(57)【要約】【課題】新たな心不全改善剤の提供。【解決手段】式（Ｉ）で示されるトランス−アスタキサンチン誘導体、その幾何異性体、それら幾何異性体の混合物、それらの光学異性体またはそれらの塩を含有する心不全改善剤。2019142815.tif 000017（式中、ｍ1、ｍ2、ｎ1およびｎ2は、それぞれ同じまたは異なって１〜６の整数を意味する。）【選択図】なし【特許請求の範囲】
【請求項１】
式（Ｉ）で示されるトランス−アスタキサンチン誘導体、その幾何異性体、それら幾何異性体の混合物、それらの光学異性体またはそれらの塩を含有する心不全改善剤。
【化１】
2019142815.tif 000015
（式中、ｍ1、ｍ2、ｎ1およびｎ2は、それぞれ同じまたは異なって１〜６の整数を意味する。）
【請求項２】
式（Ｉ）において、ｍ1およびｍ2がそれぞれ１の整数であり、ｎ1およびｎ2はそれぞれ３の整数である請求項１記載の心不全改善剤。
【請求項３】
塩がリシン塩である請求項１または２記載の心不全改善剤。
【請求項４】
式（ＩＡ）で示される光学活性トランス−アスタキサンチン誘導体、その幾何異性体、それら幾何異性体の混合物またはそれらの塩を含有する心不全改善剤。
【化２】
2019142815.tif 000016
（式中、ｍ1、ｍ2、ｎ1およびｎ2は、同じまたは異なって１〜６の整数を意味する。）
【請求項５】
式（ＩＡ）において、ｍ1およびｍ2がそれぞれ１の整数であり、ｎ1およびｎ2がそれぞれ３の整数である請求項４記載の心不全改善剤。
【請求項６】
塩がリシン塩である請求項４〜５のいずれか１項記載の高純度の光学活性トランス−アスタキサンチン誘導体の塩を含有する心不全改善剤。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明はアスタキサンチン誘導体を含有する心不全改善剤に関する。
【背景技術】
【０００２】
心不全は、心臓のポンプとしての働きが低下して、全身の臓器に必要な血液量を送ることができなくなった状態をいう。心不全は様々な原因によって起こるので、原疾患によって治療法も大きく異なる。
薬物治療の原則としては、静脈鬱滞を改善するには利尿薬が、心臓の拍出量改善のためには強心薬が使われる。その他血管拡張薬を併用することもある。遺伝子組み換えヒト心房性ナトリウム利尿ペプチド（ｈＡＮＰ）も用いられる。このように心不全の原因は一つの疾患ではないことから、心不全の治療方法の多様化のためにも、これまで使用されてきた心不全治療薬とは異なる新たな作用メカニズムを有する治療剤が望まれている。
【０００３】
一方、アスタキサンチンは、優れた抗酸化活性を有し、光障害疾患領域、眼科疾患領域、皮膚科疾患領域、炎症性疾患領域、免疫疾患領域、心臓疾患領域、悪性腫瘍疾患領域、肝臓疾患領域、腎臓疾患領域、神経変性疾患領域、中毒性疾患領域、アレルギー性疾患領域、インスリン抵抗性疾患領域、糖尿病疾患領域、高脂血症疾患領域、心機能疾患領域、血管系疾患領域等に有用であることが知られている（非特許文献１及び２）。そのアスタキサンチンと同等以上の抗酸化活性を保持しつつ同化合物の水溶性及び経口吸収性を改善した化合物として下記式（Ｉ）の化合物が知られている（特許文献１）。
【０００４】
【化１】
2019142815.tif 000002
【０００５】
（式中、ｍ1、ｍ2、ｎ1及びｎ2は、それぞれ同じまたは異なって１〜６の整数を意味する）
【０００６】
特許文献１においては、式（Ｉ）の化合物が効果を示し得る疾患として心不全の例示があるものの、それに対する具体的効果の記載は全くない。
【先行技術文献】
【特許文献】
【０００７】
【特許文献１】国際公開第２０１５／１７８４０４号明細書
【非特許文献】
【０００８】
【非特許文献１】Alternative Medicine Review, 2000, 16(4), 355-364
【非特許文献２】Trends in Biotechnology, 2003, 21(5), 210-216
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００９】
本発明の主な目的は、心不全治療薬として新たな作用メカニズムを有する心不全改善剤を提供することにある。
【課題を解決するための手段】
【００１０】
本発明者らは、心不全改善のための治療薬として新たな薬剤を見出すべく鋭意検討した結果、式（Ｉ）で示されるトランス−アスタキサンチン誘導体、その幾何異性体、それら幾何異性体の混合物、それらの光学異性体またはそれらの塩が、心不全に対し優れた改善効果を有することを見出し、本発明を完成した。
【００１１】
すなわち、本発明は、次の発明〔１〕〜〔４〕を提供するものである。
【００１２】
〔１〕式（Ｉ）で示されるトランス−アスタキサンチン誘導体、その幾何異性体、それら幾何異性体の混合物、それらの光学異性体またはそれらの塩を含有する心不全改善剤。
【００１３】
【化２】
2019142815.tif 000003
【００１４】
（式中、ｍ1、ｍ2、ｎ1およびｎ2は、それぞれ同じまたは異なって１〜６の整数を意味する。）
【００１５】
〔２〕心不全改善剤製造のための、前記式（Ｉ）で示されるトランス−アスタキサンチン誘導体、その幾何異性体、それら幾何異性体の混合物、それらの光学異性体またはそれらの塩の使用。
〔３〕心不全を改善するための前記式（Ｉ）で示されるトランス−アスタキサンチン誘導体、その幾何異性体、それらの幾何異性体の混合物、それらの光学異性体またはそれらの塩。
〔４〕前記式（Ｉ）で示されるトランス−アスタキサンチン誘導体、その幾何異性体、それら幾何異性体の混合物、それらの光学異性体またはそれらの塩の有効量を投与することを特徴とする心不全改善のための治療方法。
【発明の効果】
【００１６】
本発明の式（Ｉ）で示されるトランス−アスタキサンチン誘導体、その幾何異性体、それら幾何異性体の混合物、それらの光学異性体またはそれらの塩は、ヒト、犬、猫、馬などの各種動物全般の心不全に対し優れた有効性を有するものであり、式（Ｉ）で示されるアスタキサンチン誘導体、その幾何異性体、それら幾何異性体の混合物、それらの光学異性体またはそれらの塩を含有する医薬組成物は心不全改善剤として優れたものである。
本発明の改善対象疾患である心不全については、前述のごとく、発病期間、部位や広がり、原因等によって分類され、その中でも本発明が特に効果を期待できる疾患としては慢性心不全を挙げることができる。
【図面の簡単な説明】
【００１７】
【図１】試験スケジュールを示す図である。
【図２】実施例における「エコーによる心機能測定結果（ＬＶＥＦ）」を示す図である。
【発明を実施するための形態】
【００１８】
本発明の心不全改善剤は、前記式（Ｉ）で表されるトランス−アスタキサンチン誘導体、その幾何異性体、それら幾何異性体の混合物、それらの光学異性体またはそれらの塩を有効成分として含有する。
本発明によって処置し得る対象には、ヒトを含む恒温動物、たとえばイヌ、ネコ、ウマ、サル、ウサギ、ラットまたはマウスが含まれるが、これらに限定されない。
以下、式（Ｉ）の化合物について更に説明する。
【００１９】
【化３】
2019142815.tif 000004
【００２０】
（式中、ｍ1、ｍ2、ｎ1およびｎ2は、それぞれ同じまたは異なって１〜６の整数を示す。）
【００２１】
上記式（Ｉ）の化合物の中では、ｍ1およびｍ2がそれぞれ１の整数であり、ｎ1およびｎ2がそれぞれ３の整数を示す場合が好ましい。
【００２２】
式（Ｉ）にかかる化合物、その幾何異性体、それら幾何異性体の混合物およびそれらの光学異性体は、分子内にカルボキシル基を有することから望まれる塩基物質或いは塩基化合物と通常の塩形成反応をさせることにより薬学上許容される塩を形成することができる。そのような塩としては、例えば、ナトリウム塩、カリウム塩、リチウム塩のようなアルカリ金属塩；カルシウム塩、マグネシウム塩のようなアルカリ土類金属塩；リシン塩、オルニチン塩、アルギニン塩のようなアミノ酸塩を挙げることができ、中でもナトリウム塩、リシン塩を好ましいものとして挙げることができる。
【００２３】
式（Ｉ）の化学構造式において、アスタキサンチン基本骨格中の中鎖炭素鎖部分における二重結合部分は化学構造上トランスおよびシスの幾何異性体の構造を取り得る。本発明にかかる有効成分については、式（Ｉ）のトランス体のみならず、以下の式（Ｉａ）や式（Ｉｂ）に代表されるシス体も本発明にかかる心不全改善剤の有効成分として挙げることができる。また、本発明の心不全改善剤については、式（Ｉ）のトランス体やその幾何異性体であるシス体の各種混合比での混合物も有効成分として含むものである。
【００２４】
【化４】
2019142815.tif 000005
【００２５】
（式中、ｍ1、ｍ2、ｎ1およびｎ2は、前記と同じ意味を有する。）
【００２６】
【化５】
2019142815.tif 000006
【００２７】
（式中、ｍ1、ｍ2、ｎ1およびｎ2は、前記と同じ意味を有する。）
【００２８】
また、式（Ｉ）の化合物、その幾何異性体およびそれら幾何異性体の混合物は、以下に代表される光学異性体（ＩＡ）を包含し得るものであり、その対掌体やそれらの混合物、ジアステレオマーも全て本発明にかかる心不全改善剤の有効成分として包含する。
【００２９】
【化６】
2019142815.tif 000007
【００３０】
（式中、ｍ1、ｍ2、ｎ1およびｎ2は、前記と同じ意味を有する。）
【００３１】
式（Ｉ）の化合物、その幾何異性体、それら幾何異性体の混合物およびそれらの光学異性体の中では、上記の式（Ｉ）のトランス体の化合物が好ましい。
また、上記式（Ｉ）のトランス体の化合物中でも、ｍ1およびｍ2はそれぞれ１の整数を意味しｎ1およびｎ2はそれぞれ３の整数を意味する化合物が好ましい。
【００３２】
本発明にかかる式（Ｉ）の化合物、その幾何異性体、それらの光学異性体およびそれらの塩は、国際公開第２０１５／１７８４０４号明細書に記載の製造方法や同方法と公知の方法を適宜組み合わせることにより製造することができる。それらの製造方法の中で、式（Ｉ）の化合物の幾何異性体、それらの光学異性体の製造方法について上記式（ＩＡ）の光学異性体の製造方法を代表として以下に説明する。
【００３３】
（１Ａ）  脱保護反応
【００３４】
【化７】
2019142815.tif 000008
【００３５】
（式中、ｍ1、ｍ2、ｎ1およびｎ2は、前記と同じ意味を有し、Ｒは保護基を意味する。）
【００３６】
原料化合物である式（II）の化合物の保護基を脱離することにより、目的とする式（ＩＡ）の光学活性のトランス−アスタキサンチン誘導体を製造することができる。
【００３７】
当該脱離反応は、保護基の通常の脱離反応が使用でき、具体的には、酸による脱離反応をあげることができる。
保護基としては、第三級ブチル基、トリメチルシリル基、テトラヒドロピラニル基等をあげることができ、好適なものとしては第三級ブチル基、トリメチルシリル基等をあげることができる。
【００３８】
酸による脱離反応の場合には、式（II）の化合物を不活性な溶媒中、酸を加え反応させることにより、目的とする式（ＩＡ）の化合物を製造することができる。
使用される溶媒は、本反応に不活性なものであれば特に限定はなく、例えば、ヘキサン、ヘプタン、リグロイン、石油エーテルのような脂肪族炭化水素類；ベンゼン、トルエン、キシレンのような芳香族炭化水素類；クロロホルム、塩化メチレン、１，２−ジクロロエタン、四塩化炭素のようなハロゲン化炭化水素類；アセトニトリル、プロピオニトリルのようなニトリル類；ギ酸エチル、ギ酸イソプロピル、ギ酸イソブチル、酢酸エチル、酢酸イソブチル、酢酸ブチルのような有機酸エステル類；ジエチルエーテル、ジイソプロピルエーテル、テトラヒドロフラン、ジオキサン、ジメトキシエタン、ジエチレングリコールジメチルエーテルのようなエーテル類；ジメチルホルムアミド、ジメチルアセトアミド、ヘキサメチルリン酸トリアミドのようなアミド類；メタノール、エタノール、プロパノール、イソプロパノールのようなアルコール類；トリフルオロ酢酸、ギ酸、酢酸、プロピオン酸のような有機酸類；水；またはこれらの溶媒の混合溶媒をあげることでき、好適には、ハロゲン化炭化水素類、ニトリル類、エーテル類、アルコール類、有機酸類、アミド類、水、またはこれらの溶媒の混合溶媒であり、更に好適には、ハロゲン化炭化水素類、ニトリル類、アルコール類、有機酸類、エーテル類、水またはこれらの溶媒の混合溶媒であり、最も好適には、ハロゲン化炭化水素類、アセトニトリル、水、メタノール、エタノール、イソプロパノール、ギ酸、ジオキサン、テトラヒドロフラン、または水とこれらの有機溶媒の混合溶媒（保護基がＣ１−Ｃ６アルキル基である場合）をあげることができる。
使用され得る酸は、通常の反応において、酸として使用されるものであれば特に限定はなく、例えば、塩酸、臭化水素酸、硫酸、過塩素酸、燐酸のような無機酸；酢酸、ギ酸、蓚酸、メタンスルホン酸、ｐ−トルエンスルホン酸、カンファースルホン酸、トリフルオロ酢酸、トリフルオロメタンスルホン酸のような有機酸；塩化亜鉛、四塩化スズ、ボロントリクロリド、ボロントリフルオリド、ボロントリブロミドのようなルイス酸；または酸性イオン交換樹脂であり得、好適には、無機酸または有機酸であり、最も好適には、塩酸、酢酸、ギ酸およびトリフルオロ酢酸をあげることができる。
反応温度は、反応させる原料化合物や使用する酸、溶媒等により異なるが、通常、−２０℃乃至１５０℃であり、好適には、０℃乃至１００℃である。反応時間は、原料化合物、溶媒、反応温度等により異なるが、通常、３０分間乃至１０日間であり、好適には、３０分間乃至５日間である。溶媒の使用量は、通常式（II）の化合物の使用重量に対し１０倍乃至５０倍容量を使用すればよく、好適には３０倍容量使用すればよい。酸の使用量は、原料である式（II）の化合物に対し、無機酸であれば、通常５倍乃至５０倍モル量、好適には１０倍乃至３０倍モル量使用すればよく、有機酸であれば、通常１００倍乃至１０００倍モル量、好適には２００倍乃至６００倍モル量使用すればよい。
【００３９】
以上の脱保護反応により得られる生成物は、前記の９−シス体や１３−シス体等の幾何異性体を含有し得るので、カラムクロマトグラフィー、再沈殿や結晶化等の分離、精製手段を目的に応じて適宜組み合わせることにより、同幾何異性体を分離、除去し、目的とする式（ＩＡ）の光学活性のトランス−アスタキサンチン誘導体を高純度で単離、製造することができる。
また、分離した前記シス体は、上記の如き精製、分離方法を適宜組み合わせることにより単離取得することができる。
【００４０】
（１Ｂ）  シス体からトランス体への変換方法
【００４１】
【化８】
2019142815.tif 000009
【００４２】
（式中、ｍ1、ｍ2、ｎ1およびｎ2は、前記と同じ意味を有する。）
【００４３】
本製造法で使用される代表的シス体は上記のごとき式（ＩＡａ）および（ＩＡｂ）の化合物であり、これらは、単独の原料化合物として、或いはシス体の混合物として、或いはシス体を過剰に含むトランス体との混合物として不活性な溶媒に溶解後、ヨウ素等の転換試薬を用いて反応させることにより目的とする式（ＩＡ）の高純度の光学活性トランス−アスタキサンチン誘導体を製造することができる。
【００４４】
使用される溶媒は、本反応に不活性なものであれば特に限定はされず、例えばテトラヒドロフラン、酢酸エチル、アセトニトリル、アセトン、水等をあげることができる。
上記転換試薬として好適に使用されるものしては、ヨウ素をあげることができる。
反応温度は、反応させる原料化合物や使用する転換試薬、溶媒等により異なるが、通常、−２０℃乃至１５０℃であり、好適には、１０℃乃至１００℃である。反応時間は、原料化合物、溶媒、反応温度等により異なるが、通常、３０分間乃至１０日間であり、好適には、３０分間乃至５日間である。溶媒の使用量は、通常式（ＩＡａ）または式（ＩＡｂ）の化合物の使用重量に対し通常１０倍乃至５０倍容量を使用すればよく、好適には３０倍容量使用すればよい。転換試薬の使用量は、原料である式（ＩＡａ）または式（ＩＡｂ）の化合物に対し通常０．０１倍モル量以上、好適には０．１倍モル量以上使用すればよい。
【００４５】
以上の転換反応により得られる生成物において、前記９−シス体や１３−シス体等の幾何異性体を分離する方法としては、カラムクロマトグラフィー、再沈殿や結晶化等の方法をあげることができ、目的に応じてこれらの方法を適宜組み合わせることにより、同幾何異性体を分離し、目的とする式（ＩＡ）の光学活性のトランス−アスタキサンチン誘導体を高純度で単離、製造することができる。
また、分離されたシス体も上記の分離手段を適宜組み合わせて用いることにより、夫々のシス体として単離、製造することができる。
【００４６】
次に上記の原料化合物（II）の代表的製造方法を以下に説明する。
【００４７】
（２Ａ）  ３Ｓ，３’Ｓ−アスタキサンチンに側鎖部分全体を直接結合させる方法
【００４８】
【化９】
2019142815.tif 000010
【００４９】
（式中、ｍ1およびｎ1は、前記と同じ意味を有し、Ｒは保護基（例えば、第三級ブチル基）を意味する。）
【００５０】
３Ｓ，３’Ｓ−アスタキサンチンを不活性な溶媒に溶解後、縮合試薬存在下、式（Ｉ）の化合物における側鎖部分にあたる式（III）の化合物を反応させることにより、式（II）の化合物を製造することができる。
【００５１】
溶媒としては、塩化メチレン、クロロホルム、四塩化炭素等の有機溶媒をあげることができる。
縮合試薬としては、通常の縮合反応に使用されるものを使用することができ、具体例としては水溶性カルボジイミド塩酸塩（例えば、１−（３−ジメチルアミノプロピル）−３−エチルカルボジイミド塩酸塩）、Ｎ，Ｎ−ジイソプロピルカルボジイミド、カルボニルジイミダゾール、ジシクロヘキシルカルボジイミド等をあげることができる。縮合試薬の使用量は、原料である３Ｓ，３’Ｓ−アスタキサンチンに対し通常２倍モル量以上、好適には２．５倍モル量〜２０倍モル量使用すればよい。
側鎖部分にあたる式（III）の化合物については、３Ｓ，３’Ｓ−アスタキサンチンに対し通常２倍モル量以上、好適には２．５倍モル〜２０倍モル量使用すればよい。
反応温度は、反応させる原料化合物や使用する縮合試薬、溶媒等により異なるが、通常、−２０℃乃至１５０℃であり、好適には、−１０℃乃至１００℃である。反応時間は、原料化合物、溶媒、反応温度等により異なるが、通常、３０分間乃至１０日間であり、好適には、３０分間乃至５日間である。溶媒の使用量は、３Ｓ，３’Ｓ−アスタキサンチンの使用重量に対し通常１０倍乃至５０倍容量を使用すればよく、好適には３０倍容量使用すればよい。
【００５２】
得られる式（II）の化合物は、通常、カラムクロマトグラフィー、再沈殿、再結晶等の精製手段を適宜組み合わせることにより精製、単離することができる。
なお、側鎖部分全体は、以下の方法により製造することができる。
【００５３】
（２Ａ−１）
【００５４】
【化１０】
2019142815.tif 000011
【００５５】
（式中、ｍ1、およびｎ1は、前記と同じ意味を有し、Ｒは保護基（例えば、第三級ブチル基）を意味する。）
【００５６】
式（IV）の化合物にカルボニルジイミダゾール（Ｖ）および式（VII）の化合物を順次反応することにより目的とする式（III）の化合物を製造することができる。
具体的には、式（IV）の化合物を不活性な溶媒中、カルボニルジイミダゾール（Ｖ）を塩基等の試薬の存在下或いは非存在下反応させることにより、中間物である式（VI）の化合物を得ることができる。さらに、式（VII）の化合物を塩基等の試薬の存在下トリメチルシリルクロリドと反応させ、次いで式（VI）の化合物と反応させることにより、目的とする式（III）の化合物を製造することができる。
【００５７】
式（VI）の化合物を得る工程では、溶媒としては、クロロホルム、塩化メチレン等の有機溶媒をあげることができ、これら有機溶媒の使用量は式（IV）の化合物の使用重量に対し通常５倍乃至３０倍容量、好適には１５倍容量を使用すればよい。
塩基試薬としては、通常の縮合反応に使用されるものを使用することができ、具体例としては、トリエチルアミン、Ｎ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン、ピリジン、Ｎ，Ｎ−ジメチルアミノピリジン等をあげることができる。
反応温度は、反応させる原料化合物や使用する試薬、溶媒等により異なるが、通常、−２０℃乃至１５０℃であり、好適には、０℃乃至３０℃である。反応時間は、原料化合物、溶媒、反応温度等により異なるが、通常、１５分間乃至１０日間であり、好適には、３０分間乃至２日間をあげることができる。
目的とする式（III）の化合物を得る工程では、トリメチルシリルクロリドと式（VII）の化合物を反応させる溶媒としては、クロロホルム、塩化メチレン、ピリジン等の有機溶媒をあげることができ、これら有機溶媒の使用量は式（VII）の化合物の使用重量に対し通常５倍乃至５０倍容量、好適には２０倍容量を使用すればよい。
塩基としては、通常の縮合反応に使用されるものを使用することができ、具体例としては、トリエチルアミン、Ｎ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン、ピリジン、Ｎ，Ｎ−ジメチルアミノピリジン等をあげることができる。塩基、試薬の使用量は、原料である式（VI）の化合物に対し通常２倍モル以上、好適には２．５倍モル乃至５．０倍モル使用すればよい。
反応温度は、反応させる原料化合物や使用する試薬、溶媒等により異なるが、通常、−２０℃乃至１００℃であり、好適には、０℃乃至３０℃である。反応時間は、原料化合物、溶媒、反応温度等により異なるが、通常、１５分間乃至５日間であり、好適には、３０分間乃至２日間をあげることができる。次いで式（VI）の化合物を加え、反応させるときの反応温度は、反応させる原料化合物や使用する試薬、溶媒等により異なるが、通常、−２０℃乃至１５０℃であり、好適には、１０℃乃至６０℃である。反応時間は、原料化合物、溶媒、反応温度等により異なるが、通常、３０分間乃至１０日間であり、好適には、３０分間乃至４日間をあげることができる。
【００５８】
（２Ｂ）  ３Ｓ，３’Ｓ−アスタキサンチンに側鎖部分のパーツを順次結合させる方法
【００５９】
【化１１】
2019142815.tif 000012
【００６０】
（式中、ｍ1、ｍ2、ｎ1およびｎ2は、前記と同じ意味を有し、Ｒは保護基（例えば、第三級ブチル基或いはトリメチルシリル基）を意味する。）
【００６１】
本製造方法については、基本、一般式（VII）で示される化合物とカルボニルジイミダゾール（Ｖ）を反応させて得られる側鎖部分のパーツ（VIII）を３Ｓ，３’Ｓ−アスタキサンチンに結合させ、次に、得られた生成物（IX）に側鎖部分のパーツ（XI）を結合させることにより達成できる。
【００６２】
カルボニルジイミダゾール（Ｖ）を使用した工程では上記（２Ａ−１）の製造法に示した各種反応条件を同様に使用すればよい。
溶媒としては、クロロホルム、塩化メチレン等の有機溶媒をあげることができ、これら有機溶媒の使用量は式（VII）の化合物の使用重量に対し通常２倍乃至３０倍容量を使用すればよく、好適には７倍容量使用すればよい。
反応温度は、反応させる原料化合物や使用する試薬、溶媒等により異なるが、通常、−２０℃乃至１５０℃であり、好適には、−１０℃乃至１００℃である。反応時間は、原料化合物、溶媒、反応温度等により異なるが、通常、３０分間乃至１０日間であり、好適には、３０分間乃至５日間をあげることができる。塩基はトリエチルアミン、Ｎ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン、ピリジン、Ｎ，Ｎ−ジメチルアミノピリジン等をあげることができる。
得られる側鎖部分のパーツ（VIII）と３Ｓ，３’Ｓ−アスタキサンチンとの結合反応については、上記の２Ａの反応と同様に反応させることにより、式（IX）の化合物を製造することができる。
【００６３】
目的とする一般式（II）を得る工程は、上記で得られた一般式（IX）を有する化合物に一般式（XI）を反応させることにより達成できる。本反応は上記一般式（VIII）を製造する方法に準じて行われる。
反応温度は、反応させる原料化合物や使用する試薬、溶媒等により異なるが、通常、−２０℃乃至１００℃であり、好適には、０℃乃至４０℃である。反応時間は、原料化合物、溶媒、反応温度等により異なるが、通常、３０分間乃至１０日間であり、好適には、３０分間乃至３０時間をあげることができる。
なお、一般式（XI）を有する化合物を製造する方法は、（１）Ｒがｔ―ブチル基の場合は一般的に知られたアミノ酸のｔ−ブチルエステルを合成する方法に準じて達成でき、（２）Ｒがトリメチルシリル基の場合は、一般式（X）を有する化合物とトリメチルシリルクロリドを不活性溶媒中、塩基の存在下に反応させることにより達成できる（前記一般式（III）の化合物を作る方法に準じて達成できる）。（２）の反応は一般的に知られたヒドロキシル基やカルボキシル基をシリル化する方法に準じて達成できる。なお、一般式（XI）におけるＲがトリメチルシリル基の場合は一般式（II）を生成する反応の後処理に水或いは弱酸性水を使用することにより、トリメチルシリル基を容易に脱離させることが出来る。
【００６４】
得られた生成物を、通常のカラムクロマトグラフィー、再沈殿、再結晶等の精製手段を適宜組わせて使用することにより、目的とする式（II）の化合物を製造することができる。
【００６５】
本発明に係る式（Ｉ）の化合物、その幾何異性体、それら幾何異性体の混合物、それらの光学異性体またはそれらの塩は、後記実施例に示すように、心不全の種々の症状の改善剤として有用である。ここで心不全の改善作用としては、前負荷や後負荷の増大によって悪化した心血行動態の改善が挙げられる。
また、本発明心不全改善剤は、心不全に伴う心筋リモデリングを抑制して心保護作用を示し、長期予後の改善に働く。
【００６６】
本発明に係る式（Ｉ）の化合物、その幾何異性体、それら幾何異性体の混合物、それらの光学異性体またはそれらの塩は、通常、経口剤、注射剤として投与可能である。
注射剤は、有効成分を必要に応じてｐＨ調製剤、緩衝剤、溶解剤、懸濁剤等、等張化剤、安定化剤、防腐剤などの存在下、通常の製剤化技術を使用して製造すればよい。ｐＨ調製剤としては、例えば、塩酸、水酸化ナトリウム、水酸化カリウム、トリエタノールアミンなどを挙げることができる。緩衝材としては、例えば、リン酸ナトリウム、酢酸ナトリウム、ホウ酸ナトリウム、クエン酸ナトリウム、アスパラギン酸ナトリウムなどを挙げることができる。懸濁剤としては、例えば、ポリソルベート８０、メチルセルロース、ヒドロキシエチルセルロース、ナトリウムカルボキシルメチルセルロース、ポリオキシエチレンソルビタンモノラウレート、アラビアガム、粉末トラガント、ポリビニルピロリドン、モノステアリン酸グリセリンなどを挙げることができる。溶解剤としては、例えば、ポリソルベート８０、水添ポリオキシエチレンヒマシ油、ニコチン酸アミド、ポリオキシエチレンソルビタンモノラウレート、マクロゴール、ヒマシ油脂肪酸エチルエステル、ワセリン、グリセリン、プロピレングリコールなどを挙げることができる。安定化剤としては、例えば亜硫酸ナトリウム、メタ亜硫酸ナトリウム、クエン酸ナトリウム、エデト酸ナトリウム、モノエタノールアミンなどを挙げることができる。防腐剤としては、例えば、ｐ−ヒドロキシ安息香酸メチル、ｐ−ヒドロキシ安息香酸エチル、安息香酸ナトリウム、ソルビン酸、フェノール、クレゾール、クロロクレゾール、塩化ベンザルコニウム、パラベンなどを挙げることができる。
固形の経口剤については錠剤、カプセル剤、顆粒剤、散剤等いずれの形態で投与されてもよく、有効成分を、薬学的に許容される賦形剤、崩壊剤、結合剤等の医薬添加剤と適宜混合し、通常の製剤化技術を用いることにより製造することができる。
【００６７】
本発明に係る式（Ｉ）の化合物、その幾何異性体、それら幾何異性体の混合物、それらの光学異性体またはそれらの塩を投与する場合には、症状、患者の年齢、体重、性別等に応じて、投与方法及び投与製剤を適宜選択すればよい。例えば体重約７０ｋｇの温血動物に経口で投与するとき１日当たり０．０１〜１０００ｍｇ、好ましくは１〜１００ｍｇ、より好ましくは５〜２０ｍｇを１日１〜６回に分けて投与すればよい。また、注射剤として投与する場合には、成人に対し１日あたり５．０〜４００ｍｇを静脈内に投与すればよく、症状に応じて適宜増減すればよい。
本発明に係る式（Ｉ）の化合物、その幾何異性体、それら幾何異性体の混合物、それらの光学異性体またはそれらの塩は、上記の投与量の範囲においては、安全性においても特に問題はない。
【００６８】
以下、本発明を実施例により説明する。しかしながら、本発明の範囲は下記実施例に何ら限定されるものではない。
【実施例】
【００６９】
（被験物質）：
式（Ｉ）の化合物を代表するものとして、以下の化合物Ａを使用した。
化合物Ａ：
４−（３−｛４−［１８−（４−［３−（３−カルボキシプロピル）ウレイドアセトキシ］−２，６，６−トリメチル−３−オキソシクロヘキサ−１−エニル）−３，７，１２，１６−テトラメチルオクタデカ−１，３，５，７，９，１１，１３，１５，１７−ノナエニル］−３，５，５−トリメチル−２−オキソシクロヘキサ−３−エニルオキシカルボニルメチル｝ウレイド）酪酸  二リジン塩（国際公開第２０１５／１７８４０４号明細書の実施例（２３）の化合物、幾何異性体の比率はトランス体：シス体＝５３．４％：４１．３％）
（動物モデル）：
本実施例では、ラット心筋梗塞（虚血−再灌流）モデルにおける化合物Ａ投与の有効性について説明する。本モデルは、虚血領域が再灌流障害により壊死して線維化が進行し、拡張型心筋症へと移行後、心不全となり死に至るモデルである。ヒトの心筋梗塞後心不全病態に類似したモデルであり、薬効評価や再生医療評価に適した病態モデルである。
（１）動物種
ラットＣｒｌ：ＣＤ（ＳＤ）雄、８週齢（入荷時）
（２）試験スケジュール
試験スケジュールを図１に示す。
【００７０】
（３）群分け
【００７１】
【表１】
2019142815.tif 000013
【００７２】
（４）心筋梗塞（虚血-再灌流）モデル作製
動物は、実験動物用吸入麻酔器（ソフトランダー：新鋭工業株式会社）を用いて、２％イソフルラン（麻酔補助剤；笑気：酸素＝７：３）にて吸入麻酔し、刈毛した。すばやく気管挿管を行い、そのまま０．５〜２％イソフルラン（麻酔補助剤；笑気：酸素＝７：３）吸入麻酔ガスを人工呼吸器に接続して、麻酔を維持した。人工呼吸管理のもと、仰臥位に固定し、左第３肋骨から第５肋骨までの間で２〜３本、肋軟骨の位置で縦方向に切断して開胸した。開創器により術野を拡大後、心嚢膜を剥離して心臓を露出させた。左心房を持ち上げ、血管用糸付弱弯丸針（６−０：ネスコスーチャー）を用いて左心室の深さ約２ｍｍ、長さ４〜５ｍｍに糸を通し、糸の両端を合わせてポリエチレンチューブ（ＰＥ５０、Ｂｅｃｔｏｎ  Ｄｉｃｋｉｎｓｏｎ）で作製したｓｎａｒｅを通し、動脈クレンメを用いて糸を絞り（ｓｎａｒｅ法）冠動脈を３０分間虚血した。３０分後、再灌流させ、状態が安定したら胸腔ドレナージを行い、筋層および皮膚を縫合した。
【００７３】
（５）投与経路および方法
媒体および被験物質：
シリンジおよび注射針を用いて媒体（生理食塩液）および被験物質を尾静脈に投与した。 なお、被験物質は媒体に必要量を溶解し、その後試験動物に投与した。
陽性対照物質：
カンデサルタン  シレキセチルを使用した。それぞれの化合物を０．５ｗ／ｖ％カルボキシメチルセルロース（ＣＭＣ）−Ｎａ溶液に粉砕・懸濁し、シリンジおよびゾンデを用いて試験動物に経口投与した。
【００７４】
（６）投与回数および投与期間
心筋梗塞モデル作製後２４時間を投与開始日とし、１日１回、８４日間とした。
投与量：
被験物質：３ｍｇ／ｋｇ
陽性対照物質：３ｍｇ／ｋｇ（単独投与群：２群）、１ｍｇ／ｋｇ（併用投与群：３群）
【００７５】
（７）心機能測定（心エコー）
投与前、投与２、４、８、１２週後（解剖日の前日）の投与実施前に以下の手順で心機能測定を実施した。超音波画像診断装置（Ｘａｒｉｏ  ＳＳＡ−６６０Ａ、東芝メディカルシステムズ株式会社）を用いて心エコーを測定した。動物の胸部をバリカンにて毛刈した。胸部にプローブを当てＭ−ｍｏｄｅで左室駆出率［ＬＶＥＦ＝（ＬＶＩＤｄ３−ＬＶＩＤｓ３）／ＬＶＩＤｄ３］を測定した。
【００７６】
（８）心機能測定結果
エコーによる心機能測定結果（ＬＶＥＦ）を図２および表２に示した。表２中の数値は平均±Ｓ．Ｅ．を示す。
【００７７】
【表２】
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【００７８】
（９）まとめ
ラット心筋梗塞（虚血−再灌流）モデルを作製し、化合物Ａを投与して有効性について検討した。その結果、心機能検査において、カンデサルタン単独群、併用高用量群および化合物Ａ単独投与群では、左室駆出率（ＬＶＥＦ）の低下を抑制した。このことから、化合物Ａには、心筋梗塞から心不全への病態悪化に対し、優れた抑制効果があることが明らかとなった。
【図１】
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【図２】
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