(57)【要約】【課題】本発明の課題は、新規の美白用及び／又はコラーゲン分解抑制用の美容組成物を提供することである。【解決手段】本発明は、甘草の含水アルコール抽出物を有効成分として含有する、メラニン産生抑制剤又はＭＭＰ１阻害剤である。上記含水アルコールは、含水エタノールであり、エタノール濃度が０．１〜９９．９％（ｖ／ｖ）であることが好ましく、３０．０〜７０．０％（ｖ／ｖ）であることがより好ましい。また、本発明は上記メラニン産生抑制剤又はＭＭＰ１阻害剤を含む美白用及び／又はコラーゲン分解抑制用の美容組成物である。【選択図】なし【特許請求の範囲】
【請求項１】
甘草の含水アルコール抽出物を有効成分として含有する、メラニン産生抑制剤。
【請求項２】
上記含水アルコールが、含水エタノールであり、エタノール濃度が０．１〜９９．９％（ｖ／ｖ）である、請求項１に記載のメラニン産生抑制剤。
【請求項３】
上記含水アルコールが、含水エタノールであり、エタノール濃度が３０．０〜７０．０％（ｖ／ｖ）である、請求項１に記載のメラニン産生抑制剤。
【請求項４】
上記甘草が、ウラル甘草である、請求項１から３のいずれか１項に記載のメラニン産生抑制剤。
【請求項５】
グリチルリチン酸を０．５〜２０．０重量％含有する、請求項１から４のいずれか１項に記載のメラニン産生抑制剤。
【請求項６】
リコリスサポニンＨ２を０．０５〜５．００重量％含有する、請求項１から５のいずれか１項に記載のメラニン産生抑制剤。
【請求項７】
リクイリチンを０．１〜１０．０重量％含有する、請求項１から６のいずれか１項に記載のメラニン産生抑制剤。
【請求項８】
甘草の含水アルコール抽出物を有効成分として含有する、ＭＭＰ１阻害剤。
【請求項９】
上記含水アルコールが、含水エタノールであり、エタノール濃度が０．１〜９９．９％（ｖ／ｖ）である、請求項８に記載のＭＭＰ１阻害剤。
【請求項１０】
上記含水アルコールが、含水エタノールであり、エタノール濃度が３０．０〜７０．０％（ｖ／ｖ）である、請求項８に記載のＭＭＰ１阻害剤。
【請求項１１】
上記甘草が、ウラル甘草である、請求項８から１０のいずれか１項に記載のＭＭＰ１阻害剤。
【請求項１２】
グリチルリチン酸を０．５〜２０．０重量％含有する、請求項８から１１のいずれか１項に記載のＭＭＰ１阻害剤。
【請求項１３】
リコリスサポニンＨ２を０．０５〜５．００重量％含有する、請求項８から１２のいずれか１項に記載のＭＭＰ１阻害剤。
【請求項１４】
リクイリチンを０．１〜１０．０重量％含有する、請求項８から１３のいずれか１項に記載のＭＭＰ１阻害剤。
【請求項１５】
請求項１〜１４のいずれか１項に記載のメラニン産生抑制剤及び／又はＭＭＰ１阻害剤を含有する、美容組成物。
【請求項１６】
美白用及び／又はコラーゲン分解抑制用である、請求項１５に記載の美容組成物。
【請求項１７】
飲食品、機能性表示食品、特定保健用食品、栄養機能食品、化粧品、医薬部外品、又は医薬品である、請求項１５又は１６に記載の美容組成物。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、甘草の含水アルコール抽出物を有効成分として含有するメラニン産生抑制剤又はＭＭＰ１阻害剤、及びこれらを含む美容組成物に関する。
【背景技術】
【０００２】
皮膚においてメラニンは、紫外線から生体を保護する役目を果たしている。しかし、そのメラニンが過剰に生成されたり、不均一に蓄積したりすると、シミ、ソバカスや日焼け後の色素沈着の原因となることが知られている。メラニンは色素細胞の中で生合成される酵素であるチロシナーゼの働きによって合成されことが知られており、美白のためにはメラニンの合成を抑制することが有効であると考えられる。また、老化に伴い皮膚には様々な変化が起こる。中でもシワやたるみは、真皮中にあるコラーゲンの減少により起こると言われている。このコラーゲンの減少は、加齢に伴い皮膚細胞でのコラーゲン産生が減少することや、コラーゲン分解が亢進することに起因することが知られている。このような背景から、メラニン産生を抑制して美白効果を奏する物質や、コラーゲンの減少を抑制できる物質等が強く求められている。
【０００３】
一方、甘草（Ｇｌｙｃｙｒｒｈｉｚａ  ｇｌａｂｒａ，  Ｇ．ｕｒａｌｅｎｓｉｓ，  Ｇ．ｉｎｆｌａｔａ等のＧｌｙｃｙｒｒｈｉｚａ属植物）の根又は根茎を、エタノール、クロロホルム、塩化メチレン、酢酸エチル等の有機溶媒で抽出した抽出液又はその溶媒を除去した抽出物（甘草エキス）は、グラブリジン、グラブレン等のフラボノイドを主成分とし、美白作用、チロシナーゼ活性阻害作用、抗酸化作用、抗菌作用、ＳＯＤ様作用があることが確認されており、様々な化粧料や外用剤等に使用される（特許文献１参照）。また、甘草エキスの水溶性分画には、リクイリチンが含まれており、リクイリチンはメラニン色素生成阻害効果を持つことが知られている（特許文献２参照）。さらに、特開２０００−１９１４９８号公報（特許文献３）には、甘草の葉から抽出されたエキスに線維芽細胞のコラーゲン産生促進作用があることが開示されている。
【先行技術文献】
【特許文献】
【０００４】
【特許文献１】特開２０００−２３９１７６号公報
【特許文献２】特開平１−６３５０６号公報号公報
【特許文献３】特開２０００−１９１４９８号公報
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００５】
このような中、本発明は、皮膚におけるメラニン産生抑制作用がある新規な物質、コラーゲンの減少を抑制できる新規な物質、これらを含む美容組成物を提供することを課題とする。
【課題を解決するための手段】
【０００６】
本発明者らは、鋭意研究を行った結果、甘草の特定の含水アルコール抽出物に顕著なメラニン産生抑制作用があることを見出した。さらに、甘草の特定の含水アルコール抽出物が、コラーゲンを分解するＭＭＰ１（Ｍａｔｒｉｘ  ｍｅｔａｌｌｏｐｒｏｔｅｉｎａｓｅ−１）の阻害活性を有することを見出した。これらのことから、甘草の含水アルコール抽出物を含む組成物が、美白効果、コラーゲン分解抑制効果を有する美容組成物として好適に用いられ得ることがわかった。即ち、本発明の要旨は以下のとおりである。
【０００７】
[１]甘草の含水アルコール抽出物を有効成分として含有する、メラニン産生抑制剤。
[２]上記含水アルコールが、含水エタノールであり、エタノール濃度が０．１〜９９．９％（ｖ／ｖ）である、[１]に記載のメラニン産生抑制剤。
[３]上記含水アルコールが、含水エタノールであり、エタノール濃度が３０．０〜７０．０％（ｖ／ｖ）である、[１]に記載のメラニン産生抑制剤。
[４]上記甘草が、ウラル甘草である、[１]から[３]のいずれかに記載のメラニン産生抑制剤。
[５]グリチルリチン酸を０．５〜２０．０重量％含有する、[１]から[４]のいずれかに記載のメラニン産生抑制剤。
[６]リコリスサポニンＨ２を０．０５〜５．００重量％含有する、[１]から[５]のいずれかに記載のメラニン産生抑制剤。
[７]リクイリチンを０．１〜１０．０重量％含有する、[１]から[６]のいずれかに記載のメラニン産生抑制剤。
[８]甘草の含水アルコール抽出物を有効成分として含有する、ＭＭＰ１阻害剤。
[９]上記含水アルコールが、含水エタノールであり、かつエタノール濃度が０．１〜９９．９％（ｖ／ｖ）である、[８]に記載のＭＭＰ１阻害剤。
[１０]上記含水アルコールが、含水エタノールであり、エタノール濃度が３０．０〜７０．０％（ｖ／ｖ）である、[８]に記載のＭＭＰ１阻害剤。
[１１]上記甘草が、ウラル甘草である、[８]から[１０]のいずれかに記載のＭＭＰ１阻害剤。
[１２]グリチルリチン酸を０．５〜２０．０重量％含有する、[８]から[１１]のいずれかに記載のＭＭＰ１阻害剤。
[１３]リコリスサポニンＨ２を０．０５〜５．００重量％含有する、[８]から[１２]のいずれかに記載のＭＭＰ１阻害剤。
[１４]リクイリチンを０．１〜１０．０重量％含有する、[８]から[１３]のいずれかに記載のＭＭＰ１阻害剤。
[１５][１]〜[１４]のいずれかに記載のメラニン産生抑制剤及び／又はＭＭＰ１阻害剤を含有する、美容組成物。
[１６]美白用及び／又はコラーゲン分解抑制用である、[１５]に記載の美容組成物。
[１７]飲食品、機能性表示食品、特定保健用食品、栄養機能食品、化粧品、医薬部外品、又は医薬品である、[１５]又は[１６]に記載の美容組成物。
【発明の効果】
【０００８】
本発明によると新規の美白用及び／又はコラーゲン分解抑制用の美容組成物を提供することができる。即ち、本発明のメラニン産生抑制剤、ＭＭＰ１阻害剤は、甘草の特定の含水アルコール抽出物を有効成分として含有する新規の製剤であり、これらを含む美容組成物は、優れた美白効果、コラーゲン分解抑制効果を奏するため、シミ、そばかす、シワ、たるみ等の予防／改善のために好適に用いることができる。
【図面の簡単な説明】
【０００９】
【図１】甘草の含水アルコール抽出物のメラニン産生抑制効果を示す図である。
【図２】甘草の含水アルコール抽出物のＭＭＰ１活性阻害効果を示す図である。
【発明を実施するための形態】
【００１０】
以下に、本発明について詳細に説明する。
【００１１】
＜メラニン産生抑制剤＞
本発明のメラニン産生抑制剤は、甘草の含水アルコール抽出物を有効成分として含有する。本発明のメラニン産生抑制剤は特定の甘草の含水アルコール抽出物を有効成分として含有することで、皮膚のメラノサイトにおけるメラニンの産生を抑制する効果を奏するため、これを含む化粧料等は、日焼け等による色素沈着、シミ、そばかす、肌のくすみ等の予防及び／又は改善に有効である。なお、本明細書中、メラニンとは、黒褐色の真性メラニン（ｅｕｍｅｌａｎｉｎ、エウメラニン）と、橙赤色の亜メラニン（Ｐｈｅｏｍｅｌａｎｉｎ、フェオメラニン）の２種類を指すが、本発明のメラニン産生抑制剤は主に黒褐色の真性メラニンの産生抑制効果を有する。
【００１２】
本発明のメラニン産生抑制剤が含有する「甘草の含水アルコール抽出物」は、甘草から含水アルコールを用いた抽出によって得られる。
【００１３】
上記甘草は、マメ科の多年草で、例えば、ウラル甘草（Ｇｌｙｃｙｒｒｈｉｚａ  ｕｒａｌｅｎｓｉｓ）、ナンキン甘草（Ｇｌｙｃｙｒｒｈｉｚａ  ｇｌａｂｒａ）、シナ甘草（Ｇｌｙｃｙｒｒｈｉｚａ  ｅｃｈｎａｔａ）、イヌ甘草（Ｇｌｙｃｙｒｒｈｉｚａ  ｐａｌｌｉｄｉｆｌｒａ）等が挙げられる。これらのうち、本発明の効果の観点から、ウラル甘草が好ましい。
【００１４】
上記抽出には、甘草の全草を用いてもよいし、一部（例えば、根、茎（ストロンを含む）、葉、果実（種子）、花蕾、花、樹皮等）の、粉砕物、乾燥物等を使用することもできる。使用する部位としては、根、茎（ストロンを含む）が好ましく、根がより好ましい。なお、複数の部位を混合して用いてもよい。
【００１５】
抽出溶媒としては、含水アルコールであれば特に限定されないが、例えば含水エタノール、含水メタノール等が挙げられ、含水エタノールが好ましい。上記含水アルコールのアルコール濃度は、０．１〜９９．９％（ｖ／ｖ）であり、１０．０〜１００％（ｖ／ｖ）であることが好ましく、３０．０〜７０．０％（ｖ／ｖ）であることがより好ましい。アルコール濃度が上記範囲内であると、抽出される成分の種類、濃度、比率等がうまくバランスされ、本発明の効果に優れる抽出物を得ることができる。また、含水アルコールに使用される水は、医薬上、薬理学的に又は生理学的に許容されるものであればよく、例えば、蒸留水、常水、精製水、滅菌精製水、注射用水、注射用蒸留水等が挙げられる。
【００１６】
本発明のメラニン産生抑制剤が含有する甘草の含水アルコール抽出物は、複数の成分を含んでいる。それらの成分としては、例えば、グリチルリチン酸、リコリスサポニンＧ２、リコリスサポニンＨ２、２２β−アセトキシグリチルリチン等のテルぺノイド；リクイリチン、リクイリチゲニン、イソリクイリチン、イソリクイリチゲニン等のフラボノイド等が挙げられる。
【００１７】
甘草の含水アルコール抽出物が含む上記各成分の含有量は、使用する甘草の種類、ロット、抽出条件等により調節することができるが、本発明の効果の観点から、メラニン産生抑制剤におけるグリチルリチン酸の含有量は、メラニン産生抑制剤全体の０．１〜３０．０重量％であり、０．５〜２０．０重量％であることが好ましく、１．０〜１０．０重量％であることがより好ましい。リコリスサポニンＧ２の含有量は、メラニン産生抑制剤全体の０．０１〜１０．０重量％であり、０．０５〜５．０重量％であることが好ましく、０．５〜３．０重量％であることがより好ましい。リコリスサポニンＨ２の含有量は、メラニン産生抑制剤全体の０．０１〜１０．０重量％であり、０．０５〜５．０重量％であることが好ましく、１．０〜３．０重量％であることがより好ましい。２２β−アセトキシグリチルリチンの含有量は、メラニン産生抑制剤全体の０．０１〜１０．０重量％であり、０．０５〜５．０重量％であることが好ましく、１．０〜３．０重量％であることがより好ましい。リクイリチンの含有量は、メラニン産生抑制剤全体の０．１〜３０．０重量％であり、０．５〜２０．０重量％であることが好ましく、１．０〜１０．０重量％であることがより好ましい。リクイリチゲニンの含有量は、メラニン産生抑制剤全体の０．０１〜１０．０重量％であり、０．０５〜５．０重量％であることが好ましく、０．１〜３．０重量％であることがより好ましい。イソリクイリチンの含有量は、メラニン産生抑制剤全体の０．０１〜１０．０重量％であり、０．０５〜５．０重量％であることが好ましく、０．１〜３．０重量％であることがより好ましい。イソリクイリチゲニンの含有量は、メラニン産生抑制剤全体の０．００１〜１０．０重量％であり、０．０１〜５．０重量％であることが好ましく、０．０５〜１．０重量％であることがより好ましい。
【００１８】
甘草の含水アルコール抽出物は、上記甘草の粉砕物、乾燥物等を上記含水アルコールで処理して得られた液体状のエキスであってもよいし、それを濃縮、噴霧乾燥、凍結乾燥等したものであってもよく、形態は特に限定されない。
【００１９】
甘草の含水アルコール抽出物は、例えば以下の方法により調製することができる。即ち、ウラル甘草に２〜５０倍体積量（好ましくは５〜２０倍体積量、より好ましくは１０倍体積量程度）の含水エタノール等の含水アルコールを加え、４℃〜４０℃（好ましくは１０℃〜３０℃、より好ましくは１５℃〜２５℃、さらに好ましくは２０℃程度）で５時間〜７２時間（好ましくは１０時間〜４８時間、より好ましくは２０時間〜３０時間、さらに好ましくは２４時間程度）処理する。得られた抽出液を真空下で凍結乾燥させ甘草の含水アルコール抽出物を得る。含水アルコール抽出物は、ＨＰＬＣ等を用いてさらに分画してもよく、例えば、テルぺノイド分画、フラボノイド分画等に分離してもよい。
【００２０】
本発明のメラニン産生抑制剤は、有効成分である甘草の含水アルコール抽出物以外に、用途に適した担体（例えば薬学的に許容可能な担体、化粧品的に許容可能な担体、皮膚化学的に許容可能な担体等）等を用いて、常法に従い、任意の剤形に製剤化して提供することができ、他の組成物（例えば、飲食品組成物、医薬品組成物、化粧料等）に配合して使用し得る。
【００２１】
本発明のメラニン産生抑制剤における有効成分である甘草の含水アルコール抽出物の含有量は、例えば、０．０００１〜１００重量％であり、０．００１〜１００重量％であることが好ましく、０．０１〜１００重量％であることがより好ましく、０．１〜１００重量％であることがさらに好ましく、１．０〜１００重量％であることが特に好ましい。
【００２２】
本発明のメラニン産生抑制剤は、目的に応じて、いかなる剤形であってもよく、例えば、液状、ペースト状、ゲル状、固体状、粉末状、泡状、ジェリー状等の任意の形態をとることができる。本発明のメラニン産生抑制剤の剤形が固形または粉末状である場合、適切な溶媒等を使用して所望の濃度になるように溶解し、使用してもよい。本発明のメラニン産生抑制剤の剤形が溶液である場合、所望の濃度になるように適切な溶媒に希釈するなどして、使用してもよい。本発明のメラニン産生抑制剤の剤形が溶液である場合、この溶液のｐＨは、３〜１０であり、４〜９であることが好ましく、５〜８であることがより好ましいが、これらに限定されない。
【００２３】
＜ＭＭＰ１阻害剤＞
本発明のＭＭＰ１阻害剤は、甘草の含水アルコール抽出物を有効成分として含有する。本発明のＭＭＰ１阻害剤は特定の甘草の含水アルコール抽出物を有効成分として含有することで、コラーゲンを分解するＭＭＰ１の阻害活性を有するため、これを含む化粧料等は、肌のコラーゲンの減少を抑えることができ、加齢、外的ストレス等によって引き起こされる肌のたるみ、シワ等の予防及び／又は改善に有効である。
【００２４】
本発明において、ＭＭＰ１阻害活性は、ＭＭＰ１  Ｆｌｕｏｒｏｍｅｔｒｉｃ  Ｄｒｕｇ  Ｄｉｓｃｏｖｅｒｙ  ｋｉｔ（ＢＭＬ−ＡＫ４０５，Ｅｎｚо社製）等の市販の測定キットを用いて測定することができる。
【００２５】
本発明のＭＭＰ１阻害剤が含有する「甘草の含水アルコール抽出物」については、上記メラニン産生抑制剤における説明を、「メラニン産生抑制剤」を「ＭＭＰ１阻害剤」に置き換えて適用できる。
【００２６】
本発明のＭＭＰ１阻害剤は、有効成分である甘草の含水アルコール抽出物以外に、用途に適した担体（例えば薬学的に許容可能な担体、化粧品的に許容可能な担体、皮膚化学的に許容可能な担体等）等を用いて、常法に従い、任意の剤形に製剤化して提供することができ、他の組成物（例えば、飲食品組成物、医薬品組成物、化粧料等）に配合して使用し得る。
【００２７】
本発明のＭＭＰ１阻害剤における有効成分である甘草の含水アルコール抽出物の含有量は、例えば、０．０００１〜１００重量％であり、０．００１〜１００重量％であることが好ましく、０．０１〜１００重量％であることがより好ましく、０．１〜１００重量％であることがさらに好ましく、１．０〜１００重量％であることが特に好ましい。
【００２８】
本発明のＭＭＰ１阻害剤は、目的に応じて、いかなる剤形であってもよく、例えば、液状、ペースト状、ゲル状、固体状、粉末状、泡状、ジェリー状等の任意の形態をとることができる。本発明のメラニン産生抑制剤の剤形が固形または粉末状である場合、適切な溶媒等を使用して所望の濃度になるように溶解し、使用してもよい。本発明のメラニン産生抑制剤の剤形が溶液である場合、所望の濃度になるように適切な溶媒に希釈するなどして、使用してもよい。本発明のメラニン産生抑制剤の剤形が溶液である場合、この溶液のｐＨは、３〜１０であり、４〜９であることが好ましく、５〜８であることがより好ましいが、これらに限定されない。
【００２９】
＜美容組成物＞
上述した本発明のメラニン産生抑制剤及びＭＭＰ１阻害剤は、それぞれの用途に適した各種成分を適宜配合して、美容組成物等として提供することができる。即ち、本発明の範囲には、上記本発明のメラニン産生抑制剤又はＭＭＰ１阻害剤を含有する美容組成物も含まれる。
【００３０】
本発明の美容組成物は、上述した本発明のメラニン産生抑制剤及び／又はＭＭＰ１阻害剤を含有する。本発明の美容組成物は、本発明のメラニン産生抑制剤及び／又はＭＭＰ１阻害剤を含有することで、美白効果及び／又はコラーゲン分解抑制効果を奏するため、美白及び／又はコラーゲン分解抑制を目的とした飲食品、機能性表示食品、特定保健用食品、栄養機能食品、化粧品、医薬部外品、又は医薬品として好適に用いられる。
【００３１】
本発明の美容組成物中の本発明のメラニン産生抑制剤又はＭＭＰ１阻害剤の配合量は、特に制限されず、適用の目的（症状の種類等）、適用対象部位、適用者の性別や年齢、飲食品、機能性表示食品、特定保健食品、化粧品、医薬部外品又は医薬品の形態、これらの投与方法又は摂取方法、投与又は摂取の回数、嗜好等に応じて適宜設定される。例えば、本発明の美容組成物は、成人１日当たりの適用量が、内服の場合、甘草の含水アルコール抽出物（凍結乾燥品換算）の総量で０．００１ｇ〜５．０ｇ、好ましくは０．０１ｇ〜３．０ｇ、より好ましくは０．０２ｇ〜１．０ｇ、さらに好ましくは０．０３ｇ〜０．３ｇとなるよう配合することができる。また、外用の場合は、含水アルコール抽出物の含有量が、０．０００１〜１００重量％のものを、好ましくは０．０１〜１００重量％のものを、より好ましくは０．１〜１００重量％のものを目的に応じて適量で使用することができる。上記適量としては、例えば成人１日当たりの量として、甘草の含水アルコール抽出物（凍結乾燥品換算）の総量で０．０００１ｇ〜０．５ｇ／ｋｇ、好ましくは０．００１ｇ〜０．３ｇ／ｋｇ、より好ましくは０．００２ｇ〜０．１ｇ／ｋｇ、さらに好ましくは０．００３ｇ〜０．０３ｇ／ｋｇとなるような量が挙げられる。
【００３２】
本発明の美容組成物を飲食品として調製する場合、本発明のメラニン産生抑制剤又はＭＭＰ１阻害剤の他に、甘味料、着色料、保存料、増粘剤、安定剤、ゲル化剤、糊剤、酸化防止剤、発色剤、漂白剤、防かび剤（防ばい剤）、イーストフード、ガムベース、香料、酸味料、調味料、乳化剤、ｐＨ調整剤、かんすい、膨脹剤、栄養強化剤、その他飲食品素材等を混合して、目的の形態に調製することができる。なお、本発明の美容組成物を飲食品にする場合、その形態については、特に制限されるものではない。例えば、ゲル状剤、顆粒、細粒、カプセル、錠剤、粉末、液剤、半固形剤等のサプリメントタイプの食品；炭酸飲料、清涼飲料、乳飲料、アルコール飲料、果汁飲料、茶類、栄養飲料等の飲料；粉末ジュース、粉末スープ等の粉末飲料；ガム、タブレット、キャンディー、クッキー、グミ、せんべい、ビスケット、ゼリー等の菓子類；パン、麺類、シリアル、ジャム、調味料等が挙げられる。これらの食品は、メラニン産生抑制用、ＭＭＰ１阻害用、美白用、コラーゲン分解抑制用の飲食品として使用される。また、一般の飲食品の他、栄養補助食品、機能性表示食品、特定保健用食品、栄養機能食品、病者用食品等のニュートラシューティカルとしても使用できる。
【００３３】
本発明の美容組成物を医薬品（医薬部外品を含む）として調製する場合、本発明のメラニン産生抑制剤又はＭＭＰ１阻害剤の他に、必要に応じて、他の薬効成分、薬学的に許容される担体や添加剤等を任意に配合してもよい。薬学的に許容される担体及び添加剤としては、具体的には、結合剤、崩壊剤、滑沢剤、湿潤化剤、緩衝剤、保存剤、香料等が例示される。本発明のメラニン産生抑制剤又はＭＭＰ１阻害剤、或いはこれを含む美容組成物を医薬品として調製する場合、その形態については、特に制限されるものではない。例えば、注射剤、外用剤、吸入剤、座剤、フィルム剤、トローチ剤、液剤、散剤、錠剤、顆粒剤、カプセル剤、シロップ剤、点眼剤、洗眼剤、点鼻剤等が挙げられる。これらの中でも、経口投与に適した形態（即ち、内服用医薬品）が好ましく、かかる形態として具体的にはトローチ剤、液剤、散剤、錠剤、顆粒剤、カプセル剤、シロップ剤、ドリンク剤等をより好ましい形態として挙げることができる。これらの医薬品（医薬部外品を含む）は、メラニン産生抑制作用又はＭＭＰ１阻害作用（これによる美白作用、コラーゲン分解抑制作用）を有する医薬品として使用される。
【００３４】
本発明の美容組成物を化粧料（機能性化粧料を含む）又は外用医薬部外品として調製するには、本発明のメラニン産生抑制剤又はＭＭＰ１阻害剤に加えて、薬学的又は化粧学的に許容される担体（水、油性成分等）を配合して、目的の形態に調製すればよい。上記化粧料は、皮膚に適用可能である限り、その形態については、特に制限されるものではない。例えば、液状、乳液状、粉末状、固形状、懸濁液状、クリーム状、軟膏状、ムース状、顆粒状、錠剤状、ゲル状、ゼリー状、ペースト状、ジェル状、エアゾール状、スプレー状、リニメント剤、パック剤等の形態が挙げられる。これらの化粧料は、メラニン産生抑制作用又はＭＭＰ１阻害作用（これによる美白作用、コラーゲン分解抑制作用）を有する化粧料として使用される。
【００３５】
本発明は、本発明の美容組成物及びその使用説明書を含む、メラニン産生抑制用又はＭＭＰ１阻害用（これによる美白用、コラーゲン分解抑制用）キットも含む。
【００３６】
本発明のキットに含まれる使用説明書には、本発明の美容組成物（或いはメラニン産生抑制用又はＭＭＰ１阻害用）が皮膚のメラニン産生抑制作用を有すること及び／又はこのメカニズムによる美白作用を有すること、ＭＭＰ１阻害作用を有すること及び／又はこのメカニズムによるコラーゲン分解抑制作用を有すること、さらにはＭＭＰ１阻害作用を介するコラーゲン分解抑制作用により肌のたるみ、シワの予防、改善に有効であること、これらの作用を奏する有効成分が、甘草の含水アルコール抽出物であること等を記載することができる。
【実施例】
【００３７】
以下、実施例により本発明をより詳細に説明するが、本発明は下記実施例により何ら限定されるものではない。
【００３８】
＜甘草の含水アルコール抽出物＞
以下の実験において、甘草の含水アルコール抽出物としては、リコニン（エムジーファーマ株式会社製）を用いた。なおリコニンは、以下のような方法により調製される。即ち、ウラル甘草に１０倍体積量の５０％エタノールを加え、２０℃で２４時間処理する。抽出液を真空下で凍結乾燥させリコニン（甘草の含水アルコール抽出物）を得る。リコニンは、ＨＰＬＣを用いてテルぺノイド分画とフラボノイド分画とに分離することができる。それぞれの分画に含まれる成分は以下の表１に示すとおりである。本発明の甘草の含水アルコール抽出物の成分は、従来から知られている甘草抽出物の成分（Biol. Pharm. Bull. 30(7) 1271-1277 (2007)のTable 1等に記載）とは、成分の種類（構成）、各成分の含有量、比率等が異なっていた。
【００３９】
【表１】
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【００４０】
＜メラニン産生抑制作用＞
マウス由来Ｂ１６メラノーマ細胞（ＡＴＣＣ）を、テオフィリン添加又は無添加ＤＭＥＭ培地（１０％ＦＣＳ、１％ＡＢ）を用いて、６ｗｅｌｌ  ｐｌａｔｅ（Ｃｏｒｎｉｎｇ社）に５×１０４ｃｅｌｌｓ／ｗｅｌｌ／２ｍＬで播種し、３７℃、５％ＣＯ２条件下にて２４時間培養して接着させた。その後、コウジ酸（ＴＧＩ，Ｋ００１０）を最終濃度１×１０−２％となるように調整したテオフィリン添加培地、リコニンを最終濃度１×１０−５％、１×となるように調整したテオフィリン添加培地、甘草粉末（エムジーファーマ社）を最終濃度５×１０−５％となるように調整したテオフィリン添加培地で、それぞれ培地交換を行い、３日間培養した。
【００４１】
各ｗｅｌｌをＰＢＳで洗浄後、酵素処理（トリプシン）を使用して常法に従い細胞を回収した。回収した細胞を１００μＬのＰＢＳに懸濁し、２０μＬを使用し、希釈して細胞数を計測した。残りの８０μＬに等量の４ＮのＮａＯＨを添加して８０℃で２時間インキュベートし、メラニンを含む黒い細胞ペレットがないことを確認した上で、上清を１２０μＬずつ９６ｗｅｌｌ  ｐｌａｔｅに採取し、プレートリーダーで４０５ｎｍの吸光度を測定した。得られた吸光度を生細胞数で標準化し、コントロール（テオフィリン添加培地のみ）の値を１００として各サンプル値を比較した。試験成績は図１に平均値±標準偏差で示した。なお、＊は、ｐ値が５％以下（ｐ＜０．０５）であることを示す。
【００４２】
図１に示すとおり、陽性対照としたコウジ酸と同様に、リコニンを１×１０−５％添加した細胞ではコントロールに比べてメラニン産生量が有意に低下した。また、リコニン１×１０−５％とその５倍量である５×１０−５％濃度の甘草粉末を比較すると、リコニンの方が高いメラニン産生抑制活性を示した。結論として、リコニンは細胞にメラニン産生抑制効果を付与することができ、その効果は５倍量の甘草粉末と比較しても高いものであった。
【００４３】
＜ＭＭＰ１活性阻害作用＞
コラーゲンや弾性繊維を切断するＭＭＰ１の酵素活性に対するリコニンの影響を評価した。評価試験には、ＭＭＰ１  Ｆｌｕｏｒｏｍｅｔｒｉｃ  Ｄｒｕｇ  Ｄｉｓｃｏｖｅｒｙ  ｋｉｔ（ＢＭＬ−ＡＫ４０５，Ｅｎｚо社製）を使用し、使用説明書に従って実施した。リコニンは、最終濃度１００μｇ／ｍＬ、１０μｇ／ｍＬ、１μｇ／ｍＬ、０．１μｇ／ｍＬとなるように１０倍濃度の溶液を調整した。
【００４４】
インヒビター、基質、ＭＭＰ１及びプレートを３７℃で３０分間温めた。アッセイバッファー、ＭＭＰ１、ＮＮＧＨインヒビター、リコニンを下記表２に示す量（μＬ）で各ｗｅｌｌに加え、３７℃で１時間反応させた。その後、全てのｗｅｌｌに基質を加え、１０分後にＥｘ／Ｅｍ：３２８／４２０で蛍光を測定した。コントロール群と各濃度のリコニン添加群とを比較し、評価した。結果を図２に示す。なお、＊＊＊は、ｐ値が１％以下（ｐ＜０．０１）であることを示す。
【００４５】
【表２】
2019156818.tif 000003
【００４６】
ＭＭＰ１にリコニンを添加すると、コントロールに比べてＭＭＰ１活性が低下した。以上の結果から、リコニンはＭＭＰ１阻害活性を有することから、コラーゲンの分解抑制効果があることが示唆された。
【産業上の利用可能性】
【００４７】
本発明によると新規の美白用及び／又はコラーゲン分解抑制用の美容組成物を提供することができる。即ち、本発明のメラニン産生抑制剤、ＭＭＰ１阻害剤は、甘草の特定の含水アルコール抽出物を有効成分として含有する新規の製剤であり、これらを含む美容組成物は、優れた美白効果、コラーゲン分解抑制効果を奏するため、シミ、そばかす、日焼け、シワ、たるみ等の予防／改善のために好適に用いることができる。
【図１】
2019156818.tif 000004
【図２】
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【手続補正書】
【提出日】令和1年5月23日(2019.5.23)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
甘草の含水エタノール抽出物を有効成分として含有し、上記含水エタノールにおけるエタノール濃度が３０．０〜７０．０％（ｖ／ｖ）である、ＭＭＰ１阻害剤。
【請求項２】
上記甘草が、ウラル甘草である、請求項１に記載のＭＭＰ１阻害剤。
【請求項３】
グリチルリチン酸を０．５〜２０．０重量％含有する、請求項１又は２に記載のＭＭＰ１阻害剤。
【請求項４】
リコリスサポニンＨ２を０．０５〜５．００重量％含有する、請求項１から３のいずれか１項に記載のＭＭＰ１阻害剤。
【請求項５】
リクイリチンを０．１〜１０．０重量％含有する、請求項１から４のいずれか１項に記載のＭＭＰ１阻害剤。
【請求項６】
請求項１〜５のいずれか１項に記載のＭＭＰ１阻害剤を含有する、美容組成物。
【請求項７】
コラーゲン分解抑制用である、請求項６に記載の美容組成物。
【請求項８】
飲食品、機能性表示食品、特定保健用食品、栄養機能食品、化粧品、医薬部外品、又は医薬品である、請求項６又は７に記載の美容組成物。