(57)【要約】【課題】ＲＡＳがんにおける脂質捕捉の提供。【解決手段】脂質捕捉を標的化することを含む、Ｒａｓに関係するがんを処置するための方法および組成物が提供される。また、高いまたは低い応答性のがんを同定し、かつ／または特徴付けるための方法および組成物が提供される。本開示の別の態様では、がんを処置する方法であって、がん細胞成長の１種または複数の薬理学的阻害剤を、がんの処置を必要としている患者に投与することと、該患者に、例えば多価不飽和脂肪酸に対して１を超える比の飽和脂肪酸を含む治療食を消費することによって、好適な捕捉脂質の摂取を制限する治療食を消費するように指示することとを含む方法が提供される。【選択図】なし【特許請求の範囲】
【請求項１】
明細書に記載の発明。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
政府支援
本発明は、国立衛生研究所により授与された助成金番号ＣＡ１６３５９１の下、政府支援により成された。政府は、本発明に一定の権利を有する。
【背景技術】
【０００２】
背景
がん細胞は、増殖を支持するために一定のエネルギー供給および構造的な構成成分を必要とする。多くのがん細胞は、高いｄｅ  ｎｏｖｏ脂質合成速度を有することが示されている（例えば、Ｓａｎｔｏｓ  ＆  Ｓｃｈｕｌｚｅ  ＦＥＢＳ  Ｊ  ＭｉｎｉＲｅｖｉｅｗ  ２７９巻（１５号）：２６１０頁、２０１２年７月３日参照）。近年、がんを処置するために、いくつかの治療開発戦略が、脂質生合成の阻害剤に焦点を合わせている。
【０００３】
ヒトのがんにおいて最も一般的に活性化される経路のうちの２つが、ＰＩ３Ｋ−Ａｋｔ経路およびＲａｓ経路である。ＰＩ３Ｋ−Ａｋｔ経路は、がんにおいて役割を果たすことに加えて、インスリンシグナル伝達の主なエフェクターであるため、この経路の代謝効果は広範囲に研究されてきた。Ａｋｔ活性化は、グルコースの取込み、解糖フラックス、および乳酸排出、すなわちワールブルグ効果を促進する。さらに、Ａｋｔ活性化は、ｍＴＯＲの下流活性化によって、タンパク質合成を増加させる。最後にＡｋｔは、酵素リン酸化、およびＳＲＥＢＰのｍＴＯＲ依存性活性化のような転写活性化を含めた機序を介して、脂質生成を誘導する。
【０００４】
脂肪酸は、脂質の主な構成成分である。脂肪酸の合成には、細胞質アセチル−ＣｏＡの生成が必要である（図１Ａ）。酸素正常状態では、主な経路は、グルコースからピルビン酸への異化反応を含み、ピルビン酸は、ピルビン酸デヒドロゲナーゼによってミトコンドリアアセチル−ＣｏＡに変換される。次に、アセチル−ＣｏＡは、クエン酸の形態で細胞質ゾルに輸送され、直接的なＡｋｔ標的であるＡＴＰ−クエン酸リアーゼによって切断されて、細胞質アセチル−ＣｏＡを生成する。低酸素状態では、ピルビン酸デヒドロゲナーゼが、ピルビン酸デヒドロゲナーゼキナーゼによって不活化され、グルタミンによって駆動される還元的カルボキシル化が、クエン酸、したがってアセチル−ＣｏＡの分率を増加させる原因となる。
【０００５】
脂肪酸合成経路のその後のステップは、ＳＲＥＢＰ標的であるアセチル−ＣｏＡカルボキシラーゼおよび脂肪酸シンターゼによって触媒され、パルミチン酸（Ｃ１６：０、ここで１６は、脂肪酸における炭素原子の数を指し、０は二重結合の数を指す）を生じる。次に、パルミチン酸は、様々な伸長反応および不飽和化反応のための基質となって、細胞による多様な脂肪酸の要求に応える。多様な脂肪酸のうち、最も豊富に存在するものが、一価不飽和脂肪酸のオレイン酸（Ｃ１８：１）である。オレイン酸は、伸長によってパルミチン酸からステアリン酸（Ｃ１８：０）になり、その後、電子アクセプターとして酸素を必要とするΔ９ステアロイル−ＣｏＡデサチュラーゼ１（ＳＣＤ１）による不飽和化を受けて生成される。適切な膜流動性、したがって細胞完全性を確保するためには、細胞によって、ステアリン酸に対するオレイン酸の特定の比が維持されなければならず、著しい不均衡は、アポトーシスを誘導することが示されている。ＳＣＤ１は、ＰＩ３Ｋ−Ａｋｔ−ｍＴＯＲ経路によって調節され、肥満およびがんの両方の薬理学的標的として調査されている。
【０００６】
Ｒａｓ活性化は、ＰＩ３Ｋ−Ａｋｔ経路の活性化と同様に、グルコースの取込みおよび乳酸排出を誘導する。Ｒａｓは、ＰＩ３Ｋ−Ａｋｔ経路を活性化することが公知であるが、近年の知見では、下流の代謝効果が分岐し得ることが示唆されている。例えば、Ｒａｓは、ミトコンドリア呼吸を低減する。さらに、Ｒａｓは、マクロピノサイトーシスおよび自己貪食を誘導し、それによって代謝基質の潜在的に可能な代替源を提供する。分岐的な代謝効果のさらなる裏付けとして、マウス異種移植実験によって、Ｒａｓ駆動性腫瘍とＰＩ３Ｋ−Ａｋｔ活性化を伴う腫瘍との間でカロリー制限への感度に差異があることが明らかになった。Ａｋｔの脂質生成促進効果とは対照的に、脂質代謝に対するＲａｓの影響は、調査されていない。さらに、脂質代謝を含めた代謝における酸素利用性と癌遺伝子シグナル伝達の相互作用は、広範に調査されていない。
上述の観察は、Ｒａｓ駆動性がんの処置に有用な組成物および製剤が絶えず必要であるという証拠となる。
【先行技術文献】
【非特許文献】
【０００７】
【非特許文献１】Ｓａｎｔｏｓ  ＆  Ｓｃｈｕｌｚｅ  ＦＥＢＳ  Ｊ  ＭｉｎｉＲｅｖｉｅｗ  ２７９巻（１５号）：２６１０頁、２０１２年７月３日
【発明の概要】
【課題を解決するための手段】
【０００８】
要旨
本開示は、具体的には、低酸素状態の細胞が、血清脂肪酸を捕捉することによってｄｅ
ｎｏｖｏ脂質生成を迂回し、したがってアセチル−ＣｏＡの必要性および酸素依存性ＳＣＤ１−反応の両方を迂回するという認識、さらにはｄｅ  ｎｏｖｏ脂質生成の低酸素状態による再プログラミングが、酸素正常状態の細胞においてＲａｓ活性化によって再生され得るという認識を包含する。したがって本開示は、例えばＲａｓ駆動性腫瘍を含めたＲａｓ駆動性細胞が、ＳＣＤ１阻害に耐性を示し得ることを実証する。さらに本開示は、例えばＲａｓ駆動性腫瘍を含めたＲａｓ駆動性細胞が、それらによる脂質捕捉の成功を低減する治療レジメンに対して感受性を示し得ることを実証する。
【０００９】
本開示は、具体的には、低酸素状態の細胞および／またはＲａｓ駆動性細胞による脂質捕捉にとって好ましい基質が、１つの脂肪酸の尾部を有するリン脂質（リゾリン脂質）を含むことを実証する。本開示は、例えばＲａｓ駆動性腫瘍を含めたＲａｓ駆動性細胞が、それらによるリゾリン脂質捕捉の成功を低減する治療レジメンに対して感受性を示し得ることを実証する。
【００１０】
１３Ｃ−トレーサーおよびリピドミクス（ｌｉｐｉｄｏｍｉｃｓ）を使用して、形質転換細胞における脂質生成を、癌遺伝子発現および酸素利用性の関数として研究した。低酸素状態では、脂肪酸の移入を増やすことによって、ｄｅ  ｎｏｖｏ脂肪酸合成および不飽和化の要求が減少することが見出された。発癌性Ｒａｓは、低酸素状態の代謝表現型の発生を繰り返し、脂肪酸取込みへの依存度が増加すると、Ｒａｓ駆動性がん細胞はＳＣＤ１阻害に耐性を有するようになる。移入脂肪酸の主な供給源は、１つの脂肪酸の尾部を有する血清脂質であるリゾ脂質（ｌｙｓｏｌｉｐｉｄ）である。単一の脂肪酸の尾部を有する脂質を異化する能力は、侵襲性のがんおよびＲａｓ駆動性がんにおいて増強されることが既に示されていた。本発明の結果は、関係するリゾ脂質の捕捉が、低酸素状態の細胞およびＲａｓ駆動性がん細胞の両方における脂肪酸獲得の主な経路であり得ることを示している。
【００１１】
また本開示は、具体的には、ホスファチジルグリセロール脂質ならびに／またはより高い不飽和度および／もしくはより長い炭素鎖を有する脂肪酸が、腫瘍（例えばＲａｓ関連腫瘍）において、それに隣接する良性腫瘍よりも高いレベルで典型的に検出可能であったことを実証する。本開示は、例えばＲａｓ駆動性腫瘍を含めたＲａｓ駆動性細胞が、それらによるこのようなホスファチジルグリセロール脂質および／またはより高い不飽和度を有する脂肪酸の捕捉の成功を低減する治療レジメンに対して感受性を示し得ることを実証する。
【００１２】
一態様では、本開示は、具体的には、例えば脂質摂取の食事管理によって、血清中の捕捉脂質のレベルおよび／またはタイプを制御することによって、Ｒａｓ駆動性細胞（例えばＲａｓ関連腫瘍）による脂質捕捉の成功を低減するための様式を提供する。一部の実施形態では、脂質摂取は、好適な捕捉脂質の摂取を制限することによって制御される。一部の実施形態では、脂質摂取は、他の脂質と比較して、好適な捕捉脂質の相対的な摂取を調節することによって制御される。一部の特定の実施形態では、脂質摂取は、脂質を含む、特に目的の細胞または腫瘍にとって好適な捕捉脂質ではない脂質を含有する栄養サプリメントを提供および／または使用することによって制御される。
【００１３】
多くの実施形態では、例えばＲａｓ駆動性の制御による脂質捕捉を低減するための食事管理は、過剰の完全飽和した脂肪酸を含む治療食（ｄｉｅｔ）を消費することまたは投与することを含む。一部の実施形態では、このような食事管理は、このような完全飽和した脂肪酸を含むまたはそれからなる栄養サプリメントを使用することであり、または使用することを含む。
【００１４】
単なる一つの例を挙げると、一部の実施形態では、栄養サプリメントにおける多価不飽和脂肪酸に対する飽和脂肪酸の比が１を超える、栄養サプリメント、代用食品、または食事レジメンが提供または利用される。
【００１５】
一部の実施形態では、多価不飽和脂肪酸に対する飽和脂肪酸の比は、２、３、４、５、８、１０、１５、２０、２５、３０、３５、４０、４５、または５０を超える。
【００１６】
一部の実施形態では、栄養サプリメント、代用食品、または食事レジメンは、１０重量％未満、９重量％、８重量％、７重量％、６重量％、５重量％、４重量％、３重量％、３重量％、または好ましくは１重量％未満、０．９重量％、０．８重量％、０．７重量％、０．６重量％、０．５重量％、０．４重量％、もしくは０．３重量％の必須脂肪酸を含む。
【００１７】
一部の実施形態では、栄養サプリメント、代用食品、または食事レジメンは、０．１重量％未満の濃度のアラキドン酸を含む。
【００１８】
一部の実施形態では、栄養サプリメントまたは代用食品の少なくとも７０重量％は、脂質である。
【００１９】
一部の実施形態では、利用される脂質は、動物源および／または植物源に由来する。一部の実施形態では、利用される脂質は、ココナツに由来する。
【００２０】
一部の実施形態では、利用される脂質は、陸生動物源または酪農源（ｄａｉｒｙ  ｓｏｕｒｃｅ）に由来する。
【００２１】
一部の実施形態では、栄養サプリメント、代用食品、または食事レジメンは、タンパク質源をさらに含む。
【００２２】
一部の実施形態では、栄養サプリメント、代用食品、または食事レジメンは、炭水化物源をさらに含む。
【００２３】
一部の実施形態では、栄養サプリメントまたは代用食品は、丸剤またはカプセル剤の形態である。
【００２４】
別の態様では、がんを処置する方法であって、多価不飽和脂肪酸に対して１を超える比の飽和脂肪酸を含む治療食を、がんの処置を必要としている患者に投与することを含む方法が提供される。
【００２５】
一部の実施形態では、多価不飽和脂肪酸に対する飽和脂肪酸の比は、２、３、４、５、８、１０、１５、２０、２５、３０、３５、４０、４５、または５０を超える。
【００２６】
一部の実施形態では、がんは、Ｒａｓ駆動性がんである。一部の実施形態では、Ｒａｓ駆動性がんは、膵臓がん、非小細胞肺がん、結腸直腸がん、膀胱がん、腎臓がん、甲状腺がん、黒色腫、肝細胞癌、および血液系悪性腫瘍からなる群から選択される。
【００２７】
一部の実施形態では、治療食は、少なくとも２週間の期間にわたって投与される。一部の実施形態では、治療食は、３週間、４週間、５週間、６週間、７週間、８週間、９週間、１０週間、１１週間、１２週間、１３週間、１４週間、１５週間、１６週間、１７週間、１８週間、１９週間、２０週間、２１週間、２２週間、２３週間、２４週間、２５週間、２６週間の期間にわたって、または治療エンドポイントが観察されるまで投与される。
【００２８】
一部の実施形態では、飽和脂肪酸は、動物源および／または植物源に由来する。一部の実施形態では、飽和脂肪酸は、ココナツに由来する。一部の実施形態では、飽和脂肪酸は、陸生動物源または酪農源に由来する。
【００２９】
一部の実施形態では、該方法は、化学療法剤を投与することをさらに含む。
【００３０】
本開示の別の態様では、がんを処置する方法であって、がん細胞成長の１種または複数の薬理学的阻害剤を、がんの処置を必要としている患者に投与することと、該患者に、例えば多価不飽和脂肪酸に対して１を超える比の飽和脂肪酸を含む治療食を消費することによって、好適な捕捉脂質の摂取を制限する治療食を消費するように指示することとを含む方法が提供される。
【００３１】
本開示の別の態様では、がんを処置する方法であって、本明細書に記載の栄養サプリメントのいずれかを含む治療食を、がんの処置を必要としている患者に投与することを含む方法が提供される。
【００３２】
本開示の別の態様では、がんを処置する方法であって、がん細胞成長の１種または複数の薬理学的阻害剤を、がんの処置を必要としている患者に投与することと、該患者に、本明細書に記載の栄養サプリメントのいずれかを含む治療食を消費するように指示することとを含む方法が提供される。
【００３３】
本開示の他の特色および利点は、以下の詳細な記載から明らかになる。しかしこの詳細な記載から、当業者には、本開示の精神および範囲内の様々な変更および改変が明らかになるはずなので、詳細な記載および具体例は、本開示の好ましい実施形態を示しているものの、単に例示的なものであることを理解されたい。
本発明の実施形態において、例えば以下の項目が提供される。
（項目１）
Ｒａｓ関連腫瘍による脂質捕捉を阻害することによって、Ｒａｓ関連がんを処置する方法。
（項目２）
環境からの好適な捕捉脂質を制限することを含む、項目１に記載の方法。
（項目３）
前記好適な捕捉脂質が、多価不飽和脂質であるか、またはそれを含む、項目２に記載の方法。
（項目４）
前記好適な捕捉脂質が、リン脂質であるか、またはそれを含む、項目２に記載の方法。
（項目５）
前記好適な捕捉脂質が、リゾリン脂質であるか、またはそれを含む、項目３に記載の方法。
（項目６）
前記好適な捕捉脂質が、ホスファチジルグリセロール脂質であるか、またはそれを含む、項目２に記載の方法。
（項目７）
前記好適な捕捉脂質が、より高い不飽和度の脂肪酸であるか、またはそれを含む、項目２に記載の方法。
（項目８）
前記好適な捕捉脂質が、より長い炭素鎖であるか、またはそれを含む、項目２に記載の方法。
（項目９）
腫瘍関連性Ｒａｓ変異体タンパク質、該変異体をコードする核酸および／または相補的な核酸の存在またはレベルを検出することによって、脂質生合成阻害剤を用いる治療に対する応答性の見込みに基づき腫瘍を分類する方法。
（項目１０）
脂質捕捉に対する薬剤の効果を、適切な対照と比較して決定することによって、がんの処置に有用な薬剤を同定し、かつ／または特徴付ける方法。
（項目１１）
脂質捕捉を阻害するステップが、食事による脂質摂取を制御することを含む、項目１に記載の方法。
（項目１２）
過剰の完全飽和した脂肪酸が消費されるように、食事による脂質摂取が制御される、項目１１に記載の方法。
（項目１３）
多価不飽和脂肪酸に対する飽和脂肪酸の比が、２、３、４、５、８、１０、１５、２０、２５、３０、３５、４０、４５、または５０を超えるように、食事による脂質摂取が制御される、項目１１に記載の方法。
（項目１４）
多価不飽和脂肪酸に対する飽和脂肪酸の比が、２、３、４、５、８、１０、１５、２０、２５、３０、３５、４０、４５、または５０を超えるように、食事による脂質摂取が制御される、項目１１に記載の方法。
（項目１５）
０．３重量％未満の必須脂肪酸を含む脂肪酸を含む、栄養サプリメント。
（項目１６）
０．１重量％未満の濃度のアラキドン酸を含む、項目１５に記載の栄養サプリメント。
（項目１７）
前記栄養サプリメントの少なくとも７０重量％が脂質である、項目１５に記載の栄養サプリメント。
（項目１８）
前記脂質が、動物源および／または植物源に由来する、項目１５に記載の栄養サプリメント。
（項目１９）
前記脂質が、ココナツに由来する、項目１８に記載の栄養サプリメント。
（項目２０）
前記脂質が、陸生動物源または酪農源に由来する、項目１８に記載の栄養サプリメント。
（項目２１）
タンパク質源をさらに含む、項目１５に記載の栄養サプリメント。
（項目２２）
炭水化物源をさらに含む、項目１５に記載の栄養サプリメント。
（項目２３）
丸剤またはカプセル剤の形態である、項目１５に記載の栄養サプリメント。
（項目２４）
がんを処置する方法であって、過剰の飽和脂肪酸を含む治療食を、がんの処置を必要としている患者に投与することを含む方法。
（項目２５）
前記過剰が、多価不飽和脂肪酸に対して１を超える飽和脂肪酸の比からなるか、またはその比を含む、項目２４に記載の方法。
（項目２６）
多価不飽和脂肪酸に対する飽和脂肪酸の前記比が、２、３、４、５、８、１０、１５、２０、２５、３０、３５、４０、４５、または５０を超える、項目２４に記載の方法。
（項目２７）
前記がんが、Ｒａｓ関連がんである、項目２４に記載の方法。
（項目２８）
前記Ｒａｓ駆動がんが、膵臓がん、非小細胞肺がん、結腸直腸がん、膀胱がん、腎臓がん、甲状腺がん、黒色腫、肝細胞癌、および血液系悪性腫瘍からなる群から選択される、項目２７に記載の方法。
（項目２９）
前記治療食が、少なくとも２週間にわたって投与される、項目２４に記載の方法。
（項目３０）
前記治療食が、３週間、４週間、５週間、６週間、７週間、８週間、９週間、１０週間、１１週間、１２週間、１３週間、１４週間、１５週間、１６週間、１７週間、１８週間、１９週間、２０週間、２１週間、２２週間、２３週間、２４週間、２５週間、２６週間の期間にわたって、または治療エンドポイントが観察されるまで投与される、項目２９に記載の方法。
（項目３１）
前記飽和脂肪酸が、動物源および／または植物源に由来する、項目２４に記載の方法。
（項目３２）
前記飽和脂肪酸が、ココナツに由来する、項目３１に記載の方法。
（項目３３）
前記飽和脂肪酸が、陸生動物源または酪農源に由来する、項目３１に記載の方法。
（項目３４）
化学療法剤を投与することをさらに含む、項目２４に記載の方法。
（項目３５）
がんを処置する方法であって、がん細胞成長の１種または複数の薬理学的阻害剤を、がんの処置を必要としている患者に投与することと、該患者に、多価不飽和脂肪酸に対して１を超える比の飽和脂肪酸を含む治療食を消費するように指示することとを含む、方法。
（項目３６）
化学療法を投与することをさらに含む、項目１に記載の方法。
（項目３７）
がんを処置する方法であって、がん細胞成長の１種または複数の薬理学的阻害剤を、がんの処置を必要としている患者に投与することと、該患者に、項目１５に記載の栄養サプリメントを含む治療食を消費するように指示することとを含む、方法。
【図面の簡単な説明】
【００３４】
【図１】図１は、パルミチン酸が、主に、酸素正常状態ではグルコースから合成され、低酸素状態ではグルタミンからの寄与の割合が増加することを示す図である。（Ａ）パルミチン酸（Ｃ１６：０）のｄｅ  ｎｏｖｏ合成の模式図である。ＡＣＬ、ＡＴＰ−クエン酸リアーゼ；ＡＣＣ、アセチル−ＣｏＡカルボキシラーゼ；ＦＡＳ、脂肪酸シンターゼ；ＦＦＡ、遊離脂肪酸。（Ｂ）Ｕ−１３Ｃ−グルコースおよびＵ−１３Ｃ−グルタミン中、倍加数＞５で成長させたＭＤＡ−ＭＢ−４６８細胞由来の細胞脂質からけん化したパルミチン酸（Ｃ１６：０）の標識化パターン。（Ｃ）（Ｂ）による１３Ｃ−標識化パターンに基づく、ｄｅ  ｎｏｖｏ合成によって獲得された細胞のパルミチン酸（Ｃ１６：０）脂肪酸の尾部の百分率。（Ｄ）酸素正常状態および低酸素状態において、グルコースおよびグルタミンが脂質生成に寄与することを示す模式図。（Ｅ）酸素正常状態および低酸素状態（１％Ｏ２）におけるＵ−１３Ｃ−グルコース（Ｇｌｕｃ）およびＵ−１３Ｃ−グルタミン（Ｇｌｎ）からのアセチル基の標識化百分率。定常状態におけるＮ−アセチル−グルタミン酸およびグルタミン酸からのアセチル標識化。脂肪酸標識化の分析によって、等価な結果が得られる。すべてのデータは、Ｎ＝３の平均値±ＳＤである。
【図２】図２は、低酸素状態がＳＣＤ１フラックスを低減し、脂肪酸の移入を増加させることを示す図である。（Ａ）オレイン酸（Ｃ１８：１）合成の模式図。（Ｂ）Ｕ−１３Ｃ−グルコースおよびＵ−１３Ｃ−グルタミン中、酸素正常状態および低酸素状態（１％Ｏ２）で７２時間成長させたＭＤＡ−ＭＢ−４６８細胞に由来するＣ１８：０およびＣ１８：１の標識化パターン。（Ｃ）酸素正常状態および低酸素状態（ＭＤＡ−ＭＢ−４６８およびＨｅＬａ細胞については１％Ｏ２、Ａ５４９細胞については０．５％）における不飽和化指数（Ｃ１８：１／Ｃ１８：０）。（Ｄ〜Ｅ）Ｕ−１３Ｃ−グルコースおよびＵ−１３Ｃ−グルタミンからの脂肪酸を７２時間かけて標識化することによって測定した、酸素正常状態および低酸素状態におけるＣ１８：０（Ｄ）およびＣ１８：１（Ｅ）プールの移入百分率。すべてのデータは、Ｎ＝３の平均値±ＳＤである。＊ｐ＜０．０５；＊＊ｐ＜０．０１（両側Ｔ検定）。
【図３】図３は、発癌性Ｒａｓが、低酸素状態を模倣し、脂肪酸捕捉およびグルタミンからのアセチル−ＣｏＡ標識化を増加させ、酸素消費を低減することを示す図である。（Ａ）ベクター対照（ＣＴＬ）と対比した、ｍｙｒＡｋｔまたはＨ−ＲａｓＶ１２Ｇを発現するように操作された不死化ベビーマウス腎臓（ｉＢＭＫ）同質遺伝子的細胞株における不飽和化指数（Ｃ１８：１／Ｃ１８：０）。（Ｂ）Ｕ−１３Ｃ−グルコースおよびＵ−１３Ｃ−グルタミンからの定常状態の脂肪酸標識化によって測定したＣ１８：１の移入百分率。（Ｃ）けん化脂質の測定に基づく、新鮮な培地および使用済み培地（１０％血清、７２時間のインキュベーション）によるＣ１８：１の取込み速度。（Ｄ、Ｅ、Ｆ）ベクター対照（ＣＴＬ）と対比した、発癌性Ｋ−ＲａｓＧ１２Ｄを有するＨＰＮＥ細胞に関する同じ測定。（Ｇ）ｉＢＭＫ細胞におけるグルコースの取込みおよび乳酸排出；ｌａｃ、乳酸；ｇｌｕｃ、グルコース。（Ｈ）酸素消費。（Ｉ）グルタミン由来のα−ケトグルタル酸からの還元的カルボキシル化から生成されたクエン酸（Ｍ＋５）と酸化的代謝によって生成されたクエン酸（Ｍ＋４）の比。（Ｊ、Ｋ、Ｌ）ＨＰＮＥ細胞における同じ測定。すべてのデータは、Ｎ≧３の平均値±ＳＤである。＊ｐ＜０．０５；＊＊ｐ＜０．０１（両側Ｔ検定）。
【図４】図４は、ＳＣＤ１阻害への感度に対する、ＲａｓおよびＡｋｔの差異的な影響を示す図である。（Ａ）２００ｎＭのＣＡＹ１０５６６（ＳＣＤ１阻害剤、ＳＣＤｉ）は、Ｕ−１３Ｃ−グルコースおよびＵ−１３Ｃ−グルタミンからのＣ１８：１の標識化を阻止する。（Ｂ、Ｃ）ｘＣＥＬＬｉｇｅｎｃｅ機器における、Ａ５４９細胞、ｉＢＭＫ−Ｈ−ＲａｓＶ１２Ｇ細胞、およびｉＢＭＫ−ｍｙｒＡｋｔ細胞の成長に対するＳＣＤｉの影響。ＣＴＬはビヒクル対照である。（Ｄ）ビヒクル（ＣＴＬ）またはＳＣＤｉ（ＣＡＹ１０５６６、２．５ｍｇ／ｋｇＢＩＤｐ．ｏ．）で処理した同種移植ｉＢＭＫ−Ｈ−ＲａｓＶ１２Ｇ腫瘍およびｉＢＭＫ−ｍｙｒＡｋｔ腫瘍の成長。（Ｅ）それぞれＳＣＤｉで処理して１３日後および１４日後の、未処理対照に対するｉＢＭＫ−Ｈ−ＲａｓＶ１２Ｇ腫瘍およびｉＢＭＫ−ｍｙｒＡｋｔ腫瘍の成長百分率。パネルＡ〜Ｃについて、データは、Ｎ≧３の平均値±ＳＤである。パネル（Ｄ〜Ｅ）について、データは、１群当たりマウスＮ＝１０の平均±ＳＥＭである。＊ｐ＜０．０５；＊＊ｐ＜０．０１（両側Ｔ検定）。
【図５】図５は、脂肪酸がリゾリン脂質から捕捉されることを示す図である。（Ａ）Ａ５４９細胞およびｉＢＭＫ−Ｈ−ＲａｓＶ１２Ｇ細胞の成長中の培地のリン脂質の変化倍率（１０％血清を含む新鮮な培地に対する）。（Ｂ）ＬＰＣ（１８：１）の構造。（Ｃ）不飽和化指数（Ｃ１８：１／Ｃ１８：０）に対するＬＰＣ（１８：１）補給（２０μＭ、７２時間）の効果。（Ｄ）ｉＢＭＫ−Ｈ−ＲａｓＶ１２Ｇ細胞およびｉＢＭＫ−ｍｙｒＡｋｔ細胞におけるＵ−１３Ｃ−グルコースおよびＵ−１３Ｃ−グルタミン標識化に基づく、細胞のＣ１８：１プールへの移入の寄与百分率。（Ｅ〜Ｇ）示された補給脂質（２０μＭ）の存在下で、２００ｎＭのＳＣＤｉ（ＣＡＹ１０５６６）がある状態またはない状態で７２時間インキュベーションした後の、（未処理対照、ＣＴＬに対する）（Ｅ）ｉＢＭＫ−Ｈ−ＲａｓＶ１２Ｇに関する充填された細胞の体積、（Ｆ）ｉＢＭＫ−ｍｙｒＡｋｔに関する充填された細胞の体積、（Ｇ）Ａ５４９細胞に関する充填された細胞の体積。ＬＰＣ、リゾホスファチジルコリン；ＰＣ、ホスファチジルコリン；ＰＧ、ホスファチジルグリセロール；ＰＩ、ホスファチジルイノシトール；ＭＧ、モノアシルグリセロール。データは、（Ａ）Ｎ＝３の平均値、（Ｃ〜Ｄ）Ｎ＝３の平均値±ＳＤ、（Ｅ〜Ｇ）Ｎ＝２の平均値である。＊ｐ＜０．０５；＊＊ｐ＜０．０１（両側Ｔ検定）。
【図６】図６は、酸素正常状態および低酸素状態における脂肪酸標識化を示す図である。Ｕ−１３Ｃ−グルコースおよびＵ−１３Ｃ−グルタミン中、酸素正常状態および低酸素状態（ＨｅＬａについては１％Ｏ２、Ａ５４９については０．５％）で７２時間成長させた細胞からのけん化細胞脂質抽出物に由来する、ステアリン酸（Ｃ１８：０）およびオレイン酸（Ｃ１８：１）の標識化パターン。すべてのデータは、Ｎ＝３の平均値±ＳＤである。
【図７】図７は、ステアリン酸（Ｃ１８：０）の移入と対比した、ｄｅ  ｎｏｖｏ合成に対する発癌性Ｒａｓの効果を示す図である。（Ａ）Ｕ−１３Ｃ−グルコースおよびＵ−１３Ｃ−グルタミンからの脂肪酸標識化（７２時間）によって測定した、ベクター対照（ＣＴＬ）と対比した、ｍｙｒＡｋｔまたはＨ−ＲａｓＶ１２Ｇを発現するように操作された不死化ベビーマウス腎臓（ｉＢＭＫ）同質遺伝子的細胞株、およびベクター対照（ＣＴＬ）と対比した発癌性Ｋ−ＲａｓＧ１２Ｄを有するＨＰＮＥ細胞における、Ｃ１８：０の移入百分率。（Ｂ）けん化脂質の測定に基づく、新鮮な培地および使用済み培地（１０％血清、７２時間のインキュベーション）からのＣ１８：０の取込み速度。すべてのデータは、Ｎ≧３の平均値±ＳＤである。＊ｐ＜０．０５；＊＊ｐ＜０．０１（両側Ｔ検定）。
【図８】図８は、６ｃｍの組織培養皿における細胞成長に対するＳＣＤ１阻害の効果を示す図である。２００ｎＭのＣＡＹ１０５６６で処理すると、９６ウェル培養プレートで成長させるｘＣＥＬＬｉｇｅｎｃｅ系を使用した場合よりも、６ｃｍの皿上では細胞が速く成長し、したがって培地脂質を急速に消費するので、成長阻害の開始は、組織培養皿の方が早く生じる。Ｎ＝２の平均値。
【図９】図９は、２００ｎＭのＣＡＹ１０５６６が、Ｃ１８：１標識化を完全に阻止するのに十分であることを示す図である。細胞を、２００ｎＭのＣＡＹ１０５６６（ＳＣＤ１阻害剤、ＳＣＤｉ）またはビヒクル対照（ＣＴＬ）で処理する一方で、Ｕ−１３Ｃ−グルコースおよびＵ−１３Ｃ−グルタミンを含む培地で４８時間培養した。すべてのデータは、Ｎ≧３の平均値±ＳＤである。
【図１０】図１０は、がん細胞によるリゾリン脂質の消費を示す図である。（Ａ）ＭＤＡ−ＭＢ−４６８およびｉＢＭＫ−ｍｙｒＡｋｔ細胞の成長中の培地のリン脂質の変化倍率（１０％血清を含む新鮮な培地に対する）。（Ｂ）２００ｎＭのＣＡＹ１０５６６（ＳＣＤ１阻害剤、ＳＣＤｉ）またはビヒクル対照（ＣＴＬ）で４８時間処理したｉＢＭＫ−Ｈ−ＲａｓＶ１２Ｇ細胞による、培地からのＬＰＣ（１８：１）の消費（ｎｍｏｌ）。（Ｃ）約４０％コンフルエンスまで培養した細胞に関する全Ｃ１８：１の移入（図３Ｃからの取込み速度に基づく）。（Ｄ）けん化脂質の測定に基づく、新鮮な培地および使用済み培地（１０％血清、４８時間のインキュベーション）からの全Ｃ１８：１の取込みに対するＳＣＤｉ阻害の効果。細胞を、通常よりも高い密度で播種して、脂肪酸消費の最適な決定を容易にした。すべてのデータは、Ｎ≧３の平均値±ＳＤである。
【図１１】図１１は、ヒト膵臓がんにおける腫瘍／良性の隣接組織の脂質の比を示す図である。ヒト膵臓腫瘍組織における脂質の存在量の相対比を、同じ患者からの良性の隣接組織と比較した。値は、２０人の患者の平均であり、複数の仮説試験について補正してｐ＜０．０５である。略語：ＰＥ、ホスファチジルエタノールアミン；ＰＳ、ホスファチジルセリン；ＰＧ、ホスファチジルグリセロール；ＰＣ、ホスファチジルコリン；Ｌ、リゾリン脂質。大きい方の数字は、脂質の脂肪酸の尾部における炭素原子の総数を指し、小さい方の数字は、不飽和度を指す。Ｏ−は、エーテル脂質を指す。
【図１２】図１２は、Ａ５４９異種移植を示す図である。対照、高い総脂肪、高スクロース、または高飽和脂肪の治療食を給餌された胸腺欠損ヌードマウスにおける異種移植Ａ５４９（Ｒａｓ駆動性肺がん）細胞の成長曲線を得た。値は、マウス５匹の平均±ＳＥＭである。
【発明を実施するための形態】
【００３５】
定義
活性化剤：本明細書で使用される場合、用語「活性化剤」は、その存在またはレベルが、薬剤が存在しない状態（または異なるレベルの薬剤が存在する状態）で観察される標的のレベルまたは活性と比較して、標的のレベルまたは活性の上昇と相関する薬剤を指す。一部の実施形態では、活性化剤は、その存在またはレベルが、特定の参照レベルまたは活性（例えば公知の活性化剤、例えば陽性対照が存在するなどの適切な参照条件下で観察されるもの）と比較できるまたはそれを超える標的レベルまたは活性と相関する薬剤である。
【００３６】
投与：本明細書で使用される場合、用語「投与」は、被験体または系に組成物を投与することを指す。動物被験体（例えばヒト）への投与は、任意の適切な経路によって行うことができる。例えば、一部の実施形態では、投与は、気管支（気管支への滴下注入によるものを含む）、頬側、経腸、真皮中（ｉｎｔｅｒｄｅｒｍａｌ）、動脈内、皮内、胃内、髄内、筋肉内、鼻腔内、腹腔内、髄腔内、静脈内、室内（ｉｎｔｒａｖｅｎｔｒｉｃｕｌａｒ）、粘膜、経鼻、経口、直腸、皮下、舌下、局所、気管（気管内への滴下注入によるものを含む）、経皮、膣内および硝子体により行うことができる。
【００３７】
薬剤：用語「薬剤」は、本明細書で使用される場合、例えばポリペプチド、核酸、糖類、脂質、小分子、金属、またはそれらの組合せを含めた任意の化学的クラスの化合物または実体を指すことができる。一部の実施形態では、薬剤は、自然に見出されるおよび／または自然から得られるという点で天然産物であり、または天然産物を含む。一部の実施形態では、薬剤は、人の手によって設計、操作および／もしくは生成されるという点で人為的な、ならびに／または自然には見出されない１つもしくは複数の実体であり、または１つもしくは複数の実体を含む。一部の実施形態では、薬剤は、単離形態または純粋形態で利用することができ、一部の実施形態では、薬剤は、粗製形態で利用することができる。一部の実施形態では、潜在的に可能な薬剤が、コレクションまたはライブラリーとして提供され、例えばこれらは、それらに含まれる活性剤（ａｃｔｉｖｅ  ａｇｅｎｔ）を同定しまたは特徴付けるために、スクリーニングされ得る。本発明に従って利用され得る薬剤の特定の一部の実施形態は、小分子、抗体、抗体断片、アプタマー、核酸（例えば、ｓｉＲＮＡ、ｓｈＲＮＡ、ＤＮＡ／ＲＮＡハイブリッド、アンチセンスオリゴヌクレオチド、リボザイム）、ペプチド、ペプチド模倣薬等を含む。一部の実施形態では、薬剤は、ポリマーであり、またはポリマーを含む。一部の実施形態では、薬剤は、ポリマーではなく、かつ／またはいかなるポリマーも実質的に含まない。一部の実施形態では、薬剤は、少なくとも１つのポリマー部分を含有する。一部の実施形態では、薬剤は、いかなるポリマー部分も含まず、または実質的に含まない。
【００３８】
類似体：本明細書で使用される場合、用語「類似体」は、１つまたは複数の特定の構造的特色、要素、構成成分、または部分を、参照物質と共有する物質を指す。典型的に「類似体」は、参照物質と著しい構造的類似性を示しており、例えばコアまたはコンセンサス構造を共有しているが、ある特定の個別の形で異なっている。一部の実施形態では、類似体は、参照物質の化学的操作によって参照物質から生成することができる物質である。一部の実施形態では、類似体は、参照物質を生成するプロセスと実質的に類似の（例えば、そのプロセスと複数のステップを共有する）合成プロセスを実施することによって生成され得る物質である。一部の実施形態では、類似体は、参照物質を生成するために使用されるプロセスとは異なる合成プロセスを実施することによって生成され、または生成され得る。
【００３９】
動物：本明細書で使用される場合、用語「動物」は、動物界の任意のメンバーを指す。一部の実施形態では、「動物」は、任意の発達段階のヒトを指す。一部の実施形態では、「動物」は、任意の発達段階の非ヒト動物を指す。一部の実施形態では、非ヒト動物は、哺乳動物（例えば、げっ歯類、マウス、ラット、ウサギ、サル、イヌ、ネコ、ヒツジ、ウシ、霊長類、および／またはブタ）である。一部の実施形態では、動物には、哺乳動物、鳥類、爬虫類、両生類、魚類、および／または蠕虫（ｗｏｒｍ）が含まれるが、それらに限定されない。一部の実施形態では、動物は、遺伝子導入動物、遺伝子操作動物、および／またはクローンであり得る。
【００４０】
アンタゴニスト：本明細書で使用される場合、用語「アンタゴニスト」は、ｉ）別の薬剤の効果を阻害、低減もしくは低下させ、かつ／またはｉｉ）１つもしくは複数の生物学的事象を阻害、低減、低下もしくは遅延させる薬剤を指す。アンタゴニストは、例えば小分子、ポリペプチド、核酸、炭水化物、脂質、金属、および／または関連性のある阻害活性を示す任意の他の実体を含めた、任意の化学的クラスの薬剤であってもよく、またはそれらを含むことができる。アンタゴニストは、直接的であってもよく（この場合、その標的に直接的に影響を与える）、または間接的であってもよい（この場合、例えばその標的のレベルまたは活性が変わるように、例えば標的の調節因子と相互作用することによって、その標的との結合以外によって影響を与える）。
【００４１】
およそ：本明細書で使用される場合、用語「およそ」および「約」は、それぞれ、関連性のある文脈に相応する分野の当業者によって理解される通りの通常の統計的変動を包含することを企図する。ある特定の実施形態では、用語「およそ」または「約」は、それぞれ、別段指定されない限り、または別段文脈から明らかにならない限り、記載の値（例えば、このような数字が可能値の１００％を超える場合）からいずれかの方向（超えるまたは未満）で２５％、２０％、１９％、１８％、１７％、１６％、１５％、１４％、１３％、１２％、１１％、１０％、９％、８％、７％、６％、５％、４％、３％、２％、１％またはそれ未満以内に入る値の範囲を指す。
【００４２】
と関連する：「関連する」という用語が本明細書で使用される場合、２つの事象または実体は、一方の存在、レベルおよび／または形態が他方のものと相関していれば、互いに「関連する」。例えば、特定の実体（例えば、ポリペプチド）は、その存在、レベルおよび／または形態が、特定の疾患、障害、または状態（例えば、関連性のある集団全体の）の発生率および／または感受性と相関していれば、その疾患、障害、または状態と関連するとみなされる。一部の実施形態では、２つまたはそれを超える数の実体は、それらが直接的または間接的に相互作用し、したがって互いに物理的に近接する、または近接したままであるならば、互いに物理的に「関連する」。一部の実施形態では、互いに物理的に関連する２つまたはそれを超える数の実体は、互いに共有結合によって連結しており、一部の実施形態では、互いに物理的に関連する２つまたはそれを超える数の実体は、互いに共有結合によっては連結していないが、例えば水素結合、ファンデルワールス相互作用、疎水性相互作用、磁性、およびそれらの組合せによって非共有結合的に関連している。
【００４３】
生物学的に活性な：本明細書で使用される場合、句「生物学的に活性な」は、生物系（例えば、細胞（例えば、単離された細胞、培養細胞、組織の細胞、生物の細胞）において、細胞培養物において、組織において、生物において等）において活性を有する物質を指す。例えば、生物に投与されると、その生物に対して生物学的効果を有する物質は、生物学的に活性であるとみなされる。活性が存在するためには、しばしば生物学的に活性な物質の一部または一断片だけが必要とされる（例えば必要である、十分である）、このような環境において、その一部または断片は、「生物学的に活性な」一部または断片であるとみなされることを、当業者は理解する。
【００４４】
結合：用語「結合」は、本明細書で使用される場合、典型的に、２つまたはそれを超える数の実体の間またはそれらの中で非共有結合的に関連していることを指すと理解される。「直接的」な結合は、実体または部分間の物理的接触を含み、間接的な結合は、１つまたは複数の中間にある実体との物理的な接触による物理的相互作用を含む。２つまたはそれを超える数の実体間の結合は、典型的に、相互作用する実体または部分が単離において、またはより複雑な系の文脈（例えば、担体である実体と、および／または生物系もしくは細胞において、共有結合的に関連するまたはそれ以外の方法で関連する一方）において研究される場合を含めた、様々な文脈のいずれかにおいて評価することができる。
【００４５】
特徴的な一部分：本明細書で使用される場合、用語「特徴的な一部分」は、最も広範な意味において、その存在（または非存在）が、物質の特定の特色、特質、または活性の存在（または非存在）と相関する、物質の一部分を指すために使用される。一部の実施形態では、物質の特徴的な一部分は、特定の特色、特質または活性を共有している物質および関係する物質には見出されるが、特定の特色、特質または活性を共有していないものには見出されない一部分である。ある特定の実施形態では、特徴的な一部分は、少なくとも１つの機能的特徴を、無傷の物質と共有する。例えば一部の実施形態では、タンパク質またはポリペプチドの「特徴的な一部分」は、一緒になってタンパク質またはポリペプチドの特徴となるひと続きのアミノ酸、またはひと続きのアミノ酸の集合体を含有する一部分である。一部分の実施形態では、このようなそれぞれのひと続きは、一般に、少なくとも２、５、１０、１５、２０、５０、またはそれを超える数のアミノ酸を含有する。一般に、物質（例えば、タンパク質、抗体等）の特徴的な一部分は、上に特定した配列および／または構造の同一性に加えて、少なくとも１つの機能的特徴を、関連性のある無傷の物質と共有している一部分である。一部の実施形態では、特徴的な一部分は、生物学的に活性であり得る。
【００４６】
組合せ治療：本明細書で使用される場合、用語「組合せ治療」は、被験体が、２つまたはそれを超える数の治療レジメン（例えば、２つまたはそれを超える数の治療剤）に同時に晒される状況を指す。一部の実施形態では、２つまたはそれを超える数の薬剤は、同時に投与することができ、一部の実施形態では、このような薬剤は、逐次的に投与することができ、一部の実施形態では、このような薬剤は、重複する投与レジメンで投与される。
【００４７】
比較できる：用語「比較できる」は、本明細書で使用される場合、互いに同一にはなり得ないが、それらの間で比較できるのに十分類似しており、したがって、観察された差異または類似性に基づいて合理的に結論を引き出すことができる、２つまたはそれを超える数の薬剤、実体、状況、条件の組等を指す。一部の実施形態では、条件、環境、個体、または集団の比較できる組は、複数の実質的に同一の特色、および１つのまたは少数の変化した特色によって特徴付けられる。当業者は、文脈において、２つまたはそれを超える数のこのような薬剤、実体、状況、条件の組等が任意の所与の環境において比較できるとみなされるのに、どれほどの同一性の度合いが必要とされるかを理解する。例えば当業者は、環境、個体、または集団の異なる組の下でまたはそれらによって得られた結果または観察された現象の差異が、変化する特色の変動によって引き起こされているまたはその変動を示しているという妥当な結論を保証するのに十分な数およびタイプの実質的に同一の特色によって特徴付けられる場合に、互いに比較できると理解する。
【００４８】
に対応する：本明細書で使用される場合、「に対応する」という用語は、適切な参照薬剤に存在する構造的要素または部分と、ある位置（例えば、三次元空間における、または別の要素もしくは部分に対する）を共有する、目的の薬剤における構造的要素または部分を示すためにしばしば使用される。例えば、一部の実施形態では、この用語は、ポリペプチドにおけるアミノ酸残基または核酸におけるヌクレオチド残基などの、ポリマーにおける残基の位置／同一性を指すために使用される。当業者は、このようなポリマーにおける残基が、単純化の目的で、正準のナンバリング系を使用して関係する参照ポリマーに基づいてしばしば指定され、したがって、例えば参照ポリマーの１９０位にある残基「に対応する」第１のポリマーの残基は、実際に第１のポリマーにおける１９０番目の残基である必要はないが、参照ポリマーにおける１９０番目の位置に見出される残基に対応することを、当業者は理解する。当業者には、ポリマー配列を比較するために特に設計された１つまたは複数の市販で利用可能なアルゴリズムの使用によることを含めて、「対応する」アミノ酸を同定する方法が容易に理解される。
【００４９】
誘導体：本明細書で使用される場合、用語「誘導体」は、参照物質の構造的類似体を指す。すなわち「誘導体」は、参照物質と有意な構造的類似性を示し、例えばコアまたはコンセンサス構造を共有しているが、ある特定の個別の方法で異なっている物質である。一部の実施形態では、誘導体は、化学的操作によって参照物質から生成することができる物質である。一部の実施形態では、誘導体は、参照物質を生成するプロセスと実質的に類似の（例えば、そのプロセスと複数のステップを共有する）合成プロセスを実施することによって生成され得る物質である。
【００５０】
設計された：本明細書で使用される場合、用語「設計された」は、（ｉ）その構造が人の手によって選択されるもしくは選択された薬剤、（ｉｉ）人の手を必要とするプロセスによって生成される薬剤、および／または（ｉｉｉ）天然物質および他の公知の薬剤とは異なる薬剤を指す。
【００５１】
決定する：本明細書に記載の多くの方法論は、「決定する」ステップを含む。当業者は、本明細書を読めば、このような「決定」は、例えば本明細書に明確に言及されている特定の技術を含めて当業者が利用可能な様々な技術のいずれかを利用することができるか、またはそれらを使用することによって達成できることを理解する。一部の実施形態では、決定は、物理的試料の操作を含む。一部の実施形態では、決定は、例えばコンピューター、または関連性のある分析を実施するように適合された他のプロセッシングユニットを利用して、データまたは情報を考慮および／または操作することを含む。一部の実施形態では、決定は、関連性のある情報および／または材料を供給源から受け取ることを含む。一部の実施形態では、決定は、試料または実体の１つまたは複数の特色を、比較できる参照物と比較することを含む。
【００５２】
診断情報：本明細書で使用される場合、「診断情報」または「診断に使用するための情報」は、患者が疾患、障害もしくは状態を有しているかどうかを決定し、および／あるいは疾患、障害または状態を、疾患、障害もしくは状態の予後、または疾患、障害もしくは状態の処置（一般的な処置または任意の特定の処置のいずれか）に対する応答の見込みに関して有意性を有する表現型のカテゴリーまたは任意のカテゴリーに分類するのに有用な情報である。同様に「診断」は、限定されるものではないが、被験体が疾患、障害もしくは状態（例えばがん）を有する可能性があるかもしくは発生する可能性があるかどうか、被験体に顕在化した疾患、障害もしくは状態の状況、病期分類もしくは特徴、腫瘍の性質もしくは分類に関係する情報、予後に関係する情報、および／または適切な処置を選択するのに有用な情報を含めた、任意のタイプの診断情報を提供することを指す。処置の選択は、特定の治療（例えば化学療法）剤または他の処置様式（ｍｏｄａｌｉｔｉｙ）、例えば外科手術、放射線等の選択、治療を保留するかまたは送達するかどうかに関する選択、投与レジメンに関する選択（例えば、１つまたは複数の用量の特定の治療剤または治療剤の組合せの頻度またはレベル）等を含むことができる。
【００５３】
剤形：本明細書で使用される場合、用語「剤形」は、被験体に投与するための物理的に別個の単位の活性剤（例えば、治療剤または診断剤）を指す。各単位は、所定量の活性剤を含有する。一部の実施形態では、このような量は、関連性のある集団に投与された場合に（すなわち治療投与レジメンを用いて）所望のまたは有益な転帰と相関することが決定付けられた投与レジメンに従って投与するのに適した、単位投与量（ｕｎｉｔ  ｄｏｓａｇｅ  ａｍｏｕｎｔ）（またはその画分全体）である。特定の被験体に投与された治療組成物または薬剤の総量は、１人または複数の担当医によって決定され、複数の剤形の投与を含み得ることが、当業者には理解される。
【００５４】
投与レジメン：本明細書で使用される場合、用語「投与レジメン」は、典型的に一定期間隔てて被験体に個々に投与される一群の単位用量（典型的に２つ以上）を指す。一部の実施形態では、所与の治療剤は、１つまたは複数の投与（ｄｏｓｅ）を含み得る推奨投与レジメンを有する。一部の実施形態では、投与レジメンは、複数の投与を含み、そのそれぞれは、同じ長さの期間によって互いに隔てられ、一部の実施形態では、投与レジメンは、複数の投与を含み、少なくとも２つの異なる期間によって個々の投与が隔てられる。一部の実施形態では、投与レジメン内のすべての投与は、同じ単位投与量（ｕｎｉｔ  ｄｏｓｅ  ａｍｏｕｎｔ）である。一部の実施形態では、投与レジメン内の異なる投与は、異なる量である。一部の実施形態では、投与レジメンは、第１の投与量で第１の投与を行い、その後、第１の投与量とは異なる第２の投与量で、１回または複数回の追加の投与を行うことを含む。一部の実施形態では、投与レジメンは、第１の投与量で第１の投与を行い、その後、第１の投与量と同じ第２の投与量で１回または複数回の追加の投与を行うことを含む。一部の実施形態では、投与レジメンは、関連性のある集団全体に投与された場合に、所望のまたは有益な転帰と相関する（すなわち治療投与レジメンである）。
【００５５】
必須脂肪酸：本明細書で使用される場合、用語「必須脂肪酸」は、良好な健康のために身体が必要とするが合成できないため、特定の生物（例えばヒト）が摂取しなければならない脂肪酸を指す。例示的な必須脂肪酸として、オメガ−６脂肪酸およびオメガ−３脂肪酸が挙げられるが、それらに限定されない。
【００５６】
マーカー：マーカーは、本明細書で使用される場合、その存在またはレベルが、特定の状況または事象の特徴である実体または部分を指す。一部の実施形態では、特定のマーカーの存在またはレベルは、疾患、障害または状態の存在または病期に特徴的であり得る。単なる一つの例を挙げると一部の実施形態では、この用語は、特定の腫瘍、腫瘍サブクラス、腫瘍の病期等に特徴的である遺伝子発現産物を指す。あるいはまたはさらには、一部の実施形態では、特定のマーカーの存在またはレベルは、例えば特定のクラスの腫瘍に特徴的であり得る特定のシグナル伝達経路の活性（または活性レベル）と相関する。マーカーの存在または非存在の統計的有意性は、特定のマーカーに応じて変わり得る。一部の実施形態では、マーカーの検出は、腫瘍が特定のサブクラスのものである確率が高いことをマーカーが反映するという点で、高度に特異的である。このような特異性は、感度を犠牲にして得られる場合がある（すなわち、腫瘍が、マーカーを発現すると予測される腫瘍である場合でも、陰性結果が生じ得る）。逆に、感度の度合いが高いマーカーは、感度がより低いマーカーよりも特異性が低いことがある。本発明によれば、有用なマーカーは、特定のサブクラスの腫瘍を精度１００％で区別する必要はない。
【００５７】
モジュレーター：用語「モジュレーター」は、目的の活性が、モジュレーターが存在しない場合以外は比較できる条件下で観察された活性と比較して、その活性のレベルおよび／または性質の変化と相関することが観察される系における存在またはレベルを有する実体を指すために使用される。一部の実施形態では、モジュレーターは、活性が、モジュレーターが存在しない場合以外は比較できる条件下で観察された活性と比較して、その存在が増加しているという点で活性化因子である。一部の実施形態では、モジュレーターは、活性が、モジュレーターが存在しない場合以外は比較できる条件と比較してその存在が低下するという点で、アンタゴニストまたは阻害剤である。一部の実施形態では、モジュレーターは、目的の活性を有する標的実体と直接的に相互作用する。一部の実施形態では、モジュレーターは、目的の活性を有する標的実体と間接的に相互作用する（すなわち、標的実体と相互作用する中間薬剤と直接的に相互作用する）。一部の実施形態では、モジュレーターは、目的の標的実体のレベルに影響を及ぼし、あるいはまたはさらには、一部の実施形態では、モジュレーターは、標的実体のレベルに影響を及ぼさずに、目的の標的実体の活性に影響を及ぼす。一部の実施形態では、モジュレーターは、目的の標的実体のレベルと活性の両方に影響を及ぼし、したがって観察された活性の差異は、観察されたレベルの差異によって完全には説明されず、または観察されたレベルの差異とは釣り合わない。
【００５８】
医薬組成物：本明細書で使用される場合、用語「医薬組成物」は、１つまたは複数の薬学的に許容される担体と一緒に製剤化された活性化剤を指す。一部の実施形態では、活性化剤は、関連性のある集団に投与される場合に所定の治療効果を達成する、統計的に有意な確率を示す治療レジメンで投与するのに適した単位投与量で存在する。一部の実施形態では、医薬組成物は、経口投与、例えば水薬（水性または非水性溶液または懸濁液）、錠剤、例えば頬側、舌下および全身吸収を標的としたもの、ボーラス剤、散剤、顆粒剤、舌に適用するためのペースト剤；非経口投与、例えば皮下、筋肉内、静脈内もしくは硬膜外注射、例えば無菌の溶液もしくは懸濁液、または徐放製剤によるもの；局所適用、例えばクリーム剤、軟膏剤、または皮膚、肺もしくは口腔に適用される制御放出パッチもしくはスプレー剤；膣内または直腸内、例えばペッサリー、クリーム剤またはフォーム；舌下；眼；経皮；または経鼻、肺、および他の粘膜表面に適合されるものを含めた固体形態または液体形態による投与のために、特別に製剤化され得る。
【００５９】
薬学的に許容される：用語「薬学的に許容される」は、本明細書で使用される場合、良好な医学的判断の範囲内で、過度の毒性、刺激、アレルギー応答、または他の問題もしくは合併症なしに人間および／または動物の組織に接触させて使用するのに適しており、妥当なベネフィット／リスク比に相応する薬剤を指す。
【００６０】
薬学的に許容される担体：本明細書で使用される場合、用語「薬学的に許容される担体」は、薬学的に許容される材料、組成物またはビヒクル、例えば液体もしくは固体フィラー、希釈剤、賦形剤、または身体のある臓器または一部分から身体の別の臓器または一部分に対象化合物の運搬または輸送に関与する溶媒封入材料を意味する。各担体は、製剤のその他の成分と適合性があり、患者にとって侵害性がないという意味で「許容され」なければならない。薬学的に許容される担体として働くことができる材料のいくつかの例として、糖、例えばラクトース、グルコースおよびスクロース；デンプン、例えばトウモロコシデンプンおよびバレイショデンプン；セルロース、およびその誘導体、例えばカルボキシメチルセルロースナトリウム、エチルセルロースおよび酢酸セルロース；粉末化トラガント；麦芽；ゼラチン；タルク；賦形剤、例えばカカオバターおよび坐剤ワックス；油、例えばピーナッツ油、綿実油、ベニバナ油、ゴマ油、オリーブ油、トウモロコシ油および大豆油；グリコール、例えばプロピレングリコール；ポリオール、例えばグリセリン、ソルビトール、マンニトールおよびポリエチレングリコール；エステル、例えばオレイン酸エチルおよびラウリン酸エチル；寒天；緩衝剤、例えば水酸化マグネシウムおよび水酸化アルミニウム；アルギン酸；発熱物質を含まない水；等張食塩水；リンゲル溶液；エチルアルコール；ｐＨ緩衝液；ポリエステル、ポリカーボネートおよび／またはポリ酸無水物；ならびに医薬製剤に用いられる他の非毒性の適合性のある物質が挙げられる。
【００６１】
防止：用語「防止」は、本明細書で使用される場合、特定の疾患、障害または状態の１つまたは複数の症状の発症の遅延、ならびに／またはその頻度および／もしくは重症度の低減を指す。一部の実施形態では、防止は、集団ベースで評価され、したがって特定の疾患、障害または状態に罹患しやすい集団において、その疾患、障害または状態の１つまたは複数の症状の発生、頻度および／または強度の統計的に有意な低減が観察される場合に、薬剤は、その疾患、障害または状態を「防止する」とみなされる。
【００６２】
Ｒａｓ関連性：本明細書で使用される場合、用語「Ｒａｓ関連性」または「Ｒａｓ駆動性」は、Ｒａｓ癌遺伝子が活性化される（例えば、調節されないこともしくはその他の方法での増殖の増加を特徴としない、かつ／または活性化と関連もしくは相関するＲａｓ対立遺伝子もしくは変異を含有もしくは発現しないという点でがん性ではなく、その他の点では同一であることを含めた比較できる細胞または組織などの、適切な対照細胞または組織に対して、発現および／または活性が増加する）細胞または腫瘍を指すために使用される。一部の実施形態では、このようなＲａｓ活性化は、腫瘍において検出される。一部の実施形態では、腫瘍は、Ｒａｓ活性化との相関が確立されているタイプのものであり、またはそのようなタイプの子孫である。
【００６３】
参照：用語「参照」は、本明細書では、目的の薬剤、個体、集団、試料、配列または値と比較される、標準または対照の薬剤、個体、集団、試料、配列または値を記載するためにしばしば使用される。一部の実施形態では、参照の薬剤、個体、集団、試料、配列または値は、目的の薬剤、個体、集団、試料、配列または値の試験または決定と実質的に同時に試験および／または決定される。一部の実施形態では、参照の薬剤、個体、集団、試料、配列または値は、必要に応じて有形の媒体により具体化されている歴史的参照である。典型的に、当業者に理解される通り、参照の薬剤、個体、集団、試料、配列または値は、目的の薬剤、個体、集団、試料、配列または値を決定するかまたは特徴付けるために利用される条件と比較できる条件下で決定され、または特徴付けられる。
【００６４】
応答：本明細書で使用される場合、処置への応答は、処置の結果として生じるまたは処置と相関する被験体の状態の任意の有益な変化を指すことができる。このような変化は、状態の安定化（例えば、処置がない状態で生じたと思われる悪化の防止）、状態の症状の緩和、および／または状態の治癒の見通しの改善等を含み得る。応答は、被験体の応答または腫瘍の応答を指すことができる。腫瘍または被験体の応答は、臨床基準および客観的基準を含めた、多種多様な基準に従って測定することができる。応答を評価するための技術には、臨床試験、陽電子放出断層撮影（ｔｏｍａｔｏｇｒａｐｈｙ）、胸部Ｘ線ＣＴスキャン、ＭＲＩ、超音波、内視鏡検査、腹腔鏡検査、被験体から得られた試料における腫瘍マーカーの存在もしくはレベル、細胞診断、および／または組織学的検査が含まれるが、それらに限定されない。これらの技術の多くは、腫瘍のサイズを決定し、またはその他の方法で腫瘍負荷量全体を決定しようとするものである。処置への応答を評価するための方法および指針は、Ｔｈｅｒａｓｓｅら、「Ｎｅｗ  ｇｕｉｄｅｌｉｎｅｓ  ｔｏ  ｅｖａｌｕａｔｅ  ｔｈｅ  ｒｅｓｐｏｎｓｅ  ｔｏ  ｔｒｅａｔｍｅｎｔ  ｉｎ  ｓｏｌｉｄ  ｔｕｍｏｒｓ」、Ｅｕｒｏｐｅａｎ  Ｏｒｇａｎｉｚａｔｉｏｎ  ｆｏｒ  Ｒｅｓｅａｒｃｈ  ａｎｄ  Ｔｒｅａｔｍｅｎｔ  ｏｆ  Ｃａｎｃｅｒ、Ｎａｔｉｏｎａｌ  Ｃａｎｃｅｒ  Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅ  ｏｆ  ｔｈｅ  Ｕｎｉｔｅｄ  Ｓｔａｔｅｓ、Ｎａｔｉｏｎａｌ  Ｃａｎｃｅｒ  Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅ  ｏｆ  Ｃａｎａｄａ、Ｊ．  Ｎａｔｌ．  Ｃａｎｃｅｒ  Ｉｎｓｔ．、２０００年、９２巻（３号）：２０５〜２１６頁に論じられている。正確な応答基準は、腫瘍および／または患者の群を比較する場合に、比較される群が、応答速度を決定するために同じまたは比較できる基準に基づいて評価されるという条件で、任意の適切な方式で選択することができる。当業者は、適切な基準を選択することができる。
【００６５】
リスク：文脈から理解される通り、疾患、障害または状態の「リスク」は、特定の個体が、疾患、障害または状態を発生する見込みの度合いである。一部の実施形態では、リスクは、百分率として表される。一部の実施形態では、リスクは、０％、１％、２％、３％、４％、５％、６％、７％、８％、９％、１０％から１００％までである。一部の実施形態では、リスクは、参照試料または参照試料の群と関連するリスクに対するリスクとして表される。一部の実施形態では、参照試料または参照試料の群は、疾患、障害または状態の公知のリスクを有している。一部の実施形態では、参照試料または参照試料の群は、特定の一個体と比較できる個体からのものである。一部の実施形態では、相対的リスクは、０、１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０またはそれを超える。
【００６６】
試料：本明細書で使用される場合、用語「試料」は、典型的に、本明細書に記載の通り目的の供給源から得られたまたはそれに由来する生物学的試料を指す。一部の実施形態では、目的の供給源は、生物、例えば動物またはヒトを含む。一部の実施形態では、生物学的試料は、生体組織または流体であるか、またはそれを含む。一部の実施形態では、生物学的試料は、骨髄；血液；血液細胞；腹水；組織もしくは細針生検試料；細胞を含有する体液；浮動性（ｆｒｅｅ  ｆｌｏａｔｉｎｇ）核酸；喀痰；唾液；尿；脳脊髄液、腹水；胸水；糞；リンパ；婦人科学的流体；皮膚スワブ；膣スワブ；口腔スワブ；鼻スワブ；洗浄液もしくは洗浄物、例えば腺管洗浄物もしくは気管支肺胞（ｂｒｏｎｃｈｅｏａｌｖｅｏｌａｒ）洗浄物；吸引物；擦過物；骨髄被検物；組織生検被検物；外科的被検物；糞、他の体液、分泌物および／もしくは排出物；ならびに／またはそれらに由来する細胞等であってもよく、またはそれらを含むことができる。一部の実施形態では、生物学的試料は、個体から得られた細胞であるか、またはそれを含む。一部の実施形態では、得られた細胞は、試料を得た個体から得られた細胞であるか、またはそれを含む。一部の実施形態では、試料は、目的の供給源から任意の適切な手段によって直接的に得られた「一次試料」である。例えば、一部の実施形態では、生物学的一次試料は、生検（例えば、細針吸引または組織生検）、外科手術、体液収集（例えば、血液、リンパ、糞等）等からなる群から選択される方法によって得られる。一部の実施形態では、用語「試料」は、文脈から明らかである通り、一次試料の処理によって（例えば、一次試料の１つまたは複数の構成成分を除去することによって、および／または一次試料に１つもしくは複数の薬剤を添加することによって）得られる調製物を指す。例えば、半透過膜を使用して濾過する。このような「処理された試料」は、試料から抽出された、または一次試料を、ｍＲＮＡの増幅もしくは逆転写、ある特定の構成成分の単離および／もしくは精製などの技術で処理することによって得られた、例えば核酸またはタンパク質を含むことができる。
【００６７】
小分子：本明細書で使用される場合、用語「小分子」は、低分子量の有機化合物および／または無機化合物を意味する。一般に「小分子」は、サイズが約５キロダルトン（ｋＤ）未満の分子である。一部の実施形態では、小分子は、約４ｋＤ未満、３ｋＤ未満、約２ｋＤ未満、または約１ｋＤ未満である。一部の実施形態では、小分子は、約８００ダルトン（Ｄ）未満、約６００Ｄ未満、約５００Ｄ未満、約４００Ｄ未満、約３００Ｄ未満、約２００Ｄ未満、または約１００Ｄ未満である。一部の実施形態では、小分子は、約２０００ｇ／ｍｏｌ未満、約１５００ｇ／ｍｏｌ未満、約１０００ｇ／ｍｏｌ未満、約８００ｇ／ｍｏｌ未満、または約５００ｇ／ｍｏｌ未満である。一部の実施形態では、小分子は、ポリマーではない。一部の実施形態では、小分子は、ポリマー部分を含まない。一部の実施形態では、小分子は、タンパク質またはポリペプチドではない（例えば、オリゴペプチドまたはペプチドではない）。一部の実施形態では、小分子は、ポリヌクレオチドではない（例えば、オリゴヌクレオチドではない）。一部の実施形態では、小分子は、多糖体ではない。一部の実施形態では、小分子は、多糖体を含まない（例えば、糖タンパク質、プロテオグリカン、糖脂質等ではない）。一部の実施形態では、小分子は、脂質ではない。一部の実施形態では、小分子は、モジュレート剤である。一部の実施形態では、小分子は、生物学的に活性である。一部の実施形態では、小分子は、検出可能である（例えば、少なくとも１つの検出可能な部分を含む）。一部の実施形態では、小分子は、治療剤である。
【００６８】
固体形態：当技術分野で公知の通り、多くの化学的実体（特に、多くの有機分子および／または多くの小分子）は、例えば非晶質形態および／または結晶形態（例えば多形、水和物、溶媒和物等）などの様々な異なる固体形態を取り入れることができる。一部の実施形態では、このような実体は、任意の固体形態を含めた任意の形態で利用することができる。一部の実施形態では、このような実体は、特定の形態、例えば特定の固体形態で利用される。
【００６９】
特異的な：用語「特異的な」は、活性を有する薬剤または実体を参照して本明細書で使用される場合、当業者には、その薬剤または実体が、潜在的に可能な標的または状態の間の違いを識別することを意味すると理解される。例えば薬剤は、競合する代替標的の存在下で薬剤の標的と優先的に結合する場合、その薬剤の標的に「特異的に」結合するとされる。一部の実施形態では、薬剤または実体は、その標的と結合する条件下では、競合する代替標的に検出可能に結合しない。一部の実施形態では、薬剤または実体は、競合する代替標的（複数可）と比較して、薬剤または実体の標的に対してより高いオン速度（ｏｎ−ｒａｔｅ）、より低いオフ速度（ｏｆｆ−ｒａｔｅ）、高い親和性、低い解離性、および／または高い安定性で結合する。
【００７０】
被験体：「被験体」は、哺乳動物（例えば一部の実施形態では、出生前のヒト形態を含めたヒト）を意味する。一部の実施形態では、被験体は、関連性のある疾患、障害または状態に罹患している。一部の実施形態では、被験体は、疾患、障害または状態に罹患しやすい。一部の実施形態では、被験体は、疾患、障害または状態の１つまたは複数の症状または特徴を呈している。一部の実施形態では、被験体は、疾患、障害または状態の任意の症状または特徴を呈していない。一部の実施形態では、被験体は、疾患、障害もしくは状態に対する感受性、または疾患、障害もしくは状態のリスクに特徴的な１つまたは複数の特色を有している人である。被験体は、患者であってもよく、患者は、疾患の診断または処置を施す医師の診察を受けるヒトを指す。一部の実施形態では、被験体は、治療を施される個体である。
【００７１】
実質的に：本明細書で使用される場合、用語「実質的に」は、目的の特徴または特性の全体的またはほぼ全体的な程度または度合いを呈する質的な状態を指す。生物学的分野の当業者は、生物学的現象および化学的現象が完了し、かつ／もしくは完全に至るまで進行し、もしくは達成されることは、仮にあるとしてもめったになく、または絶対的な結果を回避することを理解する。したがって、用語「実質的に」は、本明細書では、多くの生物学的現象および化学的現象に固有の、完全性の潜在的な欠如を捉えるために使用される。
【００７２】
罹患しやすい：疾患、障害または状態（例えば、インフルエンザ）に「罹患しやすい」個体は、その疾患、障害または状態を発生するリスクがある。一部の実施形態では、疾患、障害または状態に罹患しやすい個体は、その疾患、障害または状態の任意の症状も呈していない。一部の実施形態では、疾患、障害または状態に罹患しやすい個体は、その疾患、障害および／または状態を有していると診断されていない。一部の実施形態では、疾患、障害または状態に罹患しやすい個体は、その疾患、障害または状態の発生に関連する状態に曝露された個体である。一部の実施形態では、疾患、障害および／または状態を発生するリスクは、集団ベースのリスクである（例えば、疾患、障害または状態に罹患している個体の家族）。
【００７３】
症状が低減される：本発明によれば、特定の疾患、障害または状態の１つまたは複数の症状の大きさ（例えば強度、重症度等）および／または頻度が低減される場合に、「症状が低減される」。明らかにする目的で、特定の症状の発症の遅延は、その症状の頻度が減少する１つの形態とみなされる。まだ腫瘍が小さい多くのがん患者は、症状がない。本発明は、症状が排除される場合だけに限定されるものではない。本発明は、具体的には、１つまたは複数の症状が、完全には排除されないが低減される（および被験体の状態が、それによって「改善される」）ような処置を企図する。
【００７４】
治療剤：本明細書で使用される場合、句「治療剤」は、一般に、生物に投与されると所望の薬理学的効果を引き出す任意の薬剤を指す。一部の実施形態では、薬剤は、適切な集団全体に統計的に有意な効果があることを実証された場合に、治療剤であるとみなされる。一部の実施形態では、適切な集団は、モデル生物の集団であり得る。一部の実施形態では、適切な集団は、例えばある特定の年齢群、性別、遺伝的背景、既存の臨床状態等の様々な基準によって定義され得る。一部の実施形態では、治療剤は、疾患、障害および／または状態の１つまたは複数の症状または特色を、軽減する、寛解させる、和らげる、阻害する、防止する、その発症を遅延させる、その重症度を低減する、かつ／またはその発生率を低減するために使用できる物質である。一部の実施形態では、「治療剤」は、ヒトに投与するために販売され得る前に、政府機関によって承認されており、または承認される必要がある薬剤である。一部の実施形態では、「治療剤」は、ヒトに投与するために医学的処方箋が必要とされる薬剤である。
【００７５】
治療レジメン：「治療レジメン」は、この用語が本明細書で使用される場合、関連性のある集団全体への投与が、所望のまたは有益な治療転帰と相関する投与レジメンを指す。
【００７６】
治療有効量：本明細書で使用される場合、用語「治療有効量」は、処置される被験体に、任意の医学的処置に適用できる妥当なベネフィット／リスク比で治療効果を付与する、治療用タンパク質（例えば、受容体チロシンキナーゼ抗体）の量を指す。治療効果は、客観的であってもよく（すなわち、いくつかの試験またはマーカーによって測定可能である）、または主観的であってもよい（すなわち被験体が効果の指標を示し、または効果を感じる）。特に「治療有効量」は、疾患に関連する症状を寛解させること、疾患の発症を防止もしくは遅延させること、および／または疾患の症状の重症度もしくは頻度を低減することなどによって、所望の疾患もしくは状態を処置する、寛解させる、もしくは防止するか、または検出可能な治療効果もしくは防止効果を呈するのに有効な、治療用タンパク質または組成物の量を指す。治療有効量は、一般に、複数の単位用量を含み得る投与レジメンで投与される。任意の特定の治療用タンパク質について、治療有効量（および／または有効な投与レジメンにおいて適切な単位用量）は、例えば投与経路、他の医薬品との組合せに応じて変わり得る。また、任意の特定の患者のための具体的な治療有効量（および／または単位用量）は、処置される障害および障害の重症度；用いられる具体的な医薬品の活性；用いられる具体的な組成物；患者の年齢、体重、全体的な健康状態、性別および治療食；用いられる具体的な融合タンパク質の投与時間、投与経路、および／または排出速度もしくは代謝速度；処置期間；ならびに医療分野で周知の類似の要因を含めた、様々な要因に応じて変わり得る。
【００７７】
処置：本明細書で使用される場合、用語「処置」（また「処置する」または「処置すること」）は、特定の疾患、障害および／または状態（例えば、がん）の１つまたは複数の症状、特色および／または原因を、部分的または完全に軽減する、寛解させる、和らげる（ｒｅｌｉｖｅｓ）、阻害する、その発症を遅延させる、その重症度を低減する、かつ／またはその発生率を低減する物質（例えば、抗受容体チロシンキナーゼ抗体または受容体型チロシンキナーゼアンタゴニスト）の任意の投与を指す。このような処置は、関連性のある疾患、障害および／もしくは状態の徴候を呈していない被験体、ならびに／または疾患、障害および／もしくは状態の初期徴候だけを呈している被験体に対して行うことができる。あるいはまたはさらには、このような処置は、関連性のある疾患、障害および／または状態の、１つまたは複数の確立された徴候を呈している被験体に対して行うことができる。一部の実施形態では、処置は、関連性のある疾患、障害および／または状態に罹患していると診断された被験体に対して行うことができる。一部の実施形態では、処置は、関連性のある疾患、障害および／または状態が発生するリスクの増加に統計的に相関している、１つまたは複数の感受性要因を有することが公知の被験体に対して行うことができる。
【００７８】
単位用量：表現「単位用量」は、本明細書で使用される場合、医薬組成物の単回用量としておよび／または物理的に別個の単位で投与される量を指す。多くの実施形態では、単位用量は、所定量の活性剤を含有する。一部の実施形態では、単位用量は、薬剤の単回用量全体を含有する。一部の実施形態では、２つ以上の単位用量は、全単回用量を達成するために投与される。一部の実施形態では、所期の効果を達成するために、複数の単位用量の投与が必要とされ、または必要であると予測される。単位用量は、例えば、所定量の１つまたは複数の治療剤を含有する液体（例えば許容される担体）の体積、所定量の固体形態の１つまたは複数の治療剤、所定量の１つまたは複数の治療剤を含有する徐放製剤または薬物送達デバイス等であり得る。単位用量は、治療剤（複数可）に加えて、様々な構成成分のいずれかを含む製剤として存在し得ることが理解される。例えば下記の通り、許容される担体（例えば、薬学的に許容される担体）、希釈剤、安定剤、バッファ、保存剤等が含まれ得る。多くの実施形態では、特定の治療剤の適切な１日総投与量は、単位用量の一部分または複数を構成することができ、例えば担当医によって良好な医学的判断の範囲内で決定され得ることを、当業者は理解する。一部の実施形態では、任意の特定の被験体または生物のための具体的な有効用量レベルは、処置される障害および障害の重症度；用いられる具体的な活性化合物の活性；用いられる具体的な組成物；被験体の年齢、体重、全体的な健康状態、性別および治療食；用いられる具体的な活性化合物の投与時間および排出速度；処置期間；用いられる具体的な化合物（複数可）と組み合わせてまたは同時に使用される薬物および／または追加の治療、ならびに医療分野で周知の類似の要因を含めた、様々な要因に応じて変わり得る。
【００７９】
ある特定の実施形態の詳細な説明
がんにおける脂質代謝
がん細胞は、それらの増殖を支持するために一定のエネルギー供給および構造的な構成成分を必要とする。癌遺伝子は、代謝を活発に再プログラムして、この供給を容易にする（１、２）。ヒトのがんにおいて最も一般的に活性化される経路の２つが、ＰＩ３Ｋ−Ａｋｔ経路およびＲａｓ経路である（３）。ＰＩ３Ｋ−Ａｋｔ経路は、がんにおいて役割を果たすことに加えて、インスリンシグナル伝達の主なエフェクターであるため、この経路の代謝効果は広範囲に研究されてきた。Ａｋｔ活性化は、グルコースの取込み、解糖フラックス、および乳酸排出、すなわちワールブルグ効果を促進する（２）。さらに、Ａｋｔ活性化は、ｍＴＯＲの下流活性化によって、タンパク質合成を増加させる（４）。最後にＡｋｔは、酵素リン酸化、およびＳＲＥＢＰのｍＴＯＲ依存性活性化のような転写活性化を含めた機序を介して、脂質生成を誘導する（５、６）。
【００８０】
脂肪酸は、脂質の主な構成成分である。脂肪酸の合成には、細胞質アセチル−ＣｏＡの生成が必要である（図１Ａ）。酸素正常状態では、主な経路は、グルコースからピルビン酸への異化反応を含み、ピルビン酸は、ピルビン酸デヒドロゲナーゼによってミトコンドリアアセチル−ＣｏＡに変換される。次に、アセチル−ＣｏＡは、クエン酸の形態で細胞質ゾルに輸送され、直接的なＡｋｔ標的であるＡＴＰ−クエン酸リアーゼによって切断されて、細胞質アセチル−ＣｏＡを生成する。低酸素状態では、ピルビン酸デヒドロゲナーゼが、ピルビン酸デヒドロゲナーゼキナーゼによって不活化され（７、８）、グルタミンに駆動される還元的カルボキシル化が、クエン酸、したがってアセチル−ＣｏＡの分率を増加させる原因となる（９〜１１）。
【００８１】
脂肪酸合成経路のその後のステップは、ＳＲＥＢＰ標的であるアセチル−ＣｏＡカルボキシラーゼおよび脂肪酸シンターゼによって触媒され、パルミチン酸（Ｃ１６：０、ここで１６は、脂肪酸における炭素原子の数を指し、０は二重結合の数を示す）を生じる。次に、パルミチン酸は、様々な伸長反応および不飽和化反応のための基質となって、細胞による多様な脂肪酸の必要性に対応する。多様な脂肪酸のうち、最も豊富に存在するものが、一価不飽和脂肪酸のオレイン酸（Ｃ１８：１）である（１２）。オレイン酸は、伸長によってパルミチン酸からステアリン酸（Ｃ１８：０）になり、その後、電子アクセプターとして酸素を必要とするΔ９ステアロイル−ＣｏＡデサチュラーゼ１（ＳＣＤ１）による不飽和化を受けて生成される。適切な膜流動性、したがって細胞完全性を確保するためには、細胞によって、ステアリン酸に対するオレイン酸の特定の比が維持されなければならず、著しい不均衡は、アポトーシスを誘導することが示されている（１３〜１５）。ＳＣＤ１は、ＰＩ３Ｋ−Ａｋｔ−ｍＴＯＲ経路によって調節され（５）、肥満およびがんの両方の薬理学的標的として調査されている（１６〜１９）。
【００８２】
実際に本開示より以前は、本明細書に含まれる実施例で議論されている通り、本開示より以前は、がん細胞が、それらの非必須脂肪酸の大部分をｄｅ  ｎｏｖｏ合成すると一般に想定されていた。この想定は、主に、１０％血清および酸素正常状態で実施された細胞培養実験に基づくものである。この想定は、最も重要な発癌性経路の１つであるＰＩ３Ｋ−Ａｋｔ−ｍＴＯＲのグルコース依存性の脂質生成促進効果によって支持される。また、ＲａｓはＡｋｔを活性化するので、グルコース依存性の脂質生成促進の役割も有している可能性があると予測されている。本開示は、とりわけ、このような想定に関する問題の源を実証する。
【００８３】
Ｒａｓ活性化は、ＰＩ３Ｋ−Ａｋｔ経路の活性化と同様に、グルコースの取込みおよび乳酸排出を誘導する（２０）。Ｒａｓは、ＰＩ３Ｋ−Ａｋｔ経路を活性化することが公知であるが、下流の代謝効果が分岐し得ることが近年の知見から示唆されていることを、本開示では十分認識されている。例えば、Ｒａｓは、ミトコンドリア呼吸を低減する（２１）。さらに、Ｒａｓは、マクロピノサイトーシスおよび自己貪食を誘導し、それによって代謝基質の潜在的に可能な代替源を提供する（２２〜２４）。分岐的な代謝効果のさらなる支持として、マウス異種移植実験によって、Ｒａｓ駆動性腫瘍とＰＩ３Ｋ−Ａｋｔ活性化を伴う腫瘍との間でカロリー制限への感度に差異があることが明らかになった（２５）。Ａｋｔの脂質生成促進効果とは対照的に、脂質代謝に対するＲａｓの影響は、以前には調査されていなかった。さらに、脂質代謝を含めた代謝に対する、酸素利用性と癌遺伝子シグナル伝達の相互作用は、本開示より以前は広範に調査されていなかった。
【００８４】
本明細書に記載の通り、本発明者らは、１３Ｃ−トレーサーおよびリピドミクスを使用して、形質転換細胞における脂質生成を、癌遺伝子発現および酸素利用性の関数として研究した。本発明者らは、低酸素状態では、脂肪酸の移入を増加させることによって、ｄｅ
ｎｏｖｏ脂肪酸合成および不飽和化の要求が減少することを見出した。発癌性Ｒａｓは、低酸素状態の代謝表現型を繰り返し、脂肪酸取込みへの依存度が増加すると、Ｒａｓ駆動性がん細胞はＳＣＤ１阻害に耐性を有するようになる。移入脂肪酸の主な供給源は、１つの脂肪酸の尾部を有する血清脂質であるリゾ脂質である。単一の脂肪酸の尾部を有する脂質を異化する能力は、侵襲性のがんおよびＲａｓ駆動性がんにおいて増強されることが以前に示された（２６〜２８）。本発明の結果は、関係するリゾ脂質の捕捉が、低酸素状態の細胞およびＲａｓ駆動性がん細胞の両方における脂肪酸獲得の主な経路であり得ることを示している。
【００８５】
したがって本開示は、Ｒａｓが、グルコース依存性のｄｅ  ｎｏｖｏ脂質生成を誘導しないが、その代わりに血清脂肪酸の捕捉を刺激することを実証する。このような捕捉は、本明細書で研究される全ての細胞に固有の特性であり、Ｒａｓ活性化、低酸素状態、および／または培地への生理的濃度のリゾリン脂質（すなわち、ただ１つの脂肪酸の尾部を有するリン脂質）の添加によって、さらに増加する。捕捉が増強されると、Ｒａｓ駆動性細胞は、主な哺乳動物デサチュラーゼであるＳＣＤ１の薬理学的阻害に耐性を有するようになる。さらに、捕捉が増強されると、電子アクセプターとして酸素分子を必要とするＳＣＤ１を回避することによって、低酸素状態でのＲａｓ駆動性腫瘍の成長を容易にし得る。
【００８６】
脂質捕捉の標的化
本開示は、特に、例えばＲａｓ関連腫瘍などの腫瘍細胞における脂質捕捉を標的化するための様々な技術の価値を実証し、それを提供する。一部の実施形態では、このような標的化は、それらの環境から脂質を上手く捕捉する細胞（例えば、腫瘍細胞）および／または腫瘍の同定を可能にする。一部の実施形態では、提供される技術によって、脂質捕捉の度合いおよび／もしくは種類、ならびに／または脂質生合成と比較した場合の脂質捕捉への相対的な依存を同定し、かつ／または特徴付けることができる。したがって、このような技術は、脂質捕捉系を改変することによって成長、増殖および／または生存率が影響を受け得る細胞および／または腫瘍の同定を可能にする。
【００８７】
単なるいくつか例を挙げれば、本開示を読解することによって当業者には明らかになる通り、脂質を捕捉する細胞および／または腫瘍は、脂質合成を阻害する様式を用いると、成長阻害に対する感受性が低下するのに対して、このような細胞および／または腫瘍は、脂質捕捉に干渉する様式を用いると、成長阻害に対する感受性が高くなる。したがって一部の実施形態では、本発明は、異なるタイプの治療に応答する可能性が相対的に高いまたはなさそうなものとして、細胞および／または腫瘍を分類する技術を提供する。例えば本発明によれば、脂質を捕捉する細胞は、脂質生合成を阻害または妨害する治療に応答する可能性が低く、脂質捕捉を阻害または妨害する治療に応答する可能性が高い。あるいはまたはさらには、一部の実施形態では、本発明は、特定の腫瘍を処置するのに適した治療様式を選択する技術、および／またはこのような様式を用いてこのような腫瘍を処置する技術を提供する。
【００８８】
一部の実施形態では、本発明は、細胞環境（ｃｅｌｌｕｌａｒ  ｍｉｌｌｅｕ）から捕捉可能な脂質の存在またはレベルをモジュレートすることによって、脂質捕捉を標的化する技術を提供する。例えば、本明細書に記載の通り、脂質を捕捉する腫瘍細胞、例えばＲａｓ関連腫瘍細胞は、１つの脂肪酸の尾部を有するリン脂質（リゾリン脂質）を優先的に蓄積する傾向がある。本開示は、例えばＲａｓ駆動性腫瘍を含めたＲａｓ駆動性細胞が、それらによるリゾリン脂質の捕捉の成功を低減する、例えば細胞環境（例えば血液）におけるこのようなリゾリン脂質のレベルを制限することを含む治療レジメンに対して感受性を示し得ることを実証する。
【００８９】
また本開示は、具体的には、ホスファチジルグリセロール脂質ならびに／またはより高い不飽和度および／もしくはより長い炭素鎖を有する脂肪酸が、腫瘍（例えばＲａｓ関連腫瘍）において、それに隣接する良性腫瘍よりも高いレベルでしばしば検出可能であったことを実証する。本開示は、例えばＲａｓ駆動性腫瘍を含めたＲａｓ駆動性細胞が、それらによるこのような脂質（例えば、ホスファチジルグリセロール脂質ならびに／またはより高い不飽和度および／もしくはより長い炭素の尾部を有する脂肪酸）の捕捉の成功を低減する治療レジメンに対して感受性を示し得ることを実証する。本開示は、例えばＲａｓ駆動性腫瘍を含めたＲａｓ駆動性細胞が、それらによるこのような脂質の捕捉の成功を低減する、例えば細胞環境（例えば血液）におけるそれらのレベルを制限することを含む治療レジメンに対して感受性を示し得ることを実証する。
【００９０】
一部の実施形態では、本発明は、１つまたは複数の脂質の捕捉の成功に関与し、かつ／またはそれに必要な１つまたは複数の作用物質のレベルおよび／または活性を阻害する状態および／または薬剤に、細胞（例えば、腫瘍細胞および／または腫瘍）を曝露することによって、脂質捕捉を標的化する技術を提供する。あるいはまたはさらには、一部の実施形態では、本発明は、１つまたは複数の脂質の捕捉の成功に干渉する（例えば直接阻害によって、競合によって、および／または転換などによって）１つまたは複数の作用物質のレベルおよび／または活性を増強する状態および／または薬剤に、細胞（例えば、腫瘍細胞および／または腫瘍）を曝露することによって、脂質捕捉を標的化する技術を提供する。
【００９１】
一部の実施形態では、関連性のある薬剤は、細胞脂質捕捉機構の構成成分と直接的に相互作用する。一部の実施形態では、関連性のある薬剤は、細胞脂質捕捉機構の構成成分と直接的に相互作用しない。
【００９２】
感受性腫瘍
とりわけ、本開示は、ある特定のＲａｓ関連腫瘍が脂質捕捉を利用し、かつ／またはそれに依存することを実証する。したがって本発明によれば、このような腫瘍は、脂質生合成を阻害または妨害する治療様式に応答する可能性が相対的に低く、脂質捕捉を阻害または妨害する治療様式に応答する可能性が相対的に高いようである。
【００９３】
Ｒａｓ駆動性細胞によるリゾリン脂質の取込みおよび利用は、より網羅的な「捕捉剤」の存在様式の重要部分である。発癌性Ｒａｓは、自己貪食およびマクロピノサイトーシスの両方を上方調節し、これらは共にバルク材料のエンドサイトーシス小胞への取り込みに関与する。自己貪食は、細胞内内容物を消費し（細胞の喰殺）、マクロピノサイトーシスは細胞外内容物を消費する。これらは共に、高分子分解を介して栄養を提供することができ、マクロピノサイトーシスは、リゾ脂質取込みに直接的に寄与することが可能である。
【００９４】
マクロピノサイトーシスの潜在的に可能な役割に関係なく、捕捉は、Ｒａｓ駆動性がんの代謝の顕著な特徴である。ＰＩ３Ｋ−Ａｋｔ経路によって駆動された腫瘍は、活動的に生合成に従事し、代謝的に脆弱になるが、その代わり、主に発癌性Ｒａｓによって駆動された腫瘍が、細胞外高分子を利用して新しい高分子および脂質の生成に必要な基質を得ることによって急速成長を維持する能力を備えることを、本開示は実証する。この観察は、治療的な意味を有しており、ＳＣＤ１などの同化酵素の阻害剤に対してＲａｓ駆動性腫瘍が比較的頑強になる。同時に、この観察は、Ｒａｓ駆動性がんに対する治療標的としての捕捉経路酵素を暗示している。
【００９５】
Ｒａｓは、低分子量ＧＴＰａｓｅと呼ばれる、細胞内のシグナルの伝達に関与する（細胞シグナル伝達）関係するタンパク質のファミリーである。例示的なＲａｓタンパク質として、Ｈ−Ｒａｓ、Ｎ−ＲａｓおよびＫ−Ｒａｓが挙げられるが、それらに限定されない。すべてのＲａｓタンパク質は、「オン」および「オフ」状態の２つのシグナル伝達スイッチとして機能する。Ｒａｓは、典型的に、「オフ」状態（または不活性化状態）では、ヌクレオチドのグアノシン二リン酸（ＧＤＰ）に結合し、「オン」状態（または活性化状態）では、グアノシン三リン酸（ＧＴＰ）に結合する。普通は、Ｒａｓは、活性なＧＴＰ結合形態と不活性なＧＤＰ結合形態の間の循環によって調節される。本明細書で使用される場合、用語「慢性的に活性化されたＲａｓ」は、活性な状態で構成的もしくは永久的にロックされている、または野生型Ｒａｓと比較して失活速度が低下したＲａｓ  ＧＴＰａｓｅ形態を指す。
【００９６】
典型的に、慢性的に活性化されたＲａｓは、ＧＴＰ加水分解速度を防止または低減する変異を含有する。一部の実施形態では、慢性的に活性化されたＲａｓは、Ｐ−ループにおける残基Ｇ１２および／または触媒残基Ｑ６１において見出される変異によって引き起こされる。例えば、Ｈ−Ｒａｓの残基１２におけるグリシンからバリンへの変異によって、慢性的に活性化されたＲａｓが生じる。別の非限定的な例として、残基６１は、ＧＴＰ加水分解の遷移状態の安定化に関与している。一部の実施形態では、慢性的に活性なＲａｓは、Ｎ−ＲａｓにおいてＱ６１Ｋ変異を含有し、それによって固有のＲａｓ  ＧＴＰ加水分解速度が低減する。別の非限定的な例として、コドン１２の変異（ＧｌｙからＡｌａ、Ａｒｇ、Ａｓｐ、Ｃｙｓ、Ｓｅｒ、またはＶａｌ）およびコドン１３の変異（ＧｌｙからＡｓｐ）によって、慢性的に活性化されたＫ−Ｒａｓが生じる。
【００９７】
Ｒａｓ活性化に関連することが公知の特定のＲａｓ対立遺伝子には、例えばＨ−ＲａｓＶ１２Ｇ、Ｋ−ＲａｓＧ１２Ｄ、およびＫ−ＲａｓＧ１２Ｖが含まれる。
【００９８】
慢性的に活性化されたＲａｓは、様々ながんに関与するとされている。例えばいくつか例を挙げれば、以下のがんは、慢性的に活性化されたＲａｓに関連することが公知である：肺がんＫ−Ｒａｓ、膵臓（Ｋ−Ｒａｓ）、非小細胞肺腺癌（Ｋ−Ｒａｓ）、結腸直腸（Ｋ−Ｒａｓ）、甲状腺（Ｋ−Ｒａｓ、Ｈ−ＲａｓおよびＮ−Ｒａｓ）、セミノーマ（Ｋ−ＲａｓおよびＮ−Ｒａｓ）、骨髄異形成症候群（Ｋ−ＲａｓおよびＮ−Ｒａｓ）、急性骨髄性白血病（Ｎ−Ｒａｓ）、慢性骨髄性白血病（Ｎ−Ｒａｓ）、黒色腫（Ｎ−Ｒａｓ）、膀胱（Ｈ−Ｒａｓ）、肝臓（Ｎ−Ｒａｓ）および腎臓（Ｈ−Ｒａｓ）。
【００９９】
以下の表は、必ずしも完全ではないが、より包括的なＲａｓ関連がんの一覧を提示している。
【表１】
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【０１００】
標的化剤
原則として、レベル、形態および／または活性が、脂質捕捉の特色と相関し、かつ／またはそれをモジュレートする（例えば阻害するまたは増強する）任意の薬剤は、少なくとも本明細書に記載のある特定の実施形態では、脂質捕捉を標的化する薬剤であり得る。
【０１０１】
一部の実施形態では、本明細書に記載の通り脂質捕捉を標的化する薬剤は、小分子であるか、またはそれを含む。一部の実施形態では、本明細書に記載の通り脂質捕捉を標的化する薬剤は、ポリペプチドであるか、またはそれを含む。一部の実施形態では、本明細書に記載の通り脂質捕捉を標的化する薬剤は、核酸であるか、またはそれを含む。一部の実施形態では、本明細書に記載の通り脂質捕捉を標的化する薬剤は、グリカンであるか、またはそれを含む。一部の実施形態では、本明細書に記載の通り脂質捕捉を標的化する薬剤は、脂質であるか、またはそれを含む。
【０１０２】
一部の実施形態では、本明細書に記載の通り脂質捕捉を標的化する薬剤は、抗体薬剤（例えば、脂質捕捉機構の構成成分に結合する）であるか、またはそれを含む。
【０１０３】
一部の実施形態では、本明細書に記載の通り脂質捕捉を標的化する薬剤は、核酸薬剤（例えば、アンチセンス薬剤またはｓｉＲＮＡ薬剤）（例えば、脂質捕捉機構の構成成分に結合し、かつ／またはその構成成分をコードするもしくはこのような構成成分に相補的な遺伝子もしくは遺伝子産物に結合する）であるか、またはそれを含む。
【０１０４】
一部の実施形態では、標的化薬剤は、検出可能な部分であり、またはそれに関連する。一部の実施形態では、標的化薬剤は、治療部分に関連する。
【０１０５】
脂質捕捉を標的化する薬剤の同定および／または特徴付け
一部の実施形態では、本開示は、脂質捕捉を標的化する薬剤の同定および／または特徴付けのための方法論を提示する。
【０１０６】
例えば、本明細書に記載の通り、本発明は、例えば細胞の脂肪酸含量を決定することによって、ならびに／または様々な脂質および／もしくは代謝産物の測定を行うことによって、細胞、例えば腫瘍細胞による脂質捕捉を評価する技術を提供する。
【０１０７】
一部の実施形態では、提供される系は、脂質捕捉を標的化する薬剤を同定し、および／または特徴付けるために利用することができる。
【０１０８】
例えば一部の実施形態では、全体的な脂質レベル、および／または１つもしくは複数の特定の脂質もしくは脂質タイプのレベルは、細胞中で、脂質が存在しない場合および／または関連性のある対照と比較して、本明細書に記載の通り脂質捕捉を標的化する薬剤の存在下で変わる。一部の実施形態では、脂質タイプの分布（例えば、特定の脂質種および／または脂質タイプの相対量）は、細胞（例えば、腫瘍細胞または腫瘍）中で、脂質が存在しない場合および／または関連性のある対照と比較して、本明細書に記載の通り脂質捕捉を標的化する薬剤の存在下で変わる。
【０１０９】
一部の実施形態では、腫瘍体積は、脂質が存在しない場合および／または関連性のある対照と比較して、本明細書に記載の通り脂質捕捉を標的化する薬剤の存在下で低減される。
【０１１０】
一部の実施形態では、本明細書に記載の通り脂質捕捉を標的化する薬剤としてのその実用性が評価されるべき、複数の試験薬剤が提供される。このような一部の実施形態では、このような複数のメンバーは、適切な対照に対して、本明細書に記載の通りアッセイされる。このような試験薬剤は、その存在またはレベルが、適切な参照に対して本明細書に記載の脂質捕捉の特色の関連性のある変化と相関する場合に、脂質捕捉を標的化する薬剤と指定され得る。
【０１１１】
一部の実施形態では、試験薬剤は、本明細書に記載の通り、１つまたは複数のアッセイまたは評価に個々に晒すことができる。一部の実施形態では、試験薬剤は、一緒にプールし、次に本明細書に記載の通り、１つまたは複数のアッセイまたは評価に晒すことができる。次に、こうして晒したプールを、さらなるアッセイまたは評価のために分割することができる。
【０１１２】
一部の実施形態では、ハイスループットスクリーニング法を使用して、多数の潜在的に可能な試験化合物を含有する化学的ライブラリーもしくはペプチドライブラリー、または他のコレクションをスクリーニングする。次に、このような「化学的ライブラリー」を、１つまたは複数のアッセイでスクリーニングして、所望の特徴的な活性を呈するライブラリーメンバー（特定の化学種またはサブクラス）を同定する。こうして同定された化合物は、通常の「リード化合物」として働くことができ、または潜在的に可能なもしくは実際のモジュレーターとして（例えば治療剤として）それら自体使用することができる。
【０１１３】
脂質捕捉を標的化することによる処置に感受性の腫瘍の検出
本明細書に記載の通り、本発明は、例えば脂質生合成を標的化する治療または脂質捕捉を標的化する治療などの特定のタイプの治療に応答する可能性が高いまたは低い腫瘍を検出および／または分類するための様々な方法論を提供する。
【０１１４】
一部の実施形態では、腫瘍は、例えば適切な対照（例えば、隣接する非腫瘍組織の細胞）に関連性のある腫瘍細胞に存在する脂質のレベルおよび／またはタイプを決定することによって、検出および／または分類される。
【０１１５】
一部の実施形態では、腫瘍は、脂質捕捉状態と相関する特色のレベル、量またはタイプを決定することによって、検出および／または分類される。例えば本明細書に記載の通り、本開示は、Ｒａｓ関連腫瘍が脂質捕捉腫瘍であることを実証する。したがって一部の実施形態では、Ｒａｓ活性の１つもしくは複数の特徴、ならびに／またはその存在、形態もしくはレベルが脂質捕捉活性と相関する１つもしくは複数の腫瘍関連性マーカーの決定および／または検出を介して、特定のタイプの治療に応答する可能性が高いまたは低い腫瘍が同定され、かつ／または特徴付けられる。
【０１１６】
一部の実施形態では、腫瘍は、特定のがん関連性Ｒａｓ対立遺伝子（例えば、Ｈ−ＲａｓＶ１２Ｇ、Ｋ−ＲａｓＧ１２Ｄ、および／またはＫ−ＲａｓＧ１２Ｖ）を検出および／または定量することによって、検出および／または分類される。
【０１１７】
脂質捕捉を標的化することによる腫瘍の処置
哺乳動物細胞の成長は、膜構造の複製を必要とする。このことに基づいて、脂肪酸シンターゼおよびアセチルＣｏＡカルボキシラーゼを含めた脂肪酸シンターゼ酵素の阻害剤を用いたがんの処置に関心が集まっている。このような酵素は、「非必須」脂肪酸を生成する。しかし、脂質構造物の複製は、オメガ−３脂肪酸およびオメガ−６脂肪酸などの多価不飽和脂肪酸を含めた必須脂肪酸も必要とする。
【０１１８】
本明細書に記載の通り、腫瘍成長のために不飽和脂肪酸が重要であることを指摘する少なくとも３つの証拠がある。１つの証拠は、良性の隣接組織と比較したヒト膵臓がんの脂肪酸組成（全組成、膜脂質およびトリグリセリドをけん化することによって決定される）の測定を含む。膵臓がんは、多価不飽和脂肪酸の尾部を有するホスファチジル−グリセロールリン脂質が高度に富化されていることが観察された（図１１参照）。別の証拠は、Ｒａｓ駆動性肺がんの成長に対する異なる治療食の影響を測定することを含むものであった。Ｒａｓ駆動性肺がん株Ａ５４９に由来する異種移植腫瘍細胞の成長は、飽和脂肪酸または炭水化物（飽和脂肪酸に代謝され得る）が豊富な治療食を給餌したマウスと比較して、不飽和脂肪酸が豊富な治療食を給餌したマウスの方が速いことが観察された（図１２参照）。第３の証拠は、培養がん細胞による血清からの脂肪酸の取込みの研究を含んでいた（図１〜１０参照）。これらのデータはともに、いくつかのまたはすべての不飽和脂肪酸の摂取を制限することによるがんの処置、例えば米国においてがんによる一般的な死亡原因の一つであるＲａｓ駆動性腫瘍の処置を示している。特に、本明細書に提示の証拠は、オメガ−６脂肪酸の取込みを制限することの重要性を指摘する。
【０１１９】
これらの観察は、現在の臨床診療とは完全に反する。がんを有する患者にとって、食欲が低下し、体重が減少することは非常に一般的である。したがって栄養士は、消耗および悪液質を防止する一助にするために、脂肪サプリメントを頻繁に処方していた。これらのサプリメントは、典型的に、不飽和必須脂肪酸が豊富な魚油に基づくものである。このような脂肪酸は、実際、腫瘍成長を促進し得る。したがって、本開示の一態様は、オメガ−６脂肪酸、またはより一般的には多価不飽和脂肪酸、またはさらにより一般的にはすべての不飽和脂肪酸が枯渇したサプリメントを含む。このようなサプリメントは、心血管の安全性の観点から問題があるとみなされるため、現在存在していない。それにもかかわらず、このような心血管の課題は、がん患者にとって、がんを最小限に抑えるためのあらゆる可能な食事および補給ステップを取り入れることと比較して懸念が小さい。
【０１２０】
一般に、本開示は、脂質捕捉を標的化することによって、ある特定の腫瘍、特にＲａｓ関連腫瘍を処置することの望ましさおよび有効性を実証する。当業者であれば、このような標的化を果たすために、様々な手法のいずれかを利用できることが理解されよう。一部の実施形態では（例えば、本明細書に記載のある特定の食事管理の実施形態では）、例えば、治療食における脂質摂取を制御することによって、ある特定の脂質が捕捉に利用されることが制限される。
【０１２１】
一部の実施形態では、脂質捕捉機構の特定の構成成分は、例えば、このような構成成分と直接的に相互作用し、またはその他の方法で構成成分のレベルおよび／もしくは活性をモジュレートする薬剤を使用することによって標的化される。
【０１２２】
一部の実施形態では、全般的な脂質捕捉手法が履行される。一部の実施形態では、特定の脂質または脂質タイプの捕捉を標的化するためのステップが行われる。一部の特定の実施形態では、少なくともリゾリン脂質捕捉が標的化される。一部の実施形態では、少なくともホスファチジルグリセロール脂質ならびに／またはより高い不飽和度および／もしくはより長い炭素鎖を有する脂肪酸の捕捉が標的化される。様々な実施形態では、本明細書に記載の通り、食事管理によるものを含めた脂質捕捉を標的化する治療様式は、少なくとも２週間、３週間、４週間、５週間、６週間、７週間、８週間、９週間、１０週間、１１週間、１２週間、１３週間、１４週間、１５週間、１６週間、１７週間、１８週間、１９週間、２０週間、２１週間、２２週間、２３週間、２４週間、２５週間、２６週間の期間にわたって、または治療エンドポイントが観察されるまで、例えば腫瘍の縮小が観察されるまで投与される。
【０１２３】
食事管理
とりわけ、本開示は、食事による脂肪酸摂取をモジュレートすることによって、ある特定の腫瘍を処置することを包含する。
【０１２４】
一態様では、本開示は、具体的には、例えば脂質摂取の食事管理によって、血清中の捕捉脂質のレベルおよび／またはタイプを制御することによって、Ｒａｓ駆動性細胞（例えばＲａｓ関連腫瘍）による脂質捕捉の成功を低減するための様式を提供する。一部の実施形態では、脂質摂取は、好適な捕捉脂質の摂取を制限することによって制御される。一部の実施形態では、脂質摂取は、他の脂質と比較して、好適な捕捉脂質の相対的な摂取を調節することによって制御される。一部の特定の実施形態では、脂質摂取は、脂質を含む、特に目的の細胞または腫瘍にとって好適な捕捉脂質ではない脂質を含有する栄養サプリメントを提供および／または使用することによって制御される。
【０１２５】
一部の特定の実施形態では、脂質摂取は、飽和脂肪酸が豊富な治療食であるが多価不飽和脂肪酸が少ない治療食を、それを必要としている患者に投与することによって制御される。一部の実施形態では、このような治療食は、過剰の完全飽和した脂肪酸を含み、かつ／または多価不飽和脂肪酸を実質的に含まない。一部の実施形態では、このような治療食は、完全飽和した脂肪酸を提供する（例えば、このような完全飽和した脂肪酸からなるまたはそれを含む）栄養サプリメントの摂取を含む。
【０１２６】
一部の実施形態では、所望の治療食は、タンパク質が豊富なサプリメントを、高レベル（２０００カロリーの治療食に基づいて、１日当たりの推奨摂取量である約１５ｇのおよそ１００％またはそれを超える）の飽和脂肪酸を含むが、低レベル（２０００カロリーの治療食に基づいて、１日当たりの推奨摂取量である約２０ｇのおよそ０〜５０％、例えば１０ｇ未満、８ｇ未満、６ｇ未満、２ｇ未満、１ｇ未満、または０．５ｇ未満）の多価不飽和脂肪酸を含む追加の脂肪補給と組み合わせることによって達成することができる。栄養障害を防止するための多価不飽和脂肪酸の最小量は、人によって変わり、投与は、臨床医によって、潜在的な副作用、例えば乾燥、鱗状皮膚、感染に対する感受性、不十分な創傷治癒、視覚障害、および神経学的異常の出現を評価された後に修正される。
【０１２７】
脂肪補給を上記のタンパク質サプリメントと組み合わせる代替として、一部の実施形態では、追加のタンパク質補給なしに脂肪サプリメントを使用することができる。
【０１２８】
様々な実施形態では、本明細書に記載の有用な食事レジメンの一部として使用できる栄養サプリメントは、脂質を含み、この脂質の大部分は脂肪酸の尾部を含有しており、サプリメントにおける多価不飽和脂肪酸に対する飽和脂肪酸の比は、１を超える。本明細書で使用される場合、「大部分」は、サプリメントに存在する少なくとも５０．１％の脂質が、脂肪酸の尾部を有することを意味する。
【０１２９】
例えば、それに限定されるものではないが、本開示の一実施形態は、コーティングおよび内部の高カロリー物質を含む、カプセル剤または丸剤の形態の栄養サプリメントまたは代用食品を含み、このコーティングは、当技術分野で公知の任意の丸剤またはカプセル剤のコーティングであり、内部の高カロリー物質は、脂肪酸および／または脂質を含む。一部の実施形態では、脂肪酸および脂質の組成は、例えば代替の脂肪酸もしくは脂質を含む、または脂肪酸もしくは脂肪を含まない、比較できるサプリメント（例えば、他の点では類似または同一のサプリメント）を取り入れることと比較して、サプリメントを取り入れる個体におけるがんの成長を緩和するように選択される。
【０１３０】
様々な態様では、提供される栄養サプリメント、代用食品、および／または食事レジメンは、（多価）不飽和脂肪酸に対する飽和脂肪酸の比が１、２、３、４、５、８、１０、１５、２０、２５、３０、３５、４０、４５、または５０を超える脂肪酸を含むように選択される、設計される、かつ／または製造される。一部の実施形態では、含まれる脂肪酸は、動物源および／または植物源から得られる。当業者には理解される通り、このような様々な供給源は、飽和脂肪酸が豊富な脂質および／または脂質混合物を提供することができる。一部の実施形態では、提供される栄養サプリメント、代用食品、および／または食事レジメンは、健康を維持するための１日当たりの最小必要量を満たし、かつ／または例えばオメガ−３脂肪酸とオメガ−６脂肪酸の特定の所望の比を達成するため（例えば、所望の治療上の利益を達成するため）に、適切なレベルの不飽和（例えば多価不飽和）脂肪酸を含む。様々な態様では、オメガ−６脂肪酸を超える、例えば１、２、３、４、５、７、１０、１５、２０、２５または３０を超えるモル比のオメガ−３脂肪酸を含むことが望ましい。一部の実施形態では、少なくとも一部の含まれた脂肪酸は、多価不飽和脂肪酸が豊富な魚または他の供給源から得られる。
【０１３１】
一部の実施形態では、提供される栄養サプリメント、代用食品、および／または食事レジメンに含まれる脂肪酸は、遊離脂肪酸形態であり、一部の実施形態では、例えばグリセリドおよび／またはリン脂質（例えば、リゾリン脂質）の構成成分として（例えばその文脈において）提供される。
【０１３２】
様々な実施形態では、供給源から得られた１つまたは複数の脂肪酸は、本明細書に記載の栄養サプリメント、代用食品、および／または食事レジメンに含まれる前に水素化される。あるいはまたはさらには、一部の実施形態では、第１の供給源に由来する１つまたは複数の脂肪酸を、第２の供給源に由来する１つまたは複数の脂肪酸と組み合わせて、本発明による栄養サプリメント、代用食品、および／または食事レジメンに使用するための脂肪酸組成物を提供する。
【０１３３】
一部の実施形態では、本発明に従って利用される栄養サプリメント、代用食品および／または食事レジメンの総脂肪含量は、１日当たりの推奨摂取量である約１５ｇ（２０００カロリーの治療食に基づく）の少なくとも１０％、２０％、３０％、４０％、５０％、６０％、７０％、８０％、９０％もしくは１００％またはそれを超える飽和脂肪酸、および１日当たりの推奨摂取量であるおよそ２０ｇ（２０００カロリーの治療食に基づく）のおよそ０％、１０％、２０％、３０％、４０％または５０％の多価不飽和脂肪酸である。
【０１３４】
一部の実施形態では、脂肪酸摂取の所望のレベルは、本明細書に記載の通り、１〜５単位用量の栄養サプリメントまたは代用食品を消費することによって達成される。例えば、一部の実施形態では、利用される栄養サプリメントまたは代用食品は、重量比が１０：１の飽和脂肪酸と多価不飽和脂肪酸を含有する（例えば、飽和脂肪酸１０ｇおよび多価不飽和脂肪酸１ｇ、または同様に、飽和脂肪酸が豊富な脂質１０ｇおよび多価不飽和脂肪酸が豊富な脂質１ｇ）。一部の実施形態では、このような栄養サプリメントまたは代用食品は、他の方法では低脂肪の食事レジメンに含まれ、このような治療食は、必要に応じて低タンパク質の場合もある。
【０１３５】
一部の実施形態では、本発明に従って利用される栄養サプリメント、代用食品および／または食事レジメンは、１．０重量％未満、０．９重量％未満、０．８重量％未満、０．７重量％未満、０．６重量％未満、０．５重量％未満、０．４重量％未満、０．３重量％未満、０．２重量％未満、０．１重量％未満、または０．０５重量％未満の濃度のアラキドン酸を有する。
【０１３６】
一部の実施形態では、本発明に従って利用される栄養サプリメント、代用食品および／または食事レジメンは、少なくとも３０重量％、少なくとも４０重量％、少なくとも５０重量％、少なくとも６０重量％、または少なくとも７０重量％が脂質である。
【０１３７】
一般に、本発明に従って利用される栄養サプリメントおよび／または代用食品は、当技術分野で公知の任意の形態、例えば粉末、ゲル、懸濁液、ペースト、固体、液体、液体濃縮物、復元可能な粉化乳代用物、またはすぐに使用できる生成物で、製造、提供、および／または利用することができる。一部の実施形態では、このような栄養サプリメントおよび／または代用食品は、特定のカロリー含量に標準化され、すぐに使用できる生成物として提供され、かつ／または濃縮形態で提供される。様々な実施形態では、組成物は、５μｍ〜１５００μｍの範囲の粒径を有する粉末形態で存在する。
【０１３８】
脂肪酸は、例えば所望の感覚性および安定性の特性を得るために選択された、提供されたおよび／または製造された、精製され、封入され、かつ／または化学的もしくは酵素的に改変された形態で、本発明に従って利用される。一部の実施形態では、封入された脂肪酸は、耐水溶性であるが、小腸に到達すると放出される。一部の実施形態では、このような結果は、例えば腸溶コーティング、例えば架橋アルギン酸を使用することによって、および／または当技術分野で公知のかつ／もしくは当技術分野で日常的に実施される他の手法によって達成することができる。
【０１３９】
一部の実施形態では、利用される栄養サプリメント、代用食品および／または食事レジメンは、タンパク質源を含む。一部の実施形態では、タンパク質源は、限定されるものではないが、乳（例えば無脂乳）、ホエイタンパク質、カゼイン、ダイズタンパク質、加水分解タンパク質、およびアミノ酸を含めた、当技術分野で公知の任意のタンパク質源であり得る。一部の実施形態では、本開示の実施において有用なウシ乳タンパク質源には、乳タンパク質粉末、乳タンパク質濃縮物、乳タンパク質単離物、無脂乳固形分、無脂乳、乾燥無脂乳、ホエイタンパク質、ホエイタンパク質単離物、ホエイタンパク質濃縮物、スイートホエイ、酸ホエイ、カゼイン、酸カゼイン、カゼイン酸塩（例えば、カゼイン酸ナトリウム、カゼイン酸ナトリウムカルシウム（ｓｏｄｉｕｍ  ｃａｌｃｉｕｍ  ｃａｓｅｉｎａｔｅ）、カゼイン酸カルシウム）およびそれらの組合せが含まれるが、それらに限定されない。
【０１４０】
様々な実施形態では、タンパク質は、無傷のタンパク質として、本発明に従って提供される、製造されるおよび／または利用される。様々な実施形態では、タンパク質は、例えば約４％〜１０％の加水分解度で、無傷のタンパク質と部分的に加水分解されたタンパク質の両方の組合せとして提供される、製造されるおよび／または利用される。様々な実施形態では、タンパク質は、より完全に加水分解されている。様々な実施形態では、本発明に従って提供される、製造されるおよび／または利用されるタンパク質源は、個々のアミノ酸および／または短鎖オリゴペプチドからなるか、またはそれらを含む。
【０１４１】
様々な実施形態では、所望の食事レジメンを支持するために本発明に従って利用される組成物（例えば、栄養サプリメントおよび／または代用食品）は、遊離形態のおよび／または脂質構造物の一部としての、様々な供給源に由来する飽和および不飽和の脂肪酸、糖、水、グルコース、ゼラチン、クエン酸、天然フレーバー、光沢剤（限定されるものではないが、パーム油、白色蜜蝋、カルナウバワックス、乳化剤、グリセロールエステルを含む）、酒石酸、パルミチン酸アスコルビル、リンゴ酸、添加着色料（限定されるものではないが、クルクミン、パプリカ、および他の着色剤を含む）を含む。
【０１４２】
様々な実施形態では、このような例示的な組成物は、遊離形態のおよび／または脂質構造物の一部としての、当技術分野で公知の様々な供給源に由来する飽和脂肪酸、ゼラチン、グリセリン、水、天然レモン油、保存剤としての混合天然トコフェロールを含む。
【０１４３】
組合せ治療
一部の実施形態では、本明細書に記載の通り脂質捕捉を標的化する様式は、がん、例えばＲａｓ関連がんの処置における１つまたは複数の他の治療と組み合わされる。
【０１４４】
様々な多価不飽和脂肪酸、特にω−６脂肪酸であるアラキドン酸は、乳房および膵臓の腫瘍成長、ならびに他のタイプのがんの成長の促進に関与するとされている。多価不飽和脂肪酸が腫瘍成長を促進する正確な機序は、未知のままであるが、膵臓がんでは、アラキドン酸を代謝する酵素シクロオキシゲナーゼ−２に依存し得ることが示された（Ｆｕｎａｈａｓｈｉら、Ｐａｎｃｒｅａｓ、２００８年）。これにより、ＮＳＡＩＤの使用が、膵臓がんおよび潜在的に他のがんの発生率が低いことと関連し得る理由を説明することができる（Ｂｒａｄｌｅｙら、Ｂ．  Ｊ．  Ｃａｎｃｅｒ、２０１０年）。したがって、飽和脂肪酸を高レベルで（１日当たりの推奨摂取量の１００％またはそれを超える）含有するが、多価不飽和脂肪酸であるアラキドン酸および潜在的に他の多価不飽和脂肪酸を低レベルで（１日当たりの推奨摂取量の０〜５０％）含有するようにモジュレートされた治療食は、ＮＳＡＩＤクラスの薬物または他のシクロオキシゲナーゼ阻害剤と協同する。
【０１４５】
様々な実施形態では、脂質捕捉を標的化するために提供される様式は、化学療法レジメン中にがん患者に施行される。一部の実施形態では、このような化学療法レジメンは、当技術分野で公知の任意の化学療法剤の投与を含み得る。化学療法剤の例として、アルキル化剤、例えばチオテパおよびシクロホスファミド（ＣＹＴＯＸＡＮ（商標））；スルホン酸アルキル、例えばブスルファン、インプロスルファンおよびピポスルファン；アジリジン、例えばベンゾドーパ（ｂｅｎｚｏｄｏｐａ）、カルボコン、メツレドーパ（ｍｅｔｕｒｅｄｏｐａ）、およびウレドーパ（ｕｒｅｄｏｐａ）；エチレンイミンおよびメチルアメラミン（ｍｅｔｈｙｌａｍｅｌａｍｉｎｅｓ）（アルトレタミン、トリエチレンメラミン（ｔｒｉｅｔｈｙｌｅｎｅｍｅｌａｍｉｎｅ）、トリエチレンホスホルアミド（ｔｒｉｅｔｙｌｅｎｅｐｈｏｓｐｈｏｒａｍｉｄｅ）、トリエチレンチオホスホルアミド（ｔｒｉｅｔｈｙｌｅｎｅｔｈｉｏｐｈｏｓｐｈａｏｒａｍｉｄｅ）およびトリメチロロメラミン（ｔｒｉｍｅｔｈｙｌｏｌｏｍｅｌａｍｉｎｅ）を含む）；アセトゲニン（ａｃｅｔｏｇｅｎｉｎ）（特にブラタシンおよびブラタシノン）；カンプトテシン（合成類似体トポテカンを含む）；ブリオスタチン；カリスタチン（ｃａｌｌｙｓｔａｔｉｎ）；ＣＣ−１０６５（そのアドゼレシン、カルゼレシンおよびビセレシン合成類似体を含む）；クリプトフィシン（特にクリプトフィシン１およびクリプトフィシン８）；ドラスタチン；デュオカルマイシン（合成類似体、ＫＷ−２１８９およびＣＢＩ−ＴＭＩを含む）；エレウテロビン；パンクラチスタチン（ｐａｎｃｒａｔｉｓｔａｔｉｎ）；サルコジクチン（ｓａｒｃｏｄｉｃｔｙｉｎ）；スポンギスタチン；ナイトロジェンマスタード、例えばクロラムブシル、クロルナファジン（ｃｈｌｏｍａｐｈａｚｉｎｅ）、コロホスファミド（ｃｈｏｌｏｐｈｏｓｐｈａｍｉｄｅ）、エストラムスチン、イホスファミド、メクロレタミン、塩酸メクロレタミンオキシド、メルファラン、ノベムビチン（ｎｏｖｅｍｂｉｃｈｉｎ）、フェネステリン（ｐｈｅｎｅｓｔｅｒｉｎｅ）、プレドニムスチン、トロホスファミド、ウラシルマスタード；ニトロソウレア（ｎｉｔｒｏｓｕｒｅａ）、例えばカルムスチン、クロロゾトシン、フォテムスチン、ロムスチン、ニムスチン、ラニムスチン；抗生物質、例えばエンジイン抗生物質（例えばカリケアマイシン、特にカリケアマイシンガンマ１およびカリケアマイシンシータＩ、例えば、Ａｎｇｅｗ  Ｃｈｅｍ．  Ｉｎｔｌ．  Ｅｄ．  Ｅｎｇｌ．  ３３巻：１８３〜１８６頁（１９９４年）参照；ジネマイシン（ｄｙｎｅｍｉｃｉｎ）（ジネマイシンＡを含む）；エスペラマイシン；ならびにネオカルチノスタチン発色団および関係する色素タンパク質エンジイン抗生物質発色団（ｃｈｒｏｍｏｍｏｐｈｏｒｅ））、アクラシノマイシン、アクチノマイシン、オースラマイシン（ａｕｔｈｒａｍｙｃｉｎ）、アザセリン、ブレオマイシン、カクチノマイシン、カラビシン（ｃａｒａｂｉｃｉｎ）、カルミノマイシン（ｃａｍｉｎｏｍｙｃｉｎ）、カルチノフィリン（ｃａｒｚｉｎｏｐｈｉｌｉｎ）；クロモマイシン、ダクチノマイシン、ダウノルビシン、デトルビシ��、６−ジアゾ−５−オキソ−Ｌ−ノルロイシン、ドキソルビシン（モルホリノ−ドキソルビシン、シアノモルホリノ−ドキソルビシン、２−ピロリノ（ｐｙｒｒｏｌｉｎｏ）−ドキソルビシンおよびデオキシドキソルビシンを含む）、エピルビシン、エソルビシン、イダルビシン、マルセロマイシン、マイトマイシン（ｎｉｔｏｍｙｃｉｎ）、ミコフェノール酸、ノガラマイシン、オリボマイシン、ペプロマイシン、ポルフィロマイシン（ｐｏｔｆｉｒｏｍｙｃｉｎ）、ピューロマイシン、ケラマイシン（ｑｕｅｌａｍｙｃｉｎ）、ロドルビシン（ｒｏｄｏｒｕｂｉｃｉｎ）、ストレプトニグリン、ストレプトゾシン、ツベルシジン、ウベニメクス、ジノスタチン、ゾルビシン；代謝拮抗物質、例えばメトトレキサートおよび５−フルオロウラシル（５−ＦＵ）；葉酸類似体、例えばデノプテリン、メトトレキサート、プテロプテリン、トリメトレキサート；プリン類似体、例えばフルダラビン、６−メルカプトプリン、チアミプリン、チオグアニン；ピリミジン類似体、例えばアンシタビン、アザシチジン、６−アザウリジン、カルモフール、シタラビン、ジデオキシウリジン、ドキシフルリジン、エノシタビン、フロクスウリジン、５−ＦＵ；アンドロゲン、例えばカルステロン、プロピオン酸ドロモスタノロン、エピチオスタノール、メピチオスタン、テストラクトン；抗副腎剤（ａｎｔｉ−ａｄｒｅｎａｌ）、例えばアミノグルテチミド、ミトタン、トリロスタン；葉酸補充物（ｒｅｐｌｅｎｉｓｈｅｒ）、例えばフォリン（ｆｒｏｌｉｎｉｃ）酸；アセグラトン；アルドホスファミドグリコシド；アミノレブリン酸；アムサクリン；ベストラブシル；ビサントレン；エダトレキサート（ｅｄａｔｒａｘａｔｅ）；デホファミン（ｄｅｆｏｆａｍｉｎｅ）；デメコルチン；ジアジコン；エルフォミチン（ｅｌｆｏｍｉｔｈｉｎｅ）；酢酸エリプチニウム；エポチロン；エトグルシド；硝酸ガリウム；ヒドロキシ尿素；レンチナン；ロニダミン；メイタンシノイド、例えばメイタンシンおよびアンサマイトシン（ａｎｓａｍｉｔｏｃｉｎ）；ミトグアゾン；ミトキサントロン；モピダモール；ニトラクリン；ペントスタチン；フェナメット；ピラルビシン；ポドフィリン酸；２−エチルヒドラジド；プロカルバジン；ＰＳＫ（登録商標）；ラゾキサン；リゾキシン；シゾフラン（ｓｉｚｏｆｕｒａｎ）；スピロゲルマニウム；テヌアゾン酸；トリアジコン；２，２’，２’’−トリクロロトリエチルアミン；トリコテセン（特にＴ−２毒素、ベラクリン（ｖｅｒｒａｃｕｒｉｎ）Ａ、ロリジン（ｒｏｒｉｄｉｎ）Ａおよびアングイジン）；ウレタン；ビンデシン；ダカルバジン；マンノムスチン；ミトブロニトール；ミトラクトール；ピポブロマン；ガシトシン（ｇａｃｙｔｏｓｉｎｅ）；アラビノシド（「Ａｒａ−Ｃ」）；シクロホスファミド；チオテパ；タキソイド、例えばパクリタキセル（ＴＡＸＯＬ（商標）、Ｂｒｉｓｔｏｌ−Ｍｙｅｒｓ  Ｓｑｕｉｂｂ  Ｏｎｃｏｌｏｇｙ、Ｐｒｉｎｃｅｔｏｎ、ＮＪ）およびドセタキセル（ｄｏｘｅｔａｘｅｌ）（ＴＡＸＯＴＥＲＥ（登録商標）、Ｒｈｏｎｅ−Ｐｏｕｌｅｎｃ  Ｒｏｒｅｒ、Ａｎｔｏｎｙ、Ｆｒａｎｃｅ）；クロラムブシル；ゲムシタビン；６−チオグアニン；メ��カプトプリン；メトトレキサート；白金類似体、例えばシスプラチンおよびカルボプラチン；ビンブラスチン；白金；エトポシド（ＶＰ−１６）；イホスファミド；マイトマイシンＣ；ミトキサントロン；ビンクリスチン；ビノレルビン；ナベルビン；ノバントロン；テニポシド；ダウノマイシン；アミノプテリン；ゼローダ；イバンドロナート；ＣＰＴ−１１；トポイソメラーゼ阻害剤ＲＦＳ２０００；ジフルオロメチルオルニチン（ｄｉｆｌｕｏｒｏｍｅｔｈｙｌｏｍｉｔｈｉｎｅ）（ＤＭＦＯ）；レチノイン酸；カペシタビン；ならびに上記のいずれかの薬学的に許容される塩、酸または誘導体が挙げられる。この定義には、腫瘍に対するホルモン作用を調節または阻害するように作用する抗ホルモン剤、例えば抗エストロゲン薬（例えばタモキシフェン、ラロキシフェン、アロマターゼを阻害する４（５）−イミダゾール、４−ヒドロキシタモキシフェン、トリオキシフェン、ケオキシフェン、ＬＹ１１７０１８、オナプリストン、およびトレミフェン（Ｆａｒｅｓｔｏｎ）を含む）；ならびに抗アンドロゲン剤、例えばフルタミド、ニルタミド、ビカルタミド、ロイプロリド、およびゴセレリン；ｓｉＲＮＡならびに上記のいずれかの薬学的に許容される塩、酸または誘導体も含まれる。
【０１４６】
医薬組成物
本発明の方法の様々な実施形態によれば、食事レジメンまたはサプリメントの一部として摂取するための、脂質捕捉を標的化する薬剤および／または脂質は、被験体に単独で、または本明細書に記載の通り組成物もしくは医薬の構成成分として投与することができる。一部の実施形態では、提供される薬剤または脂質は、医薬組成物を調製するための生理的に許容される担体または賦形剤を用いて製剤化することができる。一部の実施形態では、このような医薬組成物に利用される担体および／または組成物は、それら自体が無菌であり得る。一部の実施形態では、医薬組成物は、特定の投与モードに合わせて製剤化される。組成物を製剤化する方法は、当技術分野で公知である（例えば、Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ’ｓ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｓ  Ｓｃｉｅｎｃｅｓ、第１７版、Ｍａｃｋ  Ｐｕｂｌｉｓｈｉｎｇ  Ｃｏ．、（Ａｌｆｏｎｓｏ  Ｒ．  Ｇｅｎｎａｒｏ編）（１９８９年）参照）。
【０１４７】
適切な薬学的に許容される担体には、水、塩類溶液（例えばＮａＣｌ）、食塩水、緩衝食塩水、アルコール、グリセロール、エタノール、アラビアゴム、植物油、ベンジルアルコール、ポリエチレングリコール、ゼラチン、炭水化物、例えばラクトース、アミロースまたはデンプン、糖、例えばマンニトール、スクロース等、デキストロース、ステアリン酸マグネシウム、タルク、ケイ酸、粘性パラフィン、香油、脂肪酸エステル、ヒドロキシメチルセルロース、ポリビニルピロリドン等、ならびにその組合せが含まれるが、それらに限定されない。一部の実施形態では、医薬調製物は、所望に応じて、活性化合物と有害に反応しない、または活性化合物の活性に干渉しない助剤（例えば、滑沢剤、保存剤、安定剤、湿潤剤、乳化剤、浸透圧に影響を及ぼす塩、バッファ、着色剤、香味剤および／または芳香物質等）と混合することができる。好ましい一実施形態では、静脈内投与に適した水溶性の担体が使用される。
【０１４８】
組成物または医薬は、所望に応じて、例えば特に脂肪酸および／または脂質を送達するための担体として、タンパク質（特にアルブミン）、ナノ粒子、微粒子、リポソーム、およびミセルの１つまたは複数を含有することができる。
【０１４９】
組成物または医薬は、所望に応じて、（典型的に微量の）湿潤剤もしくは乳化剤、またはｐＨ緩衝剤を含有することができる。組成物は、液体溶液剤、懸濁液剤、エマルジョン剤、錠剤、丸剤、カプセル剤、徐放製剤、または散剤であってもよい。また組成物は、トリグリセリドなどの従来の結合剤および担体を用いて、坐剤として製剤化することができる。経口製剤は、標準担体、例えば医薬品グレードのマンニトール、ラクトース、デンプン、ステアリン酸マグネシウム、ポリビニルピロリドン（ｐｙｒｏｌｌｉｄｏｎｅ）、サッカリン（ｓａｃｃｈａｒｉｎｅ）ナトリウム、セルロース、炭酸マグネシウム等を含むことができる。
【０１５０】
一部の実施形態では、本発明に従って提供される、製造されるおよび／または利用される、利用される組成物または医薬は、治療剤（例えば、化学療法剤）と１つまたは複数の脂肪酸の両方を含む。このような一部の実施形態では、組成物または医薬は、本明細書の他所に記載の脂肪酸のタイプおよび／または量を含有する。
【０１５１】
組成物または医薬は、通常の手順に従って、人間への投与に適合された医薬組成物として製剤化することができる。例えば、好ましい一実施形態では、静脈内投与のための組成物は、典型的に、無菌の等張水性緩衝液中の溶液である。また必要な場合、組成物は、可溶化剤、および注射部位の疼痛を和らげるための局所麻酔剤を含むことができる。一般に成分は、例えば活性剤の量を示した密封容器、例えばアンプルまたは小袋に入れた凍結乾燥させた乾燥粉末または水を含まない濃縮物として単位剤形で、別個にまたは一緒に混合して供給される。組成物を注入によって投与すべき場合、組成物は、無菌の医薬グレードの水、食塩水またはデキストロース／水を含有する注入瓶を用いて分注され得る。組成物が注射によって投与される場合、成分を投与前に混合できるように、注射のための滅菌水または食塩水のアンプルを提供することができる。
【０１５２】
一部の実施形態では、本明細書に記載の薬剤は、中性形態または塩形態として提供することができる。薬学的に許容される塩には、遊離アミノ基を用いて形成された塩、例えば塩酸、リン酸、酢酸、シュウ酸、酒石酸等から得られた塩、および遊離カルボキシル基を用いて形成された塩、例えばナトリウム、カリウム、アンモニウム、カルシウム、水酸化第二鉄、イソプロピルアミン、トリエチルアミン、２−エチルアミノエタノール、ヒスチジン、プロカイン等から得られた塩が含まれる。
【０１５３】
本明細書に記載の組成物は、任意の適切な経路によって投与することができる。一部の実施形態では、組成物は、皮下投与される。本明細書で使用される場合、用語「皮下組織」は、皮膚直下の緩い不規則な結合組織の層と定義される。例えば皮下投与は、限定されるものではないが、大腿部領域、腹部領域、殿部領域、または肩甲骨領域を含めた領域に組成物を注射することによって実施することができる。一部の実施形態では、組成物は、静脈内投与される。一部の実施形態では、組成物は、経口投与される。一部の実施形態では、組成物は、心臓または筋肉（例えば、筋肉内）、腫瘍（腫瘍内）、神経系（例えば、脳への直接注射；脳室内；髄腔内）などの標的組織への直接投与によって投与される。あるいはまたはさらには、組成物は、吸入、非経口、皮内、経皮的、または経粘膜（例えば、経口または経鼻）によって投与することができる。２つ以上の経路を、所望に応じて同時に使用することができる。
【０１５４】
一部の実施形態では、組成物は、治療有効量で、かつ／または特定の所望の転帰と相関する投与レジメンに従って投与される。
【０１５５】
本発明に従って投与される特定の用量または量は、例えば、所望の転帰の性質および／もしくは程度、投与経路および／もしくは投与のタイミングの詳細、ならびに／または１つもしくは複数の特徴（例えば、体重、年齢、個人歴、遺伝的特徴、生活習慣パラメータ、またはそれらの組合せ）に応じて変わり得る。このような用量または量は、当業者によって決定され得る。一部の実施形態では、適切な用量または量は、標準臨床技術に従って投与される。あるいはまたはさらには、一部の実施形態では、適切な用量または量は、投与される望ましいまたは最適な投与量範囲または量を同定する一助にするために、１つまたは複数のｉｎ  ｖｉｔｒｏまたはｉｎ  ｖｉｖｏアッセイを使用して決定される。
【０１５６】
様々な実施形態では、薬剤または脂質は、治療有効量で投与される。このような一部の実施形態では、「治療有効量」は、例えば、特定の組成物に含まれている薬剤または脂質の総量を考慮して決定され得る。一部の実施形態では、治療有効量は、被験体に有意義な利益をもたらす（例えば、基礎をなす疾患または状態を処置する、モジュレートする、治癒させる、防止する、かつ／または寛解させる）のに十分な量である。一部の特定の実施形態では、投与される適切な用量または量は、ｉｎ  ｖｉｔｒｏまたは動物モデル試験系から得られる用量応答曲線から推定することができる。
【０１５７】
一部の実施形態では、提供される組成物は、医薬製剤として提供される。一部の実施形態では、医薬製剤は、特定の腫瘍または腫瘍の発生率またはリスク低下の達成に相関する投与レジメンに従って投与するための単位投与量であるか、またはそれを含む。
【０１５８】
一部の実施形態では、医薬製剤として提供される組成物を含めた提供される組成物は、限定されるものではないが、水、食塩水、リン酸緩衝食塩水、リンガー溶液、デキストロース溶液、血清含有溶液、ハンクス溶液、他の生理的平衡水溶液、油、エステルおよびグリコールなどの液体担体を含む。
【０１５９】
一部の実施形態では、本明細書に記載の薬剤または脂質を含む製剤は、単回投与として投与される。一部の実施形態では、このような製剤は、一定間隔で投与される。ある「間隔」による投与は、本明細書で使用される場合、治療有効量が周期的に投与されることを示す（１回限りの投与とは区別される）。間隔は、標準臨床技術によって決定され得る。一部の実施形態では、製剤は、隔月、毎月、月２回、３週間毎、隔週、毎週、週２回、週３回、毎日、１日２回、または６時間毎に投与される。単一の個体のための投与間隔は、固定された間隔である必要はなく、個体の必要に応じて経時的に変わり得る。
【０１６０】
本明細書で使用される場合、用語「隔月」は、２カ月当たり１回（すなわち、２カ月毎に１回）の投与を意味し、用語「毎月」は、１カ月当たり１回の投与を意味し、用語「３週間毎」は、３週間当たり１回（すなわち、３週間毎に１回）の投与を意味し、用語「隔週」は、２週間当たり１回（すなわち、２週間毎に１回）の投与を意味し、用語「毎週」は、１週間当たり１回の投与を意味し、用語「毎日」は、１日当たり１回の投与を意味する。
【０１６１】
一部の実施形態では、本明細書に記載の薬剤または脂質を含む製剤は、一定間隔で無制限に投与される。一部の実施形態では、このような製剤は、規定された期間中、一定間隔で投与される。一部の実施形態では、製剤は、一定間隔で、５年間、４年間、３年間、２年間、１年間、１１カ月間、１０カ月間、９カ月間、８カ月間、７カ月間、６カ月間、５カ月間、４カ月間、３カ月間、２カ月間、１カ月間、３週間、２週間、１週間、６日間、５日間、４日間、３日間、２日間または１日間投与される。
【実施例】
【０１６２】
以下の実施例は、例示的に提示され、いかなる方式でも本発明の範囲を制限しない。
（実施例１）
低酸素状態の細胞およびＲａｓ形質転換細胞は、リゾリン脂質由来の不飽和脂肪酸を捕捉することによって成長を支持する
材料および方法
【０１６３】
細胞培養、ＳＣＤ１阻害、および脂質補給。細胞株を、以下を除外してＡＴＣＣから得た：不死化ベビーマウス腎臓（ｉＢＭＫ）細胞株は、Ｂａｘ−／−／Ｂａｋ−／−マウス由来の初代腎臓上皮細胞から導出したもので、Ｅ１Ａおよびドミナントネガティブｐ５３発現によって不死化し、対照ベクター、ヒト発癌性Ｈ−ＲａｓＶ１２Ｇ、またはｍｙｒＡＫＴをトランスフェクトした（３１）、ヒト膵臓ネスチン発現（ＨＰＮＥ）細胞（Ａ．Ｍａｉｔｒａからの厚意による寄贈）を、ｈＴＥＲＴ遺伝子を含有するレトロウイルス発現ベクター（ｐＢＡＢＥｐｕｒｏ）を形質導入することによってヒト膵管から成長させ、対照ベクターまたはヒト発癌性Ｋ−ＲａｓＧ１２Ｄをトランスフェクトした。細胞株を、２５ｍＭグルコースおよび４ｍＭグルタミンを含み、１０％ウシ胎児血清（ＨｙＣｌｏｎｅ）、２５ＩＵ／ｍｌペニシリン、および２５μｇ／ｍｌストレプトマイシン（ＭＰ  Ｂｉｏｍｅｄｉｃａｌｓ）を補充したダルベッコ改変イーグル培地（ＤＭＥＭ、Ｍｅｄｉａｔｅｃｈ）中で慣用的に継代し、８０％コンフルエンスで分割した。代謝実験は、１０％透析血清（ＤＦＢＳ、ＨｙＣｌｏｎｅ）を含有するＤＭＥＭ３ｍｌを入れた６ｃｍの培養皿で実施した。同位体標識化のために、グルコースおよびグルタミンを、それらのＵ−１３Ｃ−標識化形態（Ｃａｍｂｒｉｄｇｅ  Ｉｓｏｔｏｐｅ  Ｌａｂｓ）で置き換えた。低酸素状態の実験は、低酸素状態のグローブボックス内で実施した（示されている通り０．５％または１％Ｏ２、５％ＣＯ２および９４〜９４．５％Ｎ２、３７℃）（Ｃｏｙ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ  Ｐｒｏｄｕｃｔｓ）。細胞および培地を、実験開始前に、低酸素中で終夜平衡化した。ＣＡＹ１０５６６を、Ｃａｙｍａｎ  Ｃｈｅｍｉｃａｌから得た。脂質サプリメントをＡｖａｎｔｉ  Ｐｏｌａｒ  Ｌｉｐｉｄｓから得た。ＬＰＣ（１８：１）およびＬＰＣ（１８：０）をリン酸緩衝食塩水（ＰＢＳ）に溶解し、ＭＧ（１８：１）をメタノールに溶解し、ＰＣ（１６：０〜１８：１）を１：９クロロホルム：メタノールに溶解した。有機溶媒は、培地中＜０．１％ｖ／ｖであった。
【０１６４】
細胞増殖アッセイおよび腫瘍異種移植研究。細胞増殖を、Ｐａｃｋｅｄ  Ｃｅｌｌ  Ｖｏｌｕｍｅ管（ＰＣＶ、Ｔｅｃｈｎｏ  Ｐｌａｓｔｉｃ  Ｐｒｏｄｕｃｔｓ  ＡＧ）またはｘＣＥＬＬｉｇｅｎｃｅ系（Ｒｏｃｈｅ）のいずれかを用いて決定した。動物研究を、ＩＡＣＵＣ承認プロトコルの下で、研究における動物の適切な人道的使用のための指針に従って実施した。同種移植を作成するために、１×１０７個のｉＢＭＫ細胞を、マトリゲル（ＢＤ  Ｂｉｏｓｃｉｅｎｃｅｓ）に入れてｎｕ／ｎｕ胸腺欠損雌性マウスに移植した。触知できる腫瘍が確立された後、マウスを無作為化して、０．５％メチルセルロース中２．５ｍｇ／ｋｇＢＩＤのＣＡＹ１０５６６ｐ．ｏ．またはビヒクル対照を投与した。異種移植腫瘍を隔週で測定し、腫瘍体積を、体積＝（長さ×幅２×π／６）として算出した。
【０１６５】
脂質および代謝産物の測定。細胞からのけん化脂肪酸の分析のために、培地を吸引し、細胞を室温のＰＢＳ２ｍｌで２回すすぎ、０．１ＭのＨＣｌを含む５０：５０のＭｅＯＨ／Ｈ２Ｏ溶液１ｍｌを−２０℃で添加し、得られた液体および細胞残屑を集めて微量遠心管に入れた。培地からの類似の測定を行うために、培地０．５ｍｌを、０．２ＭのＨＣｌを含むＭｅＯＨ０．５ｍＬと混合した。クロロホルム（０．５ｍＬ）を添加し、混合物を１分間ボルテックスし、次に１６，０００×ｇで５分間遠心分離し、クロロホルム層をガラスバイアルに移した。抽出物をＮ２の下で乾燥させ、０．３ＭのＫＯＨを含有する９０：１０のＭｅＯＨ／Ｈ２Ｏに入れて復元し、８０℃で１時間インキュベートして、脂肪酸をけん化し、ギ酸０．１ｍｌで酸性にし、ヘキサン１ｍｌで２回抽出し、Ｎ２の下で乾燥させ、ＬＣ−ＭＳ分析のために１：１：０．３のＭｅＯＨ：クロロホルム：Ｈ２Ｏ（細胞には充填体積２μｌ当たり溶媒１ｍｌ、培地試料には溶媒合計２ｍｌ）に入れて復元した。分離を、陰イオンモードフルスキャンＬＣ−ＭＳにカップルさせたＣ８カラムによる逆相イオン対クロマトグラフィーによって、１Ｈｚスキャン時間および１００，０００分解能（独立型ｏｒｂｉｔｒａｐ、Ｔｈｅｒｍｏ  Ｆｉｓｃｈｅｒ  Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ）で行った。
【０１６６】
培地の脂質分析のために、上記の通り、培地０．５ｍｌから乾燥クロロホルム抽出物を得、１：１：０．３のＭｅＯＨ：クロロホルム：Ｈ２Ｏ  ０．３ｍｌで復元し、上記の通りＬＣ−ＭＳによって分析した。遊離（非エステル化）脂肪酸の分析のために、培地１ｍｌを酢酸エチル１ｍｌで３回抽出し、抽出物を乾燥させ、１：１：０．３のＭｅＯＨ：クロロホルム：Ｈ２Ｏ  ０．５ｍｌで復元した。水溶性代謝産物の分析のために、培地を細胞から吸引し、代謝を−８０℃において８０：２０のＭｅＯＨ／Ｈ２Ｏですぐにクエンチした。次に、得られた液体および細胞残屑を集めて微量遠心管に入れ、８０％のＭｅＯＨで−８０℃において３回抽出し、抽出物をＮ２の下で乾燥させ、Ｈ２Ｏに入れて復元し（５０μｌ／μｌ細胞体積）、Ｃ１８カラムを使用することを除いて、上記の通りＬＣ−ＭＳによって分析した。培地のグルコースおよび乳酸濃度を、ＹＳＩ７２００電気化学分析器（ＹＳＩ）で測定した。酸素の消費を、Ｓｅａｈｏｒｓｅ  ＸＦ２４フラックスアナライザー（Ｓｅａｈｏｒｓｅ  Ｂｉｏｓｃｉｅｎｃｅ）を使用して決定した。
【０１６７】
結果
細胞の脂肪酸源を、１３Ｃ−標識グルコースおよび１３Ｃ−標識グルタミンで確かめることができる。哺乳動物細胞は、取込みまたはｄｅ  ｎｏｖｏ合成のいずれかによって脂肪酸を獲得する（図１Ａ）。脂肪酸シンターゼによって飽和脂肪酸であるパルミチン酸（Ｃ１６：０）が生成され、それが不飽和化および／または伸長されると、多様な脂肪酸を生じることができる。このような脂肪酸への代謝経路は、１３Ｃ−標識グルコースおよび１３Ｃ−標識グルタミン（アセチル−ＣｏＡを標識化するため）を均一に供給し、その後けん化された脂肪酸を質量分析にかけることによって確かめることができる。パルミチン酸については、このような分析により、血清由来の脂肪酸ならびにｄｅ  ｎｏｖｏ脂質生成から生じた標識化形態の移入に起因して、非標識化分率（Ｍ０ピーク）が明らかになる。これらの標識化形態には、Ｕ−１３Ｃ−パルミチン酸（Ｍ＋１６）、および不完全なアセチル−ＣｏＡの標識化に起因して生じる部分的に標識化された形態が含まれ（図１Ｂ）、相対的に豊富な部分的および完全に標識化された形態は、細胞質アセチル−ＣｏＡの標識化分率を決定するのに十分である。この手法を、多様な起源を有する５種類のがん細胞系に適用することによって、過去の知見と一致して、酸素正常状態では、ｄｅ  ｎｏｖｏ脂質生成が細胞のＣ１６：０プールの７５〜９０％を占めることが実証される（図１Ｃ）（３０）。
【０１６８】
酸素正常状態では、グルコースは、脂質を生成するアセチル−ＣｏＡの主な供給源である。それとは対照的に、低酸素状態（０．５〜１％Ｏ２）では、ピルビン酸デヒドロゲナーゼは活性が低い。このような条件下では、グルタミン駆動性の還元的カルボキシル化によって、高い分率のクエン酸、したがってアセチル−ＣｏＡが生成される（図１Ｄ）。このことと一致して、Ｕ−１３Ｃ−グルコースまたはＵ−１３Ｃ−グルタミントレーサーが別個に供給される場合、酸素正常状態では、グルコース由来の炭素が主なアセチル−ＣｏＡ供給源になる一方、低酸素状態ではグルタミン由来の炭素の方が寄与が大きいことが決定付けられた（図１Ｅ）。
【０１６９】
低酸素状態の細胞は、脂肪酸を移入することによってＳＣＤ１を迂回する。哺乳動物細胞において最も豊富な脂肪酸は、ステアロイル−ＣｏＡデサチュラーゼ１（ＳＣＤ１）の主生成物であるオレイン酸（Ｃ１８：１）である。ＳＣＤ１によって触媒される反応は、酸素依存性であり、したがって低酸素状態では緩徐になる可能性があると仮定された（図２Ａ）。脂肪酸合成、伸長、および不飽和化に対する低酸素状態の効果を調査するために、本発明者らは、低酸素状態の細胞に、Ｕ−１３Ｃ−グルコースおよびＵ−１３Ｃ−グルタミンを同時に供給し、酸素正常状態と比較して脂肪酸標識化が低減し、非標識化（Ｍ０）ピークの増加が、血清からの脂肪酸の移入の増強を示すことを観察した（図２Ｂ、Ｓ１）。ＳＣＤ１活性の低下と一致して、標識化の低減は、一価不飽和脂肪酸Ｃ１８：１について特に顕著であった（図２Ｂ、Ｓ１）。このＣ１８：１標識化の低減は、細胞脂質組成が飽和脂肪酸の方向に全体的に変化したことにも関連している（Ｃ１８：１／Ｃ１８：０比、または「不飽和化指数」の低下、図２Ｃ）。したがって細胞脂質組成は、それ自体が低酸素状態の影響を受けるが、このことは、ＳＣＤ１活性の低下を完全に代償するには移入が不十分であることを示している。
【０１７０】
Ｕ−１３Ｃ−グルコースおよびＵ−１３Ｃ−グルタミンが供給された細胞では、Ｃ１６：０のＣ１８：０への伸長では、通常、標識化炭素が付加する。したがって、低酸素状態で中程度に増加している非標識化Ｃ１８：０（図２Ｄ）への唯一の主な経路は、血清からの移入である。それとは対照的に、非標識化Ｃ１８：１は、直接的な取込みに加えて、非標識化Ｃ１８：０の不飽和化から生じ得る（図２Ａ）。ＳＣＤ１活性が低酸素状態で低下することを確認するために、標識化データ（Ｌは、標識化される所与の脂肪酸の分率に等しい）を使用して、ＳＣＤ１によって生成されるＣ１８：１の分率であるＤを算出した。移入分率Ｉは、１−Ｄに等しい。血清脂肪酸は標識化されないので、標識化Ｃ１８：１への唯一の経路は、標識化Ｃ１８：０の不飽和化である。
ＬＣ１８：１＝（Ｄ）（ＬＣ１８：０）（方程式１）
Ｄ＝ＬｃｅｌｌＣ１８：１／ＬｃｅｌｌＣ１８：０（方程式２）
【０１７１】
低酸素状態では、Ｄは実際に低下し、したがってＣ１８：１の移入は増加することが決定付けられた（図２Ｅ）。
【０１７２】
発癌性Ｒａｓは、低酸素状態の代謝を繰り返す。低酸素状態の効果に加えて、ｄｅ  ｎｏｖｏ脂質生成と脂肪酸の移入との間の平衡に対する特異的な癌遺伝子の寄与について調査した。発癌性ＡｋｔおよびＲａｓは、低酸素状態と同様に、形質転換細胞におけるグルコースの取込みの増加に関与するとされている。ＰＩ３Ｋ−Ａｋｔ経路は脂質生成を促進することが示されているが、脂肪酸代謝に対するＲａｓの影響は、以前には十分に研究されていなかった。したがって、以下の同質遺伝子的細胞モデル系における脂肪酸代謝を調査した：癌遺伝子を含まない（ＣＴＬ）、膜を標的化し、したがって活性化されたＡｋｔ（ｍｙｒＡｋｔ）を含む、または発癌性Ｈ−Ｒａｓ（Ｈ−ＲａｓＶ１２Ｇ）を含む、不死化ベビーマウス腎臓（ｉＢＭＫ）細胞。ｍｙｒＡｋｔの導入により、不飽和化指数（Ｃ１８：１／Ｃ１８：０）の増加および移入から生じる一価不飽和脂肪酸の分率の低下によって証拠付けられる通り、一価不飽和の（しかし飽和していない）脂肪酸のｄｅ  ｎｏｖｏ合成が増加した（図３Ａおよび３Ｂ、図Ｓ２）。それとは対照的に、発癌性Ｈ−ＲａｓＶ１２Ｇは、不飽和化指数の低下を引き起こすが、これは、ＲａｓおよびＡｋｔの活性化が、基本的に異なる細胞脂質組成をもたらすことを示していた。さらに、発癌性Ｈ−ＲａｓＶ１２Ｇは、移入によって獲得される細胞の脂肪酸の分率を増加させた。このことは、Ｃ１８：１について最も顕著であったが、これはＳＣＤ１フラックスの低下を暗示していた。Ｒａｓ駆動性細胞による血清由来の脂肪酸の利用の増加を、培地からの脂肪酸の取込みを直接測定することによって確認した（図３Ｃ）。
【０１７３】
一価不飽和脂肪酸の取込みに対する発癌性Ｒａｓの影響の普遍性を調査するために、癌遺伝子を有していない（ＣＴＬ）または発癌性Ｋ−Ｒａｓ（Ｋ−ＲａｓＧ１２Ｄ）を有しているヒト膵臓ネスチン発現（ＨＰＮＥ）細胞を使用した。ＨＰＮＥ細胞における発癌性Ｋ−ＲａｓＧ１２Ｄの発現により、ｉＢＭＫ細胞における発癌性Ｈ−ＲａｓＶ１２Ｇと同様に、不飽和化指数がより低下し、細胞脂質への血清Ｃ１８：１の組込みがより増加し、血清Ｃ１８：１の取込みがより急速になった（図３Ｄ〜Ｆ）。
【０１７４】
次に本発明者らは、低酸素状態の影響を受ける他の代謝パラメータ、すなわちグルコースの取込み、乳酸排出、酸素消費、およびグルタミン代謝に対する、Ｒａｓ対Ａｋｔの影響を調査した。ｉＢＭＫ細胞では、発癌性ＲａｓとＡｋｔの両方によって、グルコースの取込みの増加、および乳酸へのグルコース由来炭素のシャントの増加が引き起こされた（図３Ｇ）。しかしＡｋｔ形質転換細胞は、対照細胞と比較できるレベルで酸素消費を維持した一方、Ｒａｓ形質転換細胞は、Ｕ−１３Ｃ−グルタミンを供給された細胞における１３Ｃ５−標識クエン酸の増加によって証拠付けられた通り、酸素消費の有意な低下、およびクエン酸合成への還元的カルボキシル化フラックスの寄与の割合の増加を呈した（図３Ｈ〜Ｉ）（３３）。類似の結果が、Ｋ−ＲａｓＧ１２Ｄ形質転換ＨＰＮＥ細胞に観察された（図３Ｊ〜Ｌ）。まとめると、これらの結果は、発癌性Ｒａｓが、一般に脂肪酸代謝、特にＳＣＤ１フラックスの調節に関してＡｋｔとは逆効果を有していること、および、それが低酸素状態の細胞の代謝表現型を繰り返すことを実証している。したがってとりわけ、本開示は、脂肪酸代謝を標的化する治療様式、特にＳＣＤ１を標的化する治療様式が、他のがん（例えば、ＡＫｔ関連腫瘍）を処置するために使用される場合には有用および／または有効であり得るとしても、ある特定のＲａｓ関連腫瘍の処置に関して、有効でない可能性があること、少なくとも単独では有効でない可能性があることを実証する。その異なる一面では、本開示は、脂質の移入を標的化する治療様式が、ある特定のＲａｓ関連腫瘍の処置に特に有効であり得ることを実証する。
【０１７５】
発癌性Ｒａｓは、ＳＣＤ１阻害に対する耐性を付与する。ＳＣＤ１阻害によって、ｉｎ
ｖｉｔｒｏおよび異種移植の両方で、がん細胞の成長を阻止することができる。しかし、Ａ５４９肺がん細胞を用いる実験では、Ｃ１８：１標識化を完全に阻止した（図４Ａ）ＳＣＤ１阻害剤の用量（２００ｎＭのＣＡＹ１０５６６）は、リアルタイムの細胞増殖アッセイ（１０％血清、図４Ｂ）において、または標準細胞培養条件における成長の最初の４８時間、細胞成長は損なわれなかった（図Ｓ３）。血清脂質によって支持された持続的細胞成長と一致して、２％血清に切り替えると、細胞はＳＣＤ１阻害に対して感受性になった（図４Ｂ）。Ａ５４９細胞は、発癌性Ｋ−Ｒａｓを自然に発現し、ＲａｓはＣ１８：１の取込みを促進するので、構成的なＲａｓ活性化は、ＳＣＤ１阻害に対する耐性を誘導する可能性があると仮定された。このことを調査するために、ＳＣＤ１阻害剤の存在下で、Ｈ−ＲａｓＶ１２ＧまたはｍｙｒＡｋｔを有するｉＢＭＫ細胞を成長させた。阻害剤は、両方の細胞株においてＳＣＤ１を完全に阻止した（図Ｓ４）。それにもかかわらず、１０％血清では、ｍｙｒＡｋｔ細胞の成長が著しく損なわれた一方、Ｈ−ＲａｓＶ１２Ｇ細胞は、ほぼ普通に集団倍加数３で成長した（図４Ｃ、図Ｓ３）。再びこれらのデータによって、本明細書で実証された通り、脂肪酸代謝を標的化する治療様式、特にＳＣＤ１を標的化する治療様式が、他のがん（例えば、ＡＫｔ関連腫瘍）を処置するために使用される場合には有用および／または有効とあり得るとしても、ある特定のＲａｓ関連腫瘍の処置に関して、有効でない可能性があること、少なくとも単独では有効でない可能性があることが確認される。
【０１７６】
ＳＣＤ１阻害に対する頑強性をｉｎ  ｖｉｖｏで決定するために、胸腺欠損ヌードマウスに、ｍｙｒＡｋｔまたはＨ−ＲａｓＶ１２Ｇを有するｉＢＭＫ細胞を注射した。触知できる腫瘍が確立された後、マウスを、ビヒクルまたはＳＣＤ１阻害剤（２．５ｍｇ／ｋｇのＣＡＹ１０５６６ｐ．ｏ．ＢＩＤ）で処置した。Ａｋｔ駆動性腫瘍に対するＳＣＤ１阻害の効果は、Ｒａｓ駆動性腫瘍に対する効果よりも大きく（図４Ｄ、Ｅ）、治療の１３日または１４日後の平均腫瘍体積は、未処置腫瘍に対してそれぞれ０．５１＋／−０．０４および０．６７＋／−０．０５であった（ＲａｓとＡｋｔの比較についてｐ＝０．０１、両側Ｔ検定による）。したがって、発癌性Ｒａｓ（少なくとも活性化Ａｋｔに対して）は、ｉｎ  ｖｉｔｒｏおよび同種移植の両方で、ＳＣＤ１阻害に対する耐性を付与する。
【０１７７】
移入脂肪酸は、リゾリン脂質を起源とする。本明細書に記載の結果により、とりわけ、発癌性Ｒａｓが外因性脂肪酸の移入を増加させ、ＳＣＤ１阻害に対する耐性を付与することが実証される。遊離（非エステル化）脂肪酸は、十分な大量で補給されるとＳＣＤ１阻害中に細胞増殖を助けることが示されているが、血清におけるそれらのレベルは、観察された脂肪酸の取込みおよび関連する細胞成長の原因になるには不十分である（表２）。
【０１７８】
表２
培地（１０％血清）における全脂肪酸および遊離（非エステル化）脂肪酸の濃度、ならびにＡ５４９細胞およびｉＢＭＫ−Ｈ−ＲＡＳＶ１２Ｇ細胞における脂肪酸の総濃度。培地の遊離脂肪酸は、培地の全脂肪酸の５％未満を構成する。
【表２】
2019147836.tif 000003
【０１７９】
どの脂質が捕捉脂肪酸の供給源であるかを同定するために、グリセロリン脂質レベルを、新鮮な培地および使用済み培地において質量分析によってプロファイルした（図５Ａ）。典型的なグリセロリン脂質（すなわち、１つの頭部および２つの脂肪酸の尾部を有するグリセロール）のレベルは、実質的に変化しなかった。しかし、ただ１つの脂肪酸の尾部を有するグリセロリン脂質は、ほぼすべて枯渇したことが観察された（リゾリン脂質、図５Ｂ）。選択的なリゾリン脂質の枯渇は、試験したすべての細胞株で観察された（図Ｓ５Ａ）。
【０１８０】
リゾ脂質は、Ｒａｓ駆動性細胞の成長を支持する。リゾ脂質の取込みの定量的分析によって、ＬＰＣ（１８：１）が、一価不飽和脂肪酸に対する細胞の需要を満たすのに重要な役割を果たすことが示唆される：ＳＣＤ１阻害剤で処理されたｉＢＭＫ−Ｈ−ＲａｓＶ１２Ｇ細胞では、４８時間にわたるＬＰＣ（１８：１）の取込みは、この時間に組み込まれた細胞の全Ｃ１８：１と匹敵し（図３Ｃ、Ｓ３、Ｓ５）、血清ＬＰＣ（１８：１）の枯渇は、成長阻害と同時に生じた（図Ｓ３、Ｓ５）。
【０１８１】
栄養としてのＬＰＣ（１８：１）をさらに評価するために、ｉＢＭＫ細胞の培地に、１００％血清（すなわち生理的条件）に見出された濃度の半分である２０μＭのＬＰＣ（１８：１）を入れた。不飽和化指数（Ｃ１８：１／Ｃ１８：０）は、最初、ｉＢＭＫ−Ｈ−ＲａｓＶ１２Ｇ細胞よりもｉＢＭＫ−ｍｙｒＡｋｔ細胞において２倍を超えて高く、ＬＰＣ（１８：１）を添加すると、ｉＢＭＫ−Ｈ−ＲａｓＶ１２Ｇ細胞において有意にかつ選択的に増加した（図５Ｃ）。これは、移入に由来するＣ１８：１の分率と一致する一方で、この分率はＬＰＣ（１８：１）を添加した両方の細胞株で増加しており、ｉＢＭＫ−Ｈ−ＲａｓＶ１２Ｇ細胞においては２倍を超えて増加した（図５Ｄ）。ＳＣＤ１阻害中のＬＰＣ（１８：１）の補給は、Ｃ１８：１の移入に関するＳＣＤ１への差異的な依存性と一致して、ｉＢＭＫ−Ｈ−ＲａｓＶ１２Ｇ細胞については増殖を完全に回復させたが、ｉＢＭＫ−ｍｙｒＡｋｔ細胞については部分的に回復させただけであった（図５Ｅ、Ｆ）。同様に、完全な救助が、Ｒａｓ駆動性Ａ５４９ヒトがん細胞株について観察された（図５Ｇ）。
【０１８２】
血清脂質消費の分析によって、リゾ脂質が、血清グリセロリン脂質よりも利用しやすい栄養供給源をもたらすことが示唆された。このことと一致して、ＳＣＤ１阻害剤で処理した細胞では、ＰＣ（１６：０、１８：１）を補給しても細胞成長は回復しなかった（図５Ｅ）。それについて考えられる説明として、飽和の尾部（Ｃ１６：０）の存在も挙げられる。実際、飽和リゾ脂質ＬＰＣ（１８：０）を補給すると、ＳＣＤ１阻害単独よりも強い成長阻害が引き起こされた。しかし、ＰＣ（１６：０、１８：１）ではなくＬＰＣ（１８：１）による成長回復が、リゾ脂質の一価不飽和脂肪酸の尾部を細胞がより多く利用することを反映する限り、ＬＰＣ（１８：１）およびＬＰＣ（１８：０）と同時のインキュベーションによって成長が回復した。リゾ脂質が脂肪酸捕捉に好ましい基質であることと一致して、オレオイル−モノアシルグリセロールであるＭＧ（１８：１）も、細胞増殖を回復させた。したがって、リゾ脂質捕捉は、細胞による一価不飽和脂肪酸の必要性を満たすことができる。
【０１８３】
とりわけこれらの知見によって、このような腫瘍による、ある特定のタイプの脂質、特に腫瘍細胞によって捕捉され得る脂質の利用を剥奪し、または制限することによって（例えば、食事管理または他の手段によって）、少なくともいくつかのＲａｓ関連腫瘍の処置は、十分な利益が得られる可能性があることが実証される。一部の実施形態では、このような利用の剥奪または制限は、好適な捕捉脂質への曝露を低減すること、および／または代替の非好適な捕捉脂質への曝露を増加させることを含む。例えば、一部の実施形態では、多価不飽和脂質の利用が制限され、一部の特定の実施形態では、リゾ脂質、例えば有利にはグリセロリン脂質の利用が制限される。
【０１８４】
一部の特定の実施形態では、脂質利用は、食事摂取の管理によって制限される。
【０１８５】
一部の実施形態では、関連性のある有用な食事管理は、例えば多価不飽和脂肪酸に関して、および、一部の実施形態では、このような多価不飽和脂肪酸の実質的な排除に関して、過剰の完全飽和した脂肪酸を摂取することを含む。一部の実施形態では、関連性のある有用な食事管理は、リゾ脂質、例えば有利にはグリセロリン脂質を回避することを含む。
【０１８６】
議論
腫瘍は、それらの細胞膜を複製し、それによって成長するために脂肪酸を必要とする。がん細胞は、それらの非必須脂肪酸の大部分をｄｅ  ｎｏｖｏ合成することが一般に想定される。この想定は、主に、１０％血清および酸素正常状態で実施された細胞培養実験に基づくものである。この想定は、最も重要な発癌経路の１つであるＰＩ３Ｋ−Ａｋｔ−ｍＴＯＲのグルコース依存性の脂質生成促進効果によって裏付けられる。また、ＲａｓはＡｋｔを活性化するので（３、３６）、グルコース依存性の脂質生成促進の役割を有している可能性があると考えられている。
【０１８７】
しかし本明細書で実証される通り、本発明者らは、このような想定における問題の源を同定した。例えば本発明者らは、Ｒａｓが、グルコース依存性のｄｅ  ｎｏｖｏ脂質生成を誘導しないが、その代わりに血清脂肪酸の捕捉を刺激することを実証する。このような捕捉は、本発明者らが研究したあらゆる細胞に固有の特性であり、Ｒａｓ活性化、低酸素状態、および培地への生理的濃度のリゾリン脂質（すなわち、ただ１つの脂肪酸の尾部を有するリン脂質）の添加によって、さらに増加する。捕捉が増強されると、Ｒａｓ駆動性細胞は、主な哺乳動物デサチュラーゼであるＳＣＤ１の薬理学的阻害に耐性になることができる。さらに、捕捉が増強されると、電子アクセプターとして酸素分子を必要とするＳＣＤ１を回避することによって、Ｒａｓ駆動性腫瘍を低酸素状態で容易に成長させる可能性がある。
【０１８８】
Ｒａｓ活性化および低酸素状態の両方により、脂肪酸捕捉が誘導されることに加えて、グルタミンから生成されたアセチル−ＣｏＡ単位の分率も増加する。さらに、Ｒａｓ活性化によって、酸素の消費が低減する。いかなる特定の理論にも拘泥するものではないが、本開示は、低酸素状態とＲａｓ活性化との間の代謝的類似点の１つの可能な原因が、Ｒａｓと低酸素状態の両方がＨＩＦを活性化し（または別のシグナル伝達タンパク質に共に集中する）（３７）、それによって観察された代謝的共通性をもたらす可能性があることであると提唱する。別の原因は、Ｒａｓ活性化が、低酸素状態と同様に、酸化的リン酸化を直接的に損ない、ＮＡＤＨ（または別の代謝産物）を増加させ、それによって脂質の代謝変化をもたらすことである。後者の可能性の裏付けとして、近年、Ｒａｓはミトコンドリアに移動し、複合体Ｉを阻害することが示されている（２１）。
【０１８９】
脂肪酸捕捉経路の非常に重要な基質が、血清リゾリン脂質である。２つの尾部を有する標準的なリン脂質とは対照的に、リゾリン脂質は、細胞が容易に利用できる脂肪酸源を提供する。例えば、２つの脂肪酸の尾部を有する対応するホスファチジルコリン種ではなく、オレオイルリゾホスファチジルコリンは、ＳＣＤ１阻害から細胞を助ける。遊離オレイン酸（Ｃ１８：１）も、ＳＣＤ１阻害から細胞を助けることができるが、リゾリン脂質は、血清において遊離脂肪酸よりも豊富であり、したがってより重要な生理的供給源である可能性がある。例えば、血清オレイン酸の約２０％は、５％が遊離脂肪酸形態であるのと比較して、オレオイルリゾホスファチジルコリンの形態である。
【０１９０】
細胞がリゾリン脂質を捕捉する機序は、完全には確立されていない。興味深いことに、モノアシルグリセロールから遊離脂肪酸を生成する酵素であるモノアシルグリセロールリパーゼ（ＭＡＧＬ）は、侵襲性がん細胞において高度に発現し、その過剰発現は、腫瘍原性を増強する（２６）。またモノアシルグリセロールリパーゼの発現は、Ｈ−ＲａｓおよびＫ−Ｒａｓ−ＨＩＦ経路によって増加する（２７、２８）。ＭＡＧＬとがんとの関連は、腫瘍形成を促進する脂質メッセンジャー、例えばリゾホスファチジン酸およびＰＧＥ２のレベルを増強することによるものであると既に仮定されているが、本開示は、その関連がリゾ脂質捕捉にも寄与し得ることを提唱する。
【０１９１】
本開示は、Ｒａｓ駆動性細胞によるリゾリン脂質の取込みおよび利用は、より網羅的な「捕捉剤（ｓｃａｖｅｎｇｅｒ）」ライフスタイルの一部であり得ることを教示する。発癌性Ｒａｓは、自己貪食およびマクロピノサイトーシスの両方を上方調節し、これらは共にエンドサイトーシス小胞へのバルク材料の取り込みに関与する（２２〜２４）。自己貪食は、細胞内内容物を消費し（細胞の喰殺）、マクロピノサイトーシスは細胞外内容物を消費する。これらは共に、高分子分解を介して栄養を提供することができ、マクロピノサイトーシスは、リゾ脂質取込みに直接的に寄与する可能性がある。
【０１９２】
マクロピノサイトーシスの潜在的に可能な役割に関係なく、捕捉は、Ｒａｓ駆動性がんの代謝的な顕著な特徴である。ＰＩ３Ｋ−Ａｋｔ経路によって駆動された腫瘍は、抑制なく生合成に従事し、代謝的に脆弱になるが（３８）、その代わり、主に発癌性Ｒａｓによって駆動された腫瘍が、細胞外高分子を利用して新しい高分子および脂質の生成に必要な基質を得ることによって急速成長を維持する能力を備えることを、本開示は教示する。この知見は、治療的な意味があり、ＳＣＤ１などのタンパク同化酵素の阻害剤に対してＲａｓ駆動性腫瘍が比較的頑強になる。同時に、この知見は、捕捉経路酵素がＲａｓ駆動性がんの治療標的となり得ることを教示している。したがって本発明は、高分子捕捉の１つまたは複数の特色の破壊によることを含む、Ｒａｓ関連がんの処置に有効な治療様式を同定し、かつ／または特徴付ける様々な方法を提供する。本発明はまた、このような治療様式を用いてＲａｓ関連がんを処置する方法を提供する。
【０１９３】
（実施例２）
良性の隣接組織と比較した膵臓の腫瘍組織の脂肪酸含量
本発明の実施例は、膵管腺癌腫瘍および良性の隣接組織のペア試料における脂質の存在量の分析を記載する。
【０１９４】
具体的には、膵管腺癌腫瘍および良性の隣接組織のペア被検物を、２０人の患者から外科的切除によって獲得した。試料収集プロトコルは、代謝変化を最小限に抑えるように設計した：外科手術中、切除の直前まで組織および腫瘍の灌流を維持するように努め、その後、腫瘍および良性の隣接組織の試料を液体窒素に急速に浸し、≦−７０℃で保存し、平行して抽出し、ＬＣ−ＭＳによって分析した。
【０１９５】
ヒト膵臓の腫瘍組織における脂質存在量の相対比を、同じ患者から得た良性の隣接組織と比較した。結果は、図１１に提示されている。エラーバーが重複しているが、図１１は、各タイプの組織において有意に観察された種の顕著な分離を示している。さらに図１１は、とりわけ、ホスファチジルグリセロール脂質が、良性の隣接組織ではなく腫瘍組織に検出されたことを示している。また、より高い不飽和度を有する脂肪酸は、良性の隣接組織よりも腫瘍組織に見出される可能性がはるかに高い傾向があった。より長い鎖の脂肪酸は、良性組織と比較して腫瘍により一般的であるようであり、例えば、図１１に示した結果をもたらした研究では、４０を超える長さの炭素を有する種は、良性組織において優勢には観察されなかった。これらの観察を組み合わせると、より高い不飽和度を有する脂肪酸を含有するホスファチジルグリセロール脂質は、良性の隣接組織と比較して腫瘍組織に高度に存在していたが、リゾリン脂質は、相対的に枯渇していた。
【０１９６】
したがって、一部の実施形態では、本発明は、腫瘍細胞による、ホスファチジルグリセロール脂質ならびに／または高い不飽和度および／もしくはより長い炭素鎖（例えば４０超）を有する脂肪酸の利用を取り除くことによって、Ｒａｓ関連がんを処置する方法および技術を提供する。本発明はまた、このようなホスファチジルグリセロール脂質ならびに／または高い不飽和度および／もしくはより長い鎖を有する脂肪酸が、腫瘍細胞への捕捉（例えば移入）を妨害する薬剤を同定し、かつ／または特徴付けることによって、Ｒａｓ関連腫瘍の処置に有効な治療様式を同定し、かつ／または特徴付ける方法を提供する。
【０１９７】
一部の特定の実施形態では、腫瘍細胞による、それらの好ましい捕捉可能な脂肪酸（すなわちホスファチジルグリセロール脂質、高い不飽和度を有する脂肪酸、および／またはより長い鎖の脂肪酸、特に高い不飽和度を有する脂肪酸を含有するホスファチジルグリセロール脂質）の利用に、食事管理によって影響を与えることができる。例えば、一部の実施形態では、Ｒａｓ関連腫瘍に罹患しているまたは罹患しやすい被験体には、ホスファチジルグリセロール脂質および／または高い不飽和度を有する脂肪酸および／またはより長い鎖の脂肪酸が少ない治療食が投与される。一部の実施形態では、Ｒａｓ関連腫瘍に罹患しているまたは罹患しやすい被験体には、他の脂質供給源と比較して（例えば、完全飽和した脂肪酸と比較して）、ホスファチジルグリセロール脂質および／または高い不飽和度を有する脂肪酸および／またはより長い鎖の脂肪酸が相対的に少ない治療食が投与される。
【０１９８】
多くの実施形態では、腫瘍細胞によるそれらの好ましい捕捉可能な脂肪酸の利用を制限することは、例えば完全飽和した脂肪酸からなるまたはそれを含む代替の脂質供給源を提供することを含む。一部の実施形態では、被験体には、過剰の完全飽和した脂肪酸を含む治療食が投与される。一部の実施形態では、被験体には、多価不飽和脂肪酸に対して、および／または特にホスファチジルグリセロール脂質と比較して、過剰の完全飽和した脂肪酸を含む治療食が投与される。
【０１９９】
（実施例３）
食事管理の効果
本発明の実施例は、Ｒａｓ関連腫瘍の成長に対するある特定の食事プログラムの効果を実証する。
【０２００】
具体的には、対照、高い総脂肪、高スクロース、または高飽和脂肪の治療食を給餌された胸腺欠損ヌードマウスにおける異種移植Ａ５４９（Ｒａｓ駆動性肺がん）細胞の成長の特徴を決定した。結果を、図１２に提示する。図から分かる通り、腫瘍は、豊富な不飽和脂肪酸を含有する治療食（対照治療食および高い総脂肪治療食）を給餌されたマウスにおいて最も急速に成長し、飽和脂肪酸が高度に富化された治療食を給餌されたマウスでは、腫瘍成長は緩慢である。
【０２０１】
したがって本開示は、食事による脂肪酸摂取の管理が、ある特定の腫瘍、特にある特定のＲａｓ関連腫瘍の成長に影響を及ぼし得ることを教示する。一部の実施形態では、このような腫瘍に提供される処置様式は、関連性のあるがんに罹患しているまたは罹患しやすい被験体の治療食において不飽和脂肪酸を制限すること、および／またはその治療食に飽和脂肪酸を補充することを含む。
【０２０２】
参考文献
【化１】
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【化２】
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【化３】
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【化４】
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【図１】
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【図２】
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【図３】
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【図４】
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【図５】
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【図６】
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【図７】
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【図８】
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【図９】
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【図１０】
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【図１１】
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【図１２】
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