(57)【要約】      （修正有）【課題】ヒト新生児Ｆｃ受容体（ＦｃＲｎ）結合が無効となった抗ヒトインスリン様成長因子１受容体（ＩＧＦ−１Ｒ）抗体及び血管性眼疾患の処置のために同抗体を使用する方法の提供。【解決手段】眼においてＩＧＦ−１Ｒを阻害することにおける使用のための抗ＩＧＦ−１Ｒ抗体。【選択図】なし【特許請求の範囲】
【請求項１】
眼においてＩＧＦ−１Ｒを阻害することにおける使用のための、請求項２〜２０のいずれか一項記載の抗ＩＧＦ−１Ｒ抗体。
【請求項２】
ヒトＩＧＦ−１Ｒに特異的に結合し、無効になったＦｃＲｎ結合を有する抗ＩＧＦ−１Ｒ抗体。
【請求項３】
表面プラズモン共鳴ベースの決定方法を使用して、（残りの）検出可能なＦｃＲｎ結合を有さない、請求項２記載の抗体。
【請求項４】
ｐＨ６で１．７μMを上回るＫＤ値を伴い、ヒトＦｃＲｎに結合する、請求項２〜３のいずれか一項記載の抗体。
【請求項５】
抗体が、３分又はそれ以下の、ＦｃＲｎ親和性クロマトグラフィーカラム上での保持時間を有する、請求項２〜４のいずれか一項記載の抗体。
【請求項６】
突然変異Ｌ２５１Ｄ、Ｍ２５２Ｔ、Ｉ２５３Ａ、Ｓ２５４Ｗ、Ｓ２５４Ｒ、Ｈ３１０Ａ、Ｈ４３３Ａ、Ｎ４３４Ｌ、Ｈ４３５Ａ、Ｙ４３６Ａ（Ｋａｂａｔ  ＥＵインデックスナンバリングシステムに従ったナンバリング）又はこれらの組合せの少なくとも１つを有する、請求項２〜５のいずれか一項記載の抗体。
【請求項７】
第１のＦｃ領域ポリペプチド中に突然変異Ｌ２５１Ｄ、Ｍ２５２Ｔ、Ｉ２５３Ａ、Ｓ２５４Ｗ、Ｓ２５４Ｒ、Ｈ３１０Ａ、Ｈ４３３Ａ、Ｎ４３４Ｌ、Ｈ４３５Ａ、Ｙ４３６Ａ（Ｋａｂａｔ  ＥＵインデックスナンバリングシステムに従ったナンバリング）の少なくとも１つ及び第２のＦｃ領域ポリペプチド中に突然変異Ｌ２５１Ｄ、Ｍ２５２Ｔ、Ｉ２５３Ａ、Ｓ２５４Ｗ、Ｓ２５４Ｒ、Ｈ３１０Ａ、Ｈ４３３Ａ、Ｎ４３４Ｌ、Ｈ４３５Ａ、Ｙ４３６Ａ（Ｋａｂａｔ  ＥＵインデックスナンバリングシステムに従ったナンバリング）の少なくとも１つを有する、請求項２〜６のいずれか一項記載の抗体。
【請求項８】
第１のＦｃ領域ポリペプチド中に少なくとも突然変異Ｉ２５３Ａ／Ｈ３１０Ａ／Ｈ４３５Ａ又はＨ３１０Ａ／Ｈ４３３Ａ／Ｙ４３６Ａ又はＬ２５１Ｄ／Ｌ３１４Ｄ／Ｌ４３２Ｄ又はそれらの組み合わせ（Ｋａｂａｔ  ＥＵインデックスナンバリングシステムに従ったナンバリング）及び第２のＦｃ領域ポリペプチド中に突然変異Ｌ２５１Ｄ、Ｍ２５２Ｔ、Ｉ２５３Ａ又はＳ２５４Ｗ、Ｓ２５４Ｒ、Ｈ３１０Ａ、Ｈ４３３Ａ、Ｎ４３４Ｇ、Ｎ４３４Ｌ、Ｈ４３５Ａ、Ｙ４３６Ａ（Ｋａｂａｔ  ＥＵインデックスナンバリングシステムに従ったナンバリング）の少なくとも１つを有する、請求項２〜７のいずれか一項記載の抗体。
【請求項９】
請求項２〜８のいずれか一項記載の抗体であって、抗体が、第１のＦｃ領域ポリペプチド及び第２のＦｃ領域ポリペプチドを含み、
ｉ）第１及び第２のＦｃ領域ポリペプチドが、突然変異Ｙ４３６Ａをさらに含み、又は
ｉｉ）第１及び第２のＦｃ領域ポリペプチドが、突然変異Ｉ２５３Ａ、Ｈ３１０Ａ、及びＨ４３５Ａをさらに含み、又は
ｉｉｉ）第１及び第２のＦｃ領域ポリペプチドが、突然変異Ｈ３１０Ａ、Ｈ４３３Ａ、及びＹ４３６Ａをさらに含み、又は
ｉｖ）第１及び第２のＦｃ領域ポリペプチドが、突然変異Ｌ２５１Ｄ、Ｌ３１４Ｄ、及びＬ４３２Ｄをさらに含み、又は
ｖ）第１のＦｃ領域ポリペプチドが、突然変異Ｙ４３６Ａをさらに含み、第２のＦｃ領域ポリペプチドが、
ａ）突然変異Ｉ２５３Ａ、Ｈ３１０Ａ、及びＨ４３５Ａ、又は
ｂ）突然変異Ｈ３１０Ａ、Ｈ４３３Ａ、及びＹ４３６Ａ、又は
ｃ）突然変異Ｌ２５１Ｄ、Ｌ３１４Ｄ、及びＬ４３２Ｄをさらに含み、
あるいは
ｖｉ）第１のＦｃ領域ポリペプチドが、突然変異Ｉ２５３Ａ、Ｈ３１０Ａ、及びＨ４３５Ａをさらに含み、第２のＦｃ領域ポリペプチドが、
ａ）突然変異Ｈ３１０Ａ、Ｈ４３３Ａ、及びＹ４３６Ａ、又は
ｂ）突然変異Ｌ２５１Ｄ、Ｌ３１４Ｄ、及びＬ４３２Ｄをさらに含み、
あるいは
ｖｉｉ）第１のＦｃ領域ポリペプチドが、突然変異Ｈ３１０Ａ、Ｈ４３３Ａ、及びＹ４３６Ａをさらに含み、第２のＦｃ領域ポリペプチドが、
ａ）突然変異Ｌ２５１Ｄ、Ｌ３１４Ｄ、及びＬ４３２Ｄをさらに含む、抗体。
【請求項１０】
請求項２〜８のいずれか一項記載の抗体であって、抗体が、第１のＦｃ領域ポリペプチドにおいて、ｉ）群Ｉ２５３Ａ、Ｈ３１０Ａ、Ｈ４３５Ａ、又はｉｉ）群Ｈ３１０Ａ、Ｈ４３３Ａ、Ｙ４３６Ａ、又はｉｉｉ）群Ｌ２５１Ｄ、Ｌ３１４Ｄ、Ｌ４３２Ｄ（Ｋａｂａｔ  ＥＵインデックスナンバリングシステムに従ったナンバリング）より選択される突然変異の１つ又は２つ、ならびに第２のＦｃ領域ポリペプチドにおいて、突然変異Ｌ２５１Ｄ、Ｉ２５３Ａ、Ｈ３１０Ａ、Ｌ３１４Ｄ、Ｌ４３２Ｄ、Ｈ４３３Ａ、Ｈ４３５Ａ、及びＹ４３６Ａ（Ｋａｂａｔ  ＥＵインデックスナンバリングシステムに従ったナンバリング）を含む群より選択される突然変異の１つ又は２つを含む、ヒトＩｇＧ１又はヒトＩｇＧ４サブクラス（すなわちヒト起源に由来する）の両方の第１及び第２のＦｃ領域ポリペプチドを含むＦｃ領域を含み、第１及び第２のＦｃ領域ポリペプチド中の突然変異の全てが、まとめた場合、突然変異ｉ）Ｉ２５３Ａ、Ｈ３１０Ａ、及びＨ４３５Ａ、又はｉｉ）Ｈ３１０Ａ、Ｈ４３３Ａ、及びＹ４３６Ａ、又はｉｉｉ）Ｌ２５１Ｄ、Ｌ３１４Ｄ、及びＬ４３２ＤがＦｃ領域中に含まれることになるようにする、抗体。
【請求項１１】
請求項２〜８のいずれか一項記載の抗体であって、抗体が、両方がＦｃ領域において突然変異Ｉ２５３Ａ／Ｈ３１０Ａ／Ｈ４３５Ａ又はＨ３１０Ａ／Ｈ４３３Ａ／Ｙ４３６Ａ又はＬ２５１Ｄ／Ｌ３１４Ｄ／Ｌ４３２Ｄの組み合わせ又はこれらの組み合わせ（Ｋａｂａｔ  ＥＵインデックスナンバリングシステムに従ったナンバリング）を含む、ヒトＩｇＧ１又はヒトＩｇＧ４サブクラス（すなわちヒト起源に由来する）の両方の第１及び第２のＦｃ領域ポリペプチドを含むＦｃ領域を含み、それにより、全ての突然変異が、第１又は第２のＦｃ領域ポリペプチド中にあり、あるいは、１つ又は２つの突然変異が、第１のＦｃ領域ポリペプチド中にあり、１つ又は２つの突然変異が、第２のＦｃ領域ポリペプチド中にあり、第１及び第２のＦｃ領域ポリペプチド中の突然変異の全てが、まとめた場合、突然変異ｉ）Ｉ２５３Ａ、Ｈ３１０Ａ、及びＨ４３５Ａ、又はｉｉ）Ｈ３１０Ａ、Ｈ４３３Ａ、及びＹ４３６Ａ、又はｉｉｉ）Ｌ２５１Ｄ、Ｌ３１４Ｄ、及びＬ４３２ＤがＦｃ領域中に含まれることになるようにする、抗体。
【請求項１２】
請求項２〜８のいずれか一項記載の抗体であって、第１のならびに第２のＦｃ領域ポリペプチドにおいて突然変異Ｉ２５３Ａ／Ｈ３１０Ａ／Ｈ４３５Ａ又はＨ３１０Ａ／Ｈ４３３Ａ／Ｙ４３６Ａ又はＬ２５１Ｄ／Ｌ３１４Ｄ／Ｌ４３２Ｄの組み合わせ（Ｋａｂａｔ  ＥＵインデックスナンバリングシステムに従ったナンバリング）を含む、あるいは、第１のＦｃ領域ポリペプチドにおいて突然変異Ｉ２５３Ａ／Ｈ３１０Ａ／Ｈ４３５Ａの組み合わせ及び第２のＦｃ領域ポリペプチドにおいて突然変異Ｈ３１０Ａ／Ｈ４３３Ａ／Ｙ４３６Ａの組み合わせ（Ｋａｂａｔ  ＥＵインデックスナンバリングシステムに従ったナンバリング）を含む、ヒトＩｇＧ１又はヒトＩｇＧ４サブクラス（すなわちヒト起源に由来する）の両方の第１及び第２のＦｃ領域ポリペプチドを含むＦｃ領域を含む、抗体。
【請求項１３】
抗体が、ヒトＦｃＲｎに特異的に結合せず、及び／又はブドウ球菌プロテインＡに特異的に結合する、請求項２〜１２のいずれか一項記載の抗体。
【請求項１４】
請求項２〜１３のいずれか一項記載の抗体であって、抗体が、以下：
−  Ｆｃ領域ポリペプチドにおいて突然変異を有さない、対応する二重特異性抗体と比較して、より低い血清濃度を示し（マウスＦｃＲｎ欠損であるが、ヒトＦｃＲｎについて半接合トランスジェニックであるマウスにおける硝子体内適用後９６時間）、及び／又は
−  Ｆｃ領域ポリペプチドにおいて突然変異を有さない、対応する二重特異性抗体と比較して、右眼全体の溶解物中で同様の（０．８〜１．２倍）濃度を示し（マウスＦｃＲｎ欠損であるが、ヒトＦｃＲｎについて半接合トランスジェニックであるマウスでの右眼における硝子体内適用後９６時間）、及び／又は
−  ヒトＦｃＲｎへの無効になった結合を有し、及び／又は
−  ブドウ球菌プロテインＡへの結合を有さない（ＳＰＲにより決定）、及び／又は
−  ブドウ球菌プロテインＡへの維持された結合を有する（ＳＰＲにより決定）
ことで特徴付けられる、抗体。
【請求項１５】
請求項２〜１４のいずれか一項記載の抗体であって、以下：
ａ）配列番号５６のアミノ酸配列（ＨＶＲ−Ｈ１）、配列番号５７のアミノ酸配列（ＨＶＲ−Ｈ２）、及び配列番号５８のアミノ酸配列（ＨＶＲ−Ｈ３）をＨＶＲとして含む抗体重鎖ならびに配列番号５９のアミノ酸配列（ＨＶＲ−Ｌ１）、配列番号６０のアミノ酸配列（ＨＶＲ−Ｌ２）、及び配列番号６１のアミノ酸配列（ＨＶＲ−Ｌ３）をＨＶＲとして含む抗体軽鎖、又は
ｂ）配列番号６４のアミノ酸配列（ＨＶＲ−Ｈ１）、配列番号６５のアミノ酸配列（ＨＶＲ−Ｈ２）、及び配列番号６６のアミノ酸配列（ＨＶＲ−Ｈ３）をＨＶＲとして含む抗体重鎖ならびに配列番号６７のアミノ酸配列（ＨＶＲ−Ｌ１）、配列番号６８のアミノ酸配列（ＨＶＲ−Ｌ２）、及び配列番号６９のアミノ酸配列（ＨＶＲ−Ｌ３）をＨＶＲとして含む抗体軽鎖、又は
ｃ）配列番号７２のアミノ酸配列（ＨＶＲ−Ｈ１）、配列番号７３のアミノ酸配列（ＨＶＲ−Ｈ２）、及び配列番号７４のアミノ酸配列（ＨＶＲ−Ｈ３）をＨＶＲとして含む抗体重鎖ならびに配列番号７５のアミノ酸配列（ＨＶＲ−Ｌ１）、配列番号７６のアミノ酸配列（ＨＶＲ−Ｌ２）、及び配列番号７７のアミノ酸配列（ＨＶＲ−Ｌ３）をＨＶＲとして含む抗体軽鎖、又は
ｄ）配列番号８０のアミノ酸配列（ＨＶＲ−Ｈ１）、配列番号８１のアミノ酸配列（ＨＶＲ−Ｈ２）、及び配列番号８２のアミノ酸配列（ＨＶＲ−Ｈ３）をＨＶＲとして含む抗体重鎖ならびに配列番号８３のアミノ酸配列（ＨＶＲ−Ｌ１）、配列番号８４のアミノ酸配列（ＨＶＲ−Ｌ２）、及び配列番号８５のアミノ酸配列（ＨＶＲ−Ｌ３）をＨＶＲとして含む抗体軽鎖、又は
ｅ）配列番号８８のアミノ酸配列（ＨＶＲ−Ｈ１）、配列番号８９のアミノ酸配列（ＨＶＲ−Ｈ２）、及び配列番号９０のアミノ酸配列（ＨＶＲ−Ｈ３）をＨＶＲとして含む抗体重鎖ならびに配列番号９１のアミノ酸配列（ＨＶＲ−Ｌ１）、配列番号９２のアミノ酸配列（ＨＶＲ−Ｌ２）、及び配列番号９３のアミノ酸配列（ＨＶＲ−Ｌ３）をＨＶＲとして含む抗体軽鎖、又は
ｆ）配列番号０２のアミノ酸残基３１〜３５（ＨＶＲ−Ｈ１）、アミノ酸残基５０〜６６（ＨＶＲ−Ｈ２）、及びアミノ酸残基９９〜１０７（ＨＶＲ−Ｈ３）をＨＶＲとして含む抗体重鎖ならびに配列番号０４のアミノ酸残基２４〜３４（ＨＶＲ−Ｌ１）、アミノ酸残基５０〜５６（ＨＶＲ−Ｌ２）、及びアミノ酸残基８９〜９８（ＨＶＲ−Ｌ３）をＨＶＲとして含む抗体軽鎖、又は
ｇ）配列番号０１のアミノ酸残基３１〜３５（ＨＶＲ−Ｈ１）、アミノ酸残基５０〜６６（ＨＶＲ−Ｈ２）、及びアミノ酸残基９９〜１０７（ＨＶＲ−Ｈ３）をＨＶＲとして含む抗体重鎖ならびに配列番号０３のアミノ酸残基２４〜３４（ＨＶＲ−Ｌ１）、アミノ酸残基５０〜５６（ＨＶＲ−Ｌ２）、及びアミノ酸残基８９〜９８（ＨＶＲ−Ｌ３）をＨＶＲとして含む抗体軽鎖
を有する、抗体。
【請求項１６】
請求項２〜１５のいずれか一項記載の抗体であって、以下：
ａ）配列番号６２の重鎖可変ドメインＶＨ及び配列番号６３の軽鎖可変ドメインＶＬ、又は
ｂ）配列番号７０の重鎖可変ドメインＶＨ及び配列番号７１の軽鎖可変ドメインＶＬ、又は
ｃ）配列番号７８の重鎖可変ドメインＶＨ及び配列番号７９の軽鎖可変ドメインＶＬ、又は
ｄ）配列番号８６の重鎖可変ドメインＶＨ及び配列番号８７の軽鎖可変ドメインＶＬ、又は
ｅ）配列番号９４の重鎖可変ドメインＶＨ及び配列番号９５の軽鎖可変ドメインＶＬ、又は
ｆ）配列番号０５の重鎖可変ドメインＶＨ及び配列番号０７の軽鎖可変ドメインＶＬ、又は
ｇ）配列番号０６の重鎖可変ドメインＶＨ及び配列番号０８の軽鎖可変ドメインＶＬ
を含む、抗体。
【請求項１７】
請求項２〜１６のいずれか一項記載の抗体であって、
ｉ）第１のＦｃ領域ポリペプチドが、ヒトＩｇＧ１  Ｆｃ領域ポリペプチド、ヒトＩｇＧ２  Ｆｃ領域ポリペプチド、ヒトＩｇＧ３  Ｆｃ領域ポリペプチド、ヒトＩｇＧ４  Ｆｃ領域ポリペプチド、突然変異Ｌ２３４Ａ、Ｌ２３５Ａを伴うヒトＩｇＧ１  Ｆｃ領域ポリペプチド、突然変異Ｙ３４９Ｃ、Ｔ３６６Ｓ、Ｌ３６８Ａ、Ｙ４０７Ｖを伴うヒトＩｇＧ１  Ｆｃ領域ポリペプチド、突然変異Ｌ２３４Ａ、Ｌ２３５Ａ、Ｙ３４９Ｃ、Ｔ３６６Ｓ、Ｌ３６８Ａ、Ｙ４０７Ｖを伴うヒトＩｇＧ１  Ｆｃ領域ポリペプチド、突然変異Ｐ３２９Ｇを伴うヒトＩｇＧ１  Ｆｃ領域ポリペプチド、突然変異Ｌ２３４Ａ、Ｌ２３５Ａ、Ｐ３２９Ｇを伴うヒトＩｇＧ１  Ｆｃ領域ポリペプチド、突然変異Ｐ３２９Ｇ、Ｙ３４９Ｃ、Ｔ３６６Ｓ、Ｌ３６８Ａ、Ｙ４０７Ｖを伴うヒトＩｇＧ１  Ｆｃ領域ポリペプチド、突然変異Ｌ２３４Ａ、Ｌ２３５Ａ、Ｐ３２９Ｇ、Ｙ３４９Ｃ、Ｔ３６６Ｓ、Ｌ３６８Ａ、Ｙ４０７Ｖを伴うヒトＩｇＧ１  Ｆｃ領域ポリペプチド、突然変異Ｓ２２８Ｐ、Ｌ２３５Ｅを伴うヒトＩｇＧ４  Ｆｃ領域ポリペプチド、突然変異Ｓ２２８Ｐ、Ｌ２３５Ｅ、Ｐ３２９Ｇを伴うヒトＩｇＧ４  Ｆｃ領域ポリペプチド、突然変異Ｙ３４９Ｃ、Ｔ３６６Ｓ、Ｌ３６８Ａ、Ｙ４０７Ｖを伴うヒトＩｇＧ４  Ｆｃ領域ポリペプチド、突然変異Ｓ２２８Ｐ、Ｌ２３５Ｅ、Ｙ３４９Ｃ、Ｔ３６６Ｓ、Ｌ３６８Ａ、Ｙ４０７Ｖを伴うヒトＩｇＧ４  Ｆｃ領域ポリペプチド、突然変異Ｐ３２９Ｇを伴うヒトＩｇＧ４  Ｆｃ領域ポリペプチド、突然変異Ｐ３２９Ｇ、Ｙ３４９Ｃ、Ｔ３６６Ｓ、Ｌ３６８Ａ、Ｙ４０７Ｖを伴うヒトＩｇＧ４  Ｆｃ領域ポリペプチド、突然変異Ｓ２２８Ｐ、Ｌ２３５Ｅ、Ｐ３２９Ｇ、Ｙ３４９Ｃ、Ｔ３６６Ｓ、Ｌ３６８Ａ、Ｙ４０７Ｖを伴うヒトＩｇＧ４  Ｆｃ領域ポリペプチドを含む群より選択され、ならびに
ｉｉ）第２のＦｃ領域ポリペプチドが、ヒトＩｇＧ１  Ｆｃ領域ポリペプチド、ヒトＩｇＧ２  Ｆｃ領域ポリペプチド、ヒトＩｇＧ３  Ｆｃ領域ポリペプチド、ヒトＩｇＧ４  Ｆｃ領域ポリペプチド、突然変異Ｌ２３４Ａ、Ｌ２３５Ａを伴うヒトＩｇＧ１  Ｆｃ領域ポリペプチド、突然変異Ｓ３５４Ｃ、Ｔ３６６Ｗを伴うヒトＩｇＧ１  Ｆｃ領域ポリペプチド、突然変異Ｌ２３４Ａ、Ｌ２３５Ａ、Ｓ３５４Ｃ、Ｔ３６６Ｗを伴うヒトＩｇＧ１  Ｆｃ領域ポリペプチド、突然変異Ｐ３２９Ｇを伴うヒトＩｇＧ１  Ｆｃ領域ポリペプチド、突然変異Ｌ２３４Ａ、Ｌ２３５Ａ、Ｐ３２９Ｇを伴うヒトＩｇＧ１  Ｆｃ領域ポリペプチド、突然変異Ｐ３２９Ｇ、Ｓ３５４Ｃ、Ｔ３６６Ｗを伴うヒトＩｇＧ１  Ｆｃ領域ポリペプチド、突然変異Ｌ２３４Ａ、Ｌ２３５Ａ、Ｐ３２９Ｇ、Ｓ３５４Ｃ、Ｔ３６６Ｗを伴うヒトＩｇＧ１  Ｆｃ領域ポリペプチド、突然変異Ｓ２２８Ｐ、Ｌ２３５Ｅを伴うヒトＩｇＧ４  Ｆｃ領域ポリペプチド、突然変異Ｓ２２８Ｐ、Ｌ２３５Ｅ、Ｐ３２９Ｇを伴うヒトＩｇＧ４  Ｆｃ領域ポリペプチド、突然変異Ｓ３５４Ｃ、Ｔ３６６Ｗを伴うヒトＩｇＧ４  Ｆｃ領域ポリペプチド、突然変異Ｓ２２８Ｐ、Ｌ２３５Ｅ、Ｓ３５４Ｃ、Ｔ３６６Ｗを伴うヒトＩｇＧ４  Ｆｃ領域ポリペプチド、突然変異Ｐ３２９Ｇを伴うヒトＩｇＧ４  Ｆｃ領域ポリペプチド、突然変異Ｐ３２９Ｇ、Ｓ３５４Ｃ、Ｔ３６６Ｗを伴うヒトＩｇＧ４  Ｆｃ領域ポリペプチド、及び突然変異Ｓ２２８Ｐ、Ｌ２３５Ｅ、Ｐ３２９Ｇ、Ｓ３５４Ｃ、Ｔ３６６Ｗを伴うヒトＩｇＧ４  Ｆｃ領域ポリペプチドを含む群より選択される、抗体。
【請求項１８】
請求項２〜１７のいずれか一項記載の抗体であって、
ｉ）第１のＦｃ領域ポリペプチドが、配列番号１４、１５、１６、１７、１８、１９、２１、２３、２４、２５、２７、２９、３０、３２、３４、３５、３６、及び３８を含む群より選択されるアミノ酸配列を有し、ならびに
ｉｉ）第２のＦｃ領域ポリペプチドが、配列番号１４、１５、１６、１７、１８、２０、２２、２３、２４、２６、２８、２９、３０、３１、３３、３５、３７、及び３９を含む群より選択されるアミノ酸配列を有する、抗体。
【請求項１９】
請求項２〜１７のいずれか一項記載の抗体であって、
ｉ）Ｆｃ領域ポリペプチドがヒトＩｇＧ１  Ｆｃ領域ポリペプチドであり、第２のＦｃ領域ポリペプチドがヒトＩｇＧ１  Ｆｃ領域ポリペプチドであり、又は
ｉｉ）第１のＦｃ領域ポリペプチドが、突然変異Ｌ２３４Ａ、Ｌ２３５Ａを伴うヒトＩｇＧ１  Ｆｃ領域ポリペプチドであり、第２のＦｃ領域ポリペプチドが、突然変異Ｌ２３４Ａ、Ｌ２３５Ａを伴うヒトＩｇＧ１  Ｆｃ領域ポリペプチドであり、又は
ｉｉｉ）第１のＦｃ領域ポリペプチドが、突然変異Ｌ２３４Ａ、Ｌ２３５Ａ、Ｐ３２９Ｇを伴うヒトＩｇＧ１  Ｆｃ領域ポリペプチドであり、第２のＦｃ領域ポリペプチドが、突然変異Ｌ２３４Ａ、Ｌ２３５Ａ、Ｐ３２９Ｇを伴うヒトＩｇＧ１  Ｆｃ領域ポリペプチドであり、又は
ｉｖ）第１のＦｃ領域ポリペプチドが、突然変異Ｌ２３４Ａ、Ｌ２３５Ａ、Ｓ３５４Ｃ、Ｔ３６６Ｗを伴うヒトＩｇＧ１  Ｆｃ領域ポリペプチドであり、第２のＦｃ領域ポリペプチドが、突然変異Ｌ２３４Ａ、Ｌ２３５Ａ、Ｙ３４９Ｃ、Ｔ３６６Ｓ、Ｌ３６８Ａ、Ｙ４０７Ｖを伴うヒトＩｇＧ１  Ｆｃ領域ポリペプチドであり、又は
ｖ）第１のＦｃ領域ポリペプチドが、突然変異Ｌ２３４Ａ、Ｌ２３５Ａ、Ｐ３２９Ｇ、Ｓ３５４Ｃ、Ｔ３６６Ｗを伴うヒトＩｇＧ１  Ｆｃ領域ポリペプチドであり、第２のＦｃ領域ポリペプチドが、突然変異Ｌ２３４Ａ、Ｌ２３５Ａ、Ｐ３２９Ｇ、Ｙ３４９Ｃ、Ｔ３６６Ｓ、Ｌ３６８Ａ、Ｙ４０７Ｖを伴うヒトＩｇＧ１  Ｆｃ領域ポリペプチドであり、又は
ｖｉ）第１のＦｃ領域ポリペプチドがヒトＩｇＧ４  Ｆｃ領域ポリペプチドであり、第２のＦｃ領域ポリペプチドがヒトＩｇＧ４  Ｆｃ領域ポリペプチドであり、又は
ｖｉｉ）第１のＦｃ領域ポリペプチドが、突然変異Ｓ２２８Ｐ、Ｌ２３５Ｅを伴うヒトＩｇＧ４  Ｆｃ領域ポリペプチドであり、第２のＦｃ領域ポリペプチドが、突然変異Ｓ２２８Ｐ、Ｌ２３５Ｅを伴うヒトＩｇＧ４  Ｆｃ領域ポリペプチドであり、又は
ｖｉｉｉ）第１のＦｃ領域ポリペプチドが、突然変異Ｓ２２８Ｐ、Ｌ２３５Ｅ、Ｐ３２９Ｇを伴うヒトＩｇＧ４  Ｆｃ領域ポリペプチドであり、第２のＦｃ領域ポリペプチドが、突然変異Ｓ２２８Ｐ、Ｌ２３５Ｅ、Ｐ３２９Ｇを伴うヒトＩｇＧ４  Ｆｃ領域ポリペプチドであり、又は
ｉｘ）第１のＦｃ領域ポリペプチドが、突然変異Ｓ２２８Ｐ、Ｌ２３５Ｅ、Ｓ３５４Ｃ、Ｔ３６６Ｗを伴うヒトＩｇＧ４  Ｆｃ領域ポリペプチドであり、第２のＦｃ領域ポリペプチドが、突然変異Ｓ２２８Ｐ、Ｌ２３５Ｅ、Ｙ３４９Ｃ、Ｔ３６６Ｓ、Ｌ３６８Ａ、Ｙ４０７Ｖを伴うヒトＩｇＧ４  Ｆｃ領域ポリペプチドであり、又は
ｘ）第１のＦｃ領域ポリペプチドが、突然変異Ｓ２２８Ｐ、Ｌ２３５Ｅ、Ｐ３２９Ｇ、Ｓ３５４Ｃ、Ｔ３６６Ｗを伴うヒトＩｇＧ４  Ｆｃ領域ポリペプチドであり、第２のＦｃ領域ポリペプチドが、突然変異Ｓ２２８Ｐ、Ｌ２３５Ｅ、Ｐ３２９Ｇ、Ｙ３４９Ｃ、Ｔ３６６Ｓ、Ｌ３６８Ａ、Ｙ４０７Ｖを伴うヒトＩｇＧ４  Ｆｃ領域ポリペプチドである、抗体。
【請求項２０】
請求項２〜１９のいずれか一項記載の抗体であって、
ｉ）第１のＦｃ領域ポリペプチドが配列番号１４のアミノ酸配列を有し、第２のＦｃ領域ポリペプチドが配列番号１４のアミノ酸配列を有し、又は
ｉｉ）第１のＦｃ領域ポリペプチドが配列番号１８のアミノ酸配列を有し、第２のＦｃ領域ポリペプチドが配列番号１８のアミノ酸配列を有し、又は
ｉｉｉ）第１のＦｃ領域ポリペプチドが配列番号２４のアミノ酸配列を有し、第２のＦｃ領域ポリペプチドが配列番号２４のアミノ酸配列を有し、又は
ｉｖ）第１のＦｃ領域ポリペプチドが配列番号２２のアミノ酸配列を有し、第２のＦｃ領域ポリペプチドが配列番号２１のアミノ酸配列を有し、又は
ｖ）第１のＦｃ領域ポリペプチドが配列番号２８のアミノ酸配列を有し、第２のＦｃ領域ポリペプチドが配列番号２７のアミノ酸配列を有し、又は
ｖｉ）第１のＦｃ領域ポリペプチドが配列番号１７のアミノ酸配列を有し、第２のＦｃ領域ポリペプチドが配列番号１７のアミノ酸配列を有し、又は
ｖｉｉ）第１のＦｃ領域ポリペプチドが配列番号２９のアミノ酸配列を有し、第２のＦｃ領域ポリペプチドが配列番号２９のアミノ酸配列を有し、又は
ｖｉｉｉ）第１のＦｃ領域ポリペプチドが配列番号３０のアミノ酸配列を有し、第２のＦｃ領域ポリペプチドが配列番号３０のアミノ酸配列を有し、又は
ｉｘ）第１のＦｃ領域ポリペプチドが配列番号３３のアミノ酸配列を有し、第２のＦｃ領域ポリペプチドが配列番号３４のアミノ酸配列を有し、又は
ｘ）第１のＦｃ領域ポリペプチドが配列番号３９のアミノ酸配列を有し、第２のＦｃ領域ポリペプチドが配列番号３８のアミノ酸配列を有する、抗体。
【請求項２１】
血管性眼疾患の処置のための、請求項２〜２０のいずれか一項記載の抗ＩＧＦ−１Ｒ抗体の使用。
【請求項２２】
請求項２〜２０のいずれか一項記載の抗ＩＧＦ−１Ｒ抗体を、そのような処置の必要のある患者に投与することによる、眼血管疾患に罹患した患者の処置の方法。
【請求項２３】
硝子体内適用のための、請求項２〜２０のいずれか一項記載の抗ＩＧＦ−１Ｒ抗体。
【請求項２４】
血管性眼疾患の処置のための、請求項２〜２０のいずれか一項記載の抗ＩＧＦ−１Ｒ抗体。
【請求項２５】
請求項２〜２０のいずれか一項記載の抗ＩＧＦ−１Ｒ抗体、及び場合により、医薬的に許容可能な担体を含む医薬製剤。
【請求項２６】
医薬としての使用のための、請求項２〜２０のいずれか一項記載の抗ＩＧＦ−１Ｒ抗体。
【請求項２７】
血管性眼疾患を処置する際での使用のための、請求項２〜２０のいずれか一項記載の抗ＩＧＦ−１Ｒ抗体。
【請求項２８】
処置の方法における使用のための、請求項２〜２０のいずれか一項記載の抗ＩＧＦ−１Ｒ抗体。
【請求項２９】
請求項２〜２０のいずれか一項記載の抗ＩＧＦ−１Ｒ抗体の効果的な量を個体に投与することを含む、血管性眼疾患を有する個体を処置する方法における使用のための、請求項２〜２０のいずれか一項記載の抗ＩＧＦ−１Ｒ抗体。
【請求項３０】
方法が、少なくとも１つの追加の治療薬剤の効果的な量を個体に投与することをさらに含む、請求項２９記載の抗体。
【請求項３１】
ＩＧＦ−１Ｒシグナル伝達を阻害するための、請求項２〜２０のいずれか一項記載の効果的な抗ＩＧＦ−１Ｒ抗体を個体に投与することを含む、個体において血管新生を阻害する方法における使用のための、請求項２〜２０のいずれか一項記載の抗ＩＧＦ−１Ｒ抗体。
【請求項３２】
医薬の製造における、請求項２〜２０のいずれか一項記載の抗ＩＧＦ−１Ｒ抗体の使用。
【請求項３３】
医薬が、血管性眼疾患の処置のためである、請求項３２記載の使用。
【請求項３４】
医薬が、医薬の効果的な量を、血管性眼疾患を有する個体に投与することを含む、血管性眼疾患を処置する方法における使用のためである、請求項３２〜３３のいずれか一項記載の使用。
【請求項３５】
方法が、少なくとも１つの追加の治療薬剤の効果的な量を個体に投与することをさらに含む、請求項３４記載の使用。
【請求項３６】
医薬が、血管新生を阻害するためである、請求項３２〜３５のいずれか一項記載の使用。
【請求項３７】
医薬が、ＩＧＦ−１Ｒ媒介性シグナル伝達を阻害するために効果的な医薬の量を個体に投与することを含む、個体において血管新生を阻害する方法における使用のためである、請求項３２〜３６のいずれか一項記載の使用。
【請求項３８】
血管性眼疾患を処置するための方法であって、請求項２〜２０のいずれか一項記載の抗ＩＧＦ−１Ｒ抗体の効果的な量を、そのような血管性眼疾患を有する個体に投与することを含む方法。
【請求項３９】
少なくとも１つの追加の治療薬剤の効果的な量を個体に投与することをさらに含む、請求項３８記載の方法。
【請求項４０】
ＩＧＦ−１Ｒ媒介性シグナル伝達を阻害するための、請求項２〜２０のいずれか一項記載の抗ＩＧＦ−１Ｒ抗体の効果的な量を個体に投与することを含む、個体において眼における血管新生を阻害するための方法。
【請求項４１】
請求項２〜２０のいずれか一項記載の、抗ＩＧＦ−１Ｒ抗体を含む医薬製剤。
【請求項４２】
硝子体内投与である、請求項２２、２９〜３１、３４〜３５、及び３７〜４０のいずれか一項記載の投与。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
発明の分野
本発明は、ヒトインスリン様成長因子１受容体（ＩＧＦ−１Ｒ）対するＦｃＲｎ結合サイレント抗体、それらの産生のための方法、これらの抗体を含む医薬組成物、及びそれらの使用に関する。
【０００２】
背景
インスリン様成長因子１受容体（ＩＧＦ−１Ｒ、ＥＣ２．７．１０．１、ＣＤ２２１抗原）は、膜貫通タンパク質チロシンキナーゼのファミリーに属する（LeRoith, D., et al., Endocrin. Rev. 16 (1995) 143-163；及びAdams, T.E., et al., Cell. Mol. Life Sci. 57 (2000) 1050-1063）。ＩＧＦ−１Ｒは、高親和性を伴いＩＧＦ−１に結合し、このリガンドに対する生理学的応答をインビボで開始する。ＩＧＦ−１ＲはＩＧＦ−２にも結合するが、しかし、わずかに低い親和性を伴う。ＩＧＦ−１Ｒの過剰発現は、細胞の新生物形質転換を促進し、ＩＧＦ−１Ｒが細胞の悪性形質転換に関与し、従って、癌の処置のための治療薬剤の開発のための有用な標的であるとの証拠がある（Adams, T.E., et al., Cell. Mol. Life Sci. 57 (2000) 1050-1063）。
【０００３】
血管新生は、固形腫瘍、眼内血管新生症候群、例えば増殖性網膜症又は加齢性黄斑変性症（ＡＭＤ）、関節リウマチ、及び乾癬などを含む種々の障害の病因に関与する（Folkman, J., et al., J. Biol.Chem.267 (1992) 10931-10934; Klagsbrun, M., et al., Annu.Rev.Physiol.53 (1991) 217-239；及びGarner, A., Vascular diseases, in: Pathobiology of ocular disease, A dynamic approach, Garner, A., and Klintworth, G. K. (eds.), 2nd edition, Marcel Dekker, New York (1994), pp.1625-1710）。
【０００４】
血管性眼疾患、例えば加齢性黄斑変性症（ＡＭＤ）及び糖尿病性網膜症（ＤＲ）などは、それぞれ、異常な脈絡膜又は網膜血管新生に起因する。それらは先進国における視力喪失の主な原因である。網膜は、ニューロン、グリア、及び血管要素の十分に定義された層からなるため、そのような血管増殖又は浮腫に見られるような比較的小さな乱れが、視覚機能の有意な喪失に導きうる。遺伝性網膜変性（例えば網膜色素変性症（ＲＰ）など）が、また、血管異常（例えば細動脈狭窄及び血管萎縮など）に関連付けられる。それらは、３，５００人中１人という多くに影響し、進行性夜盲症、視野喪失、視神経萎縮、細動脈減弱、及び、しばしば、完全な失明に進行する、視力の中心喪失により特徴付けられる。
【０００５】
虚血性網膜症は、血流の低下及び低酸素をもたらす網膜血管系の喪失又は機能不全により特徴付けられる。網膜は、新たな血管を成長させるためのシグナルを生成することにより、低酸素に応答するが、しかし、これらの新たな血管は、通常、脆弱で無秩序である。それは、視力への脅威の大半を生み出す、これらの異常な新たな血管の成長である。なぜなら、それらは、漏出し、出血に導く、又は網膜剥離に至りうる瘢痕化に導き得るからである。虚血性網膜症のための現在の処置は、病的な血管の成長を停止しようとするが、それらの成長を駆動する、基礎となる虚血に対処しない。さらに、何百万人に影響を与える、糖尿病性網膜症、虚血性網膜症のための標準的な処置は、新たな血管成長を停止させ、中心視野を保存する試みにおいて、レーザーを用いた、網膜の一部の破壊を含む。戦略が、血管成長の主要なプロモーターである血管内皮成長因子（ＶＥＧＦ）の機能を遮断するために用いられてきた。短期的には、抗ＶＥＧＦ治療は、視力を向上させることができるが、しかし、それは、基礎となる虚血には対処しておらず、実際には、この状態を悪化させうる。なぜなら、それは、有益な側副血管を含む全ての血管成長を阻害するからである。新たな血管成長が、虚血性脳、心臓、又は四肢において要求されうる高齢者及び／又は糖尿病患者において、これらの薬物の全身曝露の深刻な懸念もある。
【０００６】
典型的には、眼疾患のために、しばしば、硝子体内適用を介して、Ｆａｂ又はＦａｂ２のようなより小さな抗体フラグメントが使用される。なぜなら、それらは、低い血清半減期を有し、全身毒性のリスクがより低いからである。しかし、このより小さなフラグメントは、典型的には、また、より低い硝子体内半減期（例えば、血清中へのより速い拡散に起因する）を有し、典型的には、より頻繁に投与されなければならない。
【０００７】
Kimら（Kim, H., et al., Invest. Ophthalmol. Vis. Sci. 49 (2008) 2025-2029）は、網膜色素上皮及び脈絡膜組織を除き、毛様体及び虹彩、網膜、結膜、角膜、レンズ、及び視神経束を含む眼組織が、予測された大きさでＦｃＲｎ転写物の存在を示したことを報告している。血液眼関門が、ＦｃＲｎ受容体の発現を示し、眼組織から血液系へのＩｇＧの輸送で、この受容体が使用されうることを示している。眼内部組織（例えば網膜など）は、血液眼関門により血液系から分離されているため、硝子体内注射後の短時間だけで、血液系において全長抗体が検出されることは予測されないであろう。しかし、サル及びヒトからの最近の薬物動態学的データの全てが、硝子体内ベバシズマブが硝子体内注射後の数時間以内に血液中に現れることを示している。従って、結膜リンパ管におけるＦｃＲｎ受容体の機能は、結膜空間からの抗原−抗体ＩｇＧ複合体の効率的な排除のための排出受容体として作用することでありうる。同様の分子量にもかかわらず、ＩｇＧ（１５０kDa）が房水中で検出された。しかし、ＩｇＡ（１６０kDa）は検出されなかった。血清から房水中へのＩｇＧとＩｇＡの浸透の間での相違が、ＩｇＧについて選択的である、ＦｃＲｎ受容体の存在により説明されうる。
【０００８】
Kimら（Kim, H., et al., Mol. Vis. 15 (2009) 2803-2812）は、さらに、直接的な硝子体内注射は、治療用抗体を、網膜障害のために、眼の後部に送達するための一般的なアプローチとなっていることを報告している。硝子体内に投与されたベバシズマブ（ＬｇＧ）及びニワトリＩｇＹの両方が、内境界膜の障壁を乗り越えて、より深い網膜構造中に拡散した。網膜を介して拡散した後、ベバシズマブは、血液網膜関門を越えて、全身循環中に漏出した。網膜内ニワトリＩｇＹは、血液網膜関門の反管腔側だけに沿って局在化した。さらに、脈絡膜血管は、ニワトリＩｇＹの存在について陰性であった。注射用量の３０%までに相当する、硝子体内投与後のベバシズマブの生理学的に関連する血清レベルが見いだされた。これは、以前に認識されたよりも、全身性副作用のリスクが高いことを示唆する。血液眼関門は、全身循環中に全長ＩｇＧを輸送し、取り除くための固有の機構を呈示する。彼らの現在の試験によって、この機構が、新生児Ｆｃ受容体であるとの仮説が確認されている。
【０００９】
当技術分野において、種々の血管性眼疾患（例えば虚血性網膜症など）を処置及び予防するためのより良い手段についての必要性がある。
【００１０】
ＷＯ  ２００８／０７７５４６において、インスリン様成長因子Ｉ受容体に対する抗体及びその使用が報告されている。
【００１１】
ＷＯ  ２００９／１２６３０４において、抗ＩＧＦ−１Ｒ抗体及び他の化合物の治療的な組合せが報告されている。
【００１２】
Magdelaine-Beuzelin, Cらは、眼科における治療用抗体について流行は巡ると報告している（MABS 2 (2010) 176-180）。
【００１３】
Steinbrook, Rは視力の代償−ラニビズマブ、ベバシズマブ、及び黄斑変性の処置を報告している（New Eng. J. Med.355 (2006) 1409-1412）。
【００１４】
Kim, J.K.らは、ＭＨＣクラスＩ関連受容体ＦｃＲｎの結合について、ヒトＩｇＧ上の部位のマッピングを報告している（Eur. J. Immunol. 29 (1999) 2819-2825）。
【００１５】
Kuo, T.T.らは、新生児Ｆｃ受容体について報告している：免疫から治療薬へ（J. Clin. Immunol. 30 (2010) 777-789）。
【００１６】
Kuo, T.T.らは、新生児Ｆｃ受容体及びＩｇＧベースの治療薬について報告している（MABS 3 (2011) 422-438）。
【００１７】
Medesan, Cらは、マウスＩｇＧ１のトランスサイトーシス及び異化に関与するアミノ酸残基の描写を報告している（J. Immunol. 158 (1997) 2211-2217）。
【００１８】
Qiao, S.-W.らは、抗原の抗体媒介性提示のＦｃＲｎ依存性を報告している（Proc. Natl. Acad. Sci. USA 105 (2008) 9337-9342）。
【００１９】
ＷＯ  ２００６／０３１３７０において、変化したエフェクター機能を伴うポリペプチド突然変異体が報告されている。
【００２０】
概要
ＦｃＲｎ結合が無効となった抗ＩＧＦ−１Ｒ抗体を、眼におけるＩＧＦ−１Ｒ関連障害（血管性眼疾患）の処置のために使用することができることが見出されている。
【００２１】
本明細書において報告する一態様は、眼におけるＩＧＦ−１Ｒの阻害のための、ヒト新生児Ｆｃ受容体（ＦｃＲｎ）結合が無効になった抗ＩＧＦ−１Ｒ抗体の使用である。
【００２２】
本明細書において報告する一態様は、血管性眼疾患の処置のための、ヒト新生児Ｆｃ受容体（ＦｃＲｎ）結合が無効になった抗ＩＧＦ−１Ｒ抗体の使用である。
【００２３】
一実施態様において、抗ＩＧＦ−１Ｒ抗体は、表面プラズモン共鳴ベースの決定方法を使用して、（残りの）検出可能なＦｃＲｎ結合を有していない。
【００２４】
一実施態様において、抗ＩＧＦ−１Ｒ抗体は、ｐＨ６で１．７μMを上回るＫＤ値を伴い、即ち、低親和性を伴い、ヒトＦｃＲｎに結合する。
【００２５】
全ての態様の一実施態様において、抗体は、突然変異Ｉ２５３Ａ／Ｈ３１０Ａ／Ｈ４３５Ａ又はＨ３１０Ａ／Ｈ４３３Ａ／Ｙ４３６Ａ又はＬ２５１Ｄ／Ｌ３１４Ｄ／Ｌ４３２Ｄ又はそれらの組み合わせ（Ｋａｂａｔ  ＥＵインデックスナンバリングシステムに従ったナンバリング）を伴うＦｃ領域を含む抗体と同じ、又はそれより短いＦｃＲｎ親和性クロマトグラフィーカラム上での保持時間を有する。
【００２６】
全ての態様の一実施態様において、抗体は、３分又はそれ以下の、ＦｃＲｎ親和性クロマトグラフィーカラム上での保持時間を有する。
【００２７】
一実施態様において、ＦｃＲｎ親和性カラムは、５０mm×５mmのカラム寸法を有し、ベッドの高さは５cmであり、充填物は５０μg抗体である。一実施態様において、平衡化緩衝液は、ｐＨ５．５に調整した、１５０mM  ＮａＣｌを伴う２０mM  ＭＥＳであり、溶出緩衝液は、ｐＨ８．８に調整した、１５０mM  ＮａＣｌを伴う２０mM  Ｔｒｉｓ／ＨＣｌであり、溶出は、７．５ＣＶで平衡化緩衝液、３０ＣＶで０〜１００%溶出緩衝液、その後１０ＣＶで溶出緩衝液を適用することによる。
【００２８】
一実施態様において、抗ＩＧＦ−１Ｒ抗体は、抗ＩＧＦ−１Ｒ抗体のＣＨ２及び／又はＣＨ３ドメイン中の単一又は複数の点突然変異に起因して、ヒトＦｃＲｎカラムに結合しない。一実施態様において、抗体は、４つの点突然変異（ＨＣ１：Ｉ２５３Ａ、Ｈ３１０Ａ、Ｈ４３５Ａ；ＨＣ２：Ｈ３１０Ａ）を伴う抗ＩＧＦ−１Ｒ抗体と同等の、即ち、＋／−１０%内、又はより短いＦｃＲｎカラム上での保持時間を有する。
【００２９】
一実施態様において、抗ＩＧＦ−１Ｒ抗体は、突然変異Ｌ２５１Ｄ、Ｍ２５２Ｔ、Ｉ２５３Ａ、Ｓ２５４Ｗ、Ｓ２５４Ｒ、Ｈ３１０Ａ、Ｎ４３４Ｌ、Ｈ４３５Ａ、Ｙ４３６Ａ（Ｋａｂａｔ  ＥＵインデックスナンバリングシステムに従ったナンバリング）の少なくとも１つを伴うＦｃ領域を含む抗体とほぼ同じ、又はより少ない親和性を伴い、ヒトＦｃＲｎに結合する。
【００３０】
一実施態様において、抗ＩＧＦ−１Ｒ抗体は、突然変異Ｉ２５３Ａ／Ｈ３１０Ａ／Ｈ４３５Ａ又はＨ３１０Ａ／Ｈ４３３Ａ／Ｙ４３６Ａ又はＬ２５１Ｄ／Ｌ３１４Ｄ／Ｌ４３２Ｄ又はそれらの組み合わせ（Ｋａｂａｔ  ＥＵインデックスナンバリングシステムに従ったナンバリング）を伴うＦｃ領域を含む抗体とほぼ同じ、又はそれより少ない親和性を伴い、ヒトＦｃＲｎに結合する。
【００３１】
一実施態様において、抗ＩＧＦ−１Ｒ抗体は、配列番号０１又は配列番号９６の重鎖アミノ酸配列及び配列番号０３の軽鎖アミノ酸配列を伴う抗体、あるいは配列番号０２又は配列番号９６の重鎖アミノ酸配列及び配列番号０４の軽鎖アミノ酸配列を伴う抗体とほぼ同じ、又はそれより少ない親和性を伴い、ヒトＦｃＲｎに結合する。
【００３２】
一実施態様において、抗ＩＧＦ−１Ｒ抗体は、突然変異Ｌ２５１Ｄ、Ｍ２５２Ｔ、Ｉ２５３Ａ、Ｓ２５４Ｗ、Ｓ２５４Ｒ、Ｈ３１０Ａ、Ｈ４３３Ａ、Ｎ４３４Ｌ、Ｈ４３５Ａ、Ｙ４３６Ａ（Ｋａｂａｔ  ＥＵインデックスナンバリングシステムに従ったナンバリング）又はそれらの組み合わせの少なくとも１つを有する。
【００３３】
一実施態様において、抗ＩＧＦ−１Ｒ抗体は、第１のＦｃ領域ポリペプチド中に突然変異Ｌ２５１Ｄ、Ｍ２５２Ｔ、Ｉ２５３Ａ、Ｓ２５４Ｗ、Ｓ２５４Ｒ、Ｈ３１０Ａ、Ｈ４３３Ａ、Ｎ４３４Ｌ、Ｈ４３５Ａ、Ｙ４３６Ａ（Ｋａｂａｔ  ＥＵインデックスナンバリングシステムに従ったナンバリング）の少なくとも１つ及び第２のＦｃ領域ポリペプチド中に突然変異Ｌ２５１Ｄ、Ｍ２５２Ｔ、Ｉ２５３Ａ、Ｓ２５４Ｗ、Ｓ２５４Ｒ、Ｈ３１０Ａ、Ｈ４３３Ａ、Ｎ４３４Ｌ、Ｈ４３５Ａ、Ｙ４３６Ａ（Ｋａｂａｔ  ＥＵインデックスナンバリングシステムに従ったナンバリング）の少なくとも１つを有する。
【００３４】
一実施態様において、抗ＩＧＦ−１Ｒ抗体は、第１のＦｃ領域ポリペプチド中に少なくとも突然変異Ｉ２５３Ａ／Ｈ３１０Ａ／Ｈ４３５Ａ又はＨ３１０Ａ／Ｈ４３３Ａ／Ｙ４３６Ａ又はＬ２５１Ｄ／Ｌ３１４Ｄ／Ｌ４３２Ｄ又はそれらの組み合わせ（Ｋａｂａｔ  ＥＵインデックスナンバリングシステムに従ったナンバリング）及び第２のＦｃ領域ポリペプチド中に突然変異Ｌ２５１Ｄ、Ｍ２５２Ｔ、Ｉ２５３Ａ、Ｓ２５４Ｗ、Ｓ２５４Ｒ、Ｈ３１０Ａ、Ｈ４３３Ａ、Ｎ４３４Ｇ、Ｎ４３４Ｌ、Ｈ４３５Ａ、Ｙ４３６Ａ（Ｋａｂａｔ  ＥＵインデックスナンバリングシステムに従ったナンバリング）の少なくとも１つを有する。
【００３５】
一実施態様において、抗ＩＧＦ−１Ｒ抗体は、両方のＦｃ領域ポリペプチド中に少なくとも突然変異Ｉ２５３Ａ／Ｈ３１０Ａ／Ｈ４３５Ａ又はＨ３１０Ａ／Ｈ４３３Ａ／Ｙ４３６Ａ又はＬ２５１Ｄ／Ｌ３１４Ｄ／Ｌ４３２Ｄ又はそれらの組み合わせ（Ｋａｂａｔ  ＥＵインデックスナンバリングシステムに従ったナンバリング）を有する。
【００３６】
一実施態様において、抗ＩＧＦ−１Ｒ抗体は、以下を有する：
ａ）配列番号０１又は配列番号０２のアミノ酸残基３１〜３５（ＨＶＲ−Ｈ１）、アミノ酸残基５０〜６６（ＨＶＲ−Ｈ２）、及びアミノ酸残基９９〜１０７（ＨＶＲ−Ｈ３）をＨＶＲとして含む抗体重鎖、及び
ｂ）配列番号０３又は配列番号０４のアミノ酸残基２４〜３４（ＨＶＲ−Ｌ１）、アミノ酸残基５０〜５６（ＨＶＲ−Ｌ２）、及びアミノ酸残基８９〜９８（ＨＶＲ−Ｌ３）をＨＶＲとして含む抗体軽鎖。
【００３７】
１つの好ましい実施態様において、抗ＩＧＦ−１Ｒ抗体は、以下を有する：
ａ）配列番号０１のアミノ酸残基３１〜３５（ＨＶＲ−Ｈ１）、アミノ酸残基５０〜６６（ＨＶＲ−Ｈ２）、及びアミノ酸残基９９〜１０７（ＨＶＲ−Ｈ３）をＨＶＲとして含む抗体重鎖、及び
ｂ）配列番号０３のアミノ酸残基２４〜３４（ＨＶＲ−Ｌ１）、アミノ酸残基５０〜５６（ＨＶＲ−Ｌ２）、及びアミノ酸残基８９〜９８（ＨＶＲ−Ｌ３）をＨＶＲとして含む抗体軽鎖。
【００３８】
これらは、ＷＯ  ２００５／００５６３５に詳細に記載されている、ＡＫ１８（＜ＩＧＦ−１Ｒ＞ ＨＵＭＡＢクローン１８）の配列である。
【００３９】
別の好ましい実施態様において、抗ＩＧＦ−１Ｒ抗体は、ＷＯ  ２０１３／０４１４６２に詳細に記載される通りの、改善された親和性を伴うＡＫ１８（＜ＩＧＦ−１Ｒ＞ ＨＵＭＡＢクローン１８）に由来する、改変された重鎖可変ドメイン（ＶＨ）及び軽鎖可変ドメイン（ＶＬ）、ならびにそれぞれのＨＶＲを含んだ。本明細書に記載する通りの、Ｆｃ領域突然変異との組み合わせにおける、親和性が改善された抗ＩＧＦ−１Ｒ抗体は、それぞれの血管性眼疾患及び炎症性疾患の処置のために特に有用である。
【００４０】
従って、１つの好ましい実施態様において、抗ＩＧＦ−１Ｒ抗体は、以下を有する：
ａ）配列番号５６のアミノ酸配列（ＨＶＲ−Ｈ１）、配列番号５７のアミノ酸配列（ＨＶＲ−Ｈ２）、及び配列番号５８のアミノ酸配列（ＨＶＲ−Ｈ３）をＨＶＲとして含む抗体重鎖ならびに配列番号５９のアミノ酸配列（ＨＶＲ−Ｌ１）、配列番号６０のアミノ酸配列（ＨＶＲ−Ｌ２）、及び配列番号６１のアミノ酸配列（ＨＶＲ−Ｌ３）をＨＶＲとして含む抗体軽鎖、又は
ｂ）配列番号６４のアミノ酸配列（ＨＶＲ−Ｈ１）、配列番号６５のアミノ酸配列（ＨＶＲ−Ｈ２）、及び配列番号６６のアミノ酸配列（ＨＶＲ−Ｈ３）をＨＶＲとして含む抗体重鎖ならびに配列番号６７のアミノ酸配列（ＨＶＲ−Ｌ１）、配列番号６８のアミノ酸配列（ＨＶＲ−Ｌ２）、及び配列番号６９のアミノ酸配列（ＨＶＲ−Ｌ３）をＨＶＲとして含む抗体軽鎖、又は
ｃ）配列番号７２のアミノ酸配列（ＨＶＲ−Ｈ１）、配列番号７３のアミノ酸配列（ＨＶＲ−Ｈ２）、及び配列番号７４のアミノ酸配列（ＨＶＲ−Ｈ３）をＨＶＲとして含む抗体重鎖ならびに配列番号７５のアミノ酸配列（ＨＶＲ−Ｌ１）、配列番号７６のアミノ酸配列（ＨＶＲ−Ｌ２）、及び配列番号７７のアミノ酸配列（ＨＶＲ−Ｌ３）をＨＶＲとして含む抗体軽鎖、又は
ｄ）配列番号８０のアミノ酸配列（ＨＶＲ−Ｈ１）、配列番号８１のアミノ酸配列（ＨＶＲ−Ｈ２）、及び配列番号８２のアミノ酸配列（ＨＶＲ−Ｈ３）をＨＶＲとして含む抗体重鎖ならびに配列番号８３のアミノ酸配列（ＨＶＲ−Ｌ１）、配列番号８４のアミノ酸配列（ＨＶＲ−Ｌ２）、及び配列番号８５のアミノ酸配列（ＨＶＲ−Ｌ３）をＨＶＲとして含む抗体軽鎖、又は
ｅ）配列番号８８のアミノ酸配列（ＨＶＲ−Ｈ１）、配列番号８９のアミノ酸配列（ＨＶＲ−Ｈ２）、及び配列番号９０のアミノ酸配列（ＨＶＲ−Ｈ３）をＨＶＲとして含む抗体重鎖ならびに配列番号９１のアミノ酸配列（ＨＶＲ−Ｌ１）、配列番号９２のアミノ酸配列（ＨＶＲ−Ｌ２）、及び配列番号９３のアミノ酸配列（ＨＶＲ−Ｌ３）をＨＶＲとして含む抗体軽鎖。
【００４１】
従って、別の好ましい実施態様において、抗ＩＧＦ−１Ｒ抗体は、以下を含む：
ａ）配列番号６２の重鎖可変ドメインＶＨ及び配列番号６３の軽鎖可変ドメインＶＬ、又は
ｂ）配列番号７０の重鎖可変ドメインＶＨ及び配列番号７１の軽鎖可変ドメインＶＬ、又は
ｃ）配列番号７８の重鎖可変ドメインＶＨ及び配列番号７９の軽鎖可変ドメインＶＬ、又は
ｄ）配列番号８６の重鎖可変ドメインＶＨ及び配列番号８７の軽鎖可変ドメインＶＬ、又は
ｅ）配列番号９４の重鎖可変ドメインＶＨ及び配列番号９５の軽鎖可変ドメインＶＬ。
【００４２】
従って、１つの好ましい実施態様において、抗ＩＧＦ−１Ｒ抗体は、以下を有する：
配列番号５６のアミノ酸配列（ＨＶＲ−Ｈ１）、配列番号５７のアミノ酸配列（ＨＶＲ−Ｈ２）、及び配列番号５８のアミノ酸配列（ＨＶＲ−Ｈ３）をＨＶＲとして含む抗体重鎖ならびに配列番号５９のアミノ酸配列（ＨＶＲ−Ｌ１）、配列番号６０のアミノ酸配列（ＨＶＲ−Ｌ２）、及び配列番号６１のアミノ酸配列（ＨＶＲ−Ｌ３）をＨＶＲとして含む抗体軽鎖。
【００４３】
従って、別の好ましい実施態様において、抗ＩＧＦ−１Ｒ抗体は、以下を有する：
配列番号８０のアミノ酸配列（ＨＶＲ−Ｈ１）、配列番号８１のアミノ酸配列（ＨＶＲ−Ｈ２）、及び配列番号８２のアミノ酸配列（ＨＶＲ−Ｈ３）をＨＶＲとして含む抗体重鎖ならびに配列番号８３のアミノ酸配列（ＨＶＲ−Ｌ１）、配列番号８４のアミノ酸配列（ＨＶＲ−Ｌ２）、及び配列番号８５のアミノ酸配列（ＨＶＲ−Ｌ３）をＨＶＲとして含む抗体軽鎖。
【００４４】
従って、１つの好ましい実施態様において、抗ＩＧＦ−１Ｒ抗体は、以下を含む：
ａ）配列番号６２の重鎖可変ドメインＶＨ及び配列番号６３の軽鎖可変ドメインＶＬ。
【００４５】
従って、別の好ましい実施態様において、抗ＩＧＦ−１Ｒ抗体は、以下を含む：
ｄ）配列番号８６の重鎖可変ドメインＶＨ及び配列番号８７の軽鎖可変ドメインＶＬ。
【００４６】
一実施態様において、抗ＩＧＦ−１Ｒ抗体はヘテロ二量体Ｆｃ領域を有する。
【００４７】
一実施態様において、抗体は単離抗体である。
【００４８】
一実施態様において、抗体は全長抗体である。
【００４９】
一実施態様において、抗体はモノクローナル抗体である。
【００５０】
一実施態様において、抗体はヒト、ヒト化又はキメラ抗体である。
【００５１】
一実施態様において、抗体は、配列番号０５又は配列番号０６のＶＨ配列を含む。
【００５２】
一実施態様において、抗体は、配列番号０７又は配列番号０８のＶＬ配列を含む。
【００５３】
一実施態様において、抗体は、配列番号０５のＶＨ配列及び配列番号０７のＶＬ配列を含む。
【００５４】
一実施態様において、抗体は、配列番号０６のＶＨ配列及び配列番号０８のＶＬ配列を含む。
【００５５】
一実施態様において、抗体は、第１のＦｃ領域ポリペプチド及び第２のＦｃ領域ポリペプチドを含むＦｃ領域を含み、ここで
ｉ）第１及び第２のＦｃ領域ポリペプチドが、突然変異Ｙ４３６Ａを含み、又は
ｉｉ）第１及び第２のＦｃ領域ポリペプチドが、突然変異Ｉ２５３Ａ、Ｈ３１０Ａ、及びＨ４３５Ａを含み、又は
ｉｉｉ）第１及び第２のＦｃ領域ポリペプチドが、突然変異Ｈ３１０Ａ、Ｈ４３３Ａ、及びＹ４３６Ａを含み、又は
ｉｖ）第１及び第２のＦｃ領域ポリペプチドが、突然変異Ｌ２５１Ｄ、Ｌ３１４Ｄ、及びＬ４３２Ｄを含み、又は
ｖ）第１及び第２のＦｃ領域ポリペプチドが、突然変異Ｌ２５１Ｓ、Ｌ３１４Ｓ、及びＬ４３２Ｓを含み、又は
ｖｉ）第１のＦｃ領域ポリペプチドが突然変異Ｙ４３６Ａを含み、第２のＦｃ領域ポリペプチドが
ａ）突然変異Ｉ２５３Ａ、Ｈ３１０Ａ、及びＨ４３５Ａ、又は
ｂ）突然変異Ｈ３１０Ａ、Ｈ４３３Ａ、及びＹ４３６Ａ、又は
ｃ）突然変異Ｌ２５１Ｄ、Ｌ３１４Ｄ、及びＬ４３２Ｄ、又は
ｄ）突然変異Ｌ２５１Ｓ、Ｌ３１４Ｓ、及びＬ４３２Ｓを含み、
あるいは
ｖｉｉ）第１のＦｃ領域ポリペプチドが突然変異Ｉ２５３Ａ、Ｈ３１０Ａ、及びＨ４３５Ａを含み、第２のＦｃ領域ポリペプチドが
ａ）突然変異Ｈ３１０Ａ、Ｈ４３３Ａ、及びＹ４３６Ａ、又は
ｂ）突然変異Ｌ２５１Ｄ、Ｌ３１４Ｄ、及びＬ４３２Ｄ、又は
ｃ）突然変異Ｌ２５１Ｓ、Ｌ３１４Ｓ、及びＬ４３２Ｓを含み、
あるいは
ｖｉｉｉ）第１のＦｃ領域ポリペプチドが突然変異Ｈ３１０Ａ、Ｈ４３３Ａ、及びＹ４３６Ａを含み、第２のＦｃ領域ポリペプチドが
ａ）突然変異Ｌ２５１Ｄ、Ｌ３１４Ｄ、及びＬ４３２Ｄ、又は
ｂ）突然変異Ｌ２５１Ｓ、Ｌ３１４Ｓ、及びＬ４３２Ｓを含み、
あるいは
ｉｘ）第１のＦｃ領域ポリペプチドが突然変異Ｌ２５１Ｄ、Ｌ３１４Ｄ、及びＬ４３２Ｄを含み、第２のＦｃ領域ポリペプチドが突然変異Ｌ２５１Ｓ、Ｌ３１４Ｓ、及びＬ４３２Ｓを含む。
【００５６】
全ての態様の一実施態様において、抗体は、ヒトＦｃＲｎに特異的に結合しない。全ての態様の一実施態様において、抗体は、ブドウ球菌プロテインＡに特異的に結合しない。
【００５７】
全ての態様の一実施態様において、抗体は、ヒトＦｃＲｎに特異的に結合しない。全ての態様の一実施態様において、抗体は、ブドウ球菌プロテインＡに特異的に結合する。
【００５８】
全ての態様の一実施態様において、抗体は、第１のＦｃ領域ポリペプチドにおいて、ｉ）群Ｉ２５３Ａ、Ｈ３１０Ａ、及びＨ４３５Ａ、又はｉｉ）群Ｈ３１０Ａ、Ｈ４３３Ａ、及びＹ４３６Ａ、又はｉｉｉ）群Ｌ２５１Ｄ、Ｌ３１４Ｄ、及びＬ４３２Ｄ（Ｋａｂａｔ  ＥＵインデックスナンバリングシステムに従ったナンバリング）より選択される突然変異の１つ又は２つ、ならびに第２のＦｃ領域ポリペプチドにおいて、突然変異Ｌ２５１Ｄ、Ｉ２５３Ａ、Ｈ３１０Ａ、Ｌ３１４Ｄ、Ｌ４３２Ｄ、Ｈ４３３Ａ、Ｈ４３５Ａ、及びＹ４３６Ａ（Ｋａｂａｔ  ＥＵインデックスナンバリングシステムに従ったナンバリング）を含む群より選択される突然変異の１つ又は２つを含む、ヒトＩｇＧ１又はヒトＩｇＧ４サブクラス（すなわちヒト起源に由来する）の両方の第１及び第２のＦｃ領域ポリペプチドを含むＦｃ領域を含み、突然変異ｉ）Ｉ２５３Ａ、Ｈ３１０Ａ、及びＨ４３５Ａ、又はｉｉ）Ｈ３１０Ａ、Ｈ４３３Ａ、及びＹ４３６Ａ、又はｉｉｉ）Ｌ２５１Ｄ、Ｌ３１４Ｄ、及びＬ４３２Ｄの全てが、突然変異体（ヒト）ＩｇＧクラスＦｃ領域中に含まれるようにする。
【００５９】
全ての態様の一実施態様において、抗体は、Ｆｃ領域において突然変異Ｉ２５３Ａ／Ｈ３１０Ａ／Ｈ４３５Ａ又はＨ３１０Ａ／Ｈ４３３Ａ／Ｙ４３６Ａ又はＬ２５１Ｄ／Ｌ３１４Ｄ／Ｌ４３２Ｄ又はこれらの組み合わせ（Ｋａｂａｔ  ＥＵインデックスナンバリングシステムに従ったナンバリング）を含む、ヒトＩｇＧ１又はヒトＩｇＧ４サブクラス（すなわちヒト起源に由来する）の両方の第１及び第２のＦｃ領域ポリペプチドを含むＦｃ領域を含み、それにより、ｉ）全ての突然変異が、第１又は第２のＦｃ領域ポリペプチド中にあり、あるいはｉｉ）１つ又は２つの突然変異が、第１のＦｃ領域ポリペプチド中にあり、１つ又は２つの突然変異が、第２のＦｃ領域ポリペプチド中にあり、突然変異ｉ）Ｉ２５３Ａ、Ｈ３１０Ａ、及びＨ４３５Ａ、又はｉｉ）Ｈ３１０Ａ、Ｈ４３３Ａ、及びＹ４３６Ａ、又はｉｉｉ）Ｌ２５１Ｄ、Ｌ３１４Ｄ、及びＬ４３２Ｄの全てが、Ｆｃ領域中に含まれるようにする。
【００６０】
全ての態様の一実施態様において、抗体は、第１のならびに第２のＦｃ領域ポリペプチドにおいて突然変異Ｉ２５３Ａ／Ｈ３１０Ａ／Ｈ４３５Ａ又はＨ３１０Ａ／Ｈ４３３Ａ／Ｙ４３６Ａ又はＬ２５１Ｄ／Ｌ３１４Ｄ／Ｌ４３２Ｄ（Ｋａｂａｔ  ＥＵインデックスナンバリングシステムに従ったナンバリング）を含む、あるいは、第１のＦｃ領域ポリペプチドにおいて突然変異Ｉ２５３Ａ／Ｈ３１０Ａ／Ｈ４３５Ａ及び第２のＦｃ領域ポリペプチドにおいて突然変異Ｈ３１０Ａ／Ｈ４３３Ａ／Ｙ４３６Ａ（Ｋａｂａｔ  ＥＵインデックスナンバリングシステムに従ったナンバリング）を含む、ヒトＩｇＧ１又はヒトＩｇＧ４サブクラス（すなわちヒト起源に由来する）の両方の第１及び第２のＦｃ領域ポリペプチドを含むＦｃ領域を含む。
【００６１】
全ての態様の一実施態様において、第２のＦｃ領域ポリペプチドは、突然変異Ｙ３４９Ｃ、Ｔ３６６Ｓ、Ｌ３６８Ａ、及びＹ４０７Ｖ（「ホール」）をさらに含み、第１のＦｃ領域ポリペプチドは、突然変異Ｓ３５４Ｃ及びＴ３６６Ｗ（「ノブ」）をさらに含む。
【００６２】
全ての態様の一実施態様において、Ｆｃ領域ポリペプチドは、ヒトＩｇＧ１サブクラスのものである。一実施態様において、第１のＦｃ領域ポリペプチド及び第２のＦｃ領域ポリペプチドは、突然変異Ｌ２３４Ａ及びＬ２３５Ａをさらに含む。一実施態様において、第１のＦｃ領域ポリペプチド及び第２のＦｃ領域ポリペプチドは、突然変異Ｐ３２９Ｇをさらに含む。
【００６３】
全ての態様の一実施態様において、Ｆｃ領域ポリペプチドは、ヒトＩｇＧ４サブクラスのものである。一実施態様において、第１のＦｃ領域ポリペプチド及び第２のＦｃ領域ポリペプチドは、突然変異Ｓ２２８Ｐ及びＬ２３５Ｅをさらに含む。一実施態様において、第１のＦｃ領域ポリペプチド及び第２のＦｃ領域ポリペプチドは、突然変異Ｐ３２９Ｇをさらに含む。
【００６４】
本明細書において報告する一態様は、本明細書において報告する通りの抗ＩＧＦ−１Ｒ抗体を、そのような処置の必要のある患者に投与することによる、眼血管疾患に罹患した患者の処置の方法である。
【００６５】
一実施態様において、抗ＩＧＦ−１Ｒ抗体は、表面プラズモン共鳴ベースの決定方法を使用して、（残りの）検出可能なＦｃＲｎ結合を有していない。
【００６６】
一実施態様において、抗ＩＧＦ−１Ｒ抗体は、ｐＨ６で１．７μMを上回るＫＤ値を伴い、即ち、低親和性を伴い、ヒトＦｃＲｎに結合する。
【００６７】
全ての態様の一実施態様において、抗体は、突然変異Ｉ２５３Ａ／Ｈ３１０Ａ／Ｈ４３５Ａ又はＨ３１０Ａ／Ｈ４３３Ａ／Ｙ４３６Ａ又はＬ２５１Ｄ／Ｌ３１４Ｄ／Ｌ４３２Ｄ又はそれらの組み合わせ（Ｋａｂａｔ  ＥＵインデックスナンバリングシステムに従ったナンバリング）を伴うＦｃ領域を含む抗体と同じ、又はそれより短いＦｃＲｎ親和性クロマトグラフィーカラム上での保持時間を有する。
【００６８】
全ての態様の一実施態様において、抗体は、３分又はそれ以下の、ＦｃＲｎ親和性クロマトグラフィーカラム上での保持時間を有する。
【００６９】
一実施態様において、ＦｃＲｎ親和性カラムは、５０mm×５mmのカラム寸法を有し、ベッドの高さは５cmであり、充填物は５０μg抗体である。一実施態様において、平衡化緩衝液は、ｐＨ５．５に調整した、１５０mM  ＮａＣｌを伴う２０mM  ＭＥＳであり、溶出緩衝液は、ｐＨ８．８に調整した、１５０mM  ＮａＣｌを伴う２０mM  Ｔｒｉｓ／ＨＣｌであり、溶出は、７．５ＣＶで平衡化緩衝液、３０ＣＶで０〜１００%溶出緩衝液、その後１０ＣＶで溶出緩衝液を適用することによる。
【００７０】
一実施態様において、抗ＩＧＦ−１Ｒ抗体は、抗ＩＧＦ−１Ｒ抗体のＣＨ２及び／又はＣＨ３ドメイン中の単一又は複数の点突然変異に起因して、ヒトＦｃＲｎカラムに結合しない。一実施態様において、抗体は、４つの点突然変異（ＨＣ１：Ｉ２５３Ａ、Ｈ３１０Ａ、Ｈ４３５Ａ；ＨＣ２：Ｈ３１０Ａ）を伴う抗ＩＧＦ−１Ｒ抗体と同等の、即ち、＋／−１０%内、又はより短いＦｃＲｎカラム上での保持時間を有する。
【００７１】
一実施態様において、抗ＩＧＦ−１Ｒ抗体は、突然変異Ｌ２５１Ｄ、Ｍ２５２Ｔ、Ｉ２５３Ａ、Ｓ２５４Ｗ、Ｓ２５４Ｒ、Ｈ３１０Ａ、Ｎ４３４Ｌ、Ｈ４３５Ａ、Ｙ４３６Ａ（Ｋａｂａｔ  ＥＵインデックスナンバリングシステムに従ったナンバリング）の少なくとも１つを伴うＦｃ領域を含む抗体とほぼ同じ、又はより少ない親和性を伴い、ヒトＦｃＲｎに結合する。
【００７２】
一実施態様において、抗ＩＧＦ−１Ｒ抗体は、突然変異Ｉ２５３Ａ／Ｈ３１０Ａ／Ｈ４３５Ａ又はＨ３１０Ａ／Ｈ４３３Ａ／Ｙ４３６Ａ又はＬ２５１Ｄ／Ｌ３１４Ｄ／Ｌ４３２Ｄ又はそれらの組み合わせ（Ｋａｂａｔ  ＥＵインデックスナンバリングシステムに従ったナンバリング）を伴うＦｃ領域を含む抗体とほぼ同じ、又はそれより少ない親和性を伴い、ヒトＦｃＲｎに結合する。
【００７３】
一実施態様において、抗ＩＧＦ−１Ｒ抗体は、配列番号０１又は配列番号９６の重鎖アミノ酸配列及び配列番号０３の軽鎖アミノ酸配列を伴う抗体、あるいは配列番号０２又は配列番号９６の重鎖アミノ酸配列及び配列番号０４の軽鎖アミノ酸配列を伴う抗体とほぼ同じ、又はそれより少ない親和性を伴い、ヒトＦｃＲｎに結合する。
【００７４】
一実施態様において、抗ＩＧＦ−１Ｒ抗体は、突然変異Ｌ２５１Ｄ、Ｍ２５２Ｔ、Ｉ２５３Ａ、Ｓ２５４Ｗ、Ｓ２５４Ｒ、Ｈ３１０Ａ、Ｈ４３３Ａ、Ｎ４３４Ｌ、Ｈ４３５Ａ、Ｙ４３６Ａ（Ｋａｂａｔ  ＥＵインデックスナンバリングシステムに従ったナンバリング）又はそれらの組み合わせの少なくとも１つを有する。
【００７５】
一実施態様において、抗ＩＧＦ−１Ｒ抗体は、第１のＦｃ領域ポリペプチド中に突然変異Ｌ２５１Ｄ、Ｍ２５２Ｔ、Ｉ２５３Ａ、Ｓ２５４Ｗ、Ｓ２５４Ｒ、Ｈ３１０Ａ、Ｈ４３３Ａ、Ｎ４３４Ｌ、Ｈ４３５Ａ、Ｙ４３６Ａ（Ｋａｂａｔ  ＥＵインデックスナンバリングシステムに従ったナンバリング）の少なくとも１つ及び第２のＦｃ領域ポリペプチド中に突然変異Ｌ２５１Ｄ、Ｍ２５２Ｔ、Ｉ２５３Ａ、Ｓ２５４Ｗ、Ｓ２５４Ｒ、Ｈ３１０Ａ、Ｈ４３３Ａ、Ｎ４３４Ｌ、Ｈ４３５Ａ、Ｙ４３６Ａ（Ｋａｂａｔ  ＥＵインデックスナンバリングシステムに従ったナンバリング）の少なくとも１つを有する。
【００７６】
一実施態様において、抗ＩＧＦ−１Ｒ抗体は、第１のＦｃ領域ポリペプチド中に少なくとも突然変異Ｉ２５３Ａ／Ｈ３１０Ａ／Ｈ４３５Ａ又はＨ３１０Ａ／Ｈ４３３Ａ／Ｙ４３６Ａ又はＬ２５１Ｄ／Ｌ３１４Ｄ／Ｌ４３２Ｄ又はそれらの組み合わせ（Ｋａｂａｔ  ＥＵインデックスナンバリングシステムに従ったナンバリング）及び第２のＦｃ領域ポリペプチド中に突然変異Ｌ２５１Ｄ、Ｍ２５２Ｔ、Ｉ２５３Ａ、Ｓ２５４Ｗ、Ｓ２５４Ｒ、Ｈ３１０Ａ、Ｈ４３３Ａ、Ｎ４３４Ｇ、Ｎ４３４Ｌ、Ｈ４３５Ａ、Ｙ４３６Ａ（Ｋａｂａｔ  ＥＵインデックスナンバリングシステムに従ったナンバリング）の少なくとも１つを有する。
【００７７】
一実施態様において、抗ＩＧＦ−１Ｒ抗体は、両方のＦｃ領域ポリペプチド中に少なくとも突然変異Ｉ２５３Ａ／Ｈ３１０Ａ／Ｈ４３５Ａ又はＨ３１０Ａ／Ｈ４３３Ａ／Ｙ４３６Ａ又はＬ２５１Ｄ／Ｌ３１４Ｄ／Ｌ４３２Ｄ又はそれらの組み合わせ（Ｋａｂａｔ  ＥＵインデックスナンバリングシステムに従ったナンバリング）を有する。
【００７８】
一実施態様において、抗ＩＧＦ−１Ｒ抗体は、以下を有する：
ａ）配列番号０１又は配列番号０２のアミノ酸残基３１〜３５（ＨＶＲ−Ｈ１）、アミノ酸残基５０〜６６（ＨＶＲ−Ｈ２）、及びアミノ酸残基９９〜１０７（ＨＶＲ−Ｈ３）をＨＶＲとして含む抗体重鎖、及び
ｂ）配列番号０３又は配列番号０４のアミノ酸残基２４〜３４（ＨＶＲ−Ｌ１）、アミノ酸残基５０〜５６（ＨＶＲ−Ｌ２）、及びアミノ酸残基８９〜９８（ＨＶＲ−Ｌ３）をＨＶＲとして含む抗体軽鎖。
【００７９】
１つの好ましい実施態様において、抗ＩＧＦ−１Ｒ抗体は、以下を有する：
ａ）配列番号０１のアミノ酸残基３１〜３５（ＨＶＲ−Ｈ１）、アミノ酸残基５０〜６６（ＨＶＲ−Ｈ２）、及びアミノ酸残基９９〜１０７（ＨＶＲ−Ｈ３）をＨＶＲとして含む抗体重鎖、及び
ｂ）配列番号０３のアミノ酸残基２４〜３４（ＨＶＲ−Ｌ１）、アミノ酸残基５０〜５６（ＨＶＲ−Ｌ２）、及びアミノ酸残基８９〜９８（ＨＶＲ−Ｌ３）をＨＶＲとして含む抗体軽鎖。
【００８０】
これらは、ＷＯ  ２００５／００５６３５に詳細に記載されている、ＡＫ１８（＜ＩＧＦ−１Ｒ＞ ＨＵＭＡＢクローン１８）の配列である。
【００８１】
別の好ましい実施態様において、抗ＩＧＦ−１Ｒ抗体は、ＷＯ  ２０１３／０４１４６２に詳細に記載される通りの、改善された親和性を伴うＡＫ１８（＜ＩＧＦ−１Ｒ＞ ＨＵＭＡＢクローン１８）に由来する、改変された重鎖可変ドメイン（ＶＨ）及び軽鎖可変ドメイン（ＶＬ）、ならびにそれぞれのＨＶＲを含んだ。本明細書に記載する通りの、Ｆｃ領域突然変異との組み合わせにおける、親和性が改善された抗ＩＧＦ−１Ｒ抗体は、それぞれの血管性眼疾患及び炎症性疾患の処置のために特に有用である。
【００８２】
従って、１つの好ましい実施態様において、抗ＩＧＦ−１Ｒ抗体は、以下を有する：
ａ）配列番号５６のアミノ酸配列（ＨＶＲ−Ｈ１）、配列番号５７のアミノ酸配列（ＨＶＲ−Ｈ２）、及び配列番号５８のアミノ酸配列（ＨＶＲ−Ｈ３）をＨＶＲとして含む抗体重鎖ならびに配列番号５９のアミノ酸配列（ＨＶＲ−Ｌ１）、配列番号６０のアミノ酸配列（ＨＶＲ−Ｌ２）、及び配列番号６１のアミノ酸配列（ＨＶＲ−Ｌ３）をＨＶＲとして含む抗体軽鎖、又は
ｂ）配列番号６４のアミノ酸配列（ＨＶＲ−Ｈ１）、配列番号６５のアミノ酸配列（ＨＶＲ−Ｈ２）、及び配列番号６６のアミノ酸配列（ＨＶＲ−Ｈ３）をＨＶＲとして含む抗体重鎖ならびに配列番号６７のアミノ酸配列（ＨＶＲ−Ｌ１）、配列番号６８のアミノ酸配列（ＨＶＲ−Ｌ２）、及び配列番号６９のアミノ酸配列（ＨＶＲ−Ｌ３）をＨＶＲとして含む抗体軽鎖、又は
ｃ）配列番号７２のアミノ酸配列（ＨＶＲ−Ｈ１）、配列番号７３のアミノ酸配列（ＨＶＲ−Ｈ２）、及び配列番号７４のアミノ酸配列（ＨＶＲ−Ｈ３）をＨＶＲとして含む抗体重鎖ならびに配列番号７５のアミノ酸配列（ＨＶＲ−Ｌ１）、配列番号７６のアミノ酸配列（ＨＶＲ−Ｌ２）、及び配列番号７７のアミノ酸配列（ＨＶＲ−Ｌ３）をＨＶＲとして含む抗体軽鎖、又は
ｄ）配列番号８０のアミノ酸配列（ＨＶＲ−Ｈ１）、配列番号８１のアミノ酸配列（ＨＶＲ−Ｈ２）、及び配列番号８２のアミノ酸配列（ＨＶＲ−Ｈ３）をＨＶＲとして含む抗体重鎖ならびに配列番号８３のアミノ酸配列（ＨＶＲ−Ｌ１）、配列番号８４のアミノ酸配列（ＨＶＲ−Ｌ２）、及び配列番号８５のアミノ酸配列（ＨＶＲ−Ｌ３）をＨＶＲとして含む抗体軽鎖、又は
ｅ）配列番号８８のアミノ酸配列（ＨＶＲ−Ｈ１）、配列番号８９のアミノ酸配列（ＨＶＲ−Ｈ２）、及び配列番号９０のアミノ酸配列（ＨＶＲ−Ｈ３）をＨＶＲとして含む抗体重鎖ならびに配列番号９１のアミノ酸配列（ＨＶＲ−Ｌ１）、配列番号９２のアミノ酸配列（ＨＶＲ−Ｌ２）、及び配列番号９３のアミノ酸配列（ＨＶＲ−Ｌ３）をＨＶＲとして含む抗体軽鎖。
【００８３】
従って、別の好ましい実施態様において、抗ＩＧＦ−１Ｒ抗体は、以下を含む：
ａ）配列番号６２の重鎖可変ドメインＶＨ及び配列番号６３の軽鎖可変ドメインＶＬ、又は
ｂ）配列番号７０の重鎖可変ドメインＶＨ及び配列番号７１の軽鎖可変ドメインＶＬ、又は
ｃ）配列番号７８の重鎖可変ドメインＶＨ及び配列番号７９の軽鎖可変ドメインＶＬ、又は
ｄ）配列番号８６の重鎖可変ドメインＶＨ及び配列番号８７の軽鎖可変ドメインＶＬ、又は
ｅ）配列番号９４の重鎖可変ドメインＶＨ及び配列番号９５の軽鎖可変ドメインＶＬ。
【００８４】
従って、１つの好ましい実施態様において、抗ＩＧＦ−１Ｒ抗体は、以下を有する：
配列番号５６のアミノ酸配列（ＨＶＲ−Ｈ１）、配列番号５７のアミノ酸配列（ＨＶＲ−Ｈ２）、及び配列番号５８のアミノ酸配列（ＨＶＲ−Ｈ３）をＨＶＲとして含む抗体重鎖ならびに配列番号５９のアミノ酸配列（ＨＶＲ−Ｌ１）、配列番号６０のアミノ酸配列（ＨＶＲ−Ｌ２）、及び配列番号６１のアミノ酸配列（ＨＶＲ−Ｌ３）をＨＶＲとして含む抗体軽鎖。
【００８５】
従って、別の好ましい実施態様において、抗ＩＧＦ−１Ｒ抗体は、以下を有する：
配列番号８０のアミノ酸配列（ＨＶＲ−Ｈ１）、配列番号８１のアミノ酸配列（ＨＶＲ−Ｈ２）、及び配列番号８２のアミノ酸配列（ＨＶＲ−Ｈ３）をＨＶＲとして含む抗体重鎖ならびに配列番号８３のアミノ酸配列（ＨＶＲ−Ｌ１）、配列番号８４のアミノ酸配列（ＨＶＲ−Ｌ２）、及び配列番号８５のアミノ酸配列（ＨＶＲ−Ｌ３）をＨＶＲとして含む抗体軽鎖。
【００８６】
従って、１つの好ましい実施態様において、抗ＩＧＦ−１Ｒ抗体は、以下を含む：
ａ）配列番号６２の重鎖可変ドメインＶＨ及び配列番号６３の軽鎖可変ドメインＶＬ。
【００８７】
従って、別の好ましい実施態様において、抗ＩＧＦ−１Ｒ抗体は、以下を含む：
ｄ）配列番号８６の重鎖可変ドメインＶＨ及び配列番号８７の軽鎖可変ドメインＶＬ。
【００８８】
一実施態様において、抗ＩＧＦ−１Ｒ抗体はヘテロ二量体Ｆｃ領域を有する。
【００８９】
一実施態様において、抗体は単離抗体である。
【００９０】
一実施態様において、抗体は全長抗体である。
【００９１】
一実施態様において、抗体はモノクローナル抗体である。
【００９２】
一実施態様において、抗体はヒト、ヒト化又はキメラ抗体である。
【００９３】
一実施態様において、抗体は、配列番号０５又は配列番号０６のＶＨ配列を含む。
【００９４】
一実施態様において、抗体は、配列番号０７又は配列番号０８のＶＬ配列を含む。
【００９５】
一実施態様において、抗体は、配列番号０５のＶＨ配列及び配列番号０７のＶＬ配列を含む。
【００９６】
一実施態様において、抗体は、配列番号０６のＶＨ配列及び配列番号０８のＶＬ配列を含む。
【００９７】
一実施態様において、抗体は、第１のＦｃ領域ポリペプチド及び第２のＦｃ領域ポリペプチドを含むＦｃ領域を含み、ここで
ｉ）第１及び第２のＦｃ領域ポリペプチドが、突然変異Ｙ４３６Ａを含み、又は
ｉｉ）第１及び第２のＦｃ領域ポリペプチドが、突然変異Ｉ２５３Ａ、Ｈ３１０Ａ、及びＨ４３５Ａを含み、又は
ｉｉｉ）第１及び第２のＦｃ領域ポリペプチドが、突然変異Ｈ３１０Ａ、Ｈ４３３Ａ、及びＹ４３６Ａを含み、又は
ｉｖ）第１及び第２のＦｃ領域ポリペプチドが、突然変異Ｌ２５１Ｄ、Ｌ３１４Ｄ、及びＬ４３２Ｄを含み、又は
ｖ）第１及び第２のＦｃ領域ポリペプチドが、突然変異Ｌ２５１Ｓ、Ｌ３１４Ｓ、及びＬ４３２Ｓを含み、又は
ｖｉ）第１のＦｃ領域ポリペプチドが突然変異Ｙ４３６Ａを含み、第２のＦｃ領域ポリペプチドが
ａ）突然変異Ｉ２５３Ａ、Ｈ３１０Ａ、及びＨ４３５Ａ、又は
ｂ）突然変異Ｈ３１０Ａ、Ｈ４３３Ａ、及びＹ４３６Ａ、又は
ｃ）突然変異Ｌ２５１Ｄ、Ｌ３１４Ｄ、及びＬ４３２Ｄ、又は
ｄ）突然変異Ｌ２５１Ｓ、Ｌ３１４Ｓ、及びＬ４３２Ｓを含み、
あるいは
ｖｉｉ）第１のＦｃ領域ポリペプチドが突然変異Ｉ２５３Ａ、Ｈ３１０Ａ、及びＨ４３５Ａを含み、第２のＦｃ領域ポリペプチドが
ａ）突然変異Ｈ３１０Ａ、Ｈ４３３Ａ、及びＹ４３６Ａ、又は
ｂ）突然変異Ｌ２５１Ｄ、Ｌ３１４Ｄ、及びＬ４３２Ｄ、又は
ｃ）突然変異Ｌ２５１Ｓ、Ｌ３１４Ｓ、及びＬ４３２Ｓを含み、
あるいは
ｖｉｉｉ）第１のＦｃ領域ポリペプチドが突然変異Ｈ３１０Ａ、Ｈ４３３Ａ、及びＹ４３６Ａを含み、第２のＦｃ領域ポリペプチドが
ａ）突然変異Ｌ２５１Ｄ、Ｌ３１４Ｄ、及びＬ４３２Ｄ、又は
ｂ）突然変異Ｌ２５１Ｓ、Ｌ３１４Ｓ、及びＬ４３２Ｓを含み、
あるいは
ｉｘ）第１のＦｃ領域ポリペプチドが突然変異Ｌ２５１Ｄ、Ｌ３１４Ｄ、及びＬ４３２Ｄを含み、第２のＦｃ領域ポリペプチドが突然変異Ｌ２５１Ｓ、Ｌ３１４Ｓ、及びＬ４３２Ｓを含む。
【００９８】
全ての態様の一実施態様において、抗体は、ヒトＦｃＲｎに特異的に結合しない。全ての態様の一実施態様において、抗体は、ブドウ球菌プロテインＡに特異的に結合しない。
【００９９】
全ての態様の一実施態様において、抗体は、ヒトＦｃＲｎに特異的に結合しない。全ての態様の一実施態様において、抗体は、ブドウ球菌プロテインＡに特異的に結合する。
【０１００】
全ての態様の一実施態様において、抗体は、第１のＦｃ領域ポリペプチドにおいて、ｉ）群Ｉ２５３Ａ、Ｈ３１０Ａ、及びＨ４３５Ａ、又はｉｉ）群Ｈ３１０Ａ、Ｈ４３３Ａ、及びＹ４３６Ａ、又はｉｉｉ）群Ｌ２５１Ｄ、Ｌ３１４Ｄ、及びＬ４３２Ｄ（Ｋａｂａｔ  ＥＵインデックスナンバリングシステムに従ったナンバリング）より選択される突然変異の１つ又は２つ、ならびに第２のＦｃ領域ポリペプチドにおいて、突然変異Ｌ２５１Ｄ、Ｉ２５３Ａ、Ｈ３１０Ａ、Ｌ３１４Ｄ、Ｌ４３２Ｄ、Ｈ４３３Ａ、Ｈ４３５Ａ、及びＹ４３６Ａ（Ｋａｂａｔ  ＥＵインデックスナンバリングシステムに従ったナンバリング）を含む群より選択される突然変異の１つ又は２つを含む、ヒトＩｇＧ１又はヒトＩｇＧ４サブクラス（すなわちヒト起源に由来する）の両方の第１及び第２のＦｃ領域ポリペプチドを含むＦｃ領域を含み、突然変異ｉ）Ｉ２５３Ａ、Ｈ３１０Ａ、及びＨ４３５Ａ、又はｉｉ）Ｈ３１０Ａ、Ｈ４３３Ａ、及びＹ４３６Ａ、又はｉｉｉ）Ｌ２５１Ｄ、Ｌ３１４Ｄ、及びＬ４３２Ｄの全てが、突然変異体（ヒト）ＩｇＧクラスＦｃ領域中に含まれるようにする。
【０１０１】
全ての態様の一実施態様において、抗体は、Ｆｃ領域において突然変異Ｉ２５３Ａ／Ｈ３１０Ａ／Ｈ４３５Ａ又はＨ３１０Ａ／Ｈ４３３Ａ／Ｙ４３６Ａ又はＬ２５１Ｄ／Ｌ３１４Ｄ／Ｌ４３２Ｄ又はこれらの組み合わせ（Ｋａｂａｔ  ＥＵインデックスナンバリングシステムに従ったナンバリング）を含む、ヒトＩｇＧ１又はヒトＩｇＧ４サブクラス（すなわちヒト起源に由来する）の両方の第１及び第２のＦｃ領域ポリペプチドを含むＦｃ領域を含み、それにより、ｉ）全ての突然変異が、第１又は第２のＦｃ領域ポリペプチド中にあり、あるいはｉｉ）１つ又は２つの突然変異が、第１のＦｃ領域ポリペプチド中にあり、１つ又は２つの突然変異が、第２のＦｃ領域ポリペプチド中にあり、突然変異ｉ）Ｉ２５３Ａ、Ｈ３１０Ａ、及びＨ４３５Ａ、又はｉｉ）Ｈ３１０Ａ、Ｈ４３３Ａ、及びＹ４３６Ａ、又はｉｉｉ）Ｌ２５１Ｄ、Ｌ３１４Ｄ、及びＬ４３２Ｄの全てが、Ｆｃ領域中に含まれるようにする。
【０１０２】
全ての態様の一実施態様において、抗体は、第１のならびに第２のＦｃ領域ポリペプチドにおいて突然変異Ｉ２５３Ａ／Ｈ３１０Ａ／Ｈ４３５Ａ又はＨ３１０Ａ／Ｈ４３３Ａ／Ｙ４３６Ａ又はＬ２５１Ｄ／Ｌ３１４Ｄ／Ｌ４３２Ｄ（Ｋａｂａｔ  ＥＵインデックスナンバリングシステムに従ったナンバリング）を含む、あるいは、第１のＦｃ領域ポリペプチドにおいて突然変異Ｉ２５３Ａ／Ｈ３１０Ａ／Ｈ４３５Ａ及び第２のＦｃ領域ポリペプチドにおいて突然変異Ｈ３１０Ａ／Ｈ４３３Ａ／Ｙ４３６Ａ（Ｋａｂａｔ  ＥＵインデックスナンバリングシステムに従ったナンバリング）を含む、ヒトＩｇＧ１又はヒトＩｇＧ４サブクラス（すなわちヒト起源に由来する）の両方の第１及び第２のＦｃ領域ポリペプチドを含むＦｃ領域を含む。
【０１０３】
全ての態様の一実施態様において、第２のＦｃ領域ポリペプチドは、突然変異Ｙ３４９Ｃ、Ｔ３６６Ｓ、Ｌ３６８Ａ、及びＹ４０７Ｖ（「ホール」）をさらに含み、第１のＦｃ領域ポリペプチドは、突然変異Ｓ３５４Ｃ及びＴ３６６Ｗ（「ノブ」）をさらに含む。
【０１０４】
全ての態様の一実施態様において、Ｆｃ領域ポリペプチドは、ヒトＩｇＧ１サブクラスのものである。一実施態様において、第１のＦｃ領域ポリペプチド及び第２のＦｃ領域ポリペプチドは、突然変異Ｌ２３４Ａ及びＬ２３５Ａをさらに含む。一実施態様において、第１のＦｃ領域ポリペプチド及び第２のＦｃ領域ポリペプチドは、突然変異Ｐ３２９Ｇをさらに含む。
【０１０５】
全ての態様の一実施態様において、Ｆｃ領域ポリペプチドは、ヒトＩｇＧ４サブクラスのものである。一実施態様において、第１のＦｃ領域ポリペプチド及び第２のＦｃ領域ポリペプチドは、突然変異Ｓ２２８Ｐ及びＬ２３５Ｅをさらに含む。一実施態様において、第１のＦｃ領域ポリペプチド及び第２のＦｃ領域ポリペプチドは、突然変異Ｐ３２９Ｇをさらに含む。
【０１０６】
本明細書において報告する一態様は、硝子体内適用のための、無効になったヒト新生児Ｆｃ受容体（ＦｃＲｎ）結合を伴う抗ＩＧＦ−１Ｒ抗体である。
【０１０７】
本明細書において報告する一態様は、血管性眼疾患の処置のための、無効になったヒト新生児Ｆｃ受容体（ＦｃＲｎ）結合を伴う抗ＩＧＦ−１Ｒ抗体である。
【０１０８】
一実施態様において、抗ＩＧＦ−１Ｒ抗体は、表面プラズモン共鳴ベースの決定方法を使用して、（残りの）検出可能なＦｃＲｎ結合を有していない。
【０１０９】
一実施態様において、抗ＩＧＦ−１Ｒ抗体は、ｐＨ６で１．７μMを上回るＫＤ値を伴い、即ち、低親和性を伴い、ヒトＦｃＲｎに結合する。
【０１１０】
全ての態様の一実施態様において、抗体は、突然変異Ｉ２５３Ａ／Ｈ３１０Ａ／Ｈ４３５Ａ又はＨ３１０Ａ／Ｈ４３３Ａ／Ｙ４３６Ａ又はＬ２５１Ｄ／Ｌ３１４Ｄ／Ｌ４３２Ｄ又はそれらの組み合わせ（Ｋａｂａｔ  ＥＵインデックスナンバリングシステムに従ったナンバリング）を伴うＦｃ領域を含む抗体と同じ、又はそれより短いＦｃＲｎ親和性クロマトグラフィーカラム上での保持時間を有する。
【０１１１】
全ての態様の一実施態様において、抗体は、３分又はそれ以下の、ＦｃＲｎ親和性クロマトグラフィーカラム上での保持時間を有する。
【０１１２】
一実施態様において、ＦｃＲｎ親和性カラムは、５０mm×５mmのカラム寸法を有し、ベッドの高さは５ｃｍであり、充填物は５０μg抗体である。一実施態様において、平衡化緩衝液は、ｐＨ５．５に調整した、１５０mM  ＮａＣｌを伴う２０mM  ＭＥＳであり、溶出緩衝液は、ｐＨ８．８に調整した、１５０mM  ＮａＣｌを伴う２０mM  Ｔｒｉｓ／ＨＣｌであり、溶出は、７．５ＣＶで平衡化緩衝液、３０ＣＶで０〜１００%溶出緩衝液、その後１０ＣＶで溶出緩衝液を適用することによる。
【０１１３】
一実施態様において、抗ＩＧＦ−１Ｒ抗体は、抗ＩＧＦ−１Ｒ抗体のＣＨ２及び／又はＣＨ３ドメイン中の単一又は複数の点突然変異に起因して、ヒトＦｃＲｎカラムに結合しない。一実施態様において、抗体は、４つの点突然変異（ＨＣ１：Ｉ２５３Ａ、Ｈ３１０Ａ、Ｈ４３５Ａ；ＨＣ２：Ｈ３１０Ａ）を伴う抗ＩＧＦ−１Ｒ抗体と同等の、即ち、＋／−１０%内、又はより短いＦｃＲｎカラム上での保持時間を有する。
【０１１４】
一実施態様において、抗ＩＧＦ−１Ｒ抗体は、突然変異Ｌ２５１Ｄ、Ｍ２５２Ｔ、Ｉ２５３Ａ、Ｓ２５４Ｗ、Ｓ２５４Ｒ、Ｈ３１０Ａ、Ｎ４３４Ｌ、Ｈ４３５Ａ、Ｙ４３６Ａ（Ｋａｂａｔ  ＥＵインデックスナンバリングシステムに従ったナンバリング）の少なくとも１つを伴うＦｃ領域を含む抗体とほぼ同じ、又はより少ない親和性を伴い、ヒトＦｃＲｎに結合する。
【０１１５】
一実施態様において、抗ＩＧＦ−１Ｒ抗体は、突然変異Ｉ２５３Ａ／Ｈ３１０Ａ／Ｈ４３５Ａ又はＨ３１０Ａ／Ｈ４３３Ａ／Ｙ４３６Ａ又はＬ２５１Ｄ／Ｌ３１４Ｄ／Ｌ４３２Ｄ又はそれらの組み合わせ（Ｋａｂａｔ  ＥＵインデックスナンバリングシステムに従ったナンバリング）を伴うＦｃ領域を含む抗体とほぼ同じ、又はそれより少ない親和性を伴い、ヒトＦｃＲｎに結合する。
【０１１６】
一実施態様において、抗ＩＧＦ−１Ｒ抗体は、配列番号０１又は配列番号９６の重鎖アミノ酸配列及び配列番号０３の軽鎖アミノ酸配列を伴う抗体、あるいは配列番号０２又は配列番号９６の重鎖アミノ酸配列及び配列番号０４の軽鎖アミノ酸配列を伴う抗体とほぼ同じ、又はそれより少ない親和性を伴い、ヒトＦｃＲｎに結合する。
【０１１７】
一実施態様において、抗ＩＧＦ−１Ｒ抗体は、突然変異Ｌ２５１Ｄ、Ｍ２５２Ｔ、Ｉ２５３Ａ、Ｓ２５４Ｗ、Ｓ２５４Ｒ、Ｈ３１０Ａ、Ｈ４３３Ａ、Ｎ４３４Ｌ、Ｈ４３５Ａ、Ｙ４３６Ａ（Ｋａｂａｔ  ＥＵインデックスナンバリングシステムに従ったナンバリング）又はそれらの組み合わせの少なくとも１つを有する。
【０１１８】
一実施態様において、抗ＩＧＦ−１Ｒ抗体は、第１のＦｃ領域ポリペプチド中に突然変異Ｌ２５１Ｄ、Ｍ２５２Ｔ、Ｉ２５３Ａ、Ｓ２５４Ｗ、Ｓ２５４Ｒ、Ｈ３１０Ａ、Ｈ４３３Ａ、Ｎ４３４Ｌ、Ｈ４３５Ａ、Ｙ４３６Ａ（Ｋａｂａｔ  ＥＵインデックスナンバリングシステムに従ったナンバリング）の少なくとも１つ及び第２のＦｃ領域ポリペプチド中に突然変異Ｌ２５１Ｄ、Ｍ２５２Ｔ、Ｉ２５３Ａ、Ｓ２５４Ｗ、Ｓ２５４Ｒ、Ｈ３１０Ａ、Ｈ４３３Ａ、Ｎ４３４Ｌ、Ｈ４３５Ａ、Ｙ４３６Ａ（Ｋａｂａｔ  ＥＵインデックスナンバリングシステムに従ったナンバリング）の少なくとも１つを有する。
【０１１９】
一実施態様において、抗ＩＧＦ−１Ｒ抗体は、第１のＦｃ領域ポリペプチド中に少なくとも突然変異Ｉ２５３Ａ／Ｈ３１０Ａ／Ｈ４３５Ａ又はＨ３１０Ａ／Ｈ４３３Ａ／Ｙ４３６Ａ又はＬ２５１Ｄ／Ｌ３１４Ｄ／Ｌ４３２Ｄ又はそれらの組み合わせ（Ｋａｂａｔ  ＥＵインデックスナンバリングシステムに従ったナンバリング）及び第２のＦｃ領域ポリペプチド中に突然変異Ｌ２５１Ｄ、Ｍ２５２Ｔ、Ｉ２５３Ａ、Ｓ２５４Ｗ、Ｓ２５４Ｒ、Ｈ３１０Ａ、Ｈ４３３Ａ、Ｎ４３４Ｇ、Ｎ４３４Ｌ、Ｈ４３５Ａ、Ｙ４３６Ａ（Ｋａｂａｔ  ＥＵインデックスナンバリングシステムに従ったナンバリング）の少なくとも１つを有する。
【０１２０】
一実施態様において、抗ＩＧＦ−１Ｒ抗体は、両方のＦｃ領域ポリペプチド中に少なくとも突然変異Ｉ２５３Ａ／Ｈ３１０Ａ／Ｈ４３５Ａ又はＨ３１０Ａ／Ｈ４３３Ａ／Ｙ４３６Ａ又はＬ２５１Ｄ／Ｌ３１４Ｄ／Ｌ４３２Ｄ又はそれらの組み合わせ（Ｋａｂａｔ  ＥＵインデックスナンバリングシステムに従ったナンバリング）を有する。
【０１２１】
一実施態様において、抗ＩＧＦ−１Ｒ抗体は、以下を有する：
ａ）配列番号０１又は配列番号０２のアミノ酸残基３１〜３５（ＨＶＲ−Ｈ１）、アミノ酸残基５０〜６６（ＨＶＲ−Ｈ２）、及びアミノ酸残基９９〜１０７（ＨＶＲ−Ｈ３）をＨＶＲとして含む抗体重鎖、及び
ｂ）配列番号０３又は配列番号０４のアミノ酸残基２４〜３４（ＨＶＲ−Ｌ１）、アミノ酸残基５０〜５６（ＨＶＲ−Ｌ２）、及びアミノ酸残基８９〜９８（ＨＶＲ−Ｌ３）をＨＶＲとして含む抗体軽鎖。
【０１２２】
１つの好ましい実施態様において、抗ＩＧＦ−１Ｒ抗体は、以下を有する：
ａ）配列番号０１のアミノ酸残基３１〜３５（ＨＶＲ−Ｈ１）、アミノ酸残基５０〜６６（ＨＶＲ−Ｈ２）、及びアミノ酸残基９９〜１０７（ＨＶＲ−Ｈ３）をＨＶＲとして含む抗体重鎖、及び
ｂ）配列番号０３のアミノ酸残基２４〜３４（ＨＶＲ−Ｌ１）、アミノ酸残基５０〜５６（ＨＶＲ−Ｌ２）、及びアミノ酸残基８９〜９８（ＨＶＲ−Ｌ３）をＨＶＲとして含む抗体軽鎖。
【０１２３】
これらは、ＷＯ  ２００５／００５６３５に詳細に記載されている、ＡＫ１８（＜ＩＧＦ−１Ｒ＞ ＨＵＭＡＢクローン１８）の配列である。
【０１２４】
別の好ましい実施態様において、抗ＩＧＦ−１Ｒ抗体は、ＷＯ  ２０１３／０４１４６２に詳細に記載される通りの、改善された親和性を伴うＡＫ１８（＜ＩＧＦ−１Ｒ＞ ＨＵＭＡＢクローン１８）に由来する、改変された重鎖可変ドメイン（ＶＨ）及び軽鎖可変ドメイン（ＶＬ）、ならびにそれぞれのＨＶＲを含んだ。本明細書に記載する通りの、Ｆｃ領域突然変異との組み合わせにおける、親和性が改善された抗ＩＧＦ−１Ｒ抗体は、それぞれの血管性眼疾患及び炎症性疾患の処置のために特に有用である。
【０１２５】
従って、１つの好ましい実施態様において、抗ＩＧＦ−１Ｒ抗体は、以下を有する：
ａ）配列番号５６のアミノ酸配列（ＨＶＲ−Ｈ１）、配列番号５７のアミノ酸配列（ＨＶＲ−Ｈ２）、及び配列番号５８のアミノ酸配列（ＨＶＲ−Ｈ３）をＨＶＲとして含む抗体重鎖ならびに配列番号５９のアミノ酸配列（ＨＶＲ−Ｌ１）、配列番号６０のアミノ酸配列（ＨＶＲ−Ｌ２）、及び配列番号６１のアミノ酸配列（ＨＶＲ−Ｌ３）をＨＶＲとして含む抗体軽鎖、又は
ｂ）配列番号６４のアミノ酸配列（ＨＶＲ−Ｈ１）、配列番号６５のアミノ酸配列（ＨＶＲ−Ｈ２）、及び配列番号６６のアミノ酸配列（ＨＶＲ−Ｈ３）をＨＶＲとして含む抗体重鎖ならびに配列番号６７のアミノ酸配列（ＨＶＲ−Ｌ１）、配列番号６８のアミノ酸配列（ＨＶＲ−Ｌ２）、及び配列番号６９のアミノ酸配列（ＨＶＲ−Ｌ３）をＨＶＲとして含む抗体軽鎖、又は
ｃ）配列番号７２のアミノ酸配列（ＨＶＲ−Ｈ１）、配列番号７３のアミノ酸配列（ＨＶＲ−Ｈ２）、及び配列番号７４のアミノ酸配列（ＨＶＲ−Ｈ３）をＨＶＲとして含む抗体重鎖ならびに配列番号７５のアミノ酸配列（ＨＶＲ−Ｌ１）、配列番号７６のアミノ酸配列（ＨＶＲ−Ｌ２）、及び配列番号７７のアミノ酸配列（ＨＶＲ−Ｌ３）をＨＶＲとして含む抗体軽鎖、又は
ｄ）配列番号８０のアミノ酸配列（ＨＶＲ−Ｈ１）、配列番号８１のアミノ酸配列（ＨＶＲ−Ｈ２）、及び配列番号８２のアミノ酸配列（ＨＶＲ−Ｈ３）をＨＶＲとして含む抗体重鎖ならびに配列番号８３のアミノ酸配列（ＨＶＲ−Ｌ１）、配列番号８４のアミノ酸配列（ＨＶＲ−Ｌ２）、及び配列番号８５のアミノ酸配列（ＨＶＲ−Ｌ３）をＨＶＲとして含む抗体軽鎖、又は
ｅ）配列番号８８のアミノ酸配列（ＨＶＲ−Ｈ１）、配列番号８９のアミノ酸配列（ＨＶＲ−Ｈ２）、及び配列番号９０のアミノ酸配列（ＨＶＲ−Ｈ３）をＨＶＲとして含む抗体重鎖ならびに配列番号９１のアミノ酸配列（ＨＶＲ−Ｌ１）、配列番号９２のアミノ酸配列（ＨＶＲ−Ｌ２）、及び配列番号９３のアミノ酸配列（ＨＶＲ−Ｌ３）をＨＶＲとして含む抗体軽鎖。
【０１２６】
従って、別の好ましい実施態様において、抗ＩＧＦ−１Ｒ抗体は、以下を含む：
ａ）配列番号６２の重鎖可変ドメインＶＨ及び配列番号６３の軽鎖可変ドメインＶＬ、又は
ｂ）配列番号７０の重鎖可変ドメインＶＨ及び配列番号７１の軽鎖可変ドメインＶＬ、又は
ｃ）配列番号７８の重鎖可変ドメインＶＨ及び配列番号７９の軽鎖可変ドメインＶＬ、又は
ｄ）配列番号８６の重鎖可変ドメインＶＨ及び配列番号８７の軽鎖可変ドメインＶＬ、又は
ｅ）配列番号９４の重鎖可変ドメインＶＨ及び配列番号９５の軽鎖可変ドメインＶＬ。
【０１２７】
従って、１つの好ましい実施態様において、抗ＩＧＦ−１Ｒ抗体は、以下を有する：
配列番号５６のアミノ酸配列（ＨＶＲ−Ｈ１）、配列番号５７のアミノ酸配列（ＨＶＲ−Ｈ２）、及び配列番号５８のアミノ酸配列（ＨＶＲ−Ｈ３）をＨＶＲとして含む抗体重鎖ならびに配列番号５９のアミノ酸配列（ＨＶＲ−Ｌ１）、配列番号６０のアミノ酸配列（ＨＶＲ−Ｌ２）、及び配列番号６１のアミノ酸配列（ＨＶＲ−Ｌ３）をＨＶＲとして含む抗体軽鎖。
【０１２８】
従って、別の好ましい実施態様において、抗ＩＧＦ−１Ｒ抗体は、以下を有する：
配列番号８０のアミノ酸配列（ＨＶＲ−Ｈ１）、配列番号８１のアミノ酸配列（ＨＶＲ−Ｈ２）、及び配列番号８２のアミノ酸配列（ＨＶＲ−Ｈ３）をＨＶＲとして含む抗体重鎖ならびに配列番号８３のアミノ酸配列（ＨＶＲ−Ｌ１）、配列番号８４のアミノ酸配列（ＨＶＲ−Ｌ２）、及び配列番号８５のアミノ酸配列（ＨＶＲ−Ｌ３）をＨＶＲとして含む抗体軽鎖。
【０１２９】
従って、１つの好ましい実施態様において、抗ＩＧＦ−１Ｒ抗体は、以下を含む：
ａ）配列番号６２の重鎖可変ドメインＶＨ及び配列番号６３の軽鎖可変ドメインＶＬ。
【０１３０】
従って、別の好ましい実施態様において、抗ＩＧＦ−１Ｒ抗体は、以下を含む：
ｄ）配列番号８６の重鎖可変ドメインＶＨ及び配列番号８７の軽鎖可変ドメインＶＬ。
【０１３１】
一実施態様において、抗ＩＧＦ−１Ｒ抗体はヘテロ二量体Ｆｃ領域を有する。
【０１３２】
一実施態様において、抗体は単離抗体である。
【０１３３】
一実施態様において、抗体は全長抗体である。
【０１３４】
一実施態様において、抗体はモノクローナル抗体である。
【０１３５】
一実施態様において、抗体はヒト、ヒト化又はキメラ抗体である。
【０１３６】
一実施態様において、抗体は、配列番号０５又は配列番号０６のＶＨ配列を含む。
【０１３７】
一実施態様において、抗体は、配列番号０７又は配列番号０８のＶＬ配列を含む。
【０１３８】
一実施態様において、抗体は、配列番号０５のＶＨ配列及び配列番号０７のＶＬ配列を含む。
【０１３９】
一実施態様において、抗体は、配列番号０６のＶＨ配列及び配列番号０８のＶＬ配列を含む。
【０１４０】
一実施態様において、抗体は、第１のＦｃ領域ポリペプチド及び第２のＦｃ領域ポリペプチドを含むＦｃ領域を含み、ここで
ｉ）第１及び第２のＦｃ領域ポリペプチドが、突然変異Ｙ４３６Ａを含み、又は
ｉｉ）第１及び第２のＦｃ領域ポリペプチドが、突然変異Ｉ２５３Ａ、Ｈ３１０Ａ、及びＨ４３５Ａを含み、又は
ｉｉｉ）第１及び第２のＦｃ領域ポリペプチドが、突然変異Ｈ３１０Ａ、Ｈ４３３Ａ、及びＹ４３６Ａを含み、又は
ｉｖ）第１及び第２のＦｃ領域ポリペプチドが、突然変異Ｌ２５１Ｄ、Ｌ３１４Ｄ、及びＬ４３２Ｄを含み、又は
ｖ）第１及び第２のＦｃ領域ポリペプチドが、突然変異Ｌ２５１Ｓ、Ｌ３１４Ｓ、及びＬ４３２Ｓを含み、又は
ｖｉ）第１のＦｃ領域ポリペプチドが突然変異Ｙ４３６Ａを含み、第２のＦｃ領域ポリペプチドが
ａ）突然変異Ｉ２５３Ａ、Ｈ３１０Ａ、及びＨ４３５Ａ、又は
ｂ）突然変異Ｈ３１０Ａ、Ｈ４３３Ａ、及びＹ４３６Ａ、又は
ｃ）突然変異Ｌ２５１Ｄ、Ｌ３１４Ｄ、及びＬ４３２Ｄ、又は
ｄ）突然変異Ｌ２５１Ｓ、Ｌ３１４Ｓ、及びＬ４３２Ｓを含み、
あるいは
ｖｉｉ）第１のＦｃ領域ポリペプチドが突然変異Ｉ２５３Ａ、Ｈ３１０Ａ、及びＨ４３５Ａを含み、第２のＦｃ領域ポリペプチドが
ａ）突然変異Ｈ３１０Ａ、Ｈ４３３Ａ、及びＹ４３６Ａ、又は
ｂ）突然変異Ｌ２５１Ｄ、Ｌ３１４Ｄ、及びＬ４３２Ｄ、又は
ｃ）突然変異Ｌ２５１Ｓ、Ｌ３１４Ｓ、及びＬ４３２Ｓを含み、
あるいは
ｖｉｉｉ）第１のＦｃ領域ポリペプチドが突然変異Ｈ３１０Ａ、Ｈ４３３Ａ、及びＹ４３６Ａを含み、第２のＦｃ領域ポリペプチドが
ａ）突然変異Ｌ２５１Ｄ、Ｌ３１４Ｄ、及びＬ４３２Ｄ、又は
ｂ）突然変異Ｌ２５１Ｓ、Ｌ３１４Ｓ、及びＬ４３２Ｓを含み、
あるいは
ｉｘ）第１のＦｃ領域ポリペプチドが突然変異Ｌ２５１Ｄ、Ｌ３１４Ｄ、及びＬ４３２Ｄを含み、第２のＦｃ領域ポリペプチドが突然変異Ｌ２５１Ｓ、Ｌ３１４Ｓ、及びＬ４３２Ｓを含む。
【０１４１】
全ての態様の一実施態様において、抗体は、ヒトＦｃＲｎに特異的に結合しない。全ての態様の一実施態様において、抗体は、ブドウ球菌プロテインＡに特異的に結合しない。
【０１４２】
全ての態様の一実施態様において、抗体は、ヒトＦｃＲｎに特異的に結合しない。全ての態様の一実施態様において、抗体は、ブドウ球菌プロテインＡに特異的に結合する。
【０１４３】
全ての態様の一実施態様において、抗体は、第１のＦｃ領域ポリペプチドにおいて、ｉ）群Ｉ２５３Ａ、Ｈ３１０Ａ、及びＨ４３５Ａ、又はｉｉ）群Ｈ３１０Ａ、Ｈ４３３Ａ、及びＹ４３６Ａ、又はｉｉｉ）群Ｌ２５１Ｄ、Ｌ３１４Ｄ、及びＬ４３２Ｄ（Ｋａｂａｔ  ＥＵインデックスナンバリングシステムに従ったナンバリング）より選択される突然変異の１つ又は２つ、ならびに第２のＦｃ領域ポリペプチドにおいて、突然変異Ｌ２５１Ｄ、Ｉ２５３Ａ、Ｈ３１０Ａ、Ｌ３１４Ｄ、Ｌ４３２Ｄ、Ｈ４３３Ａ、Ｈ４３５Ａ、及びＹ４３６Ａ（Ｋａｂａｔ  ＥＵインデックスナンバリングシステムに従ったナンバリング）を含む群より選択される突然変異の１つ又は２つを含む、ヒトＩｇＧ１又はヒトＩｇＧ４サブクラス（すなわちヒト起源に由来する）の両方の第１及び第２のＦｃ領域ポリペプチドを含むＦｃ領域を含み、突然変異ｉ）Ｉ２５３Ａ、Ｈ３１０Ａ、及びＨ４３５Ａ、又はｉｉ）Ｈ３１０Ａ、Ｈ４３３Ａ、及びＹ４３６Ａ、又はｉｉｉ）Ｌ２５１Ｄ、Ｌ３１４Ｄ、及びＬ４３２Ｄの全てが、突然変異体（ヒト）ＩｇＧクラスＦｃ領域中に含まれるようにする。
【０１４４】
全ての態様の一実施態様において、抗体は、Ｆｃ領域において突然変異Ｉ２５３Ａ／Ｈ３１０Ａ／Ｈ４３５Ａ又はＨ３１０Ａ／Ｈ４３３Ａ／Ｙ４３６Ａ又はＬ２５１Ｄ／Ｌ３１４Ｄ／Ｌ４３２Ｄ又はこれらの組み合わせ（Ｋａｂａｔ  ＥＵインデックスナンバリングシステムに従ったナンバリング）を含む、ヒトＩｇＧ１又はヒトＩｇＧ４サブクラス（すなわちヒト起源に由来する）の両方の第１及び第２のＦｃ領域ポリペプチドを含むＦｃ領域を含み、それにより、ｉ）全ての突然変異が、第１又は第２のＦｃ領域ポリペプチド中にあり、あるいはｉｉ）１つ又は２つの突然変異が、第１のＦｃ領域ポリペプチド中にあり、１つ又は２つの突然変異が、第２のＦｃ領域ポリペプチド中にあり、突然変異ｉ）Ｉ２５３Ａ、Ｈ３１０Ａ、及びＨ４３５Ａ、又はｉｉ）Ｈ３１０Ａ、Ｈ４３３Ａ、及びＹ４３６Ａ、又はｉｉｉ）Ｌ２５１Ｄ、Ｌ３１４Ｄ、及びＬ４３２Ｄの全てが、Ｆｃ領域中に含まれるようにする。
【０１４５】
全ての態様の一実施態様において、抗体は、第１のならびに第２のＦｃ領域ポリペプチドにおいて突然変異Ｉ２５３Ａ／Ｈ３１０Ａ／Ｈ４３５Ａ又はＨ３１０Ａ／Ｈ４３３Ａ／Ｙ４３６Ａ又はＬ２５１Ｄ／Ｌ３１４Ｄ／Ｌ４３２Ｄ（Ｋａｂａｔ  ＥＵインデックスナンバリングシステムに従ったナンバリング）を含む、あるいは、第１のＦｃ領域ポリペプチドにおいて突然変異Ｉ２５３Ａ／Ｈ３１０Ａ／Ｈ４３５Ａ及び第２のＦｃ領域ポリペプチドにおいて突然変異Ｈ３１０Ａ／Ｈ４３３Ａ／Ｙ４３６Ａ（Ｋａｂａｔ  ＥＵインデックスナンバリングシステムに従ったナンバリング）を含む、ヒトＩｇＧ１又はヒトＩｇＧ４サブクラス（すなわちヒト起源に由来する）の両方の第１及び第２のＦｃ領域ポリペプチドを含むＦｃ領域を含む。
【０１４６】
全ての態様の一実施態様において、第２のＦｃ領域ポリペプチドは、突然変異Ｙ３４９Ｃ、Ｔ３６６Ｓ、Ｌ３６８Ａ、及びＹ４０７Ｖ（「ホール」）をさらに含み、第１のＦｃ領域ポリペプチドは、突然変異Ｓ３５４Ｃ及びＴ３６６Ｗ（「ノブ」）をさらに含む。
【０１４７】
全ての態様の一実施態様において、Ｆｃ領域ポリペプチドは、ヒトＩｇＧ１サブクラスのものである。一実施態様において、第１のＦｃ領域ポリペプチド及び第２のＦｃ領域ポリペプチドは、突然変異Ｌ２３４Ａ及びＬ２３５Ａをさらに含む。一実施態様において、第１のＦｃ領域ポリペプチド及び第２のＦｃ領域ポリペプチドは、突然変異Ｐ３２９Ｇをさらに含む。
【０１４８】
全ての態様の一実施態様において、Ｆｃ領域ポリペプチドは、ヒトＩｇＧ４サブクラスのものである。一実施態様において、第１のＦｃ領域ポリペプチド及び第２のＦｃ領域ポリペプチドは、突然変異Ｓ２２８Ｐ及びＬ２３５Ｅをさらに含む。一実施態様において、第１のＦｃ領域ポリペプチド及び第２のＦｃ領域ポリペプチドは、突然変異Ｐ３２９Ｇをさらに含む。
【０１４９】
本明細書において報告する一態様は、無効になったヒト新生児Ｆｃ受容体（ＦｃＲｎ）結合を伴う抗ＩＧＦ−１Ｒ抗体及び、場合により、医薬的に許容可能な担体を含む医薬製剤である。
【０１５０】
一実施態様において、抗ＩＧＦ−１Ｒ抗体は、表面プラズモン共鳴ベースの決定方法を使用して、（残りの）検出可能なＦｃＲｎ結合を有していない。
【０１５１】
一実施態様において、抗ＩＧＦ−１Ｒ抗体は、ｐＨ６で１．７μMを上回るＫＤ値を伴い、即ち、低親和性を伴い、ヒトＦｃＲｎに結合する。
【０１５２】
全ての態様の一実施態様において、抗体は、突然変異Ｉ２５３Ａ／Ｈ３１０Ａ／Ｈ４３５Ａ又はＨ３１０Ａ／Ｈ４３３Ａ／Ｙ４３６Ａ又はＬ２５１Ｄ／Ｌ３１４Ｄ／Ｌ４３２Ｄ又はそれらの組み合わせ（Ｋａｂａｔ  ＥＵインデックスナンバリングシステムに従ったナンバリング）を伴うＦｃ領域を含む抗体と同じ、又はそれより短いＦｃＲｎ親和性クロマトグラフィーカラム上での保持時間を有する。
【０１５３】
全ての態様の一実施態様において、抗体は、３分又はそれ以下の、ＦｃＲｎ親和性クロマトグラフィーカラム上での保持時間を有する。
【０１５４】
一実施態様において、ＦｃＲｎ親和性カラムは、５０mm×５mmのカラム寸法を有し、ベッドの高さは５cmであり、充填物は５０μg抗体である。一実施態様において、平衡化緩衝液は、ｐＨ５．５に調整した、１５０mM  ＮａＣｌを伴う２０mM  ＭＥＳであり、溶出緩衝液は、ｐＨ８．８に調整した、１５０mM  ＮａＣｌを伴う２０mM  Ｔｒｉｓ／ＨＣｌであり、溶出は、７．５ＣＶで平衡化緩衝液、３０ＣＶで０〜１００%溶出緩衝液、その後１０ＣＶで溶出緩衝液を適用することによる。
【０１５５】
一実施態様において、抗ＩＧＦ−１Ｒ抗体は、抗ＩＧＦ−１Ｒ抗体のＣＨ２及び／又はＣＨ３ドメイン中の単一又は複数の点突然変異に起因して、ヒトＦｃＲｎカラムに結合しない。一実施態様において、抗体は、４つの点突然変異（ＨＣ１：Ｉ２５３Ａ、Ｈ３１０Ａ、Ｈ４３５Ａ；ＨＣ２：Ｈ３１０Ａ）を伴う抗ＩＧＦ−１Ｒ抗体と同等の、即ち、＋／−１０%内、又はより短いＦｃＲｎカラム上での保持時間を有する。
【０１５６】
一実施態様において、抗ＩＧＦ−１Ｒ抗体は、突然変異Ｌ２５１Ｄ、Ｍ２５２Ｔ、Ｉ２５３Ａ、Ｓ２５４Ｗ、Ｓ２５４Ｒ、Ｈ３１０Ａ、Ｎ４３４Ｌ、Ｈ４３５Ａ、Ｙ４３６Ａ（Ｋａｂａｔ  ＥＵインデックスナンバリングシステムに従ったナンバリング）の少なくとも１つを伴うＦｃ領域を含む抗体とほぼ同じ、又はより少ない親和性を伴い、ヒトＦｃＲｎに結合する。
【０１５７】
一実施態様において、抗ＩＧＦ−１Ｒ抗体は、突然変異Ｉ２５３Ａ／Ｈ３１０Ａ／Ｈ４３５Ａ又はＨ３１０Ａ／Ｈ４３３Ａ／Ｙ４３６Ａ又はＬ２５１Ｄ／Ｌ３１４Ｄ／Ｌ４３２Ｄ又はそれらの組み合わせ（Ｋａｂａｔ  ＥＵインデックスナンバリングシステムに従ったナンバリング）を伴うＦｃ領域を含む抗体とほぼ同じ、又はそれより少ない親和性を伴い、ヒトＦｃＲｎに結合する。
【０１５８】
一実施態様において、抗ＩＧＦ−１Ｒ抗体は、配列番号０１又は配列番号９６の重鎖アミノ酸配列及び配列番号０３の軽鎖アミノ酸配列を伴う抗体、あるいは配列番号０２又は配列番号９６の重鎖アミノ酸配列及び配列番号０４の軽鎖アミノ酸配列を伴う抗体とほぼ同じ、又はそれより少ない親和性を伴い、ヒトＦｃＲｎに結合する。
【０１５９】
一実施態様において、抗ＩＧＦ−１Ｒ抗体は、突然変異Ｌ２５１Ｄ、Ｍ２５２Ｔ、Ｉ２５３Ａ、Ｓ２５４Ｗ、Ｓ２５４Ｒ、Ｈ３１０Ａ、Ｈ４３３Ａ、Ｎ４３４Ｌ、Ｈ４３５Ａ、Ｙ４３６Ａ（Ｋａｂａｔ  ＥＵインデックスナンバリングシステムに従ったナンバリング）又はそれらの組み合わせの少なくとも１つを有する。
【０１６０】
一実施態様において、抗ＩＧＦ−１Ｒ抗体は、第１のＦｃ領域ポリペプチド中に突然変異Ｌ２５１Ｄ、Ｍ２５２Ｔ、Ｉ２５３Ａ、Ｓ２５４Ｗ、Ｓ２５４Ｒ、Ｈ３１０Ａ、Ｈ４３３Ａ、Ｎ４３４Ｌ、Ｈ４３５Ａ、Ｙ４３６Ａ（Ｋａｂａｔ  ＥＵインデックスナンバリングシステムに従ったナンバリング）の少なくとも１つ及び第２のＦｃ領域ポリペプチド中に突然変異Ｌ２５１Ｄ、Ｍ２５２Ｔ、Ｉ２５３Ａ、Ｓ２５４Ｗ、Ｓ２５４Ｒ、Ｈ３１０Ａ、Ｈ４３３Ａ、Ｎ４３４Ｌ、Ｈ４３５Ａ、Ｙ４３６Ａ（Ｋａｂａｔ  ＥＵインデックスナンバリングシステムに従ったナンバリング）の少なくとも１つを有する。
【０１６１】
一実施態様において、抗ＩＧＦ−１Ｒ抗体は、第１のＦｃ領域ポリペプチド中に少なくとも突然変異Ｉ２５３Ａ／Ｈ３１０Ａ／Ｈ４３５Ａ又はＨ３１０Ａ／Ｈ４３３Ａ／Ｙ４３６Ａ又はＬ２５１Ｄ／Ｌ３１４Ｄ／Ｌ４３２Ｄ又はそれらの組み合わせ（Ｋａｂａｔ  ＥＵインデックスナンバリングシステムに従ったナンバリング）及び第２のＦｃ領域ポリペプチド中に突然変異Ｌ２５１Ｄ、Ｍ２５２Ｔ、Ｉ２５３Ａ、Ｓ２５４Ｗ、Ｓ２５４Ｒ、Ｈ３１０Ａ、Ｈ４３３Ａ、Ｎ４３４Ｇ、Ｎ４３４Ｌ、Ｈ４３５Ａ、Ｙ４３６Ａ（Ｋａｂａｔ  ＥＵインデックスナンバリングシステムに従ったナンバリング）の少なくとも１つを有する。
【０１６２】
一実施態様において、抗ＩＧＦ−１Ｒ抗体は、両方のＦｃ領域ポリペプチド中に少なくとも突然変異Ｉ２５３Ａ／Ｈ３１０Ａ／Ｈ４３５Ａ又はＨ３１０Ａ／Ｈ４３３Ａ／Ｙ４３６Ａ又はＬ２５１Ｄ／Ｌ３１４Ｄ／Ｌ４３２Ｄ又はそれらの組み合わせ（Ｋａｂａｔ  ＥＵインデックスナンバリングシステムに従ったナンバリング）を有する。
【０１６３】
一実施態様において、抗ＩＧＦ−１Ｒ抗体は、以下を有する：
ａ）配列番号０１又は配列番号０２のアミノ酸残基３１〜３５（ＨＶＲ−Ｈ１）、アミノ酸残基５０〜６６（ＨＶＲ−Ｈ２）、及びアミノ酸残基９９〜１０７（ＨＶＲ−Ｈ３）をＨＶＲとして含む抗体重鎖、及び
ｂ）配列番号０３又は配列番号０４のアミノ酸残基２４〜３４（ＨＶＲ−Ｌ１）、アミノ酸残基５０〜５６（ＨＶＲ−Ｌ２）、及びアミノ酸残基８９〜９８（ＨＶＲ−Ｌ３）をＨＶＲとして含む抗体軽鎖。
【０１６４】
１つの好ましい実施態様において、抗ＩＧＦ−１Ｒ抗体は、以下を有する：
ａ）配列番号０１のアミノ酸残基３１〜３５（ＨＶＲ−Ｈ１）、アミノ酸残基５０〜６６（ＨＶＲ−Ｈ２）、及びアミノ酸残基９９〜１０７（ＨＶＲ−Ｈ３）をＨＶＲとして含む抗体重鎖、及び
ｂ）配列番号０３のアミノ酸残基２４〜３４（ＨＶＲ−Ｌ１）、アミノ酸残基５０〜５６（ＨＶＲ−Ｌ２）、及びアミノ酸残基８９〜９８（ＨＶＲ−Ｌ３）をＨＶＲとして含む抗体軽鎖。
【０１６５】
これらは、ＷＯ  ２００５／００５６３５に詳細に記載されている、ＡＫ１８（＜ＩＧＦ−１Ｒ＞ ＨＵＭＡＢクローン１８）の配列である。
【０１６６】
別の好ましい実施態様において、抗ＩＧＦ−１Ｒ抗体は、ＷＯ  ２０１３／０４１４６２に詳細に記載される通りの、改善された親和性を伴うＡＫ１８（＜ＩＧＦ−１Ｒ＞ ＨＵＭＡＢクローン１８）に由来する、改変された重鎖可変ドメイン（ＶＨ）及び軽鎖可変ドメイン（ＶＬ）、ならびにそれぞれのＨＶＲを含んだ。本明細書に記載する通りの、Ｆｃ領域突然変異との組み合わせにおける、親和性が改善された抗ＩＧＦ−１Ｒ抗体は、それぞれの血管性眼疾患及び炎症性疾患の処置のために特に有用である。
【０１６７】
従って、１つの好ましい実施態様において、抗ＩＧＦ−１Ｒ抗体は、以下を有する：
ａ）配列番号５６のアミノ酸配列（ＨＶＲ−Ｈ１）、配列番号５７のアミノ酸配列（ＨＶＲ−Ｈ２）、及び配列番号５８のアミノ酸配列（ＨＶＲ−Ｈ３）をＨＶＲとして含む抗体重鎖ならびに配列番号５９のアミノ酸配列（ＨＶＲ−Ｌ１）、配列番号６０のアミノ酸配列（ＨＶＲ−Ｌ２）、及び配列番号６１のアミノ酸配列（ＨＶＲ−Ｌ３）をＨＶＲとして含む抗体軽鎖、又は
ｂ）配列番号６４のアミノ酸配列（ＨＶＲ−Ｈ１）、配列番号６５のアミノ酸配列（ＨＶＲ−Ｈ２）、及び配列番号６６のアミノ酸配列（ＨＶＲ−Ｈ３）をＨＶＲとして含む抗体重鎖ならびに配列番号６７のアミノ酸配列（ＨＶＲ−Ｌ１）、配列番号６８のアミノ酸配列（ＨＶＲ−Ｌ２）、及び配列番号６９のアミノ酸配列（ＨＶＲ−Ｌ３）をＨＶＲとして含む抗体軽鎖、又は
ｃ）配列番号７２のアミノ酸配列（ＨＶＲ−Ｈ１）、配列番号７３のアミノ酸配列（ＨＶＲ−Ｈ２）、及び配列番号７４のアミノ酸配列（ＨＶＲ−Ｈ３）をＨＶＲとして含む抗体重鎖ならびに配列番号７５のアミノ酸配列（ＨＶＲ−Ｌ１）、配列番号７６のアミノ酸配列（ＨＶＲ−Ｌ２）、及び配列番号７７のアミノ酸配列（ＨＶＲ−Ｌ３）をＨＶＲとして含む抗体軽鎖、又は
ｄ）配列番号８０のアミノ酸配列（ＨＶＲ−Ｈ１）、配列番号８１のアミノ酸配列（ＨＶＲ−Ｈ２）、及び配列番号８２のアミノ酸配列（ＨＶＲ−Ｈ３）をＨＶＲとして含む抗体重鎖ならびに配列番号８３のアミノ酸配列（ＨＶＲ−Ｌ１）、配列番号８４のアミノ酸配列（ＨＶＲ−Ｌ２）、及び配列番号８５のアミノ酸配列（ＨＶＲ−Ｌ３）をＨＶＲとして含む抗体軽鎖、又は
ｅ）配列番号８８のアミノ酸配列（ＨＶＲ−Ｈ１）、配列番号８９のアミノ酸配列（ＨＶＲ−Ｈ２）、及び配列番号９０のアミノ酸配列（ＨＶＲ−Ｈ３）をＨＶＲとして含む抗体重鎖ならびに配列番号９１のアミノ酸配列（ＨＶＲ−Ｌ１）、配列番号９２のアミノ酸配列（ＨＶＲ−Ｌ２）、及び配列番号９３のアミノ酸配列（ＨＶＲ−Ｌ３）をＨＶＲとして含む抗体軽鎖。
【０１６８】
従って、別の好ましい実施態様において、抗ＩＧＦ−１Ｒ抗体は、以下を含む：
ａ）配列番号６２の重鎖可変ドメインＶＨ及び配列番号６３の軽鎖可変ドメインＶＬ、又は
ｂ）配列番号７０の重鎖可変ドメインＶＨ及び配列番号７１の軽鎖可変ドメインＶＬ、又は
ｃ）配列番号７８の重鎖可変ドメインＶＨ及び配列番号７９の軽鎖可変ドメインＶＬ、又は
ｄ）配列番号８６の重鎖可変ドメインＶＨ及び配列番号８７の軽鎖可変ドメインＶＬ、又は
ｅ）配列番号９４の重鎖可変ドメインＶＨ及び配列番号９５の軽鎖可変ドメインＶＬ。
【０１６９】
従って、１つの好ましい実施態様において、抗ＩＧＦ−１Ｒ抗体は、以下を有する：
配列番号５６のアミノ酸配列（ＨＶＲ−Ｈ１）、配列番号５７のアミノ酸配列（ＨＶＲ−Ｈ２）、及び配列番号５８のアミノ酸配列（ＨＶＲ−Ｈ３）をＨＶＲとして含む抗体重鎖ならびに配列番号５９のアミノ酸配列（ＨＶＲ−Ｌ１）、配列番号６０のアミノ酸配列（ＨＶＲ−Ｌ２）、及び配列番号６１のアミノ酸配列（ＨＶＲ−Ｌ３）をＨＶＲとして含む抗体軽鎖。
【０１７０】
従って、別の好ましい実施態様において、抗ＩＧＦ−１Ｒ抗体は、以下を有する：
配列番号８０のアミノ酸配列（ＨＶＲ−Ｈ１）、配列番号８１のアミノ酸配列（ＨＶＲ−Ｈ２）、及び配列番号８２のアミノ酸配列（ＨＶＲ−Ｈ３）をＨＶＲとして含む抗体重鎖ならびに配列番号８３のアミノ酸配列（ＨＶＲ−Ｌ１）、配列番号８４のアミノ酸配列（ＨＶＲ−Ｌ２）、及び配列番号８５のアミノ酸配列（ＨＶＲ−Ｌ３）をＨＶＲとして含む抗体軽鎖。
【０１７１】
従って、１つの好ましい実施態様において、抗ＩＧＦ−１Ｒ抗体は、以下を含む：
ａ）配列番号６２の重鎖可変ドメインＶＨ及び配列番号６３の軽鎖可変ドメインＶＬ。
【０１７２】
従って、別の好ましい実施態様において、抗ＩＧＦ−１Ｒ抗体は、以下を含む：
ｄ）配列番号８６の重鎖可変ドメインＶＨ及び配列番号８７の軽鎖可変ドメインＶＬ。
【０１７３】
一実施態様において、抗ＩＧＦ−１Ｒ抗体はヘテロ二量体Ｆｃ領域を有する。
【０１７４】
一実施態様において、抗体は単離抗体である。
【０１７５】
一実施態様において、抗体は全長抗体である。
【０１７６】
一実施態様において、抗体はモノクローナル抗体である。
【０１７７】
一実施態様において、抗体はヒト、ヒト化又はキメラ抗体である。
【０１７８】
一実施態様において、抗体は、配列番号０５又は配列番号０６のＶＨ配列を含む。
【０１７９】
一実施態様において、抗体は、配列番号０７又は配列番号０８のＶＬ配列を含む。
【０１８０】
一実施態様において、抗体は、配列番号０５のＶＨ配列及び配列番号０７のＶＬ配列を含む。
【０１８１】
一実施態様において、抗体は、配列番号０６のＶＨ配列及び配列番号０８のＶＬ配列を含む。
【０１８２】
一実施態様において、抗体は、第１のＦｃ領域ポリペプチド及び第２のＦｃ領域ポリペプチドを含むＦｃ領域を含み、ここで
ｉ）第１及び第２のＦｃ領域ポリペプチドが、突然変異Ｙ４３６Ａを含み、又は
ｉｉ）第１及び第２のＦｃ領域ポリペプチドが、突然変異Ｉ２５３Ａ、Ｈ３１０Ａ、及びＨ４３５Ａを含み、又は
ｉｉｉ）第１及び第２のＦｃ領域ポリペプチドが、突然変異Ｈ３１０Ａ、Ｈ４３３Ａ、及びＹ４３６Ａを含み、又は
ｉｖ）第１及び第２のＦｃ領域ポリペプチドが、突然変異Ｌ２５１Ｄ、Ｌ３１４Ｄ、及びＬ４３２Ｄを含み、又は
ｖ）第１及び第２のＦｃ領域ポリペプチドが、突然変異Ｌ２５１Ｓ、Ｌ３１４Ｓ、及びＬ４３２Ｓを含み、又は
ｖｉ）第１のＦｃ領域ポリペプチドが突然変異Ｙ４３６Ａを含み、第２のＦｃ領域ポリペプチドが
ａ）突然変異Ｉ２５３Ａ、Ｈ３１０Ａ、及びＨ４３５Ａ、又は
ｂ）突然変異Ｈ３１０Ａ、Ｈ４３３Ａ、及びＹ４３６Ａ、又は
ｃ）突然変異Ｌ２５１Ｄ、Ｌ３１４Ｄ、及びＬ４３２Ｄ、又は
ｄ）突然変異Ｌ２５１Ｓ、Ｌ３１４Ｓ、及びＬ４３２Ｓを含み、
あるいは
ｖｉｉ）第１のＦｃ領域ポリペプチドが突然変異Ｉ２５３Ａ、Ｈ３１０Ａ、及びＨ４３５Ａを含み、第２のＦｃ領域ポリペプチドが
ａ）突然変異Ｈ３１０Ａ、Ｈ４３３Ａ、及びＹ４３６Ａ、又は
ｂ）突然変異Ｌ２５１Ｄ、Ｌ３１４Ｄ、及びＬ４３２Ｄ、又は
ｃ）突然変異Ｌ２５１Ｓ、Ｌ３１４Ｓ、及びＬ４３２Ｓを含み、
あるいは
ｖｉｉｉ）第１のＦｃ領域ポリペプチドが突然変異Ｈ３１０Ａ、Ｈ４３３Ａ、及びＹ４３６Ａを含み、第２のＦｃ領域ポリペプチドが
ａ）突然変異Ｌ２５１Ｄ、Ｌ３１４Ｄ、及びＬ４３２Ｄ、又は
ｂ）突然変異Ｌ２５１Ｓ、Ｌ３１４Ｓ、及びＬ４３２Ｓを含み、
あるいは
ｉｘ）第１のＦｃ領域ポリペプチドが突然変異Ｌ２５１Ｄ、Ｌ３１４Ｄ、及びＬ４３２Ｄを含み、第２のＦｃ領域ポリペプチドが突然変異Ｌ２５１Ｓ、Ｌ３１４Ｓ、及びＬ４３２Ｓを含む。
【０１８３】
全ての態様の一実施態様において、抗体は、ヒトＦｃＲｎに特異的に結合しない。全ての態様の一実施態様において、抗体は、ブドウ球菌プロテインＡに特異的に結合しない。
【０１８４】
全ての態様の一実施態様において、抗体は、ヒトＦｃＲｎに特異的に結合しない。全ての態様の一実施態様において、抗体は、ブドウ球菌プロテインＡに特異的に結合する。
【０１８５】
全ての態様の一実施態様において、抗体は、第１のＦｃ領域ポリペプチドにおいて、ｉ）群Ｉ２５３Ａ、Ｈ３１０Ａ、及びＨ４３５Ａ、又はｉｉ）群Ｈ３１０Ａ、Ｈ４３３Ａ、及びＹ４３６Ａ、又はｉｉｉ）群Ｌ２５１Ｄ、Ｌ３１４Ｄ、及びＬ４３２Ｄ（Ｋａｂａｔ  ＥＵインデックスナンバリングシステムに従ったナンバリング）より選択される突然変異の１つ又は２つ、ならびに第２のＦｃ領域ポリペプチドにおいて、突然変異Ｌ２５１Ｄ、Ｉ２５３Ａ、Ｈ３１０Ａ、Ｌ３１４Ｄ、Ｌ４３２Ｄ、Ｈ４３３Ａ、Ｈ４３５Ａ、及びＹ４３６Ａ（Ｋａｂａｔ  ＥＵインデックスナンバリングシステムに従ったナンバリング）を含む群より選択される突然変異の１つ又は２つを含む、ヒトＩｇＧ１又はヒトＩｇＧ４サブクラス（すなわちヒト起源に由来する）の両方の第１及び第２のＦｃ領域ポリペプチドを含むＦｃ領域を含み、突然変異ｉ）Ｉ２５３Ａ、Ｈ３１０Ａ、及びＨ４３５Ａ、又はｉｉ）Ｈ３１０Ａ、Ｈ４３３Ａ、及びＹ４３６Ａ、又はｉｉｉ）Ｌ２５１Ｄ、Ｌ３１４Ｄ、及びＬ４３２Ｄの全てが、突然変異体（ヒト）ＩｇＧクラスＦｃ領域中に含まれるようにする。
【０１８６】
全ての態様の一実施態様において、抗体は、Ｆｃ領域において突然変異Ｉ２５３Ａ／Ｈ３１０Ａ／Ｈ４３５Ａ又はＨ３１０Ａ／Ｈ４３３Ａ／Ｙ４３６Ａ又はＬ２５１Ｄ／Ｌ３１４Ｄ／Ｌ４３２Ｄ又はこれらの組み合わせ（Ｋａｂａｔ  ＥＵインデックスナンバリングシステムに従ったナンバリング）を含む、ヒトＩｇＧ１又はヒトＩｇＧ４サブクラス（すなわちヒト起源に由来する）の両方の第１及び第２のＦｃ領域ポリペプチドを含むＦｃ領域を含み、それにより、ｉ）全ての突然変異が、第１又は第２のＦｃ領域ポリペプチド中にあり、あるいはｉｉ）１つ又は２つの突然変異が、第１のＦｃ領域ポリペプチド中にあり、１つ又は２つの突然変異が、第２のＦｃ領域ポリペプチド中にあり、突然変異ｉ）Ｉ２５３Ａ、Ｈ３１０Ａ、及びＨ４３５Ａ、又はｉｉ）Ｈ３１０Ａ、Ｈ４３３Ａ、及びＹ４３６Ａ、又はｉｉｉ）Ｌ２５１Ｄ、Ｌ３１４Ｄ、及びＬ４３２Ｄの全てが、Ｆｃ領域中に含まれるようにする。
【０１８７】
全ての態様の一実施態様において、抗体は、第１のならびに第２のＦｃ領域ポリペプチドにおいて突然変異Ｉ２５３Ａ／Ｈ３１０Ａ／Ｈ４３５Ａ又はＨ３１０Ａ／Ｈ４３３Ａ／Ｙ４３６Ａ又はＬ２５１Ｄ／Ｌ３１４Ｄ／Ｌ４３２Ｄ（Ｋａｂａｔ  ＥＵインデックスナンバリングシステムに従ったナンバリング）を含む、あるいは、第１のＦｃ領域ポリペプチドにおいて突然変異Ｉ２５３Ａ／Ｈ３１０Ａ／Ｈ４３５Ａ及び第２のＦｃ領域ポリペプチドにおいて突然変異Ｈ３１０Ａ／Ｈ４３３Ａ／Ｙ４３６Ａ（Ｋａｂａｔ  ＥＵインデックスナンバリングシステムに従ったナンバリング）を含む、ヒトＩｇＧ１又はヒトＩｇＧ４サブクラス（すなわちヒト起源に由来する）の両方の第１及び第２のＦｃ領域ポリペプチドを含むＦｃ領域を含む。
【０１８８】
全ての態様の一実施態様において、第２のＦｃ領域ポリペプチドは、突然変異Ｙ３４９Ｃ、Ｔ３６６Ｓ、Ｌ３６８Ａ、及びＹ４０７Ｖ（「ホール」）をさらに含み、第１のＦｃ領域ポリペプチドは、突然変異Ｓ３５４Ｃ及びＴ３６６Ｗ（「ノブ」）をさらに含む。
【０１８９】
全ての態様の一実施態様において、Ｆｃ領域ポリペプチドは、ヒトＩｇＧ１サブクラスのものである。一実施態様において、第１のＦｃ領域ポリペプチド及び第２のＦｃ領域ポリペプチドは、突然変異Ｌ２３４Ａ及びＬ２３５Ａをさらに含む。一実施態様において、第１のＦｃ領域ポリペプチド及び第２のＦｃ領域ポリペプチドは、突然変異Ｐ３２９Ｇをさらに含む。
【０１９０】
全ての態様の一実施態様において、Ｆｃ領域ポリペプチドは、ヒトＩｇＧ４サブクラスのものである。一実施態様において、第１のＦｃ領域ポリペプチド及び第２のＦｃ領域ポリペプチドは、突然変異Ｓ２２８Ｐ及びＬ２３５Ｅをさらに含む。一実施態様において、第１のＦｃ領域ポリペプチド及び第２のＦｃ領域ポリペプチドは、突然変異Ｐ３２９Ｇをさらに含む。
【０１９１】
本明細書において報告する一態様は、ヒト新生児Ｆｃ受容体（ＦｃＲｎ）結合が無効になった抗ＩＧＦ−１Ｒ抗体である。
【０１９２】
一実施態様において、抗ＩＧＦ−１Ｒ抗体は、表面プラズモン共鳴ベースの決定方法を使用して、（残りの）検出可能なＦｃＲｎ結合を有していない。
【０１９３】
一実施態様において、抗ＩＧＦ−１Ｒ抗体は、ｐＨ６で１．７μMを上回るＫＤ値を伴い、即ち、低親和性を伴い、ヒトＦｃＲｎに結合する。
【０１９４】
全ての態様の一実施態様において、抗体は、突然変異Ｉ２５３Ａ／Ｈ３１０Ａ／Ｈ４３５Ａ又はＨ３１０Ａ／Ｈ４３３Ａ／Ｙ４３６Ａ又はＬ２５１Ｄ／Ｌ３１４Ｄ／Ｌ４３２Ｄ又はそれらの組み合わせ（Ｋａｂａｔ  ＥＵインデックスナンバリングシステムに従ったナンバリング）を伴うＦｃ領域を含む抗体と同じ、又はそれより短いＦｃＲｎ親和性クロマトグラフィーカラム上での保持時間を有する。
【０１９５】
全ての態様の一実施態様において、抗体は、３分又はそれ以下の、ＦｃＲｎ親和性クロマトグラフィーカラム上での保持時間を有する。
【０１９６】
一実施態様において、ＦｃＲｎ親和性カラムは、５０mm×５mmのカラム寸法を有し、ベッドの高さは５cmであり、充填物は５０μg抗体である。一実施態様において、平衡化緩衝液は、ｐＨ５．５に調整した、１５０mM  ＮａＣｌを伴う２０mM  ＭＥＳであり、溶出緩衝液は、ｐＨ８．８に調整した、１５０mM  ＮａＣｌを伴う２０mM  Ｔｒｉｓ／ＨＣｌであり、溶出は、７．５ＣＶで平衡化緩衝液、３０ＣＶで０〜１００%溶出緩衝液、その後１０ＣＶで溶出緩衝液を適用することによる。
【０１９７】
一実施態様において、抗ＩＧＦ−１Ｒ抗体は、抗ＩＧＦ−１Ｒ抗体のＣＨ２及び／又はＣＨ３ドメイン中の単一又は複数の点突然変異に起因して、ヒトＦｃＲｎカラムに結合しない。一実施態様において、抗体は、４つの点突然変異（ＨＣ１：Ｉ２５３Ａ、Ｈ３１０Ａ、Ｈ４３５Ａ；ＨＣ２：Ｈ３１０Ａ）を伴う抗ＩＧＦ−１Ｒ抗体と同等の、即ち、＋／−１０%内、又はより短いＦｃＲｎカラム上での保持時間を有する。
【０１９８】
一実施態様において、抗ＩＧＦ−１Ｒ抗体は、突然変異Ｌ２５１Ｄ、Ｍ２５２Ｔ、Ｉ２５３Ａ、Ｓ２５４Ｗ、Ｓ２５４Ｒ、Ｈ３１０Ａ、Ｎ４３４Ｌ、Ｈ４３５Ａ、Ｙ４３６Ａ（Ｋａｂａｔ  ＥＵインデックスナンバリングシステムに従ったナンバリング）の少なくとも１つを伴うＦｃ領域を含む抗体とほぼ同じ、又はより少ない親和性を伴い、ヒトＦｃＲｎに結合する。
【０１９９】
一実施態様において、抗ＩＧＦ−１Ｒ抗体は、突然変異Ｉ２５３Ａ／Ｈ３１０Ａ／Ｈ４３５Ａ又はＨ３１０Ａ／Ｈ４３３Ａ／Ｙ４３６Ａ又はＬ２５１Ｄ／Ｌ３１４Ｄ／Ｌ４３２Ｄ又はそれらの組み合わせ（Ｋａｂａｔ  ＥＵインデックスナンバリングシステムに従ったナンバリング）を伴うＦｃ領域を含む抗体とほぼ同じ、又はそれより少ない親和性を伴い、ヒトＦｃＲｎに結合する。
【０２００】
一実施態様において、抗ＩＧＦ−１Ｒ抗体は、配列番号０１又は配列番号９６の重鎖アミノ酸配列及び配列番号０３の軽鎖アミノ酸配列を伴う抗体、あるいは配列番号０２又は配列番号９６の重鎖アミノ酸配列及び配列番号０４の軽鎖アミノ酸配列を伴う抗体とほぼ同じ、又はそれより少ない親和性を伴い、ヒトＦｃＲｎに結合する。
【０２０１】
一実施態様において、抗ＩＧＦ−１Ｒ抗体は、突然変異Ｌ２５１Ｄ、Ｍ２５２Ｔ、Ｉ２５３Ａ、Ｓ２５４Ｗ、Ｓ２５４Ｒ、Ｈ３１０Ａ、Ｈ４３３Ａ、Ｎ４３４Ｌ、Ｈ４３５Ａ、Ｙ４３６Ａ（Ｋａｂａｔ  ＥＵインデックスナンバリングシステムに従ったナンバリング）又はそれらの組み合わせの少なくとも１つを有する。
【０２０２】
一実施態様において、抗ＩＧＦ−１Ｒ抗体は、第１のＦｃ領域ポリペプチド中に突然変異Ｌ２５１Ｄ、Ｍ２５２Ｔ、Ｉ２５３Ａ、Ｓ２５４Ｗ、Ｓ２５４Ｒ、Ｈ３１０Ａ、Ｈ４３３Ａ、Ｎ４３４Ｌ、Ｈ４３５Ａ、Ｙ４３６Ａ（Ｋａｂａｔ  ＥＵインデックスナンバリングシステムに従ったナンバリング）の少なくとも１つ及び第２のＦｃ領域ポリペプチド中に突然変異Ｌ２５１Ｄ、Ｍ２５２Ｔ、Ｉ２５３Ａ、Ｓ２５４Ｗ、Ｓ２５４Ｒ、Ｈ３１０Ａ、Ｈ４３３Ａ、Ｎ４３４Ｌ、Ｈ４３５Ａ、Ｙ４３６Ａ（Ｋａｂａｔ  ＥＵインデックスナンバリングシステムに従ったナンバリング）の少なくとも１つを有する。
【０２０３】
一実施態様において、抗ＩＧＦ−１Ｒ抗体は、第１のＦｃ領域ポリペプチド中に少なくとも突然変異Ｉ２５３Ａ／Ｈ３１０Ａ／Ｈ４３５Ａ又はＨ３１０Ａ／Ｈ４３３Ａ／Ｙ４３６Ａ又はＬ２５１Ｄ／Ｌ３１４Ｄ／Ｌ４３２Ｄ又はそれらの組み合わせ（Ｋａｂａｔ  ＥＵインデックスナンバリングシステムに従ったナンバリング）及び第２のＦｃ領域ポリペプチド中に突然変異Ｌ２５１Ｄ、Ｍ２５２Ｔ、Ｉ２５３Ａ、Ｓ２５４Ｗ、Ｓ２５４Ｒ、Ｈ３１０Ａ、Ｈ４３３Ａ、Ｎ４３４Ｇ、Ｎ４３４Ｌ、Ｈ４３５Ａ、Ｙ４３６Ａ（Ｋａｂａｔ  ＥＵインデックスナンバリングシステムに従ったナンバリング）の少なくとも１つを有する。
【０２０４】
一実施態様において、抗ＩＧＦ−１Ｒ抗体は、両方のＦｃ領域ポリペプチド中に少なくとも突然変異Ｉ２５３Ａ／Ｈ３１０Ａ／Ｈ４３５Ａ又はＨ３１０Ａ／Ｈ４３３Ａ／Ｙ４３６Ａ又はＬ２５１Ｄ／Ｌ３１４Ｄ／Ｌ４３２Ｄ又はそれらの組み合わせ（Ｋａｂａｔ  ＥＵインデックスナンバリングシステムに従ったナンバリング）を有する。
【０２０５】
一実施態様において、抗ＩＧＦ−１Ｒ抗体は、以下を有する：
ａ）配列番号０１又は配列番号０２のアミノ酸残基３１〜３５（ＨＶＲ−Ｈ１）、アミノ酸残基５０〜６６（ＨＶＲ−Ｈ２）、及びアミノ酸残基９９〜１０７（ＨＶＲ−Ｈ３）をＨＶＲとして含む抗体重鎖、及び
ｂ）配列番号０３又は配列番号０４のアミノ酸残基２４〜３４（ＨＶＲ−Ｌ１）、アミノ酸残基５０〜５６（ＨＶＲ−Ｌ２）、及びアミノ酸残基８９〜９８（ＨＶＲ−Ｌ３）をＨＶＲとして含む抗体軽鎖。
【０２０６】
１つの好ましい実施態様において、抗ＩＧＦ−１Ｒ抗体は、以下を有する：
ａ）配列番号０１のアミノ酸残基３１〜３５（ＨＶＲ−Ｈ１）、アミノ酸残基５０〜６６（ＨＶＲ−Ｈ２）、及びアミノ酸残基９９〜１０７（ＨＶＲ−Ｈ３）をＨＶＲとして含む抗体重鎖、及び
ｂ）配列番号０３のアミノ酸残基２４〜３４（ＨＶＲ−Ｌ１）、アミノ酸残基５０〜５６（ＨＶＲ−Ｌ２）、及びアミノ酸残基８９〜９８（ＨＶＲ−Ｌ３）をＨＶＲとして含む抗体軽鎖。
【０２０７】
これらは、ＷＯ  ２００５／００５６３５に詳細に記載されている、ＡＫ１８（＜ＩＧＦ−１Ｒ＞ ＨＵＭＡＢクローン１８）の配列である。
【０２０８】
別の好ましい実施態様において、抗ＩＧＦ−１Ｒ抗体は、ＷＯ  ２０１３／０４１４６２に詳細に記載される通りの、改善された親和性を伴うＡＫ１８（＜ＩＧＦ−１Ｒ＞ ＨＵＭＡＢクローン１８）に由来する、改変された重鎖可変ドメイン（ＶＨ）及び軽鎖可変ドメイン（ＶＬ）、ならびにそれぞれのＨＶＲを含んだ。本明細書に記載する通りの、Ｆｃ領域突然変異との組み合わせにおける、親和性が改善された抗ＩＧＦ−１Ｒ抗体は、それぞれの血管性眼疾患及び炎症性疾患の処置のために特に有用である。
【０２０９】
従って、１つの好ましい実施態様において、抗ＩＧＦ−１Ｒ抗体は、以下を有する：
ａ）配列番号５６のアミノ酸配列（ＨＶＲ−Ｈ１）、配列番号５７のアミノ酸配列（ＨＶＲ−Ｈ２）、及び配列番号５８のアミノ酸配列（ＨＶＲ−Ｈ３）をＨＶＲとして含む抗体重鎖ならびに配列番号５９のアミノ酸配列（ＨＶＲ−Ｌ１）、配列番号６０のアミノ酸配列（ＨＶＲ−Ｌ２）、及び配列番号６１のアミノ酸配列（ＨＶＲ−Ｌ３）をＨＶＲとして含む抗体軽鎖、又は
ｂ）配列番号６４のアミノ酸配列（ＨＶＲ−Ｈ１）、配列番号６５のアミノ酸配列（ＨＶＲ−Ｈ２）、及び配列番号６６のアミノ酸配列（ＨＶＲ−Ｈ３）をＨＶＲとして含む抗体重鎖ならびに配列番号６７のアミノ酸配列（ＨＶＲ−Ｌ１）、配列番号６８のアミノ酸配列（ＨＶＲ−Ｌ２）、及び配列番号６９のアミノ酸配列（ＨＶＲ−Ｌ３）をＨＶＲとして含む抗体軽鎖、又は
ｃ）配列番号７２のアミノ酸配列（ＨＶＲ−Ｈ１）、配列番号７３のアミノ酸配列（ＨＶＲ−Ｈ２）、及び配列番号７４のアミノ酸配列（ＨＶＲ−Ｈ３）をＨＶＲとして含む抗体重鎖ならびに配列番号７５のアミノ酸配列（ＨＶＲ−Ｌ１）、配列番号７６のアミノ酸配列（ＨＶＲ−Ｌ２）、及び配列番号７７のアミノ酸配列（ＨＶＲ−Ｌ３）をＨＶＲとして含む抗体軽鎖、又は
ｄ）配列番号８０のアミノ酸配列（ＨＶＲ−Ｈ１）、配列番号８１のアミノ酸配列（ＨＶＲ−Ｈ２）、及び配列番号８２のアミノ酸配列（ＨＶＲ−Ｈ３）をＨＶＲとして含む抗体重鎖ならびに配列番号８３のアミノ酸配列（ＨＶＲ−Ｌ１）、配列番号８４のアミノ酸配列（ＨＶＲ−Ｌ２）、及び配列番号８５のアミノ酸配列（ＨＶＲ−Ｌ３）をＨＶＲとして含む抗体軽鎖、又は
ｅ）配列番号８８のアミノ酸配列（ＨＶＲ−Ｈ１）、配列番号８９のアミノ酸配列（ＨＶＲ−Ｈ２）、及び配列番号９０のアミノ酸配列（ＨＶＲ−Ｈ３）をＨＶＲとして含む抗体重鎖ならびに配列番号９１のアミノ酸配列（ＨＶＲ−Ｌ１）、配列番号９２のアミノ酸配列（ＨＶＲ−Ｌ２）、及び配列番号９３のアミノ酸配列（ＨＶＲ−Ｌ３）をＨＶＲとして含む抗体軽鎖。
【０２１０】
従って、別の好ましい実施態様において、抗ＩＧＦ−１Ｒ抗体は、以下を含む：
ａ）配列番号６２の重鎖可変ドメインＶＨ及び配列番号６３の軽鎖可変ドメインＶＬ、又は
ｂ）配列番号７０の重鎖可変ドメインＶＨ及び配列番号７１の軽鎖可変ドメインＶＬ、又は
ｃ）配列番号７８の重鎖可変ドメインＶＨ及び配列番号７９の軽鎖可変ドメインＶＬ、又は
ｄ）配列番号８６の重鎖可変ドメインＶＨ及び配列番号８７の軽鎖可変ドメインＶＬ、又は
ｅ）配列番号９４の重鎖可変ドメインＶＨ及び配列番号９５の軽鎖可変ドメインＶＬ。
【０２１１】
従って、１つの好ましい実施態様において、抗ＩＧＦ−１Ｒ抗体は、以下を有する：
配列番号５６のアミノ酸配列（ＨＶＲ−Ｈ１）、配列番号５７のアミノ酸配列（ＨＶＲ−Ｈ２）、及び配列番号５８のアミノ酸配列（ＨＶＲ−Ｈ３）をＨＶＲとして含む抗体重鎖ならびに配列番号５９のアミノ酸配列（ＨＶＲ−Ｌ１）、配列番号６０のアミノ酸配列（ＨＶＲ−Ｌ２）、及び配列番号６１のアミノ酸配列（ＨＶＲ−Ｌ３）をＨＶＲとして含む抗体軽鎖。
【０２１２】
従って、別の好ましい実施態様において、抗ＩＧＦ−１Ｒ抗体は、以下を含む：
配列番号８０のアミノ酸配列（ＨＶＲ−Ｈ１）、配列番号８１のアミノ酸配列（ＨＶＲ−Ｈ２）、及び配列番号８２のアミノ酸配列（ＨＶＲ−Ｈ３）をＨＶＲとして含む抗体重鎖ならびに配列番号８３のアミノ酸配列（ＨＶＲ−Ｌ１）、配列番号８４のアミノ酸配列（ＨＶＲ−Ｌ２）、及び配列番号８５のアミノ酸配列（ＨＶＲ−Ｌ３）をＨＶＲとして含む抗体軽鎖。
【０２１３】
従って、１つの好ましい実施態様において、抗ＩＧＦ−１Ｒ抗体は、以下を含む：
ａ）配列番号６２の重鎖可変ドメインＶＨ及び配列番号６３の軽鎖可変ドメインＶＬ。
【０２１４】
従って、別の好ましい実施態様において、抗ＩＧＦ−１Ｒ抗体は、以下を含む：
ｄ）配列番号８６の重鎖可変ドメインＶＨ及び配列番号８７の軽鎖可変ドメインＶＬ。
【０２１５】
一実施態様において、抗ＩＧＦ−１Ｒ抗体はヘテロ二量体Ｆｃ領域を有する。
【０２１６】
一実施態様において、抗体は単離抗体である。
【０２１７】
一実施態様において、抗体は全長抗体である。
【０２１８】
一実施態様において、抗体はモノクローナル抗体である。
【０２１９】
一実施態様において、抗体はヒト、ヒト化又はキメラ抗体である。
【０２２０】
一実施態様において、抗体は、配列番号０５又は配列番号０６のＶＨ配列を含む。
【０２２１】
一実施態様において、抗体は、配列番号０７又は配列番号０８のＶＬ配列を含む。
【０２２２】
一実施態様において、抗体は、配列番号０５のＶＨ配列及び配列番号０７のＶＬ配列を含む。
【０２２３】
一実施態様において、抗体は、配列番号０６のＶＨ配列及び配列番号０８のＶＬ配列を含む。
【０２２４】
一実施態様において、抗体は、第１のＦｃ領域ポリペプチド及び第２のＦｃ領域ポリペプチドを含むＦｃ領域を含み、ここで
ｉ）第１及び第２のＦｃ領域ポリペプチドが、突然変異Ｙ４３６Ａを含み、又は
ｉｉ）第１及び第２のＦｃ領域ポリペプチドが、突然変異Ｉ２５３Ａ、Ｈ３１０Ａ、及びＨ４３５Ａを含み、又は
ｉｉｉ）第１及び第２のＦｃ領域ポリペプチドが、突然変異Ｈ３１０Ａ、Ｈ４３３Ａ、及びＹ４３６Ａを含み、又は
ｉｖ）第１及び第２のＦｃ領域ポリペプチドが、突然変異Ｌ２５１Ｄ、Ｌ３１４Ｄ、及びＬ４３２Ｄを含み、又は
ｖ）第１及び第２のＦｃ領域ポリペプチドが、突然変異Ｌ２５１Ｓ、Ｌ３１４Ｓ、及びＬ４３２Ｓを含み、又は
ｖｉ）第１のＦｃ領域ポリペプチドが突然変異Ｙ４３６Ａを含み、第２のＦｃ領域ポリペプチドが
ａ）突然変異Ｉ２５３Ａ、Ｈ３１０Ａ、及びＨ４３５Ａ、又は
ｂ）突然変異Ｈ３１０Ａ、Ｈ４３３Ａ、及びＹ４３６Ａ、又は
ｃ）突然変異Ｌ２５１Ｄ、Ｌ３１４Ｄ、及びＬ４３２Ｄ、又は
ｄ）突然変異Ｌ２５１Ｓ、Ｌ３１４Ｓ、及びＬ４３２Ｓを含み、
あるいは
ｖｉｉ）第１のＦｃ領域ポリペプチドが突然変異Ｉ２５３Ａ、Ｈ３１０Ａ、及びＨ４３５Ａを含み、第２のＦｃ領域ポリペプチドが
ａ）突然変異Ｈ３１０Ａ、Ｈ４３３Ａ、及びＹ４３６Ａ、又は
ｂ）突然変異Ｌ２５１Ｄ、Ｌ３１４Ｄ、及びＬ４３２Ｄ、又は
ｃ）突然変異Ｌ２５１Ｓ、Ｌ３１４Ｓ、及びＬ４３２Ｓを含み、
あるいは
ｖｉｉｉ）第１のＦｃ領域ポリペプチドが突然変異Ｈ３１０Ａ、Ｈ４３３Ａ、及びＹ４３６Ａを含み、第２のＦｃ領域ポリペプチドが
ａ）突然変異Ｌ２５１Ｄ、Ｌ３１４Ｄ、及びＬ４３２Ｄ、又は
ｂ）突然変異Ｌ２５１Ｓ、Ｌ３１４Ｓ、及びＬ４３２Ｓを含み、
あるいは
ｉｘ）第１のＦｃ領域ポリペプチドが突然変異Ｌ２５１Ｄ、Ｌ３１４Ｄ、及びＬ４３２Ｄを含み、第２のＦｃ領域ポリペプチドが突然変異Ｌ２５１Ｓ、Ｌ３１４Ｓ、及びＬ４３２Ｓを含む。
【０２２５】
全ての態様の一実施態様において、抗体は、ヒトＦｃＲｎに特異的に結合しない。全ての態様の一実施態様において、抗体は、ブドウ球菌プロテインＡに特異的に結合しない。
【０２２６】
全ての態様の一実施態様において、抗体は、ヒトＦｃＲｎに特異的に結合しない。全ての態様の一実施態様において、抗体は、ブドウ球菌プロテインＡに特異的に結合する。
【０２２７】
全ての態様の一実施態様において、抗体は、第１のＦｃ領域ポリペプチドにおいて、ｉ）群Ｉ２５３Ａ、Ｈ３１０Ａ、及びＨ４３５Ａ、又はｉｉ）群Ｈ３１０Ａ、Ｈ４３３Ａ、及びＹ４３６Ａ、又はｉｉｉ）群Ｌ２５１Ｄ、Ｌ３１４Ｄ、及びＬ４３２Ｄ（Ｋａｂａｔ  ＥＵインデックスナンバリングシステムに従ったナンバリング）より選択される突然変異の１つ又は２つ、ならびに第２のＦｃ領域ポリペプチドにおいて、突然変異Ｌ２５１Ｄ、Ｉ２５３Ａ、Ｈ３１０Ａ、Ｌ３１４Ｄ、Ｌ４３２Ｄ、Ｈ４３３Ａ、Ｈ４３５Ａ、及びＹ４３６Ａ（Ｋａｂａｔ  ＥＵインデックスナンバリングシステムに従ったナンバリング）を含む群より選択される突然変異の１つ又は２つを含む、ヒトＩｇＧ１又はヒトＩｇＧ４サブクラス（すなわちヒト起源に由来する）の両方の第１及び第２のＦｃ領域ポリペプチドを含むＦｃ領域を含み、突然変異ｉ）Ｉ２５３Ａ、Ｈ３１０Ａ、及びＨ４３５Ａ、又はｉｉ）Ｈ３１０Ａ、Ｈ４３３Ａ、及びＹ４３６Ａ、又はｉｉｉ）Ｌ２５１Ｄ、Ｌ３１４Ｄ、及びＬ４３２Ｄの全てが、突然変異体（ヒト）ＩｇＧクラスＦｃ領域中に含まれるようにする。
【０２２８】
全ての態様の一実施態様において、抗体は、Ｆｃ領域において突然変異Ｉ２５３Ａ／Ｈ３１０Ａ／Ｈ４３５Ａ又はＨ３１０Ａ／Ｈ４３３Ａ／Ｙ４３６Ａ又はＬ２５１Ｄ／Ｌ３１４Ｄ／Ｌ４３２Ｄ又はこれらの組み合わせ（Ｋａｂａｔ  ＥＵインデックスナンバリングシステムに従ったナンバリング）を含む、ヒトＩｇＧ１又はヒトＩｇＧ４サブクラス（すなわちヒト起源に由来する）の両方の第１及び第２のＦｃ領域ポリペプチドを含むＦｃ領域を含み、それにより、ｉ）全ての突然変異が、第１又は第２のＦｃ領域ポリペプチド中にあり、あるいはｉｉ）１つ又は２つの突然変異が、第１のＦｃ領域ポリペプチド中にあり、１つ又は２つの突然変異が、第２のＦｃ領域ポリペプチド中にあり、突然変異ｉ）Ｉ２５３Ａ、Ｈ３１０Ａ、及びＨ４３５Ａ、又はｉｉ）Ｈ３１０Ａ、Ｈ４３３Ａ、及びＹ４３６Ａ、又はｉｉｉ）Ｌ２５１Ｄ、Ｌ３１４Ｄ、及びＬ４３２Ｄの全てが、Ｆｃ領域中に含まれるようにする。
【０２２９】
全ての態様の一実施態様において、抗体は、第１のならびに第２のＦｃ領域ポリペプチドにおいて突然変異Ｉ２５３Ａ／Ｈ３１０Ａ／Ｈ４３５Ａ又はＨ３１０Ａ／Ｈ４３３Ａ／Ｙ４３６Ａ又はＬ２５１Ｄ／Ｌ３１４Ｄ／Ｌ４３２Ｄ（Ｋａｂａｔ  ＥＵインデックスナンバリングシステムに従ったナンバリング）を含む、あるいは、第１のＦｃ領域ポリペプチドにおいて突然変異Ｉ２５３Ａ／Ｈ３１０Ａ／Ｈ４３５Ａ及び第２のＦｃ領域ポリペプチドにおいて突然変異Ｈ３１０Ａ／Ｈ４３３Ａ／Ｙ４３６Ａ（Ｋａｂａｔ  ＥＵインデックスナンバリングシステムに従ったナンバリング）を含む、ヒトＩｇＧ１又はヒトＩｇＧ４サブクラス（すなわちヒト起源に由来する）の両方の第１及び第２のＦｃ領域ポリペプチドを含むＦｃ領域を含む。
【０２３０】
全ての態様の一実施態様において、第２のＦｃ領域ポリペプチドは、突然変異Ｙ３４９Ｃ、Ｔ３６６Ｓ、Ｌ３６８Ａ、及びＹ４０７Ｖ（「ホール」）をさらに含み、第１のＦｃ領域ポリペプチドは、突然変異Ｓ３５４Ｃ及びＴ３６６Ｗ（「ノブ」）をさらに含む。
【０２３１】
全ての態様の一実施態様において、Ｆｃ領域ポリペプチドは、ヒトＩｇＧ１サブクラスのものである。一実施態様において、第１のＦｃ領域ポリペプチド及び第２のＦｃ領域ポリペプチドは、突然変異Ｌ２３４Ａ及びＬ２３５Ａをさらに含む。一実施態様において、第１のＦｃ領域ポリペプチド及び第２のＦｃ領域ポリペプチドは、突然変異Ｐ３２９Ｇをさらに含む。
【０２３２】
全ての態様の一実施態様において、Ｆｃ領域ポリペプチドは、ヒトＩｇＧ４サブクラスのものである。一実施態様において、第１のＦｃ領域ポリペプチド及び第２のＦｃ領域ポリペプチドは、突然変異Ｓ２２８Ｐ及びＬ２３５Ｅをさらに含む。一実施態様において、第１のＦｃ領域ポリペプチド及び第２のＦｃ領域ポリペプチドは、突然変異Ｐ３２９Ｇをさらに含む。
【０２３３】
本明細書において報告する一態様は、本明細書において報告する抗ＩＧＦ−１Ｒ抗体をコードする核酸である。
【０２３４】
本明細書において報告する一態様は、本明細書において報告する抗ＩＧＦ−１Ｒ抗体をコードする核酸を含む宿主細胞である。
【０２３５】
本明細書において報告する一態様は、本明細書において報告する抗ＩＧＦ−１Ｒ抗体をコードする核酸を含む宿主細胞を培養することを含む、本明細書において報告する抗ＩＧＦ−１Ｒ抗体を産生するための方法である。
【図面の簡単な説明】
【０２３６】
【図１】ＦｃＲｎに結合するそれらの能力に関して操作された抗体は、ＳＰＲ分析において、参照野生型（ｗｔ）抗体と比較して、延長（ＹＴＥ）又は短縮（ＡＡＡ）したインビボ半減期、増強（ＹＴＥ）又は低下（ＡＡＡ）したＦｃＲｎ結合、ならびに、ＦｃＲｎカラムクロマトグラフィーにおいて増強又は低下した保持時間を提示する；ａ）ｈｕＦｃＲｎトランスジェニック雄Ｃ５７ＢＬ／６Ｊマウス＋／−  ２７６中への１０mg/kgの単回静脈内ボーラス適用後のＰＫデータ：野生型ＩｇＧならびにＹＴＥ及びＡＡＡ  Ｆｃ改変  ＩｇＧについてのＡＵＣデータ；ｂ）ＢＩＡｃｏｒｅセンサーグラム；ｃ）ＦｃＲｎ親和性カラム溶出；野生型抗ＩＧＦ−１Ｒ抗体（参照）、抗ＩＧＦ−１Ｒ抗体のＹＴＥ突然変異体、抗ＩＧＦ−１Ｒ抗体のＡＡＡ突然変異体。
【図２】抗体ＩＧＦ−１Ｒ  ００３３、００３５、及び００４５の静脈内適用後の血清濃度の比較。
【図３】抗体ＩＧＦ−１Ｒ  ００３３の硝子体内及び静脈内適用後の眼溶解物濃度の比較。
【図４】抗体ＩＧＦ−１Ｒ  ００３５の硝子体内及び静脈内適用後の眼溶解物濃度の比較。
【図５】抗体ＩＧＦ−１Ｒ  ００４５の硝子体内及び静脈内適用後の眼溶解物濃度の比較。
【０２３７】
本発明の実施態様の詳細な説明
Ｉ．定義
用語「約」は、その後の続く数値の＋／−２０%の範囲を表示する。一実施態様において、この約という用語は、その後の続く数値の＋／−１０%の範囲を表示する。一実施態様において、この約という用語は、その後の続く数値の＋／−５%の範囲を表示する。
【０２３８】
本明細書における目的のための「アクセプターヒトフレームワーク」は、以下に定義するヒト免疫グロブリンフレームワーク又はヒトコンセンサスフレームワークに由来する軽鎖可変ドメイン（ＶＬ）フレームワーク又は重鎖可変ドメイン（ＶＨ）フレームワークのアミノ酸配列を含むフレームワークである。ヒト免疫グロブリンフレームワーク又はヒトコンセンサスフレームワークに「由来する」アクセプターヒトフレームワークは、その同じアミノ酸配列を含みうる、あるいは、それは、アミノ酸配列の変化を含みうる。一部の実施態様において、アミノ酸変化の数は、１０又はそれ以下、９又はそれ以下、８又はそれ以下、７又はそれ以下、６又はそれ以下、５又はそれ以下、４又はそれ以下、３又はそれ以下、あるいは２又はそれ以下である。一部の実施態様において、ＶＬアクセプターヒトフレームワークは、ＶＬヒト免疫グロブリンフレームワーク配列又はヒトコンセンサスフレームワーク配列と、配列において同一である。
【０２３９】
「親和性成熟」抗体は、１つ又は複数の超可変領域（ＨＶＲ）における１つ又は複数の変化（そのような変化を持たない親抗体と比較して）を伴う抗体を指し、そのような変化は、抗原に対する抗体の親和性における改善をもたらす。
【０２４０】
用語「変化」は、改変された抗体又は融合ポリペプチドを得るための、親抗体又は融合ポリペプチド（例えば、Ｆｃ領域の少なくともＦｃＲｎ結合部分を含む融合ポリペプチド）中の１つ又は複数のアミノ酸残基の突然変異（置換）、挿入（付加）、又は欠失を表示する。用語「突然変異」は、特定されたアミノ酸残基が、異なるアミノ酸残基で置換されていることを表示する。例えば、突然変異Ｌ２３４Ａは、抗体Ｆｃ領域（ポリペプチド）中の位置２３４でのアミノ酸残基リジンが、アミノ酸残基アラニンにより置換されている（アラニンを用いたリジンの置換）ことを表示する（ＥＵインデックスナンバリングシステムに従ったナンバリング）。
【０２４１】
用語「アミノ酸突然変異」は、少なくとも１つの既存のアミノ酸残基の、別の異なるアミノ酸残基を用いた置換を表示する（＝アミノ酸残基を置換する）。置換アミノ酸残基は、「天然アミノ酸残基」でありうるが、アラニン（三文字コード：ａｌａ、一文字コード：Ａ）、アルギニン（ａｒｇ、Ｒ）、アスパラギン（ａｓｎ、Ｎ）、アスパラギン酸（ａｓｐ、Ｄ）、システイン（ｃｙｓ、Ｃ）、グルタミン（ｇｌｎ、Ｑ）、グルタミン酸（ｇｌｕ、Ｅ）、グリシン（ｇｌｙ、Ｇ）、ヒスチジン（ｈｉｓ、Ｈ）、イソロイシン（ｉｌｅ、Ｉ）、ロイシン（ｌｅｕ、Ｌ）、リジン（ｌｙｓ、Ｋ）、メチオニン（ｍｅｔ、Ｍ）、フェニルアラニン（ｐｈｅ、Ｆ）、プロリン（ｐｒｏ、Ｐ）、セリン（ｓｅｒ、Ｓ）、スレオニン（ｔｈｒ、Ｔ）、トリプトファン（ｔｒｐ、Ｗ）、チロシン（ｔｙｒ、Ｙ）、及びバリン（ｖａｌ、Ｖ）からなる群より選択されうる。
【０２４２】
用語「アミノ酸挿入」は、アミノ酸配列中の所定の位置での少なくとも１つのアミノ酸残基の（追加的な）組み入れを表示する。一実施態様において、挿入は、１つ又は２つのアミノ酸残基の挿入である。挿入されたアミノ酸残基は、任意の天然又は非天然アミノ酸残基でありうる。
【０２４３】
用語「アミノ酸欠失」は、アミノ酸配列中の所定の位置での少なくとも１つのアミノ酸残基の除去を表示する。
【０２４４】
用語「抗ＩＧＦ−１Ｒ抗体」及び「ＩＧＦ−１Ｒに結合する抗体」は、抗体が、ＩＧＦ−１Ｒを標的とする際に、診断用及び／又は治療用薬剤として有用であるように、十分な親和性を伴いＩＧＦ−１Ｒに結合することが可能である抗体を指す。一実施態様において、無関係の、非ＩＧＦ−１Ｒタンパク質に対する抗ＩＧＦ−１Ｒ抗体の結合の程度は、例えば、表面共鳴プラズモン（ＳＰＲ）により測定した場合、ＩＧＦ−１Ｒへの抗体の結合の約１０%未満である。
【０２４５】
用語「抗体」は、本明細書において、最も広い意味において使用されており、所望の抗原及び／又はプロテインＡ及び／又はＦｃＲｎ結合活性を示す限り、種々の抗体構造（モノクローナル抗体、多重特異性抗体（例えば、二重特異性抗体、三重特異性抗体）、及び抗体フラグメントを含むが、これらに限定されない）を包含する。
【０２４６】
参照抗体としての「同じエピトープに結合する抗体」は、競合アッセイにおいて、その抗原への参照抗体の結合を５０%又はそれ以上だけ遮断する抗体を指し、逆に、参照抗体は、競合アッセイにおいて、その抗原への抗体の結合を５０%又はそれ以上だけ遮断する。
【０２４７】
用語「非対称Ｆｃ領域」は、Ｋａｂａｔ  ＥＵインデックスナンバリングシステムに従った、対応する位置で異なるアミノ酸残基を有するＦｃ領域ポリペプチドの対を表示する。用語「ＦｃＲｎ結合に関する非対称Ｆｃ領域」は、対応する位置で異なるアミノ酸残基を有する２つのポリペプチド鎖からなるＦｃ領域を表示し、それにより、位置は、Ｋａｂａｔ  ＥＵインデックスナンバリングシステムに従って決定され、それにより、異なる位置は、ヒト新生児Ｆｃ受容体（ＦｃＲｎ）へのＦｃ領域の結合に影響する。本明細書における目的のために、「ＦｃＲｎ結合に関する非対称Ｆｃ領域」におけるＦｃ領域の２つのポリペプチド鎖間の差異は、ヘテロ二量体Ｆｃ領域の形成を促進するために（例えば、二重特異性抗体の産生のために）導入されている差異を含まない。これらの差異は、また、非対称でありうる、即ち、２つの鎖は、Ｋａｂａｔ  ＥＵインデックスナンバリングシステムに従った非対応アミノ酸残基で差異を有する。これらの差異は、ヘテロ二量体化を促進させ、ホモ二量体化を低下させる。そのような差異の例は、いわゆる「ノブ・インツー・ホール（ｋｎｏｂｓ  ｉｎｔｏ  ｈｏｌｅｓ）」置換である（例えば、ＵＳ  ７，６９５，９３６及びＵＳ  ２００３／００７８３８５を参照のこと）。サブクラスＩｇＧ１のＩｇＧ抗体のＦｃ領域の個々のポリペプチド鎖における以下のノブ及びホール置換によって、ヘテロ二量体形成が増加することが見出されている：１）１つの鎖中のＹ４０７Ｔ及び他の鎖中のＴ３６６Ｙ；２）１つの鎖中のＹ４０７Ａ及び他の鎖中のＴ３６６Ｗ；３）１つの鎖中のＦ４０５Ａ及び他の鎖中のＴ３９４Ｗ；４）１つの鎖中のＦ４０５Ｗ及び他の鎖中のＴ３９４Ｓ；５）１つの鎖中のＹ４０７Ｔ及び他の鎖中のＴ３６６Ｙ；６）１つの鎖中のＴ３６６Ｙ及びＦ４０５Ａならびに他の鎖中のＴ３９４Ｗ及びＹ４０７Ｔ；７）１つの鎖中のＴ３６６Ｗ及びＦ４０５Ｗならびに他の鎖中のＴ３９４Ｓ及びＹ４０７Ａ；８）１つの鎖中のＦ４０５Ｗ及びＹ４０７Ａならびに他の鎖中のＴ３６６Ｗ及びＴ３９４Ｓ；ならびに９）１つの鎖中のＴ３６６Ｗならびに他の鎖中のＴ３６６Ｓ、Ｌ３６８Ａ、及びＹ４０７Ｖ（それにより、列挙した最後が特に適する）。また、２つのＦｃ領域ポリペプチド鎖間に新たなジスルフィド架橋を作製する変化によって、ヘテロ二量体形成が促進される（例えば、ＵＳ２００３／００７８３８５を参照のこと）。サブクラスＩｇＧ１のＩｇＧ抗体のＦｃ領域の個々のポリペプチド鎖中での新たな鎖内ジスルフィド結合の形成のための適当に間隔の空いたシステイン残基をもたらす以下の置換によって、ヘテロ二量体形成が増加することが見出されている：１つの鎖中のＹ３４９Ｃ及び他におけるＳ３５４Ｃ；１つの鎖中のＹ３４９Ｃ及び他におけるＥ３５６Ｃ；１つの鎖中のＹ３４９Ｃ及び他におけるＥ３５７Ｃ；１つの鎖中のＬ３５１Ｃ及び他におけるＳ３５４Ｃ；１つの鎖中のＴ３９４Ｃ及び他におけるＥ３９７Ｃ；又は１つの鎖中のＤ３９９Ｃ及び他におけるＫ３９２Ｃ。ヘテロ二量体化を促進するアミノ酸変化のさらなる例は、いわゆる「電荷対置換」である（例えば、ＷＯ２００９／０８９００４を参照のこと）。サブクラスＩｇＧ１のＩｇＧ抗体の���ｃ領域の個々のポリペプチド鎖における以下の電荷対置換によって、ヘテロ二量体形成が増加することが見出されている：１）１つの鎖中のＫ４０９Ｄ又はＫ４０９Ｅ及び他の鎖中のＤ３９９Ｋ又はＤ３９９Ｒ；２）１つの鎖中のＫ３９２Ｄ又はＫ３９２Ｅ及び他の鎖中のＤ３９９Ｋ又はＤ３９９Ｒ；３）１つの鎖中のＫ４３９Ｄ又はＫ４３９Ｅ及び他の鎖中のＥ３５６Ｋ又はＥ３５６Ｒ；４）１つの鎖中のＫ３７０Ｄ又はＫ３７０Ｅ及び他の鎖中のＥ３５７Ｋ又はＥ３５７Ｒ；５）１つの鎖中のＫ４０９Ｄ及びＫ３６０Ｄ加えて他の鎖中のＤ３９９Ｋ及びＥ３５６Ｋ；６）１つの鎖中のＫ４０９Ｄ及びＫ３７０Ｄ、加えて、他の鎖中のＤ３９９Ｋ及びＥ３５７Ｋ；７）１つの鎖中のＫ４０９Ｄ及びＫ３９２Ｄ、加えて、他の鎖中のＤ３９９Ｋ、Ｅ３５６Ｋ、及びＥ３５７Ｋ；８）１つの鎖中のＫ４０９Ｄ及びＫ３９２Ｄならびに他の鎖中のＤ３９９Ｋ；９）１つの鎖中のＫ４０９Ｄ及びＫ３９２Ｄならびに他の鎖中のＤ３９９Ｋ及びＥ３５６Ｋ；１０）１つの鎖中のＫ４０９Ｄ及びＫ３９２Ｄならびに他の鎖中のＤ３９９Ｋ及びＤ３５７Ｋ；１１）１つの鎖中のＫ４０９Ｄ及びＫ３７０Ｄならびに他の鎖中のＤ３９９Ｋ及びＤ３５７Ｋ；１２）１つの鎖中のＤ３９９Ｋならびに他の鎖中のＫ４０９Ｄ及びＫ３６０Ｄ；ならびに１３）１つの鎖中のＫ４０９Ｄ及びＫ４３９Ｄならびに他におけるＤ３９９Ｋ及びＥ３５６Ｋ。
【０２４８】
用語「ＩＧＦ−１Ｒに結合する」は、インビトロアッセイにおける、一実施態様において、抗体が表面に結合し、抗体へのＩＧＦ−１Ｒの結合が、表面プラズモン共鳴（ＳＰＲ）により測定される結合アッセイにおけるＩＧＦ−１Ｒへの抗体の結合を表示する。結合は、１０−８M又はそれ以下の、一部の実施態様において、１０−１３M〜１０−８Mの、一部の実施態様において、１０−１３M〜１０−９Mの結合親和性（ＫＤ）を意味する。
【０２４９】
ＩＧＦ−１Ｒへの結合は、BIAcoreアッセイ（GE Healthcare Biosensor AB、ウプサラ、スウェーデン）により研究することができる。結合の親和性は、用語ｋａ（抗体／抗原複合体からの抗体の会合についての速度定数）、ｋｄ（解離定数）、及びＫＤ（ｋｄ／ｋａ）により定義される。
【０２５０】
ＩＧＦ−１ＲへのＩＧＦ−１及びＩＧＦ−２の結合が、また、本明細書において報告する抗体により阻害される。阻害は、腫瘍細胞上のＩＧＦ−１ＲへのＩＧＦ−１／ＩＧＦ−２の結合についてのアッセイにおいてＩＣ５０として測定される。そのようなアッセイにおいて、腫瘍細胞（例えば、ＨＴ２９）の表面で提供される、ＩＧＦ−１Ｒに結合した放射性標識ＩＧＦ−１もしくはＩＧＦ−２又はそれらのＩＧＦ−１Ｒ結合断片の量は、増加濃度の抗体を伴わず、及び伴い測定される。ＩＧＦ−１ＲへのＩＧＦ−１及びＩＧＦ−２の結合について、本明細書において報告する抗体のＩＣ５０値は、２nM以下であり、ＩＧＦ−１ＲへのＩＧＦ−１／ＩＧＦ−２の結合についてのＩＣ５０値の比率は、約１：３〜３：１である。ＩＣ５０値は、少なくとも３つの独立した測定値の平均値又は中央値として測定される。単一のＩＣ５０値は、その範囲外でありうる。ヒトＩＧＦ−１Ｒのアミノ酸配列を配列番号１１に示す。
【０２５１】
用語「キメラ」抗体は、重鎖及び／又は軽鎖の部分が特定の供給源又は種に由来しており、重鎖及び／又は軽鎖の残りの部分が、異なる供給源又は種に由来する抗体を指す。
【０２５２】
用語「ＣＨ２ドメイン」は、おおよそＥＵ位置２３１からＥＵ位置３４０（Ｋａｂａｔに従ったＥＵナンバリングシステム）まで伸長する抗体重鎖ポリペプチドの一部を表示する。一実施態様において、ＣＨ２ドメインは、配列番号０９のアミノ酸配列を有する：ＡＰＥＬＬＧＧ  ＰＳＶＦＬＦＰＰＫＰ  ＫＤＴＬＭＩＳＲＴＰ  ＥＶＴＣＶＷＤＶＳ  ＨＥＤＰＥＶＫＦＮＷ  ＹＶＤＧＶＥＶＨＮＡ  ＫＴＫＰＲＥＥＱ  Ｅ  ＳＴＹＲＷＳＶＬＴ  ＶＬＨＱＤＷＬＮＧＫ  ＥＹＫＣＫＶＳＮＫＡ  ＬＰＡＰＩＥＫＴＩＳ  ＫＡＫ。
【０２５３】
用語「ＣＨ３ドメイン」は、おおよそＥＵ位置３４１からＥＵ位置４４６まで伸長する抗体重鎖ポリペプチドの一部を表示する。一実施態様において、ＣＨ３ドメインは、配列番号１０のアミノ酸配列を有する：ＧＱＰＲＥＰＱ  ＶＹＴＬＰＰＳＲＤＥ  ＬＴＫＮＱＶＳＬＴＣ  ＬＶＫＧＦＹＰＳＤＩ  ＡＶＥＷＥＳＮＧＱＰ  ＥＮＮＹＫＴＴＰＰＶ  ＬＤＳＤＧＳＦＦＬＹ  ＳＫＬＴＶＤＫＳＲＷ  ＱＱＧＮＶＦＳＣＳＶ  ＭＨＥＡＬＨＮＨＹＴ  ＱＫＳＬＳＬＳＰＧ。
【０２５４】
抗体の「クラス」は、その重鎖により保持される定常ドメイン又は定常領域の型を指す。抗体には５つの主要なクラスがあり（ＩｇＡ、ＩｇＤ、ＩｇＥ、ＩｇＧ、及びＩｇＭ）、これらのいくつかは、さらに、サブクラス（アイソタイプ）に分けることができる（例えば、ＩｇＧ１、ＩｇＧ２、ＩｇＧ３、ＩｇＧ４、ＩｇＡ１、及びＩｇＡ２）。免疫グロブリンの異なるクラスに対応する重鎖定常ドメインは、それぞれα、δ、ε、γ、及びμと呼ばれる。
【０２５５】
用語「同等の長さ」は、２つのポリペプチドが、同一の数のアミノ酸残基を含む、あるいは、１つ又は複数の、最大１０アミノ酸残基までの長さにおいて異なり得ることを表示する。一実施態様において、Ｆｃ領域ポリペプチドは、同一数のアミノ酸残基を含む、又は１〜１０のアミノ酸残基の数だけ異なる。一実施態様において、Ｆｃ領域ポリペプチドは、同一数のアミノ酸残基を含む、又は１〜５のアミノ酸残基の数だけ異なる。一実施態様において、Ｆｃ領域ポリペプチドは、同一数のアミノ酸残基を含む、又は１〜３のアミノ酸残基の数だけ異なる。
【０２５６】
用語「由来する」は、アミノ酸配列が、少なくとも１つの位置に変化を導入することにより、親アミノ酸配列に由来することを表示する。このように、由来するアミノ酸配列は、少なくとも１つの対応する位置で、対応する親アミノ酸配列とは異なる（抗体Ｆｃ領域についてのＫａｂａｔ  ＥＵインデックスナンバリングシステムに従ったナンバリング）。一実施態様において、親アミノ酸配列に由来するアミノ酸配列は、対応する位置で１〜１５のアミノ酸残基だけ異なる。一実施態様において、親アミノ酸配列に由来するアミノ酸配列は、対応する位置で１〜１０のアミノ酸残基だけ異なる。一実施態様において、親アミノ酸配列に由来するアミノ酸配列は、対応する位置で１〜６のアミノ酸残基だけ異なる。同様に、由来するアミノ酸配列は、その親アミノ酸配列に対してする高いアミノ酸配列同一性を有する。一実施態様において、親アミノ酸配列に由来するアミノ酸配列は、８０%又はそれ以上のアミノ酸配列同一性を有する。一実施態様において、親アミノ酸配列に由来するアミノ酸配列は、９０%又はそれ以上のアミノ酸配列同一性を有する。一実施態様において、親アミノ酸配列に由来するアミノ酸配列は、９５%又はそれ以上のアミノ酸配列同一性を有する。
【０２５７】
「エフェクター機能」は、抗体のＦｃ領域に起因するそれらの生物学的活性を指し、それは、抗体クラスに伴って変動する。抗体エフェクター機能の例は、Ｃ１ｑ結合及び補体依存性細胞傷害（ＣＤＣ）；Ｆｃ受容体結合；抗体依存性細胞媒介性細胞傷害（ＡＤＣＣ）；食作用；細胞表面受容体（例えば、Ｂ細胞受容体）の下方制御；及びＢ細胞活性化を含む。
【０２５８】
薬剤（例えば、医薬製剤）の「効果的な量」は、所望の治療的又は予防的結果を達成するために必要な投与量で、かつ期間にわたって、効果的な量を指す。
【０２５９】
用語「Ｆｃ融合ポリペプチド」は、結合ドメイン（例えば、抗原結合ドメイン、例えば単鎖抗体など、又はポリペプチド、例えば受容体のリガンドなど）と所望の標的及び／又はプロテインＡ及び／又はＦｃＲｎ結合活性を示す抗体Ｆｃ領域との融合体を表示する。
【０２６０】
用語「ヒト起源のＦｃ領域」は、少なくともヒンジ領域の一部、ＣＨ２ドメイン、及びＣＨ３ドメインを含む、ヒト起源の免疫グロブリン重鎖のＣ末端領域を表示する。一実施態様において、ヒトＩｇＧ重鎖Ｆｃ領域は、Ｃｙｓ２２６から、又はＰｒｏ２３０から、重鎖のカルボキシル末端まで伸長する。一実施態様において、Ｆｃ領域は、配列番号１４のアミノ酸配列を有する。しかし、Ｆｃ領域のＣ末端リジン（Ｌｙｓ４４７）は、あってもなくてもよい。本明細書において他に指定がない限り、Ｆｃ領域又は定常領域中のアミノ酸残基のナンバリングは、ＥＵナンバリングシステム（また、ＥＵインデックスと呼ばれる）に従い、Kabat, E.A., et al., Sequences of Proteins of Immunological Interest, 5th ed., Public Health Service, National Institutes of Health, Bethesda, MD (1991), NIH Publication 91 3242に記載される通りである。Ｆｃ領域は、２つの重鎖Ｆｃ領域ポリペプチドで構成され、それらは、ポリペプチド間のジスルフィド結合を形成するヒンジ領域のシステイン残基を介して互いに共有結合的に連結することができる。
【０２６１】
用語「ＦｃＲｎ」は、ヒト新生児Ｆｃ受容体を表示する。ＦｃＲｎは、リソソーム分解経路からＩｇＧをサルベージするように機能し、クリアランスの低下及び半減期の増加をもたらす。ＦｃＲｎは、２つのポリペプチドからなるヘテロ二量体タンパク質である：５０kDaのクラスＩ主要組織適合遺伝子複合体様タンパク質（α−ＦｃＲｎ）及び１５kDaのβ２ミクログロブリン（β２Ｍ）。ＦｃＲｎは、高い親和性を伴い、ＩｇＧのＦｃ領域のＣＨ２−ＣＨ３部分に結合する。ＩｇＧとＦｃＲｎの間での相互作用は、厳密にｐＨ依存性であり、１：２の化学量論で生じ、１つのＩｇＧが、その２つの重鎖を介して、２つのＦｃＲｎ分子に結合する（Huber, A.H., et al., J. Mol. Biol. 230 (1993) 1077-1083）。ＦｃＲｎ結合は、酸性ｐＨ（ｐＨ＜６．５）でエンドソームにおいて生じ、ＩｇＧが、中性の細胞表面（約７．４のｐＨ）で放出される。相互作用のｐＨ感受性の性質によって、エンドソームの酸性環境内で受容体に結合することにより、細胞内分解から細胞中へ飲作用されたＩｇＧのＦｃＲｎ媒介保護が促進される。ＦｃＲｎは、次に、細胞表面へのＩｇＧのリサイクリング、及び、細胞外の中性ｐＨ環境へのＦｃＲｎ−ＩｇＧ複合体の曝露時での、血流中へのその後の放出を促進する。
【０２６２】
用語「Ｆｃ領域のＦｃＲｎ結合部分」は、およそＥＵ位置２４３からＥＵ位置２６１まで、およそＥＵ位置２７５からＥＵ位置２９３まで、およそＥＵ位置３０２からＥＵ位置３１９まで、およそＥＵ位置３３６からＥＵ位置３４８まで、およそＥＵ位置３６７からＥＵ位置３９３及びＥＵ位置４０８まで、およそＥＵ位置４２４からＥＵ位置４４０まで伸長する抗体重鎖ポリペプチドの一部を表示する。一部の実施態様において、Ｋａｂａｔ  のＥＵナンバリングに従った以下のアミノ酸残基の１つ又は複数が変化される：Ｆ２４３、Ｐ２４４、Ｐ２４５  Ｐ、Ｋ２４６、Ｐ２４７、Ｋ２４８、Ｄ２４９、Ｔ２５０、Ｌ２５１、Ｍ２５２、Ｉ２５３、Ｓ２５４、Ｒ２５５、Ｔ２５６、Ｐ２５７、Ｅ２５８、Ｖ２５９、Ｔ２６０、Ｃ２６１、Ｆ２７５、Ｎ２７６、Ｗ２７７、Ｙ２７８、Ｖ２７９、Ｄ２８０、Ｖ２８２、Ｅ２８３、Ｖ２８４、Ｈ２８５、Ｎ２８６、Ａ２８７、Ｋ２８８、Ｔ２８９、Ｋ２９０、Ｐ２９１、Ｒ２９２、Ｅ２９３、Ｖ３０２、Ｖ３０３、Ｓ３０４、Ｖ３０５、Ｌ３０６、Ｔ３０７、Ｖ３０８、Ｌ３０９、Ｈ３１０、Ｑ３１１、Ｄ３１２、Ｗ３１３、Ｌ３１４、Ｎ３１５、Ｇ３１６、Ｋ３１７、Ｅ３１８、Ｙ３１９、Ｉ３３６、Ｓ３３７、Ｋ３３８、Ａ３３９、Ｋ３４０、Ｇ３４１、Ｑ３４２、Ｐ３４３、Ｒ３４４、Ｅ３４５、Ｐ３４６、Ｑ３４７、Ｖ３４８、Ｃ３６７、Ｖ３６９、Ｆ３７２、Ｙ３７３、Ｐ３７４、Ｓ３７５、Ｄ３７６、Ｉ３７７、Ａ３７８、Ｖ３７９、Ｅ３８０、Ｗ３８１、Ｅ３８２、Ｓ３８３、Ｎ３８４、Ｇ３８５、Ｑ３８６、Ｐ３８７、Ｅ３８８、Ｎ３８９、Ｙ３９１、Ｔ３９３、Ｓ４０８、Ｓ４２４、Ｃ４２５、Ｓ４２６、Ｖ４２７、Ｍ４２８、Ｈ４２９、Ｅ４３０、Ａ４３１、Ｌ４３２、Ｈ４３３、Ｎ４３４、Ｈ４３５、Ｙ４３６、Ｔ４３７、Ｑ４３８、Ｋ４３９、及びＳ４４０（ＥＵナンバリング）。
【０２６３】
「フレームワーク」又は「ＦＲ」は、超可変領域（ＨＶＲ）残基以外の可変ドメイン残基を指す。可変ドメインのＦＲは、一般的に、４つのＦＲドメインからなる：ＦＲ１、ＦＲ２、ＦＲ３、及びＦＲ４。したがって、ＨＶＲ配列及びＦＲ配列は、一般的に、ＶＨ（又はＶＬ）において以下の配列中に現れる：ＦＲ１−Ｈ１（Ｌ１）−ＦＲ２−Ｈ２（Ｌ２）−ＦＲ３−Ｈ３（Ｌ３）−ＦＲ４。
【０２６４】
用語「全長抗体」は、天然抗体構造に実質的に類似している構造を有する、又は本明細書において定義するＦｃ領域を含む重鎖を有する抗体を表示する。全長抗体は、さらなるドメイン、例えば、全長抗体の鎖の１つ又は複数にコンジュゲートされたｓｃＦｖ又はｓｃＦａｂなどを含みうる。これらのコンジュゲートは、また、用語「全長抗体」により包含される。
【０２６５】
用語「ヘテロ二量体」又は「ヘテロ二量体の」は、（例えば、同等の長さの）２つのポリペプチド鎖を含む分子を表示し、ここで、２つのポリペプチド鎖は、対応する位置において少なくとも１つの異なるアミノ酸残基を有するアミノ酸配列を有し、それにより、対応する位置は、ＫａｂａｔのＥＵインデックスに従って決定される。
【０２６６】
用語「ホモ二量体」又は「ホモ二量体の」は、同程度の長さの２つのポリペプチド鎖を含む分子を表示し、ここで、２つのポリペプチド鎖は、対応する位置において同一であるアミノ酸配列を有し、それにより、対応する位置は、ＫａｂａｔのＥＵインデックスに従って決定される。
【０２６７】
本明細書において報告する抗体は、焦点の突然変異又は特性に関して決定される、そのＦｃ領域に関してホモ二量体又はヘテロ二量体でありうる。例えば、ＦｃＲｎ及び／又はプロテインＡへの結合に関して（即ち、特性に焦点を当てる）、Ｆｃ領域（抗体）は、突然変異Ｈ３１０Ａ、Ｈ４３３Ａ、及びＹ４３６Ａ（これらの突然変異は、抗体のＦｃＲｎ及び／又はプロテインＡ結合特性に関して焦点を当てる）に関してはホモ二量体であるが（即ち、両方の重鎖Ｆｃ領域のポリペプチドが、これらの突然変異を含む）、しかし、同時に、突然変異Ｙ３４９Ｃ、Ｔ３６６Ｓ、Ｌ３６８Ａ、及びＹ４０７Ｖ（これらの突然変異には焦点を当てていない。なぜなら、これらの突然変異は、重鎖のヘテロ二量体化に向けられ、ＦｃＲｎ／プロテインＡ結合特性には向けられていないからである）ならびに突然変異Ｓ３５４Ｃ及びＴ３６６Ｗ（第１のセットが、第１のＦｃ領域ポリペプチド中だけに含まれる対し、第２のセットは、第２のＦｃ領域ポリペプチド中だけに含まれる）に関してヘテロ二量体である。さらに、例えば、本明細書において報告する抗体は、突然変異Ｉ２５３Ａ、Ｈ３１０Ａ、Ｈ４３３Ａ、Ｈ４３５Ａ、及びＹ４３６Ａに関してヘテロ二量体でありうる（即ち、これらの突然変異は、全て、二量体ポリペプチドのＦｃＲｎ及び／又はプロテインＡ結合特性に向けられる）、即ち、１つのＦｃ領域ポリペプチドが、突然変異Ｉ２５３Ａ、Ｈ３１０Ａ、及びＨ４３５Ａを含むのに対し、他のＦｃ領域ポリペプチドは、突然変異Ｈ３１０Ａ、Ｈ４３３Ａ、及びＹ４３６Ａを含む。
【０２６８】
用語「宿主細胞」、「宿主細胞株」、及び「宿主細胞培養物」は、互換的に使用され、外因性核酸が導入された細胞（そのような細胞の子孫を含む）を指す。宿主細胞は、「形質転換体」及び「形質転換細胞」を含み、それらは、継代数に関係なく、それに由来する一次形質転換細胞及びその子孫を含む。子孫は、核酸含量において親細胞と完全に同一でなくてもよいが、突然変異を含みうる。元々形質転換されていた細胞においてスクリーニング又は選択されたものと同じ機能又は生物学的活性を有する突然変異体子孫が、本明細書に含まれる。
【０２６９】
「ヒト抗体」は、ヒト又はヒト細胞により産生される抗体、あるいはヒト抗体のレパートリー又は他のヒト抗体をコードする配列を利用した、非ヒト供給源に由来する抗体のアミノ酸配列に対応するアミノ酸配列を持つものである。ヒト抗体のこの定義では、具体的には、非ヒト抗原結合残基を含むヒト化抗体が除外される。
【０２７０】
「ヒトコンセンサスフレームワーク」は、ヒト免疫グロブリンＶＬ又はＶＨフレームワーク配列の選択において、最も共通して生じるアミノ酸残基を表すフレームワークである。一般的に、ヒト免疫グロブリンＶＬ又はＶＨ配列の選択は、可変ドメイン配列のサブグループからである。一般的に、配列のサブグループは、Kabat, E.A.et al., Sequences of Proteins of Immunological Interest, 5th ed., Bethesda MD (1991), NIH Publication 91-3242, Vols. 1-3における通りのサブグループである。一実施態様において、ＶＬについて、サブグループは、Ｋａｂａｔら（上記）における通りのサブグループカッパＩである。一実施態様において、ＶＨについて、サブグループは、Ｋａｂａｔら（上記）における通りのサブグループＩＩＩである。
【０２７１】
用語「ヒトＦｃ領域ポリペプチド」は、「天然」又は「野生型」ヒトＦｃ領域のポリペプチドと同一であるアミノ酸配列を表示する。用語「突然変異体（ヒト）Ｆｃ領域ポリペプチド」は、少なくとも１つの「アミノ酸変化」による「天然」又は「野生型」ヒトＦｃ領域ポリペプチドに由来するアミノ酸配列を表示する。「ヒトＦｃ領域」は、２つのヒトＦｃ領域ポリペプチドからなる。「突然変異体（ヒト）Ｆｃ領域」は、２つのＦｃ領域ポリペプチドからなり、それにより、両方が突然変異体（ヒト）Ｆｃ領域ポリペプチドでありうる、又は、１つがヒトＦｃ領域ポリペプチドであり、他は、突然変異体（ヒト）Ｆｃ領域ポリペプチドである。一実施態様において、ヒトＦｃ領域ポリペプチドは、配列番号１４のヒトＩｇＧ１  Ｆｃ領域ポリペプチドの、又は配列番号１５のヒトＩｇＧ２  Ｆｃ領域ポリペプチドの、又は配列番号１６のヒトＩｇＧ３  Ｆｃ領域ポリペプチドの、又は配列番号１７のヒトＩｇＧ４  Ｆｃ領域ポリペプチドのアミノ酸配列を有する。一実施態様において、Ｆｃ領域ポリペプチドは、配列番号１４又は１５又は１６又は１７のＦｃ領域ポリペプチドに由来し、配列番号１４又は１５又は１６又は１７のＦｃ領域ポリペプチドと比較して、少なくとも１つのアミノ酸突然変異を伴う。一実施態様において、Ｆｃ領域ポリペプチドは、約１つから約１０アミノ酸突然変異を含み／有し、一実施態様において、Ｆｃ領域ポリペプチドは、約１つから約５アミノ酸突然変異を含む／有する。一実施態様において、Ｆｃ領域ポリペプチドは、配列番号１４又は１５又は１６又は１７のヒトＦｃ領域ポリペプチドと少なくとも約８０%の相同性を有する。一実施態様において、Ｆｃ領域ポリペプチドは、配列番号１４又は１５又は１６又は１７のヒトＦｃ領域ポリペプチドと少なくとも約９０%の相同性を有する。一実施態様において、Ｆｃ領域ポリペプチドは、配列番号１４又は１５又は１６又は１７のヒトＦｃ領域ポリペプチドと少なくとも約９５%の相同性を有する。
【０２７２】
配列番号１４又は１５又は１６又は１７のヒトＦｃ領域ポリペプチドに由来するＦｃ領域ポリペプチドは、含まれるアミノ酸変化により定義される。このように、例えば、用語Ｐ３２９Ｇは、配列番号１４又は１５又は１６又は１７のヒトＦｃ領域ポリペプチドと比べて、アミノ酸位置３２９でプロリンからグリシンへの突然変異を伴う、ヒトＦｃ領域ポリペプチド由来のＦｃ領域ポリペプチドを表示する。
【０２７３】
ここで用いたように、重鎖及び軽鎖の全ての定常領域及びドメインのアミノ酸位置は、Kabat et al., Sequences of proteins of Immunological Interest, 5th ed., Public Health Service, National Institutes of Health, Bethesda, MD (1991)に記載されたＫａｂａｔナンバリングシステムによりナンバリングし、そして本明細書では「Ｋａｂａｔによるナンバリング」という。特には、Kabat , et al., Sequences of Proteins of Immunological Interest, 5th ed., Public Health Service, National Institutes of Health, Bethesda, MD (1991) のＫａｂａｔナンバリングシステム（６４７〜６６０頁を参照ください）をカッパアイソタイプ及びラムダアイソタイプの軽鎖定常ドメインＣＬのために用いて、そしてＫａｂａｔ  ＥＵインデックスナンバリングシステム（６６１〜７２３頁を参照ください）を定常重鎖ドメイン（ＣＨ１、ヒンジ、ＣＨ２及びＣＨ３）のために用いる。
【０２７４】
ヒトＩｇＧ１  Ｆｃ領域ポリペプチドは、以下のアミノ酸配列を有する：
【化１】
2019167363.tif 000002
【０２７５】
突然変異Ｌ２３４Ａ、Ｌ２３５Ａを伴うヒトＩｇＧ１  Ｆｃ領域由来のＦｃ領域ポリペプチドは、以下のアミノ酸配列を有する：
【化２】
2019167363.tif 000003
【０２７６】
Ｙ３４９Ｃ、Ｔ３６６Ｓ、Ｌ３６８Ａ、及びＹ４０７Ｖ突然変異を伴うヒトＩｇＧ１  Ｆｃ領域由来のＦｃ領域ポリペプチドは、以下のアミノ酸配列を有する：
【化３】
2019167363.tif 000004
【０２７７】
Ｓ３５４Ｃ、Ｔ３６６Ｗ突然変異を伴うヒトＩｇＧ１  Ｆｃ領域由来のＦｃ領域ポリペプチドは、以下のアミノ酸配列を有する：
【化４】
2019167363.tif 000005
【０２７８】
Ｌ２３４Ａ、Ｌ２３５Ａ突然変異及びＹ３４９Ｃ、Ｔ３６６Ｓ、Ｌ３６８Ａ、Ｙ４０７Ｖ突然変異を伴うヒトＩｇＧ１  Ｆｃ領域由来のＦｃ領域ポリペプチドは、以下のアミノ酸配列を有する：
【化５】
2019167363.tif 000006
【０２７９】
Ｌ２３４Ａ、Ｌ２３５Ａ及びＳ３５４Ｃ、Ｔ３６６Ｗ突然変異を伴うヒトＩｇＧ１  Ｆｃ領域由来のＦｃ領域ポリペプチドは、以下のアミノ酸配列を有する：
【化６】
2019167363.tif 000007
【０２８０】
Ｐ３２９Ｇ突然変異を伴うヒトＩｇＧ１  Ｆｃ領域由来のＦｃ領域ポリペプチドは、以下のアミノ酸配列を有する：
【化７】
2019167363.tif 000008
【０２８１】
Ｌ２３４Ａ、Ｌ２３５Ａ突然変異及びＰ３２９Ｇ突然変異を伴うヒトＩｇＧ１  Ｆｃ領域由来のＦｃ領域ポリペプチドは、以下のアミノ酸配列を有する：
【化８】
2019167363.tif 000009
【０２８２】
Ｐ３２９Ｇ突然変異及びＹ３４９Ｃ、Ｔ３６６Ｓ、Ｌ３６８Ａ、Ｙ４０７Ｖ突然変異を伴うヒトＩｇＧ１  Ｆｃ領域由来のＦｃ領域ポリペプチドは、以下のアミノ酸配列を有する：
【化９】
2019167363.tif 000010
【０２８３】
Ｐ３２９Ｇ突然変異及びＳ３５４Ｃ、Ｔ３６６Ｗ突然変異を伴うヒトＩｇＧ１  Ｆｃ領域由来のＦｃ領域ポリペプチドは、以下のアミノ酸配列を有する：
【化１０】
2019167363.tif 000011
【０２８４】
Ｌ２３４Ａ、Ｌ２３５Ａ、Ｐ３２９Ｇ及びＹ３４９Ｃ、Ｔ３６６Ｓ、Ｌ３６８Ａ、Ｙ４０７Ｖ突然変異を伴うヒトＩｇＧ１  Ｆｃ領域由来のＦｃ領域ポリペプチドは、以下のアミノ酸配列を有する：
【化１１】
2019167363.tif 000012
【０２８５】
Ｌ２３４Ａ、Ｌ２３５Ａ、Ｐ３２９Ｇ突然変異及びＳ３５４Ｃ、Ｔ３６６Ｗ突然変異を伴うヒトＩｇＧ１  Ｆｃ領域由来のＦｃ領域ポリペプチドは、以下のアミノ酸配列を有する：
【化１２】
2019167363.tif 000013
【０２８６】
ヒトＩｇＧ４  Ｆｃ領域ポリペプチドは、以下のアミノ酸配列を有する：
【化１３】
2019167363.tif 000014
【０２８７】
Ｓ２２８Ｐ及びＬ２３５Ｅ突然変異を伴うヒトＩｇＧ４  Ｆｃ領域由来のＦｃ領域ポリペプチドは、以下のアミノ酸配列を有する：
【化１４】
2019167363.tif 000015
【０２８８】
Ｓ２２８Ｐ、Ｌ２３５Ｅ突然変異及びＰ３２９Ｇ突然変異を伴うヒトＩｇＧ４  Ｆｃ領域由来のＦｃ領域ポリペプチドは、以下のアミノ酸配列を有する：
【化１５】
2019167363.tif 000016
【０２８９】
Ｓ３５４Ｃ、Ｔ３６６Ｗ突然変異を伴うヒトＩｇＧ４  Ｆｃ領域由来のＦｃ領域ポリペプチドは、以下のアミノ酸配列を有する：
【化１６】
2019167363.tif 000017
【０２９０】
Ｙ３４９Ｃ、Ｔ３６６Ｓ、Ｌ３６８Ａ、Ｙ４０７Ｖ突然変異を伴うヒトＩｇＧ４  Ｆｃ領域由来のＦｃ領域ポリペプチドは、以下のアミノ酸配列を有する：
【化１７】
2019167363.tif 000018
【０２９１】
Ｓ２２８Ｐ、Ｌ２３５Ｅ及びＳ３５４Ｃ、Ｔ３６６Ｗ突然変異を伴うヒトＩｇＧ４  Ｆｃ領域由来のＦｃ領域ポリペプチドは、以下のアミノ酸配列を有する：
【化１８】
2019167363.tif 000019
【０２９２】
Ｓ２２８Ｐ、Ｌ２３５Ｅ及びＹ３４９Ｃ、Ｔ３６６Ｓ、Ｌ３６８Ａ、Ｙ４０７Ｖ突然変異を伴うヒトＩｇＧ４  Ｆｃ領域由来のＦｃ領域ポリペプチドは、以下のアミノ酸配列を有する：
【化１９】
2019167363.tif 000020
【０２９３】
Ｐ３２９Ｇ突然変異を伴うヒトＩｇＧ４  Ｆｃ領域由来のＦｃ領域ポリペプチドは、以下のアミノ酸配列を有する：
【化２０】
2019167363.tif 000021
【０２９４】
Ｐ３２９Ｇ及びＹ３４９Ｃ、Ｔ３６６Ｓ、Ｌ３６８Ａ、Ｙ４０７Ｖ突然変異を伴うヒトＩｇＧ４  Ｆｃ領域由来のＦｃ領域ポリペプチドは、以下のアミノ酸配列を有する：
【化２１】
2019167363.tif 000022
【０２９５】
Ｐ３２９Ｇ及びＳ３５４Ｃ、Ｔ３６６Ｗ突然変異を伴うヒトＩｇＧ４  Ｆｃ領域由来のＦｃ領域ポリペプチドは、以下のアミノ酸配列を有する：
【化２２】
2019167363.tif 000023
【０２９６】
Ｓ２２８Ｐ、Ｌ２３５Ｅ、Ｐ３２９Ｇ及びＹ３４９Ｃ、Ｔ３６６Ｓ、Ｌ３６８Ａ、Ｙ４０７Ｖ突然変異を伴うヒトＩｇＧ４  Ｆｃ領域由来のＦｃ領域ポリペプチドは、以下のアミノ酸配列を有する：
【化２３】
2019167363.tif 000024
【０２９７】
Ｓ２２８Ｐ、Ｌ２３５Ｅ、Ｐ３２９Ｇ及びノブ突然変異を伴うヒトＩｇＧ４  Ｆｃ領域由来のＦｃ領域ポリペプチドは、以下のアミノ酸配列を有する：
【化２４】
2019167363.tif 000025
【０２９８】
異なるヒトＦｃ領域のアラインメントを以下に示す（ＥＵナンバリング）：
【化２５】
2019167363.tif 000026
【０２９９】
「ヒト化」抗体は、非ヒトＨＶＲからのアミノ酸残基及びヒトＦＲからのアミノ酸残基を含むキメラ抗体を指す。特定の実施態様において、ヒト化抗体は、少なくとも１つ、典型的には２つの可変ドメインの実質的に全てを含み、ここで、ＨＶＲ（例えば、ＣＤＲ）の全て又は実質的に全てが、非ヒト抗体のものに対応し、ＦＲの全て又は実質的に全てが、ヒト抗体のものに対応する。ヒト化抗体は、場合により、ヒト抗体に由来する抗体定常領域の少なくとも部分を含みうる。抗体、例えば、非ヒト抗体の「ヒト化形態」は、ヒト化を受けた抗体を指す。
【０３００】
用語「超可変領域」又は「ＨＶＲ」は、本明細書において使用する通り、配列（「相補性決定領域」又は「ＣＤＲ」）において超可変であり、構造的に定義されたループ（「超可変ループ」）を形成し、及び／又は抗原接触残基（「抗原接触」）を含む、抗体可変ドメインの領域の各々を指す。一般的に、抗体は６つのＨＶＲを含む；ＶＨ中の３つ（Ｈ１、Ｈ２、Ｈ３）及びＶＬ中の３つ（Ｌ１、Ｌ２、Ｌ３）。本明細書において表示するＨＶＲは、以下を含む：
（ａ）アミノ酸残基２６−３２（Ｌ１）、５０−５２（Ｌ２）、９１−９６（Ｌ３）、２６−３２（Ｈ１）、５３−５５（Ｈ２）、及び９６−１０１（Ｈ３）で生じる超可変ループ（Chothia, C. and Lesk, A.M., J. Mol. Biol. 196 (1987) 901-917）；
（ｂ）アミノ酸残基２４−３４（Ｌ１）、５０−５６（Ｌ２）、８９−９７（Ｌ３）、３１−３５ｂ（Ｈ１）、５０−６５（Ｈ２）、及び９５−１０２（Ｈ３）で生じるＣＤＲ（Kabat, E.A.et al., Sequences of Proteins of Immunological Interest, 5th ed. Public Health Service, National Institutes of Health, Bethesda, MD(1991), NIH Publication 91-3242）；
（ｃ）アミノ酸残基２７ｃ−３６（Ｌ１）、４６−５５（Ｌ２）、８９−９６（Ｌ３）、３０−３５ｂ（Ｈ１）、４７−５８（Ｈ２）、及び９３−１０１（Ｈ３）で生じる抗原接触（MacCallum et al. J. Mol. Biol. 262: 732-745 (1996)）；ならびに
（ｄ）ＨＶＲアミノ酸残基４６−５６（Ｌ２）、４７−５６（Ｌ２）、４８−５６（Ｌ２）、４９−５６（Ｌ２）、２６−３５（Ｈ１）、２６−３５ｂ（Ｈ１）、４９−６５（Ｈ２）、９３−１０２（Ｈ３）、及び９４−１０２（Ｈ３）を含む、（ａ）、（ｂ）、及び／又は（ｃ）の組み合わせ。
【０３０１】
一実施態様において、ＨＶＲ残基は、本明細書中の他の場所で特定されたものを含む。
【０３０２】
他に示さない限り、可変ドメイン中のＨＶＲ残基及び他の残基（例えば、ＦＲ残基）は、Ｋａｂａｔ  ＥＵインデックスナンバリングシステムに従って、本明細書においてナンバリングされている（Kabat et al.、上記）。
【０３０３】
「個体」又は「被験体」は哺乳動物である。哺乳動物は、家畜（例えば、ウシ、ヒツジ、ネコ、イヌ、及びウマ）、霊長類（例えば、ヒト及び非ヒト霊長類、例えばサルなど）、ウサギ、及び齧歯類（例えば、マウス及びラット）を含むが、これらに限定されない。特定の実施態様において、個体又は被験体はヒトである。
【０３０４】
「単離」抗体は、その自然環境の成分から分離されたものである。一部の実施態様において、抗体は、例えば、電気泳動（例えば、ＳＤＳ−ＰＡＧＥ、等電点電気泳動（ＩＥＦ）、キャピラリー電気泳動）又はクロマトグラフィー（例えば、サイズ排除クロマトグラフィー、イオン交換又は逆相ＨＰＬＣ）により決定される通り、９５%又は９９%を上回る純度まで精製される。抗体純度の評価のための方法の総説については、例えば、Flatman, S. et al., J. Chrom. B 848 (2007) 79-87を参照のこと。
【０３０５】
「単離」核酸は、その自然環境の成分から分離された核酸分子を指す。単離核酸は、通常、核酸分子を含む細胞中に含まれる核酸分子を含むが、核酸分子は、染色体外又はその自然の染色体位置と異なる染色体位置に存在する。
【０３０６】
「抗ＩＧＦ−１Ｒ抗体をコードする単離核酸」は、単一のプラスミド又は別々のプラスミドにおいてそのような核酸分子を含む、抗体の重鎖及び軽鎖（又はその断片）をコードする１つ又は複数の核酸分子を指し、そのような核酸分子は、宿主細胞中の１つ又は複数の位置に存在する。
【０３０７】
本明細書において使用する用語「モノクローナル抗体」は、実質的に均一な抗体の集団から得られる抗体を指し、即ち、その集団を含む個々の抗体は、同一である、及び／又は、可能な突然変異体抗体（例えば、自然発生する突然変異を含む、又はモノクローナル抗体調製物の産生の間に生じる）を除く、同じエピトープに結合し、そのような突然変異体は、一般的に少量で存在する。異なる決定基（エピトープ）に向けられた異なる抗体を典型的に含むポリクローナル抗体調製物とは対照的に、モノクローナル抗体調製物の各々のモノクローナル抗体は、抗原上の単一の決定基に向けられる。このように、修飾語「モノクローナル」は、実質的に均一な抗体集団から得られるという抗体の特徴を示し、任意の特定の方法による抗体の産生を要求すると解釈すべきではない。例えば、本発明に従って使用されるモノクローナル抗体は、種々の技術（ハイブリドーマ方法、組換えＤＮＡ方法、ファージディスプレイ方法、及びヒト免疫グロブリン遺伝子座の全部又は一部を含むトランスジェニック動物を利用した方法を含むが、これらに限定されない）により作製することができ、そのような方法及びモノクローナル抗体を作製するための他の例示的な方法を本明細書に記載している。
【０３０８】
「天然抗体」は、変動する構造を伴う天然免疫グロブリン分子を指す。例えば、天然ＩｇＧ抗体は、ジスルフィド結合している２つの同一の軽鎖及び２つの同一の重鎖で構成される、約１５０，０００ダルトンのヘテロ四量体糖タンパク質である。Ｎ末端からＣ末端まで、各々の重鎖は、可変領域（ＶＨ）（可変重鎖ドメイン又は重鎖可変ドメインとも呼ばれる）、それに続く３つの定常ドメイン（ＣＨ１、ＣＨ２、及びＣＨ３）を有する。同様に、Ｎ末端からＣ末端まで、各々の軽鎖は、可変領域（ＶＬ）（可変軽鎖ドメイン又は軽鎖可変ドメインとも呼ばれる）、それに続く定常軽鎖（ＣＬ）ドメインを有する。抗体の軽鎖は、その定常ドメインのアミノ酸配列に基づき、２つの型（カッパ（κ）及びラムダ（λ）と呼ばれる）のいずれかに割り当てられうる。
【０３０９】
用語「添付文書」を使用し、治療用製品の市販パッケージに習慣的に含まれる説明書を指し、適応症、使用法、用量、投与、併用治療、禁忌、及び／又はそのような治療用製品の使用に関する警告に関する情報が含まれる。
【０３１０】
参照ポリペプチド配列に関する「パーセント（%）アミノ酸配列同一性」は、配列を整列させ、ギャップを導入し（必要な場合）、最高パーセント配列同一性を達成した後（任意の保存的置換を配列同一性の部分として考慮せず）、参照ポリペプチド配列におけるアミノ酸残基と同一である候補配列中のアミノ酸残基のパーセンテージとして定義される。パーセントアミノ酸配列同一性を決定する目的のためのアラインメントは、当技術分野内にある種々の方法で、例えば、公的に利用可能なコンピューターソフトウェア、例えばＢＬＡＳＴ、ＢＬＡＳＴ−２、ＡＬＩＧＮ、又はＭｅｇａｌｉｇｎ（ＤＮＡＳＴＡＲ）ソフトウェアなどを使用して達成することができる。当業者は、配列を整列させるための適当なパラメーター（比較されている配列の全長にわたる最高アラインメントを達成するために必要とされる任意のアルゴリズムを含む）を決定することができる。本明細書における目的のために、%アミノ酸配列同一性の値を、配列比較コンピュータープログラムＡＬＩＧＮ−２を使用して生成する。ＡＬＩＧＮ−２配列比較コンピュータープログラムはGenentech, Inc.により作成されたが、そのソースコードが、U.S. Copyright Office, Washington D.C., 20559においてユーザー文書と共にファイルされており、そこでは、それはU.S. Copyright Registration No.TXU510087下で登録される。ＡＬＩＧＮ−２プログラムが、Genentech, Inc.（カリフォルニア州サウスサンフランシスコ）から公的に利用可能である、又はソースコードからコンパイルされうる。ＡＬＩＧＮ−２プログラムを、ＵＮＩＸ操作システム（デジタルUNIX V4.0Dを含む）上での使用のためにコンパイルすべきである。全ての配列比較パラメーターが、ＡＬＩＧＮ−２プログラムにより設定され、変動しない。
【０３１１】
ＡＬＩＧＮ−２がアミノ酸配列比較のために用いられる状況において、所与のアミノ酸配列Ｂに、それと、又はそれに対する所与のアミノ酸配列Ａの%アミノ酸配列同一性（あるいは、所与のアミノ酸配列Ｂに、それと、又はそれに対する特定の%アミノ酸配列同一性を有する、又はそれを含む所与のアミノ酸配列Ａとして表現することができる）を以下の通りに算出する：
１００×分数Ｘ／Ｙ
式中Ｘは、Ａ及びＢのそのプログラムのアラインメントにおける配列アラインメントプログラムＡＬＩＧＮ−２による同一のマッチとしてスコア化されるアミノ酸残基の数であり、式中、ＹはＢにおけるアミノ酸残基の総数である。アミノ酸配列Ａの長さがアミノ酸配列Ｂの長さと等しくない場合、ＡのＢに対する%アミノ酸配列同一性は、ＢのＡに対する%アミノ酸配列同一性と等しくないと理解されるであろう。他に示さない限り、本明細書において使用する全ての%アミノ酸配列同一性の値は、直前のパラグラフにおいて記載される通りに、ＡＬＩＧＮ−２コンピュータープログラムを使用して得られる。
【０３１２】
用語「医薬製剤」は、その中に含まれる活性成分の生物学的活性が効果的になることを許すような形態であり、製剤が投与されうる被験体に対して非許容可能に有毒である追加成分を含まない調製物を指す。
【０３１３】
「医薬的に許容可能な担体」は、被験体に非毒性である、活性成分以外の医薬製剤中の成分を指す。医薬的に許容可能な担体は、緩衝剤、賦形剤、安定剤、又は保存剤を含むが、これらに限定されない。
【０３１４】
本明細書において使用する用語「ペプチドリンカー」は、アミノ酸配列を伴うペプチドを表示し、それは、一実施態様において、合成由来である。ペプチドリンカーは、一実施態様において、少なくとも３０アミノ酸の長さを伴う、一実施態様において、３２〜５０アミノ酸の長さを伴うアミノ酸配列を伴うペプチドである。一実施態様において、ペプチドリンカーは、３２〜４０アミノ酸の長さを伴うアミノ酸配列を伴うペプチドである。一実施態様において、ペプチドリンカーは、Ｇ＝グリシン、Ｓ＝セリンを伴う（Ｇ×Ｓ）ｎ（ｘ＝３、ｎ＝８、９、又は１０）又は（ｘ＝４及びｎ＝６、７、又は８）であり、一実施態様において、ｘ＝４、ｎ＝６又は７を伴い、一実施態様において、ｘ＝４、ｎ＝７を伴う。一実施態様において、ペプチドリンカーは（Ｇ４Ｓ）６Ｇ２である。
【０３１５】
用語「組換え抗体」は、本明細書において使用する通り、組換え手段により調製、発現、作製、又は単離される全ての抗体（キメラ、ヒト化、及びヒト）を表示する。これは、宿主細胞（例えばＮＳ０又はＣＨＯ細胞など）から、又はヒト免疫グロブリン遺伝子についてトランスジェニックである動物（例えば、マウス）から単離された抗体、又は宿主細胞中にトランスフェクトされた組換え発現プラスミドを使用して発現された抗体を含む。そのような組換え抗体は、可変領域及び定常領域を再配置形態で有する。本明細書において報告する組換え抗体は、インビボ体細胞超突然変異を受けることができる。このように、組換え抗体のＶＨ及びＶＬ領域のアミノ酸配列は、ヒト生殖系ＶＨ及びＶＬ配列から由来する、ならびにそれらに関連するが、インビボでのヒト抗体生殖系レパートリー内に自然に存在しなくてもよい配列である。
【０３１６】
本明細書において使用する用語「ＩＧＦ−１Ｒ」は、他に示さない限り、哺乳動物、例えば霊長類（例えば、ヒト）及び齧歯動物（例えば、マウス及びラット）などを含む、任意の脊椎動物の供給源からの任意の天然ＩＧＦ−１Ｒを指す。この用語は、「全長」の、未処理ＩＧＦ−１Ｒならびに細胞におけるプロセシングに起因する、ＩＧＦ−１Ｒの任意の形態を包含する。この用語は、また、ＩＧＦ−１Ｒの天然突然変異体（例えば、スプライス突然変異体又は対立遺伝子突然変異体）を包含する。ヒトＩＧＦ−１Ｒのアミノ酸配列を配列番号１１に示す。
【０３１７】
本明細書において使用する通り、「処置」（及び、その文法上の変形、例えば「処置する」又は「処置している」など）は、処置される個体の自然経過を変化させる試みにおける臨床的介入を指し、予防のため、又は臨床病理の経過の間に実施することができる。処置の望ましい効果は、疾患の発生又は再発の防止、症状の軽減、疾患の任意の直接的又は間接的な病理学的転帰の減弱、転移の防止、疾患進行の速度の減少、疾患状態の回復又は緩和、及び寛解又は予後の改善を含むが、これらに限定されない。一部の実施態様において、本発明の抗体を使用し、疾患の発生を遅延させる、又は疾患の進行を遅らせる。
【０３１８】
用語「可変領域」又は「可変ドメイン」は、抗体の、その抗原への結合に関与する抗体の重鎖又は軽鎖のドメインを指す。抗体の重鎖及び軽鎖（それぞれＶＨ及びＶＬ）の可変領域は、一般的に、同様の構造を有し、各々のドメインは４つのフレームワーク領域（ＦＲ）及び３つの超可変領域（ＨＶＲ）を含む（例えば、Kindt, T.J. et al. Kuby Immunology, 6th ed., W.H. Freeman and Co., N.Y. (2007), page 91を参照）。単一のＶＨ又はＶＬドメインは、抗原結合特異性を付与するのに十分であり得る。さらに、特定の抗原に結合する抗体は、相補的ＶＬ又はＶＨドメインのライブラリーをそれぞれスクリーニングするために、抗原に結合する抗体からのＶＨ又はＶＬドメインを使用して単離することができる（例えば、Portolano, S. et al., J. Immunol. 150 (1993) 880-887; Clackson, T. et al., Nature 352 (1991) 624-628を参照）。
【０３１９】
用語「血管性眼疾患」は、眼内血管新生症候群、例えば糖尿病性網膜症、糖尿病性黄斑浮腫、未熟児網膜症、血管新生緑内障、網膜静脈閉塞、網膜中心静脈閉塞症、黄斑変性症、加齢性黄斑変性症、網膜色素変性症、網膜血管腫増殖、黄斑毛細血管拡張症、虚血性網膜症、虹彩血管新生、眼内血管新生、角膜血管新生、網膜血管新生、脈絡膜血管新生、及び網膜変性などを含むが、これらに限定されない（例えば、Garner, A., Vascular diseases, In: Pathobiology of ocular disease, A dynamic approach, Garner, A., and Klintworth, G.K., (eds.), 2nd edition, Marcel Dekker, New York (1994), pp. 1625-1710を参照）。
【０３２０】
用語「プラスミド」は、本明細書において使用する通り、それが連結されている別の核酸を伝播することが可能である核酸分子を指す。この用語は、自己複製核酸構造としてのプラスミド、ならびにそれが導入された宿主細胞のゲノム中に組み入れられたプラスミドを含む。特定のプラスミドは、それらが作動可能に連結された核酸の発現を指示することが可能である。そのようなプラスミドを、本明細書において「発現プラスミド」として言及する。
【０３２１】
用語「突然変異ＩＨＨ−ＡＡＡを伴う」は、本明細書において使用する通り、ＩｇＧ１又はＩｇＧ４サブクラスの定常重鎖領域における突然変異Ｉ２５３Ａ（Ｉｌｅ２５３Ａｌａ）、Ｈ３１０Ａ（Ｈｉｓ３１０Ａｌａ）、及びＨ４３５Ａ（Ｈｉｓ４３５Ａｌａ）の組み合わせを指し、用語「突然変異ＨＨＹ−ＡＡＡを伴う」は、本明細書において使用する通り、突然変異Ｈ３１０Ａ（Ｈｉｓ３１０Ａｌａ）、Ｈ４３３Ａ（Ｈｉｓ４３３Ａｌａ）、及びＹ４３６Ａ（Ｔｙｒ４３６Ａｌａ）の組み合わせを指し、用語「突然変異ＹＴＥを伴う」は、本明細書において使用する通り、突然変異Ｍ２５２Ｙ（Ｍｅｔ２５２Ｔｙｒ）、Ｓ２５４Ｔ（Ｓｅｒ２５４Ｔｈｒ）、及びＴ２５６Ｅ（Ｔｈｒ２５６Ｇｌｕ）の組み合わせを指し、ここで、ナンバリングは、ＫａｂａｔのＥＵインデックスナンバリングシステムに従う。
【０３２２】
用語「突然変異Ｐ３２９Ｇ  ＬＡＬＡを伴う」は、本明細書において使用する通り、ＩｇＧ１サブクラスの定常重鎖領域における突然変異Ｌ２３４Ａ（Ｌｅｕ２３４Ａｌａ）、Ｌ２３５Ａ（Ｌｅｕ２３５Ａｌａ）、及びＰ３２９Ｇ（Ｐｒｏ３２９Ｇｌｙ）の組合せを指し、ここで、ナンバリングは、ＫａｂａｔのＥＵインデックスナンバリングシステムに従う。用語「突然変異ＳＰＬＥを伴う」は、本明細書において使用する通り、ＩｇＧ４サブクラスの定常重鎖領域における突然変異Ｓ２２８Ｐ（Ｓｅｒ２２８Ｐｒｏ）及びＬ２３５Ｅ（Ｌｅｕ２３５Ｇｌｕ）の組合せを指し、ここで、ナンバリングは、ＫａｂａｔのＥＵインデックスナンバリングシステムに従う。用語「突然変異ＳＰＬＥ及びＰ３２９Ｇを伴う」は、本明細書において使用する通り、ＩｇＧ４サブクラスの定常重鎖領域における突然変異Ｓ２２８Ｐ（Ｓｅｒ２２８Ｐｒｏ）、Ｌ２３５Ｅ（Ｌｅｕ２３５Ｇｌｕ）、及びＰ３２９Ｇ（Ｐｒｏ３２９Ｇｌｙ）の組み合わせを指し、ここで、ナンバリングは、ＫａｂａｔのＥＵインデックスナンバリングシステムに従う。
【０３２３】
ＩＩ．組成物及び方法
本発明は、ＦｃＲｎ結合が無効となった抗ＩＧＦ−１Ｒ抗体を、眼におけるＩＧＦ−１Ｒ関連障害（血管性眼疾患）の処置のために使用することができるとの知見に、少なくとも部分的に基づいている。特定の実施態様において、無効になったＦｃＲｎ結合を伴うＩＧＦ−１Ｒに結合する抗体が提供される。本明細書において報告する抗体は、例えば、血管性眼疾患の診断又は処置のために有用である。
【０３２４】
本発明は、新生児Ｆｃ受容体（ＦｃＲｎ）への免疫グロブリンＦｃ領域の結合に影響する、即ち、ＦｃＲｎへのＦｃ領域の結合を低下又はさらには排除する、特定の突然変異又は突然変異の組み合わせが、ブドウ球菌プロテインＡへのＦｃ領域の結合を同時に排除しないとの知見に少なくとも部分的に基づく。これは、用いることができる精製プロセスに対して大きな効果を有する。なぜなら、例えば、特異的及び種限定的な親和性クロマトグラフィー材料、例えばKappaSelect（商標）（カッパ軽鎖を含む抗体だけに結合する）などが要求されないからである。このように、本明細書において報告する突然変異を用いて、プロテインＡへの結合を維持しながら、ＦｃＲｎへの結合を同時に低下又はさらには排除することが可能である。
【０３２５】
本発明は、Ｆｃ領域のＦｃ領域ポリペプチドの各々における異なる突然変異を使用することにより、一方で、低下又はさらには排除されたＦｃＲｎへの結合を有し、しかし、他方で、プロテインＡに結合する能力を維持するヘテロ二量体分子（例えば二重特異性抗体など）を提供することができるとの知見に少なくとも部分的に基づく。プロテインＡへのこの結合を使用して、ヘテロ二量体抗体をホモ二量体副産物から分離することができる。例えば、１つのＦｃ領域ポリペプチド中の突然変異Ｉ２５３Ａ、Ｈ３１０Ａ、及びＨ４３５Ａを、他のＦｃ領域ポリペプチド中の突然変異Ｈ３１０Ａ、Ｈ４３３Ａ、及びＹ４３６Ａと、「ノブ・インツー・ホール」アプローチを使用して組み合わせることにより、一方で、ＦｃＲｎに結合しないが（突然変異の両方のセットが、ヒトＦｃＲｎに関してサイレントである）、しかし、ブドウ球菌プロテインＡへの結合を維持する（突然変異Ｉ２５３Ａ、Ｈ３１０Ａ、及びＨ４３５Ａを伴うＦｃ領域ポリペプチドは、ＦｃＲｎに結合せず、プロテインＡに結合しないのに対し、突然変異Ｈ３１０Ａ、Ｈ４３３Ａ、及びＹ４３６Ａを伴うＦｃ領域ポリペプチドは、ＦｃＲｎに結合しないが、プロテインＡには依然として結合する）ヘテロ二量体Ｆｃ領域を得ることができる。このように、標準的なプロテインＡ親和性クロマトグラフィーを使用して、ホモ二量体ホール−ホール副産物を除去することができる。なぜなら、これは、プロテインＡにはもはや結合しないからである。このように、「ノブ・インツー・ホール」アプローチを、ホール鎖中の突然変異Ｉ２５３Ａ、Ｈ３１０Ａ、及びＨ４３５Ａ及びノブ鎖中の突然変異Ｈ３１０Ａ、Ｈ４３３Ａ、及びＹ４３６Ａと組み合わせることにより、ホモ二量体ホール−ホール副産物からヘテロ二量体「ノブ・インツー・ホール」産物の精製／分離を促進することができる。
【０３２６】
突然変異Ｉ２５３Ａ、Ｈ３１０Ａ、Ｈ４３５Ａ、又はＬ２５１Ｄ、Ｌ３１４Ｄ、Ｌ４３２Ｄ、又はＬ２５１Ｓ、Ｌ３１４Ｓ、Ｌ４３２Ｓの組み合わせは、プロテインＡへの結合の喪失をもたらすのに対し、突然変異Ｉ２５３Ａ、Ｈ３１０Ａ、Ｈ４３５Ａ、又はＨ３１０Ａ、Ｈ４３３Ａ、Ｙ４３６Ａ、又はＬ２５１Ｄ、Ｌ３１４Ｄ、Ｌ４３２Ｄの組み合わせは、ヒト新生児Ｆｃ受容体への結合の喪失をもたらす。
【０３２７】
以下の表は、相互作用に関与するが、又は、相互作用を改変するように変化された、Ｆｃ領域中のアミノ酸残基の例示的な概要を提示する。
【０３２８】
【表１】
2019167363.tif 000027
2019167363.tif 000028
2019167363.tif 000029
【０３２９】
本明細書において報告する改変／突然変異によって、１つ又は複数のＦｃ受容体（例えばヒトＦｃＲｎなど）についての結合特異性が変化する。同時に、ヒトＦｃＲｎへの結合を変化させる突然変異の一部によって、プロテインＡへの結合は変化しない。
【０３３０】
一実施態様において、突然変異によって、突然変異を欠く対応する抗体と比較して、抗体の血清中半減期は変化する、又は実質的に変化する。一実施態様において、突然変異によって、さらに、これらの突然変異を欠く対応する抗体と比較して、プロテインＡへの結合は変化しない、又は実質的に変化しない。
【０３３１】
Ａ．新生児Ｆｃ受容体（ＦｃＲｎ）
新生児Ｆｃ受容体（ＦｃＲｎ）は、インビボでのＩｇＧクラスの抗体の代謝的運命のために重要である。ＦｃＲｎは、リソソーム分解経路から野生型ＩｇＧをサルベージするように機能し、クリアランスの低下及び半減期の増加をもたらす。それは、２つのポリペプチドからなるヘテロ二量体タンパク質である：５０kDaのクラスＩ主要組織適合遺伝子複合体様タンパク質（α−ＦｃＲｎ）及び１５kDaのβ２ミクログロブリン（β２ｍ）。ＦｃＲｎは、高い親和性を伴い、ＩｇＧクラスの抗体のＦｃ領域のＣＨ２−ＣＨ３部分に結合する。ＩｇＧクラスの抗体とＦｃＲｎの間での相互作用は、ｐＨ依存性であり、１：２の化学量論で生じ、即ち、１つのＩｇＧ抗体分子が、その２つの重鎖Ｆｃ領域ポリペプチドを介して２つのＦｃＲｎ分子と相互作用することができる（例えば、Huber, A.H., et al., J. Mol. Biol. 230 (1993) 1077-1083を参照のこと）。
【０３３２】
このように、ＩｇＧのインビトロでのＦｃＲｎ結合特性／特徴は、血液循環中でのそのインビボの薬物動態学的特性を示している。
【０３３３】
ＦｃＲｎと、ＩｇＧクラスの抗体のＦｃ領域の間での相互作用において、重鎖ＣＨ２及びＣＨ３ドメインの異なるアミノ酸残基が関与している。ＦｃＲｎと相互作用するアミノ酸残基は、おおよそのＥＵ位置２４３とＥＵ位置２６１の間、おおよそのＥＵ位置２７５とＥＵ位置２９３の間、おおよそのＥＵ位置３０２とＥＵ位置３１９の間、おおよそのＥＵ位置３３６とＥＵ位置３４８の間、おおよそのＥＵ位置３６７とＥＵ位置３９３の間、ＥＵ位置４０８で、及び、おおよそのＥＵ位置４２４とＥＵ位置４４０の間に位置付けられる。より具体的には、ＫａｂａｔのＥＵナンバリングに従った以下のアミノ酸残基は、Ｆｃ領域とＦｃＲｎの間での相互作用に関与する：Ｆ２４３、Ｐ２４４、Ｐ２４５  Ｐ、Ｋ２４６、Ｐ２４７、Ｋ２４８、Ｄ２４９、Ｔ２５０、Ｌ２５１、Ｍ２５２、Ｉ２５３、Ｓ２５４、Ｒ２５５、Ｔ２５６、Ｐ２５７、Ｅ２５８、Ｖ２５９、Ｔ２６０、Ｃ２６１、Ｆ２７５、Ｎ２７６、Ｗ２７７、Ｙ２７８、Ｖ２７９、Ｄ２８０、Ｖ２８２、Ｅ２８３、Ｖ２８４、Ｈ２８５、Ｎ２８６、Ａ２８７、Ｋ２８８、Ｔ２８９、Ｋ２９０、Ｐ２９１、Ｒ２９２、Ｅ２９３、Ｖ３０２、Ｖ３０３、Ｓ３０４、Ｖ３０５、Ｌ３０６、Ｔ３０７、Ｖ３０８、Ｌ３０９、Ｈ３１０、Ｑ３１１、Ｄ３１２、Ｗ３１３、Ｌ３１４、Ｎ３１５、Ｇ３１６、Ｋ３１７、Ｅ３１８、Ｙ３１９、Ｉ３３６、Ｓ３３７、Ｋ３３８、Ａ３３９、Ｋ３４０、Ｇ３４１、Ｑ３４２、Ｐ３４３、Ｒ３４４、Ｅ３４５、Ｐ３４６、Ｑ３４７、Ｖ３４８、Ｃ３６７、Ｖ３６９、Ｆ３７２、Ｙ３７３、Ｐ３７４、Ｓ３７５、Ｄ３７６、Ｉ３７７、Ａ３７８、Ｖ３７９、Ｅ３８０、Ｗ３８１、Ｅ３８２、Ｓ３８３、Ｎ３８４、Ｇ３８５、Ｑ３８６、Ｐ３８７、Ｅ３８８、Ｎ３８９、Ｙ３９１、Ｔ３９３、Ｓ４０８、Ｓ４２４、Ｃ４２５、Ｓ４２６、Ｖ４２７、Ｍ４２８、Ｈ４２９、Ｅ４３０、Ａ４３１、Ｌ４３２、Ｈ４３３、Ｎ４３４、Ｈ４３５、Ｙ４３６、Ｔ４３７、Ｑ４３８、Ｋ４３９、及びＳ４４０。
【０３３４】
部位特異的突然変異誘発試験は、ＦｃＲｎについてのＩｇＧのＦｃ領域における決定的な結合部位が、ヒスチジン３１０、ヒスチジン４３５、及びイソロイシン２５３ならびに、より少ない程度で、ヒスチジン４３３及びチロシン４３６であることが証明されている（例えば、Kim, J.K., et al., Eur. J. Immunol. 29 (1999) 2819-2825；Raghavan, M., et al., Biochem. 34 (1995) 14649-146579；Medesan, C., et al., J Immunol. 158 (1997) 2211-2217を参照のこと）。
【０３３５】
ＦｃＲｎへのＩｇＧ結合を増加させるための方法が、種々のアミノ酸残基でＩｇＧを突然変異させることにより実施されている：スレオニン２５０、メチオニン２５２、セリン２５４、トレオニン２５６、トレオニン３０７、グルタミン酸３８０、メチオニン４２８、ヒスチジン４３３、及びアスパラギン４３４（Kuo, T.T., et al., J. Clin. Immunol. 30 (2010) 777-789を参照のこと）。
【０３３６】
一部の場合において、血液循環中で低下した半減期を伴う抗体が望ましい。例えば、硝子体内適用のための薬物は、患者の眼中で長い半減期及び循環中で短い半減期を有するべきである。そのような抗体は、また、疾患部位（例えば、眼中など）への曝露増加の利点を有する。
【０３３７】
ＦｃＲｎ結合及びそれに伴う血液循環中での半減期に影響する異なる突然変異が公知である。マウスＦｃマウスのＦｃＲｎ相互作用に決定的なＦｃ領域の残基が、部位特異的突然変異誘発により同定されている（例えば、Dall'Acqua, W.F., et al. J. Immunol 169 (2002) 5171-5180を参照のこと）。残基Ｉ２５３、Ｈ３１０、Ｈ４３３、Ｎ４３４、及びＨ４３５（Ｋａｂａｔに従ったＥＵナンバリング）が、相互作用に関与する（Medesan, C., et al., Eur. J. Immunol. 26 (1996) 2533-2536；Firan, M., et al., Int. Immunol. 13 (2001) 993-1002；Kim, J.K., et al., Eur. J. Immunol. 24 (1994) 542-548）。残基Ｉ２５３、Ｈ３１０、及びＨ４３５が、マウスＦｃＲｎとヒトＦｃとの相互作用のために決定的であることが見いだされた（Kim, J.K., et al., Eur. J. Immunol. 29 (1999) 2819-2825）。残基Ｍ２５２Ｙ、Ｓ２５４Ｔ、Ｔ２５６Ｅが、タンパク質−タンパク質相互作用試験により、ＦｃＲｎ結合を改善することがＤａｌｌ’Ａｃｑｕａらにより記載されている（Dall'Acqua, W.F., et al. J. Biol. Chem. 281 (2006) 23514-23524）。ヒトＦｃ−ヒトＦｃＲｎ複合体の試験では、残基Ｉ２５３、Ｓ２５４、Ｈ４３５、及びＹ４３６が、相互作用のために決定的であることが示されている（Firan, M., et al., Int. Immunol. 13 (2001) 993-1002；Shields, R.L., et al., J. Biol. Chem. 276 (2001) 6591-6604）。Yeung, Y.A., et al.（J. Immunol. 182 (2009) 7667-7671）において、残基２４８から２５９及び３０１から３１７及び３７６から３８２及び４２４から４３７の種々の突然変異体が、報告及び検証されている。例示的な突然変異及びＦｃＲｎ結合に対するそれらの効果を、以下の表に列挙する。
【０３３８】
【表２】
2019167363.tif 000030
2019167363.tif 000031
2019167363.tif 000032
2019167363.tif 000033
2019167363.tif 000034
【０３３９】
１つのＦｃ領域ポリペプチド中の片側の１つの突然変異が、Ｆｃ受容体への結合を有意に弱めるために十分であることが見出されている。より多くの突然変異がＦｃ領域中に導入されるほど、ＦｃＲｎへの結合は弱くなる。しかし、片側の非対称突然変異は、ＦｃＲｎ結合を完全に阻害するために十分でない。両側の突然変異が、ＦｃＲｎ結合を完全に阻害するために必要である。
【０３４０】
このように、Ｆｃ領域はヘテロ二量体であり、機能的なＦｃ領域を形成するための、第１（重鎖）のＦｃ領域ポリペプチドと第２（重鎖）のＦｃ領域ポリペプチドの対形成は、ヘテロ二量体の形成をもたらす。
【０３４１】
ＦｃＲｎ結合に影響する、ＩｇＧ１のＦｃ領域の対称的な操作の結果を、以下の表に示す（突然変異のアライメント及びＦｃＲｎ親和性クロマトグラフィーカラム上の保持時間）。
【０３４２】
【表３】
2019167363.tif 000035
【０３４３】
３分間を下回る保持時間は、結合なしに対応する。なぜなら、物質は、フロースルー（ボイドピーク）中にあるからである。
【０３４４】
単一の突然変異Ｈ３１０Ａは、任意のＦｃＲｎ結合を欠失させるための最もサイレントな対称突然変異である。
【０３４５】
対称の単一突然変異Ｉ２５３Ａ及びＨ４３５Ａは、０．３〜０．４分間の保持時間の相対的なシフトをもたらす。これは、一般的に、非検出可能な結合と見なすことができる。
【０３４６】
単一突然変異Ｙ４３６Ａは、ＦｃＲｎ親和性カラムに、検出可能な相互作用の強度をもたらす。この理論に拘束されないが、この突然変異は、ゼロ相互作用、例えばＩ２５３Ａ、Ｈ３１０Ａ、及びＨ４３５Ａ突然変異の組み合わせ（ＩＨＨ−ＡＡＡ突然変異）などから区別することができるＦｃＲｎ媒介性半減期を有しうる。
【０３４７】
対称的に改変された抗ＨＥＲ２抗体を用いて得られた結果を、以下の表に提示する（参考のために、ＷＯ２００６／０３１３７０を参照のこと）。
【０３４８】
【表４】
2019167363.tif 000036
【０３４９】
Ｆｃ領域において非対称ＦｃＲｎ結合に影響する突然変異の導入の効果が、「ノブ・インツー・ホール」技術を使用して組み立てられた二重特異性抗体を用いて例示されている（例えば、ＵＳ  ７，６９５，９３６、ＵＳ  ２００３／００７８３８５を参照のこと；「ホール鎖」突然変異：Ｓ３５４Ｃ／Ｔ３６６Ｗ、「ノブ鎖」突然変異：Ｙ３４９Ｃ／Ｔ３６６Ｓ／Ｌ３６８Ａ／Ｙ４０７Ｖ）。ＦｃＲｎ結合に対する非対称的に導入された突然変異の効果は、ＦｃＲｎ親和性クロマトグラフィー方法を使用して簡単に決定することができる。ＦｃＲｎ親和性カラムからのより遅い溶出を有する、即ち、ＦｃＲｎ親和性カラム上でより長い保持時間を有する抗体は、インビボでより長い半減期を有し、逆の場合も同じである。
【０３５０】
【表５】
2019167363.tif 000037
【０３５１】
Ｆｃ領域において非対称ＦｃＲｎ結合に影響する突然変異の導入の効果が、非対照突然変異の導入を可能にするために、「ノブ・インツー・ホール」技術を使用して組み立てられた単一特異性抗ＩＧＦ−１Ｒ抗体を用いてさらに例示されている（例えば、ＵＳ  ７，６９５，９３６、ＵＳ  ２００３／００７８３８５を参照のこと；「ホール鎖」突然変異：Ｓ３５４Ｃ／Ｔ３６６Ｗ、「ノブ鎖」突然変異：Ｙ３４９Ｃ／Ｔ３６６Ｓ／Ｌ３６８Ａ／Ｙ４０７Ｖ）。ＦｃＲｎ結合に対する非対称的に導入された突然変異の効果は、ＦｃＲｎ親和性クロマトグラフィー方法を使用して簡単に決定することができる（以下の表を参照のこと）。ＦｃＲｎ親和性カラムからのより遅い溶出を有する、即ち、ＦｃＲｎ親和性カラム上でより長い保持時間を有する抗体は、インビボでより長い半減期を有し、逆の場合も同じである。
【０３５２】
【表６】
2019167363.tif 000038
【０３５３】
非対称ＩＨＨ−ＡＡＡ−及びＬＬＬ−ＤＤＤ−突然変異（ＬＬＬ−ＤＤＤ−突然変異＝Ｌ２５１Ｄ、Ｌ３１４Ｄ、及びＬ４３２Ｄ）は、対応する親又は野生型抗体よりも弱い結合を示す。
【０３５４】
対称ＨＨＹ突然変異（＝突然変異Ｈ３１０Ａ、Ｈ４３３Ａ、及びＹ４３６Ａの組み合わせ）は、ヒトＦｃＲｎにもはや結合しないのに対し、プロテインＡへの結合が維持されている、Ｆｃ領域をもたらす（図１１、１２、１３、及び１４を参照のこと）。
【０３５５】
Ｆｃ領域において非対称ＦｃＲｎ結合に影響する突然変異の導入の効果が、非対照突然変異の導入を可能にするために、「ノブ・インツー・ホール」技術を使用して組み立てられた単一特異性抗ＩＧＦ−１Ｒ抗体（ＩＧＦ−１Ｒ）を用いてさらに例示されている（例えば、ＵＳ  ７，６９５，９３６、ＵＳ  ２００３／００７８３８５を参照のこと；「ホール鎖」突然変異：Ｓ３５４Ｃ／Ｔ３６６Ｗ、「ノブ鎖」突然変異：Ｙ３４９Ｃ／Ｔ３６６Ｓ／Ｌ３６８Ａ／Ｙ４０７Ｖ）。ＦｃＲｎ結合及びプロテインＡ結合に対する導入突然変異の効果は、ＦｃＲｎ親和性クロマトグラフィー方法、プロテインＡ親和性クロマトグラフィー方法、及びＳＰＲベースの方法を使用して簡単に決定することができる（以下の表を参照のこと）。
【０３５６】
【表７】
2019167363.tif 000039
【０３５７】
本明細書において報告する一態様は、本明細書において報告するＦｃ領域ポリペプチドにおける突然変異の組み合わせを含む抗体である。
【０３５８】
抗体中のＦｃ領域は、上記の特性を付与する。抗体は、インビボでの半減期が低下又は増加しなければならない、即ち、インビボでの半減期が明確に定義され、その意図された適用のためにオーダーメイドされなければならない、生物学的活性を有する任意の抗体でありうる。
【０３５９】
Ｂ．血管性眼疾患
血管性眼疾患は、眼組織（例えば網膜又は角膜など）の構造中への新たな血管の変化した、又は無制御な増殖及び侵入により特徴付けられる任意の病理学的状態である。
【０３６０】
一実施態様において、血管性眼疾患は、滲出型加齢黄斑変性症（滲出型ＡＭＤ）、乾燥型加齢黄斑変性症（乾燥型ＡＭＤ）、糖尿病性黄斑浮腫（ＤＭＥ）、嚢胞様黄斑浮腫（ＣＭＥ）、非増殖性糖尿病性網膜症（ＮＰＤＲ）、増殖性糖尿病網膜症（ＰＤＲ）、嚢胞様黄斑浮腫、血管炎（例えば、網膜中心静脈閉塞症）、乳頭浮腫、網膜炎、結膜炎、ブドウ膜炎、脈絡膜炎、多巣性脈絡膜炎、眼ヒストプラスマ症、眼瞼炎、ドライアイ（シェーグレン病）、及び他の眼疾患からなる群より選択され、ここで、眼疾患又は障害は、眼血管新生、血管漏出、及び／又は網膜浮腫に関連付けられる。
【０３６１】
本発明に従った抗ＩＧＦ−１Ｒ抗体は、滲出型ＡＭＤ、乾燥型ＡＭＤ、ＣＭＥ、ＤＭＥ、ＮＰＤＲ、ＰＤＲ、眼瞼炎、ドライアイ、及びブドウ膜炎、また、１つの好ましい実施態様において、滲出型ＡＭＤ、乾燥型ＡＭＤ、眼瞼炎、及びドライアイ、また、１つの好ましい実施態様において、ＣＭＥ、ＤＭＥ、ＮＰＤＲ、及びＰＤＲ、また、１つの好ましい実施態様において、眼瞼炎、及びドライアイ、特に、滲出型ＡＭＤ及び乾燥型ＡＭＤ、また、特に、滲出型ＡＭＤの予防及び処置において有用である。
【０３６２】
一部の実施態様において、血管性眼疾患は、滲出型加齢黄斑変性症（滲出型ＡＭＤ）、黄斑浮腫、網膜静脈閉塞、未熟児網膜症、及び糖尿病性網膜症からなる群より選択される。
【０３６３】
角膜血管新生に関連付けられる他の疾患は、流行性角結膜炎、ビタミンＡ欠乏症、コンタクトレンズの過剰装着、アトピー性角膜炎、上輪部角角膜炎、翼状片乾性角角膜炎、シェーグレン病、酒さ性ざ瘡、フィレクテヌローシス、梅毒、マイコバクテリア感染、脂質変性、化学熱傷、細菌性潰瘍、真菌性潰瘍、単純ヘルペス感染、帯状疱疹感染、原虫感染、カポジ肉腫、モーレン潰瘍、テリエン辺縁変性、辺縁角質溶解、関節リウマチ、全身性ループス、多発動脈炎、外傷、ウェゲナーサルコイドーシス、強膜炎、スティーブンジョンソン病、類天疱瘡の放射状角膜切開、及び角膜移植拒絶を含むが、これらに限定されない。
【０３６４】
網膜／脈絡膜新生血管形成に関連付けられる疾患は、糖尿病性網膜症、黄斑変性症、鎌状赤血球貧血、サルコイド、梅毒、弾性線維性仮性黄色腫、パジェット病、静脈閉塞、動脈閉塞、頸動脈閉塞性疾患、慢性ブドウ膜炎／硝子体炎、マイコバクテリア感染、ライム病、全身性エリテマトーデス、未熟児の網膜症、網膜色素変性、網膜浮腫（黄斑浮腫を含む）、イールズ病、ベーチェット病、網膜炎又は脈絡膜炎を起こす感染症、推定眼ヒストプラスマ症、ベスト病、近視、視窩、シュタルガルト病、扁平部炎、慢性網膜剥離、過粘稠度症候群、トキソプラズマ症、外傷、及びレーザー後合併症を含むが、これらに限定されない。
【０３６５】
他の疾患は、ルベオーシス（隅角新生血管形成）に関連付けられる疾患及び線維血管組織又は繊維組織の異常増殖により起こされる疾患（増殖性硝子体網膜症の全ての形態を含む）を含むが、これらに限定されない。
【０３６６】
未熟児の網膜症（ＲＯＰ）は、早期に生まれた乳児に影響する、眼の疾患である。それは、瘢痕及び網膜剥離をもたらしうる、網膜血管の無秩序な成長により起こされると考えられる。ＲＯＰは、軽度であり、自然発生的に消退しうるが、深刻な場合において失明に導きうる。そのようなものとして、全ての早産乳児には、ＲＯＰについてのリスクがあり、非常に低い出生体重は、追加のリスク因子である。酸素毒性及び相対低酸素症の両方が、ＲＯＰの発生に寄与しうる。
【０３６７】
黄斑変性症は、高齢者において主に見出される医学的状態であり、ここで、眼の内膜の中心（網膜の黄斑領域として公知である）が、菲薄化、萎縮、及び、一部の場合において、出血を被る。これは、中心視野の喪失を招きうるが、それは、細かい詳細を見る、読む、又は顔を認識する不能を伴う。米国眼科学会によれば、それは、年齢５０歳を上回る人々での、今日の米国での中心視野喪失（失明）の主要な原因である。若年者に影響する一部の黄斑ジストロフィーは、時折、黄斑変性症として言及されるが、この用語は、一般的に、加齢性黄斑変性症（ＡＭＤ又はＡＲＭＤ）を指す。
【０３６８】
加齢黄斑変性は、網膜色素上皮とその下の脈絡膜の間のドルーゼンと呼ばれる黄斑（詳細な中心視野を提供する網膜の中央領域で、中心窩と呼ばれる）において特徴的な黄色沈着を伴い始まる。これらの初期変化（加齢性黄斑症とも言及される）を伴う大半の人々は、良い視力を有する。ドルーゼンを伴う人々は、進行して、進行性ＡＭＤを発生しうる。このリスクは、ドルーゼが大きく、多数であり、黄斑下の色素性細胞層における乱れに関連付けられる場合、相当により高い。大きく、柔らかいドルーゼンは、上昇したコレステロール沈着に関連しており、コレステロール低下薬剤又はＲｈｅｏ手順に応答しうる。
【０３６９】
進行性ＡＭＤは、深刻な失明に関与し、２つの形態を有する：乾燥型及び滲出型。中央の地図状萎縮は、進行性ＡＭＤの乾燥形態であり、網膜下の網膜色素上皮層への萎縮から生じ、それは、眼の中央部分において光受容体（桿体及び錐体）の喪失を介して視力喪失を起こす。処置は、この状態について利用可能ではなく、高用量の酸化防止剤、ルテイン、及びゼアキサンチンを伴うビタミンサプリメントが、国立眼研究所及び他により、乾燥黄斑変性の進行を遅らせ、一部の患者において、視力を改善することが実証されている。
【０３７０】
網膜色素変性症（ＲＰ）は、遺伝的な眼病態の一群である。ＲＰについての症状の進行において、夜盲は、一般的に、トンネル視に数年又は、さらに数十年だけ先行する。ＲＰを伴う多くの人が、彼らの４０代又は５０代までに、法定盲目にならず、一部の視力を、全ての彼らの人生で保持する。他は、一部の場合において、小児期という早期に、ＲＰから完全な盲目になる。ＲＰの進行は、各々の場合において異なる。ＲＰは、遺伝性網膜ジストロフィーの１つの型であり、遺伝性障害の一群であり、ここで、光受容体（桿体及び錐体）又は網膜の網膜色素上皮（ＲＰＥ）の異常が、進行性の視力喪失に導く。罹患した個人は、最初に、暗順応障害又は夜盲症（夜盲）を経験し、周辺視野の低下（トンネル視として公知である）及び、時折、疾患の経過における後期に中心視野の喪失が続く。
【０３７１】
体液及びタンパク質の堆積物が眼の黄斑の上下（網膜の黄色中央領域）に集まる際、黄斑浮腫が生じ、それを厚くし、膨潤させる。腫脹が、ヒトの中心視野を歪めうる。なぜなら、黄斑は、眼球の後ろの、網膜の中心近くにあるからである。この領域は、人が、直接的に視線中にある形態、色、及び詳細を見ることを可能にする、シャープで明確な中心視野を提供する緊密に充填された錐体を保持する。嚢胞様黄斑浮腫は、嚢胞形成を含む黄斑浮腫の１つの型である。
【０３７２】
Ｃ．例示的な抗ＩＧＦ−１Ｒ抗体
一態様において、本発明は、ＩＧＦ−１Ｒに結合する単離抗体を提供する。
【０３７３】
特定の実施態様において、抗ＩＧＦ−１Ｒ抗体は、無効になったＦｃＲｎ結合を有し、即ち、それは、突然変異Ｉ２５３Ａ／Ｈ３１０Ａ／Ｈ４３５Ａ又はＨ３１０Ａ／Ｈ４３３Ａ／Ｙ４３６Ａ又はＬ２５１Ｄ／Ｌ３１４Ｄ／Ｌ４３２Ｄ又はＬ２５１Ｓ／Ｌ３１４Ｓ／Ｌ４３２Ｓ又はそれらの組み合わせ（Ｋａｂａｔ  ＥＵインデックスナンバリングシステムに従ったナンバリング）をＦｃ領域において有する抗体と同程度又はそれ未満の親和性で、ヒトＦｃＲｎに結合する。
【０３７４】
一実施態様において、抗ＩＧＦ−１Ｒ抗体は、表面プラズモン共鳴ベースの決定方法を使用して、（残りの）検出可能なＦｃＲｎ結合を有していない。
【０３７５】
一実施態様において、抗ＩＧＦ−１Ｒ抗体は、ｐＨ６で１．７μMを上回るＫＤ値を伴い、即ち、低親和性を伴い、ヒトＦｃＲｎに結合する。
【０３７６】
全ての態様の一実施態様において、抗体は、突然変異Ｉ２５３Ａ／Ｈ３１０Ａ／Ｈ４３５Ａ又はＨ３１０Ａ／Ｈ４３３Ａ／Ｙ４３６Ａ又はＬ２５１Ｄ／Ｌ３１４Ｄ／Ｌ４３２Ｄ又はそれらの組み合わせ（Ｋａｂａｔ  ＥＵインデックスナンバリングシステムに従ったナンバリング）を伴うＦｃ領域を含む抗体と同じ、又はそれより短いＦｃＲｎ親和性クロマトグラフィーカラム上での保持時間を有する。
【０３７７】
全ての態様の一実施態様において、抗体は、３分又はそれ以下の、ＦｃＲｎ親和性クロマトグラフィーカラム上での保持時間を有する。
【０３７８】
一実施態様において、ＦｃＲｎ親和性カラムは、５０mm×５mmのカラム寸法を有し、ベッドの高さは５cmであり、充填物は５０μg抗体である。一実施態様において、平衡化緩衝液は、ｐＨ５．５に調整した、１５０mM  ＮａＣｌを伴う２０mM  ＭＥＳであり、溶出緩衝液は、ｐＨ８．８に調整した、１５０mM  ＮａＣｌを伴う２０mM  Ｔｒｉｓ／ＨＣｌであり、溶出は、７．５ＣＶで平衡化緩衝液、３０ＣＶで０〜１００%溶出緩衝液、その後１０ＣＶで溶出緩衝液を適用することによる。
【０３７９】
一実施態様において、抗ＩＧＦ−１Ｒ抗体は、抗ＩＧＦ−１Ｒ抗体のＣＨ２及び／又はＣＨ３ドメイン中の単一又は複数の点突然変異に起因して、ヒトＦｃＲｎカラムに結合しない。一実施態様において、抗体は、４つの点突然変異（ＨＣ１：Ｉ２５３Ａ、Ｈ３１０Ａ、Ｈ４３５Ａ；ＨＣ２：Ｈ３１０Ａ）を伴う抗ＩＧＦ−１Ｒ抗体と同等の、即ち、＋／−１０%内、又はより短いＦｃＲｎカラム上での保持時間を有する。
【０３８０】
一実施態様において、抗ＩＧＦ−１Ｒ抗体は、突然変異Ｌ２５１Ｄ、Ｌ２５１Ｓ、Ｍ２５２Ｔ、Ｉ２５３Ａ、Ｓ２５４Ｗ、Ｓ２５４Ｒ、Ｈ３１０Ａ、Ｎ４３４Ｌ、Ｈ４３５Ａ、Ｙ４３６Ａ（Ｋａｂａｔ  ＥＵインデックスナンバリングシステムに従ったナンバリング）の少なくとも１つを伴うＦｃ領域を含む抗体とほぼ同じ、又はより少ない親和性を伴い、ヒトＦｃＲｎに結合する。
【０３８１】
一実施態様において、抗ＩＧＦ−１Ｒ抗体は、突然変異Ｉ２５３Ａ／Ｈ３１０Ａ／Ｈ４３５Ａ又はＨ３１０Ａ／Ｈ４３３Ａ／Ｙ４３６Ａ又はＬ２５１Ｄ／Ｌ３１４Ｄ／Ｌ４３２Ｄ又はＬ２５１Ｓ／Ｌ３１４Ｓ／Ｌ４３２Ｓ又はそれらの組み合わせ（Ｋａｂａｔ  ＥＵインデックスナンバリングシステムに従ったナンバリング）を伴うＦｃ領域を含む抗体とほぼ同じ、又はそれより少ない親和性を伴い、ヒトＦｃＲｎに結合する。
【０３８２】
一実施態様において、抗ＩＧＦ−１Ｒ抗体は、配列番号０１又は配列番号９６の重鎖アミノ酸配列及び配列番号０３の軽鎖アミノ酸配列を伴う抗体、あるいは配列番号０２又は配列番号９６の重鎖アミノ酸配列及び配列番号０４の軽鎖アミノ酸配列を伴う抗体とほぼ同じ、又はそれより少ない親和性を伴い、ヒトＦｃＲｎに結合する。
【０３８３】
一実施態様において、抗ＩＧＦ−１Ｒ抗体は、突然変異Ｌ２５１Ｄ、Ｌ２５１Ｓ、Ｍ２５２Ｔ、Ｉ２５３Ａ、Ｓ２５４Ｗ、Ｓ２５４Ｒ、Ｈ３１０Ａ、Ｈ４３３Ａ、Ｎ４３４Ｌ、Ｈ４３５Ａ、Ｙ４３６Ａ（Ｋａｂａｔ  ＥＵインデックスナンバリングシステムに従ったナンバリング）又はそれらの組み合わせの少なくとも１つを有する。
【０３８４】
一実施態様において、抗ＩＧＦ−１Ｒ抗体は、第１のＦｃ領域ポリペプチド中に突然変異Ｌ２５１Ｄ、Ｌ２５１Ｓ、Ｍ２５２Ｔ、Ｉ２５３Ａ、Ｓ２５４Ｗ、Ｓ２５４Ｒ、Ｈ３１０Ａ、Ｈ４３３Ａ、Ｎ４３４Ｌ、Ｈ４３５Ａ、Ｙ４３６Ａ（Ｋａｂａｔ  ＥＵインデックスナンバリングシステムに従ったナンバリング）の少なくとも１つ及び第２のＦｃ領域ポリペプチド中に突然変異Ｌ２５１Ｄ、Ｌ２５１Ｓ、Ｍ２５２Ｔ、Ｉ２５３Ａ、Ｓ２５４Ｗ、Ｓ２５４Ｒ、Ｈ３１０Ａ、Ｈ４３３Ａ、Ｎ４３４Ｌ、Ｈ４３５Ａ、Ｙ４３６Ａ（Ｋａｂａｔ  ＥＵインデックスナンバリングシステムに従ったナンバリング）の少なくとも１つを有する。
【０３８５】
一実施態様において、抗ＩＧＦ−１Ｒ抗体は、第１のＦｃ領域ポリペプチド中に少なくとも突然変異Ｉ２５３Ａ／Ｈ３１０Ａ／Ｈ４３５Ａ又はＨ３１０Ａ／Ｈ４３３Ａ／Ｙ４３６Ａ又はＬ２５１Ｄ／Ｌ３１４Ｄ／Ｌ４３２Ｄ又はＬ２５１Ｓ／Ｌ３１４Ｓ／Ｌ４３２Ｓ又はそれらの組み合わせ（Ｋａｂａｔ  ＥＵインデックスナンバリングシステムに従ったナンバリング）及び第２のＦｃ領域ポリペプチド中に突然変異Ｌ２５１Ｄ、Ｌ２５１Ｓ、Ｍ２５２Ｔ、Ｉ２５３Ａ、Ｓ２５４Ｗ、Ｓ２５４Ｒ、Ｈ３１０Ａ、Ｈ４３３Ａ、Ｎ４３４Ｇ、Ｎ４３４Ｌ、Ｈ４３５Ａ、Ｙ４３６Ａ（Ｋａｂａｔ  ＥＵインデックスナンバリングシステムに従ったナンバリング）の少なくとも１つを有する。
【０３８６】
一実施態様において、抗ＩＧＦ−１Ｒ抗体は、両方のＦｃ領域ポリペプチド中に少なくとも突然変異Ｉ２５３Ａ／Ｈ３１０Ａ／Ｈ４３５Ａ又はＨ３１０Ａ／Ｈ４３３Ａ／Ｙ４３６Ａ又はＬ２５１Ｄ／Ｌ３１４Ｄ／Ｌ４３２Ｄ又はＬ２５１Ｓ／Ｌ３１４Ｓ／Ｌ４３２Ｓ又はそれらの組み合わせ（Ｋａｂａｔ  ＥＵインデックスナンバリングシステムに従ったナンバリング）を有する。
【０３８７】
一実施態様において、抗ＩＧＦ−１Ｒ抗体は、以下を有する：
ａ）配列番号０１又は配列番号０２のアミノ酸残基３１〜３５（ＨＶＲ−Ｈ１）、アミノ酸残基５０〜６６（ＨＶＲ−Ｈ２）、及びアミノ酸残基９９〜１０７（ＨＶＲ−Ｈ３）をＨＶＲとして含む抗体重鎖、及び
ｂ）配列番号０３又は配列番号０４のアミノ酸残基２４〜３４（ＨＶＲ−Ｌ１）、アミノ酸残基５０〜５６（ＨＶＲ−Ｌ２）、及びアミノ酸残基８９〜９８（ＨＶＲ−Ｌ３）をＨＶＲとして含む抗体軽鎖。
【０３８８】
１つの好ましい実施態様において、抗ＩＧＦ−１Ｒ抗体は、以下を有する：
ａ）配列番号０１のアミノ酸残基３１〜３５（ＨＶＲ−Ｈ１）、アミノ酸残基５０〜６６（ＨＶＲ−Ｈ２）、及びアミノ酸残基９９〜１０７（ＨＶＲ−Ｈ３）をＨＶＲとして含む抗体重鎖、及び
ｂ）配列番号０３のアミノ酸残基２４〜３４（ＨＶＲ−Ｌ１）、アミノ酸残基５０〜５６（ＨＶＲ−Ｌ２）、及びアミノ酸残基８９〜９８（ＨＶＲ−Ｌ３）をＨＶＲとして含む抗体軽鎖。
【０３８９】
これらは、ＷＯ  ２００５／００５６３５に詳細に記載されている、ＡＫ１８（＜ＩＧＦ−１Ｒ＞ ＨＵＭＡＢクローン１８）の配列である。
【０３９０】
別の好ましい実施態様において、抗ＩＧＦ−１Ｒ抗体は、ＷＯ  ２０１３／０４１４６２に詳細に記載される通りの、改善された親和性を伴うＡＫ１８（＜ＩＧＦ−１Ｒ＞ ＨＵＭＡＢクローン１８）に由来する、改変された重鎖可変ドメイン（ＶＨ）及び軽鎖可変ドメイン（ＶＬ）、ならびにそれぞれのＨＶＲを含んだ。本明細書に記載する通りの、Ｆｃ領域突然変異との組み合わせにおける、親和性が改善された抗ＩＧＦ−１Ｒ抗体は、それぞれの血管性眼疾患及び炎症性疾患の処置のために特に有用である。
【０３９１】
従って、１つの好ましい実施態様において、抗ＩＧＦ−１Ｒ抗体は、以下を有する：
ａ）配列番号５６のアミノ酸配列（ＨＶＲ−Ｈ１）、配列番号５７のアミノ酸配列（ＨＶＲ−Ｈ２）、及び配列番号５８のアミノ酸配列（ＨＶＲ−Ｈ３）をＨＶＲとして含む抗体重鎖ならびに配列番号５９のアミノ酸配列（ＨＶＲ−Ｌ１）、配列番号６０のアミノ酸配列（ＨＶＲ−Ｌ２）、及び配列番号６１のアミノ酸配列（ＨＶＲ−Ｌ３）をＨＶＲとして含む抗体軽鎖、又は
ｂ）配列番号６４のアミノ酸配列（ＨＶＲ−Ｈ１）、配列番号６５のアミノ酸配列（ＨＶＲ−Ｈ２）、及び配列番号６６のアミノ酸配列（ＨＶＲ−Ｈ３）をＨＶＲとして含む抗体重鎖ならびに配列番号６７のアミノ酸配列（ＨＶＲ−Ｌ１）、配列番号６８のアミノ酸配列（ＨＶＲ−Ｌ２）、及び配列番号６９のアミノ酸配列（ＨＶＲ−Ｌ３）をＨＶＲとして含む抗体軽鎖、又は
ｃ）配列番号７２のアミノ酸配列（ＨＶＲ−Ｈ１）、配列番号７３のアミノ酸配列（ＨＶＲ−Ｈ２）、及び配列番号７４のアミノ酸配列（ＨＶＲ−Ｈ３）をＨＶＲとして含む抗体重鎖ならびに配列番号７５のアミノ酸配列（ＨＶＲ−Ｌ１）、配列番号７６のアミノ酸配列（ＨＶＲ−Ｌ２）、及び配列番号７７のアミノ酸配列（ＨＶＲ−Ｌ３）をＨＶＲとして含む抗体軽鎖、又は
ｄ）配列番号８０のアミノ酸配列（ＨＶＲ−Ｈ１）、配列番号８１のアミノ酸配列（ＨＶＲ−Ｈ２）、及び配列番号８２のアミノ酸配列（ＨＶＲ−Ｈ３）をＨＶＲとして含む抗体重鎖ならびに配列番号８３のアミノ酸配列（ＨＶＲ−Ｌ１）、配列番号８４のアミノ酸配列（ＨＶＲ−Ｌ２）、及び配列番号８５のアミノ酸配列（ＨＶＲ−Ｌ３）をＨＶＲとして含む抗体軽鎖、又は
ｅ）配列番号８８のアミノ酸配列（ＨＶＲ−Ｈ１）、配列番号８９のアミノ酸配列（ＨＶＲ−Ｈ２）、及び配列番号９０のアミノ酸配列（ＨＶＲ−Ｈ３）をＨＶＲとして含む抗体重鎖ならびに配列番号９１のアミノ酸配列（ＨＶＲ−Ｌ１）、配列番号９２のアミノ酸配列（ＨＶＲ−Ｌ２）、及び配列番号９３のアミノ酸配列（ＨＶＲ−Ｌ３）をＨＶＲとして含む抗体軽鎖。
【０３９２】
従って、別の好ましい実施態様において、抗ＩＧＦ−１Ｒ抗体は、以下を含む：
ａ）配列番号６２の重鎖可変ドメインＶＨ及び配列番号６３の軽鎖可変ドメインＶＬ、又は
ｂ）配列番号７０の重鎖可変ドメインＶＨ及び配列番号７１の軽鎖可変ドメインＶＬ、又は
ｃ）配列番号７８の重鎖可変ドメインＶＨ及び配列番号７９の軽鎖可変ドメインＶＬ、又は
ｄ）配列番号８６の重鎖可変ドメインＶＨ及び配列番号８７の軽鎖可変ドメインＶＬ、又は
ｅ）配列番号９４の重鎖可変ドメインＶＨ及び配列番号９５の軽鎖可変ドメインＶＬ。
【０３９３】
従って、１つの好ましい実施態様において、抗ＩＧＦ−１Ｒ抗体は、以下を有する：
配列番号５６のアミノ酸配列（ＨＶＲ−Ｈ１）、配列番号５７のアミノ酸配列（ＨＶＲ−Ｈ２）、及び配列番号５８のアミノ酸配列（ＨＶＲ−Ｈ３）をＨＶＲとして含む抗体重鎖ならびに配列番号５９のアミノ酸配列（ＨＶＲ−Ｌ１）、配列番号６０のアミノ酸配列（ＨＶＲ−Ｌ２）、及び配列番号６１のアミノ酸配列（ＨＶＲ−Ｌ３）をＨＶＲとして含む抗体軽鎖。
【０３９４】
従って、別の好ましい実施態様において、抗ＩＧＦ−１Ｒ抗体は、以下を有する：
配列番号８０のアミノ酸配列（ＨＶＲ−Ｈ１）、配列番号８１のアミノ酸配列（ＨＶＲ−Ｈ２）、及び配列番号８２のアミノ酸配列（ＨＶＲ−Ｈ３）をＨＶＲとして含む抗体重鎖ならびに配列番号８３のアミノ酸配列（ＨＶＲ−Ｌ１）、配列番号８４のアミノ酸配列（ＨＶＲ−Ｌ２）、及び配列番号８５のアミノ酸配列（ＨＶＲ−Ｌ３）をＨＶＲとして含む抗体軽鎖。
【０３９５】
従って、１つの好ましい実施態様において、抗ＩＧＦ−１Ｒ抗体は、以下を含む：
ａ）配列番号６２の重鎖可変ドメインＶＨ及び配列番号６３の軽鎖可変ドメインＶＬ。
【０３９６】
従って、別の好ましい実施態様において、抗ＩＧＦ−１Ｒ抗体は、以下を含む：
ｄ）配列番号８６の重鎖可変ドメインＶＨ及び配列番号８７の軽鎖可変ドメインＶＬ。
【０３９７】
一実施態様において、抗ＩＧＦ−１Ｒ抗体はヘテロ二量体Ｆｃ領域を有する。
【０３９８】
一実施態様において、抗体は単離抗体である。
【０３９９】
一実施態様において、抗体は全長抗体である。
【０４００】
一実施態様において、抗体はモノクローナル抗体である。
【０４０１】
一実施態様において、抗体はヒト、ヒト化又はキメラ抗体である。
【０４０２】
一実施態様において、抗体は、配列番号０５又は配列番号０６のＶＨ配列を含む。
【０４０３】
一実施態様において、抗体は、配列番号０７又は配列番号０８のＶＬ配列を含む。
【０４０４】
一実施態様において、抗体は、配列番号０５のＶＨ配列及び配列番号０７のＶＬ配列を含む。
【０４０５】
一実施態様において、抗体は、配列番号０６のＶＨ配列及び配列番号０８のＶＬ配列を含む。
【０４０６】
一実施態様において、抗体は、第１のＦｃ領域ポリペプチド及び第２のＦｃ領域ポリペプチドを含むＦｃ領域を含み、ここで
ｉ）第１及び第２のＦｃ領域ポリペプチドが、突然変異Ｙ４３６Ａを含み、又は
ｉｉ）第１及び第２のＦｃ領域ポリペプチドが、突然変異Ｉ２５３Ａ、Ｈ３１０Ａ、及びＨ４３５Ａを含み、又は
ｉｉｉ）第１及び第２のＦｃ領域ポリペプチドが、突然変異Ｈ３１０Ａ、Ｈ４３３Ａ、及びＹ４３６Ａを含み、又は
ｉｖ）第１及び第２のＦｃ領域ポリペプチドが、突然変異Ｌ２５１Ｄ、Ｌ３１４Ｄ、及びＬ４３２Ｄを含み、又は
ｖ）第１及び第２のＦｃ領域ポリペプチドが、突然変異Ｌ２５１Ｓ、Ｌ３１４Ｓ、及びＬ４３２Ｓを含み、又は
ｖｉ）第１のＦｃ領域ポリペプチドが突然変異Ｙ４３６Ａを含み、第２のＦｃ領域ポリペプチドが
ａ）突然変異Ｉ２５３Ａ、Ｈ３１０Ａ、及びＨ４３５Ａ、又は
ｂ）突然変異Ｈ３１０Ａ、Ｈ４３３Ａ、及びＹ４３６Ａ、又は
ｃ）突然変異Ｌ２５１Ｄ、Ｌ３１４Ｄ、及びＬ４３２Ｄ、又は
ｄ）突然変異Ｌ２５１Ｓ、Ｌ３１４Ｓ、及びＬ４３２Ｓを含み、
あるいは
ｖｉｉ）第１のＦｃ領域ポリペプチドが突然変異Ｉ２５３Ａ、Ｈ３１０Ａ、及びＨ４３５Ａを含み、第２のＦｃ領域ポリペプチドが
ａ）突然変異Ｈ３１０Ａ、Ｈ４３３Ａ、及びＹ４３６Ａ、又は
ｂ）突然変異Ｌ２５１Ｄ、Ｌ３１４Ｄ、及びＬ４３２Ｄ、又は
ｃ）突然変異Ｌ２５１Ｓ、Ｌ３１４Ｓ、及びＬ４３２Ｓを含み、
あるいは
ｖｉｉｉ）第１のＦｃ領域ポリペプチドが突然変異Ｈ３１０Ａ、Ｈ４３３Ａ、及びＹ４３６Ａを含み、第２のＦｃ領域ポリペプチドが
ａ）突然変異Ｌ２５１Ｄ、Ｌ３１４Ｄ、及びＬ４３２Ｄ、又は
ｂ）突然変異Ｌ２５１Ｓ、Ｌ３１４Ｓ、及びＬ４３２Ｓを含み、
あるいは
ｉｘ）第１のＦｃ領域ポリペプチドが突然変異Ｌ２５１Ｄ、Ｌ３１４Ｄ、及びＬ４３２Ｄを含み、第２のＦｃ領域ポリペプチドが突然変異Ｌ２５１Ｓ、Ｌ３１４Ｓ、及びＬ４３２Ｓを含む。
【０４０７】
全ての態様の一実施態様において、抗体は、ヒトＦｃＲｎに特異的に結合しない。全ての態様の一実施態様において、抗体は、ブドウ球菌プロテインＡに特異的に結合しない。
【０４０８】
全ての態様の一実施態様において、抗体は、ヒトＦｃＲｎに特異的に結合しない。全ての態様の一実施態様において、抗体は、ブドウ球菌プロテインＡに特異的に結合する。
【０４０９】
全ての態様の一実施態様において、抗体は、第１のＦｃ領域ポリペプチドにおいて、ｉ）群Ｉ２５３Ａ、Ｈ３１０Ａ、及びＨ４３５Ａ、又はｉｉ）群Ｈ３１０Ａ、Ｈ４３３Ａ、及びＹ４３６Ａ、又はｉｉｉ）群Ｌ２５１Ｄ、Ｌ３１４Ｄ、及びＬ４３２Ｄ、又はｉｖ）群Ｌ２５１Ｓ、Ｌ３１４Ｓ、及びＬ４３２Ｓ（Ｋａｂａｔ  ＥＵインデックスナンバリングシステムに従ったナンバリング）より選択される突然変異の１つ又は２つ、ならびに第２のＦｃ領域ポリペプチドにおいて、突然変異Ｌ２５１Ｄ、Ｌ２５１Ｓ、Ｉ２５３Ａ、Ｈ３１０Ａ、Ｌ３１４Ｄ、Ｌ３１４Ｓ、Ｌ４３２Ｄ、Ｌ４３２Ｓ、Ｈ４３３Ａ、Ｈ４３５Ａ、及びＹ４３６Ａ（Ｋａｂａｔ  ＥＵインデックスナンバリングシステムに従ったナンバリング）を含む群より選択される突然変異の１つ又は２つを含む、ヒトＩｇＧ１又はヒトＩｇＧ４サブクラス（すなわちヒト起源に由来する）の両方の第１及び第２のＦｃ領域ポリペプチドを含むＦｃ領域を含み、突然変異ｉ）Ｉ２５３Ａ、Ｈ３１０Ａ、及びＨ４３５Ａ、又はｉｉ）Ｈ３１０Ａ、Ｈ４３３Ａ、及びＹ４３６Ａ、又はｉｉｉ）Ｌ２５１Ｄ、Ｌ３１４Ｄ、及びＬ４３２Ｄ、又はｉｖ）Ｌ２５１Ｓ、Ｌ３１４Ｓ、及びＬ４３２Ｓの全てが、突然変異体（ヒト）ＩｇＧクラスＦｃ領域中に含まれるようにする。
【０４１０】
全ての態様の一実施態様において、抗体は、Ｆｃ領域において突然変異Ｉ２５３Ａ／Ｈ３１０Ａ／Ｈ４３５Ａ又はＨ３１０Ａ／Ｈ４３３Ａ／Ｙ４３６Ａ又はＬ２５１Ｄ／Ｌ３１４Ｄ／Ｌ４３２Ｄ又はＬ２５１Ｓ／Ｌ３１４Ｓ／Ｌ４３２Ｓ又はこれらの組み合わせ（Ｋａｂａｔ  ＥＵインデックスナンバリングシステムに従ったナンバリング）を含む、ヒトＩｇＧ１又はヒトＩｇＧ４サブクラス（すなわちヒト起源に由来する）の両方の第１及び第２のＦｃ領域ポリペプチドを含むＦｃ領域を含み、それにより、ｉ）全ての突然変異が、第１又は第２のＦｃ領域ポリペプチド中にあり、あるいはｉｉ）１つ又は２つの突然変異が、第１のＦｃ領域ポリペプチド中にあり、１つ又は２つの突然変異が、第２のＦｃ領域ポリペプチド中にあり、突然変異ｉ）Ｉ２５３Ａ、Ｈ３１０Ａ、及びＨ４３５Ａ、又はｉｉ）Ｈ３１０Ａ、Ｈ４３３Ａ、及びＹ４３６Ａ、又はｉｉｉ）Ｌ２５１Ｄ、Ｌ３１４Ｄ、及びＬ４３２Ｄ、又はｉｖ）Ｌ２５１Ｓ、Ｌ３１４Ｓ、及びＬ４３２Ｓの全てが、Ｆｃ領域中に含まれるようにする。
【０４１１】
全ての態様の一実施態様において、抗体は、第１のならびに第２のＦｃ領域ポリペプチドにおいて突然変異Ｉ２５３Ａ／Ｈ３１０Ａ／Ｈ４３５Ａ又はＨ３１０Ａ／Ｈ４３３Ａ／Ｙ４３６Ａ又はＬ２５１Ｄ／Ｌ３１４Ｄ／Ｌ４３２Ｄ又はＬ２５１Ｓ／Ｌ３１４Ｓ／Ｌ４３２Ｓ（Ｋａｂａｔ  ＥＵインデックスナンバリングシステムに従ったナンバリング）を含む、あるいは、第１のＦｃ領域ポリペプチドにおいて突然変異Ｉ２５３Ａ／Ｈ３１０Ａ／Ｈ４３５Ａ及び第２のＦｃ領域ポリペプチドにおいて突然変異Ｈ３１０Ａ／Ｈ４３３Ａ／Ｙ４３６Ａ（Ｋａｂａｔ  ＥＵインデックスナンバリングシステムに従ったナンバリング）を含む、ヒトＩｇＧ１又はヒトＩｇＧ４サブクラス（すなわちヒト起源に由来する）の両方の第１及び第２のＦｃ領域ポリペプチドを含むＦｃ領域を含む。
【０４１２】
全ての態様の一実施態様において、第２のＦｃ領域ポリペプチドは、突然変異Ｙ３４９Ｃ、Ｔ３６６Ｓ、Ｌ３６８Ａ、及びＹ４０７Ｖ（「ホール」）をさらに含み、第１のＦｃ領域ポリペプチドは、突然変異Ｓ３５４Ｃ及びＴ３６６Ｗ（「ノブ」）をさらに含む。
【０４１３】
全ての態様の一実施態様において、Ｆｃ領域ポリペプチドは、ヒトＩｇＧ１サブクラスのものである。一実施態様において、第１のＦｃ領域ポリペプチド及び第２のＦｃ領域ポリペプチドは、突然変異Ｌ２３４Ａ及びＬ２３５Ａをさらに含む。一実施態様において、第１のＦｃ領域ポリペプチド及び第２のＦｃ領域ポリペプチドは、突然変異Ｐ３２９Ｇをさらに含む。
【０４１４】
全ての態様の一実施態様において、Ｆｃ領域ポリペプチドは、ヒトＩｇＧ４サブクラスのものである。一実施態様において、第１のＦｃ領域ポリペプチド及び第２のＦｃ領域ポリペプチドは、突然変異Ｓ２２８Ｐ及びＬ２３５Ｅをさらに含む。一実施態様において、第１のＦｃ領域ポリペプチド及び第２のＦｃ領域ポリペプチドは、突然変異Ｐ３２９Ｇをさらに含む。
【０４１５】
全ての態様の一実施態様において、抗体は、以下であることで特徴付けられる：
−  Ｆｃ領域ポリペプチドにおいて突然変異を有さない、対応する二重特異性抗体と比較して、より低い血清濃度を示し（マウスＦｃＲｎ欠損であるが、ヒトＦｃＲｎについて半接合トランスジェニックであるマウスにおける硝子体内適用後９６時間）（実施例４に記載するアッセイにおいて決定）、及び／又は
−  Ｆｃ領域ポリペプチドにおいて突然変異を有さない、対応する二重特異性抗体と比較して、右眼全体の溶解物中で同様の（０．８〜１．２倍）濃度を示し（マウスＦｃＲｎ欠損であるが、ヒトＦｃＲｎについて半接合トランスジェニックであるマウスでの右眼における硝子体内適用後９６時間）（実施例４に記載するアッセイにおいて決定）、及び／又は
−  ヒトＦｃＲｎへの無効になった結合を有し、及び／又は
−  ブドウ球菌プロテインＡへの結合を有さない（ＳＰＲにより決定）、及び／又は
−  ブドウ球菌プロテインＡへの維持された結合を有する（ＳＰＲにより決定）。
【０４１６】
別の態様において、抗ＩＧＦ−１Ｒ抗体は、配列番号０５又は６２又は８６のアミノ酸配列と、少なくとも９０%、９１%、９２%、９３%、９４%、９５%、９６%、９７%、９８%、９９%、又は１００%の配列同一性を有する重鎖可変ドメイン（ＶＨ）配列を含む。特定の実施態様において、少なくとも９０%、９１%、９２%、９３%、９４%、９５%、９６%、９７%、９８%、又は９９%の同一性を有するＶＨ配列は、参照配列と比べて、置換（例えば、保存的置換）、挿入、又は欠失を含むが、しかし、その配列を含む抗ＩＧＦ−１Ｒ抗体は、ＩＧＦ−１Ｒに結合する能力を保持する。特定の実施態様において、合計１〜１０のアミノ酸が、配列番号０５又は６２又は８６において置換、挿入、及び／又は欠失されている。特定の実施態様において、置換、挿入、又は欠失は、ＨＶＲ外の領域中（即ち、ＦＲ中）で生じる。任意に、抗ＩＧＦ−１Ｒ抗体は、配列番号０５又は６２又は８６においてＶＨ配列を含む（その配列の翻訳後修飾を含む）。
【０４１７】
別の態様において、抗ＩＧＦ−１Ｒ抗体が提供され、ここで、抗体は、配列番号０７又は６３又は８７のアミノ酸配列と、少なくとも９０%、９１%、９２%、９３%、９４%、９５%、９６%、９７%、９８%、９９%、又は１００%の配列同一性を有する軽鎖可変ドメイン（ＶＬ）を含む。特定の実施態様において、少なくとも９０%、９１%、９２%、９３%、９４%、９５%、９６%、９７%、９８%、又は９９%の同一性を有するＶＬ配列は、参照配列と比べて、置換（例えば、保存的置換）、挿入、又は欠失を含むが、しかし、その配列を含む抗ＩＧＦ−１Ｒ抗体は、ＩＧＦ−１Ｒに結合する能力を保持する。特定の実施態様において、合計１〜１０のアミノ酸が、配列番号０７又は６３又は８７において置換、挿入、及び／又は欠失されている。特定の実施態様において、置換、挿入、又は欠失は、ＨＶＲ外の領域中（即ち、ＦＲ中）で生じる。任意に、抗ＩＧＦ−１Ｒ抗体は、配列番号０７又は６３又は８７においてＶＬ配列を含む（その配列の翻訳後修飾を含む）。
【０４１８】
別の態様において、抗ＩＧＦ−１Ｒ抗体が提供され、ここで、抗体は、上記の実施態様のいずれかにおける通りのＶＨ、及び上記の実施態様のいずれかにおける通りのＶＬを含む。一実施態様において、抗体は、配列番号０５及び配列番号０７における、又は配列番号６２及び配列番号６３における、又は配列番号８６又は配列番号８７におけるＶＨ及びＶＬ配列（これらの配列の翻訳後修飾を含む）をそれぞれ含む。
【０４１９】
さらなる態様において、本発明は、本明細書において提供する抗ＩＧＦ−１Ｒ抗体と同じエピトープに結合する抗体を提供する。例えば、特定の実施態様において、配列番号０５のＶＨ配列及び配列番号０７のＶＬ配列を含む抗ＩＧＦ−１Ｒ抗体と同じエピトープに結合する抗体が提供される。
【０４２０】
別の実施態様において、抗体は、全長抗体、例えば、上に定義するＦｃＲｎ結合特異性を伴う、インタクトなＩｇＧ１又はＩｇＧ４抗体である。
【０４２１】
本明細書において報告する抗体は、組換え手段により産生される。このように、本発明の一態様は、本明細書において報告する抗体をコードする核酸であり、さらなる態様は、本明細書において報告する抗体をコードする核酸を含む細胞である。組換えの産生のための方法が、最先端技術において広く公知であり、原核細胞及び真核細胞中でのタンパク質発現を含み、その後の抗体の単離及び、通常は、医薬的に許容可能な純度までの精製を伴う。宿主細胞中での上記の抗体の発現のために、それぞれの（改変された）軽鎖及び重鎖をコードする核酸を、標準方法により発現プラスミド中に挿入する。発現は、適当な原核宿主細胞又は真核宿主細胞（ＣＨＯ細胞、ＮＳ０細胞、ＳＰ２／０細胞、ＨＥＫ２９３細胞、ＣＯＳ細胞、ＰＥＲ．Ｃ６細胞、酵母、又はＥ．  ｃｏｌｉ細胞など）において実施され、抗体を細胞（培養上清又は溶解後の細胞）から回収する。抗体の組換え産生のための一般的方法が、最先端技術において周知であり、例えば、総説文献Makrides, S. C., Protein Expr. Purif. 17 (1999) 183-202, Geisse, S., et al., Protein Expr. Purif. 8 (1996) 271-282, Kaufman, R. J., Mol. Biotechnol. 16 (2000) 151-160、及びWerner, R. G., Drug Res. 48 (1998) 870-880において記載されている。
【０４２２】
したがって、本発明の一態様は、本明細書において報告する通りの抗体の調製のための方法であって、以下の工程を含む：
ａ）抗体をコードする核酸を含むプラスミドを用いて宿主細胞を形質転換すること、
ｂ）抗体の合成を可能にする条件下で宿主細胞を培養すること、及び
ｃ）培養物から抗体を回収すること。
【０４２３】
一実施態様において、ｃ）の下での回収工程は、軽鎖定常ドメイン特異的な捕捉試薬（それは、例えば、カッパ軽鎖又はラムダ軽鎖が抗体中に含まれているかに依存して、カッパ定常軽鎖又はラムダ定常軽鎖について特異的である）の使用を含む。一実施態様において、この軽鎖特異的な捕捉試薬を、結合及び溶出モードにおいて使用する。そのような軽鎖定常ドメイン特異的な捕捉試薬の例は、例えば、KappaSelect（商標）及びLambdaFabSelect（商標）（GE Healthcare/BACから入手可能）であり、それらは、高流速及び低い背圧を大規模で可能にする、高度に強固なアガロースベースマトリクスに基づく。これらの材料は、カッパ軽鎖又はラムダ軽鎖の定常領域にそれぞれ結合するリガンドを含む（即ち、軽鎖の定常領域を欠く断片は結合しない）。両方が、従って、軽鎖の定常領域（例えばＩｇＧ、ＩｇＡ、及びＩｇＭ）を含む他の標的分子に結合することが可能である。リガンドは、マトリクスに、長い親水性スペーサーアームを介して付着され、それらを、標的分子への結合のために簡単に利用可能にする。それらは、ヒトＩｇカッパ又はラムダのいずれかについてスクリーニングされる単鎖抗体フラグメントに基づく。
【０４２４】
一実施態様において、ｃ）の下での回収工程は、Ｆｃ領域特異的な捕捉試薬の使用を含む。一実施態様において、Ｆｃ領域特異的な捕捉試薬は、結合及び溶出モードにおいて使用される。そのようなＦｃ領域特異的な捕捉試薬の例は、例えば、ブドウ球菌プロテインＡベースの親和性クロマトグラフィー材料である。
【０４２５】
抗体は、従来の免疫グロブリン精製手順、例えば親和性クロマトグラフィー（プロテインＡセファロース、KappaSelect（商標）、LambdaFabSelect（商標））、ヒドロキシルアパタイトクロマトグラフィー、ゲル電気泳動、又は透析などにより培養培地から適切に分離される。
【０４２６】
モノクローナル抗体をコードするＤＮＡ及びＲＮＡは、容易に単離され、従来の手順を使用して配列決定される。Ｂ細胞又はハイブリドーマ細胞は、そのようなＤＮＡ及びＲＮＡの供給源としての役割を果たしうる。一度、単離されると、ＤＮＡを発現プラスミド中に挿入し、それを、次に、本来なら免疫グロブリンタンパク質を産生しない宿主細胞（例えばＨＥＫ  ２９３細胞、ＣＯＳ細胞、又はミエローマ細胞など）中にトランスフェクトして、宿主細胞において組換えモノクローナル抗体の合成を得ることができる。
【０４２７】
本明細書において報告する抗体の一部は、異なって改変されたＦｃ領域を含むことにより、単離／精製の容易さを提供し、ここで、改変の少なくとも１つが、ｉ）プロテインＡについての抗体の異なる親和性、及びｉｉ）ヒトＦｃＲｎについての抗体の異なる親和性をもたらし、抗体が、プロテインＡについてのその親和性に基づき、破壊細胞から、培地から、又は抗体の混合物から単離可能である。
【０４２８】
細胞成分又は他の混入物（例えば、他の細胞性核酸又はタンパク質）を、標準的な技術（アルカリ／ＳＤＳ処理、ＣｓＣｌバンディング、カラムクロマトグラフィー、アガロースゲル電気泳動を含む）、及び当技術分野において公知の他により排除するために、抗体の精製を実施する（例えば、Ausubel, F., et al., ed. Current Protocols in Molecular Biology, Greene Publishing and Wiley Interscience, New York (1987)を参照のこと）。例えば、微生物タンパク質を用いた親和性クロマトグラフィー（例えば、プロテインＡ又はプロテインＧ親和性クロマトグラフィー）、イオン交換クロマトグラフィー（例えば、陽イオン交換（カルボキシメチル樹脂）、陰イオン交換（アミノエチル樹脂）、及び混合モード交換）、チオフィリック吸着（例えば、ベータ−メルカプトエタノール及び他のＳＨリガンドを用いる）、疎水的相互作用又は芳香族吸着クロマトグラフィー（例えば、フェニル−セファロース、アザ−アレノフィリック樹脂、又はｍ−アミノフェニルボロン酸を用いる）、金属キレート親和性クロマトグラフィー（例えば、Ｎｉ（ＩＩ）及びＣｕ（ＩＩ）親和性材料を用いる）、サイズ排除クロマトグラフィー、及び電気泳動方法（例えばゲル電気泳動法、キャピラリー電気泳動など）などの異なる方法が、タンパク質精製のために、十分に確立され、広範に使用されている（Vijayalakshmi, M. A., Appl. Biochem. Biotech. 75 (1998) 93-102）。
【０４２９】
本明細書で用いる用語「含む」とは、用語「からなる」を含むことをここであえて記載する。よって、用語「含む」を含むすべての観点及び態様は、用語「からなる」を用いて開示されたものとも通じる。
さらなる態様において、上記実施態様のいずれかに従った抗ＩＧＦ−１Ｒ抗体は、以下のセクション１〜６に記載する通りの特性のいずれかを、単独又は組み合わせにおいて組み入れてもよい：
【０４３０】
１．抗体親和性
特定の実施態様において、本明細書において提供する抗体は、≦１００nM、≦１０nM（例えば、１０−７M又はそれ以下、例えば、１０−７Mから１０−１３M、例えば、１０−８Mから１０−１３M）の解離定数（Ｋｄ）を有する。
【０４３１】
一実施態様において、ＫｄはBIACORE（登録商標）表面プラズモン共鳴アッセイを使用して測定される。例えば、BIACORE（登録商標）2000又はBIACORE（登録商標）3000（GE Healthcare Inc.、ピスカタウェイ、ＮＪ）を使用したアッセイを、約１０応答単位（ＲＵ）で固定化抗原CM5チップを用いて２５℃で実施する。一実施態様において、カルボキシメチル化デキストランバイオセンサーチップ（CM5、BIAcore Inc.）を、供給業者の指示に従い、Ｎ−エチル−ｎ’−（３−ジメチルアミノプロピル）−カルボジイミド塩酸塩（ＥＤＣ）及びＮ−ヒドロキシスクシンイミド（ＮＨＳ）を用いて活性化する。抗原を、流速５μL/分での注入前に、１０mM酢酸ナトリウム（ｐＨ４．８）を用いて５μg/ml（約０．２μM）まで希釈し、約１０応答単位（ＲＵ）の共役タンパク質を達成する。抗原の注入に続き、１Mエタノールアミンを注入し、未反応基を遮断する。動態測定のために、（例えば、Ｆａｂの）２倍連続希釈物（０．７８nM〜５００nM）を、ＰＢＳ中で、０．０５%ポリソルベート（TWEEN 20（商標））界面活性剤（ＰＢＳＴ）を用いて、２５℃で、流速約２５μL/分で注入する。会合速度（ｋｏｎ）及び解離速度（ｋｏｆｆ）を、単純な１対１のラングミュア結合モデル（BIAcore（登録商標）Evaluation Softwareバージョン３．２）を使用して、会合及び解離センサーグラムを同時に適合させることにより算出する。平衡解離定数（Ｋｄ）を比率ｋｏｆｆ／ｋｏｎとして算出する（例えば、Chen, Y. et al., J. Mol. Biol. 293 (1999) 865-881を参照のこと）。オン速度が上の表面プラズモン共鳴アッセイにより１０６M−１ｓ−１を上回る場合、次に、オン速度を、２５℃でＰＢＳ（ｐＨ７．２）中の２０nMの抗抗原抗体（Ｆａｂ形態）の蛍光発光強度（励起＝２９５nm；発光＝３４０nm、１６nmバンドパス）における増加又は減少を測定する蛍光クエンチング技術を、分光計（例えばストップフロー装備分光光度計（Aviv Instruments）又は8000シリーズSLM-AMINCO（商標）分光光度計（ThermoSpectronic）など）において、撹拌キュベットを用いて測定される増加濃度の抗原の存在において、使用することにより決定することができる。
【０４３２】
２．キメラ抗体及びヒト化抗体
特定の実施態様において、本明細書に提供される抗体はキメラ抗体である。特定のキメラ抗体が、例えば、ＵＳ  ４，８１６，５６７；及びMorrison, S.L.et al., Proc. Natl. Acad. Sci. USA 81 (1984) 6851-6855において記載される。一例において、キメラ抗体は、非ヒト可変領域（例えば、マウス、ラット、ハムスター、ウサギ、又は非ヒト霊長類、例えばサルなどに由来する可変領域）及びヒト定常領域を含む。さらなる例において、キメラ抗体は、クラス又はサブクラスが、親抗体のものから変化されている「クラススイッチ」抗体である。キメラ抗体は、その抗原結合フラグメントを含む。
【０４３３】
特定の実施態様において、キメラ抗体は、ヒト化抗体である。典型的には、非ヒト抗体は、親の非ヒト抗体の特異性及び親和性を保持しながら、ヒトへの免疫原性を低下させるためにヒト化される。一般的に、ヒト化抗体は、ＨＶＲ、例えば、ＣＤＲ（又はその部分）が非ヒト抗体に由来し、ＦＲ（又はその部分）がヒト抗体配列に由来する１つ又は複数の可変ドメインを含む。また、ヒト化抗体は、場合により、ヒト定常領域の少なくとも部分を含むであろう。一部の実施態様において、ヒト化抗体における一部のＦＲ残基が、非ヒト抗体（例えば、ＨＶＲ残基が由来する抗体）からの対応する残基で置換され、例えば、抗体特異性又は親和性を回復又は改善する。
【０４３４】
ヒト化抗体及びそれらを作製する方法が、例えば、Almagro, J.C. and Fransson, J., Front. Biosci. 13 (2008) 1619-1633において概説されており、例えば、Riechmann, I., et al., Nature 332 (1988) 323-329;Queen, C., et al., Proc. Natl. Acad. Sci. USA 86 (1989) 10029-10033；ＵＳ  ５，８２１，３３７、ＵＳ  ７，５２７，７９１、ＵＳ  ６，９８２，３２１、及びＵＳ  ７，０８７，４０９；Kashmiri, S.V., et al., Methods 36 (2005) 25-34（特異性決定領域（ＳＤＲ）移植を記載）；Padlan, E.A., Mol. Immunol. 28 (1991) 489-498（「リサーフェシング」を記載）；Dall'Acqua, W.F. et al., Methods 36 (2005) 43-60（「ＦＲシャッフリング」を記載）；Osbourn, J. et al., Methods 36 (2005) 61-68；及びKlimka, A. et al., Br. J. Cancer 83 (2000) 252-260（ＦＲシャッフリングへの「ガイド付き選択」アプローチを記載）においてさらに記載されている。
【０４３５】
ヒト化のために使用されうるヒトフレームワーク領域は、「ベストフィット」方法を使用して選択されるフレームワーク領域（例えば、Sims, M.J., et al., J. Immunol. 151 (1993) 2296-2308を参照のこと）。軽鎖又は重鎖可変領域の特定のサブグループのヒト抗体のコンセンサス配列に由来するフレームワーク領域（例えば、Carter, P., et al., Proc. Natl. Acad. Sci. USA 89 (1992) 4285-4289；及びPresta, L.G., et al., J. Immunol. 151 (1993) 2623-2632を参照のこと）；ヒト成熟（体細胞突然変異した）フレームワーク領域又はヒト生殖系列フレームワーク領域（例えば、Almagro, J.C. and Fransson, J., Front. Biosci. 13 (2008) 1619-1633を参照のこと）；及び、ＦＲライブラリーのスクリーニングに由来するフレームワーク領域（例えば、Baca, M. et al., J. Biol. Chem. 272 (1997) 10678-10684及びRosok, M.J. et al., J. Biol. Chem. 271 (19969 22611-22618を参照のこと）を含むが、これらに限定されない。
【０４３６】
３．ヒト抗体
特定の実施態様において、本明細書において提供する抗体は、ヒト抗体である。ヒト抗体を、当技術分野において公知の種々の技術を使用して産生することができる。ヒト抗体は、一般的に、van Dijk, M.A. and van de Winkel, J.G., Curr. Opin. Pharmacol. 5 (2001) 368-374及びLonberg, N., Curr. Opin. Immunol. 20 (2008) 450-459において記載されている。
【０４３７】
ヒト抗体は、抗原攻撃に応答して、インタクトなヒト抗体又はヒト可変領域を伴うインタクトな抗体を産生するように改変されたトランスジェニック動物に免疫原を投与することにより調製されうる。そのような動物は、典型的には、ヒト免疫グロブリン遺伝子座の全て又は部分を含み、それらは、内因性免疫グロブリン遺伝子座を置換する、あるいは、染色体外に存在する、又は動物の染色体にランダムに組み込まれる。そのようなトランスジェニックマウスにおいて、内因性免疫グロブリン遺伝子座は、一般的に、不活性化されている。トランスジェニック動物からヒト抗体を得るための方法の概説については、Lonberg, N., Nat. Biotech. 23 (2005) 1117-1125を参照のこと（また、XENOMOUSE（商標）技術を記載するＵＳ  ６，０７５，１８１及びＵＳ  ６，１５０，５８４；ＨＵＭＡＢ（登録商標）技術を記載するＵＳ  ５，７７０，４２９；Ｋ−Ｍ  ＭＯＵＳＥ（登録商標）技術を記載するＵＳ  ７，０４１，８７０及びＶＥＬＯＣＩＭＯＵＳＥ（登録商標）技術を記載するＵＳ  ２００７／００６１９００を参照のこと）。そのような動物により生成されたインタクトな抗体からのヒト可変領域は、例えば、異なるヒト定常領域と組み合わせることにより、さらに改変してもよい。
【０４３８】
ヒト抗体は、またハイブリドーマベースの方法により作製することができる。ヒトモノクローナル抗体の産生のためのヒト骨髄腫及びマウス−ヒト異種骨髄腫細胞株が記載されている（例えば、Kozbor, D.J., Immunol. 133 (1984) 3001-3005; Brodeur, B.R., et al., Monoclonal Antibody Production Techniques and Applications, Marcel Dekker, Inc., New York (1987), pp. 51-63; 及び Boerner, P., et al., J. Immunol. 147 (1991) 86-95を参照のこと）。ヒトＢ細胞ハイブリドーマ技術を介して生成されたヒト抗体は、また、Li, J.et al., Proc. Natl. Acad. Sci. USA 103 (2006) 3557-3562に記載されている。追加の方法は、例えば、ＵＳ  ７，１８９，８２６（ハイブリドーマ細胞株からのモノクローナルヒトＩｇＭ抗体の産生を記載する）及びNi, J., Xiandai Mianyixue 26 (2006) 265-268（ヒト−ヒトハイブリドーマを記載する）において記載される方法を含む。ヒトハイブリドーマ技術（トリオーマ技術）は、また、Vollmers, H.P. and Brandlein, S., Histology and Histopathology 20 (2005) 927-937及びVollmers, H.P. and Brandlein, S., Methods and Findings in Experimental and Clinical Pharmacology 27 (2005) 185-191に記載されている。
【０４３９】
ヒト抗体は、また、ヒト由来ファージディスプレイライブラリーから選択されたＦｖクローン可変ドメイン配列を単離することにより生成することができる。そのような可変ドメイン配列は、次に、所望のヒト定常ドメインと組み合わせてもよい。抗体ライブラリーからヒト抗体を選択するための技術が、以下に記載されている。
【０４４０】
４．ライブラリー由来抗体
本発明の抗体は、所望の活性を伴う抗体について、コンビナトリアルライブラリーをスクリーニングすることにより単離されうる。例えば、種々の方法が、ファージディスプレイライブラリーを生成し、所望の結合特性を持つ抗体について、そのようなライブラリーをスクリーニングするために、当技術分野において公知である。そのような方法は、例えば、Hoogenboom, H.R. et al., Methods in Molecular Biology 178 (2001) 1-37において概説されており、例えば、McCafferty, J. et al., Nature348 (1990) 552-554；Clackson, T. et al., Nature 352 (1991) 624-628；Marks, J.D. et al., J. Mol. Biol. 222 (1992) 581-597；Marks, J.D. and Bradbury, A., Methods in Molecular Biology 248 (2003) 161-175；Sidhu, S.S. et al., J. Mol. Biol. 338 (2004) 299-310；Lee, C.V. et al., J. Mol. Biol. 340 (2004) 1073-1093；Fellouse, F.A., Proc. Natl. Acad. Sci. USA 101 (2004) 12467-12472；及びLee, C.V. et al., J. Immunol. Methods 284 (2004) 119-132においてさらに記載されている。
【０４４１】
特定のファージディスプレイ方法において、ＶＨ及びＶＬ遺伝子のレパートリーは、ポリメラーゼ連鎖反応（ＰＣＲ）により別々にクローニングされ、ファージライブラリーにおいてランダムに組み換えられ、それは、次に、Winter, G., et al., Ann. Rev. Immunol. 12 (1994) 433-455に記載される通りに、抗原結合ファージについてスクリーニングすることができる。ファージは、典型的には、単鎖Ｆｖ（ｓｃＦｖ）断片として、又はＦａｂ断片として、抗体断片をディスプレイする。免疫化された供給源からのライブラリーは、ハイブリドーマを構成する必要性を伴わず、免疫原に対する高親和性抗体を提供する。あるいは、ナイーブレパートリーを（例えば、ヒトから）クローニングし、Griffiths, A.D., et al., EMBO J. 12 (1993) 725-734に記載される通り、任意の免疫化を伴わず、広範囲の非自己及び自己抗原に対する、抗体の単一供給源を提供することができる。最後に、ナイーブライブラリーは、また、幹細胞から非再配列Ｖ遺伝子セグメントをクローニングし、高度可変ＣＤＲ３領域をコードし、インビトロで再配列を達成するためのランダム配列を含むＰＣＲプライマーを使用することにより、Hoogenboom, H.R. and Winter, G., J. Mol. Biol. 227 (1992) 381-388により記載される通り、合成的に作製することができる。ヒト抗体ファージライブラリーを記載する特許公開は、例えば、ＵＳ  ５，７５０，３７３、及びＵＳ  ２００５／００７９５７４、ＵＳ  ２００５／０１１９４５５、ＵＳ  ２００５／０２６６０００、ＵＳ  ２００７／０１１７１２６、ＵＳ  ２００７／０１６０５９８、ＵＳ  ２００７／０２３７７６４、ＵＳ  ２００７／０２９２９３６、及びＵＳ  ２００９／０００２３６０を含む。
【０４４２】
ヒト抗体ライブラリーから単離された抗体又は抗体断片は、本明細書においてヒト抗体又はヒト抗体断片と考えられる。
【０４４３】
５．多重特異性抗体
特定の実施態様において、本明細書において提供する抗体は、多重特異性抗体（例えば、二重特異性抗体）である。多重特異性抗体は、少なくとも２つの異なる部位について結合特異性を有するモノクローナル抗体である。特定の実施態様において、結合特異性の１つは、ＩＧＦ−１Ｒについてであり、他は、任意の他の抗原についてである。特定の実施態様において、二重特異性抗体は、ＩＧＦ−１Ｒの２つの異なるエピトープに結合しうる。二重特異性抗体は、また、ＩＧＦ−１Ｒを発現する細胞に、細胞傷害性薬剤を局在化するために使用してもよい。二重特異性抗体は、全長抗体又は抗体断片として調製することができる。
【０４４４】
多重特異性抗体を作製するための技術は、異なる特異性を有する２つの免疫グロブリン重鎖−軽鎖対の組換え同時発現（Milstein, C. and Cuello, A.C., Nature 305 (1983) 537-540, WO 93/08829, 及びTraunecker, A., et al., EMBO J. 10 (1991) 3655-3659を参照のこと）、及び「ノブ・イン・ホール」操作（例えば、ＵＳ  ５，７３１，１６８を参照のこと）を含むが、これらに限定されない。多重特異性抗体は、また、抗体のＦｃヘテロ二量体分子を作製するために静電ステアリング効果を操作すること（ＷＯ  ２００９／０８９００４）；２つ又はそれ以上の抗体又はその断片を架橋すること（例えば、ＵＳ  ４，６７６，９８０、及びBrennan, M. et al., Science 229 (1985) 81-83を参照のこと）；ロイシンジッパーを使用して二重特異性抗体を産生すること（例えば、Kostelny, S.A., et al., J. Immunol. 148 (1992) 1547-1553を参照のこと）；二重特異性抗体断片を作製するために「ダイアボディ」技術を使用すること（例えば、Holliger, P. et al., Proc. Natl. Acad. Sci. USA 90 (1993) 6444-6448を参照のこと）；単鎖Ｆｖ（ｓＦｖ）二量体を使用すること（例えば、Gruber, M et al., J. Immunol. 152 (1994) 5368-5374を参照のこと）；及び、三重特異性抗体を調製すること（例えばTutt, A. et al., J. Immunol. 147 (1991) 60-69において記載される通り）により作製してもよい。
【０４４５】
「オクトパス抗体」を含む３又はそれ以上の機能的な抗原結合部位を伴う操作抗体も、本明細書に含まれる（例えば、ＵＳ  ２００６／００２５５７６を参照のこと）。
【０４４６】
本明細書における抗体又は断片が、また、ＩＧＦ−１Ｒならびに別の異なる抗原に、結合する抗原結合部位を含む「二重作用Ｆａｂ」又は「ＤＡＦ」を含む（例えば、ＵＳ  ２００８／００６９８２０を参照のこと）。
【０４４７】
本明細書における抗体又は断片は、また、ＷＯ  ２００９／０８０２５１、ＷＯ  ２００９／０８０２５２、ＷＯ  ２００９／０８０２５３、ＷＯ  ２００９／０８０２５４、ＷＯ  ２０１０／１１２１９３、ＷＯ  ２０１０／１１５５８９、ＷＯ  ２０１０／１３６１７２、ＷＯ  ２０１０／１４５７９２、及びＷＯ  ２０１０／１４５７９３に記載される多重特異性抗体を含む。
【０４４８】
６．抗体突然変異体
特定の実施態様において、本明細書において提供する抗体のアミノ酸配列突然変異体が検討される。例えば、抗体の結合親和性及び／又は他の生物学的特性を改善することが望まれうる。抗体のアミノ酸配列突然変異体を、抗体をコードするヌクレオチド配列中へ適当な改変を導入することにより、又はペプチド合成により調製してもよい。そのような改変は、例えば、抗体のアミノ酸配列内の残基からの欠失、及び／又はその中への挿入、及び／又はその置換を含む。欠失、挿入、及び置換の任意の組み合わせを作製し、最終的な構築物が所望の特徴（例えば、抗原結合）を保有するという条件で、最終的な構築物に達することができる。
【０４４９】
ａ）置換、挿入、及び欠失突然変異体
特定の実施態様において、１つ又は複数のアミノ酸置換を有する抗体突然変異体が提供される。置換突然変異誘発のための目的の部位は、ＨＶＲ及びＦＲを含む。保存的置換は、以下の表中に「好ましい置換」の見出しの下に示す。より実質的な変化は、以下の表中に「例示的置換」の見出しの下に提供し、アミノ酸側鎖クラスを参照して以下にさらに記載する。アミノ酸置換を目的の抗体中に導入し、産物を、所望の活性（例えば、保持／改善された抗原結合、免疫原性の減少、又はＡＤＣＣもしくはＣＤＣの改善）についてスクリーニングしてもよい。
【０４５０】
【表８】
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【０４５１】
アミノ酸は、共通の側鎖特性に従ってグループ化してもよい：
（１）疎水性：ノルロイシン、Ｍｅｔ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ；
（２）中性親水性：Ｃｙｓ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ａｓｎ、Ｇｌｎ；
（３）酸性：Ａｓｐ、Ｇｌｕ；
（４）塩基性：Ｈｉｓ、Ｌｙｓ、Ａｒｇ；
（５）鎖の配向に影響する残基：Ｇｌｙ、Ｐｒｏ；
（６）芳香族：Ｔｒｐ、Ｔｙｒ、Ｐｈｅ。
【０４５２】
非保存的置換は、これらのクラスの１つのメンバーを別のクラスについて交換することを伴いうる。
【０４５３】
置換突然変異体の１つの型は、親抗体（例えば、ヒト化又はヒト抗体）の１つ又は複数の超可変領域の残基を置換することを含む。一般的には、さらなる試験のために選択された、結果として得られる突然変異体は、親抗体と比べて、特定の生物学的特性（例えば、親和性の増加、免疫原性の低下）における改変（例えば、改善）を有する、及び／又は、親抗体の特定の生物学的特性を実質的に保持する。例示的な置換突然変異体は、例えば、ファージディスプレイベースの親和性成熟技術（例えば、本明細書に記載されるものなど）を使用して便利に生成されうる親和性成熟抗体である。簡単には、１つ又は複数のＨＶＲ残基を突然変異させ、突然変異型抗体をファージ上に提示させ、特定の生物学的活性（例えば、結合親和性）についてスクリーニングする。
【０４５４】
変化（例えば、置換）は、例えば、抗体の親和性を改善させるために、ＨＶＲにおいて作ってもよい。そのような変化は、ＨＶＲ「ホットスポット」、即ち、体細胞成熟プロセスの間に高頻度で突然変異を受けるコドンによりコードされる残基（例えば、Chowdhury, P.S., Methods Mol. Biol. 207 (2008) 179-196を参照のこと）、及び／又は抗原に接触する残基において作ってもよく、結果として得られる突然変異体ＶＨもしくはＶＬは、結合親和性についてテストされる。二次ライブラリーから構築し、それより再選択することによる親和性成熟は、例えば、Hoogenboom, H.R. et al. Methods in Molecular Biology 178 (2002) 1-37において記載されている。親和性成熟の一部の実施態様において、多様性は、種々の方法（例えば、エラープローンＰＣＲ、鎖シャッフリング、又はオリゴヌクレオチド特異的突然変異誘発）のいずれかによる成熟のために選ばれた可変遺伝子中に導入される。二次ライブラリーを次に作製する。ライブラリーを、次に、スクリーニングし、所望の親和性を伴う、任意の抗体突然変異体を同定する。多様性を導入するための別の方法は、ＨＶＲ指向アプローチを含み、ここで、いくつかのＨＶＲ残基（例えば、一度に４〜６残基）が無作為化される。抗原結合に含まれるＨＶＲ残基は、例えば、アラニンスキャニング突然変異誘発又はモデリングを使用して、特異的に同定されうる。特に、ＣＤＲ−Ｈ３及びＣＤＲ−Ｌ３が、しばしば、標的化される。
【０４５５】
特定の実施態様において、置換、挿入、又は欠失は、そのような変化が、抗原に結合する抗体の能力を実質的に低下させない限り、１つ又は複数のＨＶＲ内で生じうる。例えば、結合親和性を実質的に低下させない保存的変化（例えば、本明細書において提供する保存的置換）が、ＨＶＲにおいて作られうる。そのような変化は、例えば、ＨＶＲにおける抗原接触残基の外でありうる。上に提供する、突然変異体ＶＨ及びＶＬ配列の特定の実施態様において、各々のＨＶＲのいずれかが変化されない、あるいは、１つ、２つ、又は３つ未満のアミノ酸置換を含む。
【０４５６】
突然変異誘発のために標的化されうる抗体の残基又は領域の同定のための有用な方法は、「アラニンスキャニング突然変異誘発」と呼ばれ、Cunningham and Wells in Science, 244: 1081-1085 (1989)により記載される通りである。この方法において、残基又は標的残基の群（例えば、荷電残基、例えばａｒｇ、ａｓｐ、ｈｉｓ、ｌｙｓ、及びｇｌｕなど）を同定し、中性又は負に荷電したアミノ酸（例えば、アラニン又はポリアラニン）により置換され、抗体と抗原との相互作用が影響されているか否かを決定する。さらなる置換を初期置換への機能的感受性を実証するアミノ酸位置に導入してもよい。あるいは、又は、加えて、抗体と抗原の間での接触点を同定するために抗原−抗体複合体の結晶構造を使用することができる。そのような接触残基及び隣接残基は、置換のための候補として標的化又は排除してもよい。突然変異体をスクリーニングし、それらが所望の特性を含むか否かを決定してもよい。
【０４５７】
アミノ酸配列の挿入は、１つの残基から１００又はそれ以上の残基を含むポリペプチドまでの長さの範囲のアミノ及び／又はカルボキシル末端融合、ならびに単一又は複数のアミノ酸残基の配列内挿入を含む。末端挿入の例は、Ｎ末端メチオニル残基を伴う抗体を含む。抗体分子の他の挿入突然変異体は、酵素（例えば、ＡＤＥＰＴ用）又は抗体の血清中半減期を増加させるポリペプチドへの抗体のＮ又はＣ末端への融合体を含む。
【０４５８】
ｂ）グリコシル化突然変異体
特定の実施態様において、本明細書において提供する抗体を変化させ、抗体がグリコシル化される程度を増加又は減少させる。抗体へのグリコシル化部位の付加又は欠失は、好都合には、１つ又は複数のグリコシル化部位が作製又は除去されるように、アミノ酸配列を変化させることにより達成してもよい。
【０４５９】
抗体がＦｃ領域を含む場合、それに付着された糖質を変化させてもよい。哺乳動物細胞により産生される天然抗体は、典型的には、Ｎ連結により、Ｆｃ領域のＣＨ２ドメインのＡｓｎ２９７に一般的に付着される分枝、二分岐オリゴ糖を含む（例えば、Wright, A. and Morrison, S.L., TIBTECH 15 (1997) 26-32を参照のこと）。オリゴ糖は、種々の糖質、例えば、マンノース、Ｎアセチルグルコサミン（ＧｌｃＮＡｃ）、ガラクトース、及びシアル酸、ならびに二分岐オリゴ糖構造の「ステム」においてＧｌｃＮＡｃに付着されたフコースを含んでもよい。一部の実施態様において、本発明の抗体におけるオリゴ糖の修飾を、特定の改善された特性を伴う抗体突然変異体を作製するために作ってもよい。
【０４６０】
一実施態様において、Ｆｃ領域に（直接的又は間接的に）付着されたフコースを欠く糖質構造を有する抗体突然変異体が提供される。例えば、そのような抗体中のフコースの量は１%〜８０%、１%〜６５%、５%〜６５%、又は２０%〜４０%でありうる。フコースの量は、Ａｓｎ  ２９７に付着されている全ての糖構造（例えば、複合ハイブリッド及び高マンノース構造）の合計と比べて、Ａｓｎ２９７での糖鎖内のフコースの平均量を算出することにより決定し、例えば、ＷＯ２００８／０７７５４６に記載される通り、ＭＡＬＤＩ−ＴＯＦ質量分析法により測定される。Ａｓｎ２９７は、Ｆｃ領域（Ｆｃ領域残基のＥＵナンバリング）において約２９７の位置に位置付けられるアスパラギン残基を指す。しかし、Ａｓｎ２９７は、また、抗体における小さな配列変動に起因して、位置２９７の上流又は下流の約±３アミノ酸、即ち、位置２９４と３００の間に位置付けられうる。そのようなフコシル化突然変異体は、改善されたＡＤＣＣ機能を有しうる。例えば、ＵＳ  ２００３／０１５７１０８；ＵＳ  ２００４／００９３６２１を参照のこと。「脱フコシル化」又は「フコース欠損」抗体突然変異体に関連する刊行物の例は、ＵＳ  ２００３／０１５７１０８；ＷＯ  ２０００／６１７３９；ＷＯ  ２００１／２９２４６；ＵＳ  ２００３／０１１５６１４；ＵＳ  ２００２／０１６４３２８；ＵＳ  ２００４／００９３６２１；ＵＳ  ２００４／０１３２１４０；ＵＳ  ２００４／０１１０７０４；ＵＳ  ２００４／０１１０２８２；ＵＳ  ２００４／０１０９８６５；ＷＯ  ２００３／０８５１１９；ＷＯ  ２００３／０８４５７０；ＷＯ  ２００５／０３５５８６；ＷＯ  ２００５／０３５７７８；ＷＯ  ２００５／０５３７４２；ＷＯ  ２００２／０３１１４０；Okazaki, A. et al., J. Mol. Biol. 336 (2004) 1239-1249；Yamane-Ohnuki, N. et al., Biotech. Bioeng. 87 (2004) 614-622を含む。脱フコシル化抗体を産生することが可能である細胞株の例は、タンパク質フコシル化が欠損したＬｅｃ１３  ＣＨＯ細胞（Ripka, J., et al., Arch. Biochem. Biophys. 249 (1986) 533-545；ＵＳ  ２００３／０１５７１０８；及びＷＯ  ２００４／０５６３１２、特に実施例１１）、及びノックアウト細胞株、例えばアルファ−１，６−フコシルトランスフェラーゼ遺伝子、ＦＵＴ８ノックアウトＣＨＯ細胞など（例えば、Yamane-Ohnuki, N., et al., Biotech. Bioeng. 87 (2004) 614-622；Kanda, Y.et al., Biotechnol. Bioeng. 94 (2006) 680-688；及びＷＯ２００３／０８５１０７を参照のこと）を含む。
【０４６１】
二分されたオリゴ糖を伴う抗体突然変異体がさらに提供され、例えば、ここで、抗体のＦｃ領域に付着した二分岐オリゴ糖は、ＧｌｃＮＡｃにより二分されている。そのような抗体突然変異体は、低下したフコシル化及び／又は改善されたＡＤＣＣ機能を有しうる。そのような抗体突然変異体の例は、例えば、ＷＯ２００３／０１１８７８；ＵＳ  ６，６０２，６８４；及びＵＳ  ２００５／０１２３５４６に記載されている。Ｆｃ領域に付着したオリゴ糖中に少なくとも１つのガラクトース残基を伴う抗体突然変異体も提供される。そのような抗体突然変異体は、改善されたＣＤＣ機能を有しうる。そのような抗体突然変異体は、例えば、ＷＯ  １９９７／３００８７；ＷＯ  １９９８／５８９６４；及びＷＯ  １９９９／２２７６４に記載されている。
【０４６２】
ｃ）Ｆｃ領域突然変異体
特定の実施態様において、１つ又は複数のさらなるアミノ酸改変を、本明細書において提供する抗体のＦｃ領域中に導入し、それにより、Ｆｃ領域突然変異体を生成してもよい。Ｆｃ領域突然変異体は、１つ又は複数のアミノ酸位置にアミノ酸改変（例えば、置換／突然変異）を含むヒトＦｃ領域配列（例えば、ヒトＩｇＧ１、ＩｇＧ２、ＩｇＧ３、又はＩｇＧ４  Ｆｃ領域）を含みうる。
【０４６３】
特定の実施態様において、本発明は、一部（しかし、全てではない）エフェクター機能を持つ抗体突然変異体を検討し、それによって、抗体のインビボでの半減期が重要である適用のための望ましい候補となる。ＦｃＲｎ結合及びインビボクリアランス／半減期の決定はまた、当技術分野において公知の方法を使用して実施することができる（例えば、Petkova, S.B. et al., Int. Immunol. 18 (2006) 1759-1769を参照のこと）。
【０４６４】
低下したエフェクター機能を伴う抗体は、Ｆｃ領域残基２３８、２６５、２６９、２７０、２９７、３２７、及び３２９の１つ又は複数の置換を伴う抗体を含む（ＵＳ  ６，７３７，０５６）。そのようなＦｃ領域突然変異体は、アラニンへの残基２６５及び２９７の置換を伴う、いわゆる「ＤＡＮＡ」Ｆｃ領域突然変異体を含む、アミノ酸位置２６５、２６９、２７０、２９７、及び３２７の２つ又はそれ以上で置換を伴うＦｃ領域を含む（ＵＳ  ７，３３２，５８１）。
【０４６５】
改善又は減弱されたＦｃＲへの結合を伴う、特定の抗体突然変異体が記載されている（例えば、ＵＳ  ６，７３７，０５６；ＷＯ  ２００４／０５６３１２、及びShields, R.L. et al., J. Biol. Chem. 276 (2001) 6591-6604を参照のこと）。
【０４６６】
特定の実施態様において、抗体突然変異体は、ＡＤＣＣを改善する１つ又は複数のアミノ酸置換、例えば、Ｆｃ領域の位置２９８、３３３、及び／又は３３４（残基のＥＵナンバリング）での置換を伴うＦｃ領域を含む。
【０４６７】
一部の実施態様において、変化した（即ち、改善又は減弱した）Ｃ１ｑ結合及び／又は補体依存性細胞傷害（ＣＤＣ）をもたらす変化がＦｃ領域において作られ、例えば、ＵＳ  ６，１９４，５５１、ＷＯ  ９９／５１６４２、及びIdusogie, E.E. et al., J. Immunol. 164 (2000) 4178-4184に記載される通りである。
【０４６８】
また、Ｆｃ領域突然変異体の他の例に関するDuncan, A.R. and Winter, G., Nature 322 (1988) 738-740；ＵＳ  ５，６４８，２６０；ＵＳ  ５，６２４，８２１；及びＷＯ  ９４／２９３５１を参照のこと。
【０４６９】
ｄ）システイン操作抗体突然変異体
特定の実施態様において、抗体の１つ又は複数の残基がシステイン残基で置換されているシステイン操作抗体（例えば、「ｔｈｉｏＭＡｂｓ」）を作製することが望ましいであろう。特定の実施態様において、置換残基は、抗体の接近可能な部位で生じる。それらの残基をシステインで置換することにより、反応性チオール基は、それにより、抗体の接近可能な部位に配置され、抗体を、他の部分、例えば薬物部分又はリンカー−薬物部分などにコンジュゲートするために使用し、本明細書にさらに記載する通り、免疫複合体を作製してもよい。特定の実施態様において、以下の残基のいずれか１つ又は複数をシステインで置換してもよい：軽鎖のＶ２０５（Ｋａｂａｔナンバリング）；重鎖のＡ１１８（ＥＵナンバリング）；及び重鎖Ｆｃ領域のＳ４００（ＥＵナンバリング）。システイン操作抗体を、例えば、ＵＳ  ７，５２１，５４１に記載される通りに生成してもよい。
【０４７０】
ｅ）抗体誘導体
特定の実施態様において、本明細書において提供する抗体をさらに改変し、当技術分野において公知であり、容易に入手可能である追加の非タンパク質性部分を含んでもよい。抗体の誘導体化のために適切である部分は、水溶性ポリマーを含むが、それに限定されない。水溶性ポリマーの非限定的な例は、ポリエチレングリコール（ＰＥＧ）、エチレングリコール／プロピレングリコールのコポリマー、カルボキシメチルセルロース、デキストラン、ポリビニルアルコール、ポリビニルピロリドン、ポリ−１，３−ジオキソラン、ポリ−１，３，６−トリオキサン、エチレン／無水マレイン酸コポリマー、ポリアミノ酸（ホモポリマー又はランダムコポリマーのいずれか）、及びデキストラン又はポリ（ｎ−ビニルピロリドン）ポリエチレングリコール、プロプロピレン（ｐｒｏｐｒｏｐｙｌｅｎｅ）グリコールホモポリマー、プロリプロピレン（ｐｒｏｌｙｐｒｏｐｙｌｅｎｅ）オキシド／エチレンオキシドコポリマー、ポリオキシエチル化ポリオール（例えば、グリセロール）、ポリビニルアルコール、及びそれらの混合物を含むが、これらに限定されない。ポリエチレングリコールプロピオンアルデヒドは、水中でのその安定性のため、製造において利点を有しうる。ポリマーは、任意の分子量でありえ、分岐又は非分岐でありうる。抗体に付着するポリマーの数は変動しうるが、１つを上回るポリマーが付着する場合、それらは同じ又は異なる分子でありうる。一般的に、誘導体化のために使用されるポリマーの数及び／又は型は、抗体誘導体が、定義された条件などの下での治療において使用されるか否かにかかわらず、考慮（改善される抗体の特定の特性又は機能を含むが、これらに限定されない）に基づいて決定することができる。
【０４７１】
別の実施態様において、放射線への曝露により選択的に加熱されうる抗体及び非タンパク質部分のコンジュゲートが提供される。一実施態様において、非タンパク質性部分はカーボンナノチューブである（Kam, N.W. et al., Proc. Natl. Acad. Sci. USA 102 (2005) 11600-11605）。放射線は、任意の波長のものでありうるが、正常細胞に害を与えないが、抗体−非タンパク質性部分に近位である細胞が死滅される温度まで、非タンパク質性部分を加熱する波長を含むが、これに限定されない。
【０４７２】
ｆ）ヘテロ二量体化
ヘテロ二量体化を実施するためのＣＨ３修飾のためのいくつかのアプローチがあり、例えば、ＷＯ  ９６／２７０１１、ＷＯ  ９８／０５０４３１、ＥＰ  １８７０４５９、ＷＯ  ２００７／１１０２０５、ＷＯ  ２００７／１４７９０１、ＷＯ  ２００９／０８９００４、ＷＯ  ２０１０／１２９３０４、ＷＯ  ２０１１／９０７５４、ＷＯ  ２０１１／１４３５４５、ＷＯ  ２０１２０５８７６８、ＷＯ  ２０１３１５７９５４、ＷＯ  ２０１３０９６２９１に十分に記載されている。典型的には、全てのそのようなアプローチにおいて、第１のＣＨ３ドメイン及び第２のＣＨ３ドメインは、両方が、相補的な様式で操作され、各々のＣＨ３ドメイン（又はそれを含む重鎖）が、それ自体ともはやホモ二量体化することができないが、しかし、相補的に操作された他のＣＨ３ドメインとヘテロ二量体化することが強制されるようにする（第１及び第２のＣＨ３ドメインがヘテロ二量体化し、２つの第１又は２つの第２のＣＨ３ドメインの間にホモ二量体が形成されないようにする）。改善された重鎖のヘテロ二量体化のためのこれらの異なるアプローチは、Ｂｅｎｃｅ−Ｊｏｎｅｓ型の副生成物の軽鎖誤対合を低下させる、本発明の多重特異性抗体において、重−軽鎖修飾（１つの結合アームにおけるＶＨ及びＶＬの交換／置換ならびにＣＨ１／ＣＬインターフェイスにおいて反対の電荷を伴う荷電アミノ酸の置換の導入）との組み合わせにおける異なる選択肢として検討される。
【０４７３】
本発明の１つの好ましい実施態様において（多重特異性抗体が、重鎖においてＣＨ３ドメインを含む場合において）、本発明に従った前記多重特異性抗体のＣＨ３ドメインを、いくつかの例、例えばＷＯ  ９６／０２７０１１、Ridgway, J.B., et al, Protein Eng. 9 (1996) 617-621；及びMerchant, A.M., et al, Nat. Biotechnol. 16 (1998) 677-681；ＷＯ  ９８／０５０４３１を用いて詳細に記載されている「ノブ・インツー・ホール」技術により変化させることができる。この方法において、２つのＣＨ３ドメインの相互作用表面を変化させ、これらの２つのＣＨ３ドメインを含む、両方の重鎖のヘテロ二量体化を増加させる。（２つの重鎖の）２つのＣＨ３ドメインの各々は「ノブ」でありうるが、他は「ホール」である。ジスルフィド架橋の導入によって、ヘテロ二量体がさらに安定化され（Merchant, A.M., et al, Nature Biotech. 16 (1998) 677-681; Atwell, S., et al, J. Mol. Biol. 270 (1997) 26-35）、収量が改善される。
【０４７４】
このように、本発明の一実施態様においては、前記多重特異性抗体（各々の重鎖においてＣＨ３ドメインを含む）は、さらに、ａ）の下の抗体の第１重鎖の第１のＣＨ３ドメイン及びｂ）の下の抗体の第２重鎖の第２のＣＨ３ドメインが、各々、抗体ＣＨ３ドメイン間の元のインターフェイスを含むインターフェイスで会合することを特徴とする。
ここで、前記インターフェイスは、多重特異性抗体の形成を促進するように変化させ、ここで、変化は、以下を特徴とする：
ｉ）１つの重鎖のＣＨ３ドメインを変化させ、多重特異性抗体内の他の重鎖のＣＨ３ドメインの元のインターフェイスと会合する１つの重鎖のＣＨ３ドメインの元のインターフェイス内で、アミノ酸残基は、より大きな側鎖容積を有するアミノ酸残基で置換され、それにより、他の重鎖のＣＨ３ドメインのインターフェイス内の空洞において配置可能である、１つの重鎖のＣＨ３ドメインのインターフェイス内に突起を生成するようにし、
ならびに
ｉｉ）他の重鎖のＣＨ３ドメインを変化させ、多重特異性抗体内の第１のＣＨ３ドメインの元のインターフェイスと会合する第２のＣＨ３ドメインの元のインターフェイス内で、アミノ酸残基は、より小さな側鎖容積を有するアミノ酸残基で置換され、それにより、第１のＣＨ３ドメインのインターフェイス内の突起を配置可能である第２のＣＨ３ドメインのインターフェイス内に空洞を生成するようにする。
【０４７５】
好ましくは、より大きな側鎖容積を有する前記アミノ酸残基は、アルギニン（Ｒ）、フェニルアラニン（Ｆ）、チロシン（Ｙ）、トリプトファン（Ｗ）からなる群より選択される。
【０４７６】
好ましくは、より小さい側鎖容積を有するアミノ酸残基は、アラニン（Ａ）、セリン（Ｓ）、トレオニン（Ｔ）、バリン（Ｖ）からなる群より選択される。
【０４７７】
本発明の１つの態様において、両方のＣＨ３ドメインを、さらに、各ＣＨ３ドメインの対応する位置においてアミノ酸としてシステイン（Ｃ）を導入することにより変化させ、両方のＣＨ３ドメイン間のジスルフィド橋を形成することができるようにする。
【０４７８】
１つの好ましい実施態様において、前記多重特異性抗体は、「ノブ鎖」の第１のＣＨ３ドメインにおいてアミノ酸Ｔ３６６Ｗ突然変異、及び「ホール鎖」の第２のＣＨ３ドメインにおいてアミノ酸Ｔ３６６Ｓ、Ｌ３６８Ａ、Ｙ４０７Ｖ突然変異を含む。ＣＨ３ドメイン間の追加的な鎖間ジスルフィド架橋（Merchant, A.M., et al, Nature Biotech. 16 (1998) 677-681）も、例えば、「ホール鎖」のＣＨ３ドメイン中にアミノ酸Ｙ３４９Ｃ突然変異、及び「ノブ鎖」のＣＨ３ドメイン中にアミノ酸Ｅ３５６Ｃ突然変異又はアミノ酸Ｓ３５４Ｃ突然変異を導入することにより使用することができる。
【０４７９】
１つの好ましい実施態様において、（各重鎖においてＣＨ３ドメインを含む）前記多重特異性抗体は、２つのＣＨ３ドメインの１つにおいてアミノ酸Ｓ３５４Ｃ、Ｔ３６６Ｗ突然変異、及び２つのＣＨ３ドメインの他においてアミノ酸Ｙ３４９Ｃ、Ｔ３６６Ｓ、Ｌ３６８Ａ、Ｙ４０７Ｖ突然変異を含む（鎖間ジスルフィド架橋を形成する１つのＣＨ３ドメインにおける追加のアミノ酸Ｓ３５４Ｃ突然変異及び他のＣＨ３ドメインにおける追加のアミノ酸Ｙ３４９Ｃ突然変異）（Ｋａｂａｔに従ったナンバリング）。
【０４８０】
ヘテロ二量体化を実施するＣＨ３修飾のための他の技術が、本発明の代替物として検討されており、例えば、ＷＯ  ９６／２７０１１、ＷＯ  ９８／０５０４３１、ＥＰ  １８７０４５９、ＷＯ  ２００７／１１０２０５、ＷＯ  ２００７／１４７９０１、ＷＯ  ２００９／０８９００４、ＷＯ  ２０１０／１２９３０４、ＷＯ  ２０１１／９０７５４、ＷＯ  ２０１１／１４３５４５、ＷＯ  ２０１２／０５８７６８、ＷＯ  ２０１３／１５７９５４、ＷＯ  ２０１３／０９６２９１に記載されている。
【０４８１】
一実施態様において、ＥＰ  １  ８７０  ４５９Ａ１に記載されるヘテロ二量体化アプローチを代わりに使用することができる。このアプローチは、両方の重鎖間でのＣＨ３／ＣＨ３ドメインインターフェイスにおける特定のアミノ酸位置での反対電荷を伴う荷電アミノ酸の置換／突然変異の導入に基づいている。前記多重特異性抗体のための好ましい一実施態様は、（多重特異性抗体の）第１のＣＨ３ドメインにおけるアミノ酸Ｒ４０９Ｄ；Ｋ３７０Ｅ突然変異及び多重特異性抗体の第２のＣＨ３ドメインにおけるアミノ酸Ｄ３９９Ｋ；Ｅ３５７Ｋ突然変異である（Ｋａｂａｔに従ったナンバリング）。
【０４８２】
別の実施態様において、前記多重特異性抗体は、「ノブ鎖」のＣＨ３ドメインにおいてアミノ酸Ｔ３６６Ｗ突然変異及び「ホール鎖」のＣＨ３ドメインにおいてアミノ酸Ｔ３６６Ｓ、Ｌ３６８Ａ、Ｙ４０７Ｖ突然変異、ならびに、追加的に、「ノブ鎖」のＣＨ３ドメインにおいてアミノ酸Ｒ４０９Ｄ；Ｋ３７０Ｅ突然変異及び「ホール鎖」のＣＨ３ドメインにおいてアミノ酸Ｄ３９９Ｋ；Ｅ３５７Ｋ突然変異を含む。
【０４８３】
別の実施態様において、前記多重特異性抗体は、２つのＣＨ３ドメインの１つにおいてアミノ酸Ｓ３５４Ｃ、Ｔ３６６Ｗ突然変異及び２つのＣＨ３ドメインの他においてアミノ酸Ｙ３４９Ｃ、Ｔ３６６Ｓ、Ｌ３６８Ａ、Ｙ４０７Ｖ突然変異を含み、又は、前記多重特異性抗体は、２つのＣＨ３ドメインの１つにおいてアミノ酸Ｙ３４９Ｃ、Ｔ３６６Ｗ突然変異及び２つのＣＨ３ドメインの他においてアミノ酸Ｓ３５４Ｃ、Ｔ３６６Ｓ、Ｌ３６８Ａ、Ｙ４０７Ｖ突然変異、ならびに、追加的に、「ノブ鎖」のＣＨ３ドメインにおいてアミノ酸Ｒ４０９Ｄ；Ｋ３７０Ｅ突然変異及び「ホール鎖」のＣＨ３ドメインにおいてアミノ酸Ｄ３９９Ｋ；Ｅ３５７Ｋ突然変異を含む。
【０４８４】
一実施態様において、ＷＯ２０１３／１５７９５３に記載されるヘテロ二量体化アプローチを代わりに使用することができる。一実施態様において、第１のＣＨ３ドメインはアミノ酸Ｔ３６６Ｋ突然変異を含み、第２のＣＨ３ドメインポリペプチドはアミノ酸Ｌ３５１Ｄ突然変異を含む。さらなる実施態様において、第１のＣＨ３ドメインは、さらに、アミノ酸Ｌ３５１Ｋ突然変異を含む。さらなる実施態様において、第２のＣＨ３ドメインは、Ｙ３４９Ｅ、Ｙ３４９Ｄ、及びＬ３６８Ｅ（好ましくは、Ｌ３６８Ｅ）から選択されるさらなるアミノ酸突然変異を含む。
【０４８５】
一実施態様において、ＷＯ２０１２／０５８７６８に記載されるヘテロ二量体化アプローチを代わりに使用することができる。一実施態様において、第１のＣＨ３ドメインはアミノ酸Ｌ３５１Ｙ、Ｙ４０７Ａ突然変異を含み、第２のＣＨ３ドメインはアミノ酸Ｔ３６６Ａ、Ｋ４０９Ｆの突然変異を含む。さらなる実施態様において、第２のＣＨ３ドメインは、位置Ｔ４１１、Ｄ３９９、Ｓ４００、Ｆ４０５、Ｎ３９０、又はＫ３９２で、例えば、ａ）Ｔ４１１  Ｎ、Ｔ４１１  Ｒ、Ｔ４１１Ｑ、Ｔ４１１  Ｋ、Ｔ４１１Ｄ、Ｔ４１１Ｅ、又はＴ４１１Ｗ、ｂ）Ｄ３９９Ｒ、Ｄ３９９Ｗ、Ｄ３９９Ｙ、又はＤ３９９Ｋ、ｃ）Ｓ４００Ｅ、Ｓ４００Ｄ、Ｓ４００Ｒ、又はＳ４００Ｋ、Ｆ４０５Ｉ、Ｆ４０５Ｍ、Ｆ４０５Ｔ、Ｆ４０５Ｓ、Ｆ４０５Ｖ又はＦ４０５Ｗ  Ｎ３９０Ｒ、Ｎ３９０Ｋ又はＮ３９０Ｄ、Ｋ３９２Ｖ、Ｋ３９２Ｍ、Ｋ３９２Ｒ、Ｋ３９２Ｌ、Ｋ３９２Ｆ又はＫ３９２Ｅから選択される、さらなるアミノ酸突然変異を含む。さらなる実施態様において、第１のＣＨ３ドメインはアミノ酸Ｌ３５１Ｙ、Ｙ４０７Ａ突然変異を含み、第２のＣＨ３ドメインはアミノ酸Ｔ３６６Ｖ、Ｋ４０９Ｆ突然変異を含む。さらなる実施態様において、第１のＣＨ３ドメインはアミノ酸Ｙ４０７Ａ突然変異を含み、第２のＣＨ３ドメインはアミノ酸Ｔ３６６Ａ、Ｋ４０９Ｆ突然変異を含む。さらなる実施態様において、第２のＣＨ３ドメインは、さらなるアミノ酸Ｋ３９２Ｅ、Ｔ４１１Ｅ、Ｄ３９９Ｒ、及びＳ４００Ｒ突然変異を含む。
【０４８６】
一実施態様において、ＷＯ２０１１／１４３５４５に記載されるヘテロ二量体化アプローチを代わりに使用することができる（例えば、３６８及び４０９からなる群より選択される位置でアミノ酸修飾を伴う）。
【０４８７】
一実施態様において、上記のようなノブインツーホール技術も用いるＷＯ２０１１／０９０７６２に記載されるヘテロ二量体化アプローチを代わりに使用することができる。一実施態様において、第１のＣＨ３ドメインはアミノ酸Ｔ３６６Ｗ突然変異を含み、第２のＣＨ３ドメインはアミノ酸Ｙ４０７Ａ突然変異を含む。一実施態様において、第１のＣＨ３ドメインはアミノ酸Ｔ３６６Ｙ突然変異を含み、第２のＣＨ３ドメインはアミノ酸Ｙ４０７Ｔ突然変異を含む。
【０４８８】
一実施態様において、多重特異性抗体はＩｇＧ２アイソタイプであり、ＷＯ２０１０／１２９３０４に記載されるヘテロ二量体化アプローチを代わりに使用することができる。
【０４８９】
一実施態様において、ＷＯ２００９／０８９００４に記載されるヘテロ二量体化アプローチを代わりに使用することができる。一実施態様において、第１のＣＨ３ドメインは、負電荷アミノ酸（例えば、グルタミン酸（Ｅ）、又はアスパラギン酸（Ｄ）、好ましくはＫ３９２Ｄ又はＮ３９２Ｄ）での、Ｋ３９２又はＮ３９２のアミノ酸置換を含み、第２のＣＨ３ドメインは、正電荷アミノ酸（例えば、リジン（Ｋ）又はアルギニン（Ｒ）、好ましくＤ３９９Ｋ、Ｅ３５６Ｋ、Ｄ３５６Ｋ、又はＥ３５７Ｋ、より好ましくはＤ３９９Ｋ及びＥ３５６Ｋ）での、Ｄ３９９、Ｅ３５６、Ｄ３５６、又はＥ３５７のアミノ酸置換を含む。さらなる実施態様において、第１のＣＨ３ドメインは、さらに、負電荷アミノ酸（例えば、グルタミン酸（Ｅ）又はアスパラギン酸（Ｄ）、好ましくはＫ４０９Ｄ又はＲ４０９Ｄ）での、Ｋ４０９又はＲ４０９のアミノ酸置換を含む。さらなる実施態様において、第１のＣＨ３ドメインは、さらに、又は、代わりに、負電荷アミノ酸（例えば、グルタミン酸（Ｅ）又はアスパラギン酸（Ｄ））での、Ｋ４３９及び／又はＫ３７０のアミノ酸置換を含む。
【０４９０】
一実施態様において、ＷＯ２００７／１４７９０１に記載されるヘテロ二量体化アプローチを代わりに使用することができる。一実施態様において、第１のＣＨ３ドメインはアミノ酸Ｋ２５３Ｅ、Ｄ２８２Ｋ、及びＫ３２２Ｄ突然変異を含み、第２のＣＨ３ドメインはアミノ酸Ｄ２３９Ｋ、Ｅ２４０Ｋ、及びＫ２９２Ｄ突然変異を含む。
【０４９１】
一実施態様において、ＷＯ２００７／１１０２０５に記載されるヘテロ二量体化アプローチを代わりに使用することができる。
【０４９２】
Ｄ．組換え方法及び組成物
抗体は、例えば、ＵＳ  ４，８１６，５６７に記載される組換え方法及び組成物を使用して産生することができる。一実施態様において、本明細書に記載する抗ＩＧＦ−１Ｒ抗体をコードする単離核酸が提供される。そのような核酸は、抗体のＶＬを含むアミノ酸配列及び／又はＶＨを含むアミノ酸配列（例えば、抗体の軽鎖及び／又は重鎖）をコードしうる。さらなる実施態様において、そのような核酸を含む、１つ又は複数のプラスミド（例えば、発現プラスミド）が提供される。さらなる実施態様において、そのような核酸を含む宿主細胞が提供される。そのような一実施態様において、宿主細胞は、以下を含む（例えば、以下で形質転換されている）：（１）抗体のＶＬを含むアミノ酸配列及び抗体のＶＨを含むアミノ酸配列をコードする核酸を含むプラスミド、又は（２）抗体のＶＬを含むアミノ酸配列をコードする核酸を含む第１のプラスミド及び抗体のＶＨを含むアミノ酸配列をコードする核酸を含む第２のプラスミド。一実施態様において、宿主細胞は、真核生物、例えば、チャイニーズハムスター卵巣（ＣＨＯ）細胞又はリンパ系細胞（例えば、Ｙ０、ＮＳ０、Ｓｐ２０細胞）である。一実施態様において、抗ＩＧＦ−１Ｒ抗体を作る方法が提供され、ここで、方法は、上に提供する抗体をコードする核酸を含む宿主細胞を、抗体の発現のために適切な条件下で培養すること、及び、場合により、宿主細胞（又は宿主細胞培養培地）から抗体を回収することを含む。
【０４９３】
抗ＩＧＦ−１Ｒ抗体の組換え産生のために、抗体をコードする核酸（例えば、上に記載する通り）を単離し、宿主細胞におけるさらなるクローニング及び／又は発現のために、１つ又は複数のプラスミド中に挿入する。そのような核酸は、従来の手順（例えば、抗体の重鎖及び軽鎖をコードする遺伝子に特異的に結合することが可能であるオリゴヌクレオチドプローブを使用することによる）を使用して容易に単離及び配列決定される。
【０４９４】
抗体をコードするプラスミドのクローニング又は発現のために適切な宿主細胞は、本明細書において記載する原核細胞又は真核細胞を含む。例えば、抗体は、特に、グリコシル化及びＦｃエフェクター機能が必要とされない場合、細菌中で産生されうる。細菌における抗体断片及びポリペプチドの発現については、例えば、ＵＳ  ５，６４８，２３７、ＵＳ  ５，７８９，１９９、及びＵＳ  ５，８４０，５２３を参照のこと（また、E.coliにおける抗体断片の発現を記載する、Charlton, K.A., In: Methods in Molecular Biology, Vol. 248, Lo, B.K.C. (ed.), Humana Press, Totowa, NJ (2003), pp. 245-254を参考のこと）。発現後、抗体は、可溶性画分中の細菌細胞ペーストから単離してもよく、さらに精製することができる。
【０４９５】
原核生物に加えて、真核微生物（例えば糸状菌又は酵母菌など）が、抗体をコードするプラスミドのために適切なクローニング又は発現宿主であり、グリコシル化経路が「ヒト化」されている真菌株及び酵母菌株を含み、部分的又は完全ヒトグリコシル化パターンを伴う抗体の産生をもたらす。Gerngross, T.U., Nat. Biotech. 22 (2004) 1409-1414；及びLi, H. et al., Nat. Biotech. 24 (2006) 210-215を参照のこと。
【０４９６】
グリコシル化抗体の発現のための適切な宿主細胞は、また、多細胞生物（無脊椎動物及び脊椎動物）に由来する。無脊椎動物細胞の例は、植物及び昆虫の細胞を含む。特にスポドプテラフルギペルダ（Ｓｐｏｄｏｐｔｅｒａ  ｆｒｕｇｉｐｅｒｄａ）細胞のトランスフェクションのために、昆虫細胞と併せて使用されうる多数のバキュロウイルス株が同定されている。
【０４９７】
植物細胞培養物も宿主として利用することができる。例えば、ＵＳ  ５，９５９，１７７、ＵＳ  ６，０４０，４９８、ＵＳ  ６，４２０，５４８、ＵＳ  ７，１２５，９７８、及びＵＳ  ６，４１７，４２９を参照のこと（トランスジェニック植物において抗体を産生するためのPLANTIBODIES（商標）技術が記載されている）。
【０４９８】
脊椎動物細胞も宿主として使用してもよい。例えば、懸濁液中で成長するように適合されている哺乳動物細胞株が有用でありうる。有用な哺乳動物宿主細胞株の他の例は、ＳＶ４０により形質転換されたサル腎臓ＣＶ１株（ＣＯＳ−７）；ヒト胚腎臓株（例えばGraham, F.L., et al., J. Gen Virol. 36 (1977) 59-74に記載される通りの、ＨＥＫ２９３又は２９３細胞）；ベビーハムスター腎臓細胞（ＢＨＫ）；マウスセルトリ細胞（例えばMather, J.P., Biol. Reprod. 23 (1980) 243-252に記載される通りの、ＴＭ４細胞）；サル腎臓細胞（ＣＶ１）；アフリカミドリザル腎臓細胞（ＶＥＲＯ−７６）；ヒト子宮頸癌細胞（ＨＥＬＡ）；イヌ腎臓細胞（ＭＤＣＫ）；バッファローラット肝臓細胞（ＢＲＬ  ３Ａ）；ヒト肺細胞（Ｗ１３８）；ヒト肝細胞（Ｈｅｐ  Ｇ２）；マウス乳癌（ＭＭＴ  ０６０５６２）；ＴＲＩ細胞（例えば、Mather, J.P., et al., Annals N.Y. Acad. Sci. 383 (1982) 44-68に記載されている通り）；ＭＲＣ５細胞；及びＦＳ４細胞である。他の有用な哺乳動物宿主細胞株は、チャイニーズハムスター卵巣（ＣＨＯ）細胞（ＤＨＦＲ−ＣＨＯ細胞を含む）（Urlaub, G., et al., Proc. Natl. Acad. Sci. USA 77 (1980) 4216-4220）；及び骨髄腫細胞株（例えばＹ０、ＮＳ０、及びＳＰ２／０など）を含む。抗体産生のために適切な特定の哺乳動物宿主細胞株の概説については、例えば、Yazaki, P. and Wu, A.M., Methods in Molecular Biology, Vol. 248, Lo, B.K.C. (ed.), Humana Press, Totowa, NJ (2004), pp. 255-268を参照のこと。
【０４９９】
Ｅ．アッセイ
本明細書において提供する抗ＩＧＦ−１Ｒ抗体を、当技術分野において公知の種々のアッセイにより、それらの物理的／化学的特性及び／又は生物学的活性について同定し、スクリーニングし、又は、特徴付けしてもよい。
【０５００】
一態様において、本発明の抗体は、例えば、公知の方法（例えばＥＬＩＳＡ、ウエスタンブロットなど）により、その抗原結合活性についてテストする。
【０５０１】
一態様において、生物学的活性を有するその抗ＩＧＦ−１Ｒ抗体を同定するためのアッセイが提供される。
【０５０２】
Ｆ．組み合わせ処置
特定の実施態様において、本発明に従った抗ＩＧＦ−１Ｒ抗体又は医薬的組成物を、本明細書において記載する１つ又は複数の血管性眼疾患の処置のために、単独で（追加の治療的薬剤を伴わない）投与する。
【０５０３】
他の実施態様において、本発明に従った抗ＩＧＦ−１Ｒ抗体又は医薬的組成物を、本明細書において記載する１つ又は複数の血管性眼疾患の処置のために、１つ又は複数の追加の治療的薬剤又は方法との組み合わせにおいて投与する。
【０５０４】
他の実施態様において、本発明に従った抗ＩＧＦ−１Ｒ抗体又は医薬的組成物を、１つ又は複数の追加の治療的薬剤との組み合わせにおいて製剤化し、本明細書において記載する１つ又は複数の血管性眼疾患の処置のために投与する。
【０５０５】
特定の実施態様において、本明細書において提供する組み合わせ処置は、本発明に従った抗ＩＧＦ−１Ｒ抗体又は医薬的組成物を、本明細書において記載する１つ又は複数の血管性眼疾患の処置のために、１つ又は複数の追加の治療的薬剤と順次投与することを含む。
【０５０６】
追加の治療的薬剤は、トリプトファニルｔＲＮＡ合成酵素（ＴｒｐＲＳ）、ＥｙｅＯＯｌ（抗ＶＥＧＦペグ化アプタマー）、スクアラミン、RETAANE（商標）（デポ懸濁液用の酢酸アネコルタブ；Alcon, Inc.）、コンブレタスタチンＡ４プロドラッグ（ＣＡ４Ｐ）、MACUGEN（商標）、MIFEPREX（商標）（ミフェプリストン−ｒｕ４８６）、サブテノントリアムシノロンアセトニド、硝子体内結晶トリアムシノロンアセトニド、プリノマスタット（ＡＧ３３４０合成マトリックスメタロプロテアーゼ阻害剤、Pfizer）、フルオシノロンアセトニド（フルオシノロン眼内インプラントを含む、Bausch & Lomb/Control Delivery Systems）、ＶＥＧＦＲ阻害剤（Sugen）、ＶＥＧＦ−Ｔｒａｐ（Regeneron/Aventis）、ＶＥＧＦ受容体チロシンキナーゼ阻害剤、例えば４−（４−ブロモ−２−フルオロアニリノ）−６−メトキシ−７−（ｌ−メチルピペリジン−４−イルメトキシ）キナゾリン（ＺＤ６４７４）、４−（４−フルオロ−２−メチルインドール−５−イルオキシ）−６−メトキシ−７−（３−ピロリジン−１−イルプロポキシ）キナゾリン（ＡＺＤ２１７１）、バタラニブ（ＰＴＫ７８７）、及びＳＵ１１２４８（スニチニブ）、リノマイド、ならびにインテグリンｖ．ベータ．３機能及びアンギオスタチンの阻害剤を含むが、これらに限定されない。
【０５０７】
本発明に従った抗ＩＧＦ−１Ｒ抗体又は医薬的組成物との組み合わせにおいて使用することができる他の医薬的治療は、非熱レーザーを使用したVISUDYNE（商標）、ＰＫＣ４１２、Endovion（NeuroSearch A/S）、神経栄養因子（例として、グリア由来の神経栄養因子及び毛様体神経栄養因子を含む）、ジアタゼム、ドルゾラミド、フォトトロプ、９−シス−レチナール、目薬（エコー治療を含む）（ヨウ化ホスホリン又はエコチオフェート又は炭酸脱水酵素阻害剤を含む）、ＡＥ−９４１（AEterna Laboratories, Inc.）、Ｓｉｒｎａ−０２７（Sima Therapeutics, Inc.）、ペガプタニブ（NeXstar Pharmaceuticals/Gilead Sciences）、ニューロトロフィン（例として、ＮＴ−４／５、ジェネンテックを含む）、Ｃａｎｄ５（Acuity Pharmaceuticals）、ＩＮＳ−３７２１７（Inspire Pharmaceuticals）、インテグリンアンタゴニスト（Jerini AG及びAbbott Laboratoriesからのものを含む）、ＥＧ−３３０６（Ark Therapeutics Ltd.）、ＢＤＭ−Ｅ（BioDiem Ltd.）、サリドマイド（例えば、EntreMed, Inc.により使用される通り）、カルジオトロフィン１（Genentech）、２−メトキシエストラジオール（Allergan/Oculex）、ＤＬ−８２３４（Toray Industries）、ＮＴＣ−２００（Neurotech）、テトラチオモリブデート（ミシガン大学）、ＬＹＮ−００２（Lynkeus Biotech）、微細藻類化合物（Aquasearch/Albany, Mera Pharmaceuticals）、Ｄ−９１２０（Celltech Group pic）、ＡＴＸ−Ｓ１０（Hamamatsu Photonics）、ＴＧＦ−ベータ２（Genzyme/Celtrix）、チロシンキナーゼ阻害剤（Allergan, SUGEN, Pfizer）、ＮＸ−２７８−Ｌ（NeXstar Pharmaceuticals/Gilead Sciences）、Ｏｐｔ−２４（OPTIS France SA）、網膜細胞神経節神経保護剤（Cogent Neurosciences）、Ｎ−ニトロピラゾール誘導体（Texas A&M University System）、ＫＰ−１０２（Krenitsky Pharmaceuticals）、シクロスポリンＡ、Ｔｉｍｉｔｅｄ網膜転座、光線力学治療（例として、受容体を標的とするＰＤＴ、Bristol-Myers Squibb, Co.；ＰＤＴを用いた注射用のポルフィマーナトリウム；ベルテポルフィン、QLT Inc.；ＰＤＴを伴うロスタポルフィン、Miravent Medical Technologies；ＰＤＴを伴うタラポルフィンナトリウム、Nippon Petroleum；モテキサフィンルテチウム、Pharmacyclics, Inc.）、アンチセンスオリゴヌクレオチド（例として、Novagali Pharma SA及びISIS-13650、Isis Pharmaceuticalsによりテストされた産物を含む）、レーザー光凝固、ドルーゼンレーザー加工、黄斑円孔手術、黄斑転座手術、移植可能ミニチュアテレスコープ、ファイモーション血管造影（また、マイクロレーザー治療及びフィーダーベッセル処置として公知である）、陽子線治療、微小刺激治療、網膜剥離及び硝子体手術、強膜バックル、黄斑下手術、経瞳孔温熱治療、光化学系Ｉ治療、ＲＮＡ干渉（ＲＮＡｉ）の使用、体外レオフェレシス（また、膜差濾過及びＲｈｅｏｔｈｅｒａｐｙとして公知である）、マイクロチップ移植、幹細胞治療、遺伝子置換治療、リボザイム遺伝子治療（低酸素応答エレメント用の遺伝子治療を含む、Oxford Biomedica;Lentipak, Genetix；ＰＤＥＦ遺伝子治療、GenVec）、光受容体／網膜細胞移植（移植可能な網膜上皮細胞、Diacrin, Inc.；網膜細胞移植、Cell Genesys, Inc.を含む）、及び鍼を含むが、これらに限定されない。
【０５０８】
任意の抗血管形成薬剤を、本発明に従った抗ＩＧＦ−１Ｒ抗体又は医薬的組成物との組み合わせにおいて使用することができる（Carmeliet and Jain, 2000, Nature 407: 249-257により列挙されるものを含むが、これに限定されない）。特定の実施態様において、抗血管形成薬剤は、別のＶＥＧＦアンタゴニスト又はＶＥＧＦ受容体アンタゴニスト、例えばＶＥＧＦ突然変異体、可溶性ＶＥＧＦ受容体フラグメント、ＶＥＧＦ又はＶＥＧＦＲを遮断することが可能であるアプタマー、中和抗ＶＥＧＦＲ抗体、ＶＥＧＦＲチロシンキナーゼの低分子量阻害剤、及びそれらの任意の組み合わせなどであり、これらは、抗ＶＥＧＦアプタマー（例えば、ペガプタニブ）、可溶性組換えデコイ受容体（例えば、ＶＥＧＦトラップ）を含む。特定の実施態様において、抗血管形成薬剤は、コルチコステロイド、血管形成抑制ステロイド、酢酸アネコルタブ、アンジオスタチン、エンドスタチン、ＶＥＧＦＲ又はＶＥＧＦリガンドの発現を減少させる低分子干渉ＲＮＡ、チロシンキナーゼ阻害剤を用いたＶＥＧＦＲ後の遮断、ＭＭＰ阻害剤、ＩＧＦＢＰ３、ＳＤＦ−１遮断薬、ＰＥＤＦ、ガンマ−セクレターゼ、デルタ様リガンド４、インテグリンアンタゴニスト、ＨＩＦ−１アルファ遮断、プロテインキナーゼＣＫ２遮断、及び血管内皮カドヘリン（ＣＤ−１４４）及び間質由来因子（ＳＤＦ）−Ｉ抗体を使用した血管新生部位への幹細胞（即ち、内皮前駆細胞）ホーミングの阻害を含む。ＶＥＧＦ受容体（ＰＴＫ７８７を含む）を標的とする小分子ＲＴＫ阻害剤を使用することもできる。必ずしも抗ＶＥＧＦ化合物ではない血管新生に対して活性を有する薬剤も使用することができ、抗炎症薬物、ｍ−Ｔｏｒ阻害剤、ラパマイシン、エベロリムス、テムシロリムス、シクロスポリン、抗ＴＮＦ薬剤、抗補体薬剤、及び非ステロイド性抗炎症薬剤を含むことができる。神経保護的であり、乾燥型黄斑変性の進行を潜在的に低下させることができる薬剤も使用することができる（例えば「神経ステロイド」と呼ばれる薬物のクラスなど）。これらは、薬物、例えばデヒドロエピアンドロステロン（ＤＨＥＡ）（ブランド名：Prastera（登録商標）及びFidelin（登録商標））、デヒドロエピアンドロステロン硫酸、及びプレグネノロン硫酸などを含む。任意のＡＭＤ（加齢性黄斑変性症）治療用薬剤は、本発明に従った二重特異性抗体又は医薬的組成物との組み合わせにおいて使用することができ、ＰＤＴとの組み合わせにおけるベルテポルフィン、ペガプタニブナトリウム、亜鉛、又は酸化防止剤（単独で又は任意の組み合わせにおいて）を含むが、これらに限定されない。
【０５０９】
Ｇ．医薬製剤
本明細書に記載する抗ＩＧＦ−１Ｒ抗体の医薬製剤は、所望の程度の純度を有するそのような抗体を、１つ又は複数の任意の医薬的に許容可能な担体（Remington's Pharmaceutical Sciences, 16th edition, Osol, A. (ed.) (1980)）と混合することにより、凍結乾燥製剤又は水溶液の形態で調製される。医薬的に許容可能な担体は、一般的に、用いられる投与量及び濃度でレシピエントに非毒性であり、緩衝剤、例えばリン酸塩、クエン酸塩、及び他の有機酸など；抗酸化剤（アスコルビン酸及びメチオニンを含む）；保存剤（例えばオクタデシルジメチルベンジルアンモニウムクロリド；塩化ヘキサメトニウム；塩化ベンザルコニウム；塩化ベンゼトニウム；フェノール、ブチル又はベンジルアルコール；アルキルパラベン、例えばメチル又はプロピルパラベン；カテコール；レゾルシノール；シクロヘキサノール；３−ペンタノール；及びｍ−クレゾールなど）；低分子量（約１０残基未満）ポリペプチド；タンパク質、例えば血清アルブミン、ゼラチン、又は免疫グロブリンなど；親水性ポリマー、例えばポリ（ビニルピロリドン）など；アミノ酸、例えばグリシン、グルタミン、アスパラギン、ヒスチジン、アルギニン、又はリジンなど；単糖類、二糖類、及び他の糖質（グルコース、マンノース、又はデキストリンを含む）；キレート剤（例えばＥＤＴＡなど）；糖（例えばスクロース、マンニトール、トレハロース、又はソルビトールなど）；塩形成対イオン（例えばナトリウムなど）；金属複合体（例えば、Ｚｎタンパク質複合体）；及び／又は非イオン性界面活性剤（例えばポリエチレングリコール（ＰＥＧ）など）を含むが、これらに限定されない。例示的な、医薬的に許容可能な担体は、本明細書において、さらに、侵入型薬物分散剤、例えば可溶性の中性活性ヒアルロニダーゼ糖タンパク質（ｓＨＡＳＥＧＰ）、例えば、ヒト可溶性ＰＨ−２０ヒアルロニダーゼ糖タンパク質、例えばｒｈｕＰＨ２０（HYLENEX（登録商標）、Baxter International, Inc.）などを含む。特定の例示的なｓＨＡＳＥＧＰ及び使用方法（ｒｈｕＰＨ２０を含む）が、ＵＳ  ２００５／０２６０１８６及びＵＳ  ２００６／０１０４９６８に記載されている。一態様において、ｓＨＡＳＥＧＰは、１つ又は複数の追加のグリコサミノグリカナーゼ（例えばコンドロイチナーゼなど）と組み合わせる。
【０５１０】
例示的な、凍結乾燥された抗体製剤は、ＵＳ  ６，２６７，９５８に記載されている。水性抗体製剤は、ＵＳ  ６，１７１，５８６及びＷＯ  ２００６／０４４９０８に記載されている製剤を含み、後者の製剤はヒスチジン−酢酸緩衝剤を含む。
【０５１１】
本明細書における製剤は、また、処置されている特定の適応症のために必要な１を上回る活性化合物、好ましくは互いに悪影響を与えない相補的な活性を伴うものを含みうる。
【０５１２】
活性成分は、例えば、コアセルベーション技術により、又は、界面重合により調製されたマイクロカプセル中に封入してもよい、（例えば、コロイド薬物送達系（例えば、リポソーム、アルブミンマイクロスフェア、マイクロエマルジョン、ナノ粒子、及びナノカプセル）中又はマクロエマルジョン中の、それぞれヒドロキシメチルセルロース又はゼラチン−マイクロカプセル及びポリ−（メチルメタクリレート（ｍｅｔｈｙｌｍｅｔｈａｃｙｌａｔｅ））マイクロカプセル）。そのような技術は、Remington's Pharmaceutical Sciences, 16th edition, Osol, A. (ed.) (1980)に開示されている。
【０５１３】
持続放出調製物を調製してもよい。持続放出調製物の適切な例は、抗体を含む固体疎水性ポリマーの半透性マトリクスを含み、そのマトリクスは成形品の形態（例えば、フィルム、又はマイクロカプセル）である。
【０５１４】
インビボ投与のために使用される製剤は、一般的に、無菌である。無菌状態は、例えば、滅菌濾過膜を通じた濾過により容易に達成されうる。
【０５１５】
Ｈ．治療方法及び組成物
本明細書において提供する抗ＩＧＦ−１Ｒ抗体のいずれかを、治療方法において使用してもよい。
【０５１６】
一態様において、医薬としての使用のための抗ＩＧＦ−１Ｒ抗体を提供する。さらなる態様において、血管性眼疾患を処置する際での使用のための抗ＩＧＦ−１Ｒ抗体を提供する。特定の実施態様において、処置の方法における使用のための抗ＩＧＦ−１Ｒ抗体を提供する。特定の実施態様において、本発明は、抗ＩＧＦ−１Ｒ抗体の効果的な量を個体に投与することを含む、血管性眼疾患を有する個体を処置する方法における使用のための抗ＩＧＦ−１Ｒ抗体を提供する。１つのそのような実施態様において、方法は、少なくとも１つの追加の治療薬剤（例えば、セクションＤにおいて上に記載する通り）の効果的な量を個体に投与することをさらに含む。さらなる実施態様において、本発明は、眼においてＩＧＦ−１Ｒを阻害する際での使用のための抗ＩＧＦ−１Ｒ抗体を提供する。特定の実施態様において、本発明は、ＩＧＦ−１Ｒシグナル伝達を阻害するための効果的な抗ＩＧＦ−１Ｒ抗体を個体に投与することを含む、個体において血管新生を阻害する方法における使用のための抗ＩＧＦ−１Ｒ抗体を提供する。上の実施態様のいずれかに従った「個体」は、１つの好ましい実施態様において、ヒトである。
【０５１７】
さらなる態様において、本発明は、医薬の製造又は調製における抗ＩＧＦ−１Ｒ抗体の使用を提供する。一実施態様において、医薬は、血管性眼疾患の処置のためである。さらなる実施態様において、医薬は、医薬の効果的な量を、血管性眼疾患を有する個体に投与することを含む、血管性眼疾患を処置する方法における使用のためである。１つのそのような実施態様において、方法は、少なくとも１つの追加の治療薬剤（例えば、上に記載する通り）の効果的な量を個体に投与することをさらに含む。さらなる実施態様において、医薬は、血管新生を阻害するためである。さらなる実施態様において、医薬は、ＩＧＦ−１Ｒ媒介性シグナル伝達を阻害するために効果的な医薬の量を個体に投与することを含む、個体において血管新生を阻害する方法における使用のためである。上の実施態様のいずれかに従った「個体」は、ヒトでありうる。
【０５１８】
さらなる態様において、本発明は、血管性眼疾患を処置するための方法を提供する。一実施態様において、方法は、抗ＩＧＦ−１Ｒ抗体の効果的な量を、そのような血管性眼疾患を有する個体に投与することを含む。１つのそのような実施態様において、方法は、少なくとも１つの追加の治療薬剤（例えば、下に記載する通り）の効果的な量を個体に投与することをさらに含む。上の実施態様のいずれかに従った「個体」は、ヒトでありうる。
【０５１９】
さらなる態様において、本発明は、個体において眼における血管新生を阻害するための方法を提供する。一実施態様において、方法が、ＩＧＦ−１Ｒ媒介性シグナル伝達を阻害するための、抗ＩＧＦ−１Ｒ抗体の効果的な量を個体に投与することを含む。一実施態様において、「個体」はヒトである。
【０５２０】
さらなる態様において、本発明は、例えば、上の治療方法のいずれかにおける使用のために、本明細書において提供する抗ＩＧＦ−１Ｒ抗体のいずれかを含む医薬製剤を提供する。一実施態様において、医薬製剤は、本明細書に提供される抗ＩＧＦ−１Ｒ抗体のいずれか及び医薬的に許容可能な担体を含む。別の実施態様において、医薬製剤は、本明細書において提供する抗ＩＧＦ−１Ｒ抗体のいずれか及び少なくとも１つの追加の治療薬剤、例えば、以下に記載する通りを含む。
【０５２１】
本発明の抗体は、治療中単独で、又は他の薬剤と組み合わせて使用することができる。例えば、本発明の抗体は、少なくとも１つの追加の治療薬剤と同時投与してもよい。
【０５２２】
本明細書において報告する抗体（及び任意の追加の治療薬剤）は、任意の適切な手段（非経口、肺内、及び鼻腔内、ならびに（局所処置が望ましい場合）病巣内投与を含む）により投与することができる。非経口注入は、筋肉内、静脈内、動脈内、腹腔内、又は皮下投与を含む。投薬は、任意の適切な経路により、例えば、注射（例えば静脈内注射又は皮下注射など）によりうる（投与が短期又は長期であるかに部分的に依存する）。種々の投薬スケジュール（種々の時間点にわたる単一又は複数投与、ボーラス投与、及びパルス注入を含むが、これらに限定されない）が、本明細書において検討される。
【０５２３】
本明細書において報告する抗体は、良好な医療行為と一致する様式において、製剤化、投薬、及び投与されうる。この状況における考慮のための因子は、処置されている特定の障害、処置されている特定の哺乳動物、個々の患者の臨床状態、障害の原因、薬剤の送達部位、投与方法、投与のスケジュール、及び医療従事者に公知の他の因子を含む。抗体は、問題の障害を予防又は処置するために現在使用される１つ又は複数の薬剤を用いて製剤化する必要はないが、しかし、場合により、製剤化される。そのような他の薬剤の効果的な量は、製剤中に存在する抗体の量、障害又は処置の型、及び上で考察する他の因子に依存する。これらは、一般的に、本明細書に記載するのと同じ投与量で、及び投与経路を用いて、又は本明細書に記載する投与量の約１〜９９%で、又は任意の投与量で、及び適当であると経験的／臨床的に決定された任意の経路により使用される。
【０５２４】
疾患の防止予防処置のために、本発明の抗体の適切な投与量（単独で、あるいは、１つ又は複数の他の追加の治療薬剤との組み合わせにおいて使用した場合）は、処置される疾患の型、抗体の型、疾患の重症度及び経過（抗体が予防的又は治療的な目的のために投与されるか否かにかかわらず）、過去の治療、患者の臨床歴及び抗体への応答、ならびに主治医の判断に依存する。抗体は、１回又は一連の処置にわたり患者に適切に投与される。疾患の型及び重症度に依存して、抗体の約１μg/kg〜１５mg/kg（例えば、０．５mg/kg〜１０mg/kg）は、例えば、１つ又は複数の別々の投与による又は連続注入によるかを問わず、患者に投与するための初期候補投与量でありうる。典型的な１日投与量は、上に言及する因子に依存して、約１μg/kg〜１００mg/kg又はそれ以上の範囲でありうる。数日間又はそれより長い反復投与のために、症状に依存し、処置は、一般的に、疾患症状の所望の抑制が生じるまで持続されうる。抗体の１つの例示的な投与量は、約０．０５mg/kgから約１０mg/kgの範囲にありうる。このように、約０．５mg/kg、２．０mg/kg、４．０mg/kg、又は１０mg/kg（又はそれらの任意の組み合わせ）の１つ又は複数の用量を患者に投与してもよい。そのような用量は、間欠的に、例えば、１週間毎又は３週間毎に投与してもよい（例えば、患者が、抗体の約２から約２０、又は、例えば、６用量を受けるようにする）。初回のより高い負荷用量、それに続く、１つ又は複数のより低い用量を投与してもよい。この治療の進行は、従来の技術及びアッセイにより簡単にモニターされる。
【０５２５】
ＩＩＩ．製造品
本発明の別の態様において、上に記載する疾患の処置、予防、及び／又は診断のために有用な材料を含む製造品が提供される。製造品は、容器及び容器上またはそれに添えられるラベル又は添付文書を含む。適切な容器は、例えば、ボトル、バイアル、シリンジ、ＩＶ用溶液バッグなどを含む。容器は、種々の材料（例えばガラス又はプラスチックなど）から形成されうる。容器は、それ自体で、あるいは、症状を治療、予防、及び／又は診断するために効果的な別の組成物と組み合わせた組成物を保持し、無菌アクセスポートを有しうる（例えば、容器は、静脈内溶液バッグ又は皮下注射針により貫通可能なストッパーを有するバイアルでありうる）。組成物中の少なくとも１つの活性薬剤は、本発明の抗体である。ラベル又は添付文書は、組成物を選択の症状を処置するために用いることを示す。さらに、製品文書は（ａ）その中に組成物を含む第１の容器（組成物は、本発明の抗体を含む）；及び（ｂ）その中に組成物を含む第２の容器（組成物は、さらなる細胞傷害性薬剤又は、そうでなければ、治療的薬剤を含む）を含んでよい。本発明の本実施態様における製造品は、組成物が、特定の症状を処置するために使用することができることを示す添付文書をさらに含みうる。あるいは、又は、加えて、製造品は、医薬的に許容可能な緩衝液、例えば注射用の静菌水（ＢＷＦＩ）、リン酸緩衝生理食塩水、リンゲル液、及びデキストロース溶液などを含む第２（又は第３）の容器をさらに含みうる。それは、商業的に、及び使用者の見地から望ましい他の材料（他の緩衝剤、希釈剤、フィルター、針、及びシリンジを含む）をさらに含みうる。
【０５２６】
上の製造品のいずれかが、抗ＩＧＦ−１Ｒ抗体の代わりに、又はそれに加えて、本発明の免疫複合体を含みうることが理解される。
【０５２７】
ＩＶ．具体的な実施態様
１．ヒトＩＧＦ−１Ｒに特異的に結合し、無効になったＦｃＲｎ結合を有する抗ＩＧＦ−１Ｒ抗体。
【０５２８】
２．Ｆｃ領域において突然変異Ｉ２５３Ａ／Ｈ３１０Ａ／Ｈ４３５Ａ又はＨ３１０Ａ／Ｈ４３３Ａ／Ｙ４３６Ａ又はＬ２５１Ｄ／Ｌ３１４Ｄ／Ｌ４３２Ｄ又はこれらの組合せ（Ｋａｂａｔ  ＥＵインデックスナンバリングシステムに従ったナンバリング）を有する抗体と同等又はそれ以下の親和性を伴い、ヒトＦｃＲｎに結合する、実施態様１に従った抗体。
【０５２９】
３．抗ＩＧＦ−１Ｒ抗体が、表面プラズモン共鳴ベースの決定方法を使用して、（残りの）検出可能なＦｃＲｎ結合を有さない、実施態様１〜２のいずれか１つに従った抗体。
【０５３０】
４．抗ＩＧＦ−１Ｒ抗体が、ｐＨ６で１．７μMを上回るＫＤ値を伴い、ヒトＦｃＲｎに結合する、実施態様１〜３のいずれか１つに従った抗体。
【０５３１】
５．抗体が、突然変異Ｉ２５３Ａ／Ｈ３１０Ａ／Ｈ４３５Ａ又はＨ３１０Ａ／Ｈ４３３Ａ／Ｙ４３６Ａ又はＬ２５１Ｄ／Ｌ３１４Ｄ／Ｌ４３２Ｄ又はそれらの組み合わせ（Ｋａｂａｔ  ＥＵインデックスナンバリングシステムに従ったナンバリング）を伴うＦｃ領域を含む抗体と同じ、又はそれより短いＦｃＲｎ親和性クロマトグラフィーカラム上での保持時間を有する、実施態様１〜４のいずれか１つに従った抗体。
【０５３２】
６．抗体が、３分又はそれ以下の、ＦｃＲｎ親和性クロマトグラフィーカラム上での保持時間を有する、実施態様１〜５のいずれか１つに従った抗体。
【０５３３】
７．ＦｃＲｎ親和性カラムが、５０mm×５mmのカラム寸法を有し、ベッドの高さが５cmで、充填物が５０μg抗体である、実施態様６に従った抗体。
【０５３４】
８．ＦｃＲｎ親和性クロマトグラフィーカラムについて、平衡化緩衝液が、ｐＨ５．５に調整した、１５０mM  ＮａＣｌを伴う２０mM  ＭＥＳであり、溶出緩衝液が、ｐＨ８．８に調整した、１５０mM  ＮａＣｌを伴う２０mM  Ｔｒｉｓ／ＨＣｌであり、溶出が、７．５カラム容積（ＣＶ）の平衡化緩衝液、３０ＣＶで０〜１００%溶出緩衝液、その後１０ＣＶで溶出緩衝液を適用することによる、実施態様６〜７のいずれか１つに従った抗体。
【０５３５】
９．抗ＩＧＦ−１Ｒ抗体が、抗ＩＧＦ−１Ｒ抗体のＣＨ２及び／又はＣＨ３ドメイン中の単一又は複数の点突然変異に起因して、ヒトＦｃＲｎカラムに結合しない、実施態様１〜８のいずれか１つに従った抗体。
【０５３６】
１０．抗ＩＧＦ−１Ｒ抗体が、突然変異Ｌ２５１Ｄ、Ｌ２５１Ｓ、Ｍ２５２Ｔ、Ｉ２５３Ａ、Ｓ２５４Ｗ、Ｓ２５４Ｒ、Ｈ３１０Ａ、Ｈ４３３Ａ、Ｎ４３４Ｌ、Ｈ４３５Ａ、Ｙ４３６Ａ（Ｋａｂａｔ  ＥＵインデックスナンバリングシステムに従ったナンバリング）の少なくとも１つを伴うＦｃ領域を含む抗体とほぼ同じ、又はより少ない親和性を伴い、ヒトＦｃＲｎに結合する、実施態様１〜９のいずれか１つに従った抗体。
【０５３７】
１１．抗ＩＧＦ−１Ｒ抗体が、突然変異Ｉ２５３Ａ／Ｈ３１０Ａ／Ｈ４３５Ａ又はＨ３１０Ａ／Ｈ４３３Ａ／Ｙ４３６Ａ又はＬ２５１Ｄ／Ｌ３１４Ｄ／Ｌ４３２Ｄ又はそれらの組み合わせ（Ｋａｂａｔ  ＥＵインデックスナンバリングシステムに従ったナンバリング）を伴うＦｃ領域を含む抗体とほぼ同じ、又はそれより少ない親和性を伴い、ヒトＦｃＲｎに結合する、実施態様１〜１０のいずれか１つに従った抗体。
【０５３８】
１２．抗ＩＧＦ−１Ｒ抗体が、配列番号０１又は配列番号９６の重鎖アミノ酸配列及び配列番号０３の軽鎖アミノ酸配列を伴う抗体、あるいは配列番号０２又は配列番号９６の重鎖アミノ酸配列及び配列番号０４の軽鎖アミノ酸配列を伴う抗体とほぼ同じ、又はそれより少ない親和性を伴い、ヒトＦｃＲｎに結合する、実施態様１〜１１のいずれか１つに従った抗体。
【０５３９】
１３．抗ＩＧＦ−１Ｒ抗体が、突然変異Ｌ２５１Ｄ、Ｌ２５１Ｓ、Ｍ２５２Ｔ、Ｉ２５３Ａ、Ｓ２５４Ｗ、Ｓ２５４Ｒ、Ｈ３１０Ａ、Ｈ４３３Ａ、Ｎ４３４Ｌ、Ｈ４３５Ａ、Ｙ４３６Ａ（Ｋａｂａｔ  ＥＵインデックスナンバリングシステムに従ったナンバリング）又はこれらの組合せの少なくとも１つを有する、実施態様１〜１２のいずれか１つに従った抗体。
【０５４０】
１４．抗ＩＧＦ−１Ｒ抗体が、第１のＦｃ領域ポリペプチド中に突然変異Ｌ２５１Ｄ、Ｌ２５１Ｓ、Ｍ２５２Ｔ、Ｉ２５３Ａ、Ｓ２５４Ｗ、Ｓ２５４Ｒ、Ｈ３１０Ａ、Ｈ４３３Ａ、Ｎ４３４Ｌ、Ｈ４３５Ａ、Ｙ４３６Ａ（Ｋａｂａｔ  ＥＵインデックスナンバリングシステムに従ったナンバリング）の少なくとも１つ及び第２のＦｃ領域ポリペプチド中に突然変異Ｌ２５１Ｄ、Ｌ２５１Ｓ、Ｍ２５２Ｔ、Ｉ２５３Ａ、Ｓ２５４Ｗ、Ｓ２５４Ｒ、Ｈ３１０Ａ、Ｈ４３３Ａ、Ｎ４３４Ｌ、Ｈ４３５Ａ、Ｙ４３６Ａ（Ｋａｂａｔ  ＥＵインデックスナンバリングシステムに従ったナンバリング）の少なくとも１つを有する、実施態様１〜１３のいずれか１つに従った抗体。
【０５４１】
１５．抗ＩＧＦ−１Ｒ抗体が、第１のＦｃ領域ポリペプチド中に少なくとも突然変異Ｉ２５３Ａ／Ｈ３１０Ａ／Ｈ４３５Ａ又はＨ３１０Ａ／Ｈ４３３Ａ／Ｙ４３６Ａ又はＬ２５１Ｄ／Ｌ３１４Ｄ／Ｌ４３２Ｄ又はこれらの組み合わせ（Ｋａｂａｔ  ＥＵインデックスナンバリングシステムに従ったナンバリング）及び第２のＦｃ領域ポリペプチド中に突然変異Ｌ２５１Ｄ、Ｍ２５２Ｔ、Ｉ２５３Ａ、Ｓ２５４Ｗ、Ｓ２５４Ｒ、Ｈ３１０Ａ、Ｈ４３３Ａ、Ｎ４３４Ｇ、Ｎ４３４Ｌ、Ｈ４３５Ａ、Ｙ４３６Ａ（Ｋａｂａｔ  ＥＵインデックスナンバリングシステムに従ったナンバリング）の少なくとも１つを有する、実施態様１〜１４のいずれか１つに従った抗体。
【０５４２】
１６．抗ＩＧＦ−１Ｒ抗体が、両方のＦｃ領域ポリペプチド中に少なくとも突然変異Ｉ２５３Ａ／Ｈ３１０Ａ／Ｈ４３５Ａ又はＨ３１０Ａ／Ｈ４３３Ａ／Ｙ４３６Ａ又はＬ２５１Ｄ／Ｌ３１４Ｄ／Ｌ４３２Ｄ又はこれらの組合せ（Ｋａｂａｔ  ＥＵインデックスナンバリングシステムに従ったナンバリング）を有する、実施態様１〜１５のいずれか１つに従った抗体。
【０５４３】
１７．実施態様１〜１６のいずれか１つに従った抗体であって、抗ＩＧＦ−１Ｒ抗体が以下を有する：
ａ）配列番号０１のアミノ酸残基３１〜３５（ＨＶＲ−Ｈ１）、アミノ酸残基５０〜６６（ＨＶＲ−Ｈ２）、及びアミノ酸残基９９〜１０７（ＨＶＲ−Ｈ３）をＨＶＲとして含む抗体重鎖、及び
ｂ）配列番号０３のアミノ酸残基２４〜３４（ＨＶＲ−Ｌ１）、アミノ酸残基５０〜５６（ＨＶＲ−Ｌ２）、及びアミノ酸残基８９〜９８（ＨＶＲ−Ｌ３）をＨＶＲとして含む抗体軽鎖。
【０５４４】
１８．実施態様１〜１６のいずれか１つに従った抗体であって、実施態様の抗ＩＧＦ−１Ｒ抗体が以下を有する：
ａ）配列番号０２のアミノ酸残基３１〜３５（ＨＶＲ−Ｈ１）、アミノ酸残基５０〜６６（ＨＶＲ−Ｈ２）、及びアミノ酸残基９９〜１０７（ＨＶＲ−Ｈ３）をＨＶＲとして含む抗体重鎖、
ｂ）配列番号０４のアミノ酸残基２４〜３４（ＨＶＲ−Ｌ１）、アミノ酸残基５０〜５６（ＨＶＲ−Ｌ２）、及びアミノ酸残基８９〜９８（ＨＶＲ−Ｌ３）をＨＶＲとして含む抗体軽鎖。
【０５４５】
１９．実施態様１〜１６のいずれか１つに従った抗体であって、抗ＩＧＦ−１Ｒ抗体が以下を有する：
ａ）配列番号５６のアミノ酸配列（ＨＶＲ−Ｈ１）、配列番号５７のアミノ酸配列（ＨＶＲ−Ｈ２）、及び配列番号５８のアミノ酸配列（ＨＶＲ−Ｈ３）をＨＶＲとして含む抗体重鎖ならびに配列番号５９のアミノ酸配列（ＨＶＲ−Ｌ１）、配列番号６０のアミノ酸配列（ＨＶＲ−Ｌ２）、及び配列番号６１のアミノ酸配列（ＨＶＲ−Ｌ３）をＨＶＲとして含む抗体軽鎖、又は
ｂ）配列番号６４のアミノ酸配列（ＨＶＲ−Ｈ１）、配列番号６５のアミノ酸配列（ＨＶＲ−Ｈ２）、及び配列番号６６のアミノ酸配列（ＨＶＲ−Ｈ３）をＨＶＲとして含む抗体重鎖ならびに配列番号６７のアミノ酸配列（ＨＶＲ−Ｌ１）、配列番号６８のアミノ酸配列（ＨＶＲ−Ｌ２）、及び配列番号６９のアミノ酸配列（ＨＶＲ−Ｌ３）をＨＶＲとして含む抗体軽鎖、又は
ｃ）配列番号７２のアミノ酸配列（ＨＶＲ−Ｈ１）、配列番号７３のアミノ酸配列（ＨＶＲ−Ｈ２）、及び配列番号７４のアミノ酸配列（ＨＶＲ−Ｈ３）をＨＶＲとして含む抗体重鎖ならびに配列番号７５のアミノ酸配列（ＨＶＲ−Ｌ１）、配列番号７６のアミノ酸配列（ＨＶＲ−Ｌ２）、及び配列番号７７のアミノ酸配列（ＨＶＲ−Ｌ３）をＨＶＲとして含む抗体軽鎖、又は
ｄ）配列番号８０のアミノ酸配列（ＨＶＲ−Ｈ１）、配列番号８１のアミノ酸配列（ＨＶＲ−Ｈ２）、及び配列番号８２のアミノ酸配列（ＨＶＲ−Ｈ３）をＨＶＲとして含む抗体重鎖ならびに配列番号８３のアミノ酸配列（ＨＶＲ−Ｌ１）、配列番号８４のアミノ酸配列（ＨＶＲ−Ｌ２）、及び配列番号８５のアミノ酸配列（ＨＶＲ−Ｌ３）をＨＶＲとして含む抗体軽鎖、又は
ｅ）配列番号８８のアミノ酸配列（ＨＶＲ−Ｈ１）、配列番号８９のアミノ酸配列（ＨＶＲ−Ｈ２）、及び配列番号９０のアミノ酸配列（ＨＶＲ−Ｈ３）をＨＶＲとして含む抗体重鎖ならびに配列番号９１のアミノ酸配列（ＨＶＲ−Ｌ１）、配列番号９２のアミノ酸配列（ＨＶＲ−Ｌ２）、及び配列番号９３のアミノ酸配列（ＨＶＲ−Ｌ３）をＨＶＲとして含む抗体軽鎖、又は
ｆ）配列番号０２のアミノ酸残基３１〜３５（ＨＶＲ−Ｈ１）、アミノ酸残基５０〜６６（ＨＶＲ−Ｈ２）、及びアミノ酸残基９９〜１０７（ＨＶＲ−Ｈ３）をＨＶＲとして含む抗体重鎖ならびに配列番号０４のアミノ酸残基２４〜３４（ＨＶＲ−Ｈ１）、アミノ酸残基５０〜５６（ＨＶＲ−Ｈ２）、及びアミノ酸残基８９〜９８（ＨＶＲ−Ｈ３）をＨＶＲとして含む抗体軽鎖、又は
ｇ）配列番号０１のアミノ酸残基３１〜３５（ＨＶＲ−Ｈ１）、アミノ酸残基５０〜６６（ＨＶＲ−Ｈ２）、及びアミノ酸残基９９〜１０７（ＨＶＲ−Ｈ３）をＨＶＲとして含む抗体重鎖ならびに配列番号０３のアミノ酸残基２４〜３４（ＨＶＲ−Ｈ１）、アミノ酸残基５０〜５６（ＨＶＲ−Ｈ２）、及びアミノ酸残基８９〜９８（ＨＶＲ−Ｈ３）をＨＶＲとして含む抗体軽鎖。
【０５４６】
２０．実施態様１〜１９のいずれか１つに従った抗体であって、抗ＩＧＦ−１Ｒ抗体が以下を含む：
ａ）配列番号６２の重鎖可変ドメインＶＨ及び配列番号６３の軽鎖可変ドメインＶＬ、又は
ｂ）配列番号７０の重鎖可変ドメインＶＨ及び配列番号７１の軽鎖可変ドメインＶＬ、又は
ｃ）配列番号７８の重鎖可変ドメインＶＨ及び配列番号７９の軽鎖可変ドメインＶＬ、又は
ｄ）配列番号８６の重鎖可変ドメインＶＨ及び配列番号８７の軽鎖可変ドメインＶＬ、又は
ｅ）配列番号９４の重鎖可変ドメインＶＨ及び配列番号９５の軽鎖可変ドメインＶＬ、又は
ｆ）配列番号０５の重鎖可変ドメインＶＨ及び配列番号０７の軽鎖可変ドメインＶＬ、又は
ｇ）配列番号０６の重鎖可変ドメインＶＨ及び配列番号０８の軽鎖可変ドメイン。
【０５４７】
２１．実施態様１〜２０のいずれか１つに従った抗体であって、抗ＩＧＦ−１Ｒ抗体が以下を有する：
配列番号５６のアミノ酸配列（ＨＶＲ−Ｈ１）、配列番号５７のアミノ酸配列（ＨＶＲ−Ｈ２）、及び配列番号５８のアミノ酸配列（ＨＶＲ−Ｈ３）をＨＶＲとして含む抗体重鎖ならびに配列番号５９のアミノ酸配列（ＨＶＲ−Ｌ１）、配列番号６０のアミノ酸配列（ＨＶＲ−Ｌ２）、及び配列番号６１のアミノ酸配列（ＨＶＲ−Ｌ３）をＨＶＲとして含む抗体軽鎖。
【０５４８】
２２．実施態様１〜２０のいずれか１つに従った抗体であって、抗ＩＧＦ−１Ｒ抗体が以下を有する：
配列番号８０のアミノ酸配列（ＨＶＲ−Ｈ１）、配列番号８１のアミノ酸配列（ＨＶＲ−Ｈ２）、及び配列番号８２のアミノ酸配列（ＨＶＲ−Ｈ３）をＨＶＲとして含む抗体重鎖ならびに配列番号８３のアミノ酸配列（ＨＶＲ−Ｌ１）、配列番号８４のアミノ酸配列（ＨＶＲ−Ｌ２）、及び配列番号８５のアミノ酸配列（ＨＶＲ−Ｌ３）をＨＶＲとして含む抗体軽鎖。
【０５４９】
２３．抗ＩＧＦ−１Ｒ抗体が、配列番号６２の重鎖可変ドメインＶＨ及び配列番号６３の軽鎖可変ドメインＶＬを含む、実施態様１〜２０のいずれか１つに従った抗体。
【０５５０】
２４．抗ＩＧＦ−１Ｒ抗体が、配列番号８６の重鎖可変ドメインＶＨ及び配列番号８７の軽鎖可変ドメインＶＬを含む、実施態様１〜２０のいずれか１つに従った抗体。
【０５５１】
２５．抗ＩＧＦ−１Ｒ抗体が、第１のＦｃ領域ポリペプチド及び第２のＦｃ領域ポリペプチドを含むＦｃ領域を有する、実施態様１〜２４のいずれか１つに従った抗体。
【０５５２】
２６．抗ＩＧＦ−１Ｒ抗体がヘテロ二量体Ｆｃ領域を有する、実施態様２５に従った抗体。
【０５５３】
２７．実施態様１〜２６のいずれか１つに従った抗体であって、
ｉ）第１のＦｃ領域ポリペプチドが、以下：
−  ヒトＩｇＧ１  Ｆｃ領域ポリペプチド、
−  ヒトＩｇＧ２  Ｆｃ領域ポリペプチド、
−  ヒトＩｇＧ３  Ｆｃ領域ポリペプチド、
−  ヒトＩｇＧ４  Ｆｃ領域ポリペプチド、
−  突然変異Ｌ２３４Ａ、Ｌ２３５Ａを伴うヒトＩｇＧ１  Ｆｃ領域ポリペプチド、
−  突然変異Ｙ３４９Ｃ、Ｔ３６６Ｓ、Ｌ３６８Ａ、Ｙ４０７Ｖを伴うヒトＩｇＧ１  Ｆｃ領域ポリペプチド、
−  突然変異Ｓ３５４Ｃ、Ｔ３６６Ｓ、Ｌ３６８Ａ、Ｙ４０７Ｖを伴うヒトＩｇＧ１  Ｆｃ領域ポリペプチド、
−  突然変異Ｌ２３４Ａ、Ｌ２３５Ａ、Ｙ３４９Ｃ、Ｔ３６６Ｓ、Ｌ３６８Ａ、Ｙ４０７Ｖを伴うヒトＩｇＧ１  Ｆｃ領域ポリペプチド、
−  突然変異Ｌ２３４Ａ、Ｌ２３５Ａ、Ｓ３５４Ｃ、Ｔ３６６Ｓ、Ｌ３６８Ａ、Ｙ４０７Ｖを伴うヒトＩｇＧ１  Ｆｃ領域ポリペプチド、
−  突然変異Ｐ３２９Ｇを伴うヒトＩｇＧ１  Ｆｃ領域ポリペプチド、
−  突然変異Ｌ２３４Ａ、Ｌ２３５Ａ、Ｐ３２９Ｇを伴うヒトＩｇＧ１  Ｆｃ領域ポリペプチド、
−  突然変異Ｐ３２９Ｇ、Ｙ３４９Ｃ、Ｔ３６６Ｓ、Ｌ３６８Ａ、Ｙ４０７Ｖを伴うヒトＩｇＧ１  Ｆｃ領域ポリペプチド、
−  突然変異Ｐ３２９Ｇ、Ｓ３５４Ｃ、Ｔ３６６Ｓ、Ｌ３６８Ａ、Ｙ４０７Ｖを伴うヒトＩｇＧ１  Ｆｃ領域ポリペプチド、
−  突然変異Ｌ２３４Ａ、Ｌ２３５Ａ、Ｐ３２９Ｇ、Ｙ３４９Ｃ、Ｔ３６６Ｓ、Ｌ３６８Ａ、Ｙ４０７Ｖを伴うヒトＩｇＧ１  Ｆｃ領域ポリペプチド、
−  突然変異Ｌ２３４Ａ、Ｌ２３５Ａ、Ｐ３２９Ｇ、Ｓ３５４Ｃ、Ｔ３６６Ｓ、Ｌ３６８Ａ、Ｙ４０７Ｖを伴うヒトＩｇＧ１  Ｆｃ領域ポリペプチド、
−  突然変異Ｓ２２８Ｐ、Ｌ２３５Ｅを伴うヒトＩｇＧ４  Ｆｃ領域ポリペプチド、
−  突然変異Ｓ２２８Ｐ、Ｌ２３５Ｅ、Ｐ３２９Ｇを伴うヒトＩｇＧ４  Ｆｃ領域ポリペプチド、
−  突然変異Ｙ３４９Ｃ、Ｔ３６６Ｓ、Ｌ３６８Ａ、Ｙ４０７Ｖを伴うヒトＩｇＧ４  Ｆｃ領域ポリペプチド、
−  突然変異Ｓ３５４Ｃ、Ｔ３６６Ｓ、Ｌ３６８Ａ、Ｙ４０７Ｖを伴うヒトＩｇＧ４  Ｆｃ領域ポリペプチド、
−  突然変異Ｓ２２８Ｐ、Ｌ２３５Ｅ、Ｙ３４９Ｃ、Ｔ３６６Ｓ、Ｌ３６８Ａ、Ｙ４０７Ｖを伴うヒトＩｇＧ４  Ｆｃ領域ポリペプチド、
−  突然変異Ｓ２２８Ｐ、Ｌ２３５Ｅ、Ｓ３５４Ｃ、Ｔ３６６Ｓ、Ｌ３６８Ａ、Ｙ４０７Ｖを伴うヒトＩｇＧ４  Ｆｃ領域ポリペプチド、
−  突然変異Ｐ３２９Ｇを伴うヒトＩｇＧ４  Ｆｃ領域ポリペプチド、
−  突然変異Ｐ３２９Ｇ、Ｙ３４９Ｃ、Ｔ３６６Ｓ、Ｌ３６８Ａ、Ｙ４０７Ｖを伴うヒトＩｇＧ４  Ｆｃ領域ポリペプチド、
−  突然変異Ｐ３２９Ｇ、Ｓ３５４Ｃ、Ｔ３６６Ｓ、Ｌ３６８Ａ、Ｙ４０７Ｖを伴うヒトＩｇＧ４  Ｆｃ領域ポリペプチド、
−  突然変異Ｓ２２８Ｐ、Ｌ２３５Ｅ、Ｐ３２９Ｇ、Ｙ３４９Ｃ、Ｔ３６６Ｓ、Ｌ３６８Ａ、Ｙ４０７Ｖを伴うヒトＩｇＧ４  Ｆｃ領域ポリペプチド、
−  突然変異Ｓ２２８Ｐ、Ｌ２３５Ｅ、Ｐ３２９Ｇ、Ｓ３５４Ｃ、Ｔ３６６Ｓ、Ｌ３６８Ａ、Ｙ４０７Ｖを伴うヒトＩｇＧ４  Ｆｃ領域ポリペプチド、
−  突然変異Ｋ３９２Ｄを伴うヒトＩｇＧ１、ＩｇＧ２、又はＩｇＧ４、及び
−  突然変異Ｎ３９２Ｄを伴うヒトＩｇＧ３からなる群より選択され、
ならびに
ｉｉ）第２のＦｃ領域ポリペプチドが、以下：
−  ヒトＩｇＧ１  Ｆｃ領域ポリペプチド、
−  ヒトＩｇＧ２  Ｆｃ領域ポリペプチド、
−  ヒトＩｇＧ３  Ｆｃ領域ポリペプチド、
−  ヒトＩｇＧ４  Ｆｃ領域ポリペプチド、
−  突然変異Ｌ２３４Ａ、Ｌ２３５Ａを伴うヒトＩｇＧ１  Ｆｃ領域ポリペプチド、
−  突然変異Ｓ３５４Ｃ、Ｔ３６６Ｗを伴うヒトＩｇＧ１  Ｆｃ領域ポリペプチド、
−  突然変異Ｙ３４９Ｃ、Ｔ３６６Ｗを伴うヒトＩｇＧ１  Ｆｃ領域ポリペプチド、
−  突然変異Ｌ２３４Ａ、Ｌ２３５Ａ、Ｓ３５４Ｃ、Ｔ３６６Ｗを伴うヒトＩｇＧ１  Ｆｃ領域ポリペプチド、
−  突然変異Ｌ２３４Ａ、Ｌ２３５Ａ、Ｙ３４９Ｃ、Ｔ３６６Ｗを伴うヒトＩｇＧ１  Ｆｃ領域ポリペプチド、
−  突然変異Ｐ３２９Ｇを伴うヒトＩｇＧ１  Ｆｃ領域ポリペプチド、
−  突然変異Ｌ２３４Ａ、Ｌ２３５Ａ、Ｐ３２９Ｇを伴うヒトＩｇＧ１  Ｆｃ領域ポリペプチド、
−  突然変異Ｐ３２９Ｇ、Ｓ３５４Ｃ、Ｔ３６６Ｗを伴うヒトＩｇＧ１  Ｆｃ領域ポリペプチド、
−  突然変異Ｐ３２９Ｇ、Ｙ３４９Ｃ、Ｔ３６６Ｗを伴うヒトＩｇＧ１  Ｆｃ領域ポリペプチド、
−  突然変異Ｌ２３４Ａ、Ｌ２３５Ａ、Ｐ３２９Ｇ、Ｓ３５４Ｃ、Ｔ３６６Ｗを伴うヒトＩｇＧ１  Ｆｃ領域ポリペプチド、
−  突然変異Ｌ２３４Ａ、Ｌ２３５Ａ、Ｐ３２９Ｇ、Ｙ３４９Ｃ、Ｔ３６６Ｗを伴うヒトＩｇＧ１  Ｆｃ領域ポリペプチド、
−  突然変異Ｓ２２８Ｐ、Ｌ２３５Ｅを伴うヒトＩｇＧ４  Ｆｃ領域ポリペプチド、
−  突然変異Ｓ２２８Ｐ、Ｌ２３５Ｅ、Ｐ３２９Ｇを伴うヒトＩｇＧ４  Ｆｃ領域ポリペプチド、
−  突然変異Ｓ３５４Ｃ、Ｔ３６６Ｗを伴うヒトＩｇＧ４  Ｆｃ領域ポリペプチド、
−  突然変異Ｙ３４９Ｃ、Ｔ３６６Ｗを伴うヒトＩｇＧ４  Ｆｃ領域ポリペプチド、
−  突然変異Ｓ２２８Ｐ、Ｌ２３５Ｅ、Ｓ３５４Ｃ、Ｔ３６６Ｗを伴うヒトＩｇＧ４  Ｆｃ領域ポリペプチド、
−  突然変異Ｓ２２８Ｐ、Ｌ２３５Ｅ、Ｙ３４９Ｃ、Ｔ３６６Ｗを伴うヒトＩｇＧ４  Ｆｃ領域ポリペプチド、
−  突然変異Ｐ３２９Ｇを伴うヒトＩｇＧ４  Ｆｃ領域ポリペプチド、
−  突然変異Ｐ３２９Ｇ、Ｓ３５４Ｃ、Ｔ３６６Ｗを伴うヒトＩｇＧ４  Ｆｃ領域ポリペプチド、
−  突然変異Ｐ３２９Ｇ、Ｙ３４９Ｃ、Ｔ３６６Ｗを伴うヒトＩｇＧ４  Ｆｃ領域ポリペプチド、
−  突然変異Ｓ２２８Ｐ、Ｌ２３５Ｅ、Ｐ３２９Ｇ、Ｓ３５４Ｃ、Ｔ３６６Ｗを伴うヒトＩｇＧ４  Ｆｃ領域ポリペプチド、
−  突然変異Ｓ２２８Ｐ、Ｌ２３５Ｅ、Ｐ３２９Ｇ、Ｙ３４９Ｃ、Ｔ３６６Ｗを伴うヒトＩｇＧ４  Ｆｃ領域ポリペプチド、
−  突然変異Ｄ３９９Ｋ、Ｄ３５６Ｋ、及び／又はＥ３５７Ｋを伴うヒトＩｇＧ１、ならびに
−  突然変異Ｄ３９９Ｋ、Ｅ３５６Ｋ、及び／又はＥ３５７Ｋを伴うヒトＩｇＧ２、ＩｇＧ３、又はＩｇＧ４からなる群より選択される抗体。
【０５５４】
２８．実施態様１〜２７のいずれか１つに従った抗体であって、
ｉ）第１のＦｃ領域ポリペプチドが、配列番号１４、１５、１６、１７、１８、１９、２１、２３、２４、２５、２７、２９、３０、３２、３４、３５、３６、及び３８を含む群より選択されるアミノ酸配列を有し、ならびに、
ｉｉ）第２のＦｃ領域ポリペプチドが、配列番号１４、１５、１６、１７、１８、２０、２２、２３、２４、２６、２８、２９、３０、３１、３３、３５、３７、及び３９を含む群より選択されるアミノ酸配列を有する抗体。
【０５５５】
２９．実施態様１〜２７のいずれか１つに従った抗体であって、
ｉ）Ｆｃ領域ポリペプチドがヒトＩｇＧ１  Ｆｃ領域ポリペプチドであり、第２のＦｃ領域ポリペプチドがヒトＩｇＧ１  Ｆｃ領域ポリペプチドであり、又は
ｉｉ）第１のＦｃ領域ポリペプチドが、突然変異Ｌ２３４Ａ、Ｌ２３５Ａを伴うヒトＩｇＧ１  Ｆｃ領域ポリペプチドであり、第２のＦｃ領域ポリペプチドが、突然変異Ｌ２３４Ａ、Ｌ２３５Ａを伴うヒトＩｇＧ１  Ｆｃ領域ポリペプチドであり、又は
ｉｉｉ）第１のＦｃ領域ポリペプチドが、突然変異Ｌ２３４Ａ、Ｌ２３５Ａ、Ｐ３２９Ｇを伴うヒトＩｇＧ１  Ｆｃ領域ポリペプチドであり、第２のＦｃ領域ポリペプチドが、突然変異Ｌ２３４Ａ、Ｌ２３５Ａ、Ｐ３２９Ｇを伴うヒトＩｇＧ１  Ｆｃ領域ポリペプチドであり、又は
ｉｖ）第１のＦｃ領域ポリペプチドが、突然変異Ｌ２３４Ａ、Ｌ２３５Ａ、Ｓ３５４Ｃ、Ｔ３６６Ｗを伴うヒトＩｇＧ１  Ｆｃ領域ポリペプチドであり、第２のＦｃ領域ポリペプチドが、突然変異Ｌ２３４Ａ、Ｌ２３５Ａ、Ｙ３４９Ｃ、Ｔ３６６Ｓ、Ｌ３６８Ａ、Ｙ４０７Ｖを伴うヒトＩｇＧ１  Ｆｃ領域ポリペプチドであり、又は
ｖ）第１のＦｃ領域ポリペプチドが、突然変異Ｌ２３４Ａ、Ｌ２３５Ａ、Ｐ３２９Ｇ、Ｓ３５４Ｃ、Ｔ３６６Ｗを伴うヒトＩｇＧ１  Ｆｃ領域ポリペプチドであり、第２のＦｃ領域ポリペプチドが、突然変異Ｌ２３４Ａ、Ｌ２３５Ａ、Ｐ３２９Ｇ、Ｙ３４９Ｃ、Ｔ３６６Ｓ、Ｌ３６８Ａ、Ｙ４０７Ｖを伴うヒトＩｇＧ１  Ｆｃ領域ポリペプチドであり、又は
ｖｉ）第１のＦｃ領域ポリペプチドがヒトＩｇＧ４  Ｆｃ領域ポリペプチドであり、第２のＦｃ領域ポリペプチドがヒトＩｇＧ４  Ｆｃ領域ポリペプチドであり、又は
ｖｉｉ）第１のＦｃ領域ポリペプチドが、突然変異Ｓ２２８Ｐ、Ｌ２３５Ｅを伴うヒトＩｇＧ４  Ｆｃ領域ポリペプチドであり、第２のＦｃ領域ポリペプチドが、突然変異Ｓ２２８Ｐ、Ｌ２３５Ｅを伴うヒトＩｇＧ４  Ｆｃ領域ポリペプチドであり、又は
ｖｉｉｉ）第１のＦｃ領域ポリペプチドが、突然変異Ｓ２２８Ｐ、Ｌ２３５Ｅ、Ｐ３２９Ｇを伴うヒトＩｇＧ４  Ｆｃ領域ポリペプチドであり、第２のＦｃ領域ポリペプチドが、突然変異Ｓ２２８Ｐ、Ｌ２３５Ｅ、Ｐ３２９Ｇを伴うヒトＩｇＧ４  Ｆｃ領域ポリペプチドであり、又は
ｉｘ）第１のＦｃ領域ポリペプチドが、突然変異Ｓ２２８Ｐ、Ｌ２３５Ｅ、Ｓ３５４Ｃ、Ｔ３６６Ｗを伴うヒトＩｇＧ４  Ｆｃ領域ポリペプチドであり、第２のＦｃ領域ポリペプチドが、突然変異Ｓ２２８Ｐ、Ｌ２３５Ｅ、Ｙ３４９Ｃ、Ｔ３６６Ｓ、Ｌ３６８Ａ、Ｙ４０７Ｖを伴うヒトＩｇＧ４  Ｆｃ領域ポリペプチドであり、又は
ｘ）第１のＦｃ領域ポリペプチドが、突然変異Ｓ２２８Ｐ、Ｌ２３５Ｅ、Ｐ３２９Ｇ、Ｓ３５４Ｃ、Ｔ３６６Ｗを伴うヒトＩｇＧ４  Ｆｃ領域ポリペプチドであり、第２のＦｃ領域ポリペプチドが、突然変異Ｓ２２８Ｐ、Ｌ２３５Ｅ、Ｐ３２９Ｇ、Ｙ３４９Ｃ、Ｔ３６６Ｓ、Ｌ３６８Ａ、Ｙ４０７Ｖを伴うヒトＩｇＧ４  Ｆｃ領域ポリペプチドである抗体。
【０５５６】
３０．実施態様１〜２９のいずれか１つに従った抗体であって、
ｉ）第１のＦｃ領域ポリペプチドが配列番号１４のアミノ酸配列を有し、第２のＦｃ領域ポリペプチドが配列番号１４のアミノ酸配列を有し、又は
ｉｉ）第１のＦｃ領域ポリペプチドが配列番号１８のアミノ酸配列を有し、第２のＦｃ領域ポリペプチドが配列番号１８のアミノ酸配列を有し、又は
ｉｉｉ）第１のＦｃ領域ポリペプチドが配列番号２４のアミノ酸配列を有し、第２のＦｃ領域ポリペプチドが配列番号２４のアミノ酸配列を有し、又は
ｉｖ）第１のＦｃ領域ポリペプチドが配列番号２２のアミノ酸配列を有し、第２のＦｃ領域ポリペプチドが配列番号２１のアミノ酸配列を有し、又は
ｖ）第１のＦｃ領域ポリペプチドが配列番号２８のアミノ酸配列を有し、第２のＦｃ領域ポリペプチドが配列番号２７のアミノ酸配列を有し、又は
ｖｉ）第１のＦｃ領域ポリペプチドが配列番号１７のアミノ酸配列を有し、第２のＦｃ領域ポリペプチドが配列番号１７のアミノ酸配列を有し、又は
ｖｉｉ）第１のＦｃ領域ポリペプチドが配列番号２９のアミノ酸配列を有し、第２のＦｃ領域ポリペプチドが配列番号２９のアミノ酸配列を有し、又は
ｖｉｉｉ）第１のＦｃ領域ポリペプチドが配列番号３０のアミノ酸配列を有し、第２のＦｃ領域ポリペプチドが配列番号３０のアミノ酸配列を有し、又は
ｉｘ）第１のＦｃ領域ポリペプチドが配列番号３３のアミノ酸配列を有し、第２のＦｃ領域ポリペプチドが配列番号３４のアミノ酸配列を有し、又は
ｘ）第１のＦｃ領域ポリペプチドが配列番号３９のアミノ酸配列を有し、第２のＦｃ領域ポリペプチドが配列番号３８のアミノ酸配列を有する抗体。
【０５５７】
３１．抗体が単離抗体である、実施態様１〜３０のいずれか１つに従った抗体。
【０５５８】
３２．抗体が全長抗体である、実施態様１〜３１のいずれか１つに従った抗体。
【０５５９】
３３．抗体がモノクローナル抗体である、実施態様１〜３２のいずれか１つに従った抗体。
【０５６０】
３４．抗体がヒト、ヒト化又はキメラ抗体である、実施態様１〜３３のいずれか１つに従った抗体。
【０５６１】
３５．抗体が、配列番号０５又は配列番号０６のＶＨ配列を含む、実施態様１〜３４のいずれか１つに従った抗体。
【０５６２】
３６．抗体が、配列番号０７又は配列番号０８のＶＬ配列を含む、実施態様１〜３４のいずれか１つに従った抗体。
【０５６３】
３７．抗体が、配列番号０５のＶＨ配列及び配列番号０７のＶＬ配列を含む、実施態様１〜３４のいずれか１つに従った抗体。
【０５６４】
３８．抗体が、配列番号０６のＶＨ配列及び配列番号０８のＶＬ配列を含む、実施態様１〜３４のいずれか１つに従った抗体。
【０５６５】
３９．抗体が、配列番号６２のＶＨ配列及び配列番号６３のＶＬ配列を含む、実施態様１〜３４のいずれか１つに従った抗体。
【０５６６】
４０．抗体が、配列番号８６のＶＨ配列及び配列番号８７のＶＬ配列を含む、実施態様１〜３４のいずれか１つに従った抗体。
【０５６７】
４１．実施態様１〜４０のいずれか１つに従った抗体であって、抗体が、第１のＦｃ領域ポリペプチド及び第２のＦｃ領域ポリペプチドを含み、
ｉ）第１及び第２のＦｃ領域ポリペプチドが、突然変異Ｙ４３６Ａをさらに含み、又は
ｉｉ）第１及び第２のＦｃ領域ポリペプチドが、突然変異Ｉ２５３Ａ、Ｈ３１０Ａ、及びＨ４３５Ａをさらに含み、又は
ｉｉｉ）第１及び第２のＦｃ領域ポリペプチドが、突然変異Ｈ３１０Ａ、Ｈ４３３Ａ、及びＹ４３６Ａをさらに含み、又は
ｉｖ）第１及び第２のＦｃ領域ポリペプチドが、突然変異Ｌ２５１Ｄ、Ｌ３１４Ｄ、及びＬ４３２Ｄをさらに含み、又は
ｖ）第１のＦｃ領域ポリペプチドが、突然変異Ｙ４３６Ａをさらに含み、第２のＦｃ領域ポリペプチドが
ａ）突然変異Ｉ２５３Ａ、Ｈ３１０Ａ、及びＨ４３５Ａ、又は
ｂ）突然変異Ｈ３１０Ａ、Ｈ４３３Ａ、及びＹ４３６Ａ、又は
ｃ）突然変異Ｌ２５１Ｄ、Ｌ３１４Ｄ、及びＬ４３２Ｄをさらに含み
あるいは
ｖｉ）第１のＦｃ領域ポリペプチドが、突然変異Ｉ２５３Ａ、Ｈ３１０Ａ、及びＨ４３５Ａをさらに含み、第２のＦｃ領域ポリペプチドが、
ａ）突然変異Ｈ３１０Ａ、Ｈ４３３Ａ、及びＹ４３６Ａ、又は
ｂ）突然変異Ｌ２５１Ｄ、Ｌ３１４Ｄ、及びＬ４３２Ｄをさらに含み、
あるいは
ｖｉｉ）第１のＦｃ領域ポリペプチドが、突然変異Ｈ３１０Ａ、Ｈ４３３Ａ、及びＹ４３６Ａをさらに含み、第２のＦｃ領域ポリペプチドが、
ａ）突然変異Ｌ２５１Ｄ、Ｌ３１４Ｄ、及びＬ４３２Ｄをさらに含む抗体。
【０５６８】
４２．実施態様１〜４０のいずれか１つに従った抗体であって、抗体は、第１のＦｃ領域ポリペプチドにおいて、ｉ）群Ｉ２５３Ａ、Ｈ３１０Ａ、及びＨ４３５Ａ、又はｉｉ）群Ｈ３１０Ａ、Ｈ４３３Ａ、及びＹ４３６Ａ、又はｉｉｉ）群Ｌ２５１Ｄ、Ｌ３１４Ｄ、及びＬ４３２Ｄ（Ｋａｂａｔ  ＥＵインデックスナンバリングシステムに従ったナンバリング）より選択される突然変異の１つ又は２つ、ならびに第２のＦｃ領域ポリペプチドにおいて、突然変異Ｌ２５１Ｄ、Ｉ２５３Ａ、Ｈ３１０Ａ、Ｌ３１４Ｄ、Ｌ４３２Ｄ、Ｈ４３３Ａ、Ｈ４３５Ａ、及びＹ４３６Ａ（Ｋａｂａｔ  ＥＵインデックスナンバリングシステムに従ったナンバリング）を含む群より選択される突然変異の１つ又は２つを含む、ヒトＩｇＧ１又はヒトＩｇＧ４サブクラス（ヒト起源に由来する）の両方の第１及び第２のＦｃ領域ポリペプチドを含むＦｃ領域を含み、第１及び第２のＦｃ領域ポリペプチド中の突然変異の全てが、まとめた場合、突然変異ｉ）Ｉ２５３Ａ、Ｈ３１０Ａ、及びＨ４３５Ａ、又はｉｉ）Ｈ３１０Ａ、Ｈ４３３Ａ、及びＹ４３６Ａ、又はｉｉｉ）Ｌ２５１Ｄ、Ｌ３１４Ｄ、及びＬ４３２ＤがＦｃ領域中に含まれることになるようにする抗体。
【０５６９】
４３．実施態様１〜４０のいずれか１つに従った抗体であって、抗体は、両方が、Ｆｃ領域において突然変異Ｉ２５３Ａ／Ｈ３１０Ａ／Ｈ４３５Ａ又はＨ３１０Ａ／Ｈ４３３Ａ／Ｙ４３６Ａ又はＬ２５１Ｄ／Ｌ３１４Ｄ／Ｌ４３２Ｄ又はこれらの組み合わせ（Ｋａｂａｔ  ＥＵインデックスナンバリングシステムに従ったナンバリング）を含む、ヒトＩｇＧ１又はヒトＩｇＧ４サブクラス（すなわちヒト起源に由来する）の両方の第１及び第２のＦｃ領域ポリペプチドを含むＦｃ領域を含み、それにより、全ての突然変異が、第１又は第２のＦｃ領域ポリペプチド中にあり、あるいは１つ又は２つの突然変異が、第１のＦｃ領域ポリペプチド中にあり、１つ又は２つの突然変異が、第２のＦｃ領域ポリペプチド中にあり、第１及び第２のＦｃ領域ポリペプチド中の突然変異の全てが、まとめた場合、突然変異ｉ）Ｉ２５３Ａ、Ｈ３１０Ａ、及びＨ４３５Ａ、又はｉｉ）Ｈ３１０Ａ、Ｈ４３３Ａ、及びＹ４３６Ａ、又はｉｉｉ）Ｌ２５１Ｄ、Ｌ３１４Ｄ、及びＬ４３２ＤがＦｃ領域中に含まれることになるようにする抗体。
【０５７０】
４４．実施態様１〜４０のいずれか１つに従った抗体であって、抗体は、第１のならびに第２のＦｃ領域ポリペプチドにおいて突然変異Ｉ２５３Ａ／Ｈ３１０Ａ／Ｈ４３５Ａ又はＨ３１０Ａ／Ｈ４３３Ａ／Ｙ４３６Ａ又はＬ２５１Ｄ／Ｌ３１４Ｄ／Ｌ４３２Ｄ（Ｋａｂａｔ  ＥＵインデックスナンバリングシステムに従ったナンバリング）を含む、あるいは、第１のＦｃ領域ポリペプチドにおいて突然変異Ｉ２５３Ａ／Ｈ３１０Ａ／Ｈ４３５Ａの組み合わせ及び第２のＦｃ領域ポリペプチドにおいて突然変異Ｈ３１０Ａ／Ｈ４３３Ａ／Ｙ４３６Ａの組み合わせ（Ｋａｂａｔ  ＥＵインデックスナンバリングシステムに従ったナンバリング）を含む、ヒトＩｇＧ１又はヒトＩｇＧ４サブクラス（すなわちヒト起源に由来する）の両方の第１及び第２のＦｃ領域ポリペプチドを含むＦｃ領域を含む。
【０５７１】
４５．実施態様１〜４４のいずれか１つに従った抗体であって、ｉ）抗体が、ヒトＦｃＲｎに特異的に結合せず、ブドウ球菌プロテインＡに特異的に結合する、又はｉｉ）抗体が、ヒトＦｃＲｎに特異的に結合せず、ブドウ球菌プロテインＡに特異的に結合しない抗体。
【０５７２】
４６．実施態様１〜４５のいずれか１つに従った抗体であって、抗体は、
−  Ｆｃ領域ポリペプチドにおいて突然変異を有さない、対応する二重特異性抗体と比較して、より低い血清濃度を示し（マウスＦｃＲｎ欠損であるが、ヒトＦｃＲｎについて半接合トランスジェニックであるマウスにおける硝子体内適用後９６時間）（実施例４に記載するアッセイにおいて決定）、及び／又は
−  Ｆｃ領域ポリペプチドにおいて突然変異を有さない、対応する二重特異性抗体と比較して、右眼全体の溶解物中で同様の（０．８〜１．２倍）濃度を示し（マウスＦｃＲｎ欠損であるが、ヒトＦｃＲｎについて半接合トランスジェニックであるマウスでの右眼における硝子体内適用後９６時間）（実施例４に記載するアッセイにおいて決定）、及び／又は
−  ヒトＦｃＲｎへの無効になった結合を有し、及び／又は
−  ブドウ球菌プロテインＡへの結合を有さない（ＳＰＲにより決定）、及び／又は
−  ブドウ球菌プロテインＡへの維持された結合を有する（ＳＰＲにより決定）抗体。
【０５７３】
４７．実施態様１〜４６のいずれか１つに従った抗体であって、抗体は、配列番号０５又は６２又は８６のアミノ酸配列と少なくとも９０%、９１%、９２%、９３%、９４%、９５%、９６%、９７%、９８%、９９%、又は１００%の配列同一性を有する重鎖可変ドメイン（ＶＨ）配列を含む抗体。
【０５７４】
４８．実施態様１〜４７のいずれか１つに従った抗体であって、抗体は、配列番号０７又は６３又は８７のアミノ酸配列と少なくとも９０%、９１%、９２%、９３%、９４%、９５%、９６%、９７%、９８%、９９%、又は１００%の配列同一性を有する軽鎖可変ドメイン（ＶＬ）を含む抗体。
【０５７５】
４９．眼におけるＩＧＦ−１Ｒの阻害のための実施態様１〜４８のいずれか１つに従った抗ＩＧＦ−１Ｒ抗体の使用。
【０５７６】
５０．血管性眼疾患の処置のための実施態様１〜４８のいずれか１つに従った抗ＩＧＦ−１Ｒ抗体の使用。
【０５７７】
５１．実施態様１〜４８のいずれか１つに従った抗ＩＧＦ−１Ｒ抗体を、そのような処置の必要のある患者に投与することによる、眼血管疾患に罹患した患者の処置の方法。
【０５７８】
５２．硝子体内適用のための実施態様１〜４８のいずれか１つに従った抗ＩＧＦ−１Ｒ抗体。
【０５７９】
５３．血管性眼疾患の処置のための実施態様１〜４８のいずれか１つに従った抗ＩＧＦ−１Ｒ抗体。
【０５８０】
５４．実施態様１〜４８のいずれか１つに従った抗ＩＧＦ−１Ｒ抗体及び、場合により、医薬的に許容可能な担体を含む医薬製剤。
【０５８１】
５５．医薬としての使用のための実施態様１〜４８のいずれか１つに従った抗ＩＧＦ−１Ｒ抗体。
【０５８２】
５６．血管性眼疾患を処置する際での使用のための実施態様１〜４８のいずれか１つに従った抗ＩＧＦ−１Ｒ抗体。
【０５８３】
５７．処置の方法における使用のための実施態様１〜４８のいずれか１つに従った抗ＩＧＦ−１Ｒ抗体。
【０５８４】
５８．実施態様１〜４８のいずれか１つに従った抗ＩＧＦ−１Ｒ抗体の効果的な量を個体に投与することを含む、血管性眼疾患を有する個体を処置する方法における使用のための実施態様１〜４８のいずれか１つに従った抗ＩＧＦ−１Ｒ抗体。
【０５８５】
５９．方法が、少なくとも１つの追加の治療薬剤の効果的な量を個体に投与することをさらに含む、実施態様５８に従った抗体。
【０５８６】
６０．眼においてＩＧＦ−１Ｒを阻害する際での使用のための実施態様１〜４８のいずれか１つに従った抗ＩＧＦ−１Ｒ抗体。
【０５８７】
６１．ＩＧＦ−１Ｒシグナル伝達を阻害するための、実施態様１〜４８のいずれか１つに従った抗ＩＧＦ−１Ｒ抗体の効果的な量を個体に投与することを含む、個体において眼における血管新生を阻害する方法における使用のための実施態様１〜４８のいずれか１つに従った抗ＩＧＦ−１Ｒ抗体。
【０５８８】
６２．医薬の製造における実施態様１〜４８のいずれか１つに従った抗ＩＧＦ−１Ｒ抗体の使用。
【０５８９】
６３．医薬が、血管性眼疾患の処置のためである、実施態様６２に従った使用。
【０５９０】
６４．医薬が、医薬の効果的な量を、血管性眼疾患を有する個体に投与することを含む、血管性眼疾患を処置する方法における使用のためである、実施態様６２〜６３のいずれか１つに従った使用。
【０５９１】
６５．方法が、少なくとも１つの追加の治療薬剤の効果的な量を個体に投与することをさらに含む、実施態様６４に従った使用。
【０５９２】
６６．医薬が、血管新生を阻害するためである、実施態様６２〜６５のいずれか１つに従った使用。
【０５９３】
６７．医薬が、ＩＧＦ−１Ｒ媒介性シグナル伝達を阻害するために効果的な医薬の量を個体に投与することを含む、個体において血管新生を阻害する方法における使用のためである、実施態様６２〜６６のいずれか１つに従った使用。
【０５９４】
６８．血管性眼疾患を処置するための方法。
【０５９５】
６９．方法が、実施態様１〜４８のいずれか１つに従った抗ＩＧＦ−１Ｒ抗体の効果的な量を、そのような血管性眼疾患を有する個体に投与することを含む、実施態様６８に従った方法。
【０５９６】
７０．方法が、少なくとも１つの追加の治療薬剤の効果的な量を個体に投与することをさらに含む、実施態様６９に従った方法。
【０５９７】
７１．個体において眼における血管新生を阻害するための方法。
【０５９８】
７２．方法が、ＩＧＦ−１Ｒ媒介性シグナル伝達を阻害するための、実施態様１〜４８のいずれか１つに従った抗ＩＧＦ−１Ｒ抗体の効果的な量を個体に投与することを含む、実施態様７１に従った方法。
【０５９９】
７３．実施態様１〜４８のいずれか１つに従った抗ＩＧＦ−１Ｒ抗体を含む医薬製剤。
【０６００】
７４．製剤が、実施態様４９〜７２のいずれかにおける使用のためである、実施態様７３に従った医薬製剤。
【０６０１】
７５．実施態様１〜４８のいずれか１つに従った抗ＩＧＦ−１Ｒ抗体及び医薬的に許容可能な担体を含む医薬製剤。
【０６０２】
７６．実施態様１〜４８のいずれか１つに従った抗ＩＧＦ−１Ｒ抗体及び少なくとも１つの追加の治療薬剤を含む医薬製剤。
【０６０３】
７７．投与が硝子体内投与である、実施態様４９〜７２のいずれか１つに従った抗体又は使用又は方法。
【０６０４】
Ｖ．実施例
以下は、本発明の方法及び組成物の例である。種々の他の実施態様が、上の一般的な記載を前提として、実行されてもよいことが理解される。
【０６０５】
抗体及びそれらのそれぞれの配列
【表９】
2019167363.tif 000041
【０６０６】
方法
エレクトロスプレーイオン化質量分析（ＥＳＩ−ＭＳ）
タンパク質の一定分量（５０μg）を、０．５μLのN-Glycanase plus（Roche）及びリン酸ナトリウム緩衝液（０．１M、ｐＨ７．１）を加えることにより脱グリコシル化し、最終サンプル容積１１５μLを得た。混合物を３７℃で１８時間にわたりインキュベートした。その後、還元及び変性のために、４Mグアニジン＊塩酸（Pierce）中の６０μLの０．５M  ＴＣＥＰ（Pierce）及び５０μLの８Ｍグアニジン＊塩酸を加えた。混合物を３７℃で３０分間にわたりインキュベートした。サンプルを、サイズ排除クロマトグラフィー（セファロースＧ−２５、均一濃度、２%ギ酸を伴う４０%アセトニトリル）により脱塩した。ＥＳＩ質量スペクトル（＋ｖｅ）を、ナノＥＳＩ源（TriVersa NanoMate, Advion）を備えたＱ−ＴＯＦ機器（maXis、Bruker）で記録した。ＭＳパラメーター設定は、以下の通りであった：転送：ファンネルＲＦ、４００Vpp；ＩＳＣＩＤエネルギー、０ｅＶ；多極ＲＦ、４００Vpp；四重極：イオンエネルギー、４．０ｅＶ；低質量６００m/z；供給源：乾燥ガス、８L/分；乾燥ガス温度、１６０℃；衝突セル：衝突エネルギー、１０ｅＶ；衝突ＲＦ：２０００Vpp；イオンクーラー：イオンクーラーＲＦ、３００Vpp；転送時間：１２０μs；Pre PULSストレージ、１０μs；スキャン範囲ｍ／ｚ  ６００から２０００。データの評価のために、社内で開発されたソフトウェア（MassAnalyzer）を使用した。
【０６０７】
ＦｃＲｎ表面プラズモン共鳴（ＳＰＲ）分析
野生型抗体の結合特性及びＦｃＲｎへの突然変異体を、BIAcore T100装置（BIAcore AB、ウプサラ、スウェーデン）を使用した、表面プラズモン共鳴（ＳＰＲ）技術により分析した。このシステムは、分子間相互作用の試験のために十分に確立されている。それによって、リガンド／検体結合の連続リアルタイムモニタリング、及び、このように、種々のアッセイの設定における動力学的パラメーターの決定が可能になる。ＳＰＲ技術は、金コーティングバイオセンサーチップの表面近くでの屈折率の測定に基づく。屈折率における変化は、固定化リガンドと、溶液で注射された分析物との相互作用により起こる表面上での質量変化を示す。分子が表面上の固定化リガンドに結合する場合、質量が増加し、解離の場合において、質量は減少する。現在のアッセイにおいて、ＦｃＲｎ受容体は、４００応答単位（ＲＵ）のレベルまでのアミンカップリングを介して、BIAcore CM5バイオセンサーチップ（GE Healthcare Bioscience、ウプサラ、スウェーデン）上に固定化した。アッセイは、ＰＢＳ、０．０５%Tween-20（商標）ｐＨ６．０（GE Healthcare Bioscience）を泳動緩衝液及び希釈緩衝液として用いて、室温で行った。２００nMの抗体サンプルを、流速５０μL/分で、室温で注入した。会合時間は１８０秒であり、解離段階は３６０秒を要した。チップ表面の再生は、ＨＢＳ−Ｐ、ｐＨ８．０の短い注入により達成した。ＳＰＲデータの評価は、注射後１８０秒と注射後３００秒での生物学的応答シグナルの高さの比較により実施した。対応するパラメーターは、Ｒｕ最大レベル（注射後１８０秒）及び後期安定性（注入終了後３００秒）である。
【０６０８】
プロテインＡ表面プラズモン共鳴（ＳＰＲ）分析
アッセイは、表面プラズモン共鳴分光法に基づく。プロテインＡは、ＳＰＲバイオセンサーの表面上に固定化される。ＳＰＲ分析装置のフローセルにサンプルを注入することにより、それは、固定化されたプロテインＡとの複合体を形成し、センサーチップ表面上に増加質量、及び、従って、より高い応答（１ＲＵは１pg/mm2として定義される）をもたらす。その後、センサーチップは、サンプル−タンパク質Ａ複合体を溶解することにより再生される。得られた応答は、次に、応答単位（ＲＵ）においてシグナル高及び解離挙動について評価される。
【０６０９】
プロテインＡの３５００応答単位（ＲＵ）前後（２０μg/mL）を、GE Healthcareのアミンカップリングキットを使用して、ｐＨ４．０でCM5チップ（GE Healthcare）上にカップリングさせた。
【０６１０】
サンプル及びシステム緩衝液は、ＨＢＳ−Ｐ＋（０．０１Ｍ  ＨＥＰＥＳ、０．１５Ｍ  ＮａＣｌ、０．００５%界面活性剤Ｐ２０滅菌濾過済み、ｐＨ７．４）であった。フローセルの温度を２５℃に、サンプルコンパートメント温度を１２℃に設定した。システムは、泳動緩衝液を用いてプライミングした。次に、サンプル構築物の５ｎＭ溶液を、流速３０μL/分で１２０秒間にわたり注入し、３００秒の解離段階が続いた。次に、センサーチップ表面を、流速３０μL/分でグリシン−ＨＣｌ  ｐＨ１．５の２回の３０秒間の長時間注射により再生した。各々のサンプルを３通り測定した。
【０６１１】
実施例１
ＦｃＲｎ親和性カラムの調製
ＨＥＫ２９３細胞におけるＦｃＲｎの発現
ＦｃＲｎを、ＦｃＲｎの及びβ−２−ミクログロブリンのコード配列を含む、２つのプラスミドを用いた、ＨＥＫ２９３細胞のトランスフェクションにより、一過性に発現させた。トランスフェクトされた細胞を、振盪フラスコ中で、３６．５℃、１２０rpm（振盪振幅５cm）、８０%湿度、及び７%ＣＯ２で培養した。細胞を、２〜３日毎に、密度３〜４×１０５個細胞／mLの密度まで希釈した。
【０６１２】
一過性発現のために、１４Lステンレス製のバイオリアクターは、８Lの培養容量を用いて、３６．５℃、ｐＨ７．０±０．２、ｐＯ２  ３５%（Ｎ２及び空気の気体供給、総気体流２００mL/分）及び撹拌速度１００〜４００rpmで開始した。細胞密度が２０×１０５個細胞/mLに達した場合、１０mgのプラスミドＤＮＡ（両方のプラスミドの等モル量）を４００mlのOpti-MEM（Invitrogen）中で希釈した。２０mLの２９３フェクチン（Invitrogen）を、この混合物に加え、それを、次に、室温で１５分間にわたりインキュベートし、その後、発酵槽に移した。次の日から、細胞を、連続モードにおいて栄養素を供給した：供給溶液を速度５００ml/日で、グルコースを必要に応じて加え、２ｇ／Ｌを上回るレベルを維持した。上清を、１Ｌバケットを備えたスイングヘッド遠心分離機を使用して（９０分間にわたる４，０００rpm）、トランスフェクションの７日後に収集した。上清（１３L）をSartobran Pフィルター（０．４５μM  ＋  ０．２μM、Sartorius）により清澄化し、ＦｃＲｎβ２−ミクログロブリン複合体をそこから精製した。
【０６１３】
新生児Ｆｃ受容体のビオチン化
ＨＥＫ２９３細胞においてβ２−ミクログロブリンと同時発現させたＨｉｓ−Ａｖｉ  Ｔａｇ伴うＦｃＲｎの可溶性細胞外ドメインは、精製後、以下の通りにビオチン化した：
【０６１４】
１５０mMのＫＣｌ、２５０μLのＰＢＳ及び１錠の完全プロテアーゼ阻害剤（Roche Diagnostics GmbH、マンハイム、ドイツ）を含む、５mlの２０mMクエン酸ナトリウム緩衝液ｐＨ５．５中の１．２mg〜１２mgの間のＦｃＲｎ／β２−ミクログロブリンを、製造者の指示（Bulk BIRA）に従って、Avidityからのビオチン化キットを使用してビオチン化した。ビオチン化反応を室温で一晩行った。修飾タンパク質を、１５０mM  ＮａＣｌを含む２０mMリン酸ナトリウム緩衝液ｐＨ７．５に対して、４℃で一晩透析し、過剰のビオチンを除去した。
【０６１５】
ストレプトアビジンセファロースへのカップリング
１グラムのストレプトアビジンセファロース（GE Healthcare）を、ビオチン化及び透析された受容体に加え（１．２〜１２mgのＦｃＲｎ／β２−ミクログロブリン、標準的な分析適用のために、３mgを選んだ）、振盪しながら２時間インキュベートした。受容体誘導化セファロースを、１mlのＸＫカラム（GE Healthcare）に充填した。
【０６１６】
実施例２
ＦｃＲｎ親和性カラムを使用したクロマトグラフィー
受容体誘導化セファロースを、１mlのXKカラム（GE Healthcare）中に充填し、ＦｃＲｎを、次に、１５０mM  ＮａＣｌを含む２０mM  ２−（Ｎ−モルホリン）−エタンスルホン酸（ＭＥＳ）緩衝液ｐＨ５．５で平衡化した。
【０６１７】
条件：
カラム寸法：５０mm  ｘ  ５mm
ベッド高：５cm
充填：５０μｇサンプル
平衡緩衝液：２０mM  ＭＥＳ、１５０mM  ＮａＣｌを伴い、ｐＨ５．５に調整
溶出緩衝液：２０mM  Ｔｒｉｓ／ＨＣｌ、１５０mM  ＮａＣｌを伴い、ｐＨ８．８に調整
溶出：７．５ＣＶで平衡化緩衝液、３０ＣＶで、１００%溶出緩衝液まで、１０ＣＶで溶出緩衝液
【０６１８】
５０〜１００μgのタンパク質を含む抗体サンプルをｐＨ５．５に調整し、AKTAエクスプローラー１０  ＸＴ又はDionex Summit（Dionex、イトシュタイン、ドイツ）を使用し、ＦｃＲｎカラムに適用した。５cmのベッド高を伴うカラムを、次に、５〜１０カラム容量の平衡化緩衝液２０mM  ＭＥＳ、１５０mM  ＮａＣｌ、ｐＨ５．５で洗浄した。親和性結合抗体を、３０カラム容量中で、２０mM  Ｔｒｉｓ／ＨＣｌ、１５０mM  ＮａＣｌ、ｐＨ８．８までのｐＨ勾配を用いて溶出した。修飾抗体の完全な溶出のために、ｐＨをｐＨ８．８までの勾配で増加させた。実験は室温で行った。溶出プロファイルを、２８０nmでの吸光度の連続測定により得た。分析物ピークＸが、サンプル注射後に検出器に達するために要する時間を、保持時間と呼ぶ。
【０６１９】
実施例３
抗ＩＧＦ−１Ｒ抗体の発現
細胞株
組換えＩｇＧ発現のための細胞株の生成のために使用される親細胞株は、チャイニーズハムスター卵巣（ＣＨＯ）細胞株ＣＨＯ−ＤＧ４４である（Flintoff, W.F. et al., Somat. Cell Genet. 2 (1976) 245-261；Flintoff et al., Mol. Cell. Biol. 2 (1982) 275-285；Urlaub, G. et al., Cell 33 (1983) 405-412;Urlaub, G. et al., Somat. Cell Mol. Genet. 12 (1986) 555-566）。ＣＨＯ−ＤＧ４４細胞は、酵素ジヒドロ葉酸還元酵素（ＤＨＦＲ）についての両方の内因性遺伝子座を失っている。
【０６２０】
ＣＨＯ−ＤＧ４４細胞は、ＭＥＭアルファマイナス培地（Gibco  Ｎｏ．２２５６１）、１０%透析ＦＣＳ（Gibco  Ｎｏ．２６４００−０４４）及び２mmol/LのＬ−グルタミン、１００μMヒポキサンチン、１６μMチミジン（ＨＴサプリメント）中で成長させた。
【０６２１】
プラスミド
発現系はＣＭＶプロモーターを含んでいたが、以下の表に記載する。抗体として、ＩＧＦ−１Ｒに対する抗体（ＷＯ  ２００５／００５６３５；ＡＫ１８又はＡＫ２２）を使用した。
【０６２２】
【表１０】
2019167363.tif 000042
2019167363.tif 000043
【０６２３】
ＨＥＫ２９３システムにおける一過性トランスフェクション
抗体を、それぞれのプラスミド（例えば、重鎖及び／又は改変重鎖、ならびに対応する軽鎖をコードする）を用いた一過性トランスフェクションにより、ＨＥＫ２９３システム（Invitrogen）を製造者の指示に従って使用して生成した。簡単には、振盪フラスコ中又は撹拌発酵槽中のいずれかで、懸濁液中で成長するＨＥＫ２９３細胞（Invitrogen）を無血清FreeStyle（商標）２９３発現培地（Invitrogen）中で、２又は３の発現プラスミド及び２９３フェクチン（商標）又はフェクチン（Invitrogen）の混合物を用いてトランスフェクトした。２L振盪フラスコ（Corning）について、ＨＥＫ２９３細胞を、６００ml中に１×１０６個細胞/mLの密度で播種し、１２０rpm、８%ＣＯ２でインキュベートした。翌日、細胞を、Ａ）重鎖又は改変重鎖、及び等モル比での対応する軽鎖をそれぞれコードする６００μgの全プラスミドＤＮＡ（１μg/mL）を伴う２０mLのOpti-MEM（Invitrogen）ならびにＢ）２０mlのOpti-MEM  ＋  １．２mLの２９３フェクチン又はフェクチン（２μL/mL）の約４２mL混合物を用いて、約１．５×１０６個細胞/mLの細胞密度でトランスフェクトした。グルコース消費量に従い、グルコース溶液を、発酵の経過の間に加えた。分泌された抗体を含む上清を、５〜１０日後に採取し、抗体を上清から直接的に精製するか、又は上清を凍結及び保存した。
【０６２４】
精製
抗体を、細胞培養上清から、MabSelectSure-Sepharose（商標）（非ＡＡＡ突然変異体用）（GE Healthcare、スウェーデン）又はKappaSelect-Agarose（ＡＡＡ突然変異体用）（GE Healthcare、スウェーデン）を使用した親和性クロマトグラフィー、ブチルセファロース（GE Healthcare、スウェーデン）を使用した疎水性相互作用クロマトグラフィー、及びSuperdex 200サイズ排除（GE Healthcare、スウェーデン）クロマトグラフィーにより精製した。
【０６２５】
簡単には、滅菌濾過した細胞培養上清を、ＰＢＳ緩衝液（１０mM  Ｎａ２ＨＰＯ４、１mM  ＫＨ２ＰＯ４、１３７mM  ＮａＣｌ、及び２．７mM  ＫＣｌ、ｐＨ７．４）を用いて平衡化したMabSelectSuRe樹脂上に捕捉し、平衡緩衝液を用いて洗浄し、２５mMクエン酸ナトリウムを用いてｐＨ３．０で溶出した。ＡＡＡ突然変異体を、２５mMトリス、５０mM  ＮａＣｌ、ｐＨ７．２を用いて平衡化したKappaSelect樹脂上に捕捉し、平衡緩衝液を用いて洗浄し、２５mMクエン酸ナトリウムｐＨ２．９を用いて溶出した。溶出したタンパク質画分をプールし、２M  Ｔｒｉｓ、ｐＨ９．０を用いて中和した。画分を含むプール抗体を、２０mMヒスチジン、１４０mMＮａＣｌ、ｐＨ６．０を用いて平衡化したSuperdex 200 26/60 GL（GE Healthcare、スウェーデン）カラムを使用したサイズ排除クロマトグラフィーにより、さらに精製した。画分を含む抗体をプールし、Vivaspin限外濾過デバイス（Sartorius Stedim Biotech S.A、フランス）を使用して、要求される濃度まで濃縮し、−８０℃で保存した。
【０６２６】
純度及び抗体の完全性を、マイクロ流体Labchip技術（Caliper Life Science、ＵＳＡ）を使用し、ＣＥ−ＳＤＳによる各々の精製工程後に分析した。５μLのタンパク質溶液を、製造者の指示に従い、HT Protein Express Reagent Kitを使用し、ＣＥ−ＳＤＳ分析のために調製し、HT Protein Express Chipを使用したLabChip GXIIシステム上で分析した。データを、LabChip GX Softwareを使用して分析した。
【０６２７】
実施例４
ｈｕＦｃＲｎについてトランスジェニックであるマウスにおける＜ＩＧＦ−１Ｒ＞抗体の薬物動態学的（ＰＫ）試験
生活相中
試験には、雌Ｃ５７ＢＬ／６Ｊマウス（バックグラウンド）；ＦｃＲｎ欠損であるが、ヒトＦｃＲｎについて半接合トランスジェニックであるマウス（ｈｕＦｃＲｎ、２７６  −／ｔｇ系統）が含まれた。
動物：Ｃ５７ＢＬ／６Ｊマウス、ｍｕＦｃＲｎについてノックアウト、ｈｕＦｃＲｎについてトランスジェニック、２７６系統、ヘテロ接合、雄及び雌
化合物：ＨｕＭａｂ＜ＩＧＦ−１Ｒ＞ｗｔ，＜ＩＧＦ−１Ｒ＿ＹＴＥ＞及び＜ＩＧＦ−１Ｒ＿ＡＡＡ＞
用量：１０mg/kg体重、単回静脈内ボーラス投与（投与容積：１０mL/kg体重）
濃度：静脈内試験用に１mg/mL
【０６２８】
パート１
全てのマウスに、＜ＩＧＦ−１Ｒ＞、＜ＩＧＦ−１Ｒ＿ＹＴＥ＞抗体（ＹＴＥ突然変異を伴う抗ＩＧＦ−１Ｒ抗体）及び＜ＩＧＦ−１Ｒ＿ＡＡＡ＞抗体（ＩＨＨ−ＡＡＡ突然変異を伴う抗ＩＧＦ−１Ｒ抗体）の適当な溶液の１μL／動物を用いて、右目中に１回硝子体内注射した。
【０６２９】
マウスを、各々６匹の動物を伴う２群に割り付けた。血液サンプルを、投与後２、２４、及び９６時間目に１群から、７、４８、及び１６８時間目に２群から採取する。
【０６３０】
マウス右眼の硝子体中への注射は、World Precision Instruments, Inc.（ドイツ、ベルリン）からのナノリットル注射用のNanoFil Microsyringeシステムを使用することにより実施した。マウスを、２．５%イソフルランを用いて麻酔し、マウス眼の視覚化のために、４０倍倍率及びLeica KL2500 LCDライトニングを用いた、リングライトを伴うLeica MZFL3顕微鏡を使用した。その後、２μLの化合物を、３５ゲージ針を使用して注射した。
【０６３１】
血液を、血清中の化合物レベルの決定のために、各々の動物から反対側の眼の眼球後静脈叢を介して収集した。
【０６３２】
少なくとも５０μLの血清サンプルを、室温での１時間後、４℃で３分間にわたる遠心分離（９，３００ｘｇ）により、血液から得た。血清サンプルを、遠心分離の直後に凍結し、分析まで−８０℃で凍結保存した。１群の動物の処置眼を、処置後９６時間目に、２群の動物では、処置後１６８時間目に単離した。サンプルを、分析まで−８０℃で凍結保存した。
【０６３３】
パート２
全てのマウスに、適当な量の抗体溶液（即ち、１mg/mL及び１０mg/kg体重の用量及び２００μLの適用容積）を用いて、尾静脈を介して１回静脈内注射した。
【０６３４】
マウスを、各々８匹の動物を伴う３群に割り付けた。血液サンプルを、投与後０、２４、及び３３６時間目に１群から、２、１６８、及び５０４時間目に２群から、ならびに８、４８、及び６７２時間目に３群から採取する。血液を、血清中の化合物レベルの決定のために、各々の動物から球後静脈叢を介して収集した。
【０６３５】
少なくとも５０μLの血清サンプルを、室温で１時間後４℃で３分間にわたる遠心分離（９，３００ｘｇ）により、血液から得た。血清サンプルを、遠心分離の直後に凍結し、分析まで−８０℃で凍結保存した。
【０６３６】
眼全体溶解物（マウス）の調製
眼溶解物を、実験動物からの眼全体の物理化学的分解により得た。機械的破壊のために、各々の眼を、円錐底を伴う１．５mLマイクロバイアル中に移した。凍結解凍後、眼を、１mLの細胞洗浄緩衝液（Bio-Rad、Bio-Plex Cell Lysis Kit、Ｃａｔ．Ｎｏ．１７１−３０４０１１）を用いて１回洗浄した。以下の工程において、５００μLの新しく調製した細胞溶解緩衝液を加え、眼を、１．５mL組織破砕乳棒（Kimble Chase、１．５mL乳棒、Ａｒｔ．Ｎｏ．７４９５２１−１５００）を使用して破砕した。混合物を、次に、５回凍結解凍し、再度粉砕した。残りの組織から溶解物を分離するために、サンプルを、４５００×ｇで４分間にわたり遠心分離した。遠心分離後、上清を収集し、定量化ＥＬＩＳＡにおけるさらなる分析まで−２０℃で保存した。
【０６３７】
分析
マウス血清及び眼溶解物中の＜ＩＧＦ−１Ｒ＞抗体の濃度を、酵素結合免疫吸着アッセイ（ＥＬＩＳＡ）を用いて測定した。
【０６３８】
マウス血清サンプル及び眼溶解物中の＜ＩＧＦ−１Ｒ＞抗体の定量化のために、捕捉抗体及び検出抗体として使用したビオチン化及びジゴキシゲニン化モノクローナル抗体を用いた標準的な固相シリアルサンドイッチイムノアッセイを実施した。ストレプトアビジンコーティングしたマイクロタイタープレート（ＳＡ−ＭＴＰ）の固相上での捕捉抗体、分析物、及び検出抗体の結合免疫複合体を、次に、抗ジゴキシゲニン抗体に結合させた西洋ワサビペルオキシダーゼを用いて検出する。ＳＡ−ＭＴＰからの非結合物質の洗浄及びＡＢＴＳ基質の添加後、得られたシグナルは、ＳＡ−ＭＴＰの固相上に結合した分析物の量に比例している。定量化を、次に、サンプルの測定シグナルを、並列で分析したキャリブレータを参照した濃度に変換することにより行う。
【０６３９】
最初の工程において、ＳＡ−ＭＴＰを、ＭＴＰ−シェイカー上で、１００μL／ウェルのビオチン化された捕捉抗体溶液（ｍＡｂ＜ｈＦＣγＰＡＮ＞ＩｇＧ−Ｂｉ）を用いてコーティングした。合間に、キャリブレータ、ＱＣ−サンプル、及びサンプルを調製した。捕捉抗体を用いてＳＡ−ＭＴＰをコーティングした後、プレートを、洗浄緩衝液を用いて３回洗浄した。その後、１００μL／ウェルのキャリブレータ、ＱＣ−サンプル、及びサンプルを、ＳＡ−ＭＴＰ上でピペッティングし、１時間にわたり５００rpmで再びインキュベートした。分析物はここで捕捉抗体を介して、ＳＡ−ＭＴＰの固相に結合した。インキュベーション及びプレートを洗浄することによる非結合分析物の除去後、１００μL／ウェルの第１検出抗体（ｍＡｂ＜ｈＦＣγＰＡＮ＞ＩｇＧ−Ｄｉｇ）をＳＡ−ＭＴＰに加えた。再び、プレートを、シェイカー上で、５００rpmで１時間にわたりインキュベートした。洗浄後、１００μL／ウェルの第２検出抗体（ｐＡｂ＜ジゴキシゲニン＞Ｓ−Ｆａｂ−ＰＯＤ（ポリ）を、濃度５０mU/mLでＳＡ−ＭＴＰのウェルに加え、プレートを、再び、１時間にわたり、５００rpmでインキュベートした。過剰の検出抗体を除去するための最終洗浄工程後、１００μL/ウェル基質（ＡＢＴＳ（登録商標））を加える。抗体−酵素コンジュゲートは、ABTS（登録商標）基質の呈色反応を触媒する。シグナルを、次に、ＥＬＩＳＡリーダーにより、４０５nm波長（参照波長：４９０nm（［４０５／４９０］nm））で測定した。
【０６４０】
薬物動態学的評価
薬物動態学的パラメーターを、薬物動態学的評価プログラムWinNonlin（商標）（Pharsight）、バージョン５．２．１を使用し、非コンパートメント分析により算出する。
【０６４１】
実施例５
ＨＨＹ−ＡＡＡ突然変異を伴う抗体の薬物動態（ＰＫ）特性
ヒトＦｃＲｎについてトランスジェニックであるＦｃＲｎマウスを用いたＰＫデータ
生活相中：
試験は、雌Ｃ５７ＢＬ／６Ｊマウス（バックグラウンド）；ＦｃＲｎ欠損であるが、しかし、ヒトＦｃＲｎについて半接合トランスジェニックであるマウス（ｈｕＦｃＲｎ、２７６系統  −／ｔｇ）を含めた。
【０６４２】
パート１：
全てのマウスに、硝子体内に１回、右眼中に、ＩＧＦ−１Ｒ  ００３３、ＩＧＦ−１Ｒ  ００３５、ＩＧＦ−１Ｒ  ００４５（即ち、ＩＧＦ−１Ｒ  ００３３の２２．２μg化合物／動物、ＩＧＦ−１Ｒ  ００３５の２４．４μg化合物／動物、３２．０μgの化合物／動物ＩＧＦ−１Ｒ及びＩＧＦ−１Ｒ  ００４５の３２．０μg化合物／動物）の適当な溶液を用いて注射した。
【０６４３】
１３匹のマウスを、各々６及び７匹の動物を伴う２群に割り付けた。血液サンプルを、投与後、２、２４、及び９６時間目に群１から、ならびに、７、４８、及び１６８時間目に群２から採取する。
【０６４４】
マウス右眼の硝子体中への注射は、World Precision Instruments, Inc.（ドイツ、ベルリン）からのナノリットル注射用のNanoFil Microsyringeシステムを使用することにより実施した。マウスは２．５%イソフルランで麻酔し、マウスの眼の視覚化のために、４０倍の倍率及びLeica KL2500LCDライトニングを伴うリングライトを用いたLeica MZFL3顕微鏡を使用した。その後、２μLの化合物を、３５ゲージ針を使用して注射した。
【０６４５】
血液を、血清中の化合物レベルの決定のために、各々の動物の反対側の眼の眼球後静脈叢を介して収集した。
【０６４６】
少なくとも５０μLの血清サンプルを、室温での１時間後、４℃で３分間にわたる遠心分離（９３００ｘｇ）により、血液から得た。血清サンプルを、遠心分離の直後に凍結し、分析まで、−８０℃で凍結保存した。群１の動物の処置眼を、処置後９６時間目に、群２の動物では、処置後１６８時間目に単離した。サンプルを、分析まで−８０℃で凍結保存した。
【０６４７】
パート２：
全てのマウスに、静脈内に１回、尾静脈を介して、ＩＧＦ−１Ｒ  ００３３、ＩＧＦ−１Ｒ  ００３５、ＩＧＦ−１Ｒ  ００４５（即ち、ＩＧＦ−１Ｒ  ００３３の２２．２μg化合物／動物、ＩＧＦ−１Ｒ  ００３５の２４．４μg化合物／動物、３２．０μgの化合物／動物ＩＧＦ−１Ｒ及びＩＧＦ−１Ｒ  ００４５の３２．０μg化合物／動物）の適当な溶液を用いて注射した。
【０６４８】
１２匹のマウスを、各々６匹の動物を伴う２群に割り付けた。血液サンプルを、投与後、１、２４、及び９６時間目に群１から、ならびに、７、４８、及び１６８時間目に群２から採取する。血液を、血清中の化合物レベルの決定のために、各々の動物から眼球後静脈叢を介して収集した。
【０６４９】
少なくとも５０μLの血清サンプルを、室温での１時間後、４℃で３分間にわたる遠心分離（９３００ｘｇ）により、血液から得た。血清サンプルを、遠心分離の直後に凍結し、分析まで、−８０℃で凍結保存した。
【０６５０】
細胞溶解緩衝液の調製
１００μLの因子１、５０μLの因子２、及び２４．７３mLの細胞溶解緩衝液（全て、Bio-Rad、Bio-Plex Cell Lysis Kit、Ｃａｔ．Ｎｏ．１７１−３０４０１１から）を慎重に混合し、１２５μLのＰＭＳＦ溶液（２．０mLのＤＭＳＯ中に希釈した１７４．４mgのフッ化フェニルメチルスルホニル）を加える。
【０６５１】
全眼溶解物（マウス）の調製
眼溶解物を、実験動物からの眼全体の物理化学的分解により得た。機械的破壊のために、各々の眼を、円錐底を伴う１．５mLマイクロバイアル中に移した。解凍後、眼を、１mLの細胞洗浄緩衝液（Bio-Rad、Bio-Plex Cell Lysis Kit、Ｃａｔ．Ｎｏ．１７１−３０４０１１）を用いて１回洗浄した。以下の工程において、５００μLの新しく調製した細胞溶解緩衝液を加え、眼を、１．５mL組織破砕乳棒（ＶＷＲ  Ｉｎｔ．  Ａｒｔ．  Ｎｏ．４３１−００９８）を使用して破砕した。混合物を、次に、５回凍結解凍し、再度粉砕した。残りの組織から溶解物を分離するために、サンプルを、４５００×ｇで４分間にわたり遠心分離した。遠心分離後、上清を収集し、定量化ＥＬＩＳＡにおけるさらなる分析まで、−２０℃で保存した。
【０６５２】
分析（血清）
マウス血清サンプル中の抗体の定量化のために、捕捉抗体及び検出抗体として使用したビオチン化及びジゴキシゲニン化モノクローナル抗体を用いた標準的な固相シリアルサンドイッチイムノアッセイを実施する。血清は、全血液サンプル容積の約５０%を占める。
【０６５３】
マウス血清サンプル中のより詳細な抗体の濃度は、ヒトＩｇＧ（Ｆａｂ）特異的酵素結合免疫吸着アッセイにより決定した。ストレプトアビジンコートしたマイクロタイタープレートを、撹拌しながら室温で１時間にわたり、アッセイ緩衝液で希釈した捕捉抗体としてのビオチン化抗ヒトＦａｂ（カッパ）モノクローナル抗体Ｍ−１．７．１０−ＩｇＧとインキュベートした。リン酸緩衝生理食塩水−ポリソルベート２０（Tween20）で３回洗浄した後、種々の希釈での血清サンプルを加え、室温で１時間にわたる第２のインキュベーションが続いた。３回の繰り返し洗浄後、結合抗体を、ジゴキシゲニンにコンジュゲートされた抗ヒトＦａｂ（ＣＨ１）モノクローナル抗体Ｍ−１．１９．３１−ＩｇＧ、それに続く西洋ワサビペルオキシダーゼ（ＨＲＰ）にコンジュゲートされた抗ジゴキシゲニン抗体を用いた、その後のインキュベーションにより検出した。ＡＢＴＳ（２，２’−アジノ−ビス（３−エチルベンゾチアゾリン−６−スルホン酸）；Roche Diagnostics GmbH、マンハイム、ドイツ）を、呈色した反応生成物を形成するためのＨＲＰ基質として使用した。得られた反応生成物の吸光度を、４０５nm（ＡＢＴＳ；参照波長：４９０nm）で読み取った。
【０６５４】
全てのサンプル、陽性及び陰性対照サンプルを、繰り返して分析し、提供される抗体スタンダードに対して較正した。
【０６５５】
分析（眼溶解物）
マウス眼溶解物サンプル中の分析物の濃度を、ＥＬＥＣＳＹＳ（登録商標）機器プラットフォーム（Roche Diagnostics GmbH、マンハイム、ドイツ）に基づく、正規の電気化学発光免疫測定（ＥＣＬＩＡ）方法を非ＧＬＰ条件下で使用して決定した。
【０６５６】
非希釈上清（眼溶解物）を、捕捉分子及び検出分子と、３７℃で９分間にわたりインキュベートした。ビオチン化抗ヒトＦａｂ（カッパ）モノクローナル抗体Ｍ−１．７．１０−ＩｇＧを捕捉分子として使用し、ルテニウム（ＩＩ）トリス（ビスピリジル）３２＋標識抗ヒトＦａｂ（ＣＨ１）モノクローナル抗体Ｍ−１．１９．３１−ＩｇＧを検出用に使用した。ストレプトアビジンコートされた磁性微粒子を加え、３７℃で、追加の９分間にわたりインキュベートし、ビオチン−ストレプトアビジン相互作用に起因して、事前に形成された免疫複合体の結合を可能にした。微粒子を、電極上で磁気的に捕捉し、化学発光シグナルを、共反応体トリプロピルアミン（ＴＰＡ）を使用して生成した。得られたシグナルを、光電子増倍管検出器により測定した。
【０６５７】
【表１１】
2019167363.tif 000044
【０６５８】
【表１２】
2019167363.tif 000045
【０６５９】
【表１３】
2019167363.tif 000046
【０６６０】
結果：
Ａ）血清濃度
血清濃度についての結果を以下の表及び図２に示す。
【０６６１】
【表１４】
2019167363.tif 000047
【０６６２】
【表１５】
2019167363.tif 000048
【０６６３】
【表１６】
2019167363.tif 000049
【０６６４】
【表１７】
2019167363.tif 000050
【０６６５】
結果：
Ｂ）左及び右眼の眼溶解物中の濃度
眼溶解物中の濃度についての結果を以下の表及び図３〜５に示す。
【０６６６】
【表１８】
2019167363.tif 000051
【０６６７】
【表１９】
2019167363.tif 000052
【０６６８】
【表２０】
2019167363.tif 000053
【０６６９】
【表２１】
2019167363.tif 000054
【０６７０】
【表２２】
2019167363.tif 000055
【０６７１】
【表２３】
2019167363.tif 000056
【０６７２】
【表２４】
2019167363.tif 000057
【０６７３】
結果の要約
硝子体内適用後、本明細書において報告する抗ＩＧＦ−１Ｒ抗体００３５及び００４５（片側又は両側ＨＨＹ−ＡＡＡ突然変異を伴う）は、ＨＨＹ−ＡＡＡ突然変異を有さない抗ＩＧＦ−１Ｒ抗体（ＩＧＦ−１Ｒ００３３）と比較して、眼溶解物中で同様の濃度（９６及び１６８時間後）を示す。
【０６７４】
また、硝子体内適用後、本明細書において報告する抗ＩＧＦ−１Ｒ抗体００３５及び００４５（片側又は両側ＨＨＹ−ＡＡＡ突然変異を伴う）は、また、ＨＨＹ−ＡＡＡ突然変異を有さない抗ＩＧＦ−１Ｒ抗体（ＩＧＦ−１Ｒ００３３）と比較して、より速いクリアランス及び血清中でより短い半減期を示す。
【０６７５】
前述の発明は、理解を明確にする目的のために、例示及び実施例によりいくらか詳細に説明してきたが、記載及び実施例を、本発明の範囲を限定するものとして解釈すべきではない。本明細書において引用される全ての特許及び科学文献の開示は、参照により、その全体がおいて明確に組み入れられる。
【図１】
2019167363.tif 000058
【図２】
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【図３】
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【図４】
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【図５】
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【配列表】
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【手続補正書】
【提出日】令和1年6月12日(2019.6.12)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
ヒトＩＧＦ−１Ｒに特異的に結合し、無効になったＦｃＲｎ結合を有する抗ＩＧＦ−１Ｒ抗体であって、
抗体は、ヒトＩｇＧ１サブクラスの第１のＦｃ領域ポリペプチド及び第２のＦｃ領域ポリペプチドを含み、
第１のＦｃ領域ポリペプチドは、突然変異Ｉ２５３Ａ、Ｈ３１０Ａ及びＨ４３５Ａを含み、そして第２のＦｃ領域ポリペプチドは、突然変異Ｈ３１０Ａ、Ｈ４３３Ａ及びＹ４３６Ａ（Ｋａｂａｔに従ったナンバリング）を含む、
抗ＩＧＦ−１Ｒ抗体。
【請求項２】
表面プラズモン共鳴ベースの決定方法を使用して、検出可能なＦｃＲｎ結合を有さない、請求項１記載の抗体。
【請求項３】
抗体が、３分又はそれ以下の、ＦｃＲｎ親和性クロマトグラフィーカラム上での保持時間を有する、請求項１〜２のいずれか一項記載の抗体。
【請求項４】
抗体が、ヒトＦｃＲｎに特異的に結合せず、及び／又はブドウ球菌プロテインＡに特異的に結合する、請求項１〜３のいずれか一項記載の抗体。
【請求項５】
請求項１〜４のいずれか一項記載の抗体であって、抗体が、以下：
−  Ｆｃ領域ポリペプチドにおいて突然変異を有さない、対応する二重特異性抗体と比較して、より低い血清濃度を示し、及び／又は
−  Ｆｃ領域ポリペプチドにおいて突然変異を有さない、対応する二重特異性抗体と比較して、右眼全体の溶解物中で同様の濃度を示し、及び／又は
−  ヒトＦｃＲｎへの無効になった結合を有し、及び／又は
−  ブドウ球菌プロテインＡへの維持された結合を有する
ことで特徴付けられる、抗体。
【請求項６】
請求項１〜５のいずれか一項記載の抗体であって、以下：
ａ）配列番号５６のアミノ酸配列（ＨＶＲ−Ｈ１）、配列番号５７のアミノ酸配列（ＨＶＲ−Ｈ２）、及び配列番号５８のアミノ酸配列（ＨＶＲ−Ｈ３）をＨＶＲとして含む抗体重鎖ならびに配列番号５９のアミノ酸配列（ＨＶＲ−Ｌ１）、配列番号６０のアミノ酸配列（ＨＶＲ−Ｌ２）、及び配列番号６１のアミノ酸配列（ＨＶＲ−Ｌ３）をＨＶＲとして含む抗体軽鎖、又は
ｂ）配列番号６４のアミノ酸配列（ＨＶＲ−Ｈ１）、配列番号６５のアミノ酸配列（ＨＶＲ−Ｈ２）、及び配列番号６６のアミノ酸配列（ＨＶＲ−Ｈ３）をＨＶＲとして含む抗体重鎖ならびに配列番号６７のアミノ酸配列（ＨＶＲ−Ｌ１）、配列番号６８のアミノ酸配列（ＨＶＲ−Ｌ２）、及び配列番号６９のアミノ酸配列（ＨＶＲ−Ｌ３）をＨＶＲとして含む抗体軽鎖、又は
ｃ）配列番号７２のアミノ酸配列（ＨＶＲ−Ｈ１）、配列番号７３のアミノ酸配列（ＨＶＲ−Ｈ２）、及び配列番号７４のアミノ酸配列（ＨＶＲ−Ｈ３）をＨＶＲとして含む抗体重鎖ならびに配列番号７５のアミノ酸配列（ＨＶＲ−Ｌ１）、配列番号７６のアミノ酸配列（ＨＶＲ−Ｌ２）、及び配列番号７７のアミノ酸配列（ＨＶＲ−Ｌ３）をＨＶＲとして含む抗体軽鎖、又は
ｄ）配列番号８０のアミノ酸配列（ＨＶＲ−Ｈ１）、配列番号８１のアミノ酸配列（ＨＶＲ−Ｈ２）、及び配列番号８２のアミノ酸配列（ＨＶＲ−Ｈ３）をＨＶＲとして含む抗体重鎖ならびに配列番号８３のアミノ酸配列（ＨＶＲ−Ｌ１）、配列番号８４のアミノ酸配列（ＨＶＲ−Ｌ２）、及び配列番号８５のアミノ酸配列（ＨＶＲ−Ｌ３）をＨＶＲとして含む抗体軽鎖、又は
ｅ）配列番号８８のアミノ酸配列（ＨＶＲ−Ｈ１）、配列番号８９のアミノ酸配列（ＨＶＲ−Ｈ２）、及び配列番号９０のアミノ酸配列（ＨＶＲ−Ｈ３）をＨＶＲとして含む抗体重鎖ならびに配列番号９１のアミノ酸配列（ＨＶＲ−Ｌ１）、配列番号９２のアミノ酸配列（ＨＶＲ−Ｌ２）、及び配列番号９３のアミノ酸配列（ＨＶＲ−Ｌ３）をＨＶＲとして含む抗体軽鎖、又は
ｆ）配列番号０２のアミノ酸残基３１〜３５（ＨＶＲ−Ｈ１）、アミノ酸残基５０〜６６（ＨＶＲ−Ｈ２）、及びアミノ酸残基９９〜１０７（ＨＶＲ−Ｈ３）をＨＶＲとして含む抗体重鎖ならびに配列番号０４のアミノ酸残基２４〜３４（ＨＶＲ−Ｌ１）、アミノ酸残基５０〜５６（ＨＶＲ−Ｌ２）、及びアミノ酸残基８９〜９８（ＨＶＲ−Ｌ３）をＨＶＲとして含む抗体軽鎖、又は
ｇ）配列番号０１のアミノ酸残基３１〜３５（ＨＶＲ−Ｈ１）、アミノ酸残基５０〜６６（ＨＶＲ−Ｈ２）、及びアミノ酸残基９９〜１０７（ＨＶＲ−Ｈ３）をＨＶＲとして含む抗体重鎖ならびに配列番号０３のアミノ酸残基２４〜３４（ＨＶＲ−Ｌ１）、アミノ酸残基５０〜５６（ＨＶＲ−Ｌ２）、及びアミノ酸残基８９〜９８（ＨＶＲ−Ｌ３）をＨＶＲとして含む抗体軽鎖
を有する、抗体。
【請求項７】
請求項１〜６のいずれか一項記載の抗体であって、以下：
ａ）配列番号６２の重鎖可変ドメインＶＨ及び配列番号６３の軽鎖可変ドメインＶＬ、又は
ｂ）配列番号７０の重鎖可変ドメインＶＨ及び配列番号７１の軽鎖可変ドメインＶＬ、又は
ｃ）配列番号７８の重鎖可変ドメインＶＨ及び配列番号７９の軽鎖可変ドメインＶＬ、又は
ｄ）配列番号８６の重鎖可変ドメインＶＨ及び配列番号８７の軽鎖可変ドメインＶＬ、又は
ｅ）配列番号９４の重鎖可変ドメインＶＨ及び配列番号９５の軽鎖可変ドメインＶＬ、又は
ｆ）配列番号０５の重鎖可変ドメインＶＨ及び配列番号０７の軽鎖可変ドメインＶＬ、又は
ｇ）配列番号０６の重鎖可変ドメインＶＨ及び配列番号０８の軽鎖可変ドメインＶＬ
を含む、抗体。
【請求項８】
請求項１〜７のいずれか一項記載の抗体であって、
ｉ）第１のＦｃ領域ポリペプチドが、突然変異Ｌ２３４Ａ、Ｌ２３５Ａ、Ｙ３４９Ｃ、Ｔ３６６Ｓ、Ｌ３６８Ａ、Ｙ４０７Ｖを伴うヒトＩｇＧ１  Ｆｃ領域ポリペプチド、突然変異Ｐ３２９Ｇを伴うヒトＩｇＧ１  Ｆｃ領域ポリペプチド、突然変異Ｌ２３４Ａ、Ｌ２３５Ａ、Ｐ３２９Ｇを伴うヒトＩｇＧ１  Ｆｃ領域ポリペプチド、突然変異Ｐ３２９Ｇ、Ｙ３４９Ｃ、Ｔ３６６Ｓ、Ｌ３６８Ａ、Ｙ４０７Ｖを伴うヒトＩｇＧ１  Ｆｃ領域ポリペプチド、突然変異Ｌ２３４Ａ、Ｌ２３５Ａ、Ｐ３２９Ｇ、Ｙ３４９Ｃ、Ｔ３６６Ｓ、Ｌ３６８Ａ、Ｙ４０７Ｖを伴うヒトＩｇＧ１  Ｆｃ領域ポリペプチドを含む群より選択され、ならびに
ｉｉ）第２のＦｃ領域ポリペプチドが、突然変異Ｌ２３４Ａ、Ｌ２３５Ａ、Ｓ３５４Ｃ、Ｔ３６６Ｗを伴うヒトＩｇＧ１  Ｆｃ領域ポリペプチド、突然変異Ｐ３２９Ｇを伴うヒトＩｇＧ１  Ｆｃ領域ポリペプチド、突然変異Ｌ２３４Ａ、Ｌ２３５Ａ、Ｐ３２９Ｇを伴うヒトＩｇＧ１  Ｆｃ領域ポリペプチド、突然変異Ｐ３２９Ｇ、Ｓ３５４Ｃ、Ｔ３６６Ｗを伴うヒトＩｇＧ１  Ｆｃ領域ポリペプチド、突然変異Ｌ２３４Ａ、Ｌ２３５Ａ、Ｐ３２９Ｇ、Ｓ３５４Ｃ、Ｔ３６６Ｗを伴うヒトＩｇＧ１  Ｆｃ領域ポリペプチドを含む群より選択される、抗体。
【請求項９】
請求項１〜８のいずれか一項記載の抗体であって、
ｉ）Ｆｃ領域ポリペプチドがヒトＩｇＧ１  Ｆｃ領域ポリペプチドであり、第２のＦｃ領域ポリペプチドがヒトＩｇＧ１  Ｆｃ領域ポリペプチドであり、又は
ｉｉ）第１のＦｃ領域ポリペプチドが、突然変異Ｌ２３４Ａ、Ｌ２３５Ａを伴うヒトＩｇＧ１  Ｆｃ領域ポリペプチドであり、第２のＦｃ領域ポリペプチドが、突然変異Ｌ２３４Ａ、Ｌ２３５Ａを伴うヒトＩｇＧ１  Ｆｃ領域ポリペプチドであり、又は
ｉｉｉ）第１のＦｃ領域ポリペプチドが、突然変異Ｌ２３４Ａ、Ｌ２３５Ａ、Ｐ３２９Ｇを伴うヒトＩｇＧ１  Ｆｃ領域ポリペプチドであり、第２のＦｃ領域ポリペプチドが、突然変異Ｌ２３４Ａ、Ｌ２３５Ａ、Ｐ３２９Ｇを伴うヒトＩｇＧ１  Ｆｃ領域ポリペプチドであり、又は
ｉｖ）第１のＦｃ領域ポリペプチドが、突然変異Ｌ２３４Ａ、Ｌ２３５Ａ、Ｓ３５４Ｃ、Ｔ３６６Ｗを伴うヒトＩｇＧ１  Ｆｃ領域ポリペプチドであり、第２のＦｃ領域ポリペプチドが、突然変異Ｌ２３４Ａ、Ｌ２３５Ａ、Ｙ３４９Ｃ、Ｔ３６６Ｓ、Ｌ３６８Ａ、Ｙ４０７Ｖを伴うヒトＩｇＧ１  Ｆｃ領域ポリペプチドであり、又は
ｖ）第１のＦｃ領域ポリペプチドが、突然変異Ｌ２３４Ａ、Ｌ２３５Ａ、Ｐ３２９Ｇ、Ｓ３５４Ｃ、Ｔ３６６Ｗを伴うヒトＩｇＧ１  Ｆｃ領域ポリペプチドであり、第２のＦｃ領域ポリペプチドが、突然変異Ｌ２３４Ａ、Ｌ２３５Ａ、Ｐ３２９Ｇ、Ｙ３４９Ｃ、Ｔ３６６Ｓ、Ｌ３６８Ａ、Ｙ４０７Ｖを伴うヒトＩｇＧ１  Ｆｃ領域ポリペプチドである、抗体。
【請求項１０】
眼内でＩＧＦ−１Ｒを阻害することにおける使用のための、請求項１〜９のいずれか一項記載の抗ＩＧＦ−１Ｒ抗体。
【請求項１１】
硝子体内適用のための、請求項１〜９のいずれか一項記載の抗ＩＧＦ−１Ｒ抗体。
【請求項１２】
血管性眼疾患の処置のための、請求項１〜９のいずれか一項記載の抗ＩＧＦ−１Ｒ抗体。
【請求項１３】
請求項１〜９のいずれか一項記載の抗ＩＧＦ−１Ｒ抗体、及び場合により、医薬的に許容可能な担体を含む医薬製剤。
【請求項１４】
医薬としての使用のための、請求項１〜９のいずれか一項記載の抗ＩＧＦ−１Ｒ抗体。
【請求項１５】
血管性眼疾患を処置する際での使用のための、請求項１〜９のいずれか一項記載の抗ＩＧＦ−１Ｒ抗体。
【請求項１６】
処置の方法における使用のための、請求項１〜９のいずれか一項記載の抗ＩＧＦ−１Ｒ抗体。
【請求項１７】
請求項１〜９のいずれか一項記載の抗ＩＧＦ−１Ｒ抗体の効果的な量を個体に投与することを含む、血管性眼疾患を有する個体を処置する方法における使用のための、請求項１〜９のいずれか一項記載の抗ＩＧＦ−１Ｒ抗体。
【請求項１８】
方法が、少なくとも１つの追加の治療薬剤の効果的な量を個体に投与することをさらに含む、請求項１７記載の抗体。
【請求項１９】
ＩＧＦ−１Ｒシグナル伝達を阻害するための、請求項１〜９のいずれか一項記載の効果的な抗ＩＧＦ−１Ｒ抗体を個体に投与することを含む、個体において血管新生を阻害する方法における使用のための、請求項１〜９のいずれか一項記載の抗ＩＧＦ−１Ｒ抗体。
【請求項２０】
医薬の製造における、請求項１〜９のいずれか一項記載の抗ＩＧＦ−１Ｒ抗体の使用。
【請求項２１】
医薬が、血管性眼疾患の処置のためである、請求項２０記載の使用。
【請求項２２】
医薬が、医薬の効果的な量を、血管性眼疾患を有する個体に投与することを含む、血管性眼疾患を処置する方法における使用のためである、請求項２０〜２１のいずれか一項記載の使用。
【請求項２３】
方法が、少なくとも１つの追加の治療薬剤の効果的な量を個体に投与することをさらに含む、請求項２２記載の使用。
【請求項２４】
医薬が、血管新生を阻害するためである、請求項２０〜２１のいずれか一項記載の使用。
【請求項２５】
医薬が、ＩＧＦ−１Ｒ媒介性シグナル伝達を阻害するために効果的な医薬の量を個体に投与することを含む、個体において血管新生を阻害する方法における使用のためである、請求項２０〜２４のいずれか一項記載の使用。
【請求項２６】
請求項１〜９のいずれか一項記載の、抗ＩＧＦ−１Ｒ抗体を含む医薬製剤。
【外国語明細書】
2019167363000001.pdf