(57)【要約】一般式（Ｉ）Ｈ−Ｈｉｓ−Ｓｅｒ−Ａｓｐ−Ａｌａ−Ｖａｌ−Ｐｈｅ−Ｔｈｒ−Ａｓｐ−Ａｓｎ−Ｔｙｒ−Ｔｈｒ−Ａｒｇ−Ｌｅｕ−Ａｒｇ−Ｘ１−Ｇｌｎ−Ｘ２−Ａｌａ−Ｖａｌ−Ｘ３−Ｘ４−Ｔｙｒ−Ｌｅｕ−Ｘ５−Ｘ６                    （Ｉ）〔式中、Ｘ１、Ｘ３およびＸ４は、それぞれＬｙｓまたはＡｒｇ；Ｘ２はＭｅｔ、ＬｅｕまたはｎＬｅｕ；Ｘ５は化学結合、Ａｓｎ、Ａｓｎ−Ｓｅｒ、Ａｓｎ−Ｓｅｒ−Ｉｌｅ、Ａｓｎ−Ｓｅｒ−Ｉｌｅ−ＬｅｕまたはＡｓｎ−Ｓｅｒ−Ｉｌｅ−Ｌｅｕ−Ａｓｎ−Ｘ７（Ｘ７は化学結合、Ｇｌｙ等）；Ｘ６は−ＯＨまたは−ＮＨ２〕で表されるペプチドまたはその製薬学的に許容される塩を有効成分として含有するドライアイおよびドライアイを伴う疾病の治療剤を提供する。
2003039577.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
一般式（Ｉ）
Ｈ−Ｈｉｓ−Ｓｅｒ−Ａｓｐ−Ａｌａ−Ｖａｌ−Ｐｈｅ−Ｔｈｒ−Ａｓｐ−Ａｓｎ−Ｔｙｒ−Ｔｈｒ−Ａｒｇ−Ｌｅｕ−Ａｒｇ−Ｘ１−Ｇｌｎ−Ｘ２−Ａｌａ−Ｖａｌ−Ｘ３−Ｘ４−Ｔｙｒ−Ｌｅｕ−Ｘ５−Ｘ６                    （Ｉ）
（式中、Ｘ１、Ｘ３およびＸ４は、それぞれＬｙｓまたはＡｒｇ；Ｘ２はＭｅｔ、ＬｅｕまたはｎＬｅｕ；Ｘ５は化学結合、Ａｓｎ、Ａｓｎ−Ｓｅｒ、Ａｓｎ−Ｓｅｒ−Ｉｌｅ、Ａｓｎ−Ｓｅｒ−Ｉｌｅ−ＬｅｕまたはＡｓｎ−Ｓｅｒ−Ｉｌｅ−Ｌｅｕ−Ａｓｎ−Ｘ７（Ｘ７は化学結合、Ｇｌｙ、Ｇｌｙ−Ｌｙｓ、Ｇｌｙ−Ｌｙｓ−Ａｒｇ、Ｇｌｙ−ＡｒｇまたはＧｌｙ−Ａｒｇ−Ａｒｇを示す。）；Ｘ６は−ＯＨまたは−ＮＨ２を示すが、Ｘ１、Ｘ３およびＸ４がＬｙｓ，Ｘ５がＡｓｎ−Ｓｅｒ−Ｉｌｅ−Ｌｅｕ−Ａｓｎ−Ｘ７、Ｘ７が化学結合、Ｘ６が−ＮＨ２の時は、Ｘ２はＬｅｕまたはｎＬｅｕを示す。）で表されるペプチドまたはその製薬学的に許容される塩を含有するドライアイまたはドライアイを伴う疾病の治療剤。
【請求項２】
一般式（Ｉ）において、Ｘ５がＡｓｎ−Ｓｅｒ−Ｉｌｅ−Ｌｅｕ−Ａｓｎ−Ｘ７であり、Ｘ７がＧｌｙ、Ｇｌｙ−Ｌｙｓ、Ｇｌｙ−Ｌｙｓ−Ａｒｇ、Ｇｌｙ−ＡｒｇまたはＧｌｙ−Ａｒｇ−Ａｒｇである請求の範囲１記載の治療剤。
【請求項３】
一般式（Ｉ）において、Ｘ５が化学結合、Ａｓｎ、Ａｓｎ−Ｓｅｒ、Ａｓｎ−Ｓｅｒ−Ｉｌｅ、Ａｓｎ−Ｓｅｒ−Ｉｌｅ−ＬｅｕまたＡｓｎ−Ｓｅｒ−Ｉｌｅ−Ｌｅｕ−Ａｓｎ−Ｘ７（Ｘ７は化学結合）である請求の範囲１記載の治療剤。
【請求項４】
一般式（Ｉ）において、Ｘ１、Ｘ３およびＸ４がＡｒｇ、Ｘ２がＬｅｕ、Ｘ５がＡｓｎ−Ｓｅｒ−Ｉｌｅ−Ｌｅｕ−Ａｓｎ−Ｘ７、Ｘ７がＧｌｙ−Ａｒｇ−Ａｒｇ、Ｘ６が−ＮＨ２である請求の範囲１記載の治療剤。
【請求項５】
一般式（Ｉ）において、Ｘ１、Ｘ３およびＸ４がＬｙｓ、Ｘ２がＬｅｕ、Ｘ５が化学結合、Ｘ６が−ＮＨ２である請求の範囲１記載の治療剤。
【請求項６】
眼局所投与剤である請求の範囲１〜５のいずれかに記載の治療剤。
【請求項７】
眼局所投与剤が点眼剤である請求の範囲６記載の治療剤。
【請求項８】
一般式（Ｉ）
Ｈ−Ｈｉｓ−Ｓｅｒ−Ａｓｐ−Ａｌａ−Ｖａｌ−Ｐｈｅ−Ｔｈｒ−Ａｓｐ−Ａｓｎ−Ｔｙｒ−Ｔｈｒ−Ａｒｇ−Ｌｅｕ−Ａｒｇ−Ｘ１−Ｇｌｎ−Ｘ２−Ａｌａ−Ｖａｌ−Ｘ３−Ｘ４−Ｔｙｒ−Ｌｅｕ−Ｘ５−Ｘ６                    （Ｉ）
（式中、Ｘ１、Ｘ３およびＸ４は、それぞれＬｙｓまたはＡｒｇ；Ｘ２はＭｅｔ、ＬｅｕまたはｎＬｅｕ；Ｘ５は化学結合、Ａｓｎ、Ａｓｎ−Ｓｅｒ、Ａｓｎ−Ｓｅｒ−Ｉｌｅ、Ａｓｎ−Ｓｅｒ−Ｉｌｅ−ＬｅｕまたはＡｓｎ−Ｓｅｒ−Ｉｌｅ−Ｌｅｕ−Ａｓｎ−Ｘ７（Ｘ７は化学結合、Ｇｌｙ、Ｇｌｙ−Ｌｙｓ、Ｇｌｙ−Ｌｙｓ−Ａｒｇ、Ｇｌｙ−ＡｒｇまたはＧｌｙ−Ａｒｇ−Ａｒｇを示す。）；Ｘ６は−ＯＨまたは−ＮＨ２を示すが、Ｘ１、Ｘ３およびＸ４がＬｙｓ、Ｘ５がＡｓｎ−Ｓｅｒ−Ｉｌｅ−Ｌｅｕ−Ａｓｎ−Ｘ７、Ｘ７が化学結合、Ｘ６が−ＮＨ２の時は、Ｘ２はＬｅｕまたはｎＬｅｕを示す。）で表されるペプチドまたはその製薬学的に許容される塩および製剤上許容される担体を含有するドライアイまたはドライアイを伴う疾病の治療用医薬組成物。
【請求項９】
一般式（Ｉ）において、Ｘ５がＡｓｎ−Ｓｅｒ−Ｉｌｅ−Ｌｅｕ−Ａｓｎ−Ｘ７であり、Ｘ７がＧｌｙ、Ｇｌｙ−Ｌｙｓ、Ｇｌｙ−Ｌｙｓ−Ａｒｇ、Ｇｌｙ−ＡｒｇまたはＧｌｙ−Ａｒｇ−Ａｒｇである請求の範囲８記載の医薬組成物。
【請求項１０】
一般式（Ｉ）において、Ｘ５が化学結合、Ａｓｎ、Ａｓｎ−Ｓｅｒ、Ａｓｎ−Ｓｅｒ−Ｉｌｅ、Ａｓｎ−Ｓｅｒ−Ｉｌｅ−ＬｅｕまたはＡｓｎ−Ｓｅｒ−Ｉｌｅ−Ｌｅｕ−Ａｓｎ−Ｘ７（Ｘ７は化学結合）である請求の範囲８記載の医薬組成物。
【請求項１１】
一般式（Ｉ）において、Ｘ１、Ｘ３およびＸ４がＡｒｇ、Ｘ２がＬｅｕ、Ｘ５がＡｓｎ−Ｓｅｒ−Ｉｌｅ−Ｌｅｕ−Ａｓｎ−Ｘ７、Ｘ７がＧｌｙ−Ａｒｇ−Ａｒｇ、Ｘ６が−ＮＨ２である請求の範囲８記載の医薬組成物。
【請求項１２】
一般式（Ｉ）において、Ｘ１、Ｘ３およびＸ４がＬｙｓ、Ｘ２がＬｅｕ、Ｘ５が化学結合、Ｘ６が−ＮＨ２である請求の範囲８記載の医薬組成物。
【請求項１３】
眼局所投与用組成物である請求の範囲８〜１２のいずれかに記載の医薬組成物。
【請求項１４】
眼局所投与用組成物が点眼剤である請求の範囲１３記載の医薬組成物。
【請求項１５】
ドライアイまたはドライアイを伴う疾病の治療用医薬を製造するための一般式（Ｉ）
Ｈ−Ｈｉｓ−Ｓｅｒ−Ａｓｐ−Ａｌａ−Ｖａｌ−Ｐｈｅ−Ｔｈｒ−Ａｓｐ−Ａｓｎ−Ｔｙｒ−Ｔｈｒ−Ａｒｇ−Ｌｅｕ−Ａｒｇ−Ｘ１−Ｇｌｎ−Ｘ２−Ａｌａ−Ｖａｌ−Ｘ３−Ｘ４−Ｔｙｒ−Ｌｅｕ−Ｘ５−Ｘ６                    （Ｉ）
（式中、Ｘ１、Ｘ３およびＸ４は、それぞれＬｙｓまたはＡｒｇ；Ｘ２はＭｅｔ、ＬｅｕまたはｎＬｅｕ；Ｘ５は化学結合、Ａｓｎ、Ａｓｎ−Ｓｅｒ、Ａｓｎ−Ｓｅｒ−Ｉｌｅ、Ａｓｎ−Ｓｅｒ−Ｉｌｅ−ＬｅｕまたはＡｓｎ−Ｓｅｒ−Ｉｌｅ−Ｌｅｕ−Ａｓｎ−Ｘ７（Ｘ７は化学結合、Ｇｌｙ、Ｇｌｙ−Ｌｙｓ、Ｇｌｙ−Ｌｙｓ−Ａｒｇ、Ｇｌｙ−ＡｒｇまたはＧｌｙ−Ａｒｇ−Ａｒｇを示す。）；Ｘ６は−ＯＨまたは−ＮＨ２を示すが、Ｘ１、Ｘ３およびＸ４がＬｙｓ、Ｘ５がＡｓｎ−Ｓｅｒ−Ｉｌｅ−Ｌｅｕ−Ａｓｎ−Ｘ７、Ｘ７が化学結合、Ｘ６が−ＮＨ２の時は、Ｘ２はＬｅｕまたはｎＬｅｕを示す。）で表されるペプチドまたはその製薬学的に許容される塩の使用。
【請求項１６】
一般式（Ｉ）において、Ｘ５がＡｓｎ−Ｓｅｒ−Ｉｌｅ−Ｌｅｕ−Ａｓｎ−Ｘ７であり、Ｘ７がＧｌｙ、Ｇｌｙ−Ｌｙｓ、Ｇｌｙ−Ｌｙｓ−Ａｒｇ、Ｇｌｙ−ＡｒｇまたはＧｌｙ−Ａｒｇ−Ａｒｇである請求の範囲１５記載の使用。
【請求項１７】
一般式（Ｉ）において、Ｘ５が化学結合、Ａｓｎ、Ａｓｎ−Ｓｅｒ、Ａｓｎ−Ｓｅｒ−Ｉｌｅ、Ａｓｎ−Ｓｅｒ−Ｉｌｅ−ＬｅｕまたはＡｓｎ−Ｓｅｒ−Ｉｌｅ−Ｌｅｕ−Ａｓｎ−Ｘ７（Ｘ７は化学結合）である請求の範囲１５記載の使用。
【請求項１８】
一般式（Ｉ）において、Ｘ１、Ｘ３およびＸ４がＡｒｇ、Ｘ２がＬｅｕ、Ｘ５がＡｓｎ−Ｓｅｒ−Ｉｌｅ−Ｌｅｕ−Ａｓｎ−Ｘ７、Ｘ７がＧｌｙ−Ａｒｇ−Ａｒｇ、Ｘ６が−ＮＨ２である請求の範囲１５記載の使用。
【請求項１９】
一般式（Ｉ）において、Ｘ１、Ｘ３およびＸ４がＬｙｓ、Ｘ２がＬｅｕ、Ｘ５が化学結合、Ｘ６が−ＮＨ２である請求の範囲１５記載の使用。
【請求項２０】
医薬が眼局所投与用医薬である請求の範囲１５〜１９のいずれかに記載の使用。
【請求項２１】
眼局所投与用医薬が点眼剤である請求の範囲２０記載の使用。
【請求項２２】
一般式（Ｉ）
Ｈ−Ｈｉｓ−Ｓｅｒ−Ａｓｐ−Ａｌａ−Ｖａｌ−Ｐｈｅ−Ｔｈｒ−Ａｓｐ−Ａｓｎ−Ｔｙｒ−Ｔｈｒ−Ａｒｇ−Ｌｅｕ−Ａｒｇ−Ｘ１−Ｇｌｎ−Ｘ２−Ａｌａ−Ｖａｌ−Ｘ３−Ｘ４−Ｔｙｒ−Ｌｅｕ−Ｘ５−Ｘ６                    （Ｉ）
（式中、Ｘ１、Ｘ３およびＸ４は、それぞれＬｙｓまたはＡｒｇ；Ｘ２はＭｅｔ、ＬｅｕまたはｎＬｅｕ；Ｘ５は化学結合、Ａｓｎ、Ａｓｎ−Ｓｅｒ、Ａｓｎ−Ｓｅｒ−Ｉｌｅ、Ａｓｎ−Ｓｅｒ−Ｉｌｅ−ＬｅｕまたはＡｓｎ−Ｓｅｒ−Ｉｌｅ−Ｌｅｕ−Ａｓｎ−Ｘ７（Ｘ７は化学結合、Ｇｌｙ、Ｇｌｙ−Ｌｙｓ、Ｇｌｙ−Ｌｙｓ−Ａｒｇ、Ｇｌｙ−ＡｒｇまたはＧｌｙ−Ａｒｇ−Ａｒｇを示す。）；Ｘ６は−ＯＨまたは−ＮＨ２を示すが、Ｘ１、Ｘ３およびＸ４がＬｙｓ，Ｘ５がＡｓｎ−Ｓｅｒ−Ｉｌｅ−Ｌｅｕ−Ａｓｎ−Ｘ７、Ｘ７が化学結合、Ｘ６が−ＮＨ２の時は、Ｘ２はＬｅｕまたはｎＬｅｕを示す。）で表されるペプチドまたはその製薬学的に許容される塩の有効量をドライアイまたはドライアイを伴う疾病の治療を必要とする温血動物に投与することを特徴とするドライアイまたはドライアイを伴う疾病の治療方法。
【請求項２３】
一般式（Ｉ）において、Ｘ５がＡｓｎ−Ｓｅｒ−Ｉｌｅ−Ｌｅｕ−Ａｓｎ−Ｘ７であり、Ｘ７がＧｌｙ、Ｇｌｙ−Ｌｙｓ、Ｇｌｙ−Ｌｙｓ−Ａｒｇ、Ｇｌｙ−ＡｒｇまたはＧｌｙ−Ａｒｇ−Ａｒｇである請求の範囲２２記載の治療方法。
【請求項２４】
一般式（Ｉ）において、Ｘ５が化学結合、Ａｓｎ、Ａｓｎ−Ｓｅｒ、Ａｓｎ−Ｓｅｒ−Ｉｌｅ、Ａｓｎ−Ｓｅｒ−Ｉｌｅ−ＬｅｕまたはＡｓｎ−Ｓｅｒ−Ｉｌｅ−Ｌｅｕ−Ａｓｎ−Ｘ７（Ｘ７は化学結合）である請求の範囲２２記載の治療方法。
【請求項２５】
一般式（Ｉ）において、Ｘ１、Ｘ３およびＸ４がＡｒｇ、Ｘ２がＬｅｕ、Ｘ５がＡｓｎ−Ｓｅｒ−Ｉｌｅ−Ｌｅｕ−Ａｓｎ−Ｘ７、Ｘ７がＧｌｙ−Ａｒｇ−Ａｒｇ、Ｘ６が−ＮＨ２である請求の範囲２２記載の治療方法。
【請求項２６】
一般式（Ｉ）において、Ｘ１、Ｘ３およびＸ４がＬｙｓ、Ｘ２がＬｅｕ、Ｘ５が化学結合、Ｘ６が−ＮＨ２である請求の範囲２２記載の治療方法。
【発明の詳細な説明】
技術分野
本発明はドライアイおよびドライアイを伴う疾病の治療剤に関する。
背景技術
涙液は正常な視覚機能を維持するために重要な役割を果たしている。涙液は角結膜の表面を覆い、その湿潤性を保つとともに、角膜表面の微絨毛による陥凹を涙液が満たして表面を平滑にするので鮮明な像を得ることが可能となる。また、角結膜の上皮細胞は活発に代謝を行ない、その最表面から不要となった細胞や代謝産物が脱落排出されているが、涙液はそれらを洗い流す一方で、必要な酸素や栄養分を供給している。さらに、涙液は角結膜表面に混入した異物を洗い流し、外界から進入したウイルス、細菌、真菌などに対しては涙液の静菌作用によって感染防御の役割を担っている。また、眼瞼と角結膜との間の滑液として瞬目や眼球運動がスムーズに行われるにように働いている。このように涙液は角結膜表面にわずかな薄膜を形成する微量の液体であるが、さまざまの精巧な仕組みにより角膜の透明性や恒常性の維持に欠かすことができないものである。
涙液の分泌障害により角結膜表面に異常を生じた状態を一般にドライアイというが、ドライアイによる角結膜障害が起こった場合、人工涙液の補給、ヒアルロン酸などの保湿性の高い粘弾性物質の点眼、眼表面を湿潤に保って乾燥症状の軽減を図るドライアイ用眼鏡の使用などが処置されている。しかしながら、これらの対症療法によって症状を軽減することはできるが、根本的に治療するための原因療法とはならない。涙液には先に述べたようにその本来の機能によりドライアイによる角結膜障害を治癒する効果があると考えられるので、涙腺に直接作用し、涙液分泌を促進する化合物を創製することは、ドライアイおよびドライアイを伴なう疾病に対して有用な治療剤となることが期待される。
涙腺は副交感神経および交感神経により支配されており、前者が優勢である。副交感神経はアセチルコリンとＶＩＰ（血管作動性腸管ペプチド；Ｖａｓｏａｃｔｉｖｅ  Ｉｎｔｅｓｔｉｎａｌ  Ｐｅｐｔｉｄｅ）を分泌し、一方、交感神経はノルエピネフリンとニューロペプチドＹを分泌する。主としてアセチルコリン、ノルエピネフリンおよびＶＩＰが涙腺を刺激する（Ｄａｒｔｔ  ＤＡ  ｅｔ  ａｌ．，Ａｄｖ  Ｅｘｐ  Ｍｅｄ  Ｂｉｏｌ  ４３８：１１３−１２１，１９９８年）。アセチルコリンはムスカリン性コリン作動性経路を活性化し、涙液分泌にも関与することが示されている（Ｎａｋａｍｕｒａ  Ｍ  ｅｔ  ａｌ．，Ｃｕｒｒ  Ｅｙｅ  Ｒｅｓ  １６：６１４−６１９，１９９７年）。ノルエピネフリンはアドレナリンαおよびβ受容体に結合する交感神経作動性アミンであり、α１アドレナリン受容体を介して涙液タンパク質を分泌させる（Ｄａｒｔｔ  ＤＡ，Ｃｕｒｒ  Ｅｙｅ  Ｒｅｓ  ８：６１９−６３６，１９８９年）。ＶＩＰは消化管や血管の平滑筋を弛緩させる多彩な生物学的活性を有するペプチドであり、このＶＩＰの受容体が涙腺に存在し（Ｈｏｄｇｅｓ  ＲＲ  ｅｔ  ａｌ．，Ｉｎｖｅｓｔ  Ｏｐｈｔｈａｌｍｏｌ  Ｖｉｓ  Ｓｃｉ  ３８：６１０−６１９，１９９７年）、実際に涙腺からのタンパク質分泌を促進させることが報告されている（Ｄａｒｔｔ  ＤＡ  ｅｔ  ａｌ．，Ａｍ  Ｊ  Ｐｈｙｓｉｏｌ  ２４７：Ｇ５０２−５０９，１９８４年）。
以上、ムスカリン、ノルエピネフリンあるいはＶＩＰなどの受容体が涙腺に分布すること、さらに涙液分泌との関係が示されてきたが、これらの生理活性成分は涙液分泌促進作用に基づくドライアイの予防治療剤として、いまだ実用化されていないのが現状である。ＶＩＰについては、局所投与することにより涙液分泌を促進させる方法が米国特許第４７４５１００号に開示されているが、それにはＶＩＰ誘導体については何ら具体的に記載されていない。また、ＶＩＰ誘導体として優れた気管支拡張作用および消化管運動抑制作用を示すペプチドが、それぞれ特開平８−３３３２７６号および特開２００１−１５１７９９号に開示されているが、これらには涙液分泌やドライアイに関する記載は一切認められない。
発明の目的
本発明の目的は、涙液分泌を促進させることにより、ドライアイおよびドライアイを伴なう疾病の治療剤を提供することにある。
発明の概要
本発明者らは、ＶＩＰのもつ涙液分泌促進作用に注目して鋭意探究を重ねた結果、特開平８−３３３２７６号や特開２００１−１５１７９９号に示されるＶＩＰ誘導体が優れた涙液分泌促進作用を有することを見出し、さらに研究を進めて本発明を完成するに至った。
すなわち、本発明は、
（１）一般式（Ｉ）
Ｈ−Ｈｉｓ−Ｓｅｒ−Ａｓｐ−Ａｌａ−Ｖａｌ−Ｐｈｅ−Ｔｈｒ−Ａｓｐ−Ａｓｎ−Ｔｙｒ−Ｔｈｒ−Ａｒｇ−Ｌｅｕ−Ａｒｇ−Ｘ１−Ｇｌｎ−Ｘ２−Ａｌａ−Ｖａｌ−Ｘ３−Ｘ４−Ｔｙｒ−Ｌｅｕ−Ｘ５−Ｘ６                    （Ｉ）
（式中、Ｘ１、Ｘ３およびＸ４は、それぞれＬｙｓまたはＡｒｇ；Ｘ２はＭｅｔ、ＬｅｕまたはｎＬｅｕ；Ｘ５は化学結合、Ａｓｎ、Ａｓｎ−Ｓｅｒ、Ａｓｎ−Ｓｅｒ−Ｉｌｅ、Ａｓｎ−Ｓｅｒ−Ｉｌｅ−ＬｅｕまたはＡｓｎ−Ｓｅｒ−Ｉｌｅ−Ｌｅｕ−Ａｓｎ−Ｘ７（Ｘ７は化学結合、Ｇｌｙ、Ｇｌｙ−Ｌｙｓ、Ｇｌｙ−Ｌｙｓ−Ａｒｇ、Ｇｌｙ−ＡｒｇまたはＧｌｙ−Ａｒｇ−Ａｒｇを示す。）；Ｘ６は−ＯＨまたは−ＮＨ２を示すが、Ｘ１、Ｘ３およびＸ４がＬｙｓ，Ｘ５がＡｓｎ−Ｓｅｒ−Ｉｌｅ−Ｌｅｕ−Ａｓｎ−Ｘ７、Ｘ７が化学結合、Ｘ６が−ＮＨ２の時は、Ｘ２はＬｅｕまたはｎＬｅｕを示す。）で表されるペプチドまたはその製薬学的に許容される塩を含有するドライアイまたはドライアイを伴う疾病の治療剤；
（２）一般式（Ｉ）において、Ｘ５がＡｓｎ−Ｓｅｒ−Ｉｌｅ−Ｌｅｕ−Ａｓｎ−Ｘ７であり、Ｘ７がＧｌｙ、Ｇｌｙ−Ｌｙｓ、Ｇｌｙ−Ｌｙｓ−Ａｒｇ、Ｇｌｙ−ＡｒｇまたはＧｌｙ−Ａｒｇ−Ａｒｇである前記（１）記載の治療剤；
（３）一般式（Ｉ）において、Ｘ５が化学結合、Ａｓｎ、Ａｓｎ−Ｓｅｒ、Ａｓｎ−Ｓｅｒ−Ｉｌｅ、Ａｓｎ−Ｓｅｒ−Ｉｌｅ−ＬｅｕまたはＡｓｎ−Ｓｅｒ−Ｉｌｅ−Ｌｅｕ−Ａｓｎ−Ｘ７（Ｘ７は化学結合）である前記（１）記載の治療剤；
（４）一般式（Ｉ）において、Ｘ１、Ｘ３およびＸ４がＡｒｇ、Ｘ２がＬｅｕ、Ｘ５がＡｓｎ−Ｓｅｒ−Ｉｌｅ−Ｌｅｕ−Ａｓｎ−Ｘ７、Ｘ７がＧｌｙ−Ａｒｇ−Ａｒｇ、Ｘ６が−ＮＨ２である前記（１）記載の治療剤；
（５）一般式（Ｉ）において、Ｘ１、Ｘ３およびＸ４がＬｙｓ、Ｘ２がＬｅｕ、Ｘ５が化学結合、Ｘ６が−ＮＨ２である前記（１）記載の治療剤；
（６）眼局所投与剤である前記（１）〜（５）のいずれかに記載の治療剤；
（７）眼局所投与剤が点眼剤である前記（６）記載の治療剤；
（８）一般式（Ｉ）
Ｈ−Ｈｉｓ−Ｓｅｒ−Ａｓｐ−Ａｌａ−Ｖａｌ−Ｐｈｅ−Ｔｈｒ−Ａｓｐ−Ａｓｎ−Ｔｙｒ−Ｔｈｒ−Ａｒｇ−Ｌｅｕ−Ａｒｇ−Ｘ１−Ｇｌｎ−Ｘ２−Ａｌａ−Ｖａｌ−Ｘ３−Ｘ４−Ｔｙｒ−Ｌｅｕ−Ｘ５−Ｘ６                    （Ｉ）
（式中、Ｘ１、Ｘ３およびＸ４は、それぞれＬｙｓまたはＡｒｇ；Ｘ２はＭｅｔ、ＬｅｕまたはｎＬｅｕ；Ｘ５は化学結合、Ａｓｎ、Ａｓｎ−Ｓｅｒ、Ａｓｎ−Ｓｅｒ−Ｉｌｅ、Ａｓｎ−Ｓｅｒ−Ｉｌｅ−ＬｅｕまたはＡｓｎ−Ｓｅｒ−Ｉｌｅ−Ｌｅｕ−Ａｓｎ−Ｘ７（Ｘ７は化学結合、Ｇｌｙ、Ｇｌｙ−Ｌｙｓ、Ｇｌｙ−Ｌｙｓ−Ａｒｇ、Ｇｌｙ−ＡｒｇまたはＧｌｙ−Ａｒｇ−Ａｒｇを示す。）；Ｘ６は−ＯＨまたは−ＮＨ２を示すが、Ｘ１、Ｘ３およびＸ４がＬｙｓ、Ｘ５がＡｓｎ−Ｓｅｒ−Ｉｌｅ−Ｌｅｕ−Ａｓｎ−Ｘ７、Ｘ７が化学結合、Ｘ６が−ＮＨ２の時は、Ｘ２はＬｅｕまたはｎＬｅｕを示す。）で表されるペプチドまたはその製薬学的に許容される塩および製剤上許容される担体を含有するドライアイまたはドライアイを伴う疾病の治療用医薬組成物；
（９）一般式（Ｉ）において、Ｘ５がＡｓｎ−Ｓｅｒ−Ｉｌｅ−Ｌｅｕ−Ａｓｎ−Ｘ７であり、Ｘ７がＧｌｙ、Ｇｌｙ−Ｌｙｓ、Ｇｌｙ−Ｌｙｓ−Ａｒｇ、Ｇｌｙ−ＡｒｇまたはＧｌｙ−Ａｒｇ−Ａｒｇである前記（８）記載の医薬組成物；
（１０）一般式（Ｉ）において、Ｘ５が化学結合、Ａｓｎ、Ａｓｎ−Ｓｅｒ、Ａｓｎ−Ｓｅｒ−Ｉｌｅ、Ａｓｎ−Ｓｅｒ−Ｉｌｅ−ＬｅｕまたはＡｓｎ−Ｓｅｒ−Ｉｌｅ−Ｌｅｕ−Ａｓｎ−Ｘ７（Ｘ７は化学結合）である前記（８）記載の医薬組成物；
（１１）一般式（Ｉ）において、Ｘ１、Ｘ３およびＸ４がＡｒｇ、Ｘ２がＬｅｕ、Ｘ５がＡｓｎ−Ｓｅｒ−Ｉｌｅ−Ｌｅｕ−Ａｓｎ−Ｘ７、Ｘ７がＧｌｙ−Ａｒｇ−Ａｒｇ、Ｘ６が−ＮＨ２である前記（８）記載の医薬組成物；
（１２）一般式（Ｉ）において、Ｘ１、Ｘ３およびＸ４がＬｙｓ、Ｘ２がＬｅｕ、Ｘ５が化学結合、Ｘ６が−ＮＨ２である前記（８）記載の医薬組成物；
（１３）眼局所投与用組成物である前記（８）〜（１２）のいずれかに記載の医薬組成物；
（１４）眼局所投与用組成物が点眼剤である前記（１３）記載の医薬組成物；
（１５）ドライアイまたはドライアイを伴う疾病の治療用医薬を製造するための一般式（Ｉ）
Ｈ−Ｈｉｓ−Ｓｅｒ−Ａｓｐ−Ａｌａ−Ｖａｌ−Ｐｈｅ−Ｔｈｒ−Ａｓｐ−Ａｓｎ−Ｔｙｒ−Ｔｈｒ−Ａｒｇ−Ｌｅｕ−Ａｒｇ−Ｘ１−Ｇｌｎ−Ｘ２−Ａｌａ−Ｖａｌ−Ｘ３−Ｘ４−Ｔｙｒ−Ｌｅｕ−Ｘ５−Ｘ６                    （Ｉ）
（式中、Ｘ１、Ｘ３およびＸ４は、それぞれＬｙｓまたはＡｒｇ；Ｘ２はＭｅｔ、ＬｅｕまたはｎＬｅｕ；Ｘ５は化学結合、Ａｓｎ、Ａｓｎ−Ｓｅｒ、Ａｓｎ−Ｓｅｒ−Ｉｌｅ、Ａｓｎ−Ｓｅｒ−Ｉｌｅ−ＬｅｕまたはＡｓｎ−Ｓｅｒ−Ｉｌｅ−Ｌｅｕ−Ａｓｎ−Ｘ７（Ｘ７は化学結合、Ｇｌｙ、Ｇｌｙ−Ｌｙｓ、Ｇｌｙ−Ｌｙｓ−Ａｒｇ、Ｇｌｙ−ＡｒｇまたはＧｌｙ−Ａｒｇ−Ａｒｇを示す。）；Ｘ６は−ＯＨまたは−ＮＨ２を示すが、Ｘ１、Ｘ３およびＸ４がＬｙｓ、Ｘ５がＡｓｎ−Ｓｅｒ−Ｉｌｅ−Ｌｅｕ−Ａｓｎ−Ｘ７、Ｘ７が化学結合、Ｘ６が−ＮＨ２の時は、Ｘ２はＬｅｕまたはｎＬｅｕを示す。）で表されるペプチドまたはその製薬学的に許容される塩の使用；
（１６）一般式（Ｉ）において、Ｘ５がＡｓｎ−Ｓｅｒ−Ｉｌｅ−Ｌｅｕ−Ａｓｎ−Ｘ７であり、Ｘ７がＧｌｙ、Ｇｌｙ−Ｌｙｓ、Ｇｌｙ−Ｌｙｓ−Ａｒｇ、Ｇｌｙ−ＡｒｇまたはＧｌｙ−Ａｒｇ−Ａｒｇである前記（１５）記載の使用；
（１７）一般式（Ｉ）において、Ｘ５が化学結合、Ａｓｎ、Ａｓｎ−Ｓｅｒ、Ａｓｎ−Ｓｅｒ−Ｉｌｅ、Ａｓｎ−Ｓｅｒ−Ｉｌｅ−ＬｅｕまたはＡｓｎ−Ｓｅｒ−Ｉｌｅ−Ｌｅｕ−Ａｓｎ−Ｘ７（Ｘ７は化学結合）である前記（１５）記載の使用；
（１８）一般式（Ｉ）において、Ｘ１、Ｘ３およびＸ４がＡｒｇ、Ｘ２がＬｅｕ、Ｘ５がＡｓｎ−Ｓｅｒ−Ｉｌｅ−Ｌｅｕ−Ａｓｎ−Ｘ７、Ｘ７がＧｌｙ−Ａｒｇ−Ａｒｇ、Ｘ６が−ＮＨ２である前記（１５）記載の使用；
（１９）一般式（Ｉ）において、Ｘ１、Ｘ３およびＸ４がＬｙｓ、Ｘ２がＬｅｕ、Ｘ５が化学結合、Ｘ６が−ＮＨ２である前記（１５）記載の使用；
（２０）医薬が眼局所投与用医薬である前記（１５）〜（１９）のいずれかに記載の使用；
（２１）眼局所投与用医薬が点眼剤である前記（２０）記載の使用；
（２２）一般式（Ｉ）
Ｈ−Ｈｉｓ−Ｓｅｒ−Ａｓｐ−Ａｌａ−Ｖａｌ−Ｐｈｅ−Ｔｈｒ−Ａｓｐ−Ａｓｎ−Ｔｙｒ−Ｔｈｒ−Ａｒｇ−Ｌｅｕ−Ａｒｇ−Ｘ１−Ｇｌｎ−Ｘ２−Ａｌａ−Ｖａｌ−Ｘ３−Ｘ４−Ｔｙｒ−Ｌｅｕ−Ｘ５−Ｘ６                    （Ｉ）
（式中、Ｘ１、Ｘ３およびＸ４は、それぞれＬｙｓまたはＡｒｇ；Ｘ２はＭｅｔ、ＬｅｕまたはｎＬｅｕ；Ｘ５は化学結合、Ａｓｎ、Ａｓｎ−Ｓｅｒ、Ａｓｎ−Ｓｅｒ−Ｉｌｅ、Ａｓｎ−Ｓｅｒ−Ｉｌｅ−ＬｅｕまたはＡｓｎ−Ｓｅｒ−Ｉｌｅ−Ｌｅｕ−Ａｓｎ−Ｘ７（Ｘ７は化学結合、Ｇｌｙ、Ｇｌｙ−Ｌｙｓ、Ｇｌｙ−Ｌｙｓ−Ａｒｇ、Ｇｌｙ−ＡｒｇまたはＧｌｙ−Ａｒｇ−Ａｒｇを示す。）；Ｘ６は−ＯＨまたは−ＮＨ２を示すが、Ｘ１、Ｘ３およびＸ４がＬｙｓ，Ｘ５がＡｓｎ−Ｓｅｒ−Ｉｌｅ−Ｌｅｕ−Ａｓｎ−Ｘ７、Ｘ７が化学結合、Ｘ６が−ＮＨ２の時は、Ｘ２はＬｅｕまたはｎＬｅｕを示す。）で表されるペプチドまたはその製薬学的に許容される塩の有効量をドライアイまたはドライアイを伴う疾病の治療を必要とする温血動物に投与することを特徴とするドライアイまたはドライアイを伴う疾病の治療方法；
（２３）一般式（Ｉ）において、Ｘ５がＡｓｎ−Ｓｅｒ−Ｉｌｅ−Ｌｅｕ−Ａｓｎ−Ｘ７であり、Ｘ７がＧｌｙ、Ｇｌｙ−Ｌｙｓ、Ｇｌｙ−Ｌｙｓ−Ａｒｇ、Ｇｌｙ−ＡｒｇまたはＧｌｙ−Ａｒｇ−Ａｒｇである前記（２２）記載の治療方法；
（２４）一般式（Ｉ）において、Ｘ５が化学結合、Ａｓｎ、Ａｓｎ−Ｓｅｒ、Ａｓｎ−Ｓｅｒ−Ｉｌｅ、Ａｓｎ−Ｓｅｒ−Ｉｌｅ−ＬｅｕまたはＡｓｎ−Ｓｅｒ−Ｉｌｅ−Ｌｅｕ−Ａｓｎ−Ｘ７（Ｘ７は化学結合）である前記（２２）記載の治療方法；
（２５）一般式（Ｉ）において、Ｘ１、Ｘ３およびＸ４がＡｒｇ、Ｘ２がＬｅｕ、Ｘ５がＡｓｎ−Ｓｅｒ−Ｉｌｅ−Ｌｅｕ−Ａｓｎ−Ｘ７、Ｘ７がＧｌｙ−Ａｒｇ−Ａｒｇ、Ｘ６が−ＮＨ２である前記（２２）記載の治療方法；および
（２６）一般式（Ｉ）において、Ｘ１、Ｘ３およびＸ４がＬｙｓ、Ｘ２がＬｅｕ、Ｘ５が化学結合、Ｘ６が−ＮＨ２である前記（２２）記載の治療方法を提供するものである。
発明の詳細な説明
本発明のドライアイおよびドライアイを伴なう疾病の治療に用いられるＶＩＰ誘導体は、一般式（Ｉ）で示されるペプチドであり、Ｘ１、Ｘ３およびＸ４はＬｙｓまたはＡｒｇである。Ｘ２はＭｅｔ、ＬｅｕまたはｎＬｅｕであるが、Ｌｅｕがより好ましい。Ｘ５は化学結合、Ａｓｎ、Ａｓｎ−Ｓｅｒ、Ａｓｎ−Ｓｅｒ−Ｉｌｅ、Ａｓｎ−Ｓｅｒ−Ｉｌｅ−ＬｅｕまたはＡｓｎ−Ｓｅｒ−Ｉｌｅ−Ｌｅｕ−Ａｓｎ−Ｘ７をとりうるが、好ましくは化学結合またはＡｓｎ−Ｓｅｒ−Ｉｌｅ−Ｌｅｕ−Ａｓｎ−Ｘ７である。Ｘ５がＡｓｎ−Ｓｅｒ−Ｉｌｅ−Ｌｅｕ−Ａｓｎ−Ｘ７の時、Ｘ７は化学結合、Ｇｌｙ、Ｇｌｙ−Ｌｙｓ、Ｇｌｙ−Ｌｙｓ−Ａｒｇ、Ｇｌｙ−ＡｒｇまたはＧｌｙ−Ａｒｇ−Ａｒｇであるが、Ｇｌｙ−Ａｒｇ−Ａｒｇが最も好ましい。Ｘ６は−ＯＨまたは−ＮＨ２であるが、−ＮＨ２がより好ましい。
本発明の一般式（Ｉ）のＶＩＰ誘導体の代表例としては、例えば、表１の１〜２５のペプチド（各々ペプチド１〜２５と称する）などが挙げられる。これらは後記配列表の配列番号１〜２５に対応するペプチドである。とりわけ、ペプチド５およびペプチド１５が有利に使用される。
ペプチド１〜２５（配列表に示した配列番号１〜２５に対応する）
Ｈ−Ｈｉｓ−Ｓｅｒ−Ａｓｐ−Ａｌａ−Ｖａｌ−Ｐｈｅ−Ｔｈｒ−Ａｓｐ−Ａｓｎ−Ｔｙｒ−Ｔｈｒ−Ａｒｇ−Ｌｅｕ−Ａｒｇ−Ｘ１−Ｇｌｎ−Ｘ２−Ａｌａ−Ｖａｌ−Ｘ３−Ｘ４−Ｔｙｒ−Ｌｅｕ−Ｘ５（−Ｘ７）−Ｘ６          （Ｉ）
2003039577.tif 000003
一般式（Ｉ）の化合物の製薬学的に許容される塩としては、ナトリウム、カリウム等のアルカリ金属との塩、カルシウム、マグネシウム等のアルカリ土類金属との塩、アルミニウム塩、アンモニウム塩等の無機塩基との塩；トリメチルアミン、ピリジン、ピコリン、エタノールアミン、ジエタノールアミン、トリエタノールアミン、ジシクロヘキシルアミン、Ｎ，Ｎ−ジベンジルエチレンジアミン等の有機塩基との塩；塩酸、臭化水素酸、硝酸、硫酸、リン酸等の無機酸との塩；ギ酸、酢酸、トリフルオロ酢酸、フマール酸、シュウ酸、酒石酸、乳酸、マレイン酸、クエン酸、コハク酸、リンゴ酸、メタンスルホン酸、ベンゼンスルホン酸、ｐ−トルエンスルホン酸等の有機酸との塩；およびタンニン酸、カルボキシメチルセルロース、ポリ乳酸、ポリグリコール酸等の重合酸との塩などが挙げられる。
一般式（Ｉ）のＶＩＰ誘導体は、例えば、特開平８−３３３２７６号、特開平９−１００２３７号、特開平１１−１００３９９号、特開２００１−１５１７９９号、特開２００１−２２６２８４号に示されるように、公知のペプチド合成の定法にしたがって合成できる。
一般式（Ｉ）のＶＩＰ誘導体は以下の特性を有する。
まず第一に、生体内における分子の安定性が高い。ペプチドおよび蛋白は生体内においてペプチダーゼによって速やかに代謝されるが、本発明で使用されるＶＩＰ誘導体の中で塩基性を高めたペプチドは代謝に対して抵抗性を示す。すなわち、ＶＩＰを構成するアミノ酸のうち、１５番目、２０番目および２１番目のリジンの１つ以上をアルギニンに置換し、さらに、Ｃ末端側にグリシン残基に続いてリジンまたはアルギニン等の塩基性アミノ酸を付加することにより塩基性が高まるので、生体内に極めて多く存在する酸性多糖類と強い親和性を示す。この性質により、生体内においてトリプシンなどのエンドペプチダーゼによる分解に対する抵抗性が高まっている。例えば、ペプチド５を用いたトリプシン消化試験において、コンドロイチン硫酸存在下でＶＩＰよりも高い残存率を示している（試験例１）。この傾向は気管支肺胞洗浄液を用いたペプチド消化試験においてより明瞭に示され、９０分後のペプチド５の残存率は、ＶＩＰのそれの約１．８倍である（試験例２）。以上のような生体内における優れた安定性により、これら高塩基性のＶＩＰ誘導体は薬理作用が長く持続する。また、眼局所に適用する場合、点眼後に酵素分解を受けにくい点眼製剤として使用できる。例えば、ペプチド５の点眼はＶＩＰよりも涙液分泌促進作用が長く持続することが試験例５に示される。
また、ＶＩＰを構成するアミノ酸残基の中で１７番目のメチオニンは酸化されやすいが、この箇所がロイシンまたはノルロイシンに置換されたＶＩＰ誘導体は酸化に対して抵抗性を示す。したがって、本発明で使用されるＶＩＰ誘導体の中で１７位ロイシン置換ペプチドは酸化されにくく、安定な点眼液として使用できる。
本発明においては、一般式（Ｉ）のＶＩＰ誘導体またはその製薬学的に許容される塩（以下、「ＶＩＰ誘導体」と略記することがある）はドライアイおよびドライアイを伴なう疾病の治療剤（以下、「ドライアイ治療剤」と略記することがある）として全身的または局所的に投与される。全身的には非経口的（静脈内注射、皮下注射、筋肉内注射など注射剤として、また、坐剤として投与される）および経口的に投与される。局所的には皮膚、眼局所などに投与される。
製剤形態として、非経口的に投与される製剤としては、注射剤、坐剤などが挙げられる。注射剤として処方される場合、例えば、溶剤（注射用蒸留水など）、安定化剤（エデト酸ナトリウムなど）、等張化剤（塩化ナトリウム、グリセリンおよびマンニトールなどの糖アルコールなど）、ｐＨ調整剤（塩酸、クエン酸、水酸化ナトリウムなど）、懸濁化剤（メチルセルロースなど）を用いることができ、坐剤として処方される場合、例えば、坐剤基剤（カカオ脂、マクロゴールなど）などを適宜に選択して使用することができる。
経口的に投与される製剤としては、例えば、粉末、顆粒、錠剤、カプセル剤、シロップ剤、液剤およびエアゾール剤などが挙げられる。製剤が粉末、顆粒、錠剤などとして処方される場合、固形製剤を処方するのに好適な任意の製薬担体、例えば、賦形剤（澱粉、ブドウ糖、果糖、白糖など）、滑沢剤（ステアリン酸マグネシウムなど）、崩壊剤（澱粉、結晶セルロースなど）、結合剤（澱粉、アラビアゴムなど）などを用いることができ、コーティング剤（ゼラチン、白糖など）でコーティングされていてもよい。また、製剤がシロップや液剤として処方される場合、例えば、安定剤（エデト酸ナトリウムなど）、懸濁化剤（アラビアゴム、カルメロースなど）、矯味剤（単シロップ、ブドウ糖など）、芳香剤などを適宜に選択して使用することができる。
局所用製剤としては、例えば、軟膏、クリーム剤、ローション剤、点鼻剤および眼局所用剤などが挙げられ、眼局所用剤がより好ましい。眼局所用剤としては点眼剤、眼軟膏剤あるいは徐放製剤などが挙げられ、点眼剤がより好ましい。これら局所用製剤には、本発明のＶＩＰ誘導体に加えて、例えば、軟膏基剤（ワセリン、ラノリンなど）、溶剤（生理食塩水、精製水など）、安定剤（エデト酸ナトリウム、クエン酸など）、湿潤剤（グリセリンなど）、乳化剤（ポリビニルピロリドンなど）、懸濁化剤（ヒドロキシプロピルメチルセルロース、ヒドロキシメチルセルロース、メチルセルロースなど）、界面活性剤（ポリソルベート８０、ポリオキシエチレン硬化ヒマシ油など）、保存剤（塩化ベンザルコニウム、パラベン類、クロロブタノールなど）、緩衝剤（ホウ酸、ホウ砂、酢酸ナトリウム、クエン酸緩衝剤、リン酸緩衝剤など）、等張化剤（塩化ナトリウム、グリセリン、マンニトールなど）、ｐＨ調整剤（塩酸、水酸化ナトリウムなど）などの公知の化合物を適宜に選択して使用することができる。
また、眼局所用の徐放製剤としては、コラーゲン等のゲル成形物、ポリ乳酸等の生体分解性高分子等により成形された眼内埋込み製剤や強膜プラグ、あるいは生体非分解性の眼内埋込み製剤などを使用できる。
一般にペプチド類がガラスあるいは樹脂容器に吸着するのを防止する目的で吸着防止成分を利用することができる。ここで利用される吸着防止成分は、保存容器の壁面に疎水結合して吸着を防止する化合物であり、より詳しくは分子内に疎水基を有し、かつ界面活性作用を有する化合物や、陰イオン荷電蛋白質である。前者の例としては、ポリオキシエチレンアルコールエーテル、ポリオキシエチレン脂肪酸エステル、ポリオキシエチレン硬化ヒマシ油、グリセリン脂肪酸エステル、ソルビタン脂肪酸エステル、ポリオキシエチレンソルビタン脂肪酸エステル等が挙げられ、後者の陰イオン荷電蛋白質の例としてはゼラチン、アルブミン、ポリゲニン等が挙げられる。ゼラチンとしては日局精製ゼラチン等を挙げることができるがこれらに限定されるものではない。吸着防止成分としてのゼラチン類は，１種または２種以上を併用して用いてもよい。また、アルブミンとしては、ヒトに対する抗原性のないものが挙げられ、その濃度は、通常、０．０１〜５０ｗ／ｖ％程度、好ましくは０．１〜２．０ｗ／ｖ％程度配合するのがよい。吸着防止成分とペプチド類とを溶解する溶媒としては、注射剤用の溶媒として生理学的に許容されるものであれば、いかなるものをも使用することができるが、好ましいものとしては例えば日局注射用水、生理食塩水などが挙げられる。その他に、容器内壁にシリコンコート等の加工を施すことによっても吸着防止の効果を上げることができる。
本発明のドライアイ治療剤を温血動物（ラット、ウサギ、ネコ、イヌ、ブタ、サル、ヒトなどの哺乳動物やハト、ニワトリ、七面鳥などの鳥類）に投与することにより、涙液の分泌が促進される。本発明のドライアイ治療剤を成人患者に投与する場合、一回あたりの投与量はＶＩＰ誘導体として、注射剤では通常０．００００１〜１００ｍｇ、好ましくは０．０００１〜０．１ｍｇであり、経口投与では通常０．１〜５００ｍｇ、好ましくは１〜２０ｍｇである。また、成人患者の眼に局所的に適用する場合には、通常、ＶＩＰ誘導体を０．００１〜３．０ｗ／ｖ％、好ましくは０．０１〜０．５ｗ／ｖ％に含有する点眼液を、１回２０〜５０μｌ、１日１〜８回点眼するのがよい。
本発明のドライアイ治療剤には、目的と必要に応じて、ＶＩＰ誘導体に他のドライアイ治療用成分を適宜組合わせて含有させることもできる。また、本発明の目的に反しない限り、他の薬効成分と組合せて使用できる。
本発明のドライアイ治療剤は、例えば、涙液減少症、眼乾燥症、シェーグレン症候群、乾性角結膜炎、スティーブンス−ジョンソン症候群、ＶＤＴ（Ｖｉｓｕａｌ  Ｄｉｓｐｌａｙ  Ｔｅｒｍｉｎａｌ）作業に関連したドライアイ等のドライアイの治療に用いられる。さらに、角結膜上皮障害、角膜上皮糜爛、角膜潰瘍、眼瞼縁炎、眼類天疱瘡、春季カタル、アレルギー性結膜炎などドライアイを伴なう疾病の治療剤としても有用である。
実施例
以下に、合成例、製剤例および試験例を挙げて本発明をさらに詳しく説明するが、本発明はこれらに限定されるものではない。
以下の合成例で用いた略称の意味は以下の通りである。
ＭＢＨＡ：ｐメチルベンズヒドリルアミン
ＭｅＯＨ：メタノール
Ｂｏｃ：ｔ−ブトキシカルボニル基
ＴＦＡ：トリフルオロ酢酸
ＴＥＡ：トリエチルアミン
Ｃｌ２−Ｂｚｌ：ジクロロベンジル基
Ｃｌ−Ｚ：クロロベンジルオキシカルボニル基
Ｘａｎ：キサンチル基
Ｔｏｓ：ｐ−トルエンスルホニル基
Ｂｚｌ：ベンジル基
ＯｃＨｅｘ：Ｏ−シクロヘキシル基
Ｂｏｍ：ベンジルオキシメチル基
ＤＣＣ：ジシクロヘキシルカルボジイミド
（合成例１）ペプチド５の製造
配列番号５に示すアミノ酸配列を有するペプチド５をペプチド固相合成の常法に従い製造した。
ＭＢＨＡ樹脂  ＨＣｌ塩（ｐｏｌｙｓｔｙｒｅｎｅ−１％  ｄｉｖｉｎｙｌｂｅｎｚｅｎｅ共重合体、１００〜２００メッシュ）をマニュアル合成用反応槽（ガラス製、φ６．０ｘ２９．５ｃｍ）に加え、樹脂容量の２〜３倍量のＭｅＯＨで攪拌洗浄し、次いでＣＨ２Ｃｌ２（樹脂容量の２−３倍量）で攪拌洗浄して樹脂を膨潤させた。１０％トリエチルアミン／ＣＨ２Ｃｌ２にて中和反応を行い、Ｃ末端アミノ酸に相当するＢｏｃ−Ａｒｇ（Ｔｏｓ）−ＯＨを樹脂の約２倍当量用い、ＤＣＣおよびＮ−ｈｙｄｒｏｘｙｂｅｎｚｏｔｒｉａｚｏｌｅを加えて縮合反応を行った。約２時間の反応（攪拌下）後、ＭｅＯＨおよびＣＨ２Ｃｌ２にて洗浄し、カイザー試験にてα−アミノ基の消失を確認後、５０％ＴＦＡ／ＣＨ２Ｃｌ２にて３０分間処理して脱保護を行った。次いで１０％  ＴＥＡ／ＣＨ２Ｃｌ２にて中和し、ＭｅＯＨおよびＣＨ２Ｃｌ２にて再洗浄後、再びカイザー試験を実施して脱保護反応の確認を行った。確認後はＣ末より２番目のＢｏｃ−Ａｒｇ（Ｔｏｓ）−ＯＨのカップリングを行うため、同様の工程を繰り返した。その後、Ｂｏｃ−Ｇｌｙ−ＯＨ、Ｂｏｃ−Ａｓｎ（Ｘａｎ）−ＯＨ、Ｂｏｃ−Ｌｅｕ−ＯＨ、Ｂｏｃ−Ｉｌｅ−ＯＨ、Ｂｏｃ−Ｓｅｒ（Ｂｚｌ）−ＯＨ、Ｂｏｃ−Ａｓｎ（Ｘａｎ）−ＯＨ、Ｂｏｃ−Ｌｅｕ−ＯＨ、Ｂｏｃ−Ｔｙｒ（Ｃｌ２−Ｂｚｌ）−ＯＨ、Ｂｏｃ−Ａｒｇ（Ｔｏｓ）−ＯＨ、Ｂｏｃ−Ａｒｇ（Ｔｏｓ）−ＯＨ、Ｂｏｃ−Ｖａｌ−ＯＨ、Ｂｏｃ−Ａｌａ−ＯＨ、Ｂｏｃ−Ｌｅｕ−ＯＨ、Ｂｏｃ−Ｇｌｎ（Ｘａｎ）−ＯＨ、Ｂｏｃ−Ａｒｇ（Ｔｏｓ）−ＯＨ、Ｂｏｃ−Ａｒｇ（Ｔｏｓ）−ＯＨ、Ｂｏｃ−Ｌｅｕ−ＯＨ、Ｂｏｃ−Ａｒｇ（Ｔｏｓ）−ＯＨ、Ｂｏｃ−Ｔｈｒ（Ｂｚｌ）−ＯＨ、Ｂｏｃ−Ｔｙｒ（Ｃｌ２−Ｂｚｌ）−ＯＨ、Ｂｏｃ−Ａｓｎ（Ｘａｎ）−ＯＨ、Ｂｏｃ−Ａｓｐ（ＯｃＨｅｘ）−ＯＨ、Ｂｏｃ−Ｔｈｒ（Ｂｚｌ）−ＯＨ、Ｂｏｃ−Ｐｈｅ−ＯＨ、Ｂｏｃ−Ｖａｌ−ＯＨ、Ｂｏｃ−Ａｌａ−ＯＨ、Ｂｏｃ−Ａｓｐ（ＯｃＨｅｘ）−ＯＨ、Ｂｏｃ−Ｓｅｒ（Ｂｚｌ）−ＯＨの順に順次カップリング／脱保護を行い、ペプチド５に相当する保護ペプチド樹脂；Ｈｉｓ（Ｂｏｍ）−Ｓｅｒ（Ｂｚｌ）−Ａｓｐ（ＯｃＨｅｘ）−Ａｌａ−Ｖａｌ−Ｐｈｅ−Ｔｈｒ（Ｂｚｌ）−Ａｓｐ（ＯｃＨｅｘ）−Ａｓｎ−Ｔｙｒ（Ｃｌ２−Ｂｚｌ）−Ｔｈｒ（Ｂｚｌ）−Ａｒｇ（Ｔｏｓ）−Ｌｅｕ−Ａｒｇ（Ｔｏｓ）−Ａｒｇ（Ｔｏｓ）−Ｇｌｎ−Ｌｅｕ−Ａｌａ−Ｖａｌ−Ａｒｇ（Ｔｏｓ）−Ａｒｇ（Ｔｏｓ）−Ｔｙｒ（Ｃｌ２−Ｂｚｌ）−Ｌｅｕ−Ａｓｎ−Ｓｅｒ（Ｂｚｌ）−Ｉｌｅ−Ｌｅｕ−Ａｓｎ−Ｇｌｙ−Ａｒｇ（Ｔｏｓ）−Ａｒｇ（Ｔｏｓ）−ＭＢＨＡを得た。
ここで得られた保護ペプチド−ＭＢＨＡ樹脂にアニソール存在下無水フッ化水素１００ｍＬを加えて反応させた。反応後、無水フッ化水素を減圧下留去後、残査をエーテルで洗浄し、これに１０％酢酸を加えてペプチドを抽出した。抽出液を逆相カラムクロマトグラフィー（１０％アセトニトリルと５０％アセトニトリルの間でのステップワイズグラジエント）により精製し、凍結乾燥を行い、ペプチド５を得た。
（合成例２）ペプチド１５の製造
配列番号１５に示すアミノ酸配列を有するペプチド１５を前記ペプチド５の製造方法と同様に合成した．すなわちＭＢＨＡ樹脂に対してＢｏｃ−Ｌｅｕ−ＯＨ、Ｂｏｃ−Ｔｙｒ（Ｃｌ２−Ｂｚｌ）−ＯＨ、Ｂｏｃ−Ｌｙｓ（Ｃｌ−Ｚ）−ＯＨ、Ｂｏｃ−Ｌｙｓ（Ｃｌ−Ｚ）−ＯＨ、Ｂｏｃ−Ｖａｌ−ＯＨ、Ｂｏｃ−Ａｌａ−ＯＨ、Ｂｏｃ−Ｌｅｕ−ＯＨ、Ｂｏｃ−Ｇｌｎ（Ｘａｎ）−ＯＨ、Ｂｏｃ−Ｌｙｓ（Ｃｌ−Ｚ）−ＯＨ、Ｂｏｃ−Ａｒｇ（Ｔｏｓ）−ＯＨ、Ｂｏｃ−Ｌｅｕ−ＯＨ、Ｂｏｃ−Ａｒｇ（Ｔｏｓ）−ＯＨ、Ｂｏｃ−Ｔｈｒ（Ｂｚｌ）−ＯＨ、Ｂｏｃ−Ｔｙｒ（Ｃｌ２−Ｂｚｌ）−ＯＨ、Ｂｏｃ−Ａｓｎ（Ｘａｎ）−ＯＨ、Ｂｏｃ−Ａｓｐ（ＯｃＨｅｘ）−ＯＨ、Ｂｏｃ−Ｔｈｒ（Ｂｚｌ）−ＯＨ、Ｂｏｃ−Ｐｈｅ−ＯＨ、Ｂｏｃ−Ｖａｌ−ＯＨ、Ｂｏｃ−Ａｌａ−ＯＨ、Ｂｏｃ−Ａｓｐ（ＯｃＨｅｘ）−ＯＨ、Ｂｏｃ−Ｓｅｒ（Ｂｚｌ）−ＯＨ、そしてＢｏｃ−Ｈｉｓ（Ｂｏｍ）−ＯＨの順に順次カップリング／脱保護を行い、ペプチド１５に相当する保護ペプチド樹脂；Ｈｉｓ（Ｂｏｍ）−Ｓｅｒ（Ｂｚｌ）−Ａｓｐ（ＯｃＨｅｘ）−Ａｌａ−Ｖａｌ−Ｐｈｅ−Ｔｈｒ（Ｂｚｌ）−Ａｓｐ（ＯｃＨｅｘ）−Ａｓｎ−Ｔｙｒ（Ｃｌ２−Ｂｚｌ）−Ｔｈｒ（Ｂｚｌ）−Ａｒｇ（Ｔｏｓ）−Ｌｅｕ−Ａｒｇ（Ｔｏｓ）−Ｌｙｓ（Ｃｌ−Ｚ）−Ｇｌｎ−Ｌｅｕ−Ａｌａ−Ｖａｌ−Ｌｙｓ（Ｃｌ−Ｚ）−Ｌｙｓ（Ｃｌ−Ｚ）−Ｔｙｒ（Ｃｌ２−Ｂｚｌ）−Ｌｅｕ−ＭＢＨＡを得た。
ここで得られた保護ペプチド−ＭＢＨＡ樹脂にアニソール存在下無水フッ化水素１００ｍＬを加えて反応させた。反応後、無水フッ化水素を減圧下留去後、残査をエーテルで洗浄し、これに１０％酢酸を加えてペプチドを抽出した。抽出液を逆相カラムクロマトグラフィー（１０％アセトニトリルと５０％アセトニトリルの間でのステップワイズグラジエント）により精製し、凍結乾燥を行い、ペプチド１５を得た。
（合成例３）ペプチド１６の製造
配列番号１６に示すアミノ酸配列を有するペプチド１６を前記ペプチド５の製造方法と同様に合成した。すなわち、ＭＢＨＡ樹脂に対してＢｏｃ−Ｌｅｕ−ＯＨ、Ｂｏｃ−Ｉｌｅ−ＯＨ、Ｂｏｃ−Ｓｅｒ（Ｂｚｌ）−ＯＨ、Ｂｏｃ−Ａｓｎ（Ｘａｎ）−ＯＨ、Ｂｏｃ−Ｌｅｕ−ＯＨ、Ｂｏｃ−Ｔｙｒ（Ｃｌ２−Ｂｚｌ）−ＯＨ、Ｂｏｃ−Ａｒｇ（Ｔｏｓ）−ＯＨ、Ｂｏｃ−Ａｒｇ（Ｔｏｓ）−ＯＨ、Ｂｏｃ−Ｖａｌ−ＯＨ，Ｂｏｃ−Ａｌａ−ＯＨ、Ｂｏｃ−Ｍｅｔ−ＯＨ，Ｂｏｃ−Ｇｌｎ（Ｘａｎ）−ＯＨ，Ｂｏｃ−Ａｒｇ（Ｔｏｓ）−ＯＨ、Ｂｏｃ−Ａｒｇ（Ｔｏｓ）−ＯＨ、Ｂｏｃ−Ｌｅｕ−ＯＨ、Ｂｏｃ−Ａｒｇ（Ｔｏｓ）−ＯＨ、Ｂｏｃ−Ｔｈｒ（Ｂｚｌ）−ＯＨ、Ｂｏｃ−Ｔｙｒ（Ｃｌ２−Ｂｚｌ）−ＯＨ、Ｂｏｃ−Ａｓｎ（Ｘａｎ）−ＯＨ、Ｂｏｃ−Ａｓｐ（ＯｃＨｅｘ）−ＯＨ、Ｂｏｃ−Ｔｈｒ（Ｂｚｌ）−ＯＨ、Ｂｏｃ−Ｐｈｅ−ＯＨ、Ｂｏｃ−Ｖａｌ−ＯＨ、Ｂｏｃ−Ａｌａ−ＯＨ、Ｂｏｃ−Ａｓｐ（ＯｃＨｅｘ）−ＯＨ、Ｂｏｃ−Ｓｅｒ（Ｂｚｌ）−ＯＨ、そしてＢｏｃ−Ｈｉｓ（Ｂｏｍ）−ＯＨの順に順次カップリング／脱保護を行い、ペプチド１６に相当する保護ペプチド樹脂；Ｈｉｓ（Ｂｏｍ）−Ｓｅｒ（Ｂｚｌ）−Ａｓｐ（ＯｃＨｅｘ）−Ａｌａ−Ｖａｌ−Ｐｈｅ−Ｔｈｒ（Ｂｚｌ）−Ａｓｐ（ＯｃＨｅｘ）−Ａｓｎ−Ｔｙｒ（Ｃｌ２−Ｂｚｌ）−Ｔｈｒ（Ｂｚｌ）−Ａｒｇ（Ｔｏｓ）−Ｌｅｕ−Ａｒｇ（Ｔｏｓ）−Ａｒｇ（Ｔｏｓ）−Ｇｌｎ−Ｍｅｔ−Ａｌａ−Ｖａｌ−Ａｒｇ（Ｔｏｓ）−Ａｒｇ（Ｔｏｓ）−Ｔｙｒ（Ｃｌ２−Ｂｚｌ）−Ｌｅｕ−Ａｓｎ−Ｓｅｒ（Ｂｚｌ）−Ｉｌｅ−Ｌｅｕ−ＭＢＨＡを得た。
ここで得られた保護ペプチド−ＭＢＨＡ樹脂にアニソール存在下無水フッ化水素１００ｍＬを加えて反応させた。反応後、無水フッ化水素を減圧下留去後、残査をエーテルで洗浄し、これに１０％酢酸を加えてペプチドを抽出した。抽出液を逆相カラムクロマトグラフィー（１０％アセトニトリルと５０％アセトニトリルの間でのステップワイズグラジエント）により精製し、凍結乾燥を行い、ペプチド１６を得た。
（合成例４）ペプチド１７の製造
配列番号１７に示すアミノ酸配列を有するペプチド１７を前記ペプチド５の製造方法と同様に合成した。すなわち、ＭＢＨＡ樹脂に対してＢｏｃ−Ｉｌｅ−ＯＨ、Ｂｏｃ−Ｓｅｒ（Ｂｚｌ）−ＯＨ、Ｂｏｃ−Ａｓｎ（Ｘａｎ）−ＯＨ、Ｂｏｃ−Ｌｅｕ−ＯＨ、Ｂｏｃ−Ｔｙｒ（Ｃｌ２−Ｂｚｌ）−ＯＨ、Ｂｏｃ−Ａｒｇ（Ｔｏｓ）−ＯＨ、Ｂｏｃ−Ａｒｇ（Ｔｏｓ）−ＯＨ、Ｂｏｃ−Ｖａｌ−ＯＨ，Ｂｏｃ−Ａｌａ−ＯＨ、Ｂｏｃ−Ｍｅｔ−ＯＨ、Ｂｏｃ−Ｇｌｎ（Ｘａｎ）−ＯＨ、Ｂｏｃ−Ａｒｇ（Ｔｏｓ）−ＯＨ、Ｂｏｃ−Ａｒｇ（Ｔｏｓ）−ＯＨ，、Ｂｏｃ−Ｌｅｕ−ＯＨ、Ｂｏｃ−Ａｒｇ（Ｔｏｓ）−ＯＨ、Ｂｏｃ−Ｔｈｒ（Ｂｚｌ）−ＯＨ、Ｂｏｃ−Ｔｙｒ（Ｃｌ２−Ｂｚｌ）−ＯＨ、Ｂｏｃ−Ａｓｎ（Ｘａｎ）−ＯＨ、Ｂｏｃ−Ａｓｐ（ＯｃＨｅｘ）−ＯＨ、Ｂｏｃ−Ｔｈｒ（Ｂｚｌ）−ＯＨ、Ｂｏｃ−Ｐｈｅ−ＯＨ、Ｂｏｃ−Ｖａｌ−ＯＨ、Ｂｏｃ−Ａｌａ−ＯＨ、Ｂｏｃ−Ａｓｐ（ＯｃＨｅｘ）−ＯＨ、Ｂｏｃ−Ｓｅｒ（Ｂｚｌ）−ＯＨ、そしてＢｏｃ−Ｈｉｓ（Ｂｏｍ）−ＯＨの順に順次カップリング／脱保護を行い、ペプチド１７に相当する保護ペプチド樹脂；Ｈｉｓ（Ｂｏｍ）−Ｓｅｒ（Ｂｚｌ）−Ａｓｐ（ＯｃＨｅｘ）−Ａｌａ−Ｖａｌ−Ｐｈｅ−Ｔｈｒ（Ｂｚｌ）−Ａｓｐ（ＯｃＨｅｘ）−Ａｓｎ−Ｔｙｒ（Ｃｌ２−Ｂｚｌ）−Ｔｈｒ（Ｂｚｌ）−Ａｒｇ（Ｔｏｓ）−Ｌｅｕ−Ａｒｇ（Ｔｏｓ）−Ａｒｇ（Ｔｏｓ）−Ｇｌｎ−Ｍｅｔ−Ａｌａ−Ｖａｌ−Ａｒｇ（Ｔｏｓ）−Ａｒｇ（Ｔｏｓ）−Ｔｙｒ（Ｃｌ２−Ｂｚｌ）−Ｌｅｕ−Ａｓｎ−Ｓｅｒ（Ｂｚｌ）−Ｉｌｅ−ＭＢＨＡを得た。
ここで得られた保護ペプチド−ＭＢＨＡ樹脂にアニソール存在下無水フッ化水素１００ｍＬを加えて反応させた。反応後、無水フッ化水素を減圧下留去後、残査をエーテルで洗浄し、これに１０％酢酸を加えてペプチドを抽出した。抽出液を逆相カラムクロマトグラフィー（１０％アセトニトリルと５０％アセトニトリルの間でのステップワイズグラジエント）により精製し、凍結乾燥を行い、ペプチド１７を得た。
（合成例５）ペプチド１８の製造
配列番号１８に示すアミノ酸配列を有するペプチド１８を前記ペプチド５の製造方法と同様に合成した。すなわち、ＭＢＨＡ樹脂に対してＢｏｃ−Ｓｅｒ（Ｂｚｌ）−ＯＨ、Ｂｏｃ−Ａｓｎ（Ｘａｎ）−ＯＨ、Ｂｏｃ−Ｌｅｕ−ＯＨ、Ｂｏｃ−Ｔｙｒ（Ｃｌ２−Ｂｚｌ）−ＯＨ、Ｂｏｃ−Ａｒｇ（Ｔｏｓ）−ＯＨ、Ｂｏｃ−Ａｒｇ（Ｔｏｓ）−ＯＨ、Ｂｏｃ−Ｖａｌ−ＯＨ、Ｂｏｃ−Ａｌａ−ＯＨ、Ｂｏｃ−Ｍｅｔ−ＯＨ、Ｂｏｃ−Ｇｌｎ（Ｘａｎ）−ＯＨ、Ｂｏｃ−Ａｒｇ（Ｔｏｓ）−ＯＨ、Ｂｏｃ−Ａｒｇ（Ｔｏｓ）−ＯＨ、Ｂｏｃ−Ｌｅｕ−ＯＨ、Ｂｏｃ−Ａｒｇ（Ｔｏｓ）−ＯＨ、Ｂｏｃ−Ｔｈｒ（Ｂｚｌ）−ＯＨ、Ｂｏｃ−Ｔｙｒ（Ｃｌ２−Ｂｚｌ）−ＯＨ、Ｂｏｃ−Ａｓｎ（Ｘａｎ）−ＯＨ、Ｂｏｃ−Ａｓｐ（ＯｃＨｅｘ）−ＯＨ、Ｂｏｃ−Ｔｈｒ（Ｂｚｌ）−ＯＨ、Ｂｏｃ−Ｐｈｅ−ＯＨ、Ｂｏｃ−Ｖａｌ−ＯＨ、Ｂｏｃ−Ａｌａ−ＯＨ、Ｂｏｃ−Ａｓｐ（ＯｃＨｅｘ）−ＯＨ、Ｂｏｃ−Ｓｅｒ（Ｂｚｌ）−ＯＨ、そしてＢｏｃ−Ｈｉｓ（Ｂｏｍ）−ＯＨの順に順次カップリング／脱保護を行い、ペプチド１８に相当する保護ペプチド樹脂；Ｈｉｓ（Ｂｏｍ）−Ｓｅｒ（Ｂｚｌ）−Ａｓｐ（ＯｃＨｅｘ）−Ａｌａ−Ｖａｌ−Ｐｈｅ−Ｔｈｒ（Ｂｚｌ）−Ａｓｐ（ＯｃＨｅｘ）−Ａｓｎ−Ｔｙｒ（Ｃｌ２−Ｂｚｌ）−Ｔｈｒ（Ｂｚｌ）−Ａｒｇ（Ｔｏｓ）−Ｌｅｕ−Ａｒｇ（Ｔｏｓ）−Ａｒｇ（Ｔｏｓ）−Ｇｌｎ−Ｍｅｔ−Ａｌａ−Ｖａｌ−Ａｒｇ（Ｔｏｓ）−Ａｒｇ（Ｔｏｓ）−Ｔｙｒ（Ｃｌ２−Ｂｚｌ）−Ｌｅｕ−Ａｓｎ−Ｓｅｒ（Ｂｚｌ）−ＭＢＨＡを得た。
ここで得られた保護ペプチド−ＭＢＨＡ樹脂にアニソール存在下無水フッ化水素１００ｍＬを加えて反応させた。反応後、無水フッ化水素を減圧下留去後、残査をエーテルで洗浄し、これに１０％酢酸を加えてペプチドを抽出した。抽出液を逆相カラムクロマトグラフィー（１０％アセトニトリルと５０％アセトニトリルの間でのステップワイズグラジエント）により精製し、凍結乾燥を行い、ペプチド１８を得た。
（合成例６）ペプチド１９の製造
配列番号１９に示すアミノ酸配列を有するペプチド１９を前記ペプチド５の製造方法と同様に合成した。すなわち、ＭＢＨＡ樹脂に対してＢｏｃ−Ａｓｎ（Ｘａｎ）−ＯＨ、Ｂｏｃ−Ｌｅｕ−ＯＨ、Ｂｏｃ−Ｔｙｒ（Ｃｌ２−Ｂｚｌ）−ＯＨ、Ｂｏｃ−Ａｒｇ（Ｔｏｓ）−ＯＨ、Ｂｏｃ−Ａｒｇ（Ｔｏｓ）−ＯＨ、Ｂｏｃ−Ｖａｌ−ＯＨ、Ｂｏｃ−Ａｌａ−ＯＨ、Ｂｏｃ−Ｍｅｔ−ＯＨ、Ｂｏｃ−Ｇｌｎ（Ｘａｎ）−ＯＨ、Ｂｏｃ−Ａｒｇ（Ｔｏｓ）−ＯＨ、Ｂｏｃ−Ａｒｇ（Ｔｏｓ）−ＯＨ、Ｂｏｃ−Ｌｅｕ−ＯＨ、Ｂｏｃ−Ａｒｇ（Ｔｏｓ）−ＯＨ、Ｂｏｃ−Ｔｈｒ（Ｂｚｌ）−ＯＨ、Ｂｏｃ−Ｔｙｒ（Ｃｌ２−Ｂｚｌ）−ＯＨ、Ｂｏｃ−Ａｓｎ（Ｘａｎ）−ＯＨ、Ｂｏｃ−Ａｓｐ（ＯｃＨｅｘ）−ＯＨ、Ｂｏｃ−Ｔｈｒ（Ｂｚｌ）−ＯＨ、Ｂｏｃ−Ｐｈｅ−ＯＨ、Ｂｏｃ−Ｖａｌ−ＯＨ、Ｂｏｃ−Ａｌａ−ＯＨ、Ｂｏｃ−Ａｓｐ（ＯｃＨｅｘ）−ＯＨ、Ｂｏｃ−Ｓｅｒ（Ｂｚｌ）−ＯＨ、そしてＢｏｃ−Ｈｉｓ（Ｂｏｍ）−ＯＨの順に順次カップリング／脱保護を行い、ペプチド１９に相当する保護ペプチド樹脂；Ｈｉｓ（Ｂｏｍ）−Ｓｅｒ（Ｂｚｌ）−Ａｓｐ（ＯｃＨｅｘ）−Ａｌａ−Ｖａｌ−Ｐｈｅ−Ｔｈｒ（Ｂｚｌ）−Ａｓｐ（ＯｃＨｅｘ）−Ａｓｎ−Ｔｙｒ（Ｃｌ２−Ｂｚｌ）−Ｔｈｒ（Ｂｚｌ）−Ａｒｇ（Ｔｏｓ）−Ｌｅｕ−Ａｒｇ（Ｔｏｓ）−Ａｒｇ（Ｔｏｓ）−Ｇｌｎ−Ｍｅｔ−Ａｌａ−Ｖａｌ−Ａｒｇ（Ｔｏｓ）−Ａｒｇ（Ｔｏｓ）−Ｔｙｒ（Ｃｌ２−Ｂｚｌ）−Ｌｅｕ−Ａｓｎ−ＭＢＨＡを得た。
ここで得られた保護ペプチド−ＭＢＨＡ樹脂にアニソール存在下無水フッ化水素１００ｍＬを加えて反応させた。反応後、無水フッ化水素を減圧下留去後、残査をエーテルで洗浄し、これに１０％酢酸を加えてペプチドを抽出した。抽出液を逆相カラムクロマトグラフィー（１０％アセトニトリルと５０％アセトニトリルの間でのステップワイズグラジエント）により精製し、凍結乾燥を行い、ペプチド１９を得た。
（合成例７）ペプチド２０の製造
配列番号２０に示すアミノ酸配列を有するペプチド２０を前記ペプチド５の製造方法と同様に合成した。すなわち、ＭＢＨＡ樹脂に対してＢｏｃ−Ｌｅｕ−ＯＨ、Ｂｏｃ−Ｔｙｒ（Ｃｌ２−Ｂｚｌ）−ＯＨ、Ｂｏｃ−Ａｒｇ（Ｔｏｓ）−ＯＨ、Ｂｏｃ−Ａｒｇ（Ｔｏｓ）−ＯＨ、Ｂｏｃ−Ｖａｌ−ＯＨ、Ｂｏｃ−Ａｌａ−ＯＨ、Ｂｏｃ−Ｍｅｔ−ＯＨ、Ｂｏｃ−Ｇｌｎ（Ｘａｎ）−ＯＨ、Ｂｏｃ−Ａｒｇ（Ｔｏｓ）−ＯＨ、Ｂｏｃ−Ａｒｇ（Ｔｏｓ）−ＯＨ、Ｂｏｃ−Ｌｅｕ−ＯＨ、Ｂｏｃ−Ａｒｇ（Ｔｏｓ）−ＯＨ、Ｂｏｃ−Ｔｈｒ（Ｂｚｌ）−ＯＨ、Ｂｏｃ−Ｔｙｒ（Ｃｌ２−Ｂｚｌ）−ＯＨ、Ｂｏｃ−Ａｓｎ（Ｘａｎ）−ＯＨ、Ｂｏｃ−Ａｓｐ（ＯｃＨｅｘ）−ＯＨ、Ｂｏｃ−Ｔｈｒ（Ｂｚｌ）−ＯＨ、Ｂｏｃ−Ｐｈｅ−ＯＨ、Ｂｏｃ−Ｖａｌ−ＯＨ、Ｂｏｃ−Ａｌａ−ＯＨ、Ｂｏｃ−Ａｓｐ（ＯｃＨｅｘ）−ＯＨ、Ｂｏｃ−Ｓｅｒ（Ｂｚｌ）−ＯＨ、そしてＢｏｃ−Ｈｉｓ（Ｂｏｍ）−ＯＨの順に順次カップリング／脱保護を行い、ペプチド２０に相当する保護ペプチド樹脂；Ｈｉｓ（Ｂｏｍ）−Ｓｅｒ（Ｂｚｌ）−Ａｓｐ（ＯｃＨｅｘ）−Ａｌａ−Ｖａｌ−Ｐｈｅ−Ｔｈｒ（Ｂｚｌ）−Ａｓｐ（ＯｃＨｅｘ）−Ａｓｎ−Ｔｙｒ（Ｃｌ２−Ｂｚｌ）−Ｔｈｒ（Ｂｚｌ）−Ａｒｇ（Ｔｏｓ）−Ｌｅｕ−Ａｒｇ（Ｔｏｓ）−Ａｒｇ（Ｔｏｓ）−Ｇｌｎ−Ｍｅｔ−Ａｌａ−Ｖａｌ−Ａｒｇ（Ｔｏｓ）−Ａｒｇ（Ｔｏｓ）−Ｔｙｒ（Ｃｌ２−Ｂｚｌ）−Ｌｅｕ−ＭＢＨＡを得た。
ここで得られた保護ペプチド−ＭＢＨＡ樹脂にアニソール存在下無水フッ化水素１００ｍＬを加えて反応させた。反応後、無水フッ化水素を減圧下留去後、残査をエーテルで洗浄し、これに１０％酢酸を加えてペプチドを抽出した。抽出液を逆相カラムクロマトグラフィー（１０％アセトニトリルと５０％アセトニトリルの間でのステップワイズグラジエント）により精製し、凍結乾燥を行い、ペプチド２０を得た。
（合成例８）ペプチド２１の製造
配列番号２１に示すアミノ酸配列を有するペプチド２１を前記ペプチド５の製造方法と同様に合成した。すなわち、ＭＢＨＡ樹脂に対してＢｏｃ−Ｌｅｕ−ＯＨ、Ｂｏｃ−Ｉｌｅ−ＯＨ、Ｂｏｃ−Ｓｅｒ（Ｂｚｌ）−ＯＨ、Ｂｏｃ−Ａｓｎ（Ｘａｎ）−ＯＨ、Ｂｏｃ−Ｌｅｕ−ＯＨ、Ｂｏｃ−Ｔｙｒ（Ｃｌ２−Ｂｚｌ）−ＯＨ、Ｂｏｃ−Ａｒｇ（Ｔｏｓ）−ＯＨ、Ｂｏｃ−Ａｒｇ（Ｔｏｓ）−ＯＨ、Ｂｏｃ−Ｖａｌ−ＯＨ、Ｂｏｃ−Ａｌａ−ＯＨ、Ｂｏｃ−Ｌｅｕ−ＯＨ、Ｂｏｃ−Ｇｌｎ（Ｘａｎ）−ＯＨ、Ｂｏｃ−Ａｒｇ（Ｔｏｓ）−ＯＨ、Ｂｏｃ−Ａｒｇ（Ｔｏｓ）−ＯＨ、Ｂｏｃ−Ｌｅｕ−ＯＨ、Ｂｏｃ−Ａｒｇ（Ｔｏｓ）−ＯＨ、Ｂｏｃ−Ｔｈｒ（Ｂｚｌ）−ＯＨ、Ｂｏｃ−Ｔｙｒ（Ｃｌ２−Ｂｚｌ）−ＯＨ、Ｂｏｃ−Ａｓｎ（Ｘａｎ）−ＯＨ、Ｂｏｃ−Ａｓｐ（ＯｃＨｅｘ）−ＯＨ、Ｂｏｃ−Ｔｈｒ（Ｂｚｌ）−ＯＨ、Ｂｏｃ−Ｐｈｅ−ＯＨ、Ｂｏｃ−Ｖａｌ−ＯＨ、Ｂｏｃ−Ａｌａ−ＯＨ、Ｂｏｃ−Ａｓｐ（ＯｃＨｅｘ）−ＯＨ、Ｂｏｃ−Ｓｅｒ（Ｂｚｌ）−ＯＨ、そしてＢｏｃ−Ｈｉｓ（Ｂｏｍ）−ＯＨの順に順次カップリング／脱保護を行い。ペプチド２１に相当する保護ペプチド樹脂；Ｈｉｓ（Ｂｏｍ）−Ｓｅｒ（Ｂｚｌ）−Ａｓｐ（ＯｃＨｅｘ）−Ａｌａ−Ｖａｌ−Ｐｈｅ−Ｔｈｒ（Ｂｚｌ）−Ａｓｐ（ＯｃＨｅｘ）−Ａｓｎ−Ｔｙｒ（Ｃｌ２−Ｂｚｌ）−Ｔｈｒ（Ｂｚｌ）−Ａｒｇ（Ｔｏｓ）−Ｌｅｕ−Ａｒｇ（Ｔｏｓ）−Ａｒｇ（Ｔｏｓ）−Ｇｌｎ−Ｌｅｕ−Ａｌａ−Ｖａｌ−Ａｒｇ（Ｔｏｓ）−Ａｒｇ（Ｔｏｓ）−Ｔｙｒ（Ｃｌ２−Ｂｚｌ）−Ｌｅｕ−Ａｓｎ−Ｓｅｒ（Ｂｚｌ）−Ｉｌｅ−Ｌｅｕ−ＭＢＨＡを得た。
ここで得られた保護ペプチド−ＭＢＨＡ樹脂にアニソール存在下無水フッ化水素１００ｍＬを加えて反応させた。反応後、無水フッ化水素を減圧下留去後、残査をエーテルで洗浄し、これに１０％酢酸を加えてペプチドを抽出した。抽出液を逆相カラムクロマトグラフィー（１０％アセトニトリルと５０％アセトニトリルの間でのステップワイズグラジエント）により精製し、凍結乾燥を行い、ペプチド２１を得た。
（合成例９）ペプチド２２の製造
配列番号２２に示すアミノ酸配列を有するペプチド２２を前記ペプチド５の製造方法と同様に合成した。すなわち、ＭＢＨＡ樹脂に対してＢｏｃ−Ｉｌｅ−ＯＨ、Ｂｏｃ−Ｓｅｒ（Ｂｚｌ）−ＯＨ、Ｂｏｃ−Ａｓｎ（Ｘａｎ）−ＯＨ、Ｂｏｃ−Ｌｅｕ−ＯＨ、Ｂｏｃ−Ｔｙｒ（Ｃｌ２−Ｂｚｌ）−ＯＨ、Ｂｏｃ−Ａｒｇ（Ｔｏｓ）−ＯＨ、Ｂｏｃ−Ａｒｇ（Ｔｏｓ）−ＯＨ、Ｂｏｃ−Ｖａｌ−ＯＨ、Ｂｏｃ−Ａｌａ−ＯＨ、Ｂｏｃ−Ｌｅｕ−ＯＨ、Ｂｏｃ−Ｇｌｎ（Ｘａｎ）−ＯＨ、Ｂｏｃ−Ａｒｇ（Ｔｏｓ）−ＯＨ、Ｂｏｃ−Ａｒｇ（Ｔｏｓ）−ＯＨ、Ｂｏｃ−Ｌｅｕ−ＯＨ、Ｂｏｃ−Ａｒｇ（Ｔｏｓ）−ＯＨ、Ｂｏｃ−Ｔｈｒ（Ｂｚｌ）−ＯＨ、Ｂｏｃ−Ｔｙｒ（Ｃｌ２−Ｂｚｌ）−ＯＨ、Ｂｏｃ−Ａｓｎ（Ｘａｎ）−ＯＨ、Ｂｏｃ−Ａｓｐ（ＯｃＨｅｘ）−ＯＨ、Ｂｏｃ−Ｔｈｒ（Ｂｚｌ）−ＯＨ、Ｂｏｃ−Ｐｈｅ−ＯＨ、Ｂｏｃ−Ｖａｌ−ＯＨ、Ｂｏｃ−Ａｌａ−ＯＨ、Ｂｏｃ−Ａｓｐ（ＯｃＨｅｘ）−ＯＨ、Ｂｏｃ−Ｓｅｒ（Ｂｚｌ）−ＯＨ、そしてＢｏｃ−Ｈｉｓ（Ｂｏｍ）−ＯＨの順に順次カップリング／脱保護を行い、ペプチド２２に相当する保護ペプチド樹脂；Ｈｉｓ（Ｂｏｍ）−Ｓｅｒ（Ｂｚｌ）−Ａｓｐ（ＯｃＨｅｘ）−Ａｌａ−Ｖａｌ−Ｐｈｅ−Ｔｈｒ（Ｂｚｌ）−Ａｓｐ（ＯｃＨｅｘ）−Ａｓｎ−Ｔｙｒ（Ｃｌ２−Ｂｚｌ）−Ｔｈｒ（Ｂｚｌ）−Ａｒｇ（Ｔｏｓ）−Ｌｅｕ−Ａｒｇ（Ｔｏｓ）−Ａｒｇ（Ｔｏｓ）−Ｇｌｎ−Ｌｅｕ−Ａｌａ−Ｖａｌ−Ａｒｇ（Ｔｏｓ）−Ａｒｇ（Ｔｏｓ）−Ｔｙｒ（Ｃｌ２−Ｂｚｌ）−Ｌｅｕ−Ａｓｎ−Ｓｅｒ（Ｂｚｌ）−Ｉｌｅ−ＭＢＨＡを得た。
ここで得られた保護ペプチド−ＭＢＨＡ樹脂にアニソール存在下無水フッ化水素１００ｍＬを加えて反応させた。反応後、無水フッ化水素を減圧下留去後、残査をエーテルで洗浄し、これに１０％酢酸を加えてペプチドを抽出した。抽出液を逆相カラムクロマトグラフィー（１０％アセトニトリルと５０％アセトニトリルの間でのステップワイズグラジエント）により精製し、凍結乾燥を行い、ペプチド２２を得た。
（合成例１０）ペプチド２３の製造
配列番号２３に示すアミノ酸配列を有するペプチド２３前記ペプチド５の製造方法と同様に合成した。すなわち、ＭＢＨＡ樹脂に対してＢｏｃ−Ｓｅｒ（Ｂｚｌ）−ＯＨ、Ｂｏｃ−Ａｓｎ（Ｘａｎ）−ＯＨ、Ｂｏｃ−Ｌｅｕ−ＯＨ、Ｂｏｃ−Ｔｙｒ（Ｃｌ２−Ｂｚｌ）−ＯＨ、Ｂｏｃ−Ａｒｇ（Ｔｏｓ）−ＯＨ、Ｂｏｃ−Ａｒｇ（Ｔｏｓ）−ＯＨ、Ｂｏｃ−Ｖａｌ−ＯＨ、Ｂｏｃ−Ａｌａ−ＯＨ、Ｂｏｃ−Ｌｅｕ−ＯＨ、Ｂｏｃ−Ｇｌｎ（Ｘａｎ）−ＯＨ、Ｂｏｃ−Ａｒｇ（Ｔｏｓ）−ＯＨ、Ｂｏｃ−Ａｒｇ（Ｔｏｓ）−ＯＨ、Ｂｏｃ−Ｌｅｕ−ＯＨ、Ｂｏｃ−Ａｒｇ（Ｔｏｓ）−ＯＨ、Ｂｏｃ−Ｔｈｒ（Ｂｚｌ）−ＯＨ、Ｂｏｃ−Ｔｙｒ（Ｃｌ２−Ｂｚｌ）−ＯＨ、Ｂｏｃ−Ａｓｎ（Ｘａｎ）−ＯＨ、Ｂｏｃ−Ａｓｐ（ＯｃＨｅｘ）−ＯＨ、Ｂｏｃ−Ｔｈｒ（Ｂｚｌ）−ＯＨ、Ｂｏｃ−Ｐｈｅ−ＯＨ、Ｂｏｃ−Ｖａｌ−ＯＨ，Ｂｏｃ−Ａｌａ−ＯＨ、Ｂｏｃ−Ａｓｐ（ＯｃＨｅｘ）−ＯＨ、Ｂｏｃ−Ｓｅｒ（Ｂｚｌ）−ＯＨ、そしてＢｏｃ−Ｈｉｓ（Ｂｏｍ）−ＯＨの順に順次カップリング／脱保護を行い、ペプチド２３に相当する保護ペプチド樹脂；Ｈｉｓ（Ｂｏｍ）−Ｓｅｒ（Ｂｚｌ）−Ａｓｐ（ＯｃＨｅｘ）−Ａｌａ−Ｖａｌ−Ｐｈｅ−Ｔｈｒ（Ｂｚｌ）−Ａｓｐ（ＯｃＨｅｘ）−Ａｓｎ−Ｔｙｒ（Ｃｌ２−Ｂｚｌ）−Ｔｈｒ（Ｂｚｌ）−Ａｒｇ（Ｔｏｓ）−Ｌｅｕ−Ａｒｇ（Ｔｏｓ）−Ａｒｇ（Ｔｏｓ）−Ｇｌｎ−Ｌｅｕ−Ａｌａ−Ｖａｌ−Ａｒｇ（Ｔｏｓ）−Ａｒｇ（Ｔｏｓ）−Ｔｙｒ（Ｃｌ２−Ｂｚｌ）−Ｌｅｕ−Ａｓｎ−Ｓｅｒ（Ｂｚｌ）−ＭＢＨＡを得た。
ここで得られた保護ペプチド−ＭＢＨＡ樹脂にアニソール存在下無水フッ化水素１００ｍＬを加えて反応させた。反応後、無水フッ化水素を減圧下留去後、残査をエーテルで洗浄し、これに１０％酢酸を加えてペプチドを抽出した。抽出液を逆相カラムクロマトグラフィー（１０％アセトニトリルと５０％アセトニトリルの間でのステップワイズグラジエント）により精製し、凍結乾燥を行い、ペプチド２３を得た。
（合成例１１）ペプチド２４の製造
配列番号２４に示すアミノ酸配列を有するペプチド２４を前記ペプチド５の製造方法と同様に合成した。すなわち、ＭＢＨＡ樹脂に対してＢｏｃ−Ａｓｎ（Ｘａｎ）−ＯＨ、Ｂｏｃ−Ｌｅｕ−ＯＨ、Ｂｏｃ−Ｔｙｒ（Ｃｌ２−Ｂｚｌ）−ＯＨ、Ｂｏｃ−Ａｒｇ（Ｔｏｓ）−ＯＨ、Ｂｏｃ−Ａｒｇ（Ｔｏｓ）−ＯＨ、Ｂｏｃ−Ｖａｌ−ＯＨ、Ｂｏｃ−Ａｌａ−ＯＨ、Ｂｏｃ−Ｌｅｕ−ＯＨ、Ｂｏｃ−Ｇｌｎ（Ｘａｎ）−ＯＨ、Ｂｏｃ−Ａｒｇ（Ｔｏｓ）−ＯＨ、Ｂｏｃ−Ａｒｇ（Ｔｏｓ）−ＯＨ、Ｂｏｃ−Ｌｅｕ−ＯＨ、Ｂｏｃ−Ａｒｇ（Ｔｏｓ）−ＯＨ、Ｂｏｃ−Ｔｈｒ（Ｂｚｌ）−ＯＨ、Ｂｏｃ−Ｔｙｒ（Ｃｌ２−Ｂｚｌ）−ＯＨ、Ｂｏｃ−Ａｓｎ（Ｘａｎ）−ＯＨ、Ｂｏｃ−Ａｓｐ（ＯｃＨｅｘ）−ＯＨ、Ｂｏｃ−Ｔｈｒ（Ｂｚｌ）−ＯＨ、Ｂｏｃ−Ｐｈｅ−ＯＨ、Ｂｏｃ−Ｖａｌ−ＯＨ、Ｂｏｃ−Ａｌａ−ＯＨ、Ｂｏｃ−Ａｓｐ（ＯｃＨｅｘ）−ＯＨ、Ｂｏｃ−Ｓｅｒ（Ｂｚｌ）−ＯＨ、そしてＢｏｃ−Ｈｉｓ（Ｂｏｍ）−ＯＨの順に順次カップリング／脱保護を行い、ペプチド２４に相当する保護ペプチド樹脂；Ｈｉｓ（Ｂｏｍ）−Ｓｅｒ（Ｂｚｌ）−Ａｓｐ（ＯｃＨｅｘ）−Ａｌａ−Ｖａｌ−Ｐｈｅ−Ｔｈｒ（Ｂｚｌ）−Ａｓｐ（ＯｃＨｅｘ）−Ａｓｎ−Ｔｙｒ（Ｃｌ２−Ｂｚｌ）−Ｔｈｒ（Ｂｚｌ）−Ａｒｇ（Ｔｏｓ）−Ｌｅｕ−Ａｒｇ（Ｔｏｓ）−Ａｒｇ（Ｔｏｓ）−Ｇｌｎ−Ｌｅｕ−Ａｌａ−Ｖａｌ−Ａｒｇ（Ｔｏｓ）−Ａｒｇ（Ｔｏｓ）−Ｔｙｒ（Ｃｌ２−Ｂｚｌ）−Ｌｅｕ−Ａｓｎ−ＭＢＨＡを得た。
ここで得られた保護ペプチド−ＭＢＨＡ樹脂にアニソール存在下無水フッ化水素１００ｍＬを加えて反応させた。反応後、無水フッ化水素を減圧下留去後、残査をエーテルで洗浄し、これに１０％酢酸を加えてペプチドを抽出した。抽出液を逆相カラムクロマトグラフィー（１０％アセトニトリルと５０％アセトニトリルの間でのステップワイズグラジエント）により精製し、凍結乾燥を行い、ペプチド２４を得た。
（合成例１２）ペプチド２５の製造
配列番号２５に示すアミノ酸配列を有するペプチド２５を前記ペプチド５の製造方法と同様に合成した。すなわち、ＭＢＨＡ樹脂に対してＢｏｃ−Ｌｅｕ−ＯＨ、Ｂｏｃ−Ｔｙｒ（Ｃｌ２−Ｂｚｌ）−ＯＨ、Ｂｏｃ−Ａｒｇ（Ｔｏｓ）−ＯＨ、Ｂｏｃ−Ａｒｇ（Ｔｏｓ）−ＯＨ、Ｂｏｃ−Ｖａｌ−ＯＨ、Ｂｏｃ−Ａｌａ−ＯＨ、Ｂｏｃ−Ｌｅｕ−ＯＨ、Ｂｏｃ−Ｇｌｎ（Ｘａｎ）−ＯＨ、Ｂｏｃ−Ａｒｇ（Ｔｏｓ）−ＯＨ、Ｂｏｃ−Ａｒｇ（Ｔｏｓ）−ＯＨ、Ｂｏｃ−Ｌｅｕ−ＯＨ、Ｂｏｃ−Ａｒｇ（Ｔｏｓ）−ＯＨ、Ｂｏｃ−Ｔｈｒ（Ｂｚｌ）−ＯＨ、Ｂｏｃ−Ｔｙｒ（Ｃｌ２−Ｂｚｌ）−ＯＨ、Ｂｏｃ−Ａｓｎ（Ｘａｎ）−ＯＨ、Ｂｏｃ−Ａｓｐ（ＯｃＨｅｘ）−ＯＨ、Ｂｏｃ−Ｔｈｒ（Ｂｚｌ）−ＯＨ、Ｂｏｃ−Ｐｈｅ−ＯＨ、Ｂｏｃ−Ｖａｌ−ＯＨ、Ｂｏｃ−Ａｌａ−ＯＨ、Ｂｏｃ−Ａｓｐ（ＯｃＨｅｘ）−ＯＨ、Ｂｏｃ−Ｓｅｒ（Ｂｚｌ）−ＯＨ、そしてＢｏｃ−Ｈｉｓ（Ｂｏｍ）−ＯＨの順に順次カップリング／脱保護を行い、ペプチド２５に相当する保護ペプチド樹脂；Ｈｉｓ（Ｂｏｍ）−Ｓｅｒ（Ｂｚｌ）−Ａｓｐ（ＯｃＨｅｘ）−Ａｌａ−Ｖａｌ−Ｐｈｅ−Ｔｈｒ（Ｂｚｌ）−Ａｓｐ（ＯｃＨｅｘ）−Ａｓｎ−Ｔｙｒ（Ｃｌ２−Ｂｚｌ）−Ｔｈｒ（Ｂｚｌ）−Ａｒｇ（Ｔｏｓ）−Ｌｅｕ−Ａｒｇ（Ｔｏｓ）−Ａｒｇ（Ｔｏｓ）−Ｇｌｎ−Ｌｅｕ−Ａｌａ−Ｖａｌ−Ａｒｇ（Ｔｏｓ）−Ａｒｇ（Ｔｏｓ）−Ｔｙｒ（Ｃｌ２−Ｂｚｌ）−Ｌｅｕ−ＭＢＨＡを得た。
ここで得られた保護ペプチド−ＭＢＨＡ樹脂にアニソール存在下無水フッ化水素１００ｍＬを加えて反応させた。反応後、無水フッ化水素を減圧下留去後、残査をエーテルで洗浄し、これに１０％酢酸を加えてペプチドを抽出した。抽出液を逆相カラムクロマトグラフィー（１０％アセトニトリルと５０％アセトニトリルの間でのステップワイズグラジエント）により精製し、凍結乾燥を行い、ペプチド２５を得た。
（合成例１３）ペプチド１の製造
配列番号１に示すアミノ酸配列を有するペプチド１を前記ペプチド５の製造方法と同様に合成した。すなわち、ＭＢＨＡ樹脂に対してＢｏｃ−Ｇｌｙ−ＯＨ、Ｂｏｃ−Ａｓｎ（Ｘａｎ）−ＯＨ、Ｂｏｃ−Ｌｅｕ−ＯＨ、Ｂｏｃ−Ｉｌｅ−ＯＨ、Ｂｏｃ−Ｓｅｒ（Ｂｚｌ）−ＯＨ、Ｂｏｃ−Ａｓｎ（Ｘａｎ）−ＯＨ、Ｂｏｃ−Ｌｅｕ−ＯＨ、Ｂｏｃ−Ｔｙｒ（Ｃｌ２−Ｚ）−ＯＨ、Ｂｏｃ−Ａｒｇ（Ｔｏｓ）−ＯＨ、Ｂｏｃ−Ａｒｇ（Ｔｏｓ）−ＯＨ、Ｂｏｃ−Ｖａｌ−ＯＨ、Ｂｏｃ−Ａｌａ−ＯＨ、Ｂｏｃ−Ｌｅｕ−ＯＨ、Ｂｏｃ−Ｇｌｎ（Ｘａｎ）−ＯＨ、Ｂｏｃ−Ａｒｇ（Ｔｏｓ）−ＯＨ、Ｂｏｃ−Ａｒｇ（Ｔｏｓ）−ＯＨ、Ｂｏｃ−Ｌｅｕ−ＯＨ、Ｂｏｃ−Ａｒｇ（Ｔｏｓ）−ＯＨ、Ｂｏｃ−Ｔｈｒ（Ｂｚｌ）−ＯＨ、Ｂｏｃ−Ｔｙｒ（Ｃｌ２−Ｚ）−ＯＨ、Ｂｏｃ−Ａｓｎ（Ｘａｎ）−ＯＨ、Ｂｏｃ−Ａｓｐ（ＯｃＨｅｘ）−ＯＨ、Ｂｏｃ−Ｔｈｒ（Ｂｚｌ）−ＯＨ、Ｂｏｃ−Ｐｈｅ−ＯＨ、Ｂｏｃ−Ｖａｌ−ＯＨ、Ｂｏｃ−Ａｌａ−ＯＨ、Ｂｏｃ−Ａｓｐ（ＯｃＨｅｘ）−ＯＨ、Ｂｏｃ−Ｓｅｒ（Ｂｚｌ）−ＯＨ、そしてＢｏｃ−Ｈｉｓ（Ｂｏｍ）−ＯＨの順に順次カップリング／脱保護を行い、ペプチド１に相当する保護ペプチド樹脂；Ｈｉｓ（Ｂｏｍ）−Ｓｅｒ（Ｂｚｌ）−Ａｓｐ（ＯｃＨｅｘ）−Ａｌａ−Ｖａｌ−Ｐｈｅ−Ｔｈｒ（Ｂｚｌ）−Ａｓｐ（ＯｃＨｅｘ）−Ａｓｎ−Ｔｙｒ（Ｃｌ２−Ｂｚｌ）−Ｔｈｒ（Ｂｚｌ）−Ａｒｇ（Ｔｏｓ）−Ｌｅｕ−Ａｒｇ（Ｔｏｓ）−Ａｒｇ（Ｔｏｓ）−Ｇｌｎ−Ｌｅｕ−Ａｌａ−Ｖａｌ−Ａｒｇ（Ｔｏｓ）−Ａｒｇ（Ｔｏｓ）−Ｔｙｒ（Ｃｌ２−Ｂｚｌ）−Ｌｅｕ−Ａｓｎ−Ｓｅｒ（Ｂｚｌ）−Ｉｌｅ−Ｌｅｕ−Ａｓｎ−Ｇｌｙ−ＭＢＨＡを得た。ここで得られた保護ペプチド−ＭＢＨＡ樹脂にアニソール存在下無水フッ化水素を加えて反応させた。反応後、無水フッ化水素を減圧下留去後、残渣をエーテルで洗浄し、これに１０％酢酸を加えてペプチドを抽出した。抽出液を逆相カラムクロマトグラフィーにより精製し、凍結乾燥を行い、ペプチド１を得た。
（合成例１４）ペプチド２の製造
配列番号２に示すアミノ酸配列を有するペプチド２を前記ペプチド５の製造方法と同様に合成した。すなわち、ＭＢＨＡ樹脂に対してＢｏｃ−Ｌｙｓ（Ｃｌ−Ｚ）−ＯＨ、Ｂｏｃ−Ｇｌｙ−ＯＨ、Ｂｏｃ−Ａｓｎ（Ｘａｎ）−ＯＨ、Ｂｏｃ−Ｌｅｕ−ＯＨ、Ｂｏｃ−Ｉｌｅ−ＯＨ、Ｂｏｃ−Ｓｅｒ（Ｂｚｌ）−ＯＨ、Ｂｏｃ−Ａｓｎ（Ｘａｎ）−ＯＨ、Ｂｏｃ−Ｌｅｕ−ＯＨ、Ｂｏｃ−Ｔｙｒ（Ｃｌ２−Ｚ）−ＯＨ、Ｂｏｃ−Ａｒｇ（Ｔｏｓ）−ＯＨ、Ｂｏｃ−Ａｒｇ（Ｔｏｓ）−ＯＨ、Ｂｏｃ−Ｖａｌ−ＯＨ、Ｂｏｃ−Ａｌａ−ＯＨ、Ｂｏｃ−Ｌｅｕ−ＯＨ、Ｂｏｃ−Ｇｌｎ（Ｘａｎ）−ＯＨ、Ｂｏｃ−Ａｒｇ（Ｔｏｓ）−ＯＨ、Ｂｏｃ−Ａｒｇ（Ｔｏｓ）−ＯＨ、Ｂｏｃ−Ｌｅｕ−ＯＨ、Ｂｏｃ−Ａｒｇ（Ｔｏｓ）−ＯＨ、Ｂｏｃ−Ｔｈｒ（Ｂｚｌ）−ＯＨ、Ｂｏｃ−Ｔｙｒ（Ｃｌ２−Ｚ）−ＯＨ、Ｂｏｃ−Ａｓｎ（Ｘａｎ）−ＯＨ、Ｂｏｃ−Ａｓｐ（ＯｃＨｅｘ）−ＯＨ、Ｂｏｃ−Ｔｈｒ（Ｂｚｌ）−ＯＨ、Ｂｏｃ−Ｐｈｅ−ＯＨ、Ｂｏｃ−Ｖａｌ−ＯＨ，Ｂｏｃ−Ａｌａ−ＯＨ、Ｂｏｃ−Ａｓｐ（ＯｃＨｅｘ）−ＯＨ、Ｂｏｃ−Ｓｅｒ（Ｂｚｌ）−ＯＨ、そしてＢｏｃ−Ｈｉｓ（Ｂｏｍ）−ＯＨの順に順次カップリング／脱保護を行い、ペプチド２に相当する保護ペプチド樹脂；Ｈｉｓ（Ｂｏｍ）−Ｓｅｒ（Ｂｚｌ）−Ａｓｐ（ＯｃＨｅｘ）−Ａｌａ−Ｖａｌ−Ｐｈｅ−Ｔｈｒ（Ｂｚｌ）−Ａｓｐ（ＯｃＨｅｘ）−Ａｓｎ−Ｔｙｒ（Ｃｌ２−Ｂｚｌ）−Ｔｈｒ（Ｂｚｌ）−Ａｒｇ（Ｔｏｓ）−Ｌｅｕ−Ａｒｇ（Ｔｏｓ）−Ａｒｇ（Ｔｏｓ）−Ｇｌｎ−Ｌｅｕ−Ａｌａ−Ｖａｌ−Ａｒｇ（Ｔｏｓ）−Ａｒｇ（Ｔｏｓ）−Ｔｙｒ（Ｃｌ２−Ｂｚｌ）−Ｌｅｕ−Ａｓｎ−Ｓｅｒ（Ｂｚｌ）−Ｉｌｅ−Ｌｅｕ−Ａｓｎ−Ｇｌｙ−Ｌｙｓ（Ｃｌ−Ｚ）−ＭＢＨＡを得た。ここで得られた保護ペプチド−ＭＢＨＡ樹脂にアニソール存在下無水フッ化水素を加えて反応させた。反応後、無水フッ化水素を減圧下留去後、残渣をエーテルで洗浄し、これに１０％酢酸を加えてペプチドを抽出した。抽出液を逆相カラムクロマトグラフィーにより精製し、凍結乾燥を行い、ペプチド２を得た。
（合成例１５）ペプチド３の製造
配列番号３に示すアミノ酸配列を有するペプチド３を前記ペプチド５の製造方法と同様に合成した。すなわち、ＭＢＨＡ樹脂に対してＢｏｃ−Ａｒｇ（Ｔｏｓ）−ＯＨ、Ｂｏｃ−Ｇｌｙ−ＯＨ、Ｂｏｃ−Ａｓｎ（Ｘａｎ）−ＯＨ、Ｂｏｃ−Ｌｅｕ−ＯＨ、Ｂｏｃ−Ｉｌｅ−ＯＨ、Ｂｏｃ−Ｓｅｒ（Ｂｚｌ）−ＯＨ、Ｂｏｃ−Ａｓｎ（Ｘａｎ）−ＯＨ、Ｂｏｃ−Ｌｅｕ−ＯＨ、Ｂｏｃ−Ｔｙｒ（Ｃｌ２−Ｚ）−ＯＨ、Ｂｏｃ−Ａｒｇ（Ｔｏｓ）−ＯＨ、Ｂｏｃ−Ａｒｇ（Ｔｏｓ）−ＯＨ、Ｂｏｃ−Ｖａｌ−ＯＨ、Ｂｏｃ−Ａｌａ−ＯＨ、Ｂｏｃ−Ｌｅｕ−ＯＨ、Ｂｏｃ−Ｇｌｎ（Ｘａｎ）−ＯＨ、Ｂｏｃ−Ａｒｇ（Ｔｏｓ）−ＯＨ、Ｂｏｃ−Ａｒｇ（Ｔｏｓ）−ＯＨ、Ｂｏｃ−Ｌｅｕ−ＯＨ、Ｂｏｃ−Ａｒｇ（Ｔｏｓ）−ＯＨ、Ｂｏｃ−Ｔｈｒ（Ｂｚｌ）−ＯＨ、Ｂｏｃ−Ｔｙｒ（Ｃｌ２−Ｚ）−ＯＨ、Ｂｏｃ−Ａｓｎ（Ｘａｎ）−ＯＨ、Ｂｏｃ−Ａｓｐ（ＯｃＨｅｘ）−ＯＨ、Ｂｏｃ−Ｔｈｒ（Ｂｚｌ）−ＯＨ、Ｂｏｃ−Ｐｈｅ−ＯＨ，Ｂｏｃ−Ｖａｌ−ＯＨ、Ｂｏｃ−Ａｌａ−ＯＨ、Ｂｏｃ−Ａｓｐ（ＯｃＨｅｘ）−ＯＨ、Ｂｏｃ−Ｓｅｒ（Ｂｚｌ）−ＯＨ、そしてＢｏｃ−Ｈｉｓ（Ｂｏｍ）−ＯＨの順に順次カップリング／脱保護を行い、ペプチド３に相当する保護ペプチド樹脂；Ｈｉｓ（Ｂｏｍ）−Ｓｅｒ（Ｂｚｌ）−Ａｓｐ（ＯｃＨｅｘ）−Ａｌａ−Ｖａｌ−Ｐｈｅ−Ｔｈｒ（Ｂｚｌ）−Ａｓｐ（ＯｃＨｅｘ）−Ａｓｎ−Ｔｙｒ（Ｃｌ２−Ｂｚｌ）−Ｔｈｒ（Ｂｚｌ）−Ａｒｇ（Ｔｏｓ）−Ｌｅｕ−Ａｒｇ（Ｔｏｓ）−Ａｒｇ（Ｔｏｓ）−Ｇｌｎ−Ｌｅｕ−Ａｌａ−Ｖａｌ−Ａｒｇ（Ｔｏｓ）−Ａｒｇ（Ｔｏｓ）−Ｔｙｒ（Ｃｌ２−Ｂｚｌ）−Ｌｅｕ−Ａｓｎ−Ｓｅｒ（Ｂｚｌ）−Ｉｌｅ−Ｌｅｕ−Ａｓｎ−Ｇｌｙ−Ａｒｇ（Ｔｏｓ）−ＭＢＨＡを得た。ここで得られた保護ペプチド−ＭＢＨＡ樹脂にアニソール存在下無水フッ化水素を加えて反応させた。反応後、無水フッ化水素を減圧下留去後、残渣をエーテルで洗浄し、これに１０％酢酸を加えてペプチドを抽出した。抽出液を逆相カラムクロマトグラフィーにより精製し、凍結乾燥を行い、ペプチド３を得た。
（合成例１６）ペプチド４の製造
配列番号４に示すアミノ酸配列を有するペプチド４を前記ペプチド５の製造方法と同様に合成した。すなわち、ＭＢＨＡ樹脂に対してＢｏｃ−Ａｒｇ（Ｔｏｓ）−ＯＨ、Ｂｏｃ−Ｌｙｓ（Ｃｌ−Ｚ）−ＯＨ、Ｂｏｃ−Ｇｌｙ−ＯＨ、Ｂｏｃ−Ａｓｎ（Ｘａｎ）−ＯＨ、Ｂｏｃ−Ｌｅｕ−ＯＨ，Ｂｏｃ−Ｉｌｅ−ＯＨ、Ｂｏｃ−Ｓｅｒ（Ｂｚｌ）−ＯＨ、Ｂｏｃ−Ａｓｎ（Ｘａｎ）−ＯＨ、Ｂｏｃ−Ｌｅｕ−ＯＨ、Ｂｏｃ−Ｔｙｒ（Ｃｌ２−Ｚ）−ＯＨ、Ｂｏｃ−Ａｒｇ（Ｔｏｓ）−ＯＨ、Ｂｏｃ−Ａｒｇ（Ｔｏｓ）−ＯＨ、Ｂｏｃ−Ｖａｌ−ＯＨ、Ｂｏｃ−Ａｌａ−ＯＨ、Ｂｏｃ−Ｌｅｕ−ＯＨ、Ｂｏｃ−Ｇｌｎ（Ｘａｎ）−ＯＨ、Ｂｏｃ−Ａｒｇ（Ｔｏｓ）−ＯＨ、Ｂｏｃ−Ａｒｇ（Ｔｏｓ）−ＯＨ、Ｂｏｃ−Ｌｅｕ−ＯＨ、Ｂｏｃ−Ａｒｇ（Ｔｏｓ）−ＯＨ、Ｂｏｃ−Ｔｈｒ（Ｂｚｌ）−ＯＨ、Ｂｏｃ−Ｔｙｒ（Ｃｌ２−Ｚ）−ＯＨ、Ｂｏｃ−Ａｓｎ（Ｘａｎ）−ＯＨ、Ｂｏｃ−Ａｓｐ（ＯｃＨｅｘ）−ＯＨ、Ｂｏｃ−Ｔｈｒ（Ｂｚｌ）−ＯＨ、Ｂｏｃ−Ｐｈｅ−ＯＨ、Ｂｏｃ−Ｖａｌ−ＯＨ、Ｂｏｃ−Ａｌａ−ＯＨ、Ｂｏｃ−Ａｓｐ（ＯｃＨｅｘ）−ＯＨ、Ｂｏｃ−Ｓｅｒ（Ｂｚｌ）−ＯＨ、そしてＢｏｃ−Ｈｉｓ（Ｂｏｍ）−ＯＨの順に順次カップリング／脱保護を行い、ペプチド４に相当する保護ペプチド樹脂；Ｈｉｓ（Ｂｏｍ）−Ｓｅｒ（Ｂｚｌ）−Ａｓｐ（ＯｃＨｅｘ）−Ａｌａ−Ｖａｌ−Ｐｈｅ−Ｔｈｒ（Ｂｚｌ）−Ａｓｐ（ＯｃＨｅｘ）−Ａｓｎ−Ｔｙｒ（Ｃｌ２−Ｂｚｌ）−Ｔｈｒ（Ｂｚｌ）−Ａｒｇ（Ｔｏｓ）−Ｌｅｕ−Ａｒｇ（Ｔｏｓ）−Ａｒｇ（Ｔｏｓ）−Ｇｌｎ−Ｌｅｕ−Ａｌａ−Ｖａｌ−Ａｒｇ（Ｔｏｓ）−Ａｒｇ（Ｔｏｓ）−Ｔｙｒ（Ｃｌ２−Ｂｚｌ）−Ｌｅｕ−Ａｓｎ−Ｓｅｒ（Ｂｚｌ）−Ｉｌｅ−Ｌｅｕ−Ａｓｎ−Ｇｌｙ−Ｌｙｓ（Ｃｌ−Ｚ）−Ａｒｇ（Ｔｏｓ）−ＭＢＨＡを得た。ここで得られた保護ペプチド−ＭＢＨＡ樹脂にアニソール存在下無水フッ化水素を加えて反応させた。反応後、無水フッ化水素を減圧下留去後、残渣をエーテルで洗浄し、これに１０％酢酸を加えてペプチドを抽出した。抽出液を逆相カラムクロマトグラフィーにより精製し、凍結乾燥を行い、ペプチド４を得た。
（合成例１７）ペプチド６の製造
配列番号６に示すアミノ酸配列を有するペプチド６を前記ペプチド５の製造方法と同様に合成した。すなわち、ＰＡＭ樹脂に対してＢｏｃ−Ａｒｇ（Ｔｏｓ）−ＯＨ、Ｂｏｃ−Ｌｙｓ（Ｃｌ−Ｚ）−ＯＨ、Ｂｏｃ−Ｇｌｙ−ＯＨ、Ｂｏｃ−Ａｓｎ（Ｘａｎ）−ＯＨ、Ｂｏｃ−Ｌｅｕ−ＯＨ、Ｂｏｃ−Ｉｌｅ−ＯＨ、Ｂｏｃ−Ｓｅｒ（Ｂｚｌ）−ＯＨ、Ｂｏｃ−Ａｓｎ（Ｘａｎ）−ＯＨ、Ｂｏｃ−Ｌｅｕ−ＯＨ、Ｂｏｃ−Ｔｙｒ（Ｃｌ２−Ｚ）−ＯＨ、Ｂｏｃ−Ａｒｇ（Ｔｏｓ）−ＯＨ、Ｂｏｃ−Ａｒｇ（Ｔｏｓ）−ＯＨ、Ｂｏｃ−Ｖａｌ−ＯＨ、Ｂｏｃ−Ａｌａ−ＯＨ、Ｂｏｃ−Ｌｅｕ−ＯＨ、Ｂｏｃ−Ｇｌｎ（Ｘａｎ）−ＯＨ、Ｂｏｃ−Ａｒｇ（Ｔｏｓ）−ＯＨ、Ｂｏｃ−Ａｒｇ（Ｔｏｓ）−ＯＨ、Ｂｏｃ−Ｌｅｕ−ＯＨ、Ｂｏｃ−Ａｒｇ（Ｔｏｓ）−ＯＨ、Ｂｏｃ−Ｔｈｒ（Ｂｚｌ）−ＯＨ、Ｂｏｃ−Ｔｙｒ（Ｃｌ２−Ｚ）−ＯＨ、Ｂｏｃ−Ａｓｎ（Ｘａｎ）−ＯＨ、Ｂｏｃ−Ａｓｐ（ＯｃＨｅｘ）−ＯＨ、Ｂｏｃ−Ｔｈｒ（Ｂｚｌ）−ＯＨ、Ｂｏｃ−Ｐｈｅ−ＯＨ、Ｂｏｃ−Ｖａｌ−ＯＨ、Ｂｏｃ−Ａｌａ−ＯＨ、Ｂｏｃ−Ａｓｐ（ＯｃＨｅｘ）−ＯＨ、Ｂｏｃ−Ｓｅｒ（Ｂｚｌ）−ＯＨ、そしてＢｏｃ−Ｈｉｓ（Ｂｏｍ）−ＯＨの順に順次カップリング／脱保護を行い、ペプチド６に相当する保護ペプチド樹脂；Ｈｉｓ（Ｂｏｍ）−Ｓｅｒ（Ｂｚｌ）−Ａｓｐ（ＯｃＨｅｘ）−Ａｌａ−Ｖａｌ−Ｐｈｅ−Ｔｈｒ（Ｂｚｌ）−Ａｓｐ（ＯｃＨｅｘ）−Ａｓｎ−Ｔｙｒ（Ｃｌ２−Ｂｚｌ）−Ｔｈｒ（Ｂｚｌ）−Ａｒｇ（Ｔｏｓ）−Ｌｅｕ−Ａｒｇ（Ｔｏｓ）−Ａｒｇ（Ｔｏｓ）−Ｇｌｎ−Ｌｅｕ−Ａｌａ−Ｖａｌ−Ａｒｇ（Ｔｏｓ）−Ａｒｇ（Ｔｏｓ）−Ｔｙｒ（Ｃｌ２−Ｂｚｌ）−Ｌｅｕ−Ａｓｎ−Ｓｅｒ（Ｂｚｌ）−Ｉｌｅ−Ｌｅｕ−Ａｓｎ−Ｇｌｙ−Ｌｙｓ（Ｃｌ−Ｚ）−Ａｒｇ（Ｔｏｓ）−ＰＡＭを得た。ここで得られた保護ペプチド−ＰＡＭ樹脂にアニソール存在下無水フッ化水素を加えて反応させた。反応後、無水フッ化水素を減圧下留去後、残渣をエーテルで洗浄し、これに１０％酢酸を加えてペプチドを抽出した。抽出液を逆相カラムクロマトグラフィーにより精製し、凍結乾燥を行い、ペプチド６を得た。
（合成例１８）ペプチド７の製造
配列番号７に示すアミノ酸配列を有するペプチド７を前記ペプチド５の製造方法と同様に合成した。すなわち、ＰＡＭ樹脂に対してＢｏｃ−Ａｓｎ（Ｘａｎ）−ＯＨ、Ｂｏｃ−Ｌｅｕ−ＯＨ、Ｂｏｃ−Ｉｌｅ−ＯＨ、Ｂｏｃ−Ｓｅｒ（Ｂｚｌ）−ＯＨ、Ｂｏｃ−Ａｓｎ（Ｘａｎ）−ＯＨ、Ｂｏｃ−Ｌｅｕ−ＯＨ、Ｂｏｃ−Ｔｙｒ（Ｃｌ２−Ｚ）−ＯＨ、Ｂｏｃ−Ｌｙｓ（Ｃｌ−Ｚ）−ＯＨ、Ｂｏｃ−Ｌｙｓ（Ｃｌ−Ｚ）−ＯＨ、Ｂｏｃ−Ｖａｌ−ＯＨ、Ｂｏｃ−Ａｌａ−ＯＨ、Ｂｏｃ−Ｍｅｔ−ＯＨ、Ｂｏｃ−Ｇｌｎ（Ｘａｎ）−ＯＨ、Ｂｏｃ−Ｌｙｓ（Ｃｌ−Ｚ）−ＯＨ、Ｂｏｃ−Ａｒｇ（Ｔｏｓ）−ＯＨ、Ｂｏｃ−Ｌｅｕ−ＯＨ、Ｂｏｃ−Ａｒｇ（Ｔｏｓ）−ＯＨ、Ｂｏｃ−Ｔｈｒ（Ｂｚｌ）−ＯＨ、Ｂｏｃ−Ｔｙｒ（Ｃｌ２−Ｚ）−ＯＨ、Ｂｏｃ−Ａｓｎ（Ｘａｎ）−ＯＨ、Ｂｏｃ−Ａｓｐ（ＯｃＨｅｘ）−ＯＨ、Ｂｏｃ−Ｔｈｒ（Ｂｚｌ）−ＯＨ、Ｂｏｃ−Ｐｈｅ−ＯＨ、Ｂｏｃ−Ｖａｌ−ＯＨ、Ｂｏｃ−Ａｌａ−ＯＨ、Ｂｏｃ−Ａｓｐ（ＯｃＨｅｘ）−ＯＨ、Ｂｏｃ−Ｓｅｒ（Ｂｚｌ）−ＯＨ、そしてＢｏｃ−Ｈｉｓ（Ｂｏｍ）−ＯＨの順に順次カップリング／脱保護を行い、ペプチド７に相当する保護ペプチド樹脂；Ｈｉｓ（Ｂｏｍ）−Ｓｅｒ（Ｂｚｌ）−Ａｓｐ（ＯｃＨｅｘ）−Ａｌａ−Ｖａｌ−Ｐｈｅ−Ｔｈｒ（Ｂｚｌ）−Ａｓｐ（ＯｃＨｅｘ）−Ａｓｎ−Ｔｙｒ（Ｃｌ２−Ｂｚｌ）−Ｔｈｒ（Ｂｚｌ）−Ａｒｇ（Ｔｏｓ）−Ｌｅｕ−Ａｒｇ（Ｔｏｓ）−Ａｒｇ（Ｔｏｓ）−Ｇｌｎ−Ｍｅｔ−Ａｌａ−Ｖａｌ−Ａｒｇ（Ｔｏｓ）−Ａｒｇ（Ｔｏｓ）−Ｔｙｒ（Ｃｌ２−Ｂｚｌ）−Ｌｅｕ−Ａｓｎ−Ｓｅｒ（Ｂｚｌ）−Ｉｌｅ−Ｌｅｕ−Ａｓｎ−ＰＡＭを得た。ここで得られた保護ペプチド−ＰＡＭ樹脂にアニソール存在下無水フッ化水素を加えて反応させた。反応後、無水フッ化水素を減圧下留去後、残渣をエーテルで洗浄し、これに１０％酢酸を加えてペプチドを抽出した。抽出液を逆相カラムクロマトグラフィーにより精製し、凍結乾燥を行い、ペプチド７を得た。
（合成例１９）ペプチド８の製造
配列番号８に示すアミノ酸配列を有するペプチド８を前記ペプチド５の製造方法と同様に合成した。すなわち、ＭＢＨＡ樹脂に対してＢｏｃ−Ｌｅｕ−ＯＨ、Ｂｏｃ−Ｉｌｅ−ＯＨ、Ｂｏｃ−Ｓｅｒ（Ｂｚｌ）−ＯＨ、Ｂｏｃ−Ａｓｎ（Ｘａｎ）−ＯＨ、Ｂｏｃ−Ｌｅｕ−ＯＨ、Ｂｏｃ−Ｔｙｒ（Ｃｌ２−Ｚ）−ＯＨ、Ｂｏｃ−Ｌｙｓ（Ｃｌ−Ｚ）−ＯＨ、Ｂｏｃ−Ｌｙｓ（Ｃｌ−Ｚ）−ＯＨ、Ｂｏｃ−Ｖａｌ−ＯＨ、Ｂｏｃ−Ａｌａ−ＯＨ、Ｂｏｃ−Ｍｅｔ−ＯＨ、Ｂｏｃ−Ｇｌｎ（Ｘａｎ）−ＯＨ、Ｂｏｃ−Ｌｙｓ（Ｃｌ−Ｚ）−ＯＨ、Ｂｏｃ−Ａｒｇ（Ｔｏｓ）−ＯＨ、Ｂｏｃ−Ｌｅｕ−ＯＨ、Ｂｏｃ−Ａｒｇ（Ｔｏｓ）−ＯＨ、Ｂｏｃ−Ｔｈｒ（Ｂｚｌ）−ＯＨ、Ｂｏｃ−Ｔｙｒ（Ｃｌ２−Ｚ）−ＯＨ、Ｂｏｃ−Ａｓｎ（Ｘａｎ）−ＯＨ、Ｂｏｃ−Ａｓｐ（ＯｃＨｅｘ）−ＯＨ、Ｂｏｃ−Ｔｈｒ（Ｂｚｌ）−ＯＨ、Ｂｏｃ−Ｐｈｅ−ＯＨ、Ｂｏｃ−Ｖａｌ−ＯＨ、Ｂｏｃ−Ａｌａ−ＯＨ、Ｂｏｃ−Ａｓｐ（ＯｃＨｅｘ）−ＯＨ、Ｂｏｃ−Ｓｅｒ（Ｂｚｌ）−ＯＨ、そしてＢｏｃ−Ｈｉｓ（Ｂｏｍ）−ＯＨの順に順次カップリング／脱保護を行い、ペプチド８に相当する保護ペプチド樹脂；Ｈｉｓ（Ｂｏｍ）−Ｓｅｒ（Ｂｚｌ）−Ａｓｐ（ＯｃＨｅｘ）−Ａｌａ−Ｖａｌ−Ｐｈｅ−Ｔｈｒ（Ｂｚｌ）−Ａｓｐ（ＯｃＨｅｘ）−Ａｓｎ−Ｔｙｒ（Ｃｌ２−Ｂｚｌ）−Ｔｈｒ（Ｂｚｌ）−Ａｒｇ（Ｔｏｓ）−Ｌｅｕ−Ａｒｇ（Ｔｏｓ）−Ａｒｇ（Ｔｏｓ）−Ｇｌｎ−Ｍｅｔ−Ａｌａ−Ｖａｌ−Ａｒｇ（Ｔｏｓ）−Ａｒｇ（Ｔｏｓ）−Ｔｙｒ（Ｃｌ２−Ｂｚｌ）−Ｌｅｕ−Ａｓｎ−Ｓｅｒ（Ｂｚｌ）−Ｉｌｅ−Ｌｅｕ−ＭＢＨＡを得た。ここで得られた保護ペプチド−ＭＢＨＡ樹脂にアニソール存在下無水フッ化水素を加えて反応させた。反応後、無水フッ化水素を減圧下留去後、残渣をエーテルで洗浄し、これに１０％酢酸を加えてペプチドを抽出した。抽出液を逆相カラムクロマトグラフィーにより精製し、凍結乾燥を行い、ペプチド８を得た。
（合成例２０）ペプチド９の製造
配列番号９に示すアミノ酸配列を有するペプチド９を前記ペプチド５の製造方法と同様に合成した。すなわち、ＭＢＨＡ樹脂に対してＢｏｃ−Ｉｌｅ−ＯＨ、Ｂｏｃ−Ｓｅｒ（Ｂｚｌ）−ＯＨ、Ｂｏｃ−Ａｓｎ（Ｘａｎ）−ＯＨ、Ｂｏｃ−Ｌｅｕ−ＯＨ、Ｂｏｃ−Ｔｙｒ（Ｃｌ２−Ｚ）−ＯＨ、Ｂｏｃ−Ｌｙｓ（Ｃｌ−Ｚ）−ＯＨ、Ｂｏｃ−Ｌｙｓ（Ｃｌ−Ｚ）−ＯＨ、Ｂｏｃ−Ｖａｌ−ＯＨ、Ｂｏｃ−Ａｌａ−ＯＨ、Ｂｏｃ−Ｍｅｔ−ＯＨ、Ｂｏｃ−Ｇｌｎ（Ｘａｎ）−ＯＨ、Ｂｏｃ−Ｌｙｓ（Ｃｌ−Ｚ）−ＯＨ、Ｂｏｃ−Ａｒｇ（Ｔｏｓ）−ＯＨ、Ｂｏｃ−Ｌｅｕ−ＯＨ、Ｂｏｃ−Ａｒｇ（Ｔｏｓ）−ＯＨ、Ｂｏｃ−Ｔｈｒ（Ｂｚｌ）−ＯＨ、Ｂｏｃ−Ｔｙｒ（Ｃｌ２−Ｚ）−ＯＨ、Ｂｏｃ−Ａｓｎ（Ｘａｎ）−ＯＨ、Ｂｏｃ−Ａｓｐ（ＯｃＨｅｘ）−ＯＨ、Ｂｏｃ−Ｔｈｒ（Ｂｚｌ）−ＯＨ、Ｂｏｃ−Ｐｈｅ−ＯＨ、Ｂｏｃ−Ｖａｌ−ＯＨ、Ｂｏｃ−Ａｌａ−ＯＨ、Ｂｏｃ−Ａｓｐ（ＯｃＨｅｘ）−ＯＨ、Ｂｏｃ−Ｓｅｒ（Ｂｚｌ）−ＯＨ、そしてＢｏｃ−Ｈｉｓ（Ｂｏｍ）−ＯＨの順に順次カップリング／脱保護を行い、ペプチド９に相当する保護ペプチド樹脂；Ｈｉｓ（Ｂｏｍ）−Ｓｅｒ（Ｂｚｌ）−Ａｓｐ（ＯｃＨｅｘ）−Ａｌａ−Ｖａｌ−Ｐｈｅ−Ｔｈｒ（Ｂｚｌ）−Ａｓｐ（ＯｃＨｅｘ）−Ａｓｎ−Ｔｙｒ（Ｃｌ２−Ｂｚｌ）−Ｔｈｒ（Ｂｚｌ）−Ａｒｇ（Ｔｏｓ）−Ｌｅｕ−Ａｒｇ（Ｔｏｓ）−Ａｒｇ（Ｔｏｓ）−Ｇｌｎ−Ｍｅｔ−Ａｌａ−Ｖａｌ−Ａｒｇ（Ｔｏｓ）−Ａｒｇ（Ｔｏｓ）−Ｔｙｒ（Ｃｌ２−Ｂｚｌ）−Ｌｅｕ−Ａｓｎ−Ｓｅｒ（Ｂｚｌ）−Ｉｌｅ−ＭＢＨＡを得た。ここで得られた保護ペプチド−ＭＢＨＡ樹脂にアニソール存在下無水フッ化水素を加えて反応させた。反応後、無水フッ化水素を減圧下留去後、残渣をエーテルで洗浄し、これに１０％酢酸を加えてペプチドを抽出した。抽出液を逆相カラムクロマトグラフィーにより精製し、凍結乾燥を行い、ペプチド９を得た。
（合成例２１）ペプチド１０の製造
配列番号１０に示すアミノ酸配列を有するペプチド１０を前記ペプチド５の製造方法と同様に合成した。すなわち、ＭＢＨＡ樹脂に対してＢｏｃ−Ｓｅｒ（Ｂｚｌ）−ＯＨ、Ｂｏｃ−Ａｓｎ（Ｘａｎ）−ＯＨ、Ｂｏｃ−Ｌｅｕ−ＯＨ、Ｂｏｃ−Ｔｙｒ（Ｃｌ２−Ｚ）−ＯＨ、Ｂｏｃ−Ｌｙｓ（Ｃｌ−Ｚ）−ＯＨ、Ｂｏｃ−Ｌｙｓ（Ｃｌ−Ｚ）−ＯＨ、Ｂｏｃ−Ｖａｌ−ＯＨ、Ｂｏｃ−Ａｌａ−ＯＨ、Ｂｏｃ−Ｍｅｔ−ＯＨ、Ｂｏｃ−Ｇｌｎ（Ｘａｎ）−ＯＨ、Ｂｏｃ−Ｌｙｓ（Ｃｌ−Ｚ）−ＯＨ、Ｂｏｃ−Ａｒｇ（Ｔｏｓ）−ＯＨ、Ｂｏｃ−Ｌｅｕ−ＯＨ、Ｂｏｃ−Ａｒｇ（Ｔｏｓ）−ＯＨ、Ｂｏｃ−Ｔｈｒ（Ｂｚｌ）−ＯＨ、Ｂｏｃ−Ｔｙｒ（Ｃｌ２−Ｚ）−ＯＨ、Ｂｏｃ−Ａｓｎ（Ｘａｎ）−ＯＨ、Ｂｏｃ−Ａｓｐ（ＯｃＨｅｘ）−ＯＨ、Ｂｏｃ−Ｔｈｒ（Ｂｚｌ）−ＯＨ、Ｂｏｃ−Ｐｈｅ−ＯＨ、Ｂｏｃ−Ｖａｌ−ＯＨ、Ｂｏｃ−Ａｌａ−ＯＨ、Ｂｏｃ−Ａｓｐ（ＯｃＨｅｘ）−ＯＨ、Ｂｏｃ−Ｓｅｒ（Ｂｚｌ）−ＯＨ、そしてＢｏｃ−Ｈｉｓ（Ｂｏｍ）−ＯＨの順に順次カップリング／脱保護を行い、ペプチド１０に相当する保護ペプチド樹脂；Ｈｉｓ（Ｂｏｍ）−Ｓｅｒ（Ｂｚｌ）−Ａｓｐ（ＯｃＨｅｘ）−Ａｌａ−Ｖａｌ−Ｐｈｅ−Ｔｈｒ（Ｂｚｌ）−Ａｓｐ（ＯｃＨｅｘ）−Ａｓｎ−Ｔｙｒ（Ｃｌ２−Ｂｚｌ）−Ｔｈｒ（Ｂｚｌ）−Ａｒｇ（Ｔｏｓ）−Ｌｅｕ−Ａｒｇ（Ｔｏｓ）−Ａｒｇ（Ｔｏｓ）−Ｇｌｎ−Ｍｅｔ−Ａｌａ−Ｖａｌ−Ａｒｇ（Ｔｏｓ）−Ａｒｇ（Ｔｏｓ）−Ｔｙｒ（Ｃｌ２−Ｂｚｌ）−Ｌｅｕ−Ａｓｎ−Ｓｅｒ（Ｂｚｌ）−ＭＢＨＡを得た。ここで得られた保護ペプチド−ＭＢＨＡ樹脂にアニソール存在下無水フッ化水素を加えて反応させた。反応後、無水フッ化水素を減圧下留去後、残渣をエーテルで洗浄し、これに１０％酢酸を加えてペプチドを抽出した。抽出液を逆相カラムクロマトグラフィーにより精製し、凍結乾燥を行い、ペプチド１０を得た。
（合成例２２）ペプチド１１の製造
配列番号１１に示すアミノ酸配列を有するペプチド１１を前記ペプチド５の製造方法と同様に合成した。すなわち、ＭＢＨＡ樹脂に対してＢｏｃ−Ａｓｎ（Ｘａｎ）−ＯＨ、Ｂｏｃ−Ｌｅｕ−ＯＨ、Ｂｏｃ−Ｔｙｒ（Ｃｌ２−Ｚ）−ＯＨ、Ｂｏｃ−Ｌｙｓ（Ｃｌ−Ｚ）−ＯＨ、Ｂｏｃ−Ｌｙｓ（Ｃｌ−Ｚ）−ＯＨ、Ｂｏｃ−Ｖａｌ−ＯＨ、Ｂｏｃ−Ａｌａ−ＯＨ、Ｂｏｃ−Ｍｅｔ−ＯＨ、Ｂｏｃ−Ｇｌｎ（Ｘａｎ）−ＯＨ、Ｂｏｃ−Ｌｙｓ（Ｃｌ−Ｚ）−ＯＨ、Ｂｏｃ−Ａｒｇ（Ｔｏｓ）−ＯＨ、Ｂｏｃ−Ｌｅｕ−ＯＨ、Ｂｏｃ−Ａｒｇ（Ｔｏｓ）−ＯＨ、Ｂｏｃ−Ｔｈｒ（Ｂｚｌ）−ＯＨ、Ｂｏｃ−Ｔｙｒ（Ｃｌ２−Ｚ）−ＯＨ、Ｂｏｃ−Ａｓｎ（Ｘａｎ）−ＯＨ、Ｂｏｃ−Ａｓｐ（ＯｃＨｅｘ）−ＯＨ、Ｂｏｃ−Ｔｈｒ（Ｂｚｌ）−ＯＨ、Ｂｏｃ−Ｐｈｅ−ＯＨ、Ｂｏｃ−Ｖａｌ−ＯＨ、Ｂｏｃ−Ａｌａ−ＯＨ、Ｂｏｃ−Ａｓｐ（ＯｃＨｅｘ）−ＯＨ、Ｂｏｃ−Ｓｅｒ（Ｂｚｌ）−ＯＨ、そしてＢｏｃ−Ｈｉｓ（Ｂｏｍ）−ＯＨの順に順次カップリング／脱保護を行い、ペプチド１１に相当する保護ペプチド樹脂；Ｈｉｓ（Ｂｏｍ）−Ｓｅｒ（Ｂｚｌ）−Ａｓｐ（ＯｃＨｅｘ）−Ａｌａ−Ｖａｌ−Ｐｈｅ−Ｔｈｒ（Ｂｚｌ）−Ａｓｐ（ＯｃＨｅｘ）−Ａｓｎ−Ｔｙｒ（Ｃｌ２−Ｂｚｌ）−Ｔｈｒ（Ｂｚｌ）−Ａｒｇ（Ｔｏｓ）−Ｌｅｕ−Ａｒｇ（Ｔｏｓ）−Ａｒｇ（Ｔｏｓ）−Ｇｌｎ−Ｍｅｔ−Ａｌａ−Ｖａｌ−Ａｒｇ（Ｔｏｓ）−Ａｒｇ（Ｔｏｓ）−Ｔｙｒ（Ｃｌ２−Ｂｚｌ）−Ｌｅｕ−Ａｓｎ−ＭＢＨＡを得た。ここで得られた保護ペプチド−ＭＢＨＡ樹脂にアニソール存在下無水フッ化水素を加えて反応させた。反応後、無水フッ化水素を減圧下留去後、残渣をエーテルで洗浄し、これに１０％酢酸を加えてペプチドを抽出した。抽出液を逆相カラムクロマトグラフィーにより精製し、凍結乾燥を行い、ペプチド１１を得た。
（合成例２３）ペプチド１２の製造
配列番号１２に示すアミノ酸配列を有するペプチド１２を前記ペプチド５の製造方法と同様に合成した。すなわち、ＭＢＨＡ樹脂に対してＢｏｃ−Ｌｅｕ−ＯＨ、Ｂｏｃ−Ｔｙｒ（Ｃｌ２−Ｚ）−ＯＨ、Ｂｏｃ−Ｌｙｓ（Ｃｌ−Ｚ）−ＯＨ、Ｂｏｃ−Ｌｙｓ（Ｃｌ−Ｚ）−ＯＨ、Ｂｏｃ−Ｖａｌ−ＯＨ、Ｂｏｃ−Ａｌａ−ＯＨ、Ｂｏｃ−Ｍｅｔ−ＯＨ、Ｂｏｃ−Ｇｌｎ（Ｘａｎ）−ＯＨ、Ｂｏｃ−Ｌｙｓ（Ｃｌ−Ｚ）−ＯＨ、Ｂｏｃ−Ａｒｇ（Ｔｏｓ）−ＯＨ、Ｂｏｃ−Ｌｅｕ−ＯＨ、Ｂｏｃ−Ａｒｇ（Ｔｏｓ）−ＯＨ、Ｂｏｃ−Ｔｈｒ（Ｂｚｌ）−ＯＨ、Ｂｏｃ−Ｔｙｒ（Ｃｌ２−Ｚ）−ＯＨ、Ｂｏｃ−Ａｓｎ（Ｘａｎ）−ＯＨ、Ｂｏｃ−Ａｓｐ（ＯｃＨｅｘ）−ＯＨ、Ｂｏｃ−Ｔｈｒ（Ｂｚｌ）−ＯＨ、Ｂｏｃ−Ｐｈｅ−ＯＨ、Ｂｏｃ−Ｖａｌ−ＯＨ、Ｂｏｃ−Ａｌａ−ＯＨ、Ｂｏｃ−Ａｓｐ（ＯｃＨｅｘ）−ＯＨ、Ｂｏｃ−Ｓｅｒ（Ｂｚｌ）−ＯＨ、そしてＢｏｃ−Ｈｉｓ（Ｂｏｍ）−ＯＨの順に順次カップリング／脱保護を行い、ペプチド１２に相当する保護ペプチド樹脂；Ｈｉｓ（Ｂｏｍ）−Ｓｅｒ（Ｂｚｌ）−Ａｓｐ（ＯｃＨｅｘ）−Ａｌａ−Ｖａｌ−Ｐｈｅ−Ｔｈｒ（Ｂｚｌ）−Ａｓｐ（ＯｃＨｅｘ）−Ａｓｎ−Ｔｙｒ（Ｃｌ２−Ｂｚｌ）−Ｔｈｒ（Ｂｚｌ）−Ａｒｇ（Ｔｏｓ）−Ｌｅｕ−Ａｒｇ（Ｔｏｓ）−Ａｒｇ（Ｔｏｓ）−Ｇｌｎ−Ｍｅｔ−Ａｌａ−Ｖａｌ−Ａｒｇ（Ｔｏｓ）−Ａｒｇ（Ｔｏｓ）−Ｔｙｒ（Ｃｌ２−Ｂｚｌ）−Ｌｅｕ−ＭＢＨＡを得た。ここで得られた保護ペプチド−ＭＢＨＡ樹脂にアニソール存在下無水フッ化水素を加えて反応させた。反応後、無水フッ化水素を減圧下留去後、残渣をエーテルで洗浄し、これに１０％酢酸を加えてペプチドを抽出した。抽出液を逆相カラムクロマトグラフィーにより精製し、凍結乾燥を行い、ペプチド１２を得た。
（合成例２４）ペプチド１３の製造
配列番号１３に示すアミノ酸配列を有するペプチド１３を前記ペプチド５の製造方法と同様に合成した。すなわち、ＭＢＨＡ樹脂に対してＢｏｃ−Ｓｅｒ（Ｂｚｌ）−ＯＨ、Ｂｏｃ−Ａｓｎ（Ｘａｎ）−ＯＨ、Ｂｏｃ−Ｌｅｕ−ＯＨ、Ｂｏｃ−Ｔｙｒ（Ｃｌ２−Ｚ）−ＯＨ、Ｂｏｃ−Ｌｙｓ（Ｃｌ−Ｚ）−ＯＨ、Ｂｏｃ−Ｌｙｓ（Ｃｌ−Ｚ）−ＯＨ、Ｂｏｃ−Ｖａｌ−ＯＨ、Ｂｏｃ−Ａｌａ−ＯＨ、Ｂｏｃ−Ｌｅｕ−ＯＨ、Ｂｏｃ−Ｇｌｎ（Ｘａｎ）−ＯＨ、Ｂｏｃ−Ｌｙｓ（Ｃｌ−Ｚ）−ＯＨ、Ｂｏｃ−Ａｒｇ（Ｔｏｓ）−ＯＨ、Ｂｏｃ−Ｌｅｕ−ＯＨ、Ｂｏｃ−Ａｒｇ（Ｔｏｓ）−ＯＨ、Ｂｏｃ−Ｔｈｒ（Ｂｚｌ）−ＯＨ、Ｂｏｃ−Ｔｙｒ（Ｃｌ２−Ｚ）−ＯＨ、Ｂｏｃ−Ａｓｎ（Ｘａｎ）−ＯＨ、Ｂｏｃ−Ａｓｐ（ＯｃＨｅｘ）−ＯＨ、Ｂｏｃ−Ｔｈｒ（Ｂｚｌ）−ＯＨ、Ｂｏｃ−Ｐｈｅ−ＯＨ、Ｂｏｃ−Ｖａｌ−ＯＨ、Ｂｏｃ−Ａｌａ−ＯＨ、Ｂｏｃ−Ａｓｐ（ＯｃＨｅｘ）−ＯＨ、Ｂｏｃ−Ｓｅｒ（Ｂｚｌ）−ＯＨ、そしてＢｏｃ−Ｈｉｓ（Ｂｏｍ）−ＯＨの順に順次カップリング／脱保護を行い、ペプチド１３に相当する保護ペプチド樹脂；Ｈｉｓ（Ｂｏｍ）−Ｓｅｒ（Ｂｚｌ）−Ａｓｐ（ＯｃＨｅｘ）−Ａｌａ−Ｖａｌ−Ｐｈｅ−Ｔｈｒ（Ｂｚｌ）−Ａｓｐ（ＯｃＨｅｘ）−Ａｓｎ−Ｔｙｒ（Ｃｌ２−Ｂｚｌ）−Ｔｈｒ（Ｂｚｌ）−Ａｒｇ（Ｔｏｓ）−Ｌｅｕ−Ａｒｇ（Ｔｏｓ）−Ａｒｇ（Ｔｏｓ）−Ｇｌｎ−Ｌｅｕ−Ａｌａ−Ｖａｌ−Ａｒｇ（Ｔｏｓ）−Ａｒｇ（Ｔｏｓ）−Ｔｙｒ（Ｃｌ２−Ｂｚｌ）−Ｌｅｕ−Ａｓｎ−Ｓｅｒ（Ｂｚｌ）−ＭＢＨＡを得た。ここで得られた保護ペプチド−ＭＢＨＡ樹脂にアニソール存在下無水フッ化水素を加えて反応させた。反応後、無水フッ化水素を減圧下留去後、残渣をエーテルで洗浄し、これに１０％酢酸を加えてペプチドを抽出した。抽出液を逆相カラムクロマトグラフィーにより精製し、凍結乾燥を行い、ペプチド１３を得た。
（合成例２５）ペプチド１４の製造
配列番号１４に示すアミノ酸配列を有するペプチド１４を前記ペプチド５の製造方法と同様に合成した。すなわち、ＭＢＨＡ樹脂に対してＢｏｃ−Ａｓｎ（Ｘａｎ）−ＯＨ、Ｂｏｃ−Ｌｅｕ−ＯＨ、Ｂｏｃ−Ｔｙｒ（Ｃｌ２−Ｚ）−ＯＨ、Ｂｏｃ−Ｌｙｓ（Ｃｌ−Ｚ）−ＯＨ、Ｂｏｃ−Ｌｙｓ（Ｃｌ−Ｚ）−ＯＨ、Ｂｏｃ−Ｖａｌ−ＯＨ、Ｂｏｃ−Ａｌａ−ＯＨ、Ｂｏｃ−Ｌｅｕ−ＯＨ、Ｂｏｃ−Ｇｌｎ（Ｘａｎ）−ＯＨ、Ｂｏｃ−Ｌｙｓ（Ｃｌ−Ｚ）−ＯＨ、Ｂｏｃ−Ａｒｇ（Ｔｏｓ）−ＯＨ、Ｂｏｃ−Ｌｅｕ−ＯＨ、Ｂｏｃ−Ａｒｇ（Ｔｏｓ）−ＯＨ、Ｂｏｃ−Ｔｈｒ（Ｂｚｌ）−ＯＨ、Ｂｏｃ−Ｔｙｒ（Ｃｌ２−Ｚ）−ＯＨ、Ｂｏｃ−Ａｓｎ（Ｘａｎ）−ＯＨ、Ｂｏｃ−Ａｓｐ（ＯｃＨｅｘ）−ＯＨ、Ｂｏｃ−Ｔｈｒ（Ｂｚｌ）−ＯＨ、Ｂｏｃ−Ｐｈｅ−ＯＨ、Ｂｏｃ−Ｖａｌ−ＯＨ、Ｂｏｃ−Ａｌａ−ＯＨ、Ｂｏｃ−Ａｓｐ（ＯｃＨｅｘ）−ＯＨ、Ｂｏｃ−Ｓｅｒ（Ｂｚｌ）−ＯＨ、そしてＢｏｃ−Ｈｉｓ（Ｂｏｍ）−ＯＨの順に順次カップリング／脱保護を行い、ペプチド１４に相当する保護ペプチド樹脂；Ｈｉｓ（Ｂｏｍ）−Ｓｅｒ（Ｂｚｌ）−Ａｓｐ（ＯｃＨｅｘ）−Ａｌａ−Ｖａｌ−Ｐｈｅ−Ｔｈｒ（Ｂｚｌ）−Ａｓｐ（ＯｃＨｅｘ）−Ａｓｎ−Ｔｙｒ（Ｃｌ２−Ｂｚｌ）−Ｔｈｒ（Ｂｚｌ）−Ａｒｇ（Ｔｏｓ）−Ｌｅｕ−Ａｒｇ（Ｔｏｓ）−Ａｒｇ（Ｔｏｓ）−Ｇｌｎ−Ｌｅｕ−Ａｌａ−Ｖａｌ−Ａｒｇ（Ｔｏｓ）−Ａｒｇ（Ｔｏｓ）−Ｔｙｒ（Ｃｌ２−Ｂｚｌ）−Ｌｅｕ−Ａｓｎ−ＭＢＨＡを得た。ここで得られた保護ペプチド−ＭＢＨＡ樹脂にアニソール存在下無水フッ化水素を加えて反応させた。反応後、無水フッ化水素を減圧下留去後、残渣をエーテルで洗浄し、これに１０％酢酸を加えてペプチドを抽出した。抽出液を逆相カラムクロマトグラフィーにより精製し、凍結乾燥を行い、ペプチド１４を得た。
（製剤例１）用時溶解型点眼剤１
ペプチド５                          ２ｇ
塩化ナトリウム                      ０．９ｇ
ホウ酸                              ０．１ｇ
ホウ砂                              適量（ｐＨ７．８）
塩化ベンザルコニウム                ０．００５ｇ
エデト酸ナトリウム                  ０．０２ｇ
精製水                              全量１００ｍＬ
ペプチド５を５ｇ、精製水１００ｍＬに溶解し、メンブランフィルター（０．４５μｍ）でろ過する。この溶液を５ｍＬの点眼容器に２ｍＬづつ分注し、凍結乾燥する。精製水約８０ｍＬに塩化ナトリウム０．９ｇ、ホウ酸０．１ｇ、塩化ベンザルコニウム０．００５ｇおよびエデト酸ナトリウム０．０２ｇを溶解し、ホウ砂でｐＨを７．８に調整した後、全量を精製水で１００ｍＬとする。この溶液をメンブランフィルター（０．４５μｍ）でろ過し、５ｍＬアンプルに分注し密封し溶解溶液とする。用時、溶解溶液を点眼容器に注入し点眼剤とする。
（製剤例２）用時溶解型点眼剤２
ペプチド１５                        ０．１ｇ
マンニトール                        ５ｇ
ホウ酸                              ０．１ｇ
ホウ砂                              適量（ｐＨ７．８）
塩化ベンザルコニウム                ０．００５ｇ
エデト酸ナトリウム                  ０．０２ｇ
精製水                              全量１００ｍＬ
ペプチド１５を０．２５ｇ、マンニトール１２．５ｇを精製水１００ｍＬに溶解し、メンブランフィルター（０．４５μｍ）でろ過する。この溶液を５ｍＬの点眼容器に２ｍＬづつ分注し、凍結乾燥する。精製水約８０ｍＬにホウ酸０．１ｇ、塩化ベンザルコニウム０．００５ｇおよびエデト酸ナトリウム０．０２ｇを溶解し、ホウ砂でｐＨを７．８に調整した後、全量を精製水で１００ｍＬとする。この溶液をメンブランフィルター（０．４５μｍ）でろ過し、５ｍＬアンプルに分注し密封し溶解溶液とする。用時、溶解溶液を点眼容器に注入し点眼剤とする。
（製剤例３）一剤性点眼剤１
ペプチド５                          ０．１ｇ
ホウ酸                              ０．７ｇ
ホウ砂                              適量（ｐＨ７．７）
塩化ナトリウム                      ０．５ｇ
エデト酸ナトリウム                  ０．０５ｇ
塩化ベンザルコニウム                ０．００５ｇ
精製水                              全量１００ｍＬ
精製水約８０ｍＬに塩化ナトリウム、ホウ酸、エデト酸ナトリウムおよび塩化ベンザルコニウムを加えて溶かし、ホウ砂を加えｐＨを７．７に調整する。この液にペプチド５を添加し溶解させた後、精製水を加え全量１００ｍＬとし、点眼剤を調製する。
（製剤例４）一剤性点眼剤２
ペプチド１５                        ０．５ｇ
塩化ナトリウム                      ０．９ｇ
リン酸２水素ナトリウム・２水和物    ０．１ｇ
塩化ベンザルコニウム                ０．００５ｇ
０．１Ｎ水酸化ナトリウム            適量（ｐＨ７．２）
精製水                              全量１００ｍＬ
精製水約８０ｍＬに塩化ナトリウム、リン酸２水素ナトリウム・２水和物および塩化ベンザルコニウムを加えて溶かし、０．１Ｎ水酸化ナトリウムを加えｐＨを７．２に調整する。この液にペプチド１５を添加し溶解させた後、精製水を加え全量１００ｍＬとし、点眼剤を調製する。
（製剤例５）注射剤１
ペプチド５（１．０ｍｇ）、塩化ナトリウム２００ｍｇおよびゼラチン３００ｍｇを注射用水に溶解する。これにｐＨ調整剤を適量加えてｐＨ７．４になるようにし、注射用水で全量２０ｍＬとし、無菌濾過後、ガラス製アンプルに２ｍＬずつ分注充填する。
（製剤例６）注射剤２
ペプチド１５（１．０ｍｇ）、塩化ナトリウム２００ｍｇおよびアルブミン２５０ｍｇを注射用水に溶解する。これにｐＨ調整剤を適量加えてｐＨ７．４になるようにし、注射用水で全量２０ｍＬとし、無菌濾過後，ガラス製アンプルに２ｍＬずつ分注充填する。
（試験例１）トリプシンによる消化試験
コンドロイチン硫酸共存下、トリプシンによる消化におけるペプチド５の高塩基性化による効果を検討した。
１）試験方法
ＶＩＰおよびペプチド５の溶液（１ｍｇ／ｍＬ）１００μＬに０．２Ｍ  Ｔｒｉｓ−ＨＣｌ緩衝液（ｐＨ７．５）に溶解したコンドロイチン硫酸溶液（ｐＨ７．５，１００μｇ／ｍＬ）４００μＬを添加した。この溶液１００μＬに対してトリプシン０．５ｍＵを加え、３７℃で１８０分インキュベートし、その後、ＨＰＬＣにて未分解のペプチド量を測定した。
２）結果
コンドロイチン硫酸共存下のトリプシンによる消化において、ＶＩＰの残存率は７５％であったのに対して、ペプチド５のそれは８９％と高かった。この結果は、本ペプチドと酸性多糖類が相互作用することにより酵素分解に対して抵抗性を示すことを示唆する。
（試験例２）気管支肺胞洗浄液による消化試験
気管支肺胞洗浄液による消化に対するペプチド５の高塩基性化による効果を検討した。
１）試験方法
ＶＩＰおよびペプチド５を０．２％Ｔｒｉｓ−ＨＣｌ緩衝液（ｐＨ７．４）に溶解し（１．１ｍｇ／ｍＬ）、これに気管支肺胞洗浄液（Ｂｒｏｎｃｈｏａｌｖｅｏｌａｒ  ｌａｖａｇｅ  ｆｌｕｉｄ，ＢＡＬＦ）を添加した。ＢＡＬＦは８〜９週齢の正常ＳＤ雄性ラット（約３５０ｇ）を麻酔下に５ｍＬの生理食塩水を気管内に注入・回収し、この操作を計３回繰り返して得た。ＢＡＬＦ０．５ｍＬにサンプル溶液０．０５ｍＬを加えて３７℃で９０分間反応させた後、未分解のペプチド量をＨＰＬＣにて測定した。
２）結果
ＢＡＬＦによる消化試験において、ＶＩＰの残存率は４５．５％であったのに対して、ペプチド５の残存率は８０．０％であり、ＶＩＰに比べて約１．８倍の残存率を示した。この結果は、本ペプチドが生体内において優れた安定性を示すことを示唆する。
（試験例３）摘出涙腺からのタンパク分泌促進作用
ウサギ摘出涙腺にＶＩＰ、ペプチド５または１５を処置し、分泌されるタンパク質量の増加に及ぼすこれらペプチドの薬理効果を検討した。
１）被験溶液の調製
ａ）塩化ナトリウム（１３７．９２ｇ）、塩化カリウム（７．０１ｇ）、塩化カルシウム・２水和物（３．５３ｇ）および塩化マグネシウム・６水和物（１．２ｇ）に精製水を加え、全量を１０００ｍＬとした（溶液１）。また、リン酸２水素カリウム（８．１７ｇ）に精製水を加え、全量を５００ｍＬとした（溶液２）。精製水９００ｍＬに溶液１（５０ｍＬ）および溶液２（１０ｍＬ）を加え、グルコース２．０７ｇおよび炭酸水素ナトリウム２．１ｇを溶解し、全量を１０００ｍＬ（ｐＨ約７．４）とし、これを培養液とした。培養液には９５％酸素および５％二酸化炭素の混合ガスを通気した。
ｂ）培養液にＶＩＰ、ペプチド５またはペプチド１５を１０−４Ｍの濃度になるように溶解し、これを被験溶液とした。
２）涙腺切片標品の作製
雄性日本白色ウサギに全身麻酔を施し、腹大動脈より灌流液（１１６ｍＭ塩化ナトリウム、５．４ｍＭ塩化カリウムを含む）を灌流し、主涙腺組織を摘出して脂肪結合組織を除去した後、２等分した（１片は約４０ｍｇ）。この涙腺組織切片を各ウェルに培養液０．５ｍＬを満たした２４ウェルプレートに移し、３７℃でインキュベーションした。２０分毎に３回培養液を交換して合計６０分間置き、定常状態の涙腺切片標品とした。
３）実験方法
ａ）定常状態にした切片標品を用い、新たな培養液０．５ｍＬと交換し、３７℃で２０分間インキュベーションした。この培養液を採取し、タンパク質染色試薬（ＤＣ  Ｐｒｏｔｅｉｎ  ａｓｓａｙ  ｒｅａｇｅｎｔ，Ｂｉｏ  Ｒａｄ）を加えタンパク質量を測定し、湿重量１ｍｇ当たりのタンパク質分泌量に換算した。この時のタンパク質量をタンパク質分泌率１００％とし、処置前の分泌率とした。
ｂ）ａ）におけるインキュベーション後の切片標品の培養液を被験溶液０．５ｍＬと交換し、２０分間隔で合計５回、交換・採取した。採取した液にタンパク質染色試薬を加えてタンパク質量を測定した。対照群の切片標品は培養液を同様に交換してタンパク質量を測定した。
４）結果
実験結果を図１に示した。縦軸は摘出涙腺からのタンパク質分泌率（％）を、横軸は各被験溶液の処置時間（分）を示す。ＶＩＰ、ペプチド５およびペプチド１５を処置すると、タンパク質分泌率は処置時間０〜４０分の間、対照群に比べて有意に増加した（ｎ＝５、平均値±標準誤差、＊；ｐ＜０．０５、＊＊；ｐ＜０．０１、Ｄｕｎｎｅｔｔの検定）。すなわち、ペプチド５および１５はＶＩＰとともに優れたタンパク質分泌促進作用を有していることが明らかとなった。
（試験例４）点眼による涙液分泌促進作用（１）
ウサギにペプチド５または１５を点眼し、分泌された涙液量を測定することにより、涙液分泌量の増加に及ぼすこれらペプチドの薬理効果を検討した。
１）溶液の調製
塩化ナトリウム（０．９ｇ）、リン酸２水素ナトリウム・２水和物（０．１ｇ）に精製水を加え、全量を１００ｍＬとした。さらに適量の水酸化ナトリウム水溶液を加えてｐＨ７．０に調整し、これを基剤とした。基剤にペプチド５を０．１ｗ／ｖ％に、ペプチド１５を２．０ｗ／ｖ％になるように溶解し、被験溶液を調製した。
２）実験方法
涙液量の測定はシルマーテストにて実施した。日本白色ウサギに被験溶液５０μＬを１回点眼投与し、点眼前および点眼１０分後の涙液分泌量を測定した。涙液量測定５分前に０．４ｗ／ｖ％塩酸オキシブプロカイン（アネロカールＴＭ点眼液、千寿製薬（株））１０μＬを点眼して局所麻酔を施した。濾紙を用いて下眼瞼結膜嚢内の涙液を拭き取った後、シルメル試験紙（昭和薬品化工（株））を使用し、１分間の涙液分泌量を測定した。
３）結果
実験結果を表２に示した。ウサギに１回点眼することにより涙液分泌量は、ペプチド５溶液点眼では有意に増加し（＊；ｐ＜０．０１、対応のあるｔ検定）、また、ペプチド１５溶液点眼では統計的に有意差は認められなかったものの、増加傾向を示した（ｐ＝０．１３、対応のあるｔ検定）。
すなわち、ペプチド５および１５は優れた涙液分泌促進作用を有していることが明らかとなった。
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（試験例５）点眼による涙液分泌促進作用（２）
試験例４と同様にペプチド５を点眼し分泌された涙液分泌量を測定した。本試験では涙液分泌量を経時的に測定し、ＶＩＰと効果を比較した。
１）溶液の調製
溶液の調製は試験例４と同様に行ない、ＶＩＰおよびペプチド５を０．１ｗ／ｖ％になるように基剤に溶解し、被験溶液を調製した。
２）実験方法
日本白色ウサギに基剤または被験溶液５０μＬを１回点眼投与し、点眼前、点眼１０分、２０分、３０分、６０分、１２０分後の涙液分泌量を測定した。涙液分泌量の測定は試験例４と同様に行なった。
３）結果
点眼後の涙液分泌量の変化を図２に示した。縦軸は涙液分泌量（シルマー値：ｍｍ／分）の点眼前との差（増加分）を示す。横軸は時間経過（分）を示す。ＶＩＰおよびペプチド５の点眼により点眼１０分後に基剤点眼の対照群に比較して有意に増加した（ｎ＝８、平均値±標準誤差、＊；ｐ＜０．０５、＊＊；ｐ＜０．０１、パラメトリックＤｕｎｎｅｔｔ型多重比較検定）。点眼後１２０分までの涙液分泌量増加分の積算値（ＡＵＣ値＝Δシルマー値×分）を表３に示した。ＡＵＣ値はペプチド５点眼群＞ＶＩＰ点眼群＞対照群の順であり、ペプチド５点眼群は対照群に対して有意に高値を示した（＊；ｐ＜０．０５）。一方、ＶＩＰ点眼群は対照群に対して有意差は認められなかった（ｐ＝０．３８）。すなわち、ペプチド５はＶＩＰに比べて優れた涙液分泌促進作用を有していることが明らかとなった。
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産業上の利用可能性
以上の結果より、本発明のＶＩＰ誘導体は優れた涙液分泌促進作用を有し、ドライアイおよびドライアイを原因とする疾患の治療剤として有用であることを示す。
【配列表】
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【図面の簡単な説明】
図１  ウサギ摘出涙腺にＶＩＰ、ペプチド５またはペプチド１５を作用させた時の涙腺よりのタンパク質分泌率を示す。
図２  ウサギにＶＩＰまたはペプチド５を１回点眼した時の涙液分泌量（シルマー値）の増加分を経時的に示す。
【図１】
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【図２】
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【国際調査報告】
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