(57)【要約】      （修正有）【課題】哺乳類を対象とした新たなサーチュイン活性促進剤の提供。【解決手段】式（Ｉ）で表されるアルキルレゾルシノールと一般式（２）で表されるアルキルレゾルシノールとを含有する。2019172579.tif 000007（式中、Ｒ1は炭素原子数２５の飽和又は不飽和のアルキル基を示し、Ｒ2は水素原子又はメチル基を示す。）2019172579.tif 000008（式中、Ｒ3は炭素原子数１５〜２４の飽和又は不飽和のアルキル基を示し、Ｒ4は水素原子又はメチル基を示す。）【選択図】図１
2019172579.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
下記一般式（Ｉ）で表されるアルキルレゾルシノールを含有する、サーチュイン活性促進剤。
【化１】
2019172579.tif 000005
（式中、Ｒ1は炭素原子数２５の飽和又は不飽和のアルキル基を示し、Ｒ2は水素原子又はメチル基を示す。）
【請求項２】
上記一般式（Ｉ）で表されるアルキルレゾルシノールと、複数種の下記一般式（II）で表されるアルキルレゾルシノールとを含む、特定アルキルレゾルシノール混合物を含有する、請求項１に記載のサーチュイン活性促進剤。
【化２】
2019172579.tif 000006
（式中、Ｒ3は炭素原子数１５〜２４の飽和又は不飽和のアルキル基を示し、Ｒ4は水素原子又はメチル基を示す。）
【請求項３】
１）上記一般式（II）におけるＲ3が炭素原子数１５の飽和又は不飽和のアルキル基であるアルキルレゾルシノールを０．１〜１０．０質量％、
２）上記一般式（II）におけるＲ3が炭素原子数１７の飽和又は不飽和のアルキル基であるアルキルレゾルシノールを１．０〜２０．０質量％、
３）上記一般式（II）におけるＲ3が炭素原子数１９の飽和又は不飽和のアルキル基であるアルキルレゾルシノールを２５．０〜４０．０質量％、
４）上記一般式（II）におけるＲ3が炭素原子数２１の飽和又は不飽和のアルキル基であるアルキルレゾルシノールを４０．０〜５５．０質量％、
５）上記一般式（II）におけるＲ3が炭素原子数２３の飽和又は不飽和のアルキル基であるアルキルレゾルシノールを１．０〜１５．０質量％、及び
６）上記一般式（Ｉ）で表されるアルキルレゾルシノールを０．００１〜５．０質量％含有する請求項２に記載のサーチュイン活性促進剤。
【請求項４】
上記一般式（Ｉ）におけるＲ1が、Ｒ2に対してパラ位に結合している請求項１〜３いずれか１項に記載のサーチュイン活性促進剤。
【請求項５】
上記一般式（II）におけるＲ3が、Ｒ4に対してパラ位に結合している請求項２又は３に記載のサーチュイン活性促進剤。
【請求項６】
イネ科植物種子のアルコール抽出物の分配クロマトグラフィーのピーク成分を含有する、請求項１〜５のいずれか１項に記載のサーチュイン活性促進剤。
【請求項７】
イネ科植物が小麦である、請求項６に記載のサーチュイン活性促進剤。
【請求項８】
哺乳類の視床下部の核に存在するサーチュインの活性を促進するために用いられる、請求項１〜７のいずれか１項に記載のサーチュイン活性促進剤。
【請求項９】
請求項１〜８何れか１項記載のサーチュイン活性促進剤を含有する、サーチュイン活性食品。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、サーチュイン活性促進剤に関する。
【背景技術】
【０００２】
サーチュインは、クロマチン構造の主要な構成因子であるヒストンの脱アセチル化を行う酵素（Histone Deacetylase、HDAC）の一種である。サーチュインとして知られる、HDACのクラスIII酵素は、ヒストンの脱アセチル化に、ニコチンアミドアデニンジヌクレオチド（NAD）を必要とする。サーチュインとしては、ＳＩＲＴ１〜７が知られている。その中で核に存在するサーチュインとしてはＳＩＲＴ１、ＳＩＲＴ６、ＳＩＲＴ７が知られている。ＳＩＲＴ１は転写因子ｐ５３、Foxos（forkheadbox O），NF-κB（nuclear factor-kappa B），PGC-1α（peroxisomeproliferator-activated receptor gammacoactivator-1α）等の細胞の維持や増殖に関与するアセチル化蛋白質のアセチル基を取り除く働きをしている。またＳＩＲＴ６は、ＮＡＤ依存的ＨＤＡＣ活性を持ち、ヒストンＨ３の９番目と５６番目のリジンを脱アセチル化することなどが知られている。ＳＩＲＴ７はヒストンＨ３の１８番目のリジン特異的なヒストンデアセチラーゼとして機能し、転写抑制を促進することが知られている。中でも、視床下部における核中のＳＩＲＴ１等のサーチュインについては、その発現の増加又はサーチュイン蛋白質の活性化により、寿命延長に繋がることが確認されている。
特許文献１には、炭素数５及び１７のアルキル基を有するアルキルレゾルシノールによりインビトロでのＳＩＲＴ１酵素活性が高まったことが記載されている。
【０００３】
一方、炭素原子数２５の飽和又は不飽和のアルキル基を有するアルキルレゾルシノールは、例えば小麦のアルコール抽出物に含まれており（特許文献２及び特許文献３）、安全で、食品として摂取できる。
【先行技術文献】
【特許文献】
【０００４】
【特許文献１】特開２０１３−２４９２６０号公報
【特許文献２】特開２０１４−１３９１６６号公報
【特許文献３】特開２０１６−１３２６４１号公報
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００５】
特許文献２には、炭素原子数２５の飽和又は不飽和のアルキル基を有するアルキルレゾルシノールを含む小麦抽出物が、耐糖能異常改善作用を有すると記載されている。また、特許文献３には炭素原子数２５の飽和又は不飽和のアルキル基を有するアルキルレゾルシノールを含む小麦抽出物が、抗肥満作用を有すると記載されている。しかしながら、炭素原子数２５の飽和又は不飽和のアルキル基を有するアルキルレゾルシノールについて、更に新たな有効活用方法が望まれている。
【０００６】
従って、本発明の目的は、哺乳類を対象とした新たなサーチュイン活性促進剤を提供することにある。
【課題を解決するための手段】
【０００７】
本発明は下記一般式（Ｉ）で表されるアルキルレゾルシノールを含有する、サーチュイン活性促進剤を提供するものである。
【化１】
2019172579.tif 000003
（式中、Ｒ1は炭素原子数２５の飽和又は不飽和のアルキル基を示し、Ｒ2は水素原子又はメチル基を示す。）
【発明の効果】
【０００８】
本発明のサーチュイン活性促進剤は、これを哺乳類が摂取することにより、視床下部におけるサーチュインの酵素活性を増大させることができる。
【図面の簡単な説明】
【０００９】
【図１】図１は、本発明の実施例１のサーチュイン活性促進剤によるＳＩＲＴｓ活性測定試験結果を示すグラフである。
【発明を実施するための形態】
【００１０】
本発明のサーチュイン活性促進剤は、上記一般式（Ｉ）で表されるアルキルレゾルシノールを含有する。
上記一般式（Ｉ）におけるＲ1に関し、炭素原子数２５の飽和アルキル基としては、代表例として、ｎ−ペンタコシル等の直鎖状のものが挙げられ、これらの他に、分岐状又は環状のものでも良い。
【００１１】
また、上記一般式（Ｉ）におけるＲ1に関し、炭素原子数２５の不飽和アルキル基としては、上記の炭素原子数２５の飽和アルキル基に対応するものが挙げられる。不飽和アルキル基に含まれる不飽和結合の数及び位置に特に制限はない。
【００１２】
また、上記一般式（Ｉ）におけるＲ2は水素原子であることが好ましく、また、Ｒ1はＲ2に対してパラ位に結合していることが好ましい。
【００１３】
上記一般式（Ｉ）で表されるアルキルレゾルシノールの具体例としては、１，３−ジヒドロキシ−５−ｎ−ペンタコシルベンゼン（Ｃ２５：０）が挙げられる。
【００１４】
上記一般式（Ｉ）で表されるアルキルレゾルシノールは、後述する特定アルキルレゾルシノール混合物中、好ましくは０．００１〜５．０質量％、更に好ましくは０．００５〜２．０質量％、より好ましくは０．０１〜１．５質量％、特に好ましくは０．１〜１．５質量％含まれる。上記一般式（Ｉ）で表されるアルキルレゾルシノールのサーチュイン活性促進剤中の質量割合は、上記特定アルキルレゾルシノール混合物中の好ましい質量割合と同様の範囲であってもよい。
【００１５】
本発明のサーチュイン活性促進剤は、上記一般式（Ｉ）で表されるアルキルレゾルシノールに加えて、複数種の下記一般式（II）で表されるアルキルレゾルシノールを含む、特定アルキルレゾルシノール混合物を含有することがサーチュイン活性促進の点で好ましい。
【００１６】
【化２】
2019172579.tif 000004
（式中、Ｒ3は炭素原子数１５〜２４の飽和又は不飽和のアルキル基を示し、炭素原子数１５〜２３の飽和又は不飽和アルキル基が好ましく、Ｒ4は水素原子又はメチル基を示す。）
【００１７】
上記一般式（II）におけるＲ3に関し、炭素原子数１５〜２４の飽和アルキル基としては、代表例として、ｎ−ペンタデシル基、ｎ−ヘプタデシル基、ｎ−ノナデシル基、ｎ−ヘンイコシル基、ｎ−トリコシル基等の直鎖状のものが挙げられ、これらの他に、分岐状又は環状のものでも良い。これらの中でも、炭素原子数１５〜２３の飽和アルキル基が好ましい。
【００１８】
また、上記一般式（II）におけるＲ3に関し、炭素原子数１５〜２４の不飽和アルキル基としては、上記の炭素原子数１５〜２４の飽和アルキル基に対応するものが挙げられる。不飽和アルキル基に含まれる不飽和結合の数及び位置に特に制限はない。
【００１９】
また、上記一般式（II）におけるＲ4は水素原子であることが好ましく、また、Ｒ3はＲ4に対してパラ位に結合していることが好ましい。
【００２０】
上記一般式（II）で表されるアルキルレゾルシノールの具体例としては、以下のものが挙げられる。
１，３−ジヒドロキシ−５−ｎ−ペンタデシルベンゼン（Ｃ１５：０）
１，３−ジヒドロキシ−５−ｎ−ヘプタデシルベンゼン（Ｃ１７：０）
１，３−ジヒドロキシ−５−ｎ−ノナデシルベンゼン（Ｃ１９：０）
１，３−ジヒドロキシ−５−ｎ−ヘンイコシルベンゼン（Ｃ２１：０）
１，３−ジヒドロキシ−５−ｎ−トリコシルベンゼン（Ｃ２３：０）
【００２１】
上記特定アルキルレゾルシノール混合物の好ましい一例として、下記６種類のアルキルレゾルシノールを含有するものが挙げられる。本発明者らの知見によれば、下記６種類のアルキルレゾルシノールの混合物は、サーチュイン活性促進に特に有効である。
１）上記一般式（II）におけるＲ3が炭素原子数１５の飽和又は不飽和のアルキル基であるアルキルレゾルシノール（以下、ＡＲ１５ともいう）。
２）上記一般式（II）におけるＲ3が炭素原子数１７の飽和又は不飽和のアルキル基であるアルキルレゾルシノール（以下、ＡＲ１７ともいう）。
３）上記一般式（II）におけるＲ3が炭素原子数１９の飽和又は不飽和のアルキル基であるアルキルレゾルシノール（以下、ＡＲ１９ともいう）。
４）上記一般式（II）におけるＲ3が炭素原子数２１の飽和又は不飽和のアルキル基であるアルキルレゾルシノール（以下、ＡＲ２１ともいう）。
５）上記一般式（II）におけるＲ3が炭素原子数２３の飽和又は不飽和のアルキル基であるアルキルレゾルシノール（以下、ＡＲ２３ともいう）。
６）上記一般式（Ｉ）で表される炭素原子数２５の飽和又は不飽和のアルキル基を有するアルキルレゾルシノール（以下、ＡＲ２５ともいう）。
【００２２】
ＡＲ１５として特に好ましいものは、Ｒ3が炭素原子数１５の飽和アルキル基、Ｒ4が水素原子であるものであり、具体的には、１，３−ジヒドロキシ−５−ｎ−ペンタデシルベンゼン（Ｃ１５：０）が挙げられる。
ＡＲ１７として特に好ましいものは、Ｒ3が炭素原子数１７の飽和アルキル基、Ｒ4が水素原子であるものであり、具体的には、１，３−ジヒドロキシ−５−ｎ−ヘプタデシルベンゼン（Ｃ１７：０）が挙げられる。
ＡＲ１９として特に好ましいものは、Ｒ3が炭素原子数１９の飽和アルキル基、Ｒ4が水素原子であるものであり、具体的には、１，３−ジヒドロキシ−５−ｎ−ノナデシルベンゼン（Ｃ１９：０）が挙げられる。
ＡＲ２１として特に好ましいものは、Ｒ3が炭素原子数２１の飽和アルキル基、Ｒ4が水素原子であるものであり、具体的には、１，３−ジヒドロキシ−５−ｎ−ヘンイコシルベンゼン（Ｃ２１：０）が挙げられる。
ＡＲ２３として特に好ましいものは、Ｒ3が炭素原子数２３の飽和アルキル基、Ｒ4が水素原子であるものであり、具体的には、１，３−ジヒドロキシ−５−ｎ−トリコシルベンゼン（Ｃ２３：０）が挙げられる。
ＡＲ２５として特に好ましいものは上記で挙げた通りである。
【００２３】
ＡＲ１５、ＡＲ１７、ＡＲ１９、ＡＲ２１及びＡＲ２３の好ましい含有量は、サーチュイン活性を効果的に向上させる観点から、それぞれ、下記範囲内にあることが好ましい。
ＡＲ１５の含有量は、上記特定アルキルレゾルシノール混合物中、好ましくは０．１〜１０．０質量％、更に好ましくは０．１〜５．０質量％、特に好ましくは０．５〜１．５質量％である。
ＡＲ１７の含有量は、上記特定アルキルレゾルシノール混合物中、好ましくは１．０〜２０．０質量％、更に好ましくは５．０〜１５．０質量％、特に好ましくは８．０〜１２．０質量％である。
ＡＲ１９の含有量は、上記特定アルキルレゾルシノール混合物中、好ましくは２５．０〜４０．０質量％、更に好ましくは２７．５〜３７．５質量％、特に好ましくは３０．０〜３５．０質量％である。
ＡＲ２１の含有量は、上記特定アルキルレゾルシノール混合物中、好ましくは４０．０〜５５．０質量％、更に好ましくは４２．５〜５２．５質量％、特に好ましくは４５．０〜５０．０質量％である。
ＡＲ２３の含有量は、上記特定アルキルレゾルシノール混合物中、好ましくは１．０〜１５．０質量％、更に好ましくは２．５〜１２．５質量％、特に好ましくは５．０〜１０．０質量％である。
【００２４】
ＡＲ１５、ＡＲ１７、ＡＲ１９、ＡＲ２１及びＡＲ２３の各含有量と、ＡＲ２５の含有量を足し合わせると１００質量％以下となる。サーチュイン活性促進剤は、ＡＲ１５、ＡＲ１７、ＡＲ１９、ＡＲ２１及びＡＲ２３をそれぞれ上記のアルキルレゾルシノール混合物中の割合と同様の割合で含有していてもよい。
【００２５】
上記特定アルキルレゾルシノール混合物は、ＡＲ１５、ＡＲ１７、ＡＲ１９、ＡＲ２１、ＡＲ２３及びＡＲ２５以外の他のアルキルレゾルシノールの１種以上を含有していても良い。この他のアルキルレゾルシノールとしては、例えば、上記一般式（II）におけるＲ３が炭素原子数２７の飽和又は不飽和のアルキル基であるアルキルレゾルシノール（以下、ＡＲ２７ともいう）が挙げられる。ＡＲ２７として特に好ましいものは、Ｒ1が炭素原子数２７の飽和アルキル基、Ｒ2が水素原子であるものであり、具体的には、１，３−ジヒドロキシ−５−ｎ−ヘプタコシルベンゼン（Ｃ２７：０）が挙げられる。
【００２６】
また、上記特定アルキルレゾルシノール混合物は、アルキルレゾルシノール以外の他の成分を含んでいても良く、このアルキルレゾルシノール以外の他の成分の含有量は、上記特定アルキルレゾルシノール混合物中、好ましくは３０質量％以下である。
【００２７】
上記特定アルキルレゾルシノール混合物の好ましい一例として、次の組成を有するものが挙げられる。即ち、ＡＲ１５として１，３−ジヒドロキシ−５−ｎ−ペンタデシルベンゼン（Ｃ１５：０）を１．２質量％、ＡＲ１７として１，３−ジヒドロキシ−５−ｎ−ヘプタデシルベンゼン（Ｃ１７：０）を１０．９質量％、ＡＲ１９として１，３−ジヒドロキシ−５−ｎ−ノナデシルベンゼン（Ｃ１９：０）を３３．９質量％、ＡＲ２１として１，３−ジヒドロキシ−５−ｎ−ヘンイコシルベンゼン（Ｃ２１：０）を４６．４質量％、ＡＲ２３として１，３−ジヒドロキシ−５−ｎ−トリコシルベンゼン（Ｃ２３：０）を７．５質量％、及びＡＲ２５として１，３−ジヒドロキシ−５−ｎ−ペンタコシルベンゼン（Ｃ２５：０）を０．１質量％含有する特定アルキルレゾルシノール混合物である。
【００２８】
アルキルレゾルシノールは、天然の非イソテルぺノイド系フェノール性両親媒性化合物であるレゾルシノール脂質として、種々の植物に含まれていることが知られており、アルキルレゾルシノールの給源としては、イネ科植物以外にも、例えば、ウルシ科、イチョウ科、ヤマモガシ科、ヤブコウジ科、サクラソウ科、ニクズク科、アヤメ科、サトイモ科、キク科のヨモギ、マメ科等が知られている。これらの植物の中でも、本発明においては、一般式（I）で表されるアルキルレゾルシノール及び特定アルキルレゾルシノール混合物の給源として、イネ科植物を採用することが、効率良く目的のアルキルレゾルシノールを得られる点で好ましい。
【００２９】
一般式（I）で表されるアルキルレゾルシノール及び特定アルキルレゾルシノール混合物の給源として利用可能なイネ科植物としては、例えば、小麦、デュラム小麦、ライ麦、
ライ小麦、大麦、オーツ麦、はと麦、トウモロコシ、イネ、ヒエ、アワ、キビ等の穀類が挙げられ、これら１種を単独で又は２種以上を組み合わせて用いることができる。これらの穀類の中でも、高い活性が得られる点から、特に小麦、デュラム小麦等のコムギ属の植物が好ましく、小麦が更に好ましい。イネ科植物種子としては、任意の形態のイネ科植物種子で良く、例えば、イネ科植物種子（好ましくは種子外皮；糟糠類）そのもの；当該イネ科植物種子を切断、粉砕若しくは粉末化したもの；当該イネ科植物種子を乾燥したもの；当該イネ科植物種子を乾燥後粉砕若しくは粉末化したもの等でも良い。イネ科植物種子外皮を含む好適な例としては、ふすま、末粉、籾殻、ぬか等が挙げられる他、外皮を伴った種子も挙げられる。
【００３０】
イネ科植物種子から、一般式（I）で表されるアルキルレゾルシノール及び特定アルキルレゾルシノール混合物を効率よく得るために、アルコール抽出による方法が好ましい。アルコールによる抽出方法は特に制限されないが、例えば、上記各種形態のイネ科植物種子をアルコール中に浸漬、攪拌又は還流する方法の他、超臨界流体抽出法等が挙げられる。前者の方法の場合、抽出温度は２〜１００℃が好ましく、抽出時間は４時間以上であることで、一般式（I）で表されるアルキルレゾルシノールが所定量得られ、７２時間以下、特に１２〜２４時間が好ましい。アルコール使用量は、イネ科植物種子１００質量部に対し５０〜２０００質量部が好ましい。
【００３１】
イネ科植物種子の抽出に用いられるアルコールとしては、例えば、メタノール、エタノール、ｎ−プロパノール、イソプロパノール、ｎ−ブタノール等の１価の低級アルコール（好ましくは炭素原子数１〜４のもの）、及び１，３−ブチレングリコール、プロピレングリコール、グリセリン等の多価アルコール等の室温（２５℃）で液体であるアルコールが挙げられる。これらのアルコールの中でも、操作性や環境性の点から、エタノールが好ましい。尚、イネ科植物種子の抽出に用いられるアルコールとしては、アルコール以外の水性成分（水、純水、蒸留水、水道水、酸性水、アルカリ水、中性水等）が含まれている含水エタノールを用いることもできる。含水アルコール中のアルコール含有量は、通常７０体積％以上、好ましくは８０体積％以上、より好ましくは９０体積％以上である。
【００３２】
本発明において、イネ科植物種子のアルコール抽出物は、そのまままたは濃縮、乾燥してサーチュイン活性促進剤とすることができるが、公知の方法、例えば分配クロマトグラフィーで精製してもよい。イネ科植物種子のアルコール抽出物の精製に用いられる分配クロマトグラフィーは、一般式（I）でアルキルレゾルシノール及びそれを含む上記特定アルキルレゾルシノール混合物が得られる手法であればその種類は問わないが、移動相として非水系溶媒を用いる順相クロマトグラフィー法が好ましく、オープンカラム法、中圧カラム法、高速液体クロマトグラフィー等の公知の方法を適宜選択することができる。
【００３３】
分配クロマトグラフィーにおける移動相としては、メタノール、エタノール、ｎ−プロパノール、イソプロパノール、ｎ−ブタノール等の１価の低級アルコール（好ましくは炭素原子数１〜４のもの）、及び１，３−ブチレングリコール、プロピレングリコール、グリセリン等の多価アルコール等の室温（２５℃）で液体であるアルコール；ジエチルエーテル、プロピルエーテル等のエーテル；酢酸ブチル、酢酸エチル等のエステル；アセトン、エチルメチルケトン等のケトン；ヘキサン；塩化メチレン；アセトニトリル；並びにクロロホルム等が挙げられ、これら溶媒の１種を単独で又は２種以上を組み合わせて用いることができる。複数の溶媒を組み合わせて移動相とする場合、分配クロマトグラフィーの実施中（イネ科植物種子のアルコール抽出物の精製中）において、複数の溶媒の混合比を一定にするイソクラクティックモードでも良く、あるいは該混合比を変化させるグラジエントモードでも良い。
【００３４】
分配クロマトグラフィーにおける担体としては、目的とする有効成分を担持−放出できる担体であればいずれも用いることができるが、一般的にはシリカゲル、ポリアクリルアミドゲル、デキストランゲル等を挙げることができる。
【００３５】
イネ科植物種子のアルコール抽出物の分配クロマトグラフィーにおける検出波長は、１７０〜３２０ｎｍであれば良く、好ましくは１９０〜２８０ｎｍである。
【００３６】
イネ科植物種子（好ましくはコムギ属の植物）のアルコール抽出物（好ましくはエタノール抽出物）の精製に好適な分配クロマトグラフィーの例として、下記分配クロマトグラフィーＡ及びＢが挙げられる。
・分配クロマトグラフィーＡ：担体としてシリカゲル及び移動相としてヘキサン−酢酸エチル混合溶媒を用いた中圧カラム法（中圧クロマトグラフィー）を用い、且つその分配クロマトグラフィーの実施中に、移動相を「ヘキサン−酢酸エチル混合溶媒においてヘキサンの含有割合が相対的に高いもの」から「ヘキサン−酢酸エチル混合溶媒においてヘキサンの含有割合が相対的に低いもの」へと変化させ（即ち、「ヘキサン大−少」へのグラジエントモードで用い）、且つ検出波長２５４ｎｍでのピーク成分を分取する。
・分配クロマトグラフィーＢ：担体としてシリカゲル及び移動相としてメタノールを用いた高速液体クロマトグラフィー（ＨＰＬＣ）を用い、且つ検出波長２１５ｎｍでのピーク成分を分取する。
上記特定アルキルレゾルシノール混合物は、上述した分配クロマトグラフィーＡ及びＢーのピーク成分として得ることができる。
【００３７】
本発明のサーチュイン活性促進剤における、特定アルキルレゾルシノール混合物の含有量は、サーチュイン酵素活性作用が奏されれば特に限定はされないが当該作用をより確実に奏させるようにする観点から、本発明のサーチュイン活性促進剤中、５０質量％以上、好ましくは７０質量％以上、更に好ましくは７５質量％以上とするのが好適である。上記特定アルキルレゾルシノール混合物の含有量は１００質量％、即ち、本発明のサーチュイン活性促進剤は上記有効成分（特定アルキルレゾルシノール混合物）のみから構成されていても良い。
【００３８】
本発明のサーチュイン活性促進剤は、上記一般式（I）で表されるアルキルレゾルシノール、特に上記特定アルキルレゾルシノール混合物、並びに必要に応じて薬学的又はサプリメント等の保健用食品において許容される種々の担体、賦形剤、その他の添加剤、その他の成分を含有するものである。本発明のサーチュイン活性促進剤は、常法により製剤化することができ、その場合、本発明のサーチュイン活性促進剤の剤型は、錠剤、散剤、液剤、シロップ剤、顆粒剤、カプセル剤等の経口剤である。また、本発明のサーチュイン活性促進剤に含有可能な「その他の成分」としては、その他の薬効作用を有する成分や健康食品素材、各種ビタミン類、生薬、ミネラル類等が挙げられる。
【００３９】
本発明のサーチュイン活性促進剤中の特定アルキルレゾルシノール混合物の含有量は、サーチュイン活性促進剤の剤型、投与又は摂取する者の症状や年齢性別等によって適宜変化させることができ、人を対象とする場合、通常、本発明のサーチュイン活性促進剤の有効成分の投与量又は摂取量が１人（６０ｋｇ換算で）１日当たり０．５〜５０００ｍｇ、好ましくは１０〜４５００ｍｇ、より好ましくは４２〜４２００ｍｇとなるように含有させることが好適である。また、本発明のサーチュイン活性促進剤をイヌやネコ等の愛玩動物に投与又は摂取させる場合には、当該有効成分の１日の投与又は摂取量は、０．０１５〜１５０ｍｇ／体重１ｋｇ、好ましくは０．０５〜１５０ｍｇ／体重１ｋｇ、より好ましくは０．１３〜１３０ｍｇ／体重１ｋｇとなるように含有させることが好適である。
【００４０】
本発明のサーチュイン活性促進剤は、前述のように医薬又は保健用食品として、人又は動物に直接投与若しくは摂取させても良いが、飲食品又はペットフード等の動物用飼料に添加・配合して摂取させても良い。この場合、サーチュイン活性促進剤を添加・配合する飲食品としては特に限定されないが、例えばパン類、ご飯類、麺類、タブレット、キャンディー等の菓子類、清涼飲料、ジュース、栄養ドリンク等の飲料等が挙げられる。また、ペットフードとしてはドライタイプ、セミドライ・セミモイストタイプ、モイストタイプの何れでも良いが、これらに限定されるものではなく、また、サーチュイン活性促進剤の飲食品又は動物用飼料への添加・配合方法も、特に制限されるものではなく、飲食品又は動物用飼料の製造前に原料・素材に直接配合しても良く、該製造工程中に添加しても良く、製造された飲食品又は動物用飼料に添加しても良い。また、本発明のサーチュイン活性促進剤を飲食品や動物用飼料に配合して摂取させる場合、本発明における特定アルキルレゾルシノール混合物に富む食品素材、例えば小麦ふすまや小麦等の全粒粉と組み合わせても良い。このとき飲食品や動物用飼料中の特定アルキルレゾルシノール混合物の量が前述の摂取量になるようにそれぞれの配合量を調整すれば良い。
【００４１】
本発明のサーチュイン活性促進剤は、後述する実施例に示すように、これを哺乳類が摂取することで、脳の視床下部、特に視床下部の核におけるサーチュインの脱アセチル酵素活性を高めることができる。本発明のサーチュイン活性促進剤の作用は、サーチュイン遺伝子の発現向上によるものであってもよく、サーチュイン酵素そのものの活性化によるものであってもよい。サーチュイン活性促進作用をより効果的なものとする点から、本発明のサーチュイン活性促進剤を好ましくは２０日間以上摂取し続けることが好ましく、４０日間以上摂取し続けることがより好ましい。
【００４２】
視床下部の核における、ＳＩＲＴ１等のサーチュインの発現上昇又は活性化は、マウス等の寿命を延ばし、老化を抑制することが知られている。従って、本発明のサーチュイン活性促進剤を摂取することにより、老化が抑制される、寿命を延ばすなどの効果が期待される。本明細書において老化としては、加齢とともに生じる動物個体の生理機能低下等が挙げられる。本発明のサーチュイン活性促進剤の対象者は、健常な個体であってもよく、或いは、加齢やストレスからくる各種疾患の患者であってもよい。サーチュイン活性促進剤は肥満症又は糖尿病の個体に対しても、サーチュイン活性を促進する。肥満症は、健康上の危険性を与える任意の程度の過剰の脂肪過多を意味する。
【実施例】
【００４３】
以下、実施例により本発明を更に詳細に説明する。本発明は、以下の実施例により何ら制限されるものではない。
【００４４】
〔実施例１〕
下記＜抽出精製法＞により、小麦ふすま（イネ科植物種子）から特定アルキルレゾルシノール混合物を得、これを実施例１のサーチュイン活性促進剤とした。小麦ふすまから得られた特定アルキルレゾルシノール混合物（実施例のサーチュイン活性促進剤）の組成は次の通り。
・１，３−ジヒドロキシ−５−ｎ−ペンタデシルベンゼン（Ｃ１５：０）１．２質量％。
・１，３−ジヒドロキシ−５−ｎ−ヘプタデシルベンゼン（Ｃ１７：０）１０．９質量％。
・１，３−ジヒドロキシ−５−ｎ−ノナデシルベンゼン（Ｃ１９：０）３３．９質量％。
・１，３−ジヒドロキシ−５−ｎ−ヘンイコシルベンゼン（Ｃ２１：０）４６．４質量％。
・１，３−ジヒドロキシ−５−ｎ−トリコシルベンゼン（Ｃ２３：０）７．５質量％。
・１，３−ジヒドロキシ−５−ｎ−ペンタコシルベンゼン（Ｃ２５：０）０．１質量％。
【００４５】
＜抽出精製法＞
小麦ふすまに質量で５倍量のエタノールを添加して、６００ｒｐｍ、室温の条件で、１６時間撹拌抽出した。抽出物を濾過して不要物を除きエタノール抽出液を回収した後、エタノールを留去し、小麦ふすま（イネ科植物種子）のエタノール抽出物を得た。次いで、このエタノール抽出物を中圧クロマトグラフィーによって精製した。中圧クロマトグラフィー条件は下記の通りである。溶出開始後３１〜３６分に出現するピーク成分を回収して、溶媒留去し、目的とする特定アルキルレゾルシノール混合物を得た。
（中圧クロマトグラフィーの条件）
・カラム：シリカゲル（インジェクトカラム３Ｌ、ハイフラッシュカラム５Ｌ、６０Å、４０μｍ、山善株式会社製）
・移動相：ヘキサン／酢酸エチル混合溶媒（体積比）＝９０／１０にて９分、８０／２０にて１５分、６０／４０にて１６分
・検出波長：２５４ｎｍ
【００４６】
尚、上記＜抽出精製法＞におけるエタノール抽出物の精製は、中圧クロマトグラフィーに代えて、ＨＰＬＣによって行うこともできる。その場合、エタノール抽出物にメタノールを添加して該エタノール抽出物の濃度が２００ｕｇ／ｍｌのメタノール添加液を調製し、該メタノール添加液を、孔径０．４５μｍのフィルターを通過させ、その通過分を、ＨＰＬＣの試料とする。ＨＰＬＣの条件は下記の通り。
（ＨＰＬＣの条件）
・カラム：シリカゲル（ＯＤＳ−８０Ａ、５μｍ、４．６×２５０ｍｍ、ジーエルサイエンス株式会社製）
・ガードカラム：ＯＤＳ−８０Ａ、５μｍ、４．６×５０ｍｍ
・カラム温度：３０℃
・移動相：メタノール１００％
・検出波長：２１５ｎｍ
【００４７】
〔試験例〕
実施例のサーチュイン活性促進剤について、下記試験により、ob/obマウスの視床下部の核に存在するサーチュイン活性への影響を調べた。その結果を図１に示す。図１中、「実施例１」は、実施例１のサーチュイン活性促進剤を添加した飼料を摂取したマウス群における視床下部の核に存在するサーチュインの活性を示し、「比較例１」は、サーチュイン活性促進剤を非添加の飼料を摂餌したマウス群における視床下部の核に存在するサーチュインの活性を示す。実施例１のサーチュイン（ＳＩＲＴｓ）活性は、比較例１に対して、ｐ＜０．０５で有意差を有していた。下記試験では、視床下部の核に存在するＳＩＲＴ１等のサーチュイン（ＳＩＲＴｓ）をサンプル液として抽出し、このＳＩＲＴｓ含有サンプルにより基質を脱アセチル化させ、その生成物量を吸光度に基づき測定することでサーチュインの活性を測定した。視床下部の核には、一般にサーチュインとして、ＳＩＲＴ１、２、６，７が存在することが知られていることから、今般の測定により、これらの活性の合計を測定するものである。
【００４８】
＜ＳＩＲＴｓ活性測定試験＞
雄性ob/obマウス（日本エスエルシー社）5週齢を動物施設に搬入し、粉末飼料AIN-93M（オリエンタル酵母工業株式会社製）にて4日間馴化した。
その後、体重がそろうように比較例１群と実施例１群の２群、それぞれ６匹ずつに分けた。７週間、明期１２時間、暗期１２時間の明暗サイクルにて飼育した。比較例１群にはAIN-93Mを自由摂取させ、実施例１群には、AIN-93Mに上記のサーチュイン活性促進剤を0.4質量%添加したものを自由摂取させた。
マウスを５時間絶食後、視床下部を摘出し液体窒素にて凍結した。
EPIGENTEK社のEpiQuik Nuclear Extraction Kit I (#OP-0002)を用いて視床下部からプロトコール通りに核タンパク質を抽出した。具体的には以下の方法にて行った。
【００４９】
（核タンパク質の抽出方法）
視床下部を細かく切り刻み、バイオマッシャーII（ニッピ社）に移した。組織１ｇあたり５．００５μＬ のNE1 buffer（０．１容量％DTT含有）を組織の入ったチューブに入れて50-60 strokesで組織を破砕した。氷上でチューブを１５分間静置した後に４℃、１２，０００ｒｐｍ、１０分間遠心させた後、上澄みを捨てた。沈殿物に対し、組織１ｍｇあたり、５μｌのNE2 buffer（DTT およびPICをそれぞれ０．１容量％含有）を添加した。
３分ごとに５秒間のボルテックスをしながら計１５分間氷上で静置させた。１０秒間のソニケーションを３回行った後、４℃、１４，０００ｒｐｍで１０分間の遠心を行った。上清を新しいチューブに移して、サンプル液とした。なお、得られたサンプル液の核タンパク質濃度をBio-Rad社のプロテインアッセイ染色液#500-0006を使用して測定した。
【００５０】
サーチュイン活性は、EPIGENTEK社のEpigenase Universal SIRT Activity/Inhibition Assay Kit Colormetric (#P-4036)を用いてプロトコール通りに測定した。測定には、各サンプル10μgの核タンパク質を供した。測定方法は、具体的には以下の通りである。
（SIRT１活性の測定方法）
９６ウェルプレートにおいて、ブランク用のウェルに（SIRT Assay Buffer ４８μＬ、SIRT Substrate １μＬ、NAD １μＬ）を入れた。
No NAD Control ウェルに（SIRT Assay Buffer ４４μＬ、SIRT Substrate １μＬ、HDAC inhibitor １μＬ、サンプル液４μＬ）を入れた。
サンプル用のウェルに（SIRT Assay Buffer４３μＬ、SIRT Substrate １μＬ、HDAC inhibitor １μＬ、NAD１μＬ、サンプル液４μＬ）を入れた。
Adhesive covering filmでしっかりと密閉し、３７℃、９０分インキュベートした。
反応溶液を捨て、１５０μＬの Wash bufferにて３回洗浄した。
各ウェルに５０μＬ  HO4 capture antibody solutionを加えアルミホイルで包み、室温にて６０分間反応させた。反応溶液を捨て、１５０μＬの Wash bufferにて３回washした後、５０μＬの HO5 detection antibody solutionを加え、アルミホイルで包み、室温にて３０分間反応させた。反応溶液を捨て、１５０μＬの Wash bufferにて３回washした。１００μＬのdeveloper solutionを加えた。遮光し、室温にて１０分間反応させた後、１００μＬのstop solutionを加えて反応を停止させ、１０分以内に４５０ｎｍと６５５ｎｍの吸光度を測定した。各ウェルについてＯＤ＝４５０ｎｍOD−６５５ｎｍODを測定した。サンプル用のウェルについて６連のODの平均値を測定した。サンプル用のウェルのODの平均値から、ブランクのODを引き、Sample ODとするとともに、No NAD Control ウェルのODからブランクのODを引き、NNC ODとした。サーチュイン活性は下記式にて求めた。
サーチュイン活性(OD/min/mg)= 1000×(Sample OD − NNC OD) / (Protein amount (μg)×90min)
【００５１】
図１に示すように、実施例１のサーチュイン活性促進剤を摂取することで有意に脳の視床下部におけるサーチュインの活性を高めることができる。
【図１】
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