(57)【要約】【課題】水への溶解性に優れるノビレチン組成物及びそれを簡便に製造する方法の提供。【解決手段】ノビレチンを含有する固体分散体の製造方法であって、ノビレチン又はノビレチン含有物と、糖転移ヘスペリジン及びメチルヘスペリジンから選ばれる水溶性ヘスペリジン誘導体を、エタノール濃度が２０〜９０体積％のエタノール水溶液に溶解させる工程、及び前記溶解液を乾燥する工程を含む、製造方法。【選択図】なし【特許請求の範囲】
【請求項１】
ノビレチンを含有する固体分散体の製造方法であって、ノビレチン又はノビレチン含有物と、糖転移ヘスペリジン及びメチルヘスペリジンから選ばれる水溶性ヘスペリジン誘導体を、エタノール濃度が２０〜９０体積％のエタノール水溶液に溶解させる工程、及び前記溶解液を乾燥する工程を含む、製造方法。
【請求項２】
ノビレチン又はノビレチン含有物と水溶性ヘスペリジン誘導体を、０〜９０℃でエタノール水溶液に溶解させる請求項１記載の固体分散体の製造方法。
【請求項３】
エタノール水溶液のエタノール濃度が３０〜８８体積％である請求項１又は２記載の固体分散体の製造方法。
【請求項４】
乾燥方法が噴霧乾燥である請求項１〜３のいずれか１項記載の固体分散体の製造方法。
【請求項５】
ノビレチン又はノビレチン含有物と水溶性ヘスペリジン誘導体を混合する際の水溶性ヘスペリジン誘導体に対するノビレチンの質量比［ノビレチン／水溶性ヘスペリジン誘導体］が０．０１〜０．６７である請求項１〜４のいずれか１項記載の固体分散体の製造方法。
【請求項６】
請求項１〜５のいずれか１項記載の製造方法により得られ、Ｘ線回折スペクトルから算出されるノビレチンの結晶化度が１０％以下であるノビレチン含有固体分散体。
【請求項７】
請求項６記載のノビレチン含有固体分散体を含有する医薬品、医薬部外品又は化粧品。
【請求項８】
請求項６記載のノビレチン含有固体分散体を含有する飲食品。
【請求項９】
使用時に水又は加熱水に溶解させ喫食する固形状のインスタント飲食品である請求項８記載の飲食品。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、ノビレチンを含有する固体分散体の製造方法に関する。
【背景技術】
【０００２】
ノビレチンは、温州みかんやシークワーサー等の柑橘類に含まれるポリメトキシフラボノイドの一種である。ノビレチンは、ＰＰＡＲ活性化作用及びアディポネクチン分泌促進作用（特許文献１）、神経突起伸長促進作用（特許文献２）、記憶障害抑制作用（非特許文献１）等の種々の生理活性を有することが知られていることから、健康食品の重要な成分として認識されている。
【０００３】
しかしながら、ノビレチンは難水溶性であり、その原体そのものの生理機能を飲食品・医薬品等で有効活用することは難しい。
そこで、ノビレチンを水に可溶化させる技術が検討され、例えばシクロデキストリン包接物とする方法が報告されている（特許文献３）。しかしながら、この製造方法では、大幅な可溶化量の向上を得ることが難しいことが知られている。
【０００４】
一方、難水溶性ポリフェノール類と難水溶性ポリフェノール類のメチル化物とを、特定濃度のエタノール水溶液に溶解した後、乾燥して得られたポリフェノール組成物において、難水溶性ポリフェノール類の水への溶解性が高まることが報告されている（特許文献４）。特に、本製造法を用いることで、非晶質固体分散体を得ることが出来れば、難水溶性ポリフェノールの過飽和溶解により、シクロデキストリン包摂などの方法を超える、顕著な溶解度増加が期待できる。しかしながら、当該文献にはノビレチンの可溶化については全く記載されておらず、その効果は明らかではない。
【先行技術文献】
【特許文献】
【０００５】
【特許文献１】国際公開第２００６／０４９２３４号
【特許文献２】特開２００２−６０３４０号公報
【特許文献３】特開平１１−１６９１４８号公報
【特許文献４】特開２０１４−１３６４号公報
【非特許文献】
【０００６】
【非特許文献１】日本薬理学雑誌, 2015, 145, 234-236
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００７】
本発明は、水への溶解性に優れるノビレチン組成物を簡便に製造する方法を提供することに関する。
【課題を解決するための手段】
【０００８】
本発明者は、上記課題に鑑み鋭意検討したところ、ノビレチン又はノビレチン含有物をエタノール水溶液に溶解し、得られた溶解液を乾燥することにより、ノビレチンが非晶質の状態で分散した固体分散体が得られること、斯かる固体分散体は、ノビレチンの水への溶解性が極めて高く、且つ水中での高い溶解性が安定的に維持され、また高い生体膜透過性を有することを見出した。
【０００９】
すなわち、本発明は、以下の（１）〜（４）に係るものである。
（１）ノビレチンを含有する固体分散体の製造方法であって、ノビレチン又はノビレチン含有物と、糖転移ヘスペリジン及びメチルヘスペリジンから選ばれる水溶性ヘスペリジン誘導体を、エタノール濃度が２０〜９０体積％のエタノール水溶液に溶解させる工程、及び前記溶解液を乾燥する工程を含む、製造方法。
（２）（１）の製造方法により得られ、Ｘ線回折スペクトルから算出されるノビレチンの結晶化度が１０％以下であるノビレチン含有固体分散体。
（３）（２）のノビレチン含有固体分散体を含有する医薬品、医薬部外品又は化粧品。
（４）（２）のノビレチン含有固体分散体を含有する飲食品。
【発明の効果】
【００１０】
本発明によれば、ノビレチンの水への溶解性が飛躍的に向上したノビレチン含有固体分散体を提供することができる。本発明の固体分散体を用いることにより、ノビレチンの生体膜透過性を向上でき、ノビレチンの生理機能を増強することなどが期待される。また、本発明の固体分散体は、製造工程中に有機溶媒を用いないため飲食品への使用に好適である。
【図面の簡単な説明】
【００１１】
【図１】実施例１のノビレチン−メチルヘスペリジン固体分散体におけるノビレチンの溶解濃度を示す図。
【図２】実施例１のノビレチン（上図）及びノビレチン−メチルヘスペリジン固体分散体（下図）の粉末Ｘ線回折の結果を示す図。
【図３】実施例２のノビレチン（上図）及びノビレチン−メチルヘスペリジン固体分散体（下図）の粉末Ｘ線回折の結果を示す図。
【図４】実施例３のノビレチン（上図）及びノビレチン−メチルヘスペリジン固体分散体（下図）の粉末Ｘ線回折の結果を示す図。
【図５】実施例４のノビレチン（上図）及びノビレチン−メチルヘスペリジン固体分散体（下図）の粉末Ｘ線回折の結果を示す図。
【図６】実施例５のノビレチン（上図）及びノビレチン−メチルヘスペリジン固体分散体（下図）の粉末Ｘ線回折の結果を示す図。
【図７】実施例６のノビレチン（上図）及びノビレチン−メチルヘスペリジン固体分散体（下図）の粉末Ｘ線回折の結果を示す図。
【図８】実施例７のノビレチン（上図）及びノビレチン−メチルヘスペリジン固体分散体（下図）の粉末Ｘ線回折の結果を示す図。
【図９】実施例８のノビレチン（上図）及びノビレチン−メチルヘスペリジン固体分散体（下図）の粉末Ｘ線回折の結果を示す図。
【図１０】実施例９のノビレチン（上図）及びノビレチン−メチルヘスペリジン固体分散体（下図）の粉末Ｘ線回折の結果を示す図。
【図１１】実施例１０のノビレチン（上図）及びノビレチン−メチルヘスペリジン固体分散体（下図）の粉末Ｘ線回折の結果を示す図。
【図１２】実施例１１のノビレチン（上図）及びノビレチン−メチルヘスペリジン固体分散体（下図）の粉末Ｘ線回折の結果を示す図。
【図１３】実施例１２のノビレチン（上図）及びノビレチン−メチルヘスペリジン固体分散体（下図）の粉末Ｘ線回折の結果を示す図。
【図１４】実施例１３のノビレチン（上図）及びノビレチン−メチルヘスペリジン固体分散体（下図）の粉末Ｘ線回折の結果を示す図。
【図１５】実施例１４のＰＭＦ９０（上図）及びＰＭＦ９０−メチルヘスペリジン固体分散体（下図）の粉末Ｘ線回折の結果を示す図。
【図１６】実施例１５のＰＭＦ９０（上図）及びＰＭＦ９０−メチルヘスペリジン固体分散体（下図）の粉末Ｘ線回折の結果を示す図。
【図１７】実施例１６のＰＭＦ９０（上図）及びＰＭＦ９０−メチルヘスペリジン固体分散体（下図）の粉末Ｘ線回折の結果を示す図。
【図１８】実施例１７のノビレチン（上図）及びノビレチン−αＧヘスペリジン ＰＡ−Ｔ固体分散体（下図）の粉末Ｘ線回折の結果を示す図。
【図１９】実施例１８のノビレチン（上図）及びノビレチン−αＧヘスペリジン ＰＡ−Ｔ固体分散体（下図）の粉末Ｘ線回折の結果を示す図。
【図２０】実施例１９のノビレチン（上図）及びノビレチン−αＧヘスペリジン ＰＡ−Ｔ固体分散体（下図）の粉末Ｘ線回折の結果を示す図。
【図２１】実施例２０のノビレチン（上図）及びノビレチン−αＧヘスペリジン ＰＡ−Ｔ固体分散体（下図）の粉末Ｘ線回折の結果を示す図。
【図２２】実施例２１のＰＭＦ９０（上図）及びＰＭＦ９０−αＧヘスペリジン ＰＡ−Ｔ固体分散体（下図）の粉末Ｘ線回折の結果を示す図。
【図２３】実施例２２のＰＭＦ９０（上図）及びＰＭＦ９０−αＧヘスペリジン ＰＡ−Ｔ固体分散体（下図）の粉末Ｘ線回折の結果を示す図。
【図２４】比較例１のエラグ酸（上図）及びエラグ酸−メチルヘスペリジン固体分散体（下図）の粉末Ｘ線回折の結果を示す図。
【図２５】比較例２のエラグ酸（上図）及びエラグ酸−メチルヘスペリジン固体分散体（下図）の粉末Ｘ線回折の結果を示す図。
【図２６】比較例３のエラグ酸（上図）及びエラグ酸−メチルヘスペリジン固体分散体（下図）の粉末Ｘ線回折の結果を示す図。
【図２７】比較例４のエラグ酸（上図）及びエラグ酸−メチルヘスペリジン固体分散体（下図）の粉末Ｘ線回折の結果を示す図。
【発明を実施するための形態】
【００１２】
本発明において、「ノビレチン」とは、３’，４’，５，６，７，８−ヘキサメトキシフラボンであり、以下の構造を有する。
【００１３】
【化１】
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【００１４】
ノビレチンとしては、例えば、化学合成したもの、天然物から分離したもの、化学合成や天然物から分離した後に精製したもの、市販品等、何れのものでも良い。ノビレチンの純度は特に限定されず、例えば、固体分散体とした際に所望の薬理効果が発揮できる程度の純度であればよい。例えば、柑橘類の果実や搾汁残渣を、メタノールやエタノール等のノビレチン可溶性の有機溶媒で抽出処理し、適宜分離・精製して得られる、ノビレチンを高含有率又は高含有量で含む「ノビレチン含有物」を用いることもできる。ノビレチン含有物としては、例えばノビレチンを高含有量で含むシークワーサーエキス（例えば「ＰＭＦ９０」＜株式会社沖縄リサーチセンター製、ノビレチン含有率約６０質量％＞等）が挙げられる。
【００１５】
本発明において用いられる「水溶性ヘスペリジン誘導体」としては、ヘスペリジンを酵素又は化学処理することにより水溶性を高めたヘスペリジン類が挙げられ、例えばグルコシルヘスペリジン等のヘスペリジンの糖部分（ルチノース部分）に別の糖を結合させた糖転移ヘスペリジンやメチルヘスペリジンが挙げられる。このうち水溶性の点から、メチルヘスペリジン、グルコシルへスペリジンが好ましい。
「メチルヘスペリジン」は、ヘスペリジン（下記式（２）においてＲが水素原子である化合物）をジメチル硫酸等のメチル化剤でメチル化することによって製造される数種類のメチル化生成物の混合物であり、主に、カルコン型化合物（１）及びフラバノン型化合物（２）が含まれることが知られており、その構成成分として、例えば以下に示す構造のものが挙げられる（例えば、日本食品化学学会誌,12(2),2005,71-75参照）。
【００１６】
【化２】
2019167336.tif 000003
【００１７】
（式中、Ｒは、水素原子もしくはメチル基を表す）
【００１８】
「メチルヘスペリジン」は、わが国において、医薬品添加物名、食品添加物名、化粧品原料名として採用されており、医薬品添加物及び食品添加物としてのメチルヘスペリジンは、主に、化合物（３）及び（４）の混合物として取り扱われている。
【００１９】
【化３】
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【００２０】
（式中、Ｇｌは、グルコース残基、Ｒｈは、ラムノース残基を表す。また、Ｇｌ−２は、グルコース残基の２位（(３−１)の場合、３位も含む）、Ｒｈ−２は、ラムノース残基の２位を表す。）
また、化粧品原料としてのヘスペリジンメチルカルコンは、（５）で示される化合物として取り扱われている。なお、カルコン型化合物を多く含む組成の場合、ヘスペリジンメチルカルコンとも呼ばれる。
【００２１】
【化４】
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【００２２】
（式中、Ｒは水素原子又はメチル基を表す。）
【００２３】
本発明において用いられるメチルヘスペリジンは、上記で示したカルコン型化合物（１）とフラバノン型化合物（２）の両方を含むものでもよいし、また、それぞれの片方のみを含むものでもよい。
本発明において、より好適なメチルヘスペリジンとしては、化合物（３）と化合物（４）の混合物が挙げられる。
メチルヘスペリジンは、公知の方法、例えば、ヘスペリジンを水酸化ナトリウム水溶液に溶かし、そのアルカリ溶液に対応量のジメチル硫酸を作用させ、反応液を硫酸で中和し、ｎ−ブチルアルコールで抽出し、溶媒を留去したのち、イソプロピルアルコールで再結晶することにより製造できるが（崎浴、日本化學雑誌、７９、７３３−６（１９５８））、その製造法はこれに限るものではない。
メチルヘスペリジンとして市販のメチルヘスペリジン含有製剤を使用してもよく、例えば、「メチルヘスペリジン」（東京化成工業（株））、「ヘスペリジンメチルカルコン」（Ｓｉｇｍａ社）、「メチルヘスペリジン」（浜理薬品工業（株））、「メチルヘスペリジン」（昭和電工(株)）、「メチルヘスペリジン」（アルプス薬品工業(株)）が挙げられる。
【００２４】
また、グルコシルヘスペリジンとしては、例えばモノグルコシルヘスペリジン（「αＧヘスペリジン  ＰＡ−Ｔ」（東洋製糖（株））、「林原ヘスペリジン（登録商標）Ｓ」（林原株式会社）等が挙げられる。
【００２５】
本発明のノビレチンを含有する固体分散体は、ノビレチン又はノビレチン含有物と水溶性ヘスペリジン誘導体をエタノール濃度が、２５℃において２０〜９０体積％のエタノール水溶液に溶解させる工程、及び前記溶解液を乾燥する工程を含む。
ノビレチン又はノビレチン含有物と水溶性ヘスペリジン誘導体の溶解に用いるエタノール水溶液のエタノール濃度は、ノビレチン又はノビレチン含有物の溶解性の点から２５体積％以上であることが好ましく、また、水溶性ヘスペリジン誘導体の溶解性の点から８８体積％以下であることが好ましい。具体的には、エタノール濃度は、３０体積％以上がより好ましく、更に３５体積％以上、更に４０体積％以上、更に５０体積％以上、更に６０体積％以上、更に７０体積％以上が好ましく、且つ８５体積％以下がより好ましく、８２体積％以下が更に好ましい。また、エタノール濃度は３０〜８５体積％がより好ましく、更に３５〜８５体積％、更に４０〜８２体積％以下、更に４５〜８２体積％が好ましい。
【００２６】
ノビレチン又はノビレチン含有物と水溶性ヘスペリジン誘導体のエタノール水溶液への溶解方法は、特に限定されないが、例えばノビレチン又はノビレチン含有物と水溶性ヘスペリジン誘導体を任意の割合で混合し、当該混合物をエタノール水溶液と混合することにより行うことができる。
【００２７】
ノビレチン又はノビレチン含有物と水溶性ヘスペリジン誘導体を混合する際、ノビレチンの含有量は、固体分散体中のノビレチンの含有量を高める点から、混合物中に１質量％以上、更に３質量％以上、更に４質量％以上、更に５質量％以上、更に７．５質量％以上、更に１０質量％以上、更に１５質量％以上が好ましく、また、加工しやすい点から、９０質量％以下、更に７０質量％以下、更に６０質量％以下、更に５０質量％以下、更に４５質量％以下、更に４０質量％以下、更に３５質量％以下が好ましい。また、混合物中のノビレチンの含有量は、１〜９０質量％、更に３〜７０質量％、更に４〜６０質量％、更に５〜５０質量％、更に７．５〜４５質量％、更に１０〜４０質量％、更に１５〜３５質量％が好ましく、２５質量％が殊更好ましい。
【００２８】
水溶性ヘスペリジン誘導体の含有量は、その種類によって異なるが、ノビレチンの水への溶解性の点から、混合物中に１０質量％以上、更に２０質量％以上、更に２５質量％以上、更に３０質量％以上、更に４５質量％以上、更に６０質量％以上、更に６５質量％以上が好ましく、また、固体分散体の調製がしやすい点から、９９質量％以下、更に９７質量％以下、更に９６質量％以下、更に９２．５質量％以下、更に９０質量％以下、更に８５質量％以下が好ましい。また、前記混合物中のメチルヘスペリジンの含有量は、１０〜９９質量％、更に２０〜９７質量％、更に２５〜９６質量％、更に３０〜９２．５質量％、更に４５〜９０質量％、更に６０〜８５質量％、更に６５〜８５質量％が好ましく、７５質量％が殊更好ましい。
【００２９】
本発明において、ノビレチン又はノビレチン含有物と水溶性ヘスペリジン誘導体を混合する際、水溶性ヘスペリジン誘導体に対するノビレチンの質量比［ノビレチン／水溶性ヘスペリジン誘導体］は、得られる固体分散体中のノビレチンの含有量を高める点、また、固体分散体を調製しやすさの点から、０．０１以上が好ましく、０．０３以上がより好ましく、０．０４以上が更に好ましく、０．０７以上が更に好ましく、０．１以上が更に好ましい。また、得られるノビレチンの水への溶解性を高める点から、９以下が好ましく、更に４以下がより好ましく、３以下が更に好ましく、１以下が更に好ましく、０．６７以下が更に好ましい。また、０．０１〜９が好ましく、０．０３〜４がより好ましく、０．０４〜３がより好ましく、更には０．０７〜１が、更には０．１〜０．６７が好ましく、０．３３が殊更好ましい。
【００３０】
ノビレチン又はノビレチン含有物と水溶性ヘスペリジン誘導体とを、上記のエタノール水溶液に溶解する際の温度は０℃〜９０℃で十分であり、かかる温度条件で溶解すれば常圧で処理が可能であり特殊な装置を必要としない点で好ましい。溶解温度の下限は、ノビレチン又はノビレチン含有物の溶解性を高める観点より５℃以上が好ましく、１０℃以上が更に好ましい。また、溶解温度の上限は、エネルギー効率、及びエタノール水溶液の沸点の点から、８５℃以下が好ましく、８０℃以下がより好ましく、７５℃以下が更に好ましく、７０℃以下が更に好ましく、６０℃以下が更に好ましい。具体的には、溶解温度は、５〜８５℃が好ましく、１０〜８０℃がより好ましく、１０〜７５℃が更に好ましく、１０〜７０℃が更に好ましく、１０〜６０℃が更に好ましい。
【００３１】
溶解処理後、溶解液を必要により、好ましくは５０℃以下、更に好ましくは３０℃以下に冷却する工程を行ってもよい。更に、必要により溶解液から固体部を除去する工程を行ってもよい。固体部を除去する方法としては、特に制限されず、例えば遠心分離やデカンテーション、ろ過により行うことができる。
【００３２】
次いで、得られた溶解液は乾燥工程に付される。
ここで、乾燥とは、溶解液から溶媒を除去することをいう。乾燥手段としては、噴霧乾燥、蒸発乾固、凍結乾燥等が挙げられる。なかでも、噴霧乾燥が、ノビレチン又はノビレチン含有物を、結晶性を持たない固体物の状態とし、ノビレチン又はノビレチン含有物の水への溶解性を一層高め、ノビレチン又はノビレチン含有物の初期溶解度を向上させる点から好ましい。
【００３３】
凍結乾燥又は噴霧乾燥の方法は、特に制限されず、公知の方法を適用できる。
例えば、噴霧乾燥の場合、好ましくはスプレードライヤーが用いられる。
噴霧乾燥の条件は適宜設定することができるが、例えば、入口ガス温度は９５〜１４５℃、好ましくは１００〜１４０℃、より好ましくは１０５〜１３５℃、出口ガス温度は５０〜９０℃、好ましくは５５〜８５℃、より好ましくは６０〜８０℃である。
また、噴霧溶液供給速度は、１５０〜６００ｍＬ／ｈ、噴霧窒素流量は、２００〜６５０Ｌ／ｈ、アスピレーター流量は、２５〜３５ｍ３／ｈの範囲に設定するのが好ましい。
【００３４】
また、凍結乾燥の場合、処理液を液体窒素やクールバス、冷凍庫等で凍結し、粉砕し、篩別したのち真空で水分を昇華させて、乾燥することができる。処理液の凍結温度は−７０〜０℃が好ましい。乾燥中の絶対圧力は０．１〜１０００Ｐａが好ましく、０．５〜１００Ｐａがより好ましく、１〜１０Ｐａが更に好ましい。
噴霧乾燥又は凍結乾燥後、必要に応じて、分級、造粒、粉砕等を行ってもよい。
【００３５】
斯かる処理によって、ノビレチンが非晶質化し、ノビレチンを非晶質の状態で含む固体分散体となる。
非晶質とは、分子配列に一定の規則性を欠いている状態である。非晶質（アモルファス）であることは、粉末Ｘ線回折によって確認できる。
本発明において固体分散体中のノビレチンは、結晶化度が５０％以下であるものが好ましく、更に結晶化度が４０％以下であるものが好ましく、更に結晶化度が２０％以下であるものが好ましく、更に結晶化度が１０％以下であるものが好ましく、更に結晶化度が５％以下であるものが好ましく、更に結晶化度が０％の完全な非晶質であることが殊更好ましい。
本発明の固体分散体は、粉末Ｘ線回折測定において、ノビレチンの結晶性回折ピークが検出されないのが好ましい。
【００３６】
ノビレチンの結晶化度は、以下の方法で算出できる。まず、Ｘ線回折法による回折強度値から、非干渉性散乱や格子の乱れ等の影響を考慮しないで、プロファイル・フィッティングの手法を用いて結晶性回折線と非晶ハローにピーク分離する。次に、そこで得られた各ピークの積分強度よりノビレチンの結晶化度を下記計算式〔１〕により算出する。
ノビレチンの結晶化度（％）＝［ΣＩα／（ΣＩα＋ΣＩａｍ）］×１００  〔１〕
［ΣＩαは、結晶性回折線の各ピークの積分強度の和、ΣＩａｍは、非晶部の回折線の各ピークの積分強度の和］
【００３７】
斯くして得られる本発明のノビレチンを含有する固体分散体（「ノビレチン含有固体分散体」）は水への溶解性（初期溶解性、経時的溶解性）に極めて優れる。
例えば後記実施例に示すように、ノビレチンの経時的溶解性（例えば、ノビレチン含有固体分散体を水に添加して６時間撹拌した場合のノビレチン溶解濃度（攪拌開始６時間後までの曲線下面積（横軸：攪拌時間（単位＝分）、縦軸：ノビレチン溶解度（単位＝ｐｐｍ））は、約１．１３×１０５ｐｐｍ・ｍｉｎと極めて高く、高い溶解度が長時間維持される（図１及び表１−１）。斯かる高い溶解性は、ノビレチンと同様に難溶性のポリフェノールとして知られている化合物（例えばエラグ酸）をメチルヘスペリジンやαＧヘスペリジン ＰＡ−Ｔと混合して製造される固体分散体では得られない予想外の効果である。
また、本発明のノビレチン含有固体分散体は、ノビレチンのヒト小腸上皮細胞由来の細胞膜に対する透過性が極めて優れており、当該効果もまた上記他の難溶性のポリフェノールの固体分散体からは予測できないものである。本製造法により、非晶質の固体分散体が得られたことにより、ノビレチンの過飽和溶解が実現したことにより、本効果が実現したものと推定される。
【００３８】
また、固体分散体中の水分含量は、微細化し易く、ハンドリング性が良好な点から、２０質量％以下、更に１０質量％以下、更に７質量％以下、更に５質量％以下が好ましい。
【００３９】
本発明の製造方法で得られるノビレチンを含有する固体分散体は、様々な飲食品や医薬品、医薬部外品、化粧品等に使用することができる。とりわけ、使用時に水系溶媒に溶解される製品に利用するのが有用である。
例えば、飲食品としては、インスタント飲料、パン類、麺類、クッキー等の菓子類、スナック類、ゼリー類、乳製品、冷凍食品、粉末コーヒー等のインスタント食品、でんぷん加工製品、加工肉製品、その他加工食品、調味料、栄養補助食品等の液状、固形状又は半固形状の飲食品が挙げられ、好ましくは使用時に水又は加熱水に溶解させ喫食する固形状のインスタント飲食品が挙げられる。また、医薬品又は医薬部外品としては、錠剤（チュアブル錠等）、カプセル剤、粉末剤等の剤型が挙げられる。また、化粧品としては、石鹸などの洗浄料、美白用化粧料等が好適に挙げられる。
上記飲食品、医薬品、医薬部外品又は化粧品に配合されるノビレチンを含有する固体分散体の量は、機能発現及び製品サイズの観点から、０．０１質量％以上、好ましくは０．０５質量％以上、さらに好ましくは０．１質量％以上、さらに好ましくは０．５質量％以上、さらに好ましくは１．０質量％以上が好ましい。一方、呈味の観点から、９０質量％以下、好ましくは８０質量％以下、さらに好ましくは７０質量％以下、さらに好ましくは６０質量％以下、さらに好ましくは５０質量％以下が好ましい。また、０．０１〜９０質量％、好ましくは０．０５〜８０質量％、さらに好ましくは０．１〜７０質量％、さらに好ましくは０．５〜６０質量％、さらに好ましくは１．０〜５０質量％である。
なお、当該製剤中のノビレチンを含有する固体分散体の存在状態は、溶解状態であっても、分散状態であってもよく、その存在状態は問わない。
本発明の態様及び好ましい実施態様を以下に示す。
【００４０】
＜１＞ノビレチンを含有する固体分散体の製造方法であって、ノビレチン又はノビレチン含有物と、糖転移ヘスペリジン及びメチルヘスペリジンから選ばれる水溶性ヘスペリジン誘導体を、エタノール濃度が２０〜９０体積％のエタノール水溶液に溶解させる工程、及び前記溶解液を乾燥する工程を含む、製造方法。
＜２＞ノビレチン又はノビレチン含有物と水溶性ヘスペリジン誘導体を、０〜９０℃でエタノール水溶液に溶解させる＜１＞の固体分散体の製造方法。
＜３＞エタノール水溶液のエタノール濃度が３０〜８８体積％である＜１＞又は＜２＞の固体分散体の製造方法。
＜４＞乾燥方法が噴霧乾燥である＜１＞〜＜３＞のいずれかの固体分散体の製造方法。
＜５＞ノビレチン又はノビレチン含有物と水溶性ヘスペリジン誘導体を混合する際の水溶性ヘスペリジン誘導体に対するノビレチンの質量比［ノビレチン／水溶性ヘスペリジン誘導体］が０．０１〜０．６７である＜１＞〜＜４＞のいずれかの固体分散体の製造方法。
＜６＞＜１＞〜＜５＞のいずれかの製造方法により得られ、Ｘ線回折スペクトルから算出されるノビレチンの結晶化度が１０％以下であるノビレチン含有固体分散体。
＜７＞＜６＞のノビレチン含有固体分散体を含有する医薬品、医薬部外品又は化粧品。
＜８＞＜６＞のノビレチン含有固体分散体を含有する飲食品。
＜９＞使用時に水又は加熱水に溶解させ喫食する固形状のインスタント飲食品である＜８＞の飲食品。
【００４１】
＜１０＞＜２＞において、溶解温度は、好ましくは５℃以上、より好ましくは１０℃以上であり、且つ好ましくは８５℃以下、より好ましくは８０℃以下、より好ましくは７５℃以下、より好ましくは７０℃以下、より好ましくは６０℃以下である。また、より好ましくは５〜８５℃、より好ましくは１０〜８０℃、より好ましくは１０〜７５℃、より好ましくは１０〜７０℃、より好ましくは１０〜６０℃である。
＜１１＞＜３＞において、エタノール水溶液のエタノール濃度は、より好ましくは３０体積％以上、より好ましくは３５体積％以上、より好ましくは４０体積％以上、より好ましくは５０体積％以上、より好ましくは６０体積％以上、より好ましくは７０体積％以上であり、且つより好ましくは８５体積％以下、より好ましくは８２体積％以下である。また、より好ましくは３０〜８５体積％、より好ましくは３５〜８５体積％、より好ましくは４０〜８２体積％、より好ましくは４５〜８２体積％である。
＜１２＞＜１＞において、ノビレチン又はノビレチン含有物と水溶性ヘスペリジン誘導体混合物中の、ノビレチンの含有量は、混合物中に好ましくは１質量％以上、より好ましくは３質量％以上、より好ましくは４質量％以上、より好ましくは５質量％以上、より好ましくは７．５質量％以上、より好ましくは１０質量％以上、より好ましくは１５質量％以上であり、且つ好ましくは９０質量％以下、より好ましくは７０質量％以下、より好ましくは６０質量％以下、より好ましくは５０質量％以下、より好ましくは４５質量％以下、より好ましくは４０質量％以下、より好ましくは３５質量％以下である。また、好ましくは１〜９０質量％、より好ましくは３〜７０質量％、より好ましくは４〜６０質量％、より好ましくは５〜５０質量％、より好ましくは７．５〜４５質量％、より好ましくは１０〜４０質量％、より好ましくは１５〜３５質量％、より好ましくは２５質量％である。
＜１３＞＜１＞において、ノビレチン又はノビレチン含有物と水溶性ヘスペリジン誘導体混合物中の、水溶性ヘスペリジン誘導体の含有量は、混合物中に好ましくは１０質量％以上、より好ましくは２０質量％以上、より好ましくは２５質量％以上、より好ましくは３０質量％以上、より好ましくは４５質量％以上、より好ましくは６０質量％以上、より好ましくは６５質量％以上であり、且つ好ましくは９９質量％以下、より好ましくは９７質量％以下、より好ましくは９６質量％以下、より好ましくは９２．５質量％以下、より好ましくは９０質量％以下、より好ましくは８５質量％以下である。また、好ましくは１０〜９９質量％、より好ましくは２０〜９７質量％、より好ましくは２５〜９６質量％、より好ましくは３０〜９２．５質量％、より好ましくは４５〜９０質量％、より好ましくは６０〜８５質量％、より好ましくは６５〜８５質量％、より好ましくは７５質量％である。
＜１４＞＜１＞において、ノビレチン又はノビレチン含有物と水溶性ヘスペリジン誘導体を混合する際のノビレチンと水溶性ヘスペリジン誘導体質量比［ノビレチン／水溶性ヘスペリジン誘導体］は、好ましくは０．０３以上、より好ましくは０．０４以上、より好ましくは０．０７以上、より好ましくは０．１以上であり、且つ好ましくは９以下、より好ましくは４以下、より好ましくは３以下、より好ましくは１以下、より好ましくは０．６７以下である。また、好ましくは０．０１〜９、より好ましくは０．０３〜４、より好ましくは０．０４〜３、より好ましくは０．０７〜１、より好ましくは０．１〜０．６７、より好ましくは０．３３である。
＜１５＞＜１＞において、ノビレチンの結晶化度は、好ましくは５０％以下、より好ましくは４０％以下、より好ましくは２０％以下、より好ましくは１０％以下、より好ましくは５％以下、より好ましくは０％である。
【実施例】
【００４２】
〔難水溶性物質の定量〕
難水溶性ポリフェノール類の定量には、高速液体クロマトグラフィー（ＨＰＬＣ）を用いた。検出には、紫外可視分光（ＵＶ−ｖｉｓ）検出器、もしくは質量分析（ＭＳ／ＭＳ）装置を使用した。
【００４３】
〔ＨＰＬＣ−ＵＶ−ｖｉｓによる難水溶性物質の定量〕
アジレント・テクノロジー株式会社製高速液体クロマトグラフを用い、化学物質評価研究機構製カラムＬ−Ｃｏｌｕｍｎ ＯＤＳ―２（４．６ｍｍφ×５０ｍｍ、２μｍ）を装着し、カラム温度４０℃でグラジエント法により行った。
試料注入量は１０μＬ、移動相Ａ液は０．１重量％トリフルオロ酢酸水溶液、Ｂ液はアセトニトリルとし、１．０ｍＬ／分で送液した。グラジエント条件は以下のとおりである。
時間（分）          Ａ液（％）    Ｂ液（％）
０                  ９９            １
１                  ９９            １
４                    ５          ９５
５                    ５          ９５
５．０１            ９９            １
６                  ９９            １
検出は、ノビレチンは波長３２０ｎｍ、エラグ酸は波長２５４ｎｍの吸光度により定量した。
【００４４】
〔ＨＰＬＣ−ＵＶ−ｖｉｓによる難水溶性物質の定量〕
アジレント・テクノロジー株式会社製高速液体クロマトグラフを用い、化学物質評価研究機構製カラムＬ−Ｃｏｌｕｍｎ ＯＤＳ―２  （４．６ｍｍφ×５０ｍｍ、２μｍ）を装着し、カラム温度４０℃でグラジエント法により行った。
ノビレチンの測定では、試料注入量は１０μＬ、移動相Ａ液は０．１重量％ぎ酸水溶液、Ｂ液はアセトニトリルとし、０．６ｍＬ／分で送液した。グラジエント条件は以下の通りである。
時間（分）          Ａ液（％）    Ｂ液（％）
０                  ９０          １０
０．５              ９０          １０
４                  １０          ９０
５                  １０          ９０
５．０１            ９０          １０
６                  ９０          １０
エラグ酸の測定では、試料注入量は１０μＬ、移動相Ａ液は５．０重量％ぎ酸水溶液、Ｂ液はアセトニトリルとし、０．６ｍＬ／分で送液した。グラジエント条件は以下の通りである。
時間（分）          Ａ液（％）    Ｂ液（％）
０                  ９９            １
０．５              ９９            １
４                    ５          ９５
５                    ５          ９５
５．０１            ９９            １
６                  ９９            １
【００４５】
[ＭＳ／ＭＳ条件]
質量分析装置はＱＴＲＡＰ(R)４５００（株式会社エービーサイエックス製）を用いた。スキャン条件はＭＲＭ，パラメータテーブルはアナライトで測定した。ノビレチンはポジティブイオンモードによりＭＲＭ（ｍ／Ｚ）４０４．０→３７４．０のイオンを、エラグ酸はネガティブモードによりＭＲＭ（ｍ／Ｚ）３００．９→２８４．０のイオンをそれぞれ検出することで定量した。
【００４６】
〔Ｘ線回折分析〕
Ｘ線回折強度は、株式会社リガク製の「ＭｉｎｉＦｌｅｘＩＩ」を用いて、Ｘ線源：Ｃｕ／Ｋα−ｒａｄｉａｔｉｏｎ、管電圧：３０ｋＶ、管電流：１５ｍＡ、測定範囲：回折角：５〜４０°、Ｘ線スキャンスピード：１０°／ｍｉｎの条件で測定した。測定用試料は、面積４００ｍｍ２×厚さ０．５ｍｍのペレットを圧縮して作製した。
【００４７】
〔経時的な溶解性の評価〕
５０ｍＬのスクリュー管（株式会社マルエム製、Ｎｏ．２、褐色）に、イオン交換水を３０ｍＬ加えた後、固体分散体１００ｍｇ添加、２ｃｍスターラーチップを用いて５００ｒｐｍで攪拌した。攪拌開始を０分とし、攪拌６時間までの間、適宜その一部を０．４５μｍセルロースアセテートフィルターでろ過し、前記〔難水溶性物質の定量〕に記載した方法によりノビレチン、エラグ酸溶解量を定量した。
【００４８】
〔Ｃａｃｏ−２細胞膜透過性評価〕
試験例１  ヒト大腸癌由来上皮細胞を用いた、難水溶性物質原体及びその固体分散体の小腸上皮の透過促進試験
Ｃａｃｏ−２細胞（ヒト大腸癌由来上皮細胞、ＤＳファーマバイオケミカル社より入手）を３７℃、５％ＣＯ２存在下で培養した。培養にはＣａｃｏ−２細胞分化培地セット（Ｃｏｒｎｉｎｇ社製）、及びバイオコートフィブリラーコラーゲンＨＴＳマルチウェルインサート（２４ウェル、膜孔１μｍ、Ｃｏｒｎｉｎｇ社製）を用いた。ＭＩＴＯ＋ＴＭシーラム・エクステンダーを添加したシーディング基本培地にＣａｃｏ−２細胞を懸濁してインサート上部（頂端膜側）に播種し、インサート下部（基底膜側）にも同培地を添加した。２４時間のＣａｃｏ−２細胞培養後に、前記シーディング基本培地をＭＩＴＯ＋ＴＭシーラム・エクステンダーを添加したＥｎｔｅｒｏ―ＳＴＩＭ腸上皮分化培地に交換した。その後、さらに４８時間前記細胞を培養し、小腸上皮細胞シート様に分化させた。
【００４９】
腸管のタイトジャンクションの形成を確認するため、難水溶性物質原体及び固体分散体の小腸上皮の透過促進試験直前にＭｉｌｌｉｃｅｌｌ  ＥＲＳ（Ｍｉｌｌｉｐｏｒｅ社製）を用いて経上皮電気抵抗（ＴＥＥＲ）値を測定し、規定値（３５０Ω・ｃｍ２）以上のＣａｃｏ−２細胞を用いた。
【００５０】
評価サンプルの調製は以下の通り行った。２０ｍＬのスクリュー管（株式会社マルエム製、Ｎｏ．２、褐色）に、ＨＢＳＳ（Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ社製、１０ｍＭ  ＭＥＳ、５ｍＭ  グルコース、１０ｍＭ  グルタミン、１ｍＭ  アスコルビン酸を添加しｐＨ６．０に調製）を６ｍＬ加えた後、難水溶性物質原体１０ｍｇもしくは固体分散体４０ｍｇ添加し、２ｃｍスターラーチップを用いて３００ｒｐｍで１０分間攪拌した。攪拌後、０．４５μｍセルロースアセテートフィルターでろ過した溶液、及びその希釈液を評価サンプルとして用いた。なお、表１−１〜表１−４には、本ろ液をＨＢＳＳで３０倍に希釈した溶液をインサート上部仕込み液に使用した評価の結果を示した。
【００５１】
ＴＥＥＲ測定による細胞選別後、インサート上部及び下部をＨＢＳＳで置換して２回洗浄した。その後、インサート上部には、前記方法で調製した難水溶性物質及びその固体分散体水溶液の希釈液を添加した。本希釈物の評価濃度を表１−１〜１−４に示す。インサート下部には、ＨＢＳＳ（１０ｍＭ  ＨＥＰＥＳ、５ｍＭ  グルコース、１０ｍＭ  グルタミン、ｐＨ７．４）を添加した。そしてＣａｃｏ−２細胞を３７℃、５％ＣＯ２存在下で４時間培養した。
その後、インサート下部のＨＢＳＳを回収し、下記の方法で小腸上皮を透過した難水溶性物質を、液体クロマトグラフ・タンデム型質量分析法（ＨＰＬＣ−ＭＳ／ＭＳ）により定量した。
【００５２】
[ＬＤＨ活性測定試験による細胞生存率評価]
試験例２  ＬＤＨ活性測定試験
試験例１のインサート上部のＨＢＳＳを回収し、下記の方法で、細胞膜を構成するＣａｃｏ−２細胞から放出された溶液中のＬＤＨ(Ｌａｃｔａｔｅ  ｄｅｈｙｄｒｏｇｅｎａｓｅ)活性測定から求まる、各評価サンプルの細胞傷害性から細胞生存率を評価した。
細胞傷害性の評価は、ＬＤＨ  Ｃｙｔｏｔｏｘｉｃｉｔｙ  Ａｓｓａｙ  Ｋｉｔ(Ｃａｙｍａｎ  Ｃｈｅｍｉｃａｌ  Ｃｏｍｐａｎｙ製)を用い、所定の方法により行った。評価終了後のインサート上部の試験溶液をサンプルとし、含有ＬＤＨにより産生されるホルマザン量（４９０ｎｍの吸光強度から定量）からＬＤＨ活性を算出した。なお、細胞生存率算出に当たり、Ｃａｃｏ−２細胞膜透過性評価（試験例１）のサンプルとして１．０％Ｔｒｉｔｏｎ Ｘ−１００のＨＢＳＳ溶液を用いた際の、評価終了後のインサート上部の試験溶液でのＬＤＨ活性を生存率０％に相当する値とした。そして、下記式により、ＬＤＨ活性の変化倍率を算出した。
（算出式）
細胞生存率（％）＝（１．０％Ｔｒｉｔｏｎ Ｘ  ＨＢＳＳ溶液 評価終了後のインサート上部の試験溶液でのＬＤＨ活性−各サンプル 評価終了後のインサート上部の試験溶液のＬＤＨ活性）÷（１．０％Ｔｒｉｔｏｎ Ｘ  ＨＢＳＳ溶液 評価終了後のインサート上部の試験溶液でのＬＤＨ活性）
算出式により求まる細胞生存率の結果の平均値及び標準誤差（Ｎ＝３または４）を表１に示す。
【００５３】
実施例１
ノビレチン（和光純薬工業株式会社製）及び、メチルヘスペリジン（東京化成工業株式会社製）をそれぞれ２５質量％、７５質量％の割合で混合した粉体５ｇを、５０体積％エタノール含有水５０ｍＬと混合した。本懸濁液を６０℃下で５分間振とうすることで、澄明な溶液が得られた。
本溶液をスプレードライヤーＢ-２９０（日本ビュッヒ社製）を、入口ガス温度：１３０℃、出口ガス温度：７６℃、溶液供給速度：３６０ｍＬ／ｈ、噴霧窒素流量：４１４Ｌ／ｈ、アスピレーター流量：３５ｍ３／ｈの条件で噴霧乾燥し、固体分散体を調製した。得られた固体分散体は１．７３ｇ（収率３５％）であった。
本固体分散体の粉末Ｘ線回折を図２に示す。ノビレチン由来の回折ピークが消失していることから、本固体分散体中でノビレチンが非晶質化していることが確認され、本固体分散体の結晶化度は０％であると見積もられた。
前記〔経時的な溶解性の評価〕により固体分散体のノビレチンの溶解濃度を測定した結果、攪拌開始６時間後までの曲線下面積（横軸：時間（単位＝分）、縦軸：溶解濃度（単位＝ｐｐｍ））は１．１３×１０５ｐｐｍ・ｍｉｎであり、極めて高い溶解濃度を長時間維持することが示された（図１及び表１−１）。
また、前記〔Ｃａｃｏ−２細胞膜透過性評価〕による、本固体分散体試験時のインサート上部評価開始時ノビレチン濃度は４１．８μＭ、インサート下部評価終了時ノビレチン濃度１．０８μＭであり、高い溶解性によるノビレチン膜透過量の向上が確認された（表１−１）。
【００５４】
実施例２
ノビレチン（和光純薬工業株式会社製）及び、メチルヘスペリジン（東京化成工業株式会社製）をそれぞれ２５質量％、７５質量％の割合で混合した粉体２．５ｇを、５０体積％エタノール含有水５０ｍＬと混合した。本懸濁液を６０℃下で５分間振とうすることで、澄明な溶液が得られた。
本溶液をスプレードライヤーＢ-２９０（日本ビュッヒ社製）を、入口ガス温度：１３０℃、出口ガス温度：７６℃、溶液供給速度：３６０ｍＬ／ｈ、噴霧窒素流量：４１４Ｌ／ｈ、アスピレーター流量：３５ｍ３／ｈの条件で噴霧乾燥し、固体分散体を調製した。得られた固体分散体は０．７５ｇ（収率３０％）であった。
本固体分散体の粉末Ｘ線回折を図３に示す。実施例１と同様に、本固体分散体中でノビレチンが非晶質化していることが確認された。前記〔経時的な溶解性の評価〕及び〔Ｃａｃｏ−２細胞膜透過性評価〕の結果を表１−１に示す。
【００５５】
実施例３
ノビレチン（和光純薬工業株式会社製）及び、メチルヘスペリジン（東京化成工業株式会社製）をそれぞれ２５質量％、７５質量％の割合で混合した粉体５ｇを、８０体積％エタノール含有水５０ｍＬと混合した。本懸濁液を６０℃下で５分間振とうすることで、澄明な溶液が得られた。
本溶液をスプレードライヤーＢ-２９０（日本ビュッヒ社製）を、入口ガス温度：１３０℃、出口ガス温度：７８℃、溶液供給速度：３６０ｍＬ／ｈ、噴霧窒素流量：４１４Ｌ／ｈ、アスピレーター流量：３５ｍ３／ｈの条件で噴霧乾燥し、固体分散体を調製した。得られた固体分散体は２．１７ｇ（収率４３％）であった。
本固体分散体の粉末Ｘ線回折を図４に示す。実施例１と同様に、本固体分散体中でノビレチンが非晶質化していることが確認された。前記〔経時的な溶解性の評価〕及び〔Ｃａｃｏ−２細胞膜透過性評価〕の結果を表１−１に示す。
【００５６】
実施例４
ノビレチン（和光純薬工業株式会社製）及び、メチルヘスペリジン（東京化成工業株式会社製）をそれぞれ２５質量％、７５質量％の割合で混合した粉体５ｇを、５０体積％エタノール含有水５０ｍＬと混合した。本懸濁液を６０℃下で５分間振とうすることで、澄明な溶液が得られた。
本溶液をスプレードライヤーＢ-２９０（日本ビュッヒ社製）を、入口ガス温度：１１０℃、出口ガス温度：６０℃、溶液供給速度：３６０ｍＬ／ｈ、噴霧窒素流量：４１４Ｌ／ｈ、アスピレーター流量：３５ｍ３／ｈの条件で噴霧乾燥し、固体分散体を調製した。得られた固体分散体は２．３２ｇ（収率４６％）であった。
本固体分散体の粉末Ｘ線回折を図５に示す。実施例１と同様に、本固体分散体中でノビレチンが非晶質化していることが確認された。前記〔経時的な溶解性の評価〕及び〔Ｃａｃｏ−２細胞膜透過性評価〕の結果を表１−１に示す。
【００５７】
実施例５
ノビレチン（和光純薬工業株式会社製）及び、メチルヘスペリジン（東京化成工業株式会社製）をそれぞれ２５質量％、７５質量％の割合で混合した粉体５ｇを、９５体積％エタノール含有水５０ｍＬと混合した。本懸濁液を６０℃下で５分間振とうすることで、澄明な溶液が得られた。
本溶液をスプレードライヤーＢ-２９０（日本ビュッヒ社製）を、入口ガス温度：１３０℃、出口ガス温度：７６℃、溶液供給速度：３６０ｍＬ／ｈ、噴霧窒素流量：４１４Ｌ／ｈ、アスピレーター流量：３５ｍ３／ｈの条件で噴霧乾燥し、固体分散体を調製した。得られた固体分散体は３．２７ｇ（収率６５％）であった。
本固体分散体の粉末Ｘ線回折を図６に示す。実施例１と同様に、本固体分散体中でノビレチンが非晶質化していることが確認された。前記〔経時的な溶解性の評価〕及び〔Ｃａｃｏ−２細胞膜透過性評価〕の結果を表１−１に示す。
【００５８】
実施例６
ノビレチン（和光純薬工業株式会社製）及び、メチルヘスペリジン（東京化成工業株式会社製）をそれぞれ２５質量％、７５質量％の割合で混合した粉体５ｇを、２０体積％エタノール含有水５０ｍＬと混合した。本懸濁液を６０℃下で５分間振とうすることで、澄明な溶液が得られた。
本溶液をスプレードライヤーＢ-２９０（日本ビュッヒ社製）を、入口ガス温度：１３０℃、出口ガス温度：７４℃、溶液供給速度：３６０ｍＬ／ｈ、噴霧窒素流量：４１４Ｌ／ｈ、アスピレーター流量：３５ｍ３／ｈの条件で噴霧乾燥し、固体分散体を調製した。得られた固体分散体は２．７９ｇ（収率５６％）であった。
本固体分散体の粉末Ｘ線回折を図７に示す。実施例１と同様に、本固体分散体中でノビレチンが非晶質化していることが確認された。前記〔経時的な溶解性の評価〕及び〔Ｃａｃｏ−２細胞膜透過性評価〕の結果を表１−１に示す。
【００５９】
実施例７
ノビレチン（和光純薬工業株式会社製）及び、メチルヘスペリジン（東京化成工業株式会社製）をそれぞれ２５質量％、７５質量％の割合で混合した粉体５ｇを、５０体積％エタノール含有水５０ｍＬと混合した。本懸濁液を６０℃下で５分間振とうすることで、澄明な溶液が得られた。
本溶液をスプレードライヤーＢ-２９０（日本ビュッヒ社製）を、入口ガス温度：１３０℃、出口ガス温度：７７℃、溶液供給速度：１８０ｍＬ／ｈ、噴霧窒素流量：４１４Ｌ／ｈ、アスピレーター流量：３５ｍ３／ｈの条件で噴霧乾燥し、固体分散体を調製した。得られた固体分散体は１．２５ｇ（収率２５％）であった。
本固体分散体の粉末Ｘ線回折を図８に示す。実施例１と同様に、本固体分散体中でノビレチンが非晶質化していることが確認された。前記〔経時的な溶解性の評価〕及び〔Ｃａｃｏ−２細胞膜透過性評価〕の結果を表１−１に示す。
【００６０】
実施例８
ノビレチン（和光純薬工業株式会社製）及び、メチルヘスペリジン（東京化成工業株式会社製）をそれぞれ２５質量％、７５質量％の割合で混合した粉体５ｇを、５０体積％エタノール含有水５０ｍＬと混合した。本懸濁液を６０℃下で５分間振とうすることで、澄明な溶液が得られた。
本溶液をスプレードライヤーＢ-２９０（日本ビュッヒ社製）を、入口ガス温度：１３０℃、出口ガス温度：７７℃、溶液供給速度：３６０ｍＬ／ｈ、噴霧窒素流量：２０７Ｌ／ｈ、アスピレーター流量：３５ｍ３／ｈの条件で噴霧乾燥し、固体分散体を調製した。得られた固体分散体は０．２３ｇ（収率５％）であった。
本固体分散体の粉末Ｘ線回折を図９に示す。実施例１と同様に、本固体分散体中でノビレチンが非晶質化していることが確認された。前記〔経時的な溶解性の評価〕及び〔Ｃａｃｏ−２細胞膜透過性評価〕の結果を表１−１に示す。
【００６１】
実施例９
ノビレチン（和光純薬工業株式会社製）及び、メチルヘスペリジン（東京化成工業株式会社製）をそれぞれ２５質量％、７５質量％の割合で混合した粉体５ｇを、５０体積％エタノール含有水５０ｍＬと混合した。本懸濁液を６０℃下で５分間振とうすることで、澄明な溶液が得られた。
本溶液をスプレードライヤーＢ-２９０（日本ビュッヒ社製）を、入口ガス温度：１３０℃、出口ガス温度：７３℃、溶液供給速度：５４０ｍＬ／ｈ、噴霧窒素流量：４１４Ｌ／ｈ、アスピレーター流量：３５ｍ３／ｈの条件で噴霧乾燥し、固体分散体を調製した。得られた固体分散体は１．２６ｇ（収率２５％）であった。
本固体分散体の粉末Ｘ線回折を図１０に示す。実施例１と同様に、本固体分散体中でノビレチンが非晶質化していることが確認された。前記〔経時的な溶解性の評価〕及び〔Ｃａｃｏ−２細胞膜透過性評価〕の結果を表１−２に示す。
【００６２】
実施例１０
ノビレチン（和光純薬工業株式会社製）及び、メチルヘスペリジン（東京化成工業株式会社製）をそれぞれ２５質量％、７５質量％の割合で混合した粉体５ｇを、５０体積％エタノール含有水５０ｍＬと混合した。本懸濁液を６０℃下で５分間振とうすることで、澄明な溶液が得られた。
本溶液をスプレードライヤーＢ-２９０（日本ビュッヒ社製）を、入口ガス温度：１３０℃、出口ガス温度：７０℃、溶液供給速度：３６０ｍＬ／ｈ、噴霧窒素流量：６２１Ｌ／ｈ、アスピレーター流量：３５ｍ３／ｈの条件で噴霧乾燥し、固体分散体を調製した。得られた固体分散体は０．６２ｇ（収率１２％）であった。
本固体分散体の粉末Ｘ線回折を図１１に示す。実施例１と同様に、本固体分散体中でノビレチンが非晶質化していることが確認された。前記〔経時的な溶解性の評価〕及び〔Ｃａｃｏ−２細胞膜透過性評価〕の結果を表１−２に示す。
【００６３】
実施例１１
ノビレチン（和光純薬工業株式会社製）及び、メチルヘスペリジン（東京化成工業株式会社製）をそれぞれ１０質量％、９０質量％の割合で混合した粉体５ｇを、５０体積％エタノール含有水５０ｍＬと混合した。本懸濁液を６０℃下で５分間振とうすることで、澄明な溶液が得られた。
本溶液をスプレードライヤーＢ-２９０（日本ビュッヒ社製）を、入口ガス温度：１３０℃、出口ガス温度：７１℃、溶液供給速度：３６０ｍＬ／ｈ、噴霧窒素流量：４１４Ｌ／ｈ、アスピレーター流量：３５ｍ３／ｈの条件で噴霧乾燥し、固体分散体を調製した。得られた固体分散体は２．４６ｇ（収率４９％）であった。
本固体分散体の粉末Ｘ線回折を図１２に示す。実施例１と同様に、本固体分散体中でノビレチンが非晶質化していることが確認された。前記〔経時的な溶解性の評価〕及び〔Ｃａｃｏ−２細胞膜透過性評価〕の結果を表１−２に示す。
【００６４】
実施例１２
ノビレチン（和光純薬工業株式会社製）及び、メチルヘスペリジン（東京化成工業株式会社製）をそれぞれ５０質量％、５０質量％の割合で混合した粉体５ｇを、５０体積％エタノール含有水５０ｍＬと混合した。本懸濁液を６０℃下で５分間振とうすることで、澄明な溶液が得られた。
本溶液をスプレードライヤーＢ-２９０（日本ビュッヒ社製）を、入口ガス温度：１３０℃、出口ガス温度：７２℃、溶液供給速度：３６０ｍＬ／ｈ、噴霧窒素流量：４１４Ｌ／ｈ、アスピレーター流量：３５ｍ３／ｈの条件で噴霧乾燥し、固体分散体を調製した。得られた固体分散体は０．５９ｇ（収率１２％）であった。
本固体分散体の粉末Ｘ線回折を図１３に示す。実施例１と同様に、本固体分散体中でノビレチンが非晶質化していることが確認された。前記〔経時的な溶解性の評価〕及び〔Ｃａｃｏ−２細胞膜透過性評価〕の結果を表１−２に示す。
【００６５】
実施例１３
ノビレチン（和光純薬工業株式会社製）及び、メチルヘスペリジン（東京化成工業株式会社製）をそれぞれ４０質量％、６０質量％の割合で混合した粉体５ｇを、５０体積％エタノール含有水５０ｍＬと混合した。本懸濁液を６０℃下で５分間振とうすることで、澄明な溶液が得られた。
本溶液をスプレードライヤーＢ-２９０（日本ビュッヒ社製）を、入口ガス温度：１３０℃、出口ガス温度：７６℃、溶液供給速度：３６０ｍＬ／ｈ、噴霧窒素流量：４１４Ｌ／ｈ、アスピレーター流量：３５ｍ３／ｈの条件で噴霧乾燥し、固体分散体を調製した。得られた固体分散体は１．９５ｇ（収率３９％）であった。
本固体分散体の粉末Ｘ線回折を図１４に示す。実施例１と同様に、本固体分散体中でノビレチンが非晶質化していることが確認された。前記〔経時的な溶解性の評価〕及び〔Ｃａｃｏ−２細胞膜透過性評価〕の結果を表１−２に示す。
【００６６】
実施例１４
ＰＭＦ９０（株式会社沖縄リサーチセンター製、ノビレチン含有率５６％（ＨＰＬＣ−ＵＶ−ｖｉｓによる定量値、花王実施））及び、メチルヘスペリジン（東京化成工業株式会社製）をそれぞれ２５質量％、７５質量％の割合で混合した粉体（ノビレチン１４質量％含有）５ｇを、５０体積％エタノール含有水５０ｍＬと混合した。本懸濁液を６０℃下で５分間振とうすることで、澄明な溶液が得られた。
本溶液をスプレードライヤーＢ-２９０（日本ビュッヒ社製）を、入口ガス温度：１３０℃、出口ガス温度：７８℃、溶液供給速度：３６０ｍＬ／ｈ、噴霧窒素流量：４１４Ｌ／ｈ、アスピレーター流量：３５ｍ３／ｈの条件で噴霧乾燥し、固体分散体を調製した。得られた固体分散体は１．１８ｇ（収率２４％）であった。
本固体分散体の粉末Ｘ線回折を図１５に示す。実施例１と同様に、本固体分散体中でノビレチンが非晶質化していることが確認された。前記〔経時的な溶解性の評価〕及び〔Ｃａｃｏ−２細胞膜透過性評価〕の結果を表１−２に示す。
【００６７】
実施例１５
ＰＭＦ９０（株式会社沖縄リサーチセンター製）及び、メチルヘスペリジン（東京化成工業株式会社製）をそれぞれ５０質量％、５０質量％の割合で混合した粉体（ノビレチン２８質量％含有）５ｇを、５０体積％エタノール含有水５０ｍＬと混合した。本懸濁液を６０℃下で５分間振とうすることで、澄明な溶液が得られた。
本溶液をスプレードライヤーＢ-２９０（日本ビュッヒ社製）を、入口ガス温度：１３０℃、出口ガス温度：７８℃、溶液供給速度：３６０ｍＬ／ｈ、噴霧窒素流量：４１４Ｌ／ｈ、アスピレーター流量：３５ｍ３／ｈの条件で噴霧乾燥し、固体分散体を調製した。得られた固体分散体は０．１３ｇ（収率３％）であった。
本固体分散体の粉末Ｘ線回折を図１６に示す。実施例１と同様に、本固体分散体中でノビレチンが非晶質化していることが確認された。前記〔経時的な溶解性の評価〕及び〔Ｃａｃｏ−２細胞膜透過性評価〕の結果を表１−２に示す。
【００６８】
実施例１６
ＰＭＦ９０（株式会社沖縄リサーチセンター製）及び、メチルヘスペリジン（東京化成工業株式会社製）をそれぞれ４０質量％、６０質量％の割合で混合した粉体（ノビレチン２２質量％含有）５ｇを、５０体積％エタノール含有水５０ｍＬと混合した。本懸濁液を６０℃下で５分間振とうすることで、澄明な溶液が得られた。
本溶液をスプレードライヤーＢ-２９０（日本ビュッヒ社製）を、入口ガス温度：１３０℃、出口ガス温度：７７℃、溶液供給速度：３６０ｍＬ／ｈ、噴霧窒素流量：４１４Ｌ／ｈ、アスピレーター流量：３５ｍ３／ｈの条件で噴霧乾燥し、固体分散体を調製した。得られた固体分散体は１．７ｇ（収率３４％）であった。
本固体分散体の粉末Ｘ線回折を図１７に示す。実施例１と同様に、本固体分散体中でノビレチンが非晶質化していることが確認された。前記〔経時的な溶解性の評価〕及び〔Ｃａｃｏ−２細胞膜透過性評価〕の結果を表１−２に示す。
【００６９】
実施例１７
ノビレチン（和光純薬工業株式会社製）及び、αＧヘスペリジン ＰＡ−Ｔ（東洋製糖株式会社製）をそれぞれ２５質量％、７５質量％の割合で混合した粉体５ｇを、８０体積％エタノール含有水５０ｍＬと混合した。本懸濁液を６０℃下で５分間振とうすることで、澄明な溶液が得られた。
本溶液をスプレードライヤーＢ-２９０（日本ビュッヒ社製）を、入口ガス温度：１３０℃、出口ガス温度：７４℃、溶液供給速度：３６０ｍＬ／ｈ、噴霧窒素流量：４１４Ｌ／ｈ、アスピレーター流量：３５ｍ３／ｈの条件で噴霧乾燥し、固体分散体を調製した。得られた固体分散体は１．３３ｇ（収率２７％）であった。
本固体分散体の粉末Ｘ線回折を図１８に示す。実施例１と同様に、本固体分散体中でノビレチンが非晶質化していることが確認された。前記〔経時的な溶解性の評価〕及び〔Ｃａｃｏ−２細胞膜透過性評価〕の結果を表１−３に示す。
【００７０】
実施例１８
ノビレチン（和光純薬工業株式会社製）及び、αＧヘスペリジン ＰＡ−Ｔ（東洋製糖株式会社製）をそれぞれ２５質量％、７５質量％の割合で混合した粉体５ｇを、８０体積％エタノール含有水５０ｍＬと混合した。本懸濁液を６０℃下で５分間振とうすることで、澄明な溶液が得られた。
本溶液をスプレードライヤーＢ-２９０（日本ビュッヒ社製）を、入口ガス温度：１１０℃、出口ガス温度：６６℃、溶液供給速度：３６０ｍＬ／ｈ、噴霧窒素流量：４１４Ｌ／ｈ、アスピレーター流量：３５ｍ３／ｈの条件で噴霧乾燥し、固体分散体を調製した。得られた固体分散体は１．８１ｇ（収率３６％）であった。
本固体分散体の粉末Ｘ線回折を図１９に示す。実施例１と同様に、本固体分散体中でノビレチンが非晶質化していることが確認された。前記〔経時的な溶解性の評価〕及び〔Ｃａｃｏ−２細胞膜透過性評価〕の結果を表１−３に示す。
【００７１】
実施例１９
ノビレチン（和光純薬工業株式会社製）及び、αＧヘスペリジン ＰＡ−Ｔ（東洋製糖株式会社製）をそれぞれ４０質量％、６０質量％の割合で混合した粉体５ｇを、８０体積％エタノール含有水５０ｍＬと混合した。本懸濁液を６０℃下で５分間振とうすることで、澄明な溶液が得られた。
本溶液をスプレードライヤーＢ-２９０（日本ビュッヒ社製）を、入口ガス温度：１３０℃、出口ガス温度：７８℃、溶液供給速度：３６０ｍＬ／ｈ、噴霧窒素流量：４１４Ｌ／ｈ、アスピレーター流量：３５ｍ３／ｈの条件で噴霧乾燥し、固体分散体を調製した。得られた固体分散体は１．３３ｇ（収率２７％）であった。
本固体分散体の粉末Ｘ線回折を図２０に示す。実施例１と同様に、本固体分散体中でノビレチンが非晶質化していることが確認された。前記〔経時的な溶解性の評価〕及び〔Ｃａｃｏ−２細胞膜透過性評価〕の結果を表１−３に示す。
【００７２】
実施例２０
ノビレチン（和光純薬工業株式会社製）及び、αＧヘスペリジン ＰＡ−Ｔ（東洋製糖株式会社製）をそれぞれ２５質量％、７５質量％の割合で混合した粉体５ｇを、５０体積％エタノール含有水５０ｍＬと混合した。本懸濁液を６０℃下で５分間振とうすることで、澄明な溶液が得られた。
本溶液をスプレードライヤーＢ-２９０（日本ビュッヒ社製）を、入口ガス温度：１３０℃、出口ガス温度：７８℃、溶液供給速度：３６０ｍＬ／ｈ、噴霧窒素流量：４１４Ｌ／ｈ、アスピレーター流量：３５ｍ３／ｈの条件で噴霧乾燥し、固体分散体を調製した。得られた固体分散体は１．４６ｇ（収率２９％）であった。
本固体分散体の粉末Ｘ線回折を図２１に示す。実施例１と同様に、本固体分散体中でノビレチンが非晶質化していることが確認された。前記〔経時的な溶解性の評価〕及び〔Ｃａｃｏ−２細胞膜透過性評価〕の結果を表１−３に示す。
【００７３】
実施例２１
ＰＭＦ９０（株式会社沖縄リサーチセンター製）及び、αＧヘスペリジン ＰＡ−Ｔ（東洋製糖株式会社製）をそれぞれ２５質量％、７５質量％の割合で混合した粉体（ノビレチン１４質量％含有）５ｇを、８０体積％エタノール含有水５０ｍＬと混合した。本懸濁液を６０℃下で５分間振とうすることで、澄明な溶液が得られた。
本溶液をスプレードライヤーＢ-２９０（日本ビュッヒ社製）を、入口ガス温度：１３０℃、出口ガス温度：７８℃、溶液供給速度：３６０ｍＬ／ｈ、噴霧窒素流量：４１４Ｌ／ｈ、アスピレーター流量：３５ｍ３／ｈの条件で噴霧乾燥し、固体分散体を調製した。得られた固体分散体は１．５８ｇ（収率３２％）であった。
本固体分散体の粉末Ｘ線回折を図２２に示す。実施例１と同様に、本固体分散体中でノビレチンが非晶質化していることが確認された。前記〔経時的な溶解性の評価〕及び〔Ｃａｃｏ−２細胞膜透過性評価〕の結果を表１−３に示す。
【００７４】
実施例２２
ＰＭＦ９０（株式会社沖縄リサーチセンター製）及び、αＧヘスペリジン ＰＡ−Ｔ（東洋製糖株式会社製）をそれぞれ４０質量％、６０質量％の割合で混合した粉体５ｇを、８０体積％エタノール含有水５０ｍＬと混合した。本懸濁液を６０℃下で５分間振とうすることで、澄明な溶液が得られた。
本溶液をスプレードライヤーＢ-２９０（日本ビュッヒ社製）を、入口ガス温度：１１０℃、出口ガス温度：７０℃、溶液供給速度：３６０ｍＬ／ｈ、噴霧窒素流量：４１４Ｌ／ｈ、アスピレーター流量：３５ｍ３／ｈの条件で噴霧乾燥し、固体分散体を調製した。得られた固体分散体は１．０３ｇ（収率２１％）であった。
本固体分散体の粉末Ｘ線回折を図２３に示す。実施例１と同様に、本固体分散体中でノビレチンが非晶質化していることが確認された。前記〔経時的な溶解性の評価〕及び〔Ｃａｃｏ−２細胞膜透過性評価〕の結果を表１−３に示す。
【００７５】
比較例１
エラグ酸二水和物（東京化成工業株式会社製）及び、メチルヘスペリジン（東京化成工業株式会社製）をそれぞれ１８．４質量％、８０．６質量％の割合で混合した粉体２．９４ｇを、８０体積％エタノール含有水１５０ｍＬと混合した。本懸濁液を６０℃下で５分間振とうしたが、澄明な溶液は得られず、粉体が均一に分散した懸濁液が得られた。
本溶液をスプレードライヤーＢ-２９０（日本ビュッヒ社製）を、入口ガス温度：１３０℃、出口ガス温度：７５℃、溶液供給速度：３６０ｍＬ／ｈ、噴霧窒素流量：４１４Ｌ／ｈ、アスピレーター流量：３５ｍ３／ｈの条件で噴霧乾燥し、固体分散体を調製した。得られた固体分散体は１．９５ｇ（収率６６％）であった。
本固体分散体の粉末Ｘ線回折を図２４に示す。実施例１と同様に、本固体分散体中でエラグ酸が非晶質化していることが確認された。前記〔経時的な溶解性の評価〕及び〔Ｃａｃｏ−２細胞膜透過性評価〕の結果を表１−４に示す。
【００７６】
比較例２
エラグ酸二水和物（東京化成工業株式会社製）及び、メチルヘスペリジン（東京化成工業株式会社製）をそれぞれ１８．４質量％、８０．６質量％の割合で混合した粉体２．９４ｇを、８０体積％エタノール含有水３００ｍＬと混合した。本懸濁液を６０℃下で５分間振とうしたが、澄明な溶液は得られず、粉体が均一に分散した懸濁液が得られた。
本溶液をスプレードライヤーＢ-２９０（日本ビュッヒ社製）を、入口ガス温度：１３０℃、出口ガス温度：８３℃、溶液供給速度：３６０ｍＬ／ｈ、噴霧窒素流量：４１４Ｌ／ｈ、アスピレーター流量：３５ｍ３／ｈの条件で噴霧乾燥し、固体分散体を調製した。得られた固体分散体は１．２１ｇ（収率４１％）であった。
本固体分散体の粉末Ｘ線回折を図２５に示す。実施例１と同様に、本固体分散体中でエラグ酸が非晶質化していることが確認された。前記〔経時的な溶解性の評価〕及び〔Ｃａｃｏ−２細胞膜透過性評価〕の結果を表１−４に示す。
【００７７】
比較例３
エラグ酸二水和物（東京化成工業株式会社製）及び、メチルヘスペリジン（東京化成工業株式会社製）をそれぞれ１８．４質量％、８０．６質量％の割合で混合した粉体２．９４ｇを、９５体積％エタノール含有水１５０ｍＬと混合した。本懸濁液を６０℃下で５分間振とうしたが、澄明な溶液は得られず、粉体が均一に分散した懸濁液が得られた。
本溶液をスプレードライヤーＢ-２９０（日本ビュッヒ社製）を、入口ガス温度：１３０℃、出口ガス温度：７５℃、溶液供給速度：３６０ｍＬ／ｈ、噴霧窒素流量：４１４Ｌ／ｈ、アスピレーター流量：３５ｍ３／ｈの条件で噴霧乾燥し、固体分散体を調製した。得られた固体分散体は１．５８ｇ（収率５４％）であった。本固体分散体の粉末Ｘ線回折を図２６に示す。実施例１と同様に、本固体分散体中でエラグ酸が非晶質化していることが確認された。前記〔経時的な溶解性の評価〕及び〔Ｃａｃｏ−２細胞膜透過性評価〕の結果を表１−４に示す。
【００７８】
比較例４
エラグ酸二水和物（東京化成工業株式会社製）及び、メチルヘスペリジン（東京化成工業株式会社製）をそれぞれ１８．４質量％、８０．６質量％の割合で混合した粉体２．９４ｇを、５０体積％エタノール含有水１５０ｍＬと混合した。本懸濁液を６０℃下で５分間振とうしたが、澄明な溶液は得られず、粉体が均一に分散した懸濁液が得られた。
本溶液をスプレードライヤーＢ-２９０（日本ビュッヒ社製）を、入口ガス温度：１３０℃、出口ガス温度：８３℃、溶液供給速度：３６０ｍＬ／ｈ、噴霧窒素流量：４１４Ｌ／ｈ、アスピレーター流量：３５ｍ３／ｈの条件で噴霧乾燥し、固体分散体を調製した。得られた固体分散体は１．９２ｇ（収率６５％）であった。
本固体分散体の粉末Ｘ線回折を図２７に示す。実施例１と同様に、本固体分散体中でエラグ酸が非晶質化していることが確認された。前記〔経時的な溶解性の評価〕及び〔Ｃａｃｏ−２細胞膜透過性評価〕の結果を表１−４に示す。
【００７９】
比較例５
難水溶性物質としてノビレチン（和光純薬工業株式会社製）及び、メチルヘスペリジン（東京化成工業株式会社製）をそれぞれ２５質量％、７５質量％の割合で混合したものを評価した。前記〔経時的な溶解性の評価〕及び〔Ｃａｃｏ−２細胞膜透過性評価〕の結果を表１−４に示す。
【００８０】
比較例６
難水溶性物質としてＰＭＦ９０（株式会社沖縄リサーチセンター製）及び、メチルヘスペリジン（東京化成工業株式会社製）をそれぞれ２５質量％、７５質量％の割合で混合したもの（ノビレチン１４質量％含有）を評価した。前記〔経時的な溶解性の評価〕及び〔Ｃａｃｏ−２細胞膜透過性評価〕の結果を表１−４に示す。
【００８１】
比較例７
難水溶性物質としてＰＭＦ９０（株式会社沖縄リサーチセンター製）及び、αＧヘスペリジン ＰＡ−Ｔ（東洋製糖株式会社製）をそれぞれ２５質量％、７５質量％の割合で混合したもの（ノビレチン１４質量％含有）を評価した。前記〔経時的な溶解性の評価〕及び〔Ｃａｃｏ−２細胞膜透過性評価〕の結果を表１−４に示す。
【００８２】
【表１−１】
2019167336.tif 000006
【００８３】
【表１−２】
2019167336.tif 000007
【００８４】
【表１−３】
2019167336.tif 000008
【００８５】
【表１−４】
2019167336.tif 000009
【図１】
2019167336.tif 000010
【図２】
2019167336.tif 000011
【図３】
2019167336.tif 000012
【図４】
2019167336.tif 000013
【図５】
2019167336.tif 000014
【図６】
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【図７】
2019167336.tif 000016
【図８】
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【図９】
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【図１０】
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【図１１】
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【図１２】
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【図１３】
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【図１４】
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【図１５】
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【図１６】
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【図１７】
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【図１８】
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【図１９】
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【図２０】
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【図２１】
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【図２２】
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【図２３】
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【図２４】
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【図２５】
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【図２６】
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【図２７】
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【手続補正書】
【提出日】令和1年7月26日(2019.7.26)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
ノビレチンを含有する固体分散体の製造方法であって、ノビレチン又はノビレチン含有物と、糖転移ヘスペリジン及びメチルヘスペリジンから選ばれる水溶性ヘスペリジン誘導体を、エタノール濃度が２０〜９０体積％のエタノール水溶液に溶解させる工程、及び前記溶解液を乾燥する工程を含む、製造方法。
【請求項２】
ノビレチン又はノビレチン含有物と水溶性ヘスペリジン誘導体を、０〜９０℃でエタノール水溶液に溶解させる請求項１記載の固体分散体の製造方法。
【請求項３】
エタノール水溶液のエタノール濃度が３０〜８８体積％である請求項１又は２記載の固体分散体の製造方法。
【請求項４】
乾燥方法が噴霧乾燥である請求項１〜３のいずれか１項記載の固体分散体の製造方法。
【請求項５】
ノビレチン又はノビレチン含有物と水溶性ヘスペリジン誘導体を混合する際の水溶性ヘスペリジン誘導体に対するノビレチンの質量比［ノビレチン／水溶性ヘスペリジン誘導体］が０．０１〜０．６７である請求項１〜４のいずれか１項記載の固体分散体の製造方法。