(57)【要約】【課題】ベンゾ[a]ピレンによるDNA損傷の阻害効果に優れ、かつ、安全性も高い、新規なベンゾ[a]ピレン誘発DNA損傷の阻害剤及びそれを含有する組成物を提供すること。【解決手段】オトメアゼナの抽出物を有効成分として含有してなる、ベンゾ[a]ピレン誘発DNA損傷の阻害剤、あるいは、オトメアゼナ抽出物に含まれる成分のモニエロサイドＡを有効成分として含有してなる、ベンゾ[a]ピレン誘発DNA損傷の阻害剤、ならびに、前記ベンゾ[a]ピレン誘発DNA損傷の阻害剤を含有してなる組成物。【選択図】なし【特許請求の範囲】
【請求項１】
オトメアゼナの抽出物を有効成分として含有してなる、ベンゾ[a]ピレン誘発DNA損傷の阻害剤。
【請求項２】
モニエロサイドＡを含有してなる、請求項１記載の阻害剤。
【請求項３】
請求項１又は２に記載のベンゾ[a]ピレン誘発DNA損傷の阻害剤を含有してなる組成物。
【請求項４】
医薬組成物である、請求項３記載の組成物。
【請求項５】
飲食品組成物である、請求項３記載の組成物。
【請求項６】
化粧料組成物である、請求項３記載の組成物。
【請求項７】
がんを予防及び／又は治療するために用いられる、請求項３〜６いずれか記載の組成物。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、オトメアゼナ植物由来の処理物、例えば、抽出物を含有するベンゾ[a]ピレン誘発DNA損傷の阻害剤及びそれを含有する組成物に関する。
【背景技術】
【０００２】
ベンゾ[a]ピレンは、炭水化物やタンパク質、脂肪等が不完全燃焼された場合に生成されるものであり、燻製食品や自動車の排気ガス、コールタール、たばこの煙等に含まれていることが知られている。また、人体に蓄積された場合は、遺伝子と結合することでDNAを損傷して細胞のがん化を誘発することから、国際がん研究機関(IARC)によりグループ１の発がん性物質に分類されている。
【０００３】
従来、ベンゾ[a]ピレンによる作用発現を抑制する観点から、様々な検討が行われている。例えば、特許文献１では、S-アデノシルメチオニン(SAM)依存メチルトランスフェラーゼが、ベンゾ[a]ピレンに特異的に結合することで作用を抑制し、発がんの予防および治療に有効であると報告されている。このSAM依存メチルトランスフェラーゼとしては、微生物や動物臓器からの抽出物が使用可能であるとされている。
【０００４】
また、特許文献２には、ローズマリー抽出物に、ベンゾ[a]ピレン等のたばこの煙に含まれる種々の有害物に起因したDNA損傷を低減する作用があると開示されている。特許文献３には、パーム油果実の抽出物にケイ皮酸エステルや安息香酸エステル等の天然フェノール類が含まれており、ゲノムDNAの損傷を治療または防止するために用いられると開示されている。
【０００５】
一方、ゴマノハグサ科オトメアゼナ(Bacopa monniera)は、日本を含め、ヨーロッパ、北アフリカ、アジア、南北アメリカに広く分布する湿性の多年草であり、インドでは伝統医学(アーユルヴェーダ)の治療薬として利用されてきたハーブのひとつである。これまで、オトメアゼナには、不安解消、記憶力・認知力向上、注意欠陥多動性障害の改善、アルツハイマー病予防等の脳機能改善効果が確認されている(例えば、特許文献４、５参照)。
【先行技術文献】
【特許文献】
【０００６】
【特許文献１】特開２００６−０４５２２８号公報
【特許文献２】特開２０１３−１５０６１９号公報
【特許文献３】特表２０１６−５０９０１０号公報
【特許文献４】特開２００８−０７４７８５号公報
【特許文献５】特開２０１６−１９６４１３号公報
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００７】
しかしながら、オトメアゼナの抽出物がベンゾ[a]ピレンによるDNA損傷を阻害する作用を有することは知られていない。
【０００８】
本発明は、ベンゾ[a]ピレンによるDNA損傷の阻害効果に優れ、かつ、安全性も高い、新規なベンゾ[a]ピレン誘発DNA損傷の阻害剤及びそれを含有する組成物に関するものである。
【課題を解決するための手段】
【０００９】
本発明者らは、上記目的を達成するために鋭意検討した結果、オトメアゼナの抽出物にベンゾ[a]ピレンによるDNA損傷を阻害する作用という従来未知の属性を発見し、その属性によりオトメアゼナ抽出物が新たな用途(例えば、がんの予防及び／又は治療)に適することを見出し、本発明を完成するに至った。
【００１０】
即ち、本発明は、下記［１］〜［７］に関する。
［１］  オトメアゼナの抽出物を有効成分として含有してなる、ベンゾ[a]ピレン誘発DNA損傷の阻害剤。
［２］  モニエロサイドＡを含有してなる、前記［１］記載の阻害剤。
［３］  前記［１］又は［２］に記載のベンゾ[a]ピレン誘発DNA損傷の阻害剤を含有してなる組成物。
［４］  医薬組成物である、前記［３］記載の組成物。
［５］  飲食品組成物である、前記［３］記載の組成物。
［６］  化粧料組成物である、前記［３］記載の組成物。
［７］  がんを予防及び／又は治療するために用いられる、前記［３］〜［６］いずれか記載の組成物。
【００１１】
また、本発明は、下記の態様も包含する。
［８］  前記［１］又は［２］に記載のベンゾ[a]ピレン誘発DNA損傷の阻害剤を投与する工程を含む、がんの予防及び／又は治療方法。
［９］  がんの予防及び／又は治療するための、オトメアゼナ抽出物の使用。
［１０］  がんの予防及び／又は治療剤を製造するための、オトメアゼナ抽出物の使用。
【発明の効果】
【００１２】
本発明のベンゾ[a]ピレン誘発DNA損傷の阻害剤は、ベンゾ[a]ピレンによるDNA損傷を阻害する効果に優れ、かつ、安全性も高いという優れた効果を奏する。また、前記作用により、ひいては、細胞のがん化を抑制し、がんの予防及び／又は治療に優れるという優れた効果を奏する。
【発明を実施するための形態】
【００１３】
本発明のベンゾ[a]ピレン誘発DNA損傷の阻害剤は、オトメアゼナの抽出物を有効成分とするものであり、以降、オトメアゼナの抽出物を、オトメアゼナ抽出物又は本発明の抽出物と記載することもある。なお、本明細書において、ベンゾ[a]ピレン誘発DNA損傷とは、ベンゾ[a]ピレンによってDNA損傷が誘発される作用のことであり、かかる作用を本発明の阻害剤は抑制する。
【００１４】
本発明のベンゾ[a]ピレン誘発DNA損傷の阻害剤は、ベンゾ[a]ピレンによるDNA損傷を阻害するものであるが、ベンゾ[a]ピレンに直接作用して阻害を示すものである必要はなく、ベンゾ[a]ピレンによるDNA損傷作用を直接又は間接的に阻害するものであればよい。本明細書において、ベンゾ[a]ピレンによるDNA損傷作用を阻害する作用としては、ベンゾ[a]ピレン存在下における細胞死を、サンプルが存在しない場合と比較して、細胞死の割合を低減させる作用を指し、例えば後述の実施例に記載の方法で確認することが可能である。本発明の抽出物は、該抽出物が存在しない場合のベンゾ[a]ピレン存在下における細胞死と比較して、これを低減させれば特に限定されないが、例えば3％以上、好ましくは5％以上、より好ましくは7％以上、更に好ましくは10％以上低減させる作用を有することが望ましい。
【００１５】
本発明の抽出物は、オトメアゼナを原料とするが、該植物に対し人為的な処理を施して得られたものであれば特に限定はなく、例えば、抽出物(エキス)の他、精油(例えば、水蒸気蒸留物、搾汁液、圧搾物、溶剤抽出物、超臨界流体抽出物)も含まれる。これらは１種単独で又は２種以上組み合わせて用いることができる。オトメアゼナは、従来、食用ハーブとして利用されているため、本発明の抽出物は安全性が高いことが分かる。
【００１６】
本発明に用いられるオトメアゼナは、産地は特に限定されず、ヨーロッパ、北アフリカ、アジア、南北アメリカ等、どのような産地から入手されたものであってもよい。
【００１７】
使用される部位については、例えば、根茎、葉、果実、種子、花、又は植物全体を使用することができ、これらの裁断物や破砕物、乾燥物等の加工品としても使用することができる。
【００１８】
本発明で用いる抽出物は、前記したオトメアゼナを用いて公知の方法に従って溶媒により抽出し、溶媒を留去することにより得ることができる。
【００１９】
抽出溶媒としては、例えば、低級アルコール(メタノール、エタノール、プロパノール、イソプロピルアルコール、n-ブタノール、イソブチルアルコール等)、多価アルコール(エチレングリコール、プロピレングリコール、１，３−ブチレングリコール等)、ケトン(アセトン、メチルエチルケトン等)、エーテル(ジオキサン、メチルエチルエーテル、ジエチルエーテル等)、ハロゲン化炭化水素(クロロホルム、ジクロロメタン、ジクロロエタン等)、極性溶媒(ジメチルホルムアミド、ジメチルスルホキシド等)のほか、酢酸エチル、トルエン、n-ヘキサン、石油エーテル等の各種有機溶媒、或いは水等を、それぞれ単独で又は２種以上組み合わせて用いることが出来る。
【００２０】
抽出温度は、用いる溶媒や植物の部位・形態などによって一概には設定することができないが、抽出効率の観点から、下限としては4℃、上限としては150℃を挙げることができる。本発明においては、前記した温度範囲内であれば上限値や下限値を適宜設定することができ、例えば、10℃、15℃、20℃、30℃、40℃、60℃、80℃、100℃、120℃、140℃等を上限値あるいは下限値として設定することができる。抽出時間は、抽出に供する原料の使用量や装置に応じて適宜設定することができる。
【００２１】
なお、抽出により得られた抽出物に対しては、ろ過、遠心分離、濃縮、限外ろ過、凍結乾燥、粉末化、及び分画からなる群より選ばれる１種又は２種以上の処理を、公知の方法に従って行ってもよい。また、必要により、常圧下又は減圧下で前記処理を行うことができる。本発明のベンゾ[a]ピレン誘発DNA損傷の阻害剤の一態様として前記処理物が含まれる。
【００２２】
かくして得られた抽出物には、例えば、下記式：
【００２３】
【化１】
2019026566.tif 000002
【００２４】
で表されるモニエロサイドＡが含まれる。モニエロサイドＡには、ベンゾ[a]ピレンによるDNA損傷を直接又は間接的に阻害する作用があることから、本発明の一態様として、モニエロサイドＡを有効成分とする、ベンゾ[a]ピレン誘発DNA損傷の阻害剤を提供することができる。
【００２５】
抽出物におけるモニエロサイドＡの含有量は、抽出条件によって一概には設定されず、例えば、0.0001〜100重量％が例示される。本明細書において含有量とは、例えば、対象物が液体である場合、液体をエバポレーター等で乾燥させた場合に得られる乾燥物全体の重量に占める、目的成分の重量を百分率で示した乾固物換算値のことであり、乾燥重量又は単に含有量と記載することもある。
【００２６】
本発明においては、分配抽出、濃縮、クロマトグラフィー精製等の処理を組み合わせて行って、抽出物におけるモニエロサイドＡの含有量を向上させることができる。例えば、分配抽出においては、酢酸エチル、n-ブタノール及び水から選ばれる１種単独で又は２種以上組み合わせて抽出を行ってもよい。クロマトグラフィー精製においては、順相と逆相を適宜組み合わせて繰り返し行ってもよい。なお、モニエロサイドＡの確認は、例えば、ＮＭＲスペクトル、旋光度又はＭＳスペクトル測定によって行うことができる。
【００２７】
本発明の抽出物の形状は、特に限定されず、粉状、固形状、液状のいずれの形状であっても良い。また、当該抽出物を公知の方法で造粒して得た粒状の固形物を、本発明の抽出物として使用することもできる。造粒方法としては、特に限定はないが、転動造粒、攪拌造粒、流動層造粒、気流造粒、押出し造粒、圧縮成型造粒、解砕造粒、噴射造粒又は噴霧造粒等が例示される。また、液状の抽出物としては、前記抽出物の製造方法により得られた液体そのもの、その濃縮物や希釈物の他、前記の粉状の抽出物を液体、例えば水やアルコール等に溶解して液状としたものが例示される。
【００２８】
また、本発明においては、前記抽出物に、公知の方法に従って製造したモニエロサイドＡを組み合わせてもよく、モニエロサイドＡとしては、フリー体の他、その薬理学的に許容し得る塩やエステル、エーテル化合物を含むことができる。
【００２９】
モニエロサイドＡの薬理学的に許容し得る塩としては、例えば、ナトリウム塩、カリウム塩等のアルカリ金属塩、マグネシウム塩、カルシウム塩等のアルカリ土類金属塩が例示される。
【００３０】
モニエロサイドＡのエステル類は、モニエロサイドＡのフェノール性水酸基をカルボン酸、スルホン酸、又はホスホン酸でエステル化することにより得られる。エステル化は、例えば、モニエロサイドＡと上記酸の酸クロリドとを反応させて行うことができる。エステル残基としては、アルキルカルボニル、アルキルスルホニル、アルキルフォスフォリル等が挙げられ、アルキル基としては、例えば、メチル、エチル、プロピル、ブチル等のＣ１〜Ｃ４の低級アルキルが好ましい。
【００３１】
モニエロサイドＡのエーテル類は、例えば、モニエロサイドＡ又はその薬理学的に許容し得る塩とハロゲン化物(例えば、ハロゲン化アルキル)とを反応させることにより得られる。ここで、アルキル基としては、例えば、メチル、エチル、プロピル、ブチル等のＣ１〜Ｃ４の低級アルキルが好ましい。
【００３２】
なお、これらの塩やエステル、エーテル化合物は、公知の方法に従って製造することができる。
【００３３】
本発明のベンゾ[a]ピレン誘発DNA損傷の阻害剤は、オトメアゼナの抽出物を有効成分として含有するのであれば特に限定はなく、阻害剤におけるオトメアゼナ抽出物の含有量は、例えば、0.1〜100重量％が例示される。また、阻害剤におけるモニエロサイドＡの含有量は特に限定されず、例えば、0.01〜100重量％が例示される。
【００３４】
本発明のベンゾ[a]ピレン誘発DNA損傷の阻害剤は、ベンゾ[a]ピレンによるDNA損傷を抑制することにより、嚥下障害、胃痛、吐き気、胸やけ、消化不良などベンゾピレンを含む食品を摂取することに基づく症状や疾患；咳、呼吸困難、痰、胸痛などベンゾピレンを含む排ガスやタバコの副流煙などを摂取することに基づく症状や疾患；しみ、しわ、ほくろや湿疹などベンゾピレンを含む排ガスやタバコの副流煙などに接触することに基づく症状や疾患の予防剤、改善剤、及び／又は治療剤として好適に用いることができる。また、これらの症状や疾患が起因となる疾患、例えば、気管支炎、肺がん、皮膚がん、食道がん、胃がん、胃炎、胃潰瘍の改善又は治療にも好適に用いることができる。
【００３５】
本発明のベンゾ[a]ピレン誘発DNA損傷の阻害剤の形態としては、本発明の抽出物を生体表面に塗布或いは体内に摂取することができる形態であれば特に限定はなく、そのまま製剤化したり、医薬品、医薬部外品、飲食品、化粧品等の原材料に用いることが可能な形態に調製してもよい。
【００３６】
本発明はまた、本発明のベンゾ[a]ピレン誘発DNA損傷の阻害剤を含有する組成物を提供する。該組成物の形態としては、本発明の抽出物を細胞内に取り込むことができる形態であれば特に限定はなく、例えば、医薬組成物、飲食品組成物、又は化粧料組成物として好適に使用される。
【００３７】
医薬組成物としては、医薬品、医薬部外品等として幅広く利用することができ、効果発揮の観点から外用剤組成物としての形態や、手軽に摂取できる観点から内服剤組成物としての形態が例示される。また、本発明の医薬組成物は、ベンゾ[a]ピレンによるDNA損傷を抑制することができることから、気管支炎、肺がん、皮膚がん、食道がん、胃がん、胃炎、胃潰瘍等の治療や予防の用途に好適に用いることができる。
【００３８】
本発明の医薬組成物は、本発明のベンゾ[a]ピレン誘発DNA損傷の阻害剤を含有するものであれば、常法に従って、製剤分野において通常使用される担体、基剤、及び／又は添加剤等を本発明の目的を達成する範囲内で適宜配合して調製することができる。
【００３９】
具体的には、例えば、錠剤(素錠、糖衣錠、フィルムコーティング錠、舌下錠、口腔内崩壊錠、バッカル錠等を含む)、丸剤、散剤、顆粒剤、カプセル剤(ソフトカプセル剤、マイクロカプセル剤を含む)、トローチ剤、シロップ剤、液剤、乳剤、懸濁剤、放出制御製剤(例、速放性製剤、徐放性製剤、徐放性マイクロカプセル剤)、エアゾール剤、フィルム剤(例、口腔内崩壊フィルム、口腔粘膜貼付フィルム)、注射剤(例、皮下注射剤、静脈内注射剤、筋肉内注射剤、腹腔内注射剤)、点滴剤、経皮吸収型製剤、軟膏剤、ローション剤、貼付剤、坐剤(例、肛門坐剤、膣坐剤)、ペレット、経鼻剤、経肺剤(吸入剤)、点眼剤等の経口剤または非経口剤が挙げられる。配合できる担体または添加剤は特に制限されないが、例えば、水、生理食塩水、その他の水性溶媒、水性または油性基剤等の各種担体；賦形剤、結合剤、pH調整剤、崩壊剤、吸収促進剤、滑沢剤、着色剤、矯味剤、香料等の各種添加剤が挙げられる。
【００４０】
錠剤、カプセル剤などに混和することができる添加剤としては、例えば、ゼラチン、コーンスターチ、トラガント、アラビアゴムのような結合剤、結晶性セルロースのような賦形剤、コーンスターチ、ゼラチン、アルギン酸などのような膨化剤、ステアリン酸マグネシウムのような潤滑剤、ショ糖、乳糖またはサッカリンのような甘味剤、ペパーミント、アカモノ油またはチェリーのような香味剤などが用いられる。調剤単位形態がカプセルである場合には、上記タイプの材料にさらに油脂のような液状担体を含有することができる。注射のための無菌組成物は通常の製剤業務(例えば有効成分を注射用水、天然植物油等の溶媒に溶解または懸濁させる、あるいは、次いで用事溶解型として凍結乾燥させる等)に従って調製することができる。注射用の水性液としては、例えば、生理食塩水、ブドウ糖やその他の補助薬(例えば、D-ソルビトール、D-マンニトール、塩化ナトリウム)を含む等張液などが用いられ、適当な溶解補助剤、例えば、アルコール(例、エタノール)、ポリアルコール(例、プロピレングリコール、ポリエチレングリコール)、非イオン性界面活性剤(例、ポリソルベート80TM、HCO-50)などと併用してもよい。油性液としては、例えば、ゴマ油、大豆油などが用いられ、溶解補助剤である安息香酸ベンジル、ベンジルアルコールなどと併用してもよい。また、緩衝剤(例えば、リン酸塩緩衝液、酢酸ナトリウム緩衝液)、無痛化剤(例えば、塩化ベンザルコニウム、塩酸プロカイン)、安定剤(例えば、ヒト血清アルブミン、ポリエチレングリコール)、保存剤(例えば、ベンジルアルコール、フェノール)、酸化防止剤などと配合してもよい。
【００４１】
このようにして得られる製剤は安全で低毒性であるので、例えば、ヒトや他の哺乳動物(例えば、ラット、マウス、ウサギ、ヒツジ、ブタ、ウシ、ネコ、イヌ、サル)に対して投与することができる。
【００４２】
オトメアゼナ抽出物の含有量は、剤型、投与方法、担体等により異なるが、本発明の医薬組成物中、通常0.01〜100重量％、好ましくは0.1〜95重量％である。
【００４３】
投与量は、投与対象、症状、投与ルートなどにより差異はあるが、経口投与の場合、一般的に例えば、体重約60kgのヒトにおいては、オトメアゼナ抽出物の乾燥重量として、１日当たり約0.01〜1000mg、好ましくは約0.1〜100mg、より好ましくは約0.5〜50mgである。１日当たりの総投与量は、単一投与量であっても分割投与量であってもよい。
【００４４】
また、本発明の医薬組成物は、例えば、気管支炎、肺がん、皮膚がん、食道がん、胃がん、胃炎、胃潰瘍等の疾患の公知治療医薬と組み合わせて使用することにより、相加的または相乗的な効果の向上が期待できる。
【００４５】
飲食品組成物としては、ベンゾ[a]ピレンによるDNA損傷を抑制するための飲料や食品が例示され、例えば、咳止め、かゆみ止め、痛み止め、吐き気止め、胸やけ改善等に作用を発揮する飲食品として好適に用いることができる。飲食品には、機能性表示食品、栄養機能食品、特定保健用食品、特別用途食品、老人用食品、病者用食品、健康補助食品（サプリメント）が含まれる。飲食品の形態は特に限定されない。
【００４６】
具体的には、例えば茶飲料、清涼飲料、炭酸飲料、栄養飲料、果実飲料、乳酸飲料等の飲料；そば、うどん、中華麺、即席麺等の麺類；飴、キャンディー、ガム、チョコレート、スナック菓子、ビスケット、ゼリー、ジャム、クリーム、焼き菓子、パン等の菓子およびパン類；かまぼこ、ハム、ソーセージ等の水産・畜産加工食品；加工乳、発酵乳等の乳製品；サラダ油、てんぷら油、マーガリン、マヨネーズ、ショートニング、ホイップクリーム、ドレッシング等の油脂および油脂加工食品；ソース、たれ等の調味料；カレー、シチュー、丼、お粥、雑炊等のレトルトパウチ食品；アイスクリーム、シャーベット、かき氷等の冷菓；錠剤、顆粒剤、散剤、ドリンク剤等のサプリメントなどを挙げることができる。なお、これらは、既成の食品に対して本発明のベンゾ[a]ピレン誘発DNA損傷の阻害剤を調製時又は調製後に添加させたものであればよく、添加時期や添加方法については特に限定されるものではない。また、飲食品組成物におけるオトメアゼナ抽出物の含有量も、本発明の効果を発揮する範囲内であれば、特に限定されない。
【００４７】
化粧料組成物としては、ベンゾ[a]ピレンによるDNA損傷を抑制するための化粧品が例示され、例えば、しみ、しわ、ほくろ、湿疹などの改善又は予防用化粧品として好適に用いることができる。化粧品には、いわゆる薬用化粧品(医薬部外品)が含まれる。化粧品としては、例えば、洗浄剤、シャンプー、リンス、ヘアートニック、ヘアーローション、アフターシェーブローション、ボディーローション、化粧ローション、クレンジングクリーム、マッサージクリーム、エモリエントクリーム、エアゾール製品、消臭剤、芳香剤、脱臭剤または入浴剤などを挙げることができる。
【００４８】
本発明の化粧料組成物は、本発明のベンゾ[a]ピレン誘発DNA損傷の阻害剤を含有するものであれば、常法に従って、当該分野において通常使用される担体、基剤、及び／又は添加剤等を本発明の目的を達成する範囲内で適宜配合して調製することができる。具体的には、例えば、界面活性剤、保湿剤、動植物由来油脂、シリコーン類、高級アルコール、低級アルコール、オトメアゼナ抽出物以外の動植物由来抽出エキス、紫外線吸収剤、消炎剤、金属封鎖剤、ビタミン類、酸化防止剤、増粘剤、防腐剤、殺菌剤、pH調整剤、着色剤、各種香料などを目的に応じて適宜配合することができる。化粧料組成物におけるオトメアゼナ抽出物の含有量は、本発明の効果を発揮する範囲内であれば、特に限定されない。
【００４９】
また、本発明は、本発明のベンゾ[a]ピレン誘発DNA損傷の阻害剤を含有する食品添加物を提供する。本発明の食品添加物は、咳止め、かゆみ止め、痛み止め、吐き気止め、胸やけ改善等に作用を発揮する飲食品用の添加物として好適である。本発明の食品添加物の形態は特に限定されないが、例えば、液状、ペースト状、粉末状、フレーク状、顆粒状等が挙げられる。本発明の食品添加物は、一般的な食品添加物の製造方法に準じて製造することができる。
【００５０】
さらに、本発明は、本発明のベンゾ[a]ピレン誘発DNA損傷の阻害剤を含有する飼料または飼料添加物としても実施することができる。
【００５１】
本発明はまた、対象者に、本発明のベンゾ[a]ピレン誘発DNA損傷の阻害剤を投与する工程を含む、がんの予防及び／又は治療方法を提供する。がんとしては、肺がん、皮膚がん、食道がん、胃がん等が挙げられる。
【００５２】
またさらに、オトメアゼナ抽出物がベンゾ[a]ピレンによるDNA損傷を阻害して、ひいては、がんを予防及び／又は治療することができることから、本発明は、本発明の一態様として、がんの予防及び／又は治療するための、オトメアゼナ抽出物の使用、ならびに、がんの予防及び／又は治療剤を製造するための、オトメアゼナ抽出物の使用を提供する。
【実施例】
【００５３】
以下、実施例により本発明を詳細に説明するが、本発明はこれらに限定されるものではない。
【００５４】
オトメアゼナ抽出物の調製例１
＜抽出、精製操作＞
オトメアゼナ(Bacopa monniera)の乾燥した植物全体(2.0kg)をメタノールで熱抽出(80℃)した。得られた抽出液を濾過し、残渣にメタノールを加え、同様の抽出操作を３回行った。メタノール抽出液を合わせて減圧下溶媒留去し、メタノール抽出エキス(608.82g、収率30.4％)を得た。
【００５５】
上記メタノール抽出エキス(608.82g)を、酢酸エチル、n-ブタノール及び水にて溶媒分配を行った。その結果、酢酸エチル画分(31.8g、収率4.8％)、n-ブタノール画分(57.94g、収率8.8％)、水画分(110.3g、収率16.8％)を得た。
【００５６】
次に、得られた酢酸エチル画分を、順相シリカゲル、逆相ＯＤＳカラムクロマトグラフィー及び逆相ＨＰＬＣで繰り返し分離精製し、その結果、粉末状のモニエロサイドＡ(Monieroside Ａ)を得た(収率0.016％)。なお、当該化合物は、１Ｈ−ＮＭＲスペクトル、１３Ｃ−ＮＭＲスペクトル、旋光度及びＭＳスペクトルにより同定した。
【００５７】
実施例１
ヒト線維芽細胞由来HDF細胞を、10％ウシ胎児血清(FBS)、100units/mLペニシリン、100μg/mLストレプトマイシン含有MEM培地(Sigma社)で、5％CO2、37℃条件下で培養した。次に、96wellマイクロプレートにHDF細胞を播種し、次いで、ベンゾ[a]ピレン(終濃度50μM)と表１又は表２に記載の濃度で被験物質をそれぞれ添加した。20時間培養後、MTT法によって吸光度を測定し(測定波長：570nm、参照波長:655nm)、コントロール群の生存率を100％とした際の相対細胞生存率(％)を算出した。結果を表１及び表２に示す。なお、コントロール群とは、ベンゾ[a]ピレン及び被験物質のいずれも添加せずに培養した群のことであり、各群いずれも複数回行った結果を平均化したものを示している。
【００５８】
【表１】
2019026566.tif 000003
【００５９】
【表２】
2019026566.tif 000004
【００６０】
表１及び表２より、対照群ではベンゾ[a]ピレンに曝露されることで細胞死が生じるところ、オトメアゼナ抽出エキスをそのまま用いた群、モニエロサイドＡを用いた群のいずれにおいても、細胞死が低減することが分かった。また、モニエロサイドＡを用いた群では、10μMと極めて低濃度でも有意に細胞死を低減しており、ベンゾ[a]ピレンにより誘発される細胞障害又は細胞死をオトメアゼナ抽出エキス又はモニエロサイドＡが十分抑制できることが判明した。
【００６１】
ベンゾ[a]ピレンによってDNAが損傷されることは既知であるが、その後、がん化に至るまでのメカニズムは完全には解明されていない。しかしながら、前記した結果により、本発明のオトメアゼナ抽出エキスやモニエロサイドＡは、ベンゾ[a]ピレン誘発DNA損傷を強力に抑制し、細胞傷害又は細胞死を抑制する作用を有することが明らかになったため、本発明のオトメアゼナ抽出エキスやモニエロサイドＡが、ベンゾ[a]ピレンが関係するがん化を抑制することは十分示唆される。
【００６２】
以下、本発明のベンゾ[a]ピレン誘発DNA損傷の阻害剤を配合した組成物の具体的処方を例示する。各処方例の右端の数値は各含有成分の重量％を意味する。
【００６３】
処方例１：医薬品組成物（顆粒状内服剤）
乳糖                                      25.0
コーンスターチ                            55.0
結晶セルロース                             9.0
ポリビニルピロリドン                       1.0
オトメアゼナ抽出物エキス                  10.0
【００６４】
処方例２：飲食品組成物（ドリンク剤）
砂糖                                       5.0
クエン酸                                  10.0
リン酸                                     5.0
ビタミン類                                 3.0
オトメアゼナ抽出物エキス                   5.0
香料                                       1.5
水                                        残部
【００６５】
処方例３：化粧品組成物（ローション剤）
オトメアゼナ抽出物エキス                   5.0
エタノール                                 8.0
プロピレングリコール                      12.0
防腐剤                                    適量
精製水                                    残部
【産業上の利用可能性】
【００６６】
本発明のベンゾ[a]ピレン誘発DNA損傷の阻害剤は、ベンゾ[a]ピレンによるDNA損傷を阻害することから、細胞障害や細胞死を予防及び／又は抑制し、がんの予防剤及び／又は治療剤として好適に用いることができる。
【手続補正書】
【提出日】平成30年6月11日(2018.6.11)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
オトメアゼナの低級アルコール抽出物を有効成分として含有してなる、ベンゾ[a]ピレン誘発DNA損傷の阻害剤。
【請求項２】
モニエロサイドＡを含有してなる、請求項１記載の阻害剤。
【請求項３】
請求項１又は２に記載のベンゾ[a]ピレン誘発DNA損傷の阻害剤を含有してなる、ベンゾ[a]ピレンを含む排ガスやタバコの副流煙の摂取及び／又は接触に基づく症状や疾患の予防及び／又は治療用組成物。
【請求項４】
医薬組成物である、請求項３記載の組成物。
【請求項５】
飲食品組成物である、請求項３記載の組成物。
【請求項６】
化粧料組成物である、請求項３記載の組成物。
【請求項７】
皮膚がんを予防及び／又は治療するために用いられる、請求項３〜６いずれか記載の組成物。