(57)【要約】      （修正有）【課題】個体におけるがんを処置する方法を提供する。【解決手段】方法は、個体におけるがんを処置する方法であって、有効量のアノルドリンまたはそのアナログ（アノルドリンなど）および任意選択的に、有効量の、タモキシフェン、ラロキシフェンまたはその機能的等価物およびアロマターゼインヒビターからなる群から選択される少なくとも１つの他の薬剤を該個体に投与することを含む。【選択図】なし【特許請求の範囲】
【請求項１】
明細書に記載の発明。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
技術分野
本発明は、アノルドリン（anordrin）またはそのアナログ（アノルドリンなど）の組み合わせを、単独または別の薬剤と組み合わせて含む、がんまたは他の疾患の処置のための方法および組成物に関する。
【背景技術】
【０００２】
背景
エストロゲンは、哺乳動物の生殖および発生の間に多くの組織中でその受容体に結合して、ＲＮＡ転写を制御し、細胞増殖を刺激し、そして代謝シグナル伝達を調整する。エストロゲン結合タンパク質の３つの遺伝子が同定されており、これらの遺伝子は、エストロゲン受容体（ＥＲ）αおよびβ、ならびにＧタンパク質共役型エストロゲン受容体１（ＧＰＥＲ１）をコードする。ＥＲ−αおよびβは、類似の構造ドメインおよび機能ドメインを有し、これらのドメインは、活性化機能ドメイン１（ＡＦ−１）、ＤＮＡ結合ドメイン（ＤＢＤ）、二量体化ドメイン、および活性化機能ドメイン２（ＡＦ−２）（リガンド結合ドメイン（ＬＢＤ）である）を含む。ＥＲ−αおよびβの両方は、リガンド依存性転写因子の核スーパーファミリーに属し、高度に保存されたＤＢＤ領域およびＬＢＤ領域（９５％）を有する。ＥＲ−αおよびβはリガンド結合の際にＲＮＡ転写を制御してリガンド−受容体複合体をもたらし、これが二量体化して核内に移動することができ、核内でエストロゲン応答遺伝子のプロモーター中に見いだされるエストロゲン応答エレメント（ＥＲＥ）に結合する。この調整タイプを、典型的には、古典的エストロゲン経路という。ＥＲ−αおよびβはまた、膜開始エストロゲンシグナル伝達（ＭＩＥＳ）を通じて多様な生物学的機能を制御し、そのリガンド結合ドメインとの相互作用によって原形質膜と結合する。膜結合ＥＲによるシグナル伝達の詳細な分子機構は依然として不明である。細胞増殖、マトリックス／遊走、代謝、およびグルコースホメオスタシスに対する膜結合受容体によって媒介されるエストロゲンの調整効果が概説されている（１、２）。さらに、ＥＲノックアウトマウスに関する研究により、ＥＲ−αがＥＲ−βと比較して優位に機能するエストロゲン受容体であることが示されている。ＥＲ−αの３つの転写バリアント（−６６、−４６、および−３６）が見出されている。ＥＲ−α−３６は、ＡＦ−１ドメインを欠き、部分的リガンド結合ドメインを含む。それは細胞膜およびサイトゾルに局在することが見出されている。ＥＲ−α−３６がＭＩＥＳの調整に制限され、タモキシフェン耐性がん細胞（ＭＤＡ−ＭＢ−２３１およびＨｅｃ１Ａなど）中で固有に発現されることが見出されたので、膜結合ＥＲによって調整されたＭＩＥＳは、ある研究者らによって見出された抗エストロゲン治療に対する抵抗性を担うと考えられる（３，４）。
【０００３】
オーファンＧタンパク質共役受容体３０（ＧＰＥＲ１）は、Ｅ２（１７−βエストラジオール、エストロゲン）に結合して（５）細胞増殖を調整し、それにより抗エストロゲン治療への抵抗性をもたらすことが見出された。しかし、その生理学的機能は、ある研究者らの間で依然として議論されている（３）。ＧＰＥＲ１ノックアウトマウスは心血管障害および代謝障害を示すことが分かっているが、生殖能力に及ぼす影響は明らかではない（６）。したがって、ＧＰＥＲ１は、エストロゲン媒介性代謝シグナル伝達の調整に関与し得る。
【０００４】
閉経後の女性におけるエストロゲン産生の減少により、数十年間にわたって生活の質に悪影響を及ぼし得る症状が生じる。１９４０年代からこれらの症状を処置するためにホルモン（エストロゲン）補充療法（ＨＲＴ／ＥＲＴ）が利用されてきた。ＨＲＴに関連する乳がんおよび子宮がんのリスクならびに血栓塞栓症の罹患率の増加を示す研究により、近年その利用が減少しており、閉経後の症状は依然として多くの高齢女性の問題であり続けている。１９９０年代からエストロゲンシグナル伝達を制御するための処置として選択的エストロゲン受容体調節因子（ＳＥＲＭ）が利用されている。しかし、関与するその分子機構および異なるエストロゲン受容体との選択的調整因子間のクロストークの干渉がより完全に理解されていないので、臨床での利用中の薬物耐性および重篤な副作用の発生を回避する処置レジメンを設計することが困難である。
【０００５】
タモキシフェンは、乳がん患者を処置するためのエストロゲン古典的経路のアンタゴニストとして市販された。タモキシフェンは、ＥＳＲ−α−３６のアゴニストとしてもまた報告されており、潜在的に抗エストロゲン治療抵抗性を引き起こす一方で、子宮内膜上皮細胞の成長を刺激し、その結果子宮内膜がんを発症した（７、８）。ラロキシフェンは、タモキシフェンのアップグレードバージョンとして市販され、副作用がより少なく、がん細胞遊走を阻害し、閉経後の症状（骨粗鬆症など）を防止するという利点があった。しかし、ラロキシフェンは、依然としてタモキシフェン処置と共通の重篤な副作用（血栓塞栓症および非アルコール性脂肪性肝炎（ＮＡＳＨ）など）を引き起こし得る（９、１０）。ラロキシフェンまたはタモキシフェンのいずれかによって引き起こされる副作用に関与する詳細な機構は、依然として不明である。イプリフラボンは、植物ホルモンの誘導体であり、その代謝産物はＥ２より低い親和性でＥＲ−αＬＢＤに結合し、低いエストロゲン様作用を示す。イプリフラボンおよびイソフラボンの代謝産物は、Ｅ２と同等のＥＲ−βに対する結合親和性および活性を示し、これらの代謝産物はいくつかの国において骨粗鬆症の予防薬として利用されている。しかし、その有効性は、少なくとも１つの臨床試験で支持されなかった（１１）。さらに、伝統的なＨＲＴを使用して見られる潜在的な副作用を依然として懸念する研究者もいる（１２）。
【０００６】
２β，７α−ジエチル−Ａ−ｎｏｒ−５α−アンドロスタン−２α，１７β−ジオール（アノルジオール）は、１９６０年代にＰｉｎｃｕｓらによって抗エストロゲン活性を有することが最初に報告された（１３、１４）。Ｌｉ，Ｒ．Ｌ．は、１９６９年にプロピオン酸を使用してアノルジオールをエステル化して２α，１７α−ジエチニル−Ａ−ｎｏｒ−５α−アンドロスタン−２β，１７β−ジオールジプロピオナート（アノルドリン、ＡＮＯ）を合成した。アノルドリンは、１９７６年の初めに中国でブランド名ＡＦ−５３を使用して避妊薬として市販されていた。エストロゲンはホルモン誘発性がんを引き起こすことが知られており、アノルドリンは、エストロゲン受容体アンタゴニストとして、悪性細胞成長を阻害することがその後に見出された（１５、１６、１７）。中国における非処方薬として、中国の医師は、法律的に承認された条件下でアノルドリンを抗腫瘍剤としてほぼ１０年間使用していた。しかし、臨床治療の間に多くの患者にとって混乱させるような結果が報告された。抗腫瘍剤としてのその臨床的利用は、中国で臨床試験法の導入後の１９９８年に停止され、全ての関連する臨床データは決して収集および研究されなかった。
本明細書中で言及した全ての刊行物、特許、特許出願、および公開特許出願の開示は、その全体が本明細書中で参考として援用される。
【先行技術文献】
【非特許文献】
【０００７】
【非特許文献１】Ｂｏｏｎｙａｒａｔａｎａｋｏｒｎｋｉｔ，  Ｖ．，  Ｓｔｅｒｉｏｄｓ．  ７６，  ８７７−８８４，  （２０１１）．
【発明の概要】
【課題を解決するための手段】
【０００８】
発明の簡単な概要
本出願は、１つの態様では、個体におけるがんを処置する方法であって、ａ）有効量のアノルドリンまたはそのアナログ（アノルドリンなど）；および、任意選択的に、ｂ）有効量の、タモキシフェン、ラロキシフェンまたはその機能的等価物、およびアロマターゼインヒビターからなる群から選択される少なくとも１つの他の薬剤を該個体に投与することを含む、方法を提供する。いくつかの実施形態では、アノルドリンまたはそのアナログ（アノルドリンなど）によって少なくとも１つの他の薬剤の副作用を軽減する方法であって、有効量のアノルドリンまたはそのアナログ（アノルドリンなど）を他の薬剤と組み合わせて個体に投与することを含み、他の薬剤が、タモキシフェン、ラロキシフェンまたはその機能的等価物、およびアロマターゼインヒビターからなる群から選択される、方法を提供する。いくつかの実施形態では、他の薬剤はタモキシフェンである。いくつかの実施形態では、他の薬剤は、ラロキシフェンまたはその機能的等価物（ラロキシフェン、ラソフォキシフェン、またはバゼドキシフェンなど）である。いくつかの実施形態では、他の薬剤は、アロマターゼインヒビター（アナストロゾールなど）である。いくつかの実施形態では、少なくとも１つの他の薬剤の副作用は、糖摂取の増加、細胞ＡＴＰ濃度の減少、またはその両方を含む。いくつかの実施形態では、副作用は、インスリン抵抗性を含む。
本発明は、例えば以下の項目を提供する。
（項目１）
個体におけるがんを処置する方法であって、有効量のアノルドリンまたはそのアナログを該個体に投与することを含む、方法。
（項目２）
有効量の、タモキシフェン、ラロキシフェンまたはその機能的等価物、およびアロマターゼインヒビターからなる群から選択される少なくとも１つの他の薬剤を前記個体に投与することをさらに含む、項目１に記載の方法。
（項目３）
アノルドリンによって少なくとも１つの他の薬剤の副作用を軽減する方法であって、該他の薬剤と組み合わせた有効量のアノルドリンまたはそのアナログを個体に投与することを含み、該他の薬剤が、タモキシフェン、ラロキシフェンまたはその機能的等価物、およびアロマターゼインヒビターからなる群から選択される、方法。
（項目４）
前記他の薬剤がタモキシフェンである、項目２または３のいずれか１項に記載の方法。（項目５）
前記他の薬剤がラロキシフェンまたはその機能的等価物である、項目２または３のいずれか１項に記載の方法。
（項目６）
前記他の薬剤がラロキシフェンである、項目２または３に記載の方法。
（項目７）
前記他の薬剤が、ラロキシフェン、ラソフォキシフェン、バゼドキシフェン、アルゾキシフェン、オルメロキシフェン、オスペミフェン、およびレボルメロキシフェンからなる群から選択される、項目２または３に記載の方法。
（項目８）
前記他の薬剤がアロマターゼインヒビターである、項目２または３のいずれか１項に記載の方法。
（項目９）
前記アロマターゼインヒビターがアナストロゾールである、項目８に記載の方法。
（項目１０）
前記アロマターゼインヒビターが、アナストロゾール、レトロゾール、エキセメスタン、ボロゾール、ホルメスタン、およびファドロゾールからなる群から選択される、項目８に記載の方法。
（項目１１）
前記がんが、乳がん、肺がん、膵臓がん、胃がん、結腸がん、肝臓がん、およびＣＬＬからなる群から選択される、項目１〜１０のいずれか１項に記載の方法。
（項目１２）
前記がんが、アノルドリンと組み合わせて投与しなかった場合に前記他の薬剤での処置に対して抵抗性である、項目２〜１１のいずれか１項に記載の方法。
（項目１３）
前記個体は膜結合型エストロゲン受容体が陽性である、項目１〜１２のいずれか１項に記載の方法。
（項目１４）
前記個体はＶＥＧＦＲまたはＥＧＦＲが陽性である、項目１〜１３のいずれか１項に記載の方法。
（項目１５）
前記アノルドリンおよび前記他の薬剤を逐次的に投与する、項目２〜１４のいずれか１項に記載の方法。
（項目１６）
前記アノルドリンおよび前記他の薬剤を同時に投与する、項目２〜１４のいずれか１項に記載の方法。
（項目１７）
前記個体はヒトである、項目１〜１６のいずれか１項に記載の方法。
（項目１８）
前記アノルドリンまたはそのアナログがアノルドリンである、項目１〜１７のいずれか１項に記載の方法。
（項目１９）
個体における閉経後の症状を軽減する方法であって、有効量のアノルドリンまたはそのアナログを該個体に投与することを含む、方法。
（項目２０）
有効量の少なくとも１つの他の薬剤を前記個体に投与することをさらに含み、該他の薬剤がラロキシフェンまたはその機能的等価物である、項目１９に記載の方法。
（項目２１）
前記他の薬剤がラロキシフェンである、項目２０に記載の方法。
（項目２２）
前記他の薬剤が、ラロキシフェン、ラソフォキシフェン、バゼドキシフェン、アルゾキシフェン、オルメロキシフェン、オスペミフェン、およびレボルメロキシフェンからなる群から選択される、項目２０に記載の方法。
（項目２３）
前記閉経後の症状が、脂肪肝、体重増加、高血中トリグリセリド、骨粗鬆症、および臓器萎縮からなる群から選択される、項目１９〜２２のいずれか１項に記載の方法。
（項目２４）
前記アノルドリンおよび前記他の薬剤を逐次的に投与する、項目２０〜２３のいずれか１項に記載の方法。
（項目２５）
前記アノルドリンおよび前記他の薬剤を同時に投与する、項目２０〜２３のいずれか１項に記載の方法。
（項目２６）
前記個体がヒトである、項目１９〜２５のいずれか１項に記載の方法。
（項目２７）
前記アノルドリンまたはそのアナログがアノルドリンである、項目１９〜２６のいずれか１項に記載の方法。
（項目２８）
アノルドリンまたはそのアナログならびにタモキシフェン、ラロキシフェンまたはその機能的等価物、およびアロマターゼインヒビターからなる群から選択される少なくとも１つの他の薬剤を含む薬学的組成物。
（項目２９）
前記他の薬剤がタモキシフェンである、項目２８に記載の薬学的組成物。
（項目３０）
前記他の薬剤がラロキシフェンまたはその機能的等価物である、項目２８に記載の薬学的組成物。
（項目３１）
前記他の薬剤がラロキシフェンである、項目２８に記載の薬学的組成物。
（項目３２）
前記他の薬剤が、ラロキシフェン、ラソフォキシフェン、バゼドキシフェン、アルゾキシフェン、オルメロキシフェン、オスペミフェン、およびレボルメロキシフェンからなる群から選択される、項目２８に記載の薬学的組成物。
（項目３３）
前記他の薬剤がアロマターゼインヒビターである、項目２８に記載の薬学的組成物。
（項目３４）
前記アロマターゼインヒビターがアナストロゾールである、項目３３に記載の薬学的組成物。
（項目３５）
前記アロマターゼインヒビターが、アナストロゾール、レトロゾール、エキセメスタン、ボロゾール、ホルメスタン、およびファドロゾールからなる群から選択される、項目３３に記載の薬学的組成物。
（項目３６）
脂質をさらに含む、項目２８〜３５のいずれか１項に記載の薬学的組成物。
（項目３７）
カゼインをさらに含む、項目２８〜３６のいずれか１項に記載の薬学的組成物。
（項目３８）
前記組成物中のアノルドリンと前記他の薬剤との重量比が約２０：１〜約１：２０である、項目２８〜３７のいずれか１項に記載の薬学的組成物。
（項目３９）
項目２８〜３８のいずれか１項に記載の薬学的組成物を含む経口単位投薬形態。
（項目４０）
前記単位投薬形態が錠剤の形態である、項目３９に記載の経口単位投薬形態。
【０００９】
上記の実施形態のいずれか１つに従ういくつかの実施形態では、がんは、乳がん、肺がん、膵臓がん、胃がん、結腸がん、肝臓がん、およびＣＬＬからなる群から選択される。いくつかの実施形態では、がんは、アノルドリンまたはそのアナログ（アノルドリンなど）と組み合わせて投与しなかった場合に他の薬剤での処置に抵抗性である。
【００１０】
上記の実施形態のいずれか１つに従ういくつかの実施形態では、個体は、膜結合型エストロゲン受容体に陽性である。いくつかの実施形態では、個体は、ＶＥＧＦＲまたはＥＧＦＲに陽性である。
【００１１】
別の態様では、個体における閉経後の症状を軽減する方法であって、ａ）有効量のアノルドリンまたはそのアナログ（アノルドリンなど）；および、任意選択的に、ｂ）有効量の、ラロキシフェンまたはその機能的等価物およびアロマターゼインヒビターからなる群から選択される少なくとも１つの他の薬剤を該個体に投与することを含む、方法を提供する。いくつかの実施形態では、他の薬剤は、ラロキシフェンまたはその機能的等価物（ラロキシフェン、ラソフォキシフェン、またはバゼドキシフェンなど）である。いくつかの実施形態では、他の薬剤は、アロマターゼインヒビター（アナストロゾールなど）である。いくつかの実施形態では、閉経後の症状は、脂肪肝、インスリン抵抗性、高糖摂取および／または低細胞ＡＴＰ濃度、体重増加、高血中トリグリセリド、骨粗鬆症、および臓器萎縮からなる群から選択される。
【００１２】
上記の実施形態のいずれか１つに従ういくつかの実施形態では、アノルドリンまたはそのアナログ（アノルドリンなど）および他の薬剤を、逐次的に投与する。いくつかの実施形態では、アノルドリンまたはそのアナログ（アノルドリンなど）および他の薬剤を、同時に投与する。
【００１３】
上記の実施形態のいずれか１つに従ういくつかの実施形態では、個体はヒトである。
【００１４】
さらに別の態様では、アノルドリンまたはそのアナログ（アノルドリンなど）ならびにタモキシフェン、ラロキシフェンまたはその機能的等価物、およびアロマターゼインヒビターからなる群から選択される少なくとも１つの他の薬剤を含む薬学的組成物を提供する。いくつかの実施形態では、他の薬剤はタモキシフェンである。いくつかの実施形態では、他の薬剤は、ラロキシフェンまたはその機能的等価物（例えば、ラロキシフェン、ラソフォキシフェン、またはバゼドキシフェンが含まれる）である。いくつかの実施形態では、他の薬剤はアロマターゼインヒビター（アナストロゾールなど）である。
【００１５】
いくつかの実施形態では、薬学的組成物は、さらに、脂質（トウモロコシ油など）を含む。いくつかの実施形態では、薬学的組成物は、さらに、タンパク質（カゼインなど）を含む。
【００１６】
いくつかの実施形態では、組成物中のアノルドリンまたはそのアナログ（アノルドリンなど）と他の薬剤との重量比は、約１：２０〜約２０：１（例えば、約１０：１〜約１：１０または約１：１０〜約１：１５が含まれる）である。
【００１７】
薬学的組成物は、単位投薬形態（例えば、カプセル、錠剤、丸薬、カプレット、ゲル、液体（例えば、懸濁液、溶液、乳濁液）、粉末、または他の粒子などのような経口単位投薬形態）で存在し得る。
【００１８】
本明細書中に記載のがんの処置、副作用の軽減、および閉経後の症状の軽減のための本明細書中に記載の薬学的組成物の使用方法も提供する。
【００１９】
本発明のこれらおよび他の態様および利点は、以後の詳細な記載および添付の特許請求の範囲から明らかとなる。本明細書中に記載の種々の実施形態の１つ、いくつか、または全ての性質を組み合わせて本発明の他の実施形態を形成することができると理解されたい。
【図面の簡単な説明】
【００２０】
【図１】アノルドリンまたはそのアナログ（アノルドリンなど）は、ＥＲのリガンド結合ドメイン（ＬＢＤ）（２μｇのＧＳＴ−融合タンパク質がビーズ上にカップリングしている）に結合せず、それにより、エストロゲン古典的経路を調整することができない。Ａ：ブランクを差し引いた後に３Ｈ−Ｅ２のみを使用して正規化したＥ２、タモキシフェン（ＴＡＭ）、またはＡＮＯとの競合後のＥＲ−α−ＬＢＤへの３Ｈ−Ｅ２の結合率；Ｂ：グルタチオンビーズによって精製したＧＳＴ融合タンパク質を示す、クーマシーブルーＲ２５０で染色した１０％ＳＧＳ−ＰＡＧＥ；Ｃ：ゲル１は、ウェスタンブロッティングを使用し、抗Ｂｃｌ−２抗体でプローブしたＴＡＭ、ＡＮＯ、またはブランクによって処理したＭＣＦ−７細胞におけるＢｃｌ−２の発現を示す；ゲル２は、各サンプルにおけるアクチンタンパク質の量を示す；ゲル３は、より長く曝露したゲル１を示す。
【００２１】
【図２】アノルドリンまたはそのアナログ（アノルドリンなど）は、ＨＥＫ−２９３細胞に発現したＥＲ−α−３６への３Ｈ−Ｅ２結合を遮断し、原形質膜上のインテグリンβ１の分布を介したＭＤＡ−ＭＢ−２３１細胞の成長および遊走を阻害する。図２Ａ：ブランクによって正規化した、ＨＥＫ−２９３に発現し、ＡＮＯまたはＴＡＭと競合させたＥＲ−α−３６への３Ｈ−Ｅ２の結合率；図２Ｂ：ＨＥＫ−２９３細胞におけるＥＲ−α−３６発現を、抗ＥＲ−α抗体を使用したウェスタンブロッティングによって検出した；図２Ｃ：ＡＮＯ（赤色カラム）は、タモキシフェン（ＴＡＭ）（青色カラム）と比較してその投薬量に依存してＭＤＡ−ＭＢ−２３１細胞の成長を有意に阻害する；図２Ｄ：ＡＮＯおよびＥＧＦは共に、ＭＤＡ−ＭＢ−２３１細胞の成長を阻害する；図２Ｅ：６μＭ［ＡＮＯ］は、８μｍトランズウェルによって試験したところＭＤＡ−ＭＢ−２３１細胞の遊走を阻害する；図２Ｆ：６μＭ［ＡＮＯ］＋１０ｎｇ／ｍｌ［ＥＧＦ］は、８μｍトランズウェルによって試験したところＭＤＡ−ＭＢ−２３１細胞の遊走を阻害する；図２Ｇ：６μＭ［ＡＮＯ］は、ＭＤＡ−ＭＢ−２３１細胞における原形質膜上のインテグリンβ１分布を阻害する；図２Ｈ：６μＭ［ＡＮＯ］は、ＭＣＦ−７細胞における原形質膜上のインテグリンβ１分布を阻害する。
【００２２】
【図３】アノルドリンまたはそのアナログ（アノルドリンなど）は、マウスにおいてＭＣＦ−７細胞におけるグルコース消費を促進し、血中グルコースを減少させる。図３Ａ：ＡＮＯは、ＴＡＭによる阻害と比較してＭＣＦ−７細胞におけるグルコース消費を増大させる；図３Ｂ：２５０ｎＭ［ＡＮＯ］は、ＭＣＦ−７細胞におけるグルコース消費に対して１μＭ［ＴＡＭ］の阻害を中和するだけでなく、基底レベルを超えて増大させる；図３Ｃ：ＡＮＯは、雌ｄｂ／ｄｂマウスの血中グルコース濃度を有意に減少させることができる。
【００２３】
【図４】アノルドリンまたはそのアナログ（アノルドリンなど）は、タモキシフェンで処置した卵巣切除（ＯＶＸ）マウスまたは正常マウスの体重増加（increased  body  mass）および肝臓でのトリグリセリド蓄積を防止する。図４Ａ：ＡＮＯは、ＯＶＸマウスにおいてイプリフラボン（ＩＰ）と比較して体重増加を有意に遮断する；図４Ｂ：ＡＮＯは、ＴＡＭ誘導性体重増加を有意に遮断する；図４Ｃおよび図４Ｄ：肝臓のパラフィン切片は、ＡＮＯがＯＶＸマウスの肝臓において同一用量のＩＰと比較してトリグリセリド蓄積を有意に減少させることができることを示す；図４Ｅおよび図４Ｆ：肝臓のパラフィン切片は、ＡＮＯが、正常マウスの肝臓において同量のＩＦと比較してタモキシフェン（ＴＡＭ）によって誘導されたトリグリセリドの量および非アルコール性脂肪性肝炎（ＮＡＳＨ）を有意に減少させることができることを示す；図４Ｇ：毛細血管により近い肝細胞においてＮＡＳＨの悪性度が増加する。
【００２４】
【図５】アノルドリンまたはそのアナログ（アノルドリンなど）は、タモキシフェンによって誘導された血清ＴＧおよび血清粘度を減少させる。
【００２５】
【図６】アノルドリンまたはそのアナログ（アノルドリンなど）（７．５μＭ）は、Ｔ４７Ｄ細胞におけるＥＧＦ（１０ｎｇ／ｍｌ）誘導性細胞成長を遮断する。
【００２６】
【図７】アノルドリンまたはそのアナログ（アノルドリンなど）は、ＨｅｐＧ２細胞の成長を阻害し、ＥＲＫのリン酸化を誘導する。
【００２７】
【図８】アノルドリンまたはそのアナログ（アノルドリンなど）は、卵巣切除されたかタモキシフェン処置されたマウスにおける子宮および膣の萎縮を防止する。
【００２８】
【図９】アノルドリンまたはそのアナログ（アノルドリンなど）により、マウスにおいて子宮内膜上皮細胞の肥大（細胞サイズが増加するが、単層は維持される）が生じるが、子宮内膜上皮細胞増殖は誘導されない。
【００２９】
【図１０】アノルドリンまたはそのアナログ（アノルドリンなど）のトウモロコシ油およびカゼイン処方（formula）（カラムｏｃ）は、その活性を増加させて、メチルセルロース（カラムｍｃ）と比較して、マウス子宮の萎縮を防止する。
【００３０】
【図１１】アノルドリンまたはそのアナログ（アノルドリンなど）は、卵巣切除マウスにおいて骨粗鬆症を防止する。
【００３１】
【図１２】アノルドリンまたはそのアナログ（アノルドリンなど）は、ＨＥＫ−２９３細胞に発現したＥＲ−β融合タンパク質およびＧＰＥＲ１融合タンパク質への３Ｈ−Ｅ２結合を阻害する。
【００３２】
【図１３】タモキシフェンおよびアノルドリンまたはアノルドリンアナログ（アノルドリンなど）の細胞成長、エストロゲン調節遺伝子発現、およびインスリン経路とのその相互作用に及ぼす影響。Ａ．培地中にインスリンが有りまたは無しの培養条件下でのＭＣＦ−７細胞の成長阻害についてのアノルドリン（ａｎｏｒｄｉｎ）またはタモキシフェンのＩＣ５０。培地中のインスリンの存在により、ＭＣＦ−７細胞のタモキシフェンに対する感受性が減少するが、ＭＣＦ−７細胞のアノルドリンに対する感受性は増加する。Ｂ．ＭＣＦ−７細胞をアノルドリン（ＡＮＯ）、タモキシフェン（ＴＡＭ）、またはラロキシフェン（ＲＡＬ）で処理した場合、薬物処理を行わないＭＣＦ−７細胞と比較して、エストロゲン古典経路による制御下の遺伝子（ＢＲＣＡ１、ＡｐｏＤ、およびＣＯＸ７ａなど）の発現レベルのｌｏｇ２倍変化を示すＲＴ−ｑＰＣＲの結果。アノルドリン処理は、ＢＲＣＡ１転写（ｔｒａｎｓｃａｔｉｐｔｉｏｎ）に有意に影響を及ぼさなかったが、タモキシフェン処理は、ＢＲＣＡ１  ｍＲＮＡおよびＣＯＸ７ａ  ｍＲＮＡの転写を有意に阻害した。Ｃ．ＭＣＦ−７細胞の培養培地からのインスリンの除去によってタンパク質レベルでＥＲ−α−３６発現が増加するが、ＧＰＥＲ１またはＥＲ−α−６６の発現レベルの視覚的相違はなかったことを示すウェスタンブロット。
【００３３】
【図１４】アノルドリンまたはそのアナログ（アノルドリンなど）は、Ｈｅｃ１Ａ細胞およびＩｓｈｉｋａｗａ細胞の成長を阻害する。
【００３４】
【図１５】６μＭのＡＮＯは、ＭＣＦ−７細胞およびＭＤＡ−ＭＢ−２３１細胞の両方においてインテグリンβ１の発現レベルを変化させない。ＭＣＦ−７細胞を採取し、ＲＩＰＡ緩衝液に溶解した。細胞ライセートの合計４０μｇのタンパク質をウェスタンブロッティングのために使用して、インテグリンβ１の発現レベルを決定した。上のゲルはインテグリンβ１の発現レベルを示し；下のゲルはアクチン量を示す。
【００３５】
【図１６】ＡＮＯは、全実験群において本発明者らの試験条件下で食物摂取量を有意に変化させない。Ａ：ＡＮＯは、ｄｂ／ｄｂマウスにおいて食物摂取量は有意に変化させない；Ｂ：ＡＮＯは、卵巣切除（ＯＶＸ）マウスにおいて他の群と比較して食物摂取量を有意に変化させない；Ｃ：ＡＮＯは、正常マウスにおいてタモキシフェン（ＴＡＭ）群と比較して食物摂取量を有意に変化させない。
【００３６】
【図１７】肝臓の総コレステロール。Ａ：卵巣切除（ＯＶＸ）群の肝臓の総コレステロール；Ｂ：ＴＡＭ／ＡＮＯ群の肝臓の総コレステロール。
【００３７】
【図１８】アノルドリンまたはそのアナログ（アノルドリンなど）により、ＭＣＦ−７培養培地のｐＨを低下させ、黄色に変化させた。ＭＣＦ−７細胞を、５×１０５細胞／ウェルの密度で０．７５ｍｌ培地中に表示濃度の薬物を含む２４ウェルプレートに２４時間播種した。ｐＨメーターを使用して培地のｐＨを測定した。
【００３８】
【図１９】アノルドリンの水素イオンは、細胞増殖阻害を担う主な部位である。エチンを、Ｃ２〜１８のアルキルアミンまたはアルケニルアミンで置換してアノルジオールの誘導体を合成する。ＭＤＡ−ＭＢ−２３１細胞を使用して薬物活性を測定する。図１９Ａ：ＭＤＡ−ＭＢ−２３１細胞の濃度依存性の形態変化および死滅；図１９Ｂ：活性薬物および濃度範囲。
【００３９】
【図２０】３Ｈ−Ｅ２は、可溶性ＥＲ−−３６に結合しない。
【００４０】
【図２１】ＥＲ−ａ（上）、ＧＰＥＲ１（中央）、およびＥＲ−ｂ（下）に対して蛍光標識（赤色）抗体を使用したマウス肝臓のパラフィン切片の免疫蛍光染色（左側のパネル）。核を、ＤＡＰＩ（青色）を使用して染色した。右側のパネル中の画像は、対応する明視野画像である。ＧＰＥＲ１のみが核周囲局在を示した。
【００４１】
【図２２】Ａ．特異的ｓｉＲＮＡを使用したＥＲ−α−３６の一過性ノックダウンはＭＤＡ−ＭＢ−２３１細胞の遊走を減少させたが、（特異的ｓｉＲＮＡを使用した）ＧＰＥＲ１の一過性ノックダウンまたはスクランブルｓｉＲＮＡを使用したコントロールは、ＭＤＡ−ＭＢ−２３１細胞の遊走に有意な影響を及ぼさなかった。マトリックスゲルアッセイを使用して細胞遊走を測定した。Ｂ．特異的ｓｉＲＮＡがタンパク質レベルでのＥＲ−α−３６およびＧＰＥＲ１のそれぞれのノックダウンで有効であったことを示すウェスタンブロット。
【００４２】
【図２３】特異的ｓｉＲＮＡを使用したＥＲ−α−３６またはＧＰＥＲ１の一過性ノックダウンは、グルコース取り込みおよび細胞ＡＴＰレベルに及ぼす薬物の影響に関してタモキシフェンおよびアノルドリン（またはアノルドリンアナログ）の両方に対するＭＣＦ−７細胞の感受性を減少させた。Ａ．タモキシフェンおよび／またはアノルドリン（ＡＮＯ）で処理したＭＣＦ−７−細胞によるグルコース取り込みを、蛍光グルコースアナログ２−ＮＢＤＧ（２−デオキシ−２−［（７−ニトロ−２，１，３−ベンゾオキサジアゾール−４−イル）アミノ］−Ｄ−グルコース）を使用して測定した。特異的ｓｉＲＮＡによるＥＲ−α−３６またはＧＰＥＲ１のノックダウンにより、ＥＲ−α−３６またはＧＰＥＲ１のＲＮＡｉノックダウンを行わなかった薬物処理ＭＣＦ−７細胞と比較して、タモキシフェン（ＴＡＭ）またはアノルドリン（ＡＮＯ）で処理したＭＣＦ−７細胞におけるグルコース取り込みが有意に減少した。Ｂ．タモキシフェンおよび／またはアノルドリン（ＡＮＯ）で処理したＭＣＦ−７細胞におけるＡＴＰ濃度を、蛍光ベースのＡＴＰ分析キットを使用して測定した。特異的ｓｉＲＮＡによるＥＲ−α−３６またはＧＰＥＲ１のノックダウンにより、対応する薬物で処理したがＲＮＡｉノックダウンを行わなかった細胞と比較して、タモキシフェン処理細胞におけるＡＰＴ濃度が増加するが、アノルドリン処理細胞では減少した。Ｃ．特異的ｓｉＲＮＡによるタンパク質レベルでのＥＲ−α−３６またはＧＰＥＲ１の有効なノックダウンを示すウェスタンブロット。
【発明を実施するための形態】
【００４３】
発明の詳細な説明
本出願は、がんの処置、副作用の軽減、および閉経後の症状（単数または複数）の軽減のために第２の薬剤と併せてアノルドリンまたはそのアナログ（アノルドリンなど）を含む併用療法のための方法および組成物を提供する。本発明は、アノルドリンまたはそのアナログ（アノルドリンなど）の固有の性質および作用機構の発見に基づく。大規模スクリーニング後、驚いたことに、本発明者らは、アノルドリンまたはそのアナログ（アノルドリンなど）が膜結合エストロゲン結合タンパク質の特異的に選択的なエストロゲン受容体調節因子であることを見出した。他方では、アノルドリンまたはそのアナログ（アノルドリンなど）は、ＧＰＥＲ１に結合して、バイオエネルギー消費の平衡を保つための代謝シグナルを調整する、ＧＰＥＲ１経路のアゴニストとして機能する。したがって、アノルドリンまたはそのアナログ（アノルドリンなど）の有益な効果には、以下が含まれる：ｉ）エストロゲン媒介性ＨＥＲ／ＶＥＧＦＲ経路を介して膜結合エストロゲン受容体によって制御された悪性細胞の遊走および成長の阻害、ｉｉ）閉経後の症状（脂肪肝、体重増加、高血中トリグリセリド、骨粗鬆症、および臓器萎縮など）を軽減させるアゴニストとしてのエストロゲン代謝効果の調整、ｉｉｉ）タモキシフェン、ラロキシフェン、およびアナストロゾールなどの薬物による有害影響（例えば、骨粗鬆症、非アルコール性脂肪性肝炎（ＮＡＳＨ）、臓器の萎縮、および子宮内膜がんが含まれる）の中和。
【００４４】
したがって、本発明は、１つの態様では、アノルドリンまたはそのアナログ（アノルドリンなど）を、単独か、タモキシフェン、ラロキシフェンまたはその機能的等価物、およびアロマターゼインヒビターからなる群から選択される少なくとも１つの他の薬剤と組み合わせて投与することを含む、がんを処置する方法を提供する。
【００４５】
別の態様では、タモキシフェン、ラロキシフェンまたはその機能的等価物、およびアロマターゼインヒビターからなる群から選択される少なくとも１つの他の薬剤の副作用を軽減する方法であって、アノルドリンまたはそのアナログ（アノルドリンなど）をかかる他の薬剤と組み合わせて投与することによる、方法を提供する。
【００４６】
別の態様では、アノルドリンまたはそのアナログ（アノルドリンなど）を単独か少なくとも１つの他の薬剤と組み合わせて投与することによる閉経後症候群を軽減する方法であって、他の薬剤がラロキシフェンまたはその機能的等価物である、方法を提供する。
【００４７】
別の態様では、アノルドリンまたはそのアナログ（アノルドリンなど）を単独か少なくとも１つの他の薬剤と組み合わせて投与することによる血液粘性（ｂｌｏｏｄ  ｖｉｓｃｏｃｉｔｙ）および血栓塞栓症を軽減する方法であって、他の薬剤がラロキシフェンまたはその機能的等価物である、方法を提供する。
【００４８】
アノルドリンまたはそのアナログ（アノルドリンなど）ならびにタモキシフェン、ラロキシフェンまたはその機能的等価物、およびアロマターゼインヒビターからなる群から選択される少なくとも１つの他の薬剤を含む薬学的組成物も提供する。
【００４９】
定義
当業者は、本明細書中に記載の併用療法が１つの薬剤または組成物を別の薬剤と併せて投与することが必要であると理解されたい。「〜と併せて」は、ある処置様式に別の処置様式を加えた投与（同一個体への本明細書中に記載のアノルドリンまたはそのアナログ（アノルドリンなど）の投与に第２の薬剤の投与を加えるなど）をいう。それゆえ、「〜と併せて」は、個体への一方の処置様式の、他方の処置様式の送達前、送達中、または送達後の投与をいう。
【００５０】
本明細書中に記載の方法は、一般に、疾患の処置に有用である。本明細書中で使用する場合、「処置」は、有利なまたは所望の臨床結果を得るためのアプローチである。例えば、がんの処置のために、有利なまたは所望の臨床結果には、以下のうちのいずれか１つまたは複数が含まれるが、これらに限定されない：１つまたは複数の症状の緩和、疾患範囲の縮小、疾患の拡大（例えば、転移（例えば、肺またはリンパ節への転移））の防止または遅延、疾患の再発の防止または遅延、疾患の進行の遅延または緩慢化、疾患状態の改善、および寛解（部分または全体のいずれか）。増殖性疾患の病理学的帰結の軽減も「処置」に含まれる。本発明の方法は、これらの処置の態様のうちのいずれか１つまたは複数を意図する。
【００５１】
本明細書中で使用される「トリプルネガティブ乳がん」を有する個体は、エストロゲン受容体（ＥＲ）、プロゲステロン受容体（ＰＲ）、およびＨＥＲ２タンパク質の発現が臨床的に陰性の個体をいう。
【００５２】
「ｍＥＲ」は、膜結合型エストロゲン受容体をいう。ＥＲは、そのエストロゲン結合ドメイン（ＬＢＤ）のシステイン残基でのパルミトイル化修飾によって原形質膜上で亢進される。ＥＲ−α−３６は、短縮ＥＲ−αバリアントである。ＥＲ−α−３６は、パルミトイル化モチーフ（４４５〜４５３）が残存し、全長ＥＲ−αのＣ末端の１４０アミノ酸領域（４５６〜５９５）の代わりに固有の２７アミノ酸を保有する。ＥＲ−α−３６が部分的なＬＢＤを保有し、主に原形質膜およびサイトゾルに局在しているので、ＥＲ−α−３６はエストロゲンと結合せず、それにより、エストロゲン古典的経路の調整能力を喪失している。
【００５３】
本明細書中で使用される「ｍＥＲ」、「ＥＧＦＲ陽性」、「ＶＥＧＦＲ陽性」は、膜結合型エストロゲン受容体、上皮成長因子受容体（ＥＧＦＲ）、または血管上皮成長因子受容体（ＶＥＧＦＲ）が臨床的に陽性の個体をいう。
【００５４】
本明細書中で使用される用語「有効量」は、特定の障害、状態、または疾患を処置する（１つまたは複数のその症状を改善する、和らげる、減らす、および／または遅延させるなど）のに十分な化合物または組成物の量をいう。がんに関して、有効量は、腫瘍を収縮させ、そして／または腫瘍の成長速度を減少させ（腫瘍成長の抑制など）、または他の望ましくない細胞増殖を防止もしくは遅延させるのに十分な量を含む。
【００５５】
用語「個体」は、哺乳動物（ヒトが含まれる）である。個体には、ヒト、ウシ、ウマ、ネコ、イヌ、齧歯類、または霊長類が含まれるが、これらに限定されない。いくつかの実施形態では、個体はヒトである。
【００５６】
本方法を、アジュバント療法（Ａｄｊｕｖａｎｔ  ｓｅｔｔｉｎｇ）で実施してよい。「アジュバント療法」は、個体に増殖性疾患、特に、がんの病歴があり、（必然ではないが）一般に、治療（手術（外科的切除など）、照射療法、および化学療法が含まれるが、これらに限定されない）に応答していた臨床実践場面をいう。しかし、その増殖性疾患（がんなど）の病歴のために、これらの個体は、疾患の発症リスクがあると考えられる。「アジュバント療法」での処置または投与は、その後の処置様式をいう。リスクの程度（すなわち、アジュバント療法における個体が「高リスク」または「低リスク」と考えられる場合）は、いくつかの要因に依存するが、最も一般的には、最初に処置された疾患の範囲に依存する。
【００５７】
本明細書中に提供した方法を、「ネオアジュバント療法」で実施してよい（すなわち、本方法を、一次／根治的治療前に行ってよい）。いくつかの実施形態では、個体は以前に処置されていた。いくつかの実施形態では、個体は以前に処置されていなかった。いくつかの実施形態では、処置は第一選択療法である。
【００５８】
「アルキル」は、線状または枝分かれの飽和炭化水素である。例えば、アルキル基は、１〜１２個の炭素原子（すなわち、（Ｃ１〜Ｃ１２アルキル））、または１〜１０個の炭素原子（すなわち、（Ｃ１〜Ｃ１０アルキル））、または１〜８個の炭素原子（すなわち、（Ｃ１〜Ｃ８アルキル））、または１〜６個の炭素原子（すなわち、（Ｃ１〜Ｃ６アルキル））、または１〜４個の炭素原子（すなわち、（Ｃ１〜Ｃ４アルキル））を有し得る。適切なアルキル基の例には、メチル（Ｍｅ、−ＣＨ３）、エチル（Ｅｔ、−ＣＨ２ＣＨ３）、１−プロピル（ｎ−Ｐｒ、ｎ−プロピル、−ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ３）、２−プロピル（ｉ−Ｐｒ、ｉ−プロピル、−ＣＨ（ＣＨ３）２）、１−ブチル（ｎ−Ｂｕ、ｎ−ブチル、−ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ３）、２−メチル−１−プロピル（ｉ−Ｂｕ、ｉ−ブチル、−ＣＨ２ＣＨ（ＣＨ３）２）、２−ブチル（ｓ−Ｂｕ、ｓ−ブチル、−ＣＨ（ＣＨ３）ＣＨ２ＣＨ３）、２−メチル−２−プロピル（ｔ−Ｂｕ、ｔ−ブチル、−Ｃ（ＣＨ３）３）、１−ペンチル（ｎ−ペンチル、−ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ３）、２−ペンチル（−ＣＨ（ＣＨ３）ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ３）、３−ペンチル（−ＣＨ（ＣＨ２ＣＨ３）２）、２−メチル−２−ブチル（−Ｃ（ＣＨ３）２ＣＨ２ＣＨ３）、３−メチル−２−ブチル（−ＣＨ（ＣＨ３）ＣＨ（ＣＨ３）２）、３−メチル−１−ブチル（−ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ（ＣＨ３）２）、２−メチル−１−ブチル（−ＣＨ２ＣＨ（ＣＨ３）ＣＨ２ＣＨ３）、１−ヘキシル（−ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ３）、２−ヘキシル（−ＣＨ（ＣＨ３）ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ３）、３−ヘキシル（−ＣＨ（ＣＨ２ＣＨ３）（ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ３））、２−メチル−２−ペンチル（−Ｃ（ＣＨ３）２ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ３）、３−メチル−２−ペンチル（−ＣＨ（ＣＨ３）ＣＨ（ＣＨ３）ＣＨ２ＣＨ３）、４−メチル−２−ペンチル（−ＣＨ（ＣＨ３）ＣＨ２ＣＨ（ＣＨ３）２）、３−メチル−３−ペンチル（−Ｃ（ＣＨ３）（ＣＨ２ＣＨ３）２）、２−メチル−３−ペンチル（−ＣＨ（ＣＨ２ＣＨ３）ＣＨ（ＣＨ３）２）、２，３−ジメチル−２−ブチル（−Ｃ（ＣＨ３）２ＣＨ（ＣＨ３）２）、３，３−ジメチル−２−ブチル（−ＣＨ（ＣＨ３）Ｃ（ＣＨ３）３、およびオクチル（−（ＣＨ２）７ＣＨ３）が含まれるが、これらに限定されない。
【００５９】
「アルケニル」は、少なくとも１つの炭素−炭素二重結合を有する線状または枝分かれの炭化水素である。例えば、アルケニル基は、２〜１２個の炭素原子（すなわち、Ｃ２〜Ｃ１２アルケニル）、または２〜１０個の炭素原子（すなわち、Ｃ２〜Ｃ１０アルケニル）、または２〜８個の炭素原子（すなわち、Ｃ２〜Ｃ８アルケニル）、または２〜６個の炭素原子（すなわち、Ｃ２〜Ｃ６アルケニル）、または２〜４個の炭素原子（すなわち、Ｃ２〜Ｃ４アルケニル）を有し得る。適切なアルケニル基の例には、エチレンまたはビニル（−ＣＨ＝ＣＨ２）、アリル（−ＣＨ２ＣＨ＝ＣＨ２）、および５−ヘキセニル（−ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ＝ＣＨ２）が含まれるが、これらに限定されない。
【００６０】
本明細書中に記載の本発明の態様および実施形態には「からなる（ｃｏｎｓｉｓｔｉｎｇ）」および／または「から本質的になる（ｃｏｎｓｉｓｔｉｎｇ  ｅｓｓｅｎｔｉａｌｌｙ  ｏｆ）」の態様および実施形態が含まれると理解される。
【００６１】
「約」に関して、本明細書中の値またはパラメータにはその値またはパラメータ自体に関する変化量が含まれる（記載される）。例えば、「約Ｘ」に関する記述には、「Ｘ」の記述が含まれる。
【００６２】
本明細書中および添付の特許請求の範囲中で使用される場合、単数形「ａ」、「ｏｒ」、および「ｔｈｅ」には、文脈上そうでないと明確に示されない限り、複数の指示対象が含まれる。本明細書中に記載の本発明の態様および変形形態には、「からなる」および／または「から本質的になる」の態様および変形形態が含まれると理解される。
【００６３】
がんの処置方法
本発明は、１つの態様では、個体におけるがんを処置する方法であって、有効量のアノルドリンまたはそのアナログ（アノルドリンなど）を該個体に投与することを含む、方法を提供する。いくつかの実施形態では、個体におけるがんを処置する方法であって、ａ）有効量のアノルドリンまたはそのアナログ（アノルドリンなど）；およびｂ）有効量の、タモキシフェン、ラロキシフェンまたはその機能的等価物、およびアロマターゼインヒビターからなる群から選択される少なくとも１つの他の薬剤を該個体に投与することを含む、方法を提供する。いくつかの実施形態では、個体におけるがんを処置する方法であって、ａ）有効量のアノルドリンまたはそのアナログ（アノルドリンなど）；およびｂ）有効量のラロキシフェンを該個体に投与することを含む、方法を提供する。いくつかの実施形態では、個体におけるがんを処置する方法であって、ａ）有効量のアノルドリンまたはそのアナログ（アノルドリンなど）；およびｂ）有効量のタモキシフェンを該個体に投与することを含む、方法を提供する。いくつかの実施形態では、個体におけるがんを処置する方法であって、ａ）有効量のアノルドリンまたはそのアナログ（アノルドリンなど）；およびｂ）有効量のラソフォキシフェン（ｌａｓｏｆｏｘｉｄｅｎｅ）またはバゼドキシフェンを該個体に投与することを含む、方法を提供する。いくつかの実施形態では、個体におけるがんを処置する方法であって、ａ）有効量のアノルドリンまたはそのアナログ（アノルドリンなど）；およびｂ）有効量のアナストロゾールを該個体に投与することを含む、方法を提供する。いくつかの実施形態では、アノルドリンまたはそのアナログ（アノルドリンなど）および他の薬剤の両方を経口投与する。いくつかの実施形態では、アノルドリンまたはそのアナログ（アノルドリンなど）および他の薬剤は、例えば、経口投薬形態の形態で単一の組成物（本明細書中に記載の薬学的組成物など）中に存在する。
【００６４】
いくつかの実施形態では、がんは、乳がん、肺がん（小細胞肺がんおよび非小細胞肺がんなど）、腎がん、膀胱がん、膵臓がん、卵巣がん、前立腺がん、脳腫瘍、結腸直腸がん、白血病、リンパ腫、および多発性骨髄腫からなる群から選択される。いくつかの実施形態では、個体はｍＥＲ陽性である。いくつかの実施形態では、個体はＥＧＦＲ陽性である。いくつかの実施形態では、個体はＶＥＧＦＲ陽性である。いくつかの実施形態では、個体は固形腫瘍を有する。
【００６５】
いくつかの実施形態では、個体におけるがんを処置する方法であって、ａ）有効量のアノルドリンまたはそのアナログ（アノルドリンなど）；およびｂ）有効量の少なくとも１つの他の薬剤であって、該他の薬剤がＥＧＦＲインヒビターである、他の薬剤を該個体に投与することを含む、方法を提供する。いくつかの実施形態では、個体におけるがんを処置する方法であって、ａ）有効量のアノルドリンまたはそのアナログ（アノルドリンなど）；およびｂ）有効量の少なくとも１つの他の薬剤であって、該他の薬剤がＶＥＧＦＲインヒビターである、他の薬剤を該個体に投与することを含む、方法を提供する。いくつかの実施形態では、個体におけるがんを処置する方法であって、ａ）有効量のアノルドリンまたはそのアナログ（アノルドリンなど）；およびｂ）有効量の少なくとも２つの他の薬剤であって、該２つの他の薬剤がＥＧＦＲインヒビターおよびＶＥＧＦＲインヒビターである、他の薬剤を該個体に投与することを含む、方法を提供する。いくつかの実施形態では、本方法は、さらに、タモキシフェン、ラロキシフェンまたはその機能的等価物、およびアロマターゼインヒビターからなる群から選択される別の薬剤を個体に投与することを含む。いくつかの実施形態では、がんはＥＧＦＲ陽性である。いくつかの実施形態では、がんはＶＥＧＦＲ陽性である。いくつかの実施形態では、がんは、ｍＥＲ陽性である。いくつかの実施形態では、がんは、ＥＧＦＲ陽性およびＶＥＧＦＲ陽性である。いくつかの実施形態では、がんは、ｍＥＲ陽性、ＥＧＦＲ陽性、およびＶＥＧＦＲ陽性である。
【００６６】
適切なＥＧＦＲインヒビターには、例えば、セツキシマブ、パニツムマブ、エルロチニブ、ゲフィチニブ、およびバンデタニブが含まれる。適切なＶＥＧＦＲインヒビターには、例えば、ベバシズマブ、パゾパニブ、レゴラフェニブ、およびソラフェニブが含まれる。
【００６７】
いくつかの実施形態では、アノルドリンまたはそのアナログ（アノルドリンなど）および他の薬剤を逐次的に投与する。いくつかの実施形態では、アノルドリンまたはそのアナログ（アノルドリンなど）および他の薬剤を同時に投与する。
【００６８】
いくつかの実施形態では、アノルドリンまたはそのアナログ（アノルドリンなど）および他の薬剤を並行して投与する。例えば、いくつかの実施形態では、アノルドリンまたはそのアナログ（アノルドリンなど）および他の薬剤の投与を、ほぼ同時に（例えば、１、２、３、４、５、６、または７日以内のうちの任意の１つ）開始する。いくつかの実施形態では、アノルドリンまたはそのアナログ（アノルドリンなど）および他の薬剤の投与を、ほぼ同時に（例えば、１、２、３、４、５、６、または７日以内のうちの任意の１つ）終了する。いくつかの実施形態では、他の薬剤の投与を、アノルドリンまたはそのアナログ（アノルドリンなど）の投与終了後に（例えば、約０．５、１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、または１２ヶ月間のうちの任意の１つ）継続する。いくつかの実施形態では、他の薬剤の投与を、アノルドリンまたはそのアナログ（アノルドリンなど）の投与開始後に（例えば、約０．５、１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、または１２ヶ月後のうちの任意の１つ）開始する。いくつかの実施形態では、アノルドリンまたはそのアナログ（アノルドリンなど）および他の薬剤の投与を、ほぼ同時に開始および終了する。いくつかの実施形態では、アノルドリンまたはそのアナログ（アノルドリンなど）および他の薬剤の投与をほぼ同時に開始し、他の薬剤の投与を、アノルドリンまたはそのアナログ（アノルドリンなど）の投与終了後に（例えば、約０．５、１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、または１２ヶ月間のうちの任意の１つ）継続する。いくつかの実施形態では、アノルドリンまたはそのアナログ（アノルドリンなど）および他の薬剤の投与をほぼ同時に停止し、他の薬剤の投与を、アノルドリンまたはそのアナログ（アノルドリンなど）の投与開始後に（例えば、約０．５、１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、または１２ヶ月後のうちの任意の１つ）開始する。いくつかの実施形態では、アノルドリンまたはそのアナログ（アノルドリンなど）および他の薬剤の投与をほぼ同時に停止し、アノルドリンまたはそのアナログ（アノルドリンなど）の投与を他の薬剤の投与開始後に（例えば、約０．５、１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、または１２ヶ月後のうちの任意の１つ）開始する。
【００６９】
本明細書中に記載のアノルドリンまたはそのアナログ（アノルドリンなど）および他の薬剤は、薬剤自体、その薬学的に許容され得る塩、およびその薬学的に許容され得るエステル、ならびに立体異性体、鏡像異性体、およびラセミ混合物などであり得る。記載のような他の薬剤（単数または複数）を投与することができ、ならびに薬剤（単数または複数）を含有する薬学的組成物（この薬学的組成物は薬学的に許容され得る担体ビヒクルを含む）なども投与することができる。
【００７０】
本明細書中に記載の方法では、アノルドリンおよび／またはそのアナログ（アノルドリンなど）ならびに他の薬剤を有効量で投与する必要がある。いくつかの実施形態では、有効量は、発症を遅延させるのに十分な量である。いくつかの実施形態では、有効量は、再発を防止または遅延するのに十分な量である。有効量を、１回または複数回投与することができる。がんの場合、薬物または組成物の有効量は、（ｉ）がん細胞の数を減少させ得；（ｉｉ）腫瘍サイズを減少させ得；（ｉｉｉ）末梢臓器内へのがん細胞浸潤を阻害し得、阻止し得、ある程度まで遅らせ得、好ましくは停止させ得；（ｉｖ）腫瘍転移を阻害し（すなわち、ある程度まで遅らせ、好ましくは停止させ）得；（ｖ）腫瘍成長を阻害し得；（ｖｉ）腫瘍の出現および／または再発を防止または遅延させ得；および／または（ｖｉｉ）がんに関連する１つまたは複数の症状をある程度まで軽減し得る。
【００７１】
したがって、いくつかの実施形態では、個体における細胞増殖（腫瘍成長など）を阻害する方法であって、ａ）有効量のアノルドリンまたはそのアナログ（アノルドリンなど）、および、任意選択的に、ｂ）有効量の、タモキシフェン、ラロキシフェンまたはその機能的等価物、およびアロマターゼインヒビターからなる群から選択される少なくとも１つの他の薬剤を該個体に投与することを含む、方法を提供する。いくつかの実施形態では、有効量のアノルドリンまたはそのアナログ（アノルドリンなど）および他の薬剤は、細胞増殖（腫瘍細胞成長など）を相乗的に阻害する。いくつかの実施形態では、少なくとも約１０％（例えば、少なくとも約２０％、３０％、４０％、６０％、７０％、８０％、９０％、または１００％のうちのいずれかが含まれる）の細胞増殖が阻害される。
【００７２】
いくつかの実施形態では、個体における腫瘍転移（乳がんの転移、肺転移、またはリンパ節への転移など）を阻害する方法であって、ａ）有効量のアノルドリンまたはそのアナログ（アノルドリンなど）、および、任意選択的に、ｂ）有効量の、タモキシフェン、ラロキシフェンまたはその機能的等価物、およびアロマターゼインヒビターからなる群から選択される少なくとも１つの他の薬剤を該個体に投与することを含む、方法を提供する。いくつかの実施形態では、有効量のアノルドリンまたはそのアナログ（アノルドリンなど）および他の薬剤は、腫瘍転移を相乗的に阻害する。いくつかの実施形態では、少なくとも約１０％（例えば、少なくとも約２０％、３０％、４０％、６０％、７０％、８０％、９０％、または１００％のいずれかが含まれる）の転移が阻害される。いくつかの実施形態では、リンパ節への転移の阻害方法を提供する。いくつかの実施形態では、肺への転移の阻害方法を提供する。
【００７３】
いくつかの実施形態では、個体における既存の腫瘍転移（肺転移またはリンパ節への転移など）の発生または負荷を軽減する方法であって、ａ）有効量のアノルドリンまたはそのアナログ（アノルドリンなど）、および、任意選択的に、ｂ）有効量の、タモキシフェン、ラロキシフェンまたはその機能的等価物、およびアロマターゼインヒビターからなる群から選択される少なくとも１つの他の薬剤を該個体に投与することを含む、方法を提供する。
【００７４】
いくつかの実施形態では、個体の腫瘍サイズを減少させる方法であって、ａ）有効量のアノルドリンまたはそのアナログ（アノルドリンなど）、および、任意選択的に、ｂ）有効量の、タモキシフェン、ラロキシフェンまたはその機能的等価物、およびアロマターゼインヒビターからなる群から選択される少なくとも１つの他の薬剤を該個体に投与することを含む、方法を提供する。いくつかの実施形態では、腫瘍サイズは、少なくとも約１０％（例えば、少なくとも約２０％、３０％、４０％、６０％、７０％、８０％、９０％、または１００％のいずれかが含まれる）減少する。
【００７５】
いくつかの実施形態では、個体におけるがんの疾患進行時間を延長する方法であって、ａ）有効量のアノルドリンまたはそのアナログ（アノルドリンなど）、および、任意選択的に、ｂ）有効量の、タモキシフェン、ラロキシフェンまたはその機能的等価物、およびアロマターゼインヒビターからなる群から選択される少なくとも１つの他の薬剤を該個体に投与することを含む、方法を提供する。いくつかの実施形態では、本方法により、疾患進行時間が少なくとも１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、または１２週間のいずれかまで延長される。
【００７６】
いくつかの実施形態では、増殖性疾患（がんなど）を有する個体の生存を延長する方法であって、ａ）有効量のアノルドリンまたはそのアナログ（アノルドリンなど）、および、任意選択的に、ｂ）有効量の、タモキシフェン、ラロキシフェンまたはその機能的等価物、およびアロマターゼインヒビターからなる群から選択される少なくとも１つの他の薬剤を該個体に投与することを含む、方法を提供する。いくつかの実施形態では、本方法により、個体の生存が少なくとも１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１８、または２４ヶ月のいずれかまで延長される。
【００７７】
いくつかの実施形態では、本方法を使用して、原発性腫瘍を処置する。いくつかの実施形態では、転移性がん（すなわち、原発性腫瘍から転移したがん）の処置方法を提供する。いくつかの実施形態では、本方法は、進行性疾患の処置または疾患範囲をより小さくすること（腫瘍量を低くするなど）を目的とする。いくつかの実施形態では、進行期のがんの処置方法を提供する。いくつかの実施形態では、本方法は、早期乳がんの処置を目的とする。本方法を、アジュバント療法で実施してよい。本明細書中に提供した方法を、ネオアジュバント療法でも実施してよい（すなわち、本方法を、一次／根治的治療前に行ってよい）。いくつかの実施形態では、本方法は、さらに、処置完了後に個体に手術を行うことを含む。例えば、がんが乳がんである場合のいくつかの実施形態では、乳房温存手術または乳房切除術を、ネオアジュバント化学療法の完了後の約２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、または１２週間以内に行うことができる。
【００７８】
いくつかの実施形態では、個体は以前に処置されていた。いくつかの実施形態では、個体は以前に処置されていなかった。いくつかの実施形態では、処置は第一選択療法である。いくつかの実施形態では、乳がんは、寛解後に再発していた。
【００７９】
いくつかの実施形態では、がんは乳がんである。これらの方法を使用して、例えば、あらゆる型または病期の乳がん（早期乳がん、非転移性乳がん、進行性乳がん、ＩＶ期乳がん、局所進行性乳がん、転移性乳がん、寛解乳がん、アジュバント療法における乳がん、またはネオアジュバント療法における乳がんなど）を処置、安定化、防止、および／または遅延させることができる。いくつかの実施形態では、本方法は、術前全身療法（ＰＳＴ）に有用である。
【００８０】
いくつかの実施形態では、乳がん（ＨＥＲ２陽性またはＨＥＲ２陰性であり得る）（例えば、進行性乳がん、ＩＶ期乳がん、局所進行性乳がん、および転移性乳がんが含まれる）を処置する方法を提供する。いくつかの実施形態では、乳がんはルミナールＢ型乳がんである。いくつかの実施形態では、乳がんは基底細胞型乳がんである。いくつかの実施形態では、個体は、Ｔ２、Ｔ３、またはＴ４病変、またはステージＮ、Ｍ０、またはＴ１ｃ、Ｎ１−３およびＭ０と診断されている。いくつかの実施形態では、個体のＥＣＯＧパフォーマンスステータスは０〜１である。いくつかの実施形態では、個体は同側乳房に皮膚転移を有する。いくつかの実施形態では、個体は前治療（ホルモン療法など）を受けている。いくつかの実施形態では、個体は前治療（ホルモン療法など）を受けていない。いくつかの実施形態では、個体は、根治手術を待機している。いくつかの実施形態では、乳がんは切除した乳がんである。いくつかの実施形態では、乳がんは非切除乳がん（非切除ＩＩ期またはＩＩＩ期乳がんなど）である。
【００８１】
いくつかの実施形態では、本方法は、１つまたは複数のこれら危険因子を有し、その結果、これらの危険因子（単数または複数）を持たない個体より乳がん発症の確率が高くなる個体の処置を目的とする。これらの危険因子には、年齢、性別、民族、食事、病歴、前駆疾患の存在、遺伝学的（すなわち、遺伝性）検討事項、および環境曝露が含まれるが、これらに限定されない。いくつかの実施形態では、個体は、乳がん発症の遺伝的素因を有するか、または乳がん発症の別の素因を有し、乳がんと診断されているか、または診断されていないヒトであり得る。乳がんリスクの有る個体には、例えば、乳がんを経験した血縁者を有する個体およびリスクが遺伝子マーカー分析または生化学マーカー分析によって決定される個体が含まれる。例えば、個体は、乳がんに関連する遺伝子、遺伝子変異、または多型（例えば、ＢＲＣＡ１、ＢＲＣＡ２、ＡＴＭ、ＣＨＥＫ２、ＲＡＤ５１、ＡＲ、ＤＩＲＡＳ３、ＥＲＢＢ２、および／またはＴＰ５３）または１つもしくは複数の乳がんに関連する遺伝子の過剰コピー（extra  copy）（例えば、１つまたは複数のＨＥＲ２遺伝子の過剰コピー）を有するヒトであり得る。いくつかの実施形態では、乳がんはＨＥＲ２陰性である。いくつかの実施形態では、乳がんはＥＲ陰性である。いくつかの実施形態では、乳がんはＰＲ陰性である。いくつかの実施形態では、乳がんはＥＰ陰性およびＨＥＲ２陰性である。いくつかの実施形態では、乳がんはＰＲ陰性およびＨＥＲ２陰性である。いくつかの実施形態では、乳がんはＥＲ陰性およびＰＲ陰性である。いくつかの実施形態では、乳がんは、ＥＲ陰性、ＰＲ陰性、およびＨＥＲ２陰性である。
【００８２】
本明細書中に記載の方法はまた、他の固形腫瘍（進行性固形腫瘍など）の処置に有用である。いくつかの実施形態では、肺がん（例えば、非小細胞肺がん（進行性ＮＳＣＬＣなどのＮＳＣＬＣ）、小細胞肺がん（進行性ＳＣＬＣなどのＳＣＬＣ）、および肺内の悪性進行性固形腫瘍が含まれる）を処置する方法を提供する。いくつかの実施形態では、卵巣がん、頭頸部がん、胃悪性腫瘍、黒色腫（転移性黒色腫および悪性黒色腫が含まれる）、卵巣がん、結腸直腸がん、および膵臓がんのいずれかを処置する方法を提供する。
【００８３】
いくつかの実施形態では、本方法は、１つまたは複数の以下の処置に有用である：皮膚Ｔ細胞リンパ腫（ＣＴＣＬ）、白血病、濾胞性リンパ腫、ホジキンリンパ腫、および急性骨髄性白血病（acute  myeloid  leukemia）。
【００８４】
いくつかの実施形態では、疾患は、以下のいずれか１つのがんである：基底細胞癌、髄芽細胞腫、膠芽細胞腫、多発性骨髄腫、慢性骨髄性白血病（ＣＭＬ）、急性骨髄性白血病（acute  myelogenous  leukemia）、膵臓がん、肺がん（小細胞肺がんおよび非小細胞肺がん）、食道がん、胃がん（ｓｔｏｍａｃｈ  ｃａｎｃｅｒ）、胆管がん（ｂｉｌｌａｒｙ  ｃａｎｃｅｒ）、前立腺がん、肝臓がん、肝細胞がん、消化管がん、胃がん（ｇａｓｔｒｉｃ  ｃａｎｃｅｒ）、ならびに卵巣がんおよび膀胱がん。いくつかの実施形態では、がんは、膵管腺癌、結腸腺癌、および卵巣嚢胞腺癌からなる群から選択される。いくつかの実施形態では、がんは、膵管腺癌である。いくつかの実施形態では、がんは、灌流および／または脈管化が乏しい腫瘍である。
【００８５】
いくつかの実施形態では、がんは、膵臓がん（例えば、膵臓腺癌、膵腺扁平上皮癌、膵扁平上皮癌、および膵巨細胞癌が含まれる）である。いくつかの実施形態では、膵臓がんは、外分泌性膵臓がんである。いくつかの実施形態では、膵臓がんは、内分泌性膵臓がん（島細胞癌など）である。いくつかの実施形態では、膵臓がんは、進行性転移性膵臓がんである。
【００８６】
本発明の方法によって処置され得るがんの他の例には、副腎皮質癌（ａｄｅｎｏｃｏｒｔｉｃａｌ  ｃａｒｃｉｎｏｍａ）、特発性骨髄化生、ＡＩＤＳ関連がん（例えば、ＡＩＤＳ関連リンパ腫）、肛門がん、虫垂がん、星状細胞腫（例えば、小脳および大脳）、基底細胞癌、胆管がん（例えば、肝外）、膀胱がん、骨のがん、（骨肉腫および悪性線維性組織球腫）、脳腫瘍（例えば、神経膠腫、脳幹部神経膠腫、小脳または大脳の星状細胞腫（例えば、毛様細胞性星状細胞腫、びまん性星状細胞腫、未分化（悪性）星状細胞腫）、悪性神経膠腫、上衣腫、オリゴデングリオーマ（oligodenglioma）、髄膜腫、頭蓋咽頭腫、血管芽細胞腫、髄芽細胞腫、テント上原始神経外胚葉腫瘍、視覚路および視床下部の神経膠腫、ならびに膠芽細胞腫）、乳がん、気管支腺腫／カルチノイド、カルチノイド腫瘍（例えば、消化管カルチノイド腫瘍）、原発不明癌、中枢神経系リンパ腫、子宮頸がん、結腸がん、結腸直腸がん、慢性骨髄増殖性障害、子宮内膜がん（例えば、子宮がん）、上衣腫、食道がん、ユーイングファミリー腫瘍、眼のがん（例えば、眼内黒色腫および網膜芽細胞腫）、胆嚢がん、胃（胃）がん、消化管カルチノイド腫瘍、消化管間質腫瘍（ＧＩＳＴ）、胚細胞腫瘍（例えば、頭蓋外、性腺外、卵巣）、妊娠性絨毛腫瘍、頭頸部がん、肝細胞（肝臓）がん（例えば、肝癌およびヘパトーマ）、下咽頭がん、島細胞癌（膵臓内分泌部）、喉頭がん、喉頭がん、白血病、口唇および口腔（ｏｒａｌ  ｃａｖｉｔｙ）がん、口腔（ｏｒａｌ）がん、肝臓がん、肺がん（例えば、小細胞肺がん、非小細胞肺がん、肺腺癌、および肺扁平上皮癌）、リンパ系新生物（例えば、リンパ腫）、髄芽細胞腫、卵巣がん、中皮腫、転移性頸部扁平上皮がん、口腔（ｍｏｕｔｈ）がん、多発性内分泌腫瘍症候群、骨髄異形成症候群、骨髄異形成／骨髄増殖性疾患、鼻腔および副鼻腔がん、鼻咽頭がん、神経芽細胞腫、神経内分泌がん、口腔咽頭がん、卵巣がん（例えば、卵巣上皮がん、卵巣胚細胞腫瘍、卵巣低悪性度腫瘍）、膵臓がん、副甲状腺がん、陰茎がん、腹膜がん、咽頭がん、クロム親和性細胞腫、松果体芽細胞腫およびテント上原始神経外胚葉腫瘍、下垂体腫瘍、胸膜肺芽腫、リンパ腫、原発性中枢神経系リンパ腫（小神経膠腫）、肺リンパ管筋腫症、直腸がん、腎がん、腎盂がんおよび尿管がん（移行細胞がん）、横紋筋肉腫、唾液腺がん、皮膚がん（例えば、非黒色腫（例えば、扁平上皮癌）、黒色腫、およびメルケル細胞癌）、小腸がん、扁平上皮がん、睾丸がん、咽頭（ｔｈｒｏａｔ）がん、胸腺腫および胸腺癌、甲状腺がん、結節性硬化症、尿道がん、膣がん、外陰がん、ウィルムス腫瘍、および移植後リンパ増殖性障害（ＰＴＬＤ）、母斑症に関連する異常な血管増殖、浮腫（脳腫瘍に関連する浮腫など）、ならびにメーグス症候群が含まれるが、これらに限定されない。
【００８７】
いくつかの実施形態では、がんは、固形腫瘍（進行性固形腫瘍など）である。固形腫瘍には、肉腫および癌（線維肉腫、粘液肉腫、脂肪肉腫、軟骨肉腫、骨原性肉腫、脊索腫、血管肉腫、内皮肉腫、リンパ管肉腫、リンパ管内皮肉腫、カポジ肉腫、軟部組織肉腫、子宮サクロノーマシノビオーマ（ｓａｃｒｏｎｏｍａｓｙｎｏｖｉｏｍａ）、中皮腫、ユーイング腫瘍、平滑筋肉腫、横紋筋肉腫、結腸癌、膵臓がん、乳がん、卵巣がん、前立腺がん、扁平上皮癌、基底細胞癌、腺癌、汗腺癌、脂腺癌、乳頭状癌、乳頭腺癌、嚢胞腺癌、髄様癌、気管支原性癌、腎細胞癌（例えば、腺癌、明細胞腎細胞癌、乳頭状腎細胞癌、嫌色素性腎細胞癌、集合管腎細胞癌、顆粒腎細胞癌（ｇｒａｎｕｌａｒ  ｒｅｎａｌ  ｃｅｌｌ  ｃａｒｃｉｎｏｍａ）、混合顆粒腎細胞癌（ｍｉｘｅｄ  ｇｒａｎｕｌａｒ  ｒｅｎａｌ  ｃｅｌｌ  ｃａｒｃｉｎｏｍａ）、腎血管筋脂肪腫（ｒｅｎａｌ  ａｎｇｉｏｍｙｏｌｉｐｏｍａｓ）、または腎紡錘細胞癌（ｓｐｉｎｄｌｅ  ｒｅｎａｌ  ｃｅｌｌ  ｃａｒｃｉｎｏｍａ）が含まれる）、ヘパトーマ、胆管癌、絨毛癌、セミノーマ、胎児性癌、ウィルムス腫瘍、子宮頸がん、精巣腫瘍、肺癌、小細胞肺癌、膀胱癌、上皮癌、神経膠腫、星状細胞腫、髄芽細胞腫、頭蓋咽頭腫、上衣腫、松果体腫、血管芽細胞腫、聴神経腫、乏突起膠腫、髄膜腫（ｍｅｎａｎｇｉｏｍａ）、黒色腫、神経芽細胞腫、および網膜芽細胞腫など）が含まれるが、これらに限定されない。
【００８８】
いくつかの実施形態では、リンパ系新生物（例えば、リンパ腫）は、Ｂ細胞新生物である。Ｂ細胞新生物の例には、前駆Ｂ細胞新生物（例えば、前駆Ｂリンパ芽球性白血病／リンパ腫）および末梢Ｂ細胞新生物（例えば、Ｂ細胞慢性リンパ性白血病／前リンパ球性白血病／小リンパ球性リンパ腫（小リンパ球性（ＳＬ）ＮＨＬ）、リンパ形質細胞性リンパ腫／免疫細胞腫、マントル細胞リンパ腫（ｍａｎｔｅｌ  ｃｅｌｌ  ｌｙｍｐｈｏｍａ）、濾胞中心リンパ腫、濾胞性リンパ腫（例えば、細胞学的悪性度：Ｉ（小細胞）、ＩＩ（小細胞と大細胞の混合型）、ＩＩＩ（大細胞）および／またはサブタイプ：びまん性および小細胞優位型）、低悪性度／濾胞性非ホジキンリンパ腫（ＮＨＬ）、中悪性度／濾胞性ＮＨＬ、辺縁帯Ｂ細胞リンパ腫（例えば、節外性（例えば、ＭＡＬＴ型＋／−単球様Ｂ細胞）および／または節性（例えば、＋／−単球様Ｂ細胞））、脾性辺縁帯リンパ腫（例えば、＋／−絨毛リンパ球）、毛様細胞白血病、形質細胞腫／形質細胞骨髄腫（例えば、骨髄腫および多発性骨髄腫）、びまん性大細胞型Ｂ細胞リンパ腫（例えば、原発性縦隔（胸腺）Ｂ細胞リンパ腫）、中悪性度びまん性ＮＨＬ、バーキットリンパ腫、高悪性度Ｂ細胞リンパ腫、バーキット様高悪性度免疫芽球性ＮＨＬ、高悪性度リンパ芽球性ＮＨＬ、高悪性度小型非切れ込み核細胞性ＮＨＬ、巨大病変ＮＨＬ、ＡＩＤＳ関連リンパ腫、ならびにワルデンシュトレームマクログロブリン血症）が含まれるが、これらに限定されない。
【００８９】
いくつかの実施形態では、リンパ系新生物（例えば、リンパ腫）は、Ｔ細胞および／または推定ＮＫ細胞新生物である。Ｔ細胞および／または推定ＮＫ細胞新生物の例には、前駆Ｔ細胞新生物（前駆Ｔリンパ芽球性リンパ腫／白血病）および末梢Ｔ細胞新生物および末梢ＮＫ細胞新生物（例えば、Ｔ細胞慢性リンパ性白血病／前リンパ球性白血病、および大顆粒リンパ球白血病（ＬＧＬ）（例えば、Ｔ細胞型および／またはＮＫ細胞型）、皮膚Ｔ細胞リンパ腫（例えば、菌状息肉症／セザリー症候群）、特定されない原発性Ｔ細胞リンパ腫（primary  T-cell  lymphomas  unspecified）（例えば、細胞学的カテゴリー（例えば、中サイズの細胞、中サイズの細胞と大細胞との混合型）、大細胞、リンパ上皮細胞（ｌｙｍｐｈｏｅｐｉｔｈｅｌｏｉｄ  ｃｅｌｌ）、サブタイプ肝脾γδＴ細胞リンパ腫、および皮下脂肪織炎様（ｐａｎｎｉｃｕｌｉｔｉｃ）Ｔ細胞リンパ腫）、血管免疫芽球性Ｔ細胞リンパ腫（ＡＩＬＤ）、血管中心性リンパ腫、腸管Ｔ細胞リンパ腫（例えば、＋／−腸症関連リンパ腫）、成人Ｔ細胞リンパ腫／白血病（ＡＴＬ）、未分化大細胞リンパ腫（ＡＬＣＬ）（例えば、ＣＤ３０＋、Ｔ細胞型およびヌル細胞型）、未分化大細胞型リンパ腫、およびホジキン様）が含まれるが、これらに限定されない。
【００９０】
いくつかの実施形態では、リンパ系新生物（例えば、リンパ腫）はホジキン病である。例えば、ホジキン病は、リンパ球優位型、結節性硬化症、混合細胞型、リンパ球減少型、および／またはリンパ球豊富型であり得る。
【００９１】
いくつかの実施形態では、がんは白血病である。いくつかの実施形態では、白血病は慢性白血病である。慢性白血病の例には、慢性骨髄性Ｉ（顆粒球性）白血病、慢性骨髄性白血病、および慢性リンパ性白血病（ＣＬＬ）が含まれるが、これらに限定されない。いくつかの実施形態では、白血病は急性白血病である。急性白血病の例には、急性リンパ芽球性白血病（ＡＬＬ）、急性骨髄性白血病（acute  myeloid  leukemia）、急性リンパ性白血病、および急性骨髄性白血病（acute  myelocytic  leukemia）（例えば、骨髄芽球性白血病、前骨髄球性白血病、骨髄単球性白血病、単球性白血病、および赤白血病）が含まれるが、これらに限定されない。
【００９２】
いくつかの実施形態では、がんは、液性腫瘍または形質細胞腫である。形質細胞腫には、骨髄腫が含まれるが、これに限定されない。骨髄腫には、髄外形質細胞腫、孤立性骨髄腫、および多発性骨髄腫が含まれるが、これらに限定されない。いくつかの実施形態では、形質細胞腫は多発性骨髄腫である。
【００９３】
いくつかの実施形態では、がんは多発性骨髄腫である。多発性骨髄腫の例には、ＩｇＧ多発性骨髄腫、ＩｇＡ多発性骨髄腫、ＩｇＤ多発性骨髄腫、ＩｇＥ多発性骨髄腫、および非分泌性多発性骨髄腫が含まれるが、これらに限定されない。いくつかの実施形態では、多発性骨髄腫はＩｇＧ多発性骨髄腫である。いくつかの実施形態では、多発性骨髄腫はＩｇＡ多発性骨髄腫である。いくつかの実施形態では、多発性骨髄腫は、くすぶり型多発性骨髄腫または無痛性多発性骨髄腫である。いくつかの実施形態では、多発性骨髄腫は、進行性多発性骨髄腫である。いくつかの実施形態では、多発性骨髄腫は、薬物（ボルテゾミブ、デキサメタゾン（Ｄｅｘ−）、ドキソルビシン（Ｄｏｘ−）、およびメルファラン（ＬＲ）などであるが、これらに限定されない）に耐性であり得る。
【００９４】
いくつかの実施形態では、アノルドリンまたはそのアナログ（アノルドリンなど）によって少なくとも１つの他の薬剤の副作用を軽減する方法であって、有効量のアノルドリンまたはそのアナログ（アノルドリンなど）を他の薬剤と組み合わせて個体に投与することを含み、他の薬剤が、タモキシフェン、ラロキシフェンまたはその機能的等価物、およびアロマターゼインヒビターからなる群から選択される、方法を提供する。いくつかの実施形態では、個体はｍＥＲ陽性である。いくつかの実施形態では、個体はＥＧＦＲ陽性である。いくつかの実施形態では、個体はＶＥＧＦＲ陽性である。
【００９５】
タモキシフェンの副作用には、例えば、子宮がん、非アルコール性脂肪性肝炎（ＮＡＳＨ）、心血管および心臓発作、下痢、嘔気、頭痛、のぼせ、副鼻腔炎、体重増加、下肢痙攣、および踝腫脹が含まれる。ラロキシフェンの副作用には、例えば、血中トリグリセリドの減少、ＮＡＳＨ、心血管および心臓発作、血塊、卒中（ｓｔｏｋｅ）、深部静脈血栓症、および肺塞栓症（ｐｕｌｏｍａｒｙ  ｅｍｂｏｌｉｓｍ）が含まれる。アナストロゾールの副作用には、例えば、下痢、嘔気、頭痛、のぼせ、副鼻腔炎、体重増加、筋痛、臓器萎縮、および骨粗鬆症が含まれる。
【００９６】
いくつかの実施形態では、ｍＥＲの状態を、がん処置（またはがん処置における他の薬剤の副作用の軽減）のための個体選択の基準として使用する。ｍＥＲレベルを、例えば、以下のうちのいずれか１つまたは複数において決定する（そして評価を補助する）ために使用することができる：ａ）個体が最初に処置を受けるのが適切であることがほぼ確実かまたはその可能性があること；ｂ）個体が最初に処置（複数可）を受けるのが不適切であることがほぼ確実かまたはその可能性があること；ｃ）処置に対する応答性；ｄ）個体に処置を継続するのが適切であることがほぼ確実かまたはその可能性があること；ｅ）個体に処置（複数可）を受けさせるのが不適切であることがほぼ確実かまたはその可能性があること；ｆ）投薬量の調整；ｇ）臨床的有益性の尤度の予測。本出願は、これらの方法のいずれも包含する。
【００９７】
例えば、いくつかの実施形態では、個体（ヒト個体など）におけるがんを処置する方法であって、ａ）有効量のアノルドリンまたはそのアナログ（アノルドリンなど）；および、任意選択的に、ｂ）有効量の、タモキシフェン、ラロキシフェンまたはその機能的等価物、およびアロマターゼインヒビターからなる群から選択される少なくとも１つの他の薬剤を該個体に投与することを含み、該個体のｍＥＲレベルが高い、方法を提供する。いくつかの実施形態では、個体（ヒト個体など）におけるがんを処置する方法であって、ａ）有効量のアノルドリンまたはそのアナログ（アノルドリンなど）；および、任意選択的に、ｂ）有効量の、タモキシフェン、ラロキシフェンまたはその機能的等価物、およびアロマターゼインヒビターからなる群から選択される少なくとも１つの他の薬剤を該個体に投与することを含み、ｍＥＲレベルを処置のための該個体選択の基準として使用する、方法を提供する。いくつかの実施形態では、個体は、該個体のｍＥＲレベルが高い場合、処置のために選択される。いくつかの実施形態では、ｍＥＲレベルを、免疫組織化学的方法によって決定する。いくつかの実施形態では、ｍＥＲレベルは、タンパク質発現レベルに基づく。いくつかの実施形態では、ｍＥＲレベルはｍＲＮＡレベルに基づく。いくつかの実施形態では、ｍＥＲレベルは、エストロゲン刺激に応答したＣａ２＋シグナルに基づく。いくつかの実施形態では、本方法は、さらに、処置前にｍＥＲレベルを決定することを含む。いくつかの実施形態では、本方法は、さらに、ｍＥＲレベルに基づいて処置のための個体を選択することを含む。
【００９８】
ｍＥＲレベルは、コントロールサンプルと比較して高レベルまたは低レベルであり得る。いくつかの実施形態では、個体のｍＥＲレベルを、コントロールサンプルにおけるｍＥＲレベルと比較する。いくつかの実施形態では、被験体におけるｍＥＲレベルを、複数のコントロールサンプルにおけるｍＥＲレベルと比較する。いくつかの実施形態では、複数のコントロールサンプルを使用して統計処理し、これを使用してがんを有する個体におけるｍＥＲレベルを分類する。
【００９９】
ｍＥＲレベル（すなわち、高いまたは低い）の分類または格付けを、コントロールレベルの統計的分布と比較して決定してよい。いくつかの実施形態では、分類または格付けを、個体から得たコントロールサンプルと比較する。いくつかの実施形態では、ｍＥＲレベルを、コントロールレベルの統計的分布と比較して分類または格付けする。いくつかの実施形態では、ｍＥＲレベルを、被験体から得たコントロールサンプル由来のレベルと比較して分類または格付けする。
【０１００】
コントロールサンプルを、非コントロールサンプルと同一の供給源および方法を使用して得ることができる。いくつかの実施形態では、コントロールサンプルを、異なる個体（例えば、がんを有さない個体ならびに／または民族、年齢、および性同一性が類似する個体）から得る。サンプルが腫瘍組織サンプルであるいくつかの実施形態では、コントロールサンプルは、同一個体由来の非がん性サンプルであり得る。いくつかの実施形態では、複数のコントロールサンプル（例えば、異なる個体由来）を使用して、特定の組織、臓器、または細胞集団中のｍＥＲレベル範囲を決定する。いくつかの実施形態では、コントロールサンプルは、適切なコントロールであると決定されている培養組織または培養細胞である。いくつかの実施形態では、コントロールは、ｍＥＲを発現しない細胞である。いくつかの実施形態では、標準化試験における臨床的に許容される正常レベルを、ｍＥＲレベル決定のためのコントロールレベルとして使用する。いくつかの実施形態では、被験体におけるｍＥＲの基準レベルを、スコアリングシステム（免疫組織化学ベースのスコアリングシステムなど）に従って、高、中、低に分類する。
【０１０１】
いくつかの実施形態では、ｍＥＲレベルを、個体におけるｍＥＲレベルの測定およびコントロールまたは基準（例えば、所与の患者集団についての中央値レベルまたは第２の個体のレベル）との比較によって決定する。例えば、単一個体のｍＥＲレベルが患者集団の中央値レベルを上回ると決定される場合、この個体はｍＥＲを高発現すると決定される。あるいは、単一個体のｍＥＲレベルが患者集団の中央値レベル未満と決定される場合、この個体はｍＥＲを低発現すると決定される。いくつかの実施形態では、個体を、第２の個体および／または処置に応答する患者集団と比較する。いくつかの実施形態では、個体を、第２の個体および／または処置に応答しない患者集団と比較する。本明細書中のいずれの実施形態では、このレベルを、ｍＥＲレベルの測定によって決定する。例えば、単一個体のｍＥＲをコードするｍＲＮＡレベルが患者集団の中央値レベルを上回ると決定される場合、この個体はｍＥＲをコードするｍＲＮＡレベルが高いと決定される。あるいは、単一個体のｍＥＲをコードするｍＲＮＡレベルが患者集団の中央値レベル未満と決定される場合、この個体はｍＥＲをコードするｍＲＮＡレベルが低いと決定される。
【０１０２】
いくつかの実施形態では、ｍＥＲの基準レベルを、ｍＥＲレベルの統計的分布を得ることによって決定する。
【０１０３】
いくつかの実施形態では、バイオインフォマティクス法を、ｍＥＲレベルの決定および分類のために使用する。遺伝子発現プロファイリングデータを使用して遺伝子組の発現プロフィールを評価するための多数の代替バイオインフォマティクスアプローチが開発されている。方法には、Ｓｅｇａｌ，Ｅ．ら、Ｎａｔ．Ｇｅｎｅｔ．３４：６６−１７６（２００３）；Ｓｅｇａｌ，Ｅ．ら、Ｎａｔ．Ｇｅｎｅｔ．３６：１０９０−１０９８（２００４）；Ｂａｒｒｙ，Ｗ．Ｔ．ら、Ｂｉｏｉｎｆｏｒｍａｔｉｃｓ  ２１：１９４３−１９４９（２００５）；Ｔｉａｎ，Ｌ．ら、Ｐｒｏｃ  Ｎａｔ’ｌ  Ａｃａｄ  Ｓｃｉ  ＵＳＡ  １０２：１３５４４−１３５４９（２００５）；Ｎｏｖａｋ  Ｂ  Ａ  ａｎｄ  Ｊａｉｎ  Ａ  Ｎ．Ｂｉｏｉｎｆｏｒｍａｔｉｃｓ  ２２：２３３−４１（２００６）；Ｍａｇｌｉｅｔｔａ  Ｒら、Ｂｉｏｉｎｆｏｒｍａｔｉｃｓ  ２３：２０６３−７２（２００７）；Ｂｕｓｓｅｍａｋｅｒ  Ｈ  Ｊ，ＢＭＣ  Ｂｉｏｉｎｆｏｒｍａｔｉｃｓ  ８  Ｓｕｐｐｌ  ６：Ｓ６（２００７）に記載の方法が含まれるが、これらに限定されない。
【０１０４】
いくつかの実施形態では、ｍＲＮＡレベルを決定し、低レベルとは、臨床的に正常と見なされるｍＲＮＡレベルまたはコントロールから得たｍＲＮＡレベルの約１／１．１、１／１．２、１／１．３、１／１．５、１／１．７、１／２、１／２．２、１／２．５、１／２．７、１／３、１／５、１／７、１／１０、１／２０、１／５０、１／７０、１／１００、１／２００、１／５００、１／１０００未満または１／１０００未満のｍＲＮＡレベルである。いくつかの実施形態では、高レベルとは、臨床的に正常と見なされるｍＲＮＡレベルまたはコントロールから得たｍＲＮＡレベルの約１．１、１．２、１．３、１．５、１．７、２、２．２、２．５、２．７、３、５、７、１０、２０、５０、７０、１００、２００、５００、１０００倍超、または１０００倍超のｍＲＮＡレベルである。
【０１０５】
いくつかの実施形態では、タンパク質発現レベルを、例えば、免疫組織化学によって決定する。例えば、ｍＥＲタンパク質を特異的に認識する抗体を使用して、陽性染色細胞数および／または染色強度に基づいて低レベルまたは高レベルの判定基準を作成することができる。いくつかの実施形態では、陽性染色細胞が約１％、５％、１０％、１５％、２０％、２５％、３０％、３５％、４０％、４５％、または５０％未満である場合、上記レベルは低い。いくつかの実施形態では、染色の強度がポジティブコントロール染色より１％、５％、１０％、１５％、２０％、２５％、３０％、３５％、４０％、４５％、または５０％低い場合、上記レベルは低い。
【０１０６】
いくつかの実施形態では、約４０％、４５％、５０％、５５％、６０％、６５％、７０％、７５％、８０％、８５％、または９０％超の細胞が陽性染色される場合、上記レベルは高い。いくつかの実施形態では、染色がポジティブコントロール染色と同様の強度である場合、上記レベルは高い。いくつかの実施形態では、染色がポジティブコントロール染色の８０％、８５％、または９０％ほどの強度である場合、上記レベルは高い。
【０１０７】
いくつかの実施形態では、強染色、中程度の染色、および弱染色とは、較正した染色レベルであって、その中で範囲を確立してこの範囲内で染色強度を区分けする（ｂｉｎｎｅｄ）。いくつかの実施形態では、強染色は強度範囲の７５パーセンタイルを超える染色であり、中程度の強度は強度範囲の２５〜７５パーセンタイルの染色であり、低染色は強度範囲の２５パーセンタイル未満の染色（ｉｓ  ｓｔａｉｎｉｎｇ  ｉｓ  ｓｔａｉｎｉｎｇ）である。いくつかの態様では、特定の染色技法に精通する当業者が区分け（ｂｉｎ）サイズを調整し、染色カテゴリーを画定する。
【０１０８】
いくつかの実施形態では、エストロゲン感受性レベルを、例えば、Ｃａ２＋オシレーションまたは電気生理学的パッチクランプ法によって決定する。例えば、エストロゲンの使用によるＣａ２＋濃度または陽性細胞の応答シグナルの変化に基づいて低レベルまたは高レベルの判定基準を作成することができる。いくつかの実施形態では、約１％、５％、１０％、１５％、２０％、２５％、３０％、３５％、４０％、４５％、または５０％未満の細胞が陽性感受性を有する場合、上記レベルは低い。いくつかの実施形態では、Ｃａ２＋濃度または応答シグナルの変化がポジティブコントロールの感受性の強度より１％、５％、１０％、１５％、２０％、２５％、３０％、３５％、４０％、４５％、または５０％低い場合、上記レベルは低い。
【０１０９】
いくつかの実施形態では、約４０％、４５％、５０％、５５％、６０％、６５％、７０％、７５％、８０％、８５％、または９０％超の細胞が陽性に変化する場合、上記レベルは高い。いくつかの実施形態では、感受性がポジティブコントロールの感受性と同程度の強度である場合、上記レベルは高い。いくつかの実施形態では、変化がポジティブコントロールの８０％、８５％、または９０％ほどの強さである場合、上記レベルは高い。
【０１１０】
いくつかの実施形態では、最大感受性、中程度の感受性、および弱感受性とは、較正した細胞中のＣａ２＋シグナルレベルであって、その中で範囲を確立してこの範囲内でＣａ２＋シグナル強度を区分けする。いくつかの実施形態では、最大感受性は強度範囲の７５パーセンタイルを超えるＣａ２＋シグナルの変化であり、中程度の感受性は強度範囲の２５〜７５パーセンタイルのＣａ２＋シグナルの変化であり、低感受性は強度範囲の２５パーセンタイル未満（ｉｓ  ｍｅａｓｕｒｉｎｇ  ｂｅｌｏｗ）のＣａ２＋シグナルの変化である。いくつかの態様では、特定の灌流技法に精通する当業者が区分けサイズを調整し、シグナル記録カテゴリーを画定する。
【０１１１】
閉経後症候群を軽減する方法
いくつかの実施形態では、個体における閉経後の症状を軽減する方法であって、有効量のアノルドリンまたはそのアナログ（アノルドリンなど）を該個体に投与することを含む、方法を提供する。
【０１１２】
いくつかの実施形態では、個体における閉経後の症状を軽減する方法であって、ａ）有効量のアノルドリンまたはそのアナログ（アノルドリンなど）；およびｂ）有効量の、ラロキシフェンまたはその機能的等価物およびアロマターゼインヒビターからなる群から選択される少なくとも１つの他の薬剤を該個体に投与することを含む、方法を提供する。いくつかの実施形態では、アノルドリンまたはそのアナログ（アノルドリンなど）および他の薬剤を逐次的に投与する。いくつかの実施形態では、アノルドリンまたはそのアナログ（アノルドリンなど）および他の薬剤を、同時に（例えば、本明細書中に記載の薬学的組成物などの単一組成物で）投与する。
【０１１３】
本明細書中に記載の閉経後症候群には、脂肪肝、体重増加、高血中トリグリセリド、骨粗鬆症、および臓器萎縮が含まれるが、これらに限定されない。
【０１１４】
したがって、例えば、いくつかの実施形態では、個体における骨粗鬆症を防止する（またはその症状を軽減する）方法であって、有効量のアノルドリンまたはそのアナログ（アノルドリンなど）を該個体に投与することを含む、方法を提供する。いくつかの実施形態では、個体における骨粗鬆症を防止する（またはその症状を軽減する）方法であって、ａ）有効量のアノルドリンまたはそのアナログ（アノルドリンなど）；およびｂ）有効量の少なくとも１つの他の薬剤であって、該他の薬剤がラロキシフェンまたはその機能的等価物である、他の薬剤を該個体に投与することを含む、方法を提供する。いくつかの実施形態では、他の薬剤はラロキシフェンである。いくつかの実施形態では、他の薬剤は、タモキシフェン、ラロキシフェン、ラソフォキシフェン、バゼドキシフェン、アルゾキシフェン、オルメロキシフェン、オスペミフェン、およびレボルメロキシフェンからなる群から選択される。いくつかの実施形態では、個体における骨粗鬆症を防止する（またはその症状を軽減する）方法であって、ａ）有効量のアノルドリンまたはそのアナログ（アノルドリンなど）；およびｂ）有効量の少なくとも１つの他の薬剤であって、該他の薬剤がアロマターゼインヒビターである、他の薬剤を該個体に投与することを含む、方法を提供する。いくつかの実施形態では、他の薬剤はアナストロゾールである。いくつかの実施形態では、本方法は、さらに、有効量のカルシウムを個体に投与することを含む。カルシウムの適量には、約１〜約５００ｍｇ／日、例えば、約１０〜約２００ｍｇ／日、約５０〜約１５００ｍｇ／日が含まれるが、これに限定されない。いくつかの実施形態では、本方法は、さらに、有効量のビタミンＤを個体に投与することを含む。ビタミンＤの適量には、約４００〜約８００ＩＵ／日（約５００〜約６００ＩＵ／日など）が含まれるが、これに限定されない。
【０１１５】
いくつかの実施形態では、個体における脂肪肝を防止する（またはその症状を軽減する）方法であって、有効量のアノルドリンまたはそのアナログ（アノルドリンなど）を該個体に投与することを含む、方法を提供する。いくつかの実施形態では、個体における脂肪肝を防止する（またはその症状を軽減する）方法であって、ａ）有効量のアノルドリンまたはそのアナログ（アノルドリンなど）；およびｂ）有効量の少なくとも１つの他の薬剤であって、該他の薬剤がラロキシフェンまたはその機能的等価物である、他の薬剤を該個体に投与することを含む、方法を提供する。いくつかの実施形態では、他の薬剤はラロキシフェンである。いくつかの実施形態では、他の薬剤は、タモキシフェン、ラロキシフェン、ラソフォキシフェン、バゼドキシフェン、アルゾキシフェン、オルメロキシフェン、オスペミフェン、およびレボルメロキシフェンからなる群から選択される。いくつかの実施形態では、個体における脂肪肝を防止する（またはその症状を軽減する）方法であって、ａ）有効量のアノルドリンまたはそのアナログ（アノルドリンなど）；およびｂ）有効量の少なくとも１つの他の薬剤であって、該他の薬剤がアロマターゼインヒビターである、他の薬剤を該個体に投与することを含む、方法を提供する。いくつかの実施形態では、他の薬剤はアナストロゾールである。
【０１１６】
いくつかの実施形態では、個体におけるインスリン抵抗性を防止する（またはその症状を軽減する）方法であって、有効量のアノルドリンまたはそのアナログ（アノルドリンなど）を該個体に投与することを含む、方法を提供する。いくつかの実施形態では、個体におけるインスリン抵抗性を防止する（またはその症状を軽減する）方法であって、ａ）有効量のアノルドリンまたはそのアナログ（アノルドリンなど）；およびｂ）有効量の少なくとも１つの他の薬剤であって、該他の薬剤がラロキシフェンまたはその機能的等価物である、他の薬剤を該個体に投与することを含む、方法を提供する。いくつかの実施形態では、他の薬剤はラロキシフェンである。いくつかの実施形態では、他の薬剤は、タモキシフェン、ラロキシフェン、ラソフォキシフェン、バゼドキシフェン、アルゾキシフェン、オルメロキシフェン、オスペミフェン、およびレボルメロキシフェンからなる群から選択される。いくつかの実施形態では、個体におけるインスリン抵抗性を防止する（またはその症状を軽減する）方法であって、ａ）有効量のアノルドリンまたはそのアナログ（アノルドリンなど）；およびｂ）有効量の少なくとも１つの他の薬剤であって、該他の薬剤がアロマターゼインヒビターである、他の薬剤を該個体に投与することを含む、方法を提供する。いくつかの実施形態では、他の薬剤はアナストロゾールである。
【０１１７】
いくつかの実施形態では、個体における糖取り込みの軽減または細胞ＡＴＰ濃度の増加またはその両方を行う方法であって、有効量のアノルドリンまたはそのアナログ（アノルドリンなど）を該個体に投与することを含む、方法を提供する。いくつかの実施形態では、個体における糖取り込みの軽減または細胞ＡＴＰ濃度の増加またはその両方を行う方法であって、ａ）有効量のアノルドリンまたはそのアナログ（アノルドリンなど）；およびｂ）有効量の少なくとも１つの他の薬剤であって、該他の薬剤がラロキシフェンまたはその機能的等価物である、他の薬剤を該個体に投与することを含む、方法を提供する。いくつかの実施形態では、他の薬剤はラロキシフェンである。いくつかの実施形態では、他の薬剤は、タモキシフェン、ラロキシフェン、ラソフォキシフェン、バゼドキシフェン、アルゾキシフェン、オルメロキシフェン、オスペミフェン、およびレボルメロキシフェンからなる群から選択される。いくつかの実施形態では、個体における糖取り込みの軽減または細胞ＡＴＰ濃度の増加またはその両方を行う方法であって、ａ）有効量のアノルドリンまたはそのアナログ（アノルドリンなど）；およびｂ）有効量の少なくとも１つの他の薬剤であって、該他の薬剤がアロマターゼインヒビターである、他の薬剤を該個体に投与することを含む、方法を提供する。いくつかの実施形態では、他の薬剤はアナストロゾールである。
【０１１８】
いくつかの実施形態では、個体における臓器萎縮を防止する（またはその症状を軽減する）方法であって、有効量のアノルドリンまたはそのアナログ（アノルドリンなど）を該個体に投与することを含む、方法を提供する。いくつかの実施形態では、個体における臓器萎縮を防止する（またはその症状を軽減する）方法であって、ａ）有効量のアノルドリンまたはそのアナログ（アノルドリンなど）；およびｂ）有効量の少なくとも１つの他の薬剤であって、該他の薬剤がラロキシフェンまたはその機能的等価物である、他の薬剤を該個体に投与することを含む、方法を提供する。いくつかの実施形態では、他の薬剤はラロキシフェンである。いくつかの実施形態では、他の薬剤は、タモキシフェン、ラロキシフェン、ラソフォキシフェン、バゼドキシフェン、アルゾキシフェン、オルメロキシフェン、オスペミフェン、およびレボルメロキシフェンからなる群から選択される。いくつかの実施形態では、個体における臓器萎縮を防止する（またはその症状を軽減する）方法であって、ａ）有効量のアノルドリンまたはそのアナログ（アノルドリンなど）；およびｂ）有効量の少なくとも１つの他の薬剤であって、該他の薬剤がアロマターゼインヒビターである、他の薬剤を該個体に投与することを含む、方法を提供する。いくつかの実施形態では、他の薬剤はアナストロゾールである。
【０１１９】
いくつかの実施形態では、個体における体重増加を防止する（またはその症状を軽減する）方法であって、有効量のアノルドリンまたはそのアナログ（アノルドリンなど）を該個体に投与することを含む、方法を提供する。いくつかの実施形態では、個体における体重増加を防止する（またはその症状を軽減する）方法であって、ａ）有効量のアノルドリンまたはそのアナログ（アノルドリンなど）；およびｂ）有効量の少なくとも１つの他の薬剤であって、該他の薬剤がラロキシフェンまたはその機能的等価物である、他の薬剤を該個体に投与することを含む、方法を提供する。いくつかの実施形態では、他の薬剤はラロキシフェンである。いくつかの実施形態では、他の薬剤は、タモキシフェン、ラロキシフェン、ラソフォキシフェン、バゼドキシフェン、アルゾキシフェン、オルメロキシフェン、オスペミフェン、およびレボルメロキシフェンからなる群から選択される。いくつかの実施形態では、個体における体重増加を防止する（またはその症状を軽減する）方法であって、ａ）有効量のアノルドリンまたはそのアナログ（アノルドリンなど）；およびｂ）有効量の少なくとも１つの他の薬剤であって、該他の薬剤がアロマターゼインヒビターである、他の薬剤を該個体に投与することを含む、方法を提供する。いくつかの実施形態では、他の薬剤はアナストロゾールである。
【０１２０】
いくつかの実施形態では、個体における血中トリグリセリドを軽減する方法であって、有効量のアノルドリンまたはそのアナログ（アノルドリンなど）を該個体に投与することを含む、方法を提供する。いくつかの実施形態では、個体における血中トリグリセリドを軽減する方法であって、ａ）有効量のアノルドリンまたはそのアナログ（アノルドリンなど）；およびｂ）有効量の少なくとも１つの他の薬剤であって、該他の薬剤がラロキシフェンまたはその機能的等価物である、他の薬剤を該個体に投与することを含む、方法を提供する。いくつかの実施形態では、他の薬剤はラロキシフェンである。いくつかの実施形態では、他の薬剤は、タモキシフェン、ラロキシフェン、ラソフォキシフェン、バゼドキシフェン、アルゾキシフェン、オルメロキシフェン、オスペミフェン、およびレボルメロキシフェンからなる群から選択される。いくつかの実施形態では、個体における（ｉｎ  ａｎ  ｉｎｄｉｖｉｄｕａｌ，ｉｎ  ａｎ  ｉｎｄｉｖｉｄｕａｌ）血中トリグリセリドを軽減する方法であって、ａ）有効量のアノルドリンまたはそのアナログ（アノルドリンなど）；およびｂ）有効量の少なくとも１つの他の薬剤であって、該他の薬剤がアロマターゼインヒビターである、他の薬剤を該個体に投与することを含む、方法を提供する。いくつかの実施形態では、他の薬剤はアナストロゾールである。
【０１２１】
いくつかの実施形態では、個体における血液粘性および／または血栓塞栓症を軽減する方法であって、有効量のアノルドリンまたはそのアナログ（アノルドリンなど）を該個体に投与することを含む、方法を提供する。いくつかの実施形態では、個体における血液粘性および／または血栓塞栓症を軽減する方法であって、ａ）有効量のアノルドリンまたはそのアナログ（アノルドリンなど）；およびｂ）有効量の少なくとも１つの他の薬剤であって、該他の薬剤がラロキシフェンまたはその機能的等価物である、他の薬剤を該個体に投与することを含む、方法を提供する。いくつかの実施形態では、他の薬剤はラロキシフェンである。いくつかの実施形態では、他の薬剤は、タモキシフェン、ラロキシフェン、ラソフォキシフェン、バゼドキシフェン、アルゾキシフェン、オルメロキシフェン、オスペミフェン、およびレボルメロキシフェンからなる群から選択される。いくつかの実施形態では、個体における血液粘性および／または血栓塞栓症を軽減する方法であって、ａ）有効量のアノルドリンまたはそのアナログ（アノルドリンなど）；およびｂ）有効量の少なくとも１つの他の薬剤であって、該他の薬剤がアロマターゼインヒビターである、他の薬剤を該個体に投与することを含む、方法を提供する。いくつかの実施形態では、他の薬剤はアナストロゾールである。
【０１２２】
投与様式
併用療法の文脈では、アノルドリンまたはそのアナログ（アノルドリンなど）および他の薬剤を含む組成物を、同時に（すなわち、同時投与）および／または逐次的に（すなわち、逐次投与）投与することができる。いくつかの実施形態では、アノルドリンまたはそのアナログ（アノルドリンなど）および他の薬剤（本明細書中に記載の具体的薬剤が含まれる）を同時に投与する。用語「同時投与」は、本明細書中で使用する場合、アノルドリンまたはそのアナログ（アノルドリンなど）および他の薬剤を約１５分間以下（約１０、５、または１分間のいずれか以下など）の時間間隔で投与することを意味する。薬物を同時に投与する場合、アノルドリンまたはそのアナログ（アノルドリンなど）および他の薬剤を、同一の組成物中（例えば、アノルドリンまたはそのアナログ（アノルドリンなど）および他の薬剤の両方を含む組成物（例えば、本明細書中に含まれる薬学的組成物））または個別の組成物中（例えば、アノルドリンまたはそのアナログ（アノルドリンなど）および他の薬剤を個別の組成物中に含める）に含めてよい。
【０１２３】
いくつかの実施形態では、アノルドリンまたはそのアナログ（アノルドリンなど）および他の薬剤を逐次的に投与する。用語「逐次投与」は、本明細書中で使用する場合、アノルドリンまたはそのアナログ（アノルドリンなど）中の薬物および他の薬剤を、約１５分間を超える時間（約２０、３０、４０、５０、６０分間を超える時間、またはそれを超える時間のいずれかなど）の時間間隔で投与することを意味する。アノルドリンまたはそのアナログ（アノルドリンなど）または他の薬剤のいずれかを、最初に投与してよい。アノルドリンまたはそのアナログ（アノルドリンなど）および他の薬剤は個別の組成物中に含まれ、この個別の組成物は、同一または異なるパッケージに含めてよい。
【０１２４】
いくつかの実施形態では、アノルドリンまたはそのアナログ（アノルドリンなど）および他の薬剤の投与は並行している。すなわち、アノルドリンまたはそのアナログ（アノルドリンなど）の投与期間と他の薬剤の投与期間は相互に重複している。いくつかの実施形態では、アノルドリンまたはそのアナログ（アノルドリンなど）を、他の薬剤の投与前に少なくとも１サイクル（例えば、少なくとも２、３、または４サイクルのいずれか）で投与する。いくつかの実施形態では、他の薬剤を、少なくとも１、２、３、または４週間のいずれかの期間投与する。いくつかの実施形態では、アノルドリンまたはそのアナログ（アノルドリンなど）および他の薬剤の投与を、ほぼ同時に（例えば、１、２、３、４、５、６、または７日以内のいずれか１つ）開始する。いくつかの実施形態では、アノルドリンまたはそのアナログ（アノルドリンなど）および他の薬剤の投与を、ほぼ同時に（例えば、１、２、３、４、５、６、または７日以内のいずれか１つ）終了する。いくつかの実施形態では、他の薬剤の投与を、アノルドリンまたはそのアナログ（アノルドリンなど）の投与終了後（例えば、約１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、または１２ヶ月間のいずれか１つの期間）継続する。いくつかの実施形態では、他の薬剤の投与を、アノルドリンまたはそのアナログ（アノルドリンなど）の投与開始後（例えば、約１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、または１２（ｗｅ）ヶ月後のいずれか１つ）開始する。いくつかの実施形態では、アノルドリンまたはそのアナログ（アノルドリンなど）および他の薬剤の投与を、ほぼ同時に開始および終了する。いくつかの実施形態では、アノルドリンまたはそのアナログ（アノルドリンなど）および他の薬剤の投与をほぼ同時に開始し、他の薬剤の投与をアノルドリンまたはそのアナログ（アノルドリンなど）の投与終了後（例えば、約１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、または１２ヶ月間のいずれか１つの期間）継続する。いくつかの実施形態では、アノルドリンまたはそのアナログ（アノルドリンなど）および他の薬剤の投与をほぼ同時に停止し、他の薬剤の投与をアノルドリンまたはそのアナログ（アノルドリンなど）の投与開始後に（例えば、約１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、または１２（ｗｅ）ヶ月後のいずれか１つ）開始する。
【０１２５】
アノルドリンまたはそのアナログ（アノルドリンなど）および／または他の薬剤の投薬頻度を、投与する医師の判断に基づいて処置のコースにわたって調整してよい。個別に投与する場合、アノルドリンまたはそのアナログ（アノルドリンなど）および他の薬剤を、異なる投薬頻度または投薬間隔で投与することができる。例えば、アノルドリンまたはそのアナログ（アノルドリンなど）を毎週投与することができる一方で、別の薬剤をより高い頻度またはより低い頻度で投与することができる。徐放を達成するための種々の製剤およびデバイスは当該分野で公知である。投薬頻度の例を本明細書中にさらに提供する。
【０１２６】
アノルドリンまたはそのアナログ（アノルドリンなど）および他の薬剤を、同一の投与経路または異なる投与経路を使用して投与することができる。投与経路の例を本明細書中にさらに提供する。いくつかの実施形態では（同時投与および逐次投与の両方について）、アノルドリンまたはそのアナログ（アノルドリンなど）および他の薬剤を、所定の比で投与する。例えば、いくつかの実施形態では、アノルドリンまたはそのアナログ（アノルドリンなど）および他の薬剤の重量比は約１対１である。いくつかの実施形態では、重量比は、約０．００１対約１〜約１０００対約１の間、または約０．０１対約１〜１００対約１の間であり得る。いくつかの実施形態では、アノルドリンまたはそのアナログ（アノルドリンなど）および他の薬剤の重量比は、約１００：１、５０：１、３０：１、１０：１、９：１、８：１、７：１、６：１、５：１、４：１、３：１、２：１、および１：１未満のいずれかである。いくつかの実施形態では、アノルドリンまたはそのアナログ（アノルドリンなど）および他の薬剤の重量比は、約１：１、２：１、３：１、４：１、５：１、６：１、７：１、８：１、９：１、３０：１、５０：１、１００：１超のいずれかである。他の比が意図される。
【０１２７】
アノルドリンまたはそのアナログ（アノルドリンなど）および／または他の薬剤に必要な用量は、各薬剤が単独で投与される場合に通常必要とされる用量より低くてよい（しかし、必ずしもそうではない）。したがって、いくつかの実施形態では、アノルドリンまたはそのアナログ（アノルドリンなど）中の治療量以下の薬物および／または他の薬剤を投与する。「治療量以下」または「治療レベル以下」は、治療量未満（すなわち、アノルドリンまたはそのアナログ（アノルドリンなど）中の薬物および／または他の薬剤を単独で投与する場合に通常使用される量未満）である量をいう。減少は、所与の投与での投与された量および／または所与の期間にわたる投与された量（頻度の減少）の点において反映され得る。
【０１２８】
いくつかの実施形態では、少なくとも約５％、１０％、２０％、３０％、５０％、６０％、７０％、８０％、９０％、またはそれ超のいずれかと同程度の処置を得るのに必要なアノルドリンまたはそのアナログ（アノルドリンなど）の通常用量を減少させるのに十分な他の薬剤を投与する。いくつかの実施形態では、少なくとも約５％、１０％、２０％、３０％、５０％、６０％、７０％、８０％、９０％、またはそれ超のいずれかと同程度の処置を得るのに必要な他の薬剤の通常用量を減少させるのに十分なアノルドリンまたはそのアナログ（アノルドリンなど）を投与する。
【０１２９】
いくつかの実施形態では、アノルドリンまたはそのアナログ（アノルドリンなど）および他の薬剤の両方の用量は、単独で投与した場合の各々の対応する通常用量と比較して減少する。いくつかの実施形態では、アノルドリンまたはそのアナログ（アノルドリンなど）および他の薬剤の両方を、治療量以下（すなわち、低レベル）で投与する。いくつかの実施形態では、アノルドリンまたはそのアナログ（アノルドリンなど）および／または他の薬剤の用量は、確立された最大中毒量（ｍａｘｉｍｕｍ  ｔｏｘｉｃ  ｄｏｓｅ）（ＭＴＤ）より実質的に低い。例えば、アノルドリンまたはそのアナログ（アノルドリンなど）および／または他の薬剤の用量は、ＭＴＤの約５０％、４０％、３０％、２０％、または１０％未満である。
【０１３０】
いくつかの実施形態では、アノルドリンまたはそのアナログ（アノルドリンなど）の用量および／または他の薬剤の用量は、各薬剤を単独で投与した場合に通常必要な用量より高い。例えば、いくつかの実施形態では、アノルドリンまたはそのアナログ（アノルドリンなど）および／または他の薬剤の用量は、確立された最大中毒量（ＭＴＤ）より実質的に高い。例えば、アノルドリンまたはそのアナログ（アノルドリンなど）および／または他の薬剤の用量は、単独で投与した場合の薬剤のＭＴＤの約５０％、４０％、３０％、２０％、または１０％超である。
【０１３１】
いくつかの実施形態では、アノルドリンまたはそのアナログ（アノルドリンなど）（単独または他の薬剤との組み合わせ）の量は、以下の範囲のいずれかに含まれる：約０．１〜約０．５ｍｇ、約０．５〜約５ｍｇ、約５〜約１０ｍｇ、約１０〜約１５ｍｇ、約１５〜約２０ｍｇ、約２０〜約２５ｍｇ、約２０〜約５０ｍｇ、約２５〜約５０ｍｇ、約５０〜約７５ｍｇ、約５０〜約１００ｍｇ、約７５〜約１００ｍｇ、約１００〜約１２５ｍｇ、約１２５〜約１５０ｍｇ、約１５０〜約１７５ｍｇ、約１７５〜約２００ｍｇ、約２００〜約２２５ｍｇ、約２２５〜約２５０ｍｇ、約２５０〜約３００ｍｇ、約３００〜約３５０ｍｇ、約３５０〜約４００ｍｇ、約４００〜約４５０ｍｇ、または約４５０〜約５００ｍｇ。いくつかの実施形態では、アノルドリンまたはそのアナログ（アノルドリンなど）（例えば、単位投薬形態）の量は、約５ｍｇ〜約５００ｍｇの範囲（約３０ｍｇ〜約３００ｍｇまたは約５０ｍｇ〜約２００ｍｇなど）である。
【０１３２】
いくつかの実施形態では、アノルドリンまたはそのアナログ（アノルドリンなど）（単独または他の薬剤との組み合わせ）の量には、少なくとも約０．０１ｍｇ／ｋｇ、０．０５ｍｇ／ｋｇ、０．１ｍｇ／ｋｇ、０．２５ｍｇ／ｋｇ、０．５ｍｇ／ｋｇ、１ｍｇ／ｋｇ、２．５ｍｇ／ｋｇ、３．５ｍｇ／ｋｇ、５ｍｇ／ｋｇ、６．５ｍｇ／ｋｇ、７．５ｍｇ／ｋｇ、１０ｍｇ／ｋｇ、１５ｍｇ／ｋｇ、または２０ｍｇ／ｋｇのいずれかが含まれる。いくつかの実施形態では、アノルドリンまたはそのアナログ（アノルドリンなど）（単独または他の薬剤との組み合わせ）の量には、少なくとも約０．０１ｍｇ／ｋｇ／日、０．０５ｍｇ／ｋｇ／日、０．１ｍｇ／ｋｇ／日、０．２５ｍｇ／ｋｇ／日、０．５ｍｇ／ｋｇ／日、１ｍｇ／ｋｇ／日、２．５ｍｇ／ｋｇ／日、３．５ｍｇ／ｋｇ／日、５ｍｇ／ｋｇ／日、６．５ｍｇ／ｋｇ／日、７．５ｍｇ／ｋｇ／日、１０ｍｇ／ｋｇ／日、１５ｍｇ／ｋｇ／日、または２０ｍｇ／ｋｇ／日のいずれかが含まれる。
【０１３３】
いくつかの実施形態では、他の薬剤の量には、少なくとも約０．０１ｍｇ／ｋｇ、０．０５ｍｇ／ｋｇ、０．１ｍｇ／ｋｇ、０．２５ｍｇ／ｋｇ、０．５ｍｇ／ｋｇ、１ｍｇ／ｋｇ、２．５ｍｇ／ｋｇ、３．５ｍｇ／ｋｇ、５ｍｇ／ｋｇ、６．５ｍｇ／ｋｇ、７．５ｍｇ／ｋｇ、１０ｍｇ／ｋｇ、１５ｍｇ／ｋｇ、または２０ｍｇ／ｋｇのいずれかが含まれる。いくつかの実施形態では、アノルドリンまたはそのアナログ（アノルドリンなど）（単独または他の薬剤との組み合わせ）の量には、少なくとも約０．０１ｍｇ／ｋｇ／日、０．０５ｍｇ／ｋｇ／日、０．１ｍｇ／ｋｇ／日、０．２５ｍｇ／ｋｇ／日、０．５ｍｇ／ｋｇ／日、１ｍｇ／ｋｇ／日、２．５ｍｇ／ｋｇ／日、３．５ｍｇ／ｋｇ／日、５ｍｇ／ｋｇ／日、６．５ｍｇ／ｋｇ／日、７．５ｍｇ／ｋｇ／日、１０ｍｇ／ｋｇ／日、１５ｍｇ／ｋｇ／日、または２０ｍｇ／ｋｇ／日のいずれかが含まれる。
【０１３４】
アノルドリンまたはそのアナログ（アノルドリンなど）（および他の薬剤）の投薬頻度の例には、２週間毎に１回、３週間毎に１回、４週間毎に１回、６週間毎に１回、または８週間毎に１回が含まれるが、これらに限定されない。いくつかの実施形態では、組成物を、少なくとも１週間に約１回、２回、３回、４回、５回、６回、または７回（すなわち、毎日）、毎日３回、または毎日２回のいずれかで投与する。いくつかの実施形態では、各投与間の間隔は、約６ヶ月、３ヶ月、１ヶ月、２０日、１５日、１２日、１０日、９日、８日、７日、６日、５日、４日、３日、２日、または１日未満のいずれかである。いくつかの実施形態では、各投与間の間隔は、約１ヶ月、２ヶ月、３ヶ月、４ヶ月、５ヶ月、６ヶ月、８ヶ月、または１２ヶ月超のいずれかである。いくつかの実施形態では、投薬計画中に休止期間はない。いくつかの実施形態では、各投与間の間隔は、約１週間以下である。
【０１３５】
アノルドリンまたはそのアナログ（アノルドリンなど）（および他の薬剤）の投与を、長期間（約１ヶ月から約７年までなど）にわたって延長することができる。いくつかの実施形態では、組成物を、少なくとも約２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１８、２４、３０、３６、４８、６０、７２、または８４ヶ月のいずれかの期間にわたって投与する。
【０１３６】
いくつかの実施形態では、個体を、少なくとも約１回、２回、３回、４回、５回、６回、７回、８回、９回、または１０回の処置サイクルのいずれかで処置する。
【０１３７】
他の薬剤の投薬頻度は、アノルドリンまたはそのアナログ（アノルドリンなど）の投薬頻度と同一または異なり得る。頻度の例は、上記している。
【０１３８】
本明細書中に記載のアノルドリンまたはそのアナログ（アノルドリンなど）（および他の薬剤）を、種々の経路（例えば、経口、静脈内、動脈内、腹腔内、肺内、吸入、小胞内、筋肉内、気管内、皮下、眼内、髄腔内、経粘膜、および経皮が含まれる）を介して個体（ヒトなど）に投与することができる。いくつかの実施形態では、組成物の徐放製剤を使用してよい。
【０１３９】
本明細書中に記載の投与形態（administration  configuration）の組み合わせを使用することができる。本明細書中に記載の併用療法を、単独または別の治療（手術、照射、化学療法、免疫療法、および遺伝子療法など）と併せて行ってよい。さらに、増殖性疾患発症リスクのより高い者は、疾患発症の阻害および／または（ｏｒ  ａｎｄ／ｏｒ）遅延のための処置を受けてよい。
【０１４０】
当業者に理解されるように、他の薬剤の適切な用量は、他の薬剤を単独または他の薬剤と組み合わせて投与する臨床治療で既に使用されている用量に近い。処置される状態に応じて投薬量の変動が生じる可能性がある。上記のように、いくつかの実施形態では、他の薬剤を低レベルで投与してよい。
【０１４１】
組成物、キット、および医薬品
本発明はまた、本明細書中に記載の方法に有用な組成物（薬学的組成物など）、医薬品、キット、および単位投薬量を提供する。医薬としての用途および／または医薬製造のための使用のいずれかに関連して、本明細書中に記載のあらゆる使用も提供する。
【０１４２】
本出願の方法は、アノルドリンまたはそのアナログ（アノルドリンなど）の投与を含む。適切なアノルドリンまたはそのアナログを、以下により詳細に記載している。
【０１４３】
いくつかの態様における本出願の方法は、ラロキシフェンまたはその機能的等価物の投与を含む。本明細書中で使用される「その機能的等価物」は、ラロキシフェンと同一の機構によって機能する化合物をいう。例えば、ラロキシフェンの機能的等価物には、ラソフォキシフェン、バゼドキシフェン、アルゾキシフェン、オルメロキシフェン、オスペミフェン、およびレボルメロキシフェンが含まれるが、これらに限定されない。
【０１４４】
別の態様では、本方法は、アロマターゼインヒビターの投与を含む。「アロマターゼインヒビター」は、アロマターゼ活性を阻害する薬剤クラスをいう。アロマターゼインヒビターは、外部テストステロンを使用したサイクル中のエストロゲン変換の増加を減少させるために閉経後の女性の乳がんおよび卵巣がんの処置で使用されている。適切なアロマターゼインヒビターには、アナストロゾール（アリミデックス）、レトロゾール（フェマラ）、エキセメスタン（アロマシン）、ボロゾール（リビゾール）、ホルメスタン（レンタロン）、およびファドロゾール（アフェマ）が含まれるが、これらに限定されない。
【０１４５】
別の態様では、アノルドリンまたはそのアナログ（アノルドリンなど）ならびにタモキシフェン、ラロキシフェンまたはその機能的等価物、およびアロマターゼインヒビターからなる群から選択される少なくとも１つの他の薬剤を含む薬学的組成物を提供する。いくつかの実施形態では、アノルドリンまたはそのアナログ（アノルドリンなど）および少なくとも１つの他の薬剤を含む薬学的組成物であって、他の薬剤がタモキシフェンである、薬学的組成物を提供する。いくつかの実施形態では、アノルドリンまたはそのアナログ（アノルドリンなど）および少なくとも１つの他の薬剤を含む薬学的組成物であって、他の薬剤がラロキシフェンである、薬学的組成物を提供する。いくつかの実施形態では、アノルドリンまたはそのアナログ（アノルドリンなど）および少なくとも１つの他の薬剤を含む薬学的組成物であって、他の薬剤がアナストロゾールである、薬学的組成物を提供する。
【０１４６】
いくつかの実施形態では、薬学的組成物は、さらに、脂質（トウモロコシ油が含まれるが、これに限定されない）を含む。脂質は、例えば、約１％〜５％（ｗ／ｗ）の量で存在し得る。
【０１４７】
いくつかの実施形態では、薬学的組成物は、さらに、タンパク質（カゼインなど）を含む。タンパク質（カゼインなど）は、例えば、約５％〜５０％（ｗ／ｗ）の量で存在し得る。
【０１４８】
いくつかの実施形態では、組成物中のアノルドリンまたはそのアナログ（アノルドリンなど）および他の薬剤の重量比は、約１対１である。いくつかの実施形態では、重量比は、約０．００１対約１〜約１０００対約１の間、または約０．０１対約１〜１００対約１の間である。いくつかの実施形態では、アノルドリンまたはそのアナログ（アノルドリンなど）および他の薬剤の重量比は、約１００：１、５０：１、３０：１、１０：１、９：１、８：１、７：１、６：１、５：１、４：１、３：１、２：１、および１：１未満のいずれかである。いくつかの実施形態では、アノルドリンまたはそのアナログ（アノルドリンなど）および他の薬剤の重量比は、約１：１、２：１、３：１、４：１、５：１、６：１、７：１、８：１、９：１、３０：１、５０：１、１００：１超のいずれかである。いくつかの実施形態では、組成物中のアノルドリンまたはそのアナログ（アノルドリンなど）および他の薬剤の重量比は、約１：２０〜約２０：１（例えば、約１０：１〜約１：１０または約１：１０〜約１：１５が含まれる）である。
【０１４９】
組成物は、いくつかの実施形態では、単位投薬形態（経口単位投薬形態など）で存在し得る。適切な単位投薬形態には、カプセル、錠剤、丸薬、カプレット、ゲル、液体（例えば、懸濁液、溶液、乳濁液）、粉末、または他の粒子などが含まれるが、これらに限定されない。
【０１５０】
別の態様では、個別の容器中または同一の容器中のいずれかにアノルドリンまたはそのアナログ（アノルドリンなど）および他の薬剤を含むキットを提供する。本発明のキットは、アノルドリンまたはそのアナログ（アノルドリンなど）（または単位投薬形態および／もしくは製品）および／または少なくとも１つの他の薬剤を含む１つまたは複数の容器を含み、いくつかの実施形態では、本明細書中に記載の任意の方法にしたがって使用するための指示をさらに含む。キットは、さらに、処置に（ｏｒ）適切な個体選択の記載を含んでよい。本発明のキット中に提供された指示は、典型的には、ラベル上の書面または添付文書（例えば、キット中に含まれる用紙）であるが、機械で読み取り可能な指示（例えば、磁気記憶ディスクまたは光学記憶ディスク上の指示）も許容され得る。
【０１５１】
いくつかの実施形態では、キットは、ａ）有効量のアノルドリンまたはそのアナログ（アノルドリンなど）ならびにｂ）有効量の、タモキシフェン、ラロキシフェンまたはその機能的等価物、およびアロマターゼインヒビターからなる群から選択される少なくとも１つの他の薬剤を含む。いくつかの実施形態では、キットは、ａ）有効量のアノルドリンまたはそのアナログ（アノルドリンなど）、ｂ）有効量の、タモキシフェン、ラロキシフェンまたはその機能的等価物、およびアロマターゼインヒビターからなる群から選択される少なくとも１つの他の薬剤、およびｃ）がんの処置（または本明細書中に記載の他の使用）のために同時に、逐次的に、または並行してアノルドリンまたはそのアナログ（アノルドリンなど）および他の薬剤を投与するための指示を含む。
【０１５２】
アノルドリンまたはそのアナログ（アノルドリンなど）および他の薬剤は、個別の容器または単一の容器中に存在し得る。キットが、１つの個別の組成物、または一方の組成物がアノルドリンまたはそのアナログ（アノルドリンなど）を含み、他方の組成物が別の薬剤を含む２つまたはそれを超える組成物を含み得ると理解される。
【０１５３】
本発明のキットは、適切に包装されている。適切な包装には、バイアル、ボトル、ジャー、およびフレキシブル包装（例えば、密封されたＭｙｌａｒまたはプラスチック製のバッグ）などが含まれるが、これらに限定されない。キットは、任意選択的に、緩衝液および解釈を促す情報などのさらなる構成要素を提供し得る。したがって、本出願は、バイアル（密封バイアルなど）、ボトル、ジャー、およびフレキシブル包装などを含む製品も提供する。
【０１５４】
アノルドリンまたはそのアナログ（アノルドリンなど）の使用に関する指示は、一般に、意図する処置のための投薬量、投薬計画、および投与経路に関する情報を含む。容器は、単位用量、大量パッケージ（例えば、複数用量パッケージ）、または単位以下の用量であり得る。例えば、長期間（１週間、２週間、３週間、４週間、６週間、８週間、３ヶ月間、４ヶ月間、５ヶ月間、７ヶ月間、８ヶ月間、９ヶ月間、またはそれ超の期間のいずれかなど）にわたって個体を有効に処置するのに十分な投薬量の本明細書中に開示のアノルドリンまたはそのアナログ（アノルドリンなど）（アノルドリンまたはそのアナログ（アノルドリンなど）など）を含むキットが提供され得る。キットはまた、複数の単位用量のアノルドリンまたはそのアナログ（アノルドリンなど）および薬学的組成物ならびに使用のための指示を含み、薬局（例えば、病院の薬局および調剤薬局）での保存および使用に十分な量でパッケージングされてよい。
【０１５５】
アノルドリンおよびそのアナログ
本出願は、方法およびアノルドリンまたはそのアナログを含む組成物を提供する。
【０１５６】
いくつかの実施形態では、アノルドリンまたはそのアナログ（ａｎａｌｏｇ  ｔｈｅｒｅｆｏｒｅ）またはその薬学的に許容され得る塩は、以下の式（Ｉ）：
【化１】
2019142969.tif 000002
（式中、
Ｒ１はヒドロキシルまたは−Ｏ（ＣＯ）Ｒ１ａであり、式中Ｒ１ａはＣ１〜Ｃ４アルキルであり；
Ｒ２は、
【化２】
2019142969.tif 000003
であり；式中Ｒ２ａおよびＲ２ｂは、独立して、水素、Ｃ１〜Ｃ１２アルキル、Ｃ２〜Ｃ１２アルケニル、またはフェニルであり；
Ｒ４はヒドロキシルまたは−Ｏ（ＣＯ）Ｒ４ａであり、式中Ｒ４ａはＣ１〜Ｃ４アルキルであり；
Ｒ５は、
【化３】
2019142969.tif 000004
であり；式中Ｒ５ａおよびＲ５ｂは、独立して、水素、Ｃ１〜Ｃ１２アルキル、Ｃ２〜Ｃ１２アルケニル、またはフェニルであり；
Ｒ６はＣ１〜Ｃ６アルキルまたはＣ２〜Ｃ６アルケニルであり；
Ｒ７はＣ１〜Ｃ６アルキルまたはＣ２〜Ｃ６アルケニルである）の構造を有する。
【０１５７】
いくつかの実施形態では、式（Ｉ）は、式（Ｉａ）：
【化４】
2019142969.tif 000005
である。
【０１５８】
いくつかの実施形態では、式（Ｉ）は、式（Ｉｂ）：
【化５】
2019142969.tif 000006
である。
【０１５９】
いくつかの実施形態では、Ｒ１は−Ｏ（ＣＯ）Ｒ１ａであり、式中Ｒ１ａはＣ１〜Ｃ４アルキル（例えば、Ｃ１アルキル、Ｃ２アルキル、Ｃ３アルキル、またはＣ４アルキル）である。いくつかの実施形態では、Ｒ１ａはＣ１〜Ｃ４アルキル（Ｃ１〜Ｃ３アルキルまたはＣ１〜Ｃ２アルキルなど）である。いくつかの実施形態では、Ｒ１ａはメチルである。いくつかの実施形態では、Ｒ１ａはエチルである。いくつかの実施形態では、Ｒ１はヒドロキシルである。
【０１６０】
いくつかの実施形態では、Ｒ２は
【化６】
2019142969.tif 000007
である。
【０１６１】
いくつかの実施形態では、Ｒ２は
【化７】
2019142969.tif 000008
であり、式中Ｒ２ａおよびＲ２ｂは、独立して、水素、Ｃ１〜Ｃ１２アルキル（例えば、Ｃ１アルキル、Ｃ２アルキル、Ｃ３アルキル、Ｃ４アルキル、Ｃ５アルキル、Ｃ６アルキル、Ｃ７アルキル、Ｃ８アルキル、Ｃ９アルキル、Ｃ１０アルキル、Ｃ１１アルキル、またはＣ１２アルキル）、Ｃ２〜Ｃ１２アルケニル（例えば、Ｃ２アルケニル、Ｃ３アルケニル、Ｃ４アルケニル、Ｃ５アルケニル、Ｃ６アルケニル、Ｃ７アルケニル、Ｃ８アルケニル、Ｃ９アルケニル、Ｃ１０アルケニル、Ｃ１１アルケニル、またはＣ１２アルケニル）、またはフェニルである。
【０１６２】
いくつかの実施形態では、Ｒ２は
【化８】
2019142969.tif 000009
であり、式中Ｒ２ａおよびＲ２ｂは、独立して、水素、Ｃ１〜Ｃ１２アルキル（例えば、Ｃ１アルキル、Ｃ２アルキル、Ｃ３アルキル、Ｃ４アルキル、Ｃ５アルキル、Ｃ６アルキル、Ｃ７アルキル、Ｃ８アルキル、Ｃ９アルキル、Ｃ１０アルキル、Ｃ１１アルキル、またはＣ１２アルキル）、Ｃ２〜Ｃ１２アルケニル（例えば、Ｃ２アルケニル、Ｃ３アルケニル、Ｃ４アルケニル、Ｃ５アルケニル、Ｃ６アルケニル、Ｃ７アルケニル、Ｃ８アルケニル、Ｃ９アルケニル、Ｃ１０アルケニル、Ｃ１１アルケニル、またはＣ１２アルケニル）、またはフェニルである。
【０１６３】
いくつかの実施形態では、Ｒ２は
【化９】
2019142969.tif 000010
であり、式中Ｒ２ａおよびＲ２ｂは、独立して、水素、Ｃ１〜Ｃ１２アルキル（例えば、Ｃ１アルキル、Ｃ２アルキル、Ｃ３アルキル、Ｃ４アルキル、Ｃ５アルキル、Ｃ６アルキル、Ｃ７アルキル、Ｃ８アルキル、Ｃ９アルキル、Ｃ１０アルキル、Ｃ１１アルキル、またはＣ１２アルキル）、Ｃ２〜Ｃ１２アルケニル（例えば、Ｃ２アルケニル、Ｃ３アルケニル、Ｃ４アルケニル、Ｃ５アルケニル、Ｃ６アルケニル、Ｃ７アルケニル、Ｃ８アルケニル、Ｃ９アルケニル、Ｃ１０アルケニル、Ｃ１１アルケニル、またはＣ１２アルケニル）、またはフェニルである。
【０１６４】
いくつかの実施形態では、Ｒ２は
【化１０】
2019142969.tif 000011
であり、式中Ｒ２ａおよびＲ２ｂは、独立して、水素、Ｃ１〜Ｃ１２アルキル（例えば、Ｃ１アルキル、Ｃ２アルキル、Ｃ３アルキル、Ｃ４アルキル、Ｃ５アルキル、Ｃ６アルキル、Ｃ７アルキル、Ｃ８アルキル、Ｃ９アルキル、Ｃ１０アルキル、Ｃ１１アルキル、またはＣ１２アルキル）、Ｃ２〜Ｃ１２アルケニル（例えば、Ｃ２アルケニル、Ｃ３アルケニル、Ｃ４アルケニル、Ｃ５アルケニル、Ｃ６アルケニル、Ｃ７アルケニル、Ｃ８アルケニル、Ｃ９アルケニル、Ｃ１０アルケニル、Ｃ１１アルケニル、またはＣ１２アルケニル）、またはフェニルである。
【０１６５】
いくつかの実施形態では、Ｒ２ａおよびＲ２ｂは、独立して、水素、Ｃ１〜Ｃ１２アルキル、またはＣ２〜Ｃ１２アルケニルである。いくつかの実施形態では、Ｒ２ａおよびＲ２ｂは、独立して、水素またはＣ１〜Ｃ１２アルキルである。いくつかの実施形態では、Ｒ２ａおよびＲ２ｂは、独立して、水素またはＣ２〜Ｃ１２アルケニルである。
【０１６６】
いくつかの実施形態では、Ｒ２ａおよびＲ２ｂは、独立して、水素、Ｃ１〜Ｃ４アルキル、またはＣ２〜Ｃ４アルケニルである。いくつかの実施形態では、Ｒ２ａおよびＲ２ｂは、独立して、水素またはＣ１〜Ｃ４アルキルである。いくつかの実施形態では、Ｒ２ａおよびＲ２ｂは、独立して、水素またはＣ２〜Ｃ４アルケニルである。
【０１６７】
いくつかの実施形態では、Ｒ２ａおよびＲ２ｂは、独立して、水素、Ｃ１０〜Ｃ１２アルキル、またはＣ１０〜Ｃ１２アルケニルである。いくつかの実施形態では、Ｒ２ａおよびＲ２ｂは、独立して、水素またはＣ１０〜Ｃ１２アルキルである。いくつかの実施形態では、Ｒ２ａおよびＲ２ｂは、独立して、水素またはＣ１０〜Ｃ１２アルケニルである。
【０１６８】
いくつかの実施形態では、Ｒ２ａは水素であり、Ｒ２ｂはＣ１〜Ｃ１２アルキル（Ｃ１〜Ｃ４アルキル、Ｃ１〜Ｃ３アルキル、Ｃ１〜Ｃ２アルキル、またはＣ１０〜Ｃ１２アルキルなど）である。いくつかの実施形態では、Ｒ２ａは水素であり、Ｒ２ｂはＣ２〜Ｃ１２アルケニル（Ｃ２〜Ｃ４アルケニル、Ｃ２〜Ｃ３アルケニル、Ｃ２アルケニル、またはＣ１０〜Ｃ１２アルケニルなど）である。
【０１６９】
いくつかの実施形態では、Ｒ４は−Ｏ（ＣＯ）Ｒ１ａであり、式中Ｒ４ａはＣ１〜Ｃ４アルキル（例えば、Ｃ１アルキル、Ｃ２アルキル、Ｃ３アルキル、またはＣ４アルキル）である。いくつかの実施形態では、Ｒ４ａはＣ１〜Ｃ４アルキル（Ｃ１〜Ｃ３アルキルまたはＣ１〜Ｃ２アルキルなど）である。いくつかの実施形態では、Ｒ４ａはメチルである。いくつかの実施形態では、Ｒ４ａはエチルである。いくつかの実施形態では、Ｒ４はヒドロキシルである。
【０１７０】
いくつかの実施形態では、Ｒ５は
【化１１】
2019142969.tif 000012
である。
【０１７１】
いくつかの実施形態では、Ｒ５は
【化１２】
2019142969.tif 000013
であり、式中Ｒ５ａおよびＲ５ｂは、独立して、水素、Ｃ１〜Ｃ１２アルキル（例えば、Ｃ１アルキル、Ｃ２アルキル、Ｃ３アルキル、Ｃ４アルキル、Ｃ５アルキル、Ｃ６アルキル、Ｃ７アルキル、Ｃ８アルキル、Ｃ９アルキル、Ｃ１０アルキル、Ｃ１１アルキル、またはＣ１２アルキル）、Ｃ２〜Ｃ１２アルケニル（例えば、Ｃ２アルケニル、Ｃ３アルケニル、Ｃ４アルケニル、Ｃ５アルケニル、Ｃ６アルケニル、Ｃ７アルケニル、Ｃ８アルケニル、Ｃ９アルケニル、Ｃ１０アルケニル、Ｃ１１アルケニル、またはＣ１２アルケニル）、またはフェニルである。
【０１７２】
いくつかの実施形態では、Ｒ５は
【化１３】
2019142969.tif 000014
であり、式中Ｒ５ａおよびＲ５ｂは、独立して、水素、Ｃ１〜Ｃ１２アルキル（例えば、Ｃ１アルキル、Ｃ２アルキル、Ｃ３アルキル、Ｃ４アルキル、Ｃ５アルキル、Ｃ６アルキル、Ｃ７アルキル、Ｃ８アルキル、Ｃ９アルキル、Ｃ１０アルキル、Ｃ１１アルキル、またはＣ１２アルキル）、Ｃ２〜Ｃ１２アルケニル（例えば、Ｃ２アルケニル、Ｃ３アルケニル、Ｃ４アルケニル、Ｃ５アルケニル、Ｃ６アルケニル、Ｃ７アルケニル、Ｃ８アルケニル、Ｃ９アルケニル、Ｃ１０アルケニル、Ｃ１１アルケニル、またはＣ１２アルケニル）、またはフェニルである。
【０１７３】
いくつかの実施形態では、Ｒ５は
【化１４】
2019142969.tif 000015
であり、式中Ｒ５ａおよびＲ５ｂは、独立して、水素、Ｃ１〜Ｃ１２アルキル（例えば、Ｃ１アルキル、Ｃ２アルキル、Ｃ３アルキル、Ｃ４アルキル、Ｃ５アルキル、Ｃ６アルキル、Ｃ７アルキル、Ｃ８アルキル、Ｃ９アルキル、Ｃ１０アルキル、Ｃ１１アルキル、またはＣ１２アルキル）、Ｃ２〜Ｃ１２アルケニル（例えば、Ｃ２アルケニル、Ｃ３アルケニル、Ｃ４アルケニル、Ｃ５アルケニル、Ｃ６アルケニル、Ｃ７アルケニル、Ｃ８アルケニル、Ｃ９アルケニル、Ｃ１０アルケニル、Ｃ１１アルケニル、またはＣ１２アルケニル）、またはフェニルである。
【０１７４】
いくつかの実施形態では、Ｒ５は
【化１５】
2019142969.tif 000016
であり、式中Ｒ５ａおよびＲ５ｂは、独立して、水素、Ｃ１〜Ｃ１２アルキル（例えば、Ｃ１アルキル、Ｃ２アルキル、Ｃ３アルキル、Ｃ４アルキル、Ｃ５アルキル、Ｃ６アルキル、Ｃ７アルキル、Ｃ８アルキル、Ｃ９アルキル、Ｃ１０アルキル、Ｃ１１アルキル、またはＣ１２アルキル）、Ｃ２〜Ｃ１２アルケニル（例えば、Ｃ２アルケニル、Ｃ３アルケニル、Ｃ４アルケニル、Ｃ５アルケニル、Ｃ６アルケニル、Ｃ７アルケニル、Ｃ８アルケニル、Ｃ９アルケニル、Ｃ１０アルケニル、Ｃ１１アルケニル、またはＣ１２アルケニル）、またはフェニルである。
【０１７５】
いくつかの実施形態では、Ｒ５ａおよびＲ５ｂは、独立して、水素、Ｃ１〜Ｃ１２アルキル、またはＣ２〜Ｃ１２アルケニルである。いくつかの実施形態では、Ｒ５ａおよびＲ５ｂは、独立して、水素またはＣ１〜Ｃ１２アルキルである。いくつかの実施形態では、Ｒ５ａおよびＲ５ｂは、独立して、水素またはＣ２〜Ｃ１２アルケニルである。
【０１７６】
いくつかの実施形態では、Ｒ５ａおよびＲ５ｂは、独立して、水素、Ｃ１〜Ｃ４アルキル、またはＣ２〜Ｃ４アルケニルである。いくつかの実施形態では、Ｒ５ａおよびＲ５ｂは、独立して、水素またはＣ１〜Ｃ４アルキルである。いくつかの実施形態では、Ｒ５ａおよびＲ５ｂは、独立して、水素またはＣ２〜Ｃ４アルケニルである。
【０１７７】
いくつかの実施形態では、Ｒ５ａおよびＲ５ｂは、独立して、水素、Ｃ１０〜Ｃ１２アルキル、またはＣ１０〜Ｃ１２アルケニルである。いくつかの実施形態では、Ｒ５ａおよびＲ５ｂは、独立して、水素またはＣ１０〜Ｃ１２アルキルである。いくつかの実施形態では、Ｒ５ａおよびＲ５ｂは、独立して、水素またはＣ１０〜Ｃ１２アルケニルである。
【０１７８】
いくつかの実施形態では、Ｒ５ａは水素であり、Ｒ５ｂはＣ１〜Ｃ１２アルキル（Ｃ１〜Ｃ４アルキル、Ｃ１〜Ｃ３アルキル、Ｃ１〜Ｃ２アルキル、またはＣ１０〜Ｃ１２アルキルなど）である。いくつかの実施形態では、Ｒ５ａは水素であり、Ｒ５ｂはＣ２〜Ｃ１２アルケニル（Ｃ２〜Ｃ４アルケニル、Ｃ２〜Ｃ３アルケニル、Ｃ２アルケニル、またはＣ１０〜Ｃ１２アルケニルなど）である。
【０１７９】
いくつかの実施形態では、Ｒ６はＣ１〜Ｃ６アルキル（例えば、Ｃ１アルキル、Ｃ２アルキル、Ｃ３アルキル、Ｃ４アルキル、Ｃ５アルキル、またはＣ６アルキル）である。いくつかの実施形態では、Ｒ６はＣ１〜Ｃ６アルキル（Ｃ１〜Ｃ３アルキルまたはＣ１〜Ｃ２アルキルなど）である。いくつかの実施形態では、Ｒ６はメチルである。いくつかの実施形態では、Ｒ６はエチルである。いくつかの実施形態では、Ｒ６はＣ２〜Ｃ６アルケニル（例えば、Ｃ２アルケニル、Ｃ３アルケニル、Ｃ４アルケニル、Ｃ５アルケニル、またはＣ６アルケニル）である。
【０１８０】
いくつかの実施形態では、Ｒ７はＣ１〜Ｃ６アルキル（例えば、Ｃ１アルキル、Ｃ２アルキル、Ｃ３アルキル、Ｃ４アルキル、Ｃ５アルキル、またはＣ６アルキル）である。いくつかの実施形態では、Ｒ７はＣ１〜Ｃ６アルキル（Ｃ１〜Ｃ３アルキル、Ｃ１〜Ｃ２アルキル、またはＣ３〜Ｃ６アルキルなど）である。いくつかの実施形態では、Ｒ７はメチルである。いくつかの実施形態では、Ｒ７はエチルである。いくつかの実施形態では、Ｒ７はＣ１〜Ｃ２アルキルである。いくつかの実施形態では、Ｒ７はＣ３〜Ｃ６アルキルである。
【０１８１】
いくつかの実施形態では、化合物は、以下の構造特性のうちのいずれか１つまたは複数を有し得る。いくつかの実施形態では、Ｒ１およびＲ４は同一の部分であり、Ｒ２およびＲ５は同一の部分である。
ａ）Ｒ１は−Ｏ（ＣＯ）Ｒ１ａであり、式中Ｒ１ａはＣ１〜Ｃ４アルキルであり；
ｂ）Ｒ４は−Ｏ（ＣＯ）Ｒ４ａであり、式中Ｒ４ａはＣ１〜Ｃ４アルキルであり；
ｃ）Ｒ２は
【化１６】
2019142969.tif 000017
であり；式中Ｒ２ａおよびＲ２ｂは、独立して、水素、Ｃ１〜Ｃ１２アルキル（例えば、Ｃ１〜Ｃ４アルキルまたはＣ１０〜Ｃ１２アルキル）、Ｃ２〜Ｃ１２アルケニル（例えば、Ｃ２〜Ｃ４アルケニルまたはＣ１０〜Ｃ１２アルケニル）、またはフェニルであり；
ｄ）Ｒ５は
【化１７】
2019142969.tif 000018
であり；式中Ｒ５ａおよびＲ５ｂは、独立して、水素、Ｃ１〜Ｃ１２アルキル（例えば、Ｃ１〜Ｃ４アルキルまたはＣ１０〜Ｃ１２アルキル）、Ｃ２〜Ｃ１２アルケニル（例えば、Ｃ２〜Ｃ４アルケニルまたはＣ１０〜Ｃ１２アルケニル）、またはフェニルである。
【０１８２】
いくつかの実施形態では、化合物は、以下の構造特性のうちのいずれか１つまたは複数を有し得る。いくつかの実施形態では、Ｒ１およびＲ４は同一の部分である。
ａ）Ｒ１は−Ｏ（ＣＯ）Ｒ１ａであり、式中Ｒ１ａはＣ１〜Ｃ４アルキルであり；
ｂ）Ｒ４は−Ｏ（ＣＯ）Ｒ４ａであり、式中Ｒ４ａはＣ１〜Ｃ４アルキルであり；
ｃ）Ｒ２は
【化１８】
2019142969.tif 000019
であり；
ｄ）Ｒ５は
【化１９】
2019142969.tif 000020
である。
【０１８３】
いくつかの実施形態では、化合物は、以下の構造特性のうちのいずれか１つまたは複数を有し得る。いくつかの実施形態では、Ｒ１およびＲ４は同一の部分であり、Ｒ２およびＲ５は同一の部分である。
ａ）Ｒ１は−Ｏ（ＣＯ）Ｒ１ａであり、式中Ｒ１ａはＣ１〜Ｃ４アルキルであり；
ｂ）Ｒ４は−Ｏ（ＣＯ）Ｒ４ａであり、式中Ｒ４ａはＣ１〜Ｃ４アルキルであり；
ｃ）Ｒ２は
【化２０】
2019142969.tif 000021
であり；式中Ｒ２ａおよびＲ２ｂは、独立して、水素、Ｃ１〜Ｃ４アルキル、Ｃ２〜Ｃ４アルケニル、またはフェニルであり；
ｄ）Ｒ５は
【化２１】
2019142969.tif 000022
であり；式中Ｒ５ａおよびＲ５ｂは、独立して、水素、Ｃ１〜Ｃ４アルキル、Ｃ２〜Ｃ４アルケニル、またはフェニルである。
【０１８４】
いくつかの実施形態では、化合物は、以下の構造特性のうちのいずれか１つまたは複数を有し得る。いくつかの実施形態では、Ｒ１およびＲ４は同一の部分であり、Ｒ２およびＲ５は同一の部分である。
ａ）Ｒ１は−Ｏ（ＣＯ）Ｒ１ａであり、式中Ｒ１ａはＣ１〜Ｃ４アルキルであり；
ｂ）Ｒ４は−Ｏ（ＣＯ）Ｒ４ａであり、式中Ｒ４ａはＣ１〜Ｃ４アルキルであり；
ｃ）Ｒ２は
【化２２】
2019142969.tif 000023
であり；式中Ｒ２ａおよびＲ２ｂは、独立して、水素、Ｃ１０〜Ｃ１２アルキル、Ｃ１０〜Ｃ１２アルケニル、またはフェニルであり；
ｄ）Ｒ５は
【化２３】
2019142969.tif 000024
であり；式中Ｒ５ａおよびＲ５ｂは、独立して、水素、Ｃ１０〜Ｃ１２アルキル、Ｃ１０〜Ｃ１２アルケニル、またはフェニルである。
【０１８５】
いくつかの実施形態では、化合物は、以下の構造特性のうちのいずれか１つまたは複数を有し得る。いくつかの実施形態では、Ｒ２およびＲ５は同一の部分である。
ａ）Ｒ２は、
【化２４】
2019142969.tif 000025
であり；式中Ｒ２ａおよびＲ２ｂは、独立して、水素、Ｃ１〜Ｃ１２アルキル（例えば、Ｃ１〜Ｃ４アルキルまたはＣ１０〜Ｃ１２アルキル）、Ｃ２〜Ｃ１２アルケニル（例えば、Ｃ２〜Ｃ４アルケニルまたはＣ１０〜Ｃ１２アルケニル）、またはフェニルであり；
ｂ）Ｒ５は、
【化２５】
2019142969.tif 000026
であり；式中Ｒ５ａおよびＲ５ｂは、独立して、水素、Ｃ１〜Ｃ１２アルキル（例えば、Ｃ１〜Ｃ４アルキルまたはＣ１０〜Ｃ１２アルキル）、Ｃ２〜Ｃ１２アルケニル（例えば、Ｃ２〜Ｃ４アルケニルまたはＣ１０〜Ｃ１２アルケニル）、またはフェニルであり；
ｃ）Ｒ１はヒドロキシルであり；
ｄ）Ｒ４はヒドロキシルである。
【０１８６】
いくつかの実施形態では、化合物は、以下の構造特性のうちのいずれか１つまたは複数を有し得る。いくつかの実施形態では、Ｒ２およびＲ５は同一の部分である。
ａ）Ｒ２は、
【化２６】
2019142969.tif 000027
であり；式中Ｒ２ａおよびＲ２ｂは、独立して、水素、Ｃ１〜Ｃ４アルキル、Ｃ２〜Ｃ４アルケニル、またはフェニルであり；
ｂ）Ｒ５は、
【化２７】
2019142969.tif 000028
であり；式中Ｒ５ａおよびＲ５ｂは、独立して、水素、Ｃ１〜Ｃ４アルキル、Ｃ２〜Ｃ４アルケニル、またはフェニルであり；
ｃ）Ｒ１はヒドロキシルであり；
ｄ）Ｒ４はヒドロキシルである。
【０１８７】
いくつかの実施形態では、化合物は、以下の構造特性のうちのいずれか１つまたは複数を有し得る。いくつかの実施形態では、Ｒ２およびＲ５は同一の部分である。
ａ）Ｒ２は、
【化２８】
2019142969.tif 000029
であり；式中Ｒ２ａおよびＲ２ｂは、独立して、水素、Ｃ１０〜Ｃ１２アルキル、Ｃ１０〜Ｃ１２アルケニル、またはフェニルであり；
ｂ）Ｒ５は、
【化２９】
2019142969.tif 000030
であり；式中Ｒ５ａおよびＲ５ｂは、独立して、水素、Ｃ１０〜Ｃ１２アルキル、Ｃ１０〜Ｃ１２アルケニル、またはフェニルであり；
ｃ）Ｒ１はヒドロキシルであり；
ｄ）Ｒ４はヒドロキシルである。
【０１８８】
いくつかの実施形態では、化合物は、以下の構造特性のうちのいずれか１つまたは複数を有し得る：
ａ）Ｒ６はＣ１〜Ｃ６アルキル（例えば、メチルまたはエチル）であり；
ｂ）Ｒ７はメチルまたはエチルである。
【０１８９】
いくつかの実施形態では、アノルドリンまたはそのアナログまたはその薬学的に許容され得る塩は、式（ＩＩ）：
【化３０】
2019142969.tif 000031
（式中、
Ｒ５は
【化３１】
2019142969.tif 000032
であり；式中Ｒ５ａおよびＲ５ｂは、独立して、水素、Ｃ１〜Ｃ１２アルキル、Ｃ２〜Ｃ１２アルケニル、またはフェニルであり；
Ｒ６はＣ１〜Ｃ６アルキルまたはＣ２〜Ｃ６アルケニルである）の構造を有する。
【０１９０】
いくつかの実施形態では、式（ＩＩ）は、式（ＩＩａ）：
【化３２】
2019142969.tif 000033
である。
【０１９１】
いくつかの実施形態では、式（ＩＩ）は、式（ＩＩｂ）：
【化３３】
2019142969.tif 000034
である。
【０１９２】
いくつかの実施形態では、Ｒ５は
【化３４】
2019142969.tif 000035
である。
【０１９３】
いくつかの実施形態では、Ｒ５は
【化３５】
2019142969.tif 000036
であり、式中Ｒ５ａおよびＲ５ｂは、独立して、水素、Ｃ１〜Ｃ１２アルキル（例えば、Ｃ１アルキル、Ｃ２アルキル、Ｃ３アルキル、Ｃ４アルキル、Ｃ５アルキル、Ｃ６アルキル、Ｃ７アルキル、Ｃ８アルキル、Ｃ９アルキル、Ｃ１０アルキル、Ｃ１１アルキル、またはＣ１２アルキル）、Ｃ２〜Ｃ１２アルケニル（例えば、Ｃ２アルケニル、Ｃ３アルケニル、Ｃ４アルケニル、Ｃ５アルケニル、Ｃ６アルケニル、Ｃ７アルケニル、Ｃ８アルケニル、Ｃ９アルケニル、Ｃ１０アルケニル、Ｃ１１アルケニル、またはＣ１２アルケニル）、またはフェニルである。
【０１９４】
いくつかの実施形態では、Ｒ５は
【化３６】
2019142969.tif 000037
であり、式中Ｒ５ａおよびＲ５ｂは、独立して、水素、Ｃ１〜Ｃ１２アルキル（例えば、Ｃ１アルキル、Ｃ２アルキル、Ｃ３アルキル、Ｃ４アルキル、Ｃ５アルキル、Ｃ６アルキル、Ｃ７アルキル、Ｃ８アルキル、Ｃ９アルキル、Ｃ１０アルキル、Ｃ１１アルキル、またはＣ１２アルキル）、Ｃ２〜Ｃ１２アルケニル（例えば、Ｃ２アルケニル、Ｃ３アルケニル、Ｃ４アルケニル、Ｃ５アルケニル、Ｃ６アルケニル、Ｃ７アルケニル、Ｃ８アルケニル、Ｃ９アルケニル、Ｃ１０アルケニル、Ｃ１１アルケニル、またはＣ１２アルケニル）、またはフェニルである。
【０１９５】
いくつかの実施形態では、Ｒ５は
【化３７】
2019142969.tif 000038
であり、式中Ｒ５ａおよびＲ５ｂは、独立して、水素、Ｃ１〜Ｃ１２アルキル（例えば、Ｃ１アルキル、Ｃ２アルキル、Ｃ３アルキル、Ｃ４アルキル、Ｃ５アルキル、Ｃ６アルキル、Ｃ７アルキル、Ｃ８アルキル、Ｃ９アルキル、Ｃ１０アルキル、Ｃ１１アルキル、またはＣ１２アルキル）、Ｃ２〜Ｃ１２アルケニル（例えば、Ｃ２アルケニル、Ｃ３アルケニル、Ｃ４アルケニル、Ｃ５アルケニル、Ｃ６アルケニル、Ｃ７アルケニル、Ｃ８アルケニル、Ｃ９アルケニル、Ｃ１０アルケニル、Ｃ１１アルケニル、またはＣ１２アルケニル）、またはフェニルである。
【０１９６】
いくつかの実施形態では、Ｒ５は
【化３８】
2019142969.tif 000039
であり、式中Ｒ５ａおよびＲ５ｂは、独立して、水素、Ｃ１〜Ｃ１２アルキル（例えば、Ｃ１アルキル、Ｃ２アルキル、Ｃ３アルキル、Ｃ４アルキル、Ｃ５アルキル、Ｃ６アルキル、Ｃ７アルキル、Ｃ８アルキル、Ｃ９アルキル、Ｃ１０アルキル、Ｃ１１アルキル、またはＣ１２アルキル）、Ｃ２〜Ｃ１２アルケニル（例えば、Ｃ２アルケニル、Ｃ３アルケニル、Ｃ４アルケニル、Ｃ５アルケニル、Ｃ６アルケニル、Ｃ７アルケニル、Ｃ８アルケニル、Ｃ９アルケニル、Ｃ１０アルケニル、Ｃ１１アルケニル、またはＣ１２アルケニル）、またはフェニルである。
【０１９７】
いくつかの実施形態では、Ｒ５ａおよびＲ５ｂは、独立して、水素、Ｃ１〜Ｃ１２アルキル、またはＣ２〜Ｃ１２アルケニルである。いくつかの実施形態では、Ｒ５ａおよびＲ５ｂは、独立して、水素またはＣ１〜Ｃ１２アルキルである。いくつかの実施形態では、Ｒ５ａおよびＲ５ｂは、独立して、水素またはＣ２〜Ｃ１２アルケニルである。
【０１９８】
いくつかの実施形態では、Ｒ５ａおよびＲ５ｂは、独立して、水素、Ｃ１〜Ｃ４アルキル、またはＣ２〜Ｃ４アルケニルである。いくつかの実施形態では、Ｒ５ａおよびＲ５ｂは、独立して、水素またはＣ１〜Ｃ４アルキルである。いくつかの実施形態では、Ｒ５ａおよびＲ５ｂは、独立して、水素またはＣ２〜Ｃ４アルケニルである。
【０１９９】
いくつかの実施形態では、Ｒ５ａおよびＲ５ｂは、独立して、水素、Ｃ１０〜Ｃ１２アルキル、またはＣ１０〜Ｃ１２アルケニルである。いくつかの実施形態では、Ｒ５ａおよびＲ５ｂは、独立して、水素またはＣ１０〜Ｃ１２アルキルである。いくつかの実施形態では、Ｒ５ａおよびＲ５ｂは、独立して、水素またはＣ１０〜Ｃ１２アルケニルである。
【０２００】
いくつかの実施形態では、Ｒ５ａは水素であり、Ｒ５ｂはＣ１〜Ｃ１２アルキル（Ｃ１〜Ｃ４アルキル、Ｃ１〜Ｃ３アルキル、Ｃ１〜Ｃ２アルキル、またはＣ１０〜Ｃ１２アルキルなど）である。いくつかの実施形態では、Ｒ５ａは水素であり、Ｒ５ｂはＣ２〜Ｃ１２アルケニル（Ｃ２〜Ｃ４アルケニル、Ｃ２〜Ｃ３アルケニル、Ｃ２アルケニル、またはＣ１０〜Ｃ１２アルケニルなど）である。
【０２０１】
いくつかの実施形態では、Ｒ６はＣ１〜Ｃ６アルキル（例えば、Ｃ１アルキル、Ｃ２アルキル、Ｃ３アルキル、Ｃ４アルキル、Ｃ５アルキル、またはＣ６アルキル）である。いくつかの実施形態では、Ｒ６はＣ１〜Ｃ６アルキル（Ｃ１〜Ｃ３アルキルまたはＣ１〜Ｃ２アルキルなど）である。いくつかの実施形態では、Ｒ６はメチルである。いくつかの実施形態では、Ｒ６はエチルである。いくつかの実施形態では、Ｒ６はＣ２〜Ｃ６アルケニル（例えば、Ｃ２アルケニル、Ｃ３アルケニル、Ｃ４アルケニル、Ｃ５アルケニル、またはＣ６アルケニル）である。
【０２０２】
いくつかの実施形態では、アノルドリンまたはそのアナログ（ａｎａｌｏｇ  ｔｈｅｒｅｆｏｒｅ）またはその薬学的に許容され得る塩は、式（ＩＩＩ）：
【化３９】
2019142969.tif 000040
（式中、
Ｒ５は
【化４０】
2019142969.tif 000041
であり；式中Ｒ５ａおよびＲ５ｂは、独立して、水素、Ｃ１〜Ｃ１２アルキル、Ｃ２〜Ｃ１２アルケニル、またはフェニルである）の構造を有する。
【０２０３】
いくつかの実施形態では、式（ＩＩＩ）は、式（ＩＩＩａ）：
【化４１】
2019142969.tif 000042
である。
【０２０４】
いくつかの実施形態では、式（ＩＩＩ）は、式（ＩＩＩｂ）：
【化４２】
2019142969.tif 000043
である。
【０２０５】
いくつかの実施形態では、Ｒ５は
【化４３】
2019142969.tif 000044
である。
【０２０６】
いくつかの実施形態では、Ｒ５は
【化４４】
2019142969.tif 000045
であり、式中Ｒ５ａおよびＲ５ｂは、独立して、水素、Ｃ１〜Ｃ１２アルキル（例えば、Ｃ１アルキル、Ｃ２アルキル、Ｃ３アルキル、Ｃ４アルキル、Ｃ５アルキル、Ｃ６アルキル、Ｃ７アルキル、Ｃ８アルキル、Ｃ９アルキル、Ｃ１０アルキル、Ｃ１１アルキル、またはＣ１２アルキル）、Ｃ２〜Ｃ１２アルケニル（例えば、Ｃ２アルケニル、Ｃ３アルケニル、Ｃ４アルケニル、Ｃ５アルケニル、Ｃ６アルケニル、Ｃ７アルケニル、Ｃ８アルケニル、Ｃ９アルケニル、Ｃ１０アルケニル、Ｃ１１アルケニル、またはＣ１２アルケニル）、またはフェニルである。
【０２０７】
いくつかの実施形態では、Ｒ５は
【化４５】
2019142969.tif 000046
であり、式中Ｒ５ａおよびＲ５ｂは、独立して、水素、Ｃ１〜Ｃ１２アルキル（例えば、Ｃ１アルキル、Ｃ２アルキル、Ｃ３アルキル、Ｃ４アルキル、Ｃ５アルキル、Ｃ６アルキル、Ｃ７アルキル、Ｃ８アルキル、Ｃ９アルキル、Ｃ１０アルキル、Ｃ１１アルキル、またはＣ１２アルキル）、Ｃ２〜Ｃ１２アルケニル（例えば、Ｃ２アルケニル、Ｃ３アルケニル、Ｃ４アルケニル、Ｃ５アルケニル、Ｃ６アルケニル、Ｃ７アルケニル、Ｃ８アルケニル、Ｃ９アルケニル、Ｃ１０アルケニル、Ｃ１１アルケニル、またはＣ１２アルケニル）、またはフェニルである。
【０２０８】
いくつかの実施形態では、Ｒ５は
【化４６】
2019142969.tif 000047
であり、式中Ｒ５ａおよびＲ５ｂは、独立して、水素、Ｃ１〜Ｃ１２アルキル（例えば、Ｃ１アルキル、Ｃ２アルキル、Ｃ３アルキル、Ｃ４アルキル、Ｃ５アルキル、Ｃ６アルキル、Ｃ７アルキル、Ｃ８アルキル、Ｃ９アルキル、Ｃ１０アルキル、Ｃ１１アルキル、またはＣ１２アルキル）、Ｃ２〜Ｃ１２アルケニル（例えば、Ｃ２アルケニル、Ｃ３アルケニル、Ｃ４アルケニル、Ｃ５アルケニル、Ｃ６アルケニル、Ｃ７アルケニル、Ｃ８アルケニル、Ｃ９アルケニル、Ｃ１０アルケニル、Ｃ１１アルケニル、またはＣ１２アルケニル）、またはフェニルである。
【０２０９】
いくつかの実施形態では、Ｒ５は
【化４７】
2019142969.tif 000048
であり、式中Ｒ５ａおよびＲ５ｂは、独立して、水素、Ｃ１〜Ｃ１２アルキル（例えば、Ｃ１アルキル、Ｃ２アルキル、Ｃ３アルキル、Ｃ４アルキル、Ｃ５アルキル、Ｃ６アルキル、Ｃ７アルキル、Ｃ８アルキル、Ｃ９アルキル、Ｃ１０アルキル、Ｃ１１アルキル、またはＣ１２アルキル）、Ｃ２〜Ｃ１２アルケニル（例えば、Ｃ２アルケニル、Ｃ３アルケニル、Ｃ４アルケニル、Ｃ５アルケニル、Ｃ６アルケニル、Ｃ７アルケニル、Ｃ８アルケニル、Ｃ９アルケニル、Ｃ１０アルケニル、Ｃ１１アルケニル、またはＣ１２アルケニル）、またはフェニルである。
【０２１０】
いくつかの実施形態では、Ｒ５ａおよびＲ５ｂは、独立して、水素、Ｃ１〜Ｃ１２アルキル、またはＣ２〜Ｃ１２アルケニルである。いくつかの実施形態では、Ｒ５ａおよびＲ５ｂは、独立して、水素またはＣ１〜Ｃ１２アルキルである。いくつかの実施形態では、Ｒ５ａおよびＲ５ｂは、独立して、水素またはＣ２〜Ｃ１２アルケニルである。
【０２１１】
いくつかの実施形態では、Ｒ５ａおよびＲ５ｂは、独立して、水素、Ｃ１〜Ｃ４アルキル、またはＣ２〜Ｃ４アルケニルである。いくつかの実施形態では、Ｒ５ａおよびＲ５ｂは、独立して、水素またはＣ１〜Ｃ４アルキルである。いくつかの実施形態では、Ｒ５ａおよびＲ５ｂは、独立して、水素またはＣ２〜Ｃ４アルケニルである。
【０２１２】
いくつかの実施形態では、Ｒ５ａおよびＲ５ｂは、独立して、水素、Ｃ１０〜Ｃ１２アルキル、またはＣ１０〜Ｃ１２アルケニルである。いくつかの実施形態では、Ｒ５ａおよびＲ５ｂは、独立して、水素またはＣ１０〜Ｃ１２アルキルである。いくつかの実施形態では、Ｒ５ａおよびＲ５ｂは、独立して、水素またはＣ１０〜Ｃ１２アルケニルである。
【０２１３】
いくつかの実施形態では、Ｒ５ａは水素であり、Ｒ５ｂはＣ１〜Ｃ１２アルキル（Ｃ１〜Ｃ４アルキル、Ｃ１〜Ｃ３アルキル、Ｃ１〜Ｃ２アルキル、またはＣ１０〜Ｃ１２アルキルなど）である。いくつかの実施形態では、Ｒ５ａは水素であり、Ｒ５ｂはＣ２〜Ｃ１２アルケニル（Ｃ２〜Ｃ４アルケニル、Ｃ２〜Ｃ３アルケニル、Ｃ２アルケニル、またはＣ１０〜Ｃ１２アルケニルなど）である。
【０２１４】
いくつかの実施形態では、アノルドリンまたはそのアナログまたはその薬学的に許容され得る塩は、式（ＩＶ）：
【化４８】
2019142969.tif 000049
（式中、
Ｒ６はＣ１〜Ｃ６アルキルまたはＣ２〜Ｃ６アルケニルである）の構造を有する。
【０２１５】
いくつかの実施形態では、式（ＩＶ）は、式（ＩＶａ）：
【化４９】
2019142969.tif 000050
である。
【０２１６】
いくつかの実施形態では、式（ＩＶ）は、式（ＩＶａ）：
【化５０】
2019142969.tif 000051
である。
【０２１７】
いくつかの実施形態では、Ｒ６はＣ１〜Ｃ６アルキル（例えば、Ｃ１アルキル、Ｃ２アルキル、Ｃ３アルキル、Ｃ４アルキル、Ｃ５アルキル、またはＣ６アルキル）である。いくつかの実施形態では、Ｒ６はＣ１〜Ｃ６アルキル（Ｃ１〜Ｃ３アルキルまたはＣ１〜Ｃ２アルキルなど）である。いくつかの実施形態では、Ｒ６はメチルである。いくつかの実施形態では、Ｒ６はエチルである。いくつかの実施形態では、Ｒ６はＣ２〜Ｃ６アルケニル（例えば、Ｃ２アルケニル、Ｃ３アルケニル、Ｃ４アルケニル、Ｃ５アルケニル、またはＣ６アルケニル）である。
【０２１８】
いくつかの実施形態では、アノルドリンまたはそのアナログはアノルドリンである。いくつかの実施形態では、アノルドリンまたはそのアナログは、下記の構造を有する化合物である。
【化５１】
2019142969.tif 000052
【化５２】
2019142969.tif 000053
【０２１９】
当業者は、いくつかの実施形態が本発明の範囲内および精神内で可能であると認識されたい。本発明を、以下の非限定的な実施例を参照してより詳細に記載する。以下の実施例は、本発明をさらに例示するが、勿論、いかなる場合も本発明の範囲を制限するとして解釈されるべきではない。
【実施例】
【０２２０】
実施例１
子宮サイトゾル中の２つのエストロゲン結合複合体（超遠心分離による沈降速度に関して命名された４Ｓおよび８Ｓ）がＭｅｈｔａら（１８）によって報告された。アノルジオール（アノルドリンまたはそのアナログ（アノルドリンなど）の非エステル化活性代謝産物）は、およそ２×１０５Ｍ−１の親和性で８Ｓ複合体と優先的に結合することが見出された。対照的に、タモキシフェンは、両方のエストロゲン結合複合体に結合することが見出された。アノルドリンまたはそのアナログ（アノルドリンなど）のたった１つのエストロゲン結合子宮サイトゾル複合体との選択的結合により、アノルドリンまたはそのアナログ（アノルドリンなど）がエストロゲンによって制御される特異的生物学的機能を調整し得ることが示唆される。特異的生物学的機能を制御するためにエストロゲンによって調整される経路は、現在２つが公知である。本発明者らは、アノルドリンまたはそのアナログ（アノルドリンなど）がエストロゲン調整の古典的経路に関与するかどうかを最初に試験した。ＥＲ−αリガンド結合ドメインを、大腸菌内でＧＳＴ融合タンパク質（ＧＳＴ−ＥＲ−α−ＬＢＤ）として発現させ、グルタチオンビーズを使用して精製した。アノルドリンまたはそのアナログ（アノルドリンなど）、タモキシフェン、およびＥ２のＥＲ−αＬＢＤへの結合親和性を、３Ｈ−Ｅ２競合アッセイを使用して比較した。５０ｎＭのアノルドリンまたはそのアナログ（アノルドリンなど）が０．５ｎＭの３Ｈ−Ｅ２の２μｇのＧＳＴ−ＥＲ−α−ＬＢＤへの結合を阻害することができないことが見出された。対照的に、同一濃度のタモキシフェンまたはＥ２のいずれかが、６０パーセントを超える３Ｈ−Ｅ２のＧＳＴ−ＥＲ−αＬＢＤへの結合を遮断した（図１Ａ）。これらの結果に基づいて、本発明者らは、アノルドリンまたはそのアナログ（アノルドリンなど）がエストロゲンシグナル伝達の古典的経路を介した遺伝子発現の制御に関与しないと仮定した。
【０２２１】
Ｂｃｌ−２は、抗アポトーシスタンパク質ファミリーの重要なメンバーである。その過剰発現は、ヒトにおける多種のがんに関連している。Ｂｃｌ−２プロモーターはＥＲＥ配列を含み、ＭＣＦ−７細胞中のＢｃｌ−２  ｍＲＮＡ発現は、Ｅ２によって正に制御され、タモキシフェンによって阻害されることが見出されている（１９）。Ｎｅｈｒａの結果と一致して、本発明者らは、Ｂｃｌ−２タンパク質の発現レベルがエストロゲンによって増強されることを見出し（図１Ｃ、レーン１および４）、７．５μＭのタモキシフェンはＢｃｌ−２発現を阻害することが見出された（図１Ｃ、レーン２）。対照的に、Ｂｃｌ−２  ｍＲＮＡ（データ示さず）またはタンパク質（図１Ｃ、レーン３）のいずれかの発現レベルは、７．５μＭのアノルドリンまたはそのアナログ（アノルドリンなど）で処理されたＭＣＦ−７細胞において影響を受けなかった。タモキシフェンおよびアノルドリンまたはそのアナログ（アノルドリンなど）のいずれにおいても、フェノールレッド不含ＤＭＥＭ培地中の活性炭処理済みＦＢＳを使用した培地中で培養した細胞におけるＢｃｌ−２タンパク質発現に影響を及ぼさないことが判明した（図１Ｃ、それぞれレーン５および６）。ＢＲＣＡ１  ｍＲＮＡの発現は、ＭＣＦ−７細胞中でエストロゲンの調節下にあることも報告されている（２０）。本発明者らは、アノルドリンまたはそのアナログ（アノルドリンなど）がＭＣＦ−７細胞においてＲＴ−ｑＰＣＲを使用して測定した場合にＢＲＣＡ１のｍＲＮＡレベルに有意に影響を及ぼさない一方で、タモキシフェンは同一条件下でＢＲＣＡ１  ｍＲＮＡの合成を有意に阻害する（図１３Ｂ、列２および４）ことをさらに証明した。これらの結果は、アノルドリンまたはそのアナログ（アノルドリンなど）がエストロゲン制御の古典経路に関与しないことをさらに支持する。興味深いことに、アノルドリンまたはそのアナログ（アノルドリンなど）が古典的ＥＲ経路を通じて遺伝子転写を調整しないようであったが、本発明者らは、７．５μＭのアノルドリンがＭＣＦ−７細胞成長を５０％超、阻害することができることを実際に見出した（図１３Ａ、列１、行１および２）。さらに、Ｔ４７Ｄ細胞の７．５μＭのアノルドリンまたはそのアナログ（アノルドリンなど）での処理では、１０ｎｇ／ｍｌのＥＧＦによって誘導された細胞成長の増加を遮断しただけでなく、基底レベル未満にさらに減少させた（図６）。
【０２２２】
インスリン（ＩＬ）はインスリン受容体（ＩＲ）に結合して、インスリン様成長因子受容体１（ＩＧＦＲ１）経路を介するインスリン受容体基質（ＩＲＳ）のリン酸化を刺激する。リン酸化ＩＲＳはエストロゲン−ＥＲ複合体と相互作用し、次いで、核内に移行してエストロゲン古典的経路を介するＲＮＡ転写を制御することができる。ＭＣＦ−７細胞の増殖はＩＬによって調整され、これらの細胞のタモキシフェンに対する感受性は、ＩＬが培養培地から一時的に除去された後（２１）またはＩＲＳ特異的ｓｉＲＮＡを使用してＩＲＳ発現が一過性にノックダウンされた場合（２２）に増加することが見出された。したがって、ＩＬ−ＩＲＳ−ＩＧＦＲ１−ＥＲ経路は、ＭＣＦ−７増殖の制御で重要な役割を果たす。ＩＬ−ＩＲＳ−ＩＧＦＲ１−ＥＲ経路の妨害により、ＭＣＦ−７細胞の増殖をＭＩＥＳにさらに一層依存性にするはずである。結果的に、ＩＬ−ＩＲＳ−ＥＲ経路が破壊されたＭＣＦ−７細胞のタモキシフェン感受性は減少する一方で、ＭＩＥＳのモジュレーターに対する応答は増加する。この仮説を試験するために、本発明者らは、ＭＣＦ−７細胞をＩＬ不含培地中にて２ヶ月間誘導した。細胞成長の薬物感受性を、インキュベーションの１４４時間後に細胞計数によって試験した（図１３Ａ）。ＭＣＦ−７細胞成長のＩＣ５０に関するデータは、ＩＬがＭＣＦ−７細胞のタモキシフェンに対する感受性を増強させ（列２）、一方で、アノルドリンまたはそのアナログ（アノルドリンなど）に対する感受性を減少させる（列１）ことを示す。さらに、培養培地中の２００ｎＭアノルドリンの存在は、タモキシフェンがＭＣＦ−７細胞成長を阻害する能力に影響を及ぼさなかった（列２−行１  対  行４）。ＭＣＦ−７細胞におけるＥＲ−α−３６の発現が培養培地からのインスリンの除去に応答して増加したので、ＧＰＥＲ１およびＥＲ−α−６６の発現レベルは変化しなかった（図１３Ｃ）。これらの結果は、さらにアノルドリン活性が古典的経路から独立していることを示す。さらに、これらの結果は、アノルドリンがＭＩＥＳ経路（特に、ＥＲ−α−３６経路など）の阻害によってＭＣＦ−７細胞成長を阻害し得ることを示唆している。
【０２２３】
ＭＩＥＳは、一連の足場タンパク質複合体を介して細胞の増殖、遊走、細胞間結合および細胞間マトリックス、ならびにエネルギー代謝を制御する。原形質膜とのＥＲ−α結合は、ＬＢＤ中の残基Ｃ４４７でのパルミトイル化によって促進される。ＥＲ−α−３６は、短縮ＥＲ−αバリアントであり、パルミトイル化モチーフ（４４５〜４５３）を保持し、固有のＣ末端２７アミノ酸配列を全長ＥＲ−αの典型的な１４０アミノ酸（４５６〜５９５）の代わりに保有している（１）。ＥＲ−α−３６が部分的ＬＢＤを保有し、主に原形質膜およびサイトゾルに局在しているので、エストロゲン結合が損なわれ、それにより、エストロゲン古典的経路の調整能力が喪失している可能性がある。これを検証するために、本発明者らは、３Ｈ−Ｅ２の、大腸菌から発現し、精製されたＧＳＴ−ＥＲ−α−３６との結合親和性を測定した。結果は、大腸菌から発現されたＧＳＴ−ＥＲ−α−３６は３Ｈ−Ｅ２に結合しないことを示している（図２０）。対照的に、３Ｈ−Ｅ２は、全長ＥＲ−α−ＬＢＤを有するＧＳＴ−ＥＲ−α−４６に結合する。本発明者らは、次に、ＨＥＫ２９３細胞に発現したＥＲ−α−３６がＫａｎｇによって見出されたように類似の親和性（Ｋｄ約１．９ｎＭ）で３Ｈ−Ｅ２に結合することを確認した（２３、データ示さず）。興味深いことに、アノルドリンは、ＥＲ−α−３６への３Ｈ−Ｅ２の結合に対して二相効果（低濃度でのＥＲ−α−３６への３Ｈ−Ｅ２の結合遮断およびより高い濃度での結合の促進）を示した（図２Ａ）。まとめると、本発明者らのデータは、公開されたＥＲ−α−３６の研究を考慮して、ＥＲ−α−３６がＭＩＥＳ経路に排他的に関与し得ることを示唆している。本発明者らは、続けて、ＥＲ−α−３６を使用してＥ２およびＳＥＲＭによるＭＩＥＳ調整の生理学的意義を研究した。
【０２２４】
ＥＲ−α−３６は、ＭＤＡ−ＭＢ−２３１細胞およびＨｅｃ１Ａ細胞における固有且つ高発現性のＥＲ−αバリアントであり、ＭＡＰＫ／ＥＲＫ（１／２）経路の調整を介して細胞増殖を制御することが証明された（２３）。本発明者らは、細胞成長の点においてアノルドリンに対するＭＤＡ−ＭＢ−２３１の感受性を調べた。本発明者らによる細胞計数の結果は、６μＭのアノルドリンがＭＤＡ−ＭＢ−２３１細胞の成長を有意に阻害する一方で、タモキシフェン処理は効果がないことを示す（図２Ｃ）。アノルドリン処理により、２〜８μＭの範囲の用量でＨｅｃ１Ａ細胞およびＩｓｈｉｋａｗａ細胞の両方の増殖が阻害されることも見出された（図１４Ａ、Ｂ）。さらに、ＨｅｐＧ２細胞のアノルドリン処理により、二相用量応答によって特徴づけられる細胞成長の阻害が示され、約７μＭの中間濃度で阻害度が最も高かった（図７Ａ）。ＨｅｐＧ２細胞におけるＥＲＫのリン酸化により、アノルドリン処理に対して類似の単調でない用量応答が示され、濃度が１０μＭのアノルドリンで最大のリン酸化が起こった（図７Ｂ）。これは、アノルドリンがＥＲＫ経路を介して細胞成長に対するその阻害効果を媒介するように作用し得ることを示唆していた。本発明者らの知見に基づいて、本発明者らは、ＭＩＥＳ調整を介する作用経路を予想し、伝統的なエストロゲン遮断処置によって誘発される副作用を抑制するための併用療法プロトコールにおけるアノルドリンの有用な適用法を提案する。
【０２２５】
原形質膜に結合したＥ２−ＥＲ複合体は、ヒトにおける乳がん抗エストロゲン耐性１（ＢＣＡＲ１）としても公知のＣａｓ結合基質（ｐ１３０Ｃａｓ）などの足場タンパク質の生物学的機能を調整することができる。インテグリン−ｐ１３０Ｃａｓ複合体は、細胞外マトリックス（ＥＣＭ）ならびにがん細胞の遊走および浸潤の制御で基本的役割を果たす。ＥＲ−α−３６は、ＭＤＡ−ＭＢ−２３１細胞の遊走を調整することが以前に示されている（２４）。アノルドリンが細胞の遊走および浸潤を阻害する抗血管新生剤として報告されているので（１６）、本発明者らは、マトリックスゲルを使用してアノルドリンがＭＤＡ−ＭＢ−２３１細胞の遊走を調整する能力を研究した。ＭＤＡ−ＭＢ−２３１細胞を、基底側ウェル中でアノルドリンまたはビヒクルコントロールと組み合わせた１０ｎＭのＥ２または１０ｎｇ／ｍｌのＥＧＦのいずれかに曝露した。２０時間後、遊走細胞を染色し、プレートリーダーを使用して５６０ｎｍで定量した。本発明者らは、Ｅ２およびＥＧＦの両方がＭＤＡ−ＭＢ−２３１細胞の遊走をわずかに増大させたことを見出した。６μＭのアノルドリンは、Ｅ２またはＥＧＦのいずれかを含む培地中でＭＤＡ−ＭＢ−２３１細胞の遊走を有意に阻害した（図２ＥおよびＦ）。興味深いことに、アノルドリンは、Ｅ２によるよりもＥＧＦによって媒介されたＭＤＡ−ＭＢ−２３１細胞の遊走を効率よく阻害した。さらに、本発明者らは、特異的ｓｉＲＮＡを使用してＭＤＡ−ＭＢ−２３１細胞におけるＥＲ−α−３６またはＧＰＥＲ１をノックダウンした。本発明者らは、ＭＤＡ−ＭＢ−２３１細胞の遊走効率がＥＲ−α−３６ノックダウンに応答して減少したことを見出した。対照的に、細胞遊走効率は、ＭＤＡ−ＭＢ２３１細胞中でＧＰＥＲ１の発現がノックダウンされた場合に影響を受けなかった（図２２）。
【０２２６】
細胞表面へのインテグリン移行は、細胞の付着および遊走で基本的役割を果たすためにｐ１３０Ｃａｓ足場タンパク質複合体によって制御される。インテグリンα３β１は、ＭＤＡ−ＭＢ−２３１細胞の遊走だけでなくＭＣＦ−７細胞付着にも関与することが報告されている（２５、２６）。本発明者らの結果は、Ｅ２−ＥＲ−ｐ１３０ｃａｓ−インテグリンシグナル伝達経路の負の調整を介する細胞膜上のインテグリン分布の可能性のある下方制御因子としてのアノルドリンの役割を示唆している。この仮説を検証するために、本発明者らは、ＭＣＦ−７細胞およびＭＤＡ−ＭＢ−２３１細胞を６μＭのアノルドリンで１６時間処理し、ＦＩＴＣ標識抗インテグリンβ１抗体を使用して細胞表面のインテグリンβ１分布を測定した。本発明者らは、アノルドリンがＭＣＦ−７細胞（図２Ｈ）およびＭＤＡ−ＭＢ−２３１細胞（図２Ｇ）の原形質膜へのインテグリンβ１分布を下方制御することを見出した。しかし、アノルドリンは、ＭＣＦ−７細胞またはＭＤＡ−ＭＢ−２３１細胞のいずれにおいてもインテグリンβ１の発現レベルに影響を及ぼさなかった（図１５）。まとめると、本発明者らは、アノルドリンまたはそのアナログ（アノルドリンなど）が膜結合ＥＲに結合して細胞の遊走および増殖を阻害すると結論付ける。
【０２２７】
エストロゲンはまた、雌哺乳動物におけるエネルギー平衡の調節において重要な役割を果たす。代謝シグナル伝達のエストロゲン調整は、中枢神経系、肝臓、骨格筋、骨、腎臓、心血管系などに影響を及ぼす。エストロゲンおよびその受容体の複合体がインスリン（ＩＬ）−インスリン受容体（ＩＲ）複合体またはレプチン／ニューロンペプチドＹ（ＮＰＹ）およびその受容体とクロストークして、食物摂取、グルコース代謝、および脂肪細胞の組成を制御する。ＭＣＦ−７細胞成長に及ぼすアノルドリンおよびタモキシフェンの影響を研究する一方で、本発明者らは、アノルドリンで処理した細胞の培地がさらなる黄変となったことを観察した。これはｐＨの低下を示すものである（図１８）。これの１つの原因は、タモキシフェンで処理した細胞と比較してアノルドリン処理細胞においてグルコース消費が増大したことであろう。これが正しいかどうかを決定するために、本発明者らは、ＭＣＦ−７細胞を異なる濃度のアノルドリンまたはタモキシフェンのいずれかで６０時間処理した。培養培地中のグルコース濃度を、グルコースアッセイキットを使用して測定した。図３Ａは、アノルドリン処理細胞由来の培地のグルコース濃度がタモキシフェンで処理した細胞由来の培地と比較して低かったことを示す。本発明者らは、次に、アノルドリンがタモキシフェン処理ＭＣＦ−７細胞におけるグルコース代謝を増加させることができるかどうかを試験した。１μＭのタモキシフェンおよび２００ｎＭのアノルドリンを含む１００μｌ培地中のウェルあたり２×１０４個のＭＣＦ−７細胞を、９６ウェルプレート中に播種した。培地中のグルコース濃度を、６０時間後に測定した。図３Ｂは、２００ｎＭのアノルドリンによってグルコース代謝に及ぼす１μＭのタモキシフェンの阻害効果を逆にしただけでなく、コントロールと比較してグルコース消費がさらに増強された（図４Ｂ、バーＴＡＭ対バーＴＡＭ＋ＡＮＯ）ことを示す。レプチン耐性マウスモデル（ｄｂ／ｄｂ）では、Ｅ２は、エネルギー支出を増加させ、それにより体重が減少することが示されている（２８）。本発明者らは、アノルドリン（２．５％メチルセルロースを含む２００μｌ滅菌水に懸濁）を、０．４５μｇ／ｇ体重の用量でｄｂ／ｄｂマウスに毎日投与し、グルコースアッセイキットを使用して全血グルコースを毎週、４週間にわたって測定した。結果は、コントロール（群２）と比較してアノルドリン処置雌マウス（群１）においてグルコース消費の改善が示される（図３Ｃ）。食物摂取および体重は、試験期間中有意に変化しなかった（図１６Ａ）。興味深いことに、アノルドリンは、雄ｄｂ／ｄｂマウスにおけるグルコース消費に影響を及ぼさなかった（データ示さず）。
【０２２８】
エストロゲンは、脂肪組織中のＡＴＰ合成と脂肪の沈着との間の均衡を調整する、グルコース代謝制御に関与する重要なアディポカインの１つである。エストロゲンレベルの低下により、閉経後の女性において脂肪貯蔵および肥満が増加し、それにより、ＩＩ型糖尿病および非アルコール性脂肪性肝炎（ＮＡＳＨ）の発生率が増加し得る。結果的に、抗エストロゲン治療（タモキシフェンなど）は、乳がん患者においてＮＡＳＨの発生率を増大させる。本発明者らの結果は、アノルドリンがＭＣＦ−７細胞およびｄｂ／ｄｂマウスにおけるグルコース代謝を増大させることを既に示しており、本発明者らは、アノルドリンが卵巣切除（ＯＶＸ）マウスにおける肝臓脂肪の増加ならびに正常マウスにおけるタモキシフェンによって誘発されたＮＡＳＨを防止することができると予想した。この仮説を試験するために、６週齢マウスの卵巣を外科的に切除した。手術３日後、マウスにイプリフラボン、Ｅ２、アノルドリン、またはビヒクルコントロールの胃内注入を行った。体重および食物摂取を毎週測定した。本発明者らは、６週間後にイプリフラボン群およびコントロール群において体重が増加したが、偽投与群、Ｅ２群、およびアノルドリン群において不変のままであったことを見出した（図４Ａ）。食物摂取はいかなる群においても影響を受けず（図１６Ｂ）、差異はエネルギー支出の変化に起因することが示された。次いで、マウスを屠殺して３０〜５０ｍｇの肝臓を採取し、クロロホルム：メタノール（２：１）と０．５ｍｌの生理的塩類溶液との１ｍｌの混合物を使用して総脂質を抽出した。有機相中の総コレステロール（ＴＣ）レベルおよびトリグリセリド（ＴＧ）レベルを、ＴＣおよびＴＧのアッセイキットを使用して測定した（２９）。結果は、コントロールと比較してアノルドリン群およびＥ２群における卵巣切除（ＯＶＸ）マウスの肝臓のＴＣおよびＴＧの量が減少したが、イプリフラボン群では変化しなかったことを示す（図４Ｄ、図１７Ａ）。アノルドリン群およびＥ２群由来の肝臓のパラフィン切片は、コントロール群およびイプリフラボン群由来の切片と比較して脂肪沈着がより少なかった（図４Ｃ）。グルコース代謝に及ぼすアノルドリンおよびタモキシフェンの影響をさらに研究するために、６週齢の正常マウスを、薬物のみまたは組み合わせのいずれで処置した。タモキシフェンを４．５μｇ／ｇ体重／日の用量で９週間摂取したマウスは、コントロールマウスと比較して、体重が増加し（図４Ｂ）、ＮＡＳＨ症候群（核周囲のＴＧ沈着など）および肝臓ＴＧレベルの指標が増加していた（図４、ＥおよびＦ）。体重、ＮＡＳＨ症候群、および肝臓ＴＧ表現型は、０．４５μｇ／ｇ体重の用量でアノルドリンと組み合わせた上記のタモキシフェンを摂取したマウスにおいて完全に逆であった（図４、Ｂ、Ｅ、およびＦ）。肝臓ＴＣレベルは、いかなる群においても相違がなかった（図１７Ｂ）。本発明者らはまた、アノルドリンがタモキシフェン処置によって誘導された血清粘度およびＴＧレベルの増加を逆にすることができることを見出した（図５）。さらに、ＧＰＥＲ１、ＥＲ−α、およびＥＲ−βに対する抗体を使用したマウス肝臓のパラフィン切片の免疫蛍光（ＩＦ）染色は、それぞれ、Ｇ���ＥＲ１のみが他のエストロゲン受容体（ＥＲ−α、およびＥＲ−β、図２１）と比較して核周囲に局在されることを示した。まとめると、結果は、タモキシフェンがＧＰＥＲ１機能の阻害によってＮＡＳＨを誘発し得ることを示唆している。対照的に、アノルドリンまたはそのアナログ（アノルドリンなど）はＧＰＥＲ１のアゴニストである。
【０２２９】
核周囲のＴＧ沈着の増加は、グルコース取り込みの増加または細胞ＡＴＰ濃度の減少に原因があり得る。したがって、本発明者らは、タモキシフェンおよびアノルドリンまたはそのアナログ（アノルドリンなど）がＥＲ−αまたはＧＰＥＲ１を介してグルコース取り込みおよび細胞ＡＴＰ濃度を制御することができるかどうかを試験した。グルコース取り込みを、蛍光標識グルコース（２−ＮＢＤＧ）を使用して測定し、ＡＴＰ濃度を、ＡＴＰ分析キットを使用して測定した。本発明者らは、アノルドリンが２−ＮＢＤＧ取り込みおよび細胞ＡＴＰ濃度を増大させることを見出した（図２３ＡおよびＢ）。タモキシフェンは、２−ＮＢＤＧ取り込みを増大させたが、細胞ＡＴＰ濃度を減少させた（図２３ＡおよびＢ）。アノルドリンとタモキシフェンとの組み合わせは、薬物処置を行っていないコントロールと比較してＭＣＦ−７細胞における２−ＮＢＤＧ取り込みレベルを変化させなかった（図２３Ａ）。この結果は、アノルドリンまたはそのアナログ（アノルドリンなど）およびタモキシフェンが逆の機構によってグルコース取り込みを制御し得ることを示す。ＥＲ−αまたはＧＰＥＲ１をＭＣＦ−７細胞中で特異的ｓｉＲＮＡによって個別にノックダウンした場合（図２３Ｃ）、本発明者らは、２−ＮＢＤＧ取り込みおよび細胞ＡＴＰ濃度に及ぼす各薬物の影響が低下することを見出した（図２３ＡおよびＢ）。これらの結果は、タモキシフェンおよびアノルドリンまたはそのアナログ（アノルドリンなど）がＥＲ−αとＧＰＥＲ１との間のクロストークを介してグルコース取り込みおよび細胞ＡＴＰ濃度を制御することを示唆している。
【０２３０】
アノルドリンまたはそのアナログ（アノルドリンなど）はまた、閉経後の女性の処置において潜在的な治療的利点を有する。卵巣切除マウスの子宮萎縮を防止し（図８Ｂ）、タモキシフェン誘発性の子宮および膣の萎縮範囲を減少させることが見出された（図８、ＡおよびＣ）。特に、アノルドリンのトウモロコシ油およびカゼイン製剤は、メチル−セルロースを使用した製剤と比較してマウスにおける子宮萎縮を防止するその活性を増加させた（図１０）。重要なことに、アノルドリンは、タモキシフェンおよびＥ２（共に増殖および多層の発生を誘導する）比較して、マウスにおいて子宮内膜上皮細胞を肥大させる一方で、子宮内膜上皮細胞増殖を誘導せず、上皮が単層のままである（図９、ＡおよびＣ）。アノルドリンおよびタモキシフェンを使用した併用処置により、肥大および増殖の増加のいずれも起こらなかった（図９Ａ）。
【０２３１】
骨粗鬆症は、閉経後の女性に一般的な進行性の骨疾患であり、骨量および骨密度の減少を特徴とする。血清Ｃａ２＋濃度（［Ｃａ２＋］）の減少およびリン酸塩（ｐｈｏａｐｈａｔｅ）濃度（［Ｐｉ］）の増加が、骨粗鬆症の進行を示すために使用される臨床診断マーカーである。アノルドリンは、卵巣切除マウスにおいて、血清Ｃａ２＋の増加（図１１Ａ）、Ｐｉの減少（図１１Ｂ）、および骨密度の増加（図１１、ＤおよびＥ）によって示されるように骨粗鬆症を防止することが見出された。アノルドリンはまた、骨髄細胞の減少を防止することが見出された（図１１Ｃ）。
【０２３２】
エストロゲン、タモキシフェン、およびラロキシフェンは全てＥＲのＬＢＤに結合してエストロゲン古典的経路を調整する。タモキシフェンまたはラロキシフェンを使用したエストロゲン補充療法またはエストロゲン補充処置により、ＡｐｏＤ（潜在的に血餅形成をもたらすＨＤＬの成分）の発現を増大させることができる（図１３Ｂ、列３）。本発明者らは、エストロゲンの古典的経路を調整しないＳＥＲＭは血餅または血栓塞栓症を引き起こさないと仮定する。大規模スクリーニング後、アノルドリンを、ＥＲ古典的経路を調整せず、タモキシフェンによって誘導された血清粘度も減少させない化合物と同定した。本発明者らは、アノルドリンのＲ６中のメチル基がジノルドリンと比較してＥＲ−ＬＢＤに対するアノルドリン結合親和性の減少に不可欠であることを見出した（図１Ａ、ジノルドリン対アノルドリン）。したがって、アノルドリンのＲ６中のアルキル基またはアルケニル基は、血餅および血栓塞栓症の防止に必要である。
【０２３３】
タモキシフェンは、ＥＲ古典的経路のアンタゴニストとして有用な治療薬であるが、ｍＥＲのアゴニストでもあり、子宮内膜上皮細胞の増殖を誘導する。アノルドリンは、子宮内膜上皮細胞のタモキシフェン誘導性増殖を中和することができ、それゆえ、併用療法で有用である。本発明者らの知見に基づいて、本発明者らは、アノルドリンがｍＥＲのアンタゴニストであると結論付ける。アノルドリンは、ＥＲ古典的経路を調整しないが、エストロゲン代謝シグナル伝達を増大させることができる。本発明者らは、アノルドリンはＧＰＥＲ１のアゴニストであり、それにより、アノルドリンはエストロゲン代謝シグナル伝達を調整するということを提唱する。対照的に、タモキシフェンは、ＧＰＥＲ１のアンタゴニストであり、エストロゲン代謝シグナル伝達を阻害する。
【０２３４】
考察
エストロゲンのその膜結合受容体への結合によりサイトゾルＣａ２＋オシレーションが生じ、シグナルが細胞外マトリックス（ＥＣＭ）に伝達され、細胞遊走に影響を及ぼし得る。ＩｎｓＰ３Ｒは、多様なシグナル伝達経路の制御に関与する主要なＣａ２＋チャネルの１つである。ＩｎｓＰ３Ｒは、小胞体からのＣａ２＋放出のエストロゲン調整に貢献することが報告されており（３０）、アクチンフィラメントの機能制御に関与することも示されている（３１）。しかし、この作用の根底にある詳細な分子機構は明確に理解されていない。Ｅ２−ＥＲ複合体は、ｃ−Ｓｒｃを介して細胞遊走を制御することが報告されている（３２）。ｃ−Ｓｒｃは、細胞の接着、浸潤、成長、および分化の制御で重要な役割を果たす非受容体チロシンキナーゼである。ｃ−Ｓｒｃチロシンキナーゼの重要な調節機構は、そのリン酸化状態およびキナーゼ活性の調節に関与し、この機構を、Ｅ２のＥＲとの相互作用によって誘導されるＣａ２＋シグナル伝達によって調整することができる。ｃ−Ｓｒｃ−ＦＡＫ（焦点接着キナーゼ）−ｐ１３０Ｃａｓ足場は焦点接着複合体と反応してアクチン細胞骨格を制御し、それにより、細胞運動性および細胞接着を調整する。ｐ１３０Ｃａｓ／ＢＣＡＲ１複合体は、インテグリンと相互作用してＥＣＭおよび遊走を制御する。アノルドリンは、膜結合ＥＲと結合してエストロゲン媒介性インテグリン移行のシグナル伝達経路を遮断し、それにより、細胞遊走を阻害する。逆に、タモキシフェンはこのシグナル伝達経路のアゴニストであり、ＢＣＡＲ１は、この足場のコア成分として、乳がん患者の処置中のタモキシフェン耐性の発生に関係すると考えられる。さらに、ＦＡＫ−ＣＤＣ４２−ＡＲＨＧＡＰ２１経路は、インテグリン−Ｆ−アクチン足場複合体の形成を制御し、結果的に膠芽細胞腫の細胞遊走を制御すると報告されている（３３）。本発明者らは、ＡＲＨＧＡＰ２１のカルボキシル末端がＩｎｓＰ３Ｒのカルボキシル末端と相互作用してＩｎｓＰ３Ｒ  Ｃａ２＋チャネルを介して小胞体からのＣａ２＋放出を増大させることを見出した。ＡＲＨＧＡＰ２１のＩｎｓＰ３Ｒとの相互作用により、Ｆ−アクチンの形成およびＨＥＫ−２９３細胞遊走を制御する。したがって、本発明者らは、エストロゲンが膜結合ＥＲに結合して、ｃ−Ｓｒｃ−ＣＤＣ４２−ＡＲＨＧＡＰ２１−ＩｎｓＰ３Ｒ−インテグリン経路を介してＥＣＭおよび細胞遊走を調整することを提唱する（図１２）。
【０２３５】
ＥＧＦはＨｅｒ１に結合し、それにより、ｃ−Ｓｒｃリン酸化経路が活性化されて細胞の増殖および遊走が制御される。アノルドリンによる細胞の増殖および遊走の調整は、ｃ−Ｓｒｃ経路を介して作用することが証明されている。本発明者らは、アノルドリンが、ＭＤＡ−ＭＢ−２３１細胞における細胞遊走およびＴ４７Ｄ細胞における細胞成長に対するＥＧＦの刺激効果を遮断することができることを見出した。１９９０年代にアノルドリンが抗腫瘍薬として使用されていたとき、アノルドリンは、がんが潜在的にＥＧＦ／Ｈｅｒ１によって引き起こされ、ＥＧＦ競合物質が阻害できなかった患者の生活の質を改善し、延命することが見出された。本発明者らの結果は、アノルドリンを抗腫瘍治療で使用して腫瘍成長が膜結合ＥＲおよびＨｅｒ１−ｃ−Ｓｒｃ経路に依存する患者を処置することができることを示唆している。
【０２３６】
ＧＰＥＲ１は、ＥＲ陰性であるがＧＰＥＲ１陽性の乳がん細胞株においてＥＧＦＲ経路を介するエストロゲンによるＭＡＰＫ／ＥＲＫおよびＰＩ３Ｋ／ＡＫＴの活性化に関与することが見出されているので、生殖器がんにおける抗エストロゲン耐性に関連すると基本的に考えられている（３４）。その後、ＧＰＥＲ１が患者由来の生殖器がんの生検標本において豊富に（ａｄｕｎｄａｎｔｌｙ）発現されることが、報告された。とりわけ、ＧＰＥＲ１発現は、腫瘍サイズ、ＥＲ陰性ｈｅｒ−２／ｎｅｕ、および乳房外転移に関連する（３５）。しかし、報告では、ＧＰＥＲ１のノックダウンをＥＲＫ活性と相関させることができないことが示された（３６）。ＧＰＥＲ１選択性アゴニストＧ１も、子宮または乳腺においてエストロゲン様効果を発揮することがでなかった（３７）。本発明者らの結果は、アノルドリンが膜結合ＥＲの純粋なアンタゴニストであり、ＧＰＥＲ１アゴニストとして機能することを示す。対照的に、タモキシフェンは逆の性質を示す。したがって、本発明者らの結果に基づいて、アノルドリンとタモキシフェンとの組み合わせは、タモキシフェンの副作用を最小にすることができる。
【０２３７】
エネルギー平衡のエストロゲン制御は、主にＥＲ−αによって媒介されることが報告されている。ＥＲ−αのノックアウトにより、肥満のエストロゲン調整が損なわれる結果となることが示されている（３９）。２５％のＧＰＥＲ１ノックアウトマウスが、肥満を示すことが示されている（４０）。対照的に、ＥＲ−βノックアウトマウスは、肥満率の増加を示さない（４１）。これらの結果は、ＥＲ−αとＧＰＥＲ１との間のクロストークがエネルギー平衡のエストロゲン制御に重要であることを示唆している。ＧＰＥＲ１は、主に小胞体に局在し、小胞体でエストロゲンおよびホスファチジルイノシトール３、４、５−三リン酸（ＩＰ３）シグナルが生じ、それによりＩｎｓＰ３ＲからＣａ２＋が放出される（５）。Ｗｈｉｔｅらは、ＩｎｓＰ３ＲからのＣａ２＋放出がミトコンドリアの生体エネルギー（bioenergetic）を増大させると報告した（４２）。本実施例では、本発明者らは、卵巣切除（ＯＶＸ）マウスおよびタモキシフェン処置マウスの両方において肝臓細胞の核周囲に脂質の蓄積を見出した。まとめると、本発明者らは、ＧＰＥＲ１アゴニストが小胞体からミトコンドリアへＣａ２＋を送達させるＩｎｓＰ３Ｒ活性を増大させ、それにより、グルコースのＡＴＰへのミトコンドリア代謝を増大させる可能性があると予想する。
【０２３８】
ＧＰＥＲ１が原形質膜に局在化することも見出されているが、ＧＰＥＲ１とＩＬ−ＩＲ複合体との間のクロストークは今までに報告されていない。他方では、エストロゲン−ＥＲ−αは、Ｇｌｕｔ−４発現および細胞膜へのその移行を制御するだけでなく（４３）、それが、ＭＣＦ−７細胞および骨格筋細胞においてＩＬ−ＩＲ複合体とクロストークしてグルコース取り込みを制御する（４４、４５）。興味深いことに、タモキシフェンは、臨床的利用の間に骨粗鬆症を防止することが見出された。アノルドリンはまた、本発明者らの実験において骨粗鬆症を防止することが見出された（図１１）。
【０２３９】
タモキシフェンは、２−ＮＢＤＧ取り込みを増大させ、ＡＴＰ生成を阻害することができる。タモキシフェンに原因するグルコース取り込みの増加分を、ＡＰＴに代謝することができない。結果的に、過剰なグルコースがＴＧに変換され得る。この一連の事象により、タモキシフェンを乳がん治療に使用した場合にタモキシフェンがＮＡＳＨを誘発し得る理由が説明される。他方では、過剰量のグルコース取り込み分を代謝することができない場合、過剰量のＴＧが蓄積され、それにより、インスリン濃度が高い場合でさえグルコースのさらなる取り込みが阻害される。このシナリオは、タモキシフェンがインスリン抵抗性を誘導し、それにより、ＩＩ型糖尿病の発生率を増加させる理由を説明し得る。アノルドリンまたはそのアナログ（アノルドリンなど）は、グルコース取り込みおよびＡＴＰおよびＴＧへのグルコース代謝に及ぼすタモキシフェンの影響を弱めることができる。したがって、アノルドリンとタモキシフェンとの組み合わせは、タモキシフェン誘導性インスリン抵抗性およびＩＩ型糖尿病の発生を防止することができる。
【０２４０】
材料と方法
プラスミド構築、タンパク質の発現、精製、およびＬＣ−ＭＳＭＳによる特徴付け：ＥＲ−αリガンド結合ドメインおよびＥＲ−α−３６を、ＥｃｏＲＩ部位およびＸｈｏＩ部位でｐＧＥＸ−６Ｐ−１にクローニングした。ＧＳＴ−ＥＲ融合タンパク質を、０．１μＭ  ＩＰＴＧを使用して誘導し、大腸菌にて２５℃で３時間発現させた。細菌を回収した。ＧＳＴ融合タンパク質を、製造者の指示に従って精製した。ＧＳＴ−ビーズ上の精製タンパク質を、１×サンプル緩衝液を使用して１００℃で５分間溶離した。上清を１０％ＳＤＳ−ＰＡＧＥで泳動した。ゲルを、クーマシーブルー−Ｒ２５０を使用して染色した。タンパク質バンドを切り出し、ＬＣ−ＭＳＭＳによって特徴付けた。ＥＲ−α−３６およびＧＰＥＲ１のｃＤＮＡを、ＹＲ  ｇｅｎｅから購入し、ｐＲｅｔｒｏ−ＡｃＧＦＰベクターおよびｐＱＸＩＸ−ＥＧＦＰベクター（Ｃｌｏｎｔｅｃｈ）にそれぞれサブクローニングした。
【０２４１】
細胞培養、レトロウイルスパッケージング、細胞選別および安定な細胞株の構築、ならびに薬物阻害アッセイ：ＭＣＦ−７細胞、Ｔ４７Ｄ細胞、ＭＤＡ−ＭＢ−２３１細胞、Ｈｅｃ−１Ａ細胞、ＣＨＯ−Ｋ１細胞、およびＨＥＫ−２９３細胞を、以下のＡＴＣＣプロトコールに従って成長させた。ＥＲ−α−３６またはＧＰＥＲ１のｃＤＮＡを有するｐＶＳＶ−Ｇタンパク質ｃＤＮＡのプラスミドをＨＥＫ−２９３パッケージ細胞に共トランスフェクトした。トランスフェクション７２時間後、上清を回収し、超遠心分離を使用して２５ｋｒｐｍで２時間濃縮した。ウイルスを、安定細胞の培養培地を使用して再懸濁した。細胞を、ウイルスを使用して３７℃で２時間感染させ、２日間成長させ、ＧＦＰ陽性細胞を、９６ウェルプレート中にウェルあたり１個播種した。ＧＦＰ融合タンパク質の発現を、ウェスタンブロッティングを使用してチェックした。
【０２４２】
結合および競合アッセイ：ＧＳＴおよびＧＳＴ−ＥＲ−α融合タンパク質を大腸菌中で発現させ、グルタチオンビーズを使用して精製した。２μｇ／ｍｌのＧＳＴ（４０〜８０ｎＭ）融合タンパク質を含む１ｍｌのＴＥ緩衝液を、１ｎＭの３Ｈ−Ｅ２と４℃で２時間混合した。ビーズ上の放射能を、ＧＭメーターを使用して測定した。ＨＥＫ−２９３細胞をトランスフェクトして、ＥＲ−βまたはＧＰＥＲ１のＧＳＴ融合タンパク質を発現させた。細胞を、プロテアーゼインヒビターカクテル（ｓｉｇｍａ）を含む１×ＴＥ緩衝液中にて氷上で３０分間溶解し、２０％グリセロールに到達するまで８０％グリセロールを添加した。チューブを３００ｇで５分間遠心分離し、上清を回収した。タンパク質濃度を、Ｂｉｏ−ｒａｄタンパク質濃度アッセイキットによって測定した。１００ｎＭのアノルドリンおよび１ｎＭの３Ｈ−Ｅ２を、１ｍｌのライセート（総タンパク質５ｍｇ／ｍｌ）に４℃で２時間添加した。ビーズ上の放射能を、ＧＭメーターを使用して測定した。
【０２４３】
ミクロソームの単離および薬物競合アッセイ：細胞を回収し、ＴＥ緩衝液（５０ｍＭ  Ｔｒｉｓ（ｐＨ８．０）、５ｍＭ  ＥＤＴＡ、２ｍＭ  ＰＭＳＦ、およびプロテアーゼインヒビターカクテル（Ｓｉｇｍａ））中にて５分毎にボルテックスしながら３０分間溶解した。８０％グリセロールを含むＴＥ緩衝液を２０％に到達するまで細胞ライセートに添加し、８００ｇで５分間遠心分離した。上清を新しいチューブに移し、総タンパク質濃度を５ｍｇ／ｍｌに調整した。薬物および３Ｈ−Ｅ２を１ｍｌタンパク質溶液に添加し、４℃で２時間インキュベートした。ミクロソームを２５ｋｒｐｍ、２時間で沈殿させた。結合した３Ｈ−Ｅ２を、ＧＭメーターを使用して測定した。
【０２４４】
薬物阻害アッセイ：細胞を２４ウェルプレート中に接種し、指定濃度の薬物を使用して処理した。細胞数を、細胞カウンター（Ｃｏｕｎｔ  Ｓｔａｒ）を使用して計数した。
【０２４５】
トランズウェルおよびフローサイトメトリーアッセイ：細胞を、５％活性炭処理済みＦＢＳを含むフェノールレッド不含培地中で４８時間飢餓にさせ、次いで、フェノールレッド不含培地にさらに２４時間交換した。トランズウェルを、Ｃｈｅｍｉｃｏｎキットの指示（カタログ番号ＥＣＭ５５１）に従って実施した。簡潔に述べれば、細胞を、トリプシン処理し、Ｃａ２＋およびＭｇ２＋を含む１×ＤＰＢＳ（Ｓｉｇｍａ）を使用して洗浄し、血清およびフェノールレッドを含まない培地で０．５×１０６細胞／ｍｌの細胞密度に再懸濁した。薬物を含む２００μｌの細胞懸濁液を上部チャンバーに添加し、１０％ＦＢＳを含む０．５ｍｌの培地を含む下部チャンバーに１６時間挿入した。製造会社の指示に従って細胞をトリプシン不含細胞懸濁緩衝液（Ｍｉｌｌｉｐｏｒｅ）に懸濁し、ＦＩＴＣ−抗体（ｍｉｌｌｉｎｐｏｒｅ）で標識することによってフローサイトメトリーを行った。
【０２４６】
ＥＲ−αおよびＧＰＥＲ１に対する特異的ｓｉＲＮＡを、文献４６および４７にそれぞれ従って設計し、Ｇｅｎｅｐｈａｒｍａ  Ｃｏ．，ＬＴＤが合成した。
【０２４７】
グルコース濃度アッセイ：培地またはマウス尾部からの全血中のグルコース濃度を、製造者（Ｙｉｃｈｅｎｇ、Ｂｅｉｊｉｎｇ）の指示に従ってグルコースアッセイキットを使用して測定した。
【０２４８】
卵巣切除（ＯＶＸ）マウスモデルの構築および薬物の投与：６週齢マウスの卵巣を、手術によって切除した。手術３日後に薬物を胃管注射によって毎日投与するか、食物と混合した。
【０２４９】
パラフィン切片の調製およびＨＥ染色：マウスの組織を、手術によって切除し、２．５％ホルムアルデヒドを含む１×ＰＢＳを使用して固定した。パラフィン切片の調製およびＨＥ染色を、ＢＫ  ａｎｉｍａｌ  ｍｏｄｅｌ，Ｉｎｃ．のＧＬＰ研究所の標準的プロトコールに従って行った。
【０２５０】
マウスの肝臓および血清中のＴＣおよびＴＧの測定：３０〜５０ｍｇのマウス肝臓を手術によって切除し、１ｍｌクロロホルム（Ｃｈｏｌｒｏｆｏｒｍ）：メタノール（２：１）混合物中でホモジナイズし、０．５ｍｌのｄｄＨ２Ｏを使用して抽出した。有機相を新規のチューブに移し、風乾させた。ＴＣおよびＴＧの量を、製造者の指示に従ってキットを使用して測定した。エラーを、内部標準コントロールを使用して補正した。
【０２５１】
ｍｉｃｒｏ−ＣＴを使用した骨密度アッセイ：大腿骨を、３％ホルムアルデヒドを含む１×ＤＰＢＳ中で２週間固定した。１週間後に固定液を交換した。大腿骨の密度を、Ｓｉｅｍｅｎｓ  Ｉｎｖｅｏｎ  Ｍｉｃｒｏ−ＣＴによって測定した。Ｉｎｖｅｏｎ  Ｒｅｓｅａｒｃｈ  Ｗｏｒｋｐｌａｃｅ（ＩＲＷ）を使用して、以下の測定条件でＨＵ２０００値を分析した：８０ＫＶＰ、５００ｍＡ、曝露時間１５００ｍｓ；ＣＣＤ読み出し設定：２０４８体軸断面、２０４８ビニング；ＦＯＶ体軸横断面：１９．０３ｍｍ、体軸断面：１９．０３ｍｍ、ピクセルサイズ：９．２９μｍ。
【０２５２】
細胞ライセートの抽出、ウェスタンブロッティング、総ＲＮＡ抽出、およびＲＴ−ｑＰＣＲ：細胞を回収し、１％ｔｒｉｔｏｎ−ｘ１００およびプロテアーゼインヒビターカクテルを含むＲＩＰＡ緩衝液または１×ＤＰＢＳに溶解した。総タンパク質濃度を、Ｂｉｏ−ｒａｄタンパク質染色用色素を使用して測定した。ウェスタンブロッティングを、標準的なプロトコールに従ってニトロセルロース膜（Ｍｉｌｌｉｐｏｒｅ）およびＢｉｏ−ｒａｄセミドライトランスファーシステムを使用して行った。総ＲＮＡを、ＲＮＡ抽出溶液（ｓｉｇｍａ）を使用して抽出した。ＲＴ−ｑＰＣＲを、Ｒｏｃｈｅ  Ｓｙｂｒ  ｑＰＣＲキット、以下のプログラムを使用したＡＢＩ７９００ＨＴ  ＰＣＲ装置を使用して行った：９５℃で１０分間、その後、９５℃で１０秒間および６０℃で１分間を４０サイクル。
【０２５３】
統計分析：表および図中、結果を、平均値＋ＳＴＤＥＶで示す。アスタリスクは、両側スチューデントｔ検定を使用して計算した統計的有意差を示す。
【０２５４】
実施例２．アノルドリンおよびジノルドリンの結合アッセイ
【０２５５】
ジノルドリンは、Ｒ６位に−Ｈを有することを除いてアノルドリンに類似の構造を有する。本発明者らは、５０ｎＭのジノルドリンがビーズ上の１μｇのＧＳＴ−ＥＲ−α−ＬＢＤへの０．５ｎＭ［Ｈ３−Ｅ２］結合を６３．２±５．７％遮断することを見出した。対照的に、１μｇのＧＳＴ−ＥＲ−α−ＬＢＤへの［Ｈ３−Ｅ２］結合を遮断するアノルドリンによる阻害はない。
【０２５６】
さらに、６μＭのジノルドリンは、Ｂｃｌ−２  ｍＲＮＡ転写を１４７．２％±２２．７３％（Ｐ＜０．００１）増加させた。対照的に、ＲＴ−ｑＰＣＲを使用して、ＭＣＦ−７細胞においてアノルドリンによって統計的に有意でない差（３．１８％±３．２２％）が測定された。
【０２５７】
結果は、Ｒ６の−ＣＨ３が（−Ｈと対照的に）アノルドリンの固有の機能特性に不可欠であることが示された。
【０２５８】
キシレンを使用してマウス肝臓切片からパラフィンを除去した。肝臓切片を、それぞれＧＰＥＲ１、ＥＲ−α、またはＥＲ−βに対する抗体を使用して染色した。
参考文献
【表１】
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【表２】
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【表３】
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【図１】
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【図２】
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【図３】
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【図４】
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【図５】
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【図６】
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【図７】
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【図８】
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【図９】
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【図１０】
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【図１１】
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【図１２】
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【図１３】
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【図１４】
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【図１５】
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【図１６】
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【図１７】
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【図１８】
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【図１９】
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【図２０】
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【図２１】
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【図２２】
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【図２３】
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【外国語明細書】
2019142969000001.pdf