(57)【要約】ＮＫ細胞の活性化能、ＮＫＴ細胞の活性化能、血管新生阻害能、ＩＬ−１２の誘導産生能及びＩＦＮＹの誘導産生能の動態に着目した新免疫療法のための新規な手段の提供である。具体的には、ガンの免疫治療剤の新規用途であって、ガンを組織別及び／又は組織型別に処置するために、ガン処置の作用機作を少なくとも▲１▼血管新生阻害作用、▲２▼Ｔｈ１サイトカイン（ＴＮＦα、ＩＦＮＹ、ＩＬ−１２）を誘導してＣＴＬを活性化する作用、▲３▼ＮＫ細胞数もしくはその活性化作用、及び▲４▼ＮＫＴ細胞数もしくはその活性化作用に区別し、各作用に対応するマーカーを測定し、その測定値をガンの組織別及び／又は組織型別に分析し、もって、各ガンの組織別及び／又は組織型別に処方を選択することを特徴とするガンの免疫治療剤を提供した。【特許請求の範囲】
【請求項１】
次の少なくとも一が選択される各ガンの免疫治療剤；
１）スキルス胃ガンの処置に際し、ＮＫ細胞の活性化能、ＮＫＴ細胞の活性化能、及び血管新生阻害能の少なくとも１のその治療意義を重視しマーカーにすること。
２）非スキルス胃ガンの処置に際し、ＩＬ−１２の誘導産生能、ＮＫＴ細胞の活性化能、血管新生阻害能、及びＩＦＮＹの誘導産生能の少なくとも１のその治療意義を少なくとも重視しマーカーにすること。
３）大腸ガンの処置に際し、ＩＬ−１２の誘導産生能、血管新生阻害能、ＩＦＮＹの誘導産生能、ＮＫＴ細胞の活性化能、及びＮＫ細胞の活性化能の少なくとも１のその治療意義を少なくとも重視しマーカーにすること。
４）前立腺ガンの処置に際し、ＮＫ細胞の活性化能、及びＩＬ−１２の誘導産生能の少なくとも１のその治療意義を少なくとも重視しマーカーにすること。
５）乳ガンの処置に際し、ＩＦＮＹの誘導産生能、ＩＬ−１２の誘導産生能、及び血管新生阻害能の少なくとも１のその治療意義を少なくとも重視しマーカーにすること。
６）肺ガンの処置に際し、ＩＦＮＹの誘導産生能、ＩＬ−１２の誘導産生能、ＮＫ細胞の活性化能、及び血管新生阻害能の少なくとも１のその治療意義を重視しマーカーにすること。
７）肺扁平上皮ガンの処置に際し、ＩＬ−１２の誘導産生能、及び血管新生阻害能の少なくとも１のその治療意義を重視しマーカーにすること。
８）肺小細胞ガンの処置に際し、ＩＬ−１２の誘導産生能の治療意義を少なくとも重視しマーカーにすること。
９）肺大細胞ガンの処置に際し、ＩＬ−１２の誘導産生能、及びＮＫＴ細胞の活性化能の少なくとも１のその治療意義を重視しマーカーにすること。
１０）肺腺ガンの処置に際し、ＩＬ−１２の誘導産生能、ＮＫ細胞の活性化能、及び血管新生阻害能の少なくとも１のその治療意義を重視しマーカーにすること。
１１）悪性黒色腫の処置に際し、血管新生阻害能、ＩＦＮＹの誘導産生能、及びＩＬ−１２の誘導産生能の少なくとも１のその治療意義を重視しマーカーにすること。
１２）肝ガンの処置に際し、ＮＫ細胞の活性化能、ＮＫＴ細胞の活性化能、及びＩＦＮＹの誘導産生能の少なくとも１のその治療意義を重視しマーカーにすること。
１３）子宮ガンの処置に際し、血管新生阻害能、ＩＦＮＹの誘導産生能、及びＩＬ−１２の誘導産生能の少なくとも１のその治療意義を重視しマーカーにすること。
１４）腎ガンの処置に際し、ＮＫ細胞の活性化能、ＮＫＴ細胞の活性化能、血管新生阻害能、及びＩＬ−１２の誘導産生能の少なくとも１のその治療意義を重視しマーカーにすること。
１５）精巣ガンの処置に際し、ＮＫＴ細胞の活性化能、及び血管新生阻害能の少なくとも１のその治療意義を重視しマーカーにすること。
１６）舌ガンの処置に際し、ＮＫ細胞の活性化能、ＮＫＴ細胞の活性化能、ＩＬ−１２の誘導産生能、及びＩＦＮＹの誘導産生能の少なくとも１のその治療意義を重視しマーカーにすること。
１７）卵巣ガンの処置に際し、ＩＦＮＹの誘導産生能、及びＩＬ−１２の誘導産生能の少なくとも１のその治療意義を重視しマーカーにすること。
１８）膵ガンの処置に際し、ＮＫ細胞の活性化能、ＮＫＴ細胞の活性化能、及びＩＬ−１２の誘導産生能の少なくとも１のその治療意義を重視しマーカーにすること。
【請求項２】
ガンの免疫治療剤が次の少なくとも１から選ばれる請求項１のガンの免疫治療剤；
１）ＮＫ細胞の活性化能、及びＮＫＴ細胞の活性化能の少なくとも１のその治療意義を重視しマーカーにするα１，３グルカン構造をもつガンの免疫治療剤。
２）ＩＬ−１２の誘導産生能、及びＩＦＮＹの誘導産生能の少なくとも１のその治療意義を重視しマーカーにするβ１，３グルカン構造をもつガンの免疫治療剤。
【請求項３】
少なくとも一が選択される各ガンの免疫治療剤のスクリーニング方法；
１）スキルス胃ガンの免疫治療剤のスクリーニングに際し、ＮＫ細胞の活性化能、ＮＫＴ細胞の活性化、及び血管新生阻害能の少なくとも１を重視しマーカーにすること。
２）非スキルス胃ガンの免疫治療剤のスクリーニングに際し、ＩＬ−１２の誘導産生能、ＮＫＴ細胞の活性化能、血管新生阻害能、及びＩＦＮＹの誘導産生能の少なくとも１を重視しマーカーにすること。
３）大腸ガンの免疫治療剤のスクリーニングに際し、ＩＬ−１２の誘導産生能、ＩＦＮＹの誘導産生能、ＮＫＴ細胞の活性化能、血管新生阻害能、及びＮＫ細胞の活性化能の少なくとも１を重視しマーカーにすること。
４）前立腺ガンの免疫治療剤のスクリーニングに際し、ＩＬ−１２の誘導産生能、及びＮＫ細胞の活性化能の少なくとも１を重視しマーカーにすること。
５）乳ガンの免疫治療剤のスクリーニングに際し、ＩＬ−１２の誘導産生能、ＩＦＮＹの誘導産生能、及び血管新生阻害能の少なくとも１を重視しマーカーにすること。
６）肺ガンの免疫治療剤のスクリーニングに際しＩＦＮＹの誘導産生能、ＩＬ−１２の誘導産生能、ＮＫ細胞の活性化能、及び血管新生阻害能の少なくとも１を重視しマーカーにすること。
７）肺扁平上皮ガンの免疫治療剤のスクリーニングに際し、ＩＬ−１２の誘導産生能、及び血管新生阻害能の少なくとも１を重視しマーカーにすること。
８）肺小細胞ガンの免疫治療剤のスクリーニングに際し、ＩＬ−１２の誘導産生能を少なくとも重視しマーカーにすること。
９）肺大細胞ガンの免疫治療剤のスクリーニングに際し、ＩＬ−１２の誘導産生能及びＮＫＴ細胞の活性化能の少なくとも１を重視しマーカーにすること。
１０）肺腺ガンの免疫治療剤のスクリーニングに際し、ＩＬ−１２の誘導産生能、ＮＫ細胞の活性化能、及び血管新生阻害能の少なくとも１を重視しマーカーにすること。
１１）悪性黒色腫の免疫治療剤のスクリーニングに際し、血管新生阻害能、ＩＦＮＹの誘導産生能、及びＩＬ−１２の誘導産生能の少なくとも１を重視しマーカーにすること。
１２）肝ガンの免疫治療剤のスクリーニングに際し、ＮＫ細胞の活性化能、ＮＫＴ細胞の活性化能、及びＩＦＮＹの誘導産生能の少なくとも１を重視しマーカーにすること。
１３）子宮ガンの免疫治療剤のスクリーニングに際し、血管新生阻害能、ＩＦＮＹの誘導産生能、及びＩＬ−１２の誘導産生能の少なくとも１を重視しマーカーにすること。
１４）腎ガンの免疫治療剤のスクリーニングに際し、ＮＫ細胞の活性化能、ＮＫＴ細胞の活性化能、血管新生阻害能、及びＩＬ−１２の誘導産生能の少なくとも１を重視しマーカーにすること。
１５）精巣ガンの免疫治療剤のスクリーニングに際し、ＮＫＴ細胞の活性化能、及び血管新生阻害能の少なくとも１を重視しマーカーにすること。
１６）舌ガンの免疫治療剤のスクリーニングに際し、ＮＫ細胞の活性化能、ＮＫＴ細胞の活性化能、ＩＬ−１２の誘導産生能、及びＩＦＮＹの誘導産生能の少なくとも１を重視しマーカーにすること。
１７）卵巣ガンの免疫治療剤のスクリーニングに際し、ＩＦＮＹの誘導産生能、及びＩＬ−１２の誘導産生能の少なくとも１を重視しマーカーにすること。
１８）膵ガンの免疫治療剤のスクリーニングに際し、ＮＫ細胞の活性化能、ＮＫＴ細胞の活性化能、及びＩＬ−１２の誘導産生能の少なくとも１を重視しマーカーにすること。
【請求項４】
ガンの免疫治療剤の新規用途であって、ガンを組織別及び／又は組織型別に処置するために、ガン処置の作用機作を少なくとも▲１▼血管新生阻害作用、▲２▼Ｔｈ１サイトカイン（ＴＮＦα、ＩＦＮＹ、ＩＬ−１２）を誘導してＣＴＬを活性化する作用、▲３▼ＮＫ細胞数もしくはその活性化作用、及び▲４▼ＮＫＴ細胞数もしくはその活性化作用に区別し、各作用に対応するマーカーを測定し、その測定値をガンの組織別及び／又は組織型別に分析し、もって、各ガンの組織別及び／又は組織型別に処方を選択することを特徴とするガンの免疫治療剤。
【請求項５】
肺ガンに対する免疫治療剤であって、以下の処方から選択される請求項４のガンの免疫治療剤。
１）▲２▼Ｔｈ１サイトカイン（ＴＮＦα、ＩＦＮＹ、ＩＬ−１２）を誘導してＣＴＬを活性化する作用を有する免疫治療剤と▲４▼ＮＫＴ細胞数の増加もしくはその活性化作用を有する免疫治療剤を併用又は配合してなるガンの免疫治療剤。
２）▲２▼Ｔｈ１サイトカイン（ＴＮＦα、ＩＦＮＹ、ＩＬ−１２）を誘導してＣＴＬを活性化する作用を有する免疫治療剤と▲３▼ＮＫ細胞数の増加もしくはその活性化作用を有する免疫治療剤を併用又は配合してなるガンの免疫治療剤。
３）▲３▼ＮＫ細胞数の増加もしくはその活性化作用を有する免疫治療剤と▲４▼ＮＫＴ細胞数の増加もしくはその活性化作用を有する免疫治療剤を併用又は配合してなるガンの免疫治療剤。
４）▲１▼血管新生阻害作用を有するガンの免疫治療剤。
【請求項６】
胃ガン（スキルス性胃ガンと非スキルス性胃ガン）に対する免疫治療剤であって、以下の処方から選択される請求項４のガンの免疫治療剤。
１）▲２▼Ｔｈ１サイトカイン（ＴＮＦα、ＩＦＮＹ、ＩＬ−１２）を誘導してＣＴＬを活性化する作用を有する免疫治療剤と▲４▼ＮＫＴ細胞数の増加もしくはその活性化作用を有する免疫治療剤を併用又は配合してなるガンの免疫治療剤。
２）▲２▼Ｔｈ１サイトカイン（ＴＮＦα、ＩＦＮＹ、ＩＬ−１２）を誘導してＣＴＬを活性化する作用を有する免疫治療剤と▲３▼ＮＫ細胞数の増加もしくはその活性化作用を有する免疫治療剤を併用又は配合してなるガンの免疫治療剤。
３）▲３▼ＮＫ細胞数の増加もしくはその活性化作用を有する免疫治療剤と▲４▼ＮＫＴ細胞数の増加もしくはその活性化作用を有する免疫治療剤を併用又は配合してなるガンの免疫治療剤。
４）▲１▼血管新生阻害作用を有するガンの免疫治療剤。
【請求項７】
乳ガン、大腸ガンから選ばれるガンに対する免疫治療剤であって、以下の処方から選択される請求項４のガンの免疫治療剤。
１）▲２▼Ｔｈ１サイトカイン（ＴＮＦα、ＩＦＮＹ、ＩＬ−１２）を誘導してＣＴＬを活性化する作用を有する免疫治療剤と▲４▼ＮＫＴ細胞数の増加もしくはその活性化作用を有する免疫治療剤を併用又は配合してなるガンの免疫治療剤。
２）▲２▼Ｔｈ１サイトカイン（ＴＮＦα、ＩＦＮＹ、ＩＬ−１２）を誘導してＣＴＬを活性化する作用を有する免疫治療剤と▲３▼ＮＫ細胞数の増加もしくはその活性化作用を有する免疫治療剤を併用又は配合してなるガンの免疫治療剤。
３）▲３▼ＮＫ細胞数の増加もしくはその活性化作用を有する免疫治療剤と▲４▼ＮＫＴ細胞数の増加もしくはその活性化作用を有する免疫治療剤を併用又は配合してなるガンの免疫治療剤。
【請求項８】
前立腺ガンに対する免疫治療剤であって、以下の処方から選択される請求項４のガンの免疫治療剤。
１）▲２▼Ｔｈ１サイトカイン（ＴＮＦα、ＩＦＮＹ、ＩＬ−１２）を誘導してＣＴＬを活性化する作用を有する免疫治療剤と▲４▼ＮＫＴ細胞数の増加もしくはその活性化作用を有する免疫治療剤を併用又は配合してなるガンの免疫治療剤。
２）▲２▼Ｔｈ１サイトカイン（ＴＮＦα、ＩＦＮＹ、ＩＬ−１２）を誘導してＣＴＬを活性化する作用を有する免疫治療剤と▲３▼ＮＫ細胞数の増加もしくはその活性化作用を有する免疫治療剤を併用又は配合してなるガンの免疫治療剤。
３）▲１▼血管新生阻害作用を有するガンの免疫治療剤。
【請求項９】
▲１▼血管新生阻害作用の測定がＶＥＧＦ値のマイナス値（−ＶＥＧＦ）で、▲２▼Ｔｈ１サイトカイン（ＴＮＦα、ＩＦＮＹ、ＩＬ−１２）を誘導してＣＴＬを活性化する作用の測定が、ＩＦＮＹ産生能力（ＩＦＮＹ値）もしくはＩＬ−１２産生能力（ＩＬ−１２値）で又はＣＤ８（＋）パーフォリン値の表面マーカーで、▲３▼ＮＫ細胞数もしくはその活性化作用の測定がＣＤ３（−）ＣＤ１６１（＋）もしくはＣＤ３（−）ＣＤ１６１（＋）パーフォリン値の表面マーカーで、及び▲４▼ＮＫＴ細胞数もしくはその活性化作用の測定がＣＤ３（＋）ＣＤ１６１（＋）もしくはＣＤ３（＋）ＣＤ１６１（＋）パーフォリン値の表面マーカーでなされる測定法から選ばれる請求項４〜８のガンの免疫治療剤。
【請求項１０】
ガンの免疫治療剤の新規用途であって、ガンを組織別及び／又は組織型別に処置するために、ガン処置の作用機作を少なくとも▲１▼血管新生阻害作用、▲２▼Ｔｈ１サイトカイン（ＴＮＦα、ＩＦＮＹ、ＩＬ−１２）を誘導してＣＴＬを活性化する作用、▲３▼ＮＫ細胞数もしくはその活性化作用、及び▲４▼ＮＫＴ細胞数もしくはその活性化作用に区別し、各作用に対応するマーカーを測定し、その測定値をガンの組織別及び／又は組織型別に分析し、もって、▲３▼ＮＫ細胞数もしくはその活性化作用、又は▲４▼ＮＫＴ細胞数もしくはその活性化作用が優位の場合に、▲３▼ＮＫ細胞数もしくはその活性化作用、又は▲４▼ＮＫＴ細胞数もしくはその活性化作用を有するガン免疫治療剤と、抗ガン化学療法剤、放射線治療、ステロイド治療等から選ばれる少なくも一の処方と併用するガンの免疫治療剤。
【請求項１１】
ガンの免疫治療剤の新規用途であって、ガンを組織別及び／又は組織型別に処置するために、ガン処置の作用機作を少なくとも▲１▼血管新生阻害作用、▲２▼Ｔｈ１サイトカイン（ＴＮＦα、ＩＦＮＹ、ＩＬ−１２）を誘導してＣＴＬを活性化する作用、▲３▼ＮＫ細胞数もしくはその活性化作用、及び▲４▼ＮＫＴ細胞数もしくはその活性化作用に区別し、各作用に対応するマーカーを測定し、その測定値をガンの組織別及び／又は組織型別に分析し、もって、▲２▼Ｔｈ１サイトカイン（ＴＮＦα、ＩＦＮＹ、ＩＬ−１２）を誘導してＣＴＬを活性化する作用のみが優位のときは、この系を障害しない程度の抗ガン化学療法剤、放射線治療、ステロイド治療等から選ばれる少なくも一の処方と併用するか、又は▲２▼Ｔｈ１サイトカイン（ＴＮＦα、ＩＦＮＹ、ＩＬ−１２）を誘導してＣＴＬを活性化する作用を有するガン免疫治療剤のみで処方するガンの免疫治療剤。
【請求項１２】
ガンの免疫治療剤の新規用途であって、ガンを組織別及び／又は組織型別に処置するために、ガン処置の作用機作を少なくとも▲１▼血管新生阻害作用、▲２▼Ｔｈ１サイトカイン（ＴＮＦα、ＩＦＮＹ、ＩＬ−１２）を誘導してＣＴＬを活性化する作用、▲３▼ＮＫ細胞数もしくはその活性化作用、及び▲４▼ＮＫＴ細胞数もしくはその活性化作用に区別し、各作用に対応するマーカーを測定し、その測定値をガンの組織別及び／又は組織型別に分析し、もって、▲３▼ＮＫ細胞数もしくはその活性化作用、又は▲４▼ＮＫＴ細胞数もしくはその活性化作用が減弱している場合は、この活性化作用を有するガン免疫治療剤で処方するガンの免疫治療剤。
【請求項１３】
▲１▼血管新生阻害作用の測定がＶＥＧＦ値のマイナス値（−ＶＥＧＦ）で、▲２▼Ｔｈ１サイトカイン（ＴＮＦα、ＩＦＮＹ、ＩＬ−１２）を誘導してＣＴＬを活性化する作用の測定が、ＩＦＮＹ産生能力（ＩＦＮＹ値）もしくはＩＬ−１２産生能力（ＩＬ−１２値）で又はＣＤ８（＋）パーフォリン値の表面マーカーで、▲３▼ＮＫ細胞数もしくはその活性化作用の測定がＣＤ３（−）ＣＤ１６１（＋）もしくはＣＤ３（−）ＣＤ１６１（＋）パーフォリン値の表面マーカーで、及び▲４▼ＮＫＴ細胞数もしくはその活性化作用の測定がＣＤ３（＋）ＣＤ１６１（＋）もしくはＣＤ３（＋）ＣＤ１６１（＋）パーフォリン値の表面マーカーでなされる測定法から選ばれる請求項１０〜１２のガンの免疫治療剤。
【請求項１４】
ガンの免疫治療剤のスクリーニング方法であって、ガンを組織別及び／又は組織型別に処置するために、ガン処置の作用機作を少なくとも▲１▼血管新生阻害作用、▲２▼Ｔｈ１サイトカイン（ＴＮＦα、ＩＦＮＹ、ＩＬ−１２）を誘導してＣＴＬを活性化する作用、▲３▼ＮＫ細胞数もしくはその活性化作用、及び▲４▼ＮＫＴ細胞数もしくはその活性化作用に区別し、候補化合物投与による各作用に対応するマーカーの測定値の特徴をもって、候補化合物の各ガンの組織別及び／又は組織型別の処方を選択することを特徴とするガンの免疫治療剤のスクリーニング方法。
【請求項１５】
▲１▼血管新生阻害作用の測定がＶＥＧＦ値のマイナス値（−ＶＥＧＦ）で、▲２▼Ｔｈ１サイトカイン（ＴＮＦα、ＩＦＮＹ、ＩＬ−１２）を誘導してＣＴＬを活性化する作用の測定が、ＩＦＮＹ産生能力（ＩＦＮＹ値）もしくはＩＬ−１２産生能力（ＩＬ−１２値）で又はＣＤ８（＋）パーフォリン値の表面マーカーで、▲３▼ＮＫ細胞数もしくはその活性化作用の測定がＣＤ３（−）ＣＤ１６１（＋）もしくはＣＤ３（−）ＣＤ１６１（＋）パーフォリン値の表面マーカーで、及び▲４▼ＮＫＴ細胞数もしくはその活性化作用の測定がＣＤ３（＋）ＣＤ１６１（＋）もしくはＣＤ３（＋）ＣＤ１６１（＋）パーフォリン値の表面マーカーでなされる測定法から選ばれる請求項１４のガンの免疫治療剤のスクリーニング方法。
【請求項１６】
前項１〜１５の何れか一に記載の情報を利用したガン患者のサンプルでのガンの検査方法。
【請求項１７】
請求項１〜１５の何れか一に記載の情報を利用したガン患者のサンプルでのガンの診断方法。
【請求項１８】
請求項１〜１７の何れか一に記載の情報を利用したガンの治療方法
【請求項１９】
請求項１〜１８の何れか一に記載の情報を自然法則を利用した媒体に担持した商業用媒体。
【請求項２０】
請求項１９の商業用媒体を利用した商業方法。
【発明の詳細な説明】
本出願は、参照によりここに援用されるところの、日本特許出願番号２００１−３１２０５１、２００１−３４１１１６、２００２−６２３７３、２００２−１３９００４からの優先権を請求する。
技術分野
本発明は、ＮＫ細胞の活性化能、ＮＫＴ細胞の活性化能、血管新生阻害能、ＩＬ−１２の誘導産生能及びＩＦＮＹの誘導産生能の動態に着目した新免疫療法のための新規な手段の提供に関する。より詳しくは、スキルス性胃ガン、非スキルス性胃ガン、大腸ガン、前立腺ガン、乳ガン、肺ガン、悪性黒色腫、肝ガン、子宮ガン、腎ガン、精巣ガン、舌ガン、卵巣ガン、膵ガン等の各種ガンとその治療効果へのＮＫ細胞の活性化能、ＮＫＴ細胞の活性化能、血管新生阻害能、ＩＬ−１２の誘導産生能及びＩＦＮＹの誘導産生能の動態の相関性を検定することからなる新免疫療法のための新規な手段の提供に関する。
背景技術
ガン（ｍａｌｉｇｎａｎｔ  ｎｅｏｐｌａｓｍｓ）（ｃａｎｃｅｒ）の予防または治療のために有用な物質の選別には、従来、ガン細胞へのその直接的作用が重要視されていた。免疫賦活剤がガン治療に有用であることは認められていたが、免疫賦活剤として得られた化合物はいずれもその抗ガン効果が微弱であり、免疫療法単独または化学療法との併用治療によってもガンの十分な治療効果は達成されていない。
本発明者の医学博士、八木田は、先にガン治療における画期的な手法として、インターロイキン１２（ＩＬ−１２）を生体内で誘発する物質の有用性に着目し、キノコ菌糸体加工物がその機能を有することを発見し、新免疫療法（Ｎｏｖｅｌ  Ｉｍｍｕｎｏｔｈｅｒａｐｙ  ｆｏｒ  ｃａｎｃｅｒ）（ＮＩＴＣ）ともいうべきガン治療法を確立した。従来ＩＬ−１２は、抗ガン効果があるものの生体内にＩＬ−１２自体を直接投与した場合には副作用を生じるために患者が治療に耐えられないという事実があり、それ自体を抗ガン剤として使用できなかった。しかし、八木田が報告したキノコ菌糸体加工物を含む製剤は、ガンの治療において著しい治癒・延命効果を達成した。つまり八木田は、ＩＬ−１２を生体内で誘発できる有効量のキノコ菌糸体加工物を投与することにより、ガンの治療目的を達成した（特開平１０−１３９６７０号公報）。
ＩＬ−１２は、ＴＮＦα→ＩＦＮＹ→ＩＬ−１２→ＣＴＬ活性というルートでキラーＴ細胞の活性化効果と増強効果をもつ。つまりＩＬ−１２の産生増強は、キラーＴ細胞の活性化と増強により抗ガン効果が期待される。
八木田は、ＩＬ−１２の産生増強の系とは別にＮＫＴ細胞の活性化が抗ガン効果に有用であることを報告している。谷口等は、ＮＫＴ細胞が有するＶα２４Ｖβ１１という特異的なＴ細胞抗原受容体（ＴＣＲ）が認識する特異的な糖脂質抗原を発見し、この抗原が、αガラクトシルセラミドであることを報告している。更に、αガラクトシルセラミドを投与した担ガンマウスでは、ＮＫＴ細胞が活性化され、ガンの消失はみられないものの転移が抑制されることを証明した。
ＮＫＴ細胞には、もう一つの受容体としてＮＫ細胞抗原受容体（ＮＫＲ−Ｐ１；ナチュラルキラー受容体Ｐ１）があることは報告されている（特集  ＮＫＴ細胞の基礎と臨床：最新医学５５巻４号２０００年８１８〜８２３ページ）。ＮＫＲ−Ｐ１もＮＫＴ細胞の活性化に関与し、この活性化が抗ガン効果をより優位であることを八木田は見出している。
ＮＫ細胞についても生体の抗ガン作用に係わるという報告がなされているが、これまでＮＫ細胞の活性と臨床的な抗ガン効果とが相関せず、ＩＬ−１２の産生誘発量とＮＫ細胞の活性とが完全な逆相関を示すことが八木田により証明されており、ヒトにおける抗ガン作用についてのＮＫ細胞の関与は疑問視されていた。
発明の開示
本発明は、ＣＴＬ活性（ＩＬ−１２の誘導産生能、ＩＦＮＹの誘導産生能）、ＮＫＴ活性、ＮＫ活性、血管新生阻害作用〔−ＶＥＧＦ：ＶＥＧＦ（血管新生増生因子）の反数（ＶＥＧＦ測定数値にマイナス１を掛けて算出したパラメーター数値）〕を測定し、その測定値を使い各測定結果の検定の意味するところを分析し、ＣＴＬ活性、ＮＫＴ活性、ＮＫ活性及び−ＶＥＧＦのガン治療における各意義を見出すことによって、新免疫療法の完成を課題とする。
本発明は、ＮＫ細胞の活性化能、ＮＫＴ細胞の活性化能、血管新生阻害能、ＩＬ−１２の誘導産生能及びＩＦＮＹの誘導産生能の動態と各種ガンへの効果には特異性が存在することを見出し、本発明からなる新免疫療法を達成した。
すなわち本発明は、
１．次の少なくとも一が選択される各ガンの免疫治療剤；
１）スキルス胃ガンの処置に際し、ＮＫ細胞の活性化能、ＮＫＴ細胞の活性化能、及び血管新生阻害能の少なくとも１のその治療意義を重視しマーカーにすること。
２）非スキルス胃ガンの処置に際し、ＮＫＴ細胞の活性化能、血管新生阻害能、ＩＦＮＹの誘導産生能、及びＩＬ−１２の誘導産生能の少なくとも１のその治療意義を重視しマーカーにすること。
３）大腸ガンの処置に際し、ＩＦＮＹの誘導産生能、ＩＬ−１２の誘導産生能、血管新生阻害能、ＮＫＴ細胞の活性化能、及びＮＫ細胞の活性化能の少なくとも１のその治療意義を重視しマーカーにすること。
４）前立腺ガンの処置に際し、ＩＬ−１２の誘導産生能、及びＮＫ細胞の活性化能の少なくとも１のその治療意義を重視しマーカーにすること。
５）乳ガンの処置に際し、血管新生阻害能、ＩＦＮＹの誘導産生能、及びＩＬ−１２の誘導産生能の少なくとも１のその治療意義を少なくとも重視しマーカーにすること。
６）肺ガンの処置に際し、ＩＦＮＹの誘導産生能、ＩＬ−１２の誘導産生能、ＮＫ細胞の活性化能、及び血管新生阻害能の少なくとも１のその治療意義を重視しマーカーにすること。
７）肺扁平上皮ガンの処置に対しＩＬ−１２の誘導産生能、及び血管新生阻害能の少なくとも１のその治療意義を重視しマーカーにすること。
８）肺小細胞ガンの処置に対しＩＬ−１２の誘導産生能の治療意義を少なくとも重視しマーカーにすること。
９）肺大細胞ガンの処置に対しＩＬ−１２の誘導産生能、及びＮＫＴ細胞の活性化能の少なくとも１のその治療意義を重視しマーカーにすること。
１０）肺腺ガンの処置に対しＩＬ−１２の誘導産生能、ＮＫ細胞の活性化能及び血管新生阻害能の少なくとも１のその治療意義を重視しマーカーにすること。
１１）悪性黒色腫の処置に際し、血管新生阻害能、ＩＦＮＹの誘導産生能、及びＩＬ−１２の誘導産生能の少なくとも１のその治療意義を重視しマーカーにすること。
１２）肝ガンの処置に際し、ＮＫ細胞の活性化能、ＮＫＴ細胞の活性化能、及びＩＦＮＹの誘導産生能の少なくとも１のその治療意義を重視しマーカーにすること。
１３）子宮ガンの処置に際し、血管新生阻害能、ＩＦＮＹの誘導産生能、及びＩＬ−１２の誘導産生能の少なくとも１のその治療意義を重視しマーカーにすること。
１４）腎ガンの処置に際し、ＮＫ細胞の活性化能、ＮＫＴ細胞の活性化能、血管新生阻害能、及びＩＬ−１２の誘導産生能の少なくとも１のその治療意義を重視しマーカーにすること。
１５）精巣ガンの処置に際し、ＮＫＴ細胞の活性化能、及び血管新生阻害能の少なくとも１のその治療意義を重視しマーカーにすること。
１６）舌ガンの処置に際し、ＮＫ細胞の活性化能、ＮＫＴ細胞の活性化能、ＩＬ−１２の誘導産生能、及びＩＦＮＹの誘導産生能の少なくとも１のその治療意義を重視しマーカーにすること。
１７）卵巣ガンの処置に際し、ＩＦＮＹの誘導産生能、及びＩＬ−１２の誘導産生能の少なくとも１のその治療意義を重視しマーカーにすること。
１８）膵ガンの処置に際し、ＮＫ細胞の活性化能、ＮＫＴ細胞の活性化能、及びＩＬ−１２の誘導産生能の少なくとも１のその治療意義を重視しマーカーにすること。
２．ガンの免疫治療剤が次の少なくとも１から選ばれる前項１のガンの免疫治療剤；
１）ＮＫ細胞の活性化能及びＮＫＴ細胞の活性化能の少なくとも１のその治療意義を重視しマーカーにするα１，３グルカン構造をもつガンの免疫治療剤。
２）ＩＬ−１２の誘導産生能及びＩＦＮＹの誘導産生能の少なくとも１のその治療意義を重視しマーカーにするβ１，３グルカン構造（β１，３−１，６構造）をもつガンの免疫治療剤。
３．次の少なくとも１が選択される各ガンの免疫治療剤のスクリーニング方法；
１）スキルス胃ガンの免疫治療剤のスクリーニングに際し、ＮＫ細胞の活性化能、ＮＫＴ細胞の活性化能、及び血管新生阻害能の少なくとも１を重視しマーカーにすること。
２）非スキルス胃ガンの免疫治療剤のスクリーニングに際し、ＮＫＴ細胞の活性化能、血管新生阻害能、ＩＬ−１２の誘導産生能、及びＩＦＮＹの誘導産生能の少なくとも１を重視しマーカーにすること。
３）大腸ガンの免疫治療剤のスクリーニングに際し、ＩＦＮＹの誘導産生能、ＮＫＴ細胞の活性化能、ＩＬ−１２の誘導産生能、血管新生阻害能、及びＮＫ細胞の活性化能の少なくとも１を重視しマーカーにすること。
４）前立腺ガンの免疫治療剤のスクリーニングに際し、ＩＬ−１２の誘導産生能、及びＮＫ細胞の活性化能の少なくとも１を重視しマーカーにすること。
５）乳ガンの免疫治療剤のスクリーニングに際し、ＩＦＮＹの誘導産生能、ＩＬ−１２の誘導産生能、及び血管新生阻害能の少なくとも１を重視しマーカーにすること。
６）肺ガンの免疫治療剤のスクリーニングに際し、ＩＦＮＹの誘導産生能、ＩＬ−１２の誘導産生能、ＮＫ細胞の活性化能、及び血管新生阻害能の少なくとも１を重視しマーカーにすること。
７）肺扁平上皮ガンの免疫治療剤のスクリーニングに際し、ＩＬ−１２の誘導産生能、及び血管新生阻害能の少なくとも１を重視しマーカーにすること。
８）肺小細胞ガンの免疫治療剤のスクリーニングに際し、ＩＬ−１２の誘導産生能を少なくとも重視しマーカーにすること。
９）肺大細胞ガンの免疫治療剤のスクリーニングに際し、ＩＬ−１２の誘導産生能、及びＮＫＴ細胞の活性化能の少なくとも１を重視しマーカーにすること。
１０）肺腺ガンの免疫治療剤のスクリーニングに際し、ＩＬ−１２の誘導産生能、ＮＫ細胞の活性化能、及び血管新生阻害能の少なくとも１を重視しマーカーにすること。
１１）悪性黒色腫の免疫治療剤のスクリーニングに際し、血管新生阻害能、ＩＦＮＹの誘導産生能、及びＩＬ−１２の誘導産生能の少なくとも１を重視しマーカーにすること。
１２）肝ガンの免疫治療剤のスクリーニングに際し、ＮＫ細胞の活性化能、ＮＫＴ細胞の活性化能、及びＩＦＮＹの誘導産生能の少なくとも１を重視しマーカーにすること。
１３）子宮ガンの免疫治療剤のスクリーニングに際し、血管新生阻害能、ＩＦＮＹの誘導産生能、及びＩＬ−１２の誘導産生能の少なくとも１を重視しマーカーにすること。
１４）腎ガンの免疫治療剤のスクリーニングに際し、ＮＫ細胞の活性化能、ＮＫＴ細胞の活性化能、血管新生阻害能、及びＩＬ−１２の誘導産生能の少なくとも１を重視しマーカーにすること。
１５）精巣ガンの免疫治療剤のスクリーニングに際し、ＮＫＴ細胞の活性化能、及び血管新生阻害能の少なくとも１を重視しマーカーにすること。
１６）舌ガンの免疫治療剤のスクリーニングに際し、ＮＫ細胞の活性化能、ＮＫＴ細胞の活性化能、ＩＬ−１２の誘導産生能、及びＩＦＮＹの誘導産生能の少なくとも１を重視しマーカーにすること。
１７）卵巣ガンの免疫治療剤のスクリーニングに際し、ＩＦＮＹの誘導産生能、及びＩＬ−１２の誘導産生能の少なくとも１を重視しマーカーにすること。
１８）膵ガンの免疫治療剤のスクリーニングに際し、ＮＫ細胞の活性化能、ＮＫＴ細胞の活性化能、及びＩＬ−１２の誘導産生能の少なくとも１を重視しマーカーにすること。
４．ガンの免疫治療剤の新規用途であって、ガンを組織別及び／又は組織型別に処置するために、ガン処置の作用機作を少なくとも▲１▼血管新生阻害作用、▲２▼Ｔｈ１サイトカイン（ＴＮＦα、ＩＦＮＹ、ＩＬ−１２）を誘導してＣＴＬを活性化する作用、▲３▼ＮＫ細胞数もしくはその活性化作用、及び▲４▼ＮＫＴ細胞数もしくはその活性化作用に区別し、各作用に対応するマーカーを測定し、その測定値をガンの組織別及び／又は組織型別に分析し、もって、各ガンの組織別及び／又は組織型別に処方を選択することを特徴とするガンの免疫治療剤。
５．肺ガンに対する免疫治療剤であって、以下の処方から選択される前項４のガンの免疫治療剤。
１）▲２▼Ｔｈ１サイトカイン（ＴＮＦα、ＩＦＮＹ、ＩＬ−１２）を誘導してＣＴＬを活性化する作用を有する免疫治療剤と▲４▼ＮＫＴ細胞数の増加もしくはその活性化作用を有する免疫治療剤を併用又は配合してなるガンの免疫治療剤。
２）▲２▼Ｔｈ１サイトカイン（ＴＮＦα、ＩＦＮＹ、ＩＬ−１２）を誘導してＣＴＬを活性化する作用を有する免疫治療剤と▲３▼ＮＫ細胞数の増加もしくはその活性化作用を有する免疫治療剤を併用又は配合してなるガンの免疫治療剤。
３）▲３▼ＮＫ細胞数の増加もしくはその活性化作用を有する免疫治療剤と▲４▼ＮＫＴ細胞数の増加もしくはその活性化作用を有する免疫治療剤を併用又は配合してなるガンの免疫治療剤。
４）▲１▼血管新生阻害作用を有するガンの免疫治療剤。
６．胃ガン（スキルス性胃ガンと非スキルス性胃ガン）に対する免疫治療剤であって、以下の処方から選択される前項４のガンの免疫治療剤。
１）▲２▼Ｔｈ１サイトカイン（ＴＮＦα、ＩＦＮＹ、ＩＬ−１２）を誘導してＣＴＬを活性化する作用を有する免疫治療剤と▲４▼ＮＫＴ細胞数の増加もしくはその活性化作用を有する免疫治療剤を併用又は配合してなるガンの免疫治療剤。
２）▲２▼Ｔｈ１サイトカイン（ＴＮＦα、ＩＦＮＹ、ＩＬ−１２）を誘導してＣＴＬを活性化する作用を有する免疫治療剤と▲３▼ＮＫ細胞数の増加もしくはその活性化作用を有する免疫治療剤を併用又は配合してなるガンの免疫治療剤。
３）▲３▼ＮＫ細胞数の増加もしくはその活性化作用を有する免疫治療剤と▲４▼ＮＫＴ細胞数の増加もしくはその活性化作用を有する免疫治療剤を併用又は配合してなるガンの免疫治療剤。
４）▲１▼血管新生阻害作用を有するガンの免疫治療剤。
７．乳ガン、大腸ガンに対する免疫治療剤であって、以下の処方から選択される前項４のガンの免疫治療剤。
１）▲２▼Ｔｈ１サイトカイン（ＴＮＦα、ＩＦＮＹ、ＩＬ−１２）を誘導してＣＴＬを活性化する作用を有する免疫治療剤と▲４▼ＮＫＴ細胞数の増加もしくはその活性化作用を有する免疫治療剤を併用又は配合してなるガンの免疫治療剤。
２）▲２▼Ｔｈ１サイトカイン（ＴＮＦα、ＩＦＮＹ、ＩＬ−１２）を誘導してＣＴＬを活性化する作用を有する免疫治療剤と▲３▼ＮＫ細胞数の増加もしくはその活性化作用を有する免疫治療剤を併用又は配合してなるガンの免疫治療剤。
３）▲３▼ＮＫ細胞数の増加もしくはその活性化作用を有する免疫治療剤と▲４▼ＮＫＴ細胞数の増加もしくはその活性化作用を有する免疫治療剤を併用又は配合してなるガンの免疫治療剤。
８．前立腺ガンに対する免疫治療剤であって、以下の処方から選択される前項４のガンの免疫治療剤。
１）▲２▼Ｔｈ１サイトカイン（ＴＮＦα、ＩＦＮＹ、ＩＬ−１２）を誘導してＣＴＬを活性化する作用を有する免疫治療剤と▲４▼ＮＫＴ細胞数の増加もしくはその活性化作用を有する免疫治療剤を併用又は配合してなるガンの免疫治療剤。
２）▲２▼Ｔｈ１サイトカイン（ＴＮＦα、ＩＦＮＹ、ＩＬ−１２）を誘導してＣＴＬを活性化する作用を有する免疫治療剤と▲３▼ＮＫ細胞数の増加もしくはその活性化作用を有する免疫治療剤を併用又は配合してなるガンの免疫治療剤。
３）▲１▼血管新生阻害作用を有するガンの免疫治療剤。
９．▲１▼血管新生阻害作用の測定がＶＥＧＦ値のマイナス値（−ＶＥＧＦ）で、▲２▼Ｔｈ１サイトカイン（ＴＮＦα、ＩＦＮＹ、ＩＬ−１２）を誘導してＣＴＬを活性化する作用の測定が、ＩＦＮＹ産生能力（ＩＦＮＹ値）もしくはＩＬ−１２産生能力（ＩＬ−１２値）で又はＣＤ８（＋）パーフォリン値の表面マーカーで、▲３▼ＮＫ細胞数もしくはその活性化作用の測定がＣＤ３（−）ＣＤ１６１（＋）もしくはＣＤ３（−）ＣＤ１６１（＋）パーフォリン値の表面マーカーで、及び▲４▼ＮＫＴ細胞数もしくはその活性化作用の測定がＣＤ３（＋）ＣＤ１６１（＋）もしくはＣＤ３（＋）ＣＤ１６１（＋）パーフォリン値の表面マーカーでなされる測定法から選ばれる前項４〜８のガンの免疫治療剤。
１０．ガンの免疫治療剤の新規用途であって、ガンを組織別及び／又は組織型別に処置するために、ガン処置の作用機作を少なくとも▲１▼血管新生阻害作用、▲２▼Ｔｈ１サイトカイン（ＴＮＦα、ＩＦＮＹ、ＩＬ−１２）を誘導してＣＴＬを活性化する作用、▲３▼ＮＫ細胞数もしくはその活性化作用、及び▲４▼ＮＫＴ細胞数もしくはその活性化作用に区別し、各作用に対応するマーカーを測定し、その測定値をガンの組織別及び／又は組織型別に分析し、もって、▲３▼ＮＫ細胞数もしくはその活性化作用、又は▲４▼ＮＫＴ細胞数もしくはその活性化作用が優位の場合に、▲３▼ＮＫ細胞数もしくはその活性化作用、又は▲４▼ＮＫＴ細胞数もしくはその活性化作用を有するガン免疫治療剤と、抗ガン化学療法剤、放射線治療、ステロイド治療等から選ばれる少なくとも１の処方と併用するガンの免疫治療剤。
１１．ガンの免疫治療剤の新規用途であって、ガンを組織別及び／又は組織型別に処置するために、ガン処置の作用機作を少なくとも▲１▼血管新生阻害作用、▲２▼Ｔｈ１サイトカイン（ＴＮＦα、ＩＦＮＹ、ＩＬ−１２）を誘導してＣＴＬを活性化する作用、▲３▼ＮＫ細胞数もしくはその活性化作用、及び▲４▼ＮＫＴ細胞数もしくはその活性化作用に区別し、各作用に対応するマーカーを測定し、その測定値をガンの組織別及び／又は組織型別に分析し、もって、▲２▼Ｔｈ１サイトカイン（ＴＮＦα、ＩＦＮＹ、ＩＬ−１２）を誘導してＣＴＬを活性化する作用のみが優位のときは、この系を障害しない程度の抗ガン化学療法剤、放射線治療、ステロイド治療等から選ばれる少なくとも１の処方と併用するか、又は▲２▼Ｔｈ１サイトカイン（ＴＮＦα、ＩＦＮＹ、ＩＬ−１２）を誘導してＣＴＬを活性化する作用を有するガン免疫治療剤のみで処方するガンの免疫治療剤。
１２．ガンの免疫治療剤の新規用途であって、ガンを組織別及び／又は組織型別に処置するために、ガン処置の作用機作を少なくとも▲１▼血管新生阻害作用、▲２▼Ｔｈ１サイトカイン（ＴＮＦα、ＩＦＮＹ、ＩＬ−１２）を誘導してＣＴＬを活性化する作用、▲３▼ＮＫ細胞数もしくはその活性化作用、及び▲４▼ＮＫＴ細胞数もしくはその活性化作用に区別し、各作用に対応するマーカーを測定し、その測定値をガンの組織別及び／又は組織型別に分析し、もって、▲３▼ＮＫ細胞数もしくはその活性化作用、又は▲４▼ＮＫＴ細胞数もしくはその活性化作用が減弱している場合は、この活性化作用を有するガン免疫治療剤で処方するガンの免疫治療剤。
１３．▲１▼血管新生阻害作用の測定がＶＥＧＦ値のマイナス値（−ＶＥＧＦ）で、▲２▼Ｔｈ１サイトカイン（ＴＮＦα、ＩＦＮＹ、ＩＬ−１２）を誘導してＣＴＬを活性化する作用の測定が、ＩＦＮＹ産生能力（ＩＦＮＹ値）もしくはＩＬ−１２産生能力（ＩＬ−１２値）で又はＣＤ８（＋）パーフォリン値の表面マーカーで、▲３▼ＮＫ細胞数もしくはその活性化作用の測定がＣＤ３（−）ＣＤ１６１（＋）もしくはＣＤ３（−）ＣＤ１６１（＋）パーフォリン値の表面マーカーで、及び▲４▼ＮＫＴ細胞数もしくはその活性化作用の測定がＣＤ３（＋）ＣＤ１６１（＋）もしくはＣＤ３（＋）ＣＤ１６１（＋）パーフォリン値の表面マーカーでなされる測定法から選ばれる前項１０〜１２のガンの免疫治療剤。
１４．ガンの免疫治療剤のスクリーニング方法であって、ガンを組織別及び／又は組織型別に処置するために、ガン処置の作用機作を少なくとも▲１▼血管新生阻害作用、▲２▼Ｔｈ１サイトカイン（ＴＮＦα、ＩＦＮＹ、ＩＬ−１２）を誘導してＣＴＬを活性化する作用、▲３▼ＮＫ細胞数もしくはその活性化作用、及び▲４▼ＮＫＴ細胞数もしくはその活性化作用に区別し、候補化合物投与による各作用に対応するマーカーの測定値の特徴をもって、候補化合物の各ガンの組織別及び／又は組織型別の処方を選択することを特徴とするガンの免疫治療剤のスクリーニング方法。
１５．▲１▼血管新生阻害作用の測定がＶＥＧＦ値のマイナス値（−ＶＥＧＦ）で、▲２▼Ｔｈ１サイトカイン（ＴＮＦα、ＩＦＮＹ、ＩＬ−１２）を誘導してＣＴＬを活性化する作用の測定が、ＩＦＮＹ産生能力（ＩＦＮＹ値）もしくはＩＬ−１２産生能力（ＩＬ−１２値）で又はＣＤ８（＋）パーフォリン値の表面マーカーで、▲３▼ＮＫ細胞数もしくはその活性化作用の測定がＣＤ３（−）ＣＤ１６１（＋）もしくはＣＤ３（−）ＣＤ１６１（＋）パーフォリン値の表面マーカーで、及び▲４▼ＮＫＴ細胞数もしくはその活性化作用の測定がＣＤ３（＋）ＣＤ１６１（＋）もしくはＣＤ３（＋）ＣＤ１６１（＋）パーフォリン値の表面マーカーでなされる測定法から選ばれる前項１４のガン免疫治療剤のスクリーニング方法。
１６．前項１〜１５の何れか一に記載の情報を利用したガン患者のサンプルでのガンの検査方法。
１７．前項１〜１５の何れか一に記載の情報を利用したガン患者のサンプルでのガンの診断方法。
１８．前項１〜１７の何れか一に記載の情報を利用したガンの治療方法
１９．前項１〜１８の何れか一に記載の情報を自然法則に利用した媒体に担持した商業用媒体。
２０．前項１９の商業用媒体を利用した商業方法。
からなる。
発明を実施するための最良の形態
以下、本発明を詳しく説明するが、本明細書中で使用されている技術的および科学的用語は、別途定義されていない限り、本発明の属する技術分野において通常の知識を有する者により普通に理解される意味を持つ。
本発明者の医学博士八木田のガン新免疫療法とは４つの異なる作用機序を組み合わせることからなる治療手段である。
第一の作用機序は、血管新生阻害物質（ベターシャーク）を投与してガンへの血流を障害してガン縮小をはかる方法である。これは血管内皮細胞増殖因子（ＶＥＧＦ）を測定することでその効果は判定が可能である。血管新生阻害作用はＶＥＧＦ値のマイナス（負）値（−ＶＥＧＦ）で評価できる。このＶＥＧＦ値の替わりにＦＧＦ、ＨＧＦなどのその他の血管増殖因子を用いることも血管新生阻害能を評価することが可能である。
またＶＥＧＦの替わりに血管新生阻害作用の正数値でもその評価が可能である（例えばエンドスタチン値）。
第二の作用機序は、β１，３グルカン構造を担持する化合物を投与してＴｈ１サイトカイン（ＴＮＦα、ＩＦＮＹ、ＩＬ−１２）を誘導してＣＴＬを活性化する方法である。ＣＴＬ活性はＣＤ８（＋）パーフォリン産生能力で判定が可能であるが、このＣＤ８（＋）パーフォリン値には細胞障害性Ｔ細胞（ＣＴＬ）と免疫抑制性Ｔ細胞（ＳＴＣ；Ｓｕｐｐｒｅｓｓｏｒ  Ｔ  ｃｅｌｌ）とがあり、前者はガン細胞を障害し、後者の活性化は結果的にガンの増殖につながる。したがってその絶対値では評価はできない。しかし前者はＩＦＮＹが１０ＩＵ／ｍｌ以上かもしくはＩＬ−１２値が７．８ｐｇ／ｍｌ以上であればＣＴＬであり、ＩＦＮＹとＩＬ−１２が低値であればＳＴＣと判定される。そこでＣＴＬ活性は、ＩＦＮＹ産生能力（ＩＦＮＹ値）もしくはＩＬ−１２産生能力（ＩＬ−１２値）で評価が可能である。
第三及び第四の作用機序であるα１，３グルカン構造を担持する化合物の投与によって活性化されるｅｆｆｅｃｔｏｒ細胞はＮＫ細胞とＮＫＴ細胞である。このＮＫとＮＫＴ細胞とはＮＫＲ−Ｐ１（ＮＫ細胞受容体ＣＤ１６１（＋））を共有しており、前者はＣＤ３（−）ＣＤ１６１（＋）の表面マーカーでＮＫ細胞数は測定可能であり、その活性化はＣＤ３（−）ＣＤ１６１（＋）パーフォリン産生能力で判定が可能である。一方後者のＮＫＴ細胞はＣＤ３（＋）ＣＤ１６１（＋）でその細胞数は測定が可能となり、そのパーフォリン産生能力でＮＫＴ細胞の活性化は測定可能である。
したがってガン治療における新免疫療法（ＮＩＴＣ）であっても一般的な免疫療法であっても以下の測定項目でそれぞれのｅｆｆｅｃｔｏｒ細胞もしくは血管新生阻害作用を評価することが可能である。具体的には、ＣＴＬ活性はＩＦＮＹあるいはＩＬ−１２の誘導産生能力で評価が可能である。ＮＫ細胞の活性化はＣＤ３（−）ＣＤ１６１（＋）もしくはＣＤ３（−）ＣＤ１６１（＋）パーフォリン値でも評価可能である。ＮＫＴ細胞の活性化はＣＤ３（＋）ＣＤ１６１（＋）もしくはＣＤ３（＋）ＣＤ１６１（＋）パーフォリン値でも評価が可能である。
本発明は、臨床における結果と、ＮＫ細胞の活性化能、ＮＫＴ細胞の活性化能、血管新生阻害能、ＩＬ−１２の誘導産生能、及びＩＦＮＹの誘導産生能の相関性を検討することにより行われた。本発明者は、新免疫療法（ＮＩＴＣ）として、ガン患者にα１，３グルカン構造を担持する化合物、β１，３グルカン構造を担持する化合物と血管新生阻害作用物質（サメ軟骨）を併用し、ＩＬ−１２、ＩＦＮＹ他の各種マーカーを測定した。そしてその測定結果は、ＣＤ８（＋）パーフォリン産生は、ＩＦＮＹ及びＩＬ−１２の産生とは強い正の相関性が存在することを見出した。この結果、ＣＤ８（＋）パーフォリン産生の測定はＣＴＬ活性ルートの評価に意義を見出した。
この意義を見出したことによりＣＤ８（＋）パーフォリン産生能の測定は、有用なＣＴＬ活性化剤のスクリーニング方法に適用可能であり、このスクリーニング方法を利用すればＣＴＬ活性化能を担持するβ１，３グルカンの特定が可能であることも見出した。本発明では、β１，３グルカン構造を持つ茸菌糸体組成物製剤（例えばＩＬＸ、ＩＬＹ：（株）東西医薬研究所  いずれも商品登録）が、ＣＤ８（＋）パーフォリン産生能の活性化に有効であることを確認し、これらがＣＴＬ活性化に有効であることを確認した。その他β１，３グルカン構造を持つ化合物は種々知られており、この既知構造とＣＤ８パーフォリン産生能の測定を組み合わせれば当業者は容易にＣＴＬ活性化剤を特定可能である。
本発明では、ＮＫ細胞の意義をＮＫＴ細胞との関係から新規に確立した。その確立のために、本発明者はＮＫ細胞の新規測定法を提供した。それはＣＤ３（−）ＣＤ１６１（＋）の測定が、既知クローム・リリース法での結果との対比により、正確なＮＫ細胞の測定であることを見出した。また、ＣＤ３（−）ＣＤ１６１（＋）パーフォリン産生能の測定は、ＮＫ細胞の活性化を意味しており、さらにこの活性化が特に有効なガン種は前立腺ガンであることを見出した。かくして、ＣＤ３（−）ＣＤ１６１（＋）パーフォリン産生能の測定を含む方法は、ＮＫ活性化剤のスクリーニング方法として有用であり、さらに、本発明では、α１，３グルカン構造を持つニゲロオリゴ糖、フコイダン等の組成物製剤が、ＣＤ３（−）ＣＤ１６１（＋）パーフォリン産生能の活性化に有効であることを確認し、これらがＮＫ細胞の活性化に有効であることを再確認した。このスクリーニング方法で得られるＮＫ活性化能を担持するα１，３グルカンは制ガン剤として有用であり、その他α１，３グルカン構造を持つ化合物は種々知られており、この既知構造とＣＤ３（−）ＣＤ１６１（＋）パーフォリン産生能の測定を組み合わせれば当業者は容易にＮＫ活性化剤を特定可能である。
さらに本発明では、ＣＤ３（−）ＣＤ１６１（＋）、ＣＤ３（−）ＣＤ１６１（＋）パーフォリン産生能、ＣＤ３（＋）ＣＤ１６１（＋）、ＣＤ３（＋）ＣＤ１６１（＋）パーフォリン産生能を同時に測定し、ＮＫ細胞とＮＫＴ細胞の動態の測定法を実施することの意義も見出した。つまり、本発明者は、この測定を利用し分析した結果、ＮＫ細胞とＮＫＴ細胞の活性化が、両方とも前記α１，３グルカン構造を持つ化合物によって有効であり、その活性化は、両者は逆相関の関係、つまりＮＫ細胞が活性化するとＮＫＴ細胞は抑制され、ＮＫＴ細胞が活性化されるとＮＫ細胞が抑制されることを見出した。この結果、両系は相互に補い合いの関係にあり、ガン種類、患者適合性、α１，３グルカン構造等によって特異的に制ガン剤として利用されるべきことを見出した。上記測定法を含むＮＫ活性化剤又はＮＫＴ活性剤の分別を可能とするスクリーニング方法を提供する。本発明では、α１，３グルカン構造を持つニゲロオリゴ糖、フコイダン等の組成物製剤が有用であることを確認した。かくして、このスクリーニング方法で得られるＮＫ活性化能又はＮＫＴ活性化能を担持するα１，３グルカンは制ガン剤として有用であり、その他α１，３グルカン構造を持つ化合物は種々知られており、この既知構造とＣＤ３（−）ＣＤ１６１（＋）、ＣＤ３（−）ＣＤ１６１（＋）パーフォリン産生能、ＣＤ３（＋）ＣＤ１６１（＋）、ＣＤ３（＋）ＣＤ１６１（＋）パーフォリン産生能の測定を組み合わせれば当業者は容易にＮＫ活性化剤及びＮＫＴ活性化剤を特定可能である。
本発明による測定法を利用し、ガン種とＮＫ細胞の活性化能、ＮＫＴ細胞の活性化能、血管新生阻害能、ＩＬ−１２の誘導産生能、及びＩＦＮＹの誘導産生能の各作用機作が、結果的に抗ガン特性に対してどの程度影響を与えるかを統計学の重回帰分析と主成分分析によって分析した。各分析はＳＰＳＳ登録商標（エス・ピー・エス・エス株式会社製）やＳｔａｔｖｉｅｗ登録商標（ＳＡＳ  Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅ  Ｉｎｃ．製）などの統計解析ソフトを用いて行うことができる。分析法の原理は「医学統計学ハンドブック」（朝倉書店、宮原英夫、丹後俊朗編）などに記載されており、適用方法を以下に詳細に説明する。
抗ガン特性は、各患者の奏効率を評価関数として評価することができる。奏効率はＩＡＰ、ＴＰＡ、アルファーフェト、ＰＩＶＫＡ−ＩＩ、ＤＵＰＡＮ−２、エラスターゼ、ＣＡ１９−９、ＣＥＡ、ＳＰａｎ−１、ＮＣＣ−ＳＴ−４３９、ＣＡ１５−３、ＢＣＡ２２５、シアリルＬＥＸ、ＰＡ、Ｙ−セミノプロテイン、ＰＡＰ、ＣＡ１２５、ＣＡ７２−４、ＳＴＮコウゲン、ＳＣＣ、シフラ、ＰＲＯ  ＧＲＰ、ＮＳＥ、ＢＦＰ、ＮＭＰ２２、ＧＡＴ、ＩＣＴＰ、フェリチン、サイログロブリン、カルシトニン、ＨＣＧ、ＨＣＧ−βサブユニット、ＩｇＧ等の腫瘍マーカー値とＸ線写真やシンチグラム、ＭＲＩなどの画像診断情報を元に判定し、ＣＲ（完全寛解）、ＰＲ（部分寛解）、ＬＮＣ（６ヶ月以上の長期不変）、ＳＮＣ（６ヶ月未満の短期不変）、ＰＤ（病状進行）の５段階判定を行った。さらにＣＲ、ＰＲ、ＬＮＣ、ＳＮＣ、ＰＤにそれぞれ１０、７、４、２、０を割り振り、奏効率を点数化（ダミー変数化）した。
ＣＤ３（＋）ＣＤ１６１（＋）、ＣＤ３（＋）ＣＤ１６１（＋）パーフォリン、ＣＤ３（−）ＣＤ１６１（＋）、ＣＤ３（−）ＣＤ１６１（＋）パーフォリン、ＴＮＦα、ＩＦＮＹ、ＩＬ−１２、Ｔｈ１／Ｔｈ２比、−ＶＥＧＦの各マーカーが奏効率に影響を与えるため、これが独立変数となる。各マーカー値は、平均値を引き、標準偏差で割る標準化の操作を行い、単位の違いによる絶対値の違いが影響を与えないようにした。
以上の評価関数と独立変数の相関を、胃ガン、スキルス性胃ガン、非スキルス性胃ガン、大腸ガン、前立腺ガン、乳ガン、肺ガン、悪性黒色腫、肝ガン、子宮ガン、腎ガン、精巣ガン、舌ガン、卵巣ガン、膵ガンなどの各ガン種について重回帰分析によって調べた。独立変数は、ＮＫＴ細胞の活性化能を表すものとしてＣＤ３（＋）ＣＤ１６１（＋）を、ＮＫ細胞の活性化能を表すものとしてＣＤ３（−）ＣＤ１６１（＋）を、血管新生阻害能を表すものとして−ＶＥＧＦを、ＣＴＬ誘導を表すものとしてＩＬ−１２またはＩＦＮＹの値を用いた、４独立変数の重回帰分析を行った。重回帰分析の結果得られる各独立変数に対する偏回帰係数の値によって、各作用機作の効果を検討した。
また、胃ガン（スキルス性、非スキルス性）、乳ガン、大腸ガン、肺ガン、前立腺ガンでは、ＣＤ３（＋）ＣＤ１６１（＋）、ＣＤ３（＋）ＣＤ１６１（＋）パーフォリン、ＣＤ３（−）ＣＤ１６１（＋）、ＣＤ３（−）ＣＤ１６１（＋）パーフォリン、ＴＮＦα、ＩＦＮＹ、ＩＬ−１２、Ｔｈ１／Ｔｈ２比、−ＶＥＧＦの各マーカーの分散について主成分分析を行い、寄与率（各成分の分散／各成分の分散の全成分に関する和）が１０％以上になる第１成分から第４成分までの４つの成分を取り出し、各成分中の各マーカーに伴う係数から、各マーカーの連動程度を調べた。
以上の重回帰分析と主成分分析の結果から、以下を確認した。
ガンの免疫治療剤の新規用途であって、ガンを組織別及び／又は組織型別に処置するために、ガン処置の作用機作を少なくとも▲１▼血管新生阻害作用、▲２▼Ｔｈ１サイトカイン（ＴＮＦα、ＩＦＮＹ、ＩＬ−１２）を誘導してＣＴＬを活性化する作用、▲３▼ＮＫ細胞数もしくはその活性化作用、及び▲４▼ＮＫＴ細胞数もしくはその活性化作用に区別し、各作用に対応するマーカーを測定し、その測定値をガンの組織別及び／又は組織型別に分析し、もって、各ガンの組織別及び／又は組織型別に処方を選択することはガンの免疫治療剤として極めて有用である。
α１，３グルカン構造を含むＮＫ細胞活性化剤はスキルス性胃ガン、肺ガン、大腸ガン、前立腺ガン、肝ガン、腎ガン、舌ガン、膵ガンに対して有効である。α１，３グルカン構造を含むＮＫＴ細胞活性化剤は、スキルス性胃ガン、非スキルス性胃ガン、大腸ガン、肝ガン、腎ガン、精巣ガン、舌ガン、膵ガンに対して有効である。β１，３グルカン構造（β１，３−１，６構造）を含むＩＬ−１２の誘導産生剤は、肺ガン全体（肺腺ガン、肺大細胞ガン、肺小細胞ガン、肺扁平上皮ガン）、非スキルス性胃ガン、大腸ガン、前立腺ガン、乳ガン、悪性黒色腫、子宮ガン、腎ガン、舌ガン、卵巣ガン、膵ガンに対して有効である。β１，３グルカン構造（β１，３−１，６構造）を含むＩＦＮＹの誘導産生剤は、非スキルス性胃ガン、乳ガン、大腸ガン、肺ガン、悪性黒色腫、肝ガン、子宮ガン、舌ガン、卵巣ガンに対して有効である。
スキルス胃ガンの処置に際しては、ＮＫ細胞の活性化能、ＮＫＴ細胞の活性化能、血管新生阻害能で少なくとも１のその治療意義を重視しマーカーにすることが有効である。また、ＣＴＬ活性化能とＮＫＴ細胞の活性化能を有する免疫治療剤の併用・配合が極めて好ましい組合せである。以下、ＣＴＬ活性化能とＮＫ細胞の活性化能を有する免疫治療剤の併用・配合、ＮＫ細胞の活性化能とＮＫＴ細胞の活性化能を有する免疫治療剤の併用・配合、−ＶＥＧＦに作用する免疫治療剤の優先順位がある。
非スキルス胃ガンの処置に際しては、ＮＫＴ細胞の活性化能、血管新生阻害能、ＩＬ−１２の誘導産生能、ＩＦＮＹの誘導産生能で少なくとも１のその治療意義を重視しマーカーにすることが有効である。また、ＣＴＬ活性化能とＮＫＴ細胞の活性化能を有する免疫治療剤の併用・配合が極めて好ましい組合せである。以下、ＣＴＬ活性化能とＮＫ細胞の活性化能を有する免疫治療剤の併用・配合、ＮＫ細胞の活性化能とＮＫＴ細胞の活性化能を有する免疫治療剤の併用・配合、−ＶＥＧＦに作用する免疫治療剤の優先順位がある。
大腸ガンの処置に際しては、ＩＬ−１２の誘導産生能、血管新生阻害能、ＩＦＮＹの誘導産生能、ＮＫＴ細胞の活性化能、ＮＫ細胞の活性化能で少なくとも１のその治療意義を重視しマーカーにすることが有効である。また、ＣＴＬ活性化能とＮＫＴ細胞の活性化能を有する免疫治療剤の併用・配合が極めて好ましい組合せである。以下、ＣＴＬ活性化能とＮＫ細胞の活性化能を有する免疫治療剤の併用・配合、ＮＫ細胞の活性化能とＮＫＴ細胞の活性化能を有する免疫治療剤の併用・配合の優先順位がある。
前立腺ガンの処置に際しては、ＩＬ−１２の誘導産生能、ＮＫ細胞の活性化能で少なくとも１のその治療意義を重視しマーカーにすることが有効である。また、ＣＴＬ活性化能とＮＫＴ細胞の活性化能を有する免疫治療剤の併用・配合が極めて好ましい組合せである。以下、ＣＴＬ活性化能とＮＫ細胞の活性化能を有する免疫治療剤の併用・配合、−ＶＥＧＦに作用する免疫治療剤の優先順位がある。
乳ガンの処置に際しては、ＩＬ−１２の誘導産生能、ＩＦＮＹの誘導産生能、血管新生阻害能で少なくとも１のその治療意義を重視しマーカーにすることが有効である。また、ＣＴＬ活性化能とＮＫＴ細胞の活性化能を有する免疫治療剤の併用・配合が極めて好ましい組合せである。以下、ＣＴＬ活性化能とＮＫ細胞の活性化能を有する免疫治療剤の併用・配合、ＮＫ細胞の活性化能とＮＫＴ細胞の活性化能を有する免疫治療剤の優先順位がある。
肺ガンの処置に際しては、ＩＦＮＹの誘導産生能、ＩＬ−１２の誘導産生能、ＮＫ細胞の活性化能、血管新生阻害能で少なくとも１のその治療意義を重視しマーカーにすることが有効である。また、ＣＴＬ活性化能とＮＫＴ細胞の活性化能を有する免疫治療剤の併用・配合が極めて好ましい組合せである。以下、ＣＴＬ活性化能とＮＫ細胞の活性化能を有する免疫治療剤の併用・配合、ＮＫ細胞の活性化能とＮＫＴ細胞の活性化能を有する免疫治療剤の併用・配合、−ＶＥＧＦに作用する免疫治療剤の優先順位がある。
肺ガンの組織型別の分析によると、肺扁平上皮ガンの処置に対しＩＬ−１２の誘導産生能、及び血管新生阻害能の少なくとも１のその治療意義を重視しマーカーにすること、肺小細胞ガンの処置に対しＩＬ−１２の誘導産生能の治療意義を少なくとも重視しマーカーにすること、肺大細胞ガンの処置に対しＩＬ−１２の誘導産生能及びＮＫＴ細胞の活性化能の少なくとも１のその治療意義を重視しマーカーにすること、肺腺ガンの処置に対しＩＬ−１２の誘導産生能、ＮＫ細胞の活性化能及び血管新生阻害能の少なくとも１のその治療意義を重視しマーカーにすることが有効である。
悪性黒色腫の処置に際し、血管新生阻害能、ＩＦＮＹの誘導産生能、及びＩＬ−１２の誘導産生能の少なくとも１のその治療意義を重視しマーカーにすることが有効である。
肝ガンの処置に際し、ＮＫ細胞の活性化能、ＮＫＴ細胞の活性化能、及びＩＦＮＹの誘導産生能の少なくとも１のその治療意義を重視しマーカーにすることが有効である。
子宮ガンの処置に際し、血管新生阻害能、ＩＦＮＹの誘導産生能、及びＩＬ−１２の誘導産生能の少なくとも１のその治療意義を重視しマーカーにすることが有効である。
腎ガンの処置に際し、ＮＫ細胞の活性化能、ＮＫＴ細胞の活性化能、血管新生阻害能、及びＩＬ−１２の誘導産生能の少なくとも１のその治療意義を重視しマーカーにすることが有効である。
精巣ガンの処置に際し、ＮＫＴ細胞の活性化能、及び血管新生阻害能の少なくとも１のその治療意義を重視しマーカーにすることが有効である。
舌ガンの処置に際し、ＮＫ細胞の活性化能、ＮＫＴ細胞の活性化能、ＩＬ−１２の誘導産生能、及びＩＦＮＹの誘導産生能の少なくとも１のその治療意義を重視しマーカーにすることが有効である。
卵巣ガンの処置に際し、ＩＦＮＹの誘導産生能、及びＩＬ−１２の誘導産生能の少なくとも１のその治療意義を重視しマーカーにすることが有効である。
膵ガンの処置に際し、ＮＫ細胞の活性化能、ＮＫＴ細胞の活性化能、及びＩＬ−１２の誘導産生能の少なくとも１のその治療意義を重視しマーカーにすることが有効である。
スキルス胃ガンの処置に際しては、ＮＫ細胞の活性化能を保持するα１，３グルカン構造をもつガンの免疫治療剤、又はＮＫＴ細胞の活性化能保持するα１，３グルカン構造をもつガンの免疫治療剤、またはこれらの併用・配合が有効である。
非スキルス胃ガンの処置に際しては、ＩＦＮＹの誘導産生能及びＩＬ−１２の誘導産生能の少なくとも１を保持するβ１，３グルカン構造をもつガンの免疫治療剤、又はＮＫＴ細胞の活性化能を保持するα１，３グルカン構造をもつガンの免疫治療剤、またはこれらの併用・配合が有効である。
大腸ガンの処置に際しては、ＩＦＮＹの誘導産生能及びＩＬ−１２の誘導産生能の少なくとも１を保持するβ１，３グルカン構造をもつガンの免疫治療剤、ＮＫＴ細胞の活性化能を保持するα１，３グルカン構造をもつガンの免疫治療剤、又はＮＫ細胞の活性化能保持するα１，３グルカン構造をもつガンの免疫治療剤、またはこれらの併用・配合が有効である。
前立腺ガンの処置に際しては、ＩＬ−１２の誘導産生能を保持するβ１，３グルカン構造をもつガンの免疫治療剤、又はＮＫ細胞の活性化能を保持するα１，３グルカン構造をもつガンの免疫治療剤、またはこれらの併用，配合が有効である。
乳ガンの処置に際しては、ＩＦＮＹの誘導産生能及びＩＬ−１２の誘導産生能の少なくとも１を保持するβ１，３グルカン構造をもつガンの免疫治療剤が有効である。
肺ガンの処置に際しては、ＩＬ−１２の誘導産生能及びＩＦＮＹの誘導産生能の少なくとも１を保持するβ１，３グルカン構造をもつガンの免疫治療剤、又はＮＫ細胞の活性化能を保持するα１，３グルカン構造をもつガンの免疫治療剤、またはこれらの併用・配合が有効である。
この知見を元にした各種ガンの特異的な治療剤の選別／スクリーニングが可能である。つまり、スキルス胃ガンの免疫治療剤のスクリーニングに際しては、ＮＫ細胞の活性化能、ＮＫＴ細胞の活性化能及び血管新生阻害能の少なくとも１を重視しマーカーにする。非スキルス胃ガンの免疫治療剤のスクリーニングに際しては、ＮＫＴ細胞の活性化能、ＩＬ−１２の誘導産生能、血管新生阻害能及びＩＦＮＹの誘導産生能の少なくとも１を重視しマーカーにする。大腸ガンの免疫治療剤のスクリーニングに際しては、ＮＫＴ細胞の活性化能、ＩＬ−１２の誘導産生能、血管新生阻害能、ＩＦＮＹの誘導産生能及びＮＫ細胞の活性化能の少なくとも１を重視しマーカーにする。前立腺ガンの免疫治療剤のスクリーニングに際しては、ＩＬ−１２の誘導産生能及びＮＫ細胞の活性化能の少なくとも１を重視しマーカーにする。乳ガンの免疫治療剤のスクリーニングに際しては、ＩＦＮＹの誘導産生能、ＩＬ−１２の誘導産生能及び血管新生阻害能の少なくとも１を重視しマーカーにする。肺ガンの免疫治療剤のスクリーニングに際しては、ＮＫ細胞の活性化能、ＩＦＮＹの誘導産生能、ＩＬ−１２の誘導産生能、及び血管新生阻害能の少なくとも１を重視しマーカーにする。肺扁平上皮ガンの免疫治療剤のスクリーニングに際しては、ＩＬ−１２の誘導産生能、及び血管新生阻害能の少なくとも１を重視しマーカーにする。肺小細胞ガンの免疫治療剤のスクリーニングに際しては、ＩＬ−１２の誘導産生能を少なくとも重視しマーカーにする。肺大細胞ガンの免疫治療剤のスクリーニングに際しては、ＩＬ−１２の誘導産生能及びＮＫＴ細胞の活性化能の少なくとも１を重視しマーカーにする。肺腺ガンの免疫治療剤のスクリーニングに際しては、ＩＬ−１２の誘導産生能、ＮＫ細胞の活性化能及び血管新生阻害能の少なくとも１を重視しマーカーにする。悪性黒色腫の免疫治療剤のスクリーニングに際しては、ＩＬ−１２の誘導産生能、血管新生阻害能及びＩＦＮＹの誘導産生能の少なくとも１を重視しマーカーにする。肝ガンの免疫治療剤のスクリーニングに際しては、ＮＫＴ細胞の活性化能、ＩＦＮＹの誘導産生能及びＮＫ細胞の活性化能の少なくとも１を重視しマーカーにする。子宮ガンの免疫治療剤のスクリーニングに際しては、ＩＬ−１２の誘導産生能、血管新生阻害能及びＩＦＮＹの誘導産生能の少なくとも１を重視しマーカーにする。腎ガンの免疫治療剤のスクリーニングに際しては、ＮＫＴ細胞の活性化能、ＩＬ−１２の誘導産生能、血管新生阻害能及びＮＫ細胞の活性化能の少なくとも１を重視しマーカーにする。精巣ガンの免疫治療剤のスクリーニングに際しては、ＮＫＴ細胞の活性化能及び血管新生阻害能の少なくとも１を重視しマーカーにする。舌ガンの免疫治療剤のスクリーニングに際しては、ＮＫＴ細胞の活性化能、ＩＬ−１２の誘導産生能、ＩＦＮＹの誘導産生能及びＮＫ細胞の活性化能の少なくとも１を重視しマーカーにする。卵巣ガンの免疫治療剤のスクリーニングに際しては、ＩＬ−１２の誘導産生能及びＩＦＮＹの誘導産生能の少なくとも１を重視しマーカーにする。膵ガンの免疫治療剤のスクリーニングに際しては、ＮＫＴ細胞の活性化能、ＩＬ−１２の誘導産生能及びＮＫ細胞の活性化能の少なくとも１を重視しマーカーにする。
本発明者は、さらに本発明による測定法を利用し、ＮＫ細胞の活性化及びＮＫＴ細胞の活性化と抗ガン剤、放射線、及びステロイド治療の併用の影響を確認したところ、ＣＴＬ活性化においては重大な影響があったものが、これらＮＫ細胞及びＮＫＴ細胞の活性化には抗ガン剤、放射線、及びステロイド治療の併用の影響は一切無いことを見出した。その結果、ＮＫ細胞活性化剤及びＮＫＴ細胞活性化剤による、ガン治療あっては、抗ガン剤、放射線、及びステロイド治療との併用が可能であり、より一層の制ガン効果が達成される。
抗ガン免疫能力には２種類の免疫系が係わっており、その一つは（ａ）ＴＮＦα（ガン壊死因子α）→ＩＦＮＹ→ＩＬ−１２→キラーＴ細胞（ＣＴＬ）の系統（ＣＴＬ活性化）であり、他の一つは（ｂ）ＮＫＴ細胞活性化の系統又はＮＫ細胞活性化の系統である。これまでの新免疫療法（ＮＩＴＣ）ではこの２系統に際し同程度の治療成績が認められている。すなわち（ａ）ＩＬ−１２→キラーＴ細胞活性→アポトーシスの系統が活性化された結果として治療効果が得られた例と、（ｂ）ＮＫＴ細胞活性化の系統又はＮＫ細胞活性化の系統が活性化された結果として治療効果が得られた例とが認められている。
しかし、抗ガン剤、放射線、あるいはステロイド併用療法を行った場合、上記２種類の免疫系のうち、ＴＮＦα→ＩＦＮＹ→ＩＬ−１２→キラーＴ細胞の系統が著しく障害される。一方、ＮＫＴ細胞活性化の系統及びＮＫ細胞活性化の系統は全く障害されていないことを新たに見いだした。この現象に立脚しガン治療法を新たに組みなおすことにより、本発明の別の態様を完成した。すなわち、抗ガン剤、放射線、あるいはステロイド併用療法をガン治療に組み込むときは、（ｂ）の免疫系が強力であれば併用療法は可能であり治療効果は良好となる。しかし（ｂ）の免疫系が弱く（ａ）の免疫系のみが強い場合、併用療法は失敗することが予想される。この場合は、本発明に係るＮＫＴ細胞又はＮＫ細胞の活性化物質であるα１，３糖（α１，３立体構造の糖類物質）の投与、すなわち（ｂ）の免疫系を強化するα１，３糖の併用が必要となる。もしくは抗ガン剤を投与するとき、（ａ）の免疫系を障害しない投与法である低濃度化学療法すなわち５ＦＵ、ＵＦＴ、ミフロール、フルツロン、ＣＤＤＰ（５μｇ〜１０μｇ）の低濃度やタキソテールあるいはタキソール、アドリアマイシン、マイトマイシン、ＣＰＴ−１１などの低濃度抗ガン剤の投与法等を適用することが不可欠である。また同様に放射線療法において低容量照射の適用、ステロイド療法においても低濃度投与等を選択する必要がある。
従って抗ガン剤、放射線、あるいはステロイド療法を行う場合は、これらの療法を施される対象の各種免疫能力の測定は不可欠であり、その測定結果を踏まえて（ｂ）の免疫系が強力な場合はこれを温存するべくＮＫＴ細胞又はＮＫ細胞の活性化能を有する物質すなわちα１，３立体構造を有する糖類物質の投与が必要であり、（ｂ）の系統の免疫力が減弱している場合はさらにα１，３立体構造を有する糖類物質の大量投与あるいは直接体内投与、例えば注射による投与が必要となる。また（ａ）の系統の免疫能力のみが作用している場合は、（ａ）の免疫系を障害しない程度の抗ガン剤投与すなわち低濃度投与もしくはガン免疫治療剤投与による（ａ）免疫系をすみやかに立ち上げる方法をこうじるべく（ａ）免疫系の強化すなわちＩＬ−１２誘導物質の大量投与が必要となる。
以上のような情報は、ガン患者から摘出したサンプルにおいて、各ガン作用に対応するマーカーを測定し、その測定値をガンの組織別及び／又は組織型別に分析し、もって、各ガンの組織別及び／又は組織型別に処方を選択することを特徴とするガンの検査方法、診断方法、及び治療方法を提供した。
またこれらの情報は自然法則を利用した媒体に担持すれば商業用媒体となり、またその商業用媒体は有用な商業方法を提供する。
α１，３グルカン構造の糖類物質としては、例えば、ニゲロオリゴ糖（ＴＳＯ）、フコイダン、硫酸オリゴ糖等が挙げられる。
ニゲロオリゴ糖は、３−Ｏ−α−Ｄ−グルコピラノシル−Ｄ−グルコースを構成単位として含有する糖類である。代表的なものとしては、ニゲロース、ニゲロシルグルコース、ニゲロシルマルトース等が挙げられる。
また、市販されているニゲロオリゴ糖としては、ニゲロオリゴ糖液糖（販売者・武田食品工業株式会社）が挙げられるが、これが含有する主なニゲロオリゴ糖は（１）ニゲロース  α−Ｄ−Ｇｌｃ  ｐ−（１，３）−Ｄ−Ｇｌｃ（２）ニゲロシルグルコース  α−Ｄ−Ｇｌｃ  ｐ−（１，３）−α−Ｄ−Ｇｌｃ  ｐ−（１，４）−Ｄ−Ｇｌｃ（３）ニゲロシルマルトース  α−Ｄ−Ｇｌｃ  ｐ−（１，３）−α−Ｄ−Ｇｌｃ  ｐ−（１，４）−α−Ｄ−Ｇｌｃ  ｐ−（１，４）−Ｄ−Ｇｌｃ（なお、Ｇｌｃはグルコース、ｐはピラノースの略号である）である。
フコイダンは、狭義ではフコースの２乃至６分子に硫酸１分子が結合した硫酸化フコース含有多糖類であり、これにキシロースあるいはウロン酸を含有したフコイダン様多糖体を食品レベルで「フコイダン」と称している。フコイダンは、例えばコンブを破砕し、チップ化し、水溶液成分を抽出した後、抽出残渣を遠心分離により除去し、ヨードや塩化ナトリウム等の低分子物質を限外ろ過により除去して凍結乾燥化して製剤化される。
フコイダンとしては、褐藻類由来フコイダン、例えばガゴメコンブ由来のフコイダン、およびオキナワモズク由来フコイダン等が例示される。ガゴメコンブ等の褐藻類コンブ科由来のフコイダンには少なくとも３種類のフコイダン、Ｆ−フコイダン（α−Ｌ−フコースのポリマー）、Ｕ−フコイダン（β−Ｄ−グルクロン酸とα−Ｄ−マンノースを主鎖とし、側鎖にα−Ｌ−フコースをもつ）、Ｇ−フコイダン（β−Ｄ−ガラクトースを主鎖とし、側鎖にα−Ｌ−フコースをもつ）、が存在しており、いずれのフコイダンもフコースが硫酸化されている。
硫酸オリゴ糖としては、例えば株式会社白子製のスサビノリ（Ｐｏｒｙｐｈｙｒａ  Ｙｅｚａｅｎｓｉｓ）由来の抽出物があげられる。該抽出物の主成分はα１，３結合のガラクタン硫酸のオリゴ糖とα１，３結合およびβ１，４結合よりなるガラクタン硫酸のオリゴ糖である。
本発明のＣＴＬ活性化剤（ＩＬ−１２産生誘導剤、ＩＮＦＹ産生誘導剤）、ＮＫ活性化剤、ＮＫＴ活性化剤は、本発明の測定法を伴い、その適用法を選別することで肺ガン（肺扁平上皮ガン、肺腺ガン、小細胞肺ガン）、胸腺腫、甲状腺ガン、前立腺ガン、腎ガン、膀胱ガン、結腸ガン、直腸ガン、食道ガン、盲腸ガン、尿管ガン、乳ガン、子宮頸ガン、脳ガン、舌ガン、咽頭ガン、鼻腔ガン、喉頭ガン、胃ガン、肝ガン、胆管ガン、精巣ガン、卵巣ガン、子宮（体）ガン、転移性骨ガン、悪性黒色腫、骨肉腫、悪性リンパ腫、形質細胞腫、脂肪肉腫、膵ガン等の治療に有効である。
本発明に係るＣＴＬ活性化剤（ＩＬ−１２産生誘導剤、ＩＮＦＹ産生誘導剤）、ＮＫ活性化剤、ＮＫＴ活性化剤は、本発明の測定法による結果を指標として、その活性化を誘導または増強し、さらに活性化を維持できる処方にて用いられる。すなわち、指標をもとに、その活性化を誘導または増強し、さらに活性化を維持できる投与量、ならびに投与期間を選択して用いられる。具体的には、その投与量は、ＮＫ活性化剤又はＮＫＴ活性化剤であるα−１，３グルカン構造を持つ化合物は１ｇ〜４０ｇ／日程度、好ましくは５ｇ〜２０ｇ／日程度で、ＣＴＬ活性化剤（ＩＬ−１２産生誘導剤、ＩＮＦＹ産生誘導剤）であるβ−１，３グルカン構造を持つ化合物は１ｇ〜１０ｇ／日程度、好ましくは３ｇ〜６ｇ／日程度である。また、投与期間は一般的には１０日間〜２４ヶ月間、投与頻度は１〜３回／日で、好ましくは連日投与である。当該ＣＴＬ活性化剤（ＩＬ−１２産生誘導剤、ＩＮＦＹ産生誘導剤）、ＮＫ活性化剤、ＮＫＴ活性化剤は、好適には経口摂取される。無論、投与量を減少させ、これらを非経口に耐え得る品質に調製することで、非経口摂取（静脈内または筋肉内投与などを含む）も可能である。
細胞および各マーカーの測定方法を以下に例示する。
（ＮＫＴ細胞の測定）（ＮＫ細胞の測定）（ＣＤ８の測定）
ＮＫＲ−Ｐ１を有するＮＫＴ細胞の測定は、ＮＫＴ細胞の細胞表面に特異的に存在する細胞表面抗原（ＣＤ３およびＣＤ１６１）の測定により行うことができる。具体的には、末梢血中のリンパ球について、ＣＤ３が陽性でかつＣＤ１６１が陽性（ＣＤ３（＋）ＣＤ１６１（＋））の細胞を検定する。つまり、ＮＫＴ細胞の細胞表面抗原であるＣＤ３およびＣＤ１６１を、モノクローナル抗体を用いてフローサイトメトリーを使用するＴｗｏ  Ｃｏｌｏｒ検査により測定する。ここでＮＫＴ細胞が活性化されているとは、リンパ球の中でＣＤ３（＋）ＣＤ１６１（＋）ＮＫＴ細胞の割合が１０％以上、より好ましくは１６％以上であることをいう。ＮＫＴ細胞活性化能とは、ＮＫＴ細胞の割合を１０％以上、より好ましくは１６％以上に増加せしめる機能、またはある物質を投与する前のＮＫＴ細胞の割合より更に増強せしめる機能を意味する。
同様に（ＣＤ３（−）ＣＤ１６１（＋））とはＣＤ３が陰性でかつＣＤ１６１が陽性の細胞を検定することである。この方法が本発明ではＮＫ細胞の測定に有用であることを確認した。
さらにＣＤ８（＋）とはＣＤ８が陽性の細胞を検定することである。この方法が本発明ではＣＴＬ活性の測定に有用であることを確認した。
実施例ではガン患者の血液を用いて、血中細胞について細胞表面抗原であるＣＤ３、ＣＤ１６１、ＣＤ８について陽性・陰性で区別し、各細胞の割合を、フローサイトメトリーを用いたＴｗｏ  Ｃｏｌｏｒ検査により常法通り測定した。このときＣＤ３、ＣＤ１６１、ＣＤ８に対するモノクローナル抗体は、それぞれコールター社製又はベクトンディッキンソン社製ものを使用した。
（パーフォリン産生細胞の測定）
末梢血中のリンパ球について、細胞表面抗原であるＣＤ３、ＣＤ８、ＣＤ１６１のうち２者とパーフォリンについてフローサイトメトリーを用いたＴｈｒｅｅ  Ｃｏｌｏｒ検査により常法通り測定する。具体的には、採取した血液に固定液を加えて細胞を固定し、膜透過液を添加後抗パーフォリン抗体（Ｐｈａｒｍｉｎｇｅｎ社製）を添加して反応させ、さらにＰＲＥ−Ｃｙ５標識二次抗体（ＤＡＫＯ社製）を添加して反応させ、ついで抗ＣＤ３−ＰＥ（Ｃｏｕｌｔｅｒ  ６６０４６２７）抗体および抗ＣＤ１６１−ＦＩＴＣ（Ｂ−Ｄ）抗体を添加して反応させ、その後フローサイトメトリーで測定する。図中での略語はＰＥＲＦと表示した。
（サイトカインを測定するための試料の調製）
まず、血液より単核球画分を分離調製する。ヘパリン加末梢血をリン酸緩衝生理食塩水（Ｐｈｏｓｐｈａｔｅ  Ｂｕｆｆｅｒｅｄ  Ｓａｌｉｎｅ）（ＰＢＳ）で２倍に希釈して混和した後、Ｆｉｃｏｌｌ−Ｃｏｎｒａｙ液（比重１．０７７）上に重層し、４００Ｇで２０分間遠沈後、単核球画分を採取する。洗浄後、１０％牛胎児血清（ＦＢＳ）を加えたＲＰＭＩ−１６４０培地を加え、細胞数を１×１０６個となるように調製する。得られた細胞浮遊液２００μｌにフィトヘマグルチニン（Ｐｈｙｔｏｈｅｍａｇｇｌｕｔｉｎｉｎ）（ＤＩＦＣＯ社製）を２０μｇ／ｍｌの濃度となるように加え、９６穴マイクロプレートにて５％ＣＯ２存在下、３７℃で２４時間培養し、該培養した細胞溶液中のサイトカインを測定する試料とする。
（ＩＬ−１２の測定）
ＩＬ−１２量の測定は自体公知の臨床、生化学的検査を利用できるが、Ｒ＆Ｄ  ＳＹＳＴＥＭＳ社やＭＢＬ社より入手することのできる酵素免疫測定法（ＥＬＩＳＡ）による測定キットが使用される。ここではＲ＆Ｄ  ＳＹＳＴＥＭＳ社の測定キットを用いた。実際には９６穴マイクロプレートの各穴に測定用希釈液Ａｓｓａｙ  Ｄｉｌｕｅｎｔ  ＲＤ１Ｆを５０μｌ、標準液（ｓｔａｎｄａｒｄ）または実施例１で調製した試料を２００μｌずつ分注した後、室温にて静置して２時間反応させた。その後、西洋わさびパーオキシダーゼ（ｈｏｒｓｅ  ｒａｄｉｓｈ  ｐｅｒｏｘｉｄａｓｅ）（ＨＲＰ）標識抗ＩＬ−１２抗体を２００μｌずつ分注し２時間室温で静置した。各穴の反応液を除去し３回洗浄後、発色基質溶液を２００μｌずつ分注し、２０分間室温静置後、酵素反応停止溶液を５０μｌずつ分注した。５５０ｎｍを対照として４５０ｎｍにおける各穴の吸光度をＥｍａｘ（和光純薬株式会社製）にて測定した。ＩＬ−１２量は、ｐｇ／ｍｌとして表される。ここでＩＬ−１２産生誘発能とは、末梢血単核球画分が刺激により産生するＩＬ−１２量を、７．８ｐｇ／ｍｌ以上に増強せしめる機能、またはある物質を投与する前のＩＬ−１２産生量より増強せしめる機能を意味する。
（ＩＦＮＹの測定）
ＩＦＮＹの測定は、ＢｉｏＳｏｕｒｃｅ  Ｅｕｒｏｐｅ  Ｓ．社のＩＦＮＹ  ＥＡＳＩＡキットを用いて、酵素免疫測定法（ＥＩＡ法）で測定した。実際には９６穴マイクロプレートの各穴に標準液（ｓｔａｎｄａｒｄ）または上記調製した試料を２倍希釈したものを５０μｌずつ分注し、ＨＲＰ標識抗ＩＦＮ−Ｙ抗体を５０μｌずつ分注し更に振盪しながら２時間室温で反応させた。各穴の反応液を除去し３回洗浄後、発色基質溶液を２００μｌずつ分注し、振盪しながら１５分間室温で反応させ、酵素反応停止溶液を５０μｌずつ分注した。６３０ｎｍを対照として４５０ｎｍおよび４９０ｎｍにおける各穴の吸光度をＥｍａｘ（和光純薬株式会社製）にて測定した。ＩＦＮＹ量は、ＩＵ／ｍｌとして表される。
（血管新生阻害能の測定）
（血管内皮細胞増殖因子、ＶＥＧＦと塩基性繊維芽細胞増殖因子、ｂＦＧＦ及び血管新生阻害因子エンドスタチン、ｅｎｄｏｓｔａｔｉｎの測定）
市販キットの各酵素免疫固相法（ＥＬＩＳＡ：ｅｎｚｙｍｅ  ｌｉｎｋｅｄ  ｉｍｍｕｎｏ  ｓｏｒｂｅｎｔ  ａｓｓａｙ）（ＡＣＣＵＣＹＴＥ  Ｈｕｍａｎ  ＶＥＧＦ，ＡＣＣＵＣＹＴＥ  Ｈｕｍａｎ  ｂＦＧＦ，ＡＣＣＵＣＹＴＥ  Ｈｕｍａｎ  Ｅｎｄｏｓｔａｔｉｎ：ＣＹＴＩＭＭＵＮＥ  Ｓｃｉｅｎｃｅｓ  Ｉｎｃ．）で血清中濃度を測定した。
（実施例）
以下に、実施例を用いて本発明を具体的に説明するが、本発明は本実施例に限定されるものではない。
（実施例１）
患者には、ＩＬ−Ｘ（（株）東西医薬研究所）、さめ軟骨（セイシン企業）、及びα１，３構造をもつ糖類が、各推奨処方により投与された。処置患者群（１４８症例）で、ガンの種類とＮＫ細胞の活性化能、ＮＫＴ細胞の活性化能、血管新生阻害能、ＩＬ−１２の誘導産生能及びＩＦＮＹ誘導産生能の寄与の関係を統計解析のパッケージソフトＳＰＳＳ登録商標（エス・ピー・エス・エス株式会社製）を用いて重回帰分析によって解析した。
図１と図２は、ＮＫＴ細胞ＣＤ３（＋）ＣＤ１６１（＋）、ＮＫ細胞ＣＤ３（−）ＣＤ１６１（＋）、ＩＦＮＹ、ＶＥＧＦ（マイナス値）の４変数を用いたときの対悪性腫瘍例への貢献度を偏回帰係数で評価した実例である。図１はその数値表であり、図２は数値を図式化した。
胃ガン全体では、−ＶＥＧＦ、ＮＫ細胞、ＩＦＮＹ、ＮＫＴ細胞の関与は認められた。スキルス性胃ガンではＮＫ細胞、−ＶＥＧＦ、ＮＫＴ細胞の関与は認められ、ＩＦＮＹの関与は認められなかった。一方非スキルス性胃ガンではＮＫＴ細胞、−ＶＥＧＦ、ＩＦＮＹの関与は認められ、ＮＫ細胞の関与は認められなかった。大腸ガンでは、ＮＫ細胞、ＮＫＴ細胞、−ＶＥＧＦ、ＩＦＮＹの関与が認められた。前立腺ガンでは−ＶＥＧＦ、ＮＫ細胞の関与は認められ、ＩＦＮＹ、ＮＫＴ細胞の関与は認められなかった。乳ガンではＩＦＮＹ、−ＶＥＧＦの関与は認められ、ＮＫＴ細胞、ＮＫ細胞の関与は認められなかった。肺ガンではＩＦＮＹ、ＮＫＴ細胞、−ＶＥＧＦの関与は認められ、ＮＫ細胞の関与は認められなかった。
図２−２は、ＮＫＴ細胞ＣＤ３（＋）ＣＤ１６１（＋）、ＮＫ細胞ＣＤ３（−）ＣＤ１６１（＋）、ＩＬ−１２、ＶＥＧＦ（マイナス値）の４変数を用いたときの対悪性腫瘍例への貢献度を偏回帰係数で評価した実例である。図２−２は数値を図式化した。
胃ガン全体では、−ＶＥＧＦ、ＮＫ細胞、ＩＬ−１２、ＮＫＴ細胞の関与は認められた。スキルス性胃ガンではＮＫ細胞、−ＶＥＧＦ、ＮＫＴ細胞の関与は認められ、ＩＬ−１２の関与は認められなかった。一方非スキルス性胃ガンではＮＫＴ細胞、−ＶＥＧＦ、ＮＫ細胞、ＩＬ−１２の関与は認められた。大腸ガンでは、ＮＫ細胞、ＮＫＴ細胞、−ＶＥＧＦ、ＩＬ−１２の関与が認められた。前立腺ガンでは、ＮＫ細胞、ＩＬ−１２の関与は認められ、ＮＫＴ細胞、−ＶＥＧＦの関与は認められなかった。乳ガンではＩＬ−１２、−ＶＥＧＦの関与は認められ、ＮＫＴ細胞、ＮＫ細胞の関与は認められなかった。肺ガンではＩＬ−１２、−ＶＥＧＦの関与は認められ、ＮＫ細胞、ＮＫＴ細胞の関与は認められなかった。
図３は、肺ガンの組織型別に各マーカーの寄与率を偏回帰係数で評価したものである。組織型別に共通性と特異性が認められた。肺癌全体ではＩＬ−１２と−ＶＥＧＦのみが寄与（貢献）しているとの結果であった。しかしＩＬ−１２は組織型別とは無関係に寄与率は最大であった。一方、−ＶＥＧＦは扁平上皮癌が最も寄与率が高くついで肺腺癌であり大細胞癌と小細胞癌では全く寄与していないとの結果を得た。ＮＫＴ細胞は、肺大細胞癌でのみ寄与していたが、ＮＫ細胞は肺腺癌のみで寄与していた。
▲１▼血管新生阻害作用、▲２▼Ｔｈ１サイトカイン（ＴＮＦα、ＩＦＮＹ、ＩＬ−１２）を誘導してＣＴＬを活性化する作用、▲３▼ＮＫ細胞数もしくはその活性化作用、及び▲４▼ＮＫＴ細胞数もしくはその活性化作用による４種類の作用メカニズムはそれぞれ独立して抗腫瘍作用を発揮しているとの考え方に従ってそれぞれの寄与率を検討した各変数の許容度から各成分に関して多重共線性が若干認められた。このため実際には上述の▲１▼〜▲４▼のパスが連動して抗腫瘍性を発揮している可能性がある。この考え方に基づき肺ガンについてＳＰＳＳ登録商標ス・ピー・エス・エス株式会社製）を用いて主成分分析を行った。図４〜７に示すように、最も多い寄与率の大きい成分の組み合わせ（第１成分）は、Ｔｈ１サイトカイン（ＴＮＦα、ＩＦＮＹ、ＩＬ−１２）とＮＫＴ細胞（ＣＤ３（＋）ＣＤ１６１（＋））の組み合わせであった。以下、第２成分はＴｈ１サイトカインとＮＫ細胞の組み合わせであった。第３成分はＮＫ細胞とＮＫＴ細胞との組み合わせであり、第４成分は−ＶＥＧＦが独立していることが判明した。
胃癌（スキルス胃癌と非スキルス胃癌）、乳癌、大腸癌、前立腺癌のそれぞれにおいても癌免疫治療への主成分分析を行った。前立腺癌を除いては肺癌と同様に第１成分（最も寄与率の大きい免疫系の組み合わせ）はＴｈ１サイトカインとＮＫＴ細胞の組み合せであり、第２成分はＴｈ１サイトカインとＮＫ細胞であり、第３成分はＮＫＴ細胞とＮＫ細胞であった。そして胃癌、肺癌の第４成分は−ＶＥＧＦであった。
前立腺癌は第１成分がＴｈ１サイトカインとＮＫＴ細胞である。第２成分がＴｈ１サイトカインとＮＫ細胞である。第３成分は−ＶＥＧＦとＴｈ１／Ｔｈ２であった。すなわち前立腺癌では他の癌と著しく異なる傾向が認められた。
図８〜１１は、各癌の組織別に各ファクターの寄与度を分析したもので、これにより、各癌に対しての、活性化を刺激するマーカーを明らかにした。図８は、胃がんへの寄与分析を示す（第１〜４成分）。図中、黒◆は胃がん全体での分析、○はスキルス性胃がんでの分析、△は非スキルス性胃がんでの分析である。三種とも略同一の傾向であった。第一成分（最も寄与率の大きい免疫系の組み合わせ）は、ＣＤ３（＋）ＣＤ１６１（＋）及びＣＤ３（＋）ＣＤ１６１（＋）ＰＥＲＦが寄与率大でありＮＫＴ細胞の寄与が確認できる。またＴｈ１サイトカインの寄与も大きい。
図９は、乳癌への寄与分析を示す（第１〜３成分）。図１０は、大腸癌への寄与分析を示す（第１〜３成分）。図１１は、肺癌への寄与分析を示す（第１〜４成分）。図１２は、前立腺癌への寄与分析を示す（第１〜４成分）。
（実施例２）
抗がん剤、放射腺治療、あるいはステロイド療法との併用をおこなった各種ガン患者に、ＩＬ−Ｘ（（株）東西医薬研究所）、さめ軟骨（セイシン企業）、及びα１，３構造をもつ糖類が、各推奨処方により投与された。処置患者群で、ガンの種類とＮＫ細胞の活性化能、ＮＫＴ細胞の活性化能、血管新生阻害能、ＩＬ−１２の誘導産生能及びＩＦＮＹ誘導産生能との関係を分析した。その結果、著効を示した全ての症例で、ＮＫ細胞の活性化能又はＮＫＴ細胞の活性化能は維持されていた（約１０％以上）が、ＩＬ−１２の誘導産生能はいずれも著しい低下を示し、いずれも７．８ｐｇ／ｍｌ以下であった。
（実施例３）
実施例１と同様な方法で、処置患者数及びガンの種類を変えて、ガンの種類とＮＫ細胞の活性化能、ＮＫＴ細胞の活性化能、血管新生阻害能、ＩＬ−１２の誘導産生能及びＩＦＮＹ誘導産生能の寄与の関係を統計解析のパッケージソフトＳＰＳＳ登録商標（エス・ピー・エス・エス株式会社製）を用いて重回帰分析によって解析した。
図１３と図１３−２は、ＮＫＴ細胞ＣＤ３（＋）ＣＤ１６１（＋）、ＮＫ細胞ＣＤ３（−）ＣＤ１６１（＋）、ＩＦＮＹ、ＶＥＧＦ（マイナス値）の４変数を用いたときの対悪性腫瘍例への貢献度を偏回帰係数で評価した実例である。図１３はその数値表であり、図１３−２は数値を図式化した。
悪性黒色腫では、−ＶＥＧＦ、ＩＦＮＹの関与は認められ、ＮＫＴ細胞、ＮＫ細胞の関与は認められなかった。胃ガン（全体）では、ＮＫ細胞、ＮＫＴ細胞、−ＶＥＧＦ、ＩＦＮＹの関与が認められた。肝ガンでは、ＮＫ細胞、ＮＫＴ細胞、ＩＦＮＹの関与が認められ、−ＶＥＧＦの関与は認められなかった。子宮ガンでは、−ＶＥＧＦ、ＩＦＮＹの関与は認められ、ＮＫＴ細胞、ＮＫ細胞の関与は認められなかった。腎ガンでは、ＮＫＴ細胞、−ＶＥＧＦの関与は認められ、ＮＫ細胞、ＩＮＦγの関与は認められなかった。精巣ガンでは、ＮＫＴ細胞、−ＶＥＧＦの関与は認められ、ＮＫ細胞、ＩＮＦγの関与は認められなかった。舌ガンでは、ＮＫ細胞、ＮＫＴ細胞、ＩＦＮＹの関与が認められ、−ＶＥＧＦの関与は認められなかった。前立腺ガンではＮＫ細胞の関与は認められ、−ＶＥＧＦ、ＩＦＮＹ、ＮＫＴ細胞の関与は認められなかった。大腸ガンでは、ＮＫ細胞、ＮＫＴ細胞、−ＶＥＧＦ、ＩＦＮＹの関与が認められた。乳ガンではＩＦＮＹ、−ＶＥＧＦの関与は認められ、ＮＫＴ細胞、ＮＫ細胞の関与は認められなかった。肺ガンではＩＦＮＹ、ＮＫ細胞、−ＶＥＧＦの関与は認められ、ＮＫＴ細胞の関与は認められなかった。卵巣ガンでは、ＩＦＮＹの関与が認められ、ＮＫＴ細胞、ＮＫ細胞、−ＶＥＧＦの関与は認められなかった。膵ガンでは、ＮＫＴ細胞、ＮＫ細胞の関与が認められ、ＩＦＮＹ、−ＶＥＧＦの関与は認められなかった。
図１４と図１４−２は、ＮＫＴ細胞ＣＤ３（＋）ＣＤ１６１（＋）、ＮＫ細胞ＣＤ３（−）ＣＤ１６１（＋）、ＩＬ−１２、ＶＥＧＦ（マイナス値）の４変数を用いたときの対悪性腫瘍例への貢献度を偏回帰係数で評価した実例である。図１４はその数値表であり、図１４−２は数値を図式化した。
悪性黒色腫では、−ＶＥＧＦ、ＩＬ−１２の関与は認められ、ＮＫＴ細胞、ＮＫ細胞の関与は認められなかった。胃ガン（全体）では、ＮＫ細胞、ＮＫＴ細胞、−ＶＥＧＦの関与が認められ、ＩＬ−１２の関与は認められなかった。肝ガンでは、ＮＫ細胞、ＮＫＴ細胞の関与が認められ、ＩＬ−１２、−ＶＥＧＦの関与は認められなかった。子宮ガンでは、−ＶＥＧＦ、ＩＬ−１２の関与は認められ、ＮＫＴ細胞、ＮＫ細胞の関与は認められなかった。腎ガンでは、ＮＫＴ細胞、−ＶＥＧＦ、ＮＫ細胞、ＩＬ−１２の関与は認められた。精巣ガンでは、ＮＫＴ細胞、−ＶＥＧＦの関与は認められ、ＮＫ細胞、ＩＬ−１２の関与は認められなかった。舌ガンでは、ＮＫ細胞、ＮＫＴ細胞、ＩＬ−１２の関与が認められ、−ＶＥＧＦの関与は認められなかった。前立腺ガンではＮＫ細胞、ＩＬ−１２の関与は認められ、−ＶＥＧＦ、ＮＫＴ細胞の関与は認められなかった。大腸ガンでは、ＮＫＴ細胞、−ＶＥＧＦ、ＩＬ−１２の関与が認められ、ＮＫ細胞の関与は認められなかった。乳ガンではＩＬ−１２、−ＶＥＧＦの関与は認められ、ＮＫＴ細胞、ＮＫ細胞の関与は認められなかった。肺ガンではＩＬ−１２、ＮＫ細胞、−ＶＥＧＦの関与は認められ、ＮＫＴ細胞の関与は認められなかった。卵巣ガンでは、ＩＬ−１２の関与が認められ、ＮＫＴ細胞、ＮＫ細胞、−ＶＥＧＦの関与は認められなかった。膵ガンでは、ＮＫＴ細胞、ＩＬ−１２、ＮＫ細胞の関与が認められ、−ＶＥＧＦの関与は認められなかった。
以上の結果から各悪性腫瘍のタイプによって、ＮＫ細胞の活性化能、ＮＫＴ細胞の活性化能、血管新生阻害能、ＩＬ−１２の誘導産生能及びＩＦＮＹの誘導産生能に寄与度差が認められることが判明した。この結果は個々の悪性腫瘍患者の病態を知るのみならず治療法の指針となり、オーダーメード治療をする際の治療指針を提供する。また、抗ガン剤、放射線、ステロイド療法を併用する場合、ＮＫ、ＮＫＴ細胞、−ＶＥＧＦは抑制されないが、ＩＦＮＹやＩＬ−１２は抑制されることがわかっている。このような併用療法を行う場合でも有効な治療指針であるものと考えられる。
産業上の利用可能性
以上の実験および実施例によれば、ＮＫ細胞の活性化能、ＮＫＴ細胞の活性化能、血管新生阻害能、ＩＬ−１２の誘導産生能、及びＩＦＮＹの誘導産生能は、ガンのタイプによって特異的な寄与率のあることが見出され、ガン治療における画期的な成果を達成した。
【図面の簡単な説明】
【図１】ＮＫＴ細胞ＣＤ３（＋）ＣＤ１６１（＋）、ＮＫ細胞ＣＤ３（−）ＣＤ１６１（＋）、ＩＦＮＹ、ＶＥＧＦ（マイナス値）の４変数を用いたときの悪性ガン例の貢献度を偏回帰係数で評価した実例で、その数値表である。
【図２】ＮＫＴ細胞ＣＤ３（＋）ＣＤ１６１（＋）（図中ａ）、ＮＫ細胞ＣＤ３（−）ＣＤ１６１（＋）（図中ｂ）、ＩＦＮＹ（図中ｃ）、ＶＥＧＦ（マイナス値）（図中ｄ）の４変数を用いたときの悪性ガン例の貢献度を偏回帰係数で評価した実例で、その数値を図式化した。図中左より、胃ガン４６例、スキルス胃ガン２２例、非スキルス胃ガン２４例、大腸ガン５４例、前立腺ガン１６例、乳ガン６６例、肺ガン５９例の統計処理による。
【図２−２】ＮＫＴ細胞ＣＤ３（＋）ＣＤ１６１（＋）、ＮＫ細胞ＣＤ３（−）ＣＤ１６１（＋）、ＩＬ−１２、ＶＥＧＦ（マイナス値）の４変数を用いたときの悪性ガン例の貢献度を偏回帰係数で評価した実例で、その数値を図式化した。図中左より、胃ガン４６例、スキルス胃ガン２２例、非スキルス胃ガン２４例、大腸ガン５５例、前立腺ガン１６例、乳ガン６６例、肺ガン３７５例の統計処理による。
【図３】肺ガン組織型別のガン免疫療法のマーカー別寄与率の比較図。ＮＫＴ細胞ＣＤ３（＋）ＣＤ１６１（＋）（図中ａ）、ＮＫ細胞ＣＤ３（−）ＣＤ１６１（＋）（図中ｂ）、ＩＬ−１２（図中ｃ）、ＶＥＧＦ（マイナス値）（図中ｄ）の４変数を用いたときの悪性ガン例の貢献度を偏回帰係数で評価した実例で、その数値を図式化した。図中左より肺ガン全体３７７例、肺腺ガン２６６例、肺大細胞ガン８例、肺小細胞ガン１８例、肺扁平上皮ガン４３例の統計処理による。
【図４】癌免疫治療への主成分分析（第１成分）。図中ａ：胃ガン、ｂ：スキルス性胃ガン、ｃ：非スキルス性胃ガン、ｄ：乳ガン、ｅ：大腸ガン、ｆ：肺ガン、ｇ：前立腺ガンを意味する。
【図５】癌免疫治療への主成分分析（第２成分）。図中ａ：胃ガン、ｂ：スキルス性胃ガン、ｃ：非スキルス性胃ガン、ｄ：乳ガン、ｅ：大腸ガン、ｆ：肺ガン、ｇ：前立腺ガンを意味する。
【図６】癌免疫治療への主成分分析（第３成分）。図中ａ：胃ガン、ｂ：スキルス性胃ガン、ｃ：非スキルス性胃ガン、ｄ：乳ガン、ｅ：大腸ガン、ｆ：肺ガン、ｇ：前立腺ガンを意味する。
【図７】癌免疫治療への主成分分析（第４成分）。図中ａ：胃ガン、ｂ：スキルス性胃ガン、ｄ：乳ガン、ｆ：肺ガン、ｇ：前立腺ガンを意味する。
【図８】胃がんへの寄与分析を示す（第１〜４成分）。図中、黒◆は胃がん全体での分析、○はスキルス性胃がんでの分析、△は非スキルス性胃がんでの分析である。
【図９】乳癌への寄与分析を示す（第１〜３成分）。
【図１０】大腸癌への寄与分析を示す（第１〜３成分）。
【図１１】肺癌への寄与分析を示す（第１〜４成分）。
【図１２】前立腺癌への寄与分析を示す（第１〜４成分）。
【図１３】ＮＫＴ細胞ＣＤ３（＋）ＣＤ１６１（＋）、ＮＫ細胞ＣＤ３（−）ＣＤ１６１（＋）、ＩＦＮＹ、ＶＥＧＦ（マイナス値）の４変数を用いたときの悪性ガン例の貢献度を偏回帰係数で評価した実例で、その数値表である。
【図１３−２】ＮＫＴ細胞ＣＤ３（＋）ＣＤ１６１（＋）、ＮＫ細胞ＣＤ３（−）ＣＤ１６１（＋）、ＩＦＮＹ、ＶＥＧＦ（マイナス値）の４変数を用いたときの悪性ガン例の貢献度を偏回帰係数で評価した実例で、その数値を図式化した。図中左より、悪性黒色腫２１例、胃ガン３５６例、肝ガン１３４例、子宮ガン１２６例、腎ガン４８例、精巣ガン１８例、舌ガン１２例、前立腺ガン１９３例、大腸ガン５０５例、乳ガン５００例、肺ガン５６２例、卵巣ガン１５１例、膵ガン９８例の統計処理による。
【図１４】ＮＫＴ細胞ＣＤ３（＋）ＣＤ１６１（＋）、ＮＫ細胞ＣＤ３（−）ＣＤ１６１（＋）、ＩＬ−１２、ＶＥＧＦ（マイナス値）の４変数を用いたときの悪性ガン例の貢献度を偏回帰係数で評価した実例で、その数値表である。
【図１４−２】ＮＫＴ細胞ＣＤ３（＋）ＣＤ１６１（＋）（図中ａ）、ＮＫ細胞ＣＤ３（−）ＣＤ１６１（＋）（図中ｂ）、ＩＬ−１２（図中ｃ）、ＶＥＧＦ（マイナス値）（図中ｄ）の４変数を用いたときの悪性ガン例の貢献度を偏回帰係数で評価した実例で、その数値を図式化した。図中左より、悪性黒色腫２１例、胃ガン３５６例、肝ガン１３４例、子宮ガン１２６例、腎ガン４８例、精巣ガン１８例、舌ガン１２例、前立腺ガン１９３例、大腸ガン５０５例、乳ガン５００例、肺ガン５６２例、卵巣ガン１５１例、膵ガン９８例の統計処理による。
【図１】
2003030938.tif 000002
【図２】
2003030938.tif 000003
【図２−２】
2003030938.tif 000004
【図３】
2003030938.tif 000005
【図４】
2003030938.tif 000006
【図５】
2003030938.tif 000007
【図６】
2003030938.tif 000008
【図７】
2003030938.tif 000009
【図８】
2003030938.tif 000010
【図９】
2003030938.tif 000011
【図１０】
2003030938.tif 000012
【図１１】
2003030938.tif 000013
【図１２】
2003030938.tif 000014
【図１３】
2003030938.tif 000015
【図１３−２】
2003030938.tif 000016
【図１４】
2003030938.tif 000017
【図１４−２】
2003030938.tif 000018
【手続補正書】
【提出日】平成15年8月18日(2003.8.18)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
次の少なくとも一が選択される各ガンの免疫治療の診断方法；
１）スキルス胃ガンの処置に際し、ＮＫ細胞の活性化能、ＮＫＴ細胞の活性化能、及び血管新生阻害能を検査し、その少なくとも１のその検査結果を重視しマーカーにすること。
２）非スキルス胃ガンの処置に際し、ＩＬ−１２の誘導産生能、ＮＫＴ細胞の活性化能、血管新生阻害能、及びＩＦＮＹの誘導産生能を検査し、その少なくとも１のその検査結果を重視しマーカーにすること。
３）大腸ガンの処置に際し、ＩＬ−１２の誘導産生能、血管新生阻害能、ＩＦＮＹの誘導産生能、ＮＫＴ細胞の活性化能、及びＮＫ細胞の活性化能を検査し、その少なくとも１のその検査結果を重視しマーカーにすること。
４）前立腺ガンの処置に際し、ＮＫ細胞の活性化能、及びＩＬ−１２の誘導産生能を検査し、その少なくとも１のその検査結果を重視しマーカーにすること。
５）乳ガンの処置に際し、ＩＦＮＹの誘導産生能、ＩＬ−１２の誘導産生能、及び血管新生阻害能を検査し、その少なくとも１のその検査結果を重視しマーカーにすること。
６）肺ガンの処置に際し、ＩＦＮＹの誘導産生能、ＩＬ−１２の誘導産生能、ＮＫ細胞の活性化能、及び血管新生阻害能を検査し、その少なくとも１のその検査結果を重視しマーカーにすること。
７）肺扁平上皮ガンの処置に際し、ＩＬ−１２の誘導産生能、及び血管新生阻害能を検査し、その少なくとも１のその検査結果を重視しマーカーにすること。
８）肺小細胞ガンの処置に際し、ＩＬ−１２の誘導産生能を検査し、その検査結果を少なくとも重視しマーカーにすること。
９）肺大細胞ガンの処置に際しＩＬ−１２の誘導産生能、及びＮＫＴ細胞の活性化能を検査し、その少なくとも１のその検査結果を重視しマーカーにすること。
１０）肺腺ガンの処置に際し、ＩＬ−１２の誘導産生能、ＮＫ細胞の活性化能、及び血管新生阻害能を検査し、その少なくとも１のその検査結果を重視しマーカーにすること。
１１）悪性黒色腫の処置に際し、血管新生阻害能、ＩＦＮＹの誘導産生能、及びＩＬ−１２の誘導産生能を検査し、その少なくとも１のその検査結果を重視しマーカーにすること。
１２）肝ガンの処置に際し、ＮＫ細胞の活性化能、ＮＫＴ細胞の活性化能、及びＩＦＮＹの誘導産生能を検査し、その少なくとも１のその検査結果を重視しマーカーにすること。
１３）子宮ガンの処置に際し、血管新生阻害能、ＩＦＮＹの誘導産生能、及びＩＬ−１２の誘導産生能を検査し、その少なくとも１のその検査結果を重視しマーカーにすること。
１４）腎ガンの処置に際し、ＮＫ細胞の活性化能、ＮＫＴ細胞の活性化能、血管新生阻害能、及びＩＬ−１２の誘導産生能を検査し、その少なくとも１のその検査結果を重視しマーカーにすること。
１５）精巣ガンの処置に際し、ＮＫＴ細胞の活性化能、及び血管新生阻害能を検査し、その少なくとも１のその検査結果を重視しマーカーにすること。
１６）舌ガンの処置に際し、ＮＫ細胞の活性化能、ＮＫＴ細胞の活性化能、ＩＬ−１２の誘導産生能、及びＩＦＮＹの誘導産生能を検査し、その少なくとも１のその検査結果を重視しマーカーにすること。
１７）卵巣ガンの処置に際し、ＩＦＮＹの誘導産生能、及びＩＬ−１２の誘導産生能を検査し、その少なくとも１のその検査結果を重視しマーカーにすること。
１８）膵ガンの処置に際し、ＮＫ細胞の活性化能、ＮＫＴ細胞の活性化能、及びＩＬ−１２の誘導産生能を検査し、その少なくとも１のその検査結果を重視しマーカーにすること。
【請求項２】
少なくとも一が選択される各ガンの免疫治療剤のスクリーニング方法；
１）スキルス胃ガンの免疫治療剤のスクリーニングに際し、ＮＫ細胞の活性化能、ＮＫＴ細胞の活性化、及び血管新生阻害能を検査し、その少なくとも１の検査結果を重視しマーカーにすること。
２）非スキルス胃ガンの免疫治療剤のスクリーニングに際し、ＩＬ−１２の誘導産生能、ＮＫＴ細胞の活性化能、血管新生阻害能、及びＩＦＮＹの誘導産生能を検査し、その少なくとも１の検査結果を重視しマーカーにすること。
３）大腸ガンの免疫治療剤のスクリーニングに際し、ＩＬ−１２の誘導産生能、ＩＦＮＹの誘導産生能、ＮＫＴ細胞の活性化能、血管新生阻害能、及びＮＫ細胞の活性化能を検査し、その少なくとも１の検査結果を重視しマーカーにすること。
４）前立腺ガンの免疫治療剤のスクリーニングに際し、ＩＬ−１２の誘導産生能、及びＮＫ細胞の活性化能を検査し、その少なくとも１の検査結果を重視しマーカーにすること。
５）乳ガンの免疫治療剤のスクリーニングに際し、ＩＬ−１２の誘導産生能、ＩＦＮＹの誘導産生能、及び血管新生阻害能を検査し、その少なくとも１の検査結果を重視しマーカーにすること。
６）肺ガンの免疫治療剤のスクリーニングに際しＩＦＮＹの誘導産生能、ＩＬ−１２の誘導産生能、ＮＫ細胞の活性化能、及び血管新生阻害能を検査し、その少なくとも１の検査結果を重視しマーカーにすること。
７）肺扁平上皮ガンの免疫治療剤のスクリーニングに際し、ＩＬ−１２の誘導産生能、及び血管新生阻害能を検査し、その少なくとも１の検査結果を重視しマーカーにすること。
８）肺小細胞ガンの免疫治療剤のスクリーニングに際し、ＩＬ−１２の誘導産生能を検査し、少なくともその検査結果を重視しマーカーにすること。
９）肺大細胞ガンの免疫治療剤のスクリーニングに際し、ＩＬ−１２の誘導産生能及びＮＫＴ細胞の活性化能を検査し、その少なくとも１の検査結果を重視しマーカーにすること。
１０）肺腺ガンの免疫治療剤のスクリーニングに際し、ＩＬ−１２の誘導産生能、ＮＫ細胞の活性化能、及び血管新生阻害能を検査し、その少なくとも１の検査結果を重視しマーカーにすること。
１１）悪性黒色腫の免疫治療剤のスクリーニングに際し、血管新生阻害能、ＩＦＮＹの誘導産生能、及びＩＬ−１２の誘導産生能を検査し、その少なくとも１の検査結果を重視しマーカーにすること。
１２）肝ガンの免疫治療剤のスクリーニングに際し、ＮＫ細胞の活性化能、ＮＫＴ細胞の活性化能、及びＩＦＮＹの誘導産生能を検査し、その少なくとも１の検査結果を重視しマーカーにすること。
１３）子宮ガンの免疫治療剤のスクリーニングに際し、血管新生阻害能、ＩＦＮＹの誘導産生能、及びＩＬ−１２の誘導産生能を検査し、その少なくとも１の検査結果を重視しマーカーにすること。
１４）腎ガンの免疫治療剤のスクリーニングに際し、ＮＫ細胞の活性化能、ＮＫＴ細胞の活性化能、血管新生阻害能、及びＩＬ−１２の誘導産生能を検査し、その少なくとも１の検査結果を重視しマーカーにすること。
１５）精巣ガンの免疫治療剤のスクリーニングに際し、ＮＫＴ細胞の活性化能、及び血管新生阻害能を検査し、その少なくとも１の検査結果を重視しマーカーにすること。
１６）舌ガンの免疫治療剤のスクリーニングに際し、ＮＫ細胞の活性化能、ＮＫＴ細胞の活性化能、ＩＬ−１２の誘導産生能、及びＩＦＮＹの誘導産生能を検査し、その少なくとも１の検査結果を重視しマーカーにすること。
１７）卵巣ガンの免疫治療剤のスクリーニングに際し、ＩＦＮＹの誘導産生能、及びＩＬ−１２の誘導産生能を検査し、その少なくとも１の検査結果を重視しマーカーにすること。
１８）膵ガンの免疫治療剤のスクリーニングに際し、ＮＫ細胞の活性化能、ＮＫＴ細胞の活性化能、及びＩＬ−１２の誘導産生能を検査し、その少なくとも１の検査結果を重視しマーカーにすること。
【請求項３】
ガンを組織別及び／又は組織型別に処置するために、ガン処置の作用機作を▲１▼血管新生阻害作用、▲２▼Ｔｈ１サイトカイン（ＴＮＦａ、ＩＦＮＹ、ＩＬ−１２）を誘導してＣＴＬを活性化する作用、▲３▼ＮＫ細胞数もしくはその活性化作用、及び▲４▼ＮＫＴ細胞数もしくはその活性化作用に区別し、各作用に対応するマーカーを測定し、その測定値をガンの組織別及び／又は組織型別に分析し、もって、各ガンの組織別及び／又は組織型別に処方を選択することを特徴とするガンの免疫治療のための検査方法。
【請求項４】
▲１▼血管新生阻害作用の測定がＶＧＦ値のマイナス値（−ＶＥＧＦ）で、▲２▼Ｔｈ１サイトカイン（ＴＮＦａ、ＩＦＮＹ、ＩＬ−１２）を誘導してＣＴＬを活性化する作用の測定が、ＩＦＮＹ産生能力（ＩＦＮＹ値）もしくはＩＬ−１２産生能力（ＩＬ−１２値）で又はＣＤ８（＋）パーフォリン値の表面マーカーで、▲３▼ＮＫ細胞数もしくはその活性化作用の測定がＣＤ３（−）ＣＤ１６１（＋）もしくはＣＤ３（−）ＣＤ１６１（＋）パーフォリン値の表面マーカーで、及び▲４▼ＮＫＴ細胞数もしくはその活性化作用の測定がＣＤ３（＋）ＣＤ１６１（＋）もしくはＣＤ３（＋）ＣＤ１６１（＋）パーフォリン値の表面マーカーでなされる測定法から選ばれる請求項３のガンの免疫治療のための検査方法。
【請求項５】
肺ガンに対する免疫治療剤（方法）であって、請求項３又は４の検査方法によって決定される以下の処方から選択される免疫治療剤（方法）。
１）▲２▼Ｔｈ１サイトカイン（ＴＮＦａ、ＩＦＮＹ、ＩＬ−１２）を誘導してＣＴＬを活性化する作用を有する免疫治療剤と▲４▼ＮＫＴ細胞数の増加もしくはその活性化作用を有する免疫治療剤を併用又は配合して投与するガンの免疫治療。
２）▲２▼Ｔｈ１サイトカイン（ＴＮＦａ、ＩＦＮＹ、ＩＬ−１２）を誘導してＣＴＬを活性化する作用を有する免疫治療剤と▲３▼ＮＫ細胞数の増加もしくはその活性化作用を有する免疫治療剤を併用又は配合して投与するガンの免疫治療。
３）▲３▼ＮＫ細胞数の増加もしくはその活性化作用を有する免疫治療剤と▲４▼ＮＫＴ細胞数の増加もしくはその活性化作用を有する免疫治療剤を併用又は配合して投与するガンの免疫治療。
【請求項６】
胃ガン（スキルス性胃ガンと非スキルス性胃ガン）に対する免疫治療剤（方法）であって、請求項３又は４の検査方法によって決定される以下の処方から選択される免疫治療剤（方法）。
１）▲２▼Ｔｈ１サイトカイン（ＴＮＦａ、ＩＦＮＹ、ＩＬ−１２）を誘導してＣＴＬを活性化する作用を有する免疫治療剤と▲４▼ＮＫＴ細胞数の増加もしくはその活性化作用を有する免疫治療剤を併用又は配合して投与するガンの免疫治療。
２）▲２▼Ｔｈ１サイトカイン（ＴＮＦａ、ＩＦＮＹ、ＩＬ−１２）を誘導してＣＴＬを活性化する作用を有する免疫治療剤と▲３▼ＮＫ細胞数の増加もしくはその活性化作用を有する免疫治療剤を併用又は配合して投与するガンの免疫治療。
３）▲３▼ＮＫ細胞数の増加もしくはその活性化作用を有する免疫治療剤と▲４▼ＮＫＴ細胞数の増加もしくはその活性化作用を有する免疫治療剤を併用又は配合して投与するガンの免疫治療。
【請求項７】
乳ガン、大腸ガンから選ばれるガンに対する免疫治療剤（方法）であって、請求項３又は４の検査方法によって決定される以下の処方から選択される免疫治療剤（方法）。
１）▲２▼Ｔｈ１サイトカイン（ＴＮＦａ、ＩＦＮＹ、ＩＬ−１２）を誘導してＣＴＬを活性化する作用を有する免疫治療剤と▲４▼ＮＫＴ細胞数の増加もしくはその活性化作用を有する免疫治療剤を併用又は配合して投与するガンの免疫治療。
２）▲２▼Ｔｈ１サイトカイン（ＴＮＦａ、ＩＦＮＹ、ＩＬ−１２）を誘導してＣＴＬを活性化する作用を有する免疫治療抽と▲３▼ＮＫ細胞数の増加もしくはその活性化作用を有する免疫治療剤を併用又は配合して投与するガンの免疫治療。
３）▲３▼ＮＫ細胞数の増加もしくはその活性化作用を有する免疫治療剤と▲４▼ＮＫＴ細胞数の増加もしくはその活性化作用を有する免疫治療剤を併用又は配合して投与するガンの免疫治療。
【請求項８】
前立腺ガンに対する免疫治療剤（方法）であって、請求項３又は４の検査方法によって決定される以下の処方から選択される免疫治療剤（方法）。
１）▲２▼Ｔｈ１サイトカイン（ＴＮＦａ、ＩＦＮＹ、ＩＬ−１２）を誘導してＣＴＬを活性化する作用を有する免疫治療剤と▲４▼ＮＫＴ細胞数の増加もしくはその活性化作用を有する免疫治療剤を併用又は配合して投与するガンの免疫治療。
２）▲２▼Ｔｈ１サイトカイン（ＴＮＦａ、ＩＦＮＹ、ＩＬ−１２）を誘導してＣＴＬを活性化する作用を有する免疫治療剤と▲３▼ＮＫ細胞数の増加もしくはその活性化作用を有する免疫治療剤を併用又は配合して投与するガンの免疫治療。
【請求項９】
ガンの免疫治療剤（方法）であって、ガンを組織別及び／又は組織型別に処置するために、ガン処置の作用機作を少なくとも▲１▼血管新生阻害作用、▲２▼Ｔｈ１サイトカイン（ＴＮＦａ、ＩＦＮＹ、ＩＬ−１２）を誘導してＣＴＬを活性化する作用、▲３▼ＮＫ細胞数もしくはその活性化作用、及び▲４▼ＮＫＴ細胞数もしくはその活性化作用に区別し、各作用に対応するマーカーを測定し、その測定値をガンの組織別及び／又は組織型別に分析し、もって、▲３▼ＮＫ細胞数もしくはその活性化作用、又は▲４▼ＮＫＴ細胞数もしくはその活性化作用が優位の場合に、▲３▼ＮＫ細胞数もしくはその活性化作用、又は▲４▼ＮＫＴ細胞数もしくはその活性化作用を有するガン免疫治療剤と、抗ガン化学療法剤、放射線治療、ステロイド治療等から選ばれる少なくも一の処方と併用するガンの免疫治療剤（方法）。
【請求項１０】
ガンの免，疫治療剤（方法）であって、ガンを組織別及び／又は組織型別に処置するために、ガン処置の作用機作を少なくとも▲１▼血管新生阻害作用、▲２▼Ｔｈ１サイトカイン（ＴＮＦａ、ＩＦＮＹ、ＩＬ−１２）を誘導してＣＴＬを活性化する作用、▲３▼ＮＫ細胞数もしくはその活性化作用、及び▲４▼ＮＫＴ細胞数もしくはその活性化作用に区別し、各作用に対応するマーカーを測定し、その測定値をガンの組織別及び／又は組織型別に分析し、もって、▲２▼Ｔｈ１サイトカイン（ＴＮＦａ、ＩＦＮＹ、ＩＬ−１２）を誘導してＣＴＬを活性化する作用のみが優位のときは、この系を障害しない程度の抗ガン化学療法剤、放射線治療、ステロイド治療等から選ばれる少なくも一の処方と併用するか、又は▲２▼Ｔｈ１サイトカイン（ＴＮＦａ、ＩＦＮＹ、ＩＬ−１２）を誘導してＣＴＬを活性化する作用を有するガン免疫治療剤のみで処方するガンの免疫治療剤（方法）。
【請求項１１】
ガンの免疫治療剤（方法）であって、ガンを組織別及び／又は組織型別に処置するために、ガン処置の作用機作を少なくとも▲１▼血管新生阻害作用、▲２▼Ｔｈ１サイトカイン（ＴＮＦａ、ＩＦＮＹ、ＩＬ−１２）を誘導してＣＴＬを活性化する作用、▲３▼ＮＫ細胞数もしくはその活性化作用、及び▲４▼ＮＫＴ細胞数もしくはその活性化作用に区別し、各作用に対応するマーカーを測定し、その測定値をガンの組織別及び／又は組織型別に分析し、もって、▲３▼ＮＫ細胞数もしくはその活性化作用、又は▲４▼ＮＫＴ細胞数もしくはその活性化作用が減弱している場合は、この活性化作用を有するガン免疫治療剤で処方するガンの免疫治療剤（方法）。
【請求項１２】
▲１▼血管新生阻害作用の測定がＶＥＧＦ値のマイナス値（−ＶＥＧＦ）で、▲２▼Ｔｈ１サイトカイン（ＴＮＦａ、ＩＦＮＹ、ＩＬ−１２）を誘導してＣＴＬを活性化する作用の測定が、ＩＦＮＹ産生能力（ＩＦＮＹ値）もしくはＩＬ−１２産生能力（ＩＬ−１２値）で又はＣＤ８（＋）パーフォリン値の表面マーカーで、▲３▼ＮＫ細胞数もしくはその活性化作用の測定がＣＤ３（−）ＣＤ１６１（＋）もしくはＣＤ３（−）ＣＤ１６１（＋）パーフォリン値の表面マーカーで、及び▲４▼ＮＫＴ細胞数もしくはその活性化作用の測定がＣＤ３（＋）ＣＤ１６１（＋）もしくはＣＤ３（＋）ＣＤ１６１（＋）パーフォリン値の表面マーカーでなされる測定法によって決定される請求項９〜１１のガンの免疫治療剤（方法）。
【請求項１３】
ガンの免疫治療剤のスクリーニング方法であって、ガンを組織別及び／又は組織型別に処置するために、ガン処置の作用機作を少なくとも▲１▼血管新生阻害作用、▲２▼Ｔｈ１サイトカイン（ＴＮＦａ、ＩＦＮＹ、ＩＬ−１２）を誘導してＣＴＬを活性化する作用、▲３▼ＮＫ細胞数もしくはその活性化作用、及び▲４▼ＮＫＴ細胞数もしくはその活性化作用に区別し、候補化合物投与による各作用に対応するマーカーの測定値の特徴をもって、候補化合物の各ガンの組織別及び／又は組織型別の処方を選択することを特徴とするガンの免疫治療剤のスクリーニング方法。
【請求項１４】
▲１▼血管新生阻害作用の測定がＶＥＧＦ値のマイナス値（−ＶＥＧＦ）で、▲２▼Ｔｈ１サイトカイン（ＴＮＦａ、ＩＦＮＹ、ＩＬ−１２）を誘導してＣＴＬを活性化する作用の測定が、ＩＦＮＹ産生能力（ＩＦＮＹ値）もしくはＩＬ−１２産生能力（ＩＬ−１２値）で又はＣＤ８（＋）パーフォリン値の表面マーカーで、▲３▼ＮＫ細胞数もしくはその活性化作用の測定がＣＤ３（−）ＣＤ１６１（＋）もしくはＣＤ３（−）ＣＤ１６１（＋）パーフォリン値の表面マーカーで、及び▲４▼ＮＫＴ細胞数もしくはその活性化作用の測定がＣＤ３（＋）ＣＤ１６１（＋）もしくはＣＤ３（＋）ＣＤ１６１（＋）パーフォリン値の表面マーカーでなされる測定法から選ばれる請求項１３のガンの免疫治療剤のスクリーニング方法。
【請求項１５】
請求項１〜１４の何れか一に記載の情報を利用したガン患者のサンプルでのガンの検査方法。
【請求項１６】
請求項１〜１４の何れか一に記載の情報を利用したガン患者のサンプルでのガンの診断方法。
【請求項１７】
請求項１〜１６の何れか一に記載の情報を利用したガンの治療方法。
【請求項１８】
請求項１〜１７の何れか一に記載の情報を自然法則を利用した媒体に担持した商業用媒体。
【請求項１９】
請求項１８の商業用媒体を利用した商業方法。
【手続補正２】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００２７
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００２７】
の褐藻類コンブ科由来のフコイダンには少なくとも３種類のフコイダン、Ｆ−フコイダン（α−Ｌ−フコースのポリマー）、Ｕ−フコイダン（β−Ｄ−グルクロン酸とα−Ｄ−マンノースを主鎖とし、側鎖にα−Ｌ−フコースをもつ）、Ｇ−フコイダン（β−Ｄ−ガラクトースを主鎖とし、側鎖にα−Ｌ−フコースをもつ）、が存在しており、いずれのフコイダンもフコースが硫酸化されている。
硫酸オリゴ糖としては、例えば株式会社白子製のスサビノリ（Ｐｏｒｙｐｈｙｘａ  Ｙｅｚａｅｎｓｉｓ）由来の抽出物があげられる。該抽出物の主成分はα１，３結合のガラクタン硫酸のオリゴ糖とα１，３結合およびβ１，４結合よりなるガラクタン硫酸のオリゴ糖である。
本発明のＣＴＬ活性化剤（ＩＬ−１２産生誘導剤、ＩＦＮＹ産生誘導剤）、ＮＫ活性化剤、ＮＫＴ活性化剤は、本発明の測定法を伴い、その適用法を選別することで肺ガン（肺扁平上皮ガン、肺腺ガン、小細胞肺ガン）、胸腺腫、甲状腺ガン、前立腺ガン、腎ガン、膀胱ガン、結腸ガン、直腸ガン、食道ガン、盲腸ガン、尿管ガン、乳ガン、子宮頸ガン、脳ガン、舌ガン、咽頭ガン、鼻腔ガン、喉頭ガン、胃ガン、肝ガン、胆管ガン、精巣ガン、卵巣ガン、子宮（体）ガン、転移性骨ガン、悪性黒色腫、骨肉腫、悪性リンパ腫、形質細胞腫、脂肪肉腫、膵ガン等の治療に有効である。
本発明に係るＣＴＬ活性化剤（ＩＬ−１２産生誘導剤、ＩＦＮＹ産生誘導剤）、ＮＫ活性化剤、ＮＫＴ活性化剤は、本発明の測定法による結果を指標として、その活性化を誘導または増強し、さらに活性化を維持できる処方にて用いられる。すなわち、指標をもとに、その活性化を誘導または増強し、さらに活性化を維持できる投与量、ならびに投与期間を選択して用いられる。具体的には、その投与量は、ＮＫ活性化剤又はＮＫＴ活性化剤であるα−１，３グルカン構造を持つ化合物は１ｇ〜４０ｇ／日程度、好ましくは５ｇ〜２０ｇ／日程度で、ＣＴＬ活性化剤（ＩＬ−１２産生誘導剤、ＩＦＮＹ産生誘導剤）であるβ−１，３グルカン構造を持つ化合物は１ｇ〜１０ｇ／日程度、好ましくは３ｇ〜６ｇ／日程度である。また、投与期間は一般的には１０日間〜２４ヶ月間、投与頻度は１〜３回／日で、好ましくは連日投与である。当該ＣＴＬ活性化剤（ＩＬ−１２産生誘導剤、ＩＦＮＹ産生誘導剤）、ＮＫ活性化剤、
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【手続補正３】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００３４
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００３４】
能及びＩＦＮＹ誘導産生能の寄与の関係を統計解析のパッケージソフトＳＰＳＳ登録商標（エス・ピー・エス・エス株式会社製）を用いて重回帰分析によって解析した。
図１３と図１３−２は、ＮＫＴ細胞ＣＤ３（＋）ＣＤ１６１（＋）、ＮＫ細胞ＣＤ３（−）ＣＤ１６１（＋）、ＩＦＮＹ、ＶＧＦ（マイナス値）の４変数を用いたときの対悪性腫瘍例への貢献度を偏回帰係数で評価した実例である。図１３はその数値表であり、図１３−２は数値を図式化した。
悪性黒色腫では、−ＶＥＧＦ、ＩＦＮＹの関与は認められ、ＮＫＴ細胞、ＮＫ細胞の関与は認められなかった。胃ガン（全体）では、ＮＫ細胞、ＮＫＴ細胞、−ＶＥＧＦ、ＩＦＮＹの関与が認められた。肝ガンでは、ＮＫ細胞、ＮＫＴ細胞、ＩＦＮＹの関与が認められ、−ＶＥＧＦの関与は認められなかった。子宮ガンでは、−ＶＥＧＦ、ＩＦＮＹの関与は認められ、ＮＫＴ細胞、ＮＫ細胞の関与は認められなかった。腎ガンでは、ＮＫＴ細胞、−ＶＥＧＦの関与は認められ、ＮＫ細胞、ＩＦＮγの関与は認められなかった。精巣ガンでは、ＮＫＴ細胞、−ＶＥＧＦの関与は認められ、ＮＫ細胞、ＩＦＮγの関与は認められなかった。舌ガンでは、ＮＫ細胞、ＮＫＴ細胞、ＩＦＮＹの関与が認められ、−ＶＥＧＦの関与は認められなかった。前立腺ガンではＮＫ細胞の関与は認められ、−ＶＥＧＦ、ＩＦＮＹ、ＮＫＴ細胞の関与は認められなかった。大腸ガンでは、ＮＫ細胞、ＮＫＴ細胞、−ＶＥＧＦ、ＩＦＮＹの関与が認められた。乳ガンではＩＦＮＹ、−ＶＥＧＦの関与は認められ、ＮＫＴ細胞、ＮＫ細胞の関与は認められなかった。肺ガンではＩＦＮＹ、ＮＫ細胞、−ＶＥＧＦの関与は認められ、ＮＫＴ細胞の関与は認められなかった。卵巣ガンでは、ＩＦＮＹの関与が認められ、ＮＫＴ細胞、ＮＫ細胞、−ＶＥＧＦの関与は認められなかった。膵ガンでは、ＮＫＴ細胞、ＮＫ細胞の関与が認められ、ＩＦＮＹ、−ＶＥＧＦの関与は認められなかった。
図１４と図１４−２は、ＮＫＴ細胞ＣＤ３（＋）ＣＤ１６１（＋）、ＮＫ細胞ＣＤ３（−）ＣＤ１６１（＋）、ＩＬ−１２、ＶＥＧＦ（マイナス値）の４変数を用いたときの対悪性腫瘍例への貢献度を偏回帰係数で評価した実例である。図１４はその数値表であり、図１４−２は数値を図式化した。
悪性黒色腫では、−ＶＥＧＦ、ＩＬ−１２の関与は認められ、ＮＫＴ細胞、ＮＫ細胞の
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【手続補正４】
【補正対象書類名】図面
【補正対象項目名】図１
【補正方法】変更
【補正の内容】
【図１】
2003030938.tif 000019
【手続補正５】
【補正対象書類名】図面
【補正対象項目名】図２
【補正方法】変更
【補正の内容】
【図２】
2003030938.tif 000020
【手続補正６】
【補正対象書類名】図面
【補正対象項目名】図１３
【補正方法】変更
【補正の内容】
【図１３】
2003030938.tif 000021
【国際調査報告】
2003030938.tif 000022
2003030938.tif 000023
2003030938.tif 000024
2003030938.tif 000025
2003030938.tif 000026
2003030938.tif 000027
2003030938.tif 000028
2003030938.tif 000029
2003030938.tif 000030
2003030938.tif 000031