(57)【要約】【課題】食品等の利用形態に適合可能な天然植物素材を用いて、機能性に優れた組成物を提供する。【解決手段】クロモジエキスをコレステロール低減用組成物に用いる。この組成物は、血中の総コレステロール濃度を低減させるためのものであることが好ましい。また、血中のＬＤＬコレステロール濃度を低減させるためのものであることが好ましい。また、血中のＬＤＬコレステロール／ＨＤＬコレステロールの濃度比を低減させるためのものであることが好ましい。また、血中のｎｏｎ−ＨＤＬコレステロール濃度を低減させるためのものであることが好ましい。また、コレステロールによる血管壁の肥厚を予防するためのものであることが好ましい。クロモジエキスとしては、クロモジの熱水抽出物が好ましく用いられる。【選択図】なし【特許請求の範囲】
【請求項１】
クロモジエキスを含有するコレステロール低減用組成物。
【請求項２】
血中の総コレステロール濃度を低減させるためのものである、請求項１記載のコレステロール低減用組成物。
【請求項３】
血中のＬＤＬコレステロール濃度を低減させるためのものである、請求項１記載のコレステロール低減用組成物。
【請求項４】
血中のＬＤＬコレステロール／ＨＤＬコレステロールの濃度比を低減させるためのものである、請求項１記載のコレステロール低減用組成物。
【請求項５】
血中のｎｏｎ−ＨＤＬコレステロール濃度を低減させるためのものである、請求項１記載のコレステロール低減用組成物。
【請求項６】
コレステロールによる血管壁の肥厚を予防するためのものである、請求項１記載のコレステロール低減用組成物。
【請求項７】
前記クロモジエキスは、クロモジの熱水抽出物を含む、請求項１〜６のいずれか１つに記載のコレステロール低減用組成物。
【請求項８】
組成物中にクロモジエキスを含有せしめる該組成物のコレステロール低減機能性付与方法。
【請求項９】
前記クロモジエキスは、クロモジの熱水抽出物を含む、請求項８記載の方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、天然植物素材を利用する、コレステロール低減用組成物及びコレステロール低減機能性付与方法に関する。
【背景技術】
【０００２】
クスノキ科植物のクロモジは北海道の南部から九州まで広く分布している落葉低木であり、その枝葉は烏樟（うしょう）と呼ばれ、古くから消化器系を助ける生薬や民間薬の原料として用いられてきた。また、良い香りがあるのが特徴で、和菓子に添える高級爪楊枝や、水蒸気蒸留して採取した精油がアロマなどに利用されている。
【０００３】
従来、このクロモジには、種々の機能性が報告されている。例えば、特許文献１には、クスノキ科クロモジ樹皮の抽出物からなるメラニン産生抑制剤が記載されている。また、特許文献２には、クロモジ等の植物の抽出物を有効成分とする抗ヘリコバクター・ピロリ剤が記載されている。また、特許文献３には、クロモジ等のクスノキ科の植物の一部位の粉砕物またはその脂溶性溶媒抽出エキスを含有するアルコール障害予防剤が記載されている。また、特許文献４には、クロモジ属(Lindera Thunb.)に属する植物の抽出物を有効成分とするプロテアーゼ阻害剤が記載されている。また、特許文献５には、クロモジ等のクスノキ科植物の水蒸気蒸留水を含有することを特徴とする化粧料組成物が記載されている。また、特許文献６には、クロモジ等の植物の抽出物を有効成分とする抗インフルエンザウイルス剤が記載されている。また、特許文献７には、クロモジ等の植物又はそのエキスを含有することを特徴とする血圧降下剤が記載されている。また、特許文献８には、クロモジ等の植物エキスを有効成分として含有するメイラード反応阻害剤が記載されている。また、特許文献９には、クロモジ等の植物の処理物を含有することを特徴とするＩｇＥ産生抑制組成物及び抗アレルギー組成物が記載されている。また、特許文献１０には、クロモジ等の植物の抽出物を有効成分として含有することを特徴とするセラミダーゼ活性阻害剤が記載されている。
【先行技術文献】
【特許文献】
【０００４】
【特許文献１】特開平０７−２７７９４１号公報
【特許文献２】特開平１１−００１４２９号公報
【特許文献３】特開２０００−３４４６７５号公報
【特許文献４】特開２００１−１２２７２８号公報
【特許文献５】特開２００１−２２６２１８号公報
【特許文献６】特開２００４−０５９４６３号公報
【特許文献７】特開２００７−０５１１２９号公報
【特許文献８】特開２０１０−０７７１２３号公報
【特許文献９】特開２０１０−１８０１４１号公報
【特許文献１０】特開２０１７−１２４９８４号公報
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００５】
本発明の目的は、食品等の利用形態に適合可能な天然植物素材を用いて、機能性に優れた組成物を提供することにある。
【課題を解決するための手段】
【０００６】
本発明者らは、上記目的を達成するため鋭意研究した結果、クスノキ科植物のクロモジから抽出したクロモジエキスには、コレステロールを低減する作用効果があることを見出し、本発明を完成するに至った。
【０００７】
すなわち、本発明は、第１には、クロモジエキスを含有するコレステロール低減用組成物を提供するものである。
【０００８】
上記コレステロール低減用組成物においては、該組成物は、血中の総コレステロール濃度を低減させるためのものであることが好ましい。
【０００９】
上記コレステロール低減用組成物においては、該組成物は、血中のＬＤＬコレステロール濃度を低減させるためのものであることが好ましい。
【００１０】
上記コレステロール低減用組成物においては、該組成物は、血中のＬＤＬコレステロール／ＨＤＬコレステロールの濃度比を低減させるためのものであることが好ましい。
【００１１】
上記コレステロール低減用組成物においては、該組成物は、血中のｎｏｎ−ＨＤＬコレステロール濃度を低減させるためのものであることが好ましい。
【００１２】
上記コレステロール低減用組成物においては、該組成物は、コレステロールによる血管壁の肥厚を予防するためのものであることが好ましい。
【００１３】
上記コレステロール低減用組成物においては、前記クロモジエキスは、クロモジの熱水抽出物を含むことが好ましい。
【００１４】
一方、本発明は、第２には、組成物中にクロモジエキスを含有せしめる該組成物のコレステロール低減機能性付与方法を提供するものである。
【００１５】
上記方法においては、前記クロモジエキスは、クロモジの熱水抽出物を含むことが好ましい。
【発明の効果】
【００１６】
本発明によれば、クスノキ科植物のクロモジから抽出したクロモジエキスには、コレステロールを低減する作用効果があることが明らかとなった。よって、そのクロモジエキスを利用して、例えばコレステロール低減用組成物等、機能性に優れた組成物を提供することができる。本発明による組成物は、食品等の利用形態にも適している。
【図面の簡単な説明】
【００１７】
【図１】試験例１においてクロモジエキスによるコレステロール低減作用を検証した結果のうち、血中の総コレステロール濃度を調べた結果を示す図表である。
【図２】試験例１においてクロモジエキスによるコレステロール低減作用を検証した結果のうち、血中のＬＤＬコレステロール濃度を調べた結果を示す図表である。
【図３】試験例１においてクロモジエキスによるコレステロール低減作用を検証した結果のうち、血中のＨＤＬコレステロール濃度を調べた結果を示す図表である。
【図４】試験例１においてクロモジエキスによるコレステロール低減作用を検証した結果のうち、血中のＬＤＬコレステロール／ＨＤＬコレステロールの濃度比を評価した結果を示す図表である。
【図５】試験例１においてクロモジエキスによるコレステロール低減作用を検証した結果のうち、血中のｎｏｎ−ＨＤＬコレステロール濃度を評価した結果を示す図表である。
【発明を実施するための形態】
【００１８】
本発明は、クスノキ科植物のクロモジから抽出したクロモジエキスにコレステロールを低減する作用効果があることを見出し、これに基づいて、コレステロール低減用組成物を提供するものである。より詳細には、後述の実施例に示されるように、クロモジエキスには、血中の総コレステロール濃度を低減させたり、血中のＬＤＬコレステロール濃度を低減させたり、血中のＬＤＬコレステロール／ＨＤＬコレステロールの濃度比を低減させたり、血中のｎｏｎ−ＨＤＬコレステロール濃度を低減させたりする作用効果がある。
【００１９】
生体内でコレステロールは、血中のリポ蛋白に含まれて、その血流に乗って全身を廻っている。リポ蛋白は、ＬＤＬ（低密度リポ蛋白）とＨＤＬ（高密度リポ蛋白）とに分類される。前者は、概して、肝臓で生成したコレステロールを全身の組織や細胞に運ぶはたらきを有するが、一方で血管壁に入り込んで動脈硬化の原因になったりするので、これに含まれるＬＤＬコレステロールは「悪玉コレステロール」などと呼ばれることもある。一方、後者のＨＤＬは、概して、生体にとって不要となったコレステロールをその分解の場である肝臓に戻すはたらきを有しており、これに含まれるＨＤＬコレステロールは、前者のＬＤＬに含まれるＬＤＬコレステロール対して「善玉コレステロール」などと呼ばれることもある。これらはいずれも、一般的な健康診断や医療の現場において主要な血液検査項目となっており、その血中濃度の測定などは、血中の総コレステロール濃度の測定も含め、汎用的な方法が知られている。また、近年では、血中のｎｏｎ−ＨＤＬコレステロール濃度も主要な指標となっている。すなわち、ｎｏｎ−ＨＤＬコレステロール値は、血中の総コレステロールからＨＤＬコレステロールを除いた値であり、ＬＤＬ（低密度リポ蛋白）に加えて、カイロミクロン、ＶＬＤＬ、レムナントなど、ＨＤＬ（高密度リポ蛋白）を除く血中リポ蛋白中に含まれるコレステロール総量の指標となる。
【００２０】
一方、総頸動脈内膜中膜複合体肥厚度（ＣＣＡ−ＩＭＴ）や冠動脈狭窄度など、血管壁の肥厚を、動脈硬化度の指標にすることが広く知られているが、コレステロール値との関係性としては、例えば、総頸動脈内膜中膜複合体肥厚度（ＣＣＡ−ＩＭＴ）の低値群では、高値群に比べて、総コレステロールとＬＤＬコレステロールが有意に低値を示したことの報告がある（糖尿病 50(7) : 479〜483, 2007）。更に、ＬＤＬコレステロールを低下させると冠動脈狭窄度の進展抑制効果があるという報告がある（循環器疾患と生活習慣病 Metabolic Cardiologyの診療 (2000) 55〜61）。
【００２１】
したがって、本発明により提供される組成物は、このような血管壁の肥厚の予防のために用いられてもよい。なお、「予防」とは、本発明による組成物を適用しない場合に比べて、諸般の症状や身体的状態を適用者にとってより悪い状態にさせるリスクを低減することを意味する。よって、日頃からそのようなより良い状態を崩さずに維持するための適用をも含む意味である。また、「改善」とは、本発明による組成物を適用しない場合に比べて、適用したほうが諸般の症状や身体的状態を適用者にとってより良い状態にさせることを意味するともに、日頃からそのようなより良い状態を崩さずに維持するための予防的適用をも含む意味である。
【００２２】
本発明によれば、上記のとおり、ヒトや動物の生体に作用して健康保健的な側面で良い影響を与える組成物が提供される。以下では、更なる説明の便宜のため、本発明により提供される、クロモジエキスを含有する組成物を、単に「機能性組成物」という場合がある。
【００２３】
本発明に用いられるクロモジエキスの基原としては、クロモジ属（Ｌｉｎｄｅｒａ）に属する植物であればよく、例えば、クロモジ（Ｌｉｎｄｅｒａ  ｕｍｂｅｌｌａｔａ  Ｔｈｕｎｂ．）、オオバクロモジ（Ｌｉｎｄｅｒａ  ｕｍｂｅｌｌａｔａ  ｖａｒ． ｍｅｍｂｒａｎａｃｅａ （Ｍａｘｉｍ．） Ｍｏｍｉｙａｍ）、ヒメクロモジ（Ｌｉｎｄｅｒａ  ｕｍｂｅｌｌａｔａ  ｖａｒ．ｌａｎｃｅａ  Ｍｏｍｊｙａｍａ）、ケクロモジ（Ｌｉｎｄｅｒａ  ｓｅｒｉｃｅａ（Ｓｉｅｂ．ｅｔ  Ｚｕｃｃ．）Ｂｌｕｍｅ）、ウスゲクロモジ（Ｌｉｎｄｅｒａ  ｓｅｒｉｃｅａ  ｖａｒ．ｇｌａｂｒａｔａ  Ｂｌｕｍｅ）、シロモジ（Ｌｉｎｄｅｒａ  ｔｒｉｌｏｂａ（Ｓｉｅｂ．ｅｔ  Ｚｕｃｃ．）Ｂｌｕｍｅ）、アメリカクロモジ（Ｌｉｎｄｅｒａ  ｂｅｎｚｏｉｎ（Ｌ．）Ｂｌｕｍｅ）、ヤマコウバシ（Ｌｉｎｄｅｒａ  ｇｌａｕｃａ  Ｂｌｕｍｅ）、ダンコウバイ（Ｌｉｎｄｅｒａ  ｏｂｔｕｓｉｌｏｂａ  Ｂｌｕｍｅ）、テンダイウヤク（Ｌｉｎｄｅｒａ  ｓｔｒｙｃｈｎｉｆｏｌｉａ（Ｓｉｅｂ．ｅｔ Ｚｕｃｃ．）Ｆ．Ｖｉｌｌ．）などが挙げられる。これらの中でも、特に、クロモジ（Ｌｉｎｄｅｒａ  ｕｍｂｅｌｌａｔａ  Ｔｈｕｎｂ．）が好ましい。
【００２４】
上記植物の部位としては、特に制限はなく、例えば、幹枝、幹、枝葉、葉、樹皮、根、根茎、根皮、茎、花、種子、果皮、果肉、果実、地上部、地下部、全木などが挙げられる。これらの中でも、特に、幹枝が好ましい。
【００２５】
本発明においては、上記植物を基原として抽出物を調製してコレステロール低減の機能性を発揮させる成分として用いる。より具体的には、本発明においてはクロモジエキスが有効成分ないしは機能性関与成分である。その抽出に用いられる抽出溶媒としては、適宜適当なものを用いればよいが、典型的には水又は含水有機溶媒が挙げられる。特には、水であることがより好ましい。含水有機溶媒の有機溶媒としては、例えば、メタノール、エタノール等の低級アルコール、酢酸エチル、アセトン、クロロホルム、ｎ−ヘキサンなどが挙げられる。これら有機溶媒は二種以上を混合して用いることもできる。また、その抽出に用いられる含水有機溶媒の有機溶媒含量としては、５０体積％以下であることが好ましく、５〜５０体積％であることがより好ましく、１０〜４５体積％が更により好ましく、２０〜４０体積％が最も好ましい。特に、含水エタノールの場合には、エタノール含量５０体積％以下の含水エタノールが好ましく、エタノール含量５〜５０体積％の含水エタノールがより好ましく、エタノール含量１０〜４５体積％の含水エタノールが更により好ましく、エタノール含量２０〜４０体積％の含水エタノールが最も好ましい。
【００２６】
抽出の具体的手法としては、一般的な抽出手段を採用することができ、例えば、クロモジの幹枝の乾燥物を適当に裁断した後、その全質量に対して１〜５０倍、好ましくは５〜２０倍量の抽出溶媒を加え、１〜２４時間程度、室温〜使用溶媒の沸点の範囲で浸漬・加熱抽出を行うことができる。必要に応じて、加圧下に抽出を行ってもよい。抽出後には、必要に応じて濾過を行い、得られた抽出液を減圧濃縮したり、乾燥等により使用した抽出溶媒を除去したりして、目的とする抽出物を調製することができる。乾燥手段としては、凍結乾燥、減圧乾燥、噴霧乾燥等が挙げられる。なお、例えば、抽出溶媒が水である場合には、抽出温度は５〜１００℃であることが好ましく、３０〜１００℃であることがより好ましく、５０〜１００℃であることが更により好ましい。また、抽出溶媒が含水エタノールである場合には、抽出温度は５〜７０℃であることが好ましく、３０〜７０℃であることがより好ましく、５０〜７０℃であることが更により好ましい。
【００２７】
本発明により提供される機能性組成物は、例えば、経口的に摂取するように用いることが好ましい。経口摂取のための形態としては、特に制限はなく、上記に説明したクロモジエキスと、経口摂取用として許容される基材や担体、溶媒等を用いて、固体状物、液状物、乳化状物、ペースト状物、ゼリー状物等の形態とすることができる。また、錠剤、顆粒剤、散剤、液剤、カプセル剤等の形態とすることができる。また、上記に説明したクロモジエキスを濃縮液状のまま、もしくは固形状に調製したものを適宜溶媒に溶解・分散したうえ、その液状のまま適当な担体、好ましくは脂肪酸トリグリセライドと混合し、ソフトカプセル外皮に充填して、ソフトカプセルを調製することもできる。
【００２８】
製剤化においては、必要に応じて、通常使用されている賦形剤、結合剤、崩壊剤、滑沢剤、安定剤、界面活性剤、溶解補助剤、還元剤、緩衝剤、吸着剤、流動化剤、帯電防止剤、抗酸化剤、甘味剤、矯味剤、清涼化剤、遮光剤、着香剤、香料、芳香剤、コーティング剤、可塑剤等の製剤添加物の１種または２種以上を適宜選択して添加してもよい。
【００２９】
そのような製剤添加物としては、具体的には、例えば、結晶セルロース、低置換度ヒドロキシプロピルセルロース、ヒドロキシプロピルメチルセルロース、クロスカルメロースナトリウム、マルトデキストリン、エチルセルロース、乳糖、ソルビトール、無水ケイ酸、ケイ酸マグネシウム、ヒドロキシプロピルセルロース、ステアリン酸、オレイン酸、流動パラフィン、第二リン酸カルシウム、セバチン酸ジブチル、マクロゴール、プロピレングリコール、コーンスターチ、デンプン、アルファー化デンプン、ゼラチン、ポピドン、クロスポピドン、グリセリン、ポリソルベート８０、クエン酸、アセスルファムカリウム、アスパルテーム、炭酸ナトリウム、タルク、ステアリン酸マグネシウム、ステアリン酸カルシウム等を挙げることができる。
【００３０】
本発明により提供される機能性組成物においては、上記に説明したクロモジエキスを含有し、更に、本発明の作用効果を損なわない範囲で、ビタミン、ミネラル、アミノ酸、脂肪酸、食物繊維等の他の成分を添加してもよい。
【００３１】
本発明により提供される機能性組成物においては、上記に説明したクロモジエキスを全体中に乾燥分換算で０．００１〜１００質量％含有していることが好ましく、０．０１〜７０質量％含有していることがより好ましく、０．０５〜５０質量％含有していることが最も好ましい。
【００３２】
本発明により提供される機能性組成物をヒトに経口投与する場合、その投与量としては、年齢や体重によっても異なるが、例えば、成人１日当たり、上記に説明したクロモジエキスの乾燥分換算で１．０ｍｇ〜５０ｇ程度であることが好ましく、５．０ｍｇ〜２０ｇ程度であることがより好ましく、１０ｍｇ〜１０ｇ程度であることが最も好ましい。
【００３３】
本発明により提供される機能性組成物の使用形態としては、その作用効果を損なわない限り、特に制限はない。例えば、機能性食品、サプリメント、医薬品などの形態であってよい。これらの形態は、ヒト用だけに限られず、動物用であってもよい。より具体的には、機能性表示食品、特定保健用食品、健康食品、機能性食品、栄養補助食品、サプリメント、医薬品、医薬部外品、動物用健康食品、動物用機能性食品、動物用栄養補助食品、動物用サプリメント、動物用医薬品、動物用医薬部外品など各種の製品形態で、あるいはそれら製品と組み合わせて使用されることが可能である。
【００３４】
上記使用形態としては、食品組成物の形態であってもよい。すなわち、クロモジエキスを飲食物に所定量配合することにより、所定の機能性を発揮させるための食品組成物と成すことができる。具体的には、例えば、固形状、粉末状、顆粒状のものとしては、ビスケット、クッキー、ケーキ、スナック、煎餅などの各種の菓子類、パン、粉末飲料（粉末コーヒー、粉末ココアなど）、飴、キャラメル等を挙げることができるが、これらに限定されるものではない。また、液状、乳化状、ペースト状、ゼリー状のものとしては、ドリンク、ゼリー、ムースなどの各種製品や薬用酒等を挙げることができるが、これらに限定されるものではない。更には、これら飲食物に配合するために用いられる食品添加用の組成物の形態であってもよい。
【００３５】
上述したとおり、本発明によれば、クロモジエキスには、血中の総コレステロール濃度を低減させたり、血中のＬＤＬコレステロール濃度を低減させたり、血中のＬＤＬコレステロール／ＨＤＬコレステロールの濃度比を低減させたり、血中のｎｏｎ−ＨＤＬコレステロール濃度を低減させたりする作用効果があることが示された。よって、このようなクロモジエキスによれば、それを上記食品等の組成物に含有せしめるように使用して、それを添加された組成物にコレステロール低減の機能性を付与する、コレステロール低減機能性付与方法が提供され得る。
【実施例】
【００３６】
以下に実施例を挙げて本発明について更に具体的に説明するが、これらの実施例は本発明の範囲を限定するものではない。
【００３７】
［調製例１］
クロモジ（Lindera umbellata Thunb.）の幹枝の乾燥物を裁断した後、その全質量に対して１０倍量の水を加え加熱し、沸騰後１時間浸漬・加熱抽出を行った。抽出後は濾過により不溶物を除き、得られた抽出液を減圧濃縮し、更に凍結乾燥により抽出溶媒を除去して、乾燥粉末状のクロモジエキスを得た。
【００３８】
＜試験例１＞
調製例１で得られたクロモジエキスを用いて、コレステロール低減作用を検証した。
【００３９】
試験動物としては、生活習慣病モデルマウスであるC57BLKS/J Iar-+Lwprdb /+Lwprdb （db/dbマウス）を使用し、生活習慣病モデルマウスでは、正常マウスであるC57BLKS/J Iar-m+/+Lwprdb （db/+マウス）と比較したとき、血中コレステロールに増加傾向がみられるが、これをクロモジエキスが抑制できるかどうか評価した。
【００４０】
試験動物（生活習慣病モデルマウスと正常マウス、雄、７週齢）は、１週間予備飼育後、オールフレッシュエアー、温度２４±２℃、湿度：５０±１０％、照明時間：１日１２時間（７〜１９時）に設定されたバリア施設内の飼育室で飼育した。餌は放射線滅菌した固形飼料（ラボMRストック、日本農産工業株式会社）を使用し、飲料水は塩素消毒した井水を給水瓶を用いて自由摂取させた。
【００４１】
投与群としては、正常群（正常マウス）及び対照群（生活習慣病モデルマウス）には蒸留水を、クロモジエキス低投与群にはクロモジエキスを１００ｍｇ／ｋｇ／ｄａｙの投与量で、クロモジエキス高投与群にはクロモジエキスを３００ｍｇ／ｋｇ／ｄａｙの投与量で、それぞれ経口ゾンデを用いて１２週間毎日経口投与した。また、参考群には参考薬剤としてメトホルミン塩酸塩を３５０ｍｇ／ｋｇ／ｄａｙの投与量で、同様に経口ゾンデを用いて１２週間毎日経口投与した。なお、メトホルミン塩酸塩はビグアナイド系の血糖降下剤として知られるが、近年には、db/dbマウスにおける脂質プロファイルを変化させて血中コレステロールを低下させる作用を有することについて報告がある（参考１：Xu T, et al.「Effects of metformin on metabolite profiles and LDL cholesterol in patients with type 2 diabetes.」Diabetes Care. 2015 Oct;38(10):1858-67、参考２：Qinwen Bao, et al.「Anti-diabetic activities of catalpol in db/db mice」Korean J Physiol Pharmacol. 2016 Mar; 20(2): 153-160）。
【００４２】
投与期間終了後、イソフルラン吸入麻酔下で心臓より全採血を行い、その血清サンプルを調製した。
【００４３】
動物試験は、各投与群についてそれぞれ９〜１０例行って、以下に示した各測定結果について、その平均値及び標準偏差を求めた。更にBonferroniの多重比較検定により、正常群又は対照群に対する有意差検定を行った。
【００４４】
（１）血中の総コレステロール濃度
各投与群から調製した血清サンプルを、総コレステロール濃度測定キット（「LabAssayTM Cholesterol」、和光純薬工業株式会社）に供して、血中の総コレステロール濃度を求めた。
【００４５】
具体的には、９６穴マイクロプレートのウェル内でマウス血清検体１μＬとキットに備わる発色試薬１５０μＬを混合し、３７℃で５分加温後、主波長６００ｎｍ／副波長７００ｎｍの吸光度を測定した。別途、既知濃度検体を使用して、「ｙ＝ａｘ2＋ｂｘ＋ｃ」（ｘ：コレステロール濃度、ｙ：吸光度）を近似曲線式とした検量線を引き、その検量線に測定値をあてはめて、総コレステロール濃度（ｍｇ／ｄＬ）を算出した。
【００４６】
（２）血中のＬＤＬコレステロール濃度
各投与群から調製した血清サンプルを、ＬＤＬコレステロール濃度測定キット（「Lタイプワコー LDL-C・M」、和光純薬工業株式会社）に供して、血中のＬＤＬコレステロール濃度を求めた。
【００４７】
具体的には、９６穴マイクロプレートのウェル内でマウス血清検体２μＬとキットに備わる前処理液１８０μＬを混合し３７℃で５分加温して、更にキットに備わる反応試液６０μＬを添加し、３７℃で５分加温後、主波長６００ｎｍ／副波長７００ｎｍの吸光度を測定した。別途、既知濃度検体を使用して、上記（１）と同様にして検量線を引き、その検量線に測定値をあてはめて、ＬＤＬコレステロール濃度（ｍｇ／ｄＬ）を算出した。
【００４８】
（３）血中のＨＤＬコレステロール濃度
各投与群から調製した血清サンプルを、ＨＤＬコレステロール濃度測定キット（「HDL-コレステロール E-テストワコー」、和光純薬工業株式会社）に供して、血中のＨＤＬコレステロール濃度を求めた。
【００４９】
具体的には、マウス血清検体２μＬとキットに備わる沈殿試液２μＬを混合し、室温で１０分間放置した後、３０００ｒｐｍで１０分間遠心して、その上清を測定試料とした。９６穴マイクロプレートのウェル内でその測定試料２μＬとキットに備わる発色試薬１２０μＬを混合し、３７℃で５分加温後、主波長６００ｎｍ／副波長７００ｎｍの吸光度を測定した。別途、既知濃度検体を使用して、上記（１）と同様にして検量線を引き、その検量線に測定値をあてはめて、ＨＤＬコレステロール濃度（ｍｇ／ｄＬ）を算出した。
【００５０】
（４）血中のＬＤＬコレステロール／ＨＤＬコレステロールの濃度比
上記（２）で求められたＬＤＬコレステロール濃度（ｍｇ／ｄＬ）を、上記（３）で求められたＨＤＬコレステロール濃度（ｍｇ／ｄＬ）で除し、算出した。
【００５１】
（５）血中のｎｏｎ−ＨＤＬコレステロール濃度
上記（１）で求められた総コレステロール濃度（ｍｇ／ｄＬ）から、上記（３）で求められたＨＤＬコレステロール濃度（ｍｇ／ｄＬ）を引き、算出した。
【００５２】
上記（１）の結果を図１に、上記（２）の結果を図２に、上記（３）の結果を図３に、上記（４）の結果を図４に、上記（５）の結果を図５に、それぞれ示す。
【００５３】
図１にみられるように、対照群（生活習慣病モデルマウス）では、正常群（正常マウス）と比較して、血中の総コレステロール濃度の増加がみられたが、それをクロモジエキスの投与により低減させることができた。特に高投与群では、対照群に対して危険率ｐ＜０．０５で有意差がみられた。
【００５４】
図２にみられるように、対照群（生活習慣病モデルマウス）では、正常群（正常マウス）と比較して、血中のＬＤＬコレステロール濃度の増加がみられたが、それをクロモジエキスの投与により低減させることができた。特に高投与群では、対照群に対して危険率ｐ＜０．０５で有意差がみられた。
【００５５】
図３にみられるように、対照群（生活習慣病モデルマウス）では、正常群（正常マウス）と比較して、血中のＨＤＬコレステロール濃度の増加がみられたが、クロモジエキスを投与しても有意な変化はみられなかった。
【００５６】
図４にみられるように、クロモジエキスの投与により、血中のＬＤＬコレステロール／ＨＤＬコレステロールの濃度比を低減させることができ、特に高投与群では、対照群に対して危険率ｐ＜０．０１で有意差がみられた。
【００５７】
図５にみられるように、クロモジエキスの投与により、血中のｎｏｎ−ＨＤＬコレステロール濃度を低減させることができ、特に高投与群では、対照群に対して危険率ｐ＜０．０１で有意差がみられた。
【図１】
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【図２】
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【図３】
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【図４】
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【図５】
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