(57)【要約】本発明は、食品、食品添加物、栄養機能食品、特定保健用食品、栄養補助食品、飲料、飼料、医薬品、医薬部外品等に有用な、粉体特性の優れた甘草疎水性抽出物を得る方法の提供を目的とする。本発明は、甘草の水溶性有機溶媒による抽出を、全表面積に占める皮の面積の割合が３割以上の甘草を使用して行うことを特徴とする甘草疎水性抽出物の製造法である。また、甘草、又は甘草の抽出残渣を、水溶性有機溶媒で抽出した、甘草の水溶性有機溶媒による抽出物を、水／（水溶性有機溶媒＋水）の重量比が１／３以上である、水と水溶性有機溶媒の混合溶媒中で結晶化することを特徴とする甘草疎水性抽出物の製造法である。【特許請求の範囲】
【請求項１】
甘草の水溶性有機溶媒による抽出を、全表面積に占める皮の面積の割合が３割以上の甘草を使用して行うことを特徴とする甘草疎水性抽出物の製造法。
【請求項２】
甘草が切断品又は周皮である請求の範囲第１項記載の製造法。
【請求項３】
甘草が切断品である請求の範囲第１項記載の製造法。
【請求項４】
甘草の水溶性有機溶媒による抽出は、甘草、又は甘草の抽出残渣を水溶性有機溶媒で抽出したものである請求の範囲第１〜３項のいずれかに記載の製造法。
【請求項５】
抽出残渣は、甘草中の不純物を別の溶媒で抽出除去したものである請求の範囲第４項記載の製造法。
【請求項６】
抽出残渣は、甘草中の不純物を水、又はアルカリ性水溶液で抽出除去したものである請求の範囲第４項又は５項記載の製造法。
【請求項７】
抽出残渣中に存在する水を除去した後に、水溶性有機溶媒での抽出に用いる請求の範囲第６項記載の製造法。
【請求項８】
水溶性有機溶媒は、炭素数１〜４の１価アルコール、アセトン、又はこれらの混合物である請求の範囲第１〜７項のいずれかに記載の製造法。
【請求項９】
水溶性有機溶媒は、炭素数２〜４の１価アルコール、アセトン、又はこれらの混合物である請求の範囲第８項記載の製造法。
【請求項１０】
水溶性有機溶媒は、エタノール、アセトン、又はこれらの混合物である請求の範囲第８項又は９項記載の製造法。
【請求項１１】
水溶性有機溶媒は、エタノールである請求の範囲第８〜１０項のいずれかに記載の製造法。
【請求項１２】
水溶性有機溶媒の含水率が３０容量％以下である請求の範囲第１〜１１項のいずれかに記載の製造法。
【請求項１３】
甘草、あるいは甘草抽出残渣からの水溶性有機溶媒による抽出を、脱酸素雰囲気下に行う請求の範囲第１〜１２項のいずれかに記載の製造法。
【請求項１４】
甘草が、グリキルリーザ  ウラレンシス、又はグリキルリーザ  グラブラである請求の範囲第１〜１３項のいずれかに記載の製造法。
【請求項１５】
甘草が、グリキルリーザ  ウラレンシスである請求の範囲第１〜１４項のいずれかに記載の製造法。
【請求項１６】
甘草の水溶性有機溶媒による抽出物を、水／（水溶性有機溶媒＋水）の重量比が１／３以上である、水と水溶性有機溶媒の混合溶媒中で結晶化することを特徴とする甘草疎水性抽出物の結晶の製造法。
【請求項１７】
甘草の水溶性有機溶媒による抽出物を、水／（水溶性有機溶媒＋水）の重量比が２／３以上である、水と水溶性有機溶媒の混合溶媒中で結晶化する請求の範囲第１６項記載の甘草疎水性抽出物の結晶の製造法。
【請求項１８】
結晶化は、上記比率の溶媒中で甘草の水溶性有機溶媒による抽出物の溶解量を減じる、又は、甘草の水溶性有機溶媒による抽出物の溶液を上記比率の溶媒に変化させることで溶解量を減じるものである請求の範囲第１６項又は１７項記載の製造法。
【請求項１９】
結晶化は、濃縮による結晶化法、溶媒置換を用いる結晶化方法、あるいは貧溶媒結晶化方法のいずれか、又はこれらを組み合わせた方法により行われる請求の範囲第１６〜１８項のいずれかに記載の製造法。
【請求項２０】
結晶化は、貧溶媒結晶化方法で行われる請求の範囲第１９項記載の製造法。
【請求項２１】
甘草の水溶性有機溶媒による抽出物を、水に添加して結晶化するものである請求の範囲第１９項又は２０項記載の製造法。
【請求項２２】
甘草の水溶性有機溶媒による抽出物の水への添加は、１／２時間以上かけて行われるものである請求の範囲第１９〜２１項のいずれかに記載の製造法。
【請求項２３】
結晶化は、５０℃以下の温度で行われるものである請求の範囲第１６〜２２項のいずれかに記載の製造法。
【請求項２４】
結晶化は、単位容積当たりの攪拌所要動力が、０．１ｋＷ／ｍ３以上の攪拌下に行われる請求の範囲第１６〜２３項のいずれかに記載の製造法。
【請求項２５】
結晶化終了時の濃度が、抽出物結晶の乾体重量／溶媒重量として１重量％以上である請求の範囲第１６〜２４項のいずれかに記載の製造法。
【請求項２６】
吸着処理、及び／又は、分別によって不純物を除去した後に結晶化を行う請求の範囲第１６〜２５項のいずれかに記載の製造法。
【請求項２７】
結晶化を行うに際して、種晶を添加する請求の範囲第１６〜２６項のいずれかに記載の製造法。
【請求項２８】
甘草の水溶性有機溶媒による抽出物は、甘草、又は甘草の抽出残渣を水溶性有機溶媒で抽出したものである請求の範囲第１６〜２７項のいずれかに記載の製造法。
【請求項２９】
抽出残渣は、甘草中の不純物を別の溶媒で抽出除去したものである請求の範囲第２８項記載の製造法。
【請求項３０】
抽出残渣は、甘草中の不純物を水、又はアルカリ性水溶液で抽出除去したものである請求の範囲第２８項又は２９項記載の製造法。
【請求項３１】
抽出残渣中に存在する水を除去した後に、水溶性有機溶媒での抽出に用いる請求の範囲第３０項に記載の製造法。
【請求項３２】
水溶性有機溶媒は、炭素数１〜４の１価アルコール、アセトン、又はこれらの混合物である請求の範囲第１６〜３１項のいずれかに記載の製造法。
【請求項３３】
水溶性有機溶媒は、炭素数２〜３の１価アルコール、アセトン、又はこれらの混合物である請求の範囲第３２項記載の製造法。
【請求項３４】
水溶性有機溶媒は、エタノール、アセトン、又はこれらの混合物である請求の範囲第３２項又は３３項記載の製造法。
【請求項３５】
甘草、あるいは甘草抽出残渣からの水溶性有機溶媒による抽出、及び／又は、結晶化を脱酸素雰囲気下に行う請求の範囲第１６〜３４項のいずれかに記載の製造法。
【請求項３６】
甘草が、グリキルリーザ  ウラレンシス、又はグリキルリーザ  グラブラである請求の範囲第１６〜３５項のいずれかに記載の製造法。
【請求項３７】
甘草が、グリキルリーザ  ウラレンシスである請求の範囲第１６〜３６項のいずれかに記載の製造法。
【請求項３８】
甘草の水溶性有機溶媒による抽出物は、請求の範囲第１〜１５項のいずれかに記載の方法で得られたものである請求の範囲第１６〜３７項のいずれかに記載の製造法。
【請求項３９】
上記請求の範囲第１６〜３８項のいずれかに記載の方法により得られた甘草疎水性抽出物の結晶。
【請求項４０】
ペルオキシソーム増殖剤応答性受容体リガンド剤を含む請求の範囲第３９項記載の甘草疎水性抽出物の結晶。
【請求項４１】
グリシクマリン、グリシリン、デヒドログリアスペリンＣ、デヒドログリアスペリンＤ、グリアスペリンＤ、グリアスペリンＢ、グリチルイソフラバノン、グリウラリンＢ、セミリコイソフラボンＢ、イソリクイリチゲニン、又は、グリチルイソフラボンを、これらの総量として乾体基準で５重量％以上含有する請求の範囲第３９項又は４０項記載の甘草疎水性抽出物の結晶。
【請求項４２】
乾体基準で、グリシクマリン、グリシリン、デヒドログリアスペリンＣ、デヒドログリアスペリンＤ、グリアスペリンＢ及びグリアスペリンＤからなる群より選ばれる少なくとも１種の成分を０．５重量％以上含有する請求の範囲第３９〜４１項のいずれかに記載の甘草疎水性抽出物の結晶。
【請求項４３】
乾体基準で、グリシクマリン、グリシリン、デヒドログリアスペリンＣ、デヒドログリアスペリンＤ、グリアスペリンＢ及びグリアスペリンＤを各々０．５重量％以上含有する請求の範囲第３９〜４２項のいずれかに記載の甘草疎水性抽出物の結晶。
【請求項４４】
乾体基準で、グリチルイソフラバノン、グリチルイソフラボン、グリウラリンＢ、セミリコイソフラボンＢ及びイソリクイリチゲニンからなる群より選ばれる少なくとも１種の成分を０．０１重量％以上含有する請求の範囲第３９〜４３項のいずれかに記載の甘草疎水性抽出物の結晶。
【請求項４５】
乾体基準で、グリチルイソフラバノン、グリチルイソフラボン、グリウラリンＢ、セミリコイソフラボンＢ及びイソリクイリチゲニンを各々０．０１重量％以上含有する請求の範囲第３９〜４４項のいずれかに記載の甘草疎水性抽出物の結晶。
【請求項４６】
グリチルリチン含量が乾体基準で０．５重量％以下である請求の範囲第３９〜４５項のいずれかに記載の甘草疎水性抽出物の結晶。
【請求項４７】
食品用途に用いられる請求の範囲第３９〜４６項のいずれかに記載の甘草疎水性抽出物の結晶。
【請求項４８】
請求の範囲第３９〜４６項のいずれかに記載される甘草疎水性抽出物の結晶を用いて調製された錠剤又はカプセル剤。
【発明の詳細な説明】
技術分野
本発明は、甘草を水溶性有機溶媒で抽出して得られる甘草疎水性抽出物の製造法、並びに、該甘草疎水性抽出物の結晶の製造法に関する。
背景技術
甘草の利用は、西洋、東洋共に２０００年以上前から始まり、今日でも重要な食品原料等である。また、甘草を有機溶媒で抽出して得られる抽出物（甘草疎水性抽出物）に含まれる活性成分には、例えば、抗酸化作用（Ｄｅｍｉｚｕ  Ｓ．，ｅｔ  ａｌ．，Ｃｈｅｍ．Ｐｈａｒｍ．Ｂｕｌｌ．，３６（９），３４７４（１９８８））、酸化酵素抑制作用（Ｈａｒａｍｏｔｏ  Ｉ．，西日皮膚、５７巻、３号、５９４（１９９５））、紫外線吸収作用（特開平１−１５７９０９号公報）、抗う触作用（Ｋａｗａｉ  Ｔ．，日本口腔科学会雑誌、４０巻、５号、１２４５（１９９１））、消炎症作用（Ｓｈｉｂａｔａ  Ｓ．，ｅｔ  ａｌ．，Ｐｌａｎｔａ  Ｍｅｄ，５７（３），２２１（１９９１））、サイクリックＡＭＰホスホジエステラーゼ阻害作用（Ｋｕｓａｎｏ  Ａ．，ｅｔ  ａｌ．，Ｃｈｅｍ．Ｐｈａｒｍ．Ｂｕｌｌ．，３９，９３０（１９９１））、抗アレルギー作用（Ｋａｋｅｇａｗａ  Ｈ．，４０，１４３９（１９９２））の他、最近では、血糖降下、内臓脂肪低減、ＴＮＦ産生抑制、血圧上昇抑制（以上、ＷＯ０２／４７６９９）、動脈硬化抑制（特開平７−５３３９３号公報）、抗菌（特開平８−１１９８７２号公報）等の種々の効果があり、人のみならず家畜やペット用の食品、食品添加物、栄養機能食品、特定保健用食品、栄養補助食品、飲料、飼料、医薬品、医薬部外品等として有用である。肥満、糖尿病、高血圧症、高脂血症（これらは死の四重奏とも言われる）等の生活習慣病の予防素材（ＷＯ０２／４７６９９）としても今後の広範な利用が大いに期待されている。
甘草抽出物は、甘草又は甘草の水抽出残渣（例えば、甘味成分（グリチルリチン）を抽出した残渣）を各種溶媒で抽出後、溶媒を留去することにより得ることができる。
例えば、特開平１−１４９７０６号公報、特開平３−１０９３１４号公報は、疎水性有機溶媒を用いて抽出する例を、特開平２−２０４４９５号公報は、疎水性有機溶媒に水溶性有機溶媒を少量混合した溶媒で抽出する例を、特開平７−５３３９３号公報は、水及び／又は水溶性有機溶媒（好ましくは、温湯）を用いて抽出する例を、特開平１−１５７９０９号公報は、水溶性有機溶媒から疎水性有機溶媒の広範囲の溶媒で抽出する例を開示している。
また、上記製法に用いられる甘草の種類としては、特開平１−１５７９０９号公報には、Ｇｌｙｃｙｒｒｈｉｚａ  ｉｎｆｌａｔａ  ＢＡＴ．を用いるのが好ましいこと、特開平３−１０９３１４号公報には、Ｇｌｙｃｙｒｒｈｉｚａ  ｇｌａｂｒａ  Ｌ．ｖａｒ．を疎水性有機溶媒で抽出するのが好ましいことが記載されている。
このようにして得られる抽出液から、溶媒を留去して抽出物を得る場合、疎水性有機溶媒で抽出した場合は粉末状又は茶褐色の固体として（特開平３−１０９３１４号公報、特開平１−１４９７０６号公報、特公平４−３４５２８号公報）、さらに、疎水性有機溶媒に水溶性有機溶媒を少量混合した溶媒で抽出した場合は、黄色ないし褐色の固体あるいはペースト状として（特開平２−２０４４９５号公報）、さらに、水で抽出した場合は褐色の吸湿性を有するアモルファスとして得られやすい（特開平７−５３３９３号公報）ことが知られている。
本発明者らが検討した結果、血糖降下や内臓脂肪低減等の生活習慣病予防に有効な効果を有する活性成分は、水溶性有機溶媒によって好適に抽出されるものの、エタノールのような水溶性有機溶媒で抽出する場合には、水溶性不純物も抽出されて得られる抽出物中に混入しやすい傾向にあること、また、含水エタノールのような安価である含水した水溶性有機溶媒を用いるとさらにその傾向が顕著になることが分かった。
甘草疎水性抽出物を生活習慣病の予防素材等に用いるうえでは、グリチルリチン等の水溶性不純物の含量を低く抑えることが重要である。
特に、医薬として利用されているグリチルリチンには血圧上昇作用、心筋障害、水血症（以上、Ｈａｒｄｅｒｓ，Ｈ．＆  Ｒａｕｓｃｈ−Ｓｔｒｏｏｍａｎｎ，Ｊ．Ｇ．，Ｍｕｎｃｈ．Ｍｅｄ．Ｗｓｃｈｒ．９５，５８０（１９５３））、低カリウム血症、血漿レニン活性減少、偽性アルドステロン症、四肢弛緩性麻痺（以上、Ｃｏｎｎ，Ｊ．Ｗ．，Ｒｏｖｎｅｒ，Ｄ．Ｒ．＆  Ｃｏｈｅｎ，Ｅ．Ｌ．，Ｊ．Ａｍ．Ｍｅｄ．Ａｓｓｏｃ．２０５，４９２（１９６８））、尿中アルドステロン排泄減少、浮腫、頭痛、嗜眠状態（以上、Ｅｐｓｔｅｉｎ，Ｍ．Ｔ．，ｅｔ  ａｌ．，Ｂｒｉｔ．Ｍｅｄ．Ｊ．，１，４８８（１９７７））等の副作用があり、また、ショ糖の１５０倍の甘さがある。グリチルリチンの混入は、甘草抽出物のもつ種々の効果を阻害したり、副作用や強い甘さのために、食品等としての利用に不利を生じる。
得られる甘草抽出物中のグリチルリチン等の水溶性不純物の含量を低く抑えるためには、有機溶媒による抽出時に共存する水分量を低くするのが好ましい。そのためには、一般に、極力乾いた甘草を用い、さらに、水を含まない有機溶媒を使用することが重要となる。
しかしながら、甘草は言うまでもなく植物体であり、極力乾いた甘草を得るためには、通常行われている天日干し等では必ずしも十分ではなく、乾燥器等の使用が必要となる。これは、工業的規模での生産上、大きな難点となる。
また、水を含まない有機溶媒を使用したとしても、用いる甘草や作業環境からの水分の混入を完全に防止することが困難なために、水分含量の増加した有機溶媒として回収される。これを、そのままリサイクルすることは難しく、有機溶媒を使い捨てにするか、あるいは、無水化のための特殊で高価な精製設備が必要となり、いずれにせよ、製造コストのアップにつながる。特に、抽出溶媒として水溶性有機溶媒を用いる場合に極めて深刻な問題となる。
従って、水溶性不純物の含量の低い高品質の甘草抽出物を極めて簡便且つ安価に製造することができれば、非常に大きなメリットが期待できる。
さらに、エタノールのような水溶性有機溶媒で抽出して得られる抽出液から溶媒を留去しても、必ずしも安定的に取り扱いやすい固体としては得られず、半固体状や油状（ペースト状）として得られる傾向があることも分かった。これは、特公平４−３４５２８号公報に記載されるように、上記水溶性有機溶媒での抽出では、臭気成分や着色成分等の不純物が多く抽出されるためと思われる。また、水溶性不純物も混入しやすい傾向にあり、これも、安定的に固体として得ることを難しくしている原因と思われる。
発明の要約
本発明の目的は、上記に鑑み、甘草、特に、グリキルリーザ  ウラレンシス（Ｇｌｙｃｙｒｒｈｉｚａ  ｕｒａｌｅｎｓｉｓ  Ｆｉｓｃｈ．ｅｔ  ＤＣ；ウラルカンゾウ）、又はグリキルリーザ  グラブラ（Ｇｌｙｃｙｒｒｈｉｚａ  ｇｌａｂｒａ  Ｌ．；ヨウカンゾウ）の水溶性有機溶媒による抽出物、好ましくはグリキルリーザ  ウラレンシスの水溶性有機溶媒による抽出物を、簡便且つ安価に、水溶性不純物の含量の低い高品質の抽出物として、さらに好ましくは取り扱いやすい（粉体特性の良い）固体として、安定的に採取することを目的とする。
本発明者らは、鋭意研究を重ねた結果、甘草の水溶性有機溶媒による抽出を特定の条件下に行えば、水溶性不純物の含量の低い高品質の抽出物を好適に取得できること、さらに、甘草の水溶性有機溶媒による抽出物を、特定の条件下、好適に結晶化でき、水溶性不純物の含量が低く、且つ、取り扱いやすい（粉体特性の良い）固体として採取できることを見出し、本発明を完成させた。
すなわち、本発明の第一は、甘草の水溶性有機溶媒による抽出を、全表面積に占める皮の面積の割合が３割以上の甘草を使用して行うことを特徴とする甘草疎水性抽出物の製造法に関する。
また、本発明の第二は、甘草の水溶性有機溶媒による抽出物を、水／（水溶性有機溶媒＋水）の重量比が１／３以上である、水と水溶性有機溶媒の混合溶媒中で結晶化することを特徴とする甘草疎水性抽出物の結晶の製造法に関する。
発明の詳細な開示
以下、本発明を詳述する。
まず、本発明において使用しうる甘草は、マメ科グリキルリーザ（Ｇｌｙｃｙｒｒｈｉｚａ）属の植物、例えば、グリキルリーザ  ウラレンシス（Ｇ．ｕｒａｌｅｎｓｉｓ  Ｆｉｓｃｈ．ｅｔ  ＤＣ；ウラルカンゾウ）、グリキルリーザ  インフラータ（Ｇ．ｉｎｆｌａｔａ  ＢＡＴ．；チョウカカンゾウ）、グリキルリーザ  グラブラ（Ｇｌｙｃｙｒｒｈｉｚａ  ｇｌａｂｒａ  Ｌ．；ヨウカンゾウ）、グリキルリーザ  グラブラ（Ｇ．ｇｌａｂｒａ  Ｌ．ｖａｒ  ｇｌａｎｄｕ  ｒｉｆｅｒａ  Ｒｅｇｅｌ  ｅｔ  Ｈｅｒｄｅｒ；ナンキンカンゾウ）、グリキルリーザ  エチナータ（Ｇ．ｅｃｈｉｎａｔａ  Ｌ．；シナカンゾウ）、グリキルリーザ  パリディフローラ（Ｇ．ｐａｌｌｉｄｉｆｌｏｒａ  Ｍａｘｉｍ；イヌカンゾウ）や、その他同属植物（Ｌｅｇｕｍｉｎｏｓａｅ）を挙げることができる。これらの産地は、新彊産、東北産、西北産、モンゴル産、ロシア産、アフガニスタン産、イラン産、トルコ産等である。
なかでもＧ．ウラレンシス（Ｇ．ｕｒａｌｅｎｓｉｓ  Ｆｉｓｃｈ．ｅｔ  ＤＣ；ウラルカンゾウ；産地：東北産、西北産、モンゴル産、新彊産等）、Ｇ．グラブラ（Ｇｌｙｃｙｒｒｈｉｚａ  ｇｌａｂｒａ  Ｌ．；ヨウカンゾウ；産地：ロシア産、アフガニスタン産、イラン産、トルコ産等）が好ましく、とりわけ、後述する活性成分の含量が高いＧ．ウラレンシス（Ｇ．ｕｒａｌｅｎｓｉｓ  Ｆｉｓｃｈ．ｅｔ  ＤＣ；ウラルカンゾウ）が好ましく用いられる。
本発明において、上記甘草の根、根茎、又は、ストロンの使用が好ましく、これらは、微粉砕品、粉砕品、切断品、あるいは上記甘草の周皮が用いられる。
ここで、微粉砕品とは、いわゆる粉末、又は、粉末に近いものを言う。粉砕品とは、糸状、繊維状、又は、綿状のもの（例えば、長さ５ｍｍ程度から１０ｃｍ程度のもの）を言う。また、切断品とは、甘草の根、根茎、又は、ストロン等を切断したもの（例えば、長さは、普通約１〜１０ｃｍ程度、好ましくは約１〜５ｃｍ程度、より好ましくは２〜４ｃｍ程度であり、太さは、普通約３ｃｍ以下、好ましくは約２ｃｍ以下、より好ましくは約１ｃｍ以下程度の輪切りにしたもの）であり、普通、円柱状又はそれと本質的に類似した形態を有する。さらに、周皮とは、甘草の茎、根、ストロン等の表面の皮（例えば、長さが１ｃｍ〜１ｍ程度であり、厚さが１〜５ｍｍ程度のもの）を言う。
微粉砕品、粉砕品、切断品は、通常の機器を使用して得ることができる。微粉砕品は、例えば、マスコローダー式粉砕機、石臼式粉砕機等により粉末あるいは粉末に近いものとして得ることができる。粉砕品は、例えば、ハンマーミル式粉砕機等で得ることができる。また、切断品は、上記甘草の根等を通常の裁断機で上記長さに切断して得ることができる。さらに、周皮は、上記甘草の茎、根、ストロン等の表面の皮を、剥がして得ることができる。
なお、上記甘草は、その種類、産地、採取時期等により活性成分の組成・量が異なる場合があるので、予め実験により活性成分を多く含有することが確認されたものを使用するのが好ましい。
甘草は、その種類、産地、採取時期等により、水溶性有機溶媒で抽出しても、抽出液から溶媒を留去する方法では必ずしも安定的に取り扱いやすい固体としては得られず、半固体状や油状（ペースト状）として得られる場合もあるが、本発明の第二の結晶の製造法では、甘草の種類、産地、採取時期によらず、安定的且つ効率的に取り扱いやすい結晶として取得することができる。
本発明では、甘草の微粉砕品、粉砕品、切断品、あるいは周皮をそのまま水溶性有機溶媒で抽出してもよく、又、甘草中の不純物を別の溶媒（例えば、水、アルカリ性水溶液、ヘキサン等）で抽出除去した後の抽出残渣を水溶性有機溶媒で抽出しても良い。
甘草中の不純物の抽出除去方法としては、例えば、甘草を水抽出する、及び／又は、アルカリ性水溶液で抽出する方法を好適に挙げることができる。
アルカリ性水溶液としては、特に制限されず、例えば、水酸化ナトリウム水溶液、炭酸水素ナトリウム水溶液、アンモニア水溶液等の、無機塩基や有機塩基の水溶液を挙げることができる。上記の無機及び／又は有機塩基の濃度は、特に制限されないが、例えば０．１〜１０重量％程度、好ましくは０．２〜５重量％である。
水で抽出する場合、抽出温度は特に制限されないが、操作性の観点からは、下限は、普通１℃、好ましくは５℃、より好ましくは１０℃、さらに好ましくは１５℃であり、上限は、普通８０℃、好ましくは７５℃、より好ましくは７０℃、さらに好ましくは６５℃であり、１５〜６５℃前後で特に好適に実施できる。
アルカリ性水溶液で抽出する場合、抽出温度は特に制限されないが、操作性の観点からは、下限は、普通１℃、好ましくは５℃、より好ましくは１０℃、さらに好ましくは１５℃であり、上限は、普通４５℃、好ましくは４０℃、より好ましくは３５℃、さらに好ましくは３０℃であり、１５〜３０℃前後で特に好適に実施できる。
上記の不純物抽出除去操作は、一般的な方法に従って実施することができ、特に制限されない。例えば、上記甘草に対して０．１〜２０倍重量、好ましくは１〜１０倍重量の溶媒を用いて、好ましくは２時間以上、より好ましくは３時間以上、抽出を行えばよい。抽出時間の上限は特に制限されず、１日程度であるが、さらに長時間行っても良い。当該抽出は、必要に応じて、１回もしくは複数回実施してもよく、又、水抽出とアルカリ性水溶液抽出を適宜組み合わせることもできる。
上記抽出（不純物の抽出除去）時の圧力は、特に制限されない。常圧〜加圧された状態（１〜数気圧）が用いられうるが、所望ならば減圧にすることもできる。還流下に、又、やや加圧された状態で実施しうる。
上記抽出（不純物の抽出除去）後は、一般的な分離操作（例えば、加圧濾過、減圧濾過、フィルタープレス、遠心分離、沈降等）により、抽出液と抽出残渣を分離し、所望により水等を用いて洗浄を行い（好ましくは、アルカリ性水溶液による抽出後は、アルカリ成分を除去するための操作、例えば、中和及び／又は水洗浄の操作を行い）、抽出残渣を得ることができる。なお、上記分離操作においては、必要に応じ、活性炭、活性白土等の一般に使用しうる濾過助剤や吸着剤等を使用しうる。
このようにして得られた甘草の抽出残渣はそのまま、あるいは、一般的な乾燥操作（例えば、静置乾燥、撹拌乾燥、混合乾燥、流動乾燥、気流乾燥、噴霧乾燥等）により使用した溶媒の一部若しくは全てを除去した後、水溶性有機溶媒による抽出に用いられるが、甘草の水溶性有機溶媒による抽出物中への、グリチルリチン等の水溶性不純物の混入を最小化する観点からは、抽出残渣中に存在する水を可能な限り除去するのが好ましい。
本発明では、上記甘草、又は甘草の抽出残渣から、活性成分が好適に抽出できる溶媒として水溶性有機溶媒を用いて、抽出する。
当該抽出に好適に使用しうる水溶性有機溶媒としては、特に制限されないが、例えば、メタノール、エタノール、プロパノール、ブタノール等の炭素数１〜４の１価アルコール、アセトン等、又は、これらの混合物を挙げることができる。好ましくは、炭素数２〜４の１価アルコール、アセトン等、又は、これらの混合物であり、より好ましくは、エタノール、アセトン又はこれらの混合物であり、溶媒の人体に対する安全性の観点より、エタノールが特に好ましい。また、後述するグリチルリチンの混入を低く抑えるという点では、炭素数１〜３の１価アルコール、アセトン又はこれらの混合物が好ましく、炭素数２〜３の１価アルコール、アセトン又はこれらの混合物がより好ましく、エタノール、アセトン又はこれらの混合物がさらに好ましく、アセトンが特に好ましい。
これらの水溶性有機溶媒は、無水の状態で好適に使用しうるが、回収再利用の観点からは、水溶性有機溶媒と水との混合溶媒として使用することができる。その場合、含水率は、一般に、活性成分の効率的な抽出や抽出後の残渣の濾過性等の観点からは、普通５０容量％以下、好ましくは４０容量％以下、より好ましくは３０容量％以下、さらに好ましくは２０容量％以下、特に好ましくは１０容量％以下である。グリチルリチン等の水溶性不純物の混入を最小化するためには、上記比率はさらに低い方が好ましく、普通８容量％以下、好ましくは４容量％以下、より好ましくは２容量％以下である。下限は、特に制限されないが、好ましくは０．５容量％以上である。
上記比率は、抽出時の系中における比率と解することができる。なお、言うまでもなく、悪影響のない範囲で、他の溶媒を共存させることを妨げない。
抽出温度は、系の固化温度〜沸点であり特に制限されないが、下限は普通１℃、好ましくは５℃、より好ましくは１０℃、さらに好ましくは１５℃であり、上限は普通８０℃、好ましくは７０℃、より好ましくは６０℃、さらに好ましくは４５℃である。一般に、１〜８０℃、好ましくは１０〜６０℃前後、より好ましくは１５〜４５℃前後で好適に実施しうる。
上記の水溶性有機溶媒による抽出は、一般的な方法に従って実施することができ、特に制限されない。例えば、上記の甘草、又は抽出残渣に対して、例えば１〜２０倍重量、好ましくは２〜１０倍重量の上記水溶性有機溶媒を用いて、例えば、０．１時間以上、好ましくは０．２時間以上、より好ましくは０．５時間以上、抽出を行えばよい。普通、１回あたりの抽出時間は１〜１０時間程度で好適に実施しうる。抽出時間の上限は特に制限されず、１日程度であるが、さらに長時間行っても良い。上記抽出は、必要に応じて、１回もしくは複数回実施してもよく、又、用いる溶媒を適宜組み合わせても良い。
抽出時の圧力は、特に制限されない。常圧〜加圧された状態（１〜数気圧）が用いられうるが、所望ならば減圧にすることもできる。還流下に、又、やや加圧された状態で実施しうる。
なお、上記抽出操作は、上述したように、過剰のアルカリ成分が存在する場合は、その大半〜全てを中和等で除去し、酸性〜弱アルカリ性、好ましくは酸性〜中性で好適に実施される。
以上の方法により、好適に甘草の水溶性有機溶媒による抽出物を得ることができるが、前述の如く、甘草疎水性抽出物、とりわけ、成人病予防素材としての甘草疎水性抽出物の製造においては、グリチルリチン等の水溶性不純物の含量を低く抑えることが極めて重要である。そこで、本発明者らは、さらに好適な抽出方法について鋭意検討した結果、抽出に用いる甘草の形態として、全表面積に占める皮の面積の割合が高いものを使用すると、含水した水溶性有機溶媒で抽出した場合でも、グリチルリチン等の水溶性不純物の含量の低い、高品質の甘草抽出物を取得できることを見出した。
ここで、甘草の「皮」とは、甘草表面の皮（樹皮）の部分を意味する。
上記の全表面積に占める皮の面積の割合としては、普通３割以上であり、好ましくは５割以上、より好ましくは７割以上、さらに好ましくは８割以上、特に好ましくは９割以上である。抽出に用いる甘草の形態としては、切断品又は周皮（周皮を主とするものを含む）を使用するのが好ましく、加工がより容易である切断品の使用がより好ましい。切断品の場合は、全表面積に占める皮の面積の割合が、好ましくは５割以上、より好ましくは７割以上、さらに好ましくは８割以上、特に好ましくは９割以上である。また、当該皮の面積の割合は、例えば、切断品の場合は、円柱と見なして算出することができる。
上記形態の甘草の抽出には、前記の水溶性有機溶媒を好適に使用できるが、なかでも炭素数２〜４の１価アルコール、アセトン又はこれらの混合物が好ましく、炭素数２〜３の１価アルコール、アセトン又はこれらの混合物がより好ましく、エタノール、アセトン又はこれらの混合物がさらに好ましい。特にエタノールを用いる場合に、その効果が最大限に発揮される。また、水溶性有機溶剤としては、無水の溶媒のみならず、含水溶媒も好適に使用しうる。含水溶媒の場合の含水率としては、普通約３０容量％以下、好ましくは約２０容量％以下、より好ましくは約１０容量％以下、さらに好ましくは約８容量％以下のものを好適に使用しうる。下限は、特に制限されないが、実用性の観点から、普通約３容量％以上、好ましくは約４容量％以上である。
以上の方法により、水溶性不純物の含量の低い高品質の抽出物を好適に取得できる。得られる抽出物中のグリチルリチン含量は、好ましくは０．００１〜０．５重量％に最小化できる。また、甘草を特別に乾燥することなく、抽出溶媒として安価な含水した水溶性有機溶媒を使用する場合においても、高品質の抽出物を好適に取得できる。
また、水溶性有機溶媒による抽出の際には、活性成分の安定性の面から、窒素ガス等を用いる不活性ガス雰囲気下等の、脱酸素雰囲気下に行うのが好ましい。
次に、このようにして得られた甘草の水溶性有機溶媒による抽出物を結晶化して、取り扱いやすい固体を採取する本発明の第二について説明する。
本発明の第二においては、甘草の水溶性有機溶媒による抽出物を、一般的な溶媒除去操作（例えば、常圧濃縮、減圧濃縮、凍結乾燥、凍結濃縮等）により溶媒を除去した後、貧溶媒として水を用いて、水／（水溶性有機溶媒＋水）の重量比が１／３以上である水と水溶性有機溶媒の混合溶媒中で結晶化する。
結晶化に供する抽出物としては、前記の、皮の面積の割合が多い甘草から抽出した高品質のものが最適であるが、これに限られるものではない。
結晶化に用いる水溶性有機溶媒としては、特に制限されないが、例えば、メタノール、エタノール、プロパノール、ブタノール等の炭素数１〜４の１価アルコール、アセトン等、又はこれらの混合物を挙げることができる。好ましくは、炭素数２〜３の１価アルコール、アセトン等、又はこれらの混合物であり、より好ましくは、エタノール、アセトン又はこれらの混合物であり、溶媒の人体に対する安全性の観点より、エタノールが特に好ましい。
なお、予め活性炭や樹脂（例えば、イオン交換樹脂、合成吸着樹脂）等による吸着処理、及び／又は、分別によって不純物を除去した後、結晶化することも好ましく実施できる。結晶中のグリチルリチン含量を低減する観点からは、吸着処理及び／又は分別等を行って、グリチルリチン等の水溶性不純物を除去した後、結晶化するのがより好ましい。
本発明の結晶時の水／（水溶性有機溶媒＋水）の重量比は、普通１／３以上、好ましくは１／２以上、より好ましくは２／３以上、さらに好ましくは３／４以上、特に好ましくは９／１０以上である。結晶化の促進や回収率の向上等の観点から、上記重量比が高いのが好ましく、上記水／（水溶性有機溶媒＋水）の重量比の上限は１である。上記比率は、甘草の水溶性有機溶媒による抽出物の品質等により多少変化しうる。なお、言うまでもなく、悪影響のない範囲で他の溶媒を共存させることを妨げない。
本発明の結晶化は、上記比率の溶媒中で甘草の水溶性有機溶媒による抽出物の溶解量を減じる、又は、甘草の水溶性有機溶媒による抽出物の溶液を上記比率の溶媒に変化させることで溶解量を減じる等により実施しうる。
具体的な結晶化方法としては、一般的な結晶化操作を用いて、例えば濃縮（蒸発）による結晶化方法、溶媒置換を用いる結晶化方法（例えば、上記水溶性有機溶媒からなる溶液を、上記重量比になるように置換していく結晶化方法）、貧溶媒結晶化方法（例えば、水中に甘草の水溶性有機溶媒による抽出物を添加していく結晶化方法）等、又はこれらを組み合わせて実施することができるし、必要に応じて、他の結晶化方法も組み合わせて実施することもできる。また、結晶化に際して、必要に応じ、種晶を添加することができる。
本発明の実施における好ましい態様として、上記貧溶媒結晶化方法をさらに説明する。
この方法においては、甘草の水溶性有機溶媒による抽出物の溶液（抽出液やその濃縮液）を、水に添加するのが好ましい。上記添加時間は、濾過性等の観点から、好ましくは１／２時間以上、より好ましくは１時間以上、さらに好ましくは２時間以上である。
取り扱いやすい（粉体特性の良い）結晶を得る観点から、結晶化温度は、普通５０℃以下、好ましくは３５℃以下、より好ましくは２０℃以下、さらに好ましくは１０℃以下、特に好ましくは５℃以下である。下限は、系の固化温度である。
上記結晶化において、分散が弱いと得られる結晶の性状が悪くなる傾向もあるので、結晶化は攪拌下若しくは流動下に行うのが好ましい。攪拌、流動の程度は特に制限されないが、単位容積あたりの攪拌所要動力として、例えば０．１ｋＷ／ｍ３以上、好ましくは０．２ｋＷ／ｍ３以上、より好ましくは０．３ｋＷ／ｍ３以上で実施される。
結晶化濃度（溶媒重量に対する抽出物乾体重量）は、経済性等の観点から、結晶化終了時の値として、一般に１重量％以上、好ましくは２重量％以上、より好ましくは３重量％以上で実施される。
結晶化の後は、共存する溶媒を引き続き一般的な溶媒除去操作（例えば、常圧濃縮、減圧濃縮、凍結乾燥、凍結濃縮、噴霧乾燥等）により除去しても良く、又、スラリーを加圧濾過、減圧濾過、遠心分離等の通常用いられる固液分離法を用いて分離することにより、結晶を採取した後、一般的な乾燥操作（例えば、常圧下又は減圧下の静置乾燥、攪拌乾燥、混合乾燥、流動乾燥、気流乾燥等）により、乾燥することもできる。
後者、すなわち、固液分離後に乾燥する方法においては、母液に上記水溶性不純物を好適に除去できるので、活性成分の含量の高い抽出物を得ることができる。
乾燥した後に得られる甘草疎水性抽出物の結晶は、一般に、黄褐色〜黒褐色の固体あるいは粉体である。
なお、本発明の製造法においては、活性成分の安定性の面から、上記の一連の操作、なかでも水溶性有機溶媒による抽出、及び／又は、結晶化等の操作は、窒素ガス等を用いる不活性ガス雰囲気下等の脱酸素雰囲気下に行うのが好ましい。また、酸化を抑制する目的で、アスコルビン酸、アスコルビン酸ナトリウム、アスコルビン酸パルミチン酸エステル、アスコルビン酸ステアリン酸エステル、トコフェロール等の抗酸化剤共存下に、上記水溶性有機溶媒による抽出、及び／又は、結晶化等の操作を実施しうる。
このようにして得られる甘草疎水性抽出物の結晶は、甘草に対する重量比（乾体基準）として、普通約０．０５以上であり、活性成分が効率良く回収される。一方、抽出物乾体中のグリチルリチン含量は、乾体基準で、普通０．５重量％以下、好ましくは０．３重量％以下、より好ましくは０．２重量％以下、さらに好ましくは０．１重量％以下と、低含量である。
本発明の方法で得られる甘草疎水性抽出物結晶中の活性成分としては、３−アリルクマリン誘導体であるグリシクマリン、グリシリン；イソフラブ−３−エン誘導体であるデヒドログリアスペリンＣ、デヒドログリアスペリンＤ；イソフラバン誘導体であるグリアスペリンＤ；イソフラバノン誘導体であるグリアスペリンＢ、グリチルイソフラバノン；イソフラボン誘導体であるグリウラリンＢ、セミリコイソフラボンＢ、グリチルイソフラボン；カルコン誘導体であるイソリクイリチゲニン等が含まれる。
本発明により得られる甘草疎水性抽出物結晶中の上記成分の総量は、乾体基準で、普通５重量％以上、好ましくは６重量％以上、より好ましくは７重量％以上であり（普通最大５０重量％以下）、活性成分が効率よく回収できる。特に、上記貧溶媒結晶化法で甘草疎水性抽出物結晶を取得することにより、乾体基準での上記成分の総量を高めることができる。
上記甘草疎水性抽出物結晶中の主要成分としては、例えば、乾体基準で、グリシクマリン、グリシリン、デヒドログリアスペリンＣ、デヒドログリアスペリンＤ、グリアスペリンＢ及びグリアスペリンＤからなる群より選ばれる少なくとも１種の成分を、普通０．５重量％以上、好ましくは１重量％以上含有している。より好ましくは、乾体基準で、グリシクマリン、グリシリン、デヒドログリアスペリンＣ、デヒドログリアスペリンＤ、グリアスペリンＢ及びグリアスペリンＤを各々、普通０．５重量％以上、好ましくは１重量％以上含有している。これらの成分は、甘草の中でも特にＧ．ウラレンシス（Ｇ．ｕｒａｌｅｎｓｉｓ  Ｆｉｓｃｈ．ｅｔ  ＤＣ；ウラルカンゾウ）の抽出物の結晶に多く含まれる。
また、例えば、乾体基準で、グリチルイソフラバノン、グリチルイソフラボン、グリウラリンＢ、セミリコイソフラボンＢ及びイソリクイリチゲニンからなる群より選ばれる少なくとも１種の成分を、普通０．０１重量％以上、好ましくは０．０２重量％以上含有している。より好ましくは、乾体基準で、グリチルイソフラバノン、グリチルイソフラボン、グリウラリンＢ、セミリコイソフラボンＢ及びイソリクイリチゲニンを各々、普通０．０１重量％、好ましくは０．０２重量％以上含有している。なお、デヒドログリアスペリンＤは、ＰＣＴ／ＪＰ０２／１０５７２で初めて報告された化合物である。
上記結晶中の活性成分は、ペルオキシソーム増殖剤応答性受容体リガンド剤、すなわちＰＰＡＲリガンド活性物質でもあり、例えば、２型糖尿病、高インスリン血症、脂質代謝異常、肥満、高血圧、動脈硬化性疾患の予防・改善、あるいは、生活習慣病の予防・改善等に非常に有効である（ＰＣＴ／ＪＰ０２／１０５７２、Ａ．Ｏｋｕｎｏ，ｅｔ  ａｌ．，Ｊｏｕｒｎａｌ  ｏｆ  Ｃｌｉｎｉｃａｌ  Ｉｎｖｅｓｔｉｇａｔｉｏｎ，１０１，１３５４−１３６１，１９９８、Ｒ．Ａ．Ｄｅｇｒｏｎｚｅ，ｅｔ  ａｌ．，Ｄｉａｂｅｔｅｓ  Ｃａｒｅ，１４，１７３−１９４，１９９１）。
本発明の甘草疎水性抽出物は、特に制限されないが、食品用（食品、栄養機能食品、特定保健用食品、栄養補助食品、飲料等）として特に好適に使用しうる。
又、本発明により得られる甘草疎水性抽出物は、錠剤、カプセル剤の形態としても使用できる。さらに、甘草疎水性抽出物以外の製剤素材を、常法により適宜添加混合しても良い。このようなものとしては特に制限されず、例えば、賦形剤、崩壊剤、滑沢剤、結合剤、酸化防止剤、着色剤、凝集防止剤、吸収促進剤、安定化剤等が挙げられる。
発明を実施するための最良の形態
以下、実施例を挙げて本発明をさらに具体的に説明するが、本発明はこれらの実施例に限定されるものではない。
また、グリチルリチンの含量及び活性成分（グリチルイソフラバノン、イソリクイリチゲニン、グリシクマリン、セミリコイソフラボンＢ、グリチルイソフラボン、デヒドログリアスペリンＣ、グリシリン、グリアスペリンＢ、グリアスペリンＤ、デヒドログリアスペリンＤ、グリウラリンＢの含量は、下記条件のＨＰＬＣ分析により求めた。
（グリチルリチン分析条件）
カラム；Ｊ’ｓｐｈｅｒｅ  ＯＤＳ−Ｈ８０（ワイエムシィ）４．６ｍｍ（内径）×２５０ｍｍ（長さ）、カラム温度；４０℃、移動相；アセトニトリル：１０ｍＭリン酸水溶液＝３３：６７（ｖ／ｖ）、流速；１ｍｌ／ｍｉｎ、検出波長；２５４ｎｍ、グリチルリチンの保持時間；２７．１ｍｉｎ。
（活性成分分析条件）
カラム；Ｊ’ｓｐｈｅｒｅ  ＯＤＳ−Ｈ８０（ワイエムシィ）４．６ｍｍ（内径）×２５０ｍｍ（長さ）、カラム温度；４０℃、移動相；１０ｍＭリン酸水溶液に対してアセトニトリルの比率を分析開始１５ｍｉｎまで３５％で一定とし、１５ｍｉｎ以降６５ｍｉｎ後に７０％となるように一定比率で上昇させ、６５ｍｉｎ以降７０ｍｉｎまで７０％で一定とするグラジェント条件、流速；１ｍｌ／ｍｉｎ、検出波長；２５４ｎｍ。各成分の保持時間は、グリチルイソフラバノンが１３．３ｍｉｎ、イソリクイリチゲニンが１４．７ｍｉｎ、グリシクマリンが３２．７ｍｉｎ、セミリコイソフラボンＢが３４．２ｍｉｎ、グリチルイソフラボンが３６．３ｍｉｎ、デヒドログリアスペリンＣが３７．２ｍｉｎ、グリシリンが４８．１ｍｉｎ、グリアスペリンＢが５１．１ｍｉｎ、グリアスペリンＤが５２．７ｍｉｎ、デヒドログリアスペリンＤが５５．２ｍｉｎ、グリウラリンＢが５８．７ｍｉｎ。
（実施例１）
甘草（グリキルリーザ  ウラレンシス）切断品１．０ｋｇ（甘草の全表面積に占める皮の面積の割合が約８割）に、９９．５容量％エタノール５．０ｋｇを加え、２５℃で５時間抽出した後、残渣を濾去して抽出液を得た。この抽出液の溶媒を減圧下で除去して、濃縮液１０８．９ｇ（甘草疎水性抽出物５４．５ｇ含有）を得た。
この濃縮液４０．０ｇ（甘草疎水性抽出物２０．０ｇ含有）を、５℃にて強攪拌（０．３ｋｗ／ｍ３）している水３６０ｇに対して、１．５時間かけて滴下して結晶を析出させた。引き続き５℃にて１時間攪拌した後に、得られた結晶を減圧濾過し、次いで、５℃に冷却した水４０ｇで洗浄した。得られた湿結晶を減圧乾燥して、甘草疎水性抽出物の結晶１５．８ｇを取得した。この疎水性抽出物の結晶中に含まれるグリチルリチン及び活性成分の含量を表１に示す。
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（実施例２）
９５．０容量％エタノールを用いること以外は実施例１と同様にして、甘草油性抽出物の結晶１５．７ｇを得た。この疎水性抽出物の結晶中に含まれるグリチルリチン及び活性成分の含量を表２に示す。
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（実施例３）
甘草（グリキルリーザ  ウラレンシス）微粉砕品１．０ｋｇに９９．５容量％エタノール５．０ｋｇを加え、２５℃で５時間攪拌した後、残渣を濾去して抽出液を得た。この抽出液の溶媒を減圧下で除去して、濃縮液１８１．８ｇ（甘草疎水性抽出物９０．９ｇ含有）を得た。
この濃縮液４０．０ｇ（甘草疎水性抽出物２０．０ｇ含有）を、５℃にて強攪拌（０．３ｋｗ／ｍ３）している水３６０ｇに対して、１．５時間かけて滴下して結晶を析出させた。引き続き５℃にて１時間攪拌した後に、得られた結晶を減圧濾過し、次いで、５℃に冷却した水４０ｇで洗浄した。得られた湿結晶を減圧乾燥して、甘草疎水性抽出物の結晶１６．２ｇを取得した。この疎水性抽出物の結晶中に含まれるグリチルリチン及び活性成分の含量を表３に示す。
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（実施例４）
実施例３で用いた甘草（グリキルリーザ  ウラレンシス）微粉砕品１．０ｋｇに水１０Ｌを加え、６０℃で１日攪拌した後、濾過して残渣を得て、それを減圧乾燥させた。得られた粉末に９９．５容量％エタノール５ｋｇを加え、２５℃で５時間抽出した後、残渣を濾去して抽出液を得た。この抽出液の溶媒を減圧下で除去して、濃縮液１７８．０ｇ（甘草疎水性抽出物８９．０ｇ含有）を得た。
この濃縮液４０．０ｇ（甘草疎水性抽出物２０．０ｇ含有）を、５℃にて強攪拌（０．３ｋｗ／ｍ３）している水３６０ｇに対して、１．５時間かけて滴下して結晶を析出させた。引き続き５℃にて１時間攪拌した後に、得られた結晶を減圧濾過し、次いで、５℃に冷却した水４０ｇで洗浄した。得られた湿結晶を減圧乾燥して、甘草疎水性抽出物の結晶１６．２ｇを取得した。この疎水性抽出物の結晶中に含まれるグリチルリチン及び活性成分の含量を表４に示す。
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（比較例１）
実施例３で用いた甘草（グリキルリーザ  ウラレンシス）微粉砕品１．０ｋｇに９９．５容量％エタノール５．０ｋｇを加え、２５℃で５時間攪拌した後、残渣を濾去して抽出液を得た。この抽出液の溶媒を減圧下で除去して、さらに減圧乾燥（４０℃、フル真空、１晩）を行い、油状の甘草疎水性抽出物９６．１ｇを得た。この疎水性抽出物中に含まれるグリチルリチン及び活性成分の含量を表５に示す。
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（実施例５）
実施例３で用いた甘草（グリキルリーザ  ウラレンシス）微粉砕品１０ｇにアセトン５０ｇを加え、２５℃で５時間攪拌した後、残渣を濾去して抽出液を得た。この抽出液の溶媒を減圧下で除去して、濃縮液１．２６ｇ（甘草疎水性抽出物０．６３ｇ含有）を得た。
この濃縮液１．２６ｇ（甘草疎水性抽出物０．６３ｇ含有）を、５℃にて強攪拌（０．３ｋｗ／ｍ３）している水１１．３ｇに対して、１．５時間かけて滴下して結晶を析出させた。引き続き５℃にて１時間攪拌した後に、得られた結晶を減圧濾過し、次いで、５℃に冷却した水１．２ｇで洗浄した。得られた湿結晶を減圧乾燥して、甘草疎水性抽出物の結晶０．５１ｇを取得した。この疎水性抽出物の結晶中に含まれるグリチルリチン及び活性成分の含量を表６に示す。
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（実施例６〜１２，比較例２〜３）
含水エタノール２ｍｌに対して、実施例１で取得した甘草疎水性抽出物の結晶を２００ｍｇ添加し、２０℃で１時間攪拌した際の、甘草疎水性抽出物の性状を観察した。水／（エタノール＋水）の重量比、及び甘草疎水性抽出物の性状を表７に示す。
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表７より、水の比率が高い場合には、甘草疎水性抽出物が固相として存在しうることが分かる。
（実施例１３）
実施例１で得られた甘草疎水性抽出物の結晶に、トウモロコシ澱粉、乳糖、カルボキシメチルセルロース、ステアリン酸マグネシウムを混合し、さらにポリビニルピロリドンの水溶液を結合剤として加え、常法により顆粒化した。これにタルクを加えて混合した後、打錠し、下記組成の錠剤を得た。
甘草疎水性抽出物の結晶        １０重量部
トウモロコシ澱粉              ２５重量部
乳糖                          １５重量部
カルボキシメチルセルロース    １０重量部
ステアリン酸マグネシウム        ３重量部
ポリビニルピロリドン            ５重量部
タルク                        １０重量部
産業上の利用可能性
本発明は、上述の構成よりなるので、グリチルリチン等の水溶性不純物の混入を抑えて、高品質の甘草疎水性抽出物を得ることができ、また、粉体特性の優れた甘草疎水性抽出物を得ることができる。
【国際調査報告】
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