【手続補正書】
【提出日】平成13年4月4日(2001.4.4)
【手続補正１】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】特許請求の範囲
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
受容体のポリペプチド、または機能を有するその断片であって、
レチノイドＸ受容体（ＲＸＲ）と共にヘテロダイマーを形成すること、
少なくとも１つの、半分部位ＲＧＢＮＮＭの直接あるいは反転した配列に基づくものであって、各当該半分部位は別個に、
ＲはＡまたはＧから選択される；
ＢはＧ、Ｃ、またはＴから選択される；
各Ｎは別個に、Ａ、Ｔ、Ｃ、またはＧから選択される；そして
ＭはＡまたはＣから選択される
ものであるＲＧＢＮＮＭを有し
ただし、当該ＲＧＢＮＮＭ配列のうち少なくとも４個のヌクレオチドは、配列ＡＧＴＴＣＡの対応部位のヌクレオチドと同一でなければならない
直接の、あるいは反転した反復反応因子モチーフに結合すること、
各種の天然型および合成型ステロイドホルモンに反応してステロイド誘導性Ｐ４５０遺伝子中に見られる反応因子を通じて転写を活性化すること、および
主に肝臓および腸において発現されること、
を特徴とする上記ポリペプチド。
【請求項２】
当該ポリペプチドがさらに９個のＣｙｓ残基を含む約６７個のアミノ酸から成るＤＮＡ結合領域を有するという特徴をもつ請求項１に記載のポリペプチドであって、当該ＤＮＡ結合領域はゼノパス（Ｘｅｎｏｐｕｓ）の安息香酸Ｘ受容体のＤＮＡ結合領域と約７３％のアミノ酸相同性をもつ上記ペプチド。
【請求項３】
当該ポリペプチドがさらに約１９８個のアミノ酸から成るリガンド結合領域を有するという特徴をもつ請求項２に記載のポリペプチドであって、当該リガンド結合部位はゼノパス（Ｘｅｎｏｐｕｓ）の安息香酸Ｘ受容体のリガンド結合領域と約５２％のアミノ酸相同性をもつ上記ペプチド。
【請求項４】
当該ポリペプチドが配列番号２に記載したアミノ酸配列と実質的に同一の配列を有する請求項１に記載のポリペプチド。
【請求項５】
当該ポリペプチドが配列番号２に記載したアミノ酸配列と同一の配列を有する請求項１に記載のポリペプチド。
【請求項６】
ＲＸＲおよびＳＸＲから成るヘテロダイマー複合体。
【請求項７】
請求項１〜５のいずれか一項に記載のポリペプチドをコードする分離核酸。
【請求項８】
配列番号１に記載したヌクレオチド５８３番から１８８４番と実質的に同一の隣接したヌクレオチド配列をもつ画分を含む請求項７に記載の核酸。
【請求項９】
配列番号１に記載したヌクレオチド５８３番〜１８８４番と同一の隣接したヌクレオチド配列をもつ画分を含む請求項７に記載の核酸。
【請求項１０】
配列番号１に記載したＤＮＡまたはその相補配列のうち５８３番〜１８８４番までから任意に選択した２０個以上の隣接塩基と実質的に同一の配列をもつ少くとも２０個の隣接塩基を含むラベルした一本鎖核酸。
【請求項１１】
（ｉ）機能的に結合した請求項７に記載の核酸
（ｉｉ）動物の培養細胞において当該核酸配列の転写および当該ポリペプチドの発現に作用する調節因子
からなる分離核酸構築物。
【請求項１２】
請求項１１に記載の核酸構築物によって形質転換される動物の培養細胞。
【請求項１３】
当該細胞がさらに
（ａ）当該細胞中で作用するプロモーター
（ｂ）ホルモン反応因子、および
（ｃ）リポーター蛋白質をコードするＤＮＡ
を含有するリポーターベクターによって形質転換される請求項１２に記載の細胞であって、当該リポーター蛋白質をコードするＤＮＡは、当該ＤＮＡの転写のために当該プロモーターに機能的に結合しており、
当該プロモーターは当該ホルモン反応因子の活性化のために当該ホルモン反応因子に機能的に結合している上記細胞。
【請求項１４】
請求項１〜５のいずれか一項に記載の受容体ポリペプチドに特異的に結合する抗体。
【請求項１５】
請求項１〜５のいずれか一項に記載の受容体ポリペプチドを作成するための方法であって、当該ポリペプチドをコードするＤＮＡ配列を発現させるために当該細胞中で作用する発現ベクターを含有する細胞を培養することからなる上記方法。
【請求項１６】
受容体ポリペプチドまたは機能を有するその断片を特定するための方法であって、当該ポリペプチドが
レチノイドＸ受容体（ＲＸＲ）と共にヘテロダイマーを形成すること、
少なくとも１つの、半分部位ＲＧＢＮＮＭの直接あるいは反転した配列に基づくものであって、各当該半分部位は別個に、
ＲはＡまたはＧから選択される；
ＢはＧ、Ｃ、またはＴから選択される；
各Ｎは別個に、Ａ、Ｔ、Ｃ、またはＧから選択される；そして
ＭはＡまたはＣから選択される
ものであるＲＧＢＮＮＭを有し
ただし、当該ＲＧＢＮＮＭ配列のうち少なくとも４個のヌクレオチドは、配列ＡＧＴＴＣＡの対応部位のヌクレオチドと同一でなければならない
直接の、あるいは反転した反復反応因子モチーフに結合すること、
各種の天然型および合成型ステロイドホルモンに反応してステロイド誘導性Ｐ４５０遺伝子中に見られる反応因子を通じて転写を活性化すること、および
主に肝臓および腸において発現されること、
を特徴とする方法であって、
緊縮性の高い条件下でＤＮＡ検体を請求項１０に記載のプローブとハイブリダイズさせ、当該プローブとハイブリダイズする配列を選択することからなる上記方法。
【請求項１７】
ＳＸＲに結合する物質を特定するために一連の物質をスクリーニングするための方法であって、当該方法が結合アッセイの中で請求項１〜５のいずれか一項に記載の受容体を使用することからなる上記方法。
【請求項１８】
ある物質が請求項１〜５のいずれか一項に記載の受容体ポリペプチドの転写促進作用を調節し得るかどうか判定するための方法であって、当該方法は当該受容体ポリペプチドおよびリポーターベクターを含有する細胞と当該物質とを接触させることによりリポーター蛋白質の有無を調べることからなり、
当該リポーターベクターは
（ａ）当該細胞中で作用するプロモーター
（ｂ）ホルモン反応因子、および
（ｃ）リポーター蛋白質をコードするＤＮＡ、
からなることを特徴とし、
当該リポーター蛋白質をコードするＤＮＡは、当該ＤＮＡの転写のために当該プロモーターに機能的に結合しており、
当該プロモーターは当該ホルモン反応因子の活性化のために当該ホルモン反応因子に機能的に結合していることを特徴とする上記方法。
【請求項１９】
ステロイドＸ受容体（ＳＸＲ）の作動薬であるが他のステロイド受容体を促進したり拮抗したりすることのない物質を特定するための方法であって、
第１のアッセイ系においてＳＸＲおよびリポーターベクターを含有する細胞を当該物質と接触させることによりリポーター蛋白質の有無を検出すること、
ただし、当該リポーターベクターは
（ａ）当該細胞中で作用するプロモーター
（ｂ）ＳＸＲ反応因子、および
（ｃ）リポーター蛋白質をコードするＤＮＡ
からなることを特徴とし、
当該リポーター蛋白質をコードするＤＮＡは、当該ＤＮＡの転写のために当該プロモーターに機能的に結合しており、
当該プロモーターは当該ＳＸＲ反応因子の活性化のために当該ＳＸＲ反応因子に機能的に結合しており、
第２のアッセイ系においてＳＸＲ以外のステロイドホルモン受容体およびリポーターベクターを含有する細胞を当該物質と接触させることによりリポーター蛋白質の有無を検出すること、
ただし、当該リポーターベクターは
（ａ）当該細胞中で作用するプロモーター
（ｂ）ＳＸＲ以外の当該受容体のための反応因子、および
（ｃ）リポーター蛋白質をコードするＤＮＡ
からなることを特徴とし、
当該リポーター蛋白質をコードするＤＮＡは、当該ＤＮＡの転写のために当該プロモーターに機能的に結合しており、
当該プロモーターはＳＸＲ以外の当該受容体のための反応因子の活性化のために当該反応因子に機能的に結合しており、
当該第１アッセイにおいてリポーターの産生を誘導するが当該第２アッセイにおいては誘導しない物質を、ステロイドＸ受容体（ＳＸＲ）の作動薬であるが他のステロイド受容体の作動薬でも拮抗薬でもない物質として特定すること、
からなる上記方法。
【請求項２０】
請求項１〜５のいずれか一項に記載の受容体ポリペプチドにより媒介される過程を調節するための方法であって、当該方法が少なくとも１種類の作動薬、拮抗薬あるいは当該ポリペプチドに対して作成した抗体の存在下で当該過程を実施することからなる上記方法。
【請求項２１】
ステロイド分解酵素の発現を誘導するための方法であって、ＳＸＲの活性化を含む上記方法。
【請求項２２】
１種類以上の生体異物性ステロイドおよび／または生体異物性物質の代謝を調節するための医薬組成物であって、有効成分として、ステロイドの調節物質の有効量、並びに、ステロイドおよび生体異物受容体（ＳＸＲ）反応因子に機能的に関連している内因性遺伝子の転写を促進する生体異物受容体（ＳＸＲ）ポリペプチドを含む上記医薬組成物。
【請求項２３】
調節物質が作動薬である請求項２２に記載の医薬組成物。
【請求項２４】
調節物質が拮抗薬である請求項２２に記載の医薬組成物。
【請求項２５】
遺伝子がチトクロームＰ４５０グループのうちの１つをコードする請求項２２に記載の医薬組成物。
【請求項２６】
ステロイドおよび／または生体異物性物質を植物性エストロゲンおよびカルシウムチャンネル拮抗薬から成るグループから選択する請求項２２に記載の医薬組成物。
【請求項２７】
疾患の治療のために１種類以上の治療用ステロイドおよび／または生体異物性物質の投与を受けている被験者におけるステロイド中毒を防止するための医薬組成物であって、有効成分として、ＳＸＲ反応因子と機能的に関連する内因性遺伝子の転写を促進するために被験者の全身ステロイド量を生理学的に許容し得る値まで低下させるのに有効な量のＳＸＲポリペプチド作動薬を含む上記医薬組成物。
【請求項２８】
遺伝子がチトクロームＰ４５０グループのうちの１つをコードする請求項２７に記載の医薬組成物。
【請求項２９】
治療用の物質がステロイドである請求項２７に記載の医薬組成物。
【請求項３０】
疾患が結核である請求項２９に記載の医薬組成物。
【請求項３１】
治療用の物質がリファンピン、またはその活性誘導体あるいは類似体である請求項３０に記載の医薬組成物。
【請求項３２】
疾患が乳癌である請求項２９に記載の医薬組成物。
【請求項３３】
治療用の物質がタモキシフェン、ラロキシフェン、またはその誘導体あるいは類似体である請求項３２に記載の医薬組成物。
【請求項３４】
疾患が骨粗しょう症である請求項２９に記載の医薬組成物。
【請求項３５】
治療用の物質がビタミンＫである請求項３４に記載の医薬組成物。
【請求項３６】
治療用の物質がプロプラノロールである請求項３４に記載の医薬組成物。
【請求項３７】
治療用の物質がカルシウムチャンネル拮抗薬である請求項２７に記載の医薬組成物。
【請求項３８】
カルシウムチャンネル拮抗薬がニフェジピンである請求項３７に記載の医薬組成物。
【請求項３９】
治療用のステロイドまたは生体異物性物質を必要とする被験者からのそれらのクリアランスを遅くするための医薬組成物であって、有効成分として、ＳＸＲ反応因子に機能的に関連している内因性遺伝子の転写を促進するＳＸＲ受容体ポリペプチドの拮抗薬の有効量を含む上記医薬組成物。
【請求項４０】
被験物質またはその併用によってステロイドおよび生体異物の受容体（ＳＸＲ）ポリペプチドが活性化されるかどうか検討するためのスクリーニングアッセイ方法であって、
（ａ）適切な培地中で、ＳＸＲポリペプチドおよびリポーターベクターを含有する宿主細胞系と１種類以上の被験物質とを接触させること、
ただし、リポーターベクターは
１）細胞中で機能し得るプロモーター
２）ＳＸＲ反応因子、および
３）ＤＮＡの転写のためのプロモーターに機能的に結合したリポーター蛋白質をコードするＤＮＡ
からなることを特徴とし、
プロモーターはその活性化のためのＳＸＲ反応因子に機能的に結合しており、
（ｂ）リポーター蛋白質の有無について調べること、
からなり、
リポーター蛋白質が存在するということは被験物質がＳＸＲ受容体ポリペプチドを活性化することを意味し、リポーター蛋白質が存在しないということは被験物質がＳＸＲ受容体ポリペプチドを活性化しないことを意味することを特徴とする上記アッセイ方法。
【請求項４１】
アッセイ方法においてリポーター物質が発現されるということから、被験者に対して被験物質を治療用量で投与することにより被験者の体内で被験物質と他のステロイドおよび／または生態異物性物質との間の薬物相互作用が起こるということが３０％以上の可能性をもって示されることを特徴とする請求項４０に記載のアッセイ方法。
【請求項４２】
被験物質が治療用ステロイドの組み合わせであり、リポーター物質の発現レベルがこの組み合わせを被験者に対して同時投与した場合に予想される治療用物質間の薬物相互作用のレベルを表すものであることを特徴とする請求項４０に記載のアッセイ方法。
【請求項４３】
疾患の治療が必要な被験者において疾患を治療するための医薬組成物であって、有効成分として、被験者の体内で内因性ＳＸＲポリペプチドの転写を調節するステロイドおよび／または生体異物性物質の有効量を含む上記医薬組成物。
【請求項４４】
物質がＳＸＲポリペプチドの作動薬であり、内因性ステロイドの量がホメオスタシスの状態よりも高いのが疾患の特徴である請求項４３に記載の医薬組成物。
【請求項４５】
疾患がクッシング症候群、女性における男性化および多毛症、多嚢胞性卵巣症候群、２１−ヒドロキシラーゼ欠乏症、１１β−ヒドロキシラーゼ欠乏症、３β−ヒドロキシステロイドデヒドロゲナーゼ欠乏症、１７−ヒドロキシラーゼ欠乏症、そして乳癌、結腸直腸癌および前立腺癌から成るグループから選択される請求項４４に記載の医薬組成物。
【請求項４６】
物質がＳＸＲポリペプチドの拮抗薬であり、内因性ステロイドの量がホメオスタシスの状態よりも低いのが疾患の特徴である請求項４３に記載の医薬組成物。