(57)【要約】【課題】新規ベンジルアミン化合物を提供する。また、ＨＩＶ活性の抑制に適した医薬組成物及び抗ＨＩＶ剤を提供する。【解決手段】ベンジルアミン化合物は、下記一般式（１）で表される。2019119698.tif 000021  一般式（１）中、Ｒ１は、置換若しくは無置換のアリール基、又は、置換若しくは無置換のヘテロ環基を表し、Ａは、酸素原子又は硫黄原子を表し、Ｒ２は、置換又は無置換のアルキル基を表し、ｎは１〜１０の整数を表す。【選択図】なし【特許請求の範囲】
【請求項１】
下記一般式（１）で表されるベンジルアミン化合物。
【化１】
2019119698.tif 000020
[一般式（１）中、Ｒ１は、置換若しくは無置換のアリール基、又は、置換若しくは無置換のヘテロ環基を表し、Ａは、酸素原子又は硫黄原子を表し、Ｒ２は、置換又は無置換のアルキル基を表し、ｎは１〜１０の整数を表す。]
【請求項２】
請求項１に記載のベンジルアミン化合物と、薬学的に許容される担体と、を含有する医薬組成物。
【請求項３】
請求項１に記載のベンジルアミン化合物を有効成分として含有する、抗ＨＩＶ剤。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、ベンジルアミン化合物並びにその医薬組成物及び抗ＨＩＶ剤に関する。
【背景技術】
【０００２】
抗ヒト免疫不全ウイルス（ＨＩＶ；human immunodeficiency virus、以下、「ＨＩＶ」と称する。）は、後天性免疫不全症候群(ＡＩＤＳ)の原因ウイルスである。ＨＩＶは、免疫を担うＣＤ４陽性Ｔ細胞を標的として感染し、慢性的免疫不全を引き起こすことが知られている。
ＨＩＶウイルス感染症に対する薬物治療としては、複数の薬剤を組み合わせた多剤併用療法が多大な成果を挙げている。しかし、薬剤の長期投与による副作用、薬剤耐性ウイルスの出現等が問題となっており、既存薬とは異なる作用機序をもつ新たな抗ＨＩＶ薬の開発が求められている。
【０００３】
例えば、ペルオキシソーム増殖因子活性化レセプター（ＰＰＡＲ）類に対して活性な化合物が開示されており、対象となる疾患としてＨＩＶ感染症が挙げられている（例えば、特許文献１参照）。
【０００４】
例えば、ＨＩＶの複製に必須であるプロウイルスＤＮＡからＲＮＡへの転写過程を阻害する抗ＨＩＶ薬が開示されている（例えば、特許文献２参照）。
【０００５】
例えば、ＨＩＶ−１複製を調節するＨＩＶ−１カプシド（ＣＡ）タンパク質を標的とする細胞透過性を有するペプチドが開示されている（例えば、非特許文献１参照）。
【先行技術文献】
【特許文献】
【０００６】
【特許文献１】特表２００９−５０７０７９号公報
【特許文献２】特開２０１２−２０１６７４号公報
【非特許文献】
【０００７】
【非特許文献１】Ｐｅｐｔｉｄｅ  Ｓｃｉｅｎｃｅ，  ２０１７，  １０８：ｅ２２９２０
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００８】
カプシド（ＣＡ）は、ウイルス感染細胞で特異的に産生され、ウイルス粒子内で集合してコアと呼ばれる砲弾型の構造体を作る。コアはＨＩＶのＲＮＡゲノムを包み保護する役割を持つ。このコアを正常に形成できない、又は新たに感染した細胞中で適切なタイミングでコアを崩壊できないＨＩＶ変異ウイルスは、感染力及び増殖力を失う。すなわち、カプシドはＨＩＶの感染及び増殖に必須である。しかしながら、カプシドを標的としたＨＩＶ活性を抑制する、低分子の化合物は未だ開発されていない。
【０００９】
本発明は、新規ベンジルアミン化合物を提供することを課題とする。また、本発明は、ＨＩＶ活性の抑制に適した医薬組成物及び抗ＨＩＶ剤を提供とすることを課題とする。
【課題を解決するための手段】
【００１０】
ＣＡコアとは、Ｇａｇタンパク質前駆体から合成されたＣＡタンパク質が相互作用して形成された多量体である。近年、ＣＡタンパク質のＣ末端ドメイン(ＣＴＤ)に含まれるＷ１８４とＭ１８５を介した疎水性相互作用が、ＣＡコアの安定化に重要であることがＸ線結晶構造解析により示されている。
本発明者らは、この部位がＣＡの機能を阻害する標的となり得ることに着目し、ＭＯＥ(Molecular Operating Environment) を利用したin silico スクリーニングを行い、抗ＨＩＶ活性を有する新規化合物を設計した。基質側のＷ１８４とＭ１８５の側鎖の位置を保ち、その間を結ぶ母殻構造を置換していくことによって設計された阻害化合物候補群の中から、カプシドを標的としたＨＩＶ活性を抑制に適した新規ベンジルアミン化合物を見出した。
【００１１】
上記課題を解決するための具体的な手段には、以下の態様が含まれる。
＜１＞  下記一般式（１）で表されるベンジルアミン化合物。
【００１２】
【化１】
2019119698.tif 000002
【００１３】
一般式（１）中、Ｒ１は、置換若しくは無置換のアリール基、又は、置換若しくは無置換のヘテロ環基を表し、Ａは、酸素原子又は硫黄原子を表し、Ｒ２は、置換又は無置換のアルキル基を表し、ｎは１〜１０の整数を表す。
【００１４】
＜２＞  ＜１＞に記載のベンジルアミン化合物と、薬学的に許容される担体と、を含有する医薬組成物。
＜３＞  ＜１＞に記載のベンジルアミン化合物を有効成分として含有する、抗ＨＩＶ剤。
【発明の効果】
【００１５】
本発明によれば、新規ベンジルアミン化合物を提供することができる。また、本発明によれば、ＨＩＶ活性の抑制に適した医薬組成物及び抗ＨＩＶ剤を提供とすることができる。新規ベンジルアミン化合物は、ＨＩＶ活性の抑制に好適である。
【図面の簡単な説明】
【００１６】
【図１】図１は、実施例１で合成した化合物についてエレクトロスプレーイオン化質量分析（ＥＳＩ−ＭＳ）した結果を示す図である。
【図２】図２は、実施例２で合成した化合物についてエレクトロスプレーイオン化質量分析（ＥＳＩ−ＭＳ）した結果を示す図である。
【図３】図３は、実施例３で合成した化合物についてエレクトロスプレーイオン化質量分析（ＥＳＩ−ＭＳ）した結果を示す図である。
【図４】図４は、実施例４で合成した化合物についてエレクトロスプレーイオン化質量分析（ＥＳＩ−ＭＳ）した結果を示す図である。
【発明を実施するための形態】
【００１７】
以下、本発明を実施するための形態について詳細に説明する。
本明細書中、数値範囲を現す「〜」は、その上限及び下限としてそれぞれ記載されている数値を含む範囲を表す。また、「〜」で表される数値範囲において上限値のみ単位が記載されている場合は、下限値も同じ単位であることを意味する。
本明細書に段階的に記載されている数値範囲において、ある数値範囲で記載された上限値又は下限値は、他の段階的な記載の数値範囲の上限値又は下限値に置き換えてもよい。また、本明細書に記載されている数値範囲において、ある数値範囲で記載された上限値又は下限値は、実施例に示されている値に置き換えてもよい。
本明細書において組成物中の各成分の含有率又は含有量は、組成物中に各成分に該当する物質が複数種存在する場合、特に断らない限り、組成物中に存在する当該複数種の物質の合計の含有率又は含有量を意味する。
本明細書において、好ましい態様の組み合わせは、より好ましい態様である。
【００１８】
《ベンジルアミン化合物》
本実施形態のベンジルアミン化合物は、下記一般式（１）で表される。
【００１９】
【化２】
2019119698.tif 000003
【００２０】
一般式（１）中、Ｒ１は、置換若しくは無置換のアリール基、又は、置換若しくは無置換のヘテロ環基を表し、Ａは、酸素原子又は硫黄原子を表し、Ｒ２は、置換又は無置換のアルキル基を表し、ｎは１〜１０の整数を表す。
【００２１】
本実施形態のベンジルアミン化合物は、抗ＨＩＶ剤として用いた場合、ＨＩＶ活性を抑制することができる。従って、後述の抗ＨＩＶ剤として好適に適用することができる。この理由は明らかではないか、以下の理由によるものと推測される。
ＣＡコアを正常に形成できない遺伝子変異ウイルスは、その増殖が抑制されることが研究により明らかとなっており、上述のように感染後期においてＣＡタンパク質同士の相互作用ＣＡコアが正常に形成されることはウイルスの複製において必須の段階であると考えられている。
更に、ＣＡタンパク質は感染前期においても重要な役割を果たしており、ウイルスが宿主細胞に侵入した後に起こる脱殻過程及びそれに続く逆転写過程を調節する重要な働きをすると考えられている。本実施形態のベンジルアミン化合物を抗ＨＩＶ剤として用いた場合、ＣＡコアの安定化に関与するＣＡタンパク質中のＷ１８４とＭ１８５とを介する疎水性相互作用部位に結合し、ＣＡコアの早期崩壊、又は安定化による脱殻不全に導くことができる。コアの適切なタイミングでの崩壊は、ＨＩＶの増殖に必要であるため、本実施形態のベンジルアミン化合物は、ＨＩＶ活性を抑制すると推察される。
以下、本実施形態のベンジルアミン化合物の詳細について説明する。
【００２２】
一般式（１）中、Ｒ１は、置換若しくは無置換のアリール基又は、置換若しくは無置換のヘテロ環基を表す。
【００２３】
Ｒ１で表されるアリール基に導入可能な置換基としては、特に制限はなく、ハロゲン原子、炭素数１〜５のアルキル基、炭素数１〜５のアルコキシ基、炭素数１〜３以下のアルキル基で置換された置換アミノ基等が挙げられる。
【００２４】
Ｒ１で表されるアリール基の総炭素数（即ち、置換基を有する場合には置換基の炭素数も含めた総炭素数を意味する。以下、同義である。）としては、６〜２０が好ましく、６〜１８がより好ましい。
上記アリール基の具体例としては、フェニル基、ナフチル基、ベンジル基、ジフェニルアミノフェニル基等が挙げられる。
【００２５】
Ｒ１で表されるアリール基としては、置換又は無置換の総炭素数６〜２０のアリール基であることが好ましく、無置換の総炭素数６〜１８のアリール基であることがより好ましく、無置換のナフチル基であることが更に好ましい。
【００２６】
Ｒ１で表されるヘテロ環基に導入可能な置換基としては、特に制限はなく、Ｒ１で表されるアリール基に導入可能な置換基と同様である。
【００２７】
ヘテロ環基としては、特に制限はなく、例えば、脂肪族ヘテロ環基及び芳香族ヘテロ環基が挙げられる。
また、ヘテロ環基が有するヘテロ原子としては、窒素原子、酸素原子、硫黄原子等が挙げられる。
硫黄原子を有するヘテロ環基としては、例えば、チオフェン環及びベンゾチオフェン環が挙げられる。
酸素原子を有するヘテロ環基としては、例えば、フラン環及びベンゾフラン環が挙げられる。
【００２８】
抗ＨＩＶ活性に優れる観点から、ヘテロ環基としては、窒素原子を有するヘテロ環基（以下、「含窒素ヘテロ環基」とも称する。）であることが好ましい。
含窒素ヘテロ環基に含まれる窒素原子の数は、１〜３であることが好ましく、１又は２であることがより好ましい。
【００２９】
含窒素ヘテロ環基は、窒素原子以外のヘテロ原子を含んでいてもよい。窒素原子以外のヘテロ原子としては、例えば、酸素原子、硫黄原子が挙げられる。
含窒素ヘテロ環基が窒素原子以外のヘテロ原子を含む場合、窒素原子以外のヘテロ原子の数としては、０〜３であることが好ましく、０又は１であることがより好ましく、窒素原子以外のヘテロ原子を含まないことが更に好ましい。
【００３０】
含窒素ヘテロ環基としては、５員環又は６員環であることが好ましい。また、含窒素ヘテロ環基としては、単環又は縮合環であることが好ましく、単環又は縮合数が２〜８の縮合環であることがより好ましく、縮合数が２〜４の縮合環であることが更に好ましい。
【００３１】
含窒素ヘテロ環基としては、例えば、ピペラジン環基、ピロリジン環基、ピロール環基、ピペリジン環基、ピリジン環基、イミダゾール環基、ピラゾール環基、オキサゾール環基、チアゾール環基、ピラジン環基、モルホリン環基、チアジン環基、インドール環基、イソインドール環基、ベンゾイミダゾール環基、プリン環基、キノリン環基、イソキノリン環基、キノキサリン環基、シンノリン環基及びカルバゾール環基が挙げられる。
【００３２】
これらの中でも、抗ＨＩＶ活性に優れる観点から、含窒素ヘテロ環基としては、縮合数が２〜４の縮合環である含窒素ヘテロ環基であることが好ましく、縮合数が２〜４の縮合環であり、かつ、含窒素ヘテロ環基に含まれる窒素原子の数が１又は２である含窒素ヘテロ環基であることがより好ましく、縮合数が２の縮合環であり、かつ、含窒素ヘテロ環基に含まれる窒素原子の数が１又は２である含窒素ヘテロ環基であることが更に好ましく、縮合数が２の縮合環であり、かつ、含窒素ヘテロ環基に含まれる窒素原子の数が１である含窒素ヘテロ環基であることが特に好ましい。
縮合数が２の縮合環であり、かつ、含窒素ヘテロ環基に含まれる窒素原子の数が１である含窒素ヘテロ環基としては、インドール環基、イソインドール環基等が挙げられる。
【００３３】
抗ＨＩＶ活性に優れる観点から、Ｒ１で表される基としては、置換又は無置換の総炭素数６〜２０のアリール基（より好ましくは、無置換の総炭素数６〜１８のアリール基、更に好ましくは、無置換のナフチル基である）又は、含窒素ヘテロ環基（より好ましくは縮合数が２〜４の縮合環である含窒素ヘテロ環基、更に好ましくは縮合数が２〜４の縮合環であり、かつ、含窒素ヘテロ環基に含まれる窒素原子の数が１又は２である含窒素ヘテロ環基、特に好ましくは縮合数が２の縮合環であり、かつ、含窒素ヘテロ環基に含まれる窒素原子の数が１又は２である含窒素ヘテロ環基、最も好ましくは縮合数が２の縮合環であり、かつ、含窒素ヘテロ環基に含まれる窒素原子の数が１である）であることが好ましい。
【００３４】
一般式（１）中、Ａは、酸素原子又は硫黄原子を表す。抗ＨＩＶ活性により優れる観点から、Ａとしては、酸素原子であることが好ましい。
【００３５】
Ｒ２は、置換又は無置換のアルキル基を表す。
Ｒ２で表されるアルキル基は、直鎖状、分岐鎖状又は環状であってもよい。
Ｒ２で表されるアルキル基に導入可能な置換基としては、特に制限はなく、Ｒ１で表されるアリール基に導入可能な置換基と同様である。
【００３６】
Ｒ２で表されるアルキル基としては、無置換のアルキル基であることが好ましく、直鎖状又は分岐鎖状のアルキル基であることがより好ましく、直鎖状又は分岐鎖状の炭素数１〜１２のアルキル基であることが更に好ましく、直鎖状の炭素数１〜６のアルキル基が特に好ましく、直鎖状の炭素数１〜４のアルキル基が最も好ましい。
【００３７】
アルキル基の具体例としては、メチル基、エチル基、ｎ−プロピル基、イソプロピル基、１−エチルプロピル基、ｎ−ブチル基、イソブチル基、ｓｅｃ−ブチル基、ｔｅｒｔ−ブチル基、２−メチルブチル基、３，３−ジメチルブチル基、ｎ−ペンチル基、イソペンチル基、ネオペンチル基、１−メチルペンチル基、ｎ−ヘキシル基、イソヘキシル基、ｓｅｃ−ヘキシル基、ｔｅｒｔ−ヘキシル基、ｎ−ヘプチル基、イソヘプチル基、ｓｅｃ−ヘプチル基、ｔｅｒｔ−ヘプチル基、ｎ−オクチル基、イソオクチル基、ｓｅｃ−オクチル基、ｔｅｒｔ−オクチル基、ノニル基、デシル基、ウンデシル基、ドデシル基などが挙げられる。
【００３８】
一般式（１）中、ｎは１〜１０の整数を表す。抗ＨＩＶ活性に優れる観点から、ｎとしては、１〜８であることが好ましく、１〜４であることがより好ましく、１又は２であることが更に好ましい。
【００３９】
抗ＨＩＶ活性に優れる観点から、一般式（１）としては、Ｒ１で表される基としては、置換又は無置換の総炭素数６〜２０のアリール基（より好ましくは、無置換の総炭素数６〜１８のアリール基、更に好ましくは、無置換のナフチル基である）又は、含窒素ヘテロ環基（より好ましくは縮合数が２〜４の縮合環である含窒素ヘテロ環基、更に好ましくは縮合数が２〜４の縮合環であり、かつ、含窒素ヘテロ環基に含まれる窒素原子の数が１又は２である含窒素ヘテロ環基、特に好ましくは縮合数が２の縮合環であり、かつ、含窒素ヘテロ環基に含まれる窒素原子の数が１又は２である含窒素ヘテロ環基、最も好ましくは縮合数が２の縮合環であり、かつ、含窒素ヘテロ環基に含まれる窒素原子の数が１である）であり、Ａとしては、酸素原子であり、Ｒ２で表される基としては、無置換のアルキル基（より好ましくは、直鎖状又は分岐鎖状のアルキル基、更に好ましくは、直鎖状又は分岐鎖状の炭素数１〜１２のアルキル基、特に好ましくは、直鎖状の炭素数１〜６のアルキル基、最も好ましくは、直鎖状の炭素数１〜４のアルキル基）であることが好ましい。
【００４０】
本実施形態のベンジルアミン化合物としては、例えば、以下の例示化合物が挙げられる。
なお、本実施形態のベンジルアミン化合物は、以下の例示化合物に限定されず、既述の一般式（１）に包含される化合物であれば特に制限されない。
【００４１】
【化３】
2019119698.tif 000004
【００４２】
《ベンジルアミン化合物の合成方法》
ベンジルアミン化合物の合成方法の一例として、例示化合物ＭＫＮ−１（以下、単に「ＭＫＮ−１」とも称する。）を合成する方法について説明する。
但し、本実施形態のベンジルアミン化合物の合成方法については、これに限定されない。
本実施形態のベンジルアミン化合物の一実施形態であるＭＫＮ−１の逆合成スキームを以下に示す(スキーム１)。
【００４３】
【化４】
2019119698.tif 000005
【００４４】
ＭＫＮ−１は、例えば、エステル結合に由来する部位として、アルコール部位(セグメント１)とカルボン酸部位（セグメント２及び３）とをそれぞれ合成し、その後、得られたアルコール部位に由来する化合物と、カルボン酸部位に由来する化合物と、を縮合反応（エステル結合を形成反応）させて得られた化合物であってもよい。
また、カルボン酸部位に由来する化合物は、温和な条件かつ収束的な合成法である点から、後述のセグメント２とセグメント３とを、鈴木−宮浦クロスカップリング反応させて得ることが好ましい。また、カルボン酸部位に由来する化合物は、化学選択的が可能な他の反応を用いて得ることもできる。
以下、セグメント１〜セグメント３の合成方法及びＭＫＮ−１の合成方法の詳細について説明する。
【００４５】
−アルコール部位 (セグメント１)の合成−
セグメント１の合成スキームを以下に示す(スキーム２)。
セグメント１の合成方法は、特に制限はなく、例えば、出発物質として１,３−ブタンジオール１と、触媒量のＤＭＡＰ（Ｎ，Ｎ−ジメチル−４−アミノピリジン）存在下で塩化トシル（ＴｓＣｌ）と、を作用させることで、１,３−ブタンジオールの末端部分の１級アルコールのみをトシル化させることができ、中間体（化合物２）を好適に得ることができる。
次いで、得られた化合物２にナトリウムチオメトキシドを作用させることでセグメント１（化合物３)が得られる。
なお、上記合成における反応条件は、特に制限はなく、公知の条件から適宜選択することができる。
【００４６】
１,３−ブタンジオールは、目的とするセグメントに応じて適宜選択することができ、ラセミ体又は後述のエナンチオマーを用いてもよい。
出発物質である１,３−ブタンジオールは、市販品を購入して準備してもよく、公知の合成方法により１,３−ブタンジオールを合成して準備してもよい。
【００４７】
【化５】
2019119698.tif 000006
【００４８】
−カルボン酸部位（セグメント２）の合成−
セグメント２の合成スキームを以下に示す（スキーム３）。
出発物質としてインドール４を用いて、塩基存在下でヨウ素と反応させることで３−ヨウ化インドール５が得られ、次いで、ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル化（以下、「Ｂｏｃ化」という。）を行い、更に、ｎ−ブチルリチウムとイソプロポキシボロン酸ピナコールとを反応させることでセグメント２（ピナコールボロン酸エステル７)が得られる。
【００４９】
出発物質であるインドールは、市販品を購入して準備してもよく、公知の合成方法によりインドールを合成して準備してもよい。
【００５０】
【化６】
2019119698.tif 000007
【００５１】
−カルボン酸部位（セグメント３）の合成−
セグメント３の合成スキームを以下に示す（スキーム４−１）。
セグメント３の合成方法としては、光学活性α−アミノ酸が好適に得られる観点から、不斉Ｓｔｒｅｃｋｅｒ反応を用いることが好ましい。
なお、不斉Ｓｔｒｅｃｋｅｒ反応条件としては、特に制限はなく、公知の条件から適宜選択することができる。
【００５２】
立体選択性（ジアステレオ選択性）の観点からは、セグメント３は、不斉補助基を用いて合成することが好ましい。
ジアステレオ選択性の観点から、不斉補助基としては、（Ｓ）−（−）−１−(４−メトキシフェニル)エチルアミンを用いることが好ましい。
【００５３】
出発物質である２−ブロモベンズアルデヒドは、市販品を購入して準備してもよく、公知の合成方法により２−ブロモベンズアルデヒドを合成して準備してもよい。
【００５４】
【化７】
2019119698.tif 000008
【００５５】
[ＭＫＮ−１の合成方法]
ＭＫＮ−１の合成スキームを以下に示す（スキーム４−２）。
ＭＫＮ−１は、上記で合成したセグメント２（化合物７)及びセグメント１（化合物１３)を、テトラキス(トリフェニルホスフィン)パラジウム(０)に触媒される鈴木−宮浦クロスカップリング反応させて、カップリング化合物を合成した後、水酸化リチウム水溶液により、カルボン酸へ変換した後、上記で合成したアルコール部位(セグメント１)を、縮合剤を用いて中間体（化合物１６）を合成した後、脱保護を行うことで得ることができる。
【００５６】
高い収率が得られる観点から、鈴木−宮浦クロスカップリング反応の条件としては、化合物１３に対してピナコールボロン酸エステル７を２．５当量と３０ｍｏｌ％のパラジウム触媒とを用いて、９０℃で２４時間反応させる条件であることが好ましい。
【００５７】
縮合剤としては、特に制限はなく、公知の縮合剤から適宜選択することができる。
【００５８】
【化８】
2019119698.tif 000009
【００５９】
ＭＫＮ−１は、上記合成方法の他に、得られる化合物の立体選択性をより高めるために、以下の方法で合成してもよい。
具体的には、ＭＫＮ−１のアルコールに由来するユニットに含まれる不斉点をエンチオピュアなものにするために、セグメント１を合成する際に（Ｓ）−（＋）−１，３−ブタンジオール１８を出発物質として用い、上記スキーム１と同様にしてキラルなアルコール２０を合成することができる(スキーム５)。
【００６０】
【化９】
2019119698.tif 000010
【００６１】
[用途]
＜抗ＨＩＶ剤＞
本実施形態の抗ＨＩＶ剤は、ベンジルアミン化合物を有効成分として含有する。
本実施形態の抗ＨＩＶ剤は、レトロウイルス科に属するウイルスに対して、優れた抗ウイルス作用を有する。
【００６２】
レトロウイルス科に属するウイルスとしては、ヒト免疫不全ウイルス１型及び２型（ＨＩＶ−１及びＨＩＶ−２）、サル免疫不全ウイルス（ＳＩＶ）、猫免疫不全ウイルス（ＦＩＶ）等が挙げられる。
【００６３】
本実施形態の抗ＨＩＶ剤は、レトロウイルスの中でも、ヒト免疫不全ウイルス１型（ＨＩＶ−１）に対して、特に優れた抗ウイルス作用（即ち、抗ＨＩＶ活性）を有する。本実施形態の抗ＨＩＶ剤を医薬として使用した場合、具体的にはレトロウイルスの感染症の処置、特にＨＩＶ感染に起因するエイズの治療に有用である。
また、ベンジルアミン化合物は、後述の実施例に示すようにＨＩＶ−１に対して抗ＨＩＶ活性を有する。
【００６４】
また、本実施形態の抗ＨＩＶ剤は、逆転写酵素阻害剤、プロテアーゼ阻害剤、インテグラーゼ阻害剤等の抗ＨＩＶ剤と組み合わせて用いてもよい。
【００６５】
＜医薬組成物＞
本実施形態の医薬組成物は、本実施形態のベンジルアミン化合物と、薬学的に許容される担体と、を少なくとも含有する。
【００６６】
担体としては、特に制限はなく、乳糖、カオリン、ショ糖、結晶セルロース、コーンスターチ、タルク、寒天、ペクチン、ステアリン酸、ステアリン酸マグネシウム、レシチン、塩化ナトリウム等の固体状担体、グリセリン、落花生油、ポリビニルピロリドン、オリーブ油、エタノール、ベンジルアルコール、プロピレングリコール、水等の液状担体などが挙げられる。
【００６７】
本実施形態の医薬組成物は、上記担体の他に、医薬品の製剤化に際しては通常使用される、賦形剤、その他の添加剤を更に含有していてもよい。
【００６８】
本実施形態の医薬組成物の剤型としては、特に制限はなく、任意の形態を採ることができる。
医薬組成物が固体状担体を含有する場合、剤型としては、錠剤、散剤、顆粒剤、カプセル化剤、座剤、トローチ剤等が挙げられる。また、医薬組成物が液状担体を含有する場合、剤型としては、シロップ、乳液、軟ゼラチンカプセル、クリーム、ゲル、ペースト、スプレー、注射等が挙げられる。
【実施例】
【００６９】
以下に本発明を実施例により説明するが、本発明は、これらの実施例に限定されるものではない。なお、以下の説明において、特に断りのない限り「％」はすべて質量基準である。
【００７０】
（実施例１）
＜ＭＫＮ−１の合成＞
−セグメント１の合成−
市販の１，３−ブタンジオール１を出発物質として、触媒量のＤＭＡＰ存在下で塩化トシルを作用させることで、１，３−ブタンジオール１の末端部分の１級アルコールのみをトシル化し、化合物２を得た。続いて化合物２にナトリウムチオメトキシドを作用させることでセグメント１（化合物３）を２工程、収率９６質量％で合成した（スキーム２）。
【００７１】
【化１０】
2019119698.tif 000011
【００７２】
−セグメント２の合成−
インドール４を出発物質として、塩基存在下でヨウ素を反応させることで３−ヨウ化インドール５を合成し、これを精製せずに合成反応液（クルード）のままＢｏｃ化を行うことで、化合物６を２段階、収率６０質量％で得た。続いてｎ−ブチルリチウムとイソプロポキシボロン酸ピナコールとを反応させることでセグメント２（ピナコールボロン酸エステル７）を合成した（スキーム３）。
【００７３】
【化１１】
2019119698.tif 000012
【００７４】
−セグメント３の合成−
２−ブロモベンズアルデヒド８、シアン化ナトリウム及び（Ｓ）−（−）−１−（４−メトキシフェニル)エチルアミン９をメタノール及び水の混合液中で反応させることで、（Ｓ，Ｓ）−α−アミノニトリル化合物１０を得た。化合物１０を合成反応液（クルード）のまま６Ｍ塩酸中で加熱加水分解することでエナンチオピュアな（Ｓ）−α−アリールグリシン塩酸塩１１を合成した。続いて塩化チオニルによるカルボン酸のメチルエステル化及びアミノ基のＢｏｃ化を行い、セグメント３（化合物１３)を４段階で合成した（スキーム４−１）。
【００７５】
【化１２】
2019119698.tif 000013
【００７６】
上記で合成した化合物１３に対してピナコールボロン酸エステル７を２．５当量と３０ｍｏｌ％のテトラキス(トリフェニルホスフィン)パラジウム(０)触媒を用い、９０℃で２４時間反応（鈴木−宮浦クロスカップリング反応）させた。得られたカップリング化合物１４は１Ｍの水酸化リチウム水溶液を作用させることでメチルエステルをカルボン酸１５に変換し、このカルボン酸１５と上記で合成した化合物１３(セグメント１)について、縮合剤を用いて縮合させて、化合物１６を得た。
化合物１６における２つのＢｏｃ基を塩酸及びジオキサンの混合溶液を用いて脱保護を行い、目的の化合物１７を得た（スキーム４−２）。
【００７７】
【化１３】
2019119698.tif 000014
【００７８】
得られた化合物１７について、１Ｈ−ＮＭＲ分析を行った。得られたスペクトルのケミカルシフト〔ｐｐｍ〕は以下のとおりであった。
【００７９】
１Ｈ−ＮＭＲ  (５００  ＭＨｚ，  ＭｅＯＤ）  １．２６−１．２７  (ｄ，  ３Ｈ)，  １．２９−１．３４  （ｍ，  ３Ｈ），  １．７３−１．７９  （ｍ，  ２Ｈ）， ２．００−２．０６  （ｍ，  １Ｈ），  ２．１２−２．１７  （ｍ，  １Ｈ），  ５．０９−５．１２  （ｍ，  １Ｈ），  ５．３８  （ｓ，  １Ｈ），  ７．０７−７．１１  （ｍ，  １Ｈ），  ７．１９−７．２２  （ｍ，  １Ｈ），  ７．４３  （ｓ，  １Ｈ），  ７．４７−７．５１  （ｍ，  ３Ｈ），  ７．４５−７．６１  （ｍ，  ３Ｈ）；  １３Ｃ  ＮＭＲ  （１２５  ＭＨｚ，  ＣＤＣｌ３）１５．２，  ２０．０，  ３０．３，  ３６．０，  ５４．３，  ７４．１，  １１２．７，  １１４．６，  １１９．８，  １２１．０，  １２３．３，  １２５．５，  １２７．４，  １２８．４，  １３１．０，  １３２．７，  １３３．７，  １３７．９，  １３８．０，  １６７．０；  ＨＲＭＳ  （ＥＳＩ），  ｍ／ｚ  ｃａｌｃｄ  ｆｏｒ  Ｃ２１Ｈ２４Ｎ２Ｏ２Ｓ  ［Ｍ＋Ｈ］＋  ３６９．１６３１，  ｆｏｕｎｄ  ３６９．１６３６．
【００８０】
得られた化合物１７について、エレクトロスプレーイオン化質量分析（ＥＳＩ−ＭＳ）を行った。得られた結果を図１に示す。
以上の測定結果によって、ＭＫＮ−１（化合物１７）が得られたことが示された。なお、得られたＭＫＮ−１はジアステレオマー混合物となっているため、更に高速液体クロマトグラフィー（ＨＰＬＣ）にて精製し、ＭＫＮ−１Ａ及びＭＫＮ−１Ｂを分取した。
【００８１】
ＨＰＬＣの測定条件は以下のとおりである。
高速液体クロマトグラフィー装置（型番：ＪＡＳＣＯ  ＰＵ−２０８７  ｐｌｕｓ、日本分光株式会社製）
カラム：Ｃｏｓｍｏｓｉｌ  ５Ｃ１８−ＡＲＩＩ  ｃｏｌｕｍｎ(２０ｍｍ×２５０ｍｍ）、ナカライテスク株式会社製
溶出条件：アセトニトリル（ＣＨ３ＣＮ）３５質量％〜５０質量％、６０分
流量:５ｍＬ/分
温度条件：室温（２５℃）
【００８２】
[評価]
＜抗ＨＩＶ活性＞
１．ＭＴＴアッセイによる抗ＨＩＶ活性の測定
実施例１で得られたＭＫＮ−１Ａ及びＭＫＮ−１Ｂを試験化合物とし、3-[4,5-dimethylthiazol-2-yl]-2,5-diphenyltetrazolium bromide（ＭＴＴ）アッセイを以下の操作手順に従い行った。
【００８３】
（１）９６穴の平底マイクロプレート（以下、単に「９６ウェルマイクロプレート」とも称する。）に１０％ウシ胎児血清（ＦＢＳ）添加したＲＰＭＩ１６４０培地を１００μＬ分注した。
（２）次いで、試験化合物溶液が２段階希釈系列（０μＭ〜１００μＭ）になるように分注した。
（３）多重感染度（ＭＯＩ）が０．００１になるように、ＨＩＶ−１（ＮＬ４−３株（Ｘ４指向性株））をＭＴ−４細胞に３７℃で１時間〜１．５時間培養し、ＨＩＶ−１感染したＭＴ−４細胞（以下、単に「感染ＭＴ−４細胞」とも称する。）を準備した。
（４）上記で作製した感染ＭＴ−４細胞及び非感染ＭＴ−４細胞それぞれ２．０×１０５/ｍＬを上記９６ウェルマイクロプレートに１００μＬ分注した。
（５）３７℃、ＣＯ２濃度５％の環境下のＣＯ２インキュベーターに、９６ウェルマイクロプレートを入れ、５日間培養を行った。
【００８４】
（６）培養終了後、ＣＯ２インキュベーターから９６ウェルマイクロプレートを取り出し、１００μＬの培養上清を除去し、dye solution（ＭＴＴ試薬、製品名；CellTiter 96 Non-radioactive Cell Proliferation Assay、Promega社製）１５μＬを各ウエルに添加した後、９６ウェルマイクロプレートをＣＯ２インキュベーターに戻しし、１時間培養した。
（７）ＣＯ２インキュベーターから９６ウェルマイクロプレートを取り出し、ＭＴＴ停止液（solubilization solution/stop mix、Promega社製）１００μＬを各ウエルに添加し、よくピペッティングした後、４℃で一晩静置させた。
（８）９６ウェルマイクロプレートを室温に戻した後、分光光度計（製品名；ＢＩＯ−ＴＥＫ  ＥＬｘ８０８、ＢｉｏＴｅｋ社製）にて、各ウエルのＯＤ５７０における吸光度を測定した。なお、バックグラウンドはＯＤ６９０で測定した。
【００８５】
ＯＤ５７０における吸光度の値は生細胞数に比例するため、試験化合物を添加していない非感染ＭＴ−４細胞（対照）の吸光度の値と、試験化合物を添加していない感染ＭＴ−４細胞の吸光度の値と、の差を１００％としたとき、対照の吸光度の値と感染ＭＴ−４細胞の吸光度の値との差が５０％となる試験化合物の濃度をＥＣ50とした。また、同様に、非感染ＭＴ−４細胞の吸光度の値と対照の吸光度の値との差が５０％になったときの試験化合物の濃度をＣＣ50とした。
得られた試験化合物の抗ＨＩＶ活性（ＥＣ５０）及び細胞毒性（ＣＣ５０）を算出した。結果を表１に示す。
【００８６】
２．ｐ２４  ＣＡ  ＥＬＩＳＡによる抗ＨＩＶ活性の測定
実施例１で得られたＭＫＮ−１Ａ及びＭＫＮ−１Ｂを試験化合物とし、ＨＩＶ−ｐ２４  抗原  ＥＬＩＳＡキット（製品名；HIV-1 p24 Antigen ELISA, RETROtek、ZeptoMetrix社製)を用いて、下記手順により抗ＨＩＶ活性を測定した。
【００８７】
（１）上記１．ＭＴＴ試験で用いた感染ＭＴ−４細胞の培養上清１００μＬを上記キットに附属のLysing bufferを１１μＬと混合して、ＨＩＶ−１（ＮＬ４−３株（Ｘ４指向性株））を不活化した。
（２）不活化したＨＩＶ−１溶液をキットに附属のAssay diluentにて適宜希釈した後、キットのプロトコールに従って、試験溶液中のＨＩＶ−１  ｐ２４濃度を、分光光度計（製品名；ＢＩＯ−ＴＥＫ  ＥＬｘ８０８、ＢｉｏＴｅｋ社製）を用いて、ＯＤ４５０の吸光度を測定した。
培養上清から試験溶液への希釈倍率等から、培養上清中のＨＩＶ−１  ｐ２４濃度を算出した。感染ＭＴ−４細胞を用いた試験の測定値が５０％になった試験化合物の濃度をＥＣ50とし、抗ＨＩＶ活性（ＥＣ５０）を求めた。結果を表１に示す。
【００８８】
（実施例２）
＜ＭＫＡ−１４８の合成＞
１，３-ブタンジオール１に水素化ナトリウムとヨウ化メチルを作用させて、１，３−ブタンジオールの末端部分の１級アルコールのみをメチルエーテル化した化合物３０を合成した(スキーム９)。
【００８９】
【化１４】
2019119698.tif 000015
【００９０】
【化１５】
2019119698.tif 000016
【００９１】
上記でられた化合物３０と化合物１５とを縮合し、縮合化合物３１と、Ｂｏｃ基が一つ外れた化合物３２と、４Ｍ塩酸及びジオキサンと反応させて脱保護し、目的のエーテル体３３(ＭＫＡ−１４８)を得た(スキーム１０)。
【００９２】
得られた化合物３３について、エレクトロスプレーイオン化質量分析（ＥＳＩ−ＭＳ）を行った。得られた結果を図２に示す。
以上の結果より、ＭＫＡ−１４８が得られたことが示された。
【００９３】
上記合成で得られたＭＫＮ−１４８はジアステレオマー混合物となっているため、更に高速液体クロマトグラフィー（ＨＰＬＣ）にて精製し、ＭＫＮ−１４８Ａ及びＭＫＮ−１４８Ｂを分取した。ＨＰＬＣの測定条件は、実施例１と同様である。
【００９４】
ＭＫＡ−１４８を用いた以外は、実施例１と同様にして抗ＨＩＶ活性の評価を行った。結果を表１に示す。
【００９５】
（実施例３）
＜ＭＫＡ−１０３の合成＞
１−ナフタレンボロン酸と、化合物１３と、を鈴木−宮浦クロスカップリング反応をさせ、その後アルコール化合物３と縮合反応を行うことによって、化合物２６を得た(スキーム７）。
【００９６】
【化１６】
2019119698.tif 000017
【００９７】
得られた化合物２６について、エレクトロスプレーイオン化質量分析（ＥＳＩ−ＭＳ）を行った。得られた結果を図３に示す。
以上の結果より、１−ナフタレン体（ＭＫＡ−１０３）が得られたことが示された。
【００９８】
上記合成で得られたＭＫＮ−１０３はジアステレオマー混合物となっているため、更に高速液体クロマトグラフィー（ＨＰＬＣ）にて精製し、ＭＫＮ−１０３Ａ及びＭＫＮ−１０３Ｂを分取した。ＨＰＬＣの測定条件は、実施例１と同様である。
ＭＫＡ−１０３を用いた以外は、実施例１と同様にして抗ＨＩＶ活性の評価を行った。結果を表１に示す。
【００９９】
（実施例４）
＜ＭＫＡ−９９の合成＞
２−ナフタレンボロン酸と、化合物１３と、を鈴木−宮浦クロスカップリング反応をさせ、その後アルコール化合物３と縮合反応を行うことによって化合物２９を得た(スキーム８)。
【０１００】
【化１７】
2019119698.tif 000018
【０１０１】
得られた化合物２９について、エレクトロスプレーイオン化質量分析（ＥＳＩ−ＭＳ）を行った。得られた結果を図４に示す。
以上の結果より、２−ナフタレン体(ＭＫＡ−９９)が得られたことが示された。
【０１０２】
上記合成で得られたＭＫＮ−９９はジアステレオマー混合物となっているため、更に高速液体クロマトグラフィー（ＨＰＬＣ）にて精製し、ＭＫＮ−９９Ａ及びＭＫＮ−９９Ｂを分取した。ＨＰＬＣの測定条件は、実施例１と同様である。
【０１０３】
ＭＫＡ−９９を用いた以外は、実施例１と同様にして抗ＨＩＶ活性の評価を行った。結果を表１に示す。
【０１０４】
【表１】
2019119698.tif 000019
【０１０５】
表１中、「inh．」とは「inhabitation」の略を示す。また、「−」は、測定していないことを示す。
【０１０６】
表１に示すとおり、実施例１〜実施例４のベンジルアミン化合物は、抗ＨＩＶ活性を示すことが分かる。特に、一般式（１）におけるＲ１がインドール環であり、Ａが硫黄原子であり、Ｒ２がメチル基であり、かつ、ｎが１である、実施例１のベンジルアミン化合物では、抗ＨＩＶ活性により優れることが分かる。
以上より、本実施形態のベンジルアミン化合物は、ＨＩＶ活性の抑制に優れる。
【図１】
2019119698.tif 000022
【図２】
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【図３】
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【図４】
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