(57)【要約】タンパク質を構成する構成原子の原子化とイオン化とを単一のレーザー源で同時に実現するために、分析の対象であるタンパク質にレーザー光を照射して該タンパク質をアブレーションすることにより、タンパク質を構成元素に原子化し、原子化した構成元素をイオン化し、イオン化した構成元素を分析するレーザーアブレーションを用いたタンパク質の分析方法であって、分析の対象であるタンパク質に照射して、該タンパク質をアブレーションするレーザー光は超短パルスレーザー光であり、タンパク質を固定したチップに対して該超短パルスレーザー光を照射して、該チップに固定されたタンパク質を超短パルスレーザー光でアブレーションすることによって、該タンパク質を構成元素に原子化すると同時にイオン化し、イオン化した構成元素を分析する。
2004019026.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
分析の対象であるタンパク質にレーザー光を照射して該タンパク質をアブレーションすることにより、タンパク質を構成元素に原子化し、原子化した構成元素をイオン化し、イオン化した構成元素を分析するレーザーアブレーションを用いたタンパク質の分析方法であって、
分析の対象であるタンパク質に照射して、該タンパク質をアブレーションするレーザー光は超短パルスレーザー光であり、
タンパク質を固定したチップに対して該超短パルスレーザー光を照射して、該チップに固定されたタンパク質を超短パルスレーザー光でアブレーションすることによって、該タンパク質を構成元素に原子化すると同時にイオン化し、イオン化した構成元素を分析する
レーザーアブレーションを用いたタンパク質の分析方法。
【請求項２】
請求項１に記載のレーザーアブレーションを用いたタンパク質の分析方法において、
前記タンパク質を固定したチップは、該チップに固定された特定のタンパク質に対して特異的な結合をする物質に、該特定のタンパク質が反応して結合することにより、該チップ上に該特定のタンパク質が固定されたものである
レーザーアブレーションを用いたタンパク質の分析方法。
【請求項３】
請求項２に記載のレーザーアブレーションを用いたタンパク質の分析方法において、
前記特定のタンパク質に対して特異的な結合をする物質は、タンパク質と特異的な結合性を持った分子である
レーザーアブレーションを用いたタンパク質の分析方法。
【請求項４】
請求項３に記載のレーザーアブレーションを用いたタンパク質の分析方法において、
前記タンパク質と特異的な結合性を持った分子は、タンパク質と特異的な結合をする核酸である
レーザーアブレーションを用いたタンパク質の分析方法。
【請求項５】
請求項２に記載のレーザーアブレーションを用いたタンパク質の分析方法において、
前記特定のタンパク質に対して特異的な結合をする物質は、タンパク質同士の特異的な結合作用を発揮するタンパク質である
レーザーアブレーションを用いたタンパク質の分析方法。
【請求項６】
請求項５に記載のレーザーアブレーションを用いたタンパク質の分析方法において、
前記タンパク質同士の特異的な結合作用を発揮するタンパク質は、抗体である
レーザーアブレーションを用いたタンパク質の分析方法。
【請求項７】
請求項６に記載のレーザーアブレーションを用いたタンパク質の分析方法において、
前記タンパク質を固定したチップは、前記抗体を固定したチップに前記抗体と反応するタンパク質を含む溶液をかけて、前記抗体と反応するタンパク質と前記抗体とを反応させ、前記抗体と反応するタンパク質と前記抗体とを結合させてなるものである
レーザーアブレーションを用いたタンパク質の分析方法。
【請求項８】
請求項１〜７のいずれか１項に記載のレーザーアブレーションを用いたタンパク質の分析方法において、
前記チップに固定されたタンパク質は、元素標識を付けたものである
レーザーアブレーションを用いたタンパク質の分析方法。
【請求項９】
請求項８に記載のレーザーアブレーションを用いたタンパク質の分析方法において、
前記元素標識は、安定同位元素標識である
レーザーアブレーションを用いたタンパク質の分析方法。
【請求項１０】
請求項８〜９のいずれか１項に記載のレーザーアブレーションを用いたタンパク質の分析方法において、
前記元素標識は、ピューロマイシン誘導体を用いて標識されたものである
レーザーアブレーションを用いたタンパク質の分析方法。
【請求項１１】
請求項８〜９のいずれか１項に記載のレーザーアブレーションを用いたタンパク質の分析方法において、
前記元素標識は、サンドイッチ法により標識されたものである
レーザーアブレーションを用いたタンパク質の分析方法。
【請求項１２】
請求項８〜９のいずれか１項に記載のレーザーアブレーションを用いたタンパク質の分析方法において、
前記元素標識は、サンプル中のタンパク質に直接標識されたものである
レーザーアブレーションを用いたタンパク質の分析方法。
【請求項１３】
請求項８〜１２のいずれか１項に記載のレーザーアブレーションを用いたタンパク質の分析方法において、
前記チップは、マルチチャンネル化したチップである
レーザーアブレーションを用いたタンパク質の分析方法。
【請求項１４】
請求項１〜１０または請求項１３のいずれか１項に記載のレーザーアブレーションを用いたタンパク質の分析方法において、
分析の対象であるタンパク質を含むサンプルと該分析の対象であるタンパク質に標識を付けた標識タンパク質溶液とを混合して前記チップにかけて、前記に固定された特定のタンパク質に対して特異的な結合をする物質と前記分析の対象であるタンパク質と前記標識タンパク質とを競合的に結合させるｃｏｍｐｅｔｉｔｉｖｅ  ａｓｓａｙを行い、前記チップ上に該特定のタンパク質を固定する
レーザーアブレーションを用いたタンパク質の分析方法。
【請求項１５】
請求項１〜１４のいずれか１項に記載のレーザーアブレーションを用いたタンパク質の分析方法において、
分析の対象であるタンパク質に照射して、該タンパク質をアブレーションする超短パルスレーザー光は、パルス時間幅が１０ピコ秒以下であり、尖頭値出力が１０メガワット以上である
レーザーアブレーションを用いたタンパク質の分析方法。
【請求項１６】
請求項１５に記載のレーザーアブレーションを用いたタンパク質の分析方法において、
分析の対象であるタンパク質に照射して、該タンパク質をアブレーションする超短パルスレーザー光は、パルス時間幅が１フェムト秒以上１ピコ秒以下であり、尖頭値出力が１ギガワット以上１０ギガワット以下である
レーザーアブレーションを用いたタンパク質の分析方法。
【請求項１７】
請求項１〜１６のいずれか１項に記載のレーザーアブレーションを用いたタンパク質の分析方法において、
タンパク質をアブレーションする短パルスレーザー光と分析の対象であるタンパク質とは、少なくともいずれか一方を移動させることにより、該タンパク質をアブレーションする短パルスレーザー光により該分析の対象であるタンパク質を遺漏、重複なくアブレーションして分析を行う
レーザーアブレーションを用いたタンパク質の分析方法。
【請求項１８】
請求項１〜１７のいずれか１項に記載のレーザーアブレーションを用いたタンパク質の分析方法において、
前記イオン化した構成元素の分析は、飛行時間法による質量分析である
レーザーアブレーションを用いたタンパク質の分析方法。
【請求項１９】
請求項１〜６のいずれか１項に記載のレーザーアブレーションを用いたタンパク質の分析方法において、
前記チップ側に固定する物質を混合物として固定し、該混合物に測定したい物質ごとに異なる標識をつけた溶液を反応させ、該混合物から複数種類の物質を検出する
レーザーアブレーションを用いたタンパク質の分析方法。
【請求項２０】
請求項１〜６のいずれか１項に記載のレーザーアブレーションを用いたタンパク質の分析方法において、
前記チップにサンプルを固定し、測定対象に対する抗体を複数種類でラベルしたものをかけ、複数の物質を測定する
レーザーアブレーションを用いたタンパク質の分析方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】  本発明は、レーザーアブレーションを用いたタンパク質の分析方法に関し、さらに詳細には、従来と比較すると分析の効率を著しく向上することを可能にしたレーザーアブレーションを用いたタンパク質の分析方法に関し、例えば、生体から採取した検体に含まれるタンパク質の質量分析に用いて好適なレーザーアブレーションを用いたタンパク質の分析方法に関する。
【背景技術】  近年、質量分析法の応用範囲は、物理や化学の分野から医学や生化学などのライフサイエンスの分野へと急速に広がってきている。特に、タンパク質の分子量の決定解析やアミノ酸配列の決定解析などへの発展は著しい。
こうした質量分析法の原理は、試料を様々な方法でイオン化して、イオン化により得られたイオンを質量／電荷に従って分離し、分離した各イオンの強度を測定するというものである。
ところで、従来のタンパク質の質量分析は、タンパク質そのものに電子を付加してイオン化し、その質量を解析したり、高分子量の分子を低分子量の分子イオンに細分化して質量分析を行い、構成分子を比較するというものであった。
ここで、従来のタンパク質の質量分析におけるイオン生成方法としては、例えば、タンパク質に高エネルギー原子イオンを衝突させてイオン化する２次イオン質量分析（ＳＩＭＳ）法や、電子衝撃によって低分子量の分子イオンに細分化して質量分析を行う電子イオン化（ＥＤ）法、マトリックス支援レーザーイオン化（ＭＡＬＤＩ）法などが知られている。
しかしながら、上記したいずれの方法においても、高分子イオンを質量分析するため高分解能の質量分析装置が必要であるという問題点や、中途半端に分解生成したフラグメントイオンの存在が質量スペクトルの解析を困難にするという問題点などがあった。
一方、従来より、化学分析に際して同位元素で標識した試料の質量分析方法としては、例えば、ナノ秒レーザーにより原子化およびイオン化を行うレーザー原子化共鳴イオン化（ＬＡＲＩＭＰ）法が知られている。
しかしながら、このＬＡＲＩＭＰ法によれば、レーザーとして、標識元素を原子化するための原子化レーザーと原子化された標識元素の原子をイオン化するための共鳴イオン化レーザーとの２台のレーザー源が必要となるため、システム構成が複雑になるという問題点があった。
さらに、ＬＡＲＩＭＰ法においては、上記したように標識元素の原子を共鳴イオン化する必要があるため、各標識元素の原子に対して固有の波長のレーザー光を照射する必要があり、多種類の標識同位体が混入した状況では効率の良い分析を行うことが極めて困難であるという問題点があった。
本発明は、上記したような従来の技術の有する種々の問題点に鑑みてなされたものであり、その目的とするところは、生体から採取した検体に含まれるタンパク質などの各種のタンパク質を構成する構成原子の原子イオンを生成し、生成した原子イオンを分析するようにしたレーザーアブレーションを用いたタンパク質の分析方法であって、高分解能の分析装置を用いることを要しないようにしたレーザーアブレーションを用いたタンパク質の分析方法を提供しようとするものである。より詳細には、例えば、生体から採取した検体に含まれるタンパク質などの各種のタンパク質の質量分析を行う場合には、質量スペクトルの解析が困難になる恐れを排除するとともに、質量分析装置に高分解能を要しないようにしたレーザーアブレーションを用いたタンパク質の質量分析方法を提供しようとするものである。
また、本発明の目的とするところは、生体から採取した検体に含まれるタンパク質などの各種のタンパク質を構成する構成原子の原子化とイオン化とを１台のレーザー源で同時に実現することを可能にして、レーザーの照射制御を大幅に簡潔にすることを可能にしたレーザーアブレーションを用いたタンパク質の分析方法を提供しようとするものである。
さらに、本発明の目的とするところは、多種類の標識同位体が混入した状況においても、効率の良い分析を行うことを可能にしたレーザーアブレーションを用いたタンパク質の分析方法を提供しようとするものである。
【発明の開示】
上記目的を達成するために、本発明によるレーザーアブレーションを用いたタンパク質の分析方法は、生体から採取した検体に含まれるタンパク質などの各種のタンパク質を超短パルスレーザー光でアブレーションすることにより、それらタンパク質を原子イオン化して原子イオンを生成し、生成した原子イオンを分析するようにしたものである。これにより、各種のタンパク質の化学分析を行うことができるものである。
即ち、本発明のレーザーアブレーションを用いたタンパク質の分析方法によれば、生体から採取した検体に含まれるタンパク質などの各種のタンパク質を超短パルスレーザー光でアブレーションすることにより、タンパク質をバラバラに分解して当該タンパク質を構成する各原子毎に原子化すると同時に、原子化した原子を１価のイオンにイオン化するものであり、このイオン化により生成された原子イオンを分析することにより、定量分析が可能となるものである。
従って、本発明のレーザーアブレーションを用いたタンパク質の分析方法において質量分析を行う場合には、低質量の原子イオンを質量分析することになり、質量スペクトルの解析が困難になる恐れを排除することができるのみならず、高分解能を備えた質量分析装置を用いる必要がなくなる。
また、上記したように、本発明のレーザーアブレーションを用いたタンパク質の分析方法によれば、一種類の超短パルスレーザー光でタンパク質をアブレーションすることにより、タンパク質の原子化と同時に、原子化された原子の一価のイオンへのイオン化を効率良く行うことが可能となる。従って、レーザーの照射制御が簡潔になるとともに、例えば、化学分析に際して多種類の標識元素を同時に使用することが可能となるため、解析効率を著しく向上することができる。
つまり、本発明のレーザーアブレーションを用いたタンパク質の分析方法においては、標識元素の原子化とイオン化とを一種類の超短パルスレーザー光で同時に行うことができるため、分析作業を大幅に簡略化することが可能となり、従来と比較すると分析の効率を著しく向上することができるようになる。
さらに、上記したイオン化は、超短パルスレーザー光の高い尖頭値強度によって非共鳴過程によって行われるイオン化（非共鳴イオン化）であるので、多種類の標識同位体が混入した状況においても各標識原子をそれぞれイオン化することができ、多標識系への応用が容易であり、高精度かつ高効率な高分子の分析を行うことができるようになる。
即ち、本発明は、分析の対象であるタンパク質にレーザー光を照射して該タンパク質をアブレーションすることにより、タンパク質を構成元素に原子化し、原子化した構成元素をイオン化し、イオン化した構成元素を分析するレーザーアブレーションを用いたタンパク質の分析方法であって、分析の対象であるタンパク質に照射して、該タンパク質をアブレーションするレーザー光は超短パルスレーザー光であり、タンパク質を固定したチップに対して該超短パルスレーザー光を照射して、該チップに固定されたタンパク質を超短パルスレーザー光でアブレーションすることによって、該タンパク質を構成元素に原子化すると同時にイオン化し、イオン化した構成元素を分析するようにしたものである。
また、本発明は、上記タンパク質を固定したチップを、該チップに固定された特定のタンパク質に対して特異的な結合をする物質に、該特定のタンパク質が反応して結合することにより、該チップ上に該特定のタンパク質が固定されたものとしたものである。
また、本発明は、上記特定のタンパク質に対して特異的な結合をする物質を、タンパク質と特異的な結合性を持った分子としたものである。
また、本発明は、上記タンパク質と特異的な結合性を持った分子を、タンパク質と特異的な結合をする核酸としたものである。
また、本発明は、上記特定のタンパク質に対して特異的な結合をする物質を、タンパク質同士の特異的な結合作用を発揮するタンパク質であるとしたものである。
また、本発明は、上記タンパク質同士の特異的な結合作用を発揮するタンパク質を、抗体としたものである。
また、本発明は、上記タンパク質を固定したチップは、上記抗体を固定したチップに上記抗体と反応するタンパク質を含む溶液をかけて、上記抗体と反応するタンパク質と上記抗体とを反応させ、上記抗体と反応するタンパク質と上記抗体とを結合させて作成するようにしたものである。
また、本発明は、上記チップに固定されたタンパク質に、元素標識を付けるようにしたものである。
また、本発明は、上記元素標識を、安定同位元素標識としたものである。
また、本発明は、上記元素標識を、ピューロマイシン誘導体を用いて標識するようにしたものである。
また、本発明は、上記元素標識を、サンドイッチ法により標識するようにしたものである。
また、本発明は、上記元素標識は、サンプル中のタンパク質に直接標識されたものであるようにしたものである。
また、本発明は、上記チップを、マルチチャンネル化したチップとしたものである。
また、本発明は、分析の対象であるタンパク質を含むサンプルと該分析の対象であるタンパク質に標識を付けた標識タンパク質溶液とを混合して上記チップにかけて、上記に固定された特定のタンパク質に対して特異的な結合をする物質と上記分析の対象であるタンパク質と上記標識タンパク質とを競合的に結合させるｃｏｍｐｅｔｉｔｉｖｅ  ａｓｓａｙを行い、上記チップ上に該特定のタンパク質を固定するようにしたものである。
また、本発明は、分析の対象であるタンパク質に照射して、該タンパク質をアブレーションする超短パルスレーザー光を、パルス時間幅が１０ピコ秒以下であり、尖頭値出力が１０メガワット以上であるようにしたものである。
また、本発明は、分析の対象であるタンパク質に照射して、該タンパク質をアブレーションする超短パルスレーザー光を、パルス時間幅が１フェムト秒以上１ピコ秒以下であり、尖頭値出力が１ギガワット以上１０ギガワット以下であるようにしたものである。
また、本発明は、タンパク質をアブレーションする短パルスレーザー光と分析の対象であるタンパク質とは、少なくともいずれか一方を移動させることにより、該タンパク質をアブレーションする短パルスレーザー光により該分析の対象であるタンパク質を遺漏、重複なくアブレーションして分析を行うようにしたものである。
また、本発明は、上記イオン化した構成元素の分析は、飛行時間法による質量分析であるようにしたものである。
また、本発明は、上記チップ側に固定する物質を混合物として固定し、該混合物に測定したい物質ごとに異なる標識をつけた溶液を反応させ、該混合物から複数種類の物質を検出するようにしたものである。
また、本発明は、上記チップにサンプルを固定し、測定対象に対する抗体を複数種類でラベルしたものをかけ、複数の物質を測定するようにしたものである。
ここで、本発明において超短パルスレーザー光によりタンパク質をアブレーションする際には、タンパク質に超短パルスレーザー光を１ショット（１パルス）照射すれば十分である。しかしながら、タンパク質に超短パルスレーザー光を複数ショット（複数パルス）照射してもよく、タンパク質へ照射する超短パルスレーザー光のショット数（パルス数）は適宜に選択すればよい。
また、超短パルスレーザー光とは、パルス時間幅が１０ピコ秒以下であることが好ましく、例えば、パルス時間幅が１フェムト秒以上１ピコ秒以下の通常はフェムト秒レーザーと称されるレーザーから照射されるフェムト秒レーザー光を用いるのが適当である。
また、超短パルスレーザー光の尖頭値出力としては、１０メガワット以上が好ましく、さらに詳細には、１ギガワット以上１０ギガワット以下が好ましい。
その理由は、超短パルスレーザー光の尖頭値出力が１０ギガワット以上に大きいと、多価イオンが生成されて質量スペクトルの解析が困難となる恐れがあり、超短パルスレーザー光の尖頭値出力が１０メガワット以下であると、原子化・イオン化の効率が低下して原子イオン信号を観測することが困難となる恐れがあるからである。
なお、後述する本願発明者による実験によれば、例えば、パルス時間幅が１１０フェムト秒、尖頭値出力２ギガワットの場合には、極めて良好な結果を得ることができた。
また、本発明によれば、原子化と同時にイオン化を効率良く行うことのできるフェムト秒レーザー光などの超短パルスレーザー光を、同位元素などで標識したタンパク質試料に照射するようにしている。このため、標識元素を選択的にイオン化する必要が無くなり、種々様々な標識元素を使用することが可能となる。その上、レーザー照射の繰り返しレートを数ｋＨｚまで上げることが可能であるため、高速解析に適している。
また、本発明では、生体から採取した検体に含まれるタンパク質などの分析の対象の各種のタンパク質をアブレーションする短パルスレーザー光と当該分析の対象であるタンパク質とは、少なくともいずれか一方を移動させることにより、当該短パルスレーザー光により当該分析の対象であるタンパク質を遺漏、重複なくアブレーションして分析を行うようにしている。即ち、本発明においては、例えば、短パルスレーザー光のスポットと試料として分析の対象であるタンパク質を固定したチップとの移動により、広い面積にわたって固定された多数のタンパク質試料を遺漏・重複することなくアブレーションすることを可能にしている。これは、分析したい対象のタンパク質に対する抗体を固定したチップに、抗原抗体反応でタンパク質が固定されたチップなどを利用することを可能とするものであって、特に有効である。
本発明によれば、これらの特徴から、解析速度が従来と比較して格段に早くなる。
ここで、本発明の具体的な応用例としては、例えば、上記したような抗体を固定したチップに、抗原抗体反応でタンパク質が固定されたチップを用いたタンパク質の解析があり、その解析を高速化することが可能となる。
この際に、本発明によれば、標識として元素標識を用いることが可能となる。さらに詳細には元素標識として、多種類の同位元素を用いることが可能となり、元素標識として、例えば、安定同位元素を用いれば、標識の種類は多種類の安定同位体の数（２７０種類）にも増やすことができる。これは、従来の標識法である蛍光法（２〜６種類）や放射性同位元素（約１０種類）と比較して、飛躍的に情報量を増やすことができることを意味している。
より詳細には、抗体を固定したチップに抗原抗体反応でタンパク質が固定されたチップを用いたタンパク質解析の実験で使用する標識として、例えば、周期律表において１族の安定同位体である３９Ｋ、４１Ｋなど、周期律表において１６族の安定同位体である３２Ｓ、３５Ｓなど、周期律表において１７族の安定同位体である３５Ｃｌ、３７Ｃｌなど、周期律表において遷移金属の安定同位体である１１８Ｓｎ、１２０Ｓｎなどの安定同位元素でタンパク質を標識して使うことが可能となる。
タンパク質を上記チップ上のターゲットとなるタンパク質と結合させたのち、超短パルスレーザーでアブレーションし、分子の原子イオン化を行い、その後に、例えば、質量分析器で質量を検出すれば、結合したタンパク質内に含まれていた同位元素の量を定量できる。従って、標識分子の量比を計算することによりターゲットとなるタンパク質を分析することができる。
ここで、現在利用されている標識と比較すると例えば、安定同位元素を使えば、標識の種類を２７０種にも増やすことができる。
さらに、別々の元素でラベルした３種類以上の複数のタンパク質を混合し、同時にターゲットと結合反応させたマルチチャンネル化したチップを用いると、複数試料間のデータを比較することができる。
このように、本発明によって、多種類の安定同位元素標識による高感度・高速質量分析法を確立することができるものであり、従って、本発明は、蛍光色素や放射性同位元素で標識を行っている全ての研究分野へ応用可能である。
また、本発明によれば、標識元素に放射性同位元素を用いることなく、安定同位元素を用いることができるので、その場合には使用される施設に制限を受けないため、医療施設や民間企業への設置も可能となる。
また、本発明において、一度に複数の標識を使うマルチチャンネル化については、チップ側に固定する物質をマイクロアレイのように種類ごとにスポットするのではなく、混合物として固定し、そこに測定したい物質ごとに異なる標識をつけた溶液を反応させれば、一つのスポットから複数種類の物質を検出することができるようになる。
このようにすると、マイクロアレイを作製する手間を大幅に省くことができるようになり、ユーザーが測定したい物質を含む溶液を調整するオーダーメイドの基板が簡単に作れるようになる。
また、逆にサンプルを基板上に載せることも可能であり、例えば、測定したい対象に対する抗体をいろいろな種類でラベルしたものをかければ、複数の物質を測定することができる。
【図面の簡単な説明】  図１は、本発明によるレーザーアブレーションを用いたタンパク質の分析方法を実施する際に用いることが可能な分析システムの一例たる、タンパク質の質量を分析するための質量分析システムの構成の一例の概念構成説明図である。
図２は、本発明によるレーザーアブレーションを用いたタンパク質の分析方法の一例を示す説明図である。
図３は、測定したいタンパク質を標識する手法として、抗体を使ったサンドイッチ法を説明するための説明図である。
図４は、本願発明者による実験１に用いたターゲットとなるチップの説明図である。
図５は、本願発明者による実験１の実験結果を示し、四重極質量分析器によって測定されたスポット１ならびにスポット２のアブレーションによる質量スペクトラムを示すグラフである。
図６は、図５に示されたスポット２のアブレーションにより測定された質量スペクトラムのみを抽出して示すグラフである。
図７は、本願発明者による実験２に用いたターゲットとなるチップの説明図である。
図８は、実験２で用いたチップ１およびチップ２と測定結果を示す図との対応関係を示す説明図である。
図９は、チップ１におけるスポット１のアブレーションにより測定されたＴＯＦスペクトルのグラフである
図１０は、チップ１におけるスポット２のアブレーションにより測定されたＴＯＦスペクトルのグラフである。
図１１は、チップ２におけるスポット１のアブレーションにより測定されたＴＯＦスペクトルのグラフである、
図１２は、チップ２におけるスポット２のアブレーションにより測定されたＴＯＦスペクトルのグラフである。
図１３は、実験３のサンプル濃度が０．２ｍｇ／ｍｌの場合におけるアブレーションにより測定されたＴＯＦスペクトルのグラフである。
図１４は、ＴＯＦスペクトルより算出したサマリウム（Ｓｍ）の検出量を示す図表である。
図１５は、サンプル濃度と検出されたＳｍ量との関係を示すグラフである。
【符号の説明】
１０        質量分析システム
１２        真空槽
１４        ターゲット
１６        四重極質量分析器
１８        回転導入端子
２０        超短パルスレーザー
２２        フォーカスレンズ
１００        チップ
１０２        抗体
１０４        標識タンパク質
１０６        サンプル
１０８        サンプル中に含まれる目的のタンパク質
２００        チップ
２０２        抗体
２０６        サンプル
２０８        サンプル中に含まれる目的のタンパク質
２１０        標識元素
２１２        抗体（標識抗体）
１０００        基板
２０００        基板
【発明を実施するための最良の形態】  以下、添付の図面を参照しながら、本発明によるレーザーアブレーションを用いたタンパク質の分析方法の実施の形態の一例を詳細に説明するものとする。
本発明によるレーザーアブレーションを用いたタンパク質の分析方法によれば、生体から採取した検体に含まれるタンパク質などの各種のタンパク質を分析することができる。
図１には、本発明によるレーザーアブレーションを用いたタンパク質の分析方法を実施する際に用いることが可能な分析システムの一例として、タンパク質の質量を分析するための質量分析システムの構成の一例の概念構成説明図が示されている。
この質量分析システム１０は、例えば１０−８〜１０−６Ｔｏｒｒの真空度に設定可能な真空槽１２と、この真空槽１２内に配置されたターゲット１４と、真空槽１２内に配置された質量分析器としての四重極質量分析器１６と、ターゲット１４を回転する回転導入端子１８と、例えばフェムト秒レーザー光などの超短パルスレーザー光を出射してターゲット１４へ照射する超短パルスレーザー２０と、超短パルスレーザー２０から照射された超短パルスレーザー光をターゲット１４上へ集光するフォーカスレンズ２２とを有している。
ここで、超短パルスレーザー２０としては、フェムト秒レーザーなどのような、例えば、パルス時間幅が１フェムト秒以上１ピコ秒以下であり、尖頭値出力が１ギガワット以上１０ギガワット以下である超短パルスレーザー光を照射可能なものを用いることができる。
より詳細には、こうした超短パルスレーザー２０は、例えば、チタンサファイアレーザーにより構成され、以下に示すようなパラメータを備えているものを用いることができる。即ち、
ピーク幅（パルス時間幅）：〜１１０ｆｓ（フェムト秒）
出力                    ：５０〜４８０μＪ（マイクロジュール）
（尖頭値出力：０．５〜４ＧＷ（ギガワット））
波長                    ：〜８００ｎｍ（ナノメートル）
繰り返し                ：１ｋＨｚ（キロヘルツ）
である。
また、四重極質量分析器１６は、超短パルスレーザー２０から出射されてターゲット１４に照射される超短パルスレーザー光の照射方向に対して、９０度垂直方向に設置されている。
なお、質量分析器としては、上記した四重極質量分析器１６に代えて、飛行時間型質量分析器（ＴＯＦ  ＭＡＳＳ）を用いるようにしてもよいことは勿論である。
また、超短パルスレーザー２０から出射された超短パルスレーザー光を集光するフォーカスレンズ２２の焦点距離は、例えば、２５ｃｍに設定されている。
以上の構成において、上記した質量分析システム１０などを用いて、本発明によるレーザーアブレーションを用いたタンパク質の分析方法により質量分析を行う手法について説明する。
ここで、本発明によるレーザーアブレーションを用いたタンパク質の分析方法は、フェムト秒レーザーなどの超短パルスレーザー２０から出射された超短パルスレーザー光によるアブレーションと、四重極質量分析器１６や飛行時間型質量分析器などのような質量分析器などの分析器による分析とを用いて、生体から採取した検体に含まれるタンパク質などの各種のタンパク質の試料を検出して分析を行うものである。
即ち、本発明によるレーザーアブレーションを用いたタンパク質の分析方法は、分析の対象であるタンパク質にレーザー光を照射して当該タンパク質をアブレーションすることにより、タンパク質を構成元素に原子化し、原子化した構成元素をイオン化し、イオン化した構成元素を分析するレーザーアブレーションを用いたタンパク質の分析方法であって、分析の対象であるタンパク質に照射して、当該タンパク質をアブレーションするレーザー光は超短パルスレーザー光であり、タンパク質を固定したチップに対して当該超短パルスレーザー光を照射して、当該チップに固定されたタンパク質を超短パルスレーザー光でアブレーションすることによって、当該タンパク質を構成元素に原子化すると同時にイオン化し、イオン化した構成元素を分析するものである。
具体的には、タンパク質を固定したチップをターゲット１４として真空槽１２内に配置し、ターゲット１４たるチップに超短パルスレーザー２０から出射されたフェムト秒レーザー光などの超短パルスレーザー光を照射してアブレーションを行い、四重極質量分析器１６あるいは飛行時間型質量分析器などの質量分析器により分析するものである。
この際に、分析の対象となるタンパク質に元素標識などにより標識を付しておくようにすると、標識を付したタンパク質を固定したチップをターゲット１４として真空槽１２内に配置し、ターゲット１４たるチップに超短パルスレーザー２０から出射されたフェムト秒レーザー光などの超短パルスレーザー光を照射してアブレーションを行って、四重極質量分析器１６あるいは飛行時間型質量分析器などの質量分析器により標識元素を測定することにより、分析対象となるタンパク質を検出して分析することができる。
ここで、タンパク質を固定したチップは、例えば、チップに固定された特定のタンパク質に対して特異的な結合をする物質（抗体など）に、タンパク質が反応して結合することにより、当該チップ上にタンパク質が固定されたものを用いることができる。具体的には、タンパク質を固定したチップは、例えば、分析の対象であるタンパク質に対する抗体を固定したチップに、抗原抗体反応でタンパク質が固定されたチップを用いることができる。
従って、標識したタンパク質を固定したチップは、例えば、以下のようにして作成することができる。
即ち、特定のタンパク質に対して特異的な結合をする物質（抗体など）を固定したチップに、サンプルたる標識したタンパク質の溶液をかけるなどして、標識したタンパク質と上記特異的な結合をする物質とを反応させ、標識したタンパク質の中の特定のタンパク質をチップに固定する。さらに、標識したタンパク質の中の特定のタンパク質を固定したチップの洗浄を行うことにより、標識したタンパク質を固定したチップが得られる。
ここで、ＤＮＡチップと同様に、一枚のチップ上にそれぞれ特定のタンパク質と特異的な結合をする物質（抗体など）を何種類も固定したチップを用いて、当該何種類もの特異的な結合をする物質（抗体など）とそれぞれ結合したタンパク質を固定したチップを用いることにより、同時に多種類のタンパク質について測定することが可能となる。
また、チップに固定する特定のタンパク質に対して特異的な結合をする物質としては、タンパク質と特異的な結合性を持った分子や、さらには、抗原抗体などのようにタンパク質同士の特異的な結合作用を発揮するタンパク質を用いることができる。
なお、タンパク質と特異的な結合性を持った分子としては、例えば、抗体と同じような特異的結合をするアプタマーと呼ばれる核酸を用いることができる。アプタマーは、ランダムに合成したオリゴヌクレオチドのプールより、タンパク質などのターゲットとなる物質と結合性をの高いものを選択するＳＥＬＥＸと称される手法を使って作成することができる。
また、抗原抗体などのようにタンパク質同士の特異的な結合作用を発揮するタンパク質としては、抗原抗体の他に、リガンドとレプターや、複合体を形成するタンパク質など生体内で特異的に結合することがわかっているものなどを用いることができる。
ここで、上記した本発明によるレーザーアブレーションを用いたタンパク質の分析方法の一例について、図２を参照しながらより詳細に説明する。
即ち、上記した本発明によるレーザーアブレーションを用いたタンパク質の分析方法においては、まず、検出したいタンパク質に対する抗体１０２を固定したチップ１００を作成する。
次に、検出したいタンパク質をインビトロ翻訳（ｉｎ  ｖｉｔｒｏ  ｔｒａｎｓｌａｔｉｏｎ）などで合成し、当該タンパク質に含まれない元素（例えば、Ｓｅ，Ｅｕ，Ｓｍ，Ｔｂ，Ｆｅなどの安定同位元素）で標識（ラベル）して標識タンパク質１０４を作成する。
ここで、標識方法としては、例えば、セレメチオニン法、ピューロマイシン誘導体を用いたｉｎ  ｖｉｔｒｏ  ｖｉｒｕｓ法などを用いることができる。
なお、ｉｎ  ｖｉｔｒｏ  ｖｉｒｕｓ法では、蛍光色素による標識などが一般的であるが、元素標識体を合成し、蛍光色素による場合と同様な方法で元素標識することができる。
次に、合成した標識タンパク質１０４の濃度を変えた溶液を何種類か測定して、検量線をとっておく。
次に、生体から採取したサンプル１０６（例えば、血清など）と濃度調整をした標識タンパク質溶液を混合し、混合したものをチップ１００にかけてｃｏｍｐｅｔｉｔｉｖｅ  ａｓｓａｙし、抗原抗体反応により、抗体１０２と標識タンパク質１０４ならびにサンプル１０６中に含まれる目的のタンパク質１０８とを競合的に結合させるｃｏｍｐｅｔｉｔｉｖｅ  ａｓｓａｙを行い、抗体１０２と標識タンパク質１０４ならびにサンプル１０６中に含まれる目的のタンパク質１０８とが結合して固定されたチップ１００を洗浄して乾燥させた後に、この目的のタンパク質１０８が固定されたチップ１００をターゲット１４として超短パルスレーザー２０からのフェムト秒レーザー光を照射してアブレーションを行い、四重極質量分析器１６や飛行時間型質量分析器により標識元素を測定することにより、標識タンパク質１０４が抗体１０２と反応した量を測定して、サンプル１０６中に含まれる目的のタンパク質１０８の濃度を検出して分析するものである。
ここで、チップの状態により検量線に違いが生じる可能性があるので、それを防ぐためには、検量線の作成とサンプルの測定とを同じチップ上で同時に行うことが望ましい。
即ち、こうした問題点を解決するためには、抗体と標識タンパク質ならびにサンプル中に含まれる目的のタンパク質とが結合したチップをマルチチャンネル化すればよく、このマルチチャンネル化により、上記した本発明による手法の精度をさらに上げることができる。
このマルチチャンネル化は、例えば、以下に説明する手法により実現することができる。
つまり、チップの状態により検量線に違いが生じる可能性があるので、それを防ぐためには、検量線の作成とサンプルの測定とを同じチップ上で同時に行うことが望ましいものであり、そのために、Ａというタンパク質の測定をしようとするとき、濃度毎に異なる標識（例えば、Ｆｅの同位体何種類かで標識する。）をした標識タンパク質の溶液を準備し、これをサンプルと混合して抗体を固定したチップに反応させると、検量線作成とサンプル測定を同時に行うことが可能となる。
次に、測定したいタンパク質を標識する手法としては、上記したようなサンプルと混合する前に標識タンパク質を予め合成する方法の他に、抗体を使ったサンドイッチ法を用いるようにしてもよい。このサンドイッチ法について、図３を参照しながら説明する。
このサンドイッチ法においては、まず、検出したい目的のタンパク質に対する抗体２０２を固定したチップ２００にサンプル２０６を反応させ、サンプル２０６中に含まれる目的のタンパク質２０８と抗体２０２とを結合させる。
次に、抗体２０２と結合したサンプル２０６中に含まれる目的のタンパク質２０８の上から、標識元素２１０により標識した抗体（標識抗体）２１２をかけ、サンプル２０６中に含まれる目的のタンパク質２０８と標識抗体２１２とを反応させて結合する。
次に、抗体２０２とタンパク質２０８と標識元素２１０により標識した標識抗体２１２とが結合したチップ２００を洗浄して乾燥させた後に、このチップ２００をターゲット１４として超短パルスレーザー２０からのフェムト秒レーザー光を照射してアブレーションを行い、四重極質量分析器１６や飛行時間型質量分析器により標識元素２１０を測定することにより、サンプル２０６中に含まれる目的のタンパク質２０８の濃度を検出して分析するものである。
また、サンドイッチ法としては、上記に限られるものではなく、例えば、検出したい目的のタンパク質をサンドイッチして挟み込む際の上側の抗体の産生動物をチップに固定した抗体と違ったものを選び、標識２次抗体をさらに上からかけて検出するようにしてもよい。
また、測定したいタンパク質を標識する手法としては、サンプル中のタンパク質を直接標識する手法を用いてもよい。
具体的には、例えば、サンプル中に含まれるタンパク質をヨードでラベルするようにしてもよい。このタンパク質をヨードでラベルする手法としては、例えば、Ｉｏｄｏ−Ｂｅａｄ法（Ｐｉｅｒｃｅ社の商標）を用いて行うことができる。
そして、サンプル中のタンパク質を直接標識したサンプルを用いる場合には、当該サンプルを、検出したい目的のタンパク質に対する抗体を固定したチップにかけて、サンプル中に含まれる検出したい目的のタンパク質と抗体とを反応させ、抗原抗体反応により、サンプル中に含まれる検出したい目的のタンパク質と抗体とを結合する。
次に、サンプル中に含まれる検出したい目的のタンパク質と抗体とが結合したチップを洗浄して乾燥させた後に、このチップをターゲット１４として超短パルスレーザー２０からのフェムト秒レーザー光を照射してアブレーションを行い、四重極質量分析器１６や飛行時間型質量分析器により標識元素を測定することにより、サンプル中に含まれる検出したい目的のタンパク質の濃度を検出して分析するものである。
以下に、上記した質量分析システム１０を用いて、本願発明者が行った質量分析の実験結果について説明する。
（１）実験１
（１−１）チップの作成
まず、ターゲット１４となるチップの作成について、図４を参照しながら説明する。このチップの作成は、以下のようにして行う。
即ち、ポリＬ−リジンコートスライドガラスを基板１０００として用いた。このポリＬ−リジンコートスライドガラスは、スライドガラスをＮａＯＨ処理後に３％ポリＬ−リジン溶液に１時間浸漬し、水で洗浄後に８０℃で乾燥させて作成した。次に、ウサギ抗ヒトヘモグロビン抗体（シグマ社製），ウサギ抗ヒトＩｇＧ抗体をＰＢＳに各々０．２ｍｇ／ｍｌの濃度で分解し、上記のようにして作成したポリＬ−リジンコートスライドガラスにそれぞれスポッティングした（図４参照：スポット１はウサギ抗ヒトＩｇＧ抗体であり、スポット２はウサギ抗ヒトヘモグロビン抗体である。）。そして、３％ｎｏｎ−ｆａｔ  ｍｉｌｋ，０．１％Ｔｗｅｅｎ−２０を含むＰＢＳ溶液で余分な抗体を除去した後に、３％ｎｏｎ−ｆａｔ  ｍｉｌｋ，０．０２％アジ化ナトリウムを含むブロッキング溶液に浸漬し、４℃で一晩静置した。さらに、１０，０００ｘｇで１０分間遠心後に、ＰＢＳで洗浄してブロッキング溶液を除去し、抗体を固定したチップを作成した。
ここで、基板の材質はガラスである必要はなく、金属や絶縁体であっても良い。超短パルスレーザー光を用いたレーザーアブレーションでは、熱伝導度の高い基板が、より高いイオン検出効率を与える。なお、基板としては固体を用いるものであり、この基板として用いる固体の熱伝導率は０．１Ｗ・ｍ−１・Ｋ−１以上であることが好ましい。
（１−２）タンパク質溶液の調整と反応
次に、タンパク質溶液の調製とチップに固定された抗体との反応を行う。このタンパク質溶液の調製と反応は、以下のようにして行う。
ヒトヘモグロビン（和光純薬工業製）をＰＢＳに２ｍｇ／ｍｌの濃度で溶解し、タンパク質の溶液を調製した。抗体を固定したチップから余分なＰＢＳを振り落とし、すぐにタンパク質溶液を抗体を固定したチップ表面に載せ、上からカバーガラスを静かに被せ、４℃で２時間静置した。その後、当該チップをＰＢＳに浸漬してカバーガラスとタンパク溶液を除き、０．００５Ｍ  Ｔｒｉｓ−ＨＣｌ、０．００５％Ｔｗｅｅｎ２０，ｐＨ７．８処理し、続いてＰＢＳで処理した後に乾燥して、ターゲット１４となるチップを得た。
（１−３）測定
上記のようにして作成したターゲット１４を真空槽１２内に装着して、真空槽１２内を真空に引いて、真空槽１２内の真空度が１０−６Ｔｏｒｒ以下となるように設定する。
次に、超短パルスレーザー２０から出射された超短パルスレーザー光を、フォーカスレンズ２２を用いてターゲット１４上に集光して、ターゲット１４上に形成されたスポット１またはスポット２をアブレーションする。
なお、超短パルスレーザー２０から出射される超短パルスレーザー光のパルス幅は１１０フェムト秒であり、出力は２３０μＪである。
そして、四重極質量分析器１６によって、ターゲット１４への超短パルスレーザー光の照射により発生した一価のイオンの質量を測定した。
図５には、上記した手法により、四重極質量分析器１６によって測定されたスポット１ならびにスポット２のアブレーションによる質量スペクトラムが示されている。また、図６は、図５に示されたスポット２のアブレーションにより測定された質量スペクトラムのみを抽出して示すものである。
これら図５ならびに図６に示す実験結果から明らかなように、スポット２からはＦｅが検出され、本発明の手法によりヘモグロビンを検出することができた。
なお、上記した実験１においては、検出しようとするタンパク質に元素標識を付さなかったが、実験２ならびに実験３に示すように、元素標識を付したものも解析することができるのは勿論である。以下、実験２ならびに実験３について説明する。
（２）実験２
（２−１）チップの作成
まず、ターゲット１４となるチップの作成について、図７を参照しながら説明する。このチップの作成は、以下のようにして行う。
即ち、ポリＬ−リジンコートスライドガラスを基板２０００として用いた。このポリＬ−リジンコートスライドガラスは、スライドガラスをＮａＯＨ処理後に３％ポリＬ−リジンＰＢＳ溶液に１時間浸漬し、水で１５分間洗浄後に乾燥させて作成した。次に、抗ストレプトアビジン抗体（Ｃｏｒｔｅｘ  Ｂｉｏｃｈｅｍ社製）および抗マウスＩｇＧ抗体（Ｓｏｕｔｈｅｒｎ  Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ  Ａｓｓｏｃｉａｔｅｓ社製）をそれぞれ０．１ｍｇ／ｍｌの濃度でＰＢＳ溶液に溶解したものを、３μｌ／スポットで上記のようにして作成したポリＬ−リジンコートスライドガラス上にそれぞれ図７に示すようにスポットし、自然乾燥した（図７において、スポット１は抗ストレプトアビジン抗体であり、スポット２は抗マウスＩｇＧ抗体である。）。それから、乾燥したポリＬ−リジンコートスライドガラスを１．５％ＢＳＡ、０．１％アジ化ナトリウム、０．０５％Ｔｗｅｅｎ４０を含むＴｒｉｓ−ＨＣｌ溶液（ｐＨ７．８）に１５分間浸して洗浄し、続いて１．５％ＢＳＡ、０．１％アジ化ナトリウムを含むＴｒｉｓ−ＨＣｌ溶液（ｐＨ７．８）に浸漬し、４℃で一晩静置した。１０，０００ｘｇで１０分間遠心後に、ＰＢＳで洗浄し、ブロッキング溶液を除去した。
なお、上記のようにして作成したチップを２枚準備した（図８参照：チップ１およびチップ２）。
（２−２）タンパク質溶液の調整と反応
ユーロピウム（Ｅｕ）でラベルしたストレプトアビジン（パーキンエルーマー社製）を０．２ｍｇ／ｍｌでＴｒｉｓ−ＨＣｌ溶液（ｐＨ７．８）に溶解し、チップ１のスポット１およびスポット２上に３μｌ滴下し、室温で２時間静置した。その後、０．１％Ｔｗｅｅｎ２０を含むＴｒｉｓ−ＨＣｌ溶液（ｐＨ７．８）によりチップ１を室温で３０分間洗浄し、自然乾燥させた（図８参照）。
また、ユーロピウム（Ｅｕ）でラベルしたマウスＩｇＧ（パーキンエルマー社製）を０．２ｍｇ／ｍｌでＴｒｉｓ−ＨＣｌ溶液（ｐＨ７．８）に溶解し、チップ２のスポット１およびスポット２上に３μｌ滴下し、室温で２時間静置した。その後、０．１％Ｔｗｅｅｎ２０を含むＴｒｉｓ−ＨＣｌ溶液（ｐＨ７．８）によりチップ２を室温で３０分間洗浄し、自然乾燥させた（図８参照）。
（２−３）測定
測定方法は実験１の場合と同様であるが，超短パルスレーザー２０から出射される超短パルスレーザー光の出力を１２０μＪとし、飛行時間型質量分析器を用いて質量測定を行った点において、実験１の測定方法と異なる。この実験２の実験結果が、図９乃至図１２に示されている。ここで、図９はチップ１におけるスポット１の測定結果を示し、図１０はチップ１におけるスポット２の測定結果を示し、図１１はチップ２におけるスポット１の測定結果を示し、図１２はチップ２におけるスポット２の測定結果を示している。
これら図９乃至図１２に示す実験結果より、サンプル溶液中に含まれるタンパク質をそれに付加されたラベルを用いて検出できることがわかった。
（３）実験３
実験２と同様の方法でチップを作製し、濃度を変えた測定タンパク質溶液を反応させ、定量性の検討を行った。
ここで、タンパク質溶液の調整は、以下のようにして行った。即ち、サマリウム（Ｓｍ）でラベルしたストレプトアビジン（パーキンエルーマー社製）をそれぞれ０．００２ｍｇ／ｍｌ、０．０２ｍｇ／ｍｌ、０．１ｍｇ／ｍｌ、０．２ｍｇ／ｍｌ、０．５ｍｇ／ｍｌ含むＴｒｉｓ−ＨＣｌ溶液（ｐＨ７．８）を調整し、実験２と同様の条件で抗ストレプトアビジン抗体をスポットしたチップと反応させ、測定を行なった。
図１３にはサンプル濃度が０．２ｍｇ／ｍｌの場合の測定結果が示されており、図１４には質量スペクトルより算出したＳｍの検出量が示されている。この結果より、図１５に示すとおり、本発明による手法を用いることによって、サンプル溶液に含まれる測定タンパク質の量を定量的に測定できることが判った。
本発明によれば、超短パルスレーザーにより単数または複数の同位体元素で標識したタンパク質をアブレーションすることにより、構成元素を完全に原子イオン化し、イオン化した標識元素を質量分析することによりタンパク質の定量測定を行うことができる。これにより、多種類の同位体元素を標識として使用することができるようになる。従って、質量分析することができるタンパク質の対象範囲を飛躍的に広げることができるようになる。
つまり、本発明によって、同位体元素で標識したタンパク質それ自体を原子レベルでイオン化し、標識元素を検出することが可能となるから、質量分析可能な対象範囲を飛躍的に広げることができるようになる。例えば、標識として同位体元素を用いることが可能となり、標識の種類をたとえば安定同位体元素の数である２７０にも増やすことができる。これは、従来の標識法である蛍光法（２種類）や放射性同位元素（約１０種類）と比較して、飛躍的に情報量を増やすことができる。
なお、上記した実施の形態においては、質量分析器として四重極質量分析器を用いるようにしたが、これに限られるものではないことは勿論であり、上記したように原子の飛行時間を測定することにより質量分析を行う飛行時間質量分析器を用いることができ、その場合には、一回のレーザー照射で複数の原子の質量分析を同時に行うことができる。また、質量分析器としてイオンサイクロトロン型フーリエ変換質量分析器を用いた場合にも、複数の原子の質量分析を同時に行うことが可能となる。
また、上記した実施の形態においては、タンパク質の分析方法として質量分析に関して説明したが、これに限られるものではないことは勿論であり、質量分析以外の分析に関して本発明を用いるようにしてもよい。
また、上記した実施の形態においては、ターゲット１４を移動する移動手段として、ターゲット１４を回転する回転導入端子１８を用いたが、これに限られるものではないことは勿論であり、ターゲット１４を載置可能な移動自在のテーブルなどの適宜の移動手段を用いるようにしてもよい。
また、上記した実施の形態においては、回転導入端子１８を用いてターゲット１４を回転することにより、ターゲット１４を遺漏・重複なくアブレーションするようにしたが、これに限られるものではないことは勿論であり、超短パルスレーザー光のターゲットへの照射位置を移動する移動手段を設けるようにして、ターゲット１４を遺漏・重複なくアブレーションするようにしてもよい。
また、本発明において、一度に複数の標識を使うマルチチャンネル化については、チップ側に固定する物質をマイクロアレイのように種類ごとにスポットするのではなく、混合物として固定し、そこに測定したい物質ごとに異なる標識をつけた溶液を反応させれば、一つのスポットから複数種類の物質を検出することができるようになる。
このようにすると、マイクロアレイを作製する手間を大幅に省くことができるようになり、ユーザーが測定したい物質を含む溶液を調整するオーダーメイドの基板が簡単に作れるようになる。
また、逆にサンプルを基板上に載せることも可能であり、例えば、測定したい対象に対する抗体をいろいろな種類でラベルしたものをかければ、複数の物質を測定することができる。
【産業上の利用可能性】  本発明は、以上説明したように構成されているので、タンパク質を構成する構成原子の原子イオンを生成し、生成した原子イオンを分析するようにしたレーザーアブレーションを用いたタンパク質の分析方法であって、高分解能の分析装置を要しないようにしたレーザーアブレーションを用いたタンパク質の質量分析方法を提供することができるという優れた効果を奏する。ここで、より詳細には、例えば、質量分析を行う場合には、質量スペクトルの解析が困難になる恐れを排除することができるとともに、高分解能の質量分析装置を必要とすることがないという優れた効果を奏する。
また、本発明は、以上説明したように構成されているので、システム構成を大幅に簡潔化することができるという優れた効果を奏する。
さらに、本発明は、以上説明したように構成されているので、多種類の標識同位体が混入した状況においても、効率の良い分析を行うことができるようになるという優れた効果を奏する。
【図１】
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【図２】
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【図３】
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【図４】
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【図５】
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【図６】
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【図７】
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【図８】
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【図９】
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【図１０】
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【図１１】
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【図１２】
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【図１３】
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【図１４】
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【図１５】
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【国際調査報告】
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