(57)【要約】式（Ｉ）2003041717.tif 000006で示される（１１α，１３Ｅ，１５α）−９−オキソ−１１，１５−ジヒドロキシ−１６−（３−メトキシメチルフェニル）−１７，１８，１９，２０−テトラノル−５−チアプロスト−１３−エン酸・メチルエステルまたはその非毒性塩を有効成分として含有し、生体内吸収性高分子を基材とする骨量低下疾患部位に局所投与するための持続性フィルム状製剤および前記持続性フィルム状製剤からなる骨量低下疾患治療剤。化合物（Ｉ）を有効成分として含有する本発明の持続性フィルム状製剤は、局所投与することによって骨形成促進作用を有し、骨量低下疾患の治療に有用である。
2003041717.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
式（Ｉ）
2003041717.tif 000005
で示される（１１α，１３Ｅ，１５α）−９−オキソ−１１，１５−ジヒドロキシ−１６−（３−メトキシメチルフェニル）−１７，１８，１９，２０−テトラノル−５−チアプロスト−１３−エン酸・メチルエステルまたはその非毒性塩を有効成分として含有する骨量低下疾患部位に局所投与するための持続性フィルム状製剤。
【請求項２】
持続性フィルム状製剤のフィルム基材が生体内吸収性高分子からなる請求の範囲１に記載の持続性フィルム状製剤。
【請求項３】
生体内吸収性高分子が、脂肪酸エステル重合体またはその共重合体、ポリアクリル酸エステル類、ポリヒドロキシ酪酸類、ポリアルキレンオキサレート類、ポリオルソエステル、ポリカーボネートおよびポリアミノ酸類から選択される少なくとも１種類の高分子である請求の範囲２に記載の持続性フィルム状製剤。
【請求項４】
脂肪酸エステル重合体またはその共重合体が、ポリ乳酸、ポリグリコール酸、ポリクエン酸、ポリリンゴ酸、ポリ−ε−カプロラクトン、ポリジオキサノン、ポリフォスファゼン、ポリα−シアノアクリル酸エステル、ポリβ−ヒドロキシ酪酸、ポリトリメチレンオキサート、ポリオルソエステル、ポリオルソカーボネート、ポリエチレンカーボネート、ポリγ−ベンジル−Ｌ−グルタミン酸およびポリＬ−アラニンを単独または２成分以上含むグラフト、ブロック、交互、および／またはランダム共重合体である請求の範囲３記載の持続性フィルム状製剤。
【請求項５】
脂肪酸エステル重合体またはその共重合体が、ポリ乳酸、ポリグルコール酸または乳酸−グリコール酸共重合体である請求の範囲４記載の持続性フィルム状製剤。
【請求項６】
ポリ乳酸および乳酸−グリコール酸共重合体を構成する乳酸が、Ｌ−乳酸またはポリ−ＤＬ−乳酸である請求の範囲５記載の持続性フィルム状製剤。
【請求項７】
請求の範囲１乃至６に記載の持続性フィルム状製剤からなる局所投与用骨量低下疾患治療剤。
【請求項８】
骨量低下疾患が原発性骨粗鬆症、二次性骨粗鬆症、、癌骨転移、高カルシウム血症、ページェット病、骨欠損、骨壊死の骨疾患、骨の手術後の骨形成、骨移植代替療法である請求の範囲７記載の治療剤。
【発明の詳細な説明】
技術分野
本発明は、
（１）（１１α，１３Ｅ，１５α）−９−オキソ−１１，１５−ジヒドロキシ−１６−（３−メトキシメチルフェニル）−１７，１８，１９，２０−テトラノル−５−チアプロスト−１３−エン酸・メチルエステル（以下、化合物（Ｉ）と略記する。）を有効成分として含有する骨量低下疾患部位に局所投与するための持続性フィルム状製剤、および
（２）化合物（Ｉ）を有効成分として含有する局所投与用持続性フィルム状製剤からなる原発性骨粗鬆症、二次性骨粗鬆症、癌骨転移、高カルシウム血症、ページェット病、骨欠損、骨壊死の骨疾患、骨の手術後の骨形成、骨移植代替療法の治療剤に関する。
背景技術
近年の研究の中で、プロスタグランジンＥ２（ＰＧＥ２と略記する。）受容体には、それぞれ役割の異なったサブタイプが存在することが知られている。現時点で知られているサブタイプは、大別して４つあり、それぞれ、ＥＰ１、ＥＰ２、ＥＰ３、ＥＰ４と呼ばれている（Ｎｅｇｉｓｈｉ  Ｍ．ｅｔ  ａｌ，Ｊ．Ｌｉｐｉｄ  Ｍｅｄｉａｔｏｒｓ  Ｃｅｌｌ  Ｓｉｇｎａｌｉｎｇ  １２，３７９−３９１（１９９５））。
ＥＰ４受容体は、ＴＮＦ−α産生抑制、ＩＬ−１０産生増強に関与していると考えられているため、ＥＰ４受容体に結合する化合物は、免疫疾患（筋萎縮性側索硬化症（ＡＬＳ）、多発性硬化症、シェーグレン症候群、慢性関節リューマチ、全身性エリトマトーデス等の自己免疫疾患、臓器移植後の拒絶反応など）、喘息、神経細胞死、肺傷害、肺線維症、肺気腫、気管支炎、慢性閉塞性呼吸器疾患、肝傷害、急性肝炎、腎炎、腎不全、高血圧、心筋虚血、全身性炎症反応症候群、敗血症、血球貧食症候群、マクロファージ活性化症候群、スチル（Ｓｔｉｌｌ）病、川崎病、熱傷、全身性肉芽腫、潰瘍性大腸炎、クローン病、透析時の高サイトカイン血症、多臓器不全、ショック等の疾患の予防および／または治療に有用であると考えられている。
ＥＰ４受容体は粘膜保護作用にも関係しており、胃潰瘍、十二指腸潰瘍などの消化管潰瘍や口内炎の予防および／または治療に有用であると考えられる。また、ＥＰ４受容体は生理的睡眠の誘発や血小板凝集抑制にも関与しており、ＥＰ４受容体に結合する化合物は睡眠障害や血栓症にも有用であると考えられる。
さらに、ＥＰ４受容体に結合する化合物は、骨形成促進作用も有していることから、骨量低下疾患、例えば、
１）原発性骨粗鬆症（例えば、加齢に伴う原発性骨粗鬆症、閉経に伴う原発性骨粗鬆症、卵巣摘出術に伴う原発性骨粗鬆症等）、
２）二次性骨粗鬆症（例えば、グルココルチコイド誘発性骨粗鬆症、甲状腺機能亢進性骨粗鬆症、固定誘発性骨粗鬆症、ヘパリン誘発性骨粗鬆症、免疫抑制誘発性骨粗鬆症、腎不全による骨粗鬆症、炎症性骨粗鬆症、クッシング症候群に伴う骨粗鬆症、リューマチ性骨粗鬆症等）、
３）癌骨転移、高カルシウム血症、ページェット病、骨欠損（歯槽骨欠損、下顎骨欠損、小児期突発性骨欠損等）、骨壊死等の骨疾患の治療に有用であるばかりでなく、骨の手術後の骨形成（例えば、骨折後の骨形成、骨移植後の骨形成、人工関節術後の骨形成、脊椎固定術後の骨形成、その他骨再建術後の骨形成等）の促進・治癒促進剤、また骨移植代替療法として有用であると考えられる。
化合物（Ｉ）は、ＥＰ４受容体結合剤として有用である旨が、ＷＯ００／０３９８０号に記載されている。
また、ＷＯ０１／３７８７７号には、化合物（Ｉ）で示されるＥＰ４受容体アゴニストが骨疾患の治療に有用であることが記載されているが、局所投与に関しては一般的な記載のみであり、持続的な投与に関しての記載はない。すなわち、ＥＰ４受容体アゴニストを含有する持続性製剤を局所投与することが骨疾患の治療に有用であることは実験的には証明されていない。
さらに、ＥＰ４受容体選択的アゴニストの局所投与が、骨疾患の治療に有用である旨が特開２００１−１８１２１０号に記載されているが、実験的には証明されていない。
これまでにＥＰ４アゴニスト作用を有する化合物の骨量低下疾患治療剤への応用が見出されている。しかし、これまで見出されたＥＰ４アゴニストは、プロスタン酸骨格を有するものであり、経口投与や静脈内投与（急速静注、点滴静注）等の全身投与を行った際には、血圧低下や心拍数増加などの循環器系への影響や下痢等の副作用が考えられる。そのため、安全に投与できる用量には限界があるという大きな問題がある。
また、骨疾患の治療する場合、骨形成には時間を要するため、患者に薬剤を局所に多くの回数投与する必要がなり、患者に負担がかかる点から必ずしも満足なものではない。従って、骨疾患部位に持続性薬剤をなるべく少ない回数投与することが望ましいと考えられる。
このようなことから、骨の局所に直接かつ持続的に作用する医薬品が望まれている。
発明の開示
本発明者らは、ＥＰ４アゴニストを局所に投与することができれば、全身投与における副作用のない治療剤が創製可能であると考えた。さらに、局所投与においても、持続製剤化が可能なＥＰ４アゴニストを見出すことができれば、全身投与時に生ずる副作用がなく、さらに投与回数の少ない治療剤が創製可能であると考えた。
そこで、上記目的を解決すべく鋭意研究した結果、本発明者らは化合物（Ｉ）を生体内吸収性高分子と共にフィルム状製剤として持続製剤化することにより、目的を達成し得ることを見出し、本発明を完成した。
化合物（Ｉ）を有効成分として含有する生体内吸収性高分子のフィルム状製剤は、全く知られていない新規な持続性製剤である。
すなわち、本発明は下記の持続性フィルム状製剤および骨量低下疾患治療剤に関する。
１．式（Ｉ）
2003041717.tif 000003
で示される（１１α，１３Ｅ，１５α）−９−オキソ−１１，１５−ジヒドロキシ−１６−（３−メトキシメチルフェニル）−１７，１８，１９，２０−テトラノル−５−チアプロスト−１３−エン酸・メチルエステルまたはその非毒性塩を有効成分として含有する骨量低下疾患部位に局所投与するための持統性フィルム状製剤。
２．持続性フィルム状製剤のフィルム基材が生体内吸収性高分子からなる前記１に記載の持続性フィルム状製剤。
３．生体内吸収性高分子が、脂肪酸エステル重合体またはその共重合体、ポリアクリル酸エステル類、ポリヒドロキシ酪酸類、ポリアルキレンオキサレート類、ポリオルソエステル、ポリカーボネートおよびポリアミノ酸類から選択される少なくとも１種類の高分子である前記２に記載の持続性フィルム状製剤。
４．脂肪酸エステル重合体またはその共重合体が、ポリ乳酸、ポリグリコール酸、ポリクエン酸、ポリリンゴ酸、ポリ−ε−カプロラクトン、ポリジオキサノン、ポリフォスファゼン、ポリα−シアノアクリル酸エステル、ポリβ−ヒドロキシ酪酸、ポリトリメチレンオキサート、ポリオルソエステル、ポリオルソカーボネート、ポリエチレンカーボネート、ポリγ−ベンジル−Ｌ−グルタミン酸およびポリＬ−アラニンを単独または２成分以上含むグラフト、ブロック、交互、および／またはランダム共重合体である前記３記載の持続性フィルム状製剤。
５．脂肪酸エステル重合体またはその共重合体が、ポリ乳酸、ポリグルコール酸または乳酸−グリコール酸共重合体である前記４記載の持続性フィルム状製剤。
６．ポリ乳酸および乳酸−グリコール酸共重合体を構成する乳酸が、Ｌ−乳酸またはポリ−ＤＬ−乳酸である前記５記載の持続性フィルム状製剤。
７．前記１乃至６に記載の持続性フィルム状製剤からなる局所投与用骨量低下疾患治療剤。
８．骨量低下疾患が原発性骨粗鬆症（加齢に伴う原発性骨粗鬆症、閉経に伴う原発性骨粗鬆症、卵巣摘出術に伴う原発性骨粗鬆症）、二次性骨粗鬆症（グルココルチコイド誘発性骨粗鬆症、甲状腺機能亢進性骨粗鬆症、固定誘発性骨粗鬆症、ヘパリン誘発性骨粗鬆症、免疫抑制誘発性骨粗鬆症、腎不全による骨粗鬆症、炎症性骨粗鬆症、クッシング症候群に伴う骨粗鬆症、リューマチ性骨粗鬆症）、癌骨転移、高カルシウム血症、ページェット病、骨欠損（歯槽骨欠損、下顎骨欠損、小児期突発性骨欠損）、骨壊死の骨疾患、骨の手術後の骨形成（骨折後の骨形成、骨移植後の骨形成、人工関節術後の骨形成、脊椎固定術後の骨形成）、骨移植代替療法である前記７記載の治療剤。
発明の詳細な説明
本発明の持続性フィルム状製剤の有効成分は前記式（Ｉ）で示される（１１α，１３Ｅ，１５α）−９−オキソ−１１，１５−ジヒドロキシ−１６−（３−メトキシメチルフェニル）−１７，１８，１９，２０−テトラノル−５−チアプロスト−１３−エン酸・メチルエステル（化合物（Ｉ））またはその非毒性塩である。
ここで非毒性塩には、溶媒和物も含まれる。溶媒和物は非毒性かつ水溶性であることが好ましい。適当な溶媒和物としては、例えば水、アルコール系の溶媒（例えば、エタノール等）のような溶媒和物が挙げられる。
本発明の持続性フィルム状製剤のフィルム基材で使用する生体内吸収性高分子としては、脂肪酸エステル重合体またはその共重合体、ポリアクリル酸エステル類、ポリヒドロキシ酪酸類、ポリアルキレンオキサレート類、ポリオルソエステル、ポリカーボネートおよびポリアミノ酸類が挙げられ、これらは１種類またはそれ以上混合して使用することができる。脂肪酸エステル重合体またはその共重合体とは、ポリ乳酸、ポリグリコール酸、ポリクエン酸、ポリリンゴ酸、ポリ−ε−カプロラクトン、ポリジオキサノン、ポリフォスファゼンなど、およびこれらの２成分以上からなるグラフト、ブロック、交互、ランダム共重合体が挙げられ、これらは１種類またはそれ以上混合して使用することができる。その他に、ポリα−シアノアクリル酸エステル、ポリβ−ヒドロキシ酪酸、ポリトリメチレンオキサート、ポリオルソエステル、ポリオルソカーボネート、ポリエチレンカーボネート、ポリγ−ベンジル−Ｌ−グルタミン酸およびポリＬ−アラニンなどがあり、これらの２成分以上または上述材料との共重合体など、あるいは１種類またはそれ以上混合も使用することができる。好ましくは、ポリ乳酸、ポリグルコール酸または乳酸−グリコール酸共重合体である。
ポリ乳酸あるいは乳酸−グリコール酸共重合体で使用される乳酸としては、Ｌ−乳酸またはＤＬ−乳酸が挙げられる。
本発明に使用される前記生体内吸収性高分子重合物の平均分子量は約２，０００〜約８００，０００のものが好ましく、約５，０００〜約２００，０００がより好ましい。例えば、ポリ乳酸において、その重量平均分子量は約５，０００〜約１００，０００のものが好ましく、さらに約６，０００〜約５０，０００が好ましい。ポリ乳酸は、それ自体公知の製造方法に従って合成できる。
乳酸−グリコール酸共重合物においては、その乳酸とグリコール酸との組成比は約１００／０〜約０／１００（Ｗ／Ｗ）までのもの、より好ましくは約９０／１０〜約３０／７０（Ｗ／Ｗ）のものを目的に応じて用いることができる。使用する乳酸−グリコール酸共重合物の重量平均分子量は約５，０００〜約１００，０００が好ましく、さらに約１０，０００〜約８０，０００が好ましい。乳酸−グリコール酸共重合物は、それ自体公知の製造方法に従って合成できる。
本明細書中、重量平均分子量は、ゲルパーミェーションクロマトグラフィー（ＧＰＣ）で測定したポリスチレン換算の分子量をいう。
前記した生体内吸収性高分子の使用量は、化合物（Ｉ）の薬理活性の強さと薬物放出速度を考慮して、投与の目的が達成される範囲内で任意に変えることができる。
例えば、生体内吸収性高分子は生理活性物質（化合物（Ｉ））に対して約０．２〜１０，０００倍（質量比）、好ましくは約１〜１，０００倍（質量比）、さらに好ましくは約１〜１００倍（質量比）の量で用いられる。
本発明のフィルム状製剤の製造方法は、特に制限されないが、例えば前記の生体内吸収性高分子と化合物（Ｉ）を有機溶媒に溶解した後、蒸留乾固、風乾、または凍結乾燥してフィルム状とする方法、生体内吸収性高分子を有機溶媒に溶解し、化合物（Ｉ）を水あるいは前者有機溶媒と混和しない溶媒に溶解した後に乳化混合して凍結乾燥する方法、あるいは生体内吸収性高分子と化合物（Ｉ）を適当な溶剤に溶かした後、増粘剤（セルロース類、ポリカーボネート類等）を加えて、ゲル化する方法により製造することができる。
産業上の利用可能性
［医薬品への適用］
化合物（Ｉ）はＰＧＥ２受容体サブタイプＥＰ４に対し、特異的かつ強力に作用するため、原発性骨粗鬆症（加齢に伴う原発性骨粗鬆症、閉経に伴う原発性骨粗鬆症、卵巣摘出術に伴う原発性骨粗鬆症）、二次性骨粗鬆症（グルココルチコイド誘発性骨粗鬆症、甲状腺機能亢進性骨粗鬆症、固定誘発性骨粗鬆症、ヘパリン誘発性骨粗鬆症、免疫抑制誘発性骨粗鬆症、腎不全による骨粗鬆症、炎症性骨粗鬆症、クッシング症候群に伴う骨粗鬆症、リューマチ性骨粗鬆症）、癌骨転移、高カルシウム血症、ページェット病、骨欠損（歯槽骨欠損、下顎骨欠損、小児期突発性骨欠損）、骨壊死の骨疾患、骨の手術後の骨形成（骨折後の骨形成、骨移植後の骨形成、人工関節術後の骨形成、脊椎固定術後の骨形成）、骨移植代替療法の治療に有用である。
［局所への適用］
本発明の持続性製剤は、化合物（Ｉ）を疾患の部位へ直接、持続的に供給する局所投与用として用いられる。その投与形態の例としては埋め込み製剤が挙げられる。
本発明の持続性フィルム状製剤、生体内吸収性高分子の種類、配合量などにより化合物（Ｉ）の徐放期間は異なるが、目的に応じて通常１週間から３カ月の徐放期間を有するので、骨低下疾患等に用いることができる。これらの中でも、頻回投与を避け１回の投与で持続的に治癒促進することが望まれる患者、例えば患部を固定しギブスなどで覆うことが多い骨折患者に対して特に有効である。
本発明の持続性フィルム状製剤による医薬組成物の投与量は、薬物放出の持続時間、投与対象動物などにより異なるが、化合物（Ｉ）を有効量を投与する。例えば、骨折部位に使用する場合、１回当りの投与量として、成人（体重５０ｋｇ）当たり、有効成分として約０．００１ｍｇから５００ｍｇを、好ましくは約０．０１ｍｇから５０ｍｇを１週間ないし３カ月に１回投与すればよい。
発明を実施するための最良の形態
以下に製剤例、製剤試験例および骨再生能の評価試験を挙げて本発明を説明するが、本発明は下記の記載により制限されるものではない。
製剤例１
常法に従って調製したポリ−Ｌ−乳酸（重量平均分子量８，２００、以下、ＰＬＬＡと略記する）を４．７６質量％含むクロロホルム溶液（１ｍｌ）に、化合物（Ｉ）（１ｍｇ）を含有するクロロホルム溶液（１ｍｌ）を投入し、混合した。得られた混合物を直径３ｃｍのガラスシャーレに流延し、水平に３−４日間室温にて静置することによって、ポリ乳酸フィルム状製剤（０．１ｍｍ厚）を得た。
製剤例２
ＤＬ−乳酸とグリコール酸との共重合体（ＤＬ−乳酸：グリコール酸＝１：１（モル％）、重量平均分子量５３，１１４、ピューラック（ＰＵＲＡＣ）社製、以下、ＰＤＬＧＡと略記する。）４．７６質量％を含むクロロホルム溶液（１ｍｌ）に、化合物（Ｉ）（１ｍｇ）を含有するクロロホルム溶液（１ｍｌ）を投入し、混合した。得られた混合物を直径３ｃｍのガラスシャーレに流延し、水平に３〜４日間室温にて静置することによって、ポリ乳酸系フィルム状製剤（０．１ｍｍ厚）を得た。
製剤試験例１
製剤例１で製造したフィルム状製剤（約５ｍｇ）にＴｗｅｅｎ８０を０．２％含有する１／１５Ｍリン酸緩衝液（ｐＨ６．８）（１ｍｌ）を添加し、３７℃でインキュベーションした。経時的にサンプルを遠心し、上清を除いて得られたペレットに含まれる化合物（Ｉ）の含有量を高速液体クロマトグラフィー（ＨＰＬＣ）で測定した。開始時の遠心上清とペレット中の化合物（Ｉ）の含有量の合計を１００％として、フィルム状製剤中の残存率を算出した。
上記試験により得られた経時的な残存率の推移を図１に示す。
図１から、フィルム状製剤は持続的に化合物（Ｉ）を放出することが確認できた。
フィルム状製剤の骨再生能の評価試験
骨欠損部における骨再生能の評価は、以下に示す実験により行った。
骨欠損モデルの作製：
骨欠損モデルとしてウサギ尺骨欠損モデルを用いた。体重３ｋｇの日本白色種ウサギ（清水実験材料（株）から購入）の耳静脈より、ネンブタール（３ｍｌ／ｋｇ）を投与することによって全身麻酔を行った。ウサギ上腕部をてい毛、皮膚を切開、筋肉をはく離後、尺骨を露出した。骨切りハサミにて尺骨を骨膜とともに切り取り、１０ｍｍｇａｐの骨欠損を作製した。骨欠損部に製剤例１または製剤例２で製造したポリ乳酸系フィルム状製剤を埋入した。筋肉の位置を整え、皮膚を縫合した。コントロールとして、該フィルム状製剤の埋入をせずに、他の手術操作を同様に行った。埋入３週間後、耳静脈よりネンブタールを過剰投与することによりウサギを犠牲死させた後、尺骨を摘出しホルマリンにて固定し、ヘマトキシリン−エオジン染色組織切片を作製、観察を行った。骨密度の測定は、ＤＩＣＨＲＯＭＡ  ＳＣＡＮ  ＤＣ−６００（アロカ社製）を用いて、２７ＫｅＶと５３ＫｅＶの２つのエネルギーによる二重エネルギーＸ線吸収法に基づき、再生骨の範囲（２ｍｍ×１０ｍｍ）をスキャンニングした。
上記モデルを用いて行った実験結果を表１および図２〜図３に示す。
2003041717.tif 000004
表１および図２〜図３から、骨欠損部に化合物（Ｉ）を含有するフィルム状製剤を埋入することより、骨形成の誘導が認められることが明らかである。
【図面の簡単な説明】
図１は、本発明によるフィルム状製剤中の化合物（Ｉ）の経時的な残存率の推移を示す。
図２は、骨欠損部での骨再生能の評価におけるコントロール群の３週間後の組織切片と、製剤例１で製造した製剤をウサギ尺骨欠損部へ埋入して３週間後の組織切片を示す図面代用写真である。
図３は、骨欠損部での骨再生能の評価におけるコントロール群の３週間後の組織切片と、製剤例２で製造した製剤をウサギ尺骨欠損部へ埋入して３週間後の組織切片を示す図面代用写真である。
【図１】
2003041717.tif 000007
【図２】
2003041717.tif 000008
【図３】
2003041717.tif 000009
【国際調査報告】
2003041717.tif 000010
2003041717.tif 000011
2003041717.tif 000012
2003041717.tif 000013