(57)【要約】      （修正有）【課題】がんなどの過剰増殖性障害を治療するための、医薬品の提供。【解決手段】ＭＥＫ阻害剤としての、コビメチニブ又は５−（（２−フルオロ−４−ヨードフェニル）アミノ）−Ｎ−（２−ヒドロキシエトキシ）イミダゾ［１，５−ａ］ピリジン−６−カルボキサミド、又はその薬学的に許容される塩と、ＥＲＫ阻害剤としての（Ｓ）−１−（１−（４−クロロ−３−フルオロフェニル）−２−ヒドロキシエチル）−４−（２−（（１−メチル−１Ｈ−ピラゾール−５−イル）アミノ）ピリミジン−４−イル）ピリジン−２（１Ｈ）−オン又はその薬学的に許容される塩との組合せ。【選択図】なし【特許請求の範囲】
【請求項１】
過剰増殖性障害の治療のための方法であって、治療を必要とする哺乳動物に対し、ＭＥＫ阻害剤、又は薬学的に許容される塩と、ＥＲＫ阻害剤又は薬学的に許容される塩との組合せの治療的有効量を、一の組合せ製剤として又は交互に投与することを含む方法。
【請求項２】
過剰増殖性障害ががんであり、哺乳動物がヒトである、請求項１に記載の方法。
【請求項３】
がんがＫＲＡＳ変異に関連付けられる、請求項２に記載の方法。
【請求項４】
ＭＥＫ阻害剤がコビメチニブである、請求項２又は３に記載の方法。
【請求項５】
ＭＥＫ阻害剤がＧＤＣ−０６２３である、請求項２又は３に記載の方法。
【請求項６】
ＭＥＫ阻害剤がＧＳＫ−１１２０２１２（トラメチニブ）である、請求項２又は３に記載の方法。
【請求項７】
ＭＥＫ阻害剤がＡＺＤ−６２４４（セルメチニブ）である、請求項２又は３に記載の方法。
【請求項８】
ＭＥＫ阻害剤がＢＡＹ  ８６−９７６６（ｒｅｆａｍｅｔｉｎｉｂ）である、請求項２又は３に記載の方法。
【請求項９】
ＥＲＫ阻害剤が、（Ｓ）−１−（１−（４−クロロ−３−フルオロフェニル）−２−ヒドロキシエチル）−４−（２−（（１−メチル−１Ｈ−ピラゾール−５−イル）アミノ）ピリミジン−４−イル）ピリジン−２（１Ｈ）−オン、４−（３−（（エチルジメチルシリル）メチル）−［１，２，４］トリアゾロ［４，３−ａ］ピリジン−７−イル）−Ｎ−（１−メチル−１Ｈ−ピラゾール−５−イル）ピリミジン−２−アミン，（Ｓ）−４−（３−（２−（４−クロロフェニル）−２−メトキシエチル）−［１，２，４］トリアゾロ［４，３−ｂ］ピリダジン−７−イル）−Ｎ−（１−メチル−１Ｈ−ピラゾール−５−イル）ピリミジン−２−アミン又は（Ｓ）−Ｎ−（１−メチル−１Ｈ−ピラゾール−５−イル）−４−（３−（２−メチルブチル）−［１，２，３］トリアゾロ［１，５−ａ］ピリジン−６−イル）ピリミジン−２−アミンである、請求項２又は３に記載の方法。
【請求項１０】
ＥＲＫ阻害剤が、（Ｓ）−１−（１−（４−クロロ−３−フルオロフェニル）−２−ヒドロキシエチル）−４−（２−（（１−メチル−１Ｈ−ピラゾール−５−イル）アミノ）ピリミジン−４−イル）ピリジン−２（１Ｈ）−オン又はその薬学的に許容される塩である、請求項２から９のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１１】
前記がん又は過剰増殖性障害が、腺腫、膀胱がん、脳のがん、乳がん、結腸がん、表皮癌、濾胞腺癌、泌尿生殖器のがん、膠芽細胞腫、ホジキン疾患、頭頸部がん、ヘパトーマ、ケラトアカントーマ、腎臓がん、大細胞癌、白血病、肺腺癌、肺がん、リンパ性障害、メラノーマ及び非メラノーマ皮膚がん、骨髄異形成症候群、神経芽細胞腫、非ホジキンリンパ腫、卵巣がん、乳頭癌、膵臓がん、前立腺がん、直腸がん、肉腫、小細胞癌、精巣がん、奇形癌（ｔｅｔｒａｃａｒｃｉｎｏｍａ）、甲状腺がん、及び未分化癌からなる群より選択される、請求項２に記載の方法。
【請求項１２】
前記がんが、結腸直腸がん、肺がん、中皮腫、乳がん、膵臓がん、神経膠腫、胃がん、腎がん、卵巣がん、子宮内膜がん、膀胱がん及び頭頸部がんからなる群より選択される、請求項１１に記載の方法。
【請求項１３】
がんが、結腸直腸がん、非小細胞肺がん、膵臓がん又はメラノーマからなる群より選択される、請求項１２に記載の方法。
【請求項１４】
コビメチニブ又はその薬学的に許容される塩が、（Ｓ）−１−（１−（４−クロロ−３−フルオロフェニル）−２−ヒドロキシエチル）−４−（２−（（１−メチル−１Ｈ−ピラゾール−５−イル）アミノ）ピリミジン−４−イル）ピリジン−２（１Ｈ）−オン又はその薬学的に許容される塩と組合せて投与される、請求項１１から１３のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１５】
５−（（２−フルオロ−４−ヨードフェニル）アミノ）−Ｎ−（２−ヒドロキシエトキシ）イミダゾ［１，５−ａ］ピリジン−６−カルボキサミド又はその薬学的に許容される塩が、（Ｓ）−１−（１−（４−クロロ−３−フルオロフェニル）−２−ヒドロキシエチル）−４−（２−（（１−メチル−１Ｈ−ピラゾール−５−イル）アミノ）ピリミジン−４−イル）ピリジン−２（１Ｈ）−オン又はその薬学的に許容される塩と組合せて投与される、請求項１１から１３のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１６】
コビメチニブ又は５−（（２−フルオロ−４−ヨードフェニル）アミノ）−Ｎ−（２−ヒドロキシエトキシ）イミダゾ［１，５−ａ］ピリジン−６−カルボキサミド、又はその薬学的に許容される塩が、（Ｓ）−１−（１−（４−クロロ−３−フルオロフェニル）−２−ヒドロキシエチル）−４−（２−（（１−メチル−１Ｈ−ピラゾール−５−イル）アミノ）ピリミジン−４−イル）ピリジン−２（１Ｈ）−オン又はその薬学的に許容される塩と同時に投与される、請求項１１から１３のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１７】
コビメチニブ又は５−（（２−フルオロ−４−ヨードフェニル）アミノ）−Ｎ−（２−ヒドロキシエトキシ）イミダゾ［１，５−ａ］ピリジン−６−カルボキサミドが、（Ｓ）−１−（１−（４−クロロ−３−フルオロフェニル）−２−ヒドロキシエチル）−４−（２−（（１−メチル−１Ｈ−ピラゾール−５−イル）アミノ）ピリミジン−４−イル）ピリジン−２（１Ｈ）−オン又はその薬学的に許容される塩と順次的に投与される、請求項１１から１３のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１８】
がんの治療のために、コビメチニブ又は５−（（２−フルオロ−４−ヨードフェニル）アミノ）−Ｎ−（２−ヒドロキシエトキシ）イミダゾ［１，５−ａ］ピリジン−６−カルボキサミド、又はその薬学的に許容される塩が、４−（３−（（エチルジメチルシリル）メチル）−［１，２，４］トリアゾロ［４，３−ａ］ピリジン−７−イル）−Ｎ−（１−メチル−１Ｈ−ピラゾール−５−イル）ピリミジン−２−アミン，（Ｓ）−４−（３−（２−（４−クロロフェニル）−２−メトキシエチル）−［１，２，４］トリアゾロ［４，３−ｂ］ピリダジン−７−イル）−Ｎ−（１−メチル−１Ｈ−ピラゾール−５−イル）ピリミジン−２−アミン又は（Ｓ）−Ｎ−（１−メチル−１Ｈ−ピラゾール−５−イル）−４−（３−（２−メチルブチル）−［１，２，３］トリアゾロ［１，５−ａ］ピリジン−６−イル）ピリミジン−２−アミンから選択されるＥＲＫ阻害剤と共に投与される、請求項１０に記載の方法。
【請求項１９】
哺乳動物におけるがんの治療のための医薬の調製における、コビメチニブ又は５−（（２−フルオロ−４−ヨードフェニル）アミノ）−Ｎ−（２−ヒドロキシエトキシ）イミダゾ［１，５−ａ］ピリジン−６−カルボキサミド、又はその薬学的に許容される塩と、（Ｓ）−１−（１−（４−クロロ−３−フルオロフェニル）−２−ヒドロキシエチル）−４−（２−（（１−メチル−１Ｈ−ピラゾール−５−イル）アミノ）ピリミジン−４−イル）ピリジン−２（１Ｈ）−オン又はその薬学的に許容される塩との組合せの使用。
【請求項２０】
コビメチニブ又はその薬学的に許容される塩及び（Ｓ）−１−（１−（４−クロロ−３−フルオロフェニル）−２−ヒドロキシエチル）−４−（２−（（１−メチル−１Ｈ−ピラゾール−５−イル）アミノ）ピリミジン−４−イル）ピリジン−２（１Ｈ）−オン又はその薬学的に許容される塩、容器、並びに、がんの治療のためのコビメチニブ及び（Ｓ）−１−（１−（４−クロロ−３−フルオロフェニル）−２−ヒドロキシエチル）−４−（２−（（１−メチル−１Ｈ−ピラゾール−５−イル）アミノ）ピリミジン−４−イル）ピリジン−２（１Ｈ）−オンの投与を指示する添付文書又はラベルを含むキット。
【請求項２１】
がんの治療的処置のために、ＭＥＫ阻害剤が、コビメチニブ又は５−（（２−フルオロ−４−ヨードフェニル）アミノ）−Ｎ−（２−ヒドロキシエトキシ）イミダゾ［１，５−ａ］ピリジン−６−カルボキサミド、又はその薬学的に許容される塩であり、ＥＲＫ阻害剤が、（Ｓ）−１−（１−（４−クロロ−３−フルオロフェニル）−２−ヒドロキシエチル）−４−（２−（（１−メチル−１Ｈ−ピラゾール−５−イル）アミノ）ピリミジン−４−イル）ピリジン−２（１Ｈ）−オンである、請求項１に記載の方法。
【請求項２２】
コビメチニブ、又はその薬学的に許容される塩、又は５−（（２−フルオロ−４−ヨードフェニル）アミノ）−Ｎ−（２−ヒドロキシエトキシ）イミダゾ［１，５−ａ］ピリジン−６−カルボキサミド、又はその薬学的に許容される塩と、（Ｓ）−１−（１−（４−クロロ−３−フルオロフェニル）−２−ヒドロキシエチル）−４−（２−（（１−メチル−１Ｈ−ピラゾール−５−イル）アミノ）ピリミジン−４−イル）ピリジン−２（１Ｈ）−オンが、それぞれ単位投薬形態当たり約１ｍｇから約１０００ｍｇの量で投与される、請求項１に記載の方法。
【請求項２３】
コビメチニブ、又はその薬学的に許容される塩が、６０ｍｇの用量で、２８日サイクルの１から２１日目に投与され、（Ｓ）−１−（１−（４−クロロ−３−フルオロフェニル）−２−ヒドロキシエチル）−４−（２−（（１−メチル−１Ｈ−ピラゾール−５−イル）アミノ）ピリミジン−４−イル）ピリジン−２（１Ｈ）−オン又はその薬学的に許容される塩が、それぞれ単位投薬形態当たり約１ｍｇから約１０００ｍｇの量で投与される、請求項２２に記載の方法。
【請求項２４】
ＥＲＫ阻害剤又はその薬学的に許容される塩を含む過剰増殖性障害の治療のための医薬の製造におけるＭＥＫ阻害剤又はその薬学的に許容される塩の使用。
【請求項２５】
過剰増殖性障害ががんであり、哺乳動物がヒトである、請求項２４に記載の使用。
【請求項２６】
がんがＫＲＡＳ変異に関連付けられる、請求項２５に記載の使用。
【請求項２７】
ＭＥＫ阻害剤がコビメチニブである、請求項２４から２６のいずれか一項に記載の使用。
【請求項２８】
ＭＥＫ阻害剤がＧＤＣ−０６２３である、請求項２４から２６のいずれか一項に記載の使用。
【請求項２９】
ＭＥＫ阻害剤がＧＳＫ−１１２０２１２（トラメチニブ）である、請求項２４から２６のいずれか一項に記載の使用。
【請求項３０】
ＭＥＫ阻害剤がＡＺＤ−６２４４（セルメチニブ）である、請求項２４から２６のいずれか一項に記載の使用。
【請求項３１】
ＭＥＫ阻害剤がＢＡＹ  ８６−９７６６（ｒｅｆａｍｅｔｉｎｉｂ）である、請求項２４から２６のいずれか一項に記載の使用。
【請求項３２】
ＥＲＫ阻害剤が、（Ｓ）−１−（１−（４−クロロ−３−フルオロフェニル）−２−ヒドロキシエチル）−４−（２−（（１−メチル−１Ｈ−ピラゾール−５−イル）アミノ）ピリミジン−４−イル）ピリジン−２（１Ｈ）−オン、４−（３−（（エチルジメチルシリル）メチル）−［１，２，４］トリアゾロ［４，３−ａ］ピリジン−７−イル）−Ｎ−（１−メチル−１Ｈ−ピラゾール−５−イル）ピリミジン−２−アミン，（Ｓ）−４−（３−（２−（４−クロロフェニル）−２−メトキシエチル）−［１，２，４］トリアゾロ［４，３−ｂ］ピリダジン−７−イル）−Ｎ−（１−メチル−１Ｈ−ピラゾール−５−イル）ピリミジン−２−アミン又は（Ｓ）−Ｎ−（１−メチル−１Ｈ−ピラゾール−５−イル）−４−（３−（２−メチルブチル）−［１，２，３］トリアゾロ［１，５−ａ］ピリジン−６−イル）ピリミジン−２−アミンである、請求項２４から３１のいずれか一項に記載の使用。
【請求項３３】
ＥＲＫ阻害剤が、（Ｓ）−１−（１−（４−クロロ−３−フルオロフェニル）−２−ヒドロキシエチル）−４−（２−（（１−メチル−１Ｈ−ピラゾール−５−イル）アミノ）ピリミジン−４−イル）ピリジン−２（１Ｈ）−オン又はその薬学的に許容される塩である、請求項２４から３２のいずれか一項に記載の使用。
【請求項３４】
前記過剰増殖性障害が、腺腫、膀胱がん、脳のがん、乳がん、結腸がん、表皮癌、濾胞腺癌、泌尿生殖器のがん、膠芽細胞腫、ホジキン疾患、頭頸部がん、ヘパトーマ、ケラトアカントーマ、腎臓がん、大細胞癌、白血病、肺腺癌、肺がん、リンパ性障害、メラノーマ及び非メラノーマ皮膚がん、骨髄異形成症候群、神経芽細胞腫、非ホジキンリンパ腫、卵巣がん、乳頭癌、膵臓がん、前立腺がん、直腸がん、肉腫、小細胞癌、精巣がん、奇形癌（ｔｅｔｒａｃａｒｃｉｎｏｍａ）、甲状腺がん、及び未分化癌からなる群より選択される、請求項２４から３３のいずれか一項に記載の使用。
【請求項３５】
前記過剰増殖性障害が、結腸直腸がん、肺がん、中皮腫、乳がん、膵臓がん、神経膠腫、胃がん、腎がん、卵巣がん、子宮内膜がん、膀胱がん及び頭頸部がんからなる群より選択されるがんである、請求項２４から３４のいずれか一項に記載の使用。
【請求項３６】
過剰増殖性障害が、結腸直腸がん、非小細胞肺がん、膵臓がん又はメラノーマからなる群より選択されるがんである、請求項２４から３５のいずれか一項に記載の使用。
【請求項３７】
コビメチニブ又はその薬学的に許容される塩が、（Ｓ）−１−（１−（４−クロロ−３−フルオロフェニル）−２−ヒドロキシエチル）−４−（２−（（１−メチル−１Ｈ−ピラゾール−５−イル）アミノ）ピリミジン−４−イル）ピリジン−２（１Ｈ）−オン又はその薬学的に許容される塩と組合せて投与される、請求項２４から３６のいずれか一項に記載の使用。
【請求項３８】
５−（（２−フルオロ−４−ヨードフェニル）アミノ）−Ｎ−（２−ヒドロキシエトキシ）イミダゾ［１，５−ａ］ピリジン−６−カルボキサミド又はその薬学的に許容される塩が、（Ｓ）−１−（１−（４−クロロ−３−フルオロフェニル）−２−ヒドロキシエチル）−４−（２−（（１−メチル−１Ｈ−ピラゾール−５−イル）アミノ）ピリミジン−４−イル）ピリジン−２（１Ｈ）−オン又はその薬学的に許容される塩と組合せて投与される、請求項２４から３６のいずれか一項に記載の使用。
【請求項３９】
コビメチニブ又は５−（（２−フルオロ−４−ヨードフェニル）アミノ）−Ｎ−（２−ヒドロキシエトキシ）イミダゾ［１，５−ａ］ピリジン−６−カルボキサミド又はその薬学的に許容される塩が、（Ｓ）−１−（１−（４−クロロ−３−フルオロフェニル）−２−ヒドロキシエチル）−４−（２−（（１−メチル−１Ｈ−ピラゾール−５−イル）アミノ）ピリミジン−４−イル）ピリジン−２（１Ｈ）−オン又はその薬学的に許容される塩と同時に投与される、請求項２４から３６のいずれか一項に記載の使用。
【請求項４０】
コビメチニブ又は５−（（２−フルオロ−４−ヨードフェニル）アミノ）−Ｎ−（２−ヒドロキシエトキシ）イミダゾ［１，５−ａ］ピリジン−６−カルボキサミドが、（Ｓ）−１−（１−（４−クロロ−３−フルオロフェニル）−２−ヒドロキシエチル）−４−（２−（（１−メチル−１Ｈ−ピラゾール−５−イル）アミノ）ピリミジン−４−イル）ピリジン−２（１Ｈ）−オン又はその薬学的に許容される塩と順次的に投与される、請求項２４から３６のいずれか一項に記載の使用。
【請求項４１】
コビメチニブ、又はその薬学的に許容される塩、又は５−（（２−フルオロ−４−ヨードフェニル）アミノ）−Ｎ−（２−ヒドロキシエトキシ）イミダゾ［１，５−ａ］ピリジン−６−カルボキサミド、又はその薬学的に許容される塩と、（Ｓ）−１−（１−（４−クロロ−３−フルオロフェニル）−２−ヒドロキシエチル）−４−（２−（（１−メチル−１Ｈ−ピラゾール−５−イル）アミノ）ピリミジン−４−イル）ピリジン−２（１Ｈ）−オンが、それぞれ単位投薬形態当たり約１ｍｇから約１０００ｍｇの量で投与される、請求項２４から４０のいずれか一項に記載の使用。
【請求項４２】
コビメチニブ、又はその薬学的に許容される塩が、６０ｍｇの用量で、２８日サイクルの１から２１日目に投与され、（Ｓ）−１−（１−（４−クロロ−３−フルオロフェニル）−２−ヒドロキシエチル）−４−（２−（（１−メチル−１Ｈ−ピラゾール−５−イル）アミノ）ピリミジン−４−イル）ピリジン−２（１Ｈ）−オン又はその薬学的に許容される塩が、それぞれ単位投薬形態当たり約１ｍｇから約１０００ｍｇの量で投与される、請求項２４から４１のいずれか一項に記載の使用。
【請求項４３】
ＥＲＫ阻害剤又はその薬学的に許容される塩を含む過剰増殖性障害の治療における使用のためのＭＥＫ阻害剤又はその薬学的に許容される塩。
【請求項４４】
過剰増殖性障害ががんであり、哺乳動物がヒトである、請求項４３に記載の過剰増殖性障害の治療における使用のためのＭＥＫ阻害剤又はその薬学的に許容される塩。
【請求項４５】
がんがＫＲＡＳ変異に関連付けられる、請求項４４に記載の過剰増殖性障害の治療における使用のためのＭＥＫ阻害剤又はその薬学的に許容される塩。
【請求項４６】
ＭＥＫ阻害剤がコビメチニブである、請求項４３から４５のいずれか一項に記載の過剰増殖性障害の治療における使用のためのＭＥＫ阻害剤又はその薬学的に許容される塩。
【請求項４７】
ＭＥＫ阻害剤がＧＤＣ−０６２３である、請求項４３から４５のいずれか一項に記載の過剰増殖性障害の治療における使用のためのＭＥＫ阻害剤又はその薬学的に許容される塩。
【請求項４８】
ＭＥＫ阻害剤がＧＳＫ−１１２０２１２（トラメチニブ）である、請求項４３から４５のいずれか一項に記載の過剰増殖性障害の治療における使用のためのＭＥＫ阻害剤又はその薬学的に許容される塩。
【請求項４９】
ＭＥＫ阻害剤がＡＺＤ−６２４４（セルメチニブ）である、請求項４３から４５のいずれか一項に記載の過剰増殖性障害の治療における使用のためのＭＥＫ阻害剤又はその薬学的に許容される塩。
【請求項５０】
ＭＥＫ阻害剤がＢＡＹ  ８６−９７６６（ｒｅｆａｍｅｔｉｎｉｂ）である、請求項４３から４５のいずれか一項に記載の過剰増殖性障害の治療における使用のためのＭＥＫ阻害剤又はその薬学的に許容される塩。
【請求項５１】
ＥＲＫ阻害剤が、（Ｓ）−１−（１−（４−クロロ−３−フルオロフェニル）−２−ヒドロキシエチル）−４−（２−（（１−メチル−１Ｈ−ピラゾール−５−イル）アミノ）ピリミジン−４−イル）ピリジン−２（１Ｈ）−オン、４−（３−（（エチルジメチルシリル）メチル）−［１，２，４］トリアゾロ［４，３−ａ］ピリジン−７−イル）−Ｎ−（１−メチル−１Ｈ−ピラゾール−５−イル）ピリミジン−２−アミン，（Ｓ）−４−（３−（２−（４−クロロフェニル）−２−メトキシエチル）−［１，２，４］トリアゾロ［４，３−ｂ］ピリダジン−７−イル）−Ｎ−（１−メチル−１Ｈ−ピラゾール−５−イル）ピリミジン−２−アミン又は（Ｓ）−Ｎ−（１−メチル−１Ｈ−ピラゾール−５−イル）−４−（３−（２−メチルブチル）−［１，２，３］トリアゾロ［１，５−ａ］ピリジン−６−イル）ピリミジン−２−アミンである、請求項４３から４５のいずれか一項に記載の過剰増殖性障害の治療における使用のためのＭＥＫ阻害剤又はその薬学的に許容される塩。
【請求項５２】
ＥＲＫ阻害剤が、（Ｓ）−１−（１−（４−クロロ−３−フルオロフェニル）−２−ヒドロキシエチル）−４−（２−（（１−メチル−１Ｈ−ピラゾール−５−イル）アミノ）ピリミジン−４−イル）ピリジン−２（１Ｈ）−オン又はその薬学的に許容される塩である、請求項４３から４５のいずれか一項に記載の過剰増殖性障害の治療における使用のためのＭＥＫ阻害剤又はその薬学的に許容される塩。
【請求項５３】
前記過剰増殖性障害が、腺腫、膀胱がん、脳のがん、乳がん、結腸がん、表皮癌、濾胞腺癌、泌尿生殖器のがん、膠芽細胞腫、ホジキン疾患、頭頸部がん、ヘパトーマ、ケラトアカントーマ、腎臓がん、大細胞癌、白血病、肺腺癌、肺がん、リンパ性障害、メラノーマ及び非メラノーマ皮膚がん、骨髄異形成症候群、神経芽細胞腫、非ホジキンリンパ腫、卵巣がん、乳頭癌、膵臓がん、前立腺がん、直腸がん、肉腫、小細胞癌、精巣がん、奇形癌（ｔｅｔｒａｃａｒｃｉｎｏｍａ）、甲状腺がん、及び未分化癌からなる群より選択されるがんである、請求項４３から５２のいずれか一項に記載の過剰増殖性障害の治療における使用のためのＭＥＫ阻害剤又はその薬学的に許容される塩。
【請求項５４】
前記過剰増殖性障害が、結腸直腸がん、肺がん、中皮腫、乳がん、膵臓がん、神経膠腫、胃がん、腎がん、卵巣がん、子宮内膜がん、膀胱がん及び頭頸部がんからなる群より選択されるがんである、請求項４３から５３のいずれか一項に記載の過剰増殖性障害の治療における使用のためのＭＥＫ阻害剤又はその薬学的に許容される塩。
【請求項５５】
過剰増殖性障害が、結腸直腸がん、非小細胞肺がん、膵臓がん又はメラノーマからなる群より選択されるがんである、請求項４３から５４のいずれか一項に記載の過剰増殖性障害の治療における使用のためのＭＥＫ阻害剤又はその薬学的に許容される塩。
【請求項５６】
コビメチニブ、又はその薬学的に許容される塩、又は５−（（２−フルオロ−４−ヨードフェニル）アミノ）−Ｎ−（２−ヒドロキシエトキシ）イミダゾ［１，５−ａ］ピリジン−６−カルボキサミド、又はその薬学的に許容される塩と、（Ｓ）−１−（１−（４−クロロ−３−フルオロフェニル）−２−ヒドロキシエチル）−４−（２−（（１−メチル−１Ｈ−ピラゾール−５−イル）アミノ）ピリミジン−４−イル）ピリジン−２（１Ｈ）−オンが、それぞれ単位投薬形態当たり約１ｍｇから約１０００ｍｇの量で投与される、請求項４３から５５のいずれか一項に記載の過剰増殖性障害の治療における使用のためのＭＥＫ阻害剤又はその薬学的に許容される塩。
【請求項５７】
コビメチニブ、又はその薬学的に許容される塩が、６０ｍｇの用量で、２８日サイクルの１から２１日目に投与され、（Ｓ）−１−（１−（４−クロロ−３−フルオロフェニル）−２−ヒドロキシエチル）−４−（２−（（１−メチル−１Ｈ−ピラゾール−５−イル）アミノ）ピリミジン−４−イル）ピリジン−２（１Ｈ）−オン又はその薬学的に許容される塩が、それぞれ単位投薬形態当たり約１ｍｇから約１０００ｍｇの量で投与される、請求項４３から５２のいずれか一項に記載の過剰増殖性障害の治療における使用のためのＭＥＫ阻害剤又はその薬学的に許容される塩。
【請求項５８】
過剰増殖性障害の治療における使用のための、ＭＥＫ阻害剤又はその薬学的に許容される塩と、ＥＲＫ阻害剤又はその薬学的に許容される塩との組合せ。
【請求項５９】
過剰増殖性障害ががんであり、哺乳動物がヒトである、請求項５８に記載の組合せ。
【請求項６０】
がんがＫＲＡＳ変異に関連付けられる、請求項５８に記載の組合せ。
【請求項６１】
ＭＥＫ阻害剤がコビメチニブである、請求項５８から６０のいずれか一項に記載の組合せ。
【請求項６２】
ＭＥＫ阻害剤がＧＤＣ−０６２３である、請求項５８から６１のいずれか一項に記載の組合せ。
【請求項６３】
ＭＥＫ阻害剤がＧＳＫ−１１２０２１２（トラメチニブ）である、請求項５８から６１のいずれか一項に記載の組合せ。
【請求項６４】
ＭＥＫ阻害剤がＡＺＤ−６２４４（セルメチニブ）である、請求項５８から６１のいずれか一項に記載の組合せ。
【請求項６５】
ＭＥＫ阻害剤がＢＡＹ  ８６−９７６６（ｒｅｆａｍｅｔｉｎｉｂ）である、請求項５８から６１のいずれか一項に記載の組合せ。
【請求項６６】
ＥＲＫ阻害剤が、（Ｓ）−１−（１−（４−クロロ−３−フルオロフェニル）−２−ヒドロキシエチル）−４−（２−（（１−メチル−１Ｈ−ピラゾール−５−イル）アミノ）ピリミジン−４−イル）ピリジン−２（１Ｈ）−オン、４−（３−（（エチルジメチルシリル）メチル）−［１，２，４］トリアゾロ［４，３−ａ］ピリジン−７−イル）−Ｎ−（１−メチル−１Ｈ−ピラゾール−５−イル）ピリミジン−２−アミン，（Ｓ）−４−（３−（２−（４−クロロフェニル）−２−メトキシエチル）−［１，２，４］トリアゾロ［４，３−ｂ］ピリダジン−７−イル）−Ｎ−（１−メチル−１Ｈ−ピラゾール−５−イル）ピリミジン−２−アミン又は（Ｓ）−Ｎ−（１−メチル−１Ｈ−ピラゾール−５−イル）−４−（３−（２−メチルブチル）−［１，２，３］トリアゾロ［１，５−ａ］ピリジン−６−イル）ピリミジン−２−アミンである、請求項５８から６５のいずれか一項に記載の組合せ。
【請求項６７】
ＥＲＫ阻害剤が、（Ｓ）−１−（１−（４−クロロ−３−フルオロフェニル）−２−ヒドロキシエチル）−４−（２−（（１−メチル−１Ｈ−ピラゾール−５−イル）アミノ）ピリミジン−４−イル）ピリジン−２（１Ｈ）−オン又はその薬学的に許容される塩である、請求項５８から６６のいずれか一項に記載の組合せ。
【請求項６８】
前記過剰増殖性障害が、腺腫、膀胱がん、脳のがん、乳がん、結腸がん、表皮癌、濾胞腺癌、泌尿生殖器のがん、膠芽細胞腫、ホジキン疾患、頭頸部がん、ヘパトーマ、ケラトアカントーマ、腎臓がん、大細胞癌、白血病、肺腺癌、肺がん、リンパ性障害、メラノーマ及び非メラノーマ皮膚がん、骨髄異形成症候群、神経芽細胞腫、非ホジキンリンパ腫、卵巣がん、乳頭癌、膵臓がん、前立腺がん、直腸がん、肉腫、小細胞癌、精巣がん、奇形癌（ｔｅｔｒａｃａｒｃｉｎｏｍａ）、甲状腺がん、及び未分化癌からなる群より選択されるがんである、請求項５８から６７のいずれか一項に記載の組合せ。
【請求項６９】
前記過剰増殖性障害が、結腸直腸がん、肺がん、中皮腫、乳がん、膵臓がん、神経膠腫、胃がん、腎がん、卵巣がん、子宮内膜がん、膀胱がん及び頭頸部がんからなる群より選択されるがんである、請求項５８から６８のいずれか一項に記載の組合せ。
【請求項７０】
過剰増殖性障害が、結腸直腸がん、非小細胞肺がん、膵臓がん又はメラノーマからなる群より選択されるがんである、請求項５８から６８のいずれか一項に記載の組合せ。
【請求項７１】
コビメチニブ、又はその薬学的に許容される塩、又は５−（（２−フルオロ−４−ヨードフェニル）アミノ）−Ｎ−（２−ヒドロキシエトキシ）イミダゾ［１，５−ａ］ピリジン−６−カルボキサミド、又はその薬学的に許容される塩と、（Ｓ）−１−（１−（４−クロロ−３−フルオロフェニル）−２−ヒドロキシエチル）−４−（２−（（１−メチル−１Ｈ−ピラゾール−５−イル）アミノ）ピリミジン−４−イル）ピリジン−２（１Ｈ）−オンが、それぞれ単位投薬形態当たり約１ｍｇから約１０００ｍｇの量で投与される、請求項５８から７０のいずれか一項に記載の組合せ。
【請求項７２】
コビメチニブ、又はその薬学的に許容される塩が、６０ｍｇの用量で、２８日サイクルの１から２１日目に投与され、（Ｓ）−１−（１−（４−クロロ−３−フルオロフェニル）−２−ヒドロキシエチル）−４−（２−（（１−メチル−１Ｈ−ピラゾール−５−イル）アミノ）ピリミジン−４−イル）ピリジン−２（１Ｈ）−オン又はその薬学的に許容される塩が、それぞれ単位投薬形態当たり約１ｍｇから約１０００ｍｇの量で投与される、請求項５８から７１のいずれか一項に記載の組合せ。
【請求項７３】
過剰増殖性障害の治療における使用のための、ＭＥＫ阻害剤又はその薬学的に許容される塩と、ＥＲＫ阻害剤又はその薬学的に許容される塩との共投与であって、具体的には、ＭＥＫ阻害剤が請求項６１から６５のいずれか一項に記載のように定義され、ＥＲＫ阻害剤が請求項６６又は６７に記載のように定義され、過剰増殖性障害が請求項６８から７０のいずれか一項に記載のように定義される、共投与。
【請求項７４】
過剰増殖性障害の治療のための医薬の調製のための、ＭＥＫ阻害剤又はその薬学的に許容される塩と、ＥＲＫ阻害剤又はその薬学的に許容される塩の組合せの使用であって、具体的には、ＭＥＫ阻害剤が請求項６１から６５のいずれか一項に記載のように定義され、ＥＲＫ阻害剤が請求項６６又は６７に記載のように定義され、過剰増殖性障害が請求項６８から７０のいずれか一項に記載のように定義される、使用。
【請求項７５】
上記に記載される本発明。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、概して、がんなどの過剰増殖性障害に対する活性を有するＭＥＫ阻害剤（ＭＥＫｉ）とＥＲＫ阻害剤（ＥＲＫｉ）との薬学的組合せに関する。本発明は、哺乳動物の治療のための同化合物の使用方法にも関する。
【背景技術】
【０００２】
ＲＡＳ／ＲＡＦ／ＭＥＫ／ＥＲＫ経路は、最も一般的にはＫ−ｒａｓがん遺伝子の変異を介して、更にはＢＲＡＦの変異を介して、ヒトのがんのうち３０％以上において活性化される。したがって、この経路は、がんの治療標的として大きな関心を集めている（P. J. Roberts and C.J. Der, Oncogene 2007 26:3291-310)）。ＲＡＳを直接標的としようとする努力はこれまで成功に到っていないが、ＢＲＡＦ及びマイトジェン活性化細胞外シグナル調節キナーゼ（ＭＥＫ）阻害剤を用いた最近の臨床治験によって、これら下流のＲＡＳエフェクターを標的とすることが、この経路にがん遺伝子の変異を有するがんの治療にとって有望であることが示唆されている。（K. T. Flaherty et al., Curr. Opin. Oncol. 201022:178-83）。特にＢＲＡＦ変異メラノーマにおけるＢＲＡＦ阻害剤の場合、臨床応答と抗腫瘍活性は良好であるかもしれないが、患者の大部分は最終的には臨床的耐性と進行性疾患を生じた（Flaherty, supra; D.B. Solit and N. Rosen, N. Engl. J. Med. 364:772-4）。前臨床試験により、ＢＲＡＦ阻害剤に対する後天的耐性の複数のメカニズムが同定されており、それには、ＲＡＦアイソフォーム間の転換（J. Villaneuva et al., Cancer Cell 2010 18:683-95）、ＲＴＫ又はＮＲＡＳシグナル伝達の上方制御（R. Nazarian et al., Nature 2010 468:973-7）、及びＣＯＴ活性化（C.M. Johannessen et al., Nature 2010 468:968-72）又はＭＥＫキナーゼ活性化変異（N. Wagle et al., J. Clin. Oncol. 2011 29:3085-96）によるマイトジェン活性化キナーゼ（ＭＡＰＫ）シグナル伝達の再活性化調べた限りでは、COT活性化とＭＥＫキナーゼ活性化変異はどちらも癌を誘発するようなので、並列関係でよさそうです。が含まれる。同様の前臨床試験により、ＭＥＫ阻害に対して細胞が耐性を獲得するための別個のメカニズムが同定されており、それには、変異ＢＲＡＦの増幅（R.B. Corcorran et al., Sci. Signal 2011 3:ra84）、ＳＴＡＴ３上方制御（B. Dai et al., Cancer Res. 2011 71:3658-68）、又はＭＥＫキナーゼ活性に対する阻害剤の直接的結合を可能にするＭＥＫのアロステリックポケットにおける変異（H. Wang et al., Cancer Res. 2011 71:5535-45; C.M. Emery et al., Proc. Nat. Acad. Sci. USA 2009 106:20411-6）が含まれる。ＭＥＫ変異は、ＭＥＫ（Emera、上掲）又はＢＲＡＦ（Wagle 上掲）阻害剤により治療された患者由来の腫瘍試料において臨床的関連性を示す記載がある。
【０００３】
ＲＡＦ及びＭＥＫ阻害剤と比較して、選択的ＥＲＫ１／２阻害剤が報告されて現在臨床開発中である一方、ＭＥＫの直接下流に作用するＥＲＫ１／２に対する小分子阻害剤の同定及び開発は遅れを取っている。
【発明の概要】
【０００４】
本発明は、概して、組合せて投与されるとがん細胞の増殖を阻害する抗がん活性を有するＭＥＫ阻害剤とＥＲＫ阻害剤の相乗的組合せに関する。本発明の組合せ及び方法は、がんなどの過剰増殖性障害の治療において有用でありうる。この組成物は、哺乳動物の腫瘍の増殖を阻害し、ヒトがん患者を治療するために有用でありうる。
【０００５】
一態様では、本発明は、治療的組合せを、組合せ製剤として又は交互に哺乳動物に投与することを含む、過剰増殖性障害の治療のための方法を含み、この治療的組合せは、治療的有効量のＭＥＫｉ化合物及び治療的有効量のＥＲＫｉを含む。本発明の一態様では、ＥＲＫ阻害剤は、（Ｓ）−１−（１−（４−クロロ−３−フルオロフェニル）−２−ヒドロキシエチル）−４−（２−（（１−メチル−１Ｈ−ピラゾール−５−イル）アミノ）ピリミジン−４−イル）ピリジン−２（１Ｈ）−オン（Ｉａ、ＧＤＣ−０９９４）、４−（３−（（エチルジメチルシリル）メチル）−［１，２，４］トリアゾロ［４，３−ａ］ピリジン−７−イル）−Ｎ−（１−メチル−１Ｈ−ピラゾール−５−イル）ピリミジン−２−アミン（Ｉｂ），（Ｓ）−４−（３−（２−（４−クロロフェニル）−２−メトキシエチル）−［１，２，４］トリアゾロ［４，３−ｂ］ピリダジン−７−イル）−Ｎ−（１−メチル−１Ｈ−ピラゾール−５−イル）ピリミジン−２−アミン（Ｉｃ）又は（Ｓ）−Ｎ−（１−メチル−１Ｈ−ピラゾール−５−イル）−４−（３−（２−メチルブチル）−［１，２，３］トリアゾロ［１，５−ａ］ピリジン−６−イル）ピリミジン−２−アミン（Ｉｄ）から選択され、ＭＥＫ阻害剤は、コビメチニブ（ＩＩ、ＧＤＣ−０９７３）又は５−（（２−フルオロ−４−ヨードフェニル）アミノ）−Ｎ−（２−ヒドロキシエトキシ）イミダゾ［１，５−ａ］ピリジン−６−カルボキサミド（ＩＩａ、ＧＤＣ−０６２３）である。本発明の別の態様では、ＭＥＫ阻害剤は（ＩＩ）であり、ＥＲＫ阻害剤はＧＤＣ−０９９４（Ｉａ）である。
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【０００６】
本発明の別の態様は、ＲＡＳ／ＲＡＦ／ＭＥＫ／ＥＲＫキナーゼにより調節された過剰増殖性疾患又は障害の治療方法を提供し、この方法は、治療を必要とする哺乳動物に対し、有効量の式Ｉａ〜Ｉｄの化合物と式ＩＩ又はＩＩａの化合物を投与することを含む。式Ｉａ〜Ｉｄの化合物と式ＩＩ又はＩＩａの化合物は、薬学的組成物として組合せて投与するために共製剤化することができるか、又は治療的組合せとして別々に、交互に（順次的に）投与される。
【０００７】
本発明の別の態様は過剰増殖性障害の治療方法を提供し、この方法は、治療を必要とする哺乳動物に対し、有効量の式Ｉａ〜Ｉｄの化合物、式ＩＩ（ＧＤＣ−０９７３）又はＩＩａの化合物、及び別の化学療法剤を投与することを含む。
【０００８】
本発明の別の態様は、式Ｉａ〜Ｉｄの化合物と式（ＧＤＣ−０９７３）又はＩＩａの化合物、容器、及び任意選択的に、治療を指示する添付文書又はラベルを含む製造品又はキットを含む。
【０００９】
本発明の別の態様は、がんの治療のために組合せて使用される化合物を決定するための方法を含み、この方法は：ａ）ＭＥＫｉ及びＥＲＫｉの治療的組合せを、Ｋｒａｓ変異を有するインビトロ腫瘍細胞株に投与すること、及びｂ）相乗的又は非相乗的効果を測定することを含む。
【図面の簡単な説明】
【００１０】
【図１】実施例６のプロトコールを使用して、ＧＤＣ−０９９４、Ｉｂ、Ｉｃ若しくはＩｄとＧＤＣ−０９７３とを個別に投与したとき、又はＧＤＣ−０９９４、Ｉｂ、Ｉｃ若しくはＩｄをＧＤＣ−０９７３と組合せて投与したときの、Ａ５４９非小細胞肺がん（ＮＳＣＬＣ）細胞の細胞増殖を示す。細胞を、３倍の段階希釈による図示の最大薬物濃度を用いてインキュベートした。細胞生存能力を、ＣｅｌｌＴｉｔｅｒ−Ｇｌｏ（登録商標）アッセイ（ＣＴＧ）を用いることにより決定した。
【図２】ＧＤＣ−０９９４、Ｉｂ、Ｉｃ若しくはＩｄの用量とＧＤＣ−０９７３の用量とを個別に投与したとき、又はＧＤＣ−０９９４、Ｉｂ、Ｉｃ若しくはＩｄの用量をＧＤＣ−０９７３の用量と組合せて投与したときの、Ａ５４９非小細胞肺がん（ＮＳＣＬＣ）細胞の細胞増殖及びアポトーシス範囲を示す。細胞増殖は、ＢｒｄＵアッセイを用いて決定された。アポトーシスは、ｎｕｃＥＬＩＳＡアッセイを用いて測定された。
【図３】単独での又は組合せた場合の、組合せＭＥＫ及びＥＲＫ阻害剤による治療の薬学的結果を示す。ＥＲＫによるＲＳＫのリン酸化が阻害される。細胞周期の進行は、サイクリンＤ１の減少及びｐ２７の増加により証明されるように、有意に速度が低下した。細胞死（アポトーシス）の増加は、切断ＰＡＲＰのレベルの上昇により証明される。
【図４】Ｂｌｉｓｓ超過表面は、３８４ウェルプレート中の細胞を指示濃度の各薬物で４８時間処理することにより決定された、非同期指数関数的に増殖するＡ５４９細胞におけるＤＮＡ合成の阻害を示している。処理の最後の２時間に１ｕＭの５−エチニル−２’−デオキシウリジン（ＥｄＵ）で細胞を処理することにより、新規に合成されたＤＮＡを標識した。次いで細胞を、増殖培地に２％のパラホルムアルデヒド及び０．０２％のＴｒｉｔｏｎ  Ｘ−１００を加えることにより三十分間固定化及び透過処理し、続いて取り込まれたＥｄＵを、製造者（Ｌｉｆｅ  Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ、Ｅｕｇｅｎｅ、ＯＲ）の指示に従ってＡｌｅｘａ−Ｆｌｕｏｒ  ６３５アジドにより蛍光標識し、Ｈｏｅｃｈｓｔ  ３３３４２を用いてＤＮＡを対比染色した。蛍光顕微鏡画像を、Ｐｅｒｋｉｎ  Ｅｌｍｅｒ  Ｏｐｅｒａハイコンテンツイメージングシステムにより取得した。細胞の総数に対するＥｄＵ標識された細胞の割合を、Ａｃａｐｅｌｌａ画像分析ソフトウェアを用いて決定した。薬物処理間に起こりうる相互作用を決定するために、濃度の各ペアに観察された応答を、Ｂｌｉｓｓ相加性に基づいて（Ｆａ＋ｂ＝Ｆａ＋Ｆｂ−Ｆａ＊Ｆｂ（式中、Ｆａ及びＦｂは薬剤ａ及びｂの効果の割合である））、二つの相互作用しない薬剤に予測される応答と比較した。観察された効果割合と予測された効果割合との差異を、Ｂｌｉｓｓ超過と呼ぶ。
【図５】ＭＥＫｉ（ＧＤＣ−０９７３）阻害剤とＥＲＫｉ（ＧＤＣ−０９９４）阻害剤の組合せを用いたＮＳＣＬＣ細胞の処理を示す。試験された２９の細胞株のうちの１９は、ＥＲＫ＋ＭＥＫの何らかの組合せ効果を示している。非Ｑ６１Ｈ  Ｋｒａｓ変異株のすべては、組合せに対する何らかの感受性を示している。パネル中の二つのＢｒａｆ変異株には組合せの効果が観察されなかった。
【図６】ＮＣＩ−Ｈ２１２２非小細胞肺がん（ＮＳＣＬＣ）腫瘍異種移植片を有するＴａｃｏｎｉｃメスｎｕ／ｎｕ（ヌード）マウスにおける、時間の経過に伴う平均腫瘍体積の変化のグラフである。これらマウスには：ＭＣＴビヒクル（０．５％のメチルセルロース／０．２％のＴｗｅｅｎ  ８０）、６０ｍｇ／ｋｇの式Ｉａ（ＧＤＣ−０９９４）及び５ｍｇ／ｋｇの式ＩＩ（ＧＤＣ−０９７３）を毎日投与するか（図５ａ）、又は６０ｍｇ／ｋｇの式Ｉａ（ＧＤＣ−０９９４）を毎日と、１５ｍｇ／ｋｇの式ＩＩ（ＧＤＣ−０９７３）を三日毎に投与（Ｑ３Ｄ、即ち、間欠投薬）する（図５ｂ）かした。マウスは経口経管栄養により投薬された。薬力学的（Ｐｈａｒｍａｄｙｎａｍｉｃ）マーカーは、Ｈ２１２２  ＫＲＡＳ  ＮＳＣＬＣキセノグラフ（ｘｅｎｏｇｒａｐｈ）アッセイ６において、サイクリンＤ１及びＫｉ６７レベルの低下により立証される細胞増殖の低減（図６ｃ及び６ｄ）と、切断カスパーゼ３の増加により立証されるアポトーシスの増大（図６ｅ）とを実証するものである。
【図７】ＮＣＩ−Ｈ２１２２非小細胞肺がん（ＮＳＣＬＣ）腫瘍異種移植片を有するＴａｃｏｎｉｃメスｎｕ／ｎｕ（ヌード）マウスにおける、時間の経過に伴う平均腫瘍体積の変化のグラフである。これらマウスには：ＭＣＴビヒクル（０．５％のメチルセルロース／０．２％のＴｗｅｅｎ  ８０）、１００ｍｇ／ｋｇのＧＤＣ−０９９４及び５ｍｇ／ｋｇのＧＤＣ−０９７３を毎日投与するか（図７ａ）、１００ｍｇ／ｋｇのＧＤＣ−０９９４及び４ｍｇ／ｋｇのＧＤＣ−０９７３を毎日投与するか（図７ｂ）、又は１００ｍｇ／ｋｇのＧＤＣ−０９９４を毎日と、１５ｍｇ／ｋｇのＧＤＣ−０９７３を三日毎に（Ｑ３Ｄ、即ち、間欠投薬）する（図７ｃ）かした。マウスは経口経管栄養により投薬された。
【図８】Ａ５４９非小細胞肺がん（ＮＳＣＬＣ）腫瘍異種移植片を有するＴａｃｏｎｉｃメスｎｕ／ｎｕ（ヌード）マウスにおける時間の経過に伴う平均腫瘍体積の変化のグラフである。これらマウスには：ＭＣＴビヒクル（０．５％のメチルセルロース／０．２％のＴｗｅｅｎ  ８０）、６０ｍｇ／ｋｇの式ＧＤＣ−０９９４、及び５ｍｇ／ｋｇの式ＧＤＣ−０９７３を毎日投与するか（図５ａ）、又は６０ｍｇ／ｋｇの式ＧＤＣ−０９９４を毎日と、１５ｍｇ／ｋｇのＧＤＣ−０９７３を三日毎に投与（Ｑ３Ｄ、即ち、間欠投薬）する（図５ｂ）かした。マウスは経口経管栄養により投薬された。
【図９】腫瘍増殖阻害毎に表された、ＨＣＴ  １１６結腸直腸がん細胞株の用量範囲決定のための組合せ有効性試験におけるＧＤＣ−０９９４及びＧＤＣ−０９７３の有効性のまとめを示す。グレイ枠内の細胞は、忍容性レジメンに関して最も高い有効性を示す。黒枠内の細胞は忍容性を有さなかった。投薬は、毎日の（ＱＤ）経口経管栄養（ＰＯ）であった。
【図１０】膵管腺癌（ＰＤＡＣ）のＫＲＡＳ変異ＧＥＭモデルにおけるコビメチニブ及びＧＤＣ−０９９４の頑強な抗腫瘍活性を示す。ＭＪ担腫瘍Ｋｒａｓ変異ＧＥＭモデルを、ビヒクル、ＧＤＣ−０９７３（５ｍｇ／ｋｇ、ＰＯ、ＱＤ）、ＧＤＣ−０９９４（６０ｍｇ／ｋｇ、ＰＯ、ＱＤ）又はＧＤＣ−０９７３とＧＤＣ−０９９４の組合せで処理した。図１０ａは、ビヒクル（黒、ｎ＝８）、コビメチニブ（緑、ｎ＝８）、ＧＤＣ−０９９４（青、ｎ＝８）及び組合せ（赤、ｎ＝９）による７日間の処理後のＰＤＡＣモデルにおける、超音波イメージング（０日目、７日目）に基づくベースラインからのパーセント腫瘍体積の変化を示すＷａｔｅｒｆａｌｌプロットであり、図１０ｂは、処理コホート、即ちビヒクル（黒、ｎ＝１３）、ゲムシタビン（オレンジ、ｎ＝１０）、ＩＩｂ（緑、ｎ＝９）、ＧＤＣ−０９９４（青、ｎ＝８）及びＧＤＣ−０９９４とＧＤＣ−０９７３の組合せ（赤、ｎ＝１３）由来のＰＤＡＣモデルの全生存のカプランマイヤープロットを示す。併用処理は、ビヒクルに対して（＊＊ｐ＜０．０００１）及びゲムシタビンに対して（＊ｐ＝０．０１５９）有意であった（ログランク検定）。
【図１１】ａは、ＧＤＣ−０９７３，ＧＤＣ−０９９４及びＧＤＣ−０９９４とＧＤＣ−０９７３の組合せの存在下における、ＭＡＰＫ経路抑制の増大に起因する、ＫＲＡＳＧ１２Ｄ、ｐ１６／１９ＦＬ／ＦＬＰＤＸ−ＣＲＥ由来の細胞株の生存能力を示す。ｂは、ＧＤＣ−０９７３，ＧＤＣ−０９９４及びＧＤＣ−０９９４とＧＤＣ−０９７３の組合せの存在下における、ＫＲＡＳＧ１２Ｄ、ｐ１６／１９ＦＬ／ＦＬ  ＰＤＸ−ＣＲＥ由来の細胞株中のＰＤマーカーを示す。
【図１２】開発中の、ＧＤＣ−０９９４と複数のＭＥＫ阻害剤の組合せに観察される細胞増殖活性を示す。
【図１３】ＤＮＡ合成の相乗的阻害の評価を示す。指数関数的に増殖するＨＣＴ１１６（Ａ、Ｂ）及びＡ５４９（Ｃ、Ｄ）細胞を、指示濃度のＧＤＣ−０９９４及びＧＤＣ−０９７３で４７時間処理した後、５−エチニル−２’−デオキシウリジン（ＥｄＵ）を６０分間にわたって加え、続いてパラホルムアルデヒド固定化及びＥｄＵ含有ＤＮＡのＡｌｅｘａ  Ｆｌｕｏｒ  ６４７アジド（Ｌｉｆｅ  Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ、Ｍａｄｉｓｏｎ  ＷＩ）による標識化を行った。Ｈｏｅｃｈｓｔ  ３３５４２標識した核の総数及びＥｄＵ標識された核の割合を、自動蛍光顕微鏡検査及びＰｅｒｋｉｎ  Ｅｌｍｅｒ  Ｏｐｅｒａ機器及びＡｃａｐｅｌｌａソフトウェアを用いた画像分析により決定した。ＡとＣは、アイソボログラムプロットである。線は、二つの薬物の異なる組合せにより達成されるＤＮＡ合成の阻害が等しい点を結んでいる。斜めの太い破線は、化合物の組合せがＬｏｅｗｅモデルに従う単純な相加性を示した場合に予測される５０％阻害アイソボル（ｉｓｏｂｏｌｅ）を示す（N.Geary, Understanding synergy. Am. J. Physiol. Endocrinol. Metab. 2012. doi:10.1152/ajpendo.00308.2012）。ＢとＤは、用量マトリックス相乗効果分析であり、１；ＤＭＳＯ処理したコントロールに対するＥｄＵ陽性細胞の割合に観察されたパーセント変化、２；単一薬剤用量応答曲線に適用されたＬｏｅｗｅ相加性モデルに基づく薬物組合せに予測される効果、３；観察されたデータと予測された相加効果との差異を示す。ゼロ未満の数は、追加薬物に予測されたものより大きなＤＮＡ合成の阻害を示していた。データは、Ｇｅｎｅｄａｔａ  Ｓｃｒｅｅｎｅｒ（Ｇｅｎｅｄａｔａ  ＡＧ、Ｂａｓｅｌ）の化合物相乗効果拡張モジュールを使用して分析された。
【発明を実施するための形態】
【００１１】
定義
用語「含む（ｃｏｍｐｒｉｓｅ、ｉｎｃｌｕｄｅ）」は、本明細書及び特許請求の範囲で使用する場合、記載される特徴、完全体、成分、又は工程の存在を特定することを意図しているのであって、一つ以上の他の、特徴、完全体、成分、工程若しくはそれらの群の存在と、又は付加を排除するものではない。
【００１２】
用語「治療」及び「処置」とは、治療的処置を指し、その目的は、がんの増殖、発生又は転移などの望ましくない生理学的変化若しくは障害を予防する、又は遅延させる（低減する）ことである。本発明の目的のために、有益な又は所望の臨床結果は、限定しないが、症候の緩和、疾患の範囲の縮小、疾患の状態の安定（即ち、悪化以外）、疾患進行の遅延又は速度低下、病態の改善又は緩和、及び寛解（部分的又は完全な）を含み、検出可能であるか否かを問わない。「治療」はまた、治療を受けない場合に予想される生存と比較した、生存期間の延長を意味することができる。治療を必要とする者には、既に状態又は障害を有するもの、例えばがん患者が含まれる。
【００１３】
「阻害」することは、参照と比較して、活性、機能、及び／又は量を低減又は減少させることである。
【００１４】
「治療的に有効な量（治療的有効量）」という表現は、本明細書に記載の（ｉ）特定の疾患、状態、又は障害を治療する、（ｉｉ）特定の疾患、状態、又は障害の一又は複数の症候を軽減、改善又は排除する、又は（ｉｉｉ）特定の疾患、状態、又は障害の一又は複数の症候の開始を防止する又は遅らせる量を意味する。がんの場合、治療的に有効な量は、がん細胞数を減少させ；腫瘍の大きさを縮小させ；末梢器官へのがん細胞浸潤を阻害し（例えば、ある程度遅らせ、好ましくは停止させる）；腫瘍転移を阻害し（例えば、ある程度遅らせ、好ましくは停止させる）；腫瘍増殖をある程度阻害し；及び／又はがんに関連する一又は複数の症候をある程度緩和することができる。組合せは、増殖を防ぎ、及び／又は既存のがん細胞を死滅させうる範囲で、細胞増殖抑制性及び／又は細胞毒性でありうる。がん治療については、例えば、無増悪期間（ＴＴＰ）までの時間及び／又は奏効率（ＲＲ）を評価することにより、有効性を判定することができる。
【００１５】
所与の過剰増殖性障害のための改善された治療を提供することに加えて、本発明の特定の組合せの投与は、異なる治療を受ける患者が経験する生活の質と比較して、同じ患者の生活の質を改善することができる。例えば、患者への組合せの投与は、療法として個々の薬剤のうちの一つだけを投与された場合に同じ患者が経験するであろう生活の質と比較して、改善された生活の質を提供することができる。例えば、本明細書に記載の組合せによる併用療法は、必要とされる治療剤の用量を低減することができる。併用療法は、化学療法剤の使用に対する必要性及び高容量の化学療法剤に関連付けられる副作用（例えば、吐き気、嘔吐、脱毛、発疹、食欲減退、体重減少など）を低減又は排除することができる。組合せは、腫瘍負荷及び関連する副作用、例えば疼痛、器官不全、体重減少などの低減をもたらすこともできる。したがって、本発明の一態様は、本明細書に記載の薬剤を用いて、過剰増殖性障害について治療される患者の生活の質を改善するための治療的使用のための組合せを提供する。
【００１６】
用語「がん」及び「がん性」は、典型的には、制御されない細胞増殖を特徴とする、哺乳動物における生理学的状態を指す又は説明する。「腫瘍」とは、一又は複数のがん細胞から成る。がんの例としては、限定されないが、癌腫、リンパ腫、芽細胞腫、肉腫、及び白血病又はリンパ性腫瘍が挙げられる。このようながんのより具体的な例には、扁平上皮細胞がん（例えば、上皮性扁平上皮細胞がん）、小細胞肺がんを含む肺がん、非小細胞肺がん（「ＮＳＣＬＣ」）、肺の腺癌および肺の扁平上皮癌、腹膜のがん、肝細胞がん、消化管がんを含む胃（ｇａｓｔｒｉｃ又はｓｔｏｍａｃｈ）がん、膵がん、神経膠芽腫、子宮頸がん、卵巣がん、肝がん、膀胱がん、ヘパトーマ、乳癌、大腸がん、直腸がん、結腸直腸がん、子宮内膜又は子宮癌腫、唾液腺癌腫、腎臓がん、前立腺がん、外陰部がん、甲状腺がん、肝癌、肛門癌腫、陰茎癌、及び頭頸部がんが含まれる。本明細書で使用される胃がん（ｇａｓｔｒｉｃ  ｃａｎｃｅｒ）は、胃のあらゆる部位に発生しうる胃がん（ｓｔｏｍａｃｈ  ｃａｎｃｅｒ）を含み、これは胃全体及び他の器官、特に食道、肺、リンパ節及び肝臓に広がる可能性がある。
【００１７】
用語「哺乳動物」には、限定されないが、ヒト、マウス、ラット、モルモット、サル、イヌ、ネコ、ウマ、ウシ、ブタ、ヒツジ、及び家禽が含まれる。用語「患者」は哺乳動物を指し、一実施態様では、患者はヒトのオス又はヒトのメスである。
【００１８】
本明細書で使用される用語「相乗的」は、二つ以上の単剤の相加効果より有効性の高い治療的組合せを指す。相乗的相互作用の決定は、当技術分野で既知のアッセイから得られる結果に基づいて行うことができる。これらアッセイの結果を、Ｃｈｏｕ及びＴａｌａｌａｙの組合せ法と、ＣａｌｃｕＳｙｎソフトウェアによる用量−効果分析を用いて分析することにより、コンビネーションインデックスを得ることができる（Chou and Talalay, Adv. Enzyme Regul.1984 22:27-55）。本明細書において提供される組合せは、抗がん剤間の相乗作用、相加効果、及び拮抗作用を定量化するための標準的プログラムを用いて分析することができる。例示的な一プログラムは、Ｃｈｏｕ及びＴａｌａｌａｙにより、"New Avenues in Developmental Cancer Chemotherapy", Academic Press, 1987, Chapter 2に記載されたものである。０．８未満のコンビネーションインデックス値は相乗作用を示し、１．２を上回る値は拮抗作用を示し、０．８から１．２までの値は相加効果を示す。併用療法は、「相乗作用」を提供することができ、「相乗的」である、即ち活性成分を一緒に使用したときに達成される効果が、化合物を別々に使用することにより得られる効果の和を上回ることが証明される。相乗効果は、活性成分が：（１）共処方されて投与されるか又は組合せた単用量製剤で同時に送達されるとき；（２）別個の製剤として交互に又は並行して送達されるとき；又は（３）他の何らかの投与計画によって、得られる可能性がある。交互療法で送達される場合、化合物が例えば別個の注射器での異なる注射によって順次的に投与又は送達されるときにも、相乗効果が得られる可能性がある。一般に、交互療法の間には、各活性成分の有効投薬量は順次的に、即ち連続して投与され、併用療法では、二以上の活性成分は一緒に投与される。組合せ効果は、ＢＬＩＳＳ独立モデルと最大単剤（ＨＳＡ）モデル（Lehar et al. 2007, Molecular Systems Biology 3:80）の両方を用いて評価された。ＢＬＩＳＳスコアは、単剤による増強作用の程度を定量化するものであり、陽性ＢＬＩＳＳスコア（０を上回る）は、単純な相加性より大きいことを示唆する。２５０を上回る累積陽性ＢＬＩＳＳスコアは、試験した濃度範囲内で観察された強い相乗作用と考えられる。ＨＳＡスコア（０を上回る）は、対応する濃度における単剤応答の最大値を上回る組合せ効果を示唆する。
【００１９】
ＴＧＩの測定方法は、当技術分野で既知である。例示的一方法では、治療の前と後での患者の平均腫瘍体積を決定し、比較する。腫瘍体積は、当技術分野の任意の方法、例えば、ＵｌｔｒａＣａｌ  ＩＶノギス（Ｆｒｅｄ  Ｖ．  Ｆｏｗｌｅｒ  Ｃｏｍｐａｎｙ）を用いて又はＰＥＴ（ポジトロンエミッショントモグラフィー）により、又は他の何らかの方法により、二つの寸法（長さ及び幅）において測定することができる。式、腫瘍体積（ｍｍ３）＝（長さ×幅２）×０．５を使用することができる。複数の期間にわたる腫瘍体積の測定は、混合モデリング線形混合効果（ＬＭＥ）手法（Pinheiro et al. 2009）を用いて行うことができる。この手法は、両方の反復測定（及び複数の患者）に対処することができる。キュービック回帰スプライン（ｃｕｂｉｃ  ｒｅｇｒｅｓｓｉｏｎ  ｓｐｌｉｎｅ）を用いて、非線形プロファイルを、各用量レベルにおける腫瘍体積の経時変化に適合させることができる。次いでこれら非線形プロファイルを、混合モデル内の用量に関連させることができる。ビヒクルのパーセントとしての腫瘍増殖阻害を、以下の式を用いて、ビヒクルに対する１日当たりのパーセント近似曲線下面積（ＡＵＣ）として算出することができる：
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【００２０】
この式を用いると、１００％のＴＧＩ値は腫瘍の血行静止を示し、約１％より大きく約１００％より小さい値は腫瘍の増殖阻害を示し、約１００％を上回る値は腫瘍縮小を示す。
【００２１】
ＭＥＫ阻害剤
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【００２２】
本発明は、ＭＥＫ阻害剤と、ＨＥＲ３及びＥＧＦＲ阻害剤との併用療法におけるその使用に関する。ＭＡＫ阻害剤については、これまでに広く総説がある（S. Price, Putative Allosteric MEK1 and MEK 2 inhibitors, Expert Opin. Ther. Patents, 2008 18(6):603; J.I. Trujillo, MEK Inhibitors: a patent review 2008-2010 Expert Opin. Ther. Patents 2011 21(7):1045）。好ましくは、ＭＥＫ阻害剤は、ＧＤＣ−０９７３（コビメチニブ）、ＧＤＣ−０６２３、ＡＺＤ６２４４（セルメチニブ）、ＡＺＤ８３３０、ＢＡＹ  ８６−９７６６（ｒｅｆａｍｅｔｉｎｉｂ）、ＧＳＫ−１１２０２１２（トラメチニブ）、ＡＲＲＹ−１６２、ＭＳＣ１９３６３６９、ＭＫ１６２、ＴＡＫ７３３及びＰＤ−３２５９０１から選択される。最も好ましくは、ＭＥＫ阻害剤はＧＤＣ−０９７３（コビメチニブ）又はＧＤＣ−０６２３である。
【００２３】
コビメチニブ（ＧＤＣ−０９７３、本明細書では「化合物ＩＩ」とも呼ぶ）は、経口投与可能な、ＲＡＳ／ＲＡＦ経路の中心成分であるＭＥＫ１及びＭＥＫ２の強力で高度に選択的な阻害剤であり、複数のヒトがんモデルにおいて単剤抗腫瘍活性を有している。ＧＤＣ−０９７３は、化学名［３，４−ジフルオロ−２−［（２−フルオロ−４−ヨードフェニル）アミノ］フェニル］［３−ヒドロキシ−３−［（２Ｓ）−２−ピペリジニル］−１−アゼチジニル］メタノンを有している。コビメチニブは、以下のＣＡＳ登録番号：９３４６６０−９３−２を有している。
【００２４】
ＧＤＣ−０６２３（本明細書では「化合物ＩＩａ」とも呼ぶ）は、経口投与可能な、ＲＡＳ／ＲＡＦ経路の中心成分であるＭＥＫ１及びＭＥＫ２の強力で高度に選択的な阻害剤であり、複数のヒトがんモデルにおいて単剤抗腫瘍活性を有している。ＧＤＣ−０６２３は、化学名５−［（２−フルオロ−４−ヨードフェニル）アミノ］−Ｎ−（２−ヒドロキシエトキシ）−イミダゾ［１，５−ａ］ピリジン−６−カルボキサミドを有し、以下のＣＡＳ登録番号１１６８０９１−６８−６を有している。
【００２５】
ＥＲＫ阻害剤
がん及び過剰増殖性疾患の治療に使用されるＥｒｋ阻害剤。化合物Ｉａ〜Ｉｄは、ＥＲＫ１及びＥＲＫ２のリン酸化を阻害し、複数のヒトがんモデルにおいて単剤抗腫瘍活性を有している。ＥＲＫは、ＭＥＫ１及びＭＥＫ２に知られている唯一の基質である。ＥＲＫのリン酸化により、核標的がリン酸化される場合は核への転座が起こり、様々な細胞プロセス、例えば増殖、分化、及び細胞周期進行が調整される（J. L. Yap et al.、Chem. Med. Chem. 2011 6:38）。
【００２６】
ＥＲＫ阻害剤には総説がある（K. Burkhard et al., Curr. Top. Med. Chem. 20099(8):678-689）。ピラゾール及びインダゾールＥＲＫ阻害剤も開示されている（D. Fairfax et al.、国際公開第２０１２０９４３１３号；G.W. Shipps, Jr. et al.、国際公開第２０１２０８７７７２号；G.W. Shipps, Jr. et al.、国際公開第２０１２０３６９９７号及びY. Deng et al.、国際公開第２０１２０３０６８５号；A. M. Aronov et al.、J. Med. Chem. 2009 52:6362-68）。
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【００２７】
ヒト腫瘍プロファイリング、並びに小分子及び第分子薬物設計における最近の進歩は、その最初の開発目的であった疾患の歴史を変えた標的治療法の発見に繋がったが、腫瘍学における標的薬剤の全体の成功率は依然としてむしろ低く、これは多くのがんの非均一性と、複数の冗長経路及び多数の分子経路間のクロストークを含む、標的が作用する複雑な経路とによって部分的に説明される。
【００２８】
この問題にアプローチする一つの方法は、標的薬剤の組合せ、又は標的薬剤と化学療法剤との組合せにより腫瘍を治療することである。この手法は、独立して及び一緒に、複数の腫瘍に増殖を引き起こし、且つ通常は多数のゲノム事象により腫瘍において活性化される複数の経路を標的化することを試みている。この手法は、二重の利益を有する。即ち、複数の発がん性事象により引き起こされる腫瘍における初期腫瘍奏効率を上昇させ、且ついずれかの単一薬剤により生じうる後天性耐性の比を低下させる可能性を有している。これは、補償経路の活性化の阻害に起因しており、これは次いで組合せの活性を、いずれかの単一薬剤によりみられる活性より継続させる。
【００２９】
ナイーブなＫ−ｒａｓ変異細胞とＭＥＫ及びＥＲＫ阻害剤の組合せ治療は耐性細胞の増殖を阻害し、後天性のＭＥＫ阻害剤耐性を有する細胞のＥＲＫ阻害剤による治療は増殖を有効に遮断した（G Hatzivassiliou et al., Mol. Cancer Ther. 2012 11:1143-1154）。本明細書において、本発明者らは、同じ経路内の二つのキナーゼの同時阻害が細胞の阻害を改善することを実証した。
【００３０】
ＧＤＣ−０９９４とＧＤＣ−０９７３の組合せは、Ａ５４９  ＫＲＡＳ  ＮＳＣＬＣ細胞の増殖を相乗的に抑制した（図５）。ＭＥＫｉとＥＲＫｉの組合せは、細胞周期を改善し（サイクリンＤ１レベルの低下及びｐ２７レベルの上昇）、アポトーシスを増加させた（切断ＰＡＲＰの増加及びｎｕｃＥＬＩＳＡアッセイ）（図２及び３）。二つの薬剤の共投与は、ＤＮＡ合成の減少により測定した場合の細胞増殖を相乗的に減少させた（図４）。阻害は、Ｈ２１２２  ＮＳＣＬＣを含むキセノグラフにおいてインビボでも観察され、これは細胞増殖の有意な減少及びアポトーシスの増加（図６ｃ−６ｅ）並びにＡ５４９  ＮＳＣＬＣ細胞（図６ａ及び６ｂ及び７ａ、７ｂ及び７ｃ）の減少を示した。相乗作用は、ＫＲＡＳ変異膵管腺癌を有するＧＥＭＭモデルにおいても実証され（図１０ａ及び１０ｂ）、そこでは同じ薬力学的マーカーがはっきりと表れていた（図１１ａ及び１１ｂ）。
【００３１】
相乗作用は、ＧＤＣ−０９７３と共投与されたすべてのＭＥＫｉ阻害剤（図１２）及びＧＤＣ−０９７３と共投与されたすべてのＥＲＫｉ（図１）に観察された。
【００３２】
本発明の一態様は、併用療法を用いて、治療を必要とする患者のがんの治療のための方法を提供し、この方法は、ＭＥＫ阻害剤、とＥＲＫ阻害剤又は薬学的に許容されるいずれかの塩の投与を含む。
【００３３】
一実施態様では、併用療法のＭＥＫ阻害剤は、ＧＤＣ−０９７３又はＧＤＣ−０６２３である。ＧＤＣ−０９７３及びＧＤＣ−０６２３は、ＥＲＫ  １／２を活性化するキナーゼである、ＭＥＫ１／２の強力で高度に選択的な小分子アロステリック阻害剤である。ＭＥＫ  １／２の阻害は、ＭＥＫ／ＥＲＫ経路内の異常なシグナル伝達に依存する腫瘍の増殖を制御するための戦略である。前臨床試験により、両阻害剤が、複数の腫瘍種類に関連付けられる活性化Ｂ−ＲＡＦ変異を有する腫瘍細胞の増殖を阻害することにおいて有効であることが実証されており、このモデルにおいてＧＤＣ−０９７３は更なる活性を示している。前臨床試験により、両阻害剤が、複数の腫瘍種類に関連付けられる活性化Ｒａｓ変異を有する腫瘍細胞の増殖を阻害することにおいて有効であることが実証されており、このモデルにおいてＧＤＣ−０６２３は更なる活性を示している。ＭＥＫ阻害剤の投与は、ＥＲＫ阻害剤と組合せられる。特定の実施態様では、ＥＲＫ阻害剤は、Ｉａ、Ｉｂ、Ｉｃ又はＩｄから選択される。
【００３４】
併用療法は、ＭＥＫ阻害に観察されるＲＡＳ／ＲＡＦ／ＭＥＫ／ＥＲＫ経路の活性化に起因する先天性又は後天性の耐性を防ぐ又は遅延させるため、及びＲＡＳ経路活性化により媒介される先天性又は後天性の耐性を防ぐ又は遅延させるためにも機能しうる。
【００３５】
本組合せは、腫瘍、がん、及び腫瘍性組織を含む、過剰増殖性疾患又は障害、並びに前がん状態及び非腫瘍性又は良性の過剰増殖性障害の治療のための化学療法剤と組合せて用いることができる。
【００３６】
特定の実施態様では、一の組合せは、併用療法としての投薬レジメンにおいて、抗過剰増殖性特性を有する、又は過剰増殖性障害を治療するために有用である別の化合物と組合せられる。投薬レジメンの追加の化合物は、好ましくは、互いに悪影響を与えないように組合せを補完する活性を有する。このような化合物は、意図した目的に有効な量で投与される。
【００３７】
一実施態様では、治療的組合せは投薬レジメンにより投与され、ここで、治療的有効量のＭＥＫ阻害剤化合物（例えばＧＤＣ−０９７３又はＧＤＣ−０６２３）、又はその薬学的に許容される塩は、一日一回三週間又は三日毎に（Ｑ３Ｄ）三週間からの範囲で投与され、治療的有効量の式Ｉａ〜Ｉｄの化合物は、一日一回三週間投与される。
【００３８】
併用療法では、同時の又は順次的な投与計画として投与されてもよい。順次的に投与される場合、組合せは、２回以上の投与において投与されてもよい。併用投与には、別個の製剤を使用する共投与、及び任意の順序での連続投与が含まれ、その際、両方の（又は全ての）活性剤がそれらの生物学的活性を同時に発揮する期間があることが好ましい。
【００３９】
本発明の一実施態様では、過剰増殖性障害はがんである。
【００４０】
本発明の別の実施態様では、がんは変異ＫＲＡＳを発現する。
【００４１】
本発明の別の実施態様では、ＭＥＫｉはＧＤＣ−０９７３（ＩＩ）である。
【００４２】
本発明の別の実施態様では、ＭＥＫｉはＧＤＣ−０６２３（ＩＩ）である。
【００４３】
本発明の別の実施態様では、ＭＥＫｉはＧＳＫ−１１２０２１２（トラメチニブ）である。
【００４４】
本発明の別の実施態様では、ＭＥＫｉはＡＺＤ−６２４４（セルメチニブ）である。
【００４５】
本発明の別の実施態様では、ＭＥＫｉはＢＡＹ  ８６−９７６６（ｒｅｆａｍｅｔｉｎｉｂ）である。
【００４６】
本発明の別の実施態様では、ＥＲＫｉは式Ｉａの化合物である。
【００４７】
本発明の別の実施態様では、ＥＲＫｉは式Ｉｂの化合物である。
【００４８】
本発明の別の実施態様では、ＥＲＫｉは式Ｉｃの化合物である。
【００４９】
本発明の別の実施態様では、ＥＲＫｉは式Ｉｄの化合物である。
【００５０】
本発明の別の実施態様では、ＭＥＫｉとＥＲＫｉの組合せによりがんを治療するための方法が提供され、ここで前記がん又は過剰増殖性障害は、腺腫、膀胱がん、脳のがん、乳がん、結腸がん、表皮癌、濾胞腺癌、泌尿生殖器のがん、膠芽細胞腫、ホジキン疾患、頭頸部がん、ヘパトーマ、ケラトアカントーマ、腎臓がん、大細胞癌、白血病、肺腺癌、肺がん、リンパ性障害、メラノーマ及び非メラノーマ皮膚がん、骨髄異形成症候群、神経芽細胞腫、非ホジキンリンパ腫、卵巣がん、乳頭癌、膵臓がん、前立腺がん、直腸がん、肉腫、小細胞癌、精巣がん、奇形癌（ｔｅｔｒａｃａｒｃｉｎｏｍａ）、甲状腺がん、及び未分化癌からなる群より選択される。
【００５１】
本発明の別の実施態様では、ＭＥＫｉとＥＲＫｉの組合せによりがんを治療するための方法が提供され、ここで前記がんは、結腸直腸がん、肺がん、中皮腫、乳がん、膵臓がん、神経膠腫、胃がん、腎がん、卵巣がん、子宮内膜がん、膀胱がん及び頭頸部がんからなる群より選択される。
【００５２】
本発明の別の実施態様では、ＭＥＫｉＩＩとＥＲＫｉ  Ｉａの組合せによりがんを治療するための方法が提供され、ここで前記がん又は過剰増殖性障害は、腺腫、膀胱がん、脳のがん、乳がん、結腸がん、表皮癌、濾胞腺癌、泌尿生殖器のがん、膠芽細胞腫、ホジキン疾患、頭頸部がん、ヘパトーマ、ケラトアカントーマ、腎臓がん、大細胞癌、白血病、肺腺癌、肺がん、リンパ性障害、メラノーマ及び非メラノーマ皮膚がん、骨髄異形成症候群、神経芽細胞腫、非ホジキンリンパ腫、卵巣がん、乳頭癌、膵臓がん、前立腺がん、直腸がん、肉腫、小細胞癌、精巣がん、奇形癌（ｔｅｔｒａｃａｒｃｉｎｏｍａ）、甲状腺がん、及び未分化癌からなる群より選択される。
【００５３】
本発明の別の実施態様では、ＭＥＫｉＩＩとＥＲＫｉ  Ｉａの組合せによりがんを治療するための方法が提供され、ここで前記がんは、結腸直腸がん、肺がん、中皮腫、乳がん、膵臓がん、神経膠腫、胃がん、腎がん、卵巣がん、子宮内膜がん、膀胱がん及び頭頸部がんからなる群より選択される。
【００５４】
本発明の別の実施態様では、ＭＥＫｉＩＩａとＥＲＫｉ  Ｉａの組合せによりがんを治療するための方法が提供され、ここで前記がん又は過剰増殖性障害は、腺腫、膀胱がん、脳のがん、乳がん、結腸がん、表皮癌、濾胞腺癌、泌尿生殖器のがん、膠芽細胞腫、ホジキン疾患、頭頸部がん、ヘパトーマ、ケラトアカントーマ、腎臓がん、大細胞癌、白血病、肺腺癌、肺がん、リンパ性障害、メラノーマ及び非メラノーマ皮膚がん、骨髄異形成症候群、神経芽細胞腫、非ホジキンリンパ腫、卵巣がん、乳頭癌、膵臓がん、前立腺がん、直腸がん、肉腫、小細胞癌、精巣がん、奇形癌（ｔｅｔｒａｃａｒｃｉｎｏｍａ）、甲状腺がん、及び未分化癌からなる群より選択される。
【００５５】
本発明の別の実施態様では、ＭＥＫｉＩＩａとＥＲＫｉ  Ｉａの組合せによりがんを治療するための方法が提供され、ここで前記がんは、結腸直腸がん、肺がん、中皮腫、乳がん、膵臓がん、神経膠腫、胃がん、腎がん、卵巣がん、子宮内膜がん、膀胱がん及び頭頸部がんからなる群より選択される。
【００５６】
別の実施態様では、同時に投与されるＩＩ又はＩＩａとＩａの組合せによりがんを治療するための方法が提供される。
【００５７】
別の実施態様では、順次的に投与されるＩＩ又はＩＩａとＩａの組合せによりがんを治療するための方法が提供される。
【００５８】
本発明の別の実施態様では、がんの治療のための組成物が提供され、この組成物は、ＧＤＣ−０９７３（ＩＩ）又はＧＤＣ−０６２３（ＩＩａ）、又はその薬学的に許容される塩と、Ｉａ、Ｉｂ、Ｉｄ、若しくはＩｄから選択されるＥＲＫ阻害剤又はがんの治療のために薬学的に許容されるものを含有する。
【００５９】
本発明の別の実施態様では、がんの治療のための組成物が提供され、この組成物は、ＧＤＣ−０９７３（ＩＩ）又はその薬学的に許容される塩と、Ｉａ、Ｉｂ、Ｉｄ、若しくはＩｄから選択されるＥＲＫ阻害剤又はがんの治療のために薬学的に許容されるものを含有する。
【００６０】
本発明の別の実施態様では、がんの治療のための組成物が提供され、この組成物は、ＧＤＣ−０９７３（ＩＩ）又はＧＤＣ−０６２３（ＩＩａ）、又はその薬学的に許容される塩と、Ｉａ、Ｉｂ、Ｉｄ、若しくはＩｄから選択されるＥＲＫ阻害剤、又はがんの治療のために薬学的に許容されるものを含有し、ここで前記がんは、結腸直腸がん、肺がん、中皮腫、乳がん、膵臓がん、神経膠腫、胃がん、腎がん、卵巣がん、子宮内膜がん、膀胱がん及び頭頸部がんからなる群より選択される。
【００６１】
本発明の別の実施態様では、がんの治療のための組成物が提供され、この組成物は、ＧＤＣ−０９７３（ＩＩ）、又はその薬学的に許容される塩と、Ｉａ、Ｉｂ、Ｉｄ、若しくはＩｄから選択されるＥＲＫ阻害剤、又はがんの治療のために薬学的に許容されるものを含有し、ここで前記がんは、結腸直腸がん、肺がん、中皮腫、乳がん、膵臓がん、神経膠腫、胃がん、腎がん、卵巣がん、子宮内膜がん、膀胱がん及び頭頸部がんからなる群より選択される。
【００６２】
本発明の別の実施態様では、がん又は過剰増殖性疾患の治療のための医薬の製造のための、式ＩＩのＭＥＫｉ及び式ＩａのＥＲＫ阻害剤の使用が提供される。
【００６３】
本発明の別の実施態様では、がんの治療のための医薬の製造のための、式ＩＩのＭＥＫｉ及び式ＩａのＥＲＫ阻害剤の使用が提供される。
【００６４】
本発明の別の実施態様では、ＧＤＣ−０９７３若しくはＧＤＣ−０６２３、又はその薬学的に許容される塩、ＧＤＣ−０９９４、又はその薬学的に許容される塩、容器、及びがんを治療するための、ＧＤＣ−０９７３若しくはＧＤＣ−０６２３、又はその薬学的に許容される塩と、ＧＤＣ−０９９４の投与を示す添付文書若しくはラベルを含むキットが提供される。
【００６５】
本発明の別の実施態様では、がんの治療における、別々の、同時の、又は順次的な使用のための組合せ調製物としての、ＧＤＣ−０９７３若しくはＧＤＣ−０６２３、又はその薬学的に許容される塩と、ＧＤＣ−０９９４、又は薬学的に許容される塩を含む製品が提供される。
【００６６】
本発明の別の実施態様では、がんの治療的処置のための、ＧＤＣ−０９７３若しくはＧＤＣ−０６２３、又はその薬学的に許容される塩と、ＥＲＫ阻害剤の組合せが提供される。
【００６７】
本発明の別の実施態様では、がん又は過剰増殖性疾患の治療方法が提供され、ここでＧＤＣ−０９７３、若しくはその薬学的に許容される塩、又はＧＤＣ−０６２３、若しくはその薬学的に許容される塩と、ＧＤＣ−０９９４は、それぞれ単位投薬形態当たり約１ｍｇから約１０００ｍｇの量で投与される。
【００６８】
本発明の別の実施態様では、がん又は過剰増殖性疾患の治療方法が提供され、ここでＧＤＣ−０９７３、又はその薬学的に許容される塩は、２８日サイクルの１〜２１日目に、６０ｍｇの用量で投与され、ＧＤＣ−０９９４、又はその薬学的に許容される塩は、単位投薬形態当たり約１ｍｇから約１０００ｍｇの量で投与される。
【００６９】
本発明の別の実施態様では、ＧＤＣ−０９７３とＧＤＣ−０９９４の組合せによりがん又は過剰増殖性疾患を治療するための方法が提供され、ここでＧＤＣ−０９７３は、四週サイクルの三週にわたって毎日一又は二回、３ｍｇ／ｋｇから７．５ｍｇ／ｋｇの用量で投与され、ＧＤＣ−０９９４は、四週サイクルの三週にわたって毎日一又は二回、２５ｍｇ／ｋｇから７５ｍｇ／ｋｇの用量で投与される。
【００７０】
薬学的組成物
本発明の薬学的組成物又は製剤は、本明細書に記載の組合せを含む。
【００７１】
本化合物又はその薬学的に許容される塩は、異なる互変異性形態でも存在することができ、すべてのそのような形態は本発明の範囲内に包含される。用語「互変異性体」又は「互変異性形態」とは、低いエネルギー障壁を介して相互変換可能な、異なるエネルギーの構造異性体を指す。例えば、プロトン互変異性体（プロトン移動互変異性体としても知られる）は、プロトンの移動を介する相互変換、例えば、ケト−エノール異性及びイミン−エナミン異性を含む。原子価互変異性体は、結合電子のうちのいくつかの再編成による相互変換を含む。
【００７２】
薬学的組成物は、一より多い（例えば二の）薬学的に活性な薬剤と薬学的に不活性な賦形剤、希釈剤、担体、又は流動促進剤から構成される個別の投薬単位及びバルク組成物の両方を包含する。バルク組成物と各個別投薬単位は、固定量の前記薬学的に活性な薬剤を含有することができる。バルク組成物は、個別投薬単位に未だ成形されていない物質である。一の例示的投薬ユニットは、錠剤、ピル、カプセルなどといった経口投薬単位である。同様に、本発明の薬学的組成物を投与することにより患者を治療する本明細書に記載の方法は、バルク組成物及び個別投薬単位の投与を包含することを意図している。
【００７３】
本化合物の薬学的に許容される塩は、ヒト（例えばヒトのオス又はメス）を含む哺乳動物における過剰増殖性障害（例えば、トリプルネガティブ乳癌といったがん）の治療的処置のための治療的組合せにおける使用のための標準の薬学的手順に従って製剤化される。本発明は、一又は複数の薬学的に許容される担体、流動促進剤、希釈剤、又は賦形剤と併せて本明細書に記載の組合せを含む薬学的組成物を提供する。
【００７４】
好適な担体、希釈剤及び賦形剤は、当業者に周知であり、例えば、炭水化物、ワックス、水溶性及び／又は膨潤性ポリマー、親水性又は疎水性材料、ゼラチン、油、溶媒、水などの材料を含む。使用される特定の担体、希釈剤又は賦形剤は、本発明の化合物が適用される手段および目的に依存するであろう。溶媒は、哺乳動物に投与することが安全であると当業者によって認定されている（ＧＲＡＳ；安全食品認定）溶媒に基づいて通常選択される。一般に、安全な溶媒は非毒性の水性溶媒、例えば水、及び水に可溶性又は混和性である他の非毒性溶媒である。適切な水性溶媒は、水、エタノール、プロピレングリコール、ポリエチレングリコール（例えばＰＥＧ４００、ＰＥＧ３００）など及びそれらの混合物を含む。製剤は、薬剤（すなわち、本発明の化合物又はその薬学的組成物）を見栄え良く提供するため又は薬学的製品（すなわち、医薬）の製造を補助するための一又は複数のバッファー、安定剤、界面活性剤、湿潤剤、平滑剤、乳化剤、懸濁化剤、保存料、酸化防止剤、不透明化剤、流動促進剤、加工助剤、着色料、甘味料、香料、香味料及びその他既知の添加剤も含み得る。
【００７５】
投与のための薬学的組成物（又は製剤）は、薬物を投与するために使用される方法に応じた様々な方法で包装することができる。一般に、頒布用製品は、その中に適当な形態の薬学的製剤が配置された容器を含む。適切な容器は、当業者には周知であり、瓶（プラスチック及びガラス）、小袋、アンプル、ビニール袋、金属シリンダーなどの材料を含む。容器は、パッケージの内容物への不注意な接触を防ぐために、不正開封防止の構成部品（ａｓｓｅｍｂｌａｇｅ）を含んでもよい。加えて、この容器は、その上に容器の内容物を記したラベルを有する。このラベルは適当な注意書きを含んでもよい。
【００７６】
本薬学的製剤は、医学行動規範に則った様式、例えば、量、濃度、予定、過程、ビヒクル及び投与経路で投薬及び投与される。この観点において考慮すべき要因は、治療される特定の障害、治療される特定の哺乳動物、個々の患者の臨床状態、障害の原因、薬剤送達部位、投与方法、投与日程及び医療従事者に既知の他の要因を含む。投与される「治療的有効量」は、このような考慮事項によって決まり、凝固因子媒介性疾患を予防、改善又は治療するために必要な最小量である。このような量は、好ましくは、宿主に毒性である量又は患者を有意に出血し易くする量を下回る。
【００７７】
経口投与に適した組合せの製剤は、ピル、硬性若しくは軟性（例えば、ゼラチン）のカプセル、カシェ剤、トローチ、ロゼンジ、水性若しくは油性の懸濁液、分散可能な粉末又は顆粒、乳剤、シロップ剤又はエリキシル剤といった個別の単位として調製することができ、これらの各々は所定量のＧＤＣ−０９７３及びＧＤＣ−０６２３、又はその薬学的に許容される塩と、Ｉａ〜ＩｄのＥＲＫ阻害剤を含有する。したがって、ＧＤＣ−０９７３又はＧＤＣ−０６２３及びＩａ〜Ｉｄ、又はその薬学的に許容される塩の量は、組合せ製剤としてピル、カプセル、溶液、又は懸濁液に製剤化される。代替的に、組合せは、交互に投与するためのピル、カプセル、溶液又は懸濁液に別々に製剤化されてもよい。
【００７８】
製剤は、薬学的組成物の製造のための当技術分野で既知の任意の方法に従って調製することができ、このような組成物は、口触りのよい調製物を提供するために、甘味剤、香味剤、着色剤及び保存剤を含む一又は複数の薬剤を含有することができる。圧縮錠剤は、結合剤、潤滑剤、不活性希釈剤、防腐剤、表面活性剤又は分散剤と任意選択的に混合された易流動性形態、例えば、好適な機械において粉末又は顆粒中に活性成分を圧縮することにより調製される。成形錠剤は、不活性液体希釈剤で湿らせた粉末状の活性成分の混合物を適切な機械で成形することにより製造することができる。これらの錠剤は、任意選択的にコーディングされても刻み目を入れられてもよく、任意選択的に錠剤からの活性成分の徐放又は制御放出をもたらすように製剤化されてもよい。薬学的製剤の錠剤賦形剤には：錠剤を形成する粉末薬のバルク体積を増加させるための充填剤（又は希釈剤）；摂取されて薬物の急速な分解及び吸収を促進するとき、錠剤を、小さな断片、理想的には個々の薬物粒子に分解することを助ける崩壊剤；顆粒と錠剤が必要な機械的強度を有するように形成されて、圧密化後に錠剤を一体に保持することにより、包装、輸送及び常套的取扱い中にその成分粉末に分解することを確実に防止できるようにするための結合剤；製造の間に錠剤を軽視する粉末の流動性を改善するための流動促進剤；錠剤成形用粉末が、製造の間に錠剤をプレス加工するために使用される機器に確実に付着しないようにするための潤滑剤が含まれる。これら錠剤賦形剤は、プレス機を通る粉末混合物の流れを改善して、完成した錠剤が機器から送出される際の摩擦及び損傷を最小化し；流動促進剤の機能と同様の機能を有する抗被着材は、錠剤を形成する粉末と、製造中に錠剤の形状を穿孔するために使用される機械との接着を低減し；香味剤は、味を更に良くするか、又は不快な味を隠すために錠剤に取り込まれ；着色剤は識別及び患者のコンプライアンスを補助する。
【００７９】
錠剤の製造に適し、薬学的に許容される非毒性の賦形剤を含む混合剤中に活性成分を含有する錠剤は許容可能である。これらの賦形剤は、例えば、炭酸カルシウム又は炭酸ナトリウム、ラクトース、リン酸カルシウム又はリン酸ナトリウムなどの不活性希釈剤；トウモロコシでんぷん又はアルギン酸などの造粒剤及び崩壊剤；でんぷん、ゼラチン又はアカシアなどの結合剤；及びステアリン酸マグネシウム、ステアリン酸又はタルクなどの潤滑剤であってもよい。錠剤はコーティングされていなくてもよいが、胃腸管内の崩壊及び吸着を遅延させ、それによってより長期間にわたる持続的作用を提供するために、マイクロカプセル化を含む既知の技術によってコーティングされていてもよい。例えば、モノステアリン酸グリセリル又はジステアリン酸グリセリルなどの時間遅延材料が、単独で又はワックスとともに用いられてもよい。
【００８０】
本発明の乳剤の油相は、既知の方式で既知の成分から構成することができ、これには、少なくとも一の乳化剤と、脂肪若しくは油、又は脂肪と油の両方との混合物を含む。好ましくは、親水性乳化剤は、安定剤として働く親油性乳化剤と共に含まれる。まとめると、乳化剤は、安定剤とともに又はそれを用いずに、乳化ワックスを形成し、ワックスは、油及び脂肪とともにクリーム製剤の油分散相を形成する、乳化軟膏基剤を含む。本製剤への使用に適した乳化剤及び乳化安定剤としては、Ｔｗｅｅｎ（登録商標）６０、Ｓｐａｎ（登録商標）８０、セトステアリルアルコール、ベンジルアルコール、ミリスチルアルコール、モノステアリン酸グリセリル及びラウリル硫酸ナトリウムが挙げられる。
【００８１】
薬学的製剤の水性懸濁液は、水性懸濁液の製造に適した賦形剤と混合した活性材料を含有する。このような賦形剤としては、カルボキシメチルセルロースナトリウム、クロスカルメロース、ポビドン、メチルセルロース、ヒドロキシプロピルメチルセルロース、アルギン酸ナトリウム、ポリビニルピロリドン、トラガカントゴム及びアカシアゴムなどの懸濁化剤、並びに天然リン脂質（例えば、レシチン）、アルキレンオキシドと脂肪酸との縮合生成物（例えば、ステアリン酸ポリオキシエチレン）、エチレンオキシドと長鎖脂肪族アルコールとの縮合生成物（例えば、ヘプタデカエチレンオキシセタノール）、エチレンオキシドと、脂肪酸及び無水ヘキシトールから誘導される部分エステルとの縮合生成物（例えば、ポリオキシエチレンソルビタンモノオレエート）などの分散剤又は湿潤剤が挙げられる。水性懸濁液は、エチル又はｎ−プロピル  ｐ−ヒドロキシ安息香酸エステルといった一又は複数の防腐剤、一又は複数の着色剤、一又は複数の香味剤及びスクロース又はサッカリンといった一又は複数の甘味剤も含有できる。
【００８２】
単位用量剤形を作るために担体材料と組合わされうる一又は複数の活性成分の量は、治療される宿主及び特定の投与モードに応じて変動するであろう。例えば、ヒトに経口投与されることを意図する持続放出型製剤は、全体の組成の約５から９５％（重量：重量）までで変動しうる適切且つ便利な量の担体材料が配合された、約１から１０００ｍｇの活性物質を含むことができる。薬学的組成物は、容易に測定可能な投与量を提供するように調製することができる。例えば、静脈内注射用の水溶液は、約３０ｍＬ／時の速度で適切な量の注入を行うことができるように、溶液１ミリリットル当たり約３から５００μｇの活性成分を含有することができる。
【００８３】
製造品
本発明の別の実施態様において、上記の疾患及び障害の治療に有用な組合せを含有する製品又は「キット」が提供される。一実施態様において、キットは、容器及び本発明に記載の組合せを備える。
【００８４】
キットは、容器上に又は容器に付属するラベル又は添付文書を更に含みうる。「添付文書」という用語は、このような治療製品の使用に関する、指示、使用法、用量、投与、禁忌及び／又は注意事項についての情報を含む、治療製品の商品包装に通例含まれる説明書を指すのに使用される。適切な容器は、例えばボトル、バイアル、シリンジ、ブリスターパッグなどを含む。容器はガラス又はプラスチックなどの様々な材料から形成されうる。容器は、病態を治療するのに有効な組合せ又はその製剤を保持することができ、無菌アクセスポートを有しうる（例えば、容器は、皮下注射針によって穿孔可能なストッパーを有する静脈注射用溶液のバッグ又はバイアルとすることができる）。ラベル又は添付文書には、組成物が、がんなどの選択した病態の治療のために使用されることが示される。一実施態様において、ラベル又は添付文書に、組合せを含む組成物が、異常な細胞増殖から生じる障害を治療するために使用されうることが示される。ラベル又は添付文書には、この組成物が、他の障害を治療するのに使用できることが示されてもよい。代替的に、又は追加的に、製造品は、薬学的に許容可能なバッファー、例えば注射用静菌水（ＢＷＦＩ）、リン酸緩衝生理食塩水、リンガー溶液及びデキストロース溶液を含む第二の容器を更に含んでもよい。製造品は、他の緩衝液、希釈剤、フィルター、針及びシリンジを含む、商業的及び使用者の観点から望まれる他の材料を更に含んでもよい。
【００８５】
キットは、組合せ、及び、存在する場合、第２の薬学的製剤の投与のための説明書を更に含むことができる。例えば、キットが、ＧＤＣ−０９７３若しくはＧＤＣ−０６２３、又はその薬学的に許容可能な塩を含む第１の組成物と、ＥＲＫ阻害剤、又はその薬学的に許容可能な塩を含む第２の薬学的組成物とを含む場合、キットは、第１及び第２の薬学的組成物を、それを必要とする患者に、同時投与、順次投与又は個別投与するための説明書を更に含むことができる。
【００８６】
別の実施態様において、キットは、錠剤又はカプセル剤などの、組合せの固体経口形態の送達に適している。このようなキットは、複数の単位用量を含むことが好ましい。このようなキットは、意図された使用のための投薬量を記載したカードを含むことができる。このようなキットの例は「ブリスターパック」である。ブリスターパックは、包装産業において周知であり、薬学的単位投薬形態を包装するために広く使用されている。必要であれば、記憶の助けとなるものを、例えば数字、文字、若しくは他のマーキングの形態で、又は投薬量を投与できる治療スケジュールの日にちを示すカレンダー挿入物と共に提供することができる。
【００８７】
一実施態様によれば、キットは、（ａ）ＧＤＣ−０９７３若しくはＧＤＣ−０６２３を含む第１の容器，（ｂ）ＥＲＫ阻害剤又はその薬学的に許容される塩を中に収容する第２の容器；及び（ｃ）第３の薬学的製剤を中に収容する第３の容器を含み、第３の薬学的製剤は、抗過剰増殖活性を有する別の化合物を含む。代替的に、又は追加的に、キットは、薬学的に許容可能なバッファー、例えば注射用静菌水（ＢＷＦＩ）、リン酸緩衝生理食塩水、リンガー溶液及びデキストロース溶液を含む第第三の容器を更に含んでもよい。製造品は、他のバッファー、希釈剤、フィルター、針及びシリンジを含む、商業的及び使用者の観点から望ましい他の材料を更に含むことができる。い他の材料を更に含んでもよい。
【００８８】
キットがＧＤＣ−０９７３若しくはＧＤＣ−０６２３、又はその薬学的に許容される塩と、ＥＲＫ阻害剤、又はその薬学的に許容される塩、又はその薬学的に許容される塩との組成物を含む場合、キットは、分割された瓶又は分割された箔パケットのような別個の組成物を含有する容器を含むことができるが、別個の組成物は単一の、分割されていない容器に収容されてもよい。一般的に、キットは、別個の成分を投与するための説明書を含む。キットの形態は、別個の成分を異なる投与形態（例えば経口と口）で投与することが好ましいとき、異なる投与間隔で投与するとき、又は処方医師により組合せる個々の成分の滴定が望まれるとき、キットの形態は特に有利である。
【００８９】
本明細書で使用される用語「薬学的に許容される塩」は、本発明の化合物の薬学的に許容される有機塩又は無機塩を指す。例示的な塩には、限定されないが、硫酸塩、クエン酸塩、酢酸塩、シュウ酸塩、塩化物、臭化物、ヨウ化物、硝酸塩、重硫酸塩、リン酸塩、酸ホスフェート、イソニコチン酸塩、乳酸塩、サリチル酸塩、クエン酸、酒石酸塩、オレイン酸塩、タンニン酸塩、パントテン酸塩、酸性酒石酸塩、アスコルビン酸塩、コハク酸塩、マレイン酸塩、ゲンチアニン酸塩、フマル酸塩、グルコン酸塩、グルクロン酸塩、サッカラート、ギ酸塩、ベンゾエート、グルタミン酸塩、スルホン酸塩「メシラート」、エタンスルホン酸塩、ベンゼンスルホナート、ｐ−トルエンスルホナート、及びパモ酸塩（即ち、１，１’−メチレン−ビス−（２−ヒドロキシ−３−ナフトエ酸））塩が含まれる。薬学的に許容される塩は、酢酸イオン、コハク酸イオン又は他の対イオンなどの別の分子の包含を伴ってもよい。対イオンは、親化合物の電荷を安定化する任意の有機又は無機部分でありうる。更に、薬学的に許容される塩は、その構造内に複数の荷電原子を有することができる。複数の荷電原子が薬学的に許容される塩の一部である場合、複数の対イオンを有することができる。したがって、薬学的に許容される塩は、一又は複数の電荷を帯びた原子及び／又は一又は複数の対イオンを有することができる。
【実施例】
【００９０】
参照実施例１
（Ｓ）−（３，４−ジフルオロ−２−（（２−フルオロ−４−ヨードフェニル）アミノ）フェニル）（３−ヒドロキシ−３−（ピペリジン−２−イル）アゼチジン−１−イル）メタノン（ＧＤＣ−０９７３）
2019031517.tif 000006
表題化合物は、国際公開第２００７０４４５１５号の実施例２２においてK. D. Rice, et al., ACS Med. Chem. Lett. 2012 3:416-421によって記載されているように、又は代替的に、K. D. Rice et al., Novel Carboxamide-Based Allosteric MEK inhibitors: Discovery and Optimization Efforts toward XL518 (GDC-0973), Med. Chem. Lett. 2012 3:416によって記載されているように、調製することができる。
【００９１】
参照実施例２
５−［（２−フルオロ−４−ヨードフェニル）アミノ］−Ｎ−（２−ヒドロキシエトキシ）−イミダゾ［１，５−ａ］ピリジン−６−カルボキサミド
2019031517.tif 000007
標題化合物は、国際公開第２００９０８５９８３の実施例５に記載されているように調製することができる。
【００９２】
参照実施例３
（Ｓ）−１−（１−（４−クロロ−３−フルオロフェニル）−２−ヒドロキシエチル）−４−（２−（（１−メチル−１Ｈ−ピラゾール−４−イル）アミノ）ピリミジン−４−イル）ピリジン−２（１Ｈ）−オン
2019031517.tif 000008
【００９３】
４−（２−（メチルチオ）ピリミジン−４−イル）ピリジン−２（１Ｈ）−オン
工程１：ジオキサン／Ｈ２Ｏ（１００ｍＬ；１：１）中、４−ブロモ−２−（メチルチオ）ピリミジン（７．００ｇ、３４．１ｍｍｏｌ）、２−フルオロピリジン−４−イルボロン酸（５．０５ｇ、３５．８ｍｍｏｌ）、Ｎａ２ＣＯ３（１０．９ｇ、１０２ｍｍｏｌ）及びＰｄ（ｄｐｐｆ）Ｃｌ２  ＣＨ２Ｃｌ２（１．４０ｇ、１．７１ｍｍｏｌ）の懸濁液を、Ａｒバルーン下で２時間８５℃に加熱した。反応混合物を、室温に冷却し、濃縮した。残留物を、酢酸エチル（２００ｍＬ）及び水（１００ｍＬ）で希釈した。層を分離し、水層を酢酸エチル（１Ｘ）で抽出した。有機物を、乾燥させ、濾過し、濃縮した。粗生成物を、カラムクロマトグラフィーにより精製し、ヘキサン／酢酸エチル（３：１）で溶出して、固体として４−（２−フルオロピリジン−４−イル）−２−（メチルチオ）ピリミジン（６．８３ｇ、９０％）を得た。１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，（ＣＤ３）２ＳＯ）δ  ８．８５（ｄ、Ｊ＝５．２Ｈｚ、１Ｈ）、８．４６（ｄ、Ｊ＝５．２Ｈｚ、１Ｈ）、８．１１（ｍ、１Ｈ）、７．９６（ｄ、Ｊ＝５．２Ｈｚ、１Ｈ）、７．９２（ｓ、１Ｈ）、２．６２（ｓ、３Ｈ）；ｍ／ｚ（ＡＰＣＩ−ｐｏｓ）Ｍ＋１＝２２２．１。
【００９４】
工程２：２ＮのＨＣｌ（１００ｍＬ）中、４−（２−フルオロピリジン−４−イル）−２−（メチルチオ）ピリミジン（６．８３ｇ、３０．９ｍｍｏｌ）の懸濁液を、２時間加熱還流した。反応混合物を、室温に冷却し、氷浴した。ｐＨを、２ＮのＮａＯＨ（約１００ｍＬ）を用いて約７に調整した。その結果得られた固体を、濾過により収集し、水で洗浄し、乾燥させて、固体として４−（２−（メチルチオ）ピリミジン−４−イル）ピリジン−２（１Ｈ）−オン（５．０７ｇ）を得た。この物質を、Ｓｏｘｈｌｅｔ装置のシンブル内に配置し、酢酸エチル（５００ｍＬ）を充填した１Ｌのフラスコに付着させた。物質を、継続的に３日間抽出した。その結果酢酸エチル層から得られた白色沈殿物を、濾過により収集した（３．３グラム、収率４９％）。１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，（ＣＤ３）２ＳＯ）δ  １１．８５（ｂｒ、ｓ、１Ｈ）、８．７５（ｄ、Ｊ＝５．０Ｈｚ、１Ｈ）、７．７９（ｄ、Ｊ＝５．０Ｈｚ、１Ｈ）、７．５４（ｄ、Ｊ＝７．０Ｈｚ、１Ｈ）、７．１３（ｓ、１Ｈ）、６．８６（ｄ、Ｊ＝７．０Ｈｚ、１Ｈ）、２．５８（ｓ、３Ｈ）；ｍ／ｚ（ＡＰＣＩ−ｐｏｓ）Ｍ＋１＝２２０．０。
【００９５】
（Ｒ）−２−（ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリルオキシ）−１−（４−クロロ−３−フルオロフェニル）エチルメタンスルホネート
工程１：水素化ナトリウム（８．５４９ｇ、２１３．７ｍｍｏｌ、鉱油中６０％の懸濁液）を、冷却された（０oＣ）ＴＨＦ（４００ｍＬ）中４−クロロ−３−フルオロベンズアルデヒド（２６．０７ｇ、１６４．４ｍｍｏｌ）及びメチルトリフェニルホスホニウム  ブロミド（７０．４８ｇ、１９７．３ｍｍｏｌ）に少しずつ加えた。反応混合物を、一晩室温に温めた。固体を濾過により除去し、濾過ケーキをエーテルで洗浄した。濾液を濃縮し（約２０oＣの水浴）、残留物を、ヘキサンに懸濁して３０分間撹拌した。固体（主にＰＰｈ３Ｏ）濾過により除去し、濾過ケーキをヘキサンで洗浄した。濾液を濃縮し、粗生成物をカラムクロマトグラフィーにより精製し、ヘキサン／酢酸エチル（２５：１）を用いて溶出し、オイルとして１−クロロ−２−フルオロ−４−ビニルベンゼン（１２．１ｇ、４７％）を得た。１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ、ＣＤＣｌ３）δ  ７．３３（ｍ、１Ｈ）、７．１８（ｍ、１Ｈ）、７．１０（ｍ、１Ｈ）、６．６３（ｍ、１Ｈ）、５．７４（ｄ、Ｊ＝１７．４Ｈｚ、１Ｈ）、５．３２（ｄ、Ｊ＝１０．８Ｈｚ、１Ｈ）。
【００９６】
工程２：１−クロロ−２−フルオロ−４−ビニルベンゼン（１２．１ｇ、７７．３ｍｍｏｌ）を、ｔ−ＢｕＯＨ／Ｈ２Ｏ（６００ｍＬ；１：１）中、ＡＤ−ｍｉｘ−β（１０８ｇ、１３９ｍｍｏｌ）の、冷却した（０℃）溶液に加え、混合物を一晩室温に温めた。翌日、反応物を氷浴させ、固体のＮａ２ＳＯ３（１１４ｇ）でクエンチした。混合物を１時間撹拌し、次いで酢酸エチル（３×５００ｍＬ）で抽出した。組合せた有機物を、乾燥させ、濾過し、濃縮して、オイルとして（Ｒ）−１−（４−クロロ−３−フルオロフェニル）エタン−１，２−ジオールを得た。粗生成物は、精製せずに次の工程で使用した。
【００９７】
工程３：イミダゾール（１３．１ｇ、１９３ｍｍｏｌ）を、ＤＣＭ（１００ｍＬ）中、（Ｒ）−１−（４−クロロ−３−フルオロフェニル）エタン−１，２−ジオール（１４．７ｇ、７７．１ｍｍｏｌ）の、冷却した（０oＣ）溶液に加え、続いてＴＢＳＣｌ（１２．８ｇ、８４．８ｍｍｏｌ）を加えた。反応混合物を、０oＣで１時間撹拌し、次いで水（５０ｍＬ）でクエンチした。層を分離し、有機物を、乾燥させ、濾過し、濃縮した。粗生成物を、カラムクロマトグラフィーにより精製し、ヘキサン／酢酸エチル（１００：１）を用いて溶出し、（Ｒ）−２−（ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリルオキシ）−１−（４−クロロ−３−フルオロフェニル）エタノール（１１．０ｇ、二段階で４７％）を得た。１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ、ＣＤＣｌ３）δ  ７．３６（ｍ、１Ｈ）、７．２０（ｍ、１Ｈ）、７．０８（ｍ、１Ｈ）、４．７１（ｍ、１Ｈ）、３．７５（ｍ、１Ｈ）、３．４９（ｍ、１Ｈ）、２．９６（ｄ、Ｊ＝２．６Ｈｚ、１Ｈ）、０．９０（ｓ、９Ｈ）、０．０７（ｓ、３Ｈ）、０．０６（ｓ、３Ｈ）。
【００９８】
工程４：トリエチルアミン（２．０９ｍＬ、１５．０ｍｍｏｌ）を、ＤＣＭ（１００ｍＬ）中、（Ｒ）−２−（ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリルオキシ）−１−（４−クロロ−３−フルオロフェニル）エタノール（３．０５ｇ、１０．０ｍｍｏｌ）の、冷却した（０oＣ）溶液に加え、続いてメタンスルホニルクロリド（０．９２９ｍＬ、１２．０ｍｍｏｌ）を加えた。反応混合物を、０oＣで３０分間撹拌し、次いで水（５０ｍＬ）でクエンチした。層を分離し、有機層を、飽和したＮａＨＣＯ３で洗浄し、乾燥させ、濾過し、濃縮して粗生成物を得た。粗生成物を、カラムクロマトグラフィーにより精製し、ヘキサン／酢酸エチル（２５：１）を用いて溶出し、オイルとして（Ｒ）−２−（ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリルオキシ）−１−（４−クロロ−３−フルオロフェニル）エチル  メタンスルホネート（３．８０ｇ、９９％）を得た。１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ、ＣＤＣｌ３）δ  ７．４２（ｍ、１Ｈ）、７．２０（ｍ、１Ｈ）、７．１２（ｍ、１Ｈ）、５．５０（ｍ、１Ｈ）、３．９１（ｍ、１Ｈ）、３．８０（ｍ、１Ｈ）、２．９８（ｓ、３Ｈ）、０．８８（ｓ、９Ｈ）、０．０５（ｓ、３Ｈ）、０．０４（ｓ、３Ｈ）。
【００９９】
（Ｓ）−１−（２−（ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリルオキシ）−１−（４−クロロ−３−フルオロフェニル）エチル）−４−（２−（メチルスルホニル）ピリミジン−４−イル）ピリジン−２（１Ｈ）−オン
工程１：ＴＨＦ中の溶液としての１．０ＭのＫＨＭＤＳ（５．０９ｍＬ、５．０９ｍｍｏｌ）を、ＴＨＦ（２０ｍＬ）中、４−（２−（メチルチオ）ピリミジン−４−イル）ピリジン−２（１Ｈ）−オン（０．９３ｇ、４．２４ｍｍｏｌ）の、冷却した（０oＣ）懸濁液に加えた。反応混合物を０oＣで１０分間撹拌した後、（Ｒ）−２−（ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリルオキシ）−１−（４−クロロ−３−フルオロフェニル）エチルメタンスルホネート（２．４４ｇ、６．３６ｍｍｏｌ）を、ＴＨＦ（５ｍＬ）中の溶液として加えた。反応物を、３０時間にわたり還流加熱し、次いで室温に冷却し、濃縮した。残留物を、酢酸エチル（２００ｍＬ）に取り、水で洗浄した。有機物を、乾燥させ、濾過し、濃縮した。粗生成物を、カラムクロマトグラフィーにより精製し、ヘキサン／酢酸エチル（４：１）を用いて溶出し、固体として（Ｓ）−１−（２−（ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリルオキシ）−１−（４−クロロ−３−フルオロフェニル）エチル）−４−（２−（メチルチオ）ピリミジン−４−イル）ピリジン−２（１Ｈ）−オン（１．３５ｇ、６３％）を得た。１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ、ＣＤＣｌ３）δ  ８．６６（ｄ、Ｊ＝５．０Ｈｚ、１Ｈ）、７．４３（ｍ、２Ｈ）、７．３４（ｄ、Ｊ＝５．０Ｈｚ、１Ｈ）、７．３２−７．２８（ｍ、２Ｈ）、７．１６（ｍ、１Ｈ）、６．８５（ｍ、１Ｈ）、６．２４（ｍ、１Ｈ）、４．３５（ｍ、１Ｈ）、４．２３（ｍ、１Ｈ）、２．６５（ｓ、３Ｈ）、０．８８（ｓ、９Ｈ）、０．０３（ｓ、３Ｈ）、−０．０３（ｓ、３Ｈ）；ｍ／ｚ（ＡＰＣＩ−ｐｏｓ）Ｍ＋１＝５０６．１、５０８．１。
【０１００】
工程２：ｍＣＰＢＡ（７．１ｇ、２９ｍｍｏｌ）を、ＤＣＭ（１００ｍＬ）中、（Ｓ）−１−（２−（ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリルオキシ）−１−（４−クロロ−３−フルオロフェニル）エチル）−４−（２−（メチルチオ）ピリミジン−４−イル）ピリジン−２（１Ｈ）−オン（５．８ｇ、１１ｍｍｏｌ）の、冷却した（０oＣ）溶液に加え、混合物を２時間撹拌した。反応混合物を、飽和したＮａ２Ｓ２Ｏ３（１Ｘ）、ＮａＨＣＯ３（１Ｘ）で洗浄し、乾燥させ、濾過し、エバポレートした。粗生成物を、カラムクロマトグラフィーにより精製し、ヘキサン／酢酸エチル（１：１）を用いて溶出し、固体として（Ｓ）−１−（２−（ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリルオキシ）−１−（４−クロロ−３−フルオロフェニル）エチル）−４−（２−（メチルスルホニル）ピリミジン−４−イル）ピリジン−２（１Ｈ）−オン（５．５ｇ、８９％）を得た。１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ、ＣＤＣｌ３）δ  ９．０６（ｄ、Ｊ＝５．２Ｈｚ、１Ｈ）、７．９１（ｄ、Ｊ＝５．４Ｈｚ、１Ｈ）、７．５５（ｄ、Ｊ＝７．４Ｈｚ、１Ｈ）、７．４３（ｍ、１Ｈ）、７．３２（ｄ、Ｊ＝２．４Ｈｚ、１Ｈ）、７．２７（ｍ、１Ｈ）、７．１５（ｍ、１Ｈ）、６．９３（ｍ、１Ｈ）、６．２２（ｍ、１Ｈ）、４．３５（ｍ、１Ｈ）、４．２４（ｍ、１Ｈ）、３．４５（ｓ、３Ｈ）、０．８８（ｓ、９Ｈ）、０．０３（ｓ、３Ｈ）、−０．０３（ｓ、３Ｈ）；ｍ／ｚ（ＡＰＣＩ−ｐｏｓ）Ｍ＋１＝５３８．１、５４０．０。
【０１０１】
参照実施例４
４−［３−［［エチル（ジメチル）シリル］メチル］−［１，２，４］トリアゾロ［４，３−ａ］ピリジン−７−イル］−Ｎ−（２−メチルピラゾール−３−イル）ピリミジン−２−アミン
2019031517.tif 000009
【０１０２】
２−（エチルジメチルシリル）酢酸（４）
ＴＨＦ（４０ｍＬ）及びＬＤＡ（８．８ｍｌ、１７．５ｍｍｏｌ）の溶液に対して加え、−７８℃に冷却し、トリメチルシリルアセテート（２．０ｇ、１５．１ｍｍｏｌ）をゆっくりと加えた。混合物を−７８℃で２時間撹拌した。クロロ（エチル）ジメチルシラン（２．１ｇ、１７．５ｍｍｏｌ）を加え、その結果得られた溶液を２時間撹拌した。混合物をブライン（１０ｍｌ）でクエンチし、次いでＨＣｌ（１０ｍｌ、１Ｎ）をゆっくりと加え、その結果得られた溶液をＭＴＢＥ（３×２０ｍＬ）で抽出した。組合せた抽出物を、乾燥させ、濃縮し、残留物を、ＥｔＯＡｃ／ヘキサン（１：１０）を用いて溶出するＳｉＯ２クロマトグラフィーにより精製して、無色のオイルとして１．０ｇ（４５％）の２−（エチルジメチルシリル）酢酸を得た。１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ、ＣＤＣｌ３）＝１．８０（ｓ、１Ｈ）、０．８４（ｔ、Ｊ＝８．０Ｈｚ、３Ｈ）、０．５０（ｑ、Ｊ＝８．０Ｈｚ、２Ｈ）、０．００（ｓ、６Ｈ）。
【０１０３】
（Ｚ）−２−（エチルジメチルシリル）−Ｎ’−（４−（２−（（１−メチル−１Ｈ−ピラゾール−５−イル）アミノ）ピリミジン−４−イル）ピリジン−２（１Ｈ）−イリデン）アセトヒドラジド（７）
ＤＣＭ（１０ｍｌ）中、２−クロロ−１−メチルピリジン−１−イウム（１．３６ｇ、５．３ｍｍｏｌ）に対し、（Ｚ）−４−（２−ヒドラゾノ−１，２−ジヒドロピリジン−４−イル）−Ｎ−（１−メチル−１Ｈ−ピラゾール−５−イル）ピリミジン−２−アミン（１．３ｇ、４．６ｍｍｏｌ）及び２−（エチルジメチルシリル）酢酸（０．６７ｇ、４．６ｍｍｏｌ）を加え、続いてトリブチルアミン（１．９６ｇ、１０．６ｍｍｏｌ）を加えた。混合物を、６０〜８０℃で１時間撹拌した。混合物を、濃縮し、ＥｔＯＡｃ、次いでＤＣＭ／ＭｅＯＨを用いて（１０：１）溶出するＳｉＯ２カラムで精製し、黄色の固体として（Ｚ）−２−（エチルジメチルシリル）−Ｎ’−（４−（２−（（１−メチル−１Ｈ−ピラゾール−５−イル）アミノ）ピリミジン−４−イル）ピリジン−２（１Ｈ）−イリデン）アセトヒドラジド（１．１ｇ、４４％）を得た。
【０１０４】
４−（３−（（エチルジメチルシリル）メチル）−［１，２，４］トリアゾロ［４，３−ａ］ピリジン−７−イル）−Ｎ−（１−メチル−１Ｈ−ピラゾール−５−イル）ピリミジン−２−アミン（ＧＮＴ＿Ｄ３７９＿２８５−１）
フラスコに、（Ｚ）−２−（エチルジメチルシリル）−Ｎ’−（４−（２−（（１−メチル−１Ｈ−ピラゾール−５−イル）アミノ）ピリミジン−４−イル）ピリジン−２（１Ｈ）−イリデン）アセトヒドラジド（７）（５００ｍｇ、１．２２ｍｍｏｌ）及び１，２−ジブロモテトラクロロエタン（７９３ｍｇ、２．４４ｍｍｏｌ）を充填し、次いでＣＨ３ＣＮ（２０ｍｌ）を加え、続いてＰＰｈ３（７９８ｍｇ、３．０ｍｍｏｌ）を少しずつ加えた。混合物を、５〜７℃で１時間撹拌し、次いでＴＥＡ（１．０ｍｌ）を滴下し、得られた混合物を５〜７℃で２時間撹拌した。混合物を濾過し、濾液を濃縮し、ＥｔＯＡｃ、次いでＭｅＯＨ／ＤＣＭを用いて（１：２０）溶出するＳｉＯ２クロマトグラフィーにより精製し、得られた粗生成物（２００ｍｇ）をＥｔＯＡｃ及びＭｅＯＨで（三回）洗浄し、白色の固体として４−（３−（（エチルジメチルシリル）メチル）−［１，２，４］トリアゾロ［４，３−ａ］ピリジン−７−イル）−Ｎ−（１−メチル−１Ｈ−ピラゾール−５−イル）ピリミジン−２−アミン（ＧＮＴ＿Ｄ３７９＿２８５−１）（７３ｍｇ、１５％）を得た。
【０１０５】
１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ、ＤＭＳＯ−δ６）d＝９．５８（ｓ、１Ｈ）、８．６０（ｄ、Ｊ＝５．２Ｈｚ、１Ｈ）、８．５６（ｄ、Ｊ＝７．６Ｈｚ、１Ｈ）、８．５０（ｓ、１Ｈ）、７．６８（ｄ、Ｊ＝５．２Ｈｚ、１Ｈ）、７．５９（ｄ、Ｊ＝７．６Ｈｚ、１Ｈ）、７．４０（ｓ、１Ｈ）、６．３１（ｓ、１Ｈ）、３．７１（ｓ、３Ｈ）、２．６０（ｓ、２Ｈ）、０．８８（ｔ、Ｊ＝８．０Ｈｚ、３Ｈ）、０．５８（ｔ、Ｊ＝８．０Ｈｚ、２Ｈ）、０．０５（ｓ、６Ｈ）；ＭＳ［Ｍ＋Ｈ］＋＝３９２．１９。
【０１０６】
参照実施例４
４−［３−（２−メチルブチル）トリアゾロ［１，５−ａ］ピリジン−６−イル］−Ｎ−（２−メチルピラゾール−３−イル）ピリミジン−２−アミン
2019031517.tif 000010
【０１０７】
１−（５−ブロモピリジン−２−イル）−３−メチルペンタン−１−オン：
トルエン（３０ｍｌ）中、２，５−ジブロモピリジン（３．７２ｇ、１５．８ｍｍｏｌ）の溶液を、−４０℃に冷却し、ｎ−ＢｕＬｉ（６．３２ｍＬ、１５．８ｍｍｏｌ）を滴下した。混合物を、−４０℃で１時間撹拌し、次いでＮ−メトキシ−Ｎ、３−ジメチルペンタンアミド（２．１ｇ、１３．２ｍｍｏｌ、ＣＡＳＲＮ  １０５１４８３−４４−３）及びトルエン（５ｍＬ）の溶液を滴下した。混合物を更に２時間撹拌し、次いで水性ＮＨ４Ｃｌ（水溶液）でクエンチし、ＥｔＯＡｃ（２×５０ｍＬ）で溶出した。有機相を、乾燥させ、濃縮し、ＥｔＯＡｃ／ヘキサン（１：１０）を用いて溶出するＳｉＯ２カラムで精製し、黄色のオイルとして標題化合物（２ｇ、５９％）を得た。
【０１０８】
１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ、ＭｅＯＨ−ｄ４）δ：８．７５（ｄ、Ｊ＝２．０Ｈｚ、１Ｈ）、８．１３（ｄｄ、Ｊ＝８．４、２．４Ｈｚ、１Ｈ）、７．９２（ｄ、Ｊ＝８．４Ｈｚ、１Ｈ）、３．１７−３．１２（ｍ、１Ｈ）、２．９８−２．９２（ｍ、１Ｈ）、２．０２−２．００（ｍ、１Ｈ）、１．４１−１．２１（ｍ、２Ｈ）、０．９３−０．８９（ｍ、６Ｈ）。
【０１０９】
（Ｚ）−５−ブロモ−２−（１−ヒドラゾノ−３−メチルペンチル）ピリジン
１−（５−ブロモピリジン−２−イル）−３−メチルペンタン−１−オン（２．０ｇ、６．２ｍｍｏｌ）を、ＭｅＯＨ（５０ｍＬ）中に溶解し、ＮＨ２ＮＨ２（５ｍｌ）を加えた。混合物を、還流で４時間撹拌した。２ＮのＮａＯＨ（５ｍＬ）及びＨ２Ｏ（２０ｍＬ）を加え、得られた混合物をＥｔＯＡｃ（３×５０ｍＬ）で抽出した。有機相を、乾燥させ（Ｎａ２ＳＯ４）、濾過し、濃縮した。残留物を、それ以上精製することなく次の工程で直接使用した：ＭＳ［Ｍ＋Ｈ］＋＝２６９．７。
【０１１０】
６−ブロモ−３−（２−メチルブチル）−［１，２，３］トリアゾロ［１，５−ａ］ピリジン
ＣＨＣｌ３（３０ｍＬ）中、クルードな（Ｚ）−５−ブロモ−２−（１−ヒドラゾノ−３−メチルペンチル）ピリジン（１．９ｇ、７．１ｍｍｏｌ）の溶液に対し、活性のＭｎＯ２（３ｇ、３５．３ｍｍｏｌ）を加えた。混合物を還流加熱し、１６時間撹拌した。混合物を濾過し、濾液を、濃縮し、ＳｉＯ２クロマトグラフィーにより精製して１．６ｇの標題化合物を得た：ＭＳ［Ｍ＋Ｈ］＋＝２６７．７。
【０１１１】
３−（２−メチルブチル）−６−（４，４，５，５−テトラメチル−１，３，２−ジオキサボロラン−２−イル）−［１，２，３］トリアゾロ［１，５−ａ］ピリジン：
ジオキサン（３０ｍＬ）中、６−ブロモ−３−（２−メチルブチル）−［１，２，３］トリアゾロ［１，５−ａ］ピリジン（０．８ｇ、３ｍｍｏｌ）、４，４，４’，４’，５，５，５’，５’−オクタメチル−２，２’−ビ（１，３，２−ジオキサボロラン）（８３８ｍｇ、３．３ｍｍｏｌ）、ＫＯＡｃ（２９４ｍｇ、９ｍｍｏｌ）及びＰｄ（ｄｐｐｆ）Ｃｌ２（３２９ｍｇ、０．４５ｍｍｏｌ）の溶液を、Ｎ２下で３時間にわたり、撹拌しながら１００℃に加熱した。次いで粗生成物を、それ以上精製することなく次の工程で使用した：ＭＳ［Ｍ＋Ｈ］＋＝２３３．７。
【０１１２】
Ｎ−（１−メチル−１Ｈ−ピラゾール−５−イル）−４−（３−（２−メチルブチル）−［１，２，３］トリアゾロ［１，５−ａ］ピリジン−６−イル）ピリミジン−２−アミン（ＧＮＴ＿Ｄ３７９＿２６０）：
生成物であるクルードなボロン酸エステルに対し、４−クロロ−Ｎ−（１−メチル−１Ｈ−ピラゾール−５−イル）ピリミジン−２−アミン（７５５ｍｇ、３．６ｍｍｏｌ）、Ｐｄ（ｄｐｐｆ）Ｃｌ２（３２９ｍｇ、０．４５ｍｍｏｌ）及びＣｓ２ＣＯ３（２．９ｇ、９ｍｍｏｌ）と水Ｈ２Ｏ（５ｍＬ）を加えた。混合物を１００℃で４時間撹拌した。混合物を濾過した。濾液を、濃縮し、ＳｉＯ２カラム上でシリカゲルカラムにより精製し、続いてＰｒｅ−ＨＰＬＣを行って標題化合物（２５０ｍｇ）を得た。１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ、ＭｅＯＨ−ｄ４）δ：９．５８（ｓ、１Ｈ）、８．５４（ｄ、Ｊ＝５．２Ｈｚ、１Ｈ）、８．００−７．９０（ｍ、２Ｈ）、７．５０−７．４７（ｍ、２Ｈ）、６．３６（ｄ、Ｊ＝２Ｈｚ、１Ｈ）、３．７７（ｓ、３Ｈ）、３．０３−２．９９（ｍ、１Ｈ）、２．８７−２．８１（ｍ、１Ｈ）、１．９１（ｍ、１Ｈ）、１．４６−１．４２（ｍ、１Ｈ）、１．２８−１．２４（ｍ、１Ｈ）、０．９８−０．９１（ｍ、６Ｈ）；ＭＳ［Ｍ＋Ｈ］＋＝３６２．９。
【０１１３】
（Ｓ）光学異性体を、キラルな支持体上でのＳＦＣクロマトグラフィーにより得た。
１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ、ＭｅＯＨｌ−ｄ４）δ：９．５８（ｓ、１Ｈ）、８．５３（ｄ、Ｊ＝５．２Ｈｚ、１Ｈ）、８．００−７．９０（ｍ、２Ｈ）、７．５０−７．４６（ｍ、２Ｈ）、６．３６（ｄ、Ｊ＝２Ｈｚ、１Ｈ）、３．７７（ｓ、３Ｈ）、３．０５−２．９９（ｍ、１Ｈ）、２．８７−２．８１（ｍ、１Ｈ）、１．９１（ｍ、１Ｈ）、１．４６−１．２７（ｍ、１Ｈ）、１．２６−１．２４（ｍ、１Ｈ）、０．９８−０．９１（ｍ、６Ｈ）。
【０１１４】
参照実施例５
４−［３−［２−（４−クロロフェニル）−２−メトキシ−エチル］−［１，２，４］トリアゾロ［４，３−ｂ］ピリダジン−７−イル］−Ｎ−（２−メチルピラゾール−３−イル）ピリミジン−２−アミン
2019031517.tif 000011
【０１１５】
工程１：２−（（１−メチル−１Ｈ−ピラゾール−５−イル）アミノ）ピリミジン−４（３Ｈ）−オン（６）
Ｍｅ３ＣＣＯ２Ｈ（５０ｇ）中、２−（メチルチオ）ピリミジン−４（３Ｈ）−オン（１０ｇ、７０ｍｍｏｌ、ＣＡＳＲＮ  ５７５１−２０−２）及び１−メチル−１Ｈ−ピラゾール−５−アミン（１０ｇ、１０３ｍｍｏｌ）の混合物を、１６０℃に４８時間加熱した。混合物を、４０〜５０℃に冷却し、ＤＣＭ（３０ｍｌ）を加えた。１０分間撹拌した後、溶液を、ｎ−ヘキサン（２００ｍＬｌ）で希釈すると、赤いスラリーが形成された。混合物を０．５時間放置した後、上部の澄んだ有機相をデカントした。赤いスラリーを、ＤＣＭ（５０ｍｌ）中に溶解し、減圧下で濃縮し、粗生成物２（１６．５ｇ）を得て、これをそれ以上精製することなく次の工程で使用した。
【０１１６】
工程２：４−クロロ−Ｎ−（１−メチル−１Ｈ−ピラゾール−５−イル）ピリミジン−２−アミン（７）
ＭｅＣＮ（２００ｍｌ）中、２−（（１−メチル−１Ｈ−ピラゾール−５−イル）アミノ）ピリミジン−４（３Ｈ）−オン（１６．５ｇ、クルード）の溶液に対し、ＰＯＣｌ３（３０ｍｌ、０．３３ｍｏｌ）を加えた。混合物を１５分間還流加熱した。混合物を氷水（１００ｇ）によりクエンチし、ｐＨをＮａ２ＣＯ３粉末により１０に調整した。混合物を、ＥｔＯＡｃ（３  ｘ１００ｍＬ）で抽出し、乾燥させ（Ｎａ２ＳＯ４）、濾過し、減圧下で濃縮し、粗生成物を得た。粗生成物を、石油エーテル／ＥｔＯＡｃ（１：１）を用いて溶出するＳｉＯ２クロマトグラフィーにより精製し、７．５ｇ（２工程で５１％）の標題化合物を得た。１Ｈ  ＮＭＲ（ＭｅＯＨ−ｄ４、４００ＭＨｚ）δ：８．３０（ｄ、Ｊ＝５．２、１Ｈ）、７．４２（ｄ、Ｊ＝１．６、１Ｈ）、６．９０（ｄ、Ｊ＝５．２、１Ｈ）、６．２８（ｄ、Ｊ＝１．６、１Ｈ）、３．７２（ｓ、３Ｈ）
【０１１７】
工程３：２−ベンジル−５−（２−（（１−メチル−１Ｈ−ピラゾール−５−イル）アミノ）ピリミジン−４−イル）ピリダジン−３（２Ｈ）−オン（９）
ジオキサン（３００ｍＬ）中、４−クロロ−Ｎ−（１−メチル−１Ｈ−ピラゾール−５−イル）ピリミジン−２−アミン（２５．０ｇ、１１９ｍｍｏｌ）の溶液に対し、Ｍｅ３ＳｎＳｎＭｅ３（４６．９ｇ、１４３．１１ｍｍｏｌ）及びＰｄ（ＰＰｈ３）４（１３．８ｇ、１１．９３ｍｍｏｌ）を加え、混合物を、Ｎ２雰囲気下で３時間にわたり１２５℃で加熱した。上記溶液に対し、２−ベンジル−５−ヨードピリダジン−３（２Ｈ）−オン３（４４．７ｇ、１４３．１ｍｍｏｌ、ＣＡＳＲＮ  ８２５６３３−９３−０）、ＬｉＣｌ（１０．１ｇ、２３８．５ｍｍｏｌ）、ＣｕＩ（１１．４ｇ、５９．６ｍｍｏｌ）及びＰｄ（ＰＰｈ３）４（１３．８ｇ、１１．９３ｍｍｏｌ）を加えた。混合物を、Ｎ２雰囲気下において１６時間にわたり、１２５℃で加熱した。混合物を、室温に冷却し、セライト（登録商標）により濾過した。濾過ケーキを、ＤＣＭ（３×２００ｍＬ）で洗浄した。ＤＣＭ溶液と組合せたものを、濃縮し、ＭｅＯＨ／ＤＣＭグラジエント（１〜５％のＭｅＯＨ）を用いて溶出するＳｉＯ２クロマトグラフィーにより精製し、黄色の固体として化合物ｄ（３４ｇ、８４％）を得た。
【０１１８】
工程４：５−（２−（（１−メチル−１Ｈ−ピラゾール−５−イル）アミノ）ピリミジン−４−イル）ピリダジン−３（２Ｈ）−オン（１０）
無水のトルエン（５００ｍＬ）及び２−ベンジル−５−（２−（（１−メチル−１Ｈ−ピラゾール−５−イル）アミノ）ピリミジン−４−イル）ピリダジン−３（２Ｈ）−オン（３４ｇ、９４．６ｍｍｏｌ）の溶液に対し、ＡｌＣｌ３（６３ｇ、４７３ｍｍｏｌ）を加えた。混合物を、Ｎ２雰囲気下で１時間にわたり１２０℃で加熱した。混合物を室温に冷却し、上部の澄んだ層をデンカントした。残りの固体を氷水（２００ｇ）に加え、最初の固体が分解して黄色の固体が現れるまで室温で撹拌した。固体を、濾過し、氷水（３×１００ｍＬ）で洗浄した。乾燥後、約３５ｇのクルードな黄色の固体生成物が得られた。
【０１１９】
工程５：４−（６−クロロピリダジン−４−イル）−Ｎ−（１−メチル−１Ｈ−ピラゾール−５−イル）ピリミジン−２−アミン
撹拌したＰＯＣｌ３（２００ｍＬ）に対し、室温において５−（２−（（１−メチル−１Ｈ−ピラゾール−５−イル）アミノ）ピリミジン−４−イル）ピリダジン−３（２Ｈ）−オン（１０）（３５ｇ（クルード）、０．１３ｍｏｌ）を加えた。混合物を８０℃で２時間加熱した。混合物を、濃縮乾固し、ＣＨＣｌ３（２００ｍＬ）で溶解し、次いで撹拌しながら氷水（５００ｇ）に注いだ。得られた混合物をｐＨ約８に調整した。混合物を、ＤＣＭ（５×３００ｍＬ）で抽出した。組み合わされた有機層を、濃縮し、石油エーテル／ＥｔＯＡｃグラジエント（１〜５０％のＥｔＯＡｃ）を用いて溶出するＳｉＯ２クロマトグラフィーにより精製し、黄色の固体として１３ｇ（２段階で４７％）の標題化合物を得た。１Ｈ  ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ６、４００ＭＨｚ）δ：９．８０（ｓ、１Ｈ）、９．７４（ｓ、１Ｈ）、８．７０（ｄ、Ｊ＝４．８、１Ｈ）、８．４４（ｓ、１Ｈ）、７．７２（ｄ、Ｊ＝５．２、１Ｈ）、７．３８（ｓ、１Ｈ）、６．２９（ｓ、１Ｈ）、３．６８（ｓ、３Ｈ）。
【０１２０】
工程６：４−（３−（２−（４−クロロフェニル）−２−メトキシエチル）−［１，２，４］トリアゾロ［４，３−ｂ］ピリダジン−７−イル）−Ｎ−（１−メチル−１Ｈ−ピラゾール−５−イル）ピリミジン−２−アミン
ＩＰＡ（３ｍＬ）中に撹拌された４−（６−クロロピリダジン−４−イル）−Ｎ−（１−メチル−１Ｈ−ピラゾール−５−イル）ピリミジン−２−アミン（２００ｍｇ、０．７５８ｍｍｏｌ）の溶液に対し、３−（４−クロロフェニル）−３−メトキシプロパンヒドラジド（２００ｍｇ、０．８３４ｍｍｏｌ）、及びメタンスルホン酸（１．２ｍｇ、１．６ｍｍｏｌ）を加えた。反応混合物を、１００℃で３時間撹拌した。溶媒を、エバポレートして乾燥させ、分取ＨＰＬＣ（ＦＡ）により精製し、４０ｍｇ（７％）の所望の生成物を得た。１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ、ＭｅＯＨ−ｄ４）δ：９．２４（ｓ、１Ｈ）、８．８８（ｓ、１Ｈ）、８．６３（ｄ、Ｊ＝５．２、１Ｈ）、７．６３（ｄ、Ｊ＝５．２、１Ｈ）、７．５１（ｄ、Ｊ＝２．０、１Ｈ）、７．３６（ｓ、４Ｈ）、６．３９（ｓ、１Ｈ）、４．６３（ｓ、１Ｈ）、３．８２（ｓ、３Ｈ）、３．８１−３．７４（ｍ、１Ｈ）、３．５９−３．５４（ｍ、１Ｈ）、３．２０（ｓ、３Ｈ）；ＭＳ［Ｍ＋Ｈ］＋＝４６１．９。
【０１２１】
（Ｒ）−４−（３−（２−（４−クロロフェニル）−２−メトキシエチル）−［１，２，４］トリアゾロ［４，３−ｂ］ピリダジン−７−イル）−Ｎ−（１−メチル−１Ｈ−ピラゾール−５−イル）ピリミジン−２−アミン光学異性体を、ＳＦＣによって分解し、所望の生成物を得た（１３．８ｍｇ）。１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ、ＤＭＳＯ−ｄ６）δ  ９．７０（ｓ、１Ｈ）、９．１９（ｓ、１Ｈ）、９．００（ｄ、Ｊ＝２、１Ｈ）、８．６７（ｄ、Ｊ＝４．８、１Ｈ）、７．２３（ｄ、Ｊ＝４．８、１Ｈ）、７．４２−７．３５（ｍ、４Ｈ）、６．３３（ｓ、１Ｈ）、４．９３−４．８９（ｍ、２Ｈ）、３．７３（ｓ、３Ｈ）、３．７２−３．６４（ｍ、１Ｈ）、３．５０−３．４４（ｍ、１Ｈ）、３．１０（ｓ、３Ｈ））；ＭＳ［Ｍ＋Ｈ］＋＝４６１．９。
【０１２２】
生物学的実施例１
細胞培養物及び生存率アッセイ
ＣｅｌｌＴｉｔｅｒＧｌｏ（Ｐｒｏｍｅｇａ）：Ａ５４９細胞を、通常の増殖培地（１０％のウシ胎児血清、２  ｍＭ／Ｌ−グルタミン及び１００単位／ｍＬのペニシリン及びストレプトマイシンを含む、Ｒｏｓｗｅｌｌ  Ｐａｒｋ  Ｍｅｍｏｒｉａｌ  Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅ  １６４０（ＲＰＭＩ  １６４０）培地）に、３８４ウェルの透明底黒色プレートにおいて１ウェルあたり１５００細胞で播いた。翌日、化合物を、指示濃度から開始して連続的に１：２で希釈し、各々４つを細胞に加えた。化合物添加の９６時間後、ＣｅｌｌＴｉｔｅｒ−Ｇｌｏ  Ｌｕｍｉｎｅｓｃｅｎｔ  Ｃｅｌｌ  Ｖｉａｂｉｌｉｔｙ試薬を、製造者のプロトコールに従って加えた。
【０１２３】
ＢｒｄＵ  ＥＬＩＳＡ（Ｒｏｃｈｅ）：Ａ５４９細胞を、通常の増殖培地に、９６ウェルの透明底黒色プレートにおいて１ウェルあたり３０００細胞で播いた。翌日、化合物を、ＣＴＧ結果に基づいて、指示濃度で各々３つ加えた。化合物添加の４８及び７２時間後、ＢｒｄＵ  Ｃｅｌｌ  Ｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｏｎ  Ｃｈｅｍｉｌｕｍｉｎｅｓｃｅｎｔ  ＥＬＩＳＡを、製造者のプロトコールに従って実施した。
【０１２４】
Ｃｅｌｌ  Ｄｅａｔｈ  ｎｕｃＥＬＩＳＡ（Ｒｏｃｈｅ）：Ａ５４９細胞を、通常の増殖培地に、９６ウェルの透明底黒色プレートにおいて１ウェルあたり３０００細胞で播いた。翌日、化合物を、ＣＴＧ結果に基づいて、指示濃度で各々３つ加えた。化合物添加の４８及び７２時間後、Ｃｅｌｌ  Ｄｅａｔｈ  Ｄｅｔｅｃｔｉｏｎ  ＥＬＩＳＡＰＬＵＳ  を、製造者のプロトコールに従って実施した。
【０１２５】
生物学的実施例２
腫瘍異種移植片モデル
培養したＮＣＩ−Ｈ５２０．Ｘ１及びＥＢＣ１細胞を、培養物から取り除き、ハンクス緩衝生理食塩溶液（ＨＢＳＳ）に懸濁し、マトリゲル（ＢＤ  Ｂｉｏｓｃｉｅｎｃｅｓ、ＵＳＡ）と１：１で混合し、ナイーブメスＮＣＲヌードマウス（Ｔａｃｏｎｉｃ  Ｆａｒｍｓ、Ｈｕｄｓｏｎ、ＮＹ）の右脇腹に皮下移植した。平均体積約２５０ｍｍ３の腫瘍を有するマウスを、各１０匹の処置コホートにグループ化した。マウスには、５％のスクロースのみ又は５％のスクロース＋１ｍｇ／ｍｌのドキシサイクリン（Ｃｌｏｎｔｅｃｈ、Ｍｏｕｎｔａｉｎ  Ｖｉｅｗ、ＣＡ）を、それぞれコントロール及びノックダウンコホートとして与えた。すべての給水瓶は一週間に３回交換した。体重及び腫瘍体積の測定値（ノギスを用いた長さ及び幅の測定により得られる）は、試験期間中一週間に二回取得した。すべての実験手順は、Ａｍｅｒｉｃａｎ  Ｐｈｙｓｉｏｌｏｇｙ  Ｓｏｃｉｅｔｙの指針に準拠しており、Ｇｅｎｅｎｔｅｃｈ’ｓ  Ｉｎｓｔｉｔｕｔｉｏｎａｌ  Ａｎｉｍａｌ  Ｃａｒｅ  ａｎｄ  ＵｓｅＣｏｍｍｉｔｔｅｅにより承認された。腫瘍体積は、以下の式により算出した：腫瘍体積＝０．５＊（ａ＊ｂ２）、式中、「ａ」は最大腫瘍径であり、「ｂ」は垂直腫瘍径である。腫瘍体積の結果は、平均腫瘍体積±平均の標準誤差（ＳＥＭ）として提示される。研究の終了（ＥＯＳ）時のパーセント増殖阻害（％ＩＮＨ）は、％ＩＮＨ＝１００［（ＥＯＳビヒクル−ＥＯＳ処置）／（ＥＯＳビヒクル）］として算出された。ダネットの検定を用いたデータ分析及びｐ−値の生成は、ＪＭＰソフトウェア（ＳＡＳ  Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅ、Ｃａｒｙ、ＮＣ）を用いて行われた。
【０１２６】
Ｉａは、様々な濃度（遊離塩基当量として表される）の溶液として、４０％のＰＥＧ４００（ポリエチレングリコール４００）／６０％［１０％のＨＰ−β−ＣＤ（ヒドロキシプロピル−β−シクロデキストリン）］中で調製された。ビヒクルコントロールは、４０％のＰＥＧ４００／６０％（１０％のＨＰ−β−ＣＤ）又はＭＣＴであった。ＩＩは、様々な濃度の懸濁液として、メチルセルロースツイーン（ＭＣＴ）中で調製された。Ｉａ、ＩＩ、及びビヒクルコントロール投薬溶液を、一週間に一度、三週にわたって調製した。製剤は、投薬前に、ボルテックスによりよく混合した。試験物は、温度を４℃〜７℃に維持するように設定された冷蔵庫に貯蔵した。
【０１２７】
生物学的実施例３
遺伝的に修飾されたマウスモデル
本発明者らは、以下の団体からマウスを取得した：ＫｒａｓＬＳＬ-Ｇ１２ＤマウスはＴｙｌｅｒ  Ｊａｃｋｓ（Ｍａｓｓａｃｈｕｓｅｔｔｓ  Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅ  ｏｆ  Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ）から、ｐ１６／ｐ１９ｆｌ／ｆｌマウスはＡｎｔｏｎ  Ｂｅｒｎｓ（ＮＫＩ、Ｔｈｅ  Ｎｅｔｈｅｒｌａｎｄｓ）から、ｐ５３ｆｒｔ／ｆｒｔマウスはＥｘｅｌｉｘｉｓ、Ｉｎｃ．から、及びＰｄｘ１−ＣｒｅマウスはＡｎｄｙ  Ｌｏｗｙ（Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ  ｏｆ  Ｏｈｉｏ）から取得した。同数のオス及びメスの動物を実験コホートとして使用し、投薬は、ＰＤＡＣ用の超音波イメージング又はＮＳＣＬＣモデル用のｍｉｃｒｏＣＴにより腫瘍負荷を確認した後で開始された。動物に投薬し、Ｇｅｎｅｎｔｅｃｈ、Ｉｎｃ．のＩｎｓｔｉｔｕｔｉｏｎａｌ  Ａｎｉｍａｌ  Ｃａｒｅ  ａｎｄ  Ｕｓｅ  Ｃｏｍｍｉｔｔｅｅ（ＩＡＣＵＣ）の指針に従ってモニターした。選択された投薬レジメンのすべては、ＧＥＭＭにおいて良好な耐容性を示した。全生存の非侵襲的イメージング及び評価を、｛Ｓｉｎｇｈ：２０１０ｈｖ｝に以前に記載されているように実施した。ＧＥＭモデルに、コビメチニブ及びＩａを、５ｍｇ／ｋｇ及び６０ｍｇ／ｋｇで経口経管栄養（ＰＯ）により毎日（ＱＤ）投薬した。
【０１２８】
カプランマイヤー推定生存率として示されるデータ及びイメージングデータセットに基づく統計的分析を、以前に記載されているように（M. Singh et al., Nature Biotechnol., 2010, 28(6):585-593）行った。ＧＥＭモデル腫瘍試料を収集し、ＲＮＡＬａｔｅｒ（Ｑｉａｇｅｎ、Ｖａｌｅｎｃｉａ、ＣＡ）に貯蔵した。全部のＲＮＡを、製造者の指示に従ってＲＮｅａｓｙ  Ｐｌｕｓ  Ｍｉｎｉ  ｋｉｔ（Ｑｉａｇｅｎ）を用いて抽出した。Ｎａｏｎｄｒｏｐ（Ｔｈｅｒｍｏ  Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ、Ｗａｌｔｈａｍ、ＭＡ）を用いてＲＮＡの量を決定した。
【０１２９】
それぞれに特有な形式、即ち開示した機能を実施するための手段として表した前述の記載又は特許請求の範囲に開示された特徴、又は開示した結果を達成するための方法又はプロセスを、本発明を様々な形態で実現するために、必要に応じて、別々に、又はこのような特徴の任意の組合せで利用することができる。
【０１３０】
前述の発明は、明瞭さ及び理解の目的で、例示及び実施例によりある程度詳細に記載されている。変更及び修正が特許請求の範囲内で実施できることは当業者には明らかであろう。したがって、上記の説明は例示であって限定ではない。したがって、本発明の範囲は、上記の説明を参照して決定されるべきではなく、特許請求の範囲を、その特許請求の範囲が権利を有する等価物の全範囲と共に参照して決定されるべきである。
【０１３１】
本明細書で言及した特許、出願公開及び科学文献は、当業者の知識を確立するものであり、それぞれが具体的かつ個別に参照により本明細書に包含されることが示されているものと同じ範囲で、本明細書にそれらの全文が参照により包含される。本明細書で引用されたいずれかの参考文献と、本明細書の具体的な教示とのあらゆる矛盾は、本発明の教示に有利に解決されるものとする。同様に、語又は語句の当該技術分野で理解されている定義と本明細書で具体的に教示された語又は語句の定義とのいかなる矛盾も、本発明の教示に有利に解決されるものとする。
【図１】
2019031517.tif 000012
【図２Ａ】
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【図２Ｂ】
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【図３】
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【図４】
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【図５】
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【図６Ａ−Ｂ】
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【図６Ｃ−Ｅ】
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【図７】
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【図８】
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【図９】
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【図１０】
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【図１１】
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【図１２】
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【図１３Ａ】
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【図１３Ｂ−１】
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【図１３Ｂ−２】
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【図１３Ｂ−３】
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【図１３Ｃ】
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【図１３Ｄ−１】
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【図１３Ｄ−２】
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【図１３Ｄ−３】
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【手続補正書】
【提出日】平成30年11月2日(2018.11.2)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
哺乳動物におけるがんの治療のための医薬の調製における、コビメチニブ又は５−（（２−フルオロ−４−ヨードフェニル）アミノ）−Ｎ−（２−ヒドロキシエトキシ）イミダゾ［１，５−ａ］ピリジン−６−カルボキサミド、又はその薬学的に許容される塩と、（Ｓ）−１−（１−（４−クロロ−３−フルオロフェニル）−２−ヒドロキシエチル）−４−（２−（（１−メチル−１Ｈ−ピラゾール−５−イル）アミノ）ピリミジン−４−イル）ピリジン−２（１Ｈ）−オン又はその薬学的に許容される塩との組合せの使用。
【請求項２】
コビメチニブ又はその薬学的に許容される塩及び（Ｓ）−１−（１−（４−クロロ−３−フルオロフェニル）−２−ヒドロキシエチル）−４−（２−（（１−メチル−１Ｈ−ピラゾール−５−イル）アミノ）ピリミジン−４−イル）ピリジン−２（１Ｈ）−オン又はその薬学的に許容される塩、容器、並びに、がんの治療のためのコビメチニブ及び（Ｓ）−１−（１−（４−クロロ−３−フルオロフェニル）−２−ヒドロキシエチル）−４−（２−（（１−メチル−１Ｈ−ピラゾール−５−イル）アミノ）ピリミジン−４−イル）ピリジン−２（１Ｈ）−オンの投与を指示する添付文書又はラベルを含むキット。
【請求項３】
ＥＲＫ阻害剤又はその薬学的に許容される塩を含む過剰増殖性障害の治療のための医薬の製造におけるＭＥＫ阻害剤又はその薬学的に許容される塩の使用であって、
ＭＥＫ阻害剤が、コビメチニブ、ＧＤＣ−０６２３、ＧＳＫ−１１２０２１２（トラメチニブ）、ＡＺＤ−６２４４（セルメチニブ）、又はＢＡＹ ８６−９７６６（ｒｅｆａｍｅｔｉｎｉｂ）であり、
ＥＲＫ阻害剤が、（Ｓ）−１−（１−（４−クロロ−３−フルオロフェニル）−２−ヒドロキシエチル）−４−（２−（（１−メチル−１Ｈ−ピラゾール−５−イル）アミノ）ピリミジン−４−イル）ピリジン−２（１Ｈ）−オン、４−（３−（（エチルジメチルシリル）メチル）−［１，２，４］トリアゾロ［４，３−ａ］ピリジン−７−イル）−Ｎ−（１−メチル−１Ｈ−ピラゾール−５−イル）ピリミジン−２−アミン、（Ｓ）−４−（３−（２−（４−クロロフェニル）−２−メトキシエチル）−［１，２，４］トリアゾロ［４，３−ｂ］ピリダジン−７−イル）−Ｎ−（１−メチル−１Ｈ−ピラゾール−５−イル）ピリミジン−２−アミン、又は（Ｓ）−Ｎ−（１−メチル−１Ｈ−ピラゾール−５−イル）−４−（３−（２−メチルブチル）−［１，２，３］トリアゾロ［１，５−ａ］ピリジン−６−イル）ピリミジン−２−アミンである、使用。
【請求項４】
ＭＥＫ阻害剤がコビメチニブである、請求項３に記載の使用。
【請求項５】
ＥＲＫ阻害剤が、（Ｓ）−１−（１−（４−クロロ−３−フルオロフェニル）−２−ヒドロキシエチル）−４−（２−（（１−メチル−１Ｈ−ピラゾール−５−イル）アミノ）ピリミジン−４−イル）ピリジン−２（１Ｈ）−オン又はその薬学的に許容される塩である、請求項３又は４に記載の使用。
【請求項６】
前記過剰増殖性障害が、結腸直腸がん、非小細胞肺がん、膵臓がん、及びメラノーマからなる群より選択されるがんである、請求項３から５のいずれか一項に記載の使用。
【請求項７】
コビメチニブ又はその薬学的に許容される塩が、（Ｓ）−１−（１−（４−クロロ−３−フルオロフェニル）−２−ヒドロキシエチル）−４−（２−（（１−メチル−１Ｈ−ピラゾール−５−イル）アミノ）ピリミジン−４−イル）ピリジン−２（１Ｈ）−オン又はその薬学的に許容される塩と組合せて投与される、請求項３から６のいずれか一項に記載の使用。
【請求項８】
ＥＲＫ阻害剤又はその薬学的に許容される塩を含む過剰増殖性障害の治療における使用のためのＭＥＫ阻害剤又はその薬学的に許容される塩であって、
ＭＥＫ阻害剤が、コビメチニブ、ＧＤＣ−０６２３、ＧＳＫ−１１２０２１２（トラメチニブ）、ＡＺＤ−６２４４（セルメチニブ）、又はＢＡＹ ８６−９７６６（ｒｅｆａｍｅｔｉｎｉｂ）であり、
ＥＲＫ阻害剤が、（Ｓ）−１−（１−（４−クロロ−３−フルオロフェニル）−２−ヒドロキシエチル）−４−（２−（（１−メチル−１Ｈ−ピラゾール−５−イル）アミノ）ピリミジン−４−イル）ピリジン−２（１Ｈ）−オン、４−（３−（（エチルジメチルシリル）メチル）−［１，２，４］トリアゾロ［４，３−ａ］ピリジン−７−イル）−Ｎ−（１−メチル−１Ｈ−ピラゾール−５−イル）ピリミジン−２−アミン、（Ｓ）−４−（３−（２−（４−クロロフェニル）−２−メトキシエチル）−［１，２，４］トリアゾロ［４，３−ｂ］ピリダジン−７−イル）−Ｎ−（１−メチル−１Ｈ−ピラゾール−５−イル）ピリミジン−２−アミン、又は（Ｓ）−Ｎ−（１−メチル−１Ｈ−ピラゾール−５−イル）−４−（３−（２−メチルブチル）−［１，２，３］トリアゾロ［１，５−ａ］ピリジン−６−イル）ピリミジン−２−アミンである、ＭＥＫ阻害剤又はその薬学的に許容される塩。
【請求項９】
過剰増殖性障害がヒトにおけるがんであり、請求項８に記載の過剰増殖性障害の治療における使用のためのＭＥＫ阻害剤又はその薬学的に許容される塩。
【請求項１０】
ＭＥＫ阻害剤がコビメチニブである、請求項８又は９に記載の過剰増殖性障害の治療における使用のためのＭＥＫ阻害剤又はその薬学的に許容される塩。
【請求項１１】
ＥＲＫ阻害剤が、（Ｓ）−１−（１−（４−クロロ−３−フルオロフェニル）−２−ヒドロキシエチル）−４−（２−（（１−メチル−１Ｈ−ピラゾール−５−イル）アミノ）ピリミジン−４−イル）ピリジン−２（１Ｈ）−オン又はその薬学的に許容される塩である、請求項８から１０のいずれか一項に記載の過剰増殖性障害の治療における使用のためのＭＥＫ阻害剤又はその薬学的に許容される塩。
【請求項１２】
過剰増殖性障害が、結腸直腸がん、非小細胞肺がん、膵臓がん又はメラノーマからなる群より選択されるがんである、請求項８から１１のいずれか一項に記載の過剰増殖性障害の治療における使用のためのＭＥＫ阻害剤又はその薬学的に許容される塩。
【請求項１３】
コビメチニブ、又はその薬学的に許容される塩、又は５−（（２−フルオロ−４−ヨードフェニル）アミノ）−Ｎ−（２−ヒドロキシエトキシ）イミダゾ［１，５−ａ］ピリジン−６−カルボキサミド、又はその薬学的に許容される塩と、（Ｓ）−１−（１−（４−クロロ−３−フルオロフェニル）−２−ヒドロキシエチル）−４−（２−（（１−メチル−１Ｈ−ピラゾール−５−イル）アミノ）ピリミジン−４−イル）ピリジン−２（１Ｈ）−オンが、それぞれ単位投薬形態当たり約１ｍｇから１０００ｍｇの量で投与される、請求項８から１２のいずれか一項に記載の過剰増殖性障害の治療における使用のためのＭＥＫ阻害剤又はその薬学的に許容される塩。
【請求項１４】
ＭＥＫ阻害剤又はその薬学的に許容される塩と、ＥＲＫ阻害剤又はその薬学的に許容される塩との組合せであって、
ＭＥＫ阻害剤が、コビメチニブ、ＧＤＣ−０６２３、ＧＳＫ−１１２０２１２（トラメチニブ）、ＡＺＤ−６２４４（セルメチニブ）、又はＢＡＹ ８６−９７６６（ｒｅｆａｍｅｔｉｎｉｂ）であり、
ＥＲＫ阻害剤が、（Ｓ）−１−（１−（４−クロロ−３−フルオロフェニル）−２−ヒドロキシエチル）−４−（２−（（１−メチル−１Ｈ−ピラゾール−５−イル）アミノ）ピリミジン−４−イル）ピリジン−２（１Ｈ）−オン、４−（３−（（エチルジメチルシリル）メチル）−［１，２，４］トリアゾロ［４，３−ａ］ピリジン−７−イル）−Ｎ−（１−メチル−１Ｈ−ピラゾール−５−イル）ピリミジン−２−アミン、（Ｓ）−４−（３−（２−（４−クロロフェニル）−２−メトキシエチル）−［１，２，４］トリアゾロ［４，３−ｂ］ピリダジン−７−イル）−Ｎ−（１−メチル−１Ｈ−ピラゾール−５−イル）ピリミジン−２−アミン、又は（Ｓ）−Ｎ−（１−メチル−１Ｈ−ピラゾール−５−イル）−４−（３−（２−メチルブチル）−［１，２，３］トリアゾロ［１，５−ａ］ピリジン−６−イル）ピリミジン−２−アミンである、組合せ。
【請求項１５】
ＭＥＫ阻害剤がコビメチニブである、請求項１４に記載の組合せ。
【請求項１６】
ＥＲＫ阻害剤が、（Ｓ）−１−（１−（４−クロロ−３−フルオロフェニル）−２−ヒドロキシエチル）−４−（２−（（１−メチル−１Ｈ−ピラゾール−５−イル）アミノ）ピリミジン−４−イル）ピリジン−２（１Ｈ）−オン又はその薬学的に許容される塩である、請求項１４又は１５に記載の組合せ。
【請求項１７】
ＥＲＫ阻害剤又はその薬学的に許容される塩、及びＭＥＫ阻害剤又はその薬学的に許容される塩を含む、薬学的組成物であって、
ＭＥＫ阻害剤が、コビメチニブ、ＧＤＣ−０６２３、ＧＳＫ−１１２０２１２（トラメチニブ）、ＡＺＤ−６２４４（セルメチニブ）、又はＢＡＹ ８６−９７６６（ｒｅｆａｍｅｔｉｎｉｂ）であり、
ＥＲＫ阻害剤が、（Ｓ）−１−（１−（４−クロロ−３−フルオロフェニル）−２−ヒドロキシエチル）−４−（２−（（１−メチル−１Ｈ−ピラゾール−５−イル）アミノ）ピリミジン−４−イル）ピリジン−２（１Ｈ）−オン、４−（３−（（エチルジメチルシリル）メチル）−［１，２，４］トリアゾロ［４，３−ａ］ピリジン−７−イル）−Ｎ−（１−メチル−１Ｈ−ピラゾール−５−イル）ピリミジン−２−アミン、（Ｓ）−４−（３−（２−（４−クロロフェニル）−２−メトキシエチル）−［１，２，４］トリアゾロ［４，３−ｂ］ピリダジン−７−イル）−Ｎ−（１−メチル−１Ｈ−ピラゾール−５−イル）ピリミジン−２−アミン、又は（Ｓ）−Ｎ−（１−メチル−１Ｈ−ピラゾール−５−イル）−４−（３−（２−メチルブチル）−［１，２，３］トリアゾロ［１，５−ａ］ピリジン−６−イル）ピリミジン−２−アミンである、薬学的組成物。
【請求項１８】
ＭＥＫ阻害剤が、コビメチニブである、請求項１７に記載の薬学的組成物。
【請求項１９】
ＥＲＫ阻害剤が、（Ｓ）−１−（１−（４−クロロ−３−フルオロフェニル）−２−ヒドロキシエチル）−４−（２−（（１−メチル−１Ｈ−ピラゾール−５−イル）アミノ）ピリミジン−４−イル）ピリジン−２（１Ｈ）−オン、又はその薬学的に許容される塩である、請求項１７又は１８に記載の薬学的組成物。
【外国語明細書】
2019031517000001.pdf