(57)【要約】      （修正有）【課題】骨増殖を促進するための、骨欠損部又はその付近に適合するように構成されたインプラントの提供。又、インプラントを作成及び使用する方法の提供。【解決手段】インプラントは、無細胞組織マトリックス（ＡＴＭ）中に均一に配置されたオキシステロールを含むインプラント。無細胞組織マトリックスはブタコラーゲンであってもよく、ある場合には架橋している。該インプラントは、約５ｗｔ．％〜約２５ｗｔ．％の量の無細胞ブタ架橋コラーゲン、及び約５ｗｔ．％〜約９０ｗｔ．％の量のオキシステロールを含有することができる。【選択図】なし【特許請求の範囲】
【請求項１】
骨増殖を促進するために骨欠損部またはその付近に適合するように構成されたインプラントであって、無細胞組織マトリックス中に均一に配置されたオキシステロールを含むインプラント。
【請求項２】
（ｉ）インプラントが成形可能なゲル、ペーストまたはパテである；（ｉｉ）インプラントが凍結乾燥されている；（ｉｉｉ）インプラントが凍結乾燥されて注射器に収容されている；または（ｉｖ）インプラントが水和されて注射器に収容されている、請求項１に記載のインプラント。
【請求項３】
（ｉ）オキシステロールが（３Ｓ，５Ｓ，６Ｓ，８Ｒ，９Ｓ，１０Ｒ，１３Ｓ，１４Ｓ，１７Ｓ）  １７−（（Ｓ）−２−ヒドロキシオクタン−２−イル）−１０，１３−ジメチルヘキサデカヒドロ−ｌＨ−シクロペンタ［ａ］フェナントレン−３，６−ジオール（Ｏｘｙ１３３）、Ｏｘｙ１４９、Ｏｘｙ１５３、Ｏｘｙ１５４、Ｏｘｙ１５５、またはその水和物、溶媒和物、非晶質形態、もしくは医薬的に許容できる塩類を含む；（ｉｉ）無細胞組織マトリックスがヒト、ブタ、ヤギ、ウシ、ヒツジ、またはウマ源から得られる；（ｉｉｉ）無細胞組織マトリックスがブタコラーゲンである；あるいは（ｉｖ）無細胞組織マトリックスが架橋ブタコラーゲンである、請求項１に記載のインプラント。
【請求項４】
無細胞組織マトリックスが、約５ｗｔ．％から約２５ｗｔ．％までの無細胞ブタコラーゲンおよび約０．０１ｗｔ．％から約９０ｗｔ．％までのオキシステロールを含む、請求項１に記載のインプラント。
【請求項５】
インプラントがさらに約２５ｗｔ．％から約５０ｗｔ．％までの流体および約２５ｗｔ．％から約７５ｗｔ．％までの量の骨材を含む、請求項１に記載のインプラント。
【請求項６】
無細胞組織マトリックスが、粒状化された約５０μｍから約５００μｍまでの粒子サイズを有するブタコラーゲンを含む、請求項１に記載のインプラント。
【請求項７】
骨材が、（ｉ）脱灰骨マトリックス、石灰化骨、脱灰骨線維、脱灰骨チップ；（ｉｉ）リン酸三カルシウム、ヒドロキシアパタイト、二相性リン酸カルシウム、多孔質リン酸カルシウムセラミックス、ヒドロキシアパタイトまたはその組合わせを含む無機セラミック；（ｉｉｉ）約１２５μｍから約７５０μｍまでの粒子サイズ；（ｉｖ）約７０：３０〜約９０：１０の比率のリン酸三カルシウムおよびヒドロキシアパタイト；あるいは（ｖ）約８５：１５の比率のリン酸三カルシウムおよびヒドロキシアパタイトを含む、請求項５に記載のインプラント。
【請求項８】
流体が、水、塩類溶液、ＤＭＳＯ、酢酸、アセトン、ＤＭＥ、ＤＭＦ、ＭＴＢＥ、アセトニトリル、ブタノール、ブタノン、ｔ−ブチルアルコール、エタノール、ポリエチレングリコール、メタノール、クロロベンゼン、クロロホルム、トルエン、プロパノール、ペンタン、ヘプタン、エタノール、Ｃａｐｒｙｏｌ−９０（商標）、ジエチルエーテル、またはその組合わせを含む、請求項５に記載のインプラント。
【請求項９】
無細胞組織マトリックスが天然組織材料に由来する固体または半固体状のコラーゲン性材料の粒子であり、コラーゲン性材料はそれが由来する天然組織材料の元の線維構築および分子構造を保存しており、コラーゲン性材料は非線維性の組織タンパク質、糖タンパク質、細胞要素、脂質または脂質残渣を実質的に含まず、コラーゲン性材料は非−細胞毒性であり、インプラントはペースト、ゲルまたは注入可能な溶液の成分として使用でき、コラーゲン性材料の粒子は約５０ミクロン〜約５００ミクロンの範囲の粒子サイズを有する、請求項１に記載のインプラント。
【請求項１０】
無細胞組織マトリックスが、ヒトまたは動物組織に由来する非吸収性の、実質的に非抗原性のコラーゲン性線維組織調製物であり、組織損傷の永久修復として同種−または異種移植に適切であり、その調製物はそれが由来するヒトまたは動物組織の天然構造および元の構築を保存しており、非線維性の組織タンパク質および糖タンパク質を実質的に含まず、細胞要素を実質的に含まず、脂質および脂質残渣を実質的に含まず、非−細胞毒性であり、調製物は移植された際に宿主細胞による再コロニー形成が可能である、請求項１に記載のインプラント。
【請求項１１】
インプラントが凍結乾燥され、次いで骨欠損部またはその付近に移植される前に再水和されるように構成されている、請求項１に記載のインプラント。
【請求項１２】
インプラントの作成方法であって、流体を、インプラントの総重量を基準として約０．０１ｗｔ．％〜約９０ｗｔ．％の量のオキシステロールおよびインプラントの総重量を基準として約０．１ｗｔ．％から約２０ｗｔ．％までの量の無細胞組織マトリックスと混合することを含む方法。
【請求項１３】
（ｉ）インプラントを流体と混合して凍結乾燥させて、凍結乾燥インプラントを形成することをさらに含む；あるいは（ｉｉ）無細胞組織マトリックスは無細胞ブタコラーゲンまたは無細胞ブタ架橋コラーゲンである、請求項１２に記載のインプラントの作成方法。
【請求項１４】
流体が、約３／４ｍＬから約１０ｍＬまでの量の水、塩化ナトリウム溶液、デキストロース、乳酸リンゲル液、リン酸緩衝生理食塩水、血液、骨髄穿刺液、多血小板血漿、骨髄画分、またはその組合わせである、請求項１２に記載のインプラントの作成方法。
【請求項１５】
インプラントがさらに、インプラントの総重量を基準として約２ｗｔ．％から約４ｗｔ．％までの量のバインダーまたは膨張相材料を含む、請求項１２に記載のインプラントの作成方法。
【請求項１６】
バインダーまたは膨張相材料が、カルボキシメチルセルロース、ペクチン、キトサン、またはその組合わせである、請求項１５に記載のインプラントの作成方法。
【請求項１７】
さらに、（ｉ）インプラントを凍結乾燥前に型に入れる；（ｉｉ）インプラントを注射器に入れる；（ｉｉｉ）凍結乾燥インプラントを真空密封パウチに入れる；または（ｉｖ）インプラントを収容した注射器を真空密封パウチに入れることを含む、請求項１３に記載のインプラントの作成方法。
【請求項１８】
凍結乾燥インプラントに添加した流体の体積が約３／４ｍＬから約１０ｍＬまでを含む、請求項１３に記載のインプラントの作成方法。
【請求項１９】
処置の必要がある患者において骨欠損部を処置する方法であって、無細胞組織マトリックス中に均一に分散したオキシステロールを含むインプラントを骨欠損部またはその付近に移植することを含む方法。
【請求項２０】
インプラントがさらに、インプラントの総重量を基準として約２ｗｔ．％から約４ｗｔ．％までの量のバインダーまたは膨張相材料を含む、請求項１９に記載の骨欠損部を処置する方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
骨増殖を促進するために骨欠損部またはその付近に適合するように構成されたインプラントを提供する。インプラントは、無細胞組織マトリックス(acellular tissue matrix)（ＡＴＭ）中に均一に配置されたオキシステロールを含む。無細胞組織マトリックスはブタコラーゲンであってもよく、それはある場合には架橋している。インプラントは、インプラントの約５ｗｔ．％〜約２５ｗｔ．％の量の無細胞ブタ架橋コラーゲン、およびインプラントの約５ｗｔ．％〜約９０ｗｔ．％の量のオキシステロールを含有することができる。オキシステロールはＯｘｙ１３３の１水和物またはＯｘｙ１３３の多型であってもよい。インプラントを作成および使用する方法をさらに提供する。
【背景技術】
【０００２】
[0001]  生物製剤は、骨折治癒および脊椎障害の外科的管理を含めた医療用途において骨増殖を促進するために一般的に用いられている。脊椎固定(spine fusion)は、腰椎および頚椎を冒す椎間板変性症および関節炎に対処するために、脊柱変形により引き起こされた変形を補正するために、また脊椎すべり症による不安定性を修復するために、しばしば整形外科医および神経外科医によって同様に行なわれる。さらに、脊椎固定の手法は、圧迫された脊髄神経により引き起こされる手または足の痛みを処置するために適用できる。歴史的に、患者の腸骨稜から採取される自家骨の移植が椎骨レベル間の固定を増強するために用いられている。
【０００３】
[0002]  骨形成性であって脊椎固定を促進するために一般的に用いられているタンパク質の１つは、組換えヒト骨形態形成タンパク質−２(recombinant human bone morphogenetic protein-2)（ｒｈＢＭＰ−２）である。小分子も骨増殖を誘導するために用いられている。オキシステロール(oxysterol)類は、循環中、ならびにヒトおよび動物の組織中に存在するコレステロールの酸素化誘導体の大きなファミリーを形成する。オキシステロール類はアテローム硬化病変部に存在し、種々の生理学的プロセス、たとえば細胞分化、炎症、アポトーシス、およびステロイド産生において役割を果たすことが見出された。ある天然オキシステロール類は強い骨形成性をもち、骨を増殖させるのに使用できる。最も強力な骨形成性の天然オキシステロールである２０（Ｓ）−ヒドロキシコレステロールは、骨芽細胞および脂肪細胞に分化できる多能性間葉細胞に適用した際に骨形成性でありかつ抗脂質形成性である。
【０００４】
[0003]  そのようなオキシステロールの１つは、Ｏｘｙ１３３、すなわち（３Ｓ，５Ｓ，６Ｓ，８Ｒ，９Ｓ，１０Ｒ，１３Ｓ，１４Ｓ，１７Ｓ）  １７−（（Ｓ）−２−ヒドロキシオクタン−２−イル）−１０，１３−ジメチルヘキサデカヒドロ−１Ｈ−シクロペンタ［ａ］フェナントレン−３，６−ジオールであり、それは下記の構造を示す。
【０００５】
【化１】
2019022650.tif 000002
【０００６】
[0004]  骨欠損部を処置するために多様な材料が示唆されている。伝統的な骨移植のほかに、幾つかのマトリックス材料を含めて多数の合成代替骨移植材が使用または探索されている。
【０００７】
[0005]  近年、ヒトまたは動物のいずれかに由来するコラーゲンをベースとする材料の提供に多くの関心が集まっている。特に、ヒトに用いた際の組織拒絶を避けるために適合性を備えるように処理された動物組織をベースとする調製物および材料の開発にかなりの関心が向けられている。皮膚細胞外マトリックス中のコラーゲンの主な機能は、結合組織において骨格として作用することである。主に、コラーゲンはＩ型コラーゲン（８０〜８５％）およびＩＩＩ型コラーゲン（８〜１１％）の形態で存在し、それらは両方ともフィブリル状またはロッド状のコラーゲンである。皮膚の引張り強さの大部分は、これらのコラーゲン分子が隣接分子の架橋でアセンブリングされてフィブリルになり、引張り強さをさらに増大させることによるものである。コラーゲンは骨の内植を促進するための骨格形成材料としても使用できる。コラーゲンはしばしば、注入可能またはプレフォームド−インプラント組成物のためのキャリヤーとして用いられている。コラーゲン、エラスチンおよび／または他の生体適合性材料を含有する注入可能なインプラント組成物の難点は、移動および吸収の傾向があることであり、これはインプラントが限られた時間有効であるにすぎないことを意味する可能性がある。プレフォームドインプラントは特定の操作に使われるにすぎない。
【０００８】
[0006]  したがって、骨増殖促進剤を送達するために使用できる改良された展性(malleable)インプラントに対するニーズがある。コラゲナーゼが容易には破壊できずかつ寸法安定性を提供できるコラーゲン骨格に対するニーズもある。さらに、骨形成剤(osteogenic agent)、たとえばオキシステロールを取り込んでそのオキシステロールを簡便かつ迅速に骨欠損部へ送達できる展性インプラントの提供に対するニーズがある。さらに、骨、同種移植片、自家移植片、および／または合成材料を含む他の医療用インプラント、たとえばスクリュー、ロッド、プレート、および椎体間(interbody)デバイスに結合する接着特性をもつ展性インプラントに対するニーズもある。
【発明の概要】
【０００９】
[0007]  無細胞組織マトリックス（ＡＴＭ）中に均一に配置されたオキシステロールを含有するインプラント、ならびにそれらのインプラントを作成および使用する方法を提供する。インプラントは骨増殖を促進するために骨欠損部またはその付近に適合するように構成される。ある態様において、インプラントは成形可能なゲル、ペーストまたはパテであり、ある場合にはそれを注射器に入れることにより送達できる。他の態様においてはインプラントを凍結乾燥し、ある例では骨欠損部への送達のために注射器に入れる。再水和すると、インプラントは水和され、場合により外科処置部位へ容易に送達するために注射器に入れられる。ある態様において、凍結乾燥インプラントは、無細胞ブタコラーゲンマトリックス（架橋していてもよく、架橋していなくてもよい）、骨材、およびそれらに取り込まれた骨形成剤、たとえばオキシステロールを含む。さらに、成形可能なインプラントを提供し、それらはさらにバインダーまたは膨張相材料、たとえばカルボキシメチルセルロース、アルギネート、ペクチンまたはキトサンをも含有することができる。一側面において、本出願は無細胞ブタコラーゲンマトリックス、骨材、およびオキシステロールを含む有効薬剤の組合わせを含有する成形可能な凍結乾燥インプラントを含む、移植可能な骨形成性医療材料に関する。
【００１０】
[0008]  ある態様において、下記の構造をもつ有効薬剤：
【００１１】
【化２】
2019022650.tif 000003
【００１２】
またはその医薬的に許容できる塩、水和物もしくは溶媒和物を含む成形可能なインプラントを提供する；式中のＲｌは少なくとも１個の炭素原子をもつ脂肪族または環状の置換基を含む。ある態様において、有効薬剤はＯｘｙ１３３を含むステロールである。
【００１３】
[0009]  特定の態様において、インプラントの無細胞組織マトリックス（ＡＴＭ）は天然組織材料に由来するコラーゲン性材料の固体または半固体粒子を含み、そのコラーゲン性材料はそれが由来する天然組織材料の元の線維構築(fiber architecture)および分子超構造(molecular ultrastructure)を保存しており、コラーゲン性材料は非線維性の組織タンパク質、糖タンパク質、細胞要素、脂質または脂質残渣を実質的に含まず、コラーゲン性材料は非−細胞毒性であり、インプラント組成物はペースト、ゲルまたは注入可能な溶液の成分として使用でき、コラーゲン性材料の粒子は約５０ミクロン〜約５００ミクロンの範囲の粒子サイズをもつ。
【００１４】
[0010]  他の態様において、無細胞組織マトリックスはヒトまたは動物組織に由来する非吸収性の、実質的に非抗原性のコラーゲン性線維組織調製物であり、骨欠損部の永久修復としての同種−または異種移植に適切であり、その調製物はヒトまたは動物の組織の天然構造および元の構築を保持しており、非線維性の組織タンパク質および糖タンパク質を実質的に含まず、細胞要素を実質的に含まず、脂質および脂質残渣を実質的に含まず、非−細胞毒性であり、その調製物は移植された際に宿主細胞（たとえば、破骨細胞、骨芽細胞など）による再コロニー形成が可能である。
【００１５】
[0011]  種々の側面において、無細胞組織マトリックスはヒト、ブタ、ヤギ、ウシ、ヒツジ、またはウマ源から得られる。他の側面において、無細胞組織マトリックスはブタコラーゲンであり、ある場合には架橋ブタコラーゲンである。
【００１６】
[0012]  ある態様において、インプラントの無細胞組織マトリックスは約５ｗｔ．％から約２５ｗｔ．％までの無細胞ブタコラーゲン、および約０．０１ｗｔ．％から約９０ｗｔ．％までのオキシステロールを含む。他の態様において、インプラントは、オキシステロールおよび無細胞組織マトリックスのほかに約２５ｗｔ．％から約５０ｗｔ．％までの流体、および約２５ｗｔ．％から約７５ｗｔ．％までの骨材を含む。
【００１７】
[0013]  特定の態様において、インプラントの骨材は脱灰骨マトリックス(demineralized bone matrix)（ＤＢＭ）、石灰化(mineralized)骨マトリックス、脱灰骨線維、脱灰骨チップを含有する。他の態様において、骨材は、リン酸三カルシウム、ヒドロキシアパタイト、二相性リン酸カルシウム、多孔質リン酸カルシウムセラミックス、リン酸三カルシウム、ヒドロキシアパタイト、またはその組合わせを含む無機セラミックであってもよい。ある側面において、リン酸三カルシウムとヒドロキシアパタイトは約７０：３０から約９０：１０までの比率、または約８５：１５の比率である。種々の態様において、骨材の粒子サイズは約１２５μｍから約７５０μｍまでである。
【００１８】
[0014]  本開示のインプラントに有用な流体には、限定ではなく、水、塩化ナトリウム溶液、デキストロース、乳酸リンゲル液、血液、骨髄穿刺液、骨髄画分、リン酸緩衝生理食塩水、ＤＭＳＯ、酢酸、アセトン、ＤＭＥ、ＤＭＦ、ＭＴＢＥ、アセトニトリル、ブタノール、ブタノン、ｔ−ブチルアルコール、エタノール、ポリエチレングリコール、メタノール、クロロベンゼン、クロロホルム、トルエン、プロパノール、ペンタン、ヘプタン、エタノール、Ｃａｐｒｙｏｌ−９０（商標）、ジエチルエーテル、またはその組合わせが含まれる。成形可能なインプラントは、賦形剤、希釈剤、生分解性ポリマー、膨潤剤、増殖因子、抗生物質、可溶化剤、安定剤、増量剤、抗酸化剤または結合剤を含むこともできる。有用な結合剤または膨潤剤には、カルボキシメチルセルロース、アルギネート、キトサン、ヒドロキシプロピルセルロース、ヒドロキシプロピルメチルセルロース、ヒドロキシエチルメチルセルロース、ヒドロキシエチルセルロース、カルボポール、プロピレングリコール、ポリビニルアルコール、ゼラチン、またはその組合わせが含まれる。
【００１９】
[0015]  ある態様において、骨増殖を促進するために骨欠損部位またはその付近に適合するように構成された凍結乾燥インプラントを提供し、そのインプラントはインプラントの約０．１ｗｔ．％〜約１５ｗｔ．％の量の架橋した無細胞ブタコラーゲン、およびインプラントの約０．０１ｗｔ．％〜約９０ｗｔ．％の量のオキシステロールを含み、オキシステロールは約１００ｍｇ／ｃｃ〜約１．０ｇ／ｃｃの濃度をもつ。
【００２０】
[0016]  ある態様において、インプラントを作成する方法を提供し、その方法は流体をオキシステロール、すなわちインプラントの総重量を基準として約０．０１ｗｔ．％〜約９０ｗｔ．％の量のオキシステロール、およびインプラントの総重量を基準として約０．１ｗｔ．％〜約２０ｗｔ．％の量の無細胞組織マトリックスと混合することを含む。他の態様において、本方法はさらに、流体と混合したインプラントを凍結乾燥させて凍結乾燥インプラントを形成することを含み、その際、ある場合には無細胞組織マトリックスは無細胞ブタコラーゲンまたは無細胞ブタ架橋コラーゲンである。
【００２１】
[0017]  特定の態様において、この方法に用いる流体は、約３／４ｍＬから約１０ｍＬまでの量の水、塩化ナトリウム溶液、デキストロース、乳酸リンゲル液、リン酸緩衝生理食塩水（ＰＢＳ）、血液、骨髄穿刺液、骨髄画分、またはその組合わせである。他の態様において、本方法はさらに、インプラントの総重量を基準として約２ｗｔ．％から約４ｗｔ．％までの量のバインダーまたは膨張相材料を添加することを含む。ある側面において、バインダーまたは膨張相材料はカルボキシメチルセルロース、ペクチン、キトサン、またはその組合わせである。
【００２２】
[0018]  ある態様において、インプラントを作成するための方法はさらに、インプラントを凍結乾燥前に型に入れることを含む。この方法は、凍結乾燥インプラントの再水和を増強する造作、たとえばランダムまたは規定した形状の窪みまたは孔を付与することができる。他の側面において、インプラントを注射器に入れることができ、ある側面において、それをさらに真空密封パウチに入れることができる。他の側面において、凍結乾燥インプラントを真空密封パウチに入れることができる。
【００２３】
[0019]  ある態様において、処置の必要がある患者において骨欠損部を処置する方法を提供し、その方法は無細胞組織マトリックス中に均一に分散したオキシステロールを含むインプラントを骨欠損部またはその付近に移植することを含む。ある側面において、処置方法に用いるインプラントはさらに、インプラントの総重量を基準として約２ｗｔ．％から約４ｗｔ．％までの量のバインダーまたは膨張相材料を含む。
【００２４】
[0020]  種々の態様のさらに他の特徴および利点は一部は以下の記載中に述べられ、一部はその記載から明らかになり、あるいは種々の態様の実施によって学ぶことができる。種々の態様の目的および他の利点は、特にその記載および特許請求の範囲に指摘する要素および組合わせによって実現および達成されるであろう。
【図面の簡単な説明】
【００２５】
[0021]  一部において、前記態様の他の側面、特徴、有益性および利点は以下の記載、特許請求の範囲および添付の図面に関連して明らかになるであろう。
【図１】[0022]  図１は、２レベル後外側腰椎固定(two-level posterolateral lumbar spine fusion)を受けた手術直後に撮影したラットのＸ線写真を示す；その際、インプラントはＰｅｒｍａｃｏｌ（登録商標）、Ｏｘｙ１３３の１水和物、セラミックおよびカルボキシメチルセルロースを含有する展性ペーストであった。
【図２】[0023]  図２は、２レベル後外側腰椎固定を受けた手術の４週間後に撮影した同じラットのＸ線写真を示す；その際、インプラントはＰｅｒｍａｃｏｌ（登録商標）、Ｏｘｙ１３３の１水和物、セラミックおよびカルボキシメチルセルロースを含有する展性ペーストであった。
【図３】[0024]  図３は、２レベル後外側腰椎固定を受けた手術の８週間後に撮影した同じラットのＸ線写真を示す；その際、インプラントはＰｅｒｍａｃｏｌ（登録商標）、Ｏｘｙ１３３の１水和物、セラミックおよびカルボキシメチルセルロースを含有する展性ペーストであった。
【図４】[0025]  図４は、Ｏｘｙ１３３の１水和物を含むオキシステロールを含有しないインプラント材料を移植した対照グループのラットの組織スライドを示す。
【図５】[0026]  図５は、２レベル後外側腰椎固定を受けた同じラットの処置後８週目の組織スライド（たとえば、Ｈ＆Ｅ染色）を示す；その際、インプラントはＰｅｒｍａｃｏｌ（登録商標）、Ｏｘｙ１３３の１水和物、セラミックおよびカルボキシメチルセルロースを含有する展性ペーストであった。
【図６】[0027]  図６は、２レベル後外側腰椎固定を受けた同じラットの処置後８週目の組織スライド（たとえば、Ｈ＆Ｅ染色）を示す；その際、インプラントはＰｅｒｍａｃｏｌ（登録商標）、Ｏｘｙ１３３の１水和物、セラミックおよびカルボキシメチルセルロースを含有する展性ペーストであった。
【００２６】
[0028]  図は一定の比率で拡大縮小されたものではない可能性があることを理解すべきである。さらに、図中の対象物間の関係は一定の比率で拡大縮小されたものではない可能性があり、実際にサイズに関して逆の関係をもつ可能性がある。図は、示した各対象物の構造を理解および明瞭にすることを意図したものであり、よって構造体の特定の特徴を説明するために、ある特徴が誇張されている可能性がある。
【発明を実施するための形態】
【００２７】
[0029]  本明細書および特許請求の範囲の目的について、別に指示しない限り、本明細書および特許請求の範囲で用いる成分の量、物質のパーセントまたは割合、反応条件を表わすすべての数字、ならびに他の数値は、すべての場合、用語“約”で修飾されていると解釈すべきである。したがって、そうではないと指示しない限り、以下の本明細書および付随する特許請求の範囲で述べる数字パラメーターは、本出願によって得ようとする目的特性に応じて変動する可能性がある概数である。いずれにしろ、特許請求の範囲に対する均等物の主義の適用を限定するためではなく、それぞれの数字パラメーターは、少なくともレポートされた有意数字を考慮して、かつ通常の四捨五入法を適用することにより解釈されるべきである。
【００２８】
[0030]  本出願の広義の範囲を述べる数字範囲および他のパラメーターは概数であるにもかかわらず、具体例中に述べる数値は可能な限り厳密にレポートされている。ただし、数字は本来、それらのそれぞれの試験測定値にみられる標準偏差から必然的に生じる一定の誤差を含む。さらに、本明細書に開示するすべての範囲はそれに含まれるありとあらゆる部分範囲をそれに包含すると解釈すべきである。たとえば、“１〜１０”の範囲は、最小値１と最大値１０の間の（かつそれらを含む）ありとあらゆる部分範囲、すなわち１以上の最小値および１０以下の最大値をもつあらゆる部分範囲、たとえば５．５〜１０を含む。
【００２９】
定義
[0031]  本明細書および付随する特許請求の範囲で用いる単数形“a”、“an”および“the”は、明白かつ明解に１つの指示物に限定されない限り、複数表記を含むことを明記する。よって、たとえば、“インプラント”という表現は１、２、３またはそれ以上のインプラントを含む。
【００３０】
[0032]  本明細書中で用いる用語“生物活性薬剤”は、一般に、患者の生理的状態を変化させるいずれかの物質を表わすものとする。用語“生物活性薬剤”は、本明細書中で用語“療法薬”、“療法有効量”、“有効医薬成分(active pharmaceutical ingredient)”、“ＡＰＩ”、または“薬物”と互換性をもって使用できる。
【００３１】
[0033]  用語“生分解性(biodegradable)”は、ヒトの体内で酵素の作用により、加水分解作用により、および／または類似する他の機序により、経時的に分解する化合物または成分を含む。種々の態様において、“生分解性”には、細胞（たとえば、骨細胞）が成分に浸潤して欠損部の修復がなされるのに伴ってその成分が体内で破断または分解して無毒性成分になる可能性が含まれる。“生体侵食性(bioerodible)”とは、化合物または成分が、周囲組織中にある物質、体液との接触のため、あるいは細胞の作用により、少なくとも一部は経時的に侵食または分解されることを意味する。“生体吸収性(bioabsorbable)”とは、たとえば細胞または組織により、化合物または成分がヒトの体内で破断して吸収されることを意味する。“生体適合性(biocompatible)”は、化合物または成分が標的組織部位において実質的な組織刺激もしくは壊死を引き起こさないこと、および／または発癌性ではないことを意味する。
【００３２】
[0034]  本明細書中で用いる用語“アルキル”は、親アルカン、アルケンまたはアルキンの単一の炭素原子から１個の水素原子を除去することにより誘導される飽和または不飽和の、分枝鎖、直鎖または環状の一価炭化水素ラジカルを表わす。代表的なアルキル基には下記のものが含まれるが、それらに限定されない：メチル；エチル類、たとえばエタニル、エテニル、エチニル；プロピル類、たとえばプロパン−１−イル、プロパン−２−イル、シクロプロパン−１−イル、プロパ−ｌ−エン−１−イル、プロパ−ｌ−エン−２−イル、プロパ−２−エン−１−イル、シクロプロパ−ｌ−エン−１−イル；シクロプロパ−２−エン−１−イル、プロパ−ｌ−イン−１−イル、プロパ−２−イン−１−イルなど；ブチル類、たとえばブタン−１−イル、ブタン−２−イル、２−メチル−プロパン−１−イル、２−メチル−プロパン−２−イル、シクロブタン−１−イル、ブタ−ｌ−エン−１−イル、ブタ−ｌ−エン−２−イル、２−メチル−プロパ−ｌ−エン−１−イル、ブタ−２−エン−１−イル、ブタ−２−エン−２−イル、ブタ−１，３−ジエン−１−イル、ブタ−１，３−ジエン−２−イル、シクロブタ−ｌ−エン−１−イル、シクロブタ−ｌ−エン−３−イル、シクロブタ−１，３−ジエン−１−イル、ブタ−ｌ−イン−１−イル、ブタ−ｌ−イン−３−イル、ブタ−３−イン−１−イルなど；その他。特定の飽和レベルを表わしたい場合、後記に定義するように、命名法“アルケニル”および／または“アルキニル”を用いる。ある態様において、アルキル基は（Ｃｌ−Ｃ４０）アルキルである。ある態様において、アルキル基は（Ｃｌ−Ｃ６）アルキルである。
【００３３】
[0035]  本明細書中で用いる用語“アルカニル”は、親アルカンの単一の炭素原子から１個の水素原子を除去することにより誘導される飽和の、分枝鎖、直鎖または環状アルキルラジカルを表わす。代表的なアルカニル基には下記のものが含まれるが、それらに限定されない：メタニル；エタニル；プロパニル類、たとえばプロパン−１−イル、プロパン−２−イル（イソプロピル）、シクロプロパン−１−イルなど；ブチアニル類、たとえばブタン−１−イル、ブタン−２−イル（ｓｅｃ−ブチル）、２−メチル−プロパン−１−イル（イソブチル）、２−メチル−プロパン−２−イル（ｔ−ブチル），シクロブタン−１−イルなど；その他。ある態様において、アルカニル基は（Ｃｌ−Ｃ４０）アルカニルである。ある態様において、アルカニル基は（Ｃｌ−Ｃ６）アルカニルである。
【００３４】
[0036]  本明細書中で用いる用語“アルケニル”は、親アルケンの単一の炭素原子から１個の水素原子を除去することにより誘導される、少なくとも１つの炭素−炭素二重結合をもつ不飽和の、分枝鎖、直鎖または環状アルキルラジカルを表わす。このラジカルは、二重結合（単数または複数）についてｃｉｓまたはｔｒａｎｓコンホメーションのいずれであってもよい。代表的なアルケニル基には下記のものが含まれるが、それらに限定されない：エテニル；プロペニル類、たとえばプロパ−ｌ−エン−１−イル、プロパ−ｌ−エン−２−イル、プロパ−２−エン−１−イル、プロパ−２−エン−２−イル、シクロプロパ−ｌ−エン−１−イル、シクロプロパ−２−エン−１−イル；ブテニル類、たとえばブタ−ｌ−エン−１−イル、ブタ−ｌ−エン−２−イル、２−メチル−プロパ−ｌ−エン−１−イル、ブタ−２−エン−１−イル、ブタ−２−エン−１−イル、ブタ−２−エン−２−イル、ブタ−１，３−ジエン−１−イル、ブタ−１，３−ジエン−２−イル、シクロブタ−ｌ−エン−１−イル、シクロブタ−ｌ−エン−３−イル、シクロブタ−１，３−ジエン−１−イルなど；その他。ある態様において、アルケニル基は（Ｃ２−Ｃ４０）アルケニルである。ある態様において、アルケニル基は（Ｃ２−Ｃ６）アルケニルである。
【００３５】
[0037]  本明細書中で用いる用語“アルキニル”は、親アルキンの単一の炭素原子から１個の水素原子を除去することにより誘導される、少なくとも１つの炭素−炭素三重結合をもつ不飽和の、分枝鎖、直鎖または環状アルキルラジカルを表わす。代表的なアルキニル基には下記のものが含まれるが、それらに限定されない：エチニル；プロピニル類、たとえばプロパ−ｌ−イン−１−イル、プロパ−２−イン−１−イルなど；ブチニル類、たとえばブタ−ｌ−イン−１−イル、ブタ−３−イン−１−イルなど；その他。ある態様において、アルキニル基は（Ｃ２−Ｃ４０）アルキニルである。ある態様において、アルキニル基は（Ｃ２−Ｃ６）アルキニルである。
【００３６】
[0038]  本明細書中で用いる用語“アルキルジイル”は、親アルカン、アルケンまたはアルキンの２つの異なる炭素原子それぞれから１個の水素原子を除去することにより、あるいは親アルカン、アルケンまたはアルキンの単一炭素原子から２個の水素原子を除去することにより誘導される、飽和または不飽和の、分枝鎖、直鎖または環状の二価炭化水素ラジカルを表わす。２つの一価ラジカル中心またはそれぞれの原子価の二価ラジカル中心は、同一または異なる原子と結合を形成できる。代表的なアルキルジイルには下記のものが含まれるが、それらに限定されない：メタンジイル；エチルジイル類、たとえばエタン−１，１−ジイル、エタン−１，２−ジイル、エテン−１，１−ジイル、エテン−１，２−ジイル；プロピルジイル類、たとえばプロパン−１，１−ジイル、プロパン−１，２−ジイル、プロパン−２，２−ジイル、プロパン−１，３−ジイル、シクロプロパン−１、１−ジイル、シクロプロパン−１，２−ジイル、プロパ−ｌ−エン−１，１−ジイル、プロパ−ｌ−エン−１，２−ジイル、プロパ−２−エン−１，２−ジイル、プロパ−ｌ−エン−１，３−ジイル、シクロプロパ−ｌ−エン−１，２−ジイル、シクロプロパ−２−エン−１，２−ジイル、シクロプロパ−２−エン−１，１−ジイル、プロパ−ｌ−イン−１，３−ジイルなど；ブチルジイル類、たとえばブタン−１，１−ジイル、ブタン−１，２−ジイル、ブタン−１，３−ジイル、ブタン−１，４−ジイル、ブタン−２，２−ジイル、２−メチル−プロパン−１，１−ジイル、２−メチル−プロパン−１，２−ジイル、シクロブタン−１，１−ジイル、シクロブタン−１，２−ジイル、シクロブタン−１，３−ジイル、ブタ−ｌ−エン−１，１−ジイル、ブタ−ｌ−エン−１，２−ジイル、ブタ−ｌ−エン−１，３−ジイル、ブタ−ｌ−エン−１，４−ジイル、２−メチル−プロパ−１−エン−１，１−ジイル、２−メタニリデン−プロパン−１，１−ジイル、ブタ−１，３−ジエン−１，１−ジイル、ブタ−１，３−ジエン−ｌ，３−ジイル、シクロブタ−ｌ−エン−１，２−ジイル、シクロブタ−ｌ−エン−１，３−ジイル、シクロブタ−２−エン−１，２−ジイル、シクロブタ−ｌ，３−ジエン−１，２−ジイル、シクロブタ−ｌ，３−ジエン−１，３−ジイル、ブタ−ｌ−イン−１，３−ジイル、ブタ−ｌ−イン−１，４−ジイル、ブタ−ｌ，３−ジイン−１，４−ジイルなど；その他。特定の飽和レベルを表わしたい場合、命名法アルカニルジイル、アルケニルジイルおよび／またはアルキニルジイルを用いる。ある態様において、アルキルジイル基は（Ｃｌ−Ｃ４０）アルキルジイルである。ある態様において、アルキルジイル基は（Ｃｌ−Ｃ６）アルキルジイルである。同様に考慮されるのは、ラジカル中心が末端炭素にある飽和非環式アルカニルジイルラジカル、たとえばメタンジイル（メタノ）；エタン−１，２−ジイル（エタノ）；プロパン−１，３−ジイル（プロパノ）；ブタン−１，４−ジイル（ブタノ）などである（下記に定義するアルキレノ類とも呼ばれる）。
【００３７】
[0039]  本明細書中で用いる用語“アルキレノ”は、直鎖の親アルカン、アルケンまたはアルキンの２つの末端炭素原子それぞれから１個の水素原子を除去することにより誘導される、２つの末端一価ラジカル中心をもつ直鎖アルキルジイルラジカルを表わす。代表的なアルキレノ基には下記のものが含まれるが、それらに限定されない：メタノ；エチレノ類、たとえばエタノ、エテノ、エチノ；プロピレノ類、たとえばプロパノ、プロパ［１］エノ、プロパ［１，２］ジエノ、プロパ［１］イノなど；ブチレノ類、たとえばブタノ、ブタ［１］エノ、ブタ［２］エノ、ブタ［１，３］ジエノ、ブタ［１］イノ、ブタ［２］イノ、ブタ［１，３］ジイノなど；その他。特定の飽和レベルを表わしたい場合、命名法アルカノ、アルケノおよび／またはアルキノを用いる。ある態様において、アルキレノ基は（Ｃｌ−Ｃ４０）アルキレノである。ある態様において、アルキレノ基は（Ｃ  ｌ−Ｃ６）アルキレノである。
【００３８】
[0040]  本明細書中で用いる用語“ヘテロアルキル”、“ヘテロアルカニル”、“ヘテロアルケニル”、“ヘテロアルキニル”、“ヘテロアルキルジイル”および“ヘテロアルキレノ”は、それぞれ、１個以上の炭素原子がそれぞれ独立して同一または異なるヘテロ原子基で置き換えられたアルキル、アルカニル、アルケニル、アルキニル、アルキルジイルおよびアルキレノラジカルを表わす。これらのラジカルに含むことができる代表的なヘテロ原子基には下記のものが含まれるが、それらに限定されない：−Ｏ−、−Ｓ−、−Ｏ−Ｏ−、−Ｓ−Ｓ−、−Ｏ−Ｓ−、−ＮＲ’、＝Ｎ−Ｎ＝、−Ｎ＝Ｎ−、−Ｎ（Ｏ）Ｎ−、−Ｎ＝Ｎ−ＮＲ’−、−ＰＨ−、−Ｐ（Ｏ）２−、−Ｏ−Ｐ（Ｏ）２−、−ＳＨ２−、−Ｓ（Ｏ）２−、−ＳｎＨ２−など；これらにおいてＲ’はそれぞれ独立して、本明細書に定義するアルキル、アルカニル、アルケニル、アルキニル、アリール、アリールアリール、アリールアルキル、ヘテロアリール、ヘテロアリールアルキルまたはヘテロアリール−ヘテロアリールである。
【００３９】
[0041]  本明細書中で用いる用語“アリール”は、親芳香族環系の単一の炭素原子から１個の水素原子を除去することにより誘導される一価芳香族炭化水素ラジカルを表わす。代表的なアリール基には下記のものから誘導されるラジカルが含まれるが、それらに限定されない：アセアントリレン、アセナフチレン、アセフェナントリレン、アントラセン、アズレン、ベンゼン、クリセン(chrysene)、コロネン(coronene)、フルオランテン(fluoranthene)、フルオレン(fluorene)、ヘキサセン(hexacene)、ヘキサフェン(hexaphene)、ヘキシレン、ａｓ−インダセン、ｓ−インダセン、インダン、インデン、ナフタレン、オクタセン(octacene)、オクタフェン(octaphene)、オクタレン(octalene)、オバレン(ovalene)、ペンタ−２，４−ジエン、ペンタセン(pentacene)、ペンタレン(pentalene)、ペンタフェン(pentaphene)、ペリレン、フェナレン、フェナントレン、ピセン(picene)、プレイアデン(pleiadene)、ピレン、ピラントレン、ルビセン(rubicene)、トリフェニレン、トリナフタレンなど。ある態様において、アリール基は（Ｃ５−Ｃ１４）アリールまたは（Ｃ５−Ｃ１０）アリールである。あるアリールはフェニルおよびナフチルである。
【００４０】
[0042]  本明細書中で用いる用語“アリールジイル”は、親芳香族環系の２つの異なる炭素原子それぞれから１個の水素原子を除去することにより、あるいは親芳香族環系の単一炭素原子から２個の水素原子を除去することにより誘導される、二価芳香族炭化水素ラジカルを表わす。２つの一価ラジカル中心またはそれぞれの原子価の二価中心は、同一または異なる原子（単数または複数）と結合を形成できる。代表的なアリールジイル基には下記のものから誘導される二価ラジカルが含まれるが、それらに限定されない：アセアントリレン、アセナフチレン、アセフェナントリレン、アントラセン、アズレン、ベンゼン、クリセン、コロネン、フルオランテン、フルオリン(fluorine)、ヘキサセン、ヘキサフェン、ヘキシレン、ａｓ−インダセン、ｓ−インダセン、インダン、インデン、ナフタレン、オクタセン、オクタフェン、オクタレン、オバレン、ペンタ−２，４−ジエン、ペンタセン、ペンタレン、ペンタフェン、ペリレン、フェナレン、フェナントレン、ピセン、プレイアデン、ピレン、ピラントレン、ルビセン、トリフェニレン、トリナフタレンなど。ある態様において、アリールジイル基は（Ｃ５−Ｃ１４）アリールジイルまたは（Ｃ５−Ｃ１０）アリールジイルである。たとえば、あるアリールジイル基は、ベンゼンおよびナフタレンから誘導される二価ラジカル、特にフェナ−１，４−ジイル、ナフタ−２，６−ジイルおよびナフタ−２，７−ジイルである。
【００４１】
[0043]  本明細書中で用いる用語“アリーレノ(aryleno)”は、親芳香族環系の２つの隣接炭素原子それぞれから１個の水素原子を除去することにより誘導される、２つの隣接一価ラジカル中心をもつ二価架橋ラジカルを表わす。アリーレノ架橋ラジカル、たとえばベンゼノが、親芳香族環系、たとえばベンゼンに結合すると、縮合芳香族環系、たとえばナフタレンが得られる。架橋は、それと得られる縮合環系との結合と調和する最大数の非累積(non-cumulative)二重結合をもつと仮定される。炭素原子の重複計数を避けるために、アリーレノ置換基が別個の(alternative)置換基を含む構造上の２つの隣接置換基を合わせて形成される場合は、アリーレノ架橋の炭素原子がその構造の架橋炭素原子の代わりになる。一例として、下記の構造について考える：
【００４２】
【化３】
2019022650.tif 000004
【００４３】
[0044]  式中のＲ１は、単独の場合は水素であり、Ｒ２と一緒になった場合は（Ｃ５−Ｃ１４）アリーレノであり；Ｒ２は、単独の場合は水素であり、Ｒ１と一緒になった場合は（Ｃ５−Ｃ１４）アリーレノである。
【００４４】
[0045]  Ｒ１およびＲ２がそれぞれ水素である場合、得られる化合物はベンゼンである。Ｒ１がＲ２と一緒になってＣ６アリーレノ（ベンゼノ）である場合、得られる化合物はナフタレンである。Ｒ１がＲ２と一緒になってＣ１０アリーレノ（ナフタレノ）である場合、得られる化合物はアントラセンまたはフェナントレンである。代表的なアリーレノ基には下記のものが含まれるが、それらに限定されない：アセアントリレノ、アセナフチレノ、アセフェナントリレノ、アントラセノ、アズレノ、ベンゼノ（ベンゾ）、クリセノ、コロネノ、フルオランテノ、フルオレノ、ヘキサセノ、ヘキサフェノ、ヘキシレノ、ａｓ−インダセノ、ｓ−インダセノ、インデノ、ナフタレン（ナフト）、オクタセノ、オクタフェノ、オクタレノ、オバレノ、ペンタ−２，４−ジエノ、ペンタセノ、ペンタレノ、ペンタフェノ、ペリレノ、フェナレノ、フェナントレノ、ピセノ(piceno)、プライアデノ(pleiadeno)、ピレノ、ピラントレノ、ルビセノ、トリフェニレノ、トリナフタレノなど。特定の結合性を表わしたい場合、関与する架橋炭素原子（アリーレノ架橋の）を角かっこ内に表記する；たとえば、［ｌ，２］ベンゼノ（［ｌ，２］ベンゾ）、［ｌ，２］ナフタレノ、［２，３］ナフタレノなど。よって、上記の例において、Ｒ１がＲ２と一緒に［２，３］ナフタレノである場合、得られる化合物はアントラセンである。Ｒ１がＲ２と一緒になって［ｌ，２］ナフタレノである場合、得られる化合物はフェナントレンである。一態様において、アリーレノ基は（Ｃ５−Ｃ１４）または（Ｃ５−Ｃ１０）である。
【００４５】
[0046]  本明細書中で用いる用語“アリールアリール”は、２以上の同一または非同一の親芳香族環系が単結合によって互いに直接連結した環系の単一炭素原子から１個の水素原子を除去することにより誘導される一価炭化水素ラジカルを表わす；その際、そのような直接的な環ジャンクションの数は関与する親芳香族環系の数より１少ない。代表的なアリールアリール基には下記のものが含まれるが、それらに限定されない：ビフェニル、トリフェニル、フェニル−ナフチル、ビナフチル、ビフェニル−ナフチルなど。アリールアリール基を構成する炭素原子の数を特定した場合、その数はそれぞれの親芳香族環を構成する炭素原子の数を表わす。たとえば、（Ｃｌ−Ｃ１４）アリールアリールは、それぞれの親芳香族環が５から１４個までの炭素を含むアリールアリール基、たとえばビフェニル、トリフェニル、ビナフチル、フェニルナフチルなどである。ある例において、アリールアリール基のそれぞれの親芳香族環系は、独立して（Ｃ５−Ｃ１４）芳香族または（Ｃ１−Ｃ１０）芳香族である。あるものは、すべての親芳香族環系が同一であるアリールアリール基、たとえばビフェニル、トリフェニル、ビナフチル、トリナフチルなどである。
【００４６】
[0047]  本明細書中で用いる用語“ビアリール”は、２つの同一の親芳香族系が単結合によって互いに直接連結したアリールアリールラジカルを表わす。代表的なビアリール基にはビフェニル、ビナフチル、ビアントラシルなどが含まれるが、これらに限定されない。ある例において、芳香族環系は（Ｃ５−Ｃ１４）芳香族環または（Ｃ５−Ｃ１０）芳香族環である。一態様において、ビアリール基はビフェニルである。
【００４７】
[0048]  本明細書中で用いる用語“アリールアルキル”は、炭素原子（一般に末端またはｓｐａ炭素原子）に結合している水素原子のうちの１つがアリールラジカルで置き換えられた非環式アルキルラジカルを表わす。代表的なアリールアルキル基には下記のものが含まれるが、それらに限定されない：ベンジル、２−フェニルエタン−１−イル、２−フェニルエテン−１−イル、ナフチルメチル、２−ナフチルエタン−１−イル、２−ナフチルエテン−１−イル、ナフトベンジル、２−ナフトフェニルエタン−１−イルなど。特定のアルキル部分を表わしたい場合、命名法アリールアルカニル、アリールアルケニルおよび／またはアリールアルキニルを用いる。ある態様において、アリールアルキル基は（Ｃ６−Ｃ４０）アリールアルキルであり、たとえばアリールアルキル基のアルカニル、アルケニルまたはアルキニル部分は（Ｃｌ−Ｃ２６）であり、アリール部分は（Ｃ５−Ｃ１４）である。ある態様において、アリールアルキル基は（Ｃ６−Ｃ１３）であり、たとえばアリールアルキル基のアルカニル、アルケニルまたはアルキニル部分は（Ｃｌ−Ｃ３）であり、アリール部分は（Ｃ５−Ｃ１０）である。
【００４８】
[0049]  本明細書中で用いる用語“ヘテロアリール”は、親ヘテロ芳香族環系の単一原子から１個の水素原子を除去することにより誘導される一価ヘテロ芳香族ラジカルを表わす。代表的なヘテロアリール基には下記のものから誘導されるラジカルが含まれるが、それらに限定されない：アクリジン、アルシンドール(arsindole)、カルバゾール、β−カルボリン、クロマン、クロメン、シンノリン、フラン、イミダゾール、インダゾール、インドール、インドリン、インドリジン、イソベンゾフラン、イソクロメン、イソインドール、イソインドリン、イソキノリン、イソチアゾール、イソオキサゾール、ナフチリジン、オキサジアゾール、オキサゾール、ペリミジン(perimidine)、フェナントリジン、フェナントロリン、フェナジン、フタラジン、プテリジン、プリン、ピラン、ピラジン、ピラゾール、ピリダジン、ピリジン、ピリミジン、ピロール、ピロリジン、キナゾリン、キノリン、キノリジン、キノキサリン、テトラゾール、チアジアゾール、チアゾール、チオフェン、トリアゾール、キサンテンなど。ある態様において、ヘテロアリール基は５〜１４員ヘテロアリールであり、５〜１０員ヘテロアリールを含む。あるヘテロアリールラジカルは、いずれかの環ヘテロ原子が窒素である親ヘテロ芳香族環系、たとえばイミダゾール、インドール、インダゾール、イソインドール、ナフチリジン、プテリジン、イソキノリン、フタラジン、プリン、ピラゾール、ピラジン、ピリダジン、ピリジン、ピロール、キナゾリン、キノリンなどから誘導されるものである。
【００４９】
[0050]  用語“ヘテロアリールジイル”は、親ヘテロ芳香族環系の２つの異なる原子それぞれから１個の水素原子を除去することにより、あるいは親ヘテロ芳香族環系の単一原子から２個の水素原子を除去することにより誘導される、二価ヘテロ芳香族ラジカルを表わす。２つの一価ラジカル中心またはそれぞれの原子価の単一の二価中心は、同一または異なる原子（単数または複数）と結合を形成できる。代表的なヘテロアリールジイル基には下記のものから誘導される二価ラジカルが含まれるが、それらに限定されない：アクリジン、アルシンドール、カルバゾール、β−カルボリン、クロマン、クロメン、シンノリン、フラン、イミダゾール、インダゾール、インドール、インドリン、インドリジン、イソベンゾフラン、イソクロメン、イソインドール、イソインドリン、イソキノリン、イソチアゾール、イソオキサゾール、ナフチリジン、オキサジアゾール、オキサゾール、ペリミジン、フェナントリジン、フェナントロリン、フェナジン、フタラジン、プテリジン、プリン、ピラン、ピラジン、ピラゾール、ピリダジン、ピリジン、ピリミジン、ピロール、ピロリジン、キナゾリン、キノリン、キノリジン、キノキサリン、テトラゾール、チアジアゾール、チアゾール、チオフェン、トリアゾール、キサンテンなど。ある態様において、ヘテロアリールジイル基は５〜１４員ヘテロアリールジイルまたは５〜１０員ヘテロアリールジイルである。あるヘテロアリールジイル基は、いずれかの環ヘテロ原子が窒素である親ヘテロ芳香族環系、たとえばイミダゾール、インドール、インダゾール、イソインドール、ナフチリジン、プテリジン、イソキノリン、フタラジン、プリン、ピラゾール、ピラジン、ピリダジン、ピリジン、ピロール、キナゾリン、キノリンなどから誘導される二価ラジカルである。
【００５０】
[0051]  本明細書中で用いる用語“ヘテロアリーレノ”は、親ヘテロ芳香族環系の２つの隣接原子それぞれから１個の水素原子を除去することにより誘導される２つの隣接する一価ラジカル中心をもつ二価架橋ラジカルを表わす。ヘテロアリーレノ架橋ラジカル、たとえばピリジノを、親芳香族環系、たとえばベンゼンに結合させると、縮合ヘテロ芳香族環系、たとえばキノリンが得られる。架橋は、得られる縮合環系へのそれの結合と調和する最大数の非累積二重結合をもつと仮定される。環原子の重複計数を避けるために、ヘテロアリーレノ置換基が別個の置換基を含む構造上の２つの隣接置換基を合わせて形成される場合は、ヘテロアリーレノ架橋の環原子がその構造の架橋環原子の代わりになる。一例として、下記の構造について考える：
【００５１】
【化４】
2019022650.tif 000005
【００５２】
式中のＲ１は、単独の場合は水素であり、Ｒ２と一緒になった場合は５〜１４員ヘテロアリーレノであり；Ｒ２は、単独の場合は水素であり、Ｒ１と一緒になった場合は５〜１４員ヘテロアリーレノである。
【００５３】
[0052]  Ｒ１およびＲ２がそれぞれ水素である場合、得られる化合物はベンゼンである。Ｒ１がＲ２と一緒になって６員ヘテロアリーレノ（ピリジノ）である場合、得られる化合物はイソキノリン、キノリンまたはキノリジンである。Ｒ１がＲ２と一緒になって１０員ヘテロアリーレノ（たとえば、イソキノリン）である場合、得られる化合物は、たとえばアクリジンまたはフェナントリジンである。代表的なヘテロアリーレノ基には下記のものが含まれるが、それらに限定されない：アクリジノ、カルバゾロ、β−カルボリノ、クロメノ、シンノリノ、フラン、イミダゾロ、インダゾレノ、インドレノ、インドリジノ、イソベンゾフラノ、イソクロメノ、イソインドレノ、イソキノリノ、イソチアゾレノ、イソオキサゾレノ、ナフチリジノ、オキサジアゾレノ、オキサゾレノ、ピリミジノ、フェナントリジノ、フェナントロリノ、フェナジノ、フタラジノ、プテリジノ、プリノ、ピラノ、ピラジノ、ピラゾレノ、ピリダジノ、ピリジノ、ピリミジノ、ピロレノ、ピロリジノ、キナゾリノ、キノリノ、キノリジノ、キノキサリノ、テトラゾレノ、チアジアゾレノ、チアゾレノ、チオフェノ、トリアゾレノ、キサンテノなど。特定の結合性を表わしたい場合、関与する架橋原子（ヘテロアリーレノ架橋の）を角かっこ内に表記する；たとえば、［ｌ，２］ピリジノ、［２，３］ピリジノ、［３，４］ピリジノなど。よって、前記の例において、Ｒ１がＲ２と一緒になって［ｌ，２］ピリジノである場合、得られる化合物はキノリジンである。Ｒ１がＲ２と一緒になって［２，３］ピリジノである場合、得られる化合物はキノリンである。Ｒ１がＲ２と一緒になって［３，４］ピリジノである場合、得られる化合物はイソキノリンである。ある態様において、ヘテロアリーレノ基は５〜１４員ヘテロアリーレノまたは５〜１０員ヘテロアリーレノである。あるヘテロアリーレノラジカルは、いずれかの環ヘテロ原子が窒素である親ヘテロ芳香族環系から誘導されるもの、たとえばイミダゾロ、インドロ、インダゾロ、イソインドロ、ナフチリジノ、プテリジノ、イソキノリノ、フタラジノ、プリノ、ピラゾロ、ピラジノ、ピリダジノ、ピンドモ(pyndmo)、ピロロ、キナゾリノ、キノリノなどである。
【００５４】
[0053]  本明細書中で用いる用語“ヘテロアリール−ヘテロアリール”は、２以上の同一または非同一の親ヘテロ芳香族環系が単結合によって互いに直接連結した環系の単一原子から１個の水素原子を除去することにより誘導される一価ヘテロ芳香族ラジカルを表わす；その際、そのような直接的な環ジャンクションの数は関与する親芳香族環系の数より１少ない。代表的なヘテロアリール−ヘテロアリール基にはビピリジル、トリピリジル、ピリジルプリニル、ビプリニルなどが含まれるが、これらに限定されない。環原子の数を特定した場合、その数はそれぞれの親ヘテロ芳香族環系を構成する原子の数を表わす。たとえば、５〜１４員ヘテロアリール−ヘテロアリールはそれぞれの親ヘテロ芳香族環系が５個から１４個までの原子を含むヘテロアリール−ヘテロアリール基、たとえばビピリジル、トリピリジルなどである。ある態様において、それぞれの親ヘテロ芳香族環系は独立して５〜１４員ヘテロ芳香族、他の態様においては５〜１０員ヘテロ芳香族である。すべての親ヘテロ芳香族環系が同一であるヘテロアリール−ヘテロアリール基もある。あるヘテロアリール−ヘテロアリールラジカルは、それぞれのヘテロアリール基が、いずれかの環ヘテロ原子が窒素である親ヘテロ芳香族環系、たとえばイミダゾール、インドール、インダゾール、イソインドール、ナフチリジン、プテリジン、イソキノリン、フタラジン、プリン、ピラゾール、ピラジン、ピリダジン、ピリジン、ピロール、キナゾリン、キノリンなどから誘導されるものである。
【００５５】
[0054]  本明細書中で用いる用語“ビヘテロアリール”は、単結合により互いに直接結合した２つの同一の親ヘテロ芳香族環系をもつヘテロアリール-ヘテロアリールラジカルを表わす。代表的なビヘテロアリール基にはビピリジル、ビプリニル、ビキノリニルなどが含まれるが、これらに限定されない。ある態様において、ヘテロ芳香族環系は５〜１４員ヘテロ芳香族環または５〜１０員ヘテロ芳香族環である。あるビヘテロアリールラジカルは、ヘテロアリール基が、いずれかの環ヘテロ原子が窒素である親ヘテロ芳香族環系から誘導されるもの、たとえばビイミダゾリル、ビインドリル、ビインダゾリル、ビイソインドリル、ビナフチリジニル、ビプテリジニル、ビイソキノリニル、ビフタラジニル、ビプリニル、ビピラゾリル、ビピラジニル、ビピリダジニル、ビピリジニル、ビピロリル、ビキナゾリニル、ビキノリニルなどである。
【００５６】
[0055]  本明細書中で用いる用語“ヘテロアリールアルキル”は、炭素原子、一般に末端またはｓｐ２炭素原子に結合した水素原子のうちの１つがヘテロアリールラジカルで置き換えられた非環式アルキルラジカルを表わす。特定のアルキル部分を表わしたい場合、命名法ヘテロアリールアルカニル、ヘテロアリールアルケニルおよび／またはヘテロリルアルキニルを用いる。ある態様において、ヘテロアリールアルキル基は６〜２０員ヘテロアリールアルキルであり、たとえばヘテロアリールアルキルのアルカニル、アルケニルまたはアルキニル部分は１〜６員であり、ヘテロアリール部分は５〜１４員ヘテロアリールである。ある態様において、ヘテロアリールアルキルは６〜１３員ヘテロアリールアルキルであり、たとえばアルカニル、アルケニルまたはアルキニル部分は１〜３員であり、ヘテロアリール部分は５〜１０員ヘテロアリールである。
【００５７】
[0056]  本明細書中で用いる用語“置換された”は、１個以上の水素原子が独立して同一または異なる置換基（単数または複数）で置き換えられたラジカルを表わす。代表的な置換基には下記のものが含まれるが、それらに限定されない：−Ｘ、−Ｒ、−Ｏ−、＝Ｏ、−ＯＲ、−Ｏ−ＯＲ、−ＳＲ、−Ｓ−、＝Ｓ、−ＮＲＲ、＝ＮＲ、ペルハロ（Ｃｌ−Ｃ６）アルキル、−ＣＸ３、−ＣＦ３、−ＣＮ、−ＯＣＮ、−ＳＣＮ、−ＮＣＯ、−ＮＣＳ、−ＮＯ、−ＮＯ２、＝Ｎ２、−Ｎ３、−Ｓ（Ｏ）２Ｏ−、−Ｓ（Ｏ）２ＯＨ、−Ｓ（Ｏ）２Ｒ、−Ｃ（Ｏ）Ｒ、−Ｃ（Ｏ）Ｘ、−Ｃ（Ｓ）Ｒ、−Ｃ（Ｓ）Ｘ、−Ｃ（Ｏ）ＯＲ、−Ｃ（Ｏ）Ｏ−、−Ｃ（Ｓ）ＯＲ、−Ｃ（Ｏ）ＳＲ、−Ｃ（Ｓ）ＳＲ、−Ｃ（Ｏ）ＮＲＲ、−Ｃ（Ｓ）ＮＲＲおよび−Ｃ（ＮＲ）ＮＲＲ；これらにおいて、Ｘはそれぞれ独立してハロゲン（たとえば、−Ｆまたは−Ｃｌ）であり、Ｒはそれぞれ独立して、水素、本明細書に定義するアルキル、アルカニル、アルケニル、アルカニル、アリール、アリールアルキル、アリールアリール、ヘテロアリール、ヘテロアリールアルキルまたはヘテロアリール−ヘテロアリールである。いずれか特定の基を置換する実際の置換基は置換される基の素姓に依存するであろう。
【００５８】
[0057]  本明細書中で用いる用語“溶媒和物”は、本開示の化合物１分子以上を１分子以上の溶媒と共に含む凝集体を表わす。溶媒は水であってもよく、その場合は溶媒和物は水和物である。あるいは、溶媒は有機溶媒であってもよい。よって、本開示の化合物は、１水和物、２水和物、ヘミ水和物、セスキ水和物、３水和物、４水和物などを含めた水和物として、および対応する溶媒和形態として存在してもよい。本開示の化合物は真の溶媒和物であってもよく、一方で他の場合には本開示の化合物は偶然存在する(adventitious)水、または水と偶然存在するある溶媒との混合物を保持するにすぎなくてもよい。
【００５９】
[0058]  本明細書中で用いる用語“オキシステロール”には、１以上の酸化形コレステロールが含まれるものとする。本明細書に記載するオキシステロールは、独立してまたは総体的に、患者において骨増殖活性である；WO 2013169399 Alに記載：それの全体を本明細書に援用する。
【００６０】
[0059]  オキシステロールは医薬的に許容できる塩の状態であってもよい。医薬的に許容できる可能性がある塩の若干例には、化合物の毒性を実質的に増大させない塩を形成する酸および塩基の塩類、たとえばアルカリ金属、たとえばマグネシウム、カリウム、およびアンモニウムの塩類、無機酸、たとえば塩酸、ヨウ化水素酸、臭化水素酸、リン酸、メタリン酸、硝酸塩および硫酸の塩類、ならびに有機酸、たとえば酒石酸、酢酸、クエン酸、リンゴ酸、安息香酸、グリコール酸、グルコン酸、グロン酸、コハク酸、アリールスルホン酸、たとえばｐ−トルエンスルホン酸の塩類などが含まれる。
【００６１】
[0060]  オキシステロールの医薬的に許容できる塩類には、医薬的に許容できる無毒性の塩基または酸（無機または有機の塩基、無機または有機の酸、ならびに脂肪酸を含む）から製造される塩類が含まれる。無機塩基から誘導される塩類には、アルミニウム、アンモニウム、カルシウム、銅、第二鉄、第一鉄、リチウム、マグネシウム、第二マンガン、第一マンガン、カリウム、ナトリウム、亜鉛などの塩類が含まれる。医薬的に許容できる有機無毒性塩基から誘導される塩類には、第一級、第二級および第三級アミン、天然の置換アミンを含めた置換アミン、環状アミン、および塩基性イオン交換樹脂、たとえば下記のものの塩類が含まれる：アルギニン、ベタイン、カフェイン、コリン、Ｎ，Ｎ’−ジベンジルエチレンジアミン、ジエチルアミン、２−ジエチルアミノエタノール、２−ジメチルアミノエタノール、エタノールアミン、エチレンジアミン、Ｎ−エチル−モルホリン、Ｎ−エチルピペリジン、グルカミン、グルコサミン、ヒスチジン、ヒドラバミン、イソプロピルアミン、リジン、メチルグルカミン、モルホリン、ピペラジン、ピペリジン、ポリアミン樹脂、プロカイン、プリン類、テオブロミン、トリエチルアミン、トリメチルアミン、トリプロピルアミン、トロメタミンなど。本出願の化合物が塩基性である場合、塩類は医薬的に許容できる無毒性酸（無機酸および有機酸を含む）から製造できる。そのような酸には、酢酸、ベンゼンスルホン酸、安息香酸、カンファースルホン酸、クエン酸、エタンスルホン酸、ギ酸、フマル酸、グルコン酸、グルタミン酸、臭化水素酸、塩酸、イセチオン酸、乳酸、マレイン酸、リンゴ酸、マンデル酸、メタンスルホン酸、マロン酸、ムチン酸、硝酸、パモ酸、パントテン酸、リン酸、プロピオン酸、コハク酸、硫酸、酒石酸、ｐ−トルエンスルホン酸、トリフルオロ酢酸などが含まれる。脂肪酸塩、たとえば２個より多い炭素原子、８個より多い炭素原子、１６個より多い炭素原子をもつ脂肪酸、たとえば酪酸、カプロン酸、カプリル酸、カプリン酸、ラウリン酸、ミスチル酸、パルミチン酸、ステアリン酸、アラキジン酸の塩なども使用できる。
【００６２】
[0061]  ある態様において、オキシステロールの溶解性を低下させて制御放出デポー効果を得るのを補助するために、オキシステロールを遊離塩基として用い、あるいは比較的低い溶解性をもつ塩の状態で用いる。たとえば、本出願は不溶性塩、たとえば脂肪酸塩を使用できる。代表的な脂肪酸塩にはオレイン酸、リノール酸の塩類、または炭素８〜２０個の溶解性をもつ脂肪酸の塩、たとえば、パルミエートまたはステアリン酸塩が含まれる。
【００６３】
[0062]  本明細書中で用いる用語“生物活性”組成物または“医薬”組成物は互換性をもって使用できる。両方の用語とも、対象に投与できる組成物を表わす。生物活性組成物または医薬組成物は、本明細書中で時には本開示の“医薬組成物”または“生物活性組成物”と呼ばれる。時には、対象へのこの化合物の投与（たとえば、インプラント中において対象に化合物を接触させる、化合物を注射する、化合物を投与する、など）に関して“Ｏｘｙ１３３の投与”という句を本明細書中で用いる。そのような使用のための化合物は一般にオキシステロール（たとえば、Ｏｘｙ１３３）を含む医薬組成物または生物活性組成物の形態であると解釈すべきである。
【００６４】
[0063]  “療法有効量”または“有効量”は、投与した際にオキシステロール（たとえば、Ｏｘｙ１３３）が生物活性の変化、たとえば骨増殖の増強などをもたらすものである。患者に投与する量は、薬物の投与薬物動態特性、投与経路、患者の状態および特徴（性別、年齢、体重、健康状態、体格など）、ならびに症状の程度、併用処置、処置の頻度、および希望する効果を含めた多様な要因に応じて、単回量または多数回量であってよい。ある態様において、配合物は即時放出用にデザインされる。他の態様において、配合物は持続放出用にデザインされる。他の態様において、配合物は１以上の即時放出表面または１以上の持続放出表面を含む。
【００６５】
[0064]  “デポー剤”にはカプセル剤、マイクロスフェア、マイクロ粒子、マイクロカプセル、マイクロファイバー粒子、ナノスフェア、ナノ粒子、コーティング、マトリックス、ウェハー、ピル、ペレット、エマルジョン、リポソーム、ミセル、ゲル、もしくは他の医薬送達組成物、またはその組合わせが含まれるが、これらに限定されない。デポー剤に適した材料は、理想的には医薬的に許容できる生分解性および／またはいずれかの生体吸収性材料であって、好ましくはＦＤＡ承認済みのものまたはＧＲＡＳ材料である。これらの材料はポリマーもしくは非ポリマー、および合成物もしくは天然物、またはその組合わせであってもよい。ある態様において、マトリックスは生分解性デポー剤であってもよい。
【００６６】
[0065]  本明細書中で用いる用語“移植可能”は、哺乳動物体内に配置できる可能性をもつ生体適合性デバイス（たとえば、インプラント）を表わす。本明細書中で用いる“移植可能なデバイス”という表現および同様な移入物(import)の表現は、外科処置、注射、または他の適切な手段で移植でき、それの物理的存在または機械的特性によりそれの主な機能が達成される物体を表わす。
【００６７】
[0066]  “局所”送達には、１種類以上の薬物を、組織、たとえば骨小腔(bone cavity)内またはその近辺（たとえば、約０．１ｃｍ以内、または多くの場合、約１０ｃｍ以内）に滞在させる送達が含まれる。たとえば、インプラントから局所送達されるオキシステロール量は、たとえば経口投与量または注射量より１０％、２０％、３０％、４０％、５０％、６０％、７０％、８０％、９０％、９５％、９９％、９９．９％または９９．９９９％少なくてよい。
【００６８】
[0067]  用語“哺乳動物”は、分類学上の類“哺乳類”に属する生物を表わし、ヒト、他の霊長類、たとえばサル、チンパンジー、類人猿、オランウータンおよびサル、ラット、マウス、ウサギ、ネコ、イヌ、ブタ、ウシ、ウマなどが含まれるが、これらに限定されない。
【００６９】
[0068]  用語“粒子”は、規則的、不規則またはランダムな幾何学的形状をもつあらゆる形状、サイズ、厚さおよび構造の物体の断片、たとえば繊維、糸、細いストリップ、薄いシート、クリップ、破片(shard)などを表わす。粒子の製造に際してある程度の寸法変動が起き、そのような寸法変動を示す粒子が本出願の範囲に含まれることを理解すべきである。たとえば、無機質粒子（たとえば、セラミック）は約０．５ｍｍから約１．５ｍｍまでであってもよい。ある態様において、無機質粒子は約０．２ｍｍから約０．５ｍｍまでであってもよい。
【００７０】
[0069]  ある態様において、医療用デバイスはマトリックスを含む。本出願の“マトリックス”は、骨および／または軟骨の修復、再生、および／または増強のための足場として利用される。一般に、マトリックスは細胞遊走のための足場として作用する相互連絡した細孔の３−Ｄマトリックスを提供する。マトリックスの形態が細胞遊走をガイドし、細胞はマトリックスの内部または上へそれぞれ遊走することができる。細胞は次いで増殖して新たな組織を合成し、骨および／または軟骨を形成することができる。ある態様において、マトリックスは吸収性（resorbable）であり、マトリックス全体に均一に分布したコラーゲンおよびセラミック粒子およびオキシステロールを含む。
【００７１】
[0070]  ある態様において、マトリックスは展性、凝集性、流動性であってもよく、および／またはいかなる形状にも成形できる。用語“展性(malleable)”には、圧力を加えることによってマトリックスが第１形状から第２形状に変換できることが含まれる。
【００７２】
[0071]  本明細書中で用いる用語“凝集性(cohesive)”は、マトリックスが動いた際にも単一の結合したマスを維持する傾向をもつことを意味し、これには引き延ばした際に実質的に破断することなく伸長する能力を示すことが含まれる。凝集性マトリックスの例には、たとえばパテが含まれる。
【００７３】
[0072]  用語“成形可能(moldable)”には、マトリックスを手または機械により付形できること、または標的組織部位（たとえば、骨欠損部、骨折部、または空隙）に注入して多様な構造にできることが含まれる。ある態様において、マトリックスをシート、ブロック、リング、支柱(strut)、プレート、ディスク、コーン、ピン、スクリュー、チューブ、歯、骨、骨の一部、くさび、またはスレッドシリンダーなど、およびより複雑な幾何学的構造体に形成できる。
【００７４】
[0073]  オキシステロールは“骨形成性(osteogenic)”であることができ、それは新たな骨組織の内殖(ingrowth)を増強または促進することができる。
[0074]  用語“無細胞組織マトリックス”（“ＡＴＭ”）は、広範なコラーゲン含有組織のいずれかから、すべてまたは実質的にすべての生細胞、ならびに多くの場合、すべての検出可能な死細胞、細胞内成分、および／または死細胞もしくは死につつある細胞により発生した細胞残屑を除去することにより調製される、組織由来の構造体を表わす。本明細書中で用いる“無細胞マトリックス”は、下記のマトリックスである：（ａ）広範なコラーゲンベースの組織のいずれかから調製される；（ｂ）無細胞である；および（ｃ）それが調製された天然の組織または臓器が保有していた生物学的および構造的な機能を保持している。
【００７５】
[0075]  用語“脱細胞する(decellularize)”は、そのような組織を移植した際にそれが有害な免疫応答を引き起こさないように、組織中の天然の細胞および細胞材料を除去または十分に低減するプロセスを表わす。用語“無細胞(acellular)”は、細胞および細胞材料が有害な免疫応答を引き起こさないほど十分に低減した組織を表わすものとする。
【００７６】
[0076]  本明細書中で用いる, “凍結乾燥する”または“凍結乾燥”は、氷または他の凍結溶媒が融解することなく急速に昇華するように、材料を凍結状態できわめて低い圧力で（たとえば、高真空において）乾燥させることを伴う。凍結乾燥のための方法および装置は当技術分野で周知である(参照：たとえば、“Freeze-Drying/Lyophilization Of Pharmaceutical and Biological Products,” Third Edition, Louis Rey and Joan C. May, Informa Healthcare, 2010)。凍結乾燥の工程はいずれか適切な方法で、いずれか適切な装置を用いて実施できる。
【００７７】
[0077]  以下のセクション表題は限定すべきではなく、他のセクション表題と互換性をもつことができる。
オキシステロール類
[0078]  オキシステロールを含有するインプラントならびにそれらのインプラントを調製および使用する方法を提供する。再水和すると、インプラントを骨欠損部内に容易に適合するように形成できる。ある態様において、インプラントは無細胞ブタコラーゲン（架橋していてもよく、架橋していなくてもよい）、骨材、および骨形成剤、たとえばオキシステロールを含有する。さらに、バインダーまたは膨張相材料、たとえばカルボキシメチルセルロース、アルギネート、ペクチンまたはキトサンをも含有することができる成形可能なインプラントを提供する。一側面において、本出願は、無細胞ブタコラーゲン、骨材、およびオキシステロールを含む有効薬剤の組合わせを含有する成形可能なインプラントを含む、移植可能な骨形成性医療材料に関する。
【００７８】
[0079]  ある態様において、展性インプラントは無機質または同種移植材料を含有する堅牢なインプラントであって、なおかつ結合し、凝集性であることができる。ある態様において、骨増殖を促進するために骨欠損部またはその付近に適合するように構成された展性インプラントを提供し、その展性インプラントはインプラントの約０．１ｗｔ．％〜約２０ｗｔ．％の量の無細胞ブタコラーゲン、インプラントの約０．１ｗｔ．％〜約９５ｗｔ．％の量の骨材、およびオキシステロールを含み、インプラントは流体で湿潤した際に成形可能になるように構成されている。
【００７９】
[0080]  オキシステロール類は、コレステロールの酸素化誘導体からなる分子のファミリーである。オキシステロール類は多くの生物学的プロセスに関与しており、骨形成性をもつことが見出された。たとえば、天然オキシステロールの１つである２０（Ｓ）−ヒドロキシコレステロールは骨形成性および抗−脂質形成性をもつ。そのようなオキシステロールは、骨折治癒、長骨固定処置、脊椎固定処置、椎体間脊椎固定処置、後外側脊椎固定処置、頚椎椎間板切除および固定処置、歯科処置、ならびに頭蓋／顎顔面処置に有用な可能性がある。
【００８０】
[0081]  オキシステロール類は種々の生理学的プロセス、たとえば細胞分化、炎症、アポトーシス、およびステロイド産生においても役割をもつ。オキシステロール類はコレステロール酸化の生成物であり、インビボで骨芽細胞を含めた多様な細胞タイプにより形成される(Schroepfer. Phyiol Rev 80:361-554, 2000; Bjorkhem and Dicsfalusy. Arterioscler Thromb Vase Biol 22:734-742, 2002)。特定のオキシステロール類、たとえば２０（Ｓ）−ヒドロキシコレステロール、および２２（Ｓ）−または２２（Ｒ）−ヒドロキシコレステロールは、多能性間葉細胞、たとえばＭ２−１０Ｂ４（Ｍ２）骨髄間質細胞およびＣ３Ｈ１０Ｔｌ／２胚性線維芽細胞において骨形成性分化を誘導する(Kha et al. J Bone Miner Res 19:830-840, 2004)。オキシステロール類はヘッジホッグシグナル伝達経路の活性化により骨形成性分化を誘導し、間葉系幹細胞の脂質形成性分化を阻害することができ、それにより次いで、骨形成性および脂質形成性の分化を制御するマスタースイッチ、すなわちそれぞれＲｕｎｘ２およびＰＰＡＲｙを調節する(Richardson et al. J Cell Biochem 100:1131-1145, 2007; Dwyer et al. J Biol Chem 282: 8959-8968, 2007; Kim et al., J Bone Miner Res 22:1711-1719, 2007)。あるオキシステロール類は、骨の欠損または障害、たとえば骨粗鬆症の処置のための療法使用をも提供する。
【００８１】
[0082]  本明細書に記載するインプラントは、局所骨形成の誘導および骨欠損部の処置のためのオキシステロールを含有する新規な療法用インプラントおよびマトリックスの作成に使用できる。オキシステロールはＡＴＭ内に保持されて経時的に放出され、一方、ＡＴＭは、骨細胞が流入して骨を増殖させ、欠損部を充填するのを可能にする。ある態様において、そのような適用はこれらのオキシステロール化合物がヘッジホッグシグナル伝達経路を誘導する能力に基づく。ある態様において、インプラントによって間葉系幹細胞は骨芽細胞分化のマーカーの誘導発現を示す。本明細書に記載するインプラントおよびマトリックスは多様な療法用途に使用でき、それには局所骨形成の誘導および骨欠損部の処置が含まれるが、これらに限定されない。ある態様において、本明細書に記載するオキシステロール含有インプラントは、インプラントがヒトまたは動物の細胞に接触した際に生物学的応答を誘導する。ある態様において、その細胞は間葉系幹細胞または骨髄間質細胞である可能性がある。ある態様において、生物学的応答は骨芽細胞分化の刺激、脂肪細胞分化の阻害、また軟骨形成の刺激を含む。ある態様において、インプラントは、オキシステロールを放出して外科処置部位または骨欠損部位またはその付近に生物学的応答を誘導するためのインプラントとして構成される。
【００８２】
[0083]  オキシステロール類を用いて、骨粗鬆症などの骨欠損を処置するために全身骨形成を誘導し、偽関節骨折(nonunion fracture)、または他の骨障害、たとえば歯科適用／インプラントにおける顎骨欠損などの状態を処置するために局所骨形成を誘導し、また脊椎固定を誘導することができる。ある態様において、インプラントはオキシステロールを単独で、または１種類以上の骨形態形成タンパク質または骨形成剤との組合わせで含有することができる。ある態様において、１種類より多いオキシステロールがインプラント中に存在する。ある態様において、インプラントはＯｘｙ１３３および／またはＯｘｙ１５３を含有する。
【００８３】
[0084]  ある態様において、インプラントまたはＡＴＭは骨形成を補助するオキシステロール類を含有する。ある態様において、インプラントまたはＡＴＭはＯｘｙ３４、Ｏｘｙ４９および／またはＯｘｙ１３３を含有する。ある態様において、インプラントまたはＡＴＭは下記の構造を含むオキシステロール：
【００８４】
【化５】
2019022650.tif 000006
【００８５】
またはその医薬的に許容できる塩、水和物もしくは溶媒和物を含有する；式中のＲｌは、少なくとも１個の炭素原子をもつ脂肪族または環状の置換基を含む。
[0085]  ある態様において、Ｒｌはアルキル、ヘテロアルキル、アルカニル、ヘテロアルカニル、アルケニル、ヘテロアルケニル、アルキニル、ヘテロアルカニル、アルキルジイル、ヘテロアルキルジイル、アルキレノ、ヘテロアルキレノ、アリール、アリールジイル、アリーデノ、アリールアリール、ビアリール、アリールアルキル、ヘテロアリール、ヘテロアリールジイル、ヘテロアリーレノ、ヘテロアリール−ヘテロアリール、ビヘテロアリール、ヘテロアリールアルキル、またはその組合わせを含む。ある態様において、Ｒｌ置換基は（Ｃｌ−Ｃ２０）アルキルもしくはヘテロアルキル、（Ｃ２−Ｃ２０）アリールもしくはヘテロアリール、（Ｃ６−Ｃ２６）アリールアルキルもしくはヘテロアルキル、および（Ｃ５−Ｃ２０）アリールアルキルもしくはヘテロアリール−ヘテロアルキル、（Ｃ４−Ｃ１０）アルキルジイルもしくはヘテロアルキルジイル、または（Ｃ４−Ｃ１０）アルキレノもしくはヘテロアルキレノを含む。Ｒｌ置換基は環式もしくは非環式、分枝もしくは非分枝、置換もしくは非置換、芳香族、飽和もしくは不飽和鎖、またはその組合わせであってもよい。ある態様において、Ｒｌ置換基は脂肪族基である。ある態様において、Ｒｌ置換基は環式基である。ある態様において、Ｒｌ置換基はヘキシル基である。
【００８６】
[0086]  本開示は、ＡＴＭ中に均一に配置された（たとえば、分散した）骨形成性オキシステロール（たとえば、Ｏｘｙ１３３）を含有するインプラントを含み、オキシステロールはインビトロで骨形成性分化を促進する能力をもつ。Ｏｘｙ１３３は特に有効な骨形成剤である。種々の用途において、Ｏｘｙ１３３は、局所的な骨形成刺激が有益である状態の処置、たとえば脊椎固定、骨折修復、骨再生／組織適用、歯科インプラントのための顎の骨密度の増強、骨粗鬆症などに有用である。Ｏｘｙ１３３の特別な利点の１つは、他の骨形成性オキシステロール類と比較した場合にそれは合成がより容易であり、かつ固定時間を改善することである。Ｏｘｙ１３３は小分子であり、骨増殖のための同化作用療法薬として、また他の多様な状態を処置するのに有用な薬剤として使用できる。
【００８７】
[0087]  Ｏｘｙ１３３の組成物および製造方法は国際特許出願No. PCT/2015/064526, 2015年12月8日出願に記載されており、その内容全体を本明細書に援用する。
[0088]  本出願開示の一側面は、次式をもつＯｘｙ１３３：
【００８８】
【化６】
2019022650.tif 000007
【００８９】
またはその医薬的に許容できる塩、溶媒和物もしくは水和物を含有するインプラントまたはＡＴＭである。Ｏｘｙ１３３は、Ｏｘｙ１３３またはその医薬的に許容できる塩、溶媒和物もしくは水和物、および医薬的に許容できるキャリヤーを含む、生物活性組成物または医薬組成物として使用できる。Ｏｘｙ１３３はＩＵＰＡＣ表記（３Ｓ，５Ｓ，６Ｓ，８Ｒ，９Ｓ，１０Ｒ，１３Ｓ，１４Ｓ，１７Ｓ）−ｌ７−（（Ｓ）−２−ヒドロキシオクタン−２−イル）−１０，１３−ジメチルヘキサデカヒドロ−１Ｈ−シクロペンタ［ａ］フェナントレン−３，６−ジオールをもつ。
【００９０】
[0089]  本開示の他の側面は、細胞または組織を療法有効量のＯｘｙ１３３と接触させることを含む、細胞または組織においてヘッジホッグ（Ｈｈ）経路仲介による応答を誘導する（刺激する、増強する）ための方法である。細胞または組織は、インビトロ、または対象、たとえば哺乳動物におけるものであってもよい。ヘッジホッグ（Ｈｈ）経路仲介による応答は下記を伴う：骨芽細胞分化、骨形態形成、および／または骨増殖を刺激する；毛髪成長および／または軟骨形成を刺激する；新血管形成(neovasculogenesis)、たとえば血管新生(angiogenesis)を刺激し、それにより虚血組織への血液供給を増大させる；あるいは、それは脂肪細胞分化、脂肪細胞形態形成、および／または脂肪細胞増殖の阻害である；あるいは前駆細胞を刺激して神経発生を行なわせる。Ｈｈ仲介による応答は、再生医薬に使用するための、多様なタイプの組織のいずれかの再生を含む可能性がある。本開示の他の側面は、有効量のＯｘｙ１３３を含む生物活性組成物または医薬組成物を対象に投与することを含む、骨障害、オステオペニア（骨減少症）、骨粗鬆症、または骨折を伴う対象を処置するための方法である。対象に、生物活性組成物または医薬組成物を療法有効量で、有効な剤形において、選択した間隔で投与して、たとえば骨量を増大させ、骨粗鬆症の症状を軽減し、アテローム硬化病変を低減、排除、予防または治療することなどができる。対象に、生物活性組成物または医薬組成物を療法有効量で、有効な剤形において、選択した間隔で投与して、骨粗鬆症の症状を軽減することができる。ある態様において、Ｏｘｙ１３３を含む組成物は、標的外科領域における細胞の骨芽細胞分化を誘導するために間葉系幹細胞を含有することができる。
【００９１】
[0090]  種々の側面において、Ｏｘｙ１３３を細胞、組織または臓器に局所投与により投与することができる。たとえば、Ｏｘｙ１３３をクリーム剤などで局所適用でき、あるいはそれを細胞、組織または臓器に注入または他の形で直接導入でき、あるいはそれを適切な医療用デバイス、たとえば本明細書中に述べるインプラントと共に導入できる。
【００９２】
[0091]  ある態様において、Ｏｘｙ１３３の投与量は約１０ｐｇ／日から約８０ｇ／日までである。ある態様において、Ｏｘｙ１３３の投与量は約１．０ｇ／日、１．５、２．０、２．５、３．０、３．５、４．０、４．５、５．０、５．５、６．０、６．５、７．０、７．５、８．０、８．５、９．０、９．５、１０．０、１０．５、１１．０、１１．５、１２．０、１２．５、１３．０、１３．５、１４．０、１４．５、１５．０、１５．５、１６．０、１６．５、１７．０、１７．５、１８．０、１８．５、１９．０、１９．５、２０．０、２０．５、２１．０、２１．５、２２．０、２２．５、２３．０、２３．５、２４．０、２４．５、２５．０、２５．５、２６．０、２６．５、２７．０、２７．５、２８．０、２８．５、２９．０、２９．５、３０．０、３０．５、３１．０、３１．５、３２．０、３２．５、３３．０、３３．５、３４．０、３４．５、３５．０、３５．５、３６．０、３６．５、３７．０、３７．５、３８．０、３８．５、３９．０、３９．５、４０．０、４０．５、４１．０、４１．５、４２．０、４２．５、４３．０、４３．５、４４．０、４４．５、４５．０、４５．５、４６．０、４６．５、４７．０、４７．５、４８．０、４８．５、４９．０、４９．５、５０．０、５０．５、５１．０、５１．５、５２．０、５２．５、５３．０、５３．５、５４．０、５４．５、５５．０、５５．５、５６．０、５６．５、５７．０、５７．５、５８．０、５８．５、５９．０、５９．５から、約６０．０グラム／日までである。Ｏｘｙ１３３の他の投与量には、約２．４ｎｇ／日から約５０ｍｇ／日まで；約５０ｎｇ／日から約２．５ｍｇ／日まで；約２５０ｎｇ／日から約２５０ｍｃｇ／日まで；約２５０ｎｇ／日から約５０ｍｃｇ／日；約２５０ｎｇ／日から約２５ｍｃｇ／日まで；約２５０ｎｇ／日から約１ｍｃｇ／日まで；約３００ｎｇ／日から約７５０ｎｇ／日まで、または約０．５０ｍｃｇ／日から５００ｎｇ／日までが含まれる。種々の態様において、投与量は約０．０１〜約１０ｍｃｇ／日、または約１ｎｇ／日〜約１２０ｍｃｇ／日であってもよい。ある態様において、Ｏｘｙ１３３の投与量はより多量である。たとえば、ある態様において、Ｏｘｙ１３３の投与量は０．０１ｍｇ／日から５ｇ／日までである。
【００９３】
[0092]  無細胞組織マトリックス（ＡＴＭ）は、それの全体に均一に配置された、またはＡＴＭの別個の領域もしくは別個の層に配置された、オキシステロール（たとえば、Ｏｘｙ１３３）を含むことができる。オキシステロールをＡＴＭに装填することができ、それはＡＴＭの総重量の約０．０１、０．０２、０．０３、０．０４、０．０５、０．０６、０．０７、０．０８、０．０９、０．１、０．１５、０．２、０．２５、０．３、０．３５、０．４、０．４５、０．５、０．５５、０．６、０．６５、０．７、０．７５、０．８、０．８５、０．９、０．９５、１．０、１．５、２．０、２．５、３．０、３．５、４．０、４．５、５．０、５．５、６．０、６．５、７．０、７．５、８．０、８．５、９．０、９．５、１０．０、１０．５、１１．０、１１．５、１２．０、１２．５、１３．０、１３．５、１４．０、１４．５、１５．０、１５．５、１６．０、１６．５、１７．０、１７．５、１８．０、１８．５、１９．０、１９．５、２０．０、２０．５、２１．０、２１．５、２２．０、２２．５、２３．０、２３．５、２４．０、２４．５、２５．０、２５．５、２６．０、２６．５、２７．０、２７．５、２８．０、２８．５、２９．０、２９．５、３０．０、３０．５、３１．０、３１．５、３２．０、３２．５、３３．０、３３．５、３４．０、３４．５、３５．０、３５．５、３６．０、３６．５、３７．０、３７．５、３８．０、３８．５、３９．０、３９．５、４０．０、４０．５、４１．０、４１．５、４２．０、４２．５、４３．０、４３．５、４４．０、４４．５、４５．０、４５．５、４６．０、４６．５、４７．０、４７．５、４８．０、４８．５、４９．０、４９．５、５０．０、５０．５、５１．０、５１．５、５２．０、５２．５、５３．０、５３．５、５４．０、５４．５、５５．０、５５．５、５６．０、５６．５、５７．０、５７．５、５８．０、５８．５、５９．０、５９．５から、約６０％  ｗ／ｖ、ｗ／ｗおよび／またはｖ／ｖまでを構成することができる。
【００９４】
[0093]  ある態様において、高濃度のオキシステロールをＡＴＭに装填することができ、それはＡＴＭの約２０ｗｔ．％から約９９ｗｔ．％までを構成する。ある態様において、オキシステロールをＡＴＭの約２０ｗｔ．％から約９０ｗｔ．％まで、３５ｗｔ．％から約８０ｗｔ．％まで、または約５０ｗｔ．％から約９０ｗｔ．％までの量でＡＴＭに装填することができる。ある態様において、オキシステロールを約２０ｗｔ．％〜約３０ｗｔ．％、約３０ｗｔ．％〜約４０ｗｔ．％、約４０ｗｔ．％〜約５０ｗｔ．％、約５０ｗｔ．％〜約６０ｗｔ．％、約６０ｗｔ．％〜約７０ｗｔ．％、約７０ｗｔ．％〜約８０ｗｔ．％、約８０ｗｔ．％〜約９０ｗｔ．％、または約９０ｗｔ．％〜約９９ｗｔ．％の量でＡＴＭに装填することができる。ある態様において、オキシステロールをＡＴＭの約２０、２５、３０、３５、４０、４５、５０、５５、６０、６５、７０、７５、８０、８５、９０、９５から、約９９ｗｔ．％までの量でＡＴＭに装填することができる。
【００９５】
[0094]  ある態様において、オキシステロールをＡＴＭに装填することができ、それはＡＴＭの約０．０１、０．１、０．１５、０．２、０．２５、０．３、０．３５、０．４、０．４５、０．５、０．５５、０．６、０．６５、０．７、０．７５、０．８、０．８５、０．９、０．９５、１．０、１．５、２．０、２．５、３．０、３．５、４．０、４．５、５．０、５．５、６．０、６．５、７．０、７．５、８．０、８．５、９．０、９．５、１０．０、１０．５、１１．０、１１．５、１２．０、１２．５、１３．０、１３．５、１４．０、１４．５、１５．０、１５．５、１６．０、１６．５、１７．０、１７．５、１８．０、１８．５、１９．０、１９．５、  ２０．０、２０．５、２１．０、２１．５、２２．０、２２．５、２３．０、２３．５、２４．０、２４．５、２５．０、２５．５、２６．０、２６．５、２７．０、２７．５、２８．０、２８．５、２９．０、２９．５、３０．０、３０．５、３１．０、３１．５、３２．０、３２．５、３３．０、３３．５、３４．０、３４．５、３５．０、３５．５、３６．０、３６．５、３７．０、３７．５、３８．０、３８．５、３９．０、３９．５、４０．０、４０．５、４１．０、４１．５、４２．０、４２．５、４３．０、４３．５、４４．０、４４．５、４５．０、４５．５、４６．０、４６．５、４７．０、４７．５、４８．０、４８．５、４９．０、４９．５、５０．０、５０．５、５１．０、５１．５、５２．０、５２．５、５３．０、５３．５、５４．０、５４．５、５５．０、５５．５、５６．０、５６．５、５７．０、５７．５、５８．０、５８．５、５９．０、５９．５から、約６０ｍｇ／ｃｃまでを構成することができる。ある態様において、オキシステロールをＡＴＭに約４００ｍｇ／ｃｃの量で装填することができる。ある態様において、オキシステロールをＡＴＭに約６０、７０、８０、９０、１００、１１０、１２０、１３０、１４０、１５０、１６０、１７０、１８０、１９０、２００、２１０、２２０、２３０、２４０、２５０、２６０、２７０、２８０、２９０、３００、３１０、３２０、３３０、３４０、３５０、３６０、３７０、３８０、３９０、４００、４１０、４２０、４３０、４４０、４５０、４６０、４７０、４８０、４９０から、約５００ｍｇ／ｃｃまでの量で装填することができる。ある態様において、４００ｍｇ／ｃｃをＡＴＭに装填することができる。
【００９６】
[0095]  ある態様において、オキシステロールをＡＴＭに高濃度量で装填することができる。たとえば、ある態様において、オキシステロールをＡＴＭに少なくとも５００ｍｇ／ｃｃの量で装填する。ある態様において、オキシステロールをＡＴＭに約１ｍｇ／ｃｃ〜約１ｇ／ｃｃまで、約１００ｍｇ／ｃｃから約１ｇ／ｃｃまで、約５００ｍｇ／ｃｃから約９００ｍｇ／ｃｃまで、または約６００ｍｇ／ｃｃから約８００ｍｇ／ｃｃまでの量で添加する。他の態様において、オキシステロールをＡＴＭに約５００ｍｇ／ｃｃから約６００ｍｇ／ｃｃまで、約６００ｍｇ／ｃｃから約７００ｍｇ／ｃｃまで、約７００ｍｇ／ｃｃから約８００ｍｇ／ｃｃまで、約８００ｍｇ／ｃｃから約９００ｍｇ／ｃｃまで、または約９００ｍｇ／ｃｃから約１ｇ／ｃｃまでの量で添加する。
【００９７】
[0096]  本開示の他の態様は、化合物Ｏｘｙ１３３のほかに、Ｏｘｙ１３３に存在する立体中心のいずれかにおけるありとあらゆる個々の立体異性体を包含し、それにはその化合物のジアステレオマー、ラセミ体、鏡像異性体、および他の異性体が含まれる。本開示の態様において、Ｏｘｙ１３３はその化合物のすべての多型、溶媒和物または水和物、たとえば水和物、および有機溶媒により形成されたものを含むことができる。種々の態様において、Ｏｘｙ１３３はU.S. Serial No. 15/082,695および15/374,610（完全に述べたと同様に本明細書に援用する）に記載された多型Ａ、多型Ｂ、多型Ｃ、多型Ｄ、多型Ｅ、多型Ｆ、多型Ｇ、多型Ｈ、多型Ｉ、またはその混合物を含む。
【００９８】
[0097]  ある態様において、無細胞組織マトリックス中に均一に分散させることができるオキシステロールはＯｘｙ１３３多型であってもよく、それは多型Ａおよび／または多型Ｂを含み、本質的にそれらからなり、またはそれらからなる。ある態様において、Ｏｘｙ１３３多型は、下記の反射のうち１以上を含むＸ線粉末回折パターンを生じるＡ型を含み、本質的にそれからなり、またはそれからなる：１６．４、１７．９１および２０．９４±０．２度の２θ。ある態様において、Ｏｘｙ１３３多型は、Ａ型についての上記のＸ線粉末回折パターンの代わりに、またはそれらに加えて、下記の反射のうち１以上を含むＸ線粉末回折パターンを生じるＡ型を含み、本質的にそれからなり、またはそれからなる：６．１、１２．３および１８．６±０．２度の２θ。
【００９９】
[0098]  ある態様において、無細胞組織マトリックス中に均一に分散させることができる多型Ｏｘｙ１３３は、下記の反射のうち１以上を含むＸ線粉末回折パターンを生じるＢ型を含み、本質的にそれからなり、またはそれからなる：１３．３、１６．１および１８．８２±０．２度の２θ。ある態様において、Ｏｘｙ１３３多型は、Ｂ型についての上記のＸ線粉末回折パターンの代わりに、またはそれらに加えて、下記の反射のうち１以上を含むＸ線粉末回折パターンを生じるＢ型を含み、本質的にそれからなり、またはそれからなる：５．９、１１．９および１７．９６±０．２度の２θ。
【０１００】
[0099]  塩を製造する可能性はその化合物の酸性度または塩基性度に依存する。前記化合物の適切な塩類には下記のものが含まれるが、それらに限定されない：酸付加塩、たとえば塩酸、臭化水素酸、ヨウ化水素酸、過塩素酸、硫酸、硝酸、リン酸、酢酸、プロピオン酸、グリコール酸、乳酸、ピルビン酸、マロン酸、コハク酸、マレイン酸、フマル酸、リンゴ酸、酒石酸、クエン酸、安息香酸、炭酸、ケイ皮酸、マンデル酸、メタンスルホン酸、エタンスルホン酸、ヒドロキシエタンスルホン酸、ベンゼンスルホン酸、ｐ−トルエンスルホン酸、シクロヘキサンスルファミン酸、サリチル酸、ｐ−アミノサリチル酸、２−フェノキシ安息香酸、および２−アセトキシ安息香酸により形成されるもの；サッカリンにより形成される塩類；アルカリ金属塩、たとえばナトリウム塩およびカリウム塩；アルカリ土類金属塩、たとえばカルシウム塩およびマグネシウム塩；ならびに有機または無機配位子により形成される塩類、たとえば第四級アンモニウム塩。さらに他の適切な塩類には前記化合物の下記の塩類が含まれるが、それらに限定されない：酢酸塩、ベンゼンスルホン酸塩、安息香酸塩、炭酸水素塩、硫酸水素塩、酒石酸水素塩、ホウ酸塩、ブロミド、エデト酸カルシウム塩、カムシル酸塩(camsylate)、炭酸塩、クロリド、クラブラン酸塩(clavulanate)、クエン酸塩、二塩酸塩、エデト酸塩(edetate)、エジシル酸塩(edisylate)、エストール酸塩(estolate)、エシル酸塩(esylate)、フマル酸塩、グルセプト酸塩(gluceptate)、グルコン酸塩、グルタミン酸塩、グリコリルアルサニル酸塩(glycollylarsanilate)、ヘキシルレゾルシン酸塩(hexylresorcinate)、ヒドラバミン(hydrabamine)、臭化水素酸塩、塩酸塩、ヒドロキシナフトエ酸塩、ヨージド、イソチオネート(isothionate)、乳酸塩、ラクトビオン酸塩(lactobionate)、ラウリン酸塩、リンゴ酸塩、マレイン酸塩、マンデル酸塩、メシル酸塩、メチルブロミド、硝酸メチル塩、硫酸メチル塩、ムチン酸塩(mucate)、ナプシル酸塩(napsylate)、硝酸塩、Ｎ−メチルグルカミンアンモニウム塩、オレイン酸塩、パモ酸塩(pamoate)（エンボン酸塩(embonate)）、パルミチン酸塩、パントテン酸塩、リン酸塩／二リン酸塩、ポリガラクツロン酸塩、サリチル酸塩、ステアリン酸塩、硫酸塩、塩基性酢酸塩(subacetate)、コハク酸塩、タンニン酸塩、酒石酸塩、テオクル酸塩(teoclate)、トシル酸塩、トリエチオジド(triethiodide)、および吉草酸塩。
【０１０１】
[00100]  種々の態様において、Ｏｘｙ１３３は１以上の生物学的機能を含む。すなわち、Ｏｘｙ１３３は間葉系幹細胞または骨髄間質細胞と接触した際に生物学的応答を誘導できる。たとえば、Ｏｘｙ１３３は骨芽細胞分化を刺激することができる。ある態様において、Ｏｘｙ１３３を含有する生物活性組成物は、哺乳動物細胞、たとえばインビトロにおける細胞またはヒトもしくは動物における細胞に投与した際の１以上の生物学的機能を含むことができる。たとえば、そのような生物活性組成物は骨芽細胞分化を刺激することができる。ある態様において、そのような生物学的機能はヘッジホッグ経路の刺激から生じる可能性がある。
【０１０２】
Ｏｘｙ１３３の精製
[00101]  ある態様において、オキシステロール、たとえばＯｘｙ１３３は、高度に精製されている。ある態様において、Ｏｘｙ１３３は結晶化または再結晶されていてもよい。ある態様において、精製Ｏｘｙ１３３は、下記に示すようにＯｘｙ１３３をアセトン／水の３：１混合物中で再結晶することにより形成される。
【０１０３】
【化７】
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【０１０４】
[00102]  上記に示すように、結晶化すると精製Ｏｘｙ１３３は水和物を形成する。しかし、ある態様において、Ｏｘｙ１３３は無水形態である。ある態様において、本明細書に記載する結晶質形態のいずれかのＯｘｙ１３３の結晶化率はＯｘｙ１３３の総量に対して変動する可能性がある。
【０１０５】
[00103]  特定の態様において、Ｏｘｙ１３３は塩、水和物、溶媒和物または結晶質形態のＯｘｙ１３３の結晶化率、少なくとも１０％、少なくとも２０％、少なくとも３０％、少なくとも４０％、少なくとも５０％、少なくとも６０％、少なくとも７０％、少なくとも８０％、少なくとも９０％、少なくとも９５％、または少なくとも９９％をもつことができる。ある態様において、結晶化率は実質的に１００％である可能性があり、その際、実質的に１００％とは、当技術分野で既知の方法を用いて最も良く決定できるものとしてＯｘｙ１３３の全量が結晶であるとみられることを示す。したがって、療法有効量のＯｘｙ１３３は結晶化率が異なる量を含むことができる。これらには、ある量の結晶化した固体形態のＯｘｙ１３３をその後、液体に溶解、部分溶解、または懸濁もしくは分散させる場合が含まれる。
【０１０６】
[00104]  一態様において、精製Ｏｘｙ１３３は１水和物として結晶化する。しかし、他の態様において、精製Ｏｘｙ１３３は他の含水形態、たとえば２水和物、ヘミ水和物、セスキ水和物、３水和物、４水和物など、および対応する溶媒和形態で結晶化する可能性がある。ある態様において、Ｏｘｙ１３３は非晶質形態で結晶化する。他の態様において、精製Ｏｘｙ１３３は共結晶(co-crystal)または医薬的に許容できる塩として結晶化する。
【０１０７】
[00105]  ある態様において、使用できるオキシステロール（たとえば、Ｏｘｙ１３３）は非晶質形態であって、ＡＴＭからより速やかに溶解および放出することができる；たとえば、約１０％、１５％、２０％、２５％、３０％、３５％、４５％から約５０％までのオキシステロールがＡＴＭから２４または４８時間にわたってバースト放出される。
【０１０８】
[00106]  ある態様において、未精製Ｏｘｙ１３３をヘプタンと混合することにより固化させることができる。生成物を続いて濾過し、塩化メチレンに懸濁することができる。ある態様において、未精製Ｏｘｙ１３３を懸濁液から濾過し、そしてアセトンおよび水、または他の有機もしくは無機溶媒（たとえば、ジエチルエーテル、ジクロロメタン、酢酸エチル、アセトン、ｎ，ｎ−ジメチルホルムアミド、アセトニトリル、ジメチルスルホキシド、アンモニア、ｔ−ブタノール、ｎ−プロパノール、エタノール、メタノール、酢酸またはその組合わせ）を用いて結晶化することができる。
【０１０９】
[00107]  種々の態様において、未精製Ｏｘｙ１３３を他のいずれかの伝統的手段によって単離および精製することができる。すなわち、濾過、遠心分離、揮発性液体をそれらの相対的揮発性に基づいて分離するための蒸留、結晶化、再結晶、揮発性液体を不揮発性溶質から除去するための蒸発、他の成分がそれに可溶性である溶媒に組成物を溶解して不純物を除去するための溶媒抽出、または他の精製法により未精製Ｏｘｙ１３３を単離および精製して、たとえば約９５％から約９９．９％までの希望する純度にすることができる。
【０１１０】
[00108]  ある態様において、精製Ｏｘｙ１３３は結晶化によって結晶質形態で形成される；それは、液状供給流を冷却することによりＯｘｙ１３３を液状供給流から分離するか、あるいは反応混合物中の副産物および未使用反応体の溶解度を低下させる沈殿剤を添加し、それによりＯｘｙ１３３が結晶を形成することによる。ある態様において、固体結晶を次いで濾過または遠心分離により残りの液体から分離する。結晶を溶媒に再溶解し、次いで再結晶させ、次いで結晶を濾過または遠心分離により残りの液体から分離して、高純度のＯｘｙ１３３試料を得ることができる。ある態様において、結晶を次いで造粒して希望する粒子サイズにすることができる。ある態様において、無機質粒子（たとえば、セラミック）をＡＴＭ中に使用でき、それは約０．５ｍｍから約１．５ｍｍまでの粒子サイズをもつことができる。ある態様において、無機質粒子は約０．２ｍｍから約０．５ｍｍまでであってもよい。
【０１１１】
[00109]  ある態様において、未精製Ｏｘｙ１３３を精製することができ、その際、精製Ｏｘｙ１３３は溶媒中に結晶化形態で形成され、次いで溶媒から分離されて、約９８％から約９９．９９％までの純度をもつ高純度Ｏｘｙ１３３を形成する。ある態様において、Ｏｘｙ１３３を精製の前または後に濾過または真空濾過により回収することができる。
【０１１２】
インプラント
[00110]  ある態様において、インプラントは、オキシステロール（たとえば、Ｏｘｙ１３３）のほかに、インビボにおける三次元の組織形成プロセスをガイドするための無細胞組織足場を細胞に提供するＡＴＭを含む。ある態様において、インプラントは骨の内殖を促進するための多孔質足場を提供する。ＡＴＭの形態は細胞遊走をガイドし、細胞はＡＴＭの中または上へ遊走することができる。細胞は次いで増殖して新たな組織を合成し、骨および／または軟骨を形成することができる。ある態様において、１以上の無細胞組織マトリックスが互いに積み重なっている。
【０１１３】
[00111]  ある態様において、インプラントはＡＴＭの凝集性マス中に均一に配置されたオキシステロールを含む。特定の態様において、ＡＴＭはヒト、ブタ、ヤギ、ウシ、ヒツジ、またはウマ源から得られる。他の側面において、ＡＴＭはブタコラーゲンであり、一方、他の側面においてＡＴＭは架橋ブタコラーゲンである。種々の側面において、インプラントは成形可能なゲル、ペーストまたはパテであり、注射器に入れることができる。特定の側面において、外科医または他の担当専門家がインプラントを凍結乾燥および水和し、次いで骨欠損部位に配置することができる。他の側面において、凍結乾燥インプラントを水和し、骨欠損部位への送達のために注射器に入れる。
【０１１４】
[00112]  ある態様において、インプラントはＡＴＭおよびオキシステロールのほかに骨材を含む。ＡＴＭはヒトまたは動物源から得ることができ、ある場合には架橋していなくてもよく、一方、他の場合にはＡＴＭは架橋していてもよい。種々の場合、ＡＴＭは無細胞ブタコラーゲンを含み、それは、ある場合には架橋していてもよい。無細胞ブタコラーゲン、骨材およびオキシステロールはそれぞれ粒子を構成し、それらが互いに均一に混合している。種々の態様において、骨材には下記のものが含まれる：脱灰骨（ＤＢＭ）ＡＴＭ、石灰化骨ＡＴＭ、脱灰骨線維、脱灰骨チップ；および下記を含む無機セラミック：リン酸三カルシウム、ヒドロキシアパタイト、二相性リン酸カルシウム、多孔質リン酸カルシウムセラミックス、もしくはリン酸三カルシウム、ヒドロキシアパタイト、またはその組合わせ。ある態様において、インプラントはバインダーまたは膨張相もしくは膨潤剤、たとえばカルボキシメチルセルロースまたは他のセルロース誘導体をも含む。
【０１１５】
[00113]  ある態様において、成形可能なインプラントは多孔体を含み、それはＡＴＭと均一に混和した約０．４ｍｍ〜約５．０ｍｍの平均粒子直径をもつ粒状無機質材料を含有する。ある態様において、無機質粒子は約０．５ｍｍ〜約１．５ｍｍの平均粒子サイズをもつ。ある態様において、無機質粒子は約１２５マイクロメートルから約７５０マイクロメートルまでの平均粒子サイズをもつ。
【０１１６】
[00114]  ある態様において、粒状無機質（たとえば、ＴＣＰ：ＨＡ）は、約０．１０、０．１１、０．１２、０．１３、０．１４、０．１５、０．１６、０．１７、０．１８、０．１９、０．２０、０．２１、０．２２、０．２３、０．２４、０．２５、０．２６、０．２７、０．２８、０．２９、０．３０、０．３１、０．３２、０．３３、０．３４、０．３５、０．３６、０．３７、０．３８、０．３９、０．４０、０．４１、０．４２、０．４３、０．４４、０．４５、０．４６、０．４７、０．４８、０．４９、０．５、０．５１、０．５２、０．５３、０．５４、０．５５、０．５６、０．５７、０．５８、０．５９、０．６、０．６１、０．６２、０．６３、０．６４、０．６５、０．６６、０．６７、０．６８、０．６９、０．７、０７１、０．７２、０．７３、０．７４、０．７５、０．７６、０．７７、０．７８、０．７９、０．８、０．８１、０．８２、０．８３、０．８４、０．８５、０．８６、０．８７、０．８８、０．８９、０．９、０．９１、０．９２、０．９３、０．９４、０．９５、０．９６、０．９７、０．９８、０．９９、１．０、１．２５、１．４、１．５、１．６、１．７、１．８、１．９、２．０、２．２５から、約２．５ｍｍまでの粒子サイズでＡＴＭ全体に均一に配置されていてもよい。これらの粒子は顆粒、チップ、繊維またはその組合わせの形態であってもよい。
【０１１７】
[00115]  種々の態様において、ＡＴＭの粒度分布は、約１０マイクロメートル、１３マイクロメートル、８５マイクロメートル、１００マイクロメートル、１５１マイクロメートルから、２００マイクロメートルまで、およびそれらの間のすべての部分範囲であってもよい。ある態様において、少なくとも７５％の粒子が約１０マイクロメートルから約２００マイクロメートルまでのサイズをもつ。ある態様において、少なくとも８５％の粒子が約１０マイクロメートルから約２００マイクロメートルまでのサイズをもつ。ある態様において、少なくとも９５％の粒子が約１０マイクロメートルから約２００マイクロメートルまでのサイズをもつ。ある態様において、すべての粒子が約１０マイクロメートルから約２００マイクロメートルまでのサイズをもつ。ある態様において、少なくとも７５％の粒子が約２０マイクロメートルから約１８０マイクロメートルまでのサイズをもつ。ある態様において、少なくとも８５％の粒子が約２０マイクロメートルから約１８０マイクロメートルまでのサイズをもつ。ある態様において、少なくとも９５％の粒子が約２０マイクロメートルから約１８０マイクロメートルまでのサイズをもつ。ある態様において、すべての粒子が約２０マイクロメートルから約１８０マイクロメートルまでのサイズをもつ。
【０１１８】
[00116]  ある態様において、１以上のオキシステロール類は、たとえば約２．２から約１０ミクロンまでの平均粒子サイズをもつことができる。ある態様において、オキシステロール粒子は約２．２ミクロン、または約２．５ミクロン、または約３ミクロン、または約４ミクロンの最小平均粒子サイズをもつ。粒子は約１０ミクロン、または約８ミクロン、または約７ミクロン、または約５ミクロンの最大平均粒子サイズをもつこともできる。ある態様において、オキシステロールは約５から３０マイクロメートルまで、または約２ミクロンから約２０ミクロンまで、または３０ミクロンから１００ミクロンまでの粒子サイズをもつが、種々の態様において、約１ミクロンから２５０ミクロンまでの範囲を使用できる。ある態様において、オキシステロールは、増大した溶解性およびインプラントからのより速やかな放出をもたらすために約０．１ｎｍ〜約１ミクロンの粒子サイズをもつ。ある態様において、オキシステロール（たとえば、Ｏｘｙ１３３）はナノ粒子形態であり、約１０．０、２０、３０、４０、５０、６０、７０、８０、９０、１００、１１０、１２０、１３０、１４０、１５０、１６０、１７０、１８０、１９０、２００、２１０、２２０、２３０、２４０、２５０、２６０、２７０、２８０、２９０、３００、３１０、３２０、３３０、３４０、３５０、３６０、３７０、３８０、３９０、４００、４１０、４２０、４３０、４４０、４５０、４６０、４７０、４８０、４９０から、約５００ｎｍまでの直径である。
【０１１９】
[00117]  ある態様において、オキシステロールは、Ｏｘｙ１３３の溶解速度を低下させることによりインプラントからの放出持続時間を延長するために約０．１ｍｍ〜約５ｍｍの粒子サイズを含み、それにより骨形成を調節することができる。さらに、オキシステロール粒子は単相分布をもつことができる。さらに、ある態様において、インプラントが提供しない抗炎症／鎮痛の急性効果を生じさせるために水溶性オキシステロールを含むことが好ましい可能性がある。
【０１２０】
[00118]  種々の態様において、オキシステロールは多型、溶媒和物、水和物または医薬的に許容できる塩の形態である。あるいは、オキシステロールは非晶質形態中において結晶化していてもよい。ある態様において、オキシステロールは１水和物の形態である。ある態様において、オキシステロール（たとえば、Ｏｘｙ１３３）は非晶質形態であってもよい。種々の態様において、インプラントはＯｘｙ１３３およびＡＴＭを非晶質、結晶質または半結晶質の形態で含み；その際、結晶質形態は多型、溶媒和物または水和物を含むことができる。Ｏｘｙ１３３はU.S. Serial No. 15/082,695および15/374,610（完全に記載したと同様に本明細書に援用する）に記載された多型Ａ、多型Ｂ、多型Ｃ、多型Ｄ、多型Ｅ、多型Ｆ、多型Ｇ、多型Ｈ、多型Ｉ、またはその混合物を含む。
【０１２１】
[00119]  ある態様において、本出願のＡＴＭはオキシステロールを約０．０１ｍｇ／ｃｃから約５００ｍｇ／ｃｃまでの量で含有する。ＡＴＭはオキシステロールを約１０ｍｇ／ｃｃ、２０ｍｇ／ｃｃ、２５ｍｇ／ｃｃ、３０ｍｇ／ｃｃ、４０ｍｇ／ｃｃ、５０ｍｇ／ｃｃ、６０ｍｇ／ｃｃ、７０ｍｇ／ｃｃ、８０ｍｇ／ｃｃ、９０ｍｇ／ｃｃ、１００ｍｇ／ｃｃ、１１０ｍｇ／ｃｃ、１２０ｍｇ／ｃｃ、１３０ｍｇ／ｃｃ、１４０ｍｇ／ｃｃ、１５０ｍｇ／ｃｃ、１６０ｍｇ／ｃｃ、１７０ｍｇ／ｃｃ、１８０ｍｇ／ｃｃ、１９０ｍｇ／ｃｃ、２００ｍｇ／ｃｃ、２１０ｍｇ／ｃｃ、２２０ｍｇ／ｃｃ、２３０ｍｇ／ｃｃ、２４０ｍｇ／ｃｃ、２５０ｍｇ／ｃｃ、２６０ｍｇ／ｃｃ、２７０ｍｇ／ｃｃ、２８０ｍｇ／ｃｃ、２９０ｍｇ／ｃｃ、３００ｍｇ／ｃｃ、３１０ｍｇ／ｃｃ、３２０ｍｇ／ｃｃ、３３０ｍｇ／ｃｃ、３４０ｍｇ／ｃｃ、３５０ｍｇ／ｃｃ、３６０ｍｇ／ｃｃ、３７０ｍｇ／ｃｃ、３８０ｍｇ／ｃｃ、３９０ｍｇ／ｃｃ、４００ｍｇ／ｃｃ、４１０ｍｇ／ｃｃ、４２０ｍｇ／ｃｃ、４３０ｍｇ／ｃｃ、４４０ｍｇ／ｃｃ、４５０ｍｇ／ｃｃ、４６０ｍｇ／ｃｃ、４７０ｍｇ／ｃｃ、４８０ｍｇ／ｃｃ、４９０ｍｇ／ｃｃから、約５００ｍｇ／ｃｃまでの量、またはそれらの間のいずれかの量で含有することができる。ある態様において、ＡＴＭは毎時４０ｎｇ〜約５ｍｇのオキシステロールを放出する。
【０１２２】
[00120]  ある態様において、オキシステロールを高濃度量でＡＴＭに装填できる。たとえば、ある態様において、オキシステロールを少なくとも５００ｍｇ／ｃｃの量でＡＴＭに装填する。ある態様において、オキシステロールを約１ｍｇ／ｃｃから約１ｇ／ｃｃまで、約１００ｍｇ／ｃから約１ｇ／ｃｃまで、約５００ｍｇ／ｃｃから約９００ｍｇ／ｃｃまで、または約６００ｍｇ／ｃから約８００ｍｇ／ｃｃまでの量でＡＴＭに添加する。他の態様において、オキシステロールを約５００ｍｇ／ｃｃ〜約６００ｍｇ／ｃｃ、約６００ｍｇ／ｃｃ〜約７００ｍｇ／ｃｃ、約７００ｍｇ／ｃｃ〜約８００ｍｇ／ｃｃ、約８００ｍｇ／ｃｃ〜約９００ｍｇ／ｃｃ、または約９００ｍｇ／ｃｃ〜約１ｇ／ｃｃの量でＡＴＭに添加する。ある態様において、オキシステロールを約１３４ｍｇ／ｃｃの量でＡＴＭに装填する。
【０１２３】
[00121]  ある態様において、オキシステロールは湿潤させる前または後のＡＴＭまたはインプラントの総重量を基準として約０．０１ｗｔ．％〜約４５ｗｔ．％の範囲を構成する。ある態様において、インプラントは、ＡＴＭまたはインプラントの総重量を基準として約６％、７％、８％、９％、１０％、１１％、１２％、１３％、１４％、１５％、１６％、１７％、１８％、１９％、２０％、２１％、２２％、２３％、２４％、２５％、２６％、２７％、２８％、２９％、３０％、３１％、３２％、３３％、３４％、３５％、３６％、３７％、３８％、３９％、４０％、４１％、４２％、４３％から、約４４％（ｗｔ．％）までの少なくとも１種類の生分解性材料を含む。
【０１２４】
[00122]  ある態様において、オキシステロールを含有するＡＴＭは、約１０％、１５％、２０％、２５％、３０％、３５％、４５％から、約５０％までのオキシステロールを２４または４８時間にわたって放出するバースト放出表面をもつことができる。
【０１２５】
[00123]  ある態様において、高濃度のオキシステロールをＡＴＭに装填することができ、それはＡＴＭの約０．０１ｗｔ．％から約９０ｗｔ．％までを構成する。ある態様において、オキシステロールをＡＴＭの約０．１ｗｔ．％から約９０ｗｔ．％まで、または約１．０ｗｔ．％から約９０ｗｔ．％までの量でＡＴＭに装填できる。ある態様において、オキシステロールをＡＴＭの約２０ｗｔ．％から約３０ｗｔ．％まで、約３０ｗｔ．％から約４０ｗｔ．％まで、約４０ｗｔ．％から約５０ｗｔ．％まで、約５０ｗｔ．％から約６０ｗｔ．％まで、約６０ｗｔ．％から約７０ｗｔ．％まで、約７０ｗｔ．％から約８０ｗｔ．％まで、約８０ｗｔ．％から約９０ｗｔ．％まで、または約９０ｗｔ．％から約９９ｗｔ．％までの量でＡＴＭに装填できる。ある態様において、オキシステロールをＡＴＭの約２０、２５、３０、３５、４０、４５、５０、５５、６０、６５、７０、７５、８０、８５、９０から、９５ｗｔ．％までの量でＡＴＭに装填できる。
【０１２６】
[00124]  ある態様において、ＡＴＭはオキシステロールを１〜９０日、１〜１０日、１〜３日、３〜７日、３〜１２日、３〜１４日、７〜１０日、７〜１４日、７〜２１日、７〜３０日、７〜５０日、７〜９０日、７〜１４０日、１４〜１４０日、３日〜１３５日、３日〜１８０日、または３日〜６か月の期間にわたって放出する。ある態様において、骨増殖は少なくとも１４日、たとえば１４〜９０日、１４〜３０日、１４〜６０日、２１〜９０日、２１〜１８０日、１４〜２１０日、または１４日〜６か月の期間にわたってみられるであろう。
【０１２７】
[00125]  ある態様において、ＡＴＭ（ある場合には、無細胞ブタコラーゲン）は、インプラントの約０．１、０．２、０．３、０．４、０．５、０．６、０．７、０．８、０．９、１．０、１．５、２．０、２．５、３．０、３．５、４．０、４．５、５．０、５．５、６．０、６．５、７．０、７．５、８．０、８．５、９．０、９．５、１０．０、１０．５、１１．０、１１．５、１２．０、１２．５、１３．０、１３．５、１４．０、１４．５、１５．０、１５．５、１６．０、１６．５、１７．０、１７．５、１８．０、１８．５、１９．０、１９．５、２０．０、２０．５、２１．０、２１．５、２２．０、２２．５、２３．０、２３．５、２４．０、２４．５、２５．０、２５．５、２６．０、２６．５、２７．０、２７．５、２８．０、２８．５、２９．０、２９．５、３０．０、３０．５、３１．０、３１．５、３２．０、３２．５、３３．０、３３．５、３４．０、３４．５、３５．０、３５．５、３６．０、３６．５、３７．０、３７．５、３８．０、３８．５、３９．０、３９．５、４０．０、４０．５、４１．０、４１．５、４２．０、４２．５、４３．０、４３．５、４４．０、４４．５、４５．０、４５．５、４６．０、４６．５、４７．０、４７．５、４８．０、４８．５、４９．０、４９．５から、約５０．０ｗ／ｗ、ｗ／ｖ、またはｖ／ｖまでを構成する。特定の態様において、ＡＴＭは無細胞ブタコラーゲンであり、それはインプラントの約０．１ｗｔ．％〜約２５ｗｔ．％の量で存在することができる。ある態様において、ＡＴＭはインプラントの約０．０１ｗｔ．％〜約５０ｗｔ．％、約０．１ｗｔ．％〜約２０ｗｔ．％、または約０．１ｗｔ．％〜約２５ｗｔ．％の量で存在する。ある態様において、ＡＴＭは無細胞架橋ブタコラーゲンであり、それは約０．１ｗｔ．％から約２５ｗｔ．％まで、約１．０ｗｔ．％から約２０ｗｔ．％まで、約２０ｗｔ．％から約３０ｗｔ．％まで、約３０ｗｔ．％から約４０ｗｔ．％まで、または約４０ｗｔ．％から約５０ｗｔ．％までの量で存在できる。
【０１２８】
[00126]  ある態様において、インプラントはさらに約２５ｗｔ．％から約５０ｗｔ．％までの流体を含み、それは成形可能なインプラントの展性を増大させるために添加される。展性インプラントは、骨欠損部位に適合させるために、希望するいかなる形状にも成形可能であるように構成される。ある態様において、展性インプラントは、外科処置部位、たとえば骨欠損部位に適合するように成形できる。ＡＴＭの形状は、それを配置すべき部位に合わせることができる。たとえば、それは小片(morsel)、プラグ、ピン、ペグ、シリンダー、ブロック、くさび、シート、ストリップなどの形状であってもよい。用語“形状(shape)”は、不確定(indeterminate)または漠然とした(vague)形態(form)または構造(configuration)（塊(lump)または特別な形態のない他の固体マスの場合のような）とは対照的に、確定した(determined)または規則的な形態または構造を表わし、シート、ストリップ、プレート、ディスク、コア、チューブ、くさび、シリンダーなどの材料に特徴的である。これには、規則的な幾何学的形状から、不規則な、傾斜した(angled)、もしくは他の非−幾何学的形状、またはこれらの特徴のいずれかをもつ造作の組合わせにまでわたる形態が含まれる。ある態様において、インプラントは外科処置部位に移植される前に展性である。そのような態様において、医師は、移植前にインプラントを希望する形状に成形し、そしてインプラントを硬化または乾燥させることができる。そのような態様において、医師はインプラントを直接に骨欠損部位内へ成形することができる。そのインプラントは展性であり、骨欠損部位内へ押し込んで骨欠損部位の間隙(crevice)を充填するように構成できる。ある態様において、インプラントは湿潤した際に展性であり、骨欠損部位と接触している間は展性を維持するように構成される。特定の態様において、成形可能なインプラントを骨欠損部位へ送達するために注射器に入れる。インプラントを収容した注射器を真空密封パウチに入れることもできる。
【０１２９】
[00127]  ある態様において、展性ＡＴＭを、椎体間ケージの空隙内に、または椎骨間腔(intervertebral space)のケージの外側周囲に適合するように付形することができる。
[00128]  インプラントを多様な流体で湿潤または水和させて、展性かつ成形可能なインプラントまたはスラリーを形成し、それを次いで凍結乾燥することができる。ある態様において、ＡＴＭを無菌水、生理食塩水、塩化ナトリウム、デキストロース、乳酸リンゲル液、リン酸緩衝生理食塩水（ＰＢＳ）、血液、骨髄穿刺液、骨髄画分、またはその組合わせで湿潤させる。ＡＴＭを湿潤させることができる流体の量には、約０．２５、０．５、０．７５、１．０、１．５、２．０、２．５、３．０、３．５、４．０、４．５、５．０、５．５、６．０、６．５、７．０、７．５、８．０、８．５、９．０、９．５、１０．０、１０．５、１１．０、１１．５、１２．０、１２．５、１３．０、１３．５、１４．０、１４．５、１５．０、１５．５、１６．０、１６．５、１７．０、１７．５、１８．０、１８．５、１９．０、１９．５、２０．０、２０．５、２１．０、２１．５、２２．０、２２．５、２３．０、２３．５、２４．０、２４．５、２５．０、２５．５、２６．０、２６．５、２７．０、２７．５、２８．０、２８．５、２９．０、２９．５、３０．０、３０．５、３１．０、３１．５、３２．０、３２．５、３３．０、３３．５、３４．０、３４．５、３５．０、３５．５、３６．０、３６．５、３７．０、３７．５、３８．０、３８．５、３９．０、３９．５、４０．０、４０．５、４１．０、４１．５、４２．０、４２．５、４３．０、４３．５、４４．０、４４．５、４５．０、４５．５、４６．０、４６．５、４７．０、４７．５、４８．０、４８．５、４９．０、４９．５から、約５０．０ｍｌまでが含まれる。
【０１３０】
[00129]  ある態様において、インプラントをヒアルロン酸、セルロースエーテル類（たとえば、カルボキシメチルセルロース）、コラーゲン、ゼラチン、オートクレーブ滅菌した骨粉、骨伝導性(osteoconductive)キャリヤー、全血、血液画分、骨髄穿刺液、濃縮した骨髄穿刺液、およびその混合物で水和する。限定ではない血液画分の例には、血清、血漿、多血小板血漿(platelet-rich plasma)（ＰＲＰ）、濃縮した多血小板血漿、乏血小板血漿、および濃縮した乏血小板血漿が含まれる。水和後、インプラントはゲル、パテまたはペーストになり、それを前決定した形状に約３０秒以内に成形するか、あるいは骨欠損部に投与し、治癒を促進するように骨欠損部に適合させる操作をすることができる。
【０１３１】
[00130]  ある態様において、インプラントは少なくとも骨および／または軟骨の細胞がそれに流入できるように構成された多孔質ＡＴＭを含む。ある態様において、マトリックスはまた、有効薬剤、たとえばオキシステロールを放出するように構成される。“多孔質”とは、マトリックスが多数の細孔をもつことを意味する。マトリックスの細孔は、血液、他の体液、ならびに前駆細胞および／または骨細胞および／または軟骨細胞を内部に流入させてインビボにおける三次元の組織形成プロセスをガイドすることができるのに十分なほど大きいサイズである。
【０１３２】
[00131]  ある態様において、ＡＴＭは多数の細孔を含む。ある態様において、少なくとも１０％の細孔はそれらの最大幅の地点で約５０マイクロメートル〜約５００マイクロメートルである。ある態様において、少なくとも２０％の細孔はそれらの最大幅の地点で約５０マイクロメートル〜約２５０マイクロメートルである。ある態様において、少なくとも３０％の細孔はそれらの最大幅の地点で約５０マイクロメートル〜約１５０マイクロメートルである。ある態様において、少なくとも５０％の細孔はそれらの最大幅の地点で約１０マイクロメートル〜約５００マイクロメートルである。ある態様において、少なくとも９０％の細孔はそれらの最大幅の地点で約５０マイクロメートル〜約２５０マイクロメートルである。ある態様において、少なくとも９５％の細孔はそれらの最大幅の地点で約５０マイクロメートル〜約１５０マイクロメートルである。ある態様において、１００％の細孔はそれらの最大幅の地点で約１０マイクロメートル〜約５００マイクロメートルである。
【０１３３】
[00132]  ある態様において、ＡＴＭは少なくとも約３０％、少なくとも約５０％、少なくとも約６０％、少なくとも約７０％、少なくとも約９０％もしくは少なくとも約９５％、または少なくとも約９９％の多孔度をもつ。細孔は細胞の内殖、骨、軟骨および／または脈管組織の形成またはリモデリングを支持することができる。
【０１３４】
[00133]  ある態様において、オキシステロールを固体または半固体状のインプラント中において投与する。種々の側面において、オキシステロールは（３Ｓ，５Ｓ，６Ｓ，８Ｒ，９Ｓ，１０Ｒ，１３Ｓ，１４Ｓ，１７Ｓ）  １７−（（Ｓ）−２−ヒドロキシオクタン−２−イル）−１０，１３−ジメチルヘキサデカヒドロ−ｌＨ−シクロペンタ［ａ］フェナントレン−３，６−ジオール（Ｏｘｙ１３３）、Ｏｘｙ１４９、Ｏｘｙ１５３、Ｏｘｙ１５４、Ｏｘｙ１５５、またはその水和物、溶媒和物、非晶質形態、多型もしくはその医薬的に許容できる塩類である。他の側面において、オキシステロールはU.S. Serial No. 15/082,695および15/374,610（完全に記載したと同様に本明細書に援用する）に記載されたＯｘｙ１３３の多型Ａ、多型Ｂ、多型Ｃ、多型Ｄ、多型Ｅ、多型Ｆ、多型Ｇ、多型Ｈ、多型Ｉ、またはその混合物を含む。
【０１３５】
[00134]  成形可能な形態のインプラントは、約１〜約２０００センチポアズ（ｃｐｓ）、１〜約２００ｃｐ、または１〜約１００ｃｐｓの範囲の投与前粘度をもつことができる。種々の態様において、半固体または固体インプラントは、約０．１０ｄＬ／ｇから約１．２ｄＬ／ｇまで、または約０．２０ｄＬ／ｇから約０．５０ｄＬ／ｇまでのインヘレント粘度(inherent viscosity)（ＩＶ）により示される分子量（ＭＷ）をもつ無細胞ブタコラーゲンを含むことができる。他のＩＶ範囲には下記のものが含まれるが、それらに限定されない：約０．０５〜約０．１５ｄＬ／ｇ、約０．１０〜約０．２０ｄＬ／ｇ、約０．１５〜約０．２５ｄＬ／ｇ、約０．２０〜約０．３０ｄＬ／ｇ、約０．２５〜約０．３５ｄＬ／ｇ、約０．３０〜約０．３５ｄＬ／ｇ、約０．３５〜約０．４５ｄＬ／ｇ、約０．４０〜約０．４５ｄＬ／ｇ、約０．４５〜約０．５５ｄＬ／ｇ、約０．５０〜約０．７０ｄＬ／ｇ、約０．５５〜約０．６ｄＬ／ｇ、約０．６０〜約０．８０ｄＬ／ｇ、約０．７０〜約０．９０ｄＬ／ｇ、約０．８０〜約１．００ｄＬ／ｇ、約０．９０〜約１．１０ｄＬ／ｇ、約１．０〜約１．２ｄＬ／ｇ、約１．１〜約１．３ｄＬ／ｇ、約１．２〜約１．４ｄＬ／ｇ、約１．３〜約１．５ｄＬ／ｇ、約１．４〜約１．６ｄＬ／ｇ、約１．５〜約１．７ｄＬ／ｇ、約１．６〜約１．８ｄＬ／ｇ、約１．７〜約１．９ｄＬ／ｇ、または約１．８〜約２．１ｄＬ／ｇ。
【０１３６】
[00135]  ある態様において、ＡＴＭは約ｌ×１０２〜約６×１０５ダイン／ｃｍ２、または２×１０４〜約５×１０５ダイン／ｃｍ２、または５×１０４〜約５×１０５ダイン／ｃｍ２の範囲の弾性率をもつ。ある態様において、ＡＴＭは凍結乾燥形態である。
【０１３７】
[00136]  ある態様において、ＡＴＭは約１．６ｇ／ｃｍ３〜約０．０５ｇ／ｃｍ３の密度をもつ。ある態様において、ＡＴＭは約１．１ｇ／ｃｍ３〜約０．０７ｇ／ｃｍ３の密度をもつ。たとえば、密度は約１ｇ／ｃｍ３未満、約０．７ｇ／ｃｍ３未満、約０．６ｇ／ｃｍ３未満、約０．５ｇ／ｃｍ３未満、約０．４ｇ／ｃｍ３未満、約０．３ｇ／ｃｍ３未満、約０．２ｇ／ｃｍ３未満、または約０．１ｇ／ｃｍ３未満であってもよい。
【０１３８】
[00137]  ある態様において、ＡＴＭの直径または対角線は１ｍｍから５０ｍｍまでの範囲であってもよい。ある態様において、ＡＴＭの直径または対角線は１ｍｍから３０ｍｍまで、または５ｍｍから１０ｍｍまでの範囲であってもよく、それは内視鏡カニューレに通るのに十分なほど小さく、ただし、大きな骨欠損部（たとえば、骨軟骨欠損部）を充填するのに必要なマトリックスの数を最小限に抑えるのに十分なほど大きい。ある態様において、外科処置時に外科医がＡＴＭを組織または骨欠損部に適合するように希望する形状に成形することができる。
【０１３９】
[00138]  ある態様において、本明細書中で述べるように、多孔質である内部はオキシステロールをＡＴＭ内に保持することができ、内部が多孔質であるためオキシステロールをＡＴＭに取り込ませた際にオキシステロールはＡＴＭ全体に均一に分布する。
【０１４０】
[00139]  ある態様において、オキシステロールはＡＴＭの内部に保持され、ＡＴＭが経時的に分解するのに伴ってＡＴＭ周囲の環境（たとえば、骨欠損部、骨軟骨欠損部など）内へ放出されるであろう。
【０１４１】
[00140]  ある態様において、採取した骨細胞および／または骨組織、たとえば皮質骨、自家骨、同種骨および／または異種骨をＡＴＭに播種することができる。ある態様において、採取した軟骨細胞および／または軟骨組織（たとえば、自家、同種および／または異種の軟骨組織）をＡＴＭに播種することができる。たとえば、ＡＴＭを、標的組織部位に挿入する前に約３：１、２：１、１：１、１：３または１：２の体積比の骨組織／細胞、通常は患者から吸引した移植骨組織／細胞で湿潤させることができる。用意したＡＴＭ内へ骨組織／細胞を浸透させ、そしてＡＴＭを手または機械で混練し、それによって可撓性かつ凝集性のコンシステンシーが得られ、それを続いて骨欠損部に充填することができる。ある態様において、ＡＴＭは移植部位に正確に配置して保持することができる展性の非−水溶性キャリヤーを提供する。ある態様において、採取した骨および／または軟骨の細胞をオキシステロールと混合し、そしてＡＴＭ内部に播種することができる。
【０１４２】
無細胞組織マトリックス（ＡＴＭ）
[00141]  本明細書中で用いる“無細胞組織マトリックス(acellular tissue matrix)”（ＡＴＭ）は、広範なコラーゲン含有組織のいずれかから、すべてまたは実質的にすべての生細胞、ならびに同様にすべての検出可能な死細胞、細胞内成分、および／または死細胞もしくは死につつある細胞により発生した細胞残屑を除去することにより調製される組織由来の構造体である。種々の側面において、本明細書中で用いる“無細胞組織マトリックス”は、下記のマトリックスである：（ａ）広範なコラーゲンベースの組織のいずれかから調製されるもの；（ｂ）無細胞であるもの；および（ｃ）それが調製された天然の組織または臓器が保有していた生物学的および構造的な機能を保持しているもの。本明細書中で用いる“実質的にすべての生細胞”を含まないＡＴＭは、生細胞の濃度が、それから骨材を調製した天然の組織または臓器の濃度の１％未満（たとえば：０．１％未満；０．０１％未満；０．００１％未満；０．０００１％未満；０．００００１％未満；または０．０００００１％未満）であるＡＴＭである。“死細胞および／または細胞残屑を実質的に含まない”ＡＴＭは、細胞除去プロセス後に骨材中に存在する死細胞および／または細胞残屑が１０％未満（たとえば：８％未満；５％未満；１％未満；０．１％未満；０．００１％未満；０．０００１％未満；またはそれ未満）であるものである。
【０１４３】
[00142]  ＡＴＭが保持している生物学的機能には、細胞認識および細胞結合、ならびに細胞拡散、細胞増殖および細胞分化を支持する能力が含まれる。そのような機能は、未変性のコラーゲン性タンパク質（たとえば、Ｉ型コラーゲン）および多様な非コラーゲン性分子（たとえば、いずれかの分子に対するリガンドとして作用するタンパク質、たとえばインテグリン受容体、高い電荷密度をもつ分子、たとえばグリコサミノグリカン（たとえば、ヒアルロナン）、またはプロテオグリカン、または他の接着分子）が備えている。有用な無細胞マトリックスが保持している構造的機能には、組織学的構造の維持、組織の構成要素の三次元アレイ、および物理的特性（たとえば強度、弾性および耐久性）、一定の多孔度の維持、ならびに高分子の保持が含まれる。ＡＴＭの生物学的機能の有効性は、たとえばそれが細胞増殖を支持する能力により測定でき、それからＡＴＭが調製された天然の組織または臓器の能力の少なくとも５０％（たとえば、少なくとも：５０％；６０％；７０％；８０％；９０％；９５％；９８％；９９％；９９．５％；１００％；または１００％より大）である。さらに、電子顕微鏡検査および／または免疫組織化学により測定したＡＴＭの基底膜の統合性は、それからＡＴＭが調製された天然の組織または臓器の統合性の少なくとも７０％である。
【０１４４】
[00143]  上記の特性をＡＴＭが保持している限り、骨材はいずれかの哺乳動物コラーゲンベースの組織（たとえば、真皮、筋膜、臍帯、胎盤、心臓弁、靭帯、腱、脈管組織（動脈、および静脈、たとえば伏在静脈、神経結合組織、または尿管）から調製できる。ある側面において、これらの同種移植片を配置できる組織には、本質的に、細胞の侵入または浸潤によりリモデリングできるいかなる組織も含まれる。関連組織には、骨格組織、たとえば骨、軟骨、靭帯、筋膜、および腱が含まれる。上記のいずれかの無細胞組織マトリックスを配置できる他の組織には、限定ではなく、皮膚、歯肉、硬膜、心筋、脈管組織、神経組織、横紋筋、平滑筋、膀胱壁、尿管組織、腸、および尿道組織が含まれる。
【０１４５】
[00144]  種々の態様において、無細胞組織マトリックス材料は、哺乳動物（ヒトまたは動物）由来のいずれかのコラーゲン含有組織材料を含むことができる。無細胞組織マトリックス材料は、主にＩ型コラーゲンを含む組織であってもよい。他の側面において、出発材料には真皮および腱が含まれる。ある態様において、ブタ組織材料を処理してコラーゲン性材料を得る；ただし、他の哺乳類源、たとえば霊長類、ウシ、ヒツジ、ヤギまたはウマを代わりに使用できることは理解されるであろう。本出願のインプラントに有用な無細胞ブタ組織マトリックスの例は、Ｐｅｒｍａｃｏｌ（登録商標）である。Ｐｅｒｍａｃｏｌ（登録商標）は、細胞要素および遺伝子材料が除去処理されたブタ真皮に由来するものである。残りの細胞外−無細胞組織マトリックス（ＡＴＭ）、主にコラーゲンを、次いで架橋させ、２０％のコラーゲンを８０％の塩類溶液中に含有するＡＴＭを形成する。Ｐｅｒｍａｃｏｌ（登録商標）は、異物拒絶が最小でありかつ天然コラゲナーゼによる生分解に対して抵抗性であることが認められた。
【０１４６】
[00145]  出発材料に応じて、コラーゲンの粒子はある割合のエラスチンを含有する可能性がある。よって、それらの粒子、およびそれから形成された凝集性コラーゲン性材料は本質的にコラーゲンからなり、場合によっては小割合のエラスチンを含む。
【０１４７】
[00146]  無細胞コラーゲンの粒子は、いずれか適切な方法を用いて形成できる。天然組織材料の元のコラーゲンの線維構築および分子超構造が粒子に保持されていなくてはならない。コラーゲン性組織はそのプロセスで可溶化または変性されないので、それの天然の線維構造は保持されている。要求されるすべては、それらの調製に用いる工程によって前記の生物学的特性および構造特性を備えたマトリックスが得られることである。有用な調製方法には、U.S. Pat. No. 5,397,353および6,936,271、U.S. Published Pat. Application No. 2013/0045923および2013/0267465、ならびにEP1112096に記載されるものが含まれる；それらのすべてを全体として本明細書に援用する。
【０１４８】
[00147]  よって、切断したばかりの天然組織材料を処理してそれから実質的にすべての脂質および脂質残渣を除去し、その後、非線維性の組織タンパク質および細胞要素を除去するための処理をする。脂質抽出は、有機溶媒、たとえばアセトンを用いる溶媒抽出により達成できる。適切な溶媒の限定ではない他の例には、非水性溶媒、たとえばエタノールおよびエーテルが含まれる。
【０１４９】
[00148]  非線維性の組織タンパク質には、糖タンパク質、プロテオグリカン、球状タンパク質など、たとえば細胞外ＡＴＭ成分が含まれる。細胞要素には抗原性タンパク質および酵素、ならびに処理条件から生じる他の細胞残屑が含まれる。天然組織材料のこれらの部分は、タンパク質分解酵素、たとえばトリプシンで処理することにより除去できる。２０℃を超えると、トリプシンによる処理は、ある場合にはコラーゲン線維構造の変化を生じて、より低い物理的強度を生じることが以前に見出された。さらに、低温は調製物における微生物の増殖を抑制する。したがって、２０℃より低い温度でトリプシンによる処理を行なうことが有用である。さらに、２０℃未満ではトリプシンがより安定であり、必要量がより少ない可能性がある。いずれか適切なトリプシン濃度、たとえば約０．０１ｇ／ｌ〜２５ｇ／ｌの範囲の濃度を使用できる。約２．５ｇ／ｌのトリプシンを用いて良好な結果が得られることが認められた。場合により、さらなる処理、たとえば１種類以上の追加酵素、たとえば炭水化物分解酵素による処理を行なってもよい。
【０１５０】
[00149]  得られたコラーゲン性材料を次いで粒子にする；サイズ低減に伴なって出発材料の元のコラーゲン線維構築および分子超構造が破壊されないように注意を払う。粒子は、たとえばボールミルまたはハンマーミルを用いて粉砕またはミリングすることにより製造でき、それを適切な温度に冷却することができる。ミリング前にシート材料を切断して小片にしてもよい。ミリングは乾燥形態（１０％未満の含水率）または凍結水和形態（２０〜８０％の含水率）で実施できる。
【０１５１】
[00150]  無細胞コラーゲン粒子はいずれか適切なサイズであってよい。ある態様において無細胞コラーゲン粒子は約５μｍから約１０００μｍまで、他の態様においては約５０μｍから約５００μｍの範囲の平均直径をもつ。おおよそ１５０μｍの平均直径をもつ無細胞コラーゲン粒子を用いて良好な結果が達成された。
【０１５２】
[00151]  簡単に述べると、ＡＴＭの製造に伴なう工程は、ドナーからの組織（たとえば、ヒトの遺体または前記に挙げた他のいずれかの哺乳動物からのもの；ブタ真皮を含む）の採取、組織を安定化させかつ生化学的分解および構造破壊を避けるための化学処理、それと共に、またはそれに続いて、同様に生物学的機能および構造機能を保存する条件下での細胞除去を含む。同様にＡＴＭの前記の生物学的特性および構造特性を保持するのに必要な条件下で、骨材を場合により凍結保存剤で処理して凍結保存し、場合により凍結乾燥させることができる。凍結または凍結乾燥の後、同様な機能保存条件下で、組織を断片化、たとえば粉末化または微細化して、粒状ＡＴＭを製造することができる。すべての工程を一般に無菌条件下で実施する。
【０１５３】
[00152]  より詳細にU.S. Pat. No. 5,397,353に記載されているＡＴＭを製造するための代表的方法は下記の工程を含む：（ａ）切断したばかりの真皮をアセトンで、１回以上交換して抽出する；（ｂ）真皮を緩衝液または塩類溶液に入れてアセトンを除去する；（ｃ）真皮を次いでトリプシン溶液（ｐＨ７．０〜９．０）で消化して抗原性タンパク質および細胞要素、たとえば毛包および汗腺を除去する；（ｄ）場合により、組織を炭水化物分解酵素、たとえばアミラーゼ、ヒアルロニダーゼまたはノイラミダーゼで処理して、抗原性の多糖類およびムコ多糖類を除去することができる；（ｅ）精製した組織を、ジイソシアネート、たとえばアセトン中０．１％溶液としてのヘキサンジイソシアネートで処理することによって安定化する；（ｆ）アセトンでさらに２回洗浄する；（ｇ）緩衝液または塩類溶液ですすぐ；（ｈ）殺菌剤の存在下で保存するか、あるいはガンマ線照射で滅菌する；そして（ｉ）無菌条件下でパックする。この方法により、ヒトまたは動物の組織に由来する、非吸収性の、実質的に非抗原性のコラーゲン性線維組織調製物が得られ、それは骨傷害の永久修復としての同種−または異種移植に適切であり、その調製物はヒトまたは動物の組織の天然構造および元の構築を保持しており、非線維性の組織タンパク質および糖タンパク質を実質的に含まず、細胞要素を実質的に含まず、脂質および脂質残渣を実質的に含まず、かつ非−細胞毒性であり、その調製物は移植された際に宿主細胞（たとえば、骨芽細胞、破骨細胞など）による再コロニー形成が可能であり、かつ脈管再生される。さらに、非吸収性の、実質的に非抗原性のコラーゲン性線維組織調製物は、抗原性多糖類およびムコ多糖類も実質的に含まない。
【０１５４】
[00153]  本出願のさらなる側面によれば、天然組織材料から無細胞コラーゲン性材料を調製するための方法が提供され、その方法は下記の工程を含む：（ｉ）天然組織材料を有機溶媒で処理する；（ｉｉ）非線維性の組織タンパク質、細胞要素、および脂質または脂質残渣を実質的に含まず、それが由来する天然組織材料の元のコラーゲン線維構築および分子超構造を示す、処理済み材料が得られるように、天然組織材料をタンパク質分解酵素で処理する；（ｉｉｉ）処理済み材料を、コラーゲン線維の断片を含む複数のコラーゲン粒子にする；そして（ｉｖ）凍結乾燥用の懸濁媒体に懸濁したコラーゲン粒子を凍結乾燥する；この方法は、ある側面において、酸および／またはアルカリによるコラーゲン粒子の膨潤を排除する。
【０１５５】
[00154]  本出願の他の側面によれば、複数のコラーゲン粒子から無細胞コラーゲン性材料を調製するための方法が提供され、それらのコラーゲン粒子はコラーゲン線維の断片を含み、処理済み材料から得られたものであり、その処理済み材料は非線維性の組織タンパク質、細胞要素、および脂質または脂質残渣を実質的に含まない材料が得られるように天然組織材料から有機溶媒およびタンパク質分解酵素で処理することにより製造されたものであり、天然組織材料の元のコラーゲン線維構築および分子超構造を示し、その方法は、凍結乾燥用の懸濁媒体に懸濁したコラーゲン粒子を凍結乾燥する工程を含み、その方法は酸および／またはアルカリによるコラーゲン粒子の膨潤を排除する。
【０１５６】
[00155]  ある態様において、ＡＴＭの移植後、約１か月〜約６か月以内に、少なくとも約５０パーセント程度、組織が骨材に浸潤するであろう。他の態様において、ＡＴＭの移植後、約２〜３か月以内に、約７５パーセントの骨材に組織が浸潤するであろう。ある場合には、ＡＴＭは、ＡＴＭの移植後、約６か月以内に、実質的に約９０パーセント以上が組織に埋没し、または包み込まれるであろう。他の場合には、ＡＴＭは、移植後、約９〜１２か月以内に完全に組織に埋没し、または包み込まれるであろう。
【０１５７】
[00156]  ある側面において、本出願のインプラントはＡＴＭ中に均一に配置されたオキシステロールを含むことができ、その際、ＡＴＭは他の供給源、たとえば霊長類、ウシ、ヒツジまたは魚類からの無細胞コラーゲンを含み、ある場合には架橋しており、一方、他の場合には架橋していない。この種類のＡＴＭは外科処置部位への送達のために注射器に入れることができ、あるいは外科処置部位での再水和のために凍結することができる。上記のようにブタコラーゲン以外の供給源から調製した有用な無細胞組織マトリックスも、オキシステロールが均一に配置された（たとえば、分散された）インプラントを形成するために使用できる。これらのＡＴＭから調製したインプラントは、無機粒子を含む他の骨材を、バインダーまたは膨潤性材料と共に、またはそれらを含まずに、含有することができる。ブタコラーゲンを含有するＡＴＭについて、これらのＡＴＭにおいてコラーゲンは架橋していてもよく、架橋していなくてもよい。無細胞性の非ブタコラーゲンから調製したＡＴＭを含有するインプラントは、無細胞ブタコラーゲンを含有するＡＴＭと同様な方法で、すなわち注射器により送達でき、あるいは凍結乾燥し、次いで外科処置部位への送達のために再水和することができる。
【０１５８】
[00157]  ある態様において、前記の実質的に非抗原性のコラーゲン性線維組織調製物のシートから調製したインプラントはブタ真皮に由来するものであってもよい。ある態様において、ブタ真皮に由来する線維性無細胞コラーゲン性組織のシートをポリイソシアネートにより架橋させることができ、それは、ある場合にはヘキサメチレンジイソシアネート（ＨＭＤＩ）である。本出願において記載するインプラントに有用な製品は、Ｐｅｒｍａｃｏｌ（登録商標）、すなわちブタ真皮から調製した生物材料であってペーストとして得られるものである。ブタ真皮は宿主細胞浸潤および脈管再生を支持するので、無細胞コラーゲンの良好な供給源である。Ｐｅｒｍａｃｏｌ（登録商標）が必要とする再水和は最少であるので、Ｐｅｒｍａｃｏｌ（登録商標）およびオキシステロールを含有するインプラントはわずか３０秒で調製できる。Ｐｅｒｍａｃｏｌ（登録商標）は一般にジイソシアネートで架橋され、それによってそれは酵素分解に対してかなり抵抗性になる。
【０１５９】
[00158]  他の態様において、ブタ真皮を含めた天然組織材料に由来する無細胞コラーゲン性材料の固体または半固体粒子が分散された生体適合性キャリヤーを含むインプラントを提供し、その際、無細胞コラーゲン性材料はそれが由来する天然組織材料の元の線維構築および分子超構造を保存しており、無細胞コラーゲン性材料は非線維性の組織タンパク質、糖タンパク質、細胞要素、脂質または脂質残渣を実質的に含まず、無細胞コラーゲン性材料は非−細胞毒性であり、インプラント組成物はペースト、ゲルまたは注入可能な溶液の成分として使用でき、無細胞コラーゲン性材料の粒子は約５０ミクロン〜約５００ミクロンの範囲の粒子サイズをもつ。
【０１６０】
[00159]  他の態様において、無細胞コラーゲン性材料の粒子は、少なくとも５０パーセントの粒子の粒子サイズが平均粒子サイズの３５パーセント以内にある粒度分布をもち、抗原性の多糖類およびムコ多糖類を含まないもの、抗原性の多糖類およびムコ多糖類を実質的に含まないものである可能性がある。種々の態様において、無細胞コラーゲン性材料はある割合のエラスチンを含有する。他の側面において、無細胞コラーゲン性材料は架橋している。特定の実施態様において、生体適合性キャリヤーは塩類溶液、グリセロール、デキストラン溶液、無毒性非抗原性の粘性多糖類、またはその組合わせのうち少なくとも１種類である。特定の側面において、無細胞コラーゲン性材料はインプラント組成物の約１０重量パーセント〜約９０重量パーセントを構成する。
【０１６１】
[00160]  ある態様において、ＡＴＭは無細胞コラーゲンを含有する生体材料を含み、それは骨欠損部内に配置された際に骨格を提供し、それの周囲に患者の新たな骨および／または軟骨が増殖して、標的部位が治癒するのに伴なって次第にキャリヤーＡＴＭに置き換わる。適切なキャリヤーマトリックスの例には下記のものを含めることができるが、それらに限定されない：ＭａｓｔｅｒＧｒａｆｔ（登録商標）ＡＴＭ，製造：Ｍｅｄｔｒｏｎｉｃ  Ｓｏｆａｍｏｒ  Ｄａｎｅｋ，Ｉｎｃ．，テネシー州メンフィス；ＭａｓｔｅｒＧｒａｆｔ（登録商標）パテ，製造：Ｍｅｄｔｒｏｎｉｃ  Ｓｏｆａｍｏｒ  Ｄａｎｅｋ，Ｉｎｃ．，テネシー州メンフィス；Ａｂｓｏｒｂａｂｌｅ  Ｃｏｌｌａｇｅｎ  Ｓｐｏｎｇｅ（“ＡＣＳ”），製造：Ｉｎｔｅｇｒａ  ＬｉｆｅＳｃｉｅｎｃｅｓ  Ｃｏｒｐｏｒａｔｉｏｎ，ニュージャージー州プレインズボロ；ヒドロキシアパタイトでコートしたウシ皮膚コラーゲン線維、たとえばＨｅａｌｏｓ（登録商標），製造：Ｊｏｈｎｓｏｎ  ＆  Ｊｏｈｎｓｏｎ，ＵＳＡ；コラーゲンスポンジ、たとえばＨｅｍｏｓｔａｇｅｎｅ（登録商標），販売：Ｃｏｌｅｔｉｃａ  Ｓ  Ａ，フランス；または、たとえばＨｅｌｉｓａｔ（登録商標），販売：Ｉｎｔｅｇｒａ  Ｌｉｆｅ  Ｓｃｉｅｎｃｅｓ  Ｉｎｃ．，ＵＳＡ；およびＣｏｌｌａｇｒａｆｔ（登録商標）骨グラフトＡＴＭ，製造：Ｚｉｍｍｅｒ  Ｈｏｌｄｉｎｇｓ，Ｉｎｃ．，インディアナ州ウォーソー。
【０１６２】
[00161]  ある態様において、無細胞コラーゲンは可溶性無細胞コラーゲンおよび不溶性無細胞コラーゲン線維の両方を含む。可溶性無細胞コラーゲンと不溶性無細胞コラーゲン線維をまず別個に調製し、次いで混和することができる。可溶性無細胞コラーゲンおよび不溶性無細胞コラーゲン線維は共に、ヒト、ウシ、ヒツジ、魚類またはブタ源を含めた多様な供給源から得ることができる。
【０１６３】
[00162]  特定の態様において、無細胞コラーゲンＡＴＭは、ＡＴＭの０．０４ｇ／ｃｃ〜０．１ｇ／ｃｃのレベルの不溶性無細胞コラーゲン線維、およびＡＴＭの０．０１ｇ／ｃｃ〜０．０８ｇ／ｃｃのレベルの可溶性コラーゲンを含む、成形可能な組成物を含有する。他の態様において、そのような組成物は、ＡＴＭ中の約０．０５〜０．０８ｇ／ｃｃのレベルの不溶性無細胞コラーゲン線維、およびＡＴＭ中の約０．０２〜約０．０５ｇ／ｃｃのレベルの可溶性無細胞コラーゲンを含む。一般に、ＡＴＭは、ＡＴＭ材料の希望する取り扱いおよびインプラント特性に有益に寄与するために、可溶性無細胞コラーゲンの量と少なくとも同等またはより多い量（重量パーセント）の不溶性無細胞コラーゲン線維を含有するであろう。ある態様において、無細胞コラーゲンＡＴＭは、４：１〜１：１、ある場合には約７５：２５から約６０：４０までの重量比で存在する不溶性無細胞コラーゲン線維および可溶性無細胞コラーゲンを含有するであろう。他の態様において、無細胞コラーゲンＡＴＭは不溶性無細胞コラーゲン線維と可溶性無細胞コラーゲンを約７５：２５〜約６５：３５、一態様においては約７０：３０の重量比で含有することができる。
【０１６４】
[00163]  ある態様において、無細胞コラーゲンＡＴＭは無細胞ブタコラーゲンおよび／または非高分子材料を含む。ある態様において、無細胞コラーゲンＡＴＭはオキシステロールの即時放出または持続放出をもたらすことができる生分解性バイオポリマーを含有することができる。たとえば、無細胞コラーゲンＡＴＭはポリエーテルエーテルケトン（ＰＥＥＫ）を含む。ある態様において、無細胞コラーゲンＡＴＭは、１種類以上のポリ（アルファ−ヒドロキシ酸）、ポリグリコリド（ＰＧ）、ポリ（アルファ−ヒドロキシ酸）のポリエチレングリコール（ＰＥＧ）コンジュゲート、ポリオルトエステル（ＰＯＥ）、ポリアスピリン、ポリホスファゲン、コラーゲン、加水分解コラーゲン、ゼラチン、加水分解ゼラチン、加水分解ゼラチンの画分、エラスチン、デンプン、アルファ化デンプン、ヒアルロン酸、キトサン、アルギネート、アルブミン、フィブリン、ビタミンＥアナログ、たとえば酢酸アルファトコフェリル、コハク酸ｄ−アルファトコフェリル、Ｄ，Ｌ−ラクチドもしくはＬ−ラクチド、カプロラクトン、デキストラン、ビニルピロリドン、ポリビニルアルコール（ＰＶＡ）、ＰＶＡ−ｇ−ＰＬＧＡ、ＰＥＧＴ−ＰＢＴコポリマー（ｐｏｌｙａｃｔｉｖｅ）、メタクリレート、ＰＥＯ−ＰＰＯ−ＰＡＡコポリマー、ＰＬＧＡ−ＰＥＯ−ＰＬＧＡ、ＰＥＧ−ＰＬＧ、ＰＬＡ−ＰＬＧＡ、ポロキサマー４０７、ＰＥＧ−ＰＬＧＡ−ＰＥＧトリブロックコポリマー、ＰＯＥ、ＳＡＩＢ(sucrose acetate isobutyrate)（酢酸イソ酪酸スクロース）、ポリジオキサノン、メタクリル酸メチル（ＭＭＡ）、ＭＭＡおよびＮ−ビニルピロリドン、ポリアミド、オキシセルロース、グリコール酸と炭酸トリメチレンのコポリマー、ポリエステルアミド、ポリエーテルエーテルケトン、ポリメタクリル酸メチル、シリコーン、ヒアルロン酸、キトサン、またはその組合わせを含むことができる。
【０１６５】
[00164]  ある態様において、インプラントは完全な生分解性でなくてもよい。たとえば、デバイスはポリウレタン、ポリウレア、ポリエーテル（アミド）、ＰＥＢＡ、熱可塑性弾性オレフィン、コポリエステル、およびスチレン系熱可塑性エラストマー、スチール、アルミニウム、ステンレススチール、チタン、高い非鉄金属含量および低い相対割合の鉄の合金、カーボンデバイス、ガラスデバイス、プラスチック、セラミックス、メタクリレート、ポリ（Ｎ−イソプロピルアクリルアミド）、ＰＥＯ−ＰＰＯ−ＰＥＯ（プルロニック）、またはその組合わせを含むことができる。ある態様において、これらのタイプのマトリックスは一定期間後に除去することが必要である可能性がある。
【０１６６】
[00165]  ある態様において、インプラントは、ポリ（ラクチド−ｃｏ−グリコリド）（ＰＬＧＡ）、ポリラクチド（ＰＬＡ）、ポリグリコリド（ＰＧＡ）、Ｄ−ラクチド、Ｄ，Ｌ−ラクチド、Ｌ−ラクチド、Ｄ，Ｌ−ラクチド−ｃｏ−ε−カプロラクトン、Ｌ−ラクチド−ｃｏ−ε−カプロラクトン、Ｄ，Ｌ−ラクチド−ｃｏ−グリコリド−ｃｏ−ε−カプロラクトン、ポリ（Ｄ，Ｌ−ラクチド−ｃｏ−カプロラクトン）、ポリ（Ｌ−ラクチド−ｃｏ−カプロラクトン）、ポリ（Ｄ−ラクチド−ｃｏ−カプロラクトン）、ポリ（Ｄ，Ｌ−ラクチド）、ポリ（Ｄ−ラクチド）、ポリ（Ｌ−ラクチド）、ポリ（エステルアミド）、またはその組合わせのうち１種類以上を含む少なくとも１種類の無細胞ブタコラーゲンを含む。ある態様において、オキシステロールは無細胞ブタコラーゲン中に封入されている。
【０１６７】
[00166]  ある態様において、ＡＴＭは、約１５，０００から約１５０，０００Ｄａまで、または約２５，０００から約１００，０００ＤａまでのＭＷをもつ１種類以上のポリマー（たとえば、ＰＬＡ、ＰＬＧＡなど）を含む。
【０１６８】
[00167]  ある態様において、インプラントは、ＡＴＭまたはインプラントの総重量を基準として約９９．５％、９９％、９８％、９７％、９６％、９５％、９４％、９３％、９２％、９１％、９０％、８９％、８８％、８７％、８６％、８５％、８４％、８３％、８２％、８１％、８０％、７９％、７８％、７６％、７５％、７４％、７３％、７２％、７１％、７０％、６５％、６０％、５５％、５０％、４５％、３５％、２５％、２０％、１５％、１０％から、約５％（ｗｔ．％）までの、少なくとも１種類の生分解性材料を含む。ある態様において、無細胞ブタコラーゲンはＡＴＭまたはインプラントの総重量を基準として約０．１％から約２０％までの範囲を構成する。ある態様において、無細胞ブタコラーゲンはＡＴＭまたはインプラントの総重量を基準として約０．１％〜約１５％の範囲を構成する。ある態様において、無細胞ブタコラーゲンはＡＴＭまたはインプラントの総重量を基準として１４％、１３％、１２％、１１％、９％、８％、７％、６％から、約５％までを構成する。
【０１６９】
[00168]  ある態様において、無細胞ブタコラーゲンはＡＴＭ中にＡＴＭの約０．０１ｗｔ．％から約５０ｗｔ．％まで、または約８．０ｗｔ．％から約５０ｗｔ．％までの量で存在する。ある態様において、無細胞ブタコラーゲンは約０．１ｗｔ．％から約１０ｗｔ．％まで、約１０ｗｔ．％から約２０ｗｔ．％まで、約２０ｗｔ．％から約３０ｗｔ．％まで、約３０ｗｔ．％から約４０ｗｔ．％まで、または約４０ｗｔ．％から約５０ｗｔ．％までの量で存在する。
【０１７０】
[00169]  マンニトール、トレハロース、デキストラン、ｍＰＥＧおよび／またはＰＥＧをポリマーの可塑剤として使用できる。ある態様において、希望する放出プロファイルを得るためにポリマーおよび／または可塑剤をインプラント上にコートすることもできる。ある態様において、コーティング厚さは薄いもの、たとえば約５、１０、１５、２０、２５、３０、３５、４０、４５または５０ミクロンから、インプラントからのオキシステロールの放出を遅延させるためのより厚いコーティング６０、６５、７０、７５、８０、８５、９０、９５、１００ミクロンまでであってもよい。ある態様において、インプラント上のコーティングの範囲は、インプラントからの放出を遅延させるために、約５ミクロンから約２５０ミクロンまで、または５ミクロンから約２００ミクロンまでの範囲である。
【０１７１】
[00170]  多くの組織工学適用、たとえば脛骨プラトー(tibial plateau)骨折、寛骨臼(acetabular)欠損、長骨粉砕骨折(long bone comminuted fracture)、口腔顎顔面(oral maxillofacial)欠損、脊椎固定、および軟骨軟骨下骨欠損に、圧縮抵抗性が望ましいであろう。圧縮抵抗性コラーゲンマトリックスは新たに形成される骨が適切な体積になるのを促進するのに役立つであろう。
【０１７２】
[00171]  ある態様において、ＡＴＭは圧縮抵抗性であり、そのＡＴＭは骨材が内部に配置されていないコラーゲンマトリックスと比較して、力が加えられた際のサイズ低減または密度増大に抵抗する。種々の態様において、無細胞コラーゲンＡＴＭは、ＡＴＭに力が加えられた際に圧縮に対して一方向または全方向に１０％、１５％、２０％、２５％、３０％、３５％、４０％、４５％、５０％、５５％、６０％、６５％、７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９５％、またはそれ以上、抵抗する。
【０１７３】
骨材
[00172]  ある態様において、インプラントはその中に配置された脱灰骨材を含むことができる。脱灰骨材は、脱灰骨の粉末、チップ、三角プリズム、球体、キューブ、シリンダー、破片、繊維、または不規則もしくはランダムな幾何学的形状をもつ他の形状のものを含むことができる。これらには、たとえば、“実質的に脱灰された”、“部分的に脱灰された”または“完全に脱灰された”皮質骨および海綿骨を含めることができる。これらには表面脱灰も含まれ、その際、骨構造体の表面は実質的に脱灰され、部分的に脱灰され、または完全に脱灰されているが、なお骨構造体の本体は完全に石灰化している。ある態様において、無細胞組織マトリックスは若干の完全石灰化した骨材を含むことができる。骨材の構造は、全骨をミリング、シェービング、カッティングまたは機械加工することにより得ることができる；たとえば、 U.S. Pat. No. 5,899,939に記載；その開示内容全体を本開示に援用する。
【０１７４】
[00173]  ある態様において、骨材は約５０：１から約１０００：１までの線維の平均長さ：平均厚さの比またはアスペクト比をもつ長い脱灰骨線維を含むことができる。全体的外観において、長い脱灰骨線維は丸形、球形、顆粒状、長形、粉末、チップ、繊維、シリンダー、糸、細いストリップ、薄いシート、またはその組合わせであってもよい。長い脱灰骨線維は、実質的に線状の外観であってもよく、あるいはそれらはスプリングに似たコイル状であってもよい。ある態様において、長い脱灰骨線維は不規則な形状のものであり、それにはたとえば直線的な、蛇行した、または弯曲した形状が含まれる。長い骨線維は脱灰されていてもよいが、特定の態様について望ましい場合には元の無機質含量をある程度保持することができる。ある態様において、骨材は長い脱灰骨線維およびチップを含む。ある態様において、骨材は完全脱灰した繊維および表面脱灰したチップを含む。ある態様において、繊維：チップまたは粉末の比率は、約５、１０、１５、２０、２５、３０、３５、４０、または４５の繊維−対−約３０、３５、４０、４５、５０、５５、６０、６５、または７０のチップである。
【０１７５】
[00174]  ある態様において、骨材は脱灰骨ＡＴＭ（ＤＢＭ）繊維および脱灰骨ＡＴＭチップを３０：６０の比率で含む。ある態様において、骨材は脱灰骨ＡＴＭ繊維および脱灰骨ＡＴＭチップを２５：７５〜約７５：２５の繊維：チップの比率で含む。
【０１７６】
[00175]  ある態様において、脱灰骨ＡＴＭに、採取した骨細胞および／または骨組織、たとえば皮質骨、自家骨、同種骨および／または異種骨を播種することができる。ある態様において、ＤＢＭ  ＡＴＭに、採取した軟骨細胞および／または軟骨組織（たとえば、自家、同種、および／または異種軟骨組織）を播種することができる。たとえば、標的組織部位に挿入する前に、ＤＢＭ  ＡＴＭを約３：１、２：１、１：１、１：３または１：２の体積比の移植骨組織／細胞、通常は患者から吸引した骨組織／細胞で湿潤させることができる。用意したＤＢＭ  ＡＴＭに骨組織／細胞を吸収させ、ＡＴＭを手または機械により混練し、それによって柔軟な凝集性コンシステンシーが得られ、それをその後、骨欠損部に充填することができる。ある態様において、ＤＢＭ  ＡＴＭは移植部位に正確に配置して保持することができる展性の水不溶性キャリヤーを提供する。ある態様において、採取した骨および／または軟骨の細胞をＯｘｙ１３３と混合し、ＡＴＭの内部に播種することができる。
【０１７７】
[00176]  ある態様において、骨材はさらに無機質粒子、たとえばセラミックスを含む。ある態様において、インプラント中の粒子は吸収性セラミック、骨、合成された分解性ポリマー、ヒアルロン酸、キトサンまたはその組合わせを含む。ある態様において、粒子は皮質性(cortical)、海綿性(cancellous)、および／または皮質海綿性(cortico-cancellous)、同種、異種またはトランスジェニック骨組織を含む。ある態様において、無機質粒子は、本質的に骨粉、脱灰骨粉、多孔質リン酸カルシウムセラミックス、ヒドロキシアパタイト、リン酸三カルシウム、生物活性ガラスまたはその組合わせからなるか、あるいはそれらからなる。
【０１７８】
[00177]  ある態様において、骨材は吸収性セラミック（たとえば、ヒドロキシアパタイト、リン酸三カルシウム、バイオガラス(bioglass)、硫酸カルシウム）、チロシン由来のポリカーボネートであるポリ（ＤＴＥ−ｃｏ−ＤＴカーボネート）を含むことができ、その際、チロシン−アミノ酸−を介したペンダント基はエチルエステル（ＤＴＥ）もしくは遊離カルボキシレート（ＤＴ）またはその組合わせのいずれかである。
【０１７９】
[00178]  ある態様において、骨材は無機材料、たとえば無機セラミックおよび／または骨代用材を含むことができる。代表的な無機材料または骨代用材には、下記のものが含まれるが、それらに限定されない：アラゴナイト(aragonite)、ダーライト(dahlite)、カルサイト(calcite)、ブルシャイト(brushite)、非晶質炭酸カルシウム、バテライト(vaterite)、ウェッデライト(weddellite)、ウェーウェライト(whewellite)、スツルバイト(struvite)、尿酸塩、フェリハイドレート(ferrihydrate)、フランコライト(francolite)、モノハイドロカルサイト(monohydrocalcite)、マグネタイト、ゲオサイト(goethite)、象牙質、炭酸カルシウム、硫酸カルシウム、リンケイ酸カルシウム、リン酸ナトリウム、アルミン酸カルシウム、リン酸カルシウム、ヒドロキシアパタイト、アルファ−リン酸三カルシウム、リン酸二カルシウム、β−リン酸三カルシウム、リン酸四カルシウム、非晶質リン酸カルシウム、リン酸八カルシウム、ＢＩＯＧＬＡＳＳ（商標）フルオロアパタイト、クロルアパタイト、マグネシウム置換リン酸三カルシウム、炭酸ヒドロキシアパタイト、置換形のヒドロキシアパタイト（たとえば、骨由来のヒドロキシアパタイトを他のイオン、たとえばフルオリド、クロリド、マグネシウム、ナトリウム、カリウムなどで置換することができる）、またはその組合わせもしくは誘導体。
【０１８０】
[00179]  ある態様において、無機セラミックス、たとえばリン酸カルシウムをインプラントに含有させることにより、これは新たな骨を沈着させようとしている細胞へのカルシウムおよびホスフェートの局所供給源として作用するであろう。無機セラミックはインプラントに圧縮抵抗性および耐荷重特性をも付与する。
【０１８１】
[00180]  ある態様において、インプラント中の無機質粒子はリン酸三カルシウムおよびヒドロキシアパタイトを約８０：２０〜約９０：１０の比率で含む。ある態様において、インプラント中の無機質粒子はリン酸三カルシウムおよびヒドロキシアパタイトを約７０：３０〜約９５：５の比率で含む。ある態様において、インプラント中の無機質粒子はリン酸三カルシウムおよびヒドロキシアパタイトを約８５：１５の比率で含む。
【０１８２】
[00181]  ある態様において、骨材は圧縮抵抗性をもたらす無機質粒子を含む。ある態様において、無機質粒子（たとえば、セラミック）はＡＴＭの少なくとも１０％、１５％、２０％、２５％、３０％、３５％、４０％、４５％、５０％、５５％、６０％、６５％、７０％、７５％、８０％、８５％、９０％から、約９５％（重量）までを構成する。ある態様において、粒子は主として任意の形状（たとえば、丸形、球形、長形、粉末、チップ、繊維、シリンダーなど）である。ある態様において、骨材は無機質粒子をＡＴＭの約０．１ｗｔ．％〜約９５ｗｔ．％の量で含む。ある態様において、骨材は無機質粒子をＡＴＭの約５０ｗｔ．％〜約８０ｗｔ．％の量で含む。ある態様において、ＡＴＭはＡＴＭの約５１％、５２％、５３％、５４％、５５％、５６％、５７％、５８％、５９％、６０％、６１％、６２％、６３％、６４％、６５％、６６％、６７％、６８％、６９％、７０％、７１％、７２％、７３％、７４％、７５％、７６％、７７％、７８％から、約７９％（重量）までを構成する。
【０１８３】
[00182]  ある態様において、無機質粒子は骨材の約０．１ｗｔ．％〜約３０ｗｔ．％の量で存在する。ある態様において、無機質粒子はＡＴＭの約０．０１ｗｔ．％〜約５０ｗｔ．％の量で存在する。ある態様において、無機質粒子はＡＴＭの約７．０ｗｔ．％〜約５０ｗｔ．％の量で存在する。ある態様において、無機質粒子は約０．１ｗｔ．％〜約１０ｗｔ．％、約１０ｗｔ．％〜約２０ｗｔ．％、約２０ｗｔ．％〜約３０ｗｔ．％、約３０ｗｔ．％〜約４０ｗｔ．％、または約４０ｗｔ．％〜約５０ｗｔ．％の量で存在する。
【０１８４】
[00183]  ある態様において、粒子の多孔度には０から５０％までが含まれ、ある態様において、粒子の多孔度には５％〜２５％が含まれる。ある態様において、粒子は互いに絡みあってはいないが、互いに接触し、各粒子の一部は骨材中で重なり合って圧縮抵抗性をもたらす。ある態様において、少なくとも５０％、５５％、６０％、６５％、７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９５％、またはそれ以上の粒子がＡＴＭ中で重なり合っている。
【０１８５】
[00184]  ある態様において、粒子はＡＴＭ全体にランダムに分布している。他の態様において、粒子はＡＴＭ全体に均一または均等に分布している。ある態様において、分散剤を用いて粒子をＡＴＭ中に分散させることができる。他の態様において、粒子をポリマー中で撹拌することができ、その機械的撹拌により粒子は希望する分布（たとえば、ランダムまたは均一）に達するまでＡＴＭ中に分布するであろう。
【０１８６】
[00185]  ある態様において、骨材を１種類以上の療法薬、たとえば抗炎症薬、鎮痛薬、骨増殖誘導因子、抗微生物薬、またはその組合わせと混合することができる。骨誘導剤には、骨形態形成タンパク質(Bone Morphogenic Protein)（“ＢＭＰ”）ファミリーの１以上のメンバーが含まれる。ＢＭＰは、内在骨組織に対する骨誘導活性または増殖促進活性をもち、あるいはプロコラーゲン前駆体として機能すると考えられる、タンパク質のクラスである。ＢＭＰファミリーの既知メンバーには下記のものが含まれるが、それらに限定されない：ＢＭＰ−１、ＢＭＰ−２、ＢＭＰ−３、ＢＭＰ−４、ＢＭＰ−５、ＢＭＰ−６、ＢＭＰ−７、ＢＭＰ−８、ＢＭＰ−９、ＢＭＰ−１０、ＢＭＰ−１１、ＢＭＰ−１２、ＢＭＰ−１３、ＢＭＰ−１４（ＧＤＦ−５）、ＢＭＰ−１５、ＢＭＰ−１６、ＢＭＰ−１７、ＢＭＰ−１８、ならびにそのポリヌクレオチドまたはポリペプチド、ならびに成熟ポリペプチドまたはそれをコードするポリヌクレオチド。
【０１８７】
[00186]  骨誘導剤として用いられるＢＭＰには、下記のうち１種類以上が含まれる：ＢＭＰ−１；ＢＭＰ−２；ＢＭＰ−３；ＢＭＰ−４；ＢＭＰ−５；ＢＭＰ−６；ＢＭＰ−７；ＢＭＰ−８；ＢＭＰ−９；ＢＭＰ−１０；ＢＭＰ−１１；ＢＭＰ−１２；ＢＭＰ−１３；ＢＭＰ−１５；ＢＭＰ−１６；ＢＭＰ−１７；またはＢＭＰ−１８；ならびにこれらのＢＭＰのうち１種類以上のいずれかの組合わせ：全長ＢＭＰもしくはそのフラグメント、またはその組合わせを含む；上記に挙げたすべてのＢＭＰのポリペプチド、またはポリペプチドフラグメントをコードするポリヌクレオチドのいずれかとして。単離されたＢＭＰ骨誘導剤を、ポリヌクレオチド、ポリペプチド、全長タンパク質、またはその組合わせとして投与できる。
【０１８８】
[00187]  実際に、好ましい骨誘導因子は組換えヒト骨形態形成タンパク質(recombinant human bone morphogenetic protein)（ｒｈＢＭＰ）である；それらは供給制限なしに入手でき、感染性疾患を伝達しないからである。ある態様において、骨形態形成タンパク質はｒｈＢＭＰ−２、ｒｈＢＭＰ−４、ｒｈＢＭＰ−７、またはそのヘテロダイマーである。
【０１８９】
[00188]  組換えＢＭＰ−２を約０．４ｍｇ／ｍｌ〜約１０．０ｍｇ／ｍｌ、場合により約１．５ｍｇ／ｍｌの濃度で使用できる。しかし、ＢＭＰ−１〜ＢＭＰ−１８と表記される骨形態形成タンパク質を含めたいずれの骨形態形成タンパク質も含まれるものとする。ＢＭＰはＷｙｅｔｈ（マサチュセッツ州ケンブリッジ）から入手でき、ＢＭＰおよびそれらをコードする遺伝子も下記の記載に従って当業者が調製できる：U.S. Pat. No. 5,187,076 to Wozney et al.; U.S. Pat. No. 5,366,875 to Wozney et al.; U.S.Pat. No. 4,877,864 to Wang et al.; U.S. Pat. No. 5,108,922 to Wang et al.; U.S.Pat. No. 5,116,738 to Wang et al.; U.S. Pat. No. 5,013,649 to Wang et al.; U.S.Pat. No. 5,106,748 to Wozney et al.;およびPCT Patent Nos. W093/00432 to Wozney et al.; W094/26893 to Celeste et al.;およびW094/26892 to Celeste et al。前記に従って得られたものまたは骨から単離されたもののいずれであってもすべての骨誘導因子が含まれるものとする。骨形態形成タンパク質を骨から単離するための方法は、たとえば、U.S. Pat. No. 4,294,753 to UristおよびUrist et al., 81 PNAS 371, 1984に記載されている。
【０１９０】
[00189]  前記のほかに、骨材はＴＧＦ−βスーパーファミリーからの１種類以上のメンバーを含有するか、あるいはそれらと混合することができる。たとえば、ＡＴＭはＡＭＨ、ＡＲＴＮ、ＧＤＦｌ、ＧＤＦｌ０、ＧＤＦｌ１、ＧＤＦ１５、ＧＤＦ２、ＧＤＦ３、ＧＤＦ３Ａ、ＧＤＦ５、ＧＤＦ６、ＧＤＦ７、ＧＤＦ８、ＧＤＦ９、ＧＤＮＦ、ＩＮＨＡ、ＩＮＨＢＡ、ＩＮＨＢＢ、ＩＮＨＢＣ、ＩＮＨＢＥ、ＬＥＦＴＹｌ、ＬＥＦＴＹ２、ＭＳＴＮ、ＮＯＤＡＬ、ＮＲＴＮ、ＰＳＰＮ、ＴＧＦＢｌ、ＴＧＦＢ２、ＴＧＦＢ３、ＦＧＦ、塩基性ＦＧＦ、ＶＥＧＦ、インスリン様増殖因子、ＥＧＦ、ＰＤＧＦ、神経増殖因子、またはその組合わせを含有することができる。
【０１９１】
[00190]  骨材は下記のものを含めた療法薬（それらに限定されない）を含有するか、あるいはそれらと混合することができる：ＩＬ−１阻害薬、たとえばＫｉｎｅｒｅｔ（登録商標）（アナキンラ(anakinra)）：それは組換え非グリコシル化形のヒトインターロイキン−１受容体アンタゴニスト（ＩＬ−ｌＲａ）である；またはＡＭＧ  １０８：それはＩＬ−１の作用を遮断するモノクローナル抗体である。骨材は、興奮性アミノ酸、たとえばグルタメートおよびアスパルテート、グルタメートのアンタゴニストまたは阻害薬であってＮＭＤＡ受容体、ＡＭＰＡ受容体、および／またはカイニン酸受容体に結合するものを含めた療法薬含有するか、あるいはそれらと混合することができる。骨材は下記のものを含めた炎症を軽減するための療法薬（それらに限定されない）を含めた療法薬を含有するか、あるいはそれらと混合することができる：インターロイキン−１受容体アンタゴニスト、サリドマイド（ＴＮＦ−α放出阻害薬）、サリドマイドアナログ（マクロファージによるＴＮＦ−α産生を低減する）、キナプリル(quinapril)（ＴＮＦ−αをアップレギュレートするアンギオテンシンＩＩの阻害薬）、インターフェロン、たとえばＩＬ−１１（ＴＮＦ−α受容体発現を調節する）、またはアウリン−トリカルボン酸（ＴＮＦ−αを阻害する）。
【０１９２】
[00191]  骨材は鎮痛薬（それらに限定されない）を含めた療法薬を含有するか、あるいはそれらと混合することができる。鎮痛薬の例には下記のものが含まれるが、それらに限定されない：アセトアミノフェン、トラマドール、リドカイン、ブピバカイン、ロピバカイン、オピオイド鎮痛薬、たとえばブプレノルフィン、ブトルファノール、デキストロモラミド、デゾシン、デキストロプロポキシフェン、ダイアモルフィン、フェンタニル、アルフェンタニル、スフェンタニル、ヒドロコドン、ヒドロモルフォン、ケトベミドン、レボメタジル、レボルファノール、メペリジン、メサドン、モルヒネ、ナルブフィン、アヘン、オキシコドン、パパベレタム、ペンタゾシン、ペチジン、フェノペリジン、ピリトラミド、デキストロプロポキシフェン、レミフェンタニル、スフェンタニル、チリジン、トラマドール、コデイン、ジヒドロコデイン、メプタジノール、デゾシン、エプタゾシン、フルピルチン、またはその組合わせ。
【０１９３】
[00192]  骨材は、抗炎症薬（それらに限定されない）を含めた療法薬を含有するか、あるいはそれらと混合することができる。抗炎症薬の例には下記のものが含まれるが、それらに限定されない：クロニジン、スリンダク、スルファサラジン、ナロキシン(naroxyn)、ジクロフェナク、インドメタシン、イブプロフェン、フルルビプロフェン、ケトプロフェン、アクロフェナク、アロキシプリン、アプロキセン、アスピリン、ジフルニサル、フェノプロフェン、メフェナム酸、ナプロキセン、フェニルブタゾン、ピロキシカム、メロキシカム、サリチルアミド、サリチル酸、デスオキシスリンダク、テノキシカム、ケトロラク、クロニジン、フルフェニサール、サルサレート、サリチル酸トリエタノールアミン、アミノピリン、アンチピリン、オキシフェンブタゾン、アパゾン、シンタゾン、フルフェナム酸、クロニキセリル、クロニキシン、メクロフェナム酸、フルニキシン、コルヒチン、デメコルシン、アロプリノール、オキシプリノール、塩酸ベンジダミン、ジメファダン、インドキソール、イントラゾール、塩酸ミムバン、塩酸パラニレン、テトリダミン、塩酸ベンゾインドピリン、フルプロフェン、イブフェナク、ナプロキソール、フェンブフェン、シンコフェン、ジフルミドン  ナトリウム、フェナモール、フルチアジン、メタザミド、塩酸レチミド、塩酸ネキセリジン、オクタザミド、モリナゾール、ネオシンコフェン、ニマゾール、クエン酸プロキサゾール、テシカム、テシミド、トルメチン、トリフルミデート、フェナメート類（メフェナム酸、メクロフェナム酸）、ナブメトン、セレコキシブ、エトドラク、ニメスリド、アパゾン、金、テポキサリン；ジチオカルバメート、またはその組合わせ。
【０１９４】
[00193]  抗炎症薬にはステロイド類、たとえば下記のものも含まれる：２１−アセトキシプレグネノロン、アルクロメタゾン、アルゲストン、アムシノニド、ベクロメタゾン、ベタメタゾン、ブデソニド、クロロプレドニゾン、クロベタゾール、クロベタゾン、クロコルトロン、クロプレドノール、コルチコステロン、コルチゾン、コルチバゾール、デフラザコルト、デソニド、デスオキシメタゾン、デキサメタゾン、デキサメタゾン  ２１−アセテート、デキサメタゾン  ２１−ホスフェート  二ナトリウム塩、ジフロラゾン、ジフルコルトロン、ジフルプレドネート、エノキソロン、フルアザコルト、フルクロニド、フルメタゾン、フルニソリド、フルオシノロン アセトニド、フルオシノニド、フルオコルチン ブチル、フルオコルトロン、フルオロメトロン、酢酸フルペロロン、酢酸フルプレドニデン、フルプレドニゾロン、フルランドレノリド、プロピオン酸フルチカゾン、ホルモコルタル、ハルシノニド、プロピオン酸ハロベタゾール、ハロメタゾン、酢酸ハロプレドン、ヒドロコルタメート、ヒドロコルチゾン、ロテプレドノール  エタボネート(loteprednol etabonate)、マジプレドン、メドリゾン、メプレドニゾン、メチルプレドニゾロン、フロ酸モメタゾン(mometasone furoate)、パラメタゾン、プレドニカルベート、プレドニゾロン、プレドニゾロン  ２５−ジエチルアミノ−アセテート、リン酸プレドニゾロン  ナトリウム、プレドニゾン、プレドニバル、プレドニリデン、リメキソロン、チキソコルトル、トリアムシノロン、トリアムシノロン  アセトニド、トリアムシノロン ベネトニド(triamcinolon benetonide)、トリアムシノロン  ヘキサアセトニド、またはその組合わせ。
【０１９５】
[00194]  骨材は、スタチン（それらに限定されない）を含めた療法薬を含有するか、あるいはそれらと混合することができる。有用なスタチンの例には下記のものが含まれるが、それらに限定されない：アトルバスタチン、シンバスタチン、プラバスタチン、セリバスタチン、メバスタチン(参照： U.S. Pat. No. 3,883,140, その開示内容全体を本明細書に援用する）、ベロスタチン(シンビノリンとも呼ばれる；参照：U.S. Pat. No. 4,448,784および4,450,171, これらの開示内容全体を本明細書に援用する）、フルバスタチン、ロバスタチン、ロスバスタチンおよびフルインドスタチン（Ｓａｎｄｏｚ  ＸＵ−６２−３２０）、ダルバスタチン(EP Appln. Publn. No. 738510 A2, その開示内容全体を本明細書に援用する）、エプタスタチン、ピタバスタチン、またはその医薬的に許容できる塩類もしくは組合わせ。種々の態様において、スタチンはスタチンの（＋）Ｒおよび（−）−Ｓ鏡像異性体を含むことができる。種々の態様において、スタチンはスタチンの１：１ラセミ混合物を含むことができる。
【０１９６】
[00195]  ある態様において、骨材は抗微生物薬を含有することができる。ある態様において、抗微生物薬は下記のうち１種類以上を含むことができる：トリクロサン（２，４，４’−トリクロロ−２’−ヒドロキシジフェニルエーテルとしても知られている）、クロルヘキシジンおよび下記を含むそれの塩類：酢酸クロルヘキシジン、グルコン酸クロルヘキシジン、塩酸クロルヘキシジン、および硫酸クロルヘキシジン、銀および下記を含むそれの塩類：酢酸銀、安息香酸銀、炭酸銀、クエン酸銀、ヨウ素酸銀、ヨウ化銀、乳酸銀、ラウリン酸銀、硝酸銀、酸化銀、パルミチン酸銀、銀タンパク質、および銀スルファジアジン、ポリミキシン、テトラサイクリン、アミノグリコシド類、たとえばトブラマイシンおよびゲンタマイシン、リファンピシン、バシトラシン、ネオマイシン、クロラムフェニコール、ミコナゾール、キノロン類、たとえばオキソリン酸(oxolinic acid)、ノルフロキサシン、ナリジキシン酸、ペフロキサシン、エノキサシンおよびシプロフロキサシン、ペニシリン類、たとえばオキサシリン、およびピプラシル、ノノキシノール９、フシジン酸、セファロスポリ類、またはその組合わせ。
【０１９７】
[00196]  抗微生物薬の例には下記のものが含まれるが、それらは説明のためのものであってそれらに限定されない：アセダプソン；アセトスルホン  ナトリウム；アラメシン；アレキシジン；アミジノシリン；アミジノシリン  ピボキシル(amidinocillin pivoxil)；アミサイクリン；アミフロキサシン；メシル酸アミフロキサシン；アミカシン；硫酸アミカシン；アミノサリチル酸；アミノサリチル酸ナトリウム；アモキシシリン；アンホマイシン；アンピシリン；アンピシリン  ナトリウム；アパルシリン  ナトリウム；アプラマイシン；アスパルトシン；硫酸アストロマイシン；アビラマイシン；アボパルシン；アジスロマイシン；アズロシリン；アズロシリン  ナトリウム；塩酸ベカンピシリン；バシトラシン；バシトラシン  メチレン  ジサリチレート；亜鉛バシトラシン；バンバーマイシン類；ベンゾイルパス  カルシウム；ベリスロマイシン；硫酸ベータマイシン；ビアペネム；ビニラマイシン；塩酸ビフェナミン；ビスピリチオン  マグスルフェックス(bispyrithione magsulfex)；ビチカシン；硫酸ブチロシン；硫酸カプレオマイシン；カルバドックス；カルベニシリン  二ナトリウム；カルベニシリン  インダニル  ナトリウム；カルベニシリン  フェニル  ナトリウム；カルベニシリン  カリウム；カルモナム  ナトリウム；セファクロル；セファドロキシル；セファマンドール；セファマンドール  ナフエート(cefamandole nafate)；セファマンドール  ナトリウム；セファパロール；セファトリジン；セファザフルル  ナトリウム；セファゾリン；セファゾリン  ナトリウム；セフブペラゾン；セフジニル；セフェピム；塩酸セフェピム；セフェテコル；セフィキシム；塩酸セフメノキシム；セフメタゾール；セフメタゾール  ナトリウム；セフォニシド  一ナトリウム；セフォニシド  ナトリウム；セフォペラゾン  ナトリウム；セフォラニド；セフォタキシム  ナトリウム；セフォテタン；セフォテタン  二ナトリウム；塩酸セフォチアム；セフォキシチン；セフォキシチン  ナトリウム；セフピミゾール；セフピミゾール  ナトリウム；セフピラミド；セフピラミド  ナトリウム；硫酸セフピロム；セフポドキシム  プロキセチル(cefpodoxime proxetil)；セフプロジル；セフロキサジン；セフスロジン  ナトリウム；セフタジジム(ceftazidime)；セフチブテン；セフチゾキシム  ナトリウム；セフトリアキソン  ナトリウム；セフロキシム；セフロキシム  アキセチル(cefuroxime axetil)；セフロキシム  ピボキセチル(cefuroxime pivoxetil)；セフロキシム  ナトリウム；セファセトリル  ナトリウム；セファレキシン；塩酸セファレキシン；セファログリシン；セファロリジン；セファロチン  ナトリウム；セファピリン  ナトリウム；セフラジン；塩酸セトサイクリン；セトフェニコール；クロラムフェニコール；パルミチン酸クロラムフェニコール；パントテン酸クロラムフェニコール複合体；コハク酸クロラムフェニコール  ナトリウム；ホスファニル酸クロルヘキシジン；クロロキシレノール；二硫酸クロルテトラサイクリン；塩酸クロルテトラサイクリン；シノキサシン；シプロフロキサシン；塩酸シプロフロキサシン；シロルマイシン；クラリスロマイシン；塩酸クリナフロキサシン；クリンダマイシン；塩酸クリンダマイシン；塩酸パルミチン酸クリンダマイシ���；リン酸クリンダマイシン；クロファジミン(clofazimine)；クロキサシリン  ベンザチン(cloxacillin benzathine)；クロキサシリン  ナトリウム；クロルヘキシジン、クロキシキン(cloxyquin)；コリスチメテート  ナトリウム；硫酸コリスチン；クメルマイシン；クメルマイシン  ナトリウム；シクラシリン；サイクロセリン；ダルホプリスチン；ダプソン；ダプトマイシン；デメクロサイクリン；塩酸デメクロサイクリン；デメサイクリン；デノフンギン(denofungin)；ジアベリジン；ジクロキサシリン；ジクロキサシリン  ナトリウム；硫酸ジヒドロストレプトマイシン；ジピリチオン；ジリスロマイシン；ドキシサイクリン；ドキシサイクリン  カルシウム；ドキシサイクリン  ホスファテックス(doxycycline fosfatex)；ドキシサイクリン  ヒクレート(doxycycline hyclate)；ドロキサシン  ナトリウム；エノキサシン；エピシリン；塩酸エピテトラサイクリン；エリスロマイシン；エリスロマイシン  アシストレート(erythromycin acistrate)；エリスロマイシン  エストレート(erythromycin estolate)；エチルコハク酸エリスロマイシン；エリスロマイシン  グルセプテート(erythromycin gluceptate)；ラクトビオン酸エリスロマイシン；プロピオン酸エリスロマイシン；ステアリン酸エリスロマイシン；塩酸エタンブトール；エチオナミド；フレオキサシン；フロキサシリン；フルダラニン；フルメキン；ホスホマイシン；ホスホマイシン  トロメタミン；フモキシシリン；フラゾリウム  クロリド(furazolium chloride)；酒石酸フラゾリウム；フシデート  ナトリウム；フシジン酸；ガンシクロビルおよびガンシクロビル  ナトリウム；硫酸ゲンタマイシン；グロキシモナム(gloximonam)；グラミシジン；ハロプロギン；ヘタシリン；ヘタシリン  カリウム；ヘキセジン；イバフロキサシン；イミペネム；イソコナゾール；イセパマイシン；イソニアジド；ジョサマイシン；硫酸カナマイシン；キタサマイシン；レボフラルタドン；レボプロピルシリン  カリウム；レキシスロマイシン；リンコマイシン；塩酸リンコマイシン；ロメフロキサシン；塩酸ロメフロキサシン；メシル酸ロメフロキサシン；ロラカルベフ(loracarbef)；メフェニド；メクロサイクリン；スルホサリチル酸メクロサイクリン；メガロマイシン  カリウム  ホスフェート；メキドックス(mequidox)；メロペネム；メタサイクリン；塩酸メタサイクリン；メテナミン；馬尿酸メテナミン；マンデル酸メテナミン；メチシリン  ナトリウム；メチオプリム；塩酸メトロニダゾール；リン酸メトロニダゾール；メズロシリン；メズロシリン  ナトリウム；ミノサイクリン；塩酸ミノサイクリン；塩酸ミリンカマイシン；モメンシン；モメンシン  ナトリウム；ナフシリン  ナトリウム；ナリジキセート  ナトリウム；ナリジキシン酸；ナタイナイシン(natainycin)；ネブラマイシン；パルミチン酸ネオマイシン；硫酸ネオマイシン；ウンデシレン酸ネオマイシン；硫酸ネチルマイシン；ニュートラマイシン；ニフイラデン(nifuiradene)；ニフラルデゾン(nifuraldezone)；ニフラテル(nifuratel)；ニフラトロン(nifuratrone)；ニフルダジル(nifurdazil)；ニフルイミド(nifurimide)；ニフィウピリノール(nifiupirinol)；ニフルキナゾール；ニフルチアゾール；ニトロサイクリン；ニトロフラントイン；ニトロミド；ノルフロキサシン；ノボビオシン  ナトリウム；オフロキサシ���；オンネトプリム；オキサシリンおよびオキサシリン  ナトリウム；オキシモナム；オキシモナム  ナトリウム；オキソリン酸(oxolinic acid)；オキシテトラサイクリン；オキシテトラサイクリン  カルシウム；塩酸オキシテトラサイクリン；パルジマイシン；パラクロロフェノール；パウロマイシン；ペフロキサシン；メシル酸ペフロキサシン；ペナメシリン；ペニシリン類、たとえばペニシリンｇ  ベンザチン、ペニシリンｇ  カリウム、ペニシリンｇ  プロカイン、ペニシリンｇ  ナトリウム、ペニシリンｖ、ペニシリンｖ  ベンザチン、ペニシリンｖ  ヒドラバミン、およびペニシリンｖ  カリウム；ペンチジドン  ナトリウム；アミノサリチル酸フェニル；ピペラシリン  ナトリウム；ピルベニシリン  ナトリウム；ピリジシリン  ナトリウム；塩酸ピルリマイシン；塩酸ピバンピシリン；パモ酸ピバンピシリン；ピバンピシリン  プロベネート(pivampicilin probenate)；硫酸ポリミキシンｂ；ポルフィロマイシン；プロピカシン；ピラジナミド；ピリチオン亜鉛；酢酸キンデカミン(quindecamine acetate)；キヌプリスチン(quinupristin)；ラセフェニコール；ラモプラニン；ラニマイシン；レロマイシン；レプロマイシン；リファブチン；リファメタン；リファメキシル；リファミド；リファンピン(rifampin)；リファペンチン；リファキシミン；ロリテトラサイクリン；硝酸ロリテトラサイクリン；ロサラマイシン；酪酸ロサラマイシン；プロピオン酸ロサラマイシン；リン酸ロサラマイシン  ナトリウム；ステアリン酸ロサラマイシン；ロソキサシン；ロキサルゾン(roxarsone)；ロキシスロマイシン；サンサイクリン；サンフェトリネム  ナトリウム；サルモキシシリン；サルピシリン；スコパファンギン(scopafungin)；シソマイシン；硫酸シソマイシン；スパルフロキサシン；塩酸スペクチノマイシン；スピラマイシン；塩酸スタリマイシン；ステフィマイシン；硫酸ストレプトマイシン；ストレプトニコジド；スルファベンズ；スルファベンズアミド；スルファセタミド；スルファセタミド  ナトリウム；スルファシチン；スルファジアジン；スルファジアジン  ナトリウム；スルファドキシン；スルファレン；スルファメラジン；スルファメテル；スルファメタジン；スルファメチゾール；スルファメトキサゾール；スルファモノメトキシン；スルファモキソール；スルファニレート亜鉛；スルファニトラン；スルファサラジン；スルファソミゾール；スルファチアゾール；スルファザメット(sulfazamet)；スルフイソオキサゾール；スルフイソオキサゾールアセチル；スルフイソオキサゾール  ジオラミン；スルホミキシン；スロペネム；スルタムリシリン(sultamricillin)；スンシリン  ナトリウム；塩酸タランピシリン；テイコプラニン；塩酸テマフロキサシン；テモシリン；テトラサイクリン；塩酸テトラサイクリン；リン酸テトラサイクリン複合体；テトロキソプリム；チアムフェニコール；チフェンシリン  カリウム；チカルシリン  クレシル  ナトリウム(ticarcillin cresyl sodium)；チカルシリン  二ナトリウム；チカルシリン  一ナトリウム；チクラトン；チオドニウム  クロリド；トブラマイシン；硫酸トブラマイシン；トスフロキサシン；トリメトプリム；硫酸トリメトプリム；トリスルファピリミジン類；トロレアンドマイシン；硫酸トロスペクトマイ��ン；チロスリシン；バンコマイシン；塩酸バンコマイシン；バージニアマイシン；またはその組合わせ。
【０１９８】
[00197]  骨材中の抗微生物薬は、骨材と混合することができる抗ウイルス薬であってもよい。抗ウイルス薬には下記のものが含まれるが、それらに限定されない：ビダラビン、アシクロビル、ファムシクロビル、バラシクロビル、ガンシクロビル、バルガンシクロビル、ヌクレオシド−アナログ逆転写酵素阻害薬（たとえば、ＡＺＴ（ジドブジン）、ｄｄＩ（ジダンソニン）、ｄｄＣ（ザルシタビン）、ｄ４Ｔ（スタブジン）、および３ＴＣ（ラミブジン））、ネビラピン、デラビルジン、プロテアーゼ阻害薬（たとえば、サキナビル、リトナビル、インジナビル、およびネルフィナビル）、リバビリン、アマンタジン、リマンタジン、ノイラミニダーゼ阻害薬（たとえば、ザナミビルおよびオセルタミビル）、プロコナリル、シドホビル、ホスカルネット、および／またはインターフェロン類。
【０１９９】
膨張相
[00198]  ある態様において、インプラントはインプラントの膨潤を容易にするための材料、たとえばバインダーまたは膨張相を含むことができる。膨張相は、流体（たとえば、塩類溶液、水、体液など）に装入した際に膨潤してインプラントの体積を増大させるポリマーを含み、それによってさらにインプラントを経時的に適所に保持する。
【０２００】
[00199]  ある態様において、バインダーまたは膨張相はインプラントの総重量を基準として約０．１％〜約２０％の範囲を構成する。ある態様において、バインダーまたは膨張相はインプラントの総重量を基準として約０．１％〜約１０％の範囲を構成する。ある態様において、バインダーまたは膨張相はインプラントの総重量を基準として０．１％、０．２５％、０．５％、０．７５％、１％、２％、３％、４％、５％、６％、７％、８％、９％から、約１０％までを構成する。
【０２０１】
[00200]  ある態様において、バインダーまたは膨張相は流体（水、塩類溶液、体液など）と接触した際に膨潤するポリマー、モノマー、デンプン、ガム、ポリ（アミノ酸）、またはその組合わせを含む。種々の態様において、膨潤量は５から１００パーセントまで、５から４０パーセントまで、または５から２０パーセントまでの範囲であってもよい。最大膨潤に達する時間は、インプラントの位置および希望する特性に応じて変動する可能性がある。実際に、最大膨潤に達する時間は５日、３日、２日の期間内、または２４時間の期間内に起きる可能性がある。
【０２０２】
[00201]  適切な膨張性材料には、限定ではなく、たとえば下記のものを含めることができる：ヒドロキシプロピルセルロース、ヒドロキシプロピルメチルセルロース、ヒドロキシエチルメチルセルロース、カルボキシメチルセルロース、ヒドロキシエチルセルロース、およびその塩類、Ｃａｒｂｏｐｏｌ、ポリ（ヒドロキシエチルメタクリレート）、ポリ（メトキシエチルメタクリレート）、ゼラチン、ポリ（メトキシエトキシ−エチルメタクリレート）、ポリメタクリル酸メチル（ＰＭＭＡ）、メタクリル酸メチル（ＭＭＡ）、ポリビニルアルコール、プロピレングリコール、ＰＥＧ  ２００、ＰＥＧ  ３００、ＰＥＧ  ４００、ＰＥＧ  ５００、ＰＥＧ  ５５０、ＰＥＧ  ６００、ＰＥＧ  ７００、ＰＥＧ  ８００、ＰＥＧ  ９００、ＰＥＧ  １０００、ＰＥＧ  １４５０、ＰＥＧ  ３３５０、ＰＥＧ  ４５００、ＰＥＧ  ８０００、またはその組合わせ。ある態様において、バインダーまたは膨張相はゲル化性ポリマーを含み、それには下記のものが含まれるが、それらに限定されない：セルロース系ポリマー、ビニルポリマー、たとえばポリビニルピロリドン；アクリル系ポリマーおよびコポリマー、たとえばアクリル酸ポリマー、メタクリル酸コポリマー，アクリル酸エチル−メタクリル酸メチルコポリマーなど；またはその混合物。
【０２０３】
[00202]  種々の実施態様において、本出願に記載するインプラントはさらに賦形剤、希釈剤、生分解性ポリマー、膨潤剤、増殖因子、抗生物質、可溶化剤、安定剤、増量剤、抗酸化剤または結合剤を含む。
【０２０４】
[00203]  バインダーまたは膨張相が含むことができる膨潤性材料の限定ではないリストには下記のものを含めることができる：ポリビニルアルコール（ＰＶＡ）、親水性コモノマー、たとえばＡＭＰＳで改質したＰＶＡ、迅速架橋基、たとえばＮＡＡＡＤで修飾したＰＶＡ、ポリビニルピロリン（ＰＶＰ）で修飾したＰＶＡ、カルボキシメチルセルロース、ポリエチレングリコール（ＰＥＧ）、ポリ（ビニルエーテル）、ＰＶＡおよびＰＥＧのコポリマー、ポリプロピレングリコール（ＰＰＧ）、ＰＥＧおよびＰＰＧのコポリマー、ＰＶＡまたはＰＰＧのコポリマー、ポリアクリロニトリル、ハイドロコロイド、たとえば寒天、アルギネート、コラーゲン、エラスチン，キチン、キトサン、ゼラチン、糖、マンニトールなど。種々の態様において、膨潤性材料にはたとえば下記のものが含まれる：ポリ（Ｎ−イソプロピルアクリルアミド−ｃｏ−アクリル酸）−ポリ（Ｌ−乳酸）（ＮＡＬ）；ポリ（Ｎ−イソプロピルアクリルアミド）（ＰＮＩＰＡＭ）が他のポリマー、たとえばカルボキシメチルセルロース（ＣＭＣ）コポリマーまたはポリマーに架橋したもの（ブロックコポリマーおよび末端官能化ポリマー、複合材料を含む）；あるいは感熱性ポリ（２−エトキシエチルビニルエーテル）および／またはポリ（ヒドロキシエチルビニルエーテル）を含有するコポリマー、および／または（ＥＯＶＥ２００−ＨＯＶＥ４００）、そのゾル−ゲル転移温度は２０．５℃である。膨潤性材料は、種々の態様において、組織および／または滑膜腔内へのオキシステロールの放出を制御するために使用できる。
【０２０５】
[00204]  ある態様において、バインダーまたは膨張相はヒアルロン酸を含有する。ある態様において、バインダーまたは膨張相はグリコサミノグリカンを含有する。限定ではないグリコサミノグリカンの例には、コンドロイチン硫酸、デルマタン硫酸、ケラチン硫酸、ヘパリン、ヘパラン硫酸、およびヒアルロナンが含まれる。ある態様において、バインダーまたは膨張相はマンニトール、ＰＥＧ、アルギン酸マグネシウムまたはグリセロールを含有する。
【０２０６】
[00205]  ポリマーは、架橋した、または軽度に架橋した親水性ポリマーであってもよい。これらのポリマーは非イオン性、カチオン性、双性イオン性、またはアニオン性であってもよいが、種々の態様において、膨潤性ポリマーはカチオン性または非イオン性である。種々の態様において、膨潤性ポリマーは多数の酸官能基、たとえばカルボン酸基またはその塩類を含むことができる。本発明に使用するのに適したそのようなポリマーの例には、重合性の酸含有モノマーまたは重合後に酸基に変換できる官能基を含むモノマーから製造されるものが含まれる。そのようなポリマーの例には、多糖ベースのポリマー、たとえばカルボキシメチルデンプンおよびセルロース、ならびにポリ（アミノ酸）ポリマー、たとえばポリ（アスパラギン酸）も含まれる。吸収性ポリマーの製造に際して、ある非酸モノマーも通常は少量含有させることができる。そのような非酸モノマーには、たとえば下記のタイプの官能基を含むモノマーが含まれる：カルボン酸またはスルホン酸のエステル、ヒドロキシル基、アミド基、アミノ基、ニトリル基、第四級アンモニウム塩基、およびアリール基（たとえば、フェニル基、たとえばスチレンモノマーから誘導されるもの）。可能性がある他の非酸モノマーには、不飽和炭化水素、たとえばエチレン、プロピレン、１−ブテン、ブタジエン、またはイソプレンが含まれる。
【０２０７】
[00206]  ある態様において、バインダーまたは膨張相は水性流体中で水和された後に易透過性になることができる物質を含む。そのような物質には、多糖類、たとえばゼラチン、サッカロース、ソルビトール、マンナン、ヒアルロン酸、ポリアミノ酸、ポリアルコール、ポリグリコールなどが含まれる。上記のほか、膨潤性ポリマーはさらに他の賦形剤、たとえば滑沢剤、流動促進剤、可塑剤、および粘着防止剤を含有することもできる。たとえば、バインダーまたは膨張相はさらにポリエチレングリコール、ポリビニルピロリドン、タルク、ステアリン酸マグネシウム、ベヘン酸グリセリル、ステアリン酸、または二酸化チタンを含有することができる。
【０２０８】
[00207]  種々の態様において、バインダーまたは膨張相材料の粒度分布は、約１０マイクロメートル、１３マイクロメートル、８５マイクロメートル、１００マイクロメートル、１５１マイクロメートル、２００マイクロメートル、およびそれらの間のすべての部分範囲であってもよい。ある態様において、少なくとも７５％の粒子が約１０マイクロメートルから約２００マイクロメートルまでのサイズをもつ。ある態様において、少なくとも８５％の粒子が約１０マイクロメートルから約２００マイクロメートルまでのサイズをもつ。ある態様において、少なくとも９５％の粒子が約１０マイクロメートルから約２００マイクロメートルまでのサイズをもつ。ある態様において、すべての粒子が約１０マイクロメートルから約２００マイクロメートルまでのサイズをもつ。ある態様において、少なくとも７５％の粒子が約２０マイクロメートルから約１８０マイクロメートルまでのサイズをもつ。ある態様において、少なくとも８５％の粒子が約２０マイクロメートルから約１８０マイクロメートルまでのサイズをもつ。ある態様において、少なくとも９５％の粒子が約２０マイクロメートルから約１８０マイクロメートルまでのサイズをもつ。ある態様において、すべての粒子が約２０マイクロメートルから約１８０マイクロメートルまでのサイズをもつ。
【０２０９】
凍結保存および凍結乾燥
[00208]  脱細胞処理の後、組織を凍結（たとえば、凍結保存）し、他の場合には凍結乾燥(freeze-driedまたはlyophilized)することができる。凍結前に、組織を凍結保存溶液中でインキュベートすることができる。この溶液は一般に、凍結に際して起きる可能性がある構造ＡＴＭに対する氷晶損傷を最小限に抑えるために１種類以上の凍結保護剤を含有する。有用な凍結保護剤の例には、限定ではなく、ジメチルスルホキシド（ＤＭＳＯ）、デキストラン、スクロース、１，２−プロパンジオール、グリセロール、ソルビトール、フルクトース、トレハロース、ラフィノース、プロピレングリコール、２、３  ブタンジオール、ヒドロキシエチルデンプン、ポリビニルピロリドン（ＰＶＰ）、プロリン（または他のタンパク質安定剤）、ヒト血清アルブミンまたはその組合わせが含まれる。組織を凍結乾燥させる場合、溶液は一般に、構造損傷を最小限に抑えるために１以上の乾燥保護成分も含有し、凍結に際して膨張または収縮のいずれも受けない有機溶媒と水の組合わせを含有することができる。凍結保護剤と乾燥保護剤は同一であるか、または１種類以上の物質である可能性がある。組織が凍結乾燥しないようであれば、それを（無菌容器に入れて）約−８０℃のフリーザーに入れることにより、またはそれを無菌の液体窒素に投入することにより凍結させ、次いで使用するまで−１６０℃より低い温度で保存することができる。
【０２１０】
[00209]  いずれか適切な凍結乾燥用の懸濁媒体を使用できる。たとえば、凍結乾燥用の懸濁媒体は水または水性媒体、たとえば塩類溶液を含むことができる。ある態様において、コラーゲン膨潤レベルの酸またはアルカリを含有する凍結乾燥用の懸濁媒体の使用を含むことができる。他の態様において、コラーゲン膨潤レベルの酸またはアルカリを含有する凍結乾燥用の懸濁媒体の使用は、コラーゲン粒子の線維構築および分子超構造に対する損傷を避けるために除外される可能性がある。たとえば、約５〜１２の範囲のｐＨをもつ凍結乾燥用の懸濁媒体を架橋した無細胞コラーゲン粒子の懸濁に使用でき、それに対し、架橋していない無細胞コラーゲン粒子については凍結乾燥用の懸濁媒体は約６〜８の範囲のｐＨをもつことができる。
【０２１１】
[00210]  無細胞コラーゲン粒子を凍結乾燥用の懸濁媒体に種々の濃度範囲で懸濁することができる。種々の態様において、凍結乾燥用の懸濁媒体に懸濁した無細胞コラーゲン粒子の濃度は１０〜８０％（ｗ／ｖ）の範囲であるが、他の濃度も使用できる。この範囲の上限では、凍結乾燥媒体中の無細胞コラーゲン粒子の懸濁液は比較的濃厚なペースト状のコンシステンシーをもつ。
【０２１２】
[00211]  このプロセスは場合により、凍結乾燥用の懸濁媒体中における無細胞コラーゲン粒子の懸濁液を混合する工程を含むことができる。これにより凍結乾燥用の懸濁媒体中における無細胞コラーゲン粒子の均一な分布が確実になる。ただし、無細胞コラーゲンの損傷を避けるために、過酷な機械的混合処理、たとえばホモジナイゼーションまたはブレンディングを避けるべきである。
【０２１３】
[00212]  無細胞コラーゲン粒子の懸濁液を、凍結乾燥前にたとえば成形、付形またはキャストして希望する形状にすることができる。多くの実施態様において、凍結乾燥工程に際して、凍結乾燥用の懸濁媒体およびそれに懸濁された無細胞コラーゲン粒子を適切な型内に保持する。したがって、このプロセスは、予め定めた形状の無細胞コラーゲン性材料の加工のために使用でき、その形状は異なる型の使用によって容易に変更できる。適切な形状の例には、シート、プラグ、ブロック、くさび、ビーズ、ロープまたはその変形が含まれる。
【０２１４】
[00213]  ＡＴＭを凍結保存溶液中でのインキュベーション後に凍結および凍結乾燥させる予定であれば、その組織を、水蒸気に対しては透過性であるけれども細菌に対しては不透過性である無菌容器、たとえば水蒸気透過性のパウチ、またはガラスバイアル内にパッケージすることができる。有用なパウチの一方側は医療用の多孔質ＴＹＶＥＫ（登録商標）膜、すなわちＤｕＰｏｎｔ  Ｃｏｍｐａｎｙ（デラウェア州ウィルミントン）の商標製品からなる。この膜は水蒸気に対しては多孔性であり、細菌および塵埃に対しては不浸透性である。ＴＹＶＥＫ（登録商標）膜は一方側を開放状態のままヒートシールして不透過性ポリエチレン積層シートにされ、よって両側パウチ(two-sided pouch)を形成している。開放パウチを使用前に照射（たとえば、γ線照射）により滅菌する。組織を無菌パウチに無菌的に入れる（開放側を通して）。開放側を次いで無菌的にヒートシールしてパウチを閉じる。パッケージされた組織は、以後、後続の加工工程全体を通して微生物汚染から保護される。
【０２１５】
[00214]  種々の態様において、無細胞コラーゲン性材料にさらに物理的強度を付与し、かつ創傷治癒環境に存在する可能性がある消化酵素に対する抵抗性を高めるために、架橋を実施することができる。意外にも、架橋した無細胞コラーゲンの粒子から形成された凍結乾燥した無細胞コラーゲン性材料は、架橋していない無細胞コラーゲン粒子から形成された対応する無細胞コラーゲン性材料と比較して改善された柔軟性をもつことが認められた。これは創傷ケアに無細胞コラーゲン性材料を使用するために有益である。よって、種々の態様において無細胞コラーゲン粒子は架橋される。
【０２１６】
[00215]  種々の態様において、架橋剤にはポリイソシアネート、ある場合にはジイソシアネートが含まれる。多官能性イソシアネートは種々のタンパク質鎖のアミノ基またはヒドロキシル基と反応して、無細胞コラーゲンの元の構築を維持した状態で安定構造をもちかつ酵素攻撃に対して抵抗性である材料を形成する。抗原性は無細胞コラーゲンのタンパク質鎖のアミノ基と関連し、アミノ基をイソシアネートと反応させるとこれらの基に関連する抗原性がいずれも排除されることが知られている。 特定の側面において、ジイソシアネート類には脂肪族、芳香族および脂環式ジイソシアネート、たとえばそれぞれ１，６−ヘキサメチレンジイソシアネート、トルエン  ジイソシアネート、４，４’−ジフェニルメタンジイソシアネート、および４，４’−ジシクロヘキシルメタンジイソシアネートが含まれる。他の側面において、有用なジイソシアネートはヘキサメチレンジイソシアネート（ＨＭＤＩ）である。カルボジイミド系架橋剤、たとえば塩酸１−エチル−３−［３−ジメチルアミノプロピル］カルボジイミド（ＥＤＣ）も使用できる。
【０２１７】
[00216]  無細胞コラーゲン粒子の架橋度は多様であってよい。有用なことに、これにより無細胞コラーゲン性材料が使用中に吸収または分解される速度を制御するメカニズムが提供される。分解に対する抵抗性は、架橋度が増大するのに伴なって増大する。
【０２１８】
[00217]  たとえば、無細胞コラーゲン粒子の架橋はＨＭＤＩを用いて実施できる。特定の態様において、ＨＭＤＩを無細胞コラーゲン５０ｇ当たり約０．０１ｇ〜０．５ｇの濃度で使用できる。濃度が高すぎれば、それは過剰架橋および異物反応を生じる可能性がある。架橋は種々の範囲の期間実施できる。たとえば、無細胞コラーゲンを約１時間〜約３日間、架橋剤に曝露することができる。一般に架橋は少なくとも１２時間、ある場合には少なくとも２０時間、実施される。架橋度を調整するために架橋条件をルーティンに変更できることは理解されるであろう。
【０２１９】
[00218]  ある態様において、凍結乾燥したインプラントはステロール、たとえば有効量のＯｘｙ１３３を含む。無細胞ブタコラーゲン、骨材およびオキシステロールを含有するスラリーを凍結乾燥または凍結する。無細胞ブタコラーゲン、骨材およびオキシステロールを含有するスラリーを互いに混和してスラリーを形成するために、スラリーにいずれか適切な液体を使用できる。適切な液体には、たとえば水性調製物、たとえば水、塩類溶液（たとえば、生理食塩水）、糖溶液、またはその組合わせが含まれる。
【０２２０】
[00219]  より具体的には、凍結乾燥インプラント配合物を一般にまずスラリーとして調製し、次いでトレーに入れて凍結および凍結乾燥させる。前−凍結乾燥に必要な総液体体積は、後−凍結乾燥に必要な液体の量と等しいか、またはそれより多い可能性がある。
【０２２１】
[00220]  凍結乾燥プロセスは、一般に、制御された条件下で凍結インプラント配合物から水を昇華させることを含む。凍結乾燥は、凍結乾燥または真空乾燥に用いられる標準的装置を用いて実施できる。充填および仕上げに用いる装置および設備に応じてサイクルを変更できる。
【０２２２】
[00221]  ある態様において、まず、ある範囲の温度下の凍結乾燥チャンバー内で、Ｏｘｙ１３３を含めたインプラント成分を含有するスラリーを希望する形状の型に入れ、次いでスラリーの凝固点より十分に低い温度を、一般に数時間施す。多くの場合、温度は約−４０℃以下で少なくとも２時間である。凍結が完了した後、凍結乾燥チャンバーおよび凝縮器を真空ポンプにより排気する；凝縮器表面は循環冷媒で予め冷却されている。凝縮器はスラリーの凝固点以下、約−４０℃にまで、ある場合には約−５０℃以下にまで、他の場合には約−６０℃以下にまで、冷却されているであろう。さらに、約５０ｍＴｏｒｒ〜約６００ｍＴｏｒｒ、ある場合には約５０〜約１５０ｍＴｏｒｒの圧力が得られるまで、チャンバーの排気を継続すべきである。
【０２２３】
[00222]  凍結乾燥インプラントを次いで真空下でチャンバーおよび凝縮器内において加温する。これは通常は、約５０ｍＴｏｒｒ〜約６００ｍＴｏｒｒの範囲の圧力での凍結乾燥プロセスに際して凍結乾燥機内の凍結乾燥インプラントを収容した型が置かれている棚を加温することにより実施されるであろう。加温プロセスは、場合により数時間かけてきわめて緩徐に行なわれるであろう。たとえば、温度をまず約−３０℃から約−１０℃にまで高め、約１０〜７０時間維持すべきである。さらに、凍結乾燥インプラントを凍結温度から約２５℃〜−４０℃にまで、３０〜１９２時間かけて上昇させることができる。完全乾燥は真空、凝縮器温度および凍結乾燥インプラント棚の温度の安定化により達成できる。最初の乾燥の後、凍結乾燥インプラントの温度を約２５℃〜−４０℃に高め、約５〜４０時間維持することができる。乾燥サイクルが完了すると、無菌の乾燥窒素ガス（またはそれと同等のガス）でチャンバー内の圧力を徐々に大気圧（またはそれよりわずかに低い）まで放圧することができる。
【０２２４】
[00223]  ある態様において、凍結乾燥の後、インプラントは約９５から約９９．５％までの無水率である。種々の態様において、インプラントは約９５、９５．５、９６、９６．５、９７、９７．５、９８、９８．５、９９、または約９９．５％の無水率である。ある態様において、インプラントは凍結乾燥後に約０．５％〜約５％の残留含水率をもつ。種々の態様において、インプラントは凍結乾燥後に約０．５、１、１．５、２、２．５、３、３．５、４、４．５、または５％の残留含水率をもつ。凍結乾燥インプラントは安定であり、広範囲の温度で保存できる。凍結乾燥インプラントは３０℃以下で、たとえば４℃に冷却して、または室温（たとえば、おおよそ２５℃）で保存できる。
【０２２５】
[00224]  凍結乾燥インプラントは安定なインプラントであり、それは構成した後に成形可能なインプラントを作成してそれを骨欠損部またはその付近に移植するための好都合な方法である。Ｏｘｙ１３３の凍結乾燥インプラントは一般に、使用するために水溶液を添加して凍結乾燥インプラントを再水和することにより再構成される。凍結乾燥インプラントを再構成するためには、広範な水溶液、たとえば生理的に許容できる水、生理食塩水、塩化ナトリウム、デキストロース、乳酸リンゲル液、リン酸緩衝生理食塩水（ＰＢＳ）、血液、骨髄穿刺液、骨髄画分、またはその組合わせを使用できる。
【０２２６】
作成方法
[00225]  ある態様において、インプラントは、約２０ｗｔ．％から約９０ｗｔ．％までの量のオキシステロールをＡＴＭまたは無細胞ブタコラーゲンに添加して混合物を形成することにより作成され、無細胞ブタコラーゲンはインプラントの総重量を基準として約０．１ｗｔ．％〜約２０ｗｔ．％の量である。他の態様において、その混合物に多孔質セラミック粒子を添加してインプラントを形成し、多孔質セラミック粒子はインプラントの総重量を基準として約３０ｗｔ．％〜約９９．５ｗｔ．％の量である。ある態様において、混合物はスラリー、パテまたはベーストを形成する。
【０２２７】
[00226]  ある態様において、インプラントの製造に際し、ＡＴＭ材料の混合物（たとえば、無細胞コラーゲンおよびオキシステロール）を骨材および液体と組み合わせて材料を湿潤させると、スラリー、パテまたはペーストが約３０秒で形成される。いずれか適切な液体を使用でき、それにはたとえば水性調製物、たとえば水、塩類溶液（たとえば、生理食塩水）、糖溶液、プロトン性有機溶媒、もしくは液状ポリヒドロキシ化合物、たとえばグリセロールおよびグリセロールエステル、またはその混合物が含まれる。液体は、たとえば凍結乾燥前の混合組成物の約５〜約７０重量パーセントを構成することができる。湿潤すると、インプラントはスラリー状で成形可能または流動性になり、次いである場合には凍結乾燥することができる。
【０２２８】
[00227]  製造の一態様において、無細胞コラーゲン混合物を、Ｐｅｒｍａｃｏｌ（登録商標）ペースト、オキシステロール（たとえば、Ｏｘｙ１３３）、および液体と、望ましくは水性調製物と組み合わせて、成形可能な凝集性マスを形成することができる。過剰の液体はいずれか適切な手段で除去でき、それにはたとえば凝集性マスを液体透過性の鋳型または型に適用し、過剰の液体を排出させることによるものが含まれる。
【０２２９】
[00228]  ある態様において、インプラントはＰｅｒｍａｃｏｌ（登録商標）ペーストである細胞コラーゲンおよびオキシステロールを凝集性マスが形成されるまで混合することにより形成される。他の側面において、骨材、Ｐｅｒｍａｃｏｌ（登録商標）ペーストおよびオキシステロールを湿潤させ、混合用注射器または類似のデバイス内で混合する。
【０２３０】
[00229]  ある態様において、ＡＴＭ、骨材および／またはオキシステロールの混合物を成形して、インプラントの形状にする。ある例ではＡＴＭに圧縮力を適用することを含む成形の前、途中または後に、無細胞ブタコラーゲンに１以上の追加操作、たとえば加熱、凍結乾燥および／または架橋を施すことができる。
【０２３１】
[00230]  架橋は付形したＡＴＭの強度を改善するために採用できる。あるいは、ＡＴＭの表面を架橋して多孔質内部の細孔のサイズを低下させ、それによって多孔質内部より低い透過性および／または低い多孔度のＡＴＭ外部を形成することができる。架橋は、たとえば化学反応、エネルギー、たとえば放射エネルギー（たとえば、ＵＶ線またはマイクロ波エネルギー）の適用、乾燥および／または加熱、ならびに色素仲介による光酸化、デヒドロサーマル処理(dehydrothermal treatment)、酵素処理その他により達成できる。
【０２３２】
[00231]  ある態様において、化学的架橋剤を用いる。適切な架橋剤の例には、２官能性または多官能性の反応基を含み、ＡＴＭと反応するものが含まれる。化学的架橋はＡＴＭ材料を化学的架橋剤に曝露することによって導入でき、それは化学的架橋剤の溶液と接触させることまたは化学的架橋剤の蒸気に曝露することにのいずれかよる。この接触または曝露は、成形操作の前、途中または後に行なうことができる。いずれの場合も、最終的な移植可能ＡＴＭの性能またはアクセプタビリティー(acceptability)にとって必要または望ましいならば、得られる材料を次いで洗浄して、残存量の化学的架橋剤を実質的にすべて除去することができる。
【０２３３】
[00232]  適切な化学的架橋剤には下記のものが含まれる：モノ−およびジアルデヒド：グルタルアルデヒドおよびホルムアルデヒドを含む；ポリエポキシ化合物、たとえばグリセロールポリグリシジルエーテル、ポリエチレングリコールジグリシジルエーテル、ならびに他のポリエポキシおよびジエポキシグリシジルエーテル；タンニング剤：多価金属酸化物、たとえば二酸化チタン、二酸化クロム、二酸化アルミニウム、ジルコニウム塩、ならびに有機タンニンおよび他の植物由来フェノールオキシドを含む；コラーゲン中のカルボキシル基をエステル化し、続いてヒドラジドと反応させて活性アシルアジド官能基を形成するのための化学物質；ジシクロヘキシルカルボジイミドおよびそれの誘導体ならびに他のヘテロ２官能性架橋剤；ヘキサメチレンジイソシアネート（ＨＭＩＤ）；および／またはグルコースを含めた糖類もＡＴＭ材料を架橋するであろう。
【０２３４】
[00233]  ある態様において、マトリックスはオキシステロールを無細胞コラーゲンなどのポリマースラリーと混合し、混合物を成形鋳型に注入することにより形成される。この複合材料混合物を凍結乾燥し、場合により化学架橋させ、切断して希望する最終形状、ある場合にはストリップにする。
【０２３５】
[00234]  ある態様において、オキシステロールを溶解し、Ｐｅｒｍａｃｏｌ（登録商標）ペースト中に存在する無細胞ブタコラーゲンと混合する。ある態様において、オキシステロールを有機溶媒（すなわち、エタノール）中に、または場合により補助溶媒（すなわち、ＰＥＧ）を用いて溶解する。有機溶媒の適切な例には、テトラヒドロフラン、ジエチルエーテル、ジクロロメタン，酢酸エチル、アセトン、ｎ，ｎ−ジメチルホルムアミド、アセトニトリル、ジメチルスルホキシド、アンモニア、ｔ−ブタノール、ｎ−プロパノール、エタノール、メタノール、酢酸またはその組合わせが含まれる。ある態様において、オキシステロールを２５：７５〜７５：２５の比率で溶媒と混合することができる。ある態様において、オキシステロールを５０：５０の比率で溶媒と混合して、オキシステロールの溶液または懸濁液を形成し、それを次いでＰｅｒｍａｃｏｌ（登録商標）ペーストおよび／または骨材に添加することができる。
【０２３６】
[00235]  たとえば、オキシステロールがＯｘｙ１３３であれば、それは一般に水にわずかに可溶性または不溶性である。Ｏｘｙ１３３を非水性溶媒、たとえばエタノールに溶解し、混合して溶液または懸濁液にすることができる。ある態様において、Ｏｘｙ１３３および溶媒をフィルター（たとえば、０．２２ミクロン）に通すことによりＯｘｙ１３３を濾過することができる。これにより、細菌および他の大型粒状物が組成物から除去されるであろう。組成物中に用いるＯｘｙ１３３を溶媒および他の賦形剤と混合する前に微細化することができる。種々の態様において、Ｏｘｙ１３３の粒子サイズは約１ミクロンから２５０ミクロンまでの範囲であってもよい。ある態様において、Ｏｘｙ１３３は約５ミクロンから約１００ミクロンまで、または約２０から５０ミクロンまでの粒子サイズをもつことができる。溶液または懸濁液状のＯｘｙ１３３を無細胞ブタコラーゲンおよび／またはセラミック粒子のスラリーに添加し、混合し、次いで乾燥させることができる。
【０２３７】
[00236]  前記インプラントを用いて、標的組織部位の骨および／または軟骨、たとえば傷害から生じたもの、外科処置、感染、悪性疾患の過程で生じた欠損部、または発生奇形を修復することができる。前記インプラントは多種多様な整形外科、歯周、神経外科、口腔および顎顔面外科の措置に使用できる：たとえば、単純および／または複雑骨折および／または偽関節の修復；外部および／または内部固定；関節再構、たとえば関節固定(arthrodesis)；全関節形成(general arthroplasty)；股関節のカップ関節形成；大腿骨および上腕骨頭置換；大腿骨頭表面置換および／または総関節置換(total joint replacement)；脊椎固定および内固定を含めた脊柱修復；腫瘍外科処置、たとえば欠損充填；椎間板切除；椎弓切除(laminectomy)；脊髄腫瘍の切除；前頚および胸郭の手術；脊髄損傷の修復；脊柱変形、脊柱前彎および脊柱後彎の処置；顎間(intermaxillary)骨折固定；おとがい（頤）形成(mentoplasty)；側頭下顎関節(temporomandibular joint)置換；歯槽堤(alveolar ridge)の補強および再建；インレー(inlay)移植可能なマトリックス；インプラントの配置および修正；サイナスリフト（上顎洞底挙上術）(sinus lift)；化粧処置など。本発明の移植可能なＡＴＭで修復または置換できる具体的な骨には、篩骨(ethmoid)、前頭骨、鼻骨、後頭骨(occipital)、頭頂骨(parietal)、側頭骨(temporal)、下顎骨(mandible)、上顎骨(maxilla)、頬骨(zygomatic)、頚椎、胸椎、腰椎、仙骨(sacrum)、肋骨(rib)、胸骨(sternum)、鎖骨(clavicle)、肩甲骨(scapula)、上腕骨(humerus)、橈骨(radius)、尺骨(ulna)、手根骨、中手骨、指節骨(phalange)、腸骨(ilium)、坐骨(ischium)、恥骨、大腿骨、脛骨、腓骨(fibula)、膝蓋骨(patella)、踵骨(calcaneus)、足根骨(tarsal)および／または中足骨(metatarsal)が含まれる。
【０２３８】
ＡＴＭへのオキシステロールの適用
[00237]  ある態様において、療法薬（たとえばオキシステロール；１種類以上の増殖因子などを含むものまたは含まないもの）を、手、混合、吹付け、含浸、注射、刷毛塗りにより、および／またはそれを注いでインプラントに注入することにより、インプラントの上または中に配置することができる。
【０２３９】
[00238]  インプラントへのオキシステロールの適用は、外科処置時に、製造業者により、または他のいずれか適切な方法で行なうことができる。たとえば、Ｐｅｒｍａｃｏｌ（登録商標）ペースト内に均一に分散したオキシステロールを外科処置部位への送達のために注射器に入れることができる。他の側面において、Ｐｅｒｍａｃｏｌ（登録商標）およびオキシステロールの凍結乾燥混合物を注射器を用いてさらに再構成することができ、注射器をニードルまたはカニューレの挿入（ＡＴＭに穿刺する）によりインプラントの内部へ配置してオキシステロールを注入し、こうしてそれは多孔質であるＡＴＭの内部全体に均一に分布する。
【０２４０】
[00239]  ある態様において、材料を混和して最終インプラント形状に付形する前に、オキシステロールをＡＴＭに適用することができる。実際に、オキシステロールまたは封入されたオキシステロールを天然または合成ポリマー（たとえば、無細胞コラーゲン、ある側面においては架橋したもの）中へブレンドし、そしてインプラントの最終形状の鋳型に注入することができる。あるいは、装填した多孔質ＡＴＭを最終形状に付形した後に、その上および／または中へオキシステロールまたは封入されたオキシステロール、たとえばＯｘｙ１３３を、混合、浸漬、滴加、注入、吹付け、またはその組合わせにより適用することができる。
【０２４１】
[00240]  増殖因子および本出願のオキシステロールを他の療法薬と共にＡＴＭの上または中に配置することができる。たとえば、増殖因子をエレクトロスプレー、イオン化スプレーもしくは含浸、振動分散（音波処理を含む）、ノズル吹付け、圧搾空気支援吹付け、刷毛塗りおよび／または注入によりキャリヤーの上または中に配置することができる。
【０２４２】
[00241]  ある態様において、骨形成誘導因子として機能するオキシステロールをインプラントの内部に装填する。他の側面において、オキシステロールをバイアルに入れ、次いで外科医が流体をオキシステロールと混合し、それを骨欠損部位に適用する前のＰｅｒｍａｃｏｌ（登録商標）ペーストへの装填に使用することができる。
【０２４３】
[00242]  オキシステロールの量は、骨および／または軟骨を増殖させるのに十分なものであればよい。ある態様において、オキシステロールはＯｘｙ１３３であり、１種類以上のＡＴＭにＡＴＭの立方センチメートル当たり１から２ｍｇまでの量で収容されている。
【０２４４】
[00243]  ある態様において、オキシステロールを液体キャリヤー（たとえば、水性緩衝液または有機溶媒）中において供給する。代表的な緩衝化された水性溶液には下記のものが含まれるが、それらに限定されない：ＴＥ、ＨＥＰＥＳ（２−［４−（２−ヒドロキシエチル）−ｌ−ピペラジニル］エタンスルホン酸）、ＭＥＳ（２−モルホリノエタンスルホン酸）、酢酸ナトリウム緩衝液、クエン酸ナトリウム緩衝液、リン酸ナトリウム緩衝液、トリス緩衝液（たとえば、トリス−ＨＣＬ）、リン酸緩衝生理食塩水（ＰＢＳ）、リン酸ナトリウム、リン酸カリウム、塩化ナトリウム、塩化カリウム、グリセロール、塩化カルシウム、またはその組合わせ。種々の態様において、緩衝液濃度は約１ｍＭから１００ｍＭまでであってもよい。ある態様において、オキシステロールはスクロース、グリシン、Ｌ−グルタミン酸、塩化ナトリウム、および／またはポリソルベート８０を含有するビヒクル（緩衝液を含む）中において供給される。代表的な有機溶媒または非水性溶媒には、ＤＭＳＯ、酢酸、アセトン、ＤＭＥ、ＤＭＦ、ＭＴＢＥ、アセトニトリル、ブタノール、ブタノン、ｔ−ブチルアルコール、エタノール、ポリエチレングリコール、メタノール、クロロベンゼン、クロロホルム、トルエン、プロパノール、ペンタン、ヘプタン、エタノール、ジエチルエーテルなどが含まれる。
【０２４５】
[00244]  ある態様において、無細胞組織マトリックス中に配置されるオキシステロールはＯＸＹ１３３であり、マトリックスに挿入する前に下記の反射のうち１以上を含むＸ線粉末回折パターンを生じる多型Ａ型：６．１、１２．３、１６．４、１７．９１、１８．６および２０．９４±０．２度の２θ；またはマトリックスに挿入する前に下記の反射のうち１以上を含むＸ線粉末回折パターンを生じるＢ型：５．９、１１．９、１３．３、１６．１、１７．９６、および１８．８２±０．２度の２θ；またはその混合物を含む。
【０２４６】
処置方法
[00245]  ある態様において、インプラントは、骨形成を促進するために無細胞ブタコラーゲン、ある場合には架橋した無細胞ブタコラーゲン、およびオキシステロール、たとえばＯｘｙ１３３の１水和物を含む。他の態様において、インプラントは骨材および流体をも含むことができる。使用すると、Ｏｘｙ１３３は骨状態のための療法処置を提供する。Ｏｘｙ１３３は、骨形成、骨芽細胞分化、骨形態形成および／または骨増殖を促進する。インプラントは、開放骨折および偽関節(non-union)のリスクが高い骨折を処置するために、また脊椎障害を伴う対象に投与することができる。すなわち、Ｏｘｙ１３３は脊椎固定を誘導でき、変性椎間板疾患または腰椎もしくは頚椎を冒す関節炎の処置を補助することができる。
【０２４７】
[00246]  ある態様において、インプラントは、凍結乾燥後にそれを湿潤させて展性および成形性をインプラントに付与することにより投与される。インプラントは種々のサイズ、形状および構造に成形できる。種々の態様において、外科医が外科処置部位へ送達できるようにＡＴＭおよびオキシステロールを含む成形可能なインプラントを注射器に入れることができ、および／または使用前にさらに保存しておくためにインプラントを収容した注射器をさらに真空パウチに入れる。他の場合には、インプラントを凍結乾燥し、次いで外科医が水和して骨欠損部の処置に使用する前に保存しておくために真空密封パウチに入れる。注射器内または真空パックのいずれであっても、これらのインプラントは約４０℃および周囲湿度７５％で保存できる。
【０２４８】
[00247]  インプラントのサイズ、形状および構造を決定する際に考慮できる幾つかの要因がある。たとえば、サイズおよび形状は共に、選択した標的組織部位にインプラントを配置するのを容易にするものであってもよい。さらに、インプラントの形状およびサイズは、移植後にインプラントが移動するのを最小限に抑えるかまたは阻止するように選択すべきである。種々の態様において、インプラントは、ロッド、または平坦な表面、たとえばフィルムもしくはシート（たとえば、リボン様）などに付形することができる。デバイスを配置するのが容易になるように柔軟性を考慮することができる。
【０２４９】
[00248]  Ｏｘｙｌ３３で処置した間葉系幹細胞は骨芽細胞分化が増大する。よって、ある態様において、Ｏｘｙ１３３を含むＡＴＭを間葉系幹細胞と共に脊椎部位に移植して、骨芽細胞分化による骨増殖を誘導することができる。骨膜組織は正常な骨折修復プロセスの初期に関与する１組織タイプであり、骨折修復に必要な種々の細胞タイプ（たとえば、間葉系幹細胞）および骨増殖因子を動員することができる。よって、ある態様において、骨膜組織を脱灰骨組成物における間葉系幹細胞および／または増殖因子の供給源として利用する。
【０２５０】
[00249]  ある態様において、Ｏｘｙ１３３を含むインプラントを患者の外科処置部位に直接に移植または注入することができる。ある態様において、インプラントはデポー剤の形態でＯｘｙ１３３を放出するように構成される。ある態様において、複数のマトリックスを提供し（たとえば、キット内に）、外科処置部位に投与して、骨増殖を必要とする部位を三角形に囲み、および／または取り巻く。種々の態様において、複数のマトリックスは約１、２、３、４、５、６、７、８、９または１０のマトリックスを含む。ある態様において、インプラントの安定性に影響を及ぼすために可塑剤を用いてガラス転移温度を低下させる。
【０２５１】
[00250]  ユーザーが患者の標的部位内にインプラントを正確に配置できるように、それにラジオグラフィーマーカーを含有させることができる。これらのラジオグラフィーマーカーにより、ユーザーはその部位におけるインプラントの動きおよび分解を経時的に追跡することもできであろう。この態様において、ユーザーは多数の診断イメージング法のいずれかを用いてその部位にインプラントを正確に配置できる。そのような診断イメージング法には、たとえばＸ線イメージングまたは蛍光透視法が含まれる。そのようなラジオグラフィーマーカーの例にはセラミックス、バリウム、ホスフェート、ビスマス、ヨウ素、タンタル、タングステン、および／または金属のビーズもしくは粒子が含まれるが、これらに限定されない。種々の態様において、ラジオグラフィーマーカーは球状またはインプラント周囲のリングであってもよい。組成物中のセラミックをラジオグラフィーマーカーとして用いることもできる。
【０２５２】
[00251]  ある態様において、ＡＴＭ中に均一に配置されたオキシステロールを含むインプラントを、医療操作のニーズに従って付形し、“カニューレ”または“ニードル”に通すことにより、標的部位に投与することができる；それらは、送達デバイス、たとえば注射器、ガン送達デバイス、または標的とする臓器もしくは解剖学的領域へインプラントを送達するのに適したいずれかの医療用デバイスの一部であってもよい。デバイスのカニューレまたはニードルは、患者に身体的および精神的な外傷を引き起こすのが最小限になるようにデザインされる。
【０２５３】
滅菌
[00252]  無細胞ブタコラーゲン、骨材、オキシステロール、およびインプラントを投与するためのデバイスを滅菌することができる。種々の態様において、ＡＴＭの１以上の成分、および／またはマトリックスを投与するために用いる医療用デバイスを、最後のパッケージングの最終滅菌工程で照射により滅菌することができる。製品の最終滅菌は、個々の製品構成要素を個別に滅菌して最後のパッケージを無菌環境で組み立てることを必要とする無菌プロセスなどのプロセスからのものより大きな無菌性の保証をもたらす。
【０２５４】
[00253]  一般に、種々の態様において、ガンマ線を最終滅菌工程に用い、それはデバイス内に深く透過するガンマ線からのイオン化エネルギーの利用を伴う。ガンマ線は微生物を死滅させるのにきわめて有効であり、それらは残留物を残さず、かつデバイスに放射活性を伝えるのに十分なエネルギーをもつ。ガンマ線はデバイスがパッケージ内にある状態で採用でき、ガンマ線滅菌は高圧または真空条件を必要とせず、よってパッケージシールその他の構成要素はストレスを受けない。さらに、ガンマ線は透過性パッケージング材料の必要性を排除する。
【０２５５】
[00254]  ある態様において、インプラントを耐湿性パッケージ内にパッケージし、次いでガンマ線により最終滅菌することができる。使用に際して外科医が使用のために無菌パッケージから一部または全部の構成要素を取り出す。
【０２５６】
[00255]  種々の態様において、電子ビーム（ｅ−ビーム）照射を用いてＡＴＭの１以上の構成要素を滅菌することができる。ｅ−ビーム照射はある形態のイオン化エネルギーを含み、それは一般に低い透過率および高い線量率を特徴とする。ｅ−ビーム照射は、接触した際に微生物の生殖細胞を含めて種々の化学結合および分子結合を変化させるという点でガンマ線処理に類似する。ｅ−ビーム滅菌のために発生させたビームは、電気の加速および変換により発生させた集束した高電荷電子流である。
【０２５７】
[00256]  移植可能なＡＴＭ、および／またはＡＴＭの１以上の構成要素を滅菌するために他の方法も使用でき、それにはガス滅菌、たとえばエチレンオキシドを用いるもの、またはスチーム滅菌が含まれるが、これらに限定されない。
【０２５８】
キット
[00257]  種々の態様において、オキシステロール（たとえば、Ｏｘｙ１３３）、ＡＴＭ（たとえば、Ｐｅｒｍａｃｏｌ（登録商標）ペースト）、骨材および／または希釈剤を含む、キットを提供する。キットは、移植可能なＡＴＭと共に、ＡＴＭの移植に使用するために組み合わせた追加部品（たとえば、ワイプ(wipe)、ニードル、注射器、混合用注射器、または他の混合デバイスなど）を収容することができる。ある例において、オキシステロールはキット内に存在するＡＴＭに既に取り込まれている。キットは、オキシステロールを含むかまたは含まないＡＴＭを第１コンパートメントに収容することができる。第２コンパートメントは、希釈剤を保持したバイアル、および局所送達に必要な他のいずれかの器具を収容できる。第３コンパートメントは、手袋、ドレープ(drape)、創傷包帯、および移植プロセスの無菌性を保持するための他の処置用備品、ならびに指示パンフレットを収容でき、パンフレットはＡＴＭを水和後に移植する方法を示すチャートを含むことができる。第４コンパートメントは、追加のニードルおよび／または縫合糸を収容できる。各ツールをプラスチックパウチに個別にパッケージし、それを照射滅菌することができる。第５コンパートメントは、ラジオグラフィーイメージングのための薬剤を収容できる。キットのカバーは移植操作の図を含むことができ、無菌性を保持するために透明なプラスチックカバーをコンパートメント上に配置することができる。
【０２５９】
[00258]  本出願のこれらおよび他の側面は、以下の実施例を考慮するとさらに認識されるであろう；実施例は本出願のある特定の態様を説明するためのものであるが、特許請求の範囲により定める本発明の範囲を限定するためのものではない。
【実施例】
【０２６０】
[00259]  Ｐｅｒｍａｃｏｌ（登録商標）ペースト、すなわちブタ真皮に由来する無細胞コラーゲンペーストは、２０％の無細胞架橋コラーゲンおよび８０％の塩類溶液を含有する。コラーゲン成分は、脱細胞処理したブタ真皮を低温ミリングし、次いでヘキサメチレンジイソシアネート（ＨＭＤＩ）を用いて架橋したものである。Ｏｘｙ１３３をＰｅｒｍａｃｏｌ（登録商標）ペーストと混合したものを含有する成形可能なインプラント配合物を調製し、ウサギおよびラットにおいて実施した脊椎固定試験に用いた。これらの組成物は凍結乾燥されておらず、注射器に装填されてもいなかった。これらの組成物を、被験ウサギおよびラットの剥皮した横突起(transverse process)上にそれらを移植することにより送達した。
【０２６１】
実施例１
[00260]  この例においては、Ｐｅｒｍａｃｏｌ（登録商標）ペーストを、下記の表１に挙げる種々の量のＯｘｙ１３３の１水和物と混合した。Ｐｅｒｍａｃｏｌ（登録商標）ペーストおよびＯｘｙ１３３の１水和物の成形可能な配合物を種々の量でウサギの単レベル後外側腰椎固定(single level posterolateral lumbar spine fusion)に適用した。架橋ウシコラーゲンの成形可能な配合物も同量でウサギに単レベル後外側腰椎固定に際して適用した。手術した脊椎部分の触診により固定率を判定した。結果を下記の表１にまとめる。
【０２６２】
【表１】
2019022650.tif 000009
【０２６３】
上記の表１に挙げた固定率から、単レベル後外側腰椎固定を施したウサギに移植した際にＰｅｒｍａｃｏｌ（登録商標）ペーストおよび８０ｍｇ／ｃｃのＯｘｙ１３３の１水和物の成形可能な配合物が最高の固定率１００％をもたらしたことが明らかであり、これは予想外の結果であった。架橋ウシコラーゲンをベースとするインプラントを同一方法でウサギに適用することによって達成された固定率は、これより有意に低かった。
【０２６４】
実施例２
[00261]  この例においては、Ｐｅｒｍａｃｏｌ（登録商標）ペーストを下記の表２に挙げる種々の量のＯｘｙ１３３の１水和物と混合した。Ｐｅｒｍａｃｏｌ（登録商標）ペーストおよびＯｘｙ１３３の１水和物の成形可能な配合物を種々の量でラットに２レベル後外側腰椎固定に際して適用した。架橋ウシコラーゲンを含む成形可能な配合物も同量でラットに２レベル後外側腰椎固定に際して適用した。手術した脊椎部分の触診により固定率を判定した。結果を下記の表２にまとめる。
【０２６５】
【表２】
2019022650.tif 000010
【０２６６】
上記の表２に挙げた固定率から、ラットに２レベル後外側腰椎固定（ＰＬＦ）に際して注入した際にＰｅｒｍａｃｏｌ（登録商標）ペーストならびにそれぞれ４０ｍｇ／ｃｃおよび８０ｍｇ／ｃｃのＯｘｙ１３３の１水和物の両方の成形可能な配合物が最高の固定率１００％をもたらしたことが明らかである。同一の固定方法について、架橋ウシコラーゲンを含有するインプラントによって達成された固定率は、これより有意に低い。これらの予想外の結果は、図１に示すように２レベル後外側腰椎固定処置を受けた手術直後、ならびにそれぞれ図２および３に示すように４週間後および８週間後のラットについて撮影したＸ線写真により確認された。図１、２および３は、成形可能なＰｅｒｍａｃｏｌ（登録商標）ペーストを４０ｍｇ／１ｃｃのＯｘｙ１３３の１水和物、セラミック顆粒およびカルボキシメチルセルロース（ＣＭＣ）ナトリウムと混合したもの０．５ｃｃのインプラントをラットのＬ３からＬ５までの横突起に両側投与したラットに実施した２レベル後外側固定処置を撮影した結果を表わす。特に、この処置に用いた成形可能なペーストインプラントの組成を下記の表３にまとめる。
【０２６７】
【表３】
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【０２６８】
[00262]  図１の手術直後のＸ線写真と比較すると、図２および３はインプラントの内部に外側縁および骨梁骨に沿った新たな骨の形成を示す。図１の術後Ｘ線写真との比較により、図２および３におけるインプラント材料のリモデリングが明瞭であった。Ｌ３−Ｌ５横突起間の骨橋の存在はＸ線によればラットが固定されていることを証明する。
【０２６９】
[00263]  図４、５および６は、２レベル後外側固定処置を受けたラットからの組織スライドである。図４の組織スライドは、Ｏｘｙ１３３を含まないインプラント材料のみのキャリヤーであった対照グループのラットのイメージである。このイメージには、残留セラミック顆粒間に新たな骨の形成および線維組織が見られない。図５および６は、上記表３の成形可能なインプラント配合物を含有する２レベル後外側固定処置を受け、図２および３に示したようにそれらについてそれぞれ４および８週間後にＸ線写真が撮影されたラットの組織スライドである。図５および６はセラミック顆粒の消失および脂肪組織の存在の増大を明瞭に示す；それらは共に骨形成の指標であり、図２および３の結果を確認する。
【０２７０】
[00264]  本開示に引用したすべての特許および非特許刊行物を、それらの特許および非特許刊行物がそれぞれその全体を本開示に引用されたと同様に本明細書に援用する。さらに、本明細書中の開示内容を特定の例および態様に関して記載したが、これらの例および態様は本開示の原理および適用の説明にすぎないことを理解すべきである。したがって、以下の特許請求の範囲により定める本開示の精神および範囲から逸脱することなくそれらの具体的態様に対して多数の改変をなしうること、および他のアレンジメントを誘導できることを理解すべきである。
【０２７１】
[00265]  本明細書に記載する種々の態様に対して、本明細書の教示の精神および範囲から逸脱することなく種々の改変および変更をなしうることは当業者に明らかであろう。よって、種々の態様は、本教示の範囲内で種々の態様の他の改変および変更を包含するものとする。
【図１】
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【図２】
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【図３】
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【図４】
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【図５】
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【図６】
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【外国語明細書】
2019022650000001.pdf