(57)【要約】本発明によれば、六炭糖由来の酸、その非毒性塩および分子内エステル化合物の少なくとも１つを有効成分として含有することからなるヒトまたは動物用の大腸炎および大腸がんの予防または治療用組成物、該組成物を含む医薬品、食品、飼料または飲料水ならびにそれらを使用することからなる大腸炎および大腸がんの予防または治療方法が提供される。【特許請求の範囲】
【請求項１】
六炭糖由来の酸、その非毒性塩および分子内エステル化合物の少なくとも１つを有効成分として含有することからなる、ヒトまたは動物用の大腸炎および大腸がんの予防または治療用組成物。
【請求項２】
六炭糖由来の酸がグルコン酸である請求項１に記載の組成物。
【請求項３】
六炭糖由来の酸の非毒性塩および分子内エステル化合物が、グルコン酸ナトリウム、グルコン酸カルシウムまたはグルコノデルタラクトンである請求項１に記載の組成物。
【請求項４】
請求項１〜３のいずれか１つに記載の組成物を含む医薬品。
【請求項５】
請求項１〜３のいずれか１つに記載の組成物を含む食品、飼料または飲料水。
【請求項６】
六炭糖由来の酸、その非毒性塩および分子内エステル化合物の少なくとも１つを有効成分として０．０１〜１０．０重量％を添加してなる請求項５に記載の食品、飼料または飲料水。
【請求項７】
請求項１〜３のいずれか１つに記載の組成物、請求項４に記載の医薬品、または請求項５に記載の食品、飼料または飲料水を与えることからなる大腸炎および大腸がんの予防または治療方法。
【請求項８】
六炭糖由来の酸、その非毒性塩および分子内エステル化合物の少なくとも１つが、１５〜１５００ｍｇ／ｋｇ／日の割合で与えられる請求項７に記載の大腸炎および大腸がんの予防または治療方法。
【発明の詳細な説明】
技術分野
この発明は、大腸炎および大腸がんの予防または治療用組成物に関する。さらに詳しくは、この発明は、六炭糖由来の酸、その非毒性塩および分子内エステル化合物の少なくとも１つを有効成分として含有することからなるヒトまたは動物用の大腸炎および大腸がんの予防または治療用組成物、この組成物を含む医薬品、食品、飼料または飲料水、ならびにそれらを使用することからなる大腸炎および大腸がんの予防または治療方法に関する。
背景技術
大腸炎は、潰瘍性大腸炎、過敏性大腸炎、消化不良性大腸炎、クローン病など種々の病因に基づいて発症する病状であり、毎年多くの人や動物が罹患している。
大腸組織の炎症をはじめとして、発熱、腹痛、便通異常などの症状をもたらす大腸炎は、ステロイド製剤、炎症抑制剤あるいは解熱剤などの種々の治療剤によって治療・緩解されている。
しかし、これらの治療剤はいずれも副作用を伴いやすいという問題があり、また、潰瘍性大腸炎が悪化すると大腸がんをもたらすことから、生体により安全でかつ有効な大腸炎および大腸がんの治療剤が求められている。
発明の開示
本発明者らは、グルコン酸で代表される六炭糖由来の酸を投与することにより、大腸炎および大腸がんの症状が改善されることを見出し、本発明を完成するに至った。
本発明によれば、六炭糖由来の酸、その非毒性塩および分子内エステル化合物（以下、これらの化合物を総称して「六炭糖由来の酸類」という）の少なくとも１つを有効成分として含有することからなるヒトまたは動物用の大腸炎および大腸がんの予防または治療用組成物、該組成物を含む医薬品、食品、飼料または飲料水、ならびにそれらの使用による大腸炎および大腸がんの予防または治療方法が提供される。
発明を実施するための最良の形態
この発明における六炭糖由来の酸は、Ｄ−体、Ｌ−体またはそれらの混合物のいずれでもよい。具体的には、グルカル酸、マンナル酸、グラル酸、イダル酸のような糖酸、またはグルコン酸、ガラクトン酸、マンノン酸、タロン酸、アロン酸のようなアルドン酸を挙げることができる。これらのうち、グルコン酸が特に好ましい。
これらの酸の非毒性塩としては、例えばナトリウムおよびカリウムのようなアルカリ金属との塩、カルシウムおよびマグネシウムのようなアルカリ土類金属との塩、銅、鉄または亜鉛のような遷移金属との塩が挙げられるが、これらのうちでもグルコン酸ナトリウムおよびグルコン酸カルシウムが特に好ましい。
また、六炭糖由来の酸の分子内エステル化合物としてはラクトン化合物が挙げられ、具体的にはグルコン酸の分子内エステル化合物である、グルコノデルタラクトン、グルコノガンマラクトン等が挙げられ、なかでもグルコノデルタラクトンが特に好ましい。
本発明者らの実験によれば、これらの六炭糖由来の酸類は、それぞれ単独で、または任意の２種以上の組み合わせにより、大腸炎の諸症状、具体的には、血便の発生および大腸組織の炎症を抑制し、かつ腫瘍の形成を有意に抑制する。
したがって、本発明の六炭糖由来の酸類は、それ自体で、または当該分野で公知の固体または液体の賦形剤とともに用いて、潰瘍性大腸炎、過敏性大腸炎、消化不良性大腸炎、クローン病など各種の大腸炎、および大腸がんの予防または治療用組成物とすることができる。
固体の賦形剤としては、例えば、乳糖、ショ糖、ブドウ糖、コーンスターチ、ゼラチン、澱粉が挙げられる。また、液体の賦形剤としては、例えば水、グリセリン、脂肪油、ソルビトールが挙げられる。
本発明の組成物は、所望により例えば塩化ベルベリン、オウバク末のような整腸剤、例えばオキシテトラサイクリン、ビコザマイシンのような抗菌剤、例えばプロピオン酸ナトリウムのような防カビ剤、例えばプラジクアンテル、イベルメクチンのような駆虫剤などの他の薬剤および／または抗酸化剤、色素、着香料、呈味料、酵素のような通常の添加剤を含んでいてもよく、常法により、散剤、細粒剤、顆粒剤、液剤、錠剤等の形態に製剤化することができる。
製剤の処方例を以下に示す：グルコノデルタラクトン４８．３４％、還元麦芽糖水飴１５．８４％、ミルクカルシウム１０．８３％、グルコン酸カルシウム５．００％、グレープフルーツ果汁末１．６７％、結晶セルロース８．３３％、ショ糖脂肪酸エステル５．００％、クエン酸２．０８％、ソーマチン１．８３％、アスパルテーム・Ｌ−フェニルアラニン化合物０．２５％、香料０．８３％の割合でこれらを混合し、打錠機（菊水製作所（株））を用いて回転数２０ｒｐｍ、打錠圧１．５ｔｏｎ、径１５ｍｍにて打錠した。この方法により、１錠当たりグルコン酸として０．７ｇを含有する経口摂取可能な、重量約１．２ｇ／錠の錠剤が得られた。
本発明の六炭糖由来の酸類は、それ自体またはそれらの製剤を組成物としてヒトまたは動物に投与することができ、これらの組成物は、医薬品または食品として使用できる。
あるいは、これらの組成物は、食品、飼料または飲料水に添加してヒトまたは動物に投与することができ、食品、飼料または飲料水に予め添加して用いるのが簡便であり、好ましい。
食品、飼料および飲料水は一般に使用されているものであればよく、特に限定されない。
食品の例としては、例えば錠剤形、粉末状、顆粒状、シロップ状、カプセル状等の健康食品、パン類、菓子類、クッキー、ビスケットなどの穀類加工品、牛乳、ヨーグルト、アイスクリームなどの乳製品類、炭酸飲料、清涼飲料、果汁入り清涼飲料、果汁入り飲料、薬系ドリンクなどの飲料、たくわん漬けなどの漬物類などが挙げられる。
また、飼料の例としては、とうもろこし、米、麦、マイロ、大豆粕、ふすま、脱脂米ぬか、魚粉、脱脂粉乳、乾燥ホエー、油脂、アルファルファミール、北洋ミール、大豆油脂、粉末精製牛脂、小麦粉、なたね油脂、肉骨粉（フェザーミール）、動物性油脂、リン酸カルシウム、コーングルテンミール、糖蜜、コーンジャームミール、炭酸カルシウム、リン酸三カルシウム、塩化ナトリウム、塩化コリン、ビタミン類（ビタミンＡ、ビタミンＢ１、ビタミンＢ２、ビタミンＢ６、ビタミンＢ１２、ビタミンＤ、ビタミンＥ、パントテン酸カルシウム、ニコチン酸アミド、葉酸等）、アミノ酸類（リジン、メチオニン等）、微量無機塩類（硫酸マグネシウム、硫酸鉄、硫酸銅、硫酸亜鉛、ヨウ化カリウム、硫酸コバルト等）、生菌剤などを適宜混合して調製したものが挙げられる。
六炭糖由来の酸類は、対象とするヒトまたは動物の種類および体重などにもよるが、通常一日当たり１５〜１５００ｍｇ／ｋｇ、好ましくは３０〜６００ｍｇ／ｋｇで用いられ、食品、飼料または飲料水に添加して用いる場合には、一般に有効成分として０．０１〜１０．０重量％、好ましくは０．０２〜４．０重量％の割合で用いることができる。特に食品及び飼料に添加する場合には、通常０．１〜１０．０重量％、好ましくは０．２〜４．０重量％の割合で、また飲料水に添加する場合には通常０．０１〜１．０重量％、好ましくは０．０２〜０．４重量％の割合で用いられる。
この発明は、さらに前記の組成物または該組成物を含む医薬品、食品、飼料または飲料水をヒトまたは動物に与えることからなる大腸炎および大腸がんの予防または治療方法を提供する。
この方法が適用される動物は通常の飼育動物であり、牛、豚、馬、羊、山羊、犬、猫のような哺乳動物および家禽や愛玩動物のような鳥類が挙げられる。この発明の組成物または該組成物を含む医薬品、食品、飼料または飲料水は、ヒトまたは動物に通常の方法で与えることができる。
実施例
以下、実施例を挙げて本発明をさらに詳細に説明するが、本発明はこれらの実施例に限定されるものではない。
実施例１：デキストラン硫酸ナトリウム（ＤＳＳ）を用いた大腸炎誘発ラットにおけるグルコン酸ナトリウム（ＧＮＡ）の炎症発生予防効果
１．材料および方法
１−１．供試動物：Ｗｉｓｔｅｒ系雄性ラット（８週齢）７匹
１−２．試験群の設定
ラットは、市販のラット用固形飼料を与えて３日間馴化した後、試験に用いた。
馴化終了後、無作為にＤＳＳ無処置ＧＮＡ無添加対照群に１匹、ＤＳＳ処置ＧＮＡ無添加対照群に３匹、ＤＳＳ処置ＧＮＡ５％添加群に３匹を割り付けた。
１−３．試験飼料の調製方法
下記表１の飼料成分を混合後、コーンスターチと同量の微温湯を加えてよく練りこみ、１日推定摂取量（２５ｇ）を団子状にして試験飼料とした。
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１−４．飼料の投与
各群とも、それぞれの飼料を連続１９日間、自由給餌した。
各飼料とも、朝１０時に前日の残餌を回収した後、新たに給与を開始した。
飲水は１０日のあいだ市水を自由摂取させ、１１日目以降からＤＳＳ添加水を自由摂取させたが、無処置無添加対照群の１匹には、１１日目以降も市水を給与した。
１−５．ＤＳＳの投与
ＤＳＳは、市水に溶解して５％溶液とし、試験開始１１日目から試験終了日まで、飲水として自由摂取させた。
１−６．便性状の観察
ＤＳＳの投与開始以後、毎日朝１０時に便性状を観察した。
１−７．剖検
ＤＳＳ投与開始後５日目に、各群で最も体重が減少した個体１匹ずつと無処置無添加対照群の１匹の計３匹を剖検に供した。
残りの４匹のラットは、ＤＳＳ投与開始後９日目に剖検に供した。
ラットは、ウレタン麻酔下で開腹して回盲末端部と肛門部を結紮し、速やかに大腸を摘出した。摘出した大腸から結直腸を分離して内容物を除去し、更に、生理食塩水で洗浄後、０．２５％（ｗ／ｖ）メチレンブルー溶液に浸漬し、炎症部の大きさを実態顕微鏡下で観察した。
１−８．病理組織学的検査
メチレンブルー染色後、炎症部の観察を行った結直腸組織をホルマリン固定し、結直腸起始部から肛門部までの縦断面をパラフィン包埋後切片とし、マッソントリクローム染色を行い、観察した。
２．結果
２−１．便性状
ＤＳＳ投与後の便性状観察結果を表２に示す。
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無添加対照群では７日目以降に下痢便または血便が観察されたが、ＧＮＡ５％投与群では便性状の変化は観察されなかった。
２−２．各臓器組織の観察および病理組織学的検査
ＤＳＳ投与終了後９日目に剖検した各群２匹ずつの各臓器組織の観察および病理組織学的検査結果を表３および図１に示す。
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図１は、デキストラン硫酸ナトリウム（ＤＳＳ）を用いた大腸炎誘発ラットにおけるグルコン酸ナトリウム（ＧＮＡ）の炎症発症予防効果を示す組織切片図である。ＡはＤＳＳ無処置対照群、ＢはＤＳＳ処置・無添加対照群およびＣはＤＳＳ処置・ＧＮＡ５％添加群である。
各臓器組織の観察において、無添加対照群では一部びらんが認められ、粘膜下層の毛細血管が観察できるほど盲腸粘膜が薄くなっていたが、ＧＮＡ５％投与群では軽度の充血が認められたのみであった。
また、病理組織学的検査においては、無添加対照群では陰窩がほぼ消滅して、粘膜上皮はなく間質層のみ存在し、粘膜下層にも腫脹が見られたが、ＧＮＡ５％投与群では無処理無添加対照群と比較すると多少の異常は認められるものの、ほぼ正常であった。
なお、ＤＳＳ投与後５日目に剖検した無処理無添加対照群を含む各群１匹ずつの各臓器組織の観察および病理組織学的検査結果では、ＤＳＳで処置したいずれの群も無処理無添加対照群と大差ない様相を呈していた。
以上の結果から、ＧＮＡの投与により、ＤＳＳ誘導大腸炎の発症を予防できることが示された。
実施例２：アゾキシメタン（ＡＯＭ）およびデオキシコール酸（ＤＣＡ）を用いた大腸がん誘発ラットにおけるグルコン酸ナトリウムの腫瘍形成抑制効果
１．材料および方法
１−１．供試動物：Ｆｉｓｈｅｒ−３４４雄性ラット（９週齢）３２匹
１−２．試験群の設定
ラットを、市販のラット用固形飼料を与えて３日間馴化し、その後、４日間の飼料馴化を行った。次いで、全ラットの平均体重が等しくなるように、ＤＣＡ無処置ＧＮＡ無添加対照群、ＤＣＡ無処置ＧＮＡ５％添加対照群、ＤＣＡ処置ＧＮＡ無添加対照群およびＤＣＡ処置ＧＮＡ５％添加群の４群に８匹づつ割り付けた。
１−３．試験飼料の調製方法
下記表４の飼料成分を混合後、コーンスターチと同量の微温湯を加えてよく練りこみ、１日推定摂取量（３５ｇ）を団子状にして試験飼料とした。
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１−４．飼料の投与
各群とも、それぞれの飼料および市水を３３週間、自由給餌した。各飼料とも、朝１０時に前日の残餌を回収した後、新たに給与を開始した。飼料摂取量を毎日測定し、体重は毎週１回測定した。
ＤＣＡ処置した２群のラットには、試験開始から最初の３週間に週１回ずつアゾキシメタン（ＡＯＭ，ナカライテスク製）生食懸濁液を１５ｍｇ／ｋｇになるよう腹腔内投与した（Ｋａｎａｍｏｔｏ，Ｒ．ら、Ｃａｎｃｅｒ  Ｌｅｔｔｅｒ，１９９９，１４５：１１５−１２０及びＢｉｏｓｃｉ．Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌ．Ｂｉｏｃｈｅｍ．，６５：８４８−８５２参照）。
１−５．剖検
試験開始より３３週目にウレタン麻酔下で開腹し、すばやく門脈より血液を採取した。各臓器を注意深く観察して写真撮影を行った後、盲腸・結直腸を摘出、重量を測定した。
その後、腸間膜脂肪を除去し、盲腸は腸間膜と逆側、結直腸は腸間膜付着部に沿って腸管を切開した。直腸の最も肛門側にある内容物は糞便水分含量測定に供した。盲腸および結腸組織を、腸管の内側に付着している内容物を生理食塩水で洗ってから、ろ紙に伸展させて貼り付けた。粘膜の状態を肉眼的に精査し、ポリープ状腫瘍数を計数し、腫瘍の大きさも計測した。すべての腫瘍領域を含む組織を定法に基づきホルマリン固定、パラフィン包埋、ＨＥ染色し、切片プレパラートを作成した。作成した組織切片プレパラートを用いて、がん病変像を顕微鏡観察した。
２．結果
２−１．便性状
ＤＣＡ無処置ＧＮＡ無添加群は、試験期間をとおして便性状に異常を生じなかった。
ＤＣＡ無処置ＧＮＡ添加群では、２３週目に１個体で血便が見られたが、すぐに回復し、その他の個体にも異常が認められなかった。
一方、大腸がん誘発群であるＤＣＡ処置ＧＮＡ無添加群では、試験開始２１週目に１個体で血便が見られ、２８週目以降にはほぼ全個体で血便が認められた。また、ＤＣＡ処置ＧＮＡ添加群では、試験開始２２週目に、下痢を呈したり、体重を減少させた２個体が認められ、３０週目までに３度血便が観察された。
２−２．各臓器組織の観察および病理組織学的検査
ＤＣＡ無処置の群では、ＧＮＡ無添加群、ＧＮＡ添加群の双方ともに盲腸及び結腸に腫瘍を形成した個体は観察されなかった。一方、ＤＣＡ処置した大腸がん誘発群の双方では、盲腸に腫瘍を形成した個体は観察されなかったが、結腸組織に腫瘍が認められた。その組織病理所見を表５に示す。
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結腸に腫瘍を発生させたラットは、ＧＮＡ無添加群の１００％に対し、ＧＮＡ添加群で３７．５％と有意に低かった。ラット１匹当たりの平均腫瘍数も、ＧＮＡ無添加群の２．７５個に対しＧＮＡ添加群で０．５個と有意に低い値が示された。
以上の結果から、ＧＮＡの投与により、ＡＯＭおよびＤＣＡ誘導性大腸がんの発症を予防または軽減できることが示された。
産業上の利用可能性
本発明によれば、六炭糖由来の酸、その非毒性塩および分子内エステル化合物の少なくとも１つを有効成分として含有することからなるヒトまたは動物用の大腸炎および大腸がんの予防または治療用組成物、該組成物を含む医薬品、食品、飼料または飲料水、ならびにそれらを使用することからなる大腸炎および大腸がんの予防または治療方法が提供される。
本発明における六炭糖由来の酸類は生体に安全であるため、大腸炎および大腸がんの治療に用いられていた従来の医薬と比べて副作用を引起こす恐れがないという利点がある。
【図１】
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【国際調査報告】
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