(57)【要約】本発明は、ソヤサポニン類化合物、ソヤサポゲニン類化合物、グリチルリチン及びそれらの塩からなる群より選択される化合物を有効成分とする、治療又は予防に神経成長因子（ＮＧＦ）産生増強を要する疾患の治療剤または予防剤、ＮＧＦ産生増強剤、並びにＮＧＦ産生増強用食品、飲料又は飼料に関する。また、本発明は、ＮＧＦ産生増強作用を有する新規なソヤサポニン類化合物及びソヤサポゲニン類化合物に関する。【特許請求の範囲】
【請求項１】
下記一般式（Ｉ）で表される化合物又はその塩。
2004009521.tif 000009
（式中、点線で示した結合子のうちＡが二重結合を示し、Ｂが単結合を示す場合、Ｒ１は−Ｏ−ＧｌｃＵＡ−Ｇａｌ−Ｇｌｃを示し、Ｒ２は−Ｏ−Ａｒａ−２−ＡｃＸｙｌ、−Ｏ−Ａｒａ−３−ＡｃＸｙｌ、−Ｏ−Ａｒａ−４−ＡｃＸｙｌ、−Ｏ−Ａｒａ−２，３−ｄｉＡｃＸｙｌ、−Ｏ−Ａｒａ−２，４−ｄｉＡｃＸｙｌ、−Ｏ−Ａｒａ−３，４−ｄｉＡｃＸｙｌ、または−Ｏ−Ａｒａ−３，４，６−ｔｒｉＡｃＧｌｃを示し、かつＲ３は−ＯＨを示す。またＡが単結合を示し、Ｂが二重結合を示す場合、Ｒ１は−ＯＨを示し、Ｒ２は−ＯＨを示し、かつＲ３は−Ｈを示す。なお、ＧｌｃＵＡはグルクロン酸残基、Ｇａｌはガラクトース残基、Ｇｌｃはグルコース残基、Ａｒａはアラビノース残基、ＡｃＸｙｌはアセチル化されたキシロース残基、ＡｃＧｌｃはアセチル化されたグルコース残基を意味する。）
【請求項２】
請求項１記載の化合物及び／又は薬理学的に許容されるその塩を有効成分として含有することを特徴とする当該化合物に感受性を示す疾患の治療剤または予防剤。
【請求項３】
請求項１記載の化合物及び／又はその塩を有効成分として含有することを特徴とする神経成長因子産生増強剤。
【請求項４】
請求項１記載の化合物及び／又はその塩を有効成分として含有することを特徴とする食品、飲料又は飼料。
【請求項５】
神経成長因子産生増強用である請求項４記載の食品、飲料又は飼料。
【請求項６】
ソヤサポニン類化合物、ソヤサポゲニン類化合物、グリチルリチン及び薬理学的に許容されるそれらの塩からなる群より選択される化合物を有効成分として含有することを特徴とする、治療又は予防に神経成長因子産生増強を要する疾患の治療剤または予防剤。
【請求項７】
ソヤサポニン類化合物及びソヤサポゲニン類化合物が下記一般式（ＩＩ）で表わされるソヤサポニン類化合物及びソヤサポゲニン類化合物である請求項６記載の治療剤または予防剤。
2004009521.tif 000010
（式中、点線で示した結合子は単結合もしくは二重結合を示し、Ｒ４は−ＯＨもしくは−Ｏ−糖残基を示し、Ｒ５は−ＯＨ、＝Ｏもしくは−Ｏ−糖残基を示し、Ｒ６は−ＯＨもしくは−Ｈを示す。）
【請求項８】
ソヤサポニン類化合物、ソヤサポゲニン類化合物、グリチルリチン及びそれらの塩からなる群より選択される化合物を有効成分として含有することを特徴とする神経成長因子産生増強剤。
【請求項９】
ソヤサポニン類化合物及びソヤサポゲニン類化合物が請求項７に記載の一般式（ＩＩ）で表わされるソヤサポニン類化合物及びソヤサポゲニン類化合物である請求項８記載の神経成長因子産生増強剤。
【請求項１０】
ソヤサポニン類化合物、ソヤサポゲニン類化合物、グリチルリチン及びそれらの塩からなる群より選択される化合物を有効成分として含有することを特徴とする神経成長因子産生増強用食品、飲料又は飼料。
【請求項１１】
ソヤサポニン類化合物及びソヤサポゲニン類化合物が請求項７に記載の一般式（ＩＩ）で表わされるソヤサポニン類化合物及びソヤサポゲニン類化合物である請求項１０記載の神経成長因子産生増強用食品、飲料又は飼料。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】  本発明は、主として食用植物由来の化合物の生理作用を利用した医薬、飲食品等に関する。
【背景技術】  神経成長因子（ＮＧＦ）は神経細胞の誕生を促す作用、神経細胞の生存を維持する作用、脳の損傷時に修復する作用、脳神経の機能を回復し脳の老化を防止する作用など神経細胞の生と死に密接に関わるタンパク質である。従ってアルツハイマー型痴呆症や糖尿病合併症の神経障害等の予防・治療効果が期待されている。しかしながらＮＧＦは分子量が大きく血液脳関門を通過できないため、血液脳関門を通過できるＮＧＦ産生増強物質の開発が望まれている。
【発明の開示】
本発明の目的は上記現状に鑑み、天然物由来の安全なＮＧＦ産生増強物質を利用した治療又は予防にＮＧＦ産生増強を要する疾患用医薬、当該化合物を高含有する飲食品等を提供することにある。
本発明を概説すれば、本発明の第１、第２、第３及び第４の発明は、下記一般式（Ｉ）で表される新規な化合物又はその塩、当該化合物を有効成分として含有する当該化合物に感受性を示す疾患の治療剤または予防剤、神経成長因子産生増強剤、神経成長因子産生増強用食品、飲料又は飼料に関する。
2004009521.tif 000002
（式中、点線で示した結合子のうちＡが二重結合を示し、Ｂが単結合を示す場合、Ｒ１は−Ｏ−ＧｌｃＵＡ−Ｇａｌ−Ｇｌｃを示し、Ｒ２は−Ｏ−Ａｒａ−２−ＡｃＸｙｌ、−Ｏ−Ａｒａ−３−ＡｃＸｙｌ、−Ｏ−Ａｒａ−４−ＡｃＸｙｌ、−Ｏ−Ａｒａ−２，３−ｄｉＡｃＸｙｌ、−Ｏ−Ａｒａ−２，４−ｄｉＡｃＸｙｌ、−Ｏ−Ａｒａ−３，４−ｄｉＡｃＸｙｌ、または−Ｏ−Ａｒａ−３，４，６−ｔｒｉＡｃＧｌｃを示し、かつＲ３は−ＯＨを示す。またＡが単結合を示し、Ｂが二重結合を示す場合、Ｒ１は−ＯＨを示し、Ｒ２は−ＯＨを示し、かつＲ３は−Ｈを示す。なお、ＧｌｃＵＡはグルクロン酸残基、Ｇａｌはガラクトース残基、Ｇｌｃはグルコース残基、Ａｒａはアラビノース残基、ＡｃＸｙｌはアセチル化されたキシロース残基、ＡｃＧｌｃはアセチル化されたグルコース残基を意味する。）
また、本発明の第５、第６および第７の発明は、ソヤサポニン類化合物、ソヤサポゲニン類化合物、グリチルリチン（ｇｌｙｃｙｒｒｈｉｚｉｎ）及び薬理学的に許容されるそれらの塩からなる群より選択される化合物を有効成分として含有することを特徴とする治療又は予防に神経成長因子産生増強を要する疾患の治療剤または予防剤、神経成長因子産生増強剤、および神経成長因子産生増強用食品、飲料又は飼料に関する。
本発明の第５、第６および第７の発明の態様において、ソヤサポニン類化合物及びソヤサポゲニン類化合物としては下記一般式（ＩＩ）で表わされる化合物が例示される。
2004009521.tif 000003
（式中、点線で示した結合子は単結合もしくは二重結合を示し、Ｒ４は−ＯＨもしくは−Ｏ−糖残基を示し、Ｒ５は−ＯＨ、＝Ｏもしくは−Ｏ−糖残基を示し、Ｒ６は−ＯＨもしくは−Ｈを示す。）
【図面の簡単な説明】  第１図は、大豆胚芽水抽出物由来フラクション７の質量スペクトルを示す図である。
第２図は、大豆胚芽水抽出物由来フラクション７の１Ｈ−ＮＭＲスペクトルを示す図である。
第３図は、大豆胚芽水抽出物由来フラクション７の１３Ｃ−ＮＭＲスペクトルを示す図である。
第４図は、大豆胚芽水抽出物由来フラクション９の質量スペクトルを示す図である。
第５図は、大豆胚芽水抽出物由来フラクション９の１Ｈ−ＮＭＲスペクトルを示す図である。
第６図は、大豆胚芽水抽出物由来フラクション９の１３Ｃ−ＮＭＲスペクトルを示す図である。
第７図は、大豆胚芽水抽出物由来フラクション１０の質量スペクトルを示す図である。
第８図は、大豆胚芽水抽出物由来フラクション１０の１Ｈ−ＮＭＲスペクトルを示す図である。
第９図は、大豆胚芽水抽出物由来フラクション１０の１３Ｃ−ＮＭＲスペクトルを示す図である。
第１０図は、大豆胚芽水抽出物由来フラクション１２の質量スペクトルを示す図である。
第１１図は、大豆胚芽水抽出物由来フラクション１２の１Ｈ−ＮＭＲスペクトルを示す図である。
第１２図は、大豆胚芽水抽出物由来フラクション１２の１３Ｃ−ＮＭＲスペクトルを示す図である。
第１３図は、大豆胚芽水抽出物由来フラクション１３の質量スペクトルを示す図である。
第１４図は、大豆胚芽水抽出物由来フラクション１３の１Ｈ−ＮＭＲスペクトルを示す図である。
第１５図は、大豆胚芽水抽出物由来フラクション１３の１３Ｃ−ＮＭＲスペクトルを示す図である。
第１６図は、大豆胚芽水抽出物由来フラクション１５の質量スペクトルを示す図である。
第１７図は、大豆胚芽水抽出物由来フラクション１５の１Ｈ−ＮＭＲスペクトルを示す図である。
第１８図は、大豆胚芽水抽出物由来フラクション１５の１３Ｃ−ＮＭＲスペクトルを示す図である。
第１９図は、大豆胚芽水抽出物由来フラクション１６の質量スペクトルを示す図である。
第２０図は、大豆胚芽水抽出物由来フラクション１６の１Ｈ−ＮＭＲスペクトルを示す図である。
第２１図は、大豆胚芽水抽出物由来フラクション１６の１３Ｃ−ＮＭＲスペクトルを示す図である。
第２２図は、大豆胚芽・酸加水分解物由来フラクションａの質量スペクトルを示す図である。
第２３図は、大豆胚芽・酸加水分解物由来フラクションａの１Ｈ−ＮＭＲスペクトルを示す図である。
第２４図は、大豆胚芽・酸加水分解物由来フラクションａの１３Ｃ−ＮＭＲスペクトルを示す図である。
【発明を実施するための最良の形態】  本発明者らは食用植物由来のＮＧＦ産生増強物質として、特定のサポニン類化合物、サポゲニン類化合物及び／又はそれらの塩が有用であることを見出し、本発明を完成させた。本発明により、それらのサポニン類化合物、サポゲニン類化合物及び／又は薬理学的に許容されるそれらの塩を有効成分として含んでなる医薬、当該サポニン類化合物、サポゲニン類化合物及び／又はそれらの塩を高含有する飲食品、飼料等の提供が可能になった。
本明細書において、「ＮＧＦ産生増強作用」及び「ＮＧＦ産生増強活性」はそれぞれＮＧＦ産生増強をもたらすことおよびＮＧＦ産生を増強する機能をいうが、その意味において特に厳密に区別するものではない。「増強」には、本発明に係る有効成分の作用前に比し、作用後において目的物質の量が増加するという態様と共に、本発明に係る有効成分を作用させることにより目的物質を生起せしめるという態様（誘導）を含む。また本明細書において、有効成分として挙げるいずれの物質も単独もしくは２種以上混合して本発明において用いることができる。
本発明において有効成分として使用される、サポニン類化合物、サポゲニン類化合物及び／又はそれらの塩（以下、本発明の化合物と称することがある）は、ＮＧＦ産生増強作用を有していればよく、天然物由来でもよく、合成品、半合成品でもよい。天然物としては食用植物由来が好ましく、食用植物由来としては大豆等の豆類由来のソヤサポニン類化合物又はソヤサポゲニン類化合物が例示される。また、甘草由来のサポニンとして知られるグリチルリチンが例示される。
大豆には化学構造上Ａ、Ｂ、Ｅ及びＤＤＭＰサポニンの４グループのサポニンが含まれており、Ａグループサポニンは、ｏｌｅａｎ−１２−ｅｎ−３β，２１β，２２β，２４−ｔｅｔｒａｏｌ（ｓｏｙａｓａｐｏｇｅｎｏｌＡ）をアグリコンとするサポニンであり、Ｂグループサポニンは、ｏｌｅａｎ−１２−ｅｎ−３β，２２β，２４ｔｒｉｏｌ（ｓｏｙａｓａｐｏｇｅｎｏｌＢ）をアグリコンとするサポニンであり、さらにＥグループサポニンはｏｌｅａｎ−１２−ｅｎ−３β，２４−ｄｉｏｌ−２２−ｏｎｅ（ｓｏｙａｓａｐｏｇｅｎｏｌＥ）をアグリコンとするサポニンであり、ＤＤＭＰサポニンはＢグループサポニンをアグリコンとし、Ｃ−２２位に２，３−ｄｉｈｙｄｒｏ−２，５−ｄｉｈｙｄｒｏｘｙ−６−ｍｅｔｈｙｌ−４Ｈ−ｐｙｒａｎ−４−ｏｎｅが結合したサポニンである（食品と開発、Ｖｏｌ３４，Ｎｏ．７  第８〜１１頁，（１９９９））。すなわち、本発明において、ソヤサポニン類化合物としてはＡ、Ｂ、Ｅグループ及びＤＤＭＰサポニンが特に好適に使用される。また、本発明の化合物としては、上記一般式（ＩＩ）で表される化合物が例示され、特に好適には下記一般式（ＩＩＩ）で表される化合物ａ〜ｎが例示される。
2004009521.tif 000004
（式中、点線で示した結合子Ｃ、Ｄ、およびＲ７、Ｒ８、Ｒ９を表１に示す。）
2004009521.tif 000005
なお、上記化合物ａ〜ｇおよびｎ、すなわち上記一般式（Ｉ）で表される化合物は、本発明により初めて得られた化合物であり、ＮＧＦ産生増強作用を有することが明らかになった。本発明においては、当該化合物、および当該化合物を有効成分とする、当該化合物に感受性を示す疾患の治療剤又は予防剤をも提供される。
また、本発明の化合物としては、大豆や甘草由来のものが好ましいが、大豆由来でなくともソヤサポニン類化合物、ソヤサポゲニン類化合物またはグリチルリチン、例えば、上記一般式（ＩＩ）で表される化合物であれば、その由来は限定されない。なお、本明細書中において、ＡｃＸｙｌは、アセチル化されたキシロース残基を意味する。ＡｃＧｌｃは、アセチル化されたグルコース残基を意味する。Ｒｈａｍは、ラムノース残基を意味する。また、ソヤサポゲニン類化合物とはソヤサポニン類化合物において糖残基を有しないアグリコンもしくはその異性体を意味する。
糖残基を構成する糖としては、単糖でも糖鎖でもよく、また、１種又は２種以上の糖からなるものであってもよい。例えば、グルコース、グルクロン酸、キシロース、ラムノース、ガラクトース、スレオース、リボース、アピオース、アロース、アラビノース、アラビノピラノース、リブロース、マンノース、タロース、フコース、フルクトース、ガラクツロン酸およびこれらの糖により構成される糖鎖が例示される。糖鎖中の糖の数としては、特に限定はないが、本発明の所望の効果の発現の観点から、２〜５が特に好適である。またこれらの糖はアセチル化、エステル化等の修飾がされていても良い。
さらに、本発明の化合物は、例えばエステルなど、体内で容易に加水分解し、所望の効果を発揮し得る誘導体（プロドラッグ）を形成可能である。かかるプロドラッグの調製は公知の方法に従えばよい。なお、かかる誘導体は、それらの塩であってもよい。
また、本発明の化合物において、塩としては薬理学的に許容される塩が好ましい。本発明で使用される塩としては、例えば、アルカリ金属塩、アルカリ土類金属塩、有機塩基との塩などが例示される。なお、本発明において使用される薬理学的に許容される塩とは生物に対して実質的に無毒であって、かつＮＧＦ産生増強作用を有する化合物の塩を意味する。本発明の有効成分である化合物の塩としては、たとえば、ナトリウム、カリウム、カルシウム、マグネシウム、アンモニウムまたはプロトン化されたベンザチン（Ｎ，Ｎ′−ジ−ベンジルエチレンジアミン）、コリン、エタノールアミン、ジエタノールアミン、エチレンジアミン、メグラミン（Ｎ−メチルグルカミン）、ベネタミン（Ｎ−ベンジルフェネチルアミン）、ピペラジンもしくはトロメタミン（２−アミノ−２−ヒドロキシメチル−１，３−プロパンジオール）との塩が挙げられる。
また、本発明の化合物の光学異性体、ケト−エノール互変異性体、幾何異性体などの各種異性体、各異性体の単離されたものであっても、ＮＧＦ産生増強作用を有する限り、全て本発明において使用することができる。従って、本発明の化合物とは、本発明の所望の効果が得られ得る限り、その誘導体、異性体ならびにそれらの塩も包含するものである。
本発明の化合物が市販されておれば、それを利用することができる。また、調製することもでき、当該方法としては、例えば、植物から常法にしたがって抽出し、精製することにより得る方法を挙げることができる。
天然物からの本発明の化合物の製造は、公知の製造方法を組み合わせて行うことができる。例えば、ソヤサポニン類化合物、ソヤサポゲニン類化合物又はそれらの塩の含有物、例えば、大豆等の植物から当該化合物を抽出し、精製することができる。また、大豆を使用する場合、好適には、大豆の胚芽、子葉を原料として使用する。抽出溶媒としては例えば、水、クロロホルム、エタノール、メタノール、イソプロピルアルコール等のアルコール類、アセトン、メチルエチルケトン等のケトン類、酢酸メチル、酢酸エチル等の親水性もしくは親油性の溶媒を、単独でもしくは混合液として用いることができる。抽出温度や時間は所望により適宜設定すればよく、抽出操作は所望により数回繰り返してもよい。精製手段としては化学的方法、物理的方法等の公知の精製手段を用いればよく、ゲルろ過法、分子量分画膜による分画法、溶媒抽出法、イオン交換樹脂等を用いた各種クロマトグラフィー法等の従来公知の精製方法を組合せ、有効成分として使用される所望の化合物を濃縮、単離等すればよい。後述する本発明の医薬等は、単離した化合物を用いなくとも、化合物の濃縮物を用いて製造することもできる。
また、本発明に使用されるグリチルリチンとしては、特に限定はないが、例えば、市販のものや甘草から抽出、精製することにより得ることができる。グリチルリチンの抽出、精製は、前記ソヤサポニン類化合物等について記載した方法に準じて行うことができる。また、本発明においては、グリチルリチンの誘導体を使用することもできる。
本発明において有効成分として使用される化合物を合成品又は半合成品として得る場合には、例えば、公知の方法に準じて、所望の化合物を合成すればよい。
所望の化合物が得られたかの確認は、例えば、後述の実施例に記載するように、質量分析法、核磁気共鳴法等で構造を決定することにより行うことができる。
本発明により、以上の本発明の化合物を有効成分として含有してなる、治療又は予防にＮＧＦ産生増強を要する疾患の治療剤または予防剤が提供される。
ＮＧＦは神経細胞の生存や機能を維持したり、ＮＧＦの濃度勾配に従って神経細胞を伸長させたりする内因性の成長因子であり、ＮＧＦの産生を増強することにより、アルツハイマー病等の老人痴呆症や末梢神経障害、脳血管障害、脳腫瘍、脳尖、頭部外傷変性疾患、麻酔薬物中毒等による神経機能の修復・再生を要する疾患の治療または予防を行うことができる。また、筋萎縮性側索硬化症、薬剤障害性末梢神経障害、糖尿病性末梢神経障害、パーキンソン病、感覚神経障害、色素性網膜症、黄斑変性症等の治療または予防にも有用である。すなわち、本発明の医薬、後述する飲食品、飼料を投与、摂取することにより上記疾患の治療又は予防が可能となる。
本発明の医薬としては、本発明において初めて得られた、一般式（Ｉ）で表される化合物及び／又は薬理学的に許容されるその塩を有効成分として含有することを特徴とする当該化合物に感受性を示す疾患の治療剤または予防剤が含まれる。
上記した本発明の治療剤又は予防剤は、本発明の化合物、例えば、ソヤサポニン類化合物、ソヤサポゲニン類化合物、グリチルリチンまたは薬理学的に許容されるそれらの塩を有効成分とし、これを公知の医薬用担体と組合せ製剤化することにより製造できる。
本発明の医薬における有効成分の含有量は、治療等の対象となる疾患、使用態様等により異なり、一概には決定できないが、通常、０．０１〜５０重量％、好適には０．１〜１０重量％程度である。
一般的には、本発明の化合物を薬理学的に許容できる液状または固体状の担体と配合し、かつ所望により溶剤、分散剤、乳化剤、緩衝剤、安定剤、賦形剤、結合剤、崩壊剤、滑沢剤等を加えて、錠剤、顆粒剤、散剤、粉末剤、カプセル剤等の固形剤、通常液剤、懸濁剤、乳剤等の液剤とすることができる。また、これを使用前に適当な担体の添加によって液状となし得る乾燥品とすることができる。
本発明の治療剤又は予防剤は、経口剤や、注射剤、点滴用剤等の非経口剤のいずれの形態によっても投与することができる。
本発明の治療剤又は予防剤の投与量は、その製剤形態、投与方法、使用目的およびこれに適用される患者の年齢、体重、症状によって適宜設定され、一定ではないが、一般には製剤中に含有される有効成分の量で、通常、ヒトでは１日当り１μｇ〜１ｇ／ｋｇ体重、好適には１０μｇ〜２００ｍｇ／ｋｇ体重程度である。もちろん、投与量は、種々の条件によって変動するので、上記投与量より少ない量で十分な場合もあるし、あるいは範囲を超えて必要な場合もある。また、投薬期間も特に限定されるものではない。本発明の医薬はそのまま経口投与するほか、任意の飲食品に添加して日常的に摂取させることもできる。
また、本発明は、本発明の化合物を有効成分として含有するＮＧＦ産生増強剤を提供する。当該増強剤としては、前記有効成分そのものであってもよく、また、前記有効成分を含む組成物であってもよい。本発明の態様においては、有効成分としての塩は薬理学的に許容される塩が好適である。ＮＧＦ産生増強剤は、たとえば、前記有効成分を当該有効成分と同じ用途に使用可能な他の成分などと配合し、上記治療剤または予防剤の製造方法に準じて通常使用される試薬の形態に製造すればよい。かかる増強剤における前記有効成分の含有量は、当該増強剤の投与方法、使用目的などを考慮し、本発明の所望の効果の発現が得られ得るような量であればよく、特に限定されるものではない。ＮＧＦ産生増強剤中の本発明の有効成分の含有量としては、通常、０．０１〜５０重量％、好適には０．１〜１０重量％程度である。また、該増強剤の使用量も、本発明の所望の効果の発現が得られ得るようであれば特に限定されるものではない。特に、生体に投与して使用する場合には、好ましくは前記治療剤または予防剤における有効成分の投与量範囲内で有効成分を投与できるような量で使用すればよい。ＮＧＦ産生増強剤は、ＮＧＦ産生増強を必要とする疾患における当該成長因子の増強に有用である。また、当該増強剤はＮＧＦに関連する疾患に対する薬物のスクリーニングにも有用である。さらに当該増強剤は、ＮＧＦ又は神経細胞の物理的変化に関する機能研究にも有用である。
つぎに、前記有効成分を含有してなる、本発明の食品、飲料（以下、飲食品という場合がある）又は飼料について説明する。本発明の飲食品又は飼料において、含有とは、含有、添加及び希釈の意を含むものであり、本発明の飲食品又は飼料は、本発明の化合物を含有、添加および／または希釈してなる食品、飲料又は飼料である。該飲食品等は、そのＮＧＦ産生増強作用により、治療又は予防にＮＧＦ産生増強を要する疾患の症状改善、予防に極めて有用である。また、生体の恒常性維持にも有用である。有効成分として使用される化合物の塩としては、薬理学的に許容される塩が好ましい。
なお、本発明の飲食品又は飼料にいう「含有」とは、飲食品等に本発明で使用される有効成分が含まれるという態様を、添加とは、飲食品等の原料に、本発明で使用される有効成分を添加するという態様を、希釈とは、本発明で使用される有効成分に、飲食品等の原料を添加するという態様をいう。
本発明の食品、飲料又は飼料の製造方法は、特に限定はないが、一般に用いられている食品、飲料又は飼料の製造方法を採用でき、製造された食品、飲料又は飼料に、本発明の化合物が有効成分として高含有されていればよく、通常の飲食品、飼料より高含有されておれば良い。すなわち、本発明の飲食品又は飼料は、通常、本発明の有効成分をその原料より濃縮又は単離し、それを、公知の飲食品又は飼料に配合することにより製造される。濃縮又は単離には、有効成分を合成することが含まれる。また、原料を、それに含まれる有効成分が高含有となるように処理可能であれば、該原料がヒトの食用に供されうるものである限り、得られる処理物をそのまま本発明の飲食品とすることも可能である。例えば、該処理物としては、濃縮果汁、野菜汁等が挙げられる。なお、ここで高含有とは、本発明の有効成分の原料、例えば大豆の単位重量あたりの本発明の化合物重量よりも、本発明の食品、飲料又は飼料の単位重量あたりの本発明の化合物重量の方が多いことを意味する。また、重量とは固形分重量をいう。
本発明の食品又は飲料は、特に限定するものではないが、例えば、穀物加工品（例、小麦粉加工品、デンプン類加工品、プレミックス加工品、麺類、マカロニ類、パン類、あん類、そば類、麩、ビーフン、はるさめ、包装餅等）、油脂加工品（例、可塑性油脂、てんぷら油、サラダ油、マヨネーズ類、ドレッシング等）、大豆加工品（例、豆腐類、味噌、納豆等）、食肉加工品（例、ハム、ベーコン、プレスハム、ソーセージ等）、水産製品（例、冷凍すりみ、かまぼこ、ちくわ、はんぺん、さつま揚げ、つみれ、すじ、魚肉ハム、ソーセージ、かつお節、魚卵加工品、水産缶詰、つくだ煮等）、乳製品（例、原料乳、クリーム、ヨーグルト、バター、チーズ、練乳、粉乳、アイスクリーム等）、野菜・果実加工品（例、ペースト類、ジャム類、漬物類、果実飲料、野菜飲料、ミックス飲料等）、菓子類（例、チョコレート、ビスケット類、菓子パン類、ケーキ、餅菓子、米菓類等）、アルコール類（例、日本酒、中国酒、ワイン、ウイスキー、焼酎、ウオッカ、ブランデー、ジン、ラム酒、ビール、清涼アルコール飲料、果実酒、リキュール等）、嗜好飲料（例、緑茶、紅茶、ウーロン茶、コーヒー、清涼飲料、乳酸飲料等）、調味料（例、しょうゆ、ソース、酢、みりん等）、缶詰・瓶詰・袋詰食品（例、牛飯、釜飯、赤飯、カレー、その他の各種調理済食品等）、半乾燥または濃縮食品（例、レバーペースト、その他のスプレッド、そば・うどんの汁、濃縮スープ類等）、乾燥食品（例、即席麺類、即席カレー、インスタントコーヒー、粉末ジュース、粉末スープ、即席味噌汁、調理済食品、調理済飲料、調理済スープ等）、冷凍食品（例、すき焼き、茶碗蒸し、うなぎかば焼き、ハンバーグステーキ、シュウマイ、餃子、各種スティック、フルーツカクテル等）、固形食品、液体食品（例、スープ等）、香辛料類等の農産・林産加工品、畜産加工品、水産加工品等が挙げられる。
本発明の飲食品中の有効成分の含有量としては、特に限定されるものではないが、通常、０．０１〜５０重量％、好適には０．１〜１０重量％程度である。
本発明の飼料とは、例えば、家畜用、養殖魚用、家禽用、ペット用の飼料であり、本発明の化合物を含有する、ヒト以外の生物の人工食料又は飲料を意味する。飲料としては、家畜用等の飲料水が挙げられる。また、本発明の一態様としては、本発明の有効成分を含んでなるＮＧＦ産生増強用飼料添加剤が提供される。該添加剤は、例えば、通常の飼料に添加して、又は生物を浸漬する水中（養殖魚を養殖するための水中等）に添加して使用される。
本発明の飼料中の有効成分の含有量は、特に限定されるものではないが、通常、０．０１〜５０重量％、好適には０．１〜１０重量％程度である。前記添加剤中の有効成分の含有量も特に限定されるものではなく、その用途に応じて所望の効果が得られうるように適宜調節すればよい。
本発明の飼料（前記添加剤を含む）の形態は、特に限定されるものではなく、粉末状、液状又は固形状であってもよい。なお、有効成分として使用される化合物の塩としては、薬理学的に許容される塩が好ましい。
本発明において医薬、飲食品、飼料中の本発明の化合物含量は前記の通りであるが、その投与、摂取等により、生体内でＮＧＦ産生が増強される量であればよく、通常の飲食品中のソヤサポニン類化合物、ソヤサポゲニン類化合物、及びグリチルリチンの含有量以上の量で高含有される。
本発明の有効成分である化合物に毒性は認められない。例えば、本発明で使用されるサポニン類化合物、グリチルリチン又はそれらの塩をマウス（雄性、６週齡）に経口投与（１０００ｍｇ／ｋｇ体重）した場合、毒性は認められない。
また、本発明はＮＧＦ産生増強作用を有する上記一般式（Ｉ）で表される新規なソヤサポニン類化合物及びソヤサポゲニン類化合物も提供する。その製造方法については上述の通りであるが、下記実施例により、より詳細に説明する。本発明の新規化合物は、当該実施例を参考に製造することができるが、これに限定されるものではない。
【実施例】  以下、本発明を実施例をもって詳細に説明するが本発明はこれらの実施例に何ら限定されるものではない。
実施例１  大豆胚芽水抽出物由来フラクションの分画
（１）乾燥大豆胚芽９．６ｋｇに蒸留水２５リットルを加えて１時間浸漬した後、ブレンダーにて破砕を行った。つぎに、蒸留水４０リットルを加えて２時間攪拌した後、５０００ｇにて７分間遠心分離を行ない、沈殿１ならびに上清１（５４リットル）を得た。沈殿１に蒸留水４０リットルを加えて２時間攪拌した後、５０００ｇにて７分間遠心分離を行ない、沈殿２（１９．７ｋｇ）ならびに上清２（３６リットル）を得た。上清１および上清２を混合し、大豆胚芽水抽出液９０Ｌを得た。
（２）実施例１−（１）で得られた大豆胚芽水抽出液９０リットルに対し、エタノール３９リットルを添加して攪拌の後、５０００ｇにて７分間遠心分離を行ない、沈殿３ならびに上清３（９０リットル）を得た。上清３をロータリーエバポレーターで１８リットルに濃縮し、等量のエタノールを加えて攪拌後、５０００ｇにて７分間遠心分離を行ない、沈殿４ならびに上清４（１５リットル）を得た。上清４を濃縮し、大豆胚芽水抽出濃縮液１．７リットルを得た。
（３）実施例１−（２）で得られた大豆胚芽水抽出濃縮液１１０ｍＬに蒸留水５００ｍＬを添加したものについて、逆相クロマトグラフィーを用いて分画した。樹脂はコスモシール１４０  Ｃ１８−ＯＰＮ（ナカライテスク社製：樹脂量３００ｍＬ）を用いた。展開溶媒としてそれぞれ１５００ｍＬの蒸留水、３０％エタノール水溶液、５０％エタノール水溶液、１００％エタノールを用い、その順に溶出、分画を行ない、各大豆胚芽水抽出物由来コスモシール溶出画分を調製した。
（４）実施例１−（３）で得られた大豆胚芽水抽出物由来コスモシール３０％エタノール溶出画分を減圧濃縮後、３倍量のアセトンを加えて攪拌し、５０００ｇにて７分間遠心分離を行ない、沈殿５ならびに上清５を得た。
（５）実施例１−（４）で得られた上清５を濃縮乾固後、酢酸エチル：酢酸：水（容量比；以下、同じ）＝８：３：２（１０ｍＬ）に溶解し、シリカクロマトを用いて分画した。以下にその条件について示す。シリカゲルにはＢＷ−３００ＳＰ（富士シリシア化学社製：樹脂量３００ｍＬ）を用いた。展開溶媒として酢酸エチル：酢酸：水＝８：３：２（１０００ｍＬ）、エタノール：水＝５：１（５００ｍＬ）を用い、その順に溶出を行ない、画分０（３００ｍＬ）、画分１（２００ｍＬ）、画分２（２００ｍＬ）、画分３（１００ｍＬ）、画分４（１５０ｍＬ）、画分５（２００ｍＬ）、画分６（１２０ｍＬ）の順に溶出画分を得た。各溶出液を減圧濃縮後、各大豆胚芽水抽出物由来シリカカラム画分０〜６を得た。
（６）実施例１−（５）で得られた大豆胚芽水抽出物由来シリカカラム画分５を蒸留水６０ｍＬに溶解し、ついで逆相クロマトグラフィーを用いて分画した。以下にその条件について述べる。カラムはＴＳＫ  ｇｅｌ  ＯＤＳ−８０Ｔｓ（２１．５ｍｍ×３０ｃｍ：東ソー社製）を用いた。溶媒Ａ（蒸留水とアセトニトリルを容量比３対１で混合したもの）と溶媒Ｂ（蒸留水とアセトニトリルを容量比１対３で混合したもの）の溶出比は０〜１０分までは溶媒Ａ比を１００％に保持し、１０〜２５分までは溶媒Ｂ比を直線的に０〜３０％に、つづく２５〜４０分までは溶媒Ｂ比を直線的に３０〜１００％に、つづく１５分間は溶媒Ｂ比を１００％に保持した。溶出速度は５ｍＬ／分、検出は２１５ｎｍで行なった。溶出液の紫外線吸収を指標に、大豆胚芽水抽出物由来フラクション１〜２１を分画した。
実施例２  ３−Ｏ−［β−Ｄ−ｇｌｕｃｏｐｙｒａｎｏｓｙｌ（１→２）−β−Ｄ−ｇａｌａｃｔｏｐｙｒａｎｏｓｙｌ−（１→２）−β−Ｄ−ｇｌｕｃｕｒｏｎｏｐｙｒａｎｏｓｙｌ］−２２−Ｏ−［２−Ｏ−ａｃｅｔｙｌ−β−Ｄ−ｘｙｌｏｐｙｒａｎｏｓｙｌ（１→３）−α−Ｌ−ａｒａｂｉｎｏｐｙｒａｎｏｓｙｌ］ｓｏｙａｓａｐｏｇｅｎｏｌ  ＡのＮＧＦ産生増強活性
（１）実施例１−（６）で分画した大豆胚芽水抽出物由来フラクション７（保持時間３２．４分の検出のピークを含むフラクション）の質量スペクトル（ＭＳ）を質量分析計（ＤＸ３０２：日本電子社製）によりＦＡＢ−ＭＳの手法で測定した。マトリックスにはトリエタノールアミンを用いた。その結果、ｍ／ｚ  １２７９（Ｍ−Ｈ）−のピークを検出した。第１図に、大豆胚芽水抽出物由来フラクション７の質量スペクトルを示す。第１図において、横軸はｍ／ｚ値、縦軸は相対強度を示す。
また、大豆胚芽水抽出物由来フラクション７を核磁気共鳴（ＮＭＲ）スペクトル装置（ＡＶＡＮＣＥ６００型：ブルカ・バイオスピン社製）を用い、各種ＮＭＲスペクトルを測定し構造解析した。以下にＮＭＲの帰属の信号を示す。
１Ｈ−ＮＭＲ：
ｓａｐｏｇｅｎｏｌ  ｍｏｉｅｔｙ；δ３．２８（１Ｈ，ｍ，３−Ｈ），５．１５（１Ｈ，ｂｒ−ｓ，１２−Ｈ），３．４５（１Ｈ，ｍ，２１−Ｈ），３．２３（１Ｈ，ｂｒ−ｓ，２２−Ｈ），３．１４（１Ｈ，ｍ，２４−Ｈ），３．８５（１Ｈ，ｍ，２４−Ｈ）
３−Ｏ−β−Ｄ−ｇｌｕｃｒｏｎｏｐｙｒａｎｏｓｙｌ  ｍｏｉｅｔｙ；δ４．４５（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝７．２Ｈｚ，１’−Ｈ），３．４４（１Ｈ，ｍ，２’−Ｈ），３．５７（１Ｈ，ｍ，３’−Ｈ），３．３２（１Ｈ，ｍ，４’−Ｈ），３．６５（１Ｈ，ｍ，５’−Ｈ）
２’−Ｏ−β−Ｄ−ｇａｌａｃｔｏｐｙｒａｎｏｓｙｌ  ｍｏｉｅｔｙ；δ４．８１（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝６．６Ｈｚ，１’’−Ｈ），３．５１（１Ｈ，ｍ，２’’−Ｈ），３．５１（１Ｈ，ｍ，３’’−Ｈ），３．６５（１Ｈ，ｍ，４’’−Ｈ），３．３８（１Ｈ，ｍ，５’’−Ｈ），３．５０（２Ｈ，ｍ，６’’−Ｈ）
２’’−Ｏ−β−Ｄ−ｇｌｕｃｏｐｙｒａｎｏｓｙｌ  ｍｏｉｅｔｙ；δ４．３８（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝７．８Ｈｚ，１’’’−Ｈ），３．０２（１Ｈ，ｍ，２’’’−Ｈ），３．１７（１Ｈ，ｍ，３’’’−Ｈ），３．０８（１Ｈ，ｍ，４’’’−Ｈ），３．１４（１Ｈ，ｍ，５’’’−Ｈ），３．４６（１Ｈ，ｍ，６’’’−Ｈ），３．７３（１Ｈ，ｍ，６’’’−Ｈ）
２２−Ｏ−α−Ｌ−ａｒａｂｉｎｏｐｙｒａｎｏｓｙｌ  ｍｏｉｅｔｙ；δ４．１３（１Ｈ，ｍ，１’’’’−Ｈ），３．４２（１Ｈ，ｍ，２’’’’−Ｈ），３．４２（１Ｈ，ｍ，３’’’’−Ｈ），３．６９（１Ｈ，ｍ，４’’’’−Ｈ），３．３５（１Ｈ，ｍ，５’’’’−Ｈ），３．６２（１Ｈ，ｍ，５’’’’−Ｈ）
３’’’’−Ｏ−β−Ｄ−ｘｙｌｏｐｙｒａｎｏｓｙｌ  ｍｏｉｅｔｙ；δ４．５７（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝７．８Ｈｚ，１’’’’’−Ｈ），４．５２（１Ｈ，ｍ，２’’’’’−Ｈ），３．２９（１Ｈ，ｍ，３’’’’’−Ｈ），３．３７（１Ｈ，ｍ，４’’’’’−Ｈ），３．０９（１Ｈ，ｍ，５’’’’’−Ｈ），３．７２（１Ｈ，ｍ，５’’’’’−Ｈ），２．００（３Ｈ，ｓ，２’’’’’−ＣＨ３）
但し、１Ｈ−ＮＭＲにおいてはサンプルは重ジメチルスルホキシドに溶解し、重ジメチルスルホキシドの残留プロトンの化学シフト値を２．５１ｐｐｍとして表した。第２図に、大豆胚芽水抽出物由来フラクション７の１Ｈ−ＮＭＲスペクトルを示す。第２図において、横軸は化学シフト値、縦軸はシグナルの強度を示す。
１３Ｃ−ＮＭＲ：
ｓａｐｏｇｅｎｏｌ  ｍｏｉｅｔｙ；δ９０．３（３−Ｃ），１２２．５（１２−Ｃ），１４４．４（１３−Ｃ），７４．７（２１−Ｃ），９２．０（２２−Ｃ），６３．０（２４−Ｃ）
３−Ｏ−β−Ｄ−ｇｌｕｃｒｏｎｏｐｙｒａｎｏｓｙｌ  ｍｏｉｅｔｙ；δ１０４．１（１’−Ｃ），７９．０（２’−Ｃ），７６．６（３’−Ｃ），７１．９（４’−Ｃ），７６．２（５’−Ｃ），１７１．０（６’−Ｃ）
２’−Ｏ−β−Ｄ−ｇａｌａｃｔｏｐｙｒａｎｏｓｙｌ  ｍｏｉｅｔｙ；δ１０１．６（１’’−Ｃ），８２．７（２’’−Ｃ），７３．４（３’’−Ｃ），６９．０（４’’−Ｃ），７５．５（５’’−Ｃ），６０．９（６’’−Ｃ）
２’’−Ｏ−β−Ｄ−ｇｌｕｃｏｐｙｒａｎｏｓｙｌ  ｍｏｉｅｔｙ；δ１０５．３（１’’’−Ｃ），７５．５（２’’’−Ｃ），７６．７（３’’’−Ｃ），７０．６（４’’’−Ｃ），７８．１（５’’’−Ｃ），６１．８（６’’’−Ｃ）
２２−Ｏ−α−Ｌ−ａｒａｂｉｎｏｐｙｒａｎｏｓｙｌ  ｍｏｉｅｔｙ；δ１０８．０（１’’’’−Ｃ），７１．９（２’’’’−Ｃ），８３．０（３’’’’−Ｃ），６８．５（４’’’’−Ｃ），６７．０（５’’’’−Ｃ）
３’’’’−Ｏ−β−Ｄ−ｘｙｌｏｐｙｒａｎｏｓｙｌ  ｍｏｉｅｔｙ；δ１０３．３（１’’’’’−Ｃ），７４．６（２’’’’’−Ｃ），７４．７（３’’’’’−Ｃ），７０．２（４’’’’’−Ｃ），６５．３（５’’’’’−Ｃ），１７０．５（２’’’’’−Ｃ＝Ｏ），２１．８（２’’’’’−ＣＨ３）
但し、１３Ｃ−ＮＭＲにおいてはサンプルは重ジメチルスルホキシドに溶解し、重ジメチルスルホキシドの化学シフト値を４０．２ｐｐｍとして表した。第３図に、大豆胚芽水抽出物由来フラクション７の１３Ｃ−ＮＭＲスペクトルを示す。第３図において、横軸は化学シフト値、縦軸はシグナルの強度を示す。
大豆胚芽水抽出物由来フラクション７を１Ｎ  Ｈ２ＳＯ４（ジオキサンと水との容量比１：３の溶液）と混合し、８０℃、４時間加温し、糖成分と非糖成分を生じさせた。非糖部分について薄層クロマトグラフィー（メルク社製Ｓｉｌｉｃａ  ｇｅｌ  ６０  Ｆ２５４、展開溶媒Ａ：クロロホルムとメタノールを１０：１で混合）を行った結果、Ｓｏｙａｓａｐｏｇｅｎｏｌ  Ａと同じＲｆ値を有するスポットを検出した。糖成分について薄層クロマトグラフィー（展開溶媒Ｂ：水とアセトニトリルを３：１７で混合）を行った結果、アラビノース、グルコース、キシロース、ガラクトースを検出した。
以上、大豆胚芽水抽出物由来フラクション７について行った質量スペクトル、ＮＭＲスペクトル解析、ならびに酸加水分解後の非糖成分と糖成分の解析により、大豆胚芽水抽出物由来フラクション７が３−Ｏ−［β−Ｄ−ｇｌｕｃｏｐｙｒａｎｏｓｙｌ（１→２）−β−Ｄ−ｇａｌａｃｔｏｐｙｒａｎｏｓｙｌ−（１→２）−β−Ｄ−ｇｌｕｃｕｒｏｎｏｐｙｒａｎｏｓｙｌ］−２２−Ｏ−［２−Ｏ−ａｃｅｔｙｌ−β−Ｄ−ｘｙｌｏｐｙｒａｎｏｓｙｌ（１→３）−α−Ｌ−ａｒａｂｉｎｏｐｙｒａｎｏｓｙｌ］ｓｏｙａｓａｐｏｇｅｎｏｌ  Ａ（分子量１２８０）であることを確定した。なお、当該化合物は上記表１における化合物ａである。
（２）化合物ａのＮＧＦ産生増強活性を測定した。マウス繊維芽細胞Ｌ−Ｍ細胞（ＡＴＣＣ  ＣＣＬ−１．２）を０．５％のバクトペプトン（ギブコ社製）を含むＭ１９９培地（バイオウィタカ社製）で１．５×１０５細胞／ｍＬに懸濁し、９６穴プレートに０．１ｍＬずつまき無菌的に培養した。３日間培養後、培地を取り除き、０．５％のウシ血清アルブミン（シグマ社製）を含むＭ１９９培地に置き換えた。これに化合物ａを添加し、２０時間培養した。培養終了後、培養液中のＮＧＦの濃度をエンザイムイムノアッセイ法（ＮＧＦ  Ｅｍａｘ  Ｉｍｍｕｎｏ  Ａｓｓａｙ  Ｓｙｓｔｅｍ：プロメガ社製）にて測定した。添加量は最終濃度で表２に示す通りとした。実験は２連で行い、その平均値を採用した。その結果、化合物ａにＮＧＦ産生増強活性があることが明らかになった。表２にその結果を示す。なお、コントロールのＮＧＦ産生量は０．７３９ｎｇ／ｍＬであった。コントロールは、化合物ａを添加しないこと以外は同様にして培養液中の濃度を測定した。以下、同様である。
実施例３  ３−Ｏ−［β−Ｄ−ｇｌｕｃｏｐｙｒａｎｏｓｙｌ（１→２）−β−Ｄ−ｇａｌａｃｔｏｐｙｒａｎｏｓｙｌ−（１→２）−β−Ｄ−ｇｌｕｃｕｒｏｎｏｐｙｒａｎｏｓｙｌ］−２２−Ｏ−［３−Ｏ−ａｃｅｔｙｌ−β−Ｄ−ｘｙｌｏｐｙｒａｎｏｓｙｌ（１→３）−α−Ｌ−ａｒａｂｉｎｏｐｙｒａｎｏｓｙｌ］ｓｏｙａｓａｐｏｇｅｎｏｌ  ＡのＮＧＦ産生増強活性
（１）実施例１−（６）で分画した大豆胚芽水抽出物由来フラクション９（保持時間３４．２分の検出のピークを含むフラクション）の質量スペクトルを実施例２−（１）と同様の方法で測定した。マトリックスにはトリエタノールアミンを用いた。質量分析によりｍ／ｚ  １２７９（Ｍ−Ｈ）−のピークを検出した。第４図に、大豆胚芽水抽出物由来フラクション９の質量スペクトルを示す。第４図において、横軸はｍ／ｚ値、縦軸は相対強度を示す。
大豆胚芽水抽出物由来フラクション９のＮＭＲスペクトルを実施例２−（１）と同様の方法で測定した。ＮＭＲの帰属の信号を以下に示す。
１Ｈ−ＮＭＲ：
ｓａｐｏｇｅｎｏｌ  ｍｏｉｅｔｙ；δ３．２７（１Ｈ，ｍ，３−Ｈ），５．１４（１Ｈ，ｂｒ−ｓ，１２−Ｈ），３．３９（１Ｈ，ｍ，２１−Ｈ），３．２４（１Ｈ，ｂｒ−ｓ，２２−Ｈ），３．１４（１Ｈ，ｍ，２４−Ｈ），３．８６（１Ｈ，ｍ，２４−Ｈ）
３−Ｏ−β−Ｄ−ｇｌｕｃｒｏｎｏｐｙｒａｎｏｓｙｌ  ｍｏｉｅｔｙ；δ４．４５（１Ｈ，ｍ，１’−Ｈ），３．４３（１Ｈ，ｍ，２’−Ｈ），３．５７（１Ｈ，ｍ，３’−Ｈ），３．３３（１Ｈ，ｔ，Ｊ＝９．７Ｈｚ，４’−Ｈ），３．６５（１Ｈ，ｍ，５’−Ｈ）
２’−Ｏ−β−Ｄ−ｇａｌａｃｔｏｐｙｒａｎｏｓｙｌ  ｍｏｉｅｔｙ；δ４．８０（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝６．６Ｈｚ，１’’−Ｈ），３．５１（１Ｈ，ｍ，２’’−Ｈ），３．５１（１Ｈ，ｍ，３’’−Ｈ），３．６５（１Ｈ，ｍ，４’’−Ｈ），３．３８（１Ｈ，ｍ，５’’−Ｈ），３．５０（２Ｈ，ｍ，６’’−Ｈ）
２’’−Ｏ−β−Ｄ−ｇｌｕｃｏｐｙｒａｎｏｓｙｌ  ｍｏｉｅｔｙ；δ４．３７（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝７．８Ｈｚ，１’’’−Ｈ），３．０３（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝７．８，９．０Ｈｚ，２’’’−Ｈ），３．１７（１Ｈ，ｔ，Ｊ＝９．０Ｈｚ，３’’’−Ｈ），３．０７（１Ｈ，ｔ，Ｊ＝９．０Ｈｚ，４’’’−Ｈ），３．１５（１Ｈ，ｍ，５’’’−Ｈ），３．４７（１Ｈ，ｍ，６’’’−Ｈ），３．７３（１Ｈ，ｍ，６’’’−Ｈ）
２２−Ｏ−α−Ｌ−ａｒａｂｉｎｏｐｙｒａｎｏｓｙｌ  ｍｏｉｅｔｙ；δ４．２２（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝７．８Ｈｚ，１’’’’−Ｈ），３．５５（１Ｈ，ｍ，２’’’’−Ｈ），３．５１（１Ｈ，ｍ，３’’’’−Ｈ），３．７５（１Ｈ，ｍ，４’’’’−Ｈ），３．４０（１Ｈ，ｍ，５’’’’−Ｈ），３．６３（１Ｈ，ｍ，５’’’’−Ｈ）
３’’’’−Ｏ−β−Ｄ−ｘｙｌｏｐｙｒａｎｏｓｙｌ  ｍｏｉｅｔｙ；δ４．４７（１Ｈ，ｍ，１’’’’’−Ｈ），３．２３（１Ｈ，ｍ，２’’’’’−Ｈ），４．７２（１Ｈ，ｔ，Ｊ＝９．３Ｈｚ，３’’’’’−Ｈ），３．４８（１Ｈ，ｍ，４’’’’’−Ｈ），３．１８（１Ｈ，ｍ，５’’’’’−Ｈ），３．７４（１Ｈ，ｍ，５’’’’’−Ｈ），２．０３（３Ｈ，ｓ，３’’’’’−ＣＨ３）
但し、１Ｈ−ＮＭＲにおいてはサンプルは重ジメチルスルホキシドに溶解し、重ジメチルスルホキシドの残留プロトンの化学シフト値を２．５１ｐｐｍとして表した。第５図に、大豆胚芽水抽出物由来フラクション９の１Ｈ−ＮＭＲスペクトルを示す。第５図において、横軸は化学シフト値、縦軸はシグナルの強度を示す。
１３Ｃ−ＮＭＲ：
ｓａｐｏｇｅｎｏｌ  ｍｏｉｅｔｙ；δ９０．４（３−Ｃ），１２２．５（１２−Ｃ），１４４．４（１３−Ｃ），７５．０（２１−Ｃ），９２．３（２２−Ｃ），６３．０（２４−Ｃ）
３−Ｏ−β−Ｄ−ｇｌｕｃｒｏｎｏｐｙｒａｎｏｓｙｌ  ｍｏｉｅｔｙ；δ１０４．１（１’−Ｃ），７８．９（２’−Ｃ），７６．７（３’−Ｃ），７２．０（４’−Ｃ），７６．１（５’−Ｃ），１７１．０（６’−Ｃ）
２’−Ｏ−β−Ｄ−ｇａｌａｃｔｏｐｙｒａｎｏｓｙｌ  ｍｏｉｅｔｙ；δ１０１．６（１’’’−Ｃ），８２．７（２’’−Ｃ），７３．４（３’’−Ｃ），６９．０（４’’−Ｃ），７５．７（５’’−Ｃ），６１．０（６’’−Ｃ）
２’’−Ｏ−β−Ｄ−ｇｌｕｃｏｐｙｒａｎｏｓｙｌ  ｍｏｉｅｔｙ；δ１０５．３（１’’’−Ｃ），７５．５（２’’’−Ｃ），７６．８（３’’’−Ｃ），７０．６（４’’’−Ｃ），７８．１（５’’’−Ｃ），６１．８（６’’’−Ｃ）
２２−Ｏ−α−Ｌ−ａｒａｂｉｎｏｐｙｒａｎｏｓｙｌ  ｍｏｉｅｔｙ；δ１０７．４（１’’’’−Ｃ），７１．９（２’’’’−Ｃ），８３．７（３’’’’−Ｃ），６８．５（４’’’’−Ｃ），６７．０（５’’’’−Ｃ）
３’’’’−Ｏ−β−Ｄ−ｘｙｌｏｐｙｒａｎｏｓｙｌ  ｍｏｉｅｔｙ；δ１０５．６（１’’’’’−Ｃ），７２．２（２’’’’’−Ｃ），７７．８（３’’’’’−Ｃ），６８．１（４’’’’’−Ｃ），６６．３（５’’’’’−Ｃ），１７０．８（３’’’’’−Ｃ＝Ｏ），２１．９（３’’’’’−ＣＨ３）
但し、１３Ｃ−ＮＭＲにおいてはサンプルは重ジメチルスルホキシドに溶解し、重ジメチルスルホキシドの化学シフト値を４０．２ｐｐｍとして表した。第６図に、大豆胚芽水抽出物由来フラクション９の１３Ｃ−ＮＭＲスペクトルを示す。第６図において、横軸は化学シフト値、縦軸はシグナルの強度を示す。
大豆胚芽水抽出物由来フラクション９を実施例２−（１）と同様の方法で加水分解に処し、糖成分と非糖成分を生じさせた。非糖部分について薄層クロマトグラフィー（展開溶媒Ａ）を行った結果、Ｓｏｙａｓａｐｏｇｅｎｏｌ  Ａと同じＲｆ値を有するスポットを検出した。糖成分について薄層クロマトグラフィー（展開溶媒Ｂ）を行った結果、アラビノース、グルコース、キシロース、ガラクトースを検出した。
以上の結果より、大豆胚芽水抽出物由来フラクション９が３−Ｏ−［β−Ｄ−ｇｌｕｃｏｐｙｒａｎｏｓｙｌ（１→２）−β−Ｄ−ｇａｌａｃｔｏｐｙｒａｎｏｓｙｌ−（１→２）−β−Ｄ−ｇｌｕｃｕｒｏｎｏｐｙｒａｎｏｓｙｌ］−２２−Ｏ−［３−Ｏ−ａｃｅｔｙｌ−β−Ｄ−ｘｙｌｏｐｙｒａｎｏｓｙｌ（１→３）−α−Ｌ−ａｒａｂｉｎｏｐｙｒａｎｏｓｙｌ］ｓｏｙａｓａｐｏｇｅｎｏｌ  Ａ（分子量１２８０）であることを確定した。なお、当該化合物は上記表１における化合物ｂである。
（２）化合物ｂのＮＧＦ産生増強活性を実施例２−（２）と同様の方法で測定した。その結果、化合物ｂにＮＧＦ産生増強活性があることが明らかになった。表２にその結果を示す。なお、コントロールのＮＧＦ産生量は０．７３９ｎｇ／ｍＬであった。
実施例４  ３−Ｏ−［β−Ｄ−ｇｌｕｃｏｐｙｒａｎｏｓｙｌ（１→２）−β−Ｄ−ｇａｌａｃｔｏｐｙｒａｎｏｓｙｌ−（１→２）−β−Ｄ−ｇｌｕｃｕｒｏｎｏｐｙｒａｎｏｓｙｌ］−２２−Ｏ−［４−Ｏ−ａｃｅｔｙｌ−β−Ｄ−ｘｙｌｏｐｙｒａｎｏｓｙｌ（１→３）−α−Ｌ−ａｒａｂｉｎｏｐｙｒａｎｏｓｙｌ］ｓｏｙａｓａｐｏｇｅｎｏｌ  ＡのＮＧＦ産生増強活性
（１）実施例１−（６）で分画した大豆胚芽水抽出物由来フラクション１０（保持時間３５．６分の検出のピークを含むフラクション）の質量スペクトルを実施例２−（１）と同様の方法で測定した。マトリックスにはトリエタノールアミンを用いた。質量分析によりｍ／ｚ  １２７９（Ｍ−Ｈ）−のピークを検出した。第７図に、大豆胚芽水抽出物由来フラクション１０の質量スペクトルを示す。第７図において、横軸はｍ／ｚ値、縦軸は相対強度を示す。
大豆胚芽水抽出物由来フラクション１０のＮＭＲスペクトルを実施例２−（１）と同様の方法で測定した。ＮＭＲの帰属の信号を以下に示す。
１Ｈ−ＮＭＲ：
ｓａｐｏｇｅｎｏｌ  ｍｏｉｅｔｙ；δ３．２６（１Ｈ，ｍ，３−Ｈ），５．１５（１Ｈ，ｂｒ−ｓ，１２−Ｈ），３．３９（１Ｈ，ｍ，２１−Ｈ），３．２３（１Ｈ，ｂｒ−ｓ，２２−Ｈ），３．１５（１Ｈ，ｍ，２４−Ｈ），３．８６（１Ｈ，ｍ，２４−Ｈ）
３−Ｏ−β−Ｄ−ｇｌｕｃｒｏｎｏｐｙｒａｎｏｓｙｌ  ｍｏｉｅｔｙ；δ４．４６（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝７．２Ｈｚ，１’−Ｈ），３．４３（１Ｈ，ｍ，２’−Ｈ），３．５６（１Ｈ，ｍ，３’−Ｈ），３．３３（１Ｈ，ｍ，４’−Ｈ），３．６５（１Ｈ，ｍ，５’−Ｈ）
２’−Ｏ−β−Ｄ−ｇａｌａｃｔｏｐｙｒａｎｏｓｙｌ  ｍｏｉｅｔｙ；δ４．８１（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝７．２Ｈｚ，１’’−Ｈ），３．５１（１Ｈ，ｍ，２’’−Ｈ），３．５１（１Ｈ，ｍ，３’’−Ｈ），３．６５（１Ｈ，ｍ，４’’−Ｈ），３．３８（１Ｈ，ｍ，５’’−Ｈ），３．５０（２Ｈ，ｍ，６’’−Ｈ）
２’’−Ｏ−β−Ｄ−ｇｌｕｃｏｐｙｒａｎｏｓｙｌ  ｍｏｉｅｔｙ；δ４．３８（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝７．８Ｈｚ，１’’’−Ｈ），３．０２（１Ｈ，ｍ，２’’’−Ｈ），３．１６（１Ｈ，ｍ，３’’’−Ｈ），３．０８（１Ｈ，ｍ，４’’’−Ｈ），３．１５（１Ｈ，ｍ，５’’’−Ｈ），３．４７（１Ｈ，ｍ，６’’’−Ｈ），３．７３（１Ｈ，ｍ，６’’’−Ｈ）
２２−Ｏ−α−Ｌ−ａｒａｂｉｎｏｐｙｒａｎｏｓｙｌ  ｍｏｉｅｔｙ；δ４．２２（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝７．２Ｈｚ，１’’’’−Ｈ），３．５７（１Ｈ，ｍ，２’’’’−Ｈ），３．４６（１Ｈ，ｍ，３’’’’−Ｈ），３．７４（１Ｈ，ｍ，４’’’’−Ｈ），３．３９（１Ｈ，ｍ，５’’’’−Ｈ），３．６２（１Ｈ，ｍ，５’’’’−Ｈ）
３’’’’−Ｏ−β−Ｄ−ｘｙｌｏｐｙｒａｎｏｓｙｌ  ｍｏｉｅｔｙ；δ４．４３（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝７．２Ｈｚ，１’’’’’−Ｈ），３．３９（１Ｈ，ｍ，２’’’’’−Ｈ），３．１８（１Ｈ，ｍ，３’’’’’−Ｈ），４．５３（１Ｈ，ｍ，４’’’’’−Ｈ），３．１７（１Ｈ，ｍ，５’’’’’−Ｈ），３．７８（１Ｈ，ｍ，５’’’’’−Ｈ），２．０１（３Ｈ，ｓ，４’’’’’−ＣＨ３）
但し、１Ｈ−ＮＭＲにおいてはサンプルは重ジメチルスルホキシドに溶解し、重ジメチルスルホキシドの残留プロトンの化学シフト値を２．５１ｐｐｍとして表した。第８図に、大豆胚芽水抽出物由来フラクション１０の１Ｈ−ＮＭＲスペクトルを示す。第８図において、横軸は化学シフト値、縦軸はシグナルの強度を示す。
１３Ｃ−ＮＭＲ：
ｓａｐｏｇｅｎｏｌ  ｍｏｉｅｔｙ；δ  ９０．３（３−Ｃ），１２２．５（１２−Ｃ），１４４．４（１３−Ｃ），７５．０（２１−Ｃ），９２．４（２２−Ｃ），６３．０（２４−Ｃ）
３−Ｏ−β−Ｄ−ｇｌｕｃｒｏｎｏｐｙｒａｎｏｓｙｌ  ｍｏｉｅｔｙ；δ１０４．１（１’−Ｃ），７８．８（２’−Ｃ），７６．５（３’−Ｃ），７１．９（４’−Ｃ），７６．２（５’−Ｃ），１７１．０（６’−Ｃ）
２’−Ｏ−β−Ｄ−ｇａｌａｃｔｏｐｙｒａｎｏｓｙｌ  ｍｏｉｅｔｙ；δ１０１．５（１’’−Ｃ），８２．７（２’’−Ｃ），７３．３（３’’−Ｃ），６９．０（４’’−Ｃ），７５．７（５’’−Ｃ），６０．９（６’’−Ｃ）
２’’−Ｏ−β−Ｄ−ｇｌｕｃｏｐｙｒａｎｏｓｙｌ  ｍｏｉｅｔｙ；δ１０５．３（１’’’−Ｃ），７５．５（２’’’−Ｃ），７６．８（３’’’−Ｃ），７０．６（４’’’−Ｃ），７８．１（５’’’−Ｃ），６１．８（６’’’−Ｃ）
２２−Ｏ−α−Ｌ−ａｒａｂｉｎｏｐｙｒａｎｏｓｙｌ  ｍｏｉｅｔｙ；δ１０７．５（１’’’’−Ｃ），７１．８（２’’’’−Ｃ），８３．９（３’’’’−Ｃ），６８．４（４’’’’−Ｃ），６７．０（５’’’’−Ｃ）
３’’’’−Ｏ−β−Ｄ−ｘｙｌｏｐｙｒａｎｏｓｙｌ  ｍｏｉｅｔｙ；δ１０５．９（１’’’’’−Ｃ），７３．３（２’’’’’−Ｃ），７４．５（３’’’’’−Ｃ），７２．３（４’’’’’−Ｃ），６２．８（５’’’’’−Ｃ），１７１．０（４’’’’’−Ｃ＝Ｏ），２１．７（４’’’’’−ＣＨ３）
但し、１３Ｃ−ＮＭＲにおいてはサンプルは重ジメチルスルホキシドに溶解し、重ジメチルスルホキシドの化学シフト値を４０．２ｐｐｍとして表した。第９図に、大豆胚芽水抽出物由来フラクション１０の１３Ｃ−ＮＭＲスペクトルを示す。第９図において、横軸は化学シフト値、縦軸はシグナルの強度を示す。
大豆胚芽水抽出物由来フラクション１０を実施例２−（１）と同様の方法で加水分解に処し、糖成分と非糖成分を生じさせた。非糖部分について薄層クロマトグラフィー（展開溶媒Ａ）を行った結果、Ｓｏｙａｓａｐｏｇｅｎｏｌ  Ａと同じＲｆ値を有するスポットを検出した。糖成分について薄層クロマトグラフィー（展開溶媒Ｂ）を行った結果、アラビノース、グルコース、キシロース、ガラクトースを検出した。
以上の結果より、大豆胚芽水抽出物由来フラクション１０が３−Ｏ−［β−Ｄ−ｇｌｕｃｏｐｙｒａｎｏｓｙｌ（１→２）−β−Ｄ−ｇａｌａｃｔｏｐｙｒａｎｏｓｙｌ−（１→２）−β−Ｄ−ｇｌｕｃｕｒｏｎｏｐｙｒａｎｏｓｙｌ］−２２−Ｏ−［４−Ｏ−ａｃｅｔｙｌ−β−Ｄ−ｘｙｌｏｐｙｒａｎｏｓｙｌ（１→３）−α−Ｌ−ａｒａｂｉｎｏｐｙｒａｎｏｓｙｌ］ｓｏｙａｓａｐｏｇｅｎｏｌ  Ａ（分子量１２８０）であることを確定した。なお、当該化合物は上記表１における化合物ｃである。
（２）化合物ｃのＮＧＦ産生増強活性を実施例２−（２）と同様の方法で測定した。その結果、化合物ｃにＮＧＦ産生増強活性があることが明らかになった。表２にその結果を示す。なお、コントロールのＮＧＦ産生量は０．７３９ｎｇ／ｍＬであった。
実施例５  ３−Ｏ−［β−Ｄ−ｇｌｕｃｏｐｙｒａｎｏｓｙｌ（１→２）−β−Ｄ−ｇａｌａｃｔｏｐｙｒａｎｏｓｙｌ−（１→２）−β−Ｄ−ｇｌｕｃｕｒｏｎｏｐｙｒａｎｏｓｙｌ］−２２−Ｏ−［２，３−ｄｉ−Ｏ−ａｃｅｔｙｌ−β−Ｄ−ｘｙｌｏｐｙｒａｎｏｓｙｌ（１→３）−α−Ｌ−ａｒａｂｉｎｏｐｙｒａｎｏｓｙｌ］ｓｏｙａｓａｐｏｇｅｎｏｌ  ＡのＮＧＦ産生増強活性
（１）実施例１−（６）で分画した大豆胚芽水抽出物由来フラクション１２（保持時間３８．２分の検出のピークを含むフラクション）の質量スペクトルを実施例２−（１）と同様の方法で測定した。マトリックスにはｍ−ニトロベンジルアルコールを用いた。質量分析によりｍ／ｚ  １３２１（Ｍ−Ｈ）−のピークを検出した。第１０図に、大豆胚芽水抽出物由来フラクション１２の質量スペクトルを示す。第１０図において、横軸はｍ／ｚ値、縦軸は相対強度を示す。
大豆胚芽水抽出物由来フラクション１２のＮＭＲスペクトルを実施例２−（１）と同様の方法で測定した。ＮＭＲの帰属の信号を以下に示す。
１Ｈ−ＮＭＲ：
ｓａｐｏｇｅｎｏｌ  ｍｏｉｅｔｙ；δ３．２６（１Ｈ，ｍ，３−Ｈ），５．１４（１Ｈ，ｂｒ−ｓ，１２−Ｈ），３．４３（１Ｈ，ｍ，２１−Ｈ），３．２３（１Ｈ，ｂｒ−ｓ，２２−Ｈ），３．１５（１Ｈ，ｍ，２４−Ｈ），３．８６（１Ｈ，ｍ，２４−Ｈ）
３−Ｏ−β−Ｄ−ｇｌｕｃｒｏｎｏｐｙｒａｎｏｓｙｌ  ｍｏｉｅｔｙ；δ４．４６（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝７．８Ｈｚ，１’−Ｈ），３．４４（１Ｈ，ｍ，２’−Ｈ），３．５６（１Ｈ，ｍ，３’−Ｈ），３．３３（１Ｈ，ｍ，４’−Ｈ），３．６５（１Ｈ，ｍ，５’−Ｈ）
２’−Ｏ−β−Ｄ−ｇａｌａｃｔｏｐｙｒａｎｏｓｙｌ  ｍｏｉｅｔｙ；δ４．８０（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝６．６Ｈｚ，１’’−Ｈ），３．５０（１Ｈ，ｍ，２’’−Ｈ），３．５１（１Ｈ，ｍ，３’’−Ｈ），３．６５（１Ｈ，ｍ，４’’−Ｈ），３．３８（１Ｈ，ｍ，５’’−Ｈ），３．５０（２Ｈ，ｍ，６’’−Ｈ）
２’’−Ｏ−β−Ｄ−ｇｌｕｃｏｐｙｒａｎｏｓｙｌ  ｍｏｉｅｔｙ；δ４．３７（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝７．８Ｈｚ，１’’’−Ｈ），３．０３（１Ｈ，ｍ，２’’’−Ｈ），３．１７（１Ｈ，ｍ，３’’’−Ｈ），３．０８（１Ｈ，ｍ，４’’’−Ｈ），３．１４（１Ｈ，ｍ，５’’’−Ｈ），３．４７（１Ｈ，ｍ，６’’’−Ｈ），３．７３（１Ｈ，ｍ，６’’’−Ｈ）
２２−Ｏ−α−Ｌ−ａｒａｂｉｎｏｐｙｒａｎｏｓｙｌ  ｍｏｉｅｔｙ；δ４．１５（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝６．６Ｈｚ，１’’’’−Ｈ），３．４２（１Ｈ，ｍ，２’’’’−Ｈ），３．４５（１Ｈ，ｍ，３’’’’−Ｈ），３．７１（１Ｈ，ｍ，４’’’’−Ｈ），３．３５（１Ｈ，ｍ，５’’’’−Ｈ），３．６２（１Ｈ，ｍ，５’’’’−Ｈ）
３’’’’−Ｏ−β−Ｄ−ｘｙｌｏｐｙｒａｎｏｓｙｌ  ｍｏｉｅｔｙ；δ４．７４（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝７．２Ｈｚ，１’’’’’−Ｈ），４．６５（１Ｈ，ｍ，２’’’’’−Ｈ），４．８３（１Ｈ，ｔ，Ｊ＝７．２Ｈｚ，３’’’’’−Ｈ），３．６０（１Ｈ，ｍ，４’’’’’−Ｈ），３．８２（１Ｈ，ｍ，５’’’’’−Ｈ），３．２４（１Ｈ，ｍ，５’’’’’−Ｈ），１．９５（３Ｈ，ｓ，２’’’’’−ＣＨ３），１．９８（３Ｈ，ｓ，３’’’’’−ＣＨ３）
但し、１Ｈ−ＮＭＲにおいてはサンプルは重ジメチルスルホキシドに溶解し、重ジメチルスルホキシドの残留プロトンの化学シフト値を２．５１ｐｐｍとして表した。第１１図に、大豆胚芽水抽出物由来フラクション１２の１Ｈ−ＮＭＲスペクトルを示す。第１１図において、横軸は化学シフト値、縦軸はシグナルの強度を示す。
１３Ｃ−ＮＭＲ：
ｓａｐｏｇｅｎｏｌ  ｍｏｉｅｔｙ；δ９０．３（３−Ｃ），１２２．５（１２−Ｃ），１４４．４（１３−Ｃ），７４．８（２１−Ｃ），９１．８（２２−Ｃ），６３．０（２４−Ｃ）
３−Ｏ−β−Ｄ−ｇｌｕｃｒｏｎｏｐｙｒａｎｏｓｙｌ  ｍｏｉｅｔｙ；δ１０４．１（１’−Ｃ），７９．０（２’−Ｃ），７６．６（３’−Ｃ），７１．９（４’−Ｃ），７６．１（５’−Ｃ），１７１．０（６’−Ｃ）
２’−Ｏ−β−Ｄ−ｇａｌａｃｔｏｐｙｒａｎｏｓｙｌ  ｍｏｉｅｔｙ；δ１０１．５（１’’−Ｃ），８２．７（２’’−Ｃ），７３．３（３’’−Ｃ），６９．０（４’’−Ｃ），７５．８（５’’−Ｃ），６０．９（６’’−Ｃ）
２’’−Ｏ−β−Ｄ−ｇｌｕｃｏｐｙｒａｎｏｓｙｌ  ｍｏｉｅｔｙ；δ１０５．３（１’’’−Ｃ），７５．５（２’’’−Ｃ），７６．７（３’’’−Ｃ），７０．６（４’’’−Ｃ），７８．１（５’’’−Ｃ），６１．８（６’’’−Ｃ）
２２−Ｏ−α−Ｌ−ａｒａｂｉｎｏｐｙｒａｎｏｓｙｌ  ｍｏｉｅｔｙ；δ１０７．９（１’’’’’−Ｃ），７２．０（２’’’’’−Ｃ），８３．５（３’’’’’−Ｃ），６８．４（４’’’’’−Ｃ），６７．０（５’’’’’−Ｃ）
３’’’’−Ｏ−β−Ｄ−ｘｙｌｏｐｙｒａｎｏｓｙｌ  ｍｏｉｅｔｙ；δ１０２．８（１’’’’’−Ｃ），７２．４（２’’’’’−Ｃ），７６．０（３’’’’’−Ｃ），６８．０（４’’’’’−Ｃ），６６．０（５’’’’’−Ｃ），１７０．４（２’’’’’−Ｃ＝Ｏ），２１．５（２’’’’’−ＣＨ３），１７０．７（３’’’’’−Ｃ＝Ｏ），２１．５（３’’’’’−ＣＨ３）
但し、１３Ｃ−ＮＭＲにおいてはサンプルは重ジメチルスルホキシドに溶解し、重ジメチルスルホキシドの化学シフト値を４０．２ｐｐｍとして表した。第１２図に、大豆胚芽水抽出物由来フラクション１２の１３Ｃ−ＮＭＲスペクトルを示す。第１２図において、横軸は化学シフト値、縦軸はシグナルの強度を示す。
大豆胚芽水抽出物由来フラクション１２を実施例２−（１）と同様の方法で加水分解に処し、糖成分と非糖成分を生じさせた。非糖部分について薄層クロマトグラフィー（展開溶媒Ａ）を行った結果、Ｓｏｙａｓａｐｏｇｅｎｏｌ  Ａと同じＲｆ値を有するスポットを検出した。糖成分について薄層クロマトグラフィー（展開溶媒Ｂ）を行った結果、アラビノース、グルコース、キシロース、ガラクトースを検出した。
以上の結果より、大豆胚芽水抽出物由来フラクション１２が３−Ｏ−［β−Ｄ−ｇｌｕｃｏｐｙｒａｎｏｓｙｌ（１→２）−β−Ｄ−ｇａｌａｃｔｏｐｙｒａｎｏｓｙｌ−（１→２）−β−Ｄ−ｇｌｕｃｕｒｏｎｏｐｙｒａｎｏｓｙｌ］−２２−Ｏ−［２，３−ｄｉ−Ｏ−ａｃｅｔｙｌ−β−Ｄ−ｘｙｌｏｐｙｒａｎｏｓｙｌ（１→３）−α−Ｌ−ａｒａｂｉｎｏｐｙｒａｎｏｓｙｌ］ｓｏｙａｓａｐｏｇｅｎｏｌ  Ａ（分子量１３２２）であることを確定した。なお、当該化合物は上記表１における化合物ｄである。
（２）化合物ｄのＮＧＦ産生増強活性を実施例２−（２）と同様の方法で測定した。その結果、化合物ｄにＮＧＦ産生増強活性があることが明らかになった。表２にその結果を示す。なお、コントロールのＮＧＦ産生量は０．７３９ｎｇ／ｍＬであった。
実施例６  ３−Ｏ−［β−Ｄ−ｇｌｕｃｏｐｙｒａｎｏｓｙｌ（１→２）−β−Ｄ−ｇａｌａｃｔｏｐｙｒａｎｏｓｙｌ−（１→２）−β−Ｄ−ｇｌｕｃｕｒｏｎｏｐｙｒａｎｏｓｙｌ］−２２−Ｏ−［２，４−ｄｉ−Ｏ−ａｃｅｔｙｌ−β−Ｄ−ｘｙｌｏｐｙｒａｎｏｓｙｌ（１→３）−α−Ｌ−ａｒａｂｉｎｏｐｙｒａｎｏｓｙｌ］ｓｏｙａｓａｐｏｇｅｎｏｌ  ＡのＮＧＦ産生増強活性
（１）実施例１−（６）で分画した大豆胚芽水抽出物由来フラクション１３（保持時間３８．９分の検出のピークを含むフラクション）の質量スペクトルを実施例２−（１）と同様の方法で測定した。マトリックスにはｍ−ニトロベンジルアルコールを用いた。質量分析によりｍ／ｚ  １３２１（Ｍ−Ｈ）−のピークを検出した。第１３図に、大豆胚芽水抽出物由来フラクション１３の質量スペクトルを示す。第１３図において、横軸はｍ／ｚ値、縦軸は相対強度を示す。
大豆胚芽水抽出物由来フラクション１３のＮＭＲスペクトルを実施例２−（１）と同様の方法で測定した。ＮＭＲの帰属の信号を以下に示す。
１Ｈ−ＮＭＲ：
ｓａｐｏｇｅｎｏｌ  ｍｏｉｅｔｙ；δ３．２７（１Ｈ，ｍ，３−Ｈ），５．１４（１Ｈ，ｂｒ−ｓ，１２−Ｈ），３．４５（１Ｈ，ｍ，２１−Ｈ），３．２２（１Ｈ，ｂｒ−ｓ，２２−Ｈ），３．１２（１Ｈ，ｍ，２４−Ｈ），３．８５（１Ｈ，ｍ，２４−Ｈ）
３−Ｏ−β−Ｄ−ｇｌｕｃｒｏｎｏｐｙｒａｎｏｓｙｌ  ｍｏｉｅｔｙ；δ４．４６（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝７．２Ｈｚ，１’−Ｈ），３．４３（１Ｈ，ｍ，２’−Ｈ），３．５７（１Ｈ，ｍ，３’−Ｈ），３．３３（１Ｈ，ｍ，４’−Ｈ），３．６４（１Ｈ，ｍ，５’−Ｈ）
２’−Ｏ−β−Ｄ−ｇａｌａｃｔｏｐｙｒａｎｏｓｙｌ  ｍｏｉｅｔｙ；δ４．８１（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝６．６Ｈｚ，１’’−Ｈ），３．５１（１Ｈ，ｍ，２’’−Ｈ），３．５１（１Ｈ，ｍ，３’’−Ｈ），３．６４（１Ｈ，ｍ，４’’−Ｈ），３．３８（１Ｈ，ｍ，５’’−Ｈ），３．５０（２Ｈ，ｍ，６’’−Ｈ）
２’’−Ｏ−β−Ｄ−ｇｌｕｃｏｐｙｒａｎｏｓｙｌ  ｍｏｉｅｔｙ；δ４．３８（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝７．８Ｈｚ，１’’’−Ｈ），３．０２（１Ｈ，ｍ，２’’’−Ｈ），３．１７（１Ｈ，ｍ，３’’’−Ｈ），３．０８（１Ｈ，ｍ，４’’’−Ｈ），３．１４（１Ｈ，ｍ，５’’’−Ｈ），３．４７（１Ｈ，ｍ，６’’’−Ｈ），３．７２（１Ｈ，ｍ，６’’’−Ｈ）
２２−Ｏ−α−Ｌ−ａｒａｂｉｎｏｐｙｒａｎｏｓｙｌ  ｍｏｉｅｔｙ；δ４．１５（１Ｈ，ｄ，１’’’’−Ｈ），３．４４（１Ｈ，ｍ，２’’’’−Ｈ），３．４３（１Ｈ，ｍ，３’’’’−Ｈ），３．６９（１Ｈ，ｍ，４’’’’−Ｈ），３．３５（１Ｈ，ｍ，５’’’’−Ｈ），３．６０（１Ｈ，ｍ，５’’’’−Ｈ）
３’’’’−Ｏ−β−Ｄ−ｘｙｌｏｐｙｒａｎｏｓｙｌ  ｍｏｉｅｔｙ；δ４．７０（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝７．２Ｈｚ，１’’’’’−Ｈ），４．６２（１Ｈ，ｍ，２’’’’’−Ｈ），３．６０（１Ｈ，ｍ，３’’’’’−Ｈ），４．５９（１Ｈ，ｍ，４’’’’’−Ｈ），３．２７（１Ｈ，ｍ，５’’’’’−Ｈ），３．９０（１Ｈ，ｍ，５’’’’’−Ｈ），２．０２（３Ｈ，ｓ，２’’’’’−ＣＨ３），２．０２（３Ｈ，ｓ，４’’’’’−ＣＨ３）
但し、１Ｈ−ＮＭＲにおいてはサンプルは重ジメチルスルホキシドに溶解し、重ジメチルスルホキシドの残留プロトンの化学シフト値を２．５１ｐｐｍとして表した。第１４図に、大豆胚芽水抽出物由来フラクション１３の１Ｈ−ＮＭＲスペクトルを示す。第１４図において、横軸は化学シフト値、縦軸はシグナルの強度を示す。
１３Ｃ−ＮＭＲ：
ｓａｐｏｇｅｎｏｌ  ｍｏｉｅｔｙ；δ９０．３（３−Ｃ），１２２．５（１２−Ｃ），１４４．４（１３−Ｃ），７４．８（２１−Ｃ），９１．８（２２−Ｃ），６３．０（２４−Ｃ）
３−Ｏ−β−Ｄ−ｇｌｕｃｒｏｎｏｐｙｒａｎｏｓｙｌ  ｍｏｉｅｔｙ；δ１０４．１（１’−Ｃ），７８．７（２’−Ｃ），７６．６（３’−Ｃ），７１．９（４’−Ｃ），７６．１（５’−Ｃ），１７１．０（６’−Ｃ）
２’−Ｏ−β−Ｄ−ｇａｌａｃｔｏｐｙｒａｎｏｓｙｌ  ｍｏｉｅｔｙ；δ１０１．５（１’’−Ｃ），８２．７（２’’−Ｃ），７３．３（３’’−Ｃ），６９．０（４’’−Ｃ），７５．５（５’’−Ｃ），６０．９（６’’−Ｃ）
２’’−Ｏ−β−Ｄ−ｇｌｕｃｏｐｙｒａｎｏｓｙｌ  ｍｏｉｅｔｙ；δ１０５．３（１’’’−Ｃ），７５．５（２’’’−Ｃ），７６．７（３’’’−Ｃ），７０．６（４’’’−Ｃ），７８．１（５’’’−Ｃ），６１．８（６’’’−Ｃ）
２２−Ｏ−α−Ｌ−ａｒａｂｉｎｏｐｙｒａｎｏｓｙｌ  ｍｏｉｅｔｙ；δ１０８．０（１’’’’−Ｃ），７１．９（２’’’’−Ｃ），８３．０（３’’’’−Ｃ），６８．２（４’’’’−Ｃ），６７．０（５’’’’−Ｃ）
３’’’’−Ｏ−β−Ｄ−ｘｙｌｏｐｙｒａｎｏｓｙｌ  ｍｏｉｅｔｙ；δ１０２．６（１’’’’’−Ｃ），７３．７（２’’’’’−Ｃ），７０．６（３’’’’’−Ｃ），７１．６（４’’’’’−Ｃ），６２．０（５’’’’’−Ｃ），１７０．４，１７０．９（２’’’’’および４’’’’’−Ｃ＝Ｏ），２１．６，２１．８（２’’’’’および４’’’’’−ＣＨ３）
但し、１３Ｃ−ＮＭＲにおいてはサンプルは重ジメチルスルホキシドに溶解し、重ジメチルスルホキシドの化学シフト値を４０．２ｐｐｍとして表した。第１５図に、大豆胚芽水抽出物由来フラクション１３の１３Ｃ−ＮＭＲスペクトルを示す。第１５図において、横軸は化学シフト値、縦軸はシグナルの強度を示す。
大豆胚芽水抽出物由来フラクション１３を実施例２−（１）と同様の方法で加水分解に処し、糖成分と非糖成分を生じさせた。非糖部分について薄層クロマトグラフィー（展開溶媒Ａ）を行った結果、Ｓｏｙａｓａｐｏｇｅｎｏｌ  Ａと同じＲｆ値を有するスポットを検出した。糖成分について薄層クロマトグラフィー（展開溶媒Ｂ）を行った結果、アラビノース、グルコース、キシロース、ガラクトースを検出した。
以上の結果より、大豆胚芽水抽出物由来フラクション１３が３−Ｏ−［β−Ｄ−ｇｌｕｃｏｐｙｒａｎｏｓｙｌ（１→２）−β−Ｄ−ｇａｌａｃｔｏｐｙｒａｎｏｓｙｌ−（１→２）−β−Ｄ−ｇｌｕｃｕｒｏｎｏｐｙｒａｎｏｓｙｌ］−２２−Ｏ−［２，４−ｄｉ−Ｏ−ａｃｅｔｙｌ−β−Ｄ−ｘｙｌｏｐｙｒａｎｏｓｙｌ（１→３）−α−Ｌ−ａｒａｂｉｎｏｐｙｒａｎｏｓｙｌ］ｓｏｙａｓａｐｏｇｅｎｏｌ  Ａ（分子量１３２２）であることを確定した。なお、当該化合物は上記表１における化合物ｅである。
（２）化合物ｅのＮＧＦ産生増強活性を実施例２−（２）と同様の方法で測定した。その結果、化合物ｅにＮＧＦ産生増強活性があることが明らかになった。表２にその結果を示す。なお、コントロールのＮＧＦ産生量は０．５７８ｎｇ／ｍＬであった。
実施例７  ３−Ｏ−［β−Ｄ−ｇｌｕｃｏｐｙｒａｎｏｓｙｌ（１→２）−β−Ｄ−ｇａｌａｃｔｏｐｙｒａｎｏｓｙｌ−（１→２）−β−Ｄ−ｇｌｕｃｕｒｏｎｏｐｙｒａｎｏｓｙｌ］−２２−Ｏ−［３，４−ｄｉ−Ｏ−ａｃｅｔｙｌ−β−Ｄ−ｘｙｌｏｐｙｒａｎｏｓｙｌ（１→３）−α−Ｌ−ａｒａｂｉｎｏｐｙｒａｎｏｓｙｌ］ｓｏｙａｓａｐｏｇｅｎｏｌ  ＡのＮＧＦ産生増強活性
（１）実施例１−（６）で分画した大豆胚芽水抽出物由来フラクション１５（保持時間４０．３分の検出のピークを含むフラクション）の質量スペクトルを実施例２−（１）と同様の方法で測定した。マトリックスにはｍ−ニトロベンジルアルコールを用いた。質量分析によりｍ／ｚ  １３２１（Ｍ−Ｈ）−のピークを検出した。第１６図に、大豆胚芽水抽出物由来フラクション１５の質量スペクトルを示す。第１６図において、横軸はｍ／ｚ値、縦軸は相対強度を示す。
大豆胚芽水抽出物由来フラクション１５のＮＭＲスペクトルを実施例２−（１）と同様の方法で測定した。ＮＭＲの帰属の信号を以下に示す。
１Ｈ−ＮＭＲ：
ｓａｐｏｇｅｎｏｌ  ｍｏｉｅｔｙ；δ３．２７（１Ｈ，ｍ，３−Ｈ），５．１４（１Ｈ，ｂｒ−ｓ，１２−Ｈ），３．３９（１Ｈ，ｍ，２１−Ｈ），３．２４（１Ｈ，ｂｒ−ｓ，２２−Ｈ），３．１４（１Ｈ，ｍ，２４−Ｈ），３．８５（１Ｈ，ｍ，２４−Ｈ）
３−Ｏ−β−Ｄ−ｇｌｕｃｒｏｎｏｐｙｒａｎｏｓｙｌ  ｍｏｉｅｔｙ；δ４．４５（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝７．８Ｈｚ，１’−Ｈ），３．４３（１Ｈ，ｍ，２’−Ｈ），３．５６（１Ｈ，ｔ，Ｊ＝８．９Ｈｚ，３’−Ｈ），３．３４（１Ｈ，ｔ，Ｊ＝８．９Ｈｚ，４’−Ｈ），３．６６（１Ｈ，ｍ，５’−Ｈ）
２’−Ｏ−β−Ｄ−ｇａｌａｃｔｏｐｙｒａｎｏｓｙｌ  ｍｏｉｅｔｙ；δ４．８０（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝６．６Ｈｚ，１’’−Ｈ），３．５１（１Ｈ，ｍ，２’’−Ｈ），３．５１（１Ｈ，ｍ，３’’−Ｈ），３．６５（１Ｈ，ｍ，４’’−Ｈ），３．３８（１Ｈ，ｍ，５’’−Ｈ），３．５０（２Ｈ，ｍ，６’’−Ｈ）
２’’−Ｏ−β−Ｄ−ｇｌｕｃｏｐｙｒａｎｏｓｙｌ  ｍｏｉｅｔｙ；δ４．３７（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝７．８Ｈｚ，１’’’−Ｈ），３．０２（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝７．８，９．０Ｈｚ，２’’’−Ｈ），３．１７（１Ｈ，ｔ，Ｊ＝９．０Ｈｚ，３’’’−Ｈ），３．０８（１Ｈ，ｔ，Ｊ＝９．０Ｈｚ，４’’’−Ｈ），３．１５（１Ｈ，ｍ，５’’’−Ｈ），３．４７（１Ｈ，ｍ，６’’’−Ｈ），３．７２（１Ｈ，ｍ，６’’’−Ｈ）
２２−Ｏ−α−Ｌ−ａｒａｂｉｎｏｐｙｒａｎｏｓｙｌ  ｍｏｉｅｔｙ；δ４．２２（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝４．８Ｈｚ，１’’’’−Ｈ），３．４６（１Ｈ，ｍ，２’’’’−Ｈ），３．４２（１Ｈ，ｍ，３’’’’−Ｈ），３．７４（１Ｈ，ｍ，４’’’’−Ｈ），３．３９（１Ｈ，ｍ，５’’’’−Ｈ），３．６３（１Ｈ，ｍ，５’’’’−Ｈ）
３’’’’−Ｏ−β−Ｄ−ｘｙｌｏｐｙｒａｎｏｓｙｌ  ｍｏｉｅｔｙ；δ４．５８（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝７．２Ｈｚ，１’’’’’−Ｈ），３．３８（１Ｈ，ｍ，２’’’’’−Ｈ），４．９７（１Ｈ，ｔ，Ｊ＝９．３Ｈｚ，３’’’’’−Ｈ），４．７２（１Ｈ，ｍ，４’’’’’−Ｈ），３．８８（１Ｈ，ｍ，５’’’’’−Ｈ），３．３６（１Ｈ，ｍ，５’’’’’−Ｈ），２．０１，１．９６（３Ｈ，ｓ，３’’’’’および４’’’’’−ＣＨ３）
但し、１Ｈ−ＮＭＲにおいてはサンプルは重ジメチルスルホキシドに溶解し、重ジメチルスルホキシドの残留プロトンの化学シフト値を２．５１ｐｐｍとして表した。第１７図に、大豆胚芽水抽出物由来フラクション１５の１Ｈ−ＮＭＲスペクトルを示す。第１７図において、横軸は化学シフト値、縦軸はシグナルの強度を示す。
１３Ｃ−ＮＭＲ：δ
ｓａｐｏｇｅｎｏｌ  ｍｏｉｅｔｙ；δ９０．３（３−Ｃ），１２２．５（１２−Ｃ），１４４．４（１３−Ｃ），７５．０（２１−Ｃ），９２．３（２２−Ｃ），６２．６（２４−Ｃ）
３−Ｏ−β−Ｄ−ｇｌｕｃｒｏｎｏｐｙｒａｎｏｓｙｌ  ｍｏｉｅｔｙ；δ１０４．１（１’−Ｃ），７８．８（２’−Ｃ），７６．５（３’−Ｃ），７２．０（４’−Ｃ），７６．１（５’−Ｃ），１７１．０（６’−Ｃ）
２’−Ｏ−β−Ｄ−ｇａｌａｃｔｏｐｙｒａｎｏｓｙｌ  ｍｏｉｅｔｙ；δ１０１．５（１’’−Ｃ），８２．７（２’’−Ｃ），７３．４（３’’−Ｃ），６９．０（４’’−Ｃ），７５．５（５’’−Ｃ），６０．９（６’’−Ｃ）
２’’−Ｏ−β−Ｄ−ｇｌｕｃｏｐｙｒａｎｏｓｙｌ  ｍｏｉｅｔｙ；δ１０５．３（１’’’−Ｃ），７５．５（２’’’−Ｃ），７６．５（３’’’−Ｃ），７０．６（４’’’−Ｃ），７８．１（５’’’−Ｃ），６１．８（６’’’−Ｃ）
２２−Ｏ−α−Ｌ−ａｒａｂｉｎｏｐｙｒａｎｏｓｙｌ  ｍｏｉｅｔｙ；δ１０７．４（１’’’’−Ｃ），７２．０（２’’’’−Ｃ），８３．７（３’’’’−Ｃ），６８．３（４’’’’−Ｃ），６７．０（５’’’’−Ｃ）
３’’’’−Ｏ−β−Ｄ−ｘｙｌｏｐｙｒａｎｏｓｙｌ  ｍｏｉｅｔｙ；δ１０５．３（１’’’’’−Ｃ），７２．０（２’’’’’−Ｃ），７４．２（３’’’’’−Ｃ），６９．９（４’’’’’−Ｃ），６２．６（５’’’’’−Ｃ），１７１．０，１７０．７（３’’’’’および４’’’’’−Ｃ＝Ｏ），２１．３，２１．５（３’’’’’および４’’’’’−ＣＨ３）
但し、１３Ｃ−ＮＭＲにおいてはサンプルは重ジメチルスルホキシドに溶解し、重ジメチルスルホキシドの化学シフト値を４０．２ｐｐｍとして表した。第１８図に、大豆胚芽水抽出物由来フラクション１５の１３Ｃ−ＮＭＲスペクトルを示す。第１８図において、横軸は化学シフト値、縦軸はシグナルの強度を示す。
大豆胚芽水抽出物由来フラクション１５を実施例２−（１）と同様の方法で加水分解に処し、糖成分と非糖成分を生じさせた。非糖部分について薄層クロマトグラフィー（展開溶媒Ａ）を行った結果、Ｓｏｙａｓａｐｏｇｅｎｏｌ  Ａと同じＲｆ値を有するスポットを検出した。糖成分について薄層クロマトグラフィー（展開溶媒Ｂ）を行った結果、アラビノース、グルコース、キシロース、ガラクトースを検出した。
その結果から、大豆胚芽水抽出物由来フラクション１５が３−Ｏ−［β−Ｄ−ｇｌｕｃｏｐｙｒａｎｏｓｙｌ（１→２）−β−Ｄ−ｇａｌａｃｔｏｐｙｒａｎｏｓｙｌ−（１→２）−β−Ｄ−ｇｌｕｃｕｒｏｎｏｐｙｒａｎｏｓｙｌ］−２２−Ｏ−［３，４−ｄｉ−Ｏ−ａｃｅｔｙｌ−β−Ｄ−ｘｙｌｏｐｙｒａｎｏｓｙｌ（１→３）−α−Ｌ−ａｒａｂｉｎｏｐｙｒａｎｏｓｙｌ］ｓｏｙａｓａｐｏｇｅｎｏｌ  Ａ（分子量１３２２）であることを確定した。なお、当該化合物は上記表１における化合物ｆである。
（２）化合物ｆのＮＧＦ産生増強活性を実施例２−（２）と同様の方法で測定した。その結果、化合物ｆにＮＧＦ産生増強活性があることが明らかになった。表２にその結果を示す。なお、コントロールのＮＧＦ産生量は０．５７８ｎｇ／ｍＬであった。
実施例８  ３−Ｏ−［β−Ｄ−ｇｌｕｃｏｐｙｒａｎｏｓｙｌ（１→２）−β−Ｄ−ｇａｌａｃｔｏｐｙｒａｎｏｓｙｌ−（１→２）−β−Ｄ−ｇｌｕｃｕｒｏｎｏｐｙｒａｎｏｓｙｌ］−２２−Ｏ−［３，４，６−ｔｒｉ−Ｏ−ａｃｅｔｙｌ−β−Ｄ−ｇｌｕｃｏｐｙｒａｎｏｓｙｌ（１→３）−α−Ｌ−ａｒａｂｉｎｏｐｙｒａｎｏｓｙｌ］ｓｏｙａｓａｐｏｇｅｎｏｌ  ＡのＮＧＦ産生増強活性
（１）実施例１−（６）で分画した大豆胚芽水抽出物由来フラクション１６（保持時間４１．０分の検出のピークを含むフラクション）の質量スペクトルを実施例２−（１）と同様の方法で測定した。マトリックスにはｍ−ニトロベンジルアルコールを用いた。質量分析によりｍ／ｚ  １３９３（Ｍ−Ｈ）−のピークを検出した。第１９図に、大豆胚芽水抽出物由来フラクション１６の質量スペクトルを示す。第１９図において、横軸はｍ／ｚ値、縦軸は相対強度を示す。
大豆胚芽水抽出物由来フラクション１６のＮＭＲスペクトルを実施例２−（１）と同様の方法で測定した。ＮＭＲの帰属の信号を以下に示す。
１Ｈ−ＮＭＲ：
ｓａｐｏｇｅｎｏｌ  ｍｏｉｅｔｙ；δ３．２８（１Ｈ，ｍ，３−Ｈ），５．１５（１Ｈ，ｂｒ−ｓ，１２−Ｈ），３．４０（１Ｈ，ｍ，２１−Ｈ），３．２５（１Ｈ，ｂｒ−ｓ，２２−Ｈ），３．１５（１Ｈ，ｍ，２４−Ｈ），３．８７（１Ｈ，ｍ，２４−Ｈ）
３−Ｏ−β−Ｄ−ｇｌｕｃｒｏｎｏｐｙｒａｎｏｓｙｌ  ｍｏｉｅｔｙ；δ４．４５（１Ｈ，ｄ，１’−Ｈ），３．４４（１Ｈ，ｍ，２’−Ｈ），３．５７（１Ｈ，ｍ，３’−Ｈ），３．３２（１Ｈ，ｍ，４’−Ｈ），３．６２（１Ｈ，ｍ，５’−Ｈ）
２’−Ｏ−β−Ｄ−ｇａｌａｃｔｏｐｙｒａｎｏｓｙｌ  ｍｏｉｅｔｙ：δ４．８２（１Ｈ，ｄ，１’’−Ｈ），３．５１（１Ｈ，ｍ，２’’−Ｈ），３．５１（１Ｈ，ｍ，３’’−Ｈ），３．６５（１Ｈ，ｍ，４’’−Ｈ），３．３８（１Ｈ，ｍ，５’’−Ｈ），３．５０（２Ｈ，ｍ，６’’−Ｈ）
２’’−Ｏ−β−Ｄ−ｇｌｕｃｏｐｙｒａｎｏｓｙｌ  ｍｏｉｅｔｙ；δ４．３８（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝７．８Ｈｚ，１’’’−Ｈ），３．０２（１Ｈ，ｍ，２’’’−Ｈ），３．１７（１Ｈ，ｍ，３’’’−Ｈ），３．０９（１Ｈ，ｍ，４’’’−Ｈ），３．１４（１Ｈ，ｍ，５’’’−Ｈ），３．４７（１Ｈ，ｍ，６’’’−Ｈ），３．７２（１Ｈ，ｍ，６’’’−Ｈ）
２２−Ｏ−α−Ｌ−ａｒａｂｉｎｏｐｙｒａｎｏｓｙｌ  ｍｏｉｅｔｙ；δ４．２５（１Ｈ，ｄ，１’’’’−Ｈ），３．５９（１Ｈ，ｍ，２’’’’−Ｈ），３．５２（１Ｈ，ｍ，３’’’’−Ｈ），３．７８（１Ｈ，ｍ，４’’’’−Ｈ），３．４２（１Ｈ，ｍ，５’’’’−Ｈ），３．６６（１Ｈ，ｍ，５’’’’−Ｈ）
３’’’’−Ｏ−β−Ｄ−ｇｌｕｃｏｐｙｒａｎｏｓｙｌ  ｍｏｉｅｔｙ；δ４．６７（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝７．８Ｈｚ，１’’’’’−Ｈ），３．４１（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝７．８，９．３Ｈｚ，２’’’’’−Ｈ），５．０３（１Ｈ，ｔ，Ｊ＝９．３Ｈｚ，３’’’’’−Ｈ），４．７７（１Ｈ，ｔ，Ｊ＝９．３Ｈｚ，４’’’’’−Ｈ），３．８７（１Ｈ，ｍ，５’’’’’−Ｈ）３．９７（１Ｈ，ｍ，６’’’’’−Ｈ），４．１７（１Ｈ，ｍ，６’’’’’−Ｈ），１．９６，１．９９（３Ｈおよび６Ｈ，ｓ，３’’’’’，４’’’’’および６’’’’’−ＣＨ３）
但し、１Ｈ−ＮＭＲにおいてはサンプルは重ジメチルスルホキシドに溶解し、重ジメチルスルホキシドの残留プロトンの化学シフト値を２．５１ｐｐｍとして表した。第２０図に、大豆胚芽水抽出物由来フラクション１６の１Ｈ−ＮＭＲスペクトルを示す。第２０図において、横軸は化学シフト値、縦軸はシグナルの強度を示す。
１３Ｃ−ＮＭＲ：
ｓａｐｏｇｅｎｏｌ  ｍｏｉｅｔｙ；δ９０．３（３−Ｃ），１２２．５（１２−Ｃ），１４４．４（１３−Ｃ），７５．０（２１−Ｃ），９２．４（２２−Ｃ），６３．０（２４−Ｃ）
３−Ｏ−β−Ｄ−ｇｌｕｃｒｏｎｏｐｙｒａｎｏｓｙｌ  ｍｏｉｅｔｙ；δ１０４．１（１’−Ｃ），７８．８（２’−Ｃ），７６．６（３’−Ｃ），７２．０（４’−Ｃ），７６．０（５’−Ｃ），１７１．０（６’−Ｃ）
２’−Ｏ−β−Ｄ−ｇａｌａｃｔｏｐｙｒａｎｏｓｙｌ  ｍｏｉｅｔｙ；δ１０１．５（１’’−Ｃ），８２．８（２’’−Ｃ），７３．２（３’’−Ｃ），６９．０（４’’−Ｃ），７５．７（５’’−Ｃ），６０．９（６’’−Ｃ）
２’’−Ｏ−β−Ｄ−ｇｌｕｃｏｐｙｒａｎｏｓｙｌ  ｍｏｉｅｔｙ；δ１０５．３（１’’’−Ｃ），７５．５（２’’’−Ｃ），７６．７（３’’’−Ｃ），７０．６（４’’’−Ｃ），７８．１（５’’’−Ｃ），６１．８（６’’’−Ｃ）
２２−Ｏ−α−Ｌ−ａｒａｂｉｎｏｐｙｒａｎｏｓｙｌ  ｍｏｉｅｔｙ；δ１０７．４（１’’’’−Ｃ），７１．６（２’’’’−Ｃ），８４．４（３’’’’−Ｃ），６８．３（４’’’’−Ｃ），６７．０（５’’’’−Ｃ）
３’’’’−Ｏ−β−Ｄ−ｇｌｕｃｏｐｙｒａｎｏｓｙｌ  ｍｏｉｅｔｙ；δ１０４．７（１’’’’’−Ｃ），７２．２（２’’’’’−Ｃ），７５．０（３’’’’’−Ｃ），６９．４（４’’’’’−Ｃ），７１．３（５’’’’’−Ｃ），６２．８（６’’’’’−Ｃ），１７０．３，１７０．５，１７１．１（３’’’’’，４’’’’’および６’’’’’−Ｃ＝Ｏ），２１．３，２１．４，２１．５（３’’’’’，４’’’’’および６’’’’’−ＣＨ３）
但し、１３Ｃ−ＮＭＲにおいてはサンプルは重ジメチルスルホキシドに溶解し、重ジメチルスルホキシドの化学シフト値を４０．２ｐｐｍとして表した。第２１図に、大豆胚芽水抽出物由来フラクション１６の１３Ｃ−ＮＭＲスペクトルを示す。第２１図において、横軸は化学シフト値、縦軸はシグナルの強度を示す。
大豆胚芽水抽出物由来フラクション１６を実施例２−（１）と同様の方法で加水分解に処し、糖成分と非糖成分を生じさせた。非糖部分について薄層クロマトグラフィー（展開溶媒Ａ）を行った結果、Ｓｏｙａｓａｐｏｇｅｎｏｌ  Ａと同じＲｆ値を有するスポットを検出した。糖成分について薄層クロマトグラフィー（展開溶媒Ｂ）を行った結果、アラビノース、グルコース、ガラクトースを検出した。
以上の結果から、大豆胚芽水抽出物由来フラクション１６が３−Ｏ−［β−Ｄ−ｇｌｕｃｏｐｙｒａｎｏｓｙｌ（１→２）−β−Ｄ−ｇａｌａｃｔｏｐｙｒａｎｏｓｙｌ−（１→２）−β−Ｄ−ｇｌｕｃｕｒｏｎｏｐｙｒａｎｏｓｙｌ］−２２−Ｏ−［３，４，６−ｔｒｉ−Ｏ−ａｃｅｔｙｌ−β−Ｄ−ｇｌｕｃｏｐｙｒａｎｏｓｙｌ（１→３）−α−Ｌ−ａｒａｂｉｎｏｐｙｒａｎｏｓｙｌ］ｓｏｙａｓａｐｏｇｅｎｏｌ  Ａ（分子量１３９４）であることを確定した。なお、当該化合物は上記表１における化合物ｇである。
（２）化合物ｇのＮＧＦ産生増強活性を実施例２−（２）と同様の方法で測定した。その結果、化合物ｇにＮＧＦ産生増強活性があることが明らかになった。表２にその結果を示す。なお、コントロールのＮＧＦ産生量は０．７３９ｎｇ／ｍＬであった。
実施例９  ３−Ｏ−［β−Ｄ−ｇｌｕｃｏｐｙｒａｎｏｓｙｌ（１→２）−β−Ｄ−ｇａｌａｃｔｏｐｙｒａｎｏｓｙｌ−（１→２）−β−Ｄ−ｇｌｕｃｕｒｏｎｏｐｙｒａｎｏｓｙｌ］−２２−Ｏ−［２，３，４，６−ｔｅｔｒａ−Ｏ−ａｃｅｔｙｌ−β−Ｄ−ｇｌｕｃｏｐｙｒａｎｏｓｙｌ（１→３）−α−Ｌ−ａｒａｂｉｎｏｐｙｒａｎｏｓｙｌ］ｓｏｙａｓａｐｏｇｅｎｏｌ  ＡのＮＧＦ産生増強活性
（１）実施例１−（６）で分画した大豆胚芽水抽出物由来フラクション１８（保持時間４２．７分の検出のピークを含むフラクション）の質量スペクトル、ＮＭＲスペクトル、糖部分及び非糖部分の薄層クロマトグラフィーを実施例２−（１）と同様の方法で測定した。その結果、大豆胚芽水抽出物由来フラクション１８が３−Ｏ−［β−Ｄ−ｇｌｕｃｏｐｙｒａｎｏｓｙｌ（１→２）−β−Ｄ−ｇａｌａｃｔｏｐｙｒａｎｏｓｙｌ−（１→２）−β−Ｄ−ｇｌｕｃｕｒｏｎｏｐｙｒａｎｏｓｙｌ］−２２−Ｏ−［２，３，４，６−ｔｅｔｒａ−Ｏ−ａｃｅｔｙｌ−β−Ｄ−ｇｌｕｃｏｐｙｒａｎｏｓｙｌ（１→３）−α−Ｌ−ａｒａｂｉｎｏｐｙｒａｎｏｓｙｌ］ｓｏｙａｓａｐｏｇｅｎｏｌ  Ａ（分子量１４３６）であることを確定した。なお、当該化合物は上記表１における化合物ｈである。
（２）化合物ｈのＮＧＦ産生増強活性を実施例２−（２）と同様の方法で測定した。その結果、化合物ｈにＮＧＦ産生増強活性があることが明らかになった。表２にその結果を示す。なお、コントロールのＮＧＦ産生量は０．８９８ｎｇ／ｍＬであった。
実施例１０  大豆胚芽７０％エタノール抽出物由来フラクションの分画
（１）実施例１−（１）で得られた沈殿２（５．６ｋｇ）に８．４リットルのエタノールを加え、室温、１時間攪拌した後、５０００ｇにて１０分間遠心分離を行ない、沈殿６ならびに上清６を得た。沈殿６に７０％エタノール１０リットルを加えて１時間攪拌した後、５０００ｇにて１０分間遠心分離を行ない、沈殿７ならびに上清７を得た。上清６および上清７を混合して減圧濃縮し、大豆胚芽７０％エタノール抽出濃縮物を得た。
（２）実施例１０−（１）で得られた大豆胚芽７０％エタノール抽出濃縮物を５００ｍＬの７０％エタノールに溶解した後、５０００ｇにて１０分間遠心分離を行ない、沈殿８ならびに上清８を得た。上清８を減圧濃縮後、１０００ｍＬの蒸留水に懸濁し、ろ過後の残さを大豆胚芽７０％エタノール抽出物由来水不溶性画分として得た。
（３）実施例１０−（２）で得られた大豆胚芽７０％エタノール抽出物由来水不溶性画分の０．４容を２ｍＬメタノール、１０ｍＬクロロホルムからなる溶媒に溶解し、シリカカラムを用いた分画を行なった。以下にその条件について示す。シリカゲルにはＢＷ−３００ＳＰ（樹脂量３００ｍＬ）を用いた。展開溶媒としてクロロホルム：メタノール：酢酸＝１００：２０：１（４００ｍＬ）、クロロホルム：メタノール＝２：１（４００ｍＬ）、エタノール：水＝１０：１（２００ｍＬ）を用い、その順に溶出を行ない、画分１〜１０まで１００ｍＬごとに画分を回収した。各溶出画分を減圧濃縮し、７０％エタノール抽出物由来シリカカラム画分１〜１０を得た。
（４）実施例１０−（３）で得られた７０％エタノール抽出物由来シリカカラム画分４、５を合わせて濃縮後、エタノール１２ｍＬに溶解し、ついで逆相クロマトグラフィーを用いて分画した。以下にその条件について述べる。カラムはＴＳＫ  ｇｅｌ  ＯＤＳ−８０Ｔｓ（２１．５ｍｍ×３０ｃｍ）を用いた。溶媒Ａ（蒸留水とアセトニトリルを容量比３対１で混合したもの）と溶媒Ｂ（蒸留水とアセトニトリルを容量比１対３で混合したもの）の溶出比は０〜２５分までは溶媒Ｂ比を直線的に４０〜７０％に、つづく２５〜２６分までは溶媒Ｂ比を直線的に７０〜１００％に、つづく５分間は溶媒Ｂ比を１００％に保持した。溶出速度は５ｍＬ／分、検出は２１５ｎｍで行なった。溶出液の紫外線吸収を指標に、大豆胚芽７０％エタノール抽出物由来フラクション１〜１０を分画した。
実施例１１  ３−Ｏ−［β−Ｄ−ｇｌｕｃｏｐｙｒａｎｏｓｙｌ（１→２）−β−Ｄ−ｇａｌａｃｔｏｐｙｒａｎｏｓｙｌ−（１→２）−β−Ｄ−ｇｌｕｃｕｒｏｎｏｐｙｒａｎｏｓｙｌ］−ｓｏｙａｓａｐｏｇｅｎｏｌ  ＢのＮＧＦ産生増強活性
（１）実施例１０−（４）で分画した大豆胚芽７０％エタノール抽出物由来フラクション６（保持時間２４．８分の検出のピークを含むフラクション）の質量スペクトル、ＮＭＲスペクトルを実施例２−（１）と同様の方法で行った。また、大豆胚芽７０％エタノール抽出物由来フラクション６を２Ｍ  トリフルオロ酢酸：２Ｎ  ＨＣｌ（１：１）の混液にて気相下、１００℃、４時間加温し、糖成分と非糖成分を生じさせた。非糖部分について薄層クロマトグラフィー（展開溶媒Ａ）を行った結果、Ｓｏｙａｓａｐｏｇｅｎｏｌ  Ｂと同じＲｆ値を有するスポットを検出した。糖成分について薄層クロマトグラフィー（展開溶媒Ｂ）を行った結果、グルコース、ガラクトースを検出した。その結果、大豆胚芽７０％エタノール抽出物由来フラクション６が３−Ｏ−［β−Ｄ−ｇｌｕｃｏｐｙｒａｎｏｓｙｌ（１→２）−β−Ｄ−ｇａｌａｃｔｏｐｙｒａｎｏｓｙｌ−（１→２）−β−Ｄ−ｇｌｕｃｕｒｏｎｏｐｙｒａｎｏｓｙｌ］−ｓｏｙａｓａｐｏｇｅｎｏｌ  Ｂ（分子量９５８）であることを確定した。なお、当該化合物は上記表１における化合物ｉである。
（２）化合物ｉのＮＧＦ産生増強活性を実施例２−（２）と同様の方法で測定した。その結果、化合物ｉにＮＧＦ産生増強活性があることが明らかになった。表２にその結果を示す。なお、コントロールのＮＧＦ産生量は０．９４８ｎｇ／ｍＬであった。
実施例１２  ３−Ｏ−［α−Ｌ−ｒｈａｍｎｏｐｙｒａｎｏｓｙｌ（１→２）−β−Ｄ−ｇａｌａｃｔｏｐｙｒａｎｏｓｙｌ−（１→２）−β−Ｄ−ｇｌｕｃｕｒｏｎｏｐｙｒａｎｏｓｙｌ］−ｓｏｙａｓａｐｏｇｅｎｏｌ  ＢのＮＧＦ産生増強活性
（１）実施例１０−（４）で分画した大豆胚芽７０％エタノール抽出物由来フラクション７（保持時間２７．４分の検出のピークを含むフラクション）の質量スペクトル、ＮＭＲスペクトル、糖部分及び非糖部分の薄層クロマトグラフィーを実施例１１−（１）と同様の方法で測定した。その結果、大豆胚芽７０％エタノール抽出物由来フラクション７が３−Ｏ−［α−Ｌ−ｒｈａｍｎｏｐｙｒａｎｏｓｙｌ（１→２）−β−Ｄ−ｇａｌａｃｔｏｐｙｒａｎｏｓｙｌ−（１→２）−β−Ｄ−ｇｌｕｃｕｒｏｎｏｐｙｒａｎｏｓｙｌ］−ｓｏｙａｓａｐｏｇｅｎｏｌ  Ｂ（分子量９４２）であることを確定した。なお、当該化合物は上記表１における化合物ｊである。
（２）化合物ｊのＮＧＦ産生増強活性を実施例２−（２）と同様の方法で測定した。その結果、化合物ｊにＮＧＦ産生増強活性があることが明らかになった。表２にその結果を示す。なお、コントロールのＮＧＦ産生量は０．９４８ｎｇ／ｍＬであった。
実施例１３  ３−Ｏ−［β−Ｄ−ｇｌｕｃｏｐｙｒａｎｏｓｙｌ（１→２）−β−Ｄ−ｇａｌａｃｔｏｐｙｒａｎｏｓｙｌ−（１→２）−β−Ｄ−ｇｌｕｃｕｒｏｎｏｐｙｒａｎｏｓｙｌ］−ｓｏｙａｓａｐｏｇｅｎｏｌ  ＥのＮＧＦ産生増強活性
（１）実施例１０−（４）で分画した大豆胚芽７０％エタノール抽出物由来フラクション８（保持時間２９．３分の検出のピークを含むフラクション）の質量スペクトル、ＮＭＲスペクトル、糖部分及び非糖部分の薄層クロマトグラフィーを実施例１１−（１）と同様の方法で測定した。その結果、大豆胚芽７０％エタノール抽出物由来フラクション８が３−Ｏ−［β−Ｄ−ｇｌｕｃｏｐｙｒａｎｏｓｙｌ（１→２）−β−Ｄ−ｇａｌａｃｔｏｐｙｒａｎｏｓｙｌ−（１→２）−β−Ｄ−ｇｌｕｃｕｒｏｎｏｐｙｒａｎｏｓｙｌ］−ｓｏｙａｓａｐｏｇｅｎｏｌ  Ｅ（分子量９５６）であることを確定した。なお、当該化合物は上記表１における化合物ｋである。
（２）化合物ｋのＮＧＦ産生増強活性を実施例２−（２）と同様の方法で測定した。その結果、化合物ｋにＮＧＦ産生増強活性があることが明らかになった。表２にその結果を示す。なお、コントロールのＮＧＦ産生量は０．９２４ｎｇ／ｍＬであった。
実施例１４  ３−Ｏ−［α−Ｌ−ｒｈａｍｎｏｐｙｒａｎｏｓｙｌ（１→２）−β−Ｄ−ｇａｌａｃｔｏｐｙｒａｎｏｓｙｌ−（１→２）−β−Ｄ−ｇｌｕｃｕｒｏｎｏｐｙｒａｎｏｓｙｌ］−ｓｏｙａｓａｐｏｇｅｎｏｌ  ＥのＮＧＦ産生増強活性
（１）実施例１０−（４）で分画した大豆胚芽７０％エタノール抽出物由来フラクション９（保持時間３１．７分の検出のピークを含むフラクション）の質量スペクトル、ＮＭＲスペクトル、糖部分及び非糖部分の薄層クロマトグラフィーを実施例１１−（１）と同様の方法で測定した。その結果、大豆胚芽７０％エタノール抽出物由来フラクション９が３−Ｏ−［α−Ｌ−ｒｈａｍｎｏｐｙｒａｎｏｓｙｌ（１→２）−β−Ｄ−ｇａｌａｃｔｏｐｙｒａｎｏｓｙｌ−（１→２）−β−Ｄ−ｇｌｕｃｕｒｏｎｏｐｙｒａｎｏｓｙｌ］−ｓｏｙａｓａｐｏｇｅｎｏｌ  Ｅ（分子量９４０）であることを確定した。なお、当該化合物は上記表１における化合物ｌである。
（２）化合物ｌのＮＧＦ産生増強活性を実施例２−（２）と同様の方法で測定した。その結果、化合物ｌにＮＧＦ産生増強活性があることが明らかになった。表２にその結果を示す。なお、コントロールのＮＧＦ産生量は０．９２４ｎｇ／ｍＬであった。
実施例１５  ３−Ｏ−［β−Ｄ−ｇｌｕｃｏｐｙｒａｎｏｓｙｌ（１→２）−β−Ｄ−ｇａｌａｃｔｏｐｙｒａｎｏｓｙｌ−（１→２）−β−Ｄ−ｇｌｕｃｕｒｏｎｏｐｙｒａｎｏｓｙｌ］−２２−Ｏ−［２，３，４−ｔｒｉ−Ｏ−ａｃｅｔｙｌ−β−Ｄ−ｘｙｌｏｐｙｒａｎｏｓｙｌ（１→３）−α−Ｌ−ａｒａｂｉｎｏｐｙｒａｎｏｓｙｌ］ｓｏｙａｓａｐｏｇｅｎｏｌ  ＡのＮＧＦ産生増強活性
（１）実施例１０−（３）で得られた大豆胚芽７０％エタノール抽出物由来シリカカラム画分３をエタノール５ｍＬに溶解し、ついで逆相クロマトグラフィーを用いて分画した。以下にその条件について述べる。カラムはＴＳＫ  ｇｅｌ  ＯＤＳ−８０Ｔｓ（２１．５ｍｍ×３０ｃｍ）を用いた。溶媒Ａ（蒸留水とアセトニトリルを容量比３対１で混合したもの）と溶媒Ｂ（蒸留水とアセトニトリルを容量比１対３で混合したもの）の溶出比は０〜１５分までは溶媒Ｂ比を直線的に４０〜４５％に、つづく１５〜２０分までは溶媒Ｂ比を直線的に４５〜１００％に、つづく５分間は溶媒Ｂ比を１００％に保持した。溶出速度は５ｍＬ／分、検出は２１５ｎｍで行なった。溶出液の紫外線吸収を指標に、フラクションを分画した。
（２）実施例１５−（１）で大豆胚芽７０％エタノール抽出物由来シリカカラム画分３を分画して得た大豆胚芽７０％エタノール抽出物由来フラクションＡ（保持時間１９．５分の検出のピークを含む）の質量スペクトル、ＮＭＲスペクトル、糖部分及び非糖部分の薄層クロマトグラフィーを実施例１１−（１）と同様の方法で測定した。その結果、大豆胚芽７０％エタノール抽出物由来フラクションＡが３−Ｏ−［β−Ｄ−ｇｌｕｃｏｐｙｒａｎｏｓｙｌ（１→２）−β−Ｄ−ｇａｌａｃｔｏｐｙｒａｎｏｓｙｌ−（１→２）−β−Ｄ−ｇｌｕｃｕｒｏｎｏｐｙｒａｎｏｓｙｌ］−２２−Ｏ−［２，３，４−ｔｒｉ−Ｏ−ａｃｅｔｙｌ−β−Ｄ−ｘｙｌｏｐｙｒａｎｏｓｙｌ（１→３）−α−Ｌ−ａｒａｂｉｎｏｐｙｒａｎｏｓｙｌ］ｓｏｙａｓａｐｏｇｅｎｏｌ  Ａ（分子量１３６４）であることを確定した。なお、当該化合物は上記表１における化合物ｍである。
（３）化合物ｍのＮＧＦ産生増強活性を実施例２−（２）と同様の方法で測定した。その結果、化合物ｍにＮＧＦ産生増強活性があることが明らかになった。表２にその結果を示す。なお、コントロールのＮＧＦ産生量は０．８９８ｎｇ／ｍＬであった。
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実施例１６  １３（１８）−ｏｌｅａｎｅｎｅ−３，２２，２４−ｔｒｉｏｌのＮＧＦ産生増強活性
（１）実施例１０−（２）で得た大豆胚芽７０％エタノール抽出物由来水不溶性画分の０．０４容について、５０％メタノール、２Ｎ塩酸、８０℃の条件下で３時間加熱を行った。次に反応液と等量のジエチルエーテルで計３回抽出し、得られたエーテル層を減圧濃縮して白色粉末を得た。得られた白色粉末をヘキサンで洗浄し、大豆胚芽・酸加水分解物を得た。
（２）実施例１６−（１）で得られた大豆胚芽・酸加水分解物をクロロホルムに溶解し、シリカクロマトを用いて分画した。以下にその条件について示す。シリカゲルにはＢＷ−３００ＳＰ（樹脂量１００ｍＬ）を用いた。展開溶媒としてクロロホルム：メタノール＝１００：１を用いて溶出を行ない、大豆胚芽・酸加水分解物由来シリカカラム画分１（５５０ｍＬ）、画分２（３００ｍＬ）、画分３（２５０ｍＬ）の順に溶出画分を得た。
（３）実施例１６−（２）で得られた大豆胚芽・酸加水分解物由来シリカカラム画分２を４ｍＬのエタノールに溶解し、逆相クロマトグラフィーを用いて分画した。以下にその条件について述べる。カラムはＴＳＫ  ｇｅｌ  ＯＤＳ−８０Ｔｓ（２１．５ｍｍ×３０ｃｍ）を用いた。溶媒には水とアセトニトリルを容量比１：９で混合したものを用い、溶出速度は５ｍＬ／分、検出は２１５ｎｍで行なった。溶出液の紫外線吸収を指標に、大豆胚芽・酸加水分解物由来フラクションを分画した。
（４）実施例１６−（３）で分画した大豆胚芽・酸加水分解物由来フラクションａ（溶出時間３７．５分のピークを含むフラクション）の質量スペクトルを実施例２−（１）と同様の方法で測定した。マトリックスにはトリエタノールアミンを用いた。質量分析によりｍ／ｚ  ４５７（Ｍ−Ｈ）−のピークを検出した。第２２図に、大豆胚芽・酸加水分解物由来フラクションａの質量スペクトルを示す。第２２図において、横軸はｍ／ｚ値、縦軸は相対強度を示す。
大豆胚芽・酸加水分解物由来フラクションａのＮＭＲスペクトルを実施例２−（１）と同様の方法で測定した。ＮＭＲの帰属の信号を以下に示す。
１Ｈ−ＮＭＲ：δ０．７０，０．９２（３Ｈ，ｓ，２９および３０−ＣＨ３），０．７７（１Ｈ，ｍ，５−Ｈ），０．７９（３Ｈ，ｓ，２６−ＣＨ３），０．８１（３Ｈ，ｓ，２５−ＣＨ３），０．８８（３Ｈ，ｓ，２８−ＣＨ３），０．９６（１Ｈ，ｍ，１−Ｈ），１．０７（１Ｈ，ｍ，１５−Ｈ），１．０８（３Ｈ，ｓ，２３−ＣＨ３），１．１２（３Ｈ，ｓ，２７−ＣＨ３），１．１６（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝４．８，１３．８Ｈｚ，１１−Ｈ），１．２５（１Ｈ，ｍ，１６−Ｈ），１．２７（１Ｈ，ｍ，２１−Ｈ），１．３２（１Ｈ，ｍ，６−Ｈ），１．３４（１Ｈ，ｍ，２１−Ｈ），１．３４（１Ｈ，ｍ，７−Ｈ），１．３７（１Ｈ，ｍ，７−Ｈ），１．４３（１Ｈ，ｍ，９−Ｈ），１．４５（１Ｈ，ｍ，１１−Ｈ），１．５５（１Ｈ，ｍ，６−Ｈ），１．５６（１Ｈ，ｍ，２−Ｈ），１．６１（１Ｈ，ｍ，１５−Ｈ），１．６２（１Ｈ，ｍ，１９−Ｈ），１．６４（１Ｈ，ｍ，２−Ｈ），１．６５（１Ｈ，ｍ，１−Ｈ），１．６８（１Ｈ，ｍ，１６−Ｈ），１．８０（１Ｈ，ｍ，１２−Ｈ），２．２４（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝１３．８Ｈｚ，１９−Ｈ），２．６１（１Ｈ，ｂｒ−ｄ，Ｊ＝１２．６Ｈｚ，１２−Ｈ），３．１２（１Ｈ，ｍ，２２−Ｈ），３．１９（１Ｈ，ｍ，３−Ｈ），３．２６（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝７．８，１０．８Ｈｚ，２４−Ｈ），３．８０（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝２．４，１０．８Ｈｚ，２４−Ｈ），４．０６（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝２．４，７．８Ｈｚ，２４−０Ｈ）），４．２６（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝４．８Ｈｚ，２２−０Ｈ），４．９５（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝４．２Ｈｚ，３−０Ｈ）
但し、１Ｈ−ＮＭＲにおいてはサンプルは重ジメチルスルホキシドに溶解し、重ジメチルスルホキシドの残留プロトンの化学シフト値を２．５１ｐｐｍとして表した。第２３図に、大豆胚芽・酸加水分解物由来フラクションａの１Ｈ−ＮＭＲスペクトルを示す。第２３図において、横軸は化学シフト値、縦軸はシグナルの強度を示す。
１３Ｃ−ＮＭＲ：δ１７．３（２５−Ｃ），１７．４（２８−Ｃ），１８．１（２６−Ｃ），１９．６（６−Ｃ），２２．１（２７−Ｃ），２２．４（１１−Ｃ），２３．８（２３−Ｃ），２５．８，３３．１（２９および３０−Ｃ），２６．１（１２−Ｃ），２６．６（１５−Ｃ），２８．２（２−Ｃ），３２．７（２０−Ｃ），３４．０（１６−Ｃ），３５．８（７−Ｃ），３７．５（１０−Ｃ），３８．６（１９−Ｃ），３９．３（１−Ｃ），４０．９（１７−Ｃ），４１．５（８−Ｃ），４３．１（４−Ｃ），４４．７（１４−Ｃ），４４．８（２１−Ｃ），５１．０（９−Ｃ），５６．３（５−Ｃ），６３．８（２４−Ｃ），７６．６（２２−Ｃ），７９．５（３−Ｃ），１３３．０（１８−Ｃ），１３６．９（１３−Ｃ）
但し、１３Ｃ−ＮＭＲにおいてはサンプルは重ジメチルスルホキシドに溶解し、重ジメチルスルホキシドの化学シフト値を４０．２ｐｐｍとして表した。第２４図に、大豆胚芽・酸加水分解物由来フラクションａの１３Ｃ−ＮＭＲスペクトルを示す。第２４図において、横軸は化学シフト値、縦軸はシグナルの強度を示す。
以上、大豆胚芽・酸加水分解物由来フラクションａについて行ったＭＳスペクトル、ＮＭＲスペクトル解析の結果、大豆胚芽・酸加水分解物由来フラクションａが１３（１８）−ｏｌｅａｎｅｎｅ−３，２２，２４−ｔｒｉｏｌ（分子量４５８）であることが確定した。なお、当該化合物は上記表１における化合物ｎである。
（５）化合物ｎのＮＧＦ産生増強活性を実施例２−（２）と同様の方法で測定した。培地への添加量は最終濃度で表３に示す通りとした。その結果、化合物ｎにＮＧＦ産生増強活性があることが明らかになった。表３にその結果を示す。なお、コントロールのＮＧＦ産生量は０．３７２ｎｇ／ｍＬであった。
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実施例１７  グリチルリチンのＮＧＦ産生増強活性
グリチルリチン（和光純薬工業社製）のＮＧＦ産生増強活性を実施例２−（２）と同様の方法で測定した。培地への添加量は最終濃度で表４に示す通りとした。その結果、グリチルリチンにＮＧＦ産生増強活性があることが明らかとなった。表４にその結果を示す。なお、コントロールのＮＧＦ産生量は０．４８４ｎｇ／ｍＬであった。
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【産業上の利用可能性】  本発明により、食用植物由来の安全なサポニン類化合物、サポゲニン類化合物又はそれらの塩を高含有する医薬、飲食品、飼料が提供される。これらはそのＮＧＦ産生増強作用により脳神経系疾患の治療、予防、症状改善に有用である。特に飲食品は日常的にサポニン類化合物等の一定量を摂取することを可能にし、生体の恒常性維持用飲食品、ＮＧＦ産生増強用飲食品として極めて有用である。
【図１】
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【図２】
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【図３】
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【図４】
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【図５】
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【図６】
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【図７】
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【図８】
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【図９】
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【図１０】
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【図１１】
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【図１２】
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【図１３】
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【図１４】
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【図１５】
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【図１６】
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【図１７】
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【図１８】
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【図１９】
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【図２０】
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【図２１】
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【図２２】
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【図２３】
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【図２４】
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【国際調査報告】
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