【事件の表示】
　特願２００３−５５６５４８「アルカリ性スフィンゴミエリナーゼを検出するための分析方法およびかかる方法に使用するキット」拒絶査定不服審判事件〔平成１５年７月１０日国際公開、ＷＯ０３／５６０３１、平成１７年５月１２日国内公表、特表２００５−５１２６０１〕について、次のとおり審決する。
【結　論】
　本件審判の請求は、成り立たない。
【理　由】
第１　手続の経緯
　本願は、平成１４年１２月１９日（パリ条約による優先権主張外国庁受理　平成１３年１２月２１日　アイルランド）を国際出願日とする出願であって、平成２０年１２月１９日付けで拒絶査定がなされ、これに対し、平成２１年３月２４日に拒絶査定不服審判の請求がなされるとともに、同年４月２２日付けで手続補正がなされたものである。
　
第２　平成２１年４月２２日付けの手続補正についての補正の却下の決定
［補正の却下の決定の結論］
　　平成２１年４月２２日付けの手続補正を却下する。
［理由］
１　補正後の本願発明
　本件補正により、特許請求の範囲の請求項７は、
「【請求項７】
　以下の試薬を含有する、アルカリ性スフィンゴミエリナーゼを検出するためのキット：
(i)スフィンゴミエリン、
(ii)中性スフィンゴミエリナーゼを阻害するのに十分な量の
EDTAおよびEGTA
(iii)グリセロリン酸、
(iv)アルカリホスファターゼ、
(v)コリンオキシダーゼ、
(vi)西洋わさびペルオキシダーゼ、
(vii)
 10-アセチル-3,7-ジヒドロキシフェノキサジン、および
(viii) 胆汁酸塩
（下線は、補正箇所を示す。）と補正された。
　
　上記補正は、補正前の請求項９に記載した発明を特定するために必要な事項である「キレート剤」及び「発色剤」を「EDTAおよびEGTA」及び「10-アセチル-3,7-ジヒドロキシフェノキサジン」と限定し、同じく「キット」について、「胆汁酸塩」を含むとの限定を付加したものであるから、平成１８年法律第５５号改正附則第３条第１項によりなお従前の例によるとされる同法による改正前の特許法第１７条の２第４項第２号の特許請求の範囲の減縮を目的とするものに該当する。
　
　そこで、本件補正後の前記請求項７に記載された発明（以下、「本願補正発明」という。）が特許出願の際独立して特許を受けることができるものであるか（平成１８年法律第５５号改正附則第３条第１項によりなお従前の例によるとされる同法による改正前の特許法第１７条の２第５項において準用する同法第１２６条第５項の規定に適合するか）について以下に検討する。
　
２　引用刊行物とその記載事項
　原査定の拒絶の理由に引用され、本願優先日前に頒布された刊行物１（原査定の引用文献４）、刊行物２（原査定の引用文献３）、刊行物３（原査定の引用文献１）及び刊行物４（原査定の引用文献２）には以下の事項がそれぞれ記載されている。なお、下線は当審で付加した。
　
（１）刊行物１：国際公開第００／７４７１２号の記載事項（当審抄訳。訳文は対応日本語公報である特表２００３−５０１３９９号公報によるものであるが明らかな誤訳は当審で直し、段落番号も併せて記載した。）
（１ａ）「【０００３】
　
３種類の異なるタイプのスフィンゴミエリナーゼ(ＳＭａｓｅ)がこれまでに同定されている
【０００４】
　
酸性のスフィンゴミエリナーゼはリソソームの酵素(最適pH４．５−５
中性スフィンゴミエリナーゼは、最適pHが７．５
マグネシウム依存性
他方は細胞質に含有され陽イオン非依存性
【０００５】
　第三のタイプは、主に
pH９で活性であるために、アルカリ性スフィンゴミエリナーゼ
グネシウム非依存性
　
（１ｂ）「【表１】
」
（第３頁Ｔａｂｌｅ）
　
（１ｃ）「【００２９】
　
以下の実験は
アルカリ性スフィンゴミエリナーゼ、すなわちヒトの皮膚内でセラミドを生成することを司る酵素の検出が含まれた
【００３０】
(方法)
乳酸菌中および腸生検材料中の
酸性
中性
アルカリ性スフィンゴミエリナーゼの分析
　10mgの凍結乾燥した細菌Streptococcus thermophilusを、50 mMの
Tris-HCl(pH 7.4)
β-グリセロリン酸
ATP
中性ＳＭaseの活性分析用
アルカリ性ＳＭaseの分析
(ホモジェナイズした)腸生検材料を、5 mMのMgCl
2
、0.15 MのKCl、50 mMのKH
2
PO
4
、1 mMのPMSFおよび1 mMのベンズアミジン(pH 7.4)を含有する0.25 Mのショ糖緩衝液に懸濁
超音波破砕により溶解
超音波破砕したサンプルを
4℃で遠心分離し、上清を採り
【００３１】
　中性ＳＭaseを測定するために、100μgのサンプルを、37℃で2時間、50mMのTris-HCl、1 mMのMgCl2、pH 7.4、および2.25μlの
[N-メチル-
14
C]-スフィンゴミエリン(ＳＭ)
【００３２】
　酸性ＳＭaseを測定するために、100μgの細菌溶解液を、37℃で2時間、250 mMの酢酸ナトリウム、1 mMのEDTA、pH 5.0、および2.25μlの
[N-メチル-
14
C]-ＳＭ
【００３３】
　
アルカリ性ＳＭaseを測定
サンプル
50 mMのTris、0.15 MのNaCl、2 mMのEDTA、およびTC : TDC : GC : GCDCのモル比が3 : 2 : 1.8 : 1である胆汁酸塩混合物3 mM、を含むTris-EDTA緩衝液(pH 9)375μlに加え、最終容積0.4 mlとした
胆汁塩混合物は、アルカリ性ＳＭaseに対する最高の刺激効果
EDTAの付加は、Mg
++
依存性で最適pHが7.5である中性ＳＭaseの活性を阻害するのに役立った
14
C-SM
分析緩衝液に溶解
【００３４】
　
クロロホルムおよびエタノール
を加え、反応を停止
ＳＭの加水分解を、オートラジオグラフィーおよび液体シンチレーション計測で定量
腸生検材料中のＳＭaseを、タンパク質１ミリグラム当り、１時間当りのＳＭ加水分解pmolで表わした
　
（２）刊行物２：Ｂｉｏｃｈｉｍｉｃａ　ｅｔ　Ｂｉｏｐｈｙｓｉｃａ　Ａｃｔａ，Ｖｏｌ．１２５９，１９９５，ｐ．４９−５５（当審抄訳）
（２ａ）「スフィンゴミエリナーゼ活性の試験。　スフィンゴミエリナーゼ活性は、Gatt等[8]の変法で測定した。エタノール中の14C-SMは、窒素下で乾燥され、TC、TCDC、GC及びGCDCをモル比で3:2:1.8:1の胆汁酸塩混合物３mMを含有する0.15M NaClに懸濁された。他の箇所では特定しないが、0.1mlの14C-SM(40000dpm)は、3mMの胆汁酸塩混合物、2mMCaCl2および25μlのサンプル（タンパク質10-15μg）含有375μl 50mMのTris-HCl緩衝液(pH9.0)に、最終濃度0.5mlで添加された。反応は、37℃30分間行われ、2mlクロロフォルム/メタノール(2:1)の添加により終了させた。遠心分離と相分離後、上相のアリコートが取り出され、放射活性が液体シンチレーションカウンターで測定された。活性は・・・計算され正規化された。」（５０頁左欄最終行〜右欄１７行）
　
（２ｂ）「胆汁酸塩依存性は、Ca2+、Mg2+の有り無しで、異なる濃度の胆汁酸塩について、スフィンゴミエリナーゼ活性を評価して調べられた。２価イオンの影響は、種々の濃度のCa2+、Mg2+及びCu2+で、胆汁酸塩の有り又は無しで評価された。」（５０頁右欄下から１５〜１０行）
　
（２ｃ）「アルカリ性スフィンゴミエリナーゼの活性に対する胆汁酸塩の影響を、図５に示した。胆汁酸塩なしでは、酵素活性は極めて低い。胆汁酸塩は濃度に依存し、3mMの含有量で最大効果をもって、アルカリ性スフィンゴミエリナーゼを活性化した。高濃度の胆汁酸塩は効果が低い。胆汁酸塩の効果は、
2mMEGTAとEDTAを含有することで、Ca
2+
、Mg
2+
をなくした溶液
　
（２ｄ）「
中性スフィンゴミエリナーゼは、Mg
2+
依存性
Ca
2+
の影響が同様に研究
Ca
2+
及びMg
2+
は、胆汁酸塩存在下のアルカリ性スフィンゴミエリナーゼ活性に、顕著な効果は有さない
　
（２ｅ）表３には、胆汁酸塩が存在する場合でも、Ca2+、Mg2+ の濃度が2mMを越えると、アルカリ性スフィンゴミエリナーゼの活性が、低下することが示されている。（５４頁左欄Table３）
　
（３）刊行物３：Ｆｒｅｅ　Ｒａｄｉｃａｌ　Ｂｉｏｌｏｇｙ　＆　Ｍｅｄｉｃｉｎｅ，Ｖｏｌ．３０，Ｎｏ．６，Ｍａｒ　２００１，ｐ．６７１−６７８　（当審抄訳）
（３ａ）「スフィンゴミエリナーゼの活性
　中性スフィンゴミエリナーゼ（ＳＰＨ）−特異的フォスフォリパーゼＣ（・・・）活性は、脱核画分中で、市販の９６穴プレートを用いたアンプレックスレッドフルオレッセント法により評価された。脱核画分は、前述のように低速遠心分離で得られた[31]。各反応は、５０μMアンプレックスレッド試薬、１Ｕ／ｍｌ西洋わさびペルオキシダーゼ（ＨＲＰ）、０．１Ｕ／ｍｌコリンオキシダーゼ，４Ｕ／ｍｌアルカリフォスファターゼ，０．２５ｍＭスフィンゴミエリン（ＳＰＨ）、及びアリコートの分析試料を含有した。細胞関連蛍光は、・・・により測定された。スタフィロコッカス　アウレウスのスフィンゴミエリナーゼ（０−４０ｍＵ／ｍｌ）は、標準として採用された。活性は、検量線に基づいて計算され、タンパク質１ｍｇ当たりに換算し、ｍｇタンパク質当たりのスフィンゴミエリナーゼ活性ｍＵで表された。」（第６７３頁左欄８〜２４行）
　
（３ｂ）「脱核画分は、細胞ホモジネートを１０００ｇ、１０分、4℃で遠心分離することにより、ＰＣ１２細胞から分離された。」（６７２頁右欄２２〜２４行）
　
（４）刊行物４：Ｊ．Ｎｅｕｒａｌ　Ｔｒａｎｓｍ．，Ｖｏｌ．１０８，Ｍａｙ　２００１，ｐ．５４１−５５７
（４ａ）「
中性スフィンゴミエリナーゼの活性
中性スフィンゴミエリナーゼ−特異的フォスフォリパーゼＣ活性は、
市販の９６穴プレートを用いたアンプレックスレッドフルオレッセント法
アンプレックスレッド試
西洋わさびペルオキシダーゼ（ＨＲＰ
コリンオキシダーゼ
アルカリフォスファターゼ
スフィンゴミエリン
分析試料
　
３　対比・判断
　刊行物１の記載事項（特に上記(1c)の【００３３】【００３４】）から、刊行物１には、
「アルカリ性ＳＭaseの検出方法であって、
　サンプルを、50 mMのTris、0.15 MのNaCl、2 mMのEDTA、およびTC : TDC : GC : GCDCのモル比が3 : 2 : 1.8 : 1である胆汁酸塩混合物3mM、を含むTris-EDTA緩衝液(pH 9)に加え、この胆汁塩混合物は、アルカリ性ＳＭaseに対する最高の刺激効果を有し、緩衝液へのEDTAの付加は、Mg++依存性で最適pHが7.5である中性ＳＭaseの活性を阻害するものであり、14C-SMをエタノールに溶解し、窒素下で乾燥し、3%のTriton X-100および3mMの胆汁塩の混合物を含有する分析緩衝液に溶解し、クロロホルムおよびエタノール２：１の混合物2mlを加え、反応を停止し、14C-SMの加水分解を、オートラジオグラフィーおよび液体シンチレーション計測で定量する方法」が記載されている。
　
　そして、刊行物１には、上記アルカリ性ＳＭaseの検出方法を実施するのに使用する、以下の試薬のセット、つまりアルカリ性ＳＭaseを検出するための試薬キットも記載されていると認められる。
　
「以下の試薬を含む、アルカリ性ＳＭaseを検出するための試薬キット
　・50 mMのTris、0.15 MのNaCl、2 mMのEDTA、およびTC : TDC : GC : GCDCのモル比が3 : 2 : 1.8 : 1である胆汁酸塩混合物3 mM、を含むTris-EDTA緩衝液(pH 9)、
　・　14C-SMを溶解した3%のTriton X-100および3 mM胆汁塩含有分析緩衝液。
　前記胆汁塩混合物は、アルカリ性ＳＭaseに対する最高の刺激効果を有し、緩衝液へのEDTAの付加は、Mg++依存性で最適pHが7.5である中性ＳＭaseの活性を阻害するものである。」（以下、「刊行物１発明」という。）
　
　そこで、本願補正発明と刊行物１発明とを比較する。
（ア）刊行物１発明の「中性ＳＭase」及び「14C-SM」は、それぞれ、中性スフィンゴミエリナーゼ、及び14Cで標識したスフィンゴミエリンを意味し、刊行物１発明の「14C-SM」と本願補正発明の「スフィンゴミエリン」とは、「スフィンゴミエリン」である点で共通する。
　
（イ）刊行物１発明の「50 mMのTris、0.15 MのNaCl、2 mMのEDTA、およびTC : TDC : GC : GCDCのモル比が3 : 2 : 1.8 : 1である胆汁酸塩混合物3 mM、を含むTris-EDTA緩衝液(pH 9)」は、刊行物１に記載された上記アルカリ性ＳＭaseの検出方法からみて、アルカリ性スフィンゴミエリナーゼにより、14C-SMを分解する際に用いる緩衝液であるから、アッセイバッファーといえ、「EDTAの付加は、Mg++依存性で最適pHが7.5である中性ＳＭaseの活性を阻害するものである」し、緩衝液のpH9はpH 8.9-9.1に包含されるから、本願補正発明の「中性スフィンゴミエリナーゼを阻害するのに十分な量のEDTAおよびEGTAを含むpH 8.9-9.1のアッセイ・バッファー」とは、中性スフィンゴミエリナーゼを阻害するのに十分な量のEDTAを含むpH 8.9-9.1のアッセイ・バッファーである点で共通する。
　
（ウ）刊行物１発明の「胆汁酸塩混合物」は、緩衝液中に含有されているが、本願補正発明とは、試薬キットが、胆汁酸塩を含む点で共通する。
　
　したがって、両者の間には、以下の一致点及び相違点がある。
（一致点）
　スフィンゴミエリン、中性スフィンゴミエリナーゼを阻害するのに十分な量のEDTAを含むpH 8.9-9.1のアッセイ・バッファー、及び胆汁酸塩を試薬として含む、アルカリ性スフィンゴミエリナーゼを検出するための試薬キットである点。
　
（相違点１）
　本願補正発明では、スフィンゴミエリンが、14C標識されたものでなく、試薬キットが、「アルカリホスファターゼ」、「コリンオキシダーゼ」、「西洋わさびペルオキシダーゼ」及び「 10-アセチル-3,7-ジヒドロキシフェノキサジン」を含有するのに対して、刊行物１発明では、スフィンゴミエリンが、14C標識されたものであり、試薬キットが、「アルカリホスファターゼ」、「コリンオキシダーゼ」、「西洋わさびペルオキシダーゼ」及び「 10-アセチル-3,7-ジヒドロキシフェノキサジン」を含まない点。
　
（相違点２）
　本願補正発明では、試薬キットが「グリセロリン酸」を含み、アッセイバッファーが「ＥＧＴＡ」を含有するのに対して、刊行物１発明は、これら含まない点。
　
(相違点３）
　本願補正発明が、「アッセイ・バッファー」とは別に、胆汁酸塩を試薬として含むのに対して、刊行物１発明は、緩衝液に胆汁酸塩が含有されている点。
　
　そこで、上記各相違点について検討する。
（相違点１について）
　スフィンゴミエリナーゼは、スフィンゴミエリンをコリンリン酸とセラミドに分解する酵素であることは技術常識である。そして、刊行物１には、[N-メチル-14C]-スフィンゴミエリンを基質として用いることが記載されており（上記(1c)）、スフィンゴミエリンのコリン部分のメチル基が14Cであることから、刊行物１発明は、スフィンゴミエリンの分解物であるコリンリン酸の14Cを検出するものといえる。さらに、刊行物１には、アルカリ性スフィンゴミエリナーゼだけでなく、中性及び酸性スフィンゴミエリナーゼも同様の方法で測定することが記載されている。
　一方、刊行物３及び４には、中性スフィンゴミエリナーゼ活性を測定するために、市販の９６穴プレートを用いたアンプレックスレッドフルオレッセント法を用いることが記載され、このための試薬である、アンプレックスレッド試薬、西洋わさびペルオキシダーゼ、コリンオキシダーゼ，アルカリフォスファターゼ，スフィンゴミエリンを、試料と混合することが記載されている（上記(3a)(4a)）。この反応混合物のｐHについては記載がないが、試料中の中性スフィンゴミエリナーゼ活性を測定することから、その最適ｐHである７．４付近であるといえる（上記(1b)参照）。
　そして、このアンプレックスレッドフルオレッセント法は、上記各試薬を用いることからみて、その測定原理は、スフィンゴミエリンの分解産物であるコリンリン酸をアルカリフォスファターゼでコリンとし、コリンをコリンオキシダーゼにより分解して過酸化水素を生成し、西洋わさびペルオキシダーゼにより、過酸化水素でアンプレックスレッド試薬を酸化して蛍光物質として測定を行うものといえる。（必要であれば、「ANALYTICAL BIOCHEMISTRY,Vol.253,1997,p.169-174」の169頁左欄要約の5〜7行に、「この分析は、10-アセチル-3,7-ジヒドロキシフェノキサジン(Amplex Red)を用いた、西洋わさびペルオキシダーゼによるH2O2カップリング反応に基づく。」ことが記載されている。）
　上記のとおり、刊行物１に記載されたコリンリン酸の14Cを検出することによる酵素の測定方法が、アルカリ性スフィンゴミエリナーゼだけでなく、中性及び酸性スフィンゴミエリナーゼに適用されること、及びアンプレックスレッドフルオレッセント法の上記測定原理からみて、アンプレックスレッドフルオレッセント法が、中性スフィンゴミエリナーゼだけでなく、同様にコリンリン酸を生成するアルカリ性や酸性スフィンゴミエリナーゼにも適用し得る方法であることは、当業者が自然に考えることといえる。さらに、放射性物質を利用することをできるだけ回避することは、当業者が通常考慮することである。
　そうすると、刊行物１発明において、スフィンゴミエリンの分解産物であるコリンリン酸の検出に、刊行物２及び３に記載されたアンプレックスレッドフルオレッセント法を採用し、基質である14C-SMに代えて、放射性標識のないスフィンゴミエリンを用い、この方法に必要な試薬である「アルカリホスファターゼ」、「コリンオキシダーゼ」、「西洋わさびペルオキシダーゼ」及び「 10-アセチル-3,7-ジヒドロキシフェノキサジン」を試薬キットの構成に加えることは当業者が容易になし得たことといえる。
　
（相違点２について）
　本願補正発明の「グリセロリン酸」について、本願明細書の段落【００２７】に「反応バッファーはβ−グリセロリン酸およびＡＴＰを含む」と記載されていることから、本願補正発明の「グリセロリン酸」が「β−グリセロリン酸」であることは明らかである。
　そして、刊行物１には、中性スフィンゴミエリナーゼの活性分析用の試料を懸濁する緩衝液として、β−グリセロリン酸、ＡＴＰ等を含有したものが記載されている（上記(1c)）。β−グリセロリン酸及びＡＴＰを添加する意義について、刊行物１には記載がないが、特表２００１−５０５２０１号公報（１０頁３〜１２行）、特表２００１−５２１５５２号公報（３４頁１〜９行）にも、中性スフィンゴミエリナーゼ活性アッセイの緩衝液として、β−グリセロリン酸、ＡＴＰ等を含有したものが記載され、後者で「Wiegmannら、１９９４」として引用された「Cell,Vol.78,1994,p.1005-1015」（同公報の６０頁参考文献一覧）には、「中性スフィンゴミエリナーゼ分析中に、酸性スフィンゴミエリナーゼ活性を排除するために、β−グリセロリン酸及びＡＴＰが添加され、これらは、中性ｐＨにおける、いかなる残余の酸性スフィンゴミエリナーゼの活性も完全にブロックする。」（1006頁右欄２７〜３０行）と記載されていることから、刊行物１で、β−グリセロリン酸及びＡＴＰを添加する意義は、中性ｐＨにおける、酸性スフィンゴミエリナーゼの活性を排除することであることは明らかといえる。
　さらに、刊行物１発明は、「アルカリ性ＳＭaseに対する刺激効果を有する胆汁塩混合物を含有し、Mg++依存性で最適pHが7.5である中性ＳＭaseの活性を阻害すするために、EDTAを付加する」ものであり、アルカリ性スフィンゴミエリナーゼの活性を最大限に引き出し、一方で他のスフィンゴミエリナーゼの活性を抑制するような試薬を含むものとなっている。
　そして、刊行物２には、アルカリ性スフィンゴミエリナーゼについて、胆汁酸塩の非存在下だけでなく、存在下においても、Ca2+及びMg2+の濃度が2mMを越えると、活性が若干低下することが示されており（上記(2e)）、アルカリ性スフィンゴミエリナーゼの測定には、、Ca2+及びMg2+を含有しない溶液を用いることが、よりよいことが理解できる。そして、刊行物２には、溶液からCa2+及びMg2+を除去するために、EGTA及びEDTAを含有させることが記載されている（上記(2c)）。
　一方、刊行物３及び４に記載された、中性スフィンゴミエリナーゼをアンプレックスレッドフルオレッセント法で測定する場合、中性スフィンゴミエリナーゼの最適ｐHが７．４であることから、反応混合物のｐＨはこの付近となっていると考えられ、アンプレックスレッドフルオレッセント法に用いる各酵素も中性付近に最適なｐＨを有するものを用いているといえるから、この中性付近のｐＨをアルカリ性スフィンゴミエリナーゼにより分解生成されたコリンリン酸の検出に適用すると、試料中に存在する可能性がある、中性及び酸性スフィンゴミエリナーゼの活性を排除することは、刊行物１発明が、アルカリ性スフィンゴミエリナーゼの活性を最大限に引き出し、一方で他のスフィンゴミエリナーゼの活性を抑制するような試薬構成となっていることから、当業者が当然に考慮することである。
　以上のことから、刊行物１発明において、アルカリ性スフィンゴミエリナーゼの活性を最大限引き出し、かつ中性及び酸性スフィンゴミエリナーゼ活性と区別して測定するために、Tris-EDTA緩衝液に、Mg++のキレート剤としてのＥＤＴＡに加え、刊行物２にCa2+及びMg2+を除去するためにＥＤＴＡに併用することが記載されているＥＧＴＡも併せて添加し、さらに、刊行物１に記載されたβ−グリセロリン酸を試薬キットに加えることは、刊行物３及び４に記載されたアンプレックスレッドフルオレッセント法を採用した際に、刊行物１ないし４の記載事項から、当然に行う最適化といえ、当業者が適宜になしえたことといえる。
　
（相違点３について）
　試薬キットを構成する際に、試薬を緩衝液に予め添加した状態でキットの構成試薬とするか、緩衝液とは別にして、試薬のみでキットの構成試薬とするかは、試薬の使用方法や安定性等を考慮して、当業者が適宜に決定することであり、刊行物１発明において、胆汁酸塩混合物を緩衝液とは別にすることは、当業者が適宜になし得ることであり、格別の困難性はない。
　
（本願補正発明の効果について）
　患者の便または体液中のアルカリ性SMaseの信頼できる安価なアッセイであるという効果は（本願明細書段落【００１３】）、刊行物１ないし４の記載事項から予測し得たものであり、格別顕著なものとはいえない。
　
　したがって、本願補正発明は、刊行物１ないし４に記載された発明及び周知技術に基づいて、当業者が容易に発明をすることができたものであるから、特許法第２９条第２項の規定により特許出願の際独立して特許を受けることができないものである。
　
４　むすび
　以上のとおり、本件補正は、平成１８年法律第５５号改正附則第３条第１項によりなお従前の例によるとされる同法による改正前の特許法第１７条の２第５項で準用する同法第１２６条第５項の規定に違反するものであり、特許法第１５９条第１項で読み替えて準用する特許法第５３条第１項の規定により却下されるべきものである。
　
第３　本願発明について
１　本願発明
　平成２１年４月２２日付けの手続補正は上記のとおり却下されることとなったので、本願の請求項１ないし１２に係る発明は、平成２０年１１月１７日付け手続補正書の特許請求の範囲の請求項１ないし１２に記載された事項により特定されるとおりのものと認められ、その請求項９に係る発明（以下、「本願発明」という。）は、以下のとおりのものである。
「以下の試薬を含有する、アルカリ性スフィンゴミエリナーゼを検出するためのキット：
(i)スフィンゴミエリン、
(ii)中性スフィンゴミエリナーゼを阻害するのに十分な量のキレート化剤を含むpH 8.9-9.1のアッセイ・バッファー、
(iii)グリセロリン酸、
(iv)アルカリホスファターゼ、
(v)コリンオキシダーゼ、
(vi)西洋わさびペルオキシダーゼ、および
(vii) 発色剤」
　
２　引用刊行物の記載事項
　原査定の拒絶の理由に引用された刊行物１ないし４、および、その記載事項は、前記「第２　２」に記載したとおりである。
　
３　対比・判断
　本願発明は、前記「第２」で検討した本願補正発明の限定事項である「EDTAおよびEGTA」及び「10-アセチル-3,7-ジヒドロキシフェノキサジン」を、それぞれ「キレート剤」及び「発色剤」と上位概念とし、同じく「キット」の限定事項である「胆汁酸塩」を含むとの構成を省いたものである。
　そうすると、本願発明の構成要件を全て含み、さらに構成を限定及び他の構成要件を付加したものに相当する本願補正発明が、前記「第２　３」に記載したとおり、刊行物１ないし４に記載された発明及び周知技術に基づいて、当業者が容易に発明をすることができたものであるから、本願発明も、同様の理由により、刊行物１ないし４に記載された発明及び周知技術に基づいて、当業者が容易に発明をすることができたものである。
　
４　むすび
　以上のとおり、本願発明は、刊行物１ないし４に記載された発明及び周知技術に基づいて、当業者が容易に発明をすることができたものであるから、特許法第２９条第２項の規定により特許を受けることができない。
　したがって、その他の請求項に係る発明についての判断を示すまでもなく本願は拒絶すべきものである。
　よって、結論のとおり審決する。