(57)【要約】      （修正有）【課題】単離抗体またはそのＢＣＭＡ結合フラグメントの提供。【解決手段】抗体等のＢＣＭＡ（Ｂ細胞成熟抗原）抗原結合タンパク質、該抗原結合タンパク質をコードするポリヌクレオチド配列、ならびに疾患を診断及び治療するための組成物及び方法に関する。本発明はまた、ＢＣＭＡ抗体薬物複合体及びその使用にも関する。【選択図】図２
2019031510.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
単離抗体またはそのＢＣＭＡ結合フラグメントであって、
Ａｂ−１の６つのＣＤＲを含む抗体、
Ａｂ−２の６つのＣＤＲを含む抗体、
Ａｂ−３の６つのＣＤＲを含む抗体、
Ａｂ−４の６つのＣＤＲを含む抗体、
Ａｂ−５の６つのＣＤＲを含む抗体、
Ａｂ−６の６つのＣＤＲを含む抗体、
Ａｂ−７の６つのＣＤＲを含む抗体、
Ａｂ−８の６つのＣＤＲを含む抗体、
Ａｂ−９の６つのＣＤＲを含む抗体、
Ａｂ−１０の６つのＣＤＲを含む抗体、
Ａｂ−１１の６つのＣＤＲを含む抗体、
Ａｂ−１２の６つのＣＤＲを含む抗体、
Ａｂ−１３の６つのＣＤＲを含む抗体、
Ａｂ−１４の６つのＣＤＲを含む抗体、
Ａｂ−１５の６つのＣＤＲを含む抗体、
Ａｂ−１６の６つのＣＤＲを含む抗体、
Ａｂ−１７の６つのＣＤＲを含む抗体、
Ａｂ−１８の６つのＣＤＲを含む抗体、
Ａｂ−１９の６つのＣＤＲを含む抗体、
Ａｂ−２０の６つのＣＤＲを含む抗体、
Ａｂ−２１の６つのＣＤＲを含む抗体、
Ａｂ−２２の６つのＣＤＲを含む抗体、
Ａｂ−２３の６つのＣＤＲを含む抗体、
Ａｂ−２４の６つのＣＤＲを含む抗体、
Ａｂ−２５の６つのＣＤＲを含む抗体、
Ａｂ−２６の６つのＣＤＲを含む抗体、
Ａｂ−２７の６つのＣＤＲを含む抗体、
Ａｂ−２８の６つのＣＤＲを含む抗体、
Ａｂ−２９の６つのＣＤＲを含む抗体、
Ａｂ−３０の６つのＣＤＲを含む抗体、
Ａｂ−３１の６つのＣＤＲを含む抗体、
Ａｂ−３２の６つのＣＤＲを含む抗体、
Ａｂ−３３の６つのＣＤＲを含む抗体、
Ａｂ−３４の６つのＣＤＲを含む抗体、
Ａｂ−３５の６つのＣＤＲを含む抗体、
Ａｂ−３６の６つのＣＤＲを含む抗体、
Ａｂ−３７の６つのＣＤＲを含む抗体、及び
Ａｂ−３８の６つのＣＤＲを含む抗体からなる群から選択される、単離抗体またはそのＢＣＭＡ結合フラグメント。
【請求項２】
前記抗体またはフラグメントは、
Ａｂ−１の６つのＣＤＲを含む抗体、
Ａｂ−２の６つのＣＤＲを含む抗体、及び
Ａｂ−３の６つのＣＤＲを含む抗体からなる群から選択される、請求項１に記載の抗体またはフラグメント。
【請求項３】
前記抗体またはフラグメントは、Ａｂ−１の６つのＣＤＲを含む抗体である、請求項１または２に記載の抗体またはフラグメント。
【請求項４】
前記Ａｂ−１のＣＤＲは、配列番号４を含むＶｈ−ＣＤＲ１、配列番号５を含むＶｈ−ＣＤＲ２、配列番号６を含むＶｈ−ＣＤＲ３、配列番号１０６を含むＶｌ−ＣＤＲ１、配列番号１０７を含むＶｌ−ＣＤＲ２、及び配列番号１０８を含むＶｌ−ＣＤＲ３を含み、前記Ａｂ−２のＣＤＲは、配列番号１０を含むＶｈ−ＣＤＲ１、配列番号１１を含むＶｈ−ＣＤＲ２、配列番号１２を含むＶｈ−ＣＤＲ３、配列番号１１２を含むＶｌ−ＣＤＲ１、配列番号１１３を含むＶｌ−ＣＤＲ２、及び配列番号１１４を含むＶｌ−ＣＤＲ３を含み、前記Ａｂ−３のＣＤＲは、配列番号１６を含むＶｈ−ＣＤＲ１、配列番号１７を含むＶｈ−ＣＤＲ２、配列番号１８を含むＶｈ−ＣＤＲ３、配列番号１１８を含むＶｌ−ＣＤＲ１、配列番号１１９を含むＶｌ−ＣＤＲ２、及び配列番号１２０を含むＶｌ−ＣＤＲ３を含み、前記Ａｂ−４のＣＤＲは、配列番号２２を含むＶｈ−ＣＤＲ１、配列番号２３を含むＶｈ−ＣＤＲ２、配列番号２４を含むＶｈ−ＣＤＲ３、配列番号１２４を含むＶｌ−ＣＤＲ１、配列番号１２５を含むＶｌ−ＣＤＲ２、及び配列番号１２６を含むＶｌ−ＣＤＲ３を含み、前記Ａｂ−５のＣＤＲは、配列番号２８を含むＶｈ−ＣＤＲ１、配列番号２９を含むＶｈ−ＣＤＲ２、配列番号３０を含むＶｈ−ＣＤＲ３、配列番号１３０を含むＶｌ−ＣＤＲ１、配列番号１３１を含むＶｌ−ＣＤＲ２、及び配列番号１３２を含むＶｌ−ＣＤＲ３を含み、前記Ａｂ−６のＣＤＲは、配列番号３４を含むＶｈ−ＣＤＲ１、配列番号３５を含むＶｈ−ＣＤＲ２、配列番号３６を含むＶｈ−ＣＤＲ３、配列番号１３６を含むＶｌ−ＣＤＲ１、配列番号１３７を含むＶｌ−ＣＤＲ２、及び配列番号１３８を含むＶｌ−ＣＤＲ３を含み、前記Ａｂ−７のＣＤＲは、配列番号４０を含むＶｈ−ＣＤＲ１、配列番号４１を含むＶｈ−ＣＤＲ２、配列番号４２を含むＶｈ−ＣＤＲ３、配列番号１４２を含むＶｌ−ＣＤＲ１、配列番号１４３を含むＶｌ−ＣＤＲ２、及び配列番号１４４を含むＶｌ−ＣＤＲ３を含み、前記Ａｂ−８のＣＤＲは、配列番号４６を含むＶｈ−ＣＤＲ１、配列番号４７を含むＶｈ−ＣＤＲ２、配列番号４８を含むＶｈ−ＣＤＲ３、配列番号１４８を含むＶｌ−ＣＤＲ１、配列番号１４９を含むＶｌ−ＣＤＲ２、及び配列番号１５０を含むＶｌ−ＣＤＲ３を含み、前記Ａｂ−９のＣＤＲは、配列番号５２を含むＶｈ−ＣＤＲ１、配列番号５３を含むＶｈ−ＣＤＲ２、配列番号５４を含むＶｈ−ＣＤＲ３、配列番号１５４を含むＶｌ−ＣＤＲ１、配列番号１５５を含むＶｌ−ＣＤＲ２、及び配列番号１５６を含むＶｌ−ＣＤＲ３を含み、前記Ａｂ−１０のＣＤＲは、配列番号５８を含むＶｈ−ＣＤＲ１、配列番号５９を含むＶｈ−ＣＤＲ２、配列番号６０を含むＶｈ−ＣＤＲ３、配列番号１６０を含むＶｌ−ＣＤＲ１、配列番号１６１を含むＶｌ−ＣＤＲ２、及び配列番号１６２を含むＶｌ−ＣＤＲ３を含み、前記Ａｂ−１１のＣＤＲは、配列番号６４を含むＶｈ−ＣＤＲ１、配列番号６５を含むＶｈ−ＣＤＲ２、配列番号６６を含むＶｈ−ＣＤＲ３、配列番号１６６を含むＶｌ−ＣＤＲ１、配列番号１６７を含むＶｌ−ＣＤＲ２、及び配列番号１６８を含むＶｌ−ＣＤＲ３を含み、前記Ａｂ−１２のＣＤＲは、配列番号７０を含むＶｈ−ＣＤＲ１、配列番号７１を含むＶｈ−ＣＤＲ２、配列番号７２を含むＶｈ−ＣＤＲ３、配列番号１７２を含むＶｌ−ＣＤＲ１、配列番号１７３を含むＶｌ−ＣＤＲ２、及び配列番号１７４を含むＶｌ−ＣＤＲ３を含み、前記Ａｂ−１３のＣＤＲは、配列番号７６を含むＶｈ−ＣＤＲ１、配列番号７７を含むＶｈ−ＣＤＲ２、配列番号７８を含むＶｈ−ＣＤＲ３、配列番号１７８を含むＶｌ−ＣＤＲ１、配列番号１７９を含むＶｌ−ＣＤＲ２、及び配列番号１８０を含むＶｌ−ＣＤＲ３を含み、前記Ａｂ−１４のＣＤＲは、配列番号８２を含むＶｈ−ＣＤＲ１、配列番号８３を含むＶｈ−ＣＤＲ２、配列番号８４を含むＶｈ−ＣＤＲ３、配列番号１８４を含むＶｌ−ＣＤＲ１、配列番号１８５を含むＶｌ−ＣＤＲ２、及び配列番号１８６を含むＶｌ−ＣＤＲ３を含み、前記Ａｂ−１５のＣＤＲは、配列番号８８を含むＶｈ−ＣＤＲ１、配列番号８９を含むＶｈ−ＣＤＲ２、配列番号９０を含むＶｈ−ＣＤＲ３、配列番号１９０を含むＶｌ−ＣＤＲ１、配列番号１９１を含むＶｌ−ＣＤＲ２、及び配列番号１９２を含むＶｌ−ＣＤＲ３を含み、前記Ａｂ−１６のＣＤＲは、配列番号９４を含むＶｈ−ＣＤＲ１、配列番号９５を含むＶｈ−ＣＤＲ２、配列番号９６を含むＶｈ−ＣＤＲ３、配列番号１９６を含むＶｌ−ＣＤＲ１、配列番号１９７を含むＶｌ−ＣＤＲ２、及び配列番号１９８を含むＶｌ−ＣＤＲ３を含み、前記Ａｂ−１７のＣＤＲは、配列番号１００を含むＶｈ−ＣＤＲ１、配列番号１０１を含むＶｈ−ＣＤＲ２、配列番号１０２を含むＶｈ−ＣＤＲ３、配列番号２０２を含むＶｌ−ＣＤＲ１、配列番号２０３を含むＶｌ−ＣＤＲ２、及び配列番号２０４を含むＶｌ−ＣＤＲ３を含む、請求項１〜３に記載の抗体またはフラグメント。
【請求項５】
前記Ａｂ−１のＣＤＲは、配列番号４を含むＶｈ−ＣＤＲ１、配列番号５を含むＶｈ−ＣＤＲ２、配列番号６を含むＶｈ−ＣＤＲ３、配列番号１０６を含むＶｌ−ＣＤＲ１、配列番号１０７を含むＶｌ−ＣＤＲ２、配列番号１０８を含むＶｌ−ＣＤＲ３を含み、前記Ａｂ−２のＣＤＲは、配列番号１０を含むＶｈ−ＣＤＲ１、配列番号１１を含むＶｈ−ＣＤＲ２、配列番号１２を含むＶｈ−ＣＤＲ３、配列番号１１２を含むＶｌ−ＣＤＲ１、配列番号１１３を含むＶｌ−ＣＤＲ２、及び配列番号１１４を含むＶｌ−ＣＤＲ３を含み、前記Ａｂ−３のＣＤＲは、配列番号１６を含むＶｈ−ＣＤＲ１、配列番号１７を含むＶｈ−ＣＤＲ２、配列番号１８を含むＶｈ−ＣＤＲ３、配列番号１１８を含むＶｌ−ＣＤＲ１、配列番号１１９を含むＶｌ−ＣＤＲ２、及び配列番号１２０を含むＶｌ−ＣＤＲ３を含む、請求項１〜４に記載の抗体またはフラグメント。
【請求項６】
前記Ａｂ−１のＣＤＲは、配列番号４を含むＶｈ−ＣＤＲ１、配列番号５を含むＶｈ−ＣＤＲ２、配列番号６を含むＶｈ−ＣＤＲ３、配列番号１０６を含むＶｌ−ＣＤＲ１、配列番号１０７を含むＶｌ−ＣＤＲ２、及び配列番号１０８を含むＶｌ−ＣＤＲ３を含む、請求項１〜５に記載の抗体またはフラグメント。
【請求項７】
前記抗体またはフラグメントは、配列番号２４０を含むＡｂ−１Ｖｌドメイン及び配列番号２０６を含むＡｂ−１Ｖｈドメインを含み、前記抗体またはフラグメントは、配列番号２４２を含むＡｂ−２Ｖｌドメイン及び配列番号２０８を含むＡｂ−２Ｖｈドメインを含み、前記抗体またはフラグメントは、配列番号２４４を含むＡｂ−３Ｖｌドメイン及び配列番号２１０を含むＡｂ−３Ｖｈドメインを含み、前記抗体またはフラグメントは、配列番号２４６を含むＡｂ−４Ｖｌドメイン及び配列番号２１２を含むＡｂ−４Ｖｈドメインを含み、前記抗体またはフラグメントは、配列番号２４８を含むＡｂ−５Ｖｌドメイン及び配列番号２１４を含むＡｂ−５Ｖｈドメインを含み、前記抗体またはフラグメントは、配列番号２５０を含むＡｂ−６Ｖｌドメイン及び配列番号２１６を含むＡｂ−６Ｖｈドメインを含み、前記抗体またはフラグメントは、配列番号２５２を含むＡｂ−７Ｖｌドメイン及び配列番号２１８を含むＡｂ−７Ｖｈドメインを含み、前記抗体またはフラグメントは、配列番号２５４を含むＡｂ−８Ｖｌドメイン及び配列番号２２０を含むＡｂ−８Ｖｈドメインを含み、前記抗体またはフラグメントは、配列番号２５６を含むＡｂ−９Ｖｌドメイン及び配列番号２２２を含むＡｂ−９Ｖｈドメインを含み、前記抗体またはフラグメントは、配列番号２５８を含むＡｂ−１０Ｖｌドメイン及び配列番号２２４を含むＡｂ−１０Ｖｈドメインを含み、前記抗体またはフラグメントは、配列番号２６０を含むＡｂ−１１Ｖｌドメイン及び配列番号２２６を含むＡｂ−１１Ｖｈドメインを含み、前記抗体またはフラグメントは、配列番号２６２を含むＡｂ−１２Ｖｌ及び配列番号２２８を含むＡｂ−１２Ｖｈドメインを含み、前記抗体またはフラグメントは、配列番号２６４を含むＡｂ−１３Ｖｌドメイン及び配列番号２３０を含むＡｂ−１３Ｖｈドメインを含み、前記抗体またはフラグメントは、配列番号２６６を含むＡｂ−１４Ｖｌドメイン及び配列番号２３２を含むＡｂ−１４Ｖｈドメインを含み、前記抗体またはフラグメントは、配列番号２６８を含むＡｂ−１５Ｖｌドメイン及び配列番号２３４を含むＡｂ−１５Ｖｈドメインを含み、前記抗体またはフラグメントは、配列番号２７０を含むＡｂ−１６Ｖｌドメイン及び配列番号２３６を含むＡｂ−１６Ｖｈドメインを含み、前記抗体またはフラグメントは、配列番号２７２を含むＡｂ−１７Ｖｌドメイン及び配列番号２３８を含むＡｂ−１７Ｖｈドメイン）ドメインを含む、請求項１〜６に記載の抗体またはフラグメント。
【請求項８】
前記抗体またはフラグメントは、配列番号２４０を含むＡｂ−１Ｖｌドメイン及び配列番号２０６を含むＡｂ−１Ｖｈドメインを含み、前記抗体またはフラグメントは、配列番号２４２を含むＡｂ−２Ｖｌドメイン及び配列番号２０８を含むＡｂ−２Ｖｈドメインを含み、前記抗体またはフラグメントは、配列番号２４４を含むＡｂ−３Ｖｌドメイン及び配列番号２１０を含むＡｂ−３Ｖｈドメインを含む、請求項１〜７に記載の抗体またはフラグメント。
【請求項９】
前記抗体またはフラグメントは、配列番号２４０を含むＡｂ−１Ｖｌドメイン及び配列番号２０６を含むＡｂ−１Ｖｈドメインを含む、請求項１〜８に記載の抗体またはフラグメント。
【請求項１０】
前記抗体またはフラグメントは、配列番号２８０を含むＡｂ−１軽鎖及び配列番号２７４を含むＡｂ−１重鎖を含み、前記抗体またはフラグメントは、配列番号２８２を含むＡｂ−２軽鎖及び配列番号２７６を含むＡｂ−２重鎖を含み、前記抗体またはフラグメントは、配列番号２８４を含むＡｂ−３軽鎖及び配列番号２７８を含むＡｂ−３重鎖を含み、前記抗体またはフラグメントは、配列番号２８０を含む２つのＡｂ−１軽鎖及び配列番号２７４を含む２つのＡｂ−１重鎖を含み、前記抗体またはフラグメントは、配列番号２８２を含む２つのＡｂ−２軽鎖及び配列番号２７６を含む２つのＡｂ−２重鎖を含み、前記抗体またはフラグメントは、配列番号２８４を含む２つのＡｂ−３軽鎖及び配列番号２７８を含む２つのＡｂ−３重鎖）を含む、請求項１〜９に記載の抗体またはフラグメント。
【請求項１１】
前記抗体またはフラグメントは、配列番号２８０を含むＡｂ−１軽鎖及び配列番号２７４を含むＡｂ−１重鎖を含み、前記抗体またはフラグメントは、配列番号２８０を含む２つのＡｂ−１軽鎖及び配列番号２７４を含む２つのＡｂ−１重鎖を含む、請求項１〜１０に記載の抗体またはフラグメント。
【請求項１２】
前記抗体またはフラグメントは、配列番号２８０を含む２つのＡｂ−１軽鎖及び配列番号２７４を含む２つのＡｂ−１重鎖を含む、請求項１〜１１に記載の抗体またはフラグメント。
【請求項１３】
前記抗体またはフラグメントは、ヒトのものである、請求項１〜１２に記載の抗体またはフラグメント。
【請求項１４】
前記抗体またはフラグメントは、ヒトモノクローナル抗体である、請求項１〜１３に記載の抗体またはフラグメント。
【請求項１５】
前記抗体またはフラグメントは、キメラモノクローナル抗体である、請求項１〜１２に記載の抗体またはフラグメント。
【請求項１６】
前記抗体またはフラグメントは、ヒトＢＣＭＡに特異的に結合する、請求項１〜１５に記載の抗体またはフラグメント。
【請求項１７】
前記抗体またはフラグメントは、ヒトＢＣＭＡに特異的に結合し、カニクイザルＢＣＭＡに交差反応する、請求項１〜１６に記載の抗体またはフラグメント。
【請求項１８】
前記抗体またはフラグメントは、ＴＡＣＩまたはＢＡＦＦ−Ｒに特異的に結合しない、請求項１〜１７に記載の抗体またはフラグメント。
【請求項１９】
前記抗体またはフラグメントは、ヒト骨髄腫細胞の表面上のＢＣＭＡに結合する、請求項１〜１８に記載の抗体またはフラグメント。
【請求項２０】
前記抗体またはフラグメントは、ヒト多発性骨髄腫細胞の表面上のＢＣＭＡに結合する、請求項１〜１９に記載の抗体またはフラグメント。
【請求項２１】
前記抗体またはフラグメントは、ヒト細胞の表面上のＢＣＭＡに結合し、前記細胞に内部移行される、請求項１〜２０に記載の抗体またはフラグメント。
【請求項２２】
前記抗体またはフラグメントは、リンカーをさらに含む、請求項１〜２１に記載の抗体またはフラグメント。
【請求項２３】
前記抗体またはフラグメントは、薬物または化学療法剤をさらに含む、請求項１〜２２に記載の抗体またはフラグメント。
【請求項２４】
前記抗体またはフラグメントは、６−マレイミドカプロイル、マレイミドプロパノイル、バリン−シトルリン、アラニン−フェニルアラニン、ｐ−アミノベンジルオキシカルボニル、Ｍａｌ−ｄＰＥＧ４−ＮＨＳ、Ｎ−スクシンイミジル４−（２−ピリジルチオ）ペンタノエート（「ＳＰＰ」）、Ｎ−スクシンイミジル４−（Ｎ−マレイミドメチル）シクロヘキサン−１カルボキシレート（「ＳＭＣＣ」または「ＭＣＣ」）、及びＮ−スクシンイミジル（４−ヨード−アセチル）アミノベンゾエート（「ＳＩＡＢ」）からなる群から選択されるリンカーをさらに含む、請求項１〜２３に記載の抗体またはフラグメント。
【請求項２５】
前記抗体またはフラグメントは、リンカーをさらに含み、前記リンカーは、Ｎ−スクシンイミジル４−（Ｎ−マレイミドメチル）シクロヘキサン−１カルボキシレート（「ＳＭＣＣ」または「ＭＣＣ」）である、請求項１〜２４に記載の抗体またはフラグメント。
【請求項２６】
前記抗体またはフラグメントは、チオテパ及びシクロホスファミド（ＣＹＴＯＸＡＮ（商標））；スルホン酸アルキル、例えば、ブスルファン、インプロスルファン、及びピポスルファン；アジリジン、例えば、ベンゾドーパ、カルボコン、メツレドーパ、及びウレドーパ；エチレンイミン及びメチラメラミン（アルトレタミン、トリエチレンメラミン、トリエチレンホスホラミド、トリエチレンチオホスファオラミド、及びトリメチローロメラミンを含む）；アセトゲニン（特にブラタシン及びブラタシノン）；カンプトテシン（合成類似体トポテカンを含む）；ブリオスタチン；カリスタチン；ＣＣ−１０６５（そのアゾゼレシン、カルゼレシン、及びビゼレシン合成類似体を含む）；クリプトフィシン（特にクリプトフィシン１及びクリプトフィシン８）；ドラスタチン；デュオカルマイシン（合成類似体ＫＷ−２１８９及びＣＢＩ−ＴＭＩを含む）；エリュテロビン；パンクラチスタチン；サルコジクチイン；スポンジスタチン；ナイトロジェンマスタード、例えば、クロラムブシル、クロマファジン、コロホスファミド、エストラムスチン、イホスファミド、メクロレタミン、メクロレタミンオキシド塩酸塩、メルファラン、ノベムビシン、フェネステリン、プレドニムスチン、トロホスファミド、ウラシルマスタード；ニトロソ尿素、例えば、カルムスチン、クロロゾトシン、フォテムスチン、ロムスチン、ニムスチン、ラニムスチン；抗生物質、例えば、エンジイン抗生物質（例えば、カリケアマイシン、特にカリケアマイシンγ１及びカリケアマイシンθＩ、例えばＡｎｇｅｗ  Ｃｈｅｍ．Ｉｎｔｌ．Ｅｄ．Ｅｎｇｌ．３３：１８３−１８６（１９９４）を参照されたい；ダイネミシン（ダイネミシンＡを含む）；エスペラミシン；ならびにネオカルジノスタチン発色団及び関連色素タンパク質エンジイン抗生物質発色団）、アクラノマイシン、アクチノマイシン、オースラマイシン、アザセリン、ブレオマイシン、カクチノマイシン、カラビシン、カミノマイシン、カルジノフィリン；クロモマイシン、ダクチノマイシン、ダウノルビシン、デトルビシン、６−ジアゾ−５−オキソ−Ｌ−ノルロイシン、ドキソルビシン（モルホリノ−ドキソルビシン、シアノモルホリノ−ドキソルビシン、２−ピロリノ−ドキソルビシン、及びデオキシドキソルビシンを含む）、エピルビシン、エソルビシン、イダルビシン、マルセロマイシン、ナイトマイシン（ｎｉｔｏｍｙｃｉｎ）、ミコフェノール酸、ノガラマイシン、オリボマイシン、ペプロマイシン、ポトフィロマイシン、ピューロマイシン、ケラマイシン、ロドルビシン、ストレプトニグリン、ストレプトゾシン、ツベルシジン、ウベニメクス、ジノスタチン、ゾルビシン；代謝拮抗薬、例えば、メトトレキサート、及び５−フルオロウラシル（５−ＦＵ）；葉酸類似体、例えば、デノプテリン、メトトレキサート、プテロプテリン、トリメトレキサート；プリン類似体、例えば、フルダラビン、６−メルカプトプリン、チアミプリン、チオグアニン；ピリミジン類似体、例えば、アンシタビン、アザシチジン、６−アザウリジン、カルモフール、シタラビン、ジデオキシウリジン、ドキシフルリジン、エノシタビン、フロクスウリジン、５−ＦＵ；アンドロゲン、例えば、カルステロン、プロピオン酸ドロモスタノロン、エピチオスタノール、メピチオスタン、テストラクトン；抗副腎剤、例えば、アミノグルテチミド、ミトタン、トリロスタン；葉酸補液、例えば、フロリン酸；アセグラトン；アルドホスファミドグリコシド；アミノレブリン酸；アムサクリン；ベストラブシル；ビスアントレン；エダトラキサート；デフォファミン；デメコルチン；ジアジクオン；エルホミチン；酢酸エリプチニウム；エポチロン；エトグルシド；硝酸ガリウム；ヒドロキシ尿素；レンチナン；ロニダミン；マイタンシノイド、例えば、マイタンシン、及びアンサマイトシン；ミトグアゾン；ミトキサントロン；モピダモール；ニトラクリン；ペントスタチン；フェナメット；ピラルビシン；ポドフィリン酸；２−エチルヒドラジド；プロカルバジン；ＰＳＫ（登録商標）；ラゾキサン；リゾキシン；シゾフラン；スピロゲルマニウム；テヌアゾン酸；トリアジクオン；２，２’，２’’−トリクロロトリエチルアミン；トリコテセン（特に、Ｔ−２毒素、ベラクリンＡ、ロリジンＡ、及びアングイジン）；ウレタン；ビンデシン；ダカルバジン；マンノムスチン；ミトブロニトール；ミトラクトール；ピポブロマン；ガシトシン；アラビノシド（「Ａｒａ−Ｃ」）；シクロホスファミド；チオテパ；タキソイド、例えば、パクリタキセル（ＴＡＸＯＬ（商標）、Ｂｒｉｓｔｏｌ−Ｍｙｅｒｓ  Ｓｑｕｉｂｂ  Ｏｎｃｏｌｏｇｙ，Ｐｒｉｎｃｅｔｏｎ，Ｎ．Ｊ．）及びドセタキセル（ＴＡＸＯＴＥＲＥ（登録商標）Ｒｈｏｎｅ−Ｐｏｕｌｅｎｃ  Ｒｏｒｅｒ，Ａｎｔｏｎｙ，Ｆｒａｎｃｅ）；クロラムブシル；ゲムシタビン；６−チオグアニン；メルカプトプリン；メトトレキサート；白金類似体、例えば、シスプラチン、及びカルボプラチン；ビンブラスチン；白金；エトポシド（ＶＰ−１６）；イホスファミド；マイトマイシンＣ；ミトキサントロン；ビンクリスチン；ビノレルビン；ナベルビン；ノバントロン；テニポシド；ダウノマイシン；アミノプテリン；キセロダ；イバンドロネート；ＣＰＴ−１１；トポイソメラーゼ阻害剤ＲＦＳ  ２０００；ジフルオロメチルオミチン（ＤＭＦＯ）；レチノイン酸；カペシタビン；タモキシフェン、ラロキシフェン、アロマターゼ阻害性４（５）−イミダゾール、４−ヒドロキシタモキシフェン、トリオキシフェン、ケオキシフェン、ＬＹ１１７０１８、オナプリストン、及びトレミフェン（Ｆａｒｅｓｔｏｎ）；ならびに抗アンドロゲン薬、例えば、フルタミド、ニルタミド、ビカルタミド、ロイプロリド、ゴセレリン、コルヒチン部位結合剤（Ｃｕｒａｃｉｎ）、コンブレタスタチン（ＡＶＥ８０６、コンブレタスタチンＡ−４プロドラッグ（ＣＡ４Ｐ）、Ｏｘｉ−４５０３）、クリプトフィシン（ＬＹ３５５７０３）、ディスコデルモリド、ドラスタチン、及び類似体（オーリスタチンＰＨＥ、ドラスタチン１０、ＩＬＸ−６５１、シンプロスタチン１、ＴＺＴ−１０２７）、エポチロン（ＢＭＳ−２４７５５０、ＢＭＳ−３１０７０５、ＥＰ０９０６、ＫＯＳ−８６２、ＺＫ−ＥＰＯ）、エリュテロビン、ＦＲ１８２８７７、ハリコンドリンＢ（Ｅ７３８９）、ハリミド（ＮＰＩ−２３５２及びＮＰＩ−２３５８）、ヘミアステリン（ＨＴＩ−２８６）、���ウリマライド、マイタンシノイド（「ＤＭ１」、「ＤＭ３」、または「ＤＭ４」）（ビバツズマブメルタンシン、カンツズマブメルタンシン、ｈｕＮ９０１−ＤＭ１／ＢＢ−１０９０１ＴＡＰ、ＭＬＮ５９１ＤＭ１、Ｍｙ９−６−ＤＭ１、トラスツズマブ−ＤＭ１）、ＰＣ−ＳＰＥＳ、ペロルシドＡ、レスベラトロール、Ｓ−アリルメルカプトシステイン（ＳＡＭＣ）、スポンジスタチン、ビチレブアミド、分子モーターキネシン（ＳＢ−７１５９９２）、設計されたコルヒチン部位結合剤（Ａ−２８９０９９、Ａ−２９３６２０／Ａ−３１８３１５、ＡＢＴ−７５１／Ｅ７０１０、Ｄ−２４８５１／Ｄ−６４１３１、ＺＤ６１２６）、他の新規な紡錘体毒（２−メトキシエストラジオール（２−ＭＥ２）、ベズイミダゾールカルバメート（ＡＮＧ  ６００シリーズ、メベンダゾール）、ＣＰ２４８／ＣＰ４６１、ＨＭＮ−２１４、Ｒ４４０、ＳＤＸ−１０３、Ｔ６７／Ｔ６０７）からなる群から選択される、薬物または化学療法剤をさらに含む、請求項１〜２５に記載の抗体またはフラグメント。
【請求項２７】
前記抗体またはフラグメントは、マイタンシノイド（「ＤＭ１」、「ＤＭ３」、または「ＤＭ４」）からなる群から選択される、薬物または化学療法剤をさらに含む、請求項１〜２６に記載の抗体またはフラグメント。
【請求項２８】
前記抗体またはフラグメントは、ＤＭ１をさらに含む、請求項１〜２７に記載の抗体またはフラグメント。
【請求項２９】
前記抗体またはフラグメントは、抗体に対する薬物の比が１〜１０である、請求項１〜２８に記載の抗体またはフラグメント。
【請求項３０】
前記抗体またはフラグメントは、抗体に対する薬物の比が２〜５である、請求項１〜２９に記載の抗体またはフラグメント。
【請求項３１】
単離ポリペプチドまたはそのＢＣＭＡ結合フラグメントであって、
Ａｂ−１の６つのＣＤＲを含むポリペプチド、
Ａｂ−２の６つのＣＤＲを含むポリペプチド、
Ａｂ−３の６つのＣＤＲを含むポリペプチド、
Ａｂ−４の６つのＣＤＲを含むポリペプチド、
Ａｂ−５の６つのＣＤＲを含むポリペプチド、
Ａｂ−６の６つのＣＤＲを含むポリペプチド、
Ａｂ−７の６つのＣＤＲを含むポリペプチド、
Ａｂ−８の６つのＣＤＲを含むポリペプチド、
Ａｂ−９の６つのＣＤＲを含むポリペプチド、
Ａｂ−１０の６つのＣＤＲを含むポリペプチド、
Ａｂ−１１の６つのＣＤＲを含むポリペプチド、
Ａｂ−１２の６つのＣＤＲを含むポリペプチド、
Ａｂ−１３の６つのＣＤＲを含むポリペプチド、
Ａｂ−１４の６つのＣＤＲを含むポリペプチド、
Ａｂ−１５の６つのＣＤＲを含むポリペプチド、
Ａｂ−１６の６つのＣＤＲを含むポリペプチド、
Ａｂ−１７の６つのＣＤＲを含むポリペプチド、
Ａｂ−１８の６つのＣＤＲを含むポリペプチド、
Ａｂ−１９の６つのＣＤＲを含むポリペプチド、
Ａｂ−２０の６つのＣＤＲを含むポリペプチド、
Ａｂ−２１の６つのＣＤＲを含むポリペプチド、
Ａｂ−２２の６つのＣＤＲを含むポリペプチド、
Ａｂ−２３の６つのＣＤＲを含むポリペプチド、
Ａｂ−２４の６つのＣＤＲを含むポリペプチド、
Ａｂ−２５の６つのＣＤＲを含むポリペプチド、
Ａｂ−２６の６つのＣＤＲを含むポリペプチド、
Ａｂ−２７の６つのＣＤＲを含むポリペプチド、
Ａｂ−２８の６つのＣＤＲを含むポリペプチド、
Ａｂ−２９の６つのＣＤＲを含むポリペプチド、
Ａｂ−３０の６つのＣＤＲを含むポリペプチド、
Ａｂ−３１の６つのＣＤＲを含むポリペプチド、
Ａｂ−３２の６つのＣＤＲを含むポリペプチド、
Ａｂ−３３の６つのＣＤＲを含むポリペプチド、
Ａｂ−３４の６つのＣＤＲを含むポリペプチド、
Ａｂ−３５の６つのＣＤＲを含むポリペプチド、
Ａｂ−３６の６つのＣＤＲを含むポリペプチド、
Ａｂ−３７の６つのＣＤＲを含むポリペプチド、及び
Ａｂ−３８の６つのＣＤＲを含むポリペプチドからなる群から選択される、単離ポリペプチドまたはそのＢＣＭＡ結合フラグメント。
【請求項３２】
前記ポリペプチドまたはフラグメントは、
Ａｂ−１の６つのＣＤＲを含むポリペプチド、
Ａｂ−２の６つのＣＤＲを含むポリペプチド、及び
Ａｂ−３の６つのＣＤＲを含むポリペプチドからなる群から選択される、請求項３１に記載のポリペプチドまたはフラグメント。
【請求項３３】
前記ポリペプチドまたはフラグメントは、Ａｂ−１の６つのＣＤＲを含むポリペプチドである、請求項３１または３２に記載のポリペプチドまたはフラグメント。
【請求項３４】
前記ＣＤＲは、配列番号４を含むＶｈ−ＣＤＲ１、配列番号５を含むＶｈ−ＣＤＲ２、配列番号６を含むＶｈ−ＣＤＲ３、配列番号１０６を含むＶｌ−ＣＤＲ１、配列番号１０７を含むＶｌ−ＣＤＲ２、及び配列番号１０８を含むＶｌ−ＣＤＲ３を含み、前記ＣＤＲは、配列番号１０を含むＶｈ−ＣＤＲ１、配列番号１１を含むＶｈ−ＣＤＲ２、配列番号１２を含むＶｈ−ＣＤＲ３、配列番号１１２を含むＶｌ−ＣＤＲ１、配列番号１１３を含むＶｌ−ＣＤＲ２、及び配列番号１１４を含むＶｌ−ＣＤＲ３を含み、前記ＣＤＲは、配列番号１６を含むＶｈ−ＣＤＲ１、配列番号１７を含むＶｈ−ＣＤＲ２、配列番号１８を含むＶｈ−ＣＤＲ３、配列番号１１８を含むＶｌ−ＣＤＲ１、配列番号１１９を含むＶｌ−ＣＤＲ２、及び配列番号１２０を含むＶｌ−ＣＤＲ３を含み、前記ＣＤＲは、配列番号２２を含むＶｈ−ＣＤＲ１、配列番号２３を含むＶｈ−ＣＤＲ２、配列番号２４を含むＶｈ−ＣＤＲ３、配列番号１２４を含むＶｌ−ＣＤＲ１、配列番号１２５を含むＶｌ−ＣＤＲ２、及び配列番号１２６を含むＶｌ−ＣＤＲ３を含み、前記ＣＤＲは、配列番号２８を含むＶｈ−ＣＤＲ１、配列番号２９を含むＶｈ−ＣＤＲ２、配列番号３０を含むＶｈ−ＣＤＲ３、配列番号１３０を含むＶｌ−ＣＤＲ１、配列番号１３１を含むＶｌ−ＣＤＲ２、及び配列番号１３２を含むＶｌ−ＣＤＲ３を含み、前記ＣＤＲは、配列番号３４を含むＶｈ−ＣＤＲ１、配列番号３５を含むＶｈ−ＣＤＲ２、配列番号３６を含むＶｈ−ＣＤＲ３、配列番号１３６を含むＶｌ−ＣＤＲ１、配列番号１３７を含むＶｌ−ＣＤＲ２、及び配列番号１３８を含むＶｌ−ＣＤＲ３を含み、前記ＣＤＲは、配列番号４０を含むＶｈ−ＣＤＲ１、配列番号４１を含むＶｈ−ＣＤＲ２、配列番号４２を含むＶｈ−ＣＤＲ３、配列番号１４２を含むＶｌ−ＣＤＲ１、配列番号１４３を含むＶｌ−ＣＤＲ２、及び配列番号１４４を含むＶｌ−ＣＤＲ３を含み、前記ＣＤＲは、配列番号４６を含むＶｈ−ＣＤＲ１、配列番号４７を含むＶｈ−ＣＤＲ２、配列番号４８を含むＶｈ−ＣＤＲ３、配列番号１４８を含むＶｌ−ＣＤＲ１、配列番号１４９を含むＶｌ−ＣＤＲ２、及び配列番号１５０を含むＶｌ−ＣＤＲ３を含み、前記ＣＤＲは、配列番号５２を含むＶｈ−ＣＤＲ１、配列番号５３を含むＶｈ−ＣＤＲ２、配列番号５４を含むＶｈ−ＣＤＲ３、配列番号１５４を含むＶｌ−ＣＤＲ１、配列番号１５５を含むＶｌ−ＣＤＲ２、及び配列番号１５６を含むＶｌ−ＣＤＲ３を含み、前記ＣＤＲは、配列番号５８を含むＶｈ−ＣＤＲ１、配列番号５９を含むＶｈ−ＣＤＲ２、配列番号６０を含むＶｈ−ＣＤＲ３、配列番号１６０を含むＶｌ−ＣＤＲ１、配列番号１６１を含むＶｌ−ＣＤＲ２、及び配列番号１６２を含むＶｌ−ＣＤＲ３を含み、前記ＣＤＲは、配列番号６４を含むＶｈ−ＣＤＲ１、配列番号６５を含むＶｈ−ＣＤＲ２、配列番号６６を含むＶｈ−ＣＤＲ３、配列番号１６６を含むＶｌ−ＣＤＲ１、配列番号１６７を含むＶｌ−ＣＤＲ２、及び配列番号１６８を含むＶｌ−ＣＤＲ３を含み、前記ＣＤＲは、配列番号７０を含むＶｈ−ＣＤＲ１、配列番号７１を含むＶｈ−ＣＤＲ２、配列番号７２を含むＶｈ−ＣＤＲ３、配列番号１７２を含むＶｌ−ＣＤＲ１、配列番号１７３を含むＶｌ−ＣＤＲ２、及び配列番号１７４を含むＶｌ−ＣＤＲ３を含み、前記ＣＤＲは、配列番号７６を含むＶｈ−ＣＤＲ１、配列番号７７を含むＶｈ−ＣＤＲ２、配列番号７８を含むＶｈ−ＣＤＲ３、配列番号１７８を含むＶｌ−ＣＤＲ１、配列番号１７９を含むＶｌ−ＣＤＲ２、及び配列番号１８０を含むＶｌ−ＣＤＲ３を含み、前記ＣＤＲは、配列番号８２を含むＶｈ−ＣＤＲ１、配列番号８３を含むＶｈ−ＣＤＲ２、配列番号８４を含むＶｈ−ＣＤＲ３、配列番号１８４を含むＶｌ−ＣＤＲ１、配列番号１８５を含むＶｌ−ＣＤＲ２、及び配列番号１８６を含むＶｌ−ＣＤＲ３を含み、前記ＣＤＲは、配列番号８８を含むＶｈ−ＣＤＲ１、配列番号８９を含むＶｈ−ＣＤＲ２、配列番号９０を含むＶｈ−ＣＤＲ３、配列番号１９０を含むＶｌ−ＣＤＲ１、配列番号１９１を含むＶｌ−ＣＤＲ２、及び配列番号１９２を含むＶｌ−ＣＤＲ３を含み、前記ＣＤＲは、配列番号９４を含むＶｈ−ＣＤＲ１、配列番号９５を含むＶｈ−ＣＤＲ２、配列番号９６を含むＶｈ−ＣＤＲ３、配列番号１９６を含むＶｌ−ＣＤＲ１、配列番号１９７を含むＶｌ−ＣＤＲ２、及び配列番号１９８を含むＶｌ−ＣＤＲ３を含み、前記ＣＤＲは、配列番号１００を含むＶｈ−ＣＤＲ１、配列番号１０１を含むＶｈ−ＣＤＲ２、配列番号１０２を含むＶｈ−ＣＤＲ３、配列番号２０２を含むＶｌ−ＣＤＲ１、配列番号２０３を含むＶｌ−ＣＤＲ２、及び配列番号２０４を含むＶｌ−ＣＤＲ３を含む、請求項３１〜３３に記載のポリペプチドまたはフラグメント。
【請求項３５】
前記ＣＤＲは、配列番号４を含むＶｈ−ＣＤＲ１、配列番号５を含むＶｈ−ＣＤＲ２、配列番号６を含むＶｈ−ＣＤＲ３、配列番号１０６を含むＶｌ−ＣＤＲ１、配列番号１０７を含むＶｌ−ＣＤＲ２、及び配列番号１０８を含むＶｌ−ＣＤＲ３を含み、前記ＣＤＲは、配列番号１０を含むＶｈ−ＣＤＲ１、配列番号１１を含むＶｈ−ＣＤＲ２、配列番号１２を含むＶｈ−ＣＤＲ３、配列番号１１２を含むＶｌ−ＣＤＲ１、配列番号１１３を含むＶｌ−ＣＤＲ２、及び配列番号１１４を含むＶｌ−ＣＤＲ３を含み、前記ＣＤＲは、配列番号１６を含むＶｈ−ＣＤＲ１、配列番号１７を含むＶｈ−ＣＤＲ２、配列番号１８を含むＶｈ−ＣＤＲ３、配列番号１１８を含むＶｌ−ＣＤＲ１、配列番号１１９を含むＶｌ−ＣＤＲ２、及び配列番号１２０を含むＶｌ−ＣＤＲ３を含む、請求項３１〜３４に記載のポリペプチドまたはフラグメント。
【請求項３６】
前記ＣＤＲは、配列番号４を含むＶｈ−ＣＤＲ１、配列番号５を含むＶｈ−ＣＤＲ２、配列番号６を含むＶｈ−ＣＤＲ３、配列番号１０６を含むＶｌ−ＣＤＲ１、配列番号１０７を含むＶｌ−ＣＤＲ２、及び配列番号１０８を含むＶｌ−ＣＤＲ３を含む、請求項３１〜３５に記載のポリペプチドまたはフラグメント。
【請求項３７】
前記ポリペプチドまたはフラグメントは、配列番号２４０を含むＶｌドメイン及び配列番号２０６を含むＶｈドメインを含み、前記ポリペプチドまたはフラグメントは、配列番号２４２を含むＶｌドメイン及び配列番号２０８を含むＶｈドメインを含み、前記ポリペプチドまたはフラグメントは、配列番号２４４を含むＶｌドメイン及び配列番号２１０を含むＶｈドメインを含み、前記ポリペプチドまたはフラグメントは、配列番号２４６を含むＶｌドメイン及び配列番号２１２を含むＶｈドメインを含み、前記ポリペプチドまたはフラグメントは、配列番号２４８を含むＶｌドメイン及び配列番号２１４を含むＶｈドメインを含み、前記ポリペプチドまたはフラグメントは、配列番号２５０を含むＶｌドメイン及び配列番号２１６を含むＶｈドメインを含み、前記ポリペプチドまたはフラグメントは、配列番号２５２を含むＶｌドメイン及び配列番号２１８を含むＶｈドメインを含み、前記ポリペプチドまたはフラグメントは、配列番号２５４を含むＶｌドメイン及び配列番号２２０を含むＶｈドメインを含み、前記ポリペプチドまたはフラグメントは、配列番号２５６を含むＶｌドメイン及び配列番号２２２を含むＶｈドメインを含み、前記ポリペプチドまたはフラグメントは、配列番号２５８を含むＶｌドメイン及び配列番号２２４を含むＶｈドメインを含み、前記ポリペプチドまたはフラグメントは、配列番号２６０を含むＶｌドメイン及び配列番号２２６を含むＶｈドメインを含み、前記ポリペプチドまたはフラグメントは、配列番号２６２を含むＶｌ及び配列番号２２８を含むＶｈドメインを含み、前記ポリペプチドまたはフラグメントは、配列番号２６４を含むＶｌドメイン及び配列番号２３０を含むＶｈドメインを含み、前記ポリペプチドまたはフラグメントは、配列番号２６６を含むＶｌドメイン及び配列番号２３２を含むＶｈドメインを含み、前記ポリペプチドまたはフラグメントは、配列番号２６８を含むＶｌドメイン及び配列番号２３４を含むＶｈドメインを含み、前記ポリペプチドまたはフラグメントは、配列番号２７０を含むＶｌドメイン及び配列番号２３６を含むＶｈドメインを含み、前記ポリペプチドまたはフラグメントは、配列番号２７２を含むＶｌドメイン及び配列番号２３８を含むＶｈドメイン）ドメインを含む、請求項３１〜３６に記載のポリペプチドまたはフラグメント。
【請求項３８】
前記ポリペプチドまたはフラグメントは、配列番号２４０を含むＶｌドメイン及び配列番号２０６を含むＶｈドメインを含み、前記ポリペプチドまたはフラグメントは、配列番号２４２を含むＶｌドメイン及び配列番号２０８を含むＶｈドメインを含み、前記ポリペプチドまたはフラグメントは、配列番号２４４を含むＶｌドメイン及び配列番号２１０を含むＶｈドメインを含む、請求項３１〜３７に記載のポリペプチドまたはフラグメント。
【請求項３９】
前記ポリペプチドまたはフラグメントは、配列番号２４０を含むＶｌドメイン及び配列番号２０６を含むＶｈドメインを含む、請求項３１〜３８に記載のポリペプチドまたはフラグメント。
【請求項４０】
前記ポリペプチドまたはフラグメントは、配列番号２８０を含むＡｂ−１軽鎖及び配列番号２７４を含むＡｂ−１重鎖を含み、前記ポリペプチドまたはフラグメントは、配列番号２８２を含むＡｂ−２軽鎖及び配列番号２７６を含むＡｂ−２重鎖を含み、前記ポリペプチドまたはフラグメントは、配列番号２８４を含むＡｂ−３軽鎖及び配列番号２７８を含むＡｂ−３重鎖を含み、前記ポリペプチドまたはフラグメントは、配列番号２８０を含む２つのＡｂ−１軽鎖及び配列番号２７４を含む２つのＡｂ−１重鎖を含み、前記ポリペプチドまたはフラグメントは、配列番号２８２を含む２つのＡｂ−２軽鎖及び配列番号２７６を含む２つのＡｂ−２重鎖を含み、前記ポリペプチドまたはフラグメントは、配列番号２８４を含む２つのＡｂ−３軽鎖及び配列番号２７８を含む２つのＡｂ−３重鎖）を含む、請求項３１〜３９に記載のポリペプチドまたはフラグメント。
【請求項４１】
前記ポリペプチドまたはフラグメントは、配列番号２８０を含むＡｂ−１軽鎖及び配列番号２７４を含むＡｂ−１重鎖を含み、前記ポリペプチドまたはフラグメントは、配列番号２８０を含む２つのＡｂ−１軽鎖及び配列番号２７４を含む２つのＡｂ−１重鎖を含む、請求項３１〜４０に記載のポリペプチドまたはフラグメント。
【請求項４２】
前記ポリペプチドまたはフラグメントは、配列番号２８０を含む２つのＡｂ−１軽鎖及び配列番号２７４を含む２つのＡｂ−１重鎖を含む、請求項３１〜４１に記載のポリペプチドまたはフラグメント。
【請求項４３】
前記ポリペプチドまたはフラグメントは、ヒトＢＣＭＡに特異的に結合する、請求項３１〜４２に記載のポリペプチドまたはフラグメント。
【請求項４４】
前記ポリペプチドまたはフラグメントは、ヒトＢＣＭＡに特異的に結合し、カニクイザルＢＣＭＡに交差反応する、請求項３１〜４３に記載のポリペプチドまたはフラグメント。
【請求項４５】
前記ポリペプチドまたはフラグメントは、ＴＡＣＩまたはＢＡＦＦ−Ｒに特異的に結合しない、請求項３１〜４４に記載のポリペプチドまたはフラグメント。
【請求項４６】
前記ポリペプチドまたはフラグメントは、ヒト骨髄腫細胞の表面上のＢＣＭＡに結合する、請求項３１〜４５に記載のポリペプチドまたはフラグメント。
【請求項４７】
前記ポリペプチドまたはフラグメントは、ヒト多発性骨髄腫細胞の表面上のＢＣＭＡに結合する、請求項３１〜４６に記載のポリペプチドまたはフラグメント。
【請求項４８】
前記ポリペプチドまたはフラグメントは、ヒト細胞の表面上のＢＣＭＡに結合し、前記細胞に内部移行される、請求項３１〜４７に記載のポリペプチドまたはフラグメント。
【請求項４９】
前記ポリペプチドまたはフラグメントは、リンカーをさらに含む、請求項３１〜４８に記載のポリペプチドまたはフラグメント。
【請求項５０】
前記ポリペプチドまたはフラグメントは、薬物または化学療法剤をさらに含む、請求項３１〜４９に記載のポリペプチドまたはフラグメント。
【請求項５１】
前記ポリペプチドまたはフラグメントは、６−マレイミドカプロイル、マレイミドプロパノイル、バリン−シトルリン、アラニン−フェニルアラニン、ｐ−アミノベンジルオキシカルボニル、Ｍａｌ−ｄＰＥＧ４−ＮＨＳ、Ｎ−スクシンイミジル４−（２−ピリジルチオ）ペンタノエート（「ＳＰＰ」）、Ｎ−スクシンイミジル４−（Ｎ−マレイミドメチル）シクロヘキサン−１カルボキシレート（「ＳＭＣＣ」または「ＭＣＣ」）、及びＮ−スクシンイミジル（４−ヨード−アセチル）アミノベンゾエート（「ＳＩＡＢ」）からなる群から選択されるリンカーをさらに含む、請求項３１〜５０に記載のポリペプチドまたはフラグメント。
【請求項５２】
前記ポリペプチドまたはフラグメントは、リンカーをさらに含み、前記リンカーは、Ｎ−スクシンイミジル４−（Ｎ−マレイミドメチル）シクロヘキサン−１カルボキシレート（「ＳＭＣＣ」または「ＭＣＣ」）である、請求項３１〜５１に記載のポリペプチドまたはフラグメント。
【請求項５３】
前記ポリペプチドまたはフラグメントは、チオテパ及びシクロホスファミド（ＣＹＴＯＸＡＮ（商標））；スルホン酸アルキル、例えば、ブスルファン、インプロスルファン、及びピポスルファン；アジリジン、例えば、ベンゾドーパ、カルボコン、メツレドーパ、及びウレドーパ；エチレンイミン及びメチラメラミン（アルトレタミン、トリエチレンメラミン、トリエチレンホスホラミド、トリエチレンチオホスファオラミド、及びトリメチローロメラミンを含む）；アセトゲニン（特にブラタシン及びブラタシノン）；カンプトテシン（合成類似体トポテカンを含む）；ブリオスタチン；カリスタチン；ＣＣ−１０６５（そのアゾゼレシン、カルゼレシン、及びビゼレシン合成類似体を含む）；クリプトフィシン（特にクリプトフィシン１及びクリプトフィシン８）；ドラスタチン；デュオカルマイシン（合成類似体ＫＷ−２１８９及びＣＢＩ−ＴＭＩを含む）；エリュテロビン；パンクラチスタチン；サルコジクチイン；スポンジスタチン；ナイトロジェンマスタード、例えば、クロラムブシル、クロマファジン、コロホスファミド、エストラムスチン、イホスファミド、メクロレタミン、メクロレタミンオキシド塩酸塩、メルファラン、ノベムビシン、フェネステリン、プレドニムスチン、トロホスファミド、ウラシルマスタード；ニトロソ尿素、例えば、カルムスチン、クロロゾトシン、フォテムスチン、ロムスチン、ニムスチン、ラニムスチン；抗生物質、例えば、エンジイン抗生物質（例えば、カリケアマイシン、特にカリケアマイシンγ１及びカリケアマイシンθＩ、例えばＡｎｇｅｗ  Ｃｈｅｍ．Ｉｎｔｌ．Ｅｄ．Ｅｎｇｌ．３３：１８３−１８６（１９９４）を参照されたい；ダイネミシン（ダイネミシンＡを含む）；エスペラミシン；ならびにネオカルジノスタチン発色団及び関連色素タンパク質エンジイン抗生物質発色団）、アクラノマイシン、アクチノマイシン、オースラマイシン、アザセリン、ブレオマイシン、カクチノマイシン、カラビシン、カミノマイシン、カルジノフィリン；クロモマイシン、ダクチノマイシン、ダウノルビシン、デトルビシン、６−ジアゾ−５−オキソ−Ｌ−ノルロイシン、ドキソルビシン（モルホリノ−ドキソルビシン、シアノモルホリノ−ドキソルビシン、２−ピロリノ−ドキソルビシン、及びデオキシドキソルビシンを含む）、エピルビシン、エソルビシン、イダルビシン、マルセロマイシン、ナイトマイシン、ミコフェノール酸、ノガラマイシン、オリボマイシン、ペプロマイシン、ポトフィロマイシン、ピューロマイシン、ケラマイシン、ロドルビシン、ストレプトニグリン、ストレプトゾシン、ツベルシジン、ウベニメクス、ジノスタチン、ゾルビシン；代謝拮抗薬、例えば、メトトレキサート、及び５−フルオロウラシル（５−ＦＵ）；葉酸類似体、例えば、デノプテリン、メトトレキサート、プテロプテリン、トリメトレキサート；プリン類似体、例えば、フルダラビン、６−メルカプトプリン、チアミプリン、チオグアニン；ピリミジン類似体、例えば、アンシタビン、アザシチジン、６−アザウリジン、カルモフール、シタラビン、ジデオキシウリジン、ドキシフルリジン、エノシタビン、フロクスウリジン、５−ＦＵ；アンドロゲン、例えば、カルステロン、プロピオン酸ドロモスタノロン、エピチオスタノール、メピチオスタン、テストラクトン；抗副腎剤、例えば、アミノグルテチミド、ミトタン、トリロスタン；葉酸補液、例えば、フロリン酸；アセグラトン；アルドホスファミドグリコシド；アミノレブリン酸；アムサクリン；ベストラブシル；ビスアントレン；エダトラキサート；デフォファミン；デメコルチン；ジアジクオン；エルホミチン；酢酸エリプチニウム；エポチロン；エトグルシド；硝酸ガリウム；ヒドロキシ尿素；レンチナン；ロニダミン；マイタンシノイド、例えば、マイタンシン、及びアンサマイトシン；ミトグアゾン；ミトキサントロン；モピダモール；ニトラクリン；ペントスタチン；フェナメット；ピラルビシン；ポドフィリン酸；２−エチルヒドラジド；プロカルバジン；ＰＳＫ（登録商標）；ラゾキサン；リゾキシン；シゾフラン；スピロゲルマニウム；テヌアゾン酸；トリアジクオン；２，２’，２’’−トリクロロトリエチルアミン；トリコテセン（特に、Ｔ−２毒素、ベラクリンＡ、ロリジンＡ、及びアングイジン）；ウレタン；ビンデシン；ダカルバジン；マンノムスチン；ミトブロニトール；ミトラクトール；ピポブロマン；ガシトシン；アラビノシド（「Ａｒａ−Ｃ」）；シクロホスファミド；チオテパ；タキソイド、例えば、パクリタキセル（ＴＡＸＯＬ（商標）、Ｂｒｉｓｔｏｌ−Ｍｙｅｒｓ  Ｓｑｕｉｂｂ  Ｏｎｃｏｌｏｇｙ，Ｐｒｉｎｃｅｔｏｎ，Ｎ．Ｊ．）及びドセタキセル（ＴＡＸＯＴＥＲＥ（登録商標）Ｒｈｏｎｅ−Ｐｏｕｌｅｎｃ  Ｒｏｒｅｒ，Ａｎｔｏｎｙ，Ｆｒａｎｃｅ）；クロラムブシル；ゲムシタビン；６−チオグアニン；メルカプトプリン；メトトレキサート；白金類似体、例えば、シスプラチン、及びカルボプラチン；ビンブラスチン；白金；エトポシド（ＶＰ−１６）；イホスファミド；マイトマイシンＣ；ミトキサントロン；ビンクリスチン；ビノレルビン；ナベルビン；ノバントロン；テニポシド；ダウノマイシン；アミノプテリン；キセロダ；イバンドロネート；ＣＰＴ−１１；トポイソメラーゼ阻害剤ＲＦＳ  ２０００；ジフルオロメチルオミチン（ＤＭＦＯ）；レチノイン酸；カペシタビン；タモキシフェン、ラロキシフェン、アロマターゼ阻害性４（５）−イミダゾール、４−ヒドロキシタモキシフェン、トリオキシフェン、ケオキシフェン、ＬＹ１１７０１８、オナプリストン、及びトレミフェン（Ｆａｒｅｓｔｏｎ）；ならびに抗アンドロゲン薬、例えば、フルタミド、ニルタミド、ビカルタミド、ロイプロリド、ゴセレリン、コルヒチン部位結合剤（Ｃｕｒａｃｉｎ）、コンブレタスタチン（ＡＶＥ８０６、コンブレタスタチンＡ−４プロドラッグ（ＣＡ４Ｐ）、Ｏｘｉ−４５０３）、クリプトフィシン（ＬＹ３５５７０３）、ディスコデルモリド、ドラスタチン、及び類似体（オーリスタチンＰＨＥ、ドラスタチン１０、ＩＬＸ−６５１、シンプロスタチン１、ＴＺＴ−１０２７）、エポチロン（ＢＭＳ−２４７５５０、ＢＭＳ−３１０７０５、ＥＰ０９０６、ＫＯＳ−８６２、ＺＫ−ＥＰＯ）、エリュテロビン、ＦＲ１８２８７７、ハリコンドリンＢ（Ｅ７３８９）、ハリミド（ＮＰＩ−２３５２及びＮＰＩ−２３５８）、ヘミアステリン（ＨＴＩ−２８６）、ラウリマライド���マイタンシノイド（「ＤＭ１」、「ＤＭ３」、または「ＤＭ４」）（ビバツズマブメルタンシン、カンツズマブメルタンシン、ｈｕＮ９０１−ＤＭ１／ＢＢ−１０９０１ＴＡＰ、ＭＬＮ５９１ＤＭ１、Ｍｙ９−６−ＤＭ１、トラスツズマブ−ＤＭ１）、ＰＣ−ＳＰＥＳ、ペロルシドＡ、レスベラトロール、Ｓ−アリルメルカプトシステイン（ＳＡＭＣ）、スポンジスタチン、ビチレブアミド、分子モーターキネシン（ＳＢ−７１５９９２）、設計されたコルヒチン部位結合剤（Ａ−２８９０９９、Ａ−２９３６２０／Ａ−３１８３１５、ＡＢＴ−７５１／Ｅ７０１０、Ｄ−２４８５１／Ｄ−６４１３１、ＺＤ６１２６）、他の新規な紡錘体毒（２−メトキシエストラジオール（２−ＭＥ２）、ベズイミダゾールカルバメート（ＡＮＧ  ６００シリーズ、メベンダゾール）、ＣＰ２４８／ＣＰ４６１、ＨＭＮ−２１４、Ｒ４４０、ＳＤＸ−１０３、Ｔ６７／Ｔ６０７）からなる群から選択される、薬物または化学療法剤をさらに含む、請求項３１〜５２に記載の抗体またはフラグメント。
【請求項５４】
前記ポリペプチドまたはフラグメントは、マイタンシノイド（「ＤＭ１」、「ＤＭ３」、または「ＤＭ４」）からなる群から選択される、薬物または化学療法剤をさらに含む、請求項３１〜５３に記載のポリペプチドまたはフラグメント。
【請求項５５】
前記ポリペプチドまたはフラグメントは、ＤＭ１をさらに含む、請求項３１〜５４に記載のポリペプチドまたはフラグメント。
【請求項５６】
前記ポリペプチドまたはフラグメントは、ポリペプチドに対する薬物の比が１〜１０である、請求項３１〜５５に記載のポリペプチドまたはフラグメント。
【請求項５７】
前記ポリペプチドまたはフラグメントは、ポリペプチドに対する薬物の比が２〜５である、請求項３１〜５７に記載のポリペプチドまたはフラグメント。
【請求項５８】
請求項１〜５７のいずれかに記載の抗体、ポリペプチド、またはそれらのフラグメントを含む、組成物。
【請求項５９】
請求項１〜５８のいずれかに記載の抗体、ポリペプチド、またはそれらのフラグメントを含む、医薬組成物。
【請求項６０】
医薬として許容される希釈剤、担体、可溶化剤、乳化剤、及び／または保存剤をさらに含む、請求項５９に記載の医薬組成物。
【請求項６１】
疾患を治療する方法であって、請求項５８〜６０のいずれかに記載の組成物の有効量を投与することを含み、前記疾患は、Ｂ細胞癌、多発性骨髄腫、悪性形質細胞腫、カーレル病、及び骨髄腫症、形質細胞性白血病、形質細胞腫、Ｂ細胞性前リンパ急性白血病、有毛細胞性白血病、Ｂ細胞非ホジキンリンパ腫（ＮＨＬ）、急性骨髄性白血病（ＡＭＬ）、慢性骨髄性白血病（ＣＭＬ）、急性リンパ球性白血病（ＡＬＬ）、慢性リンパ球性白血病（ＣＬＬ）、濾胞性リンパ腫（濾胞性非ホジキンリンパ腫型を含む）、バーキットリンパ腫（風土性バーキットリンパ腫、散発性バーキットリンパ腫）、辺縁帯リンパ腫（粘膜関連リンパ組織、ＭＡＬＴ／ＭＡＬＴリンパ腫、単球様Ｂ細胞リンパ腫、絨毛状リンパ球を伴う脾臓リンパ腫）、マントル細胞リンパ腫、大細胞型リンパ腫（びまん性大細胞、びまん性混合細胞、免疫芽球性リンパ腫、原発性縦隔性Ｂ細胞リンパ腫、血管中心性リンパ腫−肺性Ｂ細胞）、小リンパ球性リンパ腫（ＳＬＬ）、前駆Ｂリンパ芽球性リンパ腫、骨髄性白血病（顆粒球性、骨髄性、急性骨髄性白血病、慢性骨髄性白血病、亜急性骨髄性白血病、骨髄性肉腫、緑色腫、顆粒球性肉腫、急性前骨髄球性白血病、急性骨髄単球性白血病）、ヴァルデンストレームマクログロブリン血症、または他のＢ細胞リンパ腫からなる群から選択される、方法。
【請求項６２】
前記疾患は、Ｂ細胞癌、多発性骨髄腫、悪性形質細胞腫、または他のＢ細胞リンパ腫からなる群から選択される、請求項６１に記載の方法。
【請求項６３】
前記疾患は、多発性骨髄腫である、請求項６２に記載の方法。
【請求項６４】
化学療法、放射線療法、手術、プロテアソーム阻害剤、コルチコステロイド、及び幹細胞移植からなる群から選択される、さらなる追加の治療のうちの１つを施すことをさらに含む、請求項６１〜６３に記載の方法。
【請求項６５】
前記追加の治療を前記施すことは、請求項５８〜６０のいずれかに記載の組成物の前記投与の前に、それと同時に、もしくはそれに続いて、またはそのそれぞれの組み合わせで、行われる、請求項６４に記載の方法。
【請求項６６】
請求項５８〜６０のいずれかに記載の組成物は、非経口で投与される、請求項６２〜６５に記載の方法。
【請求項６７】
単離ポリヌクレオチドであって、前記ポリヌクレオチドは、請求項１〜２１及び３１〜４８のいずれかに記載の抗体またはポリペプチドをコードする、単離ポリヌクレオチド。
【請求項６８】
前記ポリヌクレオチドの配列は、配列番号１を含むＶｈ−ＣＤＲ１、配列番号２を含むＶｈ−ＣＤＲ２、配列番号３を含むＶｈ−ＣＤＲ３、配列番号１０３を含むＶｌ−ＣＤＲ１、配列番号１０４を含むＶｌ−ＣＤＲ２、及び配列番号１０５を含むＶｌ−ＣＤＲ３を含み、前記ポリヌクレオチドの配列は、配列番号７を含むＶｈ−ＣＤＲ１、配列番号８を含むＶｈ−ＣＤＲ２、配列番号９を含むＶｈ−ＣＤＲ３、配列番号１０９を含むＶｌ−ＣＤＲ１、配列番号１１０を含むＶｌ−ＣＤＲ２、及び配列番号１１１を含むＶｌ−ＣＤＲ３を含み、前記ポリヌクレオチドの配列は、配列番号１３を含むＶｈ−ＣＤＲ１、配列番号１４を含むＶｈ−ＣＤＲ２、配列番号１５を含むＶｈ−ＣＤＲ３、配列番号１１５を含むＶｌ−ＣＤＲ１、配列番号１１６を含むＶｌ−ＣＤＲ２、及び配列番号１１７を含むＶｌ−ＣＤＲ３を含み、前記ポリヌクレオチドの配列は、配列番号１９を含むＶｈ−ＣＤＲ１、配列番号２０を含むＶｈ−ＣＤＲ２、配列番号２１を含むＶｈ−ＣＤＲ３、配列番号１２１を含むＶｌ−ＣＤＲ１、配列番号１２２を含むＶｌ−ＣＤＲ２、及び配列番号１２３を含むＶｌ−ＣＤＲ３を含み、前記ポリヌクレオチドの配列は、配列番号２５を含むＶｈ−ＣＤＲ１、配列番号２６を含むＶｈ−ＣＤＲ２、配列番号２７を含むＶｈ−ＣＤＲ３、配列番号１２７を含むＶｌ−ＣＤＲ１、配列番号１２８を含むＶｌ−ＣＤＲ２、及び配列番号１２９を含むＶｌ−ＣＤＲ３を含み、前記ポリヌクレオチド配列は、配列番号３１を含むＶｈ−ＣＤＲ１、配列番号３２を含むＶｈ−ＣＤＲ２、配列番号３３を含むＶｈ−ＣＤＲ３、配列番号１３３を含むＶｌ−ＣＤＲ１、配列番号１３４を含むＶｌ−ＣＤＲ２、及び配列番号１３５を含むＶｌ−ＣＤＲ３を含み、前記ポリヌクレオチドの配列は、配列番号３７を含むＶｈ−ＣＤＲ１、配列番号３８を含むＶｈ−ＣＤＲ２、配列番号３９を含むＶｈ−ＣＤＲ３、配列番号１３９を含むＶｌ−ＣＤＲ１、配列番号１４０を含むＶｌ−ＣＤＲ２、及び配列番号１４１を含むＶｌ−ＣＤＲ３を含み、前記ポリヌクレオチド配列は、配列番号４３を含むＶｈ−ＣＤＲ１、配列番号４４を含むＶｈ−ＣＤＲ２、配列番号４５を含むＶｈ−ＣＤＲ３、配列番号１４５を含むＶｌ−ＣＤＲ１、配列番号１４６を含むＶｌ−ＣＤＲ２、及び配列番号１４７を含むＶｌ−ＣＤＲ３を含み、前記ポリヌクレオチドの配列は、配列番号４９を含むＶｈ−ＣＤＲ１、配列番号５０を含むＶｈ−ＣＤＲ２、配列番号５１を含むＶｈ−ＣＤＲ３、配列番号１５１を含むＶｌ−ＣＤＲ１、配列番号１５２を含むＶｌ−ＣＤＲ２、及び配列番号１５３を含むＶｌ−ＣＤＲ３を含み、前記ポリヌクレオチドの配列は、配列番号５５を含むＶｈ−ＣＤＲ１、配列番号５６を含むＶｈ−ＣＤＲ２、配列番号５７を含むＶｈ−ＣＤＲ３、配列番号１５７を含むＶｌ−ＣＤＲ１、配列番号１５８を含むＶｌ−ＣＤＲ２、及び配列番号１５９を含むＶｌ−ＣＤＲ３を含み、前記ポリヌクレオチドの配列は、配列番号６１を含むＶｈ−ＣＤＲ１、配列番号６２を含むＶｈ−ＣＤＲ２、配列番号６３を含むＶｈ−ＣＤＲ３、配列番号１６３を含むＶｌ−ＣＤＲ１、配列番号１６４を含むＶｌ−ＣＤＲ２、及び配列番号１６５を含むＶｌ−ＣＤＲ３を含み、前記ポリヌクレオチドの配列は、配列番号６７を含むＶｈ−ＣＤＲ１、配列番号６８を含むＶｈ−ＣＤＲ２、配列番号６９を含むＶｈ−ＣＤＲ３、配列番号１６９を含むＶｌ−ＣＤＲ１、配列番号１７０を含むＶｌ−ＣＤＲ２、及び配列番号１７１を含むＶｌ−ＣＤＲ３を含み、前記ポリヌクレオチドの配列は、配列番号７３を含むＶｈ−ＣＤＲ１、配列番号７４を含むＶｈ−ＣＤＲ２、配列番号７５を含むＶｈ−ＣＤＲ３、配列番号１７５を含むＶｌ−ＣＤＲ１、配列番号１７６を含むＶｌ−ＣＤＲ２、及び配列番号１７７を含むＶｌ−ＣＤＲ３を含み、前記ポリヌクレオチドの配列は、配列番号７９を含むＶｈ−ＣＤＲ１、配列番号８０を含むＶｈ−ＣＤＲ２、配列番号８１を含むＶｈ−ＣＤＲ３、配列番号１８１を含むＶｌ−ＣＤＲ１、配列番号１８２を含むＶｌ−ＣＤＲ２、及び配列番号１８３を含むＶｌ−ＣＤＲ３を含み、前記ポリヌクレオチドの配列は、配列番号８５を含むＶｈ−ＣＤＲ１、配列番号８６を含むＶｈ−ＣＤＲ２、配列番号８７を含むＶｈ−ＣＤＲ３、配列番号１８７を含むＶｌ−ＣＤＲ１、配列番号１８８を含むＶｌ−ＣＤＲ２、及び配列番号１８９を含むＶｌ−ＣＤＲ３を含み、前記ポリヌクレオチドの配列は、配列番号９１を含むＶｈ−ＣＤＲ１、配列番号９２を含むＶｈ−ＣＤＲ２、配列番号９３を含むＶｈ−ＣＤＲ３、配列番号１９３を含むＶｌ−ＣＤＲ１、配列番号１９４を含むＶｌ−ＣＤＲ２、及び配列番号１９５を含むＶｌ−ＣＤＲ３を含み、前記ポリヌクレオチドの配列は、配列番号９７を含むＶｈ−ＣＤＲ１、配列番号９８を含むＶｈ−ＣＤＲ２、配列番号９９を含むＶｈ−ＣＤＲ３、配列番号１９９を含むＶｌ−ＣＤＲ１、配列番号２００を含むＶｌ−ＣＤＲ２、及び配列番号２０１を含むＶｌ−ＣＤＲ３を含む、請求項６７に記載のポリヌクレオチド。
【請求項６９】
前記ポリヌクレオチド配列は、配列番号１を含むＶｈ−ＣＤＲ１、配列番号２を含むＶｈ−ＣＤＲ２、配列番号３を含むＶｈ−ＣＤＲ３、配列番号１０３を含むＶｌ−ＣＤＲ１、配列番号１０４を含むＶｌ−ＣＤＲ２、及び配列番号１０５を含むＶｌ−ＣＤＲ３を含み、前記ポリヌクレオチド配列は、配列番号７を含むＶｈ−ＣＤＲ１、配列番号８を含むＶｈ−ＣＤＲ２、配列番号９を含むＶｈ−ＣＤＲ３、配列番号１０９を含むＶｌ−ＣＤＲ１、配列番号１１０を含むＶｌ−ＣＤＲ２、及び配列番号１１１を含むＶｌ−ＣＤＲ３を含み、前記ポリヌクレオチド配列は、配列番号１３を含むＶｈ−ＣＤＲ１、配列番号１４を含むＶｈ−ＣＤＲ２、配列番号１５を含むＶｈ−ＣＤＲ３、配列番号１１５を含むＶｌ−ＣＤＲ１、配列番号１１６を含むＶｌ−ＣＤＲ２、及び配列番号１１７を含むＶｌ−ＣＤＲ３を含む、請求項６７〜６８に記載のポリヌクレオチド。
【請求項７０】
前記ポリヌクレオチド配列は、配列番号１を含むＶｈ−ＣＤＲ１、配列番号２を含むＶｈ−ＣＤＲ２、配列番号３を含むＶｈ−ＣＤＲ３、配列番号１０３を含むＶｌ−ＣＤＲ１、配列番号１０４を含むＶｌ−ＣＤＲ２、及び配列番号１０５を含むＶｌ−ＣＤＲ３を含む、請求項６７〜６９に記載のポリヌクレオチド。
【請求項７１】
前記ポリヌクレオチド配列は、配列番号２３９を含むＡｂ−１Ｖｌ及び配列番号２０５を含むＡｂ−１Ｖｈを含み、前記ポリヌクレオチド配列は、配列番号２４１を含むＡｂ−２Ｖｌ及び配列番号２０７を含むＡｂ−２Ｖｈを含み、前記ポリヌクレオチド配列は、配列番号２４３を含むＡｂ−３Ｖｌ及び配列番号２０９を含むＡｂ−３Ｖｈを含み、前記ポリヌクレオチド配列は、配列番号２４５を含むＡｂ−４Ｖｌ及び配列番号２１１を含むＡｂ−４Ｖｈを含み、前記ポリヌクレオチド配列は、配列番号２４７を含むＡｂ−５Ｖｌ及び配列番号２１３を含むＡｂ−５Ｖｈを含み、前記ポリヌクレオチド配列は、配列番号２４９を含むＡｂ−６Ｖｌ及び配列番号２１５を含むＡｂ−６Ｖｈを含み、前記ポリヌクレオチド配列は、配列番号２５１を含むＡｂ−７Ｖｌ及び配列番号２１７を含むＡｂ−７Ｖｈを含み、前記ポリヌクレオチド配列は、配列番号２５３を含むＡｂ−８Ｖｌ及び配列番号２１９を含むＡｂ−８Ｖｈを含み、前記ポリヌクレオチド配列は、配列番号２５５を含むＡｂ−９Ｖｌ及び配列番号２２１を含むＡｂ−９Ｖｈを含み、前記ポリヌクレオチド配列は、配列番号２５７を含むＡｂ−１０Ｖｌ及び配列番号２２３を含むＡｂ−１０Ｖｈを含み、前記ポリヌクレオチド配列は、配列番号２５９を含むＡｂ−１１Ｖｌ及び配列番号２２５を含むＡｂ−１１Ｖｈを含み、前記ポリヌクレオチド配列は、配列番号２６１を含むＡｂ−１２Ｖｌ及び配列番号２２７を含むＡｂ−１２Ｖｈを含み、前記ポリヌクレオチド配列は、配列番号２６３を含むＡｂ−１３Ｖｌ及び配列番号２２９を含むＡｂ−１３Ｖｈを含み、前記ポリヌクレオチド配列は、配列番号２６５を含むＡｂ−１４Ｖｌ及び配列番号２３１を含むＡｂ−１４Ｖｈを含み、前記ポリヌクレオチド配列は、配列番号２６７を含むＡｂ−１５Ｖｌ及び配列番号２３３を含むＡｂ−１５Ｖｈを含み、前記ポリヌクレオチド配列は、配列番号２６９を含むＡｂ−１６Ｖｌ及び配列番号２３５を含むＡｂ−１６Ｖｈを含み、前記ポリヌクレオチド配列は、配列番号２７１を含むＡｂ−１７Ｖｌ及び配列番号２３７を含むＡｂ−１７Ｖｈを含む、請求項６７〜７０に記載のポリヌクレオチド。
【請求項７２】
前記ポリヌクレオチド配列は、配列番号２３９を含むＡｂ−１Ｖｌ及び配列番号２０５を含むＡｂ−１Ｖｈを含み、前記ポリヌクレオチド配列は、配列番号２４１を含むＡｂ−２Ｖｌ及び配列番号２０７を含むＡｂ−２Ｖｈを含み、前記ポリヌクレオチド配列は、配列番号２４３を含むＡｂ−３Ｖｌ及び配列番号２０９を含むＡｂ−３Ｖｈを含む、請求項６７〜７１に記載のポリヌクレオチド。
【請求項７３】
前記ポリヌクレオチド配列は、配列番号２３９を含むＡｂ−１Ｖｌ及び配列番号２０５を含むＡｂ−１Ｖｈを含む、請求項６７〜７２に記載のポリヌクレオチド。
【請求項７４】
前記ポリヌクレオチド配列は、配列番号２７９を含む軽鎖及び配列番号２７３を含む重鎖を含み、前記ポリヌクレオチド配列は、配列番号２８１を含む軽鎖及び配列番号２７５を含む重鎖を含み、前記ポリヌクレオチド配列は、配列番号２８３を含む軽鎖及び配列番号２７７を含む重鎖を含む、請求項６７〜７２に記載のポリヌクレオチド。
【請求項７５】
請求項６７〜７２のいずれかに記載のポリヌクレオチドを含む、プラスミド。
【請求項７６】
前記プラスミドは、発現ベクターを含む、請求項７５に記載のプラスミド。
【請求項７７】
請求項７６に記載のプラスミドを含む単離細胞であって、前記細胞は、
ａ．原核細胞、
ｂ．真核細胞、
ｃ．哺乳動物細胞、
ｄ．昆虫細胞、及び
ｅ．ＣＨＯ細胞からなる群から選択される、単離細胞。
【請求項７８】
請求項１〜２１及び３１〜４８のいずれかに記載の抗体またはポリペプチドを作製する方法であって、請求項７７に記載の前記単離細胞を、それが前記抗体またはポリペプチドを発現できる条件下でインキュベートすることを含む、方法。
【請求項７９】
単離抗体であって、請求項７７に記載のＣＨＯ細胞によって産生される抗体を含み、前記抗体は、配列番号２７３を含む配列によってコードされる重鎖及び配列番号２７９を含む配列によってコードされる軽鎖を含む、単離抗体。
【請求項８０】
請求項７９に記載の抗体を含む、医薬組成物。
【請求項８１】
単離モノクローナル抗体であって、配列番号２８５及び配列番号２８６に特異的に結合するが、配列番号３５１には特異的に結合しない、モノクローナル抗体を含む、単離モノクローナル抗体。
【請求項８２】
前記抗体は、ヒトモノクローナル抗体である、請求項８１に記載の抗体。
【請求項８３】
前記抗体は、ＩｇＧである、請求項８２に記載の抗体。
【請求項８４】
単離モノクローナル抗体であって、配列番号３５２に特異的に結合するが、配列番号３５１には特異的に結合しない、モノクローナル抗体を含む、単離モノクローナル抗体。
【請求項８５】
前記抗体は、ヒトモノクローナル抗体である、請求項８４に記載の抗体。
【請求項８６】
前記抗体は、ＩｇＧである、請求項８５に記載の抗体。
【請求項８７】
前記抗体は、ＩｇＧ１である、請求項８５に記載の抗体。
【請求項８８】
前記抗体は、１ｎＭ〜．０１ｎＭのＫｄで配列番号３５２に特異的に結合し、１０ｎＭを上回るＫｄで配列番号３５１に結合する、請求項８１〜８７のいずれかに記載の抗体。
【請求項８９】
前記抗体は、約０．１６ｎＭのＫｄで配列番号３５２に特異的に結合し、１０ｎＭを上回るＫｄで配列番号３５１に結合する、請求項８１〜８８のいずれかに記載の抗体。
【請求項９０】
単離モノクローナル抗体であって、配列番号２８５のアミノ酸１〜２０（境界値を含む）を含む中和決定基に結合するモノクローナル抗体を含む、単離モノクローナル抗体。
【請求項９１】
前記抗体は、ヒトモノクローナル抗体である、請求項９０に記載の抗体。
【請求項９２】
前記抗体は、ＩｇＧである、請求項９１に記載の抗体。
【請求項９３】
前記抗体は、ＩｇＧ１である、請求項９２に記載の抗体。
【請求項９４】
単離モノクローナル抗体であって、配列番号２８５のアミノ酸１〜１１（境界値を含む）を含む中和決定基に結合する、モノクローナル抗体を含む、単離モノクローナル抗体。
【請求項９５】
前記抗体は、ヒトモノクローナル抗体である、請求項９４に記載の抗体。
【請求項９６】
前記抗体は、ＩｇＧである、請求項９５に記載の抗体。
【請求項９７】
前記抗体は、ＩｇＧ１である、請求項９６に記載の抗体。
【請求項９８】
前記抗体は、１ｎＭ以下のＫｄで配列番号２８５に結合する、請求項９０〜９７のいずれかに記載の抗体。
【請求項９９】
前記抗体は、バイオセンサーアッセイで測定すると、約０．１６ｎＭ±０．１ｎＭのＫｄで配列番号３５２に結合する、請求項９０〜９８のいずれかに記載の抗体。
【請求項１００】
前記抗体は、１０ｎＭ以下のＥＣ５０で、Ｈ９２９細胞の表面上に発現される配列番号２８５に結合する、請求項９０〜９７のいずれかに記載の抗体。
【請求項１０１】
前記抗体は、１０ｎＭ以下のＥＣ５０で、Ｈ９２９細胞の表面上に発現される配列番号２８５に結合する、請求項９０〜９７のいずれかに記載の抗体。
【請求項１０２】
前記抗体は、ＦＡＣＳ分析により約１．２ｎＭのＥＣ５０で、Ｈ９２９細胞の表面上に発現される配列番号２８５に結合する、請求項９０〜９７及び１０１のいずれかに記載の抗体。
【請求項１０３】
前記抗体は、１ｎＭ以下のＫｄで配列番号２８５に結合し、前記抗体は、１０ｎＭ以下のＥＣ５０で、Ｈ９２９細胞の表面上に発現される配列番号２８５に結合する、請求項９０〜９７のいずれかに記載の抗体。
【請求項１０４】
前記抗体は、実施例１６に記載されるバイオセンサーアッセイで測定すると、約０．１６ｎＭのＫｄで配列番号３５２に結合し、前記抗体は、ＦＡＣＳ分析により約１．２ｎＭのＥＣ５０で、Ｈ９２９細胞の表面上に発現される配列番号２８５に結合する、請求項９０〜９７及び１０３のいずれかに記載の抗体。
【請求項１０５】
前記６つのＣＤＲは、ＡＨｏ、Ｋａｂａｔ、またはＣｌｏｔｈｉａの番号付けシステムのいずれか１つによって決定される、請求項１〜３及び３１〜３３のいずれかに記載の抗体。
【請求項１０６】
前記抗体は、ヒトモノクローナルＩｇＧ抗体である、請求項１〜１４のいずれかに記載の抗体。
【請求項１０７】
前記抗体は、ヒトモノクローナルＩｇＧ１抗体である、請求項１〜１４及び１０６のいずれかに記載の抗体。
【請求項１０８】
単離モノクローナル抗体またはそのフラグメントであって、前記抗体またはそのフラグメントは、配列番号２８５のヒトＢＣＭＡに特異的に結合し、ＡＰＲＩＬの生物学的活性を阻害し、前記抗体は、配列番号４を含むＶｈ−ＣＤＲ１、配列番号５を含むＶｈ−ＣＤＲ２、配列番号６を含むＶｈ−ＣＤＲ３、配列番号１０６を含むＶｌ−ＣＤＲ１、配列番号１０７を含むＶｌ−ＣＤＲ２、及び配列番号１０８を含むＶｌ−ＣＤＲ３を含むヒトＩｇＧ１モノクローナル抗体の結合を競合的に阻害し、前記抗体は、ヒトＢＣＭＡに対して１〜．０１ｎＭ（境界値を含む）のＫｄを有する、単離モノクローナル抗体またはそのフラグメント。
【請求項１０９】
前記抗体またはそのフラグメントは、ヒトのものであり、前記ヒトＩｇＧ１モノクローナル抗体は、配列番号２０６を含むＶｈドメイン及び配列番号２４０を含むＶｌドメインを含む、請求項１０８に記載の抗体またはそのフラグメント。
【請求項１１０】
前記抗体またはそのフラグメントは、ヒトのものであり、前記ヒトＩｇＧ１モノクローナル抗体は、配列番号２７４を含む重鎖及び配列番号２８０を含む軽鎖を含む、請求項１０８または１０９に記載の抗体またはフラグメント。
【請求項１１１】
前記ヒトＩｇＧ１モノクローナル抗体は、０〜３．４Å（境界値を含む）の接触距離分解能でのＸ線結晶構造解析によって定義される、配列番号３６０のヒトＢＣＭＡのＧｌｙ６、Ｇｌｎ７、Ｐｈｅ１４、Ａｓｐ１５、Ｓｅｒ１６、Ｌｅｕ１７、及びＨｉｓ１９と相互作用する、請求項１０８〜１１０に記載の抗体またはそのフラグメント。
【請求項１１２】
前記ヒトＩｇＧ１モノクローナル抗体は、３．４〜５．０Å（境界値を含む）の接触距離分解能でのＸ線結晶構造解析によって定義されるように、配列番号３６０のヒトＢＣＭＡのＧｌｙ６、Ｇｌｎ７、Ｃｙｓ８、Ｔｙｒ１３、Ｐｈｅ１４、Ａｓｐ１５、Ｓｅｒ１６、Ｌｅｕ１７、Ｌｅｕ１８、Ｈｉｓ１９、及びＡｌａ２０と相互作用する、請求項１１１に記載の抗体またはそのフラグメント。
【請求項１１３】
前記ヒトＩｇＧ１モノクローナル抗体は、３．４〜５．０Å（境界値を含む）の接触距離分解能でのＸ線結晶構造解析によって定義されるように、配列番号３６０のヒトＢＣＭＡのＡｌａ５、Ｇｌｙ６、Ｇｌｎ７、Ｃｙｓ８、Ｔｙｒ１３、Ｐｈｅ１４、Ａｓｐ１５、Ｓｅｒ１６、Ｌｅｕ１７、Ｌｅｕ１８、Ｈｉｓ１９、Ａｌａ２０、Ｉｌｅ２２、Ｌｅｕ２６、Ａｒｇ２７、Ｐｒｏ３３、Ｐｒｏ３４、Ｌｅｕ３５、及びＬｅｕ３６と相互作用する、請求項１１２に記載の抗体またはそのフラグメント。
【請求項１１４】
前記ヒトＩｇＧ１モノクローナル抗体は、０〜３．４Å（境界値を含む）の接触距離分解能でのＸ線結晶構造解析によって定義されるように、配列番号３６０のヒトＢＣＭＡのＧｌｎ７、Ａｓｐ１５、Ｓｅｒ１６、Ｌｅｕ１７、及びＨｉｓ１９と水素結合を形成する、請求項１１３に記載の抗体またはそのフラグメント。
【請求項１１５】
単離モノクローナル抗体またはそのフラグメントであって、前記抗体またはそのフラグメントは、配列番号２８５のヒトＢＣＭＡに特異的に結合し、ＡＰＲＩＬの生物学的活性を阻害するヒトＩｇＧモノクローナルであり、前記抗体は、配列番号２０６に少なくとも９０％同一なＶｈドメイン及び配列番号２４０に少なくとも９０％同一なＶｌドメインを含む、単離モノクローナル抗体またはそのフラグメント。
【請求項１１６】
前記抗体またはそのフラグメントは、配列番号２７４に少なくとも９０％同一な重鎖及び配列番号２８０に少なくとも９０％同一な軽鎖を含む、請求項１１５に記載の抗体またはそのフラグメント。
【請求項１１７】
抗体またはそのフラグメントは、配列番号２０６に少なくとも９５％同一な重鎖可変ドメイン及び配列番号２４０に少なくとも９５％同一な軽鎖可変ドメインを含む、請求項１１５に記載の抗体またはそのフラグメント。
【請求項１１８】
前記抗体は、配列番号２７４に少なくとも９５％同一な重鎖及び配列番号２８０に少なくとも９５％同一な軽鎖を含む、請求項１１７に記載の抗体。
【請求項１１９】
前記抗体またはそのフラグメントは、ＶｌドメインのＡｓｎ３２、Ｔｈｒ３３、Ａｓｎ３５、Ａｓｎ５１、Ｔｒｐ９２、Ａｓｐ９４、及びＴｒｐ９９、ならびにＶｈドメインのＡｒｇ５２、Ｓｅｒ１０１、及びＴｙｒ１０３を含む、請求項１１５〜１１８に記載の抗体またはそのフラグメント。
【請求項１２０】
前記抗体またはそのフラグメントは、ＶｌドメインのＳｅｒ２６、Ｓｅｒ３１、Ａｓｎ３２、Ｔｈｒ３３、Ｖａｌ３４、Ａｓｎ３５、Ｌｅｕ４７、Ｐｈｅ５０、Ａｓｎ５１、Ｔｙｒ５２、Ｈｉｓ５３、Ｇｌｎ５４、Ｌｙｓ６７、Ｔｒｐ９２、Ａｓｐ９３、Ａｓｐ９４、Ａｓｎ９７、及びＴｒｐ９９、ならびにＶｈドメインのＡｌａ３３、Ｓｅｒ３５、Ｖａｌ５０、Ａｒｇ５２、Ｔｙｒ５６、Ｓｅｒ１０１、Ｇｌｙ１０２、Ｔｙｒ１０３、Ｔｒｐ１０７、Ｐｒｏ１０９、Ｐｈｅ１１０、及びＡｓｐ１１１を含む、請求項１１５〜１１９に記載の抗体またはフラグメント。
【請求項１２１】
前記抗体またはそのフラグメントは、ヒトＢＣＭＡに対して０．１６ｎＭ±０．１ｎＭ（境界値を含む）のＫｄを有する、請求項１０８〜１２０に記載の抗体またはそのフラグメント。
【請求項１２２】
単離モノクローナル抗体またはそのＦａｂフラグメントであって、前記抗体またはそのＦａｂフラグメントは、配列番号２０６を含むＶｈドメイン及び配列番号２４０を含むＶｌドメインを含むヒトＩｇＧ１モノクローナル抗体と同じ、配列番号２８５のヒトＢＣＭＡ上のエピトープに特異的に結合し、前記抗体またはそのＦａｂフラグメントは、ＡＰＲＩＬの生物学的活性を阻害する、単離モノクローナル抗体またはそのＦａｂフラグメント。
【請求項１２３】
前記ヒトＩｇＧ１モノクローナル抗体は、配列番号２７４を含む重鎖及び配列番号２８０を含む軽鎖を含む、請求項１２２に記載の抗体またはそのＦａｂフラグメント。
【請求項１２４】
前記エピトープは、Ｘ線結晶構造解析によって定義される、請求項１２２または１２３に記載の抗体またはそのＦａｂフラグメント。
【請求項１２５】
前記エピトープは、０〜３．４Å（境界値を含む）でのＸ線結晶構造解析及び接触距離分析によって定義される、請求項１２４に記載の抗体またはそのＦａｂフラグメント。
【請求項１２６】
前記エピトープは、３．４〜５．０Å（境界値を含む）でのＸ線結晶構造解析及び接触距離分析によって定義される、請求項１２５に記載の抗体またはそのＦａｂフラグメント。
【請求項１２７】
前記抗体またはそのＦａｂフラグメントは、配列番号２８５のヒトＢＣＭＡの１，９６４Å２±５％の表面積を被覆し、０．７０±０．０３の形状相補性を有する、請求項１２５または１２６に記載の抗体またはそのＦａｂフラグメント。
【請求項１２８】
前記モノクローナル抗体またはそのＦａｂフラグメントは、ヒトのものである、請求項１２２〜１２７に記載の抗体またはそのＦａｂフラグメント。
【請求項１２９】
前記モノクローナル抗体またはそのＦａｂフラグメントは、ヒトＩｇＧである、請求項１２８に記載の抗体またはそのＦａｂフラグメント。
【請求項１３０】
前記モノクローナル抗体またはそのＦａｂフラグメントは、ヒトＩｇＧ１である、請求項１２９に記載の抗体またはそのＦａｂフラグメント。
【請求項１３１】
前記抗体またはそのＦａｂフラグメントは、配列番号３５１のラットＢＣＭＡには特異的に結合せず、前記ラットＢＣＭＡに対して１０ｎＭを上回るＫｄを有する、請求項１２２〜１３０に記載の抗体またはそのＦａｂフラグメント
【請求項１３２】
前記抗体またはそのＦａｂフラグメントは、ヒトＢＣＭＡに対して１〜．０１ｎＭ（境界値を含む）のＫｄを有する、請求項１２２〜１３１に記載の抗体またはそのＦａｂフラグメント。
【請求項１３３】
前記抗体またはそのＦａｂフラグメントは、ヒトＢＣＭＡに対して０．１６ｎＭ±０．１ｎＭ（境界値を含む）のＫｄを有する、請求項１３２に記載の抗体またはそのＦａｂフラグメント。
【請求項１３４】
前記抗体またはそのＦａｂフラグメントはまた、配列番号２８５のアミノ酸１〜２０（境界値を含む）からなるヒトＢＣＭＡのフラグメントに特異的に結合する、請求項１３３に記載の抗体またはそのＦａｂフラグメント。
【請求項１３５】
単離モノクローナル抗体またはそのＦａｂフラグメントであって、前記抗体またはそのＦａｂフラグメントは、ヒトＢＣＭＡに特異的に結合し、０〜３．４Å（境界値を含む）の接触距離分解能でのＸ線結晶構造解析によって定義されるように、配列番号３６０のヒトＢＣＭＡのＧｌｙ６、Ｇｌｎ７、Ｐｈｅ１４、Ａｓｐ１５、Ｓｅｒ１６、Ｌｅｕ１７、及びＨｉｓ１９と相互作用し、前記抗体またはそのＦａｂフラグメントは、ＡＰＲＩＬの生物学的活性を阻害する、単離モノクローナル抗体またはそのＦａｂフラグメント。
【請求項１３６】
前記抗体またはそのＦａｂフラグメントは、３．４〜５．０Å（境界値を含む）の接触距離分解能でのＸ線結晶構造解析によって定義されるように、配列番号３６０のヒトＢＣＭＡのＧｌｙ６、Ｇｌｎ７、Ｃｙｓ８、Ｔｙｒ１３、Ｐｈｅ１４、Ａｓｐ１５、Ｓｅｒ１６、Ｌｅｕ１７、Ｌｅｕ１８、Ｈｉｓ１９、及びＡｌａ２０と相互作用する、請求項１３５に記載の抗体またはそのＦａｂフラグメント。
【請求項１３７】
前記抗体またはそのＦａｂフラグメントは、３．４〜５．０Å（境界値を含む）の接触距離分解能でのＸ線結晶構造解析によって定義されるように、配列番号３６０のヒトＢＣＭＡのＡｌａ５、Ｇｌｙ６、Ｇｌｎ７、Ｃｙｓ８、Ｔｙｒ１３、Ｐｈｅ１４、Ａｓｐ１５、Ｓｅｒ１６、Ｌｅｕ１７、Ｌｅｕ１８、Ｈｉｓ１９、Ａｌａ２０、Ｉｌｅ２２、Ｌｅｕ２６、Ａｒｇ２７、Ｐｒｏ３３、Ｐｒｏ３４、Ｌｅｕ３５、及びＬｅｕ３６と相互作用する、請求項１３６に記載の抗体またはそのＦａｂフラグメント。
【請求項１３８】
前記抗体またはそのＦａｂフラグメントは、０〜３．４Å（境界値を含む）の接触距離分解能でのＸ線結晶構造解析によって定義されるように、配列番号３６０のヒトＢＣＭＡのＧｌｎ７、Ａｓｐ１５、Ｓｅｒ１６、Ｌｅｕ１７、及びＨｉｓ１９と水素結合を形成する、請求項１３７に記載の抗体またはそのＦａｂフラグメント。
【請求項１３９】
前記モノクローナル抗体またはそのＦａｂフラグメントは、ヒトのものである、請求項１３５〜１３８のいずれかに記載の抗体またはそのＦａｂフラグメント。
【請求項１４０】
前記モノクローナル抗体またはそのＦａｂフラグメントは、ヒトＩｇＧである、請求項１３９に記載の抗体またはそのＦａｂフラグメント。
【請求項１４１】
前記モノクローナル抗体またはそのＦａｂフラグメントは、ヒトＩｇＧ１である、請求項１４０に記載の抗体またはそのＦａｂフラグメント。
【請求項１４２】
前記抗体またはそのＦａｂフラグメントは、ヒトＢＣＭＡに対して１〜．０１ｎＭ（境界値を含む）のＫｄを有する、請求項１３５〜１４１に記載の抗体またはそのＦａｂフラグメント。
【請求項１４３】
前記抗体またはそのＦａｂフラグメントは、ヒトＢＣＭＡに対して０．１６ｎＭ±０．１ｎＭ（境界値を含む）のＫｄを有する、請求項１４２に記載の抗体またはそのＦａｂフラグメント。
【請求項１４４】
単離モノクローナル抗体またはそのＦａｂフラグメントであって、前記抗体またはそのＦａｂフラグメントは、配列番号３６０のヒトＢＣＭＡに特異的に結合し、それによって、前記ヒトＢＭＣＡ上の溶媒接触可能表面積を、０〜３．４Å（境界値を含む）の接触距離分解能でのＸ線結晶構造解析によって定義されるように、配列番号３６０のアミノ酸残基Ｇｌｙ６、Ｇｌｎ７、Ｔｙｒ１３、Ｐｈｅ１４、Ａｓｐ１５、Ｓｅｒ１６、Ｌｅｕ１７、Ｌｅｕ１８、Ｈｉｓ１９、Ａｌａ２０、Ｉｌｅ２２、Ａｒｇ２７、Ｐｒｏ３４、及びＬｅｕ３５において５０％を上回って変化させ、前記抗体またはそのＦａｂフラグメントは、ＡＰＲＩＬの生物学的活性を阻害する、単離モノクローナル抗体またはそのＦａｂフラグメント。
【請求項１４５】
前記モノクローナル抗体またはそのＦａｂフラグメントは、ヒトのものである、請求項１４４に記載の抗体またはそのＦａｂフラグメント。
【請求項１４６】
前記モノクローナル抗体またはそのＦａｂフラグメントは、ヒトＩｇＧである、請求項１４５に記載の抗体またはそのＦａｂフラグメント。
【請求項１４７】
前記モノクローナル抗体またはそのＦａｂフラグメントは、ヒトＩｇＧ１である、請求項１４６に記載の抗体またはそのＦａｂフラグメント。
【請求項１４８】
前記抗体またはそのＦａｂフラグメントは、ヒトＢＣＭＡに対して１〜．０１ｎＭ（境界値を含む）のＫｄを有する、請求項１４４〜１４７に記載の抗体またはそのＦａｂフラグメント。
【請求項１４９】
前記抗体またはそのＦａｂフラグメントは、ヒトＢＣＭＡに対して０．１６ｎＭ±０．１ｎＭ（境界値を含む）のＫｄを有する、請求項１４８に記載の抗体またはそのＦａｂフラグメント。
【請求項１５０】
前記抗体またはそのＦａｂフラグメントはまた、配列番号２８５のアミノ酸１〜２０（境界値を含む）からなるヒトＢＣＭＡのフラグメントに特異的に結合する、請求項１４９に記載の抗体またはそのＦａｂフラグメント。
【請求項１５１】
単離モノクローナル抗体またはそのフラグメントであって、前記抗体またはそのフラグメントは、配列番号２８５のヒトＢＣＭＡに特異的に結合し、ＡＰＲＩＬの生物学的活性を阻害し、前記抗体は、配列番号１０を含むＶｈ−ＣＤＲ１、配列番号１１を含むＶｈ−ＣＤＲ２、配列番号１２を含むＶｈ−ＣＤＲ３、配列番号１１２を含むＶｌ−ＣＤＲ１、配列番号１１３を含むＶｌ−ＣＤＲ２、及び配列番号１１４を含むＶｌ−ＣＤＲ３を含むヒトＩｇＧ１モノクローナル抗体の結合を競合的に阻害し、前記抗体は、ヒトＢＣＭＡに対して０．７５〜１．１１ｎＭ±０．１ｎＭ（境界値を含む）のＫｄを有する、単離モノクローナル抗体またはそのフラグメント。
【請求項１５２】
前記抗体またはそのフラグメントは、ヒトのものであり、前記ヒトＩｇＧ１モノクローナル抗体は、配列番号２０８を含むＶｈドメイン及び配列番号２４２を含むＶｌを含む、請求項１５１に記載の抗体またはそのフラグメント。
【請求項１５３】
前記抗体またはそのフラグメントは、ヒトのものであり、前記ヒトＩｇＧ１モノクローナル抗体は、配列番号２７６を含む重鎖及び配列番号２８２を含む軽鎖を含む、請求項１５１または１５２に記載の抗体またはそのフラグメント。
【請求項１５４】
前記ヒトＩｇＧ１モノクローナル抗体は、０〜３．４Å（境界値を含む）の接触距離分解能でのＸ線結晶構造解析によって定義されるように、配列番号３６０のヒトＢＣＭＡのＧｌｙ６、Ｇｌｎ７、Ｔｙｒ１３、Ｓｅｒ１６、Ｌｅｕ１７、Ｈｉｓ１９、Ａｒｇ２７、及びＬｅｕ３５と相互作用する、請求項１５１〜１５３に記載の抗体またはそのフラグメント。
【請求項１５５】
前記ヒトＩｇＧ１モノクローナル抗体は、３．４〜５．０Å（境界値を含む）の接触距離分解能でのＸ線結晶構造解析によって定義されるように、配列番号３６０のヒトＢＣＭＡのＡｌａ５、Ｇｌｙ６、Ｇｌｎ７、Ｔｙｒ１３、Ｐｈｅ１４、Ａｓｐ１５、Ｓｅｒ１６、Ｌｅｕ１７、Ｌｅｕ１８、及びＨｉｓ１９と相互作用する、請求項１５４に記載の抗体またはそのフラグメント。
【請求項１５６】
前記ヒトＩｇＧ１モノクローナル抗体は、３．４〜５．０Å（境界値を含む）の接触距離分解能でのＸ線結晶構造解析によって定義されるように、配列番号３６０のヒトＢＣＭＡのＡｌａ５、Ｇｌｙ６、Ｇｌｎ７、Ｔｙｒ１３、Ｐｈｅ１４、Ａｓｐ１５、Ｓｅｒ１６、Ｌｅｕ１７、Ｌｅｕ１８、Ｈｉｓ１９、Ａｒｇ２７、Ｓｅｒ３０、Ｔｈｒ３２、Ｐｒｏ３３、Ｐｒｏ３４、及びＬｅｕ３５と相互作用する、請求項１５５に記載の抗体またはそのフラグメント。
【請求項１５７】
前記ヒトＩｇＧ１モノクローナル抗体は、０〜３．４Å（境界値を含む）の接触距離分解能でのＸ線結晶構造解析によって定義されるように、配列番号３６０のヒトＢＣＭＡのＧｌｎ７、Ｓｅｒ１６、及びＨｉｓ１９と水素結合を形成し、Ａｒｇ２７に塩架橋を形成する、請求項１５６に記載の抗体またはそのフラグメント。
【請求項１５８】
単離モノクローナル抗体またはそのフラグメントであって、前記抗体またはそのフラグメントは、配列番号２８５のヒトＢＣＭＡに特異的に結合し、ＡＰＲＩＬの生物学的活性を阻害する、ヒトＩｇＧモノクローナルであり、前記抗体は、配列番号２０８に少なくとも９０％同一なＶｈドメイン及び配列番号２４２に少なくとも９０％同一なＶｌドメインを含む、単離モノクローナル抗体またはそのフラグメント。
【請求項１５９】
前記抗体またはそのフラグメントは、配列番号２７６に少なくとも９０％同一な重鎖及び配列番号２８２に少なくとも９０％同一な軽鎖を含む、請求項１５８に記載の抗体またはそのフラグメント。
【請求項１６０】
抗体またはそのフラグメントは、配列番号２０８に少なくとも９５％同一なＶｈドメイン及び配列番号２４２に少なくとも９５％同一なＶｌドメインを含む、請求項１５８に記載の抗体またはそのフラグメント。
【請求項１６１】
前記抗体は、配列番号２７６に少なくとも９５％同一な重鎖及び配列番号２８２に少なくとも９５％同一な軽鎖を含む、請求項１６０に記載の抗体。
【請求項１６２】
前記抗体またはそのフラグメントは、ＶｌドメインのＴｙｒ３７、Ａｌａ９６、Ｌｅｕ９７、及びＡｒｇ１０１、ならびにＶｈドメインのＳｅｒ３１、Ｖａｌ５３、Ａｓｐ５６、Ａｓｐ９８、Ｇｌｙ１０５、及びＴｒｐ１０７を含む、請求項１５８〜１６１に記載の抗体またはそのフラグメント。
【請求項１６３】
前記抗体またはそのフラグメントは、軽鎖可変ドメインのＨｉｓ３１、Ａｓｎ３３、Ｔｙｒ３７、Ａｌａ９６、Ｌｅｕ９７、Ｇｌｎ９８、Ｐｒｏ９９、及びＡｒｇ１０１、ならびに重鎖可変ドメインのＴｈｒ２８、Ｓｅｒ３０、Ｓｅｒ３１、Ａｌａ３３、Ａｓｎ３５、Ａｌａ５０、Ｉｌｅ５１、Ｓｅｒ５２、Ｖａｌ５３、Ｇｌｙ５４、Ｇｌｙ５５、Ａｓｐ５６、Ｔｙｒ５８、Ａｒｇ７１、Ａｓｐ９８、Ｖａｌ１００、Ｍｅｔ１０２、Ｇｌｙ１０５、Ｖａｌ１０６、Ｔｒｐ１０７、Ｔｙｒ１０８、及びＴｙｒ１０９を含む、請求項１５８〜１６２に記載の抗体またはそのフラグメント。
【請求項１６４】
前記抗体またはそのフラグメントは、ヒトＢＣＭＡに対して０．７５〜１．１１ｎＭ±０．１ｎＭ（境界値を含む）のＫｄを有する、請求項１５８〜１６３に記載の抗体またはそのフラグメント。
【請求項１６５】
単離モノクローナル抗体またはそのＦａｂフラグメントであって、前記抗体またはそのＦａｂフラグメントは、配列番号２０８を含むＶｈドメイン及び配列番号２４２を含むＶｌドメインを含むヒトＩｇＧ１モノクローナル抗体と同じ、配列番号２８５のヒトＢＣＭＡ上のエピトープに特異的に結合し、前記抗体またはそのＦａｂフラグメントは、ＡＰＲＩＬの生物学的活性を阻害する、単離モノクローナル抗体またはそのＦａｂフラグメント。
【請求項１６６】
前記ヒトＩｇＧ１モノクローナル抗体は、配列番号２７６を含む重鎖及び配列番号２８２を含む軽鎖を含む、請求項１６５に記載の抗体またはそのＦａｂフラグメント。
【請求項１６７】
前記エピトープは、Ｘ線結晶構造解析によって定義される、請求項１６５または１６６に記載の抗体またはそのＦａｂフラグメント。
【請求項１６８】
前記エピトープは、０〜３．４Å（境界値を含む）でのＸ線結晶構造解析及び接触距離分析によって定義される、請求項１６７に記載の抗体またはそのＦａｂフラグメント。
【請求項１６９】
前記エピトープは、３．４〜５．０Å（境界値を含む）でのＸ線結晶構造解析及び接触距離分析によって定義される、請求項１６８に記載の抗体またはそのＦａｂフラグメント。
【請求項１７０】
前記抗体またはそのＦａｂフラグメントは、配列番号２８５のヒトＢＣＭＡの１，６６９Å２±５％の表面積を被覆し、０．７１±０．０３の形状相補性を有する、請求項１６８または１６９に記載の抗体またはそのＦａｂフラグメント。
【請求項１７１】
前記モノクローナル抗体またはそのＦａｂフラグメントは、ヒトのものである、請求項１６８〜１７０のいずれかに記載の抗体。
【請求項１７２】
前記モノクローナル抗体またはそのＦａｂフラグメントは、ヒトＩｇＧである、請求項１７１に記載の抗体またはそのＦａｂフラグメント。
【請求項１７３】
前記モノクローナル抗体またはそのＦａｂフラグメントは、ヒトＩｇＧ１である、請求項１７２に記載の抗体またはそのＦａｂフラグメント。
【請求項１７４】
前記抗体またはそのＦａｂフラグメントは、配列番号２８５のｈｕＢＣＭＡに対して０．７５〜１．１１ｎＭ±０．１ｎＭ（境界値を含む）のＫｄを有する、請求項１６５〜１７３のいずれかに記載の抗体またはそのＦａｂフラグメント。
【請求項１７５】
単離モノクローナル抗体またはそのＦａｂフラグメントであって、前記抗体またはそのＦａｂフラグメントは、ヒトＢＣＭＡに特異的に結合し、０〜３．４Å（境界値を含む）の接触距離分解能でのＸ線結晶構造解析によって定義されるように、配列番号３６０のヒトＢＣＭＡのＧｌｙ６、Ｇｌｎ７、Ｔｙｒ１３、Ｓｅｒ１６、Ｌｅｕ１７、Ｈｉｓ１９、Ａｒｇ２７、及びＬｅｕ３５と相互作用し、前記抗体またはそのＦａｂフラグメントは、ＡＰＲＩＬの生物学的活性を阻害する、単離モノクローナル抗体またはそのＦａｂフラグメント。
【請求項１７６】
前記抗体またはそのＦａｂフラグメントは、３．４〜５．０Å（境界値を含む）の接触距離分解能でのＸ線結晶構造解析によって定義されるように、配列番号３６０のヒトＢＣＭＡのＡｌａ５、Ｇｌｙ６、Ｇｌｎ７、Ｔｙｒ１３、Ｐｈｅ１４、Ａｓｐ１５、Ｓｅｒ１６、Ｌｅｕ１７、Ｌｅｕ１８、及びＨｉｓ１９と相互作用する、請求項１７５に記載の抗体。
【請求項１７７】
前記抗体またはそのＦａｂフラグメントは、３．４〜５．０Å（境界値を含む）の接触距離分解能でのＸ線結晶構造解析によって定義されるように、配列番号３６０のヒトＢＣＭＡのＡｌａ５、Ｇｌｙ６、Ｇｌｎ７、Ｔｙｒ１３、Ｐｈｅ１４、Ａｓｐ１５、Ｓｅｒ１６、Ｌｅｕ１７、Ｌｅｕ１８、Ｈｉｓ１９、Ａｒｇ２７、Ｓｅｒ３０、Ｔｈｒ３２、Ｐｒｏ３３、Ｐｒｏ３４、及びＬｅｕ３５と相互作用する、請求項１７５または１７６に記載の抗体。
【請求項１７８】
前記抗体またはそのＦａｂフラグメントは、０〜３．４Å（境界値を含む）の接触距離分解能でのＸ線結晶構造解析によって定義されるように、配列番号３６０のヒトＢＣＭＡのＧｌｎ７、Ｓｅｒ１６、及びＨｉｓ１９と水素結合を形成し、Ａｒｇ２７に塩架橋を形成する、請求項１７５〜１７７に記載の抗体。
【請求項１７９】
前記モノクローナル抗体またはそのＦａｂフラグメントは、ヒトのものである、請求項１７５〜１７８に記載の抗体またはそのＦａｂフラグメント。
【請求項１８０】
前記モノクローナル抗体またはそのＦａｂフラグメントは、ヒトＩｇＧである、請求項１７９に記載の抗体またはそのＦａｂフラグメント。
【請求項１８１】
前記モノクローナル抗体またはそのＦａｂフラグメントは、ヒトＩｇＧ１である、請求項１８０に記載の抗体またはそのＦａｂフラグメント。
【請求項１８２】
前記モノクローナル抗体またはそのＦａｂフラグメントは、ヒトＢＣＭＡに対して０．７５〜１．１１ｎＭ±０．１ｎＭ（境界値を含む）のＫｄを有する、請求項１７５〜１８１に記載の抗体またはそのＦａｂフラグメント。
【請求項１８３】
単離モノクローナル抗体またはそのＦａｂフラグメントであって、前記抗体またはそのＦａｂフラグメントは、配列番号３６０のヒトＢＣＭＡに特異的に結合し、それによって、前記ヒトＢＭＣＡ上の溶媒接触可能表面積を、０〜３．４Å（境界値を含む）の接触距離分解能でのＸ線結晶構造解析によって定義されるように、配列番号３６０のアミノ酸残基Ｇｌｙ６、Ｔｙｒ１３、Ｐｈｅ１４、Ａｓｐ１５、Ｓｅｒ１６、Ｌｅｕ１７、Ｈｉｓ１９、Ｔｈｒ３２、Ｐｒｏ３４、及びＬｅｕ３５において５０％を上回って変化させ、前記抗体またはそのＦａｂフラグメントは、ＡＰＲＩＬの生物学的活性を阻害する、単離モノクローナル抗体またはそのＦａｂフラグメント。
【請求項１８４】
前記モノクローナル抗体またはそのＦａｂフラグメントは、ヒトのものである、請求項１８３に記載の抗体またはそのＦａｂフラグメント。
【請求項１８５】
前記モノクローナル抗体またはそのＦａｂフラグメントは、ヒトＩｇＧである、請求項１８４に記載の抗体またはそのＦａｂフラグメント。
【請求項１８６】
前記モノクローナル抗体またはそのＦａｂフラグメントは、ヒトＩｇＧ１である、請求項１８５に記載の抗体またはそのＦａｂフラグメント。
【請求項１８７】
前記抗体またはそのＦａｂフラグメントは、ヒトＢＣＭＡに対して０．７５〜１．１１ｎＭ±０．１ｎＭ（境界値を含む）のＫｄを有する、請求項１８３〜１８６に記載の抗体。
【請求項１８８】
リンカーをさらに含む、請求項１０８〜１８７のいずれかに記載の抗体またはそのフラグメント。
【請求項１８９】
薬物または化学療法剤をさらに含む、請求項１８８に記載の抗体またはそのフラグメント。
【請求項１９０】
前記ポリペプチドまたはフラグメントは、６−マレイミドカプロイル、マレイミドプロパノイル、バリン−シトルリン、アラニン−フェニルアラニン、ｐ−アミノベンジルオキシカルボニル、Ｍａｌ−ｄＰＥＧ４−ＮＨＳ、Ｎ−スクシンイミジル４−（２−ピリジルチオ）ペンタノエート（「ＳＰＰ」）、Ｎ−スクシンイミジル４−（Ｎ−マレイミドメチル）シクロヘキサン−１カルボキシレート（「ＳＭＣＣ」または「ＭＣＣ」）、及びＮ−スクシンイミジル（４−ヨード−アセチル）アミノベンゾエート（「ＳＩＡＢ」）からなる群から選択されるリンカーをさらに含む、請求項１８９に記載の抗体またはフラグメント。
【請求項１９１】
前記リンカーは、Ｎ−スクシンイミジル４−（Ｎ−マレイミドメチル）シクロヘキサン−１カルボキシレートである、請求項１９０に記載の抗体またはフラグメント。
【請求項１９２】
前記抗体またはフラグメントは、チオテパ及びシクロホスファミド（ＣＹＴＯＸＡＮ（商標））；スルホン酸アルキル、例えば、ブスルファン、インプロスルファン、及びピポスルファン；アジリジン、例えば、ベンゾドーパ、カルボコン、メツレドーパ、及びウレドーパ；エチレンイミン及びメチラメラミン（アルトレタミン、トリエチレンメラミン、トリエチレンホスホラミド、トリエチレンチオホスファオラミド、及びトリメチローロメラミンを含む）；アセトゲニン（特にブラタシン及びブラタシノン）；カンプトテシン（合成類似体トポテカンを含む）；ブリオスタチン；カリスタチン；ＣＣ−１０６５（そのアゾゼレシン、カルゼレシン、及びビゼレシン合成類似体を含む）；クリプトフィシン（特にクリプトフィシン１及びクリプトフィシン８）；ドラスタチン；デュオカルマイシン（合成類似体ＫＷ−２１８９及びＣＢＩ−ＴＭＩを含む）；エリュテロビン；パンクラチスタチン；サルコジクチイン；スポンジスタチン；ナイトロジェンマスタード、例えば、クロラムブシル、クロマファジン、コロホスファミド、エストラムスチン、イホスファミド、メクロレタミン、メクロレタミンオキシド塩酸塩、メルファラン、ノベムビシン、フェネステリン、プレドニムスチン、トロホスファミド、ウラシルマスタード；ニトロソ尿素、例えば、カルムスチン、クロロゾトシン、フォテムスチン、ロムスチン、ニムスチン、ラニムスチン；抗生物質、例えば、エンジイン抗生物質（例えば、カリケアマイシン、特にカリケアマイシンγ１及びカリケアマイシンθＩ、例えばＡｎｇｅｗ  Ｃｈｅｍ．Ｉｎｔｌ．Ｅｄ．Ｅｎｇｌ．３３：１８３−１８６（１９９４）を参照されたい；ダイネミシン（ダイネミシンＡを含む）；エスペラミシン；ならびにネオカルジノスタチン発色団及び関連色素タンパク質エンジイン抗生物質発色団）、アクラノマイシン、アクチノマイシン、オースラマイシン、アザセリン、ブレオマイシン、カクチノマイシン、カラビシン、カミノマイシン、カルジノフィリン；クロモマイシン、ダクチノマイシン、ダウノルビシン、デトルビシン、６−ジアゾ−５−オキソ−Ｌ−ノルロイシン、ドキソルビシン（モルホリノ−ドキソルビシン、シアノモルホリノ−ドキソルビシン、２−ピロリノ−ドキソルビシン、及びデオキシドキソルビシンを含む）、エピルビシン、エソルビシン、イダルビシン、マルセロマイシン、ナイトマイシン（ｎｉｔｏｍｙｃｉｎ）、ミコフェノール酸、ノガラマイシン、オリボマイシン、ペプロマイシン、ポトフィロマイシン、ピューロマイシン、ケラマイシン、ロドルビシン、ストレプトニグリン、ストレプトゾシン、ツベルシジン、ウベニメクス、ジノスタチン、ゾルビシン；代謝拮抗薬、例えば、メトトレキサート、及び５−フルオロウラシル（５−ＦＵ）；葉酸類似体、例えば、デノプテリン、メトトレキサート、プテロプテリン、トリメトレキサート；プリン類似体、例えば、フルダラビン、６−メルカプトプリン、チアミプリン、チオグアニン；ピリミジン類似体、例えば、アンシタビン、アザシチジン、６−アザウリジン、カルモフール、シタラビン、ジデオキシウリジン、ドキシフルリジン、エノシタビン、フロクスウリジン、５−ＦＵ；アンドロゲン、例えば、カルステロン、プロピオン酸ドロモスタノロン、エピチオスタノール、メピチオスタン、テストラクトン；抗副腎剤、例えば、アミノグルテチミド、ミトタン、トリロスタン；葉酸補液、例えば、フロリン酸；アセグラトン；アルドホスファミドグリコシド；アミノレブリン酸；アムサクリン；ベストラブシル；ビスアントレン；エダトラキサート；デフォファミン；デメコルチン；ジアジクオン；エルホミチン；酢酸エリプチニウム；エポチロン；エトグルシド；硝酸ガリウム；ヒドロキシ尿素；レンチナン；ロニダミン；マイタンシノイド、例えば、マイタンシン、及びアンサマイトシン；ミトグアゾン；ミトキサントロン；モピダモール；ニトラクリン；ペントスタチン；フェナメット；ピラルビシン；ポドフィリン酸；２−エチルヒドラジド；プロカルバジン；ＰＳＫ（登録商標）；ラゾキサン；リゾキシン；シゾフラン；スピロゲルマニウム；テヌアゾン酸；トリアジクオン；２，２’，２’’−トリクロロトリエチルアミン；トリコテセン（特に、Ｔ−２毒素、ベラクリンＡ、ロリジンＡ、及びアングイジン）；ウレタン；ビンデシン；ダカルバジン；マンノムスチン；ミトブロニトール；ミトラクトール；ピポブロマン；ガシトシン；アラビノシド（「Ａｒａ−Ｃ」）；シクロホスファミド；チオテパ；タキソイド、例えば、パクリタキセル（ＴＡＸＯＬ（商標）、Ｂｒｉｓｔｏｌ−Ｍｙｅｒｓ  Ｓｑｕｉｂｂ  Ｏｎｃｏｌｏｇｙ，Ｐｒｉｎｃｅｔｏｎ，Ｎ．Ｊ．）及びドセタキセル（ＴＡＸＯＴＥＲＥ（登録商標）Ｒｈｏｎｅ−Ｐｏｕｌｅｎｃ  Ｒｏｒｅｒ，Ａｎｔｏｎｙ，Ｆｒａｎｃｅ）；クロラムブシル；ゲムシタビン；６−チオグアニン；メルカプトプリン；メトトレキサート；白金類似体、例えば、シスプラチン、及びカルボプラチン；ビンブラスチン；白金；エトポシド（ＶＰ−１６）；イホスファミド；マイトマイシンＣ；ミトキサントロン；ビンクリスチン；ビノレルビン；ナベルビン；ノバントロン；テニポシド；ダウノマイシン；アミノプテリン；キセロダ；イバンドロネート；ＣＰＴ−１１；トポイソメラーゼ阻害剤ＲＦＳ  ２０００；ジフルオロメチルオミチン（ＤＭＦＯ）；レチノイン酸；カペシタビン；タモキシフェン、ラロキシフェン、アロマターゼ阻害性４（５）−イミダゾール、４−ヒドロキシタモキシフェン、トリオキシフェン、ケオキシフェン、ＬＹ１１７０１８、オナプリストン、及びトレミフェン（Ｆａｒｅｓｔｏｎ）；ならびに抗アンドロゲン薬、例えば、フルタミド、ニルタミド、ビカルタミド、ロイプロリド、ゴセレリン、コルヒチン部位結合剤（Ｃｕｒａｃｉｎ）、コンブレタスタチン（ＡＶＥ８０６、コンブレタスタチンＡ−４プロドラッグ（ＣＡ４Ｐ）、Ｏｘｉ−４５０３）、クリプトフィシン（ＬＹ３５５７０３）、ディスコデルモリド、ドラスタチン、及び類似体（オーリスタチンＰＨＥ、ドラスタチン１０、ＩＬＸ−６５１、シンプロスタチン１、ＴＺＴ−１０２７）、エポチロン（ＢＭＳ−２４７５５０、ＢＭＳ−３１０７０５、ＥＰ０９０６、ＫＯＳ−８６２、ＺＫ−ＥＰＯ）、エリュテロビン、ＦＲ１８２８７７、ハリコンドリンＢ（Ｅ７３８９）、ハリミド（ＮＰＩ−２３５２及びＮＰＩ−２３５８）、ヘミアステリン（ＨＴＩ−２８６）、���ウリマライド、マイタンシノイド（「ＤＭ１」、「ＤＭ３」、または「ＤＭ４」）（ビバツズマブメルタンシン、カンツズマブメルタンシン、ｈｕＮ９０１−ＤＭ１／ＢＢ−１０９０１ＴＡＰ、ＭＬＮ５９１ＤＭ１、Ｍｙ９−６−ＤＭ１、トラスツズマブ−ＤＭ１）、ＰＣ−ＳＰＥＳ、ペロルシドＡ、レスベラトロール、Ｓ−アリルメルカプトシステイン（ＳＡＭＣ）、スポンジスタチン、ビチレブアミド、分子モーターキネシン（ＳＢ−７１５９９２）、設計されたコルヒチン部位結合剤（Ａ−２８９０９９、Ａ−２９３６２０／Ａ−３１８３１５、ＡＢＴ−７５１／Ｅ７０１０、Ｄ−２４８５１／Ｄ−６４１３１、ＺＤ６１２６）、他の新規な紡錘体毒（２−メトキシエストラジオール（２−ＭＥ２）、ベズイミダゾールカルバメート（ＡＮＧ  ６００シリーズ、メベンダゾール）、ＣＰ２４８／ＣＰ４６１、ＨＭＮ−２１４、Ｒ４４０、ＳＤＸ−１０３、Ｔ６７／Ｔ６０７）からなる群から選択される、薬物または化学療法剤をさらに含む、請求項１８８〜１９１に記載の抗体またはフラグメント。
【請求項１９３】
薬物または化学療法剤は、マイタンシノイド（「ＤＭ１」、「ＤＭ３」、または「ＤＭ４」）からなる群から選択される、請求項１９２に記載の抗体またはフラグメント。
【請求項１９４】
前記薬物または化学療法剤は、ＤＭ１である、請求項１９３に記載の抗体またはフラグメント。
【請求項１９５】
前記抗体またはフラグメントは、抗体／抗体フラグメントに対する薬物の比が１〜１０（境界値を含む）である、請求項１９３または１９４に記載の抗体またはフラグメント。
【請求項１９６】
前記抗体またはフラグメントは、抗体／抗体フラグメントに対する薬物の比が２〜５（境界値を含む）である、請求項１９５に記載の抗体またはフラグメント。
【請求項１９７】
請求項１０８〜１９６のいずれかに記載の抗体またはそのフラグメントを含む、組成物。
【請求項１９８】
請求項１０８〜１９６のいずれかに記載の抗体またはそのフラグメントを含む、医薬組成物。
【請求項１９９】
医薬として許容される希釈剤、担体、可溶化剤、乳化剤、及び／または保存剤を含む、請求項１９８に記載の医薬組成物。
【請求項２００】
疾患を治療する方法であって、請求項１９７〜１９９のいずれかに記載の組成物の有効量を投与することを含み、前記疾患は、Ｂ細胞癌、多発性骨髄腫、悪性形質細胞腫、カーレル病、及び骨髄腫症、形質細胞性白血病、形質細胞腫、Ｂ細胞性前リンパ急性白血病、有毛細胞性白血病、Ｂ細胞非ホジキンリンパ腫（ＮＨＬ）、急性骨髄性白血病（ＡＭＬ）、慢性骨髄性白血病（ＣＭＬ）、急性リンパ球性白血病（ＡＬＬ）、慢性リンパ球性白血病（ＣＬＬ）、濾胞性リンパ腫（濾胞性非ホジキンリンパ腫型を含む）、バーキットリンパ腫（風土性バーキットリンパ腫、散発性バーキットリンパ腫）、辺縁帯リンパ腫（粘膜関連リンパ組織、ＭＡＬＴ／ＭＡＬＴリンパ腫、単球様Ｂ細胞リンパ腫、絨毛状リンパ球を伴う脾臓リンパ腫）、マントル細胞リンパ腫、大細胞型リンパ腫（びまん性大細胞、びまん性混合細胞、免疫芽球性リンパ腫、原発性縦隔性Ｂ細胞リンパ腫、血管中心性リンパ腫−肺性Ｂ細胞）、小リンパ球性リンパ腫（ＳＬＬ）、前駆Ｂリンパ芽球性リンパ腫、骨髄性白血病（顆粒球性、骨髄性、急性骨髄性白血病、慢性骨髄性白血病、亜急性骨髄性白血病、骨髄性肉腫、緑色腫、顆粒球性肉腫、急性前骨髄球性白血病、急性骨髄単球性白血病）、ヴァルデンストレームマクログロブリン血症、または他のＢ細胞リンパ腫からなる群から選択される、方法。
【請求項２０１】
前記疾患は、Ｂ細胞癌、多発性骨髄腫、悪性形質細胞腫、または他のＢ細胞リンパ腫からなる群から選択される、請求項２００に記載の方法。
【請求項２０２】
前記疾患は、多発性骨髄腫である、請求項２０１に記載の方法。
【請求項２０３】
化学療法、放射線療法、手術、プロテアソーム阻害剤、コルチコステロイド、及び幹細胞移植からなる群から選択される、さらなる追加の治療のうちの１つを施すことをさらに含む、請求項２００〜２０２のいずれかに記載の方法。
【請求項２０４】
前記追加の治療を前記施すことは、請求項１９７〜１９９のいずれかに記載の組成物の前記投与の前に、それと同時に、もしくはそれに続いて、またはそのそれぞれの組み合わせで、行われる、請求項２０３に記載の方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
関連出願の相互参照
本出願は、３５Ｕ．Ｓ．Ｃ．§１１９の下に、２０１２年１２月７日に出願された米国仮出願第６１／７３４，７６７号、２０１３年２月１日に出願された米国仮出願第６１／７５９，７０２号、２０１３年３月８日に出願された米国仮出願第６１／７７５，１２５号、及び２０１３年１０月１１日に出願された米国仮出願第６１／８９０，０６４号の利益を主張し、これらは、参照により本明細書に組み込まれる。
【０００２】
発明の分野
本発明は、Ｂ細胞成熟抗原（ＢＣＭＡ）抗原結合タンパク質、特に抗体、該抗原結合タンパク質をコードするポリヌクレオチド配列、ならびに疾患を治療するための組成物及び方法に関する。本発明の態様はまた、抗体薬物複合体及びその使用も含む。
【背景技術】
【０００３】
Ｂ細胞成熟抗原（ＢＣＭＡ）、Ｂ細胞活性化因子受容体（ＢＡＦＦ−Ｒ）、ならびに膜貫通活性化因子及びカルシウム調節因子及びシクロフィリンリガンド相互作用因子（ＴＡＣＩ）は、増殖誘導リガンド（ＡＰＲＩＬ）及び／またはＢＡＦＦ（Ｂ細胞活性化因子）に結合することによって、異なる発生段階で、Ｂ細胞生存を促進する。異常制御されたシグナル伝達は、Ｂ細胞の生存及び増殖を促進し、自己免疫及び新生物形成を引き起こし得る。考察については、Ｒｉｃｋｅｒｔ，ｅｔ  ａｌ．，Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｉｃａｌ  Ｒｅｖｉｅｗｓ  ２０１１，Ｖｏｌ．２４４：１１５−１３３を参照されたい。
【０００４】
ＢＡＦＦ及びＡＰＲＩＬは、構造的類似性を呈し、重複するが依然として異なる受容体結合特異性を呈する。ＢＡＦＦ及びＡＰＲＩＬは、ＢＣＭＡに結合するが、ＡＰＲＩＬ：ＢＣＭＡの相互作用は、より高親和性のものであり、一方でＢＡＦＦ−Ｒのみが、高親和性でＢＡＦＦに結合する。負の制御因子であるＴＡＣＩは、類似の親和性でＢＡＦＦ及びＡＰＲＩＬに結合する。Ｂ細胞系統におけるＢＣＭＡ発現は、胚中心Ｂ細胞、メモリーＢ細胞（ヒトにおいて）、及び形質細胞に制限される。ＢＣＭＡは、骨髄形質細胞上でのＢＡＦＦ及びＡＰＲＩＬの結合のための受容体であるが、ＴＡＣＩもまた、これらの細胞上に発現される。長期生存形質細胞の生存は、ＢＡＦＦを必要としないが、ＡＰＲＩＬには依存する。
【０００５】
ＢＣＭＡ発現は、形質細胞に高度に制限される。多発性骨髄腫は、悪性形質細胞のクローン増殖によって引き起こされる。２０２０年までに、主要国における多発性骨髄腫（ＭＭ）の発症例の総数は、４６，４００から５５，３００に増加すると見られる。新たに診断される骨髄腫の症例は、それぞれ診断された症例の約３３％を占めるステージ１、２、及び３の３つの疾患ステージ間に同様に分布している。米国では、毎年おおよそ２０，５００人が多発性骨髄腫と診断され、毎年ほぼ１１，０００人のＭＭ患者が死亡する。治療法の進歩にもかかわらず、多発性骨髄腫は依然として難病である。Ｊｅｍａｌ  Ａ，ｅｔ  ａｌ．ＣＡ  Ｃａｎｃｅｒ  Ｊ  Ｃｌｉｎ．２００８；５８：７１−９６、Ｋｙｌｅ  ＲＡ，ｅｔ  ａｌ．Ｍａｙｏ  Ｃｌｉｎ  Ｐｒｏｃ．２００３；７７８：２１−３３、Ｂｅｒｇｓａｇｅｌ  ＤＥ，ｅｔ  ａｌ．Ｂｌｏｏｄ．１９９９，９４：１１７４−１１８２を参照されたい。
【先行技術文献】
【非特許文献】
【０００６】
【非特許文献１】Ｒｉｃｋｅｒｔ，ｅｔ  ａｌ．，Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｉｃａｌ  Ｒｅｖｉｅｗｓ  ２０１１，Ｖｏｌ．２４４：１１５−１３３
【非特許文献２】Ｊｅｍａｌ  Ａ，ｅｔ  ａｌ．ＣＡ  Ｃａｎｃｅｒ  Ｊ  Ｃｌｉｎ．２００８；５８：７１−９６、Ｋｙｌｅ  ＲＡ，ｅｔ  ａｌ．Ｍａｙｏ  Ｃｌｉｎ  Ｐｒｏｃ．２００３；７７８：２１−３３、Ｂｅｒｇｓａｇｅｌ  ＤＥ，ｅｔ  ａｌ．Ｂｌｏｏｄ．１９９９，９４：１１７４−１１８２
【図面の簡単な説明】
【０００７】
【図１】ヒトＢＣＭＡ（配列番号２８５）及びカニクイザル（ｃｙｎｏｍｏｌｇｕｓ）（カニクイザル（Ｍａｃａｃａ  ｆａｓｃｉｃｕｌａｒｉｓ））ＢＣＭＡ（配列番号２８６）のアミノ酸配列を示す。
【図２】抗体薬物複合体の一実施形態の概略図であり、例示的なリンカー及び毒素の構造を示す。
【図３】ＢＣＭＡ  ｍＲＮＡが、多発性骨髄腫患者試料の９９％超に発現されることを示す。
【図４Ａ−Ｂ】２つのキャンペーンに関するモノクローナル抗体の生成、スクリーニング、及び特徴付けの概略図である。
【図５Ａ−Ｃ】２つのキャンペーンに関するモノクローナル抗体の生成、スクリーニング、及び特徴付けのデータ表である。
【図６】骨髄腫細胞株Ｈ９２９に対する２Ａ１及び１Ｅ１  ｍＡｂの結合を示す。
【図７】種々の骨髄腫及びＢ細胞株上のＢＣＭＡに結合した２Ａ１  ｍＡｂを示す。
【図８】２Ａ１及び１Ｅ１抗体のＡＤＣＣ活性（２Ａ１については１１ｎｇ／ｍｌ、及び１Ｅ１については７６ｎｇ／ｍｌのＥＣ５０）のグラフである。
【図９】２Ａ１抗体が、Ｈ９２９細胞上のＢＣＭＡに結合した後に容易に内部移行されたことを示す。
【図１０】質量分析法によって分析した種々の２Ａ１−ＭＣＣ−ＤＭ１  ＡＤＣである。
【図１１】異なるリンカー及びマイタンシン分子と複合体化させ、骨髄腫細胞を殺滅させるそれらの能力について分析した２つの異なる抗体（２Ａ１及び１Ｅ）を示す。
【図１２Ａ−Ｆ】２Ａ１−ＭＣＣ−ＤＭ１  ＡＤＣを、Ｈ９２９、Ｕ２６６、ＭＭＩＲ、ＭＭＩＳを含む種々の多発性骨髄腫細胞株、ＥＷ３６  Ｂ細胞リンパ腫細胞株、及びＲＡＭＯＳバーキットリンパ腫細胞株に対して試験したことを示す。
【図１３】遊離ＤＭ１に曝露した種々の細胞株が、実際に遊離ＤＭ１によって殺滅されることをグラフで示す。
【図１４Ａ−Ｂ】種々の２Ａ１  ｍＡｂ共分散変異タンパク質のＴｍを示す。
【図１５】Ｈ９１９細胞への種々の２Ａ１  ｍＡｂ共分散変異タンパク質の結合を示すグラフである。
【図１６Ａ−Ｂ】いくつかの２Ａ１変異タンパク質抗体が、親２Ａ１（２Ａ１ＷＴ）と比較して同程度なＢＣＭＡへの結合を保持したが、２Ａ１共分散３、８、９、及び１１〜１９抗体は、ＢＣＭＡへの結合が低減したことを示す。
【図１７】種々の２Ａ１  ｍＡｂ共分散変異タンパク質の同程度なＡＤＣＣ活性を示す。
【図１８Ａ−Ｂ】種々の２Ａ１  ｍＡｂ共分散変異タンパク質の同程度なＡＤＣＣ活性を示す。
【図１９Ａ−Ｂ】種々の２Ａ１  ｍＡｂ共分散変異タンパク質の同程度なＡＤＣＣ活性を示す。
【図２０】種々の２Ａ１  ｍＡｂ共分散変異タンパク質の同程度な発現力価を示すヒストグラムである。
【図２１Ａ−Ｂ】種々の２Ａ１  ｍＡｂ共分散変異タンパク質の同程度な結合活性を示す。
【図２２Ａ−Ｂ】種々の２Ａ１  ｍＡｂ共分散変異タンパク質の同程度なＡＤＣＣ活性を示す。
【図２３】第２のキャンペーンからの抗ｈｕＢＣＭＡ抗体が、カニクイザルＢＣＭＡに結合する能力を有したことを示す。
【図２４】第２のキャンペーンからの抗ｈｕＢＣＭＡ抗体のうちのいくつかが、Ｈ９２９多発性骨髄腫細胞株上のｈｕＢＣＭＡに結合する能力を有したことを示す。
【図２５Ａ−２５Ｂ】２９Ｃ１２．１、２９Ｇ５．１、３２Ｂ５．１、３３Ｃ７．１、３５Ｄ２．１、３７Ｂ２．１、及び４０Ｄ７．１抗体から作製されたＡＤＣが、ｈｕＢＣＭＡを発現する標的細胞を選択的に殺滅させたことを示す。
【図２６】種々の候補抗体（第２のキャンペーンからの共分散変異タンパク質抗体を含む）間でのＨ９２９細胞上における同程度のｈｕＢＣＭＡへの結合を示す。
【図２７】種々のＡＤＣによるＨ９２９細胞の相対的殺滅を図示する。
【図２８】第２のキャンペーンからの共分散変異タンパク質抗体のほとんどが。カニクイザルＢＣＭＡに結合する能力を保持したことを示す。
【図２９】ＢＣＭＡ  ＡＤＣが、異種移植片皮下腫瘍モデルにおいてＨ９２９骨髄腫細胞の成長を阻害することができたことをグラフで示す。２Ａ１−ＭＣＣ−ＤＭ１での処置は、２００μｇ  ＤＭ１／ｋｇの高用量（１０ｍｇ  Ａｂ／ｋｇ）で堅強な腫瘍成長阻害を示し、６７μｇ  ＤＭ１／ｋｇの中用量（３ｍｇ  Ａｂ／ｋｇ）では中等度の腫瘍成長阻害を示した。
【図３０】２Ａ１ＣＶ５−ＭＣＣ−ＤＭ１、３２Ｂ５−ＭＣＣ−ＤＭ１、及び２９Ｃ１２−ＭＣＣ−ＤＭ１  ＡＤＣが、ＢＣＭＡを発現する骨髄腫細胞（Ｈ９２９）を標的とし、それを殺滅することができたことを示す。
【図３１】２Ａ１ＣＶ５及び２Ａ１ＣＶ５−ＭＣＣ−ＤＭ１のＨ９２９細胞への内部移行のレベル及び速度を示す。
【図３２】完全な腫瘍退縮が、Ｈ９２９骨指向性異種移植片モデルにおいて２Ａ１−ＭＣＣ−ＤＭ１または２Ａ１ＣＶ５−ＭＣＣ−ＤＭ１での単回処置後に観察されたことを示す。
【図３３】２Ａ１ＣＶ５−ＭＣＣ−ＤＭ１が、Ｕ２６６ヒト骨髄腫骨指向性異種移植片モデルにおいて有意な腫瘍退縮を媒介することができることをグラフで示す。
【図３４Ａ−Ｂ】実施例１３のアッセイプロトコル及びゲーティング方法を示す。
【図３５】２Ａ１抗体及び変異タンパク質が、試験したほとんどすべての多発性骨髄腫患者試料上のＢＣＭＡに結合することができることを示す。
【図３６】ＢＣＭＡ抗体（２Ａ１ＣＶ４−ｐＨｒｏｄｏ標識）が、２９個すべての多発性骨髄腫患者試料において効果的に内部移行されたことを示し、２Ａ１抗体及びその変異蛋白質が、試験したすべての多発性骨髄腫患者試料上のＢＣＭＡに結合し、効果的に内部移行することができることを示す。
【図３７】２Ａ１ＣＶ５−ＭＣＣ−ＤＭ１が、ＤＭ１を主な骨髄腫の骨髄単核腫瘍細胞（ＢＭＭＣ）試料及びＭＭ１Ｒ骨髄腫細胞株に送達したことを示すヒストグラムである。
【図３８】κ軽鎖の産生がＨ９２９腫瘍寸法と相関することを示す。
【図３９】κ軽鎖が、Ｈ９２９異種移植片由来の血清中に検出されたが、２Ａ１ＣＶ５−ＭＣＣ−ＤＭ１で処置したマウスに由来する血清中には検出されなかったことを示す。
【図４０】ＢＣＭＡ発現が、多発性骨髄腫患者のＢＭＭＣ試料において処置歴に基づいて変化するようではないことを示す。
【図４１Ａ−４１Ｂ】最適な特性を有する共分散変異タンパク質の重鎖及び軽鎖可変ドメインの配列アライメントである。
【図４２Ａ−４２Ｂ】親抗体可変軽鎖及び重鎖ドメイン配列のクレードが、２Ａ１抗体と２９Ｃ１２、３２Ｂ５、及び第２のキャンペーンからの他の抗体との間の相違を示すことを図示する。
【図４３Ａ−Ｆ】Ａｂ−１が、おおよそ１５５ｐＭの平衡解離速度定数（Ｋｄ）でヒトＢＣＭＡに特異的に結合し、ラットＢＣＭＡとは１０ｎＭ超の平衡解離速度定数（Ｋｄ）でわずかに相互作用するにすぎなかった（すなわち、特異的に結合しなかった）ことを示すバイオセンサーデータを図示する。Ａｂ−２及びＡｂ−３は、それぞれ、おおよそ１．１１ｎＭ及び７５０ｐＭの平衡解離速度定数（Ｋｄ）でヒトＢＣＭＡに結合した。Ａｂ−２及びＡｂ−３は、それぞれ、おおよそ２．３５ｎＭ及び２．０７ｎＭの平衡解離速度定数（Ｋｄ）でラットＢＣＭＡに特異的に結合した。
【図４４】ヒトＢＣＭＡの細胞外ドメインのアミノ酸２〜５１：配列番号３５２、カニクイザルＢＣＭＡの細胞外ドメインのアミノ酸２〜５１：配列番号３５３、及びラットＢＣＭＡの細胞外ドメインのアミノ酸２〜４９：配列番号３５１の配列アライメントを示す。
【図４５】配列番号３５０のｒｈｕＢＣＭＡ融合タンパク質（６ｘＨｉｓ：：Ｓｕｍｏ：：ｈｕＢＣＭＡ（ａａ５〜５１）：：ＧＧＳ：：Ｇ３：：Ａｖｉ）に由来するヒトＢＣＭＡの細胞外ドメインの３つの漸減するアミノ末端フラグメント（配列番号３５４、配列番号３５５、及び配列番号３５６）の配列を提供する。
【図４６】配列番号３５０及びヒトＢＣＭＡの細胞外ドメインの３つの漸減するアミノ末端フラグメントのサイズ排除クロマトグラフィー（サイズ推定はダルトン単位）の結果を示す（ピークＡ：配列番号３５４、ピークＢ：配列番号３５５、及びピークＣ：配列番号３５６）。
【図４７Ａ−Ｄ】Ａｂ−１が、ヒトＢＣＭＡの種々のフラグメント（すなわち、配列番号３５０、３５４、３５５、及び３５６）に結合したことを示すクロマトグラムである。図４７Ａは、配列番号３５０の保持時間を示す。図４７Ｂは、Ａｂ−１の保持時間を示す。図４７Ｃは、３μｇのＢＣＭＡ（配列番号３５０）と比較して過剰量のＡｂ−１（６０μｇ）が、切断されたフラグメント（すなわち、配列番号３５４〜３５６）を含む遊離ＢＣＭＡを全くもたらさなかったこと、及び２つのピークが、種々のＢＣＭＡフラグメントに結合したＡｂ−１（保持時間２．７４８）及び未結合の過剰Ａｂ−１（保持時間３．０７８）を表すことを示す。図４７Ｄは、過剰量のＢＣＭＡ（６０μｇの配列番号３５０）中のＡｂ−１抗体（３０μｇ）が、ＢＣＭＡに結合したが、少量のＢＣＭＡフラグメント（配列番号３５４〜３５６）もまた存在していたことを示す。
【図４８Ａ−Ｃ】２９Ｃ１２  ｍＡｂが、２Ａ１  ｍＡｂに関する図４７Ａ〜Ｄに見られるものに類似して、すべての形態のヒトＢＣＭＡに結合したことを示すクロマトグラムである。
【図４９Ａ】ＳｕｍｏとＳｕｍｏ−ＢＣＭＡとの間に検出可能なサイズの相違があったことを示し、図４９Ｂは、無関係の抗体対照（抗ＳＡ）がＳｕｍｏ−ＢＣＭＡに結合しなかったことを示す。図４９Ｃは、２Ａ１及び２９Ｃ１２がＳｕｍｏに結合しなかったことを示す。
【図５０】図５０Ａは、２Ａ１抗体によって結合されたＢＣＭＡの切断形態を示すクロマトグラムを提供する（ピークＡ、Ｂ、Ｄ、及びＥ）。図５０Ｂは、２９Ｃ１２抗体によって結合されたＢＣＭＡの切断形態を示す（ピークＡ、Ｂ、Ｃ、及びＥ）。
【図５１】ｈｕＢＣＭＡ及びＡｂ−１  Ｆａｂの複合体にあるｈｕＢＣＭＡの全体的な構造配設を図で表すものである（Ａｂ−１  Ｆａｂは示されない）。ジスルフィド結合は、棒状の表示で示される。
【発明を実施するための形態】
【０００８】
本明細書において用いられる見出しは、構成上の目的のためであるに過ぎず、記載される主題を限定すると見なされるものではない。実施例及び特許請求の範囲は、本発明の詳細な説明の一部である。現在提示されているもの以外のさらなる特許請求の範囲が、本明細書から草案され得る。
【０００９】
標準的な技法が、組み換えＤＮＡ、オリゴヌクレオチド合成、組織培養及び形質転換、タンパク質精製等に使用され得る。酵素反応及び精製技法は、製造業者の仕様書に従って、または当該技術分野で一般に達成されるように、または本明細書に記載されるように、行われ得る。以下の手順及び技法は、一般に、当該技術分野で周知の従来的な方法に従って、また本明細書を通して引用及び考察される種々の一般的な及びより具体的な参考文献に記載されるように、行われ得る。例えば、Ｓａｍｂｒｏｏｋ  ｅｔ  ａｌ．，２００１，Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｃｌｏｎｉｎｇ：Ａ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ  Ｍａｎｕａｌ，３ｒｄ  ｅｄ．，Ｃｏｌｄ  Ｓｐｒｉｎｇ  Ｈａｒｂｏｒ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ  Ｐｒｅｓｓ，Ｃｏｌｄ  Ｓｐｒｉｎｇ  Ｈａｒｂｏｒ，Ｎ．Ｙ．を参照されたく、これは、あらゆる目的で参照により本明細書に組み込まれる。具体的な定義が提供されない限り、本明細書に記載される分析化学、有機化学、ならびに医化学及び薬化学に関連して用いられる命名法、ならびにそれらの実験手順及び技法は、当該技術分野において周知であり、一般的に使用されるものである。標準的な技法が、化学合成、化学分析、薬剤の調製、製剤化、及び送達、ならびに患者の治療に用いられ得る。
【００１０】
本発明の態様は、本明細書により詳細に記載されるように、ＢＣＭＡに特異的に結合し、ＢＡＦＦ及びＡＰＲＩＬ等であるがこれらに限定されないＢＣＭＡリガンドによって媒介されるＢＣＭＡ活性化を阻害する、抗原結合タンパク質を提供する。本発明の態様は、ヒトＢＣＭＡに特異的に結合する抗体薬物複合体（ＡＤＣ）を含む。細胞表面上に発現されるＢＣＭＡに結合すると、ＢＣＭＡ抗体は、エンドソーム区画へのＢＣＭＡ／ＡＤＣ複合体の内部移行を促進し、リソソームへのＡＤＣの最終的な送達を促進する。内部移行されたＡＤＣは、抗体に複合体化された薬物を介して細胞を特異的に殺滅させる。本発明の態様は、本明細書により詳細に記載されるように、多発性骨髄腫を含むＢ細胞関連癌の治療におけるＡＤＣの使用を含む。
【００１１】
ＢＣＭＡ
本明細書に使用される「ＢＣＭＡ」は、ＢＡＦＦ及び／またはＡＰＲＩＬに結合する細胞表面受容体（またはＢＣＭＡを含む受容体複合体）を意味する。ヒトＢＣＭＡ（ｈｕＢＣＭＡ）のアミノ酸配列は、ＮＣＢＩ受託番号Ｑ０２２２３（ＧＩ：３１３１０４０２９）で提供され、図１に示される（配列番号２８５）。ＢＣＭＡタンパク質には、変異体も含まれ得る。ＢＣＭＡタンパク質はまた、フラグメント、例えば、膜貫通及び／または細胞内ドメインのすべてまたは一部を有さない細胞外ドメイン、ならびに細胞外ドメインのフラグメントも含み得る。細胞外ドメインの例としては、配列番号２８５のアミノ酸１〜５０から５４または８〜４８が挙げられる。ｈｕＢＣＭＡの可溶性形態には、ＢＡＦＦ及び／またはＡＰＲＩＬに結合する能力を保持する、細胞外ドメインまたは細胞外ドメインのフラグメントが含まれる。「ＢＣＭＡ」という用語は、ＢＣＭＡアミノ酸配列の翻訳後修飾も含む。翻訳後修飾には、Ｎ−及びＯ−連結型グリコシル化が挙げられるが、これらに限定されない。本発明の態様は、カニクイザルＢＣＭＡに交差反応する抗体に関する。
【００１２】
ＢＣＭＡ抗原結合タンパク質
本発明は、ＢＣＭＡに特異的に結合する抗原結合タンパク質を提供する。実施形態には、ｈｕＢＣＭＡに結合するモノクローナル抗体が含まれる。実施形態には、本明細書に記載されるモノクローナル抗体のうちの１つ以上のポリペプチド配列の一部またはすべてを含む、ポリペプチドが含まれる。ＢＣＭＡの正常な組織発現は、Ｂ細胞系統に高度に制限され、ここで、それは主として扁桃腺／リンパ節の二次卵胞／胚中心において発現される。ＢＣＭＡは、悪性形質細胞、特に、多発性骨髄腫、くすぶり型骨髄腫、及び意義不明の単一クローン性γグロブリン血症（ｍｏｎｏｃｌｏｎａｌ  ｇａｍｍｏｐａｔｈｙ  ｏｆ  ｕｎｋｎｏｗｎ  ｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｃｅ）（ＭＧＵＳ）の形質細胞においては、正常形質細胞で観察されるレベルよりも比較的高度なレベルで発現される。ＢＣＭＡは、ＢＣＭＡを発現するＢ細胞関連悪性腫瘍を治療するために特に望ましい標的であり、これは、その発現が、正常及び悪性の形質細胞に高度に制限されており、したがって、非標的組織毒性が最小限となるはずだからである。加えて、ＢＣＭＡ発現は、図４０に示されるように、現在または以前の治療レジメンにもかかわらず、多発性骨髄腫患者試料で持続したままである。
【００１３】
天然のｈｕＢＣＭＡに結合するが、ｈｕＢＡＦＦ−ＲまたはｈｕＴＡＣＩには交差反応しない、珍しい高度に特異的なヒト抗ｈｕＢＣＭＡ  Ｘｅｎｏｍｏｕｓｅ（登録商標）抗体を生成し、これは、迅速にＢＣＭＡ発現骨髄腫細胞株及び多発性骨髄腫患者由来の一次単離物に内部移行された。
【００１４】
実施形態には、ｈｕＢＣＭＡに結合し、さらにカニクイザルＢＣＭＡ（図１の配列番号２８６）に交差反応する、抗体が含まれる。これは、本明細書に提供される抗体の固有かつ有利な特徴である。カニクイザルＢＣＭＡ（例えば、実施例２を参照されたい）に結合する抗ｈｕＢＣＭＡ抗体及びそれから作製したＡＤＣを、カニクイザル動物モデルにおいて使用して、毒性、薬物動態、及び他の薬理学的特徴を試験することができる。
【００１５】
本明細書に記載される抗体のさらなる固有かつ有利な特徴は、他の関連する受容体に関して、ｈｕＢＣＭＡに対する特異性である。本明細書に記載される抗体の実施形態を、ｈｕＢＣＭＡに対する高親和性結合のために特に選択し、ｈｕＴＡＣＩ及びｈｕＢＡＦＦ−Ｒへの特異的結合がないことに関してスクリーニングした（例えば、実施例２を参照されたい）。ｈｕＢＣＭＡに対する特異性ならびにｈｕＴＡＣＩ及びｈｕＢＡＦＦ−Ｒに対する交差反応性の欠如は、形質Ｂ細胞を標的とすることに関する、ならびに多発性骨髄腫及び他のＢ細胞関連癌の治療における、はっきりと異なる利点を本明細書に記載される抗体にもたらす。
【００１６】
本明細書に記載される実施形態のさらなる固有かつ有利な特徴は、この抗体が、ｈｕＢＣＭＡの活性化を、そのリガンドであるＡＰＲＩＬの生物学的活性を阻害することによって阻害することである。本明細書に提供される実施形態を、この重要な生物学的属性に関して選択的にスクリーニングした（例えば、実施例２を参照されたい）。
【００１７】
本明細書に提供される実施形態のさらなる固有かつ有利な特徴は、抗体が、特別に高い度合いのＡＤＣＣ活性のために選択されたことである（例えば、実施例４及び８を参照されたい）。
【００１８】
本明細書に提供される実施形態のさらなる固有かつ有利な特徴は、抗体が、ｈｕＢＣＭＡに対してアゴニスト性でなく、したがって、結合時にｈｕＢＣＭＡを活性化しないことである。
【００１９】
本明細書に提供される実施形態のさらなる固有かつ有利な特徴は、細胞の表面上に発現されるｈｕＢＣＭＡに結合した際に内部移行される能力である。これは、ｈｕＢＣＭＡの細胞外ドメインが非常に小さい（おおよそ５０アミノ酸）ので、平凡なことではなく、確かに当然なことではない。多発性骨髄腫一次単離物、ならびに処理及び凍結されている多発性骨髄腫試料、ならびに多発性骨髄腫細胞株において、ｈｕＢＣＭＡに結合し、それに媒介されるエンドサイトーシスを介して内在化される能力が、特に重要である（例えば、実施例３、５、７、８、１０、１１、１３、及び１４を参照されたい）。
【００２０】
本明細書に提供される選択実施例のさらなる固有かつ有利な特徴は、部位特異的変異誘発により実験的に遺伝子操作され強化された抗体の安定性及び製造可能性である（例えば、実施例８を参照されたい）。
【００２１】
本明細書に提供される実施形態のさらなる固有かつ有利な特徴は、リンカー及び薬物（毒素とも称される）に問題なく複合体化され、さらに、高い親和性でｈｕＢＣＭＡに結合し、内部移行され、細胞の殺滅を成功させる能力を保持することができることである（例えば、実施例６、７、及び９〜１１を参照されたい）。Ａｂ−１抗体の複合体化バージョン（すなわち、Ａｂ−１  ＡＤＣ、本明細書において２Ａ１ＣＶ５−ＭＣＣ−ＤＭ１または２Ａ１ＣＶ５  ＡＤＣとも称される）が、そのような高い親和性で結合することは、当然なことではなく、また高く望ましい。
【００２２】
本明細書に提供される実施形態のさらなる固有かつ有利な特徴は、骨髄腫細胞の表面上のｈｕＢＣＭＡに結合すると、例えば、Ａｂ−１  ＡＤＣは、非複合体化抗体と同様に内部移行されること、及びＨ９２９腫瘍細胞成長阻害アッセイにおいておおよそ７８ｐＭ（抗体濃度）のＩＣ５０を有することである（例えば、実施例１１を参照されたい）。
【００２３】
本明細書に提供される実施形態のさらなる固有かつ有利な特徴は、１細胞当たり３，０００部位程度に低い平均ＢＣＭＡ発現密度を有する多発性骨髄腫細胞株が、Ａｂ−１  ＡＤＣ及び他の抗ｈｕＢＣＭＡ  ＡＤＣによって殺滅され得ることである（例えば、実施例１０を参照されたい）。
【００２４】
本明細書に提供される実施形態のさらなる固有かつ有利な特徴は、Ａｂ−１  ＡＤＣが、多発性骨髄腫患者試料の一次単離物中に効果的に内部移行されることである（例えば、実施例１３及び１４を参照されたい）。
【００２５】
本明細書に提供される実施形態のさらなる固有かつ有利な特徴は、３つのインビボ骨髄腫腫瘍異種移植片モデルにおいて、抗ｈｕＢＣＭＡ  ＡＤＣが、３つすべてのモデルにおいて抗腫瘍活性を媒介し、３つのうち２つのモデルにおいて腫瘍退縮を媒介したことである。確立された骨指向性（ｂｏｎｅ  ｔｒｏｐｉｃ）多発性骨髄腫マウスモデルにおいて、検出可能な腫瘍量が全くない完全な腫瘍退縮が、単回静脈内用量のＡｂ−１  ＡＤＣを投与した後に骨において観察された（例えば、実施例９及び１２を参照されたい）。
【００２６】
したがって、本明細書に提供される抗体を選択的にスクリーニングし、実験的に遺伝子操作し、化学的に改変して、それらと他の抗体とを区別する多数の固有な当然ではない驚くべき属性を最大化させた。
【００２７】
抗原結合タンパク質の実施形態は、ｈｕＢＣＭＡに特異的に結合するペプチド及び／またはポリペプチド（場合によっては翻訳後修飾を含む）を含む。抗原結合タンパク質の実施形態は、本明細書に様々に定義されるように、ｈｕＢＣＭＡに特異的に結合する抗体及びそのフラグメントを含む。本発明の態様は、ｈｕＢＣＭＡに特異的に結合し、ＢＡＦＦ及び／またはＡＰＲＩＬがｈｕＢＣＭＡまたはｈｕＢＣＭＡを含む多量体型もしくは異種型受容体複合体に結合すること及び／またはそれを活性化することを阻害する、抗体を含む。
【００２８】
本発明の抗原結合タンパク質は、ヒトＢＣＭＡに特異的に結合する。本明細書で使用される「特異的に結合する」とは、抗原結合タンパク質が、他のタンパク質よりも優先的にヒトＢＣＭＡに結合することを意味する。いくつかの実施形態において、「特異的に結合する」とは、ＢＣＭＡ抗原結合タンパク質が、ＢＣＭＡに対して他のタンパク質よりも高い親和性を有することを意味する。例えば、平衡解離定数は、１０−７Ｍ未満〜１０−１１Ｍ、または１０−８Ｍ未満〜１０−１０Ｍ未満、または１０−９Ｍ未満〜１０−１０Ｍ未満である。抗原結合タンパク質がｈｕＢＣＭＡに特異的に結合するかどうかを判定するアッセイの例は、実施例２及び１６に見出すことができる。
【００２９】
本明細書に記載されるＢＣＭＡ抗体の種々の実施形態への参照がなされるとき、そのＢＣＭＡ結合フラグメントもまた包含することを理解されたい。ＢＣＭＡ結合フラグメントは、ヒトＢＣＭＡに特異的に結合する能力を保持する本明細書に記載される抗体フラグメントまたはドメインのいずれをも含む。該ＢＣＭＡ結合フラグメントは、本明細書に記載される足場のいずれであってもよい。該ＢＣＭＡ結合フラグメントはまた、本明細書全体を通じて記載されるように、ＢＣＭＡの活性化を阻害する能力を有する。
【００３０】
本発明の態様は、Ａｂ−１、Ａｂ−２、及び／またはＡｂ−３抗体と同じかまたは同様の、ｈｕＢＣＭＡ上のエピトープに結合する抗体を含む。抗体エピトープは、一般に、抗体の可変領域に結合され得る抗原内の三次元構造として定義される。（Ｇｒｅｅｎｂａｕｍ，ｅｔ  ａｌ．，Ｊ  Ｍｏｌｅｃ  Ｒｅｃｏｇｎｉｔｉｏｎ，２００７，２０：７５−８２）。「同じかまたは同様のエピトープ」は、実施例１７に示され、また本明細書に記載されるように、Ｘ線結晶構造解析によって特定されるものとして定義される。
【００３１】
本発明の態様は、Ａｂ−１、Ａｂ−２、及び／またはＡｂ−３抗体とｈｕＢＣＭＡとの結合を競合的に阻害する、単離モノクローナル抗体を含む。本発明の態様は、Ａｂ−１、Ａｂ−２、及び／またはＡｂ−３抗体とｈｕＢＣＭＡとの結合を競合的に阻害する、単離ヒトモノクローナル抗体を含む。本発明の態様は、Ａｂ−１、Ａｂ−２、及び／またはＡｂ−３抗体とｈｕＢＣＭＡとの結合を競合的に阻害する、単離ヒトモノクローナルＩｇＧ抗体を含む。本発明の態様は、本明細書に様々に定義されるように、Ａｂ−１とｈｕＢＣＭＡとの結合を競合的に阻害する、単離モノクローナル抗体を含む。本発明の態様は、本明細書に様々に定義されるように、Ａｂ−１とｈｕＢＣＭＡとの結合を競合的に阻害する、単離ヒトモノクローナル抗体を含む。本発明の態様は、本明細書に様々に定義されるように、Ａｂ−１とｈｕＢＣＭＡとの結合を競合的に阻害する、単離ヒトモノクローナルＩｇＧ抗体を含む。競合する抗体（すなわち、Ａｂ−１ではないもの）が、細胞に基づくかまたは組み換えタンパク質に基づくＥＬＩＳＡアッセイにおいて、Ａｂ−１に対して等モルまたは２倍モル過剰であるときに、ある抗体がｈｕＢＣＭＡへのＡｂ−１の結合を９０％低減させる場合、それはＡｂ−１の結合を競合的に阻害する。
【００３２】
実施例１６は、Ａｂ−１が配列番号２８５のヒトＢＣＭＡ及び配列番号２８６のカニクイザルＢＣＭＡに特異的に結合するが、配列番号３５１のラットＢＣＭＡには特異的に結合しないことの根拠を提供する。この差別的結合の文脈及び以下の実施形態を説明する場合に、「特異的に結合しない」という表現は、抗体が、実施例１６に記載されるアッセイまたは当該技術分野で既知の同等のアッセイにおいて１０ｎＭ超の平衡解離速度定数（Ｋｄ）で標的タンパク質に結合することを意味する。図４４は、ヒトＢＣＭＡの細胞外ドメインのアミノ酸２〜５１：配列番号３５２、カニクイザルＢＣＭＡの細胞外ドメインのアミノ酸２〜５１：配列番号３５３、及びラットＢＣＭＡの細胞外ドメインのアミノ酸２〜４９：配列番号３５１の配列アライメントを示す。
【００３３】
種間の配列多様性が制限されるという観点から、Ａｂ−１の差別的結合は、Ａｂ−１が、配列番号２８５のアミノ酸１〜２０を含む、及びより具体的には配列番号２８５アミノ酸１〜１１を含む、ヒトＢＣＭＡ上の中和決定基に結合することを示唆する。本明細書に提供される実験的根拠は、Ａｂ−１が、配列番号３５２のヒトＢＣＭＡの細胞外ドメインに特異的に結合するが、配列番号３５１のラットＢＣＭＡの細胞外ドメインには特異的に結合しないことを示す。したがって、本発明の態様は、配列番号２８５及び配列番号２８６に特異的に結合するが、配列番号３５１には特異的に結合しない、単離モノクローナル抗体を含む。本発明の態様は、配列番号３５２に特異的に結合するが、配列番号３５１には特異的に結合しない、単離モノクローナル抗体を含む。本発明の態様は、配列番号２８５及び配列番号２８６に特異的に結合するが、配列番号３５１には特異的に結合しない、単離ヒトモノクローナル抗体を含む。本発明の態様は、配列番号３５２に特異的に結合するが、配列番号３５１には特異的に結合しない、単離ヒトモノクローナル抗体を含む。本発明の態様は、配列番号２８５及び配列番号２８６に特異的に結合するが、配列番号３５１には特異的に結合しない、単離ヒトモノクローナルＩｇＧ抗体を含む。本発明の態様は、配列番号３５２に特異的に結合するが、配列番号３５１には特異的に結合しない、単離ヒトモノクローナルＩｇＧ抗体を含む。本発明の態様は、配列番号２８５及び配列番号２８６に特異的に結合するが、配列番号３５１には特異的に結合しない、単離ヒトモノクローナルＩｇＧ１抗体を含む。本発明の態様は、配列番号３５２に特異的に結合するが、配列番号３５１には特異的に結合しない、単離ヒトモノクローナルＩｇＧ１抗体を含む。
【００３４】
本発明の態様は、１ｎＭ〜．０１ｎＭのＫｄで配列番号３５２に特異的に結合し、１０ｎＭを上回るＫｄで配列番号３５１に結合する、単離モノクローナル抗体を含む。本発明の態様は、１ｎＭ〜．０１ｎＭのＫｄ配列番号３５２に特異的に結合し、１０ｎＭを上回るＫｄで配列番号３５１に結合する、単離ヒトモノクローナル抗体を含む。本発明の態様は、１ｎＭ〜．０１ｎＭのＫｄ配列番号３５２に特異的に結合し、１０ｎＭを上回るＫｄで配列番号３５１に結合する、単離ヒトモノクローナルＩｇＧ抗体を含む。本発明の態様は、１ｎＭ〜．０１ｎＭのＫｄ配列番号３５２に特異的に結合し、１０ｎＭを上回るＫｄで配列番号３５１に結合する、単離ヒトモノクローナルＩｇＧ１抗体を含む。Ｋｄ値は、実施例１６に記載のアッセイまたは同等のアッセイを使用して決定され得る。
【００３５】
本発明の態様は、約０．１６ｎＭのＫｄで配列番号３５２に特異的に結合し、１０ｎＭを上回るＫｄで配列番号３５１に結合する、単離モノクローナル抗体を含む。「約０．１６ｎＭ」とは、０．１６ｎＭ±０．１ｎＭを意味する。本発明の態様は、約０．１６ｎＭのＫｄで配列番号３５２に特異的に結合し、１０ｎＭを上回るＫｄで配列番号３５１に結合する、単離ヒトモノクローナル抗体を含む。本発明の態様は、約０．１６ｎＭのＫｄで配列番号３５２に特異的に結合し、１０ｎＭを上回るＫｄで配列番号３５１に結合する、単離ヒトモノクローナルＩｇＧ抗体を含む。本発明の態様は、約０．１６ｎＭのＫｄで配列番号３５２に特異的に結合し、１０ｎＭを上回るＫｄで配列番号３５１に結合する、単離ヒトモノクローナルＩｇＧ１抗体を含む。Ｋｄ値は、実施例１６に記載のアッセイまたは同等のアッセイを使用して決定され得る。
【００３６】
実施例１６はまた、Ａｂ−１が、ヒトＢＣＭＡの細胞外ドメインの漸減するアミノ末端フラグメントに結合したという根拠を提供する（すなわち、配列番号３５０、３５４、３５７、３５５、及び３５６、図４５〜４７Ａ〜Ｄ及び図５０Ａに示されるように）。配列番号３５６は、すべてのＢＣＭＡフラグメントに共通しており、したがって、Ａｂ−１がヒトＢＣＭＡのアミノ末端に結合することを示す。この根拠は、Ａｂ−１とＢＣＭＡの異なるオルソログとの差別的結合とともに、Ａｂ−１が、配列番号２８５のアミノ酸１〜２０を含むヒトＢＣＭＡ上の中和決定基、またはより具体的には、配列番号２８５の１〜１１を含む中和決定基に結合することを示す。本発明の実施形態は、配列番号２８５のアミノ酸１〜２０（境界値を含む）を含む中和決定基に結合する、単離モノクローナル抗体を含む。本発明の好ましい実施形態は、配列番号２８５のアミノ酸１〜１１（境界値を含む）を含む中和決定基に結合する、単離モノクローナル抗体を含む。本発明の実施形態は、配列番号２８５のアミノ酸１〜２０（境界値を含む）を含む中和決定基に結合する、単離ヒトモノクローナル抗体を含む。本発明の好ましい実施形態は、配列番号２８５のアミノ酸１〜１１（境界値を含む）を含む中和決定基に結合する、単離ヒトモノクローナル抗体を含む。本発明の実施形態は、配列番号２８５のアミノ酸１〜２０（境界値を含む）を含む中和決定基に結合する、単離ヒトモノクローナルＩｇＧ抗体を含む。本発明の好ましい実施形態は、配列番号２８５のアミノ酸１〜１１（境界値を含む）を含む中和決定基に結合する、単離ヒトモノクローナルＩｇＧ抗体を含む。本発明の実施形態は、配列番号２８５のアミノ酸１〜２０（境界値を含む）を含む中和決定基に結合する、単離ヒトモノクローナルＩｇＧ１抗体を含む。本発明の好ましい実施形態は、配列番号２８５のアミノ酸１〜１１（境界値を含む）を含む中和決定基に結合する、単離ヒトモノクローナルＩｇＧ１抗体を含む。前述の実施形態は、必ずしも１〜２０のアミノ酸ドメインまたは１〜１１のアミノ酸ドメイン中、すべてのアミノ酸に結合するわけではない。
【００３７】
本発明の実施形態は、配列番号２８５のアミノ酸１〜２０（境界値を含む）を含む中和決定基に結合する、単離モノクローナル抗体を含み、該抗体は、１ｎＭ以下のＫｄで配列番号２８５に結合する。本発明の好ましい実施形態は、配列番号２８５のアミノ酸１〜１１（境界値を含む）を含む中和決定基に結合する単離モノクローナル抗体を含み、該抗体は、１ｎＭ以下のＫｄで配列番号２８５に結合する。本発明の実施形態は、配列番号２８５のアミノ酸１〜２０（境界値を含む）を含む中和決定基に結合する単離ヒトモノクローナル抗体を含み、該抗体は、１ｎＭ以下のＫｄで配列番号２８５に結合する。本発明の好ましい実施形態は、配列番号２８５のアミノ酸１〜１１（境界値を含む）を含む中和決定基に結合する単離ヒトモノクローナル抗体を含み、該抗体は、１ｎＭ以下のＫｄで配列番号２８５に結合する。本発明の実施形態は、配列番号２８５のアミノ酸１〜２０（境界値を含む）を含む中和決定基に結合する単離ヒトモノクローナルＩｇＧ抗体を含み、該抗体は、１ｎＭ以下のＫｄで配列番号２８５に結合する。本発明の好ましい実施形態は、配列番号２８５のアミノ酸１〜１１（境界値を含む）を含む中和決定基に結合する単離ヒトモノクローナルＩｇＧ抗体を含み、該抗体は、１ｎＭ以下のＫｄで配列番号２８５に結合する。本発明の実施形態は、配列番号２８５のアミノ酸１〜２０（境界値を含む）を含む中和決定基に結合する単離ヒトモノクローナルＩｇＧ１抗体を含み、該抗体は、１ｎＭ以下のＫｄで配列番号２８５に結合する。本発明の好ましい実施形態は、配列番号２８５のアミノ酸１〜１１（境界値を含む）を含む中和決定基に結合する単離ヒトモノクローナルＩｇＧ１抗体を含み、該抗体は、１ｎＭ以下のＫｄで配列番号２８５に結合する。
【００３８】
本発明の実施形態は、配列番号２８５のアミノ酸１〜２０（境界値を含む）を含む中和決定基に結合する単離モノクローナル抗体を含み、該抗体は、実施例１６に記載されるバイオセンサーアッセイにおいて測定すると、約０．１６ｎＭのＫｄで配列番号３５２に結合する。本発明の好ましい実施形態は、配列番号２８５のアミノ酸１〜１１（境界値を含む）を含む中和決定基に結合する単離モノクローナル抗体を含み、該抗体は、実施例１６に記載されるバイオセンサーアッセイにおいて測定すると、約０．１６ｎＭのＫｄで配列番号３５２に結合する。本発明の実施形態は、配列番号２８５のアミノ酸１〜２０（境界値を含む）を含む中和決定基に結合する単離ヒトモノクローナル抗体を含み、該抗体は、実施例１６に記載されるバイオセンサーアッセイにおいて測定すると、約０．１６ｎＭのＫｄで配列番号３５２に結合する。本発明の好ましい実施形態は、配列番号２８５のアミノ酸１〜１１（境界値を含む）を含む中和決定基に結合する単離ヒトモノクローナル抗体を含み、該抗体は、実施例１６に記載されるバイオセンサーアッセイにおいて測定すると、約０．１６ｎＭのＫｄで配列番号３５２に結合する。本発明の実施形態は、配列番号２８５のアミノ酸１〜２０（境界値を含む）を含む中和決定基に結合する単離ヒトモノクローナルＩｇＧ抗体を含み、該抗体は、実施例１６に記載されるバイオセンサーアッセイにおいて測定すると、約０．１６ｎＭのＫｄで配列番号３５２に結合する。本発明の好ましい実施形態は、配列番号２８５のアミノ酸１〜１１（境界値を含む）を含む中和決定基に結合する単離ヒトモノクローナルＩｇＧ抗体を含み、該抗体は、実施例１６に記載されるバイオセンサーアッセイにおいて測定すると、約０．１６ｎＭのＫｄで配列番号３５２に結合する。本発明の実施形態は、配列番号２８５のアミノ酸１〜２０（境界値を含む）を含む中和決定基に結合する単離ヒトモノクローナルＩｇＧ１抗体を含み、該抗体は、実施例１６に記載されるバイオセンサーアッセイにおいて測定すると、約０．１６ｎＭのＫｄで配列番号３５２に結合する。本発明の好ましい実施形態は、配列番号２８５のアミノ酸１〜１１（境界値を含む）を含む中和決定基に結合する単離ヒトモノクローナルＩｇＧ１抗体を含み、該抗体は、実施例１６に記載されるバイオセンサーアッセイにおいて測定すると、約０．１６ｎＭのＫｄで配列番号３５２に結合する。
【００３９】
本発明の実施形態は、配列番号２８５のアミノ酸１〜２０（境界値を含む）を含む中和決定基に結合する単離モノクローナル抗体を含み、該抗体は、１０ｎＭ以下のＥＣ５０で、Ｈ９２９細胞の表面上に発現される配列番号２８５に結合する。本発明の好ましい実施形態は、単離配列番号２８５のアミノ酸１〜１１（境界値を含む）を含む中和決定基に結合するモノクローナル抗体を含み、該抗体は、１０ｎＭ以下のＥＣ５０で、Ｈ９２９細胞の表面上に発現される配列番号２８５に結合する。本発明の実施形態は、配列番号２８５のアミノ酸１〜２０（境界値を含む）を含む中和決定基に結合する単離ヒトモノクローナル抗体を含み、該抗体は、１０ｎＭ以下のＥＣ５０で、Ｈ９２９細胞の表面上に発現される配列番号２８５に結合する。本発明の好ましい実施形態は、配列番号２８５のアミノ酸１〜１１（境界値を含む）を含む中和決定基に結合する単離ヒトモノクローナル抗体を含み、該抗体は、１０ｎＭ以下のＥＣ５０で、Ｈ９２９細胞の表面上に発現される配列番号２８５に結合する。本発明の実施形態は、配列番号２８５のアミノ酸１〜２０（境界値を含む）を含む中和決定基に結合する単離ヒトモノクローナルＩｇＧ抗体を含み、該抗体は、１０ｎＭ以下のＥＣ５０で、Ｈ９２９細胞の表面上に発現される配列番号２８５に結合する。本発明の好ましい実施形態は、配列番号２８５のアミノ酸１〜１１（境界値を含む）を含む中和決定基に結合する単離ヒトモノクローナルＩｇＧ抗体を含み、該抗体は、１０ｎＭ以下のＥＣ５０で、Ｈ９２９細胞の表面上に発現される配列番号２８５に結合する。本発明の実施形態は、配列番号２８５のアミノ酸１〜２０（境界値を含む）を含む中和決定基に結合する単離ヒトモノクローナルＩｇＧ１抗体を含み、該抗体は、１０ｎＭ以下のＥＣ５０で、Ｈ９２９細胞の表面上に発現される配列番号２８５に結合する。本発明の好ましい実施形態は、配列番号２８５のアミノ酸１〜１１（境界値を含む）を含む中和決定基に結合する単離ヒトモノクローナルＩｇＧ１抗体を含み、該抗体は、１０ｎＭ以下のＥＣ５０で、Ｈ９２９細胞の表面上に発現される配列番号２８５に結合する。
【００４０】
本発明の実施形態は、配列番号２８５のアミノ酸１〜２０（境界値を含む）を含む中和決定基に結合する単離モノクローナル抗体を含み、該抗体は、実施例１１に記載されるＦＡＣＳアッセイにおいて、約１．２ｎＭのＥＣ５０で、Ｈ９２９細胞の表面上に発現される配列番号２８５に結合する。本発明の好ましい実施形態は、配列番号２８５のアミノ酸１〜１１（境界値を含む）を含む中和決定基に結合する単離モノクローナル抗体を含み、該抗体は、実施例１１に記載されるＦＡＣＳアッセイにおいて、約１．２ｎＭのＥＣ５０で、Ｈ９２９細胞の表面上に発現される配列番号２８５に結合する。本発明の実施形態は、配列番号２８５のアミノ酸１〜２０（境界値を含む）を含む中和決定基に結合する単離ヒトモノクローナル抗体を含み、該抗体は、実施例１１に記載されるＦＡＣＳアッセイにおいて、約１．２ｎＭのＥＣ５０で、Ｈ９２９細胞の表面上に発現される配列番号２８５に結合する。本発明の好ましい実施形態は、配列番号２８５のアミノ酸１〜１１（境界値を含む）を含む中和決定基に結合する単離ヒトモノクローナル抗体を含み、該抗体は、実施例１１に記載されるＦＡＣＳアッセイにおいて、約１．２ｎＭのＥＣ５０で、Ｈ９２９細胞の表面上に発現される配列番号２８５に結合する。本発明の実施形態は、配列番号２８５のアミノ酸１〜２０（境界値を含む）を含む中和決定基に結合する単離ヒトモノクローナルＩｇＧ抗体を含み、該抗体は、実施例１１に記載されるＦＡＣＳアッセイにおいて、約１．２ｎＭのＥＣ５０で、Ｈ９２９細胞の表面上に発現される配列番号２８５に結合する。本発明の好ましい実施形態は、配列番号２８５のアミノ酸１〜１１（境界値を含む）を含む中和決定基に結合する単離ヒトモノクローナルＩｇＧ抗体を含み、該抗体は、実施例１１に記載されるＦＡＣＳアッセイにおいて、約１．２ｎＭのＥＣ５０で、Ｈ９２９細胞の表面上に発現される配列番号２８５に結合する。本発明の実施形態は、配列番号２８５のアミノ酸１〜２０（境界値を含む）を含む中和決定基に結合する単離ヒトモノクローナルＩｇＧ１抗体を含み、該抗体は、実施例１１に記載されるＦＡＣＳアッセイにおいて、約１．２ｎＭのＥＣ５０で、Ｈ９２９細胞の表面上に発現される配列番号２８５に結合する。本発明の好ましい実施形態は、配列番号２８５のアミノ酸１〜１１（境界値を含む）を含む中和決定基に結合する単離ヒトモノクローナルＩｇＧ１抗体を含み、該抗体は、実施例１１に記載されるＦＡＣＳアッセイにおいて、約１．２ｎＭのＥＣ５０で、Ｈ９２９細胞の表面上に発現される配列番号２８５に結合する。
【００４１】
本発明の実施形態は、配列番号２８５のアミノ酸１〜２０（境界値を含む）を含む中和決定基に結合する単離モノクローナル抗体を含み、該抗体は、１ｎＭ以下のＫｄで配列番号２８５に結合し、該抗体は、１０ｎＭ以下のＥＣ５０で、Ｈ９２９細胞の表面上に発現される配列番号２８５に結合する。本発明の好ましい実施形態は、配列番号２８５のアミノ酸１〜１１（境界値を含む）を含む中和決定基に結合する単離モノクローナル抗体を含み、該抗体は、１ｎＭ以下のＫｄで配列番号２８５に結合し、該抗体は、１０ｎＭ以下のＥＣ５０で、Ｈ９２９細胞の表面上に発現される配列番号２８５に結合する。本発明の実施形態は、配列番号２８５のアミノ酸１〜２０（境界値を含む）を含む中和決定基に結合する単離ヒトモノクローナル抗体を含み、該抗体は、１ｎＭ以下のＫｄで配列番号２８５に結合し、該抗体は、１０ｎＭ以下のＥＣ５０で、Ｈ９２９細胞の表面上に発現される配列番号２８５に結合する。本発明の好ましい実施形態は、配列番号２８５のアミノ酸１〜１１（境界値を含む）を含む中和決定基に結合する単離ヒトモノクローナル抗体を含み、該抗体は、１ｎＭ以下のＫｄで配列番号２８５に結合し、該抗体は、１０ｎＭ以下のＥＣ５０で、Ｈ９２９細胞の表面上に発現される配列番号２８５に結合する。本発明の実施形態は、配列番号２８５のアミノ酸１〜２０（境界値を含む）を含む中和決定基に結合する単離ヒトモノクローナルＩｇＧ抗体を含み、該抗体は、１ｎＭ以下のＫｄで配列番号２８５に結合し、該抗体は、１０ｎＭ以下のＥＣ５０で、Ｈ９２９細胞の表面上に発現される配列番号２８５に結合する。本発明の好ましい実施形態は、配列番号２８５のアミノ酸１〜１１（境界値を含む）を含む中和決定基に結合する単離ヒトモノクローナルＩｇＧ抗体を含み、該抗体は、１ｎＭ以下のＫｄで配列番号２８５に結合し、該抗体は、１０ｎＭ以下のＥＣ５０で、Ｈ９２９細胞の表面上に発現される配列番号２８５に結合する。本発明の実施形態は、配列番号２８５のアミノ酸１〜２０（境界値を含む）を含む中和決定基に結合する単離ヒトモノクローナルＩｇＧ１抗体を含み、該抗体は、１ｎＭ以下のＫｄで配列番号２８５に結合し、該抗体は、１０ｎＭ以下のＥＣ５０で、Ｈ９２９細胞の表面上に発現される配列番号２８５に結合する。本発明の好ましい実施形態は、配列番号２８５のアミノ酸１〜１１（境界値を含む）を含む中和決定基に結合する単離ヒトモノクローナルＩｇＧ１抗体を含み、該抗体は、１ｎＭ以下のＫｄで配列番号２８５に結合し、該抗体は、１０ｎＭ以下のＥＣ５０で、Ｈ９２９細胞の表面上に発現される配列番号２８５に結合する。
【００４２】
本発明の実施形態は、配列番号２８５のアミノ酸１〜２０（境界値を含む）を含む中和決定基に結合する単離モノクローナル抗体を含み、該抗体は、実施例１６に記載されるバイオセンサーアッセイで測定すると、約０．１６ｎＭのＫｄで配列番号３５２に結合し、該抗体は、実施例１１に記載されるＦＡＣＳアッセイにおいて、約１．２ｎＭのＥＣ５０で、Ｈ９２９細胞の表面上に発現される配列番号２８５に結合する。本発明の好ましい実施形態は、配列番号２８５のアミノ酸１〜１１（境界値を含む）を含む中和決定基に結合する単離モノクローナル抗体を含み、該抗体は、実施例１６に記載されるバイオセンサーアッセイで測定すると、約０．１６ｎＭのＫｄで配列番号３５２に結合し、該抗体は、実施例１１に記載されるＦＡＣＳアッセイにおいて、約１．２ｎＭのＥＣ５０で、Ｈ９２９細胞の表面上に発現される配列番号２８５に結合する。本発明の実施形態は、配列番号２８５のアミノ酸１〜２０（境界値を含む）を含む中和決定基に結合する単離ヒトモノクローナル抗体を含み、該抗体は、実施例１６に記載されるバイオセンサーアッセイで測定すると、約０．１６ｎＭのＫｄで配列番号３５２に結合し、該抗体は、実施例１１に記載されるＦＡＣＳアッセイにおいて、約１．２ｎＭのＥＣ５０で、Ｈ９２９細胞の表面上に発現される配列番号２８５に結合する。本発明の好ましい実施形態は、配列番号２８５のアミノ酸１〜１１（境界値を含む）を含む中和決定基に結合する単離ヒトモノクローナル抗体を含み、該抗体は、実施例１６に記載されるバイオセンサーアッセイで測定すると、約０．１６ｎＭのＫｄで配列番号３５２に結合し、該抗体は、実施例１１に記載されるＦＡＣＳアッセイにおいて、約１．２ｎＭのＥＣ５０で、Ｈ９２９細胞の表面上に発現される配列番号２８５に結合する。本発明の実施形態は、配列番号２８５のアミノ酸１〜２０（境界値を含む）を含む中和決定基に結合する単離ヒトモノクローナルＩｇＧ抗体を含み、該抗体は、実施例１６に記載されるバイオセンサーアッセイで測定すると、約０．１６ｎＭのＫｄで配列番号３５２に結合し、該抗体は、実施例１１に記載されるＦＡＣＳアッセイにおいて、約１．２ｎＭのＥＣ５０で、Ｈ９２９細胞の表面上に発現される配列番号２８５に結合する。本発明の好ましい実施形態は、配列番号２８５のアミノ酸１〜１１（境界値を含む）を含む中和決定基に結合する単離ヒトモノクローナルＩｇＧ抗体を含み、該抗体は、実施例１６に記載されるバイオセンサーアッセイで測定すると、約０．１６ｎＭのＫｄで配列番号３５２に結合し、該抗体は、実施例１１に記載されるＦＡＣＳアッセイにおいて、約１．２ｎＭのＥＣ５０で、Ｈ９２９細胞の表面上に発現される配列番号２８５に結合する。本発明の実施形態は、配列番号２８５のアミノ酸１〜２０（境界値を含む）を含む中和決定基に結合する単離ヒトモノクローナルＩｇＧ１抗体を含み、該抗体は、実施例１６に記載されるバイオセンサーアッセイで測定すると、約０．１６ｎＭのＫｄで配列番号３５２に結合し、該抗体は、実施例１１に記載されるＦＡＣＳアッセイにおいて、約１．２ｎＭのＥＣ５０で、Ｈ９２９細胞の表面上に発現される配列番号２８５に結合する。本発明の好ましい実施形態は、配列番号２８５のアミノ酸１〜１１（境界値を含む）を含む中和決定基に結合する単離ヒトモノクローナルＩｇＧ１抗体を含み、該抗体は、実施例１６に記載されるバイオセンサーアッセイで測定すると、約０．１６ｎＭのＫｄで配列番号３５２に結合し、該抗体は、実施例１１に記載されるＦＡＣＳアッセイにおいて、約１．２ｎＭのＥＣ５０で、Ｈ９２９細胞の表面上に発現される配列番号２８５に結合する。
【００４３】
本発明の態様は、以下のもの等の実施形態を含むが、これらに限定されない。実施形態１：単離抗体またはそのＢＣＭＡ結合フラグメントであって、Ａｂ−１の６つのＣＤＲを含む抗体、Ａｂ−２の６つのＣＤＲを含む抗体、Ａｂ−３の６つのＣＤＲを含む抗体、Ａｂ−４の６つのＣＤＲを含む抗体、Ａｂ−５の６つのＣＤＲを含む抗体、Ａｂ−６の６つのＣＤＲを含む抗体、Ａｂ−７の６つのＣＤＲを含む抗体、Ａｂ−８の６つのＣＤＲを含む抗体、Ａｂ−９の６つのＣＤＲを含む抗体、Ａｂ−１０の６つのＣＤＲを含む抗体、Ａｂ−１１の６つのＣＤＲを含む抗体、Ａｂ−１２の６つのＣＤＲを含む抗体、Ａｂ−１３の６つのＣＤＲを含む抗体、Ａｂ−１４の６つのＣＤＲを含む抗体、Ａｂ−１５の６つのＣＤＲを含む抗体、Ａｂ−１６の６つのＣＤＲを含む抗体、Ａｂ−１７の６つのＣＤＲを含む抗体、Ａｂ−１８の６つのＣＤＲを含む抗体、Ａｂ−１９の６つのＣＤＲを含む抗体、Ａｂ−２０の６つのＣＤＲを含む抗体、Ａｂ−２１の６つのＣＤＲを含む抗体、Ａｂ−２２の６つのＣＤＲを含む抗体、Ａｂ−２３の６つのＣＤＲを含む抗体、Ａｂ−２４の６つのＣＤＲを含む抗体、Ａｂ−２５の６つのＣＤＲを含む抗体、Ａｂ−２６の６つのＣＤＲを含む抗体、Ａｂ−２７の６つのＣＤＲを含む抗体、Ａｂ−２８の６つのＣＤＲを含む抗体、Ａｂ−２９の６つのＣＤＲを含む抗体、Ａｂ−３０の６つのＣＤＲを含む抗体、Ａｂ−３１の６つのＣＤＲを含む抗体、Ａｂ−３２の６つのＣＤＲを含む抗体、Ａｂ−３３の６つのＣＤＲを含む抗体、Ａｂ−３４の６つのＣＤＲを含む抗体、Ａｂ−３５の６つのＣＤＲを含む抗体、Ａｂ−３６の６つのＣＤＲを含む抗体、Ａｂ−３７の６つのＣＤＲを含む抗体、及びＡｂ−３８の６つのＣＤＲを含む抗体からなる群から選択される、単離抗体またはそのＢＣＭＡ結合フラグメント。実施形態２：該抗体またはフラグメントは、Ａｂ−１の６つのＣＤＲを含む抗体、Ａｂ−２の６つのＣＤＲを含む抗体、及びＡｂ−３の６つのＣＤＲを含む抗体からなる群から選択される、実施形態１に記載の抗体またはフラグメント。実施形態３：該抗体またはフラグメントは、Ａｂ−１の６つのＣＤＲを含む抗体である、実施形態１または２に記載の抗体またはフラグメント。実施形態４：該Ａｂ−１のＣＤＲは、配列番号４を含むＶｈ−ＣＤＲ１、配列番号５を含むＶｈ−ＣＤＲ２、配列番号６を含むＶｈ−ＣＤＲ３、配列番号１０６を含むＶｌ−ＣＤＲ１、配列番号１０７を含むＶｌ−ＣＤＲ２、及び配列番号１０８を含むＶｌ−ＣＤＲ３を含み、該Ａｂ−２のＣＤＲは、配列番号１０を含むＶｈ−ＣＤＲ１、配列番号１１を含むＶｈ−ＣＤＲ２、配列番号１２を含むＶｈ−ＣＤＲ３、配列番号１１２を含むＶｌ−ＣＤＲ１、配列番号１１３を含むＶｌ−ＣＤＲ２、及び配列番号１１４を含むＶｌ−ＣＤＲ３を含み、該Ａｂ−３のＣＤＲは、配列番号１６を含むＶｈ−ＣＤＲ１、配列番号１７を含むＶｈ−ＣＤＲ２、配列番号１８を含むＶｈ−ＣＤＲ３、配列番号１１８を含むＶｌ−ＣＤＲ１、配列番号１１９を含むＶｌ−ＣＤＲ２、及び配列番号１２０を含むＶｌ−ＣＤＲ３を含み、該Ａｂ−４のＣＤＲは、配列番号２２を含むＶｈ−ＣＤＲ１、配列番号２３を含むＶｈ−ＣＤＲ２、配列番号２４を含むＶｈ−ＣＤＲ３、配列番号１２４を含むＶｌ−ＣＤＲ１、配列番号１２５を含むＶｌ−ＣＤＲ２、及び配列番号１２６を含むＶｌ−ＣＤＲ３を含み、該Ａｂ−５のＣＤＲは、配列番号２８を含むＶｈ−ＣＤＲ１、配列番号２９を含むＶｈ−ＣＤＲ２、配列番号３０を含むＶｈ−ＣＤＲ３、配列番号１３０を含むＶｌ−ＣＤＲ１、配列番号１３１を含むＶｌ−ＣＤＲ２、及び配列番号１３２を含むＶｌ−ＣＤＲ３を含み、該Ａｂ−６のＣＤＲは、配列番号３４を含むＶｈ−ＣＤＲ１、配列番号３５を含むＶｈ−ＣＤＲ２、配列番号３６を含むＶｈ−ＣＤＲ３、配列番号１３６を含むＶｌ−ＣＤＲ１、配列番号１３７を含むＶｌ−ＣＤＲ２、及び配列番号１３８を含むＶｌ−ＣＤＲ３を含み、該Ａｂ−７のＣＤＲは、配列番号４０を含むＶｈ−ＣＤＲ１、配列番号４１を含むＶｈ−ＣＤＲ２、配列番号４２を含むＶｈ−ＣＤＲ３、配列番号１４２を含むＶｌ−ＣＤＲ１、配列番号１４３を含むＶｌ−ＣＤＲ２、及び配列番号１４４を含むＶｌ−ＣＤＲ３を含み、該Ａｂ−８のＣＤＲは、配列番号４６を含むＶｈ−ＣＤＲ１、配列番号４７を含むＶｈ−ＣＤＲ２、配列番号４８を含むＶｈ−ＣＤＲ３、配列番号１４８を含むＶｌ−ＣＤＲ１、配列番号１４９を含むＶｌ−ＣＤＲ２、及び配列番号１５０を含むＶｌ−ＣＤＲ３を含み、該Ａｂ−９のＣＤＲは、配列番号５２を含むＶｈ−ＣＤＲ１、配列番号５３を含むＶｈ−ＣＤＲ２、配列番号５４を含むＶｈ−ＣＤＲ３、配列番号１５４を含むＶｌ−ＣＤＲ１、配列番号１５５を含むＶｌ−ＣＤＲ２、及び配列番号１５６を含むＶｌ−ＣＤＲ３を含み、該Ａｂ−１０のＣＤＲは、配列番号５８を含むＶｈ−ＣＤＲ１、配列番号５９を含むＶｈ−ＣＤＲ２、配列番号６０を含むＶｈ−ＣＤＲ３、配列番号１６０を含むＶｌ−ＣＤＲ１、配列番号１６１を含むＶｌ−ＣＤＲ２、及び配列番号１６２を含むＶｌ−ＣＤＲ３を含み、該Ａｂ−１１のＣＤＲは、配列番号６４を含むＶｈ−ＣＤＲ１、配列番号６５を含むＶｈ−ＣＤＲ２、配列番号６６を含むＶｈ−ＣＤＲ３、配列番号１６６を含むＶｌ−ＣＤＲ１、配列番号１６７を含むＶｌ−ＣＤＲ２、及び配列番号１６８を含むＶｌ−ＣＤＲ３を含み、該Ａｂ−１２のＣＤＲは、配列番号７０を含むＶｈ−ＣＤＲ１、配列番号７１を含むＶｈ−ＣＤＲ２、配列番号７２を含むＶｈ−ＣＤＲ３、配列番号１７２を含むＶｌ−ＣＤＲ１、配列番号１７３を含むＶｌ−ＣＤＲ２、及び配列番号１７４を含むＶｌ−ＣＤＲ３を含み、該Ａｂ−１３のＣＤＲは、配列番号７６を含むＶｈ−ＣＤＲ１、配列番号７７を含むＶｈ−ＣＤＲ２、配列番号７８を含むＶｈ−ＣＤＲ３、配列番号１７８を含むＶｌ−ＣＤＲ１、配列番号１７９を含むＶｌ−ＣＤＲ２、及び配列番号１８０を含むＶｌ−ＣＤＲ３を含み、該Ａｂ−１４のＣＤＲは、配列番号８２を含むＶｈ−ＣＤＲ１、配列番号８３を含むＶｈ−ＣＤＲ２、配列番号８４を含むＶｈ−ＣＤＲ３、配列番号１８４を含むＶｌ−ＣＤＲ１、配列番号１８５を含むＶｌ−ＣＤＲ２、及び配列番号１８６を含むＶｌ−ＣＤＲ３を含み、該Ａｂ−１５のＣＤＲは、配列番号８８を含むＶｈ−ＣＤＲ１、配列番号８９を含むＶｈ−ＣＤＲ２、配列番号９０を含むＶｈ−ＣＤＲ３、配列番号１９０を含むＶｌ−ＣＤＲ１、配列番号１９１を含むＶｌ−ＣＤＲ２、及び配列番号１９２を含むＶｌ−ＣＤＲ３を含み、該Ａｂ−１６のＣＤＲは、配列番号９４を含むＶｈ−ＣＤＲ１、配列番号９５を含むＶｈ−ＣＤＲ２、配列番号９６を含むＶｈ−ＣＤＲ３、配列番号１９６を含むＶｌ−ＣＤＲ１、配列番号１９７を含むＶｌ−ＣＤＲ２、及び配列番号１９８を含むＶｌ−ＣＤＲ３を含み、該Ａｂ−１７のＣＤＲは、配列番号１００を含むＶｈ−ＣＤＲ１、配列番号１０１を含むＶｈ−ＣＤＲ２、配列番号１０２を含むＶｈ−ＣＤＲ３、配列番号２０２を含むＶｌ−ＣＤＲ１、配列番号２０３を含むＶｌ−ＣＤＲ２、及び配列番号２０４を含むＶｌ−ＣＤＲ３を含む、実施形態１〜３に記載の抗体またはフラグメント。実施形態５：該Ａｂ−１のＣＤＲは、配列番号４を含むＶｈ−ＣＤＲ１、配列番号５を含むＶｈ−ＣＤＲ２、配列番号６を含むＶｈ−ＣＤＲ３、配列番号１０６を含むＶｌ−ＣＤＲ１、配列番号１０７を含むＶｌ−ＣＤＲ２、配列番号１０８を含むＶｌ−ＣＤＲ３を含み、該Ａｂ−２のＣＤＲは、配列番号１０を含むＶｈ−ＣＤＲ１、配列番号１１を含むＶｈ−ＣＤＲ２、配列番号１２を含むＶｈ−ＣＤＲ３、配列番号１１２を含むＶｌ−ＣＤＲ１、配列番号１１３を含むＶｌ−ＣＤＲ２、及び配列番号１１４を含むＶｌ−ＣＤＲ３を含み、該Ａｂ−３のＣＤＲは、配列番号１６を含むＶｈ−ＣＤＲ１、配列番号１７を含むＶｈ−ＣＤＲ２、配列番号１８を含むＶｈ−ＣＤＲ３、配列番号１１８を含むＶｌ−ＣＤＲ１、配列番号１１９を含むＶｌ−ＣＤＲ２、及び配列番号１２０を含むＶｌ−ＣＤＲ３を含む、実施形態１〜４に記載の抗体またはフラグメント。実施形態６：該Ａｂ−１のＣＤＲは、配列番号４を含むＶｈ−ＣＤＲ１、配列番号５を含むＶｈ−ＣＤＲ２、配列番号６を含むＶｈ−ＣＤＲ３、配列番号１０６を含むＶｌ−ＣＤＲ１、配列番号１０７を含むＶｌ−ＣＤＲ２、及び配列番号１０８を含むＶｌ−ＣＤＲ３を含む、実施形態１〜５に記載の抗体またはフラグメント。実施形態７：該抗体またはフラグメントは、配列番号２４０を含むＡｂ−１Ｖｌドメイン及び配列番号２０６を含むＡｂ−１Ｖｈドメインを含み、該抗体またはフラグメントは、配列番号２４２を含むＡｂ−２Ｖｌドメイン及び配列番号２０８を含むＡｂ−２Ｖｈドメインを含み、該抗体またはフラグメントは、配列番号２４４を含むＡｂ−３Ｖｌドメイン及び配列番号２１０を含むＡｂ−３Ｖｈドメインを含み、該抗体またはフラグメントは、配列番号２４６を含むＡｂ−４Ｖｌドメイン及び配列番号２１２を含むＡｂ−４Ｖｈドメインを含み、該抗体またはフラグメントは、配列番号２４８を含むＡｂ−５Ｖｌドメイン及び配列番号２１４を含むＡｂ−５Ｖｈドメインを含み、該抗体またはフラグメントは、配列番号２５０を含むＡｂ−６Ｖｌドメイン及び配列番号２１６を含むＡｂ−６Ｖｈドメインを含み、該抗体またはフラグメントは、配列番号２５２を含むＡｂ−７Ｖｌドメイン及び配列番号２１８を含むＡｂ−７Ｖｈドメインを含み、該抗体またはフラグメントは、配列番号２５４を含むＡｂ−８Ｖｌドメイン及び配列番号２２０を含むＡｂ−８Ｖｈドメインを含み、該抗体またはフラグメントは、配列番号２５６を含むＡｂ−９Ｖｌドメイン及び配列番号２２２を含むＡｂ−９Ｖｈドメインを含み、該抗体またはフラグメントは、配列番号２５８を含むＡｂ−１０Ｖｌドメイン及び配列番号２２４を含むＡｂ−１０Ｖｈドメインを含み、該抗体またはフラグメントは、配列番号２６０を含むＡｂ−１１Ｖｌドメイン及び配列番号２２６を含むＡｂ−１１Ｖｈドメインを含み、該抗体またはフラグメントは、配列番号２６２を含むＡｂ−１２Ｖｌ及び配列番号２２８を含むＡｂ−１２Ｖｈドメインを含み、該抗体またはフラグメントは、配列番号２６４を含むＡｂ−１３Ｖｌドメイン及び配列番号２３０を含むＡｂ−１３Ｖｈドメインを含み、該抗体またはフラグメントは、配列番号２６６を含むＡｂ−１４Ｖｌドメイン及び配列番号２３２を含むＡｂ−１４Ｖｈドメインを含み、該抗体またはフラグメントは、配列番号２６８を含むＡｂ−１５Ｖｌドメイン及び配列番号２３４を含むＡｂ−１５Ｖｈドメインを含み、該抗体またはフラグメントは、配列番号２７０を含むＡｂ−１６Ｖｌドメイン及び配列番号２３６を含むＡｂ−１６Ｖｈドメインを含み、該抗体またはフラグメントは、配列番号２７２を含むＡｂ−１７Ｖｌドメイン及び配列番号２３８を含むＡｂ−１７Ｖｈドメイン）ドメインを含む、実施形態１〜６に記載の抗体またはフラグメント。実施形態８：該抗体またはフラグメントは、配列番号２４０を含むＡｂ−１Ｖｌドメイン及び配列番号２０６を含むＡｂ−１Ｖｈドメインを含み、該抗体またはフラグメントは、配列番号２４２を含むＡｂ−２Ｖｌドメイン及び配列番号２０８を含むＡｂ−２Ｖｈドメインを含み、該抗体またはフラグメントは、配列番号２４４を含むＡｂ−３Ｖｌドメイン及び配列番号２１０を含むＡｂ−３Ｖｈドメインを含む、実施形態１〜７に記載の抗体またはフラグメント。実施形態９：該抗体またはフラグメントは、配列番号２４０を含むＡｂ−１Ｖｌドメイン及び配列番号２０６を含むＡｂ−１Ｖｈドメインを含む、実施形態１〜８に記載の抗体またはフラグメント。実施形態１０：該抗体またはフラグメントは、配列番号２８０を含むＡｂ−１軽鎖及び配列番号２７４を含むＡｂ−１重鎖を含み、該抗体またはフラグメントは、配列番号２８２を含むＡｂ−２軽鎖及び配列番号２７６を含むＡｂ−２重鎖を含み、該抗体またはフラグメントは、配列番号２８４を含むＡｂ−３軽鎖及び配列番号２７８を含むＡｂ−３重鎖を含み、該抗体またはフラグメントは、配列
番号２８０を含む２つのＡｂ−１軽鎖及び配列番号２７４を含む２つのＡｂ−１重鎖を含み、該抗体またはフラグメントは、配列番号２８２を含む２つのＡｂ−２軽鎖及び配列番号２７６を含む２つのＡｂ−２重鎖を含み、該抗体またはフラグメントは、配列番号２８４を含む２つのＡｂ−３軽鎖及び配列番号２７８を含む２つのＡｂ−３重鎖）を含む、実施形態１〜９に記載の抗体またはフラグメント。実施形態１１：該抗体またはフラグメントは、配列番号２８０を含むＡｂ−１軽鎖及び配列番号２７４を含むＡｂ−１重鎖を含み、該抗体またはフラグメントは、配列番号２８０を含む２つのＡｂ−１軽鎖及び配列番号２７４を含む２つのＡｂ−１重鎖を含む、実施形態１〜１０に記載の抗体またはフラグメント。実施形態１２：該抗体またはフラグメントは、配列番号２８０を含む２つのＡｂ−１軽鎖及び配列番号２７４を含む２つのＡｂ−１重鎖を含む、実施形態１〜１１に記載の抗体またはフラグメント。実施形態１３：該抗体またはフラグメントは、ヒトのものである、実施形態１〜１２に記載の抗体またはフラグメント。実施形態１４：該抗体またはフラグメントは、ヒトモノクローナル抗体である、実施形態１〜１３に記載の抗体またはフラグメント。実施形態１５：該抗体またはフラグメントは、キメラモノクローナル抗体である、実施形態１〜１２に記載の抗体またはフラグメント。実施形態１６：該抗体またはフラグメントは、ヒトＢＣＭＡに特異的に結合する、実施形態１〜１５に記載の抗体またはフラグメント。実施形態１７：該抗体またはフラグメントは、ヒトＢＣＭＡに特異的に結合し、カニクイザルＢＣＭＡに交差反応する、実施形態１〜１６に記載の抗体またはフラグメント。実施形態１８：該抗体またはフラグメントは、ＴＡＣＩまたはＢＡＦＦ−Ｒに特異的に結合しない、実施形態１〜１７に記載の抗体またはフラグメント。実施形態１９：該抗体またはフラグメントは、ヒト骨髄腫細胞の表面上のＢＣＭＡに結合する、実施形態１〜１８に記載の抗体またはフラグメント。実施形態２０：該抗体またはフラグメントは、ヒト多発性骨髄腫細胞の表面上のＢＣＭＡに結合する、実施形態１〜１９に記載の抗体またはフラグメント。実施形態２１：該抗体またはフラグメントは、ヒト細胞の表面上のＢＣＭＡに結合し、該細胞に内部移行される、実施形態１〜２０に記載の抗体またはフラグメント。実施形態２２：該抗体またはフラグメントは、リンカーをさらに含む、実施形態１〜２１に記載の抗体またはフラグメント。実施形態２３：該抗体またはフラグメントは、薬物または化学療法剤をさらに含む、実施形態１〜２２に記載の抗体またはフラグメント。実施形態２４：該抗体またはフラグメントは、６−マレイミドカプロイル、マレイミドプロパノイル、バリン−シトルリン、アラニン−フェニルアラニン、ｐ−アミノベンジルオキシカルボニル、Ｍａｌ−ｄＰＥＧ４−ＮＨＳ、Ｎ−スクシンイミジル４−（２−ピリジルチオ）ペンタノエート（「ＳＰＰ」）、Ｎ−スクシンイミジル４−（Ｎ−マレイミドメチル）シクロヘキサン−１カルボキシレート（「ＳＭＣＣ」または「ＭＣＣ」）、及びＮ−スクシンイミジル（４−ヨード−アセチル）アミノベンゾエート（「ＳＩＡＢ」）からなる群から選択されるリンカーをさらに含む、実施形態１〜２３に記載の抗体またはフラグメント。実施形態２５：該抗体またはフラグメントは、リンカーをさらに含み、該リンカーは、Ｎ−スクシンイミジル４−（Ｎ−マレイミドメチル）シクロヘキサン−１カルボキシレート（「ＳＭＣＣ」または「ＭＣＣ」）である、実施形態１〜２４に記載の抗体またはフラグメント。実施形態２６：該抗体またはフラグメントは、チオテパ及びシクロホスファミド（ＣＹＴＯＸＡＮ（商標））；スルホン酸アルキル、例えば、ブスルファン、インプロスルファン、及びピポスルファン；アジリジン、例えば、ベンゾドーパ（ｂｅｎｚｏｄｏｐａ）、カルボコン、メツレドーパ（ｍｅｔｕｒｅｄｏｐａ）、及びウレドーパ（ｕｒｅｄｏｐａ）；エチレンイミン及びメチラメラミン（ｍｅｔｈｙｌａｍｅｌａｍｉｎｅ）（アルトレタミン、トリエチレンメラミン、トリエチレンホスホラミド（ｔｒｉｅｔｙｌｅｎｅｐｈｏｓｐｈｏｒａｍｉｄｅ）、トリエチレンチオホスファオラミド（ｔｒｉｅｔｈｙｌｅｎｅｔｈｉｏｐｈｏｓｐｈａｏｒａｍｉｄｅ）、及びトリメチローロメラミン（ｔｒｉｍｅｔｈｙｌｏｌｏｍｅｌａｍｉｎｅ）を含む）；アセトゲニン（特にブラタシン及びブラタシノン）；カンプトテシン（合成類似体トポテカンを含む）；ブリオスタチン；カリスタチン（ｃａｌｌｙｓｔａｔｉｎ）；ＣＣ−１０６５（そのアゾゼレシン、カルゼレシン、及びビゼレシン合成類似体を含む）；クリプトフィシン（特にクリプトフィシン１及びクリプトフィシン８）；ドラスタチン；デュオカルマイシン（合成類似体ＫＷ−２１８９及びＣＢＩ−ＴＭＩを含む）；エリュテロビン；パンクラチスタチン（ｐａｎｃｒａｔｉｓｔａｔｉｎ）；サルコジクチイン；スポンジスタチン（ｓｐｏｎｇｉｓｔａｔｉｎ）；ナイトロジェンマスタード、例えば、クロラムブシル、クロマファジン（ｃｈｌｏｍａｐｈａｚｉｎｅ）、コロホスファミド（ｃｈｏｌｏｐｈｏｓｐｈａｍｉｄｅ）、エストラムスチン、イホスファミド、メクロレタミン、メクロレタミンオキシド塩酸塩（ｍｅｃｈｌｏｒｅｔｈａｍｉｎｅ  ｏｘｉｄｅ  ｈｙｄｒｏｃｈｌｏｒｉｄｅ）、メルファラン、ノベムビシン（ｎｏｖｅｍｂｉｃｈｉｎ）、フェネステリン（ｐｈｅｎｅｓｔｅｒｉｎｅ）、プレドニムスチン、トロホスファミド、ウラシルマスタード；ニトロソ尿素（ｎｉｔｒｏｓｕｒｅａ）、例えば、カルムスチン、クロロゾトシン、フォテムスチン、ロムスチン、ニムスチン、ラニムスチン；抗生物質、例えば、エンジイン抗生物質（例えば、カリケアマイシン、特にカリケアマイシンγ１及びカリケアマイシンθＩ、例えばＡｎｇｅｗ  Ｃｈｅｍ．Ｉｎｔｌ．Ｅｄ．Ｅｎｇｌ．３３：１８３−１８６（１９９４）を参照されたい；ダイネミシン（ダイネミシンＡを含む）；エスペラミシン；ならびにネオカルジノスタチン発色団及び関連色素タンパク質エンジイン抗生物質発色団（ｃｈｒｏｍｏｍｏｐｈｏｒｅ））、アクラノマイシン、アクチノマイシン、オースラマイシン（ａｕｔｈｒａｍｙｃｉｎ）、アザセリン、ブレオマイシン、カクチノマイシン、カラビシン（ｃａｒａｂｉｃｉｎ）、カミノマイシン（ｃａｍｉｎｏｍｙｃｉｎ）、カルジノフィリン；クロモ��イシン、ダクチノマイシン、ダウノルビシン、デトルビシン（ｄｅｔｏｒｕｂｉｃｉｎ）、６−ジアゾ−５−オキソ−Ｌ−ノルロイシン、ドキソルビシン（モルホリノ−ドキソルビシン、シアノモルホリノ−ドキソルビシン、２−ピロリノ−ドキソルビシン、及びデオキシドキソルビシンを含む）、エピルビシン、エソルビシン（ｅｓｏｒｕｂｉｃｉｎ）、イダルビシン、マルセロマイシン、ナイトマイシン（ｎｉｔｏｍｙｃｉｎ）、ミコフェノール酸、ノガラマイシン、オリボマイシン、ペプロマイシン、ポトフィロマイシン（ｐｏｔｆｉｒｏｍｙｃｉｎ）、ピューロマイシン、ケラマイシン（ｑｕｅｌａｍｙｃｉｎ）、ロドルビシン（ｒｏｄｏｒｕｂｉｃｉｎ）、ストレプトニグリン、ストレプトゾシン、ツベルシジン、ウベニメクス、ジノスタチン、ゾルビシン；代謝拮抗薬、例えば、メトトレキサート、及び５−フルオロウラシル（５−ＦＵ）；葉酸類似体、例えば、デノプテリン、メトトレキサート、プテロプテリン、トリメトレキサート；プリン類似体、例えば、フルダラビン、６−メルカプトプリン、チアミプリン（ｔｈｉａｍｉｐｒｉｎｅ）、チオグアニン；ピリミジン類似体、例えば、アンシタビン、アザシチジン、６−アザウリジン、カルモフール、シタラビン、ジデオキシウリジン、ドキシフルリジン、エノシタビン、フロクスウリジン、５−ＦＵ；アンドロゲン、例えば、カルステロン、プロピオン酸ドロモスタノロン、エピチオスタノール、メピチオスタン、テストラクトン；抗副腎剤（ａｎｔｉ−ａｄｒｅｎａｌ）、例えば、アミノグルテチミド、ミトタン、トリロスタン；葉酸補液（ｆｏｌｉｃ  ａｃｉｄ  ｒｅｐｌｅｎｉｓｈｅｒ）、例えば、フロリン酸（ｆｒｏｌｉｎｉｃ  ａｃｉｄ）；アセグラトン；アルドホスファミドグリコシド（ａｌｄｏｐｈｏｓｐｈａｍｉｄｅ  ｇｌｙｃｏｓｉｄｅ）；アミノレブリン酸；アムサクリン；ベストラブシル（ｂｅｓｔｒａｂｕｃｉｌ）；ビスアントレン；エダトラキサート（ｅｄａｔｒａｘａｔｅ）；デフォファミン（ｄｅｆｏｆａｍｉｎｅ）；デメコルチン；ジアジクオン；エルホミチン（ｅｌｆｏｍｉｔｈｉｎｅ）；酢酸エリプチニウム；エポチロン；エトグルシド；硝酸ガリウム；ヒドロキシ尿素；レンチナン；ロニダミン；マイタンシノイド、例えば、マイタンシン、及びアンサマイトシン；ミトグアゾン；ミトキサントロン；モピダモール；ニトラクリン；ペントスタチン；フェナメット；ピラルビシン；ポドフィリン酸；２−エチルヒドラジド（２−ｅｔｈｙｌｈｙｄｒａｚｉｄｅ）；プロカルバジン；ＰＳＫ（登録商標）；ラゾキサン；リゾキシン；シゾフラン（ｓｉｚｏｆｕｒａｎ）；スピロゲルマニウム；テヌアゾン酸；トリアジクオン；２，２’，２’’−トリクロロトリエチルアミン；トリコテセン（特に、Ｔ−２毒素、ベラクリンＡ、ロリジンＡ、及びアングイジン）；ウレタン；ビンデシン；ダカルバジン；マンノムスチン；ミトブロニトール；ミトラクトール；ピポブロマン；ガシトシン（ｇａｃｙｔｏｓｉｎｅ）；アラビノシド（「Ａｒａ−Ｃ」）；シクロホスファミド；チオテパ；タキソイド、例えば、パクリタキセル（ＴＡＸＯＬ（商標）、Ｂｒｉｓｔｏｌ−Ｍｙｅｒｓ  Ｓｑｕｉｂｂ  Ｏｎｃｏｌｏｇｙ，Ｐｒｉｎｃ��ｔｏｎ，Ｎ．Ｊ．）及びドセタキセル（ＴＡＸＯＴＥＲＥ（登録商標）Ｒｈｏｎｅ−Ｐｏｕｌｅｎｃ  Ｒｏｒｅｒ，Ａｎｔｏｎｙ，Ｆｒａｎｃｅ）；クロラムブシル；ゲムシタビン；６−チオグアニン；メルカプトプリン；メトトレキサート；白金類似体、例えば、シスプラチン、及びカルボプラチン；ビンブラスチン；白金；エトポシド（ＶＰ−１６）；イホスファミド；マイトマイシンＣ；ミトキサントロン；ビンクリスチン；ビノレルビン；ナベルビン；ノバントロン；テニポシド；ダウノマイシン；アミノプテリン；キセロダ；イバンドロネート；ＣＰＴ−１１；トポイソメラーゼ阻害剤ＲＦＳ  ２０００；ジフルオロメチルオミチン（ｄｉｆｌｕｏｒｏｍｅｔｈｙｌｏｍｉｔｈｉｎｅ）（ＤＭＦＯ）；レチノイン酸；カペシタビン；タモキシフェン、ラロキシフェン、アロマターゼ阻害性４（５）−イミダゾール、４−ヒドロキシタモキシフェン、トリオキシフェン、ケオキシフェン、ＬＹ１１７０１８、オナプリストン、及びトレミフェン（Ｆａｒｅｓｔｏｎ）；ならびに抗アンドロゲン薬、例えば、フルタミド、ニルタミド、ビカルタミド、ロイプロリド、ゴセレリン、コルヒチン部位結合剤（Ｃｕｒａｃｉｎ）、コンブレタスタチン（ＡＶＥ８０６、コンブレタスタチンＡ−４プロドラッグ（ＣＡ４Ｐ）、Ｏｘｉ−４５０３）、クリプトフィシン（ＬＹ３５５７０３）、ディスコデルモリド、ドラスタチン、及び類似体（オーリスタチンＰＨＥ、ドラスタチン１０、ＩＬＸ−６５１、シンプロスタチン１、ＴＺＴ−１０２７）、エポチロン（ＢＭＳ−２４７５５０、ＢＭＳ−３１０７０５、ＥＰ０９０６、ＫＯＳ−８６２、ＺＫ−ＥＰＯ）、エリュテロビン、ＦＲ１８２８７７、ハリコンドリンＢ（Ｅ７３８９）、ハリミド（ｈａｌｉｍｉｄｅ）（ＮＰＩ−２３５２及びＮＰＩ−２３５８）、ヘミアステリン（ＨＴＩ−２８６）、ラウリマライド、マイタンシノイド（「ＤＭ１」、「ＤＭ３」、または「ＤＭ４」）（ビバツズマブメルタンシン（ｂｉｖａｔｕｚｕｍａｂ  ｍｅｒｔａｎｓｉｎｅ）、カンツズマブメルタンシン、ｈｕＮ９０１−ＤＭ１／ＢＢ−１０９０１ＴＡＰ、ＭＬＮ５９１ＤＭ１、Ｍｙ９−６−ＤＭ１、トラスツズマブ−ＤＭ１）、ＰＣ−ＳＰＥＳ、ペロルシドＡ、レスベラトロール、Ｓ−アリルメルカプトシステイン（ＳＡＭＣ）、スポンジスタチン、ビチレブアミド（ｖｉｔｉｌｅｖｕａｍｉｄｅ）、分子モーターキネシン（ＳＢ
−７１５９９２）、設計されたコルヒチン部位結合剤（Ａ−２８９０９９、Ａ−２９３６２０／Ａ−３１８３１５、ＡＢＴ−７５１／Ｅ７０１０、Ｄ−２４８５１／Ｄ−６４１３１、ＺＤ６１２６）、他の新規な紡錘体毒（２−メトキシエストラジオール（２−ＭＥ２）、ベズイミダゾールカルバメート（ｂｅｚｉｍｉｄａｚｏｌｅ  Ｃａｒｂａｍａｔｅ）（ＡＮＧ  ６００シリーズ、メベンダゾール）、ＣＰ２４８／ＣＰ４６１、ＨＭＮ−２１４、Ｒ４４０、ＳＤＸ−１０３、Ｔ６７／Ｔ６０７）からなる群から選択される、薬物または化学療法剤をさらに含む、実施形態１〜２５に記載の抗体またはフラグメント。実施形態２７：該抗体またはフラグメントは、マイタンシノイド（「ＤＭ１」、「ＤＭ３」、または「ＤＭ４」）からなる群から選択される、薬物または化学療法剤をさらに含む、実施形態１〜２６に記載の抗体またはフラグメント。実施形態２８：該抗体またはフラグメントは、ＤＭ１をさらに含む、実施形態１〜２７に記載の抗体またはフラグメント。実施形態２９：該抗体またはフラグメントは、抗体に対する薬物の比が１〜１０である、実施形態１〜２８に記載の抗体またはフラグメント。実施形態３０：該抗体またはフラグメントは、抗体に対する薬物の比が２〜５である、実施形態１〜２９に記載の抗体またはフラグメント。実施形態３１：単離ポリペプチドまたはそのＢＣＭＡ結合フラグメントであって、Ａｂ−１の６つのＣＤＲを含むポリペプチド、Ａｂ−２の６つのＣＤＲを含むポリペプチド、Ａｂ−３の６つのＣＤＲを含むポリペプチド、Ａｂ−４の６つのＣＤＲを含むポリペプチド、Ａｂ−５の６つのＣＤＲを含むポリペプチド、Ａｂ−６の６つのＣＤＲを含むポリペプチド、Ａｂ−７の６つのＣＤＲを含むポリペプチド、Ａｂ−８の６つのＣＤＲを含むポリペプチド、Ａｂ−９の６つのＣＤＲを含むポリペプチド、Ａｂ−１０の６つのＣＤＲを含むポリペプチド、Ａｂ−１１の６つのＣＤＲを含むポリペプチド、Ａｂ−１２の６つのＣＤＲを含むポリペプチド、Ａｂ−１３の６つのＣＤＲを含むポリペプチド、Ａｂ−１４の６つのＣＤＲを含むポリペプチド、Ａｂ−１５の６つのＣＤＲを含むポリペプチド、Ａｂ−１６の６つのＣＤＲを含むポリペプチド、Ａｂ−１７の６つのＣＤＲを含むポリペプチド、Ａｂ−１８の６つのＣＤＲを含むポリペプチド、Ａｂ−１９の６つのＣＤＲを含むポリペプチド、Ａｂ−２０の６つのＣＤＲを含むポリペプチド、Ａｂ−２１の６つのＣＤＲを含むポリペプチド、Ａｂ−２２の６つのＣＤＲを含むポリペプチド、Ａｂ−２３の６つのＣＤＲを含むポリペプチド、Ａｂ−２４の６つのＣＤＲを含むポリペプチド、Ａｂ−２５の６つのＣＤＲを含むポリペプチド、Ａｂ−２６の６つのＣＤＲを含むポリペプチド、Ａｂ−２７の６つのＣＤＲを含むポリペプチド、Ａｂ−２８の６つのＣＤＲを含むポリペプチド、Ａｂ−２９の６つのＣＤＲを含むポリペプチド、Ａｂ−３０の６つのＣＤＲを含むポリペプチド、Ａｂ−３１の６つのＣＤＲを含むポリペプチド、Ａｂ−３２の６つのＣＤＲを含むポリペプチド、Ａｂ−３３の６つのＣＤＲを含むポリペプチド、Ａｂ−３４の６つのＣＤＲを含むポリペプチド、Ａｂ−３５の６つのＣＤＲを含むポリペプチド、Ａｂ��３６の６つのＣＤＲを含むポリペプチド、Ａｂ−３７の６つのＣＤＲを含むポリペプチド、及びＡｂ−３８の６つのＣＤＲを含むポリペプチドからなる群から選択される、単離ポリペプチドまたはそのＢＣＭＡ結合フラグメント。実施形態３２：該ポリペプチドまたはフラグメントは、Ａｂ−１の６つのＣＤＲを含むポリペプチド、Ａｂ−２の６つのＣＤＲを含むポリペプチド、及びＡｂ−３の６つのＣＤＲを含むポリペプチドからなる群から選択される、実施形態３１に記載のポリペプチドまたはフラグメント。実施形態３３：該ポリペプチドまたはフラグメントは、Ａｂ−１の６つのＣＤＲを含むポリペプチドである、実施形態３１〜３２に記載のポリペプチドまたはフラグメント。実施形態３４：該ＣＤＲは、配列番号４を含むＶｈ−ＣＤＲ１、配列番号５を含むＶｈ−ＣＤＲ２、配列番号６を含むＶｈ−ＣＤＲ３、配列番号１０６を含むＶｌ−ＣＤＲ１、配列番号１０７を含むＶｌ−ＣＤＲ２、及び配列番号１０８を含むＶｌ−ＣＤＲ３を含み、該ＣＤＲは、配列番号１０を含むＶｈ−ＣＤＲ１、配列番号１１を含むＶｈ−ＣＤＲ２、配列番号１２を含むＶｈ−ＣＤＲ３、配列番号１１２を含むＶｌ−ＣＤＲ１、配列番号１１３を含むＶｌ−ＣＤＲ２、及び配列番号１１４を含むＶｌ−ＣＤＲ３を含み、該ＣＤＲは、配列番号１６を含むＶｈ−ＣＤＲ１、配列番号１７を含むＶｈ−ＣＤＲ２、配列番号１８を含むＶｈ−ＣＤＲ３、配列番号１１８を含むＶｌ−ＣＤＲ１、配列番号１１９を含むＶｌ−ＣＤＲ２、及び配列番号１２０を含むＶｌ−ＣＤＲ３を含み、該ＣＤＲは、配列番号２２を含むＶｈ−ＣＤＲ１、配列番号２３を含むＶｈ−ＣＤＲ２、配列番号２４を含むＶｈ−ＣＤＲ３、配列番号１２４を含むＶｌ−ＣＤＲ１、配列番号１２５を含むＶｌ−ＣＤＲ２、及び配列番号１２６を含むＶｌ−ＣＤＲ３を含み、該ＣＤＲは、配列番号２８を含むＶｈ−ＣＤＲ１、配列番号２９を含むＶｈ−ＣＤＲ２、配列番号３０を含むＶｈ−ＣＤＲ３、配列番号１３０を含むＶｌ−ＣＤＲ１、配列番号１３１を含むＶｌ−ＣＤＲ２、及び配列番号１３２を含むＶｌ−ＣＤＲ３を含み、該ＣＤＲは、配列番号３４を含むＶｈ−ＣＤＲ１、配列番号３５を含むＶｈ−ＣＤＲ２、配列番号３６を含むＶｈ−ＣＤＲ３、配列番号１３６を含むＶｌ−ＣＤＲ１、配列番号１３７を含むＶｌ−ＣＤＲ２、及び配列番号１３８を含むＶｌ−ＣＤＲ３を含み、該ＣＤＲは、配列番号４０を含むＶｈ−ＣＤＲ１、配列番号４１を含むＶｈ−ＣＤＲ２、配列番号４２を含むＶｈ−ＣＤＲ３、配列番号１４２を含むＶｌ−ＣＤＲ１、配列番号１４３を含むＶｌ−ＣＤＲ２、及び配列番号１４４を含むＶｌ−ＣＤＲ３を含み、該ＣＤＲは、配列番号４６を含むＶｈ−ＣＤＲ１、配列番号４７を含むＶｈ−ＣＤＲ２、配列番号４８を含むＶｈ−ＣＤＲ３、配列番号１４８を含むＶｌ−ＣＤＲ１、配列番号１４９を含むＶｌ−ＣＤＲ２、及び配列番号１５０を含むＶｌ−ＣＤＲ３を含み、該ＣＤＲは、配列番号５２を含むＶｈ−ＣＤＲ１、配列番号５３を含むＶｈ−ＣＤＲ２、配列番号５４を含むＶｈ−ＣＤＲ３、配列番号１５４を含むＶｌ−ＣＤＲ１、配列番号１５５を含むＶｌ−ＣＤＲ２、及び配列番号１５６を含むＶｌ−ＣＤＲ３を含み、該ＣＤＲは、配��番号５８を含むＶｈ−ＣＤＲ１、配列番号５９を含むＶｈ−ＣＤＲ２、配列番号６０を含むＶｈ−ＣＤＲ３、配列番号１６０を含むＶｌ−ＣＤＲ１、配列番号１６１を含むＶｌ−ＣＤＲ２、及び配列番号１６２を含むＶｌ−ＣＤＲ３を含み、該ＣＤＲは、配列番号６４を含むＶｈ−ＣＤＲ１、配列番号６５を含むＶｈ−ＣＤＲ２、配列番号６６を含むＶｈ−ＣＤＲ３、配列番号１６６を含むＶｌ−ＣＤＲ１、配列番号１６７を含むＶｌ−ＣＤＲ２、及び配列番号１６８を含むＶｌ−ＣＤＲ３を含み、該ＣＤＲは、配列番号７０を含むＶｈ−ＣＤＲ１、配列番号７１を含むＶｈ−ＣＤＲ２、配列番号７２を含むＶｈ−ＣＤＲ３、配列番号１７２を含むＶｌ−ＣＤＲ１、配列番号１７３を含むＶｌ−ＣＤＲ２、及び配列番号１７４を含むＶｌ−ＣＤＲ３を含み、該ＣＤＲは、配列番号７６を含むＶｈ−ＣＤＲ１、配列番号７７を含むＶｈ−ＣＤＲ２、配列番号７８を含むＶｈ−ＣＤＲ３、配列番号１７８を含むＶｌ−ＣＤＲ１、配列番号１７９を含むＶｌ−ＣＤＲ２、及び配列番号１８０を含むＶｌ−ＣＤＲ３を含み、該ＣＤＲは、配列番号８２を含むＶｈ−ＣＤＲ１、配列番号８３を含むＶｈ−ＣＤＲ２、配列番号８４を含むＶｈ−ＣＤＲ３、配列番号１８４を含むＶｌ−ＣＤＲ１、配列番号１８５を含むＶｌ−ＣＤＲ２、及び配列番号１８６を含むＶｌ−ＣＤＲ３を含み、該ＣＤＲは、配列番号８８を含むＶｈ−ＣＤＲ１、配列番号８９を含むＶｈ−ＣＤＲ２、配列番号９０を含むＶｈ−ＣＤＲ３、配列番号１９０を含むＶｌ−ＣＤＲ１、配列番号１９１を含むＶｌ−ＣＤＲ２、及び配列番号１９２を含むＶｌ−ＣＤＲ３を含み、該ＣＤＲは、配列番号９４を含むＶｈ−ＣＤＲ１、配列番号９５を含むＶｈ−ＣＤＲ２、配列番号９６を含むＶｈ−ＣＤＲ３、配列番号１９６を含むＶｌ−ＣＤＲ１、配列番号１９７を含むＶｌ−ＣＤＲ２、及び配列番号１９８を含むＶｌ−ＣＤＲ３を含み、該ＣＤＲは、配列番号１００を含むＶｈ−ＣＤＲ１、配列番号１０１を含むＶｈ−ＣＤＲ２、配列番号１０２を含むＶｈ−ＣＤＲ３、配列番号２０２を含むＶｌ−ＣＤＲ１、配列番号２０３を含むＶｌ−ＣＤＲ２、及び配列番号２０４を含むＶｌ−ＣＤＲ３を含む、実施形態３１〜３３に記載のポリペプチドまたはフラグメント。実施形態３５：該ＣＤＲは、配列番号４を含むＶｈ−ＣＤＲ１、配列番号５を含むＶｈ−ＣＤＲ２、配列番号６を含むＶｈ−ＣＤＲ３、配列番号１０６を含むＶｌ−ＣＤＲ１、配列番号１０７を含むＶｌ−ＣＤＲ２、及び配列番号１０８を含むＶｌ−ＣＤＲ３を含み、該ＣＤＲは、配列番号１０を含むＶｈ−ＣＤＲ１、配列番号１１を含むＶｈ−ＣＤＲ２、配列番号１２を含むＶｈ−ＣＤＲ３、配列番号１１２を含むＶｌ−ＣＤＲ１、配列番号１１３を含むＶｌ−ＣＤＲ２、及び配列番号１１４を含むＶｌ−ＣＤＲ３を含み、該ＣＤＲは、配列番号１６を含むＶｈ−ＣＤＲ１、配列番号１７を含むＶｈ−ＣＤＲ２、配列番号１８を含むＶｈ−ＣＤＲ３、配列番号１１８を含むＶｌ−ＣＤＲ１、配列番号１１９を含むＶｌ−ＣＤＲ２、及び配列番号１２０を含むＶｌ−ＣＤＲ３を含む、実施形態３１〜３４に記載のポリペプチドまたはフラグメント。実施形態３６：該ＣＤＲは、配列番号４を含むＶｈ−ＣＤＲ１、配列��号５を含むＶｈ−ＣＤＲ２、配列番号６を含むＶｈ−ＣＤＲ３、配列番号１０６を含むＶｌ−ＣＤＲ１、配列番号１０７を含むＶｌ−ＣＤＲ２、及び配列番号１０８を含むＶｌ−ＣＤＲ３を含む、実施形態３１〜３５に記載のポリペプチドまたはフラグメント。実施形態３７：該ポリペプチドまたはフラグメントは、配列番号２４０を含むＶｌドメイン及び配列番号２０６を含むＶｈドメインを含み、該ポリペプチドまたはフラグメントは、配列番号２４２を含むＶｌドメイン及び配列番号２０８を含むＶｈドメインを含み、該ポリペプチドまたはフラグメントは、配列番号２４４を含むＶｌドメイン及び配列番号２１０を含むＶｈドメインを含み、該ポリペプチドまたはフラグメントは、配列番号２４６を含むＶｌドメイン及び配列番号２１２を含むＶｈドメインを含み、該ポリペプチドまたはフラグメントは、配列番号２４８を含むＶｌドメイン及び配列番号２１４を含むＶｈドメインを含み、該ポリペプチドまたはフラグメントは、配列番号２５０を含むＶｌドメイン及び配列番号２１６を含むＶｈドメインを含み、該ポリペプチドまたはフラグメントは、配列番号２５２を含むＶｌドメイン及び配列番号２１８を含むＶｈドメインを含み、該ポリペプチドまたはフラグメントは、配列番号２５４を含むＶｌドメイン及び配列番号２２０を含むＶｈドメインを含み、該ポリペプチドまたはフラグメントは、配列番号２５６を含むＶｌドメイン及び配列番号２２２を含むＶｈドメインを含み、該ポリペプチドまたはフラグメントは、配列番号２５８を含むＶｌドメイン及び配列番号２２４を含むＶｈドメインを含み、該ポリペプチドまたはフラグメントは、配列番号２６０を含むＶｌドメイン及び配列番号２２６を含むＶｈドメインを含み、該ポリペプチドまたはフラグメントは、配列番号２６２を含むＶｌ及び配列番号２２８を含むＶｈドメインを含み、該ポリペプチドまたはフラグメントは、配列番号２６４を含むＶｌドメイン及び配列番号２３０を含むＶｈドメインを含み、該ポリペプチドまたはフラグメントは、配列番号２６６を含むＶｌドメイン及び配列番号２３２を含むＶｈドメインを含み、該ポリペプチドまたはフラグメントは、配列番号２６８を含むＶｌドメイン及び配列番号２３４を含むＶｈドメインを含み、該ポリペプチドまたはフラグメントは、配列番号２７０を含むＶｌドメイン及び配列番号２３６を含むＶｈドメインを含み、該ポリペプチドまた
はフラグメントは、配列番号２７２を含むＶｌドメイン及び配列番号２３８を含むＶｈドメイン）ドメインを含む、実施形態３１〜３６に記載のポリペプチドまたはフラグメント。実施形態３８：該ポリペプチドまたはフラグメントは、配列番号２４０を含むＶｌドメイン及び配列番号２０６を含むＶｈドメインを含み、該ポリペプチドまたはフラグメントは、配列番号２４２を含むＶｌドメイン及び配列番号２０８を含むＶｈドメインを含み、該ポリペプチドまたはフラグメントは、配列番号２４４を含むＶｌドメイン及び配列番号２１０を含むＶｈドメインを含む、実施形態３１〜３７に記載のポリペプチドまたはフラグメント。実施形態３９：該ポリペプチドまたはフラグメントは、配列番号２４０を含むＶｌドメイン及び配列番号２０６を含むＶｈドメインを含む、実施形態３１〜３８に記載のポリペプチドまたはフラグメント。実施形態４０：該ポリペプチドまたはフラグメントは、配列番号２８０を含むＡｂ−１軽鎖及び配列番号２７４を含むＡｂ−１重鎖を含み、該ポリペプチドまたはフラグメントは、配列番号２８２を含むＡｂ−２軽鎖及び配列番号２７６を含むＡｂ−２重鎖を含み、該ポリペプチドまたはフラグメントは、配列番号２８４を含むＡｂ−３軽鎖及び配列番号２７８を含むＡｂ−３重鎖を含み、該ポリペプチドまたはフラグメントは、配列番号２８０を含む２つのＡｂ−１軽鎖及び配列番号２７４を含む２つのＡｂ−１重鎖を含み、該ポリペプチドまたはフラグメントは、配列番号２８２を含む２つのＡｂ−２軽鎖及び配列番号２７６を含む２つのＡｂ−２重鎖を含み、該ポリペプチドまたはフラグメントは、配列番号２８４を含む２つのＡｂ−３軽鎖及び配列番号２７８を含む２つのＡｂ−３重鎖）を含む、実施形態３１〜３９に記載のポリペプチドまたはフラグメント。実施形態４１：該ポリペプチドまたはフラグメントは、配列番号２８０を含むＡｂ−１軽鎖及び配列番号２７４を含むＡｂ−１重鎖を含み、該ポリペプチドまたはフラグメントは、配列番号２８０を含む２つのＡｂ−１軽鎖及び配列番号２７４を含む２つのＡｂ−１重鎖を含む、実施形態３１〜４０に記載のポリペプチドまたはフラグメント。実施形態４２：該ポリペプチドまたはフラグメントは、配列番号２８０を含む２つのＡｂ−１軽鎖及び配列番号２７４を含む２つのＡｂ−１重鎖を含む、実施形態３１〜４１に記載のポリペプチドまたはフラグメント。実施形態４３：該ポリペプチドまたはフラグメントは、ヒトＢＣＭＡに特異的に結合する、実施形態３１〜４２に記載のポリペプチドまたはフラグメント。実施形態４４：該ポリペプチドまたはフラグメントは、ヒトＢＣＭＡに特異的に結合し、カニクイザルＢＣＭＡに交差反応する、実施形態３１〜４３に記載のポリペプチドまたはフラグメント。実施形態４５：該ポリペプチドまたはフラグメントは、ＴＡＣＩまたはＢＡＦＦ−Ｒに特異的に結合しない、実施形態３１〜４４に記載のポリペプチドまたはフラグメント。実施形態４６：該ポリペプチドまたはフラグメントは、ヒト骨髄腫細胞の表面上のＢＣＭＡに結合する、実施形態３１〜４５に記載のポリペプチドまたはフラグメント。実施形態４７：該ポリペプチドまたはフラグメントは、ヒト多発性骨髄腫細胞の表面上のＢＣＭＡに結合する、実施形態３１〜４６に記載のポリペプチドまたはフラグメント。実施形態４８：該ポリペプチドまたはフラグメントは、ヒト細胞の表面上のＢＣＭＡに結合し、該細胞に内部移行される、実施形態３１〜４７に記載のポリペプチドまたはフラグメント。実施形態４９：該ポリペプチドまたはフラグメントは、リンカーをさらに含む、実施形態３１〜４８に記載のポリペプチドまたはフラグメント。実施形態５０：該ポリペプチドまたはフラグメントは、薬物または化学療法剤をさらに含む、実施形態３１〜４９に記載のポリペプチドまたはフラグメント。実施形態５１：該ポリペプチドまたはフラグメントは、６−マレイミドカプロイル、マレイミドプロパノイル、バリン−シトルリン、アラニン−フェニルアラニン、ｐ−アミノベンジルオキシカルボニル、Ｍａｌ−ｄＰＥＧ４−ＮＨＳ、Ｎ−スクシンイミジル４−（２−ピリジルチオ）ペンタノエート（「ＳＰＰ」）、Ｎ−スクシンイミジル４−（Ｎ−マレイミドメチル）シクロヘキサン−１カルボキシレート（「ＳＭＣＣ」または「ＭＣＣ」）、及びＮ−スクシンイミジル（４−ヨード−アセチル）アミノベンゾエート（「ＳＩＡＢ」）からなる群から選択されるリンカーをさらに含む、実施形態３１〜５０に記載のポリペプチドまたはフラグメント。実施形態５２：該ポリペプチドまたはフラグメントは、リンカーをさらに含み、該リンカーは、Ｎ−スクシンイミジル４−（Ｎ−マレイミドメチル）シクロヘキサン−１カルボキシレート（「ＳＭＣＣ」または「ＭＣＣ」）である、実施形態３１〜５１に記載のポリペプチドまたはフラグメント。実施形態５３：該ポリペプチドまたはフラグメントは、チオテパ及びシクロホスファミド（ＣＹＴＯＸＡＮ（商標））；スルホン酸アルキル、例えば、ブスルファン、インプロスルファン、及びピポスルファン；アジリジン、例えば、ベンゾドーパ、カルボコン、メツレドーパ、及びウレドーパ；エチレンイミン及びメチラメラミン（アルトレタミン、トリエチレンメラミン、トリエチレンホスホラミド、トリエチレンチオホスファオラミド、及びトリメチローロメラミンを含む）；アセトゲニン（特にブラタシン及びブラタシノン）；カンプトテシン（合成類似体トポテカンを含む）；ブリオスタチン；カリスタチン；ＣＣ−１０６５（そのアゾゼレシン、カルゼレシン、及びビゼレシン合成類似体を含む）；クリプトフィシン（特にクリプトフィシン１及びクリプトフィシン８）；ドラスタチン；デュオカルマイシン（合成類似体ＫＷ−２１８９及びＣＢＩ−ＴＭＩを含む）；エリュテロビン；パンクラチスタチン；サルコジクチイン；スポンジスタチン；ナイトロジェンマスタード、例えば、クロラムブシル、クロマファジン、コロホスファミド、エストラムスチン、イホスファミド、メクロレタミン、メクロレタミンオキシド塩酸塩、メルファラン、ノベムビシン、フェネステリン、プレドニムスチン、トロホスファミド、ウラシルマスタード；ニトロソ尿素、例えば、カルムスチン、クロロゾトシン、フォテムスチン、ロムスチン、ニムスチン、ラニムスチン；抗生物質、例えば、エンジイン抗生物質（例えば、カリケアマイシン、特にカリケアマイシンγ１及びカリケアマイシンθＩ��例えばＡｎｇｅｗ  Ｃｈｅｍ．Ｉｎｔｌ．Ｅｄ．Ｅｎｇｌ．３３：１８３−１８６（１９９４）を参照されたい；ダイネミシン（ダイネミシンＡを含む）；エスペラミシン；ならびにネオカルジノスタチン発色団及び関連色素タンパク質エンジイン抗生物質発色団）、アクラノマイシン、アクチノマイシン、オースラマイシン、アザセリン、ブレオマイシン、カクチノマイシン、カラビシン、カミノマイシン、カルジノフィリン；クロモマイシン、ダクチノマイシン、ダウノルビシン、デトルビシン、６−ジアゾ−５−オキソ−Ｌ−ノルロイシン、ドキソルビシン（モルホリノ−ドキソルビシン、シアノモルホリノ−ドキソルビシン、２−ピロリノ−ドキソルビシン、及びデオキシドキソルビシンを含む）、エピルビシン、エソルビシン、イダルビシン、マルセロマイシン、ナイトマイシン、ミコフェノール酸、ノガラマイシン、オリボマイシン、ペプロマイシン、ポトフィロマイシン、ピューロマイシン、ケラマイシン、ロドルビシン、ストレプトニグリン、ストレプトゾシン、ツベルシジン、ウベニメクス、ジノスタチン、ゾルビシン；代謝拮抗薬、例えば、メトトレキサート、及び５−フルオロウラシル（５−ＦＵ）；葉酸類似体、例えば、デノプテリン、メトトレキサート、プテロプテリン、トリメトレキサート；プリン類似体、例えば、フルダラビン、６−メルカプトプリン、チアミプリン、チオグアニン；ピリミジン類似体、例えば、アンシタビン、アザシチジン、６−アザウリジン、カルモフール、シタラビン、ジデオキシウリジン、ドキシフルリジン、エノシタビン、フロクスウリジン、５−ＦＵ；アンドロゲン、例えば、カルステロン、プロピオン酸ドロモスタノロン、エピチオスタノール、メピチオスタン、テストラクトン；抗副腎剤、例えば、アミノグルテチミド、ミトタン、トリロスタン；葉酸補液、例えば、フロリン酸；アセグラトン；アルドホスファミドグリコシド；アミノレブリン酸；アムサクリン；ベストラブシル；ビスアントレン；エダトラキサート；デフォファミン；デメコルチン；ジアジクオン；エルホミチン；酢酸エリプチニウム；エポチロン；エトグルシド；硝酸ガリウム；ヒドロキシ尿素；レンチナン；ロニダミン；マイタンシノイド、例えば、マイタンシン、及びアンサマイトシン；ミトグアゾン；ミトキサントロン；モピダモール；ニトラクリン；ペントスタチン；フェナメット；ピラルビシン；ポドフィリン酸；２−エチルヒドラジド；プロカルバジン；ＰＳＫ（登録商標）；ラゾキサン；リゾキシン；シゾフラン；スピロゲルマニウム；テヌアゾン酸；トリアジクオン；２，２’，２’’−トリクロロトリエチルアミン；トリコテセン（特に、Ｔ−２毒素、ベラクリンＡ、ロリジンＡ、及びアングイジン）；ウレタン；ビンデシン；ダカルバジン；マンノムスチン；ミトブロニトール；ミトラクトール；ピポブロマン；ガシトシン；アラビノシド（「Ａｒａ−Ｃ」）；シクロホスファミド；チオテパ；タキソイド、例えば、パクリタキセル（ＴＡＸＯＬ（商標）、Ｂｒｉｓｔｏｌ−Ｍｙｅｒｓ  Ｓｑｕｉｂｂ  Ｏｎｃｏｌｏｇｙ，Ｐｒｉｎｃｅｔｏｎ，Ｎ．Ｊ．）及びドセタキセル（ＴＡＸＯＴＥＲＥ（登録商標）Ｒｈｏｎｅ−Ｐｏｕｌｅｎｃ  Ｒｏｒｅｒ，Ａｎｔｏｎｙ，Ｆｒａｎｃｅ）；クロラムブシル；ゲムシタビン；６−チオグアニン；メルカプトプリン；メトトレキサート；白金類似体、例えば、シスプラチン、及びカルボプラチン；ビンブラスチン；白金；エトポシド（ＶＰ−１６）；イホスファミド；マイトマイシンＣ；ミトキサントロン；ビンクリスチン；ビノレルビン；ナベルビン；ノバントロン；テニポシド；ダウノマイシン；アミノプテリン；キセロダ；イバンドロネート；ＣＰＴ−１１；トポイソメラーゼ阻害剤ＲＦＳ  ２０００；ジフルオロメチルオミチン（ＤＭＦＯ）；レチノイン酸；カペシタビン；タモキシフェン、ラロキシフェン、アロマターゼ阻害性４（５）−イミダゾール、４−ヒドロキシタモキシフェン、トリオキシフェン、ケオキシフェン、ＬＹ１１７０１８、オナプリストン、及びトレミフェン（Ｆａｒｅｓｔｏｎ）；ならびに抗アンドロゲン薬、例えば、フルタミド、ニルタミド、ビカルタミド、ロイプロリド、ゴセレリン、コルヒチン部位結合剤（Ｃｕｒａｃｉｎ）、コンブレタスタチン（ＡＶＥ８０６、コンブレタスタチンＡ−４プロドラッグ（ＣＡ４Ｐ）、Ｏｘｉ−４５０３）、クリプトフィシン（ＬＹ３５５７０３）、ディスコデルモリド、ドラスタチン、及び類似体（オーリスタチンＰＨＥ、ドラスタチン１０、ＩＬＸ−６５１、シンプロスタチン１、ＴＺＴ−１０２７）、エポチロン（ＢＭＳ−２４７５５０、ＢＭＳ−３１０７０５、ＥＰ０９０６、ＫＯＳ−８６２、ＺＫ−ＥＰＯ）、エリュテロビン、ＦＲ１８２８７７、ハリコンドリンＢ（Ｅ７３８９）、ハリミド（ＮＰＩ−２３５２及びＮＰＩ−２３５８）、ヘミアステリン（ＨＴＩ−２８６）、ラウリマライド、マイタンシノイド（「ＤＭ１」、「ＤＭ３」、または「ＤＭ４」）（ビバツズマブメルタンシン、カンツズマブメルタンシン、ｈｕＮ９０１−ＤＭ１／ＢＢ−１０９０１ＴＡＰ、ＭＬＮ５９１ＤＭ１、Ｍｙ９−６−ＤＭ１、トラスズマブ−ＤＭ１）、ＰＣ−ＳＰＥＳ、ペロルシドＡ、レスベラトロール、Ｓ−アリルメルカプトシステイン（ＳＡＭＣ）、スポンジスタチン、ビチレブアミド、分子モーターキネシン（ＳＢ−７１５９９２）、設計されたコルヒチン部位結合剤（Ａ−２８９０９９、Ａ−２９３６２０／Ａ−３１８３１５、ＡＢＴ−７５１／Ｅ７０１０、Ｄ−２４８５１／Ｄ−６４１３１、ＺＤ６１２６）、他の新規な紡錘体毒（２−メトキシエストラジオール（２−ＭＥ２）、ベズイミダゾールカルバメート（
ＡＮＧ  ６００シリーズ、メベンダゾール）、ＣＰ２４８／ＣＰ４６１、ＨＭＮ−２１４、Ｒ４４０、ＳＤＸ−１０３、Ｔ６７／Ｔ６０７）からなる群から選択される、薬物または化学療法剤をさらに含む、実施形態３１〜５２に記載の抗体またはフラグメント。実施形態５４：該ポリペプチドまたはフラグメントは、マイタンシノイド（「ＤＭ１」、「ＤＭ３」、または「ＤＭ４」）からなる群から選択される、薬物または化学療法剤をさらに含む、実施形態３１〜５３に記載のポリペプチドまたはフラグメント。実施形態５５：該ポリペプチドまたはフラグメントは、ＤＭ１をさらに含む、実施形態３１〜５４に記載のポリペプチドまたはフラグメント。実施形態５６：該ポリペプチドまたはフラグメントは、ポリペプチドに対する薬物の比が１〜１０である、実施形態３１〜５５に記載のポリペプチドまたはフラグメント。実施形態５７：該ポリペプチドまたはフラグメントは、ポリペプチドに対する薬物の比が２〜５である、実施形態３１〜５７に記載のポリペプチドまたはフラグメント。実施形態５８：実施形態１〜５７のいずれかに記載の抗体、ポリペプチド、またはそれらのフラグメントを含む、組成物。実施形態５９：実施形態１〜５８のいずれかに記載の抗体、ポリペプチド、またはそれらのフラグメントを含む、医薬組成物。実施形態６０：医薬として許容される希釈剤、担体、可溶化剤、乳化剤、及び／または保存剤をさらに含む、実施形態５９に記載の医薬組成物。実施形態６１：疾患を治療する方法であって、実施形態５８〜６０のいずれかに記載の組成物の有効量を投与することを含み、該疾患は、Ｂ細胞癌、多発性骨髄腫、悪性形質細胞腫、カーレル病、及び骨髄腫症、形質細胞性白血病、形質細胞腫、Ｂ細胞性前リンパ急性白血病、有毛細胞性白血病、Ｂ細胞非ホジキンリンパ腫（ＮＨＬ）、急性骨髄性白血病（ＡＭＬ）、慢性骨髄性白血病（ＣＭＬ）、急性リンパ球性白血病（ＡＬＬ）、慢性リンパ球性白血病（ＣＬＬ）、濾胞性リンパ腫（濾胞性非ホジキンリンパ腫型を含む）、バーキットリンパ腫（風土性バーキットリンパ腫、散発性バーキットリンパ腫）、辺縁帯リンパ腫（粘膜関連リンパ組織、ＭＡＬＴ／ＭＡＬＴリンパ腫、単球様Ｂ細胞リンパ腫、絨毛状リンパ球を伴う脾臓リンパ腫）、マントル細胞リンパ腫、大細胞型リンパ腫（びまん性大細胞、びまん性混合細胞、免疫芽球性リンパ腫、原発性縦隔性Ｂ細胞リンパ腫、血管中心性リンパ腫−肺性Ｂ細胞）、小リンパ球性リンパ腫（ＳＬＬ）、前駆Ｂリンパ芽球性リンパ腫、骨髄性白血病（顆粒球性、骨髄性、急性骨髄性白血病、慢性骨髄性白血病、亜急性骨髄性白血病、骨髄性肉腫、緑色腫、顆粒球性肉腫、急性前骨髄球性白血病、急性骨髄単球性白血病）、ヴァルデンストレームマクログロブリン血症、または他のＢ細胞リンパ腫からなる群から選択される、方法。実施形態６２：該疾患は、Ｂ細胞癌、多発性骨髄腫、悪性形質細胞腫、または他のＢ細胞リンパ腫からなる群から選択される、実施形態６１に記載の方法。実施形態６３：該疾患は、多発性骨髄腫である、実施形態６２に記載の方法。実施形態６４：化学療法、放射線療法、手術、プロテアソーム阻害剤、コルチコステロイド、及び幹細胞移植からなる群から選択���れる、さらなる追加の治療のうちの１つを施すことをさらに含む、実施形態６１〜６３に記載の方法。実施形態６５：該追加の治療を施すことは、実施形態５８〜６０のいずれかに記載の組成物の投与の前に、それと同時に、もしくはそれに続いて、またはそのそれぞれの組み合わせで、行われる、実施形態６４に記載の方法。実施形態６６：実施形態５８〜６０のいずれかに記載の組成物は、非経口で投与される、実施形態６２〜６５に記載の方法。実施形態６７：単離ポリヌクレオチドであって、該ポリヌクレオチドは、配列番号１〜２１及び３１〜４８のいずれかに記載の抗体またはポリペプチドをコードする、単離ポリヌクレオチド。実施形態６８：該ポリヌクレオチドの配列は、配列番号１を含むＶｈ−ＣＤＲ１、配列番号２を含むＶｈ−ＣＤＲ２、配列番号３を含むＶｈ−ＣＤＲ３、配列番号１０３を含むＶｌ−ＣＤＲ１、配列番号１０４を含むＶｌ−ＣＤＲ２、及び配列番号１０５を含むＶｌ−ＣＤＲ３を含み、該ポリヌクレオチドの配列は、配列番号７を含むＶｈ−ＣＤＲ１、配列番号８を含むＶｈ−ＣＤＲ２、配列番号９を含むＶｈ−ＣＤＲ３、配列番号１０９を含むＶｌ−ＣＤＲ１、配列番号１１０を含むＶｌ−ＣＤＲ２、及び配列番号１１１を含むＶｌ−ＣＤＲ３を含み、該ポリヌクレオチドの配列は、配列番号１３を含むＶｈ−ＣＤＲ１、配列番号１４を含むＶｈ−ＣＤＲ２、配列番号１５を含むＶｈ−ＣＤＲ３、配列番号１１５を含むＶｌ−ＣＤＲ１、配列番号１１６を含むＶｌ−ＣＤＲ２、及び配列番号１１７を含むＶｌ−ＣＤＲ３を含み、該ポリヌクレオチドの配列は、配列番号１９を含むＶｈ−ＣＤＲ１、配列番号２０を含むＶｈ−ＣＤＲ２、配列番号２１を含むＶｈ−ＣＤＲ３、配列番号１２１を含むＶｌ−ＣＤＲ１、配列番号１２２を含むＶｌ−ＣＤＲ２、及び配列番号１２３を含むＶｌ−ＣＤＲ３を含み、該ポリヌクレオチドの配列は、配列番号２５を含むＶｈ−ＣＤＲ１、配列番号２６を含むＶｈ−ＣＤＲ２、配列番号２７を含むＶｈ−ＣＤＲ３、配列番号１２７を含むＶｌ−ＣＤＲ１、配列番号１２８を含むＶｌ−ＣＤＲ２、及び配列番号１２９を含むＶｌ−ＣＤＲ３を含み、該ポリヌクレオチド配列は、配列番号３１を含むＶｈ−ＣＤＲ１、配列番号３２を含むＶｈ−ＣＤＲ２、配列番号３３を含むＶｈ−ＣＤＲ３、配列番号１３３を含むＶｌ−ＣＤＲ１、配列番号１３４を含むＶｌ−ＣＤＲ２、及び配列番号１３５を含むＶｌ−ＣＤＲ３を含み、該ポリヌクレオチドの配列は、配列番号３７を含むＶｈ−ＣＤＲ１、配列番号３８を含むＶｈ−ＣＤＲ２、配列番号３９を含むＶｈ−ＣＤＲ３、配列番号１３９を含むＶｌ−ＣＤＲ１、配列番号１４０を含むＶｌ−ＣＤＲ２、及び配列番号１４１を含むＶｌ−ＣＤＲ３を含み、該ポリヌクレオチド配列は、配列番号４３を含むＶｈ−ＣＤＲ１、配列番号４４を含むＶｈ−ＣＤＲ２、配列番号４５を含むＶｈ−ＣＤＲ３、配列番号１４５を含むＶｌ−ＣＤＲ１、配列番号１４６を含むＶｌ−ＣＤＲ２、及び配列番号１４７を含むＶｌ−ＣＤＲ３を含み、該ポリヌクレオチドの配列は、配列番号４９を含むＶｈ−ＣＤＲ１、配列番号５０を含むＶｈ−ＣＤＲ２、配列番号５１を含むＶｈ−ＣＤＲ３、配列番号１５１を含むＶｌ−ＣＤＲ１、配���番号１５２を含むＶｌ−ＣＤＲ２、及び配列番号１５３を含むＶｌ−ＣＤＲ３を含み、該ポリヌクレオチドの配列は、配列番号５５を含むＶｈ−ＣＤＲ１、配列番号５６を含むＶｈ−ＣＤＲ２、配列番号５７を含むＶｈ−ＣＤＲ３、配列番号１５７を含むＶｌ−ＣＤＲ１、配列番号１５８を含むＶｌ−ＣＤＲ２、及び配列番号１５９を含むＶｌ−ＣＤＲ３を含み、該ポリヌクレオチドの配列は、配列番号６１を含むＶｈ−ＣＤＲ１、配列番号６２を含むＶｈ−ＣＤＲ２、配列番号６３を含むＶｈ−ＣＤＲ３、配列番号１６３を含むＶｌ−ＣＤＲ１、配列番号１６４を含むＶｌ−ＣＤＲ２、及び配列番号１６５を含むＶｌ−ＣＤＲ３を含み、該ポリヌクレオチドの配列は、配列番号６７を含むＶｈ−ＣＤＲ１、配列番号６８を含むＶｈ−ＣＤＲ２、配列番号６９を含むＶｈ−ＣＤＲ３、配列番号１６９を含むＶｌ−ＣＤＲ１、配列番号１７０を含むＶｌ−ＣＤＲ２、及び配列番号１７１を含むＶｌ−ＣＤＲ３を含み、該ポリヌクレオチドの配列は、配列番号７３を含むＶｈ−ＣＤＲ１、配列番号７４を含むＶｈ−ＣＤＲ２、配列番号７５を含むＶｈ−ＣＤＲ３、配列番号１７５を含むＶｌ−ＣＤＲ１、配列番号１７６を含むＶｌ−ＣＤＲ２、及び配列番号１７７を含むＶｌ−ＣＤＲ３を含み、該ポリヌクレオチドの配列は、配列番号７９を含むＶｈ−ＣＤＲ１、配列番号８０を含むＶｈ−ＣＤＲ２、配列番号８１を含むＶｈ−ＣＤＲ３、配列番号１８１を含むＶｌ−ＣＤＲ１、配列番号１８２を含むＶｌ−ＣＤＲ２、及び配列番号１８３を含むＶｌ−ＣＤＲ３を含み、該ポリヌクレオチドの配列は、配列番号８５を含むＶｈ−ＣＤＲ１、配列番号８６を含むＶｈ−ＣＤＲ２、配列番号８７を含むＶｈ−ＣＤＲ３、配列番号１８７を含むＶｌ−ＣＤＲ１、配列番号１８８を含むＶｌ−ＣＤＲ２、及び配列番号１８９を含むＶｌ−ＣＤＲ３を含み、該ポリヌクレオチドの配列は、配列番号９１を含むＶｈ−ＣＤＲ１、配列番号９２を含むＶｈ−ＣＤＲ２、配列番号９３を含むＶｈ−ＣＤＲ３、配列番号１９３を含むＶｌ−ＣＤＲ１、配列番号１９４を含むＶｌ−ＣＤＲ２、及び配列番号１９５を含むＶｌ−ＣＤＲ３を含み、該ポリヌクレオチドの配列は、配列番号９７を含むＶｈ−ＣＤＲ１、配列番号９８を含むＶｈ−ＣＤＲ２、配列番号９９を含むＶｈ−ＣＤＲ３、配列番号１９９を含むＶｌ−ＣＤＲ１、配列番号２００を含むＶｌ−ＣＤＲ２、及び配列番号２０１を含むＶｌ−ＣＤＲ３を含む、実施形態６７に記載のポリヌクレオチド。実施形態６９：該ポリヌクレオチド配列は、配列番号１を含むＶｈ−ＣＤＲ１、配列番号２を含むＶｈ−ＣＤＲ２、配列番号３を含むＶｈ−ＣＤＲ３、配列番号１０３を含むＶｌ−ＣＤＲ１、配列番号１０４を含むＶｌ−ＣＤＲ２、及び配列番号１０５を含むＶｌ−ＣＤＲ３を含み、該ポリヌクレオチド配列は、配列番号７を含むＶｈ−ＣＤＲ１、配列番号８を含むＶｈ−ＣＤＲ２、配列番号９を含むＶｈ−ＣＤＲ３、配列番号１０９を含むＶｌ−ＣＤＲ１、配列番号１１０を含むＶｌ−ＣＤＲ２、及び配列番号１１１を含むＶｌ−ＣＤＲ３を含み、該ポリヌクレオチド配列は、配列番号１３を含むＶｈ−ＣＤＲ１、配列番号１４を含むＶｈ−ＣＤＲ２、配列番号１５を含むＶｈ−ＣＤＲ３、配列番���１１５を含むＶｌ−ＣＤＲ１、配列番号１１６を含むＶｌ−ＣＤＲ２、及び配列番号１１７を含むＶｌ−ＣＤＲ３を含む、実施形態６７〜６８に記載のポリヌクレオチド。実施形態７０：該ポリヌクレオチド配列は、配列番号１を含むＶｈ−ＣＤＲ１、配列番号２を含むＶｈ−ＣＤＲ２、配列番号３を含むＶｈ−ＣＤＲ３、配列番号１０３を含むＶｌ−ＣＤＲ１、配列番号１０４を含むＶｌ−ＣＤＲ２、及び配列番号１０５を含むＶｌ−ＣＤＲ３を含む、実施形態６７〜６９に記載のポリヌクレオチド。実施形態７１：該ポリヌクレオチド配列は、配列番号２３９を含むＡｂ−１Ｖｌ及び配列番号２０５を含むＡｂ−１Ｖｈを含み、該ポリヌクレオチド配列は、配列番号２４１を含むＡｂ−２Ｖｌ及び配列番号２０７を含むＡｂ−２Ｖｈを含み、該ポリヌクレオチド配列は、配列番号２４３を含むＡｂ−３Ｖｌ及び配列番号２０９を含むＡｂ−３Ｖｈを含み、該ポリヌクレオチド配列は、配列番号２４５を含むＡｂ−４Ｖｌ及び配列番号２１１を含むＡｂ−４Ｖｈを含み、該ポリヌクレオチド配列は、配列番号２４７を含むＡｂ−５Ｖｌ及び配列番号２１３を含むＡｂ−５Ｖｈを含み、該ポリヌクレオチド配列は、配列番号２４９を含むＡｂ−６Ｖｌ及び配列番号２１５を含むＡｂ−６Ｖｈを含み、該ポリヌクレオチド配列は、配列番号２５１を含むＡｂ−７Ｖｌ及び配列番号２１７を含むＡｂ−７Ｖｈを含み、該ポリヌクレオチド配列は、配列番号２５３を含むＡｂ−８Ｖｌ及び配列番号２１９を含むＡｂ−８Ｖｈを含み、該ポリヌクレオチド配列は、配列番号２５５を含むＡｂ−９Ｖｌ及び配列番号２２１を含むＡｂ−９Ｖｈを含み、該ポリヌクレオチド配列は、配列番号２５７を含むＡｂ−１０Ｖｌ及び配列番号２２３を含むＡｂ−１０Ｖｈを含み、該ポリヌクレオチド配列は、配列番号２５９を含むＡｂ−１１Ｖｌ及び配列番号２２５を含むＡｂ−１１Ｖｈを含み、該ポリヌクレオチド配列は、配列番号２６１を含むＡｂ−１２Ｖｌ及び配列番号２２７を含むＡｂ−１２Ｖｈを含み、該ポリヌクレオチド配列は、配列番号２６３を含むＡｂ−１３Ｖｌ及び配列番号２２９を含むＡｂ−１３Ｖｈを含み、該ポリヌクレオチド配列は、配列番号２６５を含むＡｂ−１４Ｖｌ及び配列番号２３１を含むＡｂ−１４Ｖｈを含み、該ポリヌクレオチド配列は、配列番号２６７を含むＡｂ−１５Ｖｌ及び配列番号２３３を含むＡｂ−１５Ｖｈを含み、該ポリヌクレオチド配列は、配列
番号２６９を含むＡｂ−１６Ｖｌ及び配列番号２３５を含むＡｂ−１６Ｖｈを含み、該ポリヌクレオチド配列は、配列番号２７１を含むＡｂ−１７Ｖｌ及び配列番号２３７を含むＡｂ−１７Ｖｈを含む、実施形態６７〜７０に記載のポリヌクレオチド。実施形態７２：該ポリヌクレオチド配列は、配列番号２３９を含むＡｂ−１Ｖｌ及び配列番号２０５を含むＡｂ−１Ｖｈを含み、該ポリヌクレオチド配列は、配列番号２４１を含むＡｂ−２Ｖｌ及び配列番号２０７を含むＡｂ−２Ｖｈを含み、該ポリヌクレオチド配列は、配列番号２４３を含むＡｂ−３Ｖｌ及び配列番号２０９を含むＡｂ−３Ｖｈを含む、実施形態６７〜７１に記載のポリヌクレオチド。実施形態７３：該ポリヌクレオチド配列は、配列番号２３９を含むＡｂ−１Ｖｌ及び配列番号２０５を含むＡｂ−１Ｖｈを含む、実施形態６７〜７２に記載のポリヌクレオチド。実施形態７４：該ポリヌクレオチド配列は、配列番号２７９を含む軽鎖及び配列番号２７３を含む重鎖を含み、該ポリヌクレオチド配列は、配列番号２８１を含む軽鎖及び配列番号２７５を含む重鎖を含み、該ポリヌクレオチド配列は、配列番号２８３を含む軽鎖及び配列番号２７７を含む重鎖を含む、実施形態６７〜７２に記載のポリヌクレオチド。実施形態７５：実施形態６７〜７２のいずれかに記載のポリヌクレオチドを含む、プラスミド。実施形態７６：該プラスミドは、発現ベクターを含む、実施形態７５に記載のプラスミド。実施形態７７：実施形態７６に記載のプラスミドを含む単離細胞であって、該細胞は、ａ．原核細胞、ｂ．真核細胞、ｃ．哺乳動物細胞、ｄ．昆虫細胞、及びｅ．ＣＨＯ細胞からなる群から選択される、単離細胞。実施形態７８：実施形態１〜２１及び３１〜４８のいずれかに記載の抗体またはポリペプチドを作製する方法であって、実施形態７７に記載の該単離細胞を、それが該抗体またはポリペプチドを発現できる条件下でインキュベートすることを含む、方法。実施形態７９：単離抗体であって、実施形態７７に記載のＣＨＯ細胞によって産生される抗体を含み、該抗体は、配列番号２７３を含む配列によってコードされる重鎖及び配列番号２７９を含む配列によってコードされる軽鎖を含む、単離抗体。実施形態８０：実施形態７９に記載の抗体を含む、医薬組成物。実施形態８１：単離モノクローナル抗体であって、配列番号２８５及び配列番号２８６に特異的に結合するが配列番号３５１には特異的に結合しないモノクローナル抗体を含む、単離モノクローナル抗体。実施形態８２：該抗体は、ヒトモノクローナル抗体である、実施形態８１に記載の抗体。実施形態８３：該抗体は、ＩｇＧである、実施形態８２に記載の抗体。実施形態８４：単離モノクローナル抗体であって、配列番号３５２に特異的に結合するが配列番号３５１には特異的に結合しないモノクローナル抗体を含む、単離モノクローナル抗体。実施形態８５：該抗体は、ヒトモノクローナル抗体である、実施形態８４に記載の抗体。実施形態８６：該抗体は、ＩｇＧである、実施形態８５に記載の抗体。実施形態８７：該抗体は、ＩｇＧ１である、実施形態８５に記載の抗体。実施形態８８：該抗体は、１ｎＭ〜．０１ｎＭのＫｄで配列番号３５２に特異的に結合し、１０ｎＭを上回るＫｄで配列番号３５１に結合する、実施形態８１〜８７のいずれかに記載の抗体。実施形態８９：該抗体は、約０．１６ｎＭのＫｄで配列番号３５２に特異的に結合し、１０ｎＭを上回るＫｄで配列番号３５１に結合する、実施形態８１〜８８のいずれかに記載の抗体。実施形態９０：単離モノクローナル抗体であって、配列番号２８５のアミノ酸１〜２０（境界値を含む）を含む中和決定基に結合するモノクローナル抗体を含む、単離モノクローナル抗体。実施形態９１：該抗体は、ヒトモノクローナル抗体である、実施形態９０に記載の抗体。実施形態９２：該抗体は、ＩｇＧである、実施形態９１に記載の抗体。実施形態９３：該抗体は、ＩｇＧ１である、実施形態９２に記載の抗体。実施形態９４：単離モノクローナル抗体であって、配列番号２８５のアミノ酸１〜１１（境界値を含む）を含む中和決定基に結合する、モノクローナル抗体を含む、単離モノクローナル抗体。実施形態９５：該抗体は、ヒトモノクローナル抗体である、実施形態９４に記載の抗体。実施形態９６：該抗体は、ＩｇＧである、実施形態９５に記載の抗体。実施形態９７：該抗体は、ＩｇＧ１である、実施形態９６に記載の抗体。実施形態９８：該抗体は、１ｎＭ以下のＫｄで配列番号２８５に結合する、実施形態９０〜９７のいずれかに記載の抗体。実施形態９９：該抗体は、バイオセンサーアッセイで測定すると、約０．１６ｎＭ±０．１ｎＭのＫｄで配列番号３５２に結合する、実施形態９０〜９８のいずれかに記載の抗体。実施形態１００：該抗体は、１０ｎＭ以下のＥＣ５０で、Ｈ９２９細胞の表面上に発現される配列番号２８５に結合する、実施形態９０〜９７のいずれかに記載の抗体。実施形態１０１：該抗体は、１０ｎＭ以下のＥＣ５０で、Ｈ９２９細胞の表面上に発現される配列番号２８５に結合する、実施形態９０〜９７のいずれかに記載の抗体。実施形態１０２：該抗体は、ＦＡＣＳ分析により約１．２ｎＭのＥＣ５０で、Ｈ９２９細胞の表面上に発現される配列番号２８５に結合する、実施形態９０〜９７及び１０１のいずれかに記載の抗体。実施形態１０３：該抗体は、１ｎＭ以下のＫｄで配列番号２８５に結合し、該抗体は、１０ｎＭ以下のＥＣ５０で、Ｈ９２９細胞の表面上に発現される配列番号２８５に結合する、実施形態９０〜９７のいずれかに記載の抗体。実施形態１０４：該抗体は、実施例１６に記載されるバイオセンサーアッセイで測定すると、約０．１６ｎＭのＫｄで配列番号３５２に結合し、該抗体は、ＦＡＣＳ分析により約１．２ｎＭのＥＣ５０で、Ｈ９２９細胞の表面上に発現される配列番号２８５に結合する、実施形態９０〜９７及び１０３のいずれかに記載の抗体。実施形態１０５：６つのＣＤＲは、ＡＨｏ、Ｋａｂａｔ、またはＣｌｏｔｈｉａの番号付けシステムのいずれか１つによって決定される、実施形態１〜３及び３１〜３３のいずれかに記載の抗体。実施形態１０６：該抗体は、ヒトモノクローナルＩｇＧ抗体である、実施形態１〜１４のいずれかに記載の抗体。実施形態１０７：該抗体は、ヒトモノクローナルＩｇＧ１抗体である、実施形態１〜１４及び１０６のいずれかに記載の抗体。
【００４４】
上述のように、抗体エピトープが、一般に、抗体の可変領域に結合され得る抗原内の三次元構造として定義されるとすると、エピトープの具体的な態様は、それを描写するために使用される方法によって定義される。いくつかの方法は、溶媒接触可能表面積（ＡＳＡ）分析によって測定される、結合した抗体によって被覆される抗原上の表面積等、エピトープの構造的態様を描写する。本発明の実施形態は、溶媒接触可能表面積（ＡＳＡ）分析によって判定すると、Ａｂ−１がｈｕＢＣＭＡに結合するのと同様にｈｕＢＣＭＡに結合する、モノクローナル抗体（特に、ヒトモノクローナル抗体）を含む。本発明の実施形態は、溶媒接触可能表面積（ＡＳＡ）分析によって判定すると、Ａｂ−２がｈｕＢＣＭＡに結合するのと同様にｈｕＢＣＭＡに結合する、モノクローナル抗体（特に、ヒトモノクローナル抗体）を含む。本発明の実施形態は、溶媒接触可能表面積（ＡＳＡ）分析によって判定すると、Ａｂ−３がｈｕＢＣＭＡに結合するのと同様にｈｕＢＣＭＡに結合する、モノクローナル抗体（特に、ヒトモノクローナル抗体）を含む。
【００４５】
いくつかの方法は、接触距離分析等、抗体上の残基と相互作用する抗原上の残基であるエピトープの機能的態様を描写する。ｈｕＢＣＭＡ上の残基と相互作用する抗体上の残基は、集合的に、抗体のパラトープと称される。
【００４６】
「相互作用する」とは、抗体及びＨｕＢＣＭＡのアミノ酸残基が、それらの間に、水素結合、塩架橋、静電力、疎水力、及び／またはファンデルワールス力といった、１つ以上の非共有結合力を形成することを意味する。
【００４７】
本発明の実施形態は、約０〜３．４Å（「約」は、結晶構造解析接触距離分析に関連して使用されるとき、±０．５Åを意味する）でのＸ線結晶構造解析接触距離分析によって定義されるように、Ａｂ−１がｈｕＢＣＭＡに結合するのと同様にｈｕＢＣＭＡに結合する、モノクローナル抗体（特に、ヒトＩｇＧモノクローナル抗体）を含む。本発明の実施形態は、約３．４〜５．０ÅでのＸ線結晶構造解析接触距離分析によって定義されるように、Ａｂ−１がｈｕＢＣＭＡに結合するのと同様にｈｕＢＣＭＡに結合する、モノクローナル抗体（特に、ヒトＩｇＧモノクローナル抗体）を含む。本発明の実施形態は、約０〜３．４ÅでのＸ線結晶構造解析接触距離分析によって定義されるように、Ａｂ−２がｈｕＢＣＭＡに結合するのと同様にｈｕＢＣＭＡに結合する、モノクローナル抗体（特に、ヒトＩｇＧモノクローナル抗体）を含む。本発明の実施形態は、約３．４〜５．０ÅでのＸ線結晶構造解析接触距離分析によって定義されるように、Ａｂ−２がｈｕＢＣＭＡに結合するのと同様にｈｕＢＣＭＡに結合する、モノクローナル抗体（特に、ヒトＩｇＧモノクローナル抗体）を含む。本発明の実施形態は、約０〜３．４ÅでのＸ線結晶構造解析接触距離分析によって定義されるように、Ａｂ−３がｈｕＢＣＭＡに結合するのと同様にｈｕＢＣＭＡに結合する、モノクローナル抗体（特に、ヒトＩｇＧモノクローナル抗体）を含む。本発明の実施形態は、約３．４〜５．０ÅでのＸ線結晶構造解析接触距離分析によって定義されるように、Ａｂ−３がｈｕＢＣＭＡに結合するのと同様にｈｕＢＣＭＡに結合する、モノクローナル抗体（特に、ヒトＩｇＧモノクローナル抗体）を含む。
【００４８】
したがって、本発明の態様は、以下のもの等のさらなる実施形態を含むが、これらに限定されない、実施形態１０８：単離モノクローナル抗体またはそのフラグメントであって、該抗体またはそのフラグメントは、配列番号２８５のヒトＢＣＭＡに特異的に結合し、ＡＰＲＩＬの生物学的活性を阻害し、該抗体は、配列番号４を含むＶｈ−ＣＤＲ１、配列番号５を含むＶｈ−ＣＤＲ２、配列番号６を含むＶｈ−ＣＤＲ３、配列番号１０６を含むＶｌ−ＣＤＲ１、配列番号１０７を含むＶｌ−ＣＤＲ２、及び配列番号１０８を含むＶｌ−ＣＤＲ３を含むヒトＩｇＧ１モノクローナル抗体の結合を競合的に阻害し、該抗体は、ヒトＢＣＭＡに対して１〜．０１ｎＭ（境界値を含む）のＫｄを有する、単離モノクローナル抗体またはそのフラグメント。実施形態１０９：該抗体またはそのフラグメントは、ヒトのものであり、該ヒトＩｇＧ１モノクローナル抗体は、配列番号２０６を含むＶｈドメイン及び配列番号２４０を含むＶｌドメインを含む、実施形態１０８に記載の抗体またはそのフラグメント。実施形態１１０：該抗体またはそのフラグメントは、ヒトのものであり、該ヒトＩｇＧ１モノクローナル抗体は、配列番号２７４を含む重鎖及び配列番号２８０を含む軽鎖を含む、実施形態１０８または１０９に記載の抗体またはフラグメント。実施形態１１１：該ヒトＩｇＧ１モノクローナル抗体は、０〜３．４Å（境界値を含む）の接触距離分解能でのＸ線結晶構造解析によって定義されるように、配列番号３６０のヒトＢＣＭＡのＧｌｙ６、Ｇｌｎ７、Ｐｈｅ１４、Ａｓｐ１５、Ｓｅｒ１６、Ｌｅｕ１７、及びＨｉｓ１９と相互作用する、実施形態１０８〜１１０に記載の抗体またはそのフラグメント。実施形態１１２：該ヒトＩｇＧ１モノクローナル抗体は、３．４〜５．０Å（境界値を含む）の接触距離分解能でのＸ線結晶構造解析によって定義されるように、配列番号３６０のヒトＢＣＭＡのＧｌｙ６、Ｇｌｎ７、Ｃｙｓ８、Ｔｙｒ１３、Ｐｈｅ１４、Ａｓｐ１５、Ｓｅｒ１６、Ｌｅｕ１７、Ｌｅｕ１８、Ｈｉｓ１９、及びＡｌａ２０と相互作用する、実施形態１１１に記載の抗体またはそのフラグメント。実施形態１１３：該ヒトＩｇＧ１モノクローナル抗体は、３．４〜５．０Å（境界値を含む）の接触距離分解能でのＸ線結晶構造解析によって定義されるように、配列番号３６０のヒトＢＣＭＡのＡｌａ５、Ｇｌｙ６、Ｇｌｎ７、Ｃｙｓ８、Ｔｙｒ１３、Ｐｈｅ１４、Ａｓｐ１５、Ｓｅｒ１６、Ｌｅｕ１７、Ｌｅｕ１８、Ｈｉｓ１９、Ａｌａ２０、Ｉｌｅ２２、Ｌｅｕ２６、Ａｒｇ２７、Ｐｒｏ３３、Ｐｒｏ３４、Ｌｅｕ３５、及びＬｅｕ３６と相互作用する、実施形態１１２に記載の抗体またはそのフラグメント。実施形態１１４：該ヒトＩｇＧ１モノクローナル抗体は、０〜３．４Å（境界値を含む）の接触距離分解能でのＸ線結晶構造解析によって定義されるように、配列番号３６０のヒトＢＣＭＡのＧｌｎ７、Ａｓｐ１５、Ｓｅｒ１６、Ｌｅｕ１７、及びＨｉｓ１９と水素結合を形成する、実施形態１１３に記載の抗体またはそのフラグメント。実施形態１１５：単離モノクローナル抗体またはそのフラグメントであって、該抗体またはそのフラグメントは、配列番号２８５のヒトＢＣＭＡに特異的に結合し、ＡＰＲＩＬの生物学的活性を阻害するヒトＩｇＧモノクローナルであり、該抗体は、配列番号２０６に少なくとも９０％同一なＶｈドメイン及び配列番号２４０に少なくとも９０％同一なＶｌドメインを含む、単離モノクローナル抗体またはそのフラグメント。実施形態１１６：該抗体またはそのフラグメントは、配列番号２７４に少なくとも９０％同一な重鎖及び配列番号２８０に少なくとも９０％同一な軽鎖を含む、実施形態１１５に記載の抗体またはそのフラグメント。実施形態１１７：抗体またはそのフラグメントは、配列番号２０６に少なくとも９５％同一な重鎖可変ドメイン及び配列番号２４０に少なくとも９５％同一な軽鎖可変ドメインを含む、実施形態１１５に記載の抗体またはそのフラグメント。実施形態１１８：該抗体は、配列番号２７４に少なくとも９５％同一な重鎖及び配列番号２８０に少なくとも９５％同一な軽鎖を含む、実施形態１１７に記載の抗体。実施形態１１９：該抗体またはそのフラグメントは、ＶｌドメインのＡｓｎ３２、Ｔｈｒ３３、Ａｓｎ３５、Ａｓｎ５１、Ｔｒｐ９２、Ａｓｐ９４、及びＴｒｐ９９、ならびにＶｈドメインのＡｒｇ５２、Ｓｅｒ１０１、及びＴｙｒ１０３を含む、実施形態１１５〜１１８に記載の抗体またはそのフラグメント。実施形態１２０：該抗体またはそのフラグメントは、ＶｌドメインのＳｅｒ２６、Ｓｅｒ３１、Ａｓｎ３２、Ｔｈｒ３３、Ｖａｌ３４、Ａｓｎ３５、Ｌｅｕ４７、Ｐｈｅ５０、Ａｓｎ５１、Ｔｙｒ５２、Ｈｉｓ５３、Ｇｌｎ５４、Ｌｙｓ６７、Ｔｒｐ９２、Ａｓｐ９３、Ａｓｐ９４、Ａｓｎ９７、及びＴｒｐ９９、ならびにＶｈドメインのＡｌａ３３、Ｓｅｒ３５、Ｖａｌ５０、Ａｒｇ５２、Ｔｙｒ５６、Ｓｅｒ１０１、Ｇｌｙ１０２、Ｔｙｒ１０３、Ｔｒｐ１０７、Ｐｒｏ１０９、Ｐｈｅ１１０、及びＡｓｐ１１１を含む、実施形態１１５〜１１９に記載の抗体またはフラグメント。実施形態１２１：該抗体またはそのフラグメントは、ヒトＢＣＭＡに対して０．１６ｎＭ±０．１ｎＭ（境界値を含む）のＫｄを有する、実施形態１０８〜１２０に記載の抗体またはそのフラグメント。実施形態１２２：単離モノクローナル抗体またはそのＦａｂフラグメントであって、該抗体またはそのＦａｂフラグメントは、配列番号２０６を含むＶｈドメイン及び配列番号２４０を含むＶｌドメインを含むヒトＩｇＧ１モノクローナル抗体と同じ、配列番号２８５のヒトＢＣＭＡ上のエピトープに特異的に結合し、該抗体またはそのＦａｂフラグメントは、ＡＰＲＩＬの生物学的活性を阻害する、単離モノクローナル抗体またはそのＦａｂフラグメント。実施形態１２３：該ヒトＩｇＧ１モノクローナル抗体は、配列番号２７４を含む重鎖及び配列番号２８０を含む軽鎖を含む、実施形態１２２に記載の抗体またはそのＦａｂフラグメント。実施形態１２４：該エピトープは、Ｘ線結晶構造解析によって定義される、実施形態１２２または１２３に記載の抗体またはそのＦａｂフラグメント。実施形態１２５：該エピトープは、０〜３．４Å（境界値を含む）でのＸ線結晶構造解析及び接触距離分析によって定義される、実施形態１２４に記載の抗体またはそのＦａｂフラグメント。実施形態１２６：該エピトープは、３．４〜５．０Å（境界値を���む）でのＸ線結晶構造解析及び接触距離分析によって定義される、実施形態１２５に記載の抗体またはそのＦａｂフラグメント。実施形態１２７：該抗体またはそのＦａｂフラグメントは、配列番号２８５のヒトＢＣＭＡの１，９６４Å２±５％の表面積を被覆し、０．７０±０．０３の形状相補性を有する、実施形態１２５または１２６に記載の抗体またはそのＦａｂフラグメント。実施形態１２８：該モノクローナル抗体またはそのＦａｂフラグメントは、ヒトのものである、実施形態１２２〜１２７に記載の抗体またはそのＦａｂフラグメント。実施形態１２９：該モノクローナル抗体またはそのＦａｂフラグメントは、ヒトＩｇＧである、実施形態１２８に記載の抗体またはそのＦａｂフラグメント。実施形態１３０：該モノクローナル抗体またはそのＦａｂフラグメントは、ヒトＩｇＧ１である、実施形態１２９に記載の抗体またはそのＦａｂフラグメント。実施形態１３１：該抗体またはそのＦａｂフラグメントは、配列番号３５１のラットＢＣＭＡには特異的に結合せず、該ラットＢＣＭＡに対して１０ｎＭを上回るＫｄを有する、実施形態１２２〜１３０に記載の抗体またはそのＦａｂフラグメント。実施形態１３２：該抗体またはそのＦａｂフラグメントは、ヒトＢＣＭＡに対して１〜．０１ｎＭ（境界値を含む）のＫｄを有する、実施形態１２２〜１３１に記載の抗体またはそのＦａｂフラグメント。実施形態１３３：該抗体またはそのＦａｂフラグメントは、ヒトＢＣＭＡに対して０．１６ｎＭ±０．１ｎＭ（境界値を含む）のＫｄを有する、実施形態１３２に記載の抗体またはそのＦａｂフラグメント。実施形態１３４：該抗体またはそのＦａｂフラグメントはまた、配列番号２８５のアミノ酸１〜２０（境界値を含む）からなるヒトＢＣＭＡのフラグメントに特異的に結合する、実施形態１３３に記載の抗体またはそのＦａｂフラグメント。実施形態１３５：単離モノクローナル抗体またはそのＦａｂフラグメントであって、該抗体またはそのＦａｂフラグメントは、ヒトＢＣＭＡに特異的に結合し、０〜３．４Å（境界値を含む）の接触距離分解能でのＸ線結晶構造解析によって定義されるように、配列番号３６０のヒトＢＣＭＡのＧｌｙ６、Ｇｌｎ７、Ｐｈｅ１４、Ａｓｐ１５、Ｓｅｒ１６、Ｌｅｕ１７、及びＨｉｓ１９と相互作用し、該抗体またはそのＦａｂフラグメントは、ＡＰＲＩＬの生物学的活性を阻害する、単離モノクローナル抗体またはそのＦａｂフラグメント。実施形態１３６：該抗体またはそのＦａｂフラグメントは、３．４〜５．０Å（境界値を含む）の接触距離分解能でのＸ線結晶構造解析によって定義されるように、配列番号３６０のヒトＢＣＭＡのＧｌｙ６、Ｇｌｎ７、Ｃｙｓ８、Ｔｙｒ１３、Ｐｈｅ１４、Ａｓｐ１５、Ｓｅｒ１６、Ｌｅｕ１７、Ｌｅｕ１８、Ｈｉｓ１９、及びＡｌａ２０と相互作用する、実施形態１３５に記載の抗体またはそのＦａｂフラグメント。実施形態１３７：該抗体またはそのＦａｂフラグメントは、３．４〜５．０Å（境界値を含む）の接触距離分解能でのＸ線結晶構造解析によって定義されるように、配列番号３６０のヒトＢＣＭＡのＡｌａ５、Ｇｌｙ６、Ｇｌｎ７、Ｃｙｓ８、Ｔｙｒ１３、Ｐｈｅ１４、Ａｓｐ１５、Ｓｅｒ１６、Ｌｅｕ１���、Ｌｅｕ１８、Ｈｉｓ１９、Ａｌａ２０、Ｉｌｅ２２、Ｌｅｕ２６、Ａｒｇ２７、Ｐｒｏ３３、Ｐｒｏ３４、Ｌｅｕ３５、及びＬｅｕ３６と相互作用する、実施形態１３６に記載の抗体またはそのＦａｂフラグメント。実施形態１３８：該抗体またはそのＦａｂフラグメントは、０〜３．４Å（境界値を含む）の接触距離分解能でのＸ線結晶構造解析によって定義されるように、配列番号３６０のヒトＢＣＭＡのＧｌｎ７、Ａｓｐ１５、Ｓｅｒ１６、Ｌｅｕ１７、及びＨｉｓ１９と水素結合を形成する、実施形態１３７に記載の抗体またはそのＦａｂフラグメント。実施形態１３９：該モノクローナル抗体またはそのＦａｂフラグメントは、ヒトのものである、実施形態１３５〜１３８のいずれかに記載の抗体またはそのＦａｂフラグメント。実施形態１４０：該モノクローナル抗体またはそのＦａｂフラグメントは、ヒトＩｇＧである、実施形態１３９に記載の抗体またはそのＦａｂフラグメント。実施形態１４１：該モノクローナル抗体またはそのＦａｂフラグメントは、ヒトＩｇＧ１である、実施形態１４０に記載の抗体またはそのＦａｂフラグメント。実施形態１４２：該抗体またはそのＦａｂフラグメントは、ヒトＢＣＭＡに対して１〜．０１ｎＭ（境界値を含む）のＫｄを有する、実施形態１３５〜１４１に記載の抗体またはそのＦａｂフラグメント。実施形態１４３：該抗体またはそのＦａｂフラグメントは、ヒトＢＣＭＡに対して０．１６ｎＭ±０．１ｎＭ（境界値を含む）のＫｄを有する、実施形態１４２に記載の抗体またはそのＦａｂフラグメント。実施形態１４４：単離モノクローナル抗体またはそのＦａｂフラグメントであって、該抗体またはそのＦａｂフラグメントは、配列番号３６０のヒトＢＣＭＡに特異的に結合し、それによって、該ヒトＢＭＣＡ上の溶媒接触可能表面積を、０〜３．４Å（境界値を含む）の接触距離分解能でのＸ線結晶構造解析によって定義されるように、配列番号３６０のアミノ酸残基Ｇｌｙ６、Ｇｌｎ７、Ｔｙｒ１３、Ｐｈｅ１４、Ａｓｐ１５、Ｓｅｒ１６、Ｌｅｕ１７、Ｌｅｕ１８、Ｈｉｓ１９、Ａｌａ２０、Ｉｌｅ２２、Ａｒｇ２７、Ｐｒｏ３４、及びＬｅｕ３５において５０％を上回って変化させ、該抗体またはそのＦａｂフラグメントは、ＡＰＲＩＬの生物学的活性を阻害する、単離モノクローナル抗体またはそのＦａｂフラグメント。実施形態１４５：該モノクローナル抗体またはそのＦａｂ
フラグメントは、ヒトのものである、実施形態１４４に記載の抗体またはそのＦａｂフラグメント。実施形態１４６：該モノクローナル抗体またはそのＦａｂフラグメントは、ヒトＩｇＧである、実施形態１４５に記載の抗体またはそのＦａｂフラグメント。実施形態１４７：該モノクローナル抗体またはそのＦａｂフラグメントは、ヒトＩｇＧ１である、実施形態１４６に記載の抗体またはそのＦａｂフラグメント。実施形態１４８：該抗体またはそのＦａｂフラグメントは、ヒトＢＣＭＡに対して１〜．０１ｎＭ（境界値を含む）のＫｄを有する、実施形態１４４〜１４７に記載の抗体またはそのＦａｂフラグメント。実施形態１４９：該抗体またはそのＦａｂフラグメントは、ヒトＢＣＭＡに対して０．１６ｎＭ±０．１ｎＭ（境界値を含む）のＫｄを有する、実施形態１４８に記載の抗体またはそのＦａｂフラグメント。実施形態１５０：該抗体またはそのＦａｂフラグメントはまた、配列番号２８５のアミノ酸１〜２０（境界値を含む）からなるヒトＢＣＭＡのフラグメントに特異的に結合する、実施形態１４９に記載の抗体またはそのＦａｂフラグメント。実施形態１５１：単離モノクローナル抗体またはそのフラグメントであって、該抗体またはそのフラグメントは、配列番号２８５のヒトＢＣＭＡに特異的に結合し、ＡＰＲＩＬの生物学的活性を阻害し、該抗体は、配列番号１０を含むＶｈ−ＣＤＲ１、配列番号１１を含むＶｈ−ＣＤＲ２、配列番号１２を含むＶｈ−ＣＤＲ３、配列番号１１２を含むＶｌ−ＣＤＲ１、配列番号１１３を含むＶｌ−ＣＤＲ２、及び配列番号１１４を含むＶｌ−ＣＤＲ３を含むヒトＩｇＧ１モノクローナル抗体の結合を競合的に阻害し、該抗体は、ヒトＢＣＭＡに対して０．７５〜１．１１ｎＭ±０．１ｎＭ（境界値を含む）のＫｄを有する、単離モノクローナル抗体またはそのフラグメント。実施形態１５２：該抗体またはそのフラグメントは、ヒトのものであり、該ヒトＩｇＧ１モノクローナル抗体は、配列番号２０８を含むＶｈドメイン及び配列番号２４２を含むＶｌを含む、実施形態１５１に記載の抗体またはそのフラグメント。実施形態１５３：該抗体またはそのフラグメントは、ヒトのものであり、該ヒトＩｇＧ１モノクローナル抗体は、配列番号２７６を含む重鎖及び配列番号２８２を含む軽鎖を含む、実施形態１５１または１５２に記載の抗体またはそのフラグメント。実施形態１５４：該ヒトＩｇＧ１モノクローナル抗体は、０〜３．４Å（境界値を含む）の接触距離分解能でのＸ線結晶構造解析によって定義されるように、配列番号３６０のヒトＢＣＭＡのＧｌｙ６、Ｇｌｎ７、Ｔｙｒ１３、Ｓｅｒ１６、Ｌｅｕ１７、Ｈｉｓ１９、Ａｒｇ２７、及びＬｅｕ３５と相互作用する、実施形態１５１〜１５３に記載の抗体またはそのフラグメント。実施形態１５５：該ヒトＩｇＧ１モノクローナル抗体は、３．４〜５．０Å（境界値を含む）の接触距離分解能でのＸ線結晶構造解析によって定義されるように、配列番号３６０のヒトＢＣＭＡのＡｌａ５、Ｇｌｙ６、Ｇｌｎ７、Ｔｙｒ１３、Ｐｈｅ１４、Ａｓｐ１５、Ｓｅｒ１６、Ｌｅｕ１７、Ｌｅｕ１８、及びＨｉｓ１９と相互作用する、実施形態１５４に記載の抗体またはそのフラグメント。実施形態１５６：該ヒ��ＩｇＧ１モノクローナル抗体は、３．４〜５．０Å（境界値を含む）の接触距離分解能でのＸ線結晶構造解析によって定義されるように、配列番号３６０のヒトＢＣＭＡのＡｌａ５、Ｇｌｙ６、Ｇｌｎ７、Ｔｙｒ１３、Ｐｈｅ１４、Ａｓｐ１５、Ｓｅｒ１６、Ｌｅｕ１７、Ｌｅｕ１８、Ｈｉｓ１９、Ａｒｇ２７、Ｓｅｒ３０、Ｔｈｒ３２、Ｐｒｏ３３、Ｐｒｏ３４、及びＬｅｕ３５と相互作用する、実施形態１５５に記載の抗体またはそのフラグメント。実施形態１５７：該ヒトＩｇＧ１モノクローナル抗体は、０〜３．４Å（境界値を含む）の接触距離分解能でのＸ線結晶構造解析によって定義されるように、配列番号３６０のヒトＢＣＭＡのＧｌｎ７、Ｓｅｒ１６、及びＨｉｓ１９と水素結合を形成し、Ａｒｇ２７に塩架橋を形成する、実施形態１５６に記載の抗体またはそのフラグメント。実施形態１５８：単離モノクローナル抗体またはそのフラグメントであって、該抗体またはそのフラグメントは、配列番号２８５のヒトＢＣＭＡに特異的に結合し、ＡＰＲＩＬの生物学的活性を阻害する、ヒトＩｇＧモノクローナルであり、該抗体は、配列番号２０８に少なくとも９０％同一なＶｈドメイン及び配列番号２４２に少なくとも９０％同一なＶｌドメインを含む、単離モノクローナル抗体またはそのフラグメント。実施形態１５９：該抗体またはそのフラグメントは、配列番号２７６に少なくとも９０％同一な重鎖及び配列番号２８２に少なくとも９０％同一な軽鎖を含む、実施形態１５８に記載の抗体またはそのフラグメント。実施形態１６０：抗体またはそのフラグメントは、配列番号２０８に少なくとも９５％同一なＶｈドメイン及び配列番号２４２に少なくとも９５％同一なＶｌドメインを含む、実施形態１５８に記載の抗体またはそのフラグメント。実施形態１６１：該抗体は、配列番号２７６に少なくとも９５％同一な重鎖及び配列番号２８２に少なくとも９５％同一な軽鎖を含む、実施形態１６０に記載の抗体。実施形態１６２：該抗体またはそのフラグメントは、ＶｌドメインのＴｙｒ３７、Ａｌａ９６、Ｌｅｕ９７、及びＡｒｇ１０１、ならびにＶｈドメインのＳｅｒ３１、Ｖａｌ５３、Ａｓｐ５６、Ａｓｐ９８、Ｇｌｙ１０５、Ｔｒｐ１０７を含む、実施形態１５８〜１６１に記載の抗体またはそのフラグメント。実施形態１６３：該抗体またはそのフラグメントは、軽鎖可変ドメインのＨｉｓ３１、Ａｓｎ３３、Ｔｙｒ３７、Ａｌａ９６、Ｌｅｕ９７、Ｇｌｎ９８、Ｐｒｏ９９、及びＡｒｇ１０１、ならびに重鎖可変ドメインのＴｈｒ２８、Ｓｅｒ３０、Ｓｅｒ３１、Ａｌａ３３、Ａｓｎ３５、Ａｌａ５０、Ｉｌｅ５１、Ｓｅｒ５２、Ｖａｌ５３、Ｇｌｙ５４、Ｇｌｙ５５、Ａｓｐ５６、Ｔｙｒ５８、Ａｒｇ７１、Ａｓｐ９８、Ｖａｌ１００、Ｍｅｔ１０２、Ｇｌｙ１０５、Ｖａｌ１０６、Ｔｒｐ１０７、Ｔｙｒ１０８、及びＴｙｒ１０９を含む、実施形態１５８〜１６２に記載の抗体またはそのフラグメント。実施形態１６４：該抗体またはそのフラグメントは、ヒトＢＣＭＡに対して０．７５〜１．１１ｎＭ±０．１ｎＭ（境界値を含む）のＫｄを有する、実施形態１５８〜１６３に記載の抗体またはそのフラグメント。実施形態１６５：単離モノクローナル抗体またはそのＦａｂフラグメントであって、該抗体またはそのＦａｂフラグメントは、配列番号２０８を含むＶｈドメイン及び配列番号２４２を含むＶｌドメインを含むヒトＩｇＧ１モノクローナル抗体と同じ、配列番号２８５のヒトＢＣＭＡ上のエピトープに特異的に結合し、該抗体またはそのＦａｂフラグメントは、ＡＰＲＩＬの生物学的活性を阻害する、単離モノクローナル抗体またはそのＦａｂフラグメント。実施形態１６６：該ヒトＩｇＧ１モノクローナル抗体は、配列番号２７６を含む重鎖及び配列番号２８２を含む軽鎖を含む、実施形態１６５に記載の抗体またはそのＦａｂフラグメント。実施形態１６７：該エピトープは、Ｘ線結晶構造解析によって定義される、実施形態１６５または１６６に記載の抗体またはそのＦａｂフラグメント。実施形態１６８：該エピトープは、０〜３．４Å（境界値を含む）でのＸ線結晶構造解析及び接触距離分析によって定義される、実施形態１６７に記載の抗体またはそのＦａｂフラグメント。実施形態１６９：該エピトープは、３．４〜５．０Å（境界値を含む）でのＸ線結晶構造解析及び接触距離分析によって定義される、実施形態１６８に記載の抗体またはそのＦａｂフラグメント。実施形態１７０：該抗体またはそのＦａｂフラグメントは、配列番号２８５のヒトＢＣＭＡの１，６６９Å２±５％の表面積を被覆し、０．７１±０．０３の形状相補性を有する、実施形態１６８または１６９に記載の抗体またはそのＦａｂフラグメント。実施形態１７１：該モノクローナル抗体またはそのＦａｂフラグメントは、ヒトのものである、実施形態１６８〜１７０のいずれかに記載の抗体。
実施形態１７２：該モノクローナル抗体またはそのＦａｂフラグメントは、ヒトＩｇＧである、実施形態１７１に記載の抗体またはそのＦａｂフラグメント。実施形態１７３：該モノクローナル抗体またはそのＦａｂフラグメントは、ヒトＩｇＧ１である、実施形態１７２に記載の抗体またはそのＦａｂフラグメント。実施形態１７４：該抗体またはそのＦａｂフラグメントは、配列番号２８５のｈｕＢＣＭＡに対して０．７５〜１．１１ｎＭ±０．１ｎＭ（境界値を含む）のＫｄを有する、実施形態１６５〜１７３のいずれかに記載の抗体またはそのＦａｂフラグメント。実施形態１７５：単離モノクローナル抗体またはそのＦａｂフラグメントであって、該抗体またはそのＦａｂフラグメントは、ヒトＢＣＭＡに特異的に結合し、０〜３．４Å（境界値を含む）の接触距離分解能でのＸ線結晶構造解析によって定義されるように、配列番号３６０のヒトＢＣＭＡのＧｌｙ６、Ｇｌｎ７、Ｔｙｒ１３、Ｓｅｒ１６、Ｌｅｕ１７、Ｈｉｓ１９、Ａｒｇ２７、及びＬｅｕ３５と相互作用し、該抗体またはそのＦａｂフラグメントは、ＡＰＲＩＬの生物学的活性を阻害する、単離モノクローナル抗体またはそのＦａｂフラグメント。実施形態１７６：該抗体またはそのＦａｂフラグメントは、３．４〜５．０Å（境界値を含む）の接触距離分解能でのＸ線結晶構造解析によって定義されるように、配列番号３６０のヒトＢＣＭＡのＡｌａ５、Ｇｌｙ６、Ｇｌｎ７、Ｔｙｒ１３、Ｐｈｅ１４、Ａｓｐ１５、Ｓｅｒ１６、Ｌｅｕ１７、Ｌｅｕ１８、及びＨｉｓ１９と相互作用する、実施形態１７５に記載の抗体。実施形態１７７：該抗体またはそのＦａｂフラグメントは、３．４〜５．０Å（境界値を含む）の接触距離分解能でのＸ線結晶構造解析によって定義されるように、配列番号３６０のヒトＢＣＭＡのＡｌａ５、Ｇｌｙ６、Ｇｌｎ７、Ｔｙｒ１３、Ｐｈｅ１４、Ａｓｐ１５、Ｓｅｒ１６、Ｌｅｕ１７、Ｌｅｕ１８、Ｈｉｓ１９、Ａｒｇ２７、Ｓｅｒ３０、Ｔｈｒ３２、Ｐｒｏ３３、Ｐｒｏ３４、及びＬｅｕ３５と相互作用する、実施形態１７５または１７６に記載の抗体。実施形態１７８：該抗体またはそのＦａｂフラグメントは、０〜３．４Å（境界値を含む）の接触距離分解能でのＸ線結晶構造解析によって定義されるように、配列番号３６０のヒトＢＣＭＡのＧｌｎ７、Ｓｅｒ１６、及びＨｉｓ１９と水素結合を形成し、Ａｒｇ２７に塩架橋を形成する、実施形態１７５〜１７７に記載の抗体。実施形態１７９：該モノクローナル抗体またはそのＦａｂフラグメントは、ヒトのものである、実施形態１７５〜１７８に記載の抗体またはそのＦａｂフラグメント。実施形態１８０：該モノクローナル抗体またはそのＦａｂフラグメントは、ヒトＩｇＧである、実施形態１７９に記載の抗体またはそのＦａｂフラグメント。実施形態１８１：該モノクローナル抗体またはそのＦａｂフラグメントは、ヒトＩｇＧ１である、実施形態１８０に記載の抗体またはそのＦａｂフラグメント。実施形態１８２：該モノクローナル抗体またはそのＦａｂフラグメントは、ヒトＢＣＭＡに対して０．７５〜１．１１ｎＭ±０．１ｎＭ（境界値を含む）のＫｄを有する、実施形態１７５〜１８１に記載の抗体またはそのＦａｂフラグメント。実施形��１８３：単離モノクローナル抗体またはそのＦａｂフラグメントであって、該抗体またはそのＦａｂフラグメントは、配列番号３６０のヒトＢＣＭＡに特異的に結合し、それによって、該ヒトＢＭＣＡ上の溶媒接触可能表面積を、０〜３．４Å（境界値を含む）の接触距離分解能でのＸ線結晶構造解析によって定義されるように、配列番号３６０のアミノ酸残基Ｇｌｙ６、Ｔｙｒ１３、Ｐｈｅ１４、Ａｓｐ１５、Ｓｅｒ１６、Ｌｅｕ１７、Ｈｉｓ１９、Ｔｈｒ３２、Ｐｒｏ３４、及びＬｅｕ３５において５０％を上回って変化させ、該抗体またはそのＦａｂフラグメントは、ＡＰＲＩＬの生物学的活性を阻害する、単離モノクローナル抗体またはそのＦａｂフラグメント。実施形態１８４：該モノクローナル抗体またはそのＦａｂフラグメントは、ヒトのものである、実施形態１８３に記載の抗体またはそのＦａｂフラグメント。実施形態１８５：該モノクローナル抗体またはそのＦａｂフラグメントは、ヒトＩｇＧである、実施形態１８４に記載の抗体またはそのＦａｂフラグメント。実施形態１８６：該モノクローナル抗体またはそのＦａｂフラグメントは、ヒトＩｇＧ１である、実施形態１８５に記載の抗体またはそのＦａｂフラグメント。実施形態１８７：該抗体またはそのＦａｂフラグメントは、ヒトＢＣＭＡに対して０．７５〜１．１１ｎＭ±０．１ｎＭ（境界値を含む）のＫｄを有する、実施形態１８３〜１８６に記載の抗体。実施形態１８８：リンカーをさらに含む、実施形態１０８〜１８７のいずれかに記載の抗体またはそのフラグメント。実施形態１８９：薬物または化学療法剤をさらに含む、実施形態１８８に記載の抗体またはそのフラグメント。実施形態１９０：該ポリペプチドまたはフラグメントは、６−マレイミドカプロイル、マレイミドプロパノイル、バリン−シトルリン、アラニン−フェニルアラニン、ｐ−アミノベンジルオキシカルボニル、Ｍａｌ−ｄＰＥＧ４−ＮＨＳ、Ｎ−スクシンイミジル４−（２−ピリジルチオ）ペンタノエート（「ＳＰＰ」）、Ｎ−スクシンイミジル４−（Ｎ−マレイミドメチル）シクロヘキサン−１カルボキシレート（「ＳＭＣＣ」または「ＭＣＣ」）、及びＮ−スクシンイミジル（４−ヨード−アセチル）アミノベンゾエート（「ＳＩＡＢ」）からなる群から選択されるリンカーをさらに含む、実施形態１８９に記載の抗体またはフラグメント。実施形態１９１：該リンカーは、Ｎ−スクシンイミジル４−（Ｎ−マレイミドメチル）シクロヘキサン−１カルボキシレートである、実施形態１９０に記載の抗体またはフラグメント。実施形態１９２：該抗体またはフラグメントは、チオテパ及びシクロホスファミド（ＣＹＴＯＸＡＮ（商標））；スルホン酸アルキル、例えば、ブスルファン、インプロスルファン、及びピポスルファン；アジリジン、例えば、ベンゾドーパ、カルボコン、メツレドーパ、及びウレドーパ；エチレンイミン及びメチラメラミン（アルトレタミン、トリエチレンメラミン、トリエチレンホスホラミド、トリエチレンチオホスファオラミド、及びトリメチローロメラミンを含む）；アセトゲニン（特にブラタシン及びブラタシノン）；カンプトテシン（合成類似体トポテカンを含む）；ブリオスタチン；カリスタチン；ＣＣ−１０６５（そのアゾゼレシン、カルゼレシン、及びビゼレシン合成類似体を含む）；クリプトフィシン（特にクリプトフィシン１及びクリプトフィシン８）；ドラスタチン；デュオカルマイシン（合成類似体ＫＷ−２１８９及びＣＢＩ−ＴＭＩを含む）；エリュテロビン；パンクラチスタチン；サルコジクチイン；スポンジスタチン；ナイトロジェンマスタード、例えば、クロラムブシル、クロマファジン、コロホスファミド、エストラムスチン、イホスファミド、メクロレタミン、メクロレタミンオキシド塩酸塩、メルファラン、ノベムビシン、フェネステリン（ｐｈｅｎｅｓｔｅｒｉｎｅ）、プレドニムスチン、トロホスファミド、ウラシルマスタード；ニトロソ尿素、例えば、カルムスチン、クロロゾトシン、フォテムスチン、ロムスチン、ニムスチン、ラニムスチン；抗生物質、例えば、エンジイン抗生物質（例えば、カリケアマイシン、特にカリケアマイシンγ１及びカリケアマイシンθＩ、例えばＡｎｇｅｗ  Ｃｈｅｍ．Ｉｎｔｌ．Ｅｄ．Ｅｎｇｌ．３３：１８３−１８６（１９９４）を参照されたい；ダイネミシン（ダイネミシンＡを含む）；エスペラミシン；ならびにネオカルジノスタチン発色団及び関連色素タンパク質エンジイン抗生物質発色団）、アクラノマイシン、アクチノマイシン、オースラマイシン、アザセリン、ブレオマイシン、カクチノマイシン、カラビシン、カミノマイシン、カルジノフィリン；クロモマイシン、ダクチノマイシン、ダウノルビシン、デトルビシン、６−ジアゾ−５−オキソ−Ｌ−ノルロイシン、ドキソルビシン（モルホリノ−ドキソルビシン、シアノモルホリノ−ドキソルビシン、２−ピロリノ−ドキソルビシン、及びデオキシドキソルビシンを含む）、エピルビシン、エソルビシン、イダルビシン、マルセロマイシン、ナイトマイシン、ミコフェノール酸、ノガラマイシン、オリボマイシン、ペプロマイシン、ポトフィロマイシン、ピューロマイシン、ケラマイシン、ロドルビシン、ストレプトニグリン、ストレプトゾシン、ツベルシジン、ウベニメクス、ジノスタチン、ゾルビシン；代謝拮抗薬、例えば、メトトレキサート、及び５−フルオロウラシル（５−ＦＵ）；葉酸類似体、例えば、デノプテリン、メトトレキサート、プテロプテリン、トリメトレキサート；プリン類似体、例えば、フルダラビン、６−メルカプトプリン、チアミプリン、チオグアニン；ピリミジン類似体、例えば、アンシタビン、アザシチジン、６−アザウリジン、カルモフール、シタラビン、ジデオキシウリジン、ドキシフルリジン、エノシタビン、フロクスウリジン、５−ＦＵ；アンドロゲン、例えば、カルステロン、プロピオン酸ドロモスタノロン、エピチオスタノール、メピチオスタン、テストラクトン；抗副腎剤、例えば、アミノグルテチミド、ミトタン、トリロスタン；葉酸補液、例えば、フロリン酸；アセグラトン；アルドホスファミドグリコシド；アミノレブリン酸；アムサクリン；ベストラブシル；ビスアントレン；エダトラキサート；デフォファミン；デメコルチン；ジアジクオン；エルホミチン；酢酸エリプチニウム；エポチロン；エトグルシド；硝酸ガリウム；ヒドロキシ尿素；レンチナン；ロニダミン；マイタンシノイド、例えば、マイタンシン、及びアンサマイトシン；ミトグアゾン；ミトキサントロン；モピダモール；ニトラクリン；ペントスタチン；フェナメット；ピラルビシン；ポドフィリン酸；２−エチルヒドラジド；プロカルバジン；ＰＳＫ（登録商標）；ラゾキサン；リゾキシン；シゾフラン；スピロゲルマニウム；テヌアゾン酸；トリアジクオン；２，２’，２’’−トリクロロトリエチルアミン；トリコテセン（特に、Ｔ−２毒素、ベラクリンＡ、ロリジンＡ、及びアングイジン）；ウレタン；ビンデシン；ダカルバジン；マンノムスチン；ミトブロニトール；ミトラクトール；ピポブロマン；ガシトシン；アラビノシド（「Ａｒａ−Ｃ」）；シクロホスファミド；チオテパ；タキソイド、例えば、パクリタキセル（ＴＡＸＯＬ（商標）、Ｂｒｉｓｔｏｌ−Ｍｙｅｒｓ  Ｓｑｕｉｂｂ  Ｏｎｃｏｌｏｇｙ，Ｐｒｉｎｃｅｔｏｎ，Ｎ．Ｊ．）及びドセタキセル（ＴＡＸＯＴＥＲＥ（登録商標）、Ｒｈｏｎｅ−Ｐｏｕｌｅｎｃ  Ｒｏｒｅｒ，Ａｎｔｏｎｙ，Ｆｒａｎｃｅ）；クロラムブシル；ゲムシタビン；６−チオグアニン；メルカプトプリン；メトトレキサート；白金類似体、例えば、シスプラチン、及びカルボプラチン；ビンブラスチン；白金；エトポシド（ＶＰ−１６）；イホスファミド；マイトマイシンＣ；ミトキサントロン；ビンクリスチン；ビノレルビン；ナベルビン；ノバントロン；テニポシド；ダウノマイシン；アミノプテリン；キセロダ；イバンドロネート；ＣＰＴ−１１；トポイソメラーゼ阻害剤ＲＦＳ  ２０００；ジフルオロメチルオミチン（ＤＭＦＯ）；レチノイン酸；カペシタビン；タモキシフェン、ラロキシフェン、アロマターゼ阻害性４（５）−イミダゾール、４−ヒドロキシタモキシフェン、トリオキシフェン、ケオキシフェン、ＬＹ１１７０１８、オナプリストン、及びトレミフェン；ならびに抗アンドロゲン薬、例えば、フルタミド、ニルタミド、ビカルタミド、ロイプロリド、ゴセレリン、コルヒチン部位結合剤、コンブレタスタチン（ＡＶＥ８０６、コンブレタスタチンＡ−４プロドラッグ（ＣＡ４Ｐ）、Ｏｘｉ−４５０３）、クリプトフィシン（ＬＹ３５５７０３）、ディスコデルモリド、ドラスタチン、及び類似体（オーリスタチンＰＨＥ、ドラスタチン１０、ＩＬＸ−６５１、シンプロスタチン１、ＴＺＴ−１０２７）、エポチロン（ＢＭＳ−２４７５５０、ＢＭＳ−３１０７０５、ＥＰ０９０６、ＫＯＳ−８６２、ＺＫ−ＥＰＯ）、エリュテロビン、ＦＲ１８２８７７、ハリコンドリンＢ（Ｅ
７３８９）、ハリミド（ＮＰＩ−２３５２及びＮＰＩ−２３５８）、ヘミアステリン（ＨＴＩ−２８６）、ラウリマライド、マイタンシノイド（「ＤＭ１」、「ＤＭ３」、または「ＤＭ４」）（ビバツズマブメルタンシン、カンツズマブメルタンシン、ｈｕＮ９０１−ＤＭ１／ＢＢ−１０９０１ＴＡＰ、ＭＬＮ５９１ＤＭ１、Ｍｙ９−６−ＤＭ１、トラスツズマブ−ＤＭ１）、ＰＣ−ＳＰＥＳ、ペロルシドＡ、レスベラトロール、Ｓ−アリルメルカプトシステイン（ＳＡＭＣ）、スポンジスタチン、ビチレブアミド、分子モーターキネシン（ＳＢ−７１５９９２）、設計されたコルヒチン部位結合剤（Ａ−２８９０９９、Ａ−２９３６２０／Ａ−３１８３１５、ＡＢＴ−７５１／Ｅ７０１０、Ｄ−２４８５１／Ｄ−６４１３１、ＺＤ６１２６）、他の新規な紡錘体毒（２−メトキシエストラジオール（２−ＭＥ２）、ベズイミダゾールカルバメート（ＡＮＧ  ６００シリーズ、メベンダゾール）、ＣＰ２４８／ＣＰ４６１、ＨＭＮ−２１４、Ｒ４４０、ＳＤＸ−１０３、Ｔ６７／Ｔ６０７）からなる群から選択される、薬物または化学療法剤をさらに含む、実施形態１８８〜１９１に記載の抗体またはフラグメント。実施形態１９３：薬物または化学療法剤は、マイタンシノイド（「ＤＭ１」、「ＤＭ３」、または「ＤＭ４」）からなる群から選択される、実施形態１９２に記載の抗体またはフラグメント。実施形態１９４：該薬物または化学療法剤は、ＤＭ１である、実施形態１９３に記載の抗体またはフラグメント。実施形態１９５：該抗体またはフラグメントは、抗体／抗体フラグメントに対する薬物の比が１〜１０（境界値を含む）である、実施形態１９３または１９４に記載の抗体またはフラグメント。実施形態１９６：該抗体またはフラグメントは、抗体／抗体フラグメントに対する薬物の比が２〜５（境界値を含む）である、実施形態１９５に記載の抗体またはフラグメント。実施形態１９７：実施形態１０８〜１９６のいずれかに記載の抗体またはそのフラグメントを含む、組成物。実施形態１９８：実施形態１０８〜１９６のいずれかに記載の抗体またはそのフラグメントを含む、医薬組成物。実施形態１９９：医薬として許容される希釈剤、担体、可溶化剤、乳化剤、及び／または保存剤を含む、実施形態１９８に記載の医薬組成物。実施形態２００：疾患を治療する方法であって、実施形態１９７〜１９９のいずれかに記載の組成物の有効量を投与することを含み、該疾患は、Ｂ細胞癌、多発性骨髄腫、悪性形質細胞腫、カーレル病、及び骨髄腫症、形質細胞性白血病、形質細胞腫、Ｂ細胞性前リンパ急性白血病、有毛細胞性白血病、Ｂ細胞非ホジキンリンパ腫（ＮＨＬ）、急性骨髄性白血病（ＡＭＬ）、慢性骨髄性白血病（ＣＭＬ）、急性リンパ球性白血病（ＡＬＬ）、慢性リンパ球性白血病（ＣＬＬ）、濾胞性リンパ腫（濾胞性非ホジキンリンパ腫型を含む）、バーキットリンパ腫（風土性バーキットリンパ腫、散発性バーキットリンパ腫）、辺縁帯リンパ腫（粘膜関連リンパ組織、ＭＡＬＴ／ＭＡＬＴリンパ腫、単球様Ｂ細胞リンパ腫、絨毛状リンパ球を伴う脾臓リンパ腫）、マントル細胞リンパ腫、大細胞型リンパ腫（びまん性大細胞、びまん性混合細胞、免疫芽球性リンパ腫、原発性縦隔性Ｂ細胞リ���パ腫、血管中心性リンパ腫−肺性Ｂ細胞）、小リンパ球性リンパ腫（ＳＬＬ）、前駆Ｂリンパ芽球性リンパ腫、骨髄性白血病（顆粒球性、骨髄性、急性骨髄性白血病、慢性骨髄性白血病、亜急性骨髄性白血病、骨髄性肉腫、緑色腫、顆粒球性肉腫、急性前骨髄球性白血病、急性骨髄単球性白血病）、ヴァルデンストレームマクログロブリン血症、または他のＢ細胞リンパ腫からなる群から選択される、方法。実施形態２０１：該疾患は、Ｂ細胞癌、多発性骨髄腫、悪性形質細胞腫、または他のＢ細胞リンパ腫からなる群から選択される、実施形態２００に記載の方法。実施形態２０２：該疾患は、多発性骨髄腫である、実施形態２０１に記載の方法。実施形態２０３：化学療法、放射線療法、手術、プロテアソーム阻害剤、コルチコステロイド、及び幹細胞移植からなる群から選択される、さらなる追加の治療のうちの１つを施すことをさらに含む、実施形態２００〜２０２のいずれかに記載の方法。実施形態２０４：該追加の治療を施すことは、実施形態１９７〜１９９のいずれかに記載の組成物の投与の前に、それと同時に、もしくはそれに続いて、またはそのそれぞれの組み合わせで、行われる、実施形態２０３に記載の方法。
【００４９】
ＢＣＭＡ抗原結合タンパク質を治療用途に使用する実施形態において、ＢＣＭＡ抗原結合タンパク質の１つの特徴は、それが、ＢＡＦＦ及び／またはＡＰＲＩＬがＢＣＭＡを活性化することを阻害し得ることである。そのような抗体は、ＢＡＦＦ及び／またはＡＰＲＩＬがＢＣＭＡを活性化することを阻害するそれらの能力のため、中和抗体と見なされる。この場合、抗原結合タンパク質は、ＢＣＭＡに特異的に結合し、ＢＡＦＦ及び／またはＡＰＲＩＬのＢＣＭＡに対する生物学的活性を、１０〜１００％のいずれか、例えば、少なくとも約２０、２１、２２、２３、２４、２５、２６、２７、２８、２９、３０、３１、３２、３３、３４、３５、３６、３７、３８、３９、４０、４１、４２、４３、４４、４５、４６、４７、４８、４９、５０、５１、５２、５３、５４、５５、５６、５７、５８、５９、６０、６１、６２、６３、６４、６５、６６、６７、６８、６９、７０、７１、７２、７３、７４、７５、７６、７７、７８、７９、８０、８１、８２、８３、８４、８５、８６、８７、８８、８９、９０、９１、９２、９３、９４、９５、９６、９７、９８、９９％、またはそれ以上阻害する（例えば、実施例２等、本明細書に記載されるインビトロ競合的結合アッセイで結合を測定することによって）。本発明の態様は、ヒトＢＣＭＡに特異的に結合し、実施例２に記載されるアッセイ条件下、または同等のアッセイにおいて、ヒトＡＰＲＩＬとヒトＢＣＭＡ、例えばＡｂ−１との結合を約８９％（±５％）阻害する、ヒトモノクローナル抗体を含む。
【００５０】
抗原結合タンパク質の実施形態は、本明細書において様々に定義されるように、１つ以上の相補性決定領域（ＣＤＲ）とともに、足場構造を含む。抗原結合タンパク質の実施形態は、１つ以上の可変ドメインを有する足場構造を含む。実施形態には、表１に列挙される抗体、ならびにそれらのフラグメント、誘導体、変異タンパク質、及び変異体が含まれる。実施形態には、表１に列挙される抗体のＡＤＣが含まれる。表１に列挙される抗体の配列は、配列表に提供される。
【表１】
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【００５１】
本明細書に記載される種々の抗体のＣＤＲドメインを、ＡＨｏの番号付けシステムを使用して特徴付けた。ＡＨｏの番号付けシステムは、当該技術分野で周知であり、Ｈｏｎｅｇｇｅｒ，Ａ．，ａｎｄ  Ｐｌｕｃｋｔｈｕｎ，Ａ．（２００１），Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．３０９，６５７−６７０を参照されたい。本発明の実施形態は、他の従来的な番号付けシステム、例えば、Ｋａｂａｔ及びＣｌｏｔｈｉａの番号付けシステムを用いて特定される、本明細書に記載されるＶｈ及びＶｌドメインに見出されるＣＤＲを含む抗体を含む。そのような番号付けシステムは、当該技術分野で周知である（例えば、ｈｔｔｐ：／／ｗｗｗ．ｂｉｏｃ．ｕｚｈ．ｃｈ／ａｎｔｉｂｏｄｙを参照されたい）。これらのＣＤＲ番号付けシステムの比較については、ｈｔｔｐ：／／ｗｗｗ．ｂｉｏｃ．ｕｚｈ．ｃｈ／ａｎｔｉｂｏｄｙ／Ｎｕｍｂｅｒｉｎｇ／ＮｕｍＦｒａｍｅ．ｈｔｍｌを参照されたい。
【００５２】
本発明の態様は、Ａｂ−１の６つのＣＤＲを含む単離モノクローナル抗体を含む。本発明の態様は、Ａｂ−２の６つのＣＤＲを含む単離モノクローナル抗体を含む。本発明の態様は、Ａｂ−３の６つのＣＤＲを含む単離モノクローナル抗体を含む。本発明の態様は、Ａｂ−４の６つのＣＤＲを含む単離モノクローナル抗体を含む。本発明の態様は、Ａｂ−５の６つのＣＤＲを含む単離モノクローナル抗体を含む。本発明の態様は、Ａｂ−６の６つのＣＤＲを含む単離モノクローナル抗体を含む。本発明の態様は、Ａｂ−７の６つのＣＤＲを含む単離モノクローナル抗体を含む。本発明の態様は、Ａｂ−８の６つのＣＤＲを含む単離モノクローナル抗体を含む。本発明の態様は、Ａｂ−９の６つのＣＤＲを含む単離モノクローナル抗体を含む。本発明の態様は、Ａｂ−１０の６つのＣＤＲを含む単離モノクローナル抗体を含む。本発明の態様は、Ａｂ−１１の６つのＣＤＲを含む単離モノクローナル抗体を含む。本発明の態様は、Ａｂ−１２の６つのＣＤＲを含む単離モノクローナル抗体を含む。本発明の態様は、Ａｂ−１３の６つのＣＤＲを含む単離モノクローナル抗体を含む。本発明の態様は、Ａｂ−１４の６つのＣＤＲを含む単離モノクローナル抗体を含む。本発明の態様は、Ａｂ−１５の６つのＣＤＲを含む単離モノクローナル抗体を含む。本発明の態様は、Ａｂ−１６の６つのＣＤＲを含む単離モノクローナル抗体を含む。本発明の態様は、Ａｂ−１７の６つのＣＤＲを含む単離モノクローナル抗体を含む。前述の実施形態の態様は、ヒトモノクローナル抗体、ヒトモノクローナルＩｇＧ抗体、及びヒトモノクローナルＩｇＧ１抗体を含む。
【００５３】
本発明の態様は、ＡＨｏ、Ｋａｂａｔ、またはＣｌｏｔｈｉａの番号付けシステムのうちのいずれか１つによって決定される、Ａｂ−１の６つのＣＤＲを含む単離モノクローナル抗体を含む。本発明の態様は、ＡＨｏ、Ｋａｂａｔ、またはＣｌｏｔｈｉａの番号付けシステムのうちのいずれか１つによって決定される、Ａｂ−２の６つのＣＤＲを含む単離モノクローナル抗体を含む。本発明の態様は、ＡＨｏ、Ｋａｂａｔ、またはＣｌｏｔｈｉａの番号付けシステムのうちのいずれか１つによって決定される、Ａｂ−３の６つのＣＤＲを含む単離モノクローナル抗体を含む。本発明の態様は、ＡＨｏ、Ｋａｂａｔ、またはＣｌｏｔｈｉａの番号付けシステムのうちのいずれか１つによって決定される、Ａｂ−４の６つのＣＤＲを含む単離モノクローナル抗体を含む。本発明の態様は、ＡＨｏ、Ｋａｂａｔ、またはＣｌｏｔｈｉａの番号付けシステムのうちのいずれか１つによって決定される、Ａｂ−５の６つのＣＤＲを含む単離モノクローナル抗体を含む。本発明の態様は、ＡＨｏ、Ｋａｂａｔ、またはＣｌｏｔｈｉａの番号付けシステムのうちのいずれか１つによって決定される、Ａｂ−６の６つのＣＤＲを含む単離モノクローナル抗体を含む。本発明の態様は、ＡＨｏ、Ｋａｂａｔ、またはＣｌｏｔｈｉａの番号付けシステムのうちのいずれか１つによって決定される、Ａｂ−７の６つのＣＤＲを含む単離モノクローナル抗体を含む。本発明の態様は、ＡＨｏ、Ｋａｂａｔ、またはＣｌｏｔｈｉａの番号付けシステムのうちのいずれか１つによって決定される、Ａｂ−８の６つのＣＤＲを含む単離モノクローナル抗体を含む。本発明の態様は、ＡＨｏ、Ｋａｂａｔ、またはＣｌｏｔｈｉａの番号付けシステムのうちのいずれか１つによって決定される、Ａｂ−９の６つのＣＤＲを含む単離モノクローナル抗体を含む。本発明の態様は、ＡＨｏ、Ｋａｂａｔ、またはＣｌｏｔｈｉａの番号付けシステムのうちのいずれか１つによって決定される、Ａｂ−１０の６つのＣＤＲを含む単離モノクローナル抗体を含む。本発明の態様は、ＡＨｏ、Ｋａｂａｔ、またはＣｌｏｔｈｉａの番号付けシステムのうちのいずれか１つによって決定される、Ａｂ−１１の６つのＣＤＲを含む単離モノクローナル抗体を含む。本発明の態様は、ＡＨｏ、Ｋａｂａｔ、またはＣｌｏｔｈｉａの番号付けシステムのうちのいずれか１つによって決定される、Ａｂ−１２の６つのＣＤＲを含む単離モノクローナル抗体を含む。本発明の態様は、ＡＨｏ、Ｋａｂａｔ、またはＣｌｏｔｈｉａの番号付けシステムのうちのいずれか１つによって決定される、Ａｂ−１３の６つのＣＤＲを含む単離モノクローナル抗体を含む。本発明の態様は、ＡＨｏ、Ｋａｂａｔ、またはＣｌｏｔｈｉａの番号付けシステムのうちのいずれか１つによって決定される、Ａｂ−１４の６つのＣＤＲを含む単離モノクローナル抗体を含む。本発明の態様は、ＡＨｏ、Ｋａｂａｔ、またはＣｌｏｔｈｉａの番号付けシステムのうちのいずれか１つによって決定される、Ａｂ−１５の６つのＣＤＲを含む単離モノクローナル抗体を含む。本発明の態様は、ＡＨｏ、Ｋａｂａｔ、またはＣｌｏｔｈｉａの番号付けシステムのうちのいずれか１つによって決定される、Ａｂ−１６の６つのＣＤＲを含む単離モノクローナル抗体を含む。本発明の態様は、ＡＨｏ、Ｋａｂａｔ、またはＣｌｏｔｈｉａの番号付けシステムのうちのいずれか１つによって決定される、Ａｂ−１７の６つのＣＤＲを含む単離モノクローナル抗体を含む。前述の実施形態の態様は、ヒトモノクローナル抗体、ヒトモノクローナルＩｇＧ抗体、及びヒトモノクローナルＩｇＧ１抗体を含む。
【００５４】
本発明の態様は、Ａｂ−１の６つのＣＤＲ、具体的には、Ｖｈ−ＣＤＲ１（配列番号４）、Ｖｈ−ＣＤＲ２（配列番号５）、Ｖｈ−ＣＤＲ３（配列番号６）、Ｖｌ−ＣＤＲ１（配列番号１０６）、Ｖｌ−ＣＤＲ２（配列番号１０７）、及びＶｌ−ＣＤＲ３（配列番号１０８）を含む、単離モノクローナル抗体を含む。本発明の態様は、Ａｂ−２の６つのＣＤＲ、具体的には、Ｖｈ−ＣＤＲ１（配列番号１０）、Ｖｈ−ＣＤＲ２（配列番号１１）、Ｖｈ−ＣＤＲ３（配列番号１２）、Ｖｌ−ＣＤＲ１（配列番号１１２）、Ｖｌ−ＣＤＲ２（配列番号１１３）、及びＶｌ−ＣＤＲ３（配列番号１１４）を含む、単離モノクローナル抗体を含む。本発明の態様は、Ａｂ−３の６つのＣＤＲ、具体的には、Ｖｈ−ＣＤＲ１（配列番号１６）、Ｖｈ−ＣＤＲ２（配列番号１７）、Ｖｈ−ＣＤＲ３（配列番号１８）、Ｖｌ−ＣＤＲ１（配列番号１１８）、Ｖｌ−ＣＤＲ２（配列番号１１９）、及びＶｌ−ＣＤＲ３（配列番号１２０）を含む、単離モノクローナル抗体を含む。本発明の態様は、Ａｂ−４の６つのＣＤＲ、具体的には、Ｖｈ−ＣＤＲ１（配列番号２２）、Ｖｈ−ＣＤＲ２（配列番号２３）、Ｖｈ−ＣＤＲ３（配列番号２４）、Ｖｌ−ＣＤＲ１（配列番号１２４）、Ｖｌ−ＣＤＲ２（配列番号１２５）、及びＶｌ−ＣＤＲ３（配列番号１２６）を含む、単離モノクローナル抗体を含む。本発明の態様は、Ａｂ−５の６つのＣＤＲ、具体的には、Ｖｈ−ＣＤＲ１（配列番号２８）、Ｖｈ−ＣＤＲ２（配列番号２９）、Ｖｈ−ＣＤＲ３（配列番号３０）、Ｖｌ−ＣＤＲ１（配列番号１３０）、Ｖｌ−ＣＤＲ２（配列番号１３１）、及びＶｌ−ＣＤＲ３（配列番号１３２）を含む、単離モノクローナル抗体を含む。本発明の態様は、Ａｂ−６の６つのＣＤＲ、具体的には、Ｖｈ−ＣＤＲ１（配列番号３４）、Ｖｈ−ＣＤＲ２（配列番号３５）、Ｖｈ−ＣＤＲ３（配列番号３６）、Ｖｌ−ＣＤＲ１（配列番号１３６）、Ｖｌ−ＣＤＲ２（配列番号１３７）、及びＶｌ−ＣＤＲ３（配列番号１３８）を含む、単離モノクローナル抗体を含む。本発明の態様は、Ａｂ−７の６つのＣＤＲ、具体的には、Ｖｈ−ＣＤＲ１（配列番号４０）、Ｖｈ−ＣＤＲ２（配列番号４１）、Ｖｈ−ＣＤＲ３（配列番号４２）、Ｖｌ−ＣＤＲ１（配列番号１４２）、Ｖｌ−ＣＤＲ２（配列番号１４３）、及びＶｌ−ＣＤＲ３（配列番号１４４）を含む、単離モノクローナル抗体を含む。本発明の態様は、Ａｂ−８の６つのＣＤＲ、具体的には、Ｖｈ−ＣＤＲ１（配列番号４６）、Ｖｈ−ＣＤＲ２（配列番号４７）、Ｖｈ−ＣＤＲ３（配列番号４８）、Ｖｌ−ＣＤＲ１（配列番号１４８）、Ｖｌ−ＣＤＲ２（配列番号１４９）、及びＶｌ−ＣＤＲ３（配列番号１５０）を含む、単離モノクローナル抗体を含む。本発明の態様は、Ａｂ−９の６つのＣＤＲ、具体的には、Ｖｈ−ＣＤＲ１（配列番号５２）、Ｖｈ−ＣＤＲ２（配列番号５３）、Ｖｈ−ＣＤＲ３（配列番号５４）、Ｖｌ−ＣＤＲ１（配列番号１５４）、Ｖｌ−ＣＤＲ２（配列番号１５５）、及びＶｌ−ＣＤＲ３（配列番号１５６）を含む、単離モノクローナル抗体を含む。本発明の態様は、Ａｂ−１０の６つのＣＤＲ、具体的には、Ｖｈ−ＣＤＲ１（配列番号５８）、Ｖｈ−ＣＤＲ２（配列番号５９）、Ｖｈ−ＣＤＲ３（配列番号６０）、Ｖｌ−ＣＤＲ１（配列番号１６０）、Ｖｌ−ＣＤＲ２（配列番号１６１）、及びＶｌ−ＣＤＲ３（配列番号１６２）を含む、単離モノクローナル抗体を含む。本発明の態様は、Ａｂ−１１の６つのＣＤＲ、具体的には、Ｖｈ−ＣＤＲ１（配列番号６４）、Ｖｈ−ＣＤＲ２（配列番号６５）、Ｖｈ−ＣＤＲ３（配列番号６６）、Ｖｌ−ＣＤＲ１（配列番号１６６）、Ｖｌ−ＣＤＲ２（配列番号１６７）、及びＶｌ−ＣＤＲ３（配列番号１６８）を含む、単離モノクローナル抗体を含む。本発明の態様は、Ａｂ−１２の６つのＣＤＲ、具体的には、Ｖｈ−ＣＤＲ１（配列番号７０）、Ｖｈ−ＣＤＲ２（配列番号７１）、Ｖｈ−ＣＤＲ３（配列番号７２）、Ｖｌ−ＣＤＲ１（配列番号１７２）、Ｖｌ−ＣＤＲ２（配列番号１７３）、及びＶｌ−ＣＤＲ３（配列番号１７４）を含む、単離モノクローナル抗体を含む。本発明の態様は、Ａｂ−１３の６つのＣＤＲ、具体的には、Ｖｈ−ＣＤＲ１（配列番号７６）、Ｖｈ−ＣＤＲ２（配列番号７７）、Ｖｈ−ＣＤＲ３（配列番号７８）、Ｖｌ−ＣＤＲ１（配列番号１７８）、Ｖｌ−ＣＤＲ２（配列番号１７９）、及びＶｌ−ＣＤＲ３（配列番号１８０）を含む、単離モノクローナル抗体を含む。本発明の態様は、Ａｂ−１４の６つのＣＤＲ、具体的には、Ｖｈ−ＣＤＲ１（配列番号８２）、Ｖｈ−ＣＤＲ２（配列番号８３）、Ｖｈ−ＣＤＲ３（配列番号８４）、Ｖｌ−ＣＤＲ１（配列番号１８４）、Ｖｌ−ＣＤＲ２（配列番号１８５）、及びＶｌ−ＣＤＲ３（配列番号１８６）を含む、単離モノクローナル抗体を含む。本発明の態様は、Ａｂ−１５の６つのＣＤＲ、具体的には、Ｖｈ−ＣＤＲ１（配列番号８８）、Ｖｈ−ＣＤＲ２（配列番号８９）、Ｖｈ−ＣＤＲ３（配列番号９０）、Ｖｌ−ＣＤＲ１（配列番号１９０）、Ｖｌ−ＣＤＲ２（配列番号１９１）、及びＶｌ−ＣＤＲ３（配列番号１９２）を含む、単離モノクローナル抗体を含む。本発明の態様は、Ａｂ−１６の６つのＣＤＲ、具体的には、Ｖｈ−ＣＤＲ１（配列番号９４）、Ｖｈ−ＣＤＲ２（配列番号９５）、Ｖｈ−ＣＤＲ３（配列番号９６）、Ｖｌ−ＣＤＲ１（配列番号１９６）、Ｖｌ−ＣＤＲ２（配列番号１９７）、及びＶｌ−ＣＤＲ３（配列番号１９８）を含む、単離モノクローナル抗体を含む。本発明の態様は、Ａｂ−１７の６つのＣＤＲ、具体的には、Ｖｈ−ＣＤＲ１（配列番号１００）、Ｖｈ−ＣＤＲ２（配列番号１０１）、Ｖｈ−ＣＤＲ３（配列番号１０２）、Ｖｌ−ＣＤＲ１（配列番号２０２）、Ｖｌ−ＣＤＲ２（配列番号２０３）、及びＶｌ−ＣＤＲ３（配列番号２０４）を含む、単離モノクローナル抗体を含む。前述の実施形態の態様は、ヒトモノクローナル抗体、ヒトモノクローナルＩｇＧ抗体、及びヒトモノクローナルＩｇＧ１抗体を含む。本発明の態様は、前述のもののフラグメント、誘導体、変異タンパク質、及び変異体を含む。
【００５５】
本発明の態様は、Ａｂ−１Ｖｌ（配列番号２４０）及びＡｂ−１Ｖｈ（配列番号２０６）ドメインを含む、単離モノクローナル抗体を含む。本発明の態様は、Ａｂ−２Ｖｌ（配列番号２４２）及びＡｂ−２Ｖｈ（配列番号２０８）ドメインを含む、単離モノクローナル抗体を含む。本発明の態様は、Ａｂ−３Ｖｌ（配列番号２４４）及びＡｂ−３Ｖｈ（配列番号２１０）ドメインを含む、単離モノクローナル抗体を含む。本発明の態様は、Ａｂ−４Ｖｌ（配列番号２４６）及びＡｂ−４Ｖｈ（配列番号２１２）ドメインを含む、単離モノクローナル抗体を含む。本発明の態様は、Ａｂ−５Ｖｌ（配列番号２４８）及びＡｂ−５Ｖｈ（配列番号２１４）ドメインを含む、単離モノクローナル抗体を含む。本発明の態様は、Ａｂ−６Ｖｌ（配列番号２５０）及びＡｂ−６Ｖｈ（配列番号２１６）ドメインを含む、単離モノクローナル抗体を含む。本発明の態様は、Ａｂ−７Ｖｌ（配列番号２５２）及びＡｂ−７Ｖｈ（配列番号２１８）ドメインを含む、モノクローナル抗体を含む。本発明の態様は、Ａｂ−８Ｖｌ（配列番号２５４）及びＡｂ−８Ｖｈ（配列番号２２０）ドメインを含む、単離モノクローナル抗体を含む。本発明の態様は、Ａｂ−９Ｖｌ（配列番号２５６）及びＡｂ−９Ｖｈ（配列番号２２２）ドメインを含む、単離モノクローナル抗体を含む。本発明の態様は、Ａｂ−１０Ｖｌ（配列番号２５８）及びＡｂ−１０Ｖｈ（配列番号２２４）ドメインを含む、単離モノクローナル抗体を含む。本発明の態様は、Ａｂ−１１Ｖｌ（配列番号２６０）及びＡｂ−１１Ｖｈ（配列番号２２６）ドメインを含む、単離モノクローナル抗体を含む。本発明の態様は、Ａｂ−１２Ｖｌ（配列番号２６２）及びＡｂ−１２Ｖｈ（配列番号２２８）ドメインを含む、単離モノクローナル抗体を含む。本発明の態様は、Ａｂ−１３Ｖｌ（配列番号２６４）及びＡｂ−１３Ｖｈ（配列番号２３０）ドメインを含む、単離モノクローナル抗体を含む。本発明の態様は、Ａｂ−１４Ｖｌ（配列番号２６６）及びＡｂ−１４Ｖｈ（配列番号２３２）ドメインを含む、単離モノクローナル抗体を含む。本発明の態様は、Ａｂ−１５Ｖｌ（配列番号２６８）及びＡｂ−１５Ｖｈ（配列番号２３４）ドメインを含む、単離モノクローナル抗体を含む。本発明の態様は、Ａｂ−１６Ｖｌ（配列番号２７０）及びＡｂ−１６Ｖｈ（配列番号２３６）ドメインを含む、単離モノクローナル抗体を含む。本発明の態様は、Ａｂ−１７Ｖｌ（配列番号２７２）及びＡｂ−１７Ｖｈ（配列番号２３８）ドメインを含む、単離抗体を含む。前述の実施形態の態様は、ヒトモノクローナル抗体、ヒトモノクローナルＩｇＧ抗体、及びヒトモノクローナルＩｇＧ１抗体を含む。本発明の態様は、前述のもののフラグメント、誘導体、変異タンパク質、及び変異体を含む。
【００５６】
本発明の態様は、Ａｂ−１軽鎖（配列番号２８０）及びＡｂ−１重鎖（配列番号２７４）を含む、単離モノクローナル抗体を含む。本発明の態様は、Ａｂ−２軽鎖（配列番号２８２）及びＡｂ−２重鎖（配列番号２７６）を含む、単離モノクローナル抗体を含む。本発明の態様は、Ａｂ−３軽鎖（配列番号２８４）及びＡｂ−３重鎖（配列番号２７８）を含む、単離モノクローナル抗体を含む。本発明の態様は、２つのＡｂ−１軽鎖（配列番号２８０）及び２つのＡｂ−１重鎖（配列番号２７４）を含む、単離モノクローナル抗体を含む。本発明の態様は、２つのＡｂ−２軽鎖（配列番号２８２）及び２つのＡｂ−２重鎖（配列番号２７６）を含む、単離モノクローナル抗体を含む。本発明の態様は、２つのＡｂ−３軽鎖（配列番号２８４）及び２つのＡｂ−３重鎖（配列番号２７８）を含む、単離モノクローナル抗体を含む。前述の実施形態の態様は、ヒトモノクローナル抗体、ヒトモノクローナルＩｇＧ抗体、及びヒトモノクローナルＩｇＧ１抗体を含む。本発明の態様は、前述のもののフラグメント、誘導体、変異タンパク質、及び変異体を含む。
【００５７】
本発明の態様は、Ａｂ−１の６つのＣＤＲを含む単離モノクローナル抗体を含み、ここで、ＣＤＲは、Ｖｈ−ＣＤＲ１（配列番号４）、Ｖｈ−ＣＤＲ２（配列番号５）、Ｖｈ−ＣＤＲ３（配列番号６）、Ｖｌ−ＣＤＲ１（配列番号１０６）、Ｖｌ−ＣＤＲ２（配列番号１０７）、及びＶｌ−ＣＤＲ３（配列番号１０８）の１、２、３、４、５、または６つを超えないアミノ酸付加、欠失、または置換を含む。本発明の態様は、Ａｂ−２の６つのＣＤＲを含む単離モノクローナル抗体を含み、ここで、ＣＤＲは、Ｖｈ−ＣＤＲ１（配列番号１０）、Ｖｈ−ＣＤＲ２（配列番号１１）、Ｖｈ−ＣＤＲ３（配列番号１２）、Ｖｌ−ＣＤＲ１（配列番号１１２）、Ｖｌ−ＣＤＲ２（配列番号１１３）、及びＶｌ−ＣＤＲ３（配列番号１１４）の１、２、３、４、５、または６つを超えないアミノ酸付加、欠失、または置換を含む。本発明の態様は、Ａｂ−３の６つのＣＤＲを含む単離モノクローナル抗体を含み、ここで、ＣＤＲは、Ｖｈ−ＣＤＲ１（配列番号１６）、Ｖｈ−ＣＤＲ２（配列番号１７）、Ｖｈ−ＣＤＲ３（配列番号１８）、Ｖｌ−ＣＤＲ１（配列番号１１８）、Ｖｌ−ＣＤＲ２（配列番号１１９）、及びＶｌ−ＣＤＲ３（配列番号１２０）の１、２、３、４、５、または６つを超えないアミノ酸付加、欠失、または置換を含む。本発明の態様は、Ａｂ−４の６つのＣＤＲを含む単離モノクローナル抗体を含み、ここで、ＣＤＲは、Ｖｈ−ＣＤＲ１（配列番号２２）、Ｖｈ−ＣＤＲ２（配列番号２３）、Ｖｈ−ＣＤＲ３（配列番号２４）、Ｖｌ−ＣＤＲ１（配列番号１２４）、Ｖｌ−ＣＤＲ２（配列番号１２５）、及びＶｌ−ＣＤＲ３（配列番号１２６）の１、２、３、４、５、または６つを超えないアミノ酸付加、欠失、または置換を含む。本発明の態様は、Ａｂ−５の６つのＣＤＲを含む単離モノクローナル抗体を含み、ここで、ＣＤＲは、Ｖｈ−ＣＤＲ１（配列番号２８）、Ｖｈ−ＣＤＲ２（配列番号２９）、Ｖｈ−ＣＤＲ３（配列番号３０）、Ｖｌ−ＣＤＲ１（配列番号１３０）、Ｖｌ−ＣＤＲ２（配列番号１３１）、及びＶｌ−ＣＤＲ３（配列番号１３２）の１、２、３、４、５、または６つを超えないアミノ酸付加、欠失、または置換を含む。本発明の態様は、Ａｂ−６の６つのＣＤＲを含む単離モノクローナル抗体を含み、ここで、ＣＤＲは、Ｖｈ−ＣＤＲ１（配列番号３４）、Ｖｈ−ＣＤＲ２（配列番号３５）、Ｖｈ−ＣＤＲ３（配列番号３６）、Ｖｌ−ＣＤＲ１（配列番号１３６）、Ｖｌ−ＣＤＲ２（配列番号１３７）、及びＶｌ−ＣＤＲ３（配列番号１３８）の１、２、３、４、５、または６つを超えないアミノ酸付加、欠失、または置換を含む。本発明の態様は、Ａｂ−７の６つのＣＤＲを含む単離モノクローナル抗体を含み、ここで、ＣＤＲは、Ｖｈ−ＣＤＲ１（配列番号４０）、Ｖｈ−ＣＤＲ２（配列番号４１）、Ｖｈ−ＣＤＲ３（配列番号４２）、Ｖｌ−ＣＤＲ１（配列番号１４２）、Ｖｌ−ＣＤＲ２（配列番号１４３）、及びＶｌ−ＣＤＲ３（配列番号１４４）の１、２、３、４、５、または６つを超えないアミノ酸付加、欠失、または置換を含む。本発明の態様は、Ａｂ−８の６つのＣＤＲを含む単離モノクローナル抗体を含み、ここで、ＣＤＲは、Ｖｈ−ＣＤＲ１（配列番号４６）、Ｖｈ−ＣＤＲ２（配列番号４７）、Ｖｈ−ＣＤＲ３（配列番号４８）、Ｖｌ−ＣＤＲ１（配列番号１４８）、Ｖｌ−ＣＤＲ２（配列番号１４９）、及びＶｌ−ＣＤＲ３（配列番号１５０）の１、２、３、４、５、または６つを超えないアミノ酸付加、欠失、または置換を含む。本発明の態様は、Ａｂ−９の６つのＣＤＲを含む単離モノクローナル抗体を含み、ここで、ＣＤＲは、Ｖｈ−ＣＤＲ１（配列番号５２）、Ｖｈ−ＣＤＲ２（配列番号５３）、Ｖｈ−ＣＤＲ３（配列番号５４）、Ｖｌ−ＣＤＲ１（配列番号１５４）、Ｖｌ−ＣＤＲ２（配列番号１５５）、及びＶｌ−ＣＤＲ３（配列番号１５６）の１、２、３、４、５、または６つを超えないアミノ酸付加、欠失、または置換を含む。本発明の態様は、Ａｂ−１０の６つのＣＤＲを含む単離モノクローナル抗体を含み、ここで、ＣＤＲは、Ｖｈ−ＣＤＲ１（配列番号５８）、Ｖｈ−ＣＤＲ２（配列番号５９）、Ｖｈ−ＣＤＲ３（配列番号６０）、Ｖｌ−ＣＤＲ１（配列番号１６０）、Ｖｌ−ＣＤＲ２（配列番号１６１）、及びＶｌ−ＣＤＲ３（配列番号１６２）の１、２、３、４、５、または６つを超えないアミノ酸付加、欠失、または置換を含む。本発明の態様は、Ａｂ−１１の６つのＣＤＲを含む単離モノクローナル抗体を含み、ここで、ＣＤＲは、Ｖｈ−ＣＤＲ１（配列番号６４）、Ｖｈ−ＣＤＲ２（配列番号６５）、Ｖｈ−ＣＤＲ３（配列番号６６）、Ｖｌ−ＣＤＲ１（配列番号１６６）、Ｖｌ−ＣＤＲ２（配列番号１６７）、及びＶｌ−ＣＤＲ３（配列番号１６８）の１、２、３、４、５、または６つを超えないアミノ酸付加、欠失、または置換を含む。本発明の態様は、Ａｂ−１２の６つのＣＤＲを含む単離モノクローナル抗体を含み、ここで、ＣＤＲは、Ｖｈ−ＣＤＲ１（配列番号７０）、Ｖｈ−ＣＤＲ２（配列番号７１）、Ｖｈ−ＣＤＲ３（配列番号７２）、Ｖｌ−ＣＤＲ１（配列番号１７２）、Ｖｌ−ＣＤＲ２（配列番号１７３）、及びＶｌ−ＣＤＲ３（配列番号１７４）の１、２、３、４、５、または６つを超えないアミノ酸付加、欠失、または置換を含む。本発明の態様は、Ａｂ−１３の６つのＣＤＲを含む単離モノクローナル抗体を含み、ここで、ＣＤＲは、Ｖｈ−ＣＤＲ１（配列番号７６）、Ｖｈ−ＣＤＲ２（配列番号７７）、Ｖｈ−ＣＤＲ３（配列番号７８）、Ｖｌ−ＣＤＲ１（配列番号１７８）、Ｖｌ−ＣＤＲ２（配列番号１７９）、及びＶｌ−ＣＤＲ３（配列番号１８０）の１、２、３、４、５、または６つを超えないアミノ酸付加、欠失、または置換を含む。本発明の態様は、Ａｂ−１４の６つのＣＤＲを含む単離モノクローナル抗体を含み、ここで、ＣＤＲは、Ｖｈ−ＣＤＲ１（配列番号８２）、Ｖｈ−ＣＤＲ２（配列番号８３）、Ｖｈ−ＣＤＲ３（配列番号８４）、Ｖｌ−ＣＤＲ１（配列番号１８４）、Ｖｌ−ＣＤＲ２（配列番号１８５）、及びＶｌ−ＣＤＲ３（配列番号１８６）の１、２、３、４、５、または６つを超えないアミノ酸付加、欠失、または置換を含む。本発明の態様は、Ａｂ−１５の６つのＣＤＲを含む単離モノクローナル抗体を含み、ここで、ＣＤＲは、Ｖｈ−ＣＤＲ１（配列番号８８）、Ｖｈ−ＣＤＲ２（配列番号８９）、Ｖｈ−ＣＤＲ３（配列番号９０）、Ｖｌ−ＣＤＲ１（配列番号１９０）、Ｖｌ−ＣＤＲ２（配列番号１９１）、及びＶｌ−ＣＤＲ３（配列番号１９２）の１、２、３、４、５、または６つを超えないアミノ酸付加、欠失、または置換を含む。本発明の態様は、Ａｂ−１６の６つのＣＤＲを含む単離モノクローナル抗体を含み、ここで、ＣＤＲは、Ｖｈ−ＣＤＲ１（配列番号９４）、Ｖｈ−ＣＤＲ２（配列番号９５）、Ｖｈ−ＣＤＲ３（配列番号９６）、Ｖｌ−ＣＤＲ１（配列番号１９６）、Ｖｌ−ＣＤＲ２（配列番号１９７）、及びＶｌ−ＣＤＲ３（配列番号１９８）の１、２、３、４、５、または６つを超えないアミノ酸付加、欠失、または置換を含む。本発明の態様は、Ａｂ−１７の６つのＣＤＲを含む単離モノクローナル抗体を含み、ここで、ＣＤＲは、Ｖｈ−ＣＤＲ１（配列番号１００）、Ｖｈ−ＣＤＲ２（配列番号１０１）、Ｖｈ−ＣＤＲ３（配列番号１０２）、Ｖｌ−ＣＤＲ１（配列番号２０２）、Ｖｌ−ＣＤＲ２（配列番号２０３）、及びＶｌ−ＣＤＲ３（配列番号２０４）の１、２、３、４、５、または６つを超えないアミノ酸付加、欠失、または置換を含む。前述の実施形態の態様は、ヒトモノクローナル抗体、ヒトモノクローナルＩｇＧ抗体、及びヒトモノクローナルＩｇＧ１抗体を含む。
【００５８】
本発明の態様は、それぞれ、Ａｂ−１Ｖｌ（配列番号２４０）及びＡｂ−１Ｖｈ（配列番号２０６）に少なくとも８０％、８１％、８２％、８３％、８４％、８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、または９９％同一なＶｌ及びＶｈアミノ酸配列を含む、単離モノクローナル抗体を含む。本発明の態様は、それぞれ、Ａｂ−１Ｖｌ（配列番号２４０）及びＡｂ−１Ｖｈ（配列番号２０６）に少なくとも９５％同一なＶｌ及びＶｈアミノ酸配列を含む、単離モノクローナル抗体を含む。本発明の態様は、それぞれ、Ａｂ−２Ｖｌ（配列番号２４２）及びＡｂ−２Ｖｈ（配列番号２０８）に少なくとも８０％、８１％、８２％、８３％、８４％、８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、または９９％同一なＶｌ及びＶｈアミノ酸配列を含む、単離モノクローナル抗体を含む。本発明の態様は、それぞれ、Ａｂ−３Ｖｌ（配列番号２４４）及びＡｂ−３Ｖｈ（配列番号２１０）に少なくとも８０％、８１％、８２％、８３％、８４％、８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、または９９％同一なＶｌ及びＶｈアミノ酸配列を含む、単離モノクローナル抗体を含む。本発明の態様は、それぞれ、Ａｂ−４Ｖｌ（配列番号２４６）及びＡｂ−４Ｖｈ（配列番号２１２）に少なくとも８０％、８１％、８２％、８３％、８４％、８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、または９９％同一なＶｌ及びＶｈアミノ酸配列を含む、単離モノクローナル抗体を含む。本発明の態様は、それぞれ、Ａｂ−５Ｖｌ（配列番号２４８）及びＡｂ−５Ｖｈ（配列番号２１４）に少なくとも８０％、８１％、８２％、８３％、８４％、８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、または９９％同一なＶｌ及びＶｈアミノ酸配列を含む、単離モノクローナル抗体を含む。本発明の態様は、それぞれ、Ａｂ−６Ｖｌ（配列番号２５０）及びＡｂ−６Ｖｈ（配列番号２１６）に少なくとも８０％、８１％、８２％、８３％、８４％、８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、または９９％同一なＶｌ及びＶｈアミノ酸配列を含む、単離モノクローナル抗体を含む。本発明の態様は、それぞれ、Ａｂ−７Ｖｌ（配列番号２５２）及びＡｂ−７Ｖｈ（配列番号２１８）に少なくとも８０％、８１％、８２％、８３％、８４％、８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、または９９％同一なＶｌ及びＶｈアミノ酸配列を含む、単離モノクローナル抗体を含む。本発明の態様は、それぞれ、Ａｂ−８Ｖｌ（配列番号２５４）及びＡｂ−８Ｖｈ（配列番号２２０）に少なくとも８０％、８１％、８２％、８３％、８４％、８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、または９９％同一なＶｌ及びＶｈアミノ酸配列を含む、単離モノクローナル抗体を含む。本発明の態様は、それぞれ、Ａｂ−９Ｖｌ（配列番号２５６）及びＡｂ−９Ｖｈ（配列番号２２２）に少なくとも８０％、８１％、８２％、８３％、８４％、８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、または９９％同一なＶｌ及びＶｈアミノ酸配列単離モノクローナル抗体を含む。本発明の態様は、それぞれ、Ａｂ−１０Ｖｌ（配列番号２５８）及びＡｂ−１０Ｖｈ（配列番号２２４）に少なくとも８０％、８１％、８２％、８３％、８４％、８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、または９９％同一なＶｌ及びＶｈアミノ酸配列を含む、単離モノクローナル抗体を含む。本発明の態様は、それぞれ、Ａｂ−１１Ｖｌ（配列番号２６０）及びＡｂ−１１Ｖｈ（配列番号２２６）に少なくとも８０％、８１％、８２％、８３％、８４％、８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、または９９％同一なＶｌ及びＶｈアミノ酸配列を含む、単離モノクローナル抗体を含む。本発明の態様は、それぞれ、Ａｂ−１２Ｖｌ（配列番号２６２）及びＡｂ−１２Ｖｈ（配列番号２２８）に少なくとも８０％、８１％、８２％、８３％、８４％、８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、または９９％同一なＶｌ及びＶｈアミノ酸配列を含む、単離モノクローナル抗体を含む。本発明の態様は、それぞれ、Ａｂ−１３Ｖｌ（配列番号２６４）及びＡｂ−１３Ｖｈ（配列番号２３０）に少なくとも８０％、８１％、８２％、８３％、８４％、８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、または９９％同一なＶｌ及びＶｈアミノ酸配列を含む、単離モノクローナル抗体を含む。本発明の態様は、それぞれ、Ａｂ−１４Ｖｌ（配列番号２６６）及びＡｂ−１４Ｖｈ（配列番号２３２）に少なくとも８０％、８１％、８２％、８３％、８４％、８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、または９９％同一なＶｌ及びＶｈアミノ酸配列を含む、単離モノクローナル抗体を含む。本発明の態様は、それぞれ、Ａｂ−１５Ｖｌ（配列番号２６８）及びＡｂ−１５Ｖｈ（配列番号２３４）に少なくとも８０％、８１％、８２％、８３％、８４％、８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、または９９％同一なＶｌ及びＶｈアミノ酸配列を含む、単離モノクローナル抗体を含む。本発明の態様は、それぞれ、Ａｂ−１６Ｖｌ（配列番号２７０）及びＡｂ−１６Ｖｈ（配列番号２３６）に少なくとも８０％、８１％、８２％、８３％、８４％、８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、または９９％同一なＶｌ及びＶｈアミノ酸配列を含む、単離モノクローナル抗体を含む。本発明の態様は、それぞれ、Ａｂ−１７Ｖｌ（配列番号２７２）及びＡｂ−１７Ｖｈ（配列番号２３８）に少なくとも８０％、８１％、８２％、８３％、８４％、８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、または９９％同一なＶｌ及びＶｈアミノ酸配列を含む、単離モノクローナル抗体を含む。前述の実施形態の態様は、ヒトモノクローナル抗体、ヒトモノクローナルＩｇＧ抗体、及びヒトモノクローナルＩｇＧ１抗体を含む。
【００５９】
本発明の態様は、Ａｂ−１軽鎖（配列番号２８０）及びＡｂ−１重鎖（配列番号２７４）に少なくとも８０％、８１％、８２％、８３％、８４％、８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、または９９％同一な単離モノクローナル抗体を含む。本発明の態様は、Ａｂ−１軽鎖（配列番号２８０）及びＡｂ−１重鎖（配列番号２７４）に少なくとも９５％同一な単離モノクローナル抗体を含む。本発明の態様は、Ａｂ−２軽鎖（配列番号２８２）及びＡｂ−２重鎖（配列番号２７６）に少なくとも８０％、８１％、８２％、８３％、８４％、８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、または９９％同一な単離モノクローナル抗体を含む。本発明の態様は、Ａｂ−３軽鎖（配列番号２８４）及びＡｂ−３重鎖（配列番号２７８）に少なくとも８０％、８１％、８２％、８３％、８４％、８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、または９９％同一な単離モノクローナル抗体を含む。前述の実施形態の態様は、ヒトモノクローナル抗体、ヒトモノクローナルＩｇＧ抗体、及びヒトモノクローナルＩｇＧ１抗体を含む。
【００６０】
本明細書に使用される際、「抗体」という用語は、本明細書に様々に記載されるように、抗原に特異的に結合する１つ以上のポリペプチド鎖を含む単量体または多量体タンパク質の種々の形態を指す。ある特定の実施形態において、抗体は、組み換えＤＮＡ技術によって産生される。さらなる実施形態において、抗体は、天然に存在する抗体の酵素的切断または化学的切断によって産生される。別の態様において、抗体は、ヒト抗体；ヒト化抗体；キメラ抗体；モノクローナル抗体；抗原に結合する抗体フラグメント；一本鎖抗体；ダイアボディ；トリアボディ；テトラボディ；Ｆａｂフラグメント；Ｆ（ａｂ’）２フラグメント；ＩｇＤ抗体；ＩｇＥ抗体；ＩｇＭ抗体；ＩｇＡ抗体；ＩｇＧ１抗体；ＩｇＧ２抗体；ＩｇＧ３抗体；及びＩｇＧ４抗体からなる群から選択される。
【００６１】
一般構造として、本発明の抗原結合タンパク質は、（ａ）足場、及び（ｂ）複数のＣＤＲを含む。本明細書に使用される「相補性決定領域」または「ＣＤＲ」は、抗原結合のための主要な表面接触点を構築する、結合タンパク質領域を指す。本発明の実施形態は、抗原結合タンパク質の足場構造に埋め込まれた１つ以上のＣＤＲを含む。抗原結合タンパク質の足場構造は、抗体のフレームワーク、またはそのフラグメントもしくは変異体であり得るか、あるいは完全に合成の性質であってもよい。本発明の抗原結合タンパク質の種々の足場構造の例は、以下にさらに記載される。
【００６２】
ペプチド、ポリペプチド、核酸、宿主細胞等といった生物材料と関連して本明細書全体で使用される「天然に存在する」という用語は、天然に見出される材料を指す。天然に存在する抗体において、Ｈ−ＣＤＲ１は、典型的に、約５〜約７個のアミノ酸を含み、Ｈ−ＣＤＲ２は、典型的に、約１６〜約１９個のアミノ酸を含み、Ｈ−ＣＤＲ３は、典型的に、約３〜約２５個のアミノ酸を含む。Ｌ−ＣＤＲ１は、典型的に、約１０〜約１７個のアミノ酸を含み、Ｌ−ＣＤＲ２は、典型的に、約７個のアミノ酸を含み、Ｌ−ＣＤＲ３は、典型的に、約７〜約１０個のアミノ酸を含む。本発明の種々の抗体の特定のＣＤＲの配列識別子は、表１に提供される。
【００６３】
天然に存在する抗体は、典型的に、タンパク質分泌のための細胞経路に抗体を導き、かつ成熟抗体には存在しない、シグナル配列を含む。本発明の抗体をコードするポリヌクレオチドは、以下に記載されるように、天然に存在するシグナル配列または異種シグナル配列をコードし得る。
【００６４】
天然に存在する抗体内のＣＤＲの一般構造及び特性は、当該技術分野で説明されている。簡単に言うと、従来的な抗体の足場では、ＣＤＲは、それらが抗原結合及び認識を主に担う領域を構築する、重鎖及び軽鎖可変領域のフレームワーク内に埋め込まれる。可変領域は、少なくとも３つの重鎖または軽鎖ＣＤＲ（上記を参照されたい（Ｋａｂａｔ  ｅｔ  ａｌ．，１９９１，Ｓｅｑｕｅｎｃｅｓ  ｏｆ  Ｐｒｏｔｅｉｎｓ  ｏｆ  Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｉｃａｌ  Ｉｎｔｅｒｅｓｔ，Ｐｕｂｌｉｃ  Ｈｅａｌｔｈ  Ｓｅｒｖｉｃｅ  Ｎ．Ｉ．Ｈ．，Ｂｅｔｈｅｓｄａ，ＭＤ、Ｃｈｏｔｈｉａ  ａｎｄ  Ｌｅｓｋ，１９８７，Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．１９６：９０１−９１７、Ｃｈｏｔｈｉａ  ｅｔ  ａｌ．，１９８９，Ｎａｔｕｒｅ  ３４２：８７７−８８３））を、フレームワーク領域（Ｋａｂａｔ  ｅｔ  ａｌ．，１９９１（上記）によりフレームワーク領域１〜４、ＦＲ１、ＦＲ２、ＦＲ３、及びＦＲ４として指定される（Ｃｈｏｔｈｉａ  ａｎｄ  Ｌｅｓｋ，１９８７（上記）もまた参照されたい））内に、含む。以下を参照されたい。本発明によって提供されるＣＤＲは、しかしながら、従来的な抗体構造の抗原結合ドメインを定義するために使用され得るだけでなく、本明細書に記載されるように、種々の他の足場構造に埋め込まれ得る。
【００６５】
本発明の抗体は、当該技術分野で既知の任意の定常領域を含み得る。軽鎖定常領域は、例えば、κ型またはλ型軽鎖定常領域、例えば、ヒトκ型λ型軽鎖定常領域であり得る。重鎖定常領域は、例えば、α型、δ型、ε型、γ型、またはμ型重鎖定常領域、例えば、ヒトα型、δ型、ε型、γ型、またはμ型重鎖定常領域であり得る。一実施形態において、軽鎖または重鎖定常領域は、天然に存在する定常領域のフラグメント、誘導体、変異体、または変異タンパク質である。
【００６６】
実施形態には、ヒト抗体足場構成要素（例えば、定常ドメイン）の使用が含まれる。重鎖に好ましいヒトＩｇＧ１定常ドメインの実施形態は、配列番号２７４に（Ｖｈドメインとともに）示され、重鎖に好ましいヒトＩｇＧ１定常ドメインは、配列番号２８０に（Ｖｌドメインとともに）示される。実施形態には、ヒト抗体足場構成要素の使用が含まれる。当然ながら、当該技術分野で既知の任意の好適な足場が利用され得ることが理解される。
【００６７】
従来的な抗体構造単位は、典型的に、四量体を含む。各四量体は、典型的に、各対が一本の「軽」鎖（典型的には約２５ｋＤａの分子量を有する）と１本の「重」鎖（典型的には約５０〜７０ｋＤａの分子量を有する）とを有する、２つの同一なポリペプチド鎖対から構成される。各鎖のアミノ末端部分は、主として抗原認識を担う約１００〜１１０個またはそれ以上のアミノ酸の可変領域を含む。各鎖のカルボキシ末端部分は、主としてエフェクター機能を担う定常領域を定義する。ヒト軽鎖は、κ及びλ軽鎖として分類される。重鎖は、μ、δ、γ、α、またはεとして分類され、それぞれ、抗体のアイソタイプをＩｇＭ、ＩｇＤ、ＩｇＧ、ＩｇＡ、及びＩｇＥとして定義する。ＩｇＧは、ＩｇＧ１、ＩｇＧ２、ＩｇＧ３、及びＩｇＧ４を含むがこれらに限定されない、複数のサブクラスを有する。ＩｇＭは、ＩｇＭ１及びＩｇＭ２を含むがこれらに限定されないサブクラスを有する。本発明の実施形態は、本明細書に記載されるように、抗原結合タンパク質の可変ドメインを組み込む、すべてのそのような抗体のクラスを含む。
【００６８】
軽鎖及び重鎖内で、可変領域及び定常領域は、約１２個以上のアミノ酸の「Ｊ」領域によって接合され、重鎖は、約１０個以上のアミノ酸の「Ｄ」領域もまた含む。一般には、Ｐａｕｌ，Ｗ．，ｅｄ．，１９８９，Ｆｕｎｄａｍｅｎｔａｌ  Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｙ  Ｃｈ．７，２ｎｄ  ｅｄ．Ｒａｖｅｎ  Ｐｒｅｓｓ，Ｎ．Ｙを参照されたい。各軽鎖／重鎖対の可変領域が、抗体結合部位を形成する。本発明の足場には、そのような領域が含まれる。
【００６９】
いくつかの実施形態において、しかしながら、足場構成要素は、異なる種からの混合物であってもよい。そのため、抗原結合タンパク質が抗体である場合、そのような抗体は、キメラ抗体及び／またはヒト化抗体であり得る。一般に、「キメラ抗体」及び「ヒト化抗体」はいずれも、１つを上回る種に由来する領域を組み合わせた抗体を指す。例えば、「キメラ抗体」は、従来的に、マウス（または場合によってはラット）由来の可変領域（複数可）及びヒト由来の定常領域（複数可）を含む。
【００７０】
「ヒト化抗体」は、一般に、可変ドメインのフレームワーク領域がヒト抗体に見出される配列と交換された、非ヒト抗体を指す。一般に、ヒト化抗体では、ＣＤＲを除く抗体全体がヒト起源のポリヌクレオチドによってコードされるか、またはそのＣＤＲ内を除いてそのような抗体と同一である。一部またはすべてが非ヒト生物を起源とする核酸によってコードされるＣＤＲが、ヒト抗体可変領域のβシートフレームワークにグラフトされて抗体が作製され、この抗体の特異性は、グラフトされたＣＤＲによって決定される。そのような抗体の作製は、例えば、国際公開第ＷＯ９２／１１０１８号、Ｊｏｎｅｓ，１９８６，Ｎａｔｕｒｅ  ３２１：５２２−５２５、Ｖｅｒｈｏｅｙｅｎ  ｅｔ  ａｌ．，１９８８，Ｓｃｉｅｎｃｅ  ２３９：１５３４−１５３６に記載されている。ヒト化抗体はまた、遺伝子操作された免疫系を有するマウスを用いて作製することもできる。Ｒｏｑｕｅ  ｅｔ  ａｌ．，２００４，Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌ．Ｐｒｏｇ．２０：６３９−６５４。本発明において、特定されたＣＤＲは、ヒトのものであり、したがって、この文脈においてヒト化抗体及びキメラ抗体のいずれも、いくつかの非ヒトＣＤＲを含む；例えば、ＣＤＲＨ３及びＣＤＲＬ３領域を含み、他のＣＤＲ領域のうちの１つ以上が異なる種起源のものである、ヒト化抗体が作製され得る。
【００７１】
一実施形態において、ＢＣＭＡ抗原結合タンパク質は、多特異性抗体、及びとりわけ二特異性抗体であり、時には「ダイアボディ」とも称される。これらは、２つ（またはそれ以上）の異なる抗原に結合する抗体である。ダイアボディは、当該技術分野で既知の種々の手段で製造され得（Ｈｏｌｌｉｇｅｒ  ａｎｄ  Ｗｉｎｔｅｒ，１９９３，Ｃｕｒｒｅｎｔ  Ｏｐｉｎｉｏｎ  Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌ．４：４４６−４４９）、例えば、化学的に調製されるか、またはハイブリッドハイブリドーマから調製され得る。
【００７２】
一実施形態において、ＢＣＭＡ抗原結合タンパク質は、ミニボディである。ミニボディは、ＣＨ３ドメインに接合されたｓｃＦｖを含む、最小化された抗体様タンパク質である。Ｈｕ  ｅｔ  ａｌ．，１９９６，Ｃａｎｃｅｒ  Ｒｅｓ．５６：３０５５−３０６１。
【００７３】
一実施形態において、ＢＣＭＡ抗原結合タンパク質は、ドメイン抗体であり、例えば、米国特許第６，２４８，５１６号を参照されたい。ドメイン抗体（ｄＡｂ）は、ヒト抗体の重鎖可変領域（ＶＨ）または軽鎖可変領域（ＶＬ）のいずれかに対応する抗体の機能的結合ドメインであり、ｄＡＢは、おおよそ１３ｋＤａの分子量を有するか、または完全抗体の１０分の１未満の寸法である。ｄＡＢは、細菌、酵母、及び哺乳動物細胞系を含む、種々の宿主において良好に発現される。加えて、ｄＡｂは高度に安定であり、凍結乾燥または熱変性等の過酷な条件に供された後ですら、活性を保持する。例えば、米国特許第６，２９１，１５８号、同第６，５８２，９１５号、同第６，５９３，０８１号、同第６，１７２，１９７号、米国第２００４／０１１０９４１号、欧州特許第０３６８６８４号、米国特許第６，６９６，２４５号、国際公開第ＷＯ０４／０５８８２１号、同第ＷＯ０４／００３０１９号、及び同第ＷＯ０３／００２６０９号を参照されたい。
【００７４】
一実施形態において、ＢＣＭＡ抗原結合タンパク質は、抗体フラグメント、すなわち、ＢＣＭＡに対する結合特異性を保持する、本明細書に概説される抗体のうちのいずれかのフラグメントである。種々の実施形態において、抗体結合タンパク質は、限定されないが、Ｆ（ａｂ）、Ｆ（ａｂ’）、Ｆ（ａｂ’）２、Ｆｖ、または一本鎖Ｆｖフラグメント（ＳｃＦｖ）を含む。最低でも、本明細書で意味される抗体は、１つ以上のＣＤＲ等、軽鎖または重鎖可変領域のすべてまたは一部を含む、ＢＣＭＡに特異的に結合し得るポリペプチドを含む。
【００７５】
ＢＣＭＡに結合する抗体フラグメントのさらなる例としては、（ｉ）ＶＬ、ＶＨ、ＣＬ、及びＣＨ１ドメインからなるＦａｂフラグメント、（ｉｉ）ＶＨ及びＣＨ１ドメインからなるＦｄフラグメント、（ｉｉｉ）一本鎖抗体のＶＬ及びＶＨドメインからなるＦｖフラグメント、（ｉｖ）一本鎖可変からなるｄＡｂフラグメント（Ｗａｒｄ  ｅｔ  ａｌ．，１９８９，Ｎａｔｕｒｅ  ３４１：５４４−５４６）、（ｖ）単離ＣＤＲ領域、（ｖｉ）２つの連結されたＦａｂフラグメントを含む二価フラグメントである、Ｆ（ａｂ’）２フラグメント、（ｖｉｉ）ＶＨドメインとＶＬドメインとが、２つのドメインを会合させて抗原結合部位を形成することができるペプチドリンカーによって連結された、一本鎖Ｆｖ分子（ｓｃＦｖ）（Ｂｉｒｄ  ｅｔ  ａｌ．，１９８８，Ｓｃｉｅｎｃｅ  ２４２：４２３−４２６、Ｈｕｓｔｏｎ  ｅｔ  ａｌ．，１９８８，Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．Ｕ．Ｓ．Ａ．８５：５８７９−５８８３）、（ｖｉｉｉ）二特異性一本鎖Ｆｖ二量体（ＰＣＴ／ＵＳ第９２／０９９６５号）、ならびに（ｉｘ）遺伝子融合によって構築された「ダイアボディ」または「トリアボディ」、多価または多特異性フラグメント（Ｔｏｍｌｉｎｓｏｎ  ｅｔ．ａｌ．，２０００，Ｍｅｔｈｏｄｓ  Ｅｎｚｙｍｏｌ．３２６：４６１−４７９、国際公開第ＷＯ９４／１３８０４号、Ｈｏｌｌｉｇｅｒ  ｅｔ  ａｌ．，１９９３，Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．Ｕ．Ｓ．Ａ．９０：６４４４−６４４８）が挙げられるが、これらに限定されない。抗体フラグメントは修飾されてもよい。例えば、分子は、ＶＨとＶＬドメインとを連結させるジスルフィド架橋を組み込むことによって、安定化され得る（Ｒｅｉｔｅｒ  ｅｔ  ａｌ．，１９９６，Ｎａｔｕｒｅ  Ｂｉｏｔｅｃｈ．１４：１２３９−１２４５）。本発明の態様は、これらのフラグメントの非ＣＤＲ構成要素がヒト配列である実施形態を含む。
【００７６】
特定の実施形態は、完全にヒトのものであるＢＣＭＡ抗体を含む。この実施形態では、上に概説されたように、特定の構造は、ＣＤＲ領域を含む図示される完全な重鎖及び軽鎖を含む。さらなる実施形態は、本発明のＣＤＲのうちの１つ以上を利用し、他のＣＤＲ、フレームワーク領域、Ｊ及びＤ領域、定常領域等は、他のヒト抗体に由来する。例えば、本発明のＣＤＲは、任意の数のヒト抗体、特に、商業用抗体のＣＤＲと置き換わることができる。
【００７７】
ＸｅｎｏＭｏｕｓｅ（登録商標）技術を使用して、本明細書に提供されるヒト抗体を作製した（実施例２を参照されたい）。この技術は、マウス免疫グロブリン分子及び抗体の産生を欠くヒト免疫グロブリン分子及び抗体を産生することができる。そのような技術の使用を通じて、ＢＣＭＡに対する完全ヒトモノクローナル抗体を産生することができる。一実施形態において、ＸｅｎｏＭｏｕｓｅ（登録商標）マウス株に、ｈｕＢＣＭＡを免疫付与し、抗体を発現したマウスからリンパ性細胞（Ｂ細胞等）を回収し、そのような細胞を骨髄型細胞株と融合して不死ハイブリドーマ細胞株を調製し、そのようなハイブリドーマ細胞株を、目的の抗原に特異的な抗体を産生するハイブリドーマ細胞株を特定するためにスクリーニング及び選択する。ＢＣＭＡに特異的な抗体を産生する複数のハイブリドーマ細胞株の産生のための方法が、本明細書に提供される。さらに、そのような抗体の重鎖及び軽鎖のヌクレオチド及びアミノ酸配列を含む、そのような細胞株によって産生される抗体の特徴付けもまた、本明細書に提供される。
【００７８】
あるいは、骨髄腫細胞に融合してハイブリドーマを生成する代わりに、免疫付与したＸｅｎｏＭｏｕｓｅ（登録商標）マウス株から単離した回収細胞によって産生された抗体を、初期抗原、好ましくはＢＣＭＡタンパク質に対する反応性に関してさらにスクリーニングする。そのようなスクリーニングには、全長ＢＣＭＡを安定に発現する２９３Ｔ細胞（例として）にインビトロで結合するＢＣＭＡタンパク質を用いたＥＬＩＳＡが含まれる。目的の抗体を分泌する単一Ｂ細胞を、次いで、ＢＣＭＡ特異的結合アッセイ（ＦＡＣＳによるもの等）を使用して単離する。単一抗原特異的形質細胞を単離し、抗体の特異性をコードする遺伝情報を単一形質細胞から単離する。逆転写酵素ＰＣＲを使用して、分泌された抗体の可変領域をコードするＤＮＡをクローニングすることができる。そのようなクローニングＤＮＡを、次いで、好適な発現ベクター、好ましくはｐｃＤＮＡ等のベクターカセット、より好ましくは免疫グロブリン重鎖及び軽鎖の定常ドメインを含有するｐｃＤＮＡベクターに、さらに挿入する。生成されたベクターを、次いで、宿主細胞、好ましくはＣＨＯ細胞にトランスフェクトし、プロモーターを誘導する、形質転換体を選択する、または所望の配列をコードする遺伝子を増幅するために適宜修正した従来的な栄養培地で培養する。
【００７９】
ＸｅｎｏＭｏｕｓｅ（登録商標）マウス由来のＢ細胞をまた、抗体提示ライブラリーが生成され得る遺伝子材料の供給源として使用することができる。そのようなライブラリーは、当該技術分野における通常の技術を使用して、バクテリオファージ、酵母、またはインビトロで、リボソームディスプレイを介して作製され得る。過免疫ＸｅｎｏＭｏｕｓｅ（登録商標）マウスは、そこから高親和性の抗原反応性抗体を単離することができる、豊富な供給源であり得る。したがって、ＢＣＭＡに対して過免疫のＸｅｎｏＭｏｕｓｅ（登録商標）マウスを使用して、そこからＢＣＭＡに対する高親和性抗体を単離することができる抗体提示ライブラリーを生成することができる。そのようなライブラリーを、ＢＣＭＡを発現する細胞に対してスクリーニングして、天然の提示抗原に対する特異性を確認することができる。完全ＩｇＧ抗体を、次いで、組み換えＤＮＡ技術を使用して発現させることができる。例えば、国際公開第ＷＯ９９／５３０４９号を参照されたい。
【００８０】
一般に、上述の細胞株によって産生される抗体は、完全ヒトＩｇＧ１またはＩｇＧ２重鎖を、ヒトκ軽鎖とともに有していた。一実施形態において、抗体は、高親和性を有し、典型的には、固相または溶液相のいずれかで測定した際、約１０−９〜約１０−１３Ｍの親和性定数を有した。当業者には理解されるように、本実施形態による抗体は、ハイブリドーマ細胞株以外の細胞株において発現され得る。特定の抗体をコードする配列を、好適な哺乳動物宿主細胞の形質転換に使用することができる。形質転換は、米国特許第４，３９９，２１６号、同第４，９１２，０４０号、同第４，７４０，４６１号、及び同第４，９５９，４５５号（これらの特許は、参照により本明細書に組み込まれる）よって例証されるように、例えば、ポリヌクレオチドをウイルス（またはウイルスベクター）に封入すること、及び宿主細胞にウイルス（またはベクター）を形質導入することを含む、ポリヌクレオチドを宿主細胞に導入するための任意の既知の方法によるか、または当該技術分野で既知のトランスフェクション手順によるものであり得る。使用される形質転換手順は、形質転換される宿主に依存する。異種ポリヌクレオチドを哺乳動物細胞に導入するための方法は、当該技術分野で周知であり、これらには、デキストラン媒介性トランスフェクション、リン酸カルシウム沈殿、ポリブレン媒介性トランスフェクション、プロトプラスト融合、エレクトロポレーション、ポリヌクレオチド（複数可）のリポソーム封入、及び核内へのＤＮＡの直接的マイクロインジェクションが挙げられる。発現のための宿主として利用可能な哺乳動物細胞株は、当該技術分野で周知であり、これらには、チャイニーズハムスター卵巣（ＣＨＯ）細胞、ＨｅＬａ細胞、ベビーハムスター腎臓（ＢＨＫ）細胞、サル腎臓細胞（ＣＯＳ）、ヒト肝細胞癌細胞（例えば、Ｈｅｐ  Ｇ２）、及びいくつかの他の細胞株を含むがこれらに限定されない、Ａｍｅｒｉｃａｎ  Ｔｙｐｅ  Ｃｕｌｔｕｒｅ  Ｃｏｌｌｅｃｔｉｏｎ（ＡＴＣＣ）から入手可能な多数の不死化細胞株が挙げられる。特に好ましい細胞株は、高い発現レベルを有し、構造的ＢＣＭＡ結合特性を有する抗体を産生する細胞株を判定することにより選択される。
【００８１】
一本鎖抗体は、重鎖及び軽鎖可変ドメイン（Ｆｖ領域）フラグメントを、アミノ酸架橋（短いペプチドリンカー）を介して連結させ、一本のポリペプチド鎖をもたらすことによって形成され得る。そのような一本鎖Ｆｖ（ｓｃＦｖ）は、２つの可変ドメインポリペプチド（ＶＬ及びＶＨ）をコードするＤＮＡの間に、ペプチドリンカーをコードするＤＮＡを融合することによって、調製されている。結果として得られるポリペプチドは、２つの可変ドメイン間の柔軟なリンカーの長さに応じて、それ自体の上で折り畳まって抗原に結合する単量体を形成し得るか、または多量体（例えば、二量体、三量体、もしくは四量体）を形成し得る（Ｋｏｒｔｔ  ｅｔ  ａｌ．，１９９７，Ｐｒｏｔ．Ｅｎｇ．１０：４２３、Ｋｏｒｔｔ  ｅｔ  ａｌ．，２００１，Ｂｉｏｍｏｌ．Ｅｎｇ．１８：９５−１０８）。異なるＶＬ及びＶＨを含むポリペプチドを組み合わせることによって、異なるエピトープに結合する多量体ｓｃＦｖを形成することができる（Ｋｒｉａｎｇｋｕｍ  ｅｔ  ａｌ．，２００１，Ｂｉｏｍｏｌ．Ｅｎｇ．１８：３１−４０）。一本鎖抗体の産生のために開発された技法には、米国特許第４，９４６，７７８号、Ｂｉｒｄ，１９８８，Ｓｃｉｅｎｃｅ  ２４２：４２３、Ｈｕｓｔｏｎ  ｅｔ  ａｌ．，１９８８，Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ  ８５：５８７９、Ｗａｒｄ  ｅｔ  ａｌ．，１９８９，Ｎａｔｕｒｅ  ３３４：５４４、ｄｅ  Ｇｒａａｆ  ｅｔ  ａｌ．，２００２，Ｍｅｔｈｏｄｓ  Ｍｏｌ  Ｂｉｏｌ．１７８：３７９−８７に記載のものが挙げられる。
【００８２】
一実施形態において、ＢＣＭＡ抗原結合タンパク質は、抗体融合タンパク質（本明細書において、「抗体複合体」または「抗体−薬物複合体」または「ＡＤＣ」と称されることもある）である。複合体パートナーは、タンパク質性または非タンパク質性であり得、後者は、一般に、抗原結合タンパク質上（抗原結合タンパク質の共有結合による修飾に関する考察を参照されたい）及び複合体パートナー上の官能基を使用して生成されている。例えば、リンカーは、当該技術分野で既知であり、例えば、ホモまたはヘテロ二官能性リンカーが周知である（１９９４  Ｐｉｅｒｃｅ  Ｃｈｅｍｉｃａｌ  Ｃｏｍｐａｎｙ  ｃａｔａｌｏｇ，ｔｅｃｈｎｉｃａｌ  ｓｅｃｔｉｏｎ  ｏｎ  ｃｒｏｓｓ−ｌｉｎｋｅｒｓ，ｐａｇｅｓ  １５５−２００を参照されたく、これは参照により本明細書に組み込まれる）。本発明のＡＤＣは、以下及び実施例においてより詳細に記載される。
【００８３】
一実施形態において、ＢＣＭＡ抗原結合タンパク質は、抗体類似体であり、「合成抗体」と称されることもある。例えば、最近の様々な研究は、代替的なタンパク質足場またはＣＤＲがグラフトされた人工的足場のいずれかを利用している。そのような足場には、結合タンパク質の三次元構造を安定させるために導入される変異、ならびに例えば生体適合性ポリマーからなる完全合成足場が挙げられるが、これらに限定されない。例えば、Ｋｏｒｎｄｏｒｆｅｒ  ｅｔ  ａｌ．，２００３，Ｐｒｏｔｅｉｎｓ：Ｓｔｒｕｃｔｕｒｅ，Ｆｕｎｃｔｉｏｎ，ａｎｄ  Ｂｉｏｉｎｆｏｒｍａｔｉｃｓ，Ｖｏｌｕｍｅ  ５３，Ｉｓｓｕｅ  １：１２１−１２９．Ｒｏｑｕｅ  ｅｔ  ａｌ．，２００４，Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌ．Ｐｒｏｇ．２０：６３９−６５４を参照されたい。加えて、ペプチド抗体模倣体（「ＰＡＭ」）、ならびに足場としてフィブロネクチン構成要素を利用する抗体模倣体に基づく研究を用いることができる。
【００８４】
Ａｂ−１、２、及び３に例示されるヒトＩｇＧ１足場以外に想定される足場のさらなる例としては、フィブロネクチン、ネオカルチノスタチンＣＢＭ４−２、リポカリン、Ｔ細胞受容体、プロテインＡドメイン（プロテインＺ）、Ｉｍ９、ＴＰＲタンパク質、亜鉛フィンガードメイン、ｐＶＩＩＩ、トリ膵臓ポリペプチド、ＧＣＮ４、ＷＷドメイン、Ｓｒｃ相同ドメイン３、ＰＤＺドメイン、ＴＥＭ−１β−ラクタマーゼ、チオレドキシン、チオレドキシン、ブドウ球菌ヌクレアーゼ、ＰＨＤフィンガードメイン、ＣＬ−２、ＢＰＴＩ、ＡＰＰＩ、ＨＰＳＴＩ、エコチン、ＬＡＣＩ−Ｄ１、ＬＤＴＩ、ＭＴＩ−ＩＩ、サソリ毒素、昆虫ディフェンシンＡペプチド、ＥＥＴＩ−ＩＩ、Ｍｉｎ−２３、ＣＢＤ、ＰＢＰ、シトクロムｂ−５６２、Ｌｄｌ受容体ドメイン、γ−クリスタリン、ユビキチン、トランスフェリン（ｔｒａｎｓｆｅｒｒｉｎｇ）、及び／またはＣ型レクチン用ドメインが挙げられる。
【００８５】
本発明の態様は、Ａｂ−１の６つのＣＤＲ、具体的には、Ｖｈ−ＣＤＲ１（配列番号４）、Ｖｈ−ＣＤＲ２（配列番号５）、Ｖｈ−ＣＤＲ３（配列番号６）、Ｖｌ−ＣＤＲ１（配列番号１０６）、Ｖｌ−ＣＤＲ２（配列番号１０７）、及びＶｌ−ＣＤＲ３（配列番号１０８）を含む、単離ポリペプチドを含む。本発明の態様は、Ａｂ−２の６つのＣＤＲ、具体的には、Ｖｈ−ＣＤＲ１（配列番号１０）、Ｖｈ−ＣＤＲ２（配列番号１１）、Ｖｈ−ＣＤＲ３（配列番号１２）、Ｖｌ−ＣＤＲ１（配列番号１１２）、Ｖｌ−ＣＤＲ２（配列番号１１３）、及びＶｌ−ＣＤＲ３（配列番号１１４）を含む、単離ポリペプチドを含む。本発明の態様は、Ａｂ−３の６つのＣＤＲ、具体的には、Ｖｈ−ＣＤＲ１（配列番号１６）、Ｖｈ−ＣＤＲ２（配列番号１７）、Ｖｈ−ＣＤＲ３（配列番号１８）、Ｖｌ−ＣＤＲ１（配列番号１１８）、Ｖｌ−ＣＤＲ２（配列番号１１９）、及びＶｌ−ＣＤＲ３（配列番号１２０）を含む、単離ポリペプチドを含む。本発明の態様は、Ａｂ−４の６つのＣＤＲ、具体的には、Ｖｈ−ＣＤＲ１（配列番号２２）、Ｖｈ−ＣＤＲ２（配列番号２３）、Ｖｈ−ＣＤＲ３（配列番号２４）、Ｖｌ−ＣＤＲ１（配列番号１２４）、Ｖｌ−ＣＤＲ２（配列番号１２５）、及びＶｌ−ＣＤＲ３（配列番号１２６）を含む、単離ポリペプチドを含む。本発明の態様は、Ａｂ−５の６つのＣＤＲ、具体的には、Ｖｈ−ＣＤＲ１（配列番号２８）、Ｖｈ−ＣＤＲ２（配列番号２９）、Ｖｈ−ＣＤＲ３（配列番号３０）、Ｖｌ−ＣＤＲ１（配列番号１３０）、Ｖｌ−ＣＤＲ２（配列番号１３１）、及びＶｌ−ＣＤＲ３（配列番号１３２）を含む、単離ポリペプチドを含む。本発明の態様は、Ａｂ−６の６つのＣＤＲ、具体的には、Ｖｈ−ＣＤＲ１（配列番号３４）、Ｖｈ−ＣＤＲ２（配列番号３５）、Ｖｈ−ＣＤＲ３（配列番号３６）、Ｖｌ−ＣＤＲ１（配列番号１３６）、Ｖｌ−ＣＤＲ２（配列番号１３７）、及びＶｌ−ＣＤＲ３（配列番号１３８）を含む、単離ポリペプチドを含む。本発明の態様は、Ａｂ−７の６つのＣＤＲ、具体的には、Ｖｈ−ＣＤＲ１（配列番号４０）、Ｖｈ−ＣＤＲ２（配列番号４１）、Ｖｈ−ＣＤＲ３（配列番号４２）、Ｖｌ−ＣＤＲ１（配列番号１４２）、Ｖｌ−ＣＤＲ２（配列番号１４３）、及びＶｌ−ＣＤＲ３（配列番号１４４）を含む、単離ポリペプチドを含む。本発明の態様は、Ａｂ−８の６つのＣＤＲ、具体的には、Ｖｈ−ＣＤＲ１（配列番号４６）、Ｖｈ−ＣＤＲ２（配列番号４７）、Ｖｈ−ＣＤＲ３（配列番号４８）、Ｖｌ−ＣＤＲ１（配列番号１４８）、Ｖｌ−ＣＤＲ２（配列番号１４９）、及びＶｌ−ＣＤＲ３（配列番号１５０）を含む、単離ポリペプチドを含む。本発明の態様は、Ａｂ−９の６つのＣＤＲ、具体的には、Ｖｈ−ＣＤＲ１（配列番号５２）、Ｖｈ−ＣＤＲ２（配列番号５３）、Ｖｈ−ＣＤＲ３（配列番号５４）、Ｖｌ−ＣＤＲ１（配列番号１５４）、Ｖｌ−ＣＤＲ２（配列番号１５５）、及びＶｌ−ＣＤＲ３（配列番号１５６）を含む、単離ポリペプチドを含む。本発明の態様は、Ａｂ−１０の６つのＣＤＲ、具体的には、Ｖｈ−ＣＤＲ１（配列番号５８）、Ｖｈ−ＣＤＲ２（配列番号５９）、Ｖｈ−ＣＤＲ３（配列番号６０）、Ｖｌ−ＣＤＲ１（配列番号１６０）、Ｖｌ−ＣＤＲ２（配列番号１６１）、及びＶｌ−ＣＤＲ３（配列番号１６２）を含む、単離ポリペプチドを含む。本発明の態様は、Ａｂ−１１の６つのＣＤＲ、具体的には、Ｖｈ−ＣＤＲ１（配列番号６４）、Ｖｈ−ＣＤＲ２（配列番号６５）、Ｖｈ−ＣＤＲ３（配列番号６６）、Ｖｌ−ＣＤＲ１（配列番号１６６）、Ｖｌ−ＣＤＲ２（配列番号１６７）、及びＶｌ−ＣＤＲ３（配列番号１６８）を含む、単離ポリペプチドを含む。本発明の態様は、Ａｂ−１２の６つのＣＤＲ、具体的には、Ｖｈ−ＣＤＲ１（配列番号７０）、Ｖｈ−ＣＤＲ２（配列番号７１）、Ｖｈ−ＣＤＲ３（配列番号７２）、Ｖｌ−ＣＤＲ１（配列番号１７２）、Ｖｌ−ＣＤＲ２（配列番号１７３）、及びＶｌ−ＣＤＲ３（配列番号１７４）を含む、単離ポリペプチドを含む。本発明の態様は、Ａｂ−１３の６つのＣＤＲ、具体的には、Ｖｈ−ＣＤＲ１（配列番号７６）、Ｖｈ−ＣＤＲ２（配列番号７７）、Ｖｈ−ＣＤＲ３（配列番号７８）、Ｖｌ−ＣＤＲ１（配列番号１７８）、Ｖｌ−ＣＤＲ２（配列番号１７９）、及びＶｌ−ＣＤＲ３（配列番号１８０）を含む、単離ポリペプチドを含む。本発明の態様は、Ａｂ−１４の６つのＣＤＲ、具体的には、Ｖｈ−ＣＤＲ１（配列番号８２）、Ｖｈ−ＣＤＲ２（配列番号８３）、Ｖｈ−ＣＤＲ３（配列番号８４）、Ｖｌ−ＣＤＲ１（配列番号１８４）、Ｖｌ−ＣＤＲ２（配列番号１８５）、及びＶｌ−ＣＤＲ３（配列番号１８６）を含む、単離ポリペプチドを含む。本発明の態様は、Ａｂ−１５の６つのＣＤＲ、具体的には、Ｖｈ−ＣＤＲ１（配列番号８８）、Ｖｈ−ＣＤＲ２（配列番号８９）、Ｖｈ−ＣＤＲ３（配列番号９０）、Ｖｌ−ＣＤＲ１（配列番号１９０）、Ｖｌ−ＣＤＲ２（配列番号１９１）、及びＶｌ−ＣＤＲ３（配列番号１９２）を含む、単離ポリペプチドを含む。本発明の態様は、Ａｂ−１６の６つのＣＤＲ、具体的には、Ｖｈ−ＣＤＲ１（配列番号９４）、Ｖｈ−ＣＤＲ２（配列番号９５）、Ｖｈ−ＣＤＲ３（配列番号９６）、Ｖｌ−ＣＤＲ１（配列番号１９６）、Ｖｌ−ＣＤＲ２（配列番号１９７）、及びＶｌ−ＣＤＲ３（配列番号１９８）を含む、単離ポリペプチドを含む。本発明の態様は、Ａｂ−１７の６つのＣＤＲ、具体的には、Ｖｈ−ＣＤＲ１（配列番号１００）、Ｖｈ−ＣＤＲ２（配列番号１０１）、Ｖｈ−ＣＤＲ３（配列番号１０２）、Ｖｌ−ＣＤＲ１（配列番号２０２）、Ｖｌ−ＣＤＲ２（配列番号２０３）、及びＶｌ−ＣＤＲ３（配列番号２０４）を含む、単離ポリペプチドを含む。本発明の態様は、前述のもののフラグメント、誘導体、変異タンパク質、及び変異体を含む。
【００８６】
本発明の態様は、Ａｂ−１Ｖｌ（配列番号２４０）及びＡｂ−１Ｖｈ（配列番号２０６）ドメインを含む、単離ポリペプチドを含む。本発明の態様は、Ａｂ−２Ｖｌ（配列番号２４２）及びＡｂ−２Ｖｈ（配列番号２０８）ドメインを含む、単離ポリペプチドを含む。本発明の態様は、Ａｂ−３Ｖｌ（配列番号２４４）及びＡｂ−３Ｖｈ（配列番号２１０）ドメインを含む、単離ポリペプチドを含む。本発明の態様は、Ａｂ−４Ｖｌ（配列番号２４６）及びＡｂ−４Ｖｈ（配列番号２１２）ドメインを含む、単離ポリペプチドを含む。本発明の態様は、Ａｂ−５Ｖｌ（配列番号２４８）及びＡｂ−５Ｖｈ（配列番号２１４）ドメインを含む、単離ポリペプチドを含む。本発明の態様は、Ａｂ−６Ｖｌ（配列番号２５０）及びＡｂ−６Ｖｈ（配列番号２１６）ドメインを含む、単離ポリペプチドを含む。本発明の態様は、Ａｂ−７Ｖｌ（配列番号２５２）及びＡｂ−７Ｖｈ（配列番号２１８）ドメインを含む、単離ポリペプチドを含む。本発明の態様は、Ａｂ−８Ｖｌ（配列番号２５４）及びＡｂ−８Ｖｈ（配列番号２２０）ドメインを含む、単離ポリペプチドを含む。本発明の態様は、Ａｂ−９Ｖｌ（配列番号２５６）及びＡｂ−９Ｖｈ（配列番号２２２）ドメインを含む、単離ポリペプチドを含む。本発明の態様は、Ａｂ−１０Ｖｌ（配列番号２５８）及びＡｂ−１０Ｖｈ（配列番号２２４）ドメインを含む、単離ポリペプチドを含む。本発明の態様は、Ａｂ−１１Ｖｌ（配列番号２６０）及びＡｂ−１１Ｖｈ（配列番号２２６）ドメインを含む、単離ポリペプチドを含む。本発明の態様は、Ａｂ−１２Ｖｌ（配列番号２６２）及びＡｂ−１２Ｖｈ（配列番号２２８）ドメインを含む、単離ポリペプチドを含む。本発明の態様は、Ａｂ−１３Ｖｌ（配列番号２６４）及びＡｂ−１３Ｖｈ（配列番号２３０）ドメインを含む、単離ポリペプチドを含む。本発明の態様は、Ａｂ−１４Ｖｌ（配列番号２６６）及びＡｂ−１４Ｖｈ（配列番号２３２）ドメインを含む、単離ポリペプチドを含む。本発明の態様は、Ａｂ−１５Ｖｌ（配列番号２６８）及びＡｂ−１５Ｖｈ（配列番号２３４）ドメインを含む、単離ポリペプチドを含む。本発明の態様は、Ａｂ−１６Ｖｌ（配列番号２７０）及びＡｂ−１６Ｖｈ（配列番号２３６）ドメインを含む、単離ポリペプチドを含む。本発明の態様は、Ａｂ−１７Ｖｌ（配列番号２７２）及びＡｂ−１７Ｖｈ（配列番号２３８）ドメインを含む、単離ポリペプチドを含む。本発明の態様は、前述のもののフラグメント、誘導体、変異タンパク質、及び変異体を含む。
【００８７】
本発明の態様は、Ａｂ−１軽鎖（配列番号２８０）及びＡｂ−１重鎖（配列番号２７４）を含む、単離ポリペプチドを含む。本発明の態様は、Ａｂ−２軽鎖（配列番号２８２）及びＡｂ−２重鎖（配列番号２７６）を含む、単離ポリペプチドを含む。本発明の態様は、Ａｂ−３軽鎖（配列番号２８４）及びＡｂ−３重鎖（配列番号２７８）を含む、単離ポリペプチドを含む。本発明の態様は、２つ以上のＡｂ−１軽鎖（配列番号２８０）及び２つ以上のＡｂ−１重鎖（配列番号２７４）を含む、単離ポリペプチドを含む。本発明の態様は、２つ以上のＡｂ−２軽鎖（配列番号２８２）及び２つ以上のＡｂ−２重鎖（配列番号２７６）を含む、単離ポリペプチドを含む。本発明の態様は、２つ以上のＡｂ−３軽鎖（配列番号２８４）及び２つ以上のＡｂ−３重鎖（配列番号２７８）を含む、単離ポリペプチドを含む。本発明の態様は、前述のもののフラグメント、誘導体、変異タンパク質、及び変異体を含む。
【００８８】
本発明の態様は、Ａｂ−１の６つのＣＤＲを含む、単離ポリペプチドを含み、ここで、ＣＤＲは、Ｖｈ−ＣＤＲ１（配列番号４）、Ｖｈ−ＣＤＲ２（配列番号５）、Ｖｈ−ＣＤＲ３（配列番号６）、Ｖｌ−ＣＤＲ１（配列番号１０６）、Ｖｌ−ＣＤＲ２（配列番号１０７）、及びＶｌ−ＣＤＲ３（配列番号１０８）の１、２、３、４、５、または６つを超えないアミノ酸付加、欠失、または置換を含む。本発明の態様は、Ａｂ−２の６つのＣＤＲを含む、単離ポリペプチドを含み、ここで、ＣＤＲは、Ｖｈ−ＣＤＲ１（配列番号１０）、Ｖｈ−ＣＤＲ２（配列番号１１）、Ｖｈ−ＣＤＲ３（配列番号１２）、Ｖｌ−ＣＤＲ１（配列番号１１２）、Ｖｌ−ＣＤＲ２（配列番号１１３）、及びＶｌ−ＣＤＲ３（配列番号１１４）の１、２、３、４、５、または６つを超えないアミノ酸付加、欠失、または置換を含む。本発明の態様は、Ａｂ−３の６つのＣＤＲを含む、単離ポリペプチドを含み、ここで、ＣＤＲは、Ｖｈ−ＣＤＲ１（配列番号１６）、Ｖｈ−ＣＤＲ２（配列番号１７）、Ｖｈ−ＣＤＲ３（配列番号１８）、Ｖｌ−ＣＤＲ１（配列番号１１８）、Ｖｌ−ＣＤＲ２（配列番号１１９）、及びＶｌ−ＣＤＲ３（配列番号１２０）の１、２、３、４、５、または６つを超えないアミノ酸付加、欠失、または置換を含む。本発明の態様は、Ａｂ−４の６つのＣＤＲを含む、単離ポリペプチドを含み、ここで、ＣＤＲは、Ｖｈ−ＣＤＲ１（配列番号２２）、Ｖｈ−ＣＤＲ２（配列番号２３）、Ｖｈ−ＣＤＲ３（配列番号２４）、Ｖｌ−ＣＤＲ１（配列番号１２４）、Ｖｌ−ＣＤＲ２（配列番号１２５）、及びＶｌ−ＣＤＲ３（配列番号１２６）の１、２、３、４、５、または６つを超えないアミノ酸付加、欠失、または置換を含む。本発明の態様は、Ａｂ−５の６つのＣＤＲを含む、単離ポリペプチドを含み、ここで、ＣＤＲは、Ｖｈ−ＣＤＲ１（配列番号２８）、Ｖｈ−ＣＤＲ２（配列番号２９）、Ｖｈ−ＣＤＲ３（配列番号３０）、Ｖｌ−ＣＤＲ１（配列番号１３０）、Ｖｌ−ＣＤＲ２（配列番号１３１）、及びＶｌ−ＣＤＲ３（配列番号１３２）の１、２、３、４、５、または６つを超えないアミノ酸付加、欠失、または置換を含む。本発明の態様は、Ａｂ−６の６つのＣＤＲを含む、単離ポリペプチドを含み、ここで、ＣＤＲは、Ｖｈ−ＣＤＲ１（配列番号３４）、Ｖｈ−ＣＤＲ２（配列番号３５）、Ｖｈ−ＣＤＲ３（配列番号３６）、Ｖｌ−ＣＤＲ１（配列番号１３６）、Ｖｌ−ＣＤＲ２（配列番号１３７）、及びＶｌ−ＣＤＲ３（配列番号１３８）の１、２、３、４、５、または６つを超えないアミノ酸付加、欠失、または置換を含む。本発明の態様は、Ａｂ−７の６つのＣＤＲを含む、単離ポリペプチドを含み、ここで、ＣＤＲは、Ｖｈ−ＣＤＲ１（配列番号４０）、Ｖｈ−ＣＤＲ２（配列番号４１）、Ｖｈ−ＣＤＲ３（配列番号４２）、Ｖｌ−ＣＤＲ１（配列番号１４２）、Ｖｌ−ＣＤＲ２（配列番号１４３）、及びＶｌ−ＣＤＲ３（配列番号１４４）の１、２、３、４、５、または６つを超えないアミノ酸付加、欠失、または置換を含む。本発明の態様は、Ａｂ−８の６つのＣＤＲを含む、単離ポリペプチドを含み、ここで、ＣＤＲは、Ｖｈ−ＣＤＲ１（配列番号４６）、Ｖｈ−ＣＤＲ２（配列番号４７）、Ｖｈ−ＣＤＲ３（配列番号４８）、Ｖｌ−ＣＤＲ１（配列番号１４８）、Ｖｌ−ＣＤＲ２（配列番号１４９）、及びＶｌ−ＣＤＲ３（配列番号１５０）の１、２、３、４、５、または６つを超えないアミノ酸付加、欠失、または置換を含む。本発明の態様は、Ａｂ−９の６つのＣＤＲを含む、単離ポリペプチドを含み、ここで、ＣＤＲは、Ｖｈ−ＣＤＲ１（配列番号５２）、Ｖｈ−ＣＤＲ２（配列番号５３）、Ｖｈ−ＣＤＲ３（配列番号５４）、Ｖｌ−ＣＤＲ１（配列番号１５４）、Ｖｌ−ＣＤＲ２（配列番号１５５）、及びＶｌ−ＣＤＲ３（配列番号１５６）の１、２、３、４、５、または６つを超えないアミノ酸付加、欠失、または置換を含む。本発明の態様は、Ａｂ−１０の６つのＣＤＲを含む、単離ポリペプチドを含み、ここで、ＣＤＲは、Ｖｈ−ＣＤＲ１（配列番号５８）、Ｖｈ−ＣＤＲ２（配列番号５９）、Ｖｈ−ＣＤＲ３（配列番号６０）、Ｖｌ−ＣＤＲ１（配列番号１６０）、Ｖｌ−ＣＤＲ２（配列番号１６１）、及びＶｌ−ＣＤＲ３（配列番号１６２）の１、２、３、４、５、または６つを超えないアミノ酸付加、欠失、または置換を含む。本発明の態様は、Ａｂ−１１の６つのＣＤＲを含む、単離ポリペプチドを含み、ここで、ＣＤＲは、Ｖｈ−ＣＤＲ１（配列番号６４）、Ｖｈ−ＣＤＲ２（配列番号６５）、Ｖｈ−ＣＤＲ３（配列番号６６）、Ｖｌ−ＣＤＲ１（配列番号１６６）、Ｖｌ−ＣＤＲ２（配列番号１６７）、及びＶｌ−ＣＤＲ３（配列番号１６８）の１、２、３、４、５、または６つを超えないアミノ酸付加、欠失、または置換を含む。本発明の態様は、Ａｂ−１２の６つのＣＤＲを含む、単離ポリペプチドを含み、ここで、ＣＤＲは、Ｖｈ−ＣＤＲ１（配列番号７０）、Ｖｈ−ＣＤＲ２（配列番号７１）、Ｖｈ−ＣＤＲ３（配列番号７２）、Ｖｌ−ＣＤＲ１（配列番号１７２）、Ｖｌ−ＣＤＲ２（配列番号１７３）、及びＶｌ−ＣＤＲ３（配列番号１７４）の１、２、３、４、５、または６つを超えないアミノ酸付加、欠失、または置換を含む。本発明の態様は、Ａｂ−１３の６つのＣＤＲを含む、単離ポリペプチドを含み、ここで、ＣＤＲは、Ｖｈ−ＣＤＲ１（配列番号７６）、Ｖｈ−ＣＤＲ２（配列番号７７）、Ｖｈ−ＣＤＲ３（配列番号７８）、Ｖｌ−ＣＤＲ１（配列番号１７８）、Ｖｌ−ＣＤＲ２（配列番号１７９）、及びＶｌ−ＣＤＲ３（配列番号１８０）の１、２、３、４、５、または６つを超えないアミノ酸付加、欠失、または置換を含む。本発明の態様は、Ａｂ−１４の６つのＣＤＲを含む、単離ポリペプチドを含み、ここで、ＣＤＲは、Ｖｈ−ＣＤＲ１（配列番号８２）、Ｖｈ−ＣＤＲ２（配列番号８３）、Ｖｈ−ＣＤＲ３（配列番号８４）、Ｖｌ−ＣＤＲ１（配列番号１８４）、Ｖｌ−ＣＤＲ２（配列番号１８５）、及びＶｌ−ＣＤＲ３（配列番号１８６）の１、２、３、４、５、または６つを超えないアミノ酸付加、欠失、または置換を含む。本発明の態様は、Ａｂ−１５の６つのＣＤＲを含む、単離ポリペプチドを含み、ここで、ＣＤＲは、Ｖｈ−ＣＤＲ１（配列番号８８）、Ｖｈ−ＣＤＲ２（配列番号８９）、Ｖｈ−ＣＤＲ３（配列番号９０）、Ｖｌ−ＣＤＲ１（配列番号１９０）、Ｖｌ−ＣＤＲ２（配列番号１９１）、及びＶｌ−ＣＤＲ３（配列番号１９２）の１、２、３、４、５、または６つを超えないアミノ酸付加、欠失、または置換を含む。本発明の態様は、Ａｂ−１６の６つのＣＤＲを含む、単離ポリペプチドを含み、ここで、ＣＤＲは、Ｖｈ−ＣＤＲ１（配列番号９４）、Ｖｈ−ＣＤＲ２（配列番号９５）、Ｖｈ−ＣＤＲ３（配列番号９６）、Ｖｌ−ＣＤＲ１（配列番号１９６）、Ｖｌ−ＣＤＲ２（配列番号１９７）、及びＶｌ−ＣＤＲ３（配列番号１９８）の１、２、３、４、５、または６つを超えないアミノ酸付加、欠失、または置換を含む。本発明の態様は、Ａｂ−１７の６つのＣＤＲを含む、単離ポリペプチドを含み、ここで、ＣＤＲは、Ｖｈ−ＣＤＲ１（配列番号１００）、Ｖｈ−ＣＤＲ２（配列番号１０１）、Ｖｈ−ＣＤＲ３（配列番号１０２）、Ｖｌ−ＣＤＲ１（配列番号２０２）、Ｖｌ−ＣＤＲ２（配列番号２０３）、及びＶｌ−ＣＤＲ３（配列番号２０４）の１、２、３、４、５、または６つを超えないアミノ酸付加、欠失、または置換を含む。
【００８９】
本発明の態様は、それぞれ、Ａｂ−１Ｖｌ（配列番号２４０）及びＡｂ−１Ｖｈ（配列番号２０６）に少なくとも８０％、８１％、８２％、８３％、８４％、８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、または９９％同一である、Ｖｌ及びＶｈアミノ酸配列を含む、単離ポリペプチドを含む。本発明の態様は、それぞれ、Ａｂ−２Ｖｌ（配列番号２４２）及びＡｂ−２Ｖｈ（配列番号２０８）に少なくとも８０％、８１％、８２％、８３％、８４％、８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、または９９％同一である、Ｖｌ及びＶｈアミノ酸配列を含む、単離ポリペプチドを含む。本発明の態様は、それぞれ、Ａｂ−３Ｖｌ（配列番号２４４）及びＡｂ−３Ｖｈ（配列番号２１０）に少なくとも８０％、８１％、８２％、８３％、８４％、８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、または９９％同一である、Ｖｌ及びＶｈアミノ酸配列を含む、単離ポリペプチドを含む。本発明の態様は、それぞれ、Ａｂ−４Ｖｌ（配列番号２４６）及びＡｂ−４Ｖｈ（配列番号２１２）に少なくとも８０％、８１％、８２％、８３％、８４％、８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、または９９％同一である、Ｖｌ及びＶｈアミノ酸配列を含む、単離ポリペプチドを含む。本発明の態様は、それぞれ、Ａｂ−５Ｖｌ（配列番号２４８）及びＡｂ−５Ｖｈ（配列番号２１４）に少なくとも８０％、８１％、８２％、８３％、８４％、８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、または９９％同一である、Ｖｌ及びＶｈアミノ酸配列を含む、単離ポリペプチドを含む。本発明の態様は、それぞれ、Ａｂ−６Ｖｌ（配列番号２５０）及びＡｂ−６Ｖｈ（配列番号２１６）に少なくとも８０％、８１％、８２％、８３％、８４％、８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、または９９％同一である、Ｖｌ及びＶｈアミノ酸配列を含む、単離ポリペプチドを含む。本発明の態様は、それぞれ、Ａｂ−７Ｖｌ（配列番号２５２）及びＡｂ−７Ｖｈ（配列番号２１８）に少なくとも８０％、８１％、８２％、８３％、８４％、８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、または９９％同一である、Ｖｌ及びＶｈアミノ酸配列を含む、単離ポリペプチドを含む。本発明の態様は、それぞれ、Ａｂ−８Ｖｌ（配列番号２５４）及びＡｂ−８Ｖｈ（配列番号２２０）に少なくとも８０％、８１％、８２％、８３％、８４％、８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、または９９％同一である、Ｖｌ及びＶｈアミノ酸配列を含む、単離ポリペプチドを含む。本発明の態様は、それぞれ、Ａｂ−９Ｖｌ（配列番号２５６）及びＡｂ−９Ｖｈ（配列番号２２２）に少なくとも８０％、８１％、８２％、８３％、８４％、８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、または９９％同一である、Ｖｌ及びＶｈアミノ酸配列を含む、単離ポリペプチドを含む。本発明の態様は、それぞれ、Ａｂ−１０Ｖｌ（配列番号２５８）及びＡｂ−１０Ｖｈ（配列番号２２４）に少なくとも８０％、８１％、８２％、８３％、８４％、８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、または９９％同一である、Ｖｌ及びＶｈアミノ酸配列を含む、単離ポリペプチドを含む。本発明の態様は、それぞれ、Ａｂ−１１Ｖｌ（配列番号２６０）及びＡｂ−１１Ｖｈ（配列番号２２６）に少なくとも８０％、８１％、８２％、８３％、８４％、８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、または９９％同一である、Ｖｌ及びＶｈアミノ酸配列を含む、単離ポリペプチドを含む。本発明の態様は、それぞれ、Ａｂ−１２Ｖｌ（配列番号２６２）及びＡｂ−１２Ｖｈ（配列番号２２８）に少なくとも８０％、８１％、８２％、８３％、８４％、８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、または９９％同一である、Ｖｌ及びＶｈアミノ酸配列を含む、単離ポリペプチドを含む。本発明の態様は、それぞれ、Ａｂ−１３Ｖｌ（配列番号２６４）及びＡｂ−１３Ｖｈ（配列番号２３０）に少なくとも８０％、８１％、８２％、８３％、８４％、８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、または９９％同一である、Ｖｌ及びＶｈアミノ酸配列を含む、単離ポリペプチドを含む。本発明の態様は、それぞれ、Ａｂ−１４Ｖｌ（配列番号２６６）及びＡｂ−１４Ｖｈ（配列番号２３２）に少なくとも８０％、８１％、８２％、８３％、８４％、８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、または９９％同一である、Ｖｌ及びＶｈアミノ酸配列を含む、単離ポリペプチドを含む。本発明の態様は、それぞれ、Ａｂ−１５Ｖｌ（配列番号２６８）及びＡｂ−１５Ｖｈ（配列番号２３４）に少なくとも８０％、８１％、８２％、８３％、８４％、８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、または９９％同一である、Ｖｌ及びＶｈアミノ酸配列を含む、単離ポリペプチドを含む。本発明の態様は、それぞれ、Ａｂ−１６Ｖｌ（配列番号２７０）及びＡｂ−１６Ｖｈ（配列番号２３６）に少なくとも８０％、８１％、８２％、８３％、８４％、８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、または９９％同一である、Ｖｌ及びＶｈアミノ酸配列を含む、単離ポリペプチドを含む。本発明の態様は、それぞれ、Ａｂ−１７Ｖｌ（配列番号２７２）及びＡｂ−１７Ｖｈ（配列番号２３８）に少なくとも８０％、８１％、８２％、８３％、８４％、８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、または９９％同一である、Ｖｌ及びＶｈアミノ酸配列を含む、単離ポリペプチドを含む。
【００９０】
本発明の態様は、Ａｂ−１軽鎖（配列番号２８０）及び／またはＡｂ−１重鎖（配列番号２７４）を含むポリペプチドに少なくとも８０％、８１％、８２％、８３％、８４％、８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、または９９％同一である、単離ポリペプチドを含む。本発明の態様は、Ａｂ−２軽鎖（配列番号２８２）及び／またはＡｂ−２重鎖（配列番号２７６）を含むポリペプチドに少なくとも８０％、８１％、８２％、８３％、８４％、８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、または９９％同一である、単離ポリペプチドを含む。本発明の態様は、Ａｂ−３軽鎖（配列番号２８４）及び／またはＡｂ−３重鎖（配列番号２７８）を含むポリペプチドに少なくとも８０％、８１％、８２％、８３％、８４％、８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、または９９％同一である、単離ポリペプチドを含む。本発明の態様は、前述のもののフラグメント、誘導体、変異タンパク質、及び変異体を含む。
【００９１】
本明細書に使用される「タンパク質」とは、タンパク質、ポリペプチド、オリゴペプチド、及びペプチドを含む、少なくとも２つの共有結合で結合したアミノ酸を意味する。いくつかの実施形態において、２つ以上の共有結合で結合したアミノ酸は、ペプチド結合によって結合する。タンパク質は、例えば、以下に概説されるように、タンパク質が発現系及び宿主細胞を使用して組み換えで作製される場合、天然に存在するアミノ酸及びペプチド結合から構成され得る。あるいは、タンパク質は、プロテアーゼまたは他の生理学的及び／もしくは保管条件に耐性であり得る、合成アミノ酸（例えば、ホモフェニルアラニン、シトルリン、オルニチン、及びノルロイシン）、またはペプチド模倣体構造、すなわち、ペプトイド等の「ペプチドまたはタンパク質類似体」を含み得る（Ｓｉｍｏｎ  ｅｔ  ａｌ．，１９９２，Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．Ｕ．Ｓ．Ａ．８９：９３６７を参照されたく、これは参照により本明細書に組み込まれる）。そのような合成アミノ酸は、特に、抗原結合タンパク質が、当該技術分野で周知の従来的な方法によってインビトロで合成されるときに、組み込まれ得る。加えて、ペプチド模倣体、合成、及び天然に存在する残基／構造の任意の組み合わせが使用され得る。「アミノ酸」にはまた、プロリン及びヒドロキシプロリン等のイミノ酸残基も含まれる。アミノ酸の「Ｒ基」または「側鎖」は、（Ｌ）または（Ｓ）配座のいずれかであり得る。具体的な実施形態において、アミノ酸は、（Ｌ）または（Ｓ）配座にある。
【００９２】
「組み換えタンパク質」は、当該技術分野で既知の任意の技術及び方法を使用して、組み換え技術を用いて、すなわち、本明細書に記載される組み換え核酸の発現を通じて、作製されるタンパク質である。組み換えタンパク質の産生のための方法及び技術は、当該技術分野で周知である。
【００９３】
いくつかの実施形態において、本発明の抗原結合タンパク質は、単離タンパク質または実質的に純粋なタンパク質である。「単離」タンパク質は、その天然の状態では通常関連している物質のうちの少なくとも一部を伴わず、例えば、所与の試料中の総タンパク質の少なくとも約５重量％、または少なくとも約５０重量％を構成する。単離タンパク質は、状況に応じて、総タンパク質含量の５〜９９．９重量％を構成し得ることを理解されたい。例えば、タンパク質が高い濃度レベルで作製されるように、タンパク質は、誘導プロモーターまたは高発現プロモーターの使用を通じて、有意に高い濃度で作製されてもよい。この定義は、当該技術分野で既知の多様な生物及び／または宿主細胞における抗原結合タンパク質の産生を含む。
【００９４】
アミノ酸配列に関して、配列同一性及び／または類似性は、Ｓｍｉｔｈ  ａｎｄ  Ｗａｔｅｒｍａｎ，１９８１，Ａｄｖ．Ａｐｐｌ．Ｍａｔｈ．２：４８２の局所的配列同一性アルゴリズム、Ｎｅｅｄｌｅｍａｎ  ａｎｄ  Ｗｕｎｓｃｈ，１９７０，Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．４８：４４３の配列同一性アライメントアルゴリズム、Ｐｅａｒｓｏｎ  ａｎｄ  Ｌｉｐｍａｎ，１９８８，Ｐｒｏｃ．Ｎａｔ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．Ｕ．Ｓ．Ａ．８５：２４４４の類似性検索方法、これらのアルゴリズムのコンピュータによる実装（Ｗｉｓｃｏｎｓｉｎ  Ｇｅｎｅｔｉｃｓ  Ｓｏｆｔｗａｒｅ  Ｐａｃｋａｇｅ，Ｇｅｎｅｔｉｃｓ  Ｃｏｍｐｕｔｅｒ  Ｇｒｏｕｐ，５７５  Ｓｃｉｅｎｃｅ  Ｄｒｉｖｅ，Ｍａｄｉｓｏｎ，Ｗｉｓ．におけるＧＡＰ、ＢＥＳＴＦＩＴ、ＦＡＳＴＡ、及びＴＦＡＳＴＡ）、Ｄｅｖｅｒｅｕｘ  ｅｔ  ａｌ．，１９８４，Ｎｕｃｌ．Ａｃｉｄ  Ｒｅｓ．１２：３８７−３９５によって記載されるＢｅｓｔ  Ｆｉｔ配列プログラムを含むがこれらに限定されない、当該技術分野で既知の標準的な技術を用いて、好ましくはデフォルト設定を使用して、または検査によって、判定される。好ましくは、パーセント同一性は、次のパラメーターに基づいてＦａｓｔＤＢによって計算される：ミスマッチペナルティ１、ギャップペナルティ１、ギャップサイズペナルティ０．３３、及び接合ペナルティ３０（”Ｃｕｒｒｅｎｔ  Ｍｅｔｈｏｄｓ  ｉｎ  Ｓｅｑｕｅｎｃｅ  Ｃｏｍｐａｒｉｓｏｎ  ａｎｄ  Ａｎａｌｙｓｉｓ，”Ｍａｃｒｏｍｏｌｅｃｕｌｅ  Ｓｅｑｕｅｎｃｉｎｇ  ａｎｄ  Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ，Ｓｅｌｅｃｔｅｄ  Ｍｅｔｈｏｄｓ  ａｎｄ  Ａｐｐｌｉｃａｔｉｏｎｓ，ｐｐ  １２７−１４９（１９８８），Ａｌａｎ  Ｒ．Ｌｉｓｓ，Ｉｎｃ．）。
【００９５】
有用なアルゴリズムの一例は、ＰＩＬＥＵＰである。ＰＩＬＥＵＰは、累進ペアワイズアライメントを使用して、関連配列の群から多重配列アライメントを作出する。これは、さらに、アライメントを作出するために使用されるクラスタ化関係を示すツリーをプロットすることができる。ＰＩＬＥＵＰは、Ｆｅｎｇ＆Ｄｏｏｌｉｔｔｌｅ，１９８７，Ｊ．Ｍｏｌ．Ｅｖｏｌ．３５：３５１−３６０の累進アライメントを単純化したものを使用し、この方法は、Ｈｉｇｇｉｎｓ  ａｎｄ  Ｓｈａｒｐ，１９８９，ＣＡＢＩＯＳ  ５：１５１−１５３によって記載される方法に類似である。有用なＰＩＬＥＵＰパラメーターは、デフォルトギャップ重み付け３．００、デフォルトギャップ長さ重み付け０．１０、及び重み付き末端ギャップを含む。
【００９６】
有用なアルゴリズムの別の例は、Ａｌｔｓｃｈｕｌ  ｅｔ  ａｌ．，１９９０，Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．２１５：４０３−４１０、Ａｌｔｓｃｈｕｌ  ｅｔ  ａｌ．，１９９７，Ｎｕｃｌｅｉｃ  Ａｃｉｄｓ  Ｒｅｓ．２５：３３８９−３４０２、及びＫａｒｉｎ  ｅｔ  ａｌ．，１９９３，Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．Ｕ．Ｓ．Ａ．９０：５８７３−５７８７に記載されるＢＬＡＳＴアルゴリズムである。特に有用なＢＬＡＳＴプログラムは、Ａｌｔｓｃｈｕｌ  ｅｔ  ａｌ．，１９９６，Ｍｅｔｈｏｄｓ  ｉｎ  Ｅｎｚｙｍｏｌｏｇｙ  ２６６：４６０−４８０から得られたＷＵ−ＢＬＡＳＴ−２プログラムである。ＷＵ−ＢＬＡＳＴ−２は、複数の検索パラメーターを使用し、そのほとんどが、デフォルト値に設定される。調整可能なパラメーターは、次の値で設定される：重複範囲＝１、重複画分＝０．１２５、ワード閾値（Ｔ）＝ＩＩ。ＨＳＰ  Ｓ及びＨＳＰ  Ｓ２のパラメーターは、動的な値であり、特定の配列の組成、及び目的の配列が検索される特定のデータベースの組成に応じてプログラム自体によって確立されるが、しかしながら、値は、感度を増加させるように調整され得る。
【００９７】
さらなる有用なアルゴリズムは、Ａｌｔｓｃｈｕｌ  ｅｔ  ａｌ．，１９９３，Ｎｕｃｌ．Ａｃｉｄｓ  Ｒｅｓ．２５：３３８９−３４０２によって報告されたギャップ付きＢＬＡＳＴである。ギャップ付きＢＬＡＳＴは、ＢＬＯＳＵＭ−６２置換スコア、９に設定した閾値Ｔパラメーター、ギャップなしの伸長を開始するための２ヒット法、ギャップ長ｋにコスト１０＋ｋを負荷、１６に設定したＸｕ、アルゴリズムのデータベース検索段階は４０、出力段階は６７に設定したＸｇを使用する。ギャップ付アラインメントは、約２２ビットに対応するスコアによって開始される。
【００９８】
一般に、本明細書に示される配列に対する個々の変異体ＣＤＲ間のアミノ酸の相同性、類似性、または同一性は、少なくとも８０％であり、より典型的には、少なくとも８５％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、及びほぼ１００％の増加する相同性または同一性が好ましい。類似の様式で、本明細書に特定される結合タンパク質の核酸配列に関する「パーセント（％）核酸配列同一性」は、抗原結合タンパク質のコード配列のヌクレオチド残基と同一な候補配列のヌクレオチド残基のパーセンテージとして定義される。特定の方法は、重複範囲及び重複画分をそれぞれ１及び０．１２５に設定して、デフォルトパラメーターに設定されたＷＵ−ＢＬＡＳＴ−２のＢＬＡＳＴＮモジュールを利用する。
【００９９】
アミノ酸配列変異を導入するための部位または領域は事前に決定されているが、変異自体は、必ずしも事前に決定されるわけではない。例えば、所与の部位における変異の性能を最適化するために、ランダム変異誘発を標的コドンまたは領域で実行して、発現された抗原結合タンパク質ＣＤＲ変異体を所望される活性の最適な組み合わせに関してスクリーニングすることができる。既知の配列を有するＤＮＡの所定の部位に置換変異を行うための技法、例えばＭ１３プライマー変異誘発及びＰＣＲ変異誘発が、周知である。突然変異体のスクリーニングは、例えば、実施例に記載されるアッセイを使用して行われる。
【０１００】
アミノ酸置換は、典型的には、単一残基のものであり、挿入は、通常、約１（１）〜約２０（２０）個程度のアミノ酸残基であるが、それよりも大幅に大きな挿入が耐容され得る。欠失は、約１（１）〜約２０（２０）個のアミノ酸残基の範囲であるが、いくつかの場合では、欠失はさらにより大きくてもよい。置換、欠失、挿入、またはこれらの任意の組み合わせが、最終的な誘導体または変異体に到達するために用いられ得る。一般に、これらの変化は、分子の改変、特に、抗原結合タンパク質の免疫原性及び特異性の改変を最小限に抑えるために、数個のアミノ酸に対して行われる。しかしながら、より大規模な変更が、ある特定の状況では耐容され得る。保存的置換は、一般的に表２に示される以下の表に従って、行われる。
【表２】
2019031510.tif 000009
【０１０１】
機能または免疫学的識別の大幅な変更は、表２に示されるものよりも保存性が低い置換を選択することによって行われる。例えば、改変の領域内のポリペプチ骨格の構造、例えば、αヘリックスまたはβシート構造、標的部位における分子の電荷もしくは疎水性、または側鎖の嵩高さに、より著しく影響を及ぼす置換が行われてもよい。一般に、ポリペプチドの特性に最も大きな変化をもたらすことが予測される置換は、（ａ）親水性残基、例えば、セリルもしくはスレオリルが、疎水性残基、例えば、ロイシル、イソロイシル、フェニルアラニル、バリル、もしくはアラニルと（もしくはそれによって）置換されるもの、（ｂ）システインもしくはプロリンが、任意の他の残基と（もしくはそれによって）置換されるもの、（ｃ）電気的陽性側鎖を有する残基、例えば、リジル、アルギニル、もしくはヒスチジルが、電気的陰性残基、例えば、グルタミンルもしくはアスパルチルと（もしくはそれによって）置換されるもの、または（ｄ）大きな側鎖を有する残基、例えば、フェニルアラニンが、側鎖を有しないもの、例えば、グリシンと（もしくはそれによって）置換されるものである。
【０１０２】
変異体は、典型的に、天然に存在する類似体と同じ定性的生物学的活性を示し、同じ免疫応答を誘起するが、変異体はまた、必要に応じて抗原結合タンパク質タンパク質の特徴を修飾するためにも選択される。あるいは、変異体は、抗原結合タンパク質の生物学的活性が改変されるように設計され得る。例えば、グリコシル化部位は、本明細書に記載されるように、改変または除去され得る。抗体を含むＢＣＭＡ抗原結合タンパク質のそのような修飾は、誘導体の一例である。ポリペプチドの「誘導体」は、例えば、例としてポリエチレングリコール、アルブミン（例えば、ヒト血清アルブミン）、リン酸化、及びグリコシル化等の別の部分との複合体化を介して化学修飾されているポリペプチド（例えば、抗体）である。
【０１０３】
本発明の範囲内のＢＣＭＡ抗体の他の誘導体には、ＢＣＭＡ抗体ポリペプチドのＮ末端またはＣ末端に融合された異種ポリペプチドを含む組み換え融合タンパク質の発現等による、ＢＣＭＡ抗体またはそのフラグメントと、他のタンパク質またはポリペプチドとの共有結合または凝集複合体が含まれる。例えば、複合体化されるペプチドは、異種シグナル（またはリーダー）ポリペプチド、例えば、酵母α因子リーダー、またはエピトープタグ等のペプチドであり得る。ＢＣＭＡ抗体を含有する融合タンパク質は、ＢＣＭＡ抗体の精製または特定を促進するために付加されるペプチド（例えば、ポリ−Ｈｉｓ）を含み得る。ＢＣＭＡ抗体ポリペプチドはまた、Ｈｏｐｐ  ｅｔ  ａｌ．，Ｂｉｏ／Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ  ６：１２０４，１９８８及び米国特許第５，０１１，９１２号に記載されるように、ＦＬＡＧペプチドＤＹＫＤＤＤＤＫ（配列番号４４７）に連結され得る。ＦＬＡＧペプチドは、高度に抗原性であり、特異的モノクローナル抗体（ｍＡｂ）によって可逆的に結合されるエピトープを提供し、発現される組み換えタンパク質の迅速なアッセイ及び容易な精製を可能にする。ＦＬＡＧペプチドが所与のポリペプチドに融合された融合タンパク質を調製するのに有用な試薬は、市販入手可能である（Ｓｉｇｍａ、ミズーリ州セントルイス）。
【０１０４】
１つ以上のＢＣＭＡ抗体ポリペプチドを含有するオリゴマーが、ＢＣＭＡアンタゴニストとして用いられ得る。オリゴマーは、共有結合で連結されたかまたは非共有結合で連結された二量体、三量体、またはより高度なオリゴマーの形態であり得る。２つ以上のＢＣＭＡ抗体ポリペプチドを含むオリゴマーの使用が企図され、その一例は、ホモ二量体である。他のオリゴマーには、ヘテロ二量体、ホモ三量体、ヘテロ三量体、ホモ四量体、ヘテロ四量体等である。一実施形態は、ＢＣＭＡ抗体ポリペプチドに融合されるペプチド部分間の共有結合または非共有結合による相互作用を介して連結された複数のＢＣＭＡ抗体ポリペプチドを含むオリゴマーを対象とする。そのようなペプチドは、ペプチドリンカー（スペーサー）、またはオリゴマー形成を促進する特性を有するペプチドであり得る。ロイシンジッパー及び抗体由来のある特定のポリペプチドは、以下により詳細に記載されるように、そこに付加されるＢＣＭＡ抗体ポリペプチドのオリゴマー形成を促進し得るペプチドに含まれる。具体的な実施形態において、オリゴマーは、２〜４つのＢＣＭＡ抗体ポリペプチドを含む。オリゴマーのＢＣＭＡ抗体部分は、上述の形態のいずれか、例えば、変異体またはフラグメントにあり得る。
【０１０５】
本発明の一実施形態は、ＢＣＭＡ抗体のＢＣＭＡ結合フラグメントを、ある抗体のＦｃ領域に融合することによって作製される、２つの融合タンパク質を含む二量体である。二量体は、例えば、融合タンパク質をコードする遺伝子融合体を適切な発現ベクターに挿入し、組み換え発現ベクターで形質転換した宿主細胞において遺伝子融合体を発現させ、発現した融合タンパク質を抗体分子に酷似するように構築することによって作製され得、そうすることで、Ｆｃ部分間に鎖間ジスルフィド結合が形成されて二量体が生じる。あるいは、オリゴマーは、複数のＢＣＭＡ抗体ポリペプチドを、ペプチドリンカー（スペーサーペプチド）ありまたはなしで含む、融合タンパク質である。好適なペプチドリンカーの中には、米国特許第４，７５１，１８０号及び同第４，９３５，２３３号に記載されるものがある。
【０１０６】
オリゴマーＢＣＭＡ抗体誘導体を調製するための別の方法は、ロイシンジッパーの使用を伴う。ロイシンジッパードメインは、それらが見出されるタンパク質のオリゴマー形成を促進するペプチドである。ロイシンジッパーは、元々、いくつかのＤＮＡ結合タンパク質において特定され（Ｌａｎｄｓｃｈｕｌｚ  ｅｔ  ａｌ．，１９８８，Ｓｃｉｅｎｃｅ  ２４０：１７５９）、それ以来種々の異なるタンパク質において発見されている。既知のロイシンジッパーの中には、二量体形成または三量体形成を行う、天然に存在するペプチド及びそれらの誘導体がある。可溶性オリゴマータンパク質を産生するのに好適なロイシンジッパードメインの例は、ＰＣＴ出願第ＷＯ９４／１０３０８号に記載され、肺界面活性タンパク質Ｄ（ＳＰＤ）に由来するロイシンジッパーはＨｏｐｐｅ  ｅｔ  ａｌ．，１９９４，ＦＥＢＳ  Ｌｅｔｔｅｒｓ  ３４４：１９１に記載されている（参照により本明細書に組み込まれる）。融合される異種タンパク質の安定な三量体形成を可能にする修飾ロイシンジッパーの使用は、Ｆａｎｓｌｏｗ  ｅｔ  ａｌ．，１９９４，Ｓｅｍｉｎ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．６：２６７−７８に記載されている。１つのアプローチでは、ロイシンジッパーペプチドに融合されたＢＣＭＡ抗体フラグメントまたは誘導体を含む組み換え融合タンパク質が、好適な宿主細胞において発現され、形成される可溶性オリゴマーＢＣＭＡ抗体フラグメントまたは誘導体が、培養上清から回収される。
【０１０７】
共有結合修飾もまた、ＢＣＭＡ抗原結合タンパク質の誘導体と見なされ、本発明の範囲内に含まれ、これは、必ずではないが一般的には翻訳後に行われる。例えば、抗原結合タンパク質のいくつかの種類の共有結合修飾は、抗原結合タンパク質の特定のアミノ酸残基と、選択されたＮまたはＣ末端残基の側鎖と反応することができる有機誘導体化剤とを反応させることによって、分子に導入される。
【０１０８】
システイニル残基を、最も一般的には、α−ハロアセテート（及び対応するアミン）、例えばクロロ酢酸またはクロロアセトアミドと反応させて、カルボキシメチルまたはカルボキシアミドメチル誘導体を得る。システイニル残基はまた、ブロモトリフルオロアセトン、α−ブロモ−β−（５−イミドゾイル）プロピオン酸、クロロアセチルリン酸、Ｎ−アルキルマレイミド、３−ニトロ−２−ピリジルジスルフィド、メチル２−ピリジルジスルフィド、ｐ−クロロ水銀安息香酸、２−クロロ水銀−４−ニトロフェノール、またはクロロ−７−ニトロベンゾ−２−オキサ−１，３−ジアゾールとの反応によって誘導体化される。
【０１０９】
ヒスチジル残基は、ｐＨ５．５〜７．０でジエチルピロカーボネートとの反応によって誘導体化され、これは、この薬剤が、ヒスチジル側鎖に比較的特異的であるためである。パラ−ブロモフェナシルブロミドもまた有用であり、反応は、好ましくは、ｐＨ６．０において０．１Ｍカコジル酸ナトリウム中で行われる。
【０１１０】
リジニル及びアミノ末端残基を、コハク酸または他のカルボン酸無水物と反応させる。これらの薬剤での誘導体化は、リジニル残基の電荷を反転させる効果を有する。α−アミノ含有残基の誘導体化に好適な他の試薬には、イミドエステル、例えばメチルピコリンイミデート；ピリドキサールリン酸；ピリドキサール；クロロボロヒドリド；トリニトロベンゼンスルホン酸；Ｏ−メチルイソ尿素；２，４−ペンタンジオン；及びグリオキシル酸とのトランスアミナーゼ触媒反応が挙げられる。
【０１１１】
アルギニル残基は、１つまたは複数の従来的な試薬、とりわけ、フェニルグリオキサール、２，３−ブタンジオン、１，２−シクロヘキサンジオン、及びニンヒドリンとの反応によって、修飾される。アルギニン残基の誘導体化は、グアニジン官能基のｐＫａが高いため、アルカリ性条件において行うことが必要である。さらに、これらの試薬は、リジン基ならびにアルギニンεアミノ基と反応し得る。
【０１１２】
チロシル残基の特定の修飾は、チロシル残基にスペクトル標識を導入することに特に関心を払って芳香族ジアゾニウム化合物またはテトラニトロメタンとの反応によって行われ得る。最も一般的には、Ｎ−アセチルイミジゾール（Ｎ−ａｃｅｔｙｌｉｍｉｄｉｚｏｌｅ）及びテトラニトロメタンを使用して、それぞれ、Ｏ−アセチルチロシル種及び３−ニトロ誘導体を形成する。チロシル残基を、１２５Ｉまたは１３１Ｉを使用してヨウ素化して、放射免疫測定法で使用するための標識タンパク質を調製し、これには上述のクロラミンＴ法が好適である。
【０１１３】
カルボキシ側基（アスパルチルまたはグルタミル）は、カルボジイミド（Ｒ’−Ｎ＝Ｃ＝Ｎ−−Ｒ’）との反応によって選択的に修飾され、式中、Ｒ及びＲ’は、任意で異なるアルキル基、例えば、１−シクロヘキシル−３−（２−モルホリニル−４−エチル）カルボジイミドまたは１−エチル−３−（４−アゾニア−４，４−次メチルペンチル）カルボジイミドである。さらに、アスパルチル及びグルタミル残基は、アンモニウムイオンとの反応によって、アスパルギニル及びグルタミニル残基に変換される。
【０１１４】
二官能性薬剤での誘導体化は、種々の方法で使用される抗原結合タンパク質を不水溶性支持マトリックスまたは表面に架橋させるのに有用である。広く使用される架橋剤には、例えば、１，１−ビス（ジアゾアセチル）−２−フェニルエタン、グルタルアルデヒド、Ｎ−ヒドロキシスクシンイミドエステル、例えば、４−アジドサリチル酸、ホモ二官能性イミドエステル（ジスクシンイミジルエステル、例えば３，３’−ジチオビス（スクシンイミジルプロピオネート））、及び二官能性マレイミド、例えば、ビス−Ｎ−マレイミド−１，８−オクタンが挙げられる。メチル−３−［（ｐ−アジドフェニル）ジチオ］プロピオイミデート等の誘導体化剤は、光の存在下で架橋を形成することができる光活性化可能な中間体をもたらす。あるいは、米国特許第３，９６９，２８７号、同第３，６９１，０１６号、同第４，１９５，１２８号、同第４，２４７，６４２号、同第４，２２９，５３７号、及び同第４，３３０，４４０号に記載される、臭化シアン活性化炭水化物及び反応基質といった、反応性の不水溶性マトリックスが、タンパク質の固定化に用いられる。
【０１１５】
グルタミニル及びアスパラギニル残基は、脱アミド化して、それぞれ、対応するグルタミル及びアスパルチル残基になることが多い。あるいは、これらの残基は、弱酸性条件下で脱アミド化される。これらの残基のいずれの形態も、本発明の範囲内に含まれる。
【０１１６】
他の修飾には、プロリン及びリジンのヒドロキシル化、セリルまたはスレオニル残基のヒドロキシル基のリン酸化、リジン、アルギニン、及びヒスチジン側鎖のα−アミノ基のメチル化（Ｔ．Ｅ．Ｃｒｅｉｇｈｔｏｎ，Ｐｒｏｔｅｉｎｓ：Ｓｔｒｕｃｔｕｒｅ  ａｎｄ  Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｐｒｏｐｅｒｔｉｅｓ，Ｗ．Ｈ．Ｆｒｅｅｍａｎ＆Ｃｏ．，Ｓａｎ  Ｆｒａｎｃｉｓｃｏ，１９８３，ｐｐ．７９−８６）、Ｎ末端アミンのアセチル化、ならびに任意のＣ末端カルボキシル基のアミド化が挙げられる。
【０１１７】
本発明の範囲内に含まれる、抗原結合タンパク質の別の種類の共有結合修飾は、タンパク質のグリコシル化パターンを改変させることを含む。当該技術分野で既知のように、グリコシル化パターンは、タンパク質の配列（例えば、以下に記載される特定のグリコシル化アミノ酸残基の存在もしくは不在）、またはタンパク質が産生される宿主細胞もしくは生物の両方に依存し得る。具体的な発現系は、以下に記載される。
【０１１８】
ポリペプチドのグリコシル化は、典型的に、Ｎ結合型またはＯ結合型のいずれかである。Ｎ結合型は、アスパラギン残基の側鎖への炭水化物部分の結合を指す。アスパラギン−Ｘ−セリン及びアスパラギン−Ｘ−スレオニンというトリ−ペプチド配列（式中、Ｘはプロリン以外のアミノ酸である）は、アスパラギン側鎖への炭水化物部分の酵素結合の認識配列である。したがって、ポリペプチド中のこれらのトリ−ペプチド配列のいずれかの存在が、可能性のあるグリコシル化部位を作出する。Ｏ結合型グリコシル化は、糖類、すなわちＮ−アセチルガラクトサミン、ガラクトース、またはキシロースのうちの１つが、ヒドロキシアミノ酸、最も一般的にはセリンまたはスレオニンに結合することを指すが、５−ヒドロキシプロリンまたは５−ヒドロキシリジンもまた使用され得る。
【０１１９】
抗原結合タンパク質へのグリコシル化部位の付加は、アミノ酸配列が、上述のトリ−ペプチド配列のうちの１つ以上を含有するように、アミノ酸配列を改変させることによって便宜的に達成される（Ｎ結合型グリコシル化部位に関して）。改変はまた、１つ以上のセリンまたはスレオニン残基を、開始配列に付加するか、またはそれと置換することによって行われてもよい（Ｏ結合型グリコシル部位に関して）。容易さのため、抗原結合タンパク質のアミノ酸配列は、好ましくは、ＤＮＡレベルでの変化を通じて、特に、コドンが生成され、それが所望のアミノ酸に翻訳されるように、標的ポリペプチドをコードするＤＮＡを事前に選択した塩基で変異させることによって、改変される。
【０１２０】
抗原結合タンパク質の炭水化物部分の数を増加させる別の手段は、グリコシドとタンパク質との化学的または酵素的カップリングによるものである。これらの手順は、Ｎ及びＯ結合型グリコシル化のためのグリコシル化能を有する宿主細胞におけるタンパク質の産生を必要としないという点で、有利である。使用されるカップリング様式に応じて、糖類（複数可）が、（ａ）アルギニン及びヒスチジン、（ｂ）遊離カルボキシル基、（ｃ）遊離スルフヒドリル基、例えばシステインのもの、（ｄ）遊離ヒドロキシル基、例えばセリン、スレオニン、もしくはヒドロキシプロリンのもの、（ｅ）芳香族残基、例えば、フェニルアラニン、チロシン、もしくはトリプトファンのもの、または（ｆ）グルタミンのアミド基に結合され得る。これらの方法は、１９８７年９月１１日に公開された国際公開第ＷＯ８７／０５３３０号及びＡｐｌｉｎ  ａｎｄ  Ｗｒｉｓｔｏｎ，１９８１，ＣＲＣ  Ｃｒｉｔ．Ｒｅｖ．Ｂｉｏｃｈｅｍ．，ｐｐ．２５９−３０６に記載されている。
【０１２１】
出発抗原結合タンパク質に存在する炭水化物部分の除去は、化学的または酵素的に達成され得る。化学的脱グリコシル化は、トリフルオロメタンスルホン酸または同等の化合物へのタンパク質の曝露を必要とする。この処理は、連結している糖（Ｎ−アセチルグルコサミンまたはＮ−アセチルガラクトサミン）を除くほとんどまたは全ての糖の切断をもたらすが、ポリペプチド無傷なままである。化学的脱グリコシル化は、Ｈａｋｉｍｕｄｄｉｎ  ｅｔ  ａｌ．，１９８７，Ａｒｃｈ．Ｂｉｏｃｈｅｍ．Ｂｉｏｐｈｙｓ．２５９：５２及びＥｄｇｅ  ｅｔ  ａｌ．，１９８１，Ａｎａｌ．Ｂｉｏｃｈｅｍ．１１８：１３１によって記載されている。ポリペプチドの炭水化物部分の酵素的切断は、Ｔｈｏｔａｋｕｒａ  ｅｔ  ａｌ．，１９８７，Ｍｅｔｈ．Ｅｎｚｙｍｏｌ．１３８：３５０によって記載される、多様なエンド及びエキソグリコシダーゼの使用によって達成され得る。可能性のあるグリコシル化部位のグリコシル化は、Ｄｕｓｋｉｎ  ｅｔ  ａｌ．，１９８２，Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．２５７：３１０５によって記載されるように、化合物のツニカマイシンの使用によって防止され得る。ツニカマイシンは、タンパク質−Ｎ−グリコシド連結の形成を阻止する。
【０１２２】
抗原結合タンパク質の別の種類の共有結合修飾は、米国特許第４，６４０，８３５号、同第４，４９６，６８９号、同第４，３０１，１４４号、同第４，６７０，４１７号、同第４，７９１，１９２号、または同第４，１７９，３３７号に記載される様式で、ポリエチレングリコール、ポリプロピレングリコール、またはポリオキシアルキレン等の種々のポリオールを含むがこれらに限定されない、抗原結合タンパク質と種々の非タンパク質性ポリマーとを連結させることを含む。加えて、当該技術分野で既知のように、アミノ酸置換を、抗原結合タンパク質内の種々の位置に行って、ＰＥＧ等のポリマーの付加を促進することができる。
【０１２３】
いくつかの実施形態において、本発明の抗原結合タンパク質の共有結合修飾は、１つ以上の標識の付加を含む。「標識基」という用語は、任意の検出可能な標識を意味する。好適な標識基の例としては、次のものが挙げられるが、これらに限定されない：放射性同位体もしくは放射性核種（例えば、３Ｈ、１４Ｃ、１５Ｎ、３５Ｓ、９０Ｙ、９９Ｔｃ、１１１Ｉｎ、１２５Ｉ、１３１Ｉ）、蛍光基（例えば、ＦＩＴＣ、ローダミン、ランタニド蛍光体）、酵素基（例えば、西洋ワサビペルオキシダーゼ、β−ガラクトシダーゼ、ルシフェラーゼ、アルカリホスファターゼ）、化学発光基、ビオチニル基、または二次レポーターによって認識される所定のポリペプチドエピトープ（例えば、ロイシンジッパー対配列、二次抗体の結合部位、金属結合部位、エピトープタグ）。いくつかの実施形態において、標識基は、可能性のある立体障害を低減させるために、種々の長さのスペーサーアームを介して抗原結合タンパク質に結合される。タンパク質を標識するための種々の方法が、当該技術分野で既知であり、本発明を実施する際に使用され得る。
【０１２４】
一般に、標識は、それらが検出されるアッセイに応じて、種々のクラスに分類される：ａ）放射性または重同位体であり得る同位体標識、ｂ）磁気標識（例えば、磁気粒子）、ｃ）レドックス活性部分、ｄ）光学色素、酵素基（例えば、西洋ワサビペルオキシダーゼ、β−ガラクトシダーゼ、ルシフェラーゼ、アルカリホスファターゼ）、ｅ）ビオチニル化基、及びｆ）二次レポーターによって認識される所定のポリペプチドエピトープ（例えば、ロイシンジッパー対配列、二次抗体の結合部位、金属結合ドメイン、エピトープタグ）。いくつかの実施形態において、標識基は、可能性のある立体障害を低減させるために、種々の長さのスペーサーアームを介して抗原結合タンパク質に結合される。タンパク質を標識するための種々の方法が、当該技術分野で既知であり、本発明を実施する際に使用され得る。
【０１２５】
特異的標識には、発色団、蛍光体、及びフルオロフォアを含むがこれらに限定されない光学色素が含まれ、後者は多くの場合において特異的である。フルオロフォアは、「小分子」蛍光またはタンパク質性蛍光のいずれかであり得る。
【０１２６】
「蛍光標識」とは、その固有の蛍光特性によって検出され得る任意の分子を意味する。好適な蛍光標識には、フルオレセイン、ローダミン、テトラメチルローダミン、エオシン、エリスロシン、クマリン、メチル−クマリン、ピレン、マラカイトグリーン（Ｍａｌａｃｉｔｅ  ｇｒｅｅｎ）、スチルベン、ルシファーイエロー、カスケードブルーＪ、テキサスレッド、ＩＡＥＤＡＮＳ、ＥＤＡＮＳ、ＢＯＤＩＰＹ  ＦＬ、ＬＣ  Ｒｅｄ  ６４０、Ｃｙ  ５、Ｃｙ  ５．５、ＬＣ  Ｒｅｄ  ７０５、オレゴングリーン、Ａｌｅｘａ−Ｆｌｕｏｒ色素（Ａｌｅｘａ  Ｆｌｕｏｒ  ３５０、Ａｌｅｘａ  Ｆｌｕｏｒ  ４３０、Ａｌｅｘａ  Ｆｌｕｏｒ  ４８８、Ａｌｅｘａ  Ｆｌｕｏｒ  ５４６、Ａｌｅｘａ  Ｆｌｕｏｒ  ５６８、Ａｌｅｘａ  Ｆｌｕｏｒ  ５９４、Ａｌｅｘａ  Ｆｌｕｏｒ  ６３３、Ａｌｅｘａ  Ｆｌｕｏｒ  ６６０、Ａｌｅｘａ  Ｆｌｕｏｒ  ６８０）、カスケードブルー、カスケードイエロー、及びＲ−フィコエリトリン（ＰＥ）（Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｐｒｏｂｅｓ，Ｅｕｇｅｎｅ，ＯＲ）、ＦＩＴＣ、ローダミン、ならびにテキサスレッド（Ｐｉｅｒｃｅ，Ｒｏｃｋｆｏｒｄ，ＩＬ）、Ｃｙ５、Ｃｙ５．５、Ｃｙ７（Ａｍｅｒｓｈａｍ  Ｌｉｆｅ  Ｓｃｉｅｎｃｅ，Ｐｉｔｔｓｂｕｒｇｈ，ＰＡ）が挙げられるが、これらに限定されない。フルオロフォアを含む好適な光学色素は、Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｐｒｏｂｅｓ  Ｈａｎｄｂｏｏｋ  ｂｙ  Ｒｉｃｈａｒｄ  Ｐ．Ｈａｕｇｌａｎｄに記載されており、参照により本明細書に明示的に組み込まれる。
【０１２７】
好適なタンパク質性蛍光標識は、緑色蛍光タンパク質（ウミシイタケ、ウミエラ（Ｐｔｉｌｏｓａｒｃｕｓ）、またはオワンクラゲ種のＧＦＰを含む）（Ｃｈａｌｆｉｅ  ｅｔ  ａｌ．，１９９４，Ｓｃｉｅｎｃｅ  ２６３：８０２−８０５）、ＥＧＦＰ（Ｃｌｏｎｔｅｃｈ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓ，Ｉｎｃ．，Ｇｅｎｂａｎｋ受託番号Ｕ５５７６２）、青色蛍光タンパク質（ＢＦＰ，Ｑｕａｎｔｕｍ  Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ，Ｉｎｃ．１８０１  ｄｅ  Ｍａｉｓｏｎｎｅｕｖｅ  Ｂｌｖｄ．Ｗｅｓｔ，８ｔｈ  Ｆｌｏｏｒ，Ｍｏｎｔｒｅａｌ，Ｑｕｅｂｅｃ，Ｃａｎａｄａ  Ｈ３Ｈ  １Ｊ９、Ｓｔａｕｂｅｒ，１９９８，Ｂｉｏｔｅｃｈｎｉｑｕｅｓ  ２４：４６２−４７１、Ｈｅｉｍ  ｅｔ  ａｌ．，１９９６，Ｃｕｒｒ．Ｂｉｏｌ．６：１７８−１８２）、強化黄色蛍光タンパク質（ＥＹＦＰ、Ｃｌｏｎｔｅｃｈ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓ，Ｉｎｃ．）、ルシフェラーゼ（Ｉｃｈｉｋｉ  ｅｔ  ａｌ．，１９９３，Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．１５０：５４０８−５４１７）、βガラクトシダーゼ（Ｎｏｌａｎ  ｅｔ  ａｌ．，１９８８，Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．Ｕ．Ｓ．Ａ．８５：２６０３−２６０７）、及びウミシイタケ（国際公開第ＷＯ９２／１５６７３号、同第ＷＯ９５／０７４６３号、同第ＷＯ９８／１４６０５号、同第ＷＯ９８／２６２７７号、同第ＷＯ９９／４９０１９号、米国特許第５２９２６５８号、同第５４１８１５５号、同第５６８３８８８号、同第５７４１６６８号、同第５７７７０７９号、同第５８０４３８７号、同第５８７４３０４号、同第５８７６９９５号、同第５９２５５５８号）も挙げられるが、これらに限定されない。上記引用参考文献のすべては、参照により本明細書に明示的に組み込まれる。
【０１２８】
ＢＣＭＡ抗原結合タンパク質をコードするポリヌクレオチド
ＢＣＭＡ抗原結合タンパク質をコードするポリヌクレオチド、特に、本明細書に定義される抗体が、本発明に包含される。選択した抗体の重鎖可変及び軽鎖可変領域、ＣＤＲ、ならびに全長重鎖及び軽鎖のポリヌクレオチド配列が、本明細書に提供される。
【０１２９】
本発明の態様は、Ａｂ−１の６つのＣＤＲを含むモノクローナル抗体をコードする、単離ポリヌクレオチドを含む。本発明の態様は、Ａｂ−２の６つのＣＤＲを含むモノクローナル抗体をコードする、単離ポリヌクレオチドを含む。本発明の態様は、Ａｂ−３の６つのＣＤＲを含むモノクローナル抗体をコードする、単離ポリヌクレオチドを含む。本発明の態様は、Ａｂ−４の６つのＣＤＲを含むモノクローナル抗体をコードする、単離ポリヌクレオチドを含む。本発明の態様は、Ａｂ−５の６つのＣＤＲを含むモノクローナル抗体をコードする、単離ポリヌクレオチドを含む。本発明の態様は、Ａｂ−６の６つのＣＤＲを含むモノクローナル抗体をコードする、単離ポリヌクレオチドを含む。本発明の態様は、Ａｂ−７の６つのＣＤＲを含むモノクローナル抗体をコードする、単離ポリヌクレオチドを含む。本発明の態様は、Ａｂ−８の６つのＣＤＲを含むモノクローナル抗体をコードする、単離ポリヌクレオチドを含む。本発明の態様は、Ａｂ−９の６つのＣＤＲを含むモノクローナル抗体をコードする、単離ポリヌクレオチドを含む。本発明の態様は、Ａｂ−１０の６つのＣＤＲを含むモノクローナル抗体をコードする、単離ポリヌクレオチドを含む。本発明の態様は、Ａｂ−１１の６つのＣＤＲを含むモノクローナル抗体をコードする、単離ポリヌクレオチドを含む。本発明の態様は、Ａｂ−１２の６つのＣＤＲを含むモノクローナル抗体をコードする、単離ポリヌクレオチドを含む。本発明の態様は、Ａｂ−１３の６つのＣＤＲを含むモノクローナル抗体をコードする、単離ポリヌクレオチドを含む。本発明の態様は、Ａｂ−１４の６つのＣＤＲを含むモノクローナル抗体をコードする、単離ポリヌクレオチドを含む。本発明の態様は、Ａｂ−１５の６つのＣＤＲを含むモノクローナル抗体をコードする、単離ポリヌクレオチドを含む。本発明の態様は、Ａｂ−１６の６つのＣＤＲを含むモノクローナル抗体をコードする、単離ポリヌクレオチドを含む。本発明の態様は、Ａｂ−１７の６つのＣＤＲを含むモノクローナル抗体をコードする、単離ポリヌクレオチドを含む。前述の実施形態の態様は、ヒトモノクローナル抗体、ヒトモノクローナルＩｇＧ抗体、及びヒトモノクローナルＩｇＧ１抗体を含む。
【０１３０】
本発明の態様は、ＡＨｏ、Ｋａｂａｔ、またはＣｌｏｔｈｉａの番号付けシステムのうちのいずれか１つによって決定されるＡｂ−１の６つのＣＤＲを含むモノクローナル抗体をコードする、単離ポリヌクレオチドを含む。本発明の態様は、ＡＨｏ、Ｋａｂａｔ、またはＣｌｏｔｈｉａの番号付けシステムのうちのいずれか１つによって決定されるＡｂ−２の６つのＣＤＲを含むモノクローナル抗体をコードする、単離ポリヌクレオチドを含む。本発明の態様は、ＡＨｏ、Ｋａｂａｔ、またはＣｌｏｔｈｉａの番号付けシステムのうちのいずれか１つによって決定されるＡｂ−３の６つのＣＤＲを含むモノクローナル抗体をコードする、単離ポリヌクレオチドを含む。本発明の態様は、ＡＨｏ、Ｋａｂａｔ、またはＣｌｏｔｈｉａの番号付けシステムのうちのいずれか１つによって決定されるＡｂ−４の６つのＣＤＲを含むモノクローナル抗体をコードする、単離ポリヌクレオチドを含む。本発明の態様は、ＡＨｏ、Ｋａｂａｔ、またはＣｌｏｔｈｉａの番号付けシステムのうちのいずれか１つによって決定されるＡｂ−５の６つのＣＤＲを含むモノクローナル抗体をコードする、単離ポリヌクレオチドを含む。本発明の態様は、ＡＨｏ、Ｋａｂａｔ、またはＣｌｏｔｈｉａの番号付けシステムのうちのいずれか１つによって決定されるＡｂ−６の６つのＣＤＲを含むモノクローナル抗体をコードする、単離ポリヌクレオチドを含む。本発明の態様は、ＡＨｏ、Ｋａｂａｔ、またはＣｌｏｔｈｉａの番号付けシステムのうちのいずれか１つによって決定されるＡｂ−７の６つのＣＤＲを含むモノクローナル抗体をコードする、単離ポリヌクレオチドを含む。本発明の態様は、ＡＨｏ、Ｋａｂａｔ、またはＣｌｏｔｈｉａの番号付けシステムのうちのいずれか１つによって決定されるＡｂ−８の６つのＣＤＲを含むモノクローナル抗体をコードする、単離ポリヌクレオチドを含む。本発明の態様は、ＡＨｏ、Ｋａｂａｔ、またはＣｌｏｔｈｉａの番号付けシステムのうちのいずれか１つによって決定されるＡｂ−９の６つのＣＤＲを含むモノクローナル抗体をコードする、単離ポリヌクレオチドを含む。本発明の態様は、ＡＨｏ、Ｋａｂａｔ、またはＣｌｏｔｈｉａの番号付けシステムのうちのいずれか１つによって決定されるＡｂ−１０の６つのＣＤＲを含むモノクローナル抗体をコードする、単離ポリヌクレオチドを含む。本発明の態様は、ＡＨｏ、Ｋａｂａｔ、またはＣｌｏｔｈｉａの番号付けシステムのうちのいずれか１つによって決定されるＡｂ−１１の６つのＣＤＲを含むモノクローナル抗体をコードする、単離ポリヌクレオチドを含む。本発明の態様は、ＡＨｏ、Ｋａｂａｔ、またはＣｌｏｔｈｉａの番号付けシステムのうちのいずれか１つによって決定されるＡｂ−１２の６つのＣＤＲを含むモノクローナル抗体をコードする、単離ポリヌクレオチドを含む。本発明の態様は、ＡＨｏ、Ｋａｂａｔ、またはＣｌｏｔｈｉａの番号付けシステムのうちのいずれか１つによって決定されるＡｂ−１３の６つのＣＤＲを含むモノクローナル抗体をコードする、単離ポリヌクレオチドを含む。本発明の態様は、ＡＨｏ、Ｋａｂａｔ、またはＣｌｏｔｈｉａの番号付けシステムのうちのいずれか１つによって決定されるＡｂ−１４の６つのＣＤＲを含むモノクローナル抗体をコードする、単離ポリヌクレオチドを含む。本発明の態様は、ＡＨｏ、Ｋａｂａｔ、またはＣｌｏｔｈｉａの番号付けシステムのうちのいずれか１つによって決定されるＡｂ−１５の６つのＣＤＲを含むモノクローナル抗体をコードする、単離ポリヌクレオチドを含む。本発明の態様は、ＡＨｏ、Ｋａｂａｔ、またはＣｌｏｔｈｉａの番号付けシステムのうちのいずれか１つによって決定されるＡｂ−１６の６つのＣＤＲを含むモノクローナル抗体をコードする、単離ポリヌクレオチドを含む。本発明の態様は、ＡＨｏ、Ｋａｂａｔ、またはＣｌｏｔｈｉａの番号付けシステムのうちのいずれか１つによって決定されるＡｂ−１７の６つのＣＤＲを含むモノクローナル抗体をコードする、単離ポリヌクレオチドを含む。前述の実施形態の態様は、ヒトモノクローナル抗体、ヒトモノクローナルＩｇＧ抗体、及びヒトモノクローナルＩｇＧ１抗体を含む。
【０１３１】
本発明の態様は、Ａｂ−１の６つのＣＤＲ、特に、Ｖｈ−ＣＤＲ１（配列番号４）、Ｖｈ−ＣＤＲ２（配列番号５）、Ｖｈ−ＣＤＲ３（配列番号６）、Ｖｌ−ＣＤＲ１（配列番号１０６）、Ｖｌ−ＣＤＲ２（配列番号１０７）、及びＶｌ−ＣＤＲ３（配列番号１０８）を含むモノクローナル抗体をコードする、単離ポリヌクレオチドを含む。本発明の態様は、Ａｂ−２の６つのＣＤＲ、特に、Ｖｈ−ＣＤＲ１（配列番号１０）、Ｖｈ−ＣＤＲ２（配列番号１１）、Ｖｈ−ＣＤＲ３（配列番号１２）、Ｖｌ−ＣＤＲ１（配列番号１１２）、Ｖｌ−ＣＤＲ２（配列番号１１３）、及びＶｌ−ＣＤＲ３（配列番号１１４）を含むモノクローナル抗体をコードする、単離ポリヌクレオチドを含む。本発明の態様は、Ａｂ−３の６つのＣＤＲ、特に、Ｖｈ−ＣＤＲ１（配列番号１６）、Ｖｈ−ＣＤＲ２（配列番号１７）、Ｖｈ−ＣＤＲ３（配列番号１８）、Ｖｌ−ＣＤＲ１（配列番号１１８）、Ｖｌ−ＣＤＲ２（配列番号１１９）、及びＶｌ−ＣＤＲ３（配列番号１２０）を含むモノクローナル抗体をコードする、単離ポリヌクレオチドを含む。本発明の態様は、Ａｂ−４の６つのＣＤＲ、特に、Ｖｈ−ＣＤＲ１（配列番号２２）、Ｖｈ−ＣＤＲ２（配列番号２３）、Ｖｈ−ＣＤＲ３（配列番号２４）、Ｖｌ−ＣＤＲ１（配列番号１２４）、Ｖｌ−ＣＤＲ２（配列番号１２５）、及びＶｌ−ＣＤＲ３（配列番号１２６）を含むモノクローナル抗体をコードする、単離ポリヌクレオチドを含む。本発明の態様は、Ａｂ−５の６つのＣＤＲ、特に、Ｖｈ−ＣＤＲ１（配列番号２８）、Ｖｈ−ＣＤＲ２（配列番号２９）、Ｖｈ−ＣＤＲ３（配列番号３０）、Ｖｌ−ＣＤＲ１（配列番号１３０）、Ｖｌ−ＣＤＲ２（配列番号１３１）、及びＶｌ−ＣＤＲ３（配列番号１３２）を含むモノクローナル抗体をコードする、単離ポリヌクレオチドを含む。本発明の態様は、Ａｂ−６の６つのＣＤＲ、特に、Ｖｈ−ＣＤＲ１（配列番号３４）、Ｖｈ−ＣＤＲ２（配列番号３５）、Ｖｈ−ＣＤＲ３（配列番号３６）、Ｖｌ−ＣＤＲ１（配列番号１３６）、Ｖｌ−ＣＤＲ２（配列番号１３７）、及びＶｌ−ＣＤＲ３（配列番号１３８）を含むモノクローナル抗体をコードする、単離ポリヌクレオチドを含む。本発明の態様は、Ａｂ−７の６つのＣＤＲ、特に、Ｖｈ−ＣＤＲ１（配列番号４０）、Ｖｈ−ＣＤＲ２（配列番号４１）、Ｖｈ−ＣＤＲ３（配列番号４２）、Ｖｌ−ＣＤＲ１（配列番号１４２）、Ｖｌ−ＣＤＲ２（配列番号１４３）、及びＶｌ−ＣＤＲ３（配列番号１４４）を含むモノクローナル抗体をコードする、単離ポリヌクレオチドを含む。本発明の態様は、Ａｂ−８の６つのＣＤＲ、特に、Ｖｈ−ＣＤＲ１（配列番号４６）、Ｖｈ−ＣＤＲ２（配列番号４７）、Ｖｈ−ＣＤＲ３（配列番号４８）、Ｖｌ−ＣＤＲ１（配列番号１４８）、Ｖｌ−ＣＤＲ２（配列番号１４９）、及びＶｌ−ＣＤＲ３（配列番号１５０）を含むモノクローナル抗体をコードする、単離ポリヌクレオチドを含む。本発明の態様は、Ａｂ−９の６つのＣＤＲ、特に、Ｖｈ−ＣＤＲ１（配列番号５２）、Ｖｈ−ＣＤＲ２（配列番号５３）、Ｖｈ−ＣＤＲ３（配列番号５４）、Ｖｌ−ＣＤＲ１（配列番号１５４）、Ｖｌ−ＣＤＲ２（配列番号１５５）、及びＶｌ−ＣＤＲ３（配列番号１５６）を含むモノクローナル抗体をコードする、単離ポリヌクレオチドを含む。本発明の態様は、Ａｂ−１０の６つのＣＤＲ、特に、Ｖｈ−ＣＤＲ１（配列番号５８）、Ｖｈ−ＣＤＲ２（配列番号５９）、Ｖｈ−ＣＤＲ３（配列番号６０）、Ｖｌ−ＣＤＲ１（配列番号１６０）、Ｖｌ−ＣＤＲ２（配列番号１６１）、及びＶｌ−ＣＤＲ３（配列番号１６２）を含むモノクローナル抗体をコードする、単離ポリヌクレオチドを含む。本発明の態様は、Ａｂ−１１の６つのＣＤＲ、特に、Ｖｈ−ＣＤＲ１（配列番号６４）、Ｖｈ−ＣＤＲ２（配列番号６５）、Ｖｈ−ＣＤＲ３（配列番号６６）、Ｖｌ−ＣＤＲ１（配列番号１６６）、Ｖｌ−ＣＤＲ２（配列番号１６７）、及びＶｌ−ＣＤＲ３（配列番号１６８）を含むモノクローナル抗体をコードする、単離ポリヌクレオチドを含む。本発明の態様は、Ａｂ−１２の６つのＣＤＲ、特に、Ｖｈ−ＣＤＲ１（配列番号７０）、Ｖｈ−ＣＤＲ２（配列番号７１）、Ｖｈ−ＣＤＲ３（配列番号７２）、Ｖｌ−ＣＤＲ１（配列番号１７２）、Ｖｌ−ＣＤＲ２（配列番号１７３）、及びＶｌ−ＣＤＲ３（配列番号１７４）を含むモノクローナル抗体をコードする、単離ポリヌクレオチドを含む。本発明の態様は、Ａｂ−１３の６つのＣＤＲ、特に、Ｖｈ−ＣＤＲ１（配列番号７６）、Ｖｈ−ＣＤＲ２（配列番号７７）、Ｖｈ−ＣＤＲ３（配列番号７８）、Ｖｌ−ＣＤＲ１（配列番号１７８）、Ｖｌ−ＣＤＲ２（配列番号１７９）、及びＶｌ−ＣＤＲ３（配列番号１８０）を含むモノクローナル抗体をコードする、単離ポリヌクレオチドを含む。本発明の態様は、Ａｂ−１４の６つのＣＤＲ、特に、Ｖｈ−ＣＤＲ１（配列番号８２）、Ｖｈ−ＣＤＲ２（配列番号８３）、Ｖｈ−ＣＤＲ３（配列番号８４）、Ｖｌ−ＣＤＲ１（配列番号１８４）、Ｖｌ−ＣＤＲ２（配列番号１８５）、及びＶｌ−ＣＤＲ３（配列番号１８６）を含むモノクローナル抗体をコードする、単離ポリヌクレオチドを含む。本発明の態様は、Ａｂ−１５の６つのＣＤＲ、特に、Ｖｈ−ＣＤＲ１（配列番号８８）、Ｖｈ−ＣＤＲ２（配列番号８９）、Ｖｈ−ＣＤＲ３（配列番号９０）、Ｖｌ−ＣＤＲ１（配列番号１９０）、Ｖｌ−ＣＤＲ２（配列番号１９１）、及びＶｌ−ＣＤＲ３（配列番号１９２）を含むモノクローナル抗体をコードする、単離ポリヌクレオチドを含む。本発明の態様は、Ａｂ−１６の６つのＣＤＲ、特に、Ｖｈ−ＣＤＲ１（配列番号９４）、Ｖｈ−ＣＤＲ２（配列番号９５）、Ｖｈ−ＣＤＲ３（配列番号９６）、Ｖｌ−ＣＤＲ１（配列番号１９６）、Ｖｌ−ＣＤＲ２（配列番号１９７）、及びＶｌ−ＣＤＲ３（配列番号１９８）を含むモノクローナル抗体をコードする、単離ポリヌクレオチドを含む。本発明の態様は、Ａｂ−１７の６つのＣＤＲ、特に、Ｖｈ−ＣＤＲ１（配列番号１００）、Ｖｈ−ＣＤＲ２（配列番号１０１）、Ｖｈ−ＣＤＲ３（配列番号１０２）、Ｖｌ−ＣＤＲ１（配列番号２０２）、Ｖｌ−ＣＤＲ２（配列番号２０３）、及びＶｌ−ＣＤＲ３（配列番号２０４）を含むモノクローナル抗体をコードする、単離ポリヌクレオチドを含む。前述の実施形態の態様は、ヒトモノクローナル抗体、ヒトモノクローナルＩｇＧ抗体、及びヒトモノクローナルＩｇＧ１抗体を含む。本発明の態様は、前述のもののフラグメント、誘導体、変異タンパク質、及び変異体を含む。
【０１３２】
本発明の態様は、Ａｂ−１Ｖｌ（配列番号２４０）及びＡｂ−１Ｖｈ（配列番号２０６）ドメインを含むモノクローナル抗体をコードする、単離ポリヌクレオチドを含む。本発明の態様は、Ａｂ−２Ｖｌ（配列番号２４２）及びＡｂ−２Ｖｈ（配列番号２０８）ドメインを含むモノクローナル抗体をコードする、単離ポリヌクレオチドを含む。本発明の態様は、Ａｂ−３Ｖｌ（配列番号２４４）及びＡｂ−３Ｖｈ（配列番号２１０）ドメインを含むモノクローナル抗体をコードする、単離ポリヌクレオチドを含む。本発明の態様は、Ａｂ−４Ｖｌ（配列番号２４６）及びＡｂ−４Ｖｈ（配列番号２１２）ドメインを含むモノクローナル抗体をコードする、単離ポリヌクレオチドを含む。本発明の態様は、Ａｂ−５Ｖｌ（配列番号２４８）及びＡｂ−５Ｖｈ（配列番号２１４）ドメインを含むモノクローナル抗体をコードする、単離ポリヌクレオチドを含む。本発明の態様は、Ａｂ−６Ｖｌ（配列番号２５０）及びＡｂ−６Ｖｈ（配列番号２１６）ドメインを含むモノクローナル抗体をコードする、単離ポリヌクレオチドを含む。本発明の態様は、Ａｂ−７Ｖｌ（配列番号２５２）及びＡｂ−７Ｖｈ（配列番号２１８）ドメインを含むモノクローナル抗体をコードする、単離ポリヌクレオチドを含む。本発明の態様は、Ａｂ−８Ｖｌ（配列番号２５４）及びＡｂ−８Ｖｈ（配列番号２２０）ドメインを含むモノクローナル抗体をコードする、単離ポリヌクレオチドを含む。本発明の態様は、Ａｂ−９Ｖｌ（配列番号２５６）及びＡｂ−９Ｖｈ（配列番号２２２）ドメインを含むモノクローナル抗体をコードする、単離ポリヌクレオチドを含む。本発明の態様は、Ａｂ−１０Ｖｌ（配列番号２５８）及びＡｂ−１０Ｖｈ（配列番号２２４）ドメインを含むモノクローナル抗体をコードする、単離ポリヌクレオチドを含む。本発明の態様は、Ａｂ−１１Ｖｌ（配列番号２６０）及びＡｂ−１１Ｖｈ（配列番号２２６）ドメインを含むモノクローナル抗体をコードする、単離ポリヌクレオチドを含む。本発明の態様は、Ａｂ−１２Ｖｌ（配列番号２６２）及びＡｂ−１２Ｖｈ（配列番号２２８）ドメインを含むモノクローナル抗体をコードする、単離ポリヌクレオチドを含む。本発明の態様は、Ａｂ−１３Ｖｌ（配列番号２６４）及びＡｂ−１３Ｖｈ（配列番号２３０）ドメインを含むモノクローナル抗体をコードする、単離ポリヌクレオチドを含む。本発明の態様は、Ａｂ−１４Ｖｌ（配列番号２６６）及びＡｂ−１４Ｖｈ（配列番号２３２）ドメインを含むモノクローナル抗体をコードする、単離ポリヌクレオチドを含む。本発明の態様は、Ａｂ−１５Ｖｌ（配列番号２６８）及びＡｂ−１５Ｖｈ（配列番号２３４）ドメインを含むモノクローナル抗体をコードする、単離ポリヌクレオチドを含む。本発明の態様は、Ａｂ−１６Ｖｌ（配列番号２７０）及びＡｂ−１６Ｖｈ（配列番号２３６）ドメインを含むモノクローナル抗体をコードする、単離ポリヌクレオチドを含む。本発明の態様は、Ａｂ−１７Ｖｌ（配列番号２７２）及びＡｂ−１７Ｖｈ（配列番号２３８）ドメインを含むモノクローナル抗体をコードする、単離ポリヌクレオチドを含む。前述の実施形態の態様は、ヒトモノクローナル抗体、ヒトモノクローナルＩｇＧ抗体、及びヒトモノクローナルＩｇＧ１抗体を含む。本発明の態様は、前述のもののフラグメント、誘導体、変異タンパク質、及び変異体を含む。
【０１３３】
本発明の態様は、１つのＡｂ−１軽鎖（配列番号２８０）及び１つのＡｂ−１重鎖（配列番号２７４）を含むモノクローナル抗体をコードする、単離ポリヌクレオチドを含む。本発明の態様は、１つのＡｂ−２軽鎖（配列番号２８２）及び１つのＡｂ−２重鎖（配列番号２７６）を含むモノクローナル抗体をコードする、単離ポリヌクレオチドを含む。本発明の態様は、１つのＡｂ−３軽鎖（配列番号２８４）及び１つのＡｂ−３重鎖（配列番号２７８）を含むモノクローナル抗体をコードする、単離ポリヌクレオチドを含む。本発明の態様は、２つのＡｂ−１軽鎖（配列番号２８０）及び２つのＡｂ−１重鎖（配列番号２７４）を含むモノクローナル抗体をコードする、単離ポリヌクレオチドを含む。本発明の態様は、２つのＡｂ−２軽鎖（配列番号２８２）及び２つのＡｂ−２重鎖（配列番号２７６）を含むモノクローナル抗体をコードする、単離ポリヌクレオチドを含む。本発明の態様は、２つのＡｂ−３軽鎖（配列番号２８４）及び２つのＡｂ−３重鎖（配列番号２７８）を含むモノクローナル抗体をコードする、単離ポリヌクレオチドを含む。前述の実施形態の態様は、ヒトモノクローナル抗体、ヒトモノクローナルＩｇＧ抗体、及びヒトモノクローナルＩｇＧ１抗体を含む。本発明の態様は、前述のもののフラグメント、誘導体、変異タンパク質、及び変異体を含む。
【０１３４】
本発明の態様は、Ａｂ−１の６つのＣＤＲを含むモノクローナル抗体をコードする、単離ポリヌクレオチドを含み、ここで、ＣＤＲは、Ｖｈ−ＣＤＲ１（配列番号４）、Ｖｈ−ＣＤＲ２（配列番号５）、Ｖｈ−ＣＤＲ３（配列番号６）、Ｖｌ−ＣＤＲ１（配列番号１０６）、Ｖｌ−ＣＤＲ２（配列番号１０７）、及びＶｌ−ＣＤＲ３（配列番号１０８）の１、２、３、４、５、または６つを超えないアミノ酸付加、欠失、または置換を含む。本発明の態様は、Ａｂ−２の６つのＣＤＲを含むモノクローナル抗体をコードする、単離ポリヌクレオチドを含み、ここで、ＣＤＲは、Ｖｈ−ＣＤＲ１（配列番号１０）、Ｖｈ−ＣＤＲ２（配列番号１１）、Ｖｈ−ＣＤＲ３（配列番号１２）、Ｖｌ−ＣＤＲ１（配列番号１１２）、Ｖｌ−ＣＤＲ２（配列番号１１３）、及びＶｌ−ＣＤＲ３（配列番号１１４）の１、２、３、４、５、または６つを超えないアミノ酸付加、欠失、または置換を含む。本発明の態様は、Ａｂ−３の６つのＣＤＲを含むモノクローナル抗体をコードする、単離ポリヌクレオチドを含み、ここで、ＣＤＲは、Ｖｈ−ＣＤＲ１（配列番号１６）、Ｖｈ−ＣＤＲ２（配列番号１７）、Ｖｈ−ＣＤＲ３（配列番号１８）、Ｖｌ−ＣＤＲ１（配列番号１１８）、Ｖｌ−ＣＤＲ２（配列番号１１９）、及びＶｌ−ＣＤＲ３（配列番号１２０）の１、２、３、４、５、または６つを超えないアミノ酸付加、欠失、または置換を含む。本発明の態様は、Ａｂ−４の６つのＣＤＲを含むモノクローナル抗体をコードする、単離ポリヌクレオチドを含み、ここで、ＣＤＲは、Ｖｈ−ＣＤＲ１（配列番号２２）、Ｖｈ−ＣＤＲ２（配列番号２３）、Ｖｈ−ＣＤＲ３（配列番号２４）、Ｖｌ−ＣＤＲ１（配列番号１２４）、Ｖｌ−ＣＤＲ２（配列番号１２５）、及びＶｌ−ＣＤＲ３（配列番号１２６）の１、２、３、４、５、または６つを超えないアミノ酸付加、欠失、または置換を含む。本発明の態様は、Ａｂ−５の６つのＣＤＲを含むモノクローナル抗体をコードする、単離ポリヌクレオチドを含み、ここで、ＣＤＲは、Ｖｈ−ＣＤＲ１（配列番号２８）、Ｖｈ−ＣＤＲ２（配列番号２９）、Ｖｈ−ＣＤＲ３（配列番号３０）、Ｖｌ−ＣＤＲ１（配列番号１３０）、Ｖｌ−ＣＤＲ２（配列番号１３１）、及びＶｌ−ＣＤＲ３（配列番号１３２）の１、２、３、４、５、または６つを超えないアミノ酸付加、欠失、または置換を含む。本発明の態様は、Ａｂ−６の６つのＣＤＲを含むモノクローナル抗体をコードする、単離ポリヌクレオチドを含み、ここで、ＣＤＲは、Ｖｈ−ＣＤＲ１（配列番号３４）、Ｖｈ−ＣＤＲ２（配列番号３５）、Ｖｈ−ＣＤＲ３（配列番号３６）、Ｖｌ−ＣＤＲ１（配列番号１３６）、Ｖｌ−ＣＤＲ２（配列番号１３７）、及びＶｌ−ＣＤＲ３（配列番号１３８）の１、２、３、４、５、または６つを超えないアミノ酸付加、欠失、または置換を含む。本発明の態様は、Ａｂ−７の６つのＣＤＲを含むモノクローナル抗体をコードする、単離ポリヌクレオチドを含み、ここで、ＣＤＲは、Ｖｈ−ＣＤＲ１（配列番号４０）、Ｖｈ−ＣＤＲ２（配列番号４１）、Ｖｈ−ＣＤＲ３（配列番号４２）、Ｖｌ−ＣＤＲ１（配列番号１４２）、Ｖｌ−ＣＤＲ２（配列番号１４３）、及びＶｌ−ＣＤＲ３（配列番号１４４）の１、２、３、４、５、または６つを超えないアミノ酸付加、欠失、または置換を含む。本発明の態様は、Ａｂ−８の６つのＣＤＲを含むモノクローナル抗体をコードする、単離ポリヌクレオチドを含み、ここで、ＣＤＲは、Ｖｈ−ＣＤＲ１（配列番号４６）、Ｖｈ−ＣＤＲ２（配列番号４７）、Ｖｈ−ＣＤＲ３（配列番号４８）、Ｖｌ−ＣＤＲ１（配列番号１４８）、Ｖｌ−ＣＤＲ２（配列番号１４９）、及びＶｌ−ＣＤＲ３（配列番号１５０）の１、２、３、４、５、または６つを超えないアミノ酸付加、欠失、または置換を含む。本発明の態様は、Ａｂ−９の６つのＣＤＲを含むモノクローナル抗体をコードする、単離ポリヌクレオチドを含み、ここで、ＣＤＲは、Ｖｈ−ＣＤＲ１（配列番号５２）、Ｖｈ−ＣＤＲ２（配列番号５３）、Ｖｈ−ＣＤＲ３（配列番号５４）、Ｖｌ−ＣＤＲ１（配列番号１５４）、Ｖｌ−ＣＤＲ２（配列番号１５５）、及びＶｌ−ＣＤＲ３（配列番号１５６）の１、２、３、４、５、または６つを超えないアミノ酸付加、欠失、または置換を含む。本発明の態様は、Ａｂ−１０の６つのＣＤＲを含むモノクローナル抗体をコードする、単離ポリヌクレオチドを含み、ここで、ＣＤＲは、Ｖｈ−ＣＤＲ１（配列番号５８）、Ｖｈ−ＣＤＲ２（配列番号５９）、Ｖｈ−ＣＤＲ３（配列番号６０）、Ｖｌ−ＣＤＲ１（配列番号１６０）、Ｖｌ−ＣＤＲ２（配列番号１６１）、及びＶｌ−ＣＤＲ３（配列番号１６２）の１、２、３、４、５、または６つを超えないアミノ酸付加、欠失、または置換を含む。本発明の態様は、Ａｂ−１１の６つのＣＤＲを含むモノクローナル抗体をコードする、単離ポリヌクレオチドを含み、ここで、ＣＤＲは、Ｖｈ−ＣＤＲ１（配列番号６４）、Ｖｈ−ＣＤＲ２（配列番号６５）、Ｖｈ−ＣＤＲ３（配列番号６６）、Ｖｌ−ＣＤＲ１（配列番号１６６）、Ｖｌ−ＣＤＲ２（配列番号１６７）、及びＶｌ−ＣＤＲ３（配列番号１６８）の１、２、３、４、５、または６つを超えないアミノ酸付加、欠失、または置換を含む。本発明の態様は、Ａｂ−１２の６つのＣＤＲを含むモノクローナル抗体をコードする、単離ポリヌクレオチドを含み、ここで、ＣＤＲは、Ｖｈ−ＣＤＲ１（配列番号７０）、Ｖｈ−ＣＤＲ２（配列番号７１）、Ｖｈ−ＣＤＲ３（配列番号７２）、Ｖｌ−ＣＤＲ１（配列番号１７２）、Ｖｌ−ＣＤＲ２（配列番号１７３）、及びＶｌ−ＣＤＲ３（配列番号１７４）の１、２、３、４、５、または６つを超えないアミノ酸付加、欠失、または置換を含む。本発明の態様は、Ａｂ−１３の６つのＣＤＲを含むモノクローナル抗体をコードする、単離ポリヌクレオチドを含み、ここで、ＣＤＲは、Ｖｈ−ＣＤＲ１（配列番号７６）、Ｖｈ−ＣＤＲ２（配列番号７７）、Ｖｈ−ＣＤＲ３（配列番号７８）、Ｖｌ−ＣＤＲ１（配列番号１７８）、Ｖｌ−ＣＤＲ２（配列番号１７９）、及びＶｌ−ＣＤＲ３（配列番号１８０）の１、２、３、４、５、または６つを超えないアミノ酸付加、欠失、または置換を含む。本発明の態様は、Ａｂ−１４の６つのＣＤＲを含むモノクローナル抗体をコードする、単離ポリヌクレオチドを含み、ここで、ＣＤＲは、Ｖｈ−ＣＤＲ１（配列番号８２）、Ｖｈ−ＣＤＲ２（配列番号８３）、Ｖｈ−ＣＤＲ３（配列番号８４）、Ｖｌ−ＣＤＲ１（配列番号１８４）、Ｖｌ−ＣＤＲ２（配列番号１８５）、及びＶｌ−ＣＤＲ３（配列番号１８６）の１、２、３、４、５、または６つを超えないアミノ酸付加、欠失、または置換を含む。本発明の態様は、Ａｂ−１５の６つのＣＤＲを含むモノクローナル抗体をコードする、単離ポリヌクレオチドを含み、ここで、ＣＤＲは、Ｖｈ−ＣＤＲ１（配列番号８８）、Ｖｈ−ＣＤＲ２（配列番号８９）、Ｖｈ−ＣＤＲ３（配列番号９０）、Ｖｌ−ＣＤＲ１（配列番号１９０）、Ｖｌ−ＣＤＲ２（配列番号１９１）、及びＶｌ−ＣＤＲ３（配列番号１９２）の１、２、３、４、５、または６つを超えないアミノ酸付加、欠失、または置換を含む。本発明の態様は、Ａｂ−１６の６つのＣＤＲを含むモノクローナル抗体をコードする、単離ポリヌクレオチドを含み、ここで、ＣＤＲは、Ｖｈ−ＣＤＲ１（配列番号９４）、Ｖｈ−ＣＤＲ２（配列番号９５）、Ｖｈ−ＣＤＲ３（配列番号９６）、Ｖｌ−ＣＤＲ１（配列番号１９６）、Ｖｌ−ＣＤＲ２（配列番号１９７）、及びＶｌ−ＣＤＲ３（配列番号１９８）の１、２、３、４、５、または６つを超えないアミノ酸付加、欠失、または置換を含む。本発明の態様は、Ａｂ−１７の６つのＣＤＲを含むモノクローナル抗体をコードする、単離ポリヌクレオチドを含み、ここで、ＣＤＲは、Ｖｈ−ＣＤＲ１（配列番号１００）、Ｖｈ−ＣＤＲ２（配列番号１０１）、Ｖｈ−ＣＤＲ３（配列番号１０２）、Ｖｌ−ＣＤＲ１（配列番号２０２）、Ｖｌ−ＣＤＲ２（配列番号２０３）、及びＶｌ−ＣＤＲ３（配列番号２０４）の１、２、３、４、５、または６つを超えないアミノ酸付加、欠失、または置換を含む。前述の実施形態の態様は、ヒトモノクローナル抗体、ヒトモノクローナルＩｇＧ抗体、及びヒトモノクローナルＩｇＧ１抗体を含む。
【０１３５】
本発明の態様は、それぞれ、Ａｂ−１Ｖｌ（配列番号２４０）及びＡｂ−１Ｖｈ（配列番号２０６）に少なくとも８０％、８１％、８２％、８３％、８４％、８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、または９９％同一なＶｌ及びＶｈアミノ酸配列を含むモノクローナル抗体をコードする、単離ポリヌクレオチドを含む。本発明の態様は、それぞれ、Ａｂ−２Ｖｌ（配列番号２４２）及びＡｂ−２Ｖｈ（配列番号２０８）に少なくとも８０％、８１％、８２％、８３％、８４％、８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、または９９％同一なＶｌ及びＶｈアミノ酸配列を含むモノクローナル抗体をコードする、単離ポリヌクレオチドを含む。本発明の態様は、それぞれ、Ａｂ−３Ｖｌ（配列番号２４４）及びＡｂ−３Ｖｈ（配列番号２１０）に少なくとも８０％、８１％、８２％、８３％、８４％、８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、または９９％同一なＶｌ及びＶｈアミノ酸配列を含むモノクローナル抗体をコードする、単離ポリヌクレオチドを含む。本発明の態様は、それぞれ、Ａｂ−４Ｖｌ（配列番号２４６）及びＡｂ−４Ｖｈ（配列番号２１２）に少なくとも８０％、８１％、８２％、８３％、８４％、８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、または９９％同一なＶｌ及びＶｈアミノ酸配列を含むモノクローナル抗体をコードする、単離ポリヌクレオチドを含む。本発明の態様は、それぞれ、Ａｂ−５Ｖｌ（配列番号２４８）及びＡｂ−５Ｖｈ（配列番号２１４）に少なくとも８０％、８１％、８２％、８３％、８４％、８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、または９９％同一なＶｌ及びＶｈアミノ酸配列を含むモノクローナル抗体をコードする、単離ポリヌクレオチドを含む。本発明の態様は、それぞれ、Ａｂ−６Ｖｌ（配列番号２５０）及びＡｂ−６Ｖｈ（配列番号２１６）に少なくとも８０％、８１％、８２％、８３％、８４％、８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、または９９％同一なＶｌ及びＶｈアミノ酸配列を含むモノクローナル抗体をコードする、単離ポリヌクレオチドを含む。本発明の態様は、それぞれ、Ａｂ−７Ｖｌ（配列番号２５２）及びＡｂ−７Ｖｈ（配列番号２１８）に少なくとも８０％、８１％、８２％、８３％、８４％、８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、または９９％同一なＶｌ及びＶｈアミノ酸配列を含むモノクローナル抗体をコードする、単離ポリヌクレオチドを含む。本発明の態様は、それぞれ、Ａｂ−８Ｖｌ（配列番号２５４）及びＡｂ−８Ｖｈ（配列番号２２０）に少なくとも８０％、８１％、８２％、８３％、８４％、８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、または９９％同一なＶｌ及びＶｈアミノ酸配列を含むモノクローナル抗体をコードする、単離ポリヌクレオチドを含む。本発明の態様は、それぞれ、Ａｂ−９Ｖｌ（配列番号２５６）及びＡｂ−９Ｖｈ（配列番号２２２）に少なくとも８０％、８１％、８２％、８３％、８４％、８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、または９９％同一なＶｌ及びＶｈアミノ酸配列を含むモノクローナル抗体をコードする、単離ポリヌクレオチドを含む。本発明の態様は、それぞれ、Ａｂ−１０Ｖｌ（配列番号２５８）及びＡｂ−１０Ｖｈ（配列番号２２４）に少なくとも８０％、８１％、８２％、８３％、８４％、８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、または９９％同一なＶｌ及びＶｈアミノ酸配列を含むモノクローナル抗体をコードする、単離ポリヌクレオチドを含む。本発明の態様は、それぞれ、Ａｂ−１１Ｖｌ（配列番号２６０）及びＡｂ−１１Ｖｈ（配列番号２２６）に少なくとも８０％、８１％、８２％、８３％、８４％、８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、または９９％同一なＶｌ及びＶｈアミノ酸配列を含むモノクローナル抗体をコードする、単離ポリヌクレオチドを含む。本発明の態様は、それぞれ、Ａｂ−１２Ｖｌ（配列番号２６２）及びＡｂ−１２Ｖｈ（配列番号２２８）に少なくとも８０％、８１％、８２％、８３％、８４％、８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、または９９％同一なＶｌ及びＶｈアミノ酸配列を含むモノクローナル抗体をコードする、単離ポリヌクレオチドを含む。本発明の態様は、それぞれ、Ａｂ−１３Ｖｌ（配列番号２６４）及びＡｂ−１３Ｖｈ（配列番号２３０）に少なくとも８０％、８１％、８２％、８３％、８４％、８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、または９９％同一なＶｌ及びＶｈアミノ酸配列を含むモノクローナル抗体をコードする、単離ポリヌクレオチドを含む。本発明の態様は、それぞれ、Ａｂ−１４Ｖｌ（配列番号２６６）及びＡｂ−１４Ｖｈ（配列番号２３２）に少なくとも８０％、８１％、８２％、８３％、８４％、８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、または９９％同一なＶｌ及びＶｈアミノ酸配列を含むモノクローナル抗体をコードする、単離ポリヌクレオチドを含む。本発明の態様は、それぞれ、Ａｂ−１５Ｖｌ（配列番号２６８）及びＡｂ−１５Ｖｈ（配列番号２３４）に少なくとも８０％、８１％、８２％、８３％、８４％、８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、または９９％同一なＶｌ及びＶｈアミノ酸配列を含むモノクローナル抗体をコードする、単離ポリヌクレオチドを含む。本発明の態様は、それぞれ、Ａｂ−１６Ｖｌ（配列番号２７０）及びＡｂ−１６Ｖｈ（配列番号２３６）に少なくとも８０％、８１％、８２％、８３％、８４％、８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、または９９％同一なＶｌ及びＶｈアミノ酸配列を含むモノクローナル抗体をコードする、単離ポリヌクレオチドを含む。本発明の態様は、それぞれ、Ａｂ−１７Ｖｌ（配列番号２７２）及びＡｂ−１７Ｖｈ（配列番号２３８）に少なくとも８０％、８１％、８２％、８３％、８４％、８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、または９９％同一なＶｌ及びＶｈアミノ酸配列を含むモノクローナル抗体をコードする、単離ポリヌクレオチドを含む。前述の実施形態の態様は、ヒトモノクローナル抗体、ヒトモノクローナルＩｇＧ抗体、及びヒトモノクローナルＩｇＧ１抗体を含む。
【０１３６】
本発明の態様は、Ａｂ−１の６つのＣＤＲを含むモノクローナル抗体をコードする、単離ポリヌクレオチドを含み、ここで、ポリヌクレオチド配列は、Ｖｈ−ＣＤＲ１（配列番号１）、Ｖｈ−ＣＤＲ２（配列番号２）、Ｖｈ−ＣＤＲ３（配列番号３）、Ｖｌ−ＣＤＲ１（配列番号１０３）、Ｖｌ−ＣＤＲ２（配列番号１０４）、及びＶｌ−ＣＤＲ３（配列番号１０５）を含む。本発明の態様は、Ａｂ−２の６つのＣＤＲのを含むモノクローナル抗体をコードする、単離ポリヌクレオチドを含み、ここで、ポリヌクレオチド配列は、Ｖｈ−ＣＤＲ１（配列番号７）、Ｖｈ−ＣＤＲ２（配列番号８）、Ｖｈ−ＣＤＲ３（配列番号９）、Ｖｌ−ＣＤＲ１（配列番号１０９）、Ｖｌ−ＣＤＲ２（配列番号１１０）、及びＶｌ−ＣＤＲ３（配列番号１１１）を含む。本発明の態様は、Ａｂ−３の６つのＣＤＲを含むモノクローナル抗体をコードする、単離ポリヌクレオチドを含み、ここで、ポリヌクレオチド配列は、Ｖｈ−ＣＤＲ１（配列番号１３）、Ｖｈ−ＣＤＲ２（配列番号１４）、Ｖｈ−ＣＤＲ３（配列番号１５）、Ｖｌ−ＣＤＲ１（配列番号１１５）、Ｖｌ−ＣＤＲ２（配列番号１１６）、及びＶｌ−ＣＤＲ３（配列番号１１７）を含む。本発明の態様は、Ａｂ−４の６つのＣＤＲを含むモノクローナル抗体をコードする、単離ポリヌクレオチドを含み、ここで、ポリヌクレオチド配列は、Ｖｈ−ＣＤＲ１（配列番号１９）、Ｖｈ−ＣＤＲ２（配列番号２０）、Ｖｈ−ＣＤＲ３（配列番号２１）、Ｖｌ−ＣＤＲ１（配列番号１２１）、Ｖｌ−ＣＤＲ２（配列番号１２２）、及びＶｌ−ＣＤＲ３（配列番号１２３）を含む。本発明の態様は、Ａｂ−５の６つのＣＤＲを含むモノクローナル抗体をコードする、単離ポリヌクレオチドを含み、ここで、ポリヌクレオチド配列は、Ｖｈ−ＣＤＲ１（配列番号２５）、Ｖｈ−ＣＤＲ２（配列番号２６）、Ｖｈ−ＣＤＲ３（配列番号２７）、Ｖｌ−ＣＤＲ１（配列番号１２７）、Ｖｌ−ＣＤＲ２（配列番号１２８）、及びＶｌ−ＣＤＲ３（配列番号１２９）を含む。本発明の態様は、Ａｂ−６の６つのＣＤＲを含むモノクローナル抗体をコードする、単離ポリヌクレオチドを含み、ここで、ポリヌクレオチド配列は、Ｖｈ−ＣＤＲ１（配列番号３１）、Ｖｈ−ＣＤＲ２（配列番号３２）、Ｖｈ−ＣＤＲ３（配列番号３３）、Ｖｌ−ＣＤＲ１（配列番号１３３）、Ｖｌ−ＣＤＲ２（配列番号１３４）、及びＶｌ−ＣＤＲ３（配列番号１３５）を含む。本発明の態様は、Ａｂ−７の６つのＣＤＲを含むモノクローナル抗体をコードする、単離ポリヌクレオチドを含み、ここで、ポリヌクレオチド配列は、Ｖｈ−ＣＤＲ１（配列番号３７）、Ｖｈ−ＣＤＲ２（配列番号３８）、Ｖｈ−ＣＤＲ３（配列番号３９）、Ｖｌ−ＣＤＲ１（配列番号１３９）、Ｖｌ−ＣＤＲ２（配列番号１４０）、及びＶｌ−ＣＤＲ３（配列番号１４１）を含む。本発明の態様は、Ａｂ−８の６つのＣＤＲを含むモノクローナル抗体をコードする、単離ポリヌクレオチドを含み、ここで、ポリヌクレオチド配列は、Ｖｈ−ＣＤＲ１（配列番号４３）、Ｖｈ−ＣＤＲ２（配列番号４４）、Ｖｈ−ＣＤＲ３（配列番号４５）、Ｖｌ−ＣＤＲ１（配列番号１４５）、Ｖｌ−ＣＤＲ２（配列番号１４６）、及びＶｌ−ＣＤＲ３（配列番号１４７）を含む。本発明の態様は、Ａｂ−９の６つのＣＤＲを含むモノクローナル抗体をコードする、単離ポリヌクレオチドを含み、ここで、ポリヌクレオチド配列は、Ｖｈ−ＣＤＲ１（配列番号４９）、Ｖｈ−ＣＤＲ２（配列番号５０）、Ｖｈ−ＣＤＲ３（配列番号５１）、Ｖｌ−ＣＤＲ１（配列番号１５１）、Ｖｌ−ＣＤＲ２（配列番号１５２）、及びＶｌ−ＣＤＲ３（配列番号１５３）を含む。本発明の態様は、Ａｂ−１０の６つのＣＤＲを含むモノクローナル抗体をコードする、単離ポリヌクレオチドを含み、ここで、ポリヌクレオチド配列は、Ｖｈ−ＣＤＲ１（配列番号５５）、Ｖｈ−ＣＤＲ２（配列番号５６）、Ｖｈ−ＣＤＲ３（配列番号５７）、Ｖｌ−ＣＤＲ１（配列番号１５７）、Ｖｌ−ＣＤＲ２（配列番号１５８）、及びＶｌ−ＣＤＲ３（配列番号１５９）を含む。本発明の態様は、Ａｂ−１１の６つのＣＤＲを含むモノクローナル抗体をコードする、単離ポリヌクレオチドを含み、ここで、ポリヌクレオチド配列は、Ｖｈ−ＣＤＲ１（配列番号６１）、Ｖｈ−ＣＤＲ２（配列番号６２）、Ｖｈ−ＣＤＲ３（配列番号６３）、Ｖｌ−ＣＤＲ１（配列番号１６３）、Ｖｌ−ＣＤＲ２（配列番号１６４）、及びＶｌ−ＣＤＲ３（配列番号１６５）を含む。本発明の態様は、Ａｂ−１２の６つのＣＤＲを含むモノクローナル抗体をコードする、単離ポリヌクレオチドを含み、ここで、ポリヌクレオチド配列は、Ｖｈ−ＣＤＲ１（配列番号６７）、Ｖｈ−ＣＤＲ２（配列番号６８）、Ｖｈ−ＣＤＲ３（配列番号６９）、Ｖｌ−ＣＤＲ１（配列番号１６９）、Ｖｌ−ＣＤＲ２（配列番号１７０）、及びＶｌ−ＣＤＲ３（配列番号１７１）を含む。本発明の態様は、Ａｂ−１３の６つのＣＤＲを含むモノクローナル抗体をコードする、単離ポリヌクレオチドを含み、ここで、ポリヌクレオチド配列は、Ｖｈ−ＣＤＲ１（配列番号７３）、Ｖｈ−ＣＤＲ２（配列番号７４）、Ｖｈ−ＣＤＲ３（配列番号７５）、Ｖｌ−ＣＤＲ１（配列番号１７５）、Ｖｌ−ＣＤＲ２（配列番号１７６）、及びＶｌ−ＣＤＲ３（配列番号１７７）を含む。本発明の態様は、Ａｂ−１４の６つのＣＤＲを含むモノクローナル抗体をコードする、単離ポリヌクレオチドを含み、ここで、ポリヌクレオチド配列は、Ｖｈ−ＣＤＲ１（配列番号７９）、Ｖｈ−ＣＤＲ２（配列番号８０）、Ｖｈ−ＣＤＲ３（配列番号８１）、Ｖｌ−ＣＤＲ１（配列番号１８１）、Ｖｌ−ＣＤＲ２（配列番号１８２）、及びＶｌ−ＣＤＲ３（配列番号１８３）を含む。本発明の態様は、Ａｂ−１５の６つのＣＤＲを含むモノクローナル抗体をコードする、単離ポリヌクレオチドを含み、ここで、ポリヌクレオチド配列は、Ｖｈ−ＣＤＲ１（配列番号８５）、Ｖｈ−ＣＤＲ２（配列番号８６）、Ｖｈ−ＣＤＲ３（配列番号８７）、Ｖｌ−ＣＤＲ１（配列番号１８７）、Ｖｌ−ＣＤＲ２（配列番号１８８）、及びＶｌ−ＣＤＲ３（配列番号１８９）を含む。本発明の態様は、Ａｂ−１６の６つのＣＤＲを含むモノクローナル抗体をコードする、単離ポリヌクレオチドを含み、ここで、ポリヌクレオチド配列は、Ｖｈ−ＣＤＲ１（配列番号９１）、Ｖｈ−ＣＤＲ２（配列番号９２）、Ｖｈ−ＣＤＲ３（配列番号９３）、Ｖｌ−ＣＤＲ１（配列番号１９３）、Ｖｌ−ＣＤＲ２（配列番号１９４）、及びＶｌ−ＣＤＲ３（配列番号１９５）を含む。本発明の態様は、Ａｂ−１７の６つのＣＤＲを含むモノクローナル抗体をコードする、単離ポリヌクレオチドを含み、ここで、ポリヌクレオチド配列は、Ｖｈ−ＣＤＲ１（配列番号９７）、Ｖｈ−ＣＤＲ２（配列番号９８）、Ｖｈ−ＣＤＲ３（配列番号９９）、Ｖｌ−ＣＤＲ１（配列番号１９９）、Ｖｌ−ＣＤＲ２（配列番号２００）、及びＶｌ−ＣＤＲ３（配列番号２０１）を含む。前述の実施形態の態様は、ヒトモノクローナル抗体、ヒトモノクローナルＩｇＧ抗体、及びヒトモノクローナルＩｇＧ１抗体を含む。
【０１３７】
本発明の態様は、Ａｂ−１のＶｌ及びＶｈドメインを含むモノクローナル抗体をコードする、単離ポリヌクレオチドを含み、ここで、ポリヌクレオチド配列は、Ａｂ−１Ｖｌ（配列番号２３９）及びＡｂ−１Ｖｈ（配列番号２０５）を含む。本発明の態様は、Ａｂ−２のＶｌ及びＶｈドメインを含むモノクローナル抗体をコードする、単離ポリヌクレオチドを含み、ここで、ポリヌクレオチド配列は、Ａｂ−２Ｖｌ（配列番号２４１）及びＡｂ−２Ｖｈ（配列番号２０７）を含む。本発明の態様は、Ａｂ−３のＶｌ及びＶｈドメインを含むモノクローナル抗体をコードする、単離ポリヌクレオチドを含み、ここで、ポリヌクレオチド配列は、Ａｂ−３Ｖｌ（配列番号２４３）及びＡｂ−３Ｖｈ（配列番号２０９）を含む。本発明の態様は、Ａｂ−４のＶｌ及びＶｈドメインを含むモノクローナル抗体をコードする、単離ポリヌクレオチドを含み、ここで、ポリヌクレオチド配列は、Ａｂ−４Ｖｌ（配列番号２４５）及びＡｂ−４Ｖｈ（配列番号２１１）を含む。本発明の態様は、Ａｂ−５のＶｌ及びＶｈドメインを含むモノクローナル抗体をコードする、単離ポリヌクレオチドを含み、ここで、ポリヌクレオチド配列は、Ａｂ−５Ｖｌ（配列番号２４７）及びＡｂ−５Ｖｈ（配列番号２１３）を含む。本発明の態様は、Ａｂ−６のＶｌ及びＶｈドメインを含むモノクローナル抗体をコードする、単離ポリヌクレオチドを含み、ここで、ポリヌクレオチド配列は、Ａｂ−６Ｖｌ（配列番号２４９）及びＡｂ−６Ｖｈ（配列番号２１５）を含む。本発明の態様は、Ａｂ−７のＶｌ及びＶｈドメインを含むモノクローナル抗体をコードする、単離ポリヌクレオチドを含み、ここで、ポリヌクレオチド配列は、Ａｂ−７Ｖｌ（配列番号２５１）及びＡｂ−７Ｖｈ（配列番号２１７）を含む。本発明の態様は、Ａｂ−８のＶｌ及びＶｈドメインを含むモノクローナル抗体をコードする、単離ポリヌクレオチドを含み、ここで、ポリヌクレオチド配列は、Ａｂ−８Ｖｌ（配列番号２５３）及びＡｂ−８Ｖｈ（配列番号２１９）を含む。本発明の態様は、Ａｂ−９のＶｌ及びＶｈドメインを含むモノクローナル抗体をコードする、単離ポリヌクレオチドを含み、ここで、ポリヌクレオチド配列は、Ａｂ−９Ｖｌ（配列番号２５５）及びＡｂ−９Ｖｈ（配列番号２２１）を含む。本発明の態様は、Ａｂ−１０のＶｌ及びＶｈドメインを含むモノクローナル抗体をコードする、単離ポリヌクレオチドを含み、ここで、ポリヌクレオチド配列は、Ａｂ−１０Ｖｌ（配列番号２５７）及びＡｂ−１０Ｖｈ（配列番号２２３）ドメインを含む。本発明の態様は、Ａｂ−１１のＶｌ及びＶｈドメインを含むモノクローナル抗体をコードする、単離ポリヌクレオチドを含み、ここで、ポリヌクレオチド配列は、Ａｂ−１１Ｖｌ（配列番号２５９）及びＡｂ−１１Ｖｈ（配列番号２２５）を含む。本発明の態様は、Ａｂ−１２のＶｌ及びＶｈドメインを含むモノクローナル抗体をコードする、単離ポリヌクレオチドを含み、ここで、ポリヌクレオチド配列は、Ａｂ−１２Ｖｌ（配列番号２６１）及びＡｂ−１２Ｖｈ（配列番号２２７）を含む。本発明の態様は、Ａｂ−１３のＶｌ及びＶｈドメインを含むモノクローナル抗体をコードする、単離ポリヌクレオチドを含み、ここで、ポリヌクレオチド配列は、Ａｂ−１３Ｖｌ（配列番号２６３）及びＡｂ−１３Ｖｈ（配列番号２２９）を含む。本発明の態様は、Ａｂ−１４のＶｌ及びＶｈドメインを含むモノクローナル抗体をコードする、単離ポリヌクレオチドを含み、ここで、ポリヌクレオチド配列は、Ａｂ−１４Ｖｌ（配列番号２６５）及びＡｂ−１４Ｖｈ（配列番号２３１）を含む。本発明の態様は、Ａｂ−１５のＶｌ及びＶｈドメインを含むモノクローナル抗体をコードする、単離ポリヌクレオチドを含み、ここで、ポリヌクレオチド配列は、Ａｂ−１５Ｖｌ（配列番号２６７）及びＡｂ−１５Ｖｈ（配列番号２３３）を含む。本発明の態様は、Ａｂ−１６のＶｌ及びＶｈドメインを含むモノクローナル抗体をコードする、単離ポリヌクレオチドを含み、ここで、ポリヌクレオチド配列は、Ａｂ−１６Ｖｌ（配列番号２６９）及びＡｂ−１６Ｖｈ（配列番号２３５）を含む。本発明の態様は、Ａｂ−１７のＶｌ及びＶｈドメインを含むモノクローナル抗体をコードする、単離ポリヌクレオチドを含み、ここで、ポリヌクレオチド配列は、Ａｂ−１７Ｖｌ（配列番号２７１）及びＡｂ−１７Ｖｈ（配列番号２３７）を含む。前述の実施形態の態様は、ヒトモノクローナル抗体、ヒトモノクローナルＩｇＧ抗体、及びヒトモノクローナルＩｇＧ１抗体を含む。
【０１３８】
本発明の態様は、抗体Ａｂ−１を含むモノクローナル抗体をコードする、単離ポリヌクレオチドを含み、ここで、ポリヌクレオチド配列は、軽鎖（配列番号２７９）及び重鎖（配列番号２７３）を含む。本発明の態様は、抗体Ａｂ−２を含むモノクローナル抗体をコードする、単離ポリヌクレオチドを含み、ここで、ポリヌクレオチド配列は、軽鎖（配列番号２８１）及び重鎖（配列番号２７５）を含む。本発明の態様は、抗体Ａｂ−３を含むモノクローナル抗体をコードする、単離ポリヌクレオチドを含み、ここで、ポリヌクレオチド配列は、軽鎖（配列番号２８３）及び重鎖（配列番号２７７）を含む。前述の実施形態の態様は、ヒトモノクローナル抗体、ヒトモノクローナルＩｇＧ抗体、及びヒトモノクローナルＩｇＧ１抗体を含む。
【０１３９】
本発明の態様は、Ａｂ−１の６つのＣＤＲ、具体的には、Ｖｈ−ＣＤＲ１（配列番号４）、Ｖｈ−ＣＤＲ２（配列番号５）、Ｖｈ−ＣＤＲ３（配列番号６）、Ｖｌ−ＣＤＲ１（配列番号１０６）、Ｖｌ−ＣＤＲ２（配列番号１０７）、及びＶｌ−ＣＤＲ３（配列番号１０８）を含むポリペプチドをコードする、単離ポリヌクレオチドを含む。本発明の態様は、Ａｂ−２の６つのＣＤＲ、具体的には、Ｖｈ−ＣＤＲ１（配列番号１０）、Ｖｈ−ＣＤＲ２（配列番号１１）、Ｖｈ−ＣＤＲ３（配列番号１２）、Ｖｌ−ＣＤＲ１（配列番号１１２）、Ｖｌ−ＣＤＲ２（配列番号１１３）、及びＶｌ−ＣＤＲ３（配列番号１１４）を含むポリペプチドをコードする、単離ポリヌクレオチドを含む。本発明の態様は、Ａｂ−３の６つのＣＤＲ、具体的には、Ｖｈ−ＣＤＲ１（配列番号１６）、Ｖｈ−ＣＤＲ２（配列番号１７）、Ｖｈ−ＣＤＲ３（配列番号１８）、Ｖｌ−ＣＤＲ１（配列番号１１８）、Ｖｌ−ＣＤＲ２（配列番号１１９）、及びＶｌ−ＣＤＲ３（配列番号１２０）を含むポリペプチドをコードする、単離ポリヌクレオチドを含む。本発明の態様は、Ａｂ−４の６つのＣＤＲ、具体的には、Ｖｈ−ＣＤＲ１（配列番号２２）、Ｖｈ−ＣＤＲ２（配列番号２３）、Ｖｈ−ＣＤＲ３（配列番号２４）、Ｖｌ−ＣＤＲ１（配列番号１２４）、Ｖｌ−ＣＤＲ２（配列番号１２５）、及びＶｌ−ＣＤＲ３（配列番号１２６）を含むポリペプチドをコードする、単離ポリヌクレオチドを含む。本発明の態様は、Ａｂ−５の６つのＣＤＲ、具体的には、Ｖｈ−ＣＤＲ１（配列番号２８）、Ｖｈ−ＣＤＲ２（配列番号２９）、Ｖｈ−ＣＤＲ３（配列番号３０）、Ｖｌ−ＣＤＲ１（配列番号１３０）、Ｖｌ−ＣＤＲ２（配列番号１３１）、及びＶｌ−ＣＤＲ３（配列番号１３２）を含むポリペプチドをコードする、単離ポリヌクレオチドを含む。本発明の態様は、Ａｂ−６の６つのＣＤＲ、具体的には、Ｖｈ−ＣＤＲ１（配列番号３４）、Ｖｈ−ＣＤＲ２（配列番号３５）、Ｖｈ−ＣＤＲ３（配列番号３６）、Ｖｌ−ＣＤＲ１（配列番号１３６）、Ｖｌ−ＣＤＲ２（配列番号１３７）、及びＶｌ−ＣＤＲ３（配列番号１３８）を含むポリペプチドをコードする、単離ポリヌクレオチドを含む。本発明の態様は、Ａｂ−７の６つのＣＤＲ、具体的には、Ｖｈ−ＣＤＲ１（配列番号４０）、Ｖｈ−ＣＤＲ２（配列番号４１）、Ｖｈ−ＣＤＲ３（配列番号４２）、Ｖｌ−ＣＤＲ１（配列番号１４２）、Ｖｌ−ＣＤＲ２（配列番号１４３）、及びＶｌ−ＣＤＲ３（配列番号１４４）を含むポリペプチドをコードする、単離ポリヌクレオチドを含む。本発明の態様は、Ａｂ−８の６つのＣＤＲ、具体的には、Ｖｈ−ＣＤＲ１（配列番号４６）、Ｖｈ−ＣＤＲ２（配列番号４７）、Ｖｈ−ＣＤＲ３（配列番号４８）、Ｖｌ−ＣＤＲ１（配列番号１４８）、Ｖｌ−ＣＤＲ２（配列番号１４９）、及びＶｌ−ＣＤＲ３（配列番号１５０）を含むポリペプチドをコードする、単離ポリヌクレオチドを含む。本発明の態様は、Ａｂ−９の６つのＣＤＲ、具体的には、Ｖｈ−ＣＤＲ１（配列番号５２）、Ｖｈ−ＣＤＲ２（配列番号５３）、Ｖｈ−ＣＤＲ３（配列番号５４）、Ｖｌ−ＣＤＲ１（配列番号１５４）、Ｖｌ−ＣＤＲ２（配列番号１５５）、及びＶｌ−ＣＤＲ３（配列番号１５６）を含むポリペプチドをコードする、単離ポリヌクレオチドを含む。本発明の態様は、Ａｂ−１０の６つのＣＤＲ、具体的には、Ｖｈ−ＣＤＲ１（配列番号５８）、Ｖｈ−ＣＤＲ２（配列番号５９）、Ｖｈ−ＣＤＲ３（配列番号６０）、Ｖｌ−ＣＤＲ１（配列番号１６０）、Ｖｌ−ＣＤＲ２（配列番号１６１）、及びＶｌ−ＣＤＲ３（配列番号１６２）を含むポリペプチドをコードする、単離ポリヌクレオチドを含む。本発明の態様は、Ａｂ−１１の６つのＣＤＲ、具体的には、Ｖｈ−ＣＤＲ１（配列番号６４）、Ｖｈ−ＣＤＲ２（配列番号６５）、Ｖｈ−ＣＤＲ３（配列番号６６）、Ｖｌ−ＣＤＲ１（配列番号１６６）、Ｖｌ−ＣＤＲ２（配列番号１６７）、及びＶｌ−ＣＤＲ３（配列番号１６８）を含むポリペプチドをコードする、単離ポリヌクレオチドを含む。本発明の態様は、Ａｂ−１２の６つのＣＤＲ、具体的には、Ｖｈ−ＣＤＲ１（配列番号７０）、Ｖｈ−ＣＤＲ２（配列番号７１）、Ｖｈ−ＣＤＲ３（配列番号７２）、Ｖｌ−ＣＤＲ１（配列番号１７２）、Ｖｌ−ＣＤＲ２（配列番号１７３）、及びＶｌ−ＣＤＲ３（配列番号１７４）を含むポリペプチドをコードする、単離ポリヌクレオチドを含む。本発明の態様は、Ａｂ−１３の６つのＣＤＲ、具体的には、Ｖｈ−ＣＤＲ１（配列番号７６）、Ｖｈ−ＣＤＲ２（配列番号７７）、Ｖｈ−ＣＤＲ３（配列番号７８）、Ｖｌ−ＣＤＲ１（配列番号１７８）、Ｖｌ−ＣＤＲ２（配列番号１７９）、及びＶｌ−ＣＤＲ３（配列番号１８０）を含むポリペプチドをコードする、単離ポリヌクレオチドを含む。本発明の態様は、Ａｂ−１４の６つのＣＤＲ、具体的には、Ｖｈ−ＣＤＲ１（配列番号８２）、Ｖｈ−ＣＤＲ２（配列番号８３）、Ｖｈ−ＣＤＲ３（配列番号８４）、Ｖｌ−ＣＤＲ１（配列番号１８４）、Ｖｌ−ＣＤＲ２（配列番号１８５）、及びＶｌ−ＣＤＲ３（配列番号１８６）を含むポリペプチドをコードする、単離ポリヌクレオチドを含む。本発明の態様は、Ａｂ−１５の６つのＣＤＲ、具体的には、Ｖｈ−ＣＤＲ１（配列番号８８）、Ｖｈ−ＣＤＲ２（配列番号８９）、Ｖｈ−ＣＤＲ３（配列番号９０）、Ｖｌ−ＣＤＲ１（配列番号１９０）、Ｖｌ−ＣＤＲ２（配列番号１９１）、及びＶｌ−ＣＤＲ３（配列番号１９２）を含むポリペプチドをコードする、単離ポリヌクレオチドを含む。本発明の態様は、Ａｂ−１６の６つのＣＤＲ、具体的には、Ｖｈ−ＣＤＲ１（配列番号９４）、Ｖｈ−ＣＤＲ２（配列番号９５）、Ｖｈ−ＣＤＲ３（配列番号９６）、Ｖｌ−ＣＤＲ１（配列番号１９６）、Ｖｌ−ＣＤＲ２（配列番号１９７）、及びＶｌ−ＣＤＲ３（配列番号１９８）を含むポリペプチドをコードする、単離ポリヌクレオチドを含む。本発明の態様は、Ａｂ−１７の６つのＣＤＲ、具体的には、Ｖｈ−ＣＤＲ１（配列番号１００）、Ｖｈ−ＣＤＲ２（配列番号１０１）、Ｖｈ−ＣＤＲ３（配列番号１０２）、Ｖｌ−ＣＤＲ１（配列番号２０２）、Ｖｌ−ＣＤＲ２（配列番号２０３）、及びＶｌ−ＣＤＲ３（配列番号２０４）を含むポリペプチドをコードする、単離ポリヌクレオチドを含む。本発明の態様は、前述のもののフラグメント、誘導体、変異タンパク質、及び変異体を含む。
【０１４０】
本発明の態様は、Ａｂ−１Ｖｌ（配列番号２４０）及びＡｂ−１Ｖｈ（配列番号２０６）ドメインを含むポリペプチドをコードする、単離ポリヌクレオチドを含む。本発明の態様は、Ａｂ−２Ｖｌ（配列番号２４２）及びＡｂ−２Ｖｈ（配列番号２０８）ドメインを含むポリペプチドをコードする、単離ポリヌクレオチドを含む。本発明の態様は、Ａｂ−３Ｖｌ（配列番号２４４）及びＡｂ−３Ｖｈ（配列番号２１０）ドメインを含むポリペプチドをコードする、単離ポリヌクレオチドを含む。本発明の態様は、Ａｂ−４Ｖｌ（配列番号２４６）及びＡｂ−４Ｖｈ（配列番号２１２）ドメインを含むポリペプチドをコードする、単離ポリヌクレオチドを含む。本発明の態様は、Ａｂ−５Ｖｌ（配列番号２４８）及びＡｂ−５Ｖｈ（配列番号２１４）ドメインを含むポリペプチドをコードする、単離ポリヌクレオチドを含む。本発明の態様は、Ａｂ−６Ｖｌ（配列番号２５０）及びＡｂ−６Ｖｈ（配列番号２１６）ドメインを含むポリペプチドをコードする、単離ポリヌクレオチドを含む。本発明の態様は、Ａｂ−７Ｖｌ（配列番号２５２）及びＡｂ−７Ｖｈ（配列番号２１８）ドメインを含むポリペプチドをコードする、単離ポリヌクレオチドを含む。本発明の態様は、Ａｂ−８Ｖｌ（配列番号２５４）及びＡｂ−８Ｖｈ（配列番号２２０）ドメインを含むポリペプチドをコードする、単離ポリヌクレオチドを含む。本発明の態様は、Ａｂ−９Ｖｌ（配列番号２５６）及びＡｂ−９Ｖｈ（配列番号２２２）ドメインを含むポリペプチドをコードする、単離ポリヌクレオチドを含む。本発明の態様は、Ａｂ−１０Ｖｌ（配列番号２５８）及びＡｂ−１０Ｖｈ（配列番号２２４）ドメインを含むポリペプチドをコードする、単離ポリヌクレオチドを含む。本発明の態様は、Ａｂ−１１Ｖｌ（配列番号２６０）及びＡｂ−１１Ｖｈ（配列番号２２６）ドメインを含むポリペプチドをコードする、単離ポリヌクレオチドを含む。本発明の態様は、Ａｂ−１２Ｖｌ（配列番号２６２）及びＡｂ−１２Ｖｈ（配列番号２２８）ドメインを含むポリペプチドをコードする、単離ポリヌクレオチドを含む。本発明の態様は、Ａｂ−１３Ｖｌ（配列番号２６４）及びＡｂ−１３Ｖｈ（配列番号２３０）ドメインを含むポリペプチドをコードする、単離ポリヌクレオチドを含む。本発明の態様は、Ａｂ−１４Ｖｌ（配列番号２６６）及びＡｂ−１４Ｖｈ（配列番号２３２）ドメインを含むポリペプチドをコードする、単離ポリヌクレオチドを含む。本発明の態様は、Ａｂ−１５Ｖｌ（配列番号２６８）及びＡｂ−１５Ｖｈ（配列番号２３４）ドメインを含むポリペプチドをコードする、単離ポリヌクレオチドを含む。本発明の態様は、Ａｂ−１６Ｖｌ（配列番号２７０）及びＡｂ−１６Ｖｈ（配列番号２３６）ドメインを含むポリペプチドをコードする、単離ポリヌクレオチドを含む。本発明の態様は、Ａｂ−１７Ｖｌ（配列番号２７２）及びＡｂ−１７Ｖｈ（配列番号２３８）ドメインを含むポリペプチドをコードする、単離ポリヌクレオチドを含む。本発明の態様は、前述のもののフラグメント、誘導体、変異タンパク質、及び変異体を含む。
【０１４１】
本発明の態様は、１つのＡｂ−１軽鎖（配列番号２８０）及び１つのＡｂ−１重鎖（配列番号２７４）を含むポリペプチドをコードする、単離ポリヌクレオチドを含む。本発明の態様は、１つのＡｂ−２軽鎖（配列番号２８２）及び１つのＡｂ−２重鎖（配列番号２７６）を含むポリペプチドをコードする、単離ポリヌクレオチドを含む。本発明の態様は、１つのＡｂ−３軽鎖（配列番号２８４）及び１つのＡｂ−３重鎖（配列番号２７８）を含むポリペプチドをコードする、単離ポリヌクレオチドを含む。本発明の態様は、２つのＡｂ−１軽鎖（配列番号２８０）及び２つのＡｂ−１重鎖（配列番号２７４）を含むポリペプチドをコードする、単離ポリヌクレオチドを含む。本発明の態様は、２つ以上のＡｂ−２軽鎖（配列番号２８２）及び２つ以上のＡｂ−２重鎖（配列番号２７６）を含むポリペプチドをコードする、単離ポリヌクレオチドを含む。本発明の態様は、２つ以上のＡｂ−３軽鎖（配列番号２８４）及び２つ以上のＡｂ−３重鎖（配列番号２７８）を含むポリペプチドをコードする、単離ポリヌクレオチドを含む。本発明の態様は、前述のもののフラグメント、誘導体、変異タンパク質、及び変異体を含む。
【０１４２】
本発明の態様は、Ａｂ−１の６つのＣＤＲを含むポリペプチドをコードする、単離ポリヌクレオチドを含み、ここで、ＣＤＲは、Ｖｈ−ＣＤＲ１（配列番号４）、Ｖｈ−ＣＤＲ２（配列番号５）、Ｖｈ−ＣＤＲ３（配列番号６）、Ｖｌ−ＣＤＲ１（配列番号１０６）、Ｖｌ−ＣＤＲ２（配列番号１０７）、及びＶｌ−ＣＤＲ３（配列番号１０８）の１、２、３、４、５、または６つを超えないアミノ酸付加、欠失、または置換を含む。本発明の態様は、Ａｂ−２の６つのＣＤＲを含むポリペプチドをコードする、単離ポリヌクレオチドを含み、ここで、ＣＤＲは、Ｖｈ−ＣＤＲ１（配列番号１０）、Ｖｈ−ＣＤＲ２（配列番号１１）、Ｖｈ−ＣＤＲ３（配列番号１２）、Ｖｌ−ＣＤＲ１（配列番号１１２）、Ｖｌ−ＣＤＲ２（配列番号１１３）、及びＶｌ−ＣＤＲ３（配列番号１１４）の１、２、３、４、５、または６つを超えないアミノ酸付加、欠失、または置換を含む。本発明の態様は、Ａｂ−３の６つのＣＤＲを含むポリペプチドをコードする、単離ポリヌクレオチドを含み、ここで、ＣＤＲは、Ｖｈ−ＣＤＲ１（配列番号１６）、Ｖｈ−ＣＤＲ２（配列番号１７）、Ｖｈ−ＣＤＲ３（配列番号１８）、Ｖｌ−ＣＤＲ１（配列番号１１８）、Ｖｌ−ＣＤＲ２（配列番号１１９）、及びＶｌ−ＣＤＲ３（配列番号１２０）の１、２、３、４、５、または６つを超えないアミノ酸付加、欠失、または置換を含む。本発明の態様は、Ａｂ−４の６つのＣＤＲを含むポリペプチドをコードする、単離ポリヌクレオチドを含み、ここで、ＣＤＲは、Ｖｈ−ＣＤＲ１（配列番号２２）、Ｖｈ−ＣＤＲ２（配列番号２３）、Ｖｈ−ＣＤＲ３（配列番号２４）、Ｖｌ−ＣＤＲ１（配列番号１２４）、Ｖｌ−ＣＤＲ２（配列番号１２５）、及びＶｌ−ＣＤＲ３（配列番号１２６）の１、２、３、４、５、または６つを超えないアミノ酸付加、欠失、または置換を含む。本発明の態様は、Ａｂ−５の６つのＣＤＲを含むポリペプチドをコードする、単離ポリヌクレオチドを含み、ここで、ＣＤＲは、Ｖｈ−ＣＤＲ１（配列番号２８）、Ｖｈ−ＣＤＲ２（配列番号２９）、Ｖｈ−ＣＤＲ３（配列番号３０）、Ｖｌ−ＣＤＲ１（配列番号１３０）、Ｖｌ−ＣＤＲ２（配列番号１３１）、及びＶｌ−ＣＤＲ３（配列番号１３２）の１、２、３、４、５、または６つを超えないアミノ酸付加、欠失、または置換を含む。本発明の態様は、Ａｂ−６の６つのＣＤＲを含むポリペプチドをコードする、単離ポリヌクレオチドを含み、ここで、ＣＤＲは、Ｖｈ−ＣＤＲ１（配列番号３４）、Ｖｈ−ＣＤＲ２（配列番号３５）、Ｖｈ−ＣＤＲ３（配列番号３６）、Ｖｌ−ＣＤＲ１（配列番号１３６）、Ｖｌ−ＣＤＲ２（配列番号１３７）、及びＶｌ−ＣＤＲ３（配列番号１３８）の１、２、３、４、５、または６つを超えないアミノ酸付加、欠失、または置換を含む。本発明の態様は、Ａｂ−７の６つのＣＤＲを含むポリペプチドをコードする、単離ポリヌクレオチドを含み、ここで、ＣＤＲは、Ｖｈ−ＣＤＲ１（配列番号４０）、Ｖｈ−ＣＤＲ２（配列番号４１）、Ｖｈ−ＣＤＲ３（配列番号４２）、Ｖｌ−ＣＤＲ１（配列番号１４２）、Ｖｌ−ＣＤＲ２（配列番号１４３）、及びＶｌ−ＣＤＲ３（配列番号１４４）の１、２、３、４、５、または６つを超えないアミノ酸付加、欠失、または置換を含む。本発明の態様は、Ａｂ−８の６つのＣＤＲを含むポリペプチドをコードする、単離ポリヌクレオチドを含み、ここで、ＣＤＲは、Ｖｈ−ＣＤＲ１（配列番号４６）、Ｖｈ−ＣＤＲ２（配列番号４７）、Ｖｈ−ＣＤＲ３（配列番号４８）、Ｖｌ−ＣＤＲ１（配列番号１４８）、Ｖｌ−ＣＤＲ２（配列番号１４９）、及びＶｌ−ＣＤＲ３（配列番号１５０）の１、２、３、４、５、または６つを超えないアミノ酸付加、欠失、または置換を含む。本発明の態様は、Ａｂ−９の６つのＣＤＲを含むポリペプチドをコードする、単離ポリヌクレオチドを含み、ここで、ＣＤＲは、Ｖｈ−ＣＤＲ１（配列番号５２）、Ｖｈ−ＣＤＲ２（配列番号５３）、Ｖｈ−ＣＤＲ３（配列番号５４）、Ｖｌ−ＣＤＲ１（配列番号１５４）、Ｖｌ−ＣＤＲ２（配列番号１５５）、及びＶｌ−ＣＤＲ３（配列番号１５６）の１、２、３、４、５、または６つを超えないアミノ酸付加、欠失、または置換を含む。本発明の態様は、Ａｂ−１０の６つのＣＤＲを含むポリペプチドをコードする、単離ポリヌクレオチドを含み、ここで、ＣＤＲは、Ｖｈ−ＣＤＲ１（配列番号５８）、Ｖｈ−ＣＤＲ２（配列番号５９）、Ｖｈ−ＣＤＲ３（配列番号６０）、Ｖｌ−ＣＤＲ１（配列番号１６０）、Ｖｌ−ＣＤＲ２（配列番号１６１）、及びＶｌ−ＣＤＲ３（配列番号１６２）の１、２、３、４、５、または６つを超えないアミノ酸付加、欠失、または置換を含む。本発明の態様は、Ａｂ−１１の６つのＣＤＲを含むポリペプチドをコードする、単離ポリヌクレオチドを含み、ここで、ＣＤＲは、Ｖｈ−ＣＤＲ１（配列番号６４）、Ｖｈ−ＣＤＲ２（配列番号６５）、Ｖｈ−ＣＤＲ３（配列番号６６）、Ｖｌ−ＣＤＲ１（配列番号１６６）、Ｖｌ−ＣＤＲ２（配列番号１６７）、及びＶｌ−ＣＤＲ３（配列番号１６８）の１、２、３、４、５、または６つを超えないアミノ酸付加、欠失、または置換を含む。本発明の態様は、Ａｂ−１２の６つのＣＤＲを含むポリペプチドをコードする、単離ポリヌクレオチドを含み、ここで、ＣＤＲは、Ｖｈ−ＣＤＲ１（配列番号７０）、Ｖｈ−ＣＤＲ２（配列番号７１）、Ｖｈ−ＣＤＲ３（配列番号７２）、Ｖｌ−ＣＤＲ１（配列番号１７２）、Ｖｌ−ＣＤＲ２（配列番号１７３）、及びＶｌ−ＣＤＲ３（配列番号１７４）の１、２、３、４、５、または６つを超えないアミノ酸付加、欠失、または置換を含む。本発明の態様は、Ａｂ−１３の６つのＣＤＲを含むポリペプチドをコードする、単離ポリヌクレオチドを含み、ここで、ＣＤＲは、Ｖｈ−ＣＤＲ１（配列番号７６）、Ｖｈ−ＣＤＲ２（配列番号７７）、Ｖｈ−ＣＤＲ３（配列番号７８）、Ｖｌ−ＣＤＲ１（配列番号１７８）、Ｖｌ−ＣＤＲ２（配列番号１７９）、及びＶｌ−ＣＤＲ３（配列番号１８０）の１、２、３、４、５、または６つを超えないアミノ酸付加、欠失、または置換を含む。本発明の態様は、Ａｂ−１４の６つのＣＤＲを含むポリペプチドをコードする、単離ポリヌクレオチドを含み、ここで、ＣＤＲは、Ｖｈ−ＣＤＲ１（配列番号８２）、Ｖｈ−ＣＤＲ２（配列番号８３）、Ｖｈ−ＣＤＲ３（配列番号８４）、Ｖｌ−ＣＤＲ１（配列番号１８４）、Ｖｌ−ＣＤＲ２（配列番号１８５）、及びＶｌ−ＣＤＲ３（配列番号１８６）の１、２、３、４、５、または６つを超えないアミノ酸付加、欠失、または置換を含む。本発明の態様は、Ａｂ−１５の６つのＣＤＲを含むポリペプチドをコードする、単離ポリヌクレオチドを含み、ここで、ＣＤＲは、Ｖｈ−ＣＤＲ１（配列番号８８）、Ｖｈ−ＣＤＲ２（配列番号８９）、Ｖｈ−ＣＤＲ３（配列番号９０）、Ｖｌ−ＣＤＲ１（配列番号１９０）、Ｖｌ−ＣＤＲ２（配列番号１９１）、及びＶｌ−ＣＤＲ３（配列番号１９２）の１、２、３、４、５、または６つを超えないアミノ酸付加、欠失、または置換を含む。本発明の態様は、Ａｂ−１６の６つのＣＤＲを含むポリペプチドをコードする、単離ポリヌクレオチドを含み、ここで、ＣＤＲは、Ｖｈ−ＣＤＲ１（配列番号９４）、Ｖｈ−ＣＤＲ２（配列番号９５）、Ｖｈ−ＣＤＲ３（配列番号９６）、Ｖｌ−ＣＤＲ１（配列番号１９６）、Ｖｌ−ＣＤＲ２（配列番号１９７）、及びＶｌ−ＣＤＲ３（配列番号１９８）の１、２、３、４、５、または６つを超えないアミノ酸付加、欠失、または置換を含む。本発明の態様は、Ａｂ−１７の６つのＣＤＲを含むポリペプチドをコードする、単離ポリヌクレオチドを含み、ここで、ＣＤＲは、Ｖｈ−ＣＤＲ１（配列番号１００）、Ｖｈ−ＣＤＲ２（配列番号１０１）、Ｖｈ−ＣＤＲ３（配列番号１０２）、Ｖｌ−ＣＤＲ１（配列番号２０２）、Ｖｌ−ＣＤＲ２（配列番号２０３）、及びＶｌ−ＣＤＲ３（配列番号２０４）の１、２、３、４、５、または６つを超えないアミノ酸付加、欠失、または置換を含む。
【０１４３】
本発明の態様は、それぞれ、Ａｂ−１Ｖｌ（配列番号２４０）及びＡｂ−１Ｖｈ（配列番号２０６）に少なくとも８０％、８１％、８２％、８３％、８４％、８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、または９９％同一なＶｌ及びＶｈアミノ酸配列を含むポリペプチドをコードする、単離ポリヌクレオチドを含む。本発明の態様は、それぞれ、Ａｂ−２Ｖｌ（配列番号２４２）及びＡｂ−２Ｖｈ（配列番号２０８）に少なくとも８０％、８１％、８２％、８３％、８４％、８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、または９９％同一なＶｌ及びＶｈアミノ酸配列を含むポリペプチドをコードする、単離ポリヌクレオチドを含む。本発明の態様は、それぞれ、Ａｂ−３Ｖｌ（配列番号２４４）及びＡｂ−３Ｖｈ（配列番号２１０）に少なくとも８０％、８１％、８２％、８３％、８４％、８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、または９９％同一なＶｌ及びＶｈアミノ酸配列を含むポリペプチドをコードする、単離ポリヌクレオチドを含む。本発明の態様は、それぞれ、Ａｂ−４Ｖｌ（配列番号２４６）及びＡｂ−４Ｖｈ（配列番号２１２）に少なくとも８０％、８１％、８２％、８３％、８４％、８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、または９９％同一なＶｌ及びＶｈアミノ酸配列を含むポリペプチドをコードする、単離ポリヌクレオチドを含む。本発明の態様は、それぞれ、Ａｂ−５Ｖｌ（配列番号２４８）及びＡｂ−５Ｖｈ（配列番号２１４）に少なくとも８０％、８１％、８２％、８３％、８４％、８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、または９９％同一なＶｌ及びＶｈアミノ酸配列を含むポリペプチドをコードする、単離ポリヌクレオチドを含む。本発明の態様は、それぞれ、Ａｂ−６Ｖｌ（配列番号２５０）及びＡｂ−６Ｖｈ（配列番号２１６）に少なくとも８０％、８１％、８２％、８３％、８４％、８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、または９９％同一なＶｌ及びＶｈアミノ酸配列を含むポリペプチドをコードする、単離ポリヌクレオチドを含む。本発明の態様は、それぞれ、Ａｂ−７Ｖｌ（配列番号２５２）及びＡｂ−７Ｖｈ（配列番号２１８）に少なくとも８０％、８１％、８２％、８３％、８４％、８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、または９９％同一なＶｌ及びＶｈアミノ酸配列を含むポリペプチドをコードする、単離ポリヌクレオチドを含む。本発明の態様は、それぞれ、Ａｂ−８Ｖｌ（配列番号２５４）及びＡｂ−８Ｖｈ（配列番号２２０）に少なくとも８０％、８１％、８２％、８３％、８４％、８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、または９９％同一なＶｌ及びＶｈアミノ酸配列を含むポリペプチドをコードする、単離ポリヌクレオチドを含む。本発明の態様は、それぞれ、Ａｂ−９Ｖｌ（配列番号２５６）及びＡｂ−９Ｖｈ（配列番号２２２）に少なくとも８０％、８１％、８２％、８３％、８４％、８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、または９９％同一なＶｌ及びＶｈアミノ酸配列を含むポリペプチドをコードする、単離ポリヌクレオチドを含む。本発明の態様は、それぞれ、Ａｂ−１０Ｖｌ（配列番号２５８）及びＡｂ−１０Ｖｈ（配列番号２２４）に少なくとも８０％、８１％、８２％、８３％、８４％、８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、または９９％同一なＶｌ及びＶｈアミノ酸配列を含むポリペプチドをコードする、単離ポリヌクレオチドを含む。本発明の態様は、それぞれ、Ａｂ−１１Ｖｌ（配列番号２６０）及びＡｂ−１１Ｖｈ（配列番号２２６）に少なくとも８０％、８１％、８２％、８３％、８４％、８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、または９９％同一なＶｌ及びＶｈアミノ酸配列を含むポリペプチドをコードする、単離ポリヌクレオチドを含む。本発明の態様は、それぞれ、Ａｂ−１２Ｖｌ（配列番号２６２）及びＡｂ−１２Ｖｈ（配列番号２２８）に少なくとも８０％、８１％、８２％、８３％、８４％、８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、または９９％同一なＶｌ及びＶｈアミノ酸配列を含むポリペプチドをコードする、単離ポリヌクレオチドを含む。本発明の態様は、それぞれ、Ａｂ−１３Ｖｌ（配列番号２６４）及びＡｂ−１３Ｖｈ（配列番号２３０）に少なくとも８０％、８１％、８２％、８３％、８４％、８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、または９９％同一なＶｌ及びＶｈアミノ酸配列を含むポリペプチドをコードする、単離ポリヌクレオチドを含む。本発明の態様は、それぞれ、Ａｂ−１４Ｖｌ（配列番号２６６）及びＡｂ−１４Ｖｈ（配列番号２３２）に少なくとも８０％、８１％、８２％、８３％、８４％、８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、または９９％同一なＶｌ及びＶｈアミノ酸配列を含むポリペプチドをコードする、単離ポリヌクレオチドを含む。本発明の態様は、それぞれ、Ａｂ−１５Ｖｌ（配列番号２６８）及びＡｂ−１５Ｖｈ（配列番号２３４）に少なくとも８０％、８１％、８２％、８３％、８４％、８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、または９９％同一なＶｌ及びＶｈアミノ酸配列を含むポリペプチドをコードする、単離ポリヌクレオチドを含む。本発明の態様は、それぞれ、Ａｂ−１６Ｖｌ（配列番号２７０）及びＡｂ−１６Ｖｈ（配列番号２３６）に少なくとも８０％、８１％、８２％、８３％、８４％、８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、または９９％同一なＶｌ及びＶｈアミノ酸配列を含むポリペプチドをコードする、単離ポリヌクレオチドを含む。本発明の態様は、それぞれ、Ａｂ−１７Ｖｌ（配列番号２７２）及びＡｂ−１７Ｖｈ（配列番号２３８）に少なくとも８０％、８１％、８２％、８３％、８４％、８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、または９９％同一なＶｌ及びＶｈアミノ酸配列を含むポリペプチドをコードする、単離ポリヌクレオチドを含む。
【０１４４】
本発明の態様は、Ａｂ−１の６つのＣＤＲを含むポリペプチドをコードする、単離ポリヌクレオチドを含み、ここで、ポリヌクレオチド配列は、Ｖｈ−ＣＤＲ１（配列番号１）、Ｖｈ−ＣＤＲ２（配列番号２）、Ｖｈ−ＣＤＲ３（配列番号３）、Ｖｌ−ＣＤＲ１（配列番号１０３）、Ｖｌ−ＣＤＲ２（配列番号１０４）、及びＶｌ−ＣＤＲ３（配列番号１０５）を含む。本発明の態様は、Ａｂ−２の６つのＣＤＲを含むポリペプチドをコードする、単離ポリヌクレオチドを含み、ここで、ポリヌクレオチド配列は、Ｖｈ−ＣＤＲ１（配列番号７）、Ｖｈ−ＣＤＲ２（配列番号８）、Ｖｈ−ＣＤＲ３（配列番号９）、Ｖｌ−ＣＤＲ１（配列番号１０９）、Ｖｌ−ＣＤＲ２（配列番号１１０）、及びＶｌ−ＣＤＲ３（配列番号１１１）を含む。本発明の態様は、Ａｂ−３の６つのＣＤＲを含むポリペプチドをコードする、単離ポリヌクレオチドを含み、ここで、ポリヌクレオチド配列は、Ｖｈ−ＣＤＲ１（配列番号１３）、Ｖｈ−ＣＤＲ２（配列番号１４）、Ｖｈ−ＣＤＲ３（配列番号１５）、Ｖｌ−ＣＤＲ１（配列番号１１５）、Ｖｌ−ＣＤＲ２（配列番号１１６）、及びＶｌ−ＣＤＲ３（配列番号１１７）を含む。本発明の態様は、Ａｂ−４の６つのＣＤＲを含むポリペプチドをコードする、単離ポリヌクレオチドを含み、ここで、ポリヌクレオチド配列は、Ｖｈ−ＣＤＲ１（配列番号１９）、Ｖｈ−ＣＤＲ２（配列番号２０）、Ｖｈ−ＣＤＲ３（配列番号２１）、Ｖｌ−ＣＤＲ１（配列番号１２１）、Ｖｌ−ＣＤＲ２（配列番号１２２）、及びＶｌ−ＣＤＲ３（配列番号１２３）を含む。本発明の態様は、Ａｂ−５の６つのＣＤＲを含むポリペプチドをコードする、単離ポリヌクレオチドを含み、ここで、ポリヌクレオチド配列は、Ｖｈ−ＣＤＲ１（配列番号２５）、Ｖｈ−ＣＤＲ２（配列番号２６）、Ｖｈ−ＣＤＲ３（配列番号２７）、Ｖｌ−ＣＤＲ１（配列番号１２７）、Ｖｌ−ＣＤＲ２（配列番号１２８）、及びＶｌ−ＣＤＲ３（配列番号１２９）を含む。本発明の態様は、Ａｂ−６の６つのＣＤＲを含むポリペプチドをコードする、単離ポリヌクレオチドを含み、ここで、ポリヌクレオチド配列は、Ｖｈ−ＣＤＲ１（配列番号３１）、Ｖｈ−ＣＤＲ２（配列番号３２）、Ｖｈ−ＣＤＲ３（配列番号３３）、Ｖｌ−ＣＤＲ１（配列番号１３３）、Ｖｌ−ＣＤＲ２（配列番号１３４）、及びＶｌ−ＣＤＲ３（配列番号１３５）を含む。本発明の態様は、Ａｂ−７の６つのＣＤＲを含むポリペプチドをコードする、単離ポリヌクレオチドを含み、ここで、ポリヌクレオチド配列は、Ｖｈ−ＣＤＲ１（配列番号３７）、Ｖｈ−ＣＤＲ２（配列番号３８）、Ｖｈ−ＣＤＲ３（配列番号３９）、Ｖｌ−ＣＤＲ１（配列番号１３９）、Ｖｌ−ＣＤＲ２（配列番号１４０）、及びＶｌ−ＣＤＲ３（配列番号１４１）を含む。本発明の態様は、Ａｂ−８の６つのＣＤＲを含むポリペプチドをコードする、単離ポリヌクレオチドを含み、ここで、ポリヌクレオチド配列は、Ｖｈ−ＣＤＲ１（配列番号４３）、Ｖｈ−ＣＤＲ２（配列番号４４）、Ｖｈ−ＣＤＲ３（配列番号４５）、Ｖｌ−ＣＤＲ１（配列番号１４５）、Ｖｌ−ＣＤＲ２（配列番号１４６）、及びＶｌ−ＣＤＲ３（配列番号１４７）を含む。本発明の態様は、Ａｂ−９の６つＣＤＲを含むポリペプチドをコードする、単離ポリヌクレオチドを含み、ここで、ポリヌクレオチド配列は、Ｖｈ−ＣＤＲ１（配列番号４９）、Ｖｈ−ＣＤＲ２（配列番号５０）、Ｖｈ−ＣＤＲ３（配列番号５１）、Ｖｌ−ＣＤＲ１（配列番号１５１）、Ｖｌ−ＣＤＲ２（配列番号１５２）、及びＶｌ−ＣＤＲ３（配列番号１５３）を含む。本発明の態様は、Ａｂ−１０の６つのＣＤＲを含むポリペプチドをコードする、単離ポリヌクレオチドを含み、ここで、ポリヌクレオチド配列は。Ｖｈ−ＣＤＲ１（配列番号５５）、Ｖｈ−ＣＤＲ２（配列番号５６）、Ｖｈ−ＣＤＲ３（配列番号５７）、Ｖｌ−ＣＤＲ１（配列番号１５７）、Ｖｌ−ＣＤＲ２（配列番号１５８）、及びＶｌ−ＣＤＲ３（配列番号１５９）を含む。本発明の態様は、Ａｂ−１１の６つのＣＤＲを含むポリペプチドをコードする、単離ポリヌクレオチドを含み、ここで、ポリヌクレオチド配列は、Ｖｈ−ＣＤＲ１（配列番号６１）、Ｖｈ−ＣＤＲ２（配列番号６２）、Ｖｈ−ＣＤＲ３（配列番号６３）、Ｖｌ−ＣＤＲ１（配列番号１６３）、Ｖｌ−ＣＤＲ２（配列番号１６４）、及びＶｌ−ＣＤＲ３（配列番号１６５）を含む。本発明の態様は、Ａｂ−１２の６つのＣＤＲを含むポリペプチドをコードする、単離ポリヌクレオチドを含み、ここで、ポリヌクレオチド配列は、Ｖｈ−ＣＤＲ１（配列番号６７）、Ｖｈ−ＣＤＲ２（配列番号６８）、Ｖｈ−ＣＤＲ３（配列番号６９）、Ｖｌ−ＣＤＲ１（配列番号１６９）、Ｖｌ−ＣＤＲ２（配列番号１７０）、及びＶｌ−ＣＤＲ３（配列番号１７１）を含む。本発明の態様は、Ａｂ−１３の６つのＣＤＲを含むポリペプチドをコードする、単離ポリヌクレオチドを含み、ここで、ポリヌクレオチド配列は、Ｖｈ−ＣＤＲ１（配列番号７３）、Ｖｈ−ＣＤＲ２（配列番号７４）、Ｖｈ−ＣＤＲ３（配列番号７５）、Ｖｌ−ＣＤＲ１（配列番号１７５）、Ｖｌ−ＣＤＲ２（配列番号１７６）、及びＶｌ−ＣＤＲ３（配列番号１７７）を含む。本発明の態様は、Ａｂ−１４の６つのＣＤＲを含むポリペプチドをコードする、単離ポリヌクレオチドを含み、ここで、ポリヌクレオチド配列は、Ｖｈ−ＣＤＲ１（配列番号７９）、Ｖｈ−ＣＤＲ２（配列番号８０）、Ｖｈ−ＣＤＲ３（配列番号８１）、Ｖｌ−ＣＤＲ１（配列番号１８１）、Ｖｌ−ＣＤＲ２（配列番号１８２）、及びＶｌ−ＣＤＲ３（配列番号１８３）を含む。本発明の態様は、Ａｂ−１５の６つのＣＤＲを含むポリペプチドをコードする、単離ポリヌクレオチドを含み、ここで、ポリヌクレオチド配列は、Ｖｈ−ＣＤＲ１（配列番号８５）、Ｖｈ−ＣＤＲ２（配列番号８６）、Ｖｈ−ＣＤＲ３（配列番号８７）、Ｖｌ−ＣＤＲ１（配列番号１８７）、Ｖｌ−ＣＤＲ２（配列番号１８８）、及びＶｌ−ＣＤＲ３（配列番号１８９）を含む。本発明の態様は、Ａｂ−１６の６つのＣＤＲを含むポリペプチドをコードする、単離ポリヌクレオチドを含み、ここで、ポリヌクレオチド配列は、Ｖｈ−ＣＤＲ１（配列番号９１）、Ｖｈ−ＣＤＲ２（配列番号９２）、Ｖｈ−ＣＤＲ３（配列番号９３）、Ｖｌ−ＣＤＲ１（配列番号１９３）、Ｖｌ−ＣＤＲ２（配列番号１９４）、及びＶｌ−ＣＤＲ３（配列番号１９５）を含む。本発明の態様は、Ａｂ−１７の６つのＣＤＲを含むポリペプチドをコードする、単離ポリヌクレオチドを含み、ここで、ポリヌクレオチド配列は、Ｖｈ−ＣＤＲ１（配列番号９７）、Ｖｈ−ＣＤＲ２（配列番号９８）、Ｖｈ−ＣＤＲ３（配列番号９９）、Ｖｌ−ＣＤＲ１（配列番号１９９）、Ｖｌ−ＣＤＲ２（配列番号２００）、及びＶｌ−ＣＤＲ３（配列番号２０１）を含む。
【０１４５】
本発明の態様は、Ａｂ−１のＶｌ及びＶｈドメインを含むポリペプチドをコードする、単離ポリヌクレオチドを含み、ここで、ポリヌクレオチド配列は、Ａｂ−１Ｖｌ（配列番号２３９）及びＡｂ−１Ｖｈ（配列番号２０５）を含む。本発明の態様は、Ａｂ−２のＶｌ及びＶｈドメインを含むポリペプチドをコードする、単離ポリヌクレオチドを含み、ここで、ポリヌクレオチド配列は、Ａｂ−２Ｖｌ（配列番号２４１）及びＡｂ−２Ｖｈ（配列番号２０７）を含む。本発明の態様は、Ａｂ−３のＶｌ及びＶｈドメインを含むポリペプチドをコードする、単離ポリヌクレオチドを含み、ここで、ポリヌクレオチド配列は、Ａｂ−３Ｖｌ（配列番号２４３）及びＡｂ−３Ｖｈ（配列番号２０９）を含む。本発明の態様は、Ａｂ−４のＶｌ及びＶｈドメインを含むポリペプチドをコードする、単離ポリヌクレオチドを含み、ここで、ポリヌクレオチド配列は、Ａｂ−４Ｖｌ（配列番号２４５）及びＡｂ−４Ｖｈ（配列番号２１１）を含む。本発明の態様は、Ａｂ−５のＶｌ及びＶｈドメインを含むポリペプチドをコードする、単離ポリヌクレオチドを含み、ここで、ポリヌクレオチド配列は、Ａｂ−５Ｖｌ（配列番号２４７）及びＡｂ−５Ｖｈ（配列番号２１３）を含む。本発明の態様は、Ａｂ−６のＶｌ及びＶｈドメインを含むポリペプチドをコードする、単離ポリヌクレオチドを含み、ここで、ポリヌクレオチド配列は、Ａｂ−６Ｖｌ（配列番号２４９）及びＡｂ−６Ｖｈ（配列番号２１５）を含む。本発明の態様は、Ａｂ−７のＶｌ及びＶｈドメインを含むポリペプチドをコードする、単離ポリヌクレオチドを含み、ここで、ポリヌクレオチド配列は、Ａｂ−７Ｖｌ（配列番号２５１）及びＡｂ−７Ｖｈ（配列番号２１７）を含む。本発明の態様は、Ａｂ−８のＶｌ及びＶｈドメインを含むポリペプチドをコードする、単離ポリヌクレオチドを含み、ここで、ポリヌクレオチド配列は、Ａｂ−８Ｖｌ（配列番号２５３）及びＡｂ−８Ｖｈ（配列番号２１９）を含む。本発明の態様は、Ａｂ−９のＶｌ及びＶｈドメインを含むポリペプチドをコードする、単離ポリヌクレオチドを含み、ここで、ポリヌクレオチド配列は、Ａｂ−９Ｖｌ（配列番号２５５）及びＡｂ−９Ｖｈ（配列番号２２１）を含む。本発明の態様は、Ａｂ−１０のＶｌ及びＶｈドメインを含むポリペプチドをコードする、単離ポリヌクレオチドを含み、ここで、ポリヌクレオチド配列は、Ａｂ−１０Ｖｌ（配列番号２５７）及びＡｂ−１０Ｖｈ（配列番号２２３）ドメインを含む。本発明の態様は、Ａｂ−１１のＶｌ及びＶｈドメインを含むポリペプチドをコードする、単離ポリヌクレオチドを含み、ここで、ポリヌクレオチド配列は、Ａｂ−１１Ｖｌ（配列番号２５９）及びＡｂ−１１Ｖｈ（配列番号２２５）を含む。本発明の態様は、Ａｂ−１２のＶｌ及びＶｈドメインを含むポリペプチドをコードする、単離ポリヌクレオチドを含み、ここで、ポリヌクレオチド配列は、Ａｂ−１２Ｖｌ（配列番号２６１）及びＡｂ−１２Ｖｈ（配列番号２２７）を含む。本発明の態様は、Ａｂ−１３のＶｌ及びＶｈドメインを含むポリペプチドをコードする、単離ポリヌクレオチドを含み、ここで、ポリヌクレオチド配列は、Ａｂ−１３Ｖｌ（配列番号２６３）及びＡｂ−１３Ｖｈ（配列番号２２９）を含む。本発明の態様は、Ａｂ−１４のＶｌ及びＶｈドメインを含むポリペプチドをコードする、単離ポリヌクレオチドを含み、ここで、ポリヌクレオチド配列は、Ａｂ−１４Ｖｌ（配列番号２６５）及びＡｂ−１４Ｖｈ（配列番号２３１）を含む。本発明の態様は、Ａｂ−１５のＶｌ及びＶｈドメインを含むポリペプチドをコードする、単離ポリヌクレオチドを含み、ここで、ポリヌクレオチド配列は、Ａｂ−１５Ｖｌ（配列番号２６７）及びＡｂ−１５Ｖｈ（配列番号２３３）を含む。本発明の態様は、Ａｂ−１６のＶｌ及びＶｈドメインを含むポリペプチドをコードする、単離ポリヌクレオチドを含み、ここで、ポリヌクレオチド配列は、Ａｂ−１６Ｖｌ（配列番号２６９）及びＡｂ−１６Ｖｈ（配列番号２３５）を含む。本発明の態様は、Ａｂ−１７Ｖｌ及びＶｈドメインを含むポリペプチドをコードする、単離ポリヌクレオチドを含み、ここで、ポリヌクレオチド配列は、Ａｂ−１７Ｖｌ（配列番号２７１）及びＡｂ−１７Ｖｈ（配列番号２３７）を含む。
【０１４６】
本発明の態様は、抗体Ａｂ−１の重鎖及び軽鎖を含むポリペプチドをコードする、単離ポリヌクレオチドを含み、ここで、ポリヌクレオチド配列は、軽鎖（配列番号２７９）及び重鎖（配列番号２７３）を含む。本発明の態様は、抗体Ａｂ−２の重鎖及び軽鎖を含むポリペプチドをコードする、単離ポリヌクレオチドを含み、ここで、ポリヌクレオチド配列は、軽鎖（配列番号２８１）及び重鎖（配列番号２７５）を含む。本発明の態様は、抗体Ａｂ−３の重鎖及び軽鎖を含むポリペプチドをコードする、単離ポリヌクレオチドを含み、ここで、ポリヌクレオチド配列は、軽鎖（配列番号２８３）及び重鎖（配列番号２７７）を含む。
【０１４７】
核酸の単離のためのプローブもしくはプライマーとして、またはデータベース検索のクエリ配列として使用される、本明細書に記載されるアミノ酸配列に対応するヌクレオチド配列は、アミノ酸配列からの「逆翻訳」によって、またはコードＤＮＡ配列が特定されているポリペプチドとのアミノ酸同一性の領域の特定によって、得ることができる。周知のポリメラーゼ連鎖反応（ＰＣＲ）手順を用いて、ＢＣＭＡ抗原結合タンパク質をコードするＤＮＡ配列または所望される組み合わせのＢＣＭＡ抗原結合タンパク質ポリペプチドフラグメントを単離及び増幅することができる。ＤＮＡフラグメントの組み合わせの所望される末端を定義するオリゴヌクレオチドが、５’及び３’プライマーとして用いられる。オリゴヌクレオチドは、さらに、発現ベクターへの増幅したＤＮＡフラグメントの組み合わせの挿入を促進するために、制限エンドヌクレアーゼの認識部位を含有し得る。ＰＣＲ技術は、Ｓａｉｋｉ  ｅｔ  ａｌ．，Ｓｃｉｅｎｃｅ  ２３９：４８７（１９８８）、Ｒｅｃｏｍｂｉｎａｎｔ  ＤＮＡ  Ｍｅｔｈｏｄｏｌｏｇｙ，Ｗｕ  ｅｔ  ａｌ．，ｅｄｓ．，Ａｃａｄｅｍｉｃ  Ｐｒｅｓｓ，Ｉｎｃ．，Ｓａｎ  Ｄｉｅｇｏ（１９８９），ｐｐ．１８９−１９６、及びＰＣＲ  Ｐｒｏｔｏｃｏｌｓ：Ａ  Ｇｕｉｄｅ  ｔｏ  Ｍｅｔｈｏｄｓ  ａｎｄ  Ａｐｐｌｉｃａｔｉｏｎｓ，Ｉｎｎｉｓ  ｅｔ．ａｌ．，ｅｄｓ．，Ａｃａｄｅｍｉｃ  Ｐｒｅｓｓ，Ｉｎｃ．（１９９０）に記載される。
【０１４８】
本発明の核酸分子には、一本鎖及び二本鎖の両方の形態のＤＮＡ及びＲＮＡ、ならびに対応する相補的配列が含まれる。ＤＮＡには、例えば、ｃＤＮＡ、ゲノムＤＮＡ、化学合成したＤＮＡ、ＰＣＲによって増幅されたＤＮＡ、及びこれらの組み合わせが含まれる。本発明の核酸分子には、全長遺伝子またはｃＤＮＡ分子、ならびにそれらのフラグメントの組み合わせが含まれる。本発明の核酸は、優先的にはヒト源に由来するが、本発明は、非ヒト種に由来するものも同様に含む。
【０１４９】
「単離核酸」は、天然に存在する源から単離された核酸の場合には、核酸が単離された生物のゲノムに存在する隣接する遺伝子配列から分離されている、核酸である。例えば、鋳型から酵素的または化学的に合成された核酸、例えばＰＣＲ産物、ｃＤＮＡ分子、またはオリゴヌクレオチドの場合には、そのようなプロセスから得られた核酸は、単離核酸であることが理解される。単離核酸分子は、別個のフラグメントの形態にあるか、またはより大きな核酸構築物の構成要素としての、核酸分子を指す。１つの好ましい実施形態において、核酸は、内因性混入物質を実質的に含まない。核酸分子は、好ましくは、標準的な生化学的方法（Ｓａｍｂｒｏｏｋ  ｅｔ  ａｌ．，Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｃｌｏｎｉｎｇ：Ａ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ  Ｍａｎｕａｌ，２ｎｄ  ｅｄ．，Ｃｏｌｄ  Ｓｐｒｉｎｇ  Ｈａｒｂｏｒ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ，Ｃｏｌｄ  Ｓｐｒｉｎｇ  Ｈａｒｂｏｒ，ＮＹ（１９８９）に概説されるもの等）によって、実質的に純粋な形態で、かつその構成要素のヌクレオチド配列の特定、操作、及び回収を可能にする量または濃度で、少なくとも１回単離されたＤＮＡまたはＲＮＡから導出されたものである。そのような配列は、好ましくは、典型的には真核生物遺伝子に存在する内部非翻訳配列またはイントロンによって中断されないオープンリーディングフレームの形態で提供及び／または構築される。非翻訳ＤＮＡ配列が、オープンリーディングフレームから５’または３’に存在し得、ここで、この配列は、コード領域の操作または発現を妨害しない。
【０１５０】
本発明はまた、中等度にストリンジェントな条件下で、及びより好ましくは高度にストリンジェントな条件下で、本明細書に記載されるＢＣＭＡ抗原結合タンパク質をコードする核酸にハイブリダイズする核酸を含む。ハイブリダイゼーション条件の選択に影響を及ぼす基本的なパラメーター及び好適な条件を考案するための案内は、Ｓａｍｂｒｏｏｋ，，Ｆｒｉｔｓｃｈ，ａｎｄ  Ｍａｎｉａｔｉｓ（１９８９，Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｃｌｏｎｉｎｇ：Ａ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ  Ｍａｎｕａｌ，Ｃｏｌｄ  Ｓｐｒｉｎｇ  Ｈａｒｂｏｒ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ  Ｐｒｅｓｓ，Ｃｏｌｄ  Ｓｐｒｉｎｇ  Ｈａｒｂｏｒ，Ｎ．Ｙ．，ｃｈａｐｔｅｒｓ  ９  ａｎｄ  １１、及びＣｕｒｒｅｎｔ  Ｐｒｏｔｏｃｏｌｓ  ｉｎ  Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｂｉｏｌｏｇｙ，１９９５，Ａｕｓｕｂｅｌ  ｅｔ  ａｌ．，ｅｄｓ．，Ｊｏｈｎ  Ｗｉｌｅｙ＆Ｓｏｎｓ，Ｉｎｃ．，ｓｅｃｔｉｏｎｓ  ２．１０  ａｎｄ  ６．３−６．４）に記載され、例えば、ＤＮＡの長さ及び／または塩基組成に基づいて、当業者によって容易に決定することができる。中等度にストリンジェントな条件を達成する１つの手段は、５×ＳＳＣ、０．５％ＳＤＳ、１．０ｍＭ  ＥＤＴＡ（ｐＨ８．０）を含有する予備洗浄溶液、約５０％ホルムアミド、６×ＳＳＣのハイブリダイゼーション緩衝液、及び約５５℃のハイブリダイゼーション温度（または他の類似のハイブリダイゼーション溶液、例えば、約５０％ホルムアミドを含有するもの、約４２℃のハイブリダイゼーション温度）、ならびに約６０℃、０．５×ＳＳＣ、０．１％ＳＤＳでの洗浄条件の使用を伴う。一般に、高度にストリンジェントな条件は、上述のハイブリダイゼーション条件として定義されるが、おおよそ６８℃、０．２×ＳＳＣ、０．１％ＳＤＳでの洗浄を伴う。ＳＳＰＥ（１×ＳＳＰＥは、０．１５Ｍ  ＮａＣｌ、１０ｍＭ／ＮａＨ．ｓｕｂ．２  ＰＯ．ｓｕｂ．４、及び１．２５ｍＭ  ＥＤＴＡ、ｐＨ７．４）が、ハイブリダイゼーション及び洗浄緩衝液中のＳＳＣ（１×ＳＳＣは、０．１５Ｍ  ＮａＣｌ及び１５ｍＭクエン酸ナトリウム）の代用とされてもよく、洗浄は、ハイブリダイゼーションが完了した後に１５分間行われる。洗浄温度及び洗浄塩濃度は、当業者に既知であり、以下にさらに記載されるように、ハイブリダイゼーション反応及び二重鎖の安定性を左右する基本原理を適用することによって、所望される程度のストリンジェンシーを達成するように必要に応じて調整することができることを理解されたい（例えば、Ｓａｍｂｒｏｏｋ  ｅｔ  ａｌ．，１９８９を参照されたい）。ある核酸を、配列が未知の標的核酸にハイブリダイズする場合、ハイブリッドの長さは、ハイブリダイズする核酸のものとなることが想定される。配列が既知の核酸をハイブリダイズする場合、ハイブリッドの長さは、核酸の配列をアライメントし、最適な配列相補性の領域（複数可）を特定することによって決定され得る。長さが５０塩基対未満となることが予想されるハイブリッドのハイブリダイゼーション温度は、ハイブリッドの溶融温度（Ｔｍ）よりも５〜１０℃低く、ここで、Ｔｍは、以下の等式に従って決定される。長さが１８塩基対未満のハイブリッドについては、Ｔｍ（℃）＝２（Ａ＋Ｔ塩基の数）＋４（Ｇ＋Ｃ塩基の数）。長さが１８塩基対を上回るハイブリッドについては、Ｔｍ（℃）＝８１．５＋１６．６（ｌｏｇ１０［Ｎａ＋］）＋０．４１（％Ｇ＋Ｃ）−（６００／Ｎ）であり、式中、Ｎは、ハイブリッド中の塩基の数であり、［Ｎａ＋］は、ハイブリダイゼーション緩衝液中のナトリウムイオンの濃度である（１×ＳＳＣの［Ｎａ＋］＝０．１６５Ｍ）。好ましくは、それぞれのそのようなハイブリダイズ核酸は、少なくとも１５ヌクレオチド（または好ましくは少なくとも１８ヌクレオチド、もしくは少なくとも２０ヌクレオチド、もしくは少なくとも２５ヌクレオチド、もしくは少なくとも３０ヌクレオチド、もしくは少なくとも４０ヌクレオチド、または最も好ましくは少なくとも５０ヌクレオチド）、またはそれがハイブリダイズする本発明の核酸の長さの少なくとも２５％（より好ましくは少なくとも５０％、もしくは少なくとも６０％、もしくは少なくとも７０％、及び最も好ましくは少なくとも８０％）の長さを有し、それがハイブリダイズする本発明の核酸に少なくとも６０％（より好ましくは少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８１％、少なくとも８２％、少なくとも８３％、少なくとも８４％、少なくとも８５％、少なくとも８６％、少なくとも８７％、少なくとも８８％、少なくとも８９％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、または少なくとも９９％、及び最も好ましくは少なくとも９９．５％）の配列同一性を有し、ここで、配列同一性は、上により詳細に説明されるように、重複及び同一性を最大化し、配列ギャップを最小化するようにアライメントしたとき、ハイブリダイズする核酸の配列を比較することによって判定される。
【０１５１】
本発明による変異体は、通常、カセットもしくはＰＣＲ変異誘発、または当該技術分野で周知の他の技法を使用して、抗原結合タンパク質をコードするＤＮＡ内のヌクレオチドの部位特異的変異誘発を行って、変異体をコードするＤＮＡを産生させた後、本明細書に概説されるように細胞培養物中で組み換えＤＮＡを発現させることによって調製される。しかしながら、最大で約１００〜１５０個の残基を有する変異体ＣＤＲを含む抗原結合タンパク質フラグメントは、確立された技法を使用してインビトロ合成によって調製されてもよい。変異体は、典型的に、天然に存在する類似体と同じ定性的生物学的活性、例えば、ＢＣＭＡへの結合及びシグナル伝達の阻害を示すが、以下により詳細に概説されるように、修正された特徴を有する変異体もまた選択され得る。
【０１５２】
当業者には理解されるように、遺伝コードの縮重に起因して、極めて多数の核酸が作製され得、それらはすべて、本発明のＣＤＲ（ならびに重鎖及び軽鎖または抗原結合タンパク質の他の構成要素）をコードする。したがって、特定のアミノ酸配列を特定した後、当業者であれば、コードされるタンパク質のアミノ酸配列を変化させない様式で１つ以上のコドンの配列を単純に修飾することによって、任意の数の異なる核酸を作製することができる。
【０１５３】
本発明はまた、少なくとも１つの上述のポリヌクレオチドを含むプラスミド、発現ベクター、転写または発現カセットの形態で、発現系及び構築物を提供する。加えて、本発明は、そのような発現系または構築物を含む宿主細胞を提供する。
【０１５４】
典型的に、宿主細胞のうちのいずれかにおいて使用される発現ベクターは、プラスミド維持のため、ならびに外因性ヌクレオチド配列のクローニング及び発現のための配列を含有するであろう。ある特定の実施形態では集合的に「フランキング配列」と称されるそのような配列は、典型的に、次のヌクレオチド配列のうちの１つ以上を含むであろう：プロモーター、１つ以上のエンハンサー配列、複製起点、転写終結配列、ドナー及びアクセプタースプライシング部位を含有する完全イントロン配列、ポリペプチド分泌のためのリーダー配列をコードする配列、リボソーム結合部位、ポリアデニル化配列、発現されるポリペプチドをコードする核酸を挿入するためのポリリンカー領域、ならびに選択可能なマーカー要素。これらの配列のそれぞれは、以下に考察される。
【０１５５】
任意で、ベクターは、「タグ」コード配列、すなわち、ＢＣＭＡ抗原結合タンパク質コード配列の５’または３’末端に位置するオリゴヌクレオチド分子を含有し得、オリゴヌクレオチド配列は、ポリＨｉｓ（ヘキサＨｉｓなど）、またはＦＬＡＧ、ＨＡ（赤血球凝集素インフルエンザウイルス）、もしくはｍｙｃ（これらには市販入手可能な抗体が存在する）といった別の「タグ」をコードする。このタグは、典型的に、ポリペプチドの発現時にそのポリペプチドに融合され、宿主細胞からのＢＣＭＡ抗原結合タンパク質の親和性精製または検出のための手段として機能し得る。親和性精製は、例えば、そのタグに対する抗体を親和性マトリックスとして使用してカラムクロマトグラフィーによって達成することができる。任意で、このタグは、続いて、切断にある特定のペプチダーゼを使用する等、種々の手段によって、精製されたＢＣＭＡ抗原結合タンパク質から除去され得る。
【０１５６】
フランキング配列は、同種（すなわち、宿主細胞と同じ種及び／もしくは株に由来する）、異種（すなわち、宿主細胞の種もしくは株以外の種に由来する）、ハイブリッド（すなわち、１つを上回る源に由来するフランキング配列の組み合わせ）、合成、または天然であり得る。このように、フランキング配列の源は、任意の原核生物もしくは真核生物、任意の脊椎動物もしくは無脊椎動物、または任意の植物であり得るが、但し、フランキング配列が、宿主細胞機構において機能性であり、それによって活性化され得ることを条件とする。
【０１５７】
本発明のベクターに有用なフランキング配列は、当該技術分野で周知のいくつかの方法のうちのいずれかによって得ることができる。典型的には、本明細書において有用なフランキング配列は、マッピング及び／または制限エンドヌクレアーゼ消化によって既に特定されているものであり、したがって、適切な制限エンドヌクレアーゼを使用して適切な組織源から単離することができる。いくつかの場合において、フランキング配列の全ヌクレオチド配列が既知であり得る。本明細書では、フランキング配列は、核酸の合成またはクローニングに関して本明細書に記載される方法を使用して、合成することができる。
【０１５８】
すべてまたは一部分にかかわらずフランキング配列がわかっている場合、それは、ポリメラーゼ連鎖反応（ＰＣＲ）を使用して、ならびに／または同じかもしくは別の種に由来するオリゴヌクレオチド及び／もしくはフランキング配列フラグメントといった好適なプローブを用いてゲノムライブラリーをスクリーニングすることによって、得ることができる。フランキング配列がわかっていない場合、フランキング配列を含有するＤＮＡのフラグメントは、例えば、コード配列または別の遺伝子（複数可）さえも含有し得るＤＮＡのより大きな断片から単離することができる。単離は、制限エンドヌクレアーゼ消化によって適切なＤＮＡフラグメントを産生した後、アガロースゲル精製、Ｑｉａｇｅｎ（登録商標）カラムクロマトグラフィー（Ｃｈａｔｓｗｏｒｔｈ，ＣＡ）、または当業者に既知の他の方法を使用して単離することによって、達成され得る。この目的を達成するのに好適な酵素の選択は、当業者には容易に明らかであろう。
【０１５９】
複製起点は、典型的に、市販購入される原核生物発現ベクターの一部であり、この起点は、宿主細胞におけるベクターの増幅に役立つ。選択したベクターが複製起点部位を含有しない場合は、既知の配列に基づいて化学合成し、ベクターにライゲーションしてもよい。例えば、プラスミドｐＢＲ３２２（Ｎｅｗ  Ｅｎｇｌａｎｄ  Ｂｉｏｌａｂｓ，Ｂｅｖｅｒｌｙ，ＭＡ）由来の複製起点は、ほとんどのグラム陰性菌に好適であり、種々のウイルス起源（例えば、ＳＶ４０、ポリオーマ、アデノウイルス、水疱性口内炎ウイルス（ｖｅｓｉｃｕｌａｒ  ｓｔｏｍａｔｉｔｕｓ  ｖｉｒｕｓ）（ＶＳＶ）、またはＨＰＶもしくはＢＰＶ等のパピローマウイルス）が、哺乳動物細胞におけるベクターのクローニングに有用である。一般に、複製起点要素は、哺乳動物発現ベクターには必要ない（例えば、ＳＶ４０起点は、ウイルス初期プロモーターも含有するという理由でのみ使用されることが多い）。
【０１６０】
転写終結配列は、典型的に、ポリペプチドコード領域の末端に対して３’に位置し、転写を終結させるように機能する。通常、原核生物細胞における転写終結配列は、Ｇ−Ｃリッチフラグメントの後にポリＴ配列が続く。この配列は、ライブラリーから容易にクローニングされるか、またはさらにはベクターの一部として市販購入されるが、本明細書に記載されるもの等、核酸合成のための方法を使用して容易に合成することもできる。
【０１６１】
選択可能なマーカー遺伝子は、選択培養培地において成長する宿主細胞の生存及び成長に必要なタンパク質をコードする。典型的な選択マーカー遺伝子は、（ａ）抗生物質もしくは他の毒素、例えば、原核生物宿主細胞についてはアンピシリン、テトラサイクリン、もしくはカナマイシンに対する耐性を付与するタンパク質、（ｂ）細胞の栄養要求不足を補完するタンパク質、または（ｃ）複合培地もしくは限定培地からは利用可能でない重要な栄養素を供給するタンパク質をコードする。具体的な選択可能なマーカーは、カナマイシン耐性遺伝子、アンピシリン耐性遺伝子、及びテトラサイクリン耐性遺伝子である。有利なことに、ネオマイシン耐性遺伝子もまた、原核生物及び真核生物両方の宿主細胞における選択に使用することができる。
【０１６２】
他の選択可能な遺伝子を使用して、発現される遺伝子を増幅させてもよい。増幅は、成長または細胞生存に重要なタンパク質の産生に必要とされる遺伝子が組み換え細胞の後継代の染色体内でタンデムに反復されるプロセスである。哺乳動物細胞に好適な選択可能なマーカーの例には、ジヒドロ葉酸還元酵素（ＤＨＦＲ）及びプロモーターを持たないチミジン（ｔｈｙｒｎｉｄｉｎｅ）キナーゼ遺伝子が含まれる。哺乳動物細胞形質転換体は、選択圧下に置かれ、ここで、ベクターに存在する選択可能な遺伝子のために、形質転換体のみが生存するように独自に適合される。選択圧は、形質転換した細胞を、培地中の選択剤の濃度が継続的に増加する条件下で培養することによって課され、それによって、選択可能な遺伝子と、別の遺伝子、例えばＢＣＭＡポリペプチドに結合する抗原結合タンパク質抗体をコードするＤＮＡの両方の増幅がもたらされる。結果として、増加した量のポリペプチド、例えば、ＢＣＭＡ抗原結合タンパク質が、増幅したＤＮＡから合成される。
【０１６３】
リボソーム結合部位は、通常、ｒｎＲＮＡの翻訳開始に必要であり、シャイン・ダルガーノ配列（原核生物）またはコザック配列（真核生物）によって特徴付けられる。この要素は、典型的に、プロモーターに対して３’に位置し、発現されるポリペプチドのコード配列に対して５’に位置する。
【０１６４】
グリコシル化が真核生物の宿主細胞発現系において所望される場合等、いくつかの場合において、種々のプレまたはプロ配列を操作して、グリコシル化または収率を改善することができる。例えば、特定のシグナルペプチドのペプチダーゼ切断部位を改変するか、または同様にグリコシル化に影響を及ぼし得るプロ配列を付加することができる。最終的なタンパク質産物は、発現に付随する１つ以上の追加のアミノ酸を−１位（成熟タンパク質の最初のアミノ酸に対して）に有し得、これは、完全に除去されていない場合がある。例えば、最終的なタンパク質産物は、アミノ末端に付加される、ペプチダーゼ切断部位に見出される１つまたは２つのアミノ酸残基を有し得る。あるいは、いくつかの酵素切断部位の使用は、酵素が、成熟ポリペプチド内のそのような領域を切断する場合、所望されるポリペプチドのわずかに切断された形態をもたらし得る。
【０１６５】
本発明の発現及びクローニングベクターは、典型的に、宿主生物によって認識され、ＢＣＭＡ抗原結合タンパク質をコードする分子に動作可能に連結される、プロモーターを含有する。プロモーターは、構造遺伝子の転写を制御する構造遺伝子（一般に約１００〜１０００ｂｐ内）の開始コドンに対して上流（すなわち、５’）に位置する非転写配列である。プロモーターは、従来的には、誘導性プロモーター及び構成性プロモーターという２つのクラスのうちの１つに分類される。誘導性プロモーターは、栄養素の存在もしくは不在または温度の変化といった培養条件における何らかの変化に応答して、それらの制御下でＤＮＡから増加したレベルの転写を開始する。構成性プロモーターは、一方で、それらが動作可能に連結される遺伝子を一様に、すなわち、遺伝子発現に対する制御をほとんど有さないか、または有さずに、転写する。種々の可能性のある宿主細胞によって認識される多数のプロモーターが、周知である。好適なプロモーターは、制限酵素消化によって源ＤＮＡからプロモーターを除去し、所望されるプロモーター配列をベクターに挿入することによって、本発明のＢＣＭＡ抗原結合タンパク質を含む重鎖または軽鎖をコードするＤＮＡに動作可能に連結される。
【０１６６】
酵母宿主での使用に好適なプロモーターもまた、当該技術分野で周知である。酵母エンハンサーが、酵母プロモーターとともに有利に使用される。哺乳動物宿主細胞での使用に好適なプロモーターが周知であり、これらには、ポリオーマウイルス、鶏痘ウイルス、アデノウイルス（アデノウイルス２等）、ウシパピローマウイルス、トリ肉腫ウイルス、サイトメガロウイルス、レトロウイルス、Ｂ型肝炎ウイルス、及び最も好ましくはシミアンウイルス４０（ＳＶ４０）といったウイルスのゲノムから得られるものが含まれるが、これらに限定されない。他の好適な哺乳動物プロモーターには、異種哺乳動物プロモーター、例えば、熱ショックプロモーター及びアクチンプロモーターが含まれる。
【０１６７】
目的とされ得るさらなるプロモーターには、ＳＶ４０初期プロモーター（Ｂｅｎｏｉｓｔ  ａｎｄ  Ｃｈａｍｂｏｎ，１９８１，Ｎａｔｕｒｅ  ２９０：３０４−３１０）、ＣＭＶプロモーター（Ｔｈｏｒｎｓｅｎ  ｅｔ  ａｌ．，１９８４，Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｕ．Ｓ．Ａ．８１：６５９−６６３）、ラウス肉腫ウイルスの３’長末端反復に含有されるプロモーター（Ｙａｍａｍｏｔｏ  ｅｔ  ａｌ．，１９８０，Ｃｅｌｌ  ２２：７８７−７９７）、ヘルペスチミジンキナーゼプロモーター（Ｗａｇｎｅｒ  ｅｔ  ａｌ．，１９８１，Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．Ｕ．Ｓ．Ａ．７８：１４４４−１４４５）、メタロチオニン遺伝子に由来するプロモーター及び制御性配列Ｐｒｉｎｓｔｅｒ  ｅｔ  ａｌ．，１９８２，Ｎａｔｕｒｅ  ２９６：３９−４２）、ならびにβ−ラクタマーゼプロモーター等の原核生物プロモーター（Ｖｉｌｌａ−Ｋａｍａｒｏｆｆ  ｅｔ  ａｌ．，１９７８，Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．Ｕ．Ｓ．Ａ．７５：３７２７−３７３１）、またはｔａｃプロモーター（ＤｅＢｏｅｒ  ｅｔ  ａｌ．，１９８３，Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．Ｕ．Ｓ．Ａ．８０：２１−２５）が挙げられるが、これらに限定されない。組織特異性を示し、トランスジェニック動物に用いられている、以下の動物転写制御領域もまた対象とされる：膵腺房細胞において活性なエラスターゼＩ遺伝子制御領域（Ｓｗｉｆｔ  ｅｔ  ａｌ．，１９８４，Ｃｅｌｌ３８：６３９−６４６、Ｏｒｎｉｔｚ  ｅｔ  ａｌ．，１９８６，Ｃｏｌｄ  Ｓｐｒｉｎｇ  Ｈａｒｂｏｒ  Ｓｙｍｐ．Ｑｕａｎｔ．Ｂｉｏｌ．５０：３９９−４０９、ＭａｃＤｏｎａｌｄ，１９８７，Ｈｅｐａｔｏｌｏｇｙ  ７：４２５−５１５）、膵β細胞において活性なインスリン遺伝子制御領域（Ｈａｎａｈａｎ，１９８５，Ｎａｔｕｒｅ  ３１５：１１５−１２２）、リンパ系細胞において活性な免疫グロブリン遺伝子制御領域（Ｇｒｏｓｓｃｈｅｄｌ  ｅｔ  ａｌ．，１９８４，Ｃｅｌｌ  ３８：６４７−６５８、Ａｄａｍｅｓ  ｅｔ  ａｌ．，１９８５，Ｎａｔｕｒｅ  ３１８：５３３−５３８、Ａｌｅｘａｎｄｅｒ  ｅｔ  ａｌ．，１９８７，Ｍｏｌ．Ｃｅｌｌ．Ｂｉｏｌ．７：１４３６−１４４４）、精巣、乳房、リンパ系、及び肥満細胞において活性なマウス乳腺腫瘍ウイルス制御領域（Ｌｅｄｅｒ  ｅｔ  ａｌ．，１９８６，Ｃｅｌｌ  ４５：４８５−４９５）、肝臓において活性なアルブミン遺伝子制御領域（Ｐｉｎｋｅｒｔ  ｅｔ  ａｌ．，１９８７，Ｇｅｎｅｓ  ａｎｄ  Ｄｅｖｅｌ．１：２６８−２７６）、肝臓において活性なα−フェトプロテイン遺伝子制御領域（Ｋｒｕｍｌａｕｆ  ｅｔ  ａｌ．，１９８５，Ｍｏｌ．Ｃｅｌｌ．Ｂｉｏｌ．５：１６３９−１６４８、Ｈａｍｍｅｒ  ｅｔ  ａｌ．，１９８７，Ｓｃｉｅｎｃｅ  ２５３：５３−５８）、肝臓において活性なα１−アンチトリプシン遺伝子制御領域（Ｋｅｌｓｅｙ  ｅｔ  ａｌ．，１９８７，Ｇｅｎｅｓ  ａｎｄ  Ｄｅｖｅｌ．１：１６１−１７１）、骨髄腫細胞において活性なβ−グロビン遺伝子制御領域（Ｍｏｇｒａｍ  ｅｔ  ａｌ．，１９８５，Ｎａｔｕｒｅ  ３１５：３３８−３４０、Ｋｏｌｌｉａｓ  ｅｔ  ａｌ．，１９８６，Ｃｅｌｌ  ４６：８９−９���）、脳内の乏突起膠細胞において活性なミエリン塩基性タンパク質遺伝子制御領域（Ｒｅａｄｈｅａｄ  ｅｔ  ａｌ．，１９８７，Ｃｅｌｌ  ４８：７０３−７１２）、骨格筋において活性なミオシン軽鎖−２遺伝子制御領域（Ｓａｎｉ，１９８５，Ｎａｔｕｒｅ  ３１４：２８３−２８６）、ならびに視床下部において活性なゴナドトロピン放出ホルモン遺伝子制御領域（Ｍａｓｏｎ  ｅｔ  ａｌ．，１９８６，Ｓｃｉｅｎｃｅ  ２３４：１３７２−１３７８）。
【０１６８】
より高度な真核生物による本発明のＢＣＭＡ抗原結合タンパク質を構成する軽鎖または重鎖をコードするＤＮＡの転写を増加させるために、エンハンサー配列がベクターに挿入され得る。エンハンサーは、通常、長さが約１０〜３００ｂｐであり、転写を増加させるようにプロモーターに作用する、ＤＮＡのシス作用要素である。エンハンサーは、比較的配向及び位置に依存せず、転写単位に対して５’及び３’の両方の位置に見出されている。哺乳動物遺伝子から得ることができるいくつかのエンハンサー配列が、既知である（例えば、グロビン、エラスターゼ、アルブミン、α−フェトプロテイン、及びインスリン）。しかしながら、典型的には、ウイルス由来のエンハンサーが使用される。当該技術分野で既知であるＳＶ４０エンハンサー、サイトメガロウイスル初期プロモーターエンハンサー、ポリオーマエンハンサー、及びアデノウイルスエンハンサーは、真核生物プロモーターの活性化のための例示的な増強要素である。エンハンサーは、コード配列に対して５’または３’のいずれかでベクターに配置され得るが、典型的には、プロモーターから５’の部位に位置する。適切な天然または異種シグナル配列（リーダー配列またはシグナルペプチド）をコードする配列が、抗体の細胞外分泌を促進するために、発現ベクターに組み込まれ得る。シグナルペプチドまたはリーダーの選択は、抗体が産生される宿主細胞の種類に依存し、異種シグナル配列が、天然のシグナル配列に置き換わることができる。哺乳動物宿主細胞において機能性であるシグナルペプチドの例には、次のものが含まれる：米国特許第４，９６５，１９５号に記載されるインターロイキン−７（ＩＬ−７）のシグナル配列；Ｃｏｓｍａｎ  ｅｔ  ａｌ．，１９８４，Ｎａｔｕｒｅ  ３１２：７６８に記載されるインターロイキン−２受容体のシグナル配列；欧州特許第０３６７  ５６６号に記載されるインターロイキン−４受容体シグナル配列；米国特許第号４，９６８，６０７号に記載されるＩ型インターロイキン−１受容体シグナルペプチド；欧州特許第０  ４６０  ８４６号に記載されるＩＩ型インターロイキン−１受容体シグナルペプチド。
【０１６９】
本発明の発現ベクターは、市販入手可能なベクター等の開始ベクターから構築され得る。そのようなベクターは、所望されるフランキング配列のすべてを含有し得るか、または含有しない場合もある。本明細書に記載されるフランキング配列のうちの１つ以上が、ベクター内にまだ存在しない場合、それらを個別に得てベクターにライゲーションさせてもよい。フランキング配列のそれぞれを得るために使用される方法は、当業者に周知である。
【０１７０】
ベクターが構築され、ＢＣＭＡ抗原に結合する配列を含む軽鎖、重鎖、または軽鎖及び重鎖をコードする核酸分子が、ベクターの適切な部位に挿入された後、完成したベクターを、増幅及び／またはポリペプチド発現のために好適な宿主細胞に挿入することができる。選択した宿主細胞へのＢＣＭＡ抗原結合タンパク質の発現ベクターの形質転換は、トランスフェクション、感染、リン酸カルシウム共沈降、エレクトロポレーション、マイクロインジェクション、リポフェクション、ＤＥＡＥ−デキストラン媒介性トランスフェクション、または他の既知の技法を含む、周知の方法によって達成され得る。選択される方法は、部分的に、使用される宿主細胞の種類に応じることになる。これらの方法及び他の好適な方法は、当業者に周知であり、例えば、Ｓａｍｂｒｏｏｋ  ｅｔ  ａｌ．，２００１（上記）に記載される。
【０１７１】
宿主細胞は、適切な条件下で培養されると、ＢＣＭＡ抗原結合タンパク質を合成し、これは、続いて培養培地から（宿主細胞がそれを培地中に分泌する場合）、またはそれを産生する宿主細胞から直接に（分泌されない場合）、回収することができる。適切な宿主細胞の選択は、所望される発現レベル、活性に望ましいかまたは必要であるポリペプチド修飾（グリコシル化またはリン酸化等）、ならびに生物学的に活性な分子への折り畳みの容易さといった、種々の要因に依存することになる。宿主細胞は、真核生物または原核生物のものであり得る。
【０１７２】
発現のための宿主として利用可能な哺乳動物細胞株は、当該技術分野で周知であり、Ａｍｅｒｉｃａｎ  Ｔｙｐｅ  Ｃｕｌｔｕｒｅ  Ｃｏｌｌｅｃｔｉｏｎ（ＡＴＣＣ）から入手可能な不死化細胞株及び本発明の組み換えポリペプチドを作製するのに使用することができる当該技術分野で既知の発現系に使用される任意の細胞株が含まれるが、これらに限定されない。一般には、宿主細胞を、所望される抗ＢＣＭＡ抗体ポリペプチドをコードするＤＮＡを含む組み換え発現ベクターを用いて形質転換する。用いられ得る宿主細胞の中には、原核生物、酵母、またはより高度な真核生物の細胞がある。原核生物には、グラム陰性またはグラム陽性生物、例えば、大腸菌または桿菌が含まれる。より高度な真核生物細胞には、昆虫細胞及び哺乳動物起源の樹立細胞株が含まれる。好適な哺乳動物宿主細胞株の例には、サル腎臓細胞のＣＯＳ−７株（ＡＴＣＣ  ＣＲＬ  １６５１）（Ｇｌｕｚｍａｎ  ｅｔ  ａｌ．，１９８１，Ｃｅｌｌ  ２３：１７５）、Ｌ細胞、２９３細胞、Ｃ１２７細胞、３Ｔ３細胞（ＡＴＣＣ  ＣＣＬ  １６３）、チャイニーズハムスター卵巣（ＣＨＯ）細胞またはＶｅｇｇｉｅ  ＣＨＯ及び血清不含培地で成長させた関連細胞といったそれらの誘導体（Ｒａｓｍｕｓｓｅｎ  ｅｔ  ａｌ．，１９９８，Ｃｙｔｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ  ２８：３１）、ＨｅＬａ細胞、ＢＨＫ（ＡＴＣＣ  ＣＲＬ  １０）細胞株、ならびにＭｃＭａｈａｎ  ｅｔ  ａｌ．，１９９１，ＥＭＢＯ  Ｊ．１０：２８２１に記載されるアフリカミドリザル腎臓細胞株ＣＶＩに由来するＣＶＩ／ＥＢＮＡ細胞株（ＡＴＣＣ  ＣＣＬ  ７０）、２９３、２９３  ＥＢＮＡ、もしくはＭＳＲ  ２９３等のヒト胎児腎臓細胞、ヒト表皮Ａ４３１細胞、ヒトＣｏｌｏ２０５細胞、他の形質転換された霊長類細胞株、正常２倍体細胞、一次組織のインビトロ培養から導出される細胞株、一次外植片、ＨＬ−６０、Ｕ９３７、ＨａＫ、またはＪｕｒｋａｔ細胞が挙げられる。任意で、ＨｅｐＧ２／３Ｂ、ＫＢ、ＮＩＨ  ３Ｔ３、またはＳ４９等の哺乳動物細胞株は、例えば、種々のシグナル伝達またはレポーターアッセイにおいてポリペプチドを使用することが望ましい場合、ポリペプチドの発現に使用され得る。あるいは、ポリペプチドを、より下等な真核生物、例えば酵母、または原核生物、例えば細菌において産生することが可能である。好適な酵母には、サッカロマイセス・セレビシエ、シゾサッカロマイセス・ポンベ、クリベロマイセス株、カンジダ、または異種ポリペプチドを発現することができる任意の酵母株が挙げられる。好適な細菌株には、大腸菌、バチルス・スブチリス、サルモネラ・チフィムリウム、または異種ポリペプチドを発現することができる任意の細菌株が挙げられる。ポリペプチドが酵母または細菌において作製される場合、機能的なポリペプチドを得るために、例えば、適切な部位のリン酸化またはグリコシル化によって、そこで産生されるポリペプチドを修飾することが望ましい場合がある。そのような共有結合は、既知の化学的または酵素的方法を使用して達成することができる。ポリペプチドはまた、１つ以上の昆虫発現ベクターにおいて、本発明の単離核酸と好適な制御配列とを動作可能に連結させ、昆虫発現系を用いることによって、産生され得る。バキュロウイルス／昆虫細胞発現系のための材料及び方法は、例えば、米国カリフォルニア州サンディエゴ、Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ（ＭａｘＢａｃ（登録商標）キット）からキットの形態で市販入手可能であり、そのような方法は、Ｓｕｍｍｅｒｓ  ａｎｄ  Ｓｍｉｔｈ，Ｔｅｘａｓ  Ａｇｒｉｃｕｌｔｕｒａｌ  Ｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔ  Ｓｔａｔｉｏｎ  Ｂｕｌｌｅｔｉｎ  Ｎｏ．１５５５（１９８７）及びＬｕｃｋｏｗ  ａｎｄ  Ｓｕｍｍｅｒｓ，Ｂｉｏ／Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ  ６：４７（１９８８）に記載されるように、当該技術分野で周知である。細胞不含翻訳系もまた、本明細書に開示される核酸構築物に由来するＲＮＡを使用してポリペプチドを産生するために利用することができる。細菌、真菌、酵母、及び哺乳動物細胞の宿主とともに使用するのに適切なクローニング及び発現ベクターは、Ｐｏｕｗｅｌｓら（Ｃｌｏｎｉｎｇ  Ｖｅｃｔｏｒｓ：Ａ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ  Ｍａｎｕａｌ，Ｅｌｓｅｖｉｅｒ，Ｎｅｗ  Ｙｏｒｋ，１９８５）によって記載されている。好ましくは、少なくとも１つの発現制御配列に動作可能に連結される、本発明の単離核酸を含む宿主細胞は、「組み換え宿主細胞」である。
【０１７３】
ある特定の実施形態において、細胞株は、どの細胞株が高い発現レベルを有し、ＢＣＭＡ結合特性を有する抗原結合タンパク質を構成的に産生するかを判定することを通じて、選択され得る。別の実施形態において、それ自体の抗体は作製しないが、異種抗体を作製及び分泌する能力のある、Ｂ細胞系統に由来する細胞株が、選択され得る。
【０１７４】
抗体薬物複合体（ＡＤＣ）
本発明の実施形態は、抗体薬物複合体（ＡＤＣ）を含む。理解されるように、毒素または他の分子といった薬物と複合体化された抗体は、抗体等の特異的結合分子によって特異的に結合され得る分子を発現する細胞の標的殺滅に高度に有用である。ＢＣＭＡは、実施例１に示されるように、悪性形質細胞（多発性骨髄腫及びくすぶり型骨髄腫）、ならびに意義不明の単一クローン性γグロブリン血症（ＭＧＵＳ）形質細胞において、正常形質細胞で観察されるレベルよりも比較的高度なレベルで発現される。
【０１７５】
一般に、ＡＤＣは、化学療法剤、例えば、細胞毒性剤、細胞分裂阻害剤、毒素、または放射性薬剤に複合体化された本明細書に記載されるＢＣＭＡ抗原結合タンパク質、好ましくは抗体（より好ましくはヒトモノクローナル抗ｈｕＢＣＭＡ抗体、例えばＡｂ−１、Ａｂ−２、またはＡｂ−３）を含む。リンカー分子が、抗体への薬物の複合体化に使用され得る。ＡＤＣ技術において有用な種々のリンカー及び薬物が、当該技術分野で既知であり、本発明の実施形態において使用され得る。（米国第２００９００２８８５６号、同第２００９／０２７４７１３号、同第ＵＳ２００７／００３１４０２号、国際公開第ＷＯ２００５／０８４３９０号、同第ＷＯ２００９／０９９７２８号、米国第５２０８０２０号、同第５４１６０６４号、同第５４７５０９２号、同第５５８５４９９号、同第６４３６９３１号、同第６３７２７３８号、及び同第６３４０７０１号を参照されたく、これらはすべて参照により本明細書に組み込まれる）。
【０１７６】
実施形態には、本明細書に定義されるように、薬物に複合体化された本出願を通じて提供される配列を含むＢＣＭＡ抗原結合タンパク質が含まれる。好ましい実施形態は、本明細書に記載される抗ｈｕＢＣＭＡ抗体に複合体化された薬物を含む。好ましい実施形態は、リンカーを使用して本明細書に記載される抗ｈｕＢＣＭＡ抗体に複合体化された薬物を含む。好ましい実施形態は、リンカーを使用して本明細書に記載される抗ｈｕＢＣＭＡ抗体に複合体化された薬物を含み、ここで、リンカーは、切断不可能であり、例えばＭＣＣまたはＭａｌ−ｄＰＥＧ４−ＮＨＳである。好ましい実施形態は、切断不可能なリンカーを使用して本明細書に記載される抗ｈｕＢＣＭＡ抗体に複合体化された薬物を含み、ここで、リンカーは、ＭＣＣ（本明細書においてＳＭＣＣとも称される（図２を参照されたい））である。好ましい薬物は、以下に記載されるように、マイタンシノイドであり、具体的にはＤＭ１またはＤＭ４である。したがって、好ましい実施形態において、本明細書に記載されるｈｕＢＣＭＡ抗体は、ＭＣＣリンカーによってＤＭ１に複合体化される。特に好ましい実施形態において、抗ｈｕＢＣＭＡ抗体は、ＭＣＣリンカーによってＤＭ１に複合体化された、本明細書に様々に記載されるＡｂ−１、Ａｂ−２、またはＡｂ−３である。
【０１７７】
リンカー
ある特定の実施形態において、ＡＤＣは、１つ以上のリンカー構成要素から構成されるリンカーを含む。例示的なリンカー構成要素には、６−マレイミドカプロイル、マレイミドプロパノイル、バリン−シトルリン、アラニン−フェニルアラニン、ｐ−アミノベンジルオキシカルボニル、Ｍａｌ−ｄＰＥＧ４−ＮＨＳ（ＱｕａｎｔａＢｉｏｄｅｓｉｇｎ）、ならびに、Ｎ−スクシンイミジル４−（２−ピリジルチオ）ペンタノエート（「ＳＰＰ」）、Ｎ−スクシンイミジル４−（Ｎ−マレイミドメチル）シクロヘキサン−１カルボキシレート（「ＳＭＣＣ」、本明細書において「ＭＣＣ」とも称される）、及びＮ−スクシンイミジル（４−ヨード−アセチル）アミノベンゾエート（「ＳＩＡＢ」）を含むがこれらに限定されないリンカー試薬との複合体化により得られるものが挙げられる。リンカーは、「切断可能な」リンカーであり得るか、または「切断不可能な」リンカーであってもよい（Ｄｕｃｒｙ  ａｎｄ  Ｓｔｕｍｐ，Ｂｉｏｃｏｎｊｕｇａｔｅ  Ｃｈｅｍ．２０１０，２１，５−１３、参照によりその全体が本明細書に組み込まれる）。切断可能なリンカーは、ある特定の環境要因に供されたとき、例えば、標的細胞に内部移行されたときに、薬物を放出するように設計される。切断可能なリンカーには、酸に不安定なリンカー、プロテアーゼ感受性リンカー、光解離性リンカー、ジメチルリンカー、またはジスルフィド含有リンカーが含まれる。切断不可能なリンカーは、標的細胞による内部移行及び標的細胞内での分解の際に、抗体の少なくとも１つのアミノ酸及び薬物と共有結合で会合した状態に留まる傾向がある。例示的な切断不可能なリンカーは、ＭＣＣである（本明細書においてＳＭＣＣとも称される）。最も好ましいＢＣＭＡ  ＡＤＣの切断不可能なリンカーは、以下に示されるように、Ｎ−スクシンイミジル４−（Ｎ−マレイミドメチル）シクロヘキサン−１カルボキシレート（「ＳＭＣＣ」、本明細書において「ＭＣＣ」とも称される）またはＭａｌ−ｄＰＥＧ４−ＮＨＳである。
【化１】
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【０１７８】
薬物
ある特定の実施形態において、抗体は、化学療法剤に複合体化される。化学療法剤の例としては、アルキル化剤、例えば、チオテパ及びシクロホスファミド（ＣＹＴＯＸＡＮ（商標））；スルホン酸アルキル、例えば、ブスルファン、インプロスルファン、及びピポスルファン；アジリジン、例えば、ベンゾドーパ、カルボコン、メツレドーパ、及びウレドーパ；エチレンイミン及びメチラメラミン（アルトレタミン、トリエチレンメラミン、トリエチレンホスホラミド、トリエチレンチオホスファオラミド、及びトリメチローロメラミンを含む）；アセトゲニン（特に、ブラタシン及びブラタシノン）；カンプトテシン（合成類似体トポテカンを含む）；ブリオスタチン；カリスタチン；ＣＣ−１０６５（そのアゾゼレシン、カルゼレシン、及びビゼレシン合成類似体を含む）；クリプトフィシン（特に、クリプトフィシン  １及びクリプトフィシン８）；ドラスタチン；デュオカルマイシン（合成類似体、ＫＷ−２１８９及びＣＢＩ−ＴＭＩを含む）；エリュテロビン；パンクラチスタチン；サルコジクチイン；スポンジスタチン；ナイトロジェンマスタード、例えば、クロラムブシル、クロマファジン、コロホスファミド、エストラムスチン、イホスファミド、メクロレタミン、メクロレタミンオキシド塩酸塩、メルファラン、ノベムビシン、フェネステリン、プレドニムスチン、トロホスファミド、ウラシルマスタード；ニトロソ尿素、例えば、カルムスチン、クロロゾトシン、フォテムスチン、ロムスチン、ニムスチン、ラニムスチン；抗生物質、例えば、エンジイン抗生物質（例えば、カリケアマイシン、特にカリケアマイシンγ１及びカリケアマイシンθＩ、例えばＡｎｇｅｗ  Ｃｈｅｍ．Ｉｎｔｌ．Ｅｄ．Ｅｎｇｌ．３３：１８３−１８６（１９９４）を参照されたい；ダイネミシン（ダイネミシンＡを含む）；エスペラミシン；ならびにネオカルジノスタチン発色団及び関連色素タンパク質エンジイン抗生物質）、アクラノマイシン、アクチノマイシン、オースラマイシン、アザセリン、ブレオマイシン、カクチノマイシン、カラビシン、カミノマイシン、カルジノフィリン；クロモマイシン、ダクチノマイシン、ダウノルビシン、デトルビシン、６−ジアゾ−５−オキソ−Ｌ−ノルロイシン、ドキソルビシン（モルホリノ−ドキソルビシン、シアノモルホリノ−ドキソルビシン、２−ピロリノ−ドキソルビシン、及びデオキシドキソルビシンを含む）、エピルビシン、エソルビシン、イダルビシン、マルセロマイシン、ナイトマイシン、ミコフェノール酸、ノガラマイシン、オリボマイシン、ペプロマイシン、ポトフィロマイシン、ピューロマイシン、ケラマイシン、ロドルビシン、ストレプトニグリン、ストレプトゾシン、ツベルシジン、ウベニメクス、ジノスタチン、ゾルビシン；代謝拮抗薬、例えば、メトトレキサート及び５−フルオロウラシル（５−ＦＵ）；葉酸類似体、例えば、デノプテリン、メトトレキサート、プテロプテリン、トリメトレキサート；プリン類似体、例えば、フルダラビン、６−メルカプトプリン、チアミプリン、チオグアニン；ピリミジン類似体、例えば、アンシタビン、アザシチジン、６−アザウリジン、カルモフール、シタラビン、ジデオキシウリジン、ドキシフルリジン、エ���シタビン、フロクスウリジン、５−ＦＵ；アンドロゲン、例えば、カルステロン、プロピオン酸ドロモスタノロン、エピチオスタノール、メピチオスタン、テストラクトン；抗副腎剤、例えば、アミノグルテチミド、ミトタン、トリロスタン；葉酸補液、例えば、フロリン酸；アセグラトン；アルドホスファミドグリコシド；アミノレブリン酸；アムサクリン；ベストラブシル；ビスアントレン；エダトラキサート；デフォファミン；デメコルチン；ジアジクオン；エルホミチン；酢酸エリプチニウム；エポチロン；エトグルシド；硝酸ガリウム；ヒドロキシ尿素；レンチナン；ロニダミン；マイタンシノイド、例えば、マイタンシン及びアンサマイトシン；ミトグアゾン；ミトキサントロン；モピダモール；ニトラクリン；ペントスタチン；フェナメット；ピラルビシン；ポドフィリン酸；２−エチルヒドラジド；プロカルバジン；ＰＳＫ（登録商標）；ラゾキサン；リゾキシン；シゾフラン；スピロゲルマニウム；テヌアゾン酸；トリアジクオン；２，２’，２’’−トリクロロトリエチルアミン；トリコテセン（特にＴ−２毒素、ベラクリンＡ、ロリジンＡ、及びアングイジン）；ウレタン；ビンデシン；ダカルバジン；マンノムスチン；ミトブロニトール；ミトラクトール；ピポブロマン；ガシトシン；アラビノシド、（「Ａｒａ−Ｃ」）；シクロホスファミド；チオテパ；タキソイド、例えば、パクリタキセル（ＴＡＸＯＬ（商標）Ｂｒｉｓｔｏｌ−Ｍｙｅｒｓ  Ｓｑｕｉｂｂ  Ｏｎｃｏｌｏｇｙ，Ｐｒｉｎｃｅｔｏｎ，Ｎ．Ｊ．）及び、ドセタキセル（ＴＡＸＯＴＥＲＥ（登録商標）Ｒｈｏｎｅ−Ｐｏｕｌｅｎｃ  Ｒｏｒｅｒ，Ａｎｔｏｎｙ，Ｆｒａｎｃｅ）；クロラムブシル；ゲムシタビン；６−チオグアニン；メルカプトプリン；メトトレキサート；白金類似体、例えば、シスプラチン及びカルボプラチン；ビンブラスチン；白金；エトポシド（ＶＰ−１６）；イホスファミド；マイトマイシンＣ；ミトキサントロン；ビンクリスチン；ビノレルビン；ナベルビン；ノバントロン；テニポシド；ダウノマイシン；アミノプテリン；キセロダ；イバンドロネート；ＣＰＴ−１１；トポイソメラーゼ阻害剤ＲＦＳ  ２０００；ジフルオロメチルオミチン（ＤＭＦＯ）；レチノイン酸；カペシタビン；ならびに上述のもののいずれかの医薬として許容される塩、酸、または誘導体が挙げられる。腫瘍に対するホルモンの作用を制御または阻害するように作用する抗ホルモン剤、例えば、抗エストロゲン薬（例えば、タモキシフェン、ラロキシフェン、アロマターゼ阻害性４（５）−イミダゾール、４−ヒドロキシタモキシフェン、トリオキシフェン、ケオキシフェン、ＬＹ１１７０１８、オナプリストン、及びトレミフェン（Ｆａｒｅｓｔｏｎ）を含む）；ならびに抗アンドロゲン薬、例えば、フルタミド、ニルタミド、ビカルタミド、ロイプロリド、及びゴセレリン；ｓｉＲＮＡ、及び上述のもののいずれかの医薬として許容される塩、酸、または誘導体もまた、この定義に含まれる。本発明とともに使用され得る他の化学療法剤は、米国公開第２００８０１７１０４０号または米国公開第２００８０３０５０４４号に開示され、これらは参照によりその全体が本明細書に組み込まれる。
【０１７９】
細胞の微小管に影響を及ぼす、天然源抽出物から得られた多数の化合物、ならびに免疫複合体の生成に毒素としての可能性を有すると見られる半合成及び合成類似体が存在する。そのような分子及びそれらを用いた薬物製品の例には、次のものが挙げられる：コルヒチン部位結合剤（Ｃｕｒａｃｉｎ）、コンブレタスタチン（ＡＶＥ８０６、コンブレタスタチンＡ−４プロドラッグ（ＣＡ４Ｐ）、Ｏｘｉ−４５０３）、クリプトフィシン（ＬＹ３５５７０３）、ディスコデルモリド、ドラスタチン及び類似体（オーリスタチンＰＨＥ、ドラスタチン１０、ＩＬＸ−６５１、シンプロスタチン１、ＴＺＴ−１０２７）、エポチロン（ＢＭＳ−２４７５５０、ＢＭＳ−３１０７０５、ＥＰ０９０６、ＫＯＳ−８６２、ＺＫ−ＥＰＯ）、エリュテロビン、ＦＲ１８２８７７、ハリコンドリンＢ（Ｅ７３８９）、ハリミド（ＮＰＩ−２３５２及びＮＰＩ−２３５８）、ヘミアステリン（ＨＴＩ−２８６）、ラウリマライド、マイタンシノイド（「ＤＭ１」、「ＤＭ３」、または「ＤＭ４」）（ビバツズマブメルタンシン、カンツズマブメルタンシン、ｈｕＮ９０１−ＤＭ１／ＢＢ−１０９０１ＴＡＰ、ＭＬＮ５９１ＤＭ１、Ｍｙ９−６−ＤＭ１、トラスツズマブ−ＤＭ１）、ＰＣ−ＳＰＥＳ、ペロルシドＡ、レスベラトロール、Ｓ−アリルメルカプトシステイン（ＳＡＭＣ）、スポンジスタチン、ビチレブアミド、分子モーターキネシン（ＳＢ−７１５９９２）、設計されたコルヒチン部位結合剤（Ａ−２８９０９９、Ａ−２９３６２０／Ａ−３１８３１５、ＡＢＴ−７５１／Ｅ７０１０、Ｄ−２４８５１／Ｄ−６４１３１、ＺＤ６１２６）、他の新規な紡錘体毒（２−メトキシエストラジオール（２−ＭＥ２）、ベズイミダゾールカルバメート（ＡＮＧ  ６００シリーズ、メベンダゾール）、ＣＰ２４８／ＣＰ４６１、ＨＭＮ−２１４、Ｒ４４０、ＳＤＸ−１０３、Ｔ６７／Ｔ６０７）。さらに、追加の海洋生物由来の毒素は、Ｍａｙｅｒ，Ａ．Ｍ．Ｓ．Ｍａｒｉｎｅ  Ｐｈａｒｍａｃｏｌｏｇｙ  ｉｎ  １９９８：Ａｎｔｉｔｕｍｏｒ  ａｎｄ  Ｃｙｔｏｔｏｘｉｃ  Ｃｏｍｐｏｕｎｄｓ．Ｔｈｅ  Ｐｈａｒｍａｃｏｌｏｇｉｓｔ．４１（４）：１５９−１６４（１９９９）で考察されている。
【０１８０】
好ましい実施形態において、ＢＣＭＡ  ＡＤＣは、チューブリン重合を阻害することによって作用する有糸分裂阻害剤である１つ以上のマイタンシノイド分子に複合体化された本明細書に記載の抗体を含む。種々の変化形を含むマイタンシノイドは、米国特許第３８９６１１１号、同第４１５１０４２号、同第４１３７２３０号、同第４２４８８７０号、同第４２５６７４６号、同第４２６０６０８号、同第４２６５８１４号、同第４２９４７５７号、同第４３０７０１６号、同第４３０８２６８号、同第４３０９４２８号、同第４３１３９４６号、同第４３１５９２９号、同第４３１７８２１号、同第４３２２３４８号、同第４３３１５９８号、同第４３６１６５０号、同第４３６４８６６号、同第４４２４２１９号、同第４４５０２５４号、同第４３６２６６３号、同第４３７１５３３号、及び国際公開第ＷＯ２００９／０９９７２８号に記載される。マイタンシノイド薬物部分は、天然源から単離され得るか、組み換え技術を用いて産生され得るか、または合成により調製され得る。例示的なマイタンシノイドには、Ｃ−１９−デクロロ（米国特許第４２５６７４６号）、Ｃ−２０−ヒドロキシ（またはＣ−２０−デメチル）＋／−Ｃ−１９−デクロロ（米国特許第４３０７０１６号及び同第４３６１６５０号）、Ｃ−２０−デメトキシ（またはＣ−２０−アシルオキシ（−ＯＣＯＲ）、＋／−デクロロ（米国特許４２９４７５７号）、Ｃ−９−ＳＨ（米国特許第４，４２４，２１９号）、Ｃ−１４−アルコキシメチル（デメトキシ／ＣＨ２ＯＲ）（米国特許第４，３３１，５９８号）、Ｃ−１４−ヒドロキシメチルまたはアシルオキシメチル（ＣＨ２ＯＨまたはＣＨ２ＯＡｃ）（米国特許第４，４５０，２５４号）、Ｃ−１５−ヒドロキシ／アシルオキシ（米国特許第４，３６４，８６６号）、Ｃ−１５−メトキシ（米国特許第４，３１３，９４６号及び同第４，３１５，９２９号）、Ｃ−１８−Ｎ−デメチル（米国特許第４，３６２，６６３号及び同第４，３２２，３４８号）、ならびに４，５−デオキシ（米国特許第４，３７１，５３３号）が挙げられる。所望される結合の種類に応じて、マイタンシノイド化合物上の種々の位置が、結合位置として使用され得る。例えば、エステル結合の形成については、ヒドロキシル基を有するＣ−３位、ヒドロジメチル（ｈｙｄｒｏｚｙｍｅｔｈｙｌ）で修飾されたＣ−１４位、ヒドロキシル基で修飾されたＣ−１５位、及びヒドロキシル基を有するＣ−２０位が、すべて好適である（米国特許第５２０８０２０号、ＲＥ３９１５１、及び同第６９１３７４８号、米国特許出願公開第２００６０１６７２４５号及び同第２００７００３７９７２号、ならびに国際公開第ＷＯ２００９０９９７２８号）。
【０１８１】
好ましいマイタンシノイドは、ＤＭ１、ＤＭ３、及びＤＭ４として当該技術分野で既知であるものを含む（米国特許出願公開第２００９０３０９２４号及び同第２００５０２７６８１２号、参照により本明細書に組み込まれる）。アンサマイトシンＰ−３は、弾頭部（ｗａｒｈｅａｄ）ＤＭ１を産生するように合成により改変される。ＤＭ１は、ビンカアルカロイド結合部位においてチューブリンに結合し、チューブリン重合を阻害することが報告されている。
【０１８２】
マイタンシノイドを含有するＡＤＣ、そのようなＡＤＣを作製する方法、及びそれらの治療的使用は、米国特許第５２０８０２０号及び同第５４１６０６４号、米国特許出願公開第２００５０２７６８１２号、ならびに国際公開第ＷＯ２００９０９９７２８号（すべて参照により本明細書に組み込まれる）に開示されている。マイタンシノイドＡＤＣを作製するのに有用なリンカーは、当該技術分野で既知である（米国特許第５２０８０２０号、ならびに米国特許出願公開第２００５０１６９９３号及び同第２００９０２７４７１３号、すべて参照により本明細書に組み込まれる）。ＳＭＣＣリンカーを含むマイタンシノイドＡＤＣは、米国特許公開第２００５／０２７６８１２号に開示されるように調製され得る。
【０１８３】
本発明の実施形態には、Ａｂ−１−ＭＣＣ−ＤＭ１、Ａｂ−２−ＭＣＣ−ＤＭ１、Ａｂ−３−ＭＣＣ−ＤＭ１、Ａｂ−４−ＭＣＣ−ＤＭ１、Ａｂ−５−ＭＣＣ−ＤＭ１、Ａｂ−６−ＭＣＣ−ＤＭ１、Ａｂ−７−ＭＣＣ−ＤＭ１、Ａｂ−８−ＭＣＣ−ＤＭ１、Ａｂ−９−ＭＣＣ−ＤＭ１、Ａｂ−１０−ＭＣＣ−ＤＭ１、Ａｂ−１１−ＭＣＣ−ＤＭ１、Ａｂ−１２−ＭＣＣ−ＤＭ１、Ａｂ−１３−ＭＣＣ−ＤＭ１、Ａｂ−１４−ＭＣＣ−ＤＭ１、Ａｂ−１５−ＭＣＣ−ＤＭ１、Ａｂ−１６−ＭＣＣ−ＤＭ１、及びＡｂ−１７−ＭＣＣ−ＤＭ１が含まれる。
【０１８４】
薬物の充填
既存の抗体−薬物複合体の主な欠点は、標的となる抗原の数が制限されており、メトトレキサート、ダウノルビシン、及びビンクリスチンのような制癌（ｃａｎｃｅｒｏｓｔａｔｉｃ）薬の細胞毒性が比較的中等度であるため、十分な濃度の薬物を標的部位に送達することができないことである。十分な細胞毒性を達成するためには、多数の薬物分子を、抗体に直接か、またはポリマー担体分子を通じてのいずれかで結合させることが必要となる。しかしながら、そのような重度に修飾された抗体は、標的抗原への不十分な結合、及び血流からの迅速なインビボクリアランスを呈することが多い。
【０１８５】
マイタンシノイドと細胞に結合する薬剤（抗体等）との複合体化の現在の方法は、当該技術分野で周知であり、ＢＣＭＡ  ＡＤＣを作製するために使用することができる。複合体化方法は、米国特許第５，２０８，０２０号に記載されるように、２つの反応ステップを伴い得る。マイタンシノイドの複合のための１ステッププロセスが、ＢＣＭＡ  ＡＤＣの作製に使用可能であり、これは、米国特許第６，４４１，１６３号に記載されている。マイタンシノイドに基づく免疫毒技術は、ＩｍｍｕｎｏＧｅｎ  Ｃｏｒｐｏｒａｔｉｏｎ（Ｃａｍｂｒｉｄｇｅ，Ｍａｓｓ．）から利用可能である。
【０１８６】
マイタンシノイド（例えば、ＤＭ１）を本明細書に記載されるＢＣＭＡ抗体に複合体化するプロセスは、１抗体当たり広範な数のマイタンシノイド（例えば、ＤＭ１）分子（薬物−抗体比、またはＤＡＲ）を有する、マイタンシノイド（例えば、ＤＭ１）に複合体化された抗体の集団を含む組成物をもたらす。ＢＣＭＡ  ＡＤＣは、１抗体当たり１〜２０個の化学療法剤を有し得る。ＢＣＭＡ  ＡＤＣの組成物は、組成物中の１抗体分子当たりの平均薬物部分数によって特徴付けることができる。平均薬物部分数は、質量分析法、免疫アッセイ、及びＨＰＬＣといった、従来的な手段によって判定され得る（例えば、実施例７を参照されたい）。いくつかの事例において、同種ＢＣＭＡ  ＡＤＣ集団を分離し、逆相ＨＰＬＣまたは電気泳動によって精製することができる。したがって、薬学的ＢＣＭＡ  ＡＤＣ組成物は、１、２、３、４、５、６、７個以上の薬物部分に連結された異種または同種抗体集団を含有し得る。本発明の実施形態は、１つのＢＣＭＡ  ＡＤＣ当たり１〜１０個、２〜７個、または好ましくは３〜５個の平均数のマイタンシノイド（例えば、ＤＭ１）分子を含む組成物を含む。好ましい実施形態において、ＢＣＭＡ  ＡＤＣの組成物は、１つのＢＣＭＡ  ＡＤＣ当たり約３．０、約３．１、約３．２、約３．３、約３．４、約３．５、約３．６、約３．７、約３．８、約３．９、約４．０、約４．１、約４．２、約４．３、約４．４、約４．５、約４．６、約４．７、約４．８、約４．９、または約５．０個の平均マイタンシノイド（例えば、ＤＭ１）分子数を有する。そのような組成物は、ＢＣＭＡ  ＡＤＣの治療有効量を含有し得、また凍結乾燥され得る。特に好ましい実施形態において、ＢＣＭＡ  ＡＤＣは、本明細書に様々に記載されるように、上述の比率でＭＣＣリンカーによってＤＭ１に複合体化された、抗体Ａｂ−１、Ａｂ−２、またはＡｂ−３を含む。
【０１８７】
本発明の態様は、Ａｂ−１の６つのＣＤＲを含む単離モノクローナル抗体を含み、ここで、該抗体は、リンカー及び薬物をさらに含む。本発明の態様は、Ａｂ−２の６つのＣＤＲを含む単離モノクローナル抗体を含み、ここで、該抗体は、リンカー及び薬物をさらに含む。本発明の態様は、Ａｂ−３の６つのＣＤＲを含む単離モノクローナル抗体を含み、ここで、該抗体は、リンカー及び薬物をさらに含む。本発明の態様は、Ａｂ−４の６つのＣＤＲを含む単離モノクローナル抗体を含み、ここで、該抗体は、リンカー及び薬物をさらに含む。本発明の態様は、Ａｂ−５の６つのＣＤＲを含む単離モノクローナル抗体を含み、ここで、該抗体は、リンカー及び薬物をさらに含む。本発明の態様は、Ａｂ−６の６つのＣＤＲを含む単離モノクローナル抗体を含み、ここで、該抗体は、リンカー及び薬物をさらに含む。本発明の態様は、Ａｂ−７の６つのＣＤＲを含む単離モノクローナル抗体を含み、ここで、該抗体は、リンカー及び薬物をさらに含む。本発明の態様は、Ａｂ−８の６つのＣＤＲを含む単離モノクローナル抗体を含み、ここで、該抗体は、リンカー及び薬物をさらに含む。本発明の態様は、Ａｂ−９の６つのＣＤＲを含む単離モノクローナル抗体を含み、ここで、該抗体は、リンカー及び薬物をさらに含む。本発明の態様は、Ａｂ−１０の６つのＣＤＲを含む単離モノクローナル抗体を含み、ここで、該抗体は、リンカー及び薬物をさらに含む。本発明の態様は、Ａｂ−１１の６つのＣＤＲを含む単離モノクローナル抗体を含み、ここで、該抗体は、リンカー及び薬物をさらに含む。本発明の態様は、Ａｂ−１２の６つのＣＤＲを含む単離モノクローナル抗体を含み、ここで、該抗体は、リンカー及び薬物をさらに含む。本発明の態様は、Ａｂ−１３の６つのＣＤＲを含む単離モノクローナル抗体を含み、ここで、該抗体は、リンカー及び薬物をさらに含む。本発明の態様は、Ａｂ−１４の６つのＣＤＲを含む単離モノクローナル抗体を含み、ここで、該抗体は、リンカー及び薬物をさらに含む。本発明の態様は、Ａｂ−１５の６つのＣＤＲを含む単離モノクローナル抗体を含み、ここで、該抗体は、リンカー及び薬物をさらに含む。本発明の態様は、Ａｂ−１６の６つのＣＤＲを含む単離モノクローナル抗体を含み、ここで、該抗体は、リンカー及び薬物をさらに含む。本発明の態様は、Ａｂ−１７の６つのＣＤＲを含む単離モノクローナル抗体を含み、ここで、該抗体は、リンカー及び薬物をさらに含む。前述の実施形態の態様は、ヒトモノクローナル抗体、ヒトモノクローナルＩｇＧ抗体、及びヒトモノクローナルＩｇＧ１抗体を含む。
【０１８８】
本発明の態様は、ＡＨｏ、Ｋａｂａｔ、またはＣｌｏｔｈｉａの番号付けシステムのいずれか１つによって決定される、Ａｂ−１の６つのＣＤＲを含む単離モノクローナル抗体を含み、ここで、該抗体は、リンカー及び薬物をさらに含む。本発明の態様は、ＡＨｏ、Ｋａｂａｔ、またはＣｌｏｔｈｉａの番号付けシステムのいずれか１つによって決定される、Ａｂ−２の６つのＣＤＲを含む単離モノクローナル抗体を含み、ここで、該抗体は、リンカー及び薬物をさらに含む。本発明の態様は、ＡＨｏ、Ｋａｂａｔ、またはＣｌｏｔｈｉａの番号付けシステムのいずれか１つによって決定される、Ａｂ−３の６つのＣＤＲを含む単離モノクローナル抗体を含み、ここで、該抗体は、リンカー及び薬物をさらに含む。本発明の態様は、ＡＨｏ、Ｋａｂａｔ、またはＣｌｏｔｈｉａの番号付けシステムのいずれか１つによって決定される、Ａｂ−４の６つのＣＤＲを含む単離モノクローナル抗体を含み、ここで、該抗体は、リンカー及び薬物をさらに含む。本発明の態様は、ＡＨｏ、Ｋａｂａｔ、またはＣｌｏｔｈｉａの番号付けシステムのいずれか１つによって決定される、Ａｂ−５の６つのＣＤＲを含む単離モノクローナル抗体を含み、ここで、該抗体は、リンカー及び薬物をさらに含む。本発明の態様は、ＡＨｏ、Ｋａｂａｔ、またはＣｌｏｔｈｉａの番号付けシステムのいずれか１つによって決定される、Ａｂ−６の６つのＣＤＲを含む単離モノクローナル抗体を含み、ここで、該抗体は、リンカー及び薬物をさらに含む。本発明の態様は、ＡＨｏ、Ｋａｂａｔ、またはＣｌｏｔｈｉａの番号付けシステムのいずれか１つによって決定される、Ａｂ−７の６つのＣＤＲを含む単離モノクローナル抗体を含み、ここで、該抗体は、リンカー及び薬物をさらに含む。本発明の態様は、ＡＨｏ、Ｋａｂａｔ、またはＣｌｏｔｈｉａの番号付けシステムのいずれか１つによって決定される、Ａｂ−８の６つのＣＤＲを含む単離モノクローナル抗体を含み、ここで、該抗体は、リンカー及び薬物をさらに含む。本発明の態様は、ＡＨｏ、Ｋａｂａｔ、またはＣｌｏｔｈｉａの番号付けシステムのいずれか１つによって決定される、Ａｂ−９の６つのＣＤＲを含む単離モノクローナル抗体を含み、ここで、該抗体は、リンカー及び薬物をさらに含む。本発明の態様は、ＡＨｏ、Ｋａｂａｔ、またはＣｌｏｔｈｉａの番号付けシステムのいずれか１つによって決定される、Ａｂ−１０の６つのＣＤＲを含む単離モノクローナル抗体を含み、ここで、該抗体は、リンカー及び薬物をさらに含む。本発明の態様は、ＡＨｏ、Ｋａｂａｔ、またはＣｌｏｔｈｉａの番号付けシステムのいずれか１つによって決定される、Ａｂ−１１の６つのＣＤＲを含む単離モノクローナル抗体を含み、ここで、該抗体は、リンカー及び薬物をさらに含む。本発明の態様は、ＡＨｏ、Ｋａｂａｔ、またはＣｌｏｔｈｉａの番号付けシステムのいずれか１つによって決定される、Ａｂ−１２の６つのＣＤＲを含む単離モノクローナル抗体を含み、ここで、該抗体は、リンカー及び薬物をさらに含む。本発明の態様は、ＡＨｏ、Ｋａｂａｔ、またはＣｌｏｔｈｉａの番号付けシステムのいずれか１つによって決定される、Ａｂ−１３の６つのＣＤＲを含む単離モノクローナル抗体を含み、ここで、該抗体は、リンカー及び薬物をさらに含む。本発明の態様は、ＡＨｏ、Ｋａｂａｔ、またはＣｌｏｔｈｉａの番号付けシステムのいずれか１つによって決定される、Ａｂ−１４の６つのＣＤＲを含む単離モノクローナル抗体を含み、ここで、該抗体は、リンカー及び薬物をさらに含む。本発明の態様は、ＡＨｏ、Ｋａｂａｔ、またはＣｌｏｔｈｉａの番号付けシステムのいずれか１つによって決定される、Ａｂ−１５の６つのＣＤＲを含む単離モノクローナル抗体を含み、ここで、該抗体は、リンカー及び薬物をさらに含む。本発明の態様は、ＡＨｏ、Ｋａｂａｔ、またはＣｌｏｔｈｉａの番号付けシステムのいずれか１つによって決定される、Ａｂ−１６の６つのＣＤＲを含む単離モノクローナル抗体を含み、ここで、該抗体は、リンカー及び薬物をさらに含む。本発明の態様は、ＡＨｏ、Ｋａｂａｔ、またはＣｌｏｔｈｉａの番号付けシステムのいずれか１つによって決定される、Ａｂ−１７の６つのＣＤＲを含む単離モノクローナル抗体を含み、ここで、該抗体は、リンカー及び薬物をさらに含む。前述の実施形態の態様は、ヒトモノクローナル抗体、ヒトモノクローナルＩｇＧ抗体、及びヒトモノクローナルＩｇＧ１抗体を含む。
【０１８９】
本発明の態様は、Ａｂ−１の６つのＣＤＲ、具体的には、Ｖｈ−ＣＤＲ１（配列番号４）、Ｖｈ−ＣＤＲ２（配列番号５）、Ｖｈ−ＣＤＲ３（配列番号６）、Ｖｌ−ＣＤＲ１（配列番号１０６）、Ｖｌ−ＣＤＲ２（配列番号１０７）、及びＶｌ−ＣＤＲ３（配列番号１０８）を含む単離モノクローナル抗体を含み、ここで、該抗体は、リンカー及び薬物をさらに含む。本発明の態様は、Ａｂ−２の６つのＣＤＲ、具体的には、Ｖｈ−ＣＤＲ１（配列番号１０）、Ｖｈ−ＣＤＲ２（配列番号１１）、Ｖｈ−ＣＤＲ３（配列番号１２）、Ｖｌ−ＣＤＲ１（配列番号１１２）、Ｖｌ−ＣＤＲ２（配列番号１１３）、及びＶｌ−ＣＤＲ３（配列番号１１４）を含む単離モノクローナル抗体を含み、ここで、該抗体は、リンカー及び薬物をさらに含む。本発明の態様は、Ａｂ−３の６つのＣＤＲ、具体的には、Ｖｈ−ＣＤＲ１（配列番号１６）、Ｖｈ−ＣＤＲ２（配列番号１７）、Ｖｈ−ＣＤＲ３（配列番号１８）、Ｖｌ−ＣＤＲ１（配列番号１１８）、Ｖｌ−ＣＤＲ２（配列番号１１９）、及びＶｌ−ＣＤＲ３（配列番号１２０）を含む単離モノクローナル抗体を含み、ここで、該抗体は、リンカー及び薬物をさらに含む。本発明の態様は、の６つのＣＤＲを含む単離モノクローナル抗体を含み、Ａｂ−４、具体的には、Ｖｈ−ＣＤＲ１（配列番号２２）、Ｖｈ−ＣＤＲ２（配列番号２３）、Ｖｈ−ＣＤＲ３（配列番号２４）、Ｖｌ−ＣＤＲ１（配列番号１２４）、Ｖｌ−ＣＤＲ２（配列番号１２５）、及びＶｌ−ＣＤＲ３（配列番号１２６）ここで、該抗体は、リンカー及び薬物をさらに含む。本発明の態様は、の６つのＣＤＲを含む単離モノクローナル抗体を含み、Ａｂ−５、具体的には、Ｖｈ−ＣＤＲ１（配列番号２８）、Ｖｈ−ＣＤＲ２（配列番号２９）、Ｖｈ−ＣＤＲ３（配列番号３０）、Ｖｌ−ＣＤＲ１（配列番号１３０）、Ｖｌ−ＣＤＲ２（配列番号１３１）、及びＶｌ−ＣＤＲ３（配列番号１３２）ここで、該抗体は、リンカー及び薬物をさらに含む。本発明の態様は、の６つのＣＤＲを含む単離モノクローナル抗体を含み、Ａｂ−６、具体的には、Ｖｈ−ＣＤＲ１（配列番号３４）、Ｖｈ−ＣＤＲ２（配列番号３５）、Ｖｈ−ＣＤＲ３（配列番号３６）、Ｖｌ−ＣＤＲ１（配列番号１３６）、Ｖｌ−ＣＤＲ２（配列番号１３７）、及びＶｌ−ＣＤＲ３（配列番号１３８）ここで、該抗体は、リンカー及び薬物をさらに含む。本発明の態様は、の６つのＣＤＲを含む単離モノクローナル抗体を含み、Ａｂ−７、具体的には、Ｖｈ−ＣＤＲ１（配列番号４０）、Ｖｈ−ＣＤＲ２（配列番号４１）、Ｖｈ−ＣＤＲ３（配列番号４２）、Ｖｌ−ＣＤＲ１（配列番号１４２）、Ｖｌ−ＣＤＲ２（配列番号１４３）、及びＶｌ−ＣＤＲ３（配列番号１４４）ここで、該抗体は、リンカー及び薬物をさらに含む。本発明の態様は、の６つのＣＤＲを含む単離モノクローナル抗体を含み、Ａｂ−８、具体的には、Ｖｈ−ＣＤＲ１（配列番号４６）、Ｖｈ−ＣＤＲ２（配列番号４７）、Ｖｈ−ＣＤＲ３（配列番号４８）、Ｖｌ−ＣＤＲ１（配列番号１４８）、Ｖｌ−ＣＤＲ２（配列番号１４９）、及びＶｌ−ＣＤＲ３（配列番号１５０）ここで、該抗体は、リンカー及び薬物をさらに含む。本発明の態様は、の６つのＣＤＲを含む単離モノクローナル抗体を含み、Ａｂ−９、具体的には、Ｖｈ−ＣＤＲ１（配列番号５２）、Ｖｈ−ＣＤＲ２（配列番号５３）、Ｖｈ−ＣＤＲ３（配列番号５４）、Ｖｌ−ＣＤＲ１（配列番号１５４）、Ｖｌ−ＣＤＲ２（配列番号１５５）、及びＶｌ−ＣＤＲ３（配列番号１５６）ここで、該抗体は、リンカー及び薬物をさらに含む。本発明の態様は、の６つのＣＤＲを含む単離モノクローナル抗体を含み、Ａｂ−１０、具体的には、Ｖｈ−ＣＤＲ１（配列番号５８）、Ｖｈ−ＣＤＲ２（配列番号５９）、Ｖｈ−ＣＤＲ３（配列番号６０）、Ｖｌ−ＣＤＲ１（配列番号１６０）、Ｖｌ−ＣＤＲ２（配列番号１６１）、及びＶｌ−ＣＤＲ３（配列番号１６２）ここで、該抗体は、リンカー及び薬物をさらに含む。本発明の態様は、の６つのＣＤＲを含む単離モノクローナル抗体を含み、Ａｂ−１１、具体的には、Ｖｈ−ＣＤＲ１（配列番号６４）、Ｖｈ−ＣＤＲ２（配列番号６５）、Ｖｈ−ＣＤＲ３（配列番号６６）、Ｖｌ−ＣＤＲ１（配列番号１６６）、Ｖｌ−ＣＤＲ２（配列番号１６７）、及びＶｌ−ＣＤＲ３（配列番号１６８）ここで、該抗体は、リンカー及び薬物をさらに含む。本発明の態様は、の６つのＣＤＲを含む単離モノクローナル抗体を含み、Ａｂ−１２、具体的には、Ｖｈ−ＣＤＲ１（配列番号７０）、Ｖｈ−ＣＤＲ２（配列番号７１）、Ｖｈ−ＣＤＲ３（配列番号７２）、Ｖｌ−ＣＤＲ１（配列番号１７２）、Ｖｌ−ＣＤＲ２（配列番号１７３）、及びＶｌ−ＣＤＲ３（配列番号１７４）ここで、該抗体は、リンカー及び薬物をさらに含む。本発明の態様は、の６つのＣＤＲを含む単離モノクローナル抗体を含み、Ａｂ−１３、具体的には、Ｖｈ−ＣＤＲ１（配列番号７６）、Ｖｈ−ＣＤＲ２（配列番号７７）、Ｖｈ−ＣＤＲ３（配列番号７８）、Ｖｌ−ＣＤＲ１（配列番号１７８）、Ｖｌ−ＣＤＲ２（配列番号１７９）、及びＶｌ−ＣＤＲ３（配列番号１８０）ここで、該抗体は、リンカー及び薬物をさらに含む。本発明の態様は、の６つのＣＤＲを含む単離モノクローナル抗体を含み、Ａｂ−１４、具体的には、Ｖｈ−ＣＤＲ１（配列番号８２）、Ｖｈ−ＣＤＲ２（配列番号８３）、Ｖｈ−ＣＤＲ３（配列番号８４）、Ｖｌ−ＣＤＲ１（配列番号１８４）、Ｖｌ−ＣＤＲ２（配列番号１８５）、及びＶｌ−ＣＤＲ３（配列番号１８６）ここで、該抗体は、リンカー及び薬物をさらに含む。本発明の態様は、の６つのＣＤＲを含む単離モノクローナル抗体を含み、Ａｂ−１５、具体的には、Ｖｈ−ＣＤＲ１（配列番号８８）、Ｖｈ−ＣＤＲ２（配列番号８９）、Ｖｈ−ＣＤＲ３（配列番号９０）、Ｖｌ−ＣＤＲ１（配列番号１９０）、Ｖｌ−ＣＤＲ２（配列番号１９１）、及びＶｌ−ＣＤＲ３（配列番号１９２）ここで、該抗体は、リンカー及び薬物をさらに含む。本発明の態様は、の６つのＣＤＲを含む単離モノクローナル抗体を含み、Ａｂ−１６、具体的には、Ｖｈ−ＣＤＲ１（配列番号９４）、Ｖｈ−ＣＤＲ２（配列番号９５）、Ｖｈ−ＣＤＲ３（配列番号９６）、Ｖｌ−ＣＤＲ１（配列番号１９６）、Ｖｌ−ＣＤＲ２（配列番号１９７）、及びＶｌ−ＣＤＲ３（配列番号１９８）ここで、該抗体は、リンカー及び薬物をさらに含む。本発明の態様は、の６つのＣＤＲを含む単離モノクローナル抗体を含み、Ａｂ−１７、具体的には、Ｖｈ−ＣＤＲ１（配列番号１００）、Ｖｈ−ＣＤＲ２（配列番号１０１）、Ｖｈ−ＣＤＲ３（配列番号１０２）、Ｖｌ−ＣＤＲ１（配列番号２０２）、Ｖｌ−ＣＤＲ２（配列番号２０３）、及びＶｌ−ＣＤＲ３（配列番号２０４）ここで、該抗体は、リンカー及び薬物をさらに含む。前述の実施形態の態様は、ヒトモノクローナル抗体、ヒトモノクローナルＩｇＧ抗体、及びヒトモノクローナルＩｇＧ１抗体を含む。本発明の態様は、前述のもののフラグメント、誘導体、変異タンパク質、及び変異体を含む。
【０１９０】
本発明の態様は、Ａｂ−１Ｖｌ（配列番号２４０）及びＡｂ−１Ｖｈ（配列番号２０６）ドメインを含む単離モノクローナル抗体を含み、ここで、該抗体は、リンカー及び薬物をさらに含む。本発明の態様は、Ａｂ−２Ｖｌ（配列番号２４２）及びＡｂ−２Ｖｈ（配列番号２０８）ドメインを含む単離モノクローナル抗体を含み、ここで、該抗体は、リンカー及び薬物をさらに含む。本発明の態様は、Ａｂ−３Ｖｌ（配列番号２４４）及びＡｂ−３Ｖｈ（配列番号２１０）ドメインを含む単離モノクローナル抗体を含み、ここで、該抗体は、リンカー及び薬物をさらに含む。本発明の態様は、Ａｂ−４Ｖｌ（配列番号２４６）及びＡｂ−４Ｖｈ（配列番号２１２）ドメインを含む単離モノクローナル抗体を含み、ここで、該抗体は、リンカー及び薬物をさらに含む。本発明の態様は、Ａｂ−５Ｖｌ（配列番号２４８）及びＡｂ−５Ｖｈ（配列番号２１４）ドメインを含む単離モノクローナル抗体を含み、ここで、該抗体は、リンカー及び薬物をさらに含む。本発明の態様は、Ａｂ−６Ｖｌ（配列番号２５０）及びＡｂ−６Ｖｈ（配列番号２１６）ドメインを含む単離モノクローナル抗体を含み、ここで、該抗体は、リンカー及び薬物をさらに含む。本発明の態様は、Ａｂ−７Ｖｌ（配列番号２５２）及びＡｂ−７Ｖｈ（配列番号２１８）ドメインを含む単離モノクローナル抗体を含み、ここで、該抗体は、リンカー及び薬物をさらに含む。本発明の態様は、Ａｂ−８Ｖｌ（配列番号２５４）及びＡｂ−８Ｖｈ（配列番号２２０）ドメインを含む単離モノクローナル抗体を含み、ここで、該抗体は、リンカー及び薬物をさらに含む。本発明の態様は、Ａｂ−９Ｖｌ（配列番号２５６）及びＡｂ−９Ｖｈ（配列番号２２２）ドメインを含む単離モノクローナル抗体を含み、ここで、該抗体は、リンカー及び薬物をさらに含む。本発明の態様は、Ａｂ−１０Ｖｌ（配列番号２５８）及びＡｂ−１０Ｖｈ（配列番号２２４）ドメインを含む単離モノクローナル抗体を含み、ここで、該抗体は、リンカー及び薬物をさらに含む。本発明の態様は、Ａｂ−１１Ｖｌ（配列番号２６０）及びＡｂ−１１Ｖｈ（配列番号２２６）ドメインを含む単離モノクローナル抗体を含み、ここで、該抗体は、リンカー及び薬物をさらに含む。本発明の態様は、Ａｂ−１２Ｖｌ（配列番号２６２）及びＡｂ−１２Ｖｈ（配列番号２２８）ドメインを含む単離モノクローナル抗体を含み、ここで、該抗体は、リンカー及び薬物をさらに含む。本発明の態様は、Ａｂ−１３Ｖｌ（配列番号２６４）及びＡｂ−１３Ｖｈ（配列番号２３０）ドメインを含む単離モノクローナル抗体を含み、ここで、該抗体は、リンカー及び薬物をさらに含む。本発明の態様は、Ａｂ−１４Ｖｌ（配列番号２６６）及びＡｂ−１４Ｖｈ（配列番号２３２）ドメインを含む単離モノクローナル抗体を含み、ここで、該抗体は、リンカー及び薬物をさらに含む。本発明の態様は、Ａｂ−１５Ｖｌ（配列番号２６８）及びＡｂ−１５Ｖｈ（配列番号２３４）ドメインを含む単離モノクローナル抗体を含み、ここで、該抗体は、リンカー及び薬物をさらに含む。本発明の態様は、Ａｂ−１６Ｖｌ（配列番号２７０）及びＡｂ−１６Ｖｈ（配列番号２３６）ドメインを含む単離モノクローナル抗体を含み、ここで、該抗体は、リンカー及び薬物をさらに含む。本発明の態様は、Ａｂ−１７Ｖｌ（配列番号２７２）及びＡｂ−１７Ｖｈ（配列番号２３８）ドメインを含む単離モノクローナル抗体を含み、ここで、該抗体は、リンカー及び薬物をさらに含む。前述の実施形態の態様は、ヒトモノクローナル抗体、ヒトモノクローナルＩｇＧ抗体、及びヒトモノクローナルＩｇＧ１抗体を含む。本発明の態様は、前述のもののフラグメント、誘導体、変異タンパク質、及び変異体を含む。
【０１９１】
本発明の態様は、Ａｂ−１軽鎖（配列番号２８０）及びＡｂ−１重鎖（配列番号２７４）を含む単離モノクローナル抗体を含み、ここで、該抗体は、リンカー及び薬物をさらに含む。本発明の態様は、Ａｂ−２軽鎖（配列番号２８２）及びＡｂ−２重鎖（配列番号２７６）を含む単離モノクローナル抗体を含み、ここで、該抗体は、リンカー及び薬物をさらに含む。本発明の態様は、Ａｂ−３軽鎖（配列番号２８４）及びＡｂ−３重鎖（配列番号２７８）を含む単離モノクローナル抗体を含み、ここで、該抗体は、リンカー及び薬物をさらに含む。本発明の態様は、２つのＡｂ−１軽鎖（配列番号２８０）及び２つのＡｂ−１重鎖（配列番号２７４）を含む単離モノクローナル抗体を含み、ここで、該抗体は、リンカー及び薬物をさらに含む。本発明の態様は、２つのＡｂ−２軽鎖（配列番号２８２）及び２つのＡｂ−２重鎖（配列番号２７６）を含む単離モノクローナル抗体を含み、ここで、該抗体は、リンカー及び薬物をさらに含む。本発明の態様は、２つのＡｂ−３軽鎖（配列番号２８４）及び２つのＡｂ−３重鎖（配列番号２７８）を含む単離モノクローナル抗体を含み、ここで、該抗体は、リンカー及び薬物をさらに含む。前述の実施形態の態様は、ヒトモノクローナル抗体、ヒトモノクローナルＩｇＧ抗体、及びヒトモノクローナルＩｇＧ１抗体を含む。本発明の態様は、前述のもののフラグメント、誘導体、変異タンパク質、及び変異体を含む。
【０１９２】
本発明の態様は、Ａｂ−１の６つのＣＤＲを含む単離モノクローナル抗体を含み、ここで、ＣＤＲは、Ｖｈ−ＣＤＲ１（配列番号４）、Ｖｈ−ＣＤＲ２（配列番号５）、Ｖｈ−ＣＤＲ３（配列番号６）、Ｖｌ−ＣＤＲ１（配列番号１０６）、Ｖｌ−ＣＤＲ２（配列番号１０７）、及びＶｌ−ＣＤＲ３（配列番号１０８）の１、２、３、４、５、または６つを超えないアミノ酸付加、欠失、または置換を含み、該抗体は、リンカー及び薬物をさらに含む。本発明の態様は、Ａｂ−２の６つのＣＤＲを含む単離モノクローナル抗体を含み、ここで、ＣＤＲは、Ｖｈ−ＣＤＲ１（配列番号１０）、Ｖｈ−ＣＤＲ２（配列番号１１）、Ｖｈ−ＣＤＲ３（配列番号１２）、Ｖｌ−ＣＤＲ１（配列番号１１２）、Ｖｌ−ＣＤＲ２（配列番号１１３）、及びＶｌ−ＣＤＲ３（配列番号１１４）の１、２、３、４、５、または６つを超えないアミノ酸付加、欠失、または置換を含み、該抗体は、リンカー及び薬物をさらに含む。本発明の態様は、Ａｂ−３の６つのＣＤＲを含む単離モノクローナル抗体を含み、ここで、ＣＤＲは、Ｖｈ−ＣＤＲ１（配列番号１６）、Ｖｈ−ＣＤＲ２（配列番号１７）、Ｖｈ−ＣＤＲ３（配列番号１８）、Ｖｌ−ＣＤＲ１（配列番号１１８）、Ｖｌ−ＣＤＲ２（配列番号１１９）、及びＶｌ−ＣＤＲ３（配列番号１２０）の１、２、３、４、５、または６つを超えないアミノ酸付加、欠失、または置換を含み、該抗体は、リンカー及び薬物をさらに含む。本発明の態様は、Ａｂ−４の６つのＣＤＲを含む単離モノクローナル抗体を含み、ここで、ＣＤＲは、Ｖｈ−ＣＤＲ１（配列番号２２）、Ｖｈ−ＣＤＲ２（配列番号２３）、Ｖｈ−ＣＤＲ３（配列番号２４）、Ｖｌ−ＣＤＲ１（配列番号１２４）、Ｖｌ−ＣＤＲ２（配列番号１２５）、及びＶｌ−ＣＤＲ３（配列番号１２６）の１、２、３、４、５、または６つを超えないアミノ酸付加、欠失、または置換を含み、該抗体は、リンカー及び薬物をさらに含む。本発明の態様は、Ａｂ−５の６つのＣＤＲを含む単離モノクローナル抗体を含み、ここで、ＣＤＲは、Ｖｈ−ＣＤＲ１（配列番号２８）、Ｖｈ−ＣＤＲ２（配列番号２９）、Ｖｈ−ＣＤＲ３（配列番号３０）、Ｖｌ−ＣＤＲ１（配列番号１３０）、Ｖｌ−ＣＤＲ２（配列番号１３１）、及びＶｌ−ＣＤＲ３（配列番号１３２）の１、２、３、４、５、または６つを超えないアミノ酸付加、欠失、または置換を含み、該抗体は、リンカー及び薬物をさらに含む。本発明の態様は、Ａｂ−６の６つのＣＤＲを含む単離モノクローナル抗体を含み、ここで、ＣＤＲは、Ｖｈ−ＣＤＲ１（配列番号３４）、Ｖｈ−ＣＤＲ２（配列番号３５）、Ｖｈ−ＣＤＲ３（配列番号３６）、Ｖｌ−ＣＤＲ１（配列番号１３６）、Ｖｌ−ＣＤＲ２（配列番号１３７）、及びＶｌ−ＣＤＲ３（配列番号１３８）の１、２、３、４、５、または６つを超えないアミノ酸付加、欠失、または置換を含み、該抗体は、リンカー及び薬物をさらに含む。本発明の態様は、Ａｂ−７の６つのＣＤＲを含む単離モノクローナル抗体を含み、ここで、ＣＤＲは、Ｖｈ−ＣＤＲ１（配列番号４０）、Ｖｈ−ＣＤＲ２（配列番号４１）、Ｖｈ−ＣＤＲ３（配列番号４２）、Ｖｌ−ＣＤＲ１（配列番号１４２）、Ｖｌ−ＣＤＲ２（配列番号１４３）、及びＶｌ−ＣＤＲ３（配列番号１４４）の１、２、３、４、５、または６つを超えないアミノ酸付加、欠失、または置換を含み、該抗体は、リンカー及び薬物をさらに含む。本発明の態様は、Ａｂ−８の６つのＣＤＲを含む単離モノクローナル抗体を含み、ここで、ＣＤＲは、Ｖｈ−ＣＤＲ１（配列番号４６）、Ｖｈ−ＣＤＲ２（配列番号４７）、Ｖｈ−ＣＤＲ３（配列番号４８）、Ｖｌ−ＣＤＲ１（配列番号１４８）、Ｖｌ−ＣＤＲ２（配列番号１４９）、及びＶｌ−ＣＤＲ３（配列番号１５０）の１、２、３、４、５、または６つを超えないアミノ酸付加、欠失、または置換を含み、該抗体は、リンカー及び薬物をさらに含む。本発明の態様は、Ａｂ−９の６つのＣＤＲを含む単離モノクローナル抗体を含み、ここで、ＣＤＲは、Ｖｈ−ＣＤＲ１（配列番号５２）、Ｖｈ−ＣＤＲ２（配列番号５３）、Ｖｈ−ＣＤＲ３（配列番号５４）、Ｖｌ−ＣＤＲ１（配列番号１５４）、Ｖｌ−ＣＤＲ２（配列番号１５５）、及びＶｌ−ＣＤＲ３（配列番号１５６）の１、２、３、４、５、または６つを超えないアミノ酸付加、欠失、または置換を含み、該抗体は、リンカー及び薬物をさらに含む。本発明の態様は、Ａｂ−１０の６つのＣＤＲを含む単離モノクローナル抗体を含み、ここで、ＣＤＲは、Ｖｈ−ＣＤＲ１（配列番号５８）、Ｖｈ−ＣＤＲ２（配列番号５９）、Ｖｈ−ＣＤＲ３（配列番号６０）、Ｖｌ−ＣＤＲ１（配列番号１６０）、Ｖｌ−ＣＤＲ２（配列番号１６１）、及びＶｌ−ＣＤＲ３（配列番号１６２）の１、２、３、４、５、または６つを超えないアミノ酸付加、欠失、または置換を含み、該抗体は、リンカー及び薬物をさらに含む。本発明の態様は、Ａｂ−１１の６つのＣＤＲを含む単離モノクローナル抗体を含み、ここで、ＣＤＲは、Ｖｈ−ＣＤＲ１（配列番号６４）、Ｖｈ−ＣＤＲ２（配列番号６５）、Ｖｈ−ＣＤＲ３（配列番号６６）、Ｖｌ−ＣＤＲ１（配列番号１６６）、Ｖｌ−ＣＤＲ２（配列番号１６７）、及びＶｌ−ＣＤＲ３（配列番号１６８）の１、２、３、４、５、または６つを超えないアミノ酸付加、欠失、または置換を含み、該抗体は、リンカー及び薬物をさらに含む。本発明の態様は、Ａｂ−１２の６つのＣＤＲを含む単離モノクローナル抗体を含み、ここで、ＣＤＲは、Ｖｈ−ＣＤＲ１（配列番号７０）、Ｖｈ−ＣＤＲ２（配列番号７１）、Ｖｈ−ＣＤＲ３（配列番号７２）、Ｖｌ−ＣＤＲ１（配列番号１７２）、Ｖｌ−ＣＤＲ２（配列番号１７３）、及びＶｌ−ＣＤＲ３（配列番号１７４）の１、２、３、４、５、または６つを超えないアミノ酸付加、欠失、または置換を含み、該抗体は、リンカー及び薬物をさらに含む。本発明の態様は、Ａｂ−１３の６つのＣＤＲを含む単離モノクローナル抗体を含み、ここで、ＣＤＲは、Ｖｈ−ＣＤＲ１（配列番号７６）、Ｖｈ−ＣＤＲ２（配列番号７７）、Ｖｈ−ＣＤＲ３（配列番号７８）、Ｖｌ−ＣＤＲ１（配列番号１７８）、Ｖｌ−ＣＤＲ２（配列番号１７９）、及びＶｌ−ＣＤＲ３（配列番号１８０）の１、２、３、４、５、または６つを超えないアミノ酸付加、欠失、または置換を含み、該抗体は、リンカー及び薬物をさらに含む。本発明の態様は、Ａｂ−１４の６つのＣＤＲを含む単離モノクローナル抗体を含み、ここで、ＣＤＲは、Ｖｈ−ＣＤＲ１（配列番号８２）、Ｖｈ−ＣＤＲ２（配列番号８３）、Ｖｈ−ＣＤＲ３（配列番号８４）、Ｖｌ−ＣＤＲ１（配列番号１８４）、Ｖｌ−ＣＤＲ２（配列番号１８５）、及びＶｌ−ＣＤＲ３（配列番号１８６）の１、２、３、４、５、または６つを超えないアミノ酸付加、欠失、または置換を含み、該抗体は、リンカー及び薬物をさらに含む。本発明の態様は、Ａｂ−１５の６つのＣＤＲを含む単離モノクローナル抗体を含み、ここで、ＣＤＲは、Ｖｈ−ＣＤＲ１（配列番号８８）、Ｖｈ−ＣＤＲ２（配列番号８９）、Ｖｈ−ＣＤＲ３（配列番号９０）、Ｖｌ−ＣＤＲ１（配列番号１９０）、Ｖｌ−ＣＤＲ２（配列番号１９１）、及びＶｌ−ＣＤＲ３（配列番号１９２）の１、２、３、４、５、または６つを超えないアミノ酸付加、欠失、または置換を含み、該抗体は、リンカー及び薬物をさらに含む。本発明の態様は、Ａｂ−１６の６つのＣＤＲを含む単離モノクローナル抗体を含み、ここで、ＣＤＲは、Ｖｈ−ＣＤＲ１（配列番号９４）、Ｖｈ−ＣＤＲ２（配列番号９５）、Ｖｈ−ＣＤＲ３（配列番号９６）、Ｖｌ−ＣＤＲ１（配列番号１９６）、Ｖｌ−ＣＤＲ２（配列番号１９７）、及びＶｌ−ＣＤＲ３（配列番号１９８）の１、２、３、４、５、または６つを超えないアミノ酸付加、欠失、または置換を含み、該抗体は、リンカー及び薬物をさらに含む。本発明の態様は、Ａｂ−１７の６つのＣＤＲを含む単離モノクローナル抗体を含み、ここで、ＣＤＲは、Ｖｈ−ＣＤＲ１（配列番号１００）、Ｖｈ−ＣＤＲ２（配列番号１０１）、Ｖｈ−ＣＤＲ３（配列番号１０２）、Ｖｌ−ＣＤＲ１（配列番号２０２）、Ｖｌ−ＣＤＲ２（配列番号２０３）、及びＶｌ−ＣＤＲ３（配列番号２０４）の１、２、３、４、５、または６つを超えないアミノ酸付加、欠失、または置換を含み、該抗体は、リンカー及び薬物をさらに含む。前述の実施形態の態様は、ヒトモノクローナル抗体、ヒトモノクローナルＩｇＧ抗体、及びヒトモノクローナルＩｇＧ１抗体を含む。
【０１９３】
本発明の態様は、それぞれ、Ａｂ−１Ｖｌ（配列番号２４０）及びＡｂ−１Ｖｈ（配列番号２０６）に少なくとも８０％、８１％、８２％、８３％、８４％、８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、または９９％同一なＶｌ及びＶｈアミノ酸配列を含む単離モノクローナル抗体を含み、ここで、該抗体は、リンカー及び薬物をさらに含む。本発明の態様は、それぞれ、Ａｂ−２Ｖｌ（配列番号２４２）及びＡｂ−２Ｖｈ（配列番号２０８）に少なくとも８０％、８１％、８２％、８３％、８４％、８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、または９９％同一なＶｌ及びＶｈアミノ酸配列を含む単離モノクローナル抗体を含み、ここで、該抗体は、リンカー及び薬物をさらに含む。本発明の態様は、それぞれ、Ａｂ−３Ｖｌ（配列番号２４４）及びＡｂ−３Ｖｈ（配列番号２１０）に少なくとも８０％、８１％、８２％、８３％、８４％、８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、または９９％同一なＶｌ及びＶｈアミノ酸配列を含む単離モノクローナル抗体を含み、ここで、該抗体は、リンカー及び薬物をさらに含む。本発明の態様は、それぞれ、Ａｂ−４Ｖｌ（配列番号２４６）及びＡｂ−４Ｖｈ（配列番号２１２）に少なくとも８０％、８１％、８２％、８３％、８４％、８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、または９９％同一なＶｌ及びＶｈアミノ酸配列を含む単離モノクローナル抗体を含み、ここで、該抗体は、リンカー及び薬物をさらに含む。本発明の態様は、それぞれ、Ａｂ−５Ｖｌ（配列番号２４８）及びＡｂ−５Ｖｈ（配列番号２１４）に少なくとも８０％、８１％、８２％、８３％、８４％、８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、または９９％同一なＶｌ及びＶｈアミノ酸配列を含む単離モノクローナル抗体を含み、ここで、該抗体は、リンカー及び薬物をさらに含む。本発明の態様は、それぞれ、Ａｂ−６Ｖｌ（配列番号２５０）及びＡｂ−６Ｖｈ（配列番号２１６）に少なくとも８０％、８１％、８２％、８３％、８４％、８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、または９９％同一なＶｌ及びＶｈアミノ酸配列を含む単離モノクローナル抗体を含み、ここで、該抗体は、リンカー及び薬物をさらに含む。本発明の態様は、それぞれ、Ａｂ−７Ｖｌ（配列番号２５２）及びＡｂ−７Ｖｈ（配列番号２１８）に少なくとも８０％、８１％、８２％、８３％、８４％、８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、または９９％同一なＶｌ及びＶｈアミノ酸配列を含む単離モノクローナル抗体を含み、ここで、該抗体は、リンカー及び薬物をさらに含む。本発明の態様は、それぞれ、Ａｂ−８Ｖｌ（配列番号２５４）及びＡｂ−８Ｖｈ（配列番号２２０）に少なくとも８０％、８１％、８２％、８３％、８４％、８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、または９９％同一なＶｌ及びＶｈアミノ酸配列を含む単離モノクローナル抗体を含み、ここで、該抗体は、リンカー及び薬物をさらに含む。本発明の態様は、それぞれ、Ａｂ−９Ｖｌ（配列番号２５６）及びＡｂ−９Ｖｈ（配列番号２２２）に少なくとも８０％、８１％、８２％、８３％、８４％、８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、または９９％同一なＶｌ及びＶｈアミノ酸配列を含む単離モノクローナル抗体を含み、ここで、該抗体は、リンカー及び薬物をさらに含む。本発明の態様は、それぞれ、Ａｂ−１０Ｖｌ（配列番号２５８）及びＡｂ−１０Ｖｈ（配列番号２２４）に少なくとも８０％、８１％、８２％、８３％、８４％、８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、または９９％同一なＶｌ及びＶｈアミノ酸配列を含む単離モノクローナル抗体を含み、ここで、該抗体は、リンカー及び薬物をさらに含む。本発明の態様は、それぞれ、Ａｂ−１１Ｖｌ（配列番号２６０）及びＡｂ−１１Ｖｈ（配列番号２２６）に少なくとも８０％、８１％、８２％、８３％、８４％、８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、または９９％同一なＶｌ及びＶｈアミノ酸配列を含む単離モノクローナル抗体を含み、ここで、該抗体は、リンカー及び薬物をさらに含む。本発明の態様は、それぞれ、Ａｂ−１２Ｖｌ（配列番号２６２）及びＡｂ−１２Ｖｈ（配列番号２２８）に少なくとも８０％、８１％、８２％、８３％、８４％、８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、または９９％同一なＶｌ及びＶｈアミノ酸配列を含む単離モノクローナル抗体を含み、ここで、該抗体は、リンカー及び薬物をさらに含む。本発明の態様は、それぞれ、Ａｂ−１３Ｖｌ（配列番号２６４）及びＡｂ−１３Ｖｈ（配列番号２３０）に少なくとも８０％、８１％、８２％、８３％、８４％、８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、または９９％同一なＶｌ及びＶｈアミノ酸配列を含む単離モノクローナル抗体を含み、ここで、該抗体は、リンカー及び薬物をさらに含む。本発明の態様は、それぞれ、Ａｂ−１４Ｖｌ（配列番号２６６）及びＡｂ−１４Ｖｈ（配列番号２３２）に少なくとも８０％、８１％、８２％、８３％、８４％、８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、または９９％同一なＶｌ及びＶｈアミノ酸配列を含む単離モノクローナル抗体を含み、ここで、該抗体は、リンカー及び薬物をさらに含む。本発明の態様は、それぞれ、Ａｂ−１５Ｖｌ（配列番号２６８）及びＡｂ−１５Ｖｈ（配列番号２３４）に少なくとも８０％、８１％、８２％、８３％、８４％、８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、または９９％同一なＶｌ及びＶｈアミノ酸配列を含む単離モノクローナル抗体を含み、ここで、該抗体は、リンカー及び薬物をさらに含む。本発明の態様は、それぞれ、Ａｂ−１６Ｖｌ（配列番号２７０）及びＡｂ−１６Ｖｈ（配列番号２３６）に少なくとも８０％、８１％、８２％、８３％、８４％、８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、または９９％同一なＶｌ及びＶｈアミノ酸配列を含む単離モノクローナル抗体を含み、ここで、該抗体は、リンカー及び薬物をさらに含む。本発明の態様は、それぞれ、Ａｂ−１７Ｖｌ（配列番号２７２）及びＡｂ−１７Ｖｈ（配列番号２３８）に少なくとも８０％、８１％、８２％、８３％、８４％、８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、または９９％同一なＶｌ及びＶｈアミノ酸配列を含む単離モノクローナル抗体を含み、ここで、該抗体は、リンカー及び薬物をさらに含む。前述の実施形態の態様は、ヒトモノクローナル抗体、ヒトモノクローナルＩｇＧ抗体、及びヒトモノクローナルＩｇＧ１抗体を含む。
【０１９４】
本発明の態様は、Ａｂ−１軽鎖（配列番号２８０）及びＡｂ−１重鎖（配列番号２７４）に少なくとも８０％、８１％、８２％、８３％、８４％、８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、または９９％同一な単離モノクローナル抗体を含み、ここで、該抗体は、リンカー及び薬物をさらに含む。本発明の態様は、Ａｂ−２軽鎖（配列番号２８２）及びＡｂ−２重鎖（配列番号２７６）に少なくとも８０％、８１％、８２％、８３％、８４％、８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、または９９％同一な単離モノクローナル抗体を含み、ここで、該抗体は、リンカー及び薬物をさらに含む。本発明の態様は、Ａｂ−３軽鎖（配列番号２８４）及びＡｂ−３重鎖（配列番号２７８）に少なくとも８０％、８１％、８２％、８３％、８４％、８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、または９９％同一な単離モノクローナル抗体を含み、ここで、該抗体は、リンカー及び薬物をさらに含む。前述の実施形態の態様は、ヒトモノクローナル抗体、ヒトモノクローナルＩｇＧ抗体、及びヒトモノクローナルＩｇＧ１抗体を含む。
【０１９５】
本発明の態様は、Ａｂ−１の６つのＣＤＲを含む単離モノクローナル抗体を含み、ここで、該抗体は、リンカー及び薬物をさらに含み、該リンカーはＭＣＣであり、該薬物はマイタンシノイド、例えばＤＭ１である。本発明の態様は、Ａｂ−２の６つのＣＤＲを含む単離モノクローナル抗体を含み、ここで、該抗体は、リンカー及び薬物をさらに含み、該リンカーはＭＣＣであり、該薬物はマイタンシノイド、例えばＤＭ１である。本発明の態様は、Ａｂ−３の６つのＣＤＲを含む単離モノクローナル抗体を含み、ここで、該抗体は、リンカー及び薬物をさらに含み、該リンカーはＭＣＣであり、該薬物はマイタンシノイド、例えばＤＭ１である。本発明の態様は、Ａｂ−４の６つのＣＤＲを含む単離モノクローナル抗体を含み、ここで、該抗体は、リンカー及び薬物をさらに含み、該リンカーはＭＣＣであり、該薬物はマイタンシノイド、例えばＤＭ１である。本発明の態様は、Ａｂ−５の６つのＣＤＲを含む単離モノクローナル抗体を含み、ここで、該抗体は、リンカー及び薬物をさらに含み、該リンカーはＭＣＣであり、該薬物はマイタンシノイド、例えばＤＭ１である。本発明の態様は、Ａｂ−６の６つのＣＤＲを含む単離モノクローナル抗体を含み、ここで、該抗体は、リンカー及び薬物をさらに含み、該リンカーはＭＣＣであり、該薬物はマイタンシノイド、例えばＤＭ１である。本発明の態様は、Ａｂ−７の６つのＣＤＲを含む単離モノクローナル抗体を含み、ここで、該抗体は、リンカー及び薬物をさらに含み、該リンカーはＭＣＣであり、該薬物はマイタンシノイド、例えばＤＭ１である。本発明の態様は、Ａｂ−８の６つのＣＤＲを含む単離モノクローナル抗体を含み、ここで、該抗体は、リンカー及び薬物をさらに含み、該リンカーはＭＣＣであり、該薬物はマイタンシノイド、例えばＤＭ１である。本発明の態様は、Ａｂ−９の６つのＣＤＲを含む単離モノクローナル抗体を含み、ここで、該抗体は、リンカー及び薬物をさらに含み、該リンカーはＭＣＣであり、該薬物はマイタンシノイド、例えばＤＭ１である。本発明の態様は、Ａｂ−１０の６つのＣＤＲを含む単離モノクローナル抗体を含み、ここで、該抗体は、リンカー及び薬物をさらに含み、該リンカーはＭＣＣであり、該薬物はマイタンシノイド、例えばＤＭ１である。本発明の態様は、Ａｂ−１１の６つのＣＤＲを含む単離モノクローナル抗体を含み、ここで、該抗体は、リンカー及び薬物をさらに含み、該リンカーはＭＣＣであり、該薬物はマイタンシノイド、例えばＤＭ１である。本発明の態様は、Ａｂ−１２の６つのＣＤＲを含む単離モノクローナル抗体を含み、ここで、該抗体は、リンカー及び薬物をさらに含み、該リンカーはＭＣＣであり、該薬物はマイタンシノイド、例えばＤＭ１である。本発明の態様は、Ａｂ−１３の６つのＣＤＲを含む単離モノクローナル抗体を含み、ここで、該抗体は、リンカー及び薬物をさらに含み、該リンカーはＭＣＣであり、該薬物はマイタンシノイド、例えばＤＭ１である。本発明の態様は、Ａｂ−１４の６つのＣＤＲを含む単離モノクローナル抗体を含み、ここで、該抗体は、リンカー及び薬物をさらに含み、該リンカーはＭＣＣであり、該薬物はマイタンシノイド、例えばＤＭ１である。本発明の態様は、Ａｂ−１５の６つのＣＤＲを含む単離モノクローナル抗体を含み、ここで、該抗体は、リンカー及び薬物をさらに含み、該リンカーはＭＣＣであり、該薬物はマイタンシノイド、例えばＤＭ１である。本発明の態様は、Ａｂ−１６の６つのＣＤＲを含む単離モノクローナル抗体を含み、ここで、該抗体は、リンカー及び薬物をさらに含み、該リンカーはＭＣＣであり、該薬物はマイタンシノイド、例えばＤＭ１である。本発明の態様は、Ａｂ−１７の６つのＣＤＲを含む単離モノクローナル抗体を含み、ここで、該抗体は、リンカー及び薬物をさらに含み、該リンカーはＭＣＣであり、該薬物はマイタンシノイド、例えばＤＭ１である。前述の実施形態の態様は、ヒトモノクローナル抗体、ヒトモノクローナルＩｇＧ抗体、及びヒトモノクローナルＩｇＧ１抗体を含む。
【０１９６】
本発明の態様は、ＡＨｏ、Ｋａｂａｔ、またはＣｌｏｔｈｉａの番号付けシステムのいずれか１つによって決定される、Ａｂ−１の６つのＣＤＲを含む単離モノクローナル抗体を含み、ここで、該抗体は、リンカー及び薬物をさらに含み、該リンカーはＭＣＣであり、該薬物はマイタンシノイド、例えばＤＭ１である。本発明の態様は、ＡＨｏ、Ｋａｂａｔ、またはＣｌｏｔｈｉａの番号付けシステムのいずれか１つによって決定される、Ａｂ−２の６つのＣＤＲを含む単離モノクローナル抗体を含み、ここで、該抗体は、リンカー及び薬物をさらに含み、該リンカーはＭＣＣであり、該薬物はマイタンシノイド、例えばＤＭ１である。本発明の態様は、ＡＨｏ、Ｋａｂａｔ、またはＣｌｏｔｈｉａの番号付けシステムのいずれか１つによって決定される、Ａｂ−３の６つのＣＤＲを含む単離モノクローナル抗体を含み、ここで、該抗体は、リンカー及び薬物をさらに含み、該リンカーはＭＣＣであり、該薬物はマイタンシノイド、例えばＤＭ１である。本発明の態様は、ＡＨｏ、Ｋａｂａｔ、またはＣｌｏｔｈｉａの番号付けシステムのいずれか１つによって決定される、Ａｂ−４の６つのＣＤＲを含む単離モノクローナル抗体を含み、ここで、該抗体は、リンカー及び薬物をさらに含み、該リンカーはＭＣＣであり、該薬物はマイタンシノイド、例えばＤＭ１である。本発明の態様は、ＡＨｏ、Ｋａｂａｔ、またはＣｌｏｔｈｉａの番号付けシステムのいずれか１つによって決定される、Ａｂ−５の６つのＣＤＲを含む単離モノクローナル抗体を含み、ここで、該抗体は、リンカー及び薬物をさらに含み、該リンカーはＭＣＣであり、該薬物はマイタンシノイド、例えばＤＭ１である。本発明の態様は、ＡＨｏ、Ｋａｂａｔ、またはＣｌｏｔｈｉａの番号付けシステムのいずれか１つによって決定される、Ａｂ−６の６つのＣＤＲを含む単離モノクローナル抗体を含み、ここで、該抗体は、リンカー及び薬物をさらに含み、該リンカーはＭＣＣであり、該薬物はマイタンシノイド、例えばＤＭ１である。本発明の態様は、ＡＨｏ、Ｋａｂａｔ、またはＣｌｏｔｈｉａの番号付けシステムのいずれか１つによって決定される、Ａｂ−７の６つのＣＤＲを含む単離モノクローナル抗体を含み、ここで、該抗体は、リンカー及び薬物をさらに含み、該リンカーはＭＣＣであり、該薬物はマイタンシノイド、例えばＤＭ１である。本発明の態様は、ＡＨｏ、Ｋａｂａｔ、またはＣｌｏｔｈｉａの番号付けシステムのいずれか１つによって決定される、Ａｂ−８の６つのＣＤＲを含む単離モノクローナル抗体を含み、ここで、該抗体は、リンカー及び薬物をさらに含み、該リンカーはＭＣＣであり、該薬物はマイタンシノイド、例えばＤＭ１である。本発明の態様は、ＡＨｏ、Ｋａｂａｔ、またはＣｌｏｔｈｉａの番号付けシステムのいずれか１つによって決定される、Ａｂ−９の６つのＣＤＲを含む単離モノクローナル抗体を含み、ここで、該抗体は、リンカー及び薬物をさらに含み、該リンカーはＭＣＣであり、該薬物はマイタンシノイド、例えばＤＭ１である。本発明の態様は、ＡＨｏ、Ｋａｂａｔ、またはＣｌｏｔｈｉａの番号付けシステムのいずれか１つによって決定される、Ａｂ−１０の６つのＣＤＲを含む単離モノクローナル抗体を含み、ここで、該抗体は、リンカー及び薬物をさらに含み、該リンカーはＭＣＣであり、該薬物はマイタンシノイド、例えばＤＭ１である。本発明の態様は、ＡＨｏ、Ｋａｂａｔ、またはＣｌｏｔｈｉａの番号付けシステムのいずれか１つによって決定される、Ａｂ−１１の６つのＣＤＲを含む単離モノクローナル抗体を含み、ここで、該抗体は、リンカー及び薬物をさらに含み、該リンカーはＭＣＣであり、該薬物はマイタンシノイド、例えばＤＭ１である。本発明の態様は、ＡＨｏ、Ｋａｂａｔ、またはＣｌｏｔｈｉａの番号付けシステムのいずれか１つによって決定される、Ａｂ−１２の６つのＣＤＲを含む単離モノクローナル抗体を含み、ここで、該抗体は、リンカー及び薬物をさらに含み、該リンカーはＭＣＣであり、該薬物はマイタンシノイド、例えばＤＭ１である。本発明の態様は、ＡＨｏ、Ｋａｂａｔ、またはＣｌｏｔｈｉａの番号付けシステムのいずれか１つによって決定される、Ａｂ−１３の６つのＣＤＲを含む単離モノクローナル抗体を含み、ここで、該抗体は、リンカー及び薬物をさらに含み、該リンカーはＭＣＣであり、該薬物はマイタンシノイド、例えばＤＭ１である。本発明の態様は、ＡＨｏ、Ｋａｂａｔ、またはＣｌｏｔｈｉａの番号付けシステムのいずれか１つによって決定される、Ａｂ−１４の６つのＣＤＲを含む単離モノクローナル抗体を含み、ここで、該抗体は、リンカー及び薬物をさらに含み、該リンカーはＭＣＣであり、該薬物はマイタンシノイド、例えばＤＭ１である。本発明の態様は、ＡＨｏ、Ｋａｂａｔ、またはＣｌｏｔｈｉａの番号付けシステムのいずれか１つによって決定される、Ａｂ−１５の６つのＣＤＲを含む単離モノクローナル抗体を含み、ここで、該抗体は、リンカー及び薬物をさらに含み、該リンカーはＭＣＣであり、該薬物はマイタンシノイド、例えばＤＭ１である。本発明の態様は、ＡＨｏ、Ｋａｂａｔ、またはＣｌｏｔｈｉａの番号付けシステムのいずれか１つによって決定される、Ａｂ−１６の６つのＣＤＲを含む単離モノクローナル抗体を含み、ここで、該抗体は、リンカー及び薬物をさらに含み、該リンカーはＭＣＣであり、該薬物はマイタンシノイド、例えばＤＭ１である。本発明の態様は、ＡＨｏ、Ｋａｂａｔ、またはＣｌｏｔｈｉａの番号付けシステムのいずれか１つによって決定される、Ａｂ−１７の６つのＣＤＲを含む単離モノクローナル抗体を含み、ここで、該抗体は、リンカー及び薬物をさらに含み、該リンカーはＭＣＣであり、該薬物はマイタンシノイド、例えばＤＭ１である。前述の実施形態の態様は、ヒトモノクローナル抗体、ヒトモノクローナルＩｇＧ抗体、及びヒトモノクローナルＩｇＧ１抗体を含む。
【０１９７】
本発明の態様は、Ａｂ−１の６つのＣＤＲ、特に、Ｖｈ−ＣＤＲ１（配列番号４）、Ｖｈ−ＣＤＲ２（配列番号５）、Ｖｈ−ＣＤＲ３（配列番号６）、Ｖｌ−ＣＤＲ１（配列番号１０６）、Ｖｌ−ＣＤＲ２（配列番号１０７）、及びＶｌ−ＣＤＲ３（配列番号１０８）を含む単離モノクローナル抗体を含み、ここで、該抗体は、リンカー及び薬物をさらに含み、該リンカーはＭＣＣであり、該薬物はマイタンシノイド、例えばＤＭ１である。本発明の態様は、Ａｂ−２の６つのＣＤＲ、特に、Ｖｈ−ＣＤＲ１（配列番号１０）、Ｖｈ−ＣＤＲ２（配列番号１１）、Ｖｈ−ＣＤＲ３（配列番号１２）、Ｖｌ−ＣＤＲ１（配列番号１１２）、Ｖｌ−ＣＤＲ２（配列番号１１３）、及びＶｌ−ＣＤＲ３（配列番号１１４）を含む単離モノクローナル抗体を含み、ここで、該抗体は、リンカー及び薬物をさらに含み、該リンカーはＭＣＣであり、該薬物はマイタンシノイド、例えばＤＭ１である。本発明の態様は、Ａｂ−３の６つのＣＤＲ、特に、Ｖｈ−ＣＤＲ１（配列番号１６）、Ｖｈ−ＣＤＲ２（配列番号１７）、Ｖｈ−ＣＤＲ３（配列番号１８）、Ｖｌ−ＣＤＲ１（配列番号１１８）、Ｖｌ−ＣＤＲ２（配列番号１１９）、及びＶｌ−ＣＤＲ３（配列番号１２０）を含む単離モノクローナル抗体を含み、ここで、該抗体は、リンカー及び薬物をさらに含み、該リンカーはＭＣＣであり、該薬物はマイタンシノイド、例えばＤＭ１である。本発明の態様は、Ａｂ−４の６つのＣＤＲ、特に、Ｖｈ−ＣＤＲ１（配列番号２２）、Ｖｈ−ＣＤＲ２（配列番号２３）、Ｖｈ−ＣＤＲ３（配列番号２４）、Ｖｌ−ＣＤＲ１（配列番号１２４）、Ｖｌ−ＣＤＲ２（配列番号１２５）、及びＶｌ−ＣＤＲ３（配列番号１２６）を含む単離モノクローナル抗体を含み、ここで、該抗体は、リンカー及び薬物をさらに含み、該リンカーはＭＣＣであり、該薬物はマイタンシノイド、例えばＤＭ１である。本発明の態様は、Ａｂ−５の６つのＣＤＲ、特に、Ｖｈ−ＣＤＲ１（配列番号２８）、Ｖｈ−ＣＤＲ２（配列番号２９）、Ｖｈ−ＣＤＲ３（配列番号３０）、Ｖｌ−ＣＤＲ１（配列番号１３０）、Ｖｌ−ＣＤＲ２（配列番号１３１）、及びＶｌ−ＣＤＲ３（配列番号１３２）を含む単離モノクローナル抗体を含み、ここで、該抗体は、リンカー及び薬物をさらに含み、該リンカーはＭＣＣであり、該薬物はマイタンシノイド、例えばＤＭ１である。本発明の態様は、Ａｂ−６の６つのＣＤＲ、特に、Ｖｈ−ＣＤＲ１（配列番号３４）、Ｖｈ−ＣＤＲ２（配列番号３５）、Ｖｈ−ＣＤＲ３（配列番号３６）、Ｖｌ−ＣＤＲ１（配列番号１３６）、Ｖｌ−ＣＤＲ２（配列番号１３７）、及びＶｌ−ＣＤＲ３（配列番号１３８）を含む単離モノクローナル抗体を含み、ここで、該抗体は、リンカー及び薬物をさらに含み、該リンカーはＭＣＣであり、該薬物はマイタンシノイド、例えばＤＭ１である。本発明の態様は、Ａｂ−７の６つのＣＤＲ、特に、Ｖｈ−ＣＤＲ１（配列番号４０）、Ｖｈ−ＣＤＲ２（配列番号４１）、Ｖｈ−ＣＤＲ３（配列番号４２）、Ｖｌ−ＣＤＲ１（配列番号１４２）、Ｖｌ−ＣＤＲ２（配列番号１４３）、及びＶｌ−ＣＤＲ３（配列番号１４４）を含む単離モノクローナル抗体を含み、ここで、該抗体は、リンカー及び薬物をさらに含み、該リンカーはＭＣＣであり、該薬物はマイタンシノイド、例えばＤＭ１である。本発明の態様は、Ａｂ−８の６つのＣＤＲ、特に、Ｖｈ−ＣＤＲ１（配列番号４６）、Ｖｈ−ＣＤＲ２（配列番号４７）、Ｖｈ−ＣＤＲ３（配列番号４８）、Ｖｌ−ＣＤＲ１（配列番号１４８）、Ｖｌ−ＣＤＲ２（配列番号１４９）、及びＶｌ−ＣＤＲ３（配列番号１５０）を含む単離モノクローナル抗体を含み、ここで、該抗体は、リンカー及び薬物をさらに含み、該リンカーはＭＣＣであり、該薬物はマイタンシノイド、例えばＤＭ１である。本発明の態様は、Ａｂ−９の６つのＣＤＲ、特に、Ｖｈ−ＣＤＲ１（配列番号５２）、Ｖｈ−ＣＤＲ２（配列番号５３）、Ｖｈ−ＣＤＲ３（配列番号５４）、Ｖｌ−ＣＤＲ１（配列番号１５４）、Ｖｌ−ＣＤＲ２（配列番号１５５）、及びＶｌ−ＣＤＲ３（配列番号１５６）を含む単離モノクローナル抗体を含み、ここで、該抗体は、リンカー及び薬物をさらに含み、該リンカーはＭＣＣであり、該薬物はマイタンシノイド、例えばＤＭ１である。本発明の態様は、Ａｂ−１０の６つのＣＤＲ、特に、Ｖｈ−ＣＤＲ１（配列番号５８）、Ｖｈ−ＣＤＲ２（配列番号５９）、Ｖｈ−ＣＤＲ３（配列番号６０）、Ｖｌ−ＣＤＲ１（配列番号１６０）、Ｖｌ−ＣＤＲ２（配列番号１６１）、及びＶｌ−ＣＤＲ３（配列番号１６２）を含む単離モノクローナル抗体を含み、ここで、該抗体は、リンカー及び薬物をさらに含み、該リンカーはＭＣＣであり、該薬物はマイタンシノイド、例えばＤＭ１である。本発明の態様は、Ａｂ−１１の６つのＣＤＲ、特に、Ｖｈ−ＣＤＲ１（配列番号６４）、Ｖｈ−ＣＤＲ２（配列番号６５）、Ｖｈ−ＣＤＲ３（配列番号６６）、Ｖｌ−ＣＤＲ１（配列番号１６６）、Ｖｌ−ＣＤＲ２（配列番号１６７）、及びＶｌ−ＣＤＲ３（配列番号１６８）を含む単離モノクローナル抗体を含み、ここで、該抗体は、リンカー及び薬物をさらに含み、該リンカーはＭＣＣであり、該薬物はマイタンシノイド、例えばＤＭ１である。本発明の態様は、Ａｂ−１２の６つのＣＤＲ、特に、Ｖｈ−ＣＤＲ１（配列番号７０）、Ｖｈ−ＣＤＲ２（配列番号７１）、Ｖｈ−ＣＤＲ３（配列番号７２）、Ｖｌ−ＣＤＲ１（配列番号１７２）、Ｖｌ−ＣＤＲ２（配列番号１７３）、及びＶｌ−ＣＤＲ３（配列番号１７４）を含む単離モノクローナル抗体を含み、ここで、該抗体は、リンカー及び薬物をさらに含み、該リンカーはＭＣＣであり、該薬物はマイタンシノイド、例えばＤＭ１である。本発明の態様は、Ａｂ−１３の６つのＣＤＲ、特に、Ｖｈ−ＣＤＲ１（配列番号７６）、Ｖｈ−ＣＤＲ２（配列番号７７）、Ｖｈ−ＣＤＲ３（配列番号７８）、Ｖｌ−ＣＤＲ１（配列番号１７８）、Ｖｌ−ＣＤＲ２（配列番号１７９）、及びＶｌ−ＣＤＲ３（配列番号１８０）を含む単離モノクローナル抗体を含み、ここで、該抗体は、リンカー及び薬物をさらに含み、該リンカーはＭＣＣであり、該薬物はマイタンシノイド、例えばＤＭ１である。本発明の態様は、Ａｂ−１４の６つのＣＤＲ、特に、Ｖｈ−ＣＤＲ１（配列番号８２）、Ｖｈ−ＣＤＲ２（配列番号８３）、Ｖｈ−ＣＤＲ３（配列番号８４）、Ｖｌ−ＣＤＲ１（配列番号１８４）、Ｖｌ−ＣＤＲ２（配列番号１８５）、及びＶｌ−ＣＤＲ３（配列番号１８６）を含む単離モノクローナル抗体を含み、ここで、該抗体は、リンカー及び薬物をさらに含み、該リンカーはＭＣＣであり、該薬物はマイタンシノイド、例えばＤＭ１である。本発明の態様は、Ａｂ−１５の６つのＣＤＲ、特に、Ｖｈ−ＣＤＲ１（配列番号８８）、Ｖｈ−ＣＤＲ２（配列番号８９）、Ｖｈ−ＣＤＲ３（配列番号９０）、Ｖｌ−ＣＤＲ１（配列番号１９０）、Ｖｌ−ＣＤＲ２（配列番号１９１）、及びＶｌ−ＣＤＲ３（配列番号１９２）を含む単離モノクローナル抗体を含み、ここで、該抗体は、リンカー及び薬物をさらに含み、該リンカーはＭＣＣであり、該薬物はマイタンシノイド、例えばＤＭ１である。本発明の態様は、Ａｂ−１６の６つのＣＤＲ、特に、Ｖｈ−ＣＤＲ１（配列番号９４）、Ｖｈ−ＣＤＲ２（配列番号９５）、Ｖｈ−ＣＤＲ３（配列番号９６）、Ｖｌ−ＣＤＲ１（配列番号１９６）、Ｖｌ−ＣＤＲ２（配列番号１９７）、及びＶｌ−ＣＤＲ３（配列番号１９８）を含む単離モノクローナル抗体を含み、ここで、該抗体は、リンカー及び薬物をさらに含み、該リンカーはＭＣＣであり、該薬物はマイタンシノイド、例えばＤＭ１である。本発明の態様は、Ａｂ−１７の６つのＣＤＲ、特に、Ｖｈ−ＣＤＲ１（配列番号１００）、Ｖｈ−ＣＤＲ２（配列番号１０１）、Ｖｈ−ＣＤＲ３（配列番号１０２）、Ｖｌ−ＣＤＲ１（配列番号２０２）、Ｖｌ−ＣＤＲ２（配列番号２０３）、及びＶｌ−ＣＤＲ３（配列番号２０４）を含む単離モノクローナル抗体を含み、ここで、該抗体は、リンカー及び薬物をさらに含み、該リンカーはＭＣＣであり、該薬物はマイタンシノイド、例えばＤＭ１である。前述の実施形態の態様は、ヒトモノクローナル抗体、ヒトモノクローナルＩｇＧ抗体、及びヒトモノクローナルＩｇＧ１抗体を含む。本発明の態様は、前述のもののフラグメント、誘導体、変異タンパク質、及び変異体を含む。
【０１９８】
本発明の態様は、Ａｂ−１Ｖｌ（配列番号２４０）及びＡｂ−１Ｖｈ（配列番号２０６）ドメインを含む単離モノクローナル抗体を含み、ここで、該抗体は、リンカー及び薬物をさらに含み、該リンカーはＭＣＣであり、該薬物はマイタンシノイド、例えばＤＭ１である。本発明の態様は、Ａｂ−２Ｖｌ（配列番号２４２）及びＡｂ−２Ｖｈ（配列番号２０８）ドメインを含む単離モノクローナル抗体を含み、ここで、該抗体は、リンカー及び薬物をさらに含み、該リンカーはＭＣＣであり、該薬物はマイタンシノイド、例えばＤＭ１である。本発明の態様は、Ａｂ−３Ｖｌ（配列番号２４４）及びＡｂ−３Ｖｈ（配列番号２１０）ドメインを含む単離モノクローナル抗体を含み、ここで、該抗体は、リンカー及び薬物をさらに含み、該リンカーはＭＣＣであり、該薬物はマイタンシノイド、例えばＤＭ１である。本発明の態様は、Ａｂ−４Ｖｌ（配列番号２４６）及びＡｂ−４Ｖｈ（配列番号２１２）ドメインを含む単離モノクローナル抗体を含み、ここで、該抗体は、リンカー及び薬物をさらに含み、該リンカーはＭＣＣであり、該薬物はマイタンシノイド、例えばＤＭ１である。本発明の態様は、Ａｂ−５Ｖｌ（配列番号２４８）及びＡｂ−５Ｖｈ（配列番号２１４）ドメインを含む単離モノクローナル抗体を含み、ここで、該抗体は、リンカー及び薬物をさらに含む。本発明の態様は、Ａｂ−６Ｖｌ（配列番号２５０）及びＡｂ−６Ｖｈ（配列番号２１６）ドメインを含む単離モノクローナル抗体を含み、ここで、該抗体は、リンカー及び薬物をさらに含み、該リンカーはＭＣＣであり、該薬物はマイタンシノイド、例えばＤＭ１である。本発明の態様は、Ａｂ−７Ｖｌ（配列番号２５２）及びＡｂ−７Ｖｈ（配列番号２１８）ドメインを含むモノクローナル抗体であり、ここで、該抗体は、リンカー及び薬物をさらに含み、該リンカーはＭＣＣであり、該薬物はマイタンシノイド、例えばＤＭ１である。本発明の態様は、Ａｂ−８Ｖｌ（配列番号２５４）及びＡｂ−８Ｖｈ（配列番号２２０）ドメインを含む単離モノクローナル抗体を含み、ここで、該抗体は、リンカー及び薬物をさらに含み、該リンカーはＭＣＣであり、該薬物はマイタンシノイド、例えばＤＭ１である。本発明の態様は、Ａｂ−９Ｖｌ（配列番号２５６）及びＡｂ−９Ｖｈ（配列番号２２２）ドメインを含む単離モノクローナル抗体を含み、ここで、該抗体は、リンカー及び薬物をさらに含み、該リンカーはＭＣＣであり、該薬物はマイタンシノイド、例えばＤＭ１である。本発明の態様は、Ａｂ−１０Ｖｌ（配列番号２５８）及びＡｂ−１０Ｖｈ（配列番号２２４）ドメインを含む単離モノクローナル抗体を含み、ここで、該抗体は、リンカー及び薬物をさらに含み、該リンカーはＭＣＣであり、該薬物はマイタンシノイド、例えばＤＭ１である。本発明の態様は、Ａｂ−１１Ｖｌ（配列番号２６０）及びＡｂ−１１Ｖｈ（配列番号２２６）ドメインを含む単離モノクローナル抗体を含み、ここで、該抗体は、リンカー及び薬物をさらに含み、該リンカーはＭＣＣであり、該薬物はマイタンシノイド、例えばＤＭ１である。本発明の態様は、Ａｂ−１２Ｖｌ（配列番号２６２）及びＡｂ−１２Ｖｈ（配列番号２２８）ドメインを含む単離モノクローナル抗体を含み、ここで、該抗体は、リンカー及び薬物をさらに含み、該リンカーはＭＣＣであり、該薬物はマイタンシノイド、例えばＤＭ１である。本発明の態様は、Ａｂ−１３Ｖｌ（配列番号２６４）及びＡｂ−１３Ｖｈ（配列番号２３０）ドメインを含む単離モノクローナル抗体を含み、ここで、該抗体は、リンカー及び薬物をさらに含み、該リンカーはＭＣＣであり、該薬物はマイタンシノイド、例えばＤＭ１である。本発明の態様は、Ａｂ−１４Ｖｌ（配列番号２６６）及びＡｂ−１４Ｖｈ（配列番号２３２）ドメインを含む単離モノクローナル抗体を含み、ここで、該抗体は、リンカー及び薬物をさらに含み、該リンカーはＭＣＣであり、該薬物はマイタンシノイド、例えばＤＭ１である。本発明の態様は、Ａｂ−１５Ｖｌ（配列番号２６８）及びＡｂ−１５Ｖｈ（配列番号２３４）ドメインを含む単離モノクローナル抗体を含み、ここで、該抗体は、リンカー及び薬物をさらに含み、該リンカーはＭＣＣであり、該薬物はマイタンシノイド、例えばＤＭ１である。本発明の態様は、Ａｂ−１６Ｖｌ（配列番号２７０）及びＡｂ−１６Ｖｈ（配列番号２３６）ドメインを含む単離モノクローナル抗体を含み、ここで、該抗体は、リンカー及び薬物をさらに含み、該リンカーはＭＣＣであり、該薬物はマイタンシノイド、例えばＤＭ１である。本発明の態様は、Ａｂ−１７Ｖｌ（配列番号２７２）及びＡｂ−１７Ｖｈ（配列番号２３８）ドメインを含む単離モノクローナル抗体を含み、ここで、該抗体は、リンカー及び薬物をさらに含み、該リンカーはＭＣＣであり、該薬物はマイタンシノイド、例えばＤＭ１である。前述の実施形態の態様は、ヒトモノクローナル抗体、ヒトモノクローナルＩｇＧ抗体、及びヒトモノクローナルＩｇＧ１抗体を含む。本発明の態様は、前述のもののフラグメント、誘導体、変異タンパク質、及び変異体を含む。
【０１９９】
本発明の態様は、Ａｂ−１軽鎖（配列番号２８０）及びＡｂ−１重鎖（配列番号２７４）を含む単離モノクローナル抗体を含み、ここで、該抗体は、リンカー及び薬物をさらに含み、該リンカーはＭＣＣであり、該薬物はマイタンシノイド、例えばＤＭ１である。本発明の態様は、Ａｂ−２軽鎖（配列番号２８２）及びＡｂ−２重鎖（配列番号２７６）を含む単離モノクローナル抗体を含み、ここで、該抗体は、リンカー及び薬物をさらに含み、該リンカーはＭＣＣであり、該薬物はマイタンシノイド、例えばＤＭ１である。本発明の態様は、Ａｂ−３軽鎖（配列番号２８４）及びＡｂ−３重鎖（配列番号２７８）を含む単離モノクローナル抗体を含み、ここで、該抗体は、リンカー及び薬物をさらに含み、該リンカーはＭＣＣであり、該薬物はマイタンシノイド、例えばＤＭ１である。本発明の態様は、２つのＡｂ−１軽鎖（配列番号２８０）及び２つのＡｂ−１重鎖（配列番号２７４）を含む単離モノクローナル抗体を含み、ここで、該抗体は、リンカー及び薬物をさらに含み、該リンカーはＭＣＣであり、該薬物はマイタンシノイド、例えばＤＭ１である。本発明の態様は、２つのＡｂ−２軽鎖（配列番号２８２）及び２つのＡｂ−２重鎖（配列番号２７６）を含む単離モノクローナル抗体を含み、ここで、該抗体は、リンカー及び薬物をさらに含み、該リンカーはＭＣＣであり、該薬物はマイタンシノイド、例えばＤＭ１である。本発明の態様は、２つのＡｂ−３軽鎖（配列番号２８４）及び２つのＡｂ−３重鎖（配列番号２７８）を含む単離モノクローナル抗体を含み、ここで、該抗体は、リンカー及び薬物をさらに含み、該リンカーはＭＣＣであり、該薬物はマイタンシノイド、例えばＤＭ１である。前述の実施形態の態様は、ヒトモノクローナル抗体、ヒトモノクローナルＩｇＧ抗体、及びヒトモノクローナルＩｇＧ１抗体を含む。本発明の態様は、前述のもののフラグメント、誘導体、変異タンパク質、及び変異体を含む。
【０２００】
本発明の態様は、Ａｂ−１の６つのＣＤＲを含む単離モノクローナル抗体を含み、ここで、ＣＤＲは、Ｖｈ−ＣＤＲ１（配列番号４）、Ｖｈ−ＣＤＲ２（配列番号５）、Ｖｈ−ＣＤＲ３（配列番号６）、Ｖｌ−ＣＤＲ１（配列番号１０６）、Ｖｌ−ＣＤＲ２（配列番号１０７）、及びＶｌ−ＣＤＲ３（配列番号１０８）の１、２、３、４、５、または６つを超えないアミノ酸付加、欠失、または置換を含み、該抗体は、リンカー及び薬物をさらに含み、該リンカーはＭＣＣであり、該薬物はマイタンシノイド、例えばＤＭ１である。本発明の態様は、Ａｂ−２の６つのＣＤＲを含む単離モノクローナル抗体を含み、ここで、ＣＤＲは、Ｖｈ−ＣＤＲ１（配列番号１０）、Ｖｈ−ＣＤＲ２（配列番号１１）、Ｖｈ−ＣＤＲ３（配列番号１２）、Ｖｌ−ＣＤＲ１（配列番号１１２）、Ｖｌ−ＣＤＲ２（配列番号１１３）、及びＶｌ−ＣＤＲ３（配列番号１１４）の１、２、３、４、５、または６つを超えないアミノ酸付加、欠失、または置換を含み、該抗体は、リンカー及び薬物をさらに含み、該リンカーはＭＣＣであり、該薬物はマイタンシノイド、例えばＤＭ１である。本発明の態様は、Ａｂ−３の６つのＣＤＲを含む単離モノクローナル抗体を含み、ここで、ＣＤＲは、Ｖｈ−ＣＤＲ１（配列番号１６）、Ｖｈ−ＣＤＲ２（配列番号１７）、Ｖｈ−ＣＤＲ３（配列番号１８）、Ｖｌ−ＣＤＲ１（配列番号１１８）、Ｖｌ−ＣＤＲ２（配列番号１１９）、及びＶｌ−ＣＤＲ３（配列番号１２０）の１、２、３、４、５、または６つを超えないアミノ酸付加、欠失、または置換を含み、該抗体は、リンカー及び薬物をさらに含み、該リンカーはＭＣＣであり、該薬物はマイタンシノイド、例えばＤＭ１である。本発明の態様は、Ａｂ−４の６つのＣＤＲを含む単離モノクローナル抗体を含み、ここで、ＣＤＲは、Ｖｈ−ＣＤＲ１（配列番号２２）、Ｖｈ−ＣＤＲ２（配列番号２３）、Ｖｈ−ＣＤＲ３（配列番号２４）、Ｖｌ−ＣＤＲ１（配列番号１２４）、Ｖｌ−ＣＤＲ２（配列番号１２５）、及びＶｌ−ＣＤＲ３（配列番号１２６）の１、２、３、４、５、または６つを超えないアミノ酸付加、欠失、または置換を含み、該抗体は、リンカー及び薬物をさらに含み、該リンカーはＭＣＣであり、該薬物はマイタンシノイド、例えばＤＭ１である。本発明の態様は、Ａｂ−５の６つのＣＤＲを含む単離モノクローナル抗体を含み、ここで、ＣＤＲは、Ｖｈ−ＣＤＲ１（配列番号２８）、Ｖｈ−ＣＤＲ２（配列番号２９）、Ｖｈ−ＣＤＲ３（配列番号３０）、Ｖｌ−ＣＤＲ１（配列番号１３０）、Ｖｌ−ＣＤＲ２（配列番号１３１）、及びＶｌ−ＣＤＲ３（配列番号１３２）の１、２、３、４、５、または６つを超えないアミノ酸付加、欠失、または置換を含み、該抗体は、リンカー及び薬物をさらに含み、該リンカーはＭＣＣであり、該薬物はマイタンシノイド、例えばＤＭ１である。本発明の態様は、Ａｂ−６の６つのＣＤＲを含む単離モノクローナル抗体を含み、ここで、ＣＤＲは、Ｖｈ−ＣＤＲ１（配列番号３４）、Ｖｈ−ＣＤＲ２（配列番号３５）、Ｖｈ−ＣＤＲ３（配列番号３６）、Ｖｌ−ＣＤＲ１（配列番号１３６）、Ｖｌ−ＣＤＲ２（配列番号１３７）、及びＶｌ−ＣＤＲ３（配列番号１３８）の１、２、３、４、５、または６つを超えないアミノ酸付加、欠失、または置換を含み、該抗体は、リンカー及び薬物をさらに含み、該リンカーはＭＣＣであり、該薬物はマイタンシノイド、例えばＤＭ１である。本発明の態様は、Ａｂ−７の６つのＣＤＲを含む単離モノクローナル抗体を含み、ここで、ＣＤＲは、Ｖｈ−ＣＤＲ１（配列番号４０）、Ｖｈ−ＣＤＲ２（配列番号４１）、Ｖｈ−ＣＤＲ３（配列番号４２）、Ｖｌ−ＣＤＲ１（配列番号１４２）、Ｖｌ−ＣＤＲ２（配列番号１４３）、及びＶｌ−ＣＤＲ３（配列番号１４４）の１、２、３、４、５、または６つを超えないアミノ酸付加、欠失、または置換を含み、該抗体は、リンカー及び薬物をさらに含み、該リンカーはＭＣＣであり、該薬物はマイタンシノイド、例えばＤＭ１である。本発明の態様は、Ａｂ−８の６つのＣＤＲを含む単離モノクローナル抗体を含み、ここで、ＣＤＲは、Ｖｈ−ＣＤＲ１（配列番号４６）、Ｖｈ−ＣＤＲ２（配列番号４７）、Ｖｈ−ＣＤＲ３（配列番号４８）、Ｖｌ−ＣＤＲ１（配列番号１４８）、Ｖｌ−ＣＤＲ２（配列番号１４９）、及びＶｌ−ＣＤＲ３（配列番号１５０）の１、２、３、４、５、または６つを超えないアミノ酸付加、欠失、または置換を含み、該抗体は、リンカー及び薬物をさらに含み、該リンカーはＭＣＣであり、該薬物はマイタンシノイド、例えばＤＭ１である。本発明の態様は、Ａｂ−９の６つのＣＤＲを含む単離モノクローナル抗体を含み、ここで、ＣＤＲは、Ｖｈ−ＣＤＲ１（配列番号５２）、Ｖｈ−ＣＤＲ２（配列番号５３）、Ｖｈ−ＣＤＲ３（配列番号５４）、Ｖｌ−ＣＤＲ１（配列番号１５４）、Ｖｌ−ＣＤＲ２（配列番号１５５）、及びＶｌ−ＣＤＲ３（配列番号１５６）の１、２、３、４、５、または６つを超えないアミノ酸付加、欠失、または置換を含み、該抗体は、リンカー及び薬物をさらに含み、該リンカーはＭＣＣであり、該薬物はマイタンシノイド、例えばＤＭ１である。本発明の態様は、Ａｂ−１０の６つのＣＤＲを含む単離モノクローナル抗体を含み、ここで、ＣＤＲは、Ｖｈ−ＣＤＲ１（配列番号５８）、Ｖｈ−ＣＤＲ２（配列番号５９）、Ｖｈ−ＣＤＲ３（配列番号６０）、Ｖｌ−ＣＤＲ１（配列番号１６０）、Ｖｌ−ＣＤＲ２（配列番号１６１）、及びＶｌ−ＣＤＲ３（配列番号１６２）の１、２、３、４、５、または６つを超えないアミノ酸付加、欠失、または置換を含み、該抗体は、リンカー及び薬物をさらに含み、該リンカーはＭＣＣであり、該薬物はマイタンシノイド、例えばＤＭ１である。本発明の態様は、Ａｂ−１１の６つのＣＤＲを含む単離モノクローナル抗体を含み、ここで、ＣＤＲは、Ｖｈ−ＣＤＲ１（配列番号６４）、Ｖｈ−ＣＤＲ２（配列番号６５）、Ｖｈ−ＣＤＲ３（配列番号６６）、Ｖｌ−ＣＤＲ１（配列番号１６６）、Ｖｌ−ＣＤＲ２（配列番号１６７）、及びＶｌ−ＣＤＲ３（配列番号１６８）の１、２、３、４、５、または６つを超えないアミノ酸付加、欠失、または置換を含み、該抗体は、リンカー及び薬物をさらに含み、該リンカーはＭＣＣであり、該薬物はマイタンシノイド、例えばＤＭ１である。本発明の態様は、Ａｂ−１２の６つのＣＤＲを含む単離モノクローナル抗体を含み、ここで、ＣＤＲは、Ｖｈ−ＣＤＲ１（配列番号７０）、Ｖｈ−ＣＤＲ２（配列番号７１）、Ｖｈ−ＣＤＲ３（配列番号７２）、Ｖｌ−ＣＤＲ１（配列番号１７２）、Ｖｌ−ＣＤＲ２（配列番号１７３）、及びＶｌ−ＣＤＲ３（配列番号１７４）の１、２、３、４、５、または６つを超えないアミノ酸付加、欠失、または置換を含み、該抗体は、リンカー及び薬物をさらに含み、該リンカーはＭＣＣであり、該薬物はマイタンシノイド、例えばＤＭ１である。本発明の態様は、Ａｂ−１３の６つのＣＤＲを含む単離モノクローナル抗体を含み、ここで、ＣＤＲは、Ｖｈ−ＣＤＲ１（配列番号７６）、Ｖｈ−ＣＤＲ２（配列番号７７）、Ｖｈ−ＣＤＲ３（配列番号７８）、Ｖｌ−ＣＤＲ１（配列番号１７８）、Ｖｌ−ＣＤＲ２（配列番号１７９）、及びＶｌ−ＣＤＲ３（配列番号１８０）の１、２、３、４、５、または６つを超えないアミノ酸付加、欠失、または置換を含み、該抗体は、リンカー及び薬物をさらに含み、該リンカーはＭＣＣであり、該薬物はマイタンシノイド、例えばＤＭ１である。本発明の態様は、Ａｂ−１４の６つのＣＤＲを含む単離モノクローナル抗体を含み、ここで、ＣＤＲは、Ｖｈ−ＣＤＲ１（配列番号８２）、Ｖｈ−ＣＤＲ２（配列番号８３）、Ｖｈ−ＣＤＲ３（配列番号８４）、Ｖｌ−ＣＤＲ１（配列番号１８４）、Ｖｌ−ＣＤＲ２（配列番号１８５）、及びＶｌ−ＣＤＲ３（配列番号１８６）の１、２、３、４、５、または６つを超えないアミノ酸付加、欠失、または置換を含み、該抗体は、リンカー及び薬物をさらに含み、該リンカーはＭＣＣであり、該薬物はマイタンシノイド、例えばＤＭ１である。本発明の態様は、Ａｂ−１５の６つのＣＤＲを含む単離モノクローナル抗体を含み、ここで、ＣＤＲは、Ｖｈ−ＣＤＲ１（配列番号８８）、Ｖｈ−ＣＤＲ２（配列番号８９）、Ｖｈ−ＣＤＲ３（配列番号９０）、Ｖｌ−ＣＤＲ１（配列番号１９０）、Ｖｌ−ＣＤＲ２（配列番号１９１）、及びＶｌ−ＣＤＲ３（配列番号１９２）の１、２、３、４、５、または６つを超えないアミノ酸付加、欠失、または置換を含み、該抗体は、リンカー及び薬物をさらに含み、該リンカーはＭＣＣであり、該薬物はマイタンシノイド、例えばＤＭ１である。本発明の態様は、Ａｂ−１６の６つのＣＤＲを含む単離モノクローナル抗体を含み、ここで、ＣＤＲは、Ｖｈ−ＣＤＲ１（配列番号９４）、Ｖｈ−ＣＤＲ２（配列番号９５）、Ｖｈ−ＣＤＲ３（配列番号９６）、Ｖｌ−ＣＤＲ１（配列番号１９６）、Ｖｌ−ＣＤＲ２（配列番号１９７）、及びＶｌ−ＣＤＲ３（配列番号１９８）の１、２、３、４、５、または６つを超えないアミノ酸付加、欠失、または置換を含み、該抗体は、リンカー及び薬物をさらに含み、該リンカーはＭＣＣであり、該薬物はマイタンシノイド、例えばＤＭ１である。本発明の態様は、Ａｂ−１７の６つのＣＤＲを含む単離モノクローナル抗体を含み、ここで、ＣＤＲは、Ｖｈ−ＣＤＲ１（配列番号１００）、Ｖｈ−ＣＤＲ２（配列番号１０１）、Ｖｈ−ＣＤＲ３（配列番号１０２）、Ｖｌ−ＣＤＲ１（配列番号２０２）、Ｖｌ−ＣＤＲ２（配列番号２０３）、及びＶｌ−ＣＤＲ３（配列番号２０４）の１、２、３、４、５、または６つを超えないアミノ酸付加、欠失、または置換を含み、該抗体は、リンカー及び薬物をさらに含み、該リンカーはＭＣＣであり、該薬物はマイタンシノイド、例えばＤＭ１である。前述の実施形態の態様は、ヒトモノクローナル抗体、ヒトモノクローナルＩｇＧ抗体、及びヒトモノクローナルＩｇＧ１抗体を含む。
【０２０１】
本発明の態様は、それぞれ、Ａｂ−１Ｖｌ（配列番号２４０）及びＡｂ−１Ｖｈ（配列番号２０６）に少なくとも８０％、８１％、８２％、８３％、８４％、８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、または９９％同一なＶｌ及びＶｈアミノ酸配列を含む単離モノクローナル抗体を含み、ここで、該抗体は、リンカー及び薬物をさらに含み、該リンカーはＭＣＣであり、該薬物はマイタンシノイド、例えばＤＭ１である。本発明の態様は、それぞれ、Ａｂ−２Ｖｌ（配列番号２４２）及びＡｂ−２Ｖｈ（配列番号２０８）に少なくとも８０％、８１％、８２％、８３％、８４％、８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、または９９％同一なＶｌ及びＶｈアミノ酸配列を含む単離モノクローナル抗体を含み、ここで、該抗体は、リンカー及び薬物をさらに含み、該リンカーはＭＣＣであり、該薬物はマイタンシノイド、例えばＤＭ１である。本発明の態様は、それぞれ、Ａｂ−３Ｖｌ（配列番号２４４）及びＡｂ−３Ｖｈ（配列番号２１０）に少なくとも８０％、８１％、８２％、８３％、８４％、８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、または９９％同一なＶｌ及びＶｈアミノ酸配列を含む単離モノクローナル抗体を含み、ここで、該抗体は、リンカー及び薬物をさらに含み、該リンカーはＭＣＣであり、該薬物はマイタンシノイド、例えばＤＭ１である。本発明の態様は、それぞれ、Ａｂ−４Ｖｌ（配列番号２４６）及びＡｂ−４Ｖｈ（配列番号２１２）に少なくとも８０％、８１％、８２％、８３％、８４％、８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、または９９％同一なＶｌ及びＶｈアミノ酸配列を含む単離モノクローナル抗体を含み、ここで、該抗体は、リンカー及び薬物をさらに含み、該リンカーはＭＣＣであり、該薬物はマイタンシノイド、例えばＤＭ１である。本発明の態様は、それぞれ、Ａｂ−５Ｖｌ（配列番号２４８）及びＡｂ−５Ｖｈ（配列番号２１４）に少なくとも８０％、８１％、８２％、８３％、８４％、８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、または９９％同一なＶｌ及びＶｈアミノ酸配列を含む単離モノクローナル抗体を含み、ここで、該抗体は、リンカー及び薬物をさらに含み、該リンカーはＭＣＣであり、該薬物はマイタンシノイド、例えばＤＭ１である。本発明の態様は、それぞれ、Ａｂ−６Ｖｌ（配列番号２５０）及びＡｂ−６Ｖｈ（配列番号２１６）に少なくとも８０％、８１％、８２％、８３％、８４％、８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、または９９％同一なＶｌ及びＶｈアミノ酸配列を含む単離モノクローナル抗体を含み、ここで、該抗体は、リンカー及び薬物をさらに含み、該リンカーはＭＣＣであり、該薬物はマイタンシノイド、例えばＤＭ１である。本発明の態様は、それぞれ、Ａｂ−７Ｖｌ（配列番号２５２）及びＡｂ−７Ｖｈ（配列番号２１８）に少なくとも８０％、８１％、８２％、８３％、８４％、８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、または９９％同一なＶｌ及びＶｈアミノ酸配列を含む単離モノクローナル抗体を含み、ここで、該抗体は、リンカー及び薬物をさらに含み、該リンカーはＭＣＣであり、該薬物はマイタンシノイド、例えばＤＭ１である。本発明の態様は、それぞれ、Ａｂ−８Ｖｌ（配列番号２５４）及びＡｂ−８Ｖｈ（配列番号２２０）に少なくとも８０％、８１％、８２％、８３％、８４％、８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、または９９％同一なＶｌ及びＶｈアミノ酸配列を含む単離モノクローナル抗体を含み、ここで、該抗体は、リンカー及び薬物をさらに含み、該リンカーはＭＣＣであり、該薬物はマイタンシノイド、例えばＤＭ１である。本発明の態様は、それぞれ、Ａｂ−９Ｖｌ（配列番号２５６）及びＡｂ−９Ｖｈ（配列番号２２２）に少なくとも８０％、８１％、８２％、８３％、８４％、８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、または９９％同一なＶｌ及びＶｈアミノ酸配列を含む単離モノクローナル抗体を含み、ここで、該抗体は、リンカー及び薬物をさらに含み、該リンカーはＭＣＣであり、該薬物はマイタンシノイド、例えばＤＭ１である。本発明の態様は、それぞれ、Ａｂ−１０Ｖｌ（配列番号２５８）及びＡｂ−１０Ｖｈ（配列番号２２４）に少なくとも８０％、８１％、８２％、８３％、８４％、８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、または９９％同一なＶｌ及びＶｈアミノ酸配列を含む単離モノクローナル抗体を含み、それぞれ、ここで、該抗体は、リンカー及び薬物をさらに含み、該リンカーはＭＣＣであり、該薬物はマイタンシノイド、例えばＤＭ１である。本発明の態様は、それぞれ、Ａｂ−１１Ｖｌ（配列番号２６０）及びＡｂ−１１Ｖｈ（配列番号２２６）に少なくとも８０％、８１％、８２％、８３％、８４％、８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、または９９％同一なＶｌ及びＶｈアミノ酸配列を含む単離モノクローナル抗体を含み、ここで、該抗体は、リンカー及び薬物をさらに含み、該リンカーはＭＣＣであり、該薬物はマイタンシノイド、例えばＤＭ１である。本発明の態様は、それぞれ、Ａｂ−１２Ｖｌ（配列番号２６２）及びＡｂ−１２Ｖｈ（配列番号２２８）に少なくとも８０％、８１％、８２％、８３％、８４％、８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、または９９％同一なＶｌ及びＶｈアミノ酸配列を含む単離モノクローナル抗体を含み、ここで、該抗体は、リンカー及び薬物をさらに含み、該リンカーはＭＣＣであり、該薬物はマイタンシノイド、例えばＤＭ１である。本発明の態様は、それぞれ、Ａｂ−１３Ｖｌ（配列番号２６４）及びＡｂ−１３Ｖｈ（配列番号２３０）に少なくとも８０％、８１％、８２％、８３％、８４％、８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、または９９％同一なＶｌ及びＶｈアミノ酸配列を含む単離モノクローナル抗体を含み、ここで、該抗体は、リンカー及び薬物をさらに含み、該リンカーはＭＣＣであり、該薬物はマイタンシノイド、例えばＤＭ１である。本発明の態様は、それぞれ、Ａｂ−１４Ｖｌ（配列番号２６６）及びＡｂ−１４Ｖｈ（配列番号２３２）に少なくとも８０％、８１％、８２％、８３％、８４％、８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、または９９％同一なＶｌ及びＶｈアミノ酸配列を含む単離モノクローナル抗体を含み、ここで、該抗体は、リンカー及び薬物をさらに含み、該リンカーはＭＣＣであり、該薬物はマイタンシノイド、例えばＤＭ１である。本発明の態様は、それぞれ、Ａｂ−１５Ｖｌ（配列番号２６８）及びＡｂ−１５Ｖｈ（配列番号２３４）に少なくとも８０％、８１％、８２％、８３％、８４％、８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、または９９％同一なＶｌ及びＶｈアミノ酸配列を含む単離モノクローナル抗体を含み、ここで、該抗体は、リンカー及び薬物をさらに含み、該リンカーはＭＣＣであり、該薬物はマイタンシノイド、例えばＤＭ１である。本発明の態様は、それぞれ、Ａｂ−１６Ｖｌ（配列番号２７０）及びＡｂ−１６Ｖｈ（配列番号２３６）に少なくとも８０％、８１％、８２％、８３％、８４％、８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、または９９％同一なＶｌ及びＶｈアミノ酸配列を含む単離モノクローナル抗体を含み、ここで、該抗体は、リンカー及び薬物をさらに含み、該リンカーはＭＣＣであり、該薬物はマイタンシノイド、例えばＤＭ１である。本発明の態様は、それぞれ、Ａｂ−１７Ｖｌ（配列番号２７２）及びＡｂ−１７Ｖｈ（配列番号２３８）に少なくとも８０％、８１％、８２％、８３％、８４％、８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、または９９％同一なＶｌ及びＶｈアミノ酸配列を含む単離モノクローナル抗体を含み、ここで、該抗体は、リンカー及び薬物をさらに含み、該リンカーはＭＣＣであり、該薬物はマイタンシノイド、例えばＤＭ１である。前述の実施形態の態様は、ヒトモノクローナル抗体、ヒトモノクローナルＩｇＧ抗体、及びヒトモノクローナルＩｇＧ１抗体を含む。
【０２０２】
本発明の態様は、Ａｂ−１軽鎖（配列番号２８０）及びＡｂ−１重鎖（配列番号２７４）に少なくとも８０％、８１％、８２％、８３％、８４％、８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、または９９％同一な単離モノクローナル抗体を含み、ここで、該抗体は、リンカー及び薬物をさらに含み、該リンカーはＭＣＣであり、該薬物はマイタンシノイド、例えばＤＭ１である。本発明の態様は、Ａｂ−２軽鎖（配列番号２８２）及びＡｂ−２重鎖（配列番号２７６）に少なくとも８０％、８１％、８２％、８３％、８４％、８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、または９９％同一な単離抗体を含み、ここで、該抗体は、リンカー及び薬物をさらに含み、該リンカーはＭＣＣであり、該薬物はマイタンシノイド、例えばＤＭ１である。本発明の態様は、Ａｂ−３軽鎖（配列番号２８４）及びＡｂ−３重鎖（配列番号２７８）に少なくとも８０％、８１％、８２％、８３％、８４％、８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、または９９％同一な単離モノクローナル抗体を含み、ここで、該抗体は、リンカー及び薬物をさらに含み、該リンカーはＭＣＣであり、該薬物はマイタンシノイド、例えばＤＭ１である。前述の実施形態の態様は、ヒトモノクローナル抗体、ヒトモノクローナルＩｇＧ抗体、及びヒトモノクローナルＩｇＧ１抗体を含む。
【０２０３】
治療目的でのＢＣＭＡ抗原結合タンパク質の使用
本明細書を通じて記載されるＢＣＭＡ抗原結合タンパク質のすべての態様は、本明細書に記載される種々の状態及び疾患の治療のための医薬品の調製において使用され得る。本明細書を通じて記載されるＢＣＭＡ抗原結合タンパク質のすべての態様は、ＢＣＭＡを発現するＢ細胞、ならびに具体的にはメモリーＢ細胞及び形質Ｂ細胞と関連する疾患または状態の治療に使用され得る。ＢＣＭＡは、実施例１に示されるように、悪性形質細胞（多発性骨髄腫及びくすぶり型骨髄腫）、ならびに意義不明の単一クローン性γグロブリン血症（ＭＧＵＳ）形質細胞において、正常形質細胞で観察されるレベルよりも比較的高度なレベルで発現される。
【０２０４】
ＢＣＭＡ  ＡＤＣ、具体的にはＡｂ−１、Ａｂ−２、またはＡｂ−３  ＡＤＣ、及びより具体的にはＡｂ−１  ＡＤＣは、本明細書に様々に記載されるように、悪性Ｂ細胞がそれらの表面上にＢＣＭＡを発現する、Ｂ細胞関連癌を治療するために使用され得る。ＢＣＭＡ  ＡＤＣは、悪性Ｂ細胞の表面上のＢＣＭＡに結合し、受容体に媒介されるエンドサイトーシスによって内部移行され、細胞内で化学療法薬を放出し（典型的には、リソソーム−エンドソーム経路の酸性環境を介して）、それによって悪性細胞を殺滅させる。細胞内で薬物を放出することにより、遊離薬物による非悪性細胞の無関係な殺滅を低減させる。したがって、ＢＣＭＡ  ＡＤＣ、具体的にはＡｂ−１、Ａｂ−２、またはＡｂ−３  ＡＤＣ、及びより具体的にはＡｂ−１  ＡＤＣは、本明細書に様々に記載されるように、Ｂ細胞癌、ならびに具体的に多発性骨髄腫及び悪性形質細胞腫、ならびにＢＣＭＡ＋高悪性度リンパ腫を含むがこれらに限定されない疾患を治療するために使用され得る。ＢＣＭＡ  ＡＤＣ、具体的にはＡｂ−１、Ａｂ−２、またはＡｂ−３  ＡＤＣ、及びより具体的にはＡｂ−１  ＡＤＣは、本明細書に様々に記載されるように、カーレル病及び骨髄腫症；形質細胞性白血病；形質細胞腫；Ｂ細胞性前リンパ急性白血病；有毛細胞性白血病；Ｂ細胞非ホジキンリンパ腫（ＮＨＬ）；急性骨髄性白血病（ＡＭＬ）；慢性骨髄性白血病（ＣＭＬ）；急性リンパ球性白血病（ＡＬＬ）；慢性リンパ球性白血病（ＣＬＬ）；濾胞性リンパ腫（濾胞性非ホジキンリンパ腫型を含む）；バーキットリンパ腫（風土性バーキットリンパ腫；散発性バーキットリンパ腫）；辺縁帯リンパ腫（粘膜関連リンパ組織；ＭＡＬＴ／ＭＡＬＴリンパ腫；単球様Ｂ細胞リンパ腫；絨毛状リンパ球を伴う脾臓リンパ腫）；マントル細胞リンパ腫；大細胞型リンパ腫（びまん性大細胞；びまん性混合細胞；免疫芽球性リンパ腫；原発性縦隔性Ｂ細胞リンパ腫；血管中心性リンパ腫−肺性Ｂ細胞）；小リンパ球性リンパ腫（ＳＬＬ）；前駆Ｂリンパ芽球性リンパ腫；骨髄性白血病（顆粒球性；骨髄性；急性骨髄性白血病；慢性骨髄性白血病；亜急性骨髄性白血病；骨髄性肉腫；緑色腫；顆粒球性肉腫；急性前骨髄球性白血病；急性骨髄単球性白血病）；ヴァルデンストレームマクログロブリン血症、または他のＢ細胞リンパ腫を治療するために使用され得る。
【０２０５】
ＢＣＭＡ  ＡＤＣ、具体的にはＡｂ−１、Ａｂ−２、またはＡｂ−３  ＡＤＣ、及びより具体的にはＡｂ−１  ＡＤＣは、本明細書に様々に記載されるように、手術、放射線療法、及び化学療法、ならびにプロテアソーム阻害剤、コルチコステロイド、及び幹細胞移植等であるがこれらに限定されない標準的な癌治療と組み合わせて使用され得る。ＢＣＭＡ  ＡＤＣ、具体的にはＡｂ−１、Ａｂ−２、またはＡｂ−３  ＡＤＣ、及びより具体的にはＡｂ−１  ＡＤＣは、本明細書に様々に記載されるように、化学療法剤の投与と組み合わせて使用され得る。化学療法剤は、本明細書に様々に記載されるように、１つ以上のＢＣＭＡ  ＡＤＣ、具体的にはＡｂ−１、Ａｂ−２、またはＡｂ−３  ＡＤＣ、及びより具体的にはＡｂ−１  ＡＤＣの投与の前に、それと同時に、またはそれに続いて、投与され得る。化学療法剤は、癌の治療において使用される化合物である。化学療法剤の例としては、１３−シスレチノイン酸、２−ＣｄＡ  ２−クロロデオキシアデノシン、５−アザシチジン５−フルオロウラシル５−ＦＵ、６−メルカプトプリン、６−ＭＰ  ６−ＴＧ  ６−チオグアニン、アブラキサン、Ａｃｃｕｔａｎｅ（登録商標）、アクチノマイシン−Ｄ、Ａｄｒｉａｍｙｃｉｎ（登録商標）、Ａｄｒｕｃｉｌ（登録商標）、Ａｇｒｙｌｉｎ（登録商標）、Ａｌａ−Ｃｏｒｔ（登録商標）、アルデスロイキン、アレムツズマブ、ＡＬＩＭＴＡ、アリトレチノイン、Ａｌｋａｂａｎ−ＡＱ（登録商標）、Ａｌｋｅｒａｎ（登録商標）、全トランス型レチノイン酸、αインターフェロン、アルトレタミン、アメトプテリン、アミホスチン、アミノグルテチミドアナグレリド、Ａｎａｎｄｒｏｎ（登録商標）、アナストロゾール、アラブノシルシトシン、Ａｒａ−Ｃ、Ａｒａｎｅｓｐ（登録商標）、Ａｒｅｄｉａ（登録商標）、Ａｒｉｍｉｄｅｘ（登録商標）、Ａｒｏｍａｓｉｎ（登録商標）、Ａｒｒａｎｏｎ（登録商標）、三酸化ヒ素、アスパラギナーゼ、ＡＴＲＡ、Ａｖａｓｔｉｎ（登録商標）、アザシチジン、ＢＣＧ、ＢＣＮＵ、ベンダムスチン、ベバシズマブ、ベキサロテン、ＢＥＸＸＡＲ（登録商標）、ビカルタミド、ＢｉＣＮＵ、Ｂｌｅｎｏｘａｎｅ（登録商標）、ブレオマイシン、ボルテゾミブ、ブスルファン、Ｂｕｓｕｌｆｅｘ（登録商標）、Ｃ２２５、ロイコボリンカルシウム、Ｃａｍｐａｔｈ（登録商標）、Ｃａｍｐｔｏｓａｒ（登録商標）、カンプトテシン−１１、Ｃａｐｅｃｉｔａｂｉｎｅ  Ｃａｒａｃ（商標）、カルボプラチン、カルムスチン、カルムスチン  Ｗａｆｅｒ、Ｃａｓｏｄｅｘ（登録商標）、ＣＣ−５０１３、ＣＣＩ−７７９、ＣＣＮＵ、ＣＤＤＰ、ＣｅｅＮＵ、Ｃｅｒｕｂｉｄｉｎｅ（登録商標）、セツキシマブ、クロラムブシル、シスプラチン、シトロボラム因子、クラドリビン、コルチゾン、Ｃｏｓｍｅｇｅｎ（登録商標）、ＣＰＴ−１１、シクロホスファミド、Ｃｙｔａｄｒｅｎ（登録商標）、シタラビン、シタラビンリポソーム（Ｃｙｔａｒａｂｉｎｅ  Ｌｉｐｏｓｏｍａｌ）、Ｃｙｔｏｓａｒ−Ｕ（登録商標）、Ｃｙｔｏｘａｎ（登録商標）、ダカルバジン、ダコゲン（Ｄａｃｏｇｅｎ）、ダクチノマイシン、ダルベポエチンα、ダサチニブ、ダウノマイシン、ダウノルビシン、ダウノルビシン��酸塩、ダウノルビシンリポソーム、ＤａｕｎｏＸｏｍｅ（登録商標）、デカドロン、デシタビン、Ｄｅｌｔａ−Ｃｏｒｔｅｆ（登録商標）、Ｄｅｌｔａｓｏｎｅ（登録商標）、デニロイキン、ジフチトクス、ＤｅｐｏＣｙｔ（商標）、デキサメタゾン、酢酸デキサメタゾン、リン酸デキサメタゾンナトリウム、デキサゾン（Ｄｅｘａｓｏｎｅ）、デクスラゾキサン、ＤＨＡＤ、ＤＩＣ、ジオデクス（Ｄｉｏｄｅｘ）、ドセタキセル、Ｄｏｘｉｌ（登録商標）、ドキソルビシン、ドキソルビシンリポソーム、Ｄｒｏｘｉａ（商標）、ＤＴＩＣ、ＤＴＩＣ−Ｄｏｍｅ（登録商標）、Ｄｕｒａｌｏｎｅ（登録商標）、Ｅｆｕｄｅｘ（登録商標）、Ｅｌｉｇａｒｄ（商標）、Ｅｌｌｅｎｃｅ（商標）、Ｅｌｏｘａｔｉｎ（商標）、Ｅｌｓｐａｒ（登録商標）、Ｅｍｃｙｔ（登録商標）、エピルビシン、エポエチンα、アービタックス、エルロチニブ、エルウイニアＬ−アスパラギナーゼ、エストラムスチン、エチヨル、Ｅｔｏｐｏｐｈｏｓ（登録商標）、エトポシド、リン酸エトポシド、Ｅｕｌｅｘｉｎ（登録商標）、Ｅｖｉｓｔａ（登録商標）、エキセメスタン、Ｆａｒｅｓｔｏｎ（登録商標）、Ｆａｓｌｏｄｅｘ（登録商標）、Ｆｅｍａｒａ（登録商標）、フィルグラスチム、フロクスウリジン、Ｆｌｕｄａｒａ（登録商標）、フルダラビン、Ｆｌｕｏｒｏｐｌｅｘ（登録商標）、フルオロウラシル、フルオキシメステロン、フルタミド、フォリン酸、ＦＵＤＲ（登録商標）、フルベストラント、Ｇ−ＣＳＦ、ゲフィチニブ、ゲムシタビン、ゲムツズマブ、オゾガマイシン、ジェムザール、Ｇｌｅｅｖｅｃ（商標）、Ｇｌｉａｄｅｌ（登録商標）ウエハ、ＧＭ−ＣＳＦ、ゴセレリン、Ｈａｌｏｔｅｓｔｉｎ（登録商標）、Ｈｅｒｃｅｐｔｉｎ，（登録商標）、ヘキサドロール、Ｈｅｘａｌｅｎ（登録商標）、ヘキサメチルメラミン、ＨＭＭ、Ｈｙｃａｍｔｉｎ（登録商標）、Ｈｙｄｒｅａ（登録商標）、Ｈｙｄｒｏｃｏｒｔ  Ａｃｅｔａｔｅ（登録商標）、ヒドロコルチゾン、リン酸ヒドロコルチゾンナトリウム、コハク酸ヒドロコルチゾンナトリウム、リン酸ヒドロコルトン（Ｈｙｄｒｏｃｏｒｔｏｎｅ  Ｐｈｏｓｐｈａｔｅ）、ヒドロキシ尿素、イブリツモマブ、イブリツモマブ・チウキセタン、Ｉｄａｍｙｃｉｎ（登録商標）、イダルビシン、Ｉｆｅｘ（登録商標）、ＩＦＮ−α、イホスファミド、イマチニブ、メシル酸塩、イミダゾール、カルボキサミド、インターフェロンα、インターフェロンα−２ｂ（ＰＥＧ複合体）、インターロイキン−２、インターロイキン−１１、Ｉｎｔｒｏｎ  Ａ（登録商標）（インターフェロンα−２ｂ）、Ｉｒｅｓｓａ（登録商標）、イリノテカン、イソトレチノイン、イキサベピロン、Ｉｘｅｍｐｒａ（商標）、キドロラーゼ（Ｋｉｄｒｏｌａｓｅ）、Ｌａｎａｃｏｒｔ（登録商標）、ラパチニブ、Ｌ−アスパラギナーゼ、ＬＣＲ、レナリドマイド、レトロゾール、ロイコボリン、ロイケラン、Ｌｅｕｋｉｎｅ（商標）、ロイプロリド、ロイロクリスチン（Ｌｅｕｒｏｃｒｉｓｔｉｎｅ）、Ｌｅｕｓｔａｔｉｎ（商標）、リポソーム性Ａｒａ−Ｃ、Ｌｉｑｕｉｄ  Ｐｒｅｄ（登録商標）、ロムスチン、Ｌ−ＰＡＭ、Ｌ−サルコリシン（Ｌ−Ｓａｒｃｏｌｙｓｉｎ）、Ｌｕｐｒｏｎ（登録商標）、Ｌ��ｐｒｏｎ  Ｄｅｐｏｔ（登録商標）、Ｍａｔｕｌａｎｅ（登録商標）、マキシデックス、メクロレタミン、メクロレタミンＨｙｄｒｏｃｈｌｏｒｉｄｅ、Ｍｅｄｒａｌｏｎｅ（登録商標）、Ｍｅｄｒｏｌ（登録商標）、Ｍｅｇａｃｅ（登録商標）、メゲストロール、酢酸メゲストロール、メルファラン、メルカプトプリン、メスナ、Ｍｅｓｎｅｘ（商標）、メトトレキサート、メトトレキサートナトリウム、メチルプレドニゾロン、Ｍｅｔｉｃｏｒｔｅｎ（登録商標）、マイトマイシン、マイトマイシン−Ｃ、ミトキサントロン、Ｍ−Ｐｒｅｄｎｉｓｏｌ（登録商標）、ＭＴＣ、ＭＴＸ、Ｍｕｓｔａｒｇｅｎ（登録商標）、ムスチン、Ｍｕｔａｍｙｃｉｎ（登録商標）、Ｍｙｌｅｒａｎ（登録商標）、Ｍｙｌｏｃｅｌ（商標）、Ｍｙｌｏｔａｒｇ（登録商標）、Ｎａｖｅｌｂｉｎｅ（登録商標）、ネララビン、Ｎｅｏｓａｒ（登録商標）、Ｎｅｕｌａｓｔａ（商標）、Ｎｅｕｍｅｇａ（登録商標）、Ｎｅｕｐｏｇｅｎ（登録商標）、Ｎｅｘａｖａｒ（登録商標）、Ｎｉｌａｎｄｒｏｎ（登録商標）、ニルタミド、Ｎｉｐｅｎｔ（登録商標）、ナイトロジェンマスタード、Ｎｏｖａｌｄｅｘ（登録商標）、Ｎｏｖａｎｔｒｏｎｅ（登録商標）、オクトレオチド、酢酸オクトレオチド、Ｏｎｃｏｓｐａｒ（登録商標）、Ｏｎｃｏｖｉｎ（登録商標）、Ｏｎｔａｋ（登録商標）、Ｏｎｘａｌ（商標）、オプレベルキン（Ｏｐｒｅｖｅｌｋｉｎ）、Ｏｒａｐｒｅｄ（登録商標）、Ｏｒａｓｏｎｅ（登録商標）、オキサリプラチン、パクリタキセル、Ｐａｃｌｉｔａｘｅｌタンパク質−ｂｏｕｎｄ、パミドロネート、パニツムマブ、Ｐａｎｒｅｔｉｎ（登録商標）、Ｐａｒａｐｌａｔｉｎ（登録商標）、Ｐｅｄｉａｐｒｅｄ（登録商標）、ＰＥＧインターフェロン、ペグアスパルガーゼ、ペグフィルグラスチム、ＰＥＧ−ＩＮＴＲＯＮ（商標）、ＰＥＧ  Ｌ−アスパラギナーゼ、ペメトレキセド、ペントスタチン、フェニルアラニンマスタード、Ｐｌａｔｉｎｏｌ（登録商標）、Ｐｌａｔｉｎｏｌ−ＡＱ（登録商標）、プレドニゾロン、プレドニゾン、Ｐｒｅｌｏｎｅ（登録商標）、プロカルバジン、ＰＲＯＣＲＩＴ（登録商標）、Ｐｒｏｌｅｕｋｉｎ（登録商標）、Ｐｒｏｌｉｆｅｐｒｏｓｐａｎ  ２０  ｗｉｔｈカルムスチンＩｍｐｌａｎｔ、Ｐｕｒｉｎｅｔｈｏｌ（登録商標）、ラロキシフェン、Ｒｅｖｌｉｍｉｄ（登録商標）、Ｒｈｅｕｍａｔｒｅｘ（登録商標）、Ｒｉｔｕｘａｎ（登録商標）、リツキシマブ、Ｒｏｆｅｒｏｎ−Ａ（登録商標）（インターフェロンα−２ａ）、Ｒｕｂｅｘ（登録商標）、ルビドマイシン塩酸塩、Ｓａｎｄｏｓｔａｔｉｎ（登録商標）、Ｓａｎｄｏｓｔａｔｉｎ  ＬＡＲ（登録商標）、サルグラモスチム、Ｓｏｌｕ−Ｃｏｒｔｅｆ（登録商標）、Ｓｏｌｕ−Ｍｅｄｒｏｌ（登録商標）、ソラフェニブ、ＳＰＲＹＣＥＬ（商標）、ＳＴＩ−５７１、ストレプトゾシン、ＳＵ１１２４８、スニチニブ、Ｓｕｔｅｎｔ（登録商標）、タモキシフェン、Ｔａｒｃｅｖａ（登録商標）、Ｔａｒｇｒｅｔｉｎ（登録商標）、Ｔａｘｏｌ（登録商標）、Ｔａｘｏｔｅｒｅ（登録商標）、Ｔｅｍｏｄａｒ（登録商標）、テモゾロミド、テムシロリムス、テニポシド、ＴＥＳＰＡ、サリドマイド、Ｔｈａｌｏｍｉｄ（登録商標��、ＴｈｅｒａＣｙｓ（登録商標）、チオグアニン、Ｔｈｉｏｇｕａｎｉｎｅ  Ｔａｂｌｏｉｄ（登録商標）、チオホスホアミド（Ｔｈｉｏｐｈｏｓｐｈｏａｍｉｄｅ）、Ｔｈｉｏｐｌｅｘ（登録商標）、チオテパ、ＴＩＣＥ（登録商標）、Ｔｏｐｏｓａｒ（登録商標）、トポテカン、トレミフェン、Ｔｏｒｉｓｅｌ（登録商標）、トシツモマブ、トラスツズマブ、Ｔｒｅａｎｄａ（登録商標）、トレチノイン、Ｔｒｅｘａｌｌ（商標）、Ｔｒｉｓｅｎｏｘ（登録商標）、ＴＳＰＡ、ＴＹＫＥＲＢ（登録商標）、ＶＣＲ、Ｖｅｃｔｉｂｉｘ（商標）、Ｖｅｌｂａｎ（登録商標）、Ｖｅｌｃａｄｅ（登録商標）、ＶｅＰｅｓｉｄ（登録商標）、Ｖｅｓａｎｏｉｄ（登録商標）、Ｖｉａｄｕｒ（商標）、Ｖｉｄａｚａ（登録商標）、ビンブラスチン、硫酸ビンブラスチン、ビンカサル（Ｖｉｎｃａｓａｒ）、Ｐｆｓ（登録商標）、ビンクリスチン、ビノレルビン、酒石酸ビノレルビン、ＶＬＢ、ＶＭ−２６、ボリノスタット、ＶＰ−１６、Ｖｕｍｏｎ（登録商標）、Ｘｅｌｏｄａ（登録商標）、Ｚａｎｏｓａｒ（登録商標）、Ｚｅｖａｌｉｎ（商標）、Ｚｉｎｅｃａｒｄ（登録商標）、Ｚｏｌａｄｅｘ（登録商標）、ゾレドロン酸、ゾリンザ、Ｚｏｍｅｔａ（登録商標）等が挙げられるが、これらに限定されない。
【０２０６】
上述のように、本明細書に様々に記載されるように、ＢＣＭＡ  ＡＤＣ、具体的にはＡｂ−１、Ａｂ−２、またはＡｂ−３  ＡＤＣ、及びより具体的にはＡｂ−１  ＡＤＣは、プロテアソーム阻害剤、及び具体的にはカーフィルゾミブ（Ｋｙｐｒｏｌｉｓ（登録商標）等）等であるがこれらに限定されない標準的な癌治療と組み合わせて使用され得る。
【０２０７】
加えて、本明細書に様々に記載されるように、ＢＣＭＡ  ＡＤＣ、具体的にはＡｂ−１、Ａｂ−２、またはＡｂ−３  ＡＤＣ、またより具体的にはＡｂ−１  ＡＤＣは、形質細胞によって産生された抗体が、全身性エリテマトーデス（ＳＬＥ）、リウマチ性関節炎（ＲＡ）、多発性硬化症（ＭＳ）、シェーグレン症、免疫媒介性血小板減少症、溶血性貧血、水疱性類天疱瘡、重症筋無力症、Ｉ型真性糖尿病、グレーブス病、アジソン病、落葉性天疱瘡、乾癬、乾癬性関節炎、及び強直性脊椎炎等であるがこれらに限定されない疾患の免疫病原性に寄与する、自己免疫障害の治療に使用することができる。他の実施形態において、薬物に複合体化されていない抗ｈｕＢＣＭＡ抗体、本明細書に様々に記載されるように、具体的にはＡｂ−１、Ａｂ−２、またはＡｂ−３、及びより具体的にはＡｂ−１は、この段落に列挙される自己免疫疾患を治療するために使用され得る。より具体的には、Ａｂ−１は、ＳＬＥを治療するために使用され得る。より具体的には、Ａｂ−１は、ＭＳを治療するために使用され得る。上述の方法はまた、本明細書の他の箇所に記載されるように、第１及び第２の医療用途のための同等の方法ならびにそれらに対する請求を包含することを理解されたい。
【０２０８】
診断用途、アッセイ、及びキット
本発明のＢＣＭＡ抗原結合タンパク質を、診断アッセイ、例えば、結合アッセイにおいて使用して、組織（骨髄等）または細胞（形質細胞等）に発現されるＢＣＭＡを検出及び／または定量化することができる。ＢＣＭＡ抗原結合タンパク質を研究において使用して、疾患におけるＢＣＭＡの役割をさらに調査することができる。ＢＣＭＡ抗原結合タンパク質を使用して、同種及び／または異種受容体複合体の形成におけるＢＣＭＡの役割、ならびに疾患における該ＢＣＭＡ受容体複合体の役割をさらに調査することができる。
【０２０９】
ある特定の実施形態において、患者層別化アッセイを使用して、患者が、ＢＣＭＡ  ＡＤＣでの治療に適格であるかどうかを判定することができる。具体的には、多発性骨髄腫患者が、治療に関して事前スクリーニングされ得る。例として、患者のＢ細胞において閾値レベルのＢＣＭＡ発現が検出された場合、患者は治療に適格である。対照的に、患者のＢ細胞におけるＢＣＭＡ発現の閾値レベルが不十分な場合、患者は、治療に適格でない可能性がある。ＢＣＭＡ発現は、患者の細胞におけるＢＣＭＡをコードするＲＮＡの存在に関して、または細胞表面上に発現されるＢＣＭＡタンパク質の存在に関して試験することによって、判定することができる。試料は、血液試料または生検であり得る。本明細書に記載されるＢＣＭＡ抗体を、そのようなアッセイにおいて使用して、患者の細胞表面上に発現されるＢＣＭＡの量を定量化することができる。
【０２１０】
本発明の態様は、ＢＣＭＡ  ＡＤＣの薬力学を測定するためのアッセイを含む。本明細書に記載されるように、ＢＣＭＡ  ＡＤＣは、細胞表面ＢＣＭＡに結合し、内部移行され、それによって、抗体が異化され、ｌｙｓ−ＭＣＣ−ＤＭ１を細胞質内に放出し、ここで、チューブリン重合を阻害し、有糸分裂停止及び細胞死を誘導する。多発性骨髄腫は、骨髄における形質細胞増殖によって誘導される疾患であるが、末梢形質細胞の数は、典型的に、骨髄区画の腫瘍細胞の代わりとして使用するには少なすぎる（Ｄｉｎｇｌｉ  Ｄ，Ｎｏｗａｋｏｗｓｋｉ  ＧＳ，Ｄｉｓｐｅｎｚｉｅｒｉ  Ａ，ｅｔ  ａｌ．，Ｂｌｏｏｄ  １０７，３３８４−８（２００６））。形質細胞に対するＢＣＭＡ  ＡＤＣの効果を評価するための薬力学的代理マーカーの実施形態は、血清によって腫瘍量の低減を測定することである。腫瘍量のレベルは、多発性骨髄腫における一般的な評価であり、疾患状態を判定する際及びＭＧＵＳと多発性骨髄腫とを区別する際に用いられるものである（Ｗａｘｍａｎ  ＡＪ，ｅｔ  ａｌ．，Ｃｌｉｎ  Ｌｙｍｐｈｏｍａ  Ｍｙｅｌｏｍａ  Ｌｅｕｋ．１０，２４８−５７（２０１０））。３ｇ／ｄＬのレベルの血清モノクローナル（Ｍ）タンパク質は、ＭＭの診断に使用される基準であり、血清Ｍタンパク質の低減は、臨床応答を定義するために使用される１つの基準である（Ｓｃｈａｅｆｅｒ  ＥＷ，ｅｔ  ａｌ．，Ｃａｎｃｅｒ  １１６，６４０−６（２０１０））。血清Ｍタンパク質アッセイは、血中に循環するモノクローナルタンパク質の量を測定する。このアッセイは、多発性骨髄腫診断に広く利用される臨床的に検証されたアッセイである。ＭＭ患者の小サブセット（２〜５％）は、血清中モノクローナルタンパク質非分泌性である。
【０２１１】
ＢＣＭＡの血清レベルは、予後徴候であり得、腫瘍細胞量を測定するための新しいツールであり得る（Ｓａｎｃｈｅｚ  Ｅ，ｅｔ  ａｌ．，Ｓｅｒｕｍ  Ｂ−ｃｅｌｌ  ｍａｔｕｒａｔｉｏｎ  ａｎｔｉｇｅｎ  ｉｓ  ｅｌｅｖａｔｅｄ  ｉｎ  ｍｕｌｔｉｐｌｅ  ｍｙｅｌｏｍａ  ａｎｄ  ｃｏｒｒｅｌａｔｅｓ  ｗｉｔｈ  ｄｉｓｅａｓｅ  ｓｔａｔｕｓ  ａｎｄ  ｓｕｒｖｉｖａｌ．Ｂｒ  Ｊ  Ｈａｅｍａｔｏｌｏｇｙ  １５８，７２７−３８（２０１２））。本発明の実施形態は、可溶性ＢＣＭＡが腫瘍細胞上の膜結合ＢＣＭＡに対する可能性のある代替物であることを測定するための診断アッセイ及びキットを含む。例えば、ＢＣＭＡ  ＡＤＣのうちの１つ以上の単独でのまたは従来治療と組み合わせての治療の前に可溶性ＢＣＭＡを測定することにより、血清ＢＣＭＡのベースラインレベルを確立し、周期的に試験することにより該治療に対する応答を監視する。ＢＣＭＡのリガンドであるＢＡＦＦ及びＡＰＲＩＬは、骨髄間質細胞によって腫瘍内微小環境に分泌され、ＢＡＦＦはＭＭ血清試料に検出されているＭｏｒｅａｕｘ  Ｊ，ｅｔ  ａｌ．，Ｂｌｏｏｄ  １０６，１０２１−３０（２００５）、Ｔａｉ  ＹＴ，ｅｔ  ａｌ．，Ｃａｎｃｅｒ  Ｒｅｓ．６６，６６７５−８２（２００６）、及びＦｒａｇｉｏｕｄａｋｉ  Ｍ，ｅｔ  ａｌ．，Ｌｅｕｋ  Ｒｅｓ．３６，１００４−８（２０１２））。まさに上述のように、患者の臨床状態を監視するのに使用するための、ＥＬＩＳＡ、フローサイトメトリーといった可溶性ＢＭＣＡ、ＡＰＲＩＬ、及びＢＡＦＦの診断アッセイが、想定される。適切なアッセイを特定すると、ＭＭ血清を、可溶性ＢＣＭＡ、ＡＰＲＩＬ、及びＢＡＦＦのレベルについて試験する。
【０２１２】
Ａｂ−１（２Ａ１ＣＶ５）ＡＤＣが、Ｈ９２９骨指向性異種移植片モデルにおいて腫瘍退縮を媒介することを示すＡｂ−１（２Ａ１ＣＶ５）ＡＤＣ実験のインビボ薬力学の一部として、ヒトＩｇＧ遊離軽鎖（κ）を可能性のあるバイオマーカー（ｉｏｍａｒｋｅｒ）として調べた（実施例１２を参照されたい）。ヒト免疫グロブリン分子は、クラス（ＩｇＧ、ＩｇＡ、ＩｇＭ、ＩｇＤ、ＩｇＥ）を定義する２つの重鎖と、同一な軽鎖（κまたはλ）とからなる。健常個体では、血清中の軽鎖の大半は、重鎖と結合して存在する。遊離軽鎖（ＦＬＣ）は、Ｂリンパ球の天然の産物であり、新生物及び反応性Ｂ細胞関連障害の固有なバイオマーカーを表す。ＦＬＣの増加は、種々の悪性形質障害と関連している。ＦＬＣの検出は、多発性骨髄腫、くすぶり型骨髄腫、及び意義不明の単一クローン性γグロブリン血症を含む、種々の疾患の重要な診断補助である。ヒトＩｇＧ  ＦＬＣ  κ  ＥＬＩＳＡ（Ｂｉｏｖｅｎｄｏｒ，ＲＤ  １９４０８８１００Ｒ−Ｋ）を用いて、Ｈ９２９異種移植片由来の血清中のＦＬＣの存在を分析した。κ軽鎖抗体は、２Ａ１ＣＶ５−ＭＣＣ−ＤＭ１で処置した１８日後にマウスの血清中に検出されなかったが、ビヒクル（ＰＢＳ）またはアイソタイプ対照複合体（抗ストレプトアビジン−ＭＣＣ−ＤＭ１）を受容したマウスの血清中には検出された（図３８及び３９を参照されたい）。したがって、血清中の抗体遊離γ及びκ軽鎖（ｓＦＬＣ）の測定を、診断パネルにおいて多発性骨髄腫のバイオマーカーとして使用することができる。ｓＦＬＣの１つの特に有用な特性は、それらの短い半減期であり、これは、臨床医が数日内に治療に対する応答を判定することを可能にし得る（Ｄａｖｉｄｓ  ＭＳ，ｅｔ  ａｌ．，Ｓｅｒｕｍ  ｆｒｅｅ  ｌｉｇｈｔ  ｃｈａｉｎ  ａｎａｌｙｓｉｓ．Ａｍ  Ｊ．Ｈｅｍａｔｏｌｏｇｙ  ８５，７８７−７９０（２０１０））。
【０２１３】
本発明の抗原結合タンパク質は、ＢＣＭＡと関連する疾患及び／または状態を検出、診断、または監視する診断目的で使用され得る。本発明は、当業者に既知の古典的な免疫組織学的方法を使用して試料中のＢＣＭＡの存在を検出することを提供する（例えば、Ｔｉｊｓｓｅｎ，１９９３，Ｐｒａｃｔｉｃｅ  ａｎｄ  Ｔｈｅｏｒｙ  ｏｆ  Ｅｎｚｙｍｅ  Ｉｍｍｕｎｏａｓｓａｙｓ，ｖｏｌ  １５（Ｅｄｓ  Ｒ．Ｈ．Ｂｕｒｄｏｎ  ａｎｄ  Ｐ．Ｈ．ｖａｎ  Ｋｎｉｐｐｅｎｂｅｒｇ，Ｅｌｓｅｖｉｅｒ，Ａｍｓｔｅｒｄａｍ）、Ｚｏｌａ，１９８７，Ｍｏｎｏｃｌｏｎａｌ  Ａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ：Ａ  Ｍａｎｕａｌ  ｏｆ  Ｔｅｃｈｎｉｑｕｅｓ，ｐｐ．１４７−１５８（ＣＲＣ  Ｐｒｅｓｓ，Ｉｎｃ．）、Ｊａｌｋａｎｅｎ  ｅｔ  ａｌ．，１９８５，Ｊ．Ｃｅｌｌ．Ｂｉｏｌ．１０１：９７６−９８５、Ｊａｌｋａｎｅｎ  ｅｔ  ａｌ．，１９８７，Ｊ．Ｃｅｌｌ  Ｂｉｏｌ．１０５：３０８７−３０９６）。ＢＣＭＡの検出は、インビボまたはインビトロで行われ得る。ＢＣＭＡの存在の検出に有用な方法の例としては、ＥＬＩＳＡ、ＦＡＣＳ、ＲＩＡ等が挙げられる。
【０２１４】
診断用途のために、ＢＣＭＡ抗原結合タンパク質は、典型的に、検出可能な標識基で標識される。好適な標識基には、次のものが挙げられるが、それらに限定されない：放射性同位体もしくは放射性核種（例えば、３Ｈ、１４Ｃ、１５Ｎ、３５Ｓ、９０Ｙ、９９Ｔｃ、１１１Ｉｎ、１２５Ｉ、１３１Ｉ）、蛍光基（例えば、ＦＩＴＣ、ローダミン、ランタニド蛍光体）、酵素基（例えば、西洋ワサビペルオキシダーゼ、β−ガラクトシダーゼ、ルシフェラーゼ、アルカリホスファターゼ）、化学発光基、ビオチニル基、または二次レポーターによって認識される所定のポリペプチドエピトープ（例えば、ロイシンジッパー対配列、二次抗体の結合部位、金属結合ドメイン、エピトープタグ）。いくつかの実施形態において、標識基は、可能性のある立体障害を低減させるために、種々の長さのスペーサーアームを介して抗原結合タンパク質に結合される。タンパク質を標識するための種々の方法が、当該技術分野で既知であり、本発明を実施する際に使用され得る。
【０２１５】
本発明の一態様は、ＢＣＭＡを発現する細胞（複数可）を特定することを提供する。特定の実施形態において、抗原結合タンパク質を標識基で標識し、標識された抗原結合タンパク質のＢＣＭＡへの結合を検出する。さらなる特定の実施形態において、ＢＣＭＡへの抗原結合タンパク質の結合は、インビボで検出される。さらなる特定の実施形態において、抗原結合タンパク質−ＢＣＭＡは、当該技術分野で既知の技法を使用して単離及び測定される。例えば、Ｈａｒｌｏｗ  ａｎｄ  Ｌａｎｅ，１９８８，Ａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ：Ａ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ  Ｍａｎｕａｌ，Ｎｅｗ  Ｙｏｒｋ：Ｃｏｌｄ  Ｓｐｒｉｎｇ  Ｈａｒｂｏｒ（ｅｄ．１９９１  ａｎｄ  ｐｅｒｉｏｄｉｃ  ｓｕｐｐｌｅｍｅｎｔｓ）、Ｊｏｈｎ  Ｅ．Ｃｏｌｉｇａｎ，ｅｄ．，１９９３，Ｃｕｒｒｅｎｔ  Ｐｒｏｔｏｃｏｌｓ  Ｉｎ  Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｙ  Ｎｅｗ  Ｙｏｒｋ：Ｊｏｈｎ  Ｗｉｌｅｙ＆Ｓｏｎｓを参照されたい。
【０２１６】
本発明の別の態様は、ＢＣＭＡとの結合に関して本発明の抗原結合タンパク質と競合する、試験分子の存在を検出することを提供する。１つのそのようなアッセイの例は、試験分子の存在下または不在下で、ある量のＢＣＭＡを含有する溶液中の遊離抗原結合タンパク質の量を検出することを伴う。遊離抗原結合タンパク質（すなわち、ＢＣＭＡに結合していない抗原結合タンパク質）の量の増加は、試験分子が、ＢＣＭＡ結合に関して抗原結合タンパク質と競合することができることを示すであろう。一実施形態において、抗原結合タンパク質は、標識基で標識される。あるいは、試験分子を標識し、遊離試験分子の量を抗原結合タンパク質の存在下及び不在下で監視する。
【０２１７】
薬学的製剤、投与経路
いくつかの実施形態において、本発明は、本発明の抗原結合タンパク質のうちの１つ以上の治療有効量を、医薬として許容される希釈剤、担体、可溶化剤、乳化剤、保存剤、及び／またはアジュバントとともに含む、医薬組成物を提供する。加えて、本発明は、そのような医薬組成物を投与することによって患者を治療する方法を提供する。
【０２１８】
いくつかの実施形態において、ＢＣＭＡ  ＡＤＣ、具体的にはＡｂ−１  ＡＤＣは、本明細書に記載されるＢＣＭＡ  ＡＤＣのうちの少なくとも１つ、具体的にはＡｂ−１  ＡＤＣの治療有効量を、医薬として許容される希釈剤、担体、可溶化剤、乳化剤、保存剤、及び／またはアジュバントとともに含む、医薬組成物である。加えて、本発明は、そのような医薬組成物を投与することによって患者を治療する方法を提供する。
【０２１９】
ＢＣＭＡ  ＡＤＣ、具体的にはＡｂ−１  ＡＤＣを含む医薬組成物は、本明細書に様々に記載され、悪性Ｂ細胞がその表面にＢＣＭＡを発現するＢ細胞関連癌の治療に使用することができる。ＢＣＭＡ  ＡＤＣは、悪性Ｂ細胞の表面上のＢＣＭＡに結合し、受容体に媒介されるエンドサイトーシスによって内部移行され、細胞内で化学療法薬を放出し（典型的には、リソソーム−エンドソーム経路の酸性環境を介して）、それによって悪性細胞を殺滅させる。細胞内で化学療法薬を放出することにより、遊離薬物による非悪性細胞の無関係な殺滅を低減させる。したがって、本明細書に記載されるＢＣＭＡ  ＡＤＣ、具体的にはＡｂ−１  ＡＤＣを含む医薬組成物を使用して、Ｂ細胞癌、特に多発性骨髄腫及び悪性形質細胞腫を含むがこれらに限定されない疾患を治療することができる。さらに、本明細書に様々に記載されるＢＣＭＡ  ＡＤＣ、具体的にはＡｂ−１  ＡＤＣを使用して、カーレル病及び骨髄腫症；形質細胞性白血病；形質細胞腫；Ｂ細胞性前リンパ急性白血病；有毛細胞性白血病；Ｂ細胞非ホジキンリンパ腫（ＮＨＬ）；急性骨髄性白血病（ＡＭＬ）；慢性骨髄性白血病（ＣＭＬ）；急性リンパ球性白血病（ＡＬＬ）；慢性リンパ球性白血病（ＣＬＬ）；濾胞性リンパ腫（濾胞性非ホジキンリンパ腫型を含む）；バーキットリンパ腫（風土性バーキットリンパ腫；散発性バーキットリンパ腫）；辺縁帯リンパ腫（粘膜関連リンパ組織；ＭＡＬＴ／ＭＡＬＴリンパ腫；単球様Ｂ細胞リンパ腫；絨毛状リンパ球を伴う脾臓リンパ腫）；マントル細胞リンパ腫；大細胞型リンパ腫（びまん性大細胞；びまん性混合細胞；免疫芽球性リンパ腫；原発性縦隔性Ｂ細胞リンパ腫；血管中心性リンパ腫−肺性Ｂ細胞）；小リンパ球性リンパ腫（ＳＬＬ）；前駆Ｂリンパ芽球性リンパ腫；骨髄性白血病（顆粒球性；骨髄性；急性骨髄性白血病；慢性骨髄性白血病；亜急性骨髄性白血病；骨髄性肉腫；緑色腫；顆粒球性肉腫；急性前骨髄球性白血病；急性骨髄単球性白血病）；ヴァルデンストレームマクログロブリン血症、または他のＢ細胞リンパ腫を治療することができる。
【０２２０】
加えて、本明細書に様々に記載されるＢＣＭＡ  ＡＤＣ、具体的にはＡｂ−１、Ａｂ−２、またはＡｂ−３  ＡＤＣ、またより具体的にはＡｂ−１  ＡＤＣを含む医薬組成物は、形質細胞によって産生された抗体が、全身性エリテマトーデス（ＳＬＥ）、リウマチ性関節炎（ＲＡ）、多発性硬化症（ＭＳ）、シェーグレン症、免疫媒介性血小板減少症、溶血性貧血、水疱性類天疱瘡、重症筋無力症、Ｉ型真性糖尿病、グレーブス病、アジソン病、落葉性天疱瘡、乾癬、乾癬性関節炎、及び強直性脊椎炎等であるがこれらに限定されない疾患の免疫病原性に寄与する、自己免疫障害の治療に使用することができる。他の実施形態において、薬物に複合体化されていない抗ｈｕＢＣＭＡ抗体、具体的にはＡｂ−１、Ａｂ−２、またはＡｂ−３、及びより具体的にはＡｂ−１を含む医薬組成物を使用して、この段落に列挙される自己免疫疾患を治療することができる。より具体的には、Ａｂ−１を含む医薬組成物を使用して、ＳＬＥを治療することができる。より具体的には、Ａｂ−１を含む医薬組成物を使用して、ＭＳを治療することができる。
【０２２１】
ある特定の実施形態において、許容される製剤材料は、好ましくは、用いられる投薬量及び濃度で、レシピエントに対して非毒性である。ある特定の実施形態において、医薬組成物は、例えば、組成物のｐＨ、オスモル濃度、粘度、透明度、色、等張性、臭い、滅菌性、安定性、分解もしくは放出速度、吸収、または浸透を修正、維持、または保存するための製剤材料を含有し得る。そのような実施形態において、好適な製剤材料には、アミノ酸（グリシン、グルタミン、アスパラギン、アルギニン、もしくはリジン等）；抗菌剤；酸化防止剤（アスコルビン酸、硫酸ナトリウム、もしくは亜硫酸水素ナトリウム）；緩衝剤（ホウ酸塩、重炭酸塩、Ｔｒｉｓ−ＨＣｌ、クエン酸塩、リン酸塩、もしくは他の有機酸等）；増量剤（マンニトールもしくはグリシン等）；キレート剤（エチレンジアミン四酢酸（ＥＤＴＡ）等）；錯化剤（カフェイン、ポリビニルピロリドン、β−シクロデキストリン、もしくはヒドロキシプロピル−β−シクロデキストリン）；充填剤；単糖類；二糖類；及び他の炭水化物（グルコース、マンノース、もしくはデキストリン等）；タンパク質（血清アルブミン、ゼラチン、もしくは免疫グロブリン等）；着色剤、香味剤、及び希釈剤；乳化剤；親水性ポリマー（ポリビニルピロリドン等）；低分子量ポリペプチド；塩形成対イオン（ナトリウム等）；保存剤（塩化ベンザルコニウム、安息香酸、サリチル酸、チメロサール、フェネチルアルコール、メチルパラベン、プロピルパラベン、クロルヘキシジン、ソルビン酸、もしくは過酸化水素等）；溶媒（グリセリン、プロピレングリコール、もしくはポリエチレングリコール等）；糖アルコール（マンニトールもしくはソルビトール等）；懸濁化剤；界面活性剤または湿潤剤（プルロニック、ＰＥＧ、ソルビタンエステル、ポリソルベート２０、ポリソルベート等のポリソルベート、トリトン、トロメタミン、レシチン、コレステロール、チロキサパル（ｔｙｌｏｘａｐａｌ）等）；安定性強化剤（スクロースもしくはソルビトール等）；等張性強化剤（アルカリ金属ハロゲン化物、好ましくは、塩化ナトリウムもしくは塩化カリウム、マンニトールソルビトール等）；送達ビヒクル；希釈剤；賦形剤及び／または薬学的アジュバントが挙げられるが、これらに限定されない。ＲＥＭＩＮＧＴＯＮ’Ｓ  ＰＨＡＲＭＡＣＥＵＴＩＣＡＬ  ＳＣＩＥＮＣＥＳ，１８”Ｅｄｉｔｉｏｎ，（Ａ．Ｒ．Ｇｅｎｒｍｏ，ｅｄ．），１９９０，Ｍａｃｋ  Ｐｕｂｌｉｓｈｉｎｇ  Ｃｏｍｐａｎｙを参照されたい。
【０２２２】
ある特定の実施形態において、最適な医薬組成物は、例えば、意図される投与経路、送達形式、及び所望される投薬量に応じて、当業者によって決定されるであろう。例えば、ＲＥＭＩＮＧＴＯＮ’Ｓ  ＰＨＡＲＭＡＣＥＵＴＩＣＡＬ  ＳＣＩＥＮＣＥＳ（上記）を参照されたい。ある特定の実施形態において、そのような組成物は、本発明の抗原結合タンパク質の物理的状態、安定性、インビボ放出速度、及びインビボクリアランス速度に影響を及ぼし得る。ある特定の実施形態において、医薬組成物中の主要なビヒクルまたは担体は、水溶性または非水溶性のいずれかの性質であり得る。例えば、好適なビヒクルまたは担体は、非経口投与用組成物に一般的な他の材料が補充されている可能性のある、注射用水、生理食塩水、または人工脳脊髄液であり得る。中性緩衝食塩水または血清アルブミンと混合した食塩水は、さらなる例示的なビヒクルである。特定の実施形態において、医薬組成物は、約ｐＨ７．０〜８．５のＴｒｉｓ緩衝液または約ｐＨ４．０〜５．５の酢酸緩衝液を含み、ソルビトールまたはその好適な代替物をさらに含み得る。本発明のある特定の実施形態において、ＢＣＭＡ抗原結合タンパク質組成物は、所望される程度の純度を有する選択された組成物と、任意善悪の製剤化剤（ＲＥＭＩＮＧＴＯＮ’Ｓ  ＰＨＡＲＭＡＣＥＵＴＩＣＡＬ  ＳＣＩＥＮＣＥＳ（上記））とを混合することによって、凍結乾燥ケーキまたは水溶液の形態で、保管用に調製され得る。さらに、ある特定の実施形態において、ＢＣＭＡ抗原結合タンパク質産物は、スクロース等の適切な賦形剤を使用して凍結乾燥物として製剤化されてもよい。
【０２２３】
本発明の医薬組成物は、非経口送達のために選択され得る。あるいは、組成物は、吸入、または経口等の消化管を通じた送達のために選択され得る。そのような医薬として許容される組成物の調製は、当業者の技能の範囲内である。
【０２２４】
製剤成分は、好ましくは投与の部位に許容される濃度で存在する。ある特定の実施形態において、生理学的ｐＨまたはわずかに低いｐＨ、典型的には約５〜約８のｐＨ範囲内に組成物を維持するために、緩衝液が使用される。
【０２２５】
非経口投与が企図される場合、本発明に使用される治療的組成物は、医薬として許容されるビヒクル中に所望されるＢＣＭＡ抗原結合タンパク質を含む、発熱物質不含の非経口的に許容される水溶液の形態で提供され得る。非経口注射に特に好適なビヒクルは、滅菌蒸留水であり、ＢＣＭＡ抗原結合タンパク質が、適切に保存される滅菌の等張溶液としてその中に製剤化される。ある特定の実施形態において、調製は、デポー注射によって送達され得る生成物の制御または持続放出を提供し得る薬剤、例えば、注射可能ミクロスフェア、生体内分解性粒子、ポリマー化合物（ポリ乳酸もしくはポリグリコール酸等）、ビーズ、またはリポソームを用いた、所望される分子の製剤化を伴い得る。ある特定の実施形態において、循環時の持続期間を増加させる効果を有するヒアルロン酸もまた使用され得る。ある特定の実施形態において、埋め込み可能な薬物送達デバイスを使用して、所望の抗原結合タンパク質を導入してもよい。
【０２２６】
本発明の医薬組成物は、吸入用に製剤化され得る。これらの実施形態において、ＢＣＭＡ抗原結合タンパク質は、有利なことに、乾燥した吸入可能粉末として製剤化される。特定の実施形態において、ＢＣＭＡ抗原結合タンパク質の吸入溶液はまた、エアロゾル送達のための推進剤とともに製剤化され得る。ある特定の実施形態において、溶液は、噴霧され得る。したがって、肺内投与及び製剤化方法は、国際特許出願第ＰＣＴ／ＵＳ９４／００１８７５号にさらに記載されており、これは、参照により組み込まれ、化学修飾タンパク質の肺内送達について説明している。製剤が経口投与され得ることもまた企図される。この様式で投与されるＢＣＭＡ抗原結合タンパク質は、錠剤及びカプセルといった固形剤形の調合に慣習的に使用される担体ありまたはなしで製剤化され得る。ある特定の実施形態において、カプセルは、バイオアベイラビリティが最大化され全身循環前の分解が最小化される胃腸管内の時点で、製剤の活性な部分が放出されるように設計され得る。ＢＣＭＡ抗原結合タンパク質の吸収を促進するために追加の薬剤が含まれてもよい。希釈剤、香味剤、低融点ワックス、植物油、滑沢剤、懸濁化剤、錠剤崩壊剤、及び結合剤もまた用いられ得る。
【０２２７】
本発明の医薬組成物は、好ましくは、錠剤の製造に好適な非毒性賦形剤との混合物中に、１つまたは複数のＢＣＭＡ抗原結合タンパク質の有効量を含むように提供される。錠剤を滅菌水または別の適切なビヒクル中に溶解することによって、溶液を単位剤形で調製することができる。好適な賦形剤には、不活性希釈剤、例えば、炭酸カルシウムもしくは重炭酸カルシウム、ラクトース、またはリン酸カルシウム；あるいは結合剤、例えば、デンプン、ゼラチン、またはアカシア；あるいは滑沢剤、例えば、ステアリン酸マグネシウム、ステアリン酸、またはタルクが挙げられるが、これらに限定されない。
【０２２８】
持続または制御送達製剤中にＢＣＭＡ抗原結合タンパク質を含む製剤を含む、さらなる医薬組成物が、当業者には明らかであろう。リポソーム担体、生体内分解性微小粒子もしくは多孔質ビーズ、及びデポー注射といった、種々の他の持続または制御送達手段を製剤化するための技法もまた、当業者に既知である。例えば、国際特許出願第ＰＣＴ／ＵＳ９３／００８２９号を参照されたく、これは、参照により組み込まれ、医薬組成物の送達のための多孔質ポリマー微小粒子の制御放出について説明している。持続放出調製物は、成形物品、例えば、フィルムまたはマイクロカプセルの形態にある半透過性ポリマーマトリックスを含み得る。持続放出マトリックスには、ポリエステル、ヒドロゲル、ポリラクチド（米国特許第３，７７３，９１９号及び欧州特許出願公開第ＥＰ  ０５８４８１号に開示され、これらのそれぞれは、参照により組み込まれる）、Ｌ−グルタミン酸及びγエチル−Ｌ−グルタメートのコポリマー（Ｓｉｄｍａｎ  ｅｔ  ａｌ．，１９８３，Ｂｉｏｐｏｌｙｍｅｒｓ  ２：５４７−５５６）、ポリ（２−ヒドロキシエチル−インエタクリレート（ｐｏｌｙ（２−ｈｙｄｒｏｘｙｅｔｈｙｌ−ｉｎｅｔｈａｃｒｙｌａｔｅ））（Ｌａｎｇｅｒ  ｅｔ  ａｌ．，１９８１，Ｊ．Ｂｉｏｍｅｄ．Ｍａｔｅｒ．Ｒｅｓ．１５：１６７−２７７及びＬａｎｇｅｒ，１９８２，Ｃｈｅｍ．Ｔｅｃｈ．１２：９８−１０５）、エチレン酢酸ビニル（Ｌａｎｇｅｒ  ｅｔ  ａｌ．，１９８１，（上記））、またはポリ−Ｄ（−）−３−ヒドロキシ酪酸（欧州特許出願公開第ＥＰ  １３３，９８８号）が含まれ得る。持続放出組成物はまた、当該技術分野で既知のいくつかの方法のうちのいずれかによって調製され得るリポソームが含まれ得る。例えば、Ｅｐｐｓｔｅｉｎ  ｅｔ  ａｌ．，１９８５，Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．Ｕ．Ｓ．Ａ．８２：３６８８−３６９２、欧州特許出願公開第ＥＰ  ０３６，６７６号、同第ＥＰ  ０８８，０４６号、及び同第ＥＰ  １４３，９４９号を参照されたく、これらは、参照により組み込まれる。
【０２２９】
インビボ投与に使用される医薬組成物は、典型的に、滅菌調製物として提供される。滅菌は、滅菌濾過膜を通す濾過によって達成され得る。組成物が凍結乾燥される場合、この方法を用いた滅菌は、凍結乾燥及び再構成の前または後のいずれかに行われ得る。非経口投与のための組成物は、凍結乾燥形態または溶液の状態で保管され得る。非経口組成物は、一般に、滅菌アクセスポートを有する容器、例えば、静注用バッグまたは皮下注射針で穿刺可能なストッパーを有するバイアルに入れられる。
【０２３０】
タンパク質の安定化、ならびにこの点において有用な製剤材料及び方法に関して、Ａｒａｋａｗａ  ｅｔ  ａｌ．，“Ｓｏｌｖｅｎｔ  ｉｎｔｅｒａｃｔｉｏｎｓ  ｉｎ  ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  ｆｏｒｍｕｌａｔｉｏｎｓ，”Ｐｈａｒｍ  Ｒｅｓ．８（３）：２８５−９１（１９９１）、Ｋｅｎｄｒｉｃｋ  ｅｔ  ａｌ．，“Ｐｈｙｓｉｃａｌ  ｓｔａｂｉｌｉｚａｔｉｏｎ  ｏｆ  ｐｒｏｔｅｉｎｓ  ｉｎ  ａｑｕｅｏｕｓ  ｓｏｌｕｔｉｏｎ，”ｉｎ：ＲＡＴＩＯＮＡＬ  ＤＥＳＩＧＮ  ＯＦ  ＳＴＡＢＬＥ  ＰＲＯＴＥＩＮ  ＦＯＲＭＵＬＡＴＩＯＮＳ：ＴＨＥＯＲＹ  ＡＮＤ  ＰＲＡＣＴＩＣＥ，Ｃａｒｐｅｎｔｅｒ  ａｎｄ  Ｍａｎｎｉｎｇ，ｅｄｓ．Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ．１３：６１−８４（２００２）、及びＲａｎｄｏｌｐｈ  ｅｔ  ａｌ．，“Ｓｕｒｆａｃｔａｎｔ−ｐｒｏｔｅｉｎ  ｉｎｔｅｒａｃｔｉｏｎｓ，”Ｐｈａｒｍ  Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌ．１３：１５９−７５（２００２）といった種々の解説が入手可能であり、これらのそれぞれは、参照によりその全体、特に獣医学及び／またはヒト医療用途のタンパク質薬学的生成物及びプロセスに関する部分が、本明細書に組み込まれる。
【０２３１】
本発明において有用な種々の賦形剤を、表３に列挙し、以下に詳細に説明する。
【表３】
2019031510.tif 000011
2019031510.tif 000012
【０２３２】
例えば、製剤のイオン強度及び／もしくは等張性の調節、ならびに／またはタンパク質の可溶性及び／もしくは物理的安定性の改善のために、塩が、本発明のある特定の実施形態に従って使用されてもよい。塩はまた、タンパク質製剤の粘度の低減に有効であり得、その目的で本発明において使用することができる。周知のように、イオンは、タンパク質の表面上の荷電残基に結合し、タンパク質の荷電及び極性基を遮蔽し、それらの静電相互作用、引力相互作用、及び反発相互作用の強度を低減させることによって、タンパク質の天然の状態を安定させ得る。イオンはまた、特に、タンパク質の変性ペプチド結合（−ＣＯＮＨ）に結合することによって、タンパク質の変性状態を安定させ得る。さらに、タンパク質の荷電及び極性基とのイオン相互作用もまた、分子間静電相互作用を低減させ、それによって、タンパク質の凝集及び不溶性を防止または低減させ得る。
【０２３３】
イオン種は、タンパク質への作用が著しく異なる。本発明に従って自己緩衝タンパク質組成物を製剤化する際に使用することができるイオン及びそれらのタンパク質に対する作用に関するいくつかの分類別ランク付けが開発されている。一例としてはホフマイスターシリーズであり、これは、イオン性溶質及び極性非イオン溶質を、溶液中のタンパク質の構造的安定性に対するそれらの作用によってランク付けする。安定化する溶質は、「コスモトロピック」と称される。不安定化する溶質は、「カオトロピック」と称される。コスモトロープは、一般に、高濃度（例えば、１モルを超える硫酸アンモニウム）で使用され、タンパク質を溶液から沈殿させる（「塩析」）。カオトロープは、一般に、タンパク質を変性及び／または可溶化させるために使用される（「塩溶」）。「塩溶」及び「塩析」に対するイオンの相対的有効性が、それらのホフマイスターシリーズでの位置付けを定義する。
【０２３４】
本発明の好ましい実施形態による非経口製剤における等張性の維持、タンパク質の可溶性及び／または安定性の向上、粘度特性の向上、タンパク質の安定性及び凝集に対する有害な塩作用の回避、ならびに塩に媒介されるタンパク質分解の防止のために、製剤中の塩濃度は、１５０ｍＭ未満（一価イオンに関して）及び多価イオンについては１５０ｍ等量／リットルであり得る。この点に関して、本発明のある特定の特に好ましい実施形態において、総塩濃度は、約７５ｍ等量／Ｌ〜約１４０ｍ等量／Ｌである。
【０２３５】
リジン、プロリン、セリン、及びアラニン等の遊離アミノ酸は、製剤中のタンパク質を安定させるために使用され得、また、増量剤、安定剤、及び酸化防止剤として、ならびに他の標準的な用途で、ＢＣＭＡ  ＡＤＣ製剤に使用され得る。グリシンは、正確なケーキの構造及び特性を確保するための凍結乾燥において有用である。アルギニンは、液体及び凍結乾燥の両方の製剤において、タンパク質凝集を阻害するのに有用であり得る。メチオニンは、酸化防止剤として有用である。
【０２３６】
ポリオールには、糖、例えば、マンニトール、スクロース、及びソルビトール、ならびに多価アルコール、例えば、グリセロール及びプロピレングリコール等、ならびに本明細書における考察の目的で、ポリエチレングリコール（ＰＥＧ）及び関連物質が含まれる。ポリオールは、コスモトロピックである。それらは、液体及び凍結乾燥製剤の両方において、タンパク質を物理的及び化学的分解プロセスから保護するために有用な安定剤である。ポリオールはまた、製剤の等張性を調節するのにも有用である。
【０２３７】
本発明の選択的な実施形態において有用なポリオールの中には、マンニトールがあり、これは、凍結乾燥製剤においてケーキの構造的安定性を確保するために広く使用される。それは、ケーキの構造的安定性を確保する。それは、一般に、凍結乾燥保護剤、例えば、スクロースとともに使用される。ソルビトール及びスクロースは、等張性を調節するため、ならびに輸送中の凍結−解凍の応力または製造プロセス中のバルクの調製に対して保護するための安定剤として、好ましい薬剤に含まれる。
【０２３８】
ＢＣＭＡ  ＡＤＣ製剤の実施形態は、任意で、界面活性剤をさらに含み得る。タンパク質分子は、表面上での吸着、ならびに気体−液体、固体−液体、及び液体−液体の界面での変性及びその結果としての凝集を受けやすい可能性がある。これらの作用は、一般に、タンパク質濃度と反比例して増減する。これらの有害な相互作用は、一般に、タンパク質濃度に反比例して増減し、典型的に、製品の輸送及び取り扱いの際に発生する物理的振動によって悪化する。界面活性剤は、表面吸着を防止、最小化、または低減させるために日常的に使用される。この点に関して本発明において有用な界面活性剤には、ポリソルベート２０、ポリソルベート８０、ソルビタンポリエトキシレートの他の脂肪酸エステル、及びポリオキサマー１８８が挙げられる。界面活性剤はまた、タンパク質の構造的安定性を制御するためにも広く使用される。この点に関して界面活性剤の使用は、任意の所与の界面活性剤が、典型的には、一部のタンパク質を安定化させ、その他のものを不安定化させるため、タンパク質特異的である。ポリソルベートは、酸化分解を受けやすく、供給されるときに、タンパク質残基側鎖、特にメチオニンの酸化を引き起こすのに十分な量の過酸化物を含有することが多い。その結果、ポリソルベートは、慎重に使用する必要があり、使用する際には、それらの最低有効濃度で用いなければならない。この点に関して、ポリソルベートは、賦形剤がそれらの最低有効濃度で使用されるべきであるという一般規則を例示する。
【０２３９】
ＢＣＭＡ  ＡＤＣ製剤の実施形態は、任意で、１つ以上の酸化防止剤をさらに含み得る。ある程度、タンパク質の有害な酸化は、適正なレベルの周囲酸素及び温度を維持すること、ならびに光への曝露を回避することによって、薬学的製剤において防止することができる。酸化防止賦形剤も同様に、タンパク質の酸化分解を防止するために使用することができる。この点で有用な酸化防止剤の中には、還元剤、酸素／フリーラジカルスカベンジャー、及びキレート剤がある。本発明による治療的タンパク質製剤で使用するための酸化防止剤は、好ましくは、水溶性であり、製品の保管期間を通じてそれらの活性を維持する。酸化防止剤は、タンパク質を損傷し得る。例えば、特にグルタチオン等の還元剤は、分子内ジスルフィド結合を攪乱する可能性がある。したがって、本発明に使用される酸化防止剤は、とりわけ、それら自体が製剤中のタンパク質を損傷する可能性を排除するかまたは十分に低減させるように選択される。
【０２４０】
本発明による製剤は、タンパク質補因子であり、かつタンパク質配位化合物を形成するために必要な金属イオンを含み得る。金属イオンはまた、タンパク質を分解する一部のプロセスを阻害し得る。
【０２４１】
ＢＣＭＡ  ＡＤＣ製剤の実施形態は、任意で、１つ以上の保存剤をさらに含み得る。保存剤は、同じ容器から１回を上回る抽出を伴う、複数回用量の非経口製剤を開発する際に必要である。それらの主要な機能は、微生物の成長を阻害し、薬物製品の保管期間または使用期間を通じて製品の滅菌性を確保することである。広く使用される保存剤には、ベンジルアルコール、フェノール、及びｍ−クレゾールが挙げられる。複数の側面が、保存投薬形態の製剤化及び開発の際に考慮される必要がある。薬物製品中の有効保存剤濃度は、最適化されなければならない。これは、タンパク質の安定性を低下させることなく抗菌有効性を与える濃度範囲の剤形において所与の保存剤を試験することを必要とする。
【０２４２】
保存剤を含有する液体製剤の開発は、凍結乾燥製剤よりも困難である。凍結乾燥製品は、保存剤なしで凍結乾燥され、使用時に保存剤を含有する希釈剤で再構成することができる。これは、保存剤がタンパク質と接触する時間を短縮し、関連する安定性の危険性を大幅に最小化させる。液体製剤では、保存剤の有効性及び安定性は、製品の全保管期間（約１８〜２４カ月）にわたって維持される必要がある。注記すべき重要な点としては、保存剤の有効性が、活性な薬物及びすべての賦形剤成分を含有する最終製剤において、提示されなければならないことである。
【０２４３】
医薬組成物が製剤化された後、それは、溶液、懸濁液、ゲル、エマルジョン、固体、結晶、または乾燥もしくは凍結乾燥粉末として、滅菌バイアル中に保管され得る。そのような製剤は、すぐに使用可能な形態、または投与前に再構成される形態（例えば、凍結乾燥）のいずれかで保存され得る。本発明はまた、単回用量の投与単位を生成するためのキットも提供する。本発明のキットは、それぞれ、乾燥タンパク質を有する第１の容器及び水性製剤を有する第２の容器の両方を含み得る。本発明のある特定の実施形態において、単一チャンバ及び複数チャンバの事前充填シリンジ（例えば、液体シリンジ及び凍結乾燥シリンジ（ｌｙｏｓｙｒｉｎｇｅ）を含むキットが提供される。
【０２４４】
用いられるＢＣＭＡ  ＡＤＣ含有医薬組成物の治療有効量は、例えば、治療内容及び目的に依存するであろう。当業者であれば、治療に適切な投薬量レベルが、部分的に、送達される分子、ＢＣＭＡ  ＡＤＣが使用される適応症、投与経路、ならびに患者の大きさ（体重、体表面、もしくは器官の大きさ）及び／または状態（年齢及び全般的健康状態）に応じて多様であろうことを理解するであろう。ある特定の実施形態において、臨床医は、最適な治療効果をえるように、投薬量を滴定して投与経路を修正することができる。典型的な投薬量は、上述の要因に応じて、約０．１μｇ／ｋｇ〜最大約３０ｍｇ／ｋｇの範囲、またはそれ以上であり得る。
【０２４５】
投薬頻度は、使用される製剤中の具体的なＢＣＭＡ  ＡＤＣの薬物動態パラメーターに依存するであろう。典型的には、臨床医は、所望される効果を達成する投薬量に達するまで、組成物を投与する。組成物は、したがって、単回用量として、または２回以上の用量（同じ量の所望される分子を含有してもよく、もしくはしなくてもよい）として経時的に、または埋め込みデバイスもしくはカテーテルを介した連続的注入として、投与され得る。適切な投薬量のさらなる精緻化は、当業者によって日常的に行われ、これは、当業者が日常的に行う作業の範囲内である。適切な投薬量は、適切な用量応答データの使用によって確認することができる。ある特定の実施形態において、本発明の抗原結合タンパク質は、長期間にわたって患者に投与され得る。
【０２４６】
医薬組成物の投与経路は、既知の方法に従い、例えば、経口、持続放出システムまたは埋め込みデバイスによる静脈内、腹腔内、脳内（実質内）、脳室内、筋肉内、眼内、動脈内、または病変内経路による注射を介するものである。ある特定の実施形態において、組成物は、ボーラス注射によって、もしくは注入によって連続的に、または埋め込みデバイスによって、投与され得る。組成物はまた、所望の分子が吸着またはカプセル封入された膜、スポンジ、または別の適切な材料の埋め込みを介して局所的に投与されてもよい。ある特定の実施形態において、埋め込みデバイスが使用される場合、このデバイスは、任意の好適な組織または器官に埋め込まれ得、所望される分子の送達は、拡散、徐放ボーラス、または連続投与を介して行われ得る。
【０２４７】
本明細書の本文中に引用されるすべての参考文献は、参照によりそれらの全体が明示的に本明細書に組み込まれる。
【０２４８】
以下の実施例（行った実験及び得られた結果を含む）は、例示目的で提供されるに過ぎず、本発明を制限するものと見なされるものではない。
【実施例】
【０２４９】
［実施例１］
正常な個体に由来する骨髄及び腸試料を含む常在形質細胞を含有する正常組織に加えて、多発性骨髄腫、くすぶり型骨髄腫、及びＭＧＵＳ患者試料でのＢＣＭＡ  ｍＲＮＡ発現に関する総合的な分析を行った。ＢＣＭＡ  ｍＲＮＡ発現結果は、Ｏｎｃｏｍｉｎｅ／Ｏｎｃｏｍｉｎｅ  Ｐｏｗｅｒ  Ｔｏｏｌｓ  ａｎｄ  Ａｓｃｅｎｔａ（商標）を含むＡｍｇｅｎに利用可能な腫瘍ＤＮＡマイクロアレイデータベースを調べることによって、コンピュータ分析によって得た。Ｏｎｃｏｍｉｎｅ（商標）データセットには、９９４個の原発性多発性骨髄腫の試料が存在し、それらをＢＣＭＡ発現に関して調べ、その中で５つの試料のみが、検出可能なＢＣＭＡ  ｍＲＮＡシグナルレベルを発現しなかった（シグナルは検出限界にあり、バックグラウンドレベルと一致していた、ＢＣＭＡを発現しないことが知られている組織である黒色腫及び皮膚を含む非Ｂ細胞系統組織において観察されたシグナルと同じであった）。
【０２５０】
結果は、ＢＣＭＡ  ｍＲＮＡが、多発性骨髄腫において高度に発現されることを示す。図３は、Ｃｏｍｐｅｎｄｉａ  Ｂｉｏｓｃｉｅｎｃｅから市販のＯｎｃｏｍｉｎｅ  Ｐｏｗｅｒ  Ｔｏｏｌｓ（Ｌｉｆｅ  Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓより入手）を使用して生成した散布プロットを示す。発現プロットは、１２個のデータセット（ＧＳＥ４４５２、ＧＳＥ９７８２、ＧＳＥ２９１２、ＧＳＥ１７４９８、ＧＳＥ５７８８、ＧＳＥ２３６１、ＧＳＥ２１１３、ＧＳＥ３５２６、ＧＳＥ１１３３、ＧＳＥ１１５９、ＧＳＥ２６５８、ＧＳＥ５９００）、ならびに２つのＡｆｆｙｍｅｔｒｉｘに基づくプラットフォーム（Ｈｕｍａｎ  Ｇｅｎｏｍｅ  Ｕ１３３  Ｐｌｕｓ  ２．０  Ａｒｒａｙ及びＨｕｍａｎ  Ｇｅｎｏｍｅ  Ｕ１３３Ａ  Ａｒｒａｙ）を使用して構築した。ＢＣＭＡ（ＨＵＧＯ  Ｓｙｍｂｏｌ：ＴＮＦＲＳＦ１７）の線形発現を、Ａｆｆｙｍｅｔｒｉｘ  Ｐｒｏｂｅｓｅｔ  ２０６６４１を使用して判定し、７つの組織種（骨髄、ＣＤ３４＋末梢血細胞、意義不明の単一クローン性ガンマグロブリン血症、多発性骨髄腫、末梢血、形質細胞白血病、及びくすぶり型骨髄腫）ならびに４つの試料種（骨髄穿刺液、骨髄検体、末梢血検体、及び組織検体）にわたって測定した。
【０２５１】
データの処理及び正規化：
試料は、単一の強度値を生成するアレイにおいて測定した。共通の参照物は使用しなかった。著者が提供するデータファイルは、ＭＡＳ４、ＭＡＳ５、またはＲＭＡ処理されていることが多い。ＭＡＳ５データを取り込んだ際、すべての発現値を含み、不在／存在のコールは無視した。マイクロアレイ実験毎の中央値を、各値から中央値を差し引くことによって、ゼロに対してスケーリングした。このステップは、試料間のシグナル強度における偏りを取り除くために行った。これは、中央値の発現レベルが試料間でほぼ同じであったこと、ならびに各試料は中央値よりも多く及び少なく発現した遺伝子の数が等しかったことを仮定する。これにより、試料全体にわたり中央値を標準化した。
【０２５２】
線尺度の説明：
中央値＝１。倍変化は、中央値遺伝子発現を「ｘ軸単位」倍上回るとして解釈した。例えば、線尺度値３０は、中央値遺伝子発現１よりも３０倍高い。
【０２５３】
このデータは、ＢＣＭＡ  ｍＲＮＡが、多発性骨髄腫、はんだ付け骨髄腫（ｓｏｌｄｅｒｉｎｇ  ｍｙｅｌｏｍａ）、ならびに意義不明の単一クローンγグロブリン血症において高度に発現されることを示す。このデータは、ＢＣＭＡ  ｍＲＮＡが、９９％を上回る多発性骨髄腫患者試料に発現される（多発性骨髄腫試料の８５％（７９６／９３４）が、１０を上回る線形発現値を有した）ことを示す。このデータは、ＢＣＭＡが、本明細書に様々に記載されるＢＣＭＡ抗体及びＡＤＣを使用して前述のもの及び本明細書に記載される他の癌の治療のための標的とするのに高く望ましい受容体タンパク質であることを示す。
【０２５４】
［実施例２］
ヒトＢＣＭＡを対象とする完全ヒトモノクローナル抗体の開発を、Ａｂｇｅｎｉｘ（現在のＡｍｇｅｎ  Ｆｒｅｍｏｎｔ  Ｉｎｃ．）ＸｅｎｏＭｏｕｓｅ（登録商標）技術を用いて行った（米国特許第６，１１４，５９８号、同第６，１６２，９６３号、同第６，８３３，２６８号、同第７，０４９，４２６号、同第７，０６４，２４４号（これらは参照によりその全体が本明細書に組み込まれる）、Ｇｒｅｅｎ  ｅｔ  ａｌ，１９９４，Ｎａｔｕｒｅ  Ｇｅｎｅｔｉｃｓ  ７：１３−２１、Ｍｅｎｄｅｚ  ｅｔ  ａｌ．，１９９７，Ｎａｔｕｒｅ  Ｇｅｎｅｔｉｃｓ  １５：１４６−１５６、Ｇｒｅｅｎ  ａｎｄ  Ｊａｋｏｂｏｖｉｔｉｓ，１９９８，Ｊ．Ｅｘ．Ｍｅｄ．１８８：４８３−４９５））。
【０２５５】
第１のキャンペーン概要：
概要を、図４Ａに提供する。ＸｅｎｏＭｏｕｓｅ（登録商標）動物に、２９３Ｔ／ＢＣＭＡを一過的に発現する細胞、または単量体及び二量体の両方の形態のｈｕＢＣＭＡを含有する可溶性ｈｕＢＣＭＡタンパク質の混合物のいずれかで免疫付与を行った。ハイブリドーマを生成し、抗原特異的結合剤を、ＣＨＯ／ＢＣＭＡ一過性細胞でのＦＭＡＴにより特定した。４１６個の結合剤のパネルを、ヒトＨ９２９及びＬ３０５５細胞株を使用して内在性ｈｕＢＣＭＡへの結合に関してスクリーニングした。追加のカニクイザル交差反応性のデータを、２９３／カニクイザルＢＣＭＡ一過性細胞でのＦＡＣｓ分析を用いて生成した。抗体を内在性ヒトＢＣＭＡへの最良の結合によりランク付けし、次いでカニクイザル受容体への交差反応性によりランク付けすることによって、２２個のハイブリドーマ株のリードパネルを特定した。このリードパネルを、サブクローニング、拡張、シークエンシング、及び精製へと進めた。並行して、４１６個の結合剤のパネルを、ＡＰＲＩＬ遮断及びマウスＢＣＭＡへの交差反応性についても評価した。２２個のハイブリドーマ株のうち、３個の抗体だけが、完全にヒトのもの（親Ａｂ−１（すなわち、２Ａ１）、親Ａｂ−４（すなわち、１Ｅ１）、及び親Ａｂ−６（すなわち、１１Ｆ１２）であり、残りは、ヒト重鎖及びマウス軽鎖のキメラの組み合わせであり、そのうち３つはサブクローニングできなかった。親Ａｂ−１（２Ａ１）、親Ａｂ−４（１Ｅ１）、及び親Ａｂ−６（１１Ｆ１２）の３個の抗体を、ＩｇＧ１抗体として組み換えクローニングした。このデータは、所望の属性を有する完全ヒト抗体を作製することが、日常的なことではなく、予測不可能であったことを示す。
【０２５６】
第２のキャンペーン概要：
概要を、図４Ｂに提供する。免疫原及び一次スクリーニングは、第１のキャンペーンと同じであった。第２のキャンペーンにより、ヒトＢＣＭＡへの特異的結合を有する５８１個の抗体のパネルを得た。このパネルを、ＦＡＣｓによってカニクイザルＢＣＭＡへの交差反応性に関して試験した。カニクイザル交差反応性データを使用して、検出可能なカニクイザル交差反応性を有する９０個の抗体を選択した。この９０個のサブセットを、一過的発現系を使用してＦＡＣｓによってＴＡＣＩ及びＢＡＦＦ−Ｒへの結合に関して試験した。任意の検出可能な結合レベルを有する抗体を排除した。９０個の抗体を、軽鎖使用に関してスクリーニングし、マウスλ軽鎖を有するものを排除した。これらの二次スクリーニングにより、結果として、９０個の抗体のうち、完全ヒトＩｇＧであり、ＴＡＣＩ及びＢＡＦＦＲよりもヒトＢＣＭＡに選択性であった４５個を特定した。この４５個の抗体のパネルを、次いで、カニクイザルＢＣＭＡ  ＦＡＣｓデータを使用して、カニクイザル結合の程度によりパネルを順位付けすることによって、精査した。上位３０個のカニクイザル交差反応性結合剤を、次いで、サブクローニング、拡張、シークエンシング、及び精製へと進めた。ＡＤＣに適したＡｂを特定するための追加の細胞生存スクリーニングが含まれた。ここでは、ＳＭＣＣ−ＤＭ１と複合体化した抗ｈｕＦｃ二次抗体を、直接的なＤＭ１複合体化の代わりに用いた。類似のクレード特性を有する７つの抗体の最初のセットが、スクリーニング基準を満たし、これをＩｇＧ１形式で組み換えクローニングした。結合剤（ヒト及びカニクイザルＢＣＭＡへの）のパネルを、組み換えクローニングへと進めた（３２Ｂ５、３７Ｂ２、３５Ｄ２、２９Ｃ１２、４０Ｄ７、３３Ｃ７）。ホットスポット修復を開始し、Ｎ結合型グリコシル化部位及び共分散侵害を修復した。ホットスポット修復抗体の選択には、発現及び精製の特徴、細胞表面結合のＦＡＣＳ評価、ＡＤＣ複合号体化、ならびに細胞生存アッセイが含まれた。細胞表面に発現したＢＣＭＡに対する見かけの親和性は、２Ａ１よりも低く、２Ａ１ＣＶ５−ＭＣＣ−ＤＭ１のＡＤＣ効力は、３２Ｂ５または２９Ｃ１２−ＭＣＣ−ＤＭ１に観察されたものよりも２〜３倍の改善である。配列に関連して遺伝子操作した２つの（２９Ｃ１２．Ｖ１及び３２Ｂ５．Ｖ１）を、ＡＤＣ及び医薬組成物の生成のための固有かつ望ましい属性を有するとして特定した。
【０２５７】
免疫付与：
ＢＣＭＡに対する完全ヒト抗体を、対応するアイソタイプの完全ヒトＩｇＧΚ及びＩｇＧλ抗体の多様なレパートリーを発現するように遺伝子操作されたトランスジェニックマウスであるＸｅｎｏＭｏｕｓｅ（登録商標）技術を使用して生成した（Ｍｅｎｄｅｚ，Ｍ．Ｊ．，ｅｔ  ａｌ．，（１９９７）Ｎａｔｕｒｅ  ｇｅｎｅｔｉｃｓ  １５，１４６−１５６、Ｋｅｌｌｅｒｍａｎｎ，Ｓ．Ａ．，ｅｔ  ａｌ．，（２００２）Ｃｕｒｒｅｎｔ  ｏｐｉｎｉｏｎ  ｉｎ  ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ  １３，５９３−５９７）。ＸＭＧ１−ＫＬ、ＸＭＧ２−Ｋ、ＸＭＧ２−ＫＬ、ＸＭＧ４−ＫＬ株のマウスに、全長ヒトＢＣＭＡを発現する２９３Ｔトランスフェクタント及び精製されたＢＣＭＡ可溶性タンパク質の２つのＢＣＭＡ免疫原で免疫付与を行った。ＢＣＭＡ可溶性タンパク質免疫原は、ａｖｉ−Ｈｉｓタグを有する単量体の外部ドメインとして発現されるＢＣＭＡ及びヒトＦｃが連結したホモ二量体として発現されるＢＣＭＡの２つの形態の混合物からなった。可溶性タンパク質は、最初の免疫付与は１０μｇ／マウスの用量で免疫付与し、後続の追加免疫は、５μｇ／マウスの用量で可溶性ＢＣＭＡ（単量体：二量体の比率１：１で）を投与した。細胞免疫原を、４．０×１０６のＢＣＭＡトランスフェクト細胞／マウスで投薬し、後続の追加免疫は、２．０×１０６のＢＣＭＡトランスフェクト細胞／マウスであった。用いた注射部位は、尾部の付け根での皮下と腹腔内との組み合わせであった。使用したアジュバントは、ＴｉｔｅｒＭａｘ  Ｇｏｌｄ（Ｓｉｇｍａ、カタログ番号Ｔ２６８４）であり、ミョウバン（Ｅ．Ｍ．Ｓｅｒｇｅｎｔ  Ｐｕｌｐ  ａｎｄ  Ｃｈｅｍｉｃａｌ  Ｃｏ．，Ｃｌｉｆｔｏｎ，ＮＪ、カタログ番号１４５２−２５０）を、製造業者の説明に従って調製し、アジュバントエマルジョンと抗原溶液との比率１：１で混合した。マウスに、１１〜１７回の範囲の追加免疫を伴って４〜１２週間の期間にわたり免疫付与を行った。
【０２５８】
最初の注射のおおよそ５及び９週間後に血清を採取し、ＣＨＯ−Ｓ細胞上に一過的に発現される組み換えＢＣＭＡ受容体のＦＡＣｓ染色によって、特定の力価を判定した。合計３８匹の動物が、特異的免疫応答を有すると特定され、これらの動物を６つの群にプールし、抗体生成に進めた。
【０２５９】
モノクローナル抗体の調製：
流入領域リンパ節及び脾臓を免疫動物から採取し、各コホートのためにプールした。組織から細胞を切り離すために、リンパ球及び脾細胞を、好適な培地（例えば、Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ、カリフォルニア州Ｃａｒｌｓｂａｄから入手可能なダルベッコ変法イーグル培地、ＤＭＥＭ）において組織から解離して、ＤＭＥＭ中に懸濁した。Ｂ細胞を、好適な方法を使用して選択及び／または増殖させ、好適な融合パートナー、例えば、非分泌型骨髄腫Ｐ３Ｘ６３Ａｇ８．６５３細胞（Ａｍｅｒｉｃａｎ  Ｔｙｐｅ  Ｃｕｌｔｕｒｅ  Ｃｏｌｌｅｃｔｉｏｎ  ＣＲＬ  １５８０、Ｋｅａｒｎｅｙ  ｅｔ  ａｌ，Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．１２３，１９７９，１５４８−１５５０）と融合させた。
【０２６０】
Ｂ細胞を、１：４の比率で融合パートナー細胞と混合した。細胞混合物を４００×ｇで４分間遠心分離することにより緩やかにペレット化し、上清を傾瀉し、細胞混合物を、１ｍｌピペットを使用して緩やかに混合した。ＰＥＧ／ＤＭＳＯ（ポリエチレングリコール／ジメチルスルホキシド、Ｓｉｇｍａ−Ａｌｄｒｉｃｈ、ミズーリ州セントルイスから入手、リンパ球１００万個当たり１ｍｌ）を用いて融合を誘導した。緩やかに振動させながらＰＥＧ／ＤＭＳＯを１分間にわたって徐々に添加した後、１分間混合した。ＩＤＭＥＭ（グルタミンを含まないＤＭＥＭ、Ｂ細胞１００万個当たり２ｍｌ）を、次いで、緩やかに振動させながら２分間にわたって添加した後、追加のＩＤＭＥＭ（Ｂ細胞１００万個当たり８ｍｌ）を３分間にわたって添加した。
【０２６１】
融合細胞を、緩やかにペレット化し（４００×ｇで６分間）、Ｂ細胞１００万個当たり２０ｍｌの選択培地（例えば、アザセリン及びヒポキサンチン［ＨＡ］、ならびに他の補助材料を必要に応じて含有するＤＭＥＭ）中に再懸濁させた。細胞を、３７℃で２０〜３０分間インキュベートし、次いで、２００ｍｌの選択培地中に再懸濁させ、Ｔ１７５フラスコで３〜４日間培養した後、９６ウェルに播種した。
【０２６２】
結果として得られるコロニーのクローン性を最大化するために、標準的な技法を使用して、細胞を９６ウェルプレートに分配した。数日間培養した後、ハイブリドーマ上清を収集し、ヒトＢＣＭＡ受容体への結合の確認、リガンド結合競合アッセイによるＡＰＲＩＬ遮断抗体の特定、ならびにＢＣＭＡ受容体に関連する他の受容体（例えば、ＴＡＣＩ及びＢＡＦＦ受容体）に対する交差反応性の評価を含む、以下の実施例において詳述されるスクリーニングアッセイに供した。次いで、目的の結合特性を有することが特定されたハイブリドーマ株をさらに選択し、標準的なクローニング及びサブクローニング技法に供した。クローン株をインビトロで増殖させ、分泌されたヒト抗体を分析のために得、Ｖ遺伝子配列決定を行った。
【０２６３】
ＦＭＡＴによるＢＣＭＡ受容体特異的結合抗体の選択：
１４日間培養した後、ハイブリドーマ上清を、蛍光測定微量アッセイ技術（Ｆｌｕｏｒｏｍｅｔｒｉｃ  Ｍｉｃｒｏｖｏｌｕｍｅ  Ａｓｓａｙ  Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ）（ＦＭＡＴ）（Ａｐｐｌｉｅｄ  Ｂｉｏｓｙｓｔｅｍｓ、カリフォルニア州Ｆｏｓｔｅｒ  Ｃｉｔｙ）によってＢＣＭＡ特異的モノクローナル抗体に関してスクリーニングした。上清を、ヒトＢＣＭＡを一過的にトランスフェクトしたＣＨＯ−Ｓ細胞に対してスクリーニングし、ＢＣＭＡ遺伝子を含有しなかった同じ発現プラスミドを一過的にトランスフェクトしたＣＨＯ−Ｓ細胞に対して対抗スクリーニングした。
【０２６４】
簡単に言うと、Ｆｒｅｅｓｔｙｌｅ培地（Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ、カリフォルニア州Ｃａｒｌｓｂａｄ）を、安定なトランスフェクタントについてはおおよそ４０００細胞／ウェルの密度で、親細胞についてはおおよそ１６，０００細胞／ウェルの密度で、３８４ウェルのＦＭＡＴプレートに５０μＬ／ウェルの体積で蒔き、細胞を、３７℃で一晩インキュベートした。次いで、１０μＬ／ウェルの上清を添加し、プレートを４℃でおおよそ１時間インキュベートした後、１０μＬ／ウェルの抗ヒトＩｇＧ−Ｃｙ５二次抗体（Ｊａｃｋｓｏｎ  Ｉｍｍｕｎｏｒｅｓｅａｒｃｈ、ペンシルバニア州Ｗｅｓｔ  Ｇｒｏｖｅ）を、２．８μｇ／ｍｌの濃度（４００ｎｇ／ｍｌの最終濃度）で添加した。プレートを、次いで、４℃で１時間インキュベートし、ＦＭＡＴマクロ共焦点スキャナ（Ａｐｐｌｉｅｄ  Ｂｉｏｓｙｓｔｅｍｓ、カリフォルニア州Ｆｏｓｔｅｒ  Ｃｉｔｙ）を使用して蛍光を読み取った。
【０２６５】
複数回のスクリーニングキャンペーンの後、８９７個の抗ＢＣＭＡ結合ハイブリドーマ株のパネルを特定し、さらなる特徴付けアッセイへと進めた。
【０２６６】
フローサイトメトリー（ＦＡＣｓ）によるさらなる結合の特徴付け：
ＦＡＣＳ結合アッセイを行って、Ｈ９２９及びＬ３０５５腫瘍細胞株に発現される内在性ＢＣＭＡ受容体への抗ＢＣＭＡ受容体特異的抗体の結合を評価した。加えて、マウス及びカニクイザルＢＣＭＡオルソログへの交差反応性結合、ならびに関連Ｂ細胞受容体ＴＡＣＩ及びＢＡＦＦ−Ｒへの結合もまた、２９３Ｔ細胞に一過的に発現する種々の受容体の組み換え形態を使用してＦＡＣによって評価した。
【０２６７】
ハイブリドーマ上清を１０，０００〜２５，０００の細胞とともに、４℃で１時間インキュベートした後、ＰＢＳ／２％ＦＢＳで２回洗浄することによって、ＦＡＣｓアッセイを行った。次いで、細胞を、４℃で蛍光色素（ｆｌｏｒｏｃｈｒｏｍｅ）標識した二次抗体で処置した後、２回洗浄した。細胞を５０μｌのＰＢＳ／２％ＦＢＳ中に再懸濁させ、抗体結合を、ＦＡＣＳＣａｌｉｂｕｒ（商標）機器を使用して分析した。
【０２６８】
ＦＡＣＳによるリガンド結合競合アッセイによる遮断抗体の特定：
ＢＣＭＡ受容体に結合し、ＡＰＲＩＬリガンドの結合を遮断する抗体（ハイブリドーマ上清中）を特定するためのリガンド結合競合法を開発した。９６ウェルＶ底プレート（Ｓａｒｓｔｅｄｔ  ＃８２．１５８３．００１）において、５０，０００の一過的にトランスフェクトした２９３Ｔ細胞を、１５μｌの抗ＢＣＭＡハイブリドーマ上清とともに４℃で１時間インキュベートした後、ＰＢＳ／２％ＦＢＳで２回洗浄した。次いで、２．５μｇ／ｍｌのＡｌｅｘａ６４７で標識したＡＰＲＩＬ−Ｆｃ  ５０μｌを各ウェルに添加し、プレートを４℃で１時間インキュベートした。次いで、細胞を洗浄し、Ａｌｅｘａ６４７で標識したＡＰＲＩＬ−Ｆｃと結合した細胞の量を、フローサイトメトリーによって定量化した。
【０２６９】
実験には、陰性対照のハイブリドーマ上清が含まれた。これらの陰性対照実験で観察された平均シグナルを、このアッセイの最大可能シグナルとして用いた。実験上清を、この最大シグナルと比較し、阻害パーセントを各ウェルについて計算した（阻害％＝（１−（抗ＢＣＭＡハイブリドーマ上清のＦＬ４幾何平均／最大ＦＬ４幾何平均シグナル））。
【０２７０】
２Ａ１及び１Ｅ１のさらなる特徴付け：
１つの重要な基準は、細胞表面に発現される野生型ヒトＢＣＭＡに対する強力な選択性である。全長ＢＣＭＡ、ＴＡＣＩ、またはＢＡＦＦ−Ｒを発現するように一過的にトランスフェクトした細胞上でのＦＡＣＳ結合を、標準的な技法を用いて行った。実験設計に従って、おおよそ４０×１０６の一過的にトランスフェクトした標的細胞を、染色溶液（ＰＢＳ中、２％ヤギ血清、１％ウサギ血清、０．０２％アジド）中に再懸濁させ、丸底９６ウェルプレート（Ｃｏｒｎｉｎｇ  Ｉｎｃｏｒｐ．、マサチューセッツ州Ａｃｔｏｎ）にアリコートを取った。細胞を、摂氏４度で３０分間インキュベートして、非特異的部位を遮断した。抗体を、染色溶液中に滴定した。２００μｌ／ウェルで細胞を再懸濁させることによって、すすぎ溶液（ＰＢＳ＋０．０２％アジド）中で細胞をすすいだ。細胞を、摂氏４度で７分間、１５００ｒｐｍで遠心分離した。すすぎ溶液を除去し、すすぎステップを繰り返した。細胞を、３０μｌ／ウェルで適切な抗体溶液（表４のマトリックスを参照されたい）中に再懸濁し、摂氏４度で３０分間インキュベートした。ｈｕＩｇＧ１陰性対照の二次試薬は、ビオチニル化抗ｈｕＩｇＧ（Ｊａｃｋｓｏｎ、カタログ１０９−０６５−０９８）に続いてストレプトアビジン−フィコエリトリン（ＳＡ−ＰＥ）複合体（ＢＤ  Ｐｈａｒｍｉｎｇｅｎ、カタログ５５４０６１）であり、１Ｅ１、２Ａ１、及び１１Ｆ１２の二次標識試薬は、ビオチニル化抗ｈｕＩｇＧに続いてＳＡ−ＰＥであった。マウスＩｇＧ１陰性対照及び２つのマウス抗体（１．１８３及び１．２８８）については、二次試薬は、抗マウスＩｇＧ−ＰＥ複合体（ＢＤ  Ｐｈａｒｍｉｎｇｅｎ、カタログ５５０５８９）であった。細胞／抗体を、上述のようにすすいで、過剰／非結合抗体を除去した。最後のすすぎの後、細胞を、２００μｌのすすぎ溶液中に再懸濁させ、染色溶液を滴下添加して細胞の凝集を防いだ。試料を、ＦＡＣＳにおいて５３２ｎＭの波長で読み取った。ＭＦＩが陰性対照の２倍であった場合、試料は結合に関して陽性であると見なした。
【０２７１】
表４に示されるように、２Ａ１及び１Ｅ１抗体は、ＢＣＭＡに特異的であったが、１１Ｆ１２は、構造的に相同な受容体であるＴＡＣＩ及びＢＡＦＦ−Ｒと交差反応した。１．１８３及び１．２８８は、ＴＡＣＩ及び／またはＢＡＦＦ−Ｒに交差反応し、したがって、交差反応性の陽性対照として機能するマウス抗ｈｕＢＣＭＡモノクローナル抗体である。
【表４】
2019031510.tif 000013
【０２７２】
細胞表面上に発現するヒト及びカニクイザル（ｃｙｎｏ）ＢＣＭＡへの２Ａ１及び１Ｅ１抗体の結合親和性を、ＦＡＣＳ分析によって評価した。簡単には：
１日目−カニクイザルまたはヒトＢＣＭＡのいずれかを一過的にトランスフェクトした２９３Ｔ細胞を調製した
２日目−ＢＣＭＡ発現を改善するために５ｍＭの酪酸ナトリウムを細胞に添加した
３日目−おおよそ約１６時間、３７℃で培地（Ｆｒｅｅｓｔｙｌｅ（商標）２９３発現培地（Ｇｉｂｃｏ／Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ、カリフォルニア州サンディエゴ）＋２％ＦＢＳ＋５０μｇ／ｍＬ  Ｇ４１８＋０．０５％アジ化ナトリウム中で、平衡アッセイを設定した。
【０２７３】
平衡条件：
８００ｎＭの各Ｍａｂを、４℃及び３７℃において１０個のデータ点で、１：２、次いで１：４に滴定し、
ヒトＢＣＭＡを一過的に発現する２×１０４の細胞及び３×１０５の２９３Ｔ細胞を調製し、カニクイザルＢＣＭＡを一過的に発現する２×１０４の細胞及び２．６×１０５個の２９３Ｔ細胞を調製した。
【０２７４】
４日目−ＦＡＣＳ分析：１つがＫｄ制御で、１つがＡｂ制御の２つの曲線を、各ｍＡｂについて得た。
【０２７５】
ヒト及びカニクイザル（ｃｙｎｏ）ＢＣＭＡに対する２Ａ１及び１Ｅ１抗体の平衡解離定数（Ｋｄ）を、ＢＩＡｃｏｒｅ（商標）表面プラズモン共鳴分析によって評価した。
アッセイ条件：バイオセンサー分析を、ＣＭ５センサーチップを搭載したＢＩＡｃｏｒｅ（商標）３０００光学バイオセンサー（ＧＥ  Ｈｅａｌｔｈｃａｒｅ，Ｐｉｓｃａｔａｗａｙ，ＮＪ）を使用して、ＨＢＳ−ＥＰ緩衝系（１０ｍＭ  ＨＥＰＥＳ  ｐＨ７．４、１５０ｍＭ  ＮａＣｌ、３．４ｍＭ  ＥＤＴＡ、及び０．００５％  Ｓｕｒｆａｃｔａｎｔ  Ｐ２０）において２５℃で行った。オートサンプラーは４℃に維持した。
【０２７６】
表面調製：ヤギ抗ヒトＩｇＧ捕捉抗体（Ｊａｃｋｓｏｎ  ＩｍｍｕｎｏＲｅｓｅａｒｃｈ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓ，Ｉｎｃ．、ペンシルバニア州Ｗｅｓｔ  Ｇｒｏｖｅ、１０９−００５−０９８）を、標準的なアミンカップリング化学反応（１０，０００〜１１，０００ＲＵ）を使用して、センサーチップのすべてのフローセルに固定化した。この表面型は、各再生ステップの後に、新しく分析抗体（リガンド）を再現性よく捕捉するための形式を提供した。
【０２７７】
リガンドの調製：フローセル２、３、及び４を捕捉した抗ＢＣＭＡ抗体（約３５０〜４８０ＲＵ）の分析に使用し、フローセル１を参照フローセルとして使用した。
【０２７８】
検体の調製：７５．０〜０．１０３ｎＭ（３倍希釈）の範囲で７つの抗ｈｕＢＣＭＡ濃度を、泳動緩衝液中に調製した。
【０２７９】
相互作用パラメーター：７つの検体試料濃度のそれぞれを、結合の再現性を評価し、注射の順序に対する潜在的な系統的偏りを管理する手段として、ばらばらの順序で、三連に泳動させた。さらに、複数のブランク（緩衝液）の注射も行い、これを用いて系統的人為要素を評価し、取り去った。すべての検体濃度に関して、会合及び解離の段階を、それぞれ、５０μＬ／分の流量で、１８０秒及び９００秒間監視した。さらに、５０μＬ／分の流量で、７５．０ｎＭのｒｈｕ  ＢＣＭＡ濃度を使用して、５４００秒の長い解離段階実験を行った。
【０２８０】
表面の再生：表面を、１０ｍＭグリシン、ｐＨ１．５で３５秒間、５０μＬ／分の流量で再生させた。
【０２８１】
モデル／当てはめ：データをアライメントし、二重参照し、ＳＰＲデータ処理及び非線形最小二乗回帰当てはめプログラムであるＳｃｒｕｂｂｅｒ  ｖ２．０（ｃ）ソフトウェア（ＢｉｏＬｏｇｉｃ  Ｓｏｆｔｗａｒｅ  Ｐｔｙ  Ｌｔｄ，Ｃａｍｐｂｅｌｌ，Ａｕｓｔｒａｌｉａ）を使用して当てはめた。まず、１Ａ２及び１Ｅ１抗ＢＣＭＡ抗体については、解離速度係数（ｋｄ）を、５４００秒の解離段階データから判定した。次に、この値を、１８０秒の会合段階データの全体的な当てはめにおいて固定パラメーターとして１：１の結合モデルに適用して、会合速度係数（ｋａ）及びＲｍａｘ値を判定した。１１Ｆ１２−１抗ＢＣＭＡ抗体については、平衡解離定数（Ｋｄ）は、定常状態シグナルから推定し、単純な１：１結合等温線に当てはめた。
【０２８２】
表５に示されるように、２Ａ１及び１Ｅ１は、ヒトＢＣＭＡに対して低ｎＭの親和性を示した。重要な事に、２Ａ１は、ヒトＢＣＭＡと類似の親和性でカニクイザルＢＣＭＡに結合した。対照的に、１Ｅ１は、比較的低い親和性（すなわち、１００ｎＭ超）でカニクイザルＢＣＭＡに結合した。このデータは、２Ａ１抗体の固有かつ稀有な特徴をさらに示す。２Ａ１抗体を、そのＢＣＭＡに対する例外的な特異性、そのｈｕＢＣＭＡに対する高い親和性、及びそのカニクイザルＢＣＭＡに対する交差反応性のため、さらなる特徴付け及び開発に選択した。１Ｅ１及び１１Ｆ１２は、これらの固有な特徴を共有しなかった。
【表５】
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【０２８３】
［実施例３］
２Ａ１及び１Ｅ１抗体が、一過的発現細胞上に発現するｈｕＢＣＭＡに結合したことを確定した（実施例２）後、これらの抗体が、骨髄腫患者から単離したＢリンパ球（例えば、もともと骨髄腫患者に由来するＨ９２９細胞株）が発現する天然のＢＣＭＡに結合することができたかどうかを判定することが重要であった。加えて、いくつかの異なる骨髄腫及びＢ細胞株を試験して、２Ａ１及び１Ｅ１抗体が、これらの細胞表面上のＢＣＭＡに結合するかどうか、及びどの程度結合するかを判定した。
【０２８４】
実験設計に従って、おおよそ１０〜４０×１０６のＨ９２９骨髄腫細胞を、染色溶液（ＰＢＳ中、２％ヤギ血清、１％ウサギ血清、０．０２％アジド）中に再懸濁させ、丸底９６ウェルプレート（Ｃｏｒｎｉｎｇ  Ｉｎｃｏｒｐ．、マサチューセッツ州Ａｃｔｏｎ）にアリコートを取った。細胞を、摂氏４度で３０分間インキュベートして、非特異的部位を遮断した。抗体を、染色溶液中に滴定した。２００μＬ／ウェルで細胞を再懸濁させることによって、すすぎ溶液（ＰＢＳ＋０．０２％アジド）中で細胞をすすいだ。細胞を、摂氏４度で７分間、１５００ｒｐｍで遠心分離した。すすぎ溶液を除去し、すすぎステップを繰り返した。細胞を、３０μＬ／ウェルで２Ａ１または１Ｅ１とともに再懸濁させ、摂氏４度で３０分間インキュベートした。ｈｕＩｇＧ１陰性対照の二次試薬は、ビオチニル化抗ｈｕＩｇＧ（Ｊａｃｋｓｏｎ  Ｌａｂｓ、メイン州Ｂａｒ  Ｈａｒｂｏｒ、カタログ１０９−０６５−０９８）に続いてストレプトアビジン−フィコエリトリン（ＳＡ−ＰＥ）複合体（ＢＤ  Ｐｈａｒｍｉｎｇｅｎ、カリフォルニア州サンディエゴ、カタログ５５４０６１）であった。２Ａ１及び１Ｅ１二次試薬は、同じビオチニル化抗ｈｕＩｇＧに続いてＳＡ−ＰＥであった。細胞／抗体を、上述のようにすすいで、過剰／非結合抗体を除去した。最後のすすぎの後、細胞を、２００μＬのすすぎ溶液中に再懸濁させ、染色溶液を滴下添加して細胞の凝集を防いだ。試料を、ＦＡＣＳにおいて５３２ｎＭの波長で読み取った。
【０２８５】
図５に示されるように、２Ａ１及び１Ｅ１抗体の両方が、骨髄腫細胞株（Ｈ９２９）の表面上に発現されるヒトＢＣＭＡに結合した。いずれの抗体も良好に結合したが、２Ａ１抗体は、１Ｅ１抗体よりも相当に優れた結合特徴を有した。このデータは、２Ａ１抗体が、骨髄腫細胞において発現されるヒトＢＣＭＡへの優れた結合を有するという点で固有であることをさらに実証する。
【０２８６】
いくつかの異なる骨髄腫及びＢ細胞株を試験して、２Ａ１及び１Ｅ１抗体が、これらの細胞表面上のＢＣＭＡに結合するかどうか、及びどの程度結合するかを判定した。次の骨髄腫細胞株：Ｈ９２９、ＲＰＭＩ  ８２２６、ＯＰＭ２、ＭＭ１Ｓ、Ｕ２６６、及びＭＭ１Ｒ、ならびにＢ細胞株ＲＡＭＯＳ及びＥＷ３６を、２Ａ１結合に関して試験した。実験設計に従って、おおよそ１０〜４０×１０６の細胞を、染色溶液（ＰＢＳ中、２％ヤギ血清、１％ウサギ血清、０．０２％アジド）中に再懸濁させ、丸底９６ウェルプレート（Ｃｏｒｎｉｎｇ  Ｉｎｃｏｒｐ．、マサチューセッツ州Ａｃｔｏｎ）にアリコートを取った。細胞を、摂氏４度で３０分間インキュベートして、非特異的部位を遮断した。抗体を、染色溶液中に滴定した。２００μＬ／ウェルで細胞を再懸濁させることによって、すすぎ溶液（ＰＢＳ＋０．０２％アジド）中で細胞をすすいだ。細胞を、摂氏４度で７分間、１５００ｒｐｍで遠心分離した。すすぎ溶液を除去し、すすぎステップを繰り返した。２Ａ１抗体及びヒトＩｇＧ１アイソタイプ対照抗体を、ＥＭＰ  Ｂｉｏｔｅｃｈ（蛍光励起及び蛍光放出の最大値をそれぞれ６５２ｎＭ及び６７１ｎＭに有するタンパク質−色素複合体を形成するための、タンパク質の標識及び精製のためのＦｌｕｏｒｏ−Ｓｐｉｎ  ６４９タンパク質標識及び精製キット）によって提供されるもの等、標準的な方法を用いてＤＹ−６４９の反応性スクシンイミジルエステルを使用してＤｙ６４９に複合体化させた。細胞を、３０μＬ／ウェルで２Ａ１または対照抗体とともに再懸濁させ、摂氏４度で３０分間インキュベートした。細胞／抗体を、上述のようにすすいで、過剰／非結合抗体を除去した。最後のすすぎの後、細胞を、２００μＬのすすぎ溶液中に再懸濁させ、染色溶液を滴下添加して細胞の凝集を防いだ。
【０２８７】
図７に示されるように、２Ａ１抗体は、すべての骨髄腫細胞株及びＢ細胞株に結合したが、ＲＡＭＯＳ  Ｂ細胞への結合は、比較的低かった。このデータは、２Ａ１抗体が、種々のヒト骨髄腫細胞上のＢＣＭＡに結合する能力を有することを示す。このデータは、したがって、ＢＣＭＡを発現する種々のヒト骨髄腫細胞上のＢＣＭＡを標的とするための２Ａ１抗体の有用性を示す。
【０２８８】
［実施例４］
好ましい実施形態の高度に望ましい属性は、ＡＤＣＣ（抗体依存性細胞媒介性細胞毒性）を含む種々の手段によって、標的細胞を殺滅させる能力である。典型的に、ＡＤＣＣは、抗体によるナチュラルキラー（ＮＫ）細胞の活性化を伴う。ＮＫ細胞は、ＦｃγＲ（Ｆｃ受容体タンパク質）を発現する。ＦｃγＲは、標的細胞の表面に結合している抗体、例えばＩｇＧ１のＦｃ部分に結合する。結合すると、ＮＫ細胞は、サイトカインならびにパーフォリン及びグランザイムを含有する細胞毒性粒子を放出し、これらが標的細胞に侵入し、アポトーシスを引き起こすことによって細胞死を促進する。本明細書に提供される抗体及びＡＤＣの実施形態は、ＩｇＧ１アイソタイプ（上述の通り）のものであり、したがって、ＡＤＣＣ活性が見込まれる。
【０２８９】
インビトロＡＤＣＣアッセイ：
ＢＣＭＡを比較的高いレベルで発現する、もともとは骨髄腫患者から単離されたヒトＢリンパ球細胞株である標的細胞Ｈ９２９を、以下の通りカルセイン−ＡＭで標識した。Ｈ９２９細胞を採取し、２×１０６の細胞／ｍｌでｃＲＰＭＩ−１０培地（ＲＰＭＩ（Ｌｉｆｅ  Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ、カリフォルニア州Ｃａｒｌｓｂｅｒｇ）＋１０％ウシ胎児血清）中に再懸濁させた。無水ＤＭＳＯ（Ｓｉｇｍａ−Ａｌｄｒｉｃｈ、ミズーリ州セントルイス）中４ｍＭのカルセイン−ＡＭを、１０μＭ（１：４００希釈）の最終濃度まで添加した。細胞を、３７℃で３０分間インキュベートした後、ＰＢＳ（それぞれ、１５００ｒｐｍ、４℃で５分間）中で２回洗浄した。ペレットをｃＲＰＭＩ−１０中に再懸濁させ、０．２×１０６の細胞／ｍｌの濃度に調整し、次のステップで使用するため氷上に置いた。試験抗体を、１０μｇ／ｍｌで開始する１０倍連続滴定で、Ｕ底９６ウェルプレート（ＢＤ，Ｆｒａｎｋｌｉｎ  Ｌａｋｅｓ，ＮＪ）に添加した。リツキシマブ（Ｇｅｎｅｎｔｅｃｈ、カリフォルニア州南サンフランシスコ）を陽性抗体対照として使用した。加えて、１Ｅ１抗体のＩｇＧ２  アイソタイプを対照として使用した。カルセイン−ＡＭで標識したＨ９２９細胞を各ウェルに添加し（１×１０４個の細胞／ウェル）、３７℃で２０分間抗体とともにインキュベートした。インキュベーションの後、５０μｌのＮＫ細胞を４×１０６の細胞／ｍｌの濃度で各ウェルに添加したか、またはＰＢＭＣを２０×１０６の細胞／ｍｌの濃度で添加し、３７℃で４時間インキュベートした。ＮＫ細胞またはＰＢＭＣを、エフェクター細胞として、１５００ｒｐｍで、５分間４℃でペレット化し、ｃＲＰＭＩ−１０中に再懸濁させ、細胞濃度を４×１０６の細胞／ｍｌ（ＮＫ）または２０×１０６の細胞／ｍｌ（ＰＢＭＣ）に調整した。インキュベーションの後、２０μｌ／ウェルの９％ＮＰ−４０（ＩＧＥＰＡＬ  ＣＡ  ６３０，Ｓｉｇｍａ−Ａｌｄｒｉｃｈ）を添加して１００％溶解を刺激することによって、陽性対照を調製した。すべての他のウェルには、２０μｌ／ウェルのｃＲＰＭＩ−１０培地を単独で受容させた。プレートを、８００ＲＰＭで、４分間４℃で回転させた。おおよそ１５０μｌの上清を除去し、透明底の黒色９６ウェルプレート（Ｃｏｒｎｉｎｇ、マサチューセッツ州Ｌｏｗｅｌｌ）に移し、標準的なプレートリーダー（Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｄｅｖｉｃｅｓ，Ｓｐｅｃｔｒａ  ｍａｘ  ＧＥＭＩＮＩ）において励起４８５、放出５３５で蛍光を読み取った。最大溶解パーセントを、（試料値−自発的溶解）／（１００％溶解−自発的溶解）×１００として計算した。
【０２９０】
図８に示されるように、２Ａ１及び１Ｅ１抗体は、２Ａ１については１１ｎｇ／ｍｌ、及び１Ｅ１については７６ｎｇ／ｍｌのＥＣ５０で、優れたＡＤＣＣ活性を示した。これらの抗体のＡＤＣＣ活性は、リツキサンベンチマーク抗体のものを大幅に上回った。したがって、２Ａ１及び１Ｅ１抗体は、それらの非常に優れたＡＤＣＣ活性が固有であり、したがって、これらの抗体のＡＤＣバージョンは、多発性骨髄腫等の癌患者においてＢＣＭＡを発現する細胞の殺滅に複数の手段を提供する。
【０２９１】
［実施例５］
これらの実験は、２Ａ１抗体が、ヒト骨髄腫細胞上でｈｕＢＣＭＡに結合すると、内部移行されることを示す。これは、ＡＤＣがエンドソーム／リソソーム経路内に内部移行されて、無関係な殺滅を最小限に抑えてその細胞を選択的に殺滅させるためには、抗体がＢＣＭＡ媒介性エンドサイトーシスによって内部移行されることが好ましいという点で、ＡＤＣへと発展する候補抗体の重要な属性である。
【０２９２】
Ｈ９２９骨髄腫瘍細胞を、成長培地（ＲＰＭＩ  １６４０、１０％ＦＢＳ、ＭＥＭ非必須アミノ酸、ＨＥＰＥＳ、β−メルカプトエタノール、Ｐｅｎ／Ｓｔｒｅｐ、Ｌ−グルタミン、ピルビン酸ナトリウム、ゲンタマイシン）中で培養した。Ｈ９２９細胞を、１つの管につきおおよそ５００，０００の細胞で２つの３−ｍｌ  ＦＡＣＳ管に採取し、アッセイ培地（２％ＦＢＳを含有するＰＢＳ）で１回洗浄した。細胞を、１つの管につき１０μｇ／ｍＬ（１つの管につき２００μＬ）で、２Ａ１またはＣＤ１３８抗体のいずれかとともにアッセイ培地中に懸濁させた。４℃で３０分間インキュベートした後、細胞を、アッセイ培地で１回洗浄した。抗ヒトＩｇＧ、Ａｌｅｘａ  ４８８（Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｐｒｏｂｅｓ  Ｉｎｃ．、オレゴン州Ｅｕｇｅｎｅ、カタログ番号Ａ１１０１３、アッセイ培地中１：１，０００希釈）、及びＨｏｅｃｈｓｔ  ３３３４２（Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｐｒｏｂｅｓ  Ｉｎｃ．、オレゴン州Ｅｕｇｅｎｅ、カタログ番号Ｈ２１４９２、アッセイ培地中１：２０００希釈）の混合液を、細胞に添加した。細胞を４℃で１５分間インキュベートした後、細胞を１回洗浄し、次いで、１ｍｌ当たり１×１０６の細胞の濃度に達するように、０．５ｍｌのアッセイ培地で再懸濁した。５０μＬの細胞を、各抗体８ウェルで９６ウェルプレートに移した。細胞は、５０μｌのＢＤｃｙｔｏｆｉｘ／ｃｙｔｏｐｅｒｍキット（ＢＤ  Ｂｉｏｓｉｃｅｎｃｅｓ．カタログ番号５５４７１４）を添加することによってゼロ時点で開始して固定及び透過化したか、０．５、１、及び２時間の時点で３７℃、５％ＣＯ２でインキュベートしたかのいずれかであった。各インキュベーション時点で、細胞を、０時点に関して示されるものと同じステップを使用して固定及び透過化した。内部移行速度は、４０倍対物レンズを用いてＢｉｏＡｐｐｌｉｃａｔｉｏｎの「Ｓｐｏｔ  Ｄｅｔｅｃｔｏｒ」アルゴリズムによりＡｒｒａｙＳｃａｎ  ＶＴＩ  ＨＣＳリーダー（バージョン６、Ｃｅｌｌｏｍｉｃｓ，Ｔｈｅｒｍｏ  Ｆｉｓｈｅｒ  Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ，Ｐｉｔｔｓｂｕｒｇｈ，ＰＡ）で定量化した。内部移行のフィルター設定を、以下の表に示す。少なくとも２００個の細胞が、各ウェルで計数された。
【表６】
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【０２９３】
ＡｒｒａｙＳｃａｎの出力パラメーターのアルゴリズムは、「ＳｐｏｔＣｏｕｎｔＰｅｒＯｂｊｅｃｔＣｈ２」であった。結果は、細胞２００個当たりの合計スポット数として報告した。Ｐｒｉｓｍ  ４．０１（ＧｒａｐｈＰａｄ、カリフォルニア州サンディエゴ）を使用して統計学的分析を行った。スポット計数は、二連の測定値（ｎ＝２）の平均±標準誤差（ＳＥＭ）として表した。分析ツールを使用して、単位時間当たりのスポット計数（内部移行速度＝Ｔ１／２）を、単相指数関数関連付け方程式（ｏｎｅ  ｐｈａｓｅ  ｅｘｐｏｎｅｎｔｉａｌ  ａｓｓｏｃｉａｔｉｏｎ  ｅｑｕａｔｉｏｎ）に当てはめた。ＧｒａｐｈＰａｄ（商標）Ｐｒｉｓｍからの単相指数関数関連付けを使用して、内部移行の半減期を計算した。
【０２９４】
図９は、抗体２Ａ１が、Ｈ９２９細胞上のＢＣＭＡに結合した後に容易に内部移行されたことを示す。これは、この抗体の固有な属性、及びＢＣＭＡを発現するＢ細胞を排除することによる癌の治療のためにＢＣＭＡを標的とするためのＡＤＣとしての有用性を示す。
【０２９５】
［実施例６］
親２Ａ１抗体（配列番号２８７の重鎖アミノ酸配列及び配列番号２８８の軽鎖アミノ酸配列）を、非切断型リンカー（ＳＭＣＣ）を用いてマイタンシン（ＤＭ１）に複合体化させ、２Ａ１−ＭＣＣ−ＤＭ１と称されるＡＤＣを得た。
【０２９６】
ＤＭ１−ＳＭＣＣ（スクシンイミジル４−［Ｎ−マレイミドメチル］シクロヘキサン−１−カルボキシレート、これはＮＨＳエステル及びマレイミドを含有する）との単一ステップ複合体化を開発した。以下に示されるように、ＤＭ１−ＳＭＣＣ試薬を独立して合成し、ＡＤＣプロセスにおける単一の複合体化試薬として使用した。リンカーと既に複合体化した薬物マイタンシン、例えば、この例ではＤＭ１）を荷電させることによって、多数の潜在的な工程不純物の生成を回避した。
【化２】
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【０２９７】
複合体化の概要：
ＳＭＣＣ−ＤＭ１に複合体化した抗ｈｕＢＣＭＡ  ２Ａ１の１ステップ調製は、以下に図示される通りである。５０ｍＭリン酸カリウム中の２．５ｍｇ／ｍＬの２Ａ１、５０ｍＭ  ＮａＣｌ、２ｍＭ  ＥＤＴＡ、ｐＨ７．５を、ＤＭＡ（１０％）中、８、１０、及び１２倍のモル過剰のリンカー−薬物で修飾した。反応を室温で９０分間ロッカーにおいて行い、次いで、一晩のインキュベーションの間４℃でロッカーに設置した。未反応のリンカー−薬物をＨｉＬｏａｄ  １６／６０  Ｓｕｐｅｒｄｅｘ（商標）２００によって除去した。非凝集画分をプールし、Ａｍｉｃｏｎ（登録商標）Ｕｌｔｒａ−１５  ３０ｋＤ  ＭＷＣＯ遠心分離フィルターで濃縮し、続いて、０．２２ミクロンのフィルターを使用して濾過した。
【化３】
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【０２９８】
種々の２Ａ１−ＭＣＣ−ＤＭ１  ＡＤＣを、質量分析法を用いて分析した（図１０を参照されたい）。インタクトな質量プロファイルを簡略化するために、ＡＤＣ試料を、ＰＮＧａｓｅ  Ｆ（Ｎｅｗ  Ｅｎｇｌａｎｄ  Ｂｉｏｌａｂｓ）を使用して、酵素／基質の重量比１／２０で、３７℃において一晩（１６時間）、ＰＢＳ緩衝液中で脱グリコシル化した。２０μｇの脱グルコシル化したＡＤＣ試料を、二重噴霧器エレクトロスプレーイオン源を有するＡｇｉｌｅｎｔ  ６２１０  ＴＯＦ  ＬＣ／ＭＳシステムにおいて分析した。粒径５μＭの２．１×１５０ｍｍ  Ｐｕｒｓｕｉｔ  Ｄｉｐｈｅｎｙｌカラム（Ａｇｉｌｅｎｔ  Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ）を、ＬＣシステムに接続し、０．４ｍｌ／分で操作した。カラム温度は、７５℃であり、溶媒Ａは、水中０．１％ＴＦＡであり、溶媒Ｂはアセトニトリル中０．１％ＴＦＡであった。Ｂのパーセンテージにおける勾配は、それぞれ、３、５、３０、３２、３３、及び３５分で５−５、５−２５、２５−８０、８０−８０、８０−５、５−であった。ＴＯＦ質量分析計は、１００〜１００００ｍ／ｚの範囲に調整及び較正した。ＴＯＦ  ＭＳ条件には、４５００Ｖのキャピラリー電圧、１２Ｌ／分の乾燥ガス流、３００℃の乾燥ガス温度、４０Ｌ／分の噴霧器ガス流、及び３５０Ｖのフラグメンター電圧が含まれた。ＭＳデータは、Ａｇｉｌｅｎｔ  ＭａｓｓＨｕｎｔｅｒ  Ｑｕａｌｉｔａｔｉｖｅ  Ａｎａｌｙｓｉｓプログラムで分析した。
【０２９９】
表７に示されるように、結果として得られた２Ａ１−ＭＣＣ−ＤＭ１は、おおよそ２．８対３．４の平均薬物：抗体比（ＤＡＲ）を有した。
【表７】
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【０３００】
種々のリンカー及び薬物を使用して、２Ａ１及び１Ｅ１抗体からＡＤＣを生成した。ＭＣＣ−ＤＭ１複合体化に加えて、２Ａ１及び１Ｅ１抗体を、ＰＥＧ４−Ｍａｌ−ＤＭ４に複合体化することに成功した。これは、本明細書に記載されるＡＤＣが、特に２Ａ１抗体については、ＤＭ１−ＳＭＣＣ方法以外のリンカー及び薬物技術を使用して作製されたという証拠である。
【０３０１】
２Ａ１ＣＶ５（Ａｂ−１）の複合体化：
２Ａ１ＣＶ５（Ａｂ−１）及び２Ａ１ＣＶ４抗体とＤＭ１−ＳＭＣＣとの複合体化を、本質的には上述のように行った。一般に、複合体化は、ｐＨ８．５で緩衝溶液中において行った。初期複合体化の完了時に、グリシンを導入して未反応のＤＭ１−ＳＭＣＣ及び加水分解に不安定なＤＭ１−ＭＣＣ複合体の除去／反応停止を行った。ＡＤＣを、接線流濾過（ＴＦＦ）によって小分子成分から分離した。この特定の複合体化の条件は、５ｇ／Ｌの抗体を５０ｍＭのホウ酸、５０ｍＭ  ＮａＣｌ、２ｍＭ  ＥＤＴＡ、ｐＨ８．５において希釈することであった。１０倍モル過剰のＤＭ１−ＳＭＣＣ（７．５％ＤＭＡＣ中）を添加し、２０℃で９０分間インキュベートした。３０分間ｐＨ８．０で２００ｍＭを使用して反応を停止させた。ｐＨをｐＨ５．２に調整し、溶液を接線流濾過に供して製剤化緩衝液（１０ｍＭグルタミン酸塩、４％マンニトール、２％スクロース、ｐＨ５．０）中に緩衝液交換を行い、おおよそ１１〜１４ｇ／Ｌに濃縮した。材料を、次いで、１０ｍＭグルタミン酸塩、４％マンニトール、２％スクロース、０．０１％ＰＳ−２０、ｐＨ５．０中で１０ｇ／Ｌの最終濃度まで希釈した。２Ａ１ＣＶ５（Ａｂ−１）及び２Ａ１ＣＶ４抗体のいずれも、複合体化プロセスを通じて許容可能かつ同一に挙動した。表８は、２Ａ１ＣＶ５（Ａｂ−１）及び２Ａ１ＣＶ４  ＡＤＣの最終複合体化結果を要約する。
【表８】
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【０３０２】
さらに分析すると、高いＤＡＲ値を有するＡＤＣが、ＩＶ  ｐＨ飛躍試験において溶液から沈殿する傾向を有した。追跡研究により、４未満のＤＡＲを有するＡＤＣがＩＶ  ｐＨ飛躍試験において観察される沈殿または混濁を示さなかったことがわかった。３〜４のＤＡＲを有する２Ａ１ＣＶ５（Ａｂ−１）を用いたさらなる複合体化研究により、ｐＨの変化に対して安定であることがわかった。複合体化プロセスで使用されるＤＭ１−ＳＭＣＣのモル当量を低減させることにより、所望される３〜４の平均ＤＡＲを達成した（上記を参照されたい）。本明細書に記載される抗体、特に２Ａ１ＣＶ５（Ａｂ−１）を複合体化する方法には、抗体の量に対してＸ倍モル過剰の事前カップリングしたマイタンシン−リンカー、特にＤＭ１−ＭＣＣを使用する「１ステップ」方法が含まれ、ここで、Ｘは、３、４、５、６、７、８、９、または１０、及びその間の任意の値であり得る。
【０３０３】
［実施例７］
ＢＣＭＡを発現する骨髄腫細胞を標的とし、それを殺滅させる能力について、ＡＤＣを試験した。ＣｅｌｌＴｉｔｅｒ−Ｇｌｏ（登録商標）Ｌｕｍｉｎｅｓｃｅｎｔ  Ｃｅｌｌ  Ｖｉａｂｉｌｉｔｙ  Ａｓｓａｙは、存在するＡＴＰ（代謝的に活性な細胞にシグナル伝達を行う）の定量化に基づいて培養物中の生細胞の数を判定する、均質法である。ＣｅｌｌＴｉｔｅｒ−Ｇｌｏ（登録商標）Ａｓｓａｙは、細胞毒性アッセイに適用可能である（さらなる情報については、ｈｔｔｐ：／／ｗｗｗ．ｐｒｏｍｅｇａ．ｃｏｍ／ｐｒｏｄｕｃｔｓ／ｃｅｌｌ−ｈｅａｌｔｈ−ａｓｓａｙｓ／ｃｅｌｌ−ｖｉａｂｉｌｉｔｙ−ａｓｓａｙｓ／ｃｅｌｌｔｉｔｅｒ＿ｇｌｏ−ｌｕｍｉｎｅｓｃｅｎｔ−ｃｅｌｌ−ｖｉａｂｉｌｉｔｙ−ａｓｓａｙ／を参照されたい）。細胞生存率アッセイを用いて、種々の多発性骨髄腫細胞株及びＢ細胞株に対する種々ＡＤＣの相対殺滅能力を評価した。Ｃｅｌｌ  Ｔｉｔｅｒ−Ｇｌｏキット（Ｐｒｏｍｅｇａ  Ｇ７５７２）に提供されるプロトコルに従った。簡単に言うと、９０μＬのＲＰＭＩ  １６４０、１０％ＦＢＳ中の５×１０３の標的細胞を、透明平底白色壁９６ウェルプレート（Ｃｏｓｔａｒ  ＃３９０３）にアリコートを取った。ＡＤＣを、１０倍ストック中に希釈して、５００ｎＭのマイタンシン薬物同等物を作製した。各ＡＤＣを、５００ｎＭストックで開始して、ＲＰＭＩ  １６４０、１０％ＦＢＳ中に希釈した。１０μＬの１０×ＡＤＣ連続希釈物を、培地中の細胞９０μＬに添加した（三連のウェル）。最高濃度のＡＤＣは、おおよそ５０ｎＭのマイタンシン薬物同等物であり、最低濃度のＡＤＣは、おおよそ５０ｐＭのマイタンシン薬物同等物であった。アイソタイプ対照ＡＤＣ（ＭＣＣ−ＤＭ１に複合体化した抗ストレプトアビジンｈｕＩｇＧ１）が含まれ、同様に培地のみの対照も含まれた。プレートを、３７℃、５％ＣＯ２で９６時間インキュベートした。インキュベーション後、１００μＬの基質溶液（Ｐｒｏｍｅｇａ  Ｇ７５７２）を、各ウェルに添加した。発光を、ＥｎＶｉｓｉｏｎ（商標）Ｍｕｌｔｉｌａｂｅｌリーダー（ＰｅｒｋｉｎＥｌｍｅｒ）またはＡｎａｌｙｓｔ  ＨＴプレートリーダー（ＬＪＬ  Ｂｉｏｓｃｉｅｎｃｅｓ）で読み取った。ＧｒａｐｈＰａｄ  Ｐｒｉｓｍ（商標）を用いてデータを分析及びグラフ化して、種々の癌細胞株に対するＡＤＣの相対的有効性を判定した。
【０３０４】
第１の実験において、２つの異なる抗体（２Ａ１及び１Ｅ）を、異なるリンカー及びマイタンシン分子と複合体化させ、骨髄腫細胞を殺滅させる能力について分析した。具体的には、１Ｅ１−ＰＥＧ４−Ｍａｌ−ＤＭ４、１Ｅ１−ＭＣＣ−ＤＭ１、２Ａ１−ＰＥＧ４−Ｍａｌ−ＤＭ４、及び２Ａ１−ＭＣＣ−ＤＭ１を、Ｈ９２９骨髄腫細胞において試験した、図１１に示されるように、ＰＥＧ４−Ｍａｌ−ＤＭ４及びＭＣＣ−ＤＭ１  ＡＤＣの両方が、骨髄腫細胞を選択的に殺滅させることにおいて極めて良好に機能した。２Ａ１−ＰＥＧ４−Ｍａｌ−ＤＭ４  ＡＤＣは２．２ｎＭのＩＣ５０を有し、２Ａ１−ＭＣＣ−ＤＭ１  ＡＤＣは２．４ｎＭのＩＣ５０を有し、一方で１Ｅ１−ＰＥＧ４−Ｍａｌ−ＤＭ４  ＡＤＣは６８０ｐＭのＩＣ５０を有し、１Ｅ１−ＭＣＣ−ＤＭ１  ＡＤＣは６３０ｐＭのＩＣ５０を有した。このデータは、２Ａ１及び１Ｅ１のいずれも、複合体化して生物学的に活性かつ有効なＡＤＣを作製できることを示す。このデータはまた、２Ａ１  ＡＤＣの優位性を示す。
【０３０５】
次いで、２Ａ１−ＭＣＣ−ＤＭ１  ＡＤＣを、Ｈ９２９、Ｕ２６６、ＭＭＩＲ、ＭＭＩＳを含む種々の多発性骨髄腫細胞株、ＥＷ３６  Ｂ細胞リンパ細胞株、及びＲＡＭＯＳバーキットリンパ腫細胞株に対して試験した。細胞が実際に遊離ＤＭ１によって殺滅されたことを確立するために、対照として、種々の細胞株を、遊離ＤＭ１に曝露した（図１３を参照されたい）。図１２Ａ〜Ｆに示されるように、２Ａ１−ＭＣＣ−ＤＭ１  ＡＤＣは、種々の骨髄腫細胞株の殺滅の非常に有効であり、ＥＷ３６及びＲＡＭＯＳ細胞ではそれほどでもなかった。ＩＣ５０（ｎＭ  ＤＭ１）値は、次の通りであった。
Ｈ９２９：０．６ｎＭ  ＤＭ１のＩＣ５０
Ｕ２６６：０．８ｎＭ  ＤＭ１のＩＣ５０
ＭＭ１Ｒ：３．９ｎＭ  ＤＭ１のＩＣ５０
ＭＭＩＳ：１．０ｎＭ  ＤＭ１のＩＣ５０
ＥＷ３６：３０ｎＭ  ＤＭ１のＩＣ５０
ＲＡＭＯＳ：３２ｎＭ  ＤＭ１のＩＣ５０
【０３０６】
［実施例８］
２Ａ１抗体を、乏しい安定性、凝集の可能性、誤った折り畳み等をもたらし得る、潜在的な問題のあるアミノ酸残基について分析した。軽鎖及び重鎖可変領域を、親２Ａ１ハイブリドーマに由来する独立したサブクローンからＰＣＲで増幅させた。抗体２Ａ１は、ＶＬ１／１ｃ／ＪＬ３ｂ  λ軽鎖可変領域及びＶＨ３−１５−２２／ＪＨ４γ可変領域から構成されることがわかった。軽鎖可変領域を、ＶＫ１｜Ｏ２Ｏ１２シグナルペプチドとともにλ軽鎖定常領域にクローニングし、γ鎖可変領域を、ＶＫ１｜Ｏ２Ｏ１２シグナルペプチドとともにＩｇＧ１（ｚ）、非ｘ、非ａ定常領域にクローニングした。標準的な技法及び試薬を使用して、本質的には国際公開第ＷＯ２０１１／００５６２１号に記載されるように、部位特異的変異誘発を行った。簡単に言うと、ＩｇＧｌ変異体を、ＱｕｉｋＣｈａｎｇｅ（商標）部位特異的変異誘発（Ｓｔｒａｔｅｇｅｎｅ）を用いて選択アミノ酸のコドンを変異させることによって、作製した。予測される変異を、ＤＮＡ配列決定グによって確認した。ｐＴＴ５一過的哺乳動物発現ベクター（Ｄｕｒｏｃｈｅｒ  Ｙ．，ｅｔ  ａｌ．，Ｎｕｃｌｅｉｃ  Ａｃｉｄ  Ｒｅｓｅａｒｃｈ  ３０（２）：Ｅ９）を使用して、野生型及び突然変異タンパク質を２９３Ｅ細胞に発現させた。標準的なプロテインＡクロマトグラフィー（５ｍｌカラム、Ｐｉｅｒｃｅ）を使用して、変異タンパク質を精製した。
【０３０７】
ＭＣＣ−ＤＭ１に複合体化した２Ａ１親抗体の凝集を観察した。２Ａ１抗体の配列分析により、ＶＨの１０７位に存在するＣｙｓ残基を特定し、これがＡｌａに変化した（生殖細胞系において表される）。加えて、ＣＤＲＬ１及びＣＤＲＬ３の推定上のＡｓｎ脱アミド化部位、ならびにＣＤＲＨ２及びＣＤＲＬ３のＡｓｐ異性化部位を特定した。ＣＤＲＬ３及びＣＤＲＨ３はまた、酸化を受ける傾向にあり得るＴｒｐ残基も含有した。複数回の共分散分析を適用して、親２Ａ１  Ｆａｂ領域の安定性及び生物物理学的特性を向上させた（Ｔｍ  Ｆａｂ＝６６℃）。共分散侵害を、２Ａ１抗体の可変重鎖ドメイン（配列番号２８７）において特定し、次の共分散変異を問題となるアミノ酸を補正するように設計した：Ｋ１４Ｑ、Ｒ１７Ｇ、Ｔ２４Ａ、Ｇ３２Ｓ、Ｆ４４Ｖ、Ｇ５６Ｓ、Ｄ８４Ｎ、Ｆ８８Ｔ、Ｔ９８Ａ、Ｔ１０７Ａ、及びＳ１０８Ｋ、ならびに可変軽鎖ドメイン（配列番号２８７）のＥ１４４Ｋ。本発明の態様は、前述の変異の任意の組み合わせを有する２Ａ１抗体を含む。
【０３０８】
非ジスルフィド結合Ｃｙｓを含む共分散侵害を、産生、細胞への結合、及びインビトロＡＤＣＣ効力に関して評価した（１０ＶＨ、１ＬＣ）。２Ａ１変異タンパク質のパネルを、表９に提供する。
【表９】
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【０３０９】
示差走査熱量測定（ＤＳＣ）を使用して、親抗体及び遺伝子操作した抗体の熱安定性を比較した。ＤＳＣは、制御された温度増加または減少の範囲内で試料に発生する熱エネルギー取り込みの直接的評価のための熱力学的ツールである。ＤＳＣは、タンパク質の熱的及び構造的安定性を評価するために広く利用されている。タンパク質または個々のドメインの融解温度を、ＤＳＣプロファイルから得ることができ、反応が可逆性である場合、アンフォールディングの熱力学的パラメーターを判定することができる。タンパク質は、Ｔｍ（転移温度）が高いほど、より熱安定性であるとみられる。熱安定性データを、サイズ排除クロマトグラフィー（ＳＥＣ）等の他の生物分析方法と比較すると、より高い熱安定性（高いＴｍ）と凝集の減少との間に相関性が観察されている。より高いＴｍ及び低下した凝集形成を有する抗体は、改善された長期安定性の可能性を有し、したがって、より良好な生物学的治療薬を作製する可能性を有する。
【０３１０】
オートサンプラーを搭載したＭｉｃｒｏＣａｌ（商標）ＶＰ−Ｃａｐｉｌｌａｒｙ  ＤＳＣシステム（ＧＥ  Ｈｅａｌｔｈｃａｒｅ，Ｐｉｓｃａｔａｗａｙ，ＮＪ）を使用して、ＤＳＣを実行した。参照及び試料細胞の間の温度差を、継続的に測定し、電力単位に対して較正した。例えば、表１０に示される全長抗体を、緩衝溶液中０．５ｍｇ／ｍＬに希釈した。参照溶液及びタンパク質試料を、６０℃／時間の加熱速度で２０〜１１０℃で１３５μＬの細胞において測定した。予備スキャニングを１５分に設定し、一方フィルタリング期間は１０秒であった。ブランク緩衝溶液からのシグナルを、ベースラインの減算に使用した。データ分析を、ＭｉｃｒｏＣａｌ（商標）Ｏｒｉｇｉｎ  ７ソフトウェアを使用して行った。タンパク質融解中の熱容量は、タンパク質濃度に対して正規化することにより計算した。
【表１０】
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【０３１１】
図１４Ａ及びＢに示されるように、部位特異的変異誘発によって選択的に遺伝子操作した抗体は、Ｔｍによって測定されるように、より熱安定性であった。図１４Ｂは、３つの共分散変化が、Ｔｍの８．２℃の増加をもたらしたことを示す。追加の遺伝子操作された変異タンパク質に対してさらなる研究を行い、結果を以下の表１１に示す。ともに、このデータは、遺伝子操作した抗体のうちのいくつか、特に表１１に示されるもの（すなわち、Ａｂ−１（２Ａ１ＣＶ５））が、他の抗体よりも増加した安定性を有したことを示す。熱安定性の増加は、薬学的調製物において高度に望ましい属性である。
【表１１】
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【０３１２】
遺伝子操作した変異タンパク質抗体をさらに特徴付けるために、ＢＣＭＡに結合する能力に関してＦＡＣＳ分析によりそれらを試験した。標準的なＦＡＣｓ技術を使用して骨髄腫／形質細胞腫患者由来のＢリンパ球（ＡＴＣＣ、バージニア州Ｍａｎａｓｓａ）から展開したものである、Ｈ９２９細胞株を含む種々の細胞に内在的に発現されるＢＣＭＡへの結合に関して、抗体を試験した。試薬は、標準的な方法を用いて調製した：５００ｍＬ  ＦＡＣｓ緩衝液（ＰＢＳ、１％ＢＳＡ、５ｍＭ  ＥＤＴＡ、０．０２％  ＮａＮ３）、及びＦＡＣｓブロッキング緩衝液（３０ｍＬ  ＦＡＣｓ緩衝液、５％正常ウサギ血清、５％正常ヒト血清）。おおよそ１０〜５０×１０６のＨ９２９細胞を、標準的な９６ウェルプレート（好ましくは、Ｃｏｒｎｉｎｇが提供するもの等のディープウェル）にアリコートを取った。細胞の体積を調整して、すべての体積をＦＡＣｓ緩衝液と合わせて最大１ｍＬ／管にした。細胞を、４℃で１０分間、１２００ｒｐｍで遠心分離した。上清を除去し、細胞ペレットを１つの管につき１００μＬのＦＡＣｓブロッキング緩衝液中に再懸濁させた。細胞を、氷上で３０〜６０分間インキュベートした。１００μＬの最終体積でＦＡＣＳブロッキング緩衝液中１０μｇ／ｍｌ抗体（例として）で開始する１：３連続希釈の抗体の予備混合液を作製することによって、ＢＣＭＡ抗体を調製した。ブロッキングした細胞を、４℃で１０分間、１２００ｒｐｍで遠心分離した。上清を除去し、細胞ペレットを、ＢＣＭＡ抗体を含有する１００μＬのＦＡＣｓブロッキング緩衝液中に再懸濁させた。細胞を、氷上で６０分間インキュベートした。インキュベーション後、１ｍＬの低温ＦＡＣｓブロッキング緩衝液を各管に添加した。細胞を、４℃で１０分間、１２００ｒｐｍで遠心分離した。上清を除去し、細胞ペレットを、ＦＡＣｓ緩衝液中１：１００希釈で、ビオチニル化抗ｈｕＩｇＧ（Ｊａｃｋｓｏｎ  Ｌａｂｓ、メイン州Ｂａｒ  Ｈａｒｂｏｒ、カタログ１０９−０６５−０９８）を含有する１００μＬのＦＡＣｓブロッキング緩衝液中に再懸濁した。細胞を、氷上で４５分間インキュベートした。インキュベーション後、１ｍＬの低温ＦＡＣｓブロッキング緩衝液を各管に添加した。細胞を、４℃で１０分間、１２００ｒｐｍで遠心分離した。上清を除去し、細胞ペレットを、ＦＡＣｓ緩衝液中１：１００希釈で、ストレプトアビジン−フィコエリトリン（ＳＡ−ＰＥ）複合体（ＢＤ  Ｐｈａｒｍｉｎｇｅｎ、カリフォルニア州サンディエゴ、カタログ５５４０６１）を含有する１００μＬのＦＡＣｓブロッキング緩衝液中に再懸濁した。細胞を、氷上で４５分間インキュベートした。インキュベーション後、１ｍＬの低温ＦＡＣｓブロッキング緩衝液を各管に添加した。細胞を、４℃で１０分間、１２００ｒｐｍで遠心分離した。上清を除去し、細胞ペレットを、０．２ｍＬ／管のＰＢＳ中４％パラホルムアルデヒド中に再懸濁し、フローサイトメトリーによって分析した。
【０３１３】
予備研究では、２Ａ１−Ｃ１０７Ｔ、２Ａ１−Ｓ１０８Ｒ、及び２Ａ１−Ｃ１０７Ｔ＋Ｓ１０８Ｒ変異タンパク質を、上述のようにフローサイトメトリーによってヒト骨髄腫細胞（Ｈ９２９細胞）上のＢＣＭＡへの結合に関して試験した。図１５は、２Ａ１親抗体と３つの変異タンパク質との間で同程度なＨ９２９細胞上のＢＣＭＡへの結合を示す。次いで、より大きなパネルの２Ａ１変異タンパク質（すなわち、表９に列挙されるもの）を、フローサイトメトリーによってＨ９２９細胞上のＢＣＭＡへの結合に関して試験した。図１６Ａ及びＢは、いくつかの２Ａ１変異タンパク質抗体が、親２Ａ１（２Ａ１ＷＴ）と比較して同程度なＢＣＭＡへの結合を保持したが、２Ａ１共分散３、８、９、及び１１〜１９抗体は、ＢＣＭＡへの結合が低減したことを示す。
【０３１４】
別の重要な検討事項は、抗体ＡＤＣＣ活性に対する変異誘発の影響であり、そのため種々の変異タンパク質抗体を、標準的な方法を使用して相対ＡＤＣＣ活性に関して試験した。標的細胞はＨ９２９（比較的高いレベルのＢＣＭＡ発現を有する）及びＪＤ３８（比較的低いレベルのＢＣＭＡ発現を有する）であった。ＪＤ３８は、再発性未分化非バーキットリンパ腫を有する男児の末梢血を循環する腫瘍細胞に由来するエプスタイン・バーウイルス（ＥＢＶ）陰性細胞株である。Ｈ９２９及びＪＤ３８を、カルセイン−ＡＭで標識した。Ｈ９２９及びＪＤ３８を採取し、２×１０６の細胞／ｍｌでｃＲＰＭＩ−１０培地（ＲＰＭＩ（Ｌｉｆｅ  Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ、カリフォルニア州Ｃａｒｌｓｂｅｒｇ）＋１０％ウシ胎児血清）中に再懸濁させた。無水ＤＭＳＯ（Ｓｉｇｍａ−Ａｌｄｒｉｃｈ、ミズーリ州セントルイス）中に４ｍＭでカルセイン−ＡＭを添加し、最終濃度１０μＭにした（１：４００希釈）。細胞を３７℃で３０分間インキュベートした後、ＰＢＳ中で２回洗浄した（それぞれ、１５００ｒｐｍ、４℃で５分）。ペレットをｃＲＰＭＩ−１０中に再懸濁させ、０．２×１０６の細胞／ｍｌの濃度に調整し、次のステップで使用するため氷上に置いた。種々の２Ａ１変異タンパク質抗体を、まず、１０μｇ／ｍｌで開始する１０倍連続滴定で、Ｕ底９６ウェルプレート（ＢＤ，Ｆｒａｎｋｌｉｎ  Ｌａｋｅｓ，ＮＪ）に添加した。リツキシマブ（Ｇｅｎｅｎｔｅｃｈ、カリフォルニア州南サンフランシスコ）は、使用した場合、ベンチマーク抗体対照として機能した。次いで、前からのカルセイン−ＡＭで標識した標的細胞を各ウェル（１０，０００細胞／ウェル）に添加し、３７℃で２０分間、抗体とともにインキュベートした。エフェクター細胞を調製した：ＮＫ細胞またはＰＢＭＣを、１５００ｒｐｍで、４℃で５分間ペレット化し、ｃＲＰＭＩ−１０に再懸濁させて、ＮＫ細胞については４×１０６細胞／ｍｌまたはＰＢＭＣについては２０×１０６細胞／ｍｌの最終濃度にした。インキュベーションの後、５０μｌのＮＫ細胞を４×１０６細胞／ｍｌの濃度で各ウェルに添加したか、またはＰＢＭＣを２０×１０６細胞／ｍｌの濃度で添加し、３７℃で４時間インキュベートした。インキュベーションの後、２０μｌ／ウェルの９％ＮＰ−４０（ＩＧＥＰＡＬ  ＣＡ  ６３０，Ｓｉｇｍａ−Ａｌｄｒｉｃｈ）を添加して１００％溶解を刺激することによって、対照ウェルを調製した。すべての他のウェルには、２０μｌ／ウェルのｃＲＰＭＩ−１０培地を単独で受容させた。プレートを、８００ＲＰＭで４分間４℃で回転させた。上清（１５０μｌ）を除去し、透明底の黒色９６ウェルプレート（Ｃｏｒｎｉｎｇ、マサチューセッツ州Ｌｏｗｅｌｌ）に移し、プレートリーダー（Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｄｅｖｉｃｅｓ，Ｓｐｅｃｔｒａ  ｍａｘ  ＧＥＭＩＮＩ）において励起４８５、放出５３５で蛍光を読み取った。最大溶解パーセントを、（試料値−自発的溶解）／（１００％溶解−自発的溶解）×１００として計算した。
【０３１５】
予備研究では、２Ａ１−Ｃ１０７Ｔ、２Ａ１−Ｓ１０８Ｒ、及び２Ａ１−Ｃ１０７Ｔ＋Ｓ１０８Ｒ変異タンパク質を、上述のようにＡＤＣＣ活性に関して試験した。２Ａ１変異タンパク質のＥＣ５０（ｎｇ／ｍｌ）について要約する図１７及び表１２は、２Ａ１親抗体及び３つの変異タンパク質の間で同程度なＡＤＣＣ活性を示す。次いで、より大きなパネルの２Ａ１変異タンパク質（すなわち、表９に列挙されるもののうちのいくつか）を、ＡＤＣＣ活性について試験した。図１８Ａ、１８Ｂ、１９Ａ、及び１９Ｂ、ならびに表１３は、いくつかの２Ａ１変異タンパク質抗体は、親２Ａ１（２Ａ１ＷＴ）と比較して同程度なＡＤＣＣ活性を保持したが、２Ａ１共分散のうちのいくつかは、親２Ａ１と比べてＡＤＣＣ活性が低減したことを示す。
【表１２】
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【表１３】
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【０３１６】
別の検討事項は、遺伝子操作された抗体の発現レベルに対する変異誘発の影響である。表９に列挙される抗体を、自動化された２４ウェルのトランスフェクションプロトコルを使用して、２９３−６Ｅ哺乳動物細胞に一過的に発現させた。以下のプロトコルを使用した。
【０３１７】
試薬：
−２０ｎｇ／μＬに正規化したＤＮＡ
−２５ｋＤａの直鎖ＰＥＩ  Ｍａｘ（商標）（Ｐｏｌｙｓｃｉｅｎｃｅｓ、カタログ番号２４７６５）トランスフェクション試薬（３ｍｇ／ｍＬストック）
−１ｅ６細胞／ｍＬ及び生存率９８％超の２９３６Ｅ細胞
【０３１８】
成長及びトランスフェクション培地：
−成長培地：１０ｍＬのＰｌｕｒｏｎｉｃ  Ｆ６８（Ｌｉｆｅ  Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ、カタログ番号２４０４０）及び０．５ｍＬのＧｅｎｅｔｉｃｉｎ（５０ｍｇ／ｍＬ、Ｌｉｆｅ  Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ、カタログ番号１０１３１）を補充した１Ｌ  ２９３  Ｆｒｅｅｓｔｙｌｅ（商標）培地（Ｌｉｆｅ  Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ、カタログ番号１２３３８−０１８）
−ペプトン再供給物：Ｄｉｆｃｏ  ＴＣ  Ｙｅａｓｔｏｌａｔｅ  ＵＦストック２０％ｗ／ｖ（ＢＤ  Ｂｉｏｓｃｉｅｎｃｅｓ、カタログ番号２９２８０５）
【０３１９】
備品：
−オートクレーブ２４ディープウェルブロック：Ｓｅａｈｏｒｓｅ  Ｂｉｏｓｃｉｅｎｃｅ  ２０１２７２−１００（Ｆｉｓｈｅｒ  ５０  ９９５  ８５５）
−オートクレーブｕフラスコの蓋
−９６ウェルｃｏｓｔａｒ  ３７９９プレート（Ｆｉｓｈｅｒ  ０７  ２００  ９５）
【０３２０】
自動化トランスフェクションプロセス：
生存細胞密度（ＶＣＤ）を、１×１０６細胞／ｍＬのＶＣＤ及び９８％を上回る生存率を標的として、Ｖｉ−Ｃｅｌｌ（Ｂｅｃｋｍａｎ  Ｃｏｕｌｔｅｒ）において測定した。１ｍＬの培養物当たり０．２５μｇのＤＮＡを添加した。５０μＬの正規化してプールしたＨＣ／ＬＣ  ＤＮＡを、２４ウェルプレート（総ＤＮＡが１μｇ）に移した。２００μＬの培地（非補充２９３  Ｆｒｅｅｓｔｙｌｅ）＋７μｇのＰＥＩを２４ウェルプレートに添加した（１：７のＤＮＡ：ＰＥＩ比）。培地とＰＥＩの後に、ＤＮＡをプレートに添加した。１０分間、ＤＮＡ／培地／ＰＥＩに複合体を形成させた。おおよそ１×１０６細胞／ｍＬで４ｍＬの２９３６Ｅ細胞懸濁液を、アリコートを取ることによって、細胞をプレートに分注し、４．２５ｍＬの最終体積にした。細胞を、滅菌ｕフラスコに蓋をしてＫｕｈｎｅｒ（商標）インキュベーターに設置した。トランスフェクションの１〜４時間後に、２０％ｗ／ｖのイーストレートを０．５％ｗ／ｖの最終濃度まで添加することによって、ペプトンに基づく培地の再供給を行った。細胞は、２４０ｒｐｍ、３７℃及び５％ＣＯ２で、オービタルシェーカーにそれらを設置することによって、産生期の間、インキュベーターに戻した。細胞を、成長培地で継代させ、ＶＣＤを測定して細胞を対数期（おおよそ１．５×１０５〜２×１０６細胞／ｍＬ）に保った。細胞は、おおよそ１日おきに継代させた。６日目に、プレートを３０００ｒｐｍで１０分間回転させ、上清を新しいプレートに移すことによって、上清を採取した。
【０３２１】
ＩｇＧレベルを、アライメントされたＰｒｏｔｅｉｎ  Ａ  Ｂａｓｉｃ定量化を再生プロトコルで使用してＦｏｒｔｅＢｉｏ  Ｏｃｔｅｔ  ＱＫｅ（商標）において分析した。
【０３２２】
材料：
−黒色平底アッセイプレート（Ｇｒｅｉｎｅｒ  Ｂｉｏ−ＯｎｅからのＢＬＫ  ＮＳ  ９６ウェルハーフエリア平底ＰＰマイクロタイタープレート、製造業者部品番号６７５０７６、Ｆｉｓｈｅｒ−Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ部品番号ＮＣ９６２４４５６）
−中和緩衝液（ＦｏｒｔｅＢｉｏ希釈剤−０．１％ＢＳＡ、０．０２％  Ｔｗｅｅｎ  ２０（登録商標）、０．０５％アジ化ナトリウムを有するＰＢＳ、ｐＨ７．４）、４℃
−再生緩衝液（一過性溶出緩衝液−１０ｍＭグリシン、１５０ｍＭ  ＮａＣｌ、ｐＨ２．０）
【０３２３】
プロテインＡセンサーを使用して、ヒトＩｇＧを定量化した。標準曲線（ＳＴＤ  ＣＲＶ）を、１〜５００μｇ／ｍＬの範囲に実施した。センサーを、ＦｏｒｔｅＢｉｏ希釈剤に事前浸漬させた。１００μＬのＦｏｒｔｅｂｉｏ希釈剤を黒色アッセイプレートのウェルに添加し、センサーのラックを黒色アッセイプレートの上に静置することによって、試料毎に１つのセンサーを準備した。センサーを、アッセイの前に少なくとも１０分間浸漬させた。アイソタイプが一致する標準対照（ｈｕＩｇＧ１）を調製した。対照抗体を、１００μＬのＦｏｒｔｅＢｉｏ希釈剤をカラム２〜１０に添加し、ＦｏｒｔｅＢｉｏ希釈剤中５００μｇ／ｍＬに希釈した２００μＬの対照抗体をカラム１に二連に添加することによって、アッセイプレートに滴定した。連続希釈を行い（カラム１まで１０まで１００μＬ）、次の濃度を有する標準曲線がもたらされた：５００、２５０、１２５、６２．５、３１．２５、１５．６３、７．８１、３．９１、１．９５、０．９８μｇ／ｍＬ。別個の黒色アッセイプレートにおいて、培養培地をＦｏｒｔｅｂｉｏ希釈剤中に１００μＬの総体積まで希釈することによって、抗体試料を調製した。使用したソフトウェアは、「Ｄａｔａ  Ａｃｑｕｉｓｉｔｉｏｎ  ７．０」及び「Ｂａｓｉｃ  Ｑｕａｎｔｉｔａｔｉｏｎ  ｗｉｔｈ  Ｒｅｇｅｎｅｒａｔｉｏｎ」であった。「アッセイ設定」は、「時間（秒）」のフィールドが１２０秒に設定され、「振動速度」のフィールドが４００となるように設定した。「再生」及び「中和」ステップの「時間（秒）」のフィールドは、「振動速度」が４００で、５秒に設定した。アッセイ結果を、「Ｄａｔａ  Ａｎａｌｙｓｉｓ  ７．０」ソフトウェアで分析した。
【０３２４】
図２０は、表９に列挙される共分散変異タンパク質抗体の発現力価をμｇ／ｍｌで示す。共分散変異タンパク質のうちのいくつかは、向上した発現レベルを示した。共分散変異タンパク質の多くが、許容される発現レベルを呈した。
【０３２５】
追加の２Ａ１共分散変異タンパク質に対するさらなる分析を行った。表１４の２Ａ１変異タンパク質（「変異体」として記載される）を、上述の方法を使用して、Ｔｍに関して試験し、同様に収率（ｍｇ／Ｌ）の評価に関して試験した。このデータは、Ｃ１０７ＡのＴｍが、Ｃ１０７Ｓ及びＣ１０７Ｔ変異体のものよりもいくらか好ましかったが、すべてが許容可能であったことを示す。
【表１４】
2019031510.tif 000028
【０３２６】
最新期の共分散変異タンパク質抗体が所望される生物学的活性を保持することを確実にするために、追加の２Ａ１変異タンパク質のＢＣＭＡ結合及びＡＤＣＣ活性を、２つの異なる細胞株を使用して行った。上述のアッセイを使用して、以下の２Ａ１変異タンパク質を、Ｈ９２９骨髄腫細胞株（比較的高いＢＣＭＡ表面発現を有する）及びＪＤ３８細胞株（比較的低いＢＣＭＡ表面発現を有する）上のＢＣＭＡへの結合に関して試験した。次の共分散２Ａ１抗体を試験した：２Ａ１（Ｃ１０７Ｔ）、２Ａ１（Ｒ１７Ｇ、Ｃ１０７Ａ）、２Ａ１（Ｆ８８Ｔ、Ｃ１０７Ａ）、２Ａ１（Ｔ２４Ａ、Ｃ１０７Ａ）、２Ａ１（Ｔ２４Ａ、Ｆ８８Ｔ、Ｃ１０７Ａ）、２Ａ１（Ｒ１７Ｇ、Ｆ８８Ｔ、Ｃ１０７Ａ）、２Ａ１（Ｒ１７Ｇ、Ｔ２４Ａ、Ｃ１０７Ａ）、及び２Ａ１（Ｒ１７Ｇ、Ｔ２４Ａ、Ｆ８８Ｔ、Ｃ１０７Ａ）。図２１Ａ及びＢは、共分散変異タンパク質が、骨髄腫細胞上に発現されるＢＣＭＡへの結合を保持したこと、及び試験した抗体間で結合にいくつかのわずかな相違があったことを示す。図２２Ａ及びＢは、共分散変異タンパク質が、２つの癌細胞株に発現されるＢＣＭＡに対するＡＤＣＣ活性を保持したことを示す。
【０３２７】
第２のキャンペーンからの抗体の特徴付け及び配列操作を、上述のアッセイを用いて行った。ハイブリドーマ上清から精製した追加のＸｅｎｏｍｏｕｓｅヒトモノクローナル抗体を、上述のように調製した（ＩｇＧ２またはＩｇＧ４抗ｈｕＢＣＭＡ  ｍＡｂ  ３０Ｅ１．１、２９Ｃ１２．１、２９Ｇ５．１、３２Ｂ５．１、３２Ｈ３．１、３３Ｃ７．１、３３Ｄ４．１、３５Ｄ２．１、３７Ｂ２．１、及び４０Ｄ７．１）。これらの抗体を、本明細書に記載されるように、カニクイザルＢＣＭＡを発現するように一過的にトランスフェクトした２９３Ｔ細胞上のカニクイザルＢＣＭＡへの結合に関してさらに分析した。図２３は、この選択抗体群が、カニクイザルＢＣＭＡに交差反応性を示したこと、及び１０個中７個の抗体が、２Ａ１抗体よりも高いカニクイザルＢＣＭＡへの結合を有したことを示す。この抗体パネルを、多発性骨髄腫細胞株Ｈ９２９上のｈｕＢＣＭＡへの結合に関してさらに特徴付けた。図２４は、広い結合スペクトルが存在したことを示し、さらに、ｈｕＢＣＭＡへの十分な結合能力を有するヒトモノクローナル抗体を得ることが、予測できるものでも日常的でもなかったことを示す。
【０３２８】
ハイブリドーマ上清から精製した追加のＸｅｎｏｍｏｕｓｅヒトモノクローナル抗体の抗体−薬物複合体（抗ｈｕＢＣＭＡ  ｍＡｂ  ３０Ｅ１．１、２９Ｃ１２．１、２９Ｇ５．１、３２Ｂ５．１、３２Ｈ３．１、３３Ｃ７．１、３３Ｄ４．１、３５Ｄ２．１、３７Ｂ２．１、及び４０Ｄ７．１）を、本質的に実施例６に記載されるように調製した。これらのＡＤＣを、実施例１０に記載されるＣｅｌｌＴｉｔｅｒ−Ｇｌｏ（登録商標）Ｌｕｍｉｎｅｓｃｅｎｔ  Ｃｅｌｌ  Ｖｉａｂｉｌｉｔｙ  Ａｓｓａｙを使用して、ｈｕＢＣＭＡを発現する骨髄腫細胞（Ｈ９２９細胞株）を標的とし、それを殺滅させる能力に関して試験した。図２５Ａ及び２５Ｂは、２９Ｃ１２．１、２９Ｇ５．１、３２Ｂ５．１、３３Ｃ７．１、３５Ｄ２．１、３７Ｂ２．１、及び４０Ｄ７．１  ＡＤＣが、ｈｕＢＣＭＡを発現する骨髄腫標的細胞に対して細胞毒性を示したことを示す。
【０３２９】
第２のキャンペーンからの抗体パネルを、ヒトＩｇＧ１  アイソタイプに変換させた。配列を、上述のように共分散侵害に関して分析した。表１５は、列挙した抗体の置換の一覧を要約する。
【表１５】
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【０３３０】
いくつかの共分散を部位特異的変異誘発により展開し、種々の手段（上述のように）によって分析した。表１６は、配列変化、力価、収率、純度、及びＴｍを要約する。２９Ｃ１２（ＬＣ：Ｎ６９Ｑ）及び３２Ｂ５（ＨＣ：Ａ１１Ｇ、Ｈ９２Ｑ、Ｓ９７Ｒ；ＬＣ：Ｎ６９Ｑ、Ｆ１０３Ｖ）共分散が、力価、収率、及びＴｍに顕著な増加を有したことは、注目に値する。表１７は、全長軽鎖及び重鎖のアミノ酸配列を提供する。
【表１６】
2019031510.tif 000030
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【表１７】
2019031510.tif 000032
【０３３１】
上述の第２のキャンペーンからの共分散抗体のいくつかを、機能的活性に関して試験して、生物学的活性に対する変異誘発の効果を評価した。図２６は、Ｈ９２９細胞上のｈｕＢＣＭＡへの結合に関して種々の候補抗体（第２のキャンペーンからの共分散抗体のうちのいくつかを含む）間の比較結合を示す。次の抗体のＡＤＣを、本質的に実施例６に記載されるように生成した：３２Ｂ５親、３２Ｂ５（Ｖ１Ｄ）、３２Ｂ５（Ｉ５Ｔ）、３２Ｂ５（Ａ１１Ｇ、Ｓ９７Ｒ、Ｆ１０３Ｖ）、３２Ｂ５（Ａ１１Ｇ、Ｈ９２Ｑ、Ｓ９７Ｒ、Ｆ１０３Ｖ）、３５Ｄ２／３２Ｂ５（Ｎ６９Ｑ）、３７Ｂ２／３５Ｂ５（Ｎ６９Ｑ）、２９Ｃ１２（Ｎ６９Ｑ）、及び２９Ｃ１２／４０Ｄ７（Ｎ６９Ｑ）。これらのＡＤＣを、実施例１０に記載されるＣｅｌｌＴｉｔｅｒ−Ｇｌｏ（登録商標）Ｌｕｍｉｎｅｓｃｅｎｔ  Ｃｅｌｌ  Ｖｉａｂｉｌｉｔｙ  Ａｓｓａｙを使用して、ＢＣＭＡを発現する骨髄腫細胞（Ｈ９２９細胞株）を標的とし、それを殺滅させる能力に関して試験した。図２７は、種々のＡＤＣによるＨ９２９細胞の相対的な殺滅を示す。図２８は、第２のキャンペーンからの共分散抗体のほとんどが、カニクイザルＢＣＭＡ（を一過的にトランスフェクトした２９３Ｔ細胞）に結合する能力を保持したことを示す。
【０３３２】
本明細書に記載されるように、最適な特性を有する共分散変異タンパク質の重鎖及び軽鎖可変ドメインの配列アライメントを、図４１Ａ及びＢに提供する（２９Ｃ１２ｃｖ１はＡｂ−８であり、２９Ｃ１２ｃｖ２はＡｂ−２であり、３２Ｂ５ｃｖ１は表１１に配列番号３１５〜３２０として提供され、３２Ｂ５ｃｖ２はＡｂ−３であり、２Ａ１ｃｖ４は表１１に配列番号３０９〜３１４として提供され、２Ａ１ｃｖ５はＡｂ−１である）。これは、２Ａ１と、２９Ｃ１２及び３２Ｂ５共分散変異タンパク質との間に有意な配列の相違があることを示す。親抗体可変軽鎖及び重鎖ドメイン配列のクレードは、２Ａ１抗体と、２９Ｃ１２、３２Ｂ５、及び第２のキャンペーンからの他の抗体との間の相違をさらに図示する（図４２Ａ及び４２Ｂ）。ＣＤＲまたは抗体のパラトープにおけるこの配列の相違は、抗体の２つの分岐が、ｈｕＢＣＭＡ上の異なるエピトープに結合する可能性が高いことの根拠である。
【０３３３】
［実施例９］
以下の実験は、抗ＢＣＭＡ  ＡＤＣが、異種移植片皮下腫瘍モデルにおいてＨ９２９骨髄腫細胞の成長を阻害する。多発性骨髄腫腫瘍細胞の大部分は、骨髄に存在し、腫瘍量は、溶骨性骨疾患と関連付けられている。加えて、骨髄間質細胞及び破骨細胞は、化学療法から多発性骨髄腫腫瘍細胞を保護し得る。Ｄｏｕｇａｌｌ，ＷＣ，ｅｔ  ａｌ．，ＲＡＮＫＬ  ｉｓ  ａ  ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃ  ｔａｒｇｅｔ  ｉｎ  ｍｕｌｔｉｐｌｅ  ｍｙｅｌｏｍａ，Ｒｏｏｄｍａｎ−ＧＤ  ｅｄ．Ｍｙｅｌｏｍａ  Ｂｏｎｅ  Ｄｉｓｅａｓｅ．Ｈｕｍａｎａ  Ｐｒｅｓｓ．２０１０：１６９−１８２を参照されたい。ＮＳＧ／ＮＯＧマウスモデルは、骨における多発性骨髄腫細胞の成長のための改善された宿主であることが報告されている（Ｍｉｙａｋａｗａ−Ｙ，ｅｔ  ａｌ．，ＢＢＲＣ  ３１３（２００４）２５８−２６２）。ＮＳＧマウスモデルはまた、増加した腫瘍取り込み及び成長速度に関する生物発光撮像及びエキソビボ選択のためのルシフェラーゼ標識の使用のために最適化されている（実施例１０を参照されたい）。５×１０６のＨ９２９ヒト骨髄腫細胞を、成長因子を低減させたＭａｔｒｉｇｅｌ（商標）（ＢＤ  Ｂｉｏｓｃｉｅｎｃｅｓ）を使用して雌性ＮＳＧ（ＮＯＤ／ＳＣＩＤ  ＩＬ２Ｒｇ−／−）マウスの皮下に埋め込み、効率性研究のための腫瘍異種移植片を生成した。Ｈ９２９細胞は、平均しておおよそ２４，０００のＢＣＭＡ部位／細胞を発現する。腫瘍寸法が平均でおおよそ１５０ｍｍ３に達したときに、２Ａ１−ＭＣＣ−ＤＭ１または対照複合体（抗ストレプトアビジン−ＭＣＣ−ＤＭ１）での処置を開始した。腫瘍保持動物を、腫瘍寸法によりそれぞれ１０匹の動物の群に無作為割り当てし、静脈内投薬を１回行った。２０〜２００μｇのＤＭ１／ｋｇ（１〜１０ｍｇ  Ａｂ／ｋｇ）の範囲の用量で２Ａ１−ＭＣＣ−ＤＭ１の盲検用量応答研究を行った。研究過程にわたり、投薬群のいずれにおいても体重減少は観察されなかった。栄養補助物質は提供されなかった。
【０３３４】
図２９に示されるように、２Ａ１−ＭＣＣ−ＤＭ１での処置は、２００μｇ  ＤＭ１／ｋｇの高用量（１０ｍｇ  Ａｂ／ｋｇ）で堅強な腫瘍成長阻害を示し、６７μｇ  ＤＭ１／ｋｇの中用量（３ｍｇ  Ａｂ／ｋｇ）では中等度の腫瘍成長阻害を示した。このデータは、当該技術分野で認識されている多発性骨髄腫動物モデルにおける２Ａ１−ＡＤＣのインビボでの有効性の根拠である。
【０３３５】
［実施例１０］
ＢＣＭＡを発現する骨髄腫細胞（Ｈ９２９）を標的とし、それを殺滅させる能力について、２Ａ１ＣＶ５−ＭＣＣ−ＤＭ１、３２Ｂ５−ＭＣＣ−ＤＭ１、及び２９Ｃ１２−ＭＣＣ−ＤＭ１  ＡＤＣを試験した。ＣｅｌｌＴｉｔｅｒ−Ｇｌｏ（登録商標）Ｌｕｍｉｎｅｓｃｅｎｔ  Ｃｅｌｌ  Ｖｉａｂｉｌｉｔｙ  Ａｓｓａｙは、存在するＡＴＰ（代謝的に活性な細胞にシグナル伝達を行う）の定量化に基づいて培養物中の生細胞の数を判定する、均質法である。ＣｅｌｌＴｉｔｅｒ−Ｇｌｏ（登録商標）Ａｓｓａｙは、細胞毒性アッセイに適用可能である（さらなる情報については、ｈｔｔｐ：／／ｗｗｗ．ｐｒｏｍｅｇａ．ｃｏｍ／ｐｒｏｄｕｃｔｓ／ｃｅｌｌ−ｈｅａｌｔｈ−ａｓｓａｙｓ／ｃｅｌｌ−ｖｉａｂｉｌｉｔｙ−ａｓｓａｙｓ／ｃｅｌｌｔｉｔｅｒ＿ｇｌｏ−ｌｕｍｉｎｅｓｃｅｎｔ−ｃｅｌｌ−ｖｉａｂｉｌｉｔｙ−ａｓｓａｙ／を参照されたい）。細胞生存率アッセイを用いて、種々の多発性骨髄腫細胞株及びＢ細胞株に対する種々ＡＤＣの相対殺滅能力を評価した。Ｃｅｌｌ  Ｔｉｔｅｒ−Ｇｌｏキット（Ｐｒｏｍｅｇａ  Ｇ７５７２）に提供されるプロトコルに従った。簡単に言うと、９０μＬのＲＰＭＩ  １６４０、１０％  ＦＢＳ中の５×１０３の標的細胞を、透明平底白色壁９６ウェルプレート（Ｃｏｓｔａｒ  ＃３９０３）にアリコートを取った。ＡＤＣを、１０倍ストック中に希釈して、５００ｎＭのマイタンシン薬物同等物を作製した。各ＡＤＣを、５００ｎＭストックで開始して、ＲＰＭＩ  １６４０、１０％ＦＢＳ中に２倍連続希釈で希釈した。１０μＬの１０×ＡＤＣ連続希釈物を、培地中の細胞９０μＬに添加した（三連のウェル）。最高濃度のＡＤＣは、おおよそ５０ｎＭのマイタンシン薬物同等物であり、最低濃度のＡＤＣは、おおよそ５０ｐＭのマイタンシン薬物同等物であった。アイソタイプ対照ＡＤＣ（ＭＣＣ−ＤＭ１に複合した抗ストレプトアビジンｈｕＩｇＧ１）が含まれ、同様に培地のみの対照も含まれた。プレートを、３７℃、５％ＣＯ２で９６時間インキュベートした。インキュベーション後、１００μＬの基質溶液（Ｐｒｏｍｅｇａ  Ｇ７５７２）を、各ウェルに添加した。発光を、ＥｎＶｉｓｉｏｎ（商標）Ｍｕｌｔｉｌａｂｅｌリーダー（ＰｅｒｋｉｎＥｌｍｅｒ）またはＡｎａｌｙｓｔ  ＨＴプレートリーダー（ＬＪＬ  Ｂｉｏｓｃｉｅｎｃｅｓ）で読み取った。ＧｒａｐｈＰａｄ  Ｐｒｉｓｍ（商標）を用いてデータを分析及びグラフ化して、種々の癌細胞株に対するＡＤＣの相対的有効性を判定した。
【０３３６】
図３０は、３つすべてのＡＤＣが、対照複合体と比較して、Ｈ９２９細胞成長の強力な阻害剤であることを示す。２Ａ１ＣＶ５−ＭＣＣ−ＤＭ１（２３４ｐＭのＩＣ５０を有する）は、３２Ｂ５−ＭＣＣ−ＤＭ１及び２９Ｃ１２−ＭＣＣ−ＤＭ１（それぞれ、５０６ｐＭ及び３９０ｐＭのＩＣ５０を有する）に観察されたものよりも２〜３倍の効力の増加を呈した。
【０３３７】
［実施例１１］
以下の実験は、Ａｂ−１（２Ａ１ＣＶ５）ＡＤＣ（本明細書に２Ａ１ＣＶ５−ＭＣＣ−ＤＭ１とも称される）をさらに特徴付け、多発性骨髄腫細胞（Ｈ９２９）におけるＢＣＭＡ媒介性内部取り込みの根拠を提供する。本明細書に記載されるアッセイ方法を使用して、完全ヒト抗ｈｕＢＣＭＡ抗体２Ａ１ＣＶ５が、完全ヒト抗ＢＣＭＡ抗体３２Ｂ５及び２９Ｃ１２に観察されたものよりも３倍優れた結合活性（ａｖｉｄｉｔｙ）でヒト多発性骨髄腫細胞株Ｈ９２９上に発現される天然のヒトＢＣＭＡに結合したことがわかった。２Ａ１ＣＶ５−ＭＣＣ−ＤＭ１抗体薬物複合体（ＡＤＣ）は、フローサイトメトリーによって評価すると、非複合体化２Ａ１ＣＶ５で観察された結合に類似する規模の天然ヒトＢＣＭＡへの結合を示した。２Ａ１ＣＶ５に観察された結合ＥＣ５０は、２Ａ１ＣＶ５−ＭＣＣ−ＤＭ１で観察されたものの２倍を上回って良好であったが、３２Ｂ５−ＭＣＣ−ＤＭ１の天然ＢＣＭＡに対するＥＣ５０は、３２Ｂ５に観察されたものよりも約２倍低かった（表１８）。平衡結合の正確な測定を、２Ａ１（２Ａ１ＣＶ５は同一に結合する）及び３２Ｂ５について、Ｂｉａｃｏｒｅ（商標）相互作用技術（本明細書に記載される）を使用して、組み換え可溶性ヒトＢＣＭＡに結合するそれらの能力を測定することによって判定した。結果は、２Ａ１ＣＶ５が、２桁のｐＭの親和性で組み換えヒトＢＣＭＡに結合することを示した。
【表１８】
2019031510.tif 000033
【０３３８】
２Ａ１ＣＶ５−ＭＣＣ−ＤＭ１がＨ９２９細胞に内部移行する能力を、非複合２Ａ１ＣＶ５の内部移行と比較した。
【０３３９】
材料：
−抗ストレプトアビジン−ＭＣＣ−ＤＭ１（α４．５のＤＡＲを有するＳＡ−ＭＣＣ−ＤＭ１）
−２Ａ１ＣＶ５−ＭＣＣ−ＤＭ１（ＤＡＲ４．８）
−腫瘍細胞Ｈ９２９を、成長培地：ＲＰＭＩ  １６４０＋１０％ＦＢＳ＋ＭＥＭ非必須アミノ酸＋ＨＥＰＥＳ＋β−メルカプトエタノール＋Ｐｅｎ／Ｓｔｒｅｐ＋Ｌ−グルタミン＋ピルビン酸ナトリウム＋ゲンタマイシンで培養した。
−ヤギ抗ヒトＩｇＧ（Ｈ＋Ｌ）、Ａｌｅｘａ  ４８８（Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｐｒｏｂｅｓ  Ｉｎｃ．、オレゴン州Ｅｕｇｅｎｅ、カタログ番号Ａ１１０１３）。
−  Ｈｏｅｃｈｓｔ  ３３３４２（Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｐｒｏｂｅｓ  Ｉｎｃ．、オレゴン州Ｅｕｇｅｎｅ、カタログ番号Ｈ２１４９２）。
【０３４０】
Ｈ９２９骨髄腫瘍細胞を、成長培地（ＲＰＭＩ  １６４０、１０％ＦＢＳ、ＭＥＭ非必須アミノ酸、ＨＥＰＥＳ、β−メルカプトエタノール、Ｐｅｎ／Ｓｔｒｅｐ、Ｌ−グルタミン、ピルビン酸ナトリウム、ゲンタマイシン）中で培養した。Ｈ９２９細胞を、１つの管につきおおよそ５００，０００の細胞で２つの３−ｍｌ  ＦＡＣＳ管に採取し、アッセイ培地（２％ＦＢＳを含有するＰＢＳ）で１回洗浄した。細胞を、１つの管につき１０μｇ／ｍＬ（１つの管につき２００μＬ）で、２Ａ１またはＣＤ１３８抗体のいずれかとともにアッセイ培地中に懸濁させた。４℃で３０分間インキュベートした後、細胞を、アッセイ培地で１回洗浄した。抗ヒトＩｇＧ、Ａｌｅｘａ  ４８８（Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｐｒｏｂｅｓ  Ｉｎｃ．、オレゴン州Ｅｕｇｅｎｅ、カタログ番号Ａ１１０１３、アッセイ培地中１：１，０００希釈）、及びＨｏｅｃｈｓｔ  ３３３４２（Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｐｒｏｂｅｓ  Ｉｎｃ．、オレゴン州Ｅｕｇｅｎｅ、カタログ番号Ｈ２１４９２、アッセイ培地中１：２０００希釈）の混合液を、細胞に添加した。細胞を４℃で１５分間インキュベートした後、細胞を１回洗浄し、次いで、１ｍｌ当たり１×１０６の細胞の濃度に達するように、０．５ｍｌのアッセイ培地で再懸濁した。５０μＬの細胞を、各抗体８ウェルで９６ウェルプレートに移した（以下の表１９）を参照されたい。細胞は、５０μｌのＢＤｃｙｔｏｆｉｘ／ｃｙｔｏｐｅｒｍキット（ＢＤ  Ｂｉｏｓｉｃｅｎｃｅｓ．カタログ番号５５４７１４）を添加することによってゼロ時点で開始して、固定及び透過化したか、０．５、１、及び２時間の時点で３７℃、５％ＣＯ２でインキュベートしたかのいずれかであった。各インキュベーション時点で、細胞を、０時点に関して示されるものと同じステップを使用して固定及び透過化した。内部移行速度は、４０倍対物レンズを用いてＢｉｏＡｐｐｌｉｃａｔｉｏｎの「Ｓｐｏｔ  Ｄｅｔｅｃｔｏｒ」アルゴリズムによりＡｒｒａｙＳｃａｎ  ＶＴＩ  ＨＣＳリーダー（バージョン６、Ｃｅｌｌｏｍｉｃｓ，Ｔｈｅｒｍｏ  Ｆｉｓｈｅｒ  Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ，Ｐｉｔｔｓｂｕｒｇｈ，ＰＡ）で定量化した。内部移行のフィルター設定を、以下の表に示す。少なくとも２００個の細胞が、各ウェルで計数された。
【表１９】
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【表２０】
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【０３４１】
ＡｒｒａｙＳｃａｎの出力パラメーターのアルゴリズムは、「ＳｐｏｔＣｏｕｎｔＰｅｒＯｂｊｅｃｔＣｈ２」であった。結果は、細胞２００個当たりの合計スポット数として報告した。Ｐｒｉｓｍ  ４．０１（ＧｒａｐｈＰａｄ、カリフォルニア州サンディエゴ）を使用して、統計学的分析を行った。スポット計数は、二連の測定値（ｎ＝２）の平均±標準誤差（ＳＥＭ）として表した。分析ツールを使用して、単位時間当たりのスポット計数（内部移行速度＝Ｔ１／２）を、単相指数関数関連付け方程式に当てはめた。ＧｒａｐｈＰａｄ（商標）Ｐｒｉｓｍからの単相指数関数関連付けを使用して、内部移行の半減期を計算した。
【０３４２】
Ｈ９２９細胞への内部移行のレベル及び速度は、２Ａ１ＣＶ５及び２Ａ１ＣＶ５−ＭＣＣ−ＤＭ１で類似であり、インキュベーション開始後おおよそ３０分で半最大内部移行レベルに達した（図３１）。加えて、ＭＭ１Ｒ多発性骨髄腫細胞株への２Ａ１ＣＶ５−ＭＣＣ−ＤＭ１の内部移行の速度は、Ｈ９２９へのものに近似であり、インキュベーション開始後約５０分で半最大内部移行レベルに達した。これらの結果は、ＢＣＭＡに結合した後、２Ａ１ＣＶ５−ＭＣＣ−ＤＭ１が、ＢＣＭＡ発現細胞に急速に内部移行され得ることを示す。
【０３４３】
２Ａ１ＣＶ５  ＡＤＣを、本明細書に記載されるアッセイを使用して、種々の多発性骨髄腫細胞株を殺滅させるその能力について試験した。表２１に示されるように、２Ａ１ＣＶ５  ＡＤＣは、広範なＢＣＭＡ細胞表面発現を有する多数の多発性骨髄腫細胞株を効果的に殺滅させることができた。
【表２１】
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【０３４４】
［実施例１２］
Ａｂ−１（２Ａ１ＣＶ５）ＡＤＣのインビボ薬理学を評価した。これらの実験は、Ａｂ−１（２Ａ１ＣＶ５）ＡＤＣが、Ｈ９２９骨指向性異種移植片モデルにおいて腫瘍退縮を媒介することを示す。手短に言うと、１細胞当たり平均しておおよそ２４，０００のＢＣＭＡ部位を発現するＨ９２９ルシフェラーゼ標識骨髄腫細胞を、ＮＳＧマウスに静脈内投与した（１×１０６細胞）。腫瘍接種の１４日後、腫瘍保持動物を、後肢生物発光（腫瘍量）に基づいてそれぞれ１０匹の動物の群に無作為割り当てし、静脈内投薬を１回行った。この確立された骨指向性腫瘍モデルにおいて、２５０μｇのＤＭ１／ｋｇ（１０ｍｇ  Ａｂ／ｋｇ）の単回用量を用いた２Ａ１ＣＶ５−ＭＣＣ−ＤＭ１、非複合体化２Ａ１ＣＶ５、及び対照複合体の盲検投薬研究を行った。栄養補助物質は提供されなかった。
【０３４５】
研究デザイン：
・１×１０６細胞のＨ９２９−ｌｕｃ細胞、静脈内
・１４日目に後肢ＢＬＩによって判定される同等の群にマウスを分配
・１０ｍｇ／ｋｇ、静脈内で、１４日目に抗体の単回処置
・ＢＬＩを２回／週で測定（盲検）
・研究エンドポイントは３５日目
・８０匹のＮＳＧ（ＮＯＤ／ＳＣＩＤ  ＩＬ２Ｒｇ−／−）マウスに、１／１３／１１日目に１×１０６のＨ９２９ｌｕｃ細胞を静脈内注射した
・ＢＬＩを１週間に２回測定した
・１４日目に、マウスを、ＢＬＩによって測定される後肢腫瘍量に基づいて５つの同等な群（ｎ＝１０）に分配した。
・処置計画：１回の静脈内注射
・処置群は盲検化されており、次のものが含まれる：
・ビヒクル（ＰＢＳ）
・抗ｈｕＢＣＭＡ−ｈｕＩｇＧ１−２Ａ１−ＣＶ５（非複合体化）
・抗ｈｕＢＣＭＡ−ｈｕＩｇＧ１−２Ａ１−ＣＶ５−ＭＣＣ−ＤＭ１
・抗ｈｕＢＣＭＡ−ｈｕＩｇＧ１−２Ａ１−ＷＴ−ＭＣＣ−ＤＭ１
・抗ストレプトアビジン−ＭＣＣ−ＤＭ１
・抗ｈｕＢＣＭＡ−２Ａ１−ＣＶ５−ＭＣＣ−ＤＭ１は１０ｍｐｋで使用した
・抗ｈｕＢＣＭＡ−２Ａ１−ＷＴ−ＭＣＣ−ＤＭ１及び抗ストレプトアビジン−ＭＣＣ−ＤＭ１は、１０ｍｐｋで２Ａ１−ＣＶ５−ＭＣＣ−ＤＭ１のマイタンシノイド薬物同等物に基づいて正規化した
・タイミング：Ｈ９２９ｌｕｃ細胞を注射し、ＡＤＣ処置は１４日目に開始し、分析は３５日目に開始した
【０３４６】
図３２は、完全な腫瘍退縮が、２５０μｇ  ＤＭ１／ｋｇでの２Ａ１−ＭＣＣ−ＤＭ１または２Ａ１ＣＶ５−ＭＣＣ−ＤＭ１による単回処置後に観察されたことを示す。中等度の腫瘍成長阻害効果が、複合体と同じ抗体用量での非複合体化２Ａ１ＣＶ５による処置の後に見られた。加えて、溶解骨病変は、２Ａ１ＣＶ５−ＭＣＣ−ＤＭ１で処置したマウスには観察されなかったが、ビヒクル（ＰＢＳ）またはアイソタイプ対照複合体（抗ストレプトアビジン−ＭＣＣ−ＤＭ１）を受容したマウスには観察された。対照複合体またはビヒクルで処置した動物には抗腫瘍効果は検出されなかった。研究過程にわたり、投薬群のいずれにおいても体重減少は観察されなかった。
【０３４７】
上述のものに類似のさらなる骨髄腫骨指向性異種移植片モデルにおいて、１細胞当たり平均して９，０００のＢＣＭＡ部位を発現するＵ２６６ルシフェラーゼ標識骨髄腫細胞を、ＮＳＧマウスに静脈内投与した（１×１０６細胞）。腫瘍接種の２８日後に、腫瘍保持動物を、後肢生物発光（腫瘍量）に基づいて１０匹ずつの動物の群に無作為化し、赤色Ｒｘ符号で示されるように、静脈内または腹腔内投薬を行った。この確立された骨指向性腫瘍モデルにおいて、２８日目に投与される２５０μｇのＤＭ１／ｋｇ（１０ｍｇ  Ａｂ／ｋｇ）を用いた２Ａ１ＣＶ５−ＭＣＣ−ＤＭ１、非複合体化２Ａ１ＣＶ５、及びＰＢＳの盲検投薬研究を行った。安楽死させた後、動物の放射線写真を撮った。後肢を関節で切断し、１０％中性緩衝ホルマリン中に固定し、脱灰させた。続いて、骨を処理し、包埋し、切片を作製し、各動物からの単一の代表される骨を、ｈｕＣＤ１３８発現（ＩＨＣ）に関してＨ＆Ｅ、ＴＲＡＰ色素で染色した。骨切片を、顕微鏡で調べて、残存疾患（ｈｕＣＤ１３８＋細胞）が存在するかどうかを判定し、髄腔の表面、及びＴＲＡＰ＋破骨細胞に覆われた骨針状体（ｂｏｎｅ  ｓｐｉｃｕｌｅ）の範囲を推定した。
【０３４８】
異種移植片細胞は、正常なマウス骨髄細胞集団を消失させた。腫瘍量の多い動物は、髄腔内を覆い、骨針状体を覆う、増加した数のＴＲＡＰ＋破骨細胞を有すると見られた。生存異種移植片を有する動物において、新生細胞は、場合によっては、骨皮質の幅を超え、骨膜に達した。処置の成功は、髄内ＴＲＡＰ＋破骨細胞の低減及び正常マウス骨髄の存在によって特徴付けられた。静脈内または腹腔内経路を介して送達された抗体２Ａ１ＣＶ−ＭＣＣ−ＤＭ１は、単回注射として送達した場合に、それらの疾患マウスを完全に治癒した。非複合体化抗体２Ａ１ＣＶは、腫瘍成長を遅延させたが、それらの疾患の動物を治癒しなかった。２Ａ１ＣＶまたはビヒクルのいずれかで事前に処置し（２８日目）、続いて抗体２Ａ１ＣＶ−ＭＣＣ−ＤＭ１で処置した（６３日目及び８４日目）動物は、それらの疾患を完全に治癒した。ＴＲＡＰ＋破骨細胞は、処置が成功した動物よりも腫瘍量を揺する動物においてより豊富であると見られた。完全な腫瘍退縮が、いずれの経路で投与された２５０μｇのＤＭ１／ｋｇの２Ａ１ＣＶ５−ＭＣＣ−ＤＭ１での単回処置後にも観察された（図３３）。腫瘍成長における中等度の減少が、非複合体化２Ａ１ＣＶ５で処置した動物に観察された。腫瘍接種６３日後に、ＰＢＳまたは非複合体化２Ａ１ＣＶ５で処置した動物を、続いて５匹ずつの動物の２つの群に無作為割り当てし、次いで、１０ｍｇのＡｂ／ｋｇで２Ａ１ＣＶ５−ＭＣＣ−ＤＭ１の１回の追加処置を静脈内に施した。２Ａ１ＣＶ５−ＭＣＣ−ＤＭ１処置は、処置を腫瘍接種後２８日目に開始した場合よりも２桁大きい腫瘍量を担持したこれらの動物群の両方において、堅強な腫瘍退縮を誘導した（図３３）。これらの結果は、２Ａ１ＣＶ５−ＭＣＣ−ＤＭ１が、腫瘍がＨ９２９骨指向性骨髄腫異種移植片モデルよりもほぼ３倍低い平均受容体密度を示すＵ２６６ヒト骨髄腫骨指向性モデルにおいて、有意な腫瘍退縮を媒介することができることを示す。
【０３４９】
［実施例１３］
ＢＣＭＡタンパク質発現を、ＢＡＦＦ−ＲまたはＴＡＣＩと交差反応しないＢＣＭＡ選択的モノクローナル抗体（２Ａ１ＣＶ４）を用いたフローサイトメトリーによって、４２個の原発性骨髄腫患者試料において評価した。試料は、１試料当たりおおよそ１×１０６の形質細胞を得るために、市販の供給源（ＡｌｌＣｅｌｌｓ、Ｃｏｎｖｅｒｓａｎｔ、Ｐｒｏｔｅｏｇｅｎｅｘ）から入手した。個々の多発性骨髄腫（ＭＭ）試料を、室温（ＲＴ）で緩やかに解凍した。解凍した細胞を、４ｍｌの５０％ＦＢＳ（ウシ胎児血清）ＲＰＭＩ緩衝液に室温で滴下添加した。３ｍｌの１０％ＦＢＳ  ＲＰＭＩを、細胞懸濁液に添加した。細胞懸濁液を、逆さにして緩やかに混合し、低速で遠心分離して細胞をペレット化した。培地を吸引し、細胞ペレットを１％ＦＢＳ  ＰＢＳ（リン酸緩衝食塩水）に再懸濁させた。細胞を血球計で、手作業で計測した。細胞を１０  ＦＢＳ  ＲＰＭＩに添加し、３７℃で１時間、５％ＣＯ２において、インキュベーターで回復させた。細胞生存率を以下のように評価した。原発性ＭＭ及びＨ９２９細胞株に由来する細胞を、１ウェル当たり２００，０００細胞で、１０％ＦＢＳ  ＲＰＭＩ緩衝液を有する９６ウェルプレートに、１試料当たり５ウェルで播種した。プレートを遠心分離して細胞をペレット化し、培地を吸引してＰＢＳ中に３回再懸濁させた。細胞をＶｉｏｌｅｔ  Ｌｉｖｅ／Ｄｅａｄ細胞色素（Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｐｒｏｂｅｓ−Ｌ３４９５５）で製造業者のプロトコルに従って染色し、室温で３０分間、暗所でインキュベートした。次いで、プレートを遠心分離して細胞をペレット化し、培地を吸引して、１０％ＦＢＳ  ＲＰＭＩ中に３回再懸濁させた。内部移行／免疫表現型（ＩＰ）を以下の様に評価した。抗ＢＣＭＡ−ｐＨｒｏｄｏまたは抗ＣＤ３８−ｐＨｒｏｄｏ試薬を、各試料の１ウェルに添加し、すべての試料を、３７℃において５％ＣＯ２でインキュベートした。４時間後に、プレートを遠心分離して細胞をペレット化し、培地を吸引してＰＢＳ中に３回再懸濁させた。３つの未処置ウェルのうち、抗ＢＣＭＡ−ｐＨｒｏｄｏ、抗ＢＣＭＡ−ＤｙＬｉｇｈｔ４８８、または抗ＣＤ３８−ｐＨｒｏｄｏ試薬を、各試料の１ウェル及びすべての試料に添加した。すべてのウェルをＩＰパネルで染色した（ＣＤ１９  ＰＥ−Ｃｙ５、ＣＤ５６  ＰＥ−Ｃｙ７、ＣＤ３８  Ａ５９４、ＣＤ１３８  ＡＰＣ、ＣＤ４５  ＡＰＣ−Ｈ７、表２２を参照されたい）。プレートを４℃で１時間インキュベートした。固定化及び分析を以下のように行った。すべてのウェルを、１％パラホルムアルデヒド中に固定した。各ウェルからの細胞を、ＬＳＲＩＩ（ＢＤ  Ｂｉｏｓｃｉｅｎｃｅ）を用いて評価し、ＦＣＳファイルを生成した。形質細胞の特定を、次のゲーティングを用いて行った：試料を生存率に関してゲーティングし、サブゲートを、ＣＤ１３８／ＣＤ３８発現について選択し、ヒストグラムをＢＣＭＡ発現及び内部移行、ならびにＣＤ３８内部移行及び最終的にはＦＭＯ対照について生成し、細胞計数またはＭＦＩを、Ｅｘｃｅｌ（商標）及びＧｒａｐｈＰａｄ（商標）での概要分析及び図による表示のために出力した（図３４Ａ及び３４Ｂを参照されたい）。
【表２２】
2019031510.tif 000038
【０３５０】
フローサイトメトリー結果は、評価した多発性骨髄腫患者試料の９８％（４２個中４１個）が、検出可能なＢＭＣＡタンパク質を発現することを示した。図３５に示されるように、試験した２９個すべての骨髄腫患者試料（合計４２個の試料のサブセット）が、ＦＭＯ対照（黒色のバー）と比較して、検出可能なＢＣＭＡ発現（緑色のバー）を示す。このデータは、ＢＣＭＡが、多発性骨髄腫患者由来の単離細胞上に発現され、本明細書に記載されるＢＣＭＡ  ＡＤＣを使用した治療的介入の優れた標的として機能することをさらに示す。このデータはまた、２Ａ１抗体及びその変異タンパク質が、ほとんどすべての多発性骨髄腫患者試料上のＢＣＭＡに結合することができることを示す。
【０３５１】
多発性骨髄腫患者試料上の２Ａ１抗体（２Ａ１ＣＶ４）の内部移行を、上述の骨髄単核細胞調製物からのＣＤ１３８＋形質細胞片のフローサイトメトリーによって評価した。図３６は、ＢＣＭＡ抗体（２Ａ１ＣＶ４−ｐＨｒｏｄｏ標識）が、２９個すべての多発性骨髄腫患者試料に効果的に内部移行されたことを示す。このデータはまた、２Ａ１抗体及びその変異タンパク質が、試験したすべての多発性骨髄腫患者試料上のＢＣＭＡに結合し、効果的に内部移行することができることを示す。
【０３５２】
［実施例１４］
抗ＤＭ１特異的モノクローナル抗体を検出試薬として使用したフローサイトメトリーに基づく内部移行アッセイを開発して、２Ａ１ＣＶ５−ＭＣＣ−ＤＭ１（Ａｂ−１  ＡＤＣ）が、ＤＭ１を多発性骨髄腫患者の骨髄から得た原発性骨髄腫腫瘍細胞中に送達することができたかどうかを評価した。比較的低いレベルのＢＣＭＡを発現するヒト骨髄腫腫瘍細胞株ＭＭ１Ｒを相対陽性対照として使用して、２Ａ１ＣＶ５−ＭＣＣ−ＤＭ１によって十分なＤＭ１が細胞内に送達され、細胞死を誘導したかどうかを評価した。図３７は、２Ａ１ＣＶ５−ＭＣＣ−ＤＭ１が、ＤＭ１を原発性骨髄腫骨髄単核腫瘍細胞（ＢＭＭＣ）試料及びＭＭ１Ｒ骨髄腫細胞株中に送達したことを示す（ＭＭ１Ｒ及びＢＭＭＣ＃１２の両方について、右端のヒストグラムのピークは、そのすぐ左側の対照ヒストグラムと比較して、右側にシフトしており、ＤＭ１が、細胞内に内部移行されたことを示す）。試験した１３個の評価可能な原発性多発性骨髄腫患者ＢＭＭＣ試料の中で、２Ａ１ＣＶ５−ＭＣＣ−ＤＭ１は、多様なレベルのＤＭ１を１３個すべての患者試料に送達した。このデータは、２Ａ１ＣＶ５  ＡＤＣがＢＣＭＡに結合し、内部移行され、原発性多発性骨髄腫患者試料を選択的に殺滅させるという明確な根拠を提供する。
【０３５３】
［実施例１５］
Ａｂ−１（２Ａ１ＣＶ５）ＡＤＣが、Ｈ９２９骨指向性異種移植片モデルにおいて腫瘍退縮を媒介することを示す、Ａｂ−１（２Ａ１ＣＶ５）ＡＤＣ実験のインビボ薬理学の一部として、ヒトＩｇＧ遊離軽鎖（κ）を可能性のあるバイオマーカーとして調べた（実施例１２を参照されたい）。ヒト免疫グロブリン分子は、クラス（ＩｇＧ、ＩｇＡ、ＩｇＭ、ＩｇＤ、ＩｇＥ）を定義する２つの重鎖と、同一な軽鎖（κまたはλ）とからなる。健常個体では、血清中の軽鎖の大半は、重鎖と結合して存在する。遊離軽鎖（ＦＬＣ）は、Ｂリンパ球の天然の産物であり、新生物及び反応性Ｂ細胞関連障害の固有なバイオマーカーを表す。ＦＬＣの増加は、種々の悪性形質障害と関連している。ＦＬＣの検出は、多発性骨髄腫、くすぶり型骨髄腫、及び意義不明の単一クローン性γグロブリン血症を含む、種々の疾患の重要な診断補助である。ヒトＩｇＧ  ＦＬＣ  κ  ＥＬＩＳＡ（Ｂｉｏｖｅｎｄｏｒ，ＲＤ  １９４０８８１００Ｒ−Ｋ）を用いて、Ｈ９２９異種移植片由来の血清中のＦＬＣの存在を分析した。κ軽鎖抗体は、２Ａ１ＣＶ５−ＭＣＣ−ＤＭ１で処置した１８日後にマウスの血清中に検出されなかったが、ビヒクル（ＰＢＳ）またはアイソタイプ対照複合体（抗ストレプトアビジン−ＭＣＣ−ＤＭ１）を受容したマウスの血清中には検出された（図３８及び３９を参照されたい）。
【０３５４】
［実施例１６］
組み換えヒト（ｒｈｕ）ＢＣＭＡ及び組み換えラット（ｒｒａｔ）ＢＣＭＡへのＡｂ−１（すなわち、２Ａ１ＣＶ５）、Ａｂ−２（すなわち、２９Ｃ１２＿ｍｕｔ）、及びＡｂ−３（すなわち、３２Ｂ５＿ｍｕｔ）の結合の会合及び解離速度定数（ｋａ、ｋｄ）、ならびに解離平衡結合定数（Ｋｄ）を判定した。
【０３５５】
アッセイ条件：ＣＭ５センサーチップを搭載するＢｉａｃｏｒｅ  Ｔ２００光学バイオセンサーを製造業者の一般プロトコルに従って使用して、ＨＢＳ−Ｐ緩衝系（１０ｍＭ  ＨＥＰＥＳ  ｐＨ７．４、１５０ｍＭ  ＮａＣｌ、及び０．５％  Ｓｕｒｆａｃｔａｎｔ  Ｐ２０）において２５℃でバイオセンサー分析を行った。オートサンプラーは８℃に維持した。
【０３５６】
表面調製：ヤギ抗ヒトＩｇＧ捕捉抗体（Ｊａｃｋｓｏｎ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓ、１０９−００５−０９８）を、標準的なアミンカップリング化学反応（９，０００ＲＵ）を使用して、センサーチップのすべてのフローセルに固定化した。この表面型は、各再生ステップの後に、新しく分析抗体（リガンド）を再現性よく捕捉するための形式を提供した。
【０３５７】
リガンドの調製：フローセル１、２、及び３は、捕捉したＢＣＭＡ抗体（約４００〜５００ＲＵ）の分析に使用したが、フローセル４は、参照フローセルとして使用した。
【０３５８】
検体の調製：７５．０〜０．３０９ｎＭ（３倍希釈）の範囲で６つのｒＢＣＭＡ濃度を、泳動緩衝液中に調製した。ｒｒａｔＢＣＭＡ融合タンパク質（ＧＳ：：６ｘＨｉｓ：：Ｓｕｍｏ：：ｒａｔＢＣＭＡ（ａａ２〜４９）：：ＧＧＳ：：Ｇ３：：Ａｖｉ）の配列：
ＭＧＳＳＨＨＨＨＨＨＧＳＧＬＶＰＲＧＳＡＳＭＳＤＳＥＶＮＱＥＡＫＰＥＶＫＰＥＶＫＰＥＴＨＩＮＬＫＶＳＤＧＳＳＥＩＦＦＫＩＫＫＴＴＰＬＲＲＬＭＥＡＦＡＫＲＱＧＫＥＭＤＳＬＲＦＬＹＤＧＩＲＩＱＡＤＱＴＰＥＤＬＤＭＥＤＮＤＩＩＥＡＨＲＥＱＩＧＧＡＱＲＣＦＨＳＥＹＦＤＳＬＬＨＡＣＫＰＣＲＬＲＣＳＮＰＰＡＰＣＱＰＹＣＤＰＳＭＴＳＳＶＲＧＴＹＴＧＧＳＧＧＧＬＮＤＩＦＥＡＱＫＩＥＷＨＥ（配列番号３４９）
ｒｈｕＢＣＭＡ融合タンパク質（６ｘＨｉｓ：：Ｓｕｍｏ：：ｈｕＢＣＭＡ（ａａ５〜５１）：：ＧＧＳ：：Ｇ３：：Ａｖｉ）の配列：ＭＧＳＳＨＨＨＨＨＨＧＳＧＬＶＰＲＧＳＡＳＭＳＤＳＥＶＮＱＥＡＫＰＥＶＫＰＥＶＫＰＥＴＨＩＮＬＫＶＳＤＧＳＳＥＩＦＦＫＩＫＫＴＴＰＬＲＲＬＭＥＡＦＡＫＲＱＧＫＥＭＤＳＬＲＦＬＹＤＧＩＲＩＱＡＤＱＴＰＥＤＬＤＭＥＤＮＤＩＩＥＡＨＲＥＱＩＧＧＡＧＱＣＳＱＮＥＹＦＤＳＬＬＨＡＣＩＰＣＱＬＲＣＳＳＮＴＰＰＬＴＣＱＲＹＣＮＡＳＶＴＮＳＶＫＧＴＮＡＧＧＧＳＧＧＧＬＮＤＩＦＥＡＱＫＩＥＷＨＥ（配列番号３５０）
【０３５９】
相互作用パラメーター：６つの検体試料濃度のそれぞれを、結合の再現性を評価し、注射の順序に対する潜在的な系統的偏りを管理する手段として、ばらばらの順序で、二連に泳動させた。さらに、複数のブランク（緩衝液）の注射も行い、これを用いて系統的人為要素を評価し、取り去った。すべての検体濃度に関して、会合及び解離の段階を、それぞれ、５０μＬ／分の流量で、３００秒及び３６００秒間監視した。
【０３６０】
表面の再生：表面を、１０ｍＭグリシン、ｐＨ１．５で３０秒間、５０μＬ／分の流量で再生させた。
【０３６１】
モデル／当てはめ：データをアライメントし、二重参照し、ＳＰＲデータ処理及び非線形最小二乗回帰当てはめプログラムであるＳｃｒｕｂｂｅｒ  ２（商標）ソフトウェアを使用して当てはめた。まず、解離速度係数（ｋｄ）を、解離段階データの最初の６００秒から判定した。次に、解離速度係数を、１：１の結合モデルを使用して３００秒の会合段階データの全体的な当てはめにおいて固定パラメーターとして適用して、会合速度係数（ｋａ）及びＲｍａｘ値を判定した。
【０３６２】
結果：
Ａｂ−１は、配列番号３５０に関しては、おおよそ１５５ｐＭの平衡解離速度定数（Ｋｄ）でヒトＢＣＭＡに特異的に結合し、ラットＢＣＭＡとは、１０ｎＭを超える平衡解離速度定数（Ｋｄ）でわずかに相互作用したにすぎなかった。Ａｂ−２及びＡｂ−３は、配列番号３５０に関して、それぞれ、おおよそ１．１１ｎＭ及び７５０ｐＭの平衡解離速度定数（Ｋｄ）でヒトＢＣＭＡに結合した。Ａｂ−２及びＡｂ−３は、配列番号３４９に関して、それぞれ、おおよそ２．３５ｎＭ及び２．０７ｎＭの平衡解離速度定数（Ｋｄ）でラットＢＣＭＡに結合した。図４３Ａ〜Ｆ及び表２３を参照されたい。
【表２３】
2019031510.tif 000039
【０３６３】
このデータは、Ａｂ−１結合に重要なヒトＢＣＭＡ上のドメイン及びアミノ酸に関する根拠を提供する。Ａｂ−１は、ヒト及びカニクイザルＢＣＭＡに特異的に結合するが、ラットＢＣＭＡには特異的に結合しない。図４４は、ヒトＢＣＭＡの細胞外ドメインのアミノ酸２〜５１：
ＬＱＭＡＧＱＣＳＱＮＥＹＦＤ  ＳＬＬＨＡＣＩＰＣＱＬＲＣＳＳＮＴＰＰＬＴＣＱＲＹＣＮＡＳＶＴＮＳＶＫＧ（配列番号３５２）、カニクイザルＢＣＭＡの細胞外ドメインのアミノ酸２〜５１：ＬＱＭＡＲＱＣＳＱＮＥＹＦＤＳＬＬＨＤＣＫＰＣＱＬＲＣＳＳＴＰＰＬＴ  ＣＱＲＹＣＮＡＳＭＴＮＳＶＫＧＭ（配列番号３５３）、及びラットＢＣＭＡの細胞外ドメインのアミノ酸２〜４９：ＡＱＲＣＦＨＳＥＹＦＤＳＬＬＨＡＣＫＰＣＲＬＲＣＳＮＰＰＡＰＣＱＰＹＣＤＰＳＭＴＳＳＶＲＧＴＹＴ（配列番号３５１）の配列アライメントを示す。
【０３６４】
種間の配列多様性が制限されるという観点から、Ａｂ−１の差別的結合は、Ａｂ−１が、配列番号２８５のアミノ酸１〜２０を含む、及びより具体的には配列番号２８５アミノ酸１〜１１を含む、ヒトＢＣＭＡ上の中和決定基に結合することを示唆する。
【０３６５】
サイズ排除クロマトグラフィー（ＳＥＣ）を用いて、抗ｈｕＢＣＭＡ抗体（２Ａ１または２９Ｃ１２）と単量体［６ｘヒスチジン−ＳＵＭＯ］−ｈｕＢＣＭＡ（配列番号３５０）及びそのカルボキシ末端切断形態との間の相互作用を検出した。実際には、２Ａ１及び２９Ｃ１２（１５０ｋＤａ）の抗体単離物または単量体［６ｘヒスチジン−ＳＵＭＯ］−ｈｕＢＣＭＡ（約１５〜１８ｋＤａ）の単離物は、抗ｈｕＢＣＭＡ  ２Ａ１または２９Ｃ１２  及び［６ｘヒスチジン−ＳＵＭＯ］−ｈｕＢＣＭＡのインキュベーションによって形成された複合体よりもゆっくりとＳＥＣ上を移動した。６ｘＨｉｓ−ＳＵＭＯ−ｈｕＢＣＭＡのどの形態が抗ｈｕＢＣＭＡ抗体に結合したかを判定するために、ＳＥＣ片を単離し、分析した。ヒトＢＣＭＡの細胞外ドメインのカルボキシ末端フラグメントを、図４５に示されるように、配列番号３５０のｒｈｕＢＣＭＡ融合タンパク質（６ｘＨｉｓ：：Ｓｕｍｏ：：ｈｕＢＣＭＡ（ａａ５〜５１）：：ＧＧＳ：：Ｇ３：：Ａｖｉ）から切断された形態として生成した。
【０３６６】
Ｓｕｐｅｒｄｅｘ  ２００（商標）１０／３０ｃｍ  ＳＥＣカラム（ＧＥ  Ｈｅａｌｔｈｃａｒｅ  Ｌｉｆｅ  Ｓｃｉｅｎｃｅｓ）を、製造業者の推奨に従って使用し、リン酸緩衝食塩水（ＰＢＳ）中で泳動させた。過剰レベルのｓｕｍｏＢＣＭＡとともに抗体のインキュベーションを、室温で少なくとも３０分間行った。図４６は、配列番号３５０及びヒトＢＣＭＡの細胞外ドメインの３つの漸減するアミノ末端フラグメントのサイズ排除クロマトグラフィー（サイズ推定はダルトン単位）の結果を示す（ピークＡ：配列番号３５４、ピークＢ：配列番号３５５、及びピークＣ：配列番号３５６）。
【０３６７】
Ａｂ−１は、図４７Ａ〜Ｄに示されるＳＥＣクロマトグラムに図示されるように、ヒトＢＣＭＡのすべてのフラグメント（すなわち、配列番号３５０、３５４、３５５、及び３５６）に結合した。図４７Ａは、配列番号３５０の保持時間を示す。図４７Ｂは、Ａｂ−１の保持時間を示す。図４７Ｃは、３μｇのＢＣＭＡ（配列番号３５０）と比較して過剰量のＡｂ−１（６０μｇ）が、切断されたフラグメント（すなわち、配列番号３５４〜３５６）を含む遊離ＢＣＭＡを全くもたらさなかったこと、及び２つのピークが、種々のＢＣＭＡフラグメントに結合したＡｂ−１（保持時間２．７４８）及び未結合の過剰Ａｂ−１（保持時間３．０７８）を表すことを示す。図４７Ｄは、過剰量のＢＣＭＡ（６０μｇの配列番号３５０）中のＡｂ−１抗体（３０μｇ）が、ＢＣＭＡに結合したが、少量のＢＣＭＡフラグメント（配列番号３５４〜３５６）もまた存在していたことを示す。図４８Ａ〜Ｃに示されるように、同様の結果が、２９Ｃ１２抗体にも示された。このデータはまた、１抗体当たり２：１の化学量論のＢＣＭＡ分子を示唆する。
【０３６８】
２Ａ１及び２９Ｃ１２抗体がＢＣＭＡ細胞外ドメインの切断形態（カルボキシ末端フラグメント）に結合していることを確認するためのさらなる実験では、ＳＥＣを、ＬＣ／ＭＳによって捕捉したＳＥＣピークを分析するための出発材料を提供するように拡大した。Ｓｕｐｅｒｄｅｘ  ２００（商標）１０／３０ｃｍ  ＳＥＣカラム（ＧＥ  Ｈｅａｌｔｈｃａｒｅ  Ｌｉｆｅ  Ｓｃｉｅｎｃｅｓ）を、製造業者の推奨に従って使用し、リン酸緩衝食塩水（ＰＢＳ）中で泳動させた。過剰レベルのｓｕｍｏＢＣＭＡとともに抗体のインキュベーションを、室温で少なくとも３０分間行った。５００μｇの２Ａ１または２９Ｃ１２、ならびに５００μｇの２Ａ１または２９Ｃ１２のいずれかに加えて５００μｇのＳｕｍｏＢＣＭＡを、ＳＥＣカラムに流した。ＳＥＣ対照には、５００μｇの２Ａ１または２９Ｃ１２に加えて３００μｇのＳｕｍｏ（ＳｕｍｏＢＣＭＡから切断）、ならびにストレプトアビジン（ＳＡ）に結合する５００μｇの無関係な抗体に加えて５００μｇのＳｕｍｏ−ＢＣＭＡが含まれた。図４９Ａは、ＳｕｍｏとＳｕｍｏ−ＢＣＭＡとの間に検出可能なサイズの相違があったことを示す（しかしながら、Ｓｕｍｏ調製物中に１０〜１５％未満のＳｕｍｏ−ＢＣＭＡが存在し得る）。図４９Ｂは、無関係な抗体対照（抗ＳＡ）がＳｕｍｏ−ＢＣＭＡに結合しなかったことを示す。図４９Ｃは、２Ａ１及び２９Ｃ１２がＳｕｍｏに結合しなかったことを示す。
【０３６９】
液体クロマトグラフィー及び質量分光光度測定（ＬＣ／ＭＳ）を使用して、２Ａ１及び２９Ｃ１２が結合したｈｕＢＣＭＡの形態（すなわち、全長及び種々の切断）を特定した。
【０３７０】
試料：
１．２Ａ１＋Ｓｕｍｏ−総濃度：０．６ｍｇ／ｍｌ
２．２Ａ１＋ＳｕｍｏＢＣＭＡ−総濃度：４．３ｍｇ／ｍｌ
３．２９Ｃ１２＋Ｓｕｍｏ−総濃度：０．６ｍｇ／ｍｌ
４．２９Ｃ１２＋ＳｕｍｏＢＣＭＡ−総濃度：２．２ｍｇ／ｍｌ
５．Ｓｕｍｏ（主にＳｕｍｏであり、わずかな割合のＳｕｍｏ−ＢＣＭＡを有する）
６．Ｓｕｍｏ−ＢＣＭＡ
７．２Ａ１抗体
８．２９Ｃ１２抗体
【０３７１】
プロトコル：
５μｇの総タンパク質を、５５℃で１５分間、５０ｍＭ  Ｔｒｉｓ／４Ｍグアニジン／９ｍＭ  ＤＴＴ、ｐＨ８．０において還元し、２．１ｍｍ内径×１５０ｍｍ、５μ粒径のＶｙｄａｃ  Ｃ８カラムを使用してＡｇｉｌｅｎｔ  ＬＣＴＯＦシステムで分析した。カラム温度は５５℃であり、溶媒Ａは水中０．１％ＴＦＡであり、溶媒Ｂはアセトニトリル中０．１％ＴＦＡであり、流量は０．２ｍｌ／分であった。Ｂのパーセンテージにおける勾配は、それぞれ、３、５、４０、４２、４２．５、及び４５分で５−５、５−１０、１０−８０、８０−８０、８０−５、５−であった。ＴＯＦ質量分析計は、１００〜３２００ｍ／ｚの範囲に調整及び較正した。ＴＯＦ  ＭＳ条件には、４０００Ｖのキャピラリー電圧、１０Ｌ／分の乾燥ガス流、３００℃の乾燥ガス温度、４０Ｌ／分の噴霧器ガス流、及び３００Ｖのフラグメンター電圧が含まれた。ＭＳデータは、Ａｇｉｌｅｎｔ  ＭａｓｓＨｕｎｔｅｒ（商標）Ｑｕａｌｉｔａｔｉｖｅ  Ａｎａｌｙｓｉｓプログラムで分析した。
【０３７２】
２Ａ１及び２９Ｃ１２は、ＢＣＭＡの全長及び切断形態に結合した。図５０Ａに示されるように、２Ａ１抗体が結合したＢＣＭＡの切断形態は、ピークＡ、Ｂ、Ｄ、及びＥを含み、図５０Ｂに示されるように、２９Ｃ１２抗体が結合したＢＣＭＡの切断形態は、Ａ、Ｂ、Ｃ、及びＥを含んだ。図５０Ａ及びＢを参照すると、ピークＡは配列番号３５４に対応し、ピークＤは配列番号３５５に対応し、Ｅは配列番号３５６に対応する（図４５を参照されたい）。このより詳細な分析において、ＢＣＭＡ  ｍＡｂに結合したＢＣＭＡの２つの追加のカルボキシ末端フラグメントを特定した（太字で下線の部分がＢＣＭＡである）。
ピークＢ：
ＧＳＳＨＨＨＨＨＨＧＳＧＬＶＰＲＧＳＡＳＭＳＤＳＥＶＮＱＥＡＫＰＥＶＫＰＥＶＫＰＥＴＨＩＮＬＫＶＳＤＧＳＳＥＩＦＦＫＩＫＫＴＴＰＬＲＲＬＭＥＡＦＡＫＲＱＧＫＥＭＤＳＬＲＦＬＹＤＧＩＲＩＱＡＤＱＴＰＥＤＬＤＭＥＤＮＤＩＩＥＡＨＲＥＱＩＧＧＡＧＱＣＳＱＮＥＹＦＤＳＬＬＨＡＣＩＰＣＱＬＲＣＳＳＮＴＰＰＬＴＣＱＲ（配列番号３５７）
ピークＣ：
ＧＳＳＨＨＨＨＨＨＧＳＧＬＶＰＲＧＳＡＳＭＳＤＳＥＶＮＱＥＡＫＰＥＶＫＰＥＶＫＰＥＴＨＩＮＬＫＶＳＤＧＳＳＥＩＦＦＫＩＫＫＴＴＰＬＲＲＬＭＥＡＦＡＫＲＱＧＫＥＭＤＳＬＲＦＬＹＤＧＩＲＩＱＡＤＱＴＰＥＤＬＤＭＥＤＮＤＩＩＥＡＨＲＥＱＩＧＧＡＧＱＣＳＱＮＥＹＦＤＳＬＬＨＡＣＩＰＣＱＬＲＣＳ（配列番号３５８）
【０３７３】
このデータは、Ａｂ−１が、ヒトＢＣＭＡの漸減するフラグメント（すなわち、配列番号３５０、３５４、３５７、３５５、及び３５６）に結合し、それらのすべてがアミノ末端の部分を保持したことを示す。配列番号３５６は、すべてのＢＣＭＡフラグメントに共通しており、したがって、Ａｂ−１が、ヒトＢＣＭＡのアミノ末端に結合することを示す。明確さのために、配列番号３５６は、配列番号２８５のｈｕＢＣＭＡのアミノ酸５〜２０（境界値を含む）からなる。この根拠は、Ａｂ−１とＢＣＭＡの異なるオルソログとの差別的結合とともに、Ａｂ−１が、配列番号２８５アミノ酸１〜２０を含むヒトＢＣＭＡ上の中和決定基、またはより具体的には、配列番号２８５のアミノ酸１〜１１を含む中和決定基に結合することを示す。Ａｂ−１は、必ずしも１〜２０のアミノ酸ドメインまたは１〜１１のアミノ酸ドメイン中、すべてのアミノ酸に結合するわけではないことを理解されたい。
【０３７４】
［実施例１７］
ｈｕＢＣＭＡ：Ａｂ−１、ｈｕＢＣＭＡ：Ａｂ−２、及びｈｕＢＣＭＡ：Ａｂ−３複合体の結晶構造及びエピトープマッピング。
【０３７５】
タンパク質発現及び精製：
Ａｂ−１（２Ａ１ＣＶ５）、Ａｂ−２（２９Ｃ１２＿ｍｕｔ）、及びＡｂ−３（３２Ｂ５＿ｍｕｔ）を、その部位での切断がＦａｂフラグメントをもたらすように、ヒンジ領域に対してＮ末端のシステインの後に挿入されたカスパーゼ−３感受性部位を含有するｐＴＴ５  発現ベクター（Ｌｏｎｚａ，Ｂａｓｅｌ，Ｓｗｉｔｚｅｒｌａｎｄ）において、全長抗体として２９３−６Ｅ細胞に発現させた。標準的なＬｏｎｚａの産生プロトコル及び抗体精製プロトコルを使用して、インタクトな抗体を産生した。インタクトな抗体をＰＢＳ中に製剤化し、抗体に対してヒスチジンタグカスパーゼ−３を重量比最大１００：１で添加してＦａｂフラグメントを精製した。Ｆａｂフラグメントを、ＨｉｓＴｒａｐ（商標）（ＧＥ  Ｈｅａｌｔｈｃａｒｅ  Ｌｉｆｅ  Ｓｃｉｅｎｃｅｓ）カラムに直列で接続されたＭａｂＳｅｌｅｃｔ  ＳｕＲＥ（商標）プロテインＡカラム（ＧＥ  Ｈｅａｌｔｈｃａｒｅ  Ｌｉｆｅ  Ｓｃｉｅｎｃｅｓ）を使用して、Ｆｃ及びインタクトな抗体から分離して、ヒスチジンタグカスパーゼ−３酵素を除去した。
【０３７６】
大腸菌ＧＭ２２１に発現されるアミノ酸５〜５４構築物を有するＧＳＳ：：６ｘＨｉｓ：：Ｓｕｍｏ：：ｈｕＢＣＭＡ細胞外ドメインを使用して、可溶性タンパク質としてヒトＢＣＭＡを生成した：
ＧＳＳＨＨＨＨＨＨＧＳＧＬＶＰＲＧＳＡＳＭＳＤＳＥＶＮＱＥＡＫＰＥＶＫＰＥＶＫＰＥＴＨＩＮＬＫＶＳＤＧＳＳＥＩＦＦＫＩＫＫＴＴＰＬＲＲＬＭＥＡＦＡＫＲＱＧＫＥＭＤＳＬＲＦＬＹＤＧＩＲＩＱＡＤＱＴＰＥＤＬＤＭＥＤＮＤＩＩＥＡＨＲＥＱＩＧＧＡＧＱＣＳＱＮＥＹＦＤＳＬＬＨＡＣＩＰＣＱＬＲＣＳＳＮＴＰＰＬＴＣＱＲＹＣＮＡＳＶＴＮＳＶＫＧＴＮＡ（配列番号３５９）
【０３７７】
このタンパク質を、本質的には製造業者が推奨するプロトコルに従って、ニッケルＳｅｐｈａｒｏｓｅ  ＦａｓｔＦｌｏｗ（商標）カラム（ＧＥ  Ｈｅａｌｔｈｃａｒｅ  Ｌｉｆｅ  Ｓｃｉｅｎｃｅｓ）及びＨｉＬｏａｄ  Ｓｕｐｅｒｄｅｘ（商標）２００  ２６／６０（ＧＥ  Ｈｅａｌｔｈｃａｒｅ  Ｌｉｆｅ  Ｓｃｉｅｎｃｅｓ）で精製した。以下のデータを線形配列と関連させる目的で、ｈｕＢＣＭＡのおおよその細胞外ドメイン（ａａ５〜５４）のアミノ酸配列は、次の通りである（注記：最初のＡｌａは、５位であり、基準点については、配列番号２８５に関連してアミノ酸番号５である）：ＡＧＱＣＳＱＮＥＹＦＤＳＬＬＨＡＣＩＰＣＱＬＲＣＳＳＮＴＰＰＬＴＣＱＲＹＣＮＡＳＶＴＮＳＶＫＧＴＮＡ（配列番号３６０）。
【０３７８】
ｈｕＢＣＭＡ−Ｆａｂ複合体の形成及び精製：
ｈｕＢＣＭＡ：Ａｂ−１  Ｆａｂ、ｈｕＢＣＭＡ：Ａｂ−２  Ｆａｂ、及びｈｕＢＣＭＡ：Ａｂ−３  Ｆａｂの複合体を、Ｆａｂと過剰なｈｕＢＣＭＡとを混合することによって形成した。それぞれの複合体を、ＨｉＬｏａｄ  Ｓｕｐｅｒｄｅｘ（商標）２００  １６／６０で精製し、結晶化のために１０ｍｇ／ｍＬに濃縮した。ｈｕＢＣＭＡ：Ａｂ−１  Ｆａｂ複合体を、０．２Ｍ硫酸アンモニウム、０．１Ｍ酢酸ナトリウム、２２％ポリエチレングリコール４０００中で結晶化させた。ｈｕＢＣＭＡ：Ａｂ−２  Ｆａｂ複合体を、０．２Ｍ酒石酸二アンモニウム及び２０％ポリエチレングリコール３３５０中で結晶化させた。ｈｕＢＣＭＡ：Ａｂ−３  Ｆａｂ複合体を、０．２Ｍ硫酸アンモニウム、０．１Ｍ  Ｈｅｐｅｓ、ｐＨ７．０、及び２８％ポリエチレングリコール３３５０中で結晶化させた。すべての結晶化実験は、シッティングドロップ式蒸気拡散法を用いて２０℃で行った。この方法は、当該技術分野で既知であり、例えば、Ｄｅｓｓａｕ，ｅｔ  ａｌ．，Ｊ  Ｖｉｓ  Ｅｘｐ．，２０１１；４７：２２８５を参照されたい。
【０３７９】
データの収集及び構造解：
複合体を、Ａｄｖａｎｃｅｄ  Ｐｈｏｔｏｎ  Ｓｏｕｒｃｅ  ａｔ  Ａｒｇｏｎｎｅ  Ｎａｔｉｏｎａｌ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ（Ａｒｇｏｎｎｅ，ＩＬ）において、次の分解能まで分析した：ｈｕＢＣＭＡ：Ａｂ−１  Ｆａｂは１．５Å、ｈｕＢＣＭＡ：Ａｂ−２  Ｆａｂは１．８５Å、及びｈｕＢＣＭＡ：Ａｂ−３  Ｆａｂは１．９Å。すべてのデータは、ｄ＊ＴＲＥＫ（著作権）で処理し、ＳＣＡＬＥＰＡＣＫ（著作権）によってスケーリングした。ｈｕＢＣＭＡ：Ａｂ−１  Ｆａｂの構造を、公開された構造であるＦａｂ  ＣＲ９１１４（ｐｄｂコード：４ＦＱＨ）を使用して、ＰＨＡＳＥＲ（著作権）プログラムを用いた分子置換法によって解析した。ｈｕＢＣＭＡの構造を、ＣＣＰ４プログラムスイートの自動化モデル構築ソフトウェアＢＵＣＣＡＮＥＥＲ（著作権）を用いて解析した。ｈｕＢＣＭＡ：Ａｂ−２  Ｆａｂ及びｈｕＢＣＭＡ：Ａｂ−３  Ｆａｂの構造を、既に解析したｈｕＢＣＭＡ：Ａｂ−１  Ｆａｂの構造を使用して、ＰＨＡＳＥＲ（著作権）プログラムを用いた分子置換法によって解析した。一連の反復的構造精密化及びモデル構築を、ＲＥＦＭＡＣ５（著作権）及びＣＯＯＴ（著作権）を用いて行った。
【０３８０】
Ａｂ−１（２Ａ１ＣＶ５）Ｆａｂ
ｈｕＢＣＭＡ：Ａｂ−１  Ｆａｂ複合体の結晶構造を、１６．４％のＲ係数（２２．４％のＲｆｒｅｅ係数）に対して１．５Åまで解析した。非対称単位の複合体が１つ存在する。この複合体は、１つのｈｕＢＣＭＡ分子と１つのＡｂ−１  Ｆａｂとからなった。全体として、複合体中のｈｕＢＣＭＡ及びＡｂ−１の残基の大部分は、電子密度が、特にエピトープ及びパラトープの範囲において良好に解析された。ｈｕＢＣＭＡ細胞外ドメイン（ＥＣＤ）分子は、各分子が鞍部（ｓａｄｄｌｅ）の半分である２つの分子と、「乗り手（ｒｉｄｅｒ）」として固有のヘリックスとを含有する、鞍様構造に折り畳まる（図５１）。分子のＮ末端側の半分のＡ１モジュールは、３つのβ鎖と１つのジスルフィド結合を含有する。Ｄ２と称される他方のモジュールは、２つの短いαヘリックス及び２つのジスルフィド結合を分子のＣ末端側の半分に含有する。ヒトＡＰＲＩＬに結合したヒトＢＣＭＡの結晶構造は、Ｈｙｍｏｗｉｔｚ，ｅｔ  ａｌ．，Ｊ  Ｂｉｏ  Ｃｈｅｍ，２００５，ｖｏｌ．２８０，ｐｐ．７２１８−７２２７に以前に記載されており、この著者は、β１−β２ドメインを、おおよそで配列番号３５２のアミノ酸４〜２２に及ぶと指定している。当業者であれば、この指定がアルゴリズムに基づいた概算であり、実際のドメインは、指定されたものよりもわずかに長いかまたは短い可能性がある事を理解する。
【０３８１】
Ａｂ−１は、総表面積１９６４Å２を埋めるｈｕＢＣＭＡとの拡張した非共有結合的相互作用をもたらし、これは、従来的な抗体：抗原表面積１５００〜１７００Å２よりも相当に大きい。加えて、０．７０の形状相補性は、ほとんどのモノクローナル抗体の典型的な相補性が０．６４〜０．６８であることを考慮すると、特に良好であった。Ａｂ−１は、重鎖及び軽鎖可変ドメインの６つすべてのＣＤＲループを利用して、ｈｕＢＣＭＡと相互作用した。ｈｕＢＣＭＡについては、Ｎ末端、β１−β２ループ、β２〜α１セグメント、α１−α２ループ、及びα−２ヘリックスのＮ末端部が、抗体と直接的な相互作用を行う。
【０３８２】
ｈｕＢＣＭＡ：Ａｂ−１界面を、１）その遊離形態及びＦａｂとの複合体にあるｈｕＢＣＭＡと比較した際の溶媒接触可能表面積の変化、ならびに２）ｈｕＢＣＭＡとＦａｂとの間の接触距離に基づいて、分析した。エピトープ及びパラトープの両方の領域を、上述の分析ならびに相互作用の性質から特定した。Ａｂ−１は、軽鎖及び重鎖の両方からのＣＤＲでｈｕＢＣＭＡと相互作用し、軽鎖がｈｕＢＣＭＡとの９つの水素結合及び３４３個のファンデルワールス接触（合計０〜５．０Å）を形成し、重鎖ＣＤＲは５個の水素結合及び２４８個のファンデルワールス接触（合計０〜５．０Å）を有する。ｈｕＢＣＭＡのＡ２モジュールのβ１−β２ループは、Ａｂ−１のＣＤＲ領域の重鎖と軽鎖との間の中裂に挿入され、これは、部分的に、異常に高いＡｂ−１とｈｕＢＣＭＡとの親和性を説明し得る。ｈｕＢＣＭＡのＤ２モジュール（Ｃ末端）は、主として、Ａｂ−１の軽鎖と相互作用する。ｈｕＢＣＭＡのＡ２モジュールのβ１−β２ループは、重要な特徴的エピトープ領域であり、これは、すべての水素結合相互作用及び近接ファンデルワールス相互作用（３．４Å未満）が、ｈｕＢＣＭＡのβ１−β２ループ及びＮ末端で観察されるためである。
【表２４】
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【表２５】
2019031510.tif 000041
2019031510.tif 000042
【表２６Ａ−２６Ｂ】
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2019031510.tif 000044
【表２７】
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2019031510.tif 000046
【０３８３】
Ａｂ−２（２９Ｃ１２）Ｆａｂ
ｈｕＢＣＭＡ：Ａｂ−２  Ｆａｂ複合体の結晶構造を、２１．３％のＲ係数（２２．８％のＲｆｒｅｅ係数）に対して１．８５Åの分解能まで解析した。この複合体は、１つのｈｕＢＣＭＡ分子と１つのＡｂ−２  Ｆａｂとからなった。全体として、複合体中のｈｕＢＣＭＡ及びＡｂ−２の残基の大部分は、エピトープ及びパラトープの範囲を含み、電子密度が良好に解析された。ｈｕＢＣＭＡのＤ２モジュールの部分は、低い電子密度を呈し、それが、特に残基Ｔｈｒ３２、Ｌｅｕ３５、及びＧｌｎ３８付近で可動性であることを示す。
【０３８４】
全体として、Ａｂ−２は、０．７１の形状相補性で、総表面積１６６９Å２を埋めるｈｕＢＣＭＡとの比較的拡張した相互作用をもたらす。Ａｂ−２は、重鎖可変ドメインの３つすべてのＣＤＲループ、ならびに軽鎖可変ドメインのＣＤＲ１及びＣＤＲ３を用いて、ｈｕＢＣＭＡと相互作用する。ｈｕＢＣＭＡについては、Ｎ末端、β１−β２ループ、ならびにＣ末端α１及びＮ末端α２を含むα１−α２ループが、Ａｂ−１と相互作用する。
【０３８５】
ｈｕＢＣＭＡ：Ａｂ−２  Ｆａｂ界面を、１）その遊離形態及びＡｂ−２  Ｆａｂとの複合体形態にあるｈｕＢＣＭＡと比較した際の溶媒接触可能表面積の変化、ならびに２）ｈｕＢＣＭＡとＡｂ−２との間の接触距離に基づいて、分析した。エピトープ及びパラトープの両方の領域を、上述の分析ならびに相互作用の性質から特定した。Ａｂ−２は、軽鎖及び重鎖可変ドメインの両方でｈｕＢＣＭＡを認識し、軽鎖可変ドメインが、ｈｕＢＣＭＡとの２つの水素結合及び１０６個のファンデルワールス接触（合計０〜５．０Å）を形成し、重鎖可変ドメインは３つの水素結合、２つの塩架橋、及び３１９個のファンデルワールス接触（合計０〜５．０Å）を有する。したがって、Ａｂ−２重鎖可変ドメインのＣＤＲは、ｈｕＢＣＭＡの認識に重要な役割を果たす。ｈｕＢＣＭＡのＡ２モジュールのβ１−β２ループは、Ａｂ−２  ＦａｂのＣＤＲ領域の重鎖と軽鎖との間の中裂に挿入される重要な特徴的エピトープ領域として機能する。ｈｕＢＣＭＡのＤ２モジュール（Ｃ末端）は、重鎖可変ドメインのみと相互作用する。すべての水素結合相互作用及び近接ファンデルワールス相互作用（３．４Å未満）は、ほとんどの場合、ｈｕＢＣＭＡのβ１−β２ループ及びＮ末端に主に観察される。Ａｒｇ２７及びＬｅｕ３５といったＤ２モジュールの残基によって提示される相互作用は、それらの低い電子密度データのため、あまり重要でない可能性が高い。
【表２８】
2019031510.tif 000047
【表２９】
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2019031510.tif 000049
【表３０Ａ−３０Ｂ】
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2019031510.tif 000051
【表３１Ａ−３１Ｂ】
2019031510.tif 000052
2019031510.tif 000053
【０３８６】
Ａｂ−３（３２Ｂ５＿ｍｕｔ）Ｆａｂ
ｈｕＢＣＭＡ：Ａｂ−３  Ｆａｂ複合体の結晶構造を、２１．８％のＲ係数（２４．３％のＲｆｒｅｅ係数）に対して１．９Åの分解能まで解析した。この複合体は、１つのｈｕＢＣＭＡ分子と１つのＡｂ−３  Ｆａｂとからなった。全体として、複合体中のｈｕＢＣＭＡ及びＡｂ−３の残基の大部分は、エピトープ及びパラトープの範囲を含み、電子密度が良好に解析された。ｈｕＢＣＭＡのＤ２モジュールは、低い電子密度を呈し、それが、特に残基Ａｒｇ３９及びＡｓｎ３１付近で可動性であることを示す。
【０３８７】
全体として、Ａｂ−３が、０．７１の形状相補性で、総表面積１７１９Å２を埋めるｈｕＢＣＭＡとの比較的拡張した相互作用をもたらす。Ａｂ−３は、重鎖可変ドメインの３つすべてのＣＤＲループ、ならびに軽鎖可変ドメインのＣＤＲ１及びＣＤＲ３を用いて、ｈｕＢＣＭＡと相互作用する。ｈｕＢＣＭＡについては、Ｎ末端、β１−β２ループ、ならびにＣ末端α１及びＮ末端α２を含むα１−α２ループが、Ａｂ−３と相互作用する。
【０３８８】
ｈｕＢＣＭＡ：Ａｂ−３  Ｆａｂ界面を、１）その遊離形態及びＡｂ−３  Ｆａｂとの複合体形態にあるｈｕＢＣＭＡと比較した際の溶媒接触可能表面積の変化、ならびに２）ｈｕＢＣＭＡとＡｂ−３との間の接触距離に基づいて、分析した。エピトープ及びパラトープの両方の範囲を、上述の分析ならびに相互作用の性質（すなわち、本明細書に提供される「相互作用する」の定義において説明されるもの）から特定した。Ａｂ−３は、軽鎖及び重鎖可変ドメインの両方でｈｕＢＣＭＡを認識し、軽鎖可変ドメインが、ｈｕＢＣＭＡとの１つの水素結合及び１０１個のファンデルワールス接触（合計０〜５．０Å）を形成し、重鎖可変ドメインは４つの水素結合、２つの塩架橋、及び３３９個のファンデルワールス接触（合計０〜５．０Å）を有する。したがって、Ａｂ−３重鎖可変ドメインのＣＤＲは、ｈｕＢＣＭＡとの相互作用に重要な役割を果たす。ｈｕＢＣＭＡのＡ２モジュールのβ１−β２ループは、Ａｂ−３のＣＤＲ領域の重鎖と軽鎖との間の中裂に挿入される重要な特徴的エピトープ領域である。ｈｕＢＣＭＡのＤ２モジュール（Ｃ末端、上述）は、Ａｂ−３の重鎖可変ドメインのみと相互作用する。すべての水素結合相互作用及び近接ファンデルワールス相互作用（３．４Å未満）は、ほとんどの場合、ｈｕＢＣＭＡのβ１−β２ループ及びＮ末端に主に観察される。Ａｒｇ２７、Ｔｈｒ３２、及びＬｅｕ３５といったＤ２モジュールの残基によって提示される相互作用は、それらの低い電子密度データのため、あまり重要でない可能性が高い。
【表３２】
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【表３３】
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2019031510.tif 000056
【表３４Ａ−３４Ｂ】
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【表３５Ａ−３５Ｂ】
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【０３８９】
結晶構造解析データは、Ａｂ−１、２、及び３が、ｈｕＢＣＭＡ上の重要な構造ドメイン、すなわち、β１−β２ループ及びＮ末端、ならびにこの領域の外側の残基と相互作用することを証明する。結晶構造解析データは、実施例１６におけるＡｂ−１のペプチドに基づくエピトープマッピング（Ａｂ−１がｈｕＢＣＭＡの漸減するフラグメント（すなわち、配列番号３５０、３５４、３５７、３５５、及び３５６）に結合し、これらのすべてがアミノ末端部分を保持したことを示した）を裏付ける。配列番号３５６は、試験したすべてのｈｕＢＣＭＡフラグメントに共通している；配列番号３５６は、配列番号２８５のｈｕＢＣＭＡのアミノ酸５〜２０（境界値を含む）（または配列番号３６０のアミノ酸１〜１６（境界値を含む））からなり、これは、β１−β２ループのほぼ全体を包含する。一緒にすると、これは、結晶構造解析データにおけるより詳細な分析に示されるように、Ａｂ−１がこの領域の外側のｈｕＢＣＭＡ上の残基と相互作用するという理解の下で、ｈｕＢＣＭＡのアミノ末端、特にβ１−β２ループが、Ａｂ−１のエピトープにおける重要な構造的ドメインであることの根拠である。
【０３９０】
ｈｕＢＣＭＡとＡｂ−１及びＡｂ−２／Ａｂ−３との間の詳細な相互作用は、はっきりと異なる。Ａｂ−１に観察されたｈｕＢＣＭＡのβ１鎖及びα１〜α２ヘリックスとのさらなる相互作用もまた、広範囲なものであり、これらは、Ａｂ−１の重鎖及び軽鎖の両方によって認識される。しかしながら、Ａｂ−２及びＡｂ−３に観察されたｈｕＢＣＭＡのＣ末端α１〜Ｎ末端α２（残基Ａｒｇ２７〜Ｌｅｕ３５）由来のセグメントとのさらなる相互作用は、その範囲の電子密度が弱いことに起因して、あまり重要でない可能性が高く、これらは、Ａｂ−２及びＡｂ−３の重鎖によってのみ認識される。
【図１】
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【図２】
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【図３】
2019031510.tif 000062
【図４Ａ】
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【図４Ｂ】
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【図５Ａ】
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【図５Ｂ】
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【図５Ｃ−１】
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【図５Ｃ−２】
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【図５Ｃ−３】
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【図５Ｃ−４】
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【図６】
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【図７】
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【図８】
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【図９】
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【図１０】
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【図１１】
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【図１２Ａ】
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【図１２Ｂ】
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【図１２Ｃ】
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【図１２Ｄ】
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【図１２Ｅ】
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【図１２Ｆ】
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【図１３】
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【図１４Ａ】
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【図１４Ｂ】
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【図１５】
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【図１６Ａ】
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【図１６Ｂ】
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【図１７】
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【図１８Ａ】
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【図１８Ｂ】
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【図１９Ａ】
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【図１９Ｂ】
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【図２０】
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【図２１Ａ】
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【図２１Ｂ】
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【図２２Ａ】
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【図２２Ｂ】
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【図２３】
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【図２４】
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【図２５Ａ】
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【図２５Ｂ】
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【図２６】
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【図２７】
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【図２８】
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【図２９】
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【図３０】
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【図３１】
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【図３２】
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【図３３】
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【図３４Ａ】
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【図３４Ｂ】
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【図３５】
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【図３６】
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【図３７】
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【図３８】
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【図３９】
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【図４０】
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【図４１Ａ】
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【図４１Ｂ】
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【図４２Ａ】
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【図４２Ｂ】
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【図４３Ａ】
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【図４３Ｂ】
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【図４３Ｃ】
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【図４３Ｄ】
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【図４３Ｅ】
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【図４３Ｆ】
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【図４４】
2019031510.tif 000129
【図４５】
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【図４６】
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【図４７Ａ】
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【図４７Ｂ】
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【図４７Ｃ】
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【図４７Ｄ】
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【図４８Ａ】
2019031510.tif 000136
【図４８Ｂ】
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【図４８Ｃ】
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【図４９Ａ】
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【図４９Ｂ】
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【図４９Ｃ】
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【図５０】
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【図５１】
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【配列表】
2019031510000001.app
【手続補正書】
【提出日】平成30年10月26日(2018.10.26)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
単離抗体またはそのＢＣＭＡ結合フラグメントであって、
Ａｂ−１の６つのＣＤＲを含む抗体、
Ａｂ−２の６つのＣＤＲを含む抗体、
Ａｂ−３の６つのＣＤＲを含む抗体、
Ａｂ−４の６つのＣＤＲを含む抗体、
Ａｂ−５の６つのＣＤＲを含む抗体、
Ａｂ−６の６つのＣＤＲを含む抗体、
Ａｂ−７の６つのＣＤＲを含む抗体、
Ａｂ−８の６つのＣＤＲを含む抗体、
Ａｂ−９の６つのＣＤＲを含む抗体、
Ａｂ−１０の６つのＣＤＲを含む抗体、
Ａｂ−１１の６つのＣＤＲを含む抗体、
Ａｂ−１２の６つのＣＤＲを含む抗体、
Ａｂ−１３の６つのＣＤＲを含む抗体、
Ａｂ−１４の６つのＣＤＲを含む抗体、
Ａｂ−１５の６つのＣＤＲを含む抗体、
Ａｂ−１６の６つのＣＤＲを含む抗体、
Ａｂ−１７の６つのＣＤＲを含む抗体、
Ａｂ−１８の６つのＣＤＲを含む抗体、
Ａｂ−１９の６つのＣＤＲを含む抗体、
Ａｂ−２０の６つのＣＤＲを含む抗体、
Ａｂ−２１の６つのＣＤＲを含む抗体、
Ａｂ−２２の６つのＣＤＲを含む抗体、
Ａｂ−２３の６つのＣＤＲを含む抗体、
Ａｂ−２４の６つのＣＤＲを含む抗体、
Ａｂ−２５の６つのＣＤＲを含む抗体、
Ａｂ−２６の６つのＣＤＲを含む抗体、
Ａｂ−２７の６つのＣＤＲを含む抗体、
Ａｂ−２８の６つのＣＤＲを含む抗体、
Ａｂ−２９の６つのＣＤＲを含む抗体、
Ａｂ−３０の６つのＣＤＲを含む抗体、
Ａｂ−３１の６つのＣＤＲを含む抗体、
Ａｂ−３２の６つのＣＤＲを含む抗体、
Ａｂ−３３の６つのＣＤＲを含む抗体、
Ａｂ−３４の６つのＣＤＲを含む抗体、
Ａｂ−３５の６つのＣＤＲを含む抗体、
Ａｂ−３６の６つのＣＤＲを含む抗体、
Ａｂ−３７の６つのＣＤＲを含む抗体、及び
Ａｂ−３８の６つのＣＤＲを含む抗体からなる群から選択される、単離抗体またはそのＢＣＭＡ結合フラグメント。
【外国語明細書】
2019031510000001.pdf