【事件の表示】
　特願２００８−２９５９８３「精製ラクターゼ」拒絶査定不服審判事件〔平成２１年　２月１９日出願公開、特開２００９−　３４１１６〕について、次のとおり審決する。
【結　論】
　本件審判の請求は、成り立たない。
【理　由】
第１　手続の経緯
　
　本願は、２００２年４月３日（パリ条約による優先権主張２００１年４月４日、欧州特許庁）を国際出願日とする特願２００２−５８００３６号の一部を平成２０年１１月１９日に新たな特許出願としたものであって、平成２１年１０月８日付けで拒絶査定がなされ、これに対し、平成２２年２月２２日に拒絶査定不服審判の請求がなされたものである。
　
第２　本願発明
　
　本願の請求項１ないし１７に係る発明は、平成２１年９月２日付け手続補正書の特許請求の範囲の請求項１ないし１７に記載された事項により特定されるとおりのものと認められ、そのうち請求項１は、以下のとおりである。（以下、請求項１に係る発明を「本願発明」という。）　
   　
「【請求項１】１０〜７０質量／質量％のグリセロールを含有し、かつ１００ｍＰａ未満の粘度を有するラクターゼ液の製造方法であって、ラクターゼの未処理液に存在する多糖類及びオリゴ糖類が、前記ラクターゼ液から分離され、得られたラクターゼ液に１０〜７０質量／質量％のグリセロールが添加されることを特徴とする、製造方法。」
　
第３　刊行物とその記載事項
　原査定の拒絶の理由に引用された本願優先日前に頒布された刊行物１及び２には、以下の事項がそれぞれ記載されている。なお、下線は当審が付した。
　
（１）刊行物１：特開昭５３−１４８５９１号公報の記載事項
　
（１ａ）「特許請求の範囲
（１）バチルス属に属する新ラクターゼ生産菌を培地に培養し、新ラクターゼを培地中に生産蓄積せしめ、これを採取することを特徴とする新ラクターゼの製造法。」（※当審注　原文は、（１）は丸囲み文字）（第１頁左欄３行〜７行）
  　
（１ｂ）「（２）
ミルク処理という工業的用途
　
（１ｃ）「本発明では次いで上記により得られる培養物から新ラクターゼを採取する。採取法は通常の酵素の採取法に従い行い得る。特に本発明によれば所望の新ラクターゼが菌体外に分泌生産されるため、例えば
培養液を直接又は水もしくは適当な有機溶媒にて抽出して菌体を濾過
除去後可溶性塩類例えば硫安等により塩析沈殿乾燥せしめればよく、これにより粗酵素粉末を得ることができる。更に該粗酵素粉末は常法に従い例えばこれを透析膜を用い、０．０１Ｍトリス−塩酸緩衝液（ｐＨ８．３）で透析し、ＤＥＡＥセフアデツクスＡ−２５を用いて分離精製
　
（１ｄ）「（７）
精製方法
　
（１ｅ）「実施例１
　肉エキス０．５％、ポリペプトン１％、塩化ナトリウム０．２％、乳糖０．１％を含む液体培地（ｐＨ７．０）を坂口フラスコに１００ｍｌずつ分注し、１２０℃１５分間オートクレーブする。ＬＯＢ３７７菌を１白金耳接種し、３８℃１日往復式振とう機で振とう培養する。培養液の力価は０．３ＯＮＰＧ単位／ｍｌ、０．３Ｌａｃｔ単位／ｍｌであつた。
実施例２
　乳糖５６０ｇ、脱脂大豆粉４２０ｇ、コーンジスチラーズソルブル４２０ｇ、コーンスチーブリーカー１４０ｇ、酵母エキス７０ｇ、リン酸アンモニウム７０ｇ、炭酸ナトリウム３５ｇ、大豆油２４５ｍｌ、水２７ｌを７０ｌフアーメンターに入れ、１２０℃５分間オートクレーブする。実施例１の培養液１００ｍｌを接種し、３８℃３日間３５ｌ／分通気撹拌培養する。培養液の力価は、１３ＯＮＰＧ単位／ｍｌ、１４Ｌａｃｔ単位／ｍｌであった。
実施例３
　実施例２で得られた
培養液を濾過除菌後、０．５３飽和の硫安塩析し
得られた粗酵素粉末
粗酵素粉末
を透析膜を使い、０．０１Ｍトリス−塩酸緩衝液（ｐＨ８．３）で透析し、ＤＥＡＥセフアデツクスＡ−２５に吸着させ、０．３５Ｍ塩化カリウムで溶出させた
溶出したＯＮＰＧ活性分画をさらにＤＥＡＥセフアデツクスＡ−５０に吸着、溶離させた
ＤＥＡＥセフアデツクスＡ−５０カラムクロマトグラフイー
  　
（２）刊行物２：特公平６−７３４５４号公報の記載事項
　
（２ａ）「【特許請求の範囲】
【請求項１】ラクトース分解酵素の無菌溶液の製造方法であって、発酵法により産生されたラクトース分解酵素溶液の回収及び純化後であって除菌濾過器を閉塞させるに充分な劣化生成物の形成前である、前記回収及び純化後14日以内に該
ラクトース分解酵素溶液
【請求項２】回収及び純化の直後に、そして除菌濾過前に、酵素溶液を減菌化する特許請求の範囲第１項記載の方法。
【請求項３】酵素溶液に対し１種又は複数種の溶剤及び（又は）添加物を添加する特許請求の範囲第１項又は第２項記載の方法。
【請求項４】グリセロールを添加する特許請求の範囲第３項記載の方法。
【請求項５】
除菌濾過後に約50重量％のグリセロールを添加する
【請求項６】製造されたラクトース分解酵素の無菌溶液を滅菌された容器に導入する特許請求の範囲第１〜５項のいずれか１項に記載の方法。」
　
（２ｂ）「従来の技術
ラクトース（乳糖）は酪農製品中に、及び更に詳細には牛乳、脱脂乳、クリーム及びその他の乳製品中に存在する二糖類の一種である。これらの諸製品は約４〜５％の量のラクトースを含有している。
非吸収性のラクトースは通常は体内で分解されて吸収性の単糖類であるグルコースとガラクトースとになる。人体の（及び他の哺乳動物の）腸壁内に存在するβ−ガラクトシダーゼ又はラクターゼと称される天然酵素によつて上記の分解が行われる
ラクトース含有製品中のラクトースを分解するためのラクターゼの消化系を全面的に、又は部分的に欠如することによつて起るいわゆるラクトース不耐症に悩むヒト及び動物は世界の広域に及んでいる。この場合にラクトースはグルコース及びガラクトース（これらは吸収可能である）に分解しないか又は不充分にしか分解されないので非吸収性のラクトースは腸障害を起す。
ラクトース不耐症の現象は多年にわたり認められている。牛乳タンパク質はそのアミノ酸構成の点から大きな食品価値をもつ。ラクトース不耐症患者及び罹患動物のためのラクトース低含有又はラクトース不含有の乳及び乳製品の製造が企画されてきている。ラクターゼ添加製品が甘味を増すことはラクターゼ添加における番外の利点である。」（第２欄１０行〜第３欄１８行）
  　
（２ｃ）「英国特許第1477087号明細書の方法が学術雑誌〔Voedings middelen technologie 13（1980）,23〕に更に引用されているがそれによると
酪農加工業者に供給される滅菌ラクターゼ（germ−poor lactase）は通常の場合に水溶液であつてこれに対し一種又は複数種の安定化剤例えばグリセロールを添加し、使用前に濾過
する
　
（２ｄ）「発明が解決しようとする問題点
しかるに上述の系の実施において除菌濾過器は屡々目詰まり（閉塞）するのである。閉塞は主としてタンパク質と多糖類（ガム類）との劣化によるもので該タンパク質と多糖類とは精製されても尚酵素溶液中に残留するのである。劣化現象は酵素使用前に酵素を長く置く程一般に増加し促進されるがこれは酵素製造業者による酵素製造と酪農品加工業者によるその使用との間にかなりの期間が経過するからである。ラクターゼ製品中に存在するプロテアーゼも又劣化過程で役割を果す。
除菌濾過器の取替又は清掃のくり返しは濾過工程の効率の著しい妨げとなることは明かである。除菌濾過器の取外しのために濾過工程を停止せねばならないばかりでなく全濾過系の再使用前に全濾過系を新規に滅菌せねばならない。
菌体濾過の問題の解決のための幾つかの方策が多年にわたり企図されたがそれらの努力は望ましい成果に至らなかつたか又は工業上の規模の点で方法の採算化のためには余りに高費であつた。段階的濾過法即ち順次減少の孔径をもつ複数の膜濾過器の系の助けによる濾過法が試みられたけれどもこれらの濾過器も又比較的短時間の後に詰つてしまうことが判つた。除菌濾過器を通過させる前に酵素溶液を遠心分離処理することが提案されたけれどもこの方法も同じく最適結果を与えずしかもかなり高費用を要した。その他の幾つかの回収方法、例えば酵素溶液を更に清澄化させる方法も又濾過器閉塞問題の解決に至らなかつた。
問題点を解決するための手段
上記の濾過の問題は、酵素産生菌の発酵及び常法による酵素の回収及び純化並びに任意に該酵素を溶液中で滅菌保存した直後であつて該酵素を乳へ添加する以前に該酵素を無菌化することにより克服し得ることが今や本発明によつて見出された。
即ち本発明は発酵法により産生されたラクトース分解酵素の溶液の回収及び純化後に、但し除菌濾過器を閉塞させるに充分な劣化生成物の形成前に、該ラクトース分解酵素溶液を除菌濾過によつて無菌化することを特徴とするラクトース分解酵素の無菌溶液の製造方法を提供する。」（第４欄７行〜４５行）
　
（２ｅ）「上記の除菌濾過による酵素溶液の除菌前に、又は除菌後に１種又は複数種の溶剤又は他の添加物を、例えば
酵素活性を所望のレベルに保つため及び酵素を更に安定化するために、添加してもよい
酵素の安定化に同時に資する好適溶剤はグリセロールである。最終的なグリセロール：水の比は臨界的でないけれども好ましくは1:9〜4:1（容積比）及び特に好ましくは1:3〜1:1である
本発明の例示となる好適態様において、ラクターゼ含有水性発酵産物を自己消化に付してから好ましくは濾過器の助けによつて濾過する。必要ならば液を活性炭で処理し、菌減少濾過器〔いわゆるポリシユ  フイルタ（polish filter）〕を通過させてこの溶液を減菌化する。次に限外濾過して酵素を濃厚化し、その後に
グリセロールを添加する（約50重量％）
他の適切な態様においては前記同様にして自己消化、濾過、ポリシユ（菌減少）濾過及び限外濾過を行つた後に
約20重量％のグリセロールを液へ加える
好適態様において上記の予備濾過工程及び除菌濾過工程の後に50重量％のグリセロールを加えた。上記方法に関して後者の方法の利点は除菌濾過前の溶液の粘稠性が少く、従つて濾過がより速かであることにある
更に、
本発明の方法により製造されたラクトース分解酵素の無菌溶液を、ラクトース低含有の乳及び乳製品（これはより甘い製品を意味する）の製造に用いることができる
　
（２ｆ）「例  １
ラクターゼ含有溶液の除菌濾過
ラクターゼ含有のギスト−ブロカデス（Gist−Brocades）社の市販水性発酵製品である回収及び純化後14日以内の登録商標名マキシラクト（MaxilactR）
　
第３　対比・判断
　刊行物１には、「バチルス属に属する新ラクターゼ生産菌を培地に培養し、新ラクターゼを培地中に生産蓄積せしめ、これを採取することを特徴とする新ラクターゼの製造法」であって（1a）、新ラクターゼ生産菌を培地に培養した後、得られた培養液を濾過除菌後、０．５３飽和の硫安塩析し、得られた粗酵素粉末を透析膜を使い、０．０１Ｍトリス−塩酸緩衝液（ｐＨ８．３）で透析し、ＤＥＡＥセフアデツクスＡ−２５に吸着させ、０．３５Ｍ塩化カリウムで溶出させ、溶出したＯＮＰＧ活性分画をさらにＤＥＡＥセフアデツクスＡ−５０に吸着、溶離させたこと（1e）が、記載されている。
　そうすると、刊行物１の上記記載事項（特に上記（1a,1e））から、刊行物１には、
「バチルス属に属する新ラクターゼ生産菌を培地に培養し、新ラクターゼを培地中に生産蓄積せしめ、得られた培養液を濾過除菌後、０．５３飽和の硫安塩析し、得られた粗酵素粉末を透析膜を使い、０．０１Ｍトリス−塩酸緩衝液（ｐＨ８．３）で透析し、ＤＥＡＥセフアデツクスＡ−２５に吸着させ、０．３５Ｍ塩化カリウムで溶出させ、溶出したＯＮＰＧ活性分画をさらにＤＥＡＥセフアデツクスＡ−５０に吸着、溶離させたラクターゼ液の製造法」
の発明（以下、「刊行物１発明」という。）が記載されていると認められる。
　
　そこで、本願発明と刊行物１発明とを比較する。
　
（ア）刊行物１には、「ＤＥＡＥセフアデツクスＡ−５０カラムクロマトグラフイー」と記載されており（1e）、刊行物１発明の「ＤＥＡＥセフアデツクスＡ−２５」及び「ＤＥＡＥセフアデツクスＡ−５０」はクロマトグラフィーの一種である。
　そして、刊行物１発明の「バチルス属に属する新ラクターゼ生産菌を培地に培養し、新ラクターゼを培地中に生産蓄積せしめ、得られた培養液」は、濾過除菌やクロマトグラフィー処理を行っていないものであることから、本願発明の「ラクターゼ未処理液」に相当する。
　
（イ）本願発明の「ラクターゼの未処理液に存在する多糖類及びオリゴ糖類が、前記ラクターゼ液から分離され」ることについて、本願の明細書の段落【０００６】には「クロマトグラフィーの使用によって、滅菌フィルターを詰まらせるかもしれない全て（多糖類、オリゴ糖類、タンパク質、ペプチド等）の化合物を除去できる。」と記載されていることなどから、ラクターゼの未処理液に存在する多糖類やオリゴ糖類は、クロマトグラフィーの使用によって分離されるものである。
　そうすると、刊行物１発明の「得られた培養液を濾過除菌後、０．５３飽和の硫安塩析し、得られた粗酵素粉末を透析膜を使い、０．０１Ｍトリス−塩酸緩衝液（ｐＨ８．３）で透析し、ＤＥＡＥセフアデツクスＡ−２５に吸着させ、０．３５Ｍ塩化カリウムで溶出させ、溶出したＯＮＰＧ活性分画をさらにＤＥＡＥセフアデツクスＡ−５０に吸着、溶離させ」ることは、培養液をクロマトグラフィーによって精製しラクターゼ液を得ているといえる（1c,1d）ので、本願発明の「ラクターゼの未処理液に存在する多糖類及びオリゴ糖類が、前記ラクターゼ液から分離され」ラクターゼ液を得ることは、ラクターゼ未処理液をクロマトグラフィーによって精製してラクターゼ液を得る点で共通する。
　　
　しがっって、両者の間には、以下の一致点及び相違点がある。
　
（一致点）
「ラクターゼ未処理液をクロマトグラフィーによって精製して得るラクターゼ液の製造方法」
　　
（相違点１）本願発明では「ラクターゼの未処理液に存在する多糖類及びオリゴ糖類が、前記ラクターゼ液から分離され」るのに対し、刊行物１発明では、本願の明細書でそのための手段として記載されているクロマトグラフィーによって精製しているものの、多糖類及びオリゴ糖類の分離については特に規定していない点。
    　
（相違点２）クロマトグラフィーによって精製して得られたラクターゼ液に、本願発明では「１０〜７０質量／質量％のグリセロールが添加される」のに対し、刊行物１発明ではグリセロールが添加されることについては特に規定していない点。
  　
（相違点３）製造されたラクターゼ液が、本願発明では「１００ｍＰａ未満の粘度」を有するのに対し、刊行物１発明では粘度については特に規定していない点。
　
　そこで、上記各相違点について検討する。
　
（相違点１について）
　刊行物１には、多糖類及びオリゴ糖類が分離されることについては特に記載されていないが、ラクターゼ生産菌を培養して得られた培養液をクロマトグラフィーで精製する過程においては、当然にラクターゼ以外のものを分離しようとするものであり、また、その精製を、そのための精製方法として本願明細書に記載されたクロマトグラフィーによって行っていることを考えれば、多糖類やオリゴ糖類が分離されるものといえる。　
　そうすると、刊行物１発明のラクターゼ液は、クロマトグラフィーを使用して精製されるものであることから、存在する多糖類及びオリゴ糖類が実質的に分離されるものといえ、相違点は、実質的なものではない。
　
（相違点２について）
　刊行物２には、ラクトース分解酵素であるラクターゼの溶液(2a,2b,2f)に、酵素活性を所望のレベルに保つため、グリセロールを添加することが記載され（2a,2e）、より具体的には「酵素の安定化に同時に資する好適溶剤はグリセロールである。最終的なグリセロール：水の比は臨界的でないけれども好ましくは1:9〜4:1（容積比）及び特に好ましくは1:3〜1:1である。」（2e）こと、また、好適態様としては、約50重量％（2a,2e）あるいは約20重量%加えること（2e）が記載されている。
　そうすると、刊行物１発明において、酵素活性を所望のレベルに保つことを考えて、クロマトグラフィーにより精製したラクターゼ液に、グリセロールを、酵素の安定化に資する程度の適切な量として１０〜７０質量／質量％程度添加することは、刊行物２に記載された発明を参照して、当業者が適宜になし得たことである。
　
（相違点３について）
　刊行物１発明のラクターゼ液は、クロマトグラフィーを使用して精製することにより実質的に多糖類及びオリゴ糖類が分離されたものであり、また、その粘性は、本願明細書の段落【０００７】に好適な方法として記載された陰イオン交換樹脂（DEAEセフアデツクス）を用いて精製されたものであるから、本願発明の製造方法におけるクロマトグラフィーによって精製された、グリセロールを添加する前のラクターゼ液と同程度のものと解される。
　そして、さらにこれに、刊行物２に記載された発明を参照して酵素活性を所望のレベルに保つことを考え、酵素の安定化に資する程度の適切な量のグリセロールを添加した際、得られたラクターゼ液は、本願発明の製造方法により得られたラクターゼ液と同程度のグリセロールを含むものであることから、その粘度も、本願発明の製造方法によって得られたラクターゼ液と同程度、例えば１００ｍＰ未満のものとなるといえる。
　そうすると、相違点３については、引用例１発明のラクターゼ液に、引用例２の記載事項を参照して、酵素活性を所望のレベルに保つことを考え、グリセロールを添加する工程を付加すれば、満たすことになるであろう数値範囲を特定したにすぎず、この特定により、本願発明が引用例１及び引用例２に記載された発明から容易に想到し得ないものとなるとはいえない。
   　
（本願発明の効果について）
　刊行物１発明がラクターゼ液が、クロマトグラフィーを使用して精製することにより実質的に多糖類及びオリゴ糖類が分離されたものであることを考えれば、多糖類及びオリゴ糖類の除去によってラクターゼ液の簡易な濾過滅菌を可能にし、フィルターが多糖類及びオリゴ糖類で塞がれなくなる、などの本願発明の効果は、刊行物１及び２の記載事項から当業者が予測し得たものであり、格別顕著なものとはいえない。
　
　したがって、本願発明は、刊行物１及び２に記載された発明に基いて、当業者が容易に発明をすることができたものである。
　
第４　むすび
　
　以上のとおりであるから、本願発明は特許法第２９条第２項の規定により特許を受けることができないものであるので、その余の請求項に係る発明について検討するまでもなく、本件出願は、拒絶をすべきものである。