(57)【要約】      （修正有）【課題】自己免疫疾患、炎症関連疾患、及び／又は神経変性疾患を治療するための、免疫抑制性Ｔａｔ誘導体ポリペプチド、化合物、及びこのようなポリペプチド及び化合物を用いた方法の提供。【解決手段】免疫抑制性ヒト免疫不全ウイルス（ＨＩＶ）、ＳＩＶ免疫抑制性転写トランスアクチベーター（Ｔａｔ）タンパク質、無毛又は人工免疫抑制性配列由来の配列を含む転写因子（ＴＦ）ドメイン、レンチウイルスＴａｔ又はデフェンシン分子由来のシステインリッチ領域であるドメイン、及び、レンチウイルスＴａｔタンパク質由来のＣ−末端領域であるドメイン、を示される順序で含むアミノ酸配列を含む、免疫抑制性転写トランスアクチベーター（Ｔａｔ）誘導体ポリペプチド。【選択図】なし【特許請求の範囲】
【請求項１】
免疫抑制性ヒト免疫不全ウイルス（ＨＩＶ）、ＳＩＶ  免疫抑制性転写トランスアクチベーター（Ｔａｔ）タンパク質、無毛又は人工免疫抑制性配列由来の配列を含む転写因子（ＴＦ）ドメイン、
レンチウイルスＴａｔ又はデフェンシン分子由来のシステインリッチ領域であるドメイン、及び、
レンチウイルスＴａｔタンパク質由来のＣ−末端領域であるドメイン、
を示される順序で含むアミノ酸配列を含む、免疫抑制性転写トランスアクチベーター（Ｔａｔ）誘導体ポリペプチド。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本出願は、例えば神経変性及び自己免疫疾患並びに炎症関連疾患といった異常免疫反応によって特徴付けられる疾患の治療のための免疫抑制性ヒト免疫不全ウイルス（ＨＩＶ）転写トランスアクチベーター（Ｔａｔ）誘導体ポリペプチドに関する。
【背景技術】
【０００２】
ヒト免疫不全ウイルス（ＨＩＶ）転写トランスアクチベーター（Ｔａｔ）は、少なくとも２つの独立した活性、細胞表面でのレセプターに媒介されて開始するイベント及び抗原提示細胞（ＡＰＣ）分化を制御する細胞内のトランス活性化活性を媒介する。Ｔａｔに媒介されるレセプターを介して開始するイベントはＡＰＣに特異的であり、それらを活性化させ、さらに高度に免疫抑制性の抗原提示細胞制御性マクロファージ（ＡＲｅｇ）又は特異的な細胞毒性Ｔリンパ球を刺激する樹状細胞（ＤＣ）への分化に関与する。
【０００３】
抗原提示細胞、マクロファージ及び樹状細胞は、単球を、種々の疾患、障害及び望ましくない免疫反応の発症又は反応において重要である。Ｔａｔは、単球の、提示された抗原への免疫反応を特異的に抑制する分子を発現する抗原提示マクロファージへの分化を引き起こす。自己免疫疾患では、身体自身の内因性の特定の分子が誤って外来と認識されることにより、広範囲の炎症及び組織の損傷が発生する。一例では、ＩＩ型コラーゲンの免疫原性ペプチドへの分解は、動物における関節リウマチ（ＲＡ）を誘発し得、ヒトのＲＡと関連している。膨大な研究が、これらタンパク質への免疫反応の低減に重点をおいてきた。Ｔａｔに起因する抗原特異的マクロファージ誘導抑制は、炎症及び神経変性に関連する外来性及び内因性分子に対する望ましくない免疫反応の低減に応用され得る。
【０００４】
炎症及び自己免疫疾患治療の試みは、限られた成功しか収めていない。これは、部分的には、炎症及び自己免疫疾患の病因が、一部は冗長な過程を通じて炎症を引き起こすように見える種々の炎症誘導分子及び多数の炎症媒介及び感作分子に基づく複雑な反応であるという事実による。そのため、炎症、神経変性疾患又は自己免疫疾患を治療し得る化合物、組成物及び方法が、非常に望まれている。
【発明の概要】
【課題を解決するための手段】
【０００５】
本明細書では、例えば神経変性又は自己免疫疾患又は炎症関連疾患といった異常免疫反応に関連する疾患を患う個体を治療するための化合物、組成物及び方法を開示する。これは、治療上有効な量の免疫抑制性Ｔａｔ誘導体ポリペプチド又はこのようなポリペプチドを含む組成物をこの疾患を患う個体に対して投与することにより達成される。ここで開示されるように、開示された免疫抑制性Ｔａｔ誘導体ポリペプチドは、免疫抑制活性を示した。
【０００６】
ここでは、免疫抑制性転写トランスアクチベーター（Ｔａｔ）誘導体ポリペプチドであって、以下のドメイン、免疫抑制性ヒト免疫不全ウイルス（ＨＩＶ）、ＳＩＶ  Ｔａｔ  タンパク質、無毛又は人工免疫抑制性配列由来の配列を含む転写因子（ＴＦ）ドメイン、レンチウイルスＴａｔ又はデフェンシン分子由来のシステインリッチ領域、及び、レンチウイルスＴａｔタンパク質由来のＣ−末端領域、を示される順序で含むアミノ酸配列を含む、免疫抑制性転写トランスアクチベーター（Ｔａｔ）誘導体ポリペプチドが開示される。
【０００７】
別の態様では、免疫抑制性Ｔａｔ誘導体ポリペプチドは、レンチウイルスＴａｔタンパク質由来のアルギニンリッチドメインをさらに含む。別の態様では、ＴＦドメインは、Ｎ−末端に（ＰＶＤＰＲＬＥＰＷＫＨＰＧＳＱＰ）ｎ（ｎ＝２〜１０）を含む反復配列をさらに含む。別の態様では、ＴＦドメインの少なくとも１つのアミノ酸が保存的アミノ酸置換で修飾されている。
【０００８】
免疫抑制性Ｔａｔ誘導体ポリペプチドの別の態様では、ＨＩＶはＨＩＶ−１又はＨＩＶ−２である。別の態様では、レンチウイルスＴａｔはＨＩＶ−１、ＨＩＶ−２、ＳＩＶ、ＦＩＶ、ＢＩＶ又はＥＩＡＶに由来である。
【０００９】
免疫抑制性Ｔａｔ誘導体ポリペプチドの別の態様では、ＴＦドメインは、配列番号３６、３９、４４、４８、５０、５４、５９、６０又は６１のうちの１つのアミノ酸配列を含む。別の態様では、システインリッチドメインは、配列番号３７、４０、４１、４３，４５、４７，４９、５１、５３、５５、５７、５８、６２、６３、６４又は７０のうちの１つのアミノ酸配列を含む。別の態様では、Ｃ−末端ドメインは、配列番号３８、４２、４６、４７、４９、５２、５３、６８又は７１のうちの１つのアミノ酸配列を含む。さらに別の態様では、システインリッチ領域及びＣ−末端領域はいずれも同じ源由来であり、組み合わされたシステインリッチ及びＣ−末端領域のアミノ酸配列は配列番号４７、４９又は５３のうちの１つである。別の態様では、免疫抑制性Ｔａｔ誘導体ポリペプチドは、配列番号９〜１１、１３〜３５又は６９のうちの１つに対して、８５％超の配列同一性、９０％超の配列同一性、又は９５％超の配列同一性を有する。
【００１０】
同様に、ここでは、１種以上の免疫抑制性Ｔａｔ誘導体ポリペプチド及び薬学上許容される賦形剤を含む医薬組成物が開示される。別の態様では、免疫抑制性Ｔａｔ誘導体ポリペプチドは、配列番号９〜１１、１３〜３５又は６９のうちの１つ以上に対して８５％超の配列同一性を有する。
【００１１】
さらに、ここでは、異常免疫反応により特徴付けられる疾患の治療方法であって、治療上有効な量の１種以上の免疫抑制性Ｔａｔ誘導体ポリペプチドを必要とする対象に投与することによって、免疫システムを抑制し疾患を治療することを含む方法が開示されている。
【００１２】
さらに、ここでは、抗原提示細胞制御性マクロファージ（ＡＲｅｇｓ）におけるＦａｓリガンド（ＦａｓＬ）の発現を促進する方法であって、１種以上の治療上有効な量の免疫抑制性Ｔａｔ誘導体ポリペプチドを対象に投与することによって、ＡＲｅｇｓにおけるＦａｓＬの発現を促進することを含む方法が開示されている。
【００１３】
さらに、ここでは、炎症を低減する方法であって、治療上有効な量の１種以上の免疫抑制性Ｔａｔ誘導体ポリペプチドを必要とする対象に投与することによって、対象における炎症の低減を促進することを含む、方法が開示されている。
【００１４】
ここに開示される方法の一態様では、免疫抑制性Ｔａｔ誘導体ポリペプチドは、配列番号９〜１１、１３〜３５又は６９のうちの１つと８５％超の配列同一性を有する。
【００１５】
方法の別の態様では、本治療は、抗原提示細胞制御性マクロファージ（ＡＲｅｇｓ）におけるＦａｓリガンドの発現を促進する。さらに別の態様では、ＡＲｅｇｓはＣＤ１４＋マクロファージである。
【００１６】
方法の別の態様では、本疾患は自己免疫、神経変性又は炎症関連疾患である。一態様では、自己免疫疾患は、急性散在性脳脊髄炎（ＡＤＥＭ）、アジソン病、アレルギー、アレルギー性鼻炎、アルツハイマー型認知症、抗リン脂質抗体症候群（ＡＰＳ）、関節炎、ぜんそく、自己免疫不全症候群、自己免疫性溶血性貧血、自己免疫性肝炎、自己免疫性内耳疾患、水疱性類天疱瘡、セリアック病、シャーガス病、慢性閉塞性肺疾患（ＣＯＰＤ）、１型糖尿病（ＩＤＤＭ）、湿疹、子宮内膜症、消化器疾患、グッドパスチャー症候群、グレーブス病、ギラン−バレー症候群（ＧＢＳ）、橋本甲状腺炎、汗腺膿瘍、突発性血小板減少性紫斑病、炎症性大腸炎、炎症性皮膚疾患、間質性膀胱炎、尋常性狼瘡、限局性強皮症、多発性硬化症（ＭＳ）、重症筋無力症、ミオパシー、ナルコレプシー、ニューロミオトニア、尋常性天痘瘡、悪性貧血、原発性胆汁性肝硬変、乾癬、再発性播種性脳脊髄炎、リウマチ熱、統合失調症、強皮症、シェーグレン症候群、皮膚疾患、腱滑膜炎、ブドウ膜炎、血管炎、又は白斑である。別の態様では、炎症関連疾患は、にきび、酸の逆流／胸焼け、アレルギー、アレルギー性鼻炎、アルツハイマー型認知症、虫垂炎、動脈炎、関節炎、ぜんそく、アテローム性動脈硬化、自己免疫疾患、亀頭炎、眼瞼炎、細気管支炎、気管支炎、滑液包炎、癌、心臓炎、セリアック病、蜂巣炎、子宮頸管炎、胆管炎、胆嚢炎、絨毛羊膜炎、慢性閉塞性肺疾患（ＣＯＰＤ）、肝硬変、大腸炎、結膜炎、膀胱炎、一般的な風邪、涙腺炎、認知症、皮膚炎、皮膚筋炎、湿疹、肺気腫、脳炎、心内膜炎、子宮内膜炎、腸炎、全腸炎、上顆炎、精巣上体炎、筋膜炎、結合組織炎、胃炎、胃腸炎、歯肉炎、糸球体腎炎、舌炎、心疾患、肝炎、汗腺膿瘍、高血圧、回腸炎、インスリン抵抗性、間質性膀胱炎、虹彩炎、虚血性心疾患、角膜炎、角結膜炎、喉頭炎、尋常性狼瘡、乳腺炎、乳様突起炎、髄膜炎、代謝症候群（エックス症候群）、偏頭痛、多発性硬化症、骨髄炎、心筋炎、ミオパシー、筋炎、腎炎、神経障害、肥満、臍炎、卵巣炎、精巣炎、骨軟骨炎、骨減少症、骨粗鬆症、骨炎、耳炎、膵炎、パーキンソン病、耳下腺炎、骨盤炎症性疾患、心膜炎、腹膜炎、喉頭炎、静脈炎、胸膜炎、肺炎、直腸炎、前立腺炎、乾癬、歯髄炎、腎盂腎炎、門脈炎、リウマチ熱、鼻炎、卵管炎、唾液腺炎、副鼻腔炎、痙攣性結腸、口内炎、滑膜炎、腱炎、腱症、腱滑膜炎、血栓性静脈炎、へんとう炎、三角炎、腫瘍、尿道炎、ブドウ膜炎、膣炎、血管炎、外陰炎である。別の態様では、神経変性疾患は、アレキサンダー病、アルパーズ病、アルツハイマー型認知症、アミロイド症、筋萎縮性側索硬化症、不安神経症、毛細血管拡張性運動失調、注意欠陥障害、カナバン病、中枢神経系損傷、シャルコーマリートゥース病、コケーン症候群、大脳皮質基底核変性症、クロイツフェルトヤコブ病、鬱病、脳炎（例えば、細菌性、寄生性、菌性又はウイルス性）、フリードライヒ運動失調症、前頭側頭型認知症、遺伝性痙性対麻痺、ギランバレー症候群（及びその異型である急性運動軸索型ニューロパチー、急性炎症性脱髄性多発ニューロパチー及びフィッシャー症候群）、ＨＩＶ／ＡＩＤＳによる認知症、ハンチントン病、神経系への虚血性障害、ケネディ病、クラッベ病、レビー小体型認知症、マシャドジョセフ病、髄膜炎（例えば、細菌性、寄生性、菌性又はウイルス性）、多発性硬化症、多系統萎縮症、神経系の外傷（例えば、衝撃による脳障害、脊髄損傷、神経系の外傷性損傷）、神経障害（例えば、化学療法により誘導された神経障害、糖尿病に関連する神経障害及び末梢の神経障害）、パーキンソン病、ペリツェウスメルツバッハー病、ピック病、原発性側索硬化症、プリオン病、進行性核上性麻痺、レフスム病、サンドホフ病、統合失調症、シルダー病、脊髄小脳萎縮症、スティール−リチャードソン−オルゼウスキー病、脳卒中、脊髄癆、又は血管性認知症である。
【００１７】
さらに方法の別の態様では、前記投与は、さらに自己免疫疾患、神経変性疾患又は炎症関連疾患に関連する少なくとも１つの症状を低減するものであり、当該症状は、炎症、疲労、めまい、不快感、熱及び体温の上昇、手及び足の冷えに対する過敏症、筋肉及び関節の衰弱及びこり、体重変化、消化器又は胃腸の問題、低又は高血圧、易刺激性、不安神経症又は鬱病、不妊症又は性的欲求の減少（性欲低下）、血糖変化、及び自己免疫の種類によっては臓器又は組織サイズの増大、又は臓器又は組織の崩壊である。
【００１８】
方法の別の態様では、対象は免疫疾患を持たない。別の態様では、投与の結果、対象の免疫システムは損傷しない。さらに別の態様では、投与の結果、ＡＲｅｇｓによるサイトカインの分泌は減少する。
【００１９】
方法の別の態様では、免疫抑制性Ｔａｔ誘導体ポリペプチドは、複数回投与される。別の実施形態では、免疫抑制性Ｔａｔ誘導体ポリペプチドは、１日１回、週１回、２週間に１回、１ヶ月に１回又は２ヶ月に１回投与される。さらに別の態様では、投与ステップは、反復投与サイクルを含み、各サイクルは、休薬期間が後に続く定められた期間中に、免疫抑制性Ｔａｔ誘導体ポリペプチドを複数回投与することを含み、前記サイクルは複数回繰り返される。
【００２０】
同様に、ここでは、必要とする対象における異常免疫反応によって特徴付けられる疾患の治療のための薬剤の製造における１種以上の免疫抑制性Ｔａｔ誘導体ポリペプチドの使用であって、１種以上の免疫抑制性Ｔａｔ誘導体ポリペプチドは、請求項１の免疫抑制性Ｔａｔ誘導体ポリペプチドと少なくとも８５％同一であり、免疫抑制性Ｔａｔ誘導体ポリペプチドの投与により対象における免疫システムを抑制することによって疾患を治療する、使用が開示されている。
【００２１】
さらに、ここでは、対象において、抗原提示細胞制御性マクロファージ（ＡＲｅｇｓ）におけるＦａｓリガンド（ＦａｓＬ）の発現を促進する薬剤の製造における１種以上の免疫抑制性Ｔａｔ誘導体ポリペプチドの使用であって、１種以上の免疫抑制性Ｔａｔ誘導体ポリペプチドは、請求項１の免疫抑制性Ｔａｔ誘導体ポリペプチドと少なくとも８５％同一であり、免疫抑制性Ｔａｔ誘導体ポリペプチドの投与により、ＡＲｅｇｓにおけるＦａｓＬの発現を促進する、使用が開示されている。
【００２２】
さらに、本開示では、対象の炎症を低減する薬剤の製造における１種以上の免疫抑制性Ｔａｔ誘導体ペプチドの使用であって、１種以上の免疫抑制性Ｔａｔ誘導体ポリペプチドは、請求項１の免疫抑制性Ｔａｔ誘導体ポリペプチドと少なくとも８５％の同一性を有し、免疫抑制性Ｔａｔ誘導体ポリペプチドの投与により、対象における炎症を低減する。
【００２３】
使用の別の態様では、治療は抗原提示細胞制御性マクロファージ（ＡＲｅｇｓ）のＦａｓリガンドにおける発現を促進する。別の態様では、ＡＲｅｇｓはＣＤ１４＋マクロファージである。別の態様では、ＡＲｅｇｓによるサイトカインの分泌は、減少する。さらに別の態様では、対象は免疫疾患を持たない。さらに別の態様では、投与の結果、対象の免疫システムは損傷しない。
【００２４】
使用のさらに別の態様では、免疫抑制性Ｔａｔ誘導体ポリペプチドは、配列番号９〜１１、１３〜３５又は６９のうちの１つと８５％超の配列同一性を有する。
【００２５】
使用の別の形態では、疾患は自己免疫、神経変性又は炎症関連疾患である。別の形態では、自己免疫疾患は、急性散在性脳脊髄炎（ＡＤＥＭ）、アジソン病、アレルギー、アレルギー性鼻炎、アルツハイマー型認知症、抗リン脂質抗体症候群（ＡＰＳ）、関節炎、ぜんそく、自己免疫不全症候群、自己免疫性溶血性貧血、自己免疫性肝炎、自己免疫性内耳疾患、水疱性類天疱瘡、セリアック病、シャーガス病、慢性閉塞性肺疾患（ＣＯＰＤ）、１型糖尿病（ＩＤＤＭ）、湿疹、子宮内膜症、消化器疾患、グッドパスチャー症候群、グレーブス病、ギラン−バレー症候群（ＧＢＳ）、橋本甲状腺炎、汗腺膿瘍、突発性血小板減少性紫斑病、炎症性大腸炎、炎症性皮膚疾患、間質性膀胱炎、尋常性狼瘡、限局性強皮症、多発性硬化症（ＭＳ）、重症筋無力症、ミオパシー、ナルコレプシー、ニューロミオトニア、尋常性天痘瘡、悪性貧血、原発性胆汁性肝硬変、乾癬、再発性播種性脳脊髄炎、リウマチ熱、統合失調症、強皮症、シェーグレン症候群、皮膚疾患、腱滑膜炎、ブドウ膜炎、血管炎、又は白斑である。別の態様では、炎症関連疾患は、にきび、酸の逆流／胸焼け、アレルギー、アレルギー性鼻炎、アルツハイマー型認知症、虫垂炎、動脈炎、関節炎、ぜんそく、アテローム性動脈硬化、自己免疫疾患、亀頭炎、眼瞼炎、細気管支炎、気管支炎、滑液包炎、癌、心臓炎、セリアック病、蜂巣炎、子宮頸管炎、胆管炎、胆嚢炎、絨毛羊膜炎、慢性閉塞性肺疾患（ＣＯＰＤ）、肝硬変、大腸炎、結膜炎、膀胱炎、一般的な風邪、涙腺炎、認知症、皮膚炎、皮膚筋炎、湿疹、肺気腫、脳炎、心内膜炎、子宮内膜炎、腸炎、全腸炎、上顆炎、精巣上体炎、筋膜炎、結合組織炎、胃炎、胃腸炎、歯肉炎、糸球体腎炎、舌炎、心疾患、肝炎、汗腺膿瘍、高血圧、回腸炎、インスリン抵抗性、間質性膀胱炎、虹彩炎、虚血性心疾患、角膜炎、角結膜炎、喉頭炎、尋常性狼瘡、乳腺炎、乳様突起炎、髄膜炎、代謝症候群（エックス症候群）、偏頭痛、多発性硬化症、骨髄炎、心筋炎、ミオパシー、筋炎、腎炎、神経障害、肥満、臍炎、卵巣炎、精巣炎、骨軟骨炎、骨減少症、骨粗鬆症、骨炎、耳炎、膵炎、パーキンソン病、耳下腺炎、骨盤炎症性疾患、心膜炎、腹膜炎、喉頭炎、静脈炎、胸膜炎、肺炎、直腸炎、前立腺炎、乾癬、歯髄炎、腎盂腎炎、門脈炎、リウマチ熱、鼻炎、卵管炎、唾液腺炎、副鼻腔炎、痙攣性結腸、口内炎、滑膜炎、腱炎、腱症、腱滑膜炎、血栓性静脈炎、へんとう炎、三角炎、腫瘍、尿道炎、ブドウ膜炎、膣炎、血管炎、外陰炎である。別の態様では、神経変性疾患は、アレキサンダー病、アルパーズ病、アルツハイマー型認知症、アミロイド症、筋萎縮性側索硬化症、不安神経症、毛細血管拡張性運動失調、注意欠陥障害、カナバン病、中枢神経系損傷、シャルコーマリートゥース病、コケーン症候群、大脳皮質基底核変性症、クロイツフェルトヤコブ病、鬱病、脳炎（例えば、細菌性、寄生性、菌性又はウイルス性）、フリードライヒ運動失調症、前頭側頭型認知症、遺伝性痙性対麻痺、ギランバレー症候群（及びその異型である急性運動軸索型ニューロパチー、急性炎症性脱髄性多発ニューロパチー及びフィッシャー症候群）、ＨＩＶ／ＡＩＤＳによる認知症、ハンチントン病、神経系への虚血性障害、ケネディ病、クラッベ病、レビー小体型認知症、マシャドジョセフ病、髄膜炎（例えば、細菌性、寄生性、菌性又はウイルス性）、多発性硬化症、多系統萎縮症、神経系の外傷（例えば、衝撃による脳障害、脊髄損傷、神経系の外傷性損傷）、神経障害（例えば、化学療法により誘導された神経障害、糖尿病に関連する神経障害及び末梢の神経障害）、パーキンソン病、ペリツェウスメルツバッハー病、ピック病、原発性側索硬化症、プリオン病、進行性核上性麻痺、レフスム病、サンドホフ病、統合失調症、シルダー病、脊髄小脳萎縮症、スティール−リチャードソン−オルゼウスキー病、脳卒中、脊髄癆、又は血管性認知症である。
【００２６】
使用の別の態様では、免疫抑制性Ｔａｔ誘導体ポリペプチドは、さらに自己免疫疾患、神経変性疾患又は炎症関連疾患に関連する少なくとも１つの症状を低減するものであり、当該症状は、炎症、疲労、めまい、不快感、熱及び体温の上昇、手及び足の冷えに対する過敏症、筋肉及び関節の衰弱及びこり、体重変化、消化器又は胃腸の問題、低又は高血圧、易刺激性、不安神経症又は鬱病、不妊症又は性的欲求の減少（性欲低下）、血糖変化、及び自己免疫の種類によっては臓器又は組織サイズの増大、又は臓器又は組織の崩壊である。
【００２７】
使用の別の態様では、免疫抑制性Ｔａｔ誘導体ポリペプチドは、複数回投与される。別の態様では、免疫抑制性Ｔａｔ誘導体ポリペプチドは、１日１回、週１回、２週間に１回、１ヶ月に１回又は２ヶ月に１回投与される。さらに別の態様では、投与ステップは、反復投与サイクルを含み、各サイクルは、休薬期間が後に続く定められた期間中に、免疫抑制性Ｔａｔ誘導体ポリペプチドを複数回投与することを含み、前記サイクルは複数回繰り返される。
【図面の簡単な説明】
【００２８】
【図１】単球のＴａｔ活性化で得られた蛍光活性化細胞選別（ＦＡＣＳ）解析を示す。ヒト末梢血単球は、ＧＭ−ＣＳＦ及びＩＬ−４における５日間の培養を通じて、樹状細胞（ＤＣ）への分化に関与した。関与されたＤＣを、培地単独（コントロール）、リポ多糖類（ＬＰＳ）又はＴａｔのいずれかで一晩培養した後、抗ＣＤ８６抗体で染色し、ＦＡＣＳｃａｎでＣＤ８６、ＤＣ活性特異的マーカー、誘導（左パネル）又は全身の活性（右パネル、ボックスＲ２に拡大し、Ｔａｔ刺激細胞として表示）を解析した。
【図２】Ｔａｔ＊抗原（Ａｇ）複合体により細胞毒性Ｔリンパ球（ＣＴＬ）の抗原特異的活性が亢進されたことを示す。ＣＴＬ活性は、ＥＬＩＳＰＯＴアッセイを用いて、γインターフェロン分泌スポット形成コロニー（ＳＦＣ）／１０６の個数として定量した。
【図３】刺激なし（０）、腫瘍壊死因子アルファ（ＴＩＦ−α）ＬＰＳ、Ｃ−Ｔａｔの濃度減少（ＨＩＶ由来の従来の天然免疫抑制性Ｔａｔ）、又は酸化Ｃ−Ｔａｔ（酸化−Ｃ−Ｔａｔ）のいずれかにて６日間培養し、抗Ｆａｓリガンド（ＦａｓＬ）モノクローナル抗体（Ｍａｂ）、続いて蛍光標識されたヤギ抗マウスポリクローナル抗体にて染色した単球の蛍光の中央値を示す。
【図４】免疫抑制性Ｔａｔ（ＰＴ）又は非免疫抑制性酸化Ｔａｔ＊（Ａｇ）の存在下における２週間後（Ａ）又は６週間後（Ｂ）の免疫原生抗原に対する抗体力価を示す。
【図５】ｉｎ  ｖｉｖｏでのチオグリコレート刺激（刺激＋アジュバント）又はｉｎ  ｖｉｖｏ刺激なし（休薬）後に単離されたマウス腹膜マクロファージのＦＡＣＳ解析を示す。マウス腹膜マクロファージは、５日間、追加の刺激なし（Ｃ）、ＬＰＳ又はＴａｔのいずれかにて培養した。活性は、大きくなった細胞の割合で定量した（Ｍ１フラクション）。
【図６】免疫抑制性Ｔａｔにて免疫を付与後２週間にわたるＴａｔ−Ａｇ複合体による抗原刺激Ｔリンパ球の安定的な抑制を示す。
【図７】Ｔａｔ抑制の抗原特異性を示す。マウスに、第０日に免疫をつけ、第７日にＴａｔ（Ａｇ＋Ｔａｔ）又はコントロールとしてＡｇ単独のいずれかを含むアジュバントエマルジョンにて免疫を高めた。第１４日には、流入リンパ節細胞を採取し、特異的又は非特異的抗原のいずれかで刺激し、４日間の培養後、３Ｈチミジンの取り込み（ＣＰＭ）により増殖を測定した。
【図８】コントロール培地（コントロール）、又はＴａｔ又はＬＰＳを含む培地にて４日間培養したヒト抹消血単球のＦＡＣＳ解析を示す。採取した細胞は、蛍光標識された抗ＦａｓＬ  Ｍａｂ（αＦａｓＬ−ＦＩＴＣ）と抗ＣＤ１４ローダミン標識されたＭａｂにて二重に染色した。細胞について、活性（前方散乱）、ＣＤ１４発現（％マクロファージ、Ｒ２）及びＦａｓＬの誘導（ＭＦＩ）をＦＡＣＳｃａｎで解析した。Ｔ細胞群は、Ｒ１標識した。
【図９Ａ】Ｔａｔ活性化マクロファージの制御性及び免疫抑制性特性を示す。（Ａ）１個体（ＰＢＭＣｓ  ＃３）由来のヒト抹消血単球細胞（ＰＢＭＣ）を５日間、破傷風抗原（Ａｇ）、Ｔａｔをさらに追加した抗原（Ａｇ＋Ｔａｔ）又はＴａｔ及び組み換えｓＦａｓタンパク質とともにＡｇ（Ａｇ＋Ｔａｔ＋ｓＦａｓ）の入った培地にて培養した。結果は、刺激指標（刺激した細胞の平均ｃｐｍ／培地コントロールの平均ｃｐｍ）でグラフ化した。
【図９Ｂ】Ｔａｔ活性化マクロファージの制御性及び免疫抑制性特性を示す。（Ｂ）破傷風又はカンジダ抗原単独（Ａｇ）のいずれかで６日間培養したＰＢＭＣの増殖を、Ｔａｔ（Ａｇ＋Ｔａｔ）又はＴａｔ及び拮抗性の抗Ｆａｓ抗体、ＺＢ４を追加（Ａｇ＋Ｔａｔ＋αＦａｓ）した培養物と比較した。
【図１０】Ｔａｔ誘導体によるヒト単球の刺激を示す。
【図１１】Ｔａｔ誘導体によるヒト単球の刺激の投与量−反応曲線を示す。
【図１２】ジャーカット細胞をヘキスト社のＮｕｃＢｌｕｅ及びＡｌｅｘａ４８８で標識したＴａｔ誘導体の配列番号９（Ａ）、Ａｌｅｘａ４８８で標識したＴａｔ誘導体の配列番号１１（Ｂ）、又はコントロール（Ｔａｔ誘導でない、（Ｃ））を示す。左列はヘキスト社のＮｕｃＢｌｕｅで染色した細胞核、中央列はＡｌｅｘａ４８８染色を表し、右列は左及び中央の図の拡大図を示す。
【図１３】Ｕ９３７細胞をヘキスト社のＮｕｃＢｌｕｅ及びＡｌｅｘａ４８８で標識したＴａｔ誘導体の配列番号９（図１３Ａ）、Ａｌｅｘａ４８８で標識したＴａｔ誘導体の配列番号１１（図１３Ｂ）、又はコントロール（Ｔａｔ誘導でない、図１３Ｃ）を示す。左列はヘキスト社のＮｕｃＢｌｕｅで染色した細胞核、中央列はＡｌｅｘａ４８８染色を表し、右列は左及び中央の図の拡大図を示す。
【図１４Ａ】刺激なしについて、ＦａｓＬ発現により測定したヒト抹消血単球細胞（ＰＢＭＣ）の活性を示す。
【図１４Ｂ】ＬＰＳについて、ＦａｓＬ発現により測定したヒト抹消血単球細胞（ＰＢＭＣ）の活性を示す。
【図１４Ｃ】Ｔａｔ誘導体の配列番号９について、ＦａｓＬ発現により測定したヒト抹消血単球細胞（ＰＢＭＣ）の活性を示す。
【図１５】刺激なし、ＬＰＳ、又はＴａｔ誘導体の配列番号９について、細胞表面ＣＤ１４発現により測定したヒトＣＤ１４＋ＰＢＭＣの増殖を示す。
【図１６】ＬＰＳ、Ｔａｔ誘導体の配列番号９、又は刺激なしにて処理し３日間培養したＰＢＭＣにおけるＣＤ１４＋細胞の割合を示す図である。
【図１７Ａ】５日間培養した後、刺激なしにて処理した後のＦａｓＬ及びＣＤ１４の両方におけるＰＢＭＣ発現を示す。
【図１７Ｂ】５日間培養した後、ＴＮＦ−アルファ（図１７Ｂ）にて処理した後のＦａｓＬ及びＣＤ１４の両方におけるＰＢＭＣ発現を示す。
【図１７Ｃ】５日間培養した後、ＬＰＳ（図１７Ｃ）にて処理した後のＦａｓＬ及びＣＤ１４の両方におけるＰＢＭＣ発現を示す。
【図１７Ｄ】５日間培養した後、Ｔａｔ誘導体の配列番号９にて処理した後のＦａｓＬ及びＣＤ１４の両方におけるＰＢＭＣ発現を示す。
【図１７Ｅ】図２７Ａ〜Ｄのデータをグラフ形式で示す。
【発明を実施するための形態】
【００２９】
本明細書は、例えば、神経変性疾患、又は炎症関連疾患を含む自己免疫疾患といった異常免疫反応に関連する疾患に罹患する個体を治療する化合物、組成物及び方法に関する。これは、治療上有効な量の免疫抑制性Ｔａｔ誘導体ポリペプチド又はこのようなポリペプチドを含む組成物をこの疾患を患う個体に対して投与することにより達成される。ここで開示されるように、開示された免疫抑制性Ｔａｔ誘導体ポリペプチドは、抗炎症活性を持つ。本開示の範囲に含まれる免疫抑制性誘導ペプチドは、免疫抑制性である。
【００３０】
本開示で使用される語句「異常免疫反応」とは、促進された、望ましくない、過度の、又は不適切な免疫反応を示し、例えば自己抗原のように、抗原に対する免疫反応が促進されることで、炎症及び／又は自己免疫疾患又は神経変性疾患が見られる。本開示で使用される異常免疫反応は、免疫カスケードにより特徴づけられ、身体の組織の破壊につながる。典型的には、異常免疫反応は、感染に対する通常の反応では見られないが、感染によって引き起こされ得る。
【００３１】
ＨＩＶ  Ｔａｔタンパク質は、長さ８６〜１１０のアミノ酸の可変ＲＮＡ結合ペプチドであり、ＨＩＶゲノムの２つの分離したエクソンにコードされる。分子解析に基づくと、Ｔａｔタンパク質（配列番号２）は、別個にコードされ、ペプチドの活性に関連する。ここでは、ポリペプチドの免疫療法の可能性を向上させる態様にて、少なくとも第一の又はアミノ末端部分の標準的なＨＩＶ−１  Ｔａｔ構造から誘導されたポリペプチド組成物を開示する。Ｔａｔのアミノ末端部分は、典型的には、両側にプロリン残基を有する核転写因子（ＴＦ）由来の短いペプチド領域を含む。この領域は、少なくとも部分的には、Ｔａｔポリペプチドが、免疫システムの細胞、特に、例えば樹状細胞（ＤＣ）及びマクロファージ（抗原提示細胞又はＡＰＣ）といった先天性の免疫細胞に対して、どの程度促進性又はどの程度抑制性であるか決定する。その結果、疾患の治療においては、ＴＦ領域が修飾されることで、ポリペプチドがより活性化され得ると予測される。
【００３２】
これまでの研究では、ＨＩＶ  Ｔａｔは、ヒトＨＩＶ株の大部分において免疫抑制的であると定義されてきた。しかし、Ｔ４細胞が有意に減少しておらず、後天的免疫不全症候群（ＡＩＤＳ）に進行していない、ウイルス負荷の高いＨＩＶ感染個体の集団である感染長期末発症者（ＬＴＮＰ）では、ＨＩＶ  Ｔａｔタンパク質は免疫促進的である。このＬＴＮＰにて見られるＴａｔタンパク質は、ウイルスＲＮＡをトランス活性化することができるが、ＬＴＮＰ  Ｔａｔ（本開示において、免疫刺激性Ｔａｔに対する「ＩＳ−Ｔａｔ」として後述される）は、Ｔ４細胞又はマクロファージにおけるアポトーシスを誘導せず、免疫抑制的でない。さらに、ｅｘ  ｖｉｖｏで、ＬＴＮＰ（このような細胞株はデザインされた「Ｔａｔ  ＴｃＬ」である）から単離されたＨＩＶにｅｘ  ｖｉｖｏで感染させたＴ４細胞は、ＩＳ−Ｔａｔタンパク質を過度に発現し、しばしば他のウイルスタンパク質を排除し、プロアポトーシスよりもむしろ強く増殖が促進される。これらのＴａｔ  ＴｃＬからクローニングされたＴａｔ遺伝子は、２つのＴａｔ領域、アミノ末端及び第二エクソンの第一部分内に配列変異を示す。
【００３３】
分子解析に基づくと、ＨＩＶ  Ｔａｔタンパク質（配列番号２）は、３つの異なる対象領域を含む。第一対象領域は、Ｔａｔのアミノ末端（３〜１９アミノ酸）の形質導入ドメインである。第二対象領域は、７つの保存されたシステインを含むシステインリッチリガンド結合ドメイン（２２〜３７アミノ酸）である。第三対象領域は４７〜５７アミノ酸を含む膜輸送配列（ＭＴＳ）である。
【００３４】
形質導入ドメイン内のＨＩＶ−１及びＨＩＶ−２Ｔａｔのアミノ末端近傍のプロリンリッチストレッチ（３〜１９アミノ酸）は、マウス無毛（ｈｒ）遺伝子（配列番号７２）のＳＨ３結合ドメインと有意な相同性を有するＳＨ３結合ドメインである。ＳＨ３結合ドメインは、自己免疫といった望ましくない細胞過程の診断、予防及び治療への可能性を持つ薬剤開発のための重要な標的を提示する。
【００３５】
意外にも、ｈｒ遺伝子変異を発現したマウスは、貧弱なＣＴＬ機能、制御性細胞媒介免疫（ＴＨ１）から制御性抗体媒介免疫（ＴＨ２）へのヘルパーＴリンパ球における移行、及び化学物質及び紫外線で誘発される皮膚がんへの感受性の上昇によって特徴づけられるＡＩＤＳ様症候群を発症する。さらに、Ｔａｔの変異は、免疫不全を発症せず伝染病に感染しないレトロウイルスに感染したサルにみられる。しかし、これら変異Ｔａｔは、ＳＨ３結合ドメインを持たず、代わりに異なる配列であって当該配列の端部のいずれかがプロリンによってセットオフ（ｓｅｔ  ｏｆｆ）されている配列を置換して形質導入ドメインにする。そのため、ＳＨ３結合ドメインは、Ｔａｔの免疫抑制性活性の中心をなす。遺伝子データは、ＳＨ３結合ドメインが単球の抗原提示細胞制御性マクロファージ（ＡＲｅｇｓ）への分化を制御することを示している。Ｔａｔタンパク質において、このＳＨ３ドメインが含まれていないか、又はこのドメインが突然変異していると、単球はＣＴＬ反応を刺激するＤＣに直接分化する。
【００３６】
ＨＩＶ−１遺伝子を含むが、これに限定されない遺伝子の発現をトランス活性化するＭＴＳ領域は、レセプター結合後の、Ｔａｔのエンドソーム膜を通じた細胞質への自由な輸送を許可する。ＭＴＳは、Ｔａｔの細胞への侵入を促進すると誤って推定されてきたが、それはｉｎ  ｖｉｖｏでは達成不可能な高濃度でのみ実現可能である。
【００３７】
現在の免疫抑制的治療とは違い、開示に係るＴａｔベースの組成物、免疫抑制性Ｔａｔ誘導体ポリペプチドは、患者の免疫システムを損傷することなく抗原特異的免疫反応を抑制する可能性を持つ。それらは、ウイルスの非存在下で従来のＨＩＶ  Ｔａｔの免疫抑制性活性を保存するため、免疫抑制性Ｔａｔ誘導体は、身体の自然防御の重要な要素である免疫反応の特異性を調整する。これは、例えば自己免疫、神経変性又は炎症関連疾患のように、慢性の免疫抑制的治療が必要である場合に特に重要である。
【００３８】
Ｔａｔの免疫抑制効果はマクロファージにより媒介される。天然ＨＩＶ−１感染又はＴａｔ取り込みのいずれかにより、Ｔａｔによって刺激された場合、マクロファージはＦａｓリガンド（ＦａｓＬ）を誘導し、次に抗原と反応したＦａｓ発現ヘルパーＴ細胞のプログラム細胞死（アポトーシス）を誘導する（図３）。Ｔａｔは、マクロファージがｉｎ  ｖｉｖｏで初めて活性化されたものである限り、事前の活性化なく比較的高濃度のＴａｔで刺激された場合と比較して、培養されたマウスマクロファージの生存率を向上させる。比較すると、ＬＰＳは、ｉｎ  ｖｉｖｏ刺激とは無関係に、ヒトマクロファージに有効な濃度と等しい濃度にて、マウスマクロファージの生存率を向上させる。本開示に係る特定のＴａｔがベースの組成物は、マウスリンパ球の増殖の安定的な抑制を生じさせ、様々な抗原に対する抗原特異的免疫反応を抑制する機能も同様に果たし得る。
【００３９】
これらの反応の原因となるマクロファージは、抗原提示細胞制御マクロファージ（ＡＲｅｇｓ）として同定されてきた。ＡＲｅｇｓは、「代替的に活性化された」マクロファージとしても公知である。ＡＲｅｇｓは、ＦａｓＬを発現し、サイトカインＩＬ−１０及びＩＬ−６を分泌する安定したマクロファージである。ＡＲｅｇは、安定しており、これら２つのサイトカインにオートクリン及びパラクリン様式で反応し、同様に、ＩＬ−４にパラクリン様式で反応する。これらサイトカインは、蓄積し免疫反応をＴＨ１（ヘルパーＴリンパ球に基づく）からＴＨ２（抑制性Ｔリンパ球に基づく）に変更させる。これらサイトカインは、確立されるに従って免疫反応を圧倒し抑制する。これは、免疫反応が通常、抗原特異的様式で自己限定的であることの説明になる。
【００４０】
ＣＤ４＋Ｔ細胞の直接のアポトーシスを開始するのに必要な濃度（約５００ｎＭ）と比較して、１，０００倍低い濃度のＴａｔ（５００ｐＭ）が、この効果をマクロファージにて誘発したことは、予期しない観察結果である。このため、全身投与される免疫調整剤としてＴａｔが到達可能な濃度では、マクロファージの効果がＴ細胞の効果を上回り優先的に発生するであろう。
【００４１】
Ｔａｔ媒介抗原特異的抑制は、ＣＤ４＋  ＦａｓＬ＋マクロファージのトランス（細胞内）活性化を通じて媒介される。Ｔａｔ活性マクロファージは免疫抑制性ＡＲｅｇｓである。低濃度のＴａｔ（５０ｎＭ）では、Ｔａｔ誘導免疫抑制性は、溶解性Ｆａｓを追加したことにより完全に反転されただけでなく、これらの条件下では、Ｔａｔは実際にわずかに刺激性となった（抗原のみでの処理と比較して）。ＦａｓＬに対する抗体は破傷風反応のＴａｔ免疫抑制性を反転させ、カンジダ反応をＴａｔ処理単独の場合よりも亢進させた。抑制は、さらに抗ＩＬ−１０及び抗ＩＬ−６抗体（いずれもこれらの培養条件の下のマクロファージ由来のサイトカイン）を培地に追加することで完全に反転され得る（コントロールに対して＞９５％）。特にＴａｔが高濃度である場合には、他のＴａｔ誘導因子は、Ｔ細胞増殖性反応の抑制に関与し得るが、Ｔａｔ誘導免疫抑制の一部は、ＦａｓＬの誘導によるものである。
【００４２】
以下に、Ｔａｔ遺伝子のエクソン１及び２によってコードされるＨＩＶ−１  Ｔａｔの完全なアミノ酸配列を以下に示す。
【００４３】
【化１】
2019163259.tif 000002
【００４４】
Ｔａｔは、アミノ末端近傍にプロリン（Ｐ）リッチなセグメントを有する（３〜１９アミノ酸、上述した下線部）。ＨＩＶ−１  Ｔａｔが高度に保存されたこの領域は、本開示にて核転写因子（ＴＦ）ドメインとしても示される標準的なＳＨ３結合ドメインである。マウス無毛（ｈｒ）遺伝子も同様に、ＳＨ３結合モチーフ（ＴＦ、ｈｒの１７６〜１９６アミノ酸、配列番号７２）を持つ。ヒトＴａｔ  ＳＨ３結合ドメイン（配列番号４）とマウスｈｒ遺伝子のＳＨ３結合ドメインには、相同性が存在する。
【００４５】
【化２】
2019163259.tif 000003
【００４６】
免疫不全の原因とならず、ＳＨ３結合ドメインを持たない代わりに両側に以下のプロリンを有する配列を有するＴａｔの変異体は、サルのレトロウイルスに見られる。
【００４７】
【化３】
2019163259.tif 000004
【００４８】
上記サルの配列（配列番号３）に相当するヒトの配列。
【００４９】
【化４】
2019163259.tif 000005
【００５０】
他の対象領域は、リガンドの結合が予想されるシステインリッチドメイン（２２〜３７アミノ酸）であって、該ドメインは７つのシステインを含む。
【００５１】
【化５】
2019163259.tif 000006
【００５２】
ＳＨ３結合ドメインによって定義されるシグナル形質導入モチーフの調整を通じて生成されるＴａｔの誘導体は、主に樹状細胞又は免疫抑制性ＡＲｅｇへの分化を促進する。また、ＡＲｅｇは、胃がん、膵臓がん、及び湿潤性乳管がん、同様に臓器移植における耐性の成分の浸潤に対して重要な貢献をする。ＳＨ３ドメインの両側の第３及び１８の位置にある２つの外側のプロリンは、ＳＨ３結合の適切な構造を促進するために維持されている。さらに、ｈｒ配列は、抑制を促進すると予測されるが、非免疫抑制性ヒト変異Ｔａｔ由来の形質導入ドメイン、又はｈｒ突然変異由来のドメインは、Ｔａｔの３〜１９アミノ酸を置換し得る。さらに、刺激性のＴａｔのサルの形態（配列番号３）、又はそれに相当するヒトの配列（配列番号４）は、このドメインにて置換され得る。酸化Ｔａｔ（米国特許第２００６／０１６０１８３号明細書に開示される化学的に酸化されたＴａｔ、参照によりその内容の全てはＴａｔ誘導体に関連して本開示に含まれる）といったさらなる化学的修飾は、樹状／ＣＴＬ反応の刺激に使用し得る。
【００５３】
本開示に係る一形態では、免疫抑制性Ｔａｔ誘導体は、３〜１９アミノ酸が改変されたＴａｔペプチドを含む。これら改変には、各アミノ酸と代替のアミノ酸との置換又は３〜１９アミノ酸全てと他の配列との置換が含まれる。開示に係る免疫抑制性Ｔａｔ誘導体を構成するのに適切に使用されるＴａｔペプチドには、ＨＩＶ−１変異体、ＨＩＶ−２変異体、及びＳＩＶ変異体由来のＴａｔが含まれる。ＳＩＶ変異体は、表４に挙げられたＳＩＶに感染した霊長類の任意の種由来のものでよい。同様に有用な非霊長類種由来の免疫抑制性レンチウイルスＴａｔ配列は、ネコ科（ネコ免疫抑不全ウイルス由来のＴａｔ、ＦＩＶ）、ウシ科（ウシ免疫不全ウイルス由来のＴａｔ、ＢＩＶ）又はウマ科（ウマ伝染性貧血ウイルス由来のＴａｔ、ＥＩＡＶ）を含むが、これらに限定されない。本例示の目的のため、語句「変異体」は、示されるウイルスの異なる株（天然又は変異）の配列に対応するペプチドを示す。
【００５４】
ＳＨ結合タンパク質は、核転写因子（ＴＦ）の機能に必要な一連の内部プロリンを含む。特定の形態では、内部プロリンは、それぞれアラニンにより置換され、ＳＨ３結合部位を不活性とする。
【００５５】
本開示の範囲に入る免疫抑制性Ｔａｔ誘導体の例を表１に例示する。一般に、炎症、自己免疫疾患及び神経変性の治療のための免疫抑制性Ｔａｔ誘導体ポリペプチドは、３つの領域を含む。第一の領域は誘導化ＴＦ、第二の領域はシステインリッチ領域、第三の領域はＣ−末端Ｔａｔ領域である。
【００５６】
ＴＦ領域、システインリッチ領域及びＣ−末端領域は、この順序でＴａｔポリペプチド誘導体に配置されている。ＴＦ領域は、これらに限定されないが、ＨＩＶ−１  Ｔａｔ、ＨＩＶ−２  Ｔａｔ、ＳＩＶ  Ｔａｔ、無毛遺伝子又は人工免疫抑制性配列を含む源に由来し得る。システインリッチ領域は、レンチウイルスＴａｔ又はシステインリッチデフェンシン分子由来であり得る。Ｃ−末端領域は、レンチウイルスＴａｔ由来であり得る。さらに、Ｔａｔ誘導体Ｃ−末端領域は、ＨＩＶ−１  Ｔａｔ、ＨＩＶ−２  Ｔａｔ、又はＳＩＶ  Ｔａｔ（膜輸送配列とも称される）由来のアルギニンリッチ領域を含み得る。
【００５７】
本開示で使用される語句「デフェンシン分子」は、脊椎動物及び非脊椎動物の両方に見られる小さいシステインリッチなカチオンタンパク質を示す。デフェンシンは、６から８個の保存システイン残基を含む１８〜４５アミノ酸を含む。デフェンシンは、α−デフェンシン、β−デフェンシン及びθ−デフェンシンの３つの群に分類される。
【００５８】
別の態様では、ＴＦ領域は、Ｎ末端に（ＰＶＤＰＲＬＥＰＷＫＨＰＧＳＱＰ）ｎ（ｎ＝２〜１０）（配列番号１２）を含む反復配列をさらに含むがこれに限定されない。さらに、反復配列は、スペーサーとして機能する１以上のアミノ酸により、免疫抑制性Ｔａｔ誘導体ポリペプチドのＮ端末から分離されていてもよい。
【００５９】
別の態様では、ＴＦ領域のアミノ酸配列は、配列番号３６、３９、４４、４８、５０、５４、５９、６０又は６１のうちの１つを含む。別の態様では、システインリッチ領域のアミノ酸配列は、配列番号３７、４０、４１、４３，４５、４７，４９、５１、５３、５５、５７、５８、６２、６３、６４又は７０のうちの１つを含む。別の態様では、Ｃ−末端領域のアミノ酸配列は、配列番号３８、４２、４６、４７、４９、５２、５３、６８又は７１のうちの１つを含む。さらに別の態様では、システインリッチ領域とＣ−末端領域はいずれも同じ源由来であり、システインリッチ／Ｃ−末端領域のアミノ酸配列は配列番号４７、４９又は５３である。
【００６０】
別の態様では、ＴＦドメインにおける、プロリンを含むがこれに限定されない１以上のアミノ酸は、保存アミノ酸置換で欠失又は置換される。
【００６１】
付加的な態様では、免疫抑制性Ｔａｔ誘導体の保存的に修飾された変異体の使用が提供される。ここで開示される変異体は、親又は源の分子の生物学的活性を維持する。
【００６２】
【表１−１】
2019163259.tif 000007
【表１−２】
2019163259.tif 000008
【表１−３】
2019163259.tif 000009
【００６３】
本開示で使用される語句「保存的に修飾された変異体」とは、もとのペプチドと同じ又はよく似た生物学的活性を有する変異ペプチドを示す。例えば、タンパク質又はペプチドの主要な配列は改変されてもその機能は改変されないように、保存的なアミノ酸を変化させてもよい。保存的な置換は、少なくとも１個のアミノ酸が他のアミノ酸又は典型的なリファレンスペプチド由来のもとのアミノ酸に似た少なくとも１つの特性を持つアミノ酸類似体によって置換されている。特性の例としては、類似した大きさ、トポグラフィ−、電荷、疎水性、親水性、親油性、共有結合能、水素結合能、物理化学特性等又はそれらの組み合わせが挙げられるが、これらに限定されない。保存的置換は、例えば、置換されたアミノ酸の物理的特性（表２）、又はもとのアミノ酸がどれだけ置換への耐性を備えるか（表３）といった様々な因子によって評価され得る。本開示に係るペプチドにおいて、いずれのアミノ酸を選択すれば他のアミノ酸に置換し得るかということは、本技術分野の当業者には公知である。保存的変異は、典型的な参照ペプチドと実質的に同じ形式で機能し得、本明細書のいずれの態様においても典型的な参照ペプチドと置き換えられ得る。
【００６４】
【表２】
2019163259.tif 000010
【００６５】
【表３】
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【００６６】
【表４】
2019163259.tif 000012
【００６７】
一態様における免疫抑制性Ｔａｔ誘導体ポリペプチドは、表１に開示されたペプチドである。免疫抑制性Ｔａｔ誘導体ポリペプチドは、Ｔａｔ誘導体ポリペプチドに対する保存的変異体も構成し得る。一態様では、免疫抑制性Ｔａｔ誘導体ポリペプチドの保存的変異体は、本開示に係る免疫抑制性Ｔａｔ誘導体ポリペプチドの保存的変異体である。本実施の態様では、免疫抑制性Ｔａｔ誘導体ポリペプチドの保存的変異体は、免疫抑制性Ｔａｔ誘導体ポリペプチドに対して、例えば、少なくとも５０％、５５％、６０％、６５％、７０％、７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９７％、又は少なくとも９８％、又は少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を持つアミノ酸配列であり得る。本実施の別の態様では、免疫抑制性Ｔａｔ誘導体ポリペプチドの保存的変異体は、免疫抑制性Ｔａｔ誘導体ポリペプチドに対して、例えば、最大５０％、５５％、６０％、６５％、７０％、７５％、最大８０％、最大８５％、最大９０％、最大９５％、最大９７％、又は最大９８％、又は最大９９％のアミノ酸配列同一性を持つアミノ酸配列であり得る。
【００６８】
本実施の別の態様では、免疫抑制性Ｔａｔ誘導体ポリペプチドの保存的変異体は、免疫抑制性Ｔａｔ誘導体ポリペプチドのアミノ酸配列に対して、例えば、１個、２個、３個、４個、５個、６個、７個、８個、９個、１０個、１１個、１２個、１３個、１４個、１５個、２０個、２５個、３０個又はそれ以上の保存的置換を有する免疫抑制性Ｔａｔ誘導体ポリペプチドであり得る。本実施の別の一態様では、免疫抑制性Ｔａｔ誘導体ポリペプチドの保存的変異体は、免疫抑制性Ｔａｔ誘導体ポリペプチドのアミノ酸配列に対して、例えば、少なくとも１個、少なくとも２個、少なくとも３個、少なくとも４個、少なくとも５個、少なくとも６個、少なくとも７個、少なくとも８個、少なくとも９個、少なくとも１０個、少なくとも１１個、少なくとも１２個、少なくとも１３個、少なくとも１４個、少なくとも１５個、少なくとも２０個又は少なくとも２５個の保存的置換を有するアミノ酸配列であり得る。さらに別の本実施の態様では、免疫抑制性Ｔａｔ誘導体ポリペプチドの保存的変異体は、免疫抑制性Ｔａｔ誘導体ポリペプチドのアミノ酸配列に対して、例えば、最大１個、最大２個、最大３個、最大４個、最大５個、最大６個、最大７個、最大８個、最大９個、最大１０個、最大１１個、最大１２個、最大１３個、最大１４個、最大１５個、最大２０個、又は最大２５個、又は最大３０個の保存的置換を有するアミノ酸配列であり得る。
【００６９】
修飾（通常、主要な配列は改変しない）は、例えば、アセチル化、又はカルボキシル化といったｉｎ  ｖｉｖｏ又はｉｎ  ｖｉｔｒｏにおける、ポリペプチドの化学的誘導体化を含む。同様に、例えば、合成及びプロセッシングの間又はさらなるプロセッシングのステップにおけるポリペプチドのグリコシル化パターンの修飾によるもの；例えばポリペプチドをグリコシル化に影響する酵素に曝露することによる、例えば哺乳類のグリコシル化又は脱グリコシル化酵素による、グリコシル化の修飾も含む。また、例えば、ホスホチロシン、ホスホセリン、又はホスホトレオニンといったリン酸化アミノ残基を有する配列も含まれる。
【００７０】
また同様に、タンパク質分解に対する耐性の改善、又は溶解特性の最適化を目的として通常の分子生物学上の技術を使用して修飾された免疫抑制性Ｔａｔ誘導体ポリペプチドも含まれる。このようなポリペプチドの類似体には、例えばＤ−アミノ酸といった自然発生のＬ−アミノ酸又は非自然発生である合成アミノ酸以外の残基を含有するものが含まれる。本開示に係るペプチドは、ここにリスト化された特定の典型的な任意のプロセスによる製品に限定されない。
【００７１】
本開示では、実質的に完全長のポリペプチドに加えて、免疫抑制性Ｔａｔ誘導体ポリペプチドの生物学的活性フラグメントも提供する。
【００７２】
本開示で使用されるように、実質的に同じであるアミノ酸配列は、典型的には、９５％超のアミノ酸同一性を共有する。しかし、スプライス変異体として生じた上述のレベル未満の同一性を含むタンパク質（及びこのようなタンパク質をコードするＤＮＡ又はｍＲＮＡ）、又は保存的アミノ酸置換（又は縮重コドンの置換）によって修飾されたものは、本開示の範囲に含まれると予期されることが認識される。本技術分野における当業者により容易に理解されるように、例えば、Ｈｅｎｉｋｏｆｆ  ａｎｄ  Ｈｅｎｉｋｏｆｆ  ｉｎ  Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ  Ｓｃｉ．ＵＳＡ  ８９：１０９１５（１９９２））に記載されるＢｌｏｓｕｍ６２スコアリングマトリックスといった、対象物の配列を調節するための様々な方法が考案されてきた。この目的のため、便利に採用されるアルゴリズムは、広く入手可能である（例えば、Ｎｅｅｄｌｅｍａｎ  ａｎｄ  Ｗｕｎｓｃｈ，Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏ．４８：４４３（１９７０）を参照）。
【００７３】
このため、本明細書で開示されるのは、表１に開示した免疫抑制性Ｔａｔ誘導体に対して、８５％、９０％、９５％、９８％、９９％、又は１００％同一であるアミノ酸配列である。
【００７４】
免疫抑制性Ｔａｔ誘導体は、改変されたＴａｔペプチドを含む。本実施の一態様では、免疫抑制性Ｔａｔ誘導体は、３〜１９アミノ酸が改変されたＴａｔペプチドを含む。本実施の別の一態様では、免疫抑制性Ｔａｔ誘導体は、配列番号６〜１１、１３〜３５、又は６９の３〜１９アミノ酸が改変されたＴａｔペプチドを含む。
【００７５】
本実施の別の一態様では、免疫抑制性Ｔａｔ誘導体は、配列番号６〜１１、１３〜３５、又は６９に対して、例えば、少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９３％、少なくとも９５％、少なくとも９７％、少なくとも９９％のアミノ酸同一性を有する。さらに本実施の別の一態様では、免疫抑制性Ｔａｔ誘導体は、配列番号６〜１１、１３〜３５、又は６９に対して、例えば、最大７０％、最大７５％、最大８０％、最大８５％、最大９０％、最大９３％、最大９５％、最大９７％、最大９９％のアミノ酸同一性を有する。
【００７６】
本実施の別の一態様では、免疫抑制性Ｔａｔ誘導体は、配列番号６〜１１、１３〜３５、又は６９に対して、例えば、少なくとも１個、少なくとも２個、少なくとも３個、少なくとも４個、少なくとも５個、少なくとも６個、少なくとも７個、少なくとも８個、少なくとも９個又は少なくとも１０個の連続アミノ酸置換、欠失及び／又は付加を有する。さらに本実施の別の一態様では、免疫抑制性Ｔａｔ誘導体は、配列番号６〜１１、１３〜３５、又は６９に対して、例えば、最大１個、最大２個、最大３個、最大４個、最大５個、最大６個、最大７個、最大８個、最大９個又は最大１０個の連続アミノ酸置換、欠失及び／又は付加を有する。
【００７７】
本実施の別の態様では、免疫抑制性Ｔａｔ誘導体は、配列番号６〜１１、１３〜３５、又は６９に対して、例えば、少なくとも１個、少なくとも２個、少なくとも３個、少なくとも４個、少なくとも５個、少なくとも６個、少なくとも７個、少なくとも８個、少なくとも９個又は少なくとも１０個の連続しないアミノ酸置換、欠失及び／又は付加を有する。さらに本実施の別の態様では、免疫抑制性Ｔａｔ誘導体は、配列番号６〜１１、１３〜３５、又は６９に対して、例えば、最大１個、最大２個、最大３個、最大４個、最大５個、最大６個、最大７個、最大８個、最大９個又は最大１０個の連続しないアミノ酸置換、欠失及び／又は付加を有する。
【００７８】
さらに、本開示に係るペプチドは、一量体での形態の存在に加えて、これらに限定されないが、二量体、三量体及び四量体を含む多量体に自己会合し得る。ペプチドの多量体化は、自然発生的に発生し得るか、又は多量体化につながる条件にペプチドをさらすことで促進され得る。これらの条件は、ペプチド化学における当業者に公知である。本開示に係る組成物は、一量体又は多量体のペプチド、又は一量体と多量体の混合物であり得る。
【００７９】
以下の発現システムが、開示に係る免疫抑制性Ｔａｔ誘導体の発現における使用に適している：例えば、これらに限定されないが、昆虫細胞発現システム（例えば、これらに限定されないが、Ｂａｃ−ｔｏ−Ｂａｃ発現システム、バキュロウイルス発現システム、及びＤＥＳ発現システム）といった哺乳類細胞発現システム、及びこれらに限定されないが、ｐＥＴ、ｐＳＵＭＯ、及びＧＳＴ発現システムを含む大腸菌発現システムが挙げられる。別の態様では、Ｔａｔ誘導体は、ポリペプチドの単離に有用なヒスチジンタグとともに発現される。ヒスチジンタグの精製システムは、本技術分野の当業者に公知である。さらに、免疫抑制性Ｔａｔ誘導体は、本技術分野の当業者に公知である従来の化学合成技術によって合成され得る。
【００８０】
本開示で使用される語句「治療すること」又は「治療」は、障害を示すために使用される場合、少なくとも１つの状態の症状を予防すること、すなわち、疾患に晒される、又は感染しやすくなる可能性があるが、未だその疾患の症状を経験又は発症していない対象において、臨床的症状を有意に進展させないこと、疾患の抑制、すなわちその疾患又はその症状の進展を留める又は軽減すること、又は疾患を緩和、すなわち疾患又はその症状を退行させることを含む。本開示において使用される、状態の治療、予防及び改善には、例えば、炎症、自己免疫疾患、又は神経変性疾患に関連する有害な又は害を及ぼす状態の低減又は根絶が含まれ得る。
【００８１】
「治療上有効な量」は、治療効果を達成するために必要である量の限定を意図する。
【００８２】
本開示は、同様に、上述した免疫抑制性Ｔａｔ誘導体ポリペプチドを含有する医薬組成物も対象とする。開示に係る医薬組成物の投与量及び望ましい薬物濃度は、想定される特定の使用に応じて異なり得る。適切な投与量又は投薬経路についての判断は、通常の医師の技術の範囲内に十分に入る。動物実験は、ヒトの治療のための有効な投与量の判断に対して信頼性のある指針を提供する。有効な投与量の種間のスケーリングは、Ｍａｒｄｅｎｔｉ，Ｊ  ａｎｄ  Ｃｈａｐｐｅｌｌ，Ｗ．著「Ｔｈｅ  ｕｓｅ  ｏｆ  ｉｎｔｅｒｓｐｅｃｉｅｓ  Ｎｅｗ  Ｄｒｕｇ  Ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔ，  Ｙａｃｏｂｉ  ｅｔ  ａｌ，Ｅｄｓ．，Ｐｅｒｇａｍｏｎ  Ｐｒｅｓｓ，  Ｎｅｗ  Ｙｏｒｋ  １９８９，  ｐｐ．２２−９６」により規定の原理に従ってなされる。一態様では、疾患は現存している。他の態様では、細胞又は個人の寿命は、本開示に係る方法に起因して延長される。
【００８３】
従って、経口、経鼻、舌、舌下、口腔、頬内、静脈内、皮下、筋肉内、及び経肺投与のためにデザインされた組成物は、例えば、不活性希釈剤、又は薬学上許容されるキャリアを用いた本技術分野においてよく知られた方法による過度な実験を行うことなく調整される。治療上の投与を目的とし、医薬組成物は、賦形剤と組み合わされてもよく、錠剤、トローチ、カプセル、エリキシル剤、懸濁液、溶液、シロップ等の形態で使用されてもよい。「薬学上許容されるキャリア」は、任意の標準的な薬学的キャリアを意味する。適切なキャリアの例は、本技術分野において公知であり、これらに限定されないが、リン酸緩衝生理食塩水、ポリソルブ８０を含むリン酸緩衝生理食塩水、水、油／水エマルジョンといったエマルジョン、及び様々な種類の湿潤剤のような任意の標準的な薬学的キャリアを含み得る。また、他のキャリアは、滅菌溶液、錠剤、コート錠、及びカプセルを含み得る。典型的にはこのようなキャリアは、澱粉、乳、砂糖、特定の種類の粘土、ゼラチン、ステアリン酸又はその塩、ステアリン酸マグネシウム又はステアリン酸カルシウム、タルク、植物油脂又は油、ガム、グリコール、又は他の公知の添加剤のような添加剤を含み得る。このようなキャリアを含む組成物は、従来の公知の方法で製剤され得る。
【００８４】
免役抑制性Ｔａｔ誘導体ポリペプチド組成物は、例えば静脈内、筋肉内、髄腔内、又は皮下注射によって、容易に、非経口的に投与され得る。非経口投与は、溶液又は懸濁液に化合物を組み込むことで達成され得る。このような溶液又は懸濁液は、同様に、例えば注射用水といった滅菌希釈剤、生理食塩水、固定油、ポリエチレングリコール、グリセリン、プロピレングリコール、又は他の合成溶媒を含んでもよい。非経口製剤は、同様に、例えばベンジルアルコール又はメチルパラベンといった抗菌剤、例えばアスコルビン酸又は亜硫酸水素ナトリウムといった抗酸化剤、ＥＤＴＡといったキレート剤も含み得る。例えば、酢酸塩、クエン酸塩、又はリン酸塩といった緩衝液、塩化ナトリウム又はデキストロースといった等張化調節のための薬剤も同様に加えられ得る。非経口製剤は、ガラス又はプラスチック製のアンプル、ディスポーザブルシリンジ、又は複数回投与用バイアルに封入され得る。
【００８５】
経皮投与は、皮膚を通じて組成物を経皮吸収することを含む。経皮製剤は、パッチ、イオントフォレーゼ装置、軟膏、クリーム、ジェル、膏薬等を含む。
【００８６】
組成物は、固体又は液体の投与量単位の物理形態を変更する様々な材料を含み得る。例えば、組成物は、活性成分の周囲に被覆殻を形成する材料を含み得る。被覆殻を形成する材料は、例えば、砂糖、セラック、及び他の腸溶性コーティング剤から選択され得、典型的には不活性である。代替的に、活性成分は、ゼラチンカプセル又はカシェーに包まれ得る。
【００８７】
本開示に係る免疫抑制性Ｔａｔ誘導体ポリペプチド組成物は、適切な投与レジメンに従い、治療上有効な量で投与され得る。当業者により理解されるように、必要とされる正確な量は、対象により異なり、対象の種、年齢、及び全身状態、疾患の重症度、特定の薬剤、及び投与の様式に左右される。いくつかの態様では、望ましい治療効果を得るため、対象の体重に基づき約０．０００１ｍｇ／ｋｇから約５０ｍｇ／ｋｇの組成物が１日に１回以上投与される。別の態様では、望ましい治療効果を得るため、対象の体重に基づき、約０．００１ｍｇ／ｋｇから約５０ｍｇ／ｋｇ、約０．０１ｍｇ／ｋｇから約５０ｍｇ／ｋｇ、約０．１ｍｇ／ｋｇから約５０ｍｇ／ｋｇ、約１ｍｇ／ｋｇから約５０ｍｇ／ｋｇ、約１０ｍｇ／ｋｇから約５０ｍｇ／ｋｇ、約０．０００１ｍｇ／ｋｇから約２５ｍｇ／ｋｇ、約０．０００１ｍｇ／ｋｇから約１０ｍｇ／ｋｇ、約０．０００１ｍｇ／ｋｇから約５ｍｇ／ｋｇ、約０．０００１ｍｇ／ｋｇから約１ｍｇ／ｋｇ、約１ｍｇ／ｋｇから約４５ｍｇ／ｋｇ、約１ｍｇ／ｋｇから約４０ｍｇ／ｋｇ、約１ｍｇ／ｋｇから約３５ｍｇ／ｋｇ、約１ｍｇ／ｋｇから約３０ｍｇ／ｋｇ、約１ｍｇ／ｋｇから約２５ｍｇ／ｋｇ、約１ｍｇ／ｋｇから約２０ｍｇ／ｋｇ、約１ｍｇ／ｋｇから約１５ｍｇ／ｋｇ、約１ｍｇ／ｋｇから約１０ｍｇ／ｋｇ、約１ｍｇ／ｋｇから約５ｍｇ／ｋｇの組成物が１日に１回以上投与される。
【００８８】
組成物の１日の全投与量は、専門医により、正当な医学的判断の範囲内で判断され得る。任意の特定の患者又は対象に対する特定の治療上有効な投与量は、治療されている障害及びその障害の重症度、採用される特定の化合物の活性、採用される特定の組成物、患者又は対象の年齢、体重、総合的な健康状態、性別及び食習慣、投与時間、投与経路、採用される特定の化合物の排泄速度、治療の持続時間、採用される特定の化合物と組み合わせる又は同時服用する薬剤、及び医学の分野においてよく公知である他の因子を含む様々な因子に左右されるであろう。
【００８９】
開示に係る組成物はまた、併用療法に採用され得る。すなわち、本開示に係る組成物は、１種以上の他の望ましい組成物、治療学、治療、又は医学的処理と同時、前又は後に、投与され得る。行われる治療の特定の組み合わせは、専門医により判断されるであろう、また、治療の適合性及び達成される望ましい治療効果が考慮に入れるであろう。組み合わせにて利用される治療上の活性剤は、単一の組成物、治療又は処置において組み合わせて投与され得ること、又は代替的に別個に投与され得るということが理解されるであろう。適切な治療剤は、これらに限定されないが、免疫抑制剤、抗炎症剤、化学療法剤、免疫調整剤、生物学的薬剤、及び小分子を含む。
【００９０】
他の態様では、開示に係る免疫抑制性Ｔａｔ誘導体の反復又は頻回投与が想定される。頻回投与は、例えば薬剤に対する免疫耐性を促進し得るアレルギー治療において使用されている一手法である。
【００９１】
免疫抑制性Ｔａｔ誘導体の反復投与の回数は、医療専門家が投薬に対する患者の反応に基づいて規定し得る。一態様では、免疫抑制性Ｔａｔ誘導体は、１０日の期間において、３日おきに１回、計３回投与される。この投与スキームは、その後、複数のサイクル繰り返される。本開示では、免疫抑制性Ｔａｔ誘導体が選択された時間フレーム内にて複数回投与されるような様々な異なる投与スキームを想定しており、その上、この投与スキームは複数サイクル繰り返される。別の態様では、免疫抑制性Ｔａｔ誘導体の投与は、１種以上の他の治療薬の投与と交互に行われ得る。
【００９２】
本明細書の一態様では、部分的には、免疫抑制性Ｔａｔ誘導体ポリペプチドを含む組成物が提供される。免疫抑制性Ｔａｔ誘導体ポリペプチドは、本開示に係る化合物を含む。本開示に係る組成物は、任意の数及び本開示に係る化合物の組み合わせを含んでもよいし、あるいは含まなくてもよい。例えば、組成物は、本開示に係る２種以上の化合物、又は本開示に係る３種以上の化合物を含み得る。
【００９３】
本開示に係る化合物、又はこのような化合物を含有する組成物は、一般に、医薬組成物として個体に投与される。医薬組成物は、従来の許容される医療用賦形剤と、活性成分としてここで開示される少なくとも１つの化合物を治療上有効な量で組み合わせることで調剤され得、また、治療上の使用に適切な単位投与形態にて調剤され得る。本開示で使用される語句「医薬組成物」は、治療上有効な濃度の活性化合物（例えば、本開示に係る任意の化合物）を示す。好ましくは、医薬組成物は、個体に投与された場合に、有害な、アレルギー性の、又は他の予期しない又は望ましくない反応を引き起こさない。本開示に係る医薬組成物は医学的及び獣医学的に有用である。医薬組成物は、個体に対して、単独、又は他の補助的な活性化合物、薬剤、薬物又はホルモンと併用して投与され得る。医薬組成物は、これらに限定されないが、従来の混合、溶解、造粒、ドラジェ調整、微粒子化（ｌｅｖｉｇａｔｉｎｇ）、乳化、カプセル化、封入及び凍結乾燥を含む任意の様々な工程を使用して製造され得る。医薬組成物は、これらに限定されないが、滅菌溶液、懸濁液、エマルジョン、凍結乾燥物、粉末、シロップ、エリキシル剤、又は投与に適した他のあらゆる投与形態を含む様々な形態をとることができる。
【００９４】
非経口注射に適した液体投与形態は、生理学上許容される無菌の水性又は非水性溶液、分散液、懸濁液又はエマルジョン及び無菌の注射可能溶液又は分散液に再構成するための無菌の粉末を含み得る。適切な水性及び非水性キャリア、希釈剤、溶剤又はビークルの例には、水、エタノール、ポリオール類（プロピレングリコール、ポリエチレングリコール（ＰＥＧ）、グリセロール等）、これらの適切な混合物、植物油（例えばオリーブ油）、及び例えばオレイン酸エチルといった注射可能な有機エステルが含まれる。適切な流動度は、例えば、レシチンといったコーティングを使用することで、分散液の場合は必要な粒径を維持することで、及び界面活性剤を使用することで、維持され得る。液体製剤では、本開示に係る化合物の治療上有効な量は、約０．０００１％（ｗ／ｖ）から約５０％（ｗ／ｖ）、は約０．００１％（ｗ／ｖ）から約１０．０％（ｗ／ｖ）、又は約０．０１％（ｗ／ｖ）から約１．０％（ｗ／ｖ）である。
【００９５】
本開示に係る医薬組成物は、活性化合物を薬学上許容される組成物にする処理を促進する薬学上許容されるキャリアを任意選択で含み得る。本開示で使用される語句「薬学上許容される」とは、健全な医学的判断の範囲内で、妥当な利益／リスク比率に見合っており、過剰な毒性、刺激、アレルギー反応、又は他の問題になる合併症のない人間及び動物の組織との接触に適した化合物、物質、組成物、及び／又は投薬形態を示す。本開示で使用される語句「薬学上許容されるキャリア」は、「薬理学的キャリア」と同義であり、投与された場合に長期間又は永続する有害な影響を実質的に持たない任意のキャリアを示し、例えば、「薬学上許容されるビークル、安定剤、希釈剤、添加剤、補助剤、又は賦形剤」といった語句を含む。このようなキャリアは、一般に、活性化合物と混合され、又は活性化合物を希釈又は封入することが可能であり、固形、半固形、又は液体剤であり得る。活性化合物は、望ましいキャリア又は希釈液中に溶解し得る、又は懸濁液として提供され得ることは理解される。薬学上許容され、使用され得る任意の様々なキャリアには、これらに限定されないが、例えば、水性媒体、例えば、水、生理食塩水、グリシン、ヒアルロン酸等；固体キャリア、例えば、デンプン、ステアリン酸マグネシウム、マンニトール、サッカリンナトリウム、タルク、セルロース、グルコース、ショ糖、ラクトース、トレハロース、炭酸マグネシウム等；溶剤；分散媒体；コーティング；抗菌剤及び抗真菌剤；等張性及び吸収遅延剤；又は任意の他の不活性成分が含まれる。薬学上許容されるキャリアの選択は、投与形態に左右され得る。任意の薬学上許容されるキャリアが活性化合物と不適合である場合を除き、薬学上許容される組成物中でのその使用が意図されている。このような医薬品キャリアの具体的使用の非制限的な例は、Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｄｏｓａｇｅ  Ｆｏｒｍｓ  ａｎｄ  Ｄｒｕｇ  Ｄｅｌｉｖｅｒｙ  Ｓｙｓｔｅｍｓ（Ｈｏｗａｒｄ  Ｃ．  Ａｎｓｅｌ  ｅｔ  ａｌ．、ｅｄｓ  Ｌｉｐｐｉｎｃｏｔｔ  Ｗｉｌｌｉａｍｓ  ＆  Ｗｉｌｋｉｎｓ  Ｐｕｂｌｉｓｈｅｒｓ  ７ｔｈｅｄ．１９９９）；Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ：Ｔｈｅ  Ｓｃｉｅｎｃｅ  ａｎｄ  Ｐｒａｃｔｉｃｅ  ｏｆ  Ｐｈａｒｍａｃｙ（Ａｌｆｏｎｓｏ  Ｒ．Ｇｅｎｎａｒｏｅｄ．、Ｌｉｐｐｉｎｃｏｔｔ、Ｗｉｌｌｉａｍｓ  ＆  Ｗｉｌｋｉｎｓ、２０ｔｈｅｄ．２０００）；Ｇｏｏｄｍａｎ  ＆  Ｇｉｌｍａｎ’ｓ  Ｔｈｅ  Ｐｈａｒｍａｃｏｌｏｇｉｃａｌ  Ｂａｓｉｓ  ｏｆ  Ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃｓ（Ｊｏｅｌ  Ｇ．Ｈａｒｄｍａｎ  ｅｔ  ａｌ．、ｅｄｓ．、ＭｃＧｒａｗ−Ｈｉｌｌ  Ｐｒｏｆｅｓｓｉｏｎａｌ、１０ｔｈｅｄ．２００１）、及びＨａｎｄｂｏｏｋ  ｏｆ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｅｘｃｉｐｉｅｎｔｓ（Ｒａｙｍｏｎｄ  Ｃ．Ｒｏｗｅ  ｅｔ  ａｌ．、ＡｐｈＡ  Ｐｕｂｌｉｃａｔｉｏｎｓ、４ｔｈ  ｅｄｉｔｉｏｎ  ２００３）、に見出される。これらのプロトコルは、慣用的であり、本技術分野の当業者の範囲内及び本開示の教示から、あらゆる変更は十分になされ得る。
【００９６】
本開示に係る医薬組成物は、これらに限定されないが、緩衝剤、防腐剤、張性調整剤、塩、抗酸化剤、浸透圧調整剤、生理的物質、薬理学的物質、充填剤、乳化剤、湿潤剤、スイートニング又は香料等を含む他の薬学上許容される成分（又は薬剤成分）を任意選択で含み得る。結果として生じる調整物が薬学上許容されるものである限り、様々な緩衝剤及びｐＨ調整のための方法が本開示に係る医薬組成物を調整するために使用され得る。このような緩衝剤には、これらに限定されないが、酢酸塩緩衝液、ホウ酸塩緩衝液、クエン酸塩緩衝液、リン酸塩緩衝液、中性緩衝生理食塩水、及びリン酸緩衝生理食塩水が含まれる。必要に応じて、組成物のｐＨ調整のため、酸又は塩基が使用され得ることは理解される。薬学上許容される抗酸化剤には、これらに限定されないが、メタ重亜硫酸ナトリウム、チオ硫酸ナトリウム、アセチルシステイン、ブチル化ヒドロキシアニソール、及びブチル化ヒドロキシトルエンが含まれる。有用な防腐剤には、これらに限定されないが、塩化ベンズアルコニウム、クロロブタノール、チメロサール、酢酸フェニル水銀、硝酸フェニル水銀、安定化オキシクロロ組成物、例えば、亜塩素酸ナトリウム並びにキレート剤、例えば、ＤＴＰＡ又はＤＴＰＡ−ビスアミド、カルシウムＤＴＰＡ、及びＣａＮａＤＴＰＡ−ビスアミドが含まれる。医薬組成物において有用な張性調整剤には、これらに限定されないが、例えば、塩化ナトリウム、塩化カリウムといった塩、マンニトール、又はグリセリン及び他の薬学上許容される張性調整剤が含まれる。
【００９７】
本開示にかかる化合物、又はこのような化合物を含む組成物は、経時的な化合物放出プロファイルの制御を実現するため薬物送達プラットフォームに組み込まれ得る。このような薬剤送達プラットフォームは、ポリマー基質中、典型的には、生分解性、生体内分解性、及び／又は生体吸収性ポリマー基質中に分散された本開示に係る化合物を含む。本開示にて使用される語句「ポリマー」は、合成ホモ又は共重合体、天然発生ホモ又は共重合体、同様に、直鎖、分岐鎖又はスター構造を有するその合成修飾物又は誘導体を示す。共重合体は、例えば、ランダム、ブロック、分割、テーパーブロック、グラフト、又はトリブロックといった任意の形態にて調整可能である。ポリマーは、通常、縮合ポリマーである。ポリマーは、架橋剤の導入又は側方残基の疎水性の変化によって機械的又は分解特性を亢進するため、さらなる修飾を受け得る。架橋の場合、ポリマーは、５％未満架橋され、通常、１％未満架橋される。
【００９８】
適切なポリマーには、これらに限定されないが、アルギン酸塩、脂肪族ポリエステル、シュウ酸ポリアルキレン、ポリアミド、ポリアミドエステル、ポリ無水物、ポリカーボネート、ポリエステル、ポリエチレングリコール、ポリヒドロキシ脂肪族カルボン酸、ポリオルトエステル、ポリオキサエステル、ポリペプチド、ポリホスファゼン、多糖類、及びポリウレタンが含まれる。ポリマーは、通常、少なくとも約１０％（ｗ／ｖ）、少なくとも約２０％（ｗ／ｖ）、少なくとも約３０％（ｗ／ｖ）、少なくとも約４０％（ｗ／ｖ）、少なくとも約５０％（ｗ／ｖ）、少なくとも約６０％（ｗ／ｖ）、少なくとも約７０％（ｗ／ｖ）、少なくとも約８０％（ｗ／ｖ）、又は少なくとも９０％（ｗ／ｖ）の薬剤送達プラットフォームを含む。生分解性、生体内分解性、及び／又は生体吸収性ポリマー及び薬剤送達プラットフォーム作成に有用な方法の例は、米国特許第４、７５６、９１１号明細書、米国特許第５、３７８、４７５号明細書、米国特許第７、０４８、９４６号明細書、米国特許公開第２００５／０１８１０１７号、米国特許公開第２００５／０２４４４６４号、米国特許公開第２０１１／０００８４３７号に記載されており、それぞれの内容は、参照によってその全体が本明細書に組み込まれる。
【００９９】
本実施の一態様では、基質を構成するポリマーは、例えば、シルクフィブロイン、ケラチン、又はコラーゲンといったポリペプチドである。本実施の別の態様では、基質を構成するポリマーは、例えば、セルロース、アガロース、エラスチン、キトサン、キチン、又はグリコサミノグリカン様コンドロイチン硫酸塩、デルマタン硫酸、ケラタン硫酸塩、又はヒアルロン酸といった多糖類である。本実施のさらに別の態様では、基質を構成するポリマーは、例えば、Ｄ−乳酸、Ｌ−乳酸、ラセミ体乳酸、グリコール酸、カプロラクトン、及びこれらの組み合わせといったポリエステルである。
【０１００】
本技術分野の当業者は、開示に係る適切な薬剤送達プラットフォームを形成するための適切なポリマーの選択は、いくつかの因子に左右されることを理解できる。適切なポリマーの選択により関連する因子には、これらに限定されないが、薬剤とポリマーの適合性、望ましい薬剤の放出動力学、移植部位でのプラットフォームの望ましい生分解性の動力学、移植部位でのプラットフォームの望ましい生体内分解性の動力学、移植部位でのプラットフォームの望ましい生体吸収性の動力学、プラットフォームのｉｎ  ｖｉｖｏでの力学性能、処理温度、プラットフォームの生体適合性、及び患者の耐性が含まれる。ｉｎ  ｖｉｔｒｏ及びｉｎ  ｖｉｖｏでのポリマーの振る舞いにある程度影響する別の関連因子には、化学的組成、成分の空間分布、ポリマーの分子量及び結晶化の度合いが含まれる。
【０１０１】
薬剤送達プラットフォームは、持続的放出薬剤送達プラットフォーム及び徐放的薬剤送達プラットフォームの両方を含む。本開示にて使用される語句「持続的放出」は、本開示に係る化合物を約７日間以上の期間に渡って放出することを示す。本開示にて使用される語句「除放的放出」は、本開示に係る化合物の約７日間未満の期間に渡って放出することを示す。
【０１０２】
本実施の一態様では、持続的放出薬剤送達プラットフォームは本開示に係る化合物を、例えば、投与後約７日間、投与後約１５日間、投与後約３０日間、投与後約４５日間、投与後約６０日間、投与後約７５日間、又は投与後約９０日間の期間に渡って、実質的に一次放出速度で放出する。本実施の別の態様では、持続的薬剤送達プラットフォームは、本開示に係る化合物を、例えば、最大で投与後約７日間、最大で投与後約１５日間、最大で投与後約３０日間、最大で投与後約４５日間、最大で投与後約６０日間、最大で投与後約７５日間、又は最大で投与後約９０日間に渡って、実質的に一次放出速度で放出する。
【０１０３】
本実施の一態様では、薬剤送達プラットフォームは、本開示に係る化合物を、例えば、投与後約１日間、投与後約２日間、投与後約３日間、投与後約４日間、投与後約５日間、又は投与後約６日間の期間に渡って、実質的に一次放出速度で放出する。本実施の形態の別の態様では、薬剤送達プラットフォームは、本開示に係る化合物を、例えば、最大で投与後約１日間、最大で投与後約２日間、最大で投与後約３日間、最大で投与後約４日間、最大で投与後約５日間、又は最大で投与後約６日間の期間に渡って、実質的に一次放出速度で放出する
【０１０４】
本開示の一態様では、部分的に、自己免疫疾患について開示する。自己免疫疾患は、身体に通常存在する物質及び組織に対する身体の過活性免疫反応により生じ、その結果、自己抗原に対する耐性が崩壊する。換言すると、免疫システムが身体の一部を病原体と誤認し、攻撃するため、身体が実際に自己の細胞を攻撃する。対象臓器又は組織に侵入する病原性Ｔ細胞集団の発達によって特徴付けられる自己免疫疾患は、特定の臓器に拘束されるか又は異なる場所にある特定の細胞に関与し得る。
【０１０５】
本開示の一形態は、部分的に、炎症を開示する。炎症とは、有害刺激に対する実際の組織の反応（浮腫、紅斑等）を示す。神経性炎症とは、この組織の反応が、末梢感覚神経末端からの炎症性メディエーターの放出を通じて開始及び／又は維持されるという事実を示す（すなわち、これら神経における正常の脊髄への求心性シグナルとは対照的に、遠心性機能）。神経性炎症は、最終的に、感覚ニューロンからの炎症性メディエーター及び感作化合物の局所的な放出という結果をもたらす複雑な生物学的プロセスによって媒介される一連の血管及び非血管の炎症性の反応を含む。例えば、病原体、細胞の損傷、又は刺激物といった有害な刺激により傷害を受けると、例えば、ヒスタミン、プロスタグランジン、ロイコトリエン、セロトニン、中性プロテアーゼ、サイトカイン、ブラジキニン及び一酸化窒素といった炎症媒介及び感作分子が、例えば、肥満細胞、免疫細胞、血管内皮細胞、及び血管平滑筋細胞といった炎症媒介細胞から放出される。参照によってその全体の内容が本明細書に含まれるＪｅｎｎｅｌｌｅ  Ｄｕｒｎｅｔｔ  Ｒｉｃｈａｒｄｓｏｎ  ａｎｄ  Ｍｉｃｈａｅｌ  Ｒ．  Ｖａｓｋｏ、Ｃｅｌｌｕｌａｒ  Ｍｅｃｈａｎｉｓｍｓ  ｏｆ  Ｎｅｕｒｏｇｅｎｉｃ  Ｉｎｆｌａｍｍａｔｉｏｎ、３０２（３）Ｊ．Ｐｈａｒｍａｃｏｌ．Ｅｘｐ．Ｔｈｅｒ．８３９〜８４５（２００２）を参照されたい。これら炎症媒介及び感作分子は感覚ニューロンに作用し、例えば、サブスタンスＰ（ＳＰ）及びカルシトニン遺伝子関連ペプチド（ＣＧＲＰ）のような神経ペプチド、プロスタグランジン、及びグルタミン酸塩のようなアミノ酸といった炎症誘導分子の末梢神経終末からの放出を刺激する。これら炎症誘導分子は、放出時に、典型的には、浮腫（血漿の浸出に対する二次的な膨潤）、過敏症（特定の感覚ニューロンの興奮性が交代することに対して二次的）、及び刺激の部位を超えて広がる（炎症反応）紅斑（血管拡張に対して二次的な発赤及び温感）によって特徴付けられる炎症反応の誘発の原因となる。前掲。根本的な炎症症状が、一次感覚ニューロンの活性化及びその後の炎症誘導分子の放出により引き起こされるため、反応は神経性炎症と称される。
【０１０６】
炎症は、急性炎症及び慢性炎症の両方を含む。本開示にて使用される語句「急性炎症」は、治療されている根本的な症状のうちの少なくとも１つが、例えば抗菌性反応といった有害刺激要因に起因する病態生理学上の効果を有する炎症反応を意味する。本開示で使用される語句「慢性炎症」は、治療されている根本的な症状うちの少なくとも１つが、例えば、炎症誘導分子の放出といった、侵害感覚神経に基づく要因に起因する病態生理上の効果を有する炎症反応を意味する。慢性炎症は、一次神経性炎症及び二次神経性炎症の両方を含む。本開示で使用される語句「一次」神経性炎症とは、一次感覚神経末端（例えば、Ｃ及びＡ−デルタ線維等）からの物質の放出によって開始される、又は起因する、組織炎症（炎症性症状）を示す。本開示にて使用される語句「二次」神経性炎症とは、例えば、ペプチド又はサイトカインといった感覚神経末端の刺激及び神経からの炎症性メディエーターの放出の原因となる炎症性メディエーターの非神経性の源（例えば、血管床からの管外遊出、又は例えば肥満細胞又は免疫細胞からの組織間質由来）によって開始される組織炎症を示す。これら神経由来の炎症性メディエーターは、次に、感覚神経を刺激するだけでなく非神経性の標的（例えば、肥満細胞）に作用し得る。神経性炎症の両方の形態（一次及び二次）の正味の効果は、末梢感覚神経線維の感作によって維持される炎症状態を有することである。結果として生じる神経性炎症の生理学上の結果は、例えば、皮膚疼痛（異痛症、痛覚過敏）、関節炎、内臓痛及び機能不全、肺機能不全（喘息、ＣＯＰＤ）、及び膀胱機能不全（疼痛、過敏性膀胱）が生じるように、問題となる組織により異なる。
【０１０７】
炎症及び／又は自己免疫疾患症候群は、これらに限定されないが、浮腫、充血、紅斑、挫傷、圧痛、こわばり、膨れ、発熱、悪寒、鼻、並びに気管を含む気道のうっ血、副鼻腔うっ血、呼吸障害、体液鬱滞、凝血、食欲不振、心拍数増加、肉芽種の形成、線維素性、膿又は非粘性漿液、潰瘍の形成、又は疼痛を含む。ここで開示する炎症及び自己免疫疾患に関連する実際の症状は公知であり、本技術分野の当業者によって、これらに限定されないが、炎症又は自己免疫疾患の部位、炎症又は自己免疫疾患の原因、炎症又は自己免疫疾患の重症度、炎症又は自己免疫疾患による影響を受けた組織又は臓器、及び炎症に関連する障害を含む要因を考慮することによって、判断され得る。
【０１０８】
通常、炎症は、有害な刺激を除去するだけでなく損傷した細胞の回復過程を開始するための臓器による防御機構としての機能を有する。この急性神経変性炎症は、組織の完全性を維持し細胞の修復に寄与することによって防御の第一線を形成する。実際、急性の神経性炎症がない場合、外傷及び感染は決して治癒せず、組織が進行的に破壊されて臓器の生存が危うくなる可能性がある。しかしながら、重度の又は長期間の有害な刺激は、修復を行うよりもむしろ損傷をもたらす慢性炎症性反応をもたらす。この炎症は、幅広い様々なヒトの疾患の根本的な幅広い様々な無関係である障害の病体生理学に関与してきた。
【０１０９】
慢性炎症及びそれに関連する症状は、幅広い様々なヒトの疾患の根本的な幅広い関係のない群の疾患と関連し得る。症状として炎症を呈する障害の非限定的な例は、これらに限定されないが、にきび、酸逆流／胸焼け、アルツハイマー型認知症、虫垂炎、動脈炎、関節炎、ぜんそく、アレルギー、アレルギー性鼻炎、アテローム性動脈硬化症、自己免疫疾患、亀頭炎、眼瞼炎、細気管支炎、気管支炎、滑液包炎、癌、心臓炎、セリアック病、蜂巣炎、子宮頸管炎、胆管炎、胆嚢炎、絨毛羊膜炎、慢性閉塞性肺疾患（ＣＯＰＤ）、肝硬変、大腸炎、結膜炎、膀胱炎、一般的な風邪、涙腺炎、認知症、皮膚炎、皮膚筋炎、湿疹、肺気腫、脳炎、心内膜炎、子宮内膜炎、腸炎、全腸炎、上顆炎、精巣上体炎、筋膜炎、結合組織炎、胃炎、胃腸炎、歯肉炎、糸球体腎炎、舌炎、心疾患、肝炎、汗腺膿瘍、高血圧、回腸炎、炎症性皮膚疾患、炎症性神経障害、インスリン抵抗性、間質性膀胱炎、虹彩炎、虚血性心疾患、角膜炎、角結膜炎、喉頭炎、乳腺炎、乳様突起炎、髄膜炎、代謝症候群（エックス症候群）、偏頭痛、骨髄炎、心筋炎、筋炎、腎炎、肥満、臍炎、卵巣炎、精巣炎、骨軟骨炎、骨減少症、骨粗鬆症、骨炎、耳炎、膵炎、パーキンソン病、耳下腺炎、骨盤炎症性疾患、心膜炎、腹膜炎、喉頭炎、静脈炎、胸膜炎、胸膜炎、直腸炎、前立腺炎、乾癬、歯髄炎、腎盂腎炎、門脈炎、リウマチ熱、鼻炎、卵管炎、唾液腺炎、副鼻腔炎、痙攣性結腸、口内炎、滑膜炎、腱炎、腱症、腱滑膜炎、血栓性静脈炎、扁桃炎、三角炎、腫瘍、尿道炎、ブドウ膜炎、膣炎、血管炎、及び外陰炎を含む。
【０１１０】
炎症の症状を呈する障害の１つの種類は、関節炎である。関節炎は、関節滑膜の炎症が原因となる体の関節の損傷が関係する症状の群を含み、これらに限定されないが、変性性関節症、関節リウマチ、若年性突発性関節炎、強直性脊椎炎のような脊椎関節症、反応性関節炎（ライター症候群）、乾癬性関節炎、炎症性腸疾患と関連付けられる腸疾患性関節炎、ウイップル病及びベーチェット病、敗血症性関節炎、痛風（痛風性関節炎、結晶性滑膜炎、代謝性関節炎としても知られる）、偽性痛風（ピロリン酸カルシウム結晶沈着性疾患）、並びにスティル病を含む。関節炎は、１つの関節（単関節炎）、２から４個の関節（少関節炎）又は５個以上の関節（多関節炎）に影響し得、自己免疫疾患又は非自己免疫疾患のいずれかであり得る。
【０１１１】
本開示の一態様は、部分的に、自己免疫疾患である。自己免疫疾患も同様に炎症の症状を呈する。自己免疫疾患は、各疾患の主な臨床病理学的な特徴に応じて、大きくは、全身性及び臓器特異的な自己免疫疾患に分けられ得る。全身性自己免疫疾患には、これらに限定されないが、全身性紅斑性狼瘡（ＳＬＥ）、シェーグレン症候群、硬皮症、関節リウマチ、及び多発性筋炎が含まれる。局所的自己免疫疾患には、内分泌学的（１型糖尿病、橋本甲状腺炎、アジソン病等）、皮膚病学的（尋常性天疱瘡）、血液学的（自己免疫性溶血性貧血）、神経性（多発性硬化症）であり得、又は実質的に身体組織の任意の限局的な集団を含み得る。自己免疫疾患の種類には、これらに限定されないが、急性散在性脳脊髄炎（ＡＤＥＭ）、アジソン病、アレルギー、アレルギー性鼻炎、アルツハイマー型認知症、抗リン脂質抗体症候群（ＡＰＳ）、関節炎、ぜんそく、自己免疫性溶血性貧血、自己免疫性肝炎、自己免疫性内耳疾患、水疱性天疱瘡、セリアック病、シャーガス病、慢性閉塞性肺疾患（ＳＣＯＰＤ）、１型糖尿病（ＩＤＤＭ）、湿疹、子宮内膜症、線維筋痛、グッドパスチャー症候群、グレーブス病、ギランバレー症候群（ＧＢＳ）、橋本甲状腺炎、汗腺膿瘍、突発性血小板減少性紫斑病、炎症性大腸炎、炎症性皮膚疾患、間質性膀胱炎、尋常性狼瘡（円盤状エリテマトーデス、薬剤誘発性狼瘡エリテマトーデス、狼瘡腎炎、新生児狼瘡、亜急性皮膚狼瘡エリテマトーデス、及び全身性紅斑性狼瘡を含む）、限局性強皮症、多発性硬化症（ＭＳ）重症筋無力症、ミオパシー、ナルコレプシー、ニューロミオトニア、尋常性天痘瘡、悪性貧血、乾癬、原発性胆汁性肝硬変、再発性播種性脳脊髄炎（多相性散在性脳脊髄炎）、リウマチ熱、統合失調症、強皮症、シェーグレン症候群、腱滑膜炎、血管炎、及び白斑が含まれる。
【０１１２】
炎症の症状を呈する別の種類の疾患は炎症性ミオパシーである。炎症性ミオパシーは、筋肉の成分を攻撃する免疫システムに関する問題が原因となり、筋肉における炎症のサインを引き起こす。
【０１１３】
炎症の症状を呈する別の種類の障害は血管炎である。血管炎は、白血球遊走及びその結果の損傷が原因であるリンパ管及び静脈のような血管（静脈炎）、動脈（動脈炎）及び毛細血管といった血管を含む血管壁の炎症を特徴とする様々な群の障害である。この炎症は、体の任意の部位における任意の大きさの血管に影響を与え得る。これは動脈及び／又は静脈のいずれかに影響し得る。この炎症は、血管内の単一の部位に影響を及ぼすことを意味する限局的であり得、又は炎症の領域が特定の臓器又は組織の全体にわたって散乱する、又は体内の２以上の臓器システムに影響を及ぼすことさえあるように広範囲に広がり得る。血管炎は、これらに限定されないが、バージャー病（閉塞性血栓性血管炎）、脳血管炎（中央神経系血管炎）、チャーグ−ストラウス動脈炎、クリオグロブリン血症、本態性クリオグロブリン血症性血管炎、巨細胞（側頭）動脈炎、ゴルファー血管炎、ヘノッホ−シェーンライン紫斑病、過敏性血管炎（アレルギー性血管炎）、川崎病、顕微鏡的多発動脈炎／多発性血管炎、結節性多発動脈炎、リウマチ性多発筋痛（ＰＭＲ）、リウマチ様血管炎、高安動脈炎、ヴェグナー肉芽腫症、及び全身性紅斑性狼瘡（ＳＬＥ）のような結合性の組織障害に続発する血管炎、関節リウマチ（ＲＡ）、再発性多発軟骨炎、ベーチェット病、又は他の結合性の組織障害、ウイルス感染に続発する血管炎を含む。
【０１１４】
炎症の症状を呈する別の種類の障害は、皮膚障害である。皮膚障害は、これらに限定されないが、慢性光線性皮膚炎、アトピー性湿疹、接触湿疹、乾燥性湿疹、脂漏性皮膚炎、発汗異常、円板状湿疹、静脈湿疹、ヘルペス状皮膚炎、神経皮膚炎、及び自家感作性皮膚炎のような湿疹、及びうっ滞性皮膚炎、汗腺膿瘍、プラーク乾癬、爪乾癬、滴状乾癬、頭皮乾癬、逆乾癬、膿疱性乾癬、乾癬性紅皮症を含む乾癬、酒さ、及び限局性強皮症を含む硬皮症を含む。
【０１１５】
炎症の症状を呈する別の種類の障害は、胃腸障害である。胃腸障害は、これらに限定されないが、過敏腸性疾患、クローン病を含む炎症性腸疾患、及び潰瘍性直腸炎、左側大腸炎、全大腸炎、及び劇症大腸炎のような潰瘍性大腸炎を含む。
【０１１６】
本開示の一態様は、部分的には、神経変性疾患である。神経変性疾患は、神経の死亡を含む神経の構造又は機能の進行性の消失によりもたれされる。神経変性疾患の非限定的な例には、これらに限定されないが、アレキサンダー病、アルパーズ病、アルツハイマー型認知症、アミロイド症、筋萎縮性側索硬化症、不安神経症、毛細血管拡張性運動失調、注意欠陥障害、カナバン病、中枢神経系損傷、シャルコーマリートゥース病、コケーン症候群、大脳皮質基底核変性症、クロイツフェルトヤコブ病、鬱病、脳炎（例えば、細菌性、寄生性、菌性又はウイルス性）、フリードライヒ運動失調症、前頭側頭型認知症、遺伝性痙性対麻痺、ギランバレー症候群（及びその異型である急性運動軸索型ニューロパチー、急性炎症性脱髄性多発ニューロパチー及びフィッシャー症候群）、ＨＩＶ／ＡＩＤＳによる認知症、ハンチントン病、神経系への虚血性障害、ケネディ病、クラッベ病、レビー小体型認知症、マシャドジョセフ病、髄膜炎（例えば、細菌性、寄生性、菌性又はウイルス性）、多発性硬化症、多系統萎縮症、神経系の外傷（例えば、衝撃による脳障害、脊髄損傷、神経系の外傷性損傷）、神経障害（例えば、化学療法により誘導された神経障害、糖尿病に関連する神経障害及び末梢の神経障害）、パーキンソン病、ペリツェウスメルツバッハー病、ピック病、原発性側索硬化症、プリオン病、進行性核上性麻痺、レフスム病、サンドホフ病、統合失調症、シルダー病、脊髄小脳萎縮症、スティール−リチャードソン−オルゼウスキー病、脳卒中、脊髄癆、又は血管性認知症が挙げられる。神経変性は、自己−免疫疾患又は非−自己免疫疾患に関連し得、神経変性は、全身性疾患又は臓器特異的疾であり得る。本開示に係る神経変性疾患を治療する方法によって低減される症状の非限定的な例には、不安神経症、失語症、認知、精神錯乱、鬱病、疼痛、麻痺、痙攣、チック、及び震えが含まれる。
【０１１７】
本開示の一態様は、部分的には、自己免疫疾患又は神経変性疾患に関連する症状の軽減である。本実施の一態様では、軽減される症状は、炎症、疲労、めまい、不快感、熱及び体温の上昇、手及び足の冷えに対する過敏症、筋肉及び関節の衰弱及びこり、体重変化、消化器又は胃腸の問題、低又は高血圧、易刺激性、不安神経症又は鬱病、不妊症又は性的欲求の減少（性欲低下）、血糖変化、及び自己免疫の種類によっては臓器又は組織サイズの増大、又は臓器又は組織の崩壊である。
【０１１８】
一態様では、免疫抑制性Ｔａｔ誘導体ポリペプチドは、免疫抑制性Ｔａｔ誘導体ポリペプチドに晒された抗原提示細胞制御性マクロファージ（ＡＲｅｇｓ）においてＦａｓリガンド（ＦａｓＬ）発現を促進する活性を備える。本形態の一態様では、免疫抑制性Ｔａｔ誘導体ポリペプチドは、細胞におけるＦａｓＬ発現を、同じ免疫抑制性Ｔａｔ誘導体ポリペプチドに晒されていない細胞と比較して、少なくとも１０％、少なくとも２０％、少なくとも３０％、少なくとも４０％、少なくとも５０％、少なくとも６０％、少なくとも７０％、少なくとも８０％、少なくとも９０％、少なくとも１００％、少なくとも２００％、少なくとも３００％、少なくとも４００％、少なくとも５００％促進する。本実施の別の態様では、免疫抑制性Ｔａｔ誘導体ポリペプチドは、細胞におけるＦａｓＬ発現を、同じ免疫抑制性Ｔａｔ誘導体に晒されていない細胞と比較して、約１０％から約２５％、約１０％から約５０％、約１０％から約７５％、約１０％から約１００％、約１０％から約２００％、約１０％から約３００％、約１０％から約４００％、約１０％から約５００％、約２５％から約５０％、約２５％から約７５％、約２５％から約１００％、約２５％から約２００％、約２５％から約３００％、約２５％から約４００％、約２５％から約５００％、約５０％から約１００％、約５０％から約２００％、約５０％から約３００％、約５０％から約４００％、約５０％から約５００％促進する。特定の態様では、ＡＲｅｇｓはＣＤ１４＋マクロファージである。
【０１１９】
開示に係る自己免疫、神経変性及び炎症関連疾患は、減少させることが望ましいＴ細胞媒介性炎症の促進により特徴づけられる免疫媒介性疾患である。ＡＲｅｇｓにおけるＦａｓＬ、又は樹状細胞の発現を促進、又は誘導する治療薬は、Ｔ細胞媒介性炎症を低減させ、その結果自己免疫、神経変性、又は炎症関連疾患を低減する。このため、一態様では、本開示は、自己免疫、神経変性、又は炎症関連疾患のある対象に、１種以上の開示に係る免疫抑制性Ｔａｔ誘導体ポリペプチドを投与することで、Ｔ細胞媒介性炎症を低減し、その結果、自己免疫、神経変性、又は炎症関連疾患を治療する方法を提供する。別の態様では、本開示は、自己免疫、神経変性、又は炎症関連疾患のある対象に、１種以上の開示に係る免疫抑制性Ｔａｔ誘導体ポリペプチドを投与することで、ＡＲｅｇｓにおけるＦａｓＬの発現を誘導し、その結果、自己免疫、神経変性、又は炎症関連疾患を治療する方法を提供する。
【０１２０】
本開示の一態様では、部分的に、炎症に関連する症状の軽減を追加的に提供する。本実施の一態様では、軽減される症状は、浮腫、充血、紅斑、挫傷、圧痛、こわばり、膨れ、発熱、悪寒、鼻並びに気管を含む気道のうっ血、副鼻腔うっ血、呼吸障害、体液鬱滞、凝血、食欲不振、心拍数増加、肉芽種の形成、線維素性、膿、又は非粘性漿液、潰瘍の形成、又は疼痛である。
【０１２１】
本開示の一態様は、部分的には、哺乳類に関する。哺乳類には、ヒトが含まれ、ヒトは患者であってもよい。本開示の別の態様では、部分的には、個体に関する。個体には、哺乳類及びヒトが含まれ、ヒトは患者であり得る。別の態様では、哺乳類には、イヌ、ネコ、ウマ、ウシ、ヒツジ、ヤギ及び霊長類といった、飼育される動物が含まれる。
【０１２２】
本開示の一態様は、部分的に、開示に係る化合物又は組成物の投与に関する。本開示にて使用される語句「投与」は、臨床的、治療的、又は実験的に有益な結果を生ずる可能性のある個体に対して、本開示に係る化合物又は組成物の投与を提供する任意の送達機序を意味する。
【０１２３】
本開示に係る化合物又は組成物の投与は、様々な腸内又は非経口の方法を含み、これらに限定されないが、例えば、錠剤、液体、カプセル、粉末等といった許容される任意の形態による経口投与、例えば、ドロップ、スプレー、クリーム、ゲル又は軟膏といった許容される任意の形態による局所投与、許容される任意の形態による頬、鼻、及び／又は吸入投与、許容される任意の形態による直腸投与、許容される任意の形態による膣内投与、例えば、静脈内ボーラス注射、静脈内注射、動脈内ボーラス注射、動脈内注入及び脈管構造内へのカテーテル点滴注入といった許容される任意の形態による血管内投与、例えば、腹腔内注射、筋肉内注射、皮下注射、皮下点滴、眼内注射、網膜注射、又は網膜下注射、又は硬膜外注射といった許容される任意の形態による組織周囲及び組織内投与、例えば、カテーテル点滴注入といった許容される任意の形態による小胞内投与、及び、例えば、インプラント、ステント、パッチ、ペレット、カテーテル、浸透圧ポンプ、座薬、生体内分解性の送達システム、非生体内分解性の送達システム、又は別のインプラント持続型もしくは緩徐型放出システムといった留置装置を含む。生体内分解性ポリマーの代表的なリスト及び使用方法は、例えば、Ｈａｎｄｂｏｏｋ  ｏｆ  Ｂｉｏｄｅｇｒａｄａｂｌｅ  Ｐｏｌｙｍｅｒｓ（Ａｂｒａｈａｍ  Ｊ．  Ｄｏｍｂ  ｅｔ  ａｌ、ｅｄｓ、Ｏｖｅｒｓｅａｓ  Ｐｕｂｌｉｓｈｅｒｓ  Ａｓｓｏｃｉａｔｉｏｎ、１９９７）に開示されている。
【０１２４】
本開示に係る化合物又は組成物は、哺乳類に様々な経路を使用して投与され得る。本開示に係る炎症、自己免疫疾患、又は神経変性疾患の治療に適した投与経路は、局所及び全身投与の両方を含む。局所投与は、哺乳類の全身投与の場合と比較すると、組成物を特定の部位に著しくより多く輸送することとなるのに対して、全身投与は、本質的に、組成物を個体の全身に輸送することとなる。適切な投与の経路には、また中枢及び末梢投与の両方が含まれる。中枢投与は、本質的に個体の中枢神経系に化合物又は組成物を輸送することとなるものであり、例えば、髄腔内投与、硬膜外投与及び頭蓋注射又はインプラントが含まれる。末梢投与は、本質的に個体の中枢神経系外の任意の領域に化合物又は組成物を輸送することとなり、脊髄又は脳への直接投与以外の任意の投与経路を含む。本開示に係る化合物又は組成物の実際の投与経路は、これらに限定されないが、炎症又は自己免疫又は神経変性疾患の種類、部位、原因、及び重症度、望ましい軽減の治療の持続期間、望ましい軽減の度合い、望ましい軽減の持続期間、具体的に使用される化合物又は組成物、使用される化合物又は組成物の排出速度、使用される化合物又は組成物の薬力学、組成物に含まれる他の化合物の性質、具体的な投与経路、個体の具体的な特性、病歴及びリスクファクター（例えば、年齢、体重、総合的な健康状態等）、治療に対する個体の反応、又はこれらの任意の組み合わせといった因子を考慮して、本技術分野の当業者により判断され得る。このため、本開示に係る化合物又は組成物の有効な投与量は、本技術分野の当業者が全ての基準を考慮し、個体の利益について最良の判断を利用することで容易に判断され得る。
【０１２５】
一態様では、本開示に係る化合物又は組成物は、哺乳類に全身投与される。別の態様では、本開示に係る化合物又は哺乳類に局所投与される。別の態様では、本開示に係る化合物又は組成物は哺乳類の炎症、神経変性、又は自己免疫疾患の部位に投与される。本実施の別の一態様では、本開示に係る化合物又は組成物は、哺乳類の炎症、神経変性、又は自己免疫疾患の周辺の領域に投与される。
【０１２６】
本明細書の一態様では、部分的には、本開示に係る化合物又は組成物の治療上有効な量での投与が提供される。本開示にて使用される語句「治療上有効な量」は、「治療上有効な投与量」と同義であり、炎症、神経変性、又は自己免疫疾患の治療を示して使用される場合は、望ましい治療効果を達成するのに必要な本開示に係る化合物又は組成物の最小投与量を意味し、炎症、神経変性、又は自己免疫疾患に関連する症状の低減に十分な投与量を含む。本実施の一態様では、治療上有効な量の本開示に係る化合物又は組成物は、炎症、神経変性、又は自己免疫疾患に関連する症状を、例えば、少なくとも１０％、少なくとも２０％、少なくとも３０％、少なくとも４０％、少なくとも５０％、少なくとも６０％、少なくとも７０％。少なくとも８０％、少なくとも９０％、又は少なくとも１００％軽減する。本実施の別の一態様では、治療上有効な量の本開示に係る化合物又は組成物は、炎症、神経変性、又は自己免疫疾患に関連する症状を、例えば、最大１０％、最大２０％、最大３０％、最大４０％、最大５０％、最大６０％、最大７０％。最大８０％、最大９０％、又は最大１００％低減する。本実施の別の態様では、治療上有効な量の本開示に係る化合物又は組成物は、炎症、神経変性、又は自己免疫疾患に関連する症状を、例えば、約１０％〜約１００％、約１０％〜約９０％、約１０％〜約８０％、約１０％〜約７０％、約１０％〜約６０％、約１０％〜約５０％、約１０％〜約４０％、約２０％〜約１００％、約２０％〜約９０％、約２０％〜約８０％、約２０％〜約２０％、約２０％〜約６０％、約２０％〜約５０％、約２０％〜約４０％、約３０％〜約１００％、約３０％〜約９０％、約３０％〜約８０％、約３０％〜約７０％、約３０％〜約６０％、約３０％〜約５０％低減する。本実施に係るさらに別の態様では、本開示に係る化合物又は組成物の治療上有効な投与量は、炎症、神経変性、又は自己免疫疾患に関連する症状を、例えば、少なくとも１週間、少なくとも１ヶ月間、少なくとも２ヶ月間、少なくとも３ヶ月間、少なくとも４ヶ月間、少なくとも５ヶ月間、少なくとも６ヶ月間、少なくとも７ヶ月間、少なくとも８ヶ月間、少なくとも９ヶ月間、少なくとも１０ヶ月間、少なくとも１１ヶ月間、少なくとも１２ヶ月間低減するのに充分な量である。
【０１２７】
炎症、神経変性、又は自己免疫疾患を治療するための本開示に係る化合物又は組成物の有効成分の量は、適切な投与量が得られるように変更され得る。哺乳類に投与される本開示に係る化合物又は組成物の実際の治療上有効な量は、これらに限定されないが、炎症、神経変性、又は自己免疫疾患の種類、部位、原因又は重症度、望ましい治療の持続期間、望ましい軽減の度合い、望ましい持続期間、具体的に使用される化合物又は組成物、使用される化合物又は組成物の排出速度、使用される化合物又は組成物の薬力学、組成物に含まれる他の化合物の性質、具体的な投与経路、個体の具体的な特性、病歴及びリスクファクター（例えば、年齢、体重、総合的な健康状態等）、治療に対する個体の反応、及びこれらの任意の組み合わせといった要因を考慮して、本技術分野の当業者により判断され得る。このため、本開示に係る化合物又は組成物の有効な投与量は、本技術分野の当業者が全ての判断基準を考慮し、個体の利益について最良の判断を利用すえることで、容易に判断され得る。
【０１２８】
追加的に、本開示に係る化合物又は組成物の反復投与では、本開示に係る化合物又は組成物の実際に有効な量は、これらに限定されないが、投与の頻度、本開示に係る化合物又は組成物の半減期、又はこれらの任意の組み合わせを含む要因にさらに左右されるであろう。本開示に係る化合物又は組成物の有効な量は、ｉｎ  ｖｉｔｒｏアッセイ及びヒトへの投与前の動物モデルを使ったｉｎ  ｖｉｖｏ投与試験から推定され得ることは当業者に公知である。様々な投与経路の効率の違いを考慮すると、必要な有効な量は大きく変動すると予測される。例えば、経口投与は、一般に、静脈又は硝子体への注射による投与より、高い投与量が必要となることが予測されるであろう。これら投与量の変動は、本技術分野の当業者に公知である、最適化に関する標準的な経験上のルーチンを使って調節可能である。正確な治療上有効な投与量及びパターンは、専門医により、上述した要因を考慮して判断されることが好ましい。
【０１２９】
投与は、単回又は累積的（連続投与）投与であってもよく、本技術分野の当業者により容易に判断され得る。例えば、炎症、神経変性、又は自己免疫疾患の治療は、本開示に係る化合物又は組成物を有効な投与量で１回投与することを含み得る。非限定的な例として、本開示に係る化合物又は組成物は有効な投与量で、例えば、炎症、神経変性、又は自己免疫疾患の症状を呈する部位、又はその近傍への単回注射又は沈着として、又は化合物又は組成物の単回の経口投与として、哺乳類に１回投与され得る。代替的に、炎症、神経変性、又は自己免疫疾患の治療は、本開示に係る化合物又は組成物を有効な投与量で、例えば、１日１回、数日に１回、週１回、月１回、又は１年に１回といった期間周期の範囲で行われる、複数回の投与を含み得る。非限定的な例として、本開示に係る化合物又は組成物は、哺乳類に週１回又は２回投与され得る。投与のタイミングは、哺乳類の種類によって異なり得、哺乳類の症状の重症度といった要因に左右される。例えば、有効な投与量の本開示に係る化合物又は組成物は、定められていない期間、又は、その哺乳類がそれ以上治療を必要としなくなるまで、月１回、哺乳類に投与され得る。本技術分野の当業者は、哺乳類の症状は治療のコースの初めから終わりまで監視され得ること、及び投与される本開示に係る化合物又は組成物の有効な量は、それに従って調整され得ることを理解するであろう。
【０１３０】
本開示に係る化合物又は組成物は、また、治療の全体的な治療効果を高めるため、他の治療化合物と組み合わせて哺乳類に投与され得る。自己免疫、神経変性、及び炎症関連疾患を治療する複数の化合物の使用は、本開示の範囲内である。さらに、本開示には、自己免疫、神経変性、及び炎症関連疾患を治療するための開示に係るペプチドの使用、及び自己免疫、神経変性、及び炎症関連疾患を治療するための治療薬の製造における開示に係るペプチドの使用が含まれる。
【実施例】
【０１３１】
以下の非限定的な実施例は、現在意図されている代表的な形態のより完全な理解を促進するために、説明の目的のためにのみ提供されている。これらの実施例は、ここで開示されたＴａｔ誘導体を使用した自己免疫疾患、炎症、又は神経変性疾患の治療方法に関係するものも含め、本明細書に開示された全ての形態を制限するものと解釈されるべきではない。
【０１３２】
実施例１
樹状細胞系統（ｌｉｎｋａｇｅ）におけるＴａｔの影響
Ｔａｔは、樹状細胞（ＤＣ）系統に関与する単球を拡大し活性化されたＣＤ８６＋  ＤＣ  ＡＰＣに誘導する（図１）。パーコール密度勾配分離によりＰＢＭＣから増殖し、抗ＣＤ１４で被覆された磁気ビーズ（ダイナルバイオテック、ダイナビーズＭ−４５０）に付着したヒト単球は、ＧＭ−ＣＳＦ（１００ｎｇ／ｍＬ）及びＩＬ−４（１００ｎｇ／ｍＬ）中での５日間の培養により、ＤＣへの分化に関与した。関与されたＤＣは、培地のみ（コントロール）、ＬＰＳ（１００ｎｇ／ｍＬ）、又はＴａｔ（５０ｎＭ）のいずれかで１晩培養し、その後、抗ＣＤ−８６抗体（ＢＤファーミンゲン）にて染色し、ＦＡＣＳスキャンにてＣＤ８６誘導（左パネル）又は一般化した活性（右パネル、ボックスＲ２に拡大図、Ｔａｔ刺激細胞を表示）について解析した。ＣＤ８６発現のＭＦＩは、９（コントロール）、３０（ＬＰＳ）、及び１８７（Ｔａｔ）であり、ＣＤ８６はＤＣ活性に特異的な判断因子である。
【０１３３】
誘導体化Ｔａｔは、ＡＲｅｇ分化を低減させ、ＣＴＬの抗原特異的活性を強く高める（図２）。Ｔａｔは、単球ＡＰＣ前駆体からＡＲｅｇを誘導しないよう酸化によって化学的に誘導体化する（Ｔａｔ＊又は酸化Ｔａｔ）（図３）。１０マイクログラムのＴａｔ／ｐ２４  Ｔａｔ＊−Ａｇコンジュゲート（Ａｇ−Ｔａｔ＊）が、アジュバントにおいて第０日及び第７日に、Ｂａｌｂ／Ｃマウスの両脇腹に投与された。実験群では、比較として、アジュバントにおいて片側に５μｇのｐ２４、他の側に５μｇの誘導体化Ｔａｔ（Ａｇ及びＴａｔ＊）、又はアジュバント（Ａｇ）において１０μｇのｐ２４が接種された。コントロールマウスは、アジュバントの注射を２回受けた。マウス４匹は、各群で治療を受けた。第１４日目には、各動物から流入リンパ節細胞を採取し、放射腺照射されたＡｐ２４（抗原ｐ２４を発現するよう安定的に形質転換されたＨ−２ｄ細胞）細胞又はコントロールの非形質転換細胞の培養物において１晩再刺激した。ＣＴＬ活性は、ＥＬＩＳＰＯＴアッセイを使用して、プレート上の細胞のγインターフェロン分泌スポット形成コロニー（ＳＦＣ）／１０６の数として定量した。全例で＜１０ＳＦＣ／１０６であった、非形質転換の再刺激剤によるバックグラウンドを、各ポイントから差し引いた。結果は３つの同様の実験を示す。
【０１３４】
実施例２
マクロファージのＴａｔ活性化及び免疫反応の抑制
上述したように（Ｌｉ、Ｃ．Ｊ．他（１９９５）、サイエンス２６８：４２９〜３１ページ）、組み換えＴａｔタンパク質を緩やかな変性条件下で調整し、０．１ｍＭ  ＤＴＴの存在下で復元した。
【０１３５】
単球のＴａｔ活性は、投与量依存性であり可飽和性である（図３）。ヒト単球を、６日間、組み換えＴａｔの濃度を増加させて培養した。その間、それらについては、抗Ｆａｓリガンドモノクローナル抗体（ＢＤファーミンゲンのＮｏｋ  １）による染色の度合いを定量するため（平均蛍光強度（ＭＦＩ）、フローサイトメトリー（ベクトンディッキンソンのＦＡＣＳｃａｎ）を用いて、Ｆａｓリガンド（ＦａｓＬ）誘導体を活性の測定としてアッセイした。高濃度のＴａｔでは、ＭＦＩは上昇しなかった（図示せず）、また、Ｔ細胞は、ＡＰＣのプラトー（Ｐｌａｔｅａｕ）刺激濃度である５０ｎＭ  Ｔａｔでは活性化され得なかった（図示せず）。
【０１３６】
Ｔａｔは、ＨＩＶ−ｐ２４に対する抗原特異的体液免疫反応を抑制する（図４）。第０週では、マウス（各グループ４匹）が、組み換えｐ２４タンパク質（カリフォルニア、エメリービルのキロン）５μｇ及び、組み換えＴａｔタンパク質（ＰＴ）５μｇ又は組み換え酸化Ｔａｔ＊タンパク質（Ａｇ）５μｇのいずれかが完全フロイントアジュバント１００μＬに混合され、脇腹に皮下投与されることで免疫された。免疫した後、１０週間にわたって１週間おきに血清を採取し、市販のＥＬＩＳＡ（イリノイ、アボットパークのアボットラボラトリーズ）によってｐ２４に対する特異的抗体反応をアッセイした。２週目のｐ２４抗体力価（図４Ａ）は、酸化Ｔａｔ＊コントロール（Ａｇ）と比較すると、Ｔａｔタンパク質（ＰＴ）により完全に抑制されていた。この反応は、少なくとも６週間維持された。免疫反応の成熟により、６週目の抗体力価は、２週目の約１０倍以上高かった。
【０１３７】
マクロファージがｉｎ  ｖｉｖｏで初めて活性化されたものである限り、事前の活性化なく比較的高濃度のＴａｔで刺激された場合と比較して、Ｔａｔは、培養されたマウスマクロファージの生存率を向上させる（図５）。４日前に２．９％チオグリコレート（アジュバントとして）又は０．８５％生理食塩水（休薬）のいずれかを腹腔内に注射されたマウスから腹腔洗浄によってＡＰＣが単離された。採取されたウォッシュアウト細胞は、５日間、培地のみ（コントロール、Ｃ）、リポ多糖類（ＬＰＳ、１００ｎｇ／ｍＬ）、又は大腸菌において組み換えタンパク質として生成されたＴａｔ（Ｔａｔ、５００ｎｇ／ｍＬ）内で、１０６細胞／ｍＬにて培養した。活性化は、大きくなった細胞の％（Ｍ１フラクション）として定量した。
【０１３８】
免疫抑制性Ｔａｔは、マウスのリンパ球増殖の安定した免疫抑制を提供する（図６）。マウスは、Ｔａｔ／ｐ２４（組み換えＨＩＶ−１  ｇａｇ  タンパク質ｐ２４）寛容原（ＧＲＰ２）５μｇ又はコントロールとしてアビジン−ｐ２４（ＧＲＰ１）５μｇのいずれかを含むフロイントアジュバントエマルジョンで４群に免疫された。２週目に、残りの流入リンパ節細胞が採取され、各グループでプールされ、１０５細胞／マイクロタイターウェルで４日間、段階的な濃度の組み換えｐ２４タンパク質（ｐ２４、μｇ／ｍＬ）の存在下で培養された。液体シンチレーションカウンターにおいて一晩の３Ｈチミジン取り込み（ＣＰＭ）を定量することで、回復（ｒｅｃａｌｌ）Ｔ細胞反応の判断因子として、増殖がアッセイされた。この反応は、最大６週間維持された。
【０１３９】
さらに、免疫抑制性Ｔａｔは、抗原特異的免疫抑制を生じる（図７）。４群のマウスは、第０日に免疫され、第７日に、Ｔａｔ／ｐ２４寛容原（Ａｇ＋Ｔｏｌ）５μｇ又はコントロールとしてアビジン−ｐ２４（Ａｇ単独）５μｇのいずれかを含むアジュバントエマルジョンによって免疫を高められた。第１４日目には、流入（ｄｒａｉｎｉｎｇ）リンパ節細胞が採取され、抗原（特異的、組み換えｐ２４、１μ／ｍＬ）又は抗Ｔ細胞レセプターモノクローナル抗体（非特異的、２Ｃ１１、１０μｇ／ｍＬ）のいずれかが加えられ、１０５細胞／マイクロタイターウェルで十分に刺激された。トリチウム化したチミジン取り込み（ＣＰＭ）は、培養第４日目に液体シンチレーションによって定量した。特異的Ａｇ＋Ｔｏｌ反応は、Ａｇ単独と比較して９８％抑制され、刺激剤なしで培養した細胞と見分けがつかなかった。
【０１４０】
実施例３
Ｔａｔ抑制はＡＲｅｇｓに媒介される
Ｔａｔ媒介抗原特異的抑制は、ＣＤ１４＋ＦａｓＬ＋マクロファージのトランス（細胞内）活性を通じて媒介される（図８）。マウスでは、Ｔａｔは、Ｔ細胞レベルで耐性化し、図６に示される条件下での最初の処置後、少なくとも６週間維持された。単球のためにＰｅｒｃｏｌｌ遠心分離によって濃縮したヒト抹消血単核細胞（ＰＢＭＣ）集団は、５％ウシ胎子血清（ＦＣＳ、コントロール）、Ｔａｔ（５０ｎＭ）、又はＬＰＳ（１００ｎｇ／ｍＬ）のいずれかを含む培地で４日間培養された。採取された細胞は、蛍光（抗ｆｌ１）抗ＦａｓＬモノクローナル抗体（Ｍａｂ）、（ＢＤファーミンゲンのαＦａｓＬ−ＦＩＴＣ、Ｎｏｋ１）及び抗ＣＤ１４ローダミン標識Ｍａｂ（ＢＤバイオサイエンスのαＣＤ１４ｆｌ２、ＣＤ１４は、マクロファージ（Ｍφ）に特異的な判断因子）にて二重染色された。細胞は、活性（前方の散布）、ＣＤ１４発現（Ｒ２、パーセントＭφ）及びＦａｓＬの誘導（ＭＦＩ）をＦＡＣＳｃａｎ（ベクトンディッキンソン）にて解析した。Ｔ細胞集団（Ｒ１）は、ＣＤ１４−であり、ＦａｓＬを発現しなかった。２、３、５又は６日培養した後に採取した細胞からは、第４日に採取したＰＢＭＣと、同様の結果が得られる。
【０１４１】
ヒト細胞において、Ｔａｔ活性マクロファージは、制御性及び免疫抑制性ＡＰＣマクロファージ制御因子（ＡＲｅｇｓ）である（図９）。マクロファージにおけるＦａｓＬ誘導を通じて、ヘルパーＴ細胞回復反応の喪失をもたらすＴａｔ免疫抑制の経路を特定するため、Ｔ細胞増殖アッセイが、回復抗原、ｔａｔ及びＦａｓＬアンタゴニストとともに使用された。図９Ａでは、１個体由来のヒトＰＢＭＣが５日間、培地（図示せず）、破傷風抗原（Ａｇ、０．３Ｌｆ／ｍＬ）、さらに５０ｎＭ  Ｔａｔを追加した抗原（Ａｇ＋Ｔａｔ）又は５０ｎＭのＴａｔ及びマクロファージにおける表面ＦａｓＬ発現をブロックする組み換えｓＦａｓタンパク質（２５μｇ／ｍＬ）とＡｇ（Ａｇ＋Ｔａｔ＋ｓＦａｓ）をさらに追加した抗原のいずれかにおいて、三群に培養された。トリチウム化したチミジンが最後に１８時間にわたって追加され、結果を刺激インデックスとしてグラフ化した（刺激培地の平均ｃｐｍ／コントロール培地の平均ｃｐｍ）。結果は、３つの同様の実験を表す。低濃度Ｔａｔ（５０ｎＭ）、Ｔａｔ誘導免疫抑制は、可溶性Ｆａｓの追加によって完全に回復したのみならず、これらの条件下では、Ｔａｔは実際に刺激性（抗原治療のみの場合と比較して１４１％）となった。図９Ｂには、破傷風又はカンジダ抗原のみ（Ａｇ）のいずれかで６日間培養されたＢＰＢＭＣの増殖を、Ｔａｔ（Ａｇ＋Ｔａｔ、１２５ｎＭ）、又はＴａｔ（１２５ｎＭ）及びアンタゴニスト性抗Ｆａｓ抗体、ＺＢ４（２５０μｇ／ｍＬ、アップステートバイオテクノロジー社）も同様に追加された（Ａｇ＋Ｔａｔ＋αＦａｓ）培地と比較して示す。結果は、３つの同様の実験を示す。
【０１４２】
実施例４
単球の分化に関するＩｎ  Ｖｉｔｒｏバイオアッセイ
ｉｎ  ｖｉｔｏにおける高感度単球Ｔａｔバイオアッセイが、本開示に係るＴａｔタンパク質の免疫抑制性又は免疫促進性活性の評価に使用された。本アッセイは、標準密度勾配富化工程又は当該技術分野で公知の他の細胞単離プロトコルを用いて実質的にヒト末梢血から精製した新鮮な単球を利用する。実質的に精製された単球は、洗浄され、そして１０％のＦＢＳが添加されたＲＰＭＩ−１６４０で、３７℃で培養された。
【０１４３】
ｉｎ  ｖｉｔｒｏ高感度単球Ｔａｔバイオアッセイは、ポジティブコントロールＦａｓＬ、誘導化合物）及びネガティブコントロール（非活性化合物が追加された培地）を使用して行われた。追加の適切なポジティブコントロールは、これらに限定されないが、リポ多糖類（ＬＰＳ）、及び又は腫瘍壊死因子（ＴＮＦ−α）をそれぞれ最終濃度１００ｎｇ／ｍＬ及び５０ｎｇ／ｍＬで含む。試験サンプル（Ｔａｔ調整）は、Ｔａｔ、酸化Ｔａｔ、及び他のＴａｔ誘導体及び突然変異体を含む最終濃度５０ｐＭから５０ｎＭに調整された。
【０１４４】
実質的に精製された単球と個々に混合された試験サンプル及びコントロールは、１０６細胞／ｍＬの密度で、ＲＰＭＩ−１６４０と１０％ＦＢＳ（本開示では集合的にアッセイ用培養物と呼ぶ）を含む丸底チューブに播種された。アッセイ用培養物は、その後、適切な期間、好ましくは５から６日間、３７℃で、５％ＣＯ２環境で培養された。
【０１４５】
培養期間の終わりに、細胞は、各アッセイ用培養物から取り除かれ、任意の誘導化ＦａｓＬ発現（ＡＲｅｇｓへの分化の測定のため）又はＣＤ８６発現（樹状細胞における分化のため）の存在が抗ＦａｓＬ又は抗ＣＤ８６抗体及び適切な蛍光検出剤によって染色することで検出された。培養物が染色された後、蛍光活性化細胞選別器（ＦＡＳＣＳ）を用いて蛍光が検出された。コントロール染色は、蛍光検出システムのみを使用して実施され、アッセイ用培養物に見られる特異的抗ＦａｓＬ又は抗ＣＤ８６染色から差し引かれた。所与のアッセイ用培養物におけるＦａｓＬポジティブ細胞の割合が高いほど、アッセイ用培養物における試験サンプルの免疫抑制物は多かった。反対に、アッセイ用培養物にＣＤ８６ポジティブ細胞が圧倒的に多いと、試験サンプルは免疫刺激性であると識別された。ネガティブコントロールは、常に抗体に対して非反応性であり、ポジティブコントロールは所定の範囲内であった。
【０１４６】
実施例５
Ｔａｔ誘導体の合成
合成ペプチドは、標準Ｆｍｏｃ化学により、ＣＳ３３６Ｘ自動合成器（カリフォルニア、メンローパークのコスモバイオ社）を使用して作成された。このペプチドは、７つのシステインの存在と適合するトリフルオロ酢酸開裂／脱保護混合物を使用して、樹脂から解離された。精製は、逆相ＨＰＬＣを使用して行われた。最終生成物は、Ｈ２Ｏ／アセトニトリルで凍結乾燥された。各合成物の一部をＡｌｅｘａ−４８８にて標識された。全ての合成Ｔａｔ誘導体の純度は９５％を超えた。合成ペプチドは、使用前に、０．１ｍＭジチオスレイトールの存在下でリン酸緩衝液に戻された。
【０１４７】
実施例６
Ｔａｔ誘導体のｉｎ  ｖｉｔｒｏ活性
ヒト単球が２４〜２８時間Ｔａｔ誘導体（配列番号７、Ｎａｎｉ−Ｐ２）（図１０）又はリポ多糖類（ＬＰＳ）（図１１）とともに培養され、その後細胞が洗浄され、蛍光標識ＣＤ８６で染色された。Ｔａｔ誘導体は、ＣＤ８６の方がＩＳＳ（ＴＬＲ）又はＬＰＳよりも多くの発現が刺激された。
【０１４８】
実施例７
Ｔリンパ球及び単球細胞株におけるＴａｔ誘導体の生きた細胞の造影
ジャーカット細胞株（アメリカンタイプカルチャーコレクションのクローンＥ６−１）がＲＰＭＩ−１６４０（ＧＩＢＣＯ）、１０％熱不活性化ＦＢＳ（ＧＩＢＣＯ）、５０Ｕペニシリン／５０μｇ／ｍｌストレプトマイシン（ＧＩＢＣＯ）、及び２ｍＭ  Ｌ−グルタミン（ＧＩＢＣＯ）において、３７℃、５％ＣＯ２にて維持された。Ｕ９３７細胞（アメリカンタイプカルチャーコレクション）は、ＲＰＭＩ−１６４０（ＧＩＢＣＯ）、１０％熱不活性化ＦＢＳ、５０Ｕペニシリン、５０μｇ／ｍｌストレプトマイシン、及び２ｍＭ  Ｌ−グルタミン（ＧＩＢＣＯ）、１０ｍＭのＨＥＰＥＳ（ＧＩＢＣＯ）、及び０．００５％βメルカプトエタノール（シグマアルドリッチ）において、３７℃、５％ｃＣＯ２にて維持された。
【０１４９】
１００万個の生きたジャーカット又はＵ９３７が完全培養培地にて６０〜１２０分間、３７℃、５％ＣＯ２にて、５μＭのＡｌｅｘａ４８８で標識した合成Ｔａｔ誘導体を添加し又は追加しないで培養された。細胞は、０．１％の熱不活性化ＦＢＳ、１ｍＭのＥＤＴＡを含むＰＢＳにて洗浄され、ＨＯＥＣＨＳＴ−ＮｕｃＢｌｕｅ  Ｌｉｖｅ  Ｃｅｌｌ  Ｓｔａｉｎ（分子プローブ）を２滴／ｍＬ細胞懸濁液に追加することで染色された。細胞は、生きた細胞の造影が完了するまで氷上で保持された。
【０１５０】
細胞がガラス底皿（マトテク社）に置かれ、Ｐｌａｎ−Ｎｅｏｆｌｕｏｒ（１００ｘ／１．３対物レンズ）を用いたＺｅｉｓｓ  Ａｘｉｏ  Ｏｂｓｅｒｖｅｒ  Ｚ１顕微鏡（カールツァイス）で撮像された。３６５ｎｍ及び４７０ｎｍのＬＥＤ（カールツァイスのコリブリ）を使用してＨＯＥＳＣＨＴ染色ＤＮＡ及びＡｌｅｘａ４８８標識タンパク質を活性化した。発光は、標準ＤＡＰＩ及びＦＩＴＣ蛍光フィルターにて収集された。蛍光及び位相差画像は、Ｏｒｃａ  ＥＲ冷却ＣＣＤカメラ（浜松ホトニクス）にて収集された。
【０１５１】
図１２及び１３に描画された結果は、ｉｎ  ｖｉｔｒｏでの合成Ｔａｔ誘導体のＴリンパ球及び単球細胞株への侵入能力を示す。Ａｌｅｘａ４８８標識Ｔａｔ誘導体にて処理されたジャーカットＴ細胞（図１２）及びＵ９３７単球（図１３）は、細胞取り込み及び蛍光標識タンパク質の細胞核局在を示し、細胞核内及び周辺に局在する能力を備える細胞浸透ペプチドとしてのこれらの分子の応用を強調している。
【０１５２】
実施例８
Ｔａｔ誘導体処理細胞の蛍光活性化細胞選別
ヒト末梢血単核細胞（ＰＢＭＣ）は、ＡＣＣＵＳＰＩＮ（商標）遠心分離管（シグマアルドリッチ）を使用し、ヒストパック分離溶媒を用いた密度勾配遠心分離により全血から単離された。ＰＢＭＣ培養は、細胞密度１×１０６細胞／ｍＬで、１２ウエル組織培養プレートにて、ＲＰＭＩ−１６４０、１０％の熱不活性化ウシ胎子血清、５０Ｕ  ペニシリン／５０μｇ／ｍＬストレプトマイシン、及び２ｍＭ  Ｌグルタミンにてなされた。ＰＢＭＣは、刺激なし、１μｇ／ｍｌ  ＬＰＳ（シグマアルドリッチ）、１００ｎｇ／ｍｌ  ＴＮＦ−α（ペプロテック）、又は１μｇ／ｍｌ合成Ｔａｔ誘導体（配列番号９）のいずれかの存在下で、３７℃、５％ＣＯ２にて、培養された。３〜５日後、細胞が採取され、洗浄され、及びマウス抗ヒトＣＤ−１４アロフィコシアニン（ＡＰＣ）コンジュゲートモノクローナル抗体（ＢＤバイオサイエンスのクローンＭ５Ｅ２）、又はマウス抗ヒトＦａｓリガンド蛍光（ＦＩＴＣ）コンジュゲートモノクローナル抗体（クローンＳＢ９３ａ、サザンバイオテック）にて染色された。ＢＤ  ＬＳＲ  ＩＩフローサイトメーター（ＢＤバイオサイエンス）にて蛍光活性化細胞選別（ＦＡＣＳ）を行う前に、生存率を評価するためヨウ化プロピジウムを添加した。
【０１５３】
ヒトＰＢＭＣのｉｎ  ｖｉｔｒｏにおける細胞表面ＣＤ１４及びＦａｓＬを刺激及び促進するＴａｔ誘導体の能力を示す結果を、ＦＡＳＣＳによる非刺激コントロールと比較して、図１４〜１７に示す。この結果は、存在するＡＲｅｇ細胞が、Ｔ細胞免疫反応を抑制することができることを示す。
【０１５４】
最後に、本明細書の態様を具体的な実施の形態を示して強調しているが、当業者であれば、これらの開示の形態は、開示した対象の原理の説明であるにすぎないことは、容易に理解するであろう。このため、開示対象は、開示した特定の方法、プロトコル、及び／又は試薬等に限定されないことは理解されるべきである。従って、本明細書の精神と乖離することなく、開示の教示に従って開示対象の構成に対する様々な修正又は変更又は代替を行うことができる。最後に、本開示の用語は、特定の形態の説明のみを目的とするものであり、請求項だけにより定義される本発明の範囲を制限することは意図しない。従って、本発明は、開示又は記載されたままに正確に限定されない。
【０１５５】
本発明の特定の態様は、開示され、本発明を実行する発明者が既知であるベストモードを含む。もちろん、これら開示された形態の変更は、前述の記載を読む当業者には明白なものとなるであろう。発明者は、当業者がこのような変更を適切に採用することを期待し、発明者は具体的な開示とは異なる方法で実施されることを意図している。従って、本発明は、適用される法律により許可されたものとして添付された請求項に列挙された対象の全ての修正、及び等価物を含む。さらに、本開示にて特段の示唆がなく又は文脈により明確な矛盾がない場合、全ての可能な変更における上述した形態の任意の組み合わせは、本発明に含まれる。
【０１５６】
本発明の代替的な形態、要素、又はステップのグループ分けは、限定として解釈されない。各グループのメンバーは、個別に又は本開示に係る他のグループのメンバーとの任意の組み合わせで参照及びクレームされ得る。１つの又は複数のグループのメンバーは便宜及び／又は特許性の理由で、グループに包含又は削除されることが予測される。このようないずれかの包含又は削除が発生する場合、明細書は、修正され、そして添付した請求項にて使用される全マーカッシュ群の文書による説明に記載されるグループを含むとみなされる。
【０１５７】
特段の指示がない場合、本明細書及び請求項にて使用される特性、項目、量、パラメータ、特性、期間等を表現する全てのメンバーは、全ての場合において、語句「約」によって修飾されていると理解される。本開示の語句「約」は、その特性、項目、量、パラメータ、特性、又は期間が、記述された特性、項目、量、パラメータ、特性、又は期間の上下±１０パーセントの値を含むことを意味する。従って、反対の示唆がない限り、本明細書及び添付した請求項にて述べられた数値パラメータは、変化する可能性のある近似値である。最低限でも、請求項の範囲に等価物の原理の適用を限定する意図はなく、各数値は、少なくとも報告された有効数字の数を考慮し、また通常の丸め技術を適用することにより解釈されるべきである。本発明の広い範囲を記述している数値範囲及び値は、可能な限り正確に報告されている。しかし、任意の範囲又は値は、本質的にそれぞれの測定試験にて見られる標準偏差に起因する特定の誤差を必ず含む。本開示に係る値の数値範囲の列挙は、範囲に入る別個の数値個々に参照する簡易的な方法として提供する意図があるにすぎない。本開示にて別段の示唆がない場合は、数値範囲の個別の値は、本開示にそれぞれが引用されているかのように本明細書に組み込まれる。
【０１５８】
本発明の記事の文身約にて使用される語句「ａ」、「ａｎ」、「ｔｈｅ」及び類似する参照は（特に以下の請求項の文脈において）、本開示にて別段の示唆がない、又は明らかに文脈に矛盾していない場合は、単数形及び複数形の両方を含むと解釈されるべきである。本開示に係る全ての方法は、本開示にて別段の示唆がなく、又は明らかに文脈に矛盾していない場合は、任意の適切な順序で実施され得る。本開示にて提供されるいずれか及び全ての例、又は代表的な言語（例えば、「例えば」）は、本発明の理解をよりよくする意図に過ぎず、又別段にて請求された本発明の範囲の制限を提起するものではない。本明細書のいずれの言葉も、本発明の実施に必要な非請求要素を示唆するものとして解釈されるべきでない。
【０１５９】
本開示に係る特定の態様は、言語からなる又は本質的に言語からなる請求項にてさらに限定され得る。請求項にて使用される場合、補正ごとに提出又は追加されるとしても、推移する語句「からなる」は、請求項にて特定されていない要素、ステップ、又は成文を排除する。推移する語句「本質的に〜からなる」は、特定のマテリアル又はステップ及び基本的並びに新規な特性に実質的に影響を与えないものに、請求の範囲を限定する。請求項に係る本発明の態様は、本開示に本質的に又は明確に記述されており、また実行可能なものにされている。
【０１６０】
本明細書にて引用及び特定された全ての特許、特許公報、及び他の出版物は、本発明と関連して使用され得る可能性がある、そのような出版物中に記載されている組成物及び方法を記載及び開示する目的で、個別に及び明示的に参照によりその全体が本開示に組み込まれる。これらの出版物は、単に、その開示が本発明の出願日前であるため提供されている。この点に関しては、発明者が、先行発明の長所又はその他の理由により、これらの開示に先行する権利を有さないことをみとめるものとして解釈されるべきではない。全ての日付に関する記載又はこれらの文書の内容に関する表現は、出願人が入手可能な情報に基づいたものであり、日付又はこれらの文書の正確性についていかなる承認も構成しない。
【０１６１】
本出願は、２０１２年１２月６日に出願された米国仮特許出願第６１／７３４，１３５号及び２０１３年９月２３日に出願された第６１／８８１，２６６号の利益を主張するものであり、両出願の内容は、その全体が参照により本明細書に組み入れられる。
【０１６２】
［付記］
［付記１］
免疫抑制性ヒト免疫不全ウイルス（ＨＩＶ）、ＳＩＶ  免疫抑制性転写トランスアクチベーター（Ｔａｔ）タンパク質、無毛又は人工免疫抑制性配列由来の配列を含む転写因子（ＴＦ）ドメイン、
レンチウイルスＴａｔ又はデフェンシン分子由来のシステインリッチ領域であるドメイン、及び、
レンチウイルスＴａｔタンパク質由来のＣ−末端領域であるドメイン、
を示される順序で含むアミノ酸配列を含む、免疫抑制性転写トランスアクチベーター（Ｔａｔ）誘導体ポリペプチド。
【０１６３】
［付記２］
前記ＨＩＶは、ＨＩＶ−１又はＨＩＶ−２である、付記１に記載の免疫抑制性Ｔａｔ誘導体ポリペプチド。
【０１６４】
［付記３］
レンチウイルスＴａｔタンパク質由来のアルギニンリッチドメインをさらに含む、付記１に記載の免疫抑制性Ｔａｔ誘導体ポリペプチド。
【０１６５】
［付記４］
前記ＴＦドメインの少なくとも１つの前記アミノ酸が保存的アミノ酸置換で修飾されている、付記１に記載の免疫抑制性Ｔａｔ誘導体ポリペプチド。
【０１６６】
［付記５］
前記レンチウイルスＴａｔは、ＨＩＶ−１、ＨＩＶ−２、ＳＩＶ、ＦＩＶ、又はＥＩＡＶ由来である、付記１に記載の免疫抑制性Ｔａｔ誘導体ポリペプチド。
【０１６７】
［付記６］
前記ＴＦドメインは、Ｎ−末端に（ＰＶＤＰＲＬＥＰＷＫＨＰＧＳＱＰ）ｎ（ｎ＝２〜１０）を含む反復配列をさらに含む、付記１に記載の免疫抑制性Ｔａｔ誘導体ポリペプチド。
【０１６８】
［付記７］
前記ＴＦドメインは、配列番号３６、３９、４４、４８、５０、５４、５９、６０又は６１のうちの１つのアミノ酸配列を含む、付記１に記載の免疫抑制性Ｔａｔ誘導体ペプチド。
【０１６９】
［付記８］
前記システインリッチドメインは、配列番号３７、４０、４１、４３、４５、４７、４９、５１、５３、５５、５７、５８、６２、６３、６４又は７０のうちの１つのアミノ酸配列を含む、付記１に記載の免疫抑制性Ｔａｔ誘導体ペプチド。
【０１７０】
［付記９］
前記Ｃ−末端ドメインは、配列番号３８、４２、４６、４７、４９、５２、５３、６８又は７１のうちの１つのアミノ酸配列を含む、付記１に記載の免疫抑制性Ｔａｔ誘導体ペプチド。
【０１７１】
［付記１０］
前記システインリッチ領域及び前記Ｃ−末端領域はいずれも同じ源由来であり、組み合わされたシステインリッチ及びＣ−末端領域の前記アミノ酸配列は配列番号４７、４９又は５３のうちの１つである、付記１に記載の免疫抑制性Ｔａｔ誘導体ペプチド。
【０１７２】
［付記１１］
前記免疫抑制性Ｔａｔ誘導体ポリペプチドは、配列番号９〜１１、１３〜３５又は６９のうちの１つに対して、８５％超の配列同一性を有する、付記１に記載の免疫抑制性Ｔａｔ誘導体ポリペプチド。
【０１７３】
［付記１２］
前記免疫抑制性Ｔａｔ誘導体ポリペプチドは、配列番号９〜１１、１３〜３５又は６９のうちの１つに対して、９０％超の配列同一性を有する、付記１に記載の免疫抑制性Ｔａｔ誘導体ポリペプチド。
【０１７４】
［付記１３］
前記免疫抑制性Ｔａｔ誘導体ポリペプチドは、配列番号９〜１１、１３〜３５又は６９のうちの１つに対して、９５％超の配列同一性を有する、付記１に記載の免疫抑制性Ｔａｔ誘導体ポリペプチド。
【０１７５】
［付記１４］
付記１に記載の１種以上の免疫抑制性Ｔａｔ誘導体ポリペプチド及び薬学上許容される賦形剤を含む医薬組成物。
【０１７６】
［付記１５］
前記免疫抑制性Ｔａｔ誘導体ポリペプチドは、配列番号９〜１１、１３〜３５又は６９のうちの１つ以上に対して８５％超の配列同一性を有する、付記１４に記載の医薬組成物。
【０１７７】
［付記１６］
異常免疫反応により特徴付けられる疾患の治療方法であって、
付記１に記載の１種以上の治療上有効な量の免疫抑制性Ｔａｔ誘導体ポリペプチドを、それを必要とする対象に投与することを含み、それによって、免疫システムを抑制し疾患を治療する、方法。
【０１７８】
［付記１７］
前記治療は、抗原提示細胞制御性マクロファージ（ＡＲｅｇｓ）におけるＦａｓリガンドの発現を促進する、付記１６に記載の方法。
【０１７９】
［付記１８］
前記ＡＲｅｇｓはＣＤ１４＋マクロファージである、付記１７に記載の方法。
【０１８０】
［付記１９］
前記免疫抑制性Ｔａｔ誘導体ポリペプチドは、配列番号９〜１１、１３〜３５又は６９のうちの１つと８５％超の配列同一性を有する、付記１６に記載の方法。
【０１８１】
［付記２０］
前記疾患は、自己免疫、神経変性又は炎症関連疾患である、付記１６に記載の方法。
【０１８２】
［付記２１］
前記自己免疫疾患は、急性散在性脳脊髄炎（ＡＤＥＭ）、アジソン病、アレルギー、アレルギー性鼻炎、アルツハイマー型認知症、抗リン脂質抗体症候群（ＡＰＳ）、関節炎、ぜんそく、自己免疫不全症候群、自己免疫性溶血性貧血、自己免疫性肝炎、自己免疫性内耳疾患、水疱性類天疱瘡、セリアック病、シャーガス病、慢性閉塞性肺疾患（ＣＯＰＤ）、１型糖尿病（ＩＤＤＭ）、湿疹、子宮内膜症、消化器疾患、グッドパスチャー症候群、グレーブス病、ギラン−バレー症候群（ＧＢＳ）、橋本甲状腺炎、汗腺膿瘍、突発性血小板減少性紫斑病、炎症性大腸炎、炎症性皮膚疾患、間質性膀胱炎、尋常性狼瘡、限局性強皮症、多発性硬化症（ＭＳ）、重症筋無力症、ミオパシー、ナルコレプシー、ニューロミオトニア、尋常性天痘瘡、悪性貧血、原発性胆汁性肝硬変、乾癬、再発性播種性脳脊髄炎、リウマチ熱、統合失調症、強皮症、シェーグレン症候群、皮膚疾患、腱滑膜炎、ブドウ膜炎、血管炎、又は白斑である、付記２０に記載の方法。
【０１８３】
［付記２２］
前記炎症に関連する疾患は、にきび、酸の逆流／胸焼け、アレルギー、アレルギー性鼻炎、アルツハイマー型認知症、虫垂炎、動脈炎、関節炎、ぜんそく、アテローム性動脈硬化、自己免疫疾患、亀頭炎、眼瞼炎、細気管支炎、気管支炎、滑液包炎、癌、心臓炎、セリアック病、蜂巣炎、子宮頸管炎、胆管炎、胆嚢炎、絨毛羊膜炎、慢性閉塞性肺疾患（ＣＯＰＤ）、肝硬変、大腸炎、結膜炎、膀胱炎、一般的な風邪、涙腺炎、認知症、皮膚炎、皮膚筋炎、湿疹、肺気腫、脳炎、心内膜炎、子宮内膜炎、腸炎、全腸炎、上顆炎、精巣上体炎、筋膜炎、結合組織炎、胃炎、胃腸炎、歯肉炎、糸球体腎炎、舌炎、心疾患、肝炎、汗腺膿瘍、高血圧、回腸炎、インスリン抵抗性、間質性膀胱炎、虹彩炎、虚血性心疾患、角膜炎、角結膜炎、喉頭炎、尋常性狼瘡、乳腺炎、乳様突起炎、髄膜炎、代謝症候群（エックス症候群）、偏頭痛、多発性硬化症、骨髄炎、心筋炎、ミオパシー、筋炎、腎炎、神経障害、肥満、臍炎、卵巣炎、精巣炎、骨軟骨炎、骨減少症、骨粗鬆症、骨炎、耳炎、膵炎、パーキンソン病、耳下腺炎、骨盤炎症性疾患、心膜炎、腹膜炎、喉頭炎、静脈炎、胸膜炎、肺炎、直腸炎、前立腺炎、乾癬、歯髄炎、腎盂腎炎、門脈炎、リウマチ熱、鼻炎、卵管炎、唾液腺炎、副鼻腔炎、痙攣性結腸、口内炎、滑膜炎、腱炎、腱症、腱滑膜炎、血栓性静脈炎、へんとう炎、三角炎、腫瘍、尿道炎、ブドウ膜炎、膣炎、血管炎、又は外陰炎である、付記２０に記載の方法。
【０１８４】
［付記２３］
前記神経変性疾患は、アレキサンダー病、アルパーズ病、アルツハイマー型認知症、アミロイド症、筋萎縮性側索硬化症、不安神経症、毛細血管拡張性運動失調、注意欠陥障害、カナバン病、中枢神経系損傷、シャルコーマリートゥース病、コケーン症候群、大脳皮質基底核変性症、クロイツフェルトヤコブ病、鬱病、脳炎（例えば、細菌性、寄生性、菌性又はウイルス性）、フリードライヒ運動失調症、前頭側頭型認知症、遺伝性痙性対麻痺、ギランバレー症候群（及びその異型である急性運動軸索型ニューロパチー、急性炎症性脱髄性多発ニューロパチー及びフィッシャー症候群）、ＨＩＶ／ＡＩＤＳによる認知症、ハンチントン病、神経系への虚血性障害、ケネディ病、クラッベ病、レビー小体型認知症、マシャドジョセフ病、髄膜炎（例えば、細菌性、寄生性、菌性又はウイルス性）、多発性硬化症、多系統萎縮症、神経系の外傷（例えば、衝撃による脳障害、脊髄損傷、神経系の外傷性損傷）、神経障害（例えば、化学療法により誘導された神経障害、糖尿病に関連する神経障害及び末梢の神経障害）、パーキンソン病、ペリツェウスメルツバッハー病、ピック病、原発性側索硬化症、プリオン病、進行性核上性麻痺、レフスム病、サンドホフ病、統合失調症、シルダー病、脊髄小脳萎縮症、スティール−リチャードソン−オルゼウスキー病、脳卒中、脊髄癆、又は血管性認知症である、付記２０に記載の方法。
【０１８５】
［付記２４］
前記方法は、さらに、自己免疫疾患、神経変性疾患又は炎症関連疾患に関連する少なくとも１つの症状を低減するものであり、当該症状は、炎症、疲労、めまい、不快感、熱及び体温の上昇、手及び足の冷えに対する過敏症、筋肉及び関節の衰弱及びこり、体重変化、消化器又は胃腸の問題、低又は高血圧、易刺激性、不安神経症又は鬱病、不妊症又は性的欲求の減少（性欲低下）、血糖変化、及び自己免疫疾患の種類によっては臓器又は組織サイズの増大、又は臓器又は組織の崩壊である、付記１６に記載の方法。
【０１８６】
［付記２５］
前記対象は免疫疾患を持たない、付記１６に記載の方法。
【０１８７】
［付記２６］
前記投与の結果、前記対象の免疫システムは損傷しない、付記１６に記載の方法。
【０１８８】
［付記２７］
前記投与の結果、ＡＲｅｇｓによるサイトカインの分泌は減少する、付記１６に記載の方法。
【０１８９】
［付記２８］
前記免疫抑制性Ｔａｔ誘導体ポリペプチドは、複数回投与される、付記１６に記載の方法。
【０１９０】
［付記２９］
前記免疫抑制性Ｔａｔ誘導体ポリペプチドは、１日１回、週１回、２週間に１回、１ヶ月に１回又は２ヶ月に１回投与される、付記２８に記載の方法。
【０１９１】
［付記３０］
前記投与ステップは、反復投与サイクルを含み、各サイクルは、休薬期間が後に続く定められた期間中に、前記免疫抑制性Ｔａｔ誘導体ポリペプチドを複数回投与することを含み、前記サイクルは複数回繰り返される、付記１６に記載の方法。
【０１９２】
［付記３１］
抗原提示細胞制御性マクロファージ（ＡＲｅｇｓ）におけるＦａｓリガンド（ＦａｓＬ）の発現を促進する方法であって、
付記１に記載の１種以上の治療上有効な量の免疫抑制性Ｔａｔ誘導体ポリペプチドを対象に投与することを含み、それによって、ＡＲｅｇｓにおけるＦａｓＬの発現を促進する、方法。
【０１９３】
［付記３２］
前記ＡＲｅｇｓはＣＤ１４＋マクロファージである、付記３１に記載の方法。
【０１９４】
［付記３３］
前記免疫抑制性Ｔａｔ誘導体ポリペプチドは、配列番号９〜１１、１３〜３５又は６９のうちの１つと８５％超の配列同一性を有する、付記３１に記載の方法。
【０１９５】
［付記３４］
前記疾患は自己免疫、神経変性又は炎症関連疾患である、付記３１に記載の方法。
【０１９６】
［付記３５］
前記対象は免疫疾患を持たない、付記３１に記載の方法。
【０１９７】
［付記３６］
前記投与の結果、前記対象の免疫システムは損傷しない、付記３１に記載の方法。
【０１９８】
［付記３７］
前記投与の結果、ＡＲｅｇｓによるサイトカインの分泌は減少する、付記３１に記載の方法。
【０１９９】
［付記３８］
炎症を低減する方法であって、
付記１に記載の１種以上の治療上有効な量の免疫抑制性Ｔａｔ誘導体ポリペプチドを、それを必要とする対象に投与することを含み、それによって、前記対象における炎症の低減を促進する、方法。
【０２００】
［付記３９］
前記免疫抑制性Ｔａｔ誘導体ポリペプチドは、配列番号９〜１１、１３〜３５又は６９のうちの１つと８５％超の配列同一性を有する、付記３８に記載の方法。
【０２０１】
［付記４０］
前記炎症は自己免疫、神経変性又は炎症関連疾患と関連する、付記３８に記載の方法。
【０２０２】
［付記４１］
前記対象は免疫疾患を持たない、付記３８に記載の方法。
【０２０３】
［付記４２］
前記投与の結果、前記対象の免疫システムは損傷しない、付記３８に記載の方法。
【０２０４】
［付記４３］
治療を必要とする対象における異常免疫反応によって特徴付けられる疾患の治療のための薬剤の製造における１種以上の免疫抑制性Ｔａｔ誘導体ポリペプチドの使用であって、
前記１種以上の免疫抑制性Ｔａｔ誘導体ポリペプチドは、付記１に記載の免疫抑制性Ｔａｔ誘導体ポリペプチドと少なくとも８５％の同一性を有し、前記免疫抑制性Ｔａｔ誘導体ポリペプチドの投与により対象における免疫システムを抑制することによって疾患を治療する、使用。
【０２０５】
［付記４４］
前記治療は、抗原提示細胞制御性マクロファージ（ＡＲｅｇｓ）におけるＦａｓリガンド（ＦａｓＬ）の発現を促進する、付記４３に記載の使用。
【０２０６】
［付記４５］
前記ＡＲｅｇｓはＣＤ１４＋マクロファージである、付記４３に記載の使用。
【０２０７】
［付記４６］
前記免疫抑制性Ｔａｔ誘導体ポリペプチドは、配列番号９〜１１、１３〜３５又は６９のうちの１つと８５％超の配列同一性を有する、付記４３に記載の使用。
【０２０８】
［付記４７］
前記対象は免疫疾患を持たない、付記４３に記載の使用。
【０２０９】
［付記４８］
前記投与の結果、前記対象の免疫システムは損傷しない、付記４３に記載の使用。
【０２１０】
［付記４９］
前記投与の結果、ＡＲｅｇｓによるサイトカインの分泌は減少する、付記４３に記載の使用。
【０２１１】
［付記５０］
前記疾患は、自己免疫、神経変性、又は炎症関連疾患である、付記４３に記載の使用。
【０２１２】
［付記５１］
前記自己免疫疾患は、急性散在性脳脊髄炎（ＡＤＥＭ）、アジソン病、アレルギー、アレルギー性鼻炎、アルツハイマー型認知症、抗リン脂質抗体症候群（ＡＰＳ）、関節炎、ぜんそく、自己免疫不全症候群、自己免疫性溶血性貧血、自己免疫性肝炎、自己免疫性内耳疾患、水疱性類天疱瘡、セリアック病、シャーガス病、慢性閉塞性肺疾患（ＣＯＰＤ）、１型糖尿病（ＩＤＤＭ）、湿疹、子宮内膜症、消化器疾患、グッドパスチャー症候群、グレーブス病、ギラン−バレー症候群（ＧＢＳ）、橋本甲状腺炎、汗腺膿瘍、突発性血小板減少性紫斑病、炎症性大腸炎、炎症性皮膚疾患、間質性膀胱炎、尋常性狼瘡、限局性強皮症、多発性硬化症（ＭＳ）、重症筋無力症、ミオパシー、ナルコレプシー、ニューロミオトニア、尋常性天痘瘡、悪性貧血、原発性胆汁性肝硬変、乾癬、再発性播種性脳脊髄炎、リウマチ熱、統合失調症、強皮症、シェーグレン症候群、皮膚疾患、腱滑膜炎、ブドウ膜炎、血管炎、又は白斑である、付記５０に記載の使用。
【０２１３】
［付記５２］
前記炎症関連疾患は、にきび、酸の逆流／胸焼け、アレルギー、アレルギー性鼻炎、アルツハイマー型認知症、虫垂炎、動脈炎、関節炎、ぜんそく、アテローム性動脈硬化、自己免疫疾患、亀頭炎、眼瞼炎、細気管支炎、気管支炎、滑液包炎、癌、心臓炎、セリアック病、蜂巣炎、子宮頸管炎、胆管炎、胆嚢炎、絨毛羊膜炎、慢性閉塞性肺疾患（ＣＯＰＤ）、肝硬変、大腸炎、結膜炎、膀胱炎、一般的な風邪、涙腺炎、認知症、皮膚炎、皮膚筋炎、湿疹、肺気腫、脳炎、心内膜炎、子宮内膜炎、腸炎、全腸炎、上顆炎、精巣上体炎、筋膜炎、結合組織炎、胃炎、胃腸炎、歯肉炎、糸球体腎炎、舌炎、心疾患、肝炎、汗腺膿瘍、高血圧、回腸炎、インスリン抵抗性、間質性膀胱炎、虹彩炎、虚血性心疾患、角膜炎、角結膜炎、喉頭炎、尋常性狼瘡、乳腺炎、乳様突起炎、髄膜炎、代謝症候群（エックス症候群）、偏頭痛、多発性硬化症、骨髄炎、心筋炎、ミオパシー、筋炎、腎炎、神経障害、肥満、臍炎、卵巣炎、精巣炎、骨軟骨炎、骨減少症、骨粗鬆症、骨炎、耳炎、膵炎、パーキンソン病、耳下腺炎、骨盤炎症性疾患、心膜炎、腹膜炎、喉頭炎、静脈炎、胸膜炎、肺炎、直腸炎、前立腺炎、乾癬、歯髄炎、腎盂腎炎、門脈炎、リウマチ熱、鼻炎、卵管炎、唾液腺炎、副鼻腔炎、痙攣性結腸、口内炎、滑膜炎、腱炎、腱症、腱滑膜炎、血栓性静脈炎、へんとう炎、三角炎、腫瘍、尿道炎、ブドウ膜炎、膣炎、血管炎、又は外陰炎である、付記５０に記載の使用。
【０２１４】
［付記５３］
前記神経変性疾患は、アレキサンダー病、アルパーズ病、アルツハイマー型認知症、アミロイド症、筋萎縮性側索硬化症、不安神経症、毛細血管拡張性運動失調、注意欠陥障害、カナバン病、中枢神経系損傷、シャルコーマリートゥース病、コケーン症候群、大脳皮質基底核変性症、クロイツフェルトヤコブ病、鬱病、脳炎（例えば、細菌性、寄生性、菌性又はウイルス性）、フリードライヒ運動失調症、前頭側頭型認知症、遺伝性痙性対麻痺、ギランバレー症候群（及びその異型である急性運動軸索型ニューロパチー、急性炎症性脱髄性多発ニューロパチー及びフィッシャー症候群）、ＨＩＶ／ＡＩＤＳによる認知症、ハンチントン病、神経系への虚血性障害、ケネディ病、クラッベ病、レビー小体型認知症、マシャドジョセフ病、髄膜炎（例えば、細菌性、寄生性、菌性又はウイルス性）、多発性硬化症、多系統萎縮症、神経系の外傷（例えば、衝撃による脳障害、脊髄損傷、神経系の外傷性損傷）、神経障害（例えば、化学療法により誘導された神経障害、糖尿病に関連する神経障害及び末梢の神経障害）、パーキンソン病、ペリツェウスメルツバッハー病、ピック病、原発性側索硬化症、プリオン病、進行性核上性麻痺、レフスム病、サンドホフ病、統合失調症、シルダー病、脊髄小脳萎縮症、スティール−リチャードソン−オルゼウスキー病、脳卒中、脊髄癆、又は血管性認知症である、付記５０に記載の使用。
【０２１５】
［付記５４］
前記免疫抑制性Ｔａｔ誘導体ポリペプチドは、さらに、自己免疫疾患、神経変性疾患又は炎症関連疾患に関連する少なくとも１つの症状を低減するものであり、当該症状は、炎症、疲労、めまい、不快感、熱及び体温の上昇、手及び足の冷えに対する過敏症、筋肉及び関節の衰弱及びこり、体重変化、消化器又は胃腸の問題、低又は高血圧、易刺激性、不安神経症又は鬱病、不妊症又は性的欲求の減少（性欲低下）、血糖変化、及び自己免疫の種類によっては臓器又は組織サイズの増大、又は臓器又は組織の崩壊である、付記４３に記載の使用。
【０２１６】
［付記５５］
前記免疫抑制性Ｔａｔ誘導体ポリペプチドは、複数回投与される、付記４３に記載の使用。
【０２１７】
［付記５６］
前記免疫抑制性Ｔａｔ誘導体ポリペプチドは、１日１回、週１回、２週間に１回、１ヶ月に１回又は２ヶ月に１回投与される、付記５５に記載の使用。
【０２１８】
［付記５７］
対象において、抗原提示細胞制御性マクロファージ（ＡＲｅｇｓ）におけるＦａｓリガンド（ＦａｓＬ）の発現を促進する薬剤の製造における１種以上の免疫抑制性Ｔａｔ誘導体ポリペプチドの使用であって、
前記１種以上の免疫抑制性Ｔａｔ誘導体ポリペプチドは、付記１に記載の免疫抑制性Ｔａｔ誘導体ポリペプチドと少なくとも８５％の同一性を有し、前記免疫抑制性Ｔａｔ誘導体ポリペプチドの投与によりＡＲｅｇｓにおけるＦａｓＬの発現を促進する、使用。
【０２１９】
［付記５８］
前記免疫抑制性Ｔａｔ誘導体ポリペプチドは、配列番号９〜１１、１３〜３５又は６９のうちの１つと８５％超の配列同一性を有する、付記５７に記載の使用。
【０２２０】
［付記５９］
前記ＡＲｅｇｓはＣＤ１４＋マクロファージである、付記５７に記載の使用。
【０２２１】
［付記６０］
前記疾患は自己免疫、神経変性又は炎症関連疾患である、付記５７に記載の使用。
【０２２２】
［付記６１］
前記対象は免疫疾患を持たない、付記５７に記載の使用。
【０２２３】
［付記６２］
前記投与の結果、前記対象の免疫システムは損傷しない、付記５７に記載の使用。
【０２２４】
［付記６３］
前記投与の結果、ＡＲｅｇｓによるサイトカインの分泌は減少する、付記５７に記載の使用。
【０２２５】
［付記６４］
対象における炎症の軽減のための薬剤の製造における１種以上の免疫抑制性Ｔａｔ誘導体ペプチドの使用であって、
前記１種以上の免疫抑制性Ｔａｔ誘導体ポリペプチドは、付記１に記載の免疫抑制性Ｔａｔ誘導体ポリペプチドと少なくとも８５％の同一性を有し、前記免疫抑制性Ｔａｔ誘導体ポリペプチドの投与により対象における炎症を軽減する、使用。
【０２２６】
［付記６５］
前記免疫抑制性Ｔａｔ誘導体ポリペプチドは、配列番号９〜１１、１３〜３５又は６９のうちの１つと８５％超の配列同一性を有する、付記６４に記載の使用。
【０２２７】
［付記６６］
前記炎症は自己免疫、神経変性又は炎症関連疾患に関連する、付記６４に記載の使用。
【０２２８】
［付記６７］
前記対象は免疫疾患を持たない、付記６４に記載の使用。
【０２２９】
［付記６８］
前記投与の結果、前記対象の免疫システムは損傷しない、付記６４に記載の使用。
【０２３０】
［付記６９］
免疫抑制性ヒト免疫不全ウイルス（ＨＩＶ）、ＳＩＶ  免疫抑制性転写トランスアクチベーター（Ｔａｔ）タンパク質、無毛又は人工免疫抑制性配列由来の配列を含む転写因子（ＴＦ）ドメイン、
レンチウイルスＴａｔ又はデフェンシン分子由来のシステインリッチ領域であるドメイン、及び、
レンチウイルスＴａｔタンパク質由来のＣ−末端領域であるドメイン、
を示される順序で含むアミノ酸配列を含む、免疫抑制性転写トランスアクチベーター（Ｔａｔ）誘導体ポリペプチド。
【０２３１】
［付記７０］
前記ＨＩＶは、ＨＩＶ−１又はＨＩＶ−２である、付記６９に記載の免疫抑制性Ｔａｔ誘導体ポリペプチド。
【０２３２】
［付記７１］
レンチウイルスＴａｔタンパク質由来のアルギニンリッチドメインをさらに含む、付記６９又は７０に記載の免疫抑制性Ｔａｔ誘導体ポリペプチド。
【０２３３】
［付記７２］
前記ＴＦドメインの前記アミノ酸の少なくとも１つが保存的アミノ酸置換で修飾されている、付記６９〜７１のいずれか１つに記載の免疫抑制性Ｔａｔ誘導体ポリペプチド。
【０２３４】
［付記７３］
前記レンチウイルスＴａｔは、ＨＩＶ−１、ＨＩＶ−２、ＳＩＶ、ＦＩＶ、又はＥＩＡＶ由来である、付記６９〜７２のいずれか１つに記載の免疫抑制性Ｔａｔ誘導体ポリペプチド。
【０２３５】
［付記７４］
前記ＴＦドメインは、Ｎ−末端に（ＰＶＤＰＲＬＥＰＷＫＨＰＧＳＱＰ）ｎ（ｎ＝２〜１０）を含む反復配列をさらに含む、付記６９〜７３のいずれか１つに記載の免疫抑制性Ｔａｔ誘導体ポリペプチド。
【０２３６】
［付記７５］
前記ＴＦドメインは、配列番号３６、３９、４４、４８、５０、５４、５９、６０又は６１のうちの１つのアミノ酸配列を含む、付記６９〜７４のいずれか１つに記載の免疫抑制性Ｔａｔ誘導体ペプチド。
【０２３７】
［付記７６］
前記システインリッチドメインは、配列番号３７、４０、４１、４３、４５、４７、４９、５１、５３、５５、５７、５８、６２、６３、６４又は７０のうちの１つのアミノ酸配列を含む、付記６９〜７５のいずれか１つに記載の免疫抑制性Ｔａｔ誘導体ペプチド。
【０２３８】
［付記７７］
前記Ｃ−末端ドメインは、配列番号３８、４２、４６、４７、４９、５２、５３、６８又は７１のうちの１つのアミノ酸配列を含む、付記６９〜７６のいずれか１つに記載の免疫抑制性Ｔａｔ誘導体ペプチド。
【０２３９】
［付記７８］
前記システインリッチ領域及び前記Ｃ−末端領域はいずれも同じ源由来であり、組み合わされたシステインリッチ及びＣ−末端領域の前記アミノ酸配列は配列番号４７、４９又は５３のうちの１つである、付記６９〜７７のいずれか１つに記載の免疫抑制性Ｔａｔ誘導体ペプチド。
【０２４０】
［付記７９］
前記免疫抑制性Ｔａｔ誘導体ポリペプチドは、配列番号９〜１１、１３〜３５又は６９のうちの１つに対して、８５％超の配列同一性を有する、付記６９〜７８のいずれか１つに記載の免疫抑制性Ｔａｔ誘導体ポリペプチド。
【０２４１】
［付記８０］
前記免疫抑制性Ｔａｔ誘導体ポリペプチドは、配列番号９〜１１、１３〜３５又は６９のうちの１つに対して、９０％超の配列同一性を有する、付記６９〜７９のいずれか１つに記載の免疫抑制性Ｔａｔ誘導体ポリペプチド。
【０２４２】
［付記８１］
前記免疫抑制性Ｔａｔ誘導体ポリペプチドは、配列番号９〜１１、１３〜３５又は６９のうちの１つに対して、９５％超の配列同一性を有する、付記６９〜８０に記載の免疫抑制性Ｔａｔ誘導体ポリペプチド。
【０２４３】
［付記８２］
異常免疫反応により特徴付けられる疾患の治療方法であって、
付記１に記載の１種以上の治療上有効な量の免疫抑制性Ｔａｔ誘導体ポリペプチドを、それを必要とする対象に投与することを含み、それによって、免疫システムを抑制し疾患を治療する、方法。
【０２４４】
［付記８３］
抗原提示細胞制御性マクロファージ（ＡＲｅｇｓ）におけるＦａｓリガンド（ＦａｓＬ）の発現を促進する方法であって、
付記１に記載の１種以上の治療上有効な量の免疫抑制性Ｔａｔ誘導体ポリペプチドを対象に投与することを含み、それによって、ＡＲｅｇｓにおけるＦａｓＬの発現を促進する、方法。
【０２４５】
［付記８４］
炎症を低減する方法であって、
付記１に記載の１種以上の治療上有効な量の免疫抑制性Ｔａｔ誘導体ポリペプチドを、それを必要とする対象に投与することを含み、それによって、前記対象における炎症の低減を促進する、方法。
【０２４６】
［付記８５］
前記治療は、抗原提示細胞制御性マクロファージ（ＡＲｅｇｓ）におけるＦａｓリガンドの発現を促進する、付記８２〜８４のいずれか１つに記載の方法。
【０２４７】
［付記８６］
前記ＡＲｅｇｓはＣＤ１４＋マクロファージである、付記８２〜８５のいずれか１つに記載の方法。
【０２４８】
［付記８７］
前記免疫抑制性Ｔａｔ誘導体ポリペプチドは、配列番号９〜１１、１３〜３５又は６９のうちの１つと８５％超の配列同一性を有する、付記８２〜８６のいずれか１つに記載の方法。
【０２４９】
［付記８８］
前記疾患は自己免疫、神経変性又は炎症関連疾患である、付記８２〜８７のいずれか１つに記載の方法。
【０２５０】
［付記８９］
前記自己免疫疾患は、急性散在性脳脊髄炎（ＡＤＥＭ）、アジソン病、アレルギー、アレルギー性鼻炎、アルツハイマー型認知症、抗リン脂質抗体症候群（ＡＰＳ）、関節炎、ぜんそく、自己免疫不全症候群、自己免疫性溶血性貧血、自己免疫性肝炎、自己免疫性内耳疾患、水疱性類天疱瘡、セリアック病、シャーガス病、慢性閉塞性肺疾患（ＣＯＰＤ）、１型糖尿病、（ＩＤＤＭ）湿疹、子宮内膜症、消化器疾患、グッドパスチャー症候群、グレーブス病、ギラン−バレー症候群（ＧＢＳ）、橋本甲状腺炎、汗腺膿瘍、突発性血小板減少性紫斑病、炎症性大腸炎、炎症性皮膚疾患、間質性膀胱炎、尋常性狼瘡、限局性強皮症、多発性硬化症（ＭＳ）、重症筋無力症、ミオパシー、ナルコレプシー、ニューロミオトニア、尋常性天痘瘡、悪性貧血、原発性胆汁性肝硬変、乾癬、再発性播種性脳脊髄炎、リウマチ熱、統合失調症、強皮症、シェーグレン症候群、皮膚疾患、腱滑膜炎、ブドウ膜炎、血管炎、又は白斑である、付記８８に記載の方法。
【０２５１】
［付記９０］
前記炎症関連疾患は、にきび、酸の逆流／胸焼け、アレルギー、アレルギー性鼻炎、アルツハイマー型認知症、虫垂炎、動脈炎、関節炎、ぜんそく、アテローム性動脈硬化、自己免疫疾患、亀頭炎、眼瞼炎、細気管支炎、気管支炎、滑液包炎、癌、心臓炎、セリアック病、蜂巣炎、子宮頸管炎、胆管炎、胆嚢炎、絨毛羊膜炎、慢性閉塞性肺疾患（ＣＯＰＤ）、肝硬変、大腸炎、結膜炎、膀胱炎、一般的な風邪、涙腺炎、認知症、皮膚炎、皮膚筋炎、湿疹、肺気腫、脳炎、心内膜炎、子宮内膜炎、腸炎、全腸炎、上顆炎、精巣上体炎、筋膜炎、結合組織炎、胃炎、胃腸炎、歯肉炎、糸球体腎炎、舌炎、心疾患、肝炎、汗腺膿瘍、高血圧、回腸炎、インスリン抵抗性、間質性膀胱炎、虹彩炎、虚血性心疾患、角膜炎、角結膜炎、喉頭炎、尋常性狼瘡、乳腺炎、乳様突起炎、髄膜炎、代謝症候群（エックス症候群）、偏頭痛、多発性硬化症、骨髄炎、心筋炎、ミオパシー、筋炎、腎炎、神経障害、肥満、臍炎、卵巣炎、精巣炎、骨軟骨炎、骨減少症、骨粗鬆症、骨炎、耳炎、膵炎、パーキンソン病、耳下腺炎、骨盤炎症性疾患、心膜炎、腹膜炎、喉頭炎、静脈炎、胸膜炎、肺炎、直腸炎、前立腺炎、乾癬、歯髄炎、腎盂腎炎、門脈炎、リウマチ熱、鼻炎、卵管炎、唾液腺炎、副鼻腔炎、痙攣性結腸、口内炎、滑膜炎、腱炎、腱症、腱滑膜炎、血栓性静脈炎、へんとう炎、三角炎、腫瘍、尿道炎、ブドウ膜炎、膣炎、血管炎、又は外陰炎である、付記８８に記載の方法。
【０２５２】
［付記９１］
前記神経変性疾患は、アレキサンダー病、アルパーズ病、アルツハイマー型認知症、アミロイド症、筋萎縮性側索硬化症、不安神経症、毛細血管拡張性運動失調、注意欠陥障害、カナバン病、中枢神経系損傷、シャルコーマリートゥース病、コケーン症候群、大脳皮質基底核変性症、クロイツフェルトヤコブ病、鬱病、脳炎（例えば、細菌性、寄生性、菌性又はウイルス性）、フリードライヒ運動失調症、前頭側頭型認知症、遺伝性痙性対麻痺、ギランバレー症候群（及びその異型である急性運動軸索型ニューロパチー、急性炎症性脱髄性多発ニューロパチー及びフィッシャー症候群）、ＨＩＶ／ＡＩＤＳによる認知症、ハンチントン病、神経系への虚血性障害、ケネディ病、クラッベ病、レビー小体型認知症、マシャドジョセフ病、髄膜炎（例えば、細菌性、寄生性、菌性又はウイルス性）、多発性硬化症、多系統萎縮症、神経系の外傷（例えば、衝撃による脳障害、脊髄損傷、神経系の外傷性損傷）、神経障害（例えば、化学療法により誘導された神経障害、糖尿病に関連する神経障害及び末梢の神経障害）、パーキンソン病、ペリツェウスメルツバッハー病、ピック病、原発性側索硬化症、プリオン病、進行性核上性麻痺、レフスム病、サンドホフ病、統合失調症、シルダー病、脊髄小脳萎縮症、スティール−リチャードソン−オルゼウスキー病、脳卒中、脊髄癆、又は血管性認知症である、付記８８に記載の方法。
【０２５３】
［付記９２］
前記方法は、さらに、自己免疫疾患、神経変性疾患又は炎症関連疾患に関連する少なくとも１つの症状を低減するものであり、当該症状は、炎症、疲労、めまい、不快感、熱及び体温の上昇、手及び足の冷えに対する過敏症、筋肉及び関節の衰弱及びこり、体重変化、消化器又は胃腸の問題、低又は高血圧、易刺激性、不安神経症又は鬱病、不妊症又は性的欲求の減少（性欲低下）、血糖変化、及び自己免疫疾患の種類によっては臓器又は組織サイズの増大、又は臓器又は組織の崩壊である、付記８２〜９１のいずれか１つに記載の方法。
【０２５４】
［付記９３］
前記対象は免疫疾患を持たない、付記８２〜９２のいずれか１つに記載の方法。
【０２５５】
［付記９４］
前記投与の結果、前記対象の免疫システムは損傷しない、付記８２〜９３のいずれか１つに記載の方法。
【０２５６】
［付記９５］
前記投与の結果、ＡＲｅｇｓによるサイトカインの分泌は減少する、付記８２〜９４のいずれか１つに記載の方法。
【０２５７】
［付記９６］
前記免疫抑制性Ｔａｔ誘導体ポリペプチドは、複数回投与される、付記８２〜９５のいずれか１つに記載の方法。
【０２５８】
［付記９７］
前記免疫抑制性Ｔａｔ誘導体ポリペプチドは、１日１回、週１回、２週間に１回、１ヶ月に１回又は２ヶ月に１回投与される、付記８２〜９６のいずれか１つに記載の方法。
【０２５９】
［付記９８］
前記投与ステップは、反復投与サイクルを含み、各サイクルは、休薬期間が後に続く定められた期間中に、前記免疫抑制性Ｔａｔ誘導体ポリペプチドを複数回投与することを含み、前記サイクルは複数回繰り返される、付記８２〜９７のいずれか１つに記載の方法。
【０２６０】
［付記９９］
治療を必要とする対象における異常免疫反応によって特徴付けられる疾患の治療のための薬剤の製造における１種以上の免疫抑制性Ｔａｔ誘導体ポリペプチドの使用であって、
前記１種以上の免疫抑制性Ｔａｔ誘導体ポリペプチドは、付記１に記載の免疫抑制性Ｔａｔ誘導体ポリペプチドと少なくとも８５％の同一性を有し、前記免疫抑制性Ｔａｔ誘導体ポリペプチドの投与により対象における免疫システムを抑制することによって疾患を治療する、使用。
【０２６１】
［付記１００］
対象において、抗原提示細胞制御性マクロファージ（ＡＲｅｇｓ）におけるＦａｓリガンド（ＦａｓＬ）の発現を促進する薬剤の製造における１種以上の免疫抑制性Ｔａｔ誘導体ポリペプチドの使用であって、
前記１種以上の免疫抑制性Ｔａｔ誘導体ポリペプチドは、付記１に記載の免疫抑制性Ｔａｔ誘導体ポリペプチドと少なくとも８５％の同一性を有し、前記免疫抑制性Ｔａｔ誘導体ポリペプチドの投与によりＡＲｅｇｓにおけるＦａｓＬの発現を促進する、使用。
【０２６２】
［付記１０１］
対象における炎症の軽減のための薬剤の製造における１種以上の免疫抑制性Ｔａｔ誘導体ペプチドの使用であって、
前記１種以上の免疫抑制性Ｔａｔ誘導体ポリペプチドは、付記１に記載の免疫抑制性Ｔａｔ誘導体ポリペプチドと少なくとも８５％の同一性を有し、前記免疫抑制性Ｔａｔ誘導体ポリペプチドの投与により対象における炎症を軽減する、使用。
【０２６３】
［付記１０２］
前記治療は、抗原提示細胞制御性マクロファージ（ＡＲｅｇｓ）におけるＦａｓリガンドの発現を促進する、付記９９〜１０１のいずれか１つに記載の使用。
【０２６４】
［付記１０３］
前記ＡＲｅｇｓは、ＣＤ１４＋マクロファージである、付記９９〜１０２のいずれか１つに記載の使用。
【０２６５】
［付記１０４］
前記免疫抑制性Ｔａｔ誘導体ポリペプチドは、配列番号９〜１１、１３〜３５又は６９のうちの１つと８５％超の配列同一性を有する、付記９９〜１０３のいずれか１つに記載の使用。
【０２６６】
［付記１０５］
前記対象は免疫疾患を持たない、付記９９〜１０４のいずれか１つに記載の使用。
【０２６７】
［付記１０６］
前記投与の結果、前記対象の免疫システムは損傷しない、付記９９〜１０５のいずれか１つに記載の使用。
【０２６８】
［付記１０７］
前記投与の結果、ＡＲｅｇｓによるサイトカインの分泌は減少する、付記９９〜１０６のいずれか１つに記載の使用。
【０２６９】
［付記１０８］
前記疾患は、自己免疫、神経変性、又は炎症関連疾患である、付記９９〜１０７のいずれか１つに記載の使用。
【０２７０】
［付記１０９］
前記自己免疫疾患は、急性散在性脳脊髄炎（ＡＤＥＭ）、アジソン病、アレルギー、アレルギー性鼻炎、アルツハイマー型認知症、抗リン脂質抗体症候群（ＡＰＳ）、関節炎、ぜんそく、自己免疫不全症候群、自己免疫性溶血性貧血、自己免疫性肝炎、自己免疫性内耳疾患、水疱性類天疱瘡、セリアック病、シャーガス病、慢性閉塞性肺疾患（ＣＯＰＤ）、１型糖尿病（ＩＤＤＭ）、湿疹、子宮内膜症、消化器疾患、グッドパスチャー症候群、グレーブス病、ギラン−バレー症候群（ＧＢＳ）、橋本甲状腺炎、汗腺膿瘍、突発性血小板減少性紫斑病、炎症性大腸炎、炎症性皮膚疾患、間質性膀胱炎、尋常性狼瘡、限局性強皮症、多発性硬化症（ＭＳ）、重症筋無力症、ミオパシー、ナルコレプシー、ニューロミオトニア、尋常性天痘瘡、悪性貧血、原発性胆汁性肝硬変、乾癬、再発性播種性脳脊髄炎、リウマチ熱、統合失調症、強皮症、シェーグレン症候群、皮膚疾患、腱滑膜炎、ブドウ膜炎、血管炎、又は白斑である、付記１０８に記載の使用。
【０２７１】
［付記１１０］
前記炎症関連疾患は、にきび、酸の逆流／胸焼け、アレルギー、アレルギー性鼻炎、アルツハイマー型認知症、虫垂炎、動脈炎、関節炎、ぜんそく、アテローム性動脈硬化、自己免疫疾患、亀頭炎、眼瞼炎、細気管支炎、気管支炎、滑液包炎、癌、心臓炎、セリアック病、蜂巣炎、子宮頸管炎、胆管炎、胆嚢炎、絨毛羊膜炎、慢性閉塞性肺疾患（ＣＯＰＤ）、肝硬変、大腸炎、結膜炎、膀胱炎、一般的な風邪、涙腺炎、認知症、皮膚炎、皮膚筋炎、湿疹、肺気腫、脳炎、心内膜炎、子宮内膜炎、腸炎、全腸炎、上顆炎、精巣上体炎、筋膜炎、結合組織炎、胃炎、胃腸炎、歯肉炎、糸球体腎炎、舌炎、心疾患、肝炎、汗腺膿瘍、高血圧、回腸炎、インスリン抵抗性、間質性膀胱炎、虹彩炎、虚血性心疾患、角膜炎、角結膜炎、喉頭炎、尋常性狼瘡、乳腺炎、乳様突起炎、髄膜炎、代謝症候群（エックス症候群）、偏頭痛、多発性硬化症、骨髄炎、心筋炎、ミオパシー、筋炎、腎炎、神経障害、肥満、臍炎、卵巣炎、精巣炎、骨軟骨炎、骨減少症、骨粗鬆症、骨炎、耳炎、膵炎、パーキンソン病、耳下腺炎、骨盤炎症性疾患、心膜炎、腹膜炎、喉頭炎、静脈炎、胸膜炎、肺炎、直腸炎、前立腺炎、乾癬、歯髄炎、腎盂腎炎、門脈炎、リウマチ熱、鼻炎、卵管炎、唾液腺炎、副鼻腔炎、痙攣性結腸、口内炎、滑膜炎、腱炎、腱症、腱滑膜炎、血栓性静脈炎、へんとう炎、三角炎、腫瘍、尿道炎、ブドウ膜炎、膣炎、血管炎、又は外陰炎である、付記１０８に記載の使用。
【０２７２】
［付記１１１］
前記神経変性疾患は、アレキサンダー病、アルパーズ病、アルツハイマー型認知症、アミロイド症、筋萎縮性側索硬化症、不安神経症、毛細血管拡張性運動失調、注意欠陥障害、カナバン病、中枢神経系損傷、シャルコーマリートゥース病、コケーン症候群、大脳皮質基底核変性症、クロイツフェルトヤコブ病、鬱病、脳炎（例えば、細菌性、寄生性、菌性又はウイルス性）、フリードライヒ運動失調症、前頭側頭型認知症、遺伝性痙性対麻痺、ギランバレー症候群（及びその異型である急性運動軸索型ニューロパチー、急性炎症性脱髄性多発ニューロパチー及びフィッシャー症候群）、ＨＩＶ／ＡＩＤＳによる認知症、ハンチントン病、神経系への虚血性障害、ケネディ病、クラッベ病、レビー小体型認知症、マシャドジョセフ病、髄膜炎（例えば、細菌性、寄生性、菌性又はウイルス性）、多発性硬化症、多系統萎縮症、神経系の外傷（例えば、衝撃による脳障害、脊髄損傷、神経系の外傷性損傷）、神経障害（例えば、化学療法により誘導された神経障害、糖尿病に関連する神経障害及び末梢の神経障害）、パーキンソン病、ペリツェウスメルツバッハー病、ピック病、原発性側索硬化症、プリオン病、進行性核上性麻痺、レフスム病、サンドホフ病、統合失調症、シルダー病、脊髄小脳萎縮症、スティール−リチャードソン−オルゼウスキー病、脳卒中、脊髄癆、又は血管性認知症である、付記１０８に記載の使用。
【０２７３】
［付記１１２］
前記免疫抑制性Ｔａｔ誘導体ポリペプチドは、さらに、自己免疫疾患、神経変性疾患又は炎症関連疾患に関連する少なくとも１つの症状を低減するものであり、当該症状は、炎症、疲労、めまい、不快感、熱及び体温の上昇、手及び足の冷えに対する過敏症、筋肉及び関節の衰弱及びこり、体重変化、消化器又は胃腸の問題、低又は高血圧、易刺激性、不安神経症又は鬱病、不妊症又は性的欲求の減少（性欲低下）、血糖変化、及び自己免疫疾患の種類によっては臓器又は組織サイズの増大、又は臓器又は組織の崩壊である、付記９９〜１１１のいずれか１つに記載の使用。
【０２７４】
［付記１１３］
前記免疫抑制性Ｔａｔ誘導体ポリペプチドは、複数回投与される、付記９９〜１１２のいずれか１つに記載の使用。
【０２７５】
［付記１１４］
前記免疫抑制性Ｔａｔ誘導体ポリペプチドは、１日１回、週１回、２週間に１回、１ヶ月に１回又は２ヶ月に１回投与される、付記９９〜１１３のいずれか１つに記載の使用。
【０２７６】
［付記１１５］
前記投与ステップは、反復投与サイクルを含み、各サイクルは、休薬期間が後に続く定められた期間中に、免疫抑制性Ｔａｔ誘導体ポリペプチドを複数回投与することを含み、前記サイクルは複数回繰り返される、付記９９〜１１４のいずれか１つに記載の使用。
【図１】
2019163259.tif 000013
【図２】
2019163259.tif 000014
【図３】
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【図４】
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【図５】
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【図６】
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【図７】
2019163259.tif 000019
【図８】
2019163259.tif 000020
【図９Ａ】
2019163259.tif 000021
【図９Ｂ】
2019163259.tif 000022
【図１０】
2019163259.tif 000023
【図１１】
2019163259.tif 000024
【図１２】
2019163259.tif 000025
【図１３】
2019163259.tif 000026
【図１４Ａ】
2019163259.tif 000027
【図１４Ｂ】
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【図１４Ｃ】
2019163259.tif 000029
【図１５】
2019163259.tif 000030
【図１６】
2019163259.tif 000031
【図１７Ａ】
2019163259.tif 000032
【図１７Ｂ】
2019163259.tif 000033
【図１７Ｃ】
2019163259.tif 000034
【図１７Ｄ】
2019163259.tif 000035
【図１７Ｅ】
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【配列表】
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