(57)【要約】      （修正有）【課題】少なくとも１つのＴｒｋタンパク質に関連する疼痛の治療または予防に使用される化合物の提供。【解決手段】式（Ｉ）の化合物。2019031542.tif 000153（Ｙ１、Ｙ４：ＣＨ、Ｎ。Ｙ２：Ｃ−Ｘ−Ａｒ。Ｙ３：Ｃ−Ｗ。Ａｒ：置換／非置換アリールまたはヘテロアリール。Ｘ：Ｏ、Ｓなど。Ｗ：Ｈ、ＳＨ、ＯＨなど。Ｕ：ＣＨ２、ＮＨなど。Ｖ：Ｃ（Ｏ）、Ｃ（Ｓ）など。ｎ：０または１。Ｒ１：Ｈなど。Ｒ２：Ｈなど）【選択図】なし【特許請求の範囲】
【請求項１】
疼痛の治療または予防において使用するための、下記一般式（Ｉ）の化合物、その薬学上許容可能な塩もしくは溶媒和物、その互変異性体、またはその立体異性体もしくは任意の比率の立体異性体の混合物、例えば、鏡像異性体の混合物、特に、ラセミ混合物：
【化１】
2019031542.tif 000141
［式中、
Ｙ１およびＹ４はそれぞれ互いに独立してＣＨ基または窒素原子を表し、ただし、Ｙ１およびＹ４の少なくとも一方は窒素原子を表し、
Ｙ２は、Ｃ−Ｘ−Ａｒ基を表し、
Ｙ３は、Ｃ−Ｗ基を表し、
Ａｒは、ハロゲン原子、（Ｃ１−Ｃ６）アルキル、（Ｃ１−Ｃ６）ハロアルキル、（Ｃ１−Ｃ６）ハロアルコキシ、（Ｃ１−Ｃ６）ハロチオアルコキシ、ＣＮ、ＮＯ２、ＯＲ１１、ＳＲ１２、ＮＲ１３Ｒ１４、ＣＯ２Ｒ１５、ＣＯＮＲ１６Ｒ１７、ＳＯ２Ｒ１８、ＳＯ２ＮＲ１９Ｒ２０、ＣＯＲ２１、ＮＲ２２ＣＯＲ２３、ＮＲ２４ＳＯ２Ｒ２５、およびＲ２６ＮＲ２７Ｒ２８から選択される１以上の基で置換されていてもよく、および／または複素環と縮合していてもよいアリールまたはヘテロアリール基を表し、
Ｘは、Ｏ、Ｓ、Ｓ（Ｏ）、Ｓ（Ｏ）２、ＮＲ４、Ｓ（ＮＲ４）、Ｓ（Ｏ）（ＮＲ４）、Ｓ（Ｏ）２（ＮＲ４）、ＮＲ４Ｓ、ＮＲ４Ｓ（Ｏ）、ＮＲ４Ｓ（Ｏ）２、ＣＨ２、ＣＨ２Ｓ、ＣＨ２Ｓ（Ｏ）、ＣＨ２Ｓ（Ｏ）２、ＳＣＨ２、Ｓ（Ｏ）ＣＨ２、Ｓ（Ｏ）２ＣＨ２、ＣＨ２ＣＨ２、ＣＨ＝ＣＨ、Ｃ≡Ｃ、ＣＨ２Ｏ、ＯＣＨ２、ＮＲ４ＣＨ２、およびＣＨ２ＮＲ４から選択される二価の基を表し、
Ｗは、Ｒ５、ＳＲ５、ＯＲ５またはＮＲ５Ｒ６基を表し、
Ｕは、ＣＨ２またはＮＨ基を表し、１以上の水素原子は（Ｃ１−Ｃ６）アルキル基で置換されていてもよく、
Ｖは、Ｃ（Ｏ）、Ｃ（Ｓ）またはＣＨ２を表し、
ｎは、０または１を表し、
Ｒ１は、水素原子、またはＯＲ７もしくはＮＲ７Ｒ８基を表し、
Ｒ２は、水素原子、置換されていてもよい複素環、ＮＯ２、ＯＲ９またはＮＲ９Ｒ１０を表し、
Ｒ３、Ｒ４、Ｒ１１〜Ｒ２５およびＲ２７〜Ｒ２８はそれぞれ互いに独立して、水素原子または（Ｃ１−Ｃ６）アルキル基を表し、
Ｒ５およびＲ６はそれぞれ互いに独立して、水素原子または（Ｃ１−Ｃ６）アルキル、置換されていてもよいアリールまたは置換されていてもよいベンジル基を表し、
Ｒ７、Ｒ８、Ｒ９およびＲ１０はそれぞれ互いに独立して、水素原子または置換されていてもよい（Ｃ１−Ｃ６）アルキルまたは（Ｃ３−Ｃ１２）シクロアルキル基または置換されていてもよい複素環を表し、かつ、
Ｒ２６は、（Ｃ１−Ｃ６）アルキル基を表す］。
【請求項２】
疼痛が侵害受容性疼痛、炎症性疼痛、神経因性疼痛、特発性疼痛または心因性疼痛、好ましくは、炎症性疼痛または神経因性疼痛である、請求項１に記載の使用のための化合物。
【請求項３】
疼痛が癌、神経損傷またはリウマチ性疾患によるものである、請求項１または２に記載の化合物。
【請求項４】
Ｙ１＝ＣＨまたはＮであり、かつＹ４＝Ｎである、請求項１〜３のいずれか一項に記載の使用のための化合物。
【請求項５】
Ｙ１がＣＨ基を表し、かつＹ４が窒素原子を表す、請求項１〜４のいずれか一項に記載の使用のための化合物。
【請求項６】
Ｘが、Ｓ、Ｓ（Ｏ）、Ｓ（Ｏ）２、ＮＲ４、ＣＨ２、ＣＨ２Ｓ、ＣＨ２Ｓ（Ｏ）、ＣＨ２Ｓ（Ｏ）２、ＣＨ２Ｏ、ＣＨ２ＮＲ４、ＮＨＳ（Ｏ）２、ＳＣＨ２、Ｓ（Ｏ）ＣＨ２、Ｓ（Ｏ）２ＣＨ２、Ｓ（Ｏ）２ＮＨ、ＯＣＨ２、ＮＲ４ＣＨ２、ＣＨ２ＣＨ２、ＣＨ＝ＣＨ、およびＣ≡Ｃから、特に、Ｓ、Ｓ（Ｏ）、Ｓ（Ｏ）２、ＮＲ４、ＣＨ２、ＳＣＨ２、Ｓ（Ｏ）ＣＨ２、Ｓ（Ｏ）２ＣＨ２、Ｓ（Ｏ）２ＮＨ、ＣＨ２ＣＨ２、Ｃ≡Ｃ、ＯＣＨ２、およびＮＲ４ＣＨ２から、特に、Ｓ、Ｓ（Ｏ）２、ＣＨ２、ＳＣＨ２、Ｓ（Ｏ）２ＣＨ２、Ｓ（Ｏ）２ＮＨ、ＣＨ２ＣＨ２、およびＣ≡Ｃから選択される二価の基を表し、これらの基の第一原子が、鎖Ｃ−Ｘ−Ａｒの原子Ｃと結合している、請求項１〜５のいずれか一項に記載の使用のための化合物。
【請求項７】
Ａｒが、ハロゲン原子、（Ｃ１−Ｃ６）アルキル、（Ｃ１−Ｃ６）ハロアルキル、（Ｃ１−Ｃ６）ハロアルコキシ、（Ｃ１−Ｃ６）ハロチオアルコキシ、ＣＮ、ＮＯ２、ＯＲ１１、ＳＲ１２、ＮＲ１３Ｒ１４、ＣＯ２Ｒ１５、およびＣＯＮＲ１６Ｒ１７、ＳＯ２Ｒ１８、ＳＯ２ＮＲ１９Ｒ２０、ＣＯＲ２１、ＮＲ２２ＣＯＲ２３またはＮＲ２４ＳＯ２Ｒ２５から選択される１以上の基で置換されていてもよい、フェニルなどのアリール基、またはピリジン基を表す、請求項１〜６のいずれか一項に記載の使用のための化合物。
【請求項８】
Ａｒが以下の基：
【化２】
2019031542.tif 000142
をから選択される基を表す、請求項７に記載の使用のための化合物。
【請求項９】
ＷがＲ５、ＳＲ５、ＯＲ５またはＮＲ５Ｒ６基を表し、ここで、Ｒ５およびＲ６は互いに独立して、水素原子または（Ｃ１−Ｃ６）アルキル基を表す、請求項１〜８のいずれか一項に記載の使用のための化合物。
【請求項１０】
Ｒ３＝Ｈであり、
Ｕ＝ＣＨ２またはＮＨであり、
Ｖ＝Ｃ（Ｏ）またはＣ（Ｓ）、特にＣ（Ｏ）であり、および
ｎ＝０または１、特に０である、請求項１〜９のいずれか一項に記載の使用のための化合物。
【請求項１１】
Ｒ１は水素原子またはＮＲ７Ｒ８基を表し、ここで、Ｒ７は水素原子を表し、かつ、Ｒ８は置換されていてもよい（Ｃ３−Ｃ１２）シクロアルキル基または置換されていてもよい複素環を表す、請求項１〜１０のいずれか一項に記載の使用のための化合物。
【請求項１２】
Ｒ１が以下の基：
【化３】
2019031542.tif 000143
のうちの１つを表す、請求項１１に記載の使用のための化合物。
【請求項１３】
Ｒ２がＮＯ２、ＮＲ９Ｒ１０、または（Ｃ１−Ｃ６）アルキルもしくはＮＨ２で置換されていてもよい複素環を表す、請求項１〜１２のいずれか一項に記載の使用のための化合物。
【請求項１４】
Ｒ２が以下の基：
【化４】
2019031542.tif 000144
のうちの１つを表す、請求項１３に記載の使用のための化合物。
【請求項１５】
下記の化合物：
【表１】
2019031542.tif 000145
2019031542.tif 000146
2019031542.tif 000147
2019031542.tif 000148
2019031542.tif 000149
2019031542.tif 000150
2019031542.tif 000151
2019031542.tif 000152
から選択される、請求項１〜１４のいずれか一項に記載の使用のための化合物。
【請求項１６】
疼痛の治療または予防として使用するための、少なくとも１つの薬学上許容可能な賦形剤と、有効成分としての請求項１〜１５のいずれか一項に記載の化合物とを含有する、医薬組成物。
【発明の詳細な説明】
【背景技術】
【０００１】
本発明は、疼痛、特に、少なくとも１つのＴｒｋタンパク質に関連する疼痛の治療または予防において使用するためのアザインダゾールおよびジアザインダゾール縮合二環式誘導体に関する。
【０００２】
疼痛は、生物によって受け取られ、脳によって知覚される異常な感覚および有痛性を表すために使用される用語である。疼痛は、組織損傷に関連する、またはそのような損傷に関する存在または潜在を表す不快な感覚的および感情的体験である。疼痛は急性または慢性である場合があり、種々の病状に伴う。
【０００３】
疼痛の起源におけるいくつかの機構が記載されている：
・侵害受容性疼痛：これは身体に対する侵害に応答した警報であり、例えば、火傷、外傷、挫傷、帯状疱疹、手術または抜歯によって起こる疼痛である。このメッセージは脳に送られ、その人にその攻撃の注意を促す。
・炎症性疼痛は、感染、関節炎またはクローン病に見られるように、急性または慢性炎症に関連する。
・神経因性疼痛：それは神経損傷後の疼痛である。この病変は末梢または中枢神経系の機能不全を起こす。それは脳病変もしくは梗塞後などの中枢起源の神経因性疼痛、または椎間板ヘルニアによる坐骨神経痛などの末梢神経因性疼痛であり得る。
・特発性疼痛：それは原因が十分に説明されない疼痛症候群である。検査は正常であるが、疼痛が存在する。このような疼痛は、例えば、線維筋痛症または過敏性腸症候群など機能性症候群を呈する患者に存在する。
・心因性疼痛：それは心因起源（死別、鬱病、心的外傷など）の疼痛である。それは特に鬱病に見られる慢性疼痛である。
【０００４】
疼痛は、例えば癌におけるように、侵害受容性疼痛と炎症性疼痛との混合起源の場合がある。
【０００５】
鎮痛薬またはペインキラーは、疼痛を緩和するために使用される薬剤である。世界保健機構（ＷＨＯ）によって３つのレベルに分類されている：
・レベル１は、非オピオイド鎮痛薬（パラセタモール、抗炎症薬）からなる。それらは軽度から中等度の疼痛に使用される。
・レベル２は、弱オピオイド（例えば、コデイン）を含む。それらは中等度から重度の疼痛に、またはレベル１ペインキラーが疼痛緩和に効果がない場合に使用される。
・レベル３は、強オピオイド（例えば、モルヒネ）からなる。これらの薬剤は、急性疼痛に、またはレベル２鎮痛薬が疼痛緩和に効果がない場合に使用される。
【０００６】
神経因性疼痛のための神経抑制薬もしくは抗鬱薬、または片頭痛のためのトリプタンなど、ある種の疼痛を処置するために他の種の薬剤も使用される。
【０００７】
ＷＨＯ鎮痛薬のレベル、疼痛のタイプまたは起源によらず、現行治療の限定された有効性または副作用を考えれば、疼痛の新たな治療を見出す必要は避けがたい。例えば、とりわけパラセタモール、アスピリン、非ステロイド系抗炎症薬（ＮＳＡＩＤ）およびシクロオキシゲナーゼ阻害剤を含むＷＨＯによるレベルＩ鎮痛薬は、一般に、強い疼痛に対しては効果がないが、胃への悪影響が起こり得るものの忍容性は良好である。しかしながら、ロフェコキシブ（Ｖｉｏｘｘ（商標））としての２型シクロオキシゲナーゼの選択的阻害剤は、重大な心血管リスクを示した。モルヒネおよび誘導体などのオピエートは、ある種の急性疼痛または重篤な慢性疼痛に効果的であるが、処置の初期には傾眠、眠気、悪心および嘔吐、その後に便秘、または過量で呼吸抑制を引き起こし得る。オピオイドの反復使用または慢性的使用は、鎮痛作用に対する耐性（より高用量、毒性に近い用量を必要とする）、依存性および処置の中断に対する離脱症候群をもたらすことがある。オピエートおよび誘導体は、低〜中強度の神経因性疼痛および慢性疼痛にはあまり効果がない。
【０００８】
タンパク質キナーゼは、細胞のシグナル伝達に重要な役割を果たす酵素である。タンパク質キナーゼは、例えば、細胞増殖、有糸分裂、分化、細胞浸潤および移動、ならびにアポトーシスなどの生理学的プロセスに関与する。
【０００９】
タンパク質キナーゼによって制御される生理機構の脱調節は、特に癌および疼痛を含む多くの病状の表出および発症の中枢である。
【００１０】
本発明に関して特に注目されるのは、トロポミオシン関連キナーゼ（Ｔｒｋ）のチロシン受容体キナーゼが急性または慢性疼痛に関連付けられていることである。Ｔｒｋは、神経系の発達に関与する受容体チロシンキナーゼである。Ｔｒｋ受容体ファミリーは、ニューロトロフィンと呼ばれる特異的リガンドにより活性化される３つのメンバーＴｒｋＡ、ＴｒｋＢおよびＴｒｋＣから構成される。Ｔｒｋタンパク質およびそれらの関連リガンドは、疼痛の発生に役割を果たすことが記載されている(Sah et al. 2003 Nat Rev Drug Discovery. 2:460-472)。
【００１１】
例えば、ＴｒｋＡ受容体遺伝子における突然変異が、先天性疼痛不感症の患者において記載されている(Indo et al., 1996, Nat Genet. 13: 485-488; Indo et al., 2001, Hum Mutations, 18: 308-318)。ＴｒｋＡは、疼痛メッセージを伝え、疼痛メッセージの伝達に関与するナトリウムチャネルの電気生理学的特性に影響を及ぼすニューロンである侵害受容ニューロンで発現される(Fang et al., J. Neurosci. 25: 4868-4878)。いくつかの総説文献が、特に、炎症性疼痛状態、例えば、変形性関節症などのリウマチ性疾患、腰痛、腰椎椎間板ヘルニアおよび神経根圧迫における、侵害受容ニューロンのレベルでの疼痛の誘発におけるＴｒｋＡとそのリガンドである神経成長因子（ＮＧＦ）の役割を強調している(Hefti et al., 2006; Trends Pharmacol Sci. 27:85-91; Pezet and McMahon, 2006, Ann Rev Neurosci. 29:507-538; Cheng and Ji, 2008, Neurochem Res. 33:1970-1978; Seidel et al. 2010, Semin Arthritis Rheum. 40:109-126)。
【００１２】
ＴｒｋＢとそのリガンドである脳由来神経栄養因子（ＢＤＮＦ）もまた、慢性疼痛に関連付けられている。ＢＤＮＦは、一次感覚ニューロンで合成され、脊髄の一次求心性線維の中枢末端に順行的に送られる(Obata et al., 2006, Neurosci Res. 55: 1-10)。脊髄の小膠細胞によって合成されたＢＤＮＦは、ニューロンの陰イオン勾配をシフトさせ、神経損傷後の疼痛伝達の脱抑制をもたらす(Coull et al., 2005, Nature, 438: 1017-1021)。この結果は、ＢＤＮＦ／ＴｒｋＢ経路の遮断が神経因性疼痛を治療するために有用であることを示す。脊髄上位のＢＤＮＦは疼痛増強にも役割を果たす(Guo et al., 2006, J Neurosci. 26: 126-137)。また、ＢＤＮＦ血清濃度が上昇することも線維筋痛症で報告されている(Laske et al., 2006, J Psychiatric Res, 41: 600-605)。疼痛調節におけるＢＤＮＦ／ＴｒｋＢシグナル伝達の役割は総説されている(Merighi et al., 2008 85: 297-317)。
【００１３】
ＴｒｋＡまたはＴｒｋＢ経路の遮断は、可溶性Ｔｒｋ受容体または中和抗体によって達成することができる。このような戦略は動物におけるＮＧＦ／ＴｒｋＡ経路に関して検証されており、それは骨癌に関連する疼痛(Sevcik et al., 2005, Pain 115: 128-141)または非炎症性関節痛を軽減した(McNamee et al., 2010 Pain 149:386-392)。ＮＧＦに対する組換えヒト化モノクローナル抗体であるタネズマブは、いくつかの病態に関連する急性および慢性疼痛に対するヒトへの処置として現在試験中である(Cattaneo, 2010, Curr Opin Mol Ther 12: 94-106)。しかしながら、このような療法は反復的静注によって投与しなければならない。経口バイオアベイラビリティを有する小Ｔｒｋ阻害剤分子などの他の形態の処置が極めて望ましい。
【００１４】
文献で報告されているＴｒｋ阻害剤の数は限定され、Ｔｒｋ阻害剤は実験的前臨床モデル、特に、骨癌性疼痛 (Ghilardi et al. 2010, Mol Pain 6: 87)および慢性炎症性疼痛(Winckler et al. 2009, 8th International Association for the Study of Pain Research Symposium, Poster # 348)のモデルで鎮痛有効性をすでに示しているものの、疼痛に対する薬剤として使用されるものはまだ無い。
【００１５】
従って、Ｔｒｋを阻害することができる化合物の必要がある。
【００１６】
Wang et al. (Expert Opin. Ther. Patents 2009, 19(3), 305-319)の文献は、Ｔｒｋ阻害剤ならびに癌および疼痛の治療におけるそれらの使用に関する２００２以来の特許出願についての総説である。記載されている化合物に、アザインダゾールまたはジアザインダゾール化合物に相当するものは無い。
【００１７】
ＷＯ２００８／１１２６９５は、Ｔｒｋなどのタンパク質キナーゼの阻害剤として、６位で置換されている５−アザインダゾールまたは５，７−ジアザインダゾール型化合物を記載している。しかしながら、この出願には、任意のタンパク質キナーゼ、特に、タンパク質キナーゼＴｒｋの阻害を提供する生物学的結果は存在しない。さらに、この出願には、化合物が疼痛を治療または予防し得るということも明示されていない。
【００１８】
ＷＯ２００４／１１３３０３は、タンパク質キナーゼＪＮＫの阻害剤としての、６位で置換された５−アザインダゾール型化合物を特に記載している。そのような化合物がタンパク質キナーゼＴｒｋも阻害し得ることは述べられていない。
【００１９】
ＷＯ２００７／０２３１１０は、タンパク質キナーゼｐ３８の阻害剤としての、アザインダゾールまたはジアザインダゾール型化合物を特に記載している。そのような化合物がタンパク質キナーゼＴｒｋも阻害し得ることは述べられていない。
【００２０】
ＷＯ２００８／０８９３０７は、Δ５−デサチュラーゼ活性の阻害剤としての、アザインダゾールまたはジアザインダゾール型化合物を記載している。そのような化合物がタンパク質キナーゼＴｒｋも阻害し得ることは述べられていない。
【発明の概要】
【００２１】
本発明の化合物は、Ｔｒｋタンパク質の酵素活性を阻害または変調する特性を有する。結果として、当該化合物は、疼痛、特に、少なくとも１つのＴｒｋタンパク質に関連する疼痛の治療（処置）または予防における薬剤として使用することができる。
【００２２】
さらに、本発明による化合物は、発明者らが、それらが２以上のＴｒｋタンパク質の活性を阻害または変調することを示すことができたという点で特に興味深い。従って、本化合物は、複数の起源の疼痛（例えば、癌の場合に見られるような炎症関連疼痛と侵害受容性疼痛）を同時に治療（処置）することを可能とする。
【００２３】
以下の例および図面は、その範囲を何ら限定することなく本発明を説明する。
【図面の簡単な説明】
【００２４】
【図１】図１Ａは、腹腔内経路により様々な用量でマウスに投与された化合物３０のＮＧＦにより誘導される痛覚過敏に対する阻害効果（待ち時間）のヒストグラムを表す。図１Ｂは、経口経路により様々な用量でマウスに投与された化合物３０のＮＧＦにより誘導される痛覚過敏に対する阻害効果（待ち時間）のヒストグラムを表す。
【図２】図２Ａは、様々な用量で化合物３０の腹腔内経路によりラットに投与した後の、自発的フリンチの回数に対するグラフを表す。図２Ｂは、様々な用量での化合物３０のラットへの経口投与後の、機械的アロディニアの測定値に対するグラフを表す。
【図３】図３Ａは、２．５ｍｇ／ｋｇ用量での生理食塩水または化合物３０の投与後の時間の関数として肢使用スコアのヒストグラムを表す。図３Ｂは、２．５ｍｇ／ｋｇ用量での生理食塩水または化合物３０の投与後の時間の関数としての軽接触誘発性フリンチング(light touch-evoked flinching)のヒストグラムを表す。
【発明の具体的説明】
【００２５】
よって、より詳しくは、本発明は、疼痛、特に、少なくともＴｒｋタンパク質に関連する疼痛の治療または予防において使用するための、下記一般式（Ｉ）の化合物、その薬学上許容可能な塩もしくは溶媒和物、その互変異性体、その立体異性体もしくは任意の比率の立体異性体の混合物、例えば、鏡像異性体の混合物、特に、ラセミ混合物を目的とし、
【化１】
2019031542.tif 000002
式中、
Ｙ１およびＹ４はそれぞれ互いに独立して、ＣＨ基または窒素原子を表し、
Ｙ２は、窒素原子またはＣＨもしくはＣ−Ｘ−Ａｒ基を表し、
Ｙ３は、窒素原子またはＣ−Ｘ−ＡｒもしくはＣ−Ｗ基を表し、
ただし、
・Ｙ１、Ｙ２、Ｙ３、およびＹ４基の少なくとも１つ、多くて２つが窒素原子を表し、
・Ｙ２およびＹ４が同時に窒素原子を表すことはできず、
・Ｙ２＝Ｃ−Ｘ−Ａｒのとき、Ｙ３は窒素原子またはＣ-Ｗ基を表し、かつ
・Ｙ２＝ＣＨまたはＮのとき、Ｙ３はＣ−Ｘ−Ａｒ基を表し、
Ａｒは、ハロゲン原子、（Ｃ１−Ｃ６）アルキル、（Ｃ１−Ｃ６）ハロアルキル、（Ｃ１−Ｃ６）ハロアルコキシ、（Ｃ１−Ｃ６）ハロチオアルコキシ、ＣＮ、ＮＯ２、ＯＲ１１、ＳＲ１２、ＮＲ１３Ｒ１４、ＣＯ２Ｒ１５、ＣＯＮＲ１６Ｒ１７、ＳＯ２Ｒ１８、ＳＯ２ＮＲ１９Ｒ２０、ＣＯＲ２１、ＮＲ２２ＣＯＲ２３、ＮＲ２４ＳＯ２Ｒ２５、およびＲ２６ＮＲ２７Ｒ２８から選択される１以上の基で置換されていてもよく、および／または複素環と縮合していてもよいアリールまたはヘテロアリール基を表し、
Ｘは、Ｏ、Ｓ、Ｓ（Ｏ）、Ｓ（Ｏ）２、ＮＲ４、Ｓ（ＮＲ４）、Ｓ（Ｏ）（ＮＲ４）、Ｓ（Ｏ）２（ＮＲ４）、ＮＲ４Ｓ、ＮＲ４Ｓ（Ｏ）、ＮＲ４Ｓ（Ｏ）２、ＣＨ２、ＣＨ２Ｓ、ＣＨ２Ｓ（Ｏ）、ＣＨ２Ｓ（Ｏ）２、ＳＣＨ２、Ｓ（Ｏ）ＣＨ２、Ｓ（Ｏ）２ＣＨ２、ＣＨ２ＣＨ２、ＣＨ＝ＣＨ、Ｃ≡Ｃ、ＣＨ２Ｏ、ＯＣＨ２、ＮＲ４ＣＨ２、およびＣＨ２ＮＲ４から選択される二価の基を表し、
Ｗは、Ｒ５、ＳＲ５、ＯＲ５またはＮＲ５Ｒ６基を表し、
Ｕは、ＣＨ２またはＮＨ基を表し、１以上の水素原子は（Ｃ１−Ｃ６）アルキル基で置換されていてもよく、
Ｖは、Ｃ（Ｏ）、Ｃ（Ｓ）またはＣＨ２を表し、
ｎは、０または１を表し、
Ｒ１は、水素原子、またはＯＲ７もしくはＮＲ７Ｒ８基を表し、
Ｒ２は、水素原子、置換されていてもよい複素環、ＮＯ２、ＯＲ９またはＮＲ９Ｒ１０を表し、
Ｒ３、Ｒ４、Ｒ１１〜Ｒ２５およびＲ２７〜Ｒ２８はそれぞれ互いに独立して、水素原子または（Ｃ１−Ｃ６）アルキル基を表し、
Ｒ５およびＲ６はそれぞれ互いに独立して、水素原子または（Ｃ１−Ｃ６）アルキル、置換されていてもよいアリールまたは置換されていてもよいベンジル基を表し、
Ｒ７、Ｒ８、Ｒ９およびＲ１０はそれぞれ互いに独立して、水素原子または置換されていてもよい（Ｃ１−Ｃ６）アルキルまたは（Ｃ３−Ｃ１２）シクロアルキル基または置換されていてもよい複素環を表し、かつ、
Ｒ２６は、（Ｃ１−Ｃ６）アルキルを表す。
【００２６】
前記定義では、置換基または変数のあらゆる組合せが、それらが安定な化合物をもたらす限り、可能である。
【００２７】
さらに、Ｙ２およびＹ３の少なくとも１つ、しかし１つだけ（at least one but only one）がＣ−Ｘ−Ａｒ基を表すことに留意されたい。
【００２８】
好ましい実施態様では、本発明は、疼痛の治療または予防において使用するための、下記一般式（Ｉ）の化合物、その薬学上許容可能な塩もしくは溶媒和物、その互変異性体、またはその立体異性体もしくは任意の比率の立体異性体の混合物、例えば、鏡像異性体の混合物、特に、ラセミ混合物を目的とし、
【化２】
2019031542.tif 000003
式中、
Ｙ１およびＹ４はそれぞれ互いに独立してＣＨ基または窒素原子を表し、ただし、Ｙ１およびＹ４の少なくとも一方は窒素原子を表し、
Ｙ２は、Ｃ−Ｘ−Ａｒ基を表し、
Ｙ３は、Ｃ−Ｗ基を表し、
Ａｒは、ハロゲン原子、（Ｃ１−Ｃ６）アルキル、（Ｃ１−Ｃ６）ハロアルキル、（Ｃ１−Ｃ６）ハロアルコキシ、（Ｃ１−Ｃ６）ハロチオアルコキシ、ＣＮ、ＮＯ２、ＯＲ１１、ＳＲ１２、ＮＲ１３Ｒ１４、ＣＯ２Ｒ１５、ＣＯＮＲ１６Ｒ１７、ＳＯ２Ｒ１８、ＳＯ２ＮＲ１９Ｒ２０、ＣＯＲ２１、ＮＲ２２ＣＯＲ２３、ＮＲ２４ＳＯ２Ｒ２５、およびＲ２６ＮＲ２７Ｒ２８から選択される１以上の基で置換されていてもよく、および／または複素環と縮合していてもよいアリールまたはヘテロアリール基を表し、
Ｘは、Ｏ、Ｓ、Ｓ（Ｏ）、Ｓ（Ｏ）２、ＮＲ４、Ｓ（ＮＲ４）、Ｓ（Ｏ）（ＮＲ４）、Ｓ（Ｏ）２（ＮＲ４）、ＮＲ４Ｓ、ＮＲ４Ｓ（Ｏ）、ＮＲ４Ｓ（Ｏ）２、ＣＨ２、ＣＨ２Ｓ、ＣＨ２Ｓ（Ｏ）、ＣＨ２Ｓ（Ｏ）２、ＳＣＨ２、Ｓ（Ｏ）ＣＨ２、Ｓ（Ｏ）２ＣＨ２、ＣＨ２ＣＨ２、ＣＨ＝ＣＨ、Ｃ≡Ｃ、ＣＨ２Ｏ、ＯＣＨ２、ＮＲ４ＣＨ２、およびＣＨ２ＮＲ４から選択される二価の基を表し、
Ｗは、Ｒ５、ＳＲ５、ＯＲ５またはＮＲ５Ｒ６基を表し、
Ｕは、ＣＨ２またはＮＨ基を表し、１以上の水素原子は（Ｃ１−Ｃ６）アルキル基で置換されていてもよく、
Ｖは、Ｃ（Ｏ）、Ｃ（Ｓ）またはＣＨ２を表し、
ｎは、０または１を表し、
Ｒ１は、水素原子、またはＯＲ７もしくはＮＲ７Ｒ８基を表し、
Ｒ２は、水素原子、置換されていてもよい複素環、ＮＯ２、ＯＲ９またはＮＲ９Ｒ１０を表し、
Ｒ３、Ｒ４、Ｒ１１〜Ｒ２５およびＲ２７〜Ｒ２８はそれぞれ互いに独立して、水素原子または（Ｃ１−Ｃ６）アルキル基を表し、
Ｒ５およびＲ６はそれぞれ互いに独立して、水素原子または（Ｃ１−Ｃ６）アルキル、置換されていてもよいアリールまたは置換されていてもよいベンジル基を表し、
Ｒ７、Ｒ８、Ｒ９およびＲ１０はそれぞれ互いに独立して、水素原子または置換されていてもよい（Ｃ１−Ｃ６）アルキルまたは（Ｃ３−Ｃ１２）シクロアルキル基または置換されていてもよい複素環を表し、かつ、
Ｒ２６は、（Ｃ１−Ｃ６）アルキル基を表す。
【００２９】
用語「ハロゲン」は、フッ素、塩素、臭素またはヨウ素を意味する。
【００３０】
用語「（Ｃ１−Ｃ６）アルキル」は、１〜６個の炭素原子を含んでなる飽和直鎖または分岐炭化水素鎖を意味する。それはメチル、エチル、プロピル、イソプロピル、ブチル、イソブチル、ｓｅｃ−ブチル、ｔｅｒｔ−ブチル、ペンチルまたはヘキシル基であり得る。
【００３１】
用語「（Ｃ１−Ｃ６）アルコキシ」は、酸素原子を介してその分子の残りの部分に連結されている（Ｃ１−Ｃ６）アルキル鎖を意味する。例として、メトキシ、エトキシ、プロポキシ、イソプロポキシ、ブトキシまたはｔｅｒｔ−ブトキシ基が挙げられる。
【００３２】
用語「（Ｃ１−Ｃ６）チオアルコキシ」は、硫黄原子を介してその分子の残りの部分に連結されている（Ｃ１−Ｃ６）アルキル鎖を意味する。例として、チオメトキシ、チオエトキシ、チオプロポキシ、チオイソプロポキシ、チオブトキシまたはチオ−ｔｅｒｔ−ブトキシ基が挙げられる。
【００３３】
用語「（Ｃ１−Ｃ６）ハロアルキル」は、１以上の水素原子が上記に定義されたようなハロゲン原子で置換されている（Ｃ１−Ｃ６）アルキル鎖を意味する。それは特にトリフルオロメチル基であり得る。
【００３４】
用語「（Ｃ１−Ｃ６）ハロアルコキシ」は、１以上の水素原子が上記に定義されたようなハロゲン原子で置換されている、上記に定義されたような（Ｃ１−Ｃ６）アルコキシ鎖を意味する。それは特にトリフルオロメトキシ基であり得る。
【００３５】
用語「（Ｃ１−Ｃ６）ハロチオアルコキシ」は、１以上の水素原子が上記に定義されたようなハロゲン原子で置換されている、上記に定義されたような（Ｃ１−Ｃ６）チオアルコキシ鎖を意味する。それは特にトリフルオロチオメトキシ基であり得る。
【００３６】
用語「（Ｃ３−Ｃ１２）シクロアルキル」は、３〜１２個の炭素原子を含んでなり、かつ、１以上の環、特に、縮合環を含んでなる、環状炭化水素系を意味する。例として、アダマンチルまたはシクロヘキシル基が挙げられる。
【００３７】
用語「アリール」は、好ましくは６〜１４個の炭素原子を含んでなり、かつ、１以上の縮合環を含んでなる芳香族炭化水素基、例えば、フェニルまたはナフチル基を意味する。有利には、それはフェニル基である。
【００３８】
用語「ヘテロアリール」は、それらの環に含まれる５〜７個の原子を含んでなる環状芳香族基、またはそれらの環に含まれる８〜１１個の原子を含んでなる二環式芳香族基であって、それらの環に含まれる原子の１〜４個が硫黄、窒素および酸素原子から独立して選択されるヘテロ原子であり、かつ、それらの環に含まれる他の原子は炭素原子である基を意味する。ヘテロアリール基の例としては、フリル、チエニル、ピリジニル、およびベンゾチエニル基が挙げられる。
【００３９】
用語「複素環」は、４〜７個の環原子を含有する安定な単環、または８〜１１個の環原子を含有する安定な二環のいずれかであって、飽和型であっても不飽和型であってもよく、環原子の１〜４個が硫黄、窒素および酸素原子から独立して選択されるヘテロ原子であり、かつ、他の環原子が炭素原子である環を意味する。例として、フラン、ピロール、チオフェン、チアゾール、イソチアゾール、オキサジアゾール、イミダゾール、オキサゾール、イソキサゾール、ピリジン、ピペリジン、ピラジン、ピペラジン、テトラヒドロピラン、ピリミジン、キナゾリン、キノリン、キノキサリン、ベンゾフラン、ベンゾチオフェン、インドリン、インドリジン、ベンゾチアゾール、ベンゾチエニル、ベンゾピラン、ベンゾオキサゾール、ベンゾ［１，３］ジオキソール、ベンズイソキサゾール、ベンズイミダゾール、クロマン、クロメン、ジヒドロベンゾフラン、ジヒドロベンゾチエニル、ジヒドロイソキサゾール、イソキノリン、ジヒドロベンゾ［１，４］ジオキサン、イミダゾ［１，２−ａ］ピリジン、フロ［２，３−ｃ］ピリジン、２．３−ジヒドロ−１Ｈ−インデン、［１，３］ジオキソロ［４，５−ｃ］ピリジン、ピロロ［１、２−ｃ］ピリミジン、ピロロ［１，２−ａ］ピリミジン、テトラヒドロナフタレン、ベンゾ［ｂ］［１，４］オキサジンが挙げられる。
【００４０】
本発明に関して、「置換されていてもよい（optionally substituted）」とは、対象とする基が、特に、ハロゲン原子、（Ｃ１−Ｃ６）アルキル、（Ｃ１−Ｃ６）ハロアルキル、（Ｃ１−Ｃ６）ハロアルコキシ、（Ｃ１−Ｃ６）ハロチオアルコキシ、ＣＮ、ＮＯ２、ＯＲ１１、ＳＲ１２、ＮＲ１３Ｒ１４、ＣＯ２Ｒ１５、ＣＯＮＲ１６Ｒ１７、ＳＯ２Ｒ１８、ＳＯ２ＮＲ１９Ｒ２０、ＣＯＲ２１、ＮＲ２２ＣＯＲ２３、ＮＲ２４ＳＯ２Ｒ２５、およびＲ２６ＮＲ２７Ｒ２８（ここで、Ｒ１１〜Ｒ２８は上記に定義されとおりである）から選択され得る１以上の置換基で置換されていてもよいことを意味する。
【００４１】
本発明では、「薬学上許容可能な」とは、一般に安全、無毒および生物学的にもそれ以外の点でも望ましくないものではない、かつ、獣医学的使用およびヒト医学的使用に許容可能な医薬組成物の調製に有用なものを意味する。
【００４２】
化合物の「薬学上許容可能な塩または溶媒和物」は、本明細書において定義されるように薬学上許容可能であり、かつ、親化合物の所望の薬理活性を有する、塩および溶媒和物を意味する。
【００４３】
本発明の化合物の治療的使用に許容可能な塩としては、薬学上許容可能な有機酸もしくは無機酸から、または薬学上許容可能な有機塩基もしくは無機塩基から形成されるものなどの、本発明の化合物の従来の非毒性塩が含まれる。例として、塩酸、臭化水素酸、リン酸および硫酸などの無機酸から誘導される塩、ならびに酢酸、トリフルオロ酢酸、プロピオン酸、コハク酸、フマル酸、リンゴ酸、酒石酸、クエン酸、アスコルビン酸、マレイン酸、グルタミン酸、安息香酸、サリチル酸、トルエンスルホン酸、メタンスルホン酸、ステアリン酸および乳酸などの有機酸から誘導される塩が挙げられる。例として、炭酸ナトリウム(soda)、炭酸カリウム(potash)または水酸化カルシウムなどの無機塩基から誘導される塩、およびリシンまたはアルギニンなどの有機塩基から誘導される塩が挙げられる。
【００４４】
これらの塩は、塩基性部分または酸性部分を含有する本発明の化合物ならびにその対応する酸または塩基から、当業者に周知の従来の化学法に従って合成することができる。
【００４５】
本発明の化合物の治療的使用に許容可能な溶媒和物には、本発明の化合物の最後の製造工程で、溶媒の存在のために形成される従来の溶媒和物が含まれる。例として、水またはエタノールの存在のための溶媒和物が挙げられる。
【００４６】
本発明に関して、「立体異性体」は、幾何異性体または光学異性体を意味する。
【００４７】
幾何異性体は、二重結合上の置換基の位置の違いから生じ、Ｚ配置またはＥ配置をとり得る。
【００４８】
光学異性体は、特に、４つの異なる置換基を含んでなる炭素原子上の置換基の空間的位置の違いから生じる。よって、この炭素原子はキラルまたは不斉中心を構成する。光学異性体としては、ジアステレオ異性体および鏡像異性体が含まれる。互いに鏡像であって重ね合わせることができない光学異性体が鏡像異性体である。互いに鏡像でない光学異性体がジアステレオ異性体である。
【００４９】
本発明に関して、「互変異性体」は、プロトトロピーによって、すなわち、水素原子の移動と二重結合の位置の変化によって得られる化合物の構造異性体を意味する。化合物の異なる互変異性体は一般に相互転換可能であり、溶液中で、使用溶媒、温度またはｐＨによって異なり得る比率で平衡状態にある。
【００５０】
第１の実施態様によれば、Ｙ４＝Ｎである。
【００５１】
有利には、Ｙ２＝Ｃ−Ｘ−Ａｒであり、かつ、Ｙ３は好ましくはＣ−Ｗ基を表す。
【００５２】
特に、
Ｙ１＝ＣＨまたはＮ、有利にはＣＨであり、
Ｙ２＝Ｃ−Ｘ−Ａｒであり、
Ｙ３＝Ｃ−Ｗであり、かつ
Ｙ４＝Ｎである。
【００５３】
第２の実施態様によれば、Ｙ１および／またはＹ４は窒素原子を表す。
【００５４】
この場合、Ｙ２およびＹ３は好ましくは窒素原子を表さない。
【００５５】
特に、
Ｙ１および／またはＹ４＝Ｎであり、
Ｙ２＝ＣＨまたはＣ−Ｘ−Ａｒであり、かつ
Ｙ３＝Ｃ−ＷまたはＣ−Ｘ−Ａｒである。
【００５６】
特に、
Ｙ１はＣＨ基を表し、
Ｙ４は窒素原子を表し、
Ｙ２はＣＨまたはＣ−Ｘ−Ａｒ基を表し、かつ
Ｙ３はＣ−Ｘ−ＡｒまたはＣ−Ｗ基を表し、
ただし、
Ｙ２＝Ｃ−Ｘ−Ａｒのとき、Ｙ３はＣ−Ｗ基を表し、かつ
Ｙ２＝ＣＨであるとき、Ｙ２はＣ−Ｘ−Ａｒ基を表す。
【００５７】
有利には、Ｘは、Ｏ、Ｓ、Ｓ（Ｏ）、Ｓ（Ｏ）２、ＮＲ４、ＣＨ２、ＣＨ２Ｓ、ＣＨ２Ｓ（Ｏ）、ＣＨ２Ｓ（Ｏ）２、ＮＨＳ（Ｏ）２、ＳＣＨ２、Ｓ（Ｏ）ＣＨ２、Ｓ（Ｏ）２ＣＨ２、Ｓ（Ｏ）２ＮＨ、ＣＨ２ＣＨ２、ＣＨ＝ＣＨ、Ｃ≡Ｃ、ＣＨ２Ｏ、ＯＣＨ２、ＮＲ４ＣＨ２、およびＣＨ２ＮＲ４から選択される二価の基を表す。
【００５８】
特に、Ｘは、Ｓ、Ｓ（Ｏ）、Ｓ（Ｏ）２、ＮＲ４、ＣＨ２、ＣＨ２Ｓ、ＣＨ２Ｓ（Ｏ）、ＣＨ２Ｓ（Ｏ）２、ＮＨＳ（Ｏ）２、ＳＣＨ２、Ｓ（Ｏ）ＣＨ２、Ｓ（Ｏ）２ＣＨ２、Ｓ（Ｏ）２ＮＨ、ＣＨ２ＣＨ２、Ｃ≡Ｃ、ＣＨ２Ｏ、ＯＣＨ２、ＮＲ４ＣＨ２、およびＣＨ２ＮＲ４から選択される二価の基を表す。
【００５９】
より詳しくは、Ｘは、Ｓ、Ｓ（Ｏ）、Ｓ（Ｏ）２、ＣＨ２、ＣＨ２Ｓ、ＣＨ２Ｓ（Ｏ）、ＣＨ２Ｓ（Ｏ）２、ＮＨＳ（Ｏ）２、ＳＣＨ２、Ｓ（Ｏ）ＣＨ２、Ｓ（Ｏ）２ＣＨ２、Ｓ（Ｏ）２ＮＨ、ＣＨ２ＣＨ２、ＣＨ＝ＣＨ、およびＣ≡Ｃから選択され得る。
【００６０】
特に、Ｘは、Ｓ、Ｓ（Ｏ）２、ＣＨ２、ＳＣＨ２、Ｓ（Ｏ）２ＣＨ２、Ｓ（Ｏ）２ＮＨ、ＣＨ２Ｓ、ＣＨ２Ｓ（Ｏ）２、ＮＨＳ（Ｏ）２、ＣＨ２ＣＨ２、およびＣ≡Ｃから選択され得る。
【００６１】
Ｘは、特に、Ｓ、Ｓ（Ｏ）、Ｓ（Ｏ）２、ＮＲ４、ＣＨ２、ＳＣＨ２、Ｓ（Ｏ）ＣＨ２、Ｓ（Ｏ）２ＣＨ２、Ｓ（Ｏ）２ＮＨ、ＣＨ２ＣＨ２、Ｃ≡Ｃ、ＯＣＨ２、およびＮＲ４ＣＨ２から；特に、Ｓ、Ｓ（Ｏ）２、ＣＨ２、ＳＣＨ２、Ｓ（Ｏ）２ＣＨ２、Ｓ（Ｏ）２ＮＨ、ＣＨ２ＣＨ２、およびＣ≡Ｃから選択されてよく、これらの基の第一原子は、Ｃ−Ｘ−Ａｒ鎖の原子Ｃと結合している。
【００６２】
Ｘは、特に、Ｓ、Ｓ（Ｏ）２、ＳＣＨ２、Ｓ（Ｏ）２ＣＨ２、Ｓ（Ｏ）２ＮＨ、ＣＨ２Ｓ、ＣＨ２Ｓ（Ｏ）２、またはＮＨＳ（Ｏ）２；特に、Ｓ、Ｓ（Ｏ）２、ＳＣＨ２、Ｓ（Ｏ）２ＣＨ２、またはＳ（Ｏ）２ＮＨであり得、これらの基の第一原子は、Ｃ−Ｘ−Ａｒ鎖の原子Ｃと結合している。
【００６３】
有利には、Ａｒは、ハロゲン原子、（Ｃ１−Ｃ６）アルキル、（Ｃ１−Ｃ６）ハロアルキル、（Ｃ１−Ｃ６）ハロアルコキシ、（Ｃ１−Ｃ６）ハロチオアルコキシ、ＣＮ、ＮＯ２、ＯＲ１１、ＳＲ１２、ＮＲ１３Ｒ１４、ＣＯ２Ｒ１５、ＣＯＮＲ１６Ｒ１７、ＳＯ２Ｒ１８、ＳＯ２ＮＲ１９Ｒ２０、ＣＯＲ２１、ＮＲ２２ＣＯＲ２３、およびＮＲ２４ＳＯ２Ｒ２５から選択される１以上の基で置換されていてもよく、および／または複素環と縮合していてもよい、ピリジンなどのヘテロアリール基、またはフェニルなどのアリール基を表す。
【００６４】
より詳しくは、Ａｒは、ハロゲン原子、（Ｃ１−Ｃ６）アルキル、（Ｃ１−Ｃ６）ハロアルキル、（Ｃ１−Ｃ６）ハロアルコキシ、（Ｃ１−Ｃ６）ハロチオアルコキシ、ＣＮ、ＮＯ２、ＯＲ１１、ＳＲ１２、ＮＲ１３Ｒ１４、ＣＯ２Ｒ１５、ＣＯＮＲ１６Ｒ１７、ＳＯ２Ｒ１８、ＳＯ２ＮＲ１９Ｒ２０、ＣＯＲ２１、ＮＲ２２ＣＯＲ２３、およびＮＲ２４ＳＯ２Ｒ２５から選択される１以上の基で置換されていてもよい、フェニルなどのアリール基を表し得る。
【００６５】
Ａｒは、特に、ハロゲン原子、（Ｃ１−Ｃ６）アルキル、（Ｃ１−Ｃ６）ハロアルキル、およびＣＯＮＲ１６Ｒ１７から、特に、フッ素などのハロゲン原子、メチルなどの（Ｃ１−Ｃ６）アルキル、およびＣＯＮＨ２などのＣＯＮＲ１６Ｒ１７から選択される１以上の基で置換されていてもよい、フェニルなどのアリール基を表し得る。
【００６６】
Ａｒはまた、ピリジン基も表し得る。
【００６７】
Ａｒは、特に、以下の基：
【化３】
2019031542.tif 000004
から、特に以下の基：
【化４】
2019031542.tif 000005
から、特に、以下の基：
【化５】
2019031542.tif 000006
から選択され得る。
【００６８】
Ａｒは、有利には基：
【化６】
2019031542.tif 000007
を表し得る。
【００６９】
Ｗは、有利には、Ｒ５、ＳＲ５、ＯＲ５またはＮＲ５Ｒ６基、好ましくは、Ｒ５、ＯＲ５またはＮＲ５Ｒ６を表し得、ここで、Ｒ５およびＲ６は互いに独立して、水素原子または（Ｃ１−Ｃ６）アルキル基を表す。
【００７０】
Ｗは、特に、Ｈ、ＯＭｅ、Ｍｅ、ＯＨまたはＮＨ２、特に、Ｈを表し得る。
【００７１】
有利には、Ｒ３は、水素原子を表す。
【００７２】
Ｕは、より詳しくは、ＣＨ２またはＮＨ基を表し得る。
【００７３】
有利には、ｎは０を表し得る。
【００７４】
Ｖは、より詳しくは、Ｃ（Ｏ）またはＣ（Ｓ）基、有利には、Ｃ（Ｏ）基を表し得る。
【００７５】
本発明の特定の実施態様によれば、
Ｒ３＝Ｈであり、
Ｕ＝ＣＨ２またはＮＨであり、
Ｖ＝Ｃ（Ｏ）またはＣ（Ｓ）、特に、Ｃ（Ｏ）であり、かつ
ｎ＝０または１、特に、０である。
【００７６】
本発明の別の特定の実施態様によれば、
Ｖ＝Ｃ（Ｏ）またはＣ（Ｓ）、特に、Ｃ（Ｏ）であり、かつ
ｎ＝０である。
【００７７】
本発明のさらに別の特定の実施態様によれば、
Ｒ３＝Ｈ、
Ｖ＝Ｃ（Ｏ）またはＣ（Ｓ）、特に、Ｃ（Ｏ）であり、かつ
ｎ＝０である。
【００７８】
Ｒ１は、より詳しくは、水素原子またはＮＲ７Ｒ８基を表し得、ここで、Ｒ７は特に水素原子を表し、かつ、Ｒ８は特に置換されていてもよい（Ｃ３−Ｃ１２）シクロアルキル基または置換されていてもよい複素環を表す。
【００７９】
（Ｃ３−Ｃ１２）シクロアルキル基は特にシクロヘキシルであり得る。それは１以上のハロゲン原子で置換されていてもよい。それは特に基：
【化７】
2019031542.tif 000008
であり得る。
【００８０】
複素環式基は、特に、テトラヒドロピラン、特に、非置換型であり得る。よって、それは、下記の基：
【化８】
2019031542.tif 000009
であり得る。
【００８１】
よって、Ｒ１は、より詳しくは、以下の基：
【化９】
2019031542.tif 000010
の１つを表し得る。
【００８２】
Ｒ２は、より詳しくは、置換されていてもよい複素環（特に、（Ｃ１−Ｃ６）アルキルまたはＮＨ２で置換）、ＮＯ２またはＮＲ９Ｒ１０を表してよく、ここで、特に、Ｒ９＝Ｒ１０＝Ｈまたはそうでなければ、Ｒ９およびＲ１０はそれぞれＨまたは置換されていてもよい（Ｃ１−Ｃ６）アルキルを表す。
【００８３】
Ｒ２は、特に、置換されていてもよい、特に、（Ｃ１−Ｃ６）アルキルまたはＮＨ２で置換された複素環を表し得る。前記複素環は、少なくとも１個、特に、１個または２個の窒素原子を含んでなる、特に５または６員の複素環であり得る。よって、前記複素環はピペラジン、ピペリジンおよびピロリジンから選択され得る。
【００８４】
Ｒ２は、特に、以下の基：
【化１０】
2019031542.tif 000011
のうちの１つを表し得る。
【００８５】
本発明の化合物は、下記の表に挙げられる化合物から選択され得る。
【００８６】
【表１】
2019031542.tif 000012
2019031542.tif 000013
2019031542.tif 000014
2019031542.tif 000015
2019031542.tif 000016
2019031542.tif 000017
2019031542.tif 000018
2019031542.tif 000019
【００８７】
本発明はまた、疼痛、特に、少なくとも１つのＴｒｋタンパク質に関連する疼痛の治療または予防に特に意図される薬剤の調製のための、上記に定義されたような式（Ｉ）の化合物の使用に関する。
【００８８】
本発明はまた、疼痛、特に、少なくとも１つのＴｒｋタンパク質に関連する疼痛の治療または予防のための方法であって、それを必要とする人に上記に定義されたような式（Ｉ）の化合物の有効量を投与することを含んでなる方法に関する。
【００８９】
本発明はまた、疼痛、特に、少なくとも１つのＴｒｋタンパク質に関連する疼痛の治療または予防において使用するための、上記に定義されたような少なくとも１つの式（Ｉ）の化合物と少なくとも１つの薬学上許容可能な賦形剤とを含んでなる医薬組成物に関する。
【００９０】
本発明による、疼痛、特に、少なくとも１つのＴｒｋタンパク質に関連する疼痛の治療または予防において使用するための医薬組成物は特に経口投与用または注射用に処方することができ、前記組成物はヒトを含む哺乳類のために意図される。
【００９１】
有効成分は、標準的な医薬担体と混合して単位投与形で動物またはヒトに投与することができる。有効成分としての本発明の化合物は、１日１回の単回用量で与えられるまたは１日に数用量で、例えば、１日に２回等用量で投与される、０．０１ｍｇ〜１０００ｍｇ／日の間の範囲の用量で使用することができる。１日当たりに投与される用量は有利には、５ｍｇ〜５００ｍｇの間、いっそうより有利には１０ｍｇ〜２００ｍｇの間である。当業者により決定された場合、これらの範囲の外側の用量を使用する必要のある場合もある。
【００９２】
本発明による、疼痛、特に、少なくとも１つのＴｒｋタンパク質に関連する疼痛の治療または予防において使用するための医薬組成物は、抗癌薬などの少なくとも１つの他の有効成分をさらに含んでなってもよい。
【００９３】
本発明はまた、同時、個別、または逐次使用のための配合剤として
（ｉ）上記に定義されたような少なくとも１つの式（Ｉ）の化合物と、
（ｉｉ）抗癌薬などの少なくとも１つの他の有効成分
とを含んでなる、疼痛、特に、少なくとも１つのＴｒｋタンパク質に関連する疼痛の治療または予防において使用するための医薬組成物を目的とする。
【００９４】
本発明に関して、用語「治療」は、疼痛を逆転または緩和することを意味する。
【００９５】
用語「疼痛」は、本発明によれば、いずれの種類の疼痛も意味し、特に、侵害受容性疼痛、炎症性疼痛、神経因性疼痛、特発性疼痛または心因性疼痛、好ましくは、炎症性疼痛または神経因性疼痛を意味する。本発明による疼痛はまた、この種の疼痛の２以上の組合せ、例えば、炎症性疼痛と侵害受容性疼痛の組合せであり得る。
【００９６】
本発明による疼痛はいずれの起源であってもよい。一実施態様では、本発明による疼痛は、癌、例えば、骨癌によるものである。別の実施態様では、本発明による疼痛は、例えば神経因性疼痛に関して見られるような神経損傷によるものである。別の実施態様では、本発明による疼痛は、例えば、変形性関節症などのリウマチ性疾患、腰痛、腰椎椎間板ヘルニアおよび神経根圧迫において見られるような炎症状態によるものである。別の実施態様(embodiement)では、本発明による疼痛は、例えば線維筋痛症などの機能性障害に関連する。
【００９７】
本発明によれば「Ｔｒｋタンパク質」は、Ｔｔｒｋファミリーのいずれのメンバーも意味し、例えば、ＴｒｋＡ（特に、ＧｅｎＢａｎｋに番号ＡＢ０１９４８８として記載）、ＴｒｋＢ（特に、ＧｅｎＢａｎｋに番号ＡＡＢ３３１０９．１として記載）およびＴｒｋＣ（特に、ＧｅｎＢａｎｋに番号ＣＡＡ１２０２９．１として記載）、優先的にはＴｒｋＡを意味する。
【００９８】
本発明によるＴｒｋタンパク質は、その天然型であってもまたは改変型であってもよい。「改変型」とは、野生型タンパク質の変異型を意図する。突然変異はＴｒｋタンパク質の配列における点突然変異であってよく、欠失であってもよく、または１以上のアミノ酸の挿入であってもよい。あるいは、本発明による改変Ｔｒｋタンパク質は、例えば、染色体再配列後に得られた後に得られた融合タンパク質であってもよい。改変Ｔｒｋタンパク質は、選択的スプライシングからも生じ得る。
【００９９】
本発明による「少なくとも１つのＴｒｋタンパク質に関連する」という表現は、治療される疼痛が、１以上のＴｒｋタンパク質を介して進行するシグナル伝達経路によって中継されることを意味するものとする。特に、疼痛は、それが炎症性疼痛または神経因性(neuropatic)疼痛である場合には、Ｔｒｋタンパク質に関連すると考えられる。Ｔｒｋシグナル伝達経路は当業者に周知である。
【０１００】
本発明による化合物は、１以上のＴｒｋタンパク質、好ましくは、２以上のＴｒｋタンパク質の酵素活性を阻害または変調する特性を有する。
【０１０１】
本発明による１以上のＴｒｋタンパク質の活性を阻害または変調するとは、本発明による化合物が、少なくとも１つのＴｒｋタンパク質の活性化を変調し、その結果、それ自体、疼痛の感覚の低下をもたらす、おそらくＴｒｋシグナル経路を不活性化させ得ることを意味するものとする。本発明による化合物は、例えば、約５％以上、特に約１０％以上、特に約５０％以上のＴｒｋタンパク質活性の低下を可能とする。
【０１０２】
本発明による式（Ｉ）の化合物は、特に以下のダイアグラム１ａおよび１ｂで概説される種々の方法によって調製することができる。
ダイアグラム１ａ
【化１１】
2019031542.tif 000020
【０１０３】
方法Ａ：
方法Ａによれば、式（Ｉ）の化合物は、環外第一級アミンを有するハロゲン化ヘテロ二環式環を特徴とする一般式（Ｖ）の化合物の予備合成によって得られる。これらの化合物は一般式（ＩＩ）または（ＩＩＩ）の中間体の合成を介して得られる。
【０１０４】
方法Ａ１：
以下のダイアグラム２（ヨウ素化化合物）または３（臭素化化合物）に示される方法Ａ１は、一般式（Ｉ）の説明のように定義されるＷ、特に、Ｈ、（Ｃ１−Ｃ６）アルキルまたはアリール、およびＲｊ＝ＨまたはＮ保護基を有する一般式（Ｖ）の化合物を得る一般プロセスを記載している。
【化１２】
2019031542.tif 000021
【０１０５】
ダイアグラム２に関して、置換されていてもよい２−クロロ−５−ヨードニコチノニトリル（ＩＩａ）は、対応するヒドロキシニコチノニトリルから、特に温ＤＭＦなどの極性溶媒中、Ｎ−ヨードスクシンイミド（ＮＩＳ）などのヨウ素化剤、またはヨウ素分子と、例えば、Ｋ２ＣＯ３またはＮａ２ＣＯ３などの無機塩基の連続的使用、その後の純粋なまたは高沸点非極性溶媒で希釈したオキシ塩化リン、または当業者に周知の他の任意の等価の塩素化剤による処理によって得られる。反応温度は−２０℃〜２００℃の間である。このようにして得られた化合物（ＩＩａ）を次に、好ましくは過熱下、トリチル、ｔｅｒｔ−ブチルまたはＢＯＣなどのＮ保護基を有してもよいヒドラジンの存在下でのその反応によって、置換されていてもよい５−ヨード−ピラゾロ［３，４−ｂ］ピリジン−３−アミン（Ｖａ）へと変換する。
【０１０６】
ダイアグラム１ａに記載されるような一般式（Ｖ）の臭素化類似体は、下記の参照文献：Witherington et al., Bioorg. Med. Chem. Lett., 2003, 13, 1577-1580 and Lijuan Chen et al., Bioorg. Med. Chem. Lett., 2010, 20, 4273-4278に記載されている方法の使用によって得ることができる。便宜的理由で、これらの分子は、下記のダイアグラム３に示される一連の反応の使用によって得た。
【化１３】
2019031542.tif 000022
【０１０７】
官能基を有していてもよい２−メトキシ−ニコチノトリルは、例えば、−２０℃〜その混合物の沸点の間の温度での、メタノール中ナトリウムメタノレートの反応によって得られる。あるいは、この化合物は、上記の２−ヒドロキシニコチノニトリルのメチル化またはその他の方法によって得てもよい。２−メトキシ−ニコチノニトリルの臭素化は一般に、２０℃〜１１０℃の間の様々な温度で、酢酸中、二臭素を用いて行われる。ピラゾールの形成は一般に、水、エタノール、テトラヒドロフラン（ＴＨＦ）または匹敵する特性を有する他の任意の溶媒などの極性溶媒の存在下で、２０℃〜１００℃の間の様々な温度での、官能基を有するまたは有さない過剰量のヒドラジンの反応によって行われる。あるいは、生理食塩水中での、または無溶媒で水和形態でのヒドラジンの使用も可能である。
【０１０８】
方法Ａ２：
方法Ａ２は、Ｒｊ＝ＨまたはＮ保護基であり、Ｈａｌ＝ハロゲンであり、かつ、特に、Ｗ＝Ｈ、（Ｃ１−Ｃ６）アルキルまたはアリールである、下記のダイアグラム４に示される、官能基を有するピラゾロピラジンの合成に関する。
【化１４】
2019031542.tif 000023
官能基を有していてもよい３−アミノ−６−ヨードピラジン−２−カルボキサミドは一般に、対応する３−アミノピラジン−２−カルボン酸メチルから、Ｎ−ヨードスクシンイミドまたはヨウ素分子の存在下、場合により、ＫＩＯ３、ＡｇＣＯ２ＣＦ３、Ａｇ２ＳＯ４、ＡｌＣｌ３、ＣｕＣｌ２またはＨｇＯなどの補因子の存在下でヨウ素化した後、特に、０℃〜１００℃の間の様々な温度で水、メタノールまたはＴＨＦなどの極性溶媒中、アンモニアを使用することにより、メチルエステル官能基のカルボキサミドへの変換反応を行うことによって二段階で得られる。次に、官能基を有していてもよい３−アミノ−６−ヨードピラジン−２−カルボキサミドのカルボキサミド官能基は、ピリジンなどの有機塩基の存在下で場合に応じて使用される、特に、ＣＣｌ４／ＰＰｈ３、ＳＯＣｌ２、ＰｈＳＯ２Ｃｌ、Ｐ２Ｏ５、ＴｓＣｌ、ＣＯＣｌ２、ＤＣＣ／ｐｙ（Ｎ，Ｎ’−ジシクロヘキシルカルボジイミド／ピリジン）または（ＣＯＣｌ）２などの脱水剤の使用によって、ニトリルに変換される。好ましい方法は、ジメチルホルムアミド（ＤＭＦ）中でのオキシ塩化リンの使用を含む。ジメチルホルムイミドアミド官能基の脱保護は、塩酸水溶液または等価の特性を有する他の任意の試薬などの酸で処理することによって行われる。ピラゾール環の形成は、当業者に周知のサンドマイヤー反応の後に、上記の方法に記載のとおりの条件下、官能基を有するまたは有さないヒドラジンの存在下で反応させることによって行われる。あるいは、サンドマイヤー反応の中間体であるジアゾニウム塩を、熱の作用下で分子内環化を受け得るヒドラジン官能基を形成するために、例えば、酸媒体または他の任意の等価の薬剤中での塩化スズの使用によって還元してもよい。
【０１０９】
方法Ａ３：
方法Ａ３は、ピラゾロピリジン二環の６位の可変官能基を特徴とする一般式（Ｖ）の誘導体を得ることを目的とする。これを下記のダイアグラム５に詳細に示す。
【化１５】
2019031542.tif 000024
【０１１０】
シアノチオアセトアミドと、特にLitrivnor et al., Russ. Chem. Bull., 1999, 48(1), 195-196およびTsann-Long Su et al., J. Med. Chem., 1988, 31, 1209-1215によって記載されている方法に従って様々に置換された３−エトキシアクリル酸エチルとの反応は、２位に可変官能基を有する５−シアノ−６−（メチルチオ）ニコチン酸エチルを二段階で得ることを可能とする。これらの合成は一般に、メチルモルホリン、トリエチルアミン、ＤＩＰＥＡ（Ｎ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン）またはＤＢＵ（１，８−ジアザビシクロ［５，４，０］ウンデク−７−エン）などの有機塩基の存在下、０℃〜７０℃の間の範囲の温度で、例えばエタノールなどの無水極性溶媒中で行われる。分子内環化およびアルキル化の第二段階は一般に、アルキルハライドまたは硫酸ジアルキルなどの好適なアルキル化剤の存在下、極性溶媒、例えば、エタノール中、中間体チオアミデートの溶液を、２０℃〜１００℃の間の範囲の温度で加熱することによって行われる。
【０１１１】
２位で置換された５−シアノ−６−（メチルチオ）ニコチン酸は一般に、当業者に周知の方法に従う、特に、温水酸化リチウムの使用による、対応するエチルエステルの鹸化によって得られる。これらの化合物の脱炭酸は、１５０℃〜２５０℃の間の範囲の温度でジフェニルエーテルなどの高沸点溶媒中での熱処理によって行われる。
【０１１２】
ハロゲン化反応は、基本的に、ヨウ素化、臭素化または塩素化誘導体、より詳しくは、ヨウ素化誘導体を得ることを目的とする。後者は一般に、０℃〜７０℃の間の範囲の温度、エタノールなどの極性溶媒中、例えばＡｇ２ＳＯ４などの銀塩の存在下でのヨウ素分子処理によって得られる。別法、特に、ＫＩＯ３、ＡｇＣＯ２ＣＦ３、ＡｌＣｌ３、ＣｕＣｌ２もしくはＨｇＯなどの他の塩、またはＮ−ヨードスクシンイミドなどの他のヨウ素化剤に基づく別法も考えられる。企図される臭素化法は一般に、当業者に周知の方法に従って、Ｎ−ブロモスクシンイミドまたは二臭素などの薬剤に頼る。
【０１１３】
Ｗ＝ＯＨ（一般に、２−（エトキシメチレン）マロン酸ジエチルの使用から得られる）の場合、対応する化合物はアルキル化反応によって保護される。この反応は特に、ヨウ化メチルまたはブロモメタン、およびジオキサン、ＴＨＦ、アセトニトリルもしくはアセトン中の炭酸銀、または硫酸ジメチルなどの他の任意の等価の薬剤の使用によって行われる。得られた５−ハロ−２−（メチルチオ）ニコチノニトリルは、一般にｍ−ＣＰＢＡ（ｍ−クロロ過安息香酸）、オキソンまたは他の任意の等価の薬剤の使用によってそれらのチオメトキシ官能基の酸化を受け、対応するスルホキシドの形成に至る。様々な量の対応するスルホンを含み得るこれらの化合物は、置換されていてもよいヒドラジンの存在下での反応に関わって、６位に様々な官能基を有する対応する５−ハロゲノ−ピラゾロ［３，４−ｂ］ピリジン−３−アミンを形成する。
【０１１４】
方法Ａ４：
方法Ａ４は、一般式（ＩＩＩ）の化合物から、式（ＩＶ）の化合物の中間体形成を介して、一般式（Ｖ）の誘導体を得ることを目的とする。これらの化合物は一般に、ダイアグラム６に見られる経路によって得られる。下記参照は使用する方法を例示する：Gueiffier et al. Heterocycles, 1999, 51(7), 1661-1667; Gui-Dong Zhu et al. Bioorg. Med. Chem., 2007, 15, 2441-2452。
【化１６】
2019031542.tif 000025
【０１１５】
当業者に周知の方法のあるものまたは別のものにより予めアセチル化した一般式（ＩＩＩａ）の化合物を、０℃〜４０℃の間の様々な温度で、一般に１〜３日の様々な期間、水または酢酸中、亜硝酸イソアミル、亜硝酸ナトリウムまたは他の任意の等価の有機または無機亜硝酸塩の作用に曝す。このようにして得られた一般式（ＩＶａ）の化合物は、例えば塩酸の使用によって酸性条件中で脱保護された後、０℃〜２５℃の間の様々な温度で、硫酸中、濃硝酸または硝酸カリウムなどのニトロ化剤の作用に曝す。
【０１１６】
一般式（ＩＩＩａ）の化合物の、脱保護化合物（ＩＶｂ）への直接的変換が一般に可能であることに留意されたい。
【０１１７】
このようにして得られたニトロピラゾールは一般に、塩酸中ＳｎＣｌ２の使用によって、一般式（Ｖｅ）のアミノピラゾールに還元される。別法としては、酸性条件での鉄、亜鉛またはスズの使用、および水素雰囲気下、白金、ニッケルもしくはＰｄ／Ｃの錯体の存在下、またはシクロヘキサジエン、シクロヘキセン、水素化ホウ素ナトリウムもしくはヒドラジンなどの等価の薬剤の存在下での触媒的水素化の方法を含む。
【０１１８】
方法Ｂ：
方法Ｂによれば、式（Ｉ）の化合物が、環外アミンを保持する、官能基を有するヘテロ二環式環を特徴とする一般式（ＶＩ）の化合物の予備的合成によって得られる。これらの化合物は、一般式（ＶＩ）の中間体の合成を介して得られる。
【０１１９】
方法Ｂ１：
方法Ｂ１は下記のダイアグラム７で表され、Ｗは特にＨ、（Ｃ１−Ｃ６）アルキル、アリールまたはベンジルを表す。
【化１７】
2019031542.tif 000026
【０１２０】
５位に官能基を有していてもよい３−ニトロ−６−チオキソ−１，６−ジヒドロピリジン−２−カルボニトリルおよび３−ニトロ−６−チオキソ−１，６−ジヒドロピラジン−２−カルボニトリル誘導体は一般に、対応する２，６−ジクロロ−３−ニトロピリジンまたは２，６−ジクロロ−３−ニトロピラジンから、１００℃〜２００℃の間の範囲の温度で、Ｎ−メチルピロリドンなどの高沸点極性溶媒中のシアン化銅などのシアン化塩の一連の反応と、その後の極性溶媒中のヒドロ亜硫酸ナトリウム水溶液の反応とによって得られる。次に、これらの化合物は、当業者に周知の方法に従って、例えば、塩基性媒体中、置換臭化ベンジルの使用によってアルキル化される。好ましいプロトコールは、その沸点で振る舞う(carrid)アセトンなど非プロトン性かつ無水極性溶媒およびピリジン、トリエチルアミンもしくはＤＩＰＥＡなどの有機塩基、またはナトリウム、カリウムもしくは炭酸カルシウムなどの無機塩基の使用を含む。アミンのニトロ官能基を還元するための反応は、優先的には、塩酸中、ＳｎＣｌ２の使用によって行われる。別法としては、酸性条件での鉄、亜鉛またはスズの使用、および水素雰囲気下における、白金、ニッケルもしくはＰｄ／Ｃの錯体の存在下、またはシクロヘキサジエン、シクロヘキセン、水素化ホウ素ナトリウムもしくはヒドラジンなどの等価の薬剤の存在下での触媒的水素化の方法を含む。
【０１２１】
特定の場合、還元反応の生成物は、第一級アミンを有する他、ニトリル官能基の加水分解から生じるカルボキサミド官能基を有する。この場合、対応する３−アミノピコリノニトリルまたは３−アミノピラジン−２−カルボニトリルの単離は、ＤＭＦの存在下でのオキシ塩化リンの使用または当業者に周知の他の任意の方法を介した、カルボキサミドのニトリルへの脱水によって行うことができる。最後に、アミノピラゾール環の形成は、優先的には、０℃〜２０℃の間の様々な温度で、水、塩酸、酢酸または硫酸中の亜硝酸イソアミル、亜硝酸ナトリウムまたは他の任意の等価の有機または無機亜硝酸塩の低温での一連の反応と、その後のそのヒドラジンへの還元および反応媒体の加熱によって活性される分子内環化によって得られるジアゾニウムの形成によって行われる。この還元反応は優先的には、酸性条件で塩化スズを用いて行われるが、触媒的水素化または当業者に周知の他の任意の方法によって行ってもよい。この最後の工程の代わりに、中間体ジアゾニウムにサンドマイヤー反応を行うことも企図され、その際、この官能基はＮａＩなどの適切な塩の反応によって、ヨウ素などのハロゲン原子で置換される。この選択肢が好ましい場合、アミノピラゾール環の形成は、２５℃〜１５０℃の間の様々な温度での、エタノールなどの極性溶媒中、官能基を有するまたは有さないヒドラジンの使用によって行われる。
【０１２２】
方法Ｂ２：
あるいは、ピリジンまたはピラジン環の６位を官能基化するために、芳香族求核置換反応を利用することができる。この場合、使用される求核試薬は、フェノール、チオフェノール、ベンジルアルコールまたはチオベンジルアルコール、ならびに官能基を有するまたは有さないアニリンまたはベンジルアミンである。特に、Ｗ＝Ｈ、（Ｃ１−Ｃ６）アルキル、アリールまたはベンジルの場合の一般反応ダイアグラム８ａを下記に示す。
【化１８】
2019031542.tif 000027
【０１２３】
Ｘ＝ＯまたはＳの場合、５位で置換されていてもよい、６−クロロ−３−ニトロピコリノニトリルおよび６−クロロ−３−ニトロピラジン−２−カルボニトリルを、カリウムまたは炭酸ナトリウムなどの無機塩基の存在下、アセトニトリルなどの極性溶媒中、好適な求核試薬、アルコールまたはチオールの存在下で反応させる。また、ＤＭＳＯ（ジメチルスルホキシド）、ＤＭＦ（ジメチルホルムアミド）、アセトン、ＴＨＦ（テトラヒドロフラン）またはピリジンなどの溶媒も考えられる。必要に応じて、これらの反応は、銅の作用によって触媒することができ、溶媒を用いずに行うこともできる。一般に、好ましいプロトコールは、２０℃〜１５０℃の間の範囲の温度を必要とする。
【０１２４】
あるいは、ピリジン、ＤＩＰＥＡ、ジイソプロピルアミン、トリエチルアミン、ＤＢＵ、カリウムｔｅｒｔ−ブチレート、ＮＥｔ３またはＮａＨなどの塩基の使用も可能である。
【０１２５】
Ｘ＝Ｎである場合、トルエンが好ましい溶媒であり、トリエチルアミン（ＮＥｔ３）が選択される塩基である。
【０１２６】
一般式（ＶＩＩｂ）の化合物までの下記工程は、上記の方法Ｂ１で記載したものと同じである。
【０１２７】
方法Ｂ３：
下記のダイアグラム８ｂに示す方法Ｂ３は、酸またはエステル形態のボロン酸ベンジルと６−クロロ−３−ニトロピコリノニトリルまたは６−クロロ−３−ニトロピラジン−２−カルボニトリル誘導体との間の触媒的カップリング反応から生じる第一工程を特徴とする、方法Ｂ２の変形である。また、別の触媒およびベンジル誘導体を使用する触媒的カップリング反応も可能であることが当業者に周知である。これらの中で、スズ錯体に基づくＳｔｉｌｌｅ反応、または有機亜鉛化合物に基づくものが考えられる。
【化１９】
2019031542.tif 000028
【０１２８】
置換されていてもよい２−ベンジル−４，４，５，５−テトラメチル−１，３，２−ジオキサボロランは、例えば、対応する塩化ベンジルおよびオクタメチル−ビ−ジオキサボロランから、酢酸カリウムおよびＰｔ（ｄｐｐｆ）Ｃｌ２（ｄｐｐｆ＝１，１’−ビス（ジフェニルホスフィノ）フェロセン）の存在下、ジオキサン中で予め得られる。この化合物を、トルエン、ベンゼン、ＴＨＦまたはジオキサンなどの溶媒中、６−クロロ−３−ニトロピコリノニトリル、５位で置換されていてもよい６−クロロ−３−ニトロピラジン−２−カルボニトリル、または６位で置換されていてもよい５−クロロ−２−ニトロニコチノニトリルおよびＰｄ（ｄｐｐｆ）Ｃｌ２またはＰｄ（ＰＰｈ３）４パなどのラジウム触媒、トリエチルアミンもしくはアルコレートなどの有機塩基、または炭酸ナトリウム、炭酸カリウムまたは炭酸セシウムなどの無機塩基と合わせる。好ましい反応温度は２０℃〜１００℃の間である。これらの反応の生成物は、置換６−ベンジル−３−ニトロピコリノニトリル、６−ベンジル−３−ニトロピラジン−２−カルボニトリルまたは５−ベンジル−２−ニトロニコチノニトリル誘導体に相当し、これに関する下記の変換工程は、上記の方法Ｂ１からの再現である。
【０１２９】
方法Ｂ４：
下記のダイアグラム９に示される方法Ｂ４により、Ｒｌ＝（Ｃ１−Ｃ６）アルキルであり、かつ、特に、Ｗ＝Ｈ、（Ｃ１−Ｃ６）アルキル、アリールまたはベンジルである場合に、官能基を有していてもよいアリールスルホンアミド官能基を特徴とするピラゾロピリジンおよびピラゾロピラジン二環が得られる。
【化２０】
2019031542.tif 000029
【０１３０】
この一連の反応に必要な２−クロロ−５−（クロロスルホニル）ニコチン酸エチル誘導体は、Levett P.C. et al., Org. Proc. Res. Dev., 2002, 6(6), 767-772;ＷＯ０１／９８２８４およびＷＯ２００８／０１０９６４に記載されている方法に従って得ることができる。
【０１３１】
スルホンアミドの形成は一般に、対象とする２−クロロ−５−（クロロスルホニル）ニコチン酸塩と官能基を有していてもよい第一級または第二級アニリンを、ジクロロメタン、ＴＨＦ、アセトンまたはアセトニトリルなどの非プロトン性溶媒中、トリエチルアミン（ＮＥｔ３）、ピリジンまたはＤＩＰＥＡなどの有機塩基の存在下で混合することによって行われる。炭酸ナトリウムまたは炭酸カリウムなどの無機塩基の使用もまた考えられる。最適な反応温度は０℃〜７０℃の間である。
【０１３２】
このようにして、特にＴＨＦ／水混合物中の水酸化リチウムの使用によって得られた生成物の鹸化反応により、対応する２−クロロ−５−（Ｎ−フェニルスルファモイル）ニコチン酸が得られる。
【０１３３】
対応する酸塩化物は、還流下、トルエン中、塩化チオニルでの処理によるかまたは当業者に周知の他の任意の脱塩化水素法によって調製される。これらの中間体とアンモニア水溶液の反応は、官能基を有していてもよい２−クロロ−５−（Ｎ−フェニルスルファモイル）ニコチンアミドの形成を可能とし、これは次に、特に、７５℃〜１５０℃の間の範囲の温度でのＰＯＣｌ３の使用によって脱水反応に関わる。Ｐ２Ｏ５または無水トリフルオロ酢酸およびピリジンなどの薬剤の別法使用もまた考えられる。
【０１３４】
最後に、一般式（ＶＩｈ）のこれらの誘導体を、２５℃〜１５０℃の間の様々な温度で、エタノールなどの極性溶媒中、官能基を有するまたは有さないヒドラジンの存在下で反応させて、対応する一般式（ＶＩＩｄ）の誘導体を形成する。
【０１３５】
方法Ｂ５：
下記のダイアグラム１０に示される方法Ｂ５により、特に、Ｗ＝Ｈ、（Ｃ１−Ｃ６）アルキル、アリールまたはベンジルの場合に、官能基を有していてもよいベンジルエーテル官能基を特徴とするピラゾロピリジン二環が得られる。
【化２１】
2019031542.tif 000030
【０１３６】
下記の方法は、J. Baldwin et al., J. Heterocyclic. Chem., 1980, 17(3), 445-448の研究によって示唆される。６位に官能基を有していてもよい５−ヒドロキシニコチノニトリル誘導体は、一般に、塩基の存在下での官能基を有していてもよいベンジルハライドの使用によってアルキル化される。好ましい方法は、ＤＭＦなどの非プロトン性極性溶媒およびＮａＨなどの塩基の使用を必要とする。最適な反応温度は、２０℃〜１００℃の間である。あるいは、使用可能な溶媒としては、例えば、ＴＨＦ、ＤＭＳＯ、ジオキサン、アセトニトリル、ジクロロメタンまたはアセトンおよびｔＢｕＯＫ、ＤＩＰＥＡ、ピリジン、トリエチルアミン、ＤＢＵまたは炭酸ナトリウム、炭酸カリウムもしくは炭酸セシウムなどの塩基が含まれる。
【０１３７】
ピリジン環の、ピリジン−Ｎ−オキシドへの酸化は、一般に、室温でジクロロメタン中ｍ−ＣＰＢＡの使用により行われる。しかしながらやはり、多くの別法、特に、レニウム触媒の存在下での過炭酸ナトリウム、酢酸の存在下での過ホウ酸ナトリウムまたは尿素−過酸化水素複合体の使用に基づくものが企図される。
【０１３８】
これらのピリジン−Ｎ−オキシド誘導体のオキシ塩化リンでの処理は、対応する２−クロロニコチノニトリル（ＶＩ）の形成をもたらす。
【０１３９】
加熱下、イソプロパノールまたはエタノールなどの極性溶媒中での、官能基を有するまたは有さないヒドラジンとのそれらの反応は、求めるピラゾロピリジン二環（ＶＩＩｅ）の形成をもたらす。
【０１４０】
方法Ｂ６：
下記のダイアグラム１０ａに示される方法Ｂ６により、特に、Ｗ＝Ｈ、（Ｃ１−Ｃ６）アルキル、アリールまたはベンジルの場合に、逆転したスルホンアミド官能基を特徴とする、官能基を有していてもよいピラゾロピリジンおよびピラゾロピラジン二環が得られる。
【化２２】
2019031542.tif 000031
【０１４１】
下記の方法は、芳香族アミンおよびアリールスルホニルハライド、または他の任意の等価の試薬から、場合により溶媒または補助溶媒として導入することができる塩基の存在下で、スルホンアミド官能基を形成することからなる。あるいは、アリールスルホニルハライドまたはその等価物をｉｎ  ｓｉｔｕで生成することもできる。
【０１４２】
加熱下、イソプロパノールまたはエタノールなどの極性溶媒中、官能基を有するまたは有さないヒドラジンとのそれらの反応により、所望のピラゾロピリジンおよびピラゾロピラジン二環（ＶＩＩｆ）の形成がもたらされる。
【０１４３】
方法Ｃ：
方法Ｃは、ダイアグラム１に記載のとおり一般式（ＸＩ）の化合物の調製を目的とする。
【０１４４】
方法Ｃ１：
下記のダイアグラム１１に示される方法Ｃ１は、Ｒｎ＝ハロゲン、メシレート、トシレートまたはトリフレートであり、Ｘ＝Ｏ、Ｓ、ＮＨ、Ｎ−（Ｃ１−Ｃ−）アルキルであり、および場合により、（Ｘｃ）および（Ｘｄ）ではＣＨ２であり、およびＲｊ＝ＨまたはＮ保護基である場合の、６位に官能基を有するピラゾロピリジンおよびピラゾロピラジンの調製を意図する。
【０１４５】
この方法はまた、特に、−ＡｒＣＨ２ＮＨ−、−ＡｒＣＨ２Ｎ（Ｒ４）−、−ＡｒＣＨ２Ｏ−、−ＡｒＣＨ２Ｓ−、−ＡｒＣＨ２ＣＨ２−、−ＡｒＣＨＣＨ−、または−ＡｒＣＣ−を表すＡｒＸ基に相当する二原子Ｘ基を含んでなる分子の合成を行うためにも使用することができる。
【化２３】
2019031542.tif 000032
【０１４６】
６−ヒドロキシ−２−（メチルチオ）ニコチノニトリルまたは５−ヒドロキシ−３−（メチルチオ）ピラジン−２−カルボニトリルを、一般に、オキシ塩化リンの存在下、溶媒を用いて、または無溶媒で、７０℃〜１８０℃の間の様々な温度で、脱塩化水素反応に付す。溶媒が使用される場合には、トルエンまたはキシレンなどの高沸点非極性溶媒が好ましい。あるいは、対応するトシレート、メシレートまたはトリフレートの形成を介したスルホン酸エステルへのそれらの誘導体化により、６−ヒドロキシ−２−（メチルチオ）ニコチノニトリルおよび５−ヒドロキシ−３−（メチルチオ）ピラジン−２−カルボニトリルを活性化することができる。この選択肢が好ましい場合、有機または無機塩基の存在下で、トルエン、ジクロロメタン、ＴＨＦ、アセトニトリル、アセトンまたはジオキサンなどの溶媒中、塩化トシル、塩化メシルまたは塩化トリフリルの使用により、これらの誘導体が得られる。
【０１４７】
この選択肢が好ましい場合、それぞれ得られた６−クロロ−２（メチルチオ）ニコチノニトリルおよび５−クロロ−３−（メチルチオ）ピラジン−２−カルボニトリル、またはそれらのスルホン酸エステル類似体を次に、芳香族求核置換の面において、フェノール、アニリンまたはチオフェノールなどの求核試薬と反応させる。この場合、この反応は、カリウムｔｅｒｔ−ブチレートまたはＮａＨなどの塩基の存在下、ＤＭＳＯ、ＤＭＦ、アセトン、ＴＨＦまたはアセトニトリルなどの極性溶媒中で行われる。必要に応じて、これらの反応は銅の作用によって触媒することができ、溶媒を用いずに行うこともできる。一般に、好ましいプロトコールは、２０℃〜１５０℃の間の範囲の温度を必要とする。
【０１４８】
あるいは、ピリジン、ジイソプロピルアミン、トリエチルアミンもしくはＤＢＵなどの有機塩基、または炭酸ナトリウムまたはカリウムなどの無機塩基の使用も可能である。
【０１４９】
あるいは、式（ＩＸｂ）の化合物は、鈴木の反応などの触媒的カップリング反応を生じ得る。この場合、これらの化合物を、トルエン、ベンゼン、ＴＨＦまたはジオキサンなどの溶媒中、前記方法Ｂ３ですでに記載されている置換されていてもよい２−ベンジル−４，４，５，５−テトラメチル−１，３，２−ジオキサボロラン、Ｐｄ（ｄｐｐｆ）Ｃｌ２またはＰｄ（ＰＰｈ３）４などのパラジウム触媒、トリエチルアミンもしくはアルコレートなどの有機塩基、または炭酸ナトリウム、炭酸カリウムもしくは炭酸セシウムなどの無機塩基と合わせる。好ましい反応温度は２０℃〜１００℃の間である。
【０１５０】
これらの方法のうちのあるものまたは別のものによって得られる誘導体を次に、一般にｍ−ＣＰＢＡまたはオキソンの使用によって酸化し、対応するメチルスルホキシドまたはメチルスルホンを形成する。これらの化合物は混合物として得られる場合もあるが、２５℃〜１５０℃の間の様々な温度で、エタノールなどの極性溶媒中、置換されていてもよいヒドラジンに使用によって、アミノピラゾール環形成反応にそのまま使用される。
【０１５１】
あるいは、特に、合成工程を逆転させることによって、一連の反応を改変することもできる。
【０１５２】
方法Ｃ２：
下記のダイアグラム１２に示される方法Ｃ２は、Ｘ＝Ｏ、Ｓ、ＮＨ、Ｎ−（Ｃ１−Ｃ−）アルキル、またはＣＨ２であり、およびＲｊ＝ＨまたはＮ保護基である場合の、６位に官能基を有するピラゾロピリジンおよびピラゾロピリダジンの調製を意図する。
【化２４】
2019031542.tif 000033
【０１５３】
６−ヒドロキシ−４−（メチルチオ）ニコチノニトリルまたは６−ヒドロキシ−４−（メチルチオ）ピリダジン−３−カルボニトリル誘導体を、一般に、ｍ−ＣＰＢＡまたはオキソンの使用によって酸化し、対応するメチルスルホキシドまたはメチルスルホンを形成する。これらの化合物は混合物として得られる場合もあるが、２５℃〜１５０℃の間の様々な温度で、エタノールなどの極性溶媒中、置換されていてもよいヒドラジンの使用によって、アミノピラゾール環形成反応にそのまま使用される。
【０１５４】
このようにして得られたピラゾロピリジンおよびピラゾロピリダジンを、一般に、オキシ塩化リンの存在下、溶媒を用いて、または無溶媒で、７０℃〜１８０℃の間の様々な温度で、脱塩化水素反応に付す。溶媒が使用される場合には、トルエンまたはキシレンなどの高沸点非極性溶媒が好ましい。それぞれ得られた置換されていてもよい６−クロロ−ピラゾロ［４，３−ｃ］ピリジン−３−アミンおよび６−クロロ−ピラゾロ［４，３−ｃ］ピリダジン−３−アミンを次に、芳香族求核置換の面においてフェノール、アニリンまたはチオフェノールなどの求核試薬と反応させる。この場合、この反応は、カリウムｔｅｒｔ−ブチレートまたはＮａＨなどの塩基の存在下、ＤＭＳＯ、ＤＭＦ、アセトン、ＴＨＦまたはアセトニトリルなどの極性溶媒中で行われる。必要に応じて、これらの反応は銅の作用によって触媒することができ、溶媒を用いずに行うこともできる。一般に、好ましいプロトコールは、２０℃〜１５０℃の間の範囲の温度を必要とする。
【０１５５】
あるいは、ピリジン、ジイソプロピルアミン、トリエチルアミンもしくはＤＢＵなどの有機塩基、または炭酸ナトリウムもしくは炭酸カリウムなどの無機塩基の使用も可能である。
【０１５６】
あるいは、式（ＸＩＶａ）の化合物は、鈴木の反応などの触媒的カップリング反応を生じ得る。この場合、これらの化合物を、トルエン、ベンゼン、ＴＨＦまたはジオキサンなどの溶媒中、前記方法Ｂ３ですでに記載されている置換されていてもよい２−ベンジル−４，４，５，５−テトラメチル−１，３，２−ジオキサボロラン、Ｐｄ（ｄｐｐｆ）Ｃｌ２またはＰｄ（ＰＰｈ３）４などのパラジウム触媒、トリエチルアミンもしくはアルコレートなどの有機塩基、または炭酸ナトリウム、炭酸カリウムもしくは炭酸セシウムなどの無機塩基と合わせる。好ましい反応温度は２０℃〜１００℃の間である。
【０１５７】
方法Ｃ３：
下記のダイアグラム１２ａに示される方法Ｃ３は、フェネートまたはチオフェネートなど陰イオン性求核試薬によるか、または塩化ベンジル亜鉛などの有機金属による２，６−ジクロロニコチノニトリルの位置選択的官能基化に基づく方法Ｃ１の変形である。後者の場合、反応は例えば、パラジウム（ＩＩ）錯体で触媒される。このようにして得られたクロロニコチノニトリルの、対応するピラゾロピリジンへの変換は、Ｙ１＝ＣＨの場合、方法Ａ１で従前に記載した通りに行われる。
【化２５】
2019031542.tif 000034
【０１５８】
方法Ｄ：
これらの方法は、様々な触媒的カップリング法の使用による一般式（Ｉ）または（ＶＩＩ）の化合物の合成を目的とする。
【０１５９】
方法Ｄ１：
下記のダイアグラム１３に示される方法Ｄ１では、パラジウム錯体により触媒されるｉｎ  ｓｉｔｕで調製された有機亜鉛化合物と臭化アリールの間の、J.A.C.S., 1984, 106, 158に記載されているようなカップリング反応を使用する。
【化２６】
2019031542.tif 000035
【０１６０】
置換されていてもよい３−アミノ−ジアザインダゾールまたは３−アミノ−アザインダゾールを、触媒量の（ｄｐｐｆ）２ＰｄＣｌ２・ＣＨ２Ｃｌ２などのパラジウム錯体の存在下、ＴＨＦまたはジオキサンなどの非プロトン性極性溶媒中、置換されていてもよい塩化亜鉛ベンジルと合わせる。カップリング反応は、２５℃〜１００℃の間の範囲の温度で行われる。
【０１６１】
方法Ｄ２：
下記のダイアグラム１４に示される方法Ｄ２では、銅錯体により触媒される、チオール、特に、チオフェノールまたはベンジルチオールと、ヨウ化アリールとの間の、Gueiffier A. et al., Tetrahedron, 2006, 62, 6042-6049に記載されているようなカップリング反応を使用する。
【化２７】
2019031542.tif 000036
【０１６２】
この反応は一般に、２−プロパノールなどの高沸点極性溶媒中、触媒量のポリエチレングリコール、ヨウ化銅（ＣｕＩ）などの金属塩および炭酸カリウム、炭酸カルシウムまたは炭酸ナトリウムなどの過剰量の無機塩基の存在下で行われる。反応温度は一般に、５０℃〜１００℃の間で様々である。
【０１６３】
方法Ｄ３：
下記のダイアグラム１５方法Ｄ３では、銅およびパラジウム錯体により触媒される、アセチレン誘導体とアリールハライドとの間の、Sonogashira, K. et al.によりTetrahedron Lett., 1975, 16, 4467-4470に記載されているようなカップリング反応使用する。
【化２８】
2019031542.tif 000037
【０１６４】
このような反応は一般に、触媒量のパラジウム錯体、例えば、ＰｄＣｌ２（ＰＰｈ３）２またはＰｄ（ＰＰｈ３）４、触媒量の銅塩、例えば、ＣｕＩ、およびトリエチルアミンもしくはＤＩＰＥＡなどの有機塩基、または炭酸カリウムもしくは炭酸セシウムなどの無機塩基の存在下、不活性雰囲気下でのヘテロアリールハライドと化学量論量置換されていてもよいエチニルベンゼンとの反応によって行われる。プロトコールは一般に、ＤＭＦ、ＴＨＦ、ジオキサンまたはジエチルエーテルを含む溶媒中、２０℃〜４５℃の間の範囲の反応温度を必要とする。
【０１６５】
方法Ｅ：
方法Ｅのプロトコールは、アミノピラゾール環の環外アミンを、ｉｎ  ｓｉｔｕで生成されてもよい酸塩化物、イソシアネート、イソチオシアネートまたはアルデヒドなどの求電子官能基を特徴とする中間体とそれらの反応によって官能基化することを目的とする。
【０１６６】
方法Ｅ１：
下記のダイアグラム１６に示される方法Ｅ１は、アミノピラゾール化合物の第一級環外アミン官能基のアミド官能基への変換を目的とする。
【化２９】
2019031542.tif 000038
【０１６７】
これらの化合物は、テトラヒドロフランなどの溶媒中、塩化オキサリルおよび触媒量のＤＭＦの使用によって予め調製した適切な酸塩化物の添加によって、対応する３−アミノピラゾールを経て合成される。これらの酸塩化物は、当業者に周知の塩化チオニルまたはオキシ塩化リンの使用に基づくものなどの別法の使用によっても得ることができる。アミノピラゾール上での酸塩化物の縮合は一般に、テトラヒドロフラン、トルエンまたはジクロロメタンなどの非プロトン性溶媒中、ＤＩＰＥＡ、ピリジンまたはトリエチルアミンなどの塩基の存在下で行われる。
【０１６８】
あるいは、溶媒としての塩基、特に、ピリジンの使用が可能である。
【０１６９】
あるいは、この種の反応は、周知のＳｃｈｏｔｔｅｎ−Ｂａｕｍａｎｎ法に従う二相系で行ってもよい。
【０１７０】
あるいは、アミド結合の形成は、対応する３−アミノピラゾールおよび対象とする酸から、テトラヒドロフラン、ジオキサン、ジクロロメタンなどの非プロトン性溶媒または類似の特性を有する任意の溶媒中、−２０℃〜１００℃の間の範囲の温度で、ＨＯＢｔ（ヒドロキシベンゾトリアゾール）、ＴＢＴＵ（Ｏ−（ベンゾトリアゾール−１−イル）−Ｎ，Ｎ，Ｎ’，Ｎ’−テトラメチルウロニウムテトラフルオロボレート）、ＨＡＴＵ（２−（１Ｈ−７−アザベンゾトリアゾール−１−イル）−１，１，３，３−テトラメチルウロニウムヘキサフルオロホスフェート）、ＥＤＣＩ（１−エチル−３−（３−ジメチルアミノプロピル）カルボジイミド）またはカルボニルジイミダゾールなどの試薬を用いるペプチドカップリング条件の使用によって行うことができる。
【０１７１】
方法Ｅ２：
アミノピラゾール環の３位における第二級アミンの存在を特徴とする誘導体は、下記のダイアグラム１７に従う還元的アミノ化反応によって合成される。
【化３０】
2019031542.tif 000039
【０１７２】
還元的アミノ化反応は一般に、場合により、一定量の水、ＴＦＡ（トリフルオロ酢酸）または酢酸の存在下、ＮａＢＨ４、ＮａＢＨ（ＯＡｃ）３またはＮａＢＨ３ＣＮなどの還元剤の一連の画分を加えることにより、ＤＣＥ（ジクロロエタン）、ＴＨＦまたはアセトニトリルなどの溶媒に適切な化学量論量のアミノピラゾールおよびアルデヒドを混合することによって行われる。これらの反応は一般に、室温で行われる。
【０１７３】
方法Ｅ３：
３−ウレイドまたは３−チオウレイド官能基を有する誘導体は、下記のダイアグラム１８に示される、アミノピラゾールと当業者に周知の方法に従って得られるイソシアネートまたはイソチオシアネートとの反応によって得られる。
【化３１】
2019031542.tif 000040
【０１７４】
典型的な反応では、反応混合物は、ジクロロメタン、アセトン、ＤＭＦ、ＤＭＡ、アセトニトリル、ＴＨＦまたはジオキサンなどの極性または非極性非プロトン性溶媒中、２０℃〜選択された溶媒の沸点の間の様々な温度で調製される。必要に応じて、弱い求核性有機または無機塩基に頼ることも必要であることが分かるであろう。この場合、水素化ナトリウムが可能性のある選択肢である。
【０１７５】
方法Ｆ：合成後の脱保護および修飾
方法Ｆ１：脱保護
トリフルオロ酢酸保護基は、使用する溶媒の還流温度での、メタノール、エタノールまたはＴＨＦなどの極性溶媒中、トリエチルアミンまたはピリジンなどの有機塩基の作用によって除去される。
【０１７６】
ピラゾール環が保持するｔｅｒｔ−ブチルまたはトリチル保護基は、ジクロロメタンまたはＤＣＥなどの非極性溶媒中、強酸、一般にＴＦＡの作用によって置換される。
【０１７７】
方法Ｆ２：アルキン還元
【化３２】
2019031542.tif 000041
ジアリールアルキンをジアリールアルカンへ還元するための反応は一般に、ＰｔＯ２、Ｐｔ、Ｐｄ／Ｃ、ＮｉまたはＲｈなどの触媒の存在下、水素圧下での触媒的水素化によって行われる。あるいは、Ｃｐ２ＴｉＣｌ２などの触媒の存在下または不在下でのＤＩＢＡＬ−Ｈ（水素化ジイソブチルアルミニウム）の使用も企図される。
【０１７８】
方法Ｆ３：スルフィドのスルホンおよびスルホキシドへの酸化
【化３３】
2019031542.tif 000042
スルフィドのスルホキシドへの酸化反応は一般に、ＴＨＦ／ＭｅＯＨまたはＤＭＦ／水などの極性溶媒の混合物中、オキソンの使用によって行われる。最適な反応温度は一般に２５℃〜５０℃の間である。
【０１７９】
多くの別法が利用可能であり、半酸化誘導体、すなわちスルホキシドを生成する可能性を与えるものもある。このような別法は、ｍ−ＣＰＢＡ、ジクロロメタン中ＫＭｎＯ４／ＭｎＯ２、二層媒体中のＨ２Ｏ２（３０％）の使用および相間移動触媒または尿素錯体（ＵＨＰ）の形態の触媒の存在を必要とする。
【０１８０】
Ｈ２Ｏ２とＳｃ（ＯＴｆ）３などの金属錯体の併用は、部分的酸化誘導体を促進する。
【０１８１】
他の既知の方法としては、例えば、ＣＡＮ／ＮａＢｒＯ３（ＣＡＮ＝硝酸セリウムアンモニウム）の使用が挙げられる。
【実施例】
【０１８２】
下記の略語を用いる。
ＤＭＳＯ      ジメチルスルホキシド
ＥＩ          電子衝撃
ＥＳ          エレクトロスプレー
ＬＣＭＳ      液体クロマトグラフィー−質量分析
ｍｇ          ミリグラム
ｍＬ          ミリリットル
ＮＭＲ        核磁気共鳴
【０１８３】
Ｉ．本発明による化合物の合成
方法Ａ１の例
実施例１：５−ヨード−１Ｈ−ピラゾロ［３，４−ｂ］ピリジン−３−アミン
【化３４】
2019031542.tif 000043
実施例１ａ：２−ヒドロキシ−５−ヨードニコチノニトリル
１５０ｍｌの無水ジメチルホルムアミド中、１０ｇ（８３ｍｍｏｌ）の２−ヒドロキシニコチノニトリルの溶液に、室温で９ｇ（０．５当量）のＮ−ヨードスクシンイミドを加える。この反応混合物を６０℃で撹拌する。３０分の撹拌後、９ｇ（０．５当量）のＮ−ヨードスクシンイミドを加えた後、この反応混合物を６０℃で５時間撹拌する。溶媒を蒸発させ、生じた沈殿を濾過し、水で、およびジエチルエーテルですすぎ、その後、真空下で乾燥させると、１８．５ｇ（９０％）の２−ヒドロキシ−５−ヨードニコチノニトリルがベージュ色の粉末の形態で得られる。
LCMS (EI, m/z): (M+1) 246.93
1H NMR: δHppm (400MHz, DMSO): 12.79 (1H, s, OH), 8.36 (1H, d, CHarom), 8.04 (1H, d, CHarom)
【０１８４】
実施例１ｂ：２−クロロ−５−ヨードニコチノニトリル
０℃の３０．７ｍｌ（３２９ｍｍｏｌ）のオキシ塩化リンおよび６滴の硫酸を９ｇ（６．６ｍｍｏｌ）の２−ヒドロキシ−５−ヨードニコチノニトリルに加える。この反応混合物を１１０℃で５時間加熱した後、室温で一晩置く。この反応混合物を、氷および少量の水を含有するビーカーに注ぐと、沈殿が生じる。この混合物を徐々に室温に戻した後、濾過し、水ですすぐ。固体を乾燥させると、６．８ｇ（７０％）の２−クロロ−５−ヨードニコチノニトリルが得られる。
LCMS (EI, m/z): (M+1) 265.45
1H NMR: δHppm (400MHz, DMSO): 9.61 (1H, d, CHarom), 9.14 (1H, d, CHarom)
【０１８５】
実施例１：５−ヨード−１Ｈ−ピラゾロ［３，４−ｂ］ピリジン−３−アミン
２５ｍｌのプロパン−２−オール中、２−クロロ−５−ヨードニコチノニトリルの溶液７ｇ（２６．５ｍｍｏｌ）に、室温でヒドラジン（３．８６ｍｌ、７９ｍｍｏｌ）を加える。この反応混合物を８５℃で７時間加熱した後、室温で一晩置く。懸濁固体を濾過し、イソプロパノール、次いで、エーテルですすぎ、５０℃の炉で乾燥させると、６ｇ（８７％）の５−ヨード−１Ｈ−ピラゾロ［３，４−ｂ］ピリジン−３−アミンが得られる。
LCMS (EI, m/z): (M+1) 260.95
1H NMR: δHppm (400MHz, DMSO): 12.12 (1H, bs, NH), 8.51(1H, d, CHarom), 8.45 (1H, d, CHarom), 5.64 (2H, bs, NH2)
【０１８６】
下記の化合物が同じ方法に従って得られた。
【化３５】
2019031542.tif 000044
【０１８７】
【表２】
2019031542.tif 000045
** 1H NMR, DMSO-d6, 実施例1-2: 8.55 (1H, bs, CHarom), 8.42 (1H, bs, CHarom), 6.33 (1H, bs, CHarom), 1.57 (9H, s, CH); 1-3: 11.92 (1H, s, NH), 8.55 (1H, s, CHarom), 5.59 (2H, bs, NH2), 2.66 (3H, s, CH3)
【０１８８】
実施例２：５−ブロモ−１Ｈ−ピラゾロ［３，４−ｂ］ピリジン−３−アミン
【化３６】
2019031542.tif 000046
実施例２ａ：２−メトキシ−ニコチノニトリル
４．９８ｇ（２１７ｍｍｏｌ）のナトリウムを８０ｍｌの無水メタノールに加える。この反応媒体を室温で１０分間撹拌した後、１０ｇ（７２．２ｍｍｏｌ）の２−クロロニコチノニトリルを０℃で加える。この反応媒体を２５℃で１６時間撹拌する。この反応物を０℃で水をゆっくり加えることによって加水分解する。室温に戻した後、得られた沈殿を濾過し、水ですすぎ、その後、５０℃で乾燥させると、７．８５ｇ（８１％）の２−メトキシ−ニコチノニトリルが黄色固体の形態で得られる。
LCMS (EI, m/z): (M+1) 135.04
1H NMR: δHppm (400MHz, DMSO): 8.46-8.48 (1H, dd, CHarom), 8.25-8.27 (1H, dd, CHarom), 7.17-7.20 (1H, dd, CHarom), 3.99 (3H, s, CH3) 
【０１８９】
実施例２ｂ：５−ブロモ−２−メトキシ−ニコチノニトリル
２９ｍｌの酢酸中、２−メトキシ−ニコチノニトリルの溶液１０ｇ（７４．６ｍｍｏｌ）に、０℃で１２．２３ｇ（１４９ｍｍｏｌ）の酢酸ナトリウム、次いで、７．６６ｍｌ（１４９ｍｍｏｌ）の臭素を加える。この反応混合物を７０℃で一晩加熱する。室温に戻した後、反応媒体を氷浴に入れ、得られた沈殿を濾過し、水ですすいだ後、５０℃で乾燥させると、１１．６ｇ（７３％）の５−ブロモ−２−メトキシ−ニコチノニトリルが白色固体の形態で得られる。
LCMS (EI, m/z): (M+1) 214.95
1H NMR: δHppm (400MHz, DMSO): 8.61 (1H, d, CHarom), 8.60 (1H, d, CHarom), 3.98 (3H, s, CH3)
【０１９０】
実施例２：５−ブロモ−１Ｈ−ピラゾロ［３，４−ｂ］ピリジン−３−アミン
３５ｍｌ（２３．４７ｍｍｏｌ）のヒドラジンを室温で５ｇ（２３．４７ｍｍｏｌ）の５−ブロモ−２−メトキシニコチノニトリルに加える。この反応媒体を１００℃で３時間保持する。室温に戻した後、得られた沈殿を濾過し、水ですすいだ後、５０℃で乾燥させると、３．６ｇ（７２％）の５−ブロモ−１Ｈ−ピラゾロ［３，４−ｂ］ピリジン−３−アミンが黄色固体の形態で得られる。
LCMS (EI, m/z): (M+1) 214.05
1H NMR: δHppm (400MHz, DMSO): 12.18 (1H, s, NH), 8.38 (1H, d, CHarom), 8.37 (1H, d, CHarom), 5.66 (2H, s, NH)
【０１９１】
方法Ａ２の例
実施例３：５−ヨード−１Ｈ−ピラゾロ［３，４−ｂ］ピラジン−３−アミン
【化３７】
2019031542.tif 000047
実施例３ａ：３−アミノ−６−ヨードピラジン−２−カルボン酸メチル
２５ｍｌのジメチルホルムアミド中の３−アミノピラジン−２−カルボン酸メチル溶液５ｇ（３２．７ｍｍｏｌ）に、室温で１．５当量のＮ−ヨードスクシンイミドを加える。この反応媒体を６５℃で１時間加熱し、０．５当量のＮ−ヨードスクシンイミドと合わせ、６５℃で２４時間維持する。室温に戻した後、溶媒を蒸発させ、その後、生成物をジクロロメタンで数回抽出する。有機層を合わせ、１０％重亜硫酸ナトリウム溶液で洗浄し、硫酸マグネシウムで乾燥させ、濃縮すると、８ｇ（８８％）の３−アミノ−６−ヨードピラジン−２−カルボン酸メチルが黄色固体の形態で得られる。
LCMS (EI, m/z): (M+1) 280
1H NMR: δHppm (400MHz, DMSO): 8.50 (1H, s, CHarom), 7.50 (2H, bs, NH2), 3.20 (3H, s, CH3)
【０１９２】
実施例３ｂ：３−アミノ−６−ヨードピラジン−２−カルボキサミド
１５０ｍｌのメタノール中、３−アミノ−６−ヨードピラジン−２−カルボン酸メチルの溶液１５ｇ（５３．８ｍｍｏｌ）に、磁気撹拌下、３０ｍｌのアンモニア水を加える。この反応媒体を２５℃で４８時間撹拌する。溶媒の蒸発後、得られた沈殿を濾過し、水ですすいだ後、５０℃で乾燥させると、１２．５０ｇの３−アミノ−６−ヨードピラジン−２−カルボキサミド（８８％）がベージュ色の固体の形態で得られる。
LCMS (EI, m/z): (M+1) 265.02
1H NMR: δHppm (400MHz, DMSO): 8.35 (1H, s, CHarom), 7.85 (1H, bs, NH), 7.60 (3H, bs, NH), 3.25 (3H, s, CH3)
【０１９３】
実施例３ｃ：Ｎ’−（３−シアノ−５−ヨードピラジン−２−イル）−Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムイミドアミド
８０ｍｌのジメチルホルムアミド中、３−アミノ−６−ヨードピラジン−２−カルボキサミドの溶液１１ｇ（４１．７ｍｍｏｌ）に、０℃で１３．５９ｍｌ（１４６ｍｍｏｌ）のオキシ塩化リンを滴下する。この反応混合物を室温で一晩撹拌した後、氷と少量の水を含有するビーカーに注ぐ。１Ｎソーダ溶液でｐＨを８に調整すると、沈殿が生じる。この混合物を徐々に室温に戻した後、生じた固体を濾過し、水ですすぎ、５０℃で乾燥させると、１０．５０ｇのＮ’−（３−シアノ−５−ヨードピラジン−２−イル）−Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムイミドアミド（８４％）がベージュ色の固体の形態で得られる。
LCMS (EI, m/z): (M+1) 302.07
1H NMR: δHppm (400MHz, DMSO): 8.69 (1H, s, CHarom), 8.67 (1H, s, CHethyl), 3.20 (3H, s, CH3), 3.11 (3H, s, CH3)
【０１９４】
実施例３ｄ：３−アミノ−６−ヨードピラジン−２−カルボニトリル
７７ｍｌ（７７ｍｍｏｌ）の１Ｍ塩酸溶液を７．７ｇ（２５．６ｍｍｏｌ）のＮ’−（３−シアノ−５−ヨードピラジン−２−イル）−Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムイミドアミドに加える。この反応媒体を５０℃で４時間加熱した後、室温で一晩撹拌する。生じた沈殿を濾過し、水ですすぎ、５０℃で乾燥させると６ｇ（９５％）の３−アミノ−６−ヨードピラジン−２−カルボニトリルがベージュ色の固体の形態で得られる。
LCMS (EI, m/z): (M+1) 247.0
1H NMR: δHppm (400MHz, DMSO): 8.49 (1H, s, CHarom), 7.53 (2H, bs, NH2)
【０１９５】
実施例３ｅ：３−クロロ−６−ヨードピラジン−２−カルボニトリル
６４．３ｍｌの塩酸を−５℃で７．７ｇ（３１．３ｍｍｏｌ）の３−アミノ−６−ヨードピラジン−２−カルボニトリルに加える。この温度で、９ｍｌの水に溶かした亜硝酸ナトリウム溶液（４．３２ｇ、６２．６ｍｍｏｌ）を反応混合物に加え、−５０℃で４時間、次いで、室温で一晩撹拌する。さらに同量の亜硝酸ナトリウムを反応混合物に加え、生じた沈殿を濾過し、水ですすぎ、５０℃で乾燥させると、３．６５ｇ（４４％）の３−クロロ−６−ヨードピラジン−２−カルボニトリルがベージュ色の固体の形態で得られる。
LCMS (EI, m/z): (M+1) 266.49
1H NMR: δHppm (400MHz, DMSO): 9.13 (1H, s, CHarom)
【０１９６】
実施例３：５−ヨード−１Ｈ−ピラゾロ［３，４−ｂ］ピラジン−３−アミン
１５ｍｌのブタノール中、３−クロロ−６−ヨードピラジン−２−カルボニトリルの溶液２．６ｇ（９．８０ｍｍｏｌ）に、０．７４ｍｌ（９．８ｍｍｏｌ）のヒドラジンを加える。この反応混合物を１１０℃で５時間加熱した後、室温で一晩放置する。懸濁固体を濾過し、ブタノールですすいだ後、５０℃の炉で乾燥させると、２．２ｇ（８６％）の５−ヨード−１Ｈ−ピラゾロ［３，４−ｂ］ピラジン−３−アミンが褐色固体の形態で得られる。
LCMS (EI, m/z): (M+1) 262.02
1H NMR: δHppm (400MHz, DMSO): 12.59 (1H, bs, NH), 8.60 (1H, d, CHarom), 5.83 (2H, bs, NH2)
【０１９７】
方法Ａ３の例
実施例４：５−ヨード−６−メトキシ−１Ｈ−ピラゾロ［３，４−ｂ］ピリジン−３−アミン
【化３８】
2019031542.tif 000048
実施例４ａ：５−シアノ−２−ヒドロキシ−６−（メチルチオ）ニコチン酸エチル
５−シアノ−２−ヒドロキシ−６−（メチルチオ）ニコチン酸エチルは、Ya. Yu. Yakunin et al., Russian Chemical Bulletin, 1999, 48(1), 195-6の手順に従い、総収率３４％で得られる。
LCMS (EI, m/z): (M-1) 237.22
1H NMR: δHppm (400MHz, DMSO): 12.72 (1H, bs, OH), 8.40 (1H, s, CHarom), 4.29 (2H, q, CH2), 2.64 (3H, s, CH3), 1.30 (3H, t, CH3)
【０１９８】
実施例４ｂ：５−シアノ−２−ヒドロキシ−６−（メチルチオ）ニコチン酸
１００ｍｌのエタノールおよび１００ｍｌの水中、１１．８ｇ（４９．５ｍｍｏｌ）の５−シアノ−２−ヒドロキシ−６−（メチルチオ）ニコチン酸エチルの溶液に、室温で４．１６ｇ（２当量）の水酸化リチウム一水和物を加える。この反応混合物を６０℃で２時間撹拌する。エタノールを蒸発させ、１Ｎのソーダ水溶液を加える。水相を酢酸エチルで洗浄した後、１Ｎ塩化水素水溶液（ｐＨ＝１）を加えることにより再酸性化する。生じた沈殿を濾過し、水で、およびジエチルエーテルですすぎ、その後、真空下で乾燥させると、９．９ｇ（９５％）の５−シアノ−２−ヒドロキシ−６−（メチルチオ）ニコチン酸が褐色粉末の形態で得られる。
LCMS (EI, m/z): (M-1) 209.09
1H NMR: δHppm (400MHz, DMSO): 8.32 (1H, s, CHarom), 2.61 (3H, s, CH3)
【０１９９】
実施例４ｃ：６−ヒドロキシ−２−（メチルチオ）ニコチノニトリル
３５ｍｌのジフェニルエーテル中、６ｇ（２８．５ｍｍｏｌ）の５−シアノ−２−ヒドロキシ−６−（メチルチオ）ニコチン酸の溶液を２５０℃で４時間撹拌する。室温に戻した後、１００ｍｌのシクロヘキサンを加え、反応媒体を３０分間摩砕する。生じた固体を濾過し、シクロヘキサンで十分にすすいだ後、真空下で乾燥させると、２．８７ｇ（６０％）の６−ヒドロキシ−２−（メチルチオ）ニコチノニトリルが褐色粉末の形態で得られる。
LCMS (EI, m/z): (M+1) 167.12
1H NMR: δHppm (400MHz, DMSO): 12.16 (1H, bs, OH), 7.92 (1H, d, CHarom), 6.46 (1H, d, CHarom), 2.59 (3H, s, CH3)
【０２００】
実施例４ｄ：６−ヒドロキシ−５−ヨード−２−（メチルチオ）ニコチノニトリル
２００ｍｌのエタノール中、２ｇ（１２ｍｍｏｌ）の６−ヒドロキシ−２−（メチルチオ）ニコチノニトリルの溶液に、６ｇ（１．６当量）の硫酸銀および４．５８ｇ（１．５当量）のヨウ素を順次加える。この反応媒体を室温で２時間撹拌する。固体を濾過し、残渣をメタノールで十分にすすぐ。濾液を蒸発させた後、酢酸エチルにとる。有機相を水で３回洗浄し、硫酸マグネシウムで乾燥、蒸発させると、３．１８ｇ（９０％）の６−ヒドロキシ−５−ヨード−２−（メチルチオ）ニコチノニトリルが黄色粉末の形態で得られる。
LCMS (EI, m/z): (M+1) 292.93
1H NMR: δHppm (400MHz, DMSO): 12.96 (1H, bs, OH), 8.38 (1H, s, CHarom), 2.62 (3H, s, CH3)
【０２０１】
実施例４ｅ：５−ヨード−６−メトキシ−２−（メチルチオ）ニコチノニトリル
２０ｍｌの１，４−ジオキサン中、２．１２ｇ（７．２６ｍｍｏｌ）の６−ヒドロキシ−５−ヨード−２−（メチルチオ）ニコチノニトリルの溶液に、９０５μｌ（２当量）のヨウ化メチルおよび２．１ｇ（１．０５当量）の炭酸銀を順次加える。この反応媒体を６０℃で５時間撹拌する。固体を濾過し、残渣をメタノールで十分にすすぐ。濾液を蒸発させ、残渣をシリカカラムクロマトグラフィー（溶離剤として４：６ジクロロメタン／シクロヘキサン）により精製すると、１．５２ｇ（６８％）の５−ヨード−６−メトキシ−２−（メチルチオ）ニコチノニトリルが白色粉末の形態で得られる。
LCMS (EI, m/z): (M+1) 306.95
1H NMR: δHppm (400MHz, DMSO): 8.50 (1H, s, CHarom), 4.04 (3H, s, CH3), 2.63 (3H, s, CH3)
【０２０２】
実施例４ｆ：５−ヨード−６−メトキシ−２−（メチルスルフィニル）ニコチノニトリル
２０ｍｌのジクロロメタン中、１．６ｇ（５．２３ｍｍｏｌ）の５−ヨード−６−メトキシ−２−（メチルチオ）ニコチノニトリルの溶液に、１．４２ｇ（１．１当量）の７０％  ３−クロロ過安息香酸を加える。この反応媒体を室温で１時間撹拌する。酢酸エチルを加え、有機相を飽和重炭酸ナトリウム溶液で洗浄し、硫酸マグネシウムで乾燥させ、濾過し、蒸発させると、１．６３ｇ（９７％）の５−ヨード−６−メトキシ−２−（メチルスルフィニル）ニコチノニトリルが白色粉末の形態で得られ、これはまた５−ヨード−６−メトキシ−２−（メチルスルホニル）ニコチノニトリルも低比率（＜２０％）で含有している可能性がある。必要に応じて、この混合物はそのまま次の工程で使用される。
LCMS (EI, m/z): (M+1) 322.95
1H NMR: δHppm (400MHz, DMSO): 8.86 (1H, s, CHarom), 4.05 (3H, s, CH3), 2.95 (3H, s, CH3)
【０２０３】
実施例４：５−ヨード−６−メトキシ−１Ｈ−ピラゾロ［３，４−ｂ］ピリジン−３−アミン
３０ｍｌの２−プロパノール中、１．６３ｇ（５．０５ｍｍｏｌ）の５−ヨード−６−メトキシ−２−（メチルスルフィニル）ニコチノニトリルの溶液に、２９４μｌ（１．２当量）のヒドラジン一水和物を加える。この反応媒体を８０℃で９時間撹拌する。室温に戻した後、生じた固体を濾過し、２−プロパノールですすぐと、１．１４ｇ（７８％）の５−ヨード−６−メトキシ−１Ｈ−ピラゾロ［３，４−ｂ］ピリジン−３−アミンが白色粉末の形態で得られる。
LCMS (EI, m/z): (M+1) 291.00
1H NMR: δHppm (400MHz, DMSO): 11.87 (1H, s, NH), 8.49 (1H, s, CHarom), 5.49 (2H, bs, NH2), 3.90 (3H, s, CH3)
【０２０４】
実施例５：５−ヨード−１Ｈ−ピラゾロ［３，４−ｂ］ピリジン−３，６−ジアミン
【化３９】
2019031542.tif 000049
実施例５ａ：４−メチルモルホリニウム（２，４）−エチル−５−アミノ−２，４−ジシアノ−５−メルカプトペンタ−２，４−ジエノエート
４−メチルモルホリニウム（２，４）−エチル−５−アミノ−２，４−ジシアノ−５−メルカプトペンタ−２，４−ジエノエートは、V.D. Dyachenko et al., Chemistry of Heterocyclic Compounds, 2005, 41(4), 503-10に記載されている手順に従って、収率５０％で調製される。
1H NMR: δHppm (400MHz, DMSO): 9.60 (1H, bs, NH), 8.66 (1H, s, CH), 8.33 (1H, bs, NH), 7.43 (1H, bs, NH), 4.08 (2H, q, CH2), 3.82-4.02 (2H, m, CH2), 3.55-3.78 (2H, m, CH2), 3.24-3.42 (2H, m, CH2), 3.98-3.17 (2H, m, CH2), 2.81 (3H, s, CH3), 1.19 (3H, t, CH3)
【０２０５】
実施例５ｂ：２−アミノ−５−シアノ−６−（メチルチオ）ニコチン酸エチル
７８ｍｌのＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド中、１４．２ｇ（４３．８ｍｍｏｌ）の４−メチルモルホリニウム（２，４）−エチル−５−アミノ−２，４−ジシアノ−５−メルカプトペンタ−２，４−ジエノエートの溶液に、２．７３ｍｌ（１当量）のヨウ化メチルを加える。この反応混合物を室温で１時間、次いで、７５℃で２０時間撹拌する。室温に戻した後、水を加え、生じた固体を濾過し、真空下で乾燥させると、１０．３１ｇ（１００％）の２−アミノ−５−シアノ−６−（メチルチオ）ニコチン酸エチルがベージュ色の粉末の形態で得られる。
LCMS (EI, m/z): (M+1) 238.20
1H NMR: δHppm (400MHz, DMSO): 8.25 (1H, s, CHarom), 8.19 (1H, bs, NH), 7.99 (1H, bs, NH), 4.27 (2H, q, CH2), 2.58 (3H, s, CH3), 1.31 (3H, t, CH3)
【０２０６】
実施例５ｃ：２−アミノ−５−シアノ−６−（メチルチオ）ニコチン酸
８７ｍｌのエタノールおよび８７ｍｌの水中、８．７ｇ（３６．７ｍｍｏｌ）の２−アミノ−５−シアノ−６−（メチルチオ）ニコチン酸エチルの溶液に、室温で３．０８ｇ（２当量）の水酸化リチウム一水和物を加える。この反応混合物を６０℃で２時間撹拌する。エタノールを蒸発させ、１Ｎソーダ水溶液を加える。水相を酢酸エチルで洗浄した後、１Ｎ塩化水素水溶液（ｐＨ＝１）を加えることにより再酸性化する。生じた沈殿を濾過し、水で、およびジエチルエーテルですすぎ、その後、真空下で乾燥させると、７．６７ｇ（定量的）の２−アミノ−５−シアノ−６−（メチルチオ）ニコチン酸が褐色粉末の形態で得られる。
LCMS (EI, m/z): (M+1) 210.16
1H NMR: δHppm (400MHz, DMSO): 13.28 (1H, bs, CO2H), 8.21 (1H, s, CHarom), 8.13 (2H, bs, NH2), 2.57 (3H, s, CH3)
【０２０７】
実施例５ｄ：６−アミノ−２−（メチルチオ）ニコチノニトリル
３０ｍｌのジフェニルエーテル中、３ｇ（１４．３ｍｍｏｌ）の２−アミノ−５−シアノ−６−（メチルチオ）ニコチン酸の溶液を２５５℃で６０時間撹拌する。室温に戻した後、６０ｍｌのシクロヘキサンを加え、反応媒体を３０分間摩砕する。生じた固体を濾過した後、シクロヘキサンで十分にすすぐ。固体を酢酸エチルに再溶解させた後、有機相を水で洗浄し、硫酸マグネシウムで乾燥させ、濾過し、その後、蒸発させると、１．３２ｇ（５５％）の６−アミノ−２−（メチルチオ）ニコチノニトリルが褐色粉末の形態で得られる。
LCMS (EI, m/z): (M+1) 166.13
1H NMR: δHppm (400MHz, DMSO): 7.58 (1H, d, CHarom), 7.12 (2H, bs, NH2), 6.20 (1H, d, CHarom), 2.51 (3H, s, CH3)
【０２０８】
実施例５ｅ：６−アミノ−５−ヨード−２−（メチルチオ）ニコチノニトリル
６５ｍｌのエタノール中、１．３２ｇ（８．０２ｍｍｏｌ）の６−アミノ−２−（メチルチオ）ニコチノニトリルの溶液に、３．７５ｇ（１．５当量）の硫酸銀および２．８５ｇ（１．４当量）のヨウ素を順次加える。この反応媒体を室温で３時間撹拌する。この固体を濾過し、残渣をメタノールで十分にすすぐ。濾液を蒸発させ、酢酸エチルに再溶解させる。有機相を水で３回洗浄し、硫酸マグネシウムで乾燥させ、蒸発させると、１．８９ｇ（８１％）の６−アミノ−５−ヨード−２−（メチルチオ）ニコチノニトリルが褐色粉末の形態で得られる。
LCMS (EI, m/z): (M+1) 291.99
1H NMR: δHppm (400MHz, DMSO): 8.13 (1H, s, CHarom), 7.19 (1H, broad flat singlet, NH2), 2.51 (3H, s, CH3)
【０２０９】
実施例５ｆ：６−アミノ−５−ヨード−２−（メチルスルフィニル）ニコチノニトリル
６０ｍｌのジクロロメタン中、１．８９ｇ（６．５１ｍｍｏｌ）の６−アミノ−５−ヨード−２−（メチルチオ）ニコチノニトリルの溶液に、１．７７ｇ（１．１当量）の７０％３−クロロ過安息香酸を加える。この反応媒体を室温で１時間撹拌する。酢酸エチルを加え、有機相を飽和重炭酸ナトリウム溶液で洗浄し、硫酸マグネシウムで乾燥させ、濾過し、蒸発させると、１．５ｇ（７５％）の６−アミノ−５−ヨード−２−（メチルスルフィニル）ニコチノニトリルが白色粉末の形態で得られ、これはまた６−アミノ−５−ヨード−２−（メチルスルホニル）ニコチノニトリルも小比率（＜２０％）で含有している可能性がある。必要に応じて、この混合物はそのまま次の工程で使用される。
LCMS (EI, m/z): (M+1) 307.98
1H NMR: δHppm (400MHz, DMSO): 8.45 (1H, s, CHarom), 7.70 (2H, broad flat singlet, NH2), 2.84 (3H, s, CH3)
【０２１０】
実施例５：５−ヨード−１Ｈ−ピラゾロ［３，４−ｂ］ピリジン−３，６−ジアミン
１１ｍｌの２−プロパノール中、８７２ｍｇ（２．８４ｍｍｏｌ）の６−アミノ−５−ヨード−２−（メチルスルフィニル）ニコチノニトリルの溶液に、２７５μｌ（２当量）のヒドラジン一水和物を加える。この反応媒体を８０℃で３時間撹拌する。水を加え、生成物を酢酸エチルで抽出する。有機相を硫酸マグネシウムで乾燥させ、濾過し、蒸発させる。残渣を最少量のジイソプロピルエーテル中で摩砕する。固体を濾過すると、５２３ｍｇ（６７％）の５−ヨード−１Ｈ−ピラゾロ［３，４−ｂ］ピリジン−３，６−ジアミンが褐色粉末の形態で得られる。
LCMS (EI, m/z): (M+1) 276.00
1H NMR: δHppm (400MHz, DMSO): 11.23 (1H, s, NH), 8.26 (1H, s, CHarom), 6.11 (2H, bs, NH2), 5.25 (2H, bs, NH2)
【０２１１】
方法Ｂ１の例
実施例６：５−（３，５−ジフルオロベンジルチオ）−１Ｈ−ピラゾロ［４，３−ｂ］ピリジン−３−アミン
【化４０】
2019031542.tif 000050
実施例６ａ：６−クロロ−３−ニトロピコリノニトリル
２，６−ジクロロ−３−ニトロピリジン（５．１８ｍｍｏｌ、１ｇ）をマイクロ波反応器内で５ｍｌのＮ−メチル−２−ピロリジノンと混合する。反応混合物を１８０℃で１５分間（６バール）加熱する。粗反応生成物を酢酸エチルに溶かし、濾過し、水相を用いて数回洗浄する。有機相を回収し、硫酸マグネシウムで乾燥させ、乾燥濃縮する。このようにして得られた粗生成物をシリカゲルクロマトグラフィー（ヘプタン／ＡｃＯＥｔ）により精製し、濃縮後に０．６２ｇ（６５％）の褐色油状物が得られる。
1H NMR: δHppm (400MHz, DMSO): 8.81 (1H, d, CHarom), 8.18 (1H, d, CHarom)
【０２１２】
実施例６ｂ：３−ニトロ−６−チオキソ−１，６−ジヒドロピリジン−２−カルボニトリル
２０ｍｌのＥｔＯＨ中、６−クロロ−３−ニトロピコリノニトリル（５．４５ｍｍｏｌ、１ｇ）の溶液に、１当量のＮａＳＨ：Ｈ２Ｏを加える。色が橙色に変わる。この反応媒体を室温で３０分間撹拌する。次に、粗反応生成物を濃縮し、酢酸エチルに再溶解させ、酸性水相（１Ｎ  ＨＣｌ）、次いで、中性相を用いて数回抽出する。有機相を濃縮し、粗反応生成物をアセトン中で再結晶させると、０．６４ｇ（７９％）の黄色結晶が得られる。
1H NMR: δHppm (400MHz, DMSO): 8.71 (1H, d, CHarom), 8.27 (1H, d, CHarom)
【０２１３】
実施例６ｃ：６−（３，５−ジフルオロベンジルチオ）−３−ニトロピコリノニトリル
５ｍｌのアセトン中、３−ニトロ−６−チオキソ−１，６−ジヒドロピリジン−２−カルボニトリル（４．４２ｍｍｏｌ、１．３４ｇ）、３，５−ジフルオロベンジルベンジルブロミド(diflurobenzylbenzylbromide)（８．８３ｍｍｏｌ、１．８２８ｇ）、およびＫ２ＣＯ３（１１．０４ｍｍｏｌ、１．５２５ｇ）の混合物を７０℃で１０時間加熱した後、減圧下で蒸発させる。残渣をシリカゲルクロマトグラフィー（ＡｃＯＥｔ／ヘプタン）により精製すると、１．３３ｇ（９８％）の予想生成物が得られる。
LCMS (ES-): m/z 306 (M-H+)
1H NMR: δHppm (400MHz, DMSO): 8.53 (1H, d, CHarom), 7.91 (1H, d, CHarom), 7.21 (2H, m), 7.17 (1H, m), 4.55 (2H, CH2)
【０２１４】
実施例６ｄ：３−アミノ−６−（３，５−ジフルオロベンジルチオ）ピコリンアミド
１０ｍｌのＭｅＯＨ中、６−（３，５−ジフルオロベンジルチオ）−３−ニトロピコリノニトリル（０．０５ｇ、０．１６３ｍｍｏｌ）およびＰｔＯ２（０．７３９ｍｇ、３．２５μｍｏｌ）の混合物を撹拌下、水素圧雰囲気に２時間置く。触媒を濾過し、溶液を濃縮し、このようにして得られた残渣をシリカゲルクロマトグラフィー（ＡｃＯＥｔ／ヘプタン）により精製すると、濃縮後に０．０４ｇ（８３％）の白色結晶が得られる。
LCMS (ES+) m/z: 296 (MH+)
1H NMR: δHppm (400MHz, DMSO): 7.84 (1H, 幅広s, NH), 7.40 (1H, 幅広s, NH), 7.14 (1H, d, CHarom), 7.08 (4H, m, CHarom), 6.80 (2H, 幅広s, NH2), 4.43 (2H, s, CH2)
【０２１５】
実施例６ｅ：３−アミノ−６−（３，５−ジフルオロベンジルチオ）ピコリノニトリル
３−アミノ−６−（３，５−ジフルオロベンジルチオ）ピコリノアミド（２．３７ｍｍｏｌ、０．７ｇ）およびＰ２Ｃｌ５（９．４８ｍｍｏｌ、１．３４６ｇ）、２０ｍｌのトルエンおよび１ｍｌのイオン性溶媒（１−ブチル−３−メチルイミダゾリウムテトラフルオロボレート）の混合物をマイクロ波反応器に入れた後、１４０℃で３０分間加熱する。次に、粗反応生成物を減圧下で濃縮し、このようにして得られた橙色の結晶を酢酸エチルに再溶解させ、飽和ＮａＨＣＯ３水溶液を用いて洗浄する。有機相を硫酸マグネシウムで乾燥させた後、濃縮すると、０．７ｇの褐色油状物が得られる。この粗反応生成物をシリカゲルクロマトグラフィー（ＡｃＯＥｔ／ヘプタン＋０．１％のＮＥｔ３）により精製し、濃縮後に０．１５ｇ（２３％）の橙色の結晶が得られる。
1H NMR: δHppm (400MHz, DMSO): 7.73 (1H, d, CHarom), 7.25 (2H, m, CHarom), 7.18 (1H, m), 6.85 (1H, d), 5.43 (2H, CH2)
【０２１６】
実施例６：５−（３，５−ジフルオロベンジルチオ）−１Ｈ−ピラゾロ［４，３−ｂ］ピリジン−３−アミン
３ｍｌの水中、ＮａＮＯ２の、０℃に冷却した溶液を、１５ｍｌの６Ｎ  ＨＣｌ溶液中、３−アミノ−６−（３，５−ジフルオロベンジルチオ）ピコリノニトリル（１．５８７ｍｍｏｌ、０．４４ｇ）の０℃の溶液に滴下する。１５分後、４ｍｌの１２Ｎ  ＨＣｌ中に希釈したＳｎＣｌ２・２Ｈ２Ｏの、０℃に冷却した溶液を滴下する。次に、この反応媒体を２５℃で１時間撹拌する。溶液を酢酸エチルで抽出した後、飽和ＮａＨＣＯ３溶液、次いで、飽和ＮａＣｌ溶液を用いて洗浄する。有機相を回収し、硫酸マグネシウムで乾燥させた後、減圧下で濃縮する。残渣をシリカゲルクロマトグラフィー（ＡｃＯＥｔ／ヘプタン）により精製し、有機相の濃縮後に０．０７ｇ（１５％）の黒色結晶が得られる。
1H NMR: δHppm (400MHz, DMSO): 11.64 (1H, s, NH), 7.63 (1H, d, CHarom), 7.21 (2H, m, CHarom), 7.13 (1H, d, CHarom), 7.04 (1H, m, CHarom), 5.38 (2H, s, NH2), 4.51 (2H, s, CH2)
【０２１７】
下記の化合物が同様の方法により得られる。
【化４１】
2019031542.tif 000051
【０２１８】
【表３】
2019031542.tif 000052
** 1H NMR: δH ppm (400 MHz, DMSO): 6-2: 11.65 (1H, s, NH), 7.64 (1H, dd, CHarom, J=8.8Hz), 7.42-7.51 (1H, m, CHarom), 7.20-7.25 (1H, m, CHarom), 7.14 (1H, dd, CHarom, J=8.8Hz), 7.01-7.11 (1H, m, CHarom), 5.37-5.41 (2H, m, NH2), 4.49 (2H, s). 6-3: 11.65 (1H, s, NH), 7.83 (1H, m, CHarom), 7.61 (1H, dd, CHarom, J=8.8Hz), 7.50 (1H, m, CHarom), 7.28-7.32 (1H, m, CHarom), 7.10 (1H, dd, CHarom, J=8.8Hz), 7.01-7.11 (1H, m, CHarom), 5.42 (2H, s, NH2), 4.47 (2H, s)
【０２１９】
方法Ｂ２の例
実施例７：５−（３，５−ジクロロフェニルチオ）−１Ｈ−ピラゾロ［４，３−ｂ］ピリジン−３−アミン
【化４２】
2019031542.tif 000053
実施例７ａ：６−（３，５−ジクロロフェニルチオ）−３−ニトロピコリノニトリル
１００ｍｌのアセトニトリル中、６−クロロ−３−ニトロピコリノニトリル（３．７０ｇ、０．０２ｍｏｌ）、３，５−ジクロロベンゼンチオール（３．６０ｇ、０．０２ｍｏｌ）およびＫ２ＣＯ３（５．６ｇ、０．０４ｍｏｌ）の混合物を７０℃で１６時間保持する。粗反応生成物を酢酸エチル画分に希釈し、水相を用いて洗浄する。有機相を硫酸ナトリウムで乾燥させ、残渣をシリカゲルクロマトグラフィー（ＡｃＯＥｔ／石油エーテル）により精製すると、５．４ｇ（８０％）の黄色固体が得られる。
【０２２０】
実施例７ｂ：３−アミノ−６−（３，５−ジクロロフェニルチオ）ピコリノニトリル
５０ｍｌのメタノール中、６−（３，５−ジクロロフェニルチオ）−３−ニトロピコリノニトリル（３．４ｇ、０．０１ｍｏｌ）の溶液に、撹拌下、１０ｍｌの濃ＨＣｌを加える。この反応媒体を還流させ、１．６８ｇ（０．０３ｍｏｌ）の鉄と合わせ、１０分間撹拌する。室温に戻した後、反応混合物を１００ｍｌの酢酸エチルおよび５０ｍｌの水と合わせる。３０％ソーダ溶液を用いてｐＨを１０に調整し、有機相を抽出し、次いで、無水硫酸ナトリウムで乾燥させた後、濃縮する。残渣をシリカゲルクロマトグラフィー（酢酸エチル／石油エーテル）により精製し、画分の濃縮後に２．８２ｇ（９１％）の黄色固体が得られる。
LCMS (m/e): 296(M+H+). %.
【０２２１】
実施例７：５−（３，５−ジクロロフェニルチオ）−１Ｈ−ピラゾロ［４，３−ｂ］ピリジン−３−アミン
０℃で、１００ｍｌの５０％硫酸中、１．５ｇの３−アミノ−６−（３，５−ジクロロフェニルチオ）ピコリノニトリル（５．０７ｍｍｏｌ）の撹拌溶液に、水（２ｍｌ）中、３５０ｍｇのＮａＮＯ２（５．０７ｍｍｏｌ）の溶液を加える。この混合物を０〜５℃で２０分間撹拌する。次に、塩酸（１２Ｎ溶液、１０ｍｌ）中、２．９ｇのＳｎＣｌ２・２Ｈ２Ｏ（１２．７ｍｍｏｌ、２．５当量）の溶液を加え、この溶液を室温で１時間撹拌する。生じた固体を濾過した後、２０ｍｌの水で２回洗浄する。固体を１００ｍｌに懸濁させ、３０％ソーダ溶液を加えることによりｐＨを１０に調整する。有機相を分離した後、無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、その後、真空濃縮する。酢酸エチルでの再結晶化の後に淡黄色固体が得られる（４７０ｍｇ、３４％）。
LCMS m/z 311 (M+H+)
1H NMR: δHppm (400MHz, DMSO): 11.91 (1H, bs, NH), 7.79 (1H, d, CHarom), 7.55 (1H, s, CHarom), 7.36 (2H, s, CHarom), 7.33 (1H, m, CHarom), 5.42 (2H, s, NH2)
【０２２２】
下記の化合物が同様の方法により得られる。
【化４３】
2019031542.tif 000054
【０２２３】
【表４】
2019031542.tif 000055
2019031542.tif 000056
** 1H NMR: δH ppm (400 MHz, DMSO): 7-1: 11.61 (1H, sラージ, NH), 7.73 (1H, d, CHarom), 7.24 (2H, m, CHarom), 7.18 (1H, m, CHarom), 6.86 (1H, d, CHarom). 7-2: 11.95 (1H, sl, NH), 7.78 (1H, d, CHarom, J=11.6Hz), 7.33 (1H, d, CHarom, J=11.6Hz), 7.19 (1H, t, CHarom), 7.04 (2H, 2d, CHarom, J=8.8Hz), 5.51 (2H, s, NH2). 7-3: 11.80 (1H, sl, NH), 7.70 (1H, d, CHarom, J=8.8Hz), 7.60 (1H, t, CHarom), 7.49 (1H, q, CHarom), 7.27-7.33 (1H, m, CHarom), 7.11 (1H, d, CHarom, J=8.8Hz), 5.41 (2H, s, NH2). 7-4: 11.93 (1H, sl, NH), 7.80 (1H, d, CHarom, J=11.6Hz), 7.62 (1H, d, CHarom, J=11.6Hz), 7.40 (1H, dd, CHarom, J=11.2Hz), 7.29 (1H, d, CHarom, J=11.6Hz), 7.1 (1H, s, CHarom), 5.51 (2H, s, NH2). 7-5: 11.86 (1H, sl, NH), 7.87 (1H, d, CHarom, J=9.6Hz), 7.73 (1H, d, CHarom, J=11.6), 7.50-7.68 (2H, m, CHarom), 7.44 (1H, d, CHarom, J=10.4Hz), 7.11 (1H, d, CHarom, J=11.6Hz), 5.46 (2H, s, NH2). 7-6: 12.66 (1H, sl, NH), 8.52 (1H, s, CHarom), 7.12-7.20 (1H, m, CHarom), 7.02-7.10 (2H, m, CHarom), 5.90 (2H, s, NH2). 7-7: 12.70 (1H, s, NH), 8.52 (1H, s, CHarom), 7.60 (1H, d, CHarom, J=8.8Hz), 7.38 (1H, dd, CHarom, J=8.4Hz), 7.12 (1H, s, CHarom), 5.92 (2H, s, NH2). 7-8: 12.66 (1H, s, NH), 8.39 (1H, s, CHarom), 7.84 (1H, d, CHarom, J=7.6Hz), 7.58 (1H, t, CHarom), 7.50 (1H, t, CHarom), 7.34 (1H, d, CHarom, J=7.6Hz), 5.87 (2H, s, NH2). 7-9: 11.57 (1H, s, NH), 7.74 (1H, d, Charom, J=9Hz), 7.25 (3H, m, CHarom), 6.88 (1H, d, Charom, J=9Hz), 5.44 (2H, s), 5.08 (2H, s). 7-10: 11.58 (1H, s, NH), 7.73 (1H, d, CHarom, J=12.0Hz), 7.48-7.58 (1H, m, CHarom), 7.21-7.37 (2H, m, CHarom), 6.85 (1H, d, CHarom, J=12.0Hz), 5.44 (2H, s, CH), 5.10 (2H, sl, NH2). 7-11: 11.60 (1H, sl, NH), 7.70-7.77 (2H, m, CHarom), 7.57 (1H, d, CHarom, J=11.2Hz), 7.40-7.50 (1H, m, CHarom), 6.89 (1H, d, CHarom, J=12.0Hz), 5.48 (2H, s, CH), 5.06 (2H, sl, NH2). 7-12: 11.60 (1H, sl, NH), 7.91 (1H, s, CHarom), 7.83 (1H, d, CHarom, J=11.2Hz), 7.75 (1H, d, CHarom, J=12.0Hz), 7.66 (1H, d, CHarom, J=9.6Hz), 6.88 (1H, d, CHarom, J=12.0Hz), 5.58 (2H, s, CH), 5.01 (2H, sl, NH2). 7-13: 11.56 (1H, sl, NH), 8.77 (1H, s, CHarom), 8.55 (1H, s, CHarom), 7.96 (1H, d, CHarom, J=10.4Hz), 7.72 (1H, d, CHarom, J=12.0Hz), 7.42 (1H, dd, CHarom, J=10.0Hz), 6.83 (1H, d, CHarom, J=11.6Hz), 5.45 (2H, s, CH), 5.15 (2H, sl, NH2)
【０２２４】
実施例８：Ｎ５−（３，５−ジフルオロフェニル）−１Ｈ−ピラゾロ［４，３−ｂ］ピリジン−３，５−ジアミン
【化４４】
2019031542.tif 000057
実施例８ａ：６−（３，５−ジフルオロフェニルアミノ）−３−ニトロピコリノニトリル
１００ｍｌのトルエン中、６．５ｇの６−クロロ−３−ニトロピコリノニトリル（０．０６５ｍｏｌ）と６．２ｇの３，５−ジフルオロアニリン（０．０４８ｍｏｌ）の混合物を７０℃で５時間加熱する。粗反応生成物を酢酸エチル画分に希釈し、飽和ＮａＣｌ溶液を用いて洗浄する。有機相を硫酸ナトリウムで乾燥させ、残渣をシリカゲルクロマトグラフィー（ＡｃＯＥｔ／石油エーテル）により精製すると、３．９ｇ（３３％）の黄色固体が得られる。
【０２２５】
実施例８ｂ：３−アミノ−６−（３，５−ジフルオロフェニルアミノ）ピコリノニトリル
撹拌下、１５０ｍｌのエタノール中、６−（３，５−ジクロロフェニルチオ）−３−ニトロピコリノニトリル（３．９ｇ、０．０１４１ｍｏｌ）の溶液に、１０ｍｌの濃ＨＣｌを加える。反応媒体を還流させ、２．４ｇの鉄（０．０４２３ｍｏｌ）と合わせ、８０℃で１時間撹拌する。０℃に戻した後、１Ｎソーダ溶液を用いてｐＨを８に調整し、反応媒体をセライトで濾過する。この反応混合物を１００ｍｌの酢酸エチルおよび５０ｍｌのメタノールと合わせる。有機相を抽出し、水相を酢酸エチル画分によって数回抽出する。有機層を合わせ、次いで、濃縮前に無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、濃縮後に、２．３ｇ（６６％）の褐色固体が得られる。
【０２２６】
実施例８：５−（３，５−ジフルオロフェニルアミノ）−１Ｈ−ピラゾロ［４，３−ｂ］ピリジン−３−アミン
０℃で、１００ｍｌの６Ｎ塩酸中、２．３ｇの３−アミノ−６−（３，５−ジフルオロフェニルアミノ）ピコリノニトリル（９．４ｍｍｏｌ）の撹拌溶液に、水（５ｍｌ）中、７１３ｍｇのＮａＮＯ２（１０．３ｍｍｏｌ）の溶液を滴下する。この混合物を０〜５℃で２０分間撹拌する。次に、塩酸（１２Ｎ溶液、３０ｍｌ）中、５．３ｇのＳｎＣｌ２・２Ｈ２Ｏ（２３．５ｍｍｏｌ、２．５当量）の溶液を滴下し、この溶液を室温で１時間撹拌する。次に、反応媒体を０℃で冷却し、３０％ソーダ溶液を用いてｐＨ８まで塩基性化する。この混合物を酢酸エチルで抽出し、飽和ＮａＣｌ溶液を用いて洗浄し、有機相を無水硫酸ナトリウムで乾燥させた後、真空濃縮する。残渣をシリカカラムクロマトグラフィー（ＡｃＯＥｔ）により精製する。淡黄色固体が得られる（５３０ｍｇ、２２％）。
LCMS: m/z 262 (M+H+). 
1H NMR: δHppm (400MHz, DMSO): 11.47 (s, 1H), 9.45 (s, 1H), 7.65 (m, 3H), 6.87 (d, 1H, J=7.8 Hz), 6.60 (m, 1H), 5.09 (s, 2H)
【０２２７】
下記の化合物が同様の方法により得られる。
【化４５】
2019031542.tif 000058
【０２２８】
【表５】
2019031542.tif 000059
** 1H NMR: δH ppm (400 MHz, DMSO): 8-1: 11.46 (1H, s, NH), 8.75-8.82 (2H, m, CHarom), 7.65 (1H, dd, CHarom, J=9.2Hz), 7.19-7.31 (2H, m, CHarom), 6.67-6.63 (1H, sl, CHarom), 5.06 (2H, s, NH2). 8-2: 11.58 (1H, sl, NH), 8.65 (1H, s, CHarom), 8.35 (1H, s, CHarom), 7.69 (1H, d, CHarom, J=12.0Hz), 7.45 (1H, d, CHarom, J=11.6Hz), 7.24 (1H, d, CHarom, J=12.0Hz), 6.96 (1H, dd, CHarom, J=11.2Hz), 5.03 (2H, sl, NH2) 
【０２２９】
方法Ｂ３の例
実施例９：５−（３，５−ジフルオロベンジル）−１Ｈ−ピラゾロ［４，３−ｂ］ピリジン−３−アミン
【化４６】
2019031542.tif 000060
この化合物は、下記の中間体から、方法Ｂ３に従って調製することができる。
【０２３０】
実施例９ａ：２−（３，５−ジフルオロベンジル）−４，４，５，５−テトラメチル−１，３，２−ジオキサボロラン
【０２３１】
実施例９ｂ：６−（３，５−ジフルオロベンジル）−３−ニトロピコリノニトリル
【０２３２】
実施例９ｃ：３−アミノ−６−（３，５−ジフルオロベンジル）ピコリノニトリル
【０２３３】
方法Ｂ４の例
実施例１０：３−アミノ−Ｎ−（３，５−ジフルオロフェニル）−１Ｈ−ピラゾロ［３，４−ｂ］ピリジン−５−スルホンアミド
【化４７】
2019031542.tif 000061
実施例１０ａ：５−（Ｎ−（３，５−ジフルオロフェニル）スルファモイル）ニコチン酸
１０ｍｌの無水ジクロロメタンに希釈した６２３ｍｇ（４．８２ｍｍｏｌ）の３，５−ジフルオロアニリンと１．６８ｍｌ（１２．０５ｍｍｏｌ）のトリエチルアミンとの混合物に、０℃で、２０ｍｌの無水ジクロロメタン中、２．７４ｇ（９．６４ｍｍｏｌ）の２−クロロ−５−（クロロスルホニル）ニコチン酸エチルの溶液を滴下する。この溶液を室温で３時間撹拌する。溶媒を蒸発させると、淡褐色固体が得られる。この固体を２０ｍｌのメタノール中で摩砕し、濾過した後、３ｍｌのメタノールですすぐと、２．８５ｇの白色固体が得られる。
【０２３４】
この固体を２５ｍｌのテトラヒドロフランに再溶解させ、１０ｍｌの水中、０．４２１ｇ（１０．０４ｍｍｏｌ）の水酸化リチウム一水和物の溶液と合わせる。この反応混合物を３５℃で３時間、撹拌下に置き、その後、水に希釈し、１Ｎ塩酸で酸性化し、酢酸エチルで抽出する。有機相を回収し、硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過し、濃縮すると、１．１２ｇの５−（Ｎ−（３，５−ジフルオロフェニル）スルファモイル）ニコチン酸が橙色固体の形態で得られる（収率＝６７％）。
1H NMR: δHppm (400MHz, DMSO): 8.91 (1H, s, CHarom), 8.51 (1H, s, CHarom), 7.02 (1H, dd, CHarom), 6.83 (2H, d, CHarom)
【０２３５】
実施例１０ｂ：２−クロロ−５−（Ｎ−（３，５−ジフルオロフェニル）スルファモイル）ニコチンアミド
５ｍｌの無水トルエン中、０．４５０ｇ（１．２９ｍｍｏｌ）の２−クロロ−５−（Ｎ−（３，５−ジフルオロフェニル）スルファモイル）ニコチン酸に、０．２８８ｍｌ（３．８７ｍｍｏｌ）の塩化チオニルおよび１滴のＤＭＦを順次加える。この混合物をトルエン還流下で２時間、撹拌下に置く。次に、この酸塩化物反応混合物を、撹拌下の、４．５ｍｌの２５％水酸化アンモニウムの氷冷溶液に滴下する。ガスの放出が見られる。反応媒体を室温で３０分間、撹拌下に置く。この反応媒体を酢酸エチルで数回抽出する。合わせた  有機相を無水硫酸ナトリウムで乾燥させた後、濃縮する。淡褐色固体の形態の０．３１５ｇの２−クロロ−５−（Ｎ−（３，５−ジフルオロフェニル）スルファモイル）ニコチンアミドが得られる（収率＝７２％）。
1H NMR: δHppm (400MHz, DMSO): 11.18 (1H, bs, NH), 8.86 (1H, s, CHarom), 8.22 (1H, s, CHarom), 8.21 (1H, bs, NH), 7.98 (1H, bs, NH), 6.96 (1H, dd, CHarom), 6.79 (2H, d, CHarom)
【０２３６】
実施例１０ｃ：６−クロロ−５−シアノ−Ｎ−（３，５−ジフルオロフェニル）ピリジン−３−スルホンアミド
０．３１５ｇ（０．９０６ｍｍｏｌ）の２−クロロ−５−（Ｎ−（３，５−ジフルオロフェニル）スルファモイル）ニコチンアミドに、３．４ｍｌ（３６．２ｍｍｏｌ）の塩化ホスホリルおよび１滴の濃硫酸を加える。この反応混合物を９０℃で２時間撹拌した後、氷に滴下する。褐色固体を濾過し、水ですすいだ後、真空下で乾燥させる。０．２１７ｇの６−クロロ−５−シアノ−Ｎ−（３，５−ジフルオロフェニル）ピリジン−３−スルホンアミドが淡褐色固体の形態で得られる（収率＝７２％）。
1H NMR: δHppm (400MHz, DMSO): 11.34 (1H, bs, NH), 9.04 (1H, s, CHarom), 8.92 (1H, s, CHarom), 7.03 (1H, dd, CHarom), 6.85 (2H, d, CHarom)
【０２３７】
実施例１０：３−アミノ−Ｎ−（３，５−ジフルオロフェニル）−１Ｈ−ピラゾロ［３，４−ｂ］ピリジン−５−スルホンアミド
６ｍｌのイソプロパノールに希釈した０．２１７ｇ（０．６５８ｍｍｏｌ）の６−クロロ−５−シアノ−Ｎ−（３，５−ジフルオロフェニル）ピリジン−３−スルホンアミドに、０．３７７ｍｌ（２．６３ｍｍｏｌ）の３５％ヒドラジンを加える。この溶液を７５℃で２時間加熱する。溶媒を蒸発させると、０．２１４ｇの３−アミノ−Ｎ−（３，５−ジフルオロフェニル）−１Ｈ−ピラゾロ［３，４−ｂ］ピリジン−５−スルホンアミドが黄色固体の形態で得られる（収率＝１００％）。
1H NMR: δHppm (400MHz, DMSO): 8.74 (1H, d, CHarom), 8.68 (1H, d, CHarom), 6.88 (1H, dd, CHarom), 6.80 (2H, d, CHarom), 6.04 (2H, bs, NH)
【０２３８】
方法Ｂ５の例
実施例１１：５−（３，５−ジフルオロベンジルオキシ）−１Ｈ−ピラゾロ［３，４−ｂ］ピリジン−３−アミン
【化４８】
2019031542.tif 000062
この化合物は、下記の中間体から、方法Ｂ５に従って調製することができる。
【０２３９】
実施例１１ａ：５−ヒドロキシニコチノニトリル
１ｇの５−メトキシニコチノニトリル（７．４６ｍｍｏｌ）および８．６２ｇの塩酸ピリジンの混合物を２００℃で２時間加熱する。粗反応生成物を水画分中、ジエチルエーテルで数回希釈する。重炭酸ナトリウムを加えることにより水相を塩基性化した後、再びジエチルエーテルで抽出する。有機相を乾燥させた後、濃縮すると、８５０ｍｇの５−ヒドロキシニコチノニトリル（９５％）がベージュ色の固体の形態で得られる。
LCMS: m/z 120.94 (M+H+)
1H NMR: δH ppm (400 MHz, DMSO): 10.79 (s, 1H), 8.46 (s, 1H, CHarom.), 8.42 (s, 1H, CHarom.), 7.60 (s, 1H, CHarom.)
【０２４０】
実施例１１ｂ：５−（３，５−ジフルオロベンジルオキシ）ニコチノニトリル
１５ｍＬのジメチルアセトアミド中、８６５ｍｇの５−ヒドロキシニコチノニトリル（７．２ｍｍｏｌ）の溶液に、０℃、窒素下で、８７６ｍｇ（２当量）の水素化ナトリウムを徐々に加える。この混合物を０℃で１０分撹拌した後、２．２４ｇ（１．５当量(aq)）の３，５−ジフルオロベンジルブロミドを加える。この混合物をさらに２．５時間撹拌下に置いた後、酢酸エチル画分に希釈し、水性画分で洗浄する。有機相を単離し、乾燥させ、濃縮する。得られた固体残渣をメタノール中で再結晶させると、１．１ｇ（６８％の５−（３，５−ジフルオロベンジルオキシ）ニコチノニトリルがベージュ色の粉末の形態で得られる。
LCMS: m/z 247.11 (M+H+). 
1H NMR: δH ppm (400 MHz, DMSO): 8.69 (s, 1H, CH), 8.65 (s, 1H, CH), 8.08 (s, 1H, CH), 7.26 (m, 3H, CH), 5.28 (d, 2H, CH2)
【０２４１】
実施例１１ｃ：３−シアノ−５−（３，５−ジフルオロベンジルオキシ）ピリジン１−オキシド
２５０ｍｇの５−（３，５−ジフルオロベンジルオキシ）ニコチノニトリルのアセトニトリル溶液に、０℃で２２４ｍｇのｍ−ＣＰＢＡを加える。この反応媒体を２０時間撹拌すると沈殿が徐々に(progressivelt)生じる。次に、この固体を濾過し、洗浄すると、２００ｍｇ（７５％）の３−シアノ−５−（３，５−ジフルオロベンジルオキシ）ピリジン１−オキシドが白色粉末の形態で得られる。
LCMS: m/z 263.06 (M+H+)
【０２４２】
実施例１１ｄ：２−クロロ−５−（３，５−ジフルオロベンジルオキシ）ニコチノニトリル
数滴のＨ２ＳＯ４を加えた２．３ｍＬのＰＯＣｌ３中、６５０ｍｇの３−シアノ−５−（３，５−ジフルオロベンジルオキシ）ピリジン１−オキシドの混合物を１１０℃で１時間３０分加熱する。次に、この粗反応媒体を氷に注ぎ、このようにして生じた沈殿を濾過により単離し、真空下で乾燥させると、６００ｍｇのベージュ色の固体が、主として所望の２−クロロ−５−（３，５−ジフルオロベンジルオキシ）ニコチノニトリルを含んでなる位置異性体の混合物の形態で得られ、これをそれ以上精製せずに使用する。
LCMS: m/z 281.02 (M+H+)
【０２４３】
実施例１１：５−（３，５−ジフルオロベンジルオキシ）−１Ｈ−ピラゾロ［３，４−ｂ］ピリジン−３−アミン
１０ｍＬのプロパン−２−オール中、１．６ｇの２−クロロ−５−（３，５−ジフルオロベンジルオキシ）ニコチノニトリル（４５０μｍｏｌ）の溶液に、３１３ｍｇのヒドラジン水和物（５当量）を加える。この反応混合物を１００℃で６時間加熱する。室温に戻して沈殿形成に至らせた後に、粗反応媒体を濾過し、固体を除去し、濾液を乾燥蒸発させる。その後、これを酢酸エチルおよびメタノールの勾配で溶出させるシリカカラムでのクロマトグラフィーにより精製したところ、より極性の高い画分が単離され、これを濃縮し、再び、撹拌下、小画分のメタノールに懸濁させる。このようにして得られた固体を単離し、乾燥させると、２２１ｍｇの５−（３，５−ジフルオロベンジルオキシ）−１Ｈ−ピラゾロ［３，４−ｂ］ピリジン−３−アミンがベージュ色の固体の形態で得られ、これをそれ以上精製せずに使用する。
LCMS: m/z 277.07 (M+H+)
【０２４４】
方法Ｂ６の例
実施例１１ｂｉｓ：Ｎ−（３−アミノ−１Ｈ−ピラゾロ［３，４−ｂ］ピリジン−５−イル）−３，５−ジフルオロベンゼン−スルホンアミド
【化４９】
2019031542.tif 000063
実施例１１ｂｉｓ−ａ：Ｎ−（６−クロロ−５−シアノピリジン−３−イル）−３，５−ジフルオロベンゼン−スルホンアミド
ＴＨＦおよびピリジンの無水１：１混合物２０ｍＬ中、５４５ｍｇ（３．５５ｍｍｏｌ）の５−アミノ−２−クロロニコチノトリルの溶液に、アルゴン下、１．１３２ｇ（５．３２ｍｍｏｌ）の３，５−ジフルオロベンゼン−１−スルホニルクロリドを加える。反応媒体を７０℃で３時間加熱し、室温、撹拌下でさらに１２時間放置する。溶媒を乾燥蒸発させ、粗反応生成物を酢酸エチルに再溶解させ、水性画分で数回洗浄する。有機相を硫酸マグネシウムで乾燥させ、濾過し、濃縮した後にシリカゲルクロマトグラフィーにより精製すると、７８４ｍｇ（６７％）のＮ−（６−クロロ−５−シアノピリジン−３−イル）−３，５−ジフルオロベンゼン−スルホンアミドが得られる。
1H NMR: δH ppm (400 MHz, DMSO): 11,39 (1H, sl, NH), 8.34 (1H, m, CHarom), 8.10 (1H, m, CHarom), 7.67 (1H, m, CHarom), 7.59 (2H, m, CHarom)
【０２４５】
実施例１１ｂｉｓ：Ｎ−（３−アミノ−１Ｈ−ピラゾロ［３，４−ｂ］ピリジン−５−イル）−３，５−ジフルオロベンゼン−スルホンアミド
６ｍＬのエタノール中、７８４ｍｇ（２．３８ｍｍｏｌ）のＮ−（６−クロロ−５−シアノピリジン−３−イル）−３，５−ジフルオロベンゼン−スルホンアミドの溶液に、アルゴン下、１．７８６ｇ（３５．７ｍｍｏｌ）のヒドラジン水和物を加える。この溶液を２０時間１００℃に加熱した後、室温に冷却する。溶媒を蒸発させると、８１０ｍｇのＮ−（３−アミノ−１Ｈ−ピラゾロ［３，４−ｂ］ピリジン−５−イル）−３，５−ジフルオロベンゼン−スルホンアミド（１００％）が得られ、これをそれ以上精製せずに下記の工程で使用する。
LCMS: m/z 326.07 (M+H+)
【０２４６】
方法Ｃ１の例
実施例１２：Ｎ６−（２，４−ジフルオロフェニル）−１Ｈ−ピラゾロ［３，４−ｂ］ピリジン−３，６−ジアミン
【化５０】
2019031542.tif 000064
この化合物は、下記の中間体から、方法Ｃ１に従って調製することができる。
【０２４７】
実施例１２−ａ：トリフルオロメタンスルホン酸５−シアノ−６−（メチルチオ）ピリジン−２−イル
窒素下、１８０ｍＬのテトラヒドロフラン中、３．５ｇ（２１．０６ｍｍｏｌ）の６−ヒドロキシ−２−（メチルチオ）ニコチノニトリルの溶液に、１５．２６ｍＬ（１．２当量）のカリウム２−メチルプロパン−２−オレート、次いで、９．０３ｇ（１．２当量）の１，１，１−トリフルオロ−Ｎ−フェニル−Ｎ−（トリフルオロメチルスルホニル）メタンスルホンアミドを滴下する。この反応混合物を室温で２時間４５分撹拌する。水を加え、生成物を酢酸エチルで抽出する。有機相を無水硫酸マグネシウムで乾燥させ、濾過し、蒸発させると、橙色の固体が得られる。この生成物をシリカゲルカラム（溶離剤：シクロヘキサン／ジクロロメタン５：５）で精製すると、５．３１ｇ（８５％）のトリフルオロメタンスルホン酸５−シアノ−６−（メチルチオ）ピリジン−２−イルが黄色固体の形態で得られる。
1H NMR: δH ppm (400 MHz, DMSO): 8.57 (1H, d, CH), 7.52 (1H, d, CH), 2.59 (3H, s, CH3)
【０２４８】
実施例１２−ｂ：６−（２，４−ジフルオロフェニルアミノ）−２−（メチルチオ）ニコチノニトリル
３０ｍＬの１，４−ジオキサン中、２ｇ（６．７１ｍｍｏｌ）のトリフルオロメタンスルホン酸５−シアノ−６−（メチルチオ）ピリジン−２−イルの溶液に、窒素下で、０．８１ｍＬ（１．２当量）の４−ジフルオロアニリンおよび１．５３ｇ（１．４当量）の炭酸セシウム（Ｉ）を加える。この媒体をアルゴン下で５分間脱気した後、０．２５ｇ（０．０６当量）の２，２’−ビス（ジフェニルホスフィノ）−１，１’−ビナフチルおよび０．０８ｇ（０．０４当量）の（１Ｅ，４Ｅ）−１，５−ジフェニルペンタ−１，４−ジエン−３−オン、パラジウム（ＩＩ）錯体を加える。この反応媒体を１００℃で２時間撹拌する。室温に戻した後、酢酸エチルおよびブラインを加える。有機相を無水硫酸マグネシウムで乾燥させ、濾過し(fitered)、蒸発させる。得られた残渣をシリカゲルクロマトグラフィー（溶離剤：シクロヘキサン／酢酸エチル８：２、次いで、７：３）で精製すると、１．５２ｇ（８２％）の６−（２，４−ジフルオロフェニルアミノ）−２−（メチルチオ）ニコチノニトリルが白色固体の形態で得られる。
LCMS (IE, m/z): (M+1) 278.06
1H NMR: δH ppm (400 MHz, DMSO): 9.57 (1H, s, NH), 7.73-7.86 (2H, m, CH), 7.28-7.44 (1H, m, CH), 7.02-7.18 (1H, m, CH), 6.60 (1H, d, CH), 2.41 (3H, s, CH3)
【０２４９】
実施例１２：Ｎ６−（２，４−ジフルオロフェニル）−１Ｈ−ピラゾロ［３，４−ｂ］ピリジン−３，６−ジアミン
２５ｍＬのジクロロメタン中、７８６ｍｇ（２．８３ｍｍｏｌ）の６−（２，４−ジフルオロフェニルアミノ）−２−（メチルチオ）ニコチノニトリルの撹拌溶液に、アルゴン下、７６９ｍｇ（３．１２ｍｍｏｌ）のｍ−クロロ過安息香酸（ｍＣＰＢＡ）を加える。反応媒体を室温で１時間撹拌した後、酢酸エチル画分を加え、この有機相をＮａＨＣＯ３飽和溶液で洗浄する。合わせた有機相を硫酸マグネシウムで乾燥させ、乾燥蒸発させる。粗反応生成物を再び１０ｍＬのプロパノールに溶かし、水中、２当量の塩酸ヒドラジンを加える。この混合物を９０℃で６時間加熱した後、水で希釈し、酢酸エチルで抽出する。有機相を硫酸マグネシウムで乾燥させ、乾燥蒸発させた後、シリカゲルクロマトグラフィーにより精製すると、４９５ｍｇのＮ６−（２，４−ジフルオロフェニル）−１Ｈ−ピラゾロ［３，４−ｂ］ピリジン−３，６−ジアミンが黄橙色固体の形態で得られる（６７％）。
LCMS (IE, m/z): (M+1) 262.14
1H NMR: δH ppm (400 MHz, DMSO): 11.40 (1H, s, NH), 8.76 (1H, s, NH), 8.15 (1H, m, CH), 7.81 (1H, d, CH), 7.28 (1H, m, CH), 7.06 (1H, m, CH), 6.55 (1H, d, CH), 5.24 (2H, s, NH2)
【０２５０】
下記の化合物が同様の方法により得られる。
【化５１】
2019031542.tif 000065
【０２５１】
【表６】
2019031542.tif 000066
** 1H NMR, dmso-d6, 例: 12-1: 11.17 (1H, s, NH), 7.66 (1H, d, CH), 7.37 (1H, s, NH), 7.04 (3H, m, CH), 6.24 (1H, d, CH), 5.11 (2H, s, NH2), 4.52 (2H, s, CH2)
【０２５２】
実施例１２ｂｉｓ：Ｎ６−（２，４−ジフルオロフェニル）−Ｎ６−メチル−１Ｈ−ピラゾロ［３，４−ｂ］ピリジン−３，６−ジアミン
【化５２】
2019031542.tif 000067
実施例１２ｂｉｓ−ａ：６−（（３，５−ジフルオロフェニル）（メチル）アミノ）−２−（メチルチオ）ニコチノニトリル
２０ｍＬのＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド中、７００ｍｇ（２．５２ｍｍｏｌ）の６−（２，４−ジフルオロフェニルアミノ）−２−（メチルチオ）ニコチノニトリルの溶液に、窒素下、３．０５ｍＬ（５．０４ｍｍｏｌ）のカリウム２−メチルプロパン−２−オレート、次いで、２８６μＬ（１．８当量）のヨードメタンを滴下する。反応媒体を室温で２４時間撹拌した後、１２６μＬ（０．８当量、２．０２ｍｍｏｌ）のヨードメタンを加える。反応媒体を室温でさらに２時間撹拌する。水を加え、生成物を酢酸エチルで抽出する。有機相を無水硫酸マグネシウムで乾燥させ、濾過し、蒸発させると、６６０ｍｇ（９０％）の６−（（２，４−ジフルオロフェニル）（メチル）アミノ）−２−（メチルチオ）ニコチノニトリルが褐色固体の形態で得られる。
【０２５３】
LCMS (IE, m/z): (M+1) 292.09. 
1H NMR: δH ppm (400 MHz, DMSO): 7.74-7.80 (1H, m, CH), 7.55-7.63 (1H, m, CH), 7.43-7.52 (1H, m, CH), 7.18-7.27 (1H, m, CH), 6.16-6.30 (1H, m, CH), 3.43 (3H, s, CH3), 2.42 (3H, s, CH3)
【０２５４】
実施例１２ｂｉｓ：Ｎ６−（２，４−ジフルオロフェニル）−Ｎ６−メチル−１Ｈ−ピラゾロ［３，４−ｂ］ピリジン−３，６−ジアミン
１５ｍＬのジクロロメタン中、４８６ｍｇ（１．６７ｍｍｏｌ）の６−（（２，４−ジフルオロフェニル）（メチル）アミノ）−２−（メチルチオ）ニコチノニトリルの撹拌溶液に、アルゴン下、４５２ｍｇ（１．８４ｍｍｏｌ）のｍＣＰＢＡを加える。反応媒体を室温で３０分撹拌した後、酢酸エチル画分を加える。有機相をＮａＨＣＯ３飽和溶液で洗浄し、硫酸マグネシウムで乾燥させ、乾燥蒸発させる。粗反応生成物を再び６ｍＬのプロパノールに溶かし、水中の１６４μＬ（３．３８ｍｍｏｌ）の塩酸ヒドラジンを加える。この混合物を９０℃で６時間加熱した後、水に希釈し、酢酸エチルで抽出する。有機相を硫酸マグネシウムで乾燥させ、乾燥蒸発させた後、シリカゲルクロマトグラフィーにより精製すると、３２８ｍｇのＮ６−（２，４−ジフルオロフェニル）−Ｎ６−メチル−１Ｈ−ピラゾロ［３，４−ｂ］ピリジン−３，６−ジアミンが黄橙色固体の形態で得られる（７０％）。
LCMS (IE, m/z): (M+1) 276.15
1H NMR: δH ppm (400 MHz, DMSO): 11.41 (1H, s, NH), 7.75 (1H, d, CH), 7.51-7.55 (1H, m, CH), 7.40-7.43 (1H, m, CH), 7.17-7.22 (1H, m, CH), 6.03 (1H, d, CH), 5.23 (2H, s, NH2), 3.28 (3H, s, CH3)
【０２５５】
方法Ｃ３の例
実施例１２ｔｅｒ：６−（２，４−ジフルオロフェニルチオ）−１Ｈ−ピラゾロ［３，４−ｂ］ピリジン−３−アミン
【化５３】
2019031542.tif 000068
実施例１２ｔｅｒ−ａ：２−クロロ−６−（２，４−ジフルオロフェニルチオ）ニコチノニトリル
３０ｍＬのエタノール中、６９８μＬ（６．１６ｍｍｏｌ）の２，４−ジフルオロベンゼンチオールの溶液に、窒素下、１０ｍＬのエタノール中、３６２ｍｇ（１．０５当量）の水酸化カリウムの溶液を加える。反応媒体を室温で１５分間撹拌し、次いで、氷中で冷却した後、３０ｍＬのエタノール中、１．０１５ｇ（０．９５当量）の２，６−ジクロロニコチノニトリルの溶液を加える。この反応媒体を０〜５℃で２時間撹拌する。６３ｍＬの０．１Ｎ  ＨＣｌ溶液を加えて反応を停止させる。水を加え、生成物を酢酸エチルで抽出する。有機相を無水硫酸マグネシウムで乾燥させ、濾過し、蒸発させる。残渣をシリカゲルクロマトグラフィー（溶離剤：シクロヘキサン／酢酸エチル９４：６）により精製すると、１．０９ｇ（６６％）の２−クロロ−６−（２，４−ジフルオロフェニルチオ）−ニコチノニトリルが白色固体の形態で得られる。
LCMS (IE, m/z): (M+1) 282.98
1H NMR: δH ppm (400 MHz, DMSO): 8.24 (1H, d, CH), 7.77-7.85 (1H, m, CH), 7.52-7.63 (1H, m, CH), 7.25-7.35 (2H, m, CH), 2.41 (3H, s, CH3)
【０２５６】
実施例１２ｔｅｒ：６−（２，４−ジフルオロフェニルチオ）−１Ｈ−ピラゾロ［３，４−ｂ］ピリジン−３−アミン
１５ｍＬのプロパノール中、１．０９ｇ（３．８６ｍｍｏｌ）の２−クロロ−６−（２，４−ジフルオロフェニルチオ）ニコチノニトリルの撹拌溶液に、窒素下、０．５６１ｍＬ（１１．５７ｍｍｏｌ）のヒドラジン一水和物を加える。反応媒体を８０℃で４時間加熱する。反応媒体を室温に戻した際に沈殿が得られる。この沈殿を濾過し、エタノールですすぐ。固体を酢酸エチル画分に溶かし、１Ｎ  ＨＣｌ溶液で洗浄する。有機相を硫酸マグネシウムで乾燥させ、乾燥蒸発させると、４２０ｍｇ（３９％）の６−（２，４−ジフルオロフェニルチオ）−１Ｈ−ピラゾロ［３，４−ｂ］ピリジン−３−アミンが黄色固体の形態で得られる。
1H NMR: δH ppm (400 MHz, DMSO): 12.10 (1H, s, NH), 8.11 (1H, d, CH), 7.82-7.89(1H, m, CH), 7.58-7.63 (1H, m, CH), 7.32-7.36 (1H, m, CH), 6.86 (1H, d, CH), 4.59 (2H, s, NH2)
【０２５７】
下記の化合物が同様の方法により得られる。
【化５４】
2019031542.tif 000069
【０２５８】
【表７】
2019031542.tif 000070
実施例１２ｑｕａｔｅｒ：６−（３，５−ジフルオロベンジル）−１Ｈ−ピラゾロ［３，４−ｂ］ピリジン−３−アミン
【化５５】
2019031542.tif 000071
２ｍＬの無水ＴＨＦ中、４１６ｍｇの塩化パラジウム（ＩＩ）（５１０ｍｍｏｌ）および８８３ｍｇの２，６−ジクロロニコチノニトリル（５．１ｍｍｏｌ）の溶液に、アルゴン下、（３，５−ジフルオロベンジル）亜鉛クロリド（８．５８ｍｍｏｌ）のＴＨＦ中０．５Ｍ溶液１７．３５ｍＬを加える。この反応物を７時間還流させた後、室温まで冷却する。１Ｎソーダ水溶液を加え、生成物を酢酸エチル画分で連続的に数回抽出する。有機相を硫酸マグネシウムで乾燥させ、乾燥蒸発させた後、シリカゲルクロマトグラフィーにより精製すると、２−クロロ−６−（３，５−ジフルオロベンジル）−ニコチノニトリルと副生成物との混合物６８０ｍｇが得られ、これをそれ以上精製せずに下記の工程で使用する。
【０２５９】
前記混合物を撹拌下、１０ｍＬのイソプロパノールに溶かし、７５０μＬの３５％ヒドラジン水和物を加える。この溶液を８０℃で４時間加熱する。溶媒を乾燥蒸発させ、生成物をシリカゲルクロマトグラフィー（ジクロロメタン／メタノール９：１）により精製すると、２９０ｍｇの６−（３，５−ジフルオロベンジル）−１Ｈ−ピラゾロ［３，４−ｂ］ピリジン−３−アミン（６４％）が得られる。
LCMS (IE, m/z): (M+1) 261.16
1H NMR: δH ppm (400 MHz, DMSO): 11.82 (1H, s, NH), 8.01 (1H, d, CH), 6.99-7.04 (3H, m, CH), 6.91 (1H, d, CH), 5.49 (2H, s, NH2), 4.12 (2H, s, CH2)
【０２６０】
方法Ｄ１の例：
実施例１３：５−（３，５−ジフルオロベンジル）−１Ｈ−ピラゾロ［３，４−ｂ］ピリジン−３−アミン
【化５６】
2019031542.tif 000072
１０ｍｌのテトラヒドロフラン中、５−ブロモ−１Ｈ−ピラゾロ［３，４−ｂ］ピリジン−３−アミンの溶液１．５ｇ（７．０４ｍｍｏｌ）に、０．５７５ｇ（０．７０４ｍｍｏｌ）の（ｄｐｐｆ）２ＰｄＣｌ２・ＣＨ２Ｃｌ２および２８ｍｌ（１４．０８ｍｍｏｌ）の３，５−ジフルオロベンジル亜鉛（ＩＩ）クロリドを加える。反応媒体を９０℃で１８時間加熱する。室温に戻した後、０℃で水をゆっくり加えることにより反応物を加水分解する。生じた沈殿の濾過後に、固体をテトラヒドロフランですすぎ、水性濾液を酢酸エチルで数回抽出する。有機層を合わせ、硫酸マグネシウムで乾燥させ、濃縮する。残渣をシリカクロマトグラフィー（溶離剤として９５：４．５：０．５、次いで、９５：４：１ジクロロメタン／メタノール／アンモニウム）により精製すると、１．７ｇ（９３％）の５−（３，５−ジフルオロベンジル）−１Ｈ−ピラゾロ［３，４−ｂ］ピリジン−３−アミンがベージュ色の固体の形態で得られる。
LCMS (EI, m/z): (M+1) 261.41
1H NMR: δH ppm (400MHz, DMSO): 11.87 (1H, s, NH), 8.31 (1H, d, CHarom), 7.92 (1H, d, CHarom), 6.98-7.08 (3H, m, CHarom), 5.47 (2H, s, NH), 4.04 (2H, s, CH2)
【０２６１】
下記の化合物が同様の方法により得られる。
【化５７】
2019031542.tif 000073
【０２６２】
【表８】
2019031542.tif 000074
** 1H NMR: δH ppm (400 MHz, DMSO): 13-1: 11.61 (1H, sl, NH), 7.65 (1H, d, CHarom, J=11.6Hz), 7.20 (1H, d, CHarom, J=11.2Hz), 6.95-7.10 (3H, m, CHarom), 5.32 (2H, sl, NH2), 4.18 (2H, s, CH2). 13-2: 12.31 (1H, sl, NH), 8.44 (1H, s, CHarom), 7.03-7.08 (3H, m, CHarom), 5.61 (2H, sl, NH2), 4.25 (2H, s, CH2)
【０２６３】
方法Ｄ２の例
実施例１４：５−（３，５−ジフルオロフェニルチオ）−１Ｈ−ピラゾロ［３，４−ｂ］ピラジン−３−アミン
【化５８】
2019031542.tif 000075
０．７ｇ（２．６８ｍｍｏｌ）の５−ヨード−１Ｈ−ピラゾロ［３，４−ｂ］ピリジン−３−アミン、０．７４ｇ（５．３６ｍｍｏｌ）の無水炭酸カリウムおよび０．１０ｇの塩化銅（０．５３６ｍｍｏｌ）を５０ｍｌ丸底フラスコにて混合する。次に、１５ｍｌのプロパン−２−オール、０．０１ｇ（０．２ｍｍｏｌ）のポリエチレングリコールおよび０．４３ｇ（２．９５ｍｍｏｌ）の３，５−ジフルオロチオフェノールを加える。この反応混合物を８０℃で２時間加熱する。溶媒を蒸発させ、生じた固体を濾過し、水、次いでペンタンですすいだ後、５０℃の炉で乾燥させると、０．７５ｇ（１００％）の５−（３，５−ジフルオロフェニルチオ(diflurophenylthio)）−１Ｈ−ピラゾロ［３，４−ｂ］ピラジン−３−アミンが褐色固体の形態で得られる。
LCMS (EI, m/z): (M+1) 280.03
1H NMR: δHppm (400MHz, DMSO): 12.65 (1H, bs, NH), 8.52 (1H, s, CHarom), 7.18 (1H, t, CHarom), 7.05-7.18 (2H, m, CHarom), 5.89 (2H, s, NH)
【０２６４】
下記の誘導体が同じ方法に従って得られた。
【化５９】
2019031542.tif 000076
【０２６５】
【表９】
2019031542.tif 000077
2019031542.tif 000078
** 1H NMR, DMSO-d6, 例: 14-3: 12.65 (1H, bs, NH), 8.52 (1H, s, CHarom), 7.18 (1H, t, CHarom), 7.05-7.18 (2H, m, CHarom), 5.89 (2H, s, NH). 14-6: 8.21 (2H, bs, CHarom), 7.07 (1H, m, CHarom), 6.90 (2H, m, CHarom), 6.27 (2H, bs, NH), 4.03 (2H, s, CH), 1.63 (9H, s, CH). 14-7: 12.16 (1H, bs, NH), 8.39 (1H, s, CHarom), 7.00-7.08 (1H, m, CHarom), 6.64-6.72 (2H, m, CHarom), 5.73 (2H, bs, NH2), 2.54 (3H, s, CH3). 14-9: 8.51 (1H, bs, CHarom), 8.35 (1H, bs, CHarom), 7.02 (1H, m, CHarom), 6.72 (2H, bs, CHarom), 6.52 (2H, bs, NH), 1.67 (9H, s, CH) (ND:測定されず)
【０２６６】
実施例１４ｂｉｓ：Ｎ−（５−（３，５−ジフルオロフェニルアミノ）−１Ｈ−ピラゾロ［３，４−ｂ］ピリジン−３−イル）−４−（４−メチルピペラジン−１−イル）−２−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イルアミノ）ベンズアミド
【化６０】
2019031542.tif 000079
１０ｍＬのＴＨＦ中、２２５ｍｇのＮ−（５−ヨード−１−トリチル−１Ｈ−ピラゾロ［３，４−ｂ］ピリジン−３−イル）−４−（４−メチルピペラジン−１−イル）−２−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イルアミノ）ベンズアミド（０．２５ｍｍｏｌ）、３６ｍｇのジフルオロアニリン（０．２７５ｍｍｏｌ）、１９ｍｇのＲ−（＋）−２，２’−ビス（ジフェニルホスフィノ）−１，１’−ビナフチル（０．０３０ｍｍｏｌ）、１１ｍｇ（０．０１３ｍｍｏｌ）のトリス（ジベンジリデンアセトン）ジパラジウム（０）および７５ｍｇ（０．７５ｍｍｏｌ）のナトリウムｔｅｒｔ−ブトキシドの溶液をアルゴン下で一晩還流させる。粗反応媒体を冷却し、酢酸エチルで抽出し、水で洗浄する。有機相を硫酸マグネシウムで乾燥させ、シリカゲルクロマトグラフィーにより精製すると、Ｎ−（５−（３，５−ジフルオロフェニルアミノ）−１−トリチル−１Ｈ−ピラゾロ［３，４−ｂ］ピリジン−３−イル）−４−（４−メチルピペラジン−１−イル）−２−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イルアミノ）ベンズアミドが得られ、これをそれ以上精製せずに下記の工程で使用する。
【０２６７】
このようにして得られた生成物を０℃で１０ｍＬのジクロロメタンに溶かし、５６ｍｇ（０．５ｍｍｏｌ）のＴＦＡを加える。この反応媒体を４時間撹拌する。水を加え、ＮａＨＣＯ３溶液で反応媒体のｐＨを７に調整する。水相を回収し、濃Ｋ２ＣＯ３溶液で塩基性化し（ｐＨ９〜１０）、ジクロロメタンで抽出する。有機相を回収し、硫酸マグネシウムで乾燥させ、乾燥濃縮すると、４０ｍｇのＮ−（５−（３，５−ジフルオロフェニルアミノ）−１Ｈ−ピラゾロ［３，４−ｂ］ピリジン−３−イル）−４−（４−メチルピペラジン−１−イル）−２−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イルアミノ）ベンズアミドが得られる。
LCMS (IE, m/z): (M+1) 562.12
1H NMR: δH ppm (400 MHz, DMSO): 13.45 (1H, sl, NH), 10.47 (1H, sl, NH), 8.65 (1H, s, CHarom), 8.55 (1H, s, CHarom), 8.14 (1H, d, NH), 7.77 (1H, d, CHarom), 7.26 (2H, m, CHarom), 7.05 (1H, m, CHarom), 6.25 (1H, d, CHarom), 6.14 (1H, s, NH), 6.77 (1H, s, NH), 3.82-3.84 (2H, dt, CH), 3.72 (1H, m, CH), 3.47-3.52 (2H, m, CH), 3.28-3.34 (4H, m, CH), 2.43 (4H, m, CH), 2.23 (3H, s, CH3), 1.94 -1.97 (2H, m, CH), 1.37-1.39 (2H, m, CH)
【０２６８】
方法Ｄ３の例
実施例１５：Ｎ−（５−（（３，５−ジフルオロフェニル）エチニル）−１Ｈ−ピラゾロ［３，４−ｂ］ピリジン−３−イル）−４−（４−メチルピペラジン−１−イル）−２−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イルアミノ）ベンズアミド
【化６１】
2019031542.tif 000080
アルゴン下、撹拌下の１２ｍｌの無水ジオキサン中、４００ｍｇ（０．７１２ｍｍｏｌ）のＮ−（５−ヨード−１Ｈ−ピラゾロ［３，４−ｂ］ピリジン−３−イル）−４−（４−メチルピペラジン−１−イル）−２−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イルアミノ）ベンズアミド、６７．８ｍｇ（０．３５６ｍｍｏｌ）のＣｕＩ、および５０ｍｇ（０．０７１ｍｍｏｌ）のＰｄ（ＰＰｈ３）２Ｃｌ２に、０．９４ｍｇ（０．９２６ｍｍｏｌ）のトリエチルアミンを加える。この反応物を３．５時間１００℃で加熱する。反応混合物を３０ｍｌの水で希釈し、酢酸エチルで抽出する。有機相を硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過し、濃縮する。得られた残渣をシリカゲルクロマトグラフィー（ジクロロメタン／メタノール）により精製すると、１５２ｍｇのＮ−（５−（（３，５−ジフルオロフェニル）エチニル）−１Ｈ−ピラゾロ［３，４−ｂ］ピリジン−３−イル）−４−（４−メチルピペラジン−１−イル）−２−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イルアミノ）ベンズアミドが黄色固体の形態で得られる（収率＝３７％）。
LCMS (EI, m/z): (M+1) 572.17
1H NMR: δHppm (400MHz, DMSO): 13.57 (1H, bs, NH), 10.56 (1H, bs, NH), 8.68 (1H, s, CHarom), 8.43 (1H, s, CHarom), 8.13 (1H, d, NH), 7.80 (1H, d, CHarom), 7.38 (2H, m, CHarom), 6.27 (1H, d, CHarom), 6.15 (1H, d, CHarom), 3.84-3.82 (2H, dt, CH), 3.70 (1H, m, CH), 3.45-3.50 (2H, m, CH), 3.21-3.33 (4H, m, CH), 2.42-2.46 (4H, m, CH), 2.28 (3H, s, CH3), 1.94-1.97 (2H, m, CH), 1.37-1.39 (2H, m, CH)
【０２６９】
下記の誘導体が同じ方法に従って得られた。
【化６２】
2019031542.tif 000081
【０２７０】
【表１０】
2019031542.tif 000082
** 1H NMR, dmso-d6, 例: 15-1: 12.71 (1H, sl, NH), 8.66 (1H, s, CHarom), 7.40-7.47 (3H, m, CHarom), 6.01 (2H, sl, NH2)
【０２７１】
方法Ｅの例
方法Ｅを含んでなるプロトコールは、酸塩化物、イソシアネート、イソチオシアネートまたはアルデヒドなどの、場合によりｉｎ  ｓｉｔｕで生成されてもよい、求電子官能基を特徴とする中間体とそれらの反応による、アミノピラゾール環の環外アミンの官能基化を目的とする。
【０２７２】
反応中間体の調製
実施例１６：２−（Ｎ−（４，４−ジフルオロシクロヘキシル）−２，２，２−トリフルオロアセトアミド）−４−（４−メチルピペラジン−１−イル）安息香酸
【化６３】
2019031542.tif 000083
実施例１６ａ：４−（４−メチルピペラジン−１−イル）−２−ニトロ安息香酸ｔｅｒｔ−ブチル
この化合物は、ＷＯ２００８／７４７４９において従前に記載されている。
【０２７３】
５．２８ｍｌ（４７．６ｍｍｏｌ）の１−メチルピペラジンを、４．１ｇ（１７ｍｍｏｌ）の４−フルオロ−２−ニトロ安息香酸ｔｅｒｔ−ブチルを加える。この反応混合物を無溶媒で５時間撹拌する。１５０ｍｌの水をこの反応混合物に加え、これを２４時間撹拌する。生じた沈殿を濾過し、水ですすぎ、真空下で乾燥させると、４．９ｇ（９０％）の４−（４−メチルピペラジン−１−イル）−２−ニトロ安息香酸ｔｅｒｔ−ブチルが黄色固体の形態で得られる。
LCMS (EI, m/z): (M+1) 322.37
1H NMR: δHppm (400MHz, DMSO): 7.69 (1H, d, CHarom), 7.30 (1H, d, CHarom), 7.20 (1H, dd, CHarom), 3.38 (4H, m, CH), 2.40 (4H, m, CH), 2.22 (3H, s, CH3), 1.45 (9H, s, CH3)
【０２７４】
実施例１６ｂ：２−アミノ−４−（４−メチルピペラジン−１−イル）安息香酸ｔｅｒｔ−ブチル
この化合物は、ＷＯ２００８／７４７４９において従前に記載されている。
【０２７５】
１００ｍｌのエタノール中、４．８２ｇ（１５ｍｍｏｌ）の４−（４−メチルピペラジン−１−イル）−２−ニトロ安息香酸ｔｅｒｔ−ブチルの溶液に、０．１６０ｇ（１．５００ｍｍｏｌ）のパラジウム炭素（１０％）および１５．１９ｍｌ（１５０ｍｍｏｌ）のシクロヘキセンを加える。この反応混合物を８０℃の温度で８時間加熱する。反応混合物を濾過した後、エタノールですすぐと、４．２ｇ（収率＝９６％）の２−アミノ−４−（４−メチルピペラジン−１−イル）安息香酸ｔｅｒｔ−ブチルが黄色固体の形態で得られる。
LCMS (EI, m/z): (M+1) 292.39
1H NMR: δHppm (400MHz, DMSO): 7.44 (1H, d, CHarom), 6.40 (2H, bs, NH2), 6.19 (1H, dd, CHarom), 6.12 (1H, d, CHarom), 3.17 (4H, m, CH), 2.40 (4H, m, CH), 2.22 (3H, s, CH3), 1.49 (9H, s, CH3)
【０２７６】
実施例１６ｃ：２−（４，４−ジフルオロシクロヘキシルアミノ）−４−（４−メチルピペラジン−１−イル）安息香酸ｔｅｒｔ−ブチル
６０ｍｌのジクロロメタンに溶かした１．５２１ｇ（５．２２ｍｍｏｌ）の２−アミノ−４−（４−メチルピペラジン−１−イル）安息香酸ｔｅｒｔ−ブチルに、１．０４５ｍｌ（１３．５７ｍｍｏｌ）のトリフルオロ酢酸、１ｇ（７．４６ｍｍｏｌ）の４，４−ジフルオロシクロヘキサノンおよび２．１５８ｇ（８．２０ｍｍｏｌ）のテトラメチルアンモニウムトリアセトキシボロヒドリドを加える。この反応物を撹拌下、室温で２４時間置く。溶媒を蒸発させた後、粗反応生成物を３０ｍｌの酢酸エチルに再溶解させる。この溶液を０．５Ｍ  ＨＣｌ溶液、０．５Ｍソーダ溶液、最後に飽和ＮａＨＣＯ３溶液で順次洗浄する。有機相を硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過し、濃縮すると、２．２ｇの２−（４，４−ジフルオロシクロヘキシルアミノ）−４−（４−メチルピペラジン−１−イル）安息香酸ｔｅｒｔ−ブチルが淡褐色ガムの形態で得られる（収率＝７２％）。
LCMS (EI, m/z): (M+1) 410.3
1H NMR: δHppm (400MHz, DMSO): 7.73 (1H, bs, NH), 7.58 (1H, m, CHarom), 7.77 (1H, m, CHarom), 6.09 (1H, bs, CHarom), 3.37 (4H, m, CH), 3.27 (4H, m, CH), 2.47 (4H, m, CH), 2.25 (3H, s, CH), 1.99 (4H, s, CH), 1.40 (9H, s, CH)
【０２７７】
実施例１６ｄ：２−（Ｎ−（４，４−ジフルオロシクロヘキシル）−２，２，２−トリフルオロアセトアミド）−４−（４−メチルピペラジン−１−イル）安息香酸ｔｅｒｔ−ブチル
４０ｍｌのジクロロメタンに溶かした２．２ｇ（５．３ｍｍｏｌ）の２−（４，４−ジフルオロシクロヘキシルアミノ）−４−（４−メチルピペラジン−１−イル）安息香酸ｔｅｒｔ−ブチルに、０．９９ｍｌ（６．９８ｍｍｏｌ）の無水トリフルオロ酢酸および１．１２ｍｌ（８．０６ｍｍｏｌ）のトリエチルアミンを加える。この反応物を撹拌下、室温で３時間置く。溶媒を蒸発させた後、粗反応生成物を３０ｍｌの酢酸エチルにとる。この溶液を飽和ＮａＨＣＯ３溶液で洗浄する。有機相を硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過し、濃縮すると、２．５ｇの２−（Ｎ−（４，４−ジフルオロシクロヘキシル）−２，２，２−トリフルオロアセトアミド）−４−（４−メチルピペラジン−１−イル）安息香酸ｔｅｒｔ−ブチルが淡褐色ガムの形態で得られる（収率＝９２％）。
LCMS (EI, m/z): (M+1) 506.26
1H NMR: δHppm (400MHz, DMSO): 7.84 (1H, m, CHarom), 7.09(1H, m, CHarom), 6.89 (1H, bs, CHarom), 3.45-3.39 (8H, m, CH), 2.83 (4H, m, CH), 2.20 (4H, m, CH), 2.05 (3H, s, CH), 1.46 (9H, s, CH)
【０２７８】
実施例１６：２−（Ｎ−（４，４−ジフルオロシクロヘキシル）−２，２，２−トリフルオロアセトアミド）−４−（４−メチルピペラジン−１−イル）安息香酸
３０ｍｌのジクロロメタンに溶かした２．５ｇ（４．９５ｍｍｏｌ）の２−（Ｎ−（４，４−ジフルオロシクロヘキシル）−２，２，２−トリフルオロアセトアミド）−４−（４−メチルピペラジン−１−イル）安息香酸ｔｅｒｔ−ブチルに、７．６２ｍｌ（９９ｍｍｏｌ）のトリフルオロ酢酸を加える。この反応物を撹拌下、室温で一晩置く。溶媒を蒸発させた後、粗反応生成物を３０ｍｌの酢酸エチルに再溶解させる。溶媒を蒸発させ、生じた固体をエチルエーテルに再溶解させ、再び溶媒を蒸発させる。淡褐色固体が得られるまで、この操作を３回繰り返す。２．２ｇの２−（Ｎ−（４，４−ジフルオロシクロヘキシル）−２，２，２−トリフルオロアセトアミド）−４−（４−メチルピペラジン−１−イル）安息香酸がトリフルオロ酢酸塩の形態で得られる（収率＝７９％）。
LCMS (EI, m/z): (M+1) 450.1
1H NMR: δHppm (400MHz, DMSO): 10.01 (1H, bs, OH), 7.92 (1H, m, CHarom), 7.13 (1H, m, CHarom), 7.01 (1H, bs, CHarom), 4.39 (1H, m, CH), 3.12-3.52 (8H, m, CH), 2.86 (3H, s, CH), 1.75-2.0 (8H, m, CH)
【０２７９】
下記の化合物もこの方法によって得られる。
【０２８０】
４−（４−メチルピペラジン−１−イル）−２−（２，２，２−トリフルオロ−Ｎ−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イル）アセトアミド）安息香酸
この化合物は、ＷＯ２００８／７４７４９、ＷＯ２００９／１３１２６およびＷＯ２０１０／６９９６６において従前に記載されている。
LCMS (EI, m/z): (M+1) 416.40
1H NMR: δHppm (400MHz, DMSO): 12.60 (1H, bs, OH), 10.08 (1H, bs, OH), 7.90 (1H, d, CHarom), 7.13 (1H, dd, CHarom), 6.90 (1H, d, CHarom), 4.40 (1H, m, CH), 4.10 (2H, m, CH), 3.70-3.90 (2H, m, CH), 3.59-3.62 (4H, m, CH), 3.30-3.32 (4H, m, CH), 2.87 (3H, s, CH3), 1.87-1.98 (1H, m, CH), 1.59-1.60 (1H, m, CH), 1.00-1.54 (2H, m, CH)
【０２８１】
４−（（３−（ジメチルアミノ）プロピル）（メチル）アミノ）−２−（２，２，２−トリフルオロ−Ｎ−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イル）アセトアミド）安息香酸
この化合物は、ＷＯ２００９／１３１２６およびＷＯ２００８／７４７４９において従前に記載されている。
【０２８２】
実施例１７：（Ｓ）−２−（２，２，２−トリフルオロ−Ｎ−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イル）アセトアミド）−４−（３−（２，２，２−トリフルオロアセトアミド）ピロリジン−１−イル）安息香酸
【化６４】
2019031542.tif 000084
実施例１７ａ：（Ｓ）−４−（３−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ）ピロリジン−１−イル）−２−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４ｙｌアミノ）安息香酸ｔｅｒｔ−ブチル
この化合物は、（Ｓ）−ピロリジン−３−イルカルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチルを用い、実施例１６ｄを再現することにより得られた。
【０２８３】
実施例１７ｂ：（Ｓ）−４−（３−アミノピロリジン−１−イル）−２−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イルアミノ）安息香酸
１００ｍｌのジクロロメタン中、４．７２ｇ（１０．２３ｍｍｏｌ）の（Ｓ）−４−（３−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ）ピロリジン−１−イル）−２−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イルアミノ）安息香酸ｔｅｒｔ−ブチルの溶液に、１９．７ｍｌ（２５当量）のトリフルオロ酢酸を加える。反応媒体を室温で３０時間撹拌する。溶媒を蒸発させ、残渣をジエチルエーテルに再溶解させ、固体が得られるまで摩砕する。生じた固体を濾過し、真空下で乾燥させると、４．３ｇ（１００％）の（Ｓ）−４−（３−アミノピロリジン−１−イル）−２−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イルアミノ）安息香酸の黄色粉末がトリフルオロ酢酸塩の形態で得られる。
LCMS (EI, m/z): (M+1) 306.22
【０２８４】
実施例１７：（Ｓ）−２−（２，２，２−トリフルオロ−Ｎ−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イル）アセトアミド）−４−（３−（２，２，２−トリフルオロアセトアミド）ピロリジン−１−イル）安息香酸
０℃で、４０ｍｌのジクロロメタン中、１．５ｇ（３．５８ｍｍｏｌ）の、トリフルオロ酢酸塩の形態の（Ｓ）−４−（３−アミノピロリジン−１−イル）−２−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イルアミノ）安息香酸の溶液に、１．７４ｍｌ（３．５当量）のトリエチルアミンおよび１．６ｍｌ（２．１当量）の無水トリフルオロ酢酸を加える。反応媒体を室温で２４時間撹拌する。水（１０ｍｌ）を滴下した後、有機相を飽和塩化ナトリウム溶液で洗浄し、硫酸マグネシウムで乾燥させ、濾過し、蒸発させる。残渣をシリカゲルクロマトグラフィー（溶離剤として９６：４ジクロロメタン／メタノール）により精製すると、２５０ｍｇ（１４％）の（Ｓ）−２−（２，２，２−トリフルオロ−Ｎ−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イル）アセトアミド）−４−（３−（２，２，２−トリフルオロアセトアミド）ピロリジン−１−イル）安息香酸が黄色粉末の形態で得られる。
LCMS (EI, m/z): (M+1) 498.07
【０２８５】
実施例１８：２−（２−フルオロエトキシ）−４−（４−メチルピペラジン−１−イル）安息香酸
この化合物は、下記の中間体から調製することができる。
【０２８６】
実施例１８ａ：４−フルオロ−２−（２−フルオロエトキシ）安息香酸ｔｅｒｔ−ブチル
【０２８７】
実施例１８ｂ：２−（２−フルオロエトキシ）−４−（４−メチルピペラジン−１−イル）安息香酸ｔｅｒｔ−ブチル
下記の化合物もこの方法によって得られた。
２−（２−フルオロエトキシ）−４−（４−（１−メチルピペリジン−４−イル）ピペラジン−１−イル）安息香酸
【０２８８】
実施例１９：４−（４−メチルピペラジン−１−イル）−２−（２，２，２−トリフルオロ−Ｎ−（２−フルオロエチル）−アセトアミド）−安息香酸
この化合物は、下記の中間体から調製することができる。
【０２８９】
実施例１９ａ：４−フルオロ−２−（２−フルオロエチルアミノ）安息香酸ｔｅｒｔ−ブチル
【０２９０】
実施例１９ｂ：４−フルオロ−２−（２，２，２−トリフルオロ−Ｎ−（２−フルオロエチル）アセトアミド）安息香酸ｔｅｒｔ−ブチル
【０２９１】
実施例１９ｃ：４−（４−メチルピペラジン−１−イル）−２−（２，２，２−トリフルオロ−Ｎ−（２−フルオロエチル）−アセトアミド）−安息香酸ｔｅｒｔ−ブチル
【０２９２】
下記の化合物もこの方法によって得られた。
４−（（３−（ジメチルアミノ）プロピル）（メチル）アミノ）−２−（２，２，２−トリフルオロ−Ｎ−（２−フルオロエチル）アセトアミド）ベンゾエート
【０２９３】
実施例２０：４−（１−メチルピペリジン−４−イル）−２−（２，２，２−トリフルオロ−Ｎ−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イル）アセトアミド）安息香酸ヒドロトリフルオロアセテート(hydrotrifloroacetate)
【化６５】
2019031542.tif 000085
この化合物は、下記の中間体から調製することができる。
【０２９４】
実施例２０ａ：２−ニトロ−４−（ピリジン−４−イル）安息香酸ｔｅｒｔ−ブチル
２００ｍｌのジメトキシエタンと１００ｍＬの水との混合物中、１８ｇの４−ブロモ−２−ニトロ安息香酸ｔｅｒｔ−ブチル（５９．６ｍｍｏｌ）および１０．９８ｇのピリジン−４−イルボロン酸（８９ｍｍｏｌ）の溶液に、１．６７ｇのビス（トリフェニルホスフィン）パラジウム（ＩＩ）クロリド（２．３８ｍｍｏｌ）および１５．８ｇの炭酸ナトリウム（１４９ｍｍｏｌ）を加える。反応媒体を１００℃で２４時間加熱した後、減圧下で濃縮する。得られた残渣をフラッシュクロマトグラフィー（ＣＨ２Ｃｌ２／ＡｃＯＥｔ：１００：０から７０：３０、３０分）により精製する。生成物が油状物の形態で単離され、これは結晶化して１４．６４ｇ（８２％）の結晶が得られる。
MS (m/z): (M+1) 301.0
1H NMR: δH ppm (400 MHz, DMSO): 8.73 (2H, d, CHarom, J=6.0Hz), 8.44 (1H, s, CHarom), 8.24 (1H, dd, CHarom, J=8.0Hz), 7.97 (1H, d, CHarom, J=8.0Hz), 7.85 (2H, dd, CHarom, J=4.4Hz), 1.54 (9H, s)
【０２９５】
実施例２０ｂ：４−（４−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−３−ニトロフェニル）−１−メチルピリジニウムヨージド
２０ｍＬのアセトン中、１６．２ｇの２−ニトロ−４−（ピリジン−４−イル）安息香酸ｔｅｒｔ−ブチル（６０．６ｍｍｏｌ）の溶液に、７．５５ｍＬのヨードメタン（１２１ｍｍｏｌ）を加える。反応媒体を６０℃で４時間加熱した後、室温で一晩置く。乾燥濃縮の後、２７ｇの橙色の結晶が単離される（１００％）。
MS (m/z): (M+1) 315.0
1H NMR: δH ppm (400 MHz, DMSO): 9.14 (2H, d, CHarom, J=6.4Hz), 8.71 (1H, s, CHarom), 8.63 (2H, d, CHarom, J=6.4Hz), 8.47 (1H, dd, CHarom, J=8.0Hz), 8.08 (1H, d, CHarom, J=8.0Hz), 4.37 (3H, s, CH), 1.54 (9H, s)
【０２９６】
実施例２０ｃ：２−アミノ−４−（１−メチルピペリジン−４−イル）安息香酸ｔｅｒｔ−ブチル
ステンレス鋼製の反応器に入れた２００ｍＬのメタノール中、２６．８ｇの４−（４−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−３−ニトロフェニル）−１−メチルピリジニウムヨージド（６０．６ｍｍｏｌ）の溶液に、０．４８ｇの酸化白金（ＩＶ）(platine (IV) oxide)（２．１２ｍｍｏｌ）を加える。反応媒体を５バールの水素下に２４時間曝す。触媒を濾過し、濾液を減圧下で濃縮すると、２４．８ｇ（９８％）の白色結晶が得られる。
S (m/z): (M+1) 291.1
1H NMR: δH ppm (400 MHz, DMSO): 9.18 (1H, s, HI), 7.60 (1H, d, CHarom, J=8.4Hz), 6.54-6.40 (3H, m, CHarom), 6.39 (1H, d, CHarom, J=8.0Hz), 3.48-3.53 (2H, m, CH), 3.06 (2H, t, CH), 2.81 (3H, s, CH), 2.60-2.70 (1H, m, CH), 1.89-1.97 (2H, m, CH), 1.70-1.80 (2H, m, CH), 1.52 (9H, s)
【０２９７】
実施例２０ｄ：４−（１−メチルピペリジン−４−イル）−２−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イルアミノ）安息香酸ｔｅｒｔ−ブチル
撹拌下、２００ｍＬのジクロロメタン中、１５ｇの２−アミノ−４−（１−メチルピペリジン−４−イル）安息香酸ｔｅｒｔ−ブチルの溶液に、７．１８ｍＬの２，２，２−トリフルオロ酢酸（９３ｍｍｏｌ）、４．１１ｍｇのジヒドロ−２Ｈ−ピラン−４（３Ｈ）−オン（４４．５ｍｍｏｌ）、次いで、１４．５ｇのテトラメチルアンモニウムトリアセトキシボロヒドリド（５３．８ｍｍｏｌ）を順次加える。反応媒体を室温で２時間撹拌した後、１Ｎソーダ溶液にとる(taklen up)。有機相を単離し、硫酸マグネシウムで乾燥させた後、乾燥濃縮する。残渣は常にＨＩを含有した。そして、これをジクロロメタンにとり、１００ｍＬの１Ｈソーダ溶液で洗浄する。有機相をデカントし、硫酸マグネシウムで乾燥させ、乾燥濃縮すると、１４．６ｇの黄色固体が得られる（定量的収率）。
MS (m/z): (M+1) 375.2
1H NMR: δH ppm (400 MHz, DMSO): 7.69 (1H, d, CHarom, J=8.4Hz), 7.63 (1H, d, CHarom, J=7.6Hz), 6.65 (1H, s, CHarom), 6.44 (1H, dd, CHarom, J=8.4Hz), 3.74-3.86 (2H, m, CH), 3.66-3.71 (1H, m, CH), 3.51 (2H, t, CH), 3.05-3.12 (2H, m, CH), 2.6-2.5 (1H, m, CH), 2.42 (3H, s, CH), 2.30-2.40 (2H, m, CH), 1.89-1.97 (2H, m, CH), 1.64-1.77 (4H, m, CH), 1.52 (9H, s), 1.33-1.45 (2H, m, CH)
【０２９８】
実施例２０ｅ：４−（１−メチルピペリジン−４−イル）−２−（２，２，２−トリフルオロ−Ｎ−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イル）アセトアミド）安息香酸ｔｅｒｔ−ブチル
撹拌下、２４０ｍＬのジクロロメタン中、１１．４ｇの４−（１−メチルピペリジン−４−イル）−２−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イルアミノ）安息香酸ｔｅｒｔ−ブチル（３０．４ｍｍｏｌ）の溶液に、０℃で、６．３５ｍＬのトリエチルアミンおよび５．５０ｍＬの２，２，２−無水トリフルオロ酢酸（３９．６ｍｍｏｌ）を加える。反応媒体を室温で１時間撹拌した後、１００ｍＬの水を滴下する。有機相をデカントし、硫酸マグネシウムで乾燥させ，乾燥濃縮する。残渣をエタノール／ジエチルエーテルの混合物にとると固体が得られ、これをフリット付きディスクで濾過すると、１２．０６ｇの白色結晶が単離される。濾液を濃縮し（４．５ｇ）、次いで、シリカでのフラッシュクロマトグラフィー(flach chromatography)（ＣＨ２Ｃｌ２／ｍｅＯＨ：９５：５から９０：１０、２０分）により精製する。得られた生成物をジエチルエーテル中で再結晶化させると、１．０４ｇのさらなる白色結晶が得られる（全収率＝７４％）。
【０２９９】
MS (m/z): (M+1) 471.1
1H NMR: δH ppm (400 MHz, DMSO): 9.45 (1H, sl, NH+), 7. 96 (1H, d, CHarom, J=8Hz), 7.51 (1H, d, CHarom, J=8Hz), 7.31 (1H, s, CHarom), 4.6-4.5 (1H, m, CH), 3. 90-3.75 (2H, m, CH), 3.5-3.35 (4H, m, CH), 3.1-2.85 (3H, m, CH), 2.79 (3H, s, CH3), 2.1-1.95 (3H, 3, CH), 1.9-1.75 (2H, m, CH), 1.55-1.40 (11H, m), 1.0-0.85 (1H, m, CH)
【０３００】
実施例２０：４−（１−メチルピペリジン−４−イル）−２−（２，２，２−トリフルオロ−Ｎ−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イル）アセトアミド）安息香酸ヒドロトリフルオロ酢酸塩
３０ｍＬのジクロロメタン中、３．２ｇの４−（１−メチルピペリジン−４−イル）−２−（２，２，２−トリフルオロ−Ｎ−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イル）アセトアミド）安息香酸ｔｅｒｔ−ブチル（５．４７ｍｍｏｌ）（トリフルオロ酢酸塩の形態）の溶液に、撹拌下、６．３３ｍＬの２，２，２−トリフルオロ酢酸（８２ｍｍｏｌ）を加える。反応媒体を室温で１６時間撹拌した後、減圧下で蒸発させる。残渣をエタノールにとり、生じた白色固体をフリット付きディスクで濾過すると、１．６１ｇ（５３％）の白色結晶が得られる。
MS (m/z): (M+1) 415.1
1H NMR: δH ppm (400 MHz, DMSO): 13.39 (1H, sl, COOH), 9.46 (1H, sl, COOH du TFA), 7.99 (1H, d, CHarom, J=8.4Hz), 7.49 (1H, d, CHarom, J=8.4Hz), 7.30 (1H, s, CHarom), 4.53 (1H, m, CH), 3.74-3.86 (2H, m, CH), 3.35-3.45 (5H, m, CH), 2.90-3.01 (3H, m, CH), 2.76 (3H, s, CH), 1.65-2.04 (5H, m, CH), 1.44-1.54 (2H, m, CH)
【０３０１】
実施例２１：１−（４−イソチオシアナトフェニル）−４−メチルピペラジン
この化合物は、ＥＰ１２１５２０８に記載の方法を採用することにより調製された。
【０３０２】
下記の化合物もこの方法によって得られた。
２−イソチオシアナト−５−（４−メチルピペラジン−１−イル）フェニルカルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチル
【０３０３】
実施例２２：２−イソシアナト−５−（４−メチルピペラジン−１−イル）フェニルカルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチル
この化合物は、下記の中間体から調製することができる。
【０３０４】
実施例２２ａ：５−（４−メチルピペラジン−１−イル）−２−ニトロフェニルカルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチル
【０３０５】
実施例２２ｂ：２−アミノ−５−（４−メチルピペラジン−１−イル）フェニルカルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチル
【０３０６】
実施例２２：２−イソシアナト−５−（４−メチルピペラジン−１−イル）フェニルカルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチル
【０３０７】
実施例２３：４−（４−メチルピペラジン−１−イル）−２−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イルアミノ）ベンズアルデヒド
【化６６】
2019031542.tif 000086
実施例２３ａ：（４−（４−メチルピペラジン−１−イル）−２−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イルアミノ）フェニル）メタノール
５ｍｌのテトラヒドロフランに溶かした５００ｍｇ（１．０６０ｍｍｏｌ）の４−（４−メチルピペラジン−１−イル）−２−（２，２，２−トリフルオロ−Ｎ−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イル）アセトアミド）安息香酸を０℃で、９ｍｌのテトラヒドロフラン中、２０１ｍｇ（５．３０ｍｍｏｌ）のＬｉＡｌＨ４の懸濁液に加えた。反応混合物を０℃で１時間、次いで、室温で３時間撹拌した。反応混合物を０℃で冷却した後、２００μｌの水、次いで、２００μｌのソーダ溶液（１５重量％）、最後に１ｍｌの水を滴下する。この反応混合物を室温で２時間撹拌した後、濾過し、テトラヒドロフランですすぐ。濾液を濃縮すると、２５０ｍｇ（収率＝７７％）の（４−（４−メチルピペラジン−１−イル）−２−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イルアミノ）フェニル）メタノールが白色固体の形態で得られる。
LCMS (EI, m/z): (M+1) 306.14
1H NMR: δHppm (400MHz, DMSO): 6.85 (1H, d, CHarom), 6.20 (1H, d, CHarom), 6.10 (1H, d, CHarom), 4.95 (1H, bs, OH), 4.87 (1H, d, NH), 4.37 (2H, d, CH2), 3.83-3.86 (2H, m, CH), 3.56 (1H, m, CH), 3.46-3.56 (3H, m, CH), 3.45 (1H, m, CH), 3.05-3.07 (4H, m, CH), 2.41-2.44 (4H, m, CH), 2.21 (3H, s, CH3), 1.89-1.92 (2H, m, CH)
【０３０８】
実施例２３：４−（４−メチルピペラジン−１−イル）−２−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イルアミノ）ベンズアルデヒド
酢酸エチル（１０ｍｌ）とジクロロメタン（９ｍｌ）との混合物中、（４−（４−メチルピペラジン−１−イル）−２−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イルアミノ）フェニル）メタノール（１００ｍｇ、０．３２７ｍｍｏｌ）の溶液に、室温で８５ｍｇ（０．９８２ｍｍｏｌ）の二酸化マンガンを加える。反応混合物を超音波槽に５時間置く。この反応混合物を濾過し、溶媒を蒸発させ、粗生成物をクロマトグラフィーにより精製すると、５０．０ｍｇ（収率＝５０．３％）の（４−（４−メチルピペラジン−１−イル）−２−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イルアミノ）ベンズアルデヒドが白色固体の形態で得られる。
LCMS (EI, m/z): (M+1) 304.19
1H NMR: δHppm (400MHz, DMSO): 9.43 (1H, d, CH), 7.32 (1H, d, CHarom), 6.36 (1H, d, CHarom), 6.08 (1H, d, CHarom), 3.94-3.99 (2H, m, CH), 3.77 (1H, m, CH), 3.61-3.63 (2H, m, CH), 3.42-3.45 (4H, m, CH), 2.57-2.60 (4H, m, CH), 2.36 (3H, s, CH3), 2.04-2.08 (2H, m, CH), 1.51-1.60 (2H, m, CH)
【０３０９】
実施例２４：２−（４−（４−メチルピペラジン−１−イル）フェニル）酢酸
【化６７】
2019031542.tif 000087
実施例２４ａ：２，２，２−トリクロロ−１−（４−（４−メチルピペラジン−１−イル）フェニル）エタノール
１３．５ｍｌのジメチルホルムアミド中、１．３６２ｇ（６．６７ｍｍｏｌ）の４−（４−メチルピペラジン−１−イル）ベンズアルデヒドの溶液に、室温で、１．０ｍｌ（１０．００ｍｍｏｌ）のトリクロロ酢酸および少量ずつ１．８５４ｇ（１０ｍｍｏｌ）の２，２，２−トリクロロ酢酸ナトリウムを加える。反応混合物を室温で３時間撹拌する。溶媒を濃縮し、粗反応生成物を酢酸エチルで抽出する。有機相を、飽和重炭酸ナトリウム溶液を用いて洗浄する。有機層を合わせ、硫酸マグネシウムで乾燥させた後、濃縮すると、１．７６０ｇ（収率＝８２％）の２，２，２−トリクロロ−１−（４−（４−メチルピペラジン−１−イル）フェニル）エタノールが白色固体の形態で得られる。
LCMS (EI, m/z): (M+1) 324.04
1H NMR: δHppm (400MHz, DMSO): 7.41 (2H, d, CHarom), 7.02 (1H, bs, OH), 6.90 (2H, d, CHarom), 5.08 (1H, bs, CH), 3.14-3.16 (4H, m, CH), 2.42-2.47 (4H, m, CH), 2.21 (3H, s, CH3)
【０３１０】
実施例２４：２−（４−（４−メチルピペラジン−１−イル）フェニル）酢酸
２８ｍｌのエタノール中、２．２９４ｇ（７．３５ｍｍｏｌ）の二セレン化ジベンジルに、０．５５９ｇ（１４．７７ｍｍｏｌ）の水素化ホウ素ナトリウムを速やかに加える。反応混合物を室温で１時間撹拌する。２．２６６ｇ（７ｍｍｏｌ）の２，２，２−トリクロロ−１−（４−（４−メチルピペラジン−１−イル）フェニル）エタノールを加え、次いで、１．６８０ｇ（４２．０ｍｍｏｌ）の水酸化ナトリウムを加える。この反応混合物を３５℃で２４時間撹拌する。溶媒を濃縮し、ｐＨ５の水相を加えた後に粗生成物を酢酸エチルで抽出する。有機層を合わせ、硫酸マグネシウムで乾燥させた後、濃縮すると、２−（４−（４−メチルピペラジン−１−イル）フェニル）酢酸が得られ、これをさらなる精製を行わずに使用する。
LCMS (EI、m/z): (M+1) 235.294
【０３１１】
実施例２５：２−（４−（４−メチルピペラジン−１−イル）−２−ニトロフェニル）酢酸
この化合物は、下記の中間体から調製することができる。
【０３１２】
実施例２５ａ：２−（４−フルオロ−２−ニトロフェニル）マロン酸ジエチル
【０３１３】
実施例２５ｂ：２−（４−（４−メチルピペラジン−１−イル）−２−ニトロフェニル）マロン酸ジエチル
【０３１４】
方法Ｅ１の例：
実施例２６：Ｎ−（５−（３，５−ジフルオロフェニルチオ）−１Ｈ−ピラゾロ［３，４−ｂ］ピリジン−３−イル）−４−（４−メチルピペラジン−１−イル）−２−（２，２，２−トリフルオロ−Ｎ−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イル）アセトアミド）ベンズアミド
【化６８】
2019031542.tif 000088
９５ｍｌのジクロロメタン中、４−（４−メチルピペラジン−１−イル）−２−（２，２，２−トリフルオロ−Ｎ−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イル）アセトアミド）安息香酸の溶液２．９７ｇ（５．６１ｍｍｏｌ）に、０．９５ｍｌ（１１．２１ｍｍｏｌ）の塩化オキサリルおよび２滴の無水ジメチルホルムアミドを加える。反応混合物を室温で２時間撹拌する。溶媒を蒸発させ、生じた固体をトルエンにとり、溶媒を蒸発させる。白色固体が得られるまで、この操作を３回繰り返す。酸塩化物を−２０℃で３５ｍｌの無水テトラヒドロフランに溶かした後、形成された溶液を、３０ｍｌの無水テトラヒドロフラン中、１．５６ｇ（５．６１ｍｍｏｌ）の５−（３，５−ジフルオロフェニルチオ）−１Ｈ−ピラゾロ［３，４−ｂ］ピリジン−３−アミンおよび３．７１ｍｌ（２１．３０ｍｍｏｌ）のＮ−エチル−Ｎ−イソプロピルプロパン−２−アミンを含有する溶液に加える。この反応混合物を−２０℃で３時間、次いで、室温で一晩撹拌する。得られた沈殿を濾過し、テトラヒドロフランおよび水ですすいだ後、乾燥させると、２ｇ（５３％）のＮ−（５−（３，５−ジフルオロフェニルチオ）−１Ｈ−ピラゾロ［３，４−ｂ］ピリジン−３−イル）−４−（４−メチルピペラジン−１−イル）−２−（２，２，２−トリフルオロ−Ｎ−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イル）アセトアミド）ベンズアミドが得られる。
LCMS (EI, m/z): (M+1) 676.20. 
1H NMR: δHppm (400MHz, DMSO): 13.66 (1H, bs, NH), 11.08 (1H, bs, NH), 8.61 (1H, s, CHarom), 8.46 (1H, s, CHarom), 7.83 (1H, d, CHarom), 7.05-7.10 (2H, m, CHarom), 6.83-6.89 (3H, m, CHarom), 4.39-4.44 (1H, m, CH), 3.83-3.85 (1H, m, CH), 3.69-3.72 (1H, m, CH), 3.59-3.62 (1H, m, CH), 3.30-3.32 (4H, m, CH2), 2.30-2.44 (4H, m, CH2), 2.27 (3H, s, CH3), 1.87-1.90 (1H, m, CH), 1.59-1.60 (1H, m, CH), 1.49-1.50 (1H, m, CH), 1.20-1.40 (1H, m, CH)
【０３１５】
下記の誘導体が同じ方法に従って得られた。
【化６９】
2019031542.tif 000089
【０３１６】
【表１１】
2019031542.tif 000090
2019031542.tif 000091
2019031542.tif 000092
2019031542.tif 000093
2019031542.tif 000094
2019031542.tif 000095
2019031542.tif 000096
2019031542.tif 000097
2019031542.tif 000098
2019031542.tif 000099
2019031542.tif 000100
2019031542.tif 000101
** 1H NMR, dmso-d6, 例: 26-4: 13,64 (1H, sl, NH), 11,26 (1H, sl, NH), 8,68 (1H, d, CHarom), 8,58 (1H, d, CHarom), 8,20 (2H, d, CHarom), 7,64 (2H, d, CHarom), 7,03 (1H, m, CHarom), 6,78 (2H, m, CHarom), 3,95 (2H, m, CH2). 26-8: 13,59 (1H, sl, NH), 11,05 (1H, sl, NH), 8,68 (1H, d, CHarom), 8,57 (1H, d, CHarom), 7,19 (2H, d, CHarom), 6,99-7,08 (1H, m, CHarom), 6,88 (2H, d, CHarom), 6,75-6,79 (2H, m, CHarom), 3,61 (2H, m, CH2), 3,07-3,09 (4H, m, CH), 2,41-2,44 (4H, m, CH), 2,20 (3H, s, CH3). 26-9: 13,17 (1H, sl, NH), 10,90 (1H, sl, NH), 8,55 (1H, s, CHarom), 7,79 (1H, d, CHarom), 7,07 (1H, dd, CHarom), 6,90 (1H, d, CHarom), 4,40-4,50 (1H, m, CH), 3,96 (3H, s, CH3), 3,82-3,89 (1H, m, CH), 3,74-3,80 (1H, m, CH), 3,34-3,41 (2H, m, CH), 3,28-3,33 (4H, m, 2*CH2), 2,43-2,47 (4H, m, 2*CH2), 2,23 (3H, s, CH3), 1,85-1,92 (1H, m, CH), 1,58-1,63 (1H, m, CH), 1,45-1,53 (1H, m, CH), 1,22-1,33 (1H, m, CH). 26-10: 12,48 (1H, sl, NH), 10,72 (1H, sl, NH), 8,30 (1H, s, CHarom), 7,77 (1H, d, CHarom), 7,06 (1H, dd, CHarom), 6,88 (1H, d, CHarom), 6,40 (2H, sl, NH2), 4,40-4,50 (1H, m, CH), 3,82-3,89 (1H, m, CH), 3,74-3,80 (1H, m, CH), 3,34-3,41 (2H, m, CH), 3,28-3,33 (4H, m, 2*CH2), 2,43-2,47 (4H, m, 2*CH2), 2,23 (3H, s, CH3), 1,85-1,92 (1H, m, CH), 1,58-1,65 (1H, m, CH), 1,45-1,55 (1H, m, CH), 1,22-1,34 (1H, m, CH). (ND: not determined). 26-14: 12.99 (1H, sl, NH), 10.25 (1H, s, NH), 7.96 (1H, d, CHarom, J=9.2Hz), 7.90-7.80 (1H, m, CHarom), 7.23-7.16 (3H, m, CHarom), 7.12-7.08 (1H, m, CHarom), 6.96 (1H, d, CHarom, J=8.8Hz), 6.87 (1H, s, CHarom), 5.31 (2H, s), 4.49-4.42 (1H ,m), 3.86-3.75 (2H, m), 3.45 (1H, m), 3.37 (1H,m), 3.35 (4H, s), 2.42 (4H, s), 2.22 (3H, s), 1.90-1.75 (2H, m), 1.53-1.49 (1H, m), 1.31-1.25 (1H, m). 26-16: 13.00 (1H, s, NH), 10.27 (1H, s, NH), 7.95 (1H, d, CHarom, J=8.8Hz), 7.89-7.84 (1H, m, CHarom), 7.50-7.40 (1H, m, CHarom), 7.35-7.20 (2H, m, CHarom), 7.12-7.09 (1H, m, CHarom), 6.94 (1H, d, CHarom, J=8.8Hz), 6.87 (1H, s, CHarom), 5.30 (2H, s), 4.52-4.43 (1H, m), 3.85-3.75 (2H, m), 3.46-3.43 (1H, m), 3.36 (5H, s), 2.45 (4H, s), 2.22 (3H, s), 1.92-1.82 (2H, m), 1.60-1.52 (1H, m), 1.33-1.26 (1H, m). 26-20: 13.01 (1H, s, NH), 10.22 (1H, s, NH), 7.97 (1H, d, CHarom, J=8.8Hz), 7.90-7.78 (3H, m, CHarom), 7.68-7.64 (1H, m, CHarom), 7.12-7.08 (1H, m, CHarom), 6.97 (1H, d, CHarom, J=8.8Hz), 6.85 (1H, s, CHarom), 5.43 (2H, s), 4.45-4.40 (1H, m), 3.86-3.70 (2H, m), 3.46-3.42 (1H, m), 3.30-3.28 (5H, m), 2.46 (4H, s), 2.23 (3H, s), 1.90 (1H, d, J=11.2Hz), 1.77 (1H, d, J=11.2Hz), 1.58-1.50 (1H, m), 1.30-1.20 (1H, m)
【０３１７】
特定の場合、これらの反応の主要な生成物は、ピラゾール環の付加的官能基化を特徴とする二置換生成物に相当する。これらの場合、この生成物を単離し、下記のように塩基で処理することによって一置換生成物に変換する。
【０３１８】
実施例２７：Ｎ−（５−（３，５−ジフルオロフェニルチオ）−１−Ｈ−ピラゾロ［３，４−ｂ］ピラジン−３−イル）−４−（４−メチルピペラジン−１−イル）−２−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イルアミノ）ベンズアミド
【化７０】
2019031542.tif 000102
実施例２７ａ：Ｎ−（５−（３，５−ジフルオロフェニルチオ）−１−（４−（４−メチルピペラジン−１−イル）−２−（２，２，２−トリフルオロ−Ｎ−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イル）アセトアミド）ベンゾイル）−１Ｈ−ピラゾロ［３，４−ｂ］ピラジン−３−イル）−４−（４−メチルピペラジン−１−イル）−２−（２，２，２−トリフルオロ−Ｎ−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イル）アセトアミド）ベンズアミド
６０ｍｌのジクロロメタン中、４−（４−メチルピペラジン−１−イル）−２−（２，２，２−トリフルオロ−Ｎ−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イル）アセトアミド）安息香酸の溶液４．７４ｇ（８．９５ｍｍｏｌ）に、１．５１ｍｌ（１７．９０ｍｍｏｌ）の塩化オキサリルおよび２滴の無水ジメチルホルムアミドを加える。反応混合物を室温で２時間撹拌する。溶媒を蒸発させ、生じた固体をトルエンにとり、溶媒を蒸発させ、白色固体が得られるまで、この操作を３回繰り返す。
【０３１９】
この酸塩化物を、１５ｍｌのピリジンに溶かした１ｇ（３．５８ｍｍｏｌ）の５−（３，５−ジフルオロフェニルチオ）−１Ｈ−ピラゾロ［３，４−ｂ］ピラジン−３−アミンに、０℃で、少量ずつ加える。反応混合物を２５℃の室温で一晩撹拌する。溶媒を蒸発させた後、残渣をシリカゲルクロマトグラフィー（溶離剤として９０：１０ジクロロメタン／メタノール、次いで、９０：９：１、次いで、９０：５：５ジクロロメタン／メタノール／アンモニウム）により精製すると、Ｎ−（５−（３，５−ジフルオロフェニルチオ）−１−（４−（４−メチルピペラジン−１−イル）−２−（２，２，２−トリフルオロ−Ｎ−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イル）アセトアミド）ベンゾイル）−１Ｈ−ピラゾロ［３，４−ｂ］ピラジン−３−イル）−４−（４−メチルピペラジン−１−イル）−２−（２，２，２−トリフルオロ−Ｎ−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イル）アセトアミド）ベンズアミドが得られる。
LCMS (EI, m/z):(M+1) 1074.64
【０３２０】
実施例２７：Ｎ−（５−（３，５−ジフルオロフェニルチオ）−１−Ｈ−ピラゾロ［３，４−ｂ］ピラジン−３−イル）−４−（４−メチルピペラジン−１−イル）−２−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イルアミノ）ベンズアミド
５ｍｌのメタノール中、Ｎ−（５−（３，５−ジフルオロフェニルチオ）−１−（４−（４−メチルピペラジン−１−イル）−２−（２，２，２−トリフルオロ−Ｎ−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イル）アセトアミド）ベンゾイル）−１Ｈ−ピラゾロ［３，４−ｂ］ピラジン−３−イル）−４−（４−メチルピペラジン−１−イル）−２−（２，２，２−トリフルオロ−Ｎ−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イル）アセトアミド）ベンズアミドの溶液０．２１ｇ（０．１９ｍｍｏｌ）に、０．２７ｍｌ（１．９５ｍｍｏｌ）のトリエチルアミンを加える。反応媒体を６５℃で４時間加熱した後、一晩室温で置く。溶媒を蒸発させた後、生成物を酢酸エチルで数回抽出する。有機層を合わせ、飽和重炭酸ナトリウム溶液で洗浄し、硫酸マグネシウムで乾燥させ、濃縮する。残渣をシリカゲルクロマトグラフィー（溶離剤として９５：４：１ジクロロメタン／メタノール／アンモニウム）により精製すると、０．０６５ｇ（５７％）のＮ−（５−（３，５−ジフルオロフェニルチオ）−１−Ｈ−ピラゾロ［３，４−ｂ］ピラジン−３−イル）−４−（４−メチルピペラジン−１−イル）−２−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イルアミノ）ベンズアミドが黄色固体の形態で得られる。
LCMS (EI, m/z): (M-1) 579.21
1H NMR: δHppm (400MHz, DMSO): 13.95 (1H, bs, NH), 10.25 (1H, bs, NH), 8.62 (1H, s, CHarom), 8.27 (1H, d, NH), 7.80 (1H, d, CHarom), 7.17-7.27 (3H, m, CHarom), 6.27 (1H, d, CHarom), 6.12 (1H, d, CHarom), 3.79-3.82 (2H, m, CH), 3.67 (1H, m, CH), 3.45-3.50 (2H, m, CH), 3.26-3.29 (4H, m, CH), 2.42-2.44 (4H, m, CH), 2.22 (3H, s, CH3), 1.90-1.93 (2H, m, CH), 1.31-1.36 (2H, m, CH)
【０３２１】
下記の化合物が同じ方法によって得られた。
【化７１】
2019031542.tif 000103
【０３２２】
【表１２】
2019031542.tif 000104
ピリジン中で行う反応は、多くの場合、それらの生成物の位置異性体分布の改変を可能とする。下記の実施例は、このタイプの反応に特徴的である。
【０３２３】
実施例２７−ｂｉｓ：Ｎ−（５−（Ｎ−（３，５−ジフルオロフェニル）スルファモイル）−１Ｈ−ピラゾロ［３，４−ｂ］ピリジン−３−イル）−４−（４−メチルピペラジン−１−イル）−２−（２，２，２−トリフルオロ−Ｎ−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イル）アセトアミド）ベンズアミド
【化７２】
2019031542.tif 000105
２０ｍｌのジクロロメタン中、４−（４−メチルピペラジン−１−イル）−２−（２，２，２−トリフルオロ−Ｎ−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イル）アセトアミド）安息香酸の溶液０．６９７ｇ（１．３１６ｍｍｏｌ）に、０．２２４ｍｌ（２．６３ｍｍｏｌ）の塩化オキサリルおよび２滴の無水ジメチルホルムアミドを加える。反応混合物を室温で２時間撹拌する。溶媒を蒸発させ、生じた固体をトルエンに再溶解させ、溶媒を蒸発させる。白色固体が得られるまで、この操作を３回繰り返す。
【０３２４】
この酸塩化物を５ｍｌの無水ピリジンに溶かした後、形成された溶液を、０℃で、５ｍｌのピリジン中、０．２１４ｇ（０．６５８ｍｍｏｌ）の３−アミノ−Ｎ−（３，５−ジフルオロフェニル）−１Ｈ−ピラゾロ［３，４−ｂ］ピリジン−５−スルホンアミドの溶液に加える。反応混合物を０℃で３時間、次いで、室温で一晩撹拌する。ピリジンを蒸発させ、粗反応生成物をトルエンに再溶解させた後、乾燥濃縮する。この反応混合物を飽和ＮａＨＣＯ３溶液で希釈し、酢酸エチルで抽出する。有機相をＭｇＳＯ４で乾燥させ、濾過し、濃縮し、粗生成物を、精製も特性評価も行わずに、そのまま脱保護反応に使用する。
【０３２５】
下記の化合物が同じ方法によって得られた。
【化７３】
2019031542.tif 000106
【０３２６】
【表１３】
2019031542.tif 000107
【０３２７】
方法Ｅ２の例：
実施例２８：５−（３，５−ジフルオロフェニルチオ）−Ｎ−（４−（４−メチルピペラジン−１−イル）ベンジル）−１Ｈ−ピラゾロ［３，４−ｂ］ピリジン−３−アミン
【化７４】
2019031542.tif 000108
ジクロロメタンとテトラヒドロフランとの１：１混合物２０ｍｌ中、１００ｍｇ（０．３５ｍｍｏｌ）の５−（３，５−ジフルオロフェニルチオ）−１Ｈ−ピラゾロ［３，４−ｂ］ピリジン−３−アミンおよび８１ｍｇ（０．３９５ｍｍｏｌ）の４−（４−メチルピペラジン−１−イル）ベンズアルデヒドの溶液に、４１．５μｌのトリフルオロ酢酸（０．５３９ｍｍｏｌ）および少量ずつ１２９ｍｇ（０．６１１ｍｍｏｌ）のトリアセトキシ水素化ホウ素ナトリウムを加える。反応媒体を室温で１６時間撹拌する。１２５μｌのトリフルオロ酢酸および３８８ｍｇのトリアセトキシ水素化ホウ素ナトリウムのさらなる画分を追加し、反応媒体をさらに２４時間撹拌する。次に、溶媒を濃縮し、反応媒体を酢酸エチルで抽出し、飽和重炭酸ナトリウム溶液を用いて洗浄する。有機層を合わせ、硫酸マグネシウムで乾燥させた後、濃縮すると、黄色油状物が得られる。この油状物のメタノール中での摩砕により、１３５ｍｇの黄色固体が単離される。
LCMS (EI, m/z): (M+1) 467.57
1H NMR: δHppm (400MHz, DMSO): 12.43 (1H, bs, NH), 8.49 (1H, d, CHarom), 8.47 (1H, d, CHarom), 7.25 (2H, d, CHarom), 7.03-7.08 (1H, m, CHarom), 6.89 (2H, d, CHarom), 6.76-6.77 (3H, m, NH and CHarom), 4.34 (2H, d, CH), 3.08 (4H, m, CH), 2.44 (4H, m, CH), 2.21 (3H, s, CH3)
【０３２８】
下記の誘導体が同じ方法に従って得られた。
【化７５】
2019031542.tif 000109
【０３２９】
【表１４】
2019031542.tif 000110
**1H NMR, DMSO-d6, 例: 28-1: 12.43 (1H, bs, NH), 8.49 (1H, d, CHarom), 8.47 (1H, d, CHarom), 7.51 (1H, d, CHarom), 7.45 (1H, m, CHarom), 7.27 (1H, m, CHarom), 7.03-7.08 (1H, m, CHarom), 7.00 (1H, t, NH), 6.77-6.80 (2H, m, CHarom), 4.63 (2H, d, CH), 3.19-3.21 (4H, m, CH), 2.42-2.45 (4H, m, CH), 2.21 (3H, s, CH3)
【０３３０】
方法Ｅ３の例
実施例２９：１−（５−（３，５−ジフルオロフェニルチオ）−１Ｈ−ピラゾロ［３，４−ｂ］ピリジン−３−イル）−３−（４−（４−メチルピペラジン−１−イル）フェニル）チオ尿素
【化７６】
2019031542.tif 000111
１２ｍｌの無水ジメチルアセトアミドに溶かした０．５４０ｇ（２．１７ｍｍｏｌ）の３，５−ジフルオロフェニルチオ−１Ｈ−ピラゾロ［３，４−ｂ］ピリジン−３−アミンに、２５℃で、０．５０７ｇ（２．１７ｍｍｏｌ）の１−（４−イソチオシアナトフェニル）−４−メチルピペラジンを加える。この混合物を８５℃で１５時間撹拌下に置く。この反応物を２０ｍｌの水を加えることによって処理した後、酢酸エチルで抽出する。有機相を硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過し、濃縮する。生成物をシリカクロマトグラフィー（溶離剤として１５：１ジクロロメタン／メタノール）により精製すると、０．１５６ｇ（収率＝１５％）の１−（１−ｔｅｒｔ−ブチル−５−（３，５−ジフルオロフェニルチオ）−１Ｈ−ピラゾロ［３，４−ｂ］ピリジン−３−イル）−３−（４−（４−メチルピペラジン−１−イル）フェニル）チオ尿素が淡褐色固体の形態で得られる。
LCMS (EI, m/z): (M+1) 512.08
1H NMR: δHppm (400MHz, DMSO): 13.69 (1H, bs, NH), 11.50 (1H, bs, NH), 11.19 (1H, bs, NH), 8.96 (1H, d, CHarom), 8.66 (1H, d, CHarom), 7.41 (2H, d, CHarom), 7.10 (1H, ddd, CHarom), 6.95 (2H, d, CHarom), 6.89 (2H, bd, CHarom), 3.13-3.16 (4H, m, CH), 2.45-2.47 (4H, m, CH), 2.23 (3H, s, CH)
【０３３１】
実施例２９−ｂｉｓ：１−（５−（３，５−ジフルオロフェニルチオ）−１Ｈ−ピラゾロ［３，４−ｂ］ピリジン−３−イル）−３−（４−（４−メチルピペラジン−１−イル）フェニル）尿素
【化７７】
2019031542.tif 000112
１０ｍｌの無水ジメチルアセトアミドに溶かした０．２００ｇ（０．５９８ｍｍｏｌ）の１−ｔｅｒｔ−ブチル−５−（３，５−ジフルオロフェニルチオ）−１Ｈ−ピラゾロ［３，４−ｂ］ピリジン−３−アミンに、０℃で、０．０４８ｇ（１．１９ｍｍｏｌ）の水素化ナトリウムを加える。この反応物を１０分間撹拌下に置く。次に、０．１３０ｇ（０．５９８ｍｍｏｌ）の１−（４−イソシアナトフェニル）−４−メチルピペラジンを０℃で加える。この混合物を室温で３時間撹拌下に置く。この反応物を０℃で２０ｍｌの水を滴下することによって処理した後、酢酸エチルで抽出する。有機相を硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過し、濃縮する。生成物をシリカクロマトグラフィーにより精製すると、０．１５０ｇ（収率＝４５％）の１−（１−ｔｅｒｔ−ブチル−５−（３，５−ジフルオロフェニルチオ）−１Ｈ−ピラゾロ［３，４−ｂ］ピリジン−３−イル）−３−（４−（４−メチルピペラジン−１−イル）フェニル）尿素が淡褐色固体の形態で得られる。
LCMS (EI, m/z): (M+1) 552.21
1H NMR: δHppm (400MHz, DMSO): 8.92 (1H, bs, NH), 8.58 (1H, bs, NH), 8.51 (1H, bs, CHarom), 8.30 (1H, bs, CHarom), 7.31 (2H, d, CHarom), 7.05 (1H, m, CHarom), 6.83-6.85 (2H, m, CHarom), 3.03-3.08 (4H, m, CH), 2.45-2.48 (4H, m, CH), 2.21 (3H, s, CH), 1.76 (9H, s, CH)
【０３３２】
２０ｍｌのＴＦＡ（トリフルオロ酢酸）に溶かした０．１５０ｇ（０．２７２ｍｍｏｌ）の１−（１−ｔｅｒｔ−ブチル−５−（３，５−ジフルオロフェニルチオ）−１Ｈ−ピラゾロ［３，４−ｂ］ピリジン−３−イル）−３−（４−（４−メチルピペラジン−１−イル）フェニル）尿素の溶液を３時間還流させる。溶媒を蒸発させ、粗反応生成物を飽和ＮａＨＣＯ３溶液で希釈し、酢酸エチルで抽出する。有機相をＭｇＳＯ４で乾燥させ、濾過し、濃縮する。得られた固体をメタノール中で摩砕し、濾過し、乾燥させる。ベージュ色の固体の形態の、１１０ｍｇ（８２％）の１−（５−（３，５−ジフルオロフェニルチオ）−１Ｈ−ピラゾロ［３，４−ｂ］ピリジン−３−イル）−３−（４−（４−メチルピペラジン−１−イル）フェニル）尿素が得られる。
LCMS (EI, m/z): (M+1): 496.06
1H NMR: δHppm (400MHz, DMSO): 10.85 (1H, bs, NH), 9.57 (1H, bs, NH), 8.57 (1H, bs, CHarom), 8.30 (1H, bs, CHarom), 7.39 (2H, d, CHarom), 6.99 (1H, m, CHarom), 6.89 (2H, d, CHarom), 6.70 (2H, bd, CHarom), 3.03-3.08 (4H, m, CH), 2.45-2.48 (4H, m, CH), 2.21 (3H, s, CH)
【０３３３】
方法Ｆの例
方法Ｆ１：脱保護の例
実施例３０：Ｎ−（５−（３，５−ジフルオロフェニルチオ）−１−Ｈ−ピラゾロ［３，４−ｂ］ピリジン−３−イル）−４−（４−メチルピペラジン−１−イル）−２−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イルアミノ）ベンズアミド
【化７８】
2019031542.tif 000113
６５ｍｌのメタノール中、Ｎ−（５−（３，５−ジフルオロフェニルチオ）−１Ｈ−ピラゾロ［３，４−ｂ］ピリジン−３−イル）−４−（４−メチルピペラジン−１−イル）−２−（２，２，２−トリフルオロ−Ｎ−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イル）アセトアミド）ベンズアミドの溶液２ｇ（２．９６ｍｍｏｌ）に、９．０８ｍｌ（６５．１ｍｍｏｌ）のトリエチルアミンを加える。反応媒体を６５℃で２時間加熱した後、一晩室温で置く。生じた沈殿を濾過し、ペンタン、水、次いでジエチルエーテルですすぎ、その後、真空下で乾燥させると、０．７３ｇ（４３％）の（Ｎ−（５−（３，５−ジフルオロフェニルチオ）−１−Ｈ−ピラゾロ［３，４−ｂ］ピリジン−３−イル）−４−（４−メチルピペラジン−１−イル）−２−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イルアミノ）ベンズアミドが白色固体の形態で得られる。
LCMS (EI, m/z): (M+1) 580.23
1H NMR: δHppm (400MHz, DMSO): 13.59 (1H, bs, NH), 10.56 (1H, bs, NH), 8.61 (1H, s, CHarom), 8.50 (1H, s, CHarom), 8.17 (1H, d, NH), 7.80 (1H, d, CHarom), 7.07 (1H, m, CHarom), 6.86 (2H, m, CHarom), 6.23 (1H, d, CHarom), 6.13 (1H, d, CHarom), 3.79-3.82 (2H, dt, CH), 3.60 (1H, m, CH), 3.45-3.50 (2H, m, CH), 3.21-3.33 (4H, m, CH), 2.42-2.46 (4H, m, CH), 2.22 (3H, s, CH3), 1.91-1.94 (2H, m, CH), 1.35-1.38 (2H, m, CH)
【０３３４】
下記の誘導体が同じ方法に従って得られた。
【０３３５】
【表１５】
2019031542.tif 000114
2019031542.tif 000115
2019031542.tif 000116
2019031542.tif 000117
2019031542.tif 000118
2019031542.tif 000119
2019031542.tif 000120
2019031542.tif 000121
2019031542.tif 000122
2019031542.tif 000123
** 1H NMR, DMSO-d6, 例: 30-3: 13.86 (1H, bs, NH), 10.70 (1H, bs, NH), 8.67 (2H, bs, CHarom), 8.10 (1H, d, NH), 7.77 (1H, d, CHarom), 7.22 (1H, m, CHarom), 6.95 (2H, d, CHarom), 6.26 (1H, d, CHarom), 6.16 (1H, bs, CHarom), 4.85 (2H, bs, CH), 3.82-3.86 (2H, dt, CH), 3.70 (1H, m, CH), 3.47-3.53 (2H, m, CH), 3.28-3.32 (4H, m, CH), 2.42-2.46 (4H, m, CH), 2.20 (3H, s, CH3), 1.94-1.98 (2H, m, CH), 1.34-1.41 (2H, m, CH).; 30-5: 13.25 (1H, bs, NH), 10.48 (1H, bs, NH), 8.42 (1H, s, CHarom), 8.11 (1H, d, NH), 7.76 (1H, d, CHarom), 7.00-7.10 (1H, m, CHarom), 6.79-6.87 (2H, m, CHarom), 6.23 (1H, dd, CHarom), 6.12 (1H, d, CHarom), 3.94 (3H, s, CH3), 3.75-3.83 (2H, m, CH), 3.63-3.71 (1H, m, CH), 3.42-3.52 (2H, m, CH), 3.22-3.32 (4H, m, 2*CH2), 2.36-2.48 (4H, m, 2*CH2), 2.22 (3H, s, CH3), 1.88-1.97 (2H, m, CH), 1.32-1.42 (2H, m, CH). 30-6: 13.10 (1H, bs, NH), 10.38 (1H, bs, NH), 8.56 (1H, s, CHarom), 8.12 (1H, d, NH), 7.75 (1H, d, CHarom), 6.23 (1H, dd, CHarom), 6.14 (1H, d, CHarom), 3.97 (3H, s, CH3), 3.80-3.86 (2H, m, CH), 3.62-3.74 (1H, m, CH), 3.40-3.55 (2H, m, CH), 3.22-3.32 (4H, m, 2*CH2), 2.36-2.48 (4H, m, 2*CH2), 2.23 (3H, s, CH3), 1.90-1.99 (2H, m, CH), 1.32-1.45 (2H, m, CH). 30-7: 12.43 (1H, bs, NH), 10.22 (1H, bs, NH), 8.32(1H, s, CHarom), 8.13(1H, d, NH), 7.73 (1H, d, CHarom), 6.37 (2H, bs, NH2), 6.22 (1H, dd, CHarom), 6.13 (1H, d, CHarom), 3.78-3.86 (2H, m, CH), 3.65-3.74 (1H, m, CH), 3.44-3.54 (2H, m, CH), 3.22-3.32 (4H, m, 2*CH2), 2.36-2.48 (4H, m, 2*CH2), 2.23 (3H, s, CH3), 1.90-1.99 (2H, m, CH), 1.32-1.45 (2H, m, CH). 30-8: 13.79 (1H, bs, NH), 10.91 (1H, bs, NH), 10.69 (1H, bs, NH), 8.83 (1H, s, CHarom), 8.76 (1H, s, CHarom), 8.18 (1H, d, NH), 7.80 (1H, d, CHarom), 6.82-6.75 (3H, m, CHarom), 6.26 (1H, d, CHarom), 6.15 (1H, d, CHarom), 3.87-3.82 (2H, dt, CH), 3.72 (1H, m, CH), 3.54-3.47 (2H, m, CH), 3.32-3.29 (4H, m, CH), 2.42-2.46 (4H, m, CH), 2.28 (3H, s, CH3), 1.97-1.95 (2H, m, CH), 1.43-1.36 (2H, m, CH). 30-13: 12.99 (1H, s, NH), 9.92 (1H, s, NH), 8.38 (1H, d, NH, J=7.6Hz), 7.92 (1H, d, CHarom, J=8.4Hz), 7.84 (1H, d, CHarom, J=9.2Hz), 7.32 (1H, d, CHarom, J=8.4Hz), 7.07-7.00 (3H, m, CHarom), 6.26 (1H, d, CHarom, J=8.8Hz), 6.14 (1H, s, CHarom), 4.21 (2H, s), 3.82-3.76 (2H, m), 3.69-3.63 (1H, m), 3.48 (2H, t), 3.28 (4H, s), 2.46 (4H, s), 2.25 (3H, s), 2.00-1.90 (2H, m), 1.37-1.26 (2H, m). 30-14: 12.96 (1H, sl, NH), 9.84 (1H, s, NH), 8.34 (1H, d, NH, J=7.6Hz), 7.96 (1H, d, CHarom, J=9.2Hz), 7.81 (1H, d, CHarom, J=8.8Hz), 7.25 (1H, s, CHarom), 7.23 (1H, s, CHarom), 7.17 (1H, t, CHarom), 6.96 (1H, d, CHarom, J=9.2Hz), 6.25 (1H, d, CHarom, J=7.6Hz), 6.14 (1H, s, CHarom), 5.35 (2H, s), 3.82-3.77 (2H, m), 3.67 (1H, sl), 3.46 (2H, t), 3.29 (4H, s), 2.50 (4H, s), 2.29 (3H, s), 1.93-1.88 (2H, m), 1.35-1.25 (2H, m). 30-15: 13.01 (1H, sl, NH), 10.11 (1H, sl, NH), 7.99 (1H, sl, NH), 7.97 (1H, d, CHarom, J=9.2Hz), 7.84 (1H, d, CHarom, J=8.4Hz), 7.25-7.14 (3H, m, CHarom), 6.97 (1H, d, CHarom, J=8.8Hz), 6.67 (1H, sl, CHarom), 6.51 (1H, d, CHarom, J=8.0Hz), 5.35 (2H, s, CHarom), 3.83-3.78 (2H, m), 3.68-3.63 (1H, m), 3.47 (2H, t), 2.87 (2H, d, J=11.2Hz), 2.45-2.40 (1H, m), 2.19 (3H, s), 2.00-1.87 (4H, m), 1.75-1.65 (4H, m), 1.34-1.28 (2H, m). 30-16: 12.95 (1H, sl, NH), 9.85 (1H, s, NH), 8.33 (1H, d, NH, J=7.6Hz), 7.95 (1H, d, CHarom, J=8.8Hz), 7.81 (1H, d, CHarom, J=8.8Hz), 7.48 (1H, q, CHarom), 7.31-7.20 (2H, m, CHarom), 6.93 (1H, d, CHarom, J=9.2Hz), 6.25 (1H, d, CHarom, J=9.2Hz), 6.14 (1H, s, CHarom), 5.35 (2H, s), 3.81-3.76 (2H, m), 3.68 (1H, sl), 3.47 (2H, t), 3.26 (4H, s), 2.44 (4H, s), 2.29 (3H, s), 1.94-1.88 (2H, m), 1.36-1.27 (2H, m). 30-17: 13.06 (1H, sl, NH), 10.12 (1H, sl, NH), 7.93 (1H, sl, NH), 7.86 (2H, d, CHarom, J=8.4Hz), 7.51-7.44 (1H, m, CHarom), 7.30-7.20 (2H, m, CHarom), 6.90 (1H, sl, CHarom), 6.64 (1H, sl, CHarom), 6.49 (1H, sl, CHarom), 5.37 (2H, s, CHarom), 3.83-3.76 (2H, m), 3.68-3.63 (1H, m), 3.46 (2H, t), 2.86 (2H, d, J=10.4Hz), 2.44-2.38 (1H, m), 2.19 (3H, s), 1.99-1.90 (4H, m), 1.75-1.65 (4H, m), 1.40-1.30 (2H, m). 30-18: 12.94 (1H, sl, NH), 9.81 (1H, s, NH), 8.32 (1H, d, CHarom, J=7.7Hz), 7.96 (1H, d, CHarom, J=9Hz), 7.81 (1H,d, CHarom, J=9Hz), 7.71 (1H, d, NH), 7.51 (1H, d, CHarom, J=8.6Hz), 7.43 (1H, dd, CHarom, J=8.6Hz), 6.97 (1H, d, CHarom, J=8.6Hz), 6.24 (1H, d, CHarom, J=8.9Hz), 6.13 (1H, s, CHarom), 5.39 (2H, s), 3.82-3.74 (2H, m), 3.72-3.62 (1H, m), 3.46 (2H, t), 3.28-3.22 (4H, m), 2.46-2.40 (4H, m), 2.22 (3H, s), 1.95-1.87 (2H, m), 1.37-1.26 (2H, m). 30-19: 13.01 (1H, sl, NH), 10.09 (1H, s, NH), 7.97 (2H, d, CHarom, J=9Hz), 7.83 (1H,d, CHarom, J=8.2Hz), 7.71 (1H, dd, NH), 7.50 (1H, d, CHarom, J=7.4Hz), 7.43 (1H, dd, CHarom, J=8.6Hz), 6.98 (1H, d, CHarom, J=9Hz), 6.67 (1H, s, CHarom), 6.51 (1H, d, CHarom, J=8.2Hz), 5.38 ( 2H, s), 3.84-3.75 (2H, m), 3.72-3.62 (1H, m), 3.46 (2H, t), 2.86 (2H, d), 2.43 (1H, m), 2.19 (3H, s), 1.99-1.88 (4H, m), 1.74-1.64 (4H, m), 1.38-1.26 (2H, m). 30-20: 12.97 (1H, sl, NH), 9.82 (1H, s, NH), 8.32 (1H, d, NH, J=8.0Hz), 7.97 (1H, d, CHarom, J=8.8Hz), 7.87 (1H, s, CHarom), 7.80-7.76 (2H, m, CHarom), 7.64 (1H, d, CHarom, J=8.4Hz), 6.96 (1H, d, CHarom, J=8.8Hz), 6.24 (1H, d, CHarom, J=8.8Hz), 6.13 (1H, s, CHarom), 5.47 (2H, s), 3.81-3.76 (2H, m), 3.66 (1H, sl), 3.46 (2H, t), 3.26 (4H, s), 2.43 (4H, s), 2.29 (3H, s), 1.93-1.88 (2H, m), 1.35-1.25 (2H, m). 30-21: 13.03 (1H, s, NH), 10.08 (1H, s, NH), 8.00-7.95 (2H, m, CHarom), 7.87-7.75 (3H, m, CHarom), 7.63 (1H, d, CHarom, J=8.4Hz), 6.97 (1H, d, CHarom, J=8.8Hz), 6.67 (1H, s, CHarom), 6.51 (1H, d, CHarom, J=8.0Hz), 5.47 (2H, s, CHarom), 3.83-3.76 (2H, m), 3.68-3.64 (1H, m), 3.47 (2H, t), 2.87 ( 2H, d, J=10.4Hz), 2.45-2.40 (1H, m), 2.20 (3H, s), 2.00-1.87 (4H, m), 1.74-1.65 (4H, m), 1.36-1.25 (2H, m). 30-22: 12.93 (1H, s, NH), 9.86 (1H, s, NH), 8.70 (1H, s, CHarom), 8.51 (1H, dd, CHarom, J=5.2Hz), 8.38 (1H, d, NH, J=8.0Hz), 7.96-7.90 (2H, m, CHarom), 7.84 (1H, d, CHarom, J=8.8Hz), 7.73-7.33 (1H, m, CHarom), 6.91 (1H, d, CHarom, J=8.8Hz), 6.27 (1H, d, CHarom, J=8.8Hz), 6.15 (1H, s, CHarom), 5.35 (2H, s), 3.83-3.77 (2H, m), 3.70-3.64 (1H, m), 3.47 (2H, t), 3.59 (4H, s), 2.59 (4H, s), 2.34 (3H, s), 1.95-1.88 (2H, m), 1.40-1.28 (2H, m). 30-23: 13.03 (1H, s, NH), 10.17 (1H, s, NH), 8.70 (1H, s, CHarom), 8.52 (1H, dd, CHarom, J=4.8Hz), 8.06 (1H, d, NH, J=7.6Hz), 7.96 (1H, d, CHarom, J=8.8Hz), 7.94-7.88 (2H, m, CHarom), 7.37-7.34 (1H, m, CHarom), 6.93 (1H, d, CHarom, J=9.2Hz), 6.69 (1H, s, CHarom), 6.52 (1H, d, CHarom, J=8.0Hz), 5.36 (2H, s, CHarom), 3.83-3.79 (2H, m), 3.68-3.64 (1H, m), 3.46 (2H, t), 3.25-3.15 (2H, m), 2.65-2.55 (3H, m), 2.54 (3H, s), 2.00-1.85 (6H, m), 1.41-1.28 (2H, m). 30-24: 13.21 (1H, s, NH), 10.00 (1H, s, NH), 8.30 (1H, d, NH, J=7.6Hz), 8.00 (1H, d, CHarom, J=8.8Hz), 7.79 (1H, d, CHarom, J=9.2Hz), 7.33 (1H, d, CHarom, J=8.8Hz), 7.26-7.16 (3H, m, CHarom), 6.24 (1H, d, CHarom, J=8.8Hz), 6.13 (1H, s, CHarom), 4.06-3.99 (2H, m), 3.67 (1H, sl), 3.47 (2H, t), 3.28 (4H, s), 2.47 (4H, s), 2.25 (3H, s), 1.94-1.88 (2H, m), 1.37-1.26 (2H, m). 30-25: 13.26 (1H, s, NH), 10.28 (1H, s, NH), 8.02 (1H, d, CHarom, J=8.8Hz), 7.97 (1H, d, NH, J=7.6Hz), 7.83 (1H, d, CHarom, J=8.0Hz), 7.34 (1H, d, CHarom, J=8.8Hz), 7.27-7.17 (3H, m, CHarom), 6.68 (1H, s, CHarom), 6.51 (1H, d, CHarom, J=8.0Hz), 3.85-3.78 (2H, m), 3.71-3.65 (1H, m), 3.47 (2H, t), 2.87 (2H, d, J=11.2Hz), 2.48-2.40 (1H, m), 2.19 (3H, s), 1.98-1.88 (4H, m), 1.74-1.66 (4H, m), 1.36-1.27 (2H, m). 30-26: 13.12 (1H, s, NH), 9.95 (1H, s, NH), 8.32 (1H, d, NH, J=7.6Hz), 7.93 (1H, d, CHarom, J=8.8Hz), 7.79 (1H, d, CHarom, J=8.8Hz), 7.73 (1H, t, CHarom), 7.52-7.40 (2H, m, CHarom), 7.12 (1H, d, CHarom, J=8.8Hz), 6.25 (1H, d, CHarom, J=8.8Hz), 6.13 (1H, s, CHarom), 3.83-3.77 (2H, m), 3.69 (1H, sl), 3.48 (2H, t), 3.28 (4H, s), 2.44 (4H, s), 2.27 (3H, s), 1.96-1.89 (2H, m), 1.37-1.27 (2H, m). 30-27: 13.17 (1H, s, NH), 10.21 (1H, s, NH), 7.99-7.92 (2H, m, CHarom et NH), 7.81 (1H, d, CHarom, J=8.4Hz), 7.77-7.70 (1H, m, CHarom), 7.51-7.40 (2H, m, CHarom), 7.13 (1H, dd, CHarom, J=8.8Hz), 6.69 (1H, s, CHarom), 6.51 (1H, d, CHarom, J=8.4 Hz), 3.85-3.78 (2H, m), 3.72-3.67 (1H, m), 3.48 (2H, t), 2.87 (2H, d, J=11.2Hz), 2.47-2.40 (1H, m), 2.20 (3H, s), 1.96-1.87 (4H, m), 1.75-1.65 (4H, m), 1.38-1.28 (2H, m). 30-28: 13.31 (1H, sl, NH), 9.95 (1H, sl, NH), 8.31 (1H, d, NH, J=7.6Hz), 7.99 (1H, d, CHarom, J=7.6Hz), 7.78 (1H, d, CHarom, J=9.2Hz), 7.58-7.49 (3H, m, CHarom), 7.31 (1H, d, CHarom, J=8.8Hz), 6.24 (1H, d, CHarom, J=8.8Hz), 6.10 (1H, s, CHarom), 3.83-3.76 (2H, m), 3.70-3.60 (1H, m), 3.45 (2H, t), 3.21 (4H, s), 2.43 (4H, s), 2.22 (3H, s), 1.94-1.86 (2H, m), 1.38-1.28 (2H, m). 30-29: 13.26 (1H, s, NH), 10.25 (1H, s, NH), 8.01 (1H, d, CHarom, J=8.8Hz), 7.94 (1H, d, NH, J=7.6Hz), 7.82 (1H, d, CHarom, J=8.4Hz), 7.59-7.54 (3H, m, CHarom), 7.32 (1H, d, CHarom, J=8.8Hz), 6.67 (1H, s, CHarom), 6.54 (1H, d, CHarom, J=7.6Hz), 3.84-3.78 (2H, m), 3.71-3.62 (1H, m), 3.47 (2H, t), 2.87 (2H, d, J=11.2Hz), 2.45-2.41 (1H, m), 2.19 (3H, s), 1.96-1.90 (4H, m), 1.74-1.68 (4H, m), 1.34-1.27 (2H, m). 30-30: 13.23 (1H, s, NH), 9.98 (1H, s, NH), 8.29 (1H, d, NH, J=7.6Hz), 8.01 (1H, d, CHarom, J=8.8Hz), 7.79 (1H, d, CHarom, J=8.8Hz), 7.62 (1H, d, CHarom, J=8.4Hz), 7.52 (1H, s, CHarom), 7.44 (1H, d, CHarom, J=7.6Hz), 7.24 (1H, d, CHarom, J=8.4Hz), 6.25 (1H, d, CHarom, J=8.0Hz), 6.12 (1H, s, CHarom), 3.82-3.75 (2H, m), 3.73-3.67 (1H, m), 3.47 (2H, t), 3.27 (4H, s), 2.43 (4H, s), 2.22 (3H, s), 1.95-1.87 (2H, m), 1.35-1.28 (2H, m). 30-31: 13.28 (1H, s, NH), 10.25 (1H, s, NH), 8.02 (1H, d, CHarom, J=8.8Hz), 7.95 (1H, d, NH, J=7.6Hz), 7.81 (1H, d, CHarom, J=8.0Hz), 7.61 (1H, d, CHarom, J=8.4Hz), 7.56 (1H, s, CHarom), 7.43 (1H, dd, CHarom, J=8.4Hz), 7.25 (1H, d, CHarom, J=8.8Hz), 6.68 (1H, s,
CHarom), 6.51 (1H, d, CHarom, J=7.2 Hz), 3.84-3.78 (2H, m), 3.69-3.61 (1H, m), 3.47 (2H, t), 2.87 (2H, d, J=11.2Hz), 2.47-2.41 (1H, m), 2.20 (3H, s), 2.00-1.90 (4H, m), 1.76-1.69 (4H, m), 1.40-1.30 (2H, m). 30-32: 13.16 (1H, s, NH), 9.95 (1H, s, NH), 8.33 (1H, d, NH, J=8.0Hz), 7.93 (1H, d, CHarom, J=8.8Hz), 7.89 (1H, d, CHarom, J=9.2Hz), 7.79 (1H, d, CHarom, J=9.2Hz), 7.70-7.63 (2H, m, CHarom), 7.60 (1H, t, CHarom), 6.97 (1H, d, CHarom, J=8.8Hz), 6.25 (1H, d, CHarom, J=9.2Hz), 6.14 (1H, s, CHarom), 3.83-3.78 (2H, m), 3.68 (1H, sl), 3.48 (2H, t), 3.28 (4H, s), 2.44 (4H, s), 2.23 (3H, s), 1.95-1.90 (2H, m), 1.38-1.28 (2H, m). 30-33: 13.21 (1H, s, NH), 10.22 (1H, s, NH), 7.99 (1H, d, NH, J=7.6Hz), 7.94 (1H, d, CHarom, J=9.2Hz), 7.89 (1H, d, CHarom, J=7.2Hz), 7.82 (1H, d, CHarom, J=8.4Hz), 7.71-7.57 (3H, m, CHarom), 6.98 (1H, d, CHarom, J=8.8Hz), 6.69 (1H, s, CHarom), 6.52 (1H, d, CHarom, J=8.0 Hz), 3.85-3.79 (2H, m), 3.72-3.62 (1H, m), 3.48 (2H, t), 2.87 (2H, d, J=11.2Hz), 2.47-2.41 (1H, m), 2.19 (3H, s), 2.00-1.90 (4H, m), 1.76-1.69 (4H, m), 1.40-1.30 (2H, m). 30-34: 13.07 (1H, s, NH), 10.11 (1H, s, NH), 8.32 (1H, d, NH, J=7.6Hz), 7.90-7.85 (2H, m, CHarom), 7.22 (1H, d, CHarom, J=8.8Hz), 7.19 (1H, s, CHarom), 7.17 (1H, s, CHarom), 7.03 (1H, t, CHarom), 6.30 (1H, d, CHarom, J=8.4Hz), 6.19 (1H, s, CHarom), 4.43 (2H, s), 4.02 (2H, sl), 3.80-3.74 (2H, m), 3.67 (1H, sl), 3.44 (2H, t), 3.10 (4H, s), 2.84 (3H, s), 1.89-1.84 (2H, m), 1.30-1.14 (4H, m). 30-35: 13.08 (1H, s, NH), 10.28 (1H, s, NH), 7.96 (1H, d, NH, J=7.6Hz), 7.88 (1H, d, CHarom, J=8.8Hz), 7.86 (1H, d, CHarom, J=6.8Hz), 7.22 (1H, d, CHarom, J=8.8Hz), 7.18 (1H, s, CHarom), 7.17 (1H, s, CHarom), 7.02 (1H, t, CHarom), 6.66 (1H, s, CHarom), 6.51 (1H, d, CHarom, J=8.4Hz), 4.43 (2H, s), 3.80-3.74 (2H, m), 3.64 (1H, sl), 3.44 (2H, t), 2.89-2.84 (2H, m), 2.43 (1H, sl), 2.20 (3H, s), 1.98-1.95 (2H, m), 1.89-1.84 (2H, m), 1.72-1.69 (4H, m), 1.29-1.20 (2H, m). 30-36: 13.10 (1H, sl, NH), 10.11 (1H, s, NH), 9.73 (1H, sl, COOH), 8.34 (1H, sl, NH), 7.92-7.86 (2H, m, CHarom), 7.47-7.40 (1H, m, CHarom), 7.23 (1H, d, CHarom, J=8.8Hz), 7.20-7.13 ( 1H, m, CHarom), 7.11-7.05 (1H, m, CHarom), 6.31 (1H, dd, CHarom, J=9.2Hz), 6.20 (1H, s, CHarom), 4.41 (2H, s), 4.04 (2H, d, J=8.8Hz), 3.81-3.75 (2H, m), 3.70-3.66 (1H, m), 3.51 (2H, d, J=11.2Hz), 3.44 (2H, t), 3.16-2.97 ( 4H, m), 2.87 (3H, s), 1.91-1.84 (2H, m), 1.34-1.22 (2H, m). 30-37: 13.09 (1H, s, NH), 10.29 (1H, s, NH), 7.97 (1H, d, NH, J=7.6Hz), 7.90-7.86 (2H, m, CHarom), 7.47-7.41 (1H, m, CHarom), 7.23 (1H, d, CHarom, J=8.8Hz), 7.19-7.13 ( 1H, m, CHarom), 7.11-7.05 ( 1H, m, CHarom), 6.67 (1H, s, CHarom), 6.52 (1H, d, CHarom, J=8.0Hz), 4.41 (2H, s), 3.79-3.74 (2H, m), 3.66-3.62 (1H, m), 3.44 (2H, t), 2.86 ( 2H, d, J=11.2Hz), 2.45-2.40 (1H, m), 2.19 (3H, s), 2.00-1.85 (4H, m), 1.74-1.65 (4H, m), 1.33-1.23 (2H, m). 30-38: 13.02 (1H, s, NH), 10.04 (1H, s, NH), 8.28 (1H, d, NH, J=8.0Hz), 7.88-7.84 (2H, m, CHarom), 7.74 (1H, s, CHarom), 7.43 (1H, d, CHarom, J=8.8Hz), 7.29 (1H, dd, CHarom, J=8.4Hz), 7.22 (1H, d, CHarom, J=8.8Hz), 6.25 (1H, dd, CHarom, J=9.2Hz), 6.12 (1H, s, CHarom), 4.50 (2H, s), 3.78-3.74 (2H, m), 3.66-3.62 (1H, m), 3.44 (2H, t), 3.26 (4H, s), 2.43 ( 4H, s), 2.22 (3H, s), 1.91-1.84 (2H, m), 1.35-1.23 (2H, m). 30-39: 13.09 (1H, s, NH), 10.32 (1H, s, NH), 8.28 (1H, d, NH, J=8.0Hz), 7.90 (2H, D, CHarom), 7.74 (1H, s, CHarom), 7.43 (1H, d, CHarom, J=8.4Hz), 7.29 (1H, dd, CHarom, J=8.4Hz), 7.25 (1H, d, CHarom, J=8.8Hz), 6.67 (1H, s, CHarom), 6.54 (1H, dd, CHarom, J=8,4Hz), 4.51 (2H, s), 3.79-3.76 (2H, m), 3.70-3.64 (1H, m), 3.44 (2H, t), 2.95-2.92 (2H, m), 2,52-2,51 (1H, m), 2.27 (3H, s), 2.13-2,01 (2H, m), 1,90-1,87 (2H, m) 1.77-1.69 (4H, m), 1.32-1.24 (2H, m). 30-40: 12.77 (1H, s, NH), 9.86 (1H, s, NH), 9.60 (1H, s, NH), 8.40 (1H, d, NH, J=7.6Hz), 7.86 (1H, d, CHarom, J=8.8Hz), 7.83 (1H, d, CHarom, J=9.2Hz), 7.56 (2H, d, CHarom, J=8.8Hz), 6.93 (1H, d, CHarom, J=9.2Hz), 6.55 (1H, t, CHarom), 6.23 (1H, dd, CHarom, J=9.2Hz), 6.13 (1H, s, CHarom), 3.82-3.75 (2H, m), 3.69-3.61 (1H, m), 3.46 (2H, t), 3.27 (4H, s), 2.44 (4H, s), 2.29 (3H, s), 1.96-1.88 (2H, m), 1.38-1.26 (2H, m). 30-41: 12.85 (1H, sl, NH), 10.13 (1H, s, NH), 9.62 (1H, s, NH), 8.03 (1H, d, NH, J=7.2Hz), 7.90-7.84 (2H, m, CHarom), 7.57 (2H, dd, CHarom, J=10.4Hz), 6.95 (1H, d, CHarom, J=8.8Hz), 6.68 (1H, s, CHarom), 6.60-6.50 (2H, m, CHarom), 3.83-3.78 (2H, m), 3.68-3.63 (1H, m), 3.46 (2H, t), 2.87 (2H, d, J=11.2Hz), 2.45-2.40 (1H, m), 2.20 (3H, s), 2.00-1.92 (4H, m), 1.75-1.65 (4H, m), 1.37-1.27 (2H, m). 30-42: 12.77 (1H, s, NH), 9.87 (1H, s, NH), 9.02 (1H, s, NH), 8.80-8.72 (1H, m, CHarom), 8.41(1H, d, NH, J=7.6Hz), 7.86 (1H, d, CHarom, J=8.8Hz), 7.83 (1H, d, CHarom, J=9.2Hz), 7.28 (1H, d, CHarom, J=9.2Hz), 7.22-7.15 (1H, m, CHarom), 6.63-6.57 (1H, m, CHarom), 6.23 (1H, d, CHarom, J=8.8Hz), 6.13 (1H, s, CHarom), 3.83-3.75 (2H, m), 3.70-3.64 (1H, m), 3.46 (2H, t), 3.27 (4H, s), 2.44 (4H, s), 2.23 (3H, s), 1.95-1.88 (2H, m), 1.39-1.26 (2H, m). 30-43: 12.84 (1H, s, NH), 10.13 (1H, s, NH), 9.05 (1H, sl, NH), 8.81-8.74 (1H, m, CHarom), 8.05 (1H, d, NH, J=7.2Hz ), 7.89-7.84 (2H, m, CHarom), 7.30 (1H, d, CHarom, J=8.8Hz), 7.23-7.15 (1H, m, CHarom), 6.67 (1H, s, CHarom), 6.64-6.58 (1H, m, CHarom), 6.51 (1H, d, CHarom, J=8.4Hz), 3.83-3.76 (2H, m), 3.68-3.64 (1H, m), 3.47 (2H, t), 2.89 ( 2H, d, J=10.8Hz), 2.45-2.40 (1H, m), 2.21 (3H, s), 2.01-1.91 (4H, m), 1.74-1.66 (4H, m), 1.38-1.27 (2H, m). 30-44: 12.80 (1H, s, NH), 10.16 (1H, s, NH), 8.89 (1H, s, CHarom), 8.52 (1H, s, NH), 8.34 (1H, d, NH, J=7.6Hz), 7.89 (1H, d, CHarom, J=9.2Hz), 7.81 (1H, d, CHarom, J=9.2Hz), 7.41 (1H, d, CHarom, J=8.8Hz), 7.35 (1H, d, CHarom, J=9.2Hz), 6.89 (1H, dd, CHarom, J=8.4Hz), 6.21 (1H, d, CHarom, J=9.2Hz), 6.11 (1H, s, CHarom), 3.83-3.75 (2H, m), 3.66-3.60 (1H, m), 3.46 (2H, t), 3.25 (4H, s), 2.44 (4H, s), 2.23 (3H, s), 1.95-1.87 (2H, m), 1.37-1.26 (2H, m). 30-45: 12.86 (1H, s, NH), 10.10 (1H, s, NH), 8.91 (1H, s, CHarom), 8.54 (1H, s, NH), 8.00 (1H, d, NH, J=7.6Hz ), 7.90 (1H, d, CHarom, J=9.2Hz), 7.85 (1H, d, CHarom, J=8.0Hz), 7.41 (1H, d, CHarom, J=8.4Hz), 7.37 (1H, d, CHarom, J=9.2Hz), 6.88 (1H, dd, CHarom, J=8.4Hz), 6.64 (1H, s, CHarom), 6.48 (1H, d, CHarom, J=8.4Hz), 3.83-3.77 (2H, m), 3.67-3.60 (1H, m), 3.47 (2H, t), 2.88 (2H, d, J=11.2Hz), 2.45-2.38 (1H, m), 2.21 (3H, s), 2.00-1.87 (4H, m), 1.75-1.65 (4H, m), 1.37-1.26 (2H, m). 30-46: 13.74 (1H, sl, NH), 10.14 (1H, s, NH), 8.62 (1H, s, CHarom), 8.33 (1H, d, NH), 7.81 (1H, d, CHarom, J=8.7Hz), 7.12-7.03 (3H, m, CHarom), 6.26 (1H, d, CHarom, J=8.8Hz), 6.13 (1H, s, CHarom), 4.31 (2H, s), 4.14-4.07 (4H, m), 3.68 (1H, sl), 3.28 (4H, s), 2.43 (4H, s), 2.23 (3H, s), 1.92 (2H, d, J=12.4Hz), 1.38-1.26 (2H, m). 30-47: 13.80 (1H, sl, NH), 10.41 (1H, s, NH), 8.64 (1H, s, CHarom), 8.02 (1H, d, NH), 7.85 (1H, d, CHarom, J=8.1Hz), 7.12-7.03 (3H, m, CHarom), 6.69 (1H, s, CHarom), 6.52 (1H, d, CHarom, J=8.1Hz), 4.30 (2H, s), 3.81 (2H, d, J=11.1Hz), 3.68 (1H, sl), 3.48 (2H, t), 2.87 (2H, d, J=10.5Hz), 2.47-2.39 (1H, sl), 2.19 (3H, s), 2-1.88 (4H, m), 1.76-1.66 (4H, m), 1.39-1.27 (2H, m). 30-48: 13.99 (1H, sl, NH), 10.17 (1H, s, NH), 8.34 (1H, s, CHarom), 8.29 (1H, dl, NH), 7.78 (1H, d, CHarom, J=8.9Hz), 7.54-7.41 (3H, m, CHarom), 6.07 (1H, d, CHarom, J=8.9Hz), 5.87 (1H, s, CHarom), 3.82 (2H, dl), 3.62 (1H, sl), 3.51-3.37 (4H, m), 2.97 (3H, s), 2.28-2.19 (2H, m), 2.15 (6H, s), 2-1.90 (2H, m), 1.71-1.61 (2H, m), 1.42-1.28 (2H, m). 30-49: 14.06 (1H, sl, NH), 10.56 (1H, s, NH), 8.85 (1H, s, CHarom), 7.97 (1H, sl, NH), 7.85 (1H, d, CHarom, J=8.1Hz), 7.50-7.40 (3H, m, CHarom), 6.71 (1H, s, CHarom), 6.54 (1H, d, CHarom, J=8.1Hz), 3.83-3.76 (2H, m), 3.70 (1H, sl), 3.48 (2H, t), 2.88 (2H, d, J=10.6Hz), 2.48-2.40 (1H, m), 2.20 (3H, s), 2.01-1.89 (4H, m), 1.76-1.66 (4H, m), 1.40-1.28 (2H, m). 30-50: 13.94 (1H, sl, NH), 10.11 (1H, sl, NH), 8.59 (1H, s, CHarom), 8.30 (1H, sl, NH), 7.76 (1H, d, CHarom, J=9.2Hz), 7.27-7.13 (3H, m, CHarom), 6.04 (1H, dd, CHarom, J=9.2Hz), 5.85 (1H, s, CHarom), 3.87-3.76 (2H, m), 3.66-3.55 (1H, m), 3.49-3.26 (4H, m), 2.96 (3H, s), 2.22 (2H, t), 2.14 (6H, s), 1.97-1.89 (2H, m), 1.69-1.60 (2H, q), 1.40-1.28 (2H, m). 30-51: 13.95 (1H, sl, NH), 10.17 (1H, sl, NH), 8.54 (1H, s, CHarom), 8.28 (1H, sl, NH), 7.78 (1H, d, CHarom, J=8.8Hz), 7.59 (1H, d, CHarom, J=9.2Hz), 7.42-7.38 (2H, m, CHarom), 6.23 (1H, d, CHarom, J=8.0Hz), 6.11 (1H, s, CHarom), 3.82-3.77 (2H, m), 3.66 (1H, sl), 3.46 (2H, t), 3.26 (4H, s), 2.43 (4H, s), 2.22 (3H, s), 1.92-1.88 (2H, m), 1.34-1.24 (2H, m). 30-52: 13.97 (1H, sl, NH), 10.20 (1H, s, NH), 8.38 (1H, s, CHarom), 8.27 (1H, d, NH), 7.88 (1H, d, CHarom, J=7.2Hz), 7.78 (1H, d, CHarom, J=9.2Hz), 7.66-7.55 (3H, m, CHarom), 6.26 (1H, dd, CHarom, J=9.2Hz), 6.13 (1H, s, CHarom), 3.85-3.76 (2H, m), 3.75-3.63 (1H, m), 3.48 (2H, t), 3.37-3.26 (4H, m), 2.61-2.52 (4H, m), 2.32 (3H, sl), 1.96-1.88 (2H, m), 1.39-1.26 (2H, m). 30-53: 13.64 (1H, s, NH), 10.20 (1H, s, NH), 8.30 (1H, d, CHarom, J=8.8Hz), 8.23 (1H, d, CHarom, J=8.0Hz), 8.19 (1H, d, CHarom, J=8.8Hz), 7.81 (1H, d, CHarom, J=9.2Hz), 7.75-7.65 (3H, m, CHarom), 6.28 (1H, dd, CHarom, J=8.8Hz), 6.14 (1H, s, CHarom), 3.83-3.77 (2H, m), 3.70-3.64 (1H, m), 3.48 (2H, t), 3.29 (4H, s), 2.44 (4H, s), 2.23 (3H, s), 1.95-1.89 (2H, m), 1.38-1.26 (2H, m). 30-54: 13.64 (1H, sl, NH), 10.48 (1H, sl, NH), 8.32 (1H, d, CHarom, J=8.8Hz), 8.19 (1H, d, CHarom, J=8.8Hz), 7.91 (1H, sl, NH), 7.85 (1H, d, CHarom, J=8.4Hz), 7.77-7.65 (3H, m, CHarom), 6.71 (1H, s, CHarom), 6.54 (1H, d, CHarom, J=8.4Hz), 3.86-3.80 (2H, m), 3.71-3.64 (1H, m), 3.48 (2H, t), 2.89 (2H, d, J=11.2Hz), 2.45-2.40 (1H, m), 2.21 (3H, s), 2.00-1.90 (4H, m), 1.75-1.65 (4H, m), 1.38-1.27 (2H, m). 30-55: 13.64 (1H, s, NH), 10.16 (1H, s, NH), 8.29 (1H, d, CHarom, J=8.8Hz), 8.24 (1H, d, NH, J=7.6Hz), 8.17 (1H, d, CHarom, J=8.8Hz), 8.09 (1H, t, CHarom), 7.88-7.85 (1H, m, CHarom), 7.81 (1H, d, CHarom, J=9.2Hz), 7.67 (1H, q, CHarom), 6.28 (1H, d, CHarom, J=8.8Hz), 6.14 (1H, s, CHarom), 3.83-3.75 (2H, m), 3.72-3.67 (1H, m), 3.48 (2H, t), 3.29 (4H, s), 2.44 (4H, s), 2.23 (3H, s), 1.96-1.89 (2H, m), 1.35-1.28 (2H, m). 30-56: 13.67 (1H, s, NH), 10.43 (1H, s, NH), 8.31 (1H, d, CHarom, J=8.8Hz), 8.18 (1H, d, CHarom, J=8.8Hz), 8.13-8.05 (1H, m, CHarom), 7.92 (1H, d, NH, J
=7.6Hz), 7.90-7.82 (2H, m, CHarom), 7.66 (1H, q, CHarom), 6.71 (1H, s, CHarom), 6.54 (1H, d, CHarom, J=8.4Hz), 3.85-3.80 (2H, m), 3.73-3.65 (1H, m), 3.49 (2H, t), 2.89 (2H, d, J=11.2Hz), 2.48-2.42 (1H, m), 2.21 (3H, s), 1.99-1.90 (4H, m), 1.76-1.68 (4H, m), 1.37-1.27 (2H, m). 30-57: 13.66 (1H, s, NH), 10.17 (1H, s, NH), 8.30 (1H, d, CHarom, J=8.8Hz), 8.24-8.16 (2H, m, CHarom et NH), 8.03-7.97 ( 3H, m, CHarom), 7.81 (1H, d, CHarom, J=9.2Hz), 6.28 (1H, d, CHarom, J=7.2Hz), 6.14 (1H, s, CHarom), 3.83-3.77 (2H, m), 3.71-3.67 (1H, m), 3.48 (2H, t), 3.29 (4H, s), 2.44 (4H, s), 2.23 (3H, s), 1.96-1.89 (2H, m), 1.34-1.28 (2H, m). 30-58: 13.71 (1H, s, NH), 10.45 (1H, s, NH), 8.32 (1H, d, CHarom, J=9.2Hz), 8.22 (1H, d, CHarom, J=8.8Hz), 8.02-7.96 (3H, m, CHarom), 7.86-7.81 (1H, m, NH), 7.83 (1H, d, Charom), 6.71 (1H, s, CHarom), 6.54 (1H, d, CHarom, J=7.6Hz), 3.85-3.78 (2H, m), 3.72-3.65 (1H, m), 3.48 (2H, t), 2.88 (2H, d, J=11.2Hz), 2.48-2.44 (1H, m), 2.21 (3H, s), 1.97-1.87 (4H, m), 1.76-1.70 (4H, m), 1.36-1.28 (2H, m). 30-59: 13.69 (1H, s, NH), 10.04 (1H, s, NH), 8.34 (1H, d, NH, J=8.8Hz), 8.26-8.16 (3H, m, CHarom), 7.81 (1H, dd, CHarom, J=8.4Hz), 7.74 (1H, d, CHarom, J=9.2Hz), 7.66 (1H, d, CHarom, J=8.4Hz), 6.24 (1H, dd, CHarom, J=9.2Hz), 6.10 (1H, s, CHarom), 3.82-3.76 (2H, m), 3.68-3.62 (1H, m), 3.48 (2H, t), 3.27 (4H, s), 2.43 (4H, s), 2.22 (3H, s), 1.93-1.86 (2H, m), 1.31-1.21 (2H, m). 30-60: 13.74 (1H, s, NH), 10.31 (1H, s, NH), 8.35 (1H, d, CHarom, J=8.8Hz), 8.25 (1H, d, CHarom, J=8.8Hz), 8.21 (1H, s, CHarom), 7.85 (1H, d, NH, J=7.2Hz), 7.81 (1H, dd, CHarom, J=8.8Hz), 7.76 (1H, d, CHarom, J=8.0Hz), 7.66 (1H, d, CHarom, J=8.8Hz), 6.67 (1H, s, CHarom), 6.50 (1H, d, CHarom, J=8.0Hz), 3.85-3.78 (2H, m), 3.68-3.62 (1H, m), 3.48 (2H, t), 2.87 (2H, d, J=11.2Hz), 2.46-2.40 (1H, m), 2.20 (3H, s), 1.97-1.87 (4H, m), 1.75-1.67 (4H, m), 1.32-1.24 (2H, m). 30-61: 13.61 (1H, s, NH), 10.32 (1H, s, NH), 8.71 (1H, d, NH, J=8.0Hz), 8.21 (1H, d, CHarom, J=8.8Hz), 7.87 (1H, d, CHarom, J=9.2Hz), 7.80 (1H, d, CHarom, J=8.8Hz), 7.17 (1H, t, CHarom), 7.05-7.02 (2H, m, CHarom), 6.29 (1H, d, CHarom, J=9.2Hz), 6.14 (1H, s, CHarom), 4.93 (2H, s), 3.74-3.68 (3H, m), 3.43 (2H, t), 3.29 (4H, s), 2.44 ( 4H, s), 2.28 (3H, s), 1.90-1.84 (2H, m), 1.28-1.20 (2H, m). 30-62: 13.67 (1H, sl, NH), 10.59 (1H, s, NH), 8.23 (1H, d, CHarom, J=8.8Hz), 8.10 (1H, d, NH, J=7.6Hz), 7.92 (1H, d, CHarom, J=8.0Hz), 7.82 (1H, d, CHarom, J=8.8Hz), 7.17 (1H, t, CHarom), 7.05-7.02 (2H, m, CHarom), 6.71 (1H, s, CHarom), 6.56 (1H, d, CHarom, J=8.0Hz), 4.94 (2H, s), 3.77-3.70 (3H, m), 3.43 (2H, t), 2.87 (2H, d, J=11.2Hz), 2.45-2.40 (1H, m), 2.20 (3H, s), 1.98-1.91 (2H, m), 1.89-1.95 (2H, m), 1.75-1.67 (4H, m), 1.30-1.20 (2H, m). 30-63: 13.63 (1H, sl, NH), 10.28 (1H, s, NH), 8.37 (1H, d, NH, J=8.0Hz), 8.24 (1H, d, CHarom, J=8.8Hz), 7.88-7.82 (2H, m, CHarom), 7.24-7.17 (3H, m, CHarom), 6.29 (1H, d, CHarom, J=9.2Hz), 6.14 (1H, s, CHarom), 4.87 (2H, s), 3.75-3.70 (3H, m), 3.43 (2H, t), 3.28 ( 4H, s), 2.45 ( 4H, s), 2.23 (3H, s), 1.90-1.85 (2H, m), 1.32-1.20 (2H, m). 30-64: 13.69 (1H, sl, NH), 10.55 (1H, s, NH), 8.26 (1H, d, CHarom, J=8.8Hz), 8.05 (1H, d, NH, J=7.6Hz), 7.90 (1H, d, CHarom, J=8.4Hz), 7.86 (1H, d, CHarom, J=8.8Hz), 7.24-7.15 (3H, m, CHarom), 6.70 (1H, s, CHarom), 6.56 (1H, d, CHarom, J=8.0Hz), 4.88 (2H, s), 3.80-3.65 (3H, m), 3.43 (2H, t), 2.87 (2H, d, J=11.2Hz), 2.46-2.40 (1H, m), 2.20 (3H, s), 2.00-1.86 (4H, m), 1.75-1.67 (4H, m), 1.29-1.23 (2H, m). 30-65: 13.49 (1H, sl, NH), 10.45 (1H, s, NH), 9.31 (1H, sl, COOH), 8.21 (1H, d, CHarom, J=8.8Hz), 8.06 (1H, sl, NH), 7.92 (1H, d, CHarom, J=8.4Hz), 7.57 (1H, d, CHarom, J=8.8Hz), 7.17-7.11 ( 2H, m, CHarom), 6.96-6.91 (1H, m, CHarom), 6.67 (1H, s, CHarom), 6.53 (1H, d, CHarom, J=8.0Hz), 4.51 (1H, d, J=13.2Hz), 4.20 (1H, d, J=13.2Hz), 3.81-3.76 (2H, m), 3.71-3.62 (1H, m), 3.56-3.41 (4H, m), 3.08 (2H, t), 2.83 (3H, s), 2.45-2.40 (1H, m), 2.07-2.00 (2H, m), 1.95-1.86 (4H, m), 1.41-1.29 (2H, m). 30-66: 13.62 (1H, sl, NH), 10.22 (1H, sl, NH), 8.36 (1H, d, NH, J=7.6Hz), 8.23 (1H, d, CHarom, J=8.8Hz), 7.85 (1H, d, CHarom, J=9.2Hz), 7.80 (1H, d, CHarom, J=8.8Hz), 7.48 (1H, s, CHarom), 7.45-7.37 ( 2H, m, CHarom), 6.29 (1H, d, CHarom, J=7.2Hz), 6.14 (1H, s, CHarom), 4.97 (2H, s), 3.76-3.70 (3H, m), 3.44 (2H, t), 3.28 (4H, s), 2.44 ( 4H, s), 2.23 (3H, s), 1.91-1.86 (2H, m), 1.30-1.24 (2H, m). 30-67: 13.67 (1H, sl, NH), 10.49 (1H, s, NH), 8.25 (1H, d, CHarom, J=8.8Hz), 8.02 (1H, d, NH, J=7.2Hz), 7.89 (1H, d, CHarom, J=8.0Hz), 7.82 (1H, d, CHarom, J=8.8Hz), 7.49 (1H, t, CHarom), 7.45-7.35 (2H, m, CHarom), 6.70 (1H, s, CHarom), 6.56 (1H, d, CHarom, J=8.0Hz), 4.97 (2H, s), 3.78-3.64 (3H, m), 3.44 (2H, t), 2.88 (2H, d, J=11.2Hz), 2.45-2.40 (1H, m), 2.20 (3H, s), 1.98-1.86 (4H, m), 1.76-1.66 (4H, m), 1.32-1.22 (2H, m). 30-68: 13.46 (1H, s, NH), 10.36 (1H, s, NH), 8.21 (1H, d, CHarom, J=8.8Hz), 8.00 (1H, d, NH, J=7.6Hz), 7.86 (1H, d, CHarom, J=8.4Hz), 7.59 (1H, d, CHarom, J=8.8Hz), 7.43-7.33 ( 2H, m, CHarom), 7.28 ( 1H, s, CHarom), 6.69 (1H, s, CHarom), 6.54 (1H, d, CHarom, J=7.6Hz), 4.58 (1H, d, J=12.8Hz), 4.30 (1H, d, J=12.8Hz), 3.78-3.75 (2H, m), 3.70-3.65 (1H, m), 3.46 (2H, t), 2.92-2.88 (2H, m), 2.45-2.40 (1H, m), 2.24 (3H, s), 2.05-1.95 (2H, m), 1.93-1.89 (2H, m), 1.77-1.70 (4H, m), 1.34-1.24 (2H, m) (ND:測定されず)
【０３３６】
実施例３０−ｂｉｓ：（Ｓ）−４−（３−アミノピロリジン−１−イル）−Ｎ−（５−（３，５−ジフルオロフェニルチオ）−１Ｈ−ピラゾロ［３，４−ｂ］ピリジン−３−イル）−２−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イルアミノ）ベンズアミド
【化７９】
2019031542.tif 000124
６ｍｌのメタノール中、２３８ｍｇ（０．３１４ｍｍｏｌ）の（Ｓ）−Ｎ−（５−（３，５−ジフルオロフェニルチオ）−１Ｈ−ピラゾロ［３，４−ｂ］ピリジン−３−イル）−２−（２，２，２−トリフルオロ−Ｎ−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イル）アセトアミド）−４−（３−（２，２，２−トリフルオロアセトアミド）ピロリジン−１−イル）ベンズアミドの溶液に、８７６μｌ（２０当量）のトリエチルアミンを加える。反応媒体を６５℃で４時間撹拌する。室温に戻した後、８ｍｌのｎ−ブタノールおよび２６０ｍｇ（６当量）の炭酸カリウムを加える。反応媒体を８０℃で２４時間撹拌する。室温に戻した後、溶媒を蒸発させ、水を加え、生成物をジクロロメタンで抽出する。有機相を飽和塩化ナトリウム溶液で洗浄し、硫酸マグネシウムで乾燥させ、濾過し、蒸発させる。残渣をシリカゲルクロマトグラフィー（溶離剤として８：２ジクロロメタン／メタノール）により精製すると、８７ｍｇ（収率＝４９％）の（Ｓ）−４−（３−アミノピロリジン−１−イル）−Ｎ−（５−（３，５−ジフルオロフェニルチオ）−１Ｈ−ピラゾロ［３，４−ｂ］ピラジン−３−イル）−２−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イルアミノ）ベンズアミドが褐色粉末の形態で得られる。
LCMS (EI, m/z): (M+1) 566.24
1H NMR: δHppm (400MHz, DMSO): 10.46 (1H, bs, NH), 8.60 (1H, s, CHarom), 8.50 (1H, s, CHarom), 8.26 (1H, d, NH), 7.78 (1H, d, CHarom), 7.08 (1H, t, CHarom), 6.86 (2H, d, CHarom), 5.86 (1H, dd, CHarom), 5.71 (1H, d, CHarom), 3.80-3.88 (2H, m, CH), 3.63-3.70 (2H, m, CH), 3.40-3.55 (5H, m, CH), 3.01-3.08 (1H, m, CH), 2.08-2.13 (1H, m, CH), 1.92-1.99 (2H, m, CH3), 1.76-1.82 (1H, m, CH), 1.30-1.41 (2H, m, CHヒ゜ラノン)
【０３３７】
方法Ｆ２：還元の例
実施例３１：Ｎ−（５−（３，５−ジフルオロフェネチル）−１Ｈ−ピラゾロ［３，４−ｂ］ピリジン−３−イル）−４−（４−メチルピペラジン−１−イル）−２−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イルアミノ）ベンズアミド
【化８０】
2019031542.tif 000125
１０ｍｌのテトラヒドロフランと５ｍｌのメタノールとの混合物中、１００ｍｇ（０．１７５ｍｍｏｌ）のＮ−（５−（（３，５−ジフルオロフェニル）エチニル）−１Ｈ−ピラゾロ［３，４−ｂ］ピリジン−３−イル）−４−（４−メチルピペラジン−１−イル）−２−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イルアミノ）ベンズアミドの溶液に、１０ｍｇの１０％Ｐｄ／Ｃを加えた後、反応媒体を水素雰囲気下に置く。反応混合物を室温で１２時間撹拌した後、セライトで濾過し、濃縮する。６２ｍｇ（収率＝６０％）のＮ−（５−（３，５−ジフルオロフェネチル）−１Ｈ−ピラゾロ［３，４−ｂ］ピリジン−３−イル）−４−（４−メチルピペラジン−１−イル）−２−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イルアミノ）ベンズアミドが白色固体の形態で単離される。
LCMS (EI, m/z): (M+1) 576.2
1H NMR: δHppm (400MHz, DMSO): 13.14 (1H, bs, NH), 10.32 (1H, bs, NH), 8.40 (1H, d, CHarom), 8.22 (1H, d, NH), 7.96 (1H, d, CHarom), 7.80 (1H, d, CHarom), 7.03-6.98 (3H, m, CHarom), 6.23 (1H, d, CHarom), 6.16 (1H, bs, CHarom), 3.84-3.81 (2H, dt, CH), 3.70 (1H, m, CH), 3.52-3.46 (2H, m, CH), 3.04-2.93 (4H, m, CH), 2.59-2.69 (4H, m, CH), 2.42-2.46 (4H, m, CH), 2.38 (3H, s, CH3), 1.96-1.93 (2H, m, CH), 1.40-1.33 (2H, m, CH)
【０３３８】
下記の誘導体が同じ方法に従って得られた。
【化８１】
2019031542.tif 000126
【０３３９】
【表１６】
2019031542.tif 000127
** 1H NMR, dmso-d6, 例: 31-1: 13.68 (1H, sl, NH), 10.11 (1H, s, NH), 8.52 (1H, s, CHarom), 8.35 (1H, dl, NH), 7.82 (1H, d, CHarom, J=9Hz), 7.05-6.97 (3H, m, CHarom), 6.27 (1H, dd, CHarom), 6.14 (1H, s, CHarom), 3.83-3.76 (2H, m), 3.74-3.64 (1H, m), 3.47 (2H, t), 3.32-3.20 (6H, m), 3.07 (2H, dd), 2.44 (4H, dd), 2.23 (3H, s), 1.91 (2H, d), 1.38-1.27 (2H, m)
【０３４０】
実施例３２：５−（３，５−ジフルオロフェニルチオ）−Ｎ−（４−（４−メチルピペラジン−１−イル）−２−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イルアミノ）ベンジル）−１Ｈ−ピラゾロ［３，４−ｂ］ピリジン−３−アミン
【化８２】
2019031542.tif 000128
アルゴン下、０℃で、３ｍｌの無水テトラヒドロフラン中、１９．６４ｍｇ（０．５１８ｍｍｏｌ）のＬｉＡｌＨ４の溶液に、１００ｍｇ（０．１７３ｍｍｏｌ）のＮ−（５−（３，５−ジフルオロフェニルチオ）−１−Ｈ−ピラゾロ［３，４−ｂ］ピリジン−３−イル）−４−（４−メチルピペラジン−１−イル）−２−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イルアミノ）ベンズアミドを少量ずつ加える。反応混合物を９０℃で１５時間加熱する。その後、さらに２０ｍｇのＬｉＡｌＨ４を追加し、反応媒体を９０℃で５時間撹拌する。次に、０℃で４５μｌの水をこの反応混合物に加えた後、４５μｌの水酸化ナトリウム（１５重量％）、最後に１２０μｌの水を加える。反応混合物を２５℃で１時間撹拌した後、Ｄｉｃａｌｉｔｅで濾過する。溶媒の蒸発後、粗生成物をクロマトグラフィーにより精製する。黄色固体の形態の、１６．８０ｍｇ（１７％）の５−（３，５−ジフルオロフェニルチオ）−Ｎ−（４−（４−メチルピペラジン−１−イル）−２−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イルアミノ）ベンジル）−１Ｈ−ピラゾロ［３，４−ｂ］ピリジン−３−アミンが得られる。
LCMS (EI, m/z): (M+1) 566.68
1H NMR: δHppm (400MHz, DMSO): 12.57 (1H, bs, NH), 8.45 (2H, d, CHarom), 6.97-7.06 (2H, m, CHarom), 6.73-6.75 (2H, m, CHarom), 6.65 (1H, t, NH), 6.13-6.19 (2H, m, CHarom), 4.98 (1H, d, NH), 4.30 (2H, m, CH2), 3.73-3.77 (2H, m, CH), 3.60 (1H, m, CH), 3.45-3.50 (2H, m, CH), 3.04 (4H, m, CH), 2.42 (4H, m, CH), 2.18 (3H, s, CH3), 1.80-1.83 (2H, m, CH), 1.27-1.32 (2H, m, CH)
【０３４１】
下記の誘導体が同じ方法に従って得られた。
【０３４２】
【表１７】
2019031542.tif 000129
実施例３３：２−（４−アミノフェニル）−Ｎ−（５−（３，５−ジフルオロフェニルチオ）−１Ｈ−ピラゾロ［３，４−ｂ］ピリジン−３−イル）アセトアミド
【化８３】
2019031542.tif 000130
１０ｍｌの２：１エタノール／水混合物中、０．２４ｇ（０．５４４ｍｍｏｌ）のＮ−（５−（３，５−ジフルオロフェニルチオ）−１Ｈ−ピラゾロ［３，４−ｂ］ピリジン−３−イル）−２−（４−ニトロフェニル）アセトアミドの溶液に、１００μｌの水中、１５２ｍｇ（２．７２ｍｍｏｌ）の鉄および７０ｍｇ（１．３ｍｍｏｌ）の塩化アンモニウムの溶液を加える。この混合物に数滴の酢酸を加え、それを６０℃で４時間加熱する。溶媒の冷却および濃縮の後、粗反応生成物を酢酸エチルで抽出し、飽和重炭酸ナトリウム溶液で洗浄する。有機層を合わせ、硫酸マグネシウムで乾燥させた後、濃縮する。粗生成物をシリカゲルクロマトグラフィー（ＤＣＭ／ＭｅＯＨ）により精製すると、１１ｍｇ（４％）の２−（４−アミノフェニル）−Ｎ−（５−（３，５−ジフルオロフェニルチオ）−１Ｈ−ピラゾロ［３，４−ｂ］ピリジン−３−イル）アセトアミドが褐色固体の形態で得られる。
LCMS (EI, m/z): (M+1) 412.09
1H NMR: δHppm (400MHz, DMSO): 13.60 (1H, bs, NH), 10.96 (1H, bs, NH), 8.68 (1H, d, CHarom), 8.55 (1H, d, CHarom), 7.06 (1H, m, CHarom), 6.98 (2H, d, CHarom), 6.79 (2H, m, CHarom), 6.50 (2H, m, CHarom), 4.92 (2H, s, NH), 3.51 (2H, m, CH2)
【０３４３】
方法Ｆ３：スルフィド酸化の例
実施例３４：５−（３，５−ジフルオロフェニルスルホニル）−１Ｈ−ピラゾロ［３，４−ｂ］ピリジン−３−アミン
【化８４】
2019031542.tif 000131
０℃で、テトラヒドロフランとメタノールとの１：１混合物１０ｍｌ中、３００ｍｇ（１．０７８ｍｍｏｌ）の５−（３，５−ジフルオロフェニルチオ）−１Ｈ−ピラゾロ［３，４−ｂ］ピリジン−３−アミンの溶液に、１．１ｍｌの水中、６６３ｍｇ（１．０７８ｍｍｏｌ）のオキソンの溶液を加える。反応混合物を室温で１６時間撹拌する。次に、０℃で、さらなる６６３ｍｇのオキソンを追加し、反応媒体を室温で２４時間撹拌する。溶媒を蒸発させ、反応媒体を重炭酸ナトリウム溶液で希釈し、酢酸エチルで抽出し、ＭｇＳＯ４で乾燥させた後、濃縮すると、３４０ｍｇ（８１％）の５−（３，５−ジフルオロフェニルスルホニル）−１Ｈ−ピラゾロ［３，４−ｂ］ピリジン−３−アミンが黄色固体の形態で得られる。
LCMS (EI, m/z): (M+1) 311.03
1H NMR: δHppm (400MHz, DMSO): 12.72 (1H, bs, NH), 8.92 (1H, d, CHarom), 8.84 (1H, d, CHarom), 7.89-8.01 (1H, d, CHarom), 7.62-7.80 (2H, m, CHarom), 6.06 (2H, bs, NH)
【０３４４】
下記の化合物もこの方法によって得られた。
【化８５】
2019031542.tif 000132
【０３４５】
【表１８】
2019031542.tif 000133
** 1H NMR, DMSO-d6, 例: 33-2: 12.64 (1H, bs, NH), 8.56 (1H, d, CHarom), 8.49 (1H, d, CHarom), 7.24 (1H, ddd, CHarom), 6.94 (2H, bd, CHarom), 6.03 (2H, bs, NH), 4.80 (2H, s, CH). (ND:測定されず)
【０３４６】
あるいは、保護工程は酸化反応の前に行い、その後に脱保護工程を行うことができ、これによって対応するスルホンまたはスルホキシドの調製がもたらされ得る。
【０３４７】
実施例３４−ｂｉｓ：５−（３，５−ジフルオロフェニルスルフィニル）−１Ｈ−ピラゾロ［４，３−ｂ］ピラジン−３−アミン
【化８６】
2019031542.tif 000134
１０ｍＬのテトラヒドロフラン中、５００ｍｇ（１．７９０ｍｍｏｌ）の５−（３，５−ジフルオロフェニルチオ）−１Ｈ−ピラゾロ［３，４−ｂ］ピラジン−３−アミンの溶液に、アルゴン下、０．５５ｍＬのトリエチルアミンおよび２２ｍｇの４−ジメチルアミノピリジンを加える。この溶液を０℃で撹拌し、０．９１５ｍＬの二炭酸ジ−ｔｅｒｔ−ブチルを加え、反応媒体を一晩撹拌する。水性画分を反応媒体に加え、次いで、酢酸エチルで抽出する。有機相をＭｇＳＯ４で乾燥させ、真空中で濃縮して粗生成物を得、これをそれ以上精製せずに酸化工程に使用する。
【０３４８】
得られた粗生成物を０℃で、テトラヒドロフランとメタノールとの１：１混合物１０ｍＬに溶かした後、２ｍＬの水中、１．１０３ｇ（１．７９４ｍｍｏｌ）のオキソンの溶液を加える。反応媒体を室温で１６時間撹拌する。次に、さらに５５０ｍｇのオキソンを追加し、反応媒体を室温で５時間撹拌する。溶媒を蒸発させ、反応媒体を重炭酸ナトリウム溶液で希釈し、酢酸エチルで抽出し、硫酸マグネシウムで乾燥させ、濃縮して、対応するスルホンおよびスルホキシドの混合物を得、これをそれ以上精製せずに脱保護工程に使用する。
【０３４９】
６ｍＬのジクロロメタン中、従前に得られた６００ｍｇの混合物の溶液に、０℃で、４ｍＬの無水ＴＨＦ中、０．３７３ｍＬのＴＦＡを加える。この混合物を室温で１時間撹拌し、４ｍＬのＴＨＦ中、さらに４当量のＴＦＡを追加する。１時間の撹拌後、この操作を繰り返し、反応媒体を合計時間３時間４５分撹拌する。溶媒を蒸発させ、反応媒体を炭酸カリウム溶液で希釈し、酢酸エチルで抽出し、硫酸マグネシウムで乾燥させ、濃縮すると、５−（３，５−ジフルオロフェニルスルホニル）−１Ｈ−ピラゾロ［３，４−ｂ］ピラジン−３−アミンと５−（３，５−ジフルオロフェニルスルフィニル）−１Ｈ−ピラゾロ［３，４−ｂ］ピラジン−３−アミンとの１：１混合物が得られる。この混合物をそれ以上精製せずに下記の工程で使用する。
【０３５０】
下記の化合物もこの方法によって得られた。
【化８７】
2019031542.tif 000135
【０３５１】
【表１９】
2019031542.tif 000136
** 1H NMR, DMSO-d6, 例: 34bis-1: 12.31 (1H, sl, NH), 8.08-8.18 (1H, m, CHarom), 8.05 (1H, d, CHarom, J=11.6Hz), 7.97 (1H, d, CHarom, J=11.6Hz), 7.87-7.93 (1H, m, CHarom), 7.64-7.76 (1H, m, CHarom), 5.81 (2H, sl, NH2). 34bis-2: 12.32 (1H, sl, NH), 7.94-8.11 (5H, m, CHarom), 5.85 (2H, sl, NH2). 34bis-3: 12.34 (1H, sl, NH), 8.27 (1H, s, CHarom), 8.12 (1H, d, CHarom, J=11.6Hz), 8.01 (1H, d, CHarom, J=11.6Hz), 7.82-7.89 (1H, m, CHarom), 7.67 (1H, d, CHarom, J=11.2Hz), 5.70 (2H, sl, NH2). 34bis-4: 12.28 (1H, sl, NH), 7.89 (1H, d, CHarom, J=8.8Hz), 7.68 (1H, d, CHarom, J=8.8Hz), 7.21 (1H, m, CHarom), 6.91-6.97 (2H, m, CHarom), 5.87 (2H, s, NH2), 4.94 (2H, s, CH). 34bis-5: 12.28 (1H, sl, NH), 7.89 (1H, d, CHarom, J=8.8Hz), 7.68 (1H, d, CHarom, J=8.8Hz), 7.20-7.25 (2H, m, CHarom), 7.10-7.15 (1H, m, CHarom), 5.84 (2H, s, NH2), 4.87 (2H, s, CH). 34bis-6: 12.04 (1H, s, NH), 7.87 (1H, d, CHarom, J=8.8Hz), 7.40 (1H, d, CHarom, J=8.8Hz), 7.10-7.25 (2H, m, CHarom), 6.90-6.97 (1H, m, CHarom), 5.61 (2H, s, NH2), 4.47 (1H, d, CH, J=13.2Hz), 4.18 (1H, d, CH, J=13.2Hz). 34bis-7: 12.28 (1H, s, NH), 7.89 (1H, d, CHarom, J=8.8Hz), 7.64 (1H, d, CHarom, J=8.8Hz), 7.40-7.50 (3H, m, CHarom), 5.81 (2H, s, NH2), 4.96 (2H, s, CH)
【０３５２】
方法Ｆ４：脱メチル化の例
実施例３５：Ｎ−（５−（３，５−ジフルオロフェニルチオ）−６−ヒドロキシ−１Ｈ−ピラゾロ［３，４−ｂ］ピリジン−３−イル）−４−（４−メチルピペラジン−１−イル）−２−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イルアミノ）ベンズアミド
【化８８】
2019031542.tif 000137
０℃で、４ｍｌの１，２−ジクロロエタン中、９０ｍｇ（０．１４８ｍｍｏｌ）のＮ−（５−（３，５−ジフルオロフェニルチオ）−６−メトキシ−１Ｈ−ピラゾロ［３，４−ｂ］ピリジン−３−イル）−４−（４−メチルピペラジン−１−イル）−２−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イルアミノ）ベンズアミド（実施例１８）の溶液に、ジクロロメタン中、１Ｍ三臭化ホウ素溶液４４３μｌ（３当量）を加える。反応媒体を６０℃で３時間撹拌し、次いで、氷浴中で冷却した後、メタノールを加える。溶媒を蒸発させ、残渣をメタノールと酢酸エチルの混合物に再溶解させる。生じた固体を濾過し、３ｍｌのテトラヒドロフランに再溶解させ、１Ｎソーダ溶液に加える。反応媒体を室温で１８時間撹拌する。この溶液のｐＨを８〜９に調整し、水相を酢酸エチルで抽出する。有機相を硫酸マグネシウムで乾燥させ、粗生成物をシリカゲルカラム（溶離剤としてジクロロメタン／メタノール）で精製すると、２１ｍｇ（２４％）のＮ−（５−（３，５−ジフルオロフェニルチオ）−６−ヒドロキシ−１Ｈ−ピラゾロ［３，４−ｂ］ピリジン−３−イル）−４−（４−メチルピペラジン−１−イル）−２−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イルアミノ）ベンズアミドが黄色粉末の形態で得られる。
LCMS (EI, m/z): (M+1) 596.13. 
1H NMR: δHppm (400MHz, DMSO): 12.96 (1H, 幅広のフラットな一重線), 12.02 (1H, 幅広のフラットな一重線), 10.64 (1H, bs, NH), 8.46 (1H, bs), 8.09 (1H, bs), 7.72 (1H, d, CHarom), 6.97-7.10 (1H, m, CHarom), 6.60-6.74 (2H, m, CHarom), 6.28 (1H, dd, CHarom), 6.13 (1H, d, CHarom), 3.80-3.90 (2H, m, CHピラノン), 3.65-3.77 (1H, m, CHピラノン), 3.50 (2H, t, CHピラノン), 3.25-3.32 (4H, m, 2*CH2), 2.37-2.45 (4H, m, 2*CH2), 2.22 (3H, s, CH3), 1.91-2.00 (2H, m, CHピラノン), 1.28-1.43 (2H, m, CHピラノン) 
【０３５３】
ＩＩ．本発明による化合物の生物学的試験
・ＴｒｋＡ、ＴｒｋＢまたはＴｒｋＣキナーゼの阻害を測定するための試験
これらのキナーゼはＭｉｌｌｉｐｏｒｅまたはＫｉｎｏｍｅ  Ｓｃａｎ（ＤｉｓｃｏｖｅｒＸ）により生産され、製造者のプロトコールに従ってスクリーニングされる。
【０３５４】
結果を下表に示す。
【０３５５】
【表２０】
2019031542.tif 000138
・ＮＧＦにより誘導される痛覚過敏に対するｉｎ  ｖｉｖｏ鎮痛活性
一般式（Ｉ）の化合物、特に化合物３０は、ＮＧＦの足底内注射を受けたマウスにおいてｉｎ  ｖｉｖｏで試験された。この処置は温熱性痛覚過敏を惹起する(Schuligoi et al., 1998, Neuroscience Letters 252:147-149)。簡単に述べれば、雄マウスの、右後肢の足底表面にＮＧＦβ（１μｇ；ＳＩＧＭＡ）の１０μｌ皮下注射を施した。注射後、マウスをケージに戻した。ＮＧＦ注射後４時間で、マウスをホットプレート無痛覚計（ＢＩＯ−ＨＣ２．００、Ｂｉｏｓｅｂ、フランス）の中央に載せ、および最初に後肢を振り上げるもしくは舐める、または飛び跳ねるまでの待ち時間を記録する。組織損傷を防ぐために、最大カットオフ時間６０秒を使用する。結果を待ち時間の平均±ｓ．ｅ．ｍ．で示す。試験化合物はＮＧＦ注射の３０分前に与える。
【０３５６】
図１は、腹腔内経路（図１Ａ）により投与される場合であっても経口経路（図１Ｂ）により投与される場合であっても、化合物３０がＮＧＦにより誘導される痛覚過敏を用量依存的に阻害したことを示す。ＮＧＦにより誘導される痛覚過敏の完全なまたは完全に近い逆転が１０ｍｇ／ｋｇ以下の用量で見られた（ＡＮＯＶＡによりＮＧＦ単独に対して＊Ｐ＜０．０５）。
【０３５７】
・ラットのホルマリン試験におけるｉｎ  ｖｉｖｏ鎮痛活性
この方法は、Wheeler-Aceto et al. (Pain, 1990, 40:229-38)およびBardin et al. (2003, Pharmacology 67: 182-194)から採用した。この第二相試験において、化合物３０は、ビヒクル処置動物に比べて肢を舐めることを４４％阻害した（ＡＮＯＶＡによりＰ＜０．０５）。
【０３５８】
・フロイントの完全アジュバント（ＣＦＡ）によって誘発される急性および慢性炎症性疼痛に対するｉｎ  ｖｉｖｏ鎮痛活性
到着時体重１６０〜１８０ｇの雄Ｓｐｒａｇｕｅ−Ｄａｗｌｅｙラット［Ｃｒｌ：ＯＦＡ（ＳＤ）  Ｃｈａｒｌｅｓ  Ｒｉｖｅｒ  Ｌｙｏｎ、フランス］を用いた。ラットをまず、炎症誘発の１週間前に、ｖｏｎ−Ｆｒｅｙモデルおよびホットプレートモデルのために使用する取り扱いおよび装置に毎日馴化させた。翌月曜日に、基準スコアを決定するためにラットに対して侵害受容試験を行った。その後、ラットの右後肢の足底表面にＣＦＡ（１ｍｇ／１ｍｌ；Ｓｉｇｍａ）の１００μｌの皮下注射を施す（０日目：Ｄ０）。プラセボ群には同じ経路で生理食塩水を注射した。
【０３５９】
次に、各ラットを透明なプラスチックケージ内の高架プラスチックメッシュに載せ、自発的フリンチの回数（自発痛の測定）を１０分間記録した。機械的アロディニアはｖｏｎ  Ｆｒｅｙ  Ｈａｉｒ試験を用いて評価した。各ラットを透明なプラスチックケージ内の高架プラスチックメッシュに載せ、少なくとも５分間、試験環境に適応させた。ｖｏｎ  Ｆｒｅｙ  Ｈａｉｒ（Ｓｅｍｍｅｓ−Ｗｅｉｎｓｔｅｉｎ  ｍｏｎｏｆｉｌａｍｅｎｔｓ、Ｓｔｏｅｌｔｉｎｇ  ＩＬ、ＵＳＡ；０．６、１．４、２，４、６、８、１０、および１５ｇ）をメッシュ床の下から注射した肢の足底表面に昇順で１秒間適用した。閾値を、逃避応答を誘発した最小の力として判定した。試験は、各試験間を５分あけて３回繰り返した。触覚刺激に対する肢逃避スコアを、３回の測定の平均として判定した。動物に試験化合物の腹腔内または経口注射を施した。
【０３６０】
一般式（Ｉ）の化合物は、本試験において、急性炎症性疼痛（フリンチ）および機械的アロディニアの両方に対して０．５〜２０ｍｇ／ｋｇの用量で鎮痛活性を示した。例えば、化合物３０は、腹腔内注射後のフリンチ（図２Ａ）および経口投与後の機械的アロディニア（図２Ｂ）を用量依存的に阻害した。化合物は、０．１６ｍｇ／ｋｇからの自発痛および２．５ｍｇ／ｋｇからの機械的アロディニアを完全にまたはほぼ完全に逆転させた。
【０３６１】
・骨癌性疼痛のモデルにおける慢性疼痛に対するｉｎ  ｖｉｖｏ鎮痛活性
骨癌は、ヒトおよび動物に影響を及ぼす最も痛みの強い状態をもたらす。骨癌は、進行性癌を有するヒト患者における最も多い疼痛でもあり、依存として治療が困難であり、病的状態の増悪および生活の質の低下に寄与するところが大きい。ネズミ骨肉腫誘導疼痛のいくつかのモデルが開発されている(Pacharinsak and Beitz, Animal models of cancer pain. Comp Med. 2008 Jun; 58:220-33)。
【０３６２】
本発明者らは、２×１０５のＮＣＴＣ  ２４７２溶骨性線維肉腫細胞を含有する１０μｌのＰＢＳをイソフルラン麻酔下の５〜６週齢のＣ３Ｈ／ＨｅＮＣｒｌマウスの脛骨に移植することによって骨癌性疼痛を誘導した。これらの細胞の存在は、破骨細胞数の増加とそれらの活性化のために骨に溶骨性病巣を誘発し、骨組織の破壊および隣接する軟組織の浸潤および疼痛関連挙動をもたらす。疼痛関連挙動は、腫瘍細胞注射の前、または３、７、１０、１４および１７日後に評価した。下記の挙動を評価した。
・０〜４（０＝通常の使用および４＝注射した後肢の使用無し）の尺度での自発的歩行の際の肢の使用；
・軽接触誘発性疼痛。腫瘍を注射した肢の小筆による１分間の非侵害刺激後に軽接触誘発性のフリンチングを測定した。フリンチ回数を５分間記録した。
【０３６３】
薬剤処置については、疼痛関連挙動が明らかに存在する腫瘍細胞の注射後７日目に開始し、試験３０分前にｉ．ｐ．経路によって投与される試験化合物または生理食塩水で動物を慢性的に処置した。例として、２．５ｍｇ／ｋｇの用量の化合物３０は、１０日目から肢使用スコア（図３Ａ）を、また、８日目から軽接触誘発性フリンチング（図３Ｂ）を、有意に低下させた。
【０３６４】
・比較試験：
トロポミオシン関連キナーゼ（Ｔｒｋ）受容体に対する化合物の阻害特性を、キナーゼ活性（ＴｒｋＡ（またはＮＴＲＫ１；４００ｎｇ／ウェル；Ｍｉｌｌｉｐｏｒｅ）およびＴｒｋＢ（またはＮＴＲＫ２；２００ｎｇ／ウェル；Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ））を含有するこれらの受容体の可溶性細胞内セグメントを用いて評価するために、９６ウェルアッセイプレート形式で、ｉｎ  ｖｉｔｒｏキナーゼｇｌｏ  ｐｌｕｓに基づくキナーゼアッセイ（Ｐｒｏｍｅｇａ）を開発した。このアッセイを、８ｍＭ  ＭＯＰＳ（ｐＨ７．０）、０．２ｍＭ  ＥＤＴＡ、４０ｍＭ酢酸Ｍｇ、２５ｍＭ  ２−グリセロホスフェート、１ｍＭ  ＤＴＴ、２ｍＭバナジン酸Ｎａ、０．０１％トリトンＸ−１００、１（ＴｒｋＡ）または２．５（ＴｒｋＢ）ｍｇ／ｍｌのポリＥＹ（ポリＧｌｕ−Ｔｙｒ  ４：１；基質）および３０（ＴｒｋＡ）または４０（ＴｒｋＢ）μＭ  ＡＴＰを含有する最終量５０μｌにおいて行った。試験化合物を溶かし（１０ｍＭ）、連続希釈により１００％ＤＭＳＯに希釈し、試験半対数濃度は一般に１〜３００００ｎＭ最終濃度（最終５％ＤＭＳＯ）の範囲であるが、これらの濃度は化合物の効力に応じて適合させることができる。反応はＡＴＰの添加によって開始し、これらのプレートを３０℃で２時間インキュベートした。プレートをインキュベーターから取り出し、５０μｌのキナーゼ−ｇｌｏ  ｐｌｕｓを各ウェルに加えた後、室温で１０分のインキュベーションを行った。ルシフェラーゼにより誘導される発光はウェルに残留するＡＴＰに比例し、これを照度計で測定した。各プレートの対照として、キナーゼ単独のウェル（最大ＡＴＰ消費、または０％阻害）、キナーゼ不含ウェル（最大ＡＴＰシグナルまたは１００％阻害）、および２０μＭのスタウロスポリンを含むウェル（阻害の陽性対照）を含んだ。Ｋ２５２ａによる最大濃度応答阻害曲線（１〜１００００ｎＭの半対数濃度）も各プレートに含めた。ｐＩＣ５０値は、対照により定義された０〜１００％の発光範囲を用いたＡＴＰ消費の阻害曲線の当てはめから導いた［Ｓ字用量応答方程式：％阻害＝１００−（１００／（１＋１０（Ｘ＋ｐＩＣ５０）＊ｎＨ））、式中、Ｘは供試化合物濃度の対数である］。これらの条件下で、Ｋ２５２ａのｐＩＣ５０は、ＴｒｋＡに対しては７．４６±０．０７（平均±ＳＤ；Ｎ＝４２；ＩＣ５０＝３０ｎＭ）、ＴｒｋＢに対しては７．１６±０．１８（Ｎ＝３６；ＩＣ５０＝７４ｎＭ）であり、これらの値はｉｎ  ｖｉｔｒｏの文献データ(Tapley et al (1992) Oncogene 7: 371-381, Tan et al (2007) Mol Pharmacol 72: 1440-1446)と一致した。
【０３６５】
得られた結果を以下に示す。
【表２１】
2019031542.tif 000139
2019031542.tif 000140
【図１】
2019031542.tif 000154
【図２】
2019031542.tif 000155
【図３】
2019031542.tif 000156
【外国語明細書】
2019031542000001.pdf