(57)【要約】      （修正有）【課題】抗原の非存在下で、がんを処置するための組成物の提供。【解決手段】下式のグルコピラノシル脂質Ａ（ＧＬＡ）、及び薬学的に許容される担体又は賦形剤を含み、抗原を含まない組成物。2019031540.tif 000012（式中、Ｒ１、Ｒ３、Ｒ５及びＲ６はＣ１１〜Ｃ２０アルキルであり、Ｒ２及びＲ４はＣ１２〜Ｃ２０アルキルである）【選択図】なし【特許請求の範囲】
【請求項１】
哺乳動物におけるがんの処置で使用するための有効量のＧＬＡ含有組成物であって、
（ａ）式：
【化１】
2019031540.tif 000011
（式中、
Ｒ１、Ｒ３、Ｒ５およびＲ６は、Ｃ１１〜Ｃ２０アルキルであり、
Ｒ２およびＲ４は、Ｃ１２〜Ｃ２０アルキルである）
のＧＬＡと、
（ｂ）薬学的に許容される担体または賦形剤と
を含み、抗原を含まない、組成物。
【請求項２】
Ｒ１、Ｒ３、Ｒ５およびＲ６が、ウンデシルであり、Ｒ２およびＲ４が、トリデシルで
ある、請求項１に記載の組成物。
【請求項３】
哺乳動物が、ヒトである、請求項１または２のいずれかに記載の組成物。
【請求項４】
水性製剤である、請求項１から３のいずれかに記載の組成物。
【請求項５】
水中油型エマルジョン、油中水型エマルジョン、リポソーム、ミセル製剤、または微粒
子の形態である、請求項１から３のいずれかに記載の組成物。
【請求項６】
がんが、固形腫瘍を含む、請求項１から５のいずれかに記載の組成物。
【請求項７】
固形腫瘍が、癌腫、肉腫またはリンパ腫である、請求項６に記載の組成物。
【請求項８】
固形腫瘍が、原発性固形腫瘍である、請求項６に記載の組成物。
【請求項９】
固形腫瘍が、二次性固形腫瘍である、請求項６に記載の組成物。
【請求項１０】
がんが、黒色腫、メルケル細胞癌、肺がん、子宮頸がん、卵巣がん、子宮がん、乳がん
、肝臓がん、胃がん、前立腺がん、結腸がん、腎臓がん、膀胱がん、脳がん、および膵臓
がんからなる群より選択される、請求項１から５のいずれかに記載の組成物。
【請求項１１】
皮下、皮内、筋肉内、腫瘍内、または静脈注射によって投与される、請求項１から１０
のいずれかに記載の組成物。
【請求項１２】
鼻腔内または肺内に投与される、請求項１から１０のいずれかに記載の組成物。
【請求項１３】
１種または複数の追加の治療剤または治療的処置と併用して投与される、請求項１から
１２のいずれかに記載の組成物。
【請求項１４】
治療剤が、免疫チェックポイント阻害剤である、請求項１３に記載の組成物。
【請求項１５】
治療剤が、共刺激経路を活性化する抗体である、請求項１３に記載の組成物。
【請求項１６】
抗体が、抗ＣＤ４０抗体である、請求項１５に記載の組成物。
【請求項１７】
治療剤が、がん治療剤である、請求項１３に記載の組成物。
【請求項１８】
がん治療剤が、タキソテール、カルボプラチン、トラスツズマブ、エピルビシン、シク
ロホスファミド、シスプラチン、ドセタキセル、ドキソルビシン、エトポシド、５−ＦＵ
、ゲムシタビン、メトトレキセート、およびパクリタキセル、ミトキサントロン、エポチ
ロンＢ、上皮成長因子受容体（ＥＧＦＲ）を標的とするモノクローナル抗体７Ａ７．２７
、ボリノスタット、ロミデプシン、ドコサヘキサエン酸、ボルテゾミブ、シコニンおよび
腫瘍溶解性ウイルスからなる群より選択される、請求項１７に記載の組成物。
【請求項１９】
１種または複数の追加の治療的処置が、放射線療法である、請求項１３に記載の組成物
。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明の開示は、一般に、グルコピラノシル脂質Ａ（ＧＬＡ）でがんを処置するための
組成物および方法に関する。
【背景技術】
【０００２】
先天性免疫系は、侵入微生物の存在を検出して防御反応を活性化するように設計された
進化的に古いシステムである（Ｂｅｕｔｌｅｒ、ＭｏＩ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．２００４年、
４０巻、８４５〜８５９頁）。先天性免疫系は、宿主により危険シグナルとして認識され
る病原体の必須部分である化合物に迅速に応答する。これらの分子パターンの認識は、高
度に保存された一連の受容体によって仲介されており（ｖａｎ  Ａｍｅｒｓｆｏｏｒｔら
、Ｊ．Ｃｌｉｎ．Ｍｉｃｒｏｂｉｏｌ．Ｒｅｖ．２００３年、１６巻、３７９頁）、その
活性化により急性炎症性応答が起こる。これらの応答には、多様なサイトカインおよびケ
モカインの産生、侵入する病原体に対する局所的攻撃の指示、および免疫系の適応性要素
を活性化し調節する応答の開始が含まれる（ＤａｂｂａｇｈおよびＬｅｗｉｓ、Ｃｕｒｒ
．Ｏｐｉｎ．Ｉｎｆｅｃｔ．Ｄｉｓ．２００３年、１６巻、１９９〜２０４頁；Ｂｅｖａ
ｎ、Ｎａｔ．Ｒｅｖ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．２００４年、４巻、５９５〜６０２頁；Ｐａｓａ
ｒｅおよびＭｅｄｚｈｉｔｏｖ、Ｓｅｍｉｎａｒｓ  Ｉｍｍｕｎｏｌ．２００４年、１６
巻、２３〜２６頁；ＦｉｎｌａｙおよびＨａｎｃｏｃｋ、Ｎａｔ．Ｒｅｖ．Ｍｉｃｒｏｂ
ｉｏｌ．２００４年、２巻、４９７〜５０４頁；Ａｋｉｒａら、Ｎａｔ．Ｉｍｍｕｎｏｌ
．２００１年、２巻、６７５〜６８０頁；ＰａｓａｒｅおよびＭｅｄｚｈｉｔｏｖ、Ｉｍ
ｍｕｎｉｔｙ  ２００４年、２１巻、７３３〜７４１頁）。
【０００３】
先天性免疫応答は、ワクチンのためのアジュバント開発や喘息、感染、およびがんなど
の様々な疾患の処置などの治療目的で利用される可能性があるということが立証されつつ
ある。しかしながら、このような治療の重要な懸念は、先天性免疫の過剰な活性化によっ
て敗血症性ショックの臨床症状が引き起こされる可能性があることである（Ｐｉｔｔｅｔ
ら、Ｊ．Ａｍ．Ｍｅｄ．Ａｓｓｏｃ．１９９４年、２７１巻、１５９８〜１６０１頁；Ｒ
ｉｃｅおよびＢｅｒｎａｒｄ、Ａｎｎａ．Ｒｅｖ．Ｍｅｄ．２００５年、５６巻、２２５
〜２４８頁）。
【先行技術文献】
【非特許文献】
【０００４】
【非特許文献１】Ｂｅｕｔｌｅｒ、ＭｏＩ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．２００４年、４０巻、８４５〜８５９頁
【非特許文献２】ｖａｎ  Ａｍｅｒｓｆｏｏｒｔら、Ｊ．Ｃｌｉｎ．Ｍｉｃｒｏｂｉｏｌ．Ｒｅｖ．２００３年、１６巻、３７９頁
【非特許文献３】ＤａｂｂａｇｈおよびＬｅｗｉｓ、Ｃｕｒｒ．Ｏｐｉｎ．Ｉｎｆｅｃｔ．Ｄｉｓ．２００３年、１６巻、１９９〜２０４頁
【非特許文献４】Ｂｅｖａｎ、Ｎａｔ．Ｒｅｖ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．２００４年、４巻、５９５〜６０２頁
【非特許文献５】ＰａｓａｒｅおよびＭｅｄｚｈｉｔｏｖ、Ｓｅｍｉｎａｒｓ  Ｉｍｍｕｎｏｌ．２００４年、１６巻、２３〜２６頁
【非特許文献６】ＦｉｎｌａｙおよびＨａｎｃｏｃｋ、Ｎａｔ．Ｒｅｖ．Ｍｉｃｒｏｂｉｏｌ．２００４年、２巻、４９７〜５０４頁
【非特許文献７】Ａｋｉｒａら、Ｎａｔ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．２００１年、２巻、６７５〜６８０頁
【非特許文献８】ＰａｓａｒｅおよびＭｅｄｚｈｉｔｏｖ、Ｉｍｍｕｎｉｔｙ  ２００４年、２１巻、７３３〜７４１頁
【非特許文献９】Ｐｉｔｔｅｔら、Ｊ．Ａｍ．Ｍｅｄ．Ａｓｓｏｃ．１９９４年、２７１巻、１５９８〜１６０１頁
【非特許文献１０】ＲｉｃｅおよびＢｅｒｎａｒｄ、Ａｎｎａ．Ｒｅｖ．Ｍｅｄ．２００５年、５６巻、２２５〜２４８頁
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００５】
長い間、免疫介在性の抗腫瘍活性を強化すること、腫瘍退縮を達成してがん処置の選択
肢を改善することが、がん免疫学の目標であり続けている。がん処置として使用するため
の、抗腫瘍性免疫応答を強化する改善された組成物および方法が必要であることは明らか
である。本発明は、この利点と他の関連する利点を提供する。
【課題を解決するための手段】
【０００６】
本発明の一態様は、有効量のＧＬＡ含有組成物を投与することを含む、がんに罹ってい
る哺乳動物の処置方法であって、前記組成物は、
（ａ）式：
【０００７】
【化１】
2019031540.tif 000002
（式中、Ｒ１、Ｒ３、Ｒ５およびＲ６は、Ｃ１１〜Ｃ２０アルキルであり、Ｒ２および
Ｒ４は、Ｃ１２〜Ｃ２０アルキルである）
のＧＬＡと、
（ｂ）薬学的に許容される担体または賦形剤と
を含み、抗原を含まない、処置方法を提供する。本明細書に記載される方法の一実施形態
において、Ｒ１、Ｒ３、Ｒ５およびＲ６は、ウンデシルであり、Ｒ２およびＲ４は、トリ
デシルである。本明細書に記載される方法の別の実施形態において、哺乳動物は、ヒトで
ある。さらなる追加の実施形態において、本組成物は、水性製剤であり、所定の実施形態
において、本組成物は、水中油型エマルジョン、油中水型エマルジョン、リポソーム、ミ
セル製剤、または微粒子の形態である。
【０００８】
本明細書に記載される方法の所定の実施形態において、がんは、固形腫瘍を含み、癌腫
、肉腫またはリンパ腫であってもよい。別の実施形態において、固形腫瘍は、原発性固形
腫瘍であるか、または二次性固形腫瘍であってもよい。本発明の方法は、これらに限定さ
れないが、黒色腫、メルケル細胞癌、非ホジキンリンパ腫（ＮＨＬ）、肺がん、子宮頸が
ん、卵巣がん、子宮がん、乳がん、肝臓がん、胃がん、前立腺がん、結腸がん、腎臓がん
、膀胱がん、脳がん、および膵臓がんなどの様々ながんの処置のために使用され得る。
【０００９】
所定の実施形態において、本組成物は、皮下、皮内、筋肉内、腫瘍内、または静脈注射
によって投与される。追加の実施形態において、本組成物は、鼻腔内または肺内に投与さ
れる。
【００１０】
本明細書に記載される方法の別の実施形態において、本組成物は、１種または複数の追
加の治療剤または治療的処置と併用して投与される。これに関して、所定の実施形態にお
いて、治療剤は、抗がん剤である。追加の治療剤または治療的処置は、化学療法剤、免疫
チェックポイント阻害剤、または共刺激経路を活性化する抗体、例えば、これらに限定さ
れないが、抗ＣＤ４０抗体などであってもよい。これらに限定されないが、タキソテール
、カルボプラチン、トラスツズマブ、エピルビシン、シクロホスファミド、カルボプラチ
ン、シスプラチン、ドセタキセル、ドキソルビシン、エトポシド、５−ＦＵ、ゲムシタビ
ン、メトトレキセート、およびパクリタキセルなどの多数の治療剤のいずれもが、本明細
書における使用に関して考慮される。所定の実施形態において、１種または複数の追加の
治療的処置は、放射線療法である。
【図面の簡単な説明】
【００１１】
【図１】Ｂ１６黒色腫細胞注射後に食塩水またはＧＬＡを投与したマウスの経時的な腫瘍サイズのグラフである。
【図２】ＧＬＡが与えられたマウスは、食塩水単独が与えられたマウスと比較して改善された生存率を示したことを示す生存曲線である。
【図３】マウスのＢ１６Ｆ１０マウス足蹠黒色腫の発達を示す図である。Ｂ１６Ｆ１０マウス足蹠黒色腫は、フレキシブルな治療腫瘍モデルである。Ｂ１６Ｆ１０腫瘍は、容易に観察可能であり、治療上のエンドポイントは、腫瘍体積＜１００ｍｍ２および動物の健康状態に設定されており、０．３Ｅ５のＢ１６Ｆ１０細胞が、推奨された最小の腫瘍用量であり、治療域は、注射された細胞の数に応じて１４から４０日の範囲であってもよいが、論理上、腫瘍用量を増加させることにより治療域を１４日間未満に短縮することができる。
【図４】筋肉内投与経路によって投与されたＧＬＡ−ＳＥは、ＢＡＬＢ／ｃマウスにおけるＢ１６Ｆ１０腫瘍細胞の成長速度論を有意に（ｐ＞０．００８）改変することを示す図である。統計的評価は、ウィルコクソンの符号順位検定を使用して行われた。
【図５】筋肉内投与経路によって投与されたＧＬＡ−ＳＥは、Ｂ１６Ｆ１０腫瘍の負担を負ったＢＡＬＢ／ｃマウスの生存期間を有意に（ｐ＞０．０３）長くしたことを示す図である。統計的分析は、ゲーハン−ブレスロー−ウィルコクソン検定を使用して行われた。
【図６Ａ】腫瘍細胞の植え付け後に媒体（２％ＳＥ）またはＧＬＡ−ＳＥを筋肉内（ｉ．ｍ．）または腫瘍内（ｉ．ｔ．）投与したマウスの経時的な腫瘍サイズのグラフである。グループ間の比較には、スチューデントのｔ検定が使用された：＊ｐ＜０．０５。
【図６Ｂ】腫瘍細胞の植え付け後に媒体（２％ＳＥ）またはＧＬＡ−ＳＥを筋肉内（ｉ．ｍ．）または腫瘍内（ｉ．ｔ．）投与したマウスの経時的な腫瘍サイズのグラフである。グループ間の比較には、スチューデントのｔ検定が使用された：＊ｐ＜０．０５。
【図６Ｃ】腫瘍細胞の植え付け後に媒体（２％ＳＥ）またはＧＬＡ−ＳＥを筋肉内（ｉ．ｍ．）または腫瘍内（ｉ．ｔ．）投与したマウスの経時的な腫瘍サイズのグラフである。グループ間の比較には、スチューデントのｔ検定が使用された：＊ｐ＜０．０５。
【図６Ｄ】腫瘍細胞の植え付け後に媒体（２％ＳＥ）またはＧＬＡ−ＳＥを筋肉内（ｉ．ｍ．）または腫瘍内（ｉ．ｔ．）投与したマウスの経時的な腫瘍サイズのグラフである。グループ間の比較には、スチューデントのｔ検定が使用された：＊ｐ＜０．０５。
【図７Ａ】Ｂ１６Ｆ１０マウス黒色腫モデルにおけるＧＬＡ±チェックポイント阻害剤の治療効果を示す図である。Ａは、腫瘍注射後４、９、または１４日目に開始されたＧＬＡ−ＳＥ（ｉ．ｔ．）または２％ＳＥ媒体対照の投与がなされた担腫瘍マウスの経時的な腫瘍サイズのグラフである。グループ間の比較には、スチューデントのｔ検定が使用された：＊ｐ＝０．０３；＊＊ｐ＝０．００５。
【図７Ｂ】Ｂ１６Ｆ１０マウス黒色腫モデルにおけるＧＬＡ±チェックポイント阻害剤の治療効果を示す図である。Ｂは、腫瘍注射後４日目に開始されたＧＬＡ−ＳＥ（ｉ．ｔ．）または２％ＳＥ媒体対照、加えて免疫チェックポイント阻害剤（抗ＰＤＬ１、抗ＰＤ１、抗ＣＴＬＡ４、またはＬＴＦ２対照抗体；腹腔内）の投与がなされた担腫瘍マウスの経時的な腫瘍サイズのグラフである。グループ間の比較には、スチューデントのｔ検定が使用された：＊ｐ＝０．０３；＊＊ｐ＝０．００５。
【図８Ａ】Ｂ１６Ｆ１０マウス黒色腫モデルにおけるＧＬＡ±抗ＣＤ４０の治療効果を示す図である。Ａは、腫瘍注射後４日目に開始されたＧＬＡ−ＳＥ（ｉ．ｔ．）または２％ＳＥ媒体対照、加えて抗ＣＤ４０抗体（腹腔内）の投与がなされた担腫瘍マウスの経時的な腫瘍サイズのグラフである。グループ間の比較には、スチューデントのｔ検定が使用された：＊ｐ＝０．０３；ｎｓ＝有意差なし。
【図８Ｂ】Ｂ１６Ｆ１０マウス黒色腫モデルにおけるＧＬＡ±抗ＣＤ４０の治療効果を示す図である。Ｂは、腫瘍注射後８および１５日目におけるＧＬＡ−ＳＥ（ｉ．ｔ．）または２％ＳＥ媒体対照、加えて腫瘍注射後５および１２日目における抗ＣＤ４０（ｉ．ｔ．）の投与がなされた担腫瘍マウスの経時的な腫瘍サイズのグラフである。グループ間の比較には、スチューデントのｔ検定が使用された：＊ｐ＝０．０３；ｎｓ＝有意差なし。
【発明を実施するための形態】
【００１２】
本開示は、がんが確立された後に行われたＧＬＡ単独投与により、Ｂ１６黒色腫マウス
モデルにおけるマウスの生存率の増加がもたらされたという驚くべき観察に部分的に関す
る。ＧＬＡは、種々の抗原に対する免疫応答を増強するワクチンアジュバントとして使用
されてきた。しかしながら、本出願前には、ＧＬＡは、がんの処置のための単剤療法とし
ては使用されていなかった。
【００１３】
本明細書および添付の特許請求の範囲において使用される場合には、単数形である“ａ
”、“ａｎ”および“ｔｈｅ”は、文脈で明確に別途の指示がされていない限り、複数の
指示対象を含む。したがって、例えば、“ａｎ  ａｎｔｉｇｅｎ”への言及は、そのよう
な抗原の複数を含み、“ａ  ｃｅｌｌ”または“ｔｈｅ  ｃｅｌｌ”への言及は、当業者
に知られる１つ以上の細胞およびその同等物（例えば、複数の細胞）への言及を含む、な
どである。同様に、“ａ  ｃｏｍｐｏｕｎｄ”または“ａ  ｃｏｍｐｏｓｉｔｉｏｎ”へ
の言及は、そのような化合物または組成物の複数を含み、そして、文脈で明確に別途の指
示がされていない限り、それぞれ１つ以上の化合物または組成物を指す。方法の工程が記
載され、またはクレームされ、そして、それらの工程が特定の順序で起こるものとして記
載されている場合には、第二工程「より前に」（すなわち、「の前で」）起こる（または
実施される）第一工程の記載は、第一工程に「続いて」第二工程が起こる（または実施さ
れる）ことを記述するために記載し直されていれば、同じ意味を有する。用語「約」は、
数値または数値範囲に言及するとき、言及される数値または数値範囲は、実験的な変動内
（または統計的実験誤差の範囲内）で近似であることを意味し、したがって、数値または
数値範囲は、記述された数値または数値範囲の１％と１５％との間で変動し得る。用語「
含む」（そして、「含む（ｃｏｍｐｒｉｓｅ）」または「含む（ｃｏｍｐｒｉｓｅｓ）」
または「有する（ｈａｖｉｎｇ）」または「含む（ｉｎｃｌｕｄｉｎｇ）」などの関連用
語）は、他の特定の実施形態では、例えば、本明細書に記載された任意の合成物、組成物
、方法またはプロセスなどの実施形態が、記載された特徴「からなる」または「本質的に
からなる」でもよいことを除外することを意図されてはいない。
【００１４】
本明細書の方法および組成物は、ヒトを含む任意の哺乳動物の処置に適用される。他の
哺乳動物としては、小さな家畜、特に、これらに限定されないが、マウス、ラット、ハム
スター、モルモット、ウサギ、ネコ、イヌおよび霊長類動物を含む愛玩動物およびペット
が挙げられる。処置することができる哺乳動物としては、例えば、非ヒト霊長類動物（例
えば、サル、チンパンジー、ゴリラなど）、齧歯動物（例えば、ラット、マウス、アレチ
ネズミ、ハムスター、フェレット、ウサギ）、ウサギ目の哺乳類、ブタ（ｓｗｉｎｅ）（
例えば、ブタ、ミニブタ）、ウマ、イヌ、ネコ、ウシ、および他の家庭内、農場および動
物園の動物が挙げられる。本明細書に記載の処置を必要とする対象は、がんと診断された
、またはがんを発症するリスクのある対象とする過剰増殖性疾患の兆候を有し得るもので
ある。例示的ながんの条件は、本明細書でさらに詳細に記載される。
【００１５】
本開示に従って用いるのに適切なＧＬＡの化合物としては、以下のいずれかが挙げられ
る。本発明の理論に拘束されることなく、本明細書に記載のＧＬＡの化合物は、ＴＬＲ４
を標的とすると信じられる。ＴＬＲ４は、下流のシグナル伝達がＭｙＤ８８−およびＴＲ
ＩＦ−依存性経路の両方を介して起こる点で、ＴＬＲファミリーの中でユニークである。
全体的に、これらの経路は、ＤＣ成熟、抗原プロセシング／提示、Ｔ細胞プライミング、
およびサイトカイン（例えば、ＩＬ−１２、ＩＦＮα／βおよびＴＮＦα）の産生を促進
する（例えば、Ｉｗａｓａｋｉら、Ｎａｔ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．５：９８７頁（２００４年
）を参照）。
【００１６】
式（Ｉａ）：
【００１７】
【化２】
2019031540.tif 000003
（式中、Ｒ１、Ｒ３、Ｒ５およびＲ６はＣ１１〜Ｃ２０アルキルであり；Ｒ２およびＲ４
はＣ１２〜Ｃ２０アルキルである。）
のグルコピラノシルリピドＡ（ＧＬＡ）化合物またはその薬学的に許容される塩；より具
体的な実施形態では、ＧＬＡは、Ｒ１、Ｒ３、Ｒ５およびＲ６がＣ１１〜Ｃ１４アルキル
であり；Ｒ２およびＲ４がＣ１２〜Ｃ１５アルキルである上記式（Ｉａ）を有し；さらに
より具体的な実施形態では、ＧＬＡは、Ｒ１、Ｒ３、Ｒ５およびＲ６がＣ１１アルキルま
たはウンデシルであり；Ｒ２およびＲ４がＣ１３アルキルまたはトリデシルである上記式
（Ｉａ）を有し；
あるいは、式（Ｉｂ）：
【００１８】
【化３】
2019031540.tif 000004
（式中、Ｌ１、Ｌ２、Ｌ３、Ｌ４、Ｌ５およびＬ６は、同一または異なり、独立して、Ｏ
、ＮＨおよび（ＣＨ２）から選択され；Ｌ７、Ｌ８、Ｌ９およびＬ１０は、同一または異
なり、任意の出現位置において存在しないか、またはＣ（＝Ｏ）のいずれかであることが
でき；Ｙ１は酸官能基であり；Ｙ２およびＹ３は、同一または異なり、それぞれ独立して
、ＯＨ、ＳＨおよび酸官能基から選択され；Ｙ４はＯＨまたはＳＨであり；Ｒ１、Ｒ３、
Ｒ５およびＲ６は、同一または異なり、それぞれ独立して、Ｃ８〜Ｃ１３アルキルの群か
ら選択され；そして、Ｒ２およびＲ４は、同一または異なり、それぞれ独立して、Ｃ６〜
Ｃｌ１アルキルの群から選択される。）
のグルコピラノシルリピドＡ（ＧＬＡ）化合物またはその薬学的に許容される塩。
【００１９】
ＤＳＬＰ化合物は、グルコースとアミノ置換グルコースから選択される２つの単糖基が
一緒になることにより形成された二糖（ＤＳ）基を含むＧＬＡの一種であり、その二糖は
、ホスフェート（Ｐ）基と複数の脂質（Ｌ）基の両方に化学的に結合している。より具体
的には、二糖は、それぞれが６個の炭素を有する２つの単糖単位から形成されているもの
として視覚化することができる。二糖では、単糖の１つは還元末端を形成し、他の単糖は
非還元末端を形成するであろう。便宜上、従来の炭化水素番号命名法に従って、還元末端
を形成する単糖の炭素は、１、２、３、４、５および６位に位置するとして表記され、他
方、非還元末端を形成する単糖の対応する炭素は、１’、２’、３’、４’、５’および
６’位に位置するとして表記されるであろう。ＤＳＬＰでは、非還元末端の１位の炭素は
、還元末端の６’位の炭素に、エーテル（−０−）またはアミノ（−ＮＨ−）基のいずれ
かを介して、連結されている。ホスフェート基は、好ましくは非還元末端の４’の炭素を
介して、二糖に連結されるであろう。脂質基の各々が、アミド（−ＮＨ−Ｃ（Ｏ）−）ま
たはエステル（−Ｏ−Ｃ（Ｏ）−）結合を介して、カルボニル基が脂質基に結合して、二
糖へ結合されるであろう。二糖は、アミドまたはエステル基に連結することができる７個
の位置、すなわち、非還元末端の２’、３’および６’位、および還元末端の１、２、３
および４位を有している。
【００２０】
例えば、脂質基は、少なくとも３個の炭素、または少なくとも６個の炭素、好ましくは
少なくとも８個の炭素、そして、より好ましくは少なくとも１０個の炭素を有し、それぞ
れの場合において、脂質基は、２４個以下の炭素、２２個以下の炭素、または２０個以下
の炭素を有する。一実施形態では、脂質基は一緒になって、６０〜１００個の炭素、好ま
しくは７０〜９０個の炭素を提供する。脂質基は炭素原子および水素原子のみから構成さ
れてもよく、すなわち、脂質基はヒドロカルビル脂質基であってもよく、または、脂質基
は１つのヒドロキシル基を含んでもよく、すなわち、脂質基はヒドロキシル置換された脂
質基でもよく、または、脂質基は、エステル基のカルボニル（−Ｃ（Ｏ）−）を介してヒ
ドロカルビル脂質基またはヒドロキシル置換された脂質基に順に結合したエステル基、す
なわち、エステル置換脂質を含んでもよい。ヒドロカルビル脂質基は飽和または不飽和で
もよく、不飽和ヒドロカルビル脂質基は隣接する炭素原子間に１つの二重結合を有するで
あろう。
【００２１】
ＤＳＬＰは、３または４または５または６または７個の脂質基を含む。一態様では、Ｄ
ＳＬＰは３〜７個の脂質基を含み、別の態様では、ＤＳＬＰは４〜６個の脂質を含む。一
態様では、脂質基は、独立して、ヒドロカルビル脂質、ヒドロキシル置換された脂質およ
びエステル置換脂質から選択される。一態様では、１、４’および６’位はヒドロキシル
で置換される。一態様では、単糖単位はそれぞれグルコサミンである。ＤＳＬＰは、遊離
酸の形態、または塩の形態、例えば、アンモニウム塩であってもよい。
【００２２】
特定の実施形態では、ＤＳＬＰの脂質は、以下で記述される：３’位が−Ｏ−（ＣＯ）
−ＣＨ２−ＣＨ（Ｒａ）（−Ｏ−Ｃ（Ｏ）−Ｒｂ）で置換され；２’位が−ＮＨ−（ＣＯ
）−ＣＨ２−ＣＨ（Ｒａ）（−Ｏ−Ｃ（Ｏ）−Ｒｂ）で置換され；３位が−Ｏ−（ＣＯ）
−ＣＨ２−ＣＨ（ＯＨ）（Ｒａ）で置換され；２位が−ＮＨ−（ＣＯ）−ＣＨ２−ＣＨ（
ＯＨ）（Ｒａ）で置換され；ＲａおよびＲｂのそれぞれは、デシル、ウンデシル、ドデシ
ル、トリデシル、テトラデシルから選択され、これらの用語のそれぞれは、飽和ヒドロカ
ルビル基を指す。一実施形態において、ＲａはウンデシルでＲｂはトリデシルであり、こ
の化合物は、例えば、米国特許出願公開第２００８／０１３１４６６号に「ＧＬＡ」とし
て記載されている。ＲａがウンデシルでＲｂがトリデシルである化合物は、例えば、ＰＨ
ＡＤ（商標）アジュバントとしてＡｖａｎｔｉ  Ｐｏｌａｒ  Ｌｉｐｉｄから入手可能な
ように、立体化学的に規定された形で使用することができる。
【００２３】
一態様では、ＤＳＬＰは、３Ｄ−ＭＰＬとして知られる天然由来の化合物の混合物であ
る。３Ｄ−ＭＰＬアジュバントは、ＭＰＬ（商標）アジュバントとしてグラクソスミスク
ライン社により医薬品グレードの形態で商業的に生産されている。３Ｄ−ＭＰＬは、広範
囲に、科学文献および特許文献に記載されており、例えば、ワクチンデザイン：サブユニ
ットおよびアジュバントアプローチ、Ｐｏｗｅｌｌ  Ｍ．Ｆ．とＮｅｗｍａｎ、Ｍ．Ｊ．
編、第２１章  アジュバントとしてのモノホスホリル脂質Ａ：Ｕｌｒｉｃｈ、Ｊ．Ｔ．と
Ｍｙｅｒｓ、Ｋ．Ｒ．による過去の経験と新しい方向性、Ｐｌｅｎｕｍ  Ｐｒｅｓｓ、ニ
ューヨーク（１９９５）および米国特許第４，９１２，０９４号を参照。
【００２４】
別の態様では、ＤＳＬＰ化合物は、（ｉ）非還元末端グルコサミンのヘキソサミン１位
と還元末端グルコサミンのヘキソサミン６位との間のエーテル結合を介して、非還元末端
グルコサミンに連結された還元末端グルコサミンを有するジグルコサミンバックボーン；
（ｉｉ）非還元末端グルコサミンのヘキソサミン４位に結合したＯ−ホスホリル基；およ
び（ｉｉｉ）６個までの脂肪アシル鎖を含み；脂肪アシル鎖の１つがエステル結合を介し
て還元末端グルコサミンの３−ヒドロキシに結合し；脂肪アシル鎖の１つがアミド結合を
介して非還元末端グルコサミンの２−アミノに結合し、そしてエステル結合を介して１２
個より多い炭素原子のアルカノイル鎖に連結したテトラデカノイル鎖を含み；そして、脂
肪アシル鎖の１つがエステル結合を介して非還元末端グルコサミンの３−ヒドロキシに結
合し、そしてエステル結合を介して１２個より多い炭素原子のアルカノイル鎖に連結した
テトラデカノイル鎖を含むものとして記載することができる。例えば、米国特許出願公開
第２００８／０１３１４６６号を参照。
【００２５】
別の態様では、ＧＬＡの化合物は、米国特許出願公開第２０１０／０３１０６０２号に
記載されているように６個の脂質基を有する合成二糖であってもよい。
【００２６】
別の態様では、ＤＳＬＰは、化学式（ＩＩ）：
【化４】
2019031540.tif 000005
(I)
（式中、部分Ａ１およびＡ２は、独立して、水素、ホスフェートおよびリン酸塩からなる
群から選択される。）
で記載される。ナトリウムとカリウムは、リン酸塩の例示的な対イオンである。部分Ｒ１
、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５およびＲ６は、独立して、Ｃ３〜Ｃ２３で表される３〜２３個
の炭素を有するヒドロカルビルの群から選択される。追加的に明確にするために、部分が
複数のメンバーを有する特定された群「から、独立して、選択される」場合には、最初の
部分のために選択されたメンバーは、第二の部分のために選択されるメンバーの選択に、
いかなる方法においても、影響を与えまたは制限するものではないと理解すべきであるこ
とが、説明されるであろう。Ｒ１、Ｒ３、Ｒ５およびＲ６が結合する炭素原子は、非対称
であり、したがって、ＲまたはＳ立体化学のいずれかで存在してもよい。一実施形態では
、これらの炭素原子のすべてがＲ立体化学であり、別の実施形態では、これらの炭素原子
のすべてが、Ｓ立体化学である。
【００２７】
本明細書で使用される場合には、「アルキル」は、１〜２０個の炭素原子を含む、そし
て、特定の好ましい実施形態では１１〜２０個の炭素原子を含む、直鎖状または分枝状、
非環状または環状、不飽和または飽和の脂肪族炭化水素を意味する。代表的な飽和直鎖状
アルキルとしては、メチル、エチル、ｎ−プロピル、ｎ−ブチル、ｎ−ペンチル、ｎ−ヘ
キシル、そして、ウンデシル、ドデシル、トリデシル、テトラデシル、ペンタデシル、ヘ
キサデシル、ヘプタデシル、オクタデシルなどが挙げられ；飽和分枝状アルキルとしては
、イソプロピル、ｓｅｃ−ブチル、イソブチル、ｔｅｒｔ−ブチル、イソペンチルなどが
挙げられる。代表的な飽和環状アルキルとしては、シクロプロピル、シクロブチル、シク
ロペンチル、シクロヘキシルなどが挙げられ；不飽和環状アルキルとしては、シクロペン
テニルおよびシクロヘキセニルなどが挙げられる。環状アルキルは、本明細書では、「ホ
モサイクル（ｈｏｍｏｃｙｃｌｅｓ）」または「ホモ環状リング（ｈｏｍｏｃｙｌｃｉｃ
ｒｉｎｇ）」とも呼ばれる。不飽和アルキルは、隣接する炭素原子間に少なくとも１つ
の二重結合または三重結合を含む（それぞれ「アルケニル」または「アルキニル」と呼ば
れる）。代表的な直鎖状および分枝状アルケニルとしては、エチレニル、プロピレニル、
１−ブテニル、２−ブテニル、イソブチレニル、１−ペンテニル、２−ペンテニル、３−
メチル−１−ブテニル、２−メチル−２−ブテニル、２，３−ジメチル−２−ブテニルな
どが挙げられ；代表的な直鎖状および分枝アルキニルとしては、アセチレニル、プロピニ
ル、１−ブチニル、２−ブチニル、１−ペンチニル、２−ペンチニル、３−メチル−１−
ブチニルなどが挙げられる。例えば、「Ｃ１８〜１３アルキル」および「Ｃ６〜１１アル
キル」は、それぞれ、８〜１３または６〜１１個の炭素原子を含有する、上記で定義され
たアルキルを意味する。
【００２８】
本明細書で使用される場合には、「酸官能基」は、水性媒体中でプロトンを供与するこ
とができる官能基（すなわち、ブローンステッド−ローリー酸）を意味する。プロトンを
供与した後、酸官能基は、負に帯電した種（すなわち、酸官能基の共役塩基）となる。酸
官能基の例としては、これらに限定されないが、−ＯＰ（＝Ｏ）（ＯＨ）２（ホスフェー
ト）、−ＯＳ（＝Ｏ）（ＯＨ）２（スルフェート）、−ＯＳ（ＯＨ）２（スルファイト）
、−ＯＣ（ＯＨ）２（カルボキシレート）、−ＯＣ（＝Ｏ）ＣＨ（ＮＨ２）ＣＨ２Ｃ（＝
Ｏ）ＯＨ（アスパルテート）、−ＯＣ（＝Ｏ）ＣＨ２ＣＨ２Ｃ（＝Ｏ）ＯＨ（スクシネー
ト）および−ＯＣ（＝Ｏ）ＣＨ２ＯＰ（＝Ｏ）（ＯＨ）２（カルボキシメチルホスフェー
ト）が挙げられる。
【００２９】
本明細書で使用される場合には、「ヒドロカルビル」は、もっぱら水素と炭素から形成
された化学部分であって、炭素原子の配置は、直鎖状または分枝状、非環状または環状で
あってもよく、そして、隣接する炭素原子間の結合は恐らくもっぱら単結合であり、すな
わち、飽和炭化水素を提供するためであり、または任意の２個の隣接する炭素原子間に存
在する二重結合または三重結合があってもよく、すなわち、不飽和炭化水素を提供するた
めであり、およびヒドロカルビル基の炭素原子の数が３〜２４個の炭素原子の間である、
化学部分を指す。ヒドロカルビルはアルキルでもよく、代表的な直鎖状アルキルとしては
、メチル、エチル、ｎ−プロピル、ｎ−ブチル、ｎ−ペンチル、ｎ−ヘキシル、そして、
ウンデシル、ドデシル、トリデシル、テトラデシル、ペンタデシル、ヘキサデシル、ヘプ
タデシル、オクタデシルなどが挙げられ；分枝状アルキルとしては、イソプロピル、ｓｅ
ｃ−ブチル、イソブチル、ｔｅｒｔ−ブチル、イソペンチルなどが挙げられる。代表的な
飽和環状ヒドロカルビルとしては、シクロプロピル、シクロブチル、シクロペンチル、シ
クロヘキシルなどが挙げられ；不飽和環状ヒドロカルビルとしては、シクロペンテニルお
よびシクロヘキセニルなどが挙げられる。不飽和ヒドロカルビルは、隣接する炭素原子と
の間に少なくとも１つの二重結合または三重結合を含む（ヒドロカルビルが非環状の場合
には、それぞれ「アルケニル」または「アルキニル」と呼ばれ、ヒドロカルビルが少なく
とも部分的に環状の場合には、それぞれシクロアルケニルおよびシクロアルキニルと呼ば
れる）。代表的な直鎖状および分枝状アルケニルとしては、エチレニル、プロピレニル、
１−ブテニル、２−ブテニル、イソブチレニル、１−ペンテニル、２−ペンテニル、３−
メチル−１−ブテニル、２−メチル−２−ブテニル、２，３−ジメチル−２−ブテニルな
どが挙げられ；代表的な直鎖状および分枝状アルキニルとしては、アセチレニル、プロピ
ニル、１−ブチニル、２−ブチニル、１−ペンチニル、２−ペンチニル、３−メチル−１
−ブチニルなどが挙げられる。
【００３０】
式（ＩＩ）の化合物は、当該技術分野において公知の合成方法、例えば、本明細書に参
照により組み込まれるＰＣＴ国際公開第ＷＯ２００９／０３５５２８号、ならびにＷＯ２
００９／０３５５２８中に同定されていて、それらのそれぞれも本明細書に参照により組
み込まれる刊行物に開示されている合成方法によって、得ることができる。これらの化合
物のあるものはまた、商業的に入手することができる。
【００３１】
ＤＳＬＰ化合物は、当該技術分野において公知の合成方法、例えば、本明細書に参照に
より組み込まれるＰＣＴ国際公開第ＷＯ２００９／０３５５２８号、ならびにＷＯ２００
９／０３５５２８中に同定されていて、それらのそれぞれも本明細書に参照により組み込
まれる刊行物に開示されている合成方法によって、得ることができる。化学的に合成され
るＤＳＬＰ化合物、例えば、式（ＩＩ）の化合物は、存在するＤＳＬＰ分子、例えば、式
（ＩＩ）の化合物に関して少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少
なくとも９５％、または少なくとも９６％、９７％、９８％もしくは９９％純粋な調製物
を指す実質的に均一な形態で調製することができる。所定の調製物の純度の決定は、ガス
クロマトグラフィー、液体クロマトグラフィー、質量分析および／または核磁気共鳴分析
などにより、適切な分析化学手法に精通したものによって容易に行うことができる。天然
源から得られるＤＳＬＰ化合物は、典型的には、容易に化学的に純粋な形態で製造されて
おらず、したがって、合成的に調製された化合物は、本明細書に記載のがんを処置するた
めの組成物および方法における使用に好ましい。前述したように、ＤＳＬＰ化合物のある
ものは、商業的に入手することができる。１つのそのようなＤＳＬＰ化合物は、Ａｖａｎ
ｔｉ  Ｐｏｌａｒ  Ｌｉｐｉｄｓのカタログに同定される製品番号６９９８００のＡｌａ
ｂａｓｔｅｒ  ＡＬであり、以下のＥ１０と組み合わせてＥＩを参照されたい。
【００３２】
種々の実施形態では、化合物は式（ＩＩ）の化学構造を有するが、その部分Ａｌ、Ａ２
、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５およびＲ６は、以前にこれらの部分のために提供された
選択肢のサブセットから選択され、それらのサブセットはＥ１、Ｅ２などによって以下に
同定される。
【００３３】
Ｅ１：Ａ１はホスフェートまたはリン酸塩であり、Ａ２は水素である。
Ｅ２：Ｒ１、Ｒ３、Ｒ５およびＲ６はＣ３〜Ｃ２１アルキルであり、Ｒ２およびＲ４は
Ｃ５〜Ｃ２３ヒドロカルビルである。
Ｅ３：Ｒ１、Ｒ３、Ｒ５およびＲ６はＣ５〜Ｃ１７アルキルであり、Ｒ２およびＲ４は
Ｃ７〜Ｃ１９ヒドロカルビルである。
Ｅ４：Ｒ１、Ｒ３、Ｒ５およびＲ６はＣ７〜Ｃ１５アルキルであり、Ｒ２およびＲ４は
Ｃ９〜Ｃ１７ヒドロカルビルである。
Ｅ５：Ｒ１、Ｒ３、Ｒ５およびＲ６はＣ９〜Ｃ１３アルキルであり、Ｒ２およびＲ４は
Ｃ１１〜Ｃ１５ヒドロカルビルである。
Ｅ６：Ｒ１、Ｒ３、Ｒ５およびＲ６はＣ９〜Ｃ１５アルキルであり、Ｒ２およびＲ４は
Ｃ１１〜Ｃ１７ヒドロカルビルである。
Ｅ７：Ｒ１、Ｒ３、Ｒ５およびＲ６はＣ７〜Ｃ１３アルキルであり、Ｒ２およびＲ４は
Ｃ９〜Ｃ１５ヒドロカルビルである。
Ｅ８：Ｒ１、Ｒ３、Ｒ５およびＲ６はＣ１１〜Ｃ２０アルキルであり、Ｒ２およびＲ４
はＣ１２〜Ｃ２０ヒドロカルビルである。
Ｅ９：Ｒ１、Ｒ３、Ｒ５およびＲ６はＣ１１アルキルであり、Ｒ２およびＲ４はＣ１３
ヒドロカルビルである。
Ｅ１０：Ｒ１、Ｒ３、Ｒ５およびＲ６はウンデシルであり、Ｒ２およびＲ４はトリデシ
ルである。
【００３４】
特定の実施形態では、Ｅ２からＥ１０のそれぞれが実施形態Ｅ１と組み合わされ、およ
び／または、Ｅ２からＥ９のヒドロカルビル基はアルキル基、好ましくは直鎖状アルキル
基である。
【００３５】
米国特許公開第２００８／０１３１４６６号は、ＧＬＡ化合物のための水性製剤（ＡＦ
）および安定なエマルジョン製剤（ＳＥ）などの製剤を提供するものであり、これらの製
剤は、式（Ｉ）の化合物のいずれかのために使用することができる。
【００３６】
本発明は、がん患者における免疫応答を刺激するための組成物を提供する。典型的には
、免疫応答は、これらに限定されないが、可溶性免疫グロブリンまたは抗体；サイトカイ
ン、リンホカイン、ケモカイン、ホルモン、成長因子および同種のものなどの可溶性の媒
介物質、加えて他の可溶性の低分子ペプチド、炭水化物、ヌクレオチドおよび／または脂
質媒介物質；免疫系細胞の機能的または構造的特性の変更、例えば細胞の増殖、運動性の
変更、特異的遺伝子発現などの特殊化した活性の誘導または細胞溶解性の挙動によって決
定されるような細胞の活性化状態の変化；表面抗原発現プロファイルの変更またはアポト
ーシス（プログラム細胞死）の開始などの、免疫系細胞による細胞分化；細胞傷害性Ｔ細
胞、活性化されたマクロファージまたはナチュラルキラー細胞の増加；または免疫応答の
存在を検出することができる他のあらゆる基準のインビボもしくはインビトロでの決定な
どの様々な周知のパラメーターのいずれかによって検出することができる。
【００３７】
これらのアッセイおよび類似のアッセイを行うための手法は広く知られており、例えば
、Ｌｅｆｋｏｖｉｔｓ（Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｙ  Ｍｅｔｈｏｄｓ  Ｍａｎｕａｌ：Ｔｈｅ
Ｃｏｍｐｒｅｈｅｎｓｉｖｅ  Ｓｏｕｒｃｅｂｏｏｋ  ｏｆ  Ｔｅｃｈｎｉｑｕｅｓ、
１９９８年；Ｃｕｒｒｅｎｔ  Ｐｒｏｔｏｃｏｌｓ  ｉｎ  Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｙも参照
；例えば、Ｗｅｉｒ、Ｈａｎｄｂｏｏｋ  ｏｆ  Ｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔａｌ  Ｉｍｍｕｎ
ｏｌｏｇｙ、１９８６年  Ｂｌａｃｋｗｅｌｌ  Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ、Ｂｏｓｔｏｎ、
ＭＡ；ＭｉｓｈｅｌｌおよびＳｈｉｇｉｉ（編）Ｓｅｌｅｃｔｅｄ  Ｍｅｔｈｏｄｓ  ｉ
ｎ  Ｃｅｌｌｕｌａｒ  Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｙ、１９７９年  Ｆｒｅｅｍａｎ  Ｐｕｂｌ
ｉｓｈｉｎｇ、Ｓａｎ  Ｆｒａｎｃｉｓｃｏ、ＣＡ；ＧｒｅｅｎおよびＲｅｅｄ、１９９
８年  Ｓｃｉｅｎｃｅ  ２８１巻：１３０９頁ならびにそれらにおいて引用された文献も
参照。）で見出すこともできる。
【００３８】
腫瘍反応性Ｔ細胞増殖の検出は、様々な公知の技術によって達成される可能性がある。
例えば、Ｔ細胞の増殖は、ＤＮＡ合成速度を測定することによって検出することができ、
腫瘍特異性は、候補の腫瘍反応性Ｔ細胞が晒される刺激（例えば、特異的な望ましい腫瘍
または対照抗原をパルスした抗原提示細胞など）を制御することによって決定することが
できる。増殖するように刺激されたＴ細胞は、ＤＮＡ合成速度の増加を示す。ＤＮＡ合成
速度の典型的な測定方法は、例えば、新たに合成されたＤＮＡに取り込まれるヌクレオシ
ド前駆体であるトリチウム化チミジンを用いたＴ細胞のパルス標識培養（ｐｕｌｓｅ−ｌ
ａｂｅｌｉｎｇ  ｃｕｌｔｕｒｅ）によるものである。取り込まれたトリチウム化チミジ
ンの量は、液体シンチレーション分光光度計を使用して決定できる。Ｔ細胞の増殖を検出
する他の方法としては、インターロイキン−２（ＩＬ−２）産生、Ｃａ２＋フラックス、
または色素の摂取、例えば３−（４，５−ジメチルチアゾール−２−イル）−２，５−ジ
フェニル−テトラゾリウムの増加を測定することが挙げられる。その代わりに、リンホカ
イン（例えばインターフェロン−ガンマ）の合成を測定してもよいし、または特定の抗原
に応答する可能性があるＴ細胞の相対数を定量してもよい。
【００３９】
抗体産生（例えば、腫瘍特異的抗体の産生）の検出は、例えば、ラジオイムノアッセイ
（ＲＩＡ）、酵素結合免疫吸着検査法（ＥＬＩＳＡ）、平衡透析またはウェスタンブロッ
ティングを含む固相免疫ブロッティングなどのインビトロの方法論を使用して、本発明に
係るＧＬＡ組成物で処置された宿主からのサンプル（例えば、血清、血漿または血液など
の免疫グロブリンを含有するサンプル）をアッセイすることによって達成することができ
る。好ましい実施形態において、ＥＬＩＳＡアッセイはさらに、例えばアッセイの感受性
を強化するために、標的腫瘍抗原に特異的な固相モノクローナル抗体を用いた標的腫瘍抗
原の腫瘍抗原捕捉固定を包含していてもよい。また可溶性媒介物質（例えば、サイトカイ
ン、ケモカイン、リンホカイン、プロスタグランジンなど）の詳細は、例えば、商業的な
供給源（例えば、Ｓｉｇｍａ、Ｓｔ．Ｌｏｕｉｓ、ＭＯ；Ｒ＆Ｄ  Ｓｙｓｔｅｍｓの２０
０６年カタログ、Ｒ＆Ｄ  Ｓｙｓｔｅｍｓ、Ｍｉｎｎｅａｐｏｌｉｓ、ＭＮも参照）から
容易に入手できる方法、器具および試薬を使用した酵素結合免疫吸着検査法（ＥＬＩＳＡ
）によっても容易に決定することができる。
【００４０】
当事業分野で周知の慣例的なアッセイを使用して、他の免疫学的なパラメーターをいく
つでもモニターすることが可能である。このようなアッセイとしては、例えば、抗体依存
性細胞媒介性細胞傷害（ＡＤＣＣ）アッセイ、インビトロでの二次抗体応答、十分に確立
されたマーカー抗原系を使用した様々な末梢血液またはリンパ系単核細胞の亜集団のフロ
ー免疫細胞蛍光分析（ｆｌｏｗ  ｉｍｍｕｎｏｃｙｔｏｆｌｕｏｒｉｍｅｔｒｉｃ  ａｎ
ａｌｙｓｉｓ）、免疫組織化学または他の関連アッセイが挙げられる。これらのアッセイ
および他のアッセイは、例えば、Ｒｏｓｅら（編）、Ｍａｎｕａｌ  ｏｆ  Ｃｌｉｎｉｃ
ａｌ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ  Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｙ、第５版、１９９７年  Ａｍｅｒｉ
ｃａｎ  Ｓｏｃｉｅｔｙ  ｏｆ  Ｍｉｃｒｏｂｉｏｌｏｇｙ、Ｗａｓｈｉｎｇｔｏｎ、Ｄ
Ｃで見出すことができる。
【００４１】
したがって、本明細書中で提供されるＧＬＡ組成物は、がん患者において、ＴＨ１型Ｔ
リンパ球応答、ＴＨ２型Ｔリンパ球応答、細胞傷害性Ｔリンパ球（ＣＴＬ）応答、抗体応
答、サイトカイン応答、リンホカイン応答、ケモカイン応答、および炎症性応答から選択
される少なくとも１種の免疫応答を惹起または強化することができるものと考えられる。
所定の実施形態において、免疫応答としては、ＣＤ４＋ＦｏｘＰ３＋Ｔ調節性細胞の数の
減少などの調節性Ｔ細胞の抑制を挙げることができる。別の実施形態において、免疫応答
は、腫瘍内のＣＤ８＋Ｔエフェクター細胞の数の増加を含む。所定の実施形態において、
免疫応答は、インターフェロン−ガンマ（ＩＦＮ−γ）、腫瘍壊死因子−アルファ（ＴＮ
Ｆ−α）から選択される１種または複数のサイトカインの産生、ＩＬ−１、ＩＬ−２、Ｉ
Ｌ−３、ＩＬ−４、ＩＬ−６、ＩＬ−８、ＩＬ−１０、ＩＬ−１２、ＩＬ−１３、ＩＬ−
１６、ＩＬ−１８およびＩＬ−２３から選択される１種または複数のインターロイキンの
産生、ＭＩＰ−１α、ＭＩＰ−１β、ＲＡＮＴＥＳ、ＣＣＬ４およびＣＣＬ５から選択さ
れる１種または複数のケモカインの産生、ならびにメモリーＴ細胞応答、メモリーＢ細胞
応答、エフェクターＴ細胞応答、細胞傷害性Ｔ細胞応答およびエフェクターＢ細胞応答か
ら選択されるリンパ球応答の少なくとも１つを含んでいてもよい。例えば、ＷＯ９４／０
０１５３；ＷＯ９５／１７２０９；ＷＯ９６／０２５５５；Ｕ．Ｓ．６，６９２，７５２
；Ｕ．Ｓ．７，０８４，２５６；Ｕ．Ｓ．６，９７７，０７３；Ｕ．Ｓ．６，７４９，８
５６；Ｕ．Ｓ．６，７３３，７６３；Ｕ．Ｓ．６，７９７，２７６；Ｕ．Ｓ．６，７５２
，９９５；Ｕ．Ｓ．６，０５７，４２７；Ｕ．Ｓ．６，４７２，５１５；Ｕ．Ｓ．６，３
０９，８４７；Ｕ．Ｓ．６，９６９，７０４；Ｕ．Ｓ．６，１２０，７６９；Ｕ．Ｓ．５
，９９３，８００；Ｕ．Ｓ．５，５９５，８８８；Ｓｍｉｔｈら、１９８７年  Ｊ  Ｂｉ
ｏｌ  Ｃｈｅｍ．２６２巻：６９５１頁；Ｋｒｉｅｇｌｅｒら、１９８８年  Ｃｅｌｌ  
５３巻：４５  ５３頁；Ｂｅｕｔｌｅｒら、１９８６年  Ｎａｔｕｒｅ  ３２０巻：５８
４頁；Ｕ．Ｓ．６，９９１，７９１；Ｕ．Ｓ．６，６５４，４６２；Ｕ．Ｓ．６，３７５
，９４４を参照されたい。
【００４２】
医薬組成物、送達および使用法
実施形態の例では、本明細書に記載のＧＬＡ化合物は、０．１〜１０μｇ／用量、もし
くは０．１〜２０μｇ／用量、０．１〜３０μｇ／用量、０．１〜４０μｇ／用量、もし
くは０．１〜５０μｇ／用量、もしくは１〜２０μｇ／用量、１〜３０μｇ／用量、もし
くは１〜４０μｇ／用量、もしくは１〜５０μｇ／用量、もしくは０．２〜５μｇ／用量
の量で、または０．５〜２．５μｇ／用量の量で、または０．５〜８μｇ／用量、もしく
は０．５〜１５μｇ／用量の量で、組成物中に存在している。用量は、例えば０．５μｇ
／用量、０．６μｇ／用量、０．７μｇ／用量、０．８μｇ／用量、０．９μｇ／用量、
１．０μｇ／用量、２．０μｇ／用量、３．０μｇ／用量、３．５μｇ／用量、４．０μ
ｇ／用量、４．５μｇ／用量、５．０μｇ／用量、５．５μｇ／用量、６．０μｇ／用量
、６．５μｇ／用量、７．０μｇ／用量、７．５μｇ／用量、８．０μｇ／用量、９．０
μｇ／用量、１０．０μｇ／用量、１１．０μｇ／用量、１２．０μｇ／用量、１３．０
μｇ／用量、１４．０μｇ／用量、または１５．０μｇ／用量でもよい。用量は、対象の
体質量、体面積、重量、血液量、または送達経路に応じて調節し得る。一実施形態では、
１ｍｌ中ＧＬＡ２μｇ、３μｇ、４μｇ、５μｇ、６μｇ、７μｇ、８μｇ、９μｇ、１
０μｇ、１１μｇ、または１２μｇが腫瘍内に投与される。これに関して、ＧＬＡの１ｍ
ｌ用量は、腫瘍の複数のゾーン中に同量を注射してもよい。ある種の実施形態では、体重
に対してＧＬＡが約０．０１μｇ／ｋｇから約１００ｍｇ／ｋｇ、通常は皮内、腫瘍内、
皮下、筋肉内もしくは静脈内経路で、または他の経路により投与されよう。ある種の実施
形態では、ＧＬＡの投与量は、約０．１μｇ／ｋｇから約１ｍｇ／ｋｇであり、ある種の
実施形態では、約０．１μｇ／ｋｇ、０．２μｇ／ｋｇ、０．３μｇ／ｋｇ、０．４μｇ
／ｋｇ、０．５μｇ／ｋｇ、０．６μｇ／ｋｇ、０．７μｇ／ｋｇ、０．８μｇ／ｋｇ、
０．９μｇ／ｋｇ、１μｇ／ｋｇ、２μｇ／ｋｇ、３μｇ／ｋｇ、４μｇ／ｋｇ、５μｇ
／ｋｇ、６μｇ／ｋｇ、７μｇ／ｋｇ、８μｇ／ｋｇ、９μｇ／ｋｇ、１０μｇ／ｋｇか
ら約２００μｇ／ｋｇの範囲にある。投与の回数および頻度がホストの反応に依存するこ
とは、当業者には明白であろう。本明細書に記載するように、適正な用量は、患者（例え
ばヒト）の状態、すなわち病期、全体的健康状態、ならびに年齢、性別および重量、さら
に医療当事者になじみの他の要因にも依存し得る。本明細書のどこかで触れたように、本
明細書に記載のＧＬＡ組成物は抗原を含まない。
【００４３】
医薬組成物は、例えば局所、経口、経腸、経鼻（すなわち鼻腔内）、吸入、くも膜下腔
内、経直腸、経膣、眼内、結膜下、頬側、舌下、肺内、皮内、結節内、腫瘍内、経皮性、
または皮下、経皮、静脈内、筋肉内、胸骨内、海綿体内、外尿道口内、腫瘍内、頭蓋内、
脊髄内もしくは尿道内の注射もしくは注入を含む非経口的投与を含めた、任意の適正な投
与方式のために製剤化し得る。投与方法は、本明細書により詳細に記載されている。
【００４４】
本明細書に記載するようなＧＬＡを含み、場合により１種または複数の追加の治療剤を
さらに含む組成物は、ＧＬＡまたは１種もしくは複数の追加の治療剤の有効用量を与える
任意の経路による送達のために、製剤化し得る。このような投与方法は、経口投与または
注射による送達を包含し、液体形態でもよい。液体医薬組成物は、例えば以下のものの１
種または複数：注射水、食塩水、好ましくは生理食塩水、リンゲル液、等張塩化ナトリウ
ムなどの滅菌希釈剤、溶媒もしくは懸濁媒体として働き得る不揮発性油、ポリエチレング
リコール、グリセリン、プロピレングリコール、または他の溶媒；抗細菌剤；抗酸化剤；
キレート剤；緩衝剤、および浸透圧調節用の塩化ナトリウムもしくはデキストロースなど
の作用剤、を含んでもよい。非経口製剤は、ガラス製またはプラスチック製のアンプル、
使い捨てシリンジまたは多回用量バイアルに封入することができる。生理食塩水の使用が
好ましく、注射用医薬組成物は、好ましくは滅菌されている。
【００４５】
ＧＬＡ組成物は、少なくとも１種の生理学的（または薬学的）に許容される、または適
切な賦形剤をさらに含み得る。当業者に公知で、医薬組成物に使用するための生理学的ま
たは薬学的に適切な任意の賦形剤または担体（すなわち、有効成分の活性を妨害しない非
毒性物質）が、本明細書に記載の組成物中に使用できる。例示的な賦形剤には、タンパク
質の安定性および完全性を維持する希釈剤および担体が挙げられる。治療用途の賦形剤は
周知であり、例えば、Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ：Ｔｈｅ  Ｓｃｉｅｎｃｅ  ａｎｄ  Ｐｒａｃ
ｔｉｃｅ  ｏｆ  Ｐｈａｒｍａｃｙ（Ｇｅｎｎａｒｏ、２１ｓｔ  Ｅｄ．Ｍａｃｋ  Ｐｕ
ｂ．Ｃｏ．、Ｅａｓｔｏｎ、ＰＡ（２００５））に記載されており、本明細書により詳細
に記載されている。
【００４６】
治療用途の「薬学的に許容される担体」は製薬技術で周知であり、例えば、Ｒｅｍｉｎ
ｇｔｏｎｓ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｓｃｉｅｎｃｅｓ、Ｍａｃｋ  Ｐｕｂｌｉ
ｓｈｉｎｇ  Ｃｏ．（Ａ．Ｒ．Ｇｅｎｎａｒｏ  ｅｄｉｔ，１９８５）に記載されている
。例えば、生理的ｐＨの滅菌した塩水およびリン酸緩衝塩水を使用してもよい。医薬組成
物中には、保存剤、安定剤、色素および香味剤でさえ供給され得る。例えば、安息香酸ナ
トリウム、ソルビン酸、およびｐ−ヒドロキシ安息香酸のエステルを、保存剤として添加
してもよい。同書の１４４９頁。その上、抗酸化剤および懸濁剤を使用してもよい。同書
。
【００４７】
「薬学的に許容される塩」とは、本発明の化合物と、有機酸もしくは無機酸（酸付加塩
）または有機塩基もしくは無機塩基（塩基付加塩）の組合せから誘導される、本発明の化
合物の塩を指す。本発明の組成物は、遊離塩基または塩のいずれの形態でも使用でき、両
形態とも本発明の範囲に入ると見なされる。
【００４８】
医薬組成物は、その組成物が患者に投与されることを可能にする任意の形態でもよい。
例えば、組成物は、固体、液体または気体（エアロゾル）の形態でもよい。医薬組成物は
、任意の経路により投与してもよい。典型的な投与経路には、限定せずに、経口、舌下、
頬側、局所、非経口、経直腸、経膣、鼻腔内（例えばスプレーとして）、および肺内投与
が挙げられる。本明細書で使用する場合の非経口という用語は、イオン泳動（例えば、米
国特許第７０３３５９８号、第７０１８３４５号、第６９７０７３９号）、音波泳動（例
えば、米国特許第４７８０２１２号、第４７６７４０２号、第４９４８５８７号、第５６
１８２７５号、第５６５６０１６号、第５７２２３９７号、第６３２２５３２号、第６０
１８６７８号）、熱的（例えば、米国特許第５８８５２１１号、第６６８５６９９号）、
受動経皮（例えば、米国特許第３５９８１２２号、第３５９８１２３号、第４２８６５９
２号、第４３１４５５７号、第４３７９４５４号、第４５６８３４３号、第５４６４３８
７号、英国特許明細書第２２３２８９２号、米国特許第６８７１４７７号、第６９７４５
８８号、第６６７６９６１号）、マイクロニードル（例えば、米国特許第６９０８４５３
号、第５４５７０４１号、第５５９１１３９号、第６０３３９２８号）による投与が含ま
れ、皮下注射、静脈内、筋肉内、胸骨内、海綿体内、くも膜下腔内、結節内、外尿道口内
、尿道内、腫瘍内の注射または注入技法も含まれる。特定の実施形態では、本明細書に記
載するような組成物は、イオン泳動、マイクロキャビテーション、音波泳動またはマイク
ロニードルから選択される技法によって、皮内投与される。
【００４９】
医薬組成物は、この組成物を患者に投与した際、その中に含有される有効成分が生体利
用可能となるように製剤化される。患者に投与することになる組成物は、１つまたは複数
の投与単位の形態を取っており、例えば、一錠が単一の投与単位でもよく、エアロゾル形
態の本発明の１種または複数の化合物の容器は、複数の投与単位を保持してもよい。
【００５０】
経口投与の場合、賦形剤および／または結合剤が存在してもよい。例としては、スクロ
ース、カオリン、グリセリン、澱粉デキストリン、アルギン酸ナトリウム、カルボキシメ
チルセルロース、およびエチルセルロースがある。着色剤および／または香味剤が存在し
てもよい。被膜の殻を使用してもよい。
【００５１】
組成物は、液体、例えばエリキシル、シロップ、溶液、エマルジョンまたは懸濁液の形
態でもよい。液体は、２例として、経口投与または注射による送達のためでもよい。経口
投与を意図している場合、好ましい組成物は、甘味剤、保存剤、色素／着色剤および香味
増強剤のうち１種または複数を含有する。注射により投与することを意図した組成物では
、界面活性剤、保存剤、湿潤剤、分散剤、懸濁剤、緩衝剤、安定剤および等張剤のうち、
１種または複数を含んでもよい。
【００５２】
本明細書で使用する液体医薬組成物は、溶液、懸濁液または他の類似形態の形態であろ
うが、以下の担体または賦形剤：滅菌希釈剤として、注射水、食塩水、好ましくは生理食
塩水、リンゲル液、等張塩化ナトリウム、溶媒もしくは懸濁媒体として働き得る不揮発性
油として、スクワレン、スクワラン、鉱油、モノオレイン酸マンニド、コレステロールお
よび／または合成モノもしくはジグリセリド、ポリエチレングリコール、グリセリン、プ
ロピレングリコール、または他の溶媒など；ベンジルアルコールまたはメチルパラベンな
どの抗細菌剤；アスコルビン酸または亜硫酸水素ナトリウムなどの抗酸化剤；エチレンジ
アミン四酢酸などのキレート剤；酢酸塩、クエン酸塩またはリン酸塩などの緩衝剤、およ
び浸透圧調節用の塩化ナトリウムもしくはデキストロースなどの作用剤のうち、１種また
は複数を含んでもよい。非経口製剤は、ガラス製またはプラスチック製のアンプル、使い
捨てシリンジまたは多回用量バイアルに封入することができる。注射用医薬組成物は、好
ましくは滅菌済みである。
【００５３】
特定の実施形態では、本発明の組成物は、０．２μｍ未満の安定な水性懸濁物を含み、
リン脂質、脂肪酸、界面活性剤、洗浄剤、サポニン、フッ素化脂質などからなる群から選
択される少なくとも１つの成分をさらに含む。このような安定な水性製剤は、ミセル製剤
でもよい。
【００５４】
別の実施形態では、本発明の組成物は、粉末または液体いずれかの製剤として、エアロ
ゾル化できる方法で製剤化される。
【００５５】
医薬組成物中に他の成分を含めること、例えば、それだけに限らないが、油中水エマル
ジョン、生分解性オイル媒体、水中油エマルジョン、リポソーム、ミセル成分、微粒子、
生分解性マイクロカプセル、およびリポソームを含めることも、望ましいことがある。
【００５６】
ある種の実施形態では、ＧＬＡ組成物は、米国特許第８２７３３６１号、第８３４３５
１２号に記載のように、または国際公開出願のＷＯ第２００８／１５３５４１号、ＷＯ第
２００９／１４３４５７号に記載のように製剤化されるが、例外は、本発明においては抗
原が含まれないことである。他の適切な製剤化は、ＷＯ第２０１３／１１９８５６号に記
載されているが、やはり抗原は全く含まれない。
【００５７】
特定の実施形態では、本明細書に記載するようなＧＬＡを含む組成物は、安定な水中油
エマルジョンおよび代謝性オイルを含む。ある特定の実施形態では、本発明の組成物は、
ＧＬＡが油相に取り込まれた水中油のエマルジョンを含む。ある種の実施形態では、エマ
ルジョンの油相が代謝性オイルを含む。代謝性オイルという用語の意味は、当技術分野で
周知である。代謝性とは、「代謝によって変換できる」と定義することができる（Ｄｏｒ
ｌａｎｄ’ｓ  ｉｌｌｕｓｔｒａｔｅｄ  Ｍｅｄｉｃａｌ  Ｄｉｃｔｉｏｎａｒｙ、Ｗ．
Ｂ．Ｓａｕｎｄｅｒｓ  Ｃｏｍｐａｎｙ、２５ｔｈ  ｅｄｉｔｉｏｎ（１９７４））。こ
のオイルは、任意の、植物体の油、植物油、魚油、動物油または合成油でもよく、レシピ
エントに毒性がなく、代謝によって変換できる。木の実（ピーナッツ油など）、種子およ
び穀粒が、植物油の一般的供給源である。合成油を使用してもよい。
【００５８】
ある種の実施形態では、追加の免疫刺激性物質が、本明細書に記載する組成物中に含ま
れてもよく、それにはＮ−アセチルムラミル−Ｌ−アラニン−Ｄ−イソグルタミン（ＭＤ
Ｐ）、グルカン、ＩＬ１２、ＧＭ  ＣＳＦ、インターフェロン−γおよびＩＬ１２を挙げ
ることができる。
【００５９】
当業者に公知の任意の適切な担体を本発明の医薬組成物中で使用し得るが、担体の種類
は、投与方式および持続放出を望むか否かに応じて変化するであろう。皮下注射などの非
経口的投与の場合、担体は、好ましくは水、食塩水、アルコール、脂肪、ワックスまたは
緩衝剤を含む。経口的投与の場合、上記担体のいずれも、またはマンニトール、ラクトー
ス、澱粉、ステアリン酸マグネシウム、サッカリンナトリウム、タルク、セルロース、グ
ルコース、スクロース、炭酸マグネシウムなどの固体担体を使用してもよい。生分解性ミ
クロスフィア（例えば、ポリ乳酸ガラクチド）も、本発明の医薬組成物用担体として使用
し得る。適切な生分解性ミクロスフィアは、例えば米国特許第４８９７２６８号および第
５０７５１０９号に開示されている。これに関して、ミクロスフィアはほぼ２５ミクロン
より大きいことが好ましい。
【００６０】
ＧＬＡを含む組成物は、緩衝剤などの希釈剤、アスコルビン酸などの抗酸化剤、グルコ
ース、スクロースまたはデキストリンを含む炭水化物、ＥＤＴＡなどのキレート剤、グル
タチオン、ならびに他の安定剤および賦形剤も、含有してもよい。中性の緩衝食塩水また
は非特異的血清アルブミンと混合した食塩水は、例示的な適正希釈剤である。好ましくは
、製品は、希釈剤として適正な賦形剤溶液（例えばスクロース）を用いて凍結乾燥物とし
て製剤化し得る。
【００６１】
ＧＬＡ組成物は、局所投与を意図してもよく、その場合担体は、適切には溶液、エマル
ジョン、軟膏またはゲルの基剤を含み得る。基剤は、例えば以下のもの：ワセリン、ラノ
リン、ポリエチレングリコール、蜜蝋、鉱油、水およびアルコールなどの希釈剤、ならび
に乳化剤および安定剤のうち、１種または複数を含み得る。増粘剤が、局所投与用医薬組
成物中に存在してもよい。経皮投与を意図するならば、該組成物は経皮パッチまたはイオ
ン泳動用具を含み得る。
【００６２】
本明細書に示す組成物は、多様な形態、例えば固体、液体、粉末、水性または凍結乾燥
形態を取ることができる。
【００６３】
本明細書に記載するようなＧＬＡを含む組成物は、１種または複数の他の治療剤の投与
と同時、その前、またはその後に投与されてもよい。これに関して、１種または複数の追
加の治療剤は、抗原、例えば腫瘍抗原を含まない。したがって、本明細書に記載のＧＬＡ
組成物は、他の治療剤および／または許容される担体もしくは賦形剤を含み得るが、該組
成物は、抗原を含まず、抗原と共に投与されることはない。本明細書に記載するようなＧ
ＬＡ組成物は、１種または複数の治療剤、担体または賦形剤と共に製剤化する限り、この
ような製剤化組成物は抗原を含んでいない（例えば、抗原は製剤の成分として添加されな
い）。
【００６４】
このような併用療法は、ＧＬＡおよび１種または複数の追加の活性剤を含有する単一の
医薬投与剤形の投与、ならびに本発明のＧＬＡおよび各活性剤を独自の個別な医薬投与剤
形中に含む各組成物の投与を包含し得る。例えば、ＧＬＡおよび他の活性剤を含む組成物
は、錠剤もしくはカプセルなどの単一の経腸的（例えば、経口）投与組成物中で一緒に患
者に投与でき、または各薬剤は、個別の経腸的（例えば、経口）投与剤形中で投与できる
。同様に、ＧＬＡおよび他の活性剤を含む組成物は、食塩水中もしくは他の生理学的に許
容される溶液中などの単一の非経口的（例えば、既知であり、本明細書に記載されている
、皮下、皮内、結節内、腫瘍内または筋肉内などの非経口経路のいずれか）投与組成物中
で一緒に患者に投与でき、または各薬剤は、個別の非経口投与剤形中で投与できる。本明
細書に記載するような併用療法は、同じ経路により投与でき、または異なる経路を用いて
投与してもよい（例えば、腫瘍内ＧＬＡ注射と、１種または複数の他の治療剤の腫瘍内注
射との組合せ、または腫瘍内ＧＬＡ注射と、１種または複数の他の治療剤の筋肉内、静脈
内、皮下もしくは他経路の投与との組合せ。本明細書に記載の併用療法で使用するために
、投与経路の任意の組合せを想定している）。個別の投与剤形を使用する場合、ＧＬＡお
よび１種または複数の追加の活性剤を含む各組成物は、本質的に同じ時刻に、すなわち同
時に、または別々にずらした時刻に、すなわち逐次に任意の順序で投与することができる
。併用療法は、以上のこれらすべての投与計画を含むと理解される。
【００６５】
したがって、ある種の実施形態では、１種または複数の他の治療剤（例えば、他の抗癌
剤、または他の緩和もしくは補助療法）と組み合わせた本開示のＧＬＡを含む組成物の投
与も想定されている。ある種の実施形態では、このような治療剤は、本明細書に記載する
ような特定の癌に対する標準治療として、当技術分野で許容し得る。想定される例示的な
治療剤には、サイトカイン、成長因子、ステロイド、ＮＳＡＩＤｓ、ＤＭＡＲＤｓ、抗炎
症剤、免疫チェックポイント阻害剤、化学療法剤、放射線治療薬、または他の活性剤およ
び補助剤が挙げられる。
【００６６】
一実施形態では、ＧＬＡを含む組成物は、１種または複数の化学療法剤を含めた１種ま
たは複数の癌治療剤と組み合わせて投与される。癌治療剤の例には、チオテパおよびシク
ロホスファミド（ＣＹＴＯＸＡＮ（商標））などのアルキル化剤；ブスルファン、インプ
ロスルファンおよびピポスルファンなどのアルキルスルホン酸塩；ベンゾドーパ、カルボ
コン、メツレドーパおよびウレドーパなどのアジリジン；エチレンイミンとアルトレート
アミン、トリエチレンメラミン、トリエチレンホスホラミド、トリエチレンチオホスホラ
ミドおよびトリメチローロメラミンを含むメチルアメラミン；クロランブシル、クロルナ
ファジン、コロホスファミド、エストラムスチン、イホスファミド、メクロレタミン、メ
クロレタミンオキシドヒドロクロリド、メルファラン、ノベンビチン、フェネステリン、
プレドニムスチン、トロホスファミド、ウラシルマスタードなどのナイトロジェンマスタ
ード；カルムスチン、クロロゾトシン、ホテムスチン、ロムスチン、ニムスチン、ラニム
スチンなどのニトロソウレア；アクラシノマイシン、アクチノマイシン、オースラマイシ
ン、アザセリン、ブレオマイシン、カクチノマイシン、カリケアマイシン、カラビシン、
カルミノマイシン、カルジノフィリン、クロモマイシン、ダクチノマイシン、ダウノルビ
シン、デトルビシン、６−ジアゾ−５−オキソ−Ｌ−ノルロイシン、ドキソルビシン、エ
ピルビシン、エソルビシン、イダルビシン、マルセロマイシン、マイトマイシン、ミコフ
ェノール酸、ノガラマイシン、オリボマイシン、ペプロマイシン、ポトフィロマイシン、
ピューロマイシン、ケラマイシン、ロドルビシン、ストレプトニグリン、ストレプトゾシ
ン、ツベルシジン、ウベニメクス、ジノスタチン、ゾルビシンなどの抗生物質；メソトレ
キセートおよび５−フルオロウラシル（５−ＦＵ）などの抗代謝物質；デノプテリン、メ
ソトレキセート、プテロプテリン、トリメトレキセートなどの葉酸類縁体；フルダラビン
、６−メルカプトプリン、チアミプリン、チオグアニンなどのプリン類縁体；アンシタビ
ン、アザシチジン、６−アザウリジン、カルモフール、シタラビン、ジデオキシウリジン
、ドキシフルリジン、エノシタビン、フロクスウリジン、５−ＦＵなどのピリミジン類縁
体；カルステロン、プロピオン酸ドロモスタノロン、エピチオスタノール、メピチオスタ
ン、テストラクトンなどのアンドロゲン；アミノグルテチミド、ミトタン、トリロスタン
などの抗副腎剤；フロリン酸などの葉酸補充剤；アセグラトン、アルドホスファミドグリ
コシド、アミノレブリン酸、アムサクリン、ベストラブシル、ビサントレン、エダトラキ
セート、デホファミン、デメコルシン、ジアジコン、エルホルミチン、酢酸エリプチニウ
ム、エトグルシド、硝酸ガリウム、ヒドロキシウレア、レンチナン、ロニダミン、ミトグ
アゾン、ミトキサントロン、モピダモール、ニトラクリン、ペントスタチン、フェナメッ
ト、ピラルビシン、ポドフィリン酸、２−エチルヒドラジド、プロカルバジン、ＰＳＫ（
登録商標）、ラゾキサン、シゾフィラン、スピロゲルマニウム、テニュアゾン酸、トリア
ジコン、２，２’，２’’−トリクロロトリエチルアミン、ウレタン、ビンデシン、ダカ
ルバジン、マンノムスチン、ミトブロニトール、ミトラクトール、ピポブロマン、ガシト
シン、アラビノシド（「Ａｒａ−Ｃ」）、シクロホスファミド、チオテパ；タキソイド、
例えばパクリタキセル（ＴＡＸＯＬ（登録商標）、Ｂｒｉｓｔｏｌ−Ｍｙｅｒｓ  Ｓｑｕ
ｉｂｂ  Ｏｎｃｏｌｏｇｙ、Ｐｒｉｃｅｔｏｎ、Ｎ．Ｊ．）およびドキセタキセル（ＴＡ
ＸＯＴＥＲＥ（登録商標）、Ｒｈｎｅ−Ｐｏｕｌｅｎｃ  Ｒｏｒｅｒ、Ａｎｔｏｎｙ、フ
ランス）；クロランブシル、ゲムシタビン、６−チオグアニン、メルカプトプリン、メソ
トレキセート；シスプラチンおよびカルボプラチンなどの白金類縁体；ビンブラスチン、
トラスツズマブ、ドセタキセル、白金、エトポシド（ＶＰ−１６）、イホスファミド、マ
イトマイシンＣ、ミトキサントロン、ビンクリスチン、ビノレルビン、ナベルビン、ノバ
ントロン、テニポシド、ダウノマイシン、アミノプテリン、キセローダ、イバンドロネー
ト、ＣＰＴ−１１、トポイソメラーゼ阻害剤ＲＦＳ２０００、ジフルオロメチロミチン（
ＤＭＦＯ）；Ｔａｒｇｒｅｔｉｎ（商標）（ベキサロテン）、Ｐａｎｒｅｔｉｎ（商標）
（アリトレチノイン）などのレチノイン酸誘導体；ＯＮＴＡＫ（商標）（デニリュウキン
ジフチトックス）、エスペラマイシン、カペシタビン、ならびに上記いずれかの薬学的
に許容される塩、酸または誘導体が挙げられる。また、この定義には、腫瘍に対するホル
モン作用を調節または阻害するように作用する抗ホルモン剤として、例えば、タモキシフ
ェン、ラロキシフェン、アロマターゼ阻害性４（５）−イミダゾール、４−ヒドロキシタ
モキシフェン、トリオキシフェン、ケトキシフェン、ＬＹ１１７０１８、オナプリストン
およびトレミフェン（ファレストン）を含む抗エストロゲン、ならびにフルタミド、ニル
タミド、ビカルタミド、リュウプロリドおよびゴセレリンなどの抗アンドロゲン、ならび
に上記いずれかの薬学的に許容される塩、酸または誘導体も含まれる。さらなる癌治療剤
には、ソラフェニブと、アファチニブ、アキシチニブ、ベバシズマブ、セツキシマブ、ク
リゾチニブ、ダサチニブ、エルロチニブ、ホスタマチニブ、ゲフィチニブ、イマチニブ、
ラパチニブ、レンバチニブ、ムブリチニブ、ニロチニブ、パニツムマブ、パゾパニブ、ペ
ガプタニブ、ラニビズマブ、ルキソリチニブ、トラスツズマブ、バンデタニブ、ベムラフ
ェニブおよびスニチニブなどの他のプロテインキナーゼ阻害剤；シロリムス（ラパマイシ
ン）、エベロリムスならびに他のｍＴＯＲ阻害剤が挙げられる。
【００６７】
別の実施形態では、本明細書におけるＧＬＡ組成物は、別の免疫刺激剤と組み合わせて
投与される。このような免疫刺激剤には、それだけに限らないが、Ｎ−アセチルムラミル
−Ｌ−アラニン−Ｄ−イソグルタミン（ＭＤＰ）、グルカン、ＩＬ−１２、ＧＭ−ＣＳＦ
、インターフェロン−γおよび抗ＣＤ４０抗体、または副刺激経路（例えば、ＣＤ２８、
ＩＣＯＳ、ＯＸ４０、ＣＤ２７など）に結合し、これを活性化する他の抗体が含まれる。
【００６８】
一実施形態では、本明細書におけるＧＬＡ組成物は、１種または複数の免疫チェックポ
イント阻害剤と組み合わせて投与される。免疫チェックポイントとは、自己寛容の維持な
らびに免疫反応の期間および大きさの調節に決定的である、免疫系の様々な阻害経路を指
す。腫瘍は、特に、腫瘍抗原に特異的なＴ細胞に対して、主要な免疫耐性機構としてある
種の免疫チェックポイント経路を使用する（例えば、Ｐａｒｄｏｌｌ、２０１２  Ｎａｔ
ｕｒｅ  １２：２５２；Ｃｈｅｎ  ａｎｄ  Ｍｅｌｌｍａｎ  ２０１３  Ｉｍｍｕｎｉｔ
ｙ  ３９：１を参照されたい）。本開示は、抗原なしにＧＬＡ組成物と組み合わせて投与
できる免疫チェックポイント阻害剤を提供する。このような併用療法は、抗癌免疫反応を
強化するために協奏的に働く。ある種のウイルスも、免疫チェックポイント経路を選択す
る機構を開発した。したがって、ある種の実施形態では、このような併用療法は、抗ウイ
ルス免疫反応を強化するために使用し得る。
【００６９】
免疫チェックポイント阻害剤には、免疫系の阻害経路を統計的に有意な方法で遮断また
は阻害する任意の作用剤が含まれる。このような阻害剤は、低分子を含んでもよく、ある
いは免疫チェックポイント受容体に結合し、これを遮断もしくは阻害する抗体もしくはそ
の抗原結合断片、または免疫チェックポイント受容体リガンドに結合し、これを遮断もし
くは阻害する抗体を含んでもよい。遮断または阻害の標的となり得る例示的な免疫チェッ
クポイント分子には、それだけに限らないが、ＣＴＬＡ−４、４−１ＢＢ（ＣＤ１３７）
、４−１ＢＢＬ（ＣＤ１３７Ｌ）、ＰＤＬ１、ＰＤＬ２、ＰＤ１、Ｂ７−Ｈ３、Ｂ７−Ｈ
４、ＢＴＬＡ、ＨＶＥＭ、ＴＩＭ３、ＧＡＬ９、ＬＡＧ３、ＴＩＭ３、Ｂ７Ｈ３、Ｂ７Ｈ
４、ＶＩＳＴＡ、ＫＩＲ、２Ｂ４（ＣＤ２分子ファミリーに属し、すべてのＮＫ，γδお
よび記憶ＣＤ８＋（αβ）Ｔ細胞上に発現する）、ＣＤ１６０（別名ＢＹ５５）およびＣ
ＧＥＮ−１５０４９が挙げられる。免疫チェックポイント阻害剤には、ＣＴＬＡ−４、Ｐ
ＤＬ１、ＰＤＬ２、ＰＤ１、Ｂ７−Ｈ３、Ｂ７−Ｈ４、ＢＴＬＡ、ＨＶＥＭ、ＴＩＭ３、
ＧＡＬ９、ＬＡＧ３、ＴＩＭ３、Ｂ７Ｈ３、Ｂ７Ｈ４、ＶＩＳＴＡ、ＫＩＲ、２Ｂ４、Ｃ
Ｄ１６０およびＣＧＥＮ−１５０４９のうち１種または複数に結合し、その活性を遮断ま
たは阻害する、抗体またはその抗原結合断片、または他の結合タンパク質が含まれる。例
示的な免疫チェックポイント阻害剤には、Ｔｒｅｍｅｌｉｍｕｍａｂ（ＣＴＬＡ−４遮断
抗体）、抗ＯＸ４０、ＰＤ−Ｌ１モノクローナル抗体（抗Ｂ７−Ｈ１、ＭＥＤＩ４７３６
）、ＭＫ−３４７５（ＰＤ−１遮断剤）、Ｎｉｖｏｌｕｍａｂ（抗ＰＤ１抗体）、ＣＴ−
０１１（抗ＰＤ１抗体）、ＢＹ５５モノクローナル抗体、ＡＭＰ２２４（抗ＰＤＬ１抗体
）、ＢＭＳ−９３６５５９（抗ＰＤＬ１抗体）、ＭＰＬＤＬ３２８０Ａ（抗ＰＤＬ１抗体
）、ＭＳＢ００１０７１８Ｃ（抗ＰＤＬ１抗体）およびＹｅｒｖｏｙ／イピリムマブ（抗
ＣＴＬＡ−４チェックポイント阻害剤）が挙げられる。
【００７０】
さらなる実施形態では、本明細書におけるＧＬＡ組成物は、他のＴＬＲ４アゴニスト、
またはＴＬＲ８アゴニスト、またはＴＬＲ９アゴニストと組み合わせて投与される。この
ようなアゴニストは、ペプチドグリカン、ポリＩ：Ｃ、ＣｐＧ、３Ｍ００３、フラジェリ
ン、および真核細胞リボソーム伸長および開始因子４ａのリーシュマニア相同体（ＬｅＩ
Ｆ）から選択し得る。
【００７１】
追加の実施形態では、本明細書におけるＧＬＡ組成物は、サイトカインと組み合わせて
投与される。「サイトカイン」とは、細胞内メディエーターとして別の細胞に作用する、
１つの細胞集団が放出するタンパク質の総称を意味する。このようなサイトカインの例は
、リンホカイン、モノカイン、および従来からのポリペプチドホルモンである。サイトカ
インの中に含まれるものには、ヒト成長ホルモン、Ｎ−メチオニルヒト成長ホルモンおよ
びウシ成長ホルモンなどの成長ホルモン；副甲状腺ホルモン、チロキシン、インスリン、
プロインスリン、レラキシン、プロレラキシン；卵胞刺激ホルモン（ＦＳＨ）、甲状腺刺
激ホルモン（ＴＳＨ）および黄体形成ホルモン（ＬＨ）などの糖タンパクホルモン；肝成
長因子、線維芽細胞成長因子、プロラクチン、胎盤性ラクトゲン、腫瘍壊死因子−αおよ
び−β、ミュラー管抑制物質、マウスゴナドトロピン関連ペプチド、インヒビン、アクチ
ビン、血管内皮成長因子、インテグリン、トロンボポエチン（ＴＰＯ）、ＮＧＦ−βなど
の神経成長因子、血小板成長因子、ＴＧＦ−αおよびＴＧＦ−βなどの形質転換成長因子
（ＴＧＦ）、インスリン様成長因子ＩおよびＩＩ、エリスロポエチン（ＥＰＯ）、骨誘導
因子，インターフェロン−α、βおよび−γなどのインターフェロン；マクロファージＣ
ＳＦ（Ｍ−ＣＳＦ）、顆粒球−マクロファージＣＳＦ（ＧＭ−ＣＳＦ）および顆粒球ＣＳ
Ｆ（Ｇ−ＣＳＦ）などのコロニー刺激因子（ＣＳＦ）；ＩＬ−１、ＩＬ−１α、ＩＬ−２
、ＩＬ−３、ＩＬ−４、ＩＬ−５、ＩＬ−６、ＩＬ−７、ＩＬ−８、ＩＬ−９、ＩＬ−１
０、ＩＬ−１１、ＩＬ−１２、ＩＬ−１５などのインターロイキン（ＩＬ）；ＴＮＦ−α
またはＴＮＦ−βなどの腫瘍壊死因子；ならびにＬＩＦおよびキットリガンド（ＫＬ）を
含む他のポリペプチド因子がある。本明細書で使用する場合、サイトカインという用語に
は、天然源または組換え細胞培養からのタンパク質、および自然配列サイトカインの生物
活性な同等物が包含される。
【００７２】
ある種の実施形態では、本明細書に記載するようなＧＬＡを含む組成物は、エンドソー
ムの酸性化を妨げ、かつ腫瘍細胞が、促進された細胞増殖および栄養素の枯渇から生き延
びるために引き起こす自食作用を阻害する、リソソーム指向性物質であるクロロキンと組
み合わせて投与し得る。より一般的には、本明細書に記載するようなＧＬＡを含む組成物
は、自食作用阻害剤、放射線増感剤または化学物質増感剤として作用する、クロロキン、
ミソニダゾール、メトロニダゾール、およびチラパザミンなどの低酸素性細胞毒素のよう
な治療剤と組み合わせて投与し得る。これに関して、クロロキンまたは他の放射線もしく
は化学物質増感剤、または自食作用阻害剤とのＧＬＡのこのような組合せは、他の癌治療
剤または放射線療法とさらに組み合わせて使用することができる。
【００７３】
別の実施形態では、本明細書に記載するようなＧＬＡを含む組成物は、「免疫原性細胞
死」と称する腫瘍細胞の死滅と同時の免疫反応の活性化を起こすことが知られている、シ
クロホスファミド、ドキソルビシン、オキサリプラチンおよびミトキサントロンなどの低
分子薬物と組み合わせて投与し得る。さらに、腫瘍細胞の免疫原性を増強することが知ら
れている、パツピロン（エポチロンＢ）、上皮成長因子受容体（ＥＧＦＲ）ターゲティン
グモノクローナル抗体７Ａ７．２７、ヒストンデアセチラーゼ阻害剤（例えば、ボリノス
タット、ロミデプシン、パノビノスタット、ベリノスタットおよびエンチノスタット）、
ｎ３−多価不飽和脂肪酸のドコサヘキサエノン酸、さらにプロテアソーム阻害剤（例えば
、ボルテゾミブ）、シコニン（紫根の主成分）、およびＴＶｅｃ（タリモジーン・ラハー
パレプベック（ｔａｌｉｍｏｇｅｎｅ  ｌａｈｅｒｐａｒｅｐｖｅｃ））などの腫瘍溶解
性ウイルスなどの薬物との組合せ。他の実施形態では、本明細書に記載するようなＧＬＡ
を含む組成物は、局所的または全身的に投与し得る、ＤＮＡメチルトランスフェラーゼ阻
害剤（例えば、デシタビン、５−アザ−２’−デオキシシチジン）などのエピジェネティ
ック療法薬と組み合わせて投与し得る。
【００７４】
別の実施形態では、本明細書に記載するようなＧＬＡを含む組成物は、ＤＣによる腫瘍
のＡＤＣＣ取込みを増加させる１種または複数の抗体と組み合わせて投与し得る。したが
って、本発明は、抗原提示細胞による腫瘍細胞またはその断片の摂取、続く免疫系への腫
瘍抗原の提示を誘起または増強する任意の分子と、ＧＬＡを含む組成物を組み合わせるこ
とを想定する。こうした分子には、受容体結合（Ｆｃまたはマンノース受容体）を誘起し
、抗原提示細胞に輸送する、抗体、抗体様分子、多重特異性多価分子および高分子などの
作用剤が含まれる。このような分子は、ＧＬＡを含む組成物と共に腫瘍内に投与するか、
または異なる経路により投与してもよい。例えば、本明細書に記載するようなＧＬＡを含
む組成物は、リツキシマブ、セツキシマブ、トラスツズマブ、カンパス、パニツムマブ、
オファツムマブ、ブレンツキシマブ、ペルツズマブ、アド−トラスツズマブエムタンシン
、オビヌツズマブ、抗ＨＥＲ１、抗ＨＥＲ２、または抗ＨＥＲ３抗体（例えば、ＭＥＨＤ
７９４５Ａ、ＭＭ−１１１、ＭＭ−１５１、ＭＭ−１２１、ＡＭＧ８８８）、抗ＥＧＦＲ
抗体（例えば、ニモツズマブ、ＡＢＴ−８０６）、または他の類似抗体の腫瘍内注射と共
に、腫瘍内に投与してもよい。Ｆｃ受容体、および細胞内取込みを誘起できる他の受容体
と係合可能な任意の多価足場、例えば、Ｆｃ断片に、または受容体と係合可能な高分子に
連結した標的に結合可能なペプチドおよび／またはタンパク質は、本明細書に記載する併
用療法に使用し得る。
【００７５】
ある種の実施形態では、ＧＬＡのこのような抗体との組合せは、副刺激シグナルを促進
する、抗ＣＴＬＡ−４など、または副刺激経路を活性化する、抗ＣＤ４０、抗ＣＤ２８、
抗ＩＣＯＳ、抗ＯＸ４０、抗ＣＤ２７各抗体などの抗体と、さらに組み合わせてもよい。
【００７６】
ＧＬＡを含む組成物は、単独で、または放射線療法、免疫チェックポイント阻害剤、化
学療法もしくは他の癌治療剤、移植、免疫療法、ホルモン療法、光線力学療法などの他の
公知の癌治療と組み合わせて投与してもよい。該組成物はまた、抗生物質と組み合わせて
投与してもよい。
【００７７】
本開示は、ＧＬＡが、癌治療のために単独療法として（例えば、ワクチンのアジュバン
トとしてではなく）使用することができるという発見に関する。したがって、本開示は、
癌に罹った哺乳動物を治療する方法であって、ＧＬＡを含む組成物の有効量を投与するこ
とを含み、該組成物が抗原を含まない（例えば、腫瘍抗原を含まない）方法を提供する。
本開示によれば、「ある抗原を含まない」または「抗原を含まない」という語句は、抗原
特異的免疫反応を引き出す目的ための抗原を含んでいない組成物を指す。その目的のため
に、抗原を実質的に欠いている組成物、または微量の抗原を含む組成物が、本開示によっ
て想定されており、但し、抗原の存在量は、その抗原に特異的な免疫反応を引き出すのに
不十分である。
【００７８】
本明細書に記載するＧＬＡ組成物は、多様な癌の治療に有用になり得る。一実施形態で
は、本明細書に記載するようなＧＬＡを含み、抗原を含まない組成物は、多様な固形腫瘍
、すなわち癌腫、肉腫およびリンパ腫の治療に有用になり得る。ある種の実施形態では、
癌が原発性固形腫瘍であり、他のある種の実施形態では、癌が転移性または続発性固形腫
瘍である。関連するある種の実施形態では、癌は、黒色腫、肺癌、子宮頚癌、卵巣癌、子
宮癌、乳癌、肝臓癌、胃癌、大腸癌、前立腺癌、膵臓癌、腎臓癌、膀胱癌、脳腫瘍、線維
肉腫、粘液肉腫、脂肪肉腫、軟骨肉腫、骨原性肉腫、脊索腫、血管肉腫、内皮肉腫、リン
パ管肉腫、腹膜偽粘液腫、リンパ管内皮肉腫、滑膜腫、中皮腫、ユーイング腫瘍、平滑筋
肉腫、横紋筋肉腫、結腸癌、膵臓癌、へん平上皮癌、基底細胞癌、腺癌、メルケル細胞癌
、汗腺癌、脂腺癌、乳頭状癌、乳頭腺癌、嚢胞腺癌、髄様癌、気管支原性癌、腎細胞癌、
肝臓癌、胆管癌、絨毛癌、精上皮腫、胎児性癌およびウィルムス腫瘍から選択される。関
連する他のある種の実施形態では、癌細胞は、精巣腫瘍、肺癌、小細胞肺癌、膀胱癌、上
皮癌、神経膠腫、多形性膠芽腫、星状細胞腫、形質細胞腫、髄芽腫、頭蓋咽頭腫、上衣細
胞腫、松果体腫、血管芽細胞腫、聴神経腫、乏突起神経膠腫、髄膜腫、黒色腫、神経芽細
胞腫、網膜芽細胞腫、白血病、リンパ腫、非ホジキンリンパ腫、多発性骨髄腫、ワルデン
ストレームマクログロブリン血症または他の癌から選択される癌に由来する。したがって
、本明細書に記載の方法は、癌の治療、症状の改善、および転移の抑制をするための方法
であって、本明細書に記載するようなＧＬＡを含む組成物の有効量を投与することを含み
、該組成物が抗原を含まない方法を包含する。本明細書に記載するように、本明細書に記
載の方法は、癌の治療、症状の改善、および転移の抑制をするための方法であって、本明
細書に記載するようにＧＬＡを含み、抗原を含まない組成物の有効量を、１種または複数
の他の治療剤の有効量と組み合わせて投与することを含む方法を包含する。一実施形態で
は、本明細書における方法は、ＧＬＡを含む組成物であり、抗原を含まない組成物と、チ
ェックポイント阻害剤または副刺激経路を刺激する抗体を含む組成物とを投与することを
含む、癌を治療する方法を含む。一実施形態では、該方法は、ＧＬＡを含む組成物であり
、抗原を含まない組成物の腫瘍内注射と、チェックポイント阻害剤または副刺激経路を刺
激する抗体（例えば、抗ＣＤ４０抗体）などの１種または複数の他の治療剤を腫瘍内に併
用投与することを伴う。該方法の一実施形態では、ＧＬＡ組成物および治療剤、例えばチ
ェックポイント阻害剤は、同時に投与される。該方法の他の実施形態では、ＧＬＡ組成物
および治療剤、例えばチェックポイント阻害剤、副刺激経路を刺激する抗体、サイトカイ
ンまたは他の治療剤は、別々の時刻に腫瘍内に投与され、例えば、チェックポイント阻害
剤は、ＧＬＡ組成物の注射の前または後のいずれかに投与される。さらなる実施形態では
、該方法は、ＧＬＡを含み、抗原を含まない組成物の腫瘍内注射と、それだけに限らない
がチェックポイント阻害剤または抗ＣＤ４０抗体などの治療剤をほぼ同時であるが、異な
る経路（例えば、腹腔内、ｉ．ｖ．、ｉ．ｍ．）によって投与することを伴う。したがっ
て、本発明のある種の実施形態では、ＧＬＡ組成物、およびそれだけに限らないがチェッ
クポイント阻害剤または抗ＣＤ４０抗体などの他の治療剤組成物は、同時または逐次に任
意の順序で投与されてもよく、しかも同じ経路により同じ部位に投与されてもよく、また
は異なる経路により異なる部位に投与されてもよい。
【００７９】
キットは、場合により、バイアルまたはブリスターまたはカプセルまたはプレフィルシ
リンジなどの容器中にある、ＧＬＡ組成物の１用量または複数用量と、場合により、１種
または複数の他の治療剤を収容し得る。キットは、説明書も収容し得る。説明書は、対象
の適正状態を判定する方法、適正な投与量、および組成物を投与するための適正な投与法
を含めた投与の方法を通常記載している。説明書は、治療期間に亘り対象をモニターする
ための指針も含むことができる。
【００８０】
ここに提供されるキットは、本明細書に記載の各組成物を対象に投与するための用具も
含むことができる。薬剤を投与するための当技術分野で公知の各種用具のいずれでも、本
明細書に提供されるキット中に含めることができる。例示的な用具には、それだけに限ら
ないが、皮下注射針、静脈内注射針、マイクロニードル、カテーテル、無針注射用具、エ
アロゾル散布器、吸入器またはネブライザーまたはアトマイザーまたはマイクロスプレー
器具、および点眼具などの液体ディスペンサーが挙げられる。通常、組成物を投与するた
めの用具は、キットの有効成分に適合している。
【００８１】
本発明の実施形態としては、これらに限定されないが、以下のものが挙げられる。
１．有効量のＧＬＡ含有組成物を投与することを含む、がんに罹っている哺乳動物の処
置方法であって、前記組成物は、
（ａ）式：
【００８２】
【化５】
2019031540.tif 000006
（式中、
Ｒ１、Ｒ３、Ｒ５およびＲ６は、Ｃ１１〜Ｃ２０アルキルであり、
Ｒ２およびＲ４は、Ｃ１２〜Ｃ２０アルキルである）
のＧＬＡと、
（ｂ）薬学的に許容される担体または賦形剤と
を含み、抗原を含まない、処置方法。
【００８３】
２．哺乳動物におけるがんの処置で使用するための有効量のＧＬＡ含有組成物であって
、
（ａ）式：
【００８４】
【化６】
2019031540.tif 000007
（式中、
Ｒ１、Ｒ３、Ｒ５およびＲ６は、Ｃ１１〜Ｃ２０アルキルであり、
Ｒ２およびＲ４は、Ｃ１２〜Ｃ２０アルキルである）
のＧＬＡと、
（ｂ）薬学的に許容される担体または賦形剤と
を含み、抗原を含まない、組成物。
【００８５】
３．哺乳動物におけるがんの処置のための医薬品を製造するための有効量のＧＬＡ含有
組成物の使用であって、前記組成物は、
（ａ）式：
【００８６】
【化７】
2019031540.tif 000008
（式中、
Ｒ１、Ｒ３、Ｒ５およびＲ６は、Ｃ１１〜Ｃ２０アルキルであり、
Ｒ２およびＲ４は、Ｃ１２〜Ｃ２０アルキルである）
のＧＬＡと、
（ｂ）薬学的に許容される担体または賦形剤と
を含み、抗原を含まない、使用。
【００８７】
４．Ｒ１、Ｒ３、Ｒ５およびＲ６が、ウンデシルであり、Ｒ２およびＲ４が、トリデシ
ルである、前述の実施形態のいずれか。
【００８８】
５．哺乳動物が、ヒトである、前述の実施形態のいずれか。
【００８９】
６．組成物が、水性製剤である、前述の実施形態のいずれか。
【００９０】
７．組成物が、水中油型エマルジョン、油中水型エマルジョン、リポソーム、ミセル製
剤、または微粒子の形態である、前述の実施形態のいずれか。
【００９１】
８．がんが、固形腫瘍を含む、前述の実施形態のいずれか。本明細書に記載される実施
形態のいずれかにおいて、固形腫瘍は、癌腫、肉腫またはリンパ腫である。本明細書に記
載される実施形態のいずれかにおいて、固形腫瘍は、原発性または二次性固形腫瘍である
。
【００９２】
９．がんが、黒色腫、メルケル細胞癌、肺がん、子宮頸がん、卵巣がん、子宮がん、乳
がん、肝臓がん、胃がん、前立腺がん、結腸がん、腎臓がん、膀胱がん、脳がん、および
膵臓がんからなる群より選択される、前述の実施形態のいずれか。
【００９３】
１０．組成物が、皮下、皮内、筋肉内、腫瘍内、または静脈注射によって投与される、
前述の実施形態のいずれか。
【００９４】
１１．組成物が、鼻腔内または肺内に投与される、前述の実施形態のいずれか。
【００９５】
１２．組成物が、１種または複数の追加の治療剤または治療的処置と併用して投与され
る、前述の実施形態のいずれか。
【００９６】
１３．治療剤が、免疫チェックポイント阻害剤である、実施形態１２。
【００９７】
１４．治療剤が、共刺激経路を活性化する抗体である、実施形態１２または１３。この
ような抗体の典型例は、抗ＣＤ４０抗体である。
【００９８】
１５．治療剤が、化学療法剤などのがん治療剤である、実施形態１２または１３。
【００９９】
１６．がん治療剤が、タキソテール、カルボプラチン、トラスツズマブ、エピルビシン
、シクロホスファミド、シスプラチン、ドセタキセル、ドキソルビシン、エトポシド、５
−ＦＵ、ゲムシタビン、メトトレキセート、およびパクリタキセル、ミトキサントロン、
パツピロン（ｐａｔｕｐｉｌｏｎｅ）（エポチロンＢ）、上皮成長因子受容体（ＥＧＦＲ
）を標的とするモノクローナル抗体７Ａ７．２７、ヒストンデアセチラーゼ阻害剤（ボリ
ノスタットおよびロミデプシン）、ｎ３−多価不飽和脂肪酸であるドコサヘキサエン酸、
プロテアソーム阻害剤（例えばボルテゾミブ）、シコニン（紫草（Ｌｉｔｈｏｓｐｅｒｍ
ｕｍ  ｅｒｙｔｈｒｏｒｈｉｚｏｎ）の根の主成分）、および腫瘍溶解性ウイルス、例え
ばＴＶｅｃ（タリモゲンラハーパレプベック（ｔａｌｉｍｏｇｅｎｅ  ｌａｈｅｒｐａｒ
ｅｐｖｅｃ））からなる群より選択される、実施形態１５。
【０１００】
１７．放射線療法をさらに含む、前述の実施形態のいずれか。
【０１０１】
１８．１種または複数の追加の治療的処置が、放射線療法である、実施形態１２。
【０１０２】
１９．実施形態１９は、がんに罹っている哺乳動物の処置方法であって、がんは、固形
腫瘍を含み、前記方法は、有効量のＧＬＡ含有組成物を腫瘍内に投与することを含み、前
記組成物は、
（ａ）式：
【０１０３】
【化８】
2019031540.tif 000009
（式中、
Ｒ１、Ｒ３、Ｒ５およびＲ６は、ウンデシルであり、Ｒ２およびＲ４は、トリデシルで
ある）
のＧＬＡと、
（ｂ）薬学的に許容される担体または賦形剤と
を含み、抗原を含まない、処置方法を含む。
【０１０４】
２０．免疫チェックポイント阻害剤を投与することをさらに含む、実施形態１９。
【０１０５】
２１．抗ＣＤ４０抗体を投与することをさらに含む、実施形態１９。
【０１０６】
２２．放射線療法を投与することをさらに含む、実施形態１９から２１。
【実施例】
【０１０７】
他の実施形態および使用は、当業者には本発明の開示に鑑み明らかであると予想される
。以下の実施例は単に様々な実施形態の例証として提供されたにすぎず、決して本発明を
限定すると解釈されないものとする。
【実施例１】
【０１０８】
マウスＢ１６黒色腫モデルにおけるＧＬＡのＩＮ  ＶＩＶＯ制がん作用
本実施例は、マウスＢ１６黒色腫腫瘍モデルにおいて、ＧＬＡが生理食塩水処置に比べ
て、腫瘍の大きさを縮小させ、生存率を高めることに有効であることを示す。
【０１０９】
Ｂ１６マウス黒色腫モデルは、固形腫瘍の形成と転移の両方について一般に認められて
いる動物モデルである（例えば、Ｃｕｒｒ  Ｐｒｏｔｏｃ  Ｉｍｍｕｎｏｌ．  ２００１
Ｍａｙ；  ＣＨＡＰＴＥＲ  ２０：  Ｕｎｉｔ−２０．１．  ｄｏｉ：１０．１００２
／０４７１１４２７３５．ｉｍ２００１ｓ３９を参照）。本試験において、マウスは第−
９日に３×１０５個のＢ１６細胞を皮下に接種された（１群あたりのｎ＝１０）。マウス
は、第０日、第９日および第１４日に生理食塩水または５μｇのＧＬＡ−ＳＥのいずれか
の筋肉内投与で処置された。
【０１１０】
図１に示されているように、ＧＬＡ−ＳＥ処置は生理食塩水単独に比べ、マウスにおけ
る腫瘍の大きさを縮小させた。図２に示されているように、ＧＬＡ−ＳＥ処置は生理食塩
水単独に比べ、マウスにおける生存率を増加させた。
【０１１１】
このように、これらの実験は、一般に認められている動物腫瘍モデルにおいて、がんが
確立された後に、単独で用いられたＧＬＡがｉｎ  ｖｉｖｏで制がん作用を有することを
示しており、ＧＬＡががんの治療のための単剤療法として用いられ得るという概念を支持
している。
【実施例２】
【０１１２】
マウスＢ１６黒色腫モデルにおけるＧＬＡのＩＮ  ＶＩＶＯ制がん作用
ＧＬＡ−ＳＥ投与がＣ５７ＢＬ／６マウスにおけるＢ１６Ｆ１０腫瘍の増殖を減弱させ
るかどうかをさらに確認するために、以下に詳細を述べるようなＢ１６モデルを用いて確
証実験が行われる。Ｂ１６足蹠黒色腫モデルは、この分野において定着している。Ｂ１６
黒色腫細胞は黒色であるため、足蹠における腫瘍の増殖が容易に観察される。このモデル
は図３に示されているように確立された。簡単に言えば、高用量（１Ｅ６）または低用量
（１Ｅ５）のＢ１６Ｆ１０細胞が、以下にさらに詳しく述べるようにして、８週齢のＣ５
７ＢＬ／６Ｊ雌マウスの足蹠に注入される。（腫瘍面積が１００ｍｍ２に達して）マウス
が屠殺されるまで、ＧＬＡ−ＳＥ（５μｇ／２％ｏｉｌ）が３日毎に様々な経路で注射さ
れる。
【０１１３】
方法：
（第−４日）：Ｂ１６Ｆ１０細胞を培養する；３７℃のウォーターバス中で凍結保存さ
れた細胞を解凍する；Ｂ１６Ｆ１０ストック、１バイアル：Ｂ１６−Ｆ１０  ＡＴＣＣ  
Ｌｏｔ  ＃５９１２３１８８；細胞を計数し、Ｔ２２５フラスコあたり２〜３Ｅ６個の細
胞を播種する→３７℃、５％ＣＯ２でインキュベートする。
【０１１４】
（第０日）：細胞を回収する；対数増殖期に細胞を使用する（〜約５０％コンフルエン
ト：Ｔ２２５フラスコあたり１０〜１２Ｅ６個の細胞）；細胞をトリプシン処理し、表１
にまとめられている用量に適した量のＨＢＳＳ中に再懸濁する（一般的に５０μｌの体積
を超えない）；回収された氷上の細胞を育生器に移す。
【０１１５】
（第０日）：マウスに接種する；マウス：Ｃ５７ＢＬ／６Ｊ雌マウス（注入時に８．５
週齢）。マウスに麻酔をする；識別のためにマウスを耳パンチする；表１にまとめられて
いる量の細胞をマウスの左足蹠に皮下注入する；マウスをケージに戻す。
【０１１６】
（第０＋前方３日）：ＧＬＡ−ＳＥまたは溶媒対照（２％オイル）を投与する；マウス
に麻酔をする；ＧＬＡ−ＳＥ（５μｇ／２％オイル）または溶媒対照をマウスの左足蹠（
腫瘍細胞が接種されたのと同じ足蹠）中に皮下注射するか、大腿に筋肉内注射するか、尾
の基部に皮下注射する；マウスをケージに戻す。
【０１１７】
腫瘍の増殖を週に２〜３回記録する。腫瘍が１００ｍｍ２に達したら、ＣＯ２窒息によ
りマウスを屠殺する。
【０１１８】
この実験の治療群は、以下の表１にまとめられている：
【０１１９】
【表１】
2019031540.tif 000010
【０１２０】
追加の実験が隔日または毎日のＧＬＡ注射により行われる。また、ＧＬＡ−ＳＥの用量
および／または製剤は変更されてもよい。
【０１２１】
上記の実験に加えて、さらなる確証実験および腫瘍モデルにおけるＧＬＡ単剤療法の特
徴付けが、当業者に知られている種々の異なる腫瘍モデル系を用いて実施される。種々の
皮下異種移植腫瘍モデル、同所性腫瘍モデル、転移性腫瘍モデルおよび同系マウス腫瘍モ
デルが、がんにおける単剤療法薬としてのＧＬＡのさらなる特徴付けのために用いられる
。非限定的な例としては、Ｈ２２、Ｈｅｐａ１−６、Ｐ３８８Ｄ１またはＳ１８０を用い
たマウス同系モデル系が、肝臓、白血病、および肉腫腫瘍モデルにおいてＧＬＡ単剤療法
を評価するために使用される。また、様々な転移モデルもＧＬＡ単剤療法を評価するため
に使用され、非限定的な例は、ＨＣＣＬＭ３（肝臓がん；胃およびリンパ節転移）、ＭＫ
Ｎ−４５（胃がん；肝臓およびリンパ節転移）、ＨＴ−２９（直腸がん；肝臓およびリン
パ節転移）、ＨＣＴ−１１６（直腸がん；肝臓およびリンパ節転移）、およびＰＣ−３（
前立腺がん；骨転移）を含む。そのような種々の動物モデルは、例えば、ＧｅｎＳｃｒｉ
ｐｔ（ニュージャージー州ピスキャタウェイ）またはＣｈａｒｌｅｓ  Ｒｉｖｅｒ  Ｌａ
ｂｏｒａｔｏｒｉｅｓ（マサチューセッツ州ウィルミントン）から市販されている。試験
に適したさらなるモデルは、黒色腫、肺がん、子宮頸がん、卵巣がん、子宮がん、乳がん
、肝臓がん、胃がん、前立腺がん、直腸がん、腎臓がん、膀胱がん、脳がん、膵臓がん、
白血病、およびリンパ腫のモデルを含むが、これらに限定はされない。
【０１２２】
そのようなモデルにおいて、腫瘍細胞は、確立された量の細胞と共に適切な経路（例え
ば、皮下、静脈内またはモデルにおいて一般に認められている他の経路）で接種される。
ＧＬＡ−ＳＥは、毎日、隔日、３日毎、週１回または隔週で筋肉内に接種される。生理食
塩水が対照として使用され得る。ある場合には、追加の対照としてＳＥを使用することが
望ましいことがある。腫瘍の増殖と局所的なリンパ節への転移が評価される。ＰＢＭＣに
対するＧＬＡ−ＳＥの効果は、ＣＤ２６、ＣＤ２７、ＣＤ３０、ＣＤｗ１３７（４−１Ｂ
Ｂ）、ＣＤ１５２（ＣＴＬＡ−４）、ＣＤ１５４（ｇｐ３９）、ＣＤ１３４（ＯＸ−４０
）、ＣＤ９５Ｌ（Ｆａｓリガンド）、ＣＤ４５Ｒ／Ｂ２２０、およびＬｙ−６Ｅ（ＴＳＡ
、ｓｃａ−２）などのリンパ球上の細胞表面マーカー、ならびに／またはＩＬ−２、ＩＦ
Ｎ−γ、ＩＬ−１７、ＩＬ−４、ＩＬ−１３、ＩＬ−１０などのサイトカイン発現レベル
を測定することによって、活性化状態に関して評価される。
【実施例３】
【０１２３】
マウスＢ１６黒色腫モデルにおけるＧＬＡのＩＮ  ＶＩＶＯ制がん作用
マウスＢ１６黒色腫モデルにおけるＧＬＡの制がん作用を確認し、さらに特徴付けるた
めに追加の実験が実施された。
【０１２４】
マウス（１群あたりのｎ＝１０）は、試験の６日前（第−６日）に５×１０６個のＢ１
６Ｆ１０細胞が脇腹内に接種された。マウスは次に、ＧＬＡ−ＳＥまたはプラセボ（生理
食塩水）のどちらかが第０日、第５日、第１５日、および第２４日に接種された。個々の
マウスの腫瘍の大きさが３日毎に測定された。また、腫瘍の大きさが４００ｍｍ２に達し
た場合、つまり腫瘍が病変に発展した場合の安楽死によって測定されるマウスの生存期間
も比較された。この試験の結果は、第１０日に観察された群間の明確な差異と共に、ＧＬ
Ａ−ＳＥで治療処置されたマウスが腫瘍の大きさを有意（ｐ＞０．００８）に縮小させた
ことを示している（図４）。また、第１７日の後に観察された群間の明確な差異と共に、
ＧＬＡ−ＳＥで処置されたマウスは有意（ｐ＞０．０３）に延長した生存期間も有してい
た（図５）。
【実施例４】
【０１２５】
マウス腫瘍モデルにおけるＧＬＡのＩＮ  ＶＩＶＯ制がん作用
本実施例は、特定のマウス腫瘍モデルにおいて、ＧＬＡが溶媒処置に比べ、腫瘍増殖を
遅延させることに有効であることを示す。試験された腫瘍モデルは、Ｂ１６黒色腫、ＣＴ
２６直腸がん、４Ｔ１乳がん、およびＰ８１５肥満細胞腫であった。
【０１２６】
この試験では、以下のマウスの群（１群あたりのｎ＝５）に、対応する数の腫瘍細胞が
第０日に接種された：Ｃ５７ＢＬ／６、５×１０５個のＢ１６Ｆ１０細胞、右足蹠に皮下
；ＢＡＬＢ／ｃ、５×１０５個のＣＴ２６細胞、右足蹠に皮下；ＢＡＬＢ／ｃ、４番目の
右の乳房脂肪体に１×１０５個の４Ｔ１細胞；ＤＢＡ／２、１×１０４個のＰ８１５細胞
、右脇腹に皮下。マウスは、第４日に開始し、その後、試験の終了まで３〜４日毎に、溶
媒対照（２％ＳＥ）または５μｇのＧＬＡ−ＳＥ／２％ＳＥの筋肉内（ｉ．ｍ．）または
腫瘍内（ｉ．ｔ．）投与を与えられた。
【０１２７】
図６に示されているように、ＧＬＡ−ＳＥの腫瘍内投与は、複数のマウスがんモデルに
おいて、筋肉内投与よりも効果的にマウスにおける腫瘍増殖を遅延させた。ＧＬＡ−ＳＥ
の腫瘍内投与は溶媒単独に比べて、統計的に有意な形でＢ１６Ｆ１０およびＰ８１５腫瘍
増殖を遅延させた。統計的に有意ではなかったものの、ＧＬＡ−ＳＥの腫瘍内投与は４Ｔ
１腫瘍増殖も遅延させた。腫瘍内注入は、これらの３つの腫瘍モデルにおいて、筋肉内注
入よりも効果的であった。ＧＬＡ−ＳＥの筋肉内投与は、Ｂ１６Ｆ１０腫瘍増殖への効果
を全く示さなかった一方、それは４Ｔ１とＰ８１５腫瘍増殖の両者をわずかに遅らせてい
た。腫瘍内または筋肉内に投与されたＧＬＡ−ＳＥは、ＣＴ２６腫瘍増殖には効果を全く
示さなかった。
【０１２８】
上記のデータは、単剤としてのＧＬＡが、一般に認められている動物腫瘍モデルにおい
て、がんが確立された後に、統計的に有意な制がん作用をｉｎ  ｖｉｖｏで有することを
示しており、がんの治療のための単剤療法としてＧＬＡが使用され得るという概念を支持
している。
【実施例５】
【０１２９】
Ｂ１６Ｆ１０マウス腫瘍モデルにおけるチェックポイント阻害剤と組み合わせたＧＬＡの
ＩＮ  ＶＩＶＯ制がん作用
本実施例は、ＧＬＡの存在下における特定の免疫チェックポイント阻害剤（ＣＰＩ）の
添加が、溶媒処置に比べて、腫瘍の増殖をさらに遅延させることを示す。
【０１３０】
ＧＬＡ投与を開始する最適な時間を決定するため、第０日に、雌のＣ５７ＢＬ／６マウ
ス（１群あたりのｎ＝５）に５×１０５個のＢ１６Ｆ１０細胞が右足蹠の皮下に接種され
た。マウスは第４日、第９日、または第１４日に、およびその後は試験の終了まで３〜４
日毎に５μｇのＧＬＡ−ＳＥ／２％ＳＥ（または２％ＳＥ溶媒対照）の腫瘍内（ｉ．ｔ．
）投与が与えられた。腫瘍注入後（９日または１４日ではなく）４日以内にＧＬＡ投与が
開始された場合、それは、マウスにおけるＢ１６Ｆ１０腫瘍の増殖を遅延させた（図７Ａ
）。
【０１３１】
ＣＰＩの投与が腫瘍の増殖をさらに遅延させるかどうかを決定するため、第０日に、雌
のＣ５７ＢＬ／６マウス（１群あたりのｎ＝５）に５×１０５個のＢ１６Ｆ１０細胞が右
足蹠の皮下に接種された。マウスは、第４日に開始して、その後、試験の終了まで３〜４
日毎に、５μｇのＧＬＡ−ＳＥ／２％ＳＥ（または２％ＳＥ溶媒対照）の腫瘍内投与に加
えて、ＣＰＩ［抗ＰＤＬ１、抗ＰＤ１、抗ＣＴＬＡ４（クローン９Ｈ１０）、抗ＣＴＬＡ
４（クローン９Ｄ９）、またはＬＴＦ２対照抗体］の腹膜内（ｉ．ｐ．）投与を１００μ
ｇで与えられた。ＧＬＡ単独は、マウスにおいてＢ１６Ｆ１０腫瘍増殖を遅延させた（図
７Ｂ）。ＧＬＡの存在下における抗ＰＤＬ１、抗ＰＤ１（ｐ＝０．０３）、または抗ＣＴ
ＬＡ４（クローン９Ｄ９；ｐ＝０．００５）の添加は、ＳＥ溶媒のみに比べて、腫瘍の増
殖をさらに遅延させた。抗ＣＴＬＡ４（クローン９Ｈ１０）は、Ｂ１６Ｆ１０腫瘍増殖に
対して相加効果を全く示さなかった一方で、クローン９Ｄ９はそれ自体で治療効果を示し
、異なる抗体クローン間で治療効力が異なることを示唆している。
【０１３２】
上記のデータは、ＧＬＡの存在下における免疫チェックポイント阻害剤の添加が、ｉｎ
ｖｉｖｏにおける全体的な抗腫瘍効果を統計的に有意に増強することを示している。
【実施例６】
【０１３３】
Ｂ１６Ｆ１０マウス腫瘍モデルにおける抗ＣＤ４０共刺激抗体と組み合わせたＧＬＡのＩ
Ｎ  ＶＩＶＯ制がん作用
本実施例は、ＧＬＡの存在下における抗ＣＤ４０の添加が、溶媒処置に比べて、腫瘍の
増殖をさらに遅延させることを示す。
【０１３４】
ＣＤ４０は、抗原提示細胞上に発現されており、Ｔ細胞、Ｂ細胞、樹状細胞、およびマ
クロファージの活性化のために重要な共刺激分子である。抗ＣＤ４０は以前に、マクロフ
ァージを動員するなどの自然免疫反応の活性化を通して、抗腫瘍効果を表すことが示され
ている（Ｂｕｈｔｏｉａｒｏｖ  ＩＮら  Ｊ  Ｉｍｍｕｎｏｔｈｅｒ  ２００５；１７４
：６０１３〜６０２２頁）。
【０１３５】
抗ＣＤ４０の添加が腫瘍の増殖をさらに遅延させるかどうかを決定するために、第０日
に、雌のＣ５７Ｂｌ／６マウス（１群あたりのｎ＝５）に５×１０５個のＢ１６Ｆ１０細
胞が右足蹠の皮下に接種された。マウスは、第４日に開始して、その後、試験の終了まで
３〜４日毎に、５μｇのＧＬＡ−ＳＥ／２％ＳＥ（または２％ＳＥ溶媒対照）の腫瘍内投
与に加えて、抗ＣＤ４０（または２Ａ３対照抗体）の腹膜内投与を１００μｇで与えられ
た（図８Ａ）。ＧＬＡまたは抗ＣＤ４０単独のどちらも、マウスにおけるＢ１６Ｆ１０腫
瘍増殖を遅延させた。ＧＬＡと抗ＣＤ４０の組合せはさらに腫瘍増殖を遅らせ、そして、
この遅延は対照抗体とＧＬＡ−ＳＥに比べて、また、ＳＥ対照に比べて、統計的に有意で
あった。
【０１３６】
抗ＣＤ４０が腫瘍内微小環境において抗腫瘍効果を発揮したかどうかを決定するために
、担がんマウスは、腫瘍注入後第８日と第１５日に２μｇのＧＬＡ−ＳＥ／２％ＳＥ（ま
たは２％ＳＥ溶媒対照）の腫瘍内投与と、腫瘍注入後第５日および第１２日に５０μｇの
抗ＣＤ４０（または２Ａ３対照抗体）の腫瘍内投与を与えられた（図８Ｂ）。組合せの可
能な相乗効果がマスクされるのを避けるために、最適以下の用量のＧＬＡと抗ＣＤ４０が
与えられた。ＧＬＡまたは抗ＣＤ４０単独のどちらも腫瘍増殖を遅延させたものの、ＧＬ
Ａと抗ＣＤ４０の組合せは、腫瘍内に局所的に注射された場合、増殖をさらに遅らせはし
なかった。抗ＣＤ４０の腹膜内と腫瘍内投与の間で観察された治療効果の違いは、１）治
療レジメンまたは２）自然免疫反応の全身的または局所的な活性化のターゲティングが、
抗腫瘍効果を引き出すための重要な因子となり得ることを示唆している。
【０１３７】
上記のデータは、抗ＣＤ４０（ｉ．ｐ．）の全身的な添加が、腫瘍内に施されたＧＬＡ
のｉｎ  ｖｉｖｏ抗腫瘍効果を統計的に有意に増強することを示している。
【実施例７】
【０１３８】
ヒト患者のメルケル細胞癌におけるＧＬＡ−ＳＥ腫瘍内投与のＩＮ  ＶＩＶＯ制がん作用
この実施例は、腫瘍内ＧＬＡ−ＳＥを投薬した最初のヒト患者からの予備的な所見を記
述している。
【０１３９】
メルケル細胞癌（ＭＣＣ）は稀であるが、悪性黒色腫よりもはるかに高い死亡率を有す
る、非常に悪性度の高い皮膚がんである。局所領域的なＭＣＣを有する患者に対する外科
手術または放射線の使用にもかかわらず、再発率は高く、確立されたアジュバント療法は
ない。メルケル細胞ポリオーマウイルス（ＭＣＰｙＶ）は、１０例のＭＣＣのうち８例に
存在する一般的なウイルスであり、疾患の病因にかかわると考えられている。
【０１４０】
「Ａ  Ｐｒｏｏｆ  ｏｆ  Ｃｏｎｃｅｐｔ  Ｃｌｉｎｉｃａｌ  Ｔｒｉａｌ  ｏｆ  Ｉ
ｎｔｒａｔｕｍｏｒａｌ  Ｉｎｊｅｃｔｉｏｎ  ｏｆ  ＧＬＡ−ＳＥ  ｉｎ  Ｐａｔｉｅ
ｎｔｓ  ｗｉｔｈ  Ｍｅｒｋｅｌ  Ｃｅｌｌ  Ｃａｒｃｉｎｏｍａ」と題された第Ｉ相臨
床試験の一部として、３例のＭＣＣ患者が治療された。この試験に含められた患者は、転
移性または局所領域的な疾患を伴う、生検で確認されたメルケル細胞癌を有していた。患
者は、正確に限局化でき、触診で安定化でき、腫瘍内（ｉ．ｔ．）注射を可能にするのに
十分に表層性である、容易に触診可能な表層病変（皮膚性、皮下性またはリンパ節性）と
定義される、少なくとも１つの注射可能な病変を有さなければならなかった。登録後、プ
ロトコールに述べられているように、患者は、腫瘍内に直接的に５μｇのＧＬＡ−ＳＥ（
１ｍＬ）が２〜３回注射された。
【０１４１】
局所領域的な疾患を有する１例の患者は、大腿リンパ節に腫瘍内で第１日と第８日に２
投薬のＧＬＡ−ＳＥを受けた。驚いたことに、第２１日の外科切除において、患者は、切
除した病変の病理検査でがんの証拠を全く示さず、処置した腫瘍において完全に反応した
ことが見出された。初期の観察は、腫瘍浸潤リンパ球（ＴＩＬ）の集積を示している。標
準治療の一部として、患者は、手術後のアジュバント放射線療法を受けることになる。
【０１４２】
また、転移性の疾患を示した他の２例の患者も治療された。１例は明白な反応を呈さず
、最初のサイクル中に疾患が進行した。この患者は現在、試験から離脱している。もう一
方の患者もまた、転移性の疾患を示し、３回目の投薬後に２つの注射部位において炎症を
呈した。注射していない病変に関する情報は提供されておらず、この患者に関する追加の
情報はまだ利用可能でない。
【０１４３】
本実施例は、外来性抗原の非存在下でのＧＬＡの腫瘍内注入を調査する第Ｉ相臨床試験
からのヒトにおける結果を初めて記述するものである。歴史的に治療に対して非常に抵抗
性であったこの種のがんにおいて完全な反応を認めることは完全に予想外であった。これ
らの結果は予備的なものであり、主要な反応は単一の患者における観察ではあるものの、
それらは、腫瘍内に注射されたＧＬＡ−ＳＥが制がん作用を有することを示唆しており、
ＧＬＡががんの治療のために抗原を伴わずに使用され得るという概念をさらに支持してい
る。
【実施例８】
【０１４４】
濾胞性低悪性度ＮＨＬの治療のための腫瘍内ＧＬＡ、抗ＣＴＬＡ−４およびリツキシマブ
この実施例は、がんの治療のための抗ＣＴＬＡ４およびリツキシマブ抗体と組み合わせ
たＧＬＡの効果の調査について記述する。
【０１４５】
患者は８〜１０週間、毎週繰り返される投薬で、単一の腫瘍部位におけるＧＬＡ、抗Ｃ
ＴＬＡ−４およびリツキシマブの腫瘍内注入によって治療される。２つの異なる投与量レ
ベルが試験される。第ＩＩ相試験は、固定された用量の抗ＣＴＬＡ４とリツキシマブとを
用いて、低用量のＧＬＡ対高用量のＧＬＡで無作為化された調査について行われる。ベー
スラインにおいておよび８週間、週に一度、病期決定試験が行われる。エンドポイントは
、注入部位の直接的反応、遠位のアブスコパル反応、全体的な反応（完全な反応／部分的
な反応）、進行までの時間／無増悪生存期間、および次の治療までの時間を含む。
【０１４６】
これらの試験は、抗ＣＴＬＡ４抗体および樹状細胞もしくは他の抗原提示細胞における
腫瘍抗原のＡＤＣＣ取り込みを増進する抗体（例えば、リツキシマブ）とＧＬＡとの組合
せが、抗腫瘍免疫反応を高め、がん患者に治療効果をもたらすかどうかを試験することに
なる。
【０１４７】
上述の様々な実施形態は、組み合わされて、さらなる実施形態を提供することができる
。本明細書中で言及されている、および／または、出願データシートに列挙されている、
すべての米国特許、米国特許出願公開公報、米国特許出願、外国特許、外国特許出願およ
び非特許文献は、参照によってその全体が本明細書に取り込まれる。実施形態の態様は、
必要であれば、さらなる実施形態を提供するために、様々な特許、出願、および文献の概
念を利用するように修正され得る。
【０１４８】
これらおよび他の変更が、上の詳細な説明に照らして、実施形態に対して行われ得る。
一般に、以下の特許請求の範囲においては、使用されている用語は、明細書および特許請
求の範囲に開示された特定の実施形態に請求の範囲を限定するものと解釈されるべきでは
なく、そのような特許請求が権利を有する等価物の全範囲と共に、あらゆる可能な実施形
態を含むように解釈されるべきものである。したがって、特許請求の範囲は、開示により
限定されない。
【図１】
2019031540.tif 000013
【図２】
2019031540.tif 000014
【図３】
2019031540.tif 000015
【図４】
2019031540.tif 000016
【図５】
2019031540.tif 000017
【図６Ａ】
2019031540.tif 000018
【図６Ｂ】
2019031540.tif 000019
【図６Ｃ】
2019031540.tif 000020
【図６Ｄ】
2019031540.tif 000021
【図７Ａ】
2019031540.tif 000022
【図７Ｂ】
2019031540.tif 000023
【図８Ａ】
2019031540.tif 000024
【図８Ｂ】
2019031540.tif 000025
【手続補正書】
【提出日】平成30年11月16日(2018.11.16)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
哺乳動物におけるがんの処置で使用するための有効量のＧＬＡ含有組成物であって、
（ａ）式：
【化１】
2019031540.tif 000026
（式中、
Ｌ１、Ｌ３、Ｌ５、およびＬ６はＯであり、
Ｌ２およびＬ４はＮＨであり、
Ｌ７、Ｌ８、Ｌ９、およびＬ１０はＣ（＝Ｏ）であり、
Ｙ１は、ホスフェートであり、
Ｙ２、Ｙ３、およびＹ４は、ＯＨであり、
Ｒ１、Ｒ３、Ｒ５およびＲ６は、Ｃ１１アルキルであり、
Ｒ２およびＲ４は、Ｃ９アルキルである）
のＧＬＡと、
（ｂ）薬学的に許容される担体または賦形剤と
を含み、抗原を含まない、組成物（ただし、抗原とともに投与するためのものを除く。）。
【請求項２】
哺乳動物が、ヒトである、請求項１に記載の組成物。
【請求項３】
水性製剤である、請求項１または２に記載の組成物。
【請求項４】
水中油型エマルジョン、油中水型エマルジョン、リポソーム、ミセル製剤、または微粒子の形態である、請求項１または２に記載の組成物。
【請求項５】
がんが、固形腫瘍を含む、請求項１から４のいずれかに記載の組成物。
【請求項６】
固形腫瘍が、癌腫、肉腫またはリンパ腫である、請求項５に記載の組成物。
【請求項７】
固形腫瘍が、原発性固形腫瘍である、請求項５に記載の組成物。
【請求項８】
固形腫瘍が、二次性固形腫瘍である、請求項５に記載の組成物。
【請求項９】
がんが、黒色腫、メルケル細胞癌、肺がん、子宮頸がん、卵巣がん、子宮がん、乳がん、肝臓がん、胃がん、前立腺がん、結腸がん、腎臓がん、膀胱がん、脳がん、および膵臓がんからなる群より選択される、請求項１から４のいずれかに記載の組成物。
【請求項１０】
皮下、皮内、筋肉内、腫瘍内、または静脈注射によって投与される、請求項１から９のいずれかに記載の組成物。
【請求項１１】
鼻腔内または肺内に投与される、請求項１から９のいずれかに記載の組成物。
【請求項１２】
１種または複数の追加の治療剤または治療的処置と併用して投与される、請求項１から１１のいずれかに記載の組成物。
【請求項１３】
治療剤が、免疫チェックポイント阻害剤である、請求項１２に記載の組成物。
【請求項１４】
治療剤が、共刺激経路を活性化する抗体である、請求項１２に記載の組成物。
【請求項１５】
抗体が、抗ＣＤ４０抗体である、請求項１４に記載の組成物。
【請求項１６】
治療剤が、がん治療剤である、請求項１２に記載の組成物。
【請求項１７】
がん治療剤が、タキソテール、カルボプラチン、トラスツズマブ、エピルビシン、シクロホスファミド、シスプラチン、ドセタキセル、ドキソルビシン、エトポシド、５−ＦＵ、ゲムシタビン、メトトレキセート、およびパクリタキセル、ミトキサントロン、エポチロンＢ、上皮成長因子受容体（ＥＧＦＲ）を標的とするモノクローナル抗体７Ａ７．２７、ボリノスタット、ロミデプシン、ドコサヘキサエン酸、ボルテゾミブ、シコニンおよび腫瘍溶解性ウイルスからなる群より選択される、請求項１６に記載の組成物。
【請求項１８】
１種または複数の追加の治療的処置が、放射線療法である、請求項１２に記載の組成物。
【外国語明細書】
2019031540000001.pdf