(57)【要約】【課題】担体の床高さが所望の床高さになるスラリー充填高さ又はスラリー量を、迅速且つ簡便に何度でも高精度で求めることができる方法を提供すること。【解決手段】クロマトグラフィー用担体を含むスラリーを第１のカラムに充填するときに、前記第１のカラム内に充填されるクロマトグラフィー用担体の床高さが所望の床高さになるスラリー充填高さ又はスラリー量を求める方法であって、上端部と下端部とを有し、その中にクロマトグラフィー用担体を保持できるようになっている第２のカラムを設ける工程と、所定の体積の前記スラリーを前記第２のカラムへ導入する工程と、前記第２のカラムの上端部から下端部へ圧力を加え、前記第２のカラム中のスラリーから分散媒を脱液させる工程と、脱液前の前記スラリーの重量と脱液後の前記クロマトグラフィー用担体の重量からスラリー中の担体の含有量（％（ｗ／ｗ））を算出する工程と、前記算出されたスラリー中の担体の含有量（％（ｗ／ｗ））の値から、前記第１のカラム内に充填したときに前記所望の床高さが得られるスラリー充填高さ又はスラリー量を求める工程とを含む、方法。【選択図】なし【特許請求の範囲】
【請求項１】
クロマトグラフィー用担体を含むスラリーを第１のカラムに充填するときに、前記第１のカラム内に充填されるクロマトグラフィー用担体の床高さが所望の床高さになるスラリー充填高さ又はスラリー量を求める方法であって、
上端部と下端部とを有し、その中にクロマトグラフィー用担体を保持できるようになっている第２のカラムを設ける工程と、
所定の体積の前記スラリーを前記第２のカラムへ導入する工程と、
前記第２のカラムの上端部から下端部へ圧力を加え、前記第２のカラム中のスラリーから分散媒を脱液させる工程と、
脱液前の前記スラリーの重量と脱液後の前記クロマトグラフィー用担体の重量からスラリー中の担体の含有量（％（ｗ／ｗ））を算出する工程と、
前記算出されたスラリー中の担体の含有量（％（ｗ／ｗ））の値から、前記第１のカラム内に充填したときに前記所望の床高さが得られるスラリー充填高さ又はスラリー量を求める工程とを含む、方法。
【請求項２】
前記圧力を加えることが、気体を流し込むことである、請求項１に記載の方法。
【請求項３】
第１のカラム内に充填されるクロマトグラフィー用担体の床高さが所望の床高さになるように、クロマトグラフィー用担体を含むスラリーを前記第１のカラムに充填する方法であって、
請求項１又は２に記載の方法でスラリー充填高さ又はスラリー量を求めて、前記求められたスラリー充填高さになるスラリー量又は前記求められたスラリー量を前記第１のカラム内に充填する工程を含む、方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、スラリー充填高さ又はスラリー量を求める方法、及びスラリー充填方法に関する。より詳細には、クロマトグラフィー用担体を含むスラリーをカラムに充填するときにカラム内に充填されるクロマトグラフィー用担体の床高さが所望の床高さになるスラリー充填高さ又はスラリー量を求める方法、及びこの方法を用いたスラリー充填方法に関する。
【背景技術】
【０００２】
クロマトグラフィーは、分析作業や精製処理全般において定着している有用な技法である。
代表的な産業用クロマトグラフィー装置では、直立型のカラム（ハウジング）の中に担体が充填されている。通常、流体移動相は、カラムの上端部に設けられた入口を通って入り、多孔質であるか、穿孔を有するか、メッシュか又は他の限定的な透過性を有する層を通り、充填床の中を通過し、限定的な透過性を有する層の下端部にある出口から取り出される。
【０００３】
通常、クロマトグラフィー用担体（充填剤）のスラリーをカラムに所定量加え、カラムを通る液体の流れによって担体をカラム内で沈降させることで、クロマトグラフィー用担体はカラムに充填される。このときに、担体の充填圧が低すぎる場合は、カラム上部に隙間が発生することで効率良く精製をすることができなくなり、充填圧が高すぎる場合には、精製中に圧力が上昇する可能性がある。適切な充填圧にするためには、所望の担体の床高さが得られるスラリー充填高さ（又はスラリー量）を、正確にカラムに充填することが必要である。
所望の担体の床高さが得られるスラリー充填高さ（又はスラリー量）を正確にカラムに充填するためには、スラリー中の担体濃度（％（ｖ／ｖ））を知ることが、どの様なカラムスケールの場合でも重要とされている。特にプロセスのパイロットスケールで重要とされており、一般に、スラリー中の担体濃度（％（ｖ／ｖ））は、同スラリー中の担体をメスシリンダの中で一晩以上かけて重力沈降させることによって測定されることが多い。
【０００４】
しかしながら、スラリー中の担体は、多くの場合数時間かけても完全には沈降せず、完全に沈降させるためには一晩あるいはそれより長い時間を要する。しかも、この沈降が不十分であるとスラリー中の担体濃度（％（ｖ／ｖ））の測定値が、正確な数値から大きく外れたものとなる。また、スラリー中の担体濃度（％（ｖ／ｖ））の測定は、習熟度などによって測定値のバラツキが出やすく、再現性に乏しい。
【０００５】
また、スラリー中の担体濃度（％（ｖ／ｖ））を短時間で測定するために、精製に使用するカラムとは別にカラムを準備して、このカラムにスラリーを導入し、送液ポンプを用いて液体を流すことでスラリー中の担体粒子を圧縮して担体粒子を沈降させる手法が提案されているが（特許文献１）、この方法は、煩雑な操作が必要であった。また、上記と同様に、習熟度などによって測定値のバラツキが出やすいものであった。さらに、この方法では、スラリー中の担体濃度（％（ｖ／ｖ））の測定に使用する担体の分散媒として、実際に充填を行うときに用いる分散媒と同種のものを使用する必要がある。そのため、エタノールのような保存溶媒や出荷溶媒に担体を分散させている場合等には、スラリー中の担体濃度（％（ｖ／ｖ））の測定に先立ち、分散媒を予め置換しておく必要がある。また、充填を複数回行う際には、充填を行うたびに分散媒の置換およびスラリー中の担体濃度（％（ｖ／ｖ））の測定を行う必要があり、実験者にとっては大変な負担となる。
【先行技術文献】
【特許文献】
【０００６】
【特許文献１】特表２０１０−５３２４７０号公報
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００７】
本発明が解決しようとする課題は、担体の床高さが所望の床高さになるスラリー充填高さ又はスラリー量を、迅速且つ簡便に何度でも高精度で求めることができる方法を提供することにある。
また、本発明の別の課題は、迅速且つ簡便に何度でも高精度で担体を所望の床高さにすることができる、クロマトグラフィー用担体を含むスラリーをカラムに充填する方法を提供することにある。
【課題を解決するための手段】
【０００８】
本発明の課題は、以下の＜１＞〜＜３＞の手段により解決された。
＜１＞  クロマトグラフィー用担体を含むスラリーを第１のカラムに充填するときに、前記第１のカラム内に充填されるクロマトグラフィー用担体の床高さが所望の床高さになるスラリー充填高さ又はスラリー量を求める方法であって、上端部と下端部とを有し、その中にクロマトグラフィー用担体を保持できるようになっている第２のカラムを設ける工程と、所定の体積の前記スラリーを前記第２のカラムへ導入する工程と、前記第２のカラムの上端部から下端部へ圧力を加え、前記第２のカラム中のスラリーから分散媒を脱液させる工程と、脱液前の前記スラリーの重量と脱液後の前記クロマトグラフィー用担体の重量からスラリー中の担体の含有量（％（ｗ／ｗ））を算出する工程と、前記算出されたスラリー中の担体の含有量（％（ｗ／ｗ））の値から、前記第１のカラム内に充填したときに前記所望の床高さが得られるスラリー充填高さ又はスラリー量を求める工程とを含む、方法。
＜２＞  前記圧力を加えることが、気体を流し込むことである、＜１＞に記載の方法。
＜３＞  第１のカラム内に充填されるクロマトグラフィー用担体の床高さが所望の床高さになるように、クロマトグラフィー用担体を含むスラリーを前記第１のカラムに充填する方法であって、＜１＞又は＜２＞に記載の方法でスラリー充填高さ又はスラリー量を求めて、前記求められたスラリー充填高さになるスラリー量又は前記求められたスラリー量を前記第１のカラム内に充填する工程を含む、方法。
【発明の効果】
【０００９】
本発明のスラリー充填高さ又はスラリー量を求める方法によれば、担体の床高さが所望の床高さになるスラリー充填高さ又はスラリー量を、迅速且つ簡便に何度でも高精度で求めることができる。
本発明のスラリー充填方法によれば、迅速且つ簡便に何度でも高精度で担体を所望の床高さにすることができる。
【図面の簡単な説明】
【００１０】
【図１】本発明のスラリー充填高さ又はスラリー量を求める方法において、スラリーから分散媒を脱液させる前の状態の一例を模式的に示す断面図である。
【図２】本発明のスラリー充填高さ又はスラリー量を求める方法において、スラリーから分散媒を脱液させている状態の一例を模式的に示す断面図である。
【図３】実施例１−４〜実施例１−６で算出したスラリー中の担体濃度（％（ｖ／ｖ））を縦軸に、実施例１−１〜実施例１−３で算出したスラリー中の担体の含有量（％（ｗ／ｗ））を横軸にそれぞれとったグラフである。
【発明を実施するための形態】
【００１１】
〔スラリー充填高さ又はスラリー量を求める方法〕
本発明のスラリー充填高さ又はスラリー量を求める方法は、クロマトグラフィー用担体を含むスラリーを第１のカラムに充填するときに、前記第１のカラム内に充填されるクロマトグラフィー用担体の床高さが所望の床高さになるスラリー充填高さ又はスラリー量を求める方法であって、上端部と下端部とを有し、その中にクロマトグラフィー用担体を保持できるようになっている第２のカラムを設ける工程と、所定の体積の前記スラリーを前記第２のカラムへ導入する工程と、前記第２のカラムの上端部から下端部へ圧力を加え、前記第２のカラム中のスラリーから分散媒を脱液させる工程と、脱液前の前記スラリーの重量と脱液後の前記クロマトグラフィー用担体の重量からスラリー中の担体の含有量（％（ｗ／ｗ））を算出する工程と、前記算出されたスラリー中の担体の含有量（％（ｗ／ｗ））の値から、前記第１のカラム内に充填したときに前記所望の床高さが得られるスラリー充填高さ又はスラリー量を求める工程とを含む、方法である。
【００１２】
（第１工程）
本発明のスラリー充填高さ又はスラリー量を求める方法は、上端部と下端部とを有し、その中にクロマトグラフィー用担体を保持できるようになっている第２のカラムを設ける工程（第１工程）を含む。
第２のカラムは、ハウジング内に液体を導入したときに上端部（カラム入口）から下端部（カラム出口）へと液体が流れるように設けられる。
第２のカラムとしては、シリンジが挙げられる。第２のカラムの内容積は特に限定されないが、好ましくは５〜３０ｍＬである。
また、第２のカラムは、例えばハウジング内にフィルターを備えることなどによって、クロマトグラフィー用担体を保持できるようになっている。この担体保持部は、上端部から下端部へと液体が流れるように第２のカラムを設けたときに、液体を保持せずに通過させる。フィルターのポアサイズは好ましくは５〜３０μｍである。
【００１３】
（第２工程）
本発明のスラリー充填高さ又はスラリー量を求める方法は、所定の体積の前記スラリーを前記第２のカラムへ導入する工程（第２工程）を含む。スラリーは、所望の床高さが得られるスラリー充填高さ又はスラリー量を求める対象のスラリーを用いる。上記導入は、例えば、スラリーを上端部（カラム入口）から流し込むことによって行えばよい。導入するスラリーの体積は、第２のカラムの内容積の１／２０〜１／１倍であるのが好ましい。
【００１４】
スラリーに含まれるクロマトグラフィー用担体は、精製に使用するクロマトグラフィー用担体と同様のものであればよい。例えば、樹脂又は無機化合物を支持体とし且つ当該支持体にリガンドが固定された担体が挙げられる。樹脂は、天然高分子でも合成高分子でもよい。天然高分子としては、例えば、アガロース、デキストラン、セルロース、マンナン等が挙げられる。合成高分子としては、例えば、スチレンや（メタ）アクリレート、（メタ）アクリルアミドの（共）重合体等が挙げられる。無機化合物としてはシリカ等が挙げられる。
支持体の形態は、粒子、モノリス、膜、チップが挙げられる。これらの中では、粒子が好ましい。
また、リガンドは、例えば精製における標的物質を捕捉できるものであればよい。具体的には、プロテインＡ、プロテインＧ、プロテインＬ、抗体、レクチン類等のタンパク質や、これらの疑似ペプチドリガンド等のペプチドが挙げられる。精製の標的物質が抗体等の場合は、タンパク質が好ましく、イムノグロブリン結合タンパク質がより好ましい。
なお、スラリー中の担体の含有量は、通常、１０〜８０％（ｗ／ｗ）の範囲内である。
【００１５】
また、スラリーに含まれる分散媒は、担体を分散（懸濁）できるものであればよいが、例えば、エタノール、イソプロパノール等の低級一価アルコール類；ベンジルアルコール等の芳香族アルコール類；水；各種緩衝液；これらの混液が挙げられる。精製に使用する分散媒と同種のものでなく、エタノールのような保存時や出荷時の分散媒を分散媒として使用した場合でも、所望の担体の床高さが得られるスラリー充填高さ又はスラリー量を求めることが可能である。
これらの中でも、低級一価アルコール類、水、各種緩衝液、低級一価アルコール類と水との混液、低級一価アルコール類と緩衝液との混液が好ましい。
なお、スラリーは、塩化ナトリウム、塩化カリウム等の無機塩を含んでいてもよい。
【００１６】
（第３工程）
本発明のスラリー充填高さ又はスラリー量を求める方法は、前記第２のカラムの上端部から下端部へ圧力を加え、前記第２のカラム中のスラリーから分散媒を脱液させる工程（第３工程）を含む。圧力を加える手法としては、気体を流し込むことが挙げられる。
【００１７】
図１は、スラリーから分散媒を脱液させる前の状態の一例を模式的に示す断面図である。また、図２は、スラリーから分散媒を脱液させている状態の一例を模式的に示す断面図である。
以下、第３工程の一具体例について、必要に応じて図１〜２を参照しつつ説明する。
【００１８】
図面に示すように、フィルター付シリンジ１は、ハウジング３０の内底部にフィルター４を備えている。
フィルター付シリンジ１を立てるなどして、基端開口１９（上端部）から導入されたスラリー２がフィルター４の方向へ流れるようにしたときに、フィルター４は、クロマトグラフィー用担体を保持できる（担体が筒先３（下端部）内部に到達しない）ようになっているが、スラリー中の分散媒は保持せずに通過させる。
また、筒先３は、フィルター付シリンジ１の外部へと液体が流出することを阻止するストッパ（図示しない）を取りつけることができるように構成されている。ストッパを筒先３に取りつけた場合には、スラリー中の担体のみならず分散媒も筒先３から流出しなくなる。
【００１９】
図１の状態では、フィルター付シリンジ１には、第２工程によって導入されたスラリー２が収容されている。また、図１の状態では、上記ストッパ（図示しない）によって、筒先３から分散媒が流出しないようになっている。
また、図１に示すように、フィルター付シリンジ１の基端開口１９には、シリンジ８の筒先１３が連結されており、フィルター付シリンジ１内とシリンジ８内では、気体が自由に移動できるようになっている。また、これら２本のシリンジの連結部からシリンジ外部には空気が漏れないようになっている。
また、図１に示すように、シリンジ８の基端開口９には、ガスケット６を備えるプランジャー５が、摺動可能に挿入されている。
【００２０】
そして、ストッパを筒先３から取り外し、図２に示すように、プランジャー５を、シリンジ８のハウジング２０に押入することによって、ハウジング２０内の空気７が、フィルター付シリンジ１のハウジング３０に流入し、フィルター４を通過した分散媒２２が、筒先３から押し出される。このようにして、スラリー２から分散媒２２が脱液され、乾燥した担体２１が得られる。
プランジャー５を摺動させることによる脱液操作は、分散媒２２が筒先３から流出しなくなるまで行うのが好ましい。必要に応じて繰り返し脱液操作を行ってもよい。流し込む気体の全体積は、フィルター付シリンジ１（第２のカラム）へ導入したスラリーの体積の１〜１００倍が好ましい。
【００２１】
（第４工程）
本発明のスラリー充填高さ又はスラリー量を求める方法は、脱液前の前記スラリーの重量と脱液後の前記クロマトグラフィー用担体の重量からスラリー中の担体の含有量（％（ｗ／ｗ））を算出する工程（第４工程）を含む。
【００２２】
スラリー中の担体の含有量（％（ｗ／ｗ））は、脱液前のスラリーの重量（ｇ）と脱液後のクロマトグラフィー用担体の重量（ｇ）から、下記式（α）に従い算出することができる。
【００２３】
スラリー中の担体の含有量（％（ｗ／ｗ））  ＝  （脱液後のクロマトグラフィー用担体の重量（ｇ）／脱液前のスラリーの重量（ｇ））×１００    ・・・（α）
【００２４】
脱液前のスラリーの重量は脱液前に測定しておけばよい。例えば、フィルター付シリンジ１の空重量と、スラリー２を収容したフィルター付シリンジ１の重量から算出できる。
脱液後のクロマトグラフィー用担体の重量は、例えば、フィルター付シリンジ１の空重量と、上記脱液後の乾燥した担体２１を収容したフィルター付シリンジ１の重量から算出できる。
重量を測定するときの温度は、通常、１６〜３０℃の範囲である。ただし、スラリー中の担体の含有量（％（ｗ／ｗ））は、例えば４〜１０℃のような低温条件で重量を測定した場合でも、１６〜３０℃で重量を測定した場合の値と同様の値を得ることができる。
【００２５】
（第５工程）
本発明のスラリー充填高さ又はスラリー量を求める方法は、前記算出されたスラリー中の担体の含有量（％（ｗ／ｗ））の値から、前記第１のカラム内に充填したときに前記所望の床高さが得られるスラリー充填高さ又はスラリー量を求める工程（第５工程）を含む。
【００２６】
第１のカラム内に充填したときに所望の床高さが得られるスラリー充填高さ又はスラリー量は、例えば、次のようにして求めることができる。
すなわち、スラリー中の担体の含有量（％（ｗ／ｗ））の値から、この値と相関するスラリー中の担体濃度（％（ｖ／ｖ））を、下記式（β）に従い算出する。なお、式（β）中のｋは定数であり、測定の度に導き出す必要はない。
式（β）を導くためには、例えば、クロマトグラフィー用担体を分散媒に分散したスラリーを、担体濃度を変えて３種以上用意し、それぞれスラリー中の担体の含有量（％（ｗ／ｗ））の値およびスラリー中の担体濃度（％（ｖ／ｖ））の値を算出する。そして、スラリー中の担体の含有量（％（ｗ／ｗ））の値をｘ軸に、スラリー中の担体濃度（％（ｖ／ｖ））の値をｙ軸に取った場合の回帰直線の傾きが、式（β）中のｋとなる。
【００２７】
スラリー中の担体濃度（％（ｖ／ｖ））  ＝  ｋ×スラリー中の担体の含有量（％（ｗ／ｗ））    ・・・（β）
〔式（β）中、ｋは、スラリー中の担体の含有量が１％（ｗ／ｗ）のときのスラリー中の担体濃度（％（ｖ／ｖ））を示し、定数である。〕
【００２８】
そして、常法（例えば特表２０１０−５３２４７０号公報、２９−００１３−５１  ＡＢ（ＧＥ  ｈｅａｌｔｈｃａｒｅ）等に記載）に従い、スラリー中の担体濃度（％（ｖ／ｖ））の値から上記スラリー充填高さ又はスラリー量を求めることができる。具体的には、下記式（γ）に従い、スラリー中の担体濃度（％（ｖ／ｖ））の値から、所望の担体の床高さが得られるスラリー充填高さを求めることができる。スラリー量を求めるときは、更に下記式（δ）に従って求めればよい。
【００２９】
所望の担体の床高さが得られるスラリー充填高さ（ｃｍ）  ＝  （所望の担体の床高さ（ｃｍ）×１００）  ／  スラリー中の担体濃度（％（ｖ／ｖ））    ・・・（γ）
【００３０】
所望の担体の床高さが得られるスラリー量（ｃｍ3）  ＝  所望の担体の床高さが得られるスラリー充填高さ（ｃｍ）  ×  第１のカラムの断面積（ｃｍ2）    ・・・（δ）
【００３１】
したがって、スラリー中の担体の含有量（％（ｗ／ｗ））が分かれば、同スラリーを使用して、特に大スケールのカラムにスラリーを充填する際に、迅速且つ簡便に高精度で所望の床高さにすることができる。
【００３２】
〔スラリー充填方法〕
本発明のスラリー充填方法は、第１のカラム内に充填されるクロマトグラフィー用担体の床高さが所望の床高さになるように、クロマトグラフィー用担体を含むスラリーを前記第１のカラムに充填する方法であって、本発明のスラリー充填高さ又はスラリー量を求める方法でスラリー充填高さ又はスラリー量を求めて、前記求められたスラリー充填高さになるスラリー量又は前記求められたスラリー量を前記第１のカラム内に充填する工程を含む、方法である。
本発明のスラリー充填方法は、本発明のスラリー充填高さ又はスラリー量を求める方法でスラリー充填高さ又はスラリー量を求めること以外は常法と同様にして行えばよい。例えば、特表２０１０−５３２４７０号公報等の記載を参考にして行うことができる。
本発明のスラリー充填方法は、カラムのスケールを問わずその充填に関連して使用することができるが、プロセスのパイロットスケールでのスラリー充填に適する。
【実施例】
【００３３】
以下、実施例を挙げて本発明を詳細に説明するが、本発明はこれら実施例に限定されるものではない。
【００３４】
（調製例１）
プロテインＡが固定された担体粒子（（ＴＯＹＯＰＥＡＲＬ（登録商標）  ＡＦ−ｒＰｒｏｔｅｉｎ  Ａ  ＨＣ−６５０Ｆ、東ソー株式会社）以下、担体粒子Ａとも称する）のスラリーを準備し、ステリカップ−ＧＰ、０．２２μｍ（ミリポア社製）を用いたろ過と塩化ナトリウム水溶液（０．１Ｍ）を用いた洗浄とを合計１０回繰り返すことにより、スラリーの分散媒を塩化ナトリウム水溶液（０．１Ｍ）に置換することで、スラリー中の担体粒子Ａの含有量（％（ｗ／ｗ））が異なる３種類のスラリー（総量１００ｍＬ）を調製した。これらスラリーを、スラリー（Ａ−１）〜（Ａ−３）と称する。
【００３５】
（実施例１−１）
フィルター付シリンジ（ＭｏＢｉＴｅｃ  ＧｍｂＨ製１０ｍＬ  Ｃｏｌｕｍｎｓ（１０μｍ  Ｆｉｌｔｅｒ  Ｐｏｒｅ  Ｓｉｚｅ））の空重量を測定した。このシリンジをシリンジＡと称する。
常温（２２℃）のスラリー（Ａ−１）を振とうすることで担体粒子Ａと分散媒を十分に混和させた。このスラリー（Ａ−１）を一部抜き取り、シリンジＡに速やかに充填した。スラリー（Ａ−１）を充填したシリンジＡの重量を測定し、この重量と上記空重量から、シリンジＡ中のスラリー（Ａ−１）の重量（投入したスラリーの重量）を算出した。シリンジＡの筒先にストッパ（ＭｏＢｉＴｅｃ  ＧｍｂＨ製）を取り付けた。
プランジャー付シリンジ（テルモ製ＳＳ−１０ＥＳＺ）を別途準備した。このシリンジをシリンジＢと称する。
シリンジＢのハウジング内に空気が１０ｍＬ入った状態にし、このシリンジＢの筒先を、シリンジＡの基端開口に連結した。このとき、２本のシリンジの連結部からシリンジ外部には空気が漏れない状態になっている。
シリンジＡの筒先に取り付けておいたストッパを取り外し、シリンジＢのプランジャーをハウジング内に押し込むことで、シリンジＢが備えるハウジング内の空気をシリンジＡが備えるハウジング内へ注入し、シリンジＡの筒先からシリンジ外部へとスラリー中の液体成分を押出させた。この押出操作を、シリンジＡの筒先からスラリー中の液体成分が出てこなくなるまで全１０回行った。
シリンジＢをシリンジＡから取り外し、シリンジＡの重量を測定した。この重量と上記空重量から、スラリーの乾燥重量を算出した。次いで、下記式に従い、スラリー中の担体の含有量（％（ｗ／ｗ））を算出した。算出までに要した時間は約１０分程度であった。この算出値を表１に示す。
担体含有量（％（ｗ／ｗ））＝  （スラリーの乾燥重量（ｇ）／投入したスラリーの重量（ｇ））×１００
【００３６】
（実施例１−２〜実施例１−３）
スラリー（Ａ−１）を、スラリー（Ａ−２）〜（Ａ−３）に変更する以外は、実施例１−１と同様の操作を行い、スラリー中の担体の含有量（％（ｗ／ｗ））を算出した。この算出値を表１に示す。
【００３７】
（実施例１−４）
常温（２２℃）のスラリー（Ａ−１）を振とうすることで担体粒子Ａと分散媒を十分に混和させた。このスラリー（Ａ−１）を一部抜き取り、メスシリンダ（アズワン製１００ｍＬメスシリンダ）に投入し、１８時間静置することで、スラリー（Ａ−１）中の担体粒子Ａを完全に沈降させた。
その後、スラリー中の担体の床高さ（沈降部分の高さ）とスラリー全体の高さを測定し、下記式に従って、スラリー中の担体濃度（％（ｖ／ｖ））を算出した。この算出値を表１に示す。
スラリー中の担体濃度（％（ｖ／ｖ））  ＝  スラリー中の担体の床高さ（ｃｍ）／スラリー全体の高さ（ｃｍ）×１００
【００３８】
（実施例１−５〜実施例１−６）
スラリー（Ａ−１）を、スラリー（Ａ−２）〜（Ａ−３）に変更する以外は、実施例１−４と同様の操作を行い、スラリー中の担体濃度（％（ｖ／ｖ））を算出した。この算出値を表１に示す。
【００３９】
【表１】
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【００４０】
（相関式の算出）
スラリー（Ａ−１）〜（Ａ−３）について、算出されたスラリー中の担体含有量（％（ｗ／ｗ））をｘ軸に、スラリー中の担体濃度（％（ｖ／ｖ））をｙ軸にプロットした場合の回帰直線の傾きを求めたところ、ｋ＝１．０８となった（図３）。
ｋの値は担体や分散媒の種類により異なるが、塩化ナトリウム水溶液（０．１Ｍ）に分散した担体粒子Ａのスラリー中の担体の含有量（％（ｗ／ｗ））と式（β）により、塩化ナトリウム水溶液（０．１Ｍ）に分散した担体粒子Ａのスラリー中の担体濃度（％（ｖ／ｖ））を算出することが可能である。
本方法を用いることで得られる大きな効果は、塩化ナトリウム水溶液（０．１Ｍ）に分散した担体粒子Ａのスラリーを新たに調製した場合でも、スラリー中の担体粒子Ａの含有量（％（ｗ／ｗ））を測定するのみで、スラリー中の担体粒子Ａの濃度（％（ｖ／ｖ））を式（β）により迅速簡便に算出することが可能となることにある。
本方法でなければ、塩化ナトリウム水溶液（０．１Ｍ）に分散した担体粒子Ａのスラリーを新たに調製するたびに、スラリー中の担体粒子Ａの濃度（％（ｖ／ｖ））を数時間〜１日以上をかけて実験者は算出せねばならない。
また、本方法を用いることで得られる別の効果は、分散媒を変更した場合でも、前記と同様に相関式を作ることで、スラリー中の担体粒子Ａの濃度（％（ｖ／ｖ））を迅速簡便に算出することが可能となることにある。
【００４１】
また、クロマトグラフィー用担体（特にプロテインＡ担体）は、冷蔵保管される場合が多いが、担体粒子の沈降挙動は温度によって異なる。そのため、スラリー中の担体濃度（％（ｖ／ｖ））を測定する場合には、その測定開始前までに、精製時の温度と同じ温度（常温）にしておく必要がある。これに対し、スラリー中の担体の含有量（％（ｗ／ｗ））は、冷蔵庫から取り出した直後でも常温の状態と差異がない。そのため、スラリー中の担体の含有量（％（ｗ／ｗ））を基準とすることにより、常温に戻す必要がなく、冷蔵庫から取り出してから速やかに測定を開始することができる。このようにして測定時間がより短縮化され精度も向上する。
また、スラリー中の担体濃度（％（ｖ／ｖ））を測定する場合には、メスシリンダの目盛を読むこと又はノギス、定規を用いることで高さを読み取る必要があるが、このような読み取りは、習熟度などによって測定値のバラツキが出やすく、再現性に乏しい。これに対し、スラリー中の担体の含有量（％（ｗ／ｗ））を基準とすることにより、習熟度などによる測定値のバラツキを抑えることができ、精度が向上すると考えられる。
【００４２】
（実施例１−７）
プロテインＡが固定された担体粒子（（ＴＯＹＯＰＥＡＲＬ（登録商標）  ＡＦ−ｒＰｒｏｔｅｉｎ  Ａ  ＨＣ−６５０Ｆ、東ソー株式会社）が塩化ナトリウム水溶液（０．１Ｍ）に分散したスラリーを用意した。このスラリー中の担体の含有量（％（ｗ／ｗ））を、実施例１−１と同様の操作で算出したところ、５０．０％（ｗ／ｗ）であった。
次に、得られたスラリー中の担体の含有量（％（ｗ／ｗ））と上記で求めたｋの値（＝１．０８）から、式（β）に従いスラリー中の担体濃度（％（ｖ／ｖ））を算出したところ、５０．０×１．０８＝５４％（ｖ／ｖ）であった。
所望の床高さ：２０ｃｍ、第１のカラムの直径（内径）：２０ｃｍの場合には、所望の床高さが得られるスラリー充填高さは、式（γ）に従い、３７ｃｍとなる。また、スラリー充填量は１１．６２Ｌとなり、これを第１のカラムに充填することで、所望の床高さを得ることができる。
【符号の説明】
【００４３】
１：シリンジ（フィルター付）
２：スラリー
３、１３：筒先
４：フィルター
５：プランジャー
６：ガスケット
７：空気
８：シリンジ（フィルター無し）
９、１９：基端開口
２０、３０：ハウジング
２１：クロマトグラフィー用担体（セミドライ）
２２：分散媒
【図１】
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【図２】
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【図３】
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