(57)【要約】【課題】妊婦における胎児母体間輸血症候群罹患の可能性を迅速且つ簡便に判定する。【解決手段】妊娠３０週目から４０週目の妊婦から得られた血液試料を、キャリブレーションされた、分離分析法を用いる測定装置によりアッセイし、ＨｂＦの含有量の全ヘモグロビン含有量に対する割合に基づいて、前記妊婦が胎児母体間輸血症候群に罹患している可能性を判定する。【選択図】図３
2019060653.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
（Ａ１）妊娠３０週目から４０週目の妊婦から得られた血液試料を分離分析法を用いる測定装置によりアッセイして、前記血液試料中におけるヘモグロビンＦ（ＨｂＦ）の含有量の全ヘモグロビン含有量に対する割合を決定する工程、を含み、
前記測定装置は、ＨｂＦの含有量の全ヘモグロビン含有量に対する割合についてキャリブレーションされており、
前記ＨｂＦの含有量の前記全ヘモグロビン含有量に対する割合が設定参照値以上であることが、前記妊婦が胎児母体間輸血症候群に罹患している可能性が高いことを示す、
妊婦における胎児母体間輸血症候群罹患の可能性を判定する方法。
【請求項２】
前記設定参照値が０．５％〜３％の範囲内の値である、請求項１に記載の妊婦における胎児母体間輸血症候群罹患の可能性を判定する方法。
【請求項３】
（Ａ１）妊娠３０週目から４０週目の妊婦から得られた血液試料を分離分析法を用いる測定装置によりアッセイして、前記血液試料中におけるヘモグロビンＦ（ＨｂＦ）の含有量の全ヘモグロビン含有量に対する割合を決定する工程、
（Ｂ１）前記工程（Ａ１）をそれぞれ時間間隔を開けてさらに１回以上行う工程、を含み、
前記測定装置は、ＨｂＦの含有量の全ヘモグロビン含有量に対する割合についてキャリブレーションされており、
最新の測定におけるＨｂＦの含有量の全ヘモグロビン含有量に対する割合が、前回の測定におけるＨｂＦの含有量の全ヘモグロビン含有量に対する割合に対して設定参照値以上増加していることが、前記妊婦が胎児母体間輸血症候群に罹患している可能性が高いことを示す、
妊婦における胎児母体間輸血症候群罹患の可能性を判定する方法。
【請求項４】
前記設定参照値が０．２％〜１％の範囲内の値である、請求項３に記載の妊婦における胎児母体間輸血症候群罹患の可能性を判定する方法。
【請求項５】
前記時間間隔が１週間〜６週間の範囲内の時間間隔である、請求項３又は請求項４に記載の妊婦における胎児母体間輸血症候群罹患の可能性を判定する方法。
【請求項６】
（Ａ１）妊娠３０週目から４０週目の妊婦から得られた血液試料を分離分析法を用いる測定装置によりアッセイして、前記血液試料中におけるヘモグロビンＦ（ＨｂＦ）の含有量の全ヘモグロビン含有量に対する割合を決定する工程、
（Ｂ１）前記工程（Ａ１）をそれぞれ時間間隔を開けてさらに１回以上行う工程、を含み、
前記測定装置は、ＨｂＦの含有量の全ヘモグロビン含有量に対する割合についてキャリブレーションされており、
最新の測定におけるＨｂＦの含有量の全ヘモグロビン含有量に対する割合が、前回の測定におけるＨｂＦの含有量の全ヘモグロビン含有量に対する割合に対して設定参照値Ｉ以上増加しており、且つ最新の測定におけるＨｂＦの含有量の全ヘモグロビン含有量に対する割合が設定参照値Ｌ以上であることが、前記妊婦が胎児母体間輸血症候群に罹患している可能性が高いことを示す、
妊婦における胎児母体間輸血症候群罹患の可能性を判定する方法。
【請求項７】
前記設定参照値Ｌが０．５％〜３％の範囲内の値であり、且つ前記設定参照値Ｉが０．２％〜１％の範囲内の値である、請求項６に記載の妊婦における胎児母体間輸血症候群罹患の可能性を判定する方法。
【請求項８】
前記時間間隔が１週間〜６週間の範囲内の時間間隔である、請求項６又は請求項７に記載の妊婦における胎児母体間輸血症候群罹患の可能性を判定する方法。
【請求項９】
前記測定装置は、設定された回数のアッセイが終了するたびに、ＨｂＦの含有量の全ヘモグロビン含有量に対する割合についてキャリブレーションされる、請求項１〜８のいずれか一項に記載の妊婦における胎児母体間輸血症候群罹患の可能性を判定する方法。
【請求項１０】
前記分離分析法が、液体クロマトグラフィー法、キャピラリー電気泳動法、及びキャピラリー電気クロマトグラフィー法の何れかである、請求項１〜請求項９のいずれか一項に記載の妊婦における胎児母体間輸血症候群罹患の可能性を判定する方法。
【請求項１１】
妊娠３０週目から４０週目の妊婦から得られた血液試料を分離分析法を用いる測定装置によりアッセイして、前記血液試料中におけるヘモグロビンＦ（ＨｂＦ）の含有量の全ヘモグロビン含有量に対する割合を決定する測定モジュールと、
（ｉ）ＨｂＦの含有量の全ヘモグロビン含有量に対する割合が設定参照値以上である場合に
（ｉｉ）最新の測定におけるＨｂＦの含有量の全ヘモグロビン含有量に対する割合が、前回の測定におけるＨｂＦの含有量の全ヘモグロビン含有量に対する割合に対して設定参照値以上増加している場合に、又は
（ｉｉｉ）最新の測定におけるＨｂＦの含有量の全ヘモグロビン含有量に対する割合が、前回の測定におけるＨｂＦの含有量の全ヘモグロビン含有量に対する割合に対して設定参照値Ｉ以上増加しており、且つ最新の測定におけるＨｂＦの含有量の全ヘモグロビン含有量に対する割合が設定参照値Ｌ以上である場合に、
前記妊婦が胎児母体間輸血症候群に罹患している可能性が高いと判定する判定モジュールと、
所定の条件を満たした場合に、ＨｂＦの含有量の全ヘモグロビン含有量に対する割合について前記測定モジュールにキャリブレーションを行わせる、キャリブレーション指示モジュールと、
を含む、妊婦における胎児母体間輸血症候群罹患の可能性を判定するシステム。
【請求項１２】
前記分離分析法が、液体クロマトグラフィー法、キャピラリー電気泳動法、及びキャピラリー電気クロマトグラフィー法の何れかである、請求項１１に記載のシステム。
【請求項１３】
妊娠３０週目から４０週目の妊婦から得られた血液試料を分離分析法を用いる測定装置によりアッセイして、前記血液試料中におけるヘモグロビンＦ（ＨｂＦ）の含有量の全ヘモグロビン含有量に対する割合を決定する測定手段と、
（ｉ）ＨｂＦの含有量の全ヘモグロビン含有量に対する割合が設定参照値以上である場合に
（ｉｉ）最新の測定におけるＨｂＦの含有量の全ヘモグロビン含有量に対する割合が、前回の測定におけるＨｂＦの含有量の全ヘモグロビン含有量に対する割合に対して設定参照値以上増加している場合に、又は
（ｉｉｉ）最新の測定におけるＨｂＦの含有量の全ヘモグロビン含有量に対する割合が、前回の測定におけるＨｂＦの含有量の全ヘモグロビン含有量に対する割合に対して設定参照値Ｉ以上増加しており、且つ最新の測定におけるＨｂＦの含有量の全ヘモグロビン含有量に対する割合が設定参照値Ｌ以上である場合に、
前記妊婦が胎児母体間輸血症候群に罹患している可能性が高いと判定する判定手段と、
所定の条件を満たした場合に、ＨｂＦの含有量の全ヘモグロビン含有量に対する割合について前記測定手段にキャリブレーションを行わせる、キャリブレーション指示手段と、を含む、
胎児母体間輸血症候群罹患の可能性を判定する装置。
【請求項１４】
妊婦における胎児母体間輸血症候群罹患の可能性を判定する処理をコンピュータに実行させるコンピュータプログラムであって、
前記処理が、
（Ａ１）妊娠３０週目から４０週目の妊婦から得られた血液試料を分離分析法を用いる測定装置によりアッセイして、前記血液試料中におけるヘモグロビンＦ（ＨｂＦ）の含有量の全ヘモグロビン含有量に対する割合を決定する工程、
（Ｃ１）ＨｂＦの含有量の全ヘモグロビン含有量に対する割合が設定参照値以上である場合に、前記妊婦が胎児母体間輸血症候群に罹患している可能性が高いと判定する工程、及び
（Ｅ１）所定の条件を満たした場合に、ＨｂＦの含有量の全ヘモグロビン含有量に対する割合について前記測定装置にキャリブレーションを行わせる工程、
を含むコンピュータプログラム。
【請求項１５】
妊婦における胎児母体間輸血症候群罹患の可能性を判定する処理をコンピュータに実行させるコンピュータプログラムであって、
前記処理が、
（Ａ１）妊娠３０週目から４０週目の妊婦から得られた血液試料を分離分析法を用いる測定装置によりアッセイして、前記血液試料中におけるヘモグロビンＦ（ＨｂＦ）の含有量の全ヘモグロビン含有量に対する割合を決定する工程、
（Ｂ１）ユーザーからの指示に基づいて、前記工程（Ａ１）をそれぞれ時間間隔を開けてさらに１回以上行う工程、
（Ｃ２）最新の測定におけるＨｂＦの含有量の全ヘモグロビン含有量に対する割合が、前回の測定におけるＨｂＦの含有量の全ヘモグロビン含有量に対する割合に対して設定参照値以上増加している場合に、前記妊婦が胎児母体間輸血症候群に罹患している可能性が高いと判定する工程、及び
（Ｅ１）所定の条件を満たした場合に、ＨｂＦの含有量の全ヘモグロビン含有量に対する割合について前記測定装置にキャリブレーションを行わせる工程、
を含むコンピュータプログラム。
【請求項１６】
妊婦における胎児母体間輸血症候群罹患の可能性を判定する処理をコンピュータに実行させるコンピュータプログラムであって、
前記処理が、
（Ａ１）妊娠３０週目から４０週目の妊婦から得られた血液試料を分離分析法を用いる測定装置によりアッセイして、前記血液試料中におけるヘモグロビンＦ（ＨｂＦ）の含有量の全ヘモグロビン含有量に対する割合を決定する工程、
（Ｂ１）ユーザーからの指示に基づいて、前記（Ａ１）の工程をそれぞれ時間間隔を開けてさらに１回以上行う工程、
（Ｃ３）最新の測定におけるＨｂＦの含有量の全ヘモグロビン含有量に対する割合が、前回の測定におけるＨｂＦの含有量の全ヘモグロビン含有量に対する割合に対して設定参照値Ｉ以上増加しており、且つ最新の測定におけるＨｂＦの含有量の全ヘモグロビン含有量に対する割合が設定参照値Ｌ以上である場合に、前記妊婦が胎児母体間輸血症候群に罹患している可能性が高いと判定する工程、及び
（Ｅ１）所定の条件を満たした場合に、ＨｂＦの含有量の全ヘモグロビン含有量に対する割合について前記測定装置にキャリブレーションを行わせる工程、
を含むコンピュータプログラム。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本開示は、妊婦における胎児母体間輸血症候群罹患の可能性を判定する方法、妊婦における胎児母体間輸血症候群罹患の可能性を判定するシステム及び装置、並びにコンピュータプログラムに関する。
【背景技術】
【０００２】
胎児母体間輸血症候群（ｆｅｔｏ−ｍａｔｅｒｎａｌ  ｔｒａｎｓｆｕｓｉｏｎ  ｓｙｎｄｒｏｍｅ：ＦＭＴ）は、多量の胎児血液が母体血中に移行することによって起こる異常であり、高い周産期死亡率をもたらす。胎児母体間輸血症候群は出産１０００例に１件程度の割合で発生しているが、母体の自覚症状が乏しく、発見が遅れる場合が多い。胎児母体間輸血症候群の診断にあたっては、ＣＴＧ（胎児心拍陣痛図）検査及び超音波検査（血液流速検査）などが用いられている。
【０００３】
非特許文献１においては、胎児母体間輸血症候群の症例についての報告がなされている。これらの症例では、ＣＴＧ検査における異常が認められたため、入院後に種々の検査が行われている。
【先行技術文献】
【非特許文献】
【０００４】
【非特許文献１】風間絵里菜，他5名，“胎児母体間輸血症候群を呈した３症例”，新潟産科婦人科学会誌，平成26年3月28日，第109巻，第1号，p. 12−17
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００５】
非特許文献１ではＣＴＧ検査の結果に基づいて入院の判断がなされ、そこで、種々の検査の結果を総合判断して胎児母体間輸血症候群との診断がなされている。ＣＴＧ検査は手間がかかることもあり、自覚症状の無い多数の妊婦を対象としたスクリーニング検査には必ずしも向いていない。このため、多数の妊婦を対象として胎児母体間輸血症候群を有している可能性が高い妊婦をスクリーニングするのに適した手法は未だ知られていない。
【０００６】
また、非特許文献１においては、入院後、確定診断のための材料の一つとしてヘモグロビンＦの測定値も考慮対象に含められてはいるが、この測定値は校正されていないため必ずしも正確とはいえず、ヘモグロビンＦの測定値のみで何らかの判定を行うことは困難である。
【０００７】
本開示によれば、妊婦における胎児母体間輸血症候群罹患の可能性を迅速且つ簡便に判定できる、妊婦における胎児母体間輸血症候群罹患の可能性を判定する方法、妊婦における胎児母体間輸血症候群罹患の可能性を判定するシステム及び装置、並びにコンピュータプログラムが提供される。手法が提供される。
【課題を解決するための手段】
【０００８】
前記課題を解決するために、本開示は、一態様において、
（Ａ１）妊娠３０週目から４０週目の妊婦から得られた血液試料を分離分析法を用いる測定装置によりアッセイして、前記血液試料中におけるヘモグロビンＦ（ＨｂＦ）の含有量の全ヘモグロビン含有量に対する割合を決定する工程、を含み、
前記測定装置は、ＨｂＦの含有量の全ヘモグロビン含有量に対する割合についてキャリブレーションされており、
前記ＨｂＦの含有量の前記全ヘモグロビン含有量に対する割合が設定参照値以上であることが、前記妊婦が胎児母体間輸血症候群に罹患している可能性が高いことを示す、
妊婦における胎児母体間輸血症候群罹患の可能性を判定する方法、を提供する。
【０００９】
また、本開示は、別の態様においては、
（Ａ１）妊娠３０週目から４０週目の妊婦から得られた血液試料を分離分析法を用いる測定装置によりアッセイして、前記血液試料中におけるヘモグロビンＦ（ＨｂＦ）の含有量の全ヘモグロビン含有量に対する割合を決定する工程、
（Ｂ１）前記工程（Ａ１）をそれぞれ時間間隔を開けてさらに１回以上行う工程、を含み、
前記測定装置は、ＨｂＦの含有量の全ヘモグロビン含有量に対する割合についてキャリブレーションされており、
最新の測定におけるＨｂＦの含有量の全ヘモグロビン含有量に対する割合が、前回の測定におけるＨｂＦの含有量の全ヘモグロビン含有量に対する割合に対して設定参照値以上増加していることが、前記妊婦が胎児母体間輸血症候群に罹患している可能性が高いことを示す、
妊婦における胎児母体間輸血症候群罹患の可能性を判定する方法、を提供する。
【発明の効果】
【００１０】
本開示によれば、妊婦における胎児母体間輸血症候群罹患の可能性を迅速且つ簡便に判定できる、妊婦における胎児母体間輸血症候群罹患の可能性を判定する方法、妊婦における胎児母体間輸血症候群罹患の可能性を判定するシステム及び装置、並びにコンピュータプログラムが提供される。
【図面の簡単な説明】
【００１１】
【図１】一態様に係るＨＰＬＣ装置の概略構成図である。
【図２】図１のＨＰＬＣ装置の制御系の構成図である。
【図３】一態様に係る胎児母体間輸血症候群罹患可能性判定処理のフローチャートである。
【図４】別の態様に係る胎児母体間輸血症候群罹患可能性判定処理のフローチャートである。
【図５】別の態様に係る胎児母体間輸血症候群罹患可能性判定処理のフローチャートである。
【図６】一態様に係る胎児母体間輸血症候群罹患の可能性を判定するシステムの概念図である。
【図７】一態様に係るキャリブレーション付き胎児母体間輸血症候群罹患可能性判定処理を示すフローチャートである。
【発明を実施するための形態】
【００１２】
＜妊婦における胎児母体間輸血症候群罹患の可能性を判定する方法＞
本開示の第１の態様においては、
（Ａ１）妊娠３０週目から４０週目の妊婦から得られた血液試料を分離分析法を用いる測定装置によりアッセイして、前記血液試料中におけるヘモグロビンＦ（ＨｂＦ）の含有量の全ヘモグロビン含有量に対する割合を決定する工程、を含み、
前記測定装置は、ＨｂＦの含有量の全ヘモグロビン含有量に対する割合についてキャリブレーションされており、
前記ＨｂＦの含有量の前記全ヘモグロビン含有量に対する割合が設定参照値以上であることが、前記妊婦が胎児母体間輸血症候群に罹患している可能性が高いことを示す、
妊婦における胎児母体間輸血症候群罹患の可能性を判定する方法、が提供される。
【００１３】
また、本開示の第２の態様においては、
（Ａ１）妊娠３０週目から４０週目の妊婦から得られた血液試料を分離分析法を用いる測定装置によりアッセイして、前記血液試料中におけるヘモグロビンＦ（ＨｂＦ）の含有量の全ヘモグロビン含有量に対する割合を決定する工程、
（Ｂ１）前記工程（Ａ１）をそれぞれ時間間隔を開けてさらに１回以上行う工程、を含み、
前記測定装置は、ＨｂＦの含有量の全ヘモグロビン含有量に対する割合についてキャリブレーションされており、
最新の測定におけるＨｂＦの含有量の全ヘモグロビン含有量に対する割合が、前回の測定におけるＨｂＦの含有量の全ヘモグロビン含有量に対する割合に対して設定参照値以上増加していることが、前記妊婦が胎児母体間輸血症候群に罹患している可能性が高いことを示す、
妊婦における胎児母体間輸血症候群罹患の可能性を判定する方法、が提供される。
【００１４】
以降、本開示の例示的な態様を説明するが、技術的な矛盾が生じない限りは、異なる態様で説明した事項同士を適宜組み合わせた態様も本開示の範囲内である。
【００１５】
母体の血液と胎児の血液とは胎盤において隔てられている。成人においては２本のα鎖と２本のβ鎖からなるヘモグロビンＡ（ＨｂＡ）が主要なヘモグロビンである一方、胎児においては２本のα鎖と２本のγ鎖によって作られたヘモグロビンＦ（ＨｂＦ）が主要なヘモグロビンである。ＨｂＦの方がヘモグロビンＡよりも酸素親和性が高いため、胎盤においては、母体血液中のヘモグロビンから胎児血液中のヘモグロビンへの酸素移動が起こり、胎児に酸素が供給される。
【００１６】
成人においてはＨｂＦはほぼ存在しないが、母体においては少量の胎児の血液の流入が正常母体においても起こるため、少量のＨｂＦが存在している。この胎児の血液の流入が多量に起こった場合に胎児母体間輸血症候群が生じると考えられる。胎児の血液の流入が多量に起こった場合には、胎児に特異的であるＨｂＦの流入量も増加し、母体の血液中におけるＨｂＦの含有量が増加すると考えられる。このため、本開示の種々の態様に係る妊婦における胎児母体間輸血症候群罹患の可能性を判定する方法においては、妊娠３０週目から４０週目の妊婦から得た血液試料中におけるＨｂＦの含有量が一定の範囲にあるかどうかにより、妊婦が胎児母体間輸血症候群を罹患している可能性を判定する。
【００１７】
とはいえ、胎児の血液の流入が同程度起こったとしても、胎児母体間輸血症候群を発症するかしないかは各妊婦により異なる。胎児の血液の流入が起こったとしても、胎児に実質的な悪影響が生じていなければ胎児母体間輸血症候群が発症しているとはいえない。このため、胎児母体間輸血症候群の確定診断においては胎児の健康状態をＣＴＧ検査や超音波検査により判定している。しかしこのような検査による胎児母体間輸血症候群の診断は手間と時間を要するため、何らかの症状を訴えた妊婦に対してのみ行われているのが実情である。不都合なことに、胎児母体間輸血症候群は多くの場合、妊婦に自覚症状が生じないため、実際には罹患している妊婦であっても、こうした検査による診断を受けていない妊婦がある程度の割合存在する。特別な症状を訴えない妊婦に対しても行われているような定期検診において胎児母体間輸血症候群の可能性を判定できれば、胎児母体間輸血症候群に罹患した妊婦を含む妊婦集団から胎児母体間輸血症候群に罹患している可能性が高い妊婦を検出するのに有用である。
【００１８】
本開示に係る胎児母体間輸血症候群罹患の可能性を判定する方法（本開示に記載の各例示的態様、例えば第１の態様〜第３の態様を包含する：以下同じ）においては、妊婦の定期検診においても頻繁に採取されている母体血液試料を用いて判定を行うことが出来るため、母体に追加の負担をかけることを避けることが出来、また対象となる妊婦の範囲を広くできる。このため、例えば胎児母体間輸血症候群の自覚症状はないが実際には胎児母体間輸血症候群に罹患している可能性がある妊婦も検出できる。また、血液試料の分析により判定を行うことが出来るため、迅速且つ簡便に判定を行うことが出来る。例えば、妊婦の一回の来院の中で、採血後、医師に問診前に判定結果を出すことが可能であり、これにより再度の来院をしなくても、医師による適切な指示（例えば、確定診断のためのＣＴＧ検査の実施）を出すことが可能である。
【００１９】
本開示に係る胎児母体間輸血症候群罹患の可能性を判定する方法はこのような点で大きな技術的意義を有する。本開示に係る胎児母体間輸血症候群罹患の可能性を判定する方法により、胎児母体間輸血症候群罹患の可能性が高いと判定された妊婦に対しては、胎児の健康状態をＣＴＧ検査や超音波検査により判定することにより胎児母体間輸血症候群に実際に罹患しているかどうかを確定診断すればよい。また、胎児母体間輸血症候群の症状の重篤度に応じて、帝王切開等の処置を行うことができる。
【００２０】
また、本開示に係る胎児母体間輸血症候群罹患の可能性を判定する方法においては、分離分析法に使用する測定装置は、ＨｂＦの含有量の全ヘモグロビン含有量に対する割合についてキャリブレーションされている。このため、キャリブレーションを行わない場合に比べて、ＨｂＦの含有量の全ヘモグロビン含有量に対する割合をより正確に求めることが出来、より正確な判定を行うことが可能となる。
【００２１】
＜妊婦における胎児母体間輸血症候群罹患の可能性を判定する方法＞
以下、本開示に係る妊婦における胎児母体間輸血症候群罹患の可能性を判定する方法について具体的に説明する。
【００２２】
＜＜工程（Ａ１）＞＞
工程（Ａ１）は、妊娠３０週目から４０週目の妊婦から得られた血液試料を分離分析法を用いる測定装置によりアッセイして、前記血液試料中におけるヘモグロビンＦ（ＨｂＦ）の含有量の全ヘモグロビン含有量に対する割合を決定する工程である。なお、本開示中において、ヘモグロビンＦ（ＨｂＦ）の含有量の全ヘモグロビン含有量に対する割合とはモル比を百分率で示したものである。
妊娠３０週目から４０週目の期間は、胎児母体間輸血症候群の主要な発症時期である。このため、血液試料を妊婦から採取する時期を妊娠３０週目から４０週目としている。
【００２３】
血液試料の採取は通常のやり方で行えばよく、一般的には妊婦の腕の静脈からシリンジにより採取すればよい。採血量は、例えば１ｍｌ〜１０ｍｌ程度とすることが出来る。
ＨｂＦの含有量の全ヘモグロビン含有量に対する割合を決定するための血液試料のアッセイは、分離分析法を用いる測定装置によって行われる。本明細書において「分離分析法」とは、試料に含まれる分析対象物を個別に分離しながら分析を行う方法であって、例えば、液体クロマトグラフィー法、キャピラリー電気泳動法及びキャピラリー電気クロマトグラフィー法等が挙げられる。液体クロマトグラフィー法としては、例えば、陽イオン交換クロマトグラフィー法、陰イオン交換クロマトグラフィー法、分配クロマトグラフィー法、逆相分配クロマトグラフィー法、アフィニティークロマトグラフィー法、及びゲルろ過クロマトグラフィー法等が挙げられる。液体クロマトグラフィー法は、高速液体クロマトグラフィー（ＨＰＬＣ）であることが迅速な測定の観点から好ましい。キャピラリー電気泳動法としては、例えば、キャピラリーゾーン電気泳動法、キャピラリー等電点電気泳動法、キャピラリー導電クロマトグラフィー法、キャピラリー等速電気泳動法、及びキャピラリーゲル電気泳動法等が挙げられる。
【００２４】
分離分析法によれば、ＨｂＦのピークは、ヘモグロビンＡ等の他のヘモグロビンピークと分離して生じさせることができる。ヘモグロビンＡやＨｂＦの検出は、吸光度の測定によって行うことが出来、例えばヘモグロビンが吸収する４１５ｎｍ〜４２０ｎｍの波長における吸光度を測定することで行うことが出来る。ＨｂＦのピーク面積を求めることで、ＨｂＦの含有量についての測定値を得ることが出来る。また、全ヘモグロビンのピークの総面積を求めることで、全ヘモグロビン含有量についての測定値を得ることができる。ＨｂＦのピーク面積の全ヘモグロビンのピークの総面積に対する比を求めることで、ＨｂＦの含有量の全ヘモグロビン含有量に対する割合を求めることができる。
【００２５】
このように、本開示において「ＨｂＦの含有量についての測定値」とは、前記アッセイにおいて測定される、ＨｂＦの含有量を反映した値であり、例えば、前記アッセイがクロマトグラフィーの溶出物の吸光度測定を行うアッセイである場合にはＨｂＦの吸収ピークの面積とすることができる。本開示において「全ヘモグロビン含有量についての測定値」とは、前記アッセイにおいて測定される、全ヘモグロビン含有量を反映した値であり、例えば、前記アッセイがクロマトグラフィーの溶出物の吸光度測定を行うアッセイである場合にはヘモグロビンの吸収ピークの総面積とすることができる。また、本開示において「ＨｂＦの含有量の全ヘモグロビン含有量に対する割合についての測定値」とは、前記アッセイにおいて測定される、ＨｂＦの含有量の全ヘモグロビン含有量に対する割合を反映した値であり、例えば、前記アッセイがクロマトグラフィーの溶出物の吸光度測定を行うアッセイである場合には、ＨｂＦの吸収ピークの面積のヘモグロビンの吸収ピークの総面積とすることができる。
【００２６】
こうした測定値（例えばピーク面積）を基にしてＨｂＦの含有量の全ヘモグロビン含有量に対する割合を決定するが、この際には、検量線により測定値から含有量や含有量比への値の換算を行うことができる。例えば、ＨｂＦの含有量についての測定値（例えばＨｂＦのピーク面積）をＨｂＦの含有量に換算し、全ヘモグロビン含有量についての測定値（例えば全ヘモグロビンのピークの総面積）を全ヘモグロビン含有量に換算し、そこからＨｂＦの含有量の全ヘモグロビン含有量に対する割合を求めることができる。また、ＨｂＦの含有量の全ヘモグロビン含有量に対する割合についての測定値（例えばＨｂＦのピーク面積の全ヘモグロビンのピークの総面積に対する割合）を、ＨｂＦの含有量の全ヘモグロビン含有量に対する割合に換算することができる。
【００２７】
ただし、例えばＨｂＡの含有量／全ヘモグロビン含有量の比は概ね一定とみなせるため、ＨｂＡの含有量についての測定値（例えばＨｂＡのピーク面積）を用いてＨｂＦの含有量の全ヘモグロビン含有量に対する割合を算出してもよい。このようにして算出する場合も、本開示に包含される。
【００２８】
＜＜キャリブレーション＞＞
前記測定装置は、ＨｂＦの含有量の全ヘモグロビン含有量に対する割合についてキャリブレーションされている。ここで、キャリブレーションとは、測定装置による測定値（例えばピーク面積）から所望のパラメータ（例えばＨｂＦの含有量の全ヘモグロビン含有量に対する割合）を算出する際の換算処理（例えば検量線による処理）の精度を維持するために、前記パラメータの値が既知である標準試料を用いて測定を行い、換算処理を適正化（例えば検量線の再作成又は補正係数の設定）を行うことを指す。
【００２９】
キャリブレーションは、複数回の測定毎に測定対象物質（例えば、ＨｂＦ及び／又は全ヘモグロビン）の含有量又はＨｂＦ含有量／全ヘモグロビン含有量の比が既知である標準試料を測定して検量線を作成又は補正係数を設定することで行ってもよく、毎回の測定毎に前記標準試料を用いて検量線を作成又は補正係数を設定することで行ってもよい。作成された検量線又は設定された補正係数のデータは、測定装置に記憶させて必要なときに読み出して用いてもよい。複数回の測定毎に検量線を作成又は補正係数を設定する場合は、設定された回数（例えば１０００回、又は１００回、又は１０回）の測定の後に標準試料の測定を行ってもよく、設定された時間（例えば１週間、又は１日、又は１時間）毎に標準試料の測定を行ってもよく、決められたタイミング（例えば、起動時）等に標準試料の測定を行うようにしてもよい。
【００３０】
ＨｂＦの含有量が既知の標準試料を用いる場合は、該標準試料は、ＨｂＦの含有量が既知の試料であれば特に制限はなく、市販の標品であってもよいし、生体由来試料の精製によって得られた試料におけるＨｂＦ含有量を精密測定した試料であってもよい。全ヘモグロビンの含有量が既知の標準試料を用いる場合は、全ヘモグロビンの含有量が既知の試料であれば特に制限はなく、市販の標品であってもよいし、生体由来試料の精製によって得られた試料における全ヘモグロビン含有量を精密測定した試料であってもよい。ＨｂＦ含有量／全ヘモグロビン含有量の比が既知の標準試料を用いる場合は、該標準試料は、ＨｂＦ含有量／全ヘモグロビン含有量の比が既知の試料であれば特に制限はなく、市販の標品であってもよいし、生体由来試料の精製によって得られた試料においてＨｂＦ含有量／全ヘモグロビン含有量の比を精密測定した試料であってもよい。
【００３１】
工程（Ａ１）においてＨｂＦの含有量についての測定値（例えばＨｂＦのピーク面積）をＨｂＦの含有量に換算する場合、キャリブレーションにおいてはＨｂＦの含有量が既知の標準試料を用いることができる。キャリブレーションにおいて測定する標準試料は１つだけでもよいが、キャリブレーションの精度を高める観点からは好ましくは異なる含有量のＨｂＦを含む２つ以上の標準試料を測定することが好ましい。このような２つ以上の標準試料は、例えば、単一の標準標品を別々の希釈度で希釈したり、一方のみを希釈したりすることで得ることができる。また、標準試料のうちには、ＨｂＦを含まない試料（ブランク）も含まれることが好ましい。ＨｂＦを含まない試料を測定して得られた値もキャリブレーションに用いることにより、ＨｂＦの含有量が少ない領域におけるキャリブレーション後の含有量値の精度がさらに向上する。
【００３２】
工程（Ａ１）におけるアッセイと同様のアッセイをこれら標準試料について行うことにより、各標準試料におけるＨｂＦの含有量についての測定値を得ることができる。
【００３３】
１つの標準試料のみを用いる場合には、基本的には、
ＨｂＦの含有量＝ｋ×ＨｂＦの含有量についての測定値
であると考えて、標準試料におけるＨｂＦの含有量と、実際の測定値から係数（補正係数）ｋを求め、検量線を作成すればよい。
【００３４】
ＨｂＦの含有量が異なる２つ以上の標準試料を測定して得られた複数の測定値を用いてキャリブレーションを行う場合には、例えば、各標準試料におけるＨｂＦの含有量を縦軸に、ＨｂＦの含有量についての測定値を横軸として、測定結果を二次元グラフ上にプロットし、最小二乗法によって回帰直線を求め、これを検量直線として用いることができる。もちろん、回帰は直線（一次関数）に限られず、二次あるいはさらに高次の関数に回帰させて回帰曲線を得て、これを検量線として使用してもよい。
【００３５】
キャリブレーションの精度を向上させる観点からは、ＨｂＦの含有量が最も低い標準試料からＨｂＦの含有量が最も高い標準試料までの範囲が、妊婦から得た血液試料を測定した場合に得られると想定されるＨｂＦの含有量の範囲を広くカバーしていることが好ましい。
【００３６】
なお、ＨｂＦの含有量の値は、測定のためにロードした試料の量に依存するが、ロードした試料量は分かっているため、本開示においては「含有量」の記載は、特に矛盾の無い限り「濃度」と読み替えてもよい。
【００３７】
全ヘモグロビン量についての標準試料の測定、及び全ヘモグロビン含有量についての検量線の作成も、ＨｂＦの場合と同様に行えばよい。
【００３８】
工程（Ａ１）においてＨｂＦの含有量の全ヘモグロビン含有量に対する割合についての測定値（例えば、ＨｂＦのピーク面積のヘモグロビンのピークの総面積に対する割合）をＨｂＦの含有量の全ヘモグロビン含有量に対する割合に換算する場合、キャリブレーションにおいてはＨｂＦの含有量の全ヘモグロビン含有量に対する割合が既知の標準試料を用いることができる。キャリブレーションにおいて測定する標準試料は１つだけでもよいが、キャリブレーションの精度を高める観点からは好ましくはＨｂＦ含有量／全ヘモグロビン含有量の比が異なる２つ以上の標準試料を測定することが好ましい。また、標準試料のうちには、ＨｂＦ含有量／全ヘモグロビン含有量の比の値が０である試料も含まれることが好ましい。ＨｂＦ含有量／全ヘモグロビン含有量の比の値が０である試料を測定して得られた値もキャリブレーションに用いることにより、ＨｂＦ／全ヘモグロビン含有量の比が小さい領域におけるキャリブレーション後のＨｂＦ含有量／全ヘモグロビン含有量の比の精度がさらに向上する。
【００３９】
工程（Ａ１）におけるアッセイと同様のアッセイをこれら標準試料について行うことにより、各標準試料におけるＨｂＦ含有量／全ヘモグロビン含有量の比についての測定値を得ることができる。
【００４０】
１つの標準試料のみを用いる場合には、基本的には、
ＨｂＦ含有量／全ヘモグロビン含有量の比＝ｋ×（ＨｂＦ含有量／全ヘモグロビン含有量の比についての測定値）
であると考えて、標準試料におけるＨｂＦ含有量／全ヘモグロビン含有量の比と、実際の測定値から係数（補正係数）ｋを求め、検量線を作成すればよい。
【００４１】
ＨｂＦ含有量／全ヘモグロビン含有量の比が異なる２つ以上の標準試料を測定して得られた複数の測定値を用いてキャリブレーションを行う場合には、例えば、各標準試料におけるＨｂＦ含有量／全ヘモグロビン含有量の比を縦軸に、ＨｂＦ含有量／全ヘモグロビン含有量の比についての測定値を横軸として、測定結果を二次元グラフ上にプロットし、最小二乗法によって回帰直線を求め、これを検量直線として用いることができる。もちろん、回帰は直線（一次関数）に限られず、二次あるいはさらに高次の関数に回帰させて回帰曲線を得て、これを検量線として使用してもよい。
【００４２】
キャリブレーションの精度を向上させる観点からは、ＨｂＦ含有量／全ヘモグロビン含有量の比が最も低い標準試料からＨｂＦ含有量／全ヘモグロビン含有量の比が最も高い標準試料までの範囲が、妊婦から得た血液試料を測定した場合に得られると想定されるＨｂＦ含有量／全ヘモグロビン含有量の比の範囲を広くカバーしていることが好ましい。
【００４３】
検量線を用いてキャリブレーションすることにより得られた値は、キャリブレーションを経ているため、一般的に、キャリブレーションを行わない場合に推定されるＨｂＦ含有量推定値や全ヘモグロビン含有量推計値と比べて真のＨｂＦ含有量や真の全ヘモグロビン含有量により近い値である。このため、ＨｂＦの含有量の全ヘモグロビン含有量に対する割合を基にして、妊婦における胎児母体間輸血症候群罹患の可能性をより正確に判定できる。
【００４４】
＜＜工程（Ｂ１）＞＞
工程（Ｂ１）は、前記（Ａ１）の工程をそれぞれ時間間隔を開けてさらに１回以上行う工程である。このような時間間隔は、基本的には来院して行う検査の間隔と考えられる。工程（Ｂ１）において、前記時間間隔としては、１週間〜６週間の範囲内の間隔であることが好ましく、２週間〜４週間の範囲内の間隔であることがより好ましい。この範囲内の時間間隔であれば、胎児母体間輸血症候群罹患の可能性を判定するのに十分な妊婦の状態変化が生じ、また、胎児母体間輸血症候群罹患の可能性の高い妊婦を早期に検出しやすい。
【００４５】
妊婦に対しては医療機関において定期的な検診が行われているため、上記の範囲内の時間間隔でのアッセイは、妊婦に対して特に追加の負担をかけずに行うことが可能な場合が多い。
【００４６】
なお、（Ａ１）の工程を繰り返す回数は特に限定されず、工程（Ａ１）をさらに１回以上行えばよい。例えば、（Ａ１）の工程はさらに１回（合計２回）行ってもよいし、さらに２回（合計３回）行ってもよいし、さらに３回以上（合計４回以上）おこなってもよい。
【００４７】
＜＜測定結果の判定＞＞
第１の態様においては、ＨｂＦの含有量の全ヘモグロビン含有量に対する割合が設定参照値以上であることが、前記妊婦が胎児母体間輸血症候群に罹患している可能性が高いことを示す。
【００４８】
上記のように、ＨｂＦは胎児に特異的であり、ＨｂＦの含有量の全ヘモグロビン含有量に対する割合が設定参照値以上である場合には、胎児の血液が多量に母体内に流入していると考えられる。このため、このような母体は胎児母体間輸血症候群に罹患している可能性が高いと判定できる。このように判定された妊婦については、ＣＴＧ検査や超音波測定により、確定診断を行うようにすればよい。一方、ＨｂＦの含有量の全ヘモグロビン含有量に対する割合が設定参照値未満である場合には、母体は胎児母体間輸血症候群に罹患している可能性が低いと判定できる。ただし、設定参照値の値の設定に応じて、ある程度の割合で偽陰性が生じることは医療検査の性質上避けられないものである、このため、ここでの「胎児母体間輸血症候群に罹患している可能性が高い」、「胎児母体間輸血症候群に罹患している可能性が低い」との判定結果は絶対的なものではなく、この判定により生み出される２つのグループのうち胎児母体間輸血症候群に罹患している可能性が相対的に高いあるいは相対的に低いということを表している。
【００４９】
設定参照値の値は、例えば、０．５％以上の範囲内の値とすることができる。設定参照値の値は、必要な感度と特異度を考慮して設定すればよい。疾患検出のための検査において、感度とは、疾患罹患者中の検査陽性者の割合を指し、特異度とは、疾患非罹患者中の検査陰性者の割合を指す。設定参照値の値を高く設定すると特異度は向上するが感度は低下する。一方、設定参照値の値を低く設定すれば、感度は向上するが特異度は低下する。感度が低い場合には偽陰性の割合が増加し、感度が高い場合には偽陰性の割合が低下する。広範な妊婦から胎児母体間輸血症候群に罹患している可能性が高い妊婦をスクリーニングするためには、感度が高いことが好ましいが、一般的にはその分偽陽性も増えるため、確定診断のための検査をより多数の妊婦に対して行う必要が生じる。
【００５０】
特異度を許容可能な範囲におさめつつ感度をなるべく高める観点からは、第１の態様における設定参照値の値を例えば０．５％とすることができる。一方、感度を許容可能な範囲におさめつつ特異度をなるべく高める観点からは、設定参照値の値を例えば３％とすることができる。感度と特異度のバランスを考慮して、設定参照値の値は例えば０．５％〜３％の範囲内の値としてもよく、０．６％〜２％の範囲内の値としてもよく、０．８％〜１．５％の範囲内の値としてもよく、１％〜１．３％の範囲内の値としてもよい。設定参照値の値は、例えば０．６％、あるいは０．８％、あるいは１％、あるいは２％であってもよい。
【００５１】
あるいは、感度の値が０．６以上の値となるように、設定参照値の値を設定してもよい。あるいは、感度の値が、０．７以上の値となるように設定参照値の値を設定してもよく、若しくは０．８以上の値となるように設定参照値の値を設定してもよく、若しくは０．９以上の値となるように設定参照値の値を設定してもよい。
【００５２】
さらに、特異度の値が０．６以上の値となるように、設定参照値の値を設定してもよい。あるいは、特異度の値が、０．７以上の値となるように設定参照値の値を設定してもよく、若しくは０．８以上の値となるように設定参照値の値を設定してもよく、若しくは０．９以上の値となるように設定参照値の値を設定してもよい。
【００５３】
したがって、第１の態様に係る妊婦における胎児母体間輸血症候群罹患の可能性を判定する方法は、
（Ｃ１）ＨｂＦの含有量の全ヘモグロビン含有量に対する割合が設定参照値以上である場合に、前記妊婦が胎児母体間輸血症候群に罹患している可能性が高いと判定する工程、
を含んでもよい。
【００５４】
工程（Ａ１）により得られたＨｂＦの含有量の全ヘモグロビン含有量に対する割合が設定参照値以上の場合には、その妊婦についてさらなる検査（例えば、ＣＴＧ検査及び／又は超音波検査）を行い、胎児母体間輸血症候群に罹患しているかどうかについて判定すればよい。したがって、第１の態様に係る妊婦における胎児母体間輸血症候群罹患の可能性を判定する方法に、さらに、
（Ｄ１）前記工程（Ｃ１）において胎児母体間輸血症候群に罹患している可能性が高いと判定された妊婦を、さらにＣＴＧ検査及び超音波検査からなる群から選択される１つ以上により検査し、胎児母体間輸血症候群への罹患の有無を判定する工程、
を含ませることで、妊婦における胎児母体間輸血症候群罹患の有無を判定する方法としてもよい。
【００５５】
工程（Ｄ１）において行う検査は、いわゆる確定診断のための検査である。一方、本開示に係る妊婦における胎児母体間輸血症候群罹患の可能性を判定する方法は、確定診断の前のスクリーニングのために用いることが可能であるため、胎児母体間輸血症候群罹患の可能性の程度が未だ不明な妊婦に対して行うことが好ましい。つまり、本開示に係る妊婦における胎児母体間輸血症候群罹患の可能性を判定する方法は、胎児母体間輸血症候群罹患した妊婦の検出のための一次スクリーニングのために用いることが好ましい。
【００５６】
第２の態様においては、最新の測定におけるＨｂＦの含有量の全ヘモグロビン含有量に対する割合が、前回の測定におけるＨｂＦの含有量の全ヘモグロビン含有量に対する割合に対して設定参照値以上増加していることが、前記妊婦が胎児母体間輸血症候群に罹患している可能性が高いことを示す。
【００５７】
上記のように、ＨｂＦは胎児に特異的であり、最新の測定におけるＨｂＦの含有量の全ヘモグロビン含有量に対する割合が、前回の測定におけるＨｂＦの含有量の全ヘモグロビン含有量に対する割合に対して設定参照値以上増加した場合には、胎児の血液が多量に母体内に流入するようになったと考えられる。このことは、胎盤における母胎血液と胎児血液の分離に、急に不全をきたすようになったことを反映していると考えられるため、このような母体は胎児母体間輸血症候群に罹患している可能性が高いと判定できる。このように判定された妊婦については、ＣＴＧ検査や超音波測定により、確定診断を行うようにすればよい。
【００５８】
一方、ＨｂＦの含有量の全ヘモグロビン含有量に対する割合の増加量が設定参照値未満である場合には、母体は胎児母体間輸血症候群に罹患している可能性が低いと判定できる。ただし、設定参照値の値の設定に応じて、ある程度の割合で偽陰性が生じることは医療検査の性質上避けられないものである、このため、ここでの「胎児母体間輸血症候群に罹患している可能性が高い」、「胎児母体間輸血症候群に罹患している可能性が低い」との判定結果は絶対的なものではなく、この判定により生み出される２つのグループのうち胎児母体間輸血症候群に罹患している可能性が相対的に高いあるいは相対的に低いということを表している。
【００５９】
設定参照値の値は、例えば、０．２％以上の範囲内の値とすることができる。設定参照値の値は、必要な感度と特異度を考慮して設定すればよい。設定参照値の値を高く設定すると特異度は向上するが感度は低下する。一方、設定参照値の値を低く設定すれば、感度は向上するが特異度は低下する。感度が低い場合には偽陰性の割合が増加し、感度が高い場合には偽陰性の割合が低下する。広範な妊婦から胎児母体間輸血症候群に罹患している可能性が高い妊婦をスクリーニングするためには、感度が高いことが好ましいが、一般的にはその分偽陽性も増えるため、確定診断のための検査をより多数の妊婦に対して行う必要が生じる。
【００６０】
特異度を許容可能な範囲におさめつつ感度をなるべく高める観点からは、第２の態様における設定参照値の値を例えば０．２％とすることができる。一方、感度を許容可能な範囲におさめつつ特異度をなるべく高める観点からは、設定参照値の値を例えば１％とすることができる。感度と特異度のバランスを考慮して、設定参照値の値は例えば０．２％〜１％の範囲内の値としてもよく、０．３％〜０．８％の範囲内の値としてもよく、０．４％〜０．７％の範囲内の値としてもよく、０．４％〜０．６％の範囲内の値としてもよい。設定参照値の値は、例えば０．３％、あるいは０．４％、あるいは０．６％、あるいは０．７％、あるいは０．８％であってもよい。
【００６１】
あるいは、感度の値が０．６以上の値となるように、設定参照値の値を設定してもよい。あるいは、感度の値が、０．７以上の値となるように設定参照値の値を設定してもよく、若しくは０．８以上の値となるように設定参照値の値を設定してもよく、若しくは０．９以上の値となるように設定参照値の値を設定してもよい。
【００６２】
さらに、特異度の値が０．６以上の値となるように、設定参照値の値を設定してもよい。あるいは、特異度の値が、０．７以上の値となるように設定参照値の値を設定してもよく、若しくは０．８以上の値となるように設定参照値の値を設定してもよく、若しくは０．９以上の値となるように設定参照値の値を設定してもよい。
【００６３】
したがって、第２の態様に係る妊婦における胎児母体間輸血症候群罹患の可能性を判定する方法は、
（Ｃ２）最新の測定におけるＨｂＦの含有量の全ヘモグロビン含有量に対する割合が、前回の測定におけるＨｂＦの含有量の全ヘモグロビン含有量に対する割合に対して設定参照値以上増加している場合に、前記妊婦が胎児母体間輸血症候群に罹患している可能性が高いと判定する工程、
を含んでもよい。
【００６４】
工程（Ｂ１）により得られたＨｂＦの含有量の全ヘモグロビン含有量に対する割合の増加量が設定参照値以上の場合には、その妊婦についてさらなる検査（例えば、ＣＴＧ検査及び／又は超音波検査）を行い、胎児母体間輸血症候群に罹患しているかどうかについて判定すればよい。したがって、第２の態様に係る妊婦における胎児母体間輸血症候群罹患の可能性を判定する方法に、さらに、
（Ｄ２）前記工程（Ｃ２）において胎児母体間輸血症候群に罹患している可能性が高いと判定された妊婦を、さらにＣＴＧ検査及び超音波検査からなる群から選択される１つ以上により検査し、胎児母体間輸血症候群への罹患の有無を判定する工程、
を含ませることで、妊婦における胎児母体間輸血症候群罹患の有無を判定する方法としてもよい。
【００６５】
工程（Ｄ２）において行う検査は、いわゆる確定診断のための検査である。一方、本開示に係る妊婦における胎児母体間輸血症候群罹患の可能性を判定する方法は、確定診断の前のスクリーニングのために用いることが可能であるため、胎児母体間輸血症候群罹患の可能性の程度が未だ不明な妊婦に対して行うことが好ましい。つまり、本開示に係る妊婦における胎児母体間輸血症候群罹患の可能性を判定する方法は、胎児母体間輸血症候群罹患した妊婦の検出のための一次スクリーニングのために用いることが好ましい。
【００６６】
本開示に係る妊婦における胎児母体間輸血症候群罹患の可能性を判定する方法は、判定の精度をさらに向上させるために、ＨｂＦの含有量の全ヘモグロビン含有量に対する割合の値と、ＨｂＦの含有量の全ヘモグロビン含有量に対する割合の検査間隔に相当する期間における増加量との両方を考慮して判定を行ってもよい。
【００６７】
具体的には、本開示の第３の態様においては、
（Ａ１）妊娠３０週目から４０週目の妊婦から得られた血液試料を分離分析法を用いる測定装置によりアッセイして、前記血液試料中におけるヘモグロビンＦ（ＨｂＦ）の含有量の全ヘモグロビン含有量に対する割合を決定する工程、
（Ｂ１）前記工程（Ａ１）をそれぞれ時間間隔を開けてさらに１回以上行う工程、を含み、
前記測定装置は、ＨｂＦの含有量の全ヘモグロビン含有量に対する割合についてキャリブレーションされており、
最新の測定におけるＨｂＦの含有量の全ヘモグロビン含有量に対する割合が、前回の測定におけるＨｂＦの含有量の全ヘモグロビン含有量に対する割合に対して設定参照値Ｉ以上増加しており、且つ最新の測定におけるＨｂＦの含有量の全ヘモグロビン含有量に対する割合が設定参照値Ｌ以上であることが、前記妊婦が胎児母体間輸血症候群に罹患している可能性が高いことを示す、
妊婦における胎児母体間輸血症候群罹患の可能性を判定する方法、が提供される。
【００６８】
第３の態様における設定参照値Ｉは第２の態様における設定参照値に対応し、その好ましい範囲や例も第２の態様における設定参照値の場合と同様である。第３の態様における設定参照値Ｌは第１の態様における設定参照値に対応し、その好ましい範囲や例も第１の態様における設定参照値の場合と同様である。
【００６９】
したがって、第３の態様に係る妊婦における胎児母体間輸血症候群罹患の可能性を判定する方法は、
（Ｃ３）最新の測定におけるＨｂＦの含有量の全ヘモグロビン含有量に対する割合が、前回の測定におけるＨｂＦの含有量の全ヘモグロビン含有量に対する割合に対して設定参照値Ｉ以上増加しており、且つ最新の測定におけるＨｂＦの含有量の全ヘモグロビン含有量に対する割合が設定参照値Ｌ以上である場合に、前記妊婦が胎児母体間輸血症候群に罹患している可能性が高いと判定する工程、
を含んでもよい。
【００７０】
最新の測定におけるＨｂＦの含有量の全ヘモグロビン含有量に対する割合が、前回の測定におけるＨｂＦの含有量の全ヘモグロビン含有量に対する割合に対して設定参照値Ｉ以上増加しており、且つ最新の測定におけるＨｂＦの含有量の全ヘモグロビン含有量に対する割合が設定参照値Ｌ以上である場合には、その妊婦についてさらなる検査（例えば、ＣＴＧ検査及び／又は超音波検査）を行い、胎児母体間輸血症候群に罹患しているかどうかについて判定すればよい。したがって、第３の態様に係る妊婦における胎児母体間輸血症候群罹患の可能性を判定する方法に、さらに、
（Ｄ３）前記工程（Ｃ３）において胎児母体間輸血症候群に罹患している可能性が高いと判定された妊婦を、さらにＣＴＧ検査及び超音波検査からなる群から選択される１つ以上により検査し、胎児母体間輸血症候群への罹患の有無を判定する工程、
を含ませることで、妊婦における胎児母体間輸血症候群罹患の有無を判定する方法としてもよい。
【００７１】
工程（Ｄ３）において行う検査は、いわゆる確定診断のための検査である。一方、本開示に係る妊婦における胎児母体間輸血症候群罹患の可能性を判定する方法は、確定診断の前のスクリーニングのために用いることが可能であるため、胎児母体間輸血症候群罹患の可能性の程度が未だ不明な妊婦に対して行うことが好ましい。つまり、本開示に係る妊婦における胎児母体間輸血症候群罹患の可能性を判定する方法は、胎児母体間輸血症候群罹患した妊婦の検出のための一次スクリーニングのために用いることが好ましい。
【００７２】
ＨｂＦの含有量の全ヘモグロビン含有量に対する割合の増加量が設定参照値Ｉ以上である場合であっても、ＨｂＦの含有量の全ヘモグロビン含有量に対する割合の値自体がそれほど高くなければ、胎児母体間輸血症候群に罹患していない場合もあるため、前記増加量と前記割合の両方を判定に用いることでより精度の高い判定が可能となる。
【００７３】
本開示に係る妊婦における胎児母体間輸血症候群罹患の可能性を判定する方法の実施の一例について以下に説明する。図１には、高速液体クロマトグラフィ（Ｈｉｇｈ  Ｐｅｒｆｏｒｍａｎｃｅ  Ｌｉｑｕｉｄ  Ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｙ：ＨＰＬＣ）を利用したＨＰＬＣ装置Ｘの概略構成図を示した。
【００７４】
ＨＰＬＣ装置Ｘは、採血管１１をセットして、全血中のＨｂＦの濃度を自動で測定するように構成されたものである。このＨＰＬＣ装置Ｘは、複数の溶離液ボトル１２Ａ、１２Ｂ、１２Ｃ、１２Ｄ、１２Ｅ（図１では５個）等を含む装置本体２を備えている。
【００７５】
各溶離液ボトル１２Ａ〜１２Ｅは、後述する分析カラム６０に供給すべき溶離液Ａ〜Ｅを各々保持したものである。各溶離液は、用途に応じて例えば組成、成分比、ｐＨ、浸透圧等が異なる。
【００７６】
装置本体２は、試料調製ユニット５、分析ユニット６、及び測光ユニット７を有している。
【００７７】
ラック５０における採血管１１は、後述する試料調製ユニット５におけるノズル５１により採取可能な位置に移動するように構成されている。
【００７８】
試料調製ユニット５は、採血管１１から採取した血液から、分析カラム６０に導入する試料を調製するためのものである。この試料調製ユニット５は、ノズル５１、及び希釈槽５３を有している。
【００７９】
ノズル５１は、採血管１１の血液試料１３をはじめとする各種の液体を採取するためのものであり、液体の吸引・吐出が可能であるとともに、上下方向及び水平方向に移動可能とされている。このノズル５１の動作は、後述する制御部１００によって制御される。
【００８０】
分析ユニット６は、分析カラム６０の充填剤に対する生体成分の吸着・脱着をコントロールし、各種の生体成分を測光ユニット７に供するためのものである。分析ユニット６における設定温度は、例えば４０℃程度とされる。分析カラム６０は、試料中のヘモグロビンを選択的に吸着させるための充填剤を保持させたものである。充填剤としては、例えばメタクリル酸−メタクリル酸エステル共重合体が使用される。
【００８１】
分析ユニット６は、分析カラム６０の他に、マニホールド６１、送液ポンプ６２、及びインジェクションバルブ６３を有している。また、分析カラム６０は配管８６を介して測光ユニット７に連通している。
【００８２】
マニホールド６１は、複数の溶離液ボトル１２Ａ〜１２Ｅのうちの特定の溶離液ボトルから、分析カラム６０に選択的に溶離液を供給させるためのものである。このマニホールド６１は、配管８０Ａ〜８０Ｅを介して溶離液ボトル１２Ａ、１２Ｂ、１２Ｃ、１２Ｄ、１２Ｅに各々接続され、配管８４を介してインジェクションバルブ６３に接続されている。
【００８３】
送液ポンプ６２は、溶離液をインジェクションバルブ６３に移動させるための動力を付与するためのものであり、配管８４の途中に設けられている。
【００８４】
インジェクションバルブ６３は、一定量の導入用試料を採取するとともに、その導入用試料を分析カラム６０に導入可能とするものであり、複数の導入ポート及び排出ポート（図示省略）を備えている。このインジェクションバルブ６３には、インジェクションループ６４が接続されている。このインジェクションループ６４は、一定量（例えば数μＬ）の液体を保持可能なものであり、インジェクションバルブ６３を適宜切り替えることにより、インジェクションループ６４が配管８３を介して希釈槽５３と連通して希釈槽５３からインジェクションループ６４に導入用試料が供給される状態、インジェクションループ６４がプレフィルターＰＦ及び配管８５を介して分析カラム６０と連通してインジェクションループ６４から導入用試料が分析カラム６０に導入される状態を選択することができる。このようなインジェクションバルブ６３としては、例えば六方バルブを使用することができる。なお、プレフィルターＰＦは、試料や溶離液を濾過するためのフィルターである。
【００８５】
測光ユニット７は、分析カラム６０からの脱着液に含まれるヘモグロビンを光学的に検出するためのものであり、配管８７を介して、分析カラム６０からの脱着液を排出するための廃液槽８８に接続されている。
【００８６】
図２には、ＨＰＬＣ装置Ｘの制御系のブロック図を示した。図２に示すように、ＨＰＬＣ装置Ｘは、制御部１００を備えている。制御部１００は、ＣＰＵ（Ｃｅｎｔｒａｌ  Ｐｒｏｃｅｓｓｉｎｇ  Ｕｎｉｔ）１００Ａ、ＲＯＭ（Ｒｅａｄ  Ｏｎｌｙ  Ｍｅｍｏｒｙ）１００Ｂ、ＲＡＭ（Ｒａｎｄｏｍ  Ａｃｃｅｓｓ  Ｍｅｍｏｒｙ）１００Ｃ、不揮発性メモリ１００Ｄ、及び入出力インターフェース（Ｉ／Ｏ）１００Ｅがバス１００Ｆを介して各々接続された構成となっている。
【００８７】
Ｉ／Ｏ１００Ｅには、試料調製ユニット５、分析ユニット６、及び測光ユニット７が接続されている。
【００８８】
なお、後述するキャリブレーション付き胎児母体間輸血症候群罹患可能性判定処理を実行させるプログラムは、本実施形態では一例として不揮発性メモリ１００Ｄに予め記憶される。ＣＰＵ１００Ａは、不揮発性メモリ１００Ｄに記憶されたキャリブレーション付き胎児母体間輸血症候群罹患可能性判定処理を実行させるプログラムを読み込んで実行する。また、ＣＤ−ＲＯＭ等の記録媒体にキャリブレーション付き胎児母体間輸血症候群罹患可能性判定処理を実行させるプログラムを記録し、これをＣＤ−ＲＯＭドライブ等で読み込むことにより実行するようにしてもよい。
【００８９】
＜妊婦における胎児母体間輸血症候群罹患の可能性を判定する装置＞
本開示の一態様に係る妊婦における胎児母体間輸血症候群罹患の可能性を判定する装置は、
妊娠３０週目から４０週目の妊婦から得られた血液試料を分離分析法を用いる測定装置によりアッセイして、前記血液試料中におけるヘモグロビンＦ（ＨｂＦ）の含有量の全ヘモグロビン含有量に対する割合を決定する測定手段と、
（ｉ）ＨｂＦの含有量の全ヘモグロビン含有量に対する割合が設定参照値以上である場合に
（ｉｉ）最新の測定におけるＨｂＦの含有量の全ヘモグロビン含有量に対する割合が、前回の測定におけるＨｂＦの含有量の全ヘモグロビン含有量に対する割合に対して設定参照値以上増加している場合に、又は
（ｉｉｉ）最新の測定におけるＨｂＦの含有量の全ヘモグロビン含有量に対する割合が、前回の測定におけるＨｂＦの含有量の全ヘモグロビン含有量に対する割合に対して設定参照値Ｉ以上増加しており、且つ最新の測定におけるＨｂＦの含有量の全ヘモグロビン含有量に対する割合が設定参照値Ｌ以上である場合に、
前記妊婦が胎児母体間輸血症候群に罹患している可能性が高いと判定する判定手段と、
所定の条件を満たした場合に、ヘモグロビンＦ（ＨｂＦ）の含有量の全ヘモグロビン含有量に対する割合について前記測定手段にキャリブレーションを行わせる、キャリブレーション指示手段と、を含む。なお、（ｉ）〜（ｉｉｉ）の判定基準は、いずれか１つのみを用いても、２つ以上を組み合わせても構わない。
【００９０】
前記装置における、前記測定手段としては、血液試料の分離分析法によるアッセイに使用可能な方法の例として例示したものが挙げられる。例えば、図１に示した高速液体クロマトグラフィー装置などであってもよい。
なお、測定値から含有量や含有量比への値の換算は、例えば、測定手段（例えば図１に示した高速液体クロマトグラフィー装置）からのデータを、不揮発性メモリ（例えば図２の不揮発性メモリ１００Ｄ）等に記憶された検量線データを用いて換算することにより行うことができる。前記換算は、例えば制御装置としてのＣＰＵ（例えば図２のＣＰＵ１００Ａ）による処理として行うことができる。
【００９１】
前記判定手段は、例えば、前記測定手段からのＨｂＦ含有量の全ヘモグロビン含有量に対する割合を、不揮発性メモリ（例えば図２の不揮発性メモリ１００Ｄ）に記憶された設定参照値と比較することにより、妊婦が胎児母体間輸血症候群に罹患している可能性が高いかどうか判定する手段である。実施形態によっては、ＨｂＦ含有量の全ヘモグロビン含有量に対する割合から、不揮発性メモリ（例えば図２の不揮発性メモリ１００Ｄ）に記憶された前回の測定におけるＨｂＦ含有量の全ヘモグロビン含有量に対する割合を減算した上で、さらに設定参照値との比較が行われる。前記計算や比較は、例えば制御装置としてのＣＰＵ（例えば図２のＣＰＵ１００Ａ）による処理として行うことができる。
【００９２】
前記キャリブレーション指示手段は、例えば、毎回の測定前又は毎回の測定後にキャリブレーションを行うよう測定手段に指示するものであってもよく、測定回数を例えば不揮発性メモリ（例えば図２の不揮発性メモリ１００Ｄ）に記憶させて、設定された測定回数（例えば１０００回、又は１００回、又は１０回）に達するたびにキャリブレーションを行うよう測定手段に指示するものであってもよく、例えばクロックからの信号に基づいて、設定された時間（例えば１週間、又は１日、又は１時間）が経過するたびにキャリブレーションを行うよう測定手段に指示するものであってもよい。あるいは、決められたタイミング（例えば、起動時）等にキャリブレーションを行うよう測定手段に指示するものであってもよい。このような判定は、制御手段としてのＣＰＵ（例えば図２のＣＰＵ１００Ａ）により行うことができる。なお、前記の測定回数の代わりに測定試料数に基づいてキャリブレーションを行うかどうか判定してもよい。
【００９３】
前記キャリブレーション指示手段によりキャリブレーションを指示されると、前記測定手段は１つ又は複数の標準試料を測定して、測定値からＨｂＦ含有量の全ヘモグロビン含有量に対する割合を求める換算のための検量線を作成する又は補正係数を設定する。作成された検量線又は設定された補正係数のデータは、不揮発性メモリ（例えば図２の不揮発性メモリ１００Ｄ）に記憶させて血液試料の測定の際に読み出して用いてもよい。
【００９４】
前記装置は、判定の結果としての胎児母体間輸血症候群に罹患している可能性の程度を出力する出力手段をさらに含んでいてもよく、前記出力手段は、例えば、胎児母体間輸血症候群に罹患している可能性の程度を表示装置（例えば入出力インターフェース（Ｉ／Ｏ）１００Ｅに接続したモニター等のモニター）に出力して表示させるあるいはプリンターに出力させるものとすることができる。
【００９５】
上記の装置に搭載される手段は、一つの装置に搭載される代わりに、複数の装置に分けて搭載してもよく、その場合は装置間で情報を送受信することにより必要な処理を行うことが可能である。このため、本開示によれば、妊婦における胎児母体間輸血症候群罹患の可能性を判定するシステムも提供される。
【００９６】
＜妊婦における胎児母体間輸血症候群罹患の可能性を判定するシステム＞
本開示のさらなる態様においては、
妊娠３０週目から４０週目の妊婦から得られた血液試料を分離分析法を用いる測定装置によりアッセイして、前記血液試料中におけるヘモグロビンＦ（ＨｂＦ）の含有量の全ヘモグロビン含有量に対する割合を決定する測定モジュールと、
ＨｂＦの含有量の全ヘモグロビン含有量に対する割合に基づいて胎児母体間輸血症候群に罹患している可能性を判定する判定モジュールと、
所定の条件を満たした場合に、ヘモグロビンＦ（ＨｂＦ）の含有量の全ヘモグロビン含有量に対する割合について前記測定モジュールにキャリブレーションを行わせる、キャリブレーション指示モジュールと、
を含む、妊婦における胎児母体間輸血症候群罹患の可能性を判定するシステム、が提供される。
【００９７】
上記システムにおける判定処理の詳細については、上述の第１〜第３の態様を参照できる。例えば、ＨｂＦの含有量の全ヘモグロビン含有量に対する割合が設定参照値以上である場合に、前記妊婦が胎児母体間輸血症候群に罹患している可能性が高いと判定する、あるいは最新の測定におけるＨｂＦの含有量の全ヘモグロビン含有量に対する割合が、前回の測定におけるＨｂＦの含有量の全ヘモグロビン含有量に対する割合に対して設定参照値以上増加している場合に、前記妊婦が胎児母体間輸血症候群に罹患している可能性が高いと判定する、あるいは最新の測定におけるＨｂＦの含有量の全ヘモグロビン含有量に対する割合が、前回の測定におけるＨｂＦの含有量の全ヘモグロビン含有量に対する割合に対して設定参照値Ｉ以上増加しており、且つ最新の測定におけるＨｂＦの含有量の全ヘモグロビン含有量に対する割合が設定参照値Ｌ以上である場合に、前記妊婦が胎児母体間輸血症候群に罹患している可能性が高いと判定する、ことが挙げられる。
【００９８】
いずれのシステムにおいても、前記測定モジュールとしては、血液試料の分離分析法によるアッセイに使用可能な方法の例として例示したものが挙げられる。例えば、図１に示した高速液体クロマトグラフィー装置などであってもよい。
【００９９】
なお、測定値から含有量や含有量比への値の換算は、例えば、測定モジュール（例えば図１に示した高速液体クロマトグラフィー装置）からのデータを、不揮発性メモリ等に記憶された検量線データを用いて換算することにより行うことができる。前記換算は、例えば制御装置としてのＣＰＵによる処理として行うことができる。前記換算は、測定装置に搭載した例えば図２の不揮発性メモリ１００Ｄ及び制御装置としてのＣＰＵ１００Ａを用いて行ってもよいし、測定モジュールを有する測定装置とは別個に、例えばイントラネット等のネットワークで接続した施設内のホストコンピュータやインターネットを介して接続した外部のホストコンピュータに設けられた不揮発性メモリ及び制御装置としてのＣＰＵにより行うこともできる。
【０１００】
前記判定モジュールは、例えば、ＨｂＦ含有量の全ヘモグロビン含有量に対する割合を、不揮発性メモリに記憶された設定参照値と比較することにより、妊婦が胎児母体間輸血症候群に罹患している可能性が高いと判定するモジュールである。実施形態によっては、ＨｂＦ含有量の全ヘモグロビン含有量に対する割合から、不揮発性メモリに記憶された前回の測定におけるＨｂＦ含有量の全ヘモグロビン含有量に対する割合を減算した上で、さらに設定参照値との比較が行われる。前記計算や比較は、例えば制御装置としてのＣＰＵによる処理として行うことができる。判定モジュールは、例えば図２の不揮発性メモリ１００Ｄ及び制御装置としてのＣＰＵ１００Ａを用いるものであってもよいが、測定モジュールとは別個の装置に、例えばイントラネット等のネットワークを介して接続した施設内のホストコンピュータやインターネットを介して接続した外部のホストコンピュータに設けられた不揮発性メモリ及び制御装置としてのＣＰＵを用いるものであってもよい。
【０１０１】
前記キャリブレーション指示モジュールは、例えば、毎回の測定前又は毎回の測定後にキャリブレーションを行うよう測定モジュールに指示するものであってもよく、測定回数を不揮発性メモリ（例えば図２の不揮発性メモリ１００Ｄ）に記憶させて設定された測定回数（例えば１０００回、又は１００回、又は１０回）に達するたびにキャリブレーションを行うよう測定モジュールに指示するものであってもよく、クロックからの信号に基づいて設定された時間（例えば１週間、又は１日、又は１時間；運転時間であっても絶対的な時間であってもよい）が経過するたびにキャリブレーションを行うよう測定モジュールに指示するものであってもよい。あるいは、決められたタイミング（例えば、起動時）等にキャリブレーションを行うよう測定モジュールに指示するものであってもよい。このような判定は、制御手段としてのＣＰＵ（例えば図２のＣＰＵ１００Ａ）により行うことができる。なお、前記の測定回数の代わりに測定試料数に基づいて、キャリブレーションを行うかどうか判定してもよい。
【０１０２】
前記キャリブレーション指示モジュールによりキャリブレーションを指示されると、前記測定モジュールは１つ又は複数の標準試料を測定して、測定値からＨｂＦ含有量の全ヘモグロビン含有量に対する割合を求める換算のための検量線を作成する又は補正係数を設定する。作成された検量線又は設定された補正係数のデータは、不揮発性メモリ（例えば図２の不揮発性メモリ１００Ｄ）に記憶させて血液試料の測定の際に読み出して用いてもよい。
【０１０３】
なお、設定参照値のデータ、前回の測定のデータ、作成された検量線又は設定された補正係数のデータ等は、いずれも、測定装置自体に記憶させてもよいが、イントラネット等のネットワークを介して接続した施設内のホストコンピュータや、インターネットを介して接続した外部のホストコンピュータに記憶させ、これを読み出してきて用いてもよい。前記システムは、前記測定モジュールによって得られたＨｂＦの含有量の全ヘモグロビン含有量に対する割合についてのデータを格納する記憶モジュールをさらに含んでいてもよい。
【０１０４】
前記システムは、判定の結果としての胎児母体間輸血症候群に罹患している可能性の程度を出力する出力モジュールをさらに含んでいてもよく、前記出力モジュールは、例えば、胎児母体間輸血症候群に罹患している可能性の程度を表示装置（例えば入出力インターフェース（Ｉ／Ｏ）１００Ｅに接続したモニター等の表示装置）に出力して表示させるあるいはプリンターに出力させるものとすることができる。
【０１０５】
イントラネット等のネットワークを介して測定装置に接続したホストコンピュータを利用した例を図６に示す。図６では、測定装置３２０にイントラネット３１０を介してホストコンピュータ３００が接続している。ホストコンピュータ３００は、制御装置としてのＣＰＵ３００Ａ、ＲＯＭ３００Ｂ、ＲＡＭ３００Ｃ、不揮発性メモリ３００Ｄ、及び入出力インターフェース（Ｉ／Ｏ）３００Ｅがバス３００Ｆを介して各々接続された構成となっている。測定装置３２０は、分離分析法を用いた測定装置である、例えば図１及び図２に示す装置Ｘのような構成を有する。
【０１０６】
測定装置３２０において取得された測定データ（ＨｂＦの含有量の全ヘモグロビン含有量に対する割合のデータ）を、イントラネット３１０を介してホストコンピュータ３００に送信する。前記データを入出力インターフェース（Ｉ／Ｏ）３００Ｅから不揮発性メモリ３００Ａに送り、記憶させる。測定対象の妊婦に対して次回測定が行われた際にも、同様にして、ＨｂＦの含有量の全ヘモグロビン含有量に対する割合のデータをイントラネット３１０を介してホストコンピュータ３００に送信する。不揮発性メモリ３００Ａからは、前回測定の際における前記割合のデータを読み出し、最新の測定における前記割合の値から前回測定の際の前記割合の値を減算する。算出された値を、不揮発性メモリ３００Ａから読み込まれた設定参照値と比較し、算出された値が設定参照値以上であれば、前記妊婦は胎児母体間輸血症候群に罹患している可能性が高いと判定する。この判定結果は、入出力インターフェース（Ｉ／Ｏ）３００Ｅに接続したモニター等の表示装置３３０に出力して表示してもよい。
【０１０７】
このように、判定モジュールと測定モジュールとは同じ装置であっても別の装置であってもよく、同様にキャリブレーション指示モジュールも、前記判定モジュール及び／又は前記測定モジュールと同じ装置であっても別の装置であってもよい。また、使用可能なネットワークはイントラネットに限定されず、ＬＡＮ、ＷＡＮ、インターネットなど他の形態のネットワークであってもよい。
【０１０８】
次に、例示的な態様に係る処理のステップについて説明する。
【０１０９】
図３には、制御部１００のＣＰＵ１００Ａで実行される胎児母体間輸血症候群罹患可能性判定処理（キャリブレーション付き胎児母体間輸血症候群罹患可能性判定処理のうちキャリブレーション以外の部分）の一例を示した。
【０１１０】
まずオペレータは、血液試料１３が入った採血管１１をラック５０に保持させた状態で、ラック５０を所定の部位にセットする。採血管１１の血液試料１３は、予め血漿層と血球層に分離させてもよい。血漿層と血球層の分離は、遠心分離機を用いて、あるいは血球成分を自然沈降させることにより行なうことができる。
【０１１１】
血漿層と血球層との分離は、ＨＰＬＣ装置Ｘに遠心分離機を組み込んでＨＰＬＣ装置Ｘにおいて行なうようにしてもよく、また、採血管１１をセットした状態で一定時間静置することにより行ってもよい。
【０１１２】
オペレータが操作パネルを操作して測定開始を指示すると、ＣＰＵ１００Ａは、不揮発性メモリ１００Ｄに記憶された胎児母体間輸血症候群罹患可能性判定処理を実行させるプログラムを読み込んで実行する。
【０１１３】
ステップＳ１０では、血液試料１３を導入する。具体的には、まずラック５０にセットされた採血管１１から、血液試料１３を採取する。すなわち、ノズル５１を動作させることによって採血管１１から血液試料１３を採取する。ノズル５１によって採取された血液試料１３は、ノズル５１を動作させることによって希釈槽５３に供給される。希釈槽５３にはさらに、調製液タンク（図示せず）から希釈液が供給され、ノズル５１を利用したピペッティング操作によって希釈槽５３内の液体を混合することによって導入用試料が調製される。なお、溶血剤を含まない希釈液と溶血剤とを併用する場合には、希釈槽５３に対して希釈液及び溶血液を同時的に供給して血液試料１３の希釈及び血液試料１３の血球の溶血を同時的に行なってもよいし、それらを、時間をおいて個別に供給し、血液試料１３の希釈及び血液試料１３の血球の溶血を別工程として行なってもよい。
【０１１４】
希釈槽５３において調製された導入用試料は、希釈槽５３において大気と一定時間接触させた後、配管８３を通してインジェクションループ６４に供給され、インジェクションループ６４において保持される。
【０１１５】
そして、インジェクションバルブ６３を切り替えてインジェクションループ６４に保持された試料を分析カラム６０に導入させる。分析カラム６０に試料が導入されると、充填剤にＨｂＦ及びその他のヘモグロビン等が吸着される。
【０１１６】
ステップＳ１２では、取得工程を実行する。取得工程は、液体クロマトグラフィー法により測定試料中のＨｂＦの吸光データ及び全ヘモグロビンの吸光データを測定して取得する。
【０１１７】
この取得工程では、インジェクションバルブ６３を適宜切り替えてインジェクションループ６４に保持された測定試料を分析カラム６０に供給すると共に、溶離液Ａ〜Ｃを予め定めた制御シーケンスで順次分析カラム６０に供給することにより、ＨｂＦの吸光データ及び全ヘモグロビンの吸光データを測定して取得する。
【０１１８】
分析カラム６０から排出される各種ヘモグロビンを含む脱着液は、配管８６を介して測光ユニット７の測光セルに供給される。測光セルに対しては脱着液が導入され、この脱着液は測光後に、配管８７を介して廃液槽８８に導かれる。
【０１１９】
測光ユニット７においては、脱着液が通過する際に、光源によって脱着液に対して連続的に光が照射される。その一方で、脱着液を透過した光は、ビームスプリッタにおいて分割された後、測定用受光系及び参照用受光系において受光される。測定用受光系では、干渉フィルタを透過した４１５ｎｍ〜４２０ｎｍの光（例えば４２０ｎｍの光）が受光素子において選択的に受光される。一方、参照用受光系では、干渉フィルタを透過した参照波長である５００ｎｍの光が受光素子において選択的に受光される。両受光素子での受光結果（吸光度）は、制御部１００に出力され、制御部１００においてクロマトグラムが演算・取得される。
【０１２０】
クロマトグラムは、測定を開始してからの経過時間と両受光素子での受光結果としての吸光度との関係を表すグラフである。このクロマトグラムのピークがどの位置に現れるかによって、どのヘモグロビンが検出されたかを知ることができると共に、吸光度の大きさによってヘモグロビンの濃度についての測定値を得ることができる。
【０１２１】
本実施形態では、例えば、測定試料にＨｂＦ及びその他のヘモグロビン（ヘモグロビンＡなど）が含まれている場合において、上記制御シーケンスによって溶離液を切り替えて分析カラム６０に順次送液した場合に、測定開始時点をｔ０として、ｔａの時点にＨｂＦのピークが現れることが予め想定されているとする。この場合、演算されたクロマトグラムから、ｔａ付近でピークが現れているか否かを判定することにより、ＨｂＦが検出されたか否かを判定することができる。同様に、他の時点でのピークが現れているか否かを判定することにより他のヘモグロビンについても検出されたか否かを判定することができる。
【０１２２】
ステップＳ１４では、クロマトグラムからＨｂＦのピーク面積及びヘモグロビンのピークの総面積を求めて換算を行いＨｂＦの含有量の全ヘモグロビン含有量に対する割合を決定する。この換算に使用するための検量線又は補正係数のデータは、例えば不揮発性メモリ１００Ｄに記憶されていたキャリブレーションデータを読み出すことで得ることができる。
【０１２３】
ステップＳ１６では、算出した含有量割合が設定参照値（例えば０．５％）以上であるかどうかを判定する。設定参照値は例えば不揮発性メモリ１００Ｄなどに記憶されたものを読み出してくることができる。算出した含有量割合面積比率が設定参照値以上である場合には、ステップＳ１８において、測定対象の妊婦が胎児母体間輸血症候群を罹患している可能性が高いと判定する。算出した面積比率が設定参照値未満である場合には、ステップＳ２０において、測定対象の妊婦が胎児母体間輸血症候群を罹患している可能性が低いと判定する。このような判定結果は出力してもよく、例えば入出力インターフェース（Ｉ／Ｏ）１００Ｅに接続した表示装置（例えばモニター）やプリンターに対して出力してもよい。
【０１２４】
このように、本実施形態では、ＨｂＦの含有量の全ヘモグロビン含有量に対する割合をキャリブレーションされた吸光度測定により得た上で、この割合に基づいて胎児母体間輸血症候群罹患の可能性を判定する。このため、胎児母体間輸血症候群に罹患している可能性が高い妊婦を迅速且つ簡便に検出できる。
【０１２５】
図４には、制御部１００のＣＰＵ１００Ａで実行される胎児母体間輸血症候群罹患可能性判定処理のフローチャートの別の例を示した。
【０１２６】
ステップＳ１１０での試料導入は図３におけるステップＳ１０と同様に行い、ステップＳ１１２での取得工程は図３におけるステップＳ１２と同様に行う。ステップＳ１１４では、含有量割合算出を、図３におけるステップＳ１４と同様に行い、第１の時点における含有量割合Ｙ１を得る。
【０１２７】
ステップＳ１１６及びＳ１１８では、一定期間後（例えば２週間後）に再度試料導入及び取得工程を、ステップＳ１１０及びステップＳ１１２と同様に行う。この再度の検査は、定期検診のための来院の際に行ってもよい。ステップＳ１２０では、ステップＳ１１４と同様にして、最新の時点における含有量割合Ｙ２を得る。
【０１２８】
ステップＳ１２２では、含有量割合Ｙ２−含有量割合Ｙ１の値（含有量割合の増加量）が設定参照値（例えば０．２％）以上であるかどうかを判定する。設定参照値は例えば不揮発性メモリ１００Ｄなどに記憶されたものを読み出してくることができる。算出した含有量割合の増加量が設定参照値以上である場合には、ステップＳ１２４において、測定対象の妊婦が胎児母体間輸血症候群を罹患している可能性が高いと判定する。算出した含有量割合の増加量が設定参照値未満である場合には、ステップＳ１２６において、測定対象の妊婦が胎児母体間輸血症候群を罹患している可能性が低いと判定する。このような判定結果は出力してもよく、例えば入出力インターフェース（Ｉ／Ｏ）１００Ｅに接続した表示装置（例えばモニター）やプリンターに対して出力してもよい。
【０１２９】
このように、本実施形態では、前回の測定と比較してのＨｂＦの含有量の全ヘモグロビン含有量に対する割合の値の増加量を得た上で、この割合に基づいて胎児母体間輸血症候群罹患の可能性を判定する。このため、胎児母体間輸血症候群に罹患している可能性が高い妊婦を迅速且つ簡便に検出できる。
【０１３０】
なお、前回の測定のデータは、測定装置自体に記憶されていてもよいし、イントラネット等のネットワークを介して接続した施設内のホストコンピュータや、インターネットを介して接続した外部のホストコンピュータに記憶され、これが読み出されて使用されてもよい。
【０１３１】
図５には、制御部１００のＣＰＵ１００Ａで実行される胎児母体間輸血症候群罹患可能性判定処理のフローチャートのさらに別の例を示した。
【０１３２】
ステップＳ２１０での試料導入は図４におけるステップＳ１１０と同様に行い、ステップＳ２１２での取得工程は図４におけるステップＳ１１２と同様に行い、ステップＳ２１４での含有量割合Ｙ１算出も図４におけるステップＳ１１４と同様に行い、ステップＳ２１６での再度採取した試料の導入も図４におけるステップＳ１１６と同様に行い、ステップＳ２１８での取得工程も図４におけるステップＳ１１８と同様に行い、ステップＳ２２０での含有量割合Ｙ２算出も図４におけるステップＳ１２０と同様に行う。
【０１３３】
ステップＳ２２２では、含有量割合Ｙ２−含有量割合Ｙ１の値（含有量割合の増加量）が設定参照値Ｉ（含有量割合の増加量に基づいて判定を行うための参照値であり、例えば０．２％）以上であるかどうかを判定する。設定参照値Ｉは例えば不揮発性メモリ１００Ｄなどに記憶されたものを読み出してくることができる。算出した含有量割合の増加量が設定参照値Ｉ以上である場合には、ステップＳ２２４において、さらに含有量割合Ｙ２が設定参照値Ｌ（含有量割合に基づいて判定を行うための参照値であり、例えば０．５％）以上であるかどうかを判定する。設定参照値Ｌも例えば不揮発性メモリ１００Ｄなどに記憶されたものを読み出してくることができる。ステップＳ２２４において、含有量割合Ｙ２が設定参照値Ｌ以上である場合には、ステップＳ２２８において、測定対象の妊婦が胎児母体間輸血症候群を罹患している可能性が高いと判定する。ステップＳ２２２において、算出した含有量割合の増加量が設定参照値Ｉ未満である場合には、ステップＳ２２６において、測定対象の妊婦が胎児母体間輸血症候群を罹患している可能性が低いと判定する。また、ステップＳ２２４において、含有量割合Ｙ２が設定参照値Ｌ未満である場合は、ステップＳ２３０において、測定対象の妊婦が胎児母体間輸血症候群を罹患している可能性が低いと判定する。このような判定結果は出力してもよく、例えば入出力インターフェース（Ｉ／Ｏ）１００Ｅに接続した表示装置（例えばモニター）やプリンターに対して出力してもよい。
【０１３４】
このように、本実施形態では、前回の測定と比較してのＨｂＦの含有量の全ヘモグロビン含有量に対する割合の値の増加量を得た上で、この割合に基づいて胎児母体間輸血症候群罹患の可能性を判定する。このため、胎児母体間輸血症候群に罹患している可能性が高い妊婦を迅速且つ簡便に検出できる。なお、ステップＳ２２２とステップＳ２２４の順番は逆にしてもよく、また、一つの判定ステップにまとめてしまっても構わない。
【０１３５】
図７には、キャリブレーション付き胎児母体間輸血症候群罹患可能性判定処理の一例を示した。この処理では、設定された回数（例えば１０００回）の測定毎にキャリブレーションが実行される。
【０１３６】
まず、ステップＳ４１０において、測定回数をカウントするカウンタ値ＣＴを０にリセットする。次にステップＳ４１２において、上述の胎児母体間輸血症候群罹患可能性判定処理（測定、判定を含む）が行われる。そして、ステップＳ４１４では、測定回数をカウントするカウンタ値ＣＴに１が加算される。カウンタ値は、例えば、不揮発性メモリ（例えば図２における不揮発性メモリ１００Ｄに記憶させておくことができる。
【０１３７】
Ｓ４１６では測定を続行するかどうかの判断が行われる。ラック５０中の全試料を測定し終えたことを示すセンサーからの信号を受信した等の理由により、測定を終了する場合には、処理は終了する。測定を続行する場合には、ステップＳ４１８においてカウンタ値ＣＴが設定回数未満であるかどうかが判定される。ＣＴが設定回数未満の場合には、キャリブレーションを行うことなく、ステップ４１２に戻り、次の試料について胎児母体間輸血症候群罹患可能性判定処理が行われる。このような判定は、制御装置としてのＣＰＵ（例えば図２におけるＣＰＵ１００Ａ）により行うことができる。
【０１３８】
ＣＴが設定回数の値に達した場合には、ステップＳ４２０においてキャリブレーションが実行される。これは、例えば図２におけるＣＰＵ１００Ａからの指令により、試料調製ユニット５、分析ユニット６、及び測光ユニット７に標準試料の分析を行わせ、得られた測定結果からＣＰＵ１００Ａ等を用いて検量線を作成する又は補正係数を設定することにより行うことができる。キャリブレーションが完了すると、再びステップＳ４１０に戻り、カウンタ値を０にリセットして、ステップＳ４１２で次の試料について胎児母体間輸血症候群罹患可能性判定処理が行われる。
【０１３９】
なお、図７においては、キャリブレーションを行うタイミングを測定回数を基準として判定しているが、これ以外にも設定された時間毎に、あるいは起動時など特定のイベント時にキャリブレーションを行うように、例えば制御装置であるＣＰＵから指示を発するようにしてもよい。なお、前記の測定回数の代わりに測定試料数に基づいて、キャリブレーションを行うかどうか判定してもよい。
【０１４０】
＜コンピュータプログラム＞
本開示のさらなる態様においては、
妊婦における胎児母体間輸血症候群罹患の可能性を判定する処理をコンピュータに実行させるコンピュータプログラムであって、
前記処理が、以下の（イ）、（ロ）又は（ハ）を含むコンピュータプログラムが提供される：
【０１４１】
（イ）
（Ａ１）妊娠３０週目から４０週目の妊婦から得られた血液試料を分離分析法を用いる測定装置によりアッセイして、前記血液試料中におけるヘモグロビンＦ（ＨｂＦ）の含有量の全ヘモグロビン含有量に対する割合を決定する工程、
（Ｃ１）ＨｂＦの含有量の全ヘモグロビン含有量に対する割合が設定参照値以上である場合に、前記妊婦が胎児母体間輸血症候群に罹患している可能性が高いと判定する工程、及び
（Ｅ１）所定の条件を満たした場合に、ＨｂＦの含有量の全ヘモグロビン含有量に対する割合について前記測定装置にキャリブレーションを行わせる工程。
【０１４２】
（ロ）
（Ａ１）妊娠３０週目から４０週目の妊婦から得られた血液試料を分離分析法を用いる測定装置によりアッセイして、前記血液試料中におけるヘモグロビンＦ（ＨｂＦ）の含有量の全ヘモグロビン含有量に対する割合を決定する工程、
（Ｂ１）ユーザーからの指示に基づいて、前記工程（Ａ１）をそれぞれ時間間隔を開けてさらに１回以上行う工程、
（Ｃ２）最新の測定におけるＨｂＦの含有量の全ヘモグロビン含有量に対する割合が、前回の測定におけるＨｂＦの含有量の全ヘモグロビン含有量に対する割合に対して設定参照値以上増加している場合に、前記妊婦が胎児母体間輸血症候群に罹患している可能性が高いと判定する工程、及び
（Ｅ１）所定の条件を満たした場合に、ＨｂＦの含有量の全ヘモグロビン含有量に対する割合について前記測定装置にキャリブレーションを行わせる工程。
【０１４３】
（ハ）
（Ａ１）妊娠３０週目から４０週目の妊婦から得られた血液試料を分離分析法を用いる測定装置によりアッセイして、前記血液試料中におけるヘモグロビンＦ（ＨｂＦ）の含有量の全ヘモグロビン含有量に対する割合を決定する工程、
（Ｂ１）ユーザーからの指示に基づいて、前記（Ａ１）の工程をそれぞれ時間間隔を開けてさらに１回以上行う工程、
（Ｃ３）最新の測定におけるＨｂＦの含有量の全ヘモグロビン含有量に対する割合が、前回の測定におけるＨｂＦの含有量の全ヘモグロビン含有量に対する割合に対して設定参照値Ｉ以上増加しており、且つ最新の測定におけるＨｂＦの含有量の全ヘモグロビン含有量に対する割合が設定参照値Ｌ以上である場合に、前記妊婦が胎児母体間輸血症候群に罹患している可能性が高いと判定する工程、及び。
（Ｅ１）所定の条件を満たした場合に、ＨｂＦの含有量の全ヘモグロビン含有量に対する割合について前記測定装置にキャリブレーションを行わせる工程。
【０１４４】
このようなコンピュータプログラムを記録した記録媒体も本開示の範囲内である。このような記録媒体は、コンピュータによって読み取り可能な任意の有形媒体とすることができる。例えば、ＲＡＭ、ＲＯＭ、フラッシュメモリ、ＣＤ−ＲＯＭ、ＤＶＤ、時期カセット、磁気テープなどが例として挙げられるが、これらに限定されない。このようなコンピュータプログラムをコンピュータに実行させることによって、妊婦における胎児母体間輸血症候群罹患の可能性を判定することが可能となる。
【０１４５】
本開示に係る妊婦における胎児母体間輸血症候群罹患の可能性を判定する方法は、例えば、以下の検査計画に従って実施することもできる。もちろん、本開示に従って実施できる検査計画は以下に限定されない。
【０１４６】
（検査計画例１）
妊娠３０週目の妊婦５０名から血液をそれぞれ採取する。各妊婦の血液サンプルを分離用カラム（φ４．６×２０ｍｍ  ゲル（カラム充填剤）：メタクリル酸−メタクリル酸エステル共重合体）にそれぞれロードして、以下の装置及び条件を用いて液体クロマトグラフィーにより分離する。使用する装置及び条件は以下のとおりである。
・液体クロマトグラフシステム：グリコヘモグロビン分析装置（アークレイ社製）
・流速：２．１ｍｌ／ｍｉｎ
・溶離条件：シングルポンプによる低圧ステップグラジェント
・送液シーケンス：以下（Ｉ）〜（ＶＩＩ）の順番で各溶離液を分離用カラムに送液
（Ｉ）溶離液Ｏを１秒送液、（ＩＩ）溶離液Ｌ：溶離液Ｏ＝１：３の混合比で混合した溶離液を６４秒送液、（ＩＩＩ）溶離液Ｌを４９秒送液、（ＩＶ）溶離液Ｍ：溶離液Ｌ＝１：３の混合比で混合した混合液を２２秒送液、（Ｖ）溶離液Ｍを１５秒送液、（ＶＩ）溶離液Ｂを４秒送液、（ＶＩＩ）溶離液Ｏを１５秒送液
【０１４７】
溶離液Ｂ：ｐＨ：８．０５、浸透圧：５４７ｍＯｓｍ
溶離液Ｌ：０．２５％リン酸一水素二カリウム、０．６５％リン酸二水素一カリウム、０．０１８２％アジ化ナトリウム、０．０１％プロピオン酸ナトリウム、０．０５％２−フェノキシエタノール、９９．０２％蒸留水；ｐＨ６．３５、浸透圧１３３ｍＯｓｍ
溶離液Ｍ：０．６９％リン酸一水素二カリウム、０．６１％リン酸二水素一カリウム、０．０１７４％アジ化ナトリウム、０．０１％プロピオン酸ナトリウム、０．０５％２−フェノキシエタノール、９８．６３％蒸留水；ｐＨ６．７６、浸透圧１８５ｍＯｓｍ
溶離液Ｏ：０．０３％リン酸一水素二カリウム、１．４６％リン酸二水素一カリウム、０．０１７％アジ化ナトリウム、０．０１％プロピオン酸ナトリウム、０．０５％２−フェノキシエタノール、９８．４４％蒸留水；ｐＨ５．１８、浸透圧２０６ｍＯｓｍ
（溶離液の組成中の％はいずれも（ｗ／ｖ）を表す）
【０１４８】
溶出したヘモグロビンの検出を、波長４２０ｎｍ（参照波長５００ｎｍ）での吸光度により行う。得られたクロマトグラムにおけるＨｂＦのピークの面積及び全ヘモグロビンのピークの総面積をそれぞれ求め、ＨｂＦのピーク面積の全ヘモグロビンピーク総面積に対する比を算出する。
【０１４９】
２０回の測定毎に以下のキャリブレーションを行う。測定回数は前記分析装置にカウントさせ、所定の測定回数に達する度に自動でキャリブレーションを行うように指示するプログラムをインストールした。
キャリブレーションに使用する標準試料：ＨｂＦ／全ヘモグロビン比が０．０％、１．０％、２．０％、５．０％である４種の標準試料
キャリブレーション：標準試料で得られたＨｂＦの面積／全ヘモグロビンピーク総面積比から最小二乗法により回帰直線（検量線として使用）を作成又は補正係数を設定
【０１５０】
各妊婦の測定により得られたＨｂＦのピーク面積の全ヘモグロビンピーク総面積に対する比から換算して、ＨｂＦの含有量の全ヘモグロビン含有量に対する割合を算出する。算出された割合が５．０％以上である妊婦は、胎児母体間輸血症候群に罹患している可能性が高いと判定し、さらにＣＴＧ検査及び超音波測定を行い、胎児母体間輸血症候群に罹患しているかどうかを判定する。また、各妊婦について算出されたＨｂＦの含有量の全ヘモグロビン含有量に対する割合を、病院内のホストコンピュータに送信し記憶させる。
【０１５１】
（検査計画例２）
最初の検査から４週後に、前記の妊婦集団５０名から再度血液を採取する。各妊婦の血液サンプルを検査計画例１と同様にキャリブレーション付きの液体クロマトグラフィーにかけ、検査計画例１と同様にＨｂＦの含有量の全ヘモグロビン含有量に対する割合を算出する。各妊婦について算出された割合の値（％）から、前記ホストコンピュータから読み出した該妊婦の前回（４週間前）の割合の値（％）を減算し、増加量を算出する。増加量が２．０％以上である妊婦に対しては、胎児母体間輸血症候群に罹患している可能性が高いと判定し、さらにＣＴＧ検査及び超音波測定を行い、胎児母体間輸血症候群に罹患しているかどうかを判定する。
【０１５２】
（検査計画例３）
検査計画例２と同様に検査を行うが、最新（今回）の検査で算出されたＨｂＦの含有量の全ヘモグロビン含有量に対する割合が５．０％以上であり且つ増加量が２．０％以上である妊婦に対しては、胎児母体間輸血症候群に罹患している可能性が高いと判定し、さらにＣＴＧ検査及び超音波測定を行い、胎児母体間輸血症候群に罹患しているかどうかを判定する。
【０１５３】
なお、検査計画例１〜３において、測定及びキャリブレーションは液体クロマトグラフシステムに搭載したコンピュータ又は該コンピュータからの指示により行い、算出及び判定等の処理は特に明示が無い限り前記コンピュータにより行う。
【符号の説明】
【０１５４】
２                  装置本体
５                  試料調製ユニット
６                  分析ユニット
７                  測光ユニット
１１                採血管
１２Ａ〜１２Ｅ      溶離液ボトル
１３                血液試料
５０                ラック
５１                ノズル
５３                希釈槽
６０                分析カラム
６１                マニホールド
６２                送液ポンプ
６３                インジェクションバルブ
６４                インジェクションループ
８０Ａ、８０Ｂ、８０Ｃ、８０Ｄ、８０Ｅ      配管
８３、８４、８５、８６、８７、８８          配管
１００              制御部
１００Ａ            ＣＰＵ
１００Ｂ            ＲＯＭ
１００Ｃ            ＲＡＭ
１００Ｄ            不揮発性メモリ
１００Ｅ            入出力インターフェース（Ｉ／Ｏ）
１００Ｆ            バス
ＰＦ                プレフィルター
Ｘ                  装置
３００              ホストコンピュータ
３００Ａ            ＣＰＵ
３００Ｂ            ＲＯＭ
３００Ｃ            ＲＡＭ
３００Ｄ            不揮発性メモリ
３００Ｅ            入出力インターフェース（Ｉ／Ｏ）
３００Ｆ            バス
３１０              イントラネット
３２０              測定装置
３３０              表示装置
【図１】
2019060653.tif 000003
【図２】
2019060653.tif 000004
【図３】
2019060653.tif 000005
【図４】
2019060653.tif 000006
【図５】
2019060653.tif 000007
【図６】
2019060653.tif 000008
【図７】
2019060653.tif 000009