(57)【要約】吸収性および溶解性が改善された非晶化した２−（１−イソプロポキシカルボニルオキシ−２−メチルプロピル）−７，８−ジメトキシ−４（５Ｈ），１０−ジオキソ−２Ｈ−１，２，３−トリアゾロ［４，５−ｃ］［１］ベンゾアゼピンおよびこれを含んでなる医薬組成物が開示されている。また、非晶化した２−（１−イソプロポキシカルボニルオキシ−２−メチルプロピル）−７，８−ジメトキシ−４（５Ｈ），１０−ジオキソ−２Ｈ−１，２，３−トリアゾロ［４，５−ｃ］［１］ベンゾアゼピンおよびこれを含んでなる医薬組成物の製法が開示されている。
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【特許請求の範囲】
【請求項１】
粉末Ｘ線回折分析図に回折ピークを示さず、３７℃の１重量％メチルセルロース溶液に１５μｇ／ｍＬ〜２０μｇ／ｍＬの溶解度を示す、２−（１−イソプロポキシカルボニルオキシ−２−メチルプロピル）−７，８−ジメトキシ−４（５Ｈ），１０−ジオキソ−２Ｈ−１，２，３−トリアゾロ［４，５−ｃ］［１］ベンゾアゼピン非晶質化合物。
【請求項２】
請求項１に記載の非晶質化合物と、メチルセルロースおよび／またはヒドロキシプロピルメチルセルロースとを含んでなる、組成物。
【請求項３】
請求項１に記載の非晶質化合物と、メチルセルロースおよび／またはヒドロキシプロピルメチルセルロースの合計量との混合比率（重量基準）が１：０．０１〜２の範囲である、請求項２に記載の組成物。
【請求項４】
請求項１に記載の非晶質化合物と、高分子化合物とを含んでなる、組成物。
【請求項５】
前記高分子化合物が、エチルセルロース、ヒドロキシプロピルメチルセルロースフタレート、ヒドロキシプロピルセルロース、カルボキシメチルエチルセルロース、ポリビニルピロリドン、ポリビニルアセタールジエチルアミノアセテート、メタクリル酸コポリマーＬ、アミノアルキルメタクリルアクリレートコポリマーＥ、酢酸ビニル・ビニルピロリドン共重合物から群より選ばれる一種または二種以上である、請求項４に記載の組成物。
【請求項６】
２−（１−イソプロポキシカルボニルオキシ−２−メチルプロピル）−７，８−ジメトキシ−４（５Ｈ），１０−ジオキソ−２Ｈ−１，２，３−トリアゾロ［４，５−ｃ］［１］ベンゾアゼピンを塩化メチレンに溶解後、これを噴霧乾燥することを含んでなる、請求項１に記載の非晶質化合物の製造方法。
【請求項７】
２−（１−イソプロポキシカルボニルオキシ−２−メチルプロピル）−７，８−ジメトキシ−４（５Ｈ），１０−ジオキソ−２Ｈ−１，２，３−トリアゾロ［４，５−ｃ］［１］ベンゾアゼピンと、メチルセルロースおよび／またはヒドロキシプロピルメチルセルロースとを塩化メチレンに溶解後、これを噴霧乾燥することを含んでなる、請求項２または３に記載の組成物の製造方法。
【請求項８】
２−（１−イソプロポキシカルボニルオキシ−２−メチルプロピル）−７，８−ジメトキシ−４（５Ｈ），１０−ジオキソ−２Ｈ−１，２，３−トリアゾロ［４，５−ｃ］［１］ベンゾアゼピンと、前記高分子化合物とを塩化メチレンまたは塩化メチレン／低級アルコール混合溶媒に溶解後、これを噴霧乾燥することを含んでなる、請求項４または５に記載の組成物の製造方法。
【請求項９】
前記低級アルコールが炭素数１〜３のアルキルアルコールである、請求項８に記載の製造方法。
【請求項１０】
請求項１に記載の非晶質化合物または請求項２〜５のいずれか一項に記載の組成物と、医薬上許容される担体を含んでなる、経口投与用医薬組成物。
【請求項１１】
医薬原末として用いられる、請求項１に記載の非晶質化合物または請求項２〜５に記載の組成物。
【請求項１２】
請求項１に記載の非晶質化合物または請求項２〜５に記載の組成物をヒトを含む動物に投与することを含んでなる、アレルギー疾患の予防または治療方法。
【請求項１３】
抗アレルギー薬の製造のための、請求項１に記載の非晶質化合物または請求項２〜５に記載の組成物の使用。
【発明の詳細な説明】
［発明の背景］
発明の分野
本発明は、溶解性および吸収性が改善された非晶質化した２−（１−イソプロポキシカルボニルオキシ−２−メチルプロピル）−７，８−ジメトキシ−４（５Ｈ），１０−ジオキソ−２Ｈ−１，２，３−トリアゾロ［４，５−ｃ］［１］ベンゾアゼピンおよびこれを含有してなる医薬組成物に関する。
背景技術
２−（１−イソプロポキシカルボニルオキシ−２−メチルプロピル）−７，８−ジメトキシ−４（５Ｈ），１０−ジオキソ−２Ｈ−１，２，３−トリアゾロ［４，５−ｃ］［１］ベンゾアゼピン（以下、本明細書において「化合物Ａ」という。）は、下記の化学構造を示す、ＷＯ９９／１６７７０公報（日本特許第３１８８４８２号公報、米国特許第６３７２７３５号公報）に開示された化合物である（これら公報の記載は引用することにより本明細書の開示の一部とされる）。
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この化合物は経口投与後に肥満細胞の膜安定化作用とアレルギー性炎症に対する抑制作用を発揮することから、各種の経口抗アレルギー剤として臨床での利用が期待されている。しかしながら、結晶形態の化合物Ａ（以下、本明細書において「結晶性化合物Ａ」という。）は難溶性であるため、そのままの形態で製剤に供しても消化管内でほとんど溶解せず、生体内に吸収されにくい。従って、経口製剤を設計・製造するためには、結晶性化合物Ａの溶解性および吸収性の改善が必要となる。
本発明者らは上記の結晶性化合物Ａの溶解性を改善させる目的で、これまでに種々の方法を試みた。化合物Ａは、製剤学的に許容されるｐＨ範囲において解離またはプロトン化する官能基をその構造中に有していないため、酸または塩基性の添加物を用いて結晶性化合物Ａを溶解させることは困難であった。また、シクロデキストリン類などの包接化合物や各種界面活性剤、高分子化合物などを添加しても、結晶性化合物Ａを実質的に可溶化することは困難であった。さらに、結晶性化合物Ａは、グリセリンやプロピレングリコール、マクロゴール４００などにも、製剤学的に利用できる程度には溶解しなかった。また、微粉砕による易吸収性薬物を開示している特開昭６２−１８５０１３号に記載の内容に準拠して結晶性化合物Ａの微粉砕結晶を得て、これをイヌなどの実験動物に経口投与したが、製剤として期待し得るほどの吸収率の改善は認められなかった。
このような難溶性の結晶性化合物の溶解性を改善する手法として、非晶質に変換する方法（例えば、Ｙｕ  Ｌ．、Ａｄｖａｎｃｅｄ  Ｄｒｕｇ  Ｄｅｌｉｖｅｒｙ  Ｒｅｖｉｅｗｓ  ４８巻、２９頁、２００１年）が知られている。その具体的な方法としては、加熱溶融法、難溶性溶媒添加による急速晶析、凍結乾燥、噴霧乾燥、固体分散体の調製、メカノケミカル変換（粉砕など）、結晶性水和物からの脱水和などが挙げられている。しかしながら、結晶性化合物Ａは、融点と分解点とが近接しているため加熱溶融すると分解を生じる、急速晶析法によっても結晶として析出する、凍結乾燥溶媒として適切な溶媒がない、熱可塑性物質中にも加熱溶融せずまた各種添加物とともに溶媒に溶解させても減圧留去中に結晶が析出する（すなわち、溶融法または溶媒留去法による固体分散体の調製ができない）、粉砕やエクストルーダー処理を施したが非晶質にならないまたは分解物を生じる、水和物を形成しない、など薬物を非晶質化する一般的に知られている手法の多くが適用できなかった。
［発明の概要］
本発明者らは、今般、化合物Ａを溶媒に溶解させて噴霧乾燥することにより、得られる噴霧乾燥物の結晶化度が有意に低下することを見出した。しかし、結晶性化合物Ａは水だけでなく各種溶媒にも難溶性であり、噴霧乾燥するうえで適切な溶媒の選択が課題となった。そして、本発明者らは、ある種の限られた溶媒に化合物Ａを溶解した後これを噴霧乾燥することで、結晶性化合物Ａを非晶質に変換し得ることを見出した。さらに、メチルセルロースおよび／またはヒドロキシプロピルメチルセルロースを配合することにより、非晶質化した化合物Ａの結晶化を抑制することができることを見出した。本発明は、これら知見に基づくものである。
したがって、本発明は、溶解性および吸収性が改善された非晶質化した化合物Ａおよびこれを含んでなる組成物、並びにそれらの製造方法の提供をその目的としている。
すなわち、本発明による非晶質の化合物Ａは、粉末Ｘ線回折分析図に回折ピークを示さず、３７℃の１重量％メチルセルロース溶液に１５μｇ／ｍＬ〜２０μｇ／ｍＬの溶解度を示すものである。
また、本発明によれば、非晶質の化合物Ａの結晶化が抑制された組成物が提供され、組成物は上記本発明による非晶質の化合物Ａとメチルセルロースおよび／またはヒドロキシプロピルメチルセルロースを含有する組成物を含んでなるものである。
また、本発明によれば、非晶質の化合物Ａを製造する方法が提供され、２−（１−イソプロポキシカルボニルオキシ−２−メチルプロピル）−７，８−ジメトキシ−４（５Ｈ），１０−ジオキソ−２Ｈ−１，２，３−トリアゾロ［４，５−ｃ］［１］ベンゾアゼピンを塩化メチレンに溶解後、これを噴霧乾燥することを含んでなる。
［発明の具体的説明］
非晶質の化合物Ａおよびその製造法
本発明による非晶質の化合物Ａは、粉末Ｘ線回折分析値にて固有の回折ピークを与えることのない固体状態にあるものを意味する。そして、本発明による非晶質の化合物Ａは、３７℃の１重量％メチルセルロース溶液に、１５μｇ／ｍＬ〜２０μｇ／ｍＬの溶解度を示す。
本発明による非晶質の化合物Ａは、化合物Ａを塩化メチレンに溶解後、これを噴霧乾燥することにより製造することが出来る。
結晶性化合物Ａは、水だけでなく種々の汎用される溶媒にも難溶性であり、塩化メチレン中にも約１重量％しか溶解しない。ところが、結晶性化合物Ａは塩化メチレン中に一旦溶解すれば、濃縮して１５重量％を超える濃度になっても、結晶として析出しない。また、このような濃縮操作の有無に関係なく、化合物Ａの塩化メチレン溶液を噴霧乾燥することにより、非晶質の化合物Ａを得ることが出来る。噴霧乾燥物の回収効率を高める目的で、または噴霧乾燥処理時間を短縮する目的で、噴霧乾燥に用いる溶液の濃度は高く設定されるのが好ましく、従って、本発明の好ましい態様によれば、化合物Ａの塩化メチレン溶液は濃縮操作を施した後、噴霧乾燥されることが好ましい。噴霧乾燥に供する塩化メチレン溶液中の化合物Ａの濃度は、好ましくは１〜１５重量％の範囲であり、より好ましくは３〜１０重量％の範囲である。噴霧乾燥の詳細および具体的方法は後記する。
本発明による非晶質の化合物Ａは、結晶性化合物Ａと比較して特に水に対する溶解性が改善されているため、医薬原末、とりわけ経口投与用の医薬組成物の製造原末として好ましく用いられる。なお、化合物Ａはアレルギー疾患の予防または治療に用いることが出来る。アレルギー疾患としては、例えば気管支喘息、湿疹、蕁麻疹、アレルギー性胃腸障害、アレルギー性鼻炎、アレルギー性結膜炎などが挙げられる。
本発明による非晶質の化合物Ａはそのまま経口投与されてもよいが、一般的には、公知の医薬上許容される担体とともに経口投与用の剤形とされる。担体としては、賦形剤（例えば、乳糖、結晶セルロース、デンプン、リン酸水素カルシウム等）、結合剤（例えばデンプン、カルメロースナトリウム、ヒドロキシプロピルセルロース等）、崩壊剤（カルメロースカルシウム、クロスカルメロースナトリウム等）、滑沢剤（ステアリン酸マグネシウム、タルク等）などを用いることにより、医療に通常供される錠剤、カプセル剤、顆粒剤、ドライシロップ剤や、常法によるシロップを含む各種液剤の形態に処方できる。さらに、これらの各種製剤は、長時間にわたって作用が持続する徐放性製剤とすることもできる。
さらに、本発明の別の態様によれば、本発明による非晶質の化合物Ａをヒトを含む動物に投与することを含んでなる、アレルギー疾患の予防または治療方法が提供される。また、本発明による別の態様によれば、抗アレルギー薬の製造のための、本発明による非晶質の化合物Ａの使用が提供される。
非晶質の化合物Ａを含んでなる組成物
本発明によれば、非晶質の化合物Ａを含んでなる組成物、とりわけ医薬組成物が提供される。本発明の好ましい態様によれば、特に経口投与用の医薬組成物が提供される。
本発明の好ましい態様によれば、本発明による非晶質の化合物Ａは、メチルセルロースまたはヒドロキシプロピルメチルセルロースとともに組成物に配合される。このような組成物の化合物Ａは長期間にわたり、水等の溶媒への良好な溶解度を維持する。以下の理論に拘束される訳ではないが、メチルセルロースおよびヒドロキシプロピルメチルセルロースは、非晶質化した化合物Ａの結晶化を抑制し、非晶質としての溶解濃度が長時間にわたり維持されることによるものと推定される。メチルセルロースおよびヒドロキシプロピルメチルセルロースの配合量は、意外なことにその配合量が少量であっても、化合物Ａの非晶質状態を維持する効果が高いが、本発明のより好ましい態様によれば、非晶質の化合物Ａを１とした場合、メチルセルロースおよびヒドロキシプロピルメチルセルロースの合計量との混合比率（重量基準）は０．０１〜２の範囲が好ましく、より好ましい下限は０．０５であり、好ましい上限は１である。
本発明の別の態様によれば、本発明による非晶質の化合物Ａと、製剤学的に配合することが一般に許容され得る高分子化合物とを含んでなる組成物が提供される。このような高分子化合物としては、エチルセルロース、ヒドロキシプロピルメチルセルロースフタレート、ヒドロキシプロピルセルロース、カルボキシメチルエチルセルロース、ポリビニルピロリドン、ポリビニルアセタールジエチルアミノアセテート、メタクリル酸コポリマーＬ、アミノアルキルメタクリルアクリレートコポリマーＥ、酢酸ビニル・ビニルピロリドン共重合物からなる群より選択することができるものである。これらは二種以上混合して用いてもよい。
本発明による上記組成物は、非晶質の化合物Ａを得て、その後、メチルセルロースもしくはヒドロキシプロピルメチルセルロースまたは高分子化合物とを物理的に混合して得ることが出来る。
また、本発明の別の態様によれば、本発明による上記組成物は、化合物Ａと、メチルセルロースもしくはヒドロキシプロピルメチルセルロースまたは高分子化合物とをともに塩化メチレンに溶解した後、これを噴霧乾燥することにより製造することができる。
高分子化合物の中には、塩化メチレンだけでは溶解しないか、または、溶解速度が遅いものが含まれる。例えば、メチルセルロース、ヒドロキシプロピルメチルセルロース、ヒドロキシプロピルメチルセルロースフタレート、カルボキシメチルエチルセルロース、メタクリル酸コポリマーＬなどがそのような傾向を有する。このような高分子化合物を使用する場合には、塩化メチレンにメタノールやエタノールなどの低級アルコールを加えた混合溶媒を用いることで溶解させることができる。本発明の好ましい態様によれば、低級アルコールとは好ましくは炭素数１〜３のアルキルアルコールである。
本発明の好ましい態様によれば、結晶性化合物Ａを塩化メチレン中に溶解させた後、場合によりこれを濃縮し、その溶解液または濃縮液に低級アルコールを加えて混合溶液とし、それに上記の高分子化合物を溶解させて、得られる溶液、または、化合物Ａの塩化メチレン溶液と別途調製した上記高分子化合物の低級アルコール溶液または懸濁液とを混合・撹拌することにより得られる溶液を噴霧乾燥することが好ましい。
塩化メチレンと低級アルコールとの混合比率は、化合物Ａとメチルセルロースもしくはヒドロキシプロピルメチルセルロースまたは高分子化合物の溶液として調製できるのであれば特に限定されないが、塩化メチレンに対する低級アルコール比率が重量比で３倍量以下が好ましく、より好ましくは１．５倍量以下である。
このようにして得られた、本発明による組成物は、そのまま経口投与されてもよいが、一般的には、公知の医薬上許容される担体とともに経口投与用の剤形とされる。担体としては非晶質の化合物Ａについて上記したものと同様のものが挙げられる。
さらに、本発明の別の態様によれば、本発明による非晶質の化合物Ａを含んでなる組成物をヒトを含む動物に投与することを含んでなる、アレルギー疾患の予防または治療方法が提供される。また、本発明による別の態様によれば、抗アレルギー薬の製造のための、本発明による非晶質の化合物Ａを含んでなる医薬組成物の使用が提供される。
噴霧乾燥
本発明において、噴霧乾燥を実施する装置は、一般に食品や医薬品、各種化学工業などの分野で使用されているものと同様の装置が使用可能である。ただし、噴霧乾燥に供するための溶液に低級アルコールを加える場合には、防爆仕様の噴霧乾燥機を使用することが望ましい。
化合物Ａは、噴霧乾燥工程におけるミスト形成から乾燥までに要する時間が長くなると、結晶と非晶質とが混在してしまう傾向が強い。結晶が混在しない非晶質を得るためには、噴霧ミスト径を極力小さくすることが好ましい。そのため、噴霧乾燥機の下記稼働条件以外に溶液噴霧装置の仕様や能力が重要な要素となる。噴霧装置としては、ロータリーアトマイザーよりは二流体または四流体ノズルを用いることが望ましい。ただし、それらの稼働条件にも関係するため、必ずしもこれに限定するものではない。
噴霧乾燥において上記のように噴霧ミスト径を小さくするため、得られる噴霧乾燥物の粒子径も小さくなる。噴霧乾燥物の捕集にあたっては、一般的に用いられるサイクロン以外に各種のフィルターを用いることもできる。
噴霧乾燥機の稼働条件として、缶体内への給気は、溶媒が塩化メチレンの場合には圧縮空気を含めて、噴霧乾燥に一般的に用いられる気体を用いることができる。溶媒が塩化メチレンと低級アルコールとの混合溶媒である場合には窒素ガスなどの酸素を含まない防爆用の気体を用いる。給気温度は４０〜１２０℃の範囲内に設定することが好ましく、より好ましくは５０〜１００℃の範囲内に設定することである。噴霧ノズルを用いてミストを形成させる場合、給気圧は０．０５〜１．５ＭＰａの範囲に設定することが好ましく、上述のように噴霧ミスト径を小さくするうえで、さらに好ましくは０．１〜０．７ＭＰａの範囲である。化合物Ａを含む溶液の送液速度は、噴霧ミストの形成方式の違いや給気圧の設定、さらには噴霧乾燥機の規模によっても変わり得るため、特に限定されるものではない。
実      施      例
以下の実施例により本発明をさらに具体的に説明するが、本発明はこれら実施例に限定されるものではない。
なお、以下の実施例および比較例の評価に用いた粉末Ｘ線回折装置およびその測定条件は下記のとおりである。
装置：ＲＩＮＴ２２００（理学電機（株）製）
測定条件：管球；Ｃｕ、管電圧；４０ｋＶ、管電流；２０ｍＡ、モノクロメータ；グラファイト、スキャンスピード；４°／ｍｉｎ、スキャンステップ；０．０２°、走査軸；２θ／θ、発散スリット；１°、散乱スリット；１°、受光スリット；０．３０ｍｍ、走査範囲；３〜４０°
比較例１
ＷＯ９９／１６７７０公報の実施例２０に記載の方法に準じて得られた淡黄色粉末を塩化メチレンに溶解させた後、メタノールを用いて再結晶させることにより結晶性化合物Ａを得た。結晶性化合物Ａは粉末Ｘ線回折測定にて特徴的な回折ピークを示した。
実施例１
比較例１で得られた結晶性化合物Ａ３０ｇを塩化メチレン２０００ｇ中に溶解させ、これを減圧下濃縮して５重量％の溶液とした。得られた溶液を、噴霧乾燥機（ＧＳ３１型、ヤマト科学社製）にて処理（給気温度７０℃、送液速度は溶液として毎分１０ｇ）することにより、非晶質である淡黄色の粉体２３ｇを得た。得られた粉体は粉末Ｘ線回折測定にて特徴的な回折ピークを示さないことを確認した。
実施例２
比較例１で得られた結晶性化合物Ａ３６０ｇを塩化メチレン２６００ｇ中に溶解させ、これを減圧下濃縮して８重量％の濃縮液とした。得られた濃縮液とメチルセルロース（メトローズＳＭ１５、信越化学製）７２ｇをメタノール２７００ｇ中に溶解させた溶液とを混合した。得られた溶液を、噴霧乾燥機（ＣＬ−８型、大川原化工機製）にて処理（給気温度９０℃、送液速度は溶液として毎分２０ｇ）することにより、淡黄色の粉体２９０ｇを得た。得られた粉体は粉末Ｘ線回折測定にて特徴的な回折ピークを示さないことを確認した。
実施例３
比較例１で得られた結晶性化合物Ａ２０ｇを塩化メチレン１４００ｇ中に溶解させ、これを減圧下濃縮して４重量％の濃縮液とした。得られた濃縮液中にメタノール３２０ｇを加え、さらに、ヒドロキシプロピルメチルセルロース（ＴＣ−５Ｒ、信越化学製）４ｇを加えて溶解させた。得られた溶液を、噴霧乾燥機（ＧＳ３１型）にて処理（給気温度９０℃、送液速度は溶液として毎分１０ｇ）することにより、淡黄色の粉体１３ｇを得た。得られた粉体は粉末Ｘ線回折測定にて特徴的な回折ピークを示さないことを確認した。
実施例４
比較例１で得られた結晶性化合物Ａ８ｇを塩化メチレン５６０ｇ中に溶解させ、これを減圧下濃縮して４重量％の濃縮液とした。得られた濃縮液中にメタノール１２０ｇを加え、さらに、メチルセルロース（メトローズＳＭ１５）１．６ｇおよびヒドロキシプロピルメチルセルロース（ＴＣ−５Ｒ）１．６ｇをそれぞれ加えて溶解させた。得られた溶液を、噴霧乾燥機（ＧＳ３１型）にて処理（給気温度９０℃、送液速度は溶液として毎分１０ｇ）することにより、淡黄色の粉体７ｇを得た。得られた粉体は粉末Ｘ線回折測定にて特徴的な回折ピークを示さないことを確認した。
実施例５〜１３
実施例５〜１３は、下記の方法により高分子化合物の種類のみを変えることにより同様に調製した。
すなわち、比較例１で得られた結晶性化合物Ａ８ｇを塩化メチレン５６０ｇ中に溶解させ、これを減圧下濃縮して４重量％の濃縮液とした。得られた濃縮液中にメタノール１２０ｇを加え、さらに、以下の高分子化合物をそれぞれ１．６ｇ加えて溶解させた。
実施例５：エチルセルロース（信越エチルセルロース、信越化学製）
実施例６：ヒドロキシプロピルメチルセルロースフタレート（ＨＰＭＣＰ、信越化学製）
実施例７：ヒドロキシプロピルセルロース（日曹ＨＰＣ−Ｌ、日本曹達製）
実施例８：カルボキシメチルエチルセルロース（ＣＭＥＣ、フロイント産業製）
実施例９：ポリビニルピロリドン（コリドンＫ３０、ビーエーエスエフジャパン製）
実施例１０：ポリビニルアセタールジエチルアミノアセテート（ＡＥＡ三共、三共製）
実施例１１：メタクリル酸コポリマーＬ（オイドラギットＬ、レームファルマ製）
実施例１２：アミノアルキルメタクリルアクリレートコポリマーＥ（オイドラギットＥ、レームファルマ製）
実施例１３：酢酸ビニル・ビニルピロリドン共重合物（プラスドンＳ−６３０、ＩＳＰ製）
得られた溶液を、それぞれ噴霧乾燥機（ＧＳ３１型）にて処理（給気温度９０℃、送液速度は溶液として毎分１０ｇ）することにより、淡黄色の粉体を得た。得られた粉体は何れも粉末Ｘ線回折測定にて特徴的な回折ピークを示さなかった。
実施例１４
実施例１で得られた非晶質（１０．０ｇ）、マンニトール（１０．０ｇ）、ヒドロキシプロピルメチルセルロース（２．０ｇ）、カルボキシメチルスターチナトリウム（５．０ｇ）、及びステアリン酸マグネシウム（０．１３５ｇ）を混合し、ロータリー式打錠機にて製錠（打錠圧：２ｔｏｎ／錠）した。得られた錠剤を乳鉢・乳棒にて解砕し、篩（ＪＰ３０号）を用いて整粒した。得られた顆粒に、カルボキシメチルスターチナトリウム（１０．０ｇ）を加えて混合し、その３７１．３５ｍｇをヒドロキシプロピルメチルセルロース製カプセル（０号）に充填し、１製剤あたり実施例１で得られた非晶質を１００ｍｇ含有するカプセル剤とした。
試験例１：粉末Ｘ線回折
実施例１および２で得られた粉体および比較例１で得られた結晶性化合物Ａの結晶性（結晶化度）につき試験した。結果は図１に示される通りであった。
比較例１で得られた結晶性化合物Ａは、粉末Ｘ線回折にてその結晶格子を構成する当該分子の規則的な空間配置に起因する固有の回折ピークを示した。一方、本発明により得られた実施例１および２の非晶質または非晶質組成物は、粉末Ｘ線回折にて何れも固有の回折ピークを与えない。また、実施例３〜１３で得られた組成物についても同様な結果が示された。従って、実施例は何れも非晶質であると確認された。
試験例２：溶解性試験（１）
試験液を水または１重量％メチルセルロース水溶液とした場合の各種試料の溶解性を調べた。各種試料につき化合物Ａとして約１００ｍｇを３７℃に保った試験液５００ｍＬ中に加え、パドルを用いて２００ｒｐｍで攪拌した。経時的に採取した試料をメンブランフィルター（サンプレップＬＣＲ１３−ＬＧ、ミリポア製）にて濾過し、濾液中の化合物Ａの濃度をＨＰＬＣにて分析することにより求めた。得られた結果をそれぞれ図２および３に示す。
なお、試験例２に用いたＨＰＬＣの測定条件は下記のとおりである。
検出器：紫外吸光光度計（測定波長：２４０ｎｍ）
カラム：内径４．６ｍｍ、長さ２５ｃｍのステンレス管に５μｍの液体クロマトグラフ用オクタデシルシリルシリカゲルを充填したＩｎｅｒｔｓｉｌ  ＯＤＳ２４．６×２５０ｍｍ
カラム温度：４０℃付近
移動相：０．１重量％酢酸アンモニウム：メタノール（４５：５５）
流量：１ｍＬ／分
試験液が水の場合（図２）、比較例１で得られた結晶性化合物Ａの溶解濃度は本系において１μｇ／ｍＬ以下であった。実施例２および３で得られた粉体（非晶質組成物）は約１８μｇ／ｍＬの濃度を示し、それを４時間維持した。実施例１で得られた非晶質は約５μｇ／ｍＬの濃度に達した後、約３μｇ／ｍＬに低下した。この濃度低下は、非晶質が水中で結晶化することに起因すると推定される。一方、試験液が１重量％メチルセルロース水溶液の場合（図３）、比較例１で得られた結晶性化合物Ａの溶解濃度は試験液が水の場合と同様に１μｇ／ｍＬ以下であったが、実施例１で得られた非晶質は約１８μｇ／ｍＬ以上を示しその濃度を４時間維持した。これらの結果から、メチルセルロースは結晶性化合物Ａの可溶化に寄与するものではなく、実施例１で得られた非晶質の結晶化を抑制することによるものと思われる。
試験例３：溶解性試験（２）
水を試験液として、実施例１４で得られたカプセル剤の溶解性を溶出試験器（富山産業製、ＮＴ−６１００型、紫外吸光法による自動測定、検出波長：２４６ｎｍ）にて調べた。すなわち、実施例１４で得られたカプセル剤（実施例１で得られた化合物Ａの非晶質を１００ｍｇ含有）を水（３７℃）９００ｍＬ中に加え、パドルを用いて１００ｒｐｍで攪拌した。得られた結果は図４に示される通りであった。
実施例１で得られた非晶質は、水の中では溶解濃度の速やかな低下を示す（図２）が、メチルセルロース水溶液中ではそのような溶解濃度の低下をきたすことがなく（図３）、実施例２または３で得られた非晶質組成物と同様な溶解性を示した。この結果から、メチルセルロースおよび／またはヒドロキシプロピルメチルセルロースは、非晶質を用いて製剤化する場合の成分として配合されていれば良いことが推定される。
このような観点から調製した実施例１４で得られたカプセル剤の水中における溶解性試験の結果（図４）、配合されている実施例１で得られた非晶質は図２で示したような速やかな濃度低下を示さなかった。これらの結果から、実施例１で得られた非晶質も製剤の原料として有用な非晶質であり、メチルセルロースおよび／またはヒドロキシプロピルメチルセルロースを製剤添加物として別途配合することにより、その溶解性が維持されることが確認された。
試験例４：吸収性試験
化合物Ａは生体内に吸収されるとその生理活性を発現する本体である７，８−ジメトキシ−４（５Ｈ），１０−ジオキソ−２Ｈ−１，２，３−トリアゾロ［４，５−ｃ］［１］ベンゾアゼピン（ＷＯ９５／１８１３０；以下、化合物Ｂと称する）に変換される。
比較例１または実施例１で得られた各種試料を１重量％メチルセルロース水溶液に懸濁し、１晩絶食させたビーグル犬（ｎ＝６）に経口投与した後の化合物Ｂについての血漿中薬物濃度推移は図５に示される通りであった。血漿中薬物濃度一時間曲線下面積（ＡＵＣ）を比較することで、試料間の吸収性の差を評価した。
なお、採取した血液の血漿中薬物濃度は概略下記の方法により定量した。
橈側皮静脈から採取した血液（約０．７ｍＬ）をヘパリン存在下遠心分離（４℃、約９０００×ｇ、１０ｍｉｎ）して血漿を得た。得られた血漿（１００μＬ）にメタノール（４００μＬ）および内部標準物質溶液（７−メチル−４（５Ｈ），１０−ジオキソ−２Ｈ−１，２，３−トリアゾロ［４，５−ｃ］［１］ベンゾアゼピン  ナトリウム塩、１００ｎｇ／ｍＬ、１００μＬ）を添加し、撹拌し遠心分離（４℃、約９０００×ｇ、１０ｍｉｎ）した。
得られた上清を窒素気流下室温で蒸発乾固させ、残渣に１０ｍｍｏｌ／Ｌリン酸緩衝液（ｐＨ７．０）とメタノールの混液（８：２）１５０μＬを加えて再溶解した。遠心フィルター濾過（セントリカット超ミニ（倉紡）、４℃、約９０００×ｇ、１０ｍｉｎ）し、得られた濾液を試料とし、ＨＰＬＣで測定した。試験例４に用いたＨＰＬＣの測定条件は下記のとおりである。
ＨＰＬＣポンプ：ＰＵ−９８０（日本分光）
デガッサー：ＤＧ−９８０−５０（昭和電工）
オートサンプラー：ＡＳ−９５０−１０（日本分光）
検出器：ＦＰ−９２０（日本分光）
蛍光検出波長：Ｅｘ  ２７０ｎｍ，Ｅｍ  ４６６ｎｍ（ＧＡＩＮ＝１００，Ｒｅｓｐｏｎｓｅ＝Ｓｔａｎｄａｒｄ）
カラム：ＣＡＰＣＥＬＬＰＡＣ  Ｃ１８  ＵＧ１２０（４．６×２５０ｍｍ、５μｍ、資生堂）
カラム温度：４０℃
移動相：１０ｍｍｏｌ／Ｌ  リン酸緩衝液（ｐＨ７．０）とメタノールによるリニアグラジエント（８：２→２：８）
流速：１．０ｍＬ／ｍｉｎ
注入量：２０μＬ
比較例１で得られた結晶を経口投与した場合と比較して、実施例１で得られた非晶質を投与後の化合物Ｂの血漿中濃度は有意に高かった。また、実施例１で得られた非晶質は、比較例１で得られた結晶の８分の１の投与量であっても比較例１で得られた結晶投与群をはるかに上回る血漿中濃度推移を示した。これらのことから、本発明により得られる非晶質には、顕著な吸収性の改善が確認された。同様の結果は、カニクイザルでも確認された。
【図面の簡単な説明】
図１は、実施例１および２で得られた非晶質の化合物Ａおよび非晶質組成物並びに比較例１で得られた結晶性化合物Ａの粉末Ｘ線回折図である。
図２は、実施例１、２、および３で得られた非晶質の化合物Ａおよび非晶質組成物並びに比較例１で得られた結晶性化合物Ａの水への溶解性を示す図である。
図３は、実施例１で得られた非晶質の化合物Ａおよび比較例１で得られた結晶性化合物Ａの１重量％メチルセルロース水溶液への溶解性を示す図である。
図４は、実施例１４で得られた、非晶質の化合物Ａを含んでなるカプセル剤の水への溶解性を示す図である。
図５は、実施例１で得られた非晶質の化合物Ａおよび比較例１で得られた結晶性化合物Ａを、それぞれ１重量％メチルセルロース水溶液に懸濁させて、それをビーグル犬に経口投与した場合の血漿中薬物濃度推移を示す図である。
【図１】
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【図２】
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【図３】
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【図４】
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【図５】
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【国際調査報告】
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