(57)【要約】【課題】新規な肥満抑制剤を提供すること。【解決手段】バガスの分解抽出物を有効成分として含有する、肥満抑制剤。【選択図】なし【特許請求の範囲】
【請求項１】
バガスの分解抽出物を有効成分として含有する、肥満抑制剤。
【請求項２】
前記バガスの分解抽出物は、アルカリ処理、水熱処理、酸処理、亜臨界水処理、微粉砕処理及び爆砕処理からなる群より選ばれる少なくとも１種の分解処理により得られる分解処理液である、請求項１に記載の肥満抑制剤。
【請求項３】
前記バガスの分解抽出物は、前記分解処理液を、固定担体を充填したカラムに通液することより得られる画分である、請求項２に記載の肥満抑制剤。
【請求項４】
前記固定担体は、合成吸着剤又はイオン交換樹脂である、請求項３に記載の肥満抑制剤。
【請求項５】
前記固定担体が合成吸着剤であり、前記バガスの分解抽出物は、該合成吸着剤に吸着された成分を、水、メタノール、エタノール及びこれらの混合物からなる群より選ばれる少なくとも１種の溶媒で溶出させることにより得られる画分である、請求項３に記載の肥満抑制剤。
【請求項６】
前記合成吸着剤は、芳香族系樹脂、アクリル酸系メタクリル樹脂、又はアクリロニトリル脂肪族系樹脂である、請求項４又は５に記載の肥満抑制剤。
【請求項７】
前記バガスの分解抽出物は、前記分解処理液を、固定担体としての合成吸着剤を充填したカラムに通液し、該合成吸着剤に吸着された成分を、エタノール及び水の混合溶媒で溶出させて得られる画分であり、
前記合成吸着剤は、無置換基型の芳香族系樹脂であり、
前記カラムの温度は２０〜６０℃であり、
前記混合溶媒のエタノール及び水の体積比（エタノール／水）は５０／５０〜６０／４０である、請求項２に記載の肥満抑制剤。
【請求項８】
脂肪蓄積抑制作用に基づくものである、請求項１〜７のいずれか一項に記載の肥満抑制剤。
【請求項９】
バガスの分解抽出物を有効成分として含有する、脂肪蓄積抑制剤。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、肥満抑制剤に関する。
【背景技術】
【０００２】
肥満、特に内臓脂肪の蓄積による肥満は、メタボリックシンドロームを引き起こす原因として世界的な健康問題となっている。肥満のメカニズムを組織的にみると、脂肪細胞が大量の脂肪を蓄積し肥大化した状態、さらに肥大化した脂肪細胞の数が大幅に増殖した状態を指す。
【０００３】
肥満を抑制するためには、適度な運動、摂取カロリーの制限が有効であるが、近年ではより効率よく肥満を抑制するために、肥満抑制剤の開発が進められている。特許文献１には、キーウィ抽出物が肥満抑制に有効であることが開示されている。
【先行技術文献】
【特許文献】
【０００４】
【特許文献１】特表２０１０−５０３６０９号公報
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００５】
本発明は、新規な肥満抑制剤を提供することを目的とする。
【課題を解決するための手段】
【０００６】
本発明は、一態様として、バガスの分解抽出物を有効成分として含有する肥満抑制剤を提供する。
【０００７】
本発明者らは、ｉｎ  ｖｉｔｒｏ試験によって、バガスの分解抽出物が肥満を抑制する作用を有することを見出した。すなわち、本発明の肥満抑制剤によれば、肥満を効果的に抑制することができる。
【０００８】
バガスの分解抽出物は、アルカリ処理、水熱処理、酸処理、亜臨界水処理、微粉砕処理及び爆砕処理からなる群より選ばれる少なくとも１種の分解処理により得られる分解処理液であってよい。
【０００９】
バガスの分解抽出物は、分解処理液を、固定担体を充填したカラムに通液することより得られる画分であってもよい。固定担体は、好ましくは、合成吸着剤又はイオン交換樹脂である。
【００１０】
固定担体が合成吸着剤である場合、バガスの分解抽出物は、該合成吸着剤に吸着された成分を、水、メタノール、エタノール及びこれらの混合物からなる群より選ばれる少なくとも１種の溶媒で溶出させることにより得られる画分であってもよい。
【００１１】
合成吸着剤は、好ましくは、芳香族系樹脂、アクリル酸系メタクリル樹脂、又はアクリロニトリル脂肪族系樹脂である。
【００１２】
バガスの分解抽出物は、分解処理液を、固定担体としての合成吸着剤を充填したカラムに通液し、該合成吸着剤に吸着された成分を、エタノール及び水の混合溶媒で溶出させて得られる画分であってよく、この場合、合成吸着剤は、無置換基型の芳香族系樹脂であり、カラムの温度は２０〜６０℃であり、混合溶媒のエタノール及び水の体積比（エタノール／水）は５０／５０〜６０／４０であってもよい。
【００１３】
本発明の肥満抑制剤は、少なくとも脂肪蓄積抑制作用に基づくものであってよい。
【００１４】
本発明の肥満抑制剤は、少なくとも脂肪細胞への脂肪の蓄積を抑制する作用を有する。過度な脂肪の蓄積が抑制されることは、肥満を防止する有効な手段になり得るため、本発明の肥満抑制剤により、肥満が抑制される。
【００１５】
本発明は、他の態様として、バガスの分解抽出物を有効成分として含有する脂肪蓄積抑制剤を提供するということもできる。
【発明の効果】
【００１６】
本発明によれば、新規な肥満抑制剤を提供することができる。
【図面の簡単な説明】
【００１７】
【図１】前駆細胞（未分化１−１）、陽性対照１−１、比較例１−１及び実施例１の脂肪細胞において、蓄積した脂肪滴を染色した結果を示す顕微鏡写真である。
【図２】比較例１−１、陽性対照１−１及び実施例１の脂肪蓄積率を示すグラフである。
【図３】前駆細胞（未分化１−２）、比較例１−２及び実施例２の脂肪細胞において、蓄積した脂肪滴を染色した結果を示す顕微鏡写真である。
【図４】比較例１−２及び実施例２の脂肪蓄積率を示すグラフである。
【発明を実施するための形態】
【００１８】
以下、本発明の実施形態について説明する。ただし、本発明は以下の実施形態に限定されるものではない。
【００１９】
本明細書における肥満抑制剤は、肥満を抑制する作用を備える組成物である。肥満を抑制する作用とは、例えば、脂肪細胞における脂肪の蓄積を抑制する作用（脂肪蓄積抑制作用）、脂肪細胞に蓄積した脂肪の分解を促進する作用（脂肪分解促進作用）、又は脂肪細胞の増殖を抑制する作用（脂肪細胞増殖抑制作用）等であってよい。すなわち、本明細書における肥満抑制剤は、脂肪蓄積抑制剤、脂肪分解促進剤、又は脂肪細胞増殖抑制剤等であってよい。
【００２０】
一実施形態に係る肥満抑制剤は、バガスの分解抽出物を有効成分として含有する。バガスの分解抽出物には、ｐ−クマル酸、フェルラ酸、カフェ酸及びバニリン等のフェニルプロパノイド、並びにリグニン及びその分解物からなる群より選ばれる少なくとも１種が含まれていることが好ましい。
【００２１】
「バガス」とは、典型的には原料糖製造工程における製糖過程で排出されるバガスをいう。原料糖工場における製糖過程で排出されるバガスには、最終圧搾機を出た最終バガスだけではなく、第１圧搾機を含む以降の圧搾機に食い込まれた細裂甘蔗をも含む。好適なバガスは、原料糖工場において圧搾工程により糖汁を圧搾した後に排出されるバガスである。当該バガスは、甘蔗の種類、収穫時期等により、その含まれる水分、糖分及びそれらの組成比が異なるが、本発明においては、これらのバガスを任意に用いることができる。さらに、本実施形態では、原料のバガスとして、原料糖工場と同様に、例えば黒糖製造工場において排出される甘蔗圧搾後に残るバガス、又は実験室レベルの小規模な実施により甘蔗から糖液を圧搾した後のバガスも用いることができる。
【００２２】
バガスの分解抽出物は、一実施形態において、バガス（及び／又はその加工物）の分解処理液であってよい。分解処理液は、アルカリ処理、水熱処理、酸処理、亜臨界水処理、微粉砕処理及び爆砕処理からなる群から選ばれる少なくとも１種以上の分解処理により得ることができる。分解処理は、バガスの分解抽出物を得やすい観点から、好ましくはアルカリ処理又は水熱処理である。
【００２３】
アルカリ処理は、バガスにアルカリ性溶液を接触させる処理であってよい。アルカリ性溶液を接触させる方法としては、例えば、アルカリ性溶液をバガスに振りかける方法、バガスをアルカリ性溶液に浸漬させる方法等が挙げられる。バガスをアルカリ性溶液に浸漬させる方法においては、バガス及びアルカリ性溶液の混合物を撹拌しながら浸漬させてもよい。
【００２４】
アルカリ性溶液としては、水酸化ナトリウム水溶液、水酸化カリウム水溶液、アンモニア水溶液等が挙げられる。アルカリ性溶液は、これらの溶液を１種単独で又は２種以上を混合して用いられてよい。アルカリ性溶液は、安価であり、食品製造工程で容易に用いられる観点から、好ましくは水酸化ナトリウム水溶液である。
【００２５】
アルカリ性溶液の温度（液温）は、分解処理の処理時間を短縮する観点から、好ましくは４０℃以上であり、より好ましくは１００℃以上であり、更に好ましくは１３０℃以上である。アルカリ性溶液の温度は、分解処理液に多糖類を残存させないようにする観点から、好ましくは２５０℃以下であり、より好ましくは２００℃以下であり、更に好ましくは１５０℃以下である。
【００２６】
アルカリ処理は、常圧下で行われてよく、加圧して行われてもよい。加圧する場合、圧力は、０．１ＭＰａ以上、０．２ＭＰａ以上であってよく、４．０ＭＰａ以下、１．６ＭＰａ以下、又は０．５ＭＰａ以下であってよい。
【００２７】
水熱処理は、バガスに高温の水又は水蒸気を高圧下で接触させる処理であってよい。水熱処理は、より具体的には、例えば、バガスの固形物濃度が０．１〜５０％となるように水を加え、高温・高圧条件下で分解処理を行う方法であってもよい。水又は水蒸気の温度は１３０〜２５０℃であることが好ましく、加える圧力は、各温度の水の飽和水蒸気圧に、更に０．１〜０．５ＭＰa高い圧力であることが好ましい。
【００２８】
酸処理は、バガスに酸性溶液を接触させる処理であってよい。酸性溶液としては、希硫酸等が挙げられる。バガスに酸性溶液を接触させる方法、酸処理における酸溶液の温度、酸処理における圧力条件は、上述したアルカリ処理における方法又は条件と同様であってよい。
【００２９】
亜臨界水処理は、バガスに亜臨界水を接触させる処理であってよい。バガスに亜臨界水を接触させる方法は、上述したアルカリ処理における方法と同様であってよい。亜臨界水処理の条件は特に制限されないが、亜臨界水の温度を１６０〜２４０℃とし、処理時間を１〜９０分間とすることが好ましい。
【００３０】
微粉砕処理は、圧縮、衝撃、せん断、摩擦などによりバガスを数μｍ〜数百μｍに粉砕する処理であってよい。爆砕処理は、水熱処理によりバガスに含まれる不溶性キシランをある程度分解させた後、耐圧反応容器に設けられたバルブを一気に開放すること等によって、瞬間的に大気圧に放出することによりバガスを粉砕する処理であってよい。
【００３１】
分解処理液においては、上述した分解処理の後、固形分及び液分を分離する処理がなされてもよい。この場合、分離後に得られた液分を分解処理液とすることができる。固形分及び液分を分離する方法は、ストレーナー、ろ過、遠心分離、デカンテーション等による分離であってよい。
【００３２】
分解処理液においては、膜分離により多糖類等の高分子成分が除去されてもよい。この場合、膜分離後の液分を分解処理液とすることができる。分離膜は、限外濾過膜（ＵＦ膜）であれば特に限定されない。限外濾過膜の分画分子量は、好ましくは２，５００〜５０，０００であり、より好ましくは２，５００〜５，０００である。
【００３３】
限外濾過膜の素材としては、ポリイミド、ポリエーテルスルホン（ＰＥＳ）、ポリスルホン（ＰＳ）、ポリアクリロニトリル（ＰＡＮ）、ポリフッ化ビニルデン（ＰＶＤＦ）、再生セルロース、セルロース、セルロースエステル、スルホン化ポリスルホン、スルホン化ポリエーテルスルホン、ポリオレフィン、ポリビニルアルコール、ポリメチルメタクリレート、ポリ四フッ化エチレン等を使用することができる。
【００３４】
限外濾過膜の濾過方式は、デッドエンド濾過、クロスフロー濾過であってよいが、膜ファウリング抑制の観点から、クロスフロー濾過であることが好ましい。
【００３５】
限外濾過膜の膜形態としては、平膜型、スパイラル型、チューブラー型、中空糸型等、適宜の形態のものが使用できる。より具体的には、ＧＥ  Ｐｏｗｅｒ＆ＷａｔｅｒのＧＥシリーズ、ＧＨシリーズ、ＧＫシリーズ、ＤＥＳＡＬ社のＧ−５タイプ、Ｇ−１０タイプ、Ｇ−２０タイプ、Ｇ−５０タイプ、ＰＷタイプ、ＨＷＳＵＦタイプ、ＫＯＣＨ社のＨＦＭ−１８０、ＨＦＭ−１８３、ＨＦＭ−２５１、ＨＦＭ−３００、ＨＦＫ−１３１、ＨＦＫ−３２８、ＭＰＴ−Ｕ２０、ＭＰＳ−Ｕ２０Ｐ、ＭＰＳ−Ｕ２０Ｓ、Ｓｙｎｄｅｒ社のＳＰＥ１、ＳＰＥ３、ＳＰＥ５、ＳＰＥ１０、ＳＰＥ３０、ＳＰＶ５、ＳＰＶ５０、ＳＯＷ３０、旭化成株式会社製のマイクローザ（登録商標）ＵＦシリーズの分画分子量３，０００から１０，０００に相当するもの、日東電工株式会社製のＮＴＲ７４１０、ＮＴＲ７４５０等が挙げられる。
【００３６】
バガスの分解抽出物は、他の実施形態において、上述した分解処理液を、固定担体を充填したカラムに通液することより得られる画分であってもよい。分解処理液をカラムに通液することにより、分解処理液中の肥満を抑制する作用を有する成分（有効成分）が固定担体に吸着され、糖類及び無機塩類の大部分がそのまま流出する。
【００３７】
上述した分解処理液は、直接又は水で任意の濃度に調整して、カラムに通液することができる。分解処理液においては、カラムの通液前にｐＨを調整してもよい。吸着率を向上させる観点から、分解処理液は、ｐＨ６以下に調整されていることが好ましい。分解処理液のｐＨは、４．５を超え６以下であってもよい。
【００３８】
固定担体は、好ましくは、合成吸着剤又はイオン交換樹脂のいずれかである。
【００３９】
合成吸着剤は、好ましくは合成多孔質吸着剤である。合成吸着剤（合成多孔質吸着剤）としては、好ましくは有機系樹脂が用いられる。有機系樹脂は、好ましくは、芳香族系樹脂、アクリル酸系メタクリル樹脂、又はアクリロニトリル脂肪族系樹脂である。
【００４０】
芳香族系樹脂としては、例えば、スチレン−ジビニルベンゼン系樹脂が挙げられる。芳香族系樹脂としては、疎水性置換基を有する芳香族系樹脂、無置換基型の芳香族系樹脂、無置換基型に特殊処理をした芳香族系樹脂等の多孔質性樹脂も挙げられ、このうち、無置換基型の芳香族系樹脂又は無置換基型に特殊処理をした芳香族系樹脂が好ましい。
【００４１】
合成吸着剤で市販のものとしては、ダイヤイオン（商標）ＨＰ−１０、ＨＰ−２０、ＨＰ−２１、ＨＰ−３０、ＨＰ−４０、ＨＰ−５０（以上、無置換基型の芳香族系樹脂、いずれも商品名、三菱ケミカル株式会社製）；ＳＰ−８２５、ＳＰ−８００、ＳＰ−８５０、ＳＰ−８７５、ＳＰ−７０、ＳＰ−７００（以上、無置換基型に特殊処理を施した芳香族系樹脂、いずれも商品名、三菱ケミカル株式会社製）；ＳＰ−９００（芳香族系樹脂、商品名、三菱ケミカル株式会社製）；アンバーライト（商標）ＸＡＤ−２、ＸＡＤ−４、ＸＡＤ−１６、ＸＡＤ−２０００（以上、芳香族系樹脂、いずれも商品名、株式会社オルガノ製）；ダイヤイオン（商標）ＳＰ−２０５、ＳＰ−２０６、ＳＰ−２０７（以上、疎水性置換基を有する芳香族系樹脂、いずれも商品名、三菱ケミカル株式会社製）；ＨＰ−２ＭＧ、ＥＸ−００２１（以上、疎水性置換基を有する芳香族系樹脂、いずれも商品名、三菱ケミカル株式会社製）；アンバーライト（商標）ＸＡＤ−７、ＸＡＤ−８（以上、アクリル酸エステル樹脂、いずれも商品名、株式会社オルガノ製）；ダイヤイオン（商標）ＨＰ１ＭＧ、ＨＰ２ＭＧ（以上、アクリル酸メタクリル樹脂、いずれも商品名、三菱ケミカル株式会社製）；セファデックス（商標）ＬＨ２０、ＬＨ６０（以上、架橋デキストランの誘導体、いずれも商品名、ファルマシア  バイオテク株式会社製）等が挙げられる。中でも、無置換基型の芳香族系樹脂（例えば、ＨＰ−２０）又は無置換基型に特殊処理を施した芳香族系樹脂（例えば、ＳＰ−８５０）が好ましい。
【００４２】
カラムに充填する合成吸着剤の量は、カラムの大きさ、合成吸着剤の種類等によって適宜決定することができる。
【００４３】
固定担体として合成吸着剤を用いる場合、分解処理液を通液するときの通液速度は、カラムの大きさ、溶出溶媒の種類、合成吸着剤の種類等によって適宜変更が可能であるが、好ましくは、ＳＶ＝１〜３０時間−１である。なお、ＳＶ（Ｓｐａｃｅ  Ｖｅｌｏｃｉｔｙ、空間速度）は、１時間当たり樹脂容量の何倍量の液体を通液するかという単位である。
【００４４】
合成吸着剤に吸着された吸着成分（有効成分）は、溶媒（溶出溶媒）により溶出させることができる。吸着成分をより効率よく回収する観点から、吸着成分を溶出させる前に、カラムに残留する糖類及び無機塩類を水洗により洗い流すことが好ましい。この場合、溶出させた成分をバガスの分解抽出物とすることができる。
【００４５】
固定担体として合成吸着剤を用いる場合、溶出溶媒は、水、メタノール、エタノール及びこれらの混合物からなる群より選ばれる少なくとも１種であってよい。溶出溶媒は、アルコール及び水の混合溶媒が好ましく、エタノール及び水の混合溶媒がより好ましく、吸着成分が室温においてより効率よく溶出可能となる観点から、体積比が５０／５０〜６０／４０（エタノール／水）であるエタノール及び水の混合溶媒が更に好ましい。
【００４６】
固定担体として合成吸着剤を用いる場合、溶出する際のカラムの温度（カラム温度）は室温であってよいが、室温よりもカラム温度を高温にすることにより、エタノール及び水の混合溶媒においてエタノールの混合割合を減らすことができ、吸着成分をより効率的に溶出させることができる。温度は、好ましくは２０〜６０℃であり、より好ましくは４０〜６０℃である。カラム内は常圧条件下であっても、加圧条件下であってもよい。
【００４７】
固定担体として合成吸着剤を用いる場合、溶出速度は、カラムの大きさ、溶出溶媒の種類、合成吸着剤の種類等によって適宜設定することが可能であるが、好ましくは、ＳＶ＝０．１〜１０時間−１である。
【００４８】
イオン交換樹脂は、樹脂の形態に基づいて、ゲル型樹脂と、ポーラス型、マイクロポーラス型又はハイポーラス型等の多孔性樹脂とに分類されるが、特に制限はない。イオン交換樹脂は、好ましくは陰イオン交換樹脂である。陰イオン交換樹脂としては、強塩基性陰イオン交換樹脂又は弱塩基性陰イオン交換樹脂が用いられてよい。アルカリ処理液を原料として使用する場合、好ましくは、強塩基性陰イオン交換樹脂が用いられるが、その他の処理による分解処理液を原料とする場合は特に制限はない。
【００４９】
市販の強塩基性陰イオン交換樹脂としては、ダイヤイオン（商標）ＰＡ３０６、ＰＡ３０８、ＰＡ３１２、ＰＡ３１６、ＰＡ３１８Ｌ、ＨＰＡ２５、ＳＡ１０Ａ、ＳＡ１２Ａ、ＳＡ１１Ａ、ＳＡ２０Ａ、ＵＢＡ１２０（以上、三菱ケミカル株式会社製）、アンバーライト（商標）ＩＲＡ４００Ｊ、ＩＲＡ４０２Ｂｌ、ＩＲＡ４０４Ｊ、ＩＲＡ９００Ｊ、ＩＲＡ９０４、ＩＲＡ４５８ＲＦ、ＩＲＡ９５８、ＩＲＡ４１０Ｊ、ＩＲＡ４１１、ＩＲＡ９１０ＣＴ（以上、オルガノ株式会社製）、ダウエックス（商標）マラソンＡ、マラソンＭＳＡ、ＭＯＮＯＳＰＨＥＲＥ５５０Ａ、マラソンＡ２（以上、ダウケミカル日本株式会社製）等が挙げられる。
【００５０】
市販の弱塩基性陰イオン交換樹脂としては、ダイヤイオン（商標）ＷＡ１０、ＷＡ２０、ＷＡ２１Ｊ、ＷＡ３０（以上、三菱ケミカル株式会社製）、アンバーライト（商標）ＩＲＡ４７８ＲＦ、ＩＲＡ６７、ＩＲＡ９６ＳＢ、ＩＲＡ９８、ＸＥ５８３（以上、オルガノ株式会社製）、ダウエックス（商標）マラソンＷＢＡ、６６、ＭＯＮＯＳＰＨＥＲＥ６６、ＭＯＮＯＳＰＨＥＲＥ７７（以上、ダウケミカル日本株式会社製）等が挙げられる。
【００５１】
カラムに充填するイオン交換樹脂の量は、カラムの大きさ、イオン交換樹脂の種類などによって適宜決定できるが、分解処理液の固形分に対して２〜１０，０００倍湿潤体積量が好ましく、５〜５００倍湿潤体積量がより好ましい。
【００５２】
通液条件は、前処理液の種類、イオン交換樹脂の種類等により適宜設定することが可能である。好ましくは、流速はＳＶ＝０．３〜３０時間−１であり、通液する液量はイオン交換樹脂の１００〜３００％であり、カラム温度は４０〜９０℃である。カラム内は常圧又は加圧された状態であってもよい。
【００５３】
固定担体としてイオン交換樹脂を用いる場合、バガスの分解抽出物は、イオン交換樹脂を充填したカラムに通液し、塩や酸、アルコール又はこれらの混合水溶液等の溶離液で溶出させることで得られる画分であってもよい。溶離液は脱気処理されていてもよい。
【００５４】
バガスの分解抽出物は、一実施形態においては、上述した分解処理液又は画分を濃縮した濃縮物であってもよい。濃縮方法は公知の方法であってよく、例えば、減圧下での溶媒留去、凍結乾燥等の方法であってよい。濃縮を行う場合、分解処理液又は画分を１５〜３０倍に濃縮して、濃縮後の成分をバガスの分解抽出物とすることができる。
【００５５】
バガスの分解抽出物は、例えば、次のようにして得ることができる。バガスに、固形物濃度が０．１〜５０％となるように１質量％の水酸化ナトリウム水溶液を添加して１００℃で煮沸を行い、分解処理液（アルカリ処理液）を得る。分解処理液を分画分子量２５００〜５０００のＵＦ膜にて限外濾過を行い、得られた濾過液を酸性に調整してから、無置換基型の芳香族系樹脂を充填したカラムに、カラム温度２０〜６０℃にて通液する。その後、カラムに吸着された成分を、カラム温度２０〜６０℃にて、体積比が５０／５０〜６０／４０（エタノール／水）のエタノール及び水の混合溶媒（溶出溶媒）で溶出させ、エタノール及び水の混合溶媒での溶出開始時点から集めた溶出液の量が該芳香族系樹脂の４５倍湿潤体積量以内に溶出する画分を回収する。回収された画分（肥満を抑制する作用を有する成分を含む画分）を集め、慣用の手段（減圧下での溶媒留去、凍結乾燥等）により濃縮して、バガスの分解抽出物を得ることができる。このようにして得られたバガスの分解抽出物は、固形分が３０質量％以上になるように濃縮した液状又は粉末状の抽出物として保存することができる。抽出物の保存は、当該抽出物が液状の場合、冷蔵で行うことが好ましい。
【００５６】
バガスの分解抽出物は、他の例として、例えば、次のようにして得ることもできる。すなわち、バガスに固形物濃度が０．１〜５０％となるように加水して１３０〜２５０℃の水により、０．２〜４．０Ｍｐａの圧力下で水熱処理を行い、濾過による固液分離で分解処理液（水熱処理液）を得る。得られた水熱処理液について、無置換基型に特殊処理を施した芳香族系樹脂を充填したカラムに、温度２０〜６０℃にて通液した後、カラムに吸着された成分を、カラム温度２０〜６０℃にて、体積比が５０／５０〜６０／４０（エタノール／水）のエタノール及び水の混合溶媒（溶出溶媒）で溶出させ、エタノール及び水の混合溶媒での溶出開始時点から集めた溶出液の量が該芳香族系樹脂の５倍湿潤体積量以内に溶出する画分を回収する。回収された画分（肥満を抑制する作用を有する成分を含む画分）を集め、慣用の手段（減圧下での溶媒留去、凍結乾燥等）により濃縮して、バガスの分解抽出物を得ることができる。このようにして得られたバガスの分解抽出物は、固形分が３０質量％以上になるように濃縮した液状又は粉末状の抽出物として保存することができる。抽出物の保存は、当該抽出物が液状の場合、冷蔵で行うことが好ましい。
【００５７】
上述した各実施形態におけるバガスの分解抽出物は、液状又は粉末状であってよい。粉末状のバガスの分解抽出物は、例えば、液状のバガス分解抽出物を用いて、スプレードライ法、凍結乾燥法、流動層造粒法、又は賦形剤を用いた粉末化法等により製造することができる。
【００５８】
本実施形態に係る肥満抑制剤は、有効成分であるバガスの分解抽出物のみからなってもよく、食品、医薬部外品又は医薬品に使用可能な素材を更に配合してもよい。食品、医薬部外品又は医薬品に使用可能な素材としては、特に制限されるものではないが、例えば、アミノ酸、タンパク質、炭水化物、油脂、甘味料、ミネラル、ビタミン、香料、賦形剤、結合剤、滑沢剤、崩壊剤、乳化剤、界面活性剤、基剤、溶解補助剤、懸濁化剤等が挙げられる。
【００５９】
タンパク質としては、例えば、ミルクカゼイン、ホエイ、大豆タンパク、小麦タンパク、卵白等が挙げられる。炭水化物としては、例えば、コーンスターチ、セルロース、α化デンプン、小麦デンプン、米デンプン、馬鈴薯デンプン等が挙げられる。油脂としては、例えば、サラダ油、コーン油、大豆油、ベニバナ油、オリーブ油、パーム油等が挙げられる。甘味料としては、例えば、ブドウ糖、ショ糖、果糖、ブドウ糖果糖液糖、果糖ブドウ糖液糖等の糖類、キシリトール、エリスリトール、マルチトール等の糖アルコール、スクラロース、アスパルテーム、サッカリン、アセスルファムＫ等の人工甘味料、ステビア甘味料等が挙げられる。ミネラルとしては、例えば、カルシウム、カリウム、リン、ナトリウム、マンガン、鉄、亜鉛、マグネシウム等、及びこれらの塩類等が挙げられる。ビタミンとしては、例えば、ビタミンＥ、ビタミンＣ、ビタミンＡ、ビタミンＤ、ビタミンＢ類、ビオチン、ナイアシン等が挙げられる。賦形剤としては、例えば、デキストリン、デンプン、乳糖、結晶セルロース等が挙げられる。結合剤としては、例えば、ポリビニルアルコール、ゼラチン、ヒドロキシプロピルメチルセルロース、ヒドロキシプロピルセルロース、カルボキシメチルセルロースナトリウム、ポリビニルピロリドン等が挙げられる。滑沢剤としては、例えば、ステアリン酸マグネシウム、ステアリン酸カルシウム、タルク等が挙げられる。崩壊剤としては、例えば、結晶セルロース、寒天、ゼラチン、炭酸カルシウム、炭酸水素ナトリウム、デキストリン等が挙げられる。乳化剤又は界面活性剤としては、例えば、ショ糖脂肪酸エステル、クエン酸、乳酸、グリセリン脂肪酸エステル、ポリグリセリン脂肪酸エステル、ソルビタン脂肪酸エステル、プロピレングリコール脂肪酸エステル、レシチン等が挙げられる。基剤としては、例えば、セトステアリルアルコール、ラノリン、ポリエチレングリコール等が挙げられる。溶解補助剤としては、例えば、ポリエチレングリコール、プロピレングリコール、炭酸ナトリウム、クエン酸ナトリウム等が挙げられる。懸濁化剤としては、例えば、モノステアリン酸グリセリン、ポリビニルアルコール、ポリビニルピロリドン、メチルセルロース、ヒドロキシメチルセルロース、アルギン酸ナトリウム等が挙げられる。これらは１種単独で、又は２種以上を組み合わせて使用してもよい。
【００６０】
肥満抑制剤が他の素材を配合する場合、有効成分であるバガスの分解抽出物の含有量は、後述する肥満抑制剤の形態、使用目的等に応じて適宜設定すればよいが、脂肪細胞への脂肪の蓄積をより抑制しやすくする観点から、肥満抑制剤全量を基準として、好ましくは１００μｇ／ｇ以上、より好ましくは２５０μｇ／ｇ以上、更に好ましくは４００μｇ／ｇ以上であり、また、好ましくは１０ｍｇ／ｇ以下、より好ましくは７.５ｍｇ／ｇ以下、更に好ましくは５ｍｇ／ｇ以下である。
【００６１】
肥満抑制剤は、固体（粉末、顆粒等）、液体（溶液、懸濁液等）、ペースト等のいずれの形状であってもよく、散剤、丸剤、顆粒剤、錠剤、カプセル剤、トローチ剤、液剤、懸濁剤等のいずれの剤形であってもよい。
【００６２】
肥満のメカニズムの一態様は、脂肪細胞が脂肪合成を行って脂肪が蓄積され、肥大化することである。本実施形態の肥満抑制剤は、特に、脂肪細胞における脂肪の蓄積を抑制する作用を有している。そのため、本実施形態の肥満抑制剤を摂取することにより、脂肪細胞への脂肪の蓄積が抑制され、結果として肥満が抑制される。この肥満抑制剤によれば、過度な運動や食事制限に頼ることなく肥満を効果的に抑制又は解消させることができるため、有用である。
【００６３】
肥満抑制剤が脂肪蓄積抑制作用を有しているか否かは、例えば、脂肪前駆細胞から脂肪細胞に分化誘導される際に蓄積した脂肪滴を親油性色素により染色して顕微鏡観察し、脂肪抑制剤を添加しなかった検体に比べて脂肪抑制剤を添加した検体の脂肪滴が減少しているか否かを観察することにより、確認することができる。また、肥満抑制剤が脂肪蓄積抑制作用を有しているか否かは、脂肪滴を染色した親油性色素を抽出して吸光度を測定し、脂肪抑制剤の添加に伴う吸光度の変化から脂肪蓄積の程度を算出することによっても確認することができる。
【００６４】
肥満抑制剤は、食品、医薬部外品又は医薬品として用いることができる。食品は、例えば、健康食品、特定保健用食品、機能性食品、栄養機能食品、サプリメント等の形態で提供されてもよい。
【００６５】
肥満抑制剤は、静脈投与等の非経口投与がされてよく、経口投与がされてもよい。肥満抑制剤は、経口投与されることが好ましい。
【００６６】
肥満抑制剤が、非経口投与される場合、投与量としては、例えば、バガスの分解抽出物が１回当たり５０μｇ／ｋｇ（体重）以上となるように投与されるのが好ましく、１５０μｇ／ｋｇ（体重）以上となるように投与されるのがより好ましく、２５０μｇ／ｋｇ（体重）以上となるように投与されるのが更に好ましい。また、バガスの分解抽出物が１日当たり１００μｇ／ｋｇ（体重）以上となるように投与されるのが好ましく、３００μｇ／ｋｇ（体重）以上となるように投与されるのがより好ましく、５００μｇ／ｋｇ（体重）以上となるように投与されるのが更に好ましい。また、バガスの分解抽出物が、１回当たり２０００ｍｇ／ｋｇ（体重）以下となるように投与されるのが好ましく、１５００ｍｇ／ｋｇ（体重）以下となるように投与されるのがより好ましく、１０００ｍｇ／ｋｇ（体重）以下となるように投与されるのが更に好ましい。また、バガスの分解抽出物が１日当たり４０００ｍｇ／ｋｇ（体重）以下となるように投与されるのが好ましく、３０００ｍｇ／ｋｇ（体重）以下となるように投与されるのがより好ましく、２０００ｍｇ／ｋｇ（体重）以下となるように投与されるのが更に好ましい。この範囲であれば、十分な血中濃度を達成することができ、肥満を抑制する作用をよりよく発現することができる。
【００６７】
肥満抑制剤が、経口投与される場合、投与量としては、バガスの分解抽出物が１回当たり６０μｇ／ｋｇ（体重）以上となるように投与されるのが好ましく、１２０μｇ／ｋｇ（体重）以上となるように投与されるのがより好ましく、１８０μｇ／ｋｇ（体重）以上となるように投与されるのが更に好ましい。また、バガスの分解抽出物が１日当たり１８０μｇ／ｋｇ（体重）以上となるように投与されるのが好ましく、３６０μｇ／ｋｇ（体重）以上となるように投与されるのがより好ましく、５４０μｇ／ｋｇ（体重）以上となるように投与されるのが更に好ましい。また、バガスの分解抽出物が１回当たり１０００ｍｇ／ｋｇ（体重）以下となるように投与されるのが好ましく、８００ｍｇ／ｋｇ（体重）以下となるように投与されるのがより好ましく、６００ｍｇ／ｋｇ（体重）以下となるように投与されるのが更に好ましい。また、バガスの分解抽出物が１日当たり３０００ｍｇ／ｋｇ（体重）以下となるように投与されるのが好ましく、２０００ｍｇ／ｋｇ（体重）以下となるように投与されるのがより好ましく、１０００ｍｇ／ｋｇ（体重）以下となるように投与されるのが更に好ましい。この範囲であれば、十分な血中濃度を達成することができ、肥満を抑制する作用をよりよく発現することができる。
【００６８】
本実施形態の肥満抑制剤は上述した作用を有するため、肥満と診断された患者用として、また、肥満を未然に防ぐことを望む標準体重者用として用いることができる。
【実施例】
【００６９】
以下、実施例により本発明を説明するが、本発明はこれらの実施例に限定されるものではない。バガスの分解抽出物は、以下、単に「抽出物」と表現することがある。
【００７０】
＜バガスの分解抽出物の製造＞
［製造例１］
サトウキビの搾りかすであるバガス１５ｋｇ（含水率５０質量％）及び０．５％（ｗ／ｗ）水酸化ナトリウム水溶液１００Ｌを混合し、１５０℃の条件でアルカリ処理を行った。アルカリ処理後の混合液を固形分と液分に分離して、液分を約１００Ｌ得た。分画分子量２５００のＵＦ膜（ＧＥウォーター＆プロセス・テクノロジー社、ＧＨ８０４０Ｆ３０）を用いて限外濾過を行い、濾過液８０Ｌを得た。合成吸着剤（三菱ケミカル株式会社製、ＨＰ−２０）１Ｌを樹脂塔（内径８０ｍｍ、高さ４００ｍｍ）に充填し、これに上記の濾過液を、ｐＨを６に調整してから流速１０Ｌ／時間（ＳＶ＝１０．０（時間−１））で通液した。
【００７１】
続いて、５Ｌの精製水を、流速１０Ｌ／時間（ＳＶ＝１０．０（時間−１））で樹脂塔に通液して洗浄した。次に、溶出溶媒として６０％エタノール水溶液（エタノール／水＝６０／４０（体積／体積））２Ｌを、流速２Ｌ／時間（ＳＶ＝２．０（時間−１））で樹脂塔に通液した。続けて、２Ｌの精製水を流速２Ｌ／時間（ＳＶ＝２．０（時間−１））で樹脂塔に通液し、合成吸着剤に吸着した成分を溶出させた。樹脂塔から溶出した画分を、ロータリーエバポレーターにて約１０倍の濃度に減圧濃縮したのち、一晩凍結乾燥して、バガスの分解抽出物として、茶褐色の粉末２０ｇを得た。これを抽出物Ａとした。
【００７２】
［製造例２］
サトウキビの搾りかすであるバガス３０ｋｇ（含水率５０質量％）を、２００℃、１．８ＭＰａの熱水１００Ｌで水熱処理を行った。前処理後の混合液を固形分と液分とに分離して、液分を約８８Ｌ得た。分画分子量２５００のＵＦ膜（ＧＥウォーター＆プロセス・テクノロジー社、ＧＨ８０４０Ｆ３０）を用いて限外濾過を行い、濾過液７０Ｌを得た。合成吸着剤（三菱ケミカル株式会社製、ＳＰ−８５０）１Ｌを樹脂塔（内径８０ｍｍ、高さ４００ｍｍ）に充填し、これに上記の濾過液のうち２５Ｌを、流速２０Ｌ／時間（ＳＶ＝２０．０（時間−１））で通液した。
【００７３】
続いて、３．３Ｌの精製水を、流速２０Ｌ／時間（ＳＶ＝２０．０（時間−１））で樹脂塔に通液して洗浄した。次に、溶出溶媒として６０％エタノール水溶液（エタノール／水＝６０／４０（体積／体積））２Ｌを、流速２Ｌ／時間（ＳＶ＝２．０（時間−１））で樹脂塔に通液した。続けて、２Ｌの精製水を流速２Ｌ／時間（ＳＶ＝２．０（時間−１））で樹脂塔に通液し、合成吸着剤に吸着した成分を溶出させた。樹脂塔から溶出した画分を、ロータリーエバポレーターにて約１０倍の濃度に減圧濃縮したのち、一晩凍結乾燥して、バガスの分解抽出物として、茶褐色の粉末４０ｇを得た。これを抽出物Ｗとした。
【００７４】
＜試験例１：抽出物Ａによる肥満抑制試験＞
［試験液の調製］
抽出物Ａを水に溶解させて、５０ｍｇ／ｍＬの試験液原液を調製した。この試験液原液をＤＭＥＭ培地で希釈し、検体濃度２０００μｇ／ｍＬの試験液を調製した。
【００７５】
［３Ｔ３−Ｌ１細胞脂肪蓄積抑制試験］
（細胞の培養）
マウス脂肪前駆細胞である３Ｔ３−Ｌ１細胞（国立研究開発法人  医薬基盤・健康・栄養研究所）を２４ウェルプレートに播種し、新生仔牛血清（１０ｖｏｌ％、培地全量基準）及びペニシリン−ストレプトマイシン溶液（１ｖｏｌ％、培地全量基準）を含有するＤＭＥＭ培地で４日間培養した。培養後、牛胎児血清（１０ｖｏｌ％、培地全量基準）及びペニシリン−ストレプトマイシン溶液（１ｖｏｌ％、培地全量基準）を含有するＤＭＥＭ培地に交換し、Ａｄｉｐｏｇｅｎｅｓｉｓ  Ａｓｓａｙ  Ｋｉｔ（ケイマンケミカル社）を用いて、３Ｔ３−Ｌ１細胞を脂肪細胞へと分化させた。この際、調製した２０００μｇ／ｍＬの試験液を、終濃度が１０００μｇ／ｍＬ（実施例１）となるように添加した。３日間培養後、新たに用意した試験液添加培地に交換した。また、Ａｄｉｐｏｇｅｎｅｓｉｓ  Ａｓｓａｙ  Ｋｉｔによる分化誘導を行わないものを前駆細胞（未分化１−１）、試験液を添加しなかったものを未処置対照（比較例１−１）、塩化ベルベリン（和光純薬（株））を終濃度１μｇ／ｍＬとなるように添加したものを陽性対照（陽性対照１−１）として同様に試験を行った。これらを更に４日間培養した。
【００７６】
（細胞の染色）
培養後、培養上清を除去し、Ａｄｉｐｏｇｅｎｅｓｉｓ  Ａｓｓａｙ  Ｋｉｔの手順に従って細胞を固定した後、脂肪滴を染色するための親油性色素であるオイルレッドＯ溶液により細胞を染色した。
【００７７】
［脂肪滴の観察］
倒立型位相差顕微鏡を用いて、脂肪細胞に蓄積した脂肪滴を染色した結果を観察した。各サンプルの観察結果を図１に示す。図１において、（ａ）が前駆細胞（未分化１−１）、（ｂ）が比較例１−１、（ｃ）が陽性対照１−１、（ｄ）が実施例１の観察結果である。その結果、比較例１−１の脂肪細胞では、オイルレッドＯで染色された脂肪滴の蓄積が観察できたが、実施例１の脂肪細胞では、比較例１−１の脂肪細胞と比較して、蓄積している脂肪滴が少なかった。
【００７８】
［脂肪蓄積率の測定］
脂肪滴を観察後、実施例１、比較例１−１及び陽性対照１−１のサンプルに対して、Ａｄｉｐｏｇｅｎｅｓｉｓ  Ａｓｓａｙ  Ｋｉｔに含まれる色素抽出液を添加し、脂肪滴に取り込まれたオイルレッドＯを抽出した。マイクロプレートリーダー（ＳｐｅｃｔｒａＭａｘ  Ｍ２ｅ、モレキュラーデバイス社）を用いて、抽出したオイルレッドＯの吸光度を５２０ｎｍにて測定した。
【００７９】
各サンプルの吸光度から、次式により脂肪蓄積率を算出した。
脂肪蓄積率（％）＝｛（Ｓａ−ＢＬＡｖｒ）／（ＣＮ−ＢＬＡｖｒ）Ａｖｒ｝×１００
Ｓａ：各サンプルの吸光度
ＢＬＡｖｒ：前駆細胞（未分化１−１）の吸光度の平均値（ｎ＝３）
ＣＮ：比較例１−１（未処置対照）の吸光度
（ＣＮ−ＢＬＡｖｒ）Ａｖｒ：ＣＮよりＢＬＡｖｒを差し引いた値の平均値（ｎ＝３）
【００８０】
脂肪蓄積率を算出した結果を図２に示す。脂肪蓄積率は、比較例１−１が１００±５．５％であったのに対して、陽性対照１−１が１９±１．０、実施例１が１５±１．５であった。
【００８１】
＜試験例２：抽出物Ｗによる肥満抑制試験＞
［試験液の調製］
抽出物Ｗをエタノールに溶解させて、５０ｍｇ／ｍＬの試験液原液を調製した。この試験液原液をＤＭＥＭ培地で希釈し、検体濃度５００μｇ／ｍＬの試験液をそれぞれ調製した。
【００８２】
［３Ｔ３−Ｌ１細胞脂肪蓄積抑制試験］
試験例１における方法において、調製した抽出物Ｗを含む試験液を、終濃度が２５０μｇ／ｍＬ（実施例２）となるようにそれぞれ添加した以外は、試験例１と同様の方法によって脂肪蓄積抑制試験を行った。試験例１と同様に、Ａｄｉｐｏｇｅｎｅｓｉｓ  Ａｓｓａｙ  Ｋｉｔによる分化誘導を行わないものを前駆細胞（未分化１−２）、試験液を添加しなかったものを未処置対照（比較例１−２）として同様に試験を行った。
【００８３】
［脂肪滴の観察］
試験例１と同様の方法により、脂肪細胞に蓄積した脂肪滴を染色した結果を観察した。各サンプルの観察結果を図３に示す。図３において、（ａ）が前駆細胞（未分化１−２）、（ｂ）が比較例１−２、（ｃ）が実施例２の観察結果である。その結果、比較例１−２の脂肪細胞では、オイルレッドＯで染色された脂肪滴の蓄積が観察できたが、実施例２の脂肪細胞では、比較例１−２の脂肪細胞と比較して、蓄積している脂肪滴が少なかった。
【００８４】
［脂肪蓄積率の測定］
脂肪滴を観察後、実施例２及び比較例１−２について、試験例１と同様の方法により脂肪蓄積率を算出した。結果を図４に示す。脂肪蓄積率は、比較例１−２が１００±５．６％であったのに対して、実施例２が２０±５．６であった。
【図１】
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【図２】
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【図３】
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【図４】
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