(57)【要約】【課題】抗ＧＤＦ１５抗体の提供。【解決手段】ヒトＧＤＦ１５に結合し、その活性を阻害するモノクローナル抗体を開示する。この抗体は、ヒトＧＤＦ１５の過剰発現に関連した、悪液質を含む体重減少を治療するために使用することができる。本発明は、ヒトＧＤＦ１５（ｈＧＤＦ１５）に特異的に結合する抗体ファミリーの発見に、一部基づいている。これらの抗体は、抗体のＣＤＲを基礎とするｈＧＤＦ１５結合部位を含有する。これらの抗体は、治療薬として使用することができる。治療薬として使用される場合、これらの抗体は、ヒト患者に投与されたときの免疫応答を低減または排除するために、改変、例えばヒト化されている。【選択図】なし【特許請求の範囲】
【請求項１】
明細書に記載の発明。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
関連出願の相互参照
本出願は、２０１３年５月２４日に出願された米国仮特許出願第６１／８２７，３２５号明細書および２０１２年１２月２１日に出願された米国仮特許出願第６１／７４５，５０８号明細書の利益および優先権を主張するものであり、これらのそれぞれの開示内容全体を参照により本明細書に援用するものとする。
【０００２】
本発明の分野は、分子生物学、免疫学、悪液質および悪液質様障害、ならびに腫瘍学である。より具体的には、本分野は治療抗体である。
【背景技術】
【０００３】
不随意性の体重減少は、悪液質、筋肉減少症、および飢餓を含む３つの一次病因に分類することができる。悪液質は、癌、ＡＩＤＳ、慢性心不全（うっ血性心不全としても知られている）、慢性閉塞性肺疾患（ＣＯＰＤ）、慢性腎疾患、結核、敗血症、および全身性炎症の他の形態を含む、数多くの疾患に関連した消耗性メタボリック症候群である。悪液質は、その症状が多様であるが、一般には、骨格筋量の不随意性の減少および基礎疾患の一部の形態を含む（Ｅｖａｎｓ  ｅｔ  ａｌ．（２００８）ＣＬＩＮ．ＮＵＴＲ．２７：７９３−７９９）。悪液質は、不随意性の体重減少を含む消耗性障害であり、全身性炎症および／または急性炎症反応と関連していることがある。Ｔｈｏｍａｓ（２００７）ＣＬＩＮ．ＮＵＴＲＩＴＩＯＮ  ２６：３８９−３９９。脂肪量および筋肉量などの除脂肪量の減少は、多くの場合、悪液質の顕著な臨床的特徴である。すべての場合ではないが多くの場合において、悪液質は、前悪液質、悪液質、および難治性悪液質と呼ばれる段階を通して進行する（Ｆｅａｒｏｎ  ｅｔ  ａｌ．（２０１１）ＬＡＮＣＥＴ  ＯＮＣ．１２：４８９−４９５）。オーバーラップすることもあるが、２つの異なる過程、すなわち、（ａ）筋肉に直接作用して、その量および機能を低下させる代謝過程；ならびに（ｂ）脂肪と筋肉の両方の減少をもたらす食物摂取の低下が、悪液質の発症および進行を促進するように見える（Ｔｓａｉ  ｅｔ  ａｌ．（２０１２）Ｊ．ＣＡＣＨＥＸＩＡ  ＳＡＲＣＯＰＥＮＩＡ  ＭＵＳＣＬＥ  ３：２３９−２４３）。
【０００４】
悪液質は複雑でかつ理解が不完全な症候群であるが、ＴＧＦβスーパーファミリーのメンバーであるＧＤＦ１５（ＭＩＣ−１、ＰＬＡＢ、ＰＤＦ、およびＮＡＧ−１としても知られている）が、種々の疾患における悪液質の重要なメディエーターであることが明らかになっている（Ｔｓａｉ  ｅｔ  ａｌ．前出）。少なくとも一部の腫瘍は、ＧＤＦ１５を過剰発現し、分泌しており、また血清ＧＤＦ１５レベルの上昇は、種々の癌と関連している（Ｊｏｈｎｅｎ  ｅｔ  ａｌ．（２００７）ＮＡＴ．ＭＥＤ．１３：１３３３−１３４０；Ｂａｕｓｋｉｎ  ｅｔ  ａｌ．（２００６）ＣＡＮＣＥＲ  ＲＥＳ．６６：４９８３−４９８６）。ＧＤＦ１５に対するモノクローナル抗体は、有望な抗悪液質治療剤として認識されている。例えば、米国特許第８，１９２，７３５号明細書を参照されたい。
【０００５】
悪液質に起因する体重減少は、種々の疾患において、予後不良と関連し（Ｅｖａｎｓ  ｅｔ  ａｌ．，前出）、悪液質およびその帰結は、癌死のうちの約２０％の直接的死因であると見なされている（Ｔｉｓｄａｌｅ（２００２）ＮＡＴ．ＲＥＶ．ＣＡＮＣＥＲ  ２：８６２−８７１）。悪液質が栄養療法により逆転することは稀であり、また現在、この症候群が薬物療法で治療されることもほとんどない（Ｅｖａｎｓ  ｅｔ  ａｌ．，前出）。
【０００６】
筋肉減少症は、骨格筋量および筋力の低下を特徴とする悪液質に関連した臨床症状である。筋肉量の減少は、強度の低下、転倒可能性の増大、および自律性の喪失を伴う機能障害をもたらし得る。呼吸機能も肺活量の減少と共に損なわれ得る。代謝ストレスの間に、免疫系、肝臓、および腸にアミノ酸、特にグルタミンを提供するために、筋タンパク質が迅速に動員される。筋肉減少症は、多くの場合、高齢者の疾患であるが、その発症は、筋肉廃用および栄養失調にも関連することがあり、悪液質と同時に起こり得る。筋肉減少症は、少ない筋肉重量および遅い歩行速度などの機能的な観察に基づいて診断することができる。例えば、Ｍｕｓｃａｒｉｔｏｌｉ  ｅｔ  ａｌ．（２０１０）ＣＬＩＮ．ＮＵＴＲＩＴＩＯＮ  ２９：１５４−１５９を参照されたい。
飢餓は、典型的には、不十分な食餌および／または栄養摂取による体脂肪量および除脂肪量の減少をもたらす（Ｔｈｏｍａｓ（２００７）前出）。飢餓の影響は、食餌および栄養の改善、例えばタンパク質の摂取によって逆転されることが多い。
天然抗体は、４本のポリペプチド鎖を含有する多量体タンパク質である（図１）。ポリペプチド鎖の内２本は重鎖（Ｈ鎖）と称され、ポリペプチド鎖の内２本は軽鎖（Ｌ鎖）と称される。免疫グロブリン重軽鎖は、鎖間ジスルフィド結合によって結合する。免疫グロブリン重鎖は、鎖間ジスルフィド結合によって結合する。軽鎖は、１つの可変領域（図中のＶＬ）と１つの定常領域（図１中のＣＬ）からなる。重鎖は、１つの可変領域（図１のＶＨ）と少なくとも３つの定常領域（図１のＣＨ１、ＣＨ２、およびＣＨ３）からなる。可変領域は、抗体特異性を左右する。各可変領域は、４つの比較的保存されたフレームワーク領域（ＦＲ）で挟まれた、相補性決定領域（ＣＤＲ）としても知られている３つの超可変領域を含む。ＣＤＲ１、ＣＤＲ２、およびＣＤＲ３と称される３つのＣＤＲは、抗体結合特異性に寄与する。天然抗体は、キメラ抗体およびヒト化抗体などの改変抗体のための出発原料として使用されている。
【先行技術文献】
【特許文献】
【０００７】
【特許文献１】米国特許第８，１９２，７３５号明細書
【非特許文献】
【０００８】
【非特許文献１】Ｅｖａｎｓ  ｅｔ  ａｌ．（２００８）ＣＬＩＮ．ＮＵＴＲ．２７：７９３−７９９
【非特許文献２】Ｔｈｏｍａｓ（２００７）ＣＬＩＮ．ＮＵＴＲＩＴＩＯＮ  ２６：３８９−３９９
【非特許文献３】Ｆｅａｒｏｎ  ｅｔ  ａｌ．（２０１１）ＬＡＮＣＥＴ  ＯＮＣ．１２：４８９−４９５
【非特許文献４】Ｔｓａｉ  ｅｔ  ａｌ．（２０１２）Ｊ．ＣＡＣＨＥＸＩＡ  ＳＡＲＣＯＰＥＮＩＡ  ＭＵＳＣＬＥ  ３：２３９−２４３
【非特許文献５】Ｊｏｈｎｅｎ  ｅｔ  ａｌ．（２００７）ＮＡＴ．ＭＥＤ．１３：１３３３−１３４０
【非特許文献６】Ｂａｕｓｋｉｎ  ｅｔ  ａｌ．（２００６）ＣＡＮＣＥＲ  ＲＥＳ．６６：４９８３−４９８６
【非特許文献７】Ｔｉｓｄａｌｅ（２００２）ＮＡＴ．ＲＥＶ．ＣＡＮＣＥＲ  ２：８６２−８７１
【非特許文献８】Ｍｕｓｃａｒｉｔｏｌｉ  ｅｔ  ａｌ．（２０１０）ＣＬＩＮ．ＮＵＴＲＩＴＩＯＮ  ２９：１５４−１５９
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００９】
ＧＤＦ１５を標的とするモノクローナル抗体を含む、悪液質および筋肉減少症を治療するための有効な治療薬に対する、未だ対処されていない顕著な必要性が存在する。このような治療薬は、種々の癌および他の生死にかかわる疾患の治療に重要な役割を果たす可能性がある。
【課題を解決するための手段】
【００１０】
本発明は、ヒトＧＤＦ１５（ｈＧＤＦ１５）に特異的に結合する抗体ファミリーの発見に、一部基づいている。これらの抗体は、抗体のＣＤＲを基礎とするｈＧＤＦ１５結合部位を含有する。これらの抗体は、治療薬として使用することができる。治療薬として使用される場合、これらの抗体は、ヒト患者に投与されたときの免疫応答を低減または排除するために、改変、例えばヒト化されている。
【００１１】
本開示の抗体は、ｈＧＤＦ１５の活性を防御または阻害する（すなわち、中和する）。哺乳動物に投与される場合、これらの抗体は、筋肉量減少、例えば基礎疾患に関連した筋肉量減少を抑制することができる。基礎疾患は、癌、慢性心不全、慢性腎疾患、ＣＯＰＤ、ＡＩＤＳ、多発性硬化症、関節リウマチ、敗血症、および結核からなる群から選択され得る。いくつかの実施形態では、筋肉量減少に脂肪量減少が伴い得る。本開示の抗体はまた、哺乳動物における不随意性の体重減少を抑制するために使用することができる。いくつかの実施形態では、本開示の抗体はまた、器官重量の減少を抑制するために使用することができる。さらに、本開示の抗体の少なくとも１つのうちの１つを有効量、それを必要とする哺乳動物に投与することを含む、哺乳動物において悪液質および／または筋肉減少症を治療する方法を開示する。
【００１２】
さらに、ｒｈＧＤＦ１５−免疫グロブリンＦｃ（Ｆｃ−ｒｈＧＤＦ１５）融合タンパク質を哺乳動物に投与することを含む、哺乳動物において血漿または血清中の成熟組換えヒトＧＤＦ１５（ｒｈＧＤＦ１５）の定常状態レベルを確立するための方法も開示する。Ｆｃ−ｒｈＧＤＦ１５は、マウスＦｃ成熟組換えヒトＧＤＦ１５（ｍＦｃ−ｒｈＧＤＦ１５）であってもよい。いくつかの実施形態では、哺乳動物は、げっ歯類、例えばマウスである。
【００１３】
別の態様では、治療的有効量のＦｃ−ｒｈＧＤＦ１５、例えばヒトＦｃ成熟組換えヒトＧＤＦ１５（ｈＦｃ−ｒｈＧＤＦ１５）を、それを必要とする哺乳動物に投与することを含む、哺乳動物、例えばヒトにおいて、肥満を治療する方法を開示する。Ｆｃ−ｒｈＧＤＦ１５融合タンパク質および薬学的に許容されるキャリアを含む医薬組成物も開示する。
【００１４】
本発明のこれらおよびその他の態様ならびに利点は、以下の図、詳細な説明、および特許請求の範囲の考察に基づいて明らかになる。本明細書の用法では、「含む（ｉｎｃｌｕｄｉｎｇ）」は、限定することを意図するものではなく、言及される例は非限定的である。本明細書の用法では、「抗体０１Ｇ０６、０３Ｇ０５、０４Ｆ０８、０６Ｃ１１、０８Ｇ０１、１４Ｆ１１、または１７Ｂ１１」は、抗体０１Ｇ０６、０３Ｇ０５、０４Ｆ０８、０６Ｃ１１、０８Ｇ０１、１４Ｆ１１、もしくは１７Ｂ１１、またはそれらのヒト化変異体を意味する。
特定の実施形態では、例えば以下が提供される：
（項目１）
（ａ）（ｉ）配列番号１および配列番号３８（Ｈｕ０１Ｇ０６  ＩＧＨＶ１−１８  Ｆ２）からなる群から選択されるアミノ酸配列を含むＣＤＲＨ１、配列番号２３７および配列番号２４１（Ｈｕ０１Ｇ０６  ＩＧＨＶ１−１８  Ｆ２）からなる群から選択されるアミノ酸配列を含むＣＤＲＨ２、および配列番号１５（Ｈｕ０１Ｇ０６  ＩＧＨＶ１−１８
Ｆ２）のアミノ酸配列を含むＣＤＲＨ３を含む免疫グロブリン重鎖可変領域と、
（ｉｉ）配列番号２１（Ｈｕ０１Ｇ０６  ＩＧＫＶ１−３９  Ｆ２）のアミノ酸配列を含むＣＤＲＬ１、配列番号２６（Ｈｕ０１Ｇ０６  ＩＧＫＶ１−３９  Ｆ２）のアミノ酸配列を含むＣＤＲＬ２、および配列番号２４４（Ｈｕ０１Ｇ０６  ＩＧＫＶ１−３９  Ｆ２）のアミノ酸配列を含むＣＤＲＬ３を含む免疫グロブリン軽鎖可変領域；
（ｂ）（ｉ）配列番号１および配列番号２３４（Ｈｕ０１Ｇ０６  ＩＧＨＶ１−６９  Ｆ１）からなる群から選択されるアミノ酸配列を含むＣＤＲＨ１、配列番号２３８および配列番号２４１（Ｈｕ０１Ｇ０６  ＩＧＨＶ１−６９  Ｆ１）からなる群から選択されるアミノ酸配列を含むＣＤＲＨ２、および配列番号１５（Ｈｕ０１Ｇ０６  ＩＧＨＶ１−６９  Ｆ１）のアミノ酸配列を含むＣＤＲＨ３を含む免疫グロブリン重鎖可変領域と、
（ｉｉ）配列番号２１（Ｈｕ０１Ｇ０６  ＩＧＫＶ１−３９  Ｆ１）のアミノ酸配列を含むＣＤＲＬ１、配列番号２６（Ｈｕ０１Ｇ０６  ＩＧＫＶ１−３９  Ｆ１）のアミノ酸配列を含むＣＤＲＬ２、および配列番号３２（Ｈｕ０１Ｇ０６  ＩＧＫＶ１−３９  Ｆ１）のアミノ酸配列を含むＣＤＲＬ３を含む免疫グロブリン軽鎖可変領域；
（ｃ）（ｉ）配列番号１（０１Ｇ０６、Ｃｈ０１Ｇ０６  Ｃｈｉｍｅｒｉｃ、Ｈｕ０１Ｇ０６  ＩＧＨＶ１−１８、Ｈｕ０１Ｇ０６  ＩＧＨＶ１−６９、Ｓｈ０１Ｇ０６  ＩＧＨＶ１−１８  Ｍ６９Ｌ、Ｓｈ０１Ｇ０６  ＩＧＨＶ１−６９  Ｔ３０Ｓ  Ｉ６９Ｌ）のアミノ酸配列を含むＣＤＲＨ１、配列番号７（０１Ｇ０６、Ｃｈ０１Ｇ０６  Ｃｈｉｍｅｒｉｃ、Ｈｕ０１Ｇ０６  ＩＧＨＶ１−１８、Ｈｕ０１Ｇ０６  ＩＧＨＶ１−６９、Ｓｈ０１Ｇ０６  ＩＧＨＶ１−１８  Ｍ６９Ｌ、Ｓｈ０１Ｇ０６  ＩＧＨＶ１−６９  Ｔ３０Ｓ  Ｉ６９Ｌ）のアミノ酸配列を含むＣＤＲＨ２、および配列番号１５（０１Ｇ０６、Ｃｈ０１Ｇ０６  Ｃｈｉｍｅｒｉｃ、Ｈｕ０１Ｇ０６  ＩＧＨＶ１−１８、Ｈｕ０１Ｇ０６
ＩＧＨＶ１−６９、Ｓｈ０１Ｇ０６  ＩＧＨＶ１−１８  Ｍ６９Ｌ、Ｓｈ０１Ｇ０６  ＩＧＨＶ１−６９Ｌ  Ｔ３０Ｓ  Ｉ６９Ｌ）のアミノ酸配列を含むＣＤＲＨ３を含む免疫グロブリン重鎖可変領域と、
（ｉｉ）配列番号２１（０１Ｇ０６、Ｃｈ０１Ｇ０６  Ｃｈｉｍｅｒｉｃ、Ｈｕ０１Ｇ０６  ＩＧＫＶ１−３９、Ｈｕ０１Ｇ０６  ＩＧＫＶ１−３９  Ｓ４３Ａ  Ｖ４８Ｉ、Ｈｕ０１Ｇ０６  ＩＧＫＶ１−３９  Ｖ４８Ｉ）のアミノ酸配列を含むＣＤＲＬ１、配列番号２６（０１Ｇ０６、Ｃｈ０１Ｇ０６  Ｃｈｉｍｅｒｉｃ、Ｈｕ０１Ｇ０６  ＩＧＫＶ１−３９、Ｈｕ０１Ｇ０６  ＩＧＫＶ１−３９  Ｓ４３Ａ  Ｖ４８Ｉ、Ｈｕ０１Ｇ０６  ＩＧＫＶ１−３９  Ｖ４８Ｉ）のアミノ酸配列を含むＣＤＲＬ２、および配列番号３２（０１Ｇ０６、Ｃｈ０１Ｇ０６  Ｃｈｉｍｅｒｉｃ、Ｈｕ０１Ｇ０６  ＩＧＫＶ１−３９、Ｈｕ０１Ｇ０６  ＩＧＫＶ１−３９  Ｓ４３Ａ  Ｖ４８Ｉ、Ｈｕ０１Ｇ０６  ＩＧＫＶ１−３９  Ｖ４８Ｉ）のアミノ酸配列を含むＣＤＲＬ３を含む免疫グロブリン軽鎖可変領域；
（ｄ）（ｉ）配列番号２（０３Ｇ０５）のアミノ酸配列を含むＣＤＲＨ１、配列番号８（０３Ｇ０５）のアミノ酸配列を含むＣＤＲＨ２、および配列番号１６（０３Ｇ０５）のアミノ酸配列を含むＣＤＲＨ３を含む免疫グロブリン重鎖可変領域と、
（ｉｉ）配列番号２２（０３Ｇ０５）のアミノ酸配列を含むＣＤＲＬ１、配列番号２７（０３Ｇ０５）のアミノ酸配列を含むＣＤＲＬ２、および配列番号３３（０３Ｇ０５）のアミノ酸配列を含むＣＤＲＬ３を含む免疫グロブリン軽鎖可変領域；
（ｅ）（ｉ）配列番号３（０４Ｆ０８）のアミノ酸配列を含むＣＤＲＨ１、配列番号９（０４Ｆ０８）のアミノ酸配列を含むＣＤＲＨ２、および配列番号１７（０４Ｆ０８）のアミノ酸配列を含むＣＤＲＨ３を含む免疫グロブリン重鎖可変領域と、
（ｉｉ）配列番号２３（０４Ｆ０８）のアミノ酸配列を含むＣＤＲＬ１、配列番号２８（０４Ｆ０８）のアミノ酸配列を含むＣＤＲＬ２、および配列番号３４（０４Ｆ０８）のアミノ酸配列を含むＣＤＲＬ３を含む免疫グロブリン軽鎖可変領域；
（ｆ）（ｉ）配列番号４（０６Ｃ１１、Ｃｈ０６Ｃ１１  Ｃｈｉｍｅｒｉｃ、Ｈｕ０６Ｃ１１  ＩＧＨＶ２−５）のアミノ酸配列を含むＣＤＲＨ１、配列番号９（０６Ｃ１１、Ｃｈ０６Ｃ１１  Ｃｈｉｍｅｒｉｃ、Ｈｕ０６Ｃ１１  ＩＧＨＶ２−５）のアミノ酸配列を含むＣＤＲＨ２、および配列番号１８（０６Ｃ１１、Ｃｈ０６Ｃ１１  Ｃｈｉｍｅｒｉｃ、Ｈｕ０６Ｃ１１  ＩＧＨＶ２−５）のアミノ酸配列を含むＣＤＲＨ３を含む免疫グロブリン重鎖可変領域と、
（ｉｉ）配列番号２３（０６Ｃ１１、Ｃｈ０６Ｃ１１  Ｃｈｉｍｅｒｉｃ、Ｓｈ０６Ｃ１１  ＩＧＫＶ１−１６）のアミノ酸配列を含むＣＤＲＬ１、配列番号２８（０６Ｃ１１、Ｃｈ０６Ｃ１１  Ｃｈｉｍｅｒｉｃ、Ｓｈ０６Ｃ１１  ＩＧＫＶ１−１６）のアミノ酸配列を含むＣＤＲＬ２、および配列番号３５（０６Ｃ１１、Ｃｈ０６Ｃ１１  Ｃｈｉｍｅｒｉｃ、Ｓｈ０６Ｃ１１  ＩＧＫＶ１−１６）のアミノ酸配列を含むＣＤＲＬ３を含む免疫グロブリン軽鎖可変領域；
（ｇ）（ｉ）配列番号１（０８Ｇ０１）のアミノ酸配列を含むＣＤＲＨ１、配列番号１０（０８Ｇ０１）のアミノ酸配列を含むＣＤＲＨ２、および配列番号１５（０８Ｇ０１）のアミノ酸配列を含むＣＤＲＨ３を含む免疫グロブリン重鎖可変領域と、
（ｉｉ）配列番号２４（０８Ｇ０１）のアミノ酸配列を含むＣＤＲＬ１、配列番号２９（０８Ｇ０１）のアミノ酸配列を含むＣＤＲＬ２、および配列番号３２（０８Ｇ０１）のアミノ酸配列を含むＣＤＲＬ３を含む免疫グロブリン軽鎖可変領域；
（ｈ）（ｉ）配列番号５（１４Ｆ１１、Ｃｈ１４Ｆ１１  Ｃｈｉｍｅｒｉｃ、Ｓｈ１４Ｆ１１  ＩＧＨＶ２−５、Ｓｈ１４Ｆ１１  ＩＧＨＶ２−７０）のアミノ酸配列を含むＣＤＲＨ１、配列番号１１（１４Ｆ１１、Ｃｈ１４Ｆ１１  Ｃｈｉｍｅｒｉｃ、Ｓｈ１４Ｆ１１  ＩＧＨＶ２−５、Ｓｈ１４Ｆ１１  ＩＧＨＶ２−７０）のアミノ酸配列を含むＣＤＲＨ２、および配列番号１９（１４Ｆ１１、Ｃｈ１４Ｆ１１  Ｃｈｉｍｅｒｉｃ、Ｓｈ１４Ｆ１１  ＩＧＨＶ２−５、Ｓｈ１４Ｆ１１  ＩＧＨＶ２−７０）のアミノ酸配列を含むＣＤＲＨ３を含む免疫グロブリン重鎖可変領域と、
（ｉｉ）配列番号２３（１４Ｆ１１、Ｃｈ１４Ｆ１１  Ｃｈｉｍｅｒｉｃ、Ｈｕ１４Ｆ１１  ＩＧＫＶ１−１６）のアミノ酸配列を含むＣＤＲＬ１、配列番号３０（１４Ｆ１１、Ｃｈ１４Ｆ１１  Ｃｈｉｍｅｒｉｃ、Ｈｕ１４Ｆ１１  ＩＧＫＶ１−１６）のアミノ酸配列を含むＣＤＲＬ２、および配列番号３６（１４Ｆ１１、Ｃｈ１４Ｆ１１  Ｃｈｉｍｅｒｉｃ、Ｈｕ１４Ｆ１１  ＩＧＫＶ１−１６）のアミノ酸配列を含むＣＤＲＬ３を含む免疫グロブリン軽鎖可変領域；
（ｉ）（ｉ）配列番号６（１７Ｂ１１）のアミノ酸配列を含むＣＤＲＨ１、配列番号１２（１７Ｂ１１）のアミノ酸配列を含むＣＤＲＨ２、および配列番号２０（１７Ｂ１１）のアミノ酸配列を含むＣＤＲＨ３を含む免疫グロブリン重鎖可変領域と、
（ｉｉ）配列番号２５（１７Ｂ１１）のアミノ酸配列を含むＣＤＲＬ１、配列番号３１（１７Ｂ１１）のアミノ酸配列を含むＣＤＲＬ２、および配列番号３７（１７Ｂ１１）のアミノ酸配列を含むＣＤＲＬ３を含む免疫グロブリン軽鎖可変領域；
（ｊ）（ｉ）配列番号１（Ｓｈ０１Ｇ０６  ＩＧＨＶ１−１８  Ｍ６９Ｌ  Ｋ６４Ｑ  Ｇ４４Ｓ、Ｓｈ０１Ｇ０６  ＩＧＨＶ１−１８  Ｍ６９Ｌ  Ｋ６４Ｑ、Ｓｈ０１Ｇ０６  ＩＧＨＶ１−６９  Ｔ３０Ｓ  Ｋ６４Ｑ  Ｉ６９Ｌ）のアミノ酸配列を含むＣＤＲＨ１、配列番号１３（Ｓｈ０１Ｇ０６  ＩＧＨＶ１−１８  Ｍ６９Ｌ  Ｋ６４Ｑ  Ｇ４４Ｓ、Ｓｈ０１Ｇ０６  ＩＧＨＶ１−１８  Ｍ６９Ｌ  Ｋ６４Ｑ、Ｓｈ０１Ｇ０６  ＩＧＨＶ１−６９  Ｔ３０Ｓ  Ｋ６４Ｑ  Ｉ６９Ｌ）のアミノ酸配列を含むＣＤＲＨ２、および配列番号１５（Ｓｈ０１Ｇ０６  ＩＧＨＶ１−１８  Ｍ６９Ｌ  Ｋ６４Ｑ  Ｇ４４Ｓ、Ｓｈ０１Ｇ０６  ＩＧＨＶ１−１８  Ｍ６９Ｌ  Ｋ６４Ｑ（Ｓｈ０１Ｇ０６  ＩＧＨＶ１−６９  Ｔ３０Ｓ  Ｋ６４Ｑ  Ｉ６９Ｌ）のアミノ酸配列を含むＣＤＲＨ３を含む免疫グロブリン重鎖可変領域と、
（ｉｉ）配列番号２１（０１Ｇ０６、Ｃｈ０１Ｇ０６  Ｃｈｉｍｅｒｉｃ、Ｈｕ０１Ｇ０６  ＩＧＫＶ１−３９、Ｈｕ０１Ｇ０６  ＩＧＫＶ１−３９  Ｓ４３Ａ  Ｖ４８Ｉ、Ｈｕ０１Ｇ０６  ＩＧＫＶ１−３９  Ｖ４８Ｉ）のアミノ酸配列を含むＣＤＲＬ１、配列番号２６（０１Ｇ０６、Ｃｈ０１Ｇ０６  Ｃｈｉｍｅｒｉｃ、Ｈｕ０１Ｇ０６  ＩＧＫＶ１−３９、Ｈｕ０１Ｇ０６  ＩＧＫＶ１−３９  Ｓ４３Ａ  Ｖ４８Ｉ、Ｈｕ０１Ｇ０６  ＩＧＫＶ１−３９  Ｖ４８Ｉ）のアミノ酸配列を含むＣＤＲＬ２、および配列番号３２（０１Ｇ０６、Ｃｈ０１Ｇ０６  Ｃｈｉｍｅｒｉｃ、Ｈｕ０１Ｇ０６  ＩＧＫＶ１−３９、Ｈｕ０１Ｇ０６  ＩＧＫＶ１−３９  Ｓ４３Ａ  Ｖ４８Ｉ、Ｈｕ０１Ｇ０６  ＩＧＫＶ１−３９  Ｖ４８Ｉ）のアミノ酸配列を含むＣＤＲＬ３を含む免疫グロブリン軽鎖可変領域；
（ｋ）（ｉ）配列番号１および配列番号３８（Ｈｕ０１Ｇ０６  ＩＧＨＶ１−１８  Ｆ１）からなる群から選択されるアミノ酸配列を含むＣＤＲＨ１、配列番号２３６および配列番号２４０（Ｈｕ０１Ｇ０６  ＩＧＨＶ１−１８  Ｆ１）からなる群から選択されるアミノ酸配列を含むＣＤＲＨ２、および配列番号１５（Ｈｕ０１Ｇ０６  ＩＧＨＶ１−１８
Ｆ１）のアミノ酸配列を含むＣＤＲＨ３を含む免疫グロブリン重鎖可変領域と、
（ｉｉ）配列番号２１（Ｈｕ０１Ｇ０６  ＩＧＫＶ１−３９  Ｆ１）のアミノ酸配列を含むＣＤＲＬ１、配列番号２６（Ｈｕ０１Ｇ０６  ＩＧＫＶ１−３９  Ｆ１）のアミノ酸配列を含むＣＤＲＬ２、および配列番号３２（Ｈｕ０１Ｇ０６  ＩＧＫＶ１−３９  Ｆ１）のアミノ酸配列を含むＣＤＲＬ３を含む免疫グロブリン軽鎖可変領域；
（ｌ）（ｉ）配列番号１および配列番号２３４（Ｈｕ０１Ｇ０６  ＩＧＨＶ１−６９  Ｆ２）からなる群から選択されるアミノ酸配列を含むＣＤＲＨ１、配列番号２３９および配列番号２４０（Ｈｕ０１Ｇ０６  ＩＧＨＶ１−６９  Ｆ２）からなる群から選択されるアミノ酸配列を含むＣＤＲＨ２、および配列番号１５（Ｈｕ０１Ｇ０６  ＩＧＨＶ１−６９  Ｆ２）のアミノ酸配列を含むＣＤＲＨ３を含む免疫グロブリン重鎖可変領域と、
（ｉｉ）配列番号２１（Ｈｕ０１Ｇ０６  ＩＧＫＶ１−３９  Ｆ１）のアミノ酸配列を含むＣＤＲＬ１、配列番号２６（Ｈｕ０１Ｇ０６  ＩＧＫＶ１−３９  Ｆ１）のアミノ酸配列を含むＣＤＲＬ２、および配列番号３２（Ｈｕ０１Ｇ０６  ＩＧＫＶ１−３９  Ｆ１）のアミノ酸配列を含むＣＤＲＬ３を含む免疫グロブリン軽鎖可変領域；
（ｍ）（ｉ）配列番号１および配列番号２３４（Ｈｕ０１Ｇ０６  ＩＧＨＶ１−６９  Ｆ２）からなる群から選択されるアミノ酸配列を含むＣＤＲＨ１、配列番号２３９および配列番号２４０（Ｈｕ０１Ｇ０６  ＩＧＨＶ１−６９  Ｆ２）からなる群から選択されるアミノ酸配列を含むＣＤＲＨ２、および配列番号１５（Ｈｕ０１Ｇ０６  ＩＧＨＶ１−６９  Ｆ２）のアミノ酸配列を含むＣＤＲＨ３を含む免疫グロブリン重鎖可変領域と、
（ｉｉ）配列番号２１（Ｈｕ０１Ｇ０６  ＩＧＫＶ１−３９  Ｆ２）のアミノ酸配列を含むＣＤＲＬ１、配列番号２６（Ｈｕ０１Ｇ０６  ＩＧＫＶ１−３９  Ｆ２）のアミノ酸配列を含むＣＤＲＬ２、および配列番号２４４（Ｈｕ０１Ｇ０６  ＩＧＫＶ１−３９  Ｆ２）のアミノ酸配列を含むＣＤＲＬ３を含む免疫グロブリン軽鎖可変領域；
（ｎ）（ｉ）配列番号４（ＨＥ  ＬＭ  ０６Ｃ１１  ＩＧＨＶ２−７０）のアミノ酸配列を含むＣＤＲＨ１、配列番号１４（ＨＥ  ＬＭ  ０６Ｃ１１  ＩＧＨＶ２−７０）のアミノ酸配列を含むＣＤＲＨ２、および配列番号１８（ＨＥ  ＬＭ  ０６Ｃ１１  ＩＧＨＶ２−７０）のアミノ酸配列を含むＣＤＲＨ３を含む免疫グロブリン重鎖可変領域と、
（ｉｉ）配列番号２３（Ｃｈ０６Ｃ１１  Ｃｈｉｍｅｒｉｃ、Ｓｈ０６Ｃ１１  ＩＧＫＶ１−１６）のアミノ酸配列を含むＣＤＲＬ１、配列番号２８（Ｃｈ０６Ｃ１１  Ｃｈｉｍｅｒｉｃ、Ｓｈ０６Ｃ１１  ＩＧＫＶ１−１６）のアミノ酸配列を含むＣＤＲＬ２、および配列番号３５（Ｃｈ０６Ｃ１１  Ｃｈｉｍｅｒｉｃ、Ｓｈ０６Ｃ１１  ＩＧＫＶ１−１６）のアミノ酸配列を含むＣＤＲＬ３を含む免疫グロブリン軽鎖可変領域；
（ｏ）（ｉ）配列番号４（Ｃｈ０６Ｃ１１  Ｃｈｉｍｅｒｉｃ）のアミノ酸配列を含むＣＤＲＨ１、配列番号９（Ｃｈ０６Ｃ１１  Ｃｈｉｍｅｒｉｃ）のアミノ酸配列を含むＣＤＲＨ２、および配列番号１８（Ｃｈ０６Ｃ１１  Ｃｈｉｍｅｒｉｃ）のアミノ酸配列を含むＣＤＲＨ３を含む免疫グロブリン重鎖可変領域と、
（ｉｉ）配列番号２３（Ｃｈ１４Ｆ１１  Ｃｈｉｍｅｒｉｃ）のアミノ酸配列を含むＣＤＲＬ１、配列番号３０（Ｃｈ１４Ｆ１１  Ｃｈｉｍｅｒｉｃ）のアミノ酸配列を含むＣＤＲＬ２、および配列番号３６（Ｃｈ１４Ｆ１１  Ｃｈｉｍｅｒｉｃ）のアミノ酸配列を含むＣＤＲＬ３を含む免疫グロブリン軽鎖可変領域；ならびに
（ｐ）（ｉ）配列番号５（Ｃｈ１４Ｆ１１  Ｃｈｉｍｅｒｉｃ）のアミノ酸配列を含むＣＤＲＨ１、配列番号１１（Ｃｈ１４Ｆ１１  Ｃｈｉｍｅｒｉｃ）のアミノ酸配列を含むＣＤＲＨ２、および配列番号１９（Ｃｈ１４Ｆ１１  Ｃｈｉｍｅｒｉｃ）のアミノ酸配列を含むＣＤＲＨ３を含む免疫グロブリン重鎖可変領域と、
（ｉｉ）配列番号２３（Ｃｈ０６Ｃ１１  Ｃｈｉｍｅｒｉｃ）のアミノ酸配列を含むＣＤＲＬ１、配列番号２８（Ｃｈ０６Ｃ１１  Ｃｈｉｍｅｒｉｃ）のアミノ酸配列を含むＣＤＲＬ２、および配列番号３５（Ｃｈ０６Ｃ１１  Ｃｈｉｍｅｒｉｃ）のアミノ酸配列を含むＣＤＲＬ３を含む免疫グロブリン軽鎖可変領域
からなる群から選択される免疫グロブリン重鎖可変領域と免疫グロブリン軽鎖可変領域とを含む、ヒトＧＤＦ１５に結合する単離抗体。
（項目２）
前記ＣＤＲ配列が、ヒトまたはヒト化フレームワーク配列の間に挿入される、項目１に記載の抗体。
（項目３）
項目１に記載の免疫グロブリン重鎖可変領域をコードするヌクレオチド配列を含む単離核酸。
（項目４）
項目１に記載の免疫グロブリン軽鎖可変領域をコードするヌクレオチド配列を含む単離核酸。
（項目５）
項目３に記載の核酸を含む発現ベクター。
（項目６）
項目４に記載の核酸を含む発現ベクター。
（項目７）
項目３に記載の核酸をさらに含む、項目６に記載の発現ベクター。
（項目８）
項目５に記載の発現ベクターを含む宿主細胞。
（項目９）
項目６に記載の発現ベクターを含む宿主細胞。
（項目１０）
項目７に記載の発現ベクターを含む宿主細胞。
（項目１１）
項目５に記載の発現ベクターをさらに含む、項目９に記載の宿主細胞。
（項目１２）
（ａ）宿主細胞が免疫グロブリン重鎖可変領域または免疫グロブリン軽鎖可変領域を含むポリペプチドを発現する条件下で、項目８または９に記載の宿主細胞を培養するステップと；
（ｂ）前記免疫グロブリン重鎖可変領域または免疫グロブリン軽鎖可変領域を含むポリペプチドを精製するステップ
を含む、免疫グロブリン重鎖可変領域または免疫グロブリン軽鎖可変領域を含むポリペプチドを生成する方法。
（項目１３）
（ａ）宿主細胞が免疫グロブリン重鎖可変領域および／または免疫グロブリン軽鎖可変領域を含む１つまたは複数のポリペプチドを発現する条件下で、項目１０または１１に記載の宿主細胞を培養し、それによって抗体または抗体の抗原結合性断片を生成するステップと；
（ｂ）前記抗体または前記抗体の抗原結合性断片を精製するステップ
を含む、ヒトＧＤＦ１５に結合する抗体または抗体の抗原結合性断片を生成する方法。
（項目１４）
（ａ）配列番号２４８（Ｈｕ０１Ｇ０６  ＩＧＨＶ１−１８  Ｆ２）のアミノ酸配列を含む免疫グロブリン重鎖可変領域と、配列番号２５４（Ｈｕ０１Ｇ０６  ＩＧＫＶ１−３９  Ｆ２）のアミノ酸配列を含む免疫グロブリン軽鎖可変領域；
（ｂ）配列番号２５０（Ｈｕ０１Ｇ０６  ＩＧＨＶ１−６９  Ｆ１）のアミノ酸配列を含む免疫グロブリン重鎖可変領域と、配列番号９２（Ｈｕ０１Ｇ０６  ＩＧＫＶ１−３９
Ｆ１）のアミノ酸配列を含む免疫グロブリン軽鎖可変領域；
（ｃ）配列番号４０（０１Ｇ０６、Ｃｈ０１Ｇ０６  Ｃｈｉｍｅｒｉｃ））のアミノ酸配列を含む免疫グロブリン重鎖可変領域と、配列番号７６（０１Ｇ０６（Ｃｈ０１Ｇ０６
Ｃｈｉｍｅｒｉｃ）のアミノ酸配列を含む免疫グロブリン軽鎖可変領域；
（ｄ）配列番号４２（０３Ｇ０５）のアミノ酸配列を含む免疫グロブリン重鎖可変領域と、配列番号７８（０３Ｇ０５）のアミノ酸配列を含む免疫グロブリン軽鎖可変領域；
（ｅ）配列番号４４（０４Ｆ０８）のアミノ酸配列を含む免疫グロブリン重鎖可変領域と、配列番号８０（０４Ｆ０８）のアミノ酸配列を含む免疫グロブリン軽鎖可変領域；
（ｆ）配列番号４６（０６Ｃ１１）のアミノ酸配列を含む免疫グロブリン重鎖可変領域と、配列番号８２（０６Ｃ１１）のアミノ酸配列を含む免疫グロブリン軽鎖可変領域；
（ｇ）配列番号４８（０８Ｇ０１）のアミノ酸配列を含む免疫グロブリン重鎖可変領域と、配列番号８４（０８Ｇ０１）のアミノ酸配列を含む免疫グロブリン軽鎖可変領域；
（ｈ）配列番号５０（１４Ｆ１１）のアミノ酸配列を含む免疫グロブリン重鎖可変領域と、配列番号８６（１４Ｆ１１）のアミノ酸配列を含む免疫グロブリン軽鎖可変領域；
（ｉ）配列番号５２（１７Ｂ１１）のアミノ酸配列を含む免疫グロブリン重鎖可変領域と、配列番号８８（１７Ｂ１１）のアミノ酸配列を含む免疫グロブリン軽鎖可変領域；
（ｊ）配列番号５４（Ｈｕ０１Ｇ０６  ＩＧＨＶ１−１８）のアミノ酸配列を含む免疫グロブリン重鎖可変領域と、配列番号７６（Ｃｈ０１Ｇ０６  Ｃｈｉｍｅｒｉｃ）のアミノ酸配列を含む免疫グロブリン軽鎖可変領域；
（ｋ）配列番号５６（Ｈｕ０１Ｇ０６  ＩＧＨＶ１−６９）のアミノ酸配列を含む免疫グロブリン重鎖可変領域と、配列番号７６（Ｃｈ０１Ｇ０６  Ｃｈｉｍｅｒｉｃ）のアミノ酸配列を含む免疫グロブリン軽鎖可変領域；
（ｌ）配列番号５８（Ｓｈ０１Ｇ０６  ＩＧＨＶ１−１８  Ｍ６９Ｌ）のアミノ酸配列を含む免疫グロブリン重鎖可変領域と、配列番号７６（Ｃｈ０１Ｇ０６  Ｃｈｉｍｅｒｉｃ）のアミノ酸配列を含む免疫グロブリン軽鎖可変領域；
（ｍ）配列番号６０（Ｓｈ０１Ｇ０６  ＩＧＨＶ１−１８  Ｍ６９Ｌ  Ｋ６４Ｑ  Ｇ４４Ｓ）のアミノ酸配列を含む免疫グロブリン重鎖可変領域と、配列番号７６（Ｃｈ０１Ｇ０６  Ｃｈｉｍｅｒｉｃ）のアミノ酸配列を含む免疫グロブリン軽鎖可変領域；
（ｎ）配列番号６２（Ｓｈ０１Ｇ０６  ＩＧＨＶ１−１８  Ｍ６９Ｌ  Ｋ６４Ｑ）のアミノ酸配列を含む免疫グロブリン重鎖可変領域と、配列番号７６（Ｃｈ０１Ｇ０６  Ｃｈｉｍｅｒｉｃ）のアミノ酸配列を含む免疫グロブリン軽鎖可変領域；
（ｏ）配列番号６４（Ｓｈ０１Ｇ０６  ＩＧＨＶ１−６９  Ｔ３０Ｓ  Ｉ６９Ｌ）のアミノ酸配列を含む免疫グロブリン重鎖可変領域と、配列番号７６（Ｃｈ０１Ｇ０６  Ｃｈｉｍｅｒｉｃ）のアミノ酸配列を含む免疫グロブリン軽鎖可変領域；
（ｐ）配列番号６６（Ｓｈ０１Ｇ０６  ＩＧＨＶ１−６９  Ｔ３０Ｓ  Ｋ６４Ｑ  Ｉ６９Ｌ）のアミノ酸配列を含む免疫グロブリン重鎖可変領域と、配列番号７６（Ｃｈ０１Ｇ０６  Ｃｈｉｍｅｒｉｃ）のアミノ酸配列を含む免疫グロブリン軽鎖可変領域；
（ｑ）配列番号４０（Ｃｈ０１Ｇ０６  Ｃｈｉｍｅｒｉｃ）のアミノ酸配列を含む免疫グロブリン重鎖可変領域と、配列番号９０（Ｈｕ０１Ｇ０６  ＩＧＫＶ１−３９）のアミノ酸配列を含む免疫グロブリン軽鎖可変領域；
（ｒ）配列番号５４（Ｈｕ０１Ｇ０６  ＩＧＨＶ１−１８）のアミノ酸配列を含む免疫グロブリン重鎖可変領域と、配列番号９０（Ｈｕ０１Ｇ０６  ＩＧＫＶ１−３９）のアミノ酸配列を含む免疫グロブリン軽鎖可変領域；
（ｓ）配列番号５６（Ｈｕ０１Ｇ０６  ＩＧＨＶ１−６９）のアミノ酸配列を含む免疫グロブリン重鎖可変領域と、配列番号９０（Ｈｕ０１Ｇ０６  ＩＧＫＶ１−３９）のアミノ酸配列を含む免疫グロブリン軽鎖可変領域；
（ｔ）配列番号５８（Ｓｈ０１Ｇ０６  ＩＧＨＶ１−１８  Ｍ６９Ｌ）のアミノ酸配列を含む免疫グロブリン重鎖可変領域と、配列番号９０（Ｈｕ０１Ｇ０６  ＩＧＫＶ１−３９）のアミノ酸配列を含む免疫グロブリン軽鎖可変領域；
（ｕ）配列番号６０（Ｓｈ０１Ｇ０６  ＩＧＨＶ１−１８  Ｍ６９Ｌ  Ｋ６４Ｑ  Ｇ４４Ｓ）のアミノ酸配列を含む免疫グロブリン重鎖可変領域と、配列番号９０（Ｈｕ０１Ｇ０６  ＩＧＫＶ１−３９）のアミノ酸配列を含む免疫グロブリン軽鎖可変領域；
（ｖ）配列番号６２（Ｓｈ０１Ｇ０６  ＩＧＨＶ１−１８  Ｍ６９Ｌ  Ｋ６４Ｑ）のアミノ酸配列を含む免疫グロブリン重鎖可変領域と、配列番号９０（Ｈｕ０１Ｇ０６  ＩＧＫＶ１−３９）のアミノ酸配列を含む免疫グロブリン軽鎖可変領域；
（ｗ）配列番号６４（Ｓｈ０１Ｇ０６  ＩＧＨＶ１−６９  Ｔ３０Ｓ  Ｉ６９Ｌ）のアミノ酸配列を含む免疫グロブリン重鎖可変領域と、配列番号９０（Ｈｕ０１Ｇ０６  ＩＧＫＶ１−３９）のアミノ酸配列を含む免疫グロブリン軽鎖可変領域；
（ｘ）配列番号６６（Ｓｈ０１Ｇ０６  ＩＧＨＶ１−６９  Ｔ３０Ｓ  Ｋ６４Ｑ  Ｉ６９Ｌ）のアミノ酸配列を含む免疫グロブリン重鎖可変領域と、配列番号９０（Ｈｕ０１Ｇ０６  ＩＧＫＶ１−３９）のアミノ酸配列を含む免疫グロブリン軽鎖可変領域；
（ｙ）配列番号４０（Ｃｈ０１Ｇ０６  Ｃｈｉｍｅｒｉｃ）のアミノ酸配列を含む免疫グロブリン重鎖可変領域と、配列番号９２（Ｈｕ０１Ｇ０６  ＩＧＫＶ１−３９  Ｓ４３Ａ  Ｖ４８Ｉ）のアミノ酸配列を含む免疫グロブリン軽鎖可変領域；
（ｚ）配列番号５４（Ｈｕ０１Ｇ０６  ＩＧＨＶ１−１８）のアミノ酸配列を含む免疫グロブリン重鎖可変領域と、配列番号９２（Ｈｕ０１Ｇ０６  ＩＧＫＶ１−３９  Ｓ４３Ａ  Ｖ４８Ｉ）のアミノ酸配列を含む免疫グロブリン軽鎖可変領域；
（ａａ）配列番号５６（Ｈｕ０１Ｇ０６  ＩＧＨＶ１−６９）のアミノ酸配列を含む免疫グロブリン重鎖可変領域と、配列番号９２（Ｈｕ０１Ｇ０６  ＩＧＫＶ１−３９  Ｓ４３Ａ  Ｖ４８Ｉ）のアミノ酸配列を含む免疫グロブリン軽鎖可変領域；
（ｂｂ）配列番号５８（Ｓｈ０１Ｇ０６  ＩＧＨＶ１−１８  Ｍ６９Ｌ）のアミノ酸配列を含む免疫グロブリン重鎖可変領域と、配列番号９２（Ｈｕ０１Ｇ０６  ＩＧＫＶ１−３９  Ｓ４３Ａ  Ｖ４８Ｉ）のアミノ酸配列を含む免疫グロブリン軽鎖可変領域；
（ｃｃ）配列番号６０（Ｓｈ０１Ｇ０６  ＩＧＨＶ１−１８  Ｍ６９Ｌ  Ｋ６４Ｑ  Ｇ４４Ｓ）のアミノ酸配列を含む免疫グロブリン重鎖可変領域と、配列番号９２（Ｈｕ０１Ｇ０６  ＩＧＫＶ１−３９  Ｓ４３Ａ  Ｖ４８Ｉ）のアミノ酸配列を含む免疫グロブリン軽鎖可変領域；
（ｄｄ）配列番号６２（Ｓｈ０１Ｇ０６  ＩＧＨＶ１−１８  Ｍ６９Ｌ  Ｋ６４Ｑ）のアミノ酸配列を含む免疫グロブリン重鎖可変領域と、配列番号９２（Ｈｕ０１Ｇ０６  ＩＧＫＶ１−３９  Ｓ４３Ａ  Ｖ４８Ｉ）のアミノ酸配列を含む免疫グロブリン軽鎖可変領域；
（ｅｅ）配列番号６４（Ｓｈ０１Ｇ０６  ＩＧＨＶ１−６９  Ｔ３０Ｓ  Ｉ６９Ｌ）のアミノ酸配列を含む免疫グロブリン重鎖可変領域と、配列番号９２（Ｈｕ０１Ｇ０６  ＩＧＫＶ１−３９  Ｓ４３Ａ  Ｖ４８Ｉ）のアミノ酸配列を含む免疫グロブリン軽鎖可変領域；
（ｆｆ）配列番号６６（Ｓｈ０１Ｇ０６  ＩＧＨＶ１−６９  Ｔ３０Ｓ  Ｋ６４Ｑ  Ｉ６９Ｌ）のアミノ酸配列を含む免疫グロブリン重鎖可変領域と、配列番号９２（Ｈｕ０１Ｇ０６  ＩＧＫＶ１−３９  Ｓ４３Ａ  Ｖ４８Ｉ）のアミノ酸配列を含む免疫グロブリン軽鎖可変領域；
（ｇｇ）配列番号４０（Ｃｈ０１Ｇ０６  Ｃｈｉｍｅｒｉｃ）のアミノ酸配列を含む免疫グロブリン重鎖可変領域と、配列番号９４（Ｈｕ０１Ｇ０６  ＩＧＫＶ１−３９  Ｖ４８Ｉ）のアミノ酸配列を含む免疫グロブリン軽鎖可変領域；
（ｈｈ）配列番号５４（Ｈｕ０１Ｇ０６  ＩＧＨＶ１−１８）のアミノ酸配列を含む免疫グロブリン重鎖可変領域と、配列番号９４（Ｈｕ０１Ｇ０６  ＩＧＫＶ１−３９  Ｖ４８Ｉ）のアミノ酸配列を含む免疫グロブリン軽鎖可変領域；
（ｉｉ）配列番号５６（Ｈｕ０１Ｇ０６  ＩＧＨＶ１−６９）のアミノ酸配列を含む免疫グロブリン重鎖可変領域と、配列番号９４（Ｈｕ０１Ｇ０６  ＩＧＫＶ１−３９  Ｖ４８Ｉ）のアミノ酸配列を含む免疫グロブリン軽鎖可変領域；
（ｊｊ）配列番号５８（Ｓｈ０１Ｇ０６  ＩＧＨＶ１−１８  Ｍ６９Ｌ）のアミノ酸配列を含む免疫グロブリン重鎖可変領域と、配列番号９４（Ｈｕ０１Ｇ０６  ＩＧＫＶ１−３９  Ｖ４８Ｉ）のアミノ酸配列を含む免疫グロブリン軽鎖可変領域；
（ｋｋ）配列番号６０（Ｓｈ０１Ｇ０６  ＩＧＨＶ１−１８  Ｍ６９Ｌ  Ｋ６４Ｑ  Ｇ４４Ｓ）のアミノ酸配列を含む免疫グロブリン重鎖可変領域と、配列番号９４（Ｈｕ０１Ｇ０６  ＩＧＫＶ１−３９  Ｖ４８Ｉ）のアミノ酸配列を含む免疫グロブリン軽鎖可変領域；
（ｌｌ）配列番号６２（Ｓｈ０１Ｇ０６  ＩＧＨＶ１−１８  Ｍ６９Ｌ  Ｋ６４Ｑ）のアミノ酸配列を含む免疫グロブリン重鎖可変領域と、配列番号９４（Ｈｕ０１Ｇ０６  ＩＧＫＶ１−３９  Ｖ４８Ｉ）のアミノ酸配列を含む免疫グロブリン軽鎖可変領域；
（ｍｍ）配列番号６４（Ｓｈ０１Ｇ０６  ＩＧＨＶ１−６９  Ｔ３０Ｓ  Ｉ６９Ｌ）のアミノ酸配列を含む免疫グロブリン重鎖可変領域と、配列番号９４（Ｈｕ０１Ｇ０６  ＩＧＫＶ１−３９  Ｖ４８Ｉ）のアミノ酸配列を含む免疫グロブリン軽鎖可変領域；
（ｎｎ）配列番号６６（Ｓｈ０１Ｇ０６  ＩＧＨＶ１−６９  Ｔ３０Ｓ  Ｋ６４Ｑ  Ｉ６９Ｌ）のアミノ酸配列を含む免疫グロブリン重鎖可変領域と、配列番号９４（Ｈｕ０１Ｇ０６  ＩＧＫＶ１−３９  Ｖ４８Ｉ）のアミノ酸配列を含む免疫グロブリン軽鎖可変領域；
（ｏｏ）配列番号２４６（Ｈｕ０１Ｇ０６  ＩＧＨＶ１−１８  Ｆ１）のアミノ酸配列を含む免疫グロブリン重鎖可変領域と、配列番号９２（Ｈｕ０１Ｇ０６  ＩＧＫＶ１−３９  Ｆ１）のアミノ酸配列を含む免疫グロブリン軽鎖可変領域；
（ｐｐ）配列番号２５２（Ｈｕ０１Ｇ０６  ＩＧＨＶ１−６９  Ｆ２）のアミノ酸配列を含む免疫グロブリン重鎖可変領域と、配列番号９２（Ｈｕ０１Ｇ０６  ＩＧＫＶ１−３９  Ｆ１）のアミノ酸配列を含む免疫グロブリン軽鎖可変領域；
（ｑｑ）配列番号２５２（Ｈｕ０１Ｇ０６  ＩＧＨＶ１−６９  Ｆ２）のアミノ酸配列を含む免疫グロブリン重鎖可変領域と、配列番号２５４（Ｈｕ０１Ｇ０６  ＩＧＫＶ１−３９  Ｆ２）のアミノ酸配列を含む免疫グロブリン軽鎖可変領域；
（ｒｒ）配列番号６８（ＨＥ  ＬＭ  ０６Ｃ１１  ＩＧＨＶ２−７０）のアミノ酸配列を含む免疫グロブリン重鎖可変領域と、配列番号８２（Ｃｈ０６Ｃ１１  Ｃｈｉｍｅｒｉｃ）のアミノ酸配列を含む免疫グロブリン軽鎖可変領域；
（ｓｓ）配列番号７０（Ｈｕ０６Ｃ１１  ＩＧＨＶ２−５）のアミノ酸配列を含む免疫グロブリン重鎖可変領域と、配列番号８２（Ｃｈ０６Ｃ１１  Ｃｈｉｍｅｒｉｃ）のアミノ酸配列を含む免疫グロブリン軽鎖可変領域；
（ｔｔ）配列番号４６（Ｃｈ０６Ｃ１１  Ｃｈｉｍｅｒｉｃ）のアミノ酸配列を含む免疫グロブリン重鎖可変領域と、配列番号９６（Ｓｈ０６Ｃ１１  ＩＧＫＶ１−１６）のアミノ酸配列を含む免疫グロブリン軽鎖可変領域；
（ｕｕ）配列番号６８（ＨＥ  ＬＭ  ０６Ｃ１１  ＩＧＨＶ２−７０）のアミノ酸配列を含む免疫グロブリン重鎖可変領域と、配列番号９６（Ｓｈ０６Ｃ１１  ＩＧＫＶ１−１６）のアミノ酸配列を含む免疫グロブリン軽鎖可変領域；
（ｖｖ）配列番号７０（Ｈｕ０６Ｃ１１  ＩＧＨＶ２−５）のアミノ酸配列を含む免疫グロブリン重鎖可変領域と、配列番号９６（Ｓｈ０６Ｃ１１  ＩＧＫＶ１−１６）のアミノ酸配列を含む免疫グロブリン軽鎖可変領域；
（ｗｗ）配列番号７２（Ｓｈ１４Ｆ１１  ＩＧＨＶ２−５）のアミノ酸配列を含む免疫グロブリン重鎖可変領域と、配列番号８６（Ｃｈ１４Ｆ１１  Ｃｈｉｍｅｒｉｃ）のアミノ酸配列を含む免疫グロブリン軽鎖可変領域；
（ｘｘ）配列番号７４（Ｓｈ１４Ｆ１１  ＩＧＨＶ２−７０）のアミノ酸配列を含む免疫グロブリン重鎖可変領域と、配列番号８６（Ｃｈ１４Ｆ１１  Ｃｈｉｍｅｒｉｃ）のアミノ酸配列を含む免疫グロブリン軽鎖可変領域；
（ｙｙ）配列番号５０（Ｃｈ１４Ｆ１１  Ｃｈｉｍｅｒｉｃ）のアミノ酸配列を含む免疫グロブリン重鎖可変領域と、配列番号９８（Ｈｕ１４Ｆ１１  ＩＧＫＶ１−１６）のアミノ酸配列を含む免疫グロブリン軽鎖可変領域；
（ｚｚ）配列番号７２（Ｓｈ１４Ｆ１１  ＩＧＨＶ２−５）のアミノ酸配列を含む免疫グロブリン重鎖可変領域と、配列番号９８（Ｈｕ１４Ｆ１１  ＩＧＫＶ１−１６）のアミノ酸配列を含む免疫グロブリン軽鎖可変領域；
（ａａａ）配列番号７４（Ｓｈ１４Ｆ１１  ＩＧＨＶ２−７０）のアミノ酸配列を含む免疫グロブリン重鎖可変領域と、配列番号９８（Ｈｕ１４Ｆ１１  ＩＧＫＶ１−１６）のアミノ酸配列を含む免疫グロブリン軽鎖可変領域；
からなる群から選択される免疫グロブリン重鎖可変領域と免疫グロブリン軽鎖可変領域とを含む、ヒトＧＤＦ１５に結合する単離抗体。
（項目１５）
項目１４に記載の免疫グロブリン重鎖可変領域をコードするヌクレオチド配列を含む単離核酸。
（項目１６）
項目１４に記載の免疫グロブリン軽鎖可変領域をコードするヌクレオチド配列を含む単離核酸。
（項目１７）
項目１５に記載の核酸を含む発現ベクター。
（項目１８）
項目１６に記載の核酸を含む発現ベクター。
（項目１９）
項目１５に記載の核酸をさらに含む、項目１８に記載の発現ベクター。
（項目２０）
項目１７に記載の発現ベクターを含む宿主細胞。
（項目２１）
項目１８に記載の発現ベクターを含む宿主細胞。
（項目２２）
項目１９に記載の発現ベクターを含む宿主細胞。
（項目２３）
項目１７に記載の発現ベクターをさらに含む、項目２１に記載の宿主細胞。
（項目２４）
（ａ）宿主細胞が免疫グロブリン重鎖可変領域または免疫グロブリン軽鎖可変領域を含むポリペプチドを発現する条件下で、項目２０または２１に記載の宿主細胞を培養するステップと；
（ｂ）前記免疫グロブリン重鎖可変領域または免疫グロブリン軽鎖可変領域を含むポリペプチドを精製するステップ
を含む、免疫グロブリン重鎖可変領域または免疫グロブリン軽鎖可変領域を含むポリペプチドを生成する方法。
（項目２５）
（ａ）宿主細胞が免疫グロブリン重鎖可変領域および／または免疫グロブリン軽鎖可変領域を含む１つまたは複数のポリペプチドを発現する条件下で、項目２２または２３に記載の宿主細胞を培養し、それによって抗体または抗体の抗原結合性断片を生成するステップと；
（ｂ）前記抗体または前記抗体の抗原結合性断片を精製するステップ
を含む、ヒトＧＤＦ１５に結合する抗体または抗体の抗原結合性断片を生成する方法。
（項目２６）
（ａ）配列番号２５８（Ｈｕ０１Ｇ０６  ＩＧＨＶ１−１８  Ｆ２）のアミノ酸配列を含む免疫グロブリン重鎖と、配列番号２６４（Ｈｕ０１Ｇ０６  ＩＧＫＶ１−３９  Ｆ２）のアミノ酸配列を含む免疫グロブリン軽鎖；
（ｂ）配列番号２６０（Ｈｕ０１Ｇ０６  ＩＧＨＶ１−６９  Ｆ１）のアミノ酸配列を含む免疫グロブリン重鎖と、配列番号２０８（Ｈｕ０１Ｇ０６  ＩＧＫＶ１−３９  Ｆ１）のアミノ酸配列を含む免疫グロブリン軽鎖；
（ｃ）配列番号１７６（Ｃｈ０１Ｇ０６  Ｃｈｉｍｅｒｉｃ）のアミノ酸配列を含む免疫グロブリン重鎖と、配列番号２０４（Ｃｈ０１Ｇ０６  Ｃｈｉｍｅｒｉｃ）のアミノ酸配列を含む免疫グロブリン軽鎖；
（ｄ）配列番号１９２（Ｃｈ０６Ｃ１１  Ｃｈｉｍｅｒｉｃ）のアミノ酸配列を含む免疫グロブリン重鎖と、配列番号２１２（Ｃｈ０６Ｃ１１  Ｃｈｉｍｅｒｉｃ）のアミノ酸配列を含む免疫グロブリン軽鎖；
（ｅ）配列番号１９８（Ｃｈ１４Ｆ１１  Ｃｈｉｍｅｒｉｃ）のアミノ酸配列を含む免疫グロブリン重鎖と、配列番号２１６（Ｃｈ１４Ｆ１１  Ｃｈｉｍｅｒｉｃ）のアミノ酸配列を含む免疫グロブリン軽鎖；
（ｆ）配列番号１７８（Ｈｕ０１Ｇ０６  ＩＧＨＶ１−１８）のアミノ酸配列を含む免疫グロブリン重鎖と、配列番号２０６（Ｈｕ０１Ｇ０６  ＩＧＫＶ１−３９）のアミノ酸配列を含む免疫グロブリン軽鎖；
（ｇ）配列番号１８０（Ｈｕ０１Ｇ０６  ＩＧＨＶ１−６９）のアミノ酸配列を含む免疫グロブリン重鎖と、配列番号２０６（Ｈｕ０１Ｇ０６  ＩＧＫＶ１−３９）のアミノ酸配列を含む免疫グロブリン軽鎖；
（ｈ）配列番号１８４（Ｓｈ０１Ｇ０６  ＩＧＨＶ１−１８  Ｍ６９Ｌ  Ｋ６４Ｑ  Ｇ４４Ｓ）のアミノ酸配列を含む免疫グロブリン重鎖と、配列番号２１０（Ｈｕ０１Ｇ０６
ＩＧＫＶ１−３９  Ｖ４８Ｉ）のアミノ酸配列を含む免疫グロブリン軽鎖；
（ｉ）配列番号１８８（Ｓｈ０１Ｇ０６  ＩＧＨＶ１−６９  Ｔ３０Ｓ  Ｉ６９Ｌ）のアミノ酸配列を含む免疫グロブリン重鎖と、配列番号２１０（Ｈｕ０１Ｇ０６  ＩＧＫＶ１−３９  Ｖ４８Ｉ）のアミノ酸配列を含む免疫グロブリン軽鎖；
（ｊ）配列番号１８４（Ｓｈ０１Ｇ０６  ＩＧＨＶ１−１８  Ｍ６９Ｌ  Ｋ６４Ｑ  Ｇ４４Ｓ）のアミノ酸配列を含む免疫グロブリン重鎖と、配列番号２０８（Ｈｕ０１Ｇ０６
ＩＧＫＶ１−３９  Ｓ４３Ａ  Ｖ４８Ｉ）のアミノ酸配列を含む免疫グロブリン軽鎖；
（ｋ）配列番号１８８（Ｓｈ０１Ｇ０６  ＩＧＨＶ１−６９  Ｔ３０Ｓ  Ｉ６９Ｌ）のアミノ酸配列を含む免疫グロブリン重鎖と、配列番号２０８（Ｈｕ０１Ｇ０６  ＩＧＫＶ１−３９  Ｓ４３Ａ  Ｖ４８Ｉ）のアミノ酸配列を含む免疫グロブリン軽鎖；
（ｌ）配列番号２５６（Ｈｕ０１Ｇ０６  ＩＧＨＶ１−１８  Ｆ１）のアミノ酸配列を含む免疫グロブリン重鎖と、配列番号２０８（Ｈｕ０１Ｇ０６  ＩＧＫＶ１−３９  Ｆ１）のアミノ酸配列を含む免疫グロブリン軽鎖；
（ｍ）配列番号２６２（Ｈｕ０１Ｇ０６  ＩＧＨＶ１−６９  Ｆ２）のアミノ酸配列を含む免疫グロブリン重鎖と、配列番号２０８（Ｈｕ０１Ｇ０６  ＩＧＫＶ１−３９  Ｆ１）のアミノ酸配列を含む免疫グロブリン軽鎖；
（ｎ）配列番号２６２（Ｈｕ０１Ｇ０６  ＩＧＨＶ１−６９  Ｆ２）のアミノ酸配列を含む免疫グロブリン重鎖と、配列番号２６４（Ｈｕ０１Ｇ０６  ＩＧＫＶ１−３９  Ｆ２）のアミノ酸配列を含む免疫グロブリン軽鎖；
（ｏ）配列番号１９４（ＨＥ  ＬＭ  ０６Ｃ１１  ＩＧＨＶ２−７０）のアミノ酸配列を含む免疫グロブリン重鎖と、配列番号２１４（Ｓｈ０６Ｃ１１  ＩＧＫＶ１−１６）のアミノ酸配列を含む免疫グロブリン軽鎖；
（ｐ）配列番号１９６（Ｈｕ０６Ｃ１１  ＩＧＨＶ２−５）のアミノ酸配列を含む免疫グロブリン重鎖と、配列番号２１４（Ｓｈ０６Ｃ１１  ＩＧＫＶ１−１６）のアミノ酸配列を含む免疫グロブリン軽鎖；
（ｑ）配列番号２００（Ｓｈ１４Ｆ１１  ＩＧＨＶ２−５）のアミノ酸配列を含む免疫グロブリン重鎖と、配列番号２１８（Ｈｕ１４Ｆ１１  ＩＧＫＶ１−１６）のアミノ酸配列を含む免疫グロブリン軽鎖；ならびに
（ｒ）配列番号２０２（Ｓｈ１４Ｆ１１  ＩＧＨＶ２−７０）のアミノ酸配列を含む免疫グロブリン重鎖と、配列番号２１８（Ｈｕ１４Ｆ１１  ＩＧＫＶ１−１６）のアミノ酸配列を含む免疫グロブリン軽鎖
からなる群から選択される免疫グロブリン重鎖と免疫グロブリン軽鎖とを含む、ヒトＧＤＦ１５に結合する単離抗体。
（項目２７）
項目２６に記載の免疫グロブリン重鎖をコードするヌクレオチド配列を含む単離核酸。（項目２８）
項目２６に記載の免疫グロブリン軽鎖をコードするヌクレオチド配列を含む単離核酸。（項目２９）
項目２７に記載の核酸を含む発現ベクター。
（項目３０）
項目２８に記載の核酸を含む発現ベクター。
（項目３１）
項目２７に記載の核酸をさらに含む、項目３０に記載の発現ベクター。
（項目３２）
項目２９に記載の発現ベクターを含む宿主細胞。
（項目３３）
項目３０に記載の発現ベクターを含む宿主細胞。
（項目３４）
項目３１に記載の発現ベクターを含む宿主細胞。
（項目３５）
項目２９に記載の発現ベクターをさらに含む、項目３３に記載の宿主細胞。
（項目３６）
（ａ）宿主細胞が免疫グロブリン重鎖または免疫グロブリン軽鎖を含むポリペプチドを発現する条件下で、項目３２または３３に記載の宿主細胞を培養するステップと；
（ｂ）前記免疫グロブリン重鎖または免疫グロブリン軽鎖を含むポリペプチドを精製するステップ
を含む、免疫グロブリン重鎖または免疫グロブリン軽鎖を含むポリペプチドを生成する方法。
（項目３７）
（ａ）宿主細胞が免疫グロブリン重鎖および／または免疫グロブリン軽鎖を含む１つまたは複数のポリペプチドを発現する条件下で、項目３４または３５に記載の宿主細胞を培養し、それによって抗体または抗体の抗原結合性断片を生成するステップと；（ｂ）前記抗体または前記抗体の抗原結合性断片を精製するステップを含む、ヒトＧＤＦ１５に結合する抗体または抗体の抗原結合性断片を生成する方法。
（項目３８）
前記抗体が、表面プラズモン共鳴またはバイオ層干渉法による測定で３００ｐＭ以下のＫＤを有する、項目１、２、１４、または２６のいずれか一項に記載の抗体。
（項目３９）
前記抗体が、表面プラズモン共鳴またはバイオ層干渉法による測定で１５０ｐＭ以下のＫＤを有する、項目１、２、１４、または２６のいずれか一項に記載の抗体。
（項目４０）
前記抗体が、表面プラズモン共鳴またはバイオ層干渉法による測定で１００ｐＭ以下のＫＤを有する、項目１、２、１４、または２６のいずれか一項に記載の抗体。
（項目４１）
ヒトＧＤＦ１５への結合に対して、項目１、２、１４、２６、３８、３９、または４０のいずれか一項に記載の抗体と拮抗する単離抗体。
（項目４２）
項目１、２、１４、２６、３８、３９、または４０のいずれか一項に記載の抗体としてヒトＧＤＦ１５上の同じエピトープに結合する単離抗体。
（項目４３）
項目１、２、１４、２６、３８、３９、４０、４１，または４２のいずれか一項に記載の有効量の抗体を、それを必要とする哺乳動物に投与するステップを含む、哺乳動物において悪液質を治療する方法。
（項目４４）
項目１、２、１４、２６、３８、３９、４０、４１、または４２のいずれか一項に記載の有効量の抗体を投与して、筋肉量減少を予防または低減するステップを含む、基礎疾患に関連した筋肉量減少を抑制する方法。
（項目４５）
前記基礎疾患が、癌、慢性心不全、慢性腎疾患、ＣＯＰＤ、ＡＩＤＳ、多発性硬化症、関節リウマチ、敗血症、および結核からなる群から選択される、項目４４に記載の方法。（項目４６）
前記筋肉量減少が、脂肪量減少を伴う、項目４４に記載の方法。
（項目４７）
項目１、２、１４、２６、３８、３９、４０、４１、または４２のいずれか一項に記載の有効量の抗体を、それを必要とする哺乳動物に投与するステップを含む、哺乳動物において不随意性の体重減少を抑制または低減する方法。
（項目４８）
項目１、２、１４、２６、３８、３９、４０、４１、または４２のいずれか一項に記載の有効量の抗体を投与して、器官重量減少を予防または低減するステップを含む、基礎疾患に関連した器官重量減少を抑制する方法。
（項目４９）
前記基礎疾患が、癌、慢性心不全、慢性腎疾患、ＣＯＰＤ、ＡＩＤＳ、多発性硬化症、関節リウマチ、敗血症、および結核からなる群から選択される、項目４８に記載の方法。（項目５０）
前記器官が腎臓、肝臓、心臓、または脾臓である、項目４８に記載の方法。
（項目５１）
前記器官重量減少が、筋肉量減少、脂肪量減少、または不随意性の体重減少を伴う、項目４８に記載の方法。
（項目５２）
第２の薬剤を、それを必要とする哺乳動物に投与するステップであって、前記第２の薬剤が、アクチビン−Ａ阻害剤、ＡｃｔＲＩＩＢ阻害剤、ＩＬ−６阻害剤、ＩＬ−６Ｒ阻害剤、メラノコルチンペプチド阻害剤、メラノコルチン受容体阻害剤、グレリン、グレリンミメティック、ＧＨＳ−Ｒ１ａアゴニスト、ＳＡＲＭ、ＴＮＦα阻害剤、ＩＬ−１α阻害剤、ミオスタチン阻害剤、β遮断薬、および抗癌剤からなる群から選択されるステップをさらに含む、項目４３に記載の方法。
（項目５３）
項目１、２、１４、２６、３８、３９、４０、４１、または４２のいずれか一項に記載の有効量の抗体を、それを必要とする哺乳動物に投与するステップを含む、哺乳動物において筋肉減少症を治療する方法。
（項目５４）
項目１、２、１４、２６、３８、３９、４０、４１、または４２のいずれか一項に記載の有効量の抗体を、それを必要とする哺乳動物に投与するステップを含む、哺乳動物において抗癌剤の最大耐用量を増加させる方法。
（項目５５）
前記抗癌剤が、哺乳動物において悪液質を引き起こす、項目５４に記載の方法。
（項目５６）
前記抗体が抗癌剤と組み合わせて投与される、項目５５に記載の方法。
（項目５７）
Ｆｃ−ｒｈＧＤＦ１５融合タンパク質を哺乳動物に投与するステップを含む、哺乳動物において血漿または血清中の成熟ｒｈＧＤＦ１５の定常状態レベルを確立する方法。
（項目５８）
前記哺乳動物がマウスである、項目５７に記載の方法。
（項目５９）
前記Ｆｃ−ｒｈＧＤＦ１５融合タンパク質がｍＦｃ−ｒｈＧＤＦ１５（配列番号２２０）である、項目５７に記載の方法。
（項目６０）
治療的有効量のＦｃ−ｒｈＧＤＦ１５融合タンパク質を、それを必要とする哺乳動物に投与するステップを含む、哺乳動物において肥満を治療する方法。
（項目６１）
Ｆｃ−ｒｈＧＤＦ１５融合タンパク質および薬学的に許容されるキャリアを含む、医薬組成物。
【００１５】
以下の図面を参照して、本発明をより完全に理解し得る。
【図面の簡単な説明】
【００１６】
【図１】（先行技術）典型的な自然発現の抗体の概略図である。
【図２】ナイーブマウスまたはヒト異種移植腫瘍（Ｃｈａｇｏ、ＲＰＭＩ７９５１、ＰＣ３、ＴＯＶ２１Ｇ、ＨＴ−１０８０、Ｋ−５６２、ＬＳ１０３４）を担持するマウスにおけるｈＧＤＦ１５血清レベルを測定する実験からの結果を示すグラフである。測定はＥＬＩＳＡによる。
【図３】ナイーブＩＣＲ−ＳＣＩＤマウスにおける、皮下注射（１μｇ／ｇ）により投与された切断ｒｈＧＤＦ１５の血漿薬物動態（ＰＫ）を、ＥＬＩＳＡによる測定で決定する実験からの結果を示すプロットである。
【図４】免疫能のないマウスであるＩＣＲ−ＳＣＩＤにおいて体重減少を誘導する、切断ｒｈＧＤＦ１５タンパク質（■）および陰性対照（ＰＢＳ（●））の悪液質活性を測定する実験からの結果を要約するグラフである。矢印は、１μｇ／ｇのｒｈＧＤＦ１５の皮下投与を示す。
【図５Ａ−Ｂ】免疫能のあるＢａｌｂ／Ｃマウス（図５Ａ）および免疫能のないＣＢ１７−ＳＣＩＤマウス（図５Ｂ）において体重減少を誘導する、ｍＦｃ−ｒｈＧＤＦ１５（成熟組換えヒトＧＤＦ１５のアミノ末端に融合したマウスＦｃ；■）、ｒＦｃ−ｒｍＧＤＦ１５（成熟組換えマウスＧＤＦ１５のアミノ末端に融合したウサギＦｃ；▲）、および陰性対照（ＰＢＳ；●）の悪液質活性を測定する実験からの結果を要約するグラフである。矢印は、１μｇ／ｇの組換えタンパク質の皮下投与を示す。
【図６Ａ−Ｂ】免疫能のないＩＣＲ−ＳＣＩＤマウスにおいて体重減少を誘導する（図６Ａ；矢印は、１μｇ／ｇのｍＦｃ−ｒｈＧＤＦ１５の皮下投与を示す）；脂肪組織または生殖腺の脂肪量の減少を誘導する（図６Ｂ）；腓腹筋の筋肉量減少を誘導する（図６Ｃ；腓腹筋量）；そして筋肉分解分子マーカーのｍＲＮＡ発現を増大させる（ｍＭｕＲＦ１（図６Ｄ）およびｍＡｔｒｏｇｉｎ（図６Ｅ））、ｍＦｃ−ｒｈＧＤＦ１５（■）および陰性対照（ＰＢＳ；●）の悪液質活性を実証する実験からの結果を要約するグラフである。
【図６Ｃ−Ｄ】免疫能のないＩＣＲ−ＳＣＩＤマウスにおいて体重減少を誘導する（図６Ａ；矢印は、１μｇ／ｇのｍＦｃ−ｒｈＧＤＦ１５の皮下投与を示す）；脂肪組織または生殖腺の脂肪量の減少を誘導する（図６Ｂ）；腓腹筋の筋肉量減少を誘導する（図６Ｃ；腓腹筋量）；そして筋肉分解分子マーカーのｍＲＮＡ発現を増大させる（ｍＭｕＲＦ１（図６Ｄ）およびｍＡｔｒｏｇｉｎ（図６Ｅ））、ｍＦｃ−ｒｈＧＤＦ１５（■）および陰性対照（ＰＢＳ；●）の悪液質活性を実証する実験からの結果を要約するグラフである。
【図６Ｅ】免疫能のないＩＣＲ−ＳＣＩＤマウスにおいて体重減少を誘導する（図６Ａ；矢印は、１μｇ／ｇのｍＦｃ−ｒｈＧＤＦ１５の皮下投与を示す）；脂肪組織または生殖腺の脂肪量の減少を誘導する（図６Ｂ）；腓腹筋の筋肉量減少を誘導する（図６Ｃ；腓腹筋量）；そして筋肉分解分子マーカーのｍＲＮＡ発現を増大させる（ｍＭｕＲＦ１（図６Ｄ）およびｍＡｔｒｏｇｉｎ（図６Ｅ））、ｍＦｃ−ｒｈＧＤＦ１５（■）および陰性対照（ＰＢＳ；●）の悪液質活性を実証する実験からの結果を要約するグラフである。
【図７】免疫能のないＢａｌｂ／Ｃヌードマウスにおいて体重減少を誘導する、ｍＦｃ−ｒｈＧＤＦ１５（■）および陰性対照（ＰＢＳ；●）の悪液質活性を測定する実験からの結果を要約するグラフである。矢印は、１．３３μｇ／ｇのｍＦｃ−ｒｈＧＤＦ１５の皮下投与を示す。
【図８】組換えタンパク質を投与されたマウスにおけるｍＦｃ−ｒｈＧＤＦ１５の血清レベルを測定する実験からの結果を要約するグラフである。ｍＦｃ−ｒｈＧＤＦ１５の存在は、ウエスタンブロットにより判定した。ｍＦｃ−ｒｈＧＤＦ１５およびｒｈＧＤＦ１５に対応する２つの陽性バンド（適切な分子サイズに従う）を、Ｌｉｃｏｒにより定量化した。放出されたｒｈＧＤＦ１５対ｍＦｃ−ｒｈＧＤＦ１５の割合（パーセント）を計算した。
【図９Ａ−Ｂ】図９Ａは、免疫能のないＩＣＲ−ＳＣＩＤマウスにおいて体重減少を誘導する、ｍＦｃ−ｒｈＧＤＦ１５（０．１μｇ／ｇ（■）、０．０１μｇ／ｇ（Δ））および陰性対照（ｍＩｇＧ  ０．１μｇ／ｇ（●））の悪液質活性を測定する実験からの結果を要約するグラフである。矢印は、組換えタンパク質の腹腔内投与を示す。図９Ｂは、ｍＦｃ−ｒｈＧＤＦ１５（０．１μｇ／ｇ（  ）、０．０１μｇ／ｇ（■））を投与されたマウスの、投与後５日目における血清中のｒｈＧＤＦ１５の全量を示すグラフである。測定はＥＬＩＳＡによる。
【図１０】抗体０１Ｇ０６、０３Ｇ０５、０４Ｆ０８、０６Ｃ１１、０８Ｇ０１、１４Ｆ１１、および１７Ｂ１１の完全長免疫グロブリン重鎖可変領域のアミノ酸配列を示す配列アライメントである。各抗体のアミノ酸配列を相互にアライメントし、ＣＤＲ１、ＣＤＲ２、およびＣＤＲ３をボックスで囲んで特定する。ボックスで囲んでいない配列は、フレームワーク（ＦＲ）配列を表す。アライメントの位置決め（ギャップ）は、Ｃｌｕｓｔａｌなどのアライメントアルゴリズムではなく、Ｋａｂａｔの番号付けに基づいている。配列上の番号付けは、Ｋａｂａｔの番号付けを表わす。
【図１１】図１０における免疫グロブリン重鎖可変領域配列のそれぞれに対する、ＣＤＲ１、ＣＤＲ２、およびＣＤＲ３配列の配列アライメントである。
【図１２】抗体０１Ｇ０６、０３Ｇ０５、０４Ｆ０８、０６Ｃ１１、０８Ｇ０１、１４Ｆ１１、および１７Ｂ１１の完全長免疫グロブリン軽鎖可変領域のアミノ酸配列の配列アライメントである。各抗体のアミノ酸配列を相互にアライメントし、ＣＤＲ１、ＣＤＲ２、およびＣＤＲ３をボックスで囲んで特定する。ボックスで囲んでいない配列は、フレームワーク（ＦＲ）配列を表す。アライメントの位置決め（ギャップ）は、Ｃｌｕｓｔａｌなどのアライメントアルゴリズムではなく、Ｋａｂａｔの番号付けに基づいている。配列上の番号付けは、Ｋａｂａｔの番号付けを表わす。
【図１３】図１２における免疫グロブリン軽鎖可変領域配列のそれぞれに対する、ＣＤＲ１、ＣＤＲ２、およびＣＤＲ３配列の配列アライメントである。
【図１４】ＩＣＲ−ＳＣＩＤマウスのｍＦｃ−ｒｈＧＤＦ１５悪液質モデルにおける、１０ｍｇ／ｋｇで投与された抗ＧＤＦ１５抗体０１Ｇ０６（■）、０３Ｇ０５（▲）、０４Ｆ０８（▼）、０６Ｃ１１（◇）、１４Ｆ１１（
【化１】
2019056018.tif 000002
）、および１７Ｂ１１（□）の悪液質抑制活性を測定する実験からの結果を要約するグラフである。矢印は、抗体の腹腔内注射を示す。
【図１５】ＩＣＲ−ＳＣＩＤマウスのＨＴ−１０８０線維肉腫腫瘍異種移植モデルにおける、１０ｍｇ／ｋｇで投与された抗ＧＤＦ１５抗体０１Ｇ０６（▲）、０３Ｇ０５（◇）、０４Ｆ０８（▽）、０６Ｃ１１（□）、０８Ｇ０１（■）、１４Ｆ１１（◆）、および１７Ｂ１１（
【化２】
2019056018.tif 000003
）、ならびにマウスＩｇＧ対照（●；ｍＩｇＧ）の悪液質抑制活性を測定する実験からの結果を要約するグラフである。矢印は、３日ごとの抗体の腹腔内注射を示す。
【図１６Ａ−Ｂ】ＨＴ−１０８０線維肉腫腫瘍異種移植モデルを担持する免疫能のないマウス（ＩＣＲ−ＳＣＩＤ）における、１０ｍｇ／ｋｇで投与された抗ＧＤＦ１５抗体０１Ｇ０６（■）の抗悪液質活性を実証する実験からの結果を要約するグラフである。抗体０１Ｇ０６による処置は、陰性対照（マウスＩｇＧ（●））に比較して、体重減少を逆転させ（図１６Ａ）；投与後３日目まで摂食量の有意な増大を誘導し（図１６Ｂ）；生殖腺の脂肪量の増加を誘導し（図１６Ｃ）；腓腹筋の筋肉量の増加を誘導し（図１６Ｄ）；また筋肉分解分子マーカー（ｍＭｕＲＦ１およびｍＡｔｒｏｇｉｎ（図１６Ｅ））のｍＲＮＡ発現を低下させた。図１６Ａでは、矢印は、抗体の腹腔内注射を示す。
【図１６Ｃ−Ｄ】ＨＴ−１０８０線維肉腫腫瘍異種移植モデルを担持する免疫能のないマウス（ＩＣＲ−ＳＣＩＤ）における、１０ｍｇ／ｋｇで投与された抗ＧＤＦ１５抗体０１Ｇ０６（■）の抗悪液質活性を実証する実験からの結果を要約するグラフである。抗体０１Ｇ０６による処置は、陰性対照（マウスＩｇＧ（●））に比較して、体重減少を逆転させ（図１６Ａ）；投与後３日目まで摂食量の有意な増大を誘導し（図１６Ｂ）；生殖腺の脂肪量の増加を誘導し（図１６Ｃ）；腓腹筋の筋肉量の増加を誘導し（図１６Ｄ）；また筋肉分解分子マーカー（ｍＭｕＲＦ１およびｍＡｔｒｏｇｉｎ（図１６Ｅ））のｍＲＮＡ発現を低下させた。図１６Ａでは、矢印は、抗体の腹腔内注射を示す。
【図１６Ｅ】ＨＴ−１０８０線維肉腫腫瘍異種移植モデルを担持する免疫能のないマウス（ＩＣＲ−ＳＣＩＤ）における、１０ｍｇ／ｋｇで投与された抗ＧＤＦ１５抗体０１Ｇ０６（■）の抗悪液質活性を実証する実験からの結果を要約するグラフである。抗体０１Ｇ０６による処置は、陰性対照（マウスＩｇＧ（●））に比較して、体重減少を逆転させ（図１６Ａ）；投与後３日目まで摂食量の有意な増大を誘導し（図１６Ｂ）；生殖腺の脂肪量の増加を誘導し（図１６Ｃ）；腓腹筋の筋肉量の増加を誘導し（図１６Ｄ）；また筋肉分解分子マーカー（ｍＭｕＲＦ１およびｍＡｔｒｏｇｉｎ（図１６Ｅ））のｍＲＮＡ発現を低下させた。図１６Ａでは、矢印は、抗体の腹腔内注射を示す。
【図１７Ａ】ＨＴ−１０８０線維肉腫腫瘍異種移植モデルを担持する免疫能のないマウス（ＩＣＲ−ＳＣＩＤ）における、２ｍｇ／ｋｇで投与された抗ＧＤＦ１５抗体０１Ｇ０６（■）の抗悪液質活性を実証する実験からの結果を要約するグラフである。抗体０１Ｇ０６による処置は、マウスＩｇＧ（●））に比較して、体重減少を逆転させ（図１７Ａ）；陰性対照（マウスＩｇＧ）およびベースライン（１日目）に比較して、器官重量（肝臓、心臓、脾臓、腎臓）の増加および組織重量（生殖腺および腓腹筋）の増加を誘導した（図１７Ｂ）。図１７Ａの矢印は、抗体の腹腔内注射を示す。
【図１７Ｂ】ＨＴ−１０８０線維肉腫腫瘍異種移植モデルを担持する免疫能のないマウス（ＩＣＲ−ＳＣＩＤ）における、２ｍｇ／ｋｇで投与された抗ＧＤＦ１５抗体０１Ｇ０６（■）の抗悪液質活性を実証する実験からの結果を要約するグラフである。抗体０１Ｇ０６による処置は、マウスＩｇＧ（●））に比較して、体重減少を逆転させ（図１７Ａ）；陰性対照（マウスＩｇＧ）およびベースライン（１日目）に比較して、器官重量（肝臓、心臓、脾臓、腎臓）の増加および組織重量（生殖腺および腓腹筋）の増加を誘導した（図１７Ｂ）。図１７Ａの矢印は、抗体の腹腔内注射を示す。
【図１８】免疫能のない（ＣＢ１７ＳＣＲＦＭＦ）マウスのＫ−５６２白血病腫瘍異種移植モデルにおける、１０ｍｇ／ｋｇで投与された抗ＧＤＦ１５抗体０１Ｇ０６（■）、０３Ｇ０５（▲）、０４Ｆ０８（Ｘ）、０６Ｃ１１（◆）、０８Ｇ０１（○）、１４Ｆ１１（□）、および１７Ｂ１１（△）、ならびにマウスＩｇＧ対照（●）の悪液質抑制活性を測定する実験からの結果を要約するグラフである。矢印は、抗体の腹腔内注射を示す。
【図１９−１】Ｃｈ０１Ｇ０６  Ｃｈｉｍｅｒｉｃと表記されるキメラ０１Ｇ０６可変領域；Ｈｕ０１Ｇ０６  ＩＧＨＶ１−１８、Ｈｕ０１Ｇ０６  ＩＧＨＶ１−６９、Ｓｈ０１Ｇ０６  ＩＧＨＶ１−１８  Ｍ６９Ｌ、Ｓｈ０１Ｇ０６  ＩＧＨＶ１−１８  Ｍ６９Ｌ  Ｋ６４Ｑ  Ｇ４４Ｓ、Ｓｈ０１Ｇ０６  ＩＧＨＶ１−１８  Ｍ６９Ｌ  Ｋ６４Ｑ、Ｓｈ０１Ｇ０６  ＩＧＨＶ１−６９  Ｔ３０Ｓ  Ｉ６９Ｌ、Ｓｈ０１Ｇ０６  ＩＧＨＶ１−６９  Ｔ３０Ｓ  Ｋ６４Ｑ  Ｉ６９Ｌ、Ｈｕ０１Ｇ０６  ＩＧＨＶ１−１８  Ｆ１、Ｈｕ０１Ｇ０６  ＩＧＨＶ１−１８  Ｆ２、Ｈｕ０１Ｇ０６  ＩＧＨＶ１−６９  Ｆ１、およびＨｕ０１Ｇ０６  ＩＧＨＶ１−６９  Ｆ２と表記されるヒト化０１Ｇ０６重鎖可変領域；Ｃｈ０６Ｃ１１  Ｃｈｉｍｅｒｉｃと表記されるキメラ０６Ｃ１１；ＨＥ  ＬＭ  ０６Ｃ１１  ＩＧＨＶ２−７０，およびＨｕ０６Ｃ１１  ＩＧＨＶ２−５と表記されるヒト化０６Ｃ１１重鎖可変領域；Ｃｈ１４Ｆ１１  Ｃｈｉｍｅｒｉｃと表記されるキメラ１４Ｆ１１；ならびにＳｈ１４Ｆ１１  ＩＧＨＶ２−５およびＳｈ１４Ｆ１１  ＩＧＨＶ２−７０と表記されるヒト化１４Ｆ１１重鎖可変領域、の完全長免疫グロブリン重鎖可変領域のアミノ酸配列の配列アライメントである。各抗体のアミノ酸配列を相互にアライメントし、ＣＤＲ１、ＣＤＲ２、およびＣＤＲ３をボックスで囲んで特定する。ボックスで囲んでいない配列は、フレームワーク（ＦＲ）配列を表す。アライメントの位置決め（ギャップ）は、Ｃｌｕｓｔａｌなどのアライメントアルゴリズムではなく、Ｋａｂａｔの番号付けに基づいている。配列上の番号付けは、Ｋａｂａｔの番号付けを表わす。
【図１９−２】Ｃｈ０１Ｇ０６  Ｃｈｉｍｅｒｉｃと表記されるキメラ０１Ｇ０６可変領域；Ｈｕ０１Ｇ０６  ＩＧＨＶ１−１８、Ｈｕ０１Ｇ０６  ＩＧＨＶ１−６９、Ｓｈ０１Ｇ０６  ＩＧＨＶ１−１８  Ｍ６９Ｌ、Ｓｈ０１Ｇ０６  ＩＧＨＶ１−１８  Ｍ６９Ｌ  Ｋ６４Ｑ  Ｇ４４Ｓ、Ｓｈ０１Ｇ０６  ＩＧＨＶ１−１８  Ｍ６９Ｌ  Ｋ６４Ｑ、Ｓｈ０１Ｇ０６  ＩＧＨＶ１−６９  Ｔ３０Ｓ  Ｉ６９Ｌ、Ｓｈ０１Ｇ０６  ＩＧＨＶ１−６９  Ｔ３０Ｓ  Ｋ６４Ｑ  Ｉ６９Ｌ、Ｈｕ０１Ｇ０６  ＩＧＨＶ１−１８  Ｆ１、Ｈｕ０１Ｇ０６  ＩＧＨＶ１−１８  Ｆ２、Ｈｕ０１Ｇ０６  ＩＧＨＶ１−６９  Ｆ１、およびＨｕ０１Ｇ０６  ＩＧＨＶ１−６９  Ｆ２と表記されるヒト化０１Ｇ０６重鎖可変領域；Ｃｈ０６Ｃ１１  Ｃｈｉｍｅｒｉｃと表記されるキメラ０６Ｃ１１；ＨＥ  ＬＭ  ０６Ｃ１１  ＩＧＨＶ２−７０，およびＨｕ０６Ｃ１１  ＩＧＨＶ２−５と表記されるヒト化０６Ｃ１１重鎖可変領域；Ｃｈ１４Ｆ１１  Ｃｈｉｍｅｒｉｃと表記されるキメラ１４Ｆ１１；ならびにＳｈ１４Ｆ１１  ＩＧＨＶ２−５およびＳｈ１４Ｆ１１  ＩＧＨＶ２−７０と表記されるヒト化１４Ｆ１１重鎖可変領域、の完全長免疫グロブリン重鎖可変領域のアミノ酸配列の配列アライメントである。各抗体のアミノ酸配列を相互にアライメントし、ＣＤＲ１、ＣＤＲ２、およびＣＤＲ３をボックスで囲んで特定する。ボックスで囲んでいない配列は、フレームワーク（ＦＲ）配列を表す。アライメントの位置決め（ギャップ）は、Ｃｌｕｓｔａｌなどのアライメントアルゴリズムではなく、Ｋａｂａｔの番号付けに基づいている。配列上の番号付けは、Ｋａｂａｔの番号付けを表わす。
【図２０−１】図１９における免疫グロブリン重鎖可変領域配列のそれぞれに対する、ＣＤＲ１、ＣＤＲ２、およびＣＤＲ３配列の配列アライメントである。
【図２０−２】図１９における免疫グロブリン重鎖可変領域配列のそれぞれに対する、ＣＤＲ１、ＣＤＲ２、およびＣＤＲ３配列の配列アライメントである。
【図２１】Ｃｈ０１Ｇ０６  Ｃｈｉｍｅｒｉｃと表記されるキメラ０１Ｇ０６可変領域；Ｈｕ０１Ｇ０６  ＩＧＫＶ１−３９、Ｈｕ０１Ｇ０６  ＩＧＫＶ１−３９  Ｓ４３Ａ  Ｖ４８Ｉ、Ｈｕ０１Ｇ０６  ＩＧＫＶ１−３９  Ｖ４８Ｉ、Ｈｕ０１Ｇ０６  ＩＧＫＶ１−３９  Ｆ１、およびＨｕ０１Ｇ０６  ＩＧＫＶ１−３９  Ｆ２と表記されるヒト化０１Ｇ０６軽鎖可変領域；Ｃｈ０６Ｃ１１  Ｃｈｉｍｅｒｉｃと表記されるキメラ０６Ｃ１１；Ｓｈ０６Ｃ１１  ＩＧＫＶ１−１６と表記されるヒト化０６Ｃ１１軽鎖可変領域；Ｃｈ１４Ｆ１１  Ｃｈｉｍｅｒｉｃと表記されるキメラ１４Ｆ１１；ならびにＨｕ１４Ｆ１１  ＩＧＫＶ１−１６と表記されるヒト化１４Ｆ１１軽鎖可変領域、の完全長免疫グロブリン可変領域のアミノ酸配列を示す配列アライメントである。各抗体のアミノ酸配列を相互にアライメントし、ＣＤＲ１、ＣＤＲ２、およびＣＤＲ３をボックスで囲んで特定する。ボックスで囲んでいない配列は、フレームワーク（ＦＲ）配列を表す。アライメントの位置決め（ギャップ）は、Ｃｌｕｓｔａｌなどのアライメントアルゴリズムではなく、Ｋａｂａｔの番号付けに基づいている。配列上の番号付けは、Ｋａｂａｔの番号付けを表わす。
【図２２】図２１における免疫グロブリン軽鎖可変領域配列のそれぞれに対する、ＣＤＲ１、ＣＤＲ２、およびＣＤＲ３配列の配列アライメントである。
【図２３】ＩＣＲ−ＳＣＩＤマウスのＨＴ−１０８０線維肉腫腫瘍異種移植モデルにおける、２ｍｇ／ｋｇで投与された抗ＧＤＦ１５抗体０１Ｇ０６（■）、Ｈｕ０１Ｇ０６−４６（▲）、およびＨｕ０１Ｇ０６−５２（＊）、ならびにマウスＩｇＧ対照（●）の悪液質抑制活性を測定する実験からの結果を要約するグラフである。矢印は、抗体の腹腔内注射を示す。
【図２４】ＩＣＲ−ＳＣＩＤマウスのＨＴ−１０８０線維肉腫腫瘍異種移植モデルにおける、２ｍｇ／ｋｇで投与された抗ＧＤＦ１５抗体０６Ｃ１１（◆）、Ｈｕ０６Ｃ１１−２７（  ）、およびＨｕ０６Ｃ１１−３０（▲）、ならびにマウスＩｇＧ対照（●）の悪液質抑制活性を測定する実験からの結果を要約するグラフである。矢印は、抗体の腹腔内注射を示す。
【図２５】ＩＣＲ−ＳＣＩＤマウスのＨＴ−１０８０線維肉腫腫瘍異種移植モデルにおける、２ｍｇ／ｋｇで投与された抗ＧＤＦ１５抗体１４Ｆ１１（▲）、Ｈｕ１４Ｆ１１−３９（  ）、およびＨｕ１４Ｆ１１−４７（◆）、ならびにマウスＩｇＧ対照（●）の悪液質抑制活性を測定する実験からの結果を要約するグラフである。矢印は、抗体の腹腔内注射を示す。
【図２６】ＩＣＲ−ＳＣＩＤマウスのＨＴ−１０８０線維肉腫腫瘍異種移植モデルにおける、２ｍｇ／ｋｇで投与された抗ＧＤＦ１５抗体Ｈｕ０１Ｇ０６−１２２（▼）、Ｈｕ０１Ｇ０６−１２７（  ）、Ｈｕ０１Ｇ０６−１３５（◇）、Ｈｕ０１Ｇ０６−１３８（■）、およびＨｕ０１Ｇ０６−１４６（＊）、ならびにヒトＩｇＧ対照（●）の悪液質抑制活性を測定する実験からの結果を要約するグラフである。矢印は、抗体の腹腔内注射を示す。
【図２７】ＩＣＲ−ＳＣＩＤマウスのｍＦｃ−ｒｈＧＤＦ１５悪液質モデルにおける、２ｍｇ／ｋｇで投与された抗ＧＤＦ１５抗体Ｈｕ０１Ｇ０６−１２２（▼）、Ｈｕ０１Ｇ０６−１２７（  ）、Ｈｕ０１Ｇ０６−１３５（◇）、Ｈｕ０１Ｇ０６−１３８（■）、およびＨｕ０１Ｇ０６−１４６（＊）、ならびにヒトＩｇＧ対照（●）の悪液質抑制活性を測定する実験からの結果を要約するグラフである。矢印は、抗体の腹腔内注射を示す。
【図２８】ＩＣＲ−ＳＣＩＤマウスのＨＴ−１０８０線維肉腫腫瘍異種移植モデルにおける、２０ｍｇ／ｋｇ（  ）、２ｍｇ／ｋｇ（△）、および０．２ｍｇ／ｋｇ（▽）で投与された抗ＧＤＦ１５抗体Ｈｕ０１Ｇ０６−１２７；２０ｍｇ／ｋｇ（■）、２ｍｇ／ｋｇ（▲）、および０．２ｍｇ／ｋｇ（▼）でのＨｕ０１Ｇ０６−１３５、ならびに２０ｍｇ／ｋｇ（●）でのヒトＩｇＧ対照の悪液質抑制活性を測定する実験からの結果を要約するグラフである。矢印は、抗体の静脈内注射を示す。
【図２９Ａ】ＨＴ−１０８０線維肉腫腫瘍異種移植モデルを担持する免疫能のないマウス（ＩＣＲ−ＳＣＩＤ）における、１０ｍｇ／ｋｇで投与された抗ＧＤＦ１５抗体Ｈｕ０１Ｇ０６−１２７（■）の抗悪液質活性を実証する実験からの結果を要約するグラフである。抗体Ｈｕ０１Ｇ０６−１２７による処置は、陰性対照（ｈＩｇＧ（●）；図２９Ａ）に比較して、体重減少を逆転させ（図２９Ａ）；生殖腺の脂肪量の増加を誘導し（図２９Ｂ）；また、腓腹筋の筋肉量の増加を誘導し（図２９Ｃ）、これらのレベルは非担癌マウス（ＳＨＡＭ（▲）；図２９Ａ）で見出されるレベルに類似していた。図２９Ａの矢印は、抗体の腹腔内注射を示す。
【図２９Ｂ】ＨＴ−１０８０線維肉腫腫瘍異種移植モデルを担持する免疫能のないマウス（ＩＣＲ−ＳＣＩＤ）における、１０ｍｇ／ｋｇで投与された抗ＧＤＦ１５抗体Ｈｕ０１Ｇ０６−１２７（■）の抗悪液質活性を実証する実験からの結果を要約するグラフである。抗体Ｈｕ０１Ｇ０６−１２７による処置は、陰性対照（ｈＩｇＧ（●）；図２９Ａ）に比較して、体重減少を逆転させ（図２９Ａ）；生殖腺の脂肪量の増加を誘導し（図２９Ｂ）；また、腓腹筋の筋肉量の増加を誘導し（図２９Ｃ）、これらのレベルは非担癌マウス（ＳＨＡＭ（▲）；図２９Ａ）で見出されるレベルに類似していた。図２９Ａの矢印は、抗体の腹腔内注射を示す。
【図２９Ｃ】ＨＴ−１０８０線維肉腫腫瘍異種移植モデルを担持する免疫能のないマウス（ＩＣＲ−ＳＣＩＤ）における、１０ｍｇ／ｋｇで投与された抗ＧＤＦ１５抗体Ｈｕ０１Ｇ０６−１２７（■）の抗悪液質活性を実証する実験からの結果を要約するグラフである。抗体Ｈｕ０１Ｇ０６−１２７による処置は、陰性対照（ｈＩｇＧ（●）；図２９Ａ）に比較して、体重減少を逆転させ（図２９Ａ）；生殖腺の脂肪量の増加を誘導し（図２９Ｂ）；また、腓腹筋の筋肉量の増加を誘導し（図２９Ｃ）、これらのレベルは非担癌マウス（ＳＨＡＭ（▲）；図２９Ａ）で見出されるレベルに類似していた。図２９Ａの矢印は、抗体の腹腔内注射を示す。
【発明を実施するための形態】
【００１７】
本明細書に開示の抗ＧＤＦ１５抗体は、ヒトＧＤＦ１５（ｈＧＤＦ１５）の結合および中和に基づいて選択された特定のモノクローナル抗体の抗原結合部位に基づいている。これらの抗体は、ｈＧＤＦ１５に対する結合部位を画定する、免疫グロブリン可変領域ＣＤＲ配列を含有する。
【００１８】
これらの抗体は、その中和活性によって、悪液質および／または筋肉減少症を治療するために有用である。治療薬として使用するために、これらの抗体は、ヒト患者に投与した際の免疫応答を最小化または排除するように操作することができる。本発明の種々の特徴および態様を以下でより詳細に考察する。
【００１９】
本明細書の用法では、「悪液質」は、基礎疾患に関連する、不随意性の筋肉量減少を特徴とするメタボリック症候群を意味する。悪液質には、不随意性の体重減少、脂肪量の減少、食欲減退、炎症、インスリン抵抗性、疲労、脱力感、顕著な食欲不振、および／または筋肉タンパク質分解の増大が付随することが多い。悪液質は、飢餓、筋肉量の加齢性の減少、吸収障害、および甲状腺機能亢進症とは別のものである。悪液質に関連した基礎疾患としては、癌、慢性心不全、慢性腎疾患、ＣＯＰＤ、ＡＩＤＳ、多発性硬化症、関節リウマチ、敗血症、および結核が挙げられる。
【００２０】
本明細書の用法では、「筋肉減少症」は、主として骨格筋量および筋力の低下を特徴とする病態であると考えられる。筋肉減少症は、加齢に伴うことが多い。Ｒｕｅｇｇ  ａｎｄ  Ｇｌａｓｓ（２０１１）ＡＮＮＵＡＬ  ＲＥＶ．ＰＨＡＲＭＡＣＯＬ．ＴＯＸＩＣＯＬ．５１：３７３−３９５を参照されたい。１つのアプローチでは、被験体の四肢の骨格筋量を被験体の身長（メートル単位）で割った値が、若齢の正常平均値よりも２標準偏差を超えて低い場合に、その被験体が筋肉減少症であると特定することができる。（Ｔｈｏｍａｓ（２００７）前出；Ｂａｕｍｇａｒｔｎｅｒ  ｅｔ  ａｌ．（１９９９）ＭＥＣＨ．ＡＧＥＩＮＧ  ＤＥＶ．１４７：７５５−７６３も参照のこと）。
【００２１】
本明細書の用法では、特に断りのない限り、「抗体」は、無処理抗体または修飾または遺伝子改変された、またはヒト抗体である抗原結合性断片をはじめとする、無処理抗体（例えば無処理モノクローナル抗体）または抗体の抗原結合性断片を意味する。修飾または遺伝子改変されている抗体の例は、キメラ抗体、ヒト化抗体、および多特異性抗体（例えば二重特異性抗体）である。抗原結合性断片の例としては、Ｆａｂ、Ｆａｂ’、Ｆ（ａｂ’）２、Ｆｖ、一本鎖抗体（例えばｓｃＦｖ）、小型抗体、および二特異性抗体が挙げられる。
【００２２】
Ｉ．ＧＤＦ１５に結合する抗体
本明細書にて開示される抗体は、（ａ）構造ＣＤＲＨ１−ＣＤＲＨ２−ＣＤＲＨ３を含む免疫グロブリン重鎖可変領域と、（ｂ）構造ＣＤＲＬ１−ＣＤＲＬ２−ＣＤＲＬ３を含む免疫グロブリン軽鎖可変領域とを含んでなり、重鎖可変領域と軽鎖可変領域は組み合わさって、ｈＧＤＦ１５タンパク質に結合する単一結合部位を画定する。
【００２３】
いくつかの実施形態では、抗体は、（ａ）構造ＣＤＲＨ１−ＣＤＲＨ２−ＣＤＲＨ３  を含む免疫グロブリン重鎖可変領域と、（ｂ）免疫グロブリン軽鎖可変領域とを含んでなり、重鎖可変領域と軽鎖可変領域は組み合わさって、ｈＧＤＦ１５に結合する単一結合部位を画定する。ＣＤＲＨ１は、配列番号１（０１Ｇ０６、０８Ｇ０１、Ｃｈ０１Ｇ０６  Ｃｈｉｍｅｒｉｃ、Ｈｕ０１Ｇ０６  ＩＧＨＶ１−１８、Ｈｕ０１Ｇ０６  ＩＧＨＶ１−６９、Ｓｈ０１Ｇ０６  ＩＧＨＶ１−１８  Ｍ６９Ｌ、Ｓｈ０１Ｇ０６  ＩＧＨＶ１−１８  Ｍ６９Ｌ  Ｋ６４Ｑ  Ｇ４４Ｓ、Ｓｈ０１Ｇ０６  ＩＧＨＶ１−１８  Ｍ６９Ｌ  Ｋ６４Ｑ、Ｓｈ０１Ｇ０６  ＩＧＨＶ１−６９  Ｔ３０Ｓ  Ｉ６９Ｌ、Ｓｈ０１Ｇ０６  ＩＧＨＶ１−６９  Ｔ３０Ｓ  Ｋ６４Ｑ  Ｉ６９Ｌ、Ｈｕ０１Ｇ０６  ＩＧＨＶ１−１８  Ｆ１、Ｈｕ０１Ｇ０６  ＩＧＨＶ１−１８  Ｆ２、Ｈｕ０１Ｇ０６  ＩＧＨＶ１−６９  Ｆ１、Ｈｕ０１Ｇ０６  ＩＧＨＶ１−６９  Ｆ２）、配列番号２（０３Ｇ０５）、配列番号３（０４Ｆ０８）、配列番号４（０６Ｃ１１、Ｃｈ０６Ｃ１１  Ｃｈｉｍｅｒｉｃ、ＨＥ  ＬＭ  ０６Ｃ１１  ＩＧＨＶ２−７０、Ｈｕ０６Ｃ１１  ＩＧＨＶ２−５）、配列番号５（１４Ｆ１１、Ｃｈ１４Ｆ１１  Ｃｈｉｍｅｒｉｃ、Ｓｈ１４Ｆ１１  ＩＧＨＶ２−５、Ｓｈ１４Ｆ１１  ＩＧＨＶ２−７０）、および配列番号６（１７Ｂ１１）からなる群から選択されるアミノ酸配列を含んでなり；ＣＤＲＨ２は、配列番号７（０１Ｇ０６、Ｃｈ０１Ｇ０６  Ｃｈｉｍｅｒｉｃ、Ｈｕ０１Ｇ０６  ＩＧＨＶ１−１８、Ｈｕ０１Ｇ０６
ＩＧＨＶ１−６９、Ｓｈ０１Ｇ０６  ＩＧＨＶ１−１８  Ｍ６９Ｌ、Ｓｈ０１Ｇ０６  ＩＧＨＶ１−６９  Ｔ３０Ｓ  Ｉ６９Ｌ）、配列番号８（０３Ｇ０５）、配列番号９（０４Ｆ０８、０６Ｃ１１、Ｃｈ０６Ｃ１１  Ｃｈｉｍｅｒｉｃ、Ｈｕ０６Ｃ１１  ＩＧＨＶ２−５）、配列番号１０（０８Ｇ０１）、配列番号１１（１４Ｆ１１、Ｃｈ１４Ｆ１１  Ｃｈｉｍｅｒｉｃ、Ｓｈ１４Ｆ１１  ＩＧＨＶ２−５、Ｓｈ１４Ｆ１１  ＩＧＨＶ２−７０）、配列番号１２（１７Ｂ１１）、配列番号１３（Ｓｈ０１Ｇ０６  ＩＧＨＶ１−１８
Ｍ６９Ｌ  Ｋ６４Ｑ  Ｇ４４Ｓ、Ｓｈ０１Ｇ０６  ＩＧＨＶ１−１８  Ｍ６９Ｌ  Ｋ６４Ｑ、Ｓｈ０１Ｇ０６  ＩＧＨＶ１−６９  Ｔ３０Ｓ  Ｋ６４Ｑ  Ｉ６９Ｌ）、配列番号２３６（Ｈｕ０１Ｇ０６  ＩＧＨＶ１−１８  Ｆ１）、配列番号２３７（Ｈｕ０１Ｇ０６
ＩＧＨＶ１−１８  Ｆ２）、配列番号２３８（Ｈｕ０１Ｇ０６  ＩＧＨＶ１−６９  Ｆ１）、配列番号２３９（Ｈｕ０１Ｇ０６  ＩＧＨＶ１−６９  Ｆ２）、および配列番号１４（ＨＥ  ＬＭ  ０６Ｃ１１  ＩＧＨＶ２−７０）からなる群から選択されるアミノ酸配列を含んでなり；ＣＤＲＨ３は、配列番号１５（０１Ｇ０６、０８Ｇ０１、Ｃｈ０１Ｇ０６  Ｃｈｉｍｅｒｉｃ、Ｈｕ０１Ｇ０６  ＩＧＨＶ１−１８、Ｈｕ０１Ｇ０６  ＩＧＨＶ１−６９、Ｓｈ０１Ｇ０６  ＩＧＨＶ１−１８  Ｍ６９Ｌ、Ｓｈ０１Ｇ０６  ＩＧＨＶ１−１８  Ｍ６９Ｌ  Ｋ６４Ｑ  Ｇ４４Ｓ、Ｓｈ０１Ｇ０６  ＩＧＨＶ１−１８  Ｍ６９Ｌ
Ｋ６４Ｑ、Ｓｈ０１Ｇ０６  ＩＧＨＶ１−６９  Ｔ３０Ｓ  Ｉ６９Ｌ、Ｓｈ０１Ｇ０６
ＩＧＨＶ１−６９  Ｔ３０Ｓ  Ｋ６４Ｑ  Ｉ６９Ｌ、Ｈｕ０１Ｇ０６  ＩＧＨＶ１−１８  Ｆ１、Ｈｕ０１Ｇ０６  ＩＧＨＶ１−１８  Ｆ２、Ｈｕ０１Ｇ０６  ＩＧＨＶ１−６９  Ｆ１、Ｈｕ０１Ｇ０６  ＩＧＨＶ１−６９  Ｆ２）、配列番号１６（０３Ｇ０５）、配列番号１７（０４Ｆ０８）、配列番号１８（０６Ｃ１１、Ｃｈ０６Ｃ１１  Ｃｈｉｍｅｒｉｃ、ＨＥ  ＬＭ  ０６Ｃ１１  ＩＧＨＶ２−７０、Ｈｕ０６Ｃ１１  ＩＧＨＶ２−５）、配列番号１９（１４Ｆ１１、Ｃｈ１４Ｆ１１  Ｃｈｉｍｅｒｉｃ、Ｓｈ１４Ｆ１１  ＩＧＨＶ２−５、Ｓｈ１４Ｆ１１  ＩＧＨＶ２−７０）、および配列番号２０（１７Ｂ１１）からなる群から選択されるアミノ酸配列を含む。本明細書の全体を通して、特定の配列番号の後に、その配列の元となった抗体を括弧内に示す。例えば、「配列番号２（０３Ｇ０５）」は、配列番号２が抗体０３Ｇ０５に由来することを意味する。
【００２４】
いくつかの実施形態では、抗体は、配列番号１（０１Ｇ０６、Ｃｈ０１Ｇ０６  Ｃｈｉｍｅｒｉｃ、Ｈｕ０１Ｇ０６  ＩＧＨＶ１−１８、Ｈｕ０１Ｇ０６  ＩＧＨＶ１−６９、Ｓｈ０１Ｇ０６  ＩＧＨＶ１−６９  Ｔ３０Ｓ  Ｉ６９Ｌ、Ｈｕ０１Ｇ０６  ＩＧＨＶ１−１８  Ｆ１、Ｈｕ０１Ｇ０６  ＩＧＨＶ１−１８  Ｆ２、Ｈｕ０１Ｇ０６  ＩＧＨＶ１−６９  Ｆ１、Ｈｕ０１Ｇ０６  ＩＧＨＶ１−６９  Ｆ２）のアミノ酸配列を含むＣＤＲＨ１、配列番号７（０１Ｇ０６、Ｃｈ０１Ｇ０６  Ｃｈｉｍｅｒｉｃ、Ｈｕ０１Ｇ０６  ＩＧＨＶ１−１８、Ｈｕ０１Ｇ０６  ＩＧＨＶ１−６９、Ｓｈ０１Ｇ０６  ＩＧＨＶ１−６９  Ｔ３０Ｓ  Ｉ６９Ｌ）のアミノ酸配列を含むＣＤＲＨ２、および配列番号１５（０１Ｇ０６、Ｃｈ０１Ｇ０６  Ｃｈｉｍｅｒｉｃ、Ｈｕ０１Ｇ０６  ＩＧＨＶ１−１８、Ｈｕ０１Ｇ０６  ＩＧＨＶ１−６９、Ｓｈ０１Ｇ０６  ＩＧＨＶ１−６９  Ｔ３０Ｓ  Ｉ６９Ｌ、Ｈｕ０１Ｇ０６  ＩＧＨＶ１−１８  Ｆ１、Ｈｕ０１Ｇ０６  ＩＧＨＶ１−１８  Ｆ２、Ｈｕ０１Ｇ０６  ＩＧＨＶ１−６９  Ｆ１、Ｈｕ０１Ｇ０６  ＩＧＨＶ１−６９  Ｆ２）のアミノ酸配列を含むＣＤＲＨ３を含む免疫グロブリン重鎖可変領域を含む。
【００２５】
いくつかの実施形態では、抗体は、配列番号２（０３Ｇ０５）のアミノ酸配列を含むＣＤＲＨ１、配列番号８（０３Ｇ０５）のアミノ酸配列を含むＣＤＲＨ２、および配列番号１６（０３Ｇ０５）のアミノ酸配列を含むＣＤＲＨ３を含む免疫グロブリン重鎖可変領域を含む。
【００２６】
いくつかの実施形態では、抗体は、配列番号３（０４Ｆ０８）のアミノ酸配列を含むＣＤＲＨ１、配列番号９（０４Ｆ０８）のアミノ酸配列を含むＣＤＲＨ２、および配列番号１７（０４Ｆ０８）のアミノ酸配列を含むＣＤＲＨ３を含む免疫グロブリン重鎖可変領域を含む。
【００２７】
いくつかの実施形態では、抗体は、配列番号４（０６Ｃ１１、Ｃｈ０６Ｃ１１  Ｃｈｉｍｅｒｉｃ、Ｈｕ０６Ｃ１１  ＩＧＨＶ２−５）のアミノ酸配列を含むＣＤＲＨ１、配列番号９（０６Ｃ１１、Ｃｈ０６Ｃ１１  Ｃｈｉｍｅｒｉｃ、Ｈｕ０６Ｃ１１  ＩＧＨＶ２−５）のアミノ酸配列を含むＣＤＲＨ２、および配列番号１８（０６Ｃ１１、Ｃｈ０６Ｃ１１  Ｃｈｉｍｅｒｉｃ、Ｈｕ０６Ｃ１１  ＩＧＨＶ２−５）のアミノ酸配列を含むＣＤＲＨ３を含む免疫グロブリン重鎖可変領域を含む。
【００２８】
いくつかの実施形態では、抗体は、配列番号１（０８Ｇ０１）のアミノ酸配列を含むＣＤＲＨ１、配列番号１０（０８Ｇ０１）のアミノ酸配列を含むＣＤＲＨ２、および配列番号１５（０８Ｇ０１）のアミノ酸配列を含むＣＤＲＨ３を含む免疫グロブリン重鎖可変領域を含む。
【００２９】
いくつかの実施形態では、抗体は、配列番号５（１４Ｆ１１、Ｃｈ１４Ｆ１１  Ｃｈｉｍｅｒｉｃ、Ｓｈ１４Ｆ１１  ＩＧＨＶ２−５、Ｓｈ１４Ｆ１１  ＩＧＨＶ２−７０）のアミノ酸配列を含むＣＤＲＨ１、配列番号１１（１４Ｆ１１、Ｃｈ１４Ｆ１１  Ｃｈｉｍｅｒｉｃ、Ｓｈ１４Ｆ１１  ＩＧＨＶ２−５、Ｓｈ１４Ｆ１１  ＩＧＨＶ２−７０）のアミノ酸配列を含むＣＤＲＨ２、および配列番号１９（１４Ｆ１１、Ｃｈ１４Ｆ１１  Ｃｈｉｍｅｒｉｃ、Ｓｈ１４Ｆ１１  ＩＧＨＶ２−５、Ｓｈ１４Ｆ１１  ＩＧＨＶ２−７０）のアミノ酸配列を含むＣＤＲＨ３を含む免疫グロブリン重鎖可変領域を含む。
【００３０】
いくつかの実施形態では、抗体は、配列番号６（１７Ｂ１１）のアミノ酸配列を含むＣＤＲＨ１、配列番号１２（１７Ｂ１１）のアミノ酸配列を含むＣＤＲＨ２、および配列番号２０（１７Ｂ１１）のアミノ酸配列を含むＣＤＲＨ３を含む免疫グロブリン重鎖可変領域を含む。
【００３１】
いくつかの実施形態では、抗体は、配列番号１（Ｓｈ０１Ｇ０６  ＩＧＨＶ１−１８  Ｍ６９Ｌ  Ｋ６４Ｑ  Ｇ４４Ｓ、Ｓｈ０１Ｇ０６  ＩＧＨＶ１−１８  Ｍ６９Ｌ  Ｋ６４Ｑ、Ｓｈ０１Ｇ０６  ＩＧＨＶ１−６９  Ｔ３０Ｓ  Ｋ６４Ｑ  Ｉ６９Ｌ、Ｈｕ０１Ｇ０６  ＩＧＨＶ１−１８  Ｆ１、Ｈｕ０１Ｇ０６  ＩＧＨＶ１−１８  Ｆ２、Ｈｕ０１Ｇ０６  ＩＧＨＶ１−６９  Ｆ１、Ｈｕ０１Ｇ０６  ＩＧＨＶ１−６９  Ｆ２）のアミノ酸配列を含むＣＤＲＨ１、配列番号１３（Ｓｈ０１Ｇ０６  ＩＧＨＶ１−１８  Ｍ６９Ｌ  Ｋ６４Ｑ  Ｇ４４Ｓ、Ｓｈ０１Ｇ０６  ＩＧＨＶ１−１８  Ｍ６９Ｌ  Ｋ６４Ｑ、Ｓｈ０１Ｇ０６  ＩＧＨＶ１−６９  Ｔ３０Ｓ  Ｋ６４Ｑ  Ｉ６９Ｌ）のアミノ酸配列を含むＣＤＲＨ２、および配列番号１５（Ｓｈ０１Ｇ０６  ＩＧＨＶ１−１８  Ｍ６９Ｌ  Ｋ６４Ｑ
Ｇ４４Ｓ、Ｓｈ０１Ｇ０６  ＩＧＨＶ１−１８  Ｍ６９Ｌ  Ｋ６４Ｑ、Ｓｈ０１Ｇ０６
ＩＧＨＶ１−６９  Ｔ３０Ｓ  Ｋ６４Ｑ  Ｉ６９Ｌ、Ｈｕ０１Ｇ０６  ＩＧＨＶ１−１８  Ｆ１、Ｈｕ０１Ｇ０６  ＩＧＨＶ１−１８  Ｆ２、Ｈｕ０１Ｇ０６  ＩＧＨＶ１−６９  Ｆ１、Ｈｕ０１Ｇ０６  ＩＧＨＶ１−６９  Ｆ２）のアミノ酸配列を含むＣＤＲＨ３を含む免疫グロブリン重鎖可変領域を含む。
【００３２】
いくつかの実施形態では、抗体は、配列番号１（Ｓｈ０１Ｇ０６  ＩＧＨＶ１−１８  Ｍ６９Ｌ  Ｋ６４Ｑ  Ｇ４４Ｓ、Ｓｈ０１Ｇ０６  ＩＧＨＶ１−１８  Ｍ６９Ｌ  Ｋ６４Ｑ、Ｓｈ０１Ｇ０６  ＩＧＨＶ１−６９  Ｔ３０Ｓ  Ｋ６４Ｑ  Ｉ６９Ｌ、Ｈｕ０１Ｇ０６  ＩＧＨＶ１−１８  Ｆ１、Ｈｕ０１Ｇ０６  ＩＧＨＶ１−１８  Ｆ２、Ｈｕ０１Ｇ０６  ＩＧＨＶ１−６９  Ｆ１、Ｈｕ０１Ｇ０６  ＩＧＨＶ１−６９  Ｆ２）のアミノ酸配列を含むＣＤＲＨ１、配列番号２３６（Ｈｕ０１Ｇ０６  ＩＧＨＶ１−１８  Ｆ１）のアミノ酸配列を含むＣＤＲＨ２、および配列番号１５（Ｓｈ０１Ｇ０６  ＩＧＨＶ１−１８
Ｍ６９Ｌ  Ｋ６４Ｑ  Ｇ４４Ｓ、Ｓｈ０１Ｇ０６  ＩＧＨＶ１−１８  Ｍ６９Ｌ  Ｋ６４Ｑ、Ｓｈ０１Ｇ０６  ＩＧＨＶ１−６９  Ｔ３０Ｓ  Ｋ６４Ｑ  Ｉ６９Ｌ、Ｈｕ０１Ｇ０６  ＩＧＨＶ１−１８  Ｆ１、Ｈｕ０１Ｇ０６  ＩＧＨＶ１−１８  Ｆ２、Ｈｕ０１Ｇ０６  ＩＧＨＶ１−６９  Ｆ１、Ｈｕ０１Ｇ０６  ＩＧＨＶ１−６９  Ｆ２）のアミノ酸配列を含むＣＤＲＨ３を含む免疫グロブリン重鎖可変領域を含む。
【００３３】
いくつかの実施形態では、抗体は、配列番号１（Ｓｈ０１Ｇ０６  ＩＧＨＶ１−１８  Ｍ６９Ｌ  Ｋ６４Ｑ  Ｇ４４Ｓ、Ｓｈ０１Ｇ０６  ＩＧＨＶ１−１８  Ｍ６９Ｌ  Ｋ６４Ｑ、Ｓｈ０１Ｇ０６  ＩＧＨＶ１−６９  Ｔ３０Ｓ  Ｋ６４Ｑ  Ｉ６９Ｌ、Ｈｕ０１Ｇ０６  ＩＧＨＶ１−１８  Ｆ１、Ｈｕ０１Ｇ０６  ＩＧＨＶ１−１８  Ｆ２、Ｈｕ０１Ｇ０６  ＩＧＨＶ１−６９  Ｆ１、Ｈｕ０１Ｇ０６  ＩＧＨＶ１−６９  Ｆ２）のアミノ酸配列を含むＣＤＲＨ１、配列番号２３７（Ｈｕ０１Ｇ０６  ＩＧＨＶ１−１８  Ｆ２）のアミノ酸配列を含むＣＤＲＨ２、および配列番号１５（Ｓｈ０１Ｇ０６  ＩＧＨＶ１−１８
Ｍ６９Ｌ  Ｋ６４Ｑ  Ｇ４４Ｓ、Ｓｈ０１Ｇ０６  ＩＧＨＶ１−１８  Ｍ６９Ｌ  Ｋ６４Ｑ、Ｓｈ０１Ｇ０６  ＩＧＨＶ１−６９  Ｔ３０Ｓ  Ｋ６４Ｑ  Ｉ６９Ｌ、Ｈｕ０１Ｇ０６  ＩＧＨＶ１−１８  Ｆ１、Ｈｕ０１Ｇ０６  ＩＧＨＶ１−１８  Ｆ２、Ｈｕ０１Ｇ０６  ＩＧＨＶ１−６９  Ｆ１、Ｈｕ０１Ｇ０６  ＩＧＨＶ１−６９  Ｆ２）のアミノ酸配列を含むＣＤＲＨ３を含む免疫グロブリン重鎖可変領域を含む。
【００３４】
いくつかの実施形態では、抗体は、配列番号１（Ｓｈ０１Ｇ０６  ＩＧＨＶ１−１８  Ｍ６９Ｌ  Ｋ６４Ｑ  Ｇ４４Ｓ、Ｓｈ０１Ｇ０６  ＩＧＨＶ１−１８  Ｍ６９Ｌ  Ｋ６４Ｑ、Ｓｈ０１Ｇ０６  ＩＧＨＶ１−６９  Ｔ３０Ｓ  Ｋ６４Ｑ  Ｉ６９Ｌ、Ｈｕ０１Ｇ０６  ＩＧＨＶ１−１８  Ｆ１、Ｈｕ０１Ｇ０６  ＩＧＨＶ１−１８  Ｆ２、Ｈｕ０１Ｇ０６  ＩＧＨＶ１−６９  Ｆ１、Ｈｕ０１Ｇ０６  ＩＧＨＶ１−６９  Ｆ２）のアミノ酸配列を含むＣＤＲＨ１、配列番号２３８（Ｈｕ０１Ｇ０６  ＩＧＨＶ１−６９  Ｆ１）のアミノ酸配列を含むＣＤＲＨ２、および配列番号１５（Ｓｈ０１Ｇ０６  ＩＧＨＶ１−１８
Ｍ６９Ｌ  Ｋ６４Ｑ  Ｇ４４Ｓ、Ｓｈ０１Ｇ０６  ＩＧＨＶ１−１８  Ｍ６９Ｌ  Ｋ６４Ｑ、Ｓｈ０１Ｇ０６  ＩＧＨＶ１−６９  Ｔ３０Ｓ  Ｋ６４Ｑ  Ｉ６９Ｌ、Ｈｕ０１Ｇ０６  ＩＧＨＶ１−１８  Ｆ１、Ｈｕ０１Ｇ０６  ＩＧＨＶ１−１８  Ｆ２、Ｈｕ０１Ｇ０６  ＩＧＨＶ１−６９  Ｆ１、Ｈｕ０１Ｇ０６  ＩＧＨＶ１−６９  Ｆ２）のアミノ酸配列を含むＣＤＲＨ３を含む免疫グロブリン重鎖可変領域を含む。
【００３５】
いくつかの実施形態では、抗体は、配列番号１（Ｓｈ０１Ｇ０６  ＩＧＨＶ１−１８  Ｍ６９Ｌ  Ｋ６４Ｑ  Ｇ４４Ｓ、Ｓｈ０１Ｇ０６  ＩＧＨＶ１−１８  Ｍ６９Ｌ  Ｋ６４Ｑ、Ｓｈ０１Ｇ０６  ＩＧＨＶ１−６９  Ｔ３０Ｓ  Ｋ６４Ｑ  Ｉ６９Ｌ、Ｈｕ０１Ｇ０６  ＩＧＨＶ１−１８  Ｆ１、Ｈｕ０１Ｇ０６  ＩＧＨＶ１−１８  Ｆ２、Ｈｕ０１Ｇ０６  ＩＧＨＶ１−６９  Ｆ１、Ｈｕ０１Ｇ０６  ＩＧＨＶ１−６９  Ｆ２）のアミノ酸配列を含むＣＤＲＨ１、配列番号２３９（Ｈｕ０１Ｇ０６  ＩＧＨＶ１−６９  Ｆ２）のアミノ酸配列を含むＣＤＲＨ２、および配列番号１５（Ｓｈ０１Ｇ０６  ＩＧＨＶ１−１８
Ｍ６９Ｌ  Ｋ６４Ｑ  Ｇ４４Ｓ、Ｓｈ０１Ｇ０６  ＩＧＨＶ１−１８  Ｍ６９Ｌ  Ｋ６４Ｑ、Ｓｈ０１Ｇ０６  ＩＧＨＶ１−６９  Ｔ３０Ｓ  Ｋ６４Ｑ  Ｉ６９Ｌ、Ｈｕ０１Ｇ０６  ＩＧＨＶ１−１８  Ｆ１、Ｈｕ０１Ｇ０６  ＩＧＨＶ１−１８  Ｆ２、Ｈｕ０１Ｇ０６  ＩＧＨＶ１−６９  Ｆ１、Ｈｕ０１Ｇ０６  ＩＧＨＶ１−６９  Ｆ２）のアミノ酸配列を含むＣＤＲＨ３を含む免疫グロブリン重鎖可変領域を含む。
【００３６】
いくつかの実施形態では、抗体は、配列番号４（ＨＥ  ＬＭ  ０６Ｃ１１  ＩＧＨＶ２−７０）のアミノ酸配列を含むＣＤＲＨ１、配列番号１４（ＨＥ  ＬＭ  ０６Ｃ１１  ＩＧＨＶ２−７０）のアミノ酸配列を含むＣＤＲＨ２、および配列番号１８（ＨＥ  ＬＭ  ０６Ｃ１１  ＩＧＨＶ２−７０）のアミノ酸配列を含むＣＤＲＨ３を含む免疫グロブリン重鎖可変領域を含む。
【００３７】
好適には、ＣＤＲＨ１、ＣＤＲＨ２、およびＣＤＲＨ３配列は、完全なヒトまたはヒト化免疫グロブリンＦＲ配列の間に挿入される。
【００３８】
ある実施形態では、抗体は、（ａ）構造ＣＤＲＬ１−ＣＤＲＬ２−ＣＤＲＬ３を含む免疫グロブリン軽鎖可変領域と、（ｂ）免疫グロブリン重鎖可変領域とを含んでなり、免疫グロブリン軽鎖可変領域と免疫グロブリン重鎖可変領域は組み合わさって、ｈＧＤＦ１５に結合する単一結合部位を画定する。ＣＤＲＬ１は、配列番号２１（０１Ｇ０６、Ｃｈ０１Ｇ０６  Ｃｈｉｍｅｒｉｃ、Ｈｕ０１Ｇ０６  ＩＧＫＶ１−３９、Ｈｕ０１Ｇ０６  ＩＧＫＶ１−３９  Ｓ４３Ａ  Ｖ４８Ｉ、Ｈｕ０１Ｇ０６  ＩＧＫＶ１−３９  Ｖ４８Ｉ、Ｈｕ０１Ｇ０６  ＩＧＫＶ１−３９  Ｆ１、Ｈｕ０１Ｇ０６  ＩＧＫＶ１−３９  Ｆ２）、配列番号２２（０３Ｇ０５）、配列番号２３（０４Ｆ０８、０６Ｃ１１、Ｃｈ０６Ｃ１１  Ｃｈｉｍｅｒｉｃ、Ｓｈ０６Ｃ１１  ＩＧＫＶ１−１６、１４Ｆ１１、Ｃｈ１４Ｆ１１  Ｃｈｉｍｅｒｉｃ、Ｈｕ１４Ｆ１１  ＩＧＫＶ１−１６）、配列番号２４（０８Ｇ０１）、および配列番号２５（１７Ｂ１１）からなる群から選択されるアミノ酸配列を含んでなり；ＣＤＲＬ２は、配列番号２６（０１Ｇ０６、Ｃｈ０１Ｇ０６  Ｃｈｉｍｅｒｉｃ、Ｈｕ０１Ｇ０６  ＩＧＫＶ１−３９、Ｈｕ０１Ｇ０６  ＩＧＫＶ１−３９  Ｓ４３Ａ  Ｖ４８Ｉ、Ｈｕ０１Ｇ０６  ＩＧＫＶ１−３９  Ｖ４８Ｉ、Ｈｕ０１Ｇ０６  ＩＧＫＶ１−３９  Ｆ１、Ｈｕ０１Ｇ０６  ＩＧＫＶ１−３９  Ｆ２）、配列番号２７（０３Ｇ０５）、配列番号２８（０４Ｆ０８、０６Ｃ１１、Ｃｈ０６Ｃ１１  Ｃｈｉｍｅｒｉｃ、Ｓｈ０６Ｃ１１  ＩＧＫＶ１−１６）、配列番号２９（０８Ｇ０１）、配列番号３０（１４Ｆ１１、Ｃｈ１４Ｆ１１  Ｃｈｉｍｅｒｉｃ、Ｈｕ１４Ｆ１１  ＩＧＫＶ１−１６）、および配列番号３１（１７Ｂ１１）からなる群から選択されるアミノ酸配列を含んでなり；ＣＤＲＬ３は、配列番号３２（０１Ｇ０６、Ｃｈ０１Ｇ０６  Ｃｈｉｍｅｒｉｃ、Ｈｕ０１Ｇ０６  ＩＧＫＶ１−３９、Ｈｕ０１Ｇ０６  ＩＧＫＶ１−３９  Ｓ４３Ａ  Ｖ４８Ｉ、Ｈｕ０１Ｇ０６  ＩＧＫＶ１−３９  Ｖ４８Ｉ、０８Ｇ０１、Ｈｕ０１Ｇ０６  ＩＧＫＶ１−３９  Ｆ１）、配列番号２４４（Ｈｕ０１Ｇ０６  ＩＧＫＶ１−３９  Ｆ２）、配列番号３３（０３Ｇ０５）、配列番号３４（０４Ｆ０８）、配列番号３５（０６Ｃ１１、Ｃｈ０６Ｃ１１  Ｃｈｉｍｅｒｉｃ、Ｓｈ０６Ｃ１１  ＩＧＫＶ１−１６）、配列番号３６（１４Ｆ１１、Ｃｈ１４Ｆ１１  Ｃｈｉｍｅｒｉｃ、Ｈｕ１４Ｆ１１  ＩＧＫＶ１−１６）、および配列番号３７（１７Ｂ１１）からなる群から選択されるアミノ酸配列を含む。
【００３９】
いくつかの実施形態では、抗体は、配列番号２１（０１Ｇ０６、Ｃｈ０１Ｇ０６  Ｃｈｉｍｅｒｉｃ、Ｈｕ０１Ｇ０６  ＩＧＫＶ１−３９、Ｈｕ０１Ｇ０６  ＩＧＫＶ１−３９
Ｓ４３Ａ  Ｖ４８Ｉ、Ｈｕ０１Ｇ０６  ＩＧＫＶ１−３９  Ｖ４８Ｉ、Ｈｕ０１Ｇ０６
ＩＧＫＶ１−３９  Ｆ１、Ｈｕ０１Ｇ０６  ＩＧＫＶ１−３９  Ｆ２）のアミノ酸配列を含むＣＤＲＬ１、配列番号２６（０１Ｇ０６、Ｃｈ０１Ｇ０６  Ｃｈｉｍｅｒｉｃ、Ｈｕ０１Ｇ０６  ＩＧＫＶ１−３９、Ｈｕ０１Ｇ０６  ＩＧＫＶ１−３９  Ｓ４３Ａ  Ｖ４８Ｉ、Ｈｕ０１Ｇ０６  ＩＧＫＶ１−３９  Ｖ４８Ｉ、Ｈｕ０１Ｇ０６  ＩＧＫＶ１−３９  Ｆ１、Ｈｕ０１Ｇ０６  ＩＧＫＶ１−３９  Ｆ２）のアミノ酸配列を含むＣＤＲＬ２、および配列番号３２（０１Ｇ０６、Ｃｈ０１Ｇ０６  Ｃｈｉｍｅｒｉｃ、Ｈｕ０１Ｇ０６  ＩＧＫＶ１−３９、Ｈｕ０１Ｇ０６  ＩＧＫＶ１−３９  Ｓ４３Ａ  Ｖ４８Ｉ、Ｈｕ０１Ｇ０６  ＩＧＫＶ１−３９  Ｖ４８Ｉ、Ｈｕ０１Ｇ０６  ＩＧＫＶ１−３９  Ｆ１）のアミノ酸配列を含むＣＤＲＬ３を含む免疫グロブリン軽鎖可変領域を含む。
【００４０】
いくつかの実施形態では、抗体は、配列番号２１（０１Ｇ０６、Ｃｈ０１Ｇ０６  Ｃｈｉｍｅｒｉｃ、Ｈｕ０１Ｇ０６  ＩＧＫＶ１−３９、Ｈｕ０１Ｇ０６  ＩＧＫＶ１−３９
Ｓ４３Ａ  Ｖ４８Ｉ、Ｈｕ０１Ｇ０６  ＩＧＫＶ１−３９  Ｖ４８Ｉ、Ｈｕ０１Ｇ０６
ＩＧＫＶ１−３９  Ｆ１、Ｈｕ０１Ｇ０６  ＩＧＫＶ１−３９  Ｆ２）のアミノ酸配列を含むＣＤＲＬ１、配列番号２６（０１Ｇ０６、Ｃｈ０１Ｇ０６  Ｃｈｉｍｅｒｉｃ、Ｈｕ０１Ｇ０６  ＩＧＫＶ１−３９、Ｈｕ０１Ｇ０６  ＩＧＫＶ１−３９  Ｓ４３Ａ  Ｖ４８Ｉ、Ｈｕ０１Ｇ０６  ＩＧＫＶ１−３９  Ｖ４８Ｉ、Ｈｕ０１Ｇ０６  ＩＧＫＶ１−３９  Ｆ１、Ｈｕ０１Ｇ０６  ＩＧＫＶ１−３９  Ｆ２）のアミノ酸配列を含むＣＤＲＬ２、および配列番号２４４（Ｈｕ０１Ｇ０６  ＩＧＫＶ１−３９  Ｆ２）のアミノ酸配列を含むＣＤＲＬ３を含む免疫グロブリン軽鎖可変領域を含む。
【００４１】
いくつかの実施形態では、抗体は、配列番号２２（０３Ｇ０５）のアミノ酸配列を含むＣＤＲＬ１、配列番号２７（０３Ｇ０５）のアミノ酸配列を含むＣＤＲＬ２、および配列番号３３（０３Ｇ０５）のアミノ酸配列を含むＣＤＲＬ３を含む免疫グロブリン軽鎖可変領域を含む。
【００４２】
いくつかの実施形態では、抗体は、配列番号２３（０４Ｆ０８）のアミノ酸配列を含むＣＤＲＬ１、配列番号２８（０４Ｆ０８）のアミノ酸配列を含むＣＤＲＬ２、および配列番号３４（０４Ｆ０８）のアミノ酸配列を含むＣＤＲＬ３を含む免疫グロブリン軽鎖可変領域を含む。
【００４３】
いくつかの実施形態では、抗体は、配列番号２３（０６Ｃ１１、Ｃｈ０６Ｃ１１  Ｃｈｉｍｅｒｉｃ、Ｓｈ０６Ｃ１１  ＩＧＫＶ１−１６）のアミノ酸配列を含むＣＤＲＬ１、配列番号２８（０６Ｃ１１、Ｃｈ０６Ｃ１１  Ｃｈｉｍｅｒｉｃ、Ｓｈ０６Ｃ１１  ＩＧＫＶ１−１６）のアミノ酸配列を含むＣＤＲＬ２、および配列番号３５（０６Ｃ１１、Ｃｈ０６Ｃ１１  Ｃｈｉｍｅｒｉｃ、Ｓｈ０６Ｃ１１  ＩＧＫＶ１−１６）のアミノ酸配列を含むＣＤＲＬ３を含む免疫グロブリン軽鎖可変領域を含む。
【００４４】
いくつかの実施形態では、抗体は、配列番号２４（０８Ｇ０１）のアミノ酸配列を含むＣＤＲＬ１、配列番号２９（０８Ｇ０１）のアミノ酸配列を含むＣＤＲＬ２、および配列番号３２（０８Ｇ０１）のアミノ酸配列を含むＣＤＲＬ３を含む免疫グロブリン軽鎖可変領域を含む。
【００４５】
いくつかの実施形態では、抗体は、配列番号２３（１４Ｆ１１、Ｃｈ１４Ｆ１１  Ｃｈｉｍｅｒｉｃ、Ｈｕ１４Ｆ１１  ＩＧＫＶ１−１６）のアミノ酸配列を含むＣＤＲＬ１、配列番号３０（１４Ｆ１１、Ｃｈ１４Ｆ１１  Ｃｈｉｍｅｒｉｃ、Ｈｕ１４Ｆ１１  ＩＧＫＶ１−１６）のアミノ酸配列を含むＣＤＲＬ２、および配列番号３６（１４Ｆ１１、Ｃｈ１４Ｆ１１  Ｃｈｉｍｅｒｉｃ、Ｈｕ１４Ｆ１１  ＩＧＫＶ１−１６）のアミノ酸配列を含むＣＤＲＬ３を含む免疫グロブリン軽鎖可変領域を含む。
【００４６】
いくつかの実施形態では、抗体は、配列番号２５（１７Ｂ１１）のアミノ酸配列を含むＣＤＲＬ１、配列番号３１（１７Ｂ１１）のアミノ酸配列を含むＣＤＲＬ２、および配列番号３７（１７Ｂ１１）のアミノ酸配列を含むＣＤＲＬ３を含む免疫グロブリン軽鎖可変領域を含む。
【００４７】
好適には、ＣＤＲＬ１、ＣＤＲＬ２、およびＣＤＲＬ３配列は、完全なヒトまたはヒト化免疫グロブリンＦＲ配列の間に挿入される。
【００４８】
いくつかの実施形態では、抗体は、（ａ）構造ＣＤＲＨ１−ＣＤＲＨ２−ＣＤＲＨ３を含む免疫グロブリン重鎖可変領域と、（ｂ）構造ＣＤＲＬ１−ＣＤＲＬ２−ＣＤＲＬ３を含む免疫グロブリン軽鎖可変領域とを含んでなり、重鎖可変領域と軽鎖可変領域は組み合わさって、ｈＧＤＦ１５に結合する単一結合部位を画定する。ＣＤＲＨ１は、配列番号１（０１Ｇ０６、０８Ｇ０１、Ｃｈ０１Ｇ０６  Ｃｈｉｍｅｒｉｃ、Ｈｕ０１Ｇ０６  ＩＧＨＶ１−１８、Ｈｕ０１Ｇ０６  ＩＧＨＶ１−６９、Ｓｈ０１Ｇ０６  ＩＧＨＶ１−１８  Ｍ６９Ｌ、Ｓｈ０１Ｇ０６  ＩＧＨＶ１−１８  Ｍ６９Ｌ  Ｋ６４Ｑ  Ｇ４４Ｓ、Ｓｈ０１Ｇ０６  ＩＧＨＶ１−１８  Ｍ６９Ｌ  Ｋ６４Ｑ、Ｓｈ０１Ｇ０６  ＩＧＨＶ１−６９  Ｔ３０Ｓ  Ｉ６９Ｌ、Ｓｈ０１Ｇ０６  ＩＧＨＶ１−６９  Ｔ３０Ｓ  Ｋ６４Ｑ  Ｉ６９Ｌ、Ｈｕ０１Ｇ０６  ＩＧＨＶ１−１８  Ｆ１、Ｈｕ０１Ｇ０６  ＩＧＨＶ１−１８
Ｆ２、Ｈｕ０１Ｇ０６  ＩＧＨＶ１−６９  Ｆ１、Ｈｕ０１Ｇ０６  ＩＧＨＶ１−６９
Ｆ２）、配列番号２（０３Ｇ０５）、配列番号３（０４Ｆ０８）、配列番号４（０６Ｃ１１、Ｃｈ０６Ｃ１１  Ｃｈｉｍｅｒｉｃ、ＨＥ  ＬＭ  ０６Ｃ１１  ＩＧＨＶ２−７０、Ｈｕ０６Ｃ１１  ＩＧＨＶ２−５）、配列番号５（１４Ｆ１１、Ｃｈ１４Ｆ１１  Ｃｈｉｍｅｒｉｃ、Ｓｈ１４Ｆ１１  ＩＧＨＶ２−５、Ｓｈ１４Ｆ１１  ＩＧＨＶ２−７０）、および配列番号６（１７Ｂ１１）からなる群から選択されるアミノ酸配列であり；ＣＤＲＨ２は、配列番号７（０１Ｇ０６、Ｃｈ０１Ｇ０６  Ｃｈｉｍｅｒｉｃ、Ｈｕ０１Ｇ０６  ＩＧＨＶ１−１８、Ｈｕ０１Ｇ０６  ＩＧＨＶ１−６９、Ｓｈ０１Ｇ０６  ＩＧＨＶ１−１８  Ｍ６９Ｌ、Ｓｈ０１Ｇ０６  ＩＧＨＶ１−６９  Ｔ３０Ｓ  Ｉ６９Ｌ）、配列番号８（０３Ｇ０５）、配列番号９（０４Ｆ０８、０６Ｃ１１、Ｃｈ０６Ｃ１１  Ｃｈｉｍｅｒｉｃ、Ｈｕ０６Ｃ１１  ＩＧＨＶ２−５）、配列番号１０（０８Ｇ０１）、配列番号１１（１４Ｆ１１、Ｃｈ１４Ｆ１１  Ｃｈｉｍｅｒｉｃ、Ｓｈ１４Ｆ１１  ＩＧＨＶ２−５、Ｓｈ１４Ｆ１１  ＩＧＨＶ２−７０）、配列番号１２（１７Ｂ１１）、配列番号１３（Ｓｈ０１Ｇ０６  ＩＧＨＶ１−１８  Ｍ６９Ｌ  Ｋ６４Ｑ  Ｇ４４Ｓ、Ｓｈ０１Ｇ０６  ＩＧＨＶ１−１８  Ｍ６９Ｌ  Ｋ６４Ｑ、Ｓｈ０１Ｇ０６  ＩＧＨＶ１−６９  Ｔ３０Ｓ  Ｋ６４Ｑ  Ｉ６９Ｌ）、配列番号２３６（Ｈｕ０１Ｇ０６  ＩＧＨＶ１−１８  Ｆ１）、配列番号２３７（Ｈｕ０１Ｇ０６  ＩＧＨＶ１−１８  Ｆ２）、配列番号２３８（Ｈｕ０１Ｇ０６  ＩＧＨＶ１−６９  Ｆ１）配列番号２３９（Ｈｕ０１Ｇ０６  ＩＧＨＶ１−６９  Ｆ２）、および配列番号１４（ＨＥ  ＬＭ  ０６Ｃ１１  ＩＧＨＶ２−７０）からなる群から選択されるアミノ酸配列であり；ＣＤＲＨ３は、配列番号１５（０１Ｇ０６、０８Ｇ０１、Ｃｈ０１Ｇ０６  Ｃｈｉｍｅｒｉｃ、Ｈｕ０１Ｇ０６  ＩＧＨＶ１−１８、Ｈｕ０１Ｇ０６  ＩＧＨＶ１−６９、Ｓｈ０１Ｇ０６  ＩＧＨＶ１−１８  Ｍ６９Ｌ、Ｓｈ０１Ｇ０６  ＩＧＨＶ１−１８  Ｍ６９Ｌ  Ｋ６４Ｑ  Ｇ４４Ｓ、Ｓｈ０１Ｇ０６
ＩＧＨＶ１−１８  Ｍ６９Ｌ  Ｋ６４Ｑ、Ｓｈ０１Ｇ０６  ＩＧＨＶ１−６９  Ｔ３０Ｓ  Ｉ６９Ｌ、Ｓｈ０１Ｇ０６  ＩＧＨＶ１−６９  Ｔ３０Ｓ  Ｋ６４Ｑ  Ｉ６９Ｌ、Ｈｕ０１Ｇ０６  ＩＧＨＶ１−１８  Ｆ１、Ｈｕ０１Ｇ０６  ＩＧＨＶ１−１８  Ｆ２、Ｈｕ０１Ｇ０６  ＩＧＨＶ１−６９  Ｆ１、Ｈｕ０１Ｇ０６  ＩＧＨＶ１−６９  Ｆ２）、配列番号１６（０３Ｇ０５）、配列番号１７（０４Ｆ０８）、配列番号１８（０６Ｃ１１、Ｃｈ０６Ｃ１１  Ｃｈｉｍｅｒｉｃ、ＨＥ  ＬＭ  ０６Ｃ１１  ＩＧＨＶ２−７０、Ｈｕ０６Ｃ１１  ＩＧＨＶ２−５）、配列番号１９（１４Ｆ１１、Ｃｈ１４Ｆ１１  Ｃｈｉｍｅｒｉｃ、Ｓｈ１４Ｆ１１  ＩＧＨＶ２−５、Ｓｈ１４Ｆ１１  ＩＧＨＶ２−７０）、および配列番号２０（１７Ｂ１１）からなる群から選択されるアミノ酸配列である。ＣＤＲＬ１は、配列番号２１（０１Ｇ０６、Ｃｈ０１Ｇ０６  Ｃｈｉｍｅｒｉｃ、Ｈｕ０１Ｇ０６  ＩＧＫＶ１−３９、Ｈｕ０１Ｇ０６  ＩＧＫＶ１−３９  Ｓ４３Ａ  Ｖ４８Ｉ、Ｈｕ０１Ｇ０６  ＩＧＫＶ１−３９  Ｖ４８Ｉ、Ｈｕ０１Ｇ０６  ＩＧＫＶ１−３９  Ｆ１、Ｈｕ０１Ｇ０６  ＩＧＫＶ１−３９  Ｆ２）、配列番号２２（０３Ｇ０５）、配列番号２３（０４Ｆ０８、０６Ｃ１１、Ｃｈ０６Ｃ１１  Ｃｈｉｍｅｒｉｃ、Ｓｈ０６Ｃ１１  ＩＧＫＶ１−１６、１４Ｆ１１、Ｃｈ１４Ｆ１１  Ｃｈｉｍｅｒｉｃ、Ｈｕ１４Ｆ１１  ＩＧＫＶ１−１６）、配列番号２４（０８Ｇ０１）、および配列番号２５（１７Ｂ１１）からなる群から選択されるアミノ酸配列であり；ＣＤＲＬ２は、配列番号２６（０１Ｇ０６、Ｃｈ０１Ｇ０６  Ｃｈｉｍｅｒｉｃ、Ｈｕ０１Ｇ０６  ＩＧＫＶ１−３９、Ｈｕ０１Ｇ０６  ＩＧＫＶ１−３９  Ｓ４３Ａ  Ｖ４８Ｉ、Ｈｕ０１Ｇ０６  ＩＧＫＶ１−３９  Ｖ４８Ｉ、Ｈｕ０１Ｇ０６  ＩＧＫＶ１−３９  Ｆ１、Ｈｕ０１Ｇ０６  ＩＧＫＶ１−３９  Ｆ２）、配列番号２７（０３Ｇ０５）、配列番号２８（０４Ｆ０８、０６Ｃ１１、Ｃｈ０６Ｃ１１  Ｃｈｉｍｅｒｉｃ、Ｓｈ０６Ｃ１１  ＩＧＫＶ１−１６）、配列番号２９（０８Ｇ０１）、配列番号３０（１４Ｆ１１、Ｃｈ１４Ｆ１１  Ｃｈｉｍｅｒｉｃ、Ｈｕ１４Ｆ１１  ＩＧＫＶ１−１６）、および配列番号３１（１７Ｂ１１）からなる群から選択されるアミノ酸配列であり；ＣＤＲＬ３は、配列番号３２（０１Ｇ０６、Ｃｈ０１Ｇ０６  Ｃｈｉｍｅｒｉｃ、Ｈｕ０１Ｇ０６  ＩＧＫＶ１−３９、Ｈｕ０１Ｇ０６  ＩＧＫＶ１−３９  Ｓ４３Ａ  Ｖ４８Ｉ、Ｈｕ０１Ｇ０６  ＩＧＫＶ１−３９  Ｖ４８Ｉ、０８Ｇ０１、Ｈｕ０１Ｇ０６  ＩＧＫＶ１−３９  Ｆ１）、配列番号２４４（Ｈｕ０１Ｇ０６  ＩＧＫＶ１−３９  Ｆ２）、配列番号３３（０３Ｇ０５）、配列番号３４（０４Ｆ０８）、配列番号３５（０６Ｃ１１、Ｃｈ０６Ｃ１１  Ｃｈｉｍｅｒｉｃ、Ｓｈ０６Ｃ１１  ＩＧＫＶ１−１６）、配列番号３６（１４Ｆ１１、Ｃｈ１４Ｆ１１  Ｃｈｉｍｅｒｉｃ、Ｈｕ１４Ｆ１１  ＩＧＫＶ１−１６）、および配列番号３７（１７Ｂ１１）からなる群から選択されるアミノ酸配列である。
【００４９】
いくつかの実施形態では、抗体は、配列番号１および配列番号３８（Ｈｕ０１Ｇ０６  ＩＧＨＶ１−１８  Ｆ１）からなる群から選択されるアミノ酸配列を含むＣＤＲＨ１、配列番号２３６および配列番号２４０（Ｈｕ０１Ｇ０６  ＩＧＨＶ１−１８  Ｆ１）からなる群から選択されるアミノ酸配列を含むＣＤＲＨ２、および配列番号１５（Ｈｕ０１Ｇ０６  ＩＧＨＶ１−１８  Ｆ１）のアミノ酸配列を含むＣＤＲＨ３を含む免疫グロブリン重鎖可変領域と、配列番号２１（Ｈｕ０１Ｇ０６  ＩＧＫＶ１−３９  Ｆ１）のアミノ酸配列を含むＣＤＲＬ１、配列番号２６（Ｈｕ０１Ｇ０６  ＩＧＫＶ１−３９  Ｆ１）のアミノ酸配列を含むＣＤＲＬ２、および配列番号３２（Ｈｕ０１Ｇ０６  ＩＧＫＶ１−３９  Ｆ１）のアミノ酸配列を含むＣＤＲＬ３を含む免疫グロブリン軽鎖可変領域とを含む。
【００５０】
いくつかの実施形態では、抗体は、配列番号１および配列番号３８（Ｈｕ０１Ｇ０６  ＩＧＨＶ１−１８  Ｆ２）からなる群から選択されるアミノ酸配列を含むＣＤＲＨ１、配列番号２３７および配列番号２４１（Ｈｕ０１Ｇ０６  ＩＧＨＶ１−１８  Ｆ２）からなる群から選択されるアミノ酸配列を含むＣＤＲＨ２、および配列番号１５（Ｈｕ０１Ｇ０６  ＩＧＨＶ１−１８  Ｆ２）のアミノ酸配列を含むＣＤＲＨ３を含む免疫グロブリン重鎖可変領域と、配列番号２１（Ｈｕ０１Ｇ０６  ＩＧＫＶ１−３９  Ｆ２）のアミノ酸配列を含むＣＤＲＬ１、配列番号２６（Ｈｕ０１Ｇ０６  ＩＧＫＶ１−３９  Ｆ２）のアミノ酸配列を含むＣＤＲＬ２、および配列番号２４４（Ｈｕ０１Ｇ０６  ＩＧＫＶ１−３９
Ｆ２）のアミノ酸配列を含むＣＤＲＬ３を含む免疫グロブリン軽鎖可変領域とを含む。
【００５１】
いくつかの実施形態では、抗体は、配列番号１および配列番号２３４（Ｈｕ０１Ｇ０６
ＩＧＨＶ１−６９  Ｆ１）からなる群から選択されるアミノ酸配列を含むＣＤＲＨ１、配列番号２３８および配列番号２４１（Ｈｕ０１Ｇ０６  ＩＧＨＶ１−６９  Ｆ１）からなる群から選択されるアミノ酸配列を含むＣＤＲＨ２、および配列番号１５（Ｈｕ０１Ｇ０６  ＩＧＨＶ１−６９  Ｆ１）のアミノ酸配列を含むＣＤＲＨ３を含む免疫グロブリン重鎖可変領域と、配列番号２１（Ｈｕ０１Ｇ０６  ＩＧＫＶ１−３９  Ｆ１）のアミノ酸配列を含むＣＤＲＬ１、配列番号２６（Ｈｕ０１Ｇ０６  ＩＧＫＶ１−３９  Ｆ１）のアミノ酸配列を含むＣＤＲＬ２、および配列番号３２（Ｈｕ０１Ｇ０６  ＩＧＫＶ１−３９
Ｆ１）のアミノ酸配列を含むＣＤＲＬ３を含む免疫グロブリン軽鎖可変領域とを含む。
【００５２】
いくつかの実施形態では、抗体は、配列番号１および配列番号２３４（Ｈｕ０１Ｇ０６
ＩＧＨＶ１−６９  Ｆ２）からなる群から選択されるアミノ酸配列を含むＣＤＲＨ１、配列番号２３９および配列番号２４０（Ｈｕ０１Ｇ０６  ＩＧＨＶ１−６９  Ｆ２）からなる群から選択されるアミノ酸配列を含むＣＤＲＨ２、および配列番号１５（Ｈｕ０１Ｇ０６  ＩＧＨＶ１−６９  Ｆ２）のアミノ酸配列を含むＣＤＲＨ３を含む免疫グロブリン重鎖可変領域と、配列番号２１（Ｈｕ０１Ｇ０６  ＩＧＫＶ１−３９  Ｆ１）のアミノ酸配列を含むＣＤＲＬ１、配列番号２６（Ｈｕ０１Ｇ０６  ＩＧＫＶ１−３９  Ｆ１）のアミノ酸配列を含むＣＤＲＬ２、および配列番号３２（Ｈｕ０１Ｇ０６  ＩＧＫＶ１−３９
Ｆ１）のアミノ酸配列を含むＣＤＲＬ３を含む免疫グロブリン軽鎖可変領域とを含む。
【００５３】
いくつかの実施形態では、抗体は、配列番号１および配列番号２３４（Ｈｕ０１Ｇ０６
ＩＧＨＶ１−６９  Ｆ２）からなる群から選択されるアミノ酸配列を含むＣＤＲＨ１、配列番号２３９および配列番号２４０（Ｈｕ０１Ｇ０６  ＩＧＨＶ１−６９  Ｆ２）からなる群から選択されるアミノ酸配列を含むＣＤＲＨ２、および配列番号１５（Ｈｕ０１Ｇ０６  ＩＧＨＶ１−６９  Ｆ２）のアミノ酸配列を含むＣＤＲＨ３を含む免疫グロブリン重鎖可変領域と、配列番号２１（Ｈｕ０１Ｇ０６  ＩＧＫＶ１−３９  Ｆ２）のアミノ酸配列を含むＣＤＲＬ１、配列番号２６（Ｈｕ０１Ｇ０６  ＩＧＫＶ１−３９  Ｆ２）のアミノ酸配列を含むＣＤＲＬ２、および配列番号２４４（Ｈｕ０１Ｇ０６  ＩＧＫＶ１−３９  Ｆ２）のアミノ酸配列を含むＣＤＲＬ３を含む免疫グロブリン軽鎖可変領域とを含む。
【００５４】
本明細書に開示の抗体は、免疫グロブリン重鎖可変領域と、免疫グロブリン軽鎖可変領域とを含む。いくつかの実施形態では、抗体は、配列番号４０（０１Ｇ０６、Ｃｈ０１Ｇ０６  Ｃｈｉｍｅｒｉｃ）、配列番号４２（０３Ｇ０５）、配列番号４４（０４Ｆ０８）、配列番号４６（０６Ｃ１１、Ｃｈ０６Ｃ１１  Ｃｈｉｍｅｒｉｃ）、配列番号４８（０８Ｇ０１）、配列番号５０（１４Ｆ１１、Ｃｈ１４Ｆ１１  Ｃｈｉｍｅｒｉｃ）、配列番号５２（１７Ｂ１１）、配列番号５４（Ｈｕ０１Ｇ０６  ＩＧＨＶ１−１８）、配列番号５６（Ｈｕ０１Ｇ０６  ＩＧＨＶ１−６９）、配列番号５８（Ｓｈ０１Ｇ０６  ＩＧＨＶ１−１８  Ｍ６９Ｌ）、配列番号６０（Ｓｈ０１Ｇ０６  ＩＧＨＶ１−１８  Ｍ６９Ｌ  Ｋ６４Ｑ  Ｇ４４Ｓ）、配列番号６２（Ｓｈ０１Ｇ０６  ＩＧＨＶ１−１８  Ｍ６９Ｌ  Ｋ６４Ｑ）、配列番号６４（Ｓｈ０１Ｇ０６  ＩＧＨＶ１−６９  Ｔ３０Ｓ  Ｉ６９Ｌ）、配列番号６６（Ｓｈ０１Ｇ０６  ＩＧＨＶ１−６９  Ｔ３０Ｓ  Ｋ６４Ｑ  Ｉ６９Ｌ）、配列番号２４６（Ｈｕ０１Ｇ０６  ＩＧＨＶ１−１８  Ｆ１）、配列番号２４８（Ｈｕ０１Ｇ０６  ＩＧＨＶ１−１８  Ｆ２）、配列番号２５０（Ｈｕ０１Ｇ０６  ＩＧＨＶ１−６９  Ｆ１）、配列番号２５２（Ｈｕ０１Ｇ０６  ＩＧＨＶ１−６９  Ｆ２）、配列番号６８（ＨＥ  ＬＭ  ０６Ｃ１１  ＩＧＨＶ２−７０）、配列番号７０（Ｈｕ０６Ｃ１１
ＩＧＨＶ２−５）、配列番号７２（Ｓｈ１４Ｆ１１  ＩＧＨＶ２−５）、および配列番号７４（Ｓｈ１４Ｆ１１  ＩＧＨＶ２−７０）からなる群から選択される免疫グロブリン重鎖可変領域と、免疫グロブリン軽鎖可変領域とを含む。
【００５５】
他の実施形態では、抗体は、配列番号７６（０１Ｇ０６、Ｃｈ０１Ｇ０６  Ｃｈｉｍｅｒｉｃ）、配列番号７８（０３Ｇ０５）、配列番号８０（０４Ｆ０８）、配列番号８２（０６Ｃ１１、Ｃｈ０６Ｃ１１  Ｃｈｉｍｅｒｉｃ）、配列番号８４（０８Ｇ０１）、配列番号８６（１４Ｆ１１、Ｃｈ１４Ｆ１１  Ｃｈｉｍｅｒｉｃ）、配列番号８８（１７Ｂ１１）、配列番号９０（Ｈｕ０１Ｇ０６  ＩＧＫＶ１−３９）、配列番号９２（Ｈｕ０１Ｇ０６  ＩＧＫＶ１−３９  Ｓ４３Ａ  Ｖ４８ＩまたはＨｕ０１Ｇ０６  ＩＧＫＶ１−３９
Ｆ１）、配列番号９４（Ｈｕ０１Ｇ０６  ＩＧＫＶ１−３９  Ｖ４８Ｉ）、配列番号９６（Ｓｈ０６Ｃ１１  ＩＧＫＶ１−１６）、配列番号２５４（Ｈｕ０１Ｇ０６  ＩＧＫＶ１−３９  Ｆ２）、および配列番号９８（Ｈｕ１４Ｆ１１  ＩＧＫＶ１−１６）からなる群から選択される免疫グロブリン軽鎖可変領域と、免疫グロブリン重鎖可変領域とを含む。
【００５６】
いくつかの実施形態では、抗体は、配列番号４０（０１Ｇ０６、Ｃｈ０１Ｇ０６  Ｃｈｉｍｅｒｉｃ）、配列番号４２（０３Ｇ０５）、配列番号４４（０４Ｆ０８）、配列番号４６（０６Ｃ１１、Ｃｈ０６Ｃ１１  Ｃｈｉｍｅｒｉｃ）、配列番号４８（０８Ｇ０１）、配列番号５０（１４Ｆ１１、Ｃｈ１４Ｆ１１  Ｃｈｉｍｅｒｉｃ）、配列番号５２（１７Ｂ１１）、配列番号５４（Ｈｕ０１Ｇ０６  ＩＧＨＶ１−１８）、配列番号５６（Ｈｕ０１Ｇ０６  ＩＧＨＶ１−６９）、配列番号５８（Ｓｈ０１Ｇ０６  ＩＧＨＶ１−１８  Ｍ６９Ｌ）、配列番号６０（Ｓｈ０１Ｇ０６  ＩＧＨＶ１−１８  Ｍ６９Ｌ  Ｋ６４Ｑ  Ｇ４４Ｓ）、配列番号６２（Ｓｈ０１Ｇ０６  ＩＧＨＶ１−１８  Ｍ６９Ｌ  Ｋ６４Ｑ）、配列番号６４（Ｓｈ０１Ｇ０６  ＩＧＨＶ１−６９  Ｔ３０Ｓ  Ｉ６９Ｌ）、配列番号６６（Ｓｈ０１Ｇ０６  ＩＧＨＶ１−６９  Ｔ３０Ｓ  Ｋ６４Ｑ  Ｉ６９Ｌ）、配列番号２４６（Ｈｕ０１Ｇ０６  ＩＧＨＶ１−１８  Ｆ１）、配列番号２４８（Ｈｕ０１Ｇ０６
ＩＧＨＶ１−１８  Ｆ２）、配列番号２５０（Ｈｕ０１Ｇ０６  ＩＧＨＶ１−６９  Ｆ１）、配列番号２５２（Ｈｕ０１Ｇ０６  ＩＧＨＶ１−６９  Ｆ２）、配列番号６８（ＨＥ  ＬＭ  ０６Ｃ１１  ＩＧＨＶ２−７０）、配列番号７０（Ｈｕ０６Ｃ１１  ＩＧＨＶ２−５）、配列番号７２（Ｓｈ１４Ｆ１１  ＩＧＨＶ２−５）、および配列番号７４（Ｓｈ１４Ｆ１１  ＩＧＨＶ２−７０）からなる群から選択される免疫グロブリン重鎖可変領域と、配列番号７６（０１Ｇ０６、Ｃｈ０１Ｇ０６  Ｃｈｉｍｅｒｉｃ）、配列番号７８（０３Ｇ０５）、配列番号８０（０４Ｆ０８）、配列番号８２（０６Ｃ１１、Ｃｈ０６Ｃ１１  Ｃｈｉｍｅｒｉｃ）、配列番号８４（０８Ｇ０１）、配列番号８６（１４Ｆ１１、Ｃｈ１４Ｆ１１  Ｃｈｉｍｅｒｉｃ）、配列番号８８（１７Ｂ１１）、配列番号９０（Ｈｕ０１Ｇ０６  ＩＧＫＶ１−３９）、配列番号９２（Ｈｕ０１Ｇ０６  ＩＧＫＶ１−３９
Ｓ４３Ａ  Ｖ４８ＩまたはＨｕ０１Ｇ０６  ＩＧＫＶ１−３９  Ｆ１）、配列番号９４（Ｈｕ０１Ｇ０６  ＩＧＫＶ１−３９  Ｖ４８Ｉ）、配列番号９６（Ｓｈ０６Ｃ１１  ＩＧＫＶ１−１６）、配列番号２５４（Ｈｕ０１Ｇ０６  ＩＧＫＶ１−３９  Ｆ２）、および配列番号９８（Ｈｕ１４Ｆ１１  ＩＧＫＶ１−１６）からなる群から選択される免疫グロブリン軽鎖可変領域とを含む。
【００５７】
いくつかの実施形態では、抗体は、配列番号４０（０１Ｇ０６、Ｃｈ０１Ｇ０６  Ｃｈｉｍｅｒｉｃ）のアミノ酸配列を含む免疫グロブリン重鎖可変領域と、配列番号７６（０１Ｇ０６、Ｃｈ０１Ｇ０６  Ｃｈｉｍｅｒｉｃ）のアミノ酸配列を含む免疫グロブリン軽鎖可変領域とを含む。
【００５８】
いくつかの実施形態では、抗体は、配列番号４２（０３Ｇ０５）のアミノ酸配列を含む免疫グロブリン重鎖可変領域と、配列番号７８（０３Ｇ０５）のアミノ酸配列を含む免疫グロブリン軽鎖可変領域とを含む。
【００５９】
いくつかの実施形態では、抗体は、配列番号４４（０４Ｆ０８）のアミノ酸配列を含む免疫グロブリン重鎖可変領域と、配列番号８０（０４Ｆ０８）のアミノ酸配列を含む免疫グロブリン軽鎖可変領域とを含む。
【００６０】
いくつかの実施形態では、抗体は、配列番号４６（０６Ｃ１１）のアミノ酸配列を含む免疫グロブリン重鎖可変領域と、配列番号８２（０６Ｃ１１）のアミノ酸配列を含む免疫グロブリン軽鎖可変領域とを含む。
【００６１】
いくつかの実施形態では、抗体は、配列番号４８（０８Ｇ０１）のアミノ酸配列を含む免疫グロブリン重鎖可変領域と、配列番号８４（０８Ｇ０１）のアミノ酸配列を含む免疫グロブリン軽鎖可変領域とを含む。
【００６２】
いくつかの実施形態では、抗体は、配列番号５０（１４Ｆ１１）のアミノ酸配列を含む免疫グロブリン重鎖可変領域と、配列番号８６（１４Ｆ１１）のアミノ酸配列を含む免疫グロブリン軽鎖可変領域とを含む。
【００６３】
いくつかの実施形態では、抗体は、配列番号５２（１７Ｂ１１）のアミノ酸配列を含む免疫グロブリン重鎖可変領域と、配列番号８８（１７Ｂ１１）のアミノ酸配列を含む免疫グロブリン軽鎖可変領域とを含む。
【００６４】
いくつかの実施形態では、抗体は、配列番号５４（Ｈｕ０１Ｇ０６  ＩＧＨＶ１−１８）のアミノ酸配列を含む免疫グロブリン重鎖可変領域と、配列番号７６（Ｃｈ０１Ｇ０６
Ｃｈｉｍｅｒｉｃ）のアミノ酸配列を含む免疫グロブリン軽鎖可変領域とを含む。
【００６５】
いくつかの実施形態では、抗体は、配列番号５６（Ｈｕ０１Ｇ０６  ＩＧＨＶ１−６９）のアミノ酸配列を含む免疫グロブリン重鎖可変領域と、配列番号７６（Ｃｈ０１Ｇ０６
Ｃｈｉｍｅｒｉｃ）のアミノ酸配列を含む免疫グロブリン軽鎖可変領域とを含む。
【００６６】
いくつかの実施形態では、抗体は、配列番号５８（Ｓｈ０１Ｇ０６  ＩＧＨＶ１−１８
Ｍ６９Ｌ）のアミノ酸配列を含む免疫グロブリン重鎖可変領域と、配列番号７６（Ｃｈ０１Ｇ０６  Ｃｈｉｍｅｒｉｃ）のアミノ酸配列を含む免疫グロブリン軽鎖可変領域とを含む。
【００６７】
いくつかの実施形態では、抗体は、配列番号６０（Ｓｈ０１Ｇ０６  ＩＧＨＶ１−１８
Ｍ６９Ｌ  Ｋ６４Ｑ  Ｇ４４Ｓ）のアミノ酸配列を含む免疫グロブリン重鎖可変領域と、配列番号７６（Ｃｈ０１Ｇ０６  Ｃｈｉｍｅｒｉｃ）のアミノ酸配列を含む免疫グロブリン軽鎖可変領域とを含む。
【００６８】
いくつかの実施形態では、抗体は、配列番号６２（Ｓｈ０１Ｇ０６  ＩＧＨＶ１−１８
Ｍ６９Ｌ  Ｋ６４Ｑ）のアミノ酸配列を含む免疫グロブリン重鎖可変領域と、配列番号７６（Ｃｈ０１Ｇ０６  Ｃｈｉｍｅｒｉｃ）のアミノ酸配列を含む免疫グロブリン軽鎖可変領域とを含む。
【００６９】
いくつかの実施形態では、抗体は、配列番号６４（Ｓｈ０１Ｇ０６  ＩＧＨＶ１−６９
Ｔ３０Ｓ  Ｉ６９Ｌ）のアミノ酸配列を含む免疫グロブリン重鎖可変領域と、配列番号７６（Ｃｈ０１Ｇ０６  Ｃｈｉｍｅｒｉｃ）のアミノ酸配列を含む免疫グロブリン軽鎖可変領域とを含む。
【００７０】
いくつかの実施形態では、抗体は、配列番号６６（Ｓｈ０１Ｇ０６  ＩＧＨＶ１−６９
Ｔ３０Ｓ  Ｋ６４Ｑ  Ｉ６９Ｌ）のアミノ酸配列を含む免疫グロブリン重鎖可変領域と、配列番号７６（Ｃｈ０１Ｇ０６  Ｃｈｉｍｅｒｉｃ）のアミノ酸配列を含む免疫グロブリン軽鎖可変領域とを含む。
【００７１】
いくつかの実施形態では、抗体は、配列番号４０（Ｃｈ０１Ｇ０６  Ｃｈｉｍｅｒｉｃ）のアミノ酸配列を含む免疫グロブリン重鎖可変領域と、配列番号９０（Ｈｕ０１Ｇ０６
ＩＧＫＶ１−３９）のアミノ酸配列を含む免疫グロブリン軽鎖可変領域とを含む。
【００７２】
いくつかの実施形態では、抗体は、配列番号５４（Ｈｕ０１Ｇ０６  ＩＧＨＶ１−１８）のアミノ酸配列を含む免疫グロブリン重鎖可変領域と、配列番号９０（Ｈｕ０１Ｇ０６
ＩＧＫＶ１−３９）のアミノ酸配列を含む免疫グロブリン軽鎖可変領域とを含む。
【００７３】
いくつかの実施形態では、抗体は、配列番号５６（Ｈｕ０１Ｇ０６  ＩＧＨＶ１−６９）のアミノ酸配列を含む免疫グロブリン重鎖可変領域と、配列番号９０（Ｈｕ０１Ｇ０６
ＩＧＫＶ１−３９）のアミノ酸配列を含む免疫グロブリン軽鎖可変領域とを含む。
【００７４】
いくつかの実施形態では、抗体は、配列番号５８（Ｓｈ０１Ｇ０６  ＩＧＨＶ１−１８
Ｍ６９Ｌ）のアミノ酸配列を含む免疫グロブリン重鎖可変領域と、配列番号９０（Ｈｕ０１Ｇ０６  ＩＧＫＶ１−３９）のアミノ酸配列を含む免疫グロブリン軽鎖可変領域とを含む。
【００７５】
いくつかの実施形態では、抗体は、配列番号６０（Ｓｈ０１Ｇ０６  ＩＧＨＶ１−１８  Ｍ６９Ｌ  Ｋ６４Ｑ  Ｇ４４Ｓ）のアミノ酸配列を含む免疫グロブリン重鎖可変領域と、配列番号９０（Ｈｕ０１Ｇ０６  ＩＧＫＶ１−３９）のアミノ酸配列を含む免疫グロブリン軽鎖可変領域とを含む。
【００７６】
いくつかの実施形態では、抗体は、配列番号６２（Ｓｈ０１Ｇ０６  ＩＧＨＶ１−１８
Ｍ６９Ｌ  Ｋ６４Ｑ）のアミノ酸配列を含む免疫グロブリン重鎖可変領域と、配列番号９０（Ｈｕ０１Ｇ０６  ＩＧＫＶ１−３９）のアミノ酸配列を含む免疫グロブリン軽鎖可変領域とを含む。
【００７７】
いくつかの実施形態では、抗体は、配列番号６４（Ｓｈ０１Ｇ０６  ＩＧＨＶ１−６９
Ｔ３０Ｓ  Ｉ６９Ｌ）のアミノ酸配列を含む免疫グロブリン重鎖可変領域と、配列番号９０（Ｈｕ０１Ｇ０６  ＩＧＫＶ１−３９）のアミノ酸配列を含む免疫グロブリン軽鎖可変領域とを含む。
【００７８】
いくつかの実施形態では、抗体は、配列番号６６（Ｓｈ０１Ｇ０６  ＩＧＨＶ１−６９
Ｔ３０Ｓ  Ｋ６４Ｑ  Ｉ６９Ｌ）のアミノ酸配列を含む免疫グロブリン重鎖可変領域と、配列番号９０（Ｈｕ０１Ｇ０６  ＩＧＫＶ１−３９）のアミノ酸配列を含む免疫グロブリン軽鎖可変領域とを含む。
【００７９】
いくつかの実施形態では、抗体は、配列番号４０（Ｃｈ０１Ｇ０６  Ｃｈｉｍｅｒｉｃ）のアミノ酸配列を含む免疫グロブリン重鎖可変領域と、配列番号９２（Ｈｕ０１Ｇ０６
ＩＧＫＶ１−３９  Ｓ４３Ａ  Ｖ４８Ｉ）のアミノ酸配列を含む免疫グロブリン軽鎖可変領域とを含む。
【００８０】
いくつかの実施形態では、抗体は、配列番号５４（Ｈｕ０１Ｇ０６  ＩＧＨＶ１−１８）のアミノ酸配列を含む免疫グロブリン重鎖可変領域と、配列番号９２（Ｈｕ０１Ｇ０６
ＩＧＫＶ１−３９  Ｓ４３Ａ  Ｖ４８Ｉ）のアミノ酸配列を含む免疫グロブリン軽鎖可変領域とを含む。
【００８１】
いくつかの実施形態では、抗体は、配列番号５６（Ｈｕ０１Ｇ０６  ＩＧＨＶ１−６９）のアミノ酸配列を含む免疫グロブリン重鎖可変領域と、配列番号９２（Ｈｕ０１Ｇ０６
ＩＧＫＶ１−３９  Ｓ４３Ａ  Ｖ４８Ｉ）のアミノ酸配列を含む免疫グロブリン軽鎖可変領域とを含む。
【００８２】
いくつかの実施形態では、抗体は、配列番号５８（Ｓｈ０１Ｇ０６  ＩＧＨＶ１−１８
Ｍ６９Ｌ）のアミノ酸配列を含む免疫グロブリン重鎖可変領域と、配列番号９２（Ｈｕ０１Ｇ０６  ＩＧＫＶ１−３９  Ｓ４３Ａ  Ｖ４８Ｉ）のアミノ酸配列を含む免疫グロブリン軽鎖可変領域とを含む。
【００８３】
いくつかの実施形態では、抗体は、配列番号６０（Ｓｈ０１Ｇ０６  ＩＧＨＶ１−１８
Ｍ６９Ｌ  Ｋ６４Ｑ  Ｇ４４Ｓ）のアミノ酸配列を含む免疫グロブリン重鎖可変領域と、配列番号９２（Ｈｕ０１Ｇ０６  ＩＧＫＶ１−３９  Ｓ４３Ａ  Ｖ４８Ｉ）のアミノ酸配列を含む免疫グロブリン軽鎖可変領域とを含む。
【００８４】
いくつかの実施形態では、抗体は、配列番号６２（Ｓｈ０１Ｇ０６  ＩＧＨＶ１−１８
Ｍ６９Ｌ  Ｋ６４Ｑ）のアミノ酸配列を含む免疫グロブリン重鎖可変領域と、配列番号９２（Ｈｕ０１Ｇ０６  ＩＧＫＶ１−３９  Ｓ４３Ａ  Ｖ４８Ｉ）のアミノ酸配列を含む免疫グロブリン軽鎖可変領域とを含む。
【００８５】
いくつかの実施形態では、抗体は、配列番号６４（Ｓｈ０１Ｇ０６  ＩＧＨＶ１−６９  Ｔ３０Ｓ  Ｉ６９Ｌ）のアミノ酸配列を含む免疫グロブリン重鎖可変領域と、配列番号９２（Ｈｕ０１Ｇ０６  ＩＧＫＶ１−３９  Ｓ４３Ａ  Ｖ４８Ｉ）のアミノ酸配列を含む免疫グロブリン軽鎖可変領域とを含む。
【００８６】
いくつかの実施形態では、抗体は、配列番号６６（Ｓｈ０１Ｇ０６  ＩＧＨＶ１−６９
Ｔ３０Ｓ  Ｋ６４Ｑ  Ｉ６９Ｌ）のアミノ酸配列を含む免疫グロブリン重鎖可変領域と、配列番号９２（Ｈｕ０１Ｇ０６  ＩＧＫＶ１−３９  Ｓ４３Ａ  Ｖ４８Ｉ）のアミノ酸配列を含む免疫グロブリン軽鎖可変領域とを含む。
【００８７】
いくつかの実施形態では、抗体は、配列番号４０（Ｃｈ０１Ｇ０６  Ｃｈｉｍｅｒｉｃ）のアミノ酸配列を含む免疫グロブリン重鎖可変領域と、配列番号９４（Ｈｕ０１Ｇ０６
ＩＧＫＶ１−３９  Ｖ４８Ｉ）のアミノ酸配列を含む免疫グロブリン軽鎖可変領域とを含む。
【００８８】
いくつかの実施形態では、抗体は、配列番号５４（Ｈｕ０１Ｇ０６  ＩＧＨＶ１−１８）のアミノ酸配列を含む免疫グロブリン重鎖可変領域と、配列番号９４（Ｈｕ０１Ｇ０６
ＩＧＫＶ１−３９  Ｖ４８Ｉ）のアミノ酸配列を含む免疫グロブリン軽鎖可変領域とを含む。
【００８９】
いくつかの実施形態では、抗体は、配列番号５６（Ｈｕ０１Ｇ０６  ＩＧＨＶ１−６９）のアミノ酸配列を含む免疫グロブリン重鎖可変領域と、配列番号９４（Ｈｕ０１Ｇ０６
ＩＧＫＶ１−３９  Ｖ４８Ｉ）のアミノ酸配列を含む免疫グロブリン軽鎖可変領域とを含む。
【００９０】
いくつかの実施形態では、抗体は、配列番号５８（Ｓｈ０１Ｇ０６  ＩＧＨＶ１−１８
Ｍ６９Ｌ）のアミノ酸配列を含む免疫グロブリン重鎖可変領域と、配列番号９４（Ｈｕ０１Ｇ０６  ＩＧＫＶ１−３９  Ｖ４８Ｉ）のアミノ酸配列を含む免疫グロブリン軽鎖可変領域とを含む。
【００９１】
いくつかの実施形態では、抗体は、配列番号６０（Ｓｈ０１Ｇ０６  ＩＧＨＶ１−１８
Ｍ６９Ｌ  Ｋ６４Ｑ  Ｇ４４Ｓ）のアミノ酸配列を含む免疫グロブリン重鎖可変領域と、配列番号９４（Ｈｕ０１Ｇ０６  ＩＧＫＶ１−３９  Ｖ４８Ｉ）のアミノ酸配列を含む免疫グロブリン軽鎖可変領域とを含む。
【００９２】
いくつかの実施形態では、抗体は、配列番号６２（Ｓｈ０１Ｇ０６  ＩＧＨＶ１−１８
Ｍ６９Ｌ  Ｋ６４Ｑ）のアミノ酸配列を含む免疫グロブリン重鎖可変領域と、配列番号９４（Ｈｕ０１Ｇ０６  ＩＧＫＶ１−３９  Ｖ４８Ｉ）のアミノ酸配列を含む免疫グロブリン軽鎖可変領域とを含む。
【００９３】
いくつかの実施形態では、抗体は、配列番号６４（Ｓｈ０１Ｇ０６  ＩＧＨＶ１−６９
Ｔ３０Ｓ  Ｉ６９Ｌ）のアミノ酸配列を含む免疫グロブリン重鎖可変領域と、配列番号９４（Ｈｕ０１Ｇ０６  ＩＧＫＶ１−３９  Ｖ４８Ｉ）のアミノ酸配列を含む免疫グロブリン軽鎖可変領域とを含む。
【００９４】
いくつかの実施形態では、抗体は、配列番号６６（Ｓｈ０１Ｇ０６  ＩＧＨＶ１−６９
Ｔ３０Ｓ  Ｋ６４Ｑ  Ｉ６９Ｌ）のアミノ酸配列を含む免疫グロブリン重鎖可変領域と、配列番号９４（Ｈｕ０１Ｇ０６  ＩＧＫＶ１−３９  Ｖ４８Ｉ）のアミノ酸配列を含む免疫グロブリン軽鎖可変領域とを含む。
【００９５】
いくつかの実施形態では、抗体は、配列番号２４６（Ｈｕ０１Ｇ０６  ＩＧＨＶ１−１８  Ｆ１）のアミノ酸配列を含む免疫グロブリン重鎖可変領域と、配列番号９２（Ｈｕ０１Ｇ０６  ＩＧＫＶ１−３９  Ｆ１）のアミノ酸配列を含む免疫グロブリン軽鎖可変領域とを含む。
【００９６】
いくつかの実施形態では、抗体は、配列番号２４８（Ｈｕ０１Ｇ０６  ＩＧＨＶ１−１８  Ｆ２）のアミノ酸配列を含む免疫グロブリン重鎖可変領域と、配列番号２５４（Ｈｕ０１Ｇ０６  ＩＧＫＶ１−３９  Ｆ２）のアミノ酸配列を含む免疫グロブリン軽鎖可変領域とを含む。
【００９７】
いくつかの実施形態では、抗体は、配列番号２５０（Ｈｕ０１Ｇ０６  ＩＧＨＶ１−６９  Ｆ１）のアミノ酸配列を含む免疫グロブリン重鎖可変領域と、配列番号９２（Ｈｕ０１Ｇ０６  ＩＧＫＶ１−３９  Ｆ１）のアミノ酸配列を含む免疫グロブリン軽鎖可変領域とを含む。
【００９８】
いくつかの実施形態では、抗体は、配列番号２５２（Ｈｕ０１Ｇ０６  ＩＧＨＶ１−６９  Ｆ２）のアミノ酸配列を含む免疫グロブリン重鎖可変領域と、配列番号９２（Ｈｕ０１Ｇ０６  ＩＧＫＶ１−３９  Ｆ１）のアミノ酸配列を含む免疫グロブリン軽鎖可変領域とを含む。
【００９９】
いくつかの実施形態では、抗体は、配列番号２５２（Ｈｕ０１Ｇ０６  ＩＧＨＶ１−６９  Ｆ２）のアミノ酸配列を含む免疫グロブリン重鎖可変領域と、配列番号２５４（Ｈｕ０１Ｇ０６  ＩＧＫＶ１−３９  Ｆ２）のアミノ酸配列を含む免疫グロブリン軽鎖可変領域とを含む。
【０１００】
いくつかの実施形態では、抗体は、配列番号６８（ＨＥ  ＬＭ  ０６Ｃ１１  ＩＧＨＶ２−７０）のアミノ酸配列を含む免疫グロブリン重鎖可変領域と、配列番号８２（Ｃｈ０６Ｃ１１  Ｃｈｉｍｅｒｉｃ）のアミノ酸配列を含む免疫グロブリン軽鎖可変領域とを含む。
【０１０１】
いくつかの実施形態では、抗体は、配列番号７０（Ｈｕ０６Ｃ１１  ＩＧＨＶ２−５）のアミノ酸配列を含む免疫グロブリン重鎖可変領域と、配列番号８２（Ｃｈ０６Ｃ１１  Ｃｈｉｍｅｒｉｃ）のアミノ酸配列を含む免疫グロブリン軽鎖可変領域とを含む。
【０１０２】
いくつかの実施形態では、抗体は、配列番号４６（Ｃｈ０６Ｃ１１  Ｃｈｉｍｅｒｉｃ）のアミノ酸配列を含む免疫グロブリン重鎖可変領域と、配列番号９６（Ｓｈ０６Ｃ１１
ＩＧＫＶ１−１６）のアミノ酸配列を含む免疫グロブリン軽鎖可変領域とを含む。
【０１０３】
いくつかの実施形態では、抗体は、配列番号６８（ＨＥ  ＬＭ  ０６Ｃ１１  ＩＧＨＶ２−７０）のアミノ酸配列を含む免疫グロブリン重鎖可変領域と、配列番号９６（Ｓｈ０６Ｃ１１  ＩＧＫＶ１−１６）のアミノ酸配列を含む免疫グロブリン軽鎖可変領域とを含む。
【０１０４】
いくつかの実施形態では、抗体は、配列番号７０（Ｈｕ０６Ｃ１１  ＩＧＨＶ２−５）のアミノ酸配列を含む免疫グロブリン重鎖可変領域と、配列番号９６（Ｓｈ０６Ｃ１１  ＩＧＫＶ１−１６）のアミノ酸配列を含む免疫グロブリン軽鎖可変領域とを含む。
【０１０５】
いくつかの実施形態では、抗体は、配列番号７２（Ｓｈ１４Ｆ１１  ＩＧＨＶ２−５）のアミノ酸配列を含む免疫グロブリン重鎖可変領域と、配列番号８６（Ｃｈ１４Ｆ１１  Ｃｈｉｍｅｒｉｃ）のアミノ酸配列を含む免疫グロブリン軽鎖可変領域とを含む。
【０１０６】
いくつかの実施形態では、抗体は、配列番号７４（Ｓｈ１４Ｆ１１  ＩＧＨＶ２−７０）のアミノ酸配列を含む免疫グロブリン重鎖可変領域と、配列番号８６（Ｃｈ１４Ｆ１１
Ｃｈｉｍｅｒｉｃ）のアミノ酸配列を含む免疫グロブリン軽鎖可変領域とを含む。
【０１０７】
いくつかの実施形態では、抗体は、配列番号５０（Ｃｈ１４Ｆ１１  Ｃｈｉｍｅｒｉｃ）のアミノ酸配列を含む免疫グロブリン重鎖可変領域と、配列番号９８（Ｈｕ１４Ｆ１１
ＩＧＫＶ１−１６）のアミノ酸配列を含む免疫グロブリン軽鎖可変領域とを含む。
【０１０８】
いくつかの実施形態では、抗体は、配列番号７２（Ｓｈ１４Ｆ１１  ＩＧＨＶ２−５）のアミノ酸配列を含む免疫グロブリン重鎖可変領域と、配列番号９８（Ｈｕ１４Ｆ１１  ＩＧＫＶ１−１６）のアミノ酸配列を含む免疫グロブリン軽鎖可変領域とを含む。
【０１０９】
いくつかの実施形態では、抗体は、配列番号７４（Ｓｈ１４Ｆ１１  ＩＧＨＶ２−７０）のアミノ酸配列を含む免疫グロブリン重鎖可変領域と、配列番号９８（Ｈｕ１４Ｆ１１
ＩＧＫＶ１−１６）のアミノ酸配列を含む免疫グロブリン軽鎖可変領域とを含む。
【０１１０】
いくつかの実施形態では、抗体は、配列番号４６（Ｃｈ０６Ｃ１１  Ｃｈｉｍｅｒｉｃ）のアミノ酸配列を含む免疫グロブリン重鎖可変領域と、配列番号８０（０４Ｆ０８）のアミノ酸配列を含む免疫グロブリン軽鎖可変領域とを含む。
【０１１１】
いくつかの実施形態では、抗体は、配列番号５０（Ｃｈ１４Ｆ１１  Ｃｈｉｍｅｒｉｃ）のアミノ酸配列を含む免疫グロブリン重鎖可変領域と、配列番号８０（０４Ｆ０８）のアミノ酸配列を含む免疫グロブリン軽鎖可変領域とを含む。
【０１１２】
いくつかの実施形態では、抗体は、配列番号４４（０４Ｆ０８）のアミノ酸配列を含む免疫グロブリン重鎖可変領域と、配列番号８２（Ｃｈ０６Ｃ１１  Ｃｈｉｍｅｒｉｃ）のアミノ酸配列を含む免疫グロブリン軽鎖可変領域とを含む。
【０１１３】
いくつかの実施形態では、抗体は、配列番号５０（Ｃｈ１４Ｆ１１  Ｃｈｉｍｅｒｉｃ）のアミノ酸配列を含む免疫グロブリン重鎖可変領域と、配列番号８２（Ｃｈ０６Ｃ１１
Ｃｈｉｍｅｒｉｃ）のアミノ酸配列を含む免疫グロブリン軽鎖可変領域とを含む。
【０１１４】
いくつかの実施形態では、抗体は、配列番号４４（０４Ｆ０８）のアミノ酸配列を含む免疫グロブリン重鎖可変領域と、配列番号８６（Ｃｈ１４Ｆ１１  Ｃｈｉｍｅｒｉｃ）のアミノ酸配列を含む免疫グロブリン軽鎖可変領域とを含む。
【０１１５】
いくつかの実施形態では、抗体は、配列番号４６（Ｃｈ０６Ｃ１１  Ｃｈｉｍｅｒｉｃ）のアミノ酸配列を含む免疫グロブリン重鎖可変領域と、配列番号８６（Ｃｈ１４Ｆ１１
Ｃｈｉｍｅｒｉｃ）のアミノ酸配列を含む免疫グロブリン軽鎖可変領域とを含む。
【０１１６】
いくつかの実施形態では、抗体は、配列番号４８（０８Ｇ０１）のアミノ酸配列を含む免疫グロブリン重鎖可変領域と、配列番号７６（Ｃｈ０１Ｇ０６  Ｃｈｉｍｅｒｉｃ）のアミノ酸配列を含む免疫グロブリン軽鎖可変領域とを含む。
【０１１７】
いくつかの実施形態では、抗体は、配列番号４０（Ｃｈ０１Ｇ０６  Ｃｈｉｍｅｒｉｃ）のアミノ酸配列を含む免疫グロブリン重鎖可変領域と、配列番号８４（０８Ｇ０１）のアミノ酸配列を含む免疫グロブリン軽鎖可変領域とを含む。
【０１１８】
特定の実施形態では、本明細書に開示の抗体は、免疫グロブリン重鎖と免疫グロブリン軽鎖とを含む。いくつかの実施形態では、抗体は、配列番号１００（０１Ｇ０６）、配列番号１０４（０３Ｇ０５）、配列番号１０８（０４Ｆ０８）、配列番号１１２（０６Ｃ１１）、配列番号１１６（０８Ｇ０１）、配列番号１２０（１４Ｆ１１）、配列番号１２４（１７Ｂ１１）、配列番号１７６（Ｃｈ０１Ｇ０６  Ｃｈｉｍｅｒｉｃ）、配列番号１７８（Ｈｕ０１Ｇ０６  ＩＧＨＶ１−１８）、配列番号１８０（Ｈｕ０１Ｇ０６  ＩＧＨＶ１−６９）、配列番号１８２（Ｓｈ０１Ｇ０６  ＩＧＨＶ１−１８  Ｍ６９Ｌ）、配列番号１８４（Ｓｈ０１Ｇ０６  ＩＧＨＶ１−１８  Ｍ６９Ｌ  Ｋ６４Ｑ  Ｇ４４Ｓ）、配列番号１８６（Ｓｈ０１Ｇ０６  ＩＧＨＶ１−１８  Ｍ６９Ｌ  Ｋ６４Ｑ）、配列番号１８８（Ｓｈ０１Ｇ０６  ＩＧＨＶ１−６９  Ｔ３０Ｓ  Ｉ６９Ｌ）、配列番号１９０（Ｓｈ０１Ｇ０６  ＩＧＨＶ１−６９  Ｔ３０Ｓ  Ｋ６４Ｑ  Ｉ６９Ｌ）、配列番号２５６（Ｈｕ０１Ｇ０６  ＩＧＨＶ１−１８  Ｆ１）、配列番号２５８（Ｈｕ０１Ｇ０６  ＩＧＨＶ１−１８  Ｆ２）、配列番号２６０（Ｈｕ０１Ｇ０６  ＩＧＨＶ１−６９  Ｆ１）、配列番号２６２（Ｈｕ０１Ｇ０６  ＩＧＨＶ１−６９  Ｆ２）、配列番号１９２（Ｃｈ０６Ｃ１１  Ｃｈｉｍｅｒｉｃ）、配列番号１９４（ＨＥ  ＬＭ  ０６Ｃ１１  ＩＧＨＶ２−７０）、配列番号１９６（Ｈｕ０６Ｃ１１  ＩＧＨＶ２−５）、配列番号１９８（Ｃｈ１４Ｆ１１  Ｃｈｉｍｅｒｉｃ）、配列番号２００（Ｓｈ１４Ｆ１１  ＩＧＨＶ２−５）、および配列番号２０２（Ｓｈ１４Ｆ１１  ＩＧＨＶ２−７０）からなる群から選択される免疫グロブリン重鎖と、免疫グロブリン軽鎖とを含む。
【０１１９】
他の実施形態では、抗体は、配列番号１０２（０１Ｇ０６）、配列番号１０６（０３Ｇ０５）、配列番号１１０（０４Ｆ０８）、配列番号１１４（０６Ｃ１１）、配列番号１１８（０８Ｇ０１）、配列番号１２２（１４Ｆ１１）、配列番号１２６（１７Ｂ１１）、配列番号２０４（Ｃｈ０１Ｇ０６  Ｃｈｉｍｅｒｉｃ）、配列番号２０６（Ｈｕ０１Ｇ０６
ＩＧＫＶ１−３９）、配列番号２０８（Ｈｕ０１Ｇ０６  ＩＧＫＶ１−３９  Ｓ４３Ａ
Ｖ４８ＩまたはＨｕ０１Ｇ０６  ＩＧＫＶ１−３９  Ｆ１）、配列番号２１０（Ｈｕ０１Ｇ０６  ＩＧＫＶ１−３９  Ｖ４８Ｉ）、配列番号２６４（Ｈｕ０１Ｇ０６  ＩＧＫＶ１−３９  Ｆ２）、配列番号２１２（Ｃｈ０６Ｃ１１  Ｃｈｉｍｅｒｉｃ）、配列番号２１４（Ｓｈ０６Ｃ１１  ＩＧＫＶ１−１６）、配列番号２１６（Ｃｈ１４Ｆ１１  Ｃｈｉｍｅｒｉｃ）、および配列番号２１８（Ｈｕ１４Ｆ１１  ＩＧＫＶ１−１６）からなる群から選択される免疫グロブリン軽鎖と、免疫グロブリン重鎖とを含む。
【０１２０】
いくつかの実施形態では、抗体は、（ｉ）配列番号１００（０１Ｇ０６）、配列番号１０４（０３Ｇ０５）、配列番号１０８（０４Ｆ０８）、配列番号１１２（０６Ｃ１１）、配列番号１１６（０８Ｇ０１）、配列番号１２０（１４Ｆ１１）、配列番号１２４（１７Ｂ１１）、配列番号１７６（Ｃｈ０１Ｇ０６  Ｃｈｉｍｅｒｉｃ）、配列番号１７８（Ｈｕ０１Ｇ０６  ＩＧＨＶ１−１８）、配列番号１８０（Ｈｕ０１Ｇ０６  ＩＧＨＶ１−６９）、配列番号１８２（Ｓｈ０１Ｇ０６  ＩＧＨＶ１−１８  Ｍ６９Ｌ）、配列番号１８４（Ｓｈ０１Ｇ０６  ＩＧＨＶ１−１８  Ｍ６９Ｌ  Ｋ６４Ｑ  Ｇ４４Ｓ）、配列番号１８６（Ｓｈ０１Ｇ０６  ＩＧＨＶ１−１８  Ｍ６９Ｌ  Ｋ６４Ｑ）、配列番号１８８（Ｓｈ０１Ｇ０６  ＩＧＨＶ１−６９  Ｔ３０Ｓ  Ｉ６９Ｌ）、配列番号１９０（Ｓｈ０１Ｇ０６  ＩＧＨＶ１−６９  Ｔ３０Ｓ  Ｋ６４Ｑ  Ｉ６９Ｌ）、配列番号２５６（Ｈｕ０１Ｇ０６  ＩＧＨＶ１−１８  Ｆ１）、配列番号２５８（Ｈｕ０１Ｇ０６  ＩＧＨＶ１−１８  Ｆ２）、配列番号２６０（Ｈｕ０１Ｇ０６  ＩＧＨＶ１−６９  Ｆ１）、配列番号２６２（Ｈｕ０１Ｇ０６  ＩＧＨＶ１−６９  Ｆ２）、配列番号１９２（Ｃｈ０６Ｃ１１  Ｃｈｉｍｅｒｉｃ）、配列番号１９４（ＨＥ  ＬＭ  ０６Ｃ１１  ＩＧＨＶ２−７０）、配列番号１９６（Ｈｕ０６Ｃ１１  ＩＧＨＶ２−５）、配列番号１９８（Ｃｈ１４Ｆ１１
Ｃｈｉｍｅｒｉｃ）、配列番号２００（Ｓｈ１４Ｆ１１  ＩＧＨＶ２−５）、および配列番号２０２（Ｓｈ１４Ｆ１１  ＩＧＨＶ２−７０）からなる群から選択される免疫グロブリン重鎖と、（ｉｉ）配列番号１０２（０１Ｇ０６）、配列番号１０６（０３Ｇ０５）、配列番号１１０（０４Ｆ０８）、配列番号１１４（０６Ｃ１１）、配列番号１１８（０８Ｇ０１）、配列番号１２２（１４Ｆ１１）、配列番号１２６（１７Ｂ１１）、配列番号２０４（Ｃｈ０１Ｇ０６  Ｃｈｉｍｅｒｉｃ）、配列番号２０６（Ｈｕ０１Ｇ０６  ＩＧＫＶ１−３９）、配列番号２０８（Ｈｕ０１Ｇ０６  ＩＧＫＶ１−３９  Ｓ４３Ａ  Ｖ４８ＩまたはＨｕ０１Ｇ０６  ＩＧＫＶ１−３９  Ｆ１）、配列番号２１０（Ｈｕ０１Ｇ０６  ＩＧＫＶ１−３９  Ｖ４８Ｉ）、配列番号２６４（Ｈｕ０１Ｇ０６  ＩＧＫＶ１−３９  Ｆ２）、配列番号２１２（Ｃｈ０６Ｃ１１  Ｃｈｉｍｅｒｉｃ）、配列番号２１４（Ｓｈ０６Ｃ１１  ＩＧＫＶ１−１６）、配列番号２１６（Ｃｈ１４Ｆ１１  Ｃｈｉｍｅｒｉｃ）、および配列番号２１８（Ｈｕ１４Ｆ１１  ＩＧＫＶ１−１６）からなる群から選択される免疫グロブリン軽鎖とを含む。
【０１２１】
いくつかの実施形態では、抗体は、配列番号１７６（Ｃｈ０１Ｇ０６  Ｃｈｉｍｅｒｉｃ）のアミノ酸配列を含む免疫グロブリン重鎖と、配列番号２０４（Ｃｈ０１Ｇ０６  Ｃｈｉｍｅｒｉｃ）のアミノ酸配列を含む免疫グロブリン軽鎖とを含む。
【０１２２】
いくつかの実施形態では、抗体は、配列番号１９２（Ｃｈ０６Ｃ１１  Ｃｈｉｍｅｒｉｃ）のアミノ酸配列を含む免疫グロブリン重鎖と、配列番号２１２（Ｃｈ０６Ｃ１１  Ｃｈｉｍｅｒｉｃ）のアミノ酸配列を含む免疫グロブリン軽鎖とを含む。
【０１２３】
いくつかの実施形態では、抗体は、配列番号１９８（Ｃｈ１４Ｆ１１  Ｃｈｉｍｅｒｉｃ）のアミノ酸配列を含む免疫グロブリン重鎖と、配列番号２１６（Ｃｈ１４Ｆ１１  Ｃｈｉｍｅｒｉｃ）のアミノ酸配列を含む免疫グロブリン軽鎖とを含む。
【０１２４】
いくつかの実施形態では、抗体は、配列番号１７８（Ｈｕ０１Ｇ０６  ＩＧＨＶ１−１８）のアミノ酸配列を含む免疫グロブリン重鎖と、配列番号２０６（Ｈｕ０１Ｇ０６  ＩＧＫＶ１−３９）のアミノ酸配列を含む免疫グロブリン軽鎖とを含む。
【０１２５】
いくつかの実施形態では、抗体は、配列番号１８０（Ｈｕ０１Ｇ０６  ＩＧＨＶ１−６９）のアミノ酸配列を含む免疫グロブリン重鎖と、配列番号２０６（Ｈｕ０１Ｇ０６  ＩＧＫＶ１−３９）のアミノ酸配列を含む免疫グロブリン軽鎖とを含む。
【０１２６】
いくつかの実施形態では、抗体は、配列番号１８４（Ｓｈ０１Ｇ０６  ＩＧＨＶ１−１８  Ｍ６９Ｌ  Ｋ６４Ｑ  Ｇ４４Ｓ）のアミノ酸配列を含む免疫グロブリン重鎖と、配列番号２１０（Ｈｕ０１Ｇ０６  ＩＧＫＶ１−３９  Ｖ４８Ｉ）のアミノ酸配列を含む免疫グロブリン軽鎖とを含む。
【０１２７】
いくつかの実施形態では、抗体は、配列番号１８８（Ｓｈ０１Ｇ０６  ＩＧＨＶ１−６９  Ｔ３０Ｓ  Ｉ６９Ｌ）のアミノ酸配列を含む免疫グロブリン重鎖と、配列番号２１０（Ｈｕ０１Ｇ０６  ＩＧＫＶ１−３９  Ｖ４８Ｉ）のアミノ酸配列を含む免疫グロブリン軽鎖とを含む。
【０１２８】
いくつかの実施形態では、抗体は、配列番号１８４（Ｓｈ０１Ｇ０６  ＩＧＨＶ１−１８  Ｍ６９Ｌ  Ｋ６４Ｑ  Ｇ４４Ｓ）のアミノ酸配列を含む免疫グロブリン重鎖と、配列番号２０８（Ｈｕ０１Ｇ０６  ＩＧＫＶ１−３９  Ｓ４３Ａ  Ｖ４８Ｉ）のアミノ酸配列を含む免疫グロブリン軽鎖とを含む。
【０１２９】
いくつかの実施形態では、抗体は、配列番号１８８（Ｓｈ０１Ｇ０６  ＩＧＨＶ１−６９  Ｔ３０Ｓ  Ｉ６９Ｌ）のアミノ酸配列を含む免疫グロブリン重鎖と、配列番号２０８（Ｈｕ０１Ｇ０６  ＩＧＫＶ１−３９  Ｓ４３Ａ  Ｖ４８Ｉ）のアミノ酸配列を含む免疫グロブリン軽鎖とを含む。
【０１３０】
いくつかの実施形態では、抗体は、配列番号２５６（Ｈｕ０１Ｇ０６  ＩＧＨＶ１−１８  Ｆ１）のアミノ酸配列を含む免疫グロブリン重鎖と、配列番号２０８（Ｈｕ０１Ｇ０６  ＩＧＫＶ１−３９  Ｆ１）のアミノ酸配列を含む免疫グロブリン軽鎖とを含む。
【０１３１】
いくつかの実施形態では、抗体は、配列番号２５８（Ｈｕ０１Ｇ０６  ＩＧＨＶ１−１８  Ｆ２）のアミノ酸配列を含む免疫グロブリン重鎖と、配列番号２６４（Ｈｕ０１Ｇ０６  ＩＧＫＶ１−３９  Ｆ２）のアミノ酸配列を含む免疫グロブリン軽鎖とを含む。
【０１３２】
いくつかの実施形態では、抗体は、配列番号２６０（Ｈｕ０１Ｇ０６  ＩＧＨＶ１−６９  Ｆ１）のアミノ酸配列を含む免疫グロブリン重鎖と、配列番号２０８（Ｈｕ０１Ｇ０６  ＩＧＫＶ１−３９  Ｆ１）のアミノ酸配列を含む免疫グロブリン軽鎖とを含む。
【０１３３】
いくつかの実施形態では、抗体は、配列番号２６２（Ｈｕ０１Ｇ０６  ＩＧＨＶ１−６９  Ｆ２）のアミノ酸配列を含む免疫グロブリン重鎖と、配列番号２０８（Ｈｕ０１Ｇ０６  ＩＧＫＶ１−３９  Ｆ１）のアミノ酸配列を含む免疫グロブリン軽鎖とを含む。
【０１３４】
いくつかの実施形態では、抗体は、配列番号２６２（Ｈｕ０１Ｇ０６  ＩＧＨＶ１−６９  Ｆ２）のアミノ酸配列を含む免疫グロブリン重鎖と、配列番号２６４（Ｈｕ０１Ｇ０６  ＩＧＫＶ１−３９  Ｆ２）のアミノ酸配列を含む免疫グロブリン軽鎖とを含む。
【０１３５】
いくつかの実施形態では、抗体は、配列番号１９４（ＨＥ  ＬＭ  ０６Ｃ１１  ＩＧＨＶ２−７０）のアミノ酸配列を含む免疫グロブリン重鎖と、配列番号２１４（Ｓｈ０６Ｃ１１  ＩＧＫＶ１−１６）のアミノ酸配列を含む免疫グロブリン軽鎖とを含む。
【０１３６】
いくつかの実施形態では、抗体は、配列番号１９６（Ｈｕ０６Ｃ１１  ＩＧＨＶ２−５）のアミノ酸配列を含む免疫グロブリン重鎖と、配列番号２１４（Ｓｈ０６Ｃ１１  ＩＧＫＶ１−１６）のアミノ酸配列を含む免疫グロブリン軽鎖とを含む。
【０１３７】
いくつかの実施形態では、抗体は、配列番号２００（Ｓｈ１４Ｆ１１  ＩＧＨＶ２−５）のアミノ酸配列を含む免疫グロブリン重鎖と、配列番号２１８（Ｈｕ１４Ｆ１１  ＩＧＫＶ１−１６）のアミノ酸配列を含む免疫グロブリン軽鎖とを含む。
【０１３８】
いくつかの実施形態では、抗体は、配列番号２０２（Ｓｈ１４Ｆ１１  ＩＧＨＶ２−７０）のアミノ酸配列を含む免疫グロブリン重鎖と、配列番号２１８（Ｈｕ１４Ｆ１１  ＩＧＫＶ１−１６）のアミノ酸配列を含む免疫グロブリン軽鎖とを含む。
【０１３９】
特定の実施形態では、ｈＧＤＦ１５に結合する単離抗体は、配列番号４０（０１Ｇ０６、Ｃｈ０１Ｇ０６  Ｃｈｉｍｅｒｉｃ）、配列番号４２（０３Ｇ０５）、配列番号４４（０４Ｆ０８）、配列番号４６（０６Ｃ１１、Ｃｈ０６Ｃ１１  Ｃｈｉｍｅｒｉｃ）、配列番号４８（０８Ｇ０１）、配列番号５０（１４Ｆ１１、Ｃｈ１４Ｆ１１  Ｃｈｉｍｅｒｉｃ）、配列番号５２（１７Ｂ１１）、配列番号５４（Ｈｕ０１Ｇ０６  ＩＧＨＶ１−１８）、配列番号５６（Ｈｕ０１Ｇ０６  ＩＧＨＶ１−６９）、配列番号５８（Ｓｈ０１Ｇ０６  ＩＧＨＶ１−１８  Ｍ６９Ｌ）、配列番号６０（Ｓｈ０１Ｇ０６  ＩＧＨＶ１−１８  Ｍ６９Ｌ  Ｋ６４Ｑ  Ｇ４４Ｓ）、配列番号６２（Ｓｈ０１Ｇ０６  ＩＧＨＶ１−１８  Ｍ６９Ｌ  Ｋ６４Ｑ）、配列番号６４（Ｓｈ０１Ｇ０６  ＩＧＨＶ１−６９  Ｔ３０Ｓ  Ｉ６９Ｌ）、配列番号６６（Ｓｈ０１Ｇ０６  ＩＧＨＶ１−６９  Ｔ３０Ｓ  Ｋ６４Ｑ  Ｉ６９Ｌ）、配列番号２４６（Ｈｕ０１Ｇ０６  ＩＧＨＶ１−１８  Ｆ１）、配列番号２４８（Ｈｕ０１Ｇ０６  ＩＧＨＶ１−１８  Ｆ２）、配列番号２５０（Ｈｕ０１Ｇ０６  ＩＧＨＶ１−６９  Ｆ１）、配列番号２５２（Ｈｕ０１Ｇ０６  ＩＧＨＶ１−６９  Ｆ２）、配列番号６８（ＨＥ  ＬＭ  ０６Ｃ１１  ＩＧＨＶ２−７０）、配列番号７０（Ｈｕ０６Ｃ１１  ＩＧＨＶ２−５）、配列番号７２（Ｓｈ１４Ｆ１１  ＩＧＨＶ２−５）、および配列番号７４（Ｓｈ１４Ｆ１１  ＩＧＨＶ２−７０）の全可変領域またはＦＲ配列に対して、少なくとも７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９５％、９８％、または９９％同一であるアミノ酸配列を含む免疫グロブリン重鎖可変領域を含む。
【０１４０】
特定の実施形態では、ｈＧＤＦ１５に結合する単離抗体は、配列番号７６（０１Ｇ０６、Ｃｈ０１Ｇ０６  Ｃｈｉｍｅｒｉｃ）、配列番号７８（０３Ｇ０５）、配列番号８０（０４Ｆ０８）、配列番号８２（０６Ｃ１１、Ｃｈ０６Ｃ１１  Ｃｈｉｍｅｒｉｃ）、配列番号８４（０８Ｇ０１）、配列番号８６（１４Ｆ１１、Ｃｈ１４Ｆ１１  Ｃｈｉｍｅｒｉｃ）、配列番号８８（１７Ｂ１１）、配列番号９０（Ｈｕ０１Ｇ０６  ＩＧＫＶ１−３９）、配列番号９２（Ｈｕ０１Ｇ０６  ＩＧＫＶ１−３９  Ｓ４３Ａ  Ｖ４８ＩまたはＨｕ０１Ｇ０６  ＩＧＫＶ１−３９  Ｆ１）、配列番号９４（Ｈｕ０１Ｇ０６  ＩＧＫＶ１−３９  Ｖ４８Ｉ）、配列番号２５４（Ｈｕ０１Ｇ０６  ＩＧＫＶ１−３９  Ｆ２）、配列番号９６（Ｓｈ０６Ｃ１１  ＩＧＫＶ１−１６）、および配列番号９８（Ｈｕ１４Ｆ１１
ＩＧＫＶ１−１６）の全可変領域またはＦＲ配列に対して、少なくとも７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９５％、９８％、または９９％同一であるアミノ酸配列を含む免疫グロブリン軽鎖可変領域を含む。
【０１４１】
配列同一性は、例えばＢＬＡＳＴ、ＢＬＡＳＴ−２、ＡＬＩＧＮまたはＭｅｇａｌｉｇｎ（ＤＮＡＳＴＡＲ）ソフトウェアのような公的に利用可能なコンピュータソフトウェアの使用など、当該技術分野の当業者の技術範囲内である様々なやり方で判定されてもよい。ｂｌａｓｔｐ、ｂｌａｓｔｎ、ｂｌａｓｔｘ、ｔｂｌａｓｔｎ、およびｔｂｌａｓｔｘプログラムによって用いられるアルゴリズムを使用するＢＬＡＳＴ（Ｂａｓｉｃ  Ｌｏｃａｌ  Ａｌｉｇｎｍｅｎｔ  Ｓｅａｒｃｈ  Ｔｏｏｌ）分析（Ｋａｒｌｉｎ  ｅｔ  ａｌ．，（１９９０）ＰＲＯＣ．ＮＡＴＬ．ＡＣＡＤ．ＳＣＩ．ＵＳＡ８７：２２６４−２２６８；Ａｌｔｓｃｈｕｌ，（１９９３）Ｊ．ＭＯＬ．ＥＶＯＬ．３６：２９０−３００；Ａｌｔｓｃｈｕｌ  ｅｔ  ａｌ．，（１９９７）ＮＵＣＬＥＩＣ  ＡＣＩＤＳ  ＲＥＳ．２５：３３８９−３４０２を参照によって援用）は、配列類似性検索の目的に合わせられる。配列検索における基本的問題の考察については、その全体を参照によって援用するＡｌｔｓｃｈｕｌ  ｅｔ  ａｌ．，（１９９４）ＮＡＴＵＲＥ  ＧＥＮＥＴＩＣＳ  ６：１１９−１２９を参照されたい。当業者は、比較される配列の完全長全体にわたって、最大の整列を達成するのに必要なあらゆるアルゴリズムをはじめとする、アライメント測定に適したパラメータを判定し得る。ｈｉｓｔｏｇｒａｍ、ｄｅｓｃｒｉｐｔｉｏｎｓ、ａｌｉｇｎｍｅｎｔｓ、ｅｘｐｅｃｔ（すなわちデータベース配列に対する報告されたマッチの統計的有意性閾値）、ｃｕｔｏｆｆ、ｍａｔｒｉｘ、およびｆｉｌｔｅｒの検索パラメータは、デフォルト設定である。ｂｌａｓｔｐ、ｂｌａｓｔｘ、ｔｂｌａｓｔｎ、およびｔｂｌａｓｔｘによって使用されるデフォルト重み行列は、ＢＬＯＳＵＭ６２行列である（その全体を参照によって援用するＨｅｎｉｋｏｆｆ  ｅｔ  ａｌ．，（１９９２）ＰＲＯＣ．ＮＡＴＬ．ＡＣＡＤ．ＳＣＩ．ＵＳＡ  ８９，１０９１５−１０９１９）。４つのｂｌａｓｔｎパラメータは次のように調節してもよい：Ｑ＝１０（ギャップ生成ペナルティ）；Ｒ＝１０（ギャップ伸長ペナルティ）；ｗｉｎｋ＝１（クエリーに沿ってｗｉｎｋ番目の位置ごとにワードヒットを作製する）；およびｇａｐｗ＝１６（ギャップを含むアラインメントを作製する範囲内でウィンドウ幅を設定する）。同等のＢｌａｓｔｐパラメータ設定は、Ｑ＝９；Ｒ＝２；ｗｉｎｋ＝１；およびｇａｐｗ＝３２であってもよい。検索はまた、ＮＣＢＩ（Ｎａｔｉｏｎａｌ  Ｃｅｎｔｅｒ  ｆｏｒ  Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ  Ｉｎｆｏｒｍａｔｉｏｎ）ＢＬＡＳＴ  Ａｄｖａｎｃｅｄ  Ｏｐｔｉｏｎパラメータを使用して実施してもよい。（例えばＧ（Ｃｏｓｔ  ｔｏ  ｏｐｅｎ  ｇａｐ）［整数値］：デフォルト＝ヌクレオチドでは５／タンパク質では１１；Ｅ（Ｃｏｓｔ  ｔｏ  ｅｘｔｅｎｄ  ｇａｐ）［整数値］：デフォルト＝ヌクレオチドでは２／タンパク質では１；ｑ（Ｐｅｎａｌｔｙ  ｆｏｒ  ｎｕｃｌｅｏｔｉｄｅ  ｍｉｓｍａｔｃｈ）［整数値］：デフォルト＝−３；ｒ（ｒｅｗａｒｄ  ｆｏｒ  ｎｕｃｌｅｏｔｉｄｅ  ｍａｔｃｈ）［整数値］：デフォルト＝１；ｅ（ｅｘｐｅｃｔ  ｖａｌｕｅ）［実数値］：デフォルト＝１０；Ｗ（ｗｏｒｄｓｉｚｅ）［整数値］：デフォルト＝ヌクレオチドでは１１／ｍｅｇａｂｌａｓｔでは２８／タンパク質では３；ｙ（Ｄｒｏｐｏｆｆ  （Ｘ）ｆｏｒ  ｂｌａｓｔ  ｅｘｔｅｎｓｉｏｎｓ  ｉｎ  ｂｉｔｓ）：デフォルト＝ｂｌａｓｔｎでは２０／他では７；Ｘ（Ｘ  ｄｒｏｐｏｆｆ  ｖａｌｕｅ  ｆｏｒ  ｇａｐｐｅｄ  ａｌｉｇｎｍｅｎｔ（ｉｎ  ｂｉｔｓ））：デフォルト＝全てのプログラムで１５、ｂｌａｓｔｎには適用されず；およびＺ（ｆｉｎａｌ  Ｘ  ｄｒｏｐｏｆｆ  ｖａｌｕｅ  ｆｏｒ  ｇａｐｐｅｄ  ａｌｉｇｎｍｅｎｔ（ｉｎ  ｂｉｔｓ））：ｂｌａｓｔｎでは５０、他では２５））。ペアワイズタンパク質間アライメントのためのＣｌｕｓｔａｌＷもまた、使用してもよい（デフォルトパラメータとしては、例えばＢｌｏｓｕｍ６２行列およびＧａｐ
Ｏｐｅｎｉｎｇ  Ｐｅｎａｌｔｙ＝１０およびＧａｐ  Ｅｘｔｅｎｓｉｏｎ  Ｐｅｎａｌｔｙ＝０．１が挙げられる）。ＧＣＧパッケージバージョン１０．０で利用できる配列間のＢｅｓｔｆｉｔ比較は、ＤＮＡパラメータＧＡＰ＝５０（ｇａｐ  ｃｒｅａｔｉｏｎ
ｐｅｎａｌｔｙ）およびＬＥＮ＝３（ｇａｐ  ｅｘｔｅｎｓｉｏｎ  ｐｅｎａｌｔｙ）を使用する。Ｂｅｓｔｆｉｔタンパク質比較における同等の設定はＧＡＰ＝８およびＬＥＮ＝２である。
【０１４２】
前述の各実施形態では、組み合わさってヒトＧＤＦ１５に結合する免疫グロブリン重鎖可変領域および／または軽鎖可変領域配列は、重鎖および／または軽鎖可変領域のフレームワーク領域にアミノ酸の変更（例えば少なくとも１、２、３、４、５、または１０個のアミノ酸の置換、欠損、または付加）を含有してもよいことが本明細書で熟考された。
【０１４３】
いくつかの実施形態では、抗体は、約３００ｐＭ、２５０ｐＭ、２００ｐＭ、１９０ｐＭ、１８０ｐＭ、１７０ｐＭ、１６０ｐＭ、１５０ｐＭ、１４０ｐＭ、１３０ｐＭ、１２０ｐＭ、１１０ｐＭ、１００ｐＭ、９０ｐＭ、８０ｐＭ、７０ｐＭ、６０ｐＭ、５０ｐＭ、４０ｐＭ、３０ｐＭ、２０ｐＭ、もしくは１０ｐＭ、またはそれ未満のＫＤで、ｈＧＤＦ１５に結合する。特に明記されない限り、ＫＤ値は、実施例８、１４、および１５に記載の条件下における、表面プラズモン共鳴法またはバイオ層干渉法によって決定される。
【０１４４】
いくつかの実施形態では、モノクローナル抗体は、本明細書に開示の抗体（例えば、抗体０１Ｇ０６、０３Ｇ０５、０４Ｆ０８、０６Ｃ１１、０８Ｇ０１、１４Ｆ１１、または１７Ｂ１１）の１つまたは複数によって結合されるｈＧＤＦ１５（例えば、成熟ｈＧＤＦ１５または切断ｒｈＧＤＦ１５）上の同じエピトープに結合する。いくつかの実施形態では、モノクローナル抗体は、ｈＧＤＦ１５への結合に対して、本明細書に開示の抗体（例えば、抗体０１Ｇ０６、０３Ｇ０５、０４Ｆ０８、０６Ｃ１１、０８Ｇ０１、１４Ｆ１１、または１７Ｂ１１）の１つまたは複数と拮抗する。
【０１４５】
抗体が、本明細書に開示の抗ＧＤＦ１５抗体と同じエピトープに結合するか、またはそれと結合に対して拮抗するか否かを判定するための拮抗実験は、当該技術分野で知られている。例示的な拮抗実験としては、イムノアッセイ（例えば、ＥＬＩＳＡアッセイ、ＲＩＡアッセイ）、表面プラズモン共鳴分析（例えば、ＢＩＡｃｏｒｅ（商標）装置を使用するもの）、バイオ層干渉法、およびフローサイトメトリーが挙げられる。
【０１４６】
典型的には、拮抗実験は、固体表面に結合しているかまたは細胞表面に発現している抗原、試験抗ＧＤＦ１５結合抗体、および参照抗体（例えば、抗体０１Ｇ０６、０３Ｇ０５、０４Ｆ０８、０６Ｃ１１、０８Ｇ０１、１４Ｆ１１、または１７Ｂ１１）の使用を含む。参照抗体は標識され、試験抗体は非標識である。拮抗阻害は、試験抗体の存在下で、固体表面または細胞に結合した標識参照抗体の量を決定することにより測定される。通常、試験抗体は、過剰量で存在する（例えば、１倍、５倍、１０倍、２０倍、または１００倍）。拮抗実験により特定される抗体（すなわち、拮抗する抗体）には、参照抗体と同じエピトープまたは類似の（例えば、オーバーラップする）エピトープに結合する抗体、および立体障害が起こる、参照抗体が結合するエピトープに十分近い隣接エピトープに結合する抗体が含まれる。
【０１４７】
例示的な拮抗実験では、参照抗ＧＤＦ１５抗体（例えば、抗体０１Ｇ０６、０３Ｇ０５、０４Ｆ０８、０６Ｃ１１、０８Ｇ０１、１４Ｆ１１、または１７Ｂ１１）を市販の試薬を使用してビオチン化する。ビオチン化した参照抗体を、連続稀釈した試験抗体または非標識参照抗体（自己拮抗対照）と混合し、標識参照抗体に対して種々のモル比（例えば、１倍、５倍、１０倍、２０倍、または１００倍）の試験抗体（または非標識参照抗体）の混合物を得る。ｈＧＤＦ１５ポリペプチドをコーティングしたＥＬＩＳＡプレートに抗体混合物を加える。次いで、プレートを洗浄し、西洋ワサビペルオキシダーゼ（ＨＲＰ）−ストレプトアビジンを検出試薬としてプレートに加える。標的抗原に結合した標識参照抗体の量を、当該技術分野で知られている発色基質（例えば、ＴＭＢ（３，３’，５、５’−テトラメチルベンジジン）またはＡＢＴＳ（２，２”−アジノ−ジ−（３−エチルベンズチアゾリン−６−スルホネート））の添加後に検出する。光学濃度量（ＯＤ単位）を、ＳｐｅｃｔｒａＭａｘ（登録商標）Ｍ２分光計（Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｄｅｖｉｃｅｓ）を使用して測定する。０パーセント阻害に対応するＯＤ単位は、拮抗する抗体をまったく含まないウェルから決定する。１００％阻害に対応するＯＤ単位、すなわち、実験のバックグラウンドは、標識参照抗体または試験抗体をまったく含まないウェルから決定する。各濃度の試験抗体（または非標識参照抗体）による、ＧＤＦ１５に対する標識参照抗体のパーセント阻害を、以下のように計算する：％阻害＝（１−（ＯＤ単位−１００％阻害）／（０％阻害−１００％阻害））＊１００。当業者は、当該技術分野で知られている種々の検出システムを使用して、拮抗実験を行なうことができることを認識している。
【０１４８】
拮抗実験は、標識の存在により結合が妨害、またはさもなければ阻害されないことを確認するために、両方向で行うことができる。例えば、第１の方向では、参照抗体を標識し、試験抗体を非標識にし、第２の方向では、試験抗体を標識し、参照抗体を非標識にする。
【０１４９】
拮抗結合実験で測定したときに、過剰量の一方の抗体（例えば、１倍、５倍、１０倍、２０倍、または１００倍）が他方の抗体の結合を、例えば、少なくとも５０％、７５％、９０％、９５％、または９９％阻害する場合、試験抗体は抗原に特異的な結合に対して参照抗体と拮抗する。
【０１５０】
一方の抗体の結合を低減または排除する、抗原内のアミノ酸突然変異が基本的にすべて、他方の結合を低減または排除する場合、２つの抗体は同じエピトープに結合する。一方の抗体の結合を低減または排除するアミノ酸突然変異のサブセットのみが、他方の結合を低減または排除する場合、２つの抗体はオーバーラップするエピトープに結合する。
【０１５１】
ＩＩ．抗体の生成
本明細書にて開示される抗体を生成する方法は、当該技術分野で知られている。例えば本明細書で提供される配列情報を使用して、軽鎖可変領域および／または重鎖可変領域をコードするＤＮＡ分子を化学的に合成し得る。合成ＤＮＡ分子は、例えば定常領域コード配列および発現調節配列をはじめとするその他の適切なヌクレオチド配列にライゲートして、所望される抗体をコードする、従来の遺伝子発現コンストラクトを生成し得る。定義された遺伝子コンストラクトの生成は、当該技術分野の通例の技術範囲内である。代案としては、本明細書で提供される配列は、その配列が、本明細書で提供される配列情報、またはハイブリドーマ細胞中のマウス抗体重軽鎖をコードする遺伝子に関する先行技術の配列情報に基づく、合成核酸プローブを使用して、従来のハイブリダイゼーション技術またはポリメラーゼ連鎖反応（ＰＣＲ）技術によって、ハイブリドーマからクローンし得る。
【０１５２】
所望の抗体をコードする核酸は、発現ベクターに組み込み（ライゲートし）得て、それは従来の形質移入または形質転換技術を通じて宿主細胞に導入し得る。例示的な宿主細胞は、さもなければＩｇＧタンパク質を産生しない、大腸菌（Ｅ．ｃｏｌｉ）細胞、チャイニーズハムスター卵巣（ＣＨＯ）細胞、ヒト胚腎臓２９３（ＨＥＫ２９３）細胞、ＨｅＬａ細胞、幼若ハムスター腎臓（ＢＨＫ）細胞、サル腎培養細胞（ＣＯＳ）、ヒト肝細胞癌細胞（例えばＨｅｐＧ２）、および骨髄腫細胞である。形質転換宿主細胞は、宿主細胞が免疫グロブリン軽鎖および／または重鎖可変領域をコードする遺伝子を発現できるようにする条件下で培養し得る。
【０１５３】
特定の発現および精製条件は、用いられる発現系次第で変化する。例えば大腸菌（Ｅ．ｃｏｌｉ）中で遺伝子を発現させる場合、改変遺伝子を例えばＴｒｐまたはＴａｃなどの適切な細菌プロモーター、および原核生物シグナル配列から下流に配置させることで、それを最初に発現ベクターにクローンする。発現された分泌タンパク質は、光屈折小体または封入小体中に蓄積し、フレンチプレスまたは超音波処理による細胞の破砕後に採取し得る。次に光屈折小体を可溶化し、当該技術分野で既知の方法によって、タンパク質を再び折り畳んで切断する。
【０１５４】
改変遺伝子を、例えばＣＨＯ細胞などの真核宿主細胞中で発現させる場合、最初に、適切な真核生物プロモーター、分泌シグナル、ポリＡ配列、および停止コドンを含有する発現ベクターに挿入する。場合によっては、ベクターまたは遺伝子コンストラクトは、エンハンサーおよびイントロンを含有してもよい。この発現ベクターは、定常領域の全部または一部をコードする配列を任意に含有して、重鎖または軽鎖の全部またはその一部が発現できるようにする。遺伝子コンストラクトは、従来の技術を使用して、真核生物宿主細胞に導入し得る。宿主細胞は、ＶＬまたはＶＨ断片、ＶＬ−ＶＨヘテロ二量体、ＶＨ−ＶＬまたはＶＬ−ＶＨ一本鎖ポリペプチド、完全長重または軽免疫グロブリン鎖、またはその部分を発現し、そのそれぞれが別の機能（例えば細胞毒性）を有する部分に付着してもよい。いくつかの実施形態では、宿主細胞は、重鎖（例えば重鎖可変領域）または軽鎖（例えば軽鎖可変領域）の全部または一部を発現するポリペプチドを発現する、単一ベクターで形質移入される。いくつかの実施形態では、宿主細胞は、（ａ）重鎖可変領域を含むポリペプチドおよび軽鎖可変領域を含むポリペプチドをコードし、または（ｂ）免疫グロブリン重鎖全体および免疫グロブリン軽鎖全体をコードする単一ベクターで形質移入される。いくつかの実施形態では、宿主細胞は１つを超える発現ベクター（例えば重鎖または重鎖可変領域の全体または一部を含むポリペプチドを発現する１つの発現ベクターと、軽鎖または軽鎖可変領域の全体または一部を含むポリペプチドを発現する別の発現ベクター）で同時形質移入される。
【０１５５】
免疫グロブリン重鎖可変領域または軽鎖可変領域を含むポリペプチドは、ポリペプチドを発現できるようにする条件下において、このような可変領域をコードする発現ベクターによって形質移入された宿主細胞を培養（養殖）することで生成し得る。発現に続いて、例えばグルタチオン−Ｓ−トランスフェラーゼ（ＧＳＴ）またはヒスチジンタグのような親和性タグなど、当該技術分野で知られている技術を使用して、ポリペプチドを収集し精製しまたは単離し得る。
【０１５６】
ｈＧＤＦ１５に結合するモノクローナル抗体または抗体の抗原結合性断片は、（ａ）完全長または部分的免疫グロブリン重鎖をコードする発現ベクターと、完全長または部分的免疫グロブリン軽鎖をコードする別個の発現ベクター；または（ｂ）双方の鎖（例えば完全長または部分的重鎖および軽鎖）をコードする単一発現ベクターで形質移入された宿主細胞を、双方の鎖が発現できるようにする条件下で培養（養殖）することにより生成し得る。無処理抗体（または抗原結合性断片）は、例えばプロテインＡ、プロテインＧ、グルタチオン−Ｓ−トランスフェラーゼ（ＧＳＴ）やヒスチジンタグのような親和性タグなどの当該技術分野で良く知られている技術を使用して、収集し精製しまたは単離し得る。単一発現ベクターから、または２つの別個の発現ベクターから重鎖および軽鎖を発現することは、当該技術分野の通常の技術の範囲内である。
【０１５７】
ＩＩＩ．抗体の修飾
抗体および抗体断片の抗原性を低下させまたは排除する方法は、当該技術分野で知られている。抗体がヒトに投与されると、抗体は、好適には「ヒト化」されて、ヒトにおける抗原性が低下しまたは排除される。好適には、各ヒト化抗体は、抗原に対して、それが由来する非ヒト化マウス抗体と同一のまたは実質的に同一の親和性を有する。
【０１５８】
１つのヒト化アプローチでは、その中でマウス免疫グロブリン定常領域がヒト免疫グロブリン定常領域で置換されている、キメラタンパク質が作られる。例えばＭｏｒｒｉｓｏｎ  ｅｔ  ａｌ．，１９８４，ＰＲＯＣ．ＮＡＴ．ＡＣＡＤ．ＳＣＩ  ８１：６８５１−６８５５、Ｎｅｕｂｅｒｇｅｒ  ｅｔ  ａｌ．，１９８４、ＮＡＴＵＲＥ  ３１２：６０４−６０８；米国特許第６，８９３，６２５号明細書（Ｒｏｂｉｎｓｏｎ）；米国特許第５，５００，３６２号明細書（Ｒｏｂｉｎｓｏｎ）；および米国特許第４，８１６，５６７号明細書（Ｃａｂｉｌｌｙ）を参照されたい。
【０１５９】
ＣＤＲグラフトとして知られているアプローチでは、軽鎖および重鎖可変領域のＣＤＲが、別の種からのフレームワークにグラフトされる。例えばマウスＣＤＲをヒトＦＲにグラフトし得る。いくつかの実施形態では、抗ＧＤＦ１５抗体の軽鎖および重鎖可変領域のＣＤＲが、ヒトＦＲまたはコンセンサスヒトＦＲ上にグラフトされる。コンセンサスヒトＦＲを作り出すために、いくつかのヒト重鎖または軽鎖アミノ酸配列からのＦＲを配列比較して、コンセンサスアミノ酸配列を同定する。ＣＤＲグラフトは、米国特許第７，０２２，５００号明細書（Ｑｕｅｅｎ）；米国特許第６，９８２，３２１号明細書（Ｗｉｎｔｅｒ）；米国特許第６，１８０，３７０号明細書（Ｑｕｅｅｎ）；米国特許第６，０５４，２９７号明細書（Ｃａｒｔｅｒ）；米国特許第５，６９３，７６２号明細書（Ｑｕｅｅｎ）；米国特許第５，８５９，２０５号明細書（Ａｄａｉｒ）；米国特許第５，６９３，７６１号明細書（Ｑｕｅｅｎ）；米国特許第５，５６５，３３２号明細書（Ｈｏｏｇｅｎｂｏｏｍ）；米国特許第５，５８５，０８９号明細書（Ｑｕｅｅｎ）；米国特許第５，５３０，１０１号明細書；（Ｑｕｅｅｎ）；Ｊｏｎｅｓ  ｅｔ  ａｌ．（１９８６）ＮＡＴＵＲＥ  ３２１：５２２−５２５；Ｒｉｅｃｈｍａｎｎ  ｅｔ  ａｌ．（１９８８）ＮＡＴＵＲＥ  ３３２：３２３−３２７；Ｖｅｒｈｏｅｙｅｎ  ｅｔ  ａｌ．（１９８８）ＳＣＩＥＮＣＥ  ２３９：１５３４−１５３６；およびＷｉｎｔｅｒ（１９９８）ＦＥＢＳ
ＬＥＴＴ  ４３０：９２−９４に記載される。
【０１６０】
「ＳＵＰＥＲＨＵＭＡＮＩＺＡＴＩＯＮ（商標）」と称されるアプローチでは、ヒトＣＤＲとヒト化されるマウス抗体との構造的な類似性に基づいて、ヒトＣＤＲ配列がヒト生殖細胞系遺伝子から選択される。例えば米国特許第６，８８１，５５７号明細書（Ｆｏｏｔｅ）；およびＴａｎ  ｅｔ  ａｌ．，２００２，Ｊ．ＩＭＭＵＮＯＬ  １６９：１１１９−１１２５を参照されたい。
【０１６１】
免疫原性を低下させるその他の方法としては、「再形成」、「ハイパーキメラ化」、および「ベニアリング／表面再構成」が挙げられる。例えばＶａｓｗａｍｉ  ｅｔ  ａｌ．，１９９８，ＡＮＮＡＬＳ  ＯＦ  ＡＬＬＥＲＧＹ，ＡＳＴＨＭＡ，＆  ＩＭＭＵＮＯＬ
８１：１０５；Ｒｏｇｕｓｋａ  ｅｔ  ａｌ．，１９９６，ＰＲＯＴ．ＥＮＧＩＮＥＥＲ  ９：８９５−９０４；および米国特許第６，０７２，０３５号明細書（Ｈａｒｄｍａｎ）を参照されたい。ベニアリング／表面再構成アプローチでは、マウス抗体中の表面接近可能アミノ酸残基が、ヒト抗体中の同一位置でより頻繁に見られるアミノ酸残基によって置換される。このタイプの抗体表面再構成は、例えば米国特許第５，６３９，６４１号明細書（Ｐｅｄｅｒｓｅｎ）に記載される。
【０１６２】
マウス抗体をヒトにおける医療用途に適した形態に転換する別のアプローチは、ＡＣＴＩＶＭＡＢ（商標）技術（Ｖａｃｃｉｎｅｘ、Ｉｎｃ．，Ｒｏｃｈｅｓｔｅｒ、ＮＹ）として知られており、それはワクシニアウィルスベースのベクターが哺乳類細胞内で抗体を発現することを伴う。ＩｇＧ重軽鎖に高レベルのコンビナトリアル多様性が生じるとされている。例えば米国特許第６，７０６，４７７号明細書（Ｚａｕｄｅｒｅｒ）；米国特許６，８００，４４２号明細書（Ｚａｕｄｅｒｅｒ）；よび米国特許６，８７２，５１８号明細書（Ｚａｕｄｅｒｅｒ）を参照されたい。
【０１６３】
マウス抗体をヒトでの使用に適した形態に転換する別のアプローチは、ＫａｌｏＢｉｏｓ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｓ，Ｉｎｃ．（Ｐａｌｏ  Ａｌｔｏ，ＣＡ）によって商業的に実施される技術である。この技術は、抗体を選択するための「エピトープ注目」ライブラリーを作成する、独自仕様のヒト「受容体」ライブラリーの使用を伴う。
【０１６４】
マウス抗体をヒトでの医療用途に適した形態に修飾する別のアプローチは、ＸＯＭＡ（ＵＳ）ＬＬＣ．によって商業的に実施されるＨＵＭＡＮ  ＥＮＧＩＮＥＥＲＩＮＧ（商標）技術である。例えば国際公開第９３／１１７９４号パンフレット、および米国特許第５，７６６，８８６号明細書（Ｓｔｕｄｎｉｃｋａ）；米国特許第５，７７０，１９６号明細書（Ｓｔｕｄｎｉｃｋａ）；米国特許第５，８２１，１２３号明細書（Ｓｔｕｄｎｉｃｋａ）；および米国特許第５，８６９，６１９号明細書（Ｓｔｕｄｎｉｃｋａ）を参照されたい。
【０１６５】
上のアプローチのいずれかをはじめとするあらゆる適切なアプローチを使用して、ヒト抗体の免疫原性を低下させ、または排除し得る。
【０１６６】
加えて、マウスにおいて、完全ヒト抗体を生成させることが可能である。非ヒト配列がない完全ヒトｍＡｂは、例えば、Ｌｏｎｂｅｒｇ  ｅｔ  ａｌ．，ＮＡＴＵＲＥ  ３６８：８５６−８５９，１９９４；Ｆｉｓｈｗｉｌｄ  ｅｔ  ａｌ．，ＮＡＴＵＲＥ  ＢＩＯＴＥＣＨＮＯＬＯＧＹ  １４：８４５−８５１，１９９６；およびＭｅｎｄｅｚ  ｅｔ  ａｌ．，ＮＡＴＵＲＥ  ＧＥＮＥＴＩＣＳ  １５：１４６−１５６，１９９７に掲載される技術によって、ヒト免疫グロブリントランスジェニックマウスから調製することができる。完全ヒトｍＡｂはまた、例えば、Ｋｎａｐｐｉｋ  ｅｔ  ａｌ．，Ｊ．ＭＯＬ．ＢＩＯＬ．２９６：５７−８６，２０００；およびＫｒｅｂｓ  ｅｔ  ａｌ．，Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．Ｍｅｔｈ．２５４：６７−８４  ２００１に掲載される技術によって、ファージディスプレイライブラリーから調製および最適化することができる。
【０１６７】
ＩＶ．治療用途
本明細書に開示の抗体は、種々の障害、例えば悪液質および／または筋肉減少症を治療するために使用することができる。いくつかの実施形態では、本明細書に開示の抗体（例えば、０１Ｇ０６、０３Ｇ０５、０４Ｆ０８、０６Ｃ１１、０８Ｇ０１、１４Ｆ１１、または１７Ｂ１１）を、筋肉量減少、例えば基礎疾患に関連した筋肉量減少を抑制するために使用する。悪液質に関連した基礎疾患としては、以下に限定されるものではないが、癌、慢性心不全、慢性腎疾患、ＣＯＰＤ、ＡＩＤＳ、多発性硬化症、関節リウマチ、敗血症、および結核が挙げられる。いくつかの実施形態では、本開示の抗体は、筋肉量減少を少なくとも４０％、５０％、６０％、７０％、８０％、９０％、９５％、９８％、９９％、または１００％抑制する。
【０１６８】
いくつかの実施形態では、筋肉量減少には脂肪量減少が伴う。本明細書に開示の抗体（例えば、０１Ｇ０６、０３Ｇ０５、０４Ｆ０８、０６Ｃ１１、０８Ｇ０１、１４Ｆ１１、または１７Ｂ１１）は、脂肪量減少を、少なくとも４０％、５０％、６０％、７０％、８０％、９０％、９５％、９８％、９９％、または１００％抑制し得る。
【０１６９】
他の実施形態では、本明細書に開示の抗体（例えば、０１Ｇ０６、０３Ｇ０５、０４Ｆ０８、０６Ｃ１１、０８Ｇ０１、１４Ｆ１１、または１７Ｂ１１）を、悪液質および／または筋肉減少症に伴う１つまたは複数の徴候、例えば不随意性の体重減少を治療するために使用する。いくつかの実施形態では、抗体は、不随意性の体重減少を、少なくとも２％、５％、１０％、１５％、２０％、２５％、３０％、または３５％回復させる。
【０１７０】
他の実施形態では、本明細書に開示の抗体（例えば、０１Ｇ０６、０３Ｇ０５、０４Ｆ０８、０６Ｃ１１、０８Ｇ０１、１４Ｆ１１、または１７Ｂ１１）を、器官重量の減少、例えば基礎疾患に関連した器官重量の減少を抑制するために使用する。悪液質に関連した基礎疾患としては、以下に限定されるものではないが、癌、慢性心不全、慢性腎疾患、ＣＯＰＤ、ＡＩＤＳ、多発性硬化症、関節リウマチ、敗血症、および結核が挙げられる。いくつかの実施形態では、本開示の抗体は、器官重量の減少を、少なくとも４０％、５０％、６０％、７０％、８０％、９０％、９５％、９８％、９９％、または１００％抑制する。いくつかの実施形態では、器官重量の減少は、心臓、肝臓、腎臓、および／または脾臓で観察される。いくつかの実施形態では、器官重量の減少には、筋肉量減少、脂肪量減少、および／または不随意性の体重減少が伴う。
【０１７１】
抗体０１Ｇ０６、０３Ｇ０５、０４Ｆ０８、０６Ｃ１１、０８Ｇ０１、１４Ｆ１１、または１７Ｂ１１は、治療に使用することができる。例えば、抗体０１Ｇ０６、０３Ｇ０５、０４Ｆ０８、０６Ｃ１１、０８Ｇ０１、１４Ｆ１１、または１７Ｂ１１は、悪液質および／または筋肉減少症を治療するために使用することができる。哺乳動物の悪液質および／または筋肉減少症を治療するための、抗体０１Ｇ０６、０３Ｇ０５、０４Ｆ０８、０６Ｃ１１、０８Ｇ０１、１４Ｆ１１、または１７Ｂ１１の使用は、治療的有効量の抗体を哺乳動物に投与することを含む。
【０１７２】
筋肉減少症、筋肉消耗障害、および顕著な筋肉重量減少は、悪液質、食欲減退、または体重減少がない状態でも起こることがある。したがって、特定の実施形態では、本発明の抗ＧＤＦ抗体（例えば、抗体０１Ｇ０６、０３Ｇ０５、０４Ｆ０８、０６Ｃ１１、０８Ｇ０１、１４Ｆ１１、または１７Ｂ１１）の１つまたは複数を、被験体が悪液質または食欲減退になっているかまたはそのように診断されているか否かにかかわらず、筋肉減少症、筋肉消耗障害、および／または顕著な筋肉重量減少に罹患しているかまたはそのように診断されている被験体を治療するために使用することができる。このような方法は、治療的有効量の本発明の１つまたは複数の抗体を、それを必要とする被験体に投与することを含む。
【０１７３】
本明細書に開示のＦｃ−ｒｈＧＤＦ１５融合タンパク質は、肥満を治療するために使用することができる。いくつかの実施形態では、本明細書に開示のｈＦｃ−ｒｈＧＤＦ１５融合タンパク質は、少なくとも５％、１０％、１５％、２０％、２５％、３０％、３５％、４０％、４５％、または５０％の体重増加抑制または体重減少のために使用することができる。  哺乳動物の肥満を治療するためのｈＦｃ−ｈＧＤＦ１５融合タンパク質の使用は、治療的有効量の融合タンパク質を哺乳動物に投与することを含む。
【０１７４】
本明細書の用法では、「治療する」、「治療すること」、および「治療」は、哺乳動物、例えばヒトにおける疾患の治療を意味する。これには、（ａ）疾患を抑制すること、すなわち、その進行を阻止すること、および（ｃ）疾患を緩和すること、すなわち疾患の状態を緩解させることが含まれる。
【０１７５】
概して活性構成要素の治療的有効量（例えば、抗体または融合タンパク質）は、例えば１ｍｇ／ｋｇ〜１００ｍｇ／ｋｇ、１ｍｇ／ｋｇ〜１０ｍｇ／ｋｇ、２．０ｍｇ／ｋｇ〜１０ｍｇ／ｋｇなど、０．１ｍｇ／ｋｇ〜１００ｍｇ／ｋｇの範囲内である。投与量は、疾患のタイプと程度、または治療される適応症、患者の全般的健康、抗体または融合タンパク質のインビボ効力、製剤処方、抗体または融合タンパク質の血清半減期、および投与経路などの変数に左右される。初期用量は、所望される血液レベルまたは組織レベルを迅速に達成するために、上限レベルを越えて増大させ得る。代案としては、初期用量は最適用量よりも低くあり得て、治療過程において用量を徐々に増大させてもよい。ヒト用量は、例えば０．５ｍｇ／ｋｇ〜２０ｍｇ／ｋｇで行われるようにデザインされた、従来の第Ｉ相用量漸増試験中で最適化し得る。投与頻度は、投与経路、投与量、抗体または融合タンパク質の血清半減期、および治療される疾患などの要素に応じて異なり得る。例示的な投与頻度は、日に１回、週に１回、および隔週で１回である。いくつかの実施形態では、投与は隔週で１回である。好ましい投与経路は、非経口経路、例えば静脈注入である。モノクローナル抗体ベースの薬剤および融合タンパク質ベースの薬剤の製剤は、当該技術分野の通常の技術の範囲内である。いくつかの実施形態では、抗体および融合タンパク質は、凍結乾燥し、次いで投与時に緩衝食塩水で再構成する。第２の活性薬剤、例えば抗ガン剤または下記で論ずる他の薬剤の有効量もまた、本明細書の上記で論じた原理に従い、患者において要求される治療効果を引き出すように選択される。
【０１７６】
治療用途では、抗体は、好適には薬学的に許容できるキャリアと組み合わせられる。本明細書の用法では、「薬学的に許容できるキャリア」とは、過剰な毒性、刺激、アレルギー性応答、またはその他の問題または合併症がなく、利点／リスク比が釣り合った、ヒトおよび動物の組織と接触する用途に適した、緩衝液、キャリア、および賦形剤を意味する。キャリアは、製剤のその他の成分と適合性であり、受容者にとって有害でないという意味で、「許容可能」でなくてはならない。薬学的に許容できるキャリアとしては、製薬投与に適合する、緩衝液、溶剤、分散媒、コーティング、等張剤、および吸収遅延剤などが挙げられる。薬理的活性物質のためのこのような媒体および作用物質の使用は、当該技術分野で知られている。
【０１７７】
本明細書に開示のものなどの抗体または融合タンパク質を含有する医薬組成物は、投薬単位形態で提供すことができ、任意の適切な方法で調製することができる。医薬組成物は、その意図される投与経路に適合するように処方されなくてはならない。投与経路の例は、静脈内（ＩＶ）、皮内、吸入、経皮、局所、経粘膜、および直腸内投与である。モノクローナル抗体投与の望ましい経路は、ＩＶ注入である。有用な製剤は、製薬技術で知られている方法によって調製し得る。例えばＲｅｍｉｎｇｔｏｎ’ｓ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｓｃｉｅｎｃｅｓ，１８ｔｈ  ｅｄ．（Ｍａｃｋ  Ｐｕｂｌｉｓｈｉｎｇ  Ｃｏｍｐａｎｙ，１９９０）を参照されたい。非経口投与に適した製剤構成要素としては、注射用水、食塩溶液、不揮発性油、ポリエチレングリコール、グリセリン、プロピレングリコールまたはその他の合成溶剤などの無菌希釈剤；ベンジルアルコールまたはメチルパラベンなどの抗菌剤；アスコルビン酸または亜硫酸水素ナトリウムなどの抗酸化剤；ＥＤＴＡなどのキレート化剤；酢酸、クエン酸またはリン酸などの緩衝液；および塩化ナトリウムまたはデキストロースなどの浸透圧調節剤が挙げられる。
【０１７８】
静脈内投与のための適切なキャリアとしては、生理学的食塩水、静菌水、Ｃｒｅｍｏｐｈｏｒ  ＥＬ（商標）（ＢＡＳＦ，Ｐａｒｓｉｐｐａｎｙ，ＮＪ）またはリン酸緩衝食塩水（ＰＢＳ）が挙げられる。キャリアは、製造および保存条件下で安定しているべきであり、微生物から保護されていなくてはならない。キャリアは、例えば水、エタノール、ポリオール（例えばグリセロール、プロピレングリコール、および液体ポリエチレン（ｐｏｌｙｅｔｈｅｙｌｅｎｅ）グリコール）、およびそれらの適切な混合物を含有する、溶媒または分散媒であり得る。
【０１７９】
医薬製剤は、好適には無菌である。滅菌は、例えば滅菌濾過膜を通した濾過によって達成し得る。組成物が凍結乾燥されている場合、濾過滅菌は凍結乾燥と水戻しに先だって、またはそれに続いて実施し得る。
【０１８０】
ＧＤＦ１５（すなわち、ＭＩＣ−１／ＰＬＡＢ／ＰＤＦ／ＮＡＧ−１）経路に加えて、悪液質に関与する他のサイトカインとしてアクチビンＡおよびＩＬ−６が挙げられる。アクチビンレベルの増大は、癌関連悪液質および性腺腫瘍と関連している。例えば、Ｍａｒｉｎｏ  ｅｔ  ａｌ．（２０１３）ＣＹＴＯＫＩＮＥ  ＆  ＧＲＯＷＴＨ  ＦＡＣＴＯＲ
ＲＥＶ．２４：４７７−４８４を参照されたい。アクチビンＡは、ＴＧＦβファミリーのメンバーであり、アクチビン２型受容体であるＡｃｔＲＩＩＢのリガンドである。例えば、Ｚｈｏｕ  ｅｔ  ａｌ．（２０１０）ＣＥＬＬ  １４２：５３１−５４３を参照されたい。ＩＬ−６の循環レベルは、癌患者の体重減少および生存期間短縮と相関することが示されている。例えば、Ｆｅａｒｏｎ  ｅｔ  ａｌ．（２０１２）ＣＥＬＬ  ＭＥＴＡＢＯＬＩＳＭ  １６：１５３−１６６を参照されたい。
【０１８１】
したがって、本発明の特定の実施形態では、アクチビン−Ａまたはアクチビン−Ａ受容体であるＡｃｔＲＩＩＢ、ＩＬ−６またはＩＬ−６受容体（ＩＬ−６Ｒ）の１つまたは複数の阻害剤を、ＧＤＦ−１５活性を阻害する本発明の抗体と組み合わせて投与することができる（例えば、本発明の抗体と同時に、その前に、またはその後に投与することができる）。アクチビンＡまたはＡｃｔＲＩＩＢの例示的な阻害剤としては、例えば、抗アクチビン−Ａ抗体またはその抗原結合断片、抗ＡｃｔＲＩＩＢ抗体またはその抗原結合断片、アクチビン−Ａの小分子阻害剤、ＡｃｔＲＩＩＢの小分子阻害剤、ならびに可溶性ＡｃｔＲＩＩＢ受容体およびＦｃ分子と可溶性ＡｃｔＲＩＩＢ受容体との融合物（ＡｃｔＲＩＩＢ−Ｆｃ）などのＡｃｔＲＩＩＢの「デコイ」受容体が挙げられる。例えば、前出のＺｈｏｕ  ｅｔ  ａｌ．（２０１０）を参照されたい。ＩＬ−６またはＩＬ−６Ｒの適切な阻害剤としては、抗ＩＬ−６抗体またはその抗原結合断片、抗ＩＬ−６Ｒ抗体またはその抗原結合断片、ＩＬ−６の小分子阻害剤、ＩＬ−６Ｒの小分子阻害剤、ならびに可溶性ＩＬ−６受容体およびＦｃ分子と可溶性ＩＬ−６受容体との融合物（ＩＬ６Ｒ−Ｆｃ）などのＩＬ−６Ｒの「デコイ」受容体が挙げられる。例えば、Ｅｎｏｍｏｔｏ  ｅｔ  ａｌ．（２００４）ＢＩＯＣＨＥＭ．ＡＮＤ  ＢＩＯＰＨＹＳ．ＲＥＳ．ＣＯＭＭ．３２３：１０９６−１１０２；Ａｒｇｉｌｅｓ  ｅｔ  ａｌ．（２０１１）ＥＵＲ．Ｊ．ＰＨＡＲＭＡＣＯＬ．６６８：Ｓ８１−Ｓ８６；Ｔｕｃａ  ｅｔ  ａｌ．（２０１３）ＯＮＣＯＬＯＧＹ／ＨＥＭＡＴＯＬＯＧＹ  ８８：６２５−６３６を参照されたい。ＩＬ−６またはＩＬ−６Ｒの適切な阻害剤としては、例えば、関節リウマチの治療用に認可されたヒト化抗ＩＬ−６Ｒモノクローナル抗体であるトシリズマブ（Ａｃｔｅｍｒａ（登録商標）、Ｈｏｆｆｍａｎｎ−ＬａＲｏｃｈｅ）、および関節リウマチの治療用に臨床開発中のヒト化抗ＩＬ６Ｒ抗体であるＳａｒｉｌｕｍａｂ／ＲＥＧＮ８８（Ｒｅｇｅｎｅｒｏｎ）；ならびにＩＬ−６産生を阻害することが示されている、ＭＥＫのアロステリック阻害剤であるＳｅｌｕｍｅｔｉｎｉｂ／ＡＺＤ６２４４（ＡｓｔｒａＺｅｎｅｃａ）が挙げられる。Ｐｒａｄｏ  ｅｔ  ａｌ．（２０１２）ＢＲＩＴＩＳＨ  Ｊ．ＣＡＮＣＥＲ  １０６：１５８３−１５８６。
【０１８２】
ＴＮＦαおよびＩＬ−１は、炎症促進性応答の媒介に関与することが知られているサイトカインであり、筋肉枯渇、食欲減退、および悪液質にも関係している。ＴＮＦαの循環レベルの増大は、筋形成を抑制するように見える。「カケクチン」としても知られているＴＮＦαは、インターロイキン−１の分泌を刺激し、悪液質の誘導に関係する。ＩＬ−１は、急性期炎症反応の強力なトリガーであり、ＩＬ−１の注入により顕著な体重減少および食欲不振がもたらされ得ることが示されている。ＩＬ−１は、マウス結腸２６腺癌を有するマウスにおける癌性悪液質の惹起に寄与することが示されている（Ｓｔｒａｓｓｍａｎｎ  ｅｔ  ａｌ．（１９９３）Ｊ．ＩＭＭＵＮＯＬ．１５０：２３４１）。Ｍａｔｈｙｓ  ａｎｄ  Ｂｉｌｌｉａｕ（１９９７）ＮＵＴＲＩＴＩＯＮ  １３：７６３−７７０；Ｆｏｎｇ  ｅｔ  ａｌ．（１９８９）ＡＭ．Ｊ．ＰＨＹＳＩＯＬ．−ＲＥＧＵＬＡＴＯＲＹ，ＩＮＴＥＧＲＡＴＩＶＥ  ＡＮＤ  ＣＯＭＰＡＲＡＴＩＶＥ  ＰＨＹＳＩＯＬ．，２５６：Ｒ６５９−Ｒ６６５も参照されたい。したがって、関節リウマチの治療に使用されるＴＮＦα阻害剤およびＩＬ−１阻害剤は、悪液質の治療にも有用となる可能性がある。
【０１８３】
したがって、本発明の特定の実施形態では、ＴＮＦαまたはＩＬ−１の１つまたは複数の阻害剤は、ＧＤＦ−１５活性を阻害する本発明の抗体と組み合わせて投与することができる（例えば、本発明の抗体と同時に、その前に、またはその後に投与することができる）。ＴＮＦαまたはＩＬ−１の適切な阻害剤としては、抗ＴＮＦα抗体またはその抗原結合断片、抗ＩＬ−１抗体またはその抗原結合断片、ＴＮＦαまたはＩＬ−１の小分子阻害剤、ならびに可溶性ＴＮＦαまたはＩＬ−１受容体およびＦｃ分子と可溶性形態のＴＮＦαまたはＩＬ−１との融合物などのＴＮＦαまたはＩＬ−１の「デコイ」受容体が挙げられる。ＴＮＦαの適切な阻害剤としては、例えば、エタネルセプト（Ｅｎｂｒｅｌ（登録商標）、Ｐｆｉｚｅｒ／Ａｍｇｅｎ）、インフリキシマブ（Ｒｅｍｉｃａｄｅ（登録商標）、Ｊａｎｓｓｅｎ  Ｂｉｏｔｅｃｈ）、アダリムマブ（Ｈｕｍｉｒａ（登録商標）、Ａｂｂｖｉｅ）、ゴリムマブ（Ｓｉｍｐｏｎｉ（登録商標）、Ｊｏｈｎｓｏｎ  ａｎｄ  Ｊｏｈｎｓｏｎ／Ｍｅｒｃｋ）、セルトリズマブペゴル（Ｃｉｍｚｉａ（登録商標）、ＵＣＢ）が挙げられる。適切なＩＬ−１の阻害剤としては、例えば、ＩＬ−１αを標的にするＸｉｌｏｎｉｘ（登録商標）抗体（ＸＢｉｏｔｅｃｈ）、アニキンラ（Ｋｉｎａｒｅｔ（登録商標）、Ａｍｇｅｎ）、カナキヌマブ（Ｉｌａｒｉｓ（登録商標）、Ｎｏｖａｒｔｉｓ）、およびリロナセプト（Ａｒｃａｌｙｓｔ（登録商標）、Ｒｅｇｅｎｅｒｏｎ）が挙げられる。特定の実施形態では、関節リウマチの治療用には通常全身投与されるＴＮＦα阻害剤またはＩＬ−１阻害剤は、腫瘍部位に局所的かつ直接的に投与することができる。
【０１８４】
ＧＤＦ−８としても知られているミオスタチンは、ミオスタチン欠損哺乳動物における筋肉量増大によって示されるように、筋肉量の負の調節因子となるペプチドであり、ＴＧＦβファミリーのメンバーである。ミオスタチンは、アクチビン２型受容体であるＡｃｔＲＩＩＢのリガンドである。したがって、本発明の特定の実施形態では、ミオスタチンまたはその受容体の１つまたは複数の阻害剤は、ＧＤＦ−１５活性を阻害する本発明の抗体と組み合わせて投与することができる（例えば、本発明の抗体と同時に、その前に、またはその後に投与することができる）。ミオスタチンまたはＡｃｔＲＩＩＢの適切な阻害剤としては、抗ミオスタチン抗体またはその抗原結合断片、抗ＡｃｔＲＩＩＢ抗体またはその抗原結合断片、ミオスタチンの小分子阻害剤、ＡｃｔＲＩＩＢの小分子阻害剤、ならびに可溶性ＡｃｔＲＩＩＢおよびＦｃ分子と可溶性形態のＡｃｔＲＩＩＢとの融合物などのＧＤＦ−８の「デコイ」受容体が挙げられる。例えば、Ｌｏｋｉｒｅｄｄｙ  ｅｔ  ａｌ．（２０１２）ＢＩＯＣＨＥＭ．Ｊ．４４６（１）：２３−２６を参照されたい。本発明に適し得るミオスタチン阻害剤としては、ＲＥＧＮ１０３３（Ｒｅｇｅｎｅｒｏｎ）；Ｂａｕｅｒｌｅｉｎ  ｅｔ  ａｌ．（２０１３）Ｊ．ＣＡＣＨＥＸＩＡ  ＳＡＲＣＯＰＥＮＩＡ  ＭＵＳＣＬＥ：Ａｂｓｔｒａｃｔｓ  ｏｆ  ｔｈｅ  ７ｔｈ  Ｃａｃｈｅｘｉａ  Ｃｏｎｆｅｒｅｎｃｅ，Ｋｏｂｅ／Ｏｓａｋａ，Ｊａｐａｎ，Ｄｅｃｅｍｂｅｒ  ９−１１，２０１３，Ａｂｓｔｒａｃｔ  ４−０６を参照のこと；Ｅｌｉ  Ｌｉｌｌｙにより臨床開発中のヒト化抗ミオスタチン抗体であるＬＹ２４９５６５５（Ｌｉｌｌｙ）；ｃｌｉｎｉｃａｌｔｒｉａｌｓ．ｇｏｖ／ｃｔ２／ＮＣＴ０１５０５５３０のワールドワイドウェブ上で入手可能な「Ａ  ＰＨＡＳＥ  ２  ＳＴＵＤＹ  ＯＦ  ＬＹ２４９５６５５  ＩＮ  ＰＡＲＴＩＣＩＰＡＮＴＳ  ＷＩＴＨ  ＰＡＮＣＲＥＡＴＩＣ  ＣＡＮＣＥＲ，」も参照のこと；ＮＭＬ識別番号：ＮＣＴ０１５０５５３０；ＡＣＥ−０３１（Ａｃｃｅｌｅｒｏｎ  Ｐｈａｒｍａ）；およびスタムルマブ（Ｐｆｉｚｅｒ）が挙げられる。
【０１８５】
グレリンもしくはグレリンミメティックなどの薬剤、またはグレリン受容体としても知られているＧＨＳ受容体（ＧＨＳ−Ｒ１ａ）を活性化することができる他の成長ホルモン分泌促進因子（ＧＨＳ）は、ヒトにおける食物摂取および体重を増大させるために有用となり得る。Ｇｕｉｌｌｏｒｙ  ｅｔ  ａｌ．（２０１３）ｉｎ  ＶＩＴＡＭＩＮＳ  ＡＮＤ  ＨＯＲＭＯＮＥＳ  ｖｏｌ．９２，ｃｈａｐ．３；およびＳｔｅｉｎｍａｎ  ａｎｄ
ＤｅＢｏｅｒ（２０１３）ＶＩＴＡＭＩＮＳ  ＡＮＤ  ＨＯＲＭＯＮＥＳ  ｖｏｌ．９２，ｃｈａｐ．８．を参照されたい。適切なグレリンミメティックには、アナモレリン（Ｈｅｌｓｉｎｎ、Ｌｕｇａｎｏ、ＣＨ）が含まれる。Ｔｅｍｅｌ  ｅｔ  ａｌ．（２０１３）Ｊ．ＣＡＣＨＥＸＩＡ  ＳＡＲＣＯＰＥＮＩＡ  ＭＵＳＣＬＥ：Ａｂｓｔｒａｃｔｓ
ｏｆ  ｔｈｅ  ７ｔｈ  Ｃａｃｈｅｘｉａ  Ｃｏｎｆｅｒｅｎｃｅ，Ｋｏｂｅ／Ｏｓａｋａ，Ｊａｐａｎ，Ｄｅｃｅｍｂｅｒ  ９−１１，２０１３，Ａｂｓｔｒａｃｔ  ５−０１を参照されたい。他の適切なＧＨＳ分子は、例えば、国際公開第２０１１／１１７２５４号パンフレットおよび国際公開第２０１２／１１３１０３号パンフレットに記載されている成長ホルモン分泌促進因子受容体グレリン拮抗実験を使用して、同定することができる。
【０１８６】
小分子および他の選択的アンドロゲン受容体モジュレーター（ＳＡＲＭ）を含むアンドロゲン受容体のアゴニストは、悪液質および／または筋肉減少症を治療するために有用となり得る。例えば、Ｍｏｈｌｅｒ  ｅｔ  ａｌ．（２００９）Ｊ．ＭＥＤ．ＣＨＥＭ．５２：３５９７−３６１７；Ｎａｇａｔａ  ｅｔ  ａｌ．（２０１１）ＢＩＯＯＲＧＡＮＩＣ  ＡＮＤ  ＭＥＤ．ＣＨＥＭ．ＬＥＴＴＥＲＳ  ２１：１７４４−１７４７；およびＣｈｅｎ  ｅｔ  ａｌ．（２００５）ＭＯＬ．ＩＮＴＥＲＶ．５：１７３−１８８を参照されたい。理想的には、ＳＡＲＭは、筋肉および骨などのタンパク同化性標的組織においては、テストステロンのように完全アゴニストとして作用するべきであるが、前立腺組織に対しては単に部分的なまたは純粋なアンドロゲン受容体アンタゴニスト性活性を示すべきである。例えば、Ｂｏｖｅｅ  ｅｔ  ａｌ．（２０１０）Ｊ．ＳＴＥＲＯＩＤ  ＢＩＯＣＨＥＭ．＆  ＭＯＬ．ＢＩＯＬ．１１８：８５−９２を参照されたい。適切なＳＡＲＭは、例えば、Ｚｈａｎｇ  ｅｔ  ａｌ．（２００６）ＢＩＯＯＲＧ．ＭＥＤ．ＣＨＥＭ．ＬＥＴＴ．１６：５７６３−５７６６；およびＺｈａｎｇ  ｅｔ  ａｌ．（２００７）ＢＩＯＯＲＧ．ＭＥＤ．ＣＨＥＭ．ＬＥＴＴ．１７：４３９−４４３に記載されている方法およびアッセイを使用して同定することができる。適切なＳＡＲＭとしては、例えば、ＧＴｘ，Ｉｎｃ．による第ＩＩ相臨床開発中のＳＡＲＭであるＧＴｘ−０２４（ｅｎｏｂｏｓａｒｍ，Ｏｓｔａｒｉｎｅ（登録商標），ＧＴｘ，Ｉｎｃ．）が挙げられる。Ｄａｌｔｏｎ  ｅｔ  ａｌ．（２０１１）Ｊ．ＣＡＣＨＥＸＩＡ  ＳＡＲＣＯＰＥＮＩＡ  ＭＵＳＣＬＥ  ２：１５３−１６１も参照されたい。他の適切なＳＡＲＭとしては、２−（２，２，２）−トリフルオロエチル−ベンゾイミダゾール（Ｎｇ  ｅｔ  ａｌ．（２００７）ＢＩＯＯＲＧ．ＭＥＤ．ＣＨＥＭ．ＬＥＴＴ．１７：１７８４−１７８７）およびＪＮＪ−２６１４６９００（Ａｌｌａｎ  ｅｔ  ａｌ．（２００７）Ｊ．ＳＴＥＲＯＩＤ  ＢＩＯＣＨＥＭ．＆  ＭＯＬ．ＢＩＯＬ．１０３：７６−８３）が挙げられる。
【０１８７】
β−アドレナリン受容体遮断薬（すなわちβ遮断薬）は、悪液質被験体の体重に対する効果について研究されており、うっ血性心不全患者における悪液質の部分的な逆転と関連している。例えば、Ｈｒｙｎｉｅｗｉｃｚ  ｅｔ  ａｌ．（２００３）Ｊ．ＣＡＲＤＩＡＣ  ＦＡＩＬＵＲＥ  ９：４６４−４６８を参照されたい。β遮断薬ＭＴ−１０２（ＰｓｉＯｘｕｓ  Ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃｓ，Ｌｔｄ．）は、癌性悪液質被験体に対する第２相臨床試験で評価されている。Ｃｏａｔｓ  ｅｔ  ａｌ．（２０１１）Ｊ．ＣＡＣＨＥＸＩＡ  ＳＡＲＣＯＰＥＮＩＡ  ＭＵＳＣＬＥ  ２：２０１−２０７を参照されたい。
【０１８８】
メラノコルチンシグナル伝達において遺伝子欠損を有するメラノコルチン受容体ノックアウトマウスは、悪液質とは反対の表現型、すなわち、食欲亢進、除脂肪体重の増加、および代謝減少を示す。したがって、慢性疾患と関連した悪液質に対する有望な治療法として、メラノコルチン拮抗作用が浮上した（ＤｅＢｏｅｒ  ａｎｄ  Ｍａｒｋｓ（２００６）ＴＲＥＮＤＳ  ＩＮ  ＥＮＤＯＣＲＩＮＯＬＯＧＹ  ＡＮＤ  ＭＥＴＡＢＯＬＩＳＭ  １７：１９９−２０４）。したがって、本発明の特定の実施形態では、メラノコルチンペプチドまたはメラノコルチン受容体の１つまたは複数の阻害剤は、ＧＤＦ−１５活性を阻害する本発明の抗体と組み合わせて投与することができる（例えば、本発明の抗体と同時に、その前に、またはその後に投与することができる）。メラノコルチンまたはメラノコルチン受容体の適切な阻害剤としては、抗メラノコルチンペプチド抗体またはその抗原結合断片、抗メラノコルチン受容体抗体またはその抗原結合断片、メラノコルチンペプチドの小分子阻害剤、メラノコルチン受容体の小分子阻害剤、ならびに可溶性メラノコルチン受容体およびＦｃ分子と可溶性メラノコルチン受容体との融合物などのメラノコルチン受容体の「デコイ」受容体が挙げられる。適切なメラノコルチン受容体阻害剤としては、例えば、癌関連悪液質のマウスモデルにおいて悪液質関連症状を予防することが実証されている、メラノコルチン受容体アンタゴニストのアグーチ関連ペプチド（ＡｇＲＰ（８３〜１３２））が挙げられる（Ｊｏｐｐａ  ｅｔ  ａｌ．（２００７）ＰＥＰＴＩＤＥＳ  ２８：６３６−６４２）。
【０１８９】
抗癌剤、特に、シスプラチンなど、悪液質を引き起こし、ＧＤＦ−１５レベルを上昇させ得る抗癌剤は、本発明の抗ＧＤＦ−１５抗体と組み合わせて本発明の方法で使用することができる（例えば、本発明の抗体と同時に、その前に、またはその後に投与することができる）。多くの癌患者は、放射線療法および／または化学療法の苛酷な治療過程によって弱っており、そのため、そのような療法に耐える患者の力は制限されて、投薬レジメンが限定されることがある。フルオロウラシル、アドリアマイシン、メトトレキセート、およびシスプラチンなどの特定の癌薬剤はそれ自体が、例えば、重篤な胃腸合併症を誘発することにより、悪液質に寄与することがある。例えば、Ｉｎｕｉ（２００２）ＣＡＮＣＥＲ  Ｊ．ＦＯＲ  ＣＬＩＮＩＣＩＡＮＳ  ５２：７２−９１を参照されたい。本発明の抗ＧＤＦ−１５抗体と組み合わせて抗癌剤を投与する本発明の方法により、悪液質の発生率および／または重症度を低減し、最終的には、このような抗癌剤の最大耐用量を増加させることが可能になる。したがって、悪液質を引き起こし得る抗癌剤による治療の効力を、用量制限的有害作用としての悪液質の発生率を低減することにより、また所与の抗癌剤のより高用量での投与を可能にすることにより改善することができる。
【０１９０】
したがって、本発明は、アクチビン−Ａ阻害剤、ＡｃｔＲＩＩＢ阻害剤、ＩＬ−６阻害剤またはＩＬ−６Ｒ阻害剤、グレリン、グレリンミメティックまたはＧＨＳ−Ｒ１ａアゴニスト、ＳＡＲＭ、ＴＮＦα阻害剤、ＩＬ−１α阻害剤、ミオスタチン阻害剤、β遮断薬、メラノコルチンペプチド阻害剤、メラノコルチン受容体阻害剤、および抗癌剤からなる群から選択される薬剤と組み合わせて本発明の抗ＧＤＦ−１５抗体を含む医薬組成物を含む。本発明はまた、有効量のアクチビン−Ａ阻害剤、ＡｃｔＲＩＩＢ阻害剤、ＩＬ−６阻害剤またはＩＬ−６Ｒ阻害剤、グレリン、グレリンミメティックまたはＧＨＳ−Ｒ１ａアゴニスト、ＳＡＲＭ、ＴＮＦα阻害剤、ＩＬ−１α阻害剤、ミオスタチン阻害剤、β遮断薬、メラノコルチンペプチド阻害剤またはメラノコルチン受容体阻害剤と組み合わせて、有効量の本発明の抗ＧＤＦ−１５抗体を含む医薬組成物または組成物を、それを必要とする哺乳動物に投与することを含む、哺乳動物において悪液質および／または筋肉減少症を治療、予防、最小化する方法を含む。
【０１９１】
別の実施形態では、本発明は、筋肉量減少を予防または低減するための、有効量のアクチビン−Ａ阻害剤、ＡｃｔＲＩＩＢ阻害剤、ＩＬ−６阻害剤またはＩＬ−６Ｒ阻害剤、グレリン、グレリンミメティックまたはＧＨＳ−Ｒ１ａアゴニスト、ＳＡＲＭ、ＴＮＦα阻害剤、ＩＬ−１α阻害剤、ミオスタチン阻害剤、β遮断薬、メラノコルチンペプチド阻害剤またはメラノコルチン受容体阻害剤と組み合わせて、有効量の本発明の抗ＧＤＦ−１５抗体を含む医薬組成物または組成物を、それを必要とする哺乳動物に投与することを含む、基礎疾患に関連した筋肉量減少を抑制する方法を含む。基礎疾患は、癌、慢性心不全、慢性腎疾患、ＣＯＰＤ、ＡＩＤＳ、多発性硬化症、関節リウマチ、敗血症、および結核からなる群から選択され得る。加えて、特定の実施形態では、筋肉量減少には脂肪量減少が伴う。
【０１９２】
さらにさらなる実施形態では、本発明は、有効量のアクチビン−Ａ阻害剤、ＡｃｔＲＩＩＢ阻害剤、ＩＬ−６阻害剤またはＩＬ−６Ｒ阻害剤、グレリン、グレリンミメティックまたはＧＨＳ−Ｒ１ａアゴニスト、ＳＡＲＭ、ＴＮＦα阻害剤、ＩＬ−１α阻害剤、ミオスタチン阻害剤、β遮断薬、メラノコルチンペプチド阻害剤またはメラノコルチン受容体阻害剤と組み合わせて、有効量の本発明の抗ＧＤＦ−１５抗体を含む１つまたは複数の医薬組成物を、それを必要とする哺乳動物に投与することを含む、哺乳動物において不随意性の体重減少を抑制または低減する方法を含む。
【０１９３】
シスプラチンなどの特定の抗癌剤は、悪液質、筋肉減少症、筋肉消耗、骨消耗、または不随意性の体重減少などの１つまたは複数の症候群を引き起こすかまたは増悪させることを含む、１つまたは複数の望ましくない有害作用を有している。したがって、特定の実施形態では、本発明は、１つまたは複数の抗癌剤と組み合わせて有効量の本発明の抗ＧＤＦ−１５抗体を含む医薬組成物を、それを必要とする哺乳動物に投与することを含む、哺乳動物において、癌を治療する一方、悪液質、筋肉減少症、または筋肉消耗、骨消耗、または不随意性の体重減少の発症、頻度、または重症度を予防、最小化、または低減する方法を含む。特定の実施形態では、本発明は、哺乳動物において、悪液質、筋肉減少症、または筋肉消耗、骨消耗、または不随意性の体重減少の発症、頻度、または重症度を引き起こすかまたは増悪させる１つまたは複数の抗癌剤と組み合わせて、有効量の本発明の抗ＧＤＦ−１５抗体を含む医薬組成物を、それを必要とする哺乳動物に投与することを含む、哺乳動物において、癌を治療する一方、悪液質、筋肉減少症、または筋肉消耗、骨消耗、または不随意性の体重減少の発症、頻度、または重症度を予防、最小化、または低減する方法を含む。
【実施例】
【０１９４】
以下の実施例は単に例証的であり、本発明の範囲または内容をどのようにも制限することは意図されない。
【０１９５】
実施例１：マウス異種移植腫瘍モデルにおけるヒトＧＤＦ１５の血清レベル
本実施例では、種々の異種移植腫瘍を有するマウスの血清中のｈＧＤＦ１５量を測定した。以下の腫瘍異種移植モデル：Ｃｈａｇｏ、ＲＰＭＩ７９５１、ＰＣ３、ＴＯＶ２１Ｇ、ＨＴ−１０８０、Ｋ−５６２、およびＬＳ１０３４のそれぞれについて３匹のマウスから血清を採取した。血清は、対照として３匹のナイーブマウスからも採取した。ヒトＧＤＦ１５の血清レベルは、ＥＬＩＳＡ（Ｒ＆Ｄ  Ｓｙｓｔｅｍｓ，カタログ番号ＤＹ９５７Ｅ）により測定した。悪液質を誘導するヒト異種移植腫瘍を有するマウスのｈＧＤＦ１５の血清レベルは、２ｎｇ／ｍＬを超えていたが、悪液質を誘導しないヒト異種移植腫瘍を有するマウスのｈＧＤＦ１５の血清レベルは、１ｎｇ／ｍＬ未満であった（図２）。ナイーブマウスのｈＧＤＦ１５は、検出可能でなかった（対照）。これらの結果から、約２ｎｇ／ｍＬのＧＤＦ１５の血清レベルが、このマウスモデルにおける悪液質を誘導するための閾値であることが示された。ＥＬＩＳＡにより測定すると、同様のレベルのｈＧＤＦ１５が血漿でも観察された。
【０１９６】
実施例２：悪液質の非担癌マウスモデル
悪液質の既存の非担癌マウスモデルは、マウスへの成熟ｒｈＧＤＦ１５の注射に基づくものである（Ｊｏｈｎｅｎ  ｅｔ  ａｌ．（１９９７）ＮＡＴ．ＭＥＤ．１３：１３３３−１３４０）。成熟ｒｈＧＤＦ１５は、ｈＧＤＦ１５タンパク質のアミノ酸１９７〜３０８に相当する。成熟ｒｈＧＤＦ１５は、Ｆａｉｒｌｉｅ  ｅｔ  ａｌ．（２０００）ＧＥＮＥ  ２５４：６７−７６）に記載されるように酵母ピチア・パストリス（Ｐｉｃｈｉａ
ｐａｓｔｏｒｉｓ）において産生させることができる。切断ｒｈＧＤＦ１５は、Ｆｃ−ｒｈＧＤＦ１５融合タンパク質から放出されるｈＧＤＦ１５タンパク質のアミノ酸１９７〜３０８に相当する。以下に記載する図３〜４では、切断ｒｈＧＤＦ１５を、ｍＦｃ−ｒｈＧＤＦ１５融合タンパク質の第Ｘａ因子による酵素的消化により生成し、次いで精製した後、マウスに注射した。
【０１９７】
切断ｒｈＧＤＦ１５の半減期を検討するために、切断ｒｈＧＤＦ１５（１μｇ／ｇ）の単回投与後、種々の時点（２、５、８、１１、および２３時間）で、１群３匹のマウスから血漿を採取した。ヒトＧＤＦ１５の血漿レベルは、ＥＬＩＳＡ（Ｒ＆Ｄ  Ｓｙｓｔｅｍｓ，カタログ番号ＤＹ９５７Ｅ）により測定した。図３に示すように、切断ｒｈＧＤＦ１５は、注射後血漿から迅速に除去された。注射後１１時間において、血漿中の切断ｒｈＧＤＦ１５量は１０ｎｇ／ｍＬ未満であり、２３時間以内に、切断ｒｈＧＤＦ１５は、血漿からほぼ完全に除去された。
【０１９８】
非担癌マウスにおける切断ｒｈＧＤＦ１５の迅速なクリアランスをさらに検討した。８週齢の雌性ＩＣＲ−ＳＣＩＤマウスを、それぞれ１０匹のマウスからなる２つの群に無作為に分けた。マウスに対して、３日間８時間ごとに（合計９用量）、ＰＢＳ（対照）または１μｇ／ｇの切断ｒｈＧＤＦ１５を側腹部に皮下投与した。体重を毎日測定した。二元配置分散分析を使用して統計分析を行った。
【０１９９】
図４に示すように、切断ｒｈＧＤＦ１５は体重減少を誘導した。３日間にわたる９回投与後、パーセント体重は、４日目に８８％に減少したが（ｐ＜０．００１）、最終投与約２４時間後に、マウスは体重を増加し始めた。実験の最終日である６日目に、パーセント体重は９４．８パーセントまで増加した（ｐ＜０．００１）。これらの結果から、切断ｒｈＧＤＦ１５により誘導された体重減少は長期間持続しないことが示される。本明細書に記載の切断ｒｈＧＤＦ１５で観察された活性は、既存のマウスモデル（Ｊｏｈｎｅｎ  ｅｔ  ａｌ．、前出）において成熟ｒｈＧＤＦ１５で観察されたものに類似していた。
【０２００】
悪液質についての既存の非担癌マウスモデルでは、１日当たり複数回の投与で送達される大量の成熟ｒｈＧＤＦ１５の注射によって、筋肉減少および体重減少が誘導される（Ｊｏｈｎｅｎ  ｅｔ  ａｌ．、前出）。成熟ｒｈＧＤＦ１５または切断ｒｈＧＤＦ１５が使用される場合、マウスにおいて、継続的に投与しないと、長期間にわたり筋肉重量減少または体重減少が持続することはないように思われる。このために、このようなモデルの有用性は限定される。さらに、反復投与では、体重減少測定の信頼性を損ない得るストレスを招くことになる、これらのマウスの頻繁な取り扱いが必要となる。例えば、図４に示すように、ＰＢＳの複数回投与で処置されたマウスでは、反復した投与および取り扱いのストレスによる体重下降が示された。
【０２０１】
実施例３：ＧＤＦ１５融合タンパク質
非担癌悪液質マウスモデルを誘導するのに必要とされる大量の成熟ｒｈＧＤＦ１５（または切断ｒｈＧＤＦ１５）および労働集約度（ならびにこれらのモデルがもたらす限界）を考慮して、本発明者らは、マウスにおいて悪液質表現型を誘導するためのｒｈＧＤＦ１５の代替形態を検討した。本実施例では、ｍＦｃ−ｒｈＧＤＦ１５（成熟ヒトＧＤＦ１５のアミノ末端に融合したマウスＩｇＧ１  Ｆｃ）およびｒＦｃ−ｒｍＧＤＦ１５（成熟マウスＧＤＦ１５のアミノ末端に融合したウサギＩｇＧ１  Ｆｃ）と命名された、ＧＤＦ１５および免疫グロブリンＦｃ断片からなる２つの融合タンパク質の構築および生成について記載する。ＧＤＦ１５融合タンパク質は、当該技術分野で知られている方法を使用して設計した。ｍＦｃ−ｒｈＧＤＦ１５のＤＮＡ配列は、（以下の順序で）５’ＨｉｎｄＩＩＩ制限部位、Ｋｏｚａｋコンセンサス配列、アミノ末端シグナル配列、マウスＩｇＧ１  Ｆｃ、第Ｘａ因子切断部位、ポリペプチドリンカー（ＧＧＧＧＳ）（配列番号１３９）、成熟ｈＧＤＦ１５、停止コドン、および３’ＥｃｏＲＩ制限部位を含むように、オーバーラップ伸長ＰＣＲ使用して断片から構築した。ｒＦｃ−ｒｍＧＤＦ１５アミノ酸配列は、コドン最適化ＤＮＡ配列に変換し、（以下の順序で）５’ＨｉｎｄＩＩＩ制限部位、Ｋｏｚａｋコンセンサス配列、アミノ末端シグナル配列、ウサギＩｇＧ１  Ｆｃ、ポリペプチドリンカー（ＧＧＧＧ）（配列番号２６５）、成熟マウスＧＤＦ１５、停止コドン、および３’ＥｃｏＲＩ制限部位を含むように合成した。
【０２０２】
Ｉｎ−Ｆｕｓｉｏｎ（商標）ＰＣＲクローニング（Ｃｌｏｎｔｅｃｈ，Ｍｏｕｎｔａｉｎ  Ｖｉｅｗ，ＣＡ）を使用し、ＨｉｎｄＩＩＩおよびＥｃｏＲＩ部位を介して、ＧＤＦ１５融合タンパク質を哺乳動物発現ベクターｐＥＥ１４．４（Ｌｏｎｚａ，Ｂａｓｅｌ，Ｓｗｉｔｚｅｒｌａｎｄ）にサブクローニングした。大量の精製タンパク質を生成するために、ＧＳ  Ｓｙｓｔｅｍ（商標）（Ｌｏｎｚａ  Ｂｉｏｌｏｇｉｃｓ）を使用して、ＧＤＦ１５融合タンパク質をＣＨＯＫ１ＳＶ細胞で安定に発現させた。各発現ベクターを線状化し、ＣＨＯＫ１ＳＶ細胞にトランスフェクトした。安定なクローンをメチオニンスルホキシミンの存在下で選択した。安定にトランスフェクトされたＣＨＯＫ１ＳＶ細胞株により産生された分泌タンパク質をプロテインＡおよびサイズ排除クロマトグラフィーにより精製した。
【０２０３】
マウスＩｇＧ１  Ｆｃ−成熟ヒトＧＤＦ１５融合タンパク質（ｍＦｃ−ｒｈＧＤＦ１５）を画定する核酸配列およびコード化タンパク質配列を以下に示す。ｍＦｃ−ｒｈＧＤＦ１５は、アミノ酸１〜２２２からのマウスＩｇＧ１  Ｆｃ、アミノ酸２２３〜２２８からの第Ｘａ因子切断部位、アミノ酸２２９〜２３３からの人工リンカー配列、およびアミノ酸２３４〜３４５からの成熟ｈＧＤＦ１５を含有する。
【０２０４】
マウスＩｇＧ１  Ｆｃ−成熟ヒトＧＤＦ１５融合タンパク質（ｍＦｃ−ｒｈＧＤＦ１５）をコードする核酸配列（配列番号２１９）
【化３】
2019056018.tif 000004
【０２０５】
マウスＩｇＧ１  Ｆｃ−成熟ヒトＧＤＦ１５融合タンパク質（ｍＦｃ−ｒｈＧＤＦ１５）を画定するタンパク質配列（配列番号２２０）
【化４】
2019056018.tif 000005
【０２０６】
ウサギＩｇＧ１  Ｆｃ−成熟マウスＧＤＦ１５融合タンパク質（ｒＦｃ−ｒｍＧＤＦ１５）を画定する核酸配列およびコード化タンパク質配列を以下に示す。ｒＦｃ−ｒｍＧＤＦ１５は、アミノ酸１〜２２３からのウサギＩｇＧ１  Ｆｃ、アミノ酸２２４〜２２７からの人工リンカー配列、およびアミノ酸２２８〜３４２からの成熟マウスＧＤＦ１５を含有する。
【０２０７】
ウサギＩｇＧ１  Ｆｃ−成熟マウスＧＤＦ１５融合タンパク質（ｒＦｃ−ｒｍＧＤＦ１５）をコードする核酸配列（配列番号２２１）
【化５】
2019056018.tif 000006
【０２０８】
ウサギＩｇＧ１  Ｆｃ−成熟マウスＧＤＦ１５融合タンパク質（ｒＦｃ−ｒｍＧＤＦ１５）を画定するタンパク質配列（配列番号２２２）
【化６】
2019056018.tif 000007
【０２０９】
以下の配列は、ヒトＩｇＧ１  Ｆｃ−成熟ヒトＧＤＦ１５融合タンパク質（ｈＦｃ−ｒｈＧＤＦ１５）に対する例示的なタンパク質配列を表す。ｈＦｃ−ｒｈＧＤＦ１５  Ｘａは、アミノ酸１〜２２７からのヒトＩｇＧ１  Ｆｃ、アミノ酸２２８〜２３３からの第Ｘａ因子切断部位、アミノ酸２３４〜２３８からの人工リンカー配列、およびアミノ酸２３９〜３５０からの成熟ｈＧＤＦ１５からなる。ｈＦｃ−ｒｈＧＤＦ１５は、アミノ酸１〜２２７からのヒトＩｇＧ１  Ｆｃ、アミノ酸２２８〜２３２からの人工リンカー配列、およびアミノ酸２３３〜３４４からの成熟ｈＧＤＦ１５からなる。
【０２１０】
Ｘａ切断部位を有するヒトＩｇＧ１  Ｆｃ−成熟ヒトＧＤＦ１５融合タンパク質（ｈＦｃ−ｈＧＤＦ１５  Ｘａ）を画定するタンパク質配列（配列番号２２３）
【化７】
2019056018.tif 000008
【０２１１】
ヒトＩｇＧ１  Ｆｃ−成熟ヒトＧＤＦ１５融合タンパク質（ｈＦｃ−ｈＧＤＦ１５）を画定するタンパク質配列（配列番号２２４）
【化８】
2019056018.tif 000009
【０２１２】
実施例４：Ｆｃ−ｒｈＧＤＦ１５は悪液質モデルを誘導した
本実施例では、マウスにおけるＦｃ−ＧＤＦ１５誘導悪液質モデルの生成について記載する。免疫能のあるマウス（Ｂａｌｂ／Ｃ）および免疫のないマウス（ＣＢ１７−Ｓｃｉｄ）を、それぞれ１０匹のマウスからなる３つの群に無作為に分けた。各群に以下の処置の１つを施した：ＰＢＳ（対照）、１μｇ／ｇのｍＦｃ−ｒｈＧＤＦ１５（実施例３に記載のように）、または１μｇ／ｇのｒＦｃ−ｒｍＧＤＦ１５（実施例３に記載のように）。８週齢の雌性マウスに、３日間（Ｂａｌｂ／Ｃ）または単回（ＣＢ１７−Ｓｃｉｄ）、側腹部に皮下投与した。体重を毎日測定した。
【０２１３】
図５Ａおよび図５Ｂに示すように、ｍＦｃ−ｒｈＧＤＦ１５またはｒＦｃ−ｒｍＧＤＦ１５を投与すると、免疫能のあるマウス（図５Ａ）および免疫能のないマウス（図５Ｂ）に体重減少が誘導された。これらの結果から、用量（１用量対３用量）にかかわらず、ｍＦｃ−ｒｈＧＤＦ１５とｒＦｃ−ｒｍＧＤＦ１５の両方が測定期間（７日間）にわたり持続した体重減少を誘導したので、活性ｒｈＧＤＦ１５の定常状態レベルが達成されたことが示される。
【０２１４】
融合タンパク質であるｍＦｃ−ｒｈＧＤＦ１５およびｒＦｃ−ｒｍＧＤＦ１５は、免疫能のあるマウス系統（Ｃ５７ＢＬ６，Ｓｗｉｓｓ  Ｗｅｂｓｔｅｒ）および免疫能のないマウス系統（ＩＣＲ−ＳＣＩＤ）を追加してさらに試験した。試験した各マウス系統において、ｍＦｃ−ｒｈＧＤＦ１５またはｒＦｃ−ｒｍＧＤＦ１５を投与すると、体重減少による測定で悪液質が誘導された。ｍＦｃ−ｒｈＧＤＦ１５の皮下投与または腹腔内投与にかかわらず、同様の結果が得られた。
【０２１５】
融合タンパク質で処置されたマウスの年齢にかかわらず、ｍＦｃ−ｒｈＧＤＦ１５が体重減少を誘導するか否かについても検討した。年齢の異なる（７、１３、および２５週齢）Ｓｗｉｓｓ  Ｗｅｂｓｔｅｒ（免疫能のある）雌性マウスを、１０匹からなる２つの群に分け、１日３回投与のｍＦｃ−ｒｈＧＤＦ１５またはＰＢＳ（０．８μｇ／ｇ、７週齢マウス；０．６μｇ／ｇ、１３週齢マウス；または０．４μｇ／ｇ、２５週齢マウス）で処置した。ｍＦｃ−ｒｈＧＤＦ１５誘導体重減少が、３つのマウス年齢集団すべてで観察された。各年齢集団において、ｍＦｃ−ｒｈＧＤＦ１５による処置後、マウスには、処置後１０日目の測定で約１０％の体重減少があった。
【０２１６】
別の実験では、体重減少、筋肉量減少、脂肪量減少、および筋肉分解を示す２つの分子マーカーの発現レベル（すなわち、ｍＭｕＲＦ１およびｍＡｔｒｏｇｉｎ）を測定することにより、ｍＦｃ−ｒｈＧＤＦ１５による悪液質誘導を検討した。ＭｕＲＦ１およびＡｔｒｏｇｉｎは、筋萎縮症および悪液質の複数のモデルにおいて上方制御されているＥ３−ユビキチンリガーゼである（Ｇｌａｓｓ，Ｄ．（２０１０）ＣＵＲＲ．ＯＰＩＮ．ＣＬＩＮ．ＮＵＴＲ．ＭＥＴ．ＣＡＲＥ  １３：２２５−２２９）。
【０２１７】
８週齢の雌性ＩＣＲ−ＳＣＩＤマウスを、それぞれ１０匹のマウスからなる１０の群に無作為に分けた。１日目に５つの群（それぞれ１０匹のマウス）にＰＢＳ（対照）を側腹部に皮下投与し、５つの群（それぞれ１０匹のマウス）にｍＦｃ−ｒｈＧＤＦ１５を１．６μｇ／ｇで側腹部に皮下投与した。体重を、最大１７日間毎日測定した。１つの対照群および１つの処置群を、種々の時点（投与後０、１、３、７、および１６日目）で屠殺した。指定の屠殺時間に生殖腺脂肪および腓腹筋を各群のマウスから外科的に摘出し、秤量した。組織を液体窒素で瞬間凍結し、ＲＮＡを腓腹筋試料から単離した。ｍＭｕＲＦ１およびｍＡｔｒｏｇｉｎのｍＲＮＡレベルを、投与後１、７、および１６日目に採取した群に対応する試料において、ｑＲＴ−ＰＣＲにより測定した。二元配置分散分析を使用して統計分析を行った。
【０２１８】
図６Ａに示すように、ｍＦｃ−ｒｈＧＤＦ１５はＩＣＲ−ＳＣＩＤマウスにおいて体重減少を誘導した。ｍＦｃ−ｒｈＧＤＦ１５の１回投与後１６日目に測定すると、パーセント体重は７９．４パーセントであった（ｐ＜０．００１）。ｍＦｃ−ｒｈＧＤＦ１５はまた、生殖腺脂肪の減少により観察されるように、脂肪（脂肪組織）の減少を誘導し（図６Ｂ；７日目にｐ＜０．０１、１６日目にｐ＜０．００１）、腓腹筋の減少により観察されるように、筋肉の減少を誘導した（図６Ｃ；１および３日目にｐ＜０．０５、７および１６日目にｐ＜０．０００１）。ｍＦｃ−ｒｈＧＤＦ１５の投与はまた、筋肉分解および悪液質に関連した２つの酵素、ｍＭｕＲＦ１（図６Ｄ；１、７、および１６日目にｐ＜０．００１）およびｍＡｔｒｏｇｉｎ（図６Ｅ；１および７日目にｐ＜０．００１、１６日目にｐ＜０．０１）の遺伝子発現を上昇させた。
【０２１９】
これらの結果から、ｍＦｃ−ｒｈＧＤＦ１５は、マウスにおいて悪液質を誘導することが示された。
【０２２０】
実施例５：ｍＦｃ−ｒｈＧＤＦ１５は、血清中のＧＤＦ１５の半減期を延長すると共に、悪液質を誘導する
本実施例では、ｍＦｃ−ｒｈＧＤＦ１５投与後に血清ｈＧＤＦ１５レベルを測定して、このモデルにおけるｒｈＧＤＦ１５の半減期を決定した。８週齢の雌性Ｂａｌｂ／Ｃヌードマウスを、それぞれ１２匹のマウスからなる２つの群に無作為に分けた。マウスに対して、以下の処置の１つ、すなわち、ＰＢＳ（対照）または１．３３μｇ／ｇのｍＦｃ−ｒｈＧＤＦ１５を、３日間１２時間ごとに（合計６用量）側腹部に皮下投与した。体重を毎日測定した。図７に示すように、ｍＦｃ−ｒｈＧＤＦ１５は、最終注射後少なくとも１週間持続する体重減少を誘導した。
【０２２１】
この実験では、ｈＧＤＦ１５の血清レベルを、ｍＦｃ−ｒｈＧＤＦ１５の最終投与後０．２、５、および８日目に測定した。マウスを指定時間に屠殺し、血清を採取した。ヒトＧＤＦ１５の血清レベルは、ＥＬＩＳＡ（Ｒ＆Ｄ  Ｓｙｓｔｅｍｓ，カタログ番号ＤＹ９５７Ｅ）により測定した。表１に、試験した各マウスについての血清レベル（μｇ／ｍＬ）を示す。
【０２２２】
【表１】
2019056018.tif 000010
【０２２３】
表１の結果から、ｈＧＤＦ１５の強固に持続したレベルが、ｍＦｃ−ｒｈＧＤＦ１５の最終投与後少なくとも８日目に血清中に存在していることが明らかである。
【０２２４】
血清中のｍＦｃ−ｒｈＧＤＦ１５の安定性を判定するために、最終投与後０．２日目および５日目からの血清試料をまた、ウエスタンブロット（還元ゲル；ｈＧＤＦ１５に対する抗体によるブロット（Ｒ＆Ｄ  Ｓｙｓｔｅｍｓ、カタログ番号ＡＦ９５７））により分析し、Ｌｉｃｏｒにより定量化した。予想外にも、２つのバンドが観察された。上部バンドは約４０ｋＤａであり、ｍＦｃ−ｒｈＧＤＦ１５であると考えられた。下部バンドは約１５ｋＤａであり、切断された成熟ｒｈＧＤＦ１５であると考えられた。これから、成熟ｒｈＧＤＦ１５が血清中でｍＦｃ−ｒｈＧＤＦ１５から放出されることが示された。２つのバンドの定量により、血清中に存在するｒｈＧＤＦ１５の約９０％は、ｍＦｃ−ｒｈＧＤＦ１５の形態であり、血清中の全ｒｈＧＤＦ１５の約１０％が切断された成熟形態として存在していることが示された（図８）。定量から、最終投与後５日目に採取した血清試料中のｍＦｃ−ｒｈＧＤＦ１５でわずかな減少が示されたが、驚くべきことに、血清中の成熟ｒｈＧＤＦ１５は一定レベルに維持されていた。ｍＦｃ−ｒｈＧＤＦ１５に対する成熟ｒｈＧＤＦ１５の比は、血清中のｍＦｃ−ｒｈＧＤＦ１５の減少の結果として、時間経過につれてわずかに増大した。同様の結果は、ｒＦｃ−ｒｍＧＤＦ１５をマウスに注射した場合にも観察された。
【０２２５】
図７〜８および表１に示す結果は予想外なものであった。予想では、成熟ｒｈＧＤＦ１５は０．２日目までに、あるとしてもごくわずかしかｍＦｃ−ｒｈＧＤＦ１５から切断（放出）されないであろうということ、またこれまでに観察されていたように、切断ｒｈＧＤＦ１５はいずれも、血清から迅速に除去されるであろうということであった。例えば、図４では、切断ｒｈＧＤＦ１５の単回投与当たり１μｇ／ｇの一連の９回投与（合計９μｇ／ｇ）が、マウスに顕著な体重減少を誘導するために必要とされた。これらのマウスでは、投与のほとんど停止直後に体重が増加した。これに対して、０．１μｇ／ｇのｍＦｃ−ｒｈＧＤＦ１５の単回投与で、少なくとも８日間、顕著な体重減少を誘導するのに十分であった（図９Ａ；１日目に０．１μｇ／ｇを腹腔内投与された１０匹のＩＣＲ−ＳＣＩＤマウス）。表１のデータから、ｒｈＧＤＦ１５をｍＦｃ−ｒｈＧＤＦ１５融合タンパク質として投与した場合には、ｒｈＧＤＦ１５の血清レベルは、少なくとも８日間安定であることが明らかになった。
【０２２６】
持続した体重減少をもたらす活性の原因を判定するために、本発明者らは、観察されたｒｈＧＤＦ１５活性が、ｍＦｃ−ｒｈＧＤＦ１５融合タンパク質、放出された成熟ｒｈＧＤＦ１５形態、またはその両方に起因するか否かを検討した。図９Ａに示すように、低用量のｍＦｃ−ｒｈＧＤＦ１５（０．１μｇ／ｇ）は少なくとも８日間継続する体重減少をもたらした。より低用量のｍＦｃ−ｒｈＧＤＦ１５（０．０１μｇ／ｇ）も体重減少を誘導したが、その効果は投与後３日を超えて持続しなかった。
【０２２７】
この実験では、０．１μｇ／ｇまたは０．０１μｇ／ｇをそれぞれ投与された３匹のマウスから、投与後５日目に血漿を採取した。全ｒｈＧＤＦ１５は、上記のように、ＥＬＩＳＡにより測定した。０．１μｇ／ｇを投与されたマウスの全ｒｈＧＤＦ１５血漿レベルは７０ｎｇ／ｍＬ超であり、これらのマウスに顕著な体重減少があるという観察と一致していた（図９Ｂ）。０．０１μｇ／ｇを投与されたマウスの全ｒｈＧＤＦ１５血漿レベルは約３．３ｎｇ／ｍＬであったが、これらのマウスでは体重増加があることが観察された。図２に記載するように、担癌マウスに悪液質を誘導するｈＧＤＦ１５の閾値は約２ｎｇ／ｍＬである。したがって、ｒｈＧＤＦ１５の両形態（すなわち、ｍＦｃ−ｒｈＧＤＦ１５および放出された成熟ｒｈＧＤＦ１５）とも活性であった場合、これらのマウスは、体重増加ではなく、体重減少するはずである（すなわち、３．３ｎｇ／ｍＬの全ｒｈＧＤＦ１５は、約２ｎｇ／ｍＬのｈＧＤＦ１５の閾値を超えている）。
【０２２８】
いずれの形態が活性形態であるか（すなわち、ｍＦｃ−ｒｈＧＤＦ１５または放出された成熟ｒｈＧＤＦ１５のいずれか）を判定するために、本発明者らは、血清中の全ｒｈＧＤＦ１５の約９０％がｍＦｃ−ｒｈＧＤＦ１５形態であり、残りの１０％が放出された成熟形態であることを示す、図８のデータを考慮した。この推定に基づくと、血漿中の約３．０ｎｇ／ｍＬのｒｈＧＤＦ１５は、ｍＦｃ−ｒｈＧＤＦ１５の形態になった（すなわち、３．３ｎｇ／ｍＬの９０％）。再度、ｍＦｃ−ｒｈＧＤＦ１５が活性とすると、３．３ｎｇ／ｍＬのｍＦｃ−ｒｈＧＤＦ１５が約２ｎｇ／ｍＬのｈＧＤＦ１５の閾値を超えているので、これらのマウスは、体重増加することなく、体重減少するであろう。０．１μｇ／ｇのｍＦｃ−ｒｈＧＤＦ１５を投与されたマウスは、内部標準として有用であった。というのは、これらのマウスでは、持続した体重減少があり、これにより２つの形態のうち少なくとも１つは活性でなければならないことが示されたからである。これらのマウスにおける７０ｎｇ／ｍＬの全ｒｈＧＤＦ１５の１０％を計算すると、７ｎｇ／ｍＬの放出された成熟ｒｈＧＤＦ１５が得られる。この量は、観察された体重減少の誘導および図２で観察された閾値と一致している。したがって、これらのデータから、ｍＦｃ−ｒｈＧＤＦ１５はこのタンパク質の活性形態ではなく、成熟ｒｈＧＤＦ１５のみが活性であることが示される。これらの結果は、以下の理由から予想外であった：（ａ）Ｆｃ融合タンパク質（ｍＦｃ−ｒｈＧＤＦ１５）が不活性であると予想する根拠はなかったこと；および（ｂ）Ｆｃ融合タンパク質が観察された速度で成熟ｒｈＧＤＦ１５を放出すると予想する根拠はなかったこと。
【０２２９】
これらの結果から、ｍＦｃ−ｒｈＧＤＦ１５は、成熟ｒｈＧＤＦ１５を血清中に徐々に放出することによって、悪液質表現型を持続させることが示される。これらの結果からさらに、血漿中または血清中の成熟ｒｈＧＤＦ１５の定常状態レベルは、ｍＦｃ−ｒｈＧＤＦ１５をマウスに投与することにより、非担癌マウスにおいて達成することができることが示される。したがって、非担癌マウスへのｍＦｃ−ｒｈＧＤＦ１５の投与は、強固かつ持続的な筋肉量減少、脂肪量減少、および体重減少を伴う悪液質のマウスモデルとして特に有用である（図６Ａ〜Ｃを参照のこと）。
【０２３０】
実施例６：抗ＧＤＦ１５抗体
本実施例では、抗ＧＤＦ１５モノクローナル抗体の作製を記載する。免疫処置、融合、および一次スクリーニングを、Ｒｅｐｅｔｉｔｉｖｅ  Ｉｍｍｕｎｉｚａｔｉｏｎ  Ｍｕｌｔｉｐｌｅ  Ｓｉｔｅｓ（ＲＩＭＭＳ）プロトコルに従い、従来の方法を使用して行った。５匹のＡＪマウスおよび５匹のＢａｌｂ／ｃマウスを、６ＸＨｉｓ（配列番号２６６）タグ付き組換えヒトＧＤＦ１５（Ｈｉｓ−ｒｈＧＤＦ１５）（Ｒ＆Ｄ  Ｓｙｓｔｅｍｓ，Ｉｎｃ．，Ｍｉｎｎｅａｐｏｌｉｓ，ＭＮ）により免疫処置した。酵素結合免疫吸着測定法（ＥＬＩＳＡ）により最高の抗ＧＤＦ１５活性を示す血清を有する２匹のＢａｌｂ／ｃマウスを、次の融合のために選択した。脾臓およびリンパ節を適切なマウスから摘出した。Ｂ細胞を採取し、ミエローマ株と融合した。融合生成物をクロナリティー近くまで、４０枚の９６ウェルプレート上で連続希釈した。ＥＬＩＳＡにより最高の抗ＧＤＦ１５活性を示す血清を有する２匹のＡＪマウスを、次の融合のために選択した。脾臓およびリンパ節を適切なマウスから摘出した。Ｂ細胞を採取し、ミエローマ株と融合した。融合生成物をクロナリティー近くまで、４０枚の９６ウェルプレート上で連続希釈した。
【０２３１】
細胞融合体からの約３，８４０の上澄液を、ｒｈＧＤＦ１５に対する結合についてＥＬＩＳＡによりスクリーニングした。ＧＤＦ１５に対する抗体を含有する合計１７２の上澄液をさらにインビトロで特性評価した。一群のハイブリドーマを選択し、サブクローニングし、増殖させた。抗体を発現させ、次いで標準条件下でプロテインＧ樹脂上でのアフィニティークロマトグラフィーにより精製した。
【０２３２】
実施例７：抗体配列分析
実施例６における各モノクローナル抗体の軽鎖アイソタイプおよび重鎖アイソタイプを、ＩｓｏＳｔｒｉｐ（商標）Ｍｏｕｓｅ  Ｍｏｎｏｃｌｏｎａｌ  Ａｎｔｉｂｏｄｙ  Ｉｓｏｔｙｐｉｎｇ  Ｋｉｔを使用し、キット販売会社の説明書（Ｒｏｃｈｅ  Ａｐｐｌｉｅｄ  Ｓｃｉｅｎｃｅ，Ｉｎｄｉａｎａｐｏｌｉｓ，ＩＮ）に従って判定した。抗体はすべて、κ軽鎖およびＩｇＧ１またはＩｇＧ２ｂの重鎖であることが分かった。
【０２３３】
マウスモノクローナル抗体の重鎖および軽鎖の可変領域を、５’ＲＡＣＥ（Ｒａｐｉｄ
Ａｍｐｌｉｆｉｃａｔｉｏｎ  ｏｆ  ｃＤＮＡ  Ｅｎｄｓ）を使用して配列決定した。ＲＮｅａｓｙ（登録商標）Ｍｉｎｉｐｒｅｐキットを使用し、キット販売会社の説明書（Ｑｉａｇｅｎ，Ｖａｌｅｎｃｉａ，ＣＡ）に従って、全ＲＮＡを各モノクローナルハイブリドーマ細胞株から抽出した。５’末端を含有する完全長第一鎖ｃＤＮＡを、ＳＭＡＲＴｅｒ（商標）ＲＡＣＥ  ｃＤＮＡ  Ａｍｐｌｉｆｉｃａｔｉｏｎ  Ｋｉｔ（Ｃｌｏｎｔｅｃｈ，Ｍｏｕｎｔａｉｎ  Ｖｉｅｗ，ＣＡ）を使用して生成させた。
【０２３４】
軽鎖（κ）および重鎖（ＩｇＧ１またはＩｇＧ２ｂ）の可変領域を、ＫＯＤ  Ｈｏｔ  Ｓｔａｒｔ  Ｐｏｌｙｍｅｒａｓｅ（ＥＭＤ  Ｃｈｅｍｉｃａｌｓ，Ｇｉｂｂｓｔｏｗｎ，ＮＪ）を使用し、キット販売会社の説明書に従って、ＰＣＲにより増幅した。５’ｃＤＮＡ末端の増幅のために、ＳＭＡＲＴｅｒ（商標）ＲＡＣＥ  ｃＤＮＡ  Ａｍｐｌｉｆｉｃａｔｉｏｎ  Ｋｉｔと併せて、５’ＣＴＡＡＴＡＣＧＡＣＴＣＡＣＴＡＴＡＧＧＧＣＡＡＧＣＡＧＴＧＧＴＡＴＣＡＡＣＧＣＡＧＡＧＴ３’（配列番号２３３）と５’ＣＴＡＡＴＡＣＧＡＣＴＣＡＣＴＡＴＡＧＧＧＣ３’（配列番号２２５）の混合物であるＵｎｉｖｅｒｓａｌ  Ｐｒｉｍｅｒ  Ｍｉｘ  Ａプライマー（Ｃｌｏｎｔｅｃｈ）を５’プライマーとして使用した。重鎖可変領域は、上記５’プライマーと、３’ＩｇＧ１定常領域特異的プライマーである５’ＴＡＴＧＣＡＡＧＧＣＴＴＡＣＡＡＣＣＡＣＡ３’（配列番号２２６）または３’ＩｇＧ２ｂ定常領域特異的プライマーである５’ＡＧＧＡＣＡＧＧＧＧＴＴＧＡＴＴＧＴＴＧＡ３’（配列番号２２７）を使用して増幅した。κ鎖可変領域は最初に、上記５’プライマーと、３’κ定常領域特異的プライマーである５’ＣＴＣＡＴＴＣＣＴＧＴＴＧＡＡＧＣＴＣＴＴＧＡＣＡＡＴ３’（配列番号２２８）を使用して増幅した。この軽鎖は、Ｎｅｓｔｅｄ  Ｕｎｉｖｅｒｓａｌ  Ｐｒｉｍｅｒ  Ａ（Ｃｌｏｎｔｅｃｈ）５’プライマーである５’ＡＡＧＣＡＧＴＧＧＴＡＴＣＡＡＣＧＣＡＧＡＧＴ３’（配列番号２２９）と、入れ子３’κ定常領域特異的プライマーである５’ＣＧＡＣＴＧＡＧＧＣＡＣＣＴＣＣＡＧＡＴＧＴＴ３’（配列番号２３０）を使用して、第２の入れ子ＰＣＲラウンドに供した。個々のＰＣＲ産物は、Ｑｉａｑｕｉｃｋ（登録商標）ＰＣＲ  
Ｐｕｒｉｆｉｃａｔｉｏｎキットを使用して精製するか、またはアガロースゲル電気泳動により単離して、Ｑｉａｑｕｉｃｋ（登録商標）Ｇｅｌ  Ｐｕｒｉｆｉｃａｔｉｏｎキットを使用し、キット販売会社の説明書（Ｑｉａｇｅｎ）に従って精製した。次いで、Ｚｅｒｏ  Ｂｌｕｎｔ（登録商標）ＴＯＰＯ（登録商標）ＰＣＲ  Ｃｌｏｎｉｎｇを使用し、販売会社（Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ）の使用説明書に従って、ＰＣＲ産物をｐＣＲ（登録商標）４Ｂｌｕｎｔプラスミドにクローニングし、標準分子生物学技術によりＤＨ５−α細菌（Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ）に形質転換した。形質転換された細菌クローンから単離したプラスミドＤＮＡを、Ｂｅｃｋｍａｎ  Ｇｅｎｏｍｉｃｓ（Ｄａｎｖｅｒｓ，ＭＡ）によるＭ１３順方向（５’ＧＴＡＡＡＡＣＧＡＣＧＧＣＣＡＧＴ３’）（配列番号２３１）およびＭ１３逆方向プライマー（５’ＣＡＧＧＡＡＡＣＡＧＣＴＡＴＧＡＣＣ３’）（配列番号２３２）を使用し、標準ジデオキシＤＮＡ配列決定法を使用して配列決定し、可変領域配列の配列を同定した。Ｖｅｃｔｏｒ  ＮＴＩソフトウェア（Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ）およびＩＭＧＴ／Ｖ−Ｑｕｅｓｔウェブサーバー（ｉｍｇｔ．ｃｉｎｅｓ．ｆｒ）を使用して配列を分析し、可変領域配列を同定および確認した。
【０２３５】
マウスモノクローナル抗体の可変領域をコードする核酸配列、およびそれを画定するタンパク質配列を以下に示す（アミノ末端シグナルペプチド配列は示さない）。ＣＤＲ配列（Ｋａｂａｔ定義）は、アミノ酸配列中で太字フォントおよび下線で示す。
【０２３６】
０１Ｇ０６抗体の重鎖可変領域をコードする核酸配列（配列番号３９）
【化９】
2019056018.tif 000011
【０２３７】
０１Ｇ０６抗体の重鎖可変領域を画定するタンパク質配列（配列番号４０）
【化１０】
2019056018.tif 000012
【０２３８】
０１Ｇ０６抗体のκ鎖可変領域をコードする核酸配列（配列番号７５）
【化１１】
2019056018.tif 000013
【０２３９】
０１Ｇ０６抗体のκ鎖可変領域を画定するタンパク質配列（配列番号７６）
【化１２】
2019056018.tif 000014
【０２４０】
０３Ｇ０５抗体の重鎖可変領域をコードする核酸配列（配列番号４１）
【化１３】
2019056018.tif 000015
【０２４１】
０３Ｇ０５抗体の重鎖可変領域を画定するタンパク質配列（配列番号４２）
【化１４】
2019056018.tif 000016
【０２４２】
０３Ｇ０５抗体のκ鎖可変領域をコードする核酸配列（配列番号７７）
【化１５】
2019056018.tif 000017
【０２４３】
０３Ｇ０５抗体のκ鎖可変領域を画定するタンパク質配列（配列番号７８）
【化１６】
2019056018.tif 000018
【０２４４】
０４Ｆ０８抗体の重鎖可変領域をコードする核酸配列（配列番号４３）
【化１７】
2019056018.tif 000019
【０２４５】
０４Ｆ０８抗体の重鎖可変領域を画定するタンパク質配列（配列番号４４）
【化１８】
2019056018.tif 000020
【０２４６】
０４Ｆ０８抗体のκ鎖可変領域をコードする核酸配列（配列番号７９）
【化１９】
2019056018.tif 000021
【０２４７】
０４Ｆ０８抗体のκ鎖可変領域を画定するタンパク質配列（配列番号８０）
【化２０】
2019056018.tif 000022
【０２４８】
０６Ｃ１１抗体の重鎖可変領域をコードする核酸配列（配列番号４５）
【化２１】
2019056018.tif 000023
【０２４９】
０６Ｃ１１抗体の重鎖可変領域を画定するタンパク質配列（配列番号４６）
【化２２】
2019056018.tif 000024
【０２５０】
０６Ｃ１１抗体のκ鎖可変領域をコードする核酸配列（配列番号８１）
【化２３】
2019056018.tif 000025
【０２５１】
０６Ｃ１１抗体のκ鎖可変領域を画定するタンパク質配列（配列番号８２）
【化２４】
2019056018.tif 000026
【０２５２】
０８Ｇ０１抗体の重鎖可変領域をコードする核酸配列（配列番号４７）
【化２５】
2019056018.tif 000027
【０２５３】
０８Ｇ０１抗体の重鎖可変領域を画定するタンパク質配列（配列番号４８）
【化２６】
2019056018.tif 000028
【０２５４】
０８Ｇ０１抗体のκ鎖可変領域をコードする核酸配列（配列番号８３）
【化２７】
2019056018.tif 000029
【０２５５】
０８Ｇ０１抗体のκ鎖可変領域を画定するタンパク質配列（配列番号８４）
【化２８】
2019056018.tif 000030
【０２５６】
１４Ｆ１１抗体の重鎖可変領域をコードする核酸配列（配列番号４９）
【化２９】
2019056018.tif 000031
【０２５７】
１４Ｆ１１抗体の重鎖可変領域を画定するタンパク質配列（配列番号５０）
【化３０】
2019056018.tif 000032
【０２５８】
１４Ｆ１１抗体のκ鎖可変領域をコードする核酸配列（配列番号８５）
【化３１】
2019056018.tif 000033
【０２５９】
１４Ｆ１１抗体のκ鎖可変領域を画定するタンパク質配列（配列番号８６）
【化３２】
2019056018.tif 000034
【０２６０】
１７Ｂ１１抗体の重鎖可変領域をコードする核酸配列（配列番号５１）
【化３３】
2019056018.tif 000035
【０２６１】
１７Ｂ１１抗体の重鎖可変領域を画定するタンパク質配列（配列番号５２）
【化３４】
2019056018.tif 000036
【０２６２】
１７Ｂ１１抗体のκ鎖可変領域をコードする核酸配列（配列番号８７）
【化３５】
2019056018.tif 000037
【０２６３】
１７Ｂ１１抗体のκ鎖可変領域を画定するタンパク質配列（配列番号８８）
【化３６】
2019056018.tif 000038
【０２６４】
実施例６で作製した抗体について、免疫グロブリン重鎖可変領域を画定するアミノ酸配列を図１０にアライメントする。（発現／分泌のための）アミノ末端シグナルペプチド配列は示さない。ＣＤＲ１、ＣＤＲ２、およびＣＤＲ３（Ｋａｂａｔ定義）はボックスによって特定する。図１１に、各抗体について、分離したＣＤＲ１、ＣＤＲ２、およびＣＤＲ３配列のアライメントを示す。
【０２６５】
実施例６の抗体の免疫グロリン軽鎖可変領域を画定するアミノ酸配列を図１２にアライメントする。（発現／分泌のための）アミノ末端シグナルペプチド配列は示さない。ＣＤＲ１、ＣＤＲ２、およびＣＤＲ３はボックスによって特定する。図１３に、各抗体について、分離したＣＤＲ１、ＣＤＲ２、およびＣＤＲ３配列のアライメントを示す。
【０２６６】
表２に、本実施例で論じた各配列の配列番号を示す。
【０２６７】
【表２】
2019056018.tif 000039
【０２６８】
【表３】
2019056018.tif 000040
【０２６９】
【表４】
2019056018.tif 000041
【０２７０】
マウスモノクローナル抗体重鎖ＣＤＲ配列（Ｋａｂａｔ、Ｃｈｏｔｈｉａ、およびＩＭＧＴ定義）を表３に示す。
【０２７１】
【表５】
2019056018.tif 000042
【０２７２】
マウスモノクローナル抗体κ軽鎖ＣＤＲ配列（Ｋａｂａｔ、Ｃｈｏｔｈｉａ、およびＩＭＧＴ定義）を表４に示す。
【０２７３】
【表６】
2019056018.tif 000043
【０２７４】
完全長重鎖またはκ鎖抗体配列を作り出すために、上の各可変配列をそれぞれの定常領域と組み合わせる。例えば完全長重鎖は、重可変配列とそれに続くマウスＩｇＧ１またはＩｇＧ２ｂ重鎖定常配列を含んでなり、完全長κ鎖は、κ可変配列とそれに続くマウスκ軽鎖定常配列を含む。
【０２７５】
マウスＩｇＧ１重鎖定常領域をコードする核酸配列（配列番号１６５）
【化３７】
2019056018.tif 000044
【０２７６】
マウスＩｇＧ１重鎖定常領域を画定するタンパク質配列（配列番号１６６）
【化３８】
2019056018.tif 000045
【０２７７】
マウスＩｇＧ２ｂ重鎖定常領域をコードする核酸配列（配列番号１６７）
【化３９】
2019056018.tif 000046
【０２７８】
マウスＩｇＧ２ｂ重鎖定常領域を画定するタンパク質配列（配列番号１６８）
【化４０】
2019056018.tif 000047
【０２７９】
マウスκ軽鎖定常領域をコードする核酸配列（配列番号１６９）
【化４１】
2019056018.tif 000048
【０２８０】
マウスκ軽鎖定常領域を画定するタンパク質配列（配列番号１７０）
【化４２】
2019056018.tif 000049
【０２８１】
以下の配列は、本実施例に記載の抗体について、実際のまたは想定される完全長重鎖および軽鎖配列（すなわち、可変および定常領域配列の両方を含有する）を表す。抗体の適切な分泌のためのシグナル配列（例えば、ＤＮＡ配列の５’末端またはタンパク質配列のアミノ末端にあるシグナル配列）は、本明細書に開示の完全長重鎖および軽鎖配列中には示されておらず、最終的な分泌タンパク質中に含まれない。ＤＮＡ配列の３’末端に必要とされる翻訳終結のための停止コドンも示されない。本開示の完全長免疫グロブリン重鎖および軽鎖配列の発現のためのシグナル配列および／または停止コドンを選択することは、当該技術分野の通常の技術範囲内である。可変領域配列を他の定常領域配列にライゲートして、活性完全長免疫グロブリン重鎖および軽鎖を生成させ得ることも想定される。
【０２８２】
０１Ｇ０６の完全長重鎖配列（重鎖可変領域およびＩｇＧ１定常領域）をコードする核酸配列（配列番号９９）
【化４３】
2019056018.tif 000050
【０２８３】
０１Ｇ０６の完全長重鎖配列（重鎖可変領域およびＩｇＧ１定常領域）を画定するタンパク質配列（配列番号１００）
【化４４】
2019056018.tif 000051
【０２８４】
０１Ｇ０６の完全長軽鎖配列（κ鎖可変領域および定常領域）をコードする核酸配列（配列番号１０１）
【化４５】
2019056018.tif 000052
【０２８５】
０１Ｇ０６の完全長軽鎖配列（κ鎖可変領域および定常領域）を画定するタンパク質配列（配列番号１０２）
【化４６】
2019056018.tif 000053
【０２８６】
０３Ｇ０５の完全長重鎖配列（重鎖可変領域およびＩｇＧ１定常領域）をコードする核酸配列（配列番号１０３）
【化４７】
2019056018.tif 000054
【０２８７】
０３Ｇ０５の完全長重鎖配列（重鎖可変領域およびＩｇＧ１定常領域）を画定するタンパク質配列（配列番号１０４）
【化４８】
2019056018.tif 000055
【０２８８】
０３Ｇ０５の完全長軽鎖配列（κ鎖可変領域および定常領域）をコードする核酸配列（配列番号１０５）
【化４９】
2019056018.tif 000056
【０２８９】
０３Ｇ０５の完全長軽鎖配列（κ鎖可変領域および定常領域）を画定するタンパク質配列（配列番号１０６）
【化５０】
2019056018.tif 000057
【０２９０】
０４Ｆ０８の完全長重鎖配列（重鎖可変領域およびＩｇＧ１定常領域）をコードする核酸配列（配列番号１０７）
【化５１】
2019056018.tif 000058
【０２９１】
０４Ｆ０８の完全長重鎖配列（重鎖可変領域およびＩｇＧ１定常領域）を画定するタンパク質配列（配列番号１０８）
【化５２】
2019056018.tif 000059
【０２９２】
０４Ｆ０８の完全長軽鎖配列（κ鎖可変領域および定常領域）をコードする核酸配列（配列番号１０９）
【化５３】
2019056018.tif 000060
【０２９３】
０４Ｆ０８の完全長軽鎖配列（κ鎖可変領域および定常領域）を画定するタンパク質配列（配列番号１１０）
【化５４】
2019056018.tif 000061
【０２９４】
０６Ｃ１１の完全長重鎖配列（重鎖可変領域およびＩｇＧ１定常領域）をコードする核酸配列（配列番号１１１）
【化５５】
2019056018.tif 000062
【０２９５】
０６Ｃ１１の完全長重鎖配列（重鎖可変領域およびＩｇＧ１定常領域）を画定するタンパク質配列（配列番号１１２）
【化５６】
2019056018.tif 000063
【０２９６】
０６Ｃ１１の完全長軽鎖配列（κ鎖可変領域および定常領域）をコードする核酸配列（配列番号１１３）
【化５７】
2019056018.tif 000064
【０２９７】
０６Ｃ１１の完全長軽鎖配列（κ鎖可変領域および定常領域）を画定するタンパク質配列（配列番号１１４）
【化５８】
2019056018.tif 000065
【０２９８】
０８Ｇ０１の完全長重鎖配列（重鎖可変領域およびＩｇＧ２ｂ定常領域）をコードする核酸配列（配列番号１１５）
【化５９】
2019056018.tif 000066
【０２９９】
０８Ｇ０１の完全長重鎖配列（重鎖可変領域およびＩｇＧ２ｂ定常領域）を画定するタンパク質配列（配列番号１１６）
【化６０】
2019056018.tif 000067
【０３００】
０８Ｇ０１の完全長軽鎖配列（κ鎖可変領域および定常領域）をコードする核酸配列（配列番号１１７）
【化６１】
2019056018.tif 000068
【０３０１】
０８Ｇ０１の完全長軽鎖配列（κ鎖可変領域および定常領域）を画定するタンパク質配列（配列番号１１８）
【化６２】
2019056018.tif 000069
【０３０２】
１４Ｆ１１の完全長重鎖配列（重鎖可変領域およびＩｇＧ１定常領域）をコードする核酸配列（配列番号１１９）
【化６３】
2019056018.tif 000070
【０３０３】
１４Ｆ１１の完全長重鎖配列（重鎖可変領域およびＩｇＧ１定常領域）を画定するタンパク質配列（配列番号１２０）
【化６４】
2019056018.tif 000071
【０３０４】
１４Ｆ１１の完全長軽鎖配列（κ鎖可変領域および定常領域）をコードする核酸配列（配列番号１２１）
【化６５】
2019056018.tif 000072
【０３０５】
１４Ｆ１１の完全長軽鎖配列（κ鎖可変領域および定常領域）を画定するタンパク質配列（配列番号１２２）
【化６６】
2019056018.tif 000073
【０３０６】
１７Ｂ１１の完全長重鎖配列（重鎖可変領域およびＩｇＧ１定常領域）をコードする核酸配列（配列番号１２３）
【化６７】
2019056018.tif 000074
【０３０７】
１７Ｂ１１の完全長重鎖配列（重鎖可変領域およびＩｇＧ１定常領域）を画定するタンパク質配列（配列番号１２４）
【化６８】
2019056018.tif 000075
【０３０８】
１７Ｂ１１の完全長軽鎖配列（κ鎖可変領域および定常領域）をコードする核酸配列（配列番号１２５）
【化６９】
2019056018.tif 000076
【０３０９】
１７Ｂ１１の完全長軽鎖配列（κ鎖可変領域および定常領域）を画定するタンパク質配列（配列番号１２６）
【化７０】
2019056018.tif 000077
【０３１０】
表５は、本実施例で考察する抗体の完全長配列と、配列表に示すものとの対応を示す。
【０３１１】
【表７】
2019056018.tif 000078
【０３１２】
実施例８：結合親和性
６Ｘ  Ｈｉｓタグ付き（配列番号２６６）組換えヒトＧＤＦ１５（Ｈｉｓ−ｒｈＧＤＦ１５（Ｒ＆Ｄ  Ｓｙｓｔｅｍｓ，Ｉｎｃ．））、タグなし組換えヒトＧＤＦ１５（ｒｈＧＤＦ１５（Ｐｅｐｒｏｔｅｃｈ，Ｒｏｃｋｙ  Ｈｉｌｌ，ＮＪ））、およびヒトＧＤＦ１５に融合したマウスＦｃ（ｍＦｃ−ｒｈＧＤＦ１５）またはＦｃが酵素的に除去されたバージョン（切断ｒｈＧＤＦ１５）のいずれかとして作製された組換えヒトＧＤＦ１５に対する抗体の結合親和性および結合動力学を、Ｂｉａｃｏｒｅ（登録商標）Ｔ１００装置（ＧＥ  Ｈｅａｌｔｈｃａｒｅ，Ｐｉｓｃａｔａｗａｙ，ＮＪ）を使用し、表面プラズモン共鳴により測定した。
【０３１３】
標準プロトコルに従い、アミンカップリングによって、ウサギ抗マウスＩｇＧ（ＧＥ  Ｈｅａｌｔｈｃａｒｅ）をカルボキシメチル化デキストランＣＭ４センサーチップ（ＧＥ
Ｈｅａｌｔｈｃａｒｅ）上に固定化した。移動用緩衝液として０．０５％の界面活性剤Ｐ２０を含有するＰＢＳを使用し、３７℃で分析を実施した。流速１０μＬ／分で、個々のフローセル内において抗体を捕捉した。各抗体ごとに注入時間を変えて、３０〜６０ＲＵの間のＲｍａｘを得た。必要に応じて、組換えＧＤＦ１５タンパク質のマウスＦｃ部分に対する捕捉抗体の非特異的結合をブロックするために、２５０μｇ／ｍＬのマウスＦｃ（Ｊａｃｋｓｏｎ  ＩｍｍｕｎｏＲｅｓｅａｒｃｈ，Ｗｅｓｔ  Ｇｒｏｖｅ，ＰＡ）を３０μＬ／分で１２０秒間注入した。緩衝液、移動用緩衝液で希釈したｍＦｃ−ｒｈＧＤＦ１５、切断ｒｈＧＤＦ１５、Ｈｉｓ−ｒｈＧＤＦ１５、またはｒｈＧＤＦ１５を参照表面（抗体捕捉なし）および活性表面（試験抗体）上に６０μＬ／分で２４０秒間、連続的に注入した。解離相を１５００秒までモニターした。次いで、１０ｍＭのグリシン−ＨＣｌ、ｐＨ１．７を流速３０μＬ／分で６０秒間にわたり２回注入して、表面を再生した。試験したＧＤＦ１５の濃度範囲は、３０ｎＭ〜０．６２５ｎＭであった。
【０３１４】
ＢＩＡｅｖａｌｕａｔｉｏｎソフトウェア（ＧＥ  Ｈｅａｌｔｈｃａｒｅ）の動力学機能を使用して、二重参照減法で動力学パラメータを測定した。各抗体の動力学パラメータ、ｋａ（結合速度定数）、ｋｄ（解離速度定数）、およびＫＤ（平衡解離定数）を決定した。ｍＦｃ−ｒｈＧＤＦ１５、切断ｒｈＧＤＦ１５、Ｈｉｓ−ｒｈＧＤＦ１５、またはｒｈＧＤＦ１５に対するモノクローナル抗体の動力学値をそれぞれ、表６、７、８、および９に要約する。
【０３１５】
【表８】
2019056018.tif 000079
【０３１６】
表６のデータから、抗体は、約２５０ｐＭ以下、２００ｐＭ以下、１５０ｐＭ以下、１００ｐＭ以下、７５ｐＭ以下、または５０ｐＭ以下のＫＤで、ｍＦｃ−ｒｈＧＤＦ１５に結合することが実証される。
【０３１７】
切断ｒｈＧＤＦ１５に対するモノクローナル抗体の動力学値を表７に要約する。
【０３１８】
【表９】
2019056018.tif 000080
【０３１９】
表７のデータから、抗体０１Ｇ０６、０６Ｃ１１、および１４Ｆ１１は、約２００ｐＭ以下、１５０ｐＭ以下、または１００ｐＭ以下のＫＤで、切断ｒｈＧＤＦ１５に結合することが実証される。
【０３２０】
Ｈｉｓ−ｒｈＧＤＦ１５に対するモノクローナル抗体の動力学値を表８に要約する。
【０３２１】
【表１０】
2019056018.tif 000081
【０３２２】
表８のデータから、抗体０１Ｇ０６、０６Ｃ１１、および１４Ｆ１１は、約１５０ｐＭ以下、１００ｐＭ以下、７５ｐＭ以下、または５０ｐＭ以下のＫＤで、Ｈｉｓ−ｒｈＧＤＦ１５に結合することが実証される。
【０３２３】
ｒｈＧＤＦ１５に対するモノクローナル抗体の動力学値を表９に要約する。
【０３２４】
【表１１】
2019056018.tif 000082
【０３２５】
表９のデータから、抗体０１Ｇ０６、０６Ｃ１１、および１４Ｆ１１は、約２５０ｐＭ以下、２００ｐＭ以下、１５０ｐＭ以下、１００ｐＭ以下、７５ｐＭ以下、または５０ｐＭ以下のＫＤで、ｒｈＧＤＦ１５に結合することが実証される。
【０３２６】
実施例９：ｍＦｃ−ｒｈＧＤＦ１５誘導モデルにおける悪液質の逆転
本実施例では、ｍＦｃ−ｒｈＧＤＦ１５誘導悪液質モデルにおける、抗体０１Ｇ０６、０３Ｇ０５、０４Ｆ０８、０６Ｃ１１、１４Ｆ１１、または１７Ｂ１１による悪液質（体重減少により示される）の逆転について実証する。ｍＦｃ−ｒｈＧＤＦ１５（２μｇ／ｇ）を、８週齢の雌性ＩＣＲ−ＳＣＩＤマウスの側腹部に皮下投与した。体重を毎日測定した。体重が９３％に達したときに、それぞれ１０匹のマウスからなる７つの群にマウスを無作為に分けた。各群に以下の処置の１つを施した：マウスＩｇＧ対照、１０ｍｇ／ｋｇの０１Ｇ０６、０３Ｇ０５、０４Ｆ０８、０６Ｃ１１、１４Ｆ１１、または１７Ｂ１１。処置は、腹腔内注射により１回施した。抗体０１Ｇ０６、０３Ｇ０５、０４Ｆ０８、０６Ｃ１１、１４Ｆ１１、または１７Ｂ１１による処置の結果、体重が初期体重に比較して増加するか、または約１００％になった（ｐ＜０．００１）（図１４および表１０）。
【０３２７】
【表１２】
2019056018.tif 000083
【０３２８】
図１４および表１０のデータから、本開示の抗ＧＤＦ１５抗体は、ｍＦｃ−ｒｈＧＤＦ１５誘導マウスモデル（すなわち、非担癌マウスモデル）における悪液質を逆転し得ることが示される。
【０３２９】
実施例１０：ＨＴ−１０８０異種移植腫瘍モデルにおける悪液質の逆転
本実施例では、ＨＴ−１０８０線維肉腫異種移植モデルにおける、抗体０１Ｇ０６、０３Ｇ０５、０４Ｆ０８、０６Ｃ１１、０８Ｇ０１、１４Ｆ１１、または１７Ｂ１１による悪液質（体重減少により示される）の逆転について実証する。ＨＴ−１０８０細胞を、１０％ＦＢＳを含有するイーグル最小必須培地（ＡＴＣＣ、カタログ番号３０−２００３）を使用する、５％ＣＯ２を含有する雰囲気下、３７℃での培養で増殖させた。５０％マトリゲル中の、マウス当たり５×１０６個の細胞を、８週齢の雌性ＩＣＲ  ＳＣＩＤマウスの側腹部に皮下接種した。体重を毎日測定した。体重が９３％に達したときに、それぞれ１０匹のマウスからなる８つの群にマウスを無作為に分けた。各群に以下の処置の１つを施した：マウスＩｇＧ対照、１０ｍｇ／ｋｇの０１Ｇ０６、０３Ｇ０５、０４Ｆ０８、０６Ｃ１１、０８Ｇ０１、１４Ｆ１１、または１７Ｂ１１。処置は、腹腔内注射により３日ごとに施した。抗体０１Ｇ０６、０３Ｇ０５、０４Ｆ０８、０６Ｃ１１、０８Ｇ０１、１４Ｆ１１、または１７Ｂ１１による処置の結果、体重が初期体重に比較して増加するか、または約１００％になった（ｐ＜０．００１）（図１５および表１１）。
【０３３０】
【表１３】
2019056018.tif 000084
【０３３１】
図１５および表１１のデータから、本開示の抗ＧＤＦ１５抗体は、ＨＴ−１０８０線維肉腫異種移植モデルにおける悪液質を逆転し得ることが示される。
【０３３２】
このマウスモデルにおける悪液質の逆転を実証するために、抗体０１Ｇ０６を使用して、さらなる試験を実施した。上記のように、ＨＴ−１０８０細胞を増殖させて、８週齢の雌性ＩＣＲ  ＳＣＩＤマウスの側腹部に皮下接種した。体重が９３％に達したときに、それぞれ１０匹のマウスからなる２つの群にマウスを無作為に分けた。各群に以下の処置の１つを施した：マウスＩｇＧ対照または１０ｍｇ／ｋｇの０１Ｇ０６。処置は、腹腔内注射により１回施した。図１６Ａに示すように、抗体０１Ｇ０６による処置の結果、体重が初期体重に対して増加するか、または１００％になった（ｐ＜０．００１）（図１６Ａ）。
【０３３３】
摂食量は、マウスに毎日与えられる食物供給量を秤量することにより決定した（図１６Ｂ）。摂食量の顕著な増加が、処置後最初の３日間、０１Ｇ０６処置群で観察された。それ以降、対照群（ｍＩｇＧ）に比較して顕著な変化は観察されなかった。
【０３３４】
摂水量は、マウスに毎日与えられる水供給量を秤量することにより決定した。摂水量の顕著な変化は群間で観察されなかった。
【０３３５】
本実験では、１群１０匹のマウスを、投与時点（ベースラインまたは９３％体重、無処置）および試験の終了時点（投与後７日目、ｍＩｇＧまたは０１Ｇ０６のいずれか）で屠殺した。実施例４で上記したように、生殖腺脂肪および腓腹筋を外科的に摘出して秤量し、組織を液体窒素で瞬間凍結した。実施例４に記載したように、腓腹筋試料からＲＮＡを単離して、ＲＴ−ＰＣＲによりｍＭｕＲＦ１およびｍＡｔｒｏｇｉｎのｍＲＮＡのレベルを測定した。
【０３３６】
図１６Ｃに示すように、生殖腺脂肪量の顕著な減少が、ｍＩｇＧの投与後７日目に観察されたが、抗体０１Ｇ０６で処置した群では観察されなかった。加えて、ｍＩｇＧで処置したマウスは、ベースライン群に比較して顕著な腓腹筋の減少を示したが、抗体０１Ｇ０６で処置したマウス群は示さなかった（図１６Ｄ）。さらに、筋肉分解マーカーであるｍＭｕＲＦ１およびｍＡｔｒｏｇｉｎのレベルは、０１Ｇ０６群に比較してｍＩｇＧ群で顕著に高かった（図１６Ｅ）。
【０３３７】
これらの結果から、本開示の抗ＧＤＦ１５抗体は、ＨＴ−１０８０異種移植腫瘍モデルにおける、筋肉量減少、脂肪減少、および不随意性の体重減少によって測定される悪液質を逆転し得ることが示される。
【０３３８】
実施例１１：ＨＴ−１０８０異種移植腫瘍モデルにおける悪液質の逆転
本実施例では、ＨＴ−１０８０線維肉腫異種移植モデルにおける、抗体０１Ｇ０６による悪液質（体重減少により示される）の逆転について実証する。ＨＴ−１０８０細胞を、１０％ＦＢＳを含有するイーグル最小必須培地（ＡＴＣＣ、カタログ番号３０−２００３）を使用する、５％ＣＯ２を含有する雰囲気下、３７℃での培養で増殖させた。５０％マトリゲル中の、マウス当たり５×１０６個の細胞を、８週齢の雌性ＩＣＲ  ＳＣＩＤマウスの側腹部に皮下接種した。体重を毎日測定した。体重が８０％に達したときに、それぞれ５匹のマウスからなる２つの群にマウスを無作為に分けた。各群に以下の処置の１つを施した：マウスＩｇＧ対照、１日目および７日目での２ｍｇ／ｋｇの０１Ｇ０６の投与。処置は、腹腔内注射により施した。抗体０１Ｇ０６による処置の結果、体重が初期体重に比較して増加するか、または約１００％になった（ｐ＜０．００１）（図１７Ａおよび表１２）。
【０３３９】
【表１４】
2019056018.tif 000085
【０３４０】
図１７Ａ〜Ｂおよび表１２のデータから、本開示の抗ＧＤＦ１５抗体は、ＨＴ−１０８０線維肉腫異種移植モデルにおける悪液質を逆転し得ることが示される。
【０３４１】
本実験では、１群５匹のマウスを、投与時点（ベースラインまたは８０％体重減少、無処置）および試験の終了時点（投与後７日目、ｍＩｇＧまたは０１Ｇ０６のいずれか）で屠殺した。肝臓、心臓、脾臓、腎臓、生殖腺脂肪、および腓腹筋を外科的に摘出し、秤量した。図１７Ｂに示すように、肝臓、心臓、脾臓、腎臓、生殖腺脂肪、および腓腹筋の顕著な減少が、ｍＩｇＧの投与後７日目に観察されたが、抗体０１Ｇ０６で処置した群では観察されなかった。加えて、抗体０１Ｇ０６で処置したマウスは、ベースライン群に比較して、肝臓および生殖腺筋肉の顕著な増加を示した（図１７Ｂ）。
【０３４２】
これらの結果から、本開示の抗ＧＤＦ１５抗体は、ＨＴ−１０８０異種移植腫瘍モデルにおける、重要器官の重量減少、筋肉量減少、脂肪減少、および不随意性の体重減少によって測定される悪液質を逆転し得ることが示される。
【０３４３】
実施例１２：Ｋ−５６２異種移植腫瘍モデルにおける悪液質の逆転
本実施例では、Ｋ−５６２白血病異種移植モデルにおける、抗体０１Ｇ０６、０３Ｇ０５、０４Ｆ０８、０６Ｃ１１、０８Ｇ０１、１４Ｆ１１、または１７Ｂ１１による悪液質（体重減少により示される）の逆転について実証する。Ｋ−５６２細胞を、１０％ＦＢＳを含有するイスコフ改変ダルベッコ培地（ＡＴＣＣ、カタログ番号３０−２００５）を使用する、５％ＣＯ２を含有する雰囲気下、３７℃での培養で増殖させた。５０％マトリゲル中の、マウス当たり２．５×１０６個の細胞を、８週齢の雌性ＣＢ１７ＳＣＲＦＭＦマウスの側腹部に皮下接種した。体重を毎日測定した。体重が９３％に達したときに、それぞれ１０匹のマウスからなる８つの群にマウスを無作為に分配した。各群に以下の処置の１つを施した：マウスＩｇＧ対照、１０ｍｇ／ｋｇの０１Ｇ０６、０３Ｇ０５、０４Ｆ０８、０６Ｃ１１、０８Ｇ０１、１４Ｆ１１、または１７Ｂ１１。処置は、腹腔内注射により３日ごとに施した。抗体０１Ｇ０６、０３Ｇ０５、０４Ｆ０８、０６Ｃ１１、０８Ｇ０１、１４Ｆ１１、または１７Ｂ１１による処置の結果、体重が初期体重に比較して増加するか、または約１００％になった（ｐ＜０．００１）（図１８および表１３）。
【０３４４】
【表１５】
2019056018.tif 000086
【０３４５】
図１８および表１３のデータから、本開示の抗ＧＤＦ１５抗体は、Ｋ−５６２異種移植腫瘍モデルにおける悪液質を逆転し得ることが示される。
【０３４６】
実施例１３：さらなる異種移植腫瘍モデル
抗体０１Ｇ０６を、ＴＯＶ−２１Ｇ卵巣異種移植モデルおよびＬＳ１０３４結腸異種移植モデルを含む、さらなる腫瘍異種移植モデルで試験した。各モデルにおいて、抗体０１Ｇ０６は、ＰＢＳ対照に比較して、体重減少を逆転させた（ＴＯＶ−２１Ｇモデルについてｐ＜０．００１、ＬＳ１０３４モデルについてｐ＜０．０１）。
【０３４７】
実施例１４：抗ＧＤＦ１５抗体のヒト化
本実施例では、０１Ｇ０６、０６Ｃ１１、および１４Ｆ１１と命名された３つのマウス抗体のヒト化およびキメラ化、ならびに得られたヒト化抗体の特性評価について記載する。当該技術分野で知られている方法を使用して、ヒト化抗ＧＤＦ１５抗体を設計し、標的化ＣＤＲ突然変異誘発によって親和性成熟させ、最適化した。アミノ酸配列をコドン最適化ＤＮＡ配列に変換し、（以下の順序で）５’ＨｉｎｄＩＩＩ制限部位、Ｋｏｚａｋコンセンサス配列、アミノ末端シグナル配列、ヒト化可変領域、ヒトＩｇＧ１またはκ定常領域、停止コドン、および３’ＥｃｏＲＩ制限部位を含むように合成した。
【０３４８】
キメラ（マウス可変領域およびヒト定常領域）０１Ｇ０６、０６Ｃ１１、および１４Ｆ１１重鎖（ヒトＩｇＧ１）および軽鎖（ヒトκ）も構築した。キメラ抗体を作製するために、マウス可変領域をヒト定常領域に融合し、コドン最適化ＤＮＡ配列を（以下の順序で）５’ＨｉｎｄＩＩＩ制限部位、Ｋｏｚａｋコンセンサス配列、アミノ末端シグナル配列、マウス可変領域、ヒトＩｇＧ１またはκ定常領域、停止コドン、および３’ＥｃｏＲＩ制限部位を含むように合成した。
【０３４９】
Ｉｎ−Ｆｕｓｉｏｎ（商標）ＰＣＲクローニング（Ｃｌｏｎｔｅｃｈ，Ｍｏｕｎｔａｉｎ  Ｖｉｅｗ，ＣＡ）を使用し、ＨｉｎｄＩＩＩおよびＥｃｏＲＩ部位を介して、ヒト化およびキメラ重鎖をｐＥＥ６．４（Ｌｏｎｚａ，Ｂａｓｅｌ，Ｓｗｉｔｚｅｒｌａｎｄ）にサブクローニングした。Ｉｎ−Ｆｕｓｉｏｎ（商標）ＰＣＲクローニングを使用し、ＨｉｎｄＩＩＩおよびＥｃｏＲＩ部位を介して、ヒト化およびキメラκ軽鎖をｐＥＥ１４．４（Ｌｏｎｚａ）にサブクローニングした。
【０３５０】
ヒト化抗体鎖またはキメラ抗体鎖を２９３Ｔ細胞に一過性に形質移入して、抗体を産生させた。その後のインビトロ分析のために、抗体を精製するかまたは細胞培養培地の上澄液で使用した。キメラおよびヒト化抗体とヒトＧＤＦ１５の結合は、下記のように測定した。結果を表２４〜２７に要約する。
【０３５１】
キメラまたはヒト化０１Ｇ０６免疫グロブリン重鎖と免疫グロブリン軽鎖可変領域の可能な各組み合わせを以下の表１４に示す。
【０３５２】
【表１６】
2019056018.tif 000087
【０３５３】
【表１７】
2019056018.tif 000088
【０３５４】
【表１８】
2019056018.tif 000089
【０３５５】
キメラまたはヒト化０６Ｃ１１免疫グロブリン重鎖と免疫グロブリン軽鎖可変領域の可能な各組み合わせを以下の表１５に示す。
【０３５６】
【表１９】
2019056018.tif 000090
【０３５７】
キメラまたはヒト化１４Ｆ１１免疫グロブリン重鎖と免疫グロブリン軽鎖可変領域の可能な各組み合わせを以下の表１６に示す。
【０３５８】
【表２０】
2019056018.tif 000091
【０３５９】
キメラ０４Ｆ０８、０６Ｃ１１、および１４Ｆ１１免疫グロブリン重鎖と免疫グロブリン軽鎖可変領域の可能な各組み合わせを以下の表１７に示す。
【０３６０】
【表２１】
2019056018.tif 000092
【０３６１】
キメラ０１Ｇ０６およびキメラ０８Ｇ０１免疫グロブリン重鎖と免疫グロブリン軽鎖可変領域の可能な各組み合わせを以下の表１８に示す。
【０３６２】
【表２２】
2019056018.tif 000093
【０３６３】
キメラおよびヒト化０１Ｇ０６、０６Ｃ１１、および１４Ｆ１１抗体の可変領域を画定する核酸配列およびコード化タンパク質配列を以下に要約する（アミノ末端シグナルペプチド配列は示さない）。ＣＤＲ配列（Ｋａｂａｔ定義）は、アミノ酸配列中で太字で示し下線を付す。
【０３６４】
Ｃｈ０１Ｇ０６  Ｃｈｉｍｅｒｉｃ重鎖可変領域をコードする核酸配列（配列番号１２７）
【化７１】
2019056018.tif 000094
【０３６５】
Ｃｈ０１Ｇ０６  Ｃｈｉｍｅｒｉｃ重鎖可変領域を画定するタンパク質配列（配列番号４０）
【化７２】
2019056018.tif 000095
【０３６６】
Ｈｕ０１Ｇ０６  ＩＧＨＶ１−１８重鎖可変領域をコードする核酸配列（配列番号５３）
【化７３】
2019056018.tif 000096
【０３６７】
Ｈｕ０１Ｇ０６  ＩＧＨＶ１−１８重鎖可変領域を画定するタンパク質配列（配列番号５４）
【化７４】
2019056018.tif 000097
【０３６８】
Ｈｕ０１Ｇ０６  ＩＧＨＶ１−６９重鎖可変領域をコードする核酸配列（配列番号５５）
【化７５】
2019056018.tif 000098
【０３６９】
Ｈｕ０１Ｇ０６  ＩＧＨＶ１−６９重鎖可変領域を画定するタンパク質配列（配列番号５６）
【化７６】
2019056018.tif 000099
【０３７０】
Ｓｈ０１Ｇ０６  ＩＧＨＶ１−１８  Ｍ６９Ｌ重鎖可変領域をコードする核酸配列（配列番号５７）
【化７７】
2019056018.tif 000100
【０３７１】
Ｓｈ０１Ｇ０６  ＩＧＨＶ１−１８  Ｍ６９Ｌ重鎖可変領域を画定するタンパク質配列（配列番号５８）
【化７８】
2019056018.tif 000101
【０３７２】
Ｓｈ０１Ｇ０６  ＩＧＨＶ１−１８  Ｍ６９Ｌ  Ｋ６４Ｑ  Ｇ４４Ｓ重鎖可変領域をコードする核酸配列（配列番号５９）
【化７９】
2019056018.tif 000102
【０３７３】
Ｓｈ０１Ｇ０６  ＩＧＨＶ１−１８  Ｍ６９Ｌ  Ｋ６４Ｑ  Ｇ４４Ｓ重鎖可変領域を画定するタンパク質配列（配列番号６０）
【化８０】
2019056018.tif 000103
【０３７４】
Ｓｈ０１Ｇ０６  ＩＧＨＶ１−１８  Ｍ６９Ｌ  Ｋ６４Ｑ重鎖可変領域をコードする核酸配列（配列番号６１）
【化８１】
2019056018.tif 000104
【０３７５】
Ｓｈ０１Ｇ０６  ＩＧＨＶ１−１８  Ｍ６９Ｌ  Ｋ６４Ｑ重鎖可変領域を画定するタンパク質配列（配列番号６２）
【化８２】
2019056018.tif 000105
【０３７６】
Ｓｈ０１Ｇ０６  ＩＧＨＶ１−６９  Ｔ３０Ｓ  Ｉ６９Ｌ重鎖可変領域をコードする核酸配列（配列番号６３）
【化８３】
2019056018.tif 000106
【０３７７】
Ｓｈ０１Ｇ０６  ＩＧＨＶ１−６９  Ｔ３０Ｓ  Ｉ６９Ｌ重鎖可変領域を画定するタンパク質配列（配列番号６４）
【化８４】
2019056018.tif 000107
【０３７８】
Ｓｈ０１Ｇ０６  ＩＧＨＶ１−６９  Ｔ３０Ｓ  Ｋ６４Ｑ  Ｉ６９Ｌ重鎖可変領域をコードする核酸配列（配列番号６５）
【化８５】
2019056018.tif 000108
【０３７９】
Ｓｈ０１Ｇ０６  ＩＧＨＶ１−６９  Ｔ３０Ｓ  Ｋ６４Ｑ  Ｉ６９Ｌ重鎖可変領域を画定するタンパク質配列（配列番号６６）
【化８６】
2019056018.tif 000109
【０３８０】
Ｈｕ０１Ｇ０６  ＩＧＨＶ１−１８  Ｆ１重鎖可変領域をコードする核酸配列（配列番号２４５）
【化８７】
2019056018.tif 000110
【０３８１】
Ｈｕ０１Ｇ０６  ＩＧＨＶ１−１８  Ｆ１重鎖可変領域を画定するタンパク質配列（配列番号２４６）
【化８８】
2019056018.tif 000111
【０３８２】
Ｈｕ０１Ｇ０６  ＩＧＨＶ１−１８  Ｆ２重鎖可変領域をコードする核酸配列（配列番号２４７）
【化８９】
2019056018.tif 000112
【０３８３】
Ｈｕ０１Ｇ０６  ＩＧＨＶ１−１８  Ｆ２重鎖可変領域を画定するタンパク質配列（配列番号２４８）
【化９０】
2019056018.tif 000113
【０３８４】
Ｈｕ０１Ｇ０６  ＩＧＨＶ１−６９  Ｆ１重鎖可変領域をコードする核酸配列（配列番号２４９）
【化９１】
2019056018.tif 000114
【０３８５】
Ｈｕ０１Ｇ０６  ＩＧＨＶ１−６９  Ｆ１重鎖可変領域を画定するタンパク質配列（配列番号２５０）
【化９２】
2019056018.tif 000115
【０３８６】
Ｈｕ０１Ｇ０６  ＩＧＨＶ１−６９  Ｆ２重鎖可変領域をコードする核酸配列（配列番号２５１）
【化９３】
2019056018.tif 000116
【０３８７】
Ｈｕ０１Ｇ０６  ＩＧＨＶ１−６９  Ｆ２重鎖可変領域を画定するタンパク質配列（配列番号２５２）
【化９４】
2019056018.tif 000117
【０３８８】
Ｃｈ０６Ｃ１１  Ｃｈｉｍｅｒｉｃ重鎖可変領域をコードする核酸配列（配列番号１２９）
【化９５】
2019056018.tif 000118
【０３８９】
Ｃｈ０６Ｃ１１  Ｃｈｉｍｅｒｉｃ重鎖可変領域を画定するタンパク質配列（配列番号４６）
【化９６】
2019056018.tif 000119
【０３９０】
ＨＥ  ＬＭ  ０６Ｃ１１  ＩＧＨＶ２−７０重鎖可変領域をコードする核酸配列（配列番号６７）
【化９７】
2019056018.tif 000120
【０３９１】
ＨＥ  ＬＭ  ０６Ｃ１１  ＩＧＨＶ２−７０重鎖可変領域を画定するタンパク質配列（配列番号６８）
【化９８】
2019056018.tif 000121
【０３９２】
Ｈｕ０６Ｃ１１  ＩＧＨＶ２−５重鎖可変領域をコードする核酸配列（配列番号６９）
【化９９】
2019056018.tif 000122
【０３９３】
Ｈｕ０６Ｃ１１  ＩＧＨＶ２−５重鎖可変領域を画定するタンパク質配列（配列番号７０）
【化１００】
2019056018.tif 000123
【０３９４】
Ｃｈ１４Ｆ１１  Ｃｈｉｍｅｒｉｃ重鎖可変領域をコードする核酸配列（配列番号１３１）
【化１０１】
2019056018.tif 000124
【０３９５】
Ｃｈ１４Ｆ１１  Ｃｈｉｍｅｒｉｃ重鎖可変領域を画定するタンパク質配列（配列番号５０）
【化１０２】
2019056018.tif 000125
【０３９６】
Ｓｈ１４Ｆ１１  ＩＧＨＶ２−５重鎖可変領域をコードする核酸配列（配列番号７１）
【化１０３】
2019056018.tif 000126
【０３９７】
Ｓｈ１４Ｆ１１  ＩＧＨＶ２−５重鎖可変領域を画定するタンパク質配列（配列番号７２）
【化１０４】
2019056018.tif 000127
【０３９８】
Ｓｈ１４Ｆ１１  ＩＧＨＶ２−７０重鎖可変領域をコードする核酸配列（配列番号７３）
【化１０５】
2019056018.tif 000128
【０３９９】
Ｓｈ１４Ｆ１１  ＩＧＨＶ２−７０重鎖可変領域を画定するタンパク質配列（配列番号７４）
【化１０６】
2019056018.tif 000129
【０４００】
Ｃｈ０１Ｇ０６  Ｃｈｉｍｅｒｉｃκ鎖可変領域をコードする核酸配列（配列番号１３３）
【化１０７】
2019056018.tif 000130
【０４０１】
Ｃｈ０１Ｇ０６  Ｃｈｉｍｅｒｉｃκ鎖可変領域を画定するタンパク質配列（配列番号７６）
【化１０８】
2019056018.tif 000131
【０４０２】
Ｈｕ０１Ｇ０６  ＩＧＫＶ１−３９κ鎖可変領域をコードする核酸配列（配列番号８９）
【化１０９】
2019056018.tif 000132
【０４０３】
Ｈｕ０１Ｇ０６  ＩＧＫＶ１−３９κ鎖可変領域を画定するタンパク質配列（配列番号９０）
【化１１０】
2019056018.tif 000133
【０４０４】
Ｈｕ０１Ｇ０６  ＩＧＫＶ１−３９  Ｓ４３Ａ  Ｖ４８Ｉκ鎖可変領域（Ｈｕ０１Ｇ０６
ＩＧＫＶ１−３９  Ｆ１κ鎖可変領域とも本明細書で称される；配列番号９１）をコードする核酸配列（配列番号９１）
【化１１１】
2019056018.tif 000134
【０４０５】
Ｈｕ０１Ｇ０６  ＩＧＫＶ１−３９  Ｓ４３Ａ  Ｖ４８Ｉκ鎖可変領域（Ｈｕ０１Ｇ０６
ＩＧＫＶ１−３９  Ｆ１κ鎖可変領域とも本明細書で称される；配列番号９２）を画定するタンパク質配列（配列番号９２）
【化１１２】
2019056018.tif 000135
【０４０６】
Ｈｕ０１Ｇ０６  ＩＧＫＶ１−３９  Ｖ４８Ｉκ鎖可変領域をコードする核酸配列（配列番号９３）
【化１１３】
2019056018.tif 000136
【０４０７】
Ｈｕ０１Ｇ０６  ＩＧＫＶ１−３９  Ｖ４８Ｉκ鎖可変領域を画定するタンパク質配列（配列番号９４）
【化１１４】
2019056018.tif 000137
【０４０８】
Ｈｕ０１Ｇ０６  ＩＧＫＶ１−３９  Ｆ１κ鎖可変領域（Ｈｕ０１Ｇ０６  ＩＧＫＶ１−３９  Ｓ４３Ａ  Ｖ４８Ｉκ鎖可変領域とも本明細書で称される；配列番号９１）をコードする核酸配列（配列番号９１）
【化１１５】
2019056018.tif 000138
【０４０９】
Ｈｕ０１Ｇ０６  ＩＧＫＶ１−３９  Ｆ１κ鎖可変領域（Ｈｕ０１Ｇ０６  ＩＧＫＶ１−３９  Ｓ４３Ａ  Ｖ４８Ｉκ鎖可変領域とも本明細書で称される；配列番号９２）を画定するタンパク質配列（配列番号９２）
【化１１６】
2019056018.tif 000139
【０４１０】
Ｈｕ０１Ｇ０６  ＩＧＫＶ１−３９  Ｆ２κ鎖可変領域をコードする核酸配列（配列番号２５３）
【化１１７】
2019056018.tif 000140
【０４１１】
Ｈｕ０１Ｇ０６  ＩＧＫＶ１−３９  Ｆ２κ鎖可変領域を画定するタンパク質配列（配列番号２５４）
【化１１８】
2019056018.tif 000141
【０４１２】
Ｃｈ０６Ｃ１１  Ｃｈｉｍｅｒｉｃκ鎖可変領域をコードする核酸配列（配列番号１３５）
【化１１９】
2019056018.tif 000142
【０４１３】
Ｃｈ０６Ｃ１１  Ｃｈｉｍｅｒｉｃκ鎖可変領域を画定するタンパク質配列（配列番号８２）
【化１２０】
2019056018.tif 000143
【０４１４】
Ｓｈ０６Ｃ１１  ＩＧＫＶ１−１６κ鎖可変領域をコードする核酸配列（配列番号９５）
【化１２１】
2019056018.tif 000144
【０４１５】
Ｓｈ０６Ｃ１１  ＩＧＫＶ１−１６κ鎖可変領域を画定するタンパク質配列（配列番号９６）
【化１２２】
2019056018.tif 000145
【０４１６】
Ｃｈ１４Ｆ１１  Ｃｈｉｍｅｒｉｃκ鎖可変領域をコードする核酸配列（配列番号１３７）
【化１２３】
2019056018.tif 000146
【０４１７】
Ｃｈ１４Ｆ１１  Ｃｈｉｍｅｒｉｃκ鎖可変領域を画定するタンパク質配列（配列番号８６）
【化１２４】
2019056018.tif 000147
【０４１８】
Ｈｕ１４Ｆ１１  ＩＧＫＶ１−１６κ鎖可変領域をコードする核酸配列（配列番号９７）
【化１２５】
2019056018.tif 000148
【０４１９】
Ｈｕ１４Ｆ１１  ＩＧＫＶ１−１６κ鎖可変領域を画定するタンパク質配列（配列番号９８）
【化１２６】
2019056018.tif 000149
【０４２０】
実施例１３で作製した抗体について、免疫グロブリン重鎖可変領域を画定するアミノ酸配列を図１９にアライメントする。（適切な発現／分泌のための）アミノ末端シグナルペプチド配列は示さない。ＣＤＲ１、ＣＤＲ２、およびＣＤＲ３（Ｋａｂａｔ定義）はボックスによって特定する。図２０に、図１９に示す可変領域配列のそれぞれについて、分離したＣＤＲ１、ＣＤＲ２、およびＣＤＲ３配列のアライメントを示す。
【０４２１】
実施例１３の抗体について、免疫グロリン軽鎖可変領域を画定するアミノ酸配列を図２１にアライメントする。（適切な発現／分泌のための）アミノ末端シグナルペプチド配列は示さない。ＣＤＲ１、ＣＤＲ２、およびＣＤＲ３はボックスによって特定する。図２２に、図２１に示す可変領域配列のそれぞれについて、分離したＣＤＲ１、ＣＤＲ２、およびＣＤＲ３配列のアライメントを示す。
【０４２２】
表１９は、本実施例で論じた各配列の配列番号を示す一致度チャートである。
【０４２３】
【表２３】
2019056018.tif 000150
【０４２４】
【表２４】
2019056018.tif 000151
【０４２５】
【表２５】
2019056018.tif 000152
【０４２６】
【表２６】
2019056018.tif 000153
【０４２７】
ヒト化モノクローナル抗体重鎖ＣＤＲ配列（Ｋａｂａｔ、Ｃｈｏｔｈｉａ、およびＩＭＧＴ定義）を表２０に示す。
【０４２８】
【表２７】
2019056018.tif 000154
【０４２９】
【表２８】
2019056018.tif 000155
【０４３０】
【表２９】
2019056018.tif 000156
【０４３１】
ヒト化モノクローナル抗体κ軽鎖ＣＤＲ配列（Ｋａｂａｔ、Ｃｈｏｔｈｉａ、およびＩＭＧＴ定義）を表２１に示す。
【０４３２】
【表３０】
2019056018.tif 000157
【０４３３】
完全長キメラヒト化重鎖またはκ鎖抗体配列を作り出すために、上の各可変配列をそれぞれのヒト定常領域と組み合わせる。例えば完全長重鎖は、重可変配列と、それに続くヒトＩｇＧ１重鎖定常配列を含む。完全長κ鎖は、κ可変配列と、それに続くヒトκ軽鎖定常配列を含む。
【０４３４】
ヒトＩｇＧ１重鎖定常領域をコードする核酸配列（配列番号１７１）
【化１２７】
2019056018.tif 000158
【０４３５】
ヒトＩｇＧ１重鎖定常領域を画定するタンパク質配列（配列番号１７２）
【化１２８】
2019056018.tif 000159
【０４３６】
ヒトκ軽鎖定常領域をコードする核酸配列（配列番号１７３）
【化１２９】
2019056018.tif 000160
【０４３７】
ヒトκ軽鎖定常領域を画定するタンパク質配列（配列番号１７４）
【化１３０】
2019056018.tif 000161
【０４３８】
以下の配列は、本実施例に記載の抗体について、実際のまたは想定される完全長重鎖および軽鎖配列（すなわち、可変および定常領域配列の両方を含有する）を表す。抗体の適切な分泌のためのシグナル配列（例えば、ＤＮＡ配列の５’末端またはタンパク質配列のアミノ末端にあるシグナル配列）は、本明細書に開示の完全長重鎖および軽鎖配列中には示されておらず、最終的な分泌タンパク質中に含まれない。ＤＮＡ配列の３’末端に必要とされる翻訳終結のための停止コドンも示されない。本開示の完全長免疫グロブリン重鎖および軽鎖配列の発現のためのシグナル配列および／または停止コドンを選択することは、当該技術分野の通常の技術範囲内である。可変領域配列を他の定常領域配列にライゲートして、活性完全長免疫グロブリン重鎖および軽鎖を生成させ得ることも想定される。
【０４３９】
完全長Ｃｈ０１Ｇ０６  Ｃｈｉｍｅｒｉｃ重鎖（マウス重鎖可変領域およびヒトＩｇＧ１定常領域）をコードする核酸配列（配列番号１７５）
【化１３１】
2019056018.tif 000162
【０４４０】
完全長Ｃｈ０１Ｇ０６  Ｃｈｉｍｅｒｉｃ重鎖（マウス重鎖可変領域およびヒトＩｇＧ１定常領域）を画定するタンパク質配列（配列番号１７６）
【化１３２】
2019056018.tif 000163
【０４４１】
完全長Ｈｕ０１Ｇ０６  ＩＧＨＶ１−１８重鎖（ヒト化重鎖可変領域およびヒトＩｇＧ１定常領域）をコードする核酸配列（配列番号１７７）
【化１３３】
2019056018.tif 000164
【０４４２】
完全長Ｈｕ０１Ｇ０６  ＩＧＨＶ１−１８重鎖（ヒト化重鎖可変領域およびヒトＩｇＧ１定常領域）を画定するタンパク質配列（配列番号１７８）
【化１３４】
2019056018.tif 000165
【０４４３】
完全長Ｈｕ０１Ｇ０６  ＩＧＨＶ１−６９重鎖（ヒト化重鎖可変領域およびヒトＩｇＧ１定常領域）をコードする核酸配列（配列番号１７９）
【化１３５】
2019056018.tif 000166
【０４４４】
完全長Ｈｕ０１Ｇ０６  ＩＧＨＶ１−６９重鎖（ヒト化重鎖可変領域およびヒトＩｇＧ１定常領域）を画定するタンパク質配列（配列番号１８０）
【化１３６】
2019056018.tif 000167
【０４４５】
完全長Ｓｈ０１Ｇ０６  ＩＧＨＶ１−１８  Ｍ６９Ｌ重鎖（ヒト化重鎖可変領域およびヒトＩｇＧ１定常領域）をコードする核酸配列（配列番号１８１）
【化１３７】
2019056018.tif 000168
【０４４６】
完全長Ｓｈ０１Ｇ０６  ＩＧＨＶ１−１８  Ｍ６９Ｌ重鎖（ヒト化重鎖可変領域およびヒトＩｇＧ１定常領域）を画定するタンパク質配列（配列番号１８２）
【化１３８】
2019056018.tif 000169
【０４４７】
完全長Ｓｈ０１Ｇ０６  ＩＧＨＶ１−１８  Ｍ６９Ｌ  Ｋ６４Ｑ  Ｇ４４Ｓ重鎖（ヒト化重鎖可変領域およびヒトＩｇＧ１定常領域）をコードする核酸配列（配列番号１８３）
【化１３９】
2019056018.tif 000170
【０４４８】
完全長Ｓｈ０１Ｇ０６  ＩＧＨＶ１−１８  Ｍ６９Ｌ  Ｋ６４Ｑ  Ｇ４４Ｓ重鎖（ヒト化重鎖可変領域およびヒトＩｇＧ１定常領域）を画定するタンパク質配列（配列番号１８４）
【化１４０】
2019056018.tif 000171
【０４４９】
完全長Ｓｈ０１Ｇ０６  ＩＧＨＶ１−１８  Ｍ６９Ｌ  Ｋ６４Ｑ重鎖（ヒト化重鎖可変領域およびヒトＩｇＧ１定常領域）をコードする核酸配列（配列番号１８５）
【化１４１】
2019056018.tif 000172
【０４５０】
完全長Ｓｈ０１Ｇ０６  ＩＧＨＶ１−１８  Ｍ６９Ｌ  Ｋ６４Ｑ重鎖（ヒト化重鎖可変領域およびヒトＩｇＧ１定常領域）を画定するタンパク質配列（配列番号１８６）
【化１４２】
2019056018.tif 000173
【０４５１】
完全長Ｓｈ０１Ｇ０６  ＩＧＨＶ１−６９  Ｔ３０Ｓ  Ｉ６９Ｌ重鎖（ヒト化重鎖可変領域およびヒトＩｇＧ１定常領域）をコードする核酸配列（配列番号１８７）
【化１４３】
2019056018.tif 000174
【０４５２】
完全長Ｓｈ０１Ｇ０６  ＩＧＨＶ１−６９  Ｔ３０Ｓ  Ｉ６９Ｌ重鎖（ヒト化重鎖可変領域およびヒトＩｇＧ１定常領域）を画定するタンパク質配列（配列番号１８８）
【化１４４】
2019056018.tif 000175
【０４５３】
完全長Ｓｈ０１Ｇ０６  ＩＧＨＶ１−６９  Ｔ３０Ｓ  Ｋ６４Ｑ  Ｉ６９Ｌ重鎖（ヒト化重鎖可変領域およびヒトＩｇＧ１定常領域）をコードする核酸配列（配列番号１８９）
【化１４５】
2019056018.tif 000176
【０４５４】
完全長Ｓｈ０１Ｇ０６  ＩＧＨＶ１−６９  Ｔ３０Ｓ  Ｋ６４Ｑ  Ｉ６９Ｌ重鎖（ヒト化重鎖可変領域およびヒトＩｇＧ１定常領域）を画定するタンパク質配列（配列番号１９０）
【化１４６】
2019056018.tif 000177
【０４５５】
完全長Ｈｕ０１Ｇ０６  ＩＧＨＶ１−１８  Ｆ１重鎖（ヒト化重鎖可変領域およびヒトＩｇＧ１定常領域）をコードする核酸配列（配列番号２５５）
【化１４７】
2019056018.tif 000178
【０４５６】
完全長Ｈｕ０１Ｇ０６  ＩＧＨＶ１−１８  Ｆ１重鎖（ヒト化重鎖可変領域およびヒトＩｇＧ１定常領域）を画定するタンパク質配列（配列番号２５６）
【化１４８】
2019056018.tif 000179
【０４５７】
完全長Ｈｕ０１Ｇ０６  ＩＧＨＶ１−１８  Ｆ２重鎖（ヒト化重鎖可変領域およびヒトＩｇＧ１定常領域）をコードする核酸配列（配列番号２５７）
【化１４９】
2019056018.tif 000180
【０４５８】
完全長Ｈｕ０１Ｇ０６  ＩＧＨＶ１−１８  Ｆ２重鎖（ヒト化重鎖可変領域およびヒトＩｇＧ１定常領域）を画定するタンパク質配列（配列番号２５８）
【化１５０】
2019056018.tif 000181
【０４５９】
完全長Ｈｕ０１Ｇ０６  ＩＧＨＶ１−６９  Ｆ１重鎖（ヒト化重鎖可変領域およびヒトＩｇＧ１定常領域）をコードする核酸配列（配列番号２５９）
【化１５１】
2019056018.tif 000182
【０４６０】
完全長Ｈｕ０１Ｇ０６  ＩＧＨＶ１−６９  Ｆ１重鎖（ヒト化重鎖可変領域およびヒトＩｇＧ１定常領域）を画定するタンパク質配列（配列番号２６０）
【化１５２】
2019056018.tif 000183
【０４６１】
完全長Ｈｕ０１Ｇ０６  ＩＧＨＶ１−６９  Ｆ２重鎖（ヒト化重鎖可変領域およびヒトＩｇＧ１定常領域）をコードする核酸配列（配列番号２６１）
【化１５３】
2019056018.tif 000184
【０４６２】
完全長Ｈｕ０１Ｇ０６  ＩＧＨＶ１−６９  Ｆ２重鎖（ヒト化重鎖可変領域およびヒトＩｇＧ１定常領域）を画定するタンパク質配列（配列番号２６２）
【化１５４】
2019056018.tif 000185
【０４６３】
完全長Ｃｈ０６Ｃ１１  Ｃｈｉｍｅｒｉｃ重鎖（マウス重鎖可変領域およびヒトＩｇＧ１定常領域）をコードする核酸配列（配列番号１９１）
【化１５５】
2019056018.tif 000186
【０４６４】
完全長Ｃｈ０６Ｃ１１  Ｃｈｉｍｅｒｉｃ重鎖（マウス重鎖可変領域およびヒトＩｇＧ１定常領域）を画定するタンパク質配列（配列番号１９２）
【化１５６】
2019056018.tif 000187
【０４６５】
完全長ＨＥ  ＬＭ  ０６Ｃ１１  ＩＧＨＶ２−７０重鎖（ヒト化重鎖可変領域およびヒトＩｇＧ１定常領域）をコードする核酸配列（配列番号１９３）
【化１５７】
2019056018.tif 000188
【０４６６】
完全長ＨＥ  ＬＭ  ０６Ｃ１１  ＩＧＨＶ２−７０重鎖（ヒト化重鎖可変領域およびヒトＩｇＧ１定常領域）を画定するタンパク質配列（配列番号１９４）
【化１５８】
2019056018.tif 000189
【０４６７】
完全長Ｈｕ０６Ｃ１１  ＩＧＨＶ２−５重鎖（ヒト化重鎖可変領域およびヒトＩｇＧ１定常領域）をコードする核酸配列（配列番号１９５）
【化１５９】
2019056018.tif 000190
【０４６８】
完全長Ｈｕ０６Ｃ１１  ＩＧＨＶ２−５重鎖（ヒト化重鎖可変領域およびヒトＩｇＧ１定常領域）を画定するタンパク質配列（配列番号１９６）
【化１６０】
2019056018.tif 000191
【０４６９】
完全長Ｃｈ１４Ｆ１１  Ｃｈｉｍｅｒｉｃ重鎖（マウス重鎖可変領域およびヒトＩｇＧ１定常領域）をコードする核酸配列（配列番号１９７）
【化１６１】
2019056018.tif 000192
【０４７０】
完全長Ｃｈ１４Ｆ１１  Ｃｈｉｍｅｒｉｃ重鎖（マウス重鎖可変領域およびヒトＩｇＧ１定常領域）を画定するタンパク質配列（配列番号１９８）
【化１６２】
2019056018.tif 000193
【０４７１】
完全長Ｓｈ１４Ｆ１１  ＩＧＨＶ２−５重鎖（ヒト化重鎖可変領域およびヒトＩｇＧ１定常領域）をコードする核酸配列（配列番号１９９）
【化１６３】
2019056018.tif 000194
【０４７２】
完全長Ｓｈ１４Ｆ１１  ＩＧＨＶ２−５重鎖（ヒト化重鎖可変領域およびヒトＩｇＧ１定常領域）を画定するタンパク質配列（配列番号２００）
【化１６４】
2019056018.tif 000195
【０４７３】
完全長Ｓｈ１４Ｆ１１  ＩＧＨＶ２−７０重鎖（ヒト化重鎖可変領域およびヒトＩｇＧ１定常領域）をコードする核酸配列（配列番号２０１）
【化１６５】
2019056018.tif 000196
【０４７４】
完全長Ｓｈ１４Ｆ１１  ＩＧＨＶ２−７０重鎖（ヒト化重鎖可変領域およびヒトＩｇＧ１定常領域）を画定するタンパク質配列（配列番号２０２）
【化１６６】
2019056018.tif 000197
【０４７５】
完全長Ｃｈ０１Ｇ０６  Ｃｈｉｍｅｒｉｃ軽鎖（マウスκ鎖可変領域およびヒトκ定常領域）をコードする核酸配列（配列番号２０３）
【化１６７】
2019056018.tif 000198
【０４７６】
完全長Ｃｈ０１Ｇ０６  Ｃｈｉｍｅｒｉｃ軽鎖（マウスκ鎖可変領域およびヒトκ定常領域）を画定するタンパク質配列（配列番号２０４）
【化１６８】
2019056018.tif 000199
【０４７７】
完全長Ｈｕ０１Ｇ０６  ＩＧＫＶ１−３９軽鎖（ヒト化κ鎖可変領域およびヒトκ定常領域）をコードする核酸配列（配列番号２０５）
【化１６９】
2019056018.tif 000200
【０４７８】
完全長Ｈｕ０１Ｇ０６  ＩＧＫＶ１−３９軽鎖（ヒト化κ鎖可変領域およびヒトκ定常領域）を画定するタンパク質配列（配列番号２０６）
【化１７０】
2019056018.tif 000201
【０４７９】
完全長Ｈｕ０１Ｇ０６  ＩＧＫＶ１−３９  Ｓ４３Ａ  Ｖ４８Ｉ軽鎖（ヒト化κ鎖可変領域およびヒトκ定常領域）（完全長Ｈｕ０１Ｇ０６  ＩＧＦＶ１−３９  Ｆ１軽鎖とも本明細書で称される；配列番号２０７）をコードする核酸配列
【化１７１】
2019056018.tif 000202
【０４８０】
完全長Ｈｕ０１Ｇ０６  ＩＧＫＶ１−３９  Ｓ４３Ａ  Ｖ４８Ｉ軽鎖（ヒト化κ鎖可変領域およびヒトκ定常領域）（完全長Ｈｕ０１Ｇ０６  ＩＧＦＶ１−３９  Ｆ１軽鎖とも本明細書で称される；配列番号２０８）を画定するタンパク質配列
【化１７２】
2019056018.tif 000203
【０４８１】
完全長Ｈｕ０１Ｇ０６  ＩＧＫＶ１−３９  Ｖ４８Ｉ軽鎖（ヒト化κ鎖可変領域およびヒトκ定常領域）をコードする核酸配列（配列番号２０９）
【化１７３】
2019056018.tif 000204
【０４８２】
完全長Ｈｕ０１Ｇ０６  ＩＧＫＶ１−３９  Ｖ４８Ｉ軽鎖（ヒト化κ鎖可変領域およびヒトκ定常領域）を画定するタンパク質配列（配列番号２１０）
【化１７４】
2019056018.tif 000205
【０４８３】
完全長Ｈｕ０１Ｇ０６  ＩＧＫＶ１−３９  Ｆ１軽鎖（ヒト化κ鎖可変領域およびヒトκ定常領域）（完全長Ｈｕ０１Ｇ０６  ＩＧＫＶ１−３９  Ｓ４３Ａ  Ｖ４８Ｉ軽鎖とも本明細書で称される；配列番号２０７）をコードする核酸配列
【化１７５】
2019056018.tif 000206
【０４８４】
完全長Ｈｕ０１Ｇ０６  ＩＧＫＶ１−３９  Ｆ１軽鎖（ヒト化κ鎖可変領域およびヒトκ定常領域）（完全長Ｈｕ０１Ｇ０６  ＩＧＫＶ１−３９  Ｓ４３Ａ  Ｖ４８Ｉ軽鎖とも本明細書で称される；配列番号２０８）を画定するタンパク質配列
【化１７６】
2019056018.tif 000207
【０４８５】
完全長Ｈｕ０１Ｇ０６  ＩＧＫＶ１−３９  Ｆ２軽鎖（ヒト化κ鎖可変領域およびヒトκ定常領域）をコードする核酸配列（配列番号２６３）
【化１７７】
2019056018.tif 000208
【０４８６】
完全長Ｈｕ０１Ｇ０６  ＩＧＫＶ１−３９  Ｆ２軽鎖（ヒト化κ鎖可変領域およびヒトκ定常領域）を画定するタンパク質配列（配列番号２６４）
【化１７８】
2019056018.tif 000209
【０４８７】
完全長Ｃｈ０６Ｃ１１  Ｃｈｉｍｅｒｉｃ軽鎖（マウスκ鎖可変領域およびヒトκ定常領域）をコードする核酸配列（配列番号２１１）
【化１７９】
2019056018.tif 000210
【０４８８】
完全長Ｃｈ０６Ｃ１１  Ｃｈｉｍｅｒｉｃ軽鎖（マウスκ鎖可変領域およびヒトκ定常領域）を画定するタンパク質配列（配列番号２１２）
【化１８０】
2019056018.tif 000211
【０４８９】
完全長Ｓｈ０６Ｃ１１  ＩＧＫＶ１−１６軽鎖（ヒト化κ鎖可変領域およびヒトκ定常領域）をコードする核酸配列（配列番号２１３）
【化１８１】
2019056018.tif 000212
【０４９０】
完全長Ｓｈ０６Ｃ１１  ＩＧＫＶ１−１６軽鎖（ヒト化κ鎖可変領域およびヒトκ定常領域）を画定するタンパク質配列（配列番号２１４）
【化１８２】
2019056018.tif 000213
【０４９１】
完全長Ｃｈ１４Ｆ１１  Ｃｈｉｍｅｒｉｃ軽鎖（マウスκ鎖可変領域およびヒトκ定常領域）をコードする核酸配列（配列番号２１５）
【化１８３】
2019056018.tif 000214
【０４９２】
完全長Ｃｈ１４Ｆ１１  Ｃｈｉｍｅｒｉｃ軽鎖（マウスκ鎖可変領域およびヒトκ定常領域）を画定するタンパク質配列（配列番号２１６）
【化１８４】
2019056018.tif 000215
【０４９３】
完全長Ｈｕ１４Ｆ１１  ＩＧＫＶ１−１６軽鎖（ヒト化κ鎖可変領域およびヒトκ定常領域）をコードする核酸配列（配列番号２１７）
【化１８５】
2019056018.tif 000216
【０４９４】
完全長Ｈｕ１４Ｆ１１  ＩＧＫＶ１−１６軽鎖（ヒト化κ鎖可変領域およびヒトκ定常領域）を画定するタンパク質配列（配列番号２１８）
【化１８６】
2019056018.tif 000217
【０４９５】
表２２は、本実施例で論じた各配列の配列番号を示す一致度チャートである。
【０４９６】
【表３１】
2019056018.tif 000218
【０４９７】
【表３２】
2019056018.tif 000219
【０４９８】
【表３３】
2019056018.tif 000220
【０４９９】
以下の表２３に、キメラ免疫グロブリン重鎖および軽鎖ならびに完全長キメラまたはヒト化免疫グロブリン重鎖および軽鎖の例示的な組合せを含有する抗体を示す。
【０５００】
【表３４】
2019056018.tif 000221
【０５０１】
【表３５】
2019056018.tif 000222
【０５０２】
【表３６】
2019056018.tif 000223
【０５０３】
【表３７】
2019056018.tif 000224
【０５０４】
完全長キメラ重鎖および軽鎖を含有する抗体コンストラクトを以下に示す：
キメラ０１Ｇ０６（Ｈｕ０１Ｇ０６−１）＝完全長Ｃｈ０１Ｇ０６  Ｃｈｉｍｅｒｉｃ重鎖（マウス重鎖可変領域およびヒトＩｇＧ１定常領域）（配列番号１７６）＋完全長Ｃｈ０１Ｇ０６  Ｃｈｉｍｅｒｉｃ軽鎖（マウスκ鎖可変領域およびヒトκ定常領域）（配列番号２０４）
キメラ０６Ｃ１１（Ｈｕ０６Ｃ１１−１）＝完全長Ｃｈ０６Ｃ１１  Ｃｈｉｍｅｒｉｃ重鎖（マウス重鎖可変領域およびヒトＩｇＧ１定常領域）（配列番号１９２）＋完全長Ｃｈ０６Ｃ１１  Ｃｈｉｍｅｒｉｃ軽鎖（マウスκ鎖可変領域およびヒトκ定常領域）（配列番号２１２）
キメラ１４Ｆ１１（Ｈｕ１４Ｆ１１−１）＝完全長Ｃｈ１４Ｆ１１  Ｃｈｉｍｅｒｉｃ重鎖（マウス重鎖可変領域およびヒトＩｇＧ１定常領域）（配列番号１９８）＋完全長Ｃｈ１４Ｆ１１  Ｃｈｉｍｅｒｉｃ軽鎖（マウスκ鎖可変領域およびヒトκ定常領域）（配列番号２１６）
【０５０５】
ヒト化可変領域を含有する完全長免疫グロブリン重鎖および軽鎖を含有する可能な抗体コンストラクトのうちの１５個を、下記に示す：
Ｈｕ０１Ｇ０６−４６＝完全長Ｈｕ０１Ｇ０６  ＩＧＨＶ１−１８重鎖（ヒト化重鎖可変領域およびヒトＩｇＧ１定常領域）（配列番号１７８）＋完全長Ｈｕ０１Ｇ０６  ＩＧＫＶ１−３９軽鎖（ヒト化κ鎖可変領域およびヒトκ定常領域）（配列番号２０６）
Ｈｕ０１Ｇ０６−５２＝完全長Ｈｕ０１Ｇ０６  ＩＧＨＶ１−６９重鎖（ヒト化重鎖可変領域およびヒトＩｇＧ１定常領域）（配列番号１８０）＋完全長Ｈｕ０１Ｇ０６  ＩＧＫＶ１−３９軽鎖（ヒト化κ鎖可変領域およびヒトκ定常領域）（配列番号２０６）
Ｈｕ０１Ｇ０６−１０７＝完全長Ｓｈ０１Ｇ０６  ＩＧＨＶ１−１８  Ｍ６９Ｌ  Ｋ６４Ｑ  Ｇ４４Ｓ重鎖（ヒト化重鎖可変領域およびヒトＩｇＧ１定常領域）（配列番号１８４）＋完全長Ｈｕ０１Ｇ０６  ＩＧＫＶ１−３９  Ｖ４８Ｉ軽鎖（ヒト化κ鎖可変領域およびヒトκ定常領域）（配列番号２１０）
Ｈｕ０１Ｇ０６−１０８＝完全長Ｓｈ０１Ｇ０６  ＩＧＨＶ１−６９  Ｔ３０Ｓ  Ｉ６９Ｌ重鎖（ヒト化重鎖可変領域およびヒトＩｇＧ１定常領域）（配列番号１８８）＋完全長Ｈｕ０１Ｇ０６  ＩＧＫＶ１−３９  Ｖ４８Ｉ軽鎖（ヒト化κ鎖可変領域およびヒトκ定常領域）（配列番号２１０）
Ｈｕ０１Ｇ０６−１１２＝完全長Ｓｈ０１Ｇ０６  ＩＧＨＶ１−１８  Ｍ６９Ｌ  Ｋ６４Ｑ  Ｇ４４Ｓ重鎖（ヒト化重鎖可変領域およびヒトＩｇＧ１定常領域）（配列番号１８４）＋完全長Ｈｕ０１Ｇ０６  ＩＧＫＶ１−３９  Ｓ４３Ａ  Ｖ４８Ｉ軽鎖（ヒト化κ鎖可変領域およびヒトκ定常領域）（配列番号２０８）
Ｈｕ０１Ｇ０６−１１３＝完全長Ｓｈ０１Ｇ０６  ＩＧＨＶ１−６９  Ｔ３０Ｓ  Ｉ６９Ｌ重鎖（ヒト化重鎖可変領域およびヒトＩｇＧ１定常領域）（配列番号１８８）＋完全長Ｈｕ０１Ｇ０６  ＩＧＫＶ１−３９  Ｓ４３Ａ  Ｖ４８Ｉ軽鎖（ヒト化κ鎖可変領域およびヒトκ定常領域）（配列番号２０８）
Ｈｕ０１Ｇ０６−１２２＝完全長Ｈｕ０１Ｇ０６  ＩＧＨＶ１−１８  Ｆ１重鎖（ヒト化重鎖可変領域およびヒトＩｇＧ１定常領域）（配列番号２５６）＋完全長Ｈｕ０１Ｇ０６  ＩＧＫＶ１−３９  Ｆ１軽鎖（ヒト化κ鎖可変領域およびヒトκ定常領域）（配列番号２０８）
Ｈｕ０１Ｇ０６−１２７＝完全長Ｈｕ０１Ｇ０６  ＩＧＨＶ１−１８  Ｆ２重鎖（ヒト化重鎖可変領域およびヒトＩｇＧ１定常領域）（配列番号２５８）＋完全長Ｈｕ０１Ｇ０６  ＩＧＫＶ１−３９  Ｆ２軽鎖（ヒト化κ鎖可変領域およびヒトκ定常領域）（配列番号２６４）
Ｈｕ０１Ｇ０６−１３５＝完全長Ｈｕ０１Ｇ０６  ＩＧＨＶ１−６９  Ｆ１重鎖（ヒト化重鎖可変領域およびヒトＩｇＧ１定常領域）（配列番号２６０）＋完全長Ｈｕ０１Ｇ０６  ＩＧＫＶ１−３９  Ｆ１軽鎖（ヒト化κ鎖可変領域およびヒトκ定常領域）（配列番号２０８）
Ｈｕ０１Ｇ０６−１３８＝完全長Ｈｕ０１Ｇ０６  ＩＧＨＶ１−６９  Ｆ２重鎖（ヒト化重鎖可変領域およびヒトＩｇＧ１定常領域）（配列番号２６２）＋完全長Ｈｕ０１Ｇ０６  ＩＧＫＶ１−３９  Ｆ１軽鎖（ヒト化κ鎖可変領域およびヒトκ定常領域）（配列番号２０８）
Ｈｕ０１Ｇ０６−１４６＝完全長Ｈｕ０１Ｇ０６  ＩＧＨＶ１−６９  Ｆ２重鎖（ヒト化重鎖可変領域およびヒトＩｇＧ１定常領域）（配列番号２６２）＋完全長Ｈｕ０１Ｇ０６  ＩＧＫＶ１−３９  Ｆ２軽鎖（ヒト化κ鎖可変領域およびヒトκ定常領域）（配列番号２６４）
Ｈｕ０６Ｃ１１−２７＝完全長ＨＥ  ＬＭ  ０６Ｃ１１  ＩＧＨＶ２−７０重鎖（ヒト化重鎖可変領域およびヒトＩｇＧ１定常領域）（配列番号１９４）＋完全長Ｓｈ０６Ｃ１１  ＩＧＫＶ１−１６軽鎖（ヒト化κ鎖可変領域およびヒトκ定常領域）（配列番号２１４）
Ｈｕ０６Ｃ１１−３０＝完全長Ｈｕ０６Ｃ１１  ＩＧＨＶ２−５重鎖（ヒト化重鎖可変領域およびヒトＩｇＧ１定常領域）（配列番号１９６）＋完全長Ｓｈ０６Ｃ１１  ＩＧＫＶ１−１６軽鎖（ヒト化κ鎖可変領域およびヒトκ定常領域）（配列番号２１４）
Ｈｕ１４Ｆ１１−３９＝完全長Ｓｈ１４Ｆ１１  ＩＧＨＶ２−５重鎖（ヒト化重鎖可変領域およびヒトＩｇＧ１定常領域）（配列番号２００）＋完全長Ｈｕ１４Ｆ１１  ＩＧＫＶ１−１６軽鎖（ヒト化κ鎖可変領域およびヒトκ定常領域）（配列番号２１８）
Ｈｕ１４Ｆ１１−４７＝完全長Ｓｈ１４Ｆ１１−ＩＧＨＶ２−７０重鎖（ヒト化重鎖可変領域およびヒトＩｇＧ１定常領域）（配列番号２０２）＋完全長Ｈｕ１４Ｆ１１  ＩＧＫＶ１−１６軽鎖（ヒト化κ鎖可変領域およびヒトκ定常領域）（配列番号２１８）
【０５０６】
実施例１５：ヒト化およびキメラ抗ＧＤＦ１５モノクローナル抗体の結合親和性
ｍＦｃ−ｒｈＧＤＦ１５に対するキメラおよびヒト化抗体の結合親和性および結合動力学を、ＢＩＡｃｏｒｅ（登録商標）Ｔ１００装置（ＧＥ  Ｈｅａｌｔｈｃａｒｅ，Ｐｉｓｃａｔａｗａｙ，ＮＪ）を使用し、表面プラズモン共鳴により測定した。
【０５０７】
標準プロトコルに従い、アミンカップリングによって、ヤギ抗ヒトＩｇＧｓ（Ｆｃ断片特異的、Ｊａｃｋｓｏｎ  ＩｍｍｕｎｏＲｅｓｅａｒｃｈ，Ｗｅｓｔ  Ｇｒｏｖｅ，ＰＡ）をカルボキシメチル化デキストランＣＭ４センサーチップ上に固定化した。移動用緩衝液として０．０５％の界面活性剤Ｐ２０を含有するＰＢＳを使用し、３７℃で分析を実施した。流速１０μＬ／分で、個々のフローセル内において抗体を捕捉した。各抗体ごとに注入時間を変えて、３０〜６０ＲＵの間のＲｍａｘを得た。緩衝液または移動用緩衝液で希釈したｍＦｃ−ｒｈＧＤＦ１５を参照表面（抗体捕捉なし）および活性表面（試験抗体）上に６０μＬ／分で２４０秒間、連続的に注入した。解離相を１２００秒までモニターした。次いで、１０ｍＭのグリシン−ＨＣｌ、ｐＨ２．２５を流速３０μＬ／分で６０秒間にわたり２回注入して、表面を再生した。試験したＧＤＦ１５の濃度範囲は、２０ｎＭ〜０．６２５ｎＭであった。
【０５０８】
ＢＩＡｅｖａｌｕａｔｉｏｎソフトウェア（ＧＥ  Ｈｅａｌｔｈｃａｒｅ）の動力学機能を使用して、二重参照減法で動力学パラメータを測定した。各抗体の動力学パラメータ、ｋａ（結合速度定数）、ｋｄ（解離速度定数）、およびＫＤ（平衡解離定数）を決定した。ｍＦｃ−ｒｈＧＤＦ１５に対する精製モノクローナル抗体の動力学値を表２４に要約する。
【０５０９】
【表３８】
2019056018.tif 000225
【０５１０】
表２４の結果から、キメラおよびヒト化抗体のそれぞれは、速い結合速度（ｋａ）、極めて遅い解離速度（ｋｄ）、および極めて高い親和性（ＫＤ）を有することが実証される。具体的には、これらの抗体は約６５ｐＭ〜約２００ｐＭの範囲の親和性を有する。
【０５１１】
ｍＦｃ−ｒｈＧＤＦ１５に対する、キメラ０１Ｇ０６（Ｈｕ０１Ｇ０６−１）、２つの最初のリードヒト化０１Ｇ０６モノクローナル抗体（Ｈｕ０１Ｇ０６−４６および−５２）、および配列最適化ヒト化０１Ｇ０６モノクローナル抗体変異体Ｈｕ０１Ｇ０６−１００〜１１４（上澄液中）の動力学値を表２５に要約する。
【０５１２】
【表３９】
2019056018.tif 000226
【０５１３】
表２５の結果から、配列最適化抗体であるＨｕ０１Ｇ０６−１００〜１１４は、約８９ｐＭ〜約１６０ｐＭの範囲の結合親和性を有することが実証される。
【０５１４】
キメラ１４Ｆ１１（Ｈｕ１４Ｆ１１−１）、キメラ軽鎖１４Ｆ１１とキメラ重鎖０６Ｃ１１（Ｈｕ１４Ｆ１１−２３）、ならびにキメラ軽鎖０６Ｃ１１とキメラ重鎖１４Ｆ１１（Ｈｕ１４Ｆ１１−２４）の重鎖モノクローナル抗体変異体（上澄液中）とｍＦｃ−ｒｈＧＤＦ１５の結合親和性および結合動力学を、Ｏｃｔｅｔ（商標）ＱＫ装置（ＦｏｒｔｅＢｉｏ，Ｉｎｃ．，Ｍｅｎｌｏ  Ｐａｒｋ，ＣＡ）上のバイオ層干渉計（ＢＬＩ）を使用して測定した。Ｏｃｔｅｔ分析は、アッセイ緩衝液として１Ｘ  Ｋｉｎｅｔｉｃｓ緩衝液（ＦｏｒｔｅＢｉｏ，Ｉｎｃ．）を使用して、３０℃で実施した。抗ヒトＩｇＧ  Ｆｃ  Ｃａｐｔｕｒｅ（ＡＨＣ）バイオセンサー（ＦｏｒｔｅＢｉｏ，Ｉｎｃ．）を使用して、センサー上にヒト抗体を捕捉した。アッセイ前に３００秒間、センサーをアッセイ緩衝液に浸した。センサーを抗体上澄液に２２０秒間浸漬することによって、抗体をセンサーに負荷した。これにより、典型的には、１．５〜２ｎｍの捕捉レベルが得られた。センサーを１×アッセイ緩衝液に２００秒間浸漬することにより、ベースラインを確定した。次に、４００ｎＭのｍＦｃ−ｒｈＧＤＦ１５タンパク質中で２２０秒間、結合をモニターし、単なる緩衝液中で６００秒間、解離を追跡した。
【０５１５】
Ｈｕ１４Ｆ１１−１、Ｈｕ１４Ｆ１１−２３、およびＨｕ１４Ｆ１１−２４に対する動力学パラメータを、ＦｏｒｔｅＢｉｏ分析ソフトウェアバージョン７．０の動力学機能を使用して決定した。抗体の動力学パラメータ、ｋａ、ｋｄ、およびＫＤを決定した。
【０５１６】
ｍＦｃ−ｒｈＧＤＦ１５に対するＨｕ１４Ｆ１１−１、Ｈｕ１４Ｆ１１−２３、およびＨｕ１４Ｆ１１−２４の重鎖モノクローナル抗体変異体（上澄液中）の動力学値を、表２６に要約する。
【０５１７】
【表４０】
2019056018.tif 000227
【０５１８】
表２６の結果から、Ｈｕ１４Ｆ１１−２３およびＨｕ１４Ｆ１１−２４（すなわち、１つのキメラ１４Ｆ１１鎖（重鎖または軽鎖）と混合された１つのキメラ０６Ｃ１１鎖（重鎖または軽鎖）からなる抗体）は、ＧＤＦ１５に対する結合を保持することが実証される。具体的には、これらの抗体は約１８０ｐＭ〜約３１０ｐＭの範囲の高親和性を有する。
【０５１９】
実施例１６：親和性成熟ヒト化および抗ＧＤＦ１５モノクローナル抗体の結合親和性
ｍＦｃ−ｒｈＧＤＦ１５、切断ｒｈＧＤＦ１５、ウサギＦｃ成熟組換えマウスＧＤＦ１５（ｒＦｃ−ｒｍＧＤＦ１５）、およびマウスＦｃ成熟組換えカニクイザルＧＤＦ１５（ｍＦｃ−ｒｃＧＤＦ１５）に対するキメラおよびヒト化抗体の結合親和性および結合動力学を、ＢＩＡｃｏｒｅ（登録商標）Ｔ１００装置（ＧＥ  Ｈｅａｌｔｈｃａｒｅ，Ｐｉｓｃａｔａｗａｙ，ＮＪ）を使用して、表面プラズモン共鳴により測定した。
【０５２０】
標準プロトコルに従い、アミンカップリングによって、ヤギ抗ヒトＩｇＧｓ（Ｆｃ断片特異的、Ｊａｃｋｓｏｎ  ＩｍｍｕｎｏＲｅｓｅａｒｃｈ，Ｗｅｓｔ  Ｇｒｏｖｅ，ＰＡ）をカルボキシメチル化デキストランＣＭ４センサーチップ上に固定化した。移動用緩衝液として０．０５％の界面活性剤Ｐ２０を含有するＰＢＳを使用し、３７℃で分析を実施した。流速１０μＬ／分で、個々のフローセル内において抗体を捕捉した。各抗体ごとに注入時間を変えて、３０〜６０ＲＵの間のＲｍａｘを得た。緩衝液、移動用緩衝液で希釈したｍＦｃ−ｒｈＧＤＦ１５、切断ｒｈＧＤＦ１５、ｒＦｃ−ｒｍＧＤＦ１５、またはｍＦｃ−ｒｃＧＤＦ１５を、参照表面（抗体捕捉なし）および活性表面（試験抗体）上に６０μＬ／分で２４０秒間、連続的に注入した。解離相を１５００秒までモニターした。次いで、１０ｍＭのグリシン−ＨＣｌ、ｐＨ２．２５を流速３０μＬ／分で６０秒間にわたり２回注入して、表面を再生した。試験された各ＧＤＦ１５タンパク質の濃度範囲は、５ｎＭ〜０．３１２５ｎＭ（２倍希釈）であった。
【０５２１】
ＢＩＡｅｖａｌｕａｔｉｏｎソフトウェア（ＧＥ  Ｈｅａｌｔｈｃａｒｅ）の動力学機能を使用して、二重参照減法で動力学パラメータを測定した。各抗体の動力学パラメータ、ｋａ（結合速度定数）、ｋｄ（解離速度定数）、およびＫＤ（平衡解離定数）を決定した。ｍＦｃ−ｒｈＧＤＦ１５、成熟ヒトＧＤＦ１５、ｒＦｃ−ｒｍＧＤＦ１５、およびｍＦｃ−ｒｃＧＤＦ１５に対する精製モノクローナル抗体の動力学値を表２７に要約する。
【０５２２】
【表４１】
2019056018.tif 000228
【０５２３】
表２７の結果から、キメラおよびヒト化抗体のそれぞれは、速い結合速度（ｋａ）、極めて遅い解離速度（ｋｄ）、および極めて高い親和性（ＫＤ）を有することが実証される。具体的には、抗体は、５ｐＭ未満（例えば、約４．５ｐＭ）〜約６５ｐＭの範囲の親和性を有する。
【０５２４】
実施例１７：ＨＴ−１０８０線維肉腫異種移植腫瘍モデルにおける悪液質の逆転
本実施例では、ＨＴ−１０８０線維肉腫異種移植モデルにおける、ヒト化０１Ｇ０６、０６Ｃ１１、１４Ｆ１１抗体による悪液質（体重減少により示される）の逆転について実証する。上記の実施例１０に記載のように、ＨＴ−１０８０細胞を３７℃の培養で増殖させて、８週齢の雌性ＩＣＲ−ＳＣＩＤマウスの側腹部に皮下接種した。体重を毎日測定した。体重が９３％に達したときに、それぞれ１０匹のマウスからなる群にマウスを無作為に分けた。各群に以下の処置の１つを施した：マウスＩｇＧ対照、２ｍｇ／ｋｇの０１Ｇ０６、０６Ｃ１１、１４Ｆ１１、およびこれらそれぞれのヒト化バージョン。処置は、腹腔内注射により１日１回施した。０１Ｇ０６、Ｈｕ０１Ｇ０６−４６、およびＨｕ０１Ｇ０６−５２による抗体処置の結果、体重が初期体重に対して増加するかまたは１００％（ｐ＜０．００１）になった（図２３）。統計分析は分散分析を使用して行った。ＨＴ−１０８０モデルにおける日数に対する体重の逆転ついての結果を、図２３および表２８にそれぞれ示す。
【０５２５】
【表４２】
2019056018.tif 000229
【０５２６】
図２３および表２８のデータから、０１Ｇ０６、Ｈｕ０１Ｇ０６−４６、およびＨｕ０１Ｇ０６−５２は、ＨＴ−１０８０線維肉腫異種移植モデルにおける悪液質を逆転し得ることが示される。
【０５２７】
０６Ｃ１１、Ｈｕ０６Ｃ１１−２７、およびＨｕ０６Ｃ１１−３０による抗体処置の結果、体重が初期体重に対して増加するかまたは約１００％（ｐ＜０．００１）になった（図２４）。統計分析は分散分析を使用して行った。ＨＴ−１０８０モデルにおける体重の逆転ついての結果を、図２４および表２９に示す。
【０５２８】
【表４３】
2019056018.tif 000230
【０５２９】
図２４および表２９のデータから、抗体０６Ｃ１１、Ｈｕ０６Ｃ１１−２７、およびＨｕ０６Ｃ１１−３０は、ＨＴ−１０８０線維肉腫異種移植モデルにおける悪液質を逆転し得ることが示される。
【０５３０】
１４Ｆ１１、Ｈｕ１４Ｆ１１−３９、およびＨｕ１４Ｆ１１−４７による抗体処置の結果、体重が初期体重に対して増加するかまたは約１００％（ｐ＜０．００１）になった（図２５）。統計分析は分散分析を使用して行った。ＨＴ−１０８０モデルにおける体重の逆転ついての結果を、図２５および表３０に示す。
【０５３１】
【表４４】
2019056018.tif 000231
【０５３２】
図２５および表３０のデータから、抗体１４Ｆ１１、Ｈｕ１４Ｆ１１−３９、およびＨｕ１４Ｆ１１−４７は、ＨＴ−１０８０線維肉腫異種移植モデルにおける悪液質を逆転し得ることが示される。
【０５３３】
ヒト化０１Ｇ０６抗体（すなわち、抗体Ｈｕ０１Ｇ０６−１２２、Ｈｕ０１Ｇ０６−１２７、Ｈｕ０１Ｇ０６−１３５、Ｈｕ０１Ｇ０６−１３８、およびＨｕ０１Ｇ０６−１４６）による抗体処置の結果、体重が初期体重に対して増加するかまたは約１００％（ｐ＜０．００１）になった（図２６）。統計分析は分散分析を使用して行った。ヒトＩｇＧ（ｈＩｇＧ）による処置を対照として使用した。ＨＴ−１０８０モデルにおける体重の逆転ついての結果を、図２６および表３１に示す。
【０５３４】
【表４５】
2019056018.tif 000232
【０５３５】
図２６および表３１のデータから、ヒト化抗ＧＤＦ１５抗体Ｈｕ０１Ｇ０６−１２２、Ｈｕ０１Ｇ０６−１２７、Ｈｕ０１Ｇ０６−１３５、Ｈｕ０１Ｇ０６−１３８、およびＨｕ０１Ｇ０６−１４６は、ＨＴ−１０８０線維肉腫異種移植モデルにおける悪液質を逆転し得ることが示される。
【０５３６】
実施例１８：ｍＦｃ−ｒｈＧＤＦ１５誘導モデルにおける悪液質の逆転
本実施例では、ｍＦｃ−ｒｈＧＤＦ１５誘導悪液質モデルにおける、ヒト化０１Ｇ０６抗体（すなわち、抗体Ｈｕ０１Ｇ０６−１２２、Ｈｕ０１Ｇ０６−１２７、Ｈｕ０１Ｇ０６−１３５、Ｈｕ０１Ｇ０６−１３８、またはＨｕ０１Ｇ０６−１４６）による悪液質（体重減少により示される）の逆転について実証する。ｍＦｃ−ｒｈＧＤＦ１５（１μｇ／ｇ）を、８週齢の雌性ＩＣＲ−ＳＣＩＤマウスの側腹部に皮下投与した。体重を毎日測定した。体重が９３％に達したときに、それぞれ１０匹のマウスからなる６つの群にマウスを無作為に分けた。各群に以下の処置の１つを施した：ヒトＩｇＧ対照（ｈＩｇＧ）、２ｍｇ／ｋｇのＨｕ０１Ｇ０６−１２２、Ｈｕ０１Ｇ０６−１２７、Ｈｕ０１Ｇ０６−１３５、Ｈｕ０１Ｇ０６−１３８、またはＨｕ０１Ｇ０６−１４６。処置は、腹腔内注射により１回施した。抗体Ｈｕ０１Ｇ０６−１２２、Ｈｕ０１Ｇ０６−１２７、Ｈｕ０１Ｇ０６−１３５、Ｈｕ０１Ｇ０６−１３８、またはＨｕ０１Ｇ０６−１４６による処置の結果、体重が初期体重に比較して増加するかまたは約１００％になった（ｐ＜０．００１）（図２７および表３２）。
【０５３７】
【表４６】
2019056018.tif 000233
【０５３８】
図２７および表３２のデータから、本開示の抗ＧＤＦ１５抗体は、ｍＦｃ−ｒｈＧＤＦ１５誘導マウスモデル（すなわち、非担癌マウスモデル）における悪液質を逆転し得ることが示される。
【０５３９】
これらの結果から、ヒト化抗ＧＤＦ１５抗体は、ｍＦｃ−ｒｈＧＤＦ１５誘導悪液質モデルにおける悪液質を逆転し得ることが示される。
【０５４０】
実施例１９：ＨＴ−１０８０線維肉腫異種移植腫瘍モデルにおける悪液質の用量応答逆転
本実施例では、ＨＴ−１０８０線維肉腫異種移植モデルにおける、ヒト化Ｈｕ０１Ｇ０６−１２７およびＨｕ０１Ｇ０６−１３５抗体による悪液質（体重減少により示される）の用量応答逆転について実証する。上記の実施例１０に記載のように、ＨＴ−１０８０細胞を３７℃の培養で増殖させて、８週齢の雌性ＩＣＲ−ＳＣＩＤマウスの側腹部に皮下接種した。体重を毎日測定した。体重が９３％に達したときに、それぞれ１０匹のマウスからなる群にマウスを無作為に分けた。各群に以下の処置の１つを施した：ヒトＩｇＧ対照（ｈＩｇＧ；２０ｍｇ／ｋｇ）、Ｈｕ０１Ｇ０６−１２７（２０ｍｇ／ｋｇ、２ｍｇ／ｋｇ、または０．２ｍｇ／ｋｇ）、およびＨｕ０１Ｇ０６−１３５（２０ｍｇ／ｋｇ、２ｍｇ／ｋｇまたは０．２ｍｇ／ｋｇ）。処置は、静脈内注射により１日１回施した。２０ｍｇ／ｋｇのＨｕ０１Ｇ０６−１２７およびＨｕ０１Ｇ０６−１３５による抗体処置の結果、体重が初期体重を超えて増加するかまたは１０８％（ｐ＜０．００１）になった（図２８）。２ｍｇ／ｋｇのＨｕ０１Ｇ０６−１２７およびＨｕ０１Ｇ０６−１３５による抗体処置の結果、体重が対照（ｈＩｇＧ）に比較して初期体重から限定的に減少するかまたは８８〜８５％（ｐ＜０．００１）になった（図２８）。統計分析は分散分析を使用して行った。ＨＴ−１０８０モデルにおける、試験の終了時の体重変化ついての結果を、図２８および表３３に示す。
【０５４１】
【表４７】
2019056018.tif 000234
【０５４２】
図２８および表３３のデータから、抗体Ｈｕ０１Ｇ０６−１２７およびＨｕ０１Ｇ０６−１３５は、ＨＴ−１０８０線維肉腫異種移植モデルにおける悪液質を、用量応答的に逆転し得ることが示される。
【０５４３】
実施例２０：ＨＴ−１０８０異種移植腫瘍モデルにおける、筋肉および脂肪の減少の逆転
本実施例では、ＨＴ−１０８０線維肉腫異種移植モデルにおける、抗体０１Ｇ０６による悪液質（体重減少、筋肉量減少、および脂肪量減少により示される）の逆転について実証する。ＨＴ−１０８０細胞を、１０％ＦＢＳを含有するイーグル最小必須培地（ＡＴＣＣ、カタログ番号３０−２００３）を使用する、５％ＣＯ２を含有する雰囲気下、３７℃での培養で増殖させた。５０％マトリゲル中の、マウス当たり５×１０６個の細胞を、８週齢の雌性ＩＣＲ  ＳＣＩＤマウスの側腹部に皮下接種した。同じ体重を有する１０匹の８週齢雌性ＩＣＲ  ＳＣＩＤマウスのコホートを非担癌（ＳＨＡＭ）対照アームとして選択して、マトリゲルを側腹部に皮下接種した。体重を毎日測定した。担癌マウスにおいて、体重が９１％に達したときに、それぞれ１０匹のマウスからなる２つの群にマウスを無作為に分けた。各群に以下の処置の１つを施した：１日目、３日目、および６日目におけるヒトＩｇＧ対照（ｈＩｇＧ）または１０ｍｇ／ｋｇのＨｕ０１Ｇ０６−１２７。処置は、腹腔内注射により施した。抗体Ｈｕ０１Ｇ０６−１２７による処置の結果、非担癌対照マウスに比較すると、体重が初期体重の１０５％に増加した（ＳＨＡＭ；ｐ＜０．００１）（図２９Ａおよび表３４）。
【０５４４】
【表４８】
2019056018.tif 000235
【０５４５】
図２９Ａおよび表３４のデータから、本開示の抗ＧＤＦ１５抗体は、ＨＴ−１０８０線維肉腫異種移植モデルにおける悪液質を完全に逆転し得ることが示される。
【０５４６】
本実験では、１群１０匹のマウスを、投与時点（ベースラインまたは９１％体重減少、無処置）および試験の終了時点（投与後８日目、ｈＩｇＧまたはＨｕ０１Ｇ０６−１２７のいずれかおよびＳＨＡＭ非担癌対照マウス）で屠殺した。生殖腺脂肪および腓腹筋を外科的に摘出して秤量した。図２９Ｂに示すように、ベースライン対照（９１％体重減少）に比較して、顕著な生殖腺脂肪量の減少がｈＩｇＧ投与後７日目に観察されたが、抗体Ｈｕ０１Ｇ０６−１２７で処置した群では観察されなかった。さらに、Ｈｕ０１Ｇ０６−１２７による処置により、さらなる脂肪減少（ベースライン群に比較して）が予防されただけでなく、生殖腺脂肪の正常レベルも回復することもできた（ＳＨＡＭ非担癌対照に比較して）（図２９Ｂ）。加えて、ベースライン対照（９１％体重減少）に比較して、顕著な腓腹筋量の減少がｈＩｇＧ投与後７日目に観察されたが、抗体Ｈｕ０１Ｇ０６−１２７で処置した群では観察されなかった（図２９Ｃ）。Ｈｕ０１Ｇ０６−１２７による処置により、さらなる筋肉減少（ベースライン群に比較して）が予防されただけでなく、腓腹筋の正常レベルも回復することができた（ＳＨＡＭ担癌対照に比較して）（図２９Ｃ）。
【０５４７】
これらの結果から、本開示の抗ＧＤＦ１５抗体は、ＨＴ−１０８０異種移植腫瘍モデルにおける、筋肉量減少、脂肪減少、および不随意性の体重減少によって測定される悪液質を完全に逆転し得ることが示される。
【０５４８】
参照による援用
本明細書で言及される各特許文献および科学論文の開示全体は、あらゆる目的のために参照によって援用する。
【０５４９】
同等物
本発明は、その趣旨または本質的特性を逸脱することなく、その他の特定形態で具現化されてもよい。したがって前述の実施形態は、本明細書に記載される本発明を限定せず、全ての点で例証的と見なされる。したがって本発明の範囲は、前述の説明ではなく、添付の特許請求の範囲によって示され、特許請求の範囲の同等物の意義と範囲内に入る全ての変更は、その中に包含されることが意図される。
【図１】
2019056018.tif 000236
【図２】
2019056018.tif 000237
【図３】
2019056018.tif 000238
【図４】
2019056018.tif 000239
【図５Ａ−Ｂ】
2019056018.tif 000240
【図６Ａ−Ｂ】
2019056018.tif 000241
【図６Ｃ−Ｄ】
2019056018.tif 000242
【図６Ｅ】
2019056018.tif 000243
【図７】
2019056018.tif 000244
【図８】
2019056018.tif 000245
【図９Ａ−Ｂ】
2019056018.tif 000246
【図１０】
2019056018.tif 000247
【図１１】
2019056018.tif 000248
【図１２】
2019056018.tif 000249
【図１３】
2019056018.tif 000250
【図１４】
2019056018.tif 000251
【図１５】
2019056018.tif 000252
【図１６Ａ−Ｂ】
2019056018.tif 000253
【図１６Ｃ−Ｄ】
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【図１６Ｅ】
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【図１７Ａ】
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【図１７Ｂ】
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【図１８】
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【図１９−１】
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【図１９−２】
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【図２０−１】
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【図２０−２】
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【図２１】
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【図２２】
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【図２３】
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【図２４】
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【図２５】
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【図２６】
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【図２７】
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【図２８】
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【図２９Ａ】
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【図２９Ｂ】
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【図２９Ｃ】
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【配列表】
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【外国語明細書】
2019056018000001.pdf