(57)【要約】【課題】脂質二重膜の特性を簡易に検査することができる新規の検査方法を提供すること。【解決手段】脂質一重膜で覆われた第一のバブルと脂質一重膜で覆われた第二のバブルとの接触面に形成される脂質二重膜の特性の検査方法であり、内圧検出工程、長短径検出工程、および、接触角検出工程、を含み、検出値に基づいて脂質二重膜の張力γを算出することを特徴とする、脂質二重膜の特性の検査方法を提供する。【選択図】図１
2019113417.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
脂質一重膜で覆われた第一のバブルと脂質一重膜で覆われた第二のバブルとの接触面に形成される脂質二重膜の特性の検査方法であり、
上記第一のバブルの内圧ΔＰ１および上記第二のバブルの内圧ΔＰ２を検出する内圧検出工程、
上記第一のバブルの長径Ｒ１１および短径Ｒ２１、ならびに、上記第二のバブルの長径Ｒ１２および短径Ｒ２２、を検出する長短径検出工程、
上記脂質二重膜と上記第一のバブルの脂質一重膜との境界面に発生する接触角θ１および上記脂質二重膜と上記第二のバブルの脂質一重膜との境界面に発生する接触角θ２、を検出する接触角検出工程、ならびに、
下記式（１）〜（５）から上記脂質二重膜の張力γを算出する張力算出工程、を含むことを特徴とする、脂質二重膜の特性の検査方法。
式（１）ΔＰ１＝γ１×（１／Ｒ１１＋１／Ｒ２１）
式（２）ΔＰ２＝γ２×（１／Ｒ１２＋１／Ｒ２２）
式（３）γｂ１＝γ１×ｃｏｓθ１
式（４）γｂ2＝γ２×ｃｏｓθ２
式（５）γ＝γｂ1＋γｂ２
（ここで、γ１は上記第一のバブルの脂質一重膜の張力であり、γ２は上記第二のバブルの脂質一重膜の張力であり、γｂ１は上記脂質二重膜における上記第一のバブルの側の単分子層の張力であり、γｂ２は上記脂質二重膜における上記第二のバブルの側の単分子層の張力である）
【請求項２】
さらに、
上記脂質二重膜の静電容量Ｃを検出する静電容量検出工程、
上記脂質二重膜の面積Ａを検出する面積検出工程、および、
下記式（６）から上記脂質二重膜の膜厚Ｔを算出する膜厚算出工程、を含むことを特徴とする、請求項１に記載の脂質二重膜の特性の検査方法。
式（６）Ｔ＝εｍ×ε０×Ａ／Ｃ
（ここでεｍは上記脂質二重膜の比誘電率であり、ε０は真空の誘電率である）
【請求項３】
脂質一重膜で覆われた第一のバブルと脂質一重膜で覆われた第二のバブルとの接触面に形成される脂質二重膜を用いた、上記脂質二重膜の特性を変化させる薬剤のスクリーニング方法であり、
上記脂質二重膜中に対して薬剤の導入を行う薬剤導入工程、
上記薬剤の導入の後に上記脂質二重膜の張力γを算出する張力算出工程、および、
上記張力γを基準値と比較することによって薬剤を判定する第１の薬剤判定工程、を含み、
上記張力算出工程は、
上記第一のバブルの内圧ΔＰ１および上記第二のバブルの内圧ΔＰ２を検出する内圧検出工程、
上記第一のバブルの長径Ｒ１１および短径Ｒ２１、ならびに、上記第二のバブルの長径Ｒ１２および短径Ｒ２２、を検出する長短径検出工程、ならびに
上記脂質二重膜と上記第一のバブルの脂質一重膜との境界面に発生する接触角θ１および上記脂質二重膜と上記第二のバブルの脂質一重膜との境界面に発生する接触角θ２、を検出する接触角検出工程、を含み
下記式（１）〜（５）から上記脂質二重膜の張力γを算出する工程であることを特徴とする、薬剤のスクリーニング方法。
式（１）ΔＰ１＝γ１×（１／Ｒ１１＋１／Ｒ２１）
式（２）ΔＰ２＝γ２×（１／Ｒ１２＋１／Ｒ２２）
式（３）γｂ１＝γ１×ｃｏｓθ１
式（４）γｂ2＝γ２×ｃｏｓθ２
式（５）γ＝γｂ1＋γｂ２
（ここで、γ１は上記第一のバブルの脂質一重膜の張力であり、γ２は上記第二のバブルの脂質一重膜の張力であり、γｂ１は上記脂質二重膜における上記第一のバブルの側の単分子層の張力であり、γｂ２は上記脂質二重膜における上記第二のバブルの側の単分子層の張力である）
【請求項４】
さらに、
上記薬剤の導入の後に上記脂質二重膜の膜厚Ｔを算出する膜厚算出工程、および、
上記膜厚Ｔを基準値と比較することによって薬剤を判定する第２の薬剤判定工程、を含み、
上記膜厚算出工程は、
上記脂質二重膜の静電容量Ｃを検出する静電容量検出工程、および
上記脂質二重膜の面積Ａを検出する面積検出工程、を含み、
下記式（６）から上記脂質二重膜の膜厚Ｔを算出する工程であることを特徴とする、請求項３に記載の薬剤のスクリーニング方法。
式（６）Ｔ＝εｍ×ε０×Ａ／Ｃ
（ここでεｍは上記脂質二重膜の比誘電率であり、ε０は真空の誘電率である）
【請求項５】
脂質一重膜で覆われた第一のバブルと脂質一重膜で覆われた第二のバブルとの接触面に形成される脂質二重膜の特性の解析システムであり、
上記第一のバブルの内圧ΔＰ１を検出する第一の内圧検出部、および、上記第二のバブルの内圧ΔＰ２を検出する第二の内圧検出部、
上記第一のバブルの長径Ｒ１１および短径Ｒ２１、ならびに、上記第二のバブルの長径Ｒ１２および短径Ｒ２２、を検出し、かつ、上記脂質二重膜と上記第一のバブルの脂質一重膜との境界面に発生する接触角θ１および上記脂質二重膜と上記第二のバブルの脂質一重膜との境界面に発生する接触角θ２、を検出する、長短径−接触角検出部、ならびに、
下記式（１）〜（５）から上記脂質二重膜の張力γを算出する張力算出部、を備えることを特徴とする、脂質二重膜の特性の解析システム。
式（１）ΔＰ１＝γ１×（１／Ｒ１１＋１／Ｒ２１）
式（２）ΔＰ２＝γ２×（１／Ｒ１２＋１／Ｒ２２）
式（３）γｂ１＝γ１×ｃｏｓθ１
式（４）γｂ2＝γ２×ｃｏｓθ２
式（５）γ＝γｂ1＋γｂ２
（ここで、γ１は上記第一のバブルの脂質一重膜の張力であり、γ２は上記第二のバブルの脂質一重膜の張力であり、γｂ１は上記脂質二重膜における上記第一のバブルの側の単分子層の張力であり、γｂ２は上記脂質二重膜における上記第二のバブルの側の単分子層の張力である）
【請求項６】
さらに、
上記脂質二重膜の静電容量Ｃを検出する静電容量検出部、
上記脂質二重膜の面積Ａを検出する面積検出部、および、
下記式（６）から上記脂質二重膜の膜厚Ｔを算出する膜厚算出部、を備えることを特徴とする、請求項５に記載の脂質二重膜の特性の解析システム。
式（６）Ｔ＝εｍ×ε０×Ａ／Ｃ
（ここでεｍは上記脂質二重膜の比誘電率であり、ε０は真空の誘電率である）
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、脂質二重膜の特性の検査方法、薬剤のスクリーニング方法、および脂質二重膜の特性の解析システム、に関する。
【背景技術】
【０００２】
細胞は、一般的に、脂質二重膜にて形成されている細胞膜によって覆われており、当該細胞膜によって、細胞と外界との境界が形成されている。
【０００３】
細胞膜は、外界から細胞内へ物質が自由拡散することを防ぐ機能を有しているのみならず、外界から細胞内へ物質を選択的に取り込む機能も有している。このような細胞膜の機能は、細胞膜を形成している脂質や、細胞膜中に埋め込まれている様々な膜タンパク質などによって発現されている。
【０００４】
近年、細胞膜の研究の発展に伴い、人工的に脂質二重膜を作製する技術の開発、および、当該脂質二重膜の特性を検査および解析する技術の開発、が求められている（例えば、特許文献１、および非特許文献１を参照）。
【先行技術文献】
【特許文献】
【０００５】
【特許文献１】特開２０１４−１００６７２号公報（２０１４年６月５日公開）
【非特許文献】
【０００６】
【非特許文献１】Masayuki Iwamoto & Shigetoshi Oiki, Sci. Rep. 5, 9110, 2015
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００７】
しかしながら、脂質二重膜の特性（例えば、膜の厚さおよび膜張力などの物理的特性）を検査および解析する従来の技術は、脂質二重膜の特性を、簡易に検査または解析するという観点からは十分なものでなく、さらなる改善の余地があった。
【０００８】
本発明の一実施形態の目的は、脂質二重膜の特性を検査することができる検査方法、および、脂質二重膜の特性を解析することができる解析システムを提供することである。また、本発明の他の一実施形態の目的は、脂質二重膜の特性を変化させる薬剤をスクリーニングできる薬剤のスクリーニング方法を提供することである。
【課題を解決するための手段】
【０００９】
本発明の一実施形態は、以下の構成を含むものである。
〔１〕脂質一重膜で覆われた第一のバブルと脂質一重膜で覆われた第二のバブルとの接触面に形成される脂質二重膜の特性の検査方法であり、上記第一のバブルの内圧ΔＰ１および上記第二のバブルの内圧ΔＰ２を検出する内圧検出工程、上記第一のバブルの長径Ｒ１１および短径Ｒ２１、ならびに、上記第二のバブルの長径Ｒ１２および短径Ｒ２２、を検出する長短径検出工程、上記脂質二重膜と上記第一のバブルの脂質一重膜との境界面に発生する接触角θ１および上記脂質二重膜と上記第二のバブルの脂質一重膜との境界面に発生する接触角θ２、を検出する接触角検出工程、ならびに、下記式（１）〜（５）から上記脂質二重膜の張力γを算出する張力算出工程、を含むことを特徴とする、脂質二重膜の特性の検査方法。
【００１０】
式（１）ΔＰ１＝γ１×（１／Ｒ１１＋１／Ｒ２１）
式（２）ΔＰ２＝γ２×（１／Ｒ１２＋１／Ｒ２２）
式（３）γｂ１＝γ１×ｃｏｓθ１
式（４）γｂ2＝γ２×ｃｏｓθ２
式（５）γ＝γｂ1＋γｂ２
（ここで、γ１は上記第一のバブルの脂質一重膜の張力であり、γ２は上記第二のバブルの脂質一重膜の張力であり、γｂ１は上記脂質二重膜における上記第一のバブルの側の単分子層の張力であり、γｂ２は上記脂質二重膜における上記第二のバブルの側の単分子層の張力である）
〔２〕さらに、上記脂質二重膜の静電容量Ｃを検出する静電容量検出工程、上記脂質二重膜の面積Ａを検出する面積検出工程、および、下記式（６）から上記脂質二重膜の膜厚Ｔを算出する膜厚算出工程、を含むことを特徴とする、〔１〕に記載の脂質二重膜の特性の検査方法。
【００１１】
式（６）Ｔ＝εｍ×ε０×Ａ／Ｃ
（ここでεｍは上記脂質二重膜の比誘電率であり、ε０は真空の誘電率である。）
〔３〕脂質一重膜で覆われた第一のバブルと脂質一重膜で覆われた第二のバブルとの接触面に形成される脂質二重膜を用いた、上記脂質二重膜の特性を変化させる薬剤のスクリーニング方法であり、上記脂質二重膜中に対して薬剤の導入を行う薬剤導入工程、上記薬剤の導入の後に上記脂質二重膜の張力γを算出する張力算出工程、および、上記張力γを基準値と比較することによって薬剤を判定する第１の薬剤判定工程、を含み、上記張力算出工程は、上記第一のバブルの内圧ΔＰ１および上記第二のバブルの内圧ΔＰ２を検出する内圧検出工程、上記第一のバブルの長径Ｒ１１および短径Ｒ２１、ならびに、上記第二のバブルの長径Ｒ１２および短径Ｒ２２、を検出する長短径検出工程、ならびに上記脂質二重膜と上記第一のバブルの脂質一重膜との境界面に発生する接触角θ１および上記脂質二重膜と上記第二のバブルの脂質一重膜との境界面に発生する接触角θ２、を検出する接触角検出工程、を含み下記式（１）〜（５）から上記脂質二重膜の張力γを算出する工程であることを特徴とする、薬剤のスクリーニング方法。
【００１２】
式（１）ΔＰ１＝γ１×（１／Ｒ１１＋１／Ｒ２１）
式（２）ΔＰ２＝γ２×（１／Ｒ１２＋１／Ｒ２２）
式（３）γｂ１＝γ１×ｃｏｓθ１
式（４）γｂ2＝γ２×ｃｏｓθ２
式（５）γ＝γｂ1＋γｂ２
（ここで、γ１は上記第一のバブルの脂質一重膜の張力であり、γ２は上記第二のバブルの脂質一重膜の張力であり、γｂ１は上記脂質二重膜における上記第一のバブルの側の単分子層の張力であり、γｂ２は上記脂質二重膜における上記第二のバブルの側の単分子層の張力である）
〔４〕さらに、上記薬剤の導入の後に上記脂質二重膜の膜厚Ｔを算出する膜厚算出工程、および、上記膜厚Ｔを基準値と比較することによって薬剤を判定する第２の薬剤判定工程、を含み、上記膜厚算出工程は、上記脂質二重膜の静電容量Ｃを検出する静電容量検出工程、および上記脂質二重膜の面積Ａを検出する面積検出工程、を含み、下記式（６）から上記脂質二重膜の膜厚Ｔを算出する工程であることを特徴とする、〔３〕に記載の薬剤のスクリーニング方法。
【００１３】
式（６）Ｔ＝εｍ×ε０×Ａ／Ｃ
（ここでεｍは上記脂質二重膜の比誘電率であり、ε０は真空の誘電率である。）
〔５〕脂質一重膜で覆われた第一のバブルと脂質一重膜で覆われた第二のバブルとの接触面に形成される脂質二重膜の特性の解析システムであり、上記第一のバブルの内圧ΔＰ１を検出する第一の内圧検出部、および、上記第二のバブルの内圧ΔＰ２を検出する第二の内圧検出部、上記第一のバブルの長径Ｒ１１および短径Ｒ２１、ならびに、上記第二のバブルの長径Ｒ１２および短径Ｒ２２、を検出し、かつ、上記脂質二重膜と上記第一のバブルの脂質一重膜との境界面に発生する接触角θ１および上記脂質二重膜と上記第二のバブルの脂質一重膜との境界面に発生する接触角θ２、を検出する、長短径−接触角検出部、ならびに、下記式（１）〜（５）から上記脂質二重膜の張力γを算出する張力算出部、を備えることを特徴とする、脂質二重膜の特性の解析システム。
【００１４】
式（１）ΔＰ１＝γ１×（１／Ｒ１１＋１／Ｒ２１）
式（２）ΔＰ２＝γ２×（１／Ｒ１２＋１／Ｒ２２）
式（３）γｂ１＝γ１×ｃｏｓθ１
式（４）γｂ2＝γ２×ｃｏｓθ２
式（５）γ＝γｂ1＋γｂ２
（ここで、γ１は上記第一のバブルの脂質一重膜の張力であり、γ２は上記第二のバブルの脂質一重膜の張力であり、γｂ１は上記脂質二重膜における上記第一のバブルの側の単分子層の張力であり、γｂ２は上記脂質二重膜における上記第二のバブルの側の単分子層の張力である）
〔６〕さらに、上記脂質二重膜の静電容量Ｃを検出する静電容量検出部、上記脂質二重膜の面積Ａを検出する面積検出部、および、下記式（６）から上記脂質二重膜の膜厚Ｔを算出する膜厚算出部、を備えることを特徴とする、〔５〕に記載の脂質二重膜の特性の解析システム。
【００１５】
式（６）Ｔ＝εｍ×ε０×Ａ／Ｃ
（ここでεｍは上記脂質二重膜の比誘電率であり、ε０は真空の誘電率である。）
【発明の効果】
【００１６】
本発明の一実施形態によれば、脂質二重膜の特性を簡易に検査または解析することができる。また、本発明の他の一実施形態によれば、脂質二重膜の特性を変化させる薬剤を簡易にスクリーニングできる。
【図面の簡単な説明】
【００１７】
【図１】本発明の一実施形態に係る解析システムの構成を示す概略図である。
【図２】本発明の一実施形態に係る解析システムの構成を示す概略図である。
【図３】（ａ）本発明の一実施形態に係る解析システムにおける脂質二重膜形成部の構成を示す概略図であり、脂質二重膜に垂直な断面の断面図である。（ｂ）図３の（ａ）のＡ−Ａ線矢視断面図である。
【図４】本発明の一実施形態に係る解析システムを示すブロック図である。
【図５】本発明の一実施形態に係る解析システムを示すブロック図である。
【図６】（ａ）バブルの維持圧の減圧にともなう２つのバブルおよび脂質二重膜の形状の変化を示す図である。（ｂ）図６の（ａ）を模式的に示した概略図である。
【図７】バブルの維持圧の減圧にともなうイオン電流の変化を示すグラフである。
【発明を実施するための形態】
【００１８】
本発明の一実施形態について以下に説明するが、本発明はこれに限定されるものではない。本発明は、以下に説明する各構成に限定されるものではなく、特許請求の範囲に示した範囲で種々の変更が可能である。本発明はまた、異なる実施形態や実施例にそれぞれ開示された技術的手段を適宜組み合わせて得られる実施形態や実施例についても本発明の技術的範囲に含まれる。なお、本明細書中に記載された学術文献および特許文献の全てが、本明細書中において参考文献として援用される。また、本明細書において特記しない限り、数値範囲を表す「Ａ〜Ｂ」は、「Ａ以上（Ａを含みかつＡより大きい）Ｂ以下（Ｂを含みかつＢより小さい）」を意図する。
【００１９】
〔１．本発明の特徴点〕
本発明の一実施形態に係る検査方法は、脂質二重膜の特性（具体的には、物理的特性である張力）を測定するために、バブルの内圧、バブルの長径および短径、ならびに、バブルを覆っている脂質一重膜と脂質二重膜との接触角を、それぞれ一度測定（検出）すればよい。
【００２０】
また、本発明の一実施形態に係る検査方法は、脂質二重膜の特性（具体的には、物理的特性である膜厚）を測定するために、脂質二重膜の、静電容量と面積とを、それぞれ一度測定（検出）すればよい。
【００２１】
従って、本発明の一実施形態に係る検査方法は、ある組成の脂質二重膜の物理的特性である張力および膜厚を、極めて簡便にかつ短時間に算出（例えば、リアルタイムにて算出）することができる。
【００２２】
また、本発明の一実施形態に係る検査方法では、脂質二重膜の張力だけでなく、脂質二重膜を構成する、バブル由来の２枚の単分子層の各張力を算出することもできる。なお、上記単分子層とは、バブルの脂質一重膜のうち、脂質二重膜を構成している部分のことである。
【００２３】
〔２．脂質二重膜の特性の検査方法〕
本発明の一実施形態は、内圧検出工程、長短径検出工程、接触角検出工程、および張力算出工程、を含む、脂質二重膜の特性の検査方法を提供する。
【００２４】
本発明の一実施形態に係る脂質二重膜の特性の検査方法は、上述した構成を有することにより、脂質二重膜の特性、特に脂質二重膜の張力、を簡易に検査することができるという利点を有する。
【００２５】
本明細書において、「脂質二重膜の特性の検査方法」を単に「検査方法」とも称する。
【００２６】
（脂質二重膜形成工程）
本発明の一実施形態に係る検査方法において、検査される脂質二重膜は、脂質一重膜で覆われた第一のバブルと脂質一重膜で覆われた第二のバブルとの接触面に形成される脂質二重膜である。故に、本検査方法は、脂質二重膜を形成する脂質二重膜形成工程を含んでいてもよい。
【００２７】
本脂質二重膜形成工程において、脂質二重膜を形成する方法としては、特に限定されず、従来公知の方法が用いられ得る。例えば、次の（１）および（２）を有する方法が挙げられる：
（１）油（油相とも称する）の中に水溶液からなるバブル（液滴とも称する。）を少なくとも２つ形成する。ここで、油の中に形成された水溶液からなるバブルでは、バブルの形成後、油中に含まれる、または、バブル内の水溶液中に含まれる、所望の脂質がバブルと油との界面に移動することによって、当該界面において、当該脂質を含む脂質一重膜が形成される。その結果、バブルは、脂質一重膜で覆われたバブルとなる；
（２）次に、脂質一重膜で覆われた複数のバブルのうち少なくとも２つのバブル（すなわち、第一のバブルおよび第二のバブル）を接触させることによって、それらバブルの接触面に脂質二重膜が形成される。
【００２８】
ここで、バブルを構成する水溶液は、電解質溶液であってもよい。水溶液が電解質溶液である場合には、バブルは、電解質溶液バブルともいえる。
【００２９】
油の中に水溶液からなるバブルを形成する方法としては、以下の（１）〜（３）の方法が挙げられるが、これらに限定されない：（１）マイクロピペットまたはシリンジなどによって油へ水溶液を滴下する方法（以下、滴下方法とも称する）；（２）マイクロピペットまたはシリンジの先端を油の中に挿入し、油の中に水溶液を注入する方法（以下、注入方法とも称する）；および（３）（ｉ）少なくとも２つの微小流路を、各微小流路の開口部が近接するように、かつ、各微小流路の開口部がバブル形成用流路内に満たされた油の中に浸かった状態にて配置し、（ｉｉ）その後、各開口部から水溶液を放出して、油の中に、水溶液からなるバブルを形成させた後、開口部からの水溶液の放出を停止する、方法。
【００３０】
２つのバブルを接触させる方法としては、例えば、２つのバブルをマニピュレーターで操作する方法、および、一方のバブルを形成した後、当該バブルの上に他方のバブルを形成し、重力を利用して２つのバブルを接触させる方法、および、２つの微小流路系の開口部同士を近接させることによって当該２つの開口部から膨らんだバブル同士を自動的に接触させる方法、が挙げられるがこれらに限定されない。
【００３１】
本脂質二重膜形成工程は、特願２０１７―０６３７９６に記載の技術を用いて実施されてもよい。なお、特願２０１７―０６３７９６の全体が、本明細書中において参考文献として援用される。
【００３２】
本脂質二重膜形成工程で使用する油は、特に限定されないが、リン脂質、ヘキサデカン、デカン、スクアレン、シリコンオイル、およびミネラルオイル等があげられる。これらの中でも、形成された２枚の脂質一重膜の間隙に入り込まず、形成された脂質二重膜が生体膜に近い膜構造となること、および揮発性の低さからヘキサデカンが好ましい。
【００３３】
油には、脂質一重膜を形成可能な脂質が含まれていてもよい。別の構成としては、水溶液に、脂質一重膜を形成可能な脂質が含まれていてもよい。別の構成としては、油および水溶液の両方に、脂質一重膜を形成可能な脂質が含まれていてもよい。油が脂質一重膜を形成可能な脂質を含む場合には、水溶液に脂質一重膜を形成可能な脂質が含まれていない場合であっても、バブルが脂質一重膜で覆われることが可能になる。
【００３４】
上記脂質一重膜を形成可能な脂質としては、脂質二重膜を形成できる限り特に限定されないが、例えばリン脂質、およびコレステロールがあげられる。リン脂質としては、特に限定されないが、例えば、ホスファチジルコリン、ジフィタノイルホスファチジルコリン、ジパルミトイルホスファチジルコリン、パルミトイルオレオイルホスファチジルコリン、ジオレオイルホスファチジルコリン、ホスファチジルエタノールアミン、ホスファチジルセリン、スフィンゴミエリン、およびホスファチジルグリセロール等があげられる。
【００３５】
油が脂質一重膜を形成可能な脂質を含む場合、当該脂質の濃度は特に限定されないが、１０ｍｇ／ｍｌ〜２００ｍｇ／ｍｌであることが好ましく、１５ｍｇ／ｍｌ〜１５０ｍｇ／ｍｌであることがより好ましく、２５ｍｇ／ｍｌ〜１００ｍｇ／ｍｌであることがさらに好ましく、４０ｍｇ／ｍｌ〜６０ｍｇ／ｍｌであることが特に好ましい。上記構成であれば、水溶液が脂質一重膜を形成可能な脂質を含まない場合であっても、短時間（例えば、１０秒未満）の脂質一重膜層形成時間を実現できる。
【００３６】
本脂質二重膜形成工程で使用する水溶液は、水を主成分とする溶液であれば特に限定されず、水溶液は様々な成分（例えば、塩、塩基、糖、脂質、およびタンパク質など）を含んでいてもよい。水溶液の組成は、適宜設定されることが可能であり、例えば、特定の細胞質ゾルの成分、血液成分、またはリンパ液成分など生体内の特定の環境の成分を模した組成であってもよい。
【００３７】
水溶液に含まれる塩としては、特に限定されないが、生体中に含まれる塩などから適宜選択され、例えば、ナトリウム塩、カリウム塩、マグネシウム塩、カルシウム塩、およびリン酸塩等の金属塩、ならびにアミノ酸塩等があげられる。
【００３８】
水溶液に含まれる塩基としては、特に限定されないが、グアニン、アデニン、チミン、およびシトシン等があげられる。
【００３９】
水溶液に含まれる脂質としては、特に限定されないが、コレステロール、糖脂質、リン脂質、および複合脂質等があげられる。これら脂質成分の中には、形成されたバブルにおいて、バブルと油との界面に移動し、脂質一重膜の成分になり得るものもある。そのような、脂質一重膜の成分になり得る脂質は、コレステロール、糖脂質、リン脂質、および複合脂質等である。つまり、本発明の一実施形態では、バブルを覆っている脂質一重膜は、コレステロール、糖脂質、リン脂質、および複合脂質等の脂質を含んでもよい。
【００４０】
水溶液は、脂質一重膜を形成可能な脂質を含んでもよい。水溶液が脂質一重膜を形成可能な脂質を含む場合には、油に脂質一重膜を形成可能な脂質が含まれていない場合であっても、バブルが脂質一重膜で覆われることが可能になる。水溶液に含まれる脂質一重膜を形成可能な脂質としては、油に含まれる脂質一重膜を形成可能な脂質と同様の物質をあげることができ、上述した通りである。
【００４１】
水溶液が脂質一重膜を形成可能な脂質を含む場合、当該脂質の濃度は特に限定されないが、１０ｍｇ／ｍｌ〜２００ｍｇ／ｍｌであることが好ましく、１５ｍｇ／ｍｌ〜１５０ｍｇ／ｍｌであることがより好ましく、２５ｍｇ／ｍｌ〜１００ｍｇ／ｍｌであることがさらに好ましく、４０ｍｇ／ｍｌ〜６０ｍｇ／ｍｌであることが特に好ましい。上記構成であれば、水溶液が脂質一重膜を形成可能な脂質を含まない場合であっても、短時間（例えば、１０秒未満）の脂質一重膜層形成時間を実現できる。
【００４２】
水溶液に含まれるタンパク質としては、特に限定されないが、酵素タンパク質、輸送タンパク質、および膜タンパク質等があげられる。これらのタンパク質は、脂質二重膜内に埋め込まれ、これによって、細胞膜を再現することができる。
【００４３】
膜タンパク質としては、限定されず、各種イオンチャネル、膜貫通接着タンパク質、トランスポータ、および膜貫通型輸送タンパク質等があげられる。また、上記タンパク質は、膜タンパク質であるか否かが不明なタンパク質、膜タンパク質であるが機能未知なタンパク質、または、機能が未知なタンパク質であってもよい。
【００４４】
本発明の一実施形態に係る脂質二重膜形成方法ではまた、脂質二重膜を形成すると同時に、または、脂質二重膜が形成された後に、例えば、自由拡散、および／または、マイクロピペットなどを用いること、によって、膜タンパク質を脂質二重膜に埋め込むことが可能である。
【００４５】
本発明の一実施形態に係る脂質二重膜形成方法ではまた、チャネルタンパク質等の膜タンパク質を発現させる方法を含んでいてもよい。この場合には、発現された膜タンパク質が自由拡散、および／または、マイクロピペットなどを用いること、によって、脂質二重膜に埋め込まれ得る。
【００４６】
膜タンパク質を発現させる方法としては、例えば、バブル内の水溶液が膜タンパク質をコードする遺伝子（ＤＮＡ、ＲＮＡ等）を含み、かつ、遺伝子をインヴィトロで転写および翻訳させるために必要な任意のタンパク質を含むことによって、達成され得る。また、膜タンパク質以外のタンパク質と、膜に移行させるためのシグナルペプチドとからなる融合タンパク質を発現させてもよい。
【００４７】
本発明の一実施形態に係る脂質二重膜形成方法ではまた、膜タンパク質の機能を測定する方法を含んでいてもよい。例えば、膜タンパク質としてチャネルタンパク質を用いる場合には、バブル内に電流を検出する電流検出部を設け、かつ、脂質二重膜にあらかじめ膜電位を負荷しておくことにより、チャネルタンパク質の機能を単一チャネル電流として測定できる。
【００４８】
これら膜タンパク質を発現させる方法および膜タンパク質の機能を測定する方法を組み合わせることにより、本発明の一実施形態は、膜タンパク質を発現させるとともに、膜タンパク質の機能をリアルタイムで測定できるシステムを提供できる。当該システムの具体例としては、次のようなシステムが挙げられる。システムが備える第一のバブルにチャネルタンパク質をコードするＤＮＡと、当該ＤＮＡをインヴィトロで転写および翻訳させ得る任意のタンパク質とを導入する。次に、当該システムを３７度に維持することにより、チャネルタンパク質がバブル内で合成され、当該チャネルタンパク質は自発的に脂質二重膜に移行する。脂質二重膜にあらかじめ膜電位を負荷しておくことによって、チャネルタンパク質の機能を、単一チャネル電流として測定できる。
【００４９】
本脂質二重膜形成工程ではまた、脂質二重膜が形成された後に、脂質二重膜を形成するバブル内に、任意の成分を添加することが可能であるか、または、バブルから任意の成分を回収することも可能である。この場合には、例えば、マイクロピペットなどを用いて、バブル内に任意の成分を注入、または、バブル内の任意の成分を吸引すればよい。
【００５０】
本検査方法では、第一のバブルと第二のバブルとは、大きさ（長径および短径）、内圧、バブル内部の水溶液の組成、および、バブルを覆う脂質一重膜の組成、が同じであってもよく、または異なっていてもよい。ここで、「水溶液の組成」とは、上述したような、水溶液に含まれる様々な成分の種類および含有量など、を指す。また、「脂質一重膜の組成」とは、脂質一重膜に含まれる様々な成分（例えば、リン脂質、およびコレステロールなどの脂質、ならびに、膜タンパク質などのタンパク質）の種類および含有量などを指す。
また、第一のバブルと第二のバブルとは、脂質二重膜とバブルの脂質一重膜との境界面に発生する接触角が異なっていてもよい。さらに、上述した点の相違の結果として、第一のバブルと第二のバブルとは、バブルを覆う脂質一重膜の張力および／または膜厚、が同じであってもよく、または異なっていてもよい。
【００５１】
（内圧検出工程）
内圧検出工程は、第一のバブルの内圧ΔＰ１および第二のバブルの内圧ΔＰ２を検出する工程である。また、検出された内圧ΔＰ１および内圧ΔＰ２の情報は、内圧信号として、後述する張力算出工程に用いられ得る。
【００５２】
ここで、内圧ΔＰ１および内圧ΔＰ２を合わせて、内圧ΔＰとも称する。また、内圧ΔＰは、バブルの脂質一重膜にかかる圧力でもあり、油相からバブルの脂質一重膜にかかる圧力と、バブル内部から、バブルの脂質一重膜にかかる圧力との差である。
【００５３】
本内圧検出工程は、バブルの内圧ΔＰを検出することができればよく、内圧ΔＰを検出するための具体的な方法は、特に限定されない。内圧ΔＰを検出するための方法のいくつかの例を以下に記載するが、本発明は、これらの方法に限定されない。
【００５４】
例えば、油の中に水溶液からなるバブルを形成する方法が上述した注入方法である場合には、水溶液を油の中に注入する時に水溶液に加えられる圧力を、内圧ΔＰとすることができる。この場合には、水溶液を注入するマイクロピペットまたはシリンジの内側の空間内に設けられたセンサによって、水溶液に加えられる圧力（印加する圧力）を検出することができる。さらに、かかる圧力に基づき内圧ΔＰを得、得られた内圧ΔＰの値を、後述する張力算出工程に用いることができる。
【００５５】
また、例えば、バブルの中に挿入されたセンサによって、バブルの中の圧力を直接検出し、かかる圧力に基づき内圧ΔＰを得、得られた内圧ΔＰの値を、後述する張力算出工程に用いることができる。
【００５６】
つまり、本内圧検出工程は、バブルの中の圧力を直接検出する工程であってもよいし、バブルに加えられる力から、バブルの中の圧力を間接的に検出する工程であってもよい。
【００５７】
上述したセンサとしては、それぞれの検出対象を検出できる限り特に限定されず、周知のセンサを使用することができる。
【００５８】
ここで、脂質二重膜を形成する二つのバブル、第一のバブルおよび第二のバブル、について、バブルの内部の水溶液の組成、および、バブルを覆う脂質一重膜の組成がともに同じである場合を考える。この場合には、内圧ΔＰ１および内圧ΔＰ２は等しいと仮定してもよい。従って、脂質二重膜を形成する二つのバブルのうちのいずれか一方のバブルの内圧ΔＰを検出して、当該内圧ΔＰを、内圧ΔＰ１および内圧ΔＰ２としてもよい。
【００５９】
（長短径検出工程）
長短径検出工程は、第一のバブルの長径Ｒ１１および短径Ｒ２１、ならびに、第二のバブルの長径Ｒ１２および短径Ｒ２２、を検出する工程である。ここで、第一のバブルの長径Ｒ１１および第二のバブルの長径Ｒ１２を合わせて、長径Ｒ１とも称し、第一のバブルの短径Ｒ２１および第二のバブルの短径Ｒ２２を合わせて、短径Ｒ２とも称する。検出された長径Ｒ１および短径Ｒ２の情報は、それぞれ、後述する張力算出工程に用いられ得る。
【００６０】
本長短径検出工程は、バブルの長径Ｒ１およびバブルの短径Ｒ２を検出することができればよく、バブルの長径Ｒ１および短径Ｒ２を検出するための具体的な方法は、特に限定されない。なお、バブルの長径Ｒ１とは、バブルの径のうち最も長い径を指し、バブルの短径Ｒ２とは、バブルの径のうち最も短い径を指す。また、バブルの径は、バブルの中心を通る直線のうち、バブルの脂質一重膜によって切り取られた線分の長さである。本長短径検出工程の一例を、以下に説明する。
【００６１】
本長短径検出工程では、例えば、撮像部を用いてバブルを撮像し、撮像データから、バブルの長径Ｒ１および短径Ｒ２を検出してもよい。
【００６２】
本長短径検出工程では、二つのバブルがともに写しだされた一つの撮像データを取得することが好ましい。また、二つのバブルがともに写しだされた一つの撮像データを取得する場合には、これら二つのバブルは、撮像データにおいて互いに重なり合わないことが好ましい。撮像部を用いて、脂質二重膜とバブルの脂質一重膜との境界面に対して平行な方向から二つのバブルを撮像することによって、互いに重なり合わない二つのバブルを含む一つの撮像データを取得することが可能となる。脂質二重膜とバブルの脂質一重膜との境界面に対して平行な方向は、脂質二重膜に対して平行な方向ともいえる。また、脂質二重膜とバブルの脂質一重膜との境界面は、２つのバブルの接触面でもある。
【００６３】
本検査方法におけるバブルの形状は特に限定されないが、楕円形および略真円形などの略円形であり得る。
【００６４】
ここで、脂質二重膜を形成する二つのバブル（第一のバブルおよび第二のバブル）について、バブルの内部の水溶液の組成、および、バブルを覆う脂質一重膜の組成がともに同じである場合を考える。この場合には、長径Ｒ１１および長径Ｒ１２は等しく、また、短径Ｒ２１および短径Ｒ２２は等しいと仮定することができる。従って、脂質二重膜を形成する二つのバブルのうちのいずれか一方のバブルの長径および短径を検出して、当該長径および短径を、第一のバブルの長径Ｒ１１および短径Ｒ２１、ならびに、第二のバブルの長径Ｒ１２および短径Ｒ２２とすることができる。
【００６５】
（接触角検出工程）
本検査方法が含む接触角検出工程は、脂質二重膜と第一のバブルの脂質一重膜との境界面に発生する接触角θ１および脂質二重膜と第二のバブルの脂質一重膜との境界面に発生する接触角θ２、を検出する工程である。また、検出された接触角θ１および接触角θ２の情報は、後述する張力算出工程に用いることができる。
【００６６】
本明細書において、「脂質二重膜とバブルの脂質一重膜との境界面」を、「脂質二重膜とバブルとの境界面」、または単に「境界面」と称する場合もある。また、上述したように、脂質二重膜とバブルの脂質一重膜との境界面は、２つのバブルの接触面でもある。
【００６７】
本接触角検出工程は、脂質二重膜とバブルとの境界面に発生する接触角θを検出することができればよく、接触角θを検出するための具体的な方法は特に限定されない。本接触角検出工程の一例を、以下に説明する。
【００６８】
本接触角検出工程では、例えば、撮像部を用いて境界面を撮像し、当該撮像データから接触角θを検出してもよい。
【００６９】
本接触角検出工程において、境界面を撮像する場合には、境界面に対して平行な方向から接触角を撮像することが好ましい。上記の構成であれば、境界面とバブルとが重なり合わないため、正確に接触角θを検出することができる。
【００７０】
ここで、脂質二重膜を形成する二つのバブル（第一のバブルおよび第二のバブル）について、バブルの内部の水溶液の組成、および、バブルを覆う脂質一重膜の組成がともに同じである場合を考える。この場合には、接触角θ１および接触角θ２は等しいと仮定することができる。従って、脂質二重膜を形成する二つのバブルのうちのいずれか一方のバブルの接触角θを検出して、当該接触角θを、接触角θ１および接触角θ２としてもよい。
【００７１】
（張力算出工程）
本検査方法が含む張力算出工程は、下記式（１）〜（５）から脂質二重膜の張力γを算出する工程である。
【００７２】
式（１）ΔＰ１＝γ１×（１／Ｒ１１＋１／Ｒ２１）
式（２）ΔＰ２＝γ２×（１／Ｒ１２＋１／Ｒ２２）
式（３）γｂ１＝γ１×ｃｏｓθ１
式（４）γｂ2＝γ２×ｃｏｓθ２
式（５）γ＝γｂ1＋γｂ２
（ここで、γ１は第一のバブルの脂質一重膜の張力であり、γ２は第二のバブルの脂質一重膜の張力であり、γｂ１は脂質二重膜における第一のバブルの側の単分子層の張力であり、γｂ２は脂質二重膜における第二のバブルの側の単分子層の張力である）。
【００７３】
具体的には、本張力算出工程は、（ｉ）第一のバブルの内圧ΔＰ１、第一のバブルの長径Ｒ１１および短径Ｒ２１から、式（１）に基づき、第一のバブルの脂質一重膜の張力γ１を算出し、（ｉｉ）第二のバブルの内圧ΔＰ２、第二のバブルの長径Ｒ１２および短径Ｒ２２から、式（２）に基づき、第二のバブルの脂質一重膜の張力γ２を算出し、（ｉｉｉ）上記（ｉ）で得られた張力γ１から、式（３）に基づき、脂質二重膜における第一のバブルの側の単分子層の張力γｂ１を算出し、（ｉｖ）上記（ｉｉ）で得られた張力γ２から、式（４）に基づき、脂質二重膜における第二のバブルの側の単分子層の張力γｂ２を算出し、かつ、（ｖ）上記（ｉｉｉ）で得られた張力γｂ１および上記（ｉｖ）で得られた張力γｂ２から、式（５）に基づき、脂質二重膜の張力γを算出する工程である。
【００７４】
ここで、内圧ΔＰ１および内圧ΔＰ２は、上記内圧検出工程にて検出された内圧ΔＰであり得、長径Ｒ１および短径Ｒ２は、上記長短径検出工程にて検出された長径Ｒ１および短径Ｒ２であり得、接触角θは、上記接触角検出工程にて検出された接触角θであり得る。
【００７５】
本張力算出工程では、脂質二重膜の張力γを算出することができる限り、張力γを算出するための具体的な方法は特に限定されず、周知の方法を用いることができる。本張力算出工程では、例えば、記憶部及び演算部を備えるコンピュータなどを使用することができる。
【００７６】
ここで、脂質二重膜を形成する二つのバブル（第一のバブルおよび第二のバブル）について、バブルの内部の水溶液の組成、および、バブルを覆う脂質一重膜の組成がともに同じである場合を考える。この場合には、張力γ１および張力γ２は等しく、また、張力γｂ１および張力γｂ２は等しいと仮定することができる。従って、脂質二重膜を形成する二つのバブルのうちのいずれか一方のバブルについて脂質一重膜の張力、および単分子層の張力を算出し、当該単分子層の張力を、張力γｂ１および張力γｂ２としてもよい。
【００７７】
本発明の一実施形態に係る脂質二重膜の特性の検査方法は、さらに、静電容量検出工程、面積検出工程、および膜厚算出工程を含み、脂質二重膜の膜厚Ｔを算出することが好ましい。
【００７８】
本発明の一実施形態に係る検査方法、すなわち本検査方法は、上述した構成を有することにより、脂質二重膜の特性として、脂質二重膜の張力に加えて脂質二重膜の膜厚を、簡易に検査することができるという利点を有する。
【００７９】
（静電容量検出工程）
静電容量検出工程は、脂質二重膜の静電容量Ｃを検出する工程である。また、検出された静電容量Ｃの情報は、後述する膜厚算出工程に用いられ得る。
【００８０】
本静電容量検出工程は、脂質二重膜の静電容量Ｃを検出することができればよく、静電容量Ｃを検出するための具体的な方法は特に限定されず、周知の方法を用いることができる。本静電容量検出工程の一例を、以下に説明する。
【００８１】
例えば、第一のバブルの中、および第二のバブルの中、にそれぞれ配置した電極を使用し、当該電極間にランプ波を発生させることによって脂質二重膜の容量性電流値を取得し、当該容量性電流値から、静電容量Ｃを検出することができる。この場合には、上記電極間に脂質二重膜が存在するように、各電極を配置する。脂質二重膜の静電容量Ｃをより正確に検出する観点から、上記各電極は、脂質二重膜に近い位置に配置することが好ましい。ランプ波を発生させるための装置としては、特に限定されず、周知の装置を用いることができる。
【００８２】
（面積検出工程）
面積検出工程は、脂質二重膜の面積Ａを検出する工程である。また、検出された面積Ａの情報は、後述する膜厚算出工程に用いられ得る。
【００８３】
本面積検出工程は、脂質二重膜の面積Ａを検出することができればよく、面積Ａを検出するための具体的な方法は特に限定されない。本面積検出工程の一例を、以下に説明する。
【００８４】
本面積検出工程では、例えば、撮像部を用いて脂質二重膜を撮像し、撮像データを取得することによって、面積Ａを検出してもよい。
【００８５】
本面積検出工程において、脂質二重膜を撮像する場合には、脂質二重膜に対して垂直な方向から脂質二重膜を撮像することが好ましい。上記の構成であれば、脂質二重膜の全面が写しだされた撮像データを取得できるため、正確に面積Ａを検出することができる。脂質二重膜に対して垂直な方向は、脂質二重膜とバブルの脂質一重膜との境界面に対して垂直な方向ともいえる。
【００８６】
また、脂質二重膜が真円であると近似できる場合には、脂質二重膜に平行な方向から脂質二重膜を撮像することによって、得られた撮像データから脂質二重膜の直径を取得することができ、かかる直径から、面積Ａを検出することができる。脂質二重膜に平行な方向は境界面に対して平行な方向である。それ故に、脂質二重膜が真円であると近似できる場合には、上記接触角検出工程にて得られた撮像データから、面積Ａを検出することができる。ここで、脂質二重膜が真円であると近似できる場合とは、例えばバブルの直径が５０μｍ以下の場合などである。
【００８７】
（膜厚算出工程）
本検査方法が含む膜厚算出工程は、下記式（６）から脂質二重膜の膜厚Ｔを算出する工程である。
【００８８】
式（６）Ｔ＝εｍ×ε０×Ａ／Ｃ
（ここでεｍは上記脂質二重膜の比誘電率であり、ε０は真空の誘電率である。）
具体的には、本膜厚算出工程は、脂質二重膜の静電容量Ｃおよび面積Ａ、ならびに、脂質二重膜の比誘電率εｍ、および真空の誘電率ε０から、式（６）に基づき、脂質二重膜の膜厚Ｔを算出する。また、脂質二重膜の膜厚Ｔの算出は、解析部を用いて行われてもよい。
【００８９】
ここで、静電容量Ｃは、上記静電容量検出工程にて検出された静電容量Ｃであり得、面積Ａは、上記面積検出工程にて検出された面積Ａであり得る。
【００９０】
本明細書において、「脂質二重膜の比誘電率」とは、また、脂質二重膜の疎水性コア領域に存在するリン脂質の炭化水素鎖層と当該炭化水素鎖層に挟まれた油とからなる複合層を均一の油相とみなしたとき、当該複合層の比誘電率である。油がヘキサデカンである場合には、脂質二重膜の比誘電率は、例えば２．２である。
【００９１】
上記「真空の誘電率」は、基礎物理定数であり、本明細書では、科学技術データ委員会（Committee on Data for Science and Technology: CODATA）によって提供された推奨値を採用するものとする。例えば、真空の誘電率を２０１４年の推奨値に基づき、小数点以下第４位を四捨五入して小数点以下第３位まで示すと、８．８５４×１０−１２Ｆｍ−１である。
【００９２】
〔３．薬剤のスクリーニング方法〕
本発明の他の一実施形態は、薬剤導入工程、張力算出工程、および、第１の薬剤判定工程、を含む、脂質二重膜の特性を変化させる薬剤のスクリーニング方法を提供する。
【００９３】
本発明の一実施形態に係る薬剤のスクリーニング方法は、上述した構成を有することにより、脂質二重膜の特性、特に脂質二重膜の張力、を変化させる薬剤を簡易にスクリーニングすることができるという利点を有する。
【００９４】
本明細書中において、「薬剤のスクリーニング方法」を「薬剤スクリーニング方法」とも称する。
【００９５】
（脂質二重膜形成工程）
本発明の一実施形態に係る薬剤スクリーニング方法は、脂質一重膜で覆われた第一のバブルと脂質一重膜で覆われた第二のバブルとの接触面に形成される脂質二重膜を用いる。故に、本薬剤スクリーニング方法は、脂質二重膜を形成する脂質二重膜形成工程を含んでいてもよい。
【００９６】
本薬剤スクリーニング方法における脂質二重膜形成工程の態様は、上記〔１．脂質二重膜の特性の検査方法〕の項の説明が援用され得る。
【００９７】
（薬剤導入工程）
薬剤導入工程は、脂質二重膜中に対して薬剤の導入を行う工程である。
【００９８】
本薬剤導入工程は、脂質二重膜中に薬剤を導入することができればよく、薬剤の導入を行う方法は、特に限定されない。例えば、マイクロピペットなどを用いて、油に、および／または、バブル内に、薬剤を添加する方法を挙げることができる。油およびバブル内に添加された薬剤は、拡散または脂質二重膜中の任意の成分との相互作用によって、脂質二重膜中に導入され得る。
【００９９】
本薬剤導入工程では、より簡便に薬剤を導入するために、潅流法により、脂質二重膜中に対して薬剤が導入されることが好ましい。潅流法について、以下に説明する。
【０１００】
潅流法は、油中における脂質二重膜とバブルとの境界面（すなわち脂質二重膜）の近傍において任意の成分を噴射することにより、当該成分を脂質二重膜中に導入する方法である。噴射された任意の成分は、速やかに、脂質二重膜中に組み込まれる。
【０１０１】
（張力算出工程）
張力算出工程は、薬剤の導入の後に上記脂質二重膜の張力γを算出する工程であり、内圧検出工程、長短径検出工程、および接触角検出工程を含み、下記式（１）〜（５）から脂質二重膜の張力γを算出する工程である。
【０１０２】
式（１）ΔＰ１＝γ１×（１／Ｒ１１＋１／Ｒ２１）
式（２）ΔＰ２＝γ２×（１／Ｒ１２＋１／Ｒ２２）
式（３）γｂ１＝γ１×ｃｏｓθ１
式（４）γｂ2＝γ２×ｃｏｓθ２
式（５）γ＝γｂ1＋γｂ２
（ここで、γ１は第一のバブルの脂質一重膜の張力であり、γ２は第二のバブルの脂質一重膜の張力であり、γｂ１は脂質二重膜における第一のバブルの側の単分子層の張力であり、γｂ２は脂質二重膜における第二のバブルの側の単分子層の張力である）
本薬剤スクリーニング方法が含む張力算出工程における内圧検出工程、長短径検出工程、および接触角検出工程の態様は、上記〔１．脂質二重膜の特性の検査方法〕の項の説明が援用され得る。
【０１０３】
また、本薬剤スクリーニング方法が含む張力算出工程は、内圧ΔＰ、長径Ｒ１、および短径Ｒ２から脂質一重膜の張力を算出し、さらに、当該脂質一重膜の張力および接触角θから脂質二重膜の張力γを算出するものである。従って、本薬剤スクリーニング方法が含む張力算出工程の実質的態様は、上記〔１．脂質二重膜の特性の検査方法〕の項で説明した張力算定工程の態様と同じであり、上記〔１．脂質二重膜の特性の検査方法〕の項の説明が援用され得る。
【０１０４】
（第１の薬剤判定工程）
第１の薬剤判定工程は、張力算出工程を通して得られた張力γを基準値と比較することによって薬剤を判定する工程である。
【０１０５】
上記基準値は、薬剤の導入の前に張力算出工程を通して得られた張力γの値であってもよく、他の薬剤の導入後に張力算出工程を通して得られた張力γの値であってもよく、または、あらかじめ設定された所定の値であってもよい。
【０１０６】
張力γの値が変化すると、脂質二重膜中に存在する膜タンパク質の機能が変化し得る。つまり、張力γを変化させ得る薬剤は、膜タンパク質の機能を調節し得る（例えば、膜タンパク質の酵素活性を上昇させる、または、膜タンパク質の酵素活性を低下させる。）。それ故に、第１の薬剤判定工程によって、膜タンパク質を標的とする薬剤の候補になり得る物質を選択することができる。
【０１０７】
上記「張力算出工程を通して得られた張力γを基準値と比較することによって薬剤を判定する」とは、例えば、張力算出工程を通して得られた張力γと基準値との差の絶対値に基づいて、投与した薬剤が脂質二重膜の張力γを変化させ得る薬剤であるか否か、を判定することを意図する。
【０１０８】
本発明の一実施形態に係る薬剤スクリーニング方法は、さらに、膜厚算出工程、および第２の薬剤判定工程を含むことが好ましい。
【０１０９】
本発明の一実施形態に係る薬剤スクリーニング方法、すなわち本薬剤スクリーニング方法は、上述した構成を有することにより、脂質二重膜の特性として、脂質二重膜の張力に加えて脂質二重膜の膜厚、を変化させる薬剤を簡易にスクリーニングすることができるという利点を有する。
【０１１０】
（膜厚算出工程）
膜厚算出工程は、薬剤の導入の後に上記脂質二重膜の膜厚Ｔを算出する工程であり、静電容量検出工程、および面積検出工程を含み、下記式（６）から脂質二重膜の膜厚Ｔを算出する工程である。
【０１１１】
式（６）Ｔ＝εｍ×ε０×Ａ／Ｃ
（ここでεｍは上記脂質二重膜の比誘電率であり、ε０は真空の誘電率である。）
本薬剤スクリーニング方法が含む膜厚算出工程における静電容量検出工程、および面積検出工程の態様は、上記〔１．脂質二重膜の特性の検査方法〕の項の説明が援用され得る。
【０１１２】
また、本薬剤スクリーニング方法が含む膜厚算出工程は、静電容量Ｃ、面積Ａ、脂質二重膜の比誘電率εｍ、および真空の誘電率ε０から脂質二重膜の膜厚Ｔを算出するものである。従って、本薬剤スクリーニング方法が含む膜厚算出工程の実質的態様は、上記〔１．脂質二重膜の特性の検査方法〕の項で説明した膜厚算定工程の態様と同じであり、上記〔１．脂質二重膜の特性の検査方法〕の項の説明が援用され得る。
【０１１３】
（第２の薬剤判定工程）
第２の薬剤判定工程は、膜厚算出工程を通して得られた膜厚Ｔを基準値と比較することによって薬剤を判定する工程である。
【０１１４】
上記基準値は、薬剤の導入の前に膜厚算出工程を通して得られた膜厚Ｔの値であってもよく、他の薬剤の導入後に膜厚算出工程を通して得られた膜厚Ｔの値であってもよく、または、あらかじめ設定された所定の値であってもよい。
【０１１５】
膜厚Ｔの値が変化すると、脂質二重膜中に存在する膜タンパク質の機能が変化し得る。つまり、膜厚Ｔを変化させ得る薬剤は、膜タンパク質の機能を調節し得る（例えば、膜タンパク質の酵素活性を上昇させる、または、膜タンパク質の酵素活性を低下させる。）。それ故に、第２の薬剤判定工程によって、薬剤の候補になり得る物質を選択することができる。
【０１１６】
上記「膜厚算出工程を通して得られた膜厚Ｔを基準値と比較することによって薬剤を判定する」とは、例えば、膜厚算出工程を通して得られた膜厚Ｔと基準値との差の絶対値に基づいて、投与した薬剤が脂質二重膜の膜厚Ｔを変化させ得る薬剤であるか否か、を判定することを意図する。
【０１１７】
〔４．脂質二重膜の特性の解析システム〕
本発明の他の一実施形態は、第一の内圧検出部および第二の内圧検出部、長短径−接触角検出部、ならびに、張力算出部を備える、脂質二重膜の特性の解析システムを提供する。
【０１１８】
本発明の一実施形態に係る脂質二重膜の特性の解析システムは、上述した構成を有することにより、脂質二重膜の特性、特に脂質二重膜の張力、を簡易に解析することができるという利点を有する。
【０１１９】
本発明の一実施形態に係る解析システム、すなわち本解析システムについて、図１〜５を参照して説明する。
【０１２０】
図１は、本発明の一実施形態に係る解析システム１００の構成を示す概略図である。解析システム１００は、脂質二重膜形成部１、第一の内圧検出部１０、第二の内圧検出部２０、長短径−接触角検出部３０、および張力算出部４０を備える。ここで、解析システム１００は脂質二重膜形成部１を備えているが、脂質二重膜形成部１を備えていない解析システムも、本発明の範囲内である。
【０１２１】
脂質二重膜形成部１において、脂質一重膜で覆われた第一のバブルと脂質一重膜で覆われた第二のバブルとの接触面に形成された脂質二重膜が作製される。次に、第一のバブルの内圧ΔＰ１が第一の内圧検出部１０によって検出され、第二のバブルの内圧ΔＰ２が第二の内圧検出部２０によって検出され、第一のバブルの長径Ｒ１１、短径Ｒ２１および接触角θ１、ならびに第二のバブルの長径Ｒ１２、短径Ｒ２２、および接触角θ２が長短径−接触角検出部３０によって検出される。その後、内圧ΔＰ１、内圧ΔＰ２、長径Ｒ１１、短径Ｒ２１、長径Ｒ１２、短径Ｒ２２、接触角θ１、接触角θ２から、脂質二重膜の張力γが張力算出部４０によって算出される。
【０１２２】
（脂質二重膜形成部１）
脂質二重膜形成部１について、図３を参照してさらに説明する。図３の（ａ）は、本発明の一実施形態に係る解析システムにおける脂質二重膜形成部の構成を示す概略図であり、脂質二重膜に垂直な断面の断面図である。
【０１２３】
脂質二重膜形成部１は、容器２と油相３とバブル４とから構成される。容器２は油相３およびバブル４を収容可能に構成される。容器２の形状および材質は、周知の構成が用いられる。油相３は、バブル４を覆っており、すなわち、バブル４は、油相３および別のバブル４と接している。
【０１２４】
油相３として使用可能な油は、上記〔１．脂質二重膜の特性の検査方法〕の（脂質二重膜形成工程）の項の説明が援用され得る。バブル４は、水溶液からなり、第一のバブルＭ１と第二のバブルＭ２とから構成される。なお、解析システム１００におけるバブル４は、２つであるが、本発明の他の態様では、バブル４の数は２つ以上であれば特に限定されるものではない。バブル４に使用される水溶液の態様としては、上記〔１．脂質二重膜の特性の検査方法〕の（脂質二重膜形成工程）の項の説明が援用され得る。
【０１２５】
第一のバブルＭ１は、第二のバブルＭ２の鉛直上方に積層されており、第一のバブルＭ１および第二のバブルＭ２の接触面６には、脂質二重膜７が形成されている。なお、接触面６は、脂質二重膜とバブルの脂質一重膜との境界面でもあるため、接触面６は、後述する境界面６と同一の構成を指す。また、解析システム１００では、第一のバブルＭ１および第二のバブルＭ２は、鉛直方向に積層されているが、本発明の他の態様では、第一のバブルおよび第二のバブルが水平方向に配置されていてもよい。第一のバブルおよび第二のバブルが鉛直方向に積層されている場合には、脂質二重膜は水平方向に形成され、第一のバブルおよび第二のバブルが水平方向に配置されている場合には、脂質二重膜は鉛直方向に形成される。図３の（ｂ）は、図３の（ａ）のＡ−Ａ線矢視断面図である。
【０１２６】
本解析システムにおける脂質二重膜形成部のその他の態様としては、上記〔１．脂質二重膜の特性の検査方法〕の項の説明が適宜援用され得る。
【０１２７】
（第一の内圧検出部１０および第二の内圧検出部２０）
解析システム１００では、第一の内圧検出部１０および第二の内圧検出部２０は、それぞれ、マイクロピペット５の内部に設けられている。マイクロピペット５のそれぞれは第一のバブルＭ１または第二のバブルＭ２に対して力を加えるように配置されている。ここで、第一の内圧検出部１０および第二の内圧検出部２０を単に「内圧検出部１０および２０」とも称する。
【０１２８】
内圧検出部１０および２０は、それぞれ、マイクロピペット５に加わる力（すなわちバブルによる反発の力であり、バブルの圧力ともいえる）を検出可能なセンサを備えている。内圧検出部１０および２０は、それぞれ、さらに、センサにより検出された力（または圧力）から内圧ΔＰを検出してもよい。
【０１２９】
図４に示すように、内圧検出部１０および２０によって検出された内圧ΔＰは、張力算出部４０に出力される。
【０１３０】
上記センサとしては、マイクロピペット５に加わる力を検出可能であれば特に限定されず、周知のセンサを使用できる。
【０１３１】
本解析システムにおいて、第一の内圧検出部および第二の内圧検出部は、それぞれ、バブルの内圧ΔＰを検出することができる限り、特に限定されない。
【０１３２】
本解析システムにおける第一の内圧検出部および第二の内圧検出部のその他の態様としては、上記〔１．脂質二重膜の特性の検査方法〕の項の説明が適宜援用されてもよい。すなわち、第一の内圧検出部および第二の内圧検出部は、バブルの中に設けられたセンサを備えており、かかるセンサはバブルの中の圧力を検出可能な構成であってもよい。
【０１３３】
（長短径−接触角検出部３０）
長短径−接触角検出部３０は、水平方向から、バブル４を撮像し、バブル４が写しだされた撮像データを取得する。故に、解析システム１００において、長短径−接触角検出部３０は、長短径−接触角撮像部ともいえる。なお、水平方向とは、接触面（境界面）６および脂質二重膜７と平行な方向である。従って、長短径−接触角検出部３０は、第一のバブルおよび第二のバブルを同時に撮像可能である。当該撮像データから、第一のバブルの長径および短径、第二のバブルの長径および短径、第一のバブルの脂質一重膜と脂質二重膜との境界面に発生する接触角、ならびに、第二のバブルの脂質一重膜と脂質二重膜との境界面に発生する接触角を同時に検出することができる。
【０１３４】
長短径−接触角検出部３０は、上述したようにバブル４を撮像することにより得られた撮像データを解析することにより、バブルの長径Ｒ１および短径Ｒ２、ならびに接触角θを検出することができるものであってもよい。
【０１３５】
図４に示すように、撮像データ、長径Ｒ１、短径Ｒ２、および／または、接触角θは、張力算出部４０に出力される。
【０１３６】
上記長短径−接触角撮像部としては、バブルの長径Ｒ１および短径Ｒ２ならびに接触角θを解析可能な解像度の撮像データを取得することができるものであればよく、周知の構成を使用することができる（例えば、顕微鏡のレンズ、または、顕微鏡自体）。上記レンズは、例えば、顕微鏡に用いられる対物レンズであってもよい。従って、上記長短径−接触角撮像部は、対物レンズと、対物レンズに入射した光を受光する撮像素子から構成されていてもよい。
【０１３７】
本解析システムにおいて、長短径−接触角検出部は、バブルの長径Ｒ１および短径Ｒ２、ならびに接触角θを検出することができる限り、上記構成に特に限定されない。
【０１３８】
（張力算出部４０）
張力算出部４０は、第一の内圧検出部１０および第二の内圧検出部２０より得た内圧ΔＰ、長短径−接触角検出部３０より得られた長径Ｒ１および短径Ｒ２、ならびに接触角θから、下記式（１）〜（５）を適用して、脂質二重膜の張力γを算出する。
【０１３９】
式（１）ΔＰ１＝γ１×（１／Ｒ１１＋１／Ｒ２１）
式（２）ΔＰ２＝γ２×（１／Ｒ１２＋１／Ｒ２２）
式（３）γｂ１＝γ１×ｃｏｓθ１
式（４）γｂ2＝γ２×ｃｏｓθ２
式（５）γ＝γｂ1＋γｂ２
（ここで、γ１は第一のバブルＭ１の脂質一重膜の張力であり、γ２は第二のバブルＭ２の脂質一重膜の張力であり、γｂ１は脂質二重膜における第一のバブルの側の単分子層の張力であり、γｂ２は脂質二重膜における第二のバブルの側の単分子層の張力である）。
【０１４０】
張力算出部４０としては、特に限定されないが、例えば、記憶部及び演算部を備えるコンピュータなどを使用することができる。
【０１４１】
本発明の一実施形態に係る解析システムは、さらに、静電容量検出部、面積検出部、および、膜厚算出部を備えることが好ましい。図２は、本発明の一実施形態に係る解析システム２００の構成を示す概略図である。解析システム２００は、上述した解析システム１００の構成に加えて、静電容量検出部５０、面積検出部６０、および膜厚算出部７０を備える。
【０１４２】
解析システム２００では、脂質二重膜の張力γに加えて、脂質二重膜の膜厚Ｔを算出する。具体的には、脂質二重膜の静電容量Ｃが静電容量検出部５０によって検出され、脂質二重膜の面積Ａが面積検出部６０によって検出される。その後、静電容量Ｃ、面積Ａ、脂質二重膜の比誘電率、および真空の誘電率から、脂質二重膜の膜厚Ｔが膜厚算出部７０によって算出される。
【０１４３】
（静電容量検出部５０）
静電容量検出部５０は、電極およびランプ波発生装置を備える。電極は、第一のバブルおよび第二のバブルの内部にそれぞれに配置されており、電極間にランプ波を発生させることによって脂質二重膜の電気抵抗値が取得される。図２では、電極は、マイクロピペット５の内部に配置されており、マイクロピペット５内部に満たされた電解質溶液を介して電流がそれぞれのバブルの内部に伝達される。
【０１４４】
静電容量検出部５０は、上述したように取得された脂質二重膜７の電気抵抗値を解析することにより、脂質二重膜７の静電容量Ｃを検出する。
【０１４５】
図５に示すように、静電容量Ｃは、膜厚算出部７０に出力され得る。
【０１４６】
本解析システムにおいて、静電容量検出部は、脂質二重膜の静電容量Ｃを検出することができる限り、上記構成に特に限定されない。
【０１４７】
（面積検出部６０）
面積検出部６０は、鉛直下方から、脂質二重膜７を撮像し、脂質二重膜７が写しだされた撮像データを取得する。なお、鉛直下方とは、接触面（境界面）６および脂質二重膜７に対して垂直な方向である。従って、面積検出部６０は、脂質二重膜７の全面を撮像可能である。
【０１４８】
面積検出部６０は、上述したように脂質二重膜７を撮像することにより得られた撮像データを解析することにより、脂質二重膜の面積Ａを検出する。
【０１４９】
図５に示すように、脂質二重膜の面積Ａは、膜厚算出部７０に出力され得る。
【０１５０】
本解析システムにおいて、面積検出部は、脂質二重膜の面積Ａを検出することができる限り、上記構成に特に限定されない。
【０１５１】
（膜厚算出部７０）
膜厚算出部７０は、静電容量検出部５０より得た静電容量Ｃ、面積検出部６０より得られた面積Ａ、脂質二重膜の比誘電率、および真空の誘電率から、下記式（６）を適用して、脂質二重膜の膜厚Ｔを算出する。
【０１５２】
式（６）Ｔ＝εｍ×ε０×Ａ／Ｃ
（ここでεｍは上記脂質二重膜の比誘電率であり、ε０は真空の誘電率である。）
膜厚算出部７０としては、特に限定されないが、例えば、記憶部及び演算部を備えるコンピュータなどを使用することができる。張力算出部４０と膜厚算出部７０とは同じ装置が用いられてもよい。
【０１５３】
（本解析システムの用途）
本解析システムは、上述した脂質二重膜の特性の検査方法を実施するためのシステムとして用いることが可能である。また、本解析システムは、特に、上述した薬剤スクリーニング方法を実施するためのシステムとして好適に用いることができる。
【０１５４】
なお、本発明の各部や各処理ステップは、ＣＰＵなどの演算手段が、ＲＯＭ（Read Only Memory）やＲＡＭなどの記憶手段に記憶されたプログラムを実行し、キーボードなどの入力手段、ディスプレイなどの出力手段、あるいは、インターフェース回路などの通信手段を制御することにより実現することが可能である。
【０１５５】
したがって、これらの手段を有するコンピュータが、上記プログラムを記録した記録媒体を読み取り、当該プログラムを実行するだけで、本発明を実現することができる。また、上記プログラムをリムーバブルな記録媒体に記録することにより、任意のコンピュータ上で上記の各種機能および各種処理を実現することができる。
【０１５６】
上記記録媒体としては、マイクロコンピュータで処理を行うために図示しないメモリ、例えばＲＯＭのようなものがプログラムメディアであってもよいし、また、図示していないが外部記憶装置としてプログラム読取り装置が設けられ、そこに記録媒体を挿入することにより読取り可能なプログラムメディアであってもよい。
【０１５７】
また、何れの場合でも、格納されているプログラムは、マイクロプロセッサがアクセスして実行される構成であることが好ましい。さらに、プログラムを読み出し、読み出されたプログラムは、マイクロコンピュータのプログラム記憶エリアにダウンロードされて、そのプログラムが実行される方式であることが好ましい。なお、このダウンロード用のプログラムは予め本体装置に格納されていることが好ましい。
【０１５８】
また、上記プログラムメディアは、本体と分離可能に構成される記録媒体であり、磁気テープやカセットテープ等のテープ系、フレキシブルディスクやハードディスク等の磁気ディスクやＣＤ／ＭＯ／ＭＤ／ＤＶＤ等のディスクのディスク系、ＩＣカード（メモリカードを含む）等のカード系、あるいはマスクＲＯＭ、ＥＰＲＯＭ（Erasable Programmable Read Only Memory）、ＥＥＰＲＯＭ（Electrically Erasable Programmable Read Only Memory）、フラッシュＲＯＭ等による半導体メモリを含めた固定的にプログラムを担持する記録媒体等があり得る。
【０１５９】
また、インターネットを含む通信ネットワークを接続可能なシステム構成であれば、通信ネットワークからプログラムをダウンロードするように流動的にプログラムを担持する記録媒体であることが好ましい。
【０１６０】
さらに、このように通信ネットワークからプログラムをダウンロードする場合には、そのダウンロード用のプログラムは予め本体装置に格納しておくか、あるいは別な記録媒体からインストールされるものであることが好ましい。
【実施例】
【０１６１】
本発明者らは、脂質二重膜の特性の変化によって、膜の機能が変化することを初めて見出した。以下、実施例において、脂質二重膜の張力を変化させた場合に、膜に埋め込まれた膜タンパク質の活性が変化することを実証する。
（操作）
（１．脂質二重膜の作製）
最初に、２ｍｇ／ｍLの濃度で膜タンパク質を含むリポソーム溶液（すなわちプロテオリポソーム溶液）を作製した。ここで、プロテオリポソーム溶液は、電解液にリポソームおよび膜タンパク質を溶解した溶液である。膜タンパク質としては、カリウムチャネルであるＫｃｓＡを用いた。作製したプロテオリポソーム溶液を２本のマイクロピペットに充填し、その後、当該マイクロピペットを容器内に満たされたヘキサデカン（油相）中に挿入した。ここで、容器は、倒立顕微鏡（ＩＸ７３、オリンパス社製）のステージ上に配置した。また、マイクロピペットの先端は約３０μｍであった。
【０１６２】
次に、プロテオリポソーム溶液を２本のマイクロピペットのそれぞれからヘキサデカン中に押出し、脂質一重膜で覆われたバブルを２つ作製した。バブルの直径は、約１００μｍとした。次に、作製された２つのバブルを、マイクロピペットを操作することにより接触させ、２つのバブルの接触面に脂質二重膜を形成させた。ここで、マイクロピペットの操作は、モーター駆動式マイクロマニピュレーター（ＥＭＭ−３ＮＶ、ナリシゲ社製）を用いて行った。また、マイクロピペットの内圧を、ニューマティックマイクロジンジェクター（ＩＭ−１１−２）を用いて制御した。マイクロピペットの内圧は、バブルの維持圧でもある。
【０１６３】
ここで、ＫｃｓＡの働きによるイオン電流の変化（すなわちＫｃｓＡの活性）を測定するために、２つのバブル内のプロテオリポソーム溶液のｐＨを非対称とした（ｐＨ７およびｐＨ４）。リファレンス電極は、ｐＨ７．５のプロテオリポソーム溶液を含むバブルを作製したマイクロピペットに接続した。
【０１６４】
（２．イオン電流の測定）
イオン電流を測定するための電極を、マイクロピペット内部に配置した。電極は、Ａｇ／ＡｇＣｌ金属線電極（Ｅ２５５、ワーナーインスツルメンツ社製）を使用した。イオン電流は、パッチクランプ増幅器（ＥＰＣ８００ＵＳＢ、ＨＥＫＡ社製）を用いて、電圧固定化で測定した。電流シグナルは、周波数のカットオフのために１ｋＨｚでフィルタ処理し、Ａ／Ｄコンバーター（Ｄｉｇｉｄａｔａ  １５５０Ａ、モレキュラーデバイス社製）によって５ｋＨｚでサンプリングした。サンプリングした電流シグナルは、ソフトウェア（ｐＣＬＡＭＰ、モレキュラーデバイス社製）を用いてコンピュータ内に保存した。
【０１６５】
（３．バブルの維持圧の減圧による、脂質二重膜の変化）
マイクロピペットの内圧を減少させることにより、バブルの維持圧が減少（すなわち減圧）する。バブルの維持圧を減圧させたときの、脂質一重膜で覆われた２つのバブル、および２つのバブルの接触面に形成された脂質二重膜の変化を、図６に示した。図６の（ａ）は、バブルの維持圧の減圧にともなう２つのバブルおよび脂質二重膜の形状の変化を示す図である。図６の（ｂ）は、図６の（ａ）を模式的に示した概略図である。
【０１６６】
図６より、バブルの維持圧の減圧に伴い、脂質二重膜の面積が増加し、脂質二重膜とバブルの脂質一重膜との境界面に発生する接触角θが増加することが分かった。
【０１６７】
バブルの維持圧の減少は、バブルの内圧の減少も引き起こす。従って、本発明の式（１）および（２）を参照すると、バブルの内圧の減少によって、バブルの脂質一重膜の張力が減少することが分かる。さらに、本発明の式（３）〜（５）を参照すると、バブルの脂質一重膜の張力の減少によって、脂質二重膜の張力が減少することが分かる。
【０１６８】
（４．バブルの維持圧の減圧による、膜タンパク質の活性の変化）
次に、バブルの維持圧の減少に伴う膜タンパク質（ＫｃｓＡ）の活性の変化を、バブルの維持圧の減少に伴うイオン電流の変化を測定することにより、評価した。
【０１６９】
経時的にイオン電流を測定し続ける中、ある時点でバブルの維持圧を減少させ、イオン電流の変化を評価した。結果を図７に示す。図７は、バブルの維持圧の減圧にともなうイオン電流の変化を示すグラフである。
【０１７０】
図７より、バブルの維持圧の減圧にともない、イオン電流が減少することが示された。イオン電流の減少は、すなわち、カリウムチャネルＫｃｓＡの活性が減少したことを示している。従って、バブルの維持圧の減少、すなわち、脂質二重膜の張力の減少に伴い、カリウムチャネルＫｃｓＡの活性が減少したことが示された。
【産業上の利用可能性】
【０１７１】
本発明は、脂質二重膜に関する分野に利用することができる。
【符号の説明】
【０１７２】
１  脂質二重膜形成部
２  容器
３  油相
４  バブル
５  マイクロピペット
６  接触面
７  脂質二重膜
１０  第一の内圧検出部
２０  第二の内圧検出部
３０  長短径−接触角検出部
４０  張力算出部
５０  静電容量検出部
６０  面積検出部
７０  膜厚算出部
１００、２００  解析システム
【図１】
2019113417.tif 000003
【図２】
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【図３】
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【図４】
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【図５】
2019113417.tif 000007
【図６】
2019113417.tif 000008
【図７】
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