(57)【要約】      （修正有）【課題】本発明は、ＪＡＫ１及び／またはＪＡＫ２の阻害剤とＰＩ３Ｋδの阻害剤の組み合わせを使用して骨髄線維症を処置する方法に関する。【解決手段】（３Ｒ）−３−シクロペンチル−３−［４−（７Ｈ−ピロロ［２，３−ｄ］ピリミジン−４−イル）−１Ｈ−ピラゾール−１−イル］プロパンニトリルまたはその医薬的に許容され得る塩であるＪＡＫ１／２の阻害剤を含む医薬組成物と組み合わせて、骨髄線維症の処置を必要とする患者における骨髄線維症の処置に用いるための、４−｛３−［１−（４−アミノ−３−メチル−１Ｈ−ピラゾロ［３，４−ｄ］ピリミジン−１−イル）エチル］−５−クロロ−２−エトキシ−６−フルオロフェニル｝ピロリジン−２−オンまたはその医薬的に許容され得る塩であるＰＩ３Ｋδの阻害剤を含む医薬組成物。【選択図】なし【特許請求の範囲】
【請求項１】
（３Ｒ）−３−シクロペンチル−３−［４−（７Ｈ−ピロロ［２，３−ｄ］ピリミジン−４−イル）−１Ｈ−ピラゾール−１−イル］プロパンニトリルまたはその医薬的に許容され得る塩であるＪＡＫ１／２の阻害剤を含む医薬組成物と組み合わせて、骨髄線維症の処置を必要とする患者における骨髄線維症の処置に用いるための、４−｛３−［１−（４−アミノ−３−メチル−１Ｈ−ピラゾロ［３，４−ｄ］ピリミジン−１−イル）エチル］−５−クロロ−２−エトキシ−６−フルオロフェニル｝ピロリジン−２−オンまたはその医薬的に許容され得る塩であるＰＩ３Ｋδの阻害剤を含む医薬組成物。
【請求項２】
前記ＪＡＫ１／２の阻害剤が、（３Ｒ）−３−シクロペンチル−３−［４−（７Ｈ−ピロロ［２，３−ｄ］ピリミジン−４−イル）−１Ｈ−ピラゾール−１−イル］プロパンニトリルリン酸塩である、請求項１に記載の医薬組成物。
【請求項３】
前記ＰＩ３Ｋδの阻害剤が、（Ｓ）−４−（３−（（Ｓ）−１−（４−アミノ−３−メチル−１Ｈ−ピラゾロ［３，４−ｄ］ピリミジン−１−イル）エチル）−５−クロロ−２−エトキシ−６−フルオロフェニル）ピロリジン−２−オンまたはその医薬的に許容され得る塩である、請求項１に記載の医薬組成物。
【請求項４】
前記ＰＩ３Ｋδの阻害剤が、（Ｒ）−４−（３−（（Ｓ）−１−（４−アミノ−３−メチル−１Ｈ−ピラゾロ［３，４−ｄ］ピリミジン−１−イル）エチル）−５−クロロ−２−エトキシ−６−フルオロフェニル）ピロリジン−２−オンまたはその医薬的に許容され得る塩である、請求項１に記載の医薬組成物。
【請求項５】
前記ＰＩ３Ｋδの阻害剤が、（Ｓ）−４−（３−（（Ｒ）−１−（４−アミノ−３−メチル−１Ｈ−ピラゾロ［３，４−ｄ］ピリミジン−１−イル）エチル）−５−クロロ−２−エトキシ−６−フルオロフェニル）ピロリジン−２−オンまたはその医薬的に許容され得る塩である、請求項１に記載の医薬組成物。
【請求項６】
前記ＰＩ３Ｋδの阻害剤が、（Ｒ）−４−（３−（（Ｒ）−１−（４−アミノ−３−メチル−１Ｈ−ピラゾロ［３，４−ｄ］ピリミジン−１−イル）エチル）−５−クロロ−２−エトキシ−６−フルオロフェニル）ピロリジン−２−オンまたはその医薬的に許容され得る塩である、請求項１に記載の医薬組成物。
【請求項７】
（３Ｒ）−３−シクロペンチル−３−［４−（７Ｈ−ピロロ［２，３−ｄ］ピリミジン−４−イル）−１Ｈ−ピラゾール−１−イル］プロパンニトリルリン酸塩であるＪＡＫ１／２の阻害剤と組み合わせて、骨髄線維症の処置を必要とする患者における骨髄線維症の処置に用いるための、
（Ｓ）−４−（３−（（Ｓ）−１−（４−アミノ−３−メチル−１Ｈ−ピラゾロ［３，４−ｄ］ピリミジン−１−イル）エチル）−５−クロロ−２−エトキシ−６−フルオロフェニル）ピロリジン−２−オン、
（Ｒ）−４−（３−（（Ｓ）−１−（４−アミノ−３−メチル−１Ｈ−ピラゾロ［３，４−ｄ］ピリミジン−１−イル）エチル）−５−クロロ−２−エトキシ−６−フルオロフェニル）ピロリジン−２−オン、
（Ｓ）−４−（３−（（Ｒ）−１−（４−アミノ−３−メチル−１Ｈ−ピラゾロ［３，４−ｄ］ピリミジン−１−イル）エチル）−５−クロロ−２−エトキシ−６−フルオロフェニル）ピロリジン−２−オン、及び
（Ｒ）−４−（３−（（Ｒ）−１−（４−アミノ−３−メチル−１Ｈ−ピラゾロ［３，４−ｄ］ピリミジン−１−イル）エチル）−５−クロロ−２−エトキシ−６−フルオロフェニル）ピロリジン−２−オン、
及び前述のいずれかの医薬的に許容され得る塩
から選択されるＰＩ３Ｋδの阻害剤を含む医薬組成物。
【請求項８】
前記ＰＩ３Ｋδの阻害剤が、（Ｓ）−４−（３−（（Ｓ）−１−（４−アミノ−３−メチル−１Ｈ−ピラゾロ［３，４−ｄ］ピリミジン−１−イル）エチル）−５−クロロ−２−エトキシ−６−フルオロフェニル）ピロリジン−２−オンまたはその医薬的に許容され得る塩である、請求項７に記載の医薬組成物。
【請求項９】
前記ＰＩ３Ｋδの阻害剤が、（Ｒ）−４−（３−（（Ｓ）−１−（４−アミノ−３−メチル−１Ｈ−ピラゾロ［３，４−ｄ］ピリミジン−１−イル）エチル）−５−クロロ−２−エトキシ−６−フルオロフェニル）ピロリジン−２−オンまたはその医薬的に許容され得る塩である、請求項７に記載の医薬組成物。
【請求項１０】
前記ＰＩ３Ｋδの阻害剤が、（Ｓ）−４−（３−（（Ｒ）−１−（４−アミノ−３−メチル−１Ｈ−ピラゾロ［３，４−ｄ］ピリミジン−１−イル）エチル）−５−クロロ−２−エトキシ−６−フルオロフェニル）ピロリジン−２−オンまたはその医薬的に許容され得る塩である、請求項７に記載の医薬組成物。
【請求項１１】
前記ＰＩ３Ｋδの阻害剤が、（Ｒ）−４−（３−（（Ｒ）−１−（４−アミノ−３−メチル−１Ｈ−ピラゾロ［３，４−ｄ］ピリミジン−１−イル）エチル）−５−クロロ−２−エトキシ−６−フルオロフェニル）ピロリジン−２−オンまたはその医薬的に許容され得る塩である、請求項７に記載の医薬組成物。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本出願は、その全体が参照により本明細書に組み込まれる２０１４年４月８日に出願された６１／９７６，８１５号の優先権の利益を主張する。
【０００２】
本発明は、ＪＡＫ１及び／またはＪＡＫ２の阻害剤とＰＩ３Ｋδの阻害剤の組み合わせを使用してＢ細胞悪性腫瘍を処置する方法に関する。
【背景技術】
【０００３】
Ｂ細胞受容体（ＢＣＲ）は、正常なＢ細胞及び大半の悪性Ｂ細胞の両方に存在する。ＢＣＲの係合は重要な生存シグナルを提供し、ＢＣＲシグナルの妨害は、Ｂ細胞死をもたらし得る。ＢＣＲ発現を阻害するようにｓｉＲＮＡを用いて行われた研究により、ＢＣＲによる恒常的なシグナル伝達は、ヒトＢ細胞リンパ腫の生存及び増殖にとって決定的であることが示されている。これらの細胞におけるＢＣＲシグナル伝達の主な役割は、脾臓チロシンキナーゼ（Ｓｙｋ）の活性化であるように思われ、これは次にブルトンチロシンキナーゼ（ＢＴＫ）、ホスファチジルイノシトール３キナーゼ（ＰＩ３Ｋ）、及びＡＫＴの活性化を含む細胞生存を促進するいくつかの下流事象をもたらす。びまん性大細胞型Ｂ細胞リンパ腫（ＤＬＢＣＬ）を含む多くのＢ細胞悪性腫瘍は、ＢＣＲ生存シグナルに特に依存すると示されており、これはインビトロでのＢＣＲシグナル伝達成分の遺伝的及び薬理学的阻害に対するそれらの感受性をエビデンスとする。ＤＬＢＣＬ細胞はＰＩ３Ｋと係合し、それは抗アポトーシス性ＮＦ−ｋＢシグナル伝達及び生存シグナルを増強し、ＰＩ３Ｋ／ＡＫＴ経路の阻害は、インビトロでＤＬＢＣＬ細胞系統の殺傷においてＮＦ−ｋＢ阻害と協同することが示されている。
【０００４】
サイトカイン及び増殖因子の産生を通した、ＪＡＫの異常活性化も、多くの腫瘍タイプにおける悪性細胞増殖及び生存の増加に関連している。ＪＡＫは、重要な潜伏転写因子のファミリーであるＳＴＡＴを含む悪性細胞の増殖及び生存に関与する多くの下流経路を活性化する。臨床的に関連するもののうち、ＪＡＫを通してシグナル伝達する血清ＩＬ−１０及びＩＬ−６のレベルは、正常対照と比較してＤＬＢＣＬを有する患者において上昇すると見いだされている（Ｇｕｐｔａら、２０１２）。さらに、高い血清ＩＬ−１０レベルを有する患者は、より短い無事象生存期間を有すると示された（Ｇｕｐｔａら、２０１２）。ＪＡＫファミリーのキナーゼのうち、ＪＡＫ１は、ＪＡＫ２、ＪＡＫ３、及びＴＹＫ２と協力し、ＩＬ−６、ＩＬ−１０及びインターフェロンを含む多くの炎症性サイトカインのシグナル伝達の媒介において独占的な役割を担うと示されている。
【０００５】
ＤＬＢＣＬでは、ＪＡＫ経路活性化は、オートクリン及びパラクリンメカニズムの両方を通して生じる。腫瘍細胞では、ＢＣＲシグナル伝達は、ＩＬ−６及びＩＬ−１０産生の増加をＮＦ−ｋＢ経路の活性化を通してもたらす（Ｌａｍら、２００８）。ＤＬＢＣＬのサブセットは、ＳＴＡＴ３、ＩＬ−６、及び／またはＩＬ−１０の高発現を有することを特徴としており、ＪＡＫ阻害はこれらのＤＬＢＣＬ細胞系統において細胞毒性であり、ＮＦ−ｋＢ阻害剤と協同することが示されている。オートクリン経路を通したＪＡＫ／ＳＴＡＴ経路活性化に加えて、間質コンパートメントもパラクリン様式でこれらのサイトカイン源を提供し得る（Ｈｏｄｇｅら、２００５）。
【０００６】
これらの理由から、ＤＬＢＣＬなどの、Ｂ細胞悪性腫瘍を処置するために使用することができる新しい治療法を開発する必要性がある。この発明は、この必要性及びその他に関する。
【図面の簡単な説明】
【０００７】
【図１】図１Ａは、様々なＤＬＢＣＬ細胞系統でのＩＬ６及びＩＬ１０についてプローブするウエスタンブロット分析を示す。図１Ｂは、ＩＬ６またはＩＬ１０で処置されたファイファー細胞でのアクチン及びｐ−Ｓｔａｔ３についてのウエスタンブロット分析を示す。
【図２】ビヒクル（ＤＭＳＯ）、ＤＭＳＯ＋ＩＬ１０、及びＤＭＳＯ＋ＩＬ１０＋ルクソリチニブと化合物２８の濃度の関数としてファイファー細胞での細胞増殖アッセイにおける阻害率（％）を示す。図２Ｂは、ビヒクル（ＤＭＳＯ）、ＤＭＳＯ＋ＩＬ１０、及びＤＭＳＯ＋ＩＬ１０＋化合物７と化合物２８の濃度の関数としてファイファー細胞での細胞増殖アッセイにおける阻害率（％）を示す。
【図３】ビヒクル（ＤＭＳＯ）、ＤＭＳＯ＋ＩＬ１０、及びＤＭＳＯ＋ＩＬ１０＋ルクソリチニブと化合物２８の濃度の関数としてＨＢＬ−１細胞での細胞増殖アッセイにおける阻害率（％）を示す。
【図４】ＩＬ１０を伴うまたは伴わない、ビヒクル（ＤＭＳＯ）、ルクソリチニブ、化合物２８、または化合物２８及びルクソリチニブでの処置後のファイファー細胞のウエスタンブロット分析を示す。
【図５】ＩＬ１０を伴うまたは伴わない、ビヒクル（ＤＭＳＯ）、化合物７、化合物２８、または化合物２８及び化合物７での処置後のファイファー細胞のウエスタンブロット分析を示す。
【図６】ビヒクル（ＤＭＳＯ）、ＤＭＳＯ＋ＩＬ１０、及びＤＭＳＯ＋ＩＬ１０＋化合物１６と化合物２８の濃度の関数としてファイファー細胞での細胞増殖アッセイにおける阻害率（％）を示す。
【図７】併用療法からの相乗的アポトーシス誘発を示す、化合物２８＋／−化合物１６で処置されたファイファー細胞のアネキシン−Ｖ染色を示す。
【図８】ＳＴＡＴ３及びｐＡＫＴに及ぼす効果を示す、化合物２８＋／−化合物１６を用いた処置後のファイファー細胞のウエスタンブロット分析を示す。
【発明の概要】
【０００８】
本出願は、それを必要とする患者において、Ｂ細胞悪性腫瘍を処置する方法であって、前記患者に：（ａ）ＪＡＫ１及び／またはＪＡＫ２の阻害剤；と（ｂ）ＰＩ３Ｋδの阻害剤を投与することを含む、前記方法を提供する。
【０００９】
本出願は、それを必要とする患者において、びまん性大細胞型Ｂ細胞リンパ腫、慢性リンパ性白血病（ＣＬＬ）、非ホジキンリンパ腫、毛髪様細胞白血病、マントル細胞リンパ腫、小リンパ球性リンパ腫、濾胞性リンパ腫、リンパ形質細胞性リンパ腫、節外性辺縁帯リンパ腫、ホジキンリンパ腫、バーキットリンパ腫、ワルデンシュトレームマクログロブリン血症、前リンパ球性白血病、急性リンパ芽球性白血病、骨髄線維症、粘膜関連リンパ組織（ＭＡＬＴ）リンパ腫、縦隔（胸腺）大細胞型Ｂ細胞リンパ腫、リンパ腫様肉芽腫症、脾辺縁帯リンパ腫、原発性滲出液リンパ腫、血管内大細胞型Ｂ細胞リンパ腫、形質細胞白血病、髄外形質細胞腫、くすぶり型骨髄腫（無症候性骨髄腫として公知）、意義不明の単クローン性ガンマグロブリン血症（ＭＧＵＳ）、活性化Ｂ細胞様（ＡＢＣ）びまん性大細胞型Ｂ細胞リンパ腫（ＡＢＣ−ＤＬＢＣＬ）、及び胚中心Ｂ細胞（ＧＣＢ）びまん性大細胞型Ｂ細胞リンパ腫（ＧＣＢ−ＤＬＢＣＬ）から選択された疾患を処置する方法であって、前記患者に：（ａ）ＪＡＫ１及び／またはＪＡＫ２の阻害剤；と（ｂ）ＰＩ３Ｋδの阻害剤を投与することを含む、前記方法をさらに提供する。
【００１０】
本方法のいくつかの実施形態では、ＪＡＫ１及び／またはＪＡＫ２の阻害剤は：
３−シクロペンチル−３−［４−（７Ｈ−ピロロ［２，３−ｄ］ピリミジン−４−イル）−１Ｈ−ピラゾール−１−イル］プロパンニトリル；
３−［１−（６−クロロピリジン−２−イル）ピロリジン−３−イル］−３−［４−（７Ｈ−ピロロ［２，３−ｄ］ピリミジン−４−イル）−１Ｈ−ピラゾール−１−イル］プロパンニトリル；
３−（１−［１，３］オキサゾロ［５，４−ｂ］ピリジン−２−イルピロリジン−３−イル）−３−［４−（７Ｈ−ピロロ［２，３−ｄ］ピリミジン−４−イル）−１Ｈ−ピラゾール−１−イル］プロパンニトリル；
４−［（４−｛３−シアノ−２−［４−（７Ｈ−ピロロ［２，３−ｄ］ピリミジン−４−イル）−１Ｈ−ピラゾール−１−イル］プロピル｝ピペラジン−１−イル）カルボニル］−３−フルオロベンゾニトリル；
４−［（４−｛３−シアノ−２−［３−（７Ｈ−ピロロ［２，３−ｄ］ピリミジン−４−イル）−１Ｈ−ピロール−１−イル］プロピル｝ピペラジン−１−イル）カルボニル］−３−フルオロベンゾニトリル；
｛１−｛１−［３−フルオロ−２−（トリフルオロメチル）イソニコチノイル］ピペリジン−４−イル｝−３−［４−（７Ｈ−ピロロ［２，３−ｄ］ピリミジン−４−イル）−１Ｈ−ピラゾール−１−イル］アゼチジン−３−イル｝アセトニトリル；
４−｛３−（シアノメチル）−３−［４−（７Ｈ−ピロロ［２，３−ｄ］ピリミジン−４−イル）−１Ｈ−ピラゾール−１−イル］アゼチジン−１−イル｝−Ｎ−［４−フルオロ−２−（トリフルオロメチル）フェニル］ピペリジン−１−カルボキサミド；
［３−［４−（７Ｈ−ピロロ［２，３−ｄ］ピリミジン−４−イル）−１Ｈ−ピラゾール−１−イル］−１−（１−｛［２−（トリフルオロメチル）ピリミジン−４−イル］カルボニル｝ピペリジン−４−イル）アゼチジン−３−イル］アセトニトリル；
［トランス−１−［４−（７Ｈ−ピロロ［２，３−ｄ］ピリミジン−４−イル）−１Ｈ−ピラゾール−１−イル］−３−（４−｛［２−（トリフルオロメチル）ピリミジン−４−イル］カルボニル｝ピペラジン−１−イル）シクロブチル］アセトニトリル；
｛トランス−３−（４−｛［４−［（３−ヒドロキシアゼチジン−１−イル）メチル］−６−（トリフルオロメチル）ピリジン−２−イル］オキシ｝ピペリジン−１−イル）−１−［４−（７Ｈ−ピロロ［２，３−ｄ］ピリミジン−４−イル）−１Ｈ−ピラゾール−１−イル］シクロブチル｝アセトニトリル；
｛トランス−３−（４−｛［４−｛［（２Ｓ）−２−（ヒドロキシメチル）ピロリジン−１−イル］メチル｝−６−（トリフルオロメチル）ピリジン−２−イル］オキシ｝ピペリジン−１−イル）−１−［４−（７Ｈ−ピロロ［２，３−ｄ］ピリミジン−４−イル）−１Ｈ−ピラゾール−１−イル］シクロブチル｝アセトニトリル；
｛トランス−３−（４−｛［４−｛［（２Ｒ）−２−（ヒドロキシメチル）ピロリジン−１−イル］メチル｝−６−（トリフルオロメチル）ピリジン−２−イル］オキシ｝ピペリジン−１−イル）−１−［４−（７Ｈ−ピロロ［２，３−ｄ］ピリミジン−４−イル）−１Ｈ−ピラゾール−１−イル］シクロブチル｝アセトニトリル；
４−（４−｛３−［（ジメチルアミノ）メチル］−５−フルオロフェノキシ｝ピペリジン−１−イル）−３−［４−（７Ｈ−ピロロ［２，３−ｄ］ピリミジン−４−イル）−１Ｈ−ピラゾール−１−イル］ブタンニトリル；
５−｛３−（シアノメチル）−３−［４−（７Ｈ−ピロロ［２，３−ｄ］ピリミジン−４−イル）−１Ｈ−ピラゾール−１−イル］アゼチジン−１−イル｝−Ｎ−イソプロピルピラジン−２−カルボキサミド；
４−｛３−（シアノメチル）−３−［４−（７Ｈ−ピロロ［２，３−ｄ］ピリミジン−４−イル）−１Ｈ−ピラゾール−１−イル］アゼチジン−１−イル｝−２，５−ジフルオロ−Ｎ−［（１Ｓ）−２，２，２−トリフルオロ−１−メチルエチル］ベンズアミド；
５−｛３−（シアノメチル）−３−［４−（１Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピリジン−４−イル）−１Ｈ−ピラゾール−１−イル］アゼチジン−１−イル｝−Ｎ−イソプロピルピラジン−２−カルボキサミド；
｛１−（シス−４−｛［６−（２−ヒドロキシエチル）−２−（トリフルオロメチル）ピリミジン−４−イル］オキシ｝シクロヘキシル）−３−［４−（７Ｈ−ピロロ［２，３−ｄ］ピリミジン−４−イル）−１Ｈ−ピラゾール−１−イル］アゼチジン−３−イル｝アセトニトリル；
｛１−（シス−４−｛［４−［（エチルアミノ）メチル］−６−（トリフルオロメチル）ピリジン−２−イル］オキシ｝シクロヘキシル）−３−［４−（７Ｈ−ピロロ［２，３−ｄ］ピリミジン−４−イル）−１Ｈ−ピラゾール−１−イル］アゼチジン−３−イル｝アセトニトリル；
｛１−（シス−４−｛［４−（１−ヒドロキシ−１−メチルエチル）−６−（トリフルオロメチル）ピリジン−２−イル］オキシ｝シクロヘキシル）−３−［４−（７Ｈ−ピロロ［２，３−ｄ］ピリミジン−４−イル）−１Ｈ−ピラゾール−１−イル］アゼチジン−３−イル｝アセトニトリル；
｛１−（シス−４−｛［４−｛［（３Ｒ）−３−ヒドロキシピロリジン−１−イル］メチル｝−６−（トリフルオロメチル）ピリジン−２−イル］オキシ｝シクロヘキシル）−３−［４−（７Ｈ−ピロロ［２，３−ｄ］ピリミジン−４−イル）−１Ｈ−ピラゾール−１−イル］アゼチジン−３−イル｝アセトニトリル；
｛１−（シス−４−｛［４−｛［（３Ｓ）−３−ヒドロキシピロリジン−１−イル］メチル｝−６−（トリフルオロメチル）ピリジン−２−イル］オキシ｝シクロヘキシル）−３−［４−（７Ｈ−ピロロ［２，３−ｄ］ピリミジン−４−イル）−１Ｈ−ピラゾール−１−イル］アゼチジン−３−イル｝アセトニトリル；
｛トランス−３−（４−｛［４−（｛［（１Ｓ）−２−ヒドロキシ−１−メチルエチル］アミノ｝メチル）−６−（トリフルオロメチル）ピリジン−２−イル］オキシ｝ピペリジン−１−イル）−１−［４−（７Ｈ−ピロロ［２，３−ｄ］ピリミジン−４−イル）−１Ｈ−ピラゾール−１−イル］シクロブチル｝アセトニトリル；
｛トランス−３−（４−｛［４−（｛［（２Ｒ）−２−ヒドロキシプロピル］アミノ｝メチル）−６−（トリフルオロメチル）ピリジン−２−イル］オキシ｝ピペリジン−１−イル）−１−［４−（７Ｈ−ピロロ［２，３−ｄ］ピリミジン−４−イル）−１Ｈ−ピラゾール−１−イル］シクロブチル｝アセトニトリル；
｛トランス−３−（４−｛［４−（｛［（２Ｓ）−２−ヒドロキシプロピル］アミノ｝メチル）−６−（トリフルオロメチル）ピリジン−２−イル］オキシ｝ピペリジン−１−イル）−１−［４−（７Ｈ−ピロロ［２，３−ｄ］ピリミジン−４−イル）−１Ｈ−ピラゾール−１−イル］シクロブチル｝アセトニトリル；
｛トランス−３−（４−｛［４−（２−ヒドロキシエチル）−６−（トリフルオロメチル）ピリジン−２−イル］オキシ｝ピペリジン−１−イル）−１−［４−（７Ｈ−ピロロ［２，３−ｄ］ピリミジン−４−イル）−１Ｈ−ピラゾール−１−イル］シクロブチル｝アセトニトリル；
（（２Ｒ，５Ｓ）−５−｛２−［（１Ｒ）−１−ヒドロキシエチル］−１Ｈ−イミダゾ［４，５−ｄ］チエノ［３，２−ｂ］ピリジン−１−イル｝テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−イル）アセトニトリル；
４−［３−（シアノメチル）−３−（３’，５’−ジメチル−１Ｈ，１’Ｈ−４，４’−ビピラゾール−１−イル）アゼチジン−１−イル］−２，５−ジフルオロ−Ｎ−［（１Ｓ）−２，２，２−トリフルオロ−１−メチルエチル］ベンズアミド；
及び前述のいずれかの医薬的に許容され得る塩から選択される。
【００１１】
本方法のいくつかの実施形態では、ＰＩ３Ｋδの阻害剤は：
７−（１−（９Ｈ−プリン−６−イルアミノ）エチル）−６−（３−フルオロフェニル）−３−メチル−５Ｈ−チアゾロ［３，２−ａ］ピリミジン−５−オン；
（Ｓ）−７−（１−（９Ｈ−プリン−６−イルアミノ）エチル）−６−（３−フルオロフェニル）−３−メチル−５Ｈ−チアゾロ［３，２−ａ］ピリミジン−５−オン；
４−［１−（４−アミノ−３−メチル−１Ｈ−ピラゾロ［３，４−ｄ］ピリミジン−１−イル）エチル］−６−クロロ−２−｛１−［（２Ｓ）−２−ヒドロキシプロピル］アゼチジン−３−イル｝−３−メトキシベンゾニトリル；
４−［１−（４−アミノ−３−メチル−１Ｈ−ピラゾロ［３，４−ｄ］ピリミジン−１−イル）エチル］−６−クロロ−２−［１−（２−ヒドロキシエチル）アゼチジン−３−イル］−３−メトキシベンゾニトリル；
５−｛３−［１−（４−アミノ−３−メチル−１Ｈ−ピラゾロ［３，４−ｄ］ピリミジン−１−イル）エチル］−６−シアノ−２−エトキシ−５−メチルフェニル｝−Ｎ，Ｎ−ジメチルピリジン−２−カルボキサミド；
４−｛３−［１−（４−アミノ−３−メチル−１Ｈ−ピラゾロ［３，４−ｄ］ピリミジン−１−イル）エチル］−５−クロロ−２−エトキシ−６−フルオロフェニル｝ピロリジン−２−オン；及び
Ｎ−｛１−［５−クロロ−８−（３−フルオロフェニル）シンノリン−７−イル］エチル｝−９Ｈ−プリン−６−アミン；
４−クロロ−３’−フルオロ−３−メチル−６−［１−（９Ｈ−プリン−６−イルアミノ）エチル］ビフェニル−２−カルボニトリル；
及び前述のいずれかの医薬的に許容され得る塩から選択される。
【００１２】
本出願は、Ｂ細胞悪性腫瘍または本明細書で具体化した疾患のいずれかを処置するために、ＰＩ３Ｋδ阻害剤と組み合わせて使用するためのＪＡＫ１及び／またはＪＡＫ２の阻害剤も提供する。
【００１３】
本出願は、Ｂ細胞悪性腫瘍または本明細書で具体化した疾患のいずれかを処置するための医薬品を調製するためのＪＡＫ１及び／またはＪＡＫ２の阻害剤とＰＩ３Ｋδ阻害剤の使用をさらに提供する。
【発明を実施するための形態】
【００１４】
本出願は、特に、それを必要とする患者において、びまん性大細胞型Ｂ細胞リンパ腫、慢性リンパ性白血病（ＣＬＬ）、非ホジキンリンパ腫、毛髪様細胞白血病、マントル細胞リンパ腫、小リンパ球性リンパ腫、濾胞性リンパ腫、リンパ形質細胞性リンパ腫、節外性辺縁帯リンパ腫、ホジキンリンパ腫、バーキットリンパ腫、ワルデンシュトレームマクログロブリン血症、前リンパ球性白血病、急性リンパ芽球性白血病、骨髄線維症、粘膜関連リンパ組織（ＭＡＬＴ）リンパ腫、縦隔（胸腺）大細胞型Ｂ細胞リンパ腫、リンパ腫様肉芽腫症、脾辺縁帯リンパ腫、原発性滲出液リンパ腫、血管内大細胞型Ｂ細胞リンパ腫、形質細胞白血病、髄外形質細胞腫、くすぶり型骨髄腫（無症候性骨髄腫として公知）、意義不明の単クローン性ガンマグロブリン血症（ＭＧＵＳ）、活性化Ｂ細胞様（ＡＢＣ）びまん性大細胞型Ｂ細胞リンパ腫（ＡＢＣ−ＤＬＢＣＬ）、及び胚中心Ｂ細胞（ＧＣＢ）びまん性大細胞型Ｂ細胞リンパ腫（ＧＣＢ−ＤＬＢＣＬ）から選択された疾患を処置する方法であって、前記患者に：（ａ）ＪＡＫ１及び／またはＪＡＫ２の阻害剤；と（ｂ）ＰＩ３Ｋδの阻害剤を投与することを含む、前記方法を提供する。
【００１５】
いくつかの実施形態では、非ホジキンリンパ腫は非ホジキンリンパ腫（ＮＨＬ）は、再発性または難治性ＮＨＬまたは再燃（ｒｅｃｕｃｕｒｒｅｎｔ）濾胞性ＮＨＬである。
【００１６】
いくつかの実施形態では、疾患は、びまん性大細胞型Ｂ細胞リンパ腫（ＤＬＢＣＬ）である。
【００１７】
いくつかの実施形態では、疾患は、活性化Ｂ細胞様（ＡＢＣ）びまん性大細胞型Ｂ細胞リンパ腫（ＡＢＣ−ＤＬＢＣＬ）または胚中心Ｂ細胞（ＧＣＢ）びまん性大細胞型Ｂ細胞リンパ腫（ＧＣＢ−ＤＬＢＣＬ）である。
【００１８】
いくつかの実施形態では、ＪＡＫ１及び／またはＪＡＫ２の阻害剤とＰＩ３Ｋδの阻害剤は、同時投与される。
【００１９】
いくつかの実施形態では、ＪＡＫ１及び／またはＪＡＫ２の阻害剤とＰＩ３Ｋδの阻害剤は、逐次投与される。
【００２０】
いくつかの実施形態では、ＪＡＫ１及び／またはＪＡＫ２の阻害剤は、ＪＡＫ３及びＴＹＫ２よりもＪＡＫ１及びＪＡＫ１について選択的である。いくつかの実施形態では、ＪＡＫ１及び／またはＪＡＫ２の阻害剤は、ＪＡＫ２、ＪＡＫ３、及びＴＹＫ２よりもＪＡＫ１に選択的である。例えば、本明細書に記載のいくつかの化合物、またはその医薬的に許容され得る塩は、ＪＡＫ２、ＪＡＫ３、及びＴＹＫ２の１つまたは複数よりもＪＡＫ１を優先的に阻害する。いくつかの実施形態では、化合物は、ＪＡＫ２よりも優先的にＪＡＫ１を阻害する（例えば、ＪＡＫ１／ＪＡＫ２のＩＣ５０比が１を超える）。いくつかの実施形態では、化合物または塩は、ＪＡＫ２よりも約１０倍ＪＡＫ１について選択的である。いくつかの実施形態では、化合物または塩は、ＪＡＫ２よりも約３倍、約５倍、約１０倍、約１５倍、または約２０倍ＪＡＫ１について選択的であり、これは１ｍＭ  ＡＴＰでＩＣ５０を測定することにより算出される（例えば、実施例Ａを参照されたい）。
【００２１】
いくつかの実施形態では、ＪＡＫ１及び／またはＪＡＫ２の阻害剤は、３−シクロペンチル−３−［４−（７Ｈ−ピロロ［２，３−ｄ］ピリミジン−４−イル）−１Ｈ−ピラゾール−１−イル］プロパンニトリルである。いくつかの実施形態では、ＪＡＫ１及び／またはＪＡＫ２の阻害剤は、（３Ｒ）−３−シクロペンチル−３−［４−（７Ｈ−ピロロ［２，３−ｄ］ピリミジン−４−イル）−１Ｈ−ピラゾール−１−イル］プロパンニトリル（ルクソリチニブ；ＩＮＣＢ０１８４２４としても知られる）である。ルクソリチニブは、ＪＡＫ１及びＪＡＫ２で１ｍＭ  ＡＴＰ（アッセイＡ）にて１０ｎＭ未満のＩＣ５０を有する。３−シクロペンチル−３−［４−（７Ｈ−ピロロ［２，３−ｄ］ピリミジン−４−イル）−１Ｈ−ピラゾール−１−イル］プロパンニトリル及びルクソリチニブは、その全体が参照により本明細書に組み込まれる２００６年１２月１２日に出願されたＵＳ７，５９８，２５７（実施例６７）に記載された手法により作製されることができる。いくつかの実施形態では、ＪＡＫ１及び／またはＪＡＫ２の阻害剤は、（３Ｒ）−３−シクロペンチル−３−［４−（７Ｈ−ピロロ［２，３−ｄ］ピリミジン−４−イル）−１Ｈ−ピラゾール−１−イル］プロパンニトリルリン酸塩である。
【００２２】
いくつかの実施形態では、ＪＡＫ１及び／またはＪＡＫ２の阻害剤は、表１の化合物、またはその医薬的に許容され得る塩である。表１の化合物は、選択的ＪＡＫ１阻害剤（ＪＡＫ２、ＪＡＫ３、及びＴＹＫ２よりも選択的）である。１ｍＭ  ＡＴＰでアッセイＡの方法により得られたＩＣ５０を表１に示す。
【表１−１】
2019163324.tif 000002
【表１−２】
2019163324.tif 000003
【表１−３】
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【表１−４】
2019163324.tif 000005
【表１−５】
2019163324.tif 000006
【表１−６】
2019163324.tif 000007
【表１−７】
2019163324.tif 000008
【表１−８】
2019163324.tif 000009
【表１−９】
2019163324.tif 000010
【表１−１０】
2019163324.tif 000011
【表１−１１】
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【表１−１２】
2019163324.tif 000013
【表１−１３】
2019163324.tif 000014
＋は、１０ｎＭ未満を意味する（アッセイ条件について実施例Ａを参照されたい）
＋＋は、１００ｎＭ以下を意味する（アッセイ条件について実施例Ａを参照されたい）
＋＋＋は、３００ｎＭ以下を意味する（アッセイ条件について実施例Ａを参照されたい）
ａエナンチオマー１についてのデータ
ｂエナンチオマー２についてのデータ
【００２３】
いくつかの実施形態では、ＪＡＫ１及び／またはＪＡＫ２の阻害剤は、｛１−｛１−［３−フルオロ−２−（トリフルオロメチル）イソニコチノイル］ピペリジン−４−イル｝−３−［４−（７Ｈ−ピロロ［２，３−ｄ］ピリミジン−４−イル）−１Ｈ−ピラゾール−１−イル］アゼチジン−３−イル｝アセトニトリル、またはその医薬的に許容され得る塩である。
【００２４】
いくつかの実施形態では、ＪＡＫ１及び／またはＪＡＫ２の阻害剤は、｛１−｛１−［３−フルオロ−２−（トリフルオロメチル）イソニコチノイル］ピペリジン−４−イル｝−３−［４−（７Ｈ−ピロロ［２，３−ｄ］ピリミジン−４−イル）−１Ｈ−ピラゾール−１−イル］アゼチジン−３−イル｝アセトニトリルアジピン酸塩である。
【００２５】
いくつかの実施形態では、ＪＡＫ１及び／またはＪＡＫ２の阻害剤は、４−｛３−（シアノメチル）−３−［４−（７Ｈ−ピロロ［２，３−ｄ］ピリミジン−４−イル）−１Ｈ−ピラゾール−１−イル］アゼチジン−１−イル｝−２，５−ジフルオロ−Ｎ−［（１Ｓ）−２，２，２−トリフルオロ−１−メチルエチル］ベンズアミド、またはその医薬的に許容され得る塩である。
【００２６】
いくつかの実施形態では、ＪＡＫ１及び／またはＪＡＫ２の阻害剤は、（Ｒ）−３−［１−（６−クロロピリジン−２−イル）ピロリジン−３−イル］−３−［４−（７Ｈ−ピロロ［２，３−ｄ］ピリミジン−４−イル）−１Ｈ−ピラゾール−１−イル］プロパンニトリル、（Ｒ）−３−（１−［１，３］オキサゾロ［５，４−ｂ］ピリジン−２−イルピロリジン−３−イル）−３−［４−（７Ｈ−ピロロ［２，３−ｄ］ピリミジン−４−イル）−１Ｈ−ピラゾール−１−イル］プロパンニトリル、（Ｒ）−４−［（４−｛３−シアノ−２−［４−（７Ｈ−ピロロ［２，３−ｄ］ピリミジン−４−イル）−１Ｈ−ピラゾール−１−イル］プロピル｝ピペラジン−１−イル）カルボニル］−３−フルオロベンゾニトリル、（Ｒ）−４−［（４−｛３−シアノ−２−［３−（７Ｈ−ピロロ［２，３−ｄ］ピリミジン−４−イル）−１Ｈ−ピロール−１−イル］プロピル｝ピペラジン−１−イル）カルボニル］−３−フルオロベンゾニトリル、または（Ｒ）−４−（４−｛３−［（ジメチルアミノ）メチル］−５−フルオロフェノキシ｝ピペリジン−１−イル）−３−［４−（７Ｈ−ピロロ［２，３−ｄ］ピリミジン−４−イル）−１Ｈ−ピラゾール−１−イル］ブタンニトリル、（Ｓ）−３−［１−（６−クロロピリジン−２−イル）ピロリジン−３−イル］−３−［４−（７Ｈ−ピロロ［２，３−ｄ］ピリミジン−４−イル）−１Ｈ−ピラゾール−１−イル］プロパンニトリル、（Ｓ）−３−（１−［１，３］オキサゾロ［５，４−ｂ］ピリジン−２−イルピロリジン−３−イル）−３−［４−（７Ｈ−ピロロ［２，３−ｄ］ピリミジン−４−イル）−１Ｈ−ピラゾール−１−イル］プロパンニトリル、（Ｓ）−４−［（４−｛３−シアノ−２−［４−（７Ｈ−ピロロ［２，３−ｄ］ピリミジン−４−イル）−１Ｈ−ピラゾール−１−イル］プロピル｝ピペラジン−１−イル）カルボニル］−３−フルオロベンゾニトリル、（Ｓ）−４−［（４−｛３−シアノ−２−［３−（７Ｈ−ピロロ［２，３−ｄ］ピリミジン−４−イル）−１Ｈ−ピロール−１−イル］プロピル｝ピペラジン−１−イル）カルボニル］−３−フルオロベンゾニトリル、（Ｓ）−４−（４−｛３−［（ジメチルアミノ）メチル］−５−フルオロフェノキシ｝ピペリジン−１−イル）−３−［４−（７Ｈ−ピロロ［２，３−ｄ］ピリミジン−４−イル）−１Ｈ−ピラゾール−１−イル］ブタンニトリル；及び前述のいずれかの医薬的に許容され得る塩から選択される。
【００２７】
いくつかの実施形態では、表１の化合物は、そのそれぞれが、その全体が参照により本明細書に組み込まれる、２０１０年５月２１日に出願された米国特許公開第２０１０／０２９８３３４号、２０１０年８月３１日に出願された米国特許公開第２０１１／００５９９５１号、２０１１年３月９日に出願された米国特許公開第２０１１／０２２４１９０号、２０１１年１１月１８日に出願された米国特許公開第２０１２／０１４９６８１号、２０１１年１１月１８日に出願された米国特許公開第２０１２／０１４９６８２号、２０１２年６月１９日に出願された米国特許公開第２０１３／００１８０３４号、２０１２年８月１７日に出願された米国特許公開第２０１３／００４５９６３号、及び２０１３年５月１７日に出願された米国特許公開第２０１４／０００５１６６号に記載の合成手法によって調製される。
【００２８】
いくつかの実施形態では、ＪＡＫ１及び／またはＪＡＫ２の阻害剤は、そのそれぞれが、その全体が参照により本明細書に組み込まれる、２０１０年５月２１日に出願された米国特許公開第２０１０／０２９８３３４号、２０１０年８月３１日に出願された米国特許公開第２０１１／００５９９５１号、２０１１年３月９日に出願された米国特許公開第２０１１／０２２４１９０号、２０１１年１１月１８日に出願された米国特許公開第２０１２／０１４９６８１号、２０１１年１１月１８日に出願された米国特許公開第２０１２／０１４９６８２号、２０１２年６月１９日に出願された米国特許公開第２０１３／００１８０３４号、２０１２年８月１７日に出願された米国特許公開第２０１３／００４５９６３号、及び２０１３年５月１７日に出願された米国特許公開第２０１４／０００５１６６号の化合物から選択される。
【００２９】
本明細書に記載のＰＩ３Ｋδの阻害剤は、選択的であり得る。「選択的」は、少なくとも１つの他のキナーゼと比較して、化合物が、それぞれ、より大きな親和性または作用強度で、あるキナーゼと結合または阻害することを意味する。いくつかの実施形態では、本明細書に記載の化合物は、（例えば、ＰＩ３Ｋα、ＰＩ３Ｋβ及びＰＩ３Ｋγよりも）ＰＩ３Ｋδの選択的な阻害剤である。いくつかの実施形態では、選択性は、少なくとも約２倍、５倍、１０倍、少なくとも約２０倍、少なくとも約５０倍、少なくとも約１００倍、少なくとも約２００倍、少なくとも約５００倍または少なくとも約１０００倍であり得る。選択性は、当該分野で通例の方法により測定することができる。いくつかの実施形態では、選択性は、各酵素のＫｍ  ＡＴＰ濃度で試験することができる。いくつかの実施形態では、本明細書に記載の化合物の選択性は、特定のＰＩ３Ｋキナーゼ活性と関連する細胞アッセイにより決定することができる。
【００３０】
いくつかの実施形態では、ＰＩ３Ｋδの阻害剤は、表２に示す化合物である。表２の化合物は、アッセイＢにおいて試験されており、表２のＩＣ５０を有するＰＩ３Ｋδの阻害剤であると示されている。
【表２−１】
2019163324.tif 000015
【表２−２】
2019163324.tif 000016
【表２−３】
2019163324.tif 000017
＋は、５０ｎＭ未満を意味する
＋＋は、５０ｎＭ〜２００ｎＭを意味する
＋＋＋は、５０ｎＭ〜１００ｎＭを意味する
【００３１】
いくつかの実施形態では、ＰＩ３Ｋδの阻害剤は：
（Ｓ）−４−（３−（（Ｓ）−１−（４−アミノ−３−メチル−１Ｈ−ピラゾロ［３，４−ｄ］ピリミジン−１−イル）エチル）−５−クロロ−２−エトキシ−６−フルオロフェニル）ピロリジン−２−オン；
（Ｒ）−４−（３−（（Ｓ）−１−（４−アミノ−３−メチル−１Ｈ−ピラゾロ［３，４−ｄ］ピリミジン−１−イル）エチル）−５−クロロ−２−エトキシ−６−フルオロフェニル）ピロリジン−２−オン；
（Ｓ）−４−（３−（（Ｒ）−１−（４−アミノ−３−メチル−１Ｈ−ピラゾロ［３，４−ｄ］ピリミジン−１−イル）エチル）−５−クロロ−２−エトキシ−６−フルオロフェニル）ピロリジン−２−オン；
（Ｒ）−４−（３−（（Ｒ）−１−（４−アミノ−３−メチル−１Ｈ−ピラゾロ［３，４−ｄ］ピリミジン−１−イル）エチル）−５−クロロ−２−エトキシ−６−フルオロフェニル）ピロリジン−２−オン；
Ｎ−｛（１Ｓ）−１−［５−クロロ−８−（３−フルオロフェニル）シンノリン−７−イル］エチル｝−９Ｈ−プリン−６−アミン；
及び前述のいずれかの医薬的に許容され得る塩から選択される。
【００３２】
いくつかの実施形態では、ＰＩ３Ｋδの阻害剤は、（Ｓ）−７−（１−（９Ｈ−プリン−６−イルアミノ）エチル）−６−（３−フルオロフェニル）−３−メチル−５Ｈ−チアゾロ［３，２−ａ］ピリミジン−５−オン、またはその医薬的に許容され得る塩である。
【００３３】
いくつかの実施形態では、ＰＩ３Ｋδの阻害剤は、４−［１−（４−アミノ−３−メチル−１Ｈ−ピラゾロ［３，４−ｄ］ピリミジン−１−イル）エチル］−６−クロロ−２−｛１−［（２Ｓ）−２−ヒドロキシプロピル］アゼチジン−３−イル｝−３−メトキシベンゾニトリル、またはその医薬的に許容され得る塩である。
【００３４】
いくつかの実施形態では、ＰＩ３Ｋδの阻害剤は、４−［１−（４−アミノ−３−メチル−１Ｈ−ピラゾロ［３，４−ｄ］ピリミジン−１−イル）エチル］−６−クロロ−２−［１−（２−ヒドロキシエチル）アゼチジン−３−イル］−３−メトキシベンゾニトリル、またはその医薬的に許容され得る塩である。
【００３５】
いくつかの実施形態では、ＰＩ３Ｋδの阻害剤は、５−｛３−［１−（４−アミノ−３−メチル−１Ｈ−ピラゾロ［３，４−ｄ］ピリミジン−１−イル）エチル］−６−シアノ−２−エトキシ−５−メチルフェニル｝−Ｎ，Ｎ−ジメチルピリジン−２−カルボキサミド、またはその医薬的に許容され得る塩である。
【００３６】
いくつかの実施形態では、ＰＩ３Ｋδの阻害剤は：
４−［（Ｒ）−１−（４−アミノ−３−メチル−１Ｈ−ピラゾロ［３，４−ｄ］ピリミジン−１−イル）エチル］−６−クロロ−２−｛１−［（２Ｓ）−２−ヒドロキシプロピル］アゼチジン−３−イル｝−３−メトキシベンゾニトリル；
４−［１（Ｒ）−（４−アミノ−３−メチル−１Ｈ−ピラゾロ［３，４−ｄ］ピリミジン−１−イル）エチル］−６−クロロ−２−［１−（２−ヒドロキシエチル）アゼチジン−３−イル］−３−メトキシベンゾニトリル；
５−｛３−［１（Ｒ）−（４−アミノ−３−メチル−１Ｈ−ピラゾロ［３，４−ｄ］ピリミジン−１−イル）エチル］−６−シアノ−２−エトキシ−５−メチルフェニル｝−Ｎ，Ｎ−ジメチルピリジン−２−カルボキサミド；
４−［（Ｓ）−１−（４−アミノ−３−メチル−１Ｈ−ピラゾロ［３，４−ｄ］ピリミジン−１−イル）エチル］−６−クロロ−２−｛１−［（２Ｓ）−２−ヒドロキシプロピル］アゼチジン−３−イル｝−３−メトキシベンゾニトリル；
４−［１（Ｓ）−（４−アミノ−３−メチル−１Ｈ−ピラゾロ［３，４−ｄ］ピリミジン−１−イル）エチル］−６−クロロ−２−［１−（２−ヒドロキシエチル）アゼチジン−３−イル］−３−メトキシベンゾニトリル；
５−｛３−［１（Ｓ）−（４−アミノ−３−メチル−１Ｈ−ピラゾロ［３，４−ｄ］ピリミジン−１−イル）エチル］−６−シアノ−２−エトキシ−５−メチルフェニル｝−Ｎ，Ｎ−ジメチルピリジン−２−カルボキサミド；
及び前述のいずれかの医薬的に許容され得る塩から選択される。
【００３７】
いくつかの実施形態では、ＰＩ３Ｋδの阻害剤は、そのそれぞれが、その全体が参照により本明細書に組み込まれる、２０１０年６月２８日に出願された米国特許公開第ＵＳ２０１１／００１５２１２、２０１３年８月３１日に出願された米国特許公開第２０１３／００５９８３５号、２０１０年１２月１７日に出願された米国特許公開第２０１１／０１８３９８５号、または２０１１年１２月１９日に出願された米国特許公開第２０１２／０１５７４３０号の化合物である。
【００３８】
いくつかの実施形態では、表２の化合物は、そのそれぞれが、その全体が参照により本明細書に組み込まれる、２０１０年６月２８日に出願された米国特許公開第ＵＳ２０１１／００１５２１２、２０１３年８月３１日に出願された米国特許公開第２０１３／００５９８３５号、２０１０年１２月１７日に出願された米国特許公開第２０１１／０１８３９８５号、または２０１１年１２月１９日に出願された米国特許公開第２０１２／０１５７４３０号の方法によって調製される。
【００３９】
いくつかの実施形態では、ＪＡＫ１及び／またはＪＡＫ２の阻害剤は、（３Ｒ）−３−シクロペンチル−３−［４−（７Ｈ−ピロロ［２，３−ｄ］ピリミジン−４−イル）−１Ｈ−ピラゾール−１−イル］プロパンニトリル、またはその医薬的に許容され得る塩；及び（７−（１−（９Ｈ−プリン−６−イルアミノ）エチル）−６−（３−フルオロフェニル）−３−メチル−５Ｈ−チアゾロ［３，２−ａ］ピリミジン−５−オン、またはその医薬的に許容され得る塩である。
【００４０】
いくつかの実施形態では、ＪＡＫ１及び／またはＪＡＫ２の阻害剤は、｛１−｛１−［３−フルオロ−２−（トリフルオロメチル）イソニコチノイル］ピペリジン−４−イル｝−３−［４−（７Ｈ−ピロロ［２，３−ｄ］ピリミジン−４−イル）−１Ｈ−ピラゾール−１−イル］アゼチジン−３−イル｝アセトニトリル、またはその医薬的に許容され得る塩であり；ＰＩ３Ｋδの阻害剤は、７−（１−（９Ｈ−プリン−６−イルアミノ）エチル）−６−（３−フルオロフェニル）−３−メチル−５Ｈ−チアゾロ［３，２−ａ］ピリミジン−５−オン、またはその医薬的に許容され得る塩である。
【００４１】
いくつかの実施形態では、ＪＡＫ１及び／またはＪＡＫ２の阻害剤は、４−｛３−（シアノメチル）−３−［４−（７Ｈ−ピロロ［２，３−ｄ］ピリミジン−４−イル）−１Ｈ−ピラゾール−１−イル］アゼチジン−１−イル｝−２，５−ジフルオロ−Ｎ−［（１Ｓ）−２，２，２−トリフルオロ−１−メチルエチル］ベンズアミド、またはその医薬的に許容され得る塩であり；ＰＩ３Ｋδの阻害剤は、７−（１−（９Ｈ−プリン−６−イルアミノ）エチル）−６−（３−フルオロフェニル）−３−メチル−５Ｈ−チアゾロ［３，２−ａ］ピリミジン−５−オン、またはその医薬的に許容され得る塩である。
【００４２】
いくつかの実施形態では、本出願は、それを必要とする患者において、びまん性大細胞型Ｂ細胞リンパ腫を処置する方法であって、前記患者に、（３Ｒ）−３−シクロペンチル−３−［４−（７Ｈ−ピロロ［２，３−ｄ］ピリミジン−４−イル）−１Ｈ−ピラゾール−１−イル］プロパンニトリル、またはその医薬的に許容され得る塩を投与することを含む前記方法を提供し；ＰＩ３Ｋδの阻害剤は、（７−（１−（９Ｈ−プリン−６−イルアミノ）エチル）−６−（３−フルオロフェニル）−３−メチル−５Ｈ−チアゾロ［３，２−ａ］ピリミジン−５−オン、またはその医薬的に許容され得る塩である。
【００４３】
いくつかの実施形態では、本出願は、それを必要とする患者において、びまん性大細胞型Ｂ細胞リンパ腫を処置する方法であって、前記患者に｛１−｛１−［３−フルオロ−２−（トリフルオロメチル）イソニコチノイル］ピペリジン−４−イル｝−３−［４−（７Ｈ−ピロロ［２，３−ｄ］ピリミジン−４−イル）−１Ｈ−ピラゾール−１−イル］アゼチジン−３−イル｝アセトニトリル、またはその医薬的に許容され得る塩；及び７−（１−（９Ｈ−プリン−６−イルアミノ）エチル）−６−（３−フルオロフェニル）−３−メチル−５Ｈ−チアゾロ［３，２−ａ］ピリミジン−５−オン、またはその医薬的に許容され得る塩を投与することを含む、前記方法を提供する。
【００４４】
いくつかの実施形態では、本出願は、それを必要とする患者において、びまん性大細胞型Ｂ細胞リンパ腫を処置する方法であって、前記患者に、４−｛３−（シアノメチル）−３−［４−（７Ｈ−ピロロ［２，３−ｄ］ピリミジン−４−イル）−１Ｈ−ピラゾール−１−イル］アゼチジン−１−イル｝−２，５−ジフルオロ−Ｎ−［（１Ｓ）−２，２，２−トリフルオロ−１−メチルエチル］ベンズアミド、またはその医薬的に許容され得る塩；及び７−（１−（９Ｈ−プリン−６−イルアミノ）エチル）−６−（３−フルオロフェニル）−３−メチル−５Ｈ−チアゾロ［３，２−ａ］ピリミジン−５−オン、またはその医薬的に許容され得る塩を投与することを含む、前記方法を提供する。
【００４５】
本明細書に記載の化合物は、不斉（例えば、１つまたは複数の立体中心を有する）であり得る。別段の指定がない限り、エナンチオマー及びジアステレオマーなどの、全ての立体異性体が意図される。非対称に置換された炭素原子を含有する化合物は、光学活性体またはラセミ体で単離され得る。光学的に不活性な出発物質から光学活性体を調製する方法は、ラセミ混合物の分割または立体選択的合成によるなど当該分野で公知である。オレフィン類、Ｃ＝Ｎ二重結合等の多くの幾何異性体も、本明細書に記載の化合物中に存在し得、全てのかかる安定な異性体は、本発明内で企図される。本発明の化合物のシス及びトランス幾何異性体が記載され、異性体の混合物または別々の異性体として、単離されてよい。
【００４６】
いくつかの実施形態では、化合物は、（Ｒ）配置を有する。いくつかの実施形態では、化合物は、（Ｓ）配置を有する。
【００４７】
化合物のラセミ混合物の分割は、当該分野で公知の多数の方法のいずれかにより実行することができる。方法例としては、光学的に活性な塩形成性有機酸であるキラル分割用酸を用いた分別再結晶が挙げられる。分別再結晶法のための好適な分割剤は、例えば、酒石酸のＤ体及びＬ体、ジアセチル酒石酸、ジベンゾイル酒石酸、マンデル酸、リンゴ酸、乳酸またはβ−ショウノウスルホン酸などの様々な光学活性ショウノウスルホン酸などの光学活性酸である。分別結晶法に好適な他の分割剤としては、α−メチルベンジルアミンの立体異性体的純粋型（例えば、Ｓ及びＲ体、またはジアステレオマー的純粋型）、２−フェニルグリシノール、ノルエフェドリン、エフェドリン、Ｎ−メチルエフェドリン、シクロヘキシルエチルアミン、１，２−ジアミノシクロヘキサン等が挙げられる。
【００４８】
ラセミ混合物の分割は、光学活性分割剤（例えば、ジニトロベンゾイルフェニルグリシン）を充填したカラム上での溶出によっても実行することができる。好適な溶出溶媒組成は、当業者により決定されることができる。
【００４９】
本明細書に記載の化合物は、互変異性型も含む。互変異性型は、プロトンの同時移動を伴う隣接する二重結合と一重結合の交換の結果として生じる。互変異性型は、同じ実験式及び全電荷を有する異性体のプロトン化状態であるプロトトロピー互変異性体を含む。プロトトロピー互変異性体の例としては、ケトン−エノール対、アミド−イミド酸対、ラクタム−ラクチム対、エナミン−イミン対、及びプロトンが、複素環系の２つ以上の位置を占有し得る環状体、例えば、１Ｈ−及び３Ｈ−イミダゾール、１Ｈ−、２Ｈ−及び４Ｈ−１，２，４−トリアゾール、１Ｈ−及び２Ｈ−イソインドール、及び１Ｈ−及び２Ｈ−ピラゾールが挙げられる。互変異性型は、平衡状態または適切な置換により１つの型に立体的に固定され得る。
【００５０】
本明細書に記載の化合物は、中間体または最終化合物において生じる原子の全ての同位体も含み得る。同位体は、同じ原子番号であるが、異なる質量数を有する原子を含む。例えば、水素の同位体としては、三重水素及び重水素が挙げられる
【００５１】
本明細書で用いるとき、「化合物」という用語は、示された構造の全ての立体異性体、幾何異性体、互変異性体、及び同位体を含むものとする。１つの特定の互変異性型として名称または構造により本明細書で同定された化合物は、別段の指定がない限り、他の互変異性型を含むと意図される。
【００５２】
全ての化合物、及びその医薬的に許容され得る塩は、水及び溶媒（例えば、水和物及び溶媒和化合物）などの他の物質と一緒に見いだされ得るか、または単離され得る。
【００５３】
いくつかの実施形態では、本明細書に記載の化合物、またはその塩は、実質的に単離される。「実質的に単離」は、化合物が、それが形成または検出された環境から少なくとも部分的にまたは実質的に分離されることを意味する。部分的分離は、例えば、本明細書に記載の化合物が豊富な組成物を含むことができる。実質的分離は、本明細書に記載の化合物、またはその塩の少なくとも約５０重量％、少なくとも約６０重量％、少なくとも約７０重量％、少なくとも約８０重量％、少なくとも約９０重量％、少なくとも約９５重量％、少なくとも約９７重量％、または少なくとも約９９重量％を含有する組成物を含むことができる。化合物及びそれらの塩の単離方法は、当該分野で日常的なものである。
【００５４】
「医薬的に許容され得る」という句は、健全な医学的判断の範囲内で、合理的なベネフィット・リスク比と釣り合って、過剰な毒性、刺激、アレルギー反応、または他の問題または合併症を伴わない、ヒト及び動物の組織との接触した使用に好適である化合物、材料、組成物、及び／または剤形を指すように本明細書で採用される。
【００５５】
本明細書で用いるとき、「周囲温度」及び「室温」または「ｒｔ」という表現は、当該分野で理解され、一般に、温度、例えば、反応が実行される部屋の温度に関する反応温度、例えば約２０℃〜約３０℃の温度を指す。
【００５６】
本発明は、本明細書に記載の化合物の医薬的に許容され得る塩も含む。本明細書で用いるとき、「医薬的に許容され得る塩」は、本開示の化合物の誘導体を指し、ここで親化合物は、存在する酸または塩基部分をその塩形態へ転換することにより修飾される。医薬的に許容され得る塩の例としては、アミンなどの塩基性残基の鉱酸塩または有機酸塩；カルボン酸などの酸性残基のアルカリ塩または有機塩；及び同様のものが挙げられるが、これに限定されない。本発明の医薬的に許容され得る塩としては、例えば、無毒性無機または有機酸から形成された親化合物の通常の無毒性塩が挙げられる。本発明の医薬的に許容され得る塩は、従来の化学的方法により、塩基性または酸性部分を含有する親化合物から合成され得る。一般的に、かかる塩は、これらの化合物の遊離酸または塩基形態を、水中または有機溶媒中、または該２つの混合物中で、化学量論量の好適な塩基または酸と反応させることにより、調製することができ；一般に、エーテル、酢酸エチル、アルコール類（例えば、メタノール、エタノール、イソ−プロパノール、またはブタノール）またはアセトニトリル（ＡＣＮ）の様な非水性媒体が好ましい。好適な塩の一覧は、Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ’ｓ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｓｃｉｅｎｃｅｓ，第１７版，Ｍａｃｋ  Ｐｕｂｌｉｓｈｉｎｇ  Ｃｏｍｐａｎｙ，Ｅａｓｔｏｎ，Ｐａ．，１９８５，ｐ．１４１８及びＪｏｕｒｎａｌ  ｏｆ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｓｃｉｅｎｃｅ，６６，２（１９７７）（そのそれぞれは、その全体が参照により本明細書に組み込まれる）に見いだされる。
【００５７】
本明細書で用いるとき、「個体」または「患者」という用語は、互換可能に使用され、哺乳類、好ましくはマウス、ラット、その他のげっ歯類、ウサギ、イヌ、ネコ、ブタ、ウシ、ヒツジ、ウマ、または霊長類、及び最も好ましくはヒトを含む任意の動物を指す。
【００５８】
いくつかの実施形態では、阻害剤は、治療有効量で投与される。本明細書で用いるとき、「治療有効量」という句は、研究者、獣医、医師または他の臨床医により組織、系、動物、個体またはヒトにおいて求められる生物学的または医薬的応答を引き出す活性化合物または医薬品の量を指す。いくつかの実施形態では、患者または個体に投与される化合物、またはその医薬的に許容され得る塩の投与量は、約１ｍｇ〜約２ｇ、約１ｍｇ〜約１０００ｍｇ、約１ｍｇ〜約５００ｍｇ、約１ｍｇ〜約２００ｍｇ、約１ｍｇ〜約１００ｍｇ、約１ｍｇ〜５０ｍｇ、または約５０ｍｇ〜約５００ｍｇである。
【００５９】
本明細書で用いるとき、「処置する」または「処置」という用語は、（１）疾患を阻害すること；例えば、疾患、状態または障害の病理または総体症状を経験しているまたは呈している個体において疾患、状態または障害を阻害すること（すなわち、病理及び／または総体症状のさらなる発展を停止させること）；及び（２）疾患を寛解させること；例えば、疾患、状態または障害の病理または総体症状を経験しているまたは呈している個体において疾患、状態または障害を寛解させること（すなわち、病理及び／または総体症状を回復させること）、例えば疾患の重症度を低減させること、の１つまたは複数を指す。
【００６０】
併用療法
例えば、化学療法剤、抗炎症剤、ステロイド剤、免疫抑制剤などの１つまたは複数の追加の医薬品、ならびに例えば、ＷＯ２００６／０５６３９９に記載のものなどの、Ｂｃｒ−Ａｂｌ、Ｆｌｔ−３、ＥＧＦＲ、ＨＥＲ２、ｃ−ＭＥＴ、ＶＥＧＦＲ、ＰＤＧＦＲ、ｃＫｉｔ、ＩＧＦ−１Ｒ、ＲＡＦ、ＦＡＫ、ＡｋｔｍＴＯＲ、ＰＩＭ、及びＡＫＴ（例えば、ＡＫＴ１、ＡＫＴ２、またはＡＫＴ３）キナーゼ阻害剤、または治療抗体などの他の薬剤を、ＰＩ３Ｋ関連疾患、障害または状態の処置のために、本発明の化合物と併用して使用することができる。該１つまたは複数の追加の医薬品は、同時にまたは逐次的に患者に投与することができる。
【００６１】
併用療法において使用するための抗体の例としては、トラスツズマブ（例えば、抗ＨＥＲ２）、ラニビズマブ（例えば、抗ＶＥＧＦ−Ａ）、ベバシズマブ（商品名アバスチン、例えば、抗ＶＥＧＦ、パニツムマブ（例えば、抗ＥＧＦＲ）、セツキシマブ（例えば、抗ＥＧＦＲ）、リツキサン（抗ＣＤ２０）及びｃ−ＭＥＴを対象とする抗体が挙げられるが、これらに限定されない。
【００６２】
以下の薬剤の１つまたは複数を本発明の化合物と組み合わせて使用してよく、非限定的なリストとして表す：細胞分裂阻害剤、シスプラチン、ドキソルビシン、タキソテール、タキソール、エトポシド、イリノテカン、カンプトスター（ｃａｍｐｔｏｓｔａｒ）、トポテカン、パクリタキセル、ドセタキセル、エポチロン、タモキシフェン、５−フルオロウラシル、メトクストレキサート（ｍｅｔｈｏｘｔｒｅｘａｔｅ）、テモゾロミド、シクロホスファミド、ＳＣＨ  ６６３３６、Ｒ１１５７７７、Ｌ７７８、１２３、ＢＭＳ  ２１４６６２、イレッサ、タルセバ、ＥＧＦＲに対する抗体、Ｇｌｅｅｖｅｃ（商標）、イントロン、ａｒａ−Ｃ、アドリアマイシン、シトキサン、ゲムシタビン、ウラシルマスタード、クロルメチン、イホスファミド、メルファラン、クロラムブシル、ピポブロマン、トリエチレンメラミン、トリエチレンチオホスホラミン、ブスルファン、カルムスチン、ロムスチン、ストレプトゾシン、ダカルバジン、フロクスウリジン、シタラビン、６−メルカプトプリン、６−チオグアニン、フルダラビンリン酸エステル、オキサリプラチン、ロイコビリン（ｌｅｕｃｏｖｉｒｉｎ）、ＥＬＯＸＡＴＩＮ（商標）、ペントスタチン、ビンブラスチン、ビンクリスチン、ビンデシン、ブレオマイシン、ダクチノマイシン、ダウノルビシン、ドキソルビシン、エピルビシン、イダルビシン、ミトラマイシン、デオキシコホルマイシン、マイトマイシンＣ、Ｌ−アスパラギナーゼ、テニポシド１７．アルファ．エチニルエストラジオール、ジエチルスチルベストロール、テストステロン、プレドニゾン、フルオキシメステロン、ドロモスタノロンプロピオン酸エステル、テストラクトン、メゲストロール酢酸エステル、メチルプレドニゾロン、メチルテストステロン、プレドニソロン、トリアムシノロン、クロロトリアニセン、ヒドロキシプロゲステロン、アミノグルテチミド、エストラムスチン、メドロキシプロゲステロン酢酸エステル、ロイプロリド、フルタミド、トレミフェン、ゴセレリン、シスプラチン、カルボプラチン、ヒドロキシウレア、アムサクリン、プロカルバジン、ミトタン、ミトキサントロン、レバミソール、ナベルベン（Ｎａｖｅｌｂｅｎｅ）、アナストラゾール（Ａｎａｓｔｒａｚｏｌｅ）、レトロゾール（Ｌｅｔｒａｚｏｌｅ）、カペシタビン、レロキサフィン、ドロロキサフィン、ヘキサメチルメラミン、アバスチン、ハーセプチン、ベクザー、ベルケイド、ゼバリン、トリセノックス、ゼローダ、ビノレルビン、ポルフィマー、アービタックス、リポソーマル、チオテパ、アルトレタミン、メルファラン、トラスツズマブ、レロゾール（Ｌｅｒｏｚｏｌｅ）、フルベストラント、エキセメスタン、フルベストラント、イホスフォミド（Ｉｆｏｓｆｏｍｉｄｅ）、リツキシマブ、Ｃ２２５、キャンパス、クロファラビン、クラドリビン、アフィジコロン（ａｐｈｉｄｉｃｏｌｏｎ）、リツキサン、スニチニブ、ダサチニブ、テザシタビン、Ｓｍｌ１、フルダラビン、ペントスタチン、トリアプリン、ジドックス、トリミドックス、アミドックス、３−ＡＰ、ＭＤＬ−１０１、７３１、ベンダムスチン（トレアンダ）、オファツムマブ、またはＧＳ−１１０１（ＣＡＬ−１０１としても公知��。
【００６３】
化学療法剤の例としては、プロテオソーム阻害剤（例えば、ボルテゾミブ）、サリドマイド、レブリミド、及びメルファラン、ドキソルビシン、シクロホスファミド、ビンクリスチン、エトポシド、カルムスチンなどのＤＮＡ傷害剤等が挙げられる。
【００６４】
ステロイド剤の例としては、デキサメタゾンまたはプレドニゾンなどの副腎皮質ステロイド剤が挙げられる。
【００６５】
Ｂｃｒ−Ａｂ１阻害剤の例としては、米国特許第５，５２１，１８４号、ＷＯ０４／００５２８１、及び米国仮特許出願第６０／５７８，４９１号に記載の属及び種の化合物、及びそれらの医薬的に許容され得る塩が挙げられる。
【００６６】
好適なＦｌｔ−３阻害剤の例としては、ＷＯ０３／０３７３４７、ＷＯ０３／０９９７７１、及びＷＯ０４／０４６１２０に開示の化合物、及びそれらの医薬的に許容され得る塩が挙げられる。
【００６７】
好適なＲＡＦ阻害剤の例としては、ＷＯ００／０９４９５及びＷＯ０５／０２８４４４に開示の化合物、及びそれらの医薬的に許容され得る塩が挙げられる。
【００６８】
好適なＦＡＫ阻害剤の例としては、ＷＯ０４／０８０９８０、ＷＯ０４／０５６７８６、ＷＯ０３／０２４９６７、ＷＯ０１／０６４６５５、ＷＯ００／０５３５９５、及びＷＯ０１／０１４４０２に開示の化合物、及びそれらの医薬的に許容され得る塩が挙げられる。
【００６９】
好適なｍＴＯＲ阻害剤の例としては、ＷＯ２０１１／０２５８８９に開示の化合物、及びそれらの医薬的に許容され得る塩が挙げられる。
【００７０】
いくつかの実施形態では、本発明の化合物は、特に、イマチニブまたは他のキナーゼ阻害剤に耐性のある患者を処置するため、イマチニブを含む１つまたは複数の他のキナーゼ阻害剤と組み合わせて、使用することができる。
【００７１】
いくつかの実施形態では、本発明の化合物は、多発性骨髄腫などの癌の処置において化学療法剤と併用して使用することができ、化学療法剤単独に対する応答と比較して、処置応答を改善する可能性があり、これはその毒性作用の増悪を伴わない。多発性骨髄腫の処置において使用される追加の医薬品の例としては、例えば、メルファラン、メルファラン＋プレドニゾン［ＭＰ］、ドキソルビシン、デキサメタゾン、及びベルケイド（ボルテゾミブ）を挙げることができるが、これらに限定されない。多発性骨髄腫の処置において使用されるさらなる追加の薬剤としては、Ｂｃｒ−Ａｂ１、Ｆｌｔ−３、ＲＡＦ及びＦＡＫキナーゼ阻害剤が挙げられる。相加または相乗効果は、本発明のＰＩ３Ｋ阻害剤を追加の薬剤と併用することの望ましい結果である。さらに、デキサメタゾンなどの薬剤に対する多発性骨髄腫細胞の耐性は、本発明のＰＩ３Ｋ阻害剤を用いた処置の際に可逆的であり得る。該薬剤は、単一または連続的剤形で本化合物と併用することができるか、または該薬剤は別の剤形として同時または逐次投与することができる。
【００７２】
いくつかの実施形態では、デキサメタゾンなどの副腎皮質ステロイド剤は、デキサメタゾンが連続的とは反対に間欠的に投与される場合、本発明の化合物と併用して、患者に投与される。
【００７３】
いくつかのさらなる実施形態では、本発明の化合物と他の治療薬との組み合わせは、骨髄移植または幹細胞移植の前、最中、及び／または後に、患者に投与することができる。
【００７４】
医薬製剤及び剤形
医薬品として採用するとき、本明細書に記載の化合物は、医薬組成物の形態で投与することができる。これらの組成物は、医薬分野で周知の様式で調製されることができ、局在的または全身的処置が望ましいかどうか、及び処置される領域に依存して、様々な経路により投与されることができる。投与は、局所的（経皮、上皮、眼及び鼻腔内、腟内及び直腸送達を含む粘膜を含む）、肺（例えば、ネブライザーによるものを含む散剤または噴霧剤の吸入またはガス注入による；気管内または鼻腔内）、経口または非経口であってよい。非経口投与は、静脈内、動脈内、皮下、腹腔内、筋肉内または注射もしくは点滴；または頭蓋内、例えば、くも膜下腔内または脳室内投与を含む。非経口投与は、単回のボーラス用量の形態であることができるか、または、例えば、連続的注入ポンプによるものであってよい。局所投与のための医薬組成物及び製剤は、経皮パッチ、軟膏、ローション、クリーム、ゲル、ドロップ、坐剤、スプレー、液剤及び散剤を含んでよい。従来の医薬用キャリア、水性、粉状または油状基材、粘稠化剤等が、必要または望ましくあり得る。本発明は、１つまたは複数の医薬的に許容され得るキャリア（賦形剤）と組み合わせて、有効成分として、本明細書に記載の化合物またはその医薬的に許容され得る塩を含有する医薬組成物も含む。いくつかの実施形態では、組成物は、局所投与に好適である。本発明に組成物を作製する際、典型的には、有効成分は賦形剤と混合され、賦形剤により希釈され、または例えば、カプセル、小袋、紙、または他の容器の形態で、かかるキャリア内に封入される。賦形剤が、希釈剤としての役割を果たすとき、それは有効成分に対するビヒクル、キャリアまたは媒体として作用する固体、半固体、または液体物質であり得る。ゆえに、該組成物は、錠剤、丸剤、散剤、トローチ剤、サシェ剤、カシェ剤、エリキシル剤、懸濁剤、乳剤、液剤、シロップ剤、噴霧剤（固体または液体媒体中として）、例えば、１０重量％までの活性化合物を含む軟膏剤、軟質及び硬質ゼラチンカプセル剤、坐剤、滅菌注射用水、及び滅菌容器入り散剤の形態をとることができる。
【００７５】
製剤を調製するとき、活性化合物は、他の成分と配合される前に、適切な粒度を提供するために粉砕されることができる。活性化合物が実質的に不溶性である場合、２００メッシュ未満の粒度に粉砕することができる。活性化合物が実質的に水溶性である場合、粒度は、製剤内で実質的に均一な分布、例えば、約４０メッシュを提供するために粉砕することにより、調節されることができる。
【００７６】
本明細書に記載の化合物は、錠剤製剤及び他の製剤タイプに適切な粒度を得るために、湿式粉砕などの既知の粉砕方法を用いて粉砕されてよい。本明細書に記載の化合物の微粉化した（ナノ微粒子）調製物は、当該分野において公知の手法により調製することができ、例えば、国際特許出願第ＷＯ２００２／０００１９６号を参照されたい。
【００７７】
好適な賦形剤のいくつかの例としては、ラクトース、デキストロース、スクロース、ソルビトール、マンニトール、デンプン、アカシアゴム、リン酸カルシウム、アルギン酸塩、トラガカント、ゼラチン、ケイ酸カルシウム、微結晶セルロース、ポリビニルピロリドン、セルロース、水、シロップ、及びメチルセルロースが挙げられる。製剤は、付加的に：タルク、ステアリン酸マグネシウム及び鉱油などの潤滑剤；湿潤剤；乳化及び懸濁剤；メチルベンゾエート及びプロピルヒドロキシベンゾエートなどの防腐剤；甘味料；及び香料を含むことができる。本発明の組成物は、当該分野で公知の方法を使用して、患者への投与後に、有効成分の迅速、持続または遅延放出を提供するように製剤化されることができる。
【００７８】
組成物は、単位剤形に製剤化されることができ、各投与量は約５〜約１０００ｍｇ（１ｇ）、より通常は約１００〜約５００ｍｇの有効成分を含有する。「単位剤形」という用語は、単位投与量として、ヒト対象及び他の哺乳類に好適な物理的に分離した単位を指し、各単位は、好適な医薬用賦形剤と合わせて、所望の治療効果を生じるように算出された所定量の活性物質を含有する。
【００７９】
いくつかの実施形態では、本発明の組成物は、約５〜約５０ｍｇの有効成分を含有する。当業者は、これが、約５〜約１０、約１０〜約１５、約１５〜約２０、約２０〜約２５、約２５〜約３０、約３０〜約３５、約３５〜約４０、約４０〜約４５、または約４５〜約５０ｍｇの有効成分を含有する組成物を具体的に表すことを認識するだろう。
【００８０】
いくつかの実施形態では、本発明の組成物は、約５０〜約５００ｍｇの有効成分を含有する。当業者は、これが、約５０〜約１００、約１００〜約１５０、約１５０〜約２００、約２００〜約２５０、約２５０〜約３００、約３５０〜約４００、または約４５０〜約５００ｍｇの有効成分を含有する組成物を具体的に表すことを認識するだろう。
【００８１】
いくつかの実施形態では、本発明の組成物は、約５００〜約１０００ｍｇの該有効成分を含む。当業者は、これが、約５００〜約５５０、約５５０〜約６００、約６００〜約６５０、約６５０〜約７００、約７００〜約７５０、約７５０〜約８００、約８００〜約８５０、約８５０〜約９００、約９００〜約９５０、または約９５０〜約１０００ｍｇの有効成分を含有する組成物を具体的に表すことを認識するだろう。
【００８２】
同様の投薬量は、本発明の方法及び使用で、本明細書に記載の化合物で使用され得る。
【００８３】
活性化合物は、広範囲の投薬量にわたって有効であることができ、一般に、医薬的有効量で投与される。しかしながら、実際に投与される化合物の量は、通常、処置される状態、選択される投与経路、投与される実際の化合物、個々の患者の年齢、体重及び応答、患者の症状の重症度などを含む関連する状況に従って、医師により決定されるだろうことが、理解されるだろう。
【００８４】
錠剤などの固体組成物を調製するため、主要な有効成分は、本発明の化合物の均一な混合物を含有する固体前製剤組成物を形成するために医薬用賦形剤と混合される。これらの前製剤組成物を均一と呼ぶとき、典型的には、組成物が、錠剤、丸剤及びカプセル剤などの等しく有効な単位剤形中に容易に細分化され得るように、有効成分は、組成物全体を通して均等に分散される。次いで、この固体前製剤は、例えば、約０．１〜約１０００ｍｇの本発明の有効成分を含有する、上記の単位剤形のタイプへと細分化される。
【００８５】
本発明の錠剤または丸剤は、コーティングされ得るか、そうでなければ持続性作用の利点を有する剤形を提供するように配合され得る。例えば、錠剤または丸剤は、内側薬用及び外側薬用成分を含み得、後者は、前者の外被の形態である。この２つの成分は、胃での分解に抵抗し、内側成分が、十二指腸内へと未変化で通過または放出を遅延させることを可能にする働きをする腸溶性層により、分離され得る。様々な物質が、かかる腸溶性層またはコーティングに使用され得、かかる物質としては、多数のポリマー酸及びポリマー酸とセラック、セチルアルコール、及び酢酸セルロースなどの物質との混合物が挙げられる。
【００８６】
本発明の化合物及び組成物が、経口または注射による投与のために組み込まれ得る液体形態としては、水性液剤、好適に風味付けされたシロップ剤、水性または油性懸濁剤、及び、綿実油、ゴマ油、ココナツ油、またはピーナッツ油などの食用油ならびにエリキシル及び同様の医薬用ビヒクルを伴う風味付けされた乳剤が挙げられる。
【００８７】
吸入またはガス注入用組成物は、医薬的に許容され得る水性または有機溶媒またはその混合物中の液剤及び懸濁剤、ならびに散剤を含む。液体または固体組成物は、上記のような好適な医薬的に許容され得る賦形剤を含有してよい。いくつかの実施形態では、組成物は、局所的または全身的効果のため、経口または鼻腔内呼吸経路により投与される。組成物を不活性ガスの使用により噴霧することができる。噴霧される液剤は、噴霧デバイスから直接吸い込まれてよく、または噴霧デバイスを、フェイスマスク、テント、または間欠陽圧式人工呼吸器に付着することができる。液剤、懸濁剤、または散剤組成物は、適切な様式で、製剤を送達するデバイスから、経口または鼻腔内投与されることができる。
【００８８】
局所用製剤は、１つまたは複数の従来のキャリアを含有することができる。いくつかの実施形態では、軟膏剤は、水及び、例えば、流動パラフィン、ポリオキシエチレンアルキルエーテル、プロピレングリコール、白色ワセリンなどから選択される１つまたは複数の疎水性キャリアを含有することができる。クリーム剤のキャリア組成物は、グリセロール及び１つまたは複数の他の成分、例えば、グリセリンモノステアレート、ＰＥＧ−グリセリンモノステアレート及びセチルステアリルアルコールと組み合わせた水をベースとすることができる。ゲル剤は、例えば、グリセロール、ヒドロキシエチルセルロースなどの他の成分と好適に組み合わせて、イソプロピルアルコール及び水を用いて、製剤化することができる。いくつかの実施形態では、局所用製剤は、少なくとも約０．１、少なくとも約０．２５、少なくとも約０．５、少なくとも約１、少なくとも約２、または少なくとも約５ｗｔ％の本明細書に記載の化合物を含有する。局所用製剤は、選択された適応症、例えば、乾癬または他の皮膚状態の処置のための使用説明書が任意選択的に添付されている、例えば、１００ｇのチューブ内に好適に包装することができる。
【００８９】
患者に投与される化合物または組成物の量は、何が投与されるか、予防または治療などの投与の目的、患者の状態、投与の様式等に依存して異なるだろう。治療用途では、組成物は、疾患及びその合併症の症状を治癒または少なくとも部分的に停止させるために十分な量で、既に該疾患に罹っている患者に投与され得る。有効な用量は、処置される疾患状態に、ならびに疾患の重症度、患者の年齢、体重及び全身状態などの因子に依存する主事臨床医の判断に、依存するだろう。
【００９０】
患者に投与される組成物は、上記医薬組成物の形態であることができる。これらの組成物は、従来の滅菌技術により滅菌されることができるか、または滅菌濾過されてよい。水性液剤は、そのまま使用のために包装され得るか、または凍結乾燥され得、凍結乾燥された調製物は、投与前に滅菌水性キャリアと組み合わされる。化合物調製物のｐＨは、典型的には、３と１１の間、より好ましくは、５〜９、最も好ましくは、７〜８であるだろう。ある特定の前述の賦形剤、キャリア、または安定剤の使用は、医薬品の塩の形成をもたらすだろうことが理解されるだろう。
【００９１】
本発明の化合物の治療投与量は、例えば、治療が行われるための特定の使用、化合物の投与の様式、患者の健康及び状態、及び処方医師の判断に従って異なり得る。医薬組成物中の本明細書に記載の化合物の比率または濃度は、投与量、化学的特徴（例えば、疎水性）、及び投与経路を含む多くの因子に依存して異なり得る。例えば、本明細書に記載の化合物は、非経口投与では、約０．１〜約１０％（ｗ／ｖ）の化合物を含有する水性生理緩衝液中で提供され得る。いくつかの典型的な用量範囲は、１日当たり、約１μｇ／体重ｋｇ〜約１ｇ／体重ｋｇである。いくつかの実施形態では、用量範囲は、１日当たり約０．０１ｍｇ／体重ｋｇ〜約１００ｍｇ／体重ｋｇである。投与量は、疾患または障害の進行の型及び程度、特定の患者の健康状態全般、選択される化合物の相対的生物学的効率、賦形剤の処方、及びその投与経路などの変数に依存する傾向がある。有効な用量は、インビトロまたは動物モデル試験システムから得られる用量反応曲線から推定することができる。
【００９２】
本発明の組成物は、化学療法剤、ステロイド剤、抗炎症性化合物、または免疫抑制剤などの１つまたは複数の追加の医薬品をさらに含むことができ、その例は、本明細書中に列挙する。
【００９３】
キット
本発明は、例えば、癌などのＰＩ３Ｋ関連疾患または障害の処置または予防に有用な医薬用キットも含み、これは、治療有効量の本明細書に記載の化合物を含む医薬組成物を含有する１つまたは複数の容器を含む。当業者に容易に明白であるように、そのようなキットは、必要に応じて、例えば、１つまたは複数の医薬的に許容され得るキャリアを有する容器、追加の容器などの１つまたは複数の様々な従来の医薬用キット構成要素をさらに含むことができる。投与されるべき該構成要素の量、投与の指針、及び／または該構成要素の混合に関する指針を示す、挿入物あるいはラベルのいずれかとしての使用説明書も、キット内に含むことができる。
【実施例】
【００９４】
実施例１．（（２Ｒ，５Ｓ）−５−｛２−［（１Ｒ）−１−ヒドロキシエチル］−１Ｈ−イミダゾ［４，５−ｄ］チエノ［３，２−ｂ］ピリジン−１−イル｝テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−イル）アセトニトリル
【化１】
2019163324.tif 000018
ステップ１．ｔｅｒｔ−ブチル（４Ｓ）−２，２−ジメチル−４−ビニル−１，３−オキサゾリジン−３−カルボキシレート
テトラヒドロフラン（１４０ｍＬ）中のメチルトリフェニルホスホニウムブロミド（５．６３ｇ、１５．８ｍｍｏｌ）の懸濁液に、２．５Ｍのｎ−ブチルリチウムを含むヘキサン（７．３５ｍＬ、１８．４ｍｍｏｌ）を加えた。深赤色の溶液を０℃で１時間撹拌した。次いで、テトラヒドロフラン（７．３ｍＬ）中のｔｅｒｔ−ブチル（４Ｒ）−４−ホルミル−２，２−ジメチル−１，３−オキサゾリジン−３−カルボキシレートの溶液（Ａｌｄｒｉｃｈから入手、３．０１ｇ、１３．１ｍｍｏｌ）を０℃で滴加した。赤色の溶液を室温まで温め、１２時間撹拌した。ヘキサンを反応混合物に４：１（ｖ／ｖ）の比率で加えた。懸濁液を、セライトを通して濾過し、濾過物を濃縮した。結果生じた残渣をフラッシュクロマトグラフィー（１０％酢酸エチルを含むヘキサンで溶出）によって精製して、所望の化合物を無色の油状物質（１．９２ｇ、６４％）として得た。
【００９５】
ステップ２．ｔｅｒｔ−ブチル［（１Ｓ）−１−（ヒドロキシメチル）プロパ−２−エン−１−イル］カルバメート
メタノール（８３ｍＬ）中のｔｅｒｔ−ブチル（４Ｓ）−２，２−ジメチル−４−ビニル−１，３−オキサゾリジン−３−カルボキシレート（１．９０ｇ、８．３６ｍｍｏｌ）の溶液に、ｐ−トルエンスルホン酸一水和物（０．８０ｇ、４．２ｍｍｏｌ）を０℃で加えた。混合物を一晩ゆっくりと室温まで温めた。反応混合物を飽和ＮａＨＣＯ３水溶液で希釈し、濃縮し、次いで酢酸エチルで希釈した。有機層を飽和ＮａＨＣＯ３（２ｘ）及び飽和食塩水で洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、濾過し、濃縮して、所望の生成物を無色の油状物質（１．１８７ｇ、７６％）として得た。１Ｈ  ＮＭＲ （４００  ＭＨｚ，  ＣＤＣｌ３）  δ  ５．８１  （１Ｈ，  ｍ），  ５．２５  （２Ｈ，  ｍ），  ４．９０  （１Ｈ，  ｍ），  ４．２５  （１Ｈ，  ｂｒ  ｓ），  ３．６７  （２Ｈ，  ｍ），  １．４５  （９Ｈ，  ｓ）ｐｐｍ。
【００９６】
ステップ３．ｔｅｒｔ−ブチル［（１Ｓ）−１−（｛［１−（ヒドロキシメチル）プロパ−２−エン−１−イル］オキシ｝メチル）プロパ−２−エン−１−イル］カルバメート
フラスコに、ｔｅｒｔ−ブチル［（１Ｓ）−１−（ヒドロキシメチル）プロパ−２−エン−１−イル］カルバメート（０．４０１ｇ、２．１４ｍｍｏｌ）、トリス（ジベンジリデンアセトン）ジパラジウム（０）（５９ｍｇ、０．０６４ｍｍｏｌ）、Ｎ，Ｎ’−（１Ｓ，２Ｓ）−シクロヘキサン−１，２−ジイルビス［２−（ジフェニルホスフィノ）−１−ナフトアミド］（１５０ｍｇ、０．１９ｍｍｏｌ）、及び４−ジメチルアミノピリジン（７８ｍｇ、０．６４ｍｍｏｌ）を充填した。反応混合物をＮ２で３回パージし、次いで、塩化メチレン（２１．３ｍＬ）、及び１．０Ｍトリエチルボランを含むＴＨＦ（１３０μＬ、０．１３ｍｍｏｌ）を順次加えた。１０分間撹拌した後、２−ビニルオキシラン（０．１５０ｇ、２．１４ｍｍｏｌ）を加え、結果生じた混合物を一晩撹拌した。反応物をジクロロメタン及び飽和ＮａＨＣＯ３水溶液で希釈した。有機層を分離し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、濾過し、濃縮した。粗残渣をフラッシュクロマトグラフィー（０〜５０％酢酸エチル／ヘキサンで溶出）で精製して、所望の生成物（０．２７１ｇ、４９％）を得た。１Ｈ  ＮＭＲ  （３００  ＭＨｚ，  ＣＤＣｌ３）  δ  ５．８５  （１Ｈ，  ｍ），  ５．６７  （１Ｈ，  ｍ），  ５．８４〜５．１７  （４Ｈ，  ｍ），  ４．８３  （１Ｈ，  ｍ），  ４．３０  （１Ｈ，  ｂｒ  ｓ），  ３．８３  （１Ｈ，  ｍ），  ３．６９  （１Ｈ，  ｄｄ，  Ｊ  ＝  ４．５  及び  ６．９  Ｈｚ），  ３．５４  （２Ｈ，  ｍ），  ３．３６  （１Ｈ，  ｄｄ，  Ｊ  ＝  ４．５  及び  ６．９  Ｈｚ），  １．４５  （９Ｈ，  ｓ）  ｐｐｍ。
【００９７】
ステップ４．２−（｛（２Ｓ）−２−［（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ］ブト−３−エン−１−イル｝オキシ）ブト−３−エン−１−イル酢酸塩
塩化メチレン（１０ｍＬ）中のｔｅｒｔ−ブチル［（１Ｓ）−１−（｛［１−（ヒドロキシメチル）プロパ−２−エン−１−イル］オキシ｝メチル）プロパ−２−エン−１−イル］カルバメート（２６８ｍｇ、１．０４ｍｍｏｌ）の混合物に、トリエチルアミン（４３５μＬ、３．１２ｍｍｏｌ）を加えた。混合物を０℃まで冷却し、塩化アセチル（１５０μＬ、２．１ｍｍｏｌ）を滴加した。反応物を室温で２時間撹拌し、次いで水でクエンチした。有機層を濃縮し、結果生じた残渣をシリカゲル（２０％酢酸エチル／ヘキサンで溶出）で精製して、所望の生成物（０．２６ｇ、８５％）を得た。ＬＣＭＳ  Ｃ１０Ｈ１８ＮＯ３  （Ｍ−１００＋Ｈ）＋に対する計測値：  ｍ／ｚ  ＝  ２００．１；実測値：  ２００．１。
【００９８】
ステップ５．｛（５Ｓ）−５−［（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ］−５，６−ジヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−イル｝メチル酢酸塩
５００ｍＬの２口丸底フラスコに、ベンジリデン（ジクロロ）（１，３−ジメシチルイミダゾリジン−２−イド−２−イル）（トリシクロヘキシルホスホラニル）ルテニウム（３８ｍｇ、０．０４４ｍｍｏｌ）を加えた。窒素で３回パージした後、ジクロロメタン（無水物、８ｍＬ）を加え、その後２−（｛（２Ｓ）−２−［（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ］ブト−３−エン−１−イル｝オキシ）ブト−３−エン−１−イル酢酸塩（２６５ｍｇ、０．８８５ｍｍｏｌ）を加えた。反応混合物を室温で１５時間撹拌した。混合物を真空濃縮した。残渣をフラッシュクロマトグラフィー（ヘキサンから２５％ＥｔＯＡｃを含むヘキサンで溶出）を介して精製して、所望の生成物を褐色油状物質（０．２０５ｇ、８５％）として得た。ＬＣＭＳ  Ｃ９Ｈ１４ＮＯ５  （Ｍ＋Ｈ−Ｂｕ＋Ｈ）＋に対する計測値：  ｍ／ｚ  ＝  ２１６．１；実測値：  ２１６．１。１Ｈ  ＮＭＲ  （３００  ＭＨｚ，  ＣＤＣｌ３）  δ  ５．９４ （０．１７Ｈ，  ｍ），  ５．８４  （０．８３Ｈ，  ｍ），  ５．６９  （１Ｈ，  ｍ），  ４．８９  （０．１３Ｈ，  ｍ），  ４．７０  （０．８３Ｈ，  ｍ），  ４．２５  （１Ｈ，  ｍ），  ４．０５  （４Ｈ，  ｍ），  ３．５６  （０．１３Ｈ，  ｍ），  ３．３８  （０．８７Ｈ，  ｍ），  ２．０４  （２．４９Ｈ，  ｓ），  ２．０３  （０．５１Ｈ，  ｍ），  １．３８  （９Ｈ，  ｓ）  ｐｐｍ（生成物は、トランス異性体及びシス異性体の約５：１混合物であった）。
【００９９】
ステップ６．［（５Ｓ）−５−アミノ−５，６−ジヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−イル］メチル酢酸塩
塩化メチレン（５．２ｍＬ）中の｛（５Ｓ）−５−［（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ］−５，６−ジヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−イル｝メチル酢酸塩（２０５ｍｇ、０．７５６ｍｍｏｌ）の溶液に４．０Ｍ塩化水素を含むジオキサン（１．５ｍＬ、６．０ｍｍｏｌ）を加えた。反応溶液を室温で６時間撹拌した。溶媒を減圧下で除去して、所望の生成物を白色固体として得た。ＬＣＭＳ  Ｃ８Ｈ１４ＮＯ３  （Ｍ＋  Ｈ）＋に対する計測値：  ｍ／ｚ  ＝  １７２．１；実測値：  １７２．１。
【０１００】
ステップ７．｛（５Ｓ）−５−［（６−ニトロチエノ［３，２−ｂ］ピリジン−７−イル）アミノ］−５，６−ジヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−イル｝メチル酢酸塩
イソプロピルアルコール（１．７ｍＬ）中の７−クロロ−６−ニトロチエノ［３，２−ｂ］ピリジン（１５６ｍｇ、０．７２７ｍｍｏｌ）、［（５Ｓ）−５−アミノ−５，６−ジヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−イル］メチル酢酸塩（１２９ｍｇ、０．７５４ｍｍｏｌ）及びＮ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン（０．２６ｍＬ、１．５ｍｍｏｌ）の混合物を、９０℃で２時間加熱した。反応混合物を濃縮し、フラッシュクロマトグラフィーで精製して、所望の生成物（０．２１ｇ８３％）を得た。ＬＣＭＳ  Ｃ１５Ｈ１６Ｎ３Ｏ５Ｓ  （Ｍ＋  Ｈ）＋に対する計測値：  ｍ／ｚ  ＝  ３５０．１；実測値：  ３５０．０。
【０１０１】
ステップ８．｛（５Ｓ）−５−［（６−アミノチエノ［３，２−ｂ］ピリジン−７−イル）アミノ］テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−イル｝メチル酢酸塩
メタノール（４．０ｍＬ）中の｛（５Ｓ）−５−［（６−ニトロチエノ［３，２−ｂ］ピリジン−７−イル）アミノ］−５，６−ジヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−イル｝メチル酢酸塩（２１０ｍｇ、０．６００ｍｍｏｌ）及び１０％パラジウム炭素触媒（０．２１ｇ）の混合物を、室温で２時間Ｈ２のバルーン圧に供した。混合物を濾過し、濾過物を濃縮し、フラッシュクロマトグラフィー（１５％メタノールを含むジクロロメタンで溶出）で精製して、所望の生成物（１４５ｍｇ、７５％）を得た。ＬＣＭＳ  Ｃ１５Ｈ２０Ｎ３Ｏ３Ｓ  （Ｍ＋  Ｈ）＋に対する計測値：  ｍ／ｚ  ＝  ３２２．１；実測値：  ３２２．０。
【０１０２】
ステップ９．（１Ｒ）−１−｛１−［（３Ｓ）−６−（ヒドロキシメチル）テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−３−イル］−１Ｈ−イミダゾ［４，５−ｄ］チエノ［３，２−ｂ］ピリジン−２−イル｝エタノール
ＴＨＦ（２ｍＬ）中の（２Ｒ）−２−ヒドロキシプロパンアミド（１３１ｍｇ、１．４７ｍｍｏｌ）及びトリエチルオキソニウムテトラフルオロボラート（２６３ｍｇ、１．３８ｍｍｏｌ）の混合物を室温で２時間撹拌した。溶媒を除去し、残渣をエタノール（０．８５ｍＬ）中に溶解し、エタノール（３．１ｍＬ）中の｛（５Ｓ）−５−［（６−アミノチエノ［３，２−ｂ］ピリジン−７−イル）アミノ］テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−イル｝メチル酢酸塩（１４５ｍｇ、０．４５１ｍｍｏｌ）の懸濁液に加えた。混合物を８０℃で１時間撹拌した。反応物を室温まで冷却し、水（１．０ｍＬ）で希釈した。水酸化リチウム（３２．４ｍｇ、１．３５ｍｍｏｌ）を加え、混合物を２時間撹拌した。反応混合物をメタノールで希釈し、分取ＬＣＭＳ（ＸＢｒｉｄｇｅ  Ｃ１８カラム、０．１％水酸化アンモニウムを含有するアセトニトリル／水のグラジエントで溶出、流速は６０ｍＬ／分）で精製して、所望の生成物を白色固体（９５ｍｇ、６３％）として得た。ＬＣＭＳ  Ｃ１６Ｈ２０Ｎ３Ｏ３Ｓ  （Ｍ＋  Ｈ）＋に対する計測値：  ｍ／ｚ  ＝  ３３４．１；実測値：  ３３４．０。
【０１０３】
ステップ１０：（（２Ｒ，５Ｓ）−５−｛２−［（１Ｒ）−１−ヒドロキシエチル］−１Ｈ−イミダゾ［４，５−ｄ］チエノ［３，２−ｂ］ピリジン−１−イル｝テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−イル）メチル４−メチルベンゼンスルホナート及び（（２Ｓ，５Ｓ）−５−｛２−［（１Ｒ）−１−ヒドロキシエチル］−１Ｈ−イミダゾ［４，５−ｄ］チエノ［３，２−ｂ］ピリジン−１−イル｝テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−イル）メチル４−メチルベンゼンスルホナート
塩化メチレン（３．４ｍＬ）及びピリジン（０．１４６ｍＬ、１．８０ｍｍｏｌ）中の（１Ｒ）−１−｛１−［（３Ｓ）−６−（ヒドロキシメチル）テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−３−イル］−１Ｈ−イミダゾ［４，５−ｄ］チエノ［３，２−ｂ］ピリジン−２−イル｝エタノール（１００ｍｇ、０．３００ｍｍｏｌ）の溶液（前のステップ）に、ｐ−トルエンスルホニルクロリド（５７．２ｍｇ、０．３００ｍｍｏｌ）及び４−ジメチルアミノピリジン（１．８ｍｇ、０．０１５ｍｍｏｌ）を０℃で加えた。反応混合物を室温まで一晩自然に温めた。反応混合物を濃縮し、メタノールで希釈し、分取ＬＣＭＳ（ＸＢｒｉｄｇｅ  Ｃ１８カラム、０．１％水酸化アンモニウムを含有するアセトニトリル／水のグラジエントで溶出、流速は６０ｍＬ／分）で精製して２つのピークを得た。分析用ＨＰＬＣ（Ｗａｔｅｒｓ  ＳｕｎＦｉｒｅ  Ｃ１８、２．１×５０ｍｍ、５μＭ；流速  ３ｍＬ／分；注入量  ２μＬ；グラジエントは３分間で２〜８０％Ｂ（Ａ＝０．０２５％ＴＦＡを有する水、Ｂ＝アセトニトリル））：第一ピーク（４５．３ｍｇ、３１％）保持時間  １．８１分、ＬＣＭＳ  Ｃ２３Ｈ２６Ｎ３Ｏ５Ｓ２  （Ｍ＋  Ｈ）＋に対する計測値：  ｍ／ｚ  ＝  ４８８．１；実測値：  ４８８．１。第二ピーク（８．５ｍｇ、５．８％）保持時間  １．８８分、ＬＣＭＳ  Ｃ２３Ｈ２６Ｎ３Ｏ５Ｓ２  （Ｍ＋  Ｈ）＋に対する計測値：  ｍ／ｚ  ＝  ４８８．１；実測値：  ４８８．１。
【０１０４】
ステップ１１．（（２Ｒ，５Ｓ）−５−｛２−［（１Ｒ）−１−ヒドロキシエチル］−１Ｈ−イミダゾ［４，５−ｄ］チエノ［３，２−ｂ］ピリジン−１−イル｝テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−イル）アセトニトリル
ジメチルスルホキシド（０．４ｍＬ）中の（（２Ｒ，５Ｓ）−５−｛２−［（１Ｒ）−１−ヒドロキシエチル］−１Ｈ−イミダゾ［４，５−ｄ］チエノ［３，２−ｂ］ピリジン−１−イル｝テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−イル）メチル４−メチルベンゼンスルホナート（前のステップの第一ピークから、２７ｍｇ、０．０５５ｍｍｏｌ）及びシアン化ナトリウム（４．５ｍｇ、０．０９２ｍｍｏｌ）の混合物を、５０℃で４時間撹拌した。冷却後、混合物をメタノールで希釈し、分取ＬＣＭＳ（ＸＢｒｉｄｇｅ  Ｃ１８カラム、０．１％水酸化アンモニウムを含有するアセトニトリル／水のグラジエントで溶出、流速は３０ｍＬ／分）で精製して、所望の生成物（１４．５ｍｇ、７６％）を得た。ＬＣＭＳ  Ｃ１７Ｈ１９Ｎ４Ｏ２Ｓ  （Ｍ＋  Ｈ）＋に対する計測値：  ｍ／ｚ  ＝  ３４３．１；実測値：  ３４３．０。１Ｈ  ＮＭＲ  （ＤＭＳＯ−ｄ６，  ５００  ＭＨｚ）  δ  ９．５１  （１Ｈ，  ｓ），  ８．４５  （１Ｈ，  ｄ，  Ｊ  ＝  ５．５  Ｈｚ），  ７．９７  （１Ｈ，  ｄ，  Ｊ  ＝  ５．．５  Ｈｚ），  ５．３１  （１Ｈ，  ｍ），  ５．２０  （１Ｈ，  ｍ），  ４．３１  （１Ｈ，  ｍ），  ４．２３  （１Ｈ，  ｍ），  ４．０２  （１Ｈ，  ｍ），  ２．９６  （１Ｈ，  ｄｄ，  Ｊ  ＝  １７．０  及び  ４．５  Ｈｚ），  ２．８５  （１Ｈ，  ｄｄ，  Ｊ  ＝  １７．０  及び  ４．５  Ｈｚ），  ２．６６  （１Ｈ，  ｍ），  ２．２６  （１Ｈ，  ｍ），  ２．０９  （１Ｈ，  ｍ），  １．７３  （１Ｈ，  ｍ），  １．６９  （３Ｈ，  ｄ，  Ｊ  ＝  ６．５  Ｈｚ）  ｐｐｍ。
【０１０５】
実施例１ａ．（（２Ｒ，５Ｓ）−５−｛２−［（１Ｒ）−１−ヒドロキシエチル］−１Ｈ−イミダゾ［４，５−ｄ］チエノ［３，２−ｂ］ピリジン−１−イル｝テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−イル）アセトニトリル水和物
【化２】
2019163324.tif 000019
実施例２５からの（（２Ｒ，５Ｓ）−５−｛２−［（１Ｒ）−１−ヒドロキシエチル］−１Ｈ−イミダゾ［４，５−ｄ］チエノ［３，２−ｂ］ピリジン−１−イル｝テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−イル）アセトニトリル（５２ｍｇ、０．１５ｍｍｏｌ）をアセトニトリル（８ｍＬ）及び水（４ｍＬ）の混合物から結晶化した。結果生じた回収された無色プリズム結晶は、Ｘ線結晶構造解析に好適であった。
【０１０６】
結晶データは：約０．５２０×０．１８０×０．１００ｍｍ、斜方晶、Ｐ２１２１２１、ａ＝６．９６２（３）Å、ｂ＝１１．５３１（４）Å、ｃ＝２０．７９９（７）Å、体積＝１６６９．６（１０）Å３、Ｚ＝４、Ｔ＝−１００．℃、式量＝３５９．４２、密度＝１．４３０ｇ／ｃｍ３、μ（Ｍｏ）＝０．２２ｍｍ−１を示す。
【０１０７】
データ収集は、Ｂｒｕｋｅｒ  ＳＭＡＲＴ  ＡＰＥＸ−ＩＩ  ＣＣＤシステム、ＭｏＫａｌｐｈａ放射線、標準の焦点管、アノード出力＝５０ｋＶ×４２ｍＡ、結晶からプレートまでの距離＝５．０ｃｍ、５１２×５１２ピクセル／フレーム、ビーム中心＝（２５６．１３、２５３．１４）、フレーム総数＝１１５１、振動／フレーム＝０．５０°、露出／フレーム＝１０．１秒／フレーム、ＳＡＩＮＴ統合、ｈｋｌ最小／最大＝（−９、９、−１５、１５、−２７、２７）、ｓｈｅｌｘへのデータ入力＝１７０２５、固有データ＝３９７５、２シータ範囲＝３．９２〜５５．７２°、２シータ５５．７２に対する完全性＝９９．８０％、Ｒ（ｉｎｔ−ｘｌ）＝０．０６８１、ＳＡＤＡＢＳ補正適用で行った。
【０１０８】
構造を、ＸＳ（Ｓｈｅｌｘｔｌ）を使用して解析し、ｓｈｅｌｘｔｌソフトウェアパッケージを使用して精密化、Ｆ２に基づくフルマトリックス最小二乗による精密化、Ｉｎｔ．Ｔａｂ．Ｖｏｌ  Ｃ  表４．２．６．８及び６．１．１．４からの散乱因子、データ数＝３９７５、制限数＝０、パラメータ数＝２３５、データ／パラメータ比＝１６．９１、Ｆ２の適合度＝１．０４、Ｒ指数［Ｉ＞４シグマ（Ｉ）］Ｒ１＝０．０５０５、ｗＲ２＝０．１２４２、Ｒ指数（全データ）Ｒ１＝０．０７６９、ｗＲ２＝０．１４０１、最大残差ピーク及びホール＝０．７２４及び−０．２７７ｅ／Å３、精密化フラックパラメータ＝−０．１２（１３）、ＣＨ水素原子の全ては、ライディングモデルを使用して精密化した。ＯＨ水素を差異マップから見出し、完全に精密化した。
【０１０９】
結果は、この非対称ユニットが、５０％の確率レベルになった熱楕円体で示される通り、１分子及び１水分子を含有することを示した。３つの立体中心のそれぞれにおける立体化学（上記の化合物の名称及び構造において示されている通り）が確認された。フラックパラメータは０．２８（２４）まで精密化され、このことは、正確な鏡像異性体設定を示唆している。
【０１１０】
実施例２．４−［３−（シアノメチル）−３−（３’，５’−ジメチル−１Ｈ，１’Ｈ−４，４’−ビピラゾール−１−イル）アゼチジン−１−イル］−２，５−ジフルオロ−Ｎ−［（１Ｓ）−２，２，２−トリフルオロ−１−メチルエチル］ベンズアミド
【化３】
2019163324.tif 000020
ステップ１：２，４，５−トリフルオロ−Ｎ−［（１Ｓ）−２，２，２−トリフルオロ−１−メチルエチル］ベンズアミド
アセトニトリル（５０ｍＬ）中の２，４，５−トリフルオロ安息香酸（５．００ｇ、２８．４ｍｍｏｌ）の溶液に、Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（４０μＬ）を加え、その後塩化オキサリル（３．６０ｍＬ、４２．６ｍｍｏｌ）を添加した。９０分後、揮発性物質を減圧下で除去した。残渣をアセトニトリル（５０ｍＬ）と同時蒸発させた。次いで、残渣を塩化メチレン（５０ｍＬ）に溶解した。この溶液を、トルエン（１００ｍＬ）中の（２Ｓ）−１，１，１−トリフルオロプロパン−２−アミン塩酸塩（５．５２ｇ、３６．９ｍｍｏｌ）（Ｓｙｎｑｕｅｓｔ製、９８％ｅｅ）と０．５Ｍ水酸化ナトリウム水溶液（１４２ｍＬ、７１．０ｍｍｏｌ）の冷却した（氷浴）混合物へと滴加した。添加後、氷浴を取り除き、反応物を自然に室温まで温めた。反応物を一晩撹拌した。有機層を分離した。水層を塩化メチレン（５０ｍＬ）で抽出した。合一した有機層を２０％飽和食塩水（７５ｍＬ）及び水（２×７５ｍＬ）で洗浄し、ＭｇＳＯ４で乾燥させ、濾過し、減圧下で濃縮して、所望の生成物（６．４９ｇ、８４％）を得た。これをさらなる精製を行わずに直接次のステップで使用した。１Ｈ  ＮＭＲ  （３００  ＭＨｚ，  ＤＭＳＯ−ｄ６）  δ  ９．０１  （ｄ，  Ｊ  ＝  ７．６  Ｈｚ，  １Ｈ），  ７．９２  −  ７．５０  （ｍ，  ２Ｈ），  ４．７６  （ｍ，  １Ｈ），  １．３１  （ｄ，  Ｊ  ＝  ７．０  Ｈｚ，  ３Ｈ）  ｐｐｍ。ＬＣＭＳ  Ｃ１０Ｈ８Ｆ６ＮＯ  （Ｍ＋１）＋に対する計測値：  ｍ／ｚ  ＝  ２７２．０；実測値：  ２７２．０。
【０１１１】
ステップ２：２，５−ジフルオロ−４−（３−ヒドロキシアゼチジン−１−イル）−Ｎ−［（１Ｓ）−２，２，２−トリフルオロ−１−メチルエチル］ベンズアミド
アセトニトリル（２５ｍＬ）中の２，４，５−トリフルオロ−Ｎ−［（１Ｓ）−２，２，２−トリフルオロ−１−メチルエチル］ベンズアミド（６．３９ｇ、２３．６ｍｍｏｌ）、アゼチジン−３−オール塩酸塩（３．１９ｇ、２８．３ｍｍｏｌ）及び１，８−ジアザビシクロ［５．４．０］ウンデカ−７−エン（８．８１ｍＬ、５８．９ｍｍｏｌ）の混合物を、８０℃で２時間撹拌した。反応混合物をＥｔＯＡｃ（７５ｍＬ）で希釈し、１Ｎ  ＨＣｌ（５０ｍＬ）、１Ｎ  ＮａＨＣＯ３（６０ｍＬ）、２０％飽和食塩水（５０ｍＬ）及び水（７５ｍＬ）で洗浄した。水層をＥｔＯＡｃ（１００ｍＬ）で抽出した。有機層を合一し、ＭｇＳＯ４で乾燥させ、濾過し、減圧下で濃縮して、所望の生成物（７．５９ｇ、９１．８％）を得た。１Ｈ  ＮＭＲ  （３００  ＭＨｚ，  ＤＭＳＯ−ｄ６）  δ  ８．３８  （ｄｄ，  Ｊ  ＝  ８．９，  １．９  Ｈｚ，  １Ｈ），  ７．２７  （ｄｄ，  Ｊ  ＝  １２．８，  ６．５  Ｈｚ，  １Ｈ），  ６．３８  （ｄｄ，  Ｊ  ＝  １２．３，  ７．５  Ｈｚ，  １Ｈ），  ５．７１  （ｄ，  Ｊ  ＝  ６．４  Ｈｚ，  １Ｈ），  ４．７４  （ｄｐ，  Ｊ  ＝  １５．３，  ７．６  Ｈｚ，  １Ｈ），  ４．６２  −  ４．４６  （ｍ，  １Ｈ），  ４．３０  −  ４．１５  （ｍ，  ２Ｈ），  ３．７１  （ｍ，  ２Ｈ），  １．２９  （ｄ，  Ｊ  ＝  ７．１  Ｈｚ，  ３Ｈ）  ｐｐｍ。ＬＣＭＳ  Ｃ１３Ｈ１４Ｆ５Ｎ２Ｏ２  （Ｍ＋１）＋に対する計測値：  ｍ／ｚ  ＝  ３２５．１；実測値：  ３２５．１。
【０１１２】
ステップ３：２，５−ジフルオロ−４−（３−オキソアゼチジン−１−イル）−Ｎ−［（１Ｓ）−２，２，２−トリフルオロ−１−メチルエチル］ベンズアミド
塩化メチレン（９３ｍＬ）中の２，５−ジフルオロ−４−（３−ヒドロキシアゼチジン−１−イル）−Ｎ−［（１Ｓ）−２，２，２−トリフルオロ−１−メチルエチル］ベンズアミド（７．５７ｇ、２３．３ｍｍｏｌ）の溶液に、ヨードベンゼンジアセテート（９．４０ｇ、２９．２ｍｍｏｌ）及び２，２，６，６−テトラメチル−１−ピペリジンイルオキシ遊離ラジカル（１．８２ｇ、１１．７ｍｍｏｌ）（ＴＥＭＰＯ）を室温で加えた。反応混合物を室温で一晩撹拌した。混合物をＥｔＯＡｃ（１００ｍＬ）で希釈し、０．５Ｎ  ＮａＨＣＯ３（２×８０ｍＬ）、２０％飽和食塩水（１００ｍＬ）及び水（１００ｍＬ）で洗浄した。水層を酢酸エチル（７５ｍＬ）で抽出した。有機抽出物を合一し、ＭｇＳＯ４で乾燥させ、濾過し、減圧下で濃縮した。残渣を０％〜５％酢酸エチルを含む塩化メチレンで溶出するシリカゲルカラムでのフラッシュクロマトグラフィーで精製して、粗生成物を得た。これをＭＴＢＥ（５０ｍＬ）及びヘプタン（１００ｍＬ）から再結晶化させて、所望の生成物（５．４４ｇ，７２％）を無色固体として得た。１Ｈ  ＮＭＲ  （３００  ＭＨｚ，  ＤＭＳＯ−ｄ６）  δ  ８．５２  （ｄ，  Ｊ  ＝  ８．０  Ｈｚ，  １Ｈ），  ７．３６  （ｄｄ，  Ｊ  ＝  １２．５，  ６．５  Ｈｚ，  １Ｈ），  ６．６３  （ｄｄ，  Ｊ  ＝  １２．１，  ７．６  Ｈｚ，  １Ｈ），  ４．９０  （ｄ，  Ｊ  ＝  ２．１  Ｈｚ，  ４Ｈ），  ４．８６  −  ４．６８  （ｍ，  １Ｈ），  １．３１  （ｄ，  Ｊ  ＝  ７．１  Ｈｚ，  ３Ｈ）  ｐｐｍ。ＬＣＭＳ  Ｃ１３Ｈ１２Ｆ５Ｎ２Ｏ２  （Ｍ＋１）＋に対する計測値：  ｍ／ｚ  ＝  ３２３．１；実測値：  ３２３．０。
【０１１３】
ステップ４：４−［３−（シアノメチレン）アゼチジン−１−イル］−２，５−ジフルオロ−Ｎ−［（１Ｓ）−２，２，２−トリフルオロ−１−メチルエチル］ベンズアミド
ジエチルシアノメチルホスホネート（１．９５ｍＬ、１１．８ｍｍｏｌ）を、テトラヒドロフラン（１２ｍＬ）で希釈されたＴＨＦ（１１．８ｍＬ、１１．８ｍｍｏｌ）中の１．０Ｍカリウムｔｅｒｔ−ブトキシドの冷却した（氷浴）溶液に滴加した。氷浴を取り除き、反応物を室温まで温め、９０分間撹拌した。反応溶液を氷浴で再度冷却した。次いで、上記の調製溶液を、テトラヒドロフラン（５０ｍＬ）中の２，５−ジフルオロ−４−（３−オキソアゼチジン−１−イル）−Ｎ−［（１Ｓ）−２，２，２−トリフルオロ−１−メチルエチル］ベンズアミド（４．００ｇ、１２．４ｍｍｏｌ）の冷却（氷浴）溶液に１２分間にわたって加えた。反応混合物を３０分間撹拌した。氷浴を取り除き、反応物を室温で一晩撹拌し、次いで２０％飽和食塩水（７５ｍＬ）及び酢酸エチル（７５ｍＬ）の添加によりクエンチした。有機層を分離した。水層を酢酸エチル（５０ｍＬ）で抽出した。合一した有機層をＭｇＳＯ４で乾燥させ、濾過し、減圧下で濃縮した。残渣を、酢酸エチルを含むヘキサン（０％〜３０％）を用いたシリカゲルカラムでフラッシュクロマトグラフィーにより精製して、所望の生成物（２．６ｇ）を得た。１Ｈ  ＮＭＲ  （４００  ＭＨｚ，  ＤＭＳＯ−ｄ６）  δ  ８．５９  −  ８．３７  （ｍ，  １Ｈ），  ７．３３  （ｄｄ，  Ｊ  ＝  １２．５，  ６．４  Ｈｚ，  １Ｈ），  ６．５９  （ｄｄ，  Ｊ  ＝  １２．０，  ７．４  Ｈｚ，  １Ｈ），  ５．８８  （ｍ，  １Ｈ），  ４．９４  −  ４．７５  （ｍ，  ４Ｈ），  ４．７６  （ｍ，  １Ｈ），  １．３１  （ｄ，  Ｊ  ＝  ７．１  Ｈｚ，  ３Ｈ）  ｐｐｍ。ＬＣＭＳ  Ｃ１５Ｈ１３Ｆ５Ｎ３Ｏ  （Ｍ＋１）＋に対する計測値：  ｍ／ｚ  ＝  ３４６．１；実測値：  ３４６．１。
【０１１４】
ステップ５：４−｛３−（シアノメチル）−３−［４−（４，４，５，５−テトラメチル−１，３，２−ジオキサボロラン−２−イル）−１Ｈ−ピラゾール−１−イル］アゼチジン−１−イル｝−２，５−ジフルオロ−Ｎ−［（１Ｓ）−２，２，２−トリフルオロ−１−メチルエチル］ベンズアミド
アセトニトリル（２０．２ｍＬ）中の４−（４，４，５，５−テトラメチル−１，３，２−ジオキサボロラン−２−イル）−１Ｈ−ピラゾール（１．００ｇ、５．１５ｍｍｏｌ）、４−［３−（シアノメチレン）アゼチジン−１−イル］−２，５−ジフルオロ−Ｎ−［（１Ｓ）−２，２，２−トリフルオロ−１−メチルエチル］ベンズアミド（１．７８ｇ、５．１５ｍｍｏｌ）及び１，８−ジアザビシクロ［５．４．０］ウンデカ−７−エン（０．３１ｍＬ、２．１ｍｍｏｌ）の混合物を、５０℃で一晩加熱した。冷却後、溶媒を減圧下で除去した。残渣をさらなる精製を行わずに次のステップに使用した。ＬＣＭＳ  Ｃ２４Ｈ２８ＢＦ５Ｎ５Ｏ３  （Ｍ＋１）＋に対する計測値：  ｍ／ｚ  ＝  ５４０．２；実測値：  ５４０．１。
【０１１５】
ステップ６：４−［３−（シアノメチル）−３−（３’，５’−ジメチル−１Ｈ，１’Ｈ−４，４’−ビピラゾール−１−イル）アゼチジン−１−イル］−２，５−ジフルオロ−Ｎ−［（１Ｓ）−２，２，２−トリフルオロ−１−メチルエチル］ベンズアミド
１，４−ジオキサン（１０ｍＬ）／水（５ｍＬ）中の４−｛３−（シアノメチル）−３−［４−（４，４，５，５−テトラメチル−１，３，２−ジオキサボロラン−２−イル）−１Ｈ−ピラゾール−１−イル］アゼチジン−１−イル｝−２，５−ジフルオロ−Ｎ−［（１Ｓ）−２，２，２−トリフルオロ−１−メチルエチル］ベンズアミド（３２９ｍｇ、０．６１０ｍｍｏｌ）、４−ブロモ−３，５−ジメチル−１Ｈ−ピラゾール（２０６ｍｇ、１．１８ｍｍｏｌ）、テトラキス（トリフェニルホスフィン）パラジウム（０）（１１０ｍｇ、０．０９８ｍｍｏｌ）及び炭酸ナトリウム（３２０ｍｇ、３．０ｍｍｏｌ）の混合物を、窒素でパージし、１１０℃で１時間撹拌した。反応混合物をＥｔＯＡｃで希釈し、水及び飽和食塩水で洗浄し、濃縮した。残渣をまずシリカゲル（０〜１００％ＥｔＯＡｃ／ヘキサン、その後１０％メタノール／ジクロロメタンで溶出）で、次いで、分取ＬＣＭＳ（ＸＢｒｉｄｇｅ  Ｃ１８カラム、０．１％水酸化アンモニウムを含有するアセトニトリル／水のグラジエントで溶出、流速は６０ｍＬ／分）で精製して、所望の生成物（３０ｍｇ、９．７％）を得た。１Ｈ  ＮＭＲ  （５００  ＭＨｚ，  ＤＭＳＯ−ｄ６）  δ  １２．１７  （１Ｈ，  ｓ），  ８．４５  （１Ｈ，  ｄ，  Ｊ  ＝  ８．０  Ｈｚ），  ８．１０  （１Ｈ，  ｓ），  ７．７０  （１Ｈ，  ｓ），  ７．３４  （１Ｈ，  ｍ），  ６．６１  （１Ｈ，  ｓ），  ４．７７  （１Ｈ，  ｍ），  ４．６２  （２Ｈ，  ｄ，  Ｊ  ＝  ９．０ Ｈｚ），  ４．３９  （１Ｈ，  ｄ，  Ｊ  ＝  ９．０  Ｈｚ），  ３．６４  （２Ｈ，  ｓ），  ２．２２  （６Ｈ，  ｓ），  １．３１  （６Ｈ，  ｄ，  Ｊ  ＝  ７．０  Ｈｚ）  ｐｐｍ。ＬＣＭＳ  Ｃ２３Ｈ２３Ｆ５Ｎ７Ｏ  （Ｍ＋Ｈ）＋に対する計測値：  ｍ／ｚ  ＝  ５０８．２；実測値：  ５０８．０。
【０１１６】
実施例Ａ：インビトロでのＪＡＫキナーゼアッセイ
本明細書の化合物を、Ｐａｒｋら、Ａｎａｌｙｔｉｃａｌ  Ｂｉｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ１９９９，２６９，９４−１０４に記載された以下のインビトロアッセイに従ってＪＡＫ標的の阻害活性について試験した。ヒトＪＡＫ１（ａ．ａ．８３７−１１４２）、ＪＡＫ２（ａ．ａ．８２８−１１３２）及びＪＡＫ３（ａ．ａ．７８１−１１２４）の触媒ドメインを、昆虫細胞中でバキュロウイルスを用いて発現させ、精製した。ＪＡＫ１、ＪＡＫ２またはＪＡＫ３の触媒活性を、ビオチン化ペプチドのリン酸化を測定することにより評価した。そのリン酸化ペプチドは、均一系時間分解蛍光法（ＨＴＲＦ）によって検出した。化合物のＩＣ５０は、１００ｍＭのＮａＣｌ、５ｍＭのＤＴＴ、及び０．１ｍｇ／ｍＬ（０．０１％）のＢＳＡを有する５０ｍＭのＴｒｉｓ（ｐＨ７．８）バッファー中に酵素、ＡＴＰ及び５００ｎＭのペプチドを含有する４０μＬの反応において各キナーゼについて測定した。１ｍＭのＩＣ５０測定については、反応におけるＡＴＰ濃度は１ｍＭであった。反応を室温で１時間実施し、次いで、アッセイバッファー（Ｐｅｒｋｉｎ  Ｅｌｍｅｒ、マサチューセッツ州ボストン）中の２０μＬの４５ｍＭ  ＥＤＴＡ、３００ｎＭ  ＳＡ−ＡＰＣ、６ｎＭ  Ｅｕ−Ｐｙ２０で停止させた。ユーロピウム標識抗体に対する結合は、４０分間起こり、ＨＴＲＦシグナルを、ＰＨＥＲＡ  ｓｔａｒプレートリーダー（ＢＭＧ、ノースカロライナ州ケーリー）上で測定した。ＪＡＫ１及び／またはＪＡＫ２阻害剤についてのデータは、１ｍＭ  ＡＴＰで実施例Ａアッセイにおいて化合物を試験することにより獲得した。
【０１１７】
実施例Ｂ：ＰＩ３Ｋδシンチレーション近接アッセイ
材料
［γ−３３Ｐ］ＡＴＰ（１０ｍＣｉ／ｍＬ）をＰｅｒｋｉｎ−Ｅｌｍｅｒ（マサチューセッツ州ウォルサム）から購入した。脂質キナーゼ基質、Ｄ−ミオ−ホスファチジルイノシトール４，５−二リン酸（ＰｔｄＩｎｓ（４，５）Ｐ２）Ｄ（＋）−ｓｎ−１，２−ジ−Ｏ−オクタノイルグリセリル、３−Ｏ−リン結合（ＰＩＰ２）、ＣＡＳ  ２０４８５８−５３−７を、Ｅｃｈｅｌｏｎ  Ｂｉｏｓｃｉｅｎｃｅｓ（ユタ州ソルトレイクシティ）から購入した。ＰＩ３Ｋδ（ｐ１１０δ／ｐ８５α）をＭｉｌｌｉｐｏｒｅ（マサチューセッツ州べドフォード）から購入した。ＡＴＰ、ＭｇＣｌ２、ＤＴＴ、ＥＤＴＡ、ＭＯＰＳ及びＣＨＡＰＳを、Ｓｉｇｍａ−Ａｌｄｒｉｃｈ（ミズーリ州セントルイス）から購入した。Ｗｈｅａｔ  Ｇｅｒｍ  Ａｇｇｌｕｔｉｎｉｎ（ＷＧＡ）ＹＳｉ  ＳＰＡシンチレーションビーズをＧＥ  ｈｅａｌｔｈｃａｒｅ  ｌｉｆｅ  ｓｃｉｅｎｃｅｓ（ニュージャージー州ピスカタウェイ）から購入した。
【０１１８】
キナーゼ反応を、２５μＬの最終容量で、Ｔｈｅｒｍｏ  Ｆｉｓｈｅｒ  Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ製のポリスチレンの３８４ウェルマトリックスの白色のプレートにおいて実行した。阻害剤をまずＤＭＳＯ中に連続的に希釈し、プレートウェルに添加した後、他の反応成分を添加した。アッセイにおけるＤＭＳＯの最終濃度は、０．５％であった。ＰＩ３Ｋアッセイを２０ｍＭ  ＭＯＰＳ、ｐＨ６．７、１０ｍＭ  ＭｇＣｌ２、５ｍＭ  ＤＴＴ及びＣＨＡＰＳ  ０．０３％で、室温で行った。ＡＴＰの添加により反応を開始し、最終反応混合物は、２０μＭ  ＰＩＰ２、２０μＭ  ＡＴＰ、０．２μＣｉ［γ−３３Ｐ］ＡＴＰ、４ｎＭ  ＰＩ３Ｋδから成った。反応物を２１０分間インキュベートし、反応停止緩衝液：１５０ｍＭのリン酸カリウム  ｐＨ８．０、２０％グリセロール、２５ｍＭ  ＥＤＴＡ、４００μＭ  ＡＴＰに懸濁した４０μＬ  ＳＰＡビーズの添加によって終了させた。ＳＰＡビーズの最終濃度は、１．０ｍｇ／ｍＬであった。プレート密閉後、プレートを室温で一晩振とうし、１８００ｒｐｍで１０分間遠心分離し、生成物の放射能をＴｏｐＣｏｕｎｔ（Ｐｅｒｋｉｎ−Ｅｌｍｅｒ）でのシンチレーション計数によって判定した。ＧｒａｐｈＰａｄ  Ｐｒｉｓｍ  ３．０ソフトウェアを用いて、阻害剤濃度のログに対する制御活性率（％）の曲線に適合させることによって、ＩＣ５０決定を行った。ＰＩ３Ｋδ阻害剤についてのデータは、実施例Ｂアッセイにおいて化合物を試験することにより獲得した。
【０１１９】
実施例Ｃ：リンパ腫のファイファーモデル
方法：
雌ＳＣＩＤマウス、（５〜８週齢、Ｃｈａｒｌｅｓ  Ｒｉｖｅｒ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓ、マサチューセッツ州ウィルミントン）に、１×１０７個の腫瘍細胞（ファイファー、ＡＴＣＣ番号ＣＲＬ−２６３２、バージニア州マナサス）及びマトリゲル（ＢＤ  Ｂｉｏｓｃｉｅｎｃｅｓ番号３５４２３４）を０．２ｍＬの滅菌食塩水中で接種した。接種は、側腹部皮下に行った。腫瘍組織断片（おおよそ３ｍｍ×３ｍｍ）を培養細胞の接種の３〜６週間後に回収し、細胞接種の代わりに皮下に移植した。組織断片を、鈍先端鉗子（ｂｌｕｎｔ−ｔｉｐ  ｆｏｒｃｅｐ）を使用して固体欠片として移植した。腫瘍を有するマウスの処置は、腫瘍接種の１５〜２５日後に開始され、これは腫瘍のサイズに依存した。動物を、各群において大体等しい平均腫瘍体積となるように分類した。全群における最小平均腫瘍体積は、処置の初日で１５０ｍｍ３であり、群は７動物から成った。実験治療薬、実施例３４７、をマウスに経口（ＰＯ）投与した。処置頻度は、有効性のために最小１４日間にわたる１日２回とした。皮下腫瘍のサイズは、デジタルキャリパーを使用して週に２〜３回測定した。腫瘍体積は、腫瘍を２次元で測定し、式：体積＝［長さ×（幅２）］／２（大きい数字が長さ、小さい数字が幅）を利用することにより算出された。複数の腫瘍が形成された場合、最終体積は、同じ式に当てはめられた個々の腫瘍の合計とした：例えば、２腫瘍；体積＝｛［Ｌ１×（Ｗ１）２］／２｝＋｛［Ｌ２×（Ｗ２）２］／２｝。腫瘍成長への効果は、腫瘍成長阻害率（％）（ＴＧＩ率（％））として報告された。ＴＧＩ率（％）は、式：（１−（Ｔｘ体積／対照体積））×１００（式中、対照体積は、所与の日のビヒクルまたは未処置腫瘍体積とし、Ｔｘ体積は、同じ日の任意の処置群の腫瘍体積とした）を用いて算出した。処置とビヒクル対照との間の統計学的差異は、一元配置分散分析を用いて評価した。
【０１２０】
結果：
化合物３２ｃ（上の表２）を、ＮＨＬのサブタイプである、びまん性大細胞型Ｂ細胞リンパ腫のファイファーヒト腫瘍異種移植モデルにおける単剤として評価した。ファイファー癌細胞は、インビトロで実施例３４７の抗増殖作用に感受性であると示された。それゆえ、腫瘍モデルは、ビヒクルまたは０．３、１、３、もしくは１０ｍｇ／ｋｇでの化合物３２ｃを、１４日間にわたり１日２回の経口投薬を受けた、免疫無防備ＳＣＩＤマウス及び腫瘍を有するマウスへの腫瘍細胞の皮下接種に基づいて確立された。化合物３２ｃ処置は、腫瘍成長を用量の増加とともに、２２％、２４％、３６％、及び５８％（腫瘍成長阻害率（％））阻害した。
【０１２１】
実施例Ｄ．ウエスタンブロット分析
以下の材料及び方法を、下記のウエスタンブロット分析において使用した。細胞（５００万個）を３００μｌ容量の溶解バッファーに溶解した。可溶性画分を遠心分離により回収した。２５μｌの細胞ライセートを、トリス−グリシンポリアクリルアミドゲルにロードし、電気泳動に供した。タンパク質をニトロセルロース膜へと転写し、以下のタンパク質：ホスホ−Ｓｔａｔ３  Ｙ７０５、ホスホ−Ａｋｔ  Ｓ４７３、ｐｉｍ１、ｐｉｍ２、ｐｉｍ３、ｃ−ｍｙｃ、ホスホ−ｐ７０Ｓ６Ｋ、ホスホ（ｐｈｏｓｈｏ）−Ｓ６、ホスホ−Ｂａｄ  Ｓ１１２及びアクチンについて、Ｃｅｌｌ  Ｓｉｇｎａｌｉｎｇ  Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙからの抗体でプローブした。
【０１２２】
実施例Ｅ．細胞系統におけるＩＬ６及びＩＬ１０のレベル
高いレベルのＩＬ６及びＩＬ１０が、種々のＤＬＢＣＬ細胞系統において見られた（図１Ａ）。ＩＬ６及びＩＬ１０は、ＪＡＫ／ＳＴＡＴシグナル伝達を活性化するとも示され、ＩＬ１０は、ＤＬＢＣＬ細胞系統のパネルにわたってＩＬ６よりも強いＪＡＫ／ＳＴＡＴシグナル伝達のアクチベータ―であった（図１Ｂ）。高いレベルのＩＬ６及びＩＬ１０が、ＤＬＢＣＬ患者からの血清内に存在し、無事象生存期間の短さ及び国際予後指数スコアの高さと相関した。
【０１２３】
実施例Ｆ．ＩＬ１０により、ファイファー細胞はＰＩ３Ｋδ阻害に対して耐性となり、ＪＡＫ１／２またはＪＡＫ１遮断により逆転されることができる。
細胞増殖アッセイ
びまん性大細胞型Ｂ細胞リンパ腫細胞を、１０ｎｇ／ｍｌのＩＬ１０の不在下または存在下で、２０００細胞／ウェルで９６ウェル培養プレートに播種した。化合物を、まずＤＭＳＯで希釈した後にこれらの細胞に加え、その後培養培地で希釈（４倍濃度）した。細胞を、５％ＣＯ２で、３日間インキュベーターで培養した。細胞増殖を、細胞力価増殖アッセイ（ｃｅｌｌ  ｔｉｔｅｒ−ｇｌｏｗ  ａｓｓａｙ）（Ｐｒｏｍｅｇａ、ウィスコンシン州マディソン）を使用して評価した。細胞増殖アッセイは、まず、ファイファー細胞（胚中心Ｂ細胞（ＧＣＢ）びまん性大細胞型Ｂ細胞リンパ腫（ＧＣＢ−ＤＬＢＣＬ）細胞）及びＨＢＬ−１細胞（活性化Ｂ細胞様（ＡＢＣ）びまん性大細胞型Ｂ細胞リンパ腫（ＡＢＣ−ＤＬＢＣＬ））において実行された。
【０１２４】
図２Ａは、ビヒクル（ＤＭＳＯ）、ＤＭＳＯ＋ＩＬ１０、及びＤＭＳＯ＋ＩＬ１０＋ルクソリチニブ（ＪＡＫ１／ＪＡＫ２阻害剤）と化合物２８（ＰＩ３Ｋδ阻害剤）の濃度の関数としてファイファー細胞での細胞増殖アッセイにおける阻害率（％）を示す。図２Ｂは、ビヒクル（ＤＭＳＯ）、ＤＭＳＯ＋ＩＬ１０、及びＤＭＳＯ＋ＩＬ１０＋化合物７（選択的ＪＡＫ１阻害剤）と化合物２８（ＰＩ３Ｋδ阻害剤）の濃度の関数としてファイファー細胞での細胞増殖アッセイにおける阻害率（％）を示す。結果は、ＩＬ１０によりファイファー細胞がＰＩ３Ｋδ阻害に耐性となるが、この耐性はＪＡＫ１及び／またはＪＡＫ２シグナル伝達を遮断することによって逆転され得ることを示す。従って、ＰＩ３Ｋδ阻害剤及びＪＡＫ１及び／ＪＡＫ２阻害剤が併用された時にファイファー細胞増殖への相乗効果。相乗作用は、ＩＬ１０無しでも観察された。アポトーシスの誘発は、この組み合わせでも観察された。
【０１２５】
同様の結果が、ルクソリチニブを用いたＨＢＬ−１細胞において観察された。従って、図３は、ビヒクル（ＤＭＳＯ）、ＤＭＳＯ＋ＩＬ１０、及びＤＭＳＯ＋ＩＬ１０＋ルクソリチニブ（ＪＡＫ１／ＪＡＫ２阻害剤）と化合物２８（ＰＩ３Ｋδ阻害剤）の濃度の関数としてＨＢＬ−１細胞での細胞増殖アッセイにおける阻害率（％）を示す。
【０１２６】
実施例Ｇ．Ｐｉｍ２のＩＬ１０誘発性発現は、ＪＡＫ１／２阻害剤により遮断される
ファイファー細胞を、ＩＬ１０を伴ってまたは伴わずに、ビヒクル（ＤＭＳＯ）、ルクソリチニブ（１８４２４）、化合物２８、または化合物２８及びルクソリチニブ（１８４２４）で２４時間処置し、次いでウエスタンブロット分析に供して、以下のタンパク質：ホスホ−Ｓｔａｔ３  Ｙ７０５、ホスホ−Ａｋｔ  Ｓ４７３、Ｐｉｍ２、ｃ−Ｍｙｃ、ホスホ−ｐ７０Ｓ６Ｋ、ホスホ（ｐｈｏｓｈｏ）−Ｓ６、ホスホ−Ｂａｄ  Ｓ１１２及びアクチンについてプローブした。図４は、Ｐｉｍ２のＩＬ１０誘発性発現が、ルクソリチニブ（ＪＡＫ１／ＪＡＫ２阻害剤（ｉｎｈｉｂｉｔｉｏｒ））により遮断されることを示す。ＩＬ６及びＩＬ１０は、ＪＡＫ１活性に依存する、Ｐｉｍ２の発現を通して細胞生存を促進する。図４は、組み合わされた化合物２８及びルクソリチニブ処置の存在下でｃ−Ｍｙｃ及びＰ−Ｓ６の相乗的減少も示す。ｃ−Ｍｙｃタンパク質の減少は、併用処置の相乗効果に関与し得る。
【０１２７】
実施例Ｈ．Ｐｉｍ２のＩＬ１０誘発性発現は、選択的ＪＡＫ１阻害剤により遮断される
ファイファー細胞を、ＩＬ１０を伴ってまたは伴わずに、ビヒクル（ＤＭＳＯ）、化合物７、化合物２８、または化合物２８及び化合物７で２４時間処置し、次いでウエスタンブロット分析に供して、以下のタンパク質：ホスホ−Ｓｔａｔ３  Ｙ７０５、ホスホ−Ａｋｔ  Ｓ４７３、Ｐｉｍ２、ｃ−Ｍｙｃ、ホスホ−ｐ７０Ｓ６Ｋ、ホスホ（ｐｈｏｓｈｏ）−Ｓ６、ホスホ−Ｂａｄ  Ｓ１１２及びアクチンについてプローブした。図５は、Ｐｉｍ２のＩＬ１０−誘発性発現が、選択的ＪＡＫ１阻害剤（化合物７）により遮断されることを示す。
【０１２８】
実施例Ｉ．選択的ＪＡＫ１阻害剤によるＰＩ３Ｋδ阻害剤の作用強度の増大
細胞成長及びＢＣＲ経路阻害に対する感受性に及ぼすＩＬ−１０の効果を試験するため、ファイファー細胞系統をＤＬＢＣＬのモデル系として使用した。ファイファー細胞は、ＤＬＢＣＬの胚中心Ｂ細胞（ＧＣＢ）サブタイプのものであり、ＰＩ３Ｋδを発現し、ＰＩ３Ｋδ阻害に感受性であり、上述のように複数のサイトカインに反応してＪＡＫ／ＳＴＡＴ経路を活性化させると示されている。ファイファー細胞を、ＩＬ−１０及び１μＭの化合物１６の存在下または不在下で、様々な濃度の化合物２８で３日間処置し、細胞成長を、ＡＴＰ読み取りを使用して測定した（下記の表を参照されたい）。図６に示すように、ＩＬ−１０の存在は、化合物２８の作用強度を約１０倍変えた（ＩＣ５０＝０．６７μＭ、−ＩＬ−１０；ＩＣ５０＝６．３６μＭ、＋ＩＬ−１０）。ＪＡＫ１阻害剤である、化合物１６の添加は、この効果を逆転させ、ゆえに併用は約５０倍より強力であった。この系では、ＪＡＫ１阻害剤単独は効果を有さなかった（ＩＣ５０＞１μＭ）。さらに、図７に示すように（１０％ＦＢＳ＋ＩＬ１０中で３日間処置されたファイファー細胞のアネキシン−Ｖ染色を示す；化合物１６は、１μＭで試験された）、ＪＡＫ１シグナル伝達と一緒となったＰＩ３Ｋδの阻害は、アポトーシスの増加をもたらしが、どちらの薬剤も単独では有意な効果を有さなかった。
【表３】
2019163324.tif 000021
【０１２９】
実施例Ｊ．ＳＴＡＴ３リン酸化及びｐＡＫＴ阻害に及ぼすＪＡＫ１及びＰＩ３Ｋδ併用処置の効果
下流シグナル伝達経路に及ぼす効果を評価するために、ファイファー細胞を化合物２８＋／−化合物１６で４時間処置し、次いで、ＩＬ−１０で１５分間刺激した。抽出物をｐＡＫＴ及びｐＳＴＡＴ３についてウエスタンブロット法により分析した。図８に示すように、ＡＫＴ経路は、ファイファー細胞において恒常的に活性化された。ＰＩ３Ｋδシグナル伝達の遮断は、ｐＡＫＴの完全な阻害をもたらし、一方でＪＡＫ１阻害剤での処置は効果を有さなかった。対照的に、化合物１６は、ＳＴＡＴ３リン酸化の阻害をもたらし、一方でＰＩ３Ｋδ阻害剤はもたらさなかった。両化合物の併用は、両方の経路を遮断するために必要とされた。
【０１３０】
上記に参照した全ての特許、特許公報、及び雑誌論文は、それらの全体が参照により本明細書に組み込まれる。
また、本発明は、下記のものを包含する。
［発明１］
それを必要とする患者において、びまん性大細胞型Ｂ細胞リンパ腫、慢性リンパ性白血病（ＣＬＬ）、非ホジキンリンパ腫、毛髪様細胞白血病、マントル細胞リンパ腫、小リンパ球性リンパ腫、濾胞性リンパ腫、リンパ形質細胞性リンパ腫、節外性辺縁帯リンパ腫、ホジキンリンパ腫、バーキットリンパ腫、ワルデンシュトレームマクログロブリン血症、前リンパ球性白血病、急性リンパ芽球性白血病、骨髄線維症、粘膜関連リンパ組織（ＭＡＬＴ）リンパ腫、縦隔（胸腺）大細胞型Ｂ細胞リンパ腫、リンパ腫様肉芽腫症、脾辺縁帯リンパ腫、原発性滲出液リンパ腫、血管内大細胞型Ｂ細胞リンパ腫、形質細胞白血病、髄外形質細胞腫、くすぶり型骨髄腫（無症候性骨髄腫として公知）、意義不明の単クローン性ガンマグロブリン血症（ＭＧＵＳ）、活性化Ｂ細胞様（ＡＢＣ）びまん性大細胞型Ｂ細胞リンパ腫（ＡＢＣ−ＤＬＢＣＬ）、及び胚中心Ｂ細胞（ＧＣＢ）びまん性大細胞型Ｂ細胞リンパ腫（ＧＣＢ−ＤＬＢＣＬ）から選択される疾患を処置する方法であって、前記患者に：（ａ）ＪＡＫ１及び／またはＪＡＫ２の阻害剤；及び（ｂ）ＰＩ３Ｋδの阻害剤を投与することを含み；
（ａ）ＪＡＫ１及び／またはＪＡＫ２の前記阻害剤が：
３−シクロペンチル−３−［４−（７Ｈ−ピロロ［２，３−ｄ］ピリミジン−４−イル）−１Ｈ−ピラゾール−１−イル］プロパンニトリル；
３−［１−（６−クロロピリジン−２−イル）ピロリジン−３−イル］−３−［４−（７Ｈ−ピロロ［２，３−ｄ］ピリミジン−４−イル）−１Ｈ−ピラゾール−１−イル］プロパンニトリル；
３−（１−［１，３］オキサゾロ［５，４−ｂ］ピリジン−２−イルピロリジン−３−イル）−３−［４−（７Ｈ−ピロロ［２，３−ｄ］ピリミジン−４−イル）−１Ｈ−ピラゾール−１−イル］プロパンニトリル；
４−［（４−｛３−シアノ−２−［４−（７Ｈ−ピロロ［２，３−ｄ］ピリミジン−４−イル）−１Ｈ−ピラゾール−１−イル］プロピル｝ピペラジン−１−イル）カルボニル］−３−フルオロベンゾニトリル；
４−［（４−｛３−シアノ−２−［３−（７Ｈ−ピロロ［２，３−ｄ］ピリミジン−４−イル）−１Ｈ−ピロール−１−イル］プロピル｝ピペラジン−１−イル）カルボニル］−３−フルオロベンゾニトリル；
｛１−｛１−［３−フルオロ−２−（トリフルオロメチル）イソニコチノイル］ピペリジン−４−イル｝−３−［４−（７Ｈ−ピロロ［２，３−ｄ］ピリミジン−４−イル）−１Ｈ−ピラゾール−１−イル］アゼチジン−３−イル｝アセトニトリル；
４−｛３−（シアノメチル）−３−［４−（７Ｈ−ピロロ［２，３−ｄ］ピリミジン−４−イル）−１Ｈ−ピラゾール−１−イル］アゼチジン−１−イル｝−Ｎ−［４−フルオロ−２−（トリフルオロメチル）フェニル］ピペリジン−１−カルボキサミド；
［３−［４−（７Ｈ−ピロロ［２，３−ｄ］ピリミジン−４−イル）−１Ｈ−ピラゾール−１−イル］−１−（１−｛［２−（トリフルオロメチル）ピリミジン−４−イル］カルボニル｝ピペリジン−４−イル）アゼチジン−３−イル］アセトニトリル；
［トランス−１−［４−（７Ｈ−ピロロ［２，３−ｄ］ピリミジン−４−イル）−１Ｈ−ピラゾール−１−イル］−３−（４−｛［２−（トリフルオロメチル）ピリミジン−４−イル］カルボニル｝ピペラジン−１−イル）シクロブチル］アセトニトリル；
｛トランス−３−（４−｛［４−［（３−ヒドロキシアゼチジン−１−イル）メチル］−６−（トリフルオロメチル）ピリジン−２−イル］オキシ｝ピペリジン−１−イル）−１−［４−（７Ｈ−ピロロ［２，３−ｄ］ピリミジン−４−イル）−１Ｈ−ピラゾール−１−イル］シクロブチル｝アセトニトリル；
｛トランス−３−（４−｛［４−｛［（２Ｓ）−２−（ヒドロキシメチル）ピロリジン−１−イル］メチル｝−６−（トリフルオロメチル）ピリジン−２−イル］オキシ｝ピペリジン−１−イル）−１−［４−（７Ｈ−ピロロ［２，３−ｄ］ピリミジン−４−イル）−１Ｈ−ピラゾール−１−イル］シクロブチル｝アセトニトリル；
｛トランス−３−（４−｛［４−｛［（２Ｒ）−２−（ヒドロキシメチル）ピロリジン−１−イル］メチル｝−６−（トリフルオロメチル）ピリジン−２−イル］オキシ｝ピペリジン−１−イル）−１−［４−（７Ｈ−ピロロ［２，３−ｄ］ピリミジン−４−イル）−１Ｈ−ピラゾール−１−イル］シクロブチル｝アセトニトリル；
４−（４−｛３−［（ジメチルアミノ）メチル］−５−フルオロフェノキシ｝ピペリジン−１−イル）−３−［４−（７Ｈ−ピロロ［２，３−ｄ］ピリミジン−４−イル）−１Ｈ−ピラゾール−１−イル］ブタンニトリル；
５−｛３−（シアノメチル）−３−［４−（７Ｈ−ピロロ［２，３−ｄ］ピリミジン−４−イル）−１Ｈ−ピラゾール−１−イル］アゼチジン−１−イル｝−Ｎ−イソプロピルピラジン−２−カルボキサミド；
４−｛３−（シアノメチル）−３−［４−（７Ｈ−ピロロ［２，３−ｄ］ピリミジン−４−イル）−１Ｈ−ピラゾール−１−イル］アゼチジン−１−イル｝−２，５−ジフルオロ−Ｎ−［（１Ｓ）−２，２，２−トリフルオロ−１−メチルエチル］ベンズアミド；
５−｛３−（シアノメチル）−３−［４−（１Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピリジン−４−イル）−１Ｈ−ピラゾール−１−イル］アゼチジン−１−イル｝−Ｎ−イソプロピルピラジン−２−カルボキサミド；
｛１−（シス−４−｛［６−（２−ヒドロキシエチル）−２−（トリフルオロメチル）ピリミジン−４−イル］オキシ｝シクロヘキシル）−３−［４−（７Ｈ−ピロロ［２，３−ｄ］ピリミジン−４−イル）−１Ｈ−ピラゾール−１−イル］アゼチジン−３−イル｝アセトニトリル；
｛１−（シス−４−｛［４−［（エチルアミノ）メチル］−６−（トリフルオロメチル）ピリジン−２−イル］オキシ｝シクロヘキシル）−３−［４−（７Ｈ−ピロロ［２，３−ｄ］ピリミジン−４−イル）−１Ｈ−ピラゾール−１−イル］アゼチジン−３−イル｝アセトニトリル；
｛１−（シス−４−｛［４−（１−ヒドロキシ−１−メチルエチル）−６−（トリフルオロメチル）ピリジン−２−イル］オキシ｝シクロヘキシル）−３−［４−（７Ｈ−ピロロ［２，３−ｄ］ピリミジン−４−イル）−１Ｈ−ピラゾール−１−イル］アゼチジン−３−イル｝アセトニトリル；
｛１−（シス−４−｛［４−｛［（３Ｒ）−３−ヒドロキシピロリジン−１−イル］メチル｝−６−（トリフルオロメチル）ピリジン−２−イル］オキシ｝シクロヘキシル）−３−［４−（７Ｈ−ピロロ［２，３−ｄ］ピリミジン−４−イル）−１Ｈ−ピラゾール−１−イル］アゼチジン−３−イル｝アセトニトリル；
｛１−（シス−４−｛［４−｛［（３Ｓ）−３−ヒドロキシピロリジン−１−イル］メチル｝−６−（トリフルオロメチル）ピリジン−２−イル］オキシ｝シクロヘキシル）−３−［４−（７Ｈ−ピロロ［２，３−ｄ］ピリミジン−４−イル）−１Ｈ−ピラゾール−１−イル］アゼチジン−３−イル｝アセトニトリル；
｛トランス−３−（４−｛［４−（｛［（１Ｓ）−２−ヒドロキシ−１−メチルエチル］アミノ｝メチル）−６−（トリフルオロメチル）ピリジン−２−イル］オキシ｝ピペリジン−１−イル）−１−［４−（７Ｈ−ピロロ［２，３−ｄ］ピリミジン−４−イル）−１Ｈ−ピラゾール−１−イル］シクロブチル｝アセトニトリル；
｛トランス−３−（４−｛［４−（｛［（２Ｒ）−２−ヒドロキシプロピル］アミノ｝メチル）−６−（トリフルオロメチル）ピリジン−２−イル］オキシ｝ピペリジン−１−イル）−１−［４−（７Ｈ−ピロロ［２，３−ｄ］ピリミジン−４−イル）−１Ｈ−ピラゾール−１−イル］シクロブチル｝アセトニトリル；
｛トランス−３−（４−｛［４−（｛［（２Ｓ）−２−ヒドロキシプロピル］アミノ｝メチル）−６−（トリフルオロメチル）ピリジン−２−イル］オキシ｝ピペリジン−１−イル）−１−［４−（７Ｈ−ピロロ［２，３−ｄ］ピリミジン−４−イル）−１Ｈ−ピラゾール−１−イル］シクロブチル｝アセトニトリル；
｛トランス−３−（４−｛［４−（２−ヒドロキシエチル）−６−（トリフルオロメチル）ピリジン−２−イル］オキシ｝ピペリジン−１−イル）−１−［４−（７Ｈ−ピロロ［２，３−ｄ］ピリミジン−４−イル）−１Ｈ−ピラゾール−１−イル］シクロブチル｝アセトニトリル；
（（２Ｒ，５Ｓ）−５−｛２−［（１Ｒ）−１−ヒドロキシエチル］−１Ｈ−イミダゾ［４，５−ｄ］チエノ［３，２−ｂ］ピリジン−１−イル｝テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−イル）アセトニトリル；
４−［３−（シアノメチル）−３−（３’，５’−ジメチル−１Ｈ，１’Ｈ−４，４’−ビピラゾール−１−イル）アゼチジン−１−イル］−２，５−ジフルオロ−Ｎ−［（１Ｓ）−２，２，２−トリフルオロ−１−メチルエチル］ベンズアミド；
及び前述のいずれかの医薬的に許容され得る塩から選択され；
（ｂ）ＰＩ３Ｋδの前記阻害剤が：
７−（１−（９Ｈ−プリン−６−イルアミノ）エチル）−６−（３−フルオロフェニル）−３−メチル−５Ｈ−チアゾロ［３，２−ａ］ピリミジン−５−オン；
（Ｓ）−７−（１−（９Ｈ−プリン−６−イルアミノ）エチル）−６−（３−フルオロフェニル）−３−メチル−５Ｈ−チアゾロ［３，２−ａ］ピリミジン−５−オン；
４−［１−（４−アミノ−３−メチル−１Ｈ−ピラゾロ［３，４−ｄ］ピリミジン−１−イル）エチル］−６−クロロ−２−｛１−［（２Ｓ）−２−ヒドロキシプロピル］アゼチジン−３−イル｝−３−メトキシベンゾニトリル；
４−［１−（４−アミノ−３−メチル−１Ｈ−ピラゾロ［３，４−ｄ］ピリミジン−１−イル）エチル］−６−クロロ−２−［１−（２−ヒドロキシエチル）アゼチジン−３−イル］−３−メトキシベンゾニトリル；
５−｛３−［１−（４−アミノ−３−メチル−１Ｈ−ピラゾロ［３，４−ｄ］ピリミジン−１−イル）エチル］−６−シアノ−２−エトキシ−５−メチルフェニル｝−Ｎ，Ｎ−ジメチルピリジン−２−カルボキサミド；
４−｛３−［１−（４−アミノ−３−メチル−１Ｈ−ピラゾロ［３，４−ｄ］ピリミジン−１−イル）エチル］−５−クロロ−２−エトキシ−６−フルオロフェニル｝ピロリジン−２−オン；及び
Ｎ−｛１−［５−クロロ−８−（３−フルオロフェニル）シンノリン−７−イル］エチル｝−９Ｈ−プリン−６−アミン；
４−クロロ−３’−フルオロ−３−メチル−６−［１−（９Ｈ−プリン−６−イルアミノ）エチル］ビフェニル−２カルボニトリル；
及び前述のいずれかの医薬的に許容され得る塩から選択される、前記方法。
［発明２］
ＪＡＫ１及び／またはＪＡＫ２の前記阻害剤が：
（Ｒ）−３−［１−（６−クロロピリジン−２−イル）ピロリジン−３−イル］−３−［４−（７Ｈ−ピロロ［２，３−ｄ］ピリミジン−４−イル）−１Ｈ−ピラゾール−１−イル］プロパンニトリル；
（Ｒ）−３−（１−［１，３］オキサゾロ［５，４−ｂ］ピリジン−２−イルピロリジン−３−イル）−３−［４−（７Ｈ−ピロロ［２，３−ｄ］ピリミジン−４−イル）−１Ｈ−ピラゾール−１−イル］プロパンニトリル；
（Ｒ）−４−［（４−｛３−シアノ−２−［４−（７Ｈ−ピロロ［２，３−ｄ］ピリミジン−４−イル）−１Ｈ−ピラゾール−１−イル］プロピル｝ピペラジン−１−イル）カルボニル］−３−フルオロベンゾニトリル；
（Ｒ）−４−［（４−｛３−シアノ−２−［３−（７Ｈ−ピロロ［２，３−ｄ］ピリミジン−４−イル）−１Ｈ−ピロール−１−イル］プロピル｝ピペラジン−１−イル）カルボニル］−３−フルオロベンゾニトリル；
（Ｒ）−４−（４−｛３−［（ジメチルアミノ）メチル］−５−フルオロフェノキシ｝ピペリジン−１−イル）−３−［４−（７Ｈ−ピロロ［２，３−ｄ］ピリミジン−４−イル）−１Ｈ−ピラゾール−１−イル］ブタンニトリル；
（Ｓ）−３−［１−（６−クロロピリジン−２−イル）ピロリジン−３−イル］−３−［４−（７Ｈ−ピロロ［２，３−ｄ］ピリミジン−４−イル）−１Ｈ−ピラゾール−１−イル］プロパンニトリル；
（Ｓ）−３−（１−［１，３］オキサゾロ［５，４−ｂ］ピリジン−２−イルピロリジン−３−イル）−３−［４−（７Ｈ−ピロロ［２，３−ｄ］ピリミジン−４−イル）−１Ｈ−ピラゾール−１−イル］プロパンニトリル；
（Ｓ）−４−［（４−｛３−シアノ−２−［４−（７Ｈ−ピロロ［２，３−ｄ］ピリミジン−４−イル）−１Ｈ−ピラゾール−１−イル］プロピル｝ピペラジン−１−イル）カルボニル］−３−フルオロベンゾニトリル；
（Ｓ）−４−［（４−｛３−シアノ−２−［３−（７Ｈ−ピロロ［２，３−ｄ］ピリミジン−４−イル）−１Ｈ−ピロール−１−イル］プロピル｝ピペラジン−１−イル）カルボニル］−３−フルオロベンゾニトリル；
（Ｓ）−４−（４−｛３−［（ジメチルアミノ）メチル］−５−フルオロフェノキシ｝ピペリジン−１−イル）−３−［４−（７Ｈ−ピロロ［２，３−ｄ］ピリミジン−４−イル）−１Ｈ−ピラゾール−１−イル］ブタンニトリル；
及び前述のいずれかの医薬的に許容され得る塩から選択される、発明１に記載の方法。
［発明３］
ＪＡＫ１及び／またはＪＡＫ２の前記阻害剤が、（３Ｒ）−３−シクロペンチル−３−［４−（７Ｈ−ピロロ［２，３−ｄ］ピリミジン−４−イル）−１Ｈ−ピラゾール−１−イル］プロパンニトリル、またはその医薬的に許容され得る塩である、発明１に記載の方法。
［発明４］
ＪＡＫ１及び／またはＪＡＫ２の前記阻害剤が、（３Ｒ）−３−シクロペンチル−３−［４−（７Ｈ−ピロロ［２，３−ｄ］ピリミジン−４−イル）−１Ｈ−ピラゾール−１−イル］プロパンニトリルリン酸塩である、発明１に記載の方法。
［発明５］
ＪＡＫ１及び／またはＪＡＫ２の前記阻害剤が、｛１−｛１−［３−フルオロ−２−（トリフルオロメチル）イソニコチノイル］ピペリジン−４−イル｝−３−［４−（７Ｈ−ピロロ［２，３−ｄ］ピリミジン−４−イル）−１Ｈ−ピラゾール−１−イル］アゼチジン−３−イル｝アセトニトリル、またはその医薬的に許容され得る塩である、発明１に記載の方法。
［発明６］
ＪＡＫ１及び／またはＪＡＫ２の前記阻害剤が、｛１−｛１−［３−フルオロ−２−（トリフルオロメチル）イソニコチノイル］ピペリジン−４−イル｝−３−［４−（７Ｈ−ピロロ［２，３−ｄ］ピリミジン−４−イル）−１Ｈ−ピラゾール−１−イル］アゼチジン−３−イル｝アセトニトリルアジピン酸塩である、発明１に記載の方法。
［発明７］
ＪＡＫ１及び／またはＪＡＫ２の前記阻害剤が、４−｛３−（シアノメチル）−３−［４−（７Ｈ−ピロロ［２，３−ｄ］ピリミジン−４−イル）−１Ｈ−ピラゾール−１−イル］アゼチジン−１−イル｝−２，５−ジフルオロ−Ｎ−［（１Ｓ）−２，２，２−トリフルオロ−１−メチルエチル］ベンズアミド、またはその医薬的に許容され得る塩である、発明１に記載の方法。
［発明８］
ＰＩ３Ｋδの前記阻害剤が：
（Ｓ）−４−（３−（（Ｓ）−１−（４−アミノ−３−メチル−１Ｈ−ピラゾロ［３，４−ｄ］ピリミジン−１−イル）エチル）−５−クロロ−２−エトキシ−６−フルオロフェニル）ピロリジン−２−オン；
（Ｒ）−４−（３−（（Ｓ）−１−（４−アミノ−３−メチル−１Ｈ−ピラゾロ［３，４−ｄ］ピリミジン−１−イル）エチル）−５−クロロ−２−エトキシ−６−フルオロフェニル）ピロリジン−２−オン；
（Ｓ）−４−（３−（（Ｒ）−１−（４−アミノ−３−メチル−１Ｈ−ピラゾロ［３，４−ｄ］ピリミジン−１−イル）エチル）−５−クロロ−２−エトキシ−６−フルオロフェニル）ピロリジン−２−オン；
（Ｒ）−４−（３−（（Ｒ）−１−（４−アミノ−３−メチル−１Ｈ−ピラゾロ［３，４−ｄ］ピリミジン−１−イル）エチル）−５−クロロ−２−エトキシ−６−フルオロフェニル）ピロリジン−２−オン；
（Ｎ−｛（１Ｓ）−１−［５−クロロ−８−（３−フルオロフェニル）シンノリン−７−イル］エチル｝−９Ｈ−プリン−６−アミン；
及び前述のいずれかの医薬的に許容され得る塩から選択される、発明１に記載の方法。
［発明９］
ＰＩ３Ｋδの前記阻害剤が、（Ｓ）−７−（１−（９Ｈ−プリン−６−イルアミノ）エチル）−６−（３−フルオロフェニル）−３−メチル−５Ｈ−チアゾロ［３，２−ａ］ピリミジン−５−オン、またはその医薬的に許容され得る塩である、発明１に記載の方法。
［発明１０］
ＰＩ３Ｋδの前記阻害剤が、４−［１−（４−アミノ−３−メチル−１Ｈ−ピラゾロ［３，４−ｄ］ピリミジン−１−イル）エチル］−６−クロロ−２−［１−（２−ヒドロキシエチル）アゼチジン−３−イル］−３−メトキシベンゾニトリル、またはその医薬的に許容され得る塩である、発明１に記載の方法。
［発明１１］
ＰＩ３Ｋδの前記阻害剤が、５−｛３−［１−（４−アミノ−３−メチル−１Ｈ−ピラゾロ［３，４−ｄ］ピリミジン−１−イル）エチル］−６−シアノ−２−エトキシ−５−メチルフェニル｝−Ｎ，Ｎ−ジメチルピリジン−２−カルボキサミド、またはその医薬的に許容され得る塩である、発明１に記載の方法。
［発明１２］
ＰＩ３Ｋδの前記阻害剤が、（Ｎ−｛（１Ｓ）−１−［５−クロロ−８−（３−フルオロフェニル）シンノリン−７−イル］エチル｝−９Ｈ−プリン−６−アミン、またはその医薬的に許容され得る塩である、発明１に記載の方法。
［発明１３］
前記疾患が、びまん性大細胞型Ｂ細胞リンパ腫である、発明１に記載の方法。
［発明１４］
前記疾患が、活性化Ｂ細胞様（ＡＢＣ）びまん性大細胞型Ｂ細胞リンパ腫（ＡＢＣ−ＤＬＢＣＬ）または胚中心Ｂ細胞（ＧＣＢ）びまん性大細胞型Ｂ細胞リンパ腫（ＧＣＢ−ＤＬＢＣＬ）である、発明１に記載の方法。
［発明１５］
ＪＡＫ１及び／またはＪＡＫ２の前記阻害剤及びＰＩ３Ｋδの前記阻害剤が同時投与される、発明１に記載の方法。
［発明１６］
ＪＡＫ１及び／またはＪＡＫ２の前記阻害剤及びＰＩ３Ｋδの前記阻害剤が逐次投与される、発明１に記載の方法。
［発明１７］
それを必要とする患者において、びまん性大細胞型Ｂ細胞リンパ腫を処置する方法であって、前記患者に（３Ｒ）−３−シクロペンチル−３−［４−（７Ｈ−ピロロ［２，３−ｄ］ピリミジン−４−イル）−１Ｈ−ピラゾール−１−イル］プロパンニトリル、またはその医薬的に許容され得る塩；及び（７−（１−（９Ｈ−プリン−６−イルアミノ）エチル）−６−（３−フルオロフェニル）−３−メチル−５Ｈ−チアゾロ［３，２−ａ］ピリミジン−５−オン、またはその医薬的に許容され得る塩を投与することを含む、前記方法。
［発明１８］
それを必要とする患者において、びまん性大細胞型Ｂ細胞リンパ腫を処置する方法であって、前記患者に｛１−｛１−［３−フルオロ−２−（トリフルオロメチル）イソニコチノイル］ピペリジン−４−イル｝−３−［４−（７Ｈ−ピロロ［２，３−ｄ］ピリミジン−４−イル）−１Ｈ−ピラゾール−１−イル］アゼチジン−３−イル｝アセトニトリル、またはその医薬的に許容され得る塩；及び７−（１−（９Ｈ−プリン−６−イルアミノ）エチル）−６−（３−フルオロフェニル）−３−メチル−５Ｈ−チアゾロ［３，２−ａ］ピリミジン−５−オン、またはその医薬的に許容され得る塩を投与することを含む、前記方法。
［発明１９］
それを必要とする患者において、びまん性大細胞型Ｂ細胞リンパ腫を処置する方法であって、前記患者に４−｛３−（シアノメチル）−３−［４−（７Ｈ−ピロロ［２，３−ｄ］ピリミジン−４−イル）−１Ｈ−ピラゾール−１−イル］アゼチジン−１−イル｝−２，５−ジフルオロ−Ｎ−［（１Ｓ）−２，２，２−トリフルオロ−１−メチルエチル］ベンズアミド、またはその医薬的に許容され得る塩；及び７−（１−（９Ｈ−プリン−６−イルアミノ）エチル）−６−（３−フルオロフェニル）−３−メチル−５Ｈ−チアゾロ［３，２−ａ］ピリミジン−５−オン、またはその医薬的に許容され得る塩を投与することを含む、前記方法。
【図１】
2019163324.tif 000022
【図２】
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【図３】
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【図４】
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【図５】
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【図６】
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【図７】
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【図８】
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