(57)【要約】本発明は、プリン系核酸関連物質が有する細胞増殖促進作用を効果的に発揮させるための方法を提供することを目的とするものである。本発明は、プリン系核酸関連物質とピリミジン系核酸関連物質を含有することを特徴とする細胞増殖用組成物である。また、本発明は、プリン系核酸関連物質とピリミジン系核酸関連物質を併用することを特徴とするプリン系核酸関連物質の細胞増殖促進作用の増強方法である。更に、本発明は、プリン系核酸関連物質とピリミジン系核酸関連物質を併用して、皮膚または粘膜に適用することを特徴とする、細胞増殖の促進方法である。【特許請求の範囲】
【請求項１】
プリン系核酸関連物質とピリミジン系核酸関連物質を含有することを特徴とする細胞増殖用組成物。
【請求項２】
プリン系核酸関連物質がアデニン系核酸関連物質よりなる群から選択される少なくとも１種であり、ピリミジン系核酸関連物質がウラシル系核酸関連物質よりなる群から選択される少なくとも１種である請求項１に記載の細胞増殖用組成物。
【請求項３】
プリン系核酸関連物質がアデノシン一リン酸またはその塩であり、ピリミジン系核酸関連物質がウリジン一リン酸またはその塩である請求項１に記載の細胞増殖用組成物。
【請求項４】
プリン系核酸関連物質を総量で少なくとも０．０１重量％の割合で含有する請求項１に記載の細胞増殖用組成物。
【請求項５】
プリン系核酸関連物質を総量で０．０１〜１０重量％の割合で含有する請求項１に記載の細胞増殖用組成物。
【請求項６】
組成物中のプリン系核酸関連物質１重量部に対してピリミジン系核酸関連物質を総量で０．０１〜１００重量部の割合で含有する請求項１に記載の細胞増殖用組成物。
【請求項７】
抗老化、保湿、抗アクネ、美白、抗たるみ、抗くすみ、抗シワ、育毛、抗フケ、美爪、及び創傷治療よりなる群から選択されるいずれかの用途に使用されるものである、請求項１に記載の細胞増殖用組成物。
【請求項８】
抗老化、保湿、抗アクネ、美白、抗たるみ、抗くすみ、抗シワ、育毛、美爪、及び創傷治療よりなる群から選択されるいずれかの用途に使用されるものである、請求項１に記載の細胞増殖用組成物。
【請求項９】
抗シワの用途に使用されるものである、請求項１に記載の細胞増殖用組成物。
【請求項１０】
プリン系核酸関連物質とピリミジン系核酸関連物質を併用することを特徴とするプリン系核酸関連物質の細胞増殖促進作用の増強方法。
【請求項１１】
プリン系核酸関連物質がアデニン系核酸関連物質よりなる群から選択される少なくとも１種であり、ピリミジン系核酸関連物質がウラシル系核酸関連物質よりなる群から選択される少なくとも１種である請求項１０に記載の細胞増殖促進作用の増強方法。
【請求項１２】
プリン系核酸関連物質が、アデニン、アデノシン、アデノシンのリン酸エステル、ヒポキサンチン、イノシン、イノシン酸、及びこれらの塩よりなる群から選択される少なくとも１種であり、ピリミジン系核酸関連物質がウラシル、ウリジン、ウリジンのリン酸エステル、デオキシウリジン、デオキシウリジンのリン酸エステル、及びこれらの塩よりなる群から選択される少なくとも１種である請求項１０に記載の細胞増殖促進作用の増強方法。
【請求項１３】
プリン系核酸関連物質がアデノシン一リン酸またはその塩であり、ピリミジン系核酸関連物質がウリジン一リン酸またはその塩である請求項１０に記載の細胞増殖促進作用の増強方法。
【請求項１４】
プリン系核酸関連物質１重量部に対してピリミジン系核酸関連物質を総量で０．０１〜１００重量部の割合で併用する請求項１０に記載の細胞増殖促進作用の増強方法。
【請求項１５】
プリン系核酸関連物質を含有する組成物にピリミジン系核酸関連物質を配合することを特徴とする請求項１０に記載の細胞増殖促進作用の増強方法。
【請求項１６】
組成物がプリン系核酸関連物質を総量で少なくとも０．０１重量％の割合で含有するものである請求項１５に記載の細胞増殖促進作用の増強方法。
【請求項１７】
組成物がプリン系核酸関連物質を総量で０．０１〜１０重量％の割合で含有するものである請求項１５に記載の細胞増殖促進作用の増強方法。
【請求項１８】
組成物が皮膚または粘膜に適用される外用組成物である請求項１５に記載の細胞増殖促進作用の増強方法。
【請求項１９】
組成物が抗老化、保湿、抗アクネ、美白、抗たるみ、抗くすみ、抗シワ、育毛、抗フケ、美爪、及び創傷治療よりなる群から選択されるいずれかの用途に使用されるものである請求項１５に記載の細胞増殖促進作用の増強方法。
【請求項２０】
組成物が抗老化、保湿、抗アクネ、美白、抗たるみ、抗くすみ、抗シワ、育毛、美爪、及び創傷治療よりなる群から選択されるいずれかの用途に使用されるものである請求項１５に記載の細胞増殖促進作用の増強方法。
【請求項２１】
組成物が抗シワの用途に使用されるものである請求項１５に記載の細胞増殖促進作用の増強方法。
【請求項２２】
プリン系核酸関連物質とピリミジン系核酸関連物質を併用して、皮膚または粘膜に適用することを特徴とする、細胞増殖を促進する方法。
【請求項２３】
プリン系核酸関連物質がアデニン系核酸関連物質よりなる群から選択される少なくとも１種であり、ピリミジン系核酸関連物質がウラシル系核酸関連物質よりなる群から選択される少なくとも１種である、請求項２２に記載の細胞増殖を促進する方法。
【請求項２４】
プリン系核酸関連物質が、アデニン、アデノシン、アデノシンのリン酸エステル、ヒポキサンチン、イノシン、イノシン酸、及びこれらの塩よりなる群から選択される少なくとも１種であり、ピリミジン系核酸関連物質がウラシル、ウリジン、ウリジンのリン酸エステル、デオキシウリジン、デオキシウリジンのリン酸エステル、及びこれらの塩よりなる群から選択される少なくとも１種である、請求項２２に記載の細胞増殖を促進する方法。
【請求項２５】
プリン系核酸関連物質がアデノシン一リン酸またはその塩であり、ピリミジン系核酸関連物質がウリジン一リン酸またはその塩である、請求項２２に記載の細胞増殖を促進する方法。
【請求項２６】
プリン系核酸関連物質１重量部に対してピリミジン系核酸関連物質を総量で０．０１〜１００重量部の割合で併用する、請求項２２に記載の細胞増殖を促進する方法。
【請求項２７】
プリン系核酸関連物質とピリミジン系核酸関連物質を含有する組成物を皮膚または粘膜に適用する、請求項２２に記載の細胞増殖を促進する方法。
【請求項２８】
組成物がプリン系核酸関連物質を総量で少なくとも０．０１重量％の割合で含有するものである、請求項２７記載の細胞増殖促進作用の増強方法。
【請求項２９】
組成物がプリン系核酸関連物質を総量で０．０１〜１０重量％の割合で含有するものである、請求項２７に記載の細胞増殖を促進する方法。
【請求項３０】
組成物が皮膚または粘膜に適用される外用組成物である、請求項２７に記載の細胞増殖を促進する方法。
【請求項３１】
組成物が化粧料、外用医薬部外品または外用医薬品である、請求項２７に記載の細胞増殖を促進する方法。
【請求項３２】
抗老化、保湿、抗アクネ、美白、抗たるみ、抗くすみ、抗シワ、育毛、抗フケ、美爪、及び創傷治療よりなる群から選択されるいずれかの用途で適用される、請求項２２に記載の細胞増殖を促進する方法。
【請求項３３】
抗老化、保湿、抗アクネ、美白、抗たるみ、抗くすみ、抗シワ、育毛、美爪、及び創傷治療よりなる群から選択されるいずれかの用途で適用される、請求項２２に記載の細胞増殖を促進する方法。
【請求項３４】
抗シワの用途で適用される、請求項２２に記載の細胞増殖を促進する方法。
【請求項３５】
プリン系核酸関連物質及びピリミジン系核酸関連物質の、細胞増殖用組成物の製造のための使用。
【請求項３６】
ピリミジン系核酸関連物質の、プリン系核酸関連物質の細胞増殖促進作用を増強するための使用。
【請求項３７】
プリン系核酸関連物質及びピリミジン系核酸関連物質の、細胞増殖を促進するための使用。
【請求項３８】
プリン系核酸関連物質及びピリミジン系核酸関連物質の、抗シワ作用を発揮させるための使用。
【発明の詳細な説明】
技術分野
本発明は、プリン系核酸関連物質が有する細胞増殖作用を効果的に発揮できる細胞増殖用組成物に関する。また本発明は、プリン系核酸関連物質が有する細胞増殖作用を増強する方法に関する。更に本発明は、プリン系核酸関連物質が有する細胞増殖作用を効果的に発揮させることにより、細胞増殖を促進する方法である。
背景技術
従来より、アデノシン、アデノシンリン酸及びその塩等のプリン系核酸関連物質は、皮膚に塗布されることにより角層中の遊離アミノ酸量を増大させて保湿効果を発揮し、それととともに皮膚のターンオーバーを誘導して皮膚の乾燥や老化を防止し、また荒れ肌を改善する作用を有することが知られている。かかる効果を目的として、化粧料、医薬部外品または医薬品などの外用剤へのこれらのプリン系核酸関連物質の応用が検討されている。これらのプリン系核酸関連物質には細胞増殖を促進する作用があることが知られており（Ｌｉｆｅ  Ｓｃｉｅｎｃｅｓ，Ｖｏｌ．６４，Ｎｏ．１８，ｐｐ．１６６１−１６７４，１９９９）、かかる細胞増殖促進作用が上記の各種作用に関わっているものと推測される。
しかしながら、これらのプリン系核酸関連物質は、親水性が高いため、経皮吸収されにくいという欠点がある。
このため、従来よりこれらのプリン系核酸関連物質を皮膚等に適用した場合に、当該プリン系核酸関連物質が有する細胞増殖促進作用をより効果的に発揮させるための方法が求められていた。
発明の開示
本発明は、プリン系核酸関連物質が有する細胞増殖促進作用を効果的に発揮させるための方法を提供することを目的とするものである。具体的には、本発明はプリン系核酸関連物質の細胞増殖促進作用を増強し、当該作用が効果的に得られる組成物を提供することを目的とする。また本発明は、プリン系核酸関連物質が有する細胞増殖促進作用を増強する方法を提供することを目的とする。更に本発明は、プリン系核酸関連物質が有する細胞増殖作用を効果的に発揮させて、細胞増殖を促進する方法を提供することを目的とする。
本発明者らは、プリン系核酸関連物質が有する細胞増殖促進作用を増強する方法の開発を目指して日夜研究を進めていたところ、当該プリン系核酸関連物質にピリミジン系核酸関連物質を併用することによって、上記目的が達成できることを見いだした。本発明はかかる知見に基づいて、更に検討を重ねて完成したものである。
すなわち本発明は、下記に掲げる細胞増殖用組成物である：
項１．  プリン系核酸関連物質とピリミジン系核酸関連物質を含有することを特徴とする細胞増殖用組成物。
項２．  プリン系核酸関連物質がアデニン系核酸関連物質よりなる群から選択される少なくとも１種であり、ピリミジン系核酸関連物質がウラシル系核酸関連物質よりなる群から選択される少なくとも１種である項１に記載の細胞増殖用組成物。
項３．  プリン系核酸関連物質がアデノシン一リン酸またはその塩であり、ピリミジン系核酸関連物質がウリジン一リン酸またはその塩である項１又は２に記載の細胞増殖用組成物。
項４．  プリン系核酸関連物質を総量で少なくとも０．０１重量％の割合で含有する項１乃至３のいずれかに記載の細胞増殖用組成物。
項５．  プリン系核酸関連物質を総量で０．０１〜１０重量％の割合で含有する項１乃至３のいずれかに記載の細胞増殖用組成物。
項６．  組成物中のプリン系核酸関連物質１重量部に対してピリミジン系核酸関連物質を総量で０．０１〜１００重量部の割合で含有する項１乃至５のいずれかに記載の細胞増殖用組成物。
項７．  皮膚または粘膜に使用される外用組成物である、項１乃至６のいずれかに記載の細胞増殖用組成物。
項８．  化粧料、外用医薬部外品、または外用医薬品である、項１乃至７のいずれかに記載の細胞増殖用組成物。
項９．  抗老化、保湿、抗アクネ、美白、抗たるみ、抗くすみ、抗シワ、育毛、抗フケ、美爪、及び創傷治療よりなる群から選択されるいずれかの用途に使用されるものである、請求項１乃至８のいずれかに記載の細胞増殖用組成物。
項１０．  抗老化、保湿、抗アクネ、美白、抗たるみ、抗くすみ、抗シワ、育毛、美爪、及び創傷治療よりなる群から選択されるいずれかの用途に使用されるものである、項１乃至８のいずれかに記載の細胞増殖用組成物。
項１１．  抗シワの用途に使用されるものである、項１乃至８のいずれかに記載の細胞増殖用組成物。
また、本発明は、下記に掲げる細胞増殖促進作用の増強方法である：
項１２．  プリン系核酸関連物質とピリミジン系核酸関連物質を併用することを特徴とするプリン系核酸関連物質の細胞増殖促進作用の増強方法。
項１３．  プリン系核酸関連物質がアデニン系核酸関連物質よりなる群から選択される少なくとも１種であり、ピリミジン系核酸関連物質がウラシル系核酸関連物質よりなる群から選択される少なくとも１種である項１２に記載の細胞増殖促進作用の増強方法。
項１４．  プリン系核酸関連物質が、アデニン、アデノシン、アデノシンのリン酸エステル、ヒポキサンチン、イノシン、イノシン酸、及びこれらの塩よりなる群から選択される少なくとも１種であり、ピリミジン系核酸関連物質がウラシル、ウリジン、ウリジンのリン酸エステル、デオキシウリジン、デオキシウリジンのリン酸エステル、及びこれらの塩よりなる群から選択される少なくとも１種である項１２又は１３に記載の細胞増殖促進作用の増強方法。
項１５．  プリン系核酸関連物質がアデノシン一リン酸またはその塩であり、ピリミジン系核酸関連物質がウリジン一リン酸またはその塩である項１２乃至１４のいずれかに記載の細胞増殖促進作用の増強方法。
項１６．  プリン系核酸関連物質１重量部に対してピリミジン系核酸関連物質を総量で０．０１〜１００重量部の割合で併用する項１２乃至１５のいずれかに記載の細胞増殖促進作用の増強方法。
項１７．  プリン系核酸関連物質を含有する組成物にピリミジン系核酸関連物質を配合することを特徴とする項１２乃至１６のいずれかに記載の細胞増殖促進作用の増強方法。
項１８．  組成物がプリン系核酸関連物質を総量で少なくとも０．０１重量％の割合で含有するものである項１７記載の細胞増殖促進作用の増強方法。
項１９．  組成物がプリン系核酸関連物質を総量で０．０１〜１０重量％の割合で含有するものである請求項１７又は１８に記載の細胞増殖促進作用の増強方法。
項２０．  組成物が皮膚または粘膜に適用される外用組成物である項１７乃至１９のいずれかに記載の細胞増殖促進作用の増強方法。
項２１．  組成物が化粧料、外用医薬部外品又は外用医薬品である項１７乃至２０のいずれかに記載の細胞増殖促進作用の増強方法。
項２２．  組成物が抗老化、保湿、抗アクネ、美白、抗たるみ、抗くすみ、抗シワ、育毛、抗フケ、美爪、及び創傷治療よりなる群から選択されるいずれかの用途に使用されるものである項１７乃至２１のいずれかに記載の細胞増殖促進作用の増強方法。
項２３．  組成物が抗老化、保湿、抗アクネ、美白、抗たるみ、抗くすみ、抗シワ、育毛、美爪、及び創傷治療よりなる群から選択されるいずれかの用途に使用されるものである項１７乃至２１のいずれかに記載の細胞増殖促進作用の増強方法。
項２４．  組成物が抗シワの用途に使用されるものである項１７乃至２１のいずれかに記載の細胞増殖促進作用の増強方法。
更に本発明は、下記に掲げる細胞増殖の促進方法である：
項２５．  プリン系核酸関連物質とピリミジン系核酸関連物質を併用して、皮膚または粘膜に適用することを特徴とする、細胞増殖の促進方法。
項２６．  プリン系核酸関連物質がアデニン系核酸関連物質よりなる群から選択される少なくとも１種であり、ピリミジン系核酸関連物質がウラシル系核酸関連物質よりなる群から選択される少なくとも１種である、項２５に記載の細胞増殖の促進方法。
項２７．  プリン系核酸関連物質が、アデニン、アデノシン、アデノシンのリン酸エステル、ヒポキサンチン、イノシン、イノシン酸、及びこれらの塩よりなる群から選択される少なくとも１種であり、ピリミジン系核酸関連物質がウラシル、ウリジン、ウリジンのリン酸エステル、デオキシウリジン、デオキシウリジンのリン酸エステル、及びこれらの塩よりなる群から選択される少なくとも１種である、項２５又は２６に記載の細胞増殖の促進方法。
項２８．  プリン系核酸関連物質がアデノシン一リン酸またはその塩であり、ピリミジン系核酸関連物質がウリジン一リン酸またはその塩である、項２５乃至２７のいずれかに記載の細胞増殖の促進方法。
項２９．  プリン系核酸関連物質１重量部に対してピリミジン系核酸関連物質を総量で０．０１〜１００重量部の割合で併用する、項２５乃至２８のいずれかに記載の細胞増殖の促進方法。
項３０．  プリン系核酸関連物質とピリミジン系核酸関連物質を含有する組成物を皮膚または粘膜に適用する、項２５乃至２９に記載の細胞増殖の促進方法。
項３１．  組成物がプリン系核酸関連物質を総量で少なくとも０．０１重量％の割合で含有するものである、項３０に記載の細胞増殖の促進方法。
項３２．  組成物がプリン系核酸関連物質を総量で０．０１〜１０重量％の割合で含有するものである、項３０又は３１に記載の細胞増殖の促進方法。
項３３．  組成物が皮膚または粘膜に適用される外用組成物である、項３０乃至３２のいずれかに記載の細胞増殖の促進方法。
項３４．  組成物が化粧料、外用医薬部外品または外用医薬品である、項３０乃至３３のいずれかに記載の細胞増殖の促進方法。
項３５．  抗老化、保湿、抗アクネ、美白、抗たるみ、抗くすみ、抗シワ、育毛、抗フケ、美爪、及び創傷治療よりなる群から選択されるいずれかの用途で適用される、項２５乃至３４のいずれかに記載の細胞増殖の促進方法。
項３６．  抗老化、保湿、抗アクネ、美白、抗たるみ、抗くすみ、抗シワ、育毛、美爪、及び創傷治療よりなる群から選択されるいずれかの用途で適用される、項２５乃至３４のいずれかに記載の細胞増殖の促進方法。
項３７．  抗シワの用途で適用される、項２５乃至３４のいずれかに記載の細胞増殖の促進方法。
更に本発明は、下記態様の使用である。
項３８．  プリン系核酸関連物質及びピリミジン系核酸関連物質の、細胞増殖用組成物の製造のための使用。
項３９．  ピリミジン系核酸関連物質の、プリン系核酸関連物質の細胞増殖促進作用を増強するための使用。
項４０．  プリン系核酸関連物質及びピリミジン系核酸関連物質の、細胞増殖を促進するための使用。
項４１．  プリン系核酸関連物質及びピリミジン系核酸関連物質の、抗シワ作用を発揮させるための使用。
発明を実施するための形態
（１）細胞増殖用組成物
本発明の細胞増殖用組成物は、プリン系核酸関連物質に加えてピリミジン系核酸関連物質を含有することを特徴とするものである。
ここでプリン系核酸関連物質としては、皮膚や粘膜に適用されて生理機能を発揮するものであって、化粧料や外用の医薬品又は医薬部外品中に配合できるものを広く挙げることができる。好ましくは水溶性若しくは親水性のものである。プリン系核酸関連物質としては、一般にアデニン、アデノシン、アデノシンのリン酸エステル〔例えばアデノシン２’−リン酸、アデノシン３’−リン酸、アデノシン５’−リン酸、アデノシン５’−二リン酸、アデノシン５’−三リン酸、アデノシン環状リン酸、アデニロコハク酸、ニコチンアミドアデニンモノジヌクレオチド（ＮＭＮ）、ニコチンアミドアデニンジヌクレオチド（ＮＡＤ）、ニコチンアミドアデニンジヌクレオチドリン酸（ＮＡＤＰ）、フラビンアデニンジヌクレオチド（ＦＡＤ）等〕、これらアデニン，アデノシンまたはアデノシンのリン酸エステルの代謝産物〔例えばヒポキサンチン、イノシン、イノシン酸等〕、及びこれらの塩などのアデニン系核酸関連物質；グアニン、グアノシン、グアノシンのリン酸エステル〔グアノシン３’−リン酸、グアノシン５’−リン酸、グアノシン５’−二リン酸、グアノシン５’−三リン酸等〕、これらグアニン，グアノシンまたはグアノシンのリン酸エステルの代謝産物〔例えば、キサンチル酸、キサンチン等〕、及びこれらの塩などのグアニン系核酸関連物質を挙げることができる。
中でも本発明において用いられるプリン系核酸関連物質としては、上記に掲げるアデニン系核酸関連物質を好適に例示することができる。好ましくは、アデノシンのリン酸エステル、その代謝物およびこれらの塩であり、より好ましくはアデノシンのリン酸エステル及びその塩である。ここでアデノシンのリン酸エステルとして、好適にはアデノシン１リン酸、特にアデノシン５’−リン酸（ＡＭＰ）を挙げることができる。
なお、上記において塩としては、いずれもナトリウム塩やカリウム塩などのアルカリ金属塩；カルシウム塩、マグネシウム塩およびバリウム塩等のアルカリ土類金属塩；アルギニンやリジン等の塩基性アミノ酸塩；アンモニウム塩やトリシクロヘキシルアンモニウム塩等のアンモニウム塩；モノエタノールアミン塩、ジエタノールアミン塩、トリエタノールアミン塩、モノイソプロパノールアミン塩、ジイソプロパノールアミン塩及びトリイソプロパノールアミンなどの各種のアルカノールアミン塩等を挙げることができる。好ましくはナトリウム塩などのアルカリ金属塩である。かかるアルカリ金属塩として、具体的にはアデノシン一リン酸一ナトリウム、及びアデノシン一リン酸二ナトリウムを例示することができる。
なお、これらのプリン系核酸関連物質は、本発明の細胞増殖用組成物中に１種単独で使用されてもよいし、また２種以上を任意に組み合わせて使用することもできる。
これらのプリン系核酸関連物質は、細胞増殖用組成物中に少なくとも０．０１重量％の割合で配合することができる。好ましくは少なくとも１重量％、より好ましくは３重量％である。細胞増殖用組成物中に配合するプリン系核酸関連物質の割合の上限は本発明の効果の点からは特に制限されるものではない。細胞増殖用組成物の用途によっても異なるが、他成分の配合や使用感等といった他の要因を考慮し、通常０．０１〜１０重量％の範囲から適宜選択して調整することができる。好ましくは１〜１０重量％、さらに好ましくは３〜６重量％である。
本発明で用いられるピリミジン系核酸関連物質としては、プリン系核酸関連物質と同様に、化粧料や外用の医薬品又は医薬部外品中に配合できるものを広く挙げることができる。好ましくは水溶性若しくは親水性のものである。かかるピリミジン系核酸関連物質としては、具体的にはウラシル、ウリジン、ウリジンのリン酸エステル〔ウリジン一リン酸（ウリジン５’−リン酸、ウリジン３’−リン酸、ウリジン２’−リン酸）、ウリジン二リン酸、ウリジン三リン酸、ウリジン環状リン酸等〕、デオキシウリジン、デオキシウリジンのリン酸エステル〔５’−デオキシウリジン二リン酸（ｄＵＤＰ）、５’−デオキシウリジル酸（ｄＵＭＰ）等〕及びこれらの塩などのウラシル系核酸関連物質；シトシン、シチジン、シチジンのリン酸エステル（ＣＭＰ）〔シチジン一リン酸（シチジン５’−リン酸、シチジン３’−リン酸、シチジン２’−リン酸）、シチジン三リン酸（ＣＴＰ）、シチジン二リン酸（ＣＤＰ）〕、デオキシシチジン、デオキシシチジンのリン酸エステル（５’−デオキシシチジン三リン酸（ｄＣＴＰ）、５’−デオキシシチジン二リン酸（ｄＣＤＰ）、５’−デオキシシチジル酸（ｄＣＭＰ）等）及びこれらの塩などのシトシン系核酸関連物質；チミン、チミジン、チミジンのリン酸エステル〔チミジル酸（ｄＴＭＰ）、チミジン二リン酸（ｄＴＤＰ）、チミジン三リン酸（ｄＴＴＰ）等〕、オロト酸、５’−オロトチジル酸、及びこれらの塩などのチミン系核酸関連物質を例示することができる。
なお、ここでピリミジン系核酸関連物質として、上記の各成分を含有するものであれば特にその純度や精製度を問うものではない。当該ピリミジン系核酸関連物質として、例えばアブラナ科植物（特に種子）またはマメ科植物の抽出液等の上記成分を含有する植物抽出物を用いることもできる。
本発明において用いられるピリミジン系核酸関連物質としては、上記に掲げるウラシル系核酸関連物質を好適に例示することができる。好ましくは、ウリジン、ウリジンのリン酸エステルまたはそれらの塩であり、より好ましくはウリジンのリン酸エステルまたはそれらの塩である。ここでウリジンのリン酸エステルとしては、好適にはウリジン一リン酸、特にウリジン５’−リン酸（ＵＭＰ）を挙げることができる。
また上記において塩としては、いずれもナトリウム塩やカリウム塩等のアルカリ金属塩；カルシウム塩、マグネシウム塩及びバリウム塩等のアルカリ土類金属塩；アルギニンやリジン等の塩基性アミノ酸塩；アンモニウム塩やトリシクロヘキシルアンモニウム塩等のアンモニウム塩；モノエタノールアミン塩、ジエタノールアミン塩、トリエタノールアミン塩、モノイソプロパノールアミン塩、ジイソプロパノールアミン塩及びトリイソプロパノールアミンなどの各種のアルカノールアミン塩等を挙げることができる。
これらの中で、好ましくはナトリウム塩などのアルカリ金属塩である。かかるアルカリ金属塩として、具体的にはウリジン一リン酸一ナトリウム、及びウリジン一リン酸二ナトリウムが例示される。
なお、これらのピリミジン系核酸関連物質は、本発明の細胞増殖用組成物中に１種単独で使用されてもよいし、また２種以上を任意に組み合わせて使用することもできる。
本発明の細胞増殖用組成物に配合されるピリミジン系核酸関連物質の割合は、上記効果を奏する範囲であれば特に制限されず、例えば組成物中に含まれるプリン系核酸関連物質１重量部に対してピリミジン系核酸関連物質が０．０１〜１００重量部の割合となるような範囲から適宜選択することができる。好ましくは、０．０１〜１０重量部、より好ましくは０．０１〜１重量部である。
細胞増殖用組成物１００重量％中のピリミジン系核酸関連物質の配合割合としては、上記プリン系核酸関連物質との配合比を目安として、０．０００１〜５０重量％の範囲から適宜選択調整することができる。好ましくは０．０００１〜１０重量％、より好ましくは０．０００１〜１重量％の割合を例示することができる。
本発明の組成物は、前述するプリン系核酸関連物質とピリミジン系核酸関連物質を含有することにより、細胞、具体的には皮膚細胞、皮膚付属器（毛、脂腺、爪等）細胞、または粘膜細胞などの細胞の増殖を促進する作用を有する。このため、本発明の組成物は細胞増殖用組成物または細胞増殖促進用組成物として化粧料、外用医薬品、または外用医薬部外品などの外用剤として広く用いることができる。より具体的には、例えば抗老化、保湿、抗アクネ、美白、抗シワ、抗たるみ、抗くすみ、育毛、抗フケ、美爪、創傷治療を目的とする化粧料、外用医薬品、または外用医薬部外品として用いることができる。中でも、抗老化、保湿、抗アクネ、美白、抗シワ、抗たるみ、抗くすみ、育毛、美爪、創傷治療を目的とする各種外用剤として使用することが望ましい。特に、本発明の組成物は、抗シワ作用を効果的に発揮できるので、抗シワを目的とする各種外用剤として有用である。
本発明の組成物は、好ましくは、皮膚外用剤として使用することができる。なお、かかる皮膚外用剤には、養毛剤や育毛剤、または養毛や育毛に効果のあるシャンプー、リンス、ヘアローション（トニック、リキッドを含む）などの各種のヘア化粧料が含まれる。
本発明の組成物の形態は、皮膚や粘膜に適用可能なものであれば特に制限されず、水溶液系、可溶化系、乳化系、粉末分散系、及び水／油２層系などの任意の形態に調製することができる。具体的には、液剤、油剤、ローション、リニメント剤、乳液、懸濁液、クリーム、軟膏等を例示することができる。特に化粧料としては、ローション；エモリエント乳液、ミルキーローション、ナリシング乳液、クレンジング乳液等の乳液；エモリエントクリーム、マッサージクリーム、クレンジングクリーム、メイクアップクリーム等のクリーム等を例示することができる。また、特に養毛剤や育毛剤等のヘア製品としては、トニック、ヘアクリーム、ヘアローション、エアゾール（噴霧剤）、ムース、シャンプー、リンス、リキッド等を例示することができる。
本発明の細胞増殖用組成物には、さらに本発明の効果を損なわない範囲内で、必要に応じて、化粧料や外用の医薬品・医薬部外品などの皮膚や粘膜に適用される外用組成物に配合される公知の各種成分を配合することができる。このような成分として、例えば、界面活性剤、色素（染料、顔料）、香料、防腐剤、殺菌剤（抗菌剤）、増粘剤、酸化防止剤、金属封鎖剤、清涼化剤、防臭剤等の各種添加物の他、保湿剤、紫外線吸収剤、紫外線散乱剤、ビタミン類、植物エキス、皮膚収斂剤、抗炎症剤（消炎剤）、美白剤、細胞賦活剤、血管拡張剤、血行促進剤、及び皮膚機能亢進剤などを挙げることができる。また、前述する各種の形態に応じて、自体公知の基剤や担体を使用することもできる。
上記成分として、例えば界面活性剤としては高級脂肪酸石けん、アルキル硫酸エステル塩、ポリオキシエチレンアルキルエーテル硫酸塩、アルキルエーテルリン酸エステル塩、Ｎ−アシルアミノ酸塩、アシルＮ−メチルタウリン塩等のアニオン界面活性剤；塩化アルキルトリメチルアンモニウム、塩化ジアルキルジメチルアンモニウムなどのカチオン界面活性剤；アルキルジメチルアミノ酢酸ベタイン、アルキルアミドジメチルアミノ酢酸ベタイン、２−アルキル−Ｎ−カルボキシ−Ｎ−ヒドロキシイミダゾリニウムベタインなどの両性界面活性剤；ポリオキシエチレン型、多価アルコールエステル型、エチレンオキシド・プロピレンオキシドブロック共重合体などの非イオン界面活性剤等を挙げることができる。また特に制限されることなく、高分子界面活性剤や天然界面活性剤に属する界面活性剤も使用することができる。
また防腐剤としてはパラオキシ安息香酸エチル、サリチル酸、及びソルビン酸等を例示することができる。増粘剤としてはキサンタンガム、カルボキシメチルセルロースナトリウム、カルボキシビニルポリマー等を例示することができる。金属封鎖剤としてはエチレンジアミン四酢酸のナトリウム塩、リン酸、クエン酸等を例示することができる。
本発明の細胞増殖用組成物は、化粧料、外用医薬品、または外用医薬部外品として、皮膚や粘膜に直接塗布または噴霧して使用することができる。その使用割合は、使用者（ヒト）の年齢、性別、用途、患部の症状の程度等に応じて１回／日から５又は６回／日の回数で皮膚に経皮的に投与される。本発明の細胞増殖用組成物の一回投与量は、制限されないが、例えば、投与される皮膚や粘膜の面積に対する該組成物の使用割合が０．５〜１０ｍｇ／ｃｍ２の範囲となるような量を目安として、適宜調整することができる。
前述するように、プリン系核酸関連物質にピリミジン系核酸関連物質を併用することによって、プリン系核酸関連物質が有する細胞増殖促進作用を増強することができる。従って、更に本発明は、プリン系核酸関連物質及びピリミジン系核酸関連物質の、細胞増殖用組成物の製造のための使用を提供する。
（２）プリン系核酸関連物質の細胞増殖促進作用の増強方法
本発明は、またプリン系核酸関連物質が有する細胞増殖促進作用を増強する方法を提供する。当該方法は、プリン系核酸関連物質にピリミジン系核酸関連物質を併用することによって実施することができる。
ここで用いられるプリン系核酸関連物質及びピリミジン系核酸関連物質の種類としてはいずれも前述のものを挙げることができる。プリン系核酸関連物質として好ましくはアデニン系核酸関連物質である。アデニン系核酸関連物質の中でも、好ましくはアデノシンのリン酸エステル、その代謝物およびこれらの塩であり、特に好ましくはアデノシンのリン酸エステル及びその塩である。ここでアデノシンのリン酸エステルとして、具体的にはアデノシン一リン酸、特にアデノシン５’−リン酸（ＡＭＰ）を挙げることができる。またピリミジン系核酸関連物質として好ましくはウラシル系核酸関連物質である。ウラシル系核酸関連物質の中でも、好ましくはウリジン、ウリジンのリン酸エステルまたはそれらの塩であり、特に好ましくはウリジンのリン酸エステルまたはそれらの塩である。ここでウリジンのリン酸エステルとしては、具体的にはウリジン一リン酸、特にウリジン５’−リン酸（ＵＭＰ）を挙げることができる。
プリン系核酸関連物質に対して使用されるピリミジン系核酸関連物質の割合としては、プリン系核酸関連物質１重量部に対して０．０１〜１００重量部、好ましくは０．０１〜１０重量部、より好ましくは０．０１〜１重量部である。
本発明の方法は、プリン系核酸関連物質を皮膚又は粘膜に適用するための組成物を調製するために使用される。具体的には、本発明の方法は、プリン系核酸関連物質の細胞増殖促進作用に基づいて、例えば抗老化、保湿、抗アクネ、美白、抗シワ、抗たるみ、抗くすみ、育毛、抗フケ、美爪、または創傷治療等の効果を奏する組成物を調製するために利用することができる。本発明の方法を使用して調製される上記各種効果を奏する組成物の中で、好ましくは抗老化、保湿、抗アクネ、美白、抗シワ、抗たるみ、抗くすみ、育毛、美爪、または創傷治療等の効果を奏するものである。特に好ましくは、抗シワ効果を奏する組成物である。すなわち、本発明によれば、プリン系核酸関連物質にピリミジン系核酸関連物質を併用することにより、プリン系核酸関連物質の細胞増殖促進作用が増強され、上記効果に優れた組成物を調製することができる。
かかる組成物の調製には、通常０．０１重量％以上、好ましくは１重量％以上、より好ましくは３重量％以上の割合でプリン系核酸関連物質を含む組成物に対して、ピリミジン系核酸関連物質を前述する重量比となるように配合することが好ましい。なお上記組成物中のプリン系核酸関連物質の含有量は、少なくとも上記の割合（下限）であれば特に制限されないが、好ましくは０．０１〜１０重量％、より好ましくは１〜１０重量％、さらに好ましくは３〜６重量％の割合を例示することができる。また、かかる組成物中に含まれるピリミジン系核酸関連物質の割合としては、前述するプリン系核酸関連物質に対する配合比を考慮しながら、０．０００１〜５０重量％の範囲から適宜選択調整することができる。好ましくは０．０００１〜１０重量％、より好ましくは０．０００１〜１重量％の割合を挙げることができる。
前述するように、プリン系核酸関連物質にピリミジン系核酸関連物質を併用することによって、プリン系核酸関連物質が有する細胞増殖促進作用を増強することができる。従って、更に本発明は、ピリミジン系核酸関連物質の、プリン系核酸関連物質の細胞増殖促進作用を増強するための使用を提供する。
（３）細胞増殖の促進方法。
本発明は、また細胞増殖を促進する方法を提供する。当該方法は、プリン系核酸関連物質とピリミジン系核酸関連物質とを併用して、皮膚又は粘膜に適用することによって実施される。
ここで用いられるプリン系核酸関連物質及びピリミジン系核酸関連物質の種類としてはいずれも前述のものを挙げることができる。プリン系核酸関連物質として好ましくはアデニン系核酸関連物質である。アデニン系核酸関連物質の中でも、好ましくはアデノシンのリン酸エステル、その代謝物およびこれらの塩であり、特に好ましくはアデノシンのリン酸エステル及びその塩である。ここでアデノシンのリン酸エステルとして、具体的にはアデノシン一リン酸、特にアデノシン５’−リン酸（ＡＭＰ）を挙げることができる。またピリミジン系核酸関連物質として好ましくはウラシル系核酸関連物質である。ウラシル系核酸関連物質の中でも、好ましくはウリジン、ウリジンのリン酸エステルまたはそれらの塩であり、特に好ましくはウリジンのリン酸エステルまたはそれらの塩である。ここでウリジンのリン酸エステルとしては、具体的にはウリジン一リン酸、特にウリジン５’−リン酸（ＵＭＰ）を挙げることができる。
プリン系核酸関連物質と併用されるピリミジン系核酸関連物質の割合としては、プリン系核酸関連物質１重量部に対して０．０１〜１００重量部、好ましくは０．０１〜１０重量部、より好ましくは０．０１〜１重量部である。
本発明の方法において、プリン系核酸関連物質とピリミジン系核酸関連物質を併用して、皮膚又は粘膜（以下、皮膚等という。）に適用する方法としては、プリン系核酸関連物質とピリミジン系核酸関連物質が、皮膚又は粘膜上で共存するように適用される限り、特に制限されない。例えば、プリン系核酸関連物質及びピリミジン系核酸関連物質を含有する組成物を皮膚等に適用してもよく、またプリン系核酸関連物質又はこれを含有する組成物とピリミジン系核酸関連物質又はこれを含有する組成物を任意の順で逐次に皮膚等に適用してもよい。また、上記両物質を皮膚等へ適用するには、例えば上記両物質を皮膚等に塗布又は噴霧すればよい。
本発明の方法の好ましい実施態様として、プリン系核酸関連物質及びピリミジン系核酸関連物質を含有する組成物を皮膚等に塗布又は噴霧する方法を挙げることができる。かかるプリン系核酸関連物質及びピリミジン系核酸関連物質を含有する組成物として、好ましくは上記（１）に記載の細胞増殖用組成物を使用することができる。
本発明の方法によれば、プリン系核酸関連物質の細胞増殖促進作用を増強して、細胞増殖を促進することができる。従って、本発明の方法は、例えば抗老化、保湿、抗アクネ、美白、抗シワ、抗たるみ、抗くすみ、育毛、抗フケ、美爪、または創傷治療等の用途に使用することができる。上記用途の中で、好ましくは抗老化、保湿、抗アクネ、美白、抗シワ、抗たるみ、抗くすみ、育毛、美爪、または創傷治療である。特に、本発明の方法は、細胞増殖を促進することによって効果的に抗シワ作用を発揮させることができるので、抗シワの用途に有用である。
また、上記両物質を皮膚等に適用する頻度及び量については、特に制限されない。例えば、使用者（ヒト）の年齢、性別、用途、患部の症状の程度等に応じて、１回／日から５又は６回／日の頻度で上記両物質の適当量を適用することができる。具体的には、上記（１）に記載の細胞増殖用組成物を使用して本発明の方法を実施する場合であれば、例えば適用される皮膚等の面積に対する該組成物の適用割合が０．５〜１０ｍｇ／ｃｍ２の範囲となるような量を１回適用量の目安とすることができる。
前述するように、プリン系核酸関連物質とピリミジン系核酸関連物質を併用することによって、細胞増殖を促進することができる。従って、更に本発明は、プリン系核酸関連物質及びピリミジン系核酸関連物質の、細胞増殖を促進するための使用を提供する。そして更に、本発明は、プリン系核酸関連物質及びピリミジン系核酸関連物質の、抗シワ作用を発揮させるための使用を提供する。
実  施  例
以下に実験例及び処方例を挙げて本発明を説明するが、本発明はこれらの例に何ら限定されるものではない。なお、以下の実験例及び処方例において、配合割合に関して「％」とは、特に断らない限り、重量％を意味するものである。
実験例１  ｉｎ  ｖｉｔｒｏにおける培養ヒトケラチノサイト増殖促進効果
初代培養ヒトケラチノサイト（クラボウ製）を１０ｃｍシャーレに培養し、サブコンフルエント状態で回収し凍結保存した。この細胞を用いて下記の実験を行った。
１．凍結保存した細胞をＨｕＭｅｄｉａＫＧ２液体培地（クラボウ社製）に溶解し、５０００００ｃｅｌｌｓ／ｍｌとなるように細胞濃度を調整し、該細胞液を試験プレートのウエルに１ｗｅｌｌあたり５０μｌずつの割合で注入して、２５００ｃｅｌｌｓ／５０μｌ／ｗｅｌｌとした。
２．一方、滅菌リン酸緩衝液を用いて各種濃度のアデノシン一リン酸二ナトリウム溶液及びウリジン一リン酸二ナリウム溶液を調整し、フィルターろ過して滅菌した。これに滅菌したＨｕＭｅｄｉａＫＧ２液体培地（クラボウ社製）を添加して、各種希釈系列の被験試料含有培地を調製した。
３．プレートウエルへの細胞注入から６時間後、ヒトケラチノサイトのウエル上への接着を確認し、各ウエルに上記で調製した各種希釈系列の被験試料含有培地（２５０μｌ）を添加して試験サンプル（合計３００μｌ）を調製し、これを３７℃、５％ＣＯ２の条件下で２日間培養した。なお、当該試験サンプルとして、上記３００μｌ中に含まれるアデノシン一リン酸の濃度が０、０．０００１、０．００１、０．０１、０．１及び１ｗ／ｖ％となるように調製したアデノシン一リン酸二ナトリウム溶液に、それぞれウリジン一リン酸二ナトリウムをウリジン一リン酸の濃度に換算して０、０．０００００１（１Ｅ−０６）、０．００００１（１Ｅ−０５）、０．０００１、０．００１、０．０１及び０．１ｗ／ｖ％となるように配合して調製した各種濃度の溶液を使用した。
４．培養から２日後、ＷＳＴ−１試薬（ＴａＫａＲａ製）を用いて、吸光度の上昇に基づいてヒトケラチノサイトの増殖を測定した。具体的には、上記で培養した各ウエル中の試験サンプル（３００μｌ）から２００μｌを除去して、残りの１００μｌ中にＷＳＴ−１試薬を１０μｌずつ添加して、攪拌した後、３７℃、５％ＣＯ２のインキュベーター中で２時間反応させた。反応後、マルチスキャンアセントを用いて測定波長４５０ｎｍ、対照波長６９０ｎｍにて吸光度を測定し、吸光度から細胞の増殖の有無並びにその程度を評価した。なお、ブランクとしてＨｕＭｅｄｉａＫＧ２液体培地（クラボウ社製）１００μｌにＷＳＴ−１試薬１０μｌ添加したものを用いた。
結果を図１に示す。図１は各ウリジン一リン酸二ナトリウム（ＵＭＰ・２Ｎａ）濃度を横軸とし、各濃度における細胞数（縦軸）を、該ウリジン一リン酸二ナトリウムと併用するアデノシン一リン酸二ナトリウムの濃度（正確にはアデノシン一リン酸（ＡＭＰ）濃度）毎に示したものである。なお、図１には細胞数（縦軸）として、それぞれアデノシン一リン酸二ナトリウムの配合系（０、０．０００１、０．００１、０．０１、０．１、及び１ｗ／ｖ％）において、ウリジン一リン酸二ナトリウムを配合しない試験サンプルにおいて得られた細胞数を１とした場合の相対比（ｒａｔｉｏ  ｏｆ  ｃｏｎｔ．）として示す。
図１から、プリン系核酸関連物質であるアデノシン一リン酸二ナトリウムにピリミジン系核酸関連物質であるウリジン一リン酸二ナトリウムを配合することによって、アデノシン一リン酸二ナトリウムの細胞増殖作用が増強し、促進されることが示された。
処方例１  化粧水  （ｐＨ６．５）
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処方例２  乳液  （ｐＨ６．５）
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処方例３  養毛剤
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産業上の利用可能性
本発明の細胞増殖用組成物によれば、プリン系核酸関連物質が有する細胞増殖促進作用がピリミジン系核酸関連物質によって増強されているので、抗老化、保湿、抗アクネ、美白、抗シワ、抗たるみ、抗くすみ、育毛、抗フケ、美爪、または創傷治療等の効果に有効な化粧料、または皮膚外用剤（医薬品、医薬部外品）として有用である。
また、本発明のプリン系核酸関連物質の細胞増殖促進作用の増強方法によれば、プリン系核酸関連物質が有する細胞増殖促進作用をピリミジン系核酸関連物質を併用することで増強することができる。従って、該方法によれば、少量のプリン系核酸関連物質で優れた細胞増殖促進作用を有し、抗老化、保湿、抗アクネ、美白、抗シワ、抗たるみ、抗くすみ、育毛、抗フケ、美爪、または創傷治療等の効果が優れている組成物を調製することが可能となる。
更に、本発明の細胞増殖の促進方法によれば、効果的に細胞増殖を促進することができるので、抗老化、保湿、抗アクネ、美白、抗シワ、抗たるみ、抗くすみ、育毛、抗フケ、美爪、または創傷治療等の作用を皮膚や粘膜に付与することが可能となる。
【図面の簡単な説明】
図１は、実験例１の実験において、アデノシン一リン酸二ナトリウムのヒトケラチノサイトに対する細胞増殖促成作用が、ウリジン一リン酸二ナトリウムの併用によって増強されることを示す図である。横軸は、アデノシン一リン酸二ナトリウムと併用するウリジン一リン酸二ナトリウムの濃度（ｗ／ｖ％）であり、縦軸は、それぞれのアデノシン一リン酸二ナトリウム配合系においてウリジン一リン酸二ナトリウムを添加しない試験サンプルで得られた細胞数を１とし、各試験サンプルで得られる細胞数をそれに対する相対比（ｒａｔｉｏ  ｏｆ  ｃｏｎｔ．）として示すものである。
【図１】
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【国際調査報告】
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