【事件の表示】
　特願２００２−２９８８３２「動物細胞培養用ビーズ」拒絶査定不服審判事件〔平成１５年　７月　８日出願公開、特開２００３−１８９８４８〕について、次のとおり審決する。
【結　論】
　本件審判の請求は、成り立たない。
【理　由】
第１　手続の経緯  
　本願は、平成１４年１０月１１日（優先権主張平成１３年１０月１９日）の出願であって、平成１９年９月２８日付けで拒絶理由通知書が出され、同年１２月７日付けで手続補正書が提出されたが、平成２０年１２月１０日付けで拒絶査定がなされ、これに対し、平成２１年２月６日に拒絶査定不服審判の請求がされたものである。  
 　  
第２　本願発明について  
１　本願発明の認定  
　本願の請求項１〜７に係る発明は、平成１９年１２月７日付け手続補正書により補正された特許請求の範囲の請求項１〜７に記載された事項により特定されたとおりのものと認められ、その請求項１に係る発明（以下、同項記載の発明を「本願発明」という。）は、下記の事項により特定される発明である。  
「微粒子（Ｂ）の表面に、細胞接着シグナルを現す最小アミノ酸配列を１分子中に少なくとも１個有するポリペプチド（Ｐ）を配してなり、ポリペプチド（Ｐ）の細胞接着シグナルを現す最小アミノ酸配列が、アミノ酸３文字表記で現わされる、Arg Gly Asp配列、Leu Asp Val配列、Arg Glu Asp Val配列（１）、Tyr Ile Gly Ser Arg配列（２）、Pro Asp Ser Gly Arg配列（３）、Arg Tyr Val Val Leu Pro Arg配列（４）、Leu Gly Thr Ile Pro Gly配列（５）、Arg Asn Ile Ala Glu Ile Ile Lys Asp Ile配列（６）、Ile Lys Val Ala Val配列（７）、Leu Arg Glu配列、Asp Gly Glu Ala配列（８）及びHis Ala Val配列からなる群より選ばれる少なくとも１種の配列であり、（Ｐ）の含有量が（Ｂ）の表面積１ｃｍ2当り０．１〜１００μｇであることを特徴とする動物細胞培養用ビーズ。」
 　 
２　引用刊行物およびその記載事項  
　原査定の拒絶の理由で引用され、本願優先権主張日前に頒布された刊行物である刊行物１：Cytotechnology Vol.13, p.89-98 (1993)（拒絶理由の引用文献１）には、以下の事項が記載されている。
 　  
（１）刊行物１に記載された事項  
［１ａ］「Polystyrene culture dishes and polystyrene microcarriers were coated with Pronectin-F and poly-L-lysine (polylysine), either alone or in combination. Pronectin-F is a recombinant peptide containing repeats of the RGD cell-attachment sequence from fibronectin. Polylysine is a polymer of L-lysine. Pronectin-F supported attachment of Madin-Darby Canine Kidney (MDCK) cells at concentrations as low as 0.025 μg/cm2 of surfface area. The cells rapidly spread after attachment.・・・These findings suggest that recombinant Pronectin-F alone or in conjunction with a cationic polymer could be a useful replacement for materials such as gelatin or collagen which are currently used as microcarrier surfaces.」(第８９頁「Abstract」第１〜最終行)
当審訳「ポリスチレン培養皿とポリスチレンマイクロキャリアーは、プロネクチン−Ｆ及びポリ−Ｌ−リジン（ポリリジン）の、各単独又は組み合わせたもので被覆された。プロネクチン−Ｆは組み換えペプチドで、フィブロネクチン由来のＲＧＤ細胞接着性配列の繰り返しを含むものである。ポリリジンはＬ−リジンのポリマーである。プロネクチン−Ｆは、表面積上０．０２５ μｇ／ｃｍ２ との低濃度で、メイディン・ダービー・イヌ腎臓細胞（ＭＤＣＫ）の接着を促進するものであった。細胞は接着後、急速に広がった。・・・これらの発見は、組み換えプロネクチン−Ｆの単独またはカチオン性ポリマーと組み合わせたものは、ゼラチンまたはコラーゲンのようなマイクロキャリアー表面に現在用いられている物質に対する有効な代替物となり得ることを教示するものである。」
　
［１ｂ］「The microcarriers that are the most widely used today contain gelatin or collagen linked either to dextran beads or to polystyrene beads.」(第８９頁左欄下から第３行〜右欄第１行)
当審訳「現在最も汎用されているマイクロキャリアーは、デキストランビーズまたはポリスチレンビーズに結合させたゼラチンやコラーゲンを含むものである。」
　
［１ｃ］「The present study describes the use of combinations of adhesion-promoting recombinant and synthetic peptides (with different modes of action) to facilitate cell adhesion to polystyrene microcarriers. The use of peptide-coated polystyrene microcarriers could provide a novel approach to solving the problems associated with currently-available substrates.」(第８９頁右欄下から第３行〜第９０頁左欄第５行)
当審訳「この研究は、ポリスチレンマイクロキャリアーへの細胞接着を促進させるために、接着促進性の組み換え及び合成ペプチドの組合せの利用（異なるモードの活動で）について述べるものである。ペプチド被覆されたポリスチレンマイクロキャリアーは、現在入手可能な基質に基づく問題の解決に対して、新規なアプローチを提供し得る。」
　
［１ｄ］「Pronectin-F is a genetically-engineered high molecular weight protein polymer incorporating 13 copies of the RGD cell attachment sequence of fibronectin interspersed between structural peptide segments corresponding to the crystalline region of silk. It has a molecular weight of 72 kDa.」(第９０頁左欄第１５〜２０行)
当審訳「プロネクチン−Ｆは、遺伝子組み換えされた高分子量タンパクポリマーで、フィブロネクチン由来のＲＧＤ細胞接着性配列を１３個有しており、絹の結晶領域に対応した構造ペプチド領域中に点在している。分子の質量は７２ｋＤａである。」
　
［１ｅ］「
」(第９５頁)
表の欄外の説明の当審訳「ａポリスチレンマイクロキャリアーは、プロネクチン−Ｆ及びポリリジンの、単独及び組み合わせたもので被覆された。ＭＤＣＫ細胞（３×１０３／培養皿）は、０．５％ＦＢＳが補給されたＭＥＭに添加された。細胞と基質は共に１５分間インキュベートされた。その後、非接着細胞は除去された。接着した細胞はトリプシン／ＥＤＴＡで剥離され計測された。・・・
ｂ２００ｍｌ培養実験は、細胞（１．５×１０５／ｍｌ）以外は２ｍｌ培養実験と同様に行われ、マイクロキャリアーは１５分のインキュベーションの間、継続的に攪拌された。・・・」
　
［１ｆ］「The present studies showed that Pronectin-F was capable of supporting attachment of cells to either polystyrene dishes or polystyrene microcarriers at concentrations as low 0.025 μg/cm2 of surface area. Further, the cells rapidly spread on this substrate after attachment and underwent proliferation. Thus, Pronectin-F, by itself, would appear to be an ideal surface coating for microcarriers. ・・・Whether 0.025 μg/cm2 proves optimal for use with microcarriers will require further study. ・・・ Perhaps a higher concentraion of Proncectin-F on the microcarriers would increase attachment but this would also increase overall cost.」(第９６頁左欄下から第４行〜右欄第２０行)
当審訳「この考察は、プロネクチン−Ｆが、ポリスチレン培養皿やポリスチレンマイクロキャリアーに対して、表面積上０．０２５ μｇ／ｃｍ２との低濃度で、細胞の接着を促進できたことを示したものである。さらに、細胞は接着後にこの基質上で急速に広がり増殖した。したがって、プロネクチン−Ｆ自体、マイクロキャリアーの理想的な表面被覆物質である。・・・０．０２５ μｇ／ｃｍ２ がマイクロキャリアーの使用に最適値であるか否かについては更なる考察が要される。・・・多分、マイクロキャリアー上の、より高濃度のプロネクチン−Ｆは、接着を増加させるであろうが、これはコストも増加させるものである。」
　 　  
３　対比・判断
（Ａ）本願発明のうち、細胞接着シグナルとして「Arg - Gly - Asp」を選択した場合について
（１）刊行物１記載の発明  
　特に上記［１ａ］［１ｅ］［１ｆ］の記載によれば、刊行物１には、以下の発明（以下、「刊行物発明１」という。）が記載されていると認められる。  
「メイディン・ダービー・イヌ腎臓細胞を接着及び増殖させるポリスチレンマイクロキャリアーであって、フィブロネクチン由来のＲＧＤ細胞接着性配列の繰り返しを含む組み換えペプチドであるプロネクチン−Ｆが、０．０２５ μｇ／ｃｍ２または０．００５ μｇ／ｃｍ２にて表面を被覆しているマイクロキャリアー。」  
 　  
（２）本願発明のうち、細胞接着シグナルとして「Arg - Gly - Asp」を選択した場合と、刊行物発明１との対比・検討 
ア　刊行物発明１の「フィブロネクチン由来のＲＧＤ細胞接着性配列の繰り返しを含む組み換えペプチドであるプロネクチン−Ｆ」は、「ＲＧＤ」配列の繰り返し数が１３であり（［１ｄ］参照）、且つ「ＲＧＤ」配列が「Arg - Gly - Asp」であることが周知であるから（例えば、特開平４−２０８２９５号公報第２頁の(従来の技術)、特開平５−１１１３９０号公報第２頁の段落【００１２】を参照されたい。）、本願発明の「細胞接着シグナルを現す最小アミノ酸配列を１分子中に少なくとも１個有するポリペプチド（Ｐ）」であって、「ポリペプチド（Ｐ）の細胞接着シグナルを現す最小アミノ酸配列が、アミノ酸３文字表記で現わされる、Arg Gly Asp配列、Leu Asp Val配列、Arg Glu Asp Val配列（１）、Tyr Ile Gly Ser Arg配列（２）、Pro Asp Ser Gly Arg配列（３）、Arg Tyr Val Val Leu Pro Arg配列（４）、Leu Gly Thr Ile Pro Gly配列（５）、Arg Asn Ile Ala Glu Ile Ile Lys Asp Ile配列（６）、Ile Lys Val Ala Val配列（７）、Leu Arg Glu配列、Asp Gly Glu Ala配列（８）及びHis Ala Val配列からなる群より選ばれる少なくとも１種の配列である」ポリペプチドに包含される。
　
イ　刊行物発明１の「メイディン・ダービー・イヌ腎臓細胞を接着及び増殖させるポリスチレンマイクロキャリアー」は、動物細胞を培養するものであり、且つ、該「ポリスチレンマイクロキャリアー」が微粒子状の「ポリスチレンビーズ」であることは［１ｂ］の記載より明らかであるから、本願発明の「動物細胞培養用ビーズ」に相当する。
　
ウ　刊行物発明１の「メイディン・ダービー・イヌ腎臓細胞を接着及び増殖させるポリスチレンマイクロキャリアー」と、本願発明の「動物細胞培養用ビーズ」とは、その表面に、表面積１ｃｍ2当り特定の量の細胞接着性ポリペプチドを配している点で共通する。
 　  
　以上のことを総合すると、両発明は、「微粒子（Ｂ）の表面に、細胞接着シグナルを現す最小アミノ酸配列を１分子中に少なくとも１個有するポリペプチド（Ｐ）を配してなり、ポリペプチド（Ｐ）の細胞接着シグナルを現す最小アミノ酸配列が、アミノ酸３文字表記で現わされる、Arg Gly Asp配列、Leu Asp Val配列、Arg Glu Asp Val配列（１）、Tyr Ile Gly Ser Arg配列（２）、Pro Asp Ser Gly Arg配列（３）、Arg Tyr Val Val Leu Pro Arg配列（４）、Leu Gly Thr Ile Pro Gly配列（５）、Arg Asn Ile Ala Glu Ile Ile Lys Asp Ile配列（６）、Ile Lys Val Ala Val配列（７）、Leu Arg Glu配列、Asp Gly Glu Ala配列（８）及びHis Ala Val配列からなる群より選ばれる少なくとも１種の配列であり、（Ｐ）の含有量が（Ｂ）の表面積１ｃｍ2当り特定の量である動物細胞培養用ビーズ。」という点で一致し、以下の点で相違する。
（相違点）ビーズ表面の表面積１ｃｍ2当りの細胞接着性ポリペプチドの含有量が、本願発明では「０．１〜１００μｇ」であるのに対し、刊行物発明１では「０．０２５μｇ」並びに「０．００５μｇ」である点
　
　上記相違点について検討するに、刊行物１にプロネクチン−Ｆ単独で使用した場合に０．００５ μｇ／ｃｍ２より０．０２５ μｇ／ｃｍ２の方が細胞の接着性が良好であることが記載されており（［１ｅ］）、また、「０．０２５ μｇ／ｃｍ２ がマイクロキャリアーの使用に最適値であるか否かについては更なる考察が要される。・・・多分、マイクロキャリアー上の、より高濃度のプロネクチン−Ｆは、接着を増加させるであろうが、これはコストも増加させるものである。」（［１ｆ］）と記載されているように、刊行物発明１に係るプロネクチン−Ｆの含有量を増加させると、マイクロキャリアー上の更なる細胞接着性及びそれに伴う培養効率の向上が期待されるものであるから、プロネクチン−Ｆの含有量をマイクロキャリアー表面積１ｃｍ2当り「０．０２５μｇ」から「０．１〜１００μｇ」とすることは、当業者が格別の技術的困難を要さずになし得ることである。
　そして、その効果について検討するに、細胞接着性ポリペプチドの含有量を増加させれば細胞接着性が増加することが刊行物１に教示されている以上、接着細胞数に伴い増殖細胞数が上昇し、培養効率が向上するであろうことは自明である。
　
　ここにおいて、本願明細書に記載された本願発明の効果は、「（Gly Ala Gly Ala Gly Ser）9配列（１０）とArg Gly Asp配列とを１２個含むＭｎ約１１万の遺伝子組換え大腸菌の産生蛋白質”ＳＬＰＦ”」（段落【００４６】）という特定の細胞接着性ポリペプチドを用いて、特定の細胞を増殖させた場合の効果である。
　これについて検討するに、刊行物１に記載されたプロネクチン−Ｆは、「遺伝子組み換えされた高分子量タンパクポリマーで、フィブロネクチン由来のＲＧＤ細胞接着性配列を１３個有しており、絹の結晶領域に対応した構造ペプチド領域中に点在している。分子の質量は７２ｋＤａである」（［１ｄ］）ものであって、本願明細書の実施例で用いられているＳＬＰＦとは異なる物質であるから、材料で異なる刊行物発明１の態様（特に［１ｅ］参照）を、本願発明の比較例２と同等であると断定することはできない。
　さらに、プロネクチン−ＦやＳＬＰＦは、ＲＧＤ配列以外に（Gly Ala Gly Ala Gly Ser）配列を含むものであるが、本願発明はそのような特定はないこと、並びに、本願発明はＲＧＤ配列が分子中に１個あるものも含むのに対し、プロネクチン−ＦやＳＬＰＦはＲＧＤ配列を１２〜３個有するものであるから、ＳＬＰＦとはその配列が相当に異なるようなポリペプチドまでも包含する本願発明の範囲全般にわたって、その効果が顕著であるとはいえない。
　そして、本願発明では、微粒子ビーズの材質については多様なものが含まれ（段落【０００６】〜【０００８】）、その形態や粒径も特定されるものでない（段落【０００９】〜【００１１】）のに対し、本願明細書で効果が確認されているのは、ＳＬＰＦを含有する特定の材質及び粒径のビーズのみであって、その他の広範な態様を包含する本願発明の効果が顕著であるとはいえない。
　以上の理由から、本願発明の効果を当業者の予測を超えるほどに格別に顕著に優れたものと認めることはできない。
　
（Ｂ）本願発明のうち、細胞接着シグナルとして「Arg - Gly - Asp」以外の配列を選択した場合について
（１）刊行物１記載の発明  
　上記「３（Ａ）（１）」で示した以外にも、特に上記［１ａ］［１ｃ］［１ｆ］の記載によれば、刊行物１には、以下の発明（以下、「刊行物発明２」という。）が記載されていると認められる。  
「メイディン・ダービー・イヌ腎臓細胞を接着及び増殖させるポリスチレンマイクロキャリアーであって、細胞接着性の組み換えペプチドが、表面を被覆しているマイクロキャリアー。」  
　
（２）本願発明のうち、細胞接着シグナルとして「Arg - Gly - Asp」以外の配列を選択した場合と、刊行物発明２との対比・検討 
　上記「３（Ａ）（２）」も参考にすると、両発明の一致点、相違点は以下のとおりである。
 　両発明は、「微粒子の表面に、細胞接着性ポリペプチドを配してなる動物細胞培養用ビーズ。」という点で一致し、以下の点で相違する。
（相違点１）細胞接着性ポリペプチドが、本願発明では「細胞接着シグナルを現す最小アミノ酸配列を１分子中に少なくとも１個有するポリペプチド（Ｐ）」であって、「ポリペプチド（Ｐ）の細胞接着シグナルを現す最小アミノ酸配列が、アミノ酸３文字表記で現わされる、Arg Gly Asp配列、Leu Asp Val配列、Arg Glu Asp Val配列（１）、Tyr Ile Gly Ser Arg配列（２）、Pro Asp Ser Gly Arg配列（３）、Arg Tyr Val Val Leu Pro Arg配列（４）、Leu Gly Thr Ile Pro Gly配列（５）、Arg Asn Ile Ala Glu Ile Ile Lys Asp Ile配列（６）、Ile Lys Val Ala Val配列（７）、Leu Arg Glu配列、Asp Gly Glu Ala配列（８）及びHis Ala Val配列からなる群より選ばれる少なくとも１種の配列」であるのに対し、刊行物発明２ではそのような特定がなされていない点
（相違点２）ビーズ表面の表面積１ｃｍ2当りの細胞接着性ポリペプチドの含有量が、本願発明では「０．１〜１００μｇ」であるのに対し、刊行物発明２ではそのような特定がなされていない点
　
　まず相違点１について検討する。
　刊行物１に具体的に記載されている細胞接着性ポリペプチドはプロネクチン−Ｆであって、これが本願発明に係るポリペプチドの範囲に包含されることは上記「３（Ａ）（２）ア」で述べたとおりである。
　さらに、刊行物発明２に係る細胞接着性ポリペプチドとして、本願発明で特定されている各種の配列を含むものであって、「Arg - Gly - Asp」配列を含むもの以外の周知のもの（例えば、特表平５−５０２９９８号公報（拒絶理由の引用文献３）を参照されたい）を選択することも、当業者であれば容易になし得たことである。
　次に相違点２について検討する。
　ビーズ表面の表面積１ｃｍ2当りの細胞接着性ポリペプチドの含有量について、細胞接着性ポリペプチドがプロネクチン−Ｆである場合の検討結果は、上記「３（Ａ）（２）」で述べたとおりである。
　また、本願発明に係る細胞接着性ポリペプチドのうち、「Arg Gly Asp配列」以外の細胞接着性配列を有するポリペプチドに関しては、本願明細書中でその効果が具体的に開示されているわけでもない。
　したがって、刊行物発明２において、細胞接着性ポリペプチドの種類を「Arg Gly Asp配列」を有するものから、他の細胞接着性配列を有するものに代える際に、ポリペプチドの種類及び含有量に依る細胞培養効果を確認することは、当業者の通常の創作能力の発揮に他ならない。そして、「Arg Gly Asp配列」以外の細胞接着性配列を有するポリペプチドについての効果が本願明細書に開示されていない以上、その効果の優位性を認めることはできない。
 　  
４　むすび  
　以上のとおり、本願発明は、刊行物１に記載された事項に基づいて当業者が容易に発明をすることができたものであるから、特許法第２９条第２項の規定により特許を受けることができない。 
　したがって、その他の請求項に係る発明についての判断を示すまでもなく本願は拒絶すべきものである。 
　よって、結論のとおり審決する。