(57)【要約】以下の反応スキームで示される化合物（Ｖ）またはその塩の製法。2003080643.tif 000023（式中、Ｒ１およびＲ２はそれぞれ独立して炭素数１〜８のアルキル）
2003080643.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
式：
2003080643.tif 000017
（式中、Ｒ１およびＲ２はそれぞれ独立して炭素数１〜８のアルキル）で示され、
（工程１）化合物（Ｉ）と化合物（ＩＩ）をリチウム試薬（Ａ）および有機溶媒の存在下に反応させて化合物（ＩＩＩ）を含む溶液を得る工程、
（工程２）工程１で得られた溶液にリチウム試薬（Ｂ）を加えて化合物（ＩＶ）を含む溶液を得る工程、および
（工程３）工程２で得られた溶液に酸を加える工程、
を含むことを特徴とする、化合物（Ｖ）、その製薬上許容される塩、またはその溶媒和物の製造方法。
【請求項２】
式：
2003080643.tif 000018
（式中、Ｒ１およびＲ２はそれぞれ独立して炭素数１〜８のアルキル）で示され、
（工程１）化合物（Ｉ）、化合物（ＩＩ）およびリチウム試薬（Ａ）を有機溶媒に溶解させる工程、
（工程２）リチウム試薬（Ｂ）を加える工程、および
（工程３）酸を加える工程、
を順に行うことを特徴とする、化合物（Ｖ）、その製薬上許容される塩、またはその溶媒和物の製造方法。
【請求項３】
得られた化合物（Ｖ）、その製薬上許容される塩、またはその溶媒和物を単離する工程を含むことを特徴とする、請求項１または２記載の製造方法。
【請求項４】
リチウム試薬（Ａ）が塩化リチウムまたは水酸化リチウムであり、リチウム試薬（Ｂ）が水酸化リチウムである、請求項１〜３のいずれかに記載の製造方法。
【請求項５】
有機溶媒がＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミドである、請求項１〜４のいずれかに記載の製造方法。
【請求項６】
式：
2003080643.tif 000019
（式中、Ｒ２は炭素数１〜８のアルキル）で示され、
（工程１）化合物（ＶＩ）をＰｄ−Ｃ存在下で還元することにより化合物（ＶＩＩ）を含む溶液得る工程、および
（工程２）工程１で得られた溶液に含まれる化合物（ＶＩＩ）と化合物（ＶＩＩＩ）を反応させる工程、
を含むことを特徴とする、化合物（ＩＩ）、その製薬上許容される塩、またはその溶媒和物の製造方法。
【請求項７】
工程２をｐＨ１〜７で行う請求項６記載の製造方法。
【請求項８】
工程２をＮ，Ｎ−ジメチルアニリン存在下で行う請求項６記載の製造方法。
【請求項９】
式：
2003080643.tif 000020
（式中、Ｒ１は炭素数１〜８のアルキル、Ｒ３は水素または炭素数１〜８のアルキル）で示され、
（工程１）化合物（Ｉ）と化合物（ＩＩ’）を塩基、有機溶媒および水の存在下に反応させて化合物（ＩＶ）を含む溶液を得る工程、および
（工程２）工程１で得られた溶液に酸を加える工程
を含むことを特徴とする、化合物（Ｖ）、その製薬上許容される塩、またはその溶媒和物の製造方法。
【請求項１０】
式：
2003080643.tif 000021
（式中、Ｒ１は炭素数１〜８のアルキル、Ｒ３は水素または炭素数１〜８のアルキル）で示され、
（工程１）化合物（Ｉ）、化合物（ＩＩ’）および塩基を有機溶媒および水に溶解させる工程、および
（工程２）酸を加える工程
を順に行うことを特徴とする、化合物（Ｖ）、その製薬上許容される塩、またはその溶媒和物の製造方法。
【請求項１１】
得られた化合物（Ｖ）、その製薬上許容される塩、またはその溶媒和物を単離することを特徴とする、請求項９または１０記載の製造方法。
【請求項１２】
塩基が水酸化リチウム、水酸化ナトリウムまたは水酸化カリウムである、請求項９〜１１のいずれかに記載の製造方法。
【請求項１３】
式：
2003080643.tif 000022
（式中、Ｒ１はエチル）で示される化合物（Ｉ−１）の結晶。
【請求項１４】
請求項１記載の化合物（Ｖ）を有機溶媒に溶解した後、精製水で洗浄することにより、化合物（Ｖ）からエンドトキシンを除去することを特徴とする、化合物（Ｖ）の製造方法。
【請求項１５】
有機溶媒が酢酸エチルである、請求項１４記載の方法。
【発明の詳細な説明】
技術分野
本発明は、エンドセリン受容体拮抗薬等として有用なトリテルペン誘導体、特に式：
2003080643.tif 000003
で示される化合物、その塩または媒和物（以下、化合物（Ｖ）という）の製造方法に関する。
背景技術
化合物（Ｖ）はエンドセリン受容体拮抗薬であり、種々の循環器系疾患（例：高血圧、虚血性疾患、脳循環障害、腎障害、諸臓器の循環不全、喘息、脳卒中、脳梗塞、脳浮腫等）の治療薬として有用である（特許文献１および特許文献２等）。また、その製造中間体であるミリセロン等のオレアノール酸誘導体の製造方法は特許文献３に記載されている。さらに、オレアノール酸を使用した化合物（Ｖ）の製造方法が非特許文献１および非特許文献２等に記載されている。しかし、これら文献に記載の製法では、製造中間体の単離、反応工程ごとに異なる試薬や溶媒の使用、または環境上有害な試薬の使用を必要とする等、工業的製法としては必ずしも満足のいく方法ではなかった。
特許文献４には、ヒドロキシ−２−ニトロベンズアルデヒドのニトロ基を接触還元してアミノ基とする方法が記載されているが、この方法ではアルデヒド基をアセタール化して保護した後に還元しているものである。
特許文献１  国際公開ＷＯ９２／１２９９１号パンフレット
特許文献２  特開平７−５３４８４号公報
特許文献３  特開平７−３１６１８８号公報
特許文献４  特開平７−１０１９５６号公報
非特許文献１  オーガニック・プロセス・リサーチ・アンド・デベロップメント（Ｏｒｇａｎｉｃ  Ｐｒｏｃｅｓｓ  Ｒｅｓｅａｒｃｈ  ＆  Ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔ）１９９９年，３巻，Ｐ．３４７−３５１
非特許文献２  ジャーナル・オブ・オーガニック・ケミストリー（Ｊｏｕｒｎａｌ  ｏｆ  Ｏｒｇａｎｉｃ  Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ）１９９７年，６２巻，Ｐ．９６０−９６６
発明の開示
よって化合物（Ｖ）やその製造中間体をより効率よく工業的に大量生産する方法の開発が要望されていた。
発明を実施するための最良の形態
本発明者らは、化合物（Ｖ）の製造方法について改良した結果、以下に示す発明を完成した。
（１）式：
2003080643.tif 000004
（式中、Ｒ１およびＲ２はそれぞれ独立して炭素数１〜８のアルキル）で示され、
（工程１）化合物（Ｉ）と化合物（ＩＩ）をリチウム試薬（Ａ）および有機溶媒の存在下に反応させて化合物（ＩＩＩ）を含む溶液を得る工程、
（工程２）工程１で得られた溶液中にリチウム試薬（Ｂ）を加えて化合物（ＩＶ）を含む溶液を得る工程、および
（工程３）工程２で得られた溶液に酸を加える工程、
を含むことを特徴とする、化合物（Ｖ）、その製薬上許容される塩、またはその溶媒和物の製造方法。
（２）式：
2003080643.tif 000005
（式中、Ｒ１およびＲ２はそれぞれ独立して炭素数１〜８のアルキル）で示され、
（工程１）化合物（Ｉ）、化合物（ＩＩ）およびリチウム試薬（Ａ）を有機溶媒に溶解させる工程、
（工程２）リチウム試薬（Ｂ）を加える工程、および
（工程３）酸を加える工程、
を順に行うことを特徴とする、化合物（Ｖ）、その製薬上許容される塩、またはその溶媒和物の製造方法。
（３）得られた化合物（Ｖ）、その製薬上許容される塩、またはその溶媒和物を単離する工程を含むことを特徴とする、上記（１）または（２）記載の製造方法。
（４）リチウム試薬（Ａ）が塩化リチウムまたは水酸化リチウムであり、リチウム試薬（Ｂ）が水酸化リチウムである、上記（１）〜（３）のいずれかに記載の製造方法。
（５）有機溶媒がＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミドある、上記（１）〜（４）のいずれかに記載の製造方法。
（６）式：
2003080643.tif 000006
（式中、Ｒ２は炭素数１〜８のアルキル）で示され、
（工程１）化合物（ＶＩ）をＰｄ−Ｃ存在下で還元することにより化合物（ＶＩＩ）を得る工程、および
（工程２）工程１で得られた溶液に含まれる化合物（ＶＩＩ）と化合物（ＶＩＩＩ）を反応させる工程、
を含むことを特徴とする、化合物（ＩＩ）、その製薬上許容される塩、またはその溶媒和物の製造方法。
（７）工程２をｐＨ１〜７で行う上記（６）記載の製造方法。
（８）工程２をＮ，Ｎ−ジメチルアニリン存在下で行う上記（６）記載の製造方法。
（９）式：
2003080643.tif 000007
（式中、Ｒ１は炭素数１〜８のアルキル、Ｒ３は水素または炭素数１〜８のアルキル）で示され、
（工程１）化合物（Ｉ）と化合物（ＩＩ’）を塩基、有機溶媒および水の存在下に反応させて化合物（ＩＶ）を含む溶液を得る工程、および
（工程２）工程１で得られた溶液に酸を加える工程
を含むことを特徴とする、化合物（Ｖ）、その製薬上許容される塩、またはその溶媒和物の製造方法。
（１０）式：
2003080643.tif 000008
（式中、Ｒ１は炭素数１〜８のアルキル、Ｒ３は水素または炭素数１〜８のアルキル）で示され、
（工程１）化合物（Ｉ）、化合物（ＩＩ’）および塩基を有機溶媒および水に溶解させる工程、および
（工程２）酸を加える工程
を順に行うことを特徴とする、化合物（Ｖ）、その製薬上許容される塩、またはその溶媒和物の製造方法。
（１１）得られた化合物（Ｖ）、その製薬上許容される塩、またはその溶媒和物を単離することを特徴とする、上記（９）または（１０）記載の製造方法。
（１２）塩基が水酸化リチウム、水酸化ナトリウムまたは水酸化カリウムである、上記（９）〜（１１）のいずれかに記載の製造方法。
（１３）式：
2003080643.tif 000009
（式中、Ｒ１はエチル）で示される化合物（Ｉ−１）の結晶。
（１４）上記（１）記載の化合物（Ｖ）を有機溶媒に溶解した後、精製水で洗浄することにより、化合物（Ｖ）からエンドトキシンを除去することを特徴とする、化合物（Ｖ）の製造方法。
（１５）有機溶媒が酢酸エチルである、上記（１４）に記載の方法。
本発明の一態様として、上記化合物（Ｉ）から化合物（Ｖ）を得る製法について説明する。
［方法Ａ］（工程１）
本工程では、化合物（Ｉ）、化合物（ＩＩ）およびリチウム試薬（Ａ）を有機溶媒に溶解させる。すなわち、化合物（Ｉ）と化合物（ＩＩ）をリチウム試薬（Ａ）および有機溶媒の存在下に反応させることにより、化合物（ＩＩＩ）を含む溶液が得られる。
ここで「溶液」とは、化合物（ＩＩＩ）が溶解した均一液相状態を意味するが、化合物（ＩＩＩ）が完全に溶解せず分散している懸濁液状態であるものも包含する。
以下、本明細書中における「溶液」は全て同様に懸濁液状態であるものも包含する。「溶解」も同様に懸濁状態を包含する。
化合物（Ｉ）やその３−ケト体は、例えば上記特許文献３、非特許文献１および非特許文献２等に記載されているか、ホーナ−エモンズ（Ｈｏｒｎｅｒ−Ｅｍｍｏｎｓ）反応を利用して該文献に準じて製造可能である。また、化合物（Ｉ）は該３−ケト体をエチレンジオキソで保護する方法によっても容易に製造できる。
化合物（ＩＩ）も、上記文献に記載されている方法と同様にして合成可能である。
Ｒ１またはＲ２で示される炭素数１〜８のアルキルは直鎖状および分枝状のアルキルを包含し、例えばメチル、エチル、ｎ−プロピル、イソプロピル、ｎ−ブチル、イソブチル、ｓｅｃ−ブチル、ｔｅｒｔ−ブチル、ｎ−ペンチル、イソペンチル、ネオペンチル、ヘキシル、イソヘキシル、ｎ−ヘプチル、イソヘプチルおよびｎ−オクチル、イソオクチル等が挙げられる。Ｒ１として好ましくはメチルまたはエチルであり、特に好ましくはエチルである。Ｒ２として好ましくはメチルである。
リチウム試薬（Ａ）としては、塩化リチウム、臭化リチウム、水酸化リチウム、炭酸リチウム等が例示されるが、好ましくは塩化リチウムまたは水酸化リチウムである。リチウム試薬（Ａ）の使用量は、化合物（Ｉ）に対して約２．０〜１０．０モル当量、好ましくは約２．０〜３．０モル当量である。
有機溶媒としては、Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド、ジエチルエーテル、テトラヒドロフラン、Ｎ，Ｎ−ジメチルアセトアミド、エチレングリコールジメチルエーテル等が例示されるが、好ましくはＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミドである。
反応温度は、通常、約−２０〜６０℃、好ましくは約１０〜２０℃である。
反応時間は、通常、１時間〜５０時間、好ましくは約６〜２４時間である。
本反応は所望により、塩基存在下に行ってもよい。塩基としては、ＤＢＵ（１，８−ジアザビシクロ［５．４．６］−７−ウンデセン）、トリメチルアミン、トリエチルアミン、コリン、プロカイン、エタノールアミン等が例示されるが、好ましくはＤＢＵである。
本工程により、化合物（ＩＩＩ）を含む溶液が得られる。化合物（ＩＩＩ）は単離してもよいが、好ましくは単離することなく次の反応に使用できる。
（工程２）
本工程では、工程１で得られた反応物にリチウム試薬（Ｂ）を加える。すなわち、工程１で得られた化合物（ＩＩＩ）を含む溶液にリチウム試薬（Ｂ）を加えることにより、化合物（ＩＶ）を含む溶液が得られる。
リチウム試薬（Ｂ）としては、水酸化リチウム、炭酸リチウム等が例示されるが、好ましくは水酸化リチウムである。リチウム試薬（Ｂ）の使用量は、化合物（ＩＩＩ）に対して約２．０〜１０．０モル当量、好ましくは約２．０〜４．０モル当量である。上記工程において上記リチウム試薬（Ａ）とリチウム試薬（Ｂ）は、同一でも異なっていてもよい。
有機溶媒としては、Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド、ジエチルエーテル、テトラヒドロフラン、Ｎ，Ｎ−ジメチルアセトアミド、エチレングリコールジメチルエーテル等が例示されるが、好ましくは、工程１と同一溶媒が使用され、特に好ましくはＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミドである。
反応温度は、通常、約−４０〜６０℃、好ましくは約−１０〜０℃である。
反応時間は、通常、０．１時間〜１０時間、好ましくは約０．５〜２．０時間である。
本工程により、化合物（ＩＶ）を含む溶液が得られる。化合物（ＩＶ）は単離してもよいが、好ましくは単離することなく次の反応に使用できる。
（工程３）
本工程では、工程２で得られた反応物に酸を加える。すなわち、工程２で得られた化合物（ＩＶ）を含む溶液に酸を加えることにより化合物（Ｖ）が生成する。この後、反応液に有機溶媒（好ましくは酢酸エチル）と水を加えて、常法通り、抽出、水洗浄、晶析等を行うことにより、化合物（Ｖ）を好ましくは結晶として単離することができる。
酸としては、化合物（ＩＶ）のエチレンジオキシ部分を脱保護し得るものであれば特に限定されず、塩酸、臭化水素酸、硫酸、硝酸、リン酸、ｐ−トルエンスルホン酸、メタンスルホン酸、ギ酸、トリフルオロ酢酸、マレイン酸、シュウ酸等が例示されるが、好ましくは塩酸である。酸の使用量は、化合物（ＩＶ）に対して約４．５〜１５．０モル当量、好ましくは約７．０〜９．０モル当量である。
反応温度は、通常、約０〜８０℃、好ましくは約４０〜５０℃である。
反応時間は、通常、０．１時間〜１０時間、好ましくは約１．０〜２．０時間である。
上記工程により、各製造中間体を好ましくは単離することなく、化合物（Ｉ）から化合物（Ｖ）をワンポットの反応で得られる。また使用する塩基や溶媒の種類を統一することも可能である。よって、本製法は工業的製法として非常に有利である。
［方法Ｂ］
化合物（Ｉ）、化合物（ＩＩ’）および塩基を有機溶媒および水に溶解させる工程および酸を加える工程を順に行うことにより、化合物（Ｖ）を得ることが可能である。すなわち、化合物（Ｉ）および化合物（ＩＩ’）を塩基、有機溶媒および水の存在下に反応させて化合物（ＩＶ）を含む溶液を得、得られた溶液を上記方法Ａ工程３に付すことにより、化合物（Ｖ）が得られる。
ここでＲ３で示される炭素数１〜８のアルキルとは、前記Ｒ１またはＲ２と同様である。
ここで用いる塩基としては水酸化リチウム、水酸化ナトリウム、水酸化カリウム等が挙げられ、好ましくは水酸化リチウムである。塩基の使用量は、化合物（Ｉ）に対して約２．０〜１０．０モル当量、好ましくは約２．０〜５．０モル当量である。
有機溶媒としては、Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド、ジエチルエーテル、テトラヒドロフラン、Ｎ，Ｎ−ジメチルアセトアミド、エチレングリコールジメチルエーテル等が例示されるが、好ましくはＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミドである。
添加する水の量は特に限定されないが、例えば塩基を０．１％（ｗ／ｗ）〜３０％（ｗ／ｗ）、好ましくは１％（ｗ／ｗ）〜１０％（ｗ／ｗ）の濃度の水溶液として反応に用いればよい。
反応温度は、通常、約−４０℃〜６０℃、好ましくは約−１０℃〜０℃である。反応時間は、通常、０．１時間〜１０時間、好ましくは約０．５時間〜４．０時間である。
本法によれば、極めて短時間で化合物（Ｉ）から直接化合物（ＩＶ）を製造することができ、大量合成法として有用である。
こうして得られた化合物（ＩＶ）を上記工程３に付し、化合物（Ｖ）を得ることができる。必要であれば上述の通り、抽出、水洗浄、晶析等を行うことにより、化合物（Ｖ）を好ましくは結晶として単離することができる。
化合物（Ｖ）はさらに周知の塩形成反応により、容易に製薬上許容される塩に変換され得る。
化合物（Ｖ）の製薬上許容される塩としては、無機塩基、アンモニア、有機塩基、塩基性アミノ酸等により形成される塩又は分子内塩が例示される。該無機塩基としては、アルカリ金属（Ｎａ、Ｋ等）、アルカリ土類金属（Ｃａ、Ｍｇ等）、有機塩基としては、トリメチルアミン、トリエチルアミン、コリン、プロカイン、エタノールアミン等が例示される。塩基性アミノ酸としては、リジン、アルギニン、オルニチン、ヒスチジン等が例示される。化合物（Ｖ）の塩として好ましくは、アルカリ金属塩（例：２Ｎａ塩、３Ｎａ塩）である。化合物（Ｖ）またはその塩は、水やアルコール等の溶媒和物であってもよい。
さらに本発明の一態様として、上記化合物（ＶＩ）から化合物（ＩＩ）を得る製法について説明する。
（工程１）化合物（ＶＩ）のニトロ基をＰｄ−Ｃ存在下で還元することにより化合物（ＶＩＩ）が得られる。
Ｐｄ−Ｃの重量比は、化合物（ＶＩ）に対して約０．０１〜０．２当量、好ましくは約０．０５〜０．１当量である。
使用され得る溶媒としては、水、酢酸エチル、アセトニトリル、テトラヒドロフラン、メタノール、エタノール等が例示されるが、好ましくは酢酸エチルまたはアセトニトリルである。
反応温度は、通常、約−１０〜６０℃、好ましくは約−５〜２５℃である。
反応時間は、通常、０．５時間〜１０．０時間、好ましくは約１．０〜５．０時間である。
本工程によれば、環境上好ましくないＴｉＣｌ３等を使用することなく還元反応を行える。また反応後Ｐｄ−Ｃは回収してリサイクルできるので有利である。
化合物（ＶＩ）には、ニトロ基に隣接するアルデヒド基が存在する。このようなアルデヒド基が存在する場合には、アルデヒドを保護した後に還元するが（特許文献４参照）、本工程では、特にアルデヒド基を保護することなく、ニトロ基のみを選択的に還元することができた。
本工程により化合物（ＶＩＩ）を含む溶液が得られ、化合物（ＶＩＩ）は単離することなく次の反応に使用できる。よって工業的製法としての利用価値が高い。
（工程２）
工程１で得られた化合物（ＶＩＩ）のアミノ基に化合物（ＶＩＩＩ）を縮合させることにより、化合物（ＩＩ）が得られる。化合物（ＶＩＩ）は非常に不安定であるので、当該反応に際しては、反応液のｐＨ調整が重要である。好ましくは、酢酸、酢酸ナトリム等で反応ｐＨを１〜７、より好ましくは２〜５に調節することにより反応が効率よく進行する。また溶媒との２相系で反応させることにより化合物（ＶＩＩＩ）の使用量を軽減することもできる。
化合物（ＶＩＩＩ）の化合物（ＶＩ）に対する使用割合は、通常、約０．８〜５．０モル当量、好ましくは約１．０〜１．５モル当量である。
反応溶媒としては、水、酢酸、酢酸エチル、アセトニトリル、テトラヒドロフラン、メタノール、エタノール等が例示されるが、好ましくは酢酸エチルである。反応温度は、通常、約０〜４０℃、好ましくは約０〜１５℃である。
反応時間は、通常、０．１時間〜５．０時間、好ましくは約０．５〜１．５時間である。  化合物（ＶＩＩＩ）において、Ｒ２は好ましくはメチルである。
上記化合物（ＩＩ）の製造は、好ましくは工程１および２を有機溶媒系で連続して行うことにより、ＴｉＣｌ３を用いる水系で行う場合に比べて、工程２で使用する化合物（ＶＩＩＩ）の使用量を大幅に削減できる。
（工程２  別法）
工程１で得られた化合物（ＶＩＩ）と化合物（ＶＩＩＩ）を塩基存在下で反応させて化合物（ＩＩ）を得ることも可能である。目的化合物（ＩＩ）を高収率で得、副生成物の生成量を少量に抑えるためには塩基として特にＮ，Ｎ−ジメチルアニリンを用いることが好ましい。
反応溶媒としては、水、酢酸、酢酸エチル、アセトニトリル、テトラヒドロフラン、メタノール、エタノール等が例示されるが、好ましくはアセトニトリルである。
反応温度は、通常、約−１０〜４０℃、好ましくは約−１０〜１０℃である。
反応時間は、通常、０．１時間〜５．０時間、好ましくは約０．５〜１．５時間である。
化合物（ＶＩＩＩ）の化合物（ＶＩ）に対する使用割合は、通常、約０．８〜５．０モル当量、好ましくは約１．０〜１．５モル当量である。
本別法は、高収率で目的化合物（ＩＩ）を得られる他、ＴｉＣｌ３を用いる水系で行う場合に比べて、化合物（ＶＩＩＩ）の使用量を軽減することができるという利点を有する。
化合物（ＩＩ）の塩や溶媒和物としては、前記化合物（Ｖ）の場合と同様のものが例示される。
さらに本発明は、上記化合物（Ｉ−１）の結晶も提供する。該結晶としては、例えば、以下の回折角度（２θ）の主ピークを示す粉末Ｘ線回折パターンにより特徴づけられる結晶が例示される。
２θ＝５．７６０，６．４８０，９．５８０，１０．０８０，１４．７２０，１５．３４０，１５．７４０，１９．４８０，２０．２８０（度）
（Ｘ線回折測定条件：ＣｕＫα線１．５４オングストローム、管電圧４０ｋＶ、管電流４０ｍＡ）
上記各結晶は、保存安定性が高く、高純度である。化合物（Ｉ）やその塩の製造過程において、これらの結晶を単離し製造中間体として使用することにより、カラムクロマト等の精製工程を省くこともできる。よって、当該結晶は、化合物（Ｉ）を工業的に生産する上で非常に重要である。
本発明はさらに化合物（Ｖ）の精製方法を提供する。詳細には、化合物（Ｖ）の製造過程においてエンドトキシンが混入した場合のエンドトキシンの除去法である。該除去法は、上記方法等により得られた化合物（Ｖ）を一旦、有機溶媒に溶解した後、該溶液を水で洗浄する工程を包含する。
有機溶媒としては、好ましくは酢酸エチルが例示される。
使用される水には、数十〜数百ＥＵ／ｍＬ程度のエンドトキシンが含まれていても十分な精製効果が認められる。好ましくは精製水、特に注射用蒸留水が使用され得る。
化合物（Ｖ）を含む有機溶媒溶液を水で洗浄することにより、化合物（Ｖ）に混入していたエンドトキシンが水層に移動する。本工程は１回の操作でもかなりの精製効果があるが、好ましくは２回以上繰り返され、エンドトキシンの含量を当初に比べて好ましくは約１％以下、さらに好ましくは約０．５％以下にまで低減できる。よって、本精製法は、化合物（Ｖ）またはその塩を注射剤等として使用するのに好適である。
実施例
本発明の実施例を以下に示す。実施例で用いる各略号の意味は以下の通りである。
ＤＭＥ：エチレングリコールジメチルエーテル
ＡｃＯＨ：酢酸
ＤＭＦ：Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド
ＴＨＦ：テトラヒドロフラン
参考例１  化合物（３）の合成
2003080643.tif 000010
化合物（１）（１８．２ｇ，３６．４ｍｍｏｌ）をＤＭＥ（１８２ｍＬ）と酢酸（１８．２ｇ）に懇濁させ、２５％三塩化チタン水溶液（４９．４ｇ，８０．１ｍｍｏｌ）を流入した。その後５０℃まで加熱し１時間反応した後反応液を約１２０ｇまで減圧濃縮した。濃縮液に酢酸エチル（９１ｍＬ）と水道水（９１ｍＬ）を加え、有機層を分取した。有機層に析出する固形物をろ別し、有機層を１０％食塩水（９１ｇ）で洗浄した。水層を酢酸エチル（９１ｍＬ）で抽出し、有機層と合併した後４４．２５ｇまで減圧濃縮した。得られた濃縮液のうち２２．１３ｇにＤＭＥ（６８．３ｍＬ）と酢酸（３．３ｇ）を加えた。２１％亜硝酸ナトリウム水溶液（１７．８５ｇ，５４．３ｍｍｏｌ）を流入し、２５（＋１０，−５）℃で１時間反応させた。反応終了後、１６％水酸化ナトリウム水溶液（３３．７４ｇ）を流入し５０℃で４時間反応させた。この反応はｐＨ１３以上を維持するために１６％水酸化ナトリウム水溶液を追加しながら実施した（１６％水酸化ナトリウム水溶液総量３９．６８ｇ）。反応終了後、２５℃に冷却しメタノール（５４．６ｍＬ）を流入し晶析させた。７％塩酸（５．６ｇ）で中和後、ろ過して化合物（３）を白色結晶として得た。収量６．１３ｇ（６９．４％）
参考例２  化合物（８）の合成
2003080643.tif 000011
（１）化合物（６）の合成
化合物（４）（８．０ｇ，１６．５ｍｍｏｌ）とトルエン（５６ｍＬ）の縣濁液にエチレングリコール（２．０ｇ，３３．０ｍｍｏｌ）とｐ−トルエンスルホン酸ピリジン塩（０．２ｇ，０．８ｍｍｏｌ）を加え、Ｄｅａｎ−Ｓｔａｒｋトラップにより水分を除去しながら１１０℃で加熱還流した。２時間後、９０℃まで冷却しエチレングリコール（１．０ｇ，１６．５ｍｍｏｌ）を追加してさらに１１０℃で３時間加熱還流して化合物（５）のトルエン溶液を得た。この溶液を７０℃まで冷却しピリジン（５．２ｇ，６６．０ｍｍｏｌ）を加えた。次に無水酢酸（５．１ｇ，４９．５ｍｍｏｌ）と４−ジメチルアミノピリジン（０．６ｇ，５．０ｍｍｏｌ）を加え、８０℃で２時間反応させた。反応終了後、室温まで冷却しメタノール（１２８ｍＬ）を流入した。５℃で２時間攪拌後ろ過し、冷却メタノール（２４ｍＬ）で洗浄して化合物（６）を得た。収量８．３ｇ（８８％）
（２）化合物（８）の合成
−５０℃に冷却した液体アンモニア（４００ｍＬ）に金属リチウム（３．５ｇ，４９８．６ｍｍｏｌ）を溶解させ、化合物（６）（４７．０ｇ，８２．３ｍｍｏｌ）のＴＨＦ溶液（４００ｍＬ）を１時間かけて滴下した。１時間−５０℃で反応させた後、エタノール（２３６ｍＬ）を流入し、昇温してアンモニアを除去した。次に、１０℃で水道水（７０５ｍＬ）を流入、７％塩酸（５４５ｇ）を滴下して５〜１０℃で１時間攪拌した。結晶をろ過し、５０％アセトニトリル水およびアセトニトリルで洗浄して化合物（７）の未乾晶（４２．６ｇ）を得た。
得られた未乾晶のうち２７．２１ｇとジエチルホスホノ酢酸（２２．７ｇ，１１５．６ｍｍｏｌ）をＤＭＦ（１５０ｍＬ）と酢酸エチル（６００ｍＬ）に溶解した。減圧濃縮により水分を除去し、溶液を約２１０ｍＬに調製し、室温で１，１’−カルボニルビス−１Ｈ−イミダゾール（１７．０ｇ，１０５．１ｍｍｏｌ）を加え、７０℃で１時間反応させた。反応終了後、室温に戻し、酢酸エチル（４５０ｍＬ）を流入した後、３．５％塩酸を滴下し、ｐＨを約５に調整した。水道水（２３ｍＬ）を加え有機層を分取した。この有機層を４０℃に保温しながら水道水（２４０ｍＬ）を加えて抽出した。水層は酢酸エチル（１５０ｍＬ）で抽出し、有機層を合併して酢酸エチル（３００ｍＬ）を加えた後、約３００ｍＬまで減圧濃縮し晶析させた。０〜５℃に冷却し、１時間攪拌させた後、ろ過して化合物（８）を白色結晶として得た。収量２２．８ｇ（６３％）
化合物（８）結晶の粉末Ｘ線回折パターンを図１に、主なピーク値を以下に示す。
（Ｘ線回折測定条件：ＣｕＫα線１．５４オングストローム、管電圧４０ｋＶ、管電流４０ｍＡ）
回折角度（２θ，単位：度）  面間隔（ｄ，単位：オングストローム）
５．７６０                  １５．３３０７１
６．４８０                  １３．６２８８２
９．５８０                  ９．２２４４９
１０．０８０                ８．７６８０２
１４．７２０                ６．０１２９７
１５．３４０                ５．７７１３１
１５．７４０                ５．６２５５３
１９．４８０                ４．５５３０９
２０．２８０                ４．３７５２５
実施例１  化合物（９）の合成
2003080643.tif 000012
化合物（１３）（１．７ｇ，１０ｍｍｏｌ）を酢酸エチル（１７ｍＬ）に溶解して、１０％Ｐｄ−Ｃ（５０％含水）（０．２５ｇ）を加えて、１５〜２０℃で５．５時間常圧下水素化した。触媒をろ別し、酢酸エチル（８ｍＬ）で洗浄した。得られた化合物（１４）の酢酸エチル溶液に、氷冷下、酢酸ナトリウム（０．８ｇ）を溶解した水溶液（３３ｍＬ）及び酢酸（３．３ｍＬ）を加えた（ｐＨ３．９０）。氷冷下で３−メトキシカルボニルアクリル酸クロリド（１．５ｇ）を滴下し、５０分間攪拌した。結晶をろ過した後、水（２０ｍＬ）及び酢酸エチル（５ｍＬ）で洗浄した後、乾燥して化合物（９）を得た。収量１．８ｇ（７２％）
実施例２  化合物（９）の合成
2003080643.tif 000013
化合物（１３）（１０．０ｇ，５９．８ｍｍｏｌ）と１０％Ｐｄ−Ｃ（２．０８ｇ，５２．１％ｗｅｔ，１０％（ｗ／ｗ））をアセトニトリル（２００ｍＬ）に懸濁させ０℃以下に冷却した。水素圧４ｋｇｆ／ｃｍ２以下で水素供給しながら５℃以下を保ち１時間以上攪拌した。その後Ｐｄ−Ｃをろ別し、アセトニトリルで洗浄して化合物（１４）のアセトニトリル溶液を得た。得られた溶液にＮ，Ｎ−ジメチルアニリン（６．５３ｇ，５３．９ｍｍｏｌ）を加え、−５℃まで冷却した３−メトキシカルボニルアクリル酸クロリド（１０．７ｇ，７２．０ｍｍｏｌ）のアセトニトリル（５０ｍＬ）溶液へ滴下した。滴下終了後、黄色の固体（化合物（９））が析出した。反応液を３０分攪拌し、水（１００ｍＬ）を添加した。その後室温まで加温して一昼夜放置した。減圧濃縮後、氷冷下で１時間攪拌した後晶析した黄色の固体を濾過し、１ｍｏｌ／Ｌ塩酸および水で洗浄して化合物（７）の未乾晶粗生成物を得た。次に得られた粗生成物をＤＭＦ（１００ｍＬ）およびアセトニトリル（５０ｍＬ）の混合液に懸濁させ４０℃で加温溶解させた。０．６６％炭酸水素ナトリウム水溶液（３０２ｇ）を滴下して黄色の化合物（９）の固体を析出させ、その後室温まで冷却した。１時間攪拌した後晶析した黄色の固体を濾過し、水で洗浄して化合物（９）の精生成物を得た。収量１２．３ｇ（８２．５％）
実施例３  アシル化反応における塩基の検討
アシル化反応に使用する塩基として、Ｎ，Ｎ−ジメチルアニリン、イミダゾール、ピリジン、２，６−ルチジン、トリエチルアミンおよびＬｉ２ＣＯ３を試みた。他の塩基と比較し、Ｎ，Ｎ−ジメチルアニリンを使用した場合には目的化合物（９）の生成率が高く、類縁物質の生成も最小限に抑えられた。
2003080643.tif 000014
実施例４  化合物（１２）の合成
2003080643.tif 000015
（方法１）化合物（８）（１２．６ｇ，１８．２ｍｍｏｌ）、化合物（９）（５．０ｇ，２０．０ｍｍｏｌ）および塩化リチウム（１．９ｇ，４５．５ｍｍｏｌ）をＤＭＦ（４７．８ｇ）に縣濁させ１０℃以下に冷却した。ＤＢＵ（１，８−ジアザビシクロ［５．４．６］−７−ウンデセン）（６．９ｇ，４５．５ｍｍｏｌ）を加えた後室温に戻し、２０時間反応させて化合物（１０）のＤＭＦ溶液を得た。次に、−５℃に冷却して４％水酸化リチウム水溶液（３７．７ｇ）を滴下し、−５℃で１時間攪拌して化合物（１１）のＤＭＦ溶液を得た。次に、３５℃まで昇温し、３５％塩酸（１６．１ｇ）を加え４５℃で１時間攪拌した。反応終了後、酢酸エチル（１３６ｍＬ）と水（１２０ｇ）を加え有機層を分取した。水層を酢酸エチルで抽出し、それぞれの有機層を水で洗浄した。洗浄後、５％炭酸水素ナトリウム水溶液を加え抽出した。水層を分取後、酢酸エチル（１６０ｍＬ）を加え、７％塩酸によりｐＨを約５に調整して抽出した。水層を酢酸エチルで抽出し、それぞれの有機層を水で洗浄後合併した。合併液を減圧濃縮して水分を除去した後、７０℃で化合物（１２）の種晶を投入し１時間攪拌した。晶析後、アセトニトリル（５２ｇ）を加え、室温まで徐々に冷却し２時間攪拌した。析出した黄色の固体をろ過し、アセトニトリルで洗浄して化合物（１２）を得た。収量  ９．３ｇ（７０％）
（方法２）化合物（８）（２５．２０ｇ，３６．４ｍｍｏｌ）、化合物（９）（１０．８８ｇ，４３．７ｍｍｏｌ）をＤＭＦ（１７６ｍＬ）に縣濁させた。水酸化リチウム（３．８２ｇ，９１．０ｍｍｏｌ）を加え、２０時間反応させて化合物（１０）のＤＭＦ溶液を得た。次に、−５℃に冷却して３％水酸化リチウム水溶液（７５．３４ｇ）を滴下し、−５℃で１時間攪拌して化合物（１１）のＤＭＦ溶液を得た。次に、３５℃まで昇温し、３５％塩酸（２８．４ｇ）を加え４５℃で１時間攪拌した。反応終了後、酢酸エチル（８９ｍＬ）と水（２４０ｇ）を加え抽出した。水層を酢酸エチルで抽出し、それぞれの有機層を水で洗浄した。洗浄後、５％炭酸水素ナトリウム水溶液を加え抽出した。水層を分取後、酢酸エチル（３２０ｍＬ）を加え、７％塩酸によりｐＨを約５に調整して抽出した。水層を酢酸エチルで抽出し、それぞれの有機層を水で洗浄後合併した。この合併液の４分の１（化合物（８）６．３０ｇ，９．１ｍｍｏｌ相当）を濃縮して水分を除去した後、７０℃で化合物（１２）の種晶を投入し１時間攪拌した。晶析後、アセトニトリル（２６ｇ）を加え、室温まで徐々に冷却し２時間攪拌した。析出した黄色の固体をろ過し、アセトニトリルで洗浄して化合物（１２）を得た。収量：４．８ｇ（７３％）
実施例５  化合物（１２）の合成
2003080643.tif 000016
化合物（８）（３．４６ｇ，５ｍｍｏｌ）、化合物（９）（１．５０ｇ，６ｍｍｏｌ）をＤＭＦ（２４．２ｍＬ）に懸濁させ−５℃以下に冷却した。５．６％水酸化リチウム水溶液（１０．７ｇ，２５ｍｍｏｌ）を滴下して３．５時間反応させ化合物（１１）のＤＭＦ溶液を得た。次に５℃まで昇温後、３５％塩酸（３．３９ｇ，３２．５ｍｍｏｌ）を加えて４５℃で２時間攪拌した。反応終了後、室温まで冷却し、酢酸エチル（４４．６ｇ）と水（３３．５ｇ）を加え１０％水酸化ナトリウム水溶液でｐＨを５．５付近へ調整した後、有機層を分取した。水層を酢酸エチルで抽出し、それぞれの有機層を水で洗浄後合併した。合併液を減圧濃縮して水分を除去した後、７０℃で晶析させた。その後、アセトニトリル（１４．９ｇ）を加え、室温まで徐々に冷却した後、０℃まで冷却して１時間攪拌した。析出した黄色の固体をろ過し、アセトニトリルで洗浄して化合物（１２）を得た。収量２．９７ｇ（８１．４％）
実施例６
化合物（９）の代わりに化合物（ＩＩ’）のＲ３が水素の化合物を、塩基として８．８％水酸化ナトリウム水溶液（１１．４ｇ，２５ｍｍｏｌ）を使用し、２時間反応させる以外は実施例５と同様に操作して化合物（１２）を得た。収量３．１１ｇ（８５．３％）。
実施例７  エンドトキシン除去法
（注）ＥＵ／ｍＬはエンドトキシン濃度を示す。
実施例４で得られた化合物（１２）（１．８ｇ）（＜０．３ＥＵ／ｍｇ）を酢酸エチル（４０ｍＬ）（＜１．２ＥＵ／ｍＬ）およびエンドトキシンを１２０ＥＵ／ｍＬに調整した蒸留水（１７ｍＬ）（蒸留水自体はもともとエンドトキシンフリー）に加えて、抽出した（水層１２０ＥＵ／ｍＬ）。有機層に注射用蒸留水（１７ｍＬ）（エンドトキシンフリー）に加えて、抽出した（水層６ＥＵ／ｍＬ）。更に有機層に注射用蒸留水（１７ｍＬ）に加えて、抽出した（水層０．６ＥＵ／ｍＬ）。有機層を濃縮した後、酢酸エチル（２５．５ｍＬ）（＜１．２ＥＵ／ｍＬ）を加えて濃縮した。７０℃でアセトニトリル（８．６ｍＬ）（＜０．３ＥＵ／ｍＬ）を加えて撹拌した後、室温まで徐々に冷却した。析出した黄色の固体をろ過し、アセトニトリル（３１ｍＬ）（＜０．３ＥＵ／ｍＬ）で洗浄して化合物（１２）（１．５ｇ）（＜０．３ＥＵ／ｍｇ）を得た。
産業上の利用可能性
本発明の製法によれば、エンドセリン受容体拮抗薬等として有用なトリテルペン誘導体を工業的に効率よく製造することができる。また本発明は、該トリテルペン誘導体の製造に有用な中間体の結晶も提供する。
【図面の簡単な説明】
図１  参考例１で得られた化合物（５）の粉末Ｘ線回折パターンである。縦軸はピーク強度、横軸は回折角度（２θ）を示す。
【図１】
2003080643.tif 000024
【手続補正書】
【提出日】平成15年10月10日(2003.10.10)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
式：
2003080643.tif 000025
（式中、Ｒ１およびＲ１はそれぞれ独立して炭素数１〜８のアルキル）で示され、
（工程１）化合物（Ｉ）と化合物（ＩＩ）をリチウム試薬（Ａ）および有機溶媒の存在下に反応させて化合物（ＩＩＩ）を含む溶液を得る工程、
（工程２）工程１で得られた溶液にリチウム試薬（Ｂ）を加えて化合物（ＩＶ）を含む溶液を得る工程、および
（工程３）工程２で得られた溶液に酸を加える工程、
を含むことを特徴とする、化合物（Ｖ）、その製薬上許容される塩、またはその溶媒和物の製造方法。
【請求項２】
式：
2003080643.tif 000026
（式中、Ｒ１およびＲ１はそれぞれ独立して炭素数１〜８のアルキル）で示され、
（工程１）化合物（Ｉ）、化合物（ＩＩ）およびリチウム試薬（Ａ）を有機溶媒に溶解させる工程、
（工程２）リチウム試薬（Ｂ）を加える工程、および
（工程３）酸を加える工程、
を順に行うことを特徴とする、化合物（Ｖ）、その製薬上許容される塩、またはその溶媒和物の製造方法。
【請求項３】
得られた化合物（Ｖ）、その製薬上許容される塩、またはその溶媒和物を単離する工程を含むことを特徴とする、請求項１または２記載の製造方法。
【請求項４】
リチウム試薬（Ａ）およびリチウム試薬（Ｂ）が水酸化リチウムである、請求項１〜３のいずれかに記載の製造方法。
【請求項５】
有機溶媒がＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミドである、請求項１〜４のいずれかに記載の製造方法。
【請求項６】
式：
2003080643.tif 000027
（式中、Ｒ１は炭素数１〜８のアルキル）で示され、
（工程１）化合物（ＶＩ）をＰｄ−Ｃ存在下で還元することにより化合物（ＶＩＩ）を含む溶液得る工程、および
（工程２）工程１で得られた溶液に含まれる化合物（ＶＩＩ）と化合物（ＶＩＩＩ）を反応させる工程、
を含むことを特徴とする、化合物（ＩＩ）、その製薬上許容される塩、またはその溶媒和物の製造方法。
【請求項７】
工程２をｐＨ１〜７で行う請求項６記載の製造方法。
【請求項８】
工程２をＮ，Ｎ−ジメチルアニリン存在下で行う請求項６記載の製造方法。
【請求項９】
式：
2003080643.tif 000028
（式中、Ｒ１は炭素数１〜８のアルキル、Ｒ３は水素または炭素数１〜８のアルキル）で示され、
（工程１）化合物（Ｉ）と化合物（ＩＩ’）を塩基、有機溶媒および水の存在下に反応させて化合物（ＩＶ）を含む溶液を得る工程、および
（工程２）工程１で得られた溶液に酸を加える工程
を含むことを特徴とする、化合物（Ｖ）、その製薬上許容される塩、またはその溶媒和物の製造方法。
【請求項１０】
式：
2003080643.tif 000029
（式中、Ｒ１は炭素数１〜８のアルキル、Ｒ３は水素または炭素数１〜８のアルキル）で示され、
（工程１）化合物（Ｉ）、化合物（ＩＩ’）および塩基を有機溶媒および水に溶解させる工程、および
（工程２）酸を加える工程
を順に行うことを特徴とする、化合物（Ｖ）、その製薬上許容される塩、またはその溶媒和物の製造方法。
【請求項１１】
得られた化合物（Ｖ）、その製薬上許容される塩、またはその溶媒和物を単離することを特徴とする、請求項９または１０記載の製造方法。
【請求項１２】
塩基が水酸化リチウム、水酸化ナトリウムまたは水酸化カリウムである、請求項９〜１１のいずれかに記載の製造方法。
【請求項１３】
式：
2003080643.tif 000030
（式中、Ｒ１はエチル）で示される化合物（Ｉ−１）の結晶。
【請求項１４】
請求項１記載の化合物（Ｖ）を有機溶媒に溶解した後、精製水で洗浄することにより、化合物（Ｖ）からエンドトキシンを除去することを特徴とする、化合物（Ｖ）の製造方法。
【請求項１５】
有機溶媒が酢酸エチルである、請求項１４記載の方法。
【請求項１６】
精製水が実質的にエンドトキシンを含有しない注射用蒸留水である、請求項１４または１５記載の方法。
【国際調査報告】
2003080643.tif 000031
2003080643.tif 000032
2003080643.tif 000033
2003080643.tif 000034