(57)【要約】本発明の大豆胚芽由来のイソフラボンアグリコンを含有する生体活性促進組成物は、経口摂取や点滴などにより体内に吸収させて、人間や哺乳動物の健康を促進したり病気の予防や治療に有効な作用を発揮することにより、人間や哺乳動物の健康の維持、促進、病気の予防等を良好に行なわせることができる。本発明の生体活性促進組成物は、原料としての大豆胚芽を麹菌によって発酵させて蛋白質を分解し、その後に加水分解することによって得られた生成物を更に溶媒を用いて抽出濃縮することによりイソフラボンアグリコンの濃縮物とした生成物からなることを特徴とする。更に、その濃縮物中のイソフラボンアグリコンの組成は、少なくとも７０重量％のダイゼインを含有することを特徴とする。
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【特許請求の範囲】
【請求項１】
原料としての大豆胚芽を麹菌によって発酵させて蛋白質を分解し、その後に加水分解することによって得られた生成物を更に溶媒を用いて抽出濃縮することによりイソフラボンアグリコンの濃縮物とした生成物からなることを特徴とする大豆胚芽由来のイソフラボンアグリコン含有する生体活性促進組成物。
【請求項２】
濃縮されたイソフラボンアグリコンの組成は、少なくとも７０重量％のダイゼインを含有することを特徴とする請求項１に記載の大豆胚芽由来のイソフラボンアグリコンを含有する生体活性促進組成物。
【発明の詳細な説明】
技  術  分  野
本発明は、人間や哺乳動物の健康を促進したり病気の予防や治療に有効な作用を備えた大豆胚芽由来のイソフラボンアグリコンを含有する生体活性促進組成物に関する。
背  景  技  術
本出願人は、特許第３０１４１４５号公報において、豆類を原料として麹菌によって発酵させて蛋白質を分解し、その後に加水分解することによって得られた生成物にイソフラボンアグリコンがリッチに含有されており、この生成物が人間や哺乳動物に対して種々の薬効等の生体活性を促進する作用をなすことを提案している。
本願出願の中でいうところの生体活性促進組成物とは、前述のような人間や哺乳動物の健康を促進したり病気の予防や治療に有効な作用を備えた組成物をいうものである。
そして、この薬効等としては、イソフラボン化合物につてい近年報告されているものが挙げられる。例えば、イソフラボン化合物については、エストロゲン作用、抗エストロゲン作用、酸化防止作用、抗溶血作用、抗菌作用、抗脂血、抗コレステロール作用、鎮痙作用、ガン細胞の分化誘導作用、癌遺伝子阻害作用、制癌効果、動脈硬化防止作用、脊椎動物の免疫機能向上作用、およびその他の生理活性を有していることが知られており、特に、イソフラボン化合物の中でも、イソフラボンアグリコンは、体内吸収率が高い物質であり、その薬理作用について多くの報告がなされている。
具体的には、ゲニスチンから配糖体であるグルコースが加水分解してできたアグリコンであるゲニステインは、癌遺伝子による癌化の誘導に必須であるチロシンキナーゼを阻害する物質（ＴＫ阻害剤）であることが明らかにされ、その制癌効果が確認されている（秋山等、生化学、５９巻９号、１０１６頁（１９８７））。
また、ゲニステインやダイゼインは、イソフラボン化合物のなかでも特にエストロゲン作用を有しており、骨粗鬆症治療効果や免疫機能向上効果があることが確認されている。特に、女性の場合には、閉経後の骨粗鬆症が問題となっており、その原因としてエストロゲンの不足によって引き起こされる骨代謝回転亢進に伴う骨量の減少を挙げることができる。
しかし、骨粗鬆症の治療として行われるエストロゲンの直接投与は、子宮癌、乳癌、などの生殖器に対する副作用を引き起こす問題がある。このため、食品である豆科植物、とりわけ大豆など、から有効成分であるイソフラボン化合物を効率良く抽出し、健康食品、あるいは末病対応食品として利用することができれば安全性の面から見ても有効である。
イソフラボン化合物は、その薬理作用を有することから、近年、医療、食品業界等においてその需要が要求されている。しかし、イソフラボン化合物自体、天然物質に存在する量が少なく、とりわけイソフラボンアグリコンの量は極めて少ないものである。
このようにイソフラボンアグリコンには、優れた薬効等が認められるが、更により優れた薬効等を発揮できるものが望まれている。
発  明  の  開  示
本発明はこれらの点に鑑みてなされたものであり、人間や哺乳動物の健康を促進したり病気の予防や治療に有効な作用を備えた大豆胚芽由来のイソフラボンアグリコンを含有する生体活性促進組成物を提供することを目的とする。
本発明者は鋭意研究し、本発明者が特許第３０１４１４５号において既に提案している生成物であって、「原料となる大豆等の豆類に大豆胚芽を用いて、この大豆胚芽に対して麹菌を用いて製麹処理を施すとともにその生成物に対して加水分解処理を施して、イソフラボンアグリコンを多量に含有する生成物やフイチン酸が完全に分解除去された生成物」を生成し、この生成物に対して本発明者等が特開２０００−２８１６７３号公報において提案している生成方法に従って、更に溶媒を用いて抽出濃縮することによりイソフラボンアグリコンが３０重量％以上の濃縮物とした生成物（アグリマックス：ニチモウ株式会社の登録商標、以下「アグリマックス」という）を生産し、このアグリマックスとイソフラボンアグリコン単体とを卵巣摘出（ＯＶＸ）ラットに投与して比較したところ、アグリマックスを投与したＯＶＸラットの方に対する薬効等の生体活性促進作用が、イソフラボンアグリコン単体を投与したＯＶＸラットよりも極めて優位に出現したことを確認して本発明を完成させたものである。
このようにしてなされた本発明の大豆胚芽由来のイソフラボンアグリコンを含有する生体活性促進組成物は、原料としての大豆胚芽を麹菌によって発酵させて蛋白質を分解し、その後に加水分解することによって得られた生成物を更に溶媒を用いて抽出濃縮することによりイソフラボンアグリコンの濃縮物とした生成物からなることを特徴とする。
また、濃縮物中のイソフラボンアグリコンの組成は、少なくとも７０重量％のダイゼインを含有することを特徴とする。
このようにして形成されている本発明の大豆胚芽由来のイソフラボンアグリコンを含有する生体活性促進組成物は、人間や哺乳動物の健康を促進したり病気の予防や治療に有効な作用を発揮することにより、人間や哺乳動物の健康の維持、促進、病気の予防等を良好に行なわせることができる。
発明を実施するための最良の形態
以下、本発明の実施の形態を説明する。
本実施形態においては、本発明者が特許第３０１４１４５号において既に提案している生成物であって、「原料となる大豆等の豆類に対して麹菌を用いて製麹処理を施すとともにその生成物に対して加水分解処理を施して、イソフラボンアグリコンを多量に含有する生成物やフイチン酸が完全に分解除去された生成物」において、原料として大豆胚芽をイソフラボンアグリコンを用い、本発明者等が提案している特開２０００−２８１６７３号公報に示す生成方法に従って、更に溶媒を用いて抽出濃縮することによりイソフラボンアグリコンが例えば３０重量％以上の濃縮物とした生成物とする。
図１は前記特許第３０１４１４５号において提案している生成物であって、豆類の１種である大豆胚芽のイソフラボン化合物の配糖体を分解して、アグリコンを多量に含むイソフラボン化合物を生成した生成物の製造方法の１実施形態および同時に大豆粕中のフィチン酸を除去した生成物の製造方法の１実施形態を示す工程図である。
まず、アグリコンを多量に含むイソフラボン化合物を生成した生成物を製造する場合について説明する。
図１の工程に沿って説明すると、先ず大豆胚芽を蒸煮する。この蒸煮を施すことにより、麹菌の増殖が容易となる。また、この大豆胚芽の蒸煮は製造目的等に応じてバッチ式や連続式で行うと良い。
そして、この蒸煮が終了した大豆胚芽を一旦冷却して、大豆胚芽中の水分量を麹菌が増殖可能な量（例えば、３７重量％）とさせる。
このようにして水分量を整えられた大豆胚芽に対して、本発明方法が以下のようにして行なわれる。
即ち、蒸煮が終了した大豆胚芽を殺菌し、冷却した後、大豆胚芽と麹菌との配合割合を、例えば大豆胚芽を４００ｋｇに対して麹菌胞子を８×１０７個／ｇに調整した種麹（精白米にて調整）を２００ｇを混合した。更に、製麹のスタート時には３２℃に冷却した後、品温が４０℃になるまで通風しないで４０℃になった時点で通風しながら、温度上昇を抑えた。スタートから約１７時間後の最初の撹拌（盛工程）を行った。大豆胚芽の熱を冷まし、撹拌後品温が３５℃前後になるように通風しながら、温度をコントロールをした。次いで約８時間後に２回目の撹拌（仲工程）を行い、熱を冷ました。再び品温を通風で３５℃前後にコントロールし、更に約１６時間後に３回目の撹拌（仕舞工程）を前回同様に行った。その後は品温が約３８℃になるように通風しながら、温度コントロールし、スタートから４８時間後に製麹を終了させた。製麹終了後、水分含量が５０％になるように撹拌しながら、水分調整を行い、品温が約５０℃になるように加温後、４８時間以上麹菌の酵素で大豆胚芽中のイソフラボン化合物の大部分がアグリコン体になるまで加水分解した。表１の通り本発明による処理により大豆胚芽のイソフラボン化合物はアグリコン体のダイゼインが主体となるように多量に得られた。
この製麹に用いる麹菌としては、古くからの日本独特の発酵食品やテンペに用いられている麹菌であり、食品として安全なアスペルギルス・ウサミ、アスペルギルス・カワチ、アスペルギルス・アワモリ、アスペルギルス・サイトイ、アスペルギルス・オリゼー、アスペルギルス・ニガー等アスペルギルス属およびリゾープス属等からなる麹菌を用いるとよい。
この発酵時間については、使用する麹菌の種類に応じて、少なくとも２４時間以上であり、大豆粕中のイソフラボン化合物の配糖体を十分に分解させるに十分な発酵時間とするとよい。
この蛋白質の加水分解については、使用する麹菌の種類に応じて、大豆胚芽中のイソフラボン化合物の配糖体を十分に低減させるに十分な加水分解時間ならびに加水分解温度とするとよい。
このようにすれば、発酵の初期において有機酸を生成して大豆胚芽中の雑菌の増殖を抑制し、２次汚染の心配がなくなり、大豆胚芽を原料とした生成物を大量生産することができる。また、低水分としなくともイソフラボン化合物の配糖体を十分に低減させる処理を施すことができる。
続いて、本実施形態においては加水分解によって得られた生成物を、特開２０００−２８１６７３号公報に示す方法に従って、（１）親水性有機溶媒を用いて溶媒抽出し、（２）抽出して得た親水性有機溶液に疎水性有機溶媒を用いて液液分離し、（３）液液分離して得た親水性有機溶液に疎水性有機溶媒を用いて液液分離し、そして（４）必要に応じて、液液分離して得た疎水性有機溶液を濃縮乾燥することにより、表１のようなイソフラボンアグリコンが３０重量％以上の濃縮物を得た。この場合のイソフラボンアグリコンとしては、ダイゼインが約７０重量％含有されている。
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実施例
次に、本発明の大豆胚芽由来のイソフラボンアグリコンを含有する生体活性促進組成物による生体活性に促進作用を説明する。
本実施例においては、生体活性の促進度合いを測定し易い雌に対して実験を行った。
１）雌ＳＤラット（７週齢）を用意し、１週間の予備飼育を行い、健康で各区で体重も揃った検体となる雌ＳＤラット（８週齢）を育成した。Ｓｈａｍ群以外の個体に卵巣摘出手術（ＯＶＸ）を行った。Ｓｈａｍ群は開腹のみとした。ＯＶＸ処理後１週間予備飼育した後、予備飼育の翌日より２８日間に亘り、表２に示す組成の高脂肪飼料を自由摂取として育生した。給水としては、井水（３ｐｐｍ塩素添加）を自由摂取させた。更に、飼育施設環境として、設定温湿度を２３±２℃、５５±１０％とし、空調方式を換気（１５回／１時間）とし、証明時間を８：００ａ．ｍ．〜８：００ｐ．ｍ．とし、飼育設備をステルス製代謝ケージとした。
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２）餌料の投与
比較区１（表中、Ｓｈａｍ群）には健康な雌ＳＤラットを６匹入れ、試験区１（表中、ＯＶＸ群）、試験区２（表中、ＡｇｌｙＭａｘ群）、試験区３（表中、ゲニステイン群）、試験区４（表中、ダイゼイン群）および試験区５（表中、１７β−エストラジオール群）とにそれぞれ雌ＳＤラットのＯＶＸラットを６匹づつ分け、比較区１および試験区２には通常の餌のみを給餌し、試験区２、３および４には、アグリマックス、ゲニステインおよびダイゼインをそれぞれイソフラボンアグリコン量として体重Ｋｇあたり２０ｍｇとなるように餌に添加しながら投与し、試験区５には１７β−エストラジオールを、１日当たり１μｇ／匹を餌に添加しながら投与した。
３）体重の測定
全ラットの体重を、０、７、１４、２１、２８日目に１回測定した。
４）摂餌量の測定
全ラットの摂餌量を、０、７、１４、２１、２８日目に１回測定した。
５）採尿、採血、各測定項日の測定
高脂肪飼料およびアグリマックス、ゲニステイン、ダイゼインおよび１７β−エストラジオールの投与期間中、０、７、１４、２１、２８日目に２４時間の蓄尿による採尿を行った。そして、尿中のＮＯ２／ＮＯ３の測定を行った。２８日間の投与終了後、２４時間の絶食を行い、エーテル麻酔下で解剖を行い、腹部大動脈から採血を行い、血清コレステロールとしての血清総コレステロール、ＨＤＬ−コレステロール、ＬＤＬ−コレステロールおよびコレステロールエステル比、血中中性脂肪（ＴＧ）、血中遊離脂肪酸（ＦＦＡ）、およびレプチンを酵素法にて測定した。更に、解剖した雌ラットより子宮重量を体重１００ｇ当たりの重量として測定し、体内脂肪を検出するために後腹壁脂肪、腸管膜脂肪、腎周囲脂肪および卵巣周囲脂肪を摘出して体重１００ｇ当たりの重量を測定した。更に、解剖した雌ラットより胸腺重量を体重１００ｇ当たりの重量として測定した。
６）データの統計学的処理
各区の測定結果は各測定項目毎に平均値±標準偏差で表し、有意差検定はＳｔｕｄｅｎｔ’ｓ−ｔ法を用いた。なお、検定は両側検定とし、有意水準は５および１％とする。
ｂ）試験結果
１）状態観察
試験期間中の一般状態観察については特に異常は観察されなかった。
２）体重の測定結果は表３に示す通りである。
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３）摂餌量の測定結果は表４に示す通りである。
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４）尿中のＮＯ２／ＮＯ３の測定結果は表５に示す通りである。
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５）血清コレステロールとしての血清総コレステロール、ＨＤＬ−コレステロール、ＬＤＬ−コレステロールおよびコレステロールエステル比の測定結果は表６に示す通りである。
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６）血中中性脂肪（ＴＧ）の測定結果は表７に示す通りである。
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７）血中遊離脂肪酸（ＦＦＡ）の測定結果は表８に示す通りである。
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８）レプチンの測定結果は表９に示す通りである。
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９）子宮重量の測定結果は表１０に示す通りである。
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１０）後腹壁脂肪、腸管膜脂肪、腎周囲脂肪および卵巣周囲脂肪の測定結果は表１１に示す通りである。
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１１）胸腺重量の測定結果は表１２に示す通りである。
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ｃ）評価
全部の測定項目において、本発明のアグリマックスを用いた試験区２の測定結果が、イソフラボンアグリコン単体である試験区３および試験区４に比較して生体活性の促進作用が大きく優れていることがわかる。また、試験区５に投与される１７β−エストラジオールはエストロゲンであるために、イソフラボンアグリコンに比べて４０００分の１の投与量であってもエストロゲンとしての生体活性の促進作用（アゴニスト）が高く、多量投与による副作用が懸念される結果であった。更に説明すると、エストロゲンとしての１７β−エストラジオールは効きめが強すぎて副作用発生のおそれがあって困るので、４０００分の１程度に薄めて利用しなければならないものである。
更に説明すると、本発明のアグリマックスがイソフラボンアグリコンの単体より優れた作用を有しているのは、アグリマックスが自然の原料である大豆胚芽を用いており、その製麹、麹菌による酵素の分解作用、並びに加水分解作用により大豆胚芽中から分解して生成されたイソフラボンアグリコン類が天然物であり、しかもその成分比をみると、ダイゼインが７０重量％と他のアグリコン即ちゲニステインおよびグリシテインに比べて圧倒的に多いことによるものと思われる。
更に説明すると、免疫面、特にＴ細胞の分化に重要な働きをする器官である胸腺重量は、比較区１および試験区１に対して、試験区３のゲニスティンおよび試験区５の１７β−エストラジオールにおいては低下したが、試験区２のアグリマックスは試験区４のダイゼイン単体と同様に重量を高める優れた機能があることが分かった。更に、本発明の大豆胚芽由来のイソフラボンアグリコンを含有する生体活性促進組成物がＴ細胞の分化を有効に発揮させることは、胸腺の組織標本を作製したものを顕微鏡によって観察することによって確認することができる。
また、本発明の大豆胚芽由来のイソフラボンアグリコンを含有する、弱いエストロゲン様作用による生体活性促進組成物を経口補助剤状、例えば容易に経口できるカプセル状、錠剤状、顆粒状、粉末状等に形成して、経口摂取を容易とするとともに、消化器官によって確実に吸収させて、前述した優れた効果を発揮させることができる。
なお、本発明は前記実施の形態並びに実施例に限定されるものではなく、必要に応じて変更することができる。本発明の大豆胚芽由来のイソフラボンアグリコンを含有する生体活性促進組成物は前記実施例のように経口投与の他に点滴によって体内に吸収させるようにしてもよい。
【図面の簡単な説明】
図１は本発明の大豆胚芽中のイソフラボン化合物のうち薬理作用の高いアグリコンを生成する製造方法の１実施例を示す工程図である。
【図１】
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【国際調査報告】
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