(57)【要約】本発明は、新規なテトラヒドロピラン誘導体が優れたアポＢ関連リポプロテイン分泌阻害活性を有することを見いだし上記課題の解決を達成した。【特許請求の範囲】
【請求項１】
下記一般式（Ｉ）で示されるテトラヒドロピラン誘導体又はその塩。
2003101983.tif 000045
（式中の記号は、以下の意味を示す。
Ｒ１及びＲ３：同一又は異なって、Ｈ、又は低級アルキル
Ｒ２：Ｈ、ハロゲン、Ｒａ−低級アルキル−、又はＲ２０Ｏ−ＣＯ−
Ｒａ：Ｈ、Ｒ２１Ｏ−ＣＯ−、Ｒ２２Ｒ２３Ｎ−、Ｒ２４Ｒ２５Ｎ−ＣＯ−、Ｒ２６Ｏ−、シアノ、又は置換されてもよいヘテロ環−
Ｒ４、Ｒ５、Ｒ６及びＲ７：同一又は異なって、Ｈ、ハロゲン、ハロアルキル、シアノ、低級アルキル、低級アルキル−Ｏ−、Ｒ２１Ｏ−ＣＯ−低級アルキル−、Ｒ２７−ＣＯ−、又はＲ２８Ｒ２９Ｎ−Ｓ（Ｏ）２−
Ｒ８及びＲ９：同一又は異なって、Ｈ、低級アルキル、Ｒ３０−低級アルキル−、Ｒ３１Ｒ３２Ｎ−、置換されてもよいヘテロ環−、又はＲ３３Ｒ３４Ｒ３５Ｃ−
但し、Ｒ８及びＲ９は一体となって置換されてもよいヘテロ環を形成してもよい。
Ｘ：Ｎ、又はＣＲ３６
Ｒ２０、Ｒ２２乃至Ｒ２６、Ｒ２８、Ｒ２９、Ｒ３２、Ｒ３５、及びＲ３６：同一又は異なって、Ｈ、又は低級アルキル
Ｒ２１：Ｈ、低級アルキル、又はアリール−低級アルキル−
Ｒ２７：ＨＯ−、低級アルキル−Ｏ−、又は置換されてもよいヘテロ環−
Ｒ３０：置換されてもよいアリール、置換されてもよいヘテロ環−、又は低級アルキル−Ｏ−
Ｒ３１：置換されてもよいアリール、又は置換されてもよいヘテロ環−
Ｒ３３：ＨＯ−低級アルキル−、又は置換されてもよいヘテロ環−低級アルキル−
Ｒ３４：置換されてもよいアリール）
【請求項２】
前記一般式（Ｉ）において、置換されてもよいアリール、及び置換されてもよいヘテロ環が、以下に示す群から選択される１乃至３の置換基により置換されてもよい請求の範囲１記載のテトラヒドロピラン誘導体又はその塩。
置換基：ハロゲン、オキソ、ＯＨで置換されてもよい低級アルキル、低級アルキル−Ｏ−で置換されてもよいハロアルキル−、低級アルケニル、Ｃ３−８シクロアルキル、Ｃ３−８シクロアルキル−低級アルキル−、ハロゲンで置換されてもよいアリール、アリール−低級アルキル−、ヘテロ環基、ＨＯ−、低級アルキル−Ｏ−、ＯＨで置換されてもよい低級アルキル−Ｏ−低級アルキル、低級アルキル−Ｏ−低級アルキル−ＣＯ−、低級アルキル−Ｓ（Ｏ）ｍ−、低級アルキル−Ｓ（Ｏ）ｍ−低級アルキル−、低級アルキル−Ｏ−ＣＯ−、ＨＯ−ＣＯ−低級アルキル−、ＨＯ−ＣＯ−低級アルキル−Ｏ−、ＲｘＲｙＮ−ＣＯ−、ＲｘＲｙＮ−ＣＯ−低級アルキル−、ＲｘＲｙＮ−低級アルキル−、低級アルキル−ＣＯ−、アリール−低級アルキル−Ｏ−ＣＯ−、及びヘテロ環−Ｏ−ＣＯ−。
（式中の記号は、以下の意味を示す。
Ｒｘ及びＲｙ：同一又は異なって、Ｈ、又は低級アルキル。
ｍ：０，１又は２）
【請求項３】
前記一般式（Ｉ）において、Ｒ２がＲａ−低級アルキル−であり、Ｒ４、Ｒ５、Ｒ６及びＲ７が同一又は異なって、Ｈ、又はハロゲンであり、Ｒ８及びＲ９が同一又は異なって、Ｈ、低級アルキル、或いはＲ３０−低級アルキル−であるか、又はＲ８及びＲ９が一体となって置換されてもよいヘテロ環を形成してもよく、且つＸがＮである請求の範囲１記載のテトラヒドロピラン誘導体又はその塩。
【請求項４】
３−（２，４−ジメチル−９−｛４−［（Ｓ）−２−オキソ−２−（４−ピリジン−２−イルピペラジン−１−イル）−１−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イル）エチル］ベンジル｝−９Ｈ−ピリド［２，３−ｂ］インドール−３−イル）プロパン酸；３−（２，４−ジメチル−９−｛４−［（Ｓ）−２−オキソ−２−（４−プロピルピペラジン−１−イル）−１−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イル）エチル］ベンジル｝−９Ｈ−ピリド［２，３−ｂ］インドール−３−イル）プロパン酸；３−（９−｛４−［（Ｓ）−（ベンジルカルバモイル）（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イル）メチル］ベンジル｝−２，４−ジメチル−９Ｈ−ピリド［２，３−ｂ］インドール−３−イル）プロパン酸；３−（２，４−ジメチル−９−｛４−［（Ｓ）−（ジメチルカルバモイル）（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イル）メチル］ベンジル｝−９Ｈ−ピリド［２，３−ｂ］インドール−３−イル）プロパン酸；３−（２，４−ジメチル−９−｛４−［（Ｓ）−２−モルフォリン−４−イル−２−オキソ−１−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イル）エチル］ベンジル｝−９Ｈ−ピリド［２，３−ｂ］インドール−３−イル）プロパン酸；３−（２，４−ジメチル−９−｛４−［（Ｓ）−２−（４−イソブチルピペラジン−１−イル）−２−オキソ−１−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イル）エチル］ベンジル｝−９Ｈ−ピリド［２，３−ｂ］インドール−３−イル）プロパン酸；３−（９−｛４−［（Ｓ）−２−（４−シクロブチルピペラジン−１−イル）−２−オキソ−１−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イル）エチル］ベンジル｝−２，４−ジメチル−９Ｈ−ピリド［２，３−ｂ］インドール−３−イル）プロパン酸；３−（９−｛４−［（Ｓ）−２−（４−シクロペンチルピペラジン−１−イル）−２−オキソ−１−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イル）エチル］ベンジル｝−２，４−ジメチル−９Ｈ−ピリド［２，３−ｂ］インドール−３−イル）プロパン酸から選択される化合物又はその塩。
【請求項５】
請求の範囲１記載のテトラヒドロピラン誘導体又はその製薬学的に許容される塩を含有する医薬組成物。
【請求項６】
治療を必要とする患者に、治療有効量の請求の範囲１記載のテトラヒドロピラン誘導体又はその製薬学的に許容される塩と製薬学的に許容される担体を投与することによる、高脂血症の予防又は治療方法。
【請求項７】
請求の範囲１記載のテトラヒドロピラン誘導体又はその製薬学的に許容される塩と一種または２種以上の脂質低下剤を組合せて投与することを特徴とする高脂血症治療剤。
【請求項８】
治療を必要とする患者に、治療有効量の請求の範囲１記載のテトラヒドロピラン誘導体又はその製薬学的に許容される塩と製薬学的に許容される担体と、同時に又は別個に、一種または２種以上の脂質低下剤投与することによる、高脂血症の予防又は治療方法。
【請求項９】
請求の範囲１項記載のテトラヒドロピラン誘導体又はその製薬学的に許容される塩と製薬学的に許容される担体を含有する医薬組成物、及び脂質低下剤をそれぞれ別個に包装したものをパッケージしたキット。
【発明の詳細な説明】
技術分野
本発明は，アポＢ関連リポプロテイン分泌阻害作用を有する新規テトラヒドロピラン誘導体又はその塩、それを有効成分とする医薬組成物、及び脂質低下剤との組合せに関する。
背景技術
高脂血症は、糖尿病、高血圧、喫煙などとともに虚血性心疾患などの動脈硬化性疾患の危険因子の一つであり、その改善は当該疾患の治療において有効である［ＪＡＭＡ．１９８６；２５６：２８３５−２８３８．、ＪＡＭＡ．１９８６；２５６：２８２３−２８２８．、ＪＡＭＡ．１９９３；２６９：３０１５−３０２３］。高コレステロール血症は動脈硬化の危険因子として冠動脈疾患の原因となり、高トリグリセライド血症も心筋梗塞等の虚血性心疾患の原因の一つと考えられている。従って、高脂血症の治療には血中コレステロール及びトリグリセライドを低下させることが望ましい。高脂血症の治療薬としては、これまでに、ＨＭＧ−ＣｏＡ還元酵素阻害剤、陰イオン交換樹脂製剤及びプロブコールなどが主に血液中コレステロールを低下させる薬剤として、一方フィブラートやニコチン酸製剤が主に血液中のトリグリセライドを低下させる薬剤として臨床で用いられている。
小腸で吸収されたコレステロールは、小腸上皮細胞の粗面小胞体内でアポ蛋白Ｂ（アポＢ）、リン脂質及びトリグリセライドとともにカイロミクロン複合体を形成し、リンパ管を経由して血液中に分泌され、肝臓等の組織に運ばれる。また、肝臓で合成されたコレステロールは、肝細胞の粗面小胞体内でアポＢ、リン脂質及びトリグリセライドとともにＶＬＤＬ（超低密度リポ蛋白）複合体を形成し、血液中に分泌され、ＬＤＬ（低密度リポ蛋白）に形を変えて他の組織に運ばれる［Ｎｅｗ  Ｅｎｇｌａｎｄ  Ｊｏｕｒｎａｌ  ｏｆ  Ｍｅｄｉｃｉｎｅ．１９８３；３０９：２８８−２９６］。
ここでアポＢには、アポＢ−１００、アポＢ−４８の二つの分子種があり、これらは細胞内の粗面小胞体上で合成される。肝臓細胞においてはアポＢ−１００、小腸細胞においてはアポＢ  ｍＲＮＡ  ｅｄｉｔｉｎｇによりアポＢ−４８が合成され、それぞれＶＬＤＬ、カイロミクロンの構造アポ蛋白となる。滑面小胞体で合成されたコレステロールエステル、トリグリセライドなどがＭＴＰにより転送され、小胞体内でアポＢと結合し未成熟リポ蛋白を形成する。この未成熟リポ蛋白はさらなる脂質負荷、ゴルジ体での糖鎖負荷などの過程を経て成熟リポ蛋白となり細胞外に分泌される［Ｂｉｏｃｈｅｍ．Ｂｉｏｐｈｙｓ．Ａｃｔａ．１９９９；１４４０：１−３１．、Ｂｉｏｃｈｅｍ．Ｂｉｏｐｈｙｓ．Ａｃｔａ．１９９７；１３４５：１１−２６］。
従って小腸及び／または肝臓から血液中へのアポＢを構成成分とするアポＢ関連リポプロテイン（カイロミクロン、ＶＬＤＬ、ＬＤＬの総称）の分泌を阻害することにより、血液中のコレステロール及びトリグリセライドを低下させることが可能であり、このような化合物は高脂血症、動脈硬化、肥満、膵炎等の治療薬として有用である。
アポＢ関連リポタンパクの生成及び／または分泌阻害剤としては、特許文献１又は特許文献２に開示のシクロアルカノ−インドール及びシクロアルカノ−アザインドール誘導体等のアミド型化合物が報告されている。特許文献１の実施例５に記載された化合物はＩｍｐｌｉｔａｐｉｄｅ（Ｂａｙ−１３−９９５２）として臨床段階に進んだ化合物である。その他にも、特許文献３及び４に開示のヒドラジド誘導体の他、様々な化合物が報告されているが、その作用は十分ではなく、更に優れた効果を有する化合物が求められている。
一方、ピリドインドール若しくはカルバゾール環中の窒素原子がカルバモイルメチル置換ベンジルで置換された誘導体は特許文献１及び２により報告されているが、該カルバモイルメチルのメチル部分がテトラヒドロピランで置換された化合物はこれまでに報告がない。
【特許文献１】
特開平８−２２５５２６号
【特許文献２】
特開平１０−４５７５９号
【特許文献３】
国際公開パンフレットＷＯ００／７１５０２
【特許文献４】
国際公開パンフレットＷＯ０１／７４８１７
発明の開示
本発明の目的は、優れたアポＢ関連リポプロテインの分泌阻害作用を有し、血液中のコレステロール及びトリグリセライドの低下剤として有用な新規なテトラヒドロピラン誘導体又はその塩を提供すること、更にこれらを含有する医薬を提供することである。
本発明者らは，新規なアポＢ関連リポプロテイン分泌阻害作用を有する化合物を見いだすべく鋭意研究を行ったところ，これまでに知られていなかったテトラヒドロピランを有する新規な誘導体を見いだした。更に、該テトラヒドロピランを有する誘導体が、強いアポＢ関連リポプロテイン分泌阻害活性を有し、強力なコレステロール、及びトリグリセライド低下作用を有する事を見出し本発明を完成させるに至った。
即ち，本発明は（１）下記一般式（Ｉ）で示されるテトラヒドロピラン誘導体又はその塩に関する。
2003101983.tif 000002
（式中の記号は、以下の意味を示す。
Ｒ１及びＲ３：同一又は異なって、Ｈ、又は低級アルキル
Ｒ２：Ｈ、ハロゲン、Ｒａ−低級アルキル−、又はＲ２０Ｏ−ＣＯ−
Ｒａ：Ｈ、Ｒ２１Ｏ−ＣＯ−、Ｒ２２Ｒ２３Ｎ−、Ｒ２４Ｒ２５Ｎ−ＣＯ−、Ｒ２６Ｏ−、シアノ、又は置換されてもよいヘテロ環−
Ｒ４、Ｒ５、Ｒ６及びＲ７：同一又は異なって、Ｈ、ハロゲン、ハロアルキル、シアノ、低級アルキル、低級アルキル−Ｏ−、Ｒ２１Ｏ−ＣＯ−低級アルキル−、Ｒ２７−ＣＯ−、又はＲ２８Ｒ２９Ｎ−Ｓ（Ｏ）２−
Ｒ８及びＲ９：同一又は異なって、Ｈ、低級アルキル、Ｒ３０−低級アルキル−、Ｒ３１Ｒ３２Ｎ−、置換されてもよいヘテロ環−、又はＲ３３Ｒ３４Ｒ３５Ｃ−
但し、Ｒ８及びＲ９は一体となって置換されてもよいヘテロ環−を形成してもよい。
Ｘ：Ｎ、又はＣＲ３６
Ｒ２０、Ｒ２２乃至Ｒ２６、Ｒ２８、Ｒ２９、Ｒ３２、Ｒ３５、及びＲ３６：同一又は異なって、Ｈ、又は低級アルキル
Ｒ２１：Ｈ、低級アルキル、又はアリール−低級アルキル−
Ｒ２７：ＨＯ−、低級アルキル−Ｏ−、又は置換されてもよいヘテロ環−
Ｒ３０：置換されてもよいアリール、置換されてもよいヘテロ環−、又は低級アルキル−Ｏ−
Ｒ３１：置換されてもよいアリール、又は置換されてもよいヘテロ環−
Ｒ３３：ＨＯ−低級アルキル−、又は置換されてもよいヘテロ環−低級アルキル−
Ｒ３４：置換されてもよいアリール）
（２）前記一般式（Ｉ）において、置換されてもよいアリール、及び置換されてもよいヘテロ環が、以下に示す群から選択される１乃至３の置換基により置換されてもよい（１）記載のテトラヒドロピラン誘導体又はその塩
置換基：ハロゲン、オキソ、ＯＨで置換されてもよい低級アルキル、低級アルキル−Ｏ−で置換されてもよいハロアルキル−、低級アルケニル、Ｃ３−８シクロアルキル、Ｃ３−８シクロアルキル−低級アルキル−、ハロゲンで置換されてもよいアリール、アリール−低級アルキル−、ヘテロ環基、−ＯＨ、低級アルキル−Ｏ−、ＯＨで置換されてもよい低級アルキル−Ｏ−低級アルキル、低級アルキル−Ｏ−低級アルキル−ＣＯ−、低級アルキル−Ｓ（Ｏ）ｍ−、低級アルキル−Ｓ（Ｏ）ｍ−低級アルキル−、低級アルキル−Ｏ−ＣＯ−、ＨＯ−ＣＯ−低級アルキル−、ＨＯ−ＣＯ−低級アルキル−Ｏ−、ＲｘＲｙＮ−ＣＯ−、ＲｘＲｙＮ−ＣＯ−低級アルキル−、ＲｘＲｙＮ−低級アルキル−、低級アルキル−ＣＯ−、アリール−低級アルキル−Ｏ−ＣＯ−、及びヘテロ環−Ｏ−ＣＯ−。
（式中の記号は、以下の意味を示す。
Ｒｘ及びＲｙ：同一又は異なって、Ｈ、又は低級アルキル。
ｍ：０，１又は２）
（３）前記一般式（Ｉ）において、Ｒ２がＲａ−低級アルキル−であり、Ｒ４、Ｒ５、Ｒ６及びＲ７が同一又は異なって、Ｈ、又はハロゲンであり、Ｒ８及びＲ９が同一又は異なって、Ｈ、低級アルキル、或いはＲ３０−低級アルキル−であるか、又はＲ８及びＲ９が一体となって置換されてもよいヘテロ環を形成してもよく、且つＸがＮである前記テトラヒドロピラン誘導体又はその塩。
特に好ましくは、Ｒ２がＨＯ−ＣＯ−低級アルキル−である前記テトラヒドロピラン誘導体又はその塩である。
（４）３−（２，４−ジメチル−９−｛４−［（Ｓ）−２−オキソ−２−（４−ピリジン−２−イルピペラジン−１−イル）−１−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イル）エチル］ベンジル｝−９Ｈ−ピリド［２，３−ｂ］インドール−３−イル）プロパン酸；３−（２，４−ジメチル−９−｛４−［（Ｓ）−２−オキソ−２−（４−プロピルピペラジン−１−イル）−１−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イル）エチル］ベンジル｝−９Ｈ−ピリド［２，３−ｂ］インドール−３−イル）プロパン酸；３−（９−｛４−［（Ｓ）−（ベンジルカルバモイル）（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イル）メチル］ベンジル｝−２，４−ジメチル−９Ｈ−ピリド［２，３−ｂ］インドール−３−イル）プロパン酸；３−（２，４−ジメチル−９−｛４−［（Ｓ）−（ジメチルカルバモイル）（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イル）メチル］ベンジル｝−９Ｈ−ピリド［２，３−ｂ］インドール−３−イル）プロパン酸；３−（２，４−ジメチル−９−｛４−［（Ｓ）−２−モルフォリン−４−イル−２−オキソ−１−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イル）エチル］ベンジル｝−９Ｈ−ピリド［２，３−ｂ］インドール−３−イル）プロパン酸；３−（２，４−ジメチル−９−｛４−［（Ｓ）−２−（４−イソブチルピペラジン−１−イル）−２−オキソ−１−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イル）エチル］ベンジル｝−９Ｈ−ピリド［２，３−ｂ］インドール−３−イル）プロパン酸；３−（９−｛４−［（Ｓ）−２−（４−シクロブチルピペラジン−１−イル）−２−オキソ−１−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イル）エチル］ベンジル｝−２，４−ジメチル−９Ｈ−ピリド［２，３−ｂ］インドール−３−イル）プロパン酸；３−（９−｛４−［（Ｓ）−２−（４−シクロペンチルピペラジン−１−イル）−２−オキソ−１−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イル）エチル］ベンジル｝−２，４−ジメチル−９Ｈ−ピリド［２，３−ｂ］インドール−３−イル）プロパン酸から選択される化合物又はその塩である。
（５）前記（１）記載のテトラヒドロピラン誘導体又はその製薬学的に許容される塩を含有する医薬組成物。
（６）治療を必要とする患者に、治療有効量の前記（１）のテトラヒドロピラン誘導体又はその製薬学的に許容される塩と製薬学的に許容される担体を投与することによる、高脂血症の予防又は治療方法。
（７）前記（１）記載のテトラヒドロピラン誘導体又はその製薬学的に許容される塩と一種または２種以上の脂質低下剤を組合せて投与することを特徴とする高脂血症治療剤。
（８）脂質低下剤が、以下に示される群から選択される前記（７）記載の治療剤；
（ａ）ＨＭＧ−ＣｏＡ還元酵素阻害剤
（ｂ）アシルコエンザイムＡコレステロールアシル転移酵素（ＡＣＡＴ）阻害剤
（ｃ）コレステロール吸収阻害剤
（ｄ）ニコチン酸製剤
（ｅ）フィブラート系薬剤
（ｆ）胆汁酸吸着剤
（ｇ）（ａ）〜（ｆ）以外に高脂血症の治療に用いられる薬剤。
（９）治療を必要とする患者に、治療有効量の前記（１）記載のテトラヒドロピラン誘導体又はその製薬学的に許容される塩と製薬学的に許容される担体と、同時に又は別個に、一種または２種以上の脂質低下剤投与することによる、高脂血症の予防又は治療方法。
（１０）脂質低下剤が、以下に示される群から選択される前記（９）記載の治療方法；
（ａ）ＨＭＧ−ＣｏＡ還元酵素阻害剤
（ｂ）アシルコエンザイムＡコレステロールアシル転移酵素（ＡＣＡＴ）阻害剤
（ｃ）コレステロール吸収阻害剤
（ｄ）ニコチン酸製剤
（ｅ）フィブラート系薬剤
（ｆ）胆汁酸吸着剤
（ｇ）（ａ）〜（ｆ）以外に高脂血症の治療に用いられる薬剤。
（１１）前記（１）記載のテトラヒドロピラン誘導体又はその製薬学的に許容される塩と製薬学的に許容される担体を含有する医薬組成物、及び脂質低下剤をそれぞれ別個に包装したものをパッケージしたキット。
発明の実施の形態
本発明について更に説明すると、次の通りである。
一般式（Ｉ）で示される化合物について更に説明すると，次の通りである。
本明細書の一般式の定義において，特に断らない限り「低級」なる用語は炭素数が１乃至６個の直鎖又は分岐状の炭素鎖を意味する。
「低級アルキル」とは、Ｃ１−６アルキルであり、好ましくはメチル、エチル、プロピル、イソプロピル、ｔ−ブチルなどのＣ１−４アルキル、さらに好ましくはＣ１−３アルキルである。
「アリール」とは、全体として６〜１４員の１−３環系芳香族炭化水素環基であり、好ましくは、フェニル、ナフチル、アントラニルである。
「ハロゲン」としてはたとえば，フッ素，塩素，臭素又はヨウ素原子などがあげられる。
「ハロアルキル」とは、前述の低級アルキルの任意の水素原子が上記ハロゲンに置換した基であり、好ましくは、トリフルオロメチルなどが挙げられる。
「ヘテロ環」は、窒素原子，酸素原子又は硫黄原子から選択されるヘテロ原子１乃至３個を含む縮合してもよい「飽和ヘテロ環」及び「不飽和ヘテロ環」を意味する。
「不飽和ヘテロ環」とは，窒素原子，酸素原子又は硫黄原子から選択されるヘテロ原子１乃至３個を含む縮合してもよい５又は６員不飽和ヘテロ環基を意味し，芳香族ヘテロ環を含む。好ましくは，ピロール、３−ピロリン，３，６−ジヒドロピリミジン、３，６−ジヒドロピリジン、ピリジン、フラン、チアゾール、チオフェン、イミダゾール、トリアゾール、テトラゾール、ピリミジン、ピリダジン等の窒素原子１乃至２個を含む５又は６員単環不飽和ヘテロ環である。
「飽和ヘテロ環」は、窒素原子、酸素原子、硫黄原子から選択されるヘテロ原子１乃至３個を含む縮合してもよい３〜１０員飽和ヘテロ環を意味する。該飽和ヘテロ環には、スピロ環を形成するもの及び架橋を有するものも含まれる。具体的には、アゼチジン、ピロリジン、ピペリジン、ピペラジン、アゼピン、ジアゼピン、モルホリン、チオモルホリン、チアゾリジン、１，４−ジオキサ−８−アザスピロ［４，５］デカン、イソインドリン、ジヒドロイソインドール、テトラヒドロイソキノリン、２，５−ジアザビシクロ［２．２．１］ヘプタン、テトラヒドロピランが挙げられる。好ましくは，４〜７員の飽和ヘテロ環である。
「Ｒ８及びＲ９は一体となって置換されてもよいヘテロ環」とは、上記ヘテロ環のうち、環中のヘテロ原子として窒素原子を少なくとも１個を有するヘテロ環を意味する。好ましくは、環中のヘテロ原子として窒素原子１乃至２個を有する５又は６員飽和又は不飽和ヘテロ環であり、これらのヘテロ環は低級アルキル、低級アルキレン、ハロゲンで置換されてもよいアリール、シクロアルキル、ピリジルで置換されてもよく、ベンゼン環と縮合してもよい。
「置換されてもよい」アリール、ヘテロ環は，１乃至３個の置換基を有していてもよい。
置換基は、置換される基の当該分野で慣用される通常の置換基を意味するが、ハロゲン、オキソ、ＯＨで置換されてもよい低級アルキル、低級アルキル−Ｏ−で置換されてもよいハロアルキル−、低級アルケニル、低級アルキニル、Ｃ３−８シクロアルキル、Ｃ３−８シクロアルキル−低級アルキル−、ハロゲンで置換されてもよいアリール、アリール−低級アルキル−、ヘテロ環基、ヘテロ環−低級アルキル−、ＨＯ−、低級アルキル−Ｏ−、ＯＨで置換されてもよい低級アルキル−Ｏ−低級アルキル−、低級アルキル−Ｏ−低級アルキル−ＣＯ−、低級アルケニル−Ｏ−、低級アルキニル−Ｏ−、Ｃ３−８シクロアルキル−Ｏ−、アリール−Ｏ−、アリール−低級アルキル−Ｏ−、ヘテロ環−Ｏ−、ヘテロ環−低級アルキル−Ｏ−、低級アルキル−Ｓ（Ｏ）ｍ−、（ｍ：０、１または２。以下同様）、低級アルキル−Ｓ（Ｏ）ｍ−低級アルキル−、低級アルケニル−Ｓ（Ｏ）ｍ−、低級アルキニル−Ｓ（Ｏ）ｍ−、Ｃ３−８シクロアルキル−Ｓ（Ｏ）ｍ−、アリール−Ｓ（Ｏ）ｍ−、アリール−低級アルキル−Ｓ（Ｏ）ｍ−、ヘテロ環−Ｓ（Ｏ）ｍ−、ヘテロ環−低級アルキル−Ｓ（Ｏ）ｍ−、低級アルキル−Ｏ−ＣＯ−、低級アルケニル−Ｏ−ＣＯ−、低級アルキニル−Ｏ−ＣＯ−、Ｃ３−８シクロアルキル−Ｏ−ＣＯ−、アリール−Ｏ−ＣＯ−、アリール−低級アルキル−Ｏ−ＣＯ−、ヘテロ環−Ｏ−ＣＯ−、ヘテロ環−低級アルキル−Ｏ−ＣＯ−、−ＣＯＯＨ、ＨＯＯＣ−低級アルキル−、ＨＯＯＣ−低級アルキル−Ｏ−、低級アルキル−ＣＯＮＲｘ−（Ｒｘは、同一又は異なってＨ、低級アルキルを意味する。以下同様。）、低級アルキル−ＣＯＮＲｘ−低級アルキル−、ＲｘＲｙＮ−（Ｒｙは、同一又は異なってＨ、低級アルキルを意味する。以下同様。）、ＲｘＲｙＮ−低級アルキル−、ＲｘＲｙＮ−ＣＯ−、ＲｘＲｙＮ−ＣＯ−低級アルキル−、ＨＣＯ−、低級アルキル−ＣＯ−、低級アルケニル−ＣＯ−、低級アルキニル−ＣＯ−、Ｃ３−８シクロアルキル−ＣＯ−、アリール−ＣＯ−、アリール−低級アルキル−ＣＯ−、ヘテロ環−ＣＯ−、ヘテロ環−低級アルキル−ＣＯ−、ＨＣＳ−、低級アルキル−ＣＳ−、低級アルケニル−ＣＳ−、低級アルキニル−ＣＳ−、Ｃ３−８シクロアルキル−ＣＳ−、アリール−ＣＳ−、アリール−低級アルキル−ＣＳ−、ヘテロ環−ＣＳ−、ヘテロ環−低級アルキル−ＣＳ−、低級アルキル−Ｏ−ＣＯ−ＣＯ−、ＨＣＯ−Ｏ−、低級アルキル−ＣＯ−Ｏ−、低級アルケニル−ＣＯ−Ｏ−、低級アルキニル−ＣＯ−Ｏ−、Ｃ３−８シクロアルキル−ＣＯ−Ｏ−、アリール−ＣＯ−Ｏ−、アリール−低級アルキル−ＣＯ−Ｏ−、ヘテロ環−ＣＯ−Ｏ−、ヘテロ環−低級アルキル−ＣＯ−Ｏ−、アリール−低級アルキル−Ｏ−ＣＯ−、ヘテロ環−Ｏ−ＣＯ−が挙げられる。
好ましくはハロゲン、オキソ、ＯＨで置換されてもよい低級アルキル、低級アルキル−Ｏ−で置換されてもよいハロアルキル−、低級アルケニル、Ｃ３−８シクロアルキル、Ｃ３−８シクロアルキル−低級アルキル−、ハロゲンで置換されてもよいアリール、アリール−低級アルキル−、ヘテロ環基、−ＯＨ、低級アルキル−Ｏ−、ＯＨで置換されてもよい低級アルキル−Ｏ−低級アルキル−、低級アルキル−Ｏ−低級アルキル−ＣＯ−、低級アルキル−Ｓ（Ｏ）ｍ−、低級アルキル−Ｓ（Ｏ）ｍ−低級アルキル−、低級アルキル−Ｏ−ＣＯ−、ＨＯＯＣ−低級アルキル−、ＨＯＯＣ−低級アルキル−Ｏ−、ＲｘＲｙＮ−ＣＯ−、ＲｘＲｙＮ−ＣＯ−低級アルキル−、ＲｘＲｙＮ−低級アルキル−、低級アルキル−ＣＯ−、アリール−低級アルキル−Ｏ−ＣＯ−、ヘテロ環−Ｏ−ＣＯ−である。
「Ｃ３−８シクロアルキル」とは、具体的にはシクロプロピル、シクロブチル、シクロペンチル、シクロヘキサンが挙げられる。好ましくは炭素数３〜６、特に好ましくは炭素数４乃至６のシクロアルキルである。
本発明化合物として、特に好ましいものは、前記一般式（Ｉ）において、Ｒ２がＣＯＯＨ−低級アルキル−であり、Ｒ４、Ｒ５、Ｒ６及びＲ７が同一又は異なって、Ｈ、又はハロゲンであり、Ｒ８及びＲ９が同一又は異なって、Ｈ、或いはハロゲン−低級アルキル−で置換されてもよいアリールであるか、又はＲ８及びＲ９が一体となって置換されてもよい窒素原子１乃至２を環原子として有するヘテロ環を形成してもよく、且つＸがＮである請求の範囲１記載のテトラヒドロピラン誘導体又はその塩である。
本発明化合物（Ｉ）は、不斉炭素を有し、これに基づく（Ｒ）体、（Ｓ）体の光学異性体、ラセミ体が存在する。さらに置換基の種類によっては複数個の不斉炭素を有する場合もあり、これに基づくジアステレオマー、エナンチオマーが存在する。本発明は、これら異性体の分離されたもの或いは混合物をすべて包含する。
本発明化合物（Ｉ）は、酸又は塩基と塩を形成する場合がある。かかる塩としては塩酸、臭化水素酸、ヨウ化水素酸、硫酸、硝酸、リン酸等の鉱酸や、ギ酸、酢酸、プロピオン酸、シュウ酸、マロン酸、コハク酸、フマール酸、マレイン酸、乳酸、リンゴ酸、クエン酸、酒石酸、炭酸、ピクリン酸、メタンスルホン酸、エタンスルホン酸、グルタミン酸等の有機酸の酸付加塩を挙げることが出来る。
塩基との塩としてはナトリウム、カリウム、マグネシウム、カルシウム、アルミニウム等の無機塩基、メチルアミン、エチルアミン、メグルミン、エタノールアミン、ジエタノールアミン、トロメタミン等の有機塩基又はリジン、アルギニン、オルニチン等の塩基性アミノ酸との塩やアンモニウム塩が挙げられる。
更に本発明化合物（Ｉ）の水和物、エタノール等の溶媒和物や結晶多形の物質も包含される。
更に本発明化合物には、薬理学的に許容されるプロドラッグも含まれる。本発明化合物の薬理学的に許容されるプロドラッグを形成する基としては、Ｐｒｏｇ．Ｍｅｄ．５：２１５７−２１６１（１９８５）に記載されている基や、広川書店１９９０年刊「医薬品の開発」第７巻  分子設計１６３頁から１９８頁に記載されている基が挙げられる。具体的には、加水分解、加溶媒分解により又は生理学的条件の下で本発明の１級アミン、又は２級アミン、ＯＨ、ＣＯＯＨ等に変換できる基であり、例としてはＯＨ基のプロドラッグとしては、例えば−ＯＣ（Ｏ）−置換されてもよい低級アルキル−Ｃ（Ｏ）ＯＲ（ＲはＨ又は低級アルキルを示す、以下同様）、−ＯＣ（Ｏ）−置換されてもよい低級アルケニレン−Ｃ（Ｏ）ＯＲ、−ＯＣ（Ｏ）−置換されてもよいアリール、−ＯＣ（Ｏ）−低級アルキル−Ｏ−低級アルキル−Ｃ（Ｏ）ＯＲ、−ＯＣ（Ｏ）−Ｃ（Ｏ）Ｒ、−ＯＣ（Ｏ）−置換されてもよい低級アルキル、−ＯＳＯ２−置換されてもよい低級アルキル−Ｃ（Ｏ）ＯＲ、−Ｏ−フタリジル、５−メチル−１、３−ジオキソレン−２−オン−４−イル−メチルオキシ等が挙げられる。
本発明と組み合わせて用いられる脂質低下剤としては以下の薬剤が挙げられる。
（ａ）ＨＭＧ−ＣｏＡ還元酵素阻害剤
（ｂ）アシルコエンザイムＡコレステロールアシル転移酵素（ＡＣＡＴ）阻害剤
（ｃ）コレステロール吸収阻害剤
（ｄ）ニコチン酸製剤
（ｅ）フィブラート系薬剤
（ｆ）胆汁酸吸着剤
（ｇ）（ａ）〜（ｆ）以外に高脂血症の治療に用いられる薬剤。
以下に、個々の具体例について説明する。
（ａ）ＨＭＧ−ＣｏＡ還元酵素阻害剤としては、プラバスタチン、シンバスタチン、フルバスタチン、ロバスタチン、セリバスタチン、アトルバスタチン、ピタバスタチン等が挙げられる。
（ｂ）アシルコエンザイムＡコレステロールアシル転移酵素（ＡＣＡＴ）阻害剤としては、メリナミド（Ｍｅｌｉｎａｍｉｄｅ）が挙げられる。
（ｃ）コレステロール吸収阻害剤としては、コレスチラミン（Ｃｈｏｌｅｓｔｙｒａｍｉｎｅ）、コレスチポール（Ｃｏｌｅｓｔｉｐｏｌ）等の陰イオン交換樹脂製剤が挙げられる。
（ｄ）ニコチン酸製剤としては、ニセリトロール、ニコモール、又はニコチン酸トコフェロール等が挙げられる。
（ｅ）フィブラート系薬剤としては、クロフィブラート、クリノフィブラート、シンフィブラート、ブザフィブラート、ゲムフィブロジル等が挙げられる。
（ｆ）胆汁酸吸着剤としては、アバレリックス（ａｂａｌｅｌｉｘ）等が挙げられる。
（ｇ）（ａ）〜（ｆ）以外に高脂血症の治療に用いられる薬剤としては、プロブコール、フォスファチジルコリン、リボフラビン酪酸エステル、エラスターゼ、イコサペント酸エチル、デキストラン硫酸ナトリウムの他、ポリエンホスファチジルコリン、ソイステロール、ガンマ・オリザノール、パンテチン、ウルソデオキシコール酸等が挙げられる。
また、本発明の化合物（Ｉ）およびその製薬学的に許容される塩は、アポＢ関連リポプロテイン分泌阻害作用に基づく血中脂質低下作用を有し、高脂血症、動脈硬化、肥満、膵炎の治療剤として有用である。また、本発明化合物のうち、Ｒ２がＨＯ−ＣＯ−低級アルキル−である化合物は、薬物代謝酵素ｃｙｔｏｃｈｒｏｍｅＰ４５０（ＣＹＰ）に対する阻害作用、特にＣＹＰ３Ａ４に対する阻害作用が弱く、副作用の少ない化合物であるため、上記疾患の治療剤として、特に有用である。なお、ＣＹＰ３Ａ４に対する阻害作用は、ＷＯ０２／４４１７９のｐ１６  ９〜２２行目に記載されている方法と同様に行うことが出来る。
製造法
本発明化合物（Ｉ）は、置換基の種類に応じて以下の第１から第６製法に示す方法を適宜選択することにより合成出来る。また、本発明化合物が光学活性体である場合も、以下に記載の反応条件を適切に選択することにより、製造途中でのラセミ化の問題なく後述の光学活性な化合物（ＸＶＩＩ＊）を用いて本発明化合物（Ｉ）を合成することが出来る。
第１製法
2003101983.tif 000003
本発明化合物（Ｉ）は、化合物（ＩＩ）で示すカルボン酸化合物と化合物（ＩＩＩ）で示すアミン化合物を縮合反応に付すことにより合成出来る。反応は、通常反応に影響を及ぼさない有機溶媒中、縮合剤の存在下、室温下或いは加温下にて行われる。かかる溶媒としては、塩化メチレン、クロロホルム、１，２−ジクロロエタン、ジメチルホルムアミド、ジメチルアセトアミド、１−メチルピロリジノン、テトラヒドロフラン等が挙げられる。縮合剤としては、例えばジシクロヘキシルカルボジイミド（ＤＣＣ）、１−エチル−３−（３−ジメチルアミノプロピル）カルボジイミド・塩酸塩（ＷＳＣ・ＨＣｌ）、ジフェニルホスホリルアジド（ＤＰＰＡ）、カルボニルジイミダゾール（ＣＤＩ）、ジイソプロピルカルボジイミド（ＤＩＰＣＩ）等が挙げられる。また、本反応は塩基の存在下に行われても良く、かかる塩基としては、トリエチルアミン、ジイソプロピルエチルアミン、４−メチルモルホリン、１，８−ジアザビシクロ［５，４，０］−７−ウンデセン（ＤＢＵ）等が挙げられる。また、本反応は、活性化剤の存在下に行われても良く、かかる活性化剤としては、１−ヒドロキシベンゾトリアゾール（ＨＯＢｔ）、ヒドロキシスクシンイミド（ＨＯＳｕ）、ジメチルアミノピリジン（ＤＭＡＰ）、ヒドロキシフタルイミド（ＨＯＰｈｔ）等が挙げられる。化合物（ＩＩ）と（ＩＩＩ）は、等モル量或いは一方をやや過剰量用い、縮合剤及び塩基或いは活性化剤は、化合物（ＩＩ）または（ＩＩＩ）に対して、１乃至２当量用いることが好ましい。
或いは、化合物（Ｉ）は、上記縮合剤を用いる反応ではなく、化合物（ＩＩ）を塩化チオニルやオキサリルクロライドと反応させることにより導かれる酸クロライドや、クロロギ酸エチルやクロロギ酸イソプロピルと反応させることにより導かれる混合酸無水物等の反応性誘導体に変換した後に、上述と同様の塩基の存在下に化合物（ＩＩＩ）と反応させることにより合成することも出来る。
第２製法
2003101983.tif 000004
本発明化合物中、二級アミド化合物（Ｉａ）は、アミド部がｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル基（Ｂｏｃ基）により保護されている化合物（ＩＶ）の脱保護反応により合成出来る。反応は通常反応に影響しないジクロロメタン、クロロホルム、ジクロロエタンなどの有機溶媒中、塩酸或いはトリフルオロ酢酸等の酸の存在下に、室温乃至は加温下に行うことが出来る。
本発明化合物（Ｉ）のうちの一部の化合物は、上述の第１及び第２製法の如くして得られる化合物の置換基を、更に目的とする置換基へ変換することによって合成することが出来る。このような置換基の変換方法は、目的とする置換基の種類に応じて適宜選択すればよいが、例えば以下に示す第３製法から第６製法の如く実施することが出来る。
第３製法
2003101983.tif 000005
本発明化合物中、カルボン酸化合物（Ｉｃ）は、第１製法により合成可能なエステル化合物（Ｉｂ）の加水分解反応により合成することが出来る。Ｒ３７が低級アルキル基の場合、反応は、通常反応に関与しないメタノール、エタノール、テトラヒドロフラン、ジオキサン等の有機溶媒及び水との混合溶媒中、塩基または酸を等量或いは過剰量用いて室温または加温下にて行われる。かかる塩基としては、水酸化ナトリウム、水酸化カリウム、炭酸カリウム等の無機塩基が、また酸としては塩酸、硫酸、臭化水素酸等が用いられる。また、Ｒ３７がベンジル基の場合には、ベンジルエステル体（Ｉｂ）の加水素分解反応によりカルボン酸化合物（Ｉｃ）を得ることが出来る。反応は通常反応に関与しない有機溶媒、例えばエタノール、酢酸エチル、テトラヒドロフラン、ジメチルホルムアミド、酢酸等中、水素ガス雰囲気下に、パラジウム炭素等の金属触媒の存在下に室温にて行われるのが好ましい。
第４製法
2003101983.tif 000006
本発明化合物中、アルコール化合物（Ｉｄ）は、第１製法により合成可能なエステル化合物（Ｉｂ）或いは第２製法により合成可能なカルボン酸化合物（Ｉｃ）の還元反応により合成出来る。反応は、通常反応に関与しない有機溶媒中、適当な還元剤の存在下に実施することが出来る。かかる溶媒としては、テトラヒドロフラン、ジエチルエーテル、ジオキサン、ジメトキシエタンなどが挙げられる。適当な還元剤としては、ボラン−テトラヒドロフラン錯体、水素化リチウムアルミニウム、水素化ホウ素リチウム等が挙げられる。還元剤は、化合物（Ｉｂ）または（Ｉｃ）に対して、１乃至２当量用いることが好ましい。
第５製法
2003101983.tif 000007
本発明化合物中、アミド化合物（Ｉｅ）は、第２製法により合成可能な（Ｉｃ）とアミン化合物（ＩＩＩａ）との縮合反応により合成出来る。反応は第１製法に記載の方法に準じて実施することが出来る。
第６製法
2003101983.tif 000008
本発明化合物中、テトラゾール化合物（Ｉｇ）は、第１製法により合成可能なニトリル化合物（Ｉｆ）とアジド化剤を反応させることにより合成出来る。反応は、通常反応に関与しないトルエン、キシレン、ベンゼン等の有機溶媒中、加温下に行われる。アジド化剤としては、アジ化トリブチル錫、アジ化ナトリウム等が好適である。
上記第１製法の原料化合物として用いるカルボン酸化合物（ＩＩ）の調製方法について以下に説明する。カルボン酸化合物（ＩＩ）は、化合物（Ｖ）と臭素化合物（ＶＩ）より下記工程１及び２により合成出来る。
2003101983.tif 000009
即ちカルボン酸化合物（ＩＩ）はｔｅｒｔ−ブチルエステル化合物（ＶＩＩ）を通常、当業者が用いる一般的な酸性条件下における加水分解反応に付すことにより合成出来る。反応は、ジオキサンやテトラヒドロフラン等の反応に関与しない有機溶媒中、塩酸を用いて、或いは、ジクロロメタン、クロロホルム、１，２−ジクロロエタン等の有機溶媒中、トリフルオロ酢酸を用いて、室温或いは加温下に行うことが出来る。
また、ｔｅｒｔ−ブチルエステル化合物（ＶＩＩ）は、後述の方法により合成可能な化合物（Ｖ）と臭素化合物（ＶＩ）を塩基の存在下に反応させることにより合成出来る。反応は、通常反応に関与しないジメチルホルムアミド、ジメチルアセトアミド、１−メチルピロリジノン、テトラヒドロフラン等の有機溶媒中、化合物（Ｖ）と（ＶＩ）を等モル量、或いは一方をやや過剰量用い、化合物（Ｖ）に対して等モル量或いはやや過剰量の塩基の存在下に、冷却乃至室温下に行われるのが好ましい。かかる塩基としては、カリウムｔｅｒｔ−ブトキシドや水素化ナトリウムが好ましい。
次に上述の原料化合物（Ｖ）と臭素化合物（ＶＩ）の調製方法につき順次説明する。
まず、化合物（Ｖ）は、公知の２−ハロゲン化ニトロベンゼン化合物（ＶＩＩＩ）より、下記に示す工程３から工程６により合成出来る。
2003101983.tif 000010
工程３
化合物（ＩＸ）は、Ｃ．Ａ．Ｇｒｏｂ，Ｏ．Ｗｅｉｓｓｂａｃｈ，Ｈｅｌｖ．Ｃｈｉｍ．Ａｃｔａ．，４４，１７４８（１９６１）記載の方法に準じて，化合物（ＶＩＩＩ）とシアノ酢酸エステル（好適にはシアノ酢酸エチル或いはシアノ酢酸ｔｅｒｔ−ブチル）とを塩基の存在下に反応させることにより合成出来る。かかる塩基としては、カリウムｔｅｒｔ−ブトキシド、水素化ナトリウム等の塩基が好適である。反応は通常反応に関与しない有機溶媒、例えばピリジンやジメチルホルムアミド，ジメチルアセトアミド、１−メチルピロリジノン中、シアノ酢酸エステル及び塩基を化合物（ＶＩＩＩ）に対して２当量用い、加温下に行われる。
工程４
化合物（Ｘ）は、Ｋ．Ｌ．Ｍｕｎｓｈｉ，Ｈ．Ｋｏｈｌ，Ｎ．Ｊ．ｄｅ  Ｓｏｕｚａ，Ｊ．Ｈｅｔｅｒｏｃｙｃｌｉｃ  Ｃｈｅｍ．１４，１１４５（１９７７）記載の方法に準じて、化合物（ＩＸ）を還元剤と反応させることにより合成出来る。かかる還元剤としては、亜鉛、鉄、塩化スズ（ＩＩ）等が好適に用いられ、反応は酢酸、塩酸などの酸性有機溶媒中、８０℃以上の加熱下にて行われるのが好ましい。
工程５
化合物（ＸＩ）は、Ｒ．Ａ．Ｇｌｅｎｎｎｏｎ，Ｊ．Ｈｅｔｅｒｏｃｙｃｌｉｃ  Ｃｈｅｍ．１２，１３５（１９７５）記載の方法に準じて、エステル化合物（Ｘ）より、酸性条件下において、加水分解に続く脱炭酸反応に付すことにより合成出来る。反応は、塩酸、硫酸或いはトリフルオロ酢酸などの酸性溶媒中、加熱還流下に行われるのが好ましい。
工程６
化合物（Ｖ）は、Ｒ．Ｓ．Ｓａｇｉｔｕｌｌｉｎ，Ｔ．Ｖ．Ｍｅｌ’ｎｉｋｏｖａ，Ａ．Ｎ．Ｋｏｓｔ，Ｖ．Ｆ．Ｓｎｅｇｉｒｅｖ，Ｅ．Ｎ．Ｆｒｅｎｋｅｌ，Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ  ｏｆ  Ｈｅｔｅｒｏｃｙｃｌｉｃ  Ｃｏｍｐｏｕｎｄｓ（Ｅｎｇｌｉｓｈ  Ｔｒａｎｓｌａｔｉｏｎ），９，９６８（１９７３）記載の方法に準じて、化合物（ＸＩ）と化合物（ＸＩＩ）とを塩基の存在下に反応させることにより合成出来る。反応は、通常反応に関与しない有機溶媒中、加温下に行われる。塩基としては、トリエチルアミンや、水酸化カリウムなどが用いられ、溶媒としてはエタノールや、イソプロピルアルコールが好適である。
化合物（Ｖ）のうちの一部の化合物は、工程３から工程６の如くして得られる化合物（Ｖ）の置換基を、更に目的とする置換基へ変換することによって合成することが出来る。このような置換基の変換方法は、目的とする置換基の種類に応じて適宜選択すればよいが、例えば以下に示す方法により実施することが出来る。即ち、化合物（Ｖｂ）、（Ｖｃ）、（Ｖｄ）は、工程３−６により合成可能な化合物（Ｖａ）より、工程７−１，７−２，７−３を経て順次合成出来る。
2003101983.tif 000011
工程７−１
化合物（Ｖｂ）は、化合物（Ｖａ）より、通常、当業者が一般的に用いる酸または塩基による加水分解により合成出来、第３製法に記載の方法に準じて実施することが出来る。
工程７−２
化合物（Ｖｃ）は、化合物（Ｖｂ）より、通常、当業者が一般的に用いる縮合剤によるアミド化反応により合成出来、第１製法に記載の方法に準じて実施することが出来る。
工程７−３
化合物（Ｖｄ）は、化合物（Ｖｃ）を還元反応に付すことにより合成出来る。反応は、通常反応に関与しない有機溶媒中、適当な還元剤の存在下に室温乃至は加温下に実施することが出来る。かかる溶媒としては、テトラヒドロフラン、ジエチルエーテル、ジオキサン、ジメトキシエタンなどが挙げられる。適当な還元剤としては、水素化リチウムアルミニウム、水素化ホウ素リチウム、ジボラン−テトラヒドロフラン錯体等が挙げられる。還元剤は、化合物（Ｖｃ）に対して、１乃至２当量用いることが好ましい。
化合物（Ｖｅ）、（Ｖｆ）は上述の化合物（Ｖｂ）より、工程７−４、７−５を経て順次合成出来る。
2003101983.tif 000012
工程７−４
化合物（Ｖｅ）は、化合物（Ｖｂ）より、塩化アンモニウム、炭酸アンモニウム、アンモニア水、アンモニアガス等を用いて、通常、当業者が一般的に用いる縮合剤によるアミド化反応により合成出来、第１製法に記載の方法に準じて実施することが出来る。
工程７−５
化合物（Ｖｆ）は、化合物（Ｖｅ）を脱水反応に付すことにより合成出来る。本反応は、通常反応に関与しない有機溶媒中、オキシ塩化リンのような脱水剤の存在下、氷冷下に行われるのが好ましい。
一方、臭素化合物（ＶＩ）は、公知の化合物（ＸＩＩＩ）を用いて、下記に示す工程８から工程１３により合成出来る。
2003101983.tif 000013
工程８
化合物（ＸＩＶ）は、化合物（ＸＩＩＩ）とテトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−オンを反応させることにより合成出来る。反応は、通常反応に関与しない有機溶媒中、塩基の存在下に−７８℃から−２０℃の冷却下にて行われる。かかる塩基としては、リチウムヘキサメチルジシラジド、リチウムジイソプロピルアミド等の有機金属アミドが好ましく、溶媒としては、テトラヒドロフラン、ジエチルエーテル等が好ましい。
工程９
化合物（ＸＶ）は、化合物（ＸＩＶ）を酸性条件下にて脱水反応に付すことにより合成出来る。溶媒としては、エタノール、ジオキサン等の反応に関与しない有機溶媒、或いは水中、硫酸、塩酸等の酸の存在下に４０−８０℃の加温下に行われるのが好ましい。
工程１０
化合物（ＸＶＩ）は、化合物（ＸＶ）を接触還元反応に付すことにより合成出来る。反応は、通常反応に関与しない有機溶媒、例えばエタノール、酢酸エチル、テトラヒドロフラン、酢酸等中、水素ガス雰囲気下に、パラジウム炭素等の金属触媒の存在下に室温にて行われるのが好ましい。
工程１１
化合物（ＸＶＩＩ）は、化合物（ＸＶＩ）を加水分解反応に付すことにより合成出来る。反応は、通常反応に関与しないメタノール、エタノール、テトラヒドロフラン等の有機溶媒及び水との混合溶媒中、塩基または酸の存在下に加温下に行われる。かかる塩基としては、水酸化ナトリウム、水酸化カリウム等の無機塩基が、また酸としては塩酸、硫酸、臭化水素酸等が好ましい。
工程１２
化合物（ＸＶＩＩＩ）は、化合物（ＸＶＩＩ）のｔｅｒｔ−ブチル化反応により合成出来る。反応は、通常反応に関与しないジクロロエタン、ジクロロメタン、クロロホルム等の有機溶媒中、室温下にイソブテンガスの存在下（即ち溶媒中への溶存下）に触媒量の硫酸を用いて行われる。或いは、Ｓ．Ｔ．Ｗｒｉｇｈｔ，Ｄ．Ｌ．Ｈａｇｅｍａｎ，Ａ．Ｓ．Ｗｒｉｇｈｔ，Ｌ．Ｄ．ＭｃＣｌｕｒｅ，Ｔｅｔｒａｈｅｄｒｏｎ  Ｌｅｔｔｅｒｓ，３８（４２），７３４５（１９９７）記載の方法に準じて、上記溶媒中、化合物（ＸＶＩＩ）に対して過剰量の無水硫酸マグネシウム及び等モル量の硫酸の存在下に、過剰量のｔｅｒｔ−ブチルアルコールを用いることにより系中にて発生したイソブテンガスと室温下に反応させることによっても合成可能である。
工程１３
化合物（ＶＩ）は、化合物（ＸＶＩＩＩ）の臭素化反応により合成出来る。反応は通常反応に関与しない四塩化炭素、酢酸エチル等の有機溶媒中、Ｎ−ブロモコハク酸イミド等の臭素化剤を用いて、触媒量のＮ，Ｎ’−アゾビスイソブチロニトリル、過酸化ベンゾイル等のラジカル開始剤の存在下に加熱還流下、或いは光照射下にて行われる。
一方、光学的に純粋な化合物（ＸＶＩＩ＊）は、上述のラセミ化合物（ＸＶＩＩ）より、下記、工程１４及び１５に示す光学分割法により合成出来る。
2003101983.tif 000014
工程１４
ジアステレオマー的に純粋な化合物（ＸＩＸ＊）は、化合物（ＸＶＩＩ）を（Ｓ）−（−）−１−フェニルエチルアミンと反応させて生じた塩の再結晶操作による分別晶析を１乃至数回繰り返すことにより合成出来る。化合物（ＸＶＩＩ）と（Ｓ）−（−）−１−フェニルエチルアミンとの反応は、通常反応に関与しないテトラヒドロフラン、アセトニトリル等の有機溶媒中にて、室温或いは加温下に行われ、ラセミ体の化合物（ＸＶＩＩ）に対し０．５から１当量の（Ｓ）−（−）−１−フェニルエチルアミンを用いるのが好ましく、塩析出後は、室温に数時間放置後濾取するのが好ましい。続く（Ｓ）−（−）−１−フェニルエチルアンモニウム塩の分別晶析はテトラヒドロフランを溶媒として行われるのが好ましい。
工程１５
光学的に純粋な化合物（ＸＶＩＩ＊）は、ジアステレオマー的に純粋な化合物（ＸＩＸ＊）の脱塩操作を行うことにより合成出来る。脱塩操作は、酢酸エチルやクロロホルム等の有機溶媒と水との２層系中、室温下に等モル量或いは過剰量の塩酸、硫酸等の酸を用いることにより行われる。
尚、光学的に純粋な化合物（ＸＶＩＩ＊）は、順次、上述の工程１２、工程１３、工程１、工程２及び第１製法に準ずることにより、光学的に純粋な本発明化合物（Ｉ＊）へと導くことが出来る。
2003101983.tif 000015
前記第２製法の原料化合物として用いるＢｏｃ基により保護されたアミド化合物（ＩＶ）の調製方法について以下に説明する。
2003101983.tif 000016
化合物（ＩＶ）は、前述の化合物（Ｖ）と後述の方法により合成可能な臭素化合物（ＸＸ）を塩基の存在下に工程１に準じて反応させることにより、合成出来る。即ち、反応は、通常反応に関与しないジメチルホルムアミド、ジメチルアセトアミド、１−メチルピロリジノン、テトラヒドロフラン等の有機溶媒中、化合物（Ｖ）と（ＸＸ）を等モル量、或いは一方をやや過剰量用い、化合物（Ｖ）に対して等モル量或いはやや過剰量の塩基の存在下に、冷却乃至室温下に行われるのが好ましい。かかる塩基としては、カリウムｔｅｒｔ−ブトキシドや水素化ナトリウムが好ましい。
次に上述の臭素化合物（ＸＸ）の調製方法につき説明する。
化合物（ＸＸ）は、前述のカルボン酸化合物（ＸＶＩＩ）を用いて、下記に示す工程１７から工程１９により合成出来る。
2003101983.tif 000017
工程１７
二級アミド化合物（ＸＸＩ）は、カルボン酸化合物（ＸＶＩＩ）とアミン化合物（ＩＩＩｂ）の縮合反応により合成出来、第１製法に記載の方法に準じて実施することが出来る。
工程１８
化合物（ＸＸＩＩ）は、化合物（ＸＸＩ）をジ−ｔｅｒｔ−ブチルジカルボネート（ＤＩＢＯＣ）と反応させることにより合成出来る。反応は、通常反応に関与しないアセトニトリル、テトラヒドロフラン、ジオキサン等の有機溶媒中、触媒量の４−ジメチルアミノピリジン（ＤＭＡＰ）の存在下に、化合物（ＸＸＩ）に対して等モル量乃至はやや過剰量のＤＩＢＯＣを、室温下に反応させることにより実施できる。
工程１９
臭素化合物（ＸＸ）は、化合物（ＸＸＩＩ）を臭素化反応に付すことにより合成出来、前述の工程１３に記載の方法に準じて実施することが出来る。
尚、工程１７において光学的に純粋な化合物（ＸＶＩＩ＊）を用いた場合、次に工程１８、工程１９、工程１６、及び第２製法に准ずることにより、光学的に純粋な本発明化合物（Ｉａ＊）へと導くことが出来る。
本発明化合物は、遊離化合物、その塩、水和物、溶媒和物、あるいは結晶多形の物質として単離され、精製される。本発明化合物（Ｉ）の製薬学的に許容される塩は、常法の造塩反応に付すことにより製造することもできる。
単離、精製は、抽出、分別結晶化、各種分画クロマトグラフィー等通常の化学操作を適用して行われる。
各種の異性体は，適当な原料化合物を選択することにより，あるいは異性体間の物理的性質の差を利用して分離することができる。例えば，光学異性体は適当な原料を選択することにより，あるいはラセミ化合物のラセミ分割法（例えば，一般的な光学活性な塩基とのジアステレオマー塩に導き，光学分割する方法等）により，立体化学的に純粋な異性体に導くことができる。
本発明化合物又はその塩の１種又は２種以上を有効成分として含有する製剤は，通常製剤化に用いられる担体や賦形剤，その他の添加剤を用いて調製される。
投与は錠剤，丸剤，カプセル剤，顆粒剤，散剤，液剤等による経口投与，あるいは静注，筋注等の注射剤，坐剤，経皮等による非経口投与のいずれの形態であってもよい。投与量は症状，投与対象の年令，性別等を考慮して個々の場合に応じて適宜決定されるが，通常経口投与の場合成人１日当り０．０１〜５００ｍｇ程度，非経口投与の場合成人１日当り０．００１〜１００ｍｇ程度であり，これを１回で，あるいは２〜４回に分けて投与する。
本発明のテトラヒドロピラン誘導体と併用される脂質低下剤は、該脂質低下剤の有効量の範囲内で適量選択される。
本発明のテトラヒドロピラン誘導体と併用される脂質低下剤とは、合剤としてもよいし、上記２種又はそれ以上の薬剤をそれぞれ別個に製剤化しておき、別々に投与してもよい。いずれの投与方法によっても、その治療効果が充分に発現される。
本発明による経口投与のための固体組成物としては，錠剤，散剤，顆粒剤等が用いられる。このような固体組成物においては，一つまたはそれ以上の活性物質が，少なくとも一つの不活性な希釈剤，例えば乳糖，マンニトール，ブドウ糖，ヒドロキシプロピルセルロース，微結晶セルロース，デンプン，ポリビニルピロリドン，メタケイ酸アルミン酸マグネシウムと混合される。組成物は，常法に従って，不活性な希釈剤以外の添加剤，例えばステアリン酸マグネシウムのような潤滑剤や繊維素グルコール酸カルシウムのような崩壊剤，ラクトースのような安定化剤，グルタミン酸又はアスパラギン酸のような溶解補助剤を含有していてもよい。錠剤又は丸剤は必要によりショ糖，ゼラチン，ヒドロキシプロピルセルロース，ヒドロキシプロピルメチルセルロースフタレート等の糖衣又は胃溶性あるいは腸溶性物質のフィルムで被膜してもよい。
経口投与のための液体組成物は，薬剤的に許容される乳濁剤，溶液剤，懸濁剤，シロップ剤，エリキシル剤等を含み，一般的に用いられる不活性な希釈剤，例えば精製水，エタノールを含む。この組成物は不活性な希釈剤以外に湿潤剤，懸濁剤のような補助剤，甘味剤，風味剤，芳香剤，防腐剤を含有していてもよい。
非経口投与の例としては注射剤が代表的な投与方法であり、注射剤としては，無菌の水性又は非水性の溶液剤，懸濁剤，乳濁剤を包含する。水性の溶液剤，懸濁剤としては，例えば注射用蒸留水及び生理食塩水が含まれる。非水溶性の溶液剤，懸濁剤としては，例えばプロピレングリコール，ポリエチレングリコール，オリーブ油のような植物油，エタノールのようなアルコール類，ポリソルベート８０（商品名）等がある。このような組成物はさらに防腐剤，湿潤剤，乳化剤，分散剤，安定化剤（例えば，ラクトース），溶解補助剤（例えば，グルタミン酸，アスパラギン酸）のような補助剤を含んでいてもよい。これらは例えばバクテリア保留フィルターを通す濾過，殺菌剤の配合又は照射によって無菌化される。また，これらは無菌の固体組成物を製造し，使用前に無菌水又は無菌の注射用溶媒に溶解して使用することもできる。
実施例
以下に実施例を掲記し，本発明を更に詳細に説明する。本発明は，これらの実施例に何ら制限されるものではない。尚、実施例で用いられる原料化合物の製造方法を参考例として説明する。
参考例１：（４−ヒドロキシテトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イル）（４−メチルフェニル）酢酸エチル
リチウム  ビス（トリメチルシリル）アミドの１Ｍテトラヒドロフラン（ＴＨＦ）溶液５５０ｍｌをアルゴン気流下に−７０℃に冷却し、（４−メチルフェニル）酢酸エチル９２．５ｇのＴＨＦ溶液５０ｍｌを３０分かけて滴下し、同温度にて３０分撹拌する。この反応液に更に−７０℃冷却下に、テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−オン５２．３ｇのＴＨＦ溶液５０ｍｌを３０分かけて滴下し、同温度にて１時間撹拌する。反応液に１０％クエン酸水溶液１０００ｍｌを加えた後、酢酸エチル５００ｍｌにて抽出し、有機層を１０％クエン酸水溶液５００ｍｌ、飽和食塩水５００ｍｌにて順次洗浄する。無水硫酸マグネシウムにて乾燥後、溶媒を減圧下に留去し、淡黄色結晶を得る。本結晶をｎ−ヘキサン４００ｍｌにて洗浄することにより、標記化合物１４５．７ｇを無色結晶として得た。
ＦＡＢ−ＭＳ  ｍ／ｚ：２７９（Ｍ＋＋１）
参考例２：３，６−ジヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イル）４−メチルフェニル）酢酸エチル
エタノール３００ｍｌに濃硫酸３００ｍｌを徐々に滴下後、氷浴にて１０℃に冷却する。本溶液に、参考例１にて合成した（４−ヒドロキシテトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イル）（４−メチルフェニル）酢酸エチル１４５ｇを加えた後、６０℃にて３時間撹拌する。反応液に酢酸エチル５００ｍｌ、水１５００ｍｌを加えた後、水層を更に酢酸エチル５００ｍｌにて抽出する。両酢酸エチル層を合わせ、飽和食塩水５００ｍｌにて洗浄後、無水硫酸マグネシウムにて乾燥する。溶媒を減圧下に留去後、残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィーに付し、酢酸エチル／ｎ−ヘキサン（１／９、ｖ／ｖ）にて溶出することにより、標記化合物９２．０ｇを淡黄色油状物として得た。
ＦＡＢ−ＭＳ  ｍ／ｚ：２６１（Ｍ＋＋１）
参考例３：（４−メチルフェニル）（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イル）酢酸エチル
参考例２にて合成した（３，６−ジヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イル）（４−メチルフェニル）酢酸エチル９２．０ｇをエタノール８００ｍｌに溶解し、Ａｒ雰囲気下にて１０％Ｐｄ−Ｃ  １０．２ｇを加える。反応容器内を水素ガスにて置換した後、室温下で４時間激しく撹拌する。再度反応容器内をＡｒガスにて置換した後、不溶物を濾去し、溶媒を減圧下に留去することにより、標記化合物８９．９ｇを淡黄色油状物として得た。
ＦＡＢ−ＭＳ  ｍ／ｚ：２６３（Ｍ＋＋１）
参考例４：（４−メチルフェニル）（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イル）酢酸
参考例３にて合成した（４−メチルフェニル）（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イル）酢酸エチル８９．７ｇをエタノール３００ｍｌに溶解し、８Ｍ水酸化ナトリウム水溶液１７０ｍｌを加え、４．５時間加熱還流する。エタノールを減圧下に留去した後、濃塩酸１２０ｍｌを加え、酢酸エチル５００ｍｌにて抽出する。有機層を飽和食塩水２００ｍｌにて洗浄後、無水硫酸マグネシウムにて乾燥し、溶媒を減圧下に留去することにより、無色油状物を得る。これを減圧下に乾燥し、結晶化することにより、標記化合物７４．５ｇを無色結晶として得た。
ＦＡＢ−ＭＳ  ｍ／ｚ：２３３（Ｍ＋−１）
参考例５：（２Ｓ）−（４−メチルフェニル）（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イル）酢酸
参考例４にて合成した（４−メチルフェニル）（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イル）酢酸を以下の方法により光学分割した。即ち（±）−２−（４−メチルフェニル）−２−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イル）酢酸７４．１ｇをアセトニトリル７００ｍｌに８０℃にて溶解する。トリエチルアミン１６．０ｇを加えた後、（Ｓ）−（−）−１−フェニルエチルアミン１９．２ｇを徐々に滴下すると、無色結晶が生じる。これを室温まで冷却後、同温度にて２時間撹拌する。生じた結晶を濾取し、アセトニトリル１００ｍｌにて洗浄後、乾燥することにより、無色結晶５５．０ｇを得る。これにＴＨＦ２６００ｍｌを加え、加熱還流することにより溶解させる。加熱することによりＴＨＦを約３００ｍｌ留去後、室温まで冷却すると無色結晶が生じる。同温度にて一晩撹拌する。生じた結晶を濾取し、ＴＨＦ５００ｍｌにて洗浄後、乾燥することにより、標記化合物の（Ｓ）−（−）−１−フェニルエチルアミン塩を無色結晶４３．６ｇとして得た。これに酢酸エチル７００ｍｌ、１Ｍ塩酸５００ｍｌを加え、室温にて１時間激しく撹拌する。酢酸エチル層を飽和食塩水にて洗浄後、無水硫酸マグネシウムにて乾燥し、溶媒を減圧下に留去することにより、標記化合物２９．０ｇを無色結晶として得た。［α］２５，Ｄ＝４８．３（ｃ＝１．００，ＣＨＣｌ３）
参考例６：（２Ｓ）−（４−メチルフェニル）（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イル）酢酸ｔｅｒｔ−ブチル参考例５にて合成した（２Ｓ）−（４−メチルフェニル）（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イル）酢酸６４．５ｇを塩化メチレン９００ｍｌに溶解し、濃硫酸２．５ｍｌを加える。反応液を−７０℃に冷却しながら、イソブテンガスを反応液中に吹き込み、液化することにより約５００ｍｌ貯め、この溶液を室温にて一晩撹拌する。（必要なら、イソブテンガスを再度冷却下に５００ｍｌ加え、更に一晩室温にて撹拌する。）溶媒を減圧下に留去した後、残渣にクロロホルム１０００ｍｌを加え、飽和炭酸水素ナトリウム水溶液１０００ｍｌ、飽和食塩水１０００ｍｌにて順次洗浄する。有機層を無水硫酸マグネシウムにて乾燥後、溶媒を減圧下に留去することにより、標記化合物７０．５ｇを無色固体として得た。
ＦＡＢ−ＭＳ  ｍ／ｚ：２９１（Ｍ＋＋１），［α］２５，Ｄ＝１７．７（ｃ＝１．００，ＣＨＣｌ３）
参考例７：（２Ｓ）−（４−ブロモメチルフェニル）（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イル）酢酸ｔｅｒｔ−ブチル
参考例６にて合成した（２Ｓ）−（４−メチルフェニル）（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イル）酢酸ｔｅｒｔ−ブチル４６．５ｇを四塩化炭素６００ｍｌに溶解し、５０℃にて２，２’−アゾビスイソブチロニトリル（ＡＩＢＮ）１．３ｇ、Ｎ−ブロモコハク酸イミド（ＮＢＳ）３４．２ｇを順次加えた後、反応液を１時間加熱還流する。反応液を氷冷後、不溶物を濾去し、溶媒を減圧下に留去する。残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィーに付し、酢酸エチル／ｎ−ヘキサン（１／２０→１／１０，ｖ／ｖ）で溶出することにより、標記化合物３４．５ｇを無色結晶として得た。
１Ｈ  ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）δ：１．０８−１．１８（２Ｈ，ｍ），１．３８−１．４１（１０Ｈ，ｍ），２．０８−２．２５（１Ｈ，ｍ），３．１４（１Ｈ，ｄ），３．２２−３．３３（１Ｈ，ｍ），３．４２（１Ｈ，ｄｔ），３．８０−３．９０（１Ｈ，ｍ），３．９３−４．０３（１Ｈ，ｍ），４．４８（２Ｈ，ｓ），７．２９（２Ｈ，ｄ），７．３４（２Ｈ，ｄ）
［α］２５，Ｄ＝８．９（ｃ＝１．００，ＣＨＣｌ３）
参考例８：Ｎ−ベンジル−２−（４−メチルフェニル）−２−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イル）アセタミド
ベンジルアミン８．６ｍｌをＤＭＦ１５０ｍｌに溶解し、室温にて参考例４で合成した（４−メチルフェニル）（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イル）酢酸１５．４ｇ、１−エチル−３−（３−ジメチルアミノプロピル）カルボジイミド・塩酸塩（ＷＳＣ・ＨＣｌ）１５．１ｇ及び１−ヒドロキシベンゾトリアゾール（ＨＯＢｔ）１０．７ｇを順次加え、同温度にて終夜撹拌する。反応液を減圧留去したのち、残渣に酢酸エチル及び飽和炭酸水素ナトリウム水溶液を加え、酢酸エチルにて抽出する。有機層を水、１．０Ｍ塩酸及び飽和食塩水にて洗浄後、無水硫酸マグネシウムにて乾燥し、溶媒を減圧下にて留去する。残渣をジエチルエーテル及びｎ−ヘキサンの混合溶媒にて再結晶することにより、標記化合物１７．６ｇを無色結晶として得た。
ＦＡＢ−ＭＳ  ｍ／ｚ：３２４（Ｍ＋＋１）
参考例９：Ｎ−ベンジル−［（４−メチルフェニル）（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イル）］エタノイルカルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチル
参考例８で合成したＮ−ベンジル−２−（４−メチルフェニル）−２−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イル）アセタミド１５．６ｇをアセトニトリル１６０ｍｌに溶解し、室温にて４−ジメチルアミノピリジン（ＤＭＡＰ）５８９ｍｇ、ジ−ｔｅｒｔ−ブチルジカルボネート（Ｂｏｃ２Ｏ）１２．６ｇを順次加え、同温度にて終夜撹拌する。反応液に酢酸エチル及び蒸留水を加える。有機層を飽和食塩水にて洗浄後、無水硫酸マグネシウムにて乾燥し、溶媒を減圧下にて留去する。残渣をシリカゲルカラムクマトグラフィーに付し、ｎ−ヘキサン：酢酸エチルの混合溶媒（４／１，ｖ／ｖ）にて溶出することにより、標記化合物１６．８ｇを無色油状物として得た。
ＦＡＢ−ＭＳ  ｍ／ｚ：４２４（Ｍ＋＋１）
参考例１０：Ｎ−ベンジル−［（４−ブロモメチルフェニル）（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イル）］エタノイルカルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチル
参考例９で合成した（±）−Ｎ−ベンジル−［２−（４−メチルフェニル）−２−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イル）］エタノイルカルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチル１６．８ｇを四塩化炭素１７０ｍｌに溶解し、６０℃にて２，２’−アゾビスイソブチロニトリル（ＡＩＢＮ）３２６ｍｇ、Ｎ−ブロモコハク酸イミド（ＮＢＳ）７．４２ｇを順次加えた後、反応液を１時間加熱還流する。反応液を減圧下に留去した後、残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィーに付し、酢酸エチル／ｎ−ヘキサン（１／１５→１／９，ｖ／ｖ）で溶出することにより、標記化合物１３．８ｇを無色泡状物質として得た。
ＦＡＢ−ＭＳ  ｍ／ｚ：４０２（Ｍ＋−Ｂｏｃ），１Ｈ  ＮＭＲ（ＤＭＳＯ）δ：１．３１（９Ｈ，ｓ）
参考例１１：４−クロロ−３−ニトロ−ベンゼンスルホニルクロライド
４−クロロ−３−ニトロベンゼンスルホン酸ナトリウム２６．２ｇを１，２−ジクロロエタン２５０ｍｌに溶解し、塩化チオニル２６．２ｇ、ＤＭＦ４．０ｇを加え、６時間加熱還流する。溶媒を減圧下に留去し、残渣に酢酸エチル４００ｍｌを加え、飽和炭酸水素ナトリウム水溶液、飽和食塩水にて順次洗浄後、無水硫酸マグネシウムにて乾燥し、溶媒を減圧下に留去することにより標記化合物１２．３ｇを無色油状物として得た。
１Ｈ  ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）δ：７．８８（１Ｈ，ｄ），８．１８（１Ｈ，ｄｄ），８．５４（１Ｈ，ｄ）
参考例１２：４−クロロ−Ｎ，Ｎ−ジメチル−３−ニトロベンゼンスルホンアミド
参考例１１にて合成した４−クロロ−３−ニトロ−ベンゼンスルホニルクロライド７．７ｇを１，２−ジクロロエタン８０ｍｌに溶解し、氷例下にジメチルアミン塩酸塩２．７ｇ、トリエチルアミン７．４ｇを加え、室温にて２時間撹拌する。反応液を１Ｍ塩酸、飽和炭酸水素ナトリウム、飽和食塩水にて順次洗浄後、無水硫酸マグネシウムにて乾燥する。溶媒を減圧下に留去後、残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィーに付し、クロロホルムにて溶出することにより、標記化合物４．１２ｇを淡黄色固体として得た。
ＦＡＢ−ＭＳ  ｍ／ｚ：２６４（Ｍ＋＋１）
参考例１３：シアノ−［４−（Ｎ，Ｎ−ジメチルアミノスルホニル）−２−ニトロフェニル］酢酸エチルカリウムｔｅｒｔ−ブトキシド３．５ｇをピリジン５０ｍｌに溶解し、シアノ酢酸エチル３．５ｇ及び参考例１２にて合成した４−クロロ−Ｎ，Ｎ−ジメチル−３−ニトロベンゼンスルホンアミド４．１ｇのピリジン溶液（１５ｍｌ）を順次加え、８０℃にて３０分撹拌した。溶媒を減圧下に留去後、トルエン１５０ｍｌ、水２００ｍｌを加える。水層を１Ｍ塩酸にて酸性化後、酢酸エチル２００ｍｌにて抽出し、有機層を飽和食塩水にて洗浄する。無水硫酸マグネシウムにて乾燥後、溶媒を減圧下に留去することにより、標記化合物５．７６ｇを赤色油状物として得た。
ＦＡＢ−ＭＳ  ｍ／ｚ：３４２（Ｍ＋＋１）
参考例１４：２−アミノ−６−（Ｎ，Ｎ−ジメチルアミノスルホニル）−１Ｈ−インドール−３−カルボン酸エチル
参考例１３にて合成したシアノ−［４−（Ｎ，Ｎ−ジメチルアミノスルホニル）−２−ニトロフェニル］酢酸エチル９．２ｇを酢酸１００ｍｌに溶解し、１００℃にて還元鉄４．５ｇを加える。激しく反応後、１００℃にて１時間撹拌する。反応液を室温に冷却し、不溶物を濾去する。残渣に酢酸エチル２００ｍｌ、１Ｍ塩酸１００ｍｌを加え、有機層を１Ｍ塩酸、飽和食塩水にて順次洗浄後、無水硫酸マグネシウムにて乾燥後、溶媒を減圧下に留去する。残渣にジイソプロピルエーテル６０ｍｌを加え、２０分加熱還流する。室温に冷却後、不溶物を濾取、乾燥することにより、標記化合物４．８３ｇを青紫色固体として得た。
ＦＡＢ−ＭＳ  ｍ／ｚ：３１２（Ｍ＋＋１）
参考例１５：２−アミノ−６−シアノ−１Ｈ−インドール−３−カルボン酸ｔｅｒｔ−ブチル
カリウムｔｅｒｔ−ブトキシド１８．４ｇをピリジン１５０ｍｌに溶解し、室温にてシアノ酢酸ｔｅｒｔ−ブチル１７ｍｌ、１−クロロ−５−シアノ−２−ニトロベンゼン１５．０ｇを順次加え、８０℃にて４時間攪拌する。溶媒を減圧下に留去後、残渣に水２００ｍｌを加え、トルエン３００ｍｌにて洗浄する。水層に濃塩酸１２０ｍｌを加えた後、酢酸エチル３００ｍｌにて抽出する。有機層を飽和食塩水にて洗浄後、無水硫酸マグネシウムにて乾燥し、溶媒を減圧下に留去することにより、（±）−シアノ−（４−シアノ−２−ニトロフェニル）酢酸ｔｅｒｔ−ブチル粗製物２２．９ｇを暗赤色油状物として得た。これを更に精製することなく次の反応に用いた。
（±）−シアノ−（４−シアノ−２−ニトロフェニル）酢酸ｔｅｒｔ−ブチル粗製物２２．６ｇを酢酸２００ｍｌに溶解し、１００℃に加熱する。これに還元鉄１３．２ｇを加え、１００℃にて１．５時間攪拌する。室温に冷却し、不溶物を濾去後、溶媒を減圧下に留去する。残渣に酢酸エチル３００ｍｌ及び１Ｍ塩酸３００ｍｌを加え、反応溶液をセライトろ過する。ろ液を酢酸エチルで抽出したのち、有機層を１Ｍ塩酸及び飽和食塩水溶液で洗浄し、無水硫酸マグネシウムにて乾燥する。溶媒を減圧下に留去し、残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィーに付し、酢酸エチル／ｎ−ヘキサン（３／７，ｖ／ｖ）で溶出することにより、標記化合物７．９４ｇを茶褐色泡状物質として得た。
ＦＡＢ−ＭＳ  ｍ／ｚ：２５８（Ｍ＋＋１）
参考例１６：６−（Ｎ，Ｎ−ジメチルアミノスルホニル）−２−イミノ−２，３−ジヒドロ−１Ｈ−インドール一塩酸塩
参考例１４で合成した２−アミノ−６−（Ｎ，Ｎ−ジメチルアミノスルホニル）−１Ｈ−インドール−３−カルボン酸エチル４．８３ｇに濃塩酸２０ｍｌを加え、１時間加熱還流する。溶媒を減圧下に留去後、残渣にエタノール２０ｍｌを加え、８０℃にて溶解後、室温に戻す。ジエチルエーテル２０ｍｌを加えることにより析出する固体を濾取、乾燥することにより、標記化合物３．１４ｇを淡茶色固体として得た
ＦＡＢ−ＭＳ  ｍ／ｚ：２４０（Ｍ＋＋１）
参考例１７：６−シアノ−２−イミノ−２，３−ジヒドロ−１Ｈ−インドール一塩酸塩
参考例１５で合成した２−アミノ−６−シアノ−１Ｈ−インドール−３−カルボン酸ｔｅｒｔ−ブチル３．００ｇを１，２−ジクロロエタン３０ｍｌに溶解し、室温にてトリフルオロ酢酸１５ｍｌを加え、終夜撹拌する。溶媒を減圧下に留去後、残渣を酢酸エチル３０ｍｌに溶解し、塩化水素の４Ｍ酢酸エチル溶液４ｍｌを加える。生じた固体をろ取乾燥することにより、標記化合物１．８４ｇを灰色固体として得た。
ＦＡＢ−ＭＳ  ｍ／ｚ：１５８（Ｍ＋＋１）
参考例１８：３−（２，４−ジメチル−９Ｈ−ピリド［２，３−ｂ］インドール−３−イル）プロパン酸エチル
２−イミノ−２，３−ジヒドロ−１Ｈ−インドール一塩酸塩８．０ｇにイソプロピルアルコール８０ｍｌを加え、４−アセチル−５−オキソヘキサン酸エチル９．５ｇ、トリエチルアミン１４．４ｇを順次加え、８０℃にて一晩撹拌する。反応液を室温に冷却し、生じた結晶を濾取する。これにメタノール９０ｍｌを加え、懸濁状のまま加熱還流後、室温に冷却し、結晶を濾取、乾燥することにより、標記化合物７．７５ｇを灰色結晶として得た。
参考例１８と同様の方法により、下記Ｔａｂｌｅ  １に示す化合物を合成した。表中の記号は以下の意味を示す。
Ｒｅｘ：参考例  ＤＡＴＡ：物理化学的性状  ＮＭＲ：プロトン核磁気共鳴スペクトル（ＴＭＳ内部標準）δ特に記載のないときは、ＤＭＳＯ−ｄ６
2003101983.tif 000018
参考例３５：３−（２，４−ジメチル−９Ｈ−ピリド［２，３−ｂ］インドール−３−イル）−７−カルボン酸メチル
参考例２０で合成した３−（２，４−ジメチル−９Ｈ−ピリド［２，３−ｂ］インドール−３−イル）−７−カルボン酸１．１９ｇをメタノール５０ｍｌに溶解し、濃硫酸０．５ｍｌを加え、終夜加熱還流した。溶媒を減圧下に留去後、残渣にクロロホルム１００ｍｌを加え、飽和炭酸水素ナトリウム、飽和食塩水にて順次洗浄した。有機層を無水硫酸マグネシウムにて乾燥後、溶媒を減圧下に留去することにより、標記化合物９３０ｍｇを褐色固体として得た。
ＦＡＢ−ＭＳ  ｍ／ｚ：２５５（Ｍ＋＋１）
参考例３６：３−（２，４−ジメチル−７−メトキシカルボニル−９Ｈ−ピリド［２，３−ｂ］インドール−３−イル）プロパン酸メチル
参考例３１で合成した３−（７−カルボキシ−２，４−ジメチル−９Ｈ−ピリド［２，３−ｂ］インドール−３−イル）プロパン酸エチル１．０ｇをメタノール２０ｍｌに溶解し、濃硫酸０．５ｍｌを加え、終夜撹拌した。溶媒を減圧下に留去後、残渣にクロロホルム１００ｍｌを加え、飽和炭酸水素ナトリウム、飽和食塩水にて順次洗浄した。有機層を無水硫酸マグネシウムにて乾燥後、溶媒を減圧下に留去することにより、標記化合物８４０ｍｇを無色固体として得た。
ＦＡＢ−ＭＳ  ｍ／ｚ：３４１（Ｍ＋＋１）
参考例３７：（２，４−ジメチル−９Ｈ−ピリド［２，３−ｂ］インドール−３−イル）酢酸
参考例２２で合成した（２，４−ジメチル−９Ｈ−ピリド［２，３−ｂ］インドール−３−イル）酢酸メチル８７０ｍｇをメタノール１６ｍｌに溶解し、１Ｍ水酸化ナトリウム水溶液７ｍｌを加え、１９時間加熱還流する。クエン酸水を加え、生じた固体をろ取乾燥することにより、標記化合物７６０ｍｇを無色固体として得た。
ＦＡＢ−ＭＳ  ｍ／ｚ：２５５（Ｍ＋＋１）
参考例３８：（２，４−ジメチル−９Ｈ−ピリド［２，３−ｂ］インドール−３−イル）−Ｎ，Ｎ−ジメチルアセタミド
参考例３７で合成した（２，４−ジメチル−９Ｈ−ピリド［２，３−ｂ］インドール−３−イル）酢酸４００ｍｇをＤＭＦ８ｍｌに溶解し、室温にてジメチルアミン塩酸塩２５６ｍｇ、トリエチルアミン０．６６ｍｌ、１−エチル−３−（３−ジメチルアミノプロピル）カルボジイミド・塩酸塩（ＷＳＣ・ＨＣｌ）３６１ｍｇ及び１−ヒドロキシベンゾトリアゾール（ＨＯＢｔ）２５５ｍｇを順次加え、同温度にて終夜撹拌する。反応溶液に炭酸水素ナトリウム水溶液を加え、生じた固体をろ取乾燥することにより、標記化合物３２０ｍｇを無色固体として得た。
ＦＡＢ−ＭＳ  ｍ／ｚ：２８２（Ｍ＋＋１）
参考例３９：２−（２，４−ジメチル−９Ｈ−ピリド［２，３−ｂ］インドール−３−イル）−１−（モルホリン−４−イル）エタノン
参考例３７で合成した（２，４−ジメチル−９Ｈ−ピリド［２，３−ｂ］インドール−３−イル）酢酸３６０ｍｇをＤＭＦ８ｍｌに溶解し、室温にてモルホリン０．２５ｇ、１−エチル−３−（３−ジメチルアミノプロピル）カルボジイミド・塩酸塩（ＷＳＣ・ＨＣｌ）３６１ｍｇ及び１−ヒドロキシベンゾトリアゾール（ＨＯＢｔ）２５５ｍｇを順次加え、同温度にて終夜撹拌する。反応溶液に炭酸水素ナトリウム水溶液を加え、生じた固体をろ取乾燥することにより、標記化合物３５０ｍｇを無色固体として得た。
ＦＡＢ−ＭＳ  ｍ／ｚ：３２４（Ｍ＋＋１）
参考例４０：２，４−ジメチル−３−［２−（Ｎ，Ｎ−ジメチルアミノ）エチル］−９Ｈ−ピリド［２，３−ｂ］インドール
水素化リチウムアルミニウム７５ｍｇのＴＨＦ溶液に参考例３８で合成した（２，４−ジメチル−９Ｈ−ピリド［２，３−ｂ］インドール−３−イル）−Ｎ，Ｎ−ジメチルアセタミド３２０ｍｇを加え、３．５時間加熱還流する。反応溶液に水素化リチウムアルミニウム１２０ｍｇを加え、４時間加熱還流する。反応液に蒸留水、１Ｍ水酸化ナトリウム水溶液及び酢酸エチルを順次加え、セライトろ過する。反応溶液を酢酸エチルにて抽出した後、飽和食塩水にて洗浄後、有機層を無水硫酸マグネシウムにて乾燥する。溶媒を減圧下に留去することにより、標記化合物２８８ｍｇを淡黄色固体として得た。
ＦＡＢ−ＭＳ  ｍ／ｚ：２６８（Ｍ＋＋１）
参考例４１：２，４−ジメチル−３−［２−（モルホリン−４−イル）エチル］−９Ｈ−ピリド［２，３−ｂ］インドール
水素化リチウムアルミニウム８２ｍｇのＴＨＦ溶液に参考例３９で合成した２−（２，４−ジメチル−９Ｈ−ピリド［２，３−ｂ］インドール−３−イル）−１−（モルホリン−４−イル）エタノン３５０ｍｇを加え、９時間加熱還流する。反応液に蒸留水、１Ｍ水酸化ナトリウム水溶液及び酢酸エチルを順次加え、セライトろ過する。反応溶液を酢酸エチルにて抽出した後、飽和食塩水にて洗浄後、有機層を無水硫酸マグネシウムにて乾燥する。溶媒を減圧下に留去することにより、標記化合物３３８ｍｇを淡黄色固体として得た。
ＦＡＢ−ＭＳ  ｍ／ｚ：３１０（Ｍ＋＋１）
参考例４２：３−（２，４−ジメチル−９Ｈ−ピリド［２，３−ｂ］インドール−３−イル）プロパン酸
参考例１８で合成した３−（２，４−ジメチル−９Ｈ−ピリド［２，３−ｂ］インドール−３−イル）プロパン酸エチル２．４０ｇをエタノール３０ｍｌに溶解し、１Ｍ水酸化ナトリウム水溶液１６ｍｌを加え、終夜加熱還流する。クエン酸水を加え、生じた固体をろ取乾燥することにより、標記化合物２．１７ｇを無色固体として得た。
ＦＡＢ−ＭＳ  ｍ／ｚ：２６９（Ｍ＋＋１）
参考例４３：３−（２，４−ジメチル−９Ｈ−ピリド［２，３−ｂ］インドール−３−イル）プロパン酸アミド
参考例４２で合成した３−（２，４−ジメチル−９Ｈ−ピリド［２，３−ｂ］インドール−３−イル）プロパン酸２６８ｍｇをＤＭＦ４ｍｌに溶解し、室温にて１−エチル−３−（３−ジメチルアミノプロピル）カルボジイミド・塩酸塩（ＷＳＣ・ＨＣｌ）２８８ｍｇ及び１−ヒドロキシベンゾトリアゾール（ＨＯＢｔ）２０３ｍｇを順次加え、同温度にて１．５時間撹拌する。反応液に塩化アンモニウム１６０ｍｇ及びジイソプロピルエチルアミン０．７０ｍｌを加え、終夜撹拌する。反応液に炭酸水素ナトリウム水溶液を加え、生じた固体をろ取乾燥することにより、標記化合物２３０ｍｇを無色固体として得た。
ＦＡＢ−ＭＳ  ｍ／ｚ：２６８（Ｍ＋＋１）
参考例４４：３−（２，４−ジメチル−９Ｈ−ピリド［２，３−ｂ］インドール−３−イル）プロピオニトリル
参考例４３で合成した３−（２，４−ジメチル−９Ｈ−ピリド［２，３−ｂ］インドール−３−イル）プロパン酸アミド２６７ｍｇをＤＭＦ２．７ｍｌに溶解し、氷冷下にてオキシ塩化リン０．１１ｍｌを加え、１．５時間撹拌する。反応液に酢酸エチル及び炭酸水素ナトリウム水溶液を順次加え、生じた固体をろ取乾燥することで標記化合物９２ｍｇを淡赤色固体として得た。また、ろ液を酢酸エチルにて抽出した後、飽和食塩水にて洗浄後、有機層を無水硫酸マグネシウムにて乾燥する。溶媒を減圧下に留去することにより、標記化合物１４２ｍｇを無色固体として得た。
ＦＡＢ−ＭＳ  ｍ／ｚ：２５０（Ｍ＋＋１）
参考例４５：（＋）−３−（９−｛４−［（Ｓ）−２−（ｔｅｒｔ−ブトキシ）−２−オキソ−１−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イル）エチル］ベンジル｝−２，４−ジメチル−９Ｈ−ピリド［２，３−ｂ］インドール−３−イル）プロパン酸エチル
参考例１８で合成した３−（２，４−ジメチル−９Ｈ−ピリド［２，３−ｂ］インドール−３−イル）プロパン酸エチル７．７ｇをＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（ＤＭＦ）１５０ｍｌに溶解し、０℃に冷却しながら、カリウムｔｅｒｔ−ブトキシド３．２ｇを加えた後、室温にて３０分撹拌する。反応液を再度０℃に冷却後、参考例７で合成した（２Ｓ）−（４−ブロモメチルフェニル）（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イル）酢酸ｔｅｒｔ−ブチル１０．０ｇのＤＭＦ溶液３０ｍｌを徐々に滴下する。反応液を室温に戻し、同温度にて８時間撹拌する。溶媒を減圧下に留去後、残渣にクロロホルム３００ｍｌを加え、飽和食塩水３００ｍｌにて洗浄後、有機層を無水硫酸マグネシウムにて乾燥する。溶媒を減圧下に留去し、残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィーに付し、酢酸エチル／ｎ−ヘキサン（１／５→１／２，ｖ／ｖ）にて溶出することにより、標記化合物８．１ｇを淡黄色固体として得た。
参考例４５と同様の方法により、下記Ｔａｂｌｅ  ２に示す化合物を合成した。
2003101983.tif 000019
2003101983.tif 000020
参考例６４：（Ｓ）−（＋）−（４−｛［３−（３−エトキシ−３−オキソプロピル）−２，４−ジメチル−９Ｈ−ピリド［２，３−ｂ］インドール−９−イル］メチル｝フェニル）（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イル）酢酸
参考例４５で合成した（＋）−３−（９−｛４−［（Ｓ）−２−（ｔｅｒｔ−ブトキシ）−２−オキソ−１−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イル）エチル］ベンジル｝−２，４−ジメチル−９Ｈ−ピリド［２，３−ｂ］インドール−３−イル）プロパン酸エチル２０．４ｇを１，２−ジクロロエタン１００ｍｌに溶解し、室温にてトリフルオロ酢酸１００ｍｌを加え、１時間撹拌する。反応液を減圧留去させた後、残渣に酢酸エチル２００ｍｌ及び飽和炭酸水素ナトリウム水溶液を加える。反応液をクエン酸水にて中和した後、生じた固体をろ取することにより、標記化合物５．４５ｇを無色固体として得た。また、ろ液を酢酸エチルにて抽出し、飽和食塩水にて洗浄後、有機層を無水硫酸マグネシウムにて乾燥する。溶媒を減圧下に留去し、残渣を酢酸エチルにて再結晶することにより、標記化合物７．４７ｇを無色結晶として得た。
参考例６４と同様の方法により、下記Ｔａｂｌｅ  ３に示す化合物を合成した。
2003101983.tif 000021
2003101983.tif 000022
参考例８３：（９−｛４−［２−（ベンジル−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ）−２−オキソ−１−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イル）エチル］ベンジル｝−２，４−ジメチル−９Ｈ−ピリド［２，３−ｂ］インドール−３−イル）酢酸メチル
参考例２２で合成した３−（２，４−ジメチル−９Ｈ−ピリド［２，３−ｂ］インドール−３−イル）酢酸メチル３２０ｍｇをＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（ＤＭＦ）３ｍｌに溶解し、０℃に冷却しながら、カリウムｔｅｒｔ−ブトキシド１３４ｍｇを加えた後、室温にて１５分撹拌する。反応液を再度０℃に冷却後、参考例１０で合成した（±）−Ｎ−ベンジル−［２−（４−ブロモメチルフェニル）−２−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イル）］エタノイルカルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチル６００ｍｇのＤＭＦ溶液２ｍｌを徐々に滴下する。反応液を室温に戻し、同温度にて終夜撹拌する。反応液に酢酸エチル及び蒸留水を加え、酢酸エチルにて抽出する。有機層を蒸留水及び飽和食塩水にて洗浄後、無水硫酸マグネシウムにて乾燥し、溶媒を減圧下にて留去する。残渣をシリカゲルカラムクマトグラフィーに付し、ヘキサン：酢酸エチルの混合溶媒（９／１→４／１，ｖ／ｖ）にて溶出することにより、標記化合物５０３ｍｇを無色油状物として得た。
ＦＡＢ−ＭＳ  ｍ／ｚ：６９０（Ｍ＋＋１）
参考例８３と同様の方法により、下記Ｔａｂｌｅ  ４に示す化合物を合成した。
2003101983.tif 000023
参考例８６：（４−メチルフェニル）（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イル）酢酸
（１）テトラヒドロピラン−４−オール  ５ｇにピリジン（７．６倍モル）、ｐ−トルエンスルホニルクロライド（２．２倍モル）、水（１．１倍モル）を加えて２４℃で終夜撹拌した。この反応液に水６０ｍｌを加え、トルエン６０ｍＬで抽出、２Ｍ塩酸６０ｍｌおよび水４０ｍＬで順次洗浄し、有機層を濃縮乾固、４−メチルベンゼンスルホン酸テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イル８．９８ｇを得た。
１Ｈ  ＮＭＲ：δ＝７．８３−７．８１（２Ｈ，ｄ），７．４９−７．４７（２Ｈ，ｄ），４．７５−４．６５（１Ｈ，ｍ），３．７４−３．３６（４Ｈ，ｍ），２．４２（ｓ，３Ｈ），１．７８−１．５２（４Ｈ，ｍ）
（２）ＴＨＦ１０ｍＬに０℃以下で、１．５８Ｍ  ｎ−ＢｕＬｉ  ｎ−ヘキサン溶液１７．７ｍｌ及びジイソプロピルアミン３．１ｇを加え（ＬＤＡ調製）、次いで、ｐ−トリル酢酸２ｇ（ＴＨＦ８ｍｌに溶かして）を加え、１時間撹拌した。続いて、０℃以下で４−メチルベンゼンスルホン酸テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イル３．４１ｇを加えて２４℃で６時間撹拌した。この反応液に水１０ｍｌを加え、酢酸エチル１２ｍｌで２回洗浄後、濃塩酸を加えてｐＨ４とし、酢酸エチル１２ｍｌで２回抽出、抽出液を濃縮後、残渣にエタノール７ｍｌを加えて溶解、水１４ｍｌを加えて結晶化させ、（４−メチルフェニル）（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イル）酢酸２．６５ｇを得た。
１Ｈ  ＮＭＲ：δ＝１２．３２（１Ｈ，ｓ），７．２０−７．１２（４Ｈ，ｑ），３．８６−３．１４（５Ｈ，ｍ），２．２７（３Ｈ，ｓ），２．０８（１Ｈ，ｍ），１．６９−１．００（４Ｈ，ｍ）
参考例８７：２−イミノ−２，３−ジヒドロ−１Ｈ−インドール  塩酸塩
（１）文献（Ｇｒｏｂ，Ｃ．Ａ．；Ｈｅｌｖ  Ｃｈｉｍ  Ａｃｔａ  １９６１，４４，１７４８．）に従って、１−クロロ−２−ニトロベンゼンから（＋−）−シアノ（２−ニトロフェニル）酢酸エチルを経て（２−ニトロフェニル）アセトニトリルを合成した。
次いで、（２−ニトロフェニル）アセトニトリル３．３７ｇ（２０．７８ｍｍｏｌ）をメタノール１７ｍｌ中、１０％Ｐｄ−Ｃ（５４％ｗｅｔ）０．１５ｇを用いて常圧にて接触還元を行った。触媒を濾去し、溶媒を留去して得られた濃縮残渣にジイソプロピルエーテル２０ｍｌを加え、結晶を濾取し、（２−アミノフェニル）アセトニトリル２．０５ｇを得た。
ＦＡＢ−ＭＳ（ｐｏｓ．）：ｍ／ｚ  １３３
（２）（２−アミノフェニル）アセトニトリル１．３４ｇをＴＨＦ１０ｍｌに溶解し、濃塩酸を加えて２時間加熱還流した。溶媒を留去して得られた濃縮残渣にエタノール５ｍｌ及びジイソプロピルエーテル１５ｍｌを加え懸濁させ、結晶を濾取、２−イミノ−２，３−ジヒドロ−１Ｈ−インドール  塩酸塩１．４２ｇを得た。
１Ｈ  ＮＭＲ：δ＝１２．４６（１Ｈ，ｓ），１０．２５（１Ｈ，ｓ），１０．００（１Ｈｓ，），７．４２−７．１１（４Ｈ，ｍ），４．１８（２Ｈ，ｓ）
実施例１：（−）−３−（２，４−ジメチル−９−｛４−［（Ｓ）−２−オキソ−２−（４−ピリジン−２−イルピペラジン−１−イル）−１−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イル）エチル］ベンジル｝−９Ｈ−ピリド［２，３−ｂ］インドール−３−イル）プロパン酸エチル
参考例６４で合成した（Ｓ）−（＋）−（４−｛［３−（３−エトキシ−３−オキソプロピル）−２，４−ジメチル−９Ｈ−ピリド［２，３−ｂ］インドール−９−イル］メチル｝フェニル）（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イル）酢酸２．０ｇをＤＭＦ３０ｍｌに溶解し、室温にて１−ヒドロキシベンゾトリアゾール（ＨＯＢｔ）５６０ｍｇ、１−エチル−３−（３−ジメチルアミノプロピル）カルボジイミド・塩酸塩（ＷＳＣ・ＨＣｌ）７８０ｍｇ、１−（２−ピリジル）ピペラジン６８０ｍｇ及びトリエチルアミン５８０ｍｇを順次加え、同温度にて終夜撹拌する。溶媒を減圧下に留去し、残渣に酢酸エチル１００ｍｌを加え、水、飽和炭酸水素ナトリウム水溶液、飽和食塩水にて洗浄後、有機層を無水硫酸マグネシウムにて乾燥し、溶媒を減圧下にて留去する。残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィーに付し、クロロホルム：メタノールの混合溶媒（１００／１，ｖ／ｖ）にて溶出することにより、標記化合物２．４２ｇを淡黄色泡状物質として得た。これをエタノールより結晶化することにより、標記化合物１．８５ｇを無色結晶として得た。
実施例２：（＋）−３−（２，４−ジメチル−９−｛４−［（Ｓ）−２−オキソ−２−（４−プロピルピペラジン−１−イル）−１−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イル）エチル］ベンジル｝−９Ｈ−ピリド［２，３−ｂ］インドール−３−イル）プロパン酸ベンジル
参考例７８で合成した（Ｓ）−（＋）−（４−｛［３−（３−ベンジルオキシ−３−オキソプロピル）−２，４−ジメチル−９Ｈ−ピリド［２，３−ｂ］インドール−９−イル］メチル｝フェニル）（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イル）酢酸１．８ｇをＤＭＦ４０ｍｌに溶解し、室温にてＨＯＢｔ４６０ｍｇ、ＷＳＣ・ＨＣｌ６５０ｍｇ、１−（ｎ−プロピル）ピペラジン二臭化水素酸塩９８０ｍｇ及びトリエチルアミン９３０ｍｇを順次加え、同温度にて１０時間撹拌する。溶媒を減圧下に留去し、残渣に酢酸エチル１５０ｍｌを加え、水、飽和炭酸水素ナトリウム水溶液、飽和食塩水にて洗浄後、有機層を無水硫酸マグネシウムにて乾燥し、溶媒を減圧下にて留去する。残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィーに付し、クロロホルム：メタノールの混合溶媒（２０／１，ｖ／ｖ）にて溶出することにより、標記化合物１．８５ｇを無色泡状物質として得た。このうち、３００ｍｇをエタノールより結晶化することにより、標記化合物１４８ｍｇを無色結晶として得た。
実施例１と同様の方法により、Ｔａｂｌｅ  ５に示す化合物を合成した。
2003101983.tif 000024
2003101983.tif 000025
実施例１６：（＋）−３−（２，４−ジメチル−９−｛４−［（Ｓ）−２−オキソ−２−（ピペラジン−１−イル）−１−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イル）エチル］ベンジル｝−９Ｈ−ピリド［２，３−ｂ］インドール−３−イル）プロパン酸エチル  二塩酸塩
４−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）ピペラジン２．１１ｇをＤＭＦ４０ｍｌに溶解し、室温にて参考例６４で合成した（Ｓ）−（＋）−（４−｛［３−（３−エトキシ−３−オキソプロピル）−２，４−ジメチル−９Ｈ−ピリド［２，３−ｂ］インドール−９−イル］メチル｝フェニル）（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イル）酢酸４．０ｇ、１−エチル−３−（３−ジメチルアミノプロピル）カルボジイミド・塩酸塩（ＷＳＣ・ＨＣｌ）１．７４ｇ及び１−ヒドロキシベンゾトリアゾール（ＨＯＢｔ）１．２３ｇを順次加え、同温度にて終夜撹拌する。反応液に酢酸エチル及び炭酸水素ナトリウム水溶液を加え、酢酸エチルにて抽出する。有機層を水、１．０Ｍ塩酸及び飽和食塩水にて洗浄後、無水硫酸マグネシウムにて乾燥し、溶媒を減圧下にて留去することにより、無色泡状物質を得た。得られた泡状物質を酢酸エチル２０ｍｌに溶解し、室温にて塩化水素の４Ｍ酢酸エチル溶液２０ｍｌを加え、１時間撹拌する。反応液を減圧留去した後、酢酸エチルにて洗浄することにより、標記化合物５．０７ｇを無色固体として得た。
ＦＡＢ−ＭＳ  ｍ／ｚ：５９７（Ｍ＋＋１）
実施例１７：（−）−３−（２，４−ジメチル−９−｛４−［（Ｓ）−２−オキソ−２−（４−ピリジン−２−イルピペラジン−１−イル）−１−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イル）エチル］ベンジル｝−９Ｈ−ピリド［２，３−ｂ］インドール−３−イル）プロパン酸
実施例１で合成した（−）−３−（２，４−ジメチル−９−｛４−［（Ｓ）−２−オキソ−２−（４−ピリジン−２−イルピペラジン−１−イル）−１−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イル）エチル］ベンジル｝−９Ｈ−ピリド［２，３−ｂ］インドール−３−イル）プロパン酸エチル１．８４ｇにメタノール１００ｍｌ、水１５ｍｌを加え、無水炭酸カリウム８３０ｍｇを加え、７０℃にて３時間撹拌する。氷冷後、１Ｍ塩酸５．９５ｍｌを加え、溶媒を減圧下に留去する。残渣にクロロホルムを加え、飽和食塩水にて洗浄後、有機層を無水硫酸マグネシウムにて乾燥し、溶媒を減圧下に留去する。残渣をシリカゲルカラムクマトグラフィーに付し、クロロホルム：メタノールの混合溶媒（２０／１，ｖ／ｖ）にて溶出することにより、標記化合物１．８ｇを無色泡状物質として得た。これをエタノール続いてアセトンより順次結晶化することにより、標記化合物７１０ｍｇを無色結晶として得た。
実施例１８：（＋）−３−（２，４−ジメチル−９−｛４−［（Ｓ）−２−オキソ−２−（４−プロピルピペラジン−１−イル）−１−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イル）エチル］ベンジル｝−９Ｈ−ピリド［２，３−ｂ］インドール−３−イル）プロパン酸
実施例２で合成した（＋）−３−（２，４−ジメチル−９−｛４−［（Ｓ）−２−オキソ−２−（４−プロピルピペラジン−１−イル）−１−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イル）エチル］ベンジル｝−９Ｈ−ピリド［２，３−ｂ］インドール−３−イル）プロパン酸ベンジル１．９６ｇをテトラヒドロフラン５０ｍｌに溶解し、アルゴン気流下に１０％パラジウム−炭素３００ｍｇを加えた。反応系内に水素ガスを導入し、室温にて終夜撹拌した。反応系内をアルゴンガスに置換後、セライトを用いて不溶物を濾去後、濾液を減圧下に留去する。残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィーに付し、クロロホルム：メタノール（２０：１，ｖ／ｖ）の混合溶媒にて溶出することにより、標記化合物１．７５ｇを無色泡状物質として得た。これを酢酸エチル、エタノールより順次結晶化することにより、標記化合物７６５ｍｇを無色結晶として得た。
実施例１９：（−）−３−（９−｛４−［（Ｓ）−（ベンジルカルバモイル）（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イル）メチル］ベンジル｝−２，４−ジメチル−９Ｈ−ピリド［２，３−ｂ］インドール−３−イル）プロパン酸
実施例９で合成した（−）−３−（９−｛４−［（Ｓ）−（ベンジルカルバモイル）（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イル）メチル］ベンジル｝−２，４−ジメチル−９Ｈ−ピリド［２，３−ｂ］インドール−３−イル）プロパン酸ベンジル３．２ｇをテトラヒドロフラン１２０ｍｌに溶解し、アルゴン気流下に１０％パラジウム−炭素５００ｍｇを加えた。反応系内に水素ガスを導入し、室温にて２日間撹拌した。反応系内をアルゴンガスに置換後、セライトを用いて不溶物を濾去後、濾液を減圧下に留去する。残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィーに付し、クロロホルム：メタノール（２０：１，ｖ／ｖ）の混合溶媒にて溶出することにより、標記化合物３．３１ｇを無色泡状物質として得た。これをエタノールより結晶化することにより、標記化合物２．５８ｇを無色結晶として得た。
実施例２０：（＋）−３−（９−｛４−［（Ｓ）−２−（４−シクロプロピルメチルピペラジン−１−イル）−２−オキソ−１−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イル）エチル］ベンジル−２，４−ジメチル−９Ｈ−ピリド［２，３−ｂ］インドール−３−イル｝プロパン酸
シクロプロピルアルデヒド９４ｍｇを１，２−ジクロロエタン６ｍｌに溶解し、実施例１６で合成した（＋）−３−（２，４−ジメチル−９−｛４−［（Ｓ）−２−オキソ−２−（ピラジン−１−イル）−１−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イル）エチル］ベンジル｝−９Ｈ−ピリド［２，３−ｂ］インドール−３−イル）プロパン酸エチル二塩酸塩３００ｍｇを加え、１時間撹拌する。反応液に同温度にて水素化トリアセトキシホウ素ナトリウム２８５ｍｇを加え、１時間撹拌する。反応液にクロロホルム及び飽和炭酸水素ナトリウム水溶液を加えた後、クロロホルムにて抽出する。有機層を、飽和食塩水にて洗浄後、無水硫酸マグネシウムにて乾燥し、溶媒を減圧下に留去する。残渣をシリカゲルカラムクマトグラフィーに付し、クロロホルム：メタノールの混合溶媒（９９／１，ｖ／ｖ）にて溶出することにより、無色泡状物質２６１ｍｇを得た。得られた泡状物質をメタノール１２ｍｌ及び蒸留水６ｍｌに溶解し、室温にて炭酸カリウム１９６ｍｇ加える。反応液を８０℃にて終夜撹拌した後、減圧留去する。残渣に１Ｍ塩酸を２．８ｍｌ加え、クロロホルムにて抽出する。有機層を無水硫酸マグネシウムにて乾燥し、溶媒を減圧下に留去後、残渣を酢酸エチル及びｎ−ヘキサンの混合溶媒で再結晶することにより、標記化合物１９４ｍｇを無色結晶として得た。
実施例１７，１８，１９或いは実施例２０と同様の方法により、下記Ｔａｂｌｅ  ６に示す化合物を合成した。
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2003101983.tif 000027
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実施例６９：（Ｓ）−（−）−Ｎ−ベンジル−２−（４−｛［２，４−ジメチル−３−（３−ヒドロキシプロピル）−９Ｈ−ピリド［２，３−ｂ］インドール−９−イル］メチル｝フェニル）−２−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イル）アセタミド
実施例１９で合成した（−）−３−（９−｛４−［（Ｓ）−（ベンジルカルバモイル）（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イル）メチル］ベンジル｝−２，４−ジメチル−９Ｈ−ピリド［２，３−ｂ］インドール−３−イル）プロパン酸２９５ｍｇをテトラヒドロフラン１０ｍｌに溶解し、アルゴン気流下、０℃にてボラン−テトラヒドロフラン錯体の１．０Ｍテトラヒドロフラン溶液３．０ｍｌを加えた。室温にて３．５時間攪拌した後、水１５ｍｌ、炭酸カリウム６．０ｇを加え室温にて１時間攪拌した。反応液を酢酸エチルにて抽出し、有機層を飽和食塩水で洗浄後、無水硫酸マグネシウムにて乾燥する。溶媒を減圧下に留去後、残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィーに付し、クロロホルム／メタノール（５０／１、ｖ／ｖ）にて溶出することにより、標記化合物２９６ｍｇを無色固体として得た。これをエタノールから結晶化することにより、標記化合物２１７ｍｇを結晶として得た。
ＦＡＢ−ＭＳ  ｍ／ｚ：５７６（Ｍ＋＋１），［α］２５．０，Ｄ＝−７２．０（ｃ＝１．００，ＤＭＦ）
実施例７０（±）−Ｎ−ベンジル−２−（４−｛［３−（２−シアノエチル）−２，４−ジメチル−９Ｈ−ピリド［２，３−ｂ］インドール−９−イル］メチル｝フェニル）−２−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イル）アセタミド
参考例８５で合成した（±）−Ｎ−ベンジル−［２−（４−｛［３−（２−シアノエチル）−２，４−ジメチル−９Ｈ−ピリド［２，３−ｂ］インドール−９−イル］メチル｝フェニル）−２−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イル）エタノイル］カルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステル１．１ｇを１，２−ジクロロエタン１０ｍｌに溶解し、室温にてトリフルオロ酢酸５ｍｌを加え、３時間撹拌する。反応液を減圧留去したのち、残渣に酢酸エチル及び炭酸水素ナトリウム水溶液を加え、酢酸エチルにて抽出する。有機層を蒸留水及び飽和食塩水にて洗浄後、無水硫酸マグネシウムにて乾燥し、溶媒を減圧下にて留去する。残渣を酢酸エチルにて再結晶することにより、標記化合物７２８ｍｇを無色結晶として得た。
ＦＡＢ−ＭＳ  ｍ／ｚ：５７１（Ｍ＋＋１）
実施例７１：（±）−（９−｛４−［ベンジルカルバモイル−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イル）メチル］ベンジル｝−２，４−ジメチル−９Ｈ−ピリド［２，３−ｂ］インドール−３−イル）酢酸ナトリウム
参考例８３で合成した（±）−（９−｛４−［２−（ベンジル−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ）−２−オキソ−１−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イル）エチル］ベンジル｝−２，４−ジメチル−９Ｈ−ピリド［２，３−ｂ］インドール−３−イル）酢酸メチル５００ｍｇを酢酸エチル５ｍｌに溶解し、室温にて塩化水素の４Ｍ酢酸エチル溶液５ｍｌを加え、２時間撹拌する。反応液を減圧留去したのち、残渣をメタノール５ｍｌに溶解し、室温にて１Ｍ水酸化ナトリウム水溶液３．６ｍｌ加え、室温にて終夜撹拌する。反応液を減圧留去したのち、残渣に酢酸エチル及びクエン酸水溶液を加え、生じた無色固体をろ取する。ろ液を酢酸エチルにて抽出し、有機層を蒸留水及び飽和食塩水にて洗浄後、無水硫酸マグネシウムにて乾燥し、溶媒を減圧下にて留去する。残渣に先にろ取した無色固体を混合し、酢酸エチルにて洗浄することにより、無色固体２４０ｍｇを得た。得られた無色固体２４０ｍｇをエタノール５ｍｌに溶解し、室温にて１Ｍ水酸化ナトリウム水溶液０．４１ｍｌを加え、生じた固体をろ取乾燥することにより、標記化合物１８５ｍｇを無色固体として得た。
ＦＡＢ−ＭＳ  ｍ／ｚ：５９８（Ｍ＋＋１）
実施例７１と同様の方法により、下記実施例７２に示す化合物を合成した。
実施例７２：（±）−（９−｛４−［ベンジルカルバモイル−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イル）メチル］ベンジル｝−２，４−ジメチル−９Ｈ−ピリド［２，３−ｂ］インドール−３−イル）ブタン酸ナトリウム
ＦＡＢ−ＭＳ  ｍ／ｚ：６２６（Ｍ＋＋１）
実施例７３：（±）−Ｎ−ベンジル−２−［４−（｛２，４−ジメチル−３−［２−（１Ｈ−テトラゾール−５−イル）エチル］−９Ｈ−ピリド［２，３−ｂ］インドール−９−イル｝メチル）フェニル］−２−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イル）アセタミド
アジド化トリブチル錫１．４５ｇをトルエン５ｍｌに溶解し、室温にて実施例７０で合成した（±）−Ｎ−ベンジル−２−（４−｛［３−（２−シアノエチル）−２，４−ジメチル−９Ｈ−ピリド［２，３−ｂ］インドール−９−イル］メチル｝フェニル）−２−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イル）アセタミド５００ｍｇを加え、加熱還流下終夜撹拌する。反応液に１Ｍ塩酸１０ｍｌ及び酢酸エチル２０ｍｌを加える。飽和炭酸水素ナトリウム水溶液及びクエン酸水を加え、生じた固体をろ取する。ろ液を酢酸エチルにて抽出した後、有機層を飽和食塩水にて洗浄後、無水硫酸マグネシウムにて乾燥し、溶媒を減圧下に留去する。残渣に先にろ取した固体を混ぜ、熱ヘキサンにて洗浄する。得られた無色固体をエタノールで再結晶することにより、標記化合物２７２ｍｇを無色結晶として得た。
ＦＡＢ−ＭＳ  ｍ／ｚ：６１４（Ｍ＋＋１）
下記Ｔａｂｌｅ  ７、８に示す化合物は、前述の参考例及び実施例化合物と同様の方法を用いて、或いは必要に応じて更に当業者が通常用いる操作を用いて合成した。
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上述の実施例化合物のうち、特に記載の無いものはフリー体として合成した。尚、下記に実施例番号を示す化合物は、ＨＣｌ或いはフマル酸の塩として合成した。
（ＨＣｌ塩）：実施例３，４，７，８，１０，２２，２７，３２，３５，７５，８４，８８，８９，９０，９１，９２，９３，９４，９５，９６，９７，１０１，１０２，１０３，１０７，１０８，１０９，１１０，１１１，１１３，１１９，１２０，１２３，１２４，１３２，１３３，１３４，１３６，１３７，１３８，１８５
（フマル酸）：実施例９９
これらの実施例と同様の製造法又は通常の合成法を用いることにより、以下の化合物も合成できる。
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（試験法）
本発明化合物のアポＢ関連リポプロテイン分泌阻害作用及びラットにおける血中のコレステロール、トリグリセリド低下作用は以下の試験法により確認した。
１．肝細胞中のアポＢ関連リポプロテイン分泌の測定
Ｈｅｐ  Ｇ２細胞を１０％牛胎児血清含有ダルベッコ変法イーグル培地（以後「１０％ＦＢＳ含有ＤＭＥＭ培地」と呼ぶ）を用いて９６穴プレートにて培養した。培地を試験物質のＤＭＳＯ溶液（ＤＭＳＯ最終濃度０．１％）を含む１０％ＦＢＳ含有ＤＭＥＭ培地に交換し１８時間培養し、培養上清を得た。ＤＭＳＯ（最終濃度０．１％）のみ含む１０％ＦＢＳ含有ＤＭＥＭ培地から得られた培養上清をコントロールとした。培養上清中に生成したアポＢ関連リポプロテインを以下に示すエンザイムイムノアッセイ法により定量した。
抗ヒトアポリポプロテインＢモノクローナル抗体液（４μｇ／ｍｌ）を９６穴イムノプレートに１００μｌ分注し、４℃で１８時間静置した。０．１％Ｔｗｅｅｎ２０を添加したリン酸緩衝液（以後「ＰＢＳ−Ｔと呼ぶ）で３回洗浄後、４倍希釈した免疫ブロック剤「Ｂｌｏｃｋ  Ａｃｅ」を３００μｌ添加、３７℃で１時間静置した。前述の培養上清を添加、３７℃で３時間静置した。ＰＢＳ−Ｔで３回洗浄後、ヤギ抗アポリポプロテインＢポリクローナル抗体液（２０００倍希釈）を１００μｌ添加、３７℃で１時間静置した。ＰＢＳ−Ｔで３回洗浄後、アルカリフォスファターゼ標識抗ヤギＩｇＧ抗体液（２０００倍希釈）を１００μｌ添加、３７℃で１時間静置した。ＰＢＳ−Ｔで４回、ＰＢＳで１回、炭酸緩衝液（ｐＨ９．５）で洗浄後、アルカリフォスファターゼ基質液を１００μｌ添加、室温で５分間静置した。０．２Ｍ水酸化ナトリウムを５０μｌ添加し反応を止め、４０５ｎｍの吸光度を測定した。ヒト低密度リポプロテインを標準品とした検量線よりアポＢ関連リポプロテインの絶対量を求めた。
結果を以下の表（Ｔａｂｌｅ  １０）に示す。
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本発明化合物はアポＢ関連リポプロテインの分泌を抑制することが示された。
２．ラットにおける血中のコレステロール、トリグリセライドの測定
Ｉｎ  ｖｉｖｏにおけるＶＬＤＬ分泌に関する試験物質の影響をラットで検討した。雄性ＳＤラットに試験物質を含有する０．５％メチルセルロース懸濁液を経口投与した。１時間後Ｔｒｉｔｏｎ  ＷＲ−１３３９生理食塩水溶液（４００ｍｇ／ｋｇ相当）を尾静脈より投与した。４時間後、ジエチルエーテル麻酔下において採血を行った。血清中の総コレステロール、トリグリセライドの測定はそれぞれ「コレステロールＣテストワコー」及び「トリグリセライドＧテストワコー」（和光純薬）を用いて行った。０．５％メチルセルロース液を経口投与し生理食塩水を静脈内投与したラットをノーマル群、０．５％メチルセルロース液を経口投与しＴｒｉｔｏｎ  ＷＲ−１３３９生理食塩水溶液を静脈内投与したラットをコントロール群とした。コントロール群とノーマル群の血清中の総コレステロール（ＴＣ）、トリグリセライド（ＴＧ）の差を時間当たりの分泌量とし、試験物質投与による分泌量の低下をＥＤ５０値で表した。
結果を表（Ｔａｂｌｅ  １１）に示す。
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本発明化合物は、同薬効のＩｍｐｌｉｔａｐｉｄｅと同等以上の優れたコレステロール、トリグリセライド低下作用を示した。
３．高コレステロール食負荷ラットに対する薬理試験法
Ｉｎ  ｖｉｖｏにおける血漿中脂質に関する試験物質の影響を高コレステロール食負荷ラットで検討した。高コレステロール食（１．５％コレステロール，１０％ココナッツ油，０．５％コール酸）を負荷した雄性ＳＤラットに試験物質を含有する０．５％メチルセルロース懸濁液を１日１回７日間強制経口投与した。最終投与後絶食し、６時間後にジエチルエーテル麻酔下において採血を行った。血漿中の総コレステロール、ＨＤＬコレステロール、トリグリセライドの測定を日立自動分析装置７２５０を用いて行った。総コレステロールからＨＤＬコレステロールを減算することによりｎｏｎ−ＨＤＬコレステロールを算出した。試験物質投与による、コントロール群に対するｎｏｎ−ＨＤＬコレステロールの低下をＥＤ５０値で表した。
結果を以下の表（Ｔａｂｌｅ  １２）に示す。
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本発明化合物は、食餌性の高コレステロール血症に対し、Ｉｍｐｌｉｔａｐｉｄｅと同等〜３０倍以上優れたコレステロール低下作用を有し、コレステロール低下剤として有用であることが確認された。
４．ＫＫ−Ａｙマウスに対する薬理試験法
Ｉｎ  ｖｉｖｏにおける血漿中脂質に関する試験物質の影響をＫＫ−Ａｙマウスで検討した。雄性ＫＫ−Ａｙマウスに試験物質を含有する０．５％メチルセルロース懸濁液を１日１回７日間強制経口投与した。最終投与後絶食し、６時間後にジエチルエーテル麻酔下において採血を行った。血漿中の総コレステロール、ＨＤＬコレステロール、トリグリセライドの測定を日立自動分析装置７２５０を用いて行った。総コレステロールからＨＤＬコレステロールを減算することによりｎｏｎ−ＨＤＬコレステロールを算出した。試験物質投与による、コントロール群に対する血漿中脂質の低下を低下率で表した。
結果を、以下の表（Ｔａｂｌｅ  １３）に示す。
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本発明化合物は、コレステロール、及びトリグリセライドの両方が高値となる病態モデルにおいても、Ｉｍｐｌｉｔａｐｉｄｅに対し優れたコレステロール、トリグリセライド低下作用を示し、高脂血症の治療薬として有用であることが確認された。
産業上の利用可能性
本発明によれば、アポＢ関連リポプロテイン分泌阻害作用を示す本発明化合物は優れた血中のコレステロール、トリグリセライド低下作用を有し、単独投与、或いは他の脂質低下剤との組み合わせにより、高脂血症、動脈硬化、肥満、膵炎の治療剤として有用である。
【国際調査報告】
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