(57)【要約】下記（１）式で表される（−）−７−［（７Ｓ）−アミノ−５−アザスピロ［２．４］ヘプタン−５−イル］−６−フルオロ−１−［（１Ｒ，２Ｓ）−２−フルオロ−１−シクロプロピル］−１，４−ジヒドロ−８−メトキシ−４−オキソ−３−キノリンカルボン酸・１塩酸塩・２．５水和物及びこの化合物の１塩酸塩・１水和物の製法。本発明方法によれば、優れた抗菌活性と安全性を有し、かつ光や湿度に対する安定性も優れており、抗菌剤として有用な化合物が安定して得られる。2003076428.tif 000016
2003076428.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
次式（１）
2003076428.tif 000008
で表される化合物。
【請求項２】
粉末Ｘ線回折による回折角（２θ）として５．４（°）付近に特徴的ピークを示す結晶である請求項１記載の化合物。
【請求項３】
次式（Ａ）
2003076428.tif 000009
で表される構造を有する化合物を、所望により塩酸の存在下、含水率を調整した含水溶媒中で処理するか、またはその含水溶媒から再結晶することを特徴とする次式（２）
2003076428.tif 000010
または次式（１）
2003076428.tif 000011
で表される化合物の製造方法。
【請求項４】
次式（Ａ）
2003076428.tif 000012
で表される構造を有する化合物を、所望により塩酸の存在下、含水率１〜５％の含水溶媒中で処理するか、またはこの含水溶媒から再結晶することを特徴とする、次式（２）
2003076428.tif 000013
で表される化合物の製造方法。
【請求項５】
次式（Ａ）
2003076428.tif 000014
で表される構造を有する化合物を、所望により塩酸の存在下、含水率２０〜４０％の含水溶媒中で処理するか、またはこの含水溶媒から再結晶することを特徴とする、次式（１）
2003076428.tif 000015
で表される化合物の製造方法。
【請求項６】
式（Ａ）で表される構造を有する化合物が、式（Ａ）で表される化合物の遊離体、その塩酸塩、又はそれらの水和物である請求項３から５のいずれか１項記載の製造方法。
【請求項７】
式（Ａ）で表される構造を有する化合物が、式（Ａ）で表される化合物の遊離体、その水和物、又は式（１）の化合物である請求項４記載の製造方法。
【請求項８】
式（Ａ）で表される構造を有する化合物が、式（Ａ）で表される化合物の遊離体、その水和物、又は式（２）の化合物である請求項５記載の製造方法。
【請求項９】
含水溶媒が含水２−プロパノールである請求項３から８のいずれか１項記載の方法。
【発明の詳細な説明】
技術分野
本発明は、抗菌活性及び安全性が高く、更に安定性も良好な光学活性キノロンカルボン酸誘導体の製造法及びその製造中間体に関する。
背景技術
キノロンカルボン誘導体は、合成抗菌剤として知られており、特にキノリン骨格の１位窒素原子に１，２−シス−２−ハロゲノシクロプロピル基を有する下記一般式（Ｉ）の化合物は強力な抗菌活性を有し、かつ安全性も高いため医薬として有用であることが知られている（特許第２７１４５９７号及び特許第２９１７０１０号）。
2003076428.tif 000003
（式中、Ｒ１はアミノ基、メチルアミノ基、水酸基、チオール基又は水素原子を意味し、Ｒ２は次の群から選ばれる置換基）
2003076428.tif 000004
（式中、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５及びＲ６は各々独立して水素原子又は炭素数１〜６のアルキル基を意味し、Ｒ１０及びＲ１１は独立して水素原子又は炭素数１〜６のアルキル基を意味し、Ｒ１２及びＲ１３は独立して水素原子又は炭素数１〜６のアルキル基を意味する）であるか、炭素数１〜６のアルキル基を有することもある３−ヒドロキシピロリジニル基を意味する。ＡはＣ−Ｘ３又は窒素原子を意味する。Ｘ１及びＸ２は各々独立してハロゲン原子を意味し、Ｘ３はハロゲン原子、炭素数１〜６のアルキル基、炭素数１〜６のアルコキシ基、トリフルオロメチル基又は水素原子を意味する。Ｚは水素原子、炭素数１〜６のアルキル基、炭素数１〜６のアルコキシアルキル基、炭素数１〜６のアルキル鎖のフェニルアルキル基、フェニル基、アセトキシメチル基、ピバロイルオキシメチル基、エトキシカルボニルオキシ基、コリン基、ジメチルアミノエチル基、５−インダニル基、フタリジニル基、５−置換−２−オキソ−１，３−ジオキソール−４−イルメチル基、又は３−アセトキシ−２−オキソブチル基を意味する。ただし、置換基Ｒ２が３−アミノピロリジニル基で、Ｒ１及びＸ３が水素原子である場合を除く。）
フルオロキノロン系合成抗菌薬はほぼ全身の感染症に有効な化学療法薬に発展している。この様な状況下、更に抗菌活性及び安全性が高く、かつ光や湿度に対する安定性にも優れた化合物が求められている。
発明の開示
このような状況下本出願人は、上記特許第２７１４５９７号及び特許第２９１７０１０号明細書記載のＮ１−（１，２−シス−２−フルオロシクロプロピル）置換ピロリドンカルボン酸類に着目し、更に検討してきたところ、この明細書中に遊離体の化学構造式だけが示されているにすぎない化合物４１、とりわけ（−）−７−［（７Ｓ）−７−アミノ−５−アザスピロ［２．４］ヘプタン−５−イル］−６−フルオロ−１−［（１Ｒ，２Ｓ）−２−フルオロ−１−シクロプロピル］−１，４−ジヒドロ−８−メトキシ−４−オキソ−３−キノリンカルボン酸［以下、化合物（Ａ）。化合物（Ａ）は後記式（Ａ）の構造を持った遊離体の化合物である。］については、その１塩酸塩・１水和物が、他の酸付加塩等に比べて、抗菌活性及び安全性だけでなく光や湿度に対する安定性の面でも顕著に優れており、抗菌薬として有用であることを見出し、先に特許出願した（特願２０００−０９７６９０号）。
そしてさらに検討してきたところ、化合物（Ａ）の塩酸塩には１塩酸塩・１水和物の他に、１塩酸塩・２．５水和物も存在し、これら２つの水和物は、結晶製造時の条件を適宜調整することによって、それぞれを選択的に製造できることを見出し、本発明を完成するに至った。
すなわち、本発明は次式（１）
2003076428.tif 000005
で表される化合物［（−）−７−［（７Ｓ）−７−アミノ−５−アザスピロ［２．４］ヘプタン−５−イル］−６−フルオロ−１−［（１Ｒ，２Ｓ）−２−フルオロ−１−シクロプロピル］−１，４−ジヒドロ−８−メトキシ−４−オキソ−３−キノリンカルボン酸・１塩酸塩・２．５水和物。以下、化合物（１）。化合物（１）は化合物（Ａ）の１塩酸塩・２．５水和物である。］を提供するものである。
また本発明は、式（Ａ）で表される構造を有する化合物を、所望により塩酸の存在下、含水率を調整した含水溶媒中で処理するか、またはその含水溶媒から再結晶することを特徴とする（−）−７−［（７Ｓ）−７−アミノ−５−アザスピロ［２．４］ヘプタン−５−イル］−６−フルオロ−１−［（１Ｒ，２Ｓ）−２−フルオロ−１−シクロプロピル］−１，４−ジヒドロ−８−メトキシ−４−オキソ−３−キノリンカルボン酸・１塩酸塩・１水和物［以下、化合物（２）。化合物（２）は化合物（Ａ）の１塩酸塩・１水和物である。］または化合物（１）の製造方法を提供するものである。
また本発明は、式（Ａ）で表される構造を有する化合物を、所望により塩酸の存在下、含水率１〜５％の含水溶媒中で処理するか、またはこの含水溶媒から再結晶することを特徴とする化合物（２）の製造方法を提供するものである。
さらに本発明は、式（Ａ）で表される構造を有する化合物を、所望により塩酸の存在下、含水率２０〜４０％の含水溶媒中で処理するか、またはこの含水溶媒から再結晶することを特徴とする化合物（１）の製造方法を提供するものである。
発明を実施するための最良の形態
本発明の化合物（１）及び化合物（２）は、例えば次の反応式に従って製造することができる。
2003076428.tif 000006
2003076428.tif 000007
すなわち、化合物（３）に化合物（４）を反応させて化合物（Ａ）を得、次いでこれを所望により塩酸の存在下、含水率の調整された含水溶媒中で処理するか、またはその含水溶媒から再結晶することにより化合物（１）、または化合物（２）が得られる。また、化合物（１）と化合物（２）は、含水率の調整きれた含水溶媒中で処理することによりお互いに変換させ、選択的に得ることができる。
原料化合物である化合物（３）及び化合物（４）はいずれも特許第２７１４５９７号明細書に記載の方法により得られる。
化合物（３）と化合物（４）との反応は、溶媒を使用して、また溶媒を使用せずに行うことができる。反応に使用できる溶媒は、反応に対して不活性なものであれば特に限定されない。この様な溶媒として例えば、ジメチルスルホキシド等のスルホキシド類、ピリジン等の含窒素複素環化合物、アセトニトリル等のニトリル類、エタノール等のアルコール類、クロロホルム等のハロゲン化炭化水素類、ジメチルホルムアミド、ジメチルアセトアミド、Ｎ−メチルピロリドン等のアミド類、テトラヒドロフラン等のエーテル類、水、３−メトキシブタノール等を挙げることができ、またこれらは混合物として使用してもよい。
反応は無機塩基又は有機塩基などの酸受容体の存在下に行うのが好ましい。ここで塩基としては無機塩基、有機塩基のいずれでも良いが、例えば無機塩基としては水酸化リチウム、水酸化ナトリウム、水酸化カリウム、炭酸リチウム、炭酸ナトリウム、炭酸カリウム、炭酸水素ナトリウム、炭酸水素カリウム等のアルカリ金属の水酸化物、炭酸塩、炭酸水素塩等を挙げることができる。有機塩基としてはトリエチルアミン、トリプロピルアミン、トリブチルアミン、Ｎ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン等のトリアルキルアミン類、ジエチルアニリン、ジメチルアニリン等のジアルキルアニリン類、Ｎ−メチルモルホリン、ピリジン、Ｎ，Ｎ−ジメチルアミノピリジン等を例示することができる。
反応温度は、通常、室温ないし１００℃の範囲で実施することができ、好ましくは室温から４０℃程度である。反応時間は３０分から４８時間の範囲でよく、通常は３０分から２０時間程度で終了する。
化合物（３）と化合物（４）との反応後生成物のホウ素キレートを除去するためには、生成物を含水エタノールに溶解し、トリエチルアミンを加えて数時間加熱還流すればよい。この場合、含水エタノールは他のプロトン性溶媒に代えてもよく、例えば含水イソプロパノールでもよく、水と混合することができるプロトン性溶媒であり、少なくとも加熱時に化合物（４）を溶解できるものが好ましい。また、必ずしも、トリエチルアミンを加える必要はない。
得られた化合物（Ａ）は条件をコントロールして塩酸塩に変換しないと、化合物（２）だけでなく、化合物（１）またはそれらの混合物が得られる。複数の水和物の結晶が混在していては医薬品原末としては不適格である。そこで本発明者らは化合物（１）および化合物（２）をそれぞれ単一の水和物の結晶として選択的に製造する方法について検討を行った。
まず、本発明者らは含水溶媒中における化合物（１）、（２）の結晶の安定性について検討した。検討方法は以下の通りである。
化合物（１）、（２）の等量を混合し、これに種々の含水率に調整した含水溶媒を加えた。この混合物の温度を変えて攪拌処理し、一定時間後の結晶中に含まれる化合物（１）、（２）の割合を分析した。処理時において処理混合物は懸濁状態であって、いわゆるスラリー状態であった。この処理の際に含水溶媒は１％から４０％の含水率の２−プロパノールを使用した。処理を行った際の溶媒の使用量は、結晶１ｇに対して１．５ｍｌから２０ｍｌの割合であった。なお、使用した溶媒の含水率は混合前の容積比で示している。例えば４０％含水２−プロパノールは２−プロパノール６容と水４容を混合したものである。処理は１日から３日間行った。しかし、結晶の転換には必ずしも１日から３日は必須ではなく実際には１日以内で転換が終了することもあることも明らかとなった。処理は０℃から７０℃で行った。
この検討の結果、処理温度及び処理に使用する溶媒の含水率によって存在する結晶の種類が変化することが判明した。すなわち、含水率が１％から５％の場合、０℃から７０℃で処理を行ったところ、化合物（２）のみが生成（存在）した。含水率が７％から８％の場合、２０℃から７０℃で処理を行ったところ、化合物（２）のみが生成したが、０℃から１０℃では化合物（１）、（２）の混合物となった。含水率が９％の場合、２５℃から７０℃で処理を行ったところ、化合物（２）のみが生成したが、０℃から２０℃では化合物（１）、（２）の混合物となった。含水率が１０％の場合、３０℃から７０℃で処理を行ったところ、化合物（２）のみが生成したが、５℃から２５℃では化合物（１）、（２）の混合物となった。０℃では化合物（１）のみが生成した。含水率が２０％から４０％の場合、０℃から７０℃で処理を行ったところ、化合物（１）のみが生成した。
この結果から、化合物（１）を単一物として得るには、２０％から４０％の含水率の溶媒中において処理を行えばよいことが明らかとなった。また、化合物（２）を単一物として得るには、１％から５％の含水率の溶媒中において処理を行えばよいことが明らかとなった。これらの処理はいずれも０℃から７０℃の条件で行うのが好ましい。
なお、「処理する」とは、結晶と溶媒とからなるスラリー状態の混合物を、ある選択した温度で一定時間の攪拌操作を行うことをいう。処理のためのスラリー状態の混合物を得るには、一旦結晶を溶解した後に晶析させてスラリー状態としてもよいし、単に溶媒と結晶を混合するのでもよい。
この処理に使用する原料は式（Ａ）で表される構造を有していればいかなるものでもよい。例えば、式（Ａ）で表される化合物を製造した直後の未精製なもの（いわゆる粗晶）であり、式（Ａ）で表される構造の化合物の遊離体（化合物（Ａ））、その水和物、塩酸塩、塩の水和物、そして式（１）や式（２）自体の結晶であってもよい。これらは結晶であっても単なる固形物状態のものでもよい。そして、塩酸よりも弱い酸であれば溶液中で酸の交換が起こると考えられるので、塩酸塩以外の酸付加塩であってもよい。原料化合物が塩酸塩の場合は、塩酸を添加しなくてもよい。
本発明の方法で使用できる溶媒は、結晶が溶解し、かつ水と混和する溶媒であれば特に制限はないが、例えばメタノール、エタノール、プロパノール類等の低級アルコール類を例示することができる。これらの中では２−プロパノールが最も好ましい。
一方、前記のスラリー状態において化合物（１）または化合物（２）のみが存在する条件を晶析時の条件とすれば、化合物（Ａ）を所望により塩酸の存在下、含水率の調整された含水溶媒中で処理するかその含水溶媒から再結晶することによって化合物（１）または化合物（２）のみからなる単一の結晶を選択的に製造できる。ここで晶析時の条件とは、粗結晶を溶媒に溶解し、この後に必要に応じて活性炭処理や濃縮等の処理を行って、結晶を晶析させる時の条件をいう。例えば、化合物（Ａ）と前記の含水率に調整された含水２−プロパノールを混合し、塩酸を加え加熱溶解し、必要に応じて活性炭処理や濃縮等の処理を行い結晶を晶析させた後、濾過することにより化合物（１）または化合物（２）のみからなる単一の結晶を選択的に製造できる。この場合、塩酸は塩酸ガスでも塩酸水溶液でもよい。また塩酸の使用量は化合物（Ａ）に対し１当量以上存在すればよい。
上記の如くして得られる化合物（１）及び（２）は、特許第２９１７０１０号明細書に記載の化合物９ａ、９ｂ、１３ｂ、１８ａ、１８ｂ、２６ｂｂ、２６ａａ、２６ｂａ、２６ａｂ、３１ａ、３１ｂ、３４ｂ、５４ｂ、５６ｂ、５２ｂｂや８５ｂｂに比べても、優れた抗菌活性を有しており、抗菌剤として有用である。このうち、光や湿度に対する安定性の点で化合物（２）が化合物（１）よりも好ましい。
化合物（２）は、粉末Ｘ線回折による回折角（２θ）として６．９、１０．９、１４．４、２３．１、２６．９及び２７．８（°）付近に特徴的ピークを示す結晶であるのに対し、化合物（１）は粉末Ｘ線回折による回折角（２θ）として５．４（°）付近に特徴的ピークを示す。また、化合物（２）は、５〜９５％ＲＨの湿度条件下で吸脱湿をおこさず、湿度に対する安定性も良好である。
実施例
次に実施例を挙げて本発明を更に詳細に説明するが、本発明はこれに何ら限定されるものではない。
参考例１
エチル  ３−ジメチルアミノ−２−（３−メトキシ−２，４，５−トリフルオロベンゾイル）アクリレート
３−メトキシ−２，４，５−トリフルオロ安息香酸２０６．１ｇ（１０００ｍｍｏｌ）、Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド２ｍＬ及びトルエン２０００ｍＬの混合懸濁液に塩化チオニル１０９．４ｍＬ（１５００ｍｍｏｌ）を室温下にて滴下した。滴下終了後、反応液を８０℃の油浴中にて１６時間攪拌した。反応液を冷却後、減圧濃縮し（濃縮後にトルエンを加え、更に濃縮する操作を３回実施した。）、酸クロリドを調製した。
エチル  ３−ジメチルアミノアクリレート１７１．８ｇ（１２００ｍｍｏｌ）とトリエチルアミン１８４．０ｍＬ（１３２０ｍｍｏｌ）を無水テトラヒドロフラン１５００ｍＬに溶解し、氷冷下、この溶液に先に調製した酸クロリドを無水テトラヒドロフラン５００ｍＬに溶解した溶液を滴下した。滴下終了後、反応懸濁液を５時間加熱還流した。反応液を冷却後、減圧濃縮し、残留物に水１５００ｍＬ、ジクロロメタン１５００ｍＬを加え攪拌後、ジクロロメタン層を分取し、水層ジクロロメタン１０００ｍＬにて抽出した。合わせたジクロロメタン層を飽和食塩水１５００ｍＬにて洗浄後、無水硫酸ナトリウムにて乾燥した。濾過後、濾液を減圧濃縮して得られた残留物をシリカゲルクロマトグラフィーに付し、ｎ−ヘキサン：酢酸エチル＝１：１溶出部を濃縮、減圧乾燥して黄白色クリーム状の標記化合物２７０．３ｇ（８１．６％）を得た。
１Ｈ−ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ：１．０２（３Ｈ，ｔ，Ｊ＝７．０８Ｈｚ），２．８８（３Ｈ，ｂｒ），３．３２（３Ｈ，ｂｒ），４．００（２Ｈ，ｑ，Ｊ＝７．０８Ｈｚ），７．０９−７．１３（１Ｈ，ｍ），７．８３（１Ｈ，ｓ）．
参考例２
エチル  ３−［（１Ｒ，２Ｓ）−２−フルオロ−１−シクロプロピルアミノ］−２−（３−メトキシ−２，４，５−トリフルオロベンゾイル）アクリレート
エチル  ３−ジメチルアミノ−２−（３−メトキシ−２，４，５−トリフルオロベンゾイル）アクリレート２６０．５ｇ（７８６．３ｍｍｏｌ）をジクロロメタン２２００ｍＬに溶解後、（１Ｒ，２Ｓ）−２−フルオロ−１−シクロプロピルアミンのｐ−トルエンスルホン酸塩２２３．６ｇ（９０４．２ｍｍｏｌ）を加え、この懸濁液を−１５℃に冷却した。攪拌下、トリエチルアミン１３８．６ｍＬ（９９４．６ｍｍｏｌ）のジクロロメタン３００ｍＬ溶液を４０分間で滴下した。滴下終了後、同温度にて１時間、氷冷下にて１時間、続いて室温にて１４時間攪拌した。反応液にジクロロメタン１０００ｍＬと水２０００ｍＬを加えた後、ジクロロメタン層を分取し、水層をジクロロメタン５００ｍＬにて抽出した。合わせた有機層を飽和食塩水１０００ｍＬにて洗浄後、無水硫酸ナトリウムにて乾燥した。濾過後、濾液を減圧濃縮して黄色クリーム状の標記化合物２２７．５ｇ（９７．７％）を得た。尚、本成績体は、幾何異性体（Ｅ体とＺ体の混合物）として得られ、これを分離精製することなく次の反応に使用した。
１Ｈ−ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ：０．９７，１．０９（ｔｏｔａｌ  ３Ｈ，ｅａｃｈ  ｔ，Ｊ＝７．０８Ｈｚ），１．２１−１．３７（２Ｈ，ｍ），２．９０−２．９９（１Ｈ，ｍ），４．０１（３Ｈ，ｓ），４．０３，４．０６（ｔｏｔａｌ  ２Ｈ，ｅａｃｈ  ｑ，Ｊ＝７．０８Ｈｚ），４．７３（１Ｈ，ｄｍ，Ｊ＝６３．７２Ｈｚ），６．８６−６．９２，６．９８−７．０４（ｔｏｔａｌ  １Ｈ，ｅａｃｈ  ｍ），８．１６，８．２３（ｔｏｔａｌ  １Ｈ，ｅａｃｈ  ｄ，Ｊ＝１３．６７Ｈｚ）
参考例３
エチル  ６，７−ジフルオロ−１−［（１Ｒ，２Ｓ）−２−フルオロ−１−シクロプロピル］−１，４−ジヒドロ−８−メトキシ−４−オキソ−３−キノリンカルボキシレート
先に合成した粗エチル  ３−［（１Ｒ，２Ｓ）−２−フルオロ−１−シクロプロピルアミノ］−２−（３−メトキシ−２，４，５−トリフルオベンゾイル）アクリレート２７６．２ｇ（７６４．５ｍｍｏｌ）を乾燥Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド２０００ｍＬに溶解後、氷冷下にて炭酸カリウム３１７．０ｇ（２．２９３ｍｍｏｌ）を加え、この懸濁液を室温にて７２時間攪拌した。氷冷攪拌下、反応液に２Ｎ塩酸を徐々に滴下し、懸濁液のｐＨを約３に調整した。反応懸濁液を室温にて３０分間攪拌後、生じた沈殿物を濾取した。その結晶を過剰の精製水、少量の冷エタノール、過剰のジエチルエーテルの順に洗浄後、７０℃にて減圧乾燥して白色粉末状の標記化合物２１３．４ｇ（８１．８％）を得た。
１Ｈ−ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ：１．４１（３Ｈ，ｔ，Ｊ＝７．０８Ｈｚ），１．５６−１．６８（２Ｈ，ｍ），３．８３−３．８８（１Ｈ，ｍ），４．１０（３Ｈ，ｄ，Ｊ＝２．２０Ｈｚ），４．３９（２Ｈ，ｑ，Ｊ＝７．０８Ｈｚ），４．８５（１Ｈ，ｄｍ，Ｊ＝６２．９９Ｈｚ），８．０５（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝８．５５，１０．０１Ｈｚ），８．５７（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝１．２２Ｈｚ）．
参考例４
６，７−ジフルオロ−１−［（１Ｒ，２Ｓ）−２−フルオロ−１−シクロプロピル］−１，４−ジヒドロ−８−メトキシ−４−オキソ−３−キノリンカルボン酸
エチル  ６，７−ジフルオロ−１−［（１Ｒ，２Ｓ）−２−フルオロ−１−シクロプロピル］−１，４−ジヒドロ−８−メトキシ−４−オキソ−３−キノリンカルボキシレート１２０．８ｇ（３５４．１ｍｍｏｌ）、氷酢酸２１０ｍＬ、及び濃塩酸４２０ｍＬの混合物を６時間加熱還流した。冷却した反応液を攪拌下にて氷水１５００ｍＬに注ぎ、室温にて３０分間攪拌した。析出した結晶を濾取し、過剰量の精製水、エタノール３００ｍＬ、ジエチルエーテル５００ｍＬの順で洗浄した。濾取した結晶をエタノール−アセトン系にて再結晶精製（活性炭処理、濾過）後、７０℃にて減圧乾燥した白色状針状晶の標記化合物を１０７．０ｇ（９６．５％）を得た。
１Ｈ−ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ：１．６４−１．７５（２Ｈ，ｍ），３．９７−４．００（１Ｈ，ｍ），４．１７（３Ｈ，ｄ，Ｊ＝２．２０Ｈｚ），４．９１（１Ｈ，ｄｍ，Ｊ＝６３．２３Ｈｚ），８．０５（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝８．５５，１０．０１Ｈｚ），８．８４（１Ｈ，ｓ），１４．３１（１Ｈ，ｓ）．
参考例５
６，７−ジフルオロ−１−［（１Ｒ，２Ｓ）−２−フルオロ−１−シクロプロピル］−１，４−ジヒドロ−８−メトキシ−４−オキソ−３−キノリンカルボン酸−ジフルオロボロンキレート
６，７−ジフルオロ−１−［（１Ｒ，２Ｓ）−２−フルオロ−１−シクロプロピル］−１，４−ジヒドロ−８−メトキシ−４−オキソ−３−キノリンカルボン酸９０．３０ｇ（２８８．３ｍｍｏｌ）の乾燥ジエチルエーテル１０００ｍＬ懸濁液に、氷冷下にてボロン  トリフルオリドのジエチルエーテルコンプレックス６５３ｍＬを滴下した。滴下終了後、反応懸濁液を室温にて２４時間攪拌した。析出した結晶を濾取し、過剰量の乾燥ジエチルエーテルで洗浄した。濾取した結晶を室温にて減圧乾燥して白色粉末状の標記化合物９６．４７ｇ（９２．７％）を得た。
１Ｈ−ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ：１．７７−１．９８（２Ｈ，ｍ），４．３０（３Ｈ，ｄ，Ｊ＝２．９３Ｈｚ），４．３８−４．４４（１Ｈ，ｍ），５．０３（１Ｈ，ｄｍ，Ｊ＝６２．５０Ｈｚ），８．１７（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝８．０６，８．７９Ｈｚ），９．１４（１Ｈ，ｓ）．
参考例６
６，７−ジフルオロ−１−［（１Ｒ，２Ｓ）−２−フルオロ−１−シクロプロピル］−１，４−ジヒドロ−８−メトキシ−４−オキソ−３−キノリンカルボン酸−ジフルオロボロンキレート（別途合成法）
エチル  ６，７−ジフルオロ−１−［（１Ｒ，２Ｓ）−２−フルオロ−１−シクロプロピル］−１，４−ジヒドロ−８−メトキシ−４−オキソ−３−キノリンカルボキシレート２６０ｍｇ（０．７３３ｍｍｏｌ）と４２％テトラフルオロホウ酸５ｍＬの混合物を９０℃の油浴中にて３時間攪拌した。反応液を冷却後、過剰の精製水を加え、析出した結晶を濾取した。過剰の精製水、ジエチルエーテルの順に結晶を洗浄後、濾取した結晶を室温にて減圧乾燥して白色粉末状の標記化合物２４１ｍｇ（９１．１％）を得た。本成績体の１Ｈ−ＮＭＲデータは、前述の別途合成法にて合成した成績体のデータと一致した。
参考例７
（−）−７−［（７Ｓ）−７−アミノ−５−アザスピロ［２．４］ヘプタン−５−イル］−６−フルオロ−１−［（１Ｒ，２Ｓ）−２−フルオロ−１−シクロプロピル］−１，４−ジヒドロ−８−メトキシ−４−オキソ−３−キノリンカルボン酸（化合物（Ａ））
（７Ｓ）−７−アミノ−５−アザスピロ［２．４］ヘプタン２塩酸塩６１．４ｇ（０．３３２ｍｏｌ）をジメチルスルホキシド８００ｍＬに溶解させ、窒素雰囲気下、室温にてトリエチルアミン１３８ｍＬ（０．９９４ｍｏｌ）を加えて１０時間攪拌した。反応液に６，７−ジフルオロ−１−［（１Ｒ，２Ｓ）−２−フルオロ−１−シクロプロピル］−１，４−ジヒドロ−８−メトキシ−４−オキソ−３−キノリンカルボン酸ジフルオロボロンキレート１００ｇ（０．２７６ｍｏｌ）を粉体のままゆっくりと加えて、室温にて４０時間攪拌した。反応液を減圧濃縮し、得られた残留物に９０％エタノール１０００ｍＬ、トリエチルアミン２０ｍＬを加えて２時間半加熱還流した。反応液を放冷後、析出してきた結晶を濾取し、エタノール、エーテルの順に洗浄し、７０℃で１６時間減圧乾燥して標記化合物７２．５ｇ（淡黄色粉末；０．５水和物；６１．４％）を得た。濾液を減圧下に溶媒留去し、水２０００ｍＬを加えて氷冷下攪拌しながら３Ｎ水酸化ナトリウム水溶液を加えてｐＨ１０．０に調整した後に、３Ｎ塩酸水溶液を加えてｐＨ７．４に調整した後、室温にて１６時間攪拌した。析出してきた結晶を濾取し、水で洗浄後、７０℃で減圧乾燥して標記化合物１９．２ｇ（淡黄色粉末；０．５水和物；３３．６％）を得た。
１Ｈ−ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，０．１Ｎ  ＮａＯＤ）δ：０．５３−０．５９（２Ｈ，ｍ），０．６２−０．６６（１Ｈ，ｍ），０．７８−０．８２（１Ｈ，ｍ），１．３８−１．６０（２Ｈ，ｍ），３．０７（１Ｈ，ｓ），３．３９（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝１０．３，２６．０Ｈｚ），３．５２（３Ｈ，ｓ），３．７２（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝１０．０Ｈｚ），３．８９−４．００（２Ｈ，ｍ），４．９３（１Ｈ，ｄｍ，Ｊ＝６４．２Ｈｚ），７．６２（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝１４．２Ｈｚ），８．４３（１Ｈ，ｓ）．
元素分析値；Ｃ２０Ｈ２１Ｆ２Ｎ３Ｏ４・０．５Ｈ２Ｏとして：
理論値；Ｃ，５７．９７；Ｈ，５．３５；Ｎ，１０．１４
実測値；Ｃ，５７．９７；Ｈ，５．３１；Ｎ，１０．１１
比旋光度：［α］Ｄ２２−２５．５°（ｃ＝０．８３２，０．１Ｎ  ＮａＯＨ）．
融点：２０７−２０９℃．
実施例１
（−）−７−［（７Ｓ）−７−アミノ−５−アザスピロ［２．４］ヘプタン−５−イル］−６−フルオロ−１−［（１Ｒ，２Ｓ）−２−フルオロ−１−シクロプロピル］−１，４−ジヒドロ−８−メトキシ−４−オキソ−３−キノリンカルボン酸・１塩酸塩・２．５水和物（化合物（１））
（−）−７−［（７Ｓ）−７−アミノ−５−アザスピロ［２．４］ヘプタン−５−イル］−６−フルオロ−１−［（１Ｒ，２Ｓ）−２−フルオロ−１−シクロプロピル］−１，４−ジヒドロ−８−メトキシ−４−オキソ−３−キノリンカルボン酸（０．５水和物）３．８７２ｇを２−プロパノール２３ｍｌに懸濁した後、水１３，４ｍｌ及び５Ｎ塩酸２．１ｍｌを加え６０℃で溶解した。活性炭０．３９ｇを加え２０分間処理した後、活性炭を濾去し４０％含水２−プロパノール１９．４ｍｌで洗い込んだ。濾液を放冷し徐々に内温を下げた後、０℃で攪拌したところ結晶が析出した。０℃で１時間晶析させた後、結晶を濾過し、２−プロパノール３２ｍｌで洗浄後、５０℃で減圧乾燥した。相対湿度８０％に調整した容器に一晩放置して標記化合物２．４４９ｇ（黄色結晶；５３．８％）を得た。
１Ｈ−ＮＭＲ：（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ）δ：０．７２−０．９２（３Ｈ，ｍ），１．１０−１．１８（１Ｈ，ｍ），１．３８−１．５８（２Ｈ，ｍ），３．２０−３．３５（１Ｈ，ｍ），３．４６（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝４．８Ｈｚ），３．６０（３Ｈ，ｓ），３．７４（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝１２．０Ｈｚ），４．０５−４．２５（３Ｈ，ｍ），４．９５−５．２０（１Ｈ，ｍ），７．７１（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝１４．０Ｈｚ），８．６４（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝２．８Ｈｚ）
元素分析値：Ｃ２０Ｈ２１Ｆ２Ｎ３Ｏ４−１．０ＨＣｌ，２．５Ｈ２Ｏとして
理論値：Ｃ，４９．３４；Ｈ，５．５９；Ｎ，８．６３；Ｃｌ，７．２８；Ｆ，７．８０
実測値：Ｃ，４９．５５；Ｈ，５２．６；Ｎ，８．５５；Ｃｌ，７．３０；Ｆ，７．９５
比旋光度：［α］Ｄ２０＝−１９７．５°（ｃ＝０．５００，０．１ＮＨＣｌ）但し、濃度は脱水物換算
融点：１９７−１９８℃
熱分析結果：重量減量７．５％（理論値９．３％）
カールフィッシャー：水分量９．４−９．６％
溶解性：４７．１ｍｇ／ｍｌ（Ｈ２Ｏ，２５℃）
試験例１（化合物（１）の結晶形の確認）
化合物（１）の粉末Ｘ線回折結果（Ｐｈｉｌｉｐｓ社製  Ｘ’ｐｅｒｔ粉末Ｘ線回折装置使用）を図１に、ＩＲスペクトル（ＨＯＲＩＢＡ社製、ＦＴ−ＩＲ、ＦＴ−７２０使用）を図２に示す。また、化合物（１）の熱分析の結果、重量減少は７．５重量％であった。また、カールフィッシャー法により水分値を定量した結果、９．５％であり２．５水和物としての理論値（９．３％）にほぼ一致した。
試験例２（化合物（１）の吸脱湿挙動）
化合物（１）の吸脱湿挙動を、試料約１０ｍｇを用いて、ＶＴＩ社製水分吸着解析装置（ｍｏｄｅｌ  ＳＧＡ−１００）により測定した。測定温度は２５℃であり、５から９５％の範囲内で５％又は１０％の幅で相対湿度を変化させた。３０分間の重量変化が０．０３％以内であることを平衡条件とし、最大平衡時間を１８０分として各相対湿度下での試料の重量変化を測定した。その結果、図３に示すように、化合物（１）は４０％ＲＨ以下で吸脱湿をおこさず、この範囲で２．５水和物として存在することがわかる。
試験例３（化合物（１）の溶解度）
化合物（１）の水に対する溶解度を検討したところ、化合物（１）は水に対しては４７．１ｍｇ／ｍＬ以上の高い溶解性を示した。
実施例２
（−）−７−［（７Ｓ）−７−アミノ−５−アザスピロ［２．４］ヘプタン−５−イル］−６−フルオロ−１−［（１Ｒ，２Ｓ）−２−フルオロ−１−シクロプロピル］−１，４−ジヒドロ−８−メトキシ−４−オキソ−３−キノリンカルボン酸・１塩酸塩・１水和物（化合物（２））
（−）−７−［（７Ｓ）−７−アミノ−５−アザスピロ［２．４］ヘプタン−５−イル］−６−フルオロ−１−［（１Ｒ，２Ｓ）−２−フルオロ−１−シクロプロピル］−１，４−ジヒドロ−８−メトキシ−４−オキソ−３−キノリンカルボン酸（０．５水和物）２１．３６５ｇを２−プロパノール６１２．５ｍｌに懸濁した後、水７７．６ｍｌ及び５Ｎ塩酸９．８７ｍｌを加え６０℃で溶解した。活性炭２ｇを加え３０分間処理した後、活性炭を濾去し２−プロパノール１００ｍｌで洗い込んだ後、２−プロパノール３００ｍｌを加えた。濾液を６０℃で再溶解後、内温３０℃以上で溶媒約８００ｍｌを減圧下留去した。留去後、２−プロパノール１００ｍｌを加え、２６℃で２時間攪拌した。０℃に冷却後、結晶を濾過し、５％含水２−プロパノール３０ｍｌで２回洗浄後、５０℃で減圧乾燥して標記化合物２０．８７６ｇ（淡黄色結晶；８８．０％）を得た。
１Ｈ−ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，０．１Ｎ  ＮａＯＤ）δ：０．５７−０．７０（３Ｈ，ｍ），０．８１−０．８５（１Ｈ，ｍ），１．４０−１．６４（２Ｈ，ｍ），３．１３（１Ｈ，ｔ，Ｊ＝４．３９Ｈｚ），３．４６（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝１０．５，２４．６Ｈｚ），３．６０（３Ｈ，ｓ），３．８４（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝７．８１，１０．３Ｈｚ），３．９９−４．０６（２Ｈ，ｍ），５．０１（１Ｈ，ｄｍ，Ｊ＝６４．５Ｈｚ），７．６６（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝１４．１Ｈｚ），８．４２（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝１．９５Ｈｚ）．
元素分析値；Ｃ２０Ｈ２１Ｆ２Ｎ３Ｏ４・１．０ＨＣｌ・１Ｈ２Ｏとして：
理論値；Ｃ，５２．２４；Ｈ，５．２６；Ｎ，９．１４
実測値；Ｃ，５２．１５；Ｈ，５．２５；Ｎ，９．０７
比旋光度：［α］Ｄ２２−１６６．５°（ｃ＝０．９９０，Ｈ２Ｏ）．
融点：１９９−２０８℃．
試験例５（化合物（２）の結晶形の確認）
化合物（２）の粉末Ｘ線回折結果（Ｐｈｌｉｐｓ社製  Ｘ′ｐｅｒｔ粉末Ｘ線回折装置使用）を図４に、ＩＲスペクトル（ＨＯＲＩＢＡ社製、ＦＴ−ＩＲ、ＦＴ−７２０使用）を図５にて示す。また化合物（２）の熱分析の結果、重量減少は４．２重量％で、１水和物としての理論値（３．９％）にほぼ一致した。
また、カールフィッシャー法により水分量を定量した結果、４．１１％であり、熱分析による結果と一致した。
実施例３
（−）−７−［（７Ｓ）−７−アミノ−５−アザスピロ［２．４］ヘプタン−５−イル］−６−フルオロ−１−［（１Ｒ，２Ｓ）−２−フルオロ−１−シクロプロピル］−１，４−ジヒドロ−８−メトキシ−４−オキソ−３−キノリンカルボン酸・１塩酸塩・１水和物（化合物（２））
（−）−７−［（７Ｓ）−７−アミノ−５−アザスピロ［２．４］ヘプタン−５−イル］−６−フルオロ−１−［（１Ｒ，２Ｓ）−２−フルオロ−１−シクロプロピル］−１，４−ジヒドロ−８−メトキシ−４−オキソ−３−キノリンカルボン酸・１塩酸塩・２．５水和物１６．０１ｇに２−プロパノール３０４ｍｌ、水１６ｍｌを加えた後、（−）−７−［（７Ｓ）−７−アミノ−５−アザスピロ［２．４］ヘプタン−５−イル］−６−フルオロ−１−［（１Ｒ，２Ｓ）−２−フルオロ−１−シクロプロピル］−１，４−ジヒドロ−８−メトキシ−４−オキソ−３−キノリンカルボン酸・１塩酸塩・１水和物を接種し、６０℃で１．５時間攪拌した後、２５℃で４５分攪拌した。結晶を濾過し、５％含水２−プロパノール３０ｍｌで洗浄後、５０℃で減圧乾燥して標記化合物１４．４ｇ（淡黄色結晶；９５．２％）を得た。得られた結晶は、試験例５に記載の標記化合物に特徴的な粉末Ｘ線回折スペクトルのパターンを示した。
実施例４
（−）−７−［（７Ｓ）−７−アミノ−５−アザスピロ［２．４］ヘプタン−５−イル］−６−フルオロ−１−［（１Ｒ，２Ｓ）−２−フルオロ−１−シクロプロピル］−１，４−ジヒドロ−８−メトキシ−４−オキソ−３−キノリンカルボン酸・１塩酸塩・２．５水和物（化合物（１））
（−）−７−［（７Ｓ）−７−アミノ−５−アザスピロ［２．４］ヘプタン−５−イル］−６−フルオロ−１−［（１Ｒ，２Ｓ）−２−フルオロ−１−シクロプロピル］−１，４−ジヒドロ−８−メトキシ−４−オキソ−３−キノリンカルボン酸・１塩酸塩・１水和物１３．６ｇに２−プロパノール２４５ｍｌ、水６２ｍｌを加え６０℃で溶解した。２５℃に冷却したところ結晶が析出した。５℃で３０分攪拌した後、結晶を濾過し、５℃に冷却した１０％含水２−プロパノール１５ｍｌで洗浄後、５０℃で減圧乾燥した。相対湿度８０％に調整した容器に半日放置して標記化合物１０．９５ｇ（黄色結晶；７６．０％）を得た。得られた結晶は、試験例１に記載の標記化合物に特徴的な粉末Ｘ線回折スペクトルのパターンを示した。
産業上の利用可能性
本発明によれば、優れた抗菌活性と安全性を有し、かつ光や湿度に対する安定性も優れており、抗菌剤として有用な化合物（２）及び化合物（１）が安定して得られる。
【図面の簡単な説明】
図１は、化合物（１）の粉末Ｘ線回折スペクトルを示す図である。
図２は、化合物（１）の赤外線吸収スペクトルを示す図である。
図３は、化合物（１）の５〜９５％ＲＨ条件下における重量変化を示す図である。
図４は、化合物（２）の粉末Ｘ線回折スペクトルを示す図である。
図５は、化合物（２）の赤外線吸収スペクトルを示す図である。
【図１】
2003076428.tif 000017
【図２】
2003076428.tif 000018
【図３】
2003076428.tif 000019
【図４】
2003076428.tif 000020
【図５】
2003076428.tif 000021
【国際調査報告】
2003076428.tif 000022
2003076428.tif 000023