られた残渣をＮＨ型のシリカゲルカラムクロマトグラフィーでメタノールとクロロホルムの混合溶媒を用いて精製し、Ｎ−（１−シクロオクト−１−エニル−メチル−ピペリジン−４−イル）−２−（２−ヒドロキシフェニル）アセトアミド（３．８８ｇ）を得た。
（４）フェネチルアルコール（１８３ｍｇ）とトリフェニルホスフィン（３９３ｍｇ）と４０％ジエチルアゾジカルボキシレートトルエン溶液（６５３ｍｇ）のＴＨＦ（２０ｍｌ）溶液にＮ−（１−シクロオクト−１−エニル−メチル−ピペリジン−４−イル）−２−（２−ヒドロキシフェニル）アセトアミド（３５７ｍｇ）を氷冷下加え、室温で３時間攪拌した。さらに、フェネチルアルコール（１８３ｍｇ）とトリフェニルホスフィン（３９３ｍｇ）と４０％ジエチルアゾジカルボキシレートトルエン溶液（６５３ｍｇ）のＴＨＦ（１０ｍｌ）溶液を加え、室温で２時間攪拌した。
溶媒を留去後、酢酸エチルで希釈し、２ｍｏｌ／ｌ水酸化ナトリウム水溶液、食塩水で順次洗浄した。有機層を無水硫酸マグネシウムで乾燥後、溶媒を留去した。得られた残渣をＳＣＸに吸着させ、メタノールとクロロホルムの混合溶媒で洗浄した後、７ｍｏｌ／ｌアンモニアのメタノール溶液とクロロホルムの混合溶媒で溶出させた。溶媒を留去し、残渣をＮＨ型のシリカゲルフラッシュカラムクロマトグラフィーで酢酸エチルとヘキサンの混合溶媒を用いて精製し、Ｎ−（１−シクロオクト−１−エニル−メチル−ピペリジン−４−イル）−２−（２−フェネチルオキシフェニル）アセトアミド（４０２ｍｇ）を得た。
（５）Ｎ−（１−シクロオクト−１−エニル−メチル−ピペリジン−４−イル）−２−（２−フェネチルオキシフェニル）アセトアミド（２．１５ｇ）にヨウ化メチル（２０ｍｌ）を加え、室温で一晩攪拌した。溶媒を留去し、残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィーでメタノールとクロロホルムの混合溶媒を用いて精製し、Ｒｆ値の高い低極性の化合物（ｃｉｓ体）を含むフラクションの溶媒を留去し、標題化合物（表中の化合物８１）（２．２５ｇ）を得た。また、Ｒｆ値の低い高極性の化合物（ｔｒａｎｓ体）を含むフラクションの溶媒を留去し、標題化合物（表中の化合物８１’）（０．３８ｇ）を得た。
化合物８１  １Ｈ  ＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ  ｐｐｍ  １．３５−１．７２（ｍ，８Ｈ），１．７８−１．９４（ｍ，２Ｈ），２．１１−２．４１（ｍ，６Ｈ），３．１１（ｔ，Ｊ＝６．８４Ｈｚ，２Ｈ），３．２７（ｓ，３Ｈ），３．４１−３．６７（ｍ，４Ｈ），３．５７（ｓ，２Ｈ），４．０２（ｍ，１Ｈ），４．０５（ｓ，２Ｈ），４．２０（ｔ，Ｊ＝６．８４Ｈｚ，２Ｈ），６．０９（ｔ，Ｊ＝８．０Ｈｚ，１Ｈ），６．８１−７．０２（ｍ，３Ｈ），７．１４−７．３８（ｍ，７Ｈ）
化合物８１’  １Ｈ  ＮＭＲ（２００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ  ｐｐｍ  １．３８−１．８０（ｍ，８Ｈ），１．８０−２．０５（ｍ，２Ｈ），２．１０−２．４２（ｍ，６Ｈ），３．０４（ｓ，３Ｈ），３．１３（ｔ，Ｊ＝６．９Ｈｚ，２Ｈ），３．３５−３．５８（ｍ，２Ｈ），３．７０（ｓ，２Ｈ），３．９２−４．３２（ｍ，３Ｈ），４．２１（ｔ，Ｊ＝６．９Ｈｚ，２Ｈ），４．２７（ｓ，２Ｈ），６．１５（ｔ，Ｊ＝８．１Ｈｚ，１Ｈ），６．８０−６．９６（ｍ，２Ｈ），７．１２−７．４１（ｍ，８Ｈ）
実施例
対応する原料を用いて実施例１と同様の操作を行い、以下の表に示した化合物を得た。表ではｃｉｓ体の化合物のデーターを示した。
2003104198.tif 000029
2003104198.tif 000030
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試験例１  ＣＣＲ３受容体結合阻害試験
モノ・ポリ分離液（大日本製薬製）にヒト末梢血を重層し、１５００ｒｐｍ、２０分間、室温で遠心し、多核球層を得た。この多核球層をＰＢＳ（−）で希釈し、１２００ｒｐｍ、５分間遠心し、沈殿した細胞を滅菌水で懸濁して溶血した。滅菌水と同量の１．８％  ＮａＣｌ水溶液を添加して、１２００ｒｐｍ、５分間遠心し、沈殿した細胞を一度ＰＢＳ（−）で洗浄した。氷冷したＰＢＳ（−）／２ｍＭ  ＥＤＴＡ／０．５％  ＢＳＡに懸濁し、ＣＤ１６マイクロビーズを添加して、６〜１２℃で３０分間インキュベートした後、ＭＡＣＳカラムに流して、通過した細胞液を回収し、好酸球を得た。
ヒト末梢血から分離した好酸球、０．１ｎＭ［１２５Ｉ］ｈｕｍａｎ  Ｅｏｔａｘｉｎ（２０００Ｃｉ／ｍｍｏｌ、Ａｍｅｒｓｈａｍ  Ｂｉｏｓｃｉｅｎｃｅｓ製）及び被験化合物を０．１ｍｌの５０ｍＭ  ＨＥＰＥＳ／５ｍＭ  ＭｇＣｌ２／１ｍＭ  ＣａＣｌ２／０．５％  ＢＳＡ（ｐＨ７．２）に懸濁し、３７℃、９０分間インキュベートした後、予め０．５％ポリエチレンイミン（ｐＨ７．２）に浸しておいたグラスフィルターＧＦ／Ｃにて濾過を行い、１．５ｍｌのＰＢＳ（−）／０．５Ｍ  ＮａＣｌ／０．０５％  ＢＳＡにて洗浄した後、グラスフィルター上の放射活性を測定した。ＣＣＲ３に対する結合親和性は、さまざまな濃度の化合物による［１２５Ｉ］ｈｕｍａｎ  Ｅｏｔａｘｉｎの５０％結合阻害濃度（ＩＣ５０値）を算出した。
その結果、本発明の化合物は優れた効果があることがわかった。
試験例２  ラット好酸球遊走試験
Ｂｒｏｗｎ  Ｎｏｒｗａｙ  Ｒａｔの腹腔にウマ血清を１ｍｌ投与し、４８時間後に腹腔内をＨＢＳＳで洗浄して細胞を回収した。６５％  Ｐｅｒｃｏｌｌ（Ａｍｅｒｓｈａｍ  Ｂｉｏｓｃｉｅｎｃｅｓ製）、５０％  Ｐｅｒｃｏｌｌ、回収した腹腔内細胞の順に重層し、２５００ｒｐｍ、１０分間遠心し、多核球層を得た。この多核球層を一度ＨＢＳＳで洗浄した後、ＲＰＭＩ１６４０／１％  ＦＣＳで懸濁してラット好酸球とした。９６穴ケモタキシスチャンバー（ポアアイズ５μｍ）の下室にヒトＥｏｔａｘｉｎ（１００ｎＭ）及び被験化合物を３０μｌのＲＰＭＩ１６４０／１％  ＦＣＳに調製し、フィルターをのせ、上室に５０μｌのＲＰＭＩ１６４０／１％  ＦＣＳに懸濁したラット好酸球を添加した。３７℃、２時間インキュベートした後、フィルターを取り除き、下室に移動した細胞数を測定した。
ラット好酸球の遊走に対する被験化合物の作用は、ヒトＥｏｔａｘｉｎ（１００ｎＭ）に被験化合物を添加することによって下室への遊走の抑制率（％）を算出した。
その結果、本発明の化合物は優れた効果があることがわかった。
産業上の利用可能性
本発明の化合物は、好酸球浸潤において重要な働きを担っているケモカイン受容体に対して高い親和性を有し、ケモカイン受容体の作用を阻害することにより、ヒト及び動物におけるケモカイン受容体が関わる疾患、例えば気管支喘息やアレルギー性結膜炎をはじめとするアレルギー性疾患に対する治療又は予防のために使用することができる。
【国際調査報告】
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