(57)【要約】【課題】腋臭原因物質の産生能が高い新規の腋臭原因菌を提供する。また、被検物質の腋臭抑制効果を簡便な操作で効率的に評価することの可能な腋臭原因物質産生抑制物質のスクリーニング方法を提供する。また、高い腋臭抑制効果を有する腋臭原因物質産生抑制剤を提供する。【解決手段】  ＭＤ１７０６２７−０７ＨＳ（受領番号：ＮＩＴＥ  ＡＢＰ−０２５２９）及びＭＤ１７０６２７−４０ＨＳ（受領番号：ＮＩＴＥ  ＡＢＰ−０２５３０）からなる群より選択される少なくとも１種のコリネバクテリウム属に属する腋臭原因菌。【選択図】なし【特許請求の範囲】
【請求項１】
ＭＤ１７０６２７−０７ＨＳ（受領番号：ＮＩＴＥ  ＡＢＰ−０２５２９）及びＭＤ１７０６２７−４０ＨＳ（受領番号：ＮＩＴＥ  ＡＢＰ−０２５３０）からなる群より選択される少なくとも１種のコリネバクテリウム属に属する腋臭原因菌。
【請求項２】
以下の工程を含む腋臭原因物質産生抑制物質のスクリーニング方法。
腋臭原因物質前駆体及び被検物質の存在下、請求項１記載の腋臭原因菌を培養する工程
上記工程後、培地中の腋臭原因物質前駆体及び／又は腋臭原因物質の量を測定して、被検物質の腋臭原因物質産生抑制効果を評価する工程
【請求項３】
オリーブエキス、サルビアエキス、センブリエキス、及びローズマリーエキスからなる群より選択される少なくとも１種の腋臭原因物質産生抑制物質を含有する腋臭原因物質産生抑制剤。
【請求項４】
ＭＤ１７０６２７−０７ＨＳ（受領番号：ＮＩＴＥ  ＡＢＰ−０２５２９）及びＭＤ１７０６２７−４０ＨＳ（受領番号：ＮＩＴＥ  ＡＢＰ−０２５３０）からなる群より選択される少なくとも１種のコリネバクテリウム属に属する腋臭原因菌による腋臭原因物質の産生を抑制する請求項３記載の腋臭原因物質産生抑制剤。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、腋臭原因菌、腋臭原因物質産生抑制物質のスクリーニング方法、及び腋臭原因物質産生抑制剤に関する。
【背景技術】
【０００２】
近年、体臭が周囲へ与える不快感が問題となっており、体臭に対する意識が高まっている。体臭は人体の分泌液である汗や皮脂などが皮膚常在菌により分解（代謝）されることによって発生することが知られている。人体の中でも、特にアポクリン腺が発達した腋窩は強い臭い（腋臭）を放つことがあり、周囲へ与える不快感が大きな原因となっている。腋臭は個人による差が大きく、ミルク様臭（Ｍ型）、酸臭（Ａ型）、カレーのスパイス様臭（Ｃ型）、カビ様臭（Ｋ型）、蒸した肉脂様臭（Ｅ型）、水っぽい臭い（Ｗ型）、鉄臭（Ｆ型）、及びその他の臭いに分類される（非特許文献１）。
【０００３】
前記分類の中でも、特にＣ型腋臭は３−ヒドロキシ−３−メチルヘキサン酸を臭気成分とするものであり、臭いの強度が高く周囲に与える不快感が強い。この臭気成分は分泌液中に存在する３−ヒドロキシ−３−メチルヘキサン酸とグルタミンとの結合物（例えば、３−ヒドロキシ−３−メチルヘキサノイル−グルタミン）が腋窩常在菌の１種である腋臭原因菌により分解（代謝）されることで産生することが知られている。
【０００４】
腋窩常在菌は、Ｓｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｕｓ、Ｍｉｃｒｏｃｏｃｃｕｓ、Ｃｏｒｙｎｅｂａｃｔｅｒｉｕｍ、Ｐｒｏｐｉｏｎｉｂａｃｔｅｒｉｕｍ、Ｍａｌａｓｓｅｚｉａなどに属する菌から構成されている。この中でも、Ｓｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｕｓ及びＣｏｒｙｎｅｂａｃｔｅｒｉｕｍに属する菌が腋臭の発生に寄与していると考えられ、中でもＣｏｒｙｎｅｂａｃｔｅｒｉｕｍが３−ヒドロキシ−３−メチルヘキサン酸の産生に深く関与していることが報告されている。また、３−ヒドロキシ−３−メチルヘキサン酸を産生するＣｏｒｙｎｅｂａｃｔｅｒｉｕｍとしては、Ｃｏｒｙｎｅｂａｃｔｅｒｉｕｍ  ｓｔｒｉａｔｕｍ、Ｃｏｒｙｎｅｂａｃｔｅｒｉｕｍ  ｊｅｉｋｅｉｕｍなどが知られている（非特許文献２）。
【先行技術文献】
【非特許文献】
【０００５】
【非特許文献１】遠藤祐子、臼倉淳：消毒液で腋臭の原因菌を減らす  １）Ｐａｒｔ．１  −腋窩常在菌の制御による腋臭予防と緩和−、Ｔｈｅ  Ｊａｐａｎｅｓｅ  Ｊｏｕｒｎａｌ  ｏｆ  Ｐｌａｓｔｉｃ  Ｓｕｒｇｅｙ，Ｖｏｌ．５９，増刊号，２０１６
【非特許文献２】Ａｎｄｒｅａｓ  Ｎ．，  Ｈａｎｓ  Ｇ．，：Ａ  Ｓｐｅｃｉｆｉｃ  Ｂａｃｔｅｒｉａｌ  Ａｍ  ｉｎｏａｃｙｌａｓｅ  Ｃｌｅａｖｅｓ  Ｏｄｏｒａｎｔ  Ｐｒｅｃｕｒｓｏｒｓ  Ｓｅｃｒｅｔｅｄ  ｉｎ  ｔｈｅ  Ｈｕｍａｎ  Ａｘｉｌｌａ，Ｊ．  Ｂｉｏｌ．  Ｃｈｅｍ  ２００３，２７８：５７１８−５７２７
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００６】
しかしながら、３−ヒドロキシ−３−メチルヘキサン酸の産生に関与する腋臭原因菌は未だ十分に特定されておらず、これらの細菌を見出すことによりその性質を活かした腋臭原因物質産生抑制物質（腋臭原因菌による腋臭原因物質の産生を抑制する物質）のスクリーニング方法の開発や、腋臭原因物質産生抑制剤の発見に繋がることが考えられる。しかしながら、腋臭原因菌の探索・特定は難しく、腋臭原因物質（例えば、３−ヒドロキシ−３−メチルヘキサン酸）の産生能が高い腋臭原因菌については発見されていなかった。
【０００７】
また、現在、腋臭を抑制する方法として殺菌剤、収斂剤、消臭剤（腋臭成分の吸着剤）、酸化防止剤などが用いられており、特に殺菌剤などの腋臭原因物質産生抑制物質に関しては盛んに研究されている。なお、腋臭原因物質産生抑制物質としては、前述の通り、殺菌剤の様に腋臭原因菌を殺菌すること（死滅させること）により、腋臭原因物質の産生を抑制する物質や、腋臭原因菌の代謝経路を阻害することにより、腋臭原因物質の産生を抑制する物質等が例示されるが、高い腋臭抑制効果を有するものはこれまで見出されていなかった。
【０００８】
したがって、本発明の目的は、腋臭原因物質の産生能が高い新規の腋臭原因菌を提供することにある。また、本発明の他の目的は、被検物質の腋臭原因物質産生抑制効果を簡便な操作で効率的に評価することが可能な腋臭原因物質産生抑制物質のスクリーニング方法を提供することにある。また、本発明の他の目的は、高い腋臭抑制効果を有する腋臭原因物質産生抑制剤を提供することにある。
【課題を解決するための手段】
【０００９】
上記の様な事情に鑑み、課題を解決するために鋭意検討を重ねた結果、本発明者らは腋臭原因物質の産生能が高い新規の腋臭原因菌、これを用いた腋臭原因物質産生抑制物質のスクリーニング方法、さらに特定の腋臭原因物質産生抑制物質を含有する腋臭原因物質産生抑制剤が高い腋臭抑制効果を有することを見出して本発明を完成させた。
【００１０】
すなわち、本発明は、ＭＤ１７０６２７−０７ＨＳ（受領番号：ＮＩＴＥ  ＡＢＰ−０２５２９）及びＭＤ１７０６２７−４０ＨＳ（受領番号：ＮＩＴＥ  ＡＢＰ−０２５３０）からなる群より選択される少なくとも１種のコリネバクテリウム属に属する腋臭原因菌を提供する。
【００１１】
また、本発明では、以下の工程を含む腋臭原因物質産生抑制物質のスクリーニング方法についても提供する。
腋臭原因物質前駆体及び被検物質の存在下、前記の腋臭原因菌を培養する工程
上記工程後、培地中の腋臭原因物質前駆体及び／又は腋臭原因物質の量を測定して、被検物質の腋臭原因物質産生抑制効果を評価する工程
【００１２】
また、本発明では、オリーブエキス、サルビアエキス、センブリエキス、及びローズマリーエキスからなる群より選択される少なくとも１種の腋臭原因物質産生抑制物質を含有する腋臭原因物質産生抑制剤についても提供する。
【００１３】
なお、本発明の腋臭原因物質産生抑制剤は、ＭＤ１７０６２７−０７ＨＳ（受領番号：ＮＩＴＥ  ＡＢＰ−０２５２９）及びＭＤ１７０６２７−４０ＨＳ（受領番号：ＮＩＴＥ  ＡＢＰ−０２５３０）からなる群より選択される少なくとも１種のコリネバクテリウム属に属する腋臭原因菌による腋臭原因物質の産生を抑制することが好ましい。
【発明の効果】
【００１４】
本発明の腋臭原因菌は腋臭原因物質の産生能が高いことから、腋臭原因物質産生抑制物質のスクリーニング方法に使用した場合に被検物質の腋臭原因物質産生抑制効果を簡便な操作で効率的に評価することができる。また、本発明のスクリーニング方法は、被検物質の腋臭原因物質産生抑制効果を簡便な操作で効率的に評価することができる。さらに、本発明の腋臭原因物質産生抑制剤は、腋臭原因菌における腋臭原因物質産生抑制効果を有する腋臭原因物質産生抑制物質を含有することにより、高い腋臭抑制効果を有する。
【発明を実施するための形態】
【００１５】
＜腋臭原因菌＞
本発明の腋臭原因菌は、ＭＤ１７０６２７−０７ＨＳ（受領番号：ＮＩＴＥ  ＡＢＰ−０２５２９）、及びＭＤ１７０６２７−４０ＨＳ（受領番号：ＮＩＴＥ  ＡＢＰ−０２５３０）からなる群より選択される少なくとも１種のＣｏｒｙｎｅｂａｃｔｅｒｉｕｍ（コリネバクテリウム属）に属する細菌である。これらの菌株は独立行政法人  製品評価技術基盤機構  特許微生物寄託センター  ２９２−０８１８  千葉県木更津市かずさ鎌足２−５−８に２０１７年８月１０日付で寄託済みである。以下、これらの腋臭原因菌を単に「０７ＨＳ」及び「４０ＨＳ」と称することがある。
【００１６】
０７ＨＳ及び４０ＨＳは、腋臭原因物質前駆体を分解（代謝）し、腋臭原因物質を産生する腋臭原因菌である。これらの腋臭原因菌は、特に腋臭原因物質前駆体の１種である３−ヒドロキシ−３−メチルヘキサン酸とグルタミンとの結合物（３−ヒドロキシ−３−メチルヘキサノイル−グルタミン）に対する高い分解能を有し、腋臭原因物質である３−ヒドロキシ−３−メチルヘキサン酸を産生する。このため、Ｃ型腋臭に関連する腋臭原因菌として重要な役割を果たしている。以下に、０７ＨＳ及び４０ＨＳの性質を示す。
【００１７】
［０７ＨＳ］
・０．６〜０．７μｍ×１．２〜１．５μｍ
・グラム陽性桿菌である。
・運動性は陰性である。
・ヒツジ血液寒天培地上で３７℃、７２時間培養した際、１．０ｍｍ以下で白色円形の不透明な集落を呈する。
・好気性である。
・下記の表１に示すような酵素活性を示す。
・１６Ｓ  ｒＤＮＡの塩基配列は下記の表２（配列番号１）の通りである。
【００１８】
［４０ＨＳ］
・０．７〜０．８μｍ×１．２〜２．０μｍ
・グラム陽性のＶ字型の配列を形成する桿菌である。
・運動性は陰性である。
・ヒツジ血液寒天培地上で３７℃、７２時間培養した際、１．０ｍｍ以下で淡黄色円形の不透明な集落を呈する。
・好気性である。
・下記の表１に示すような酵素活性を示す。
・１６Ｓ  ｒＤＮＡの塩基配列は下記の表３（配列番号２）の通りである。
【００１９】
＜腋臭原因物質産生抑制物質のスクリーニング方法＞
本発明のスクリーニング方法は、本発明の腋臭原因菌を用いた腋臭原因物質産生抑制物質のスクリーニング方法であり、腋臭原因物質前駆体及び被検物質の存在下、腋臭原因菌を培養する工程（以下、「培養工程」と称することがある）と、培養工程後、培地中の腋臭原因物質前駆体及び／又は腋臭原因物質の量を測定して、被検物質の腋臭原因物質産生抑制効果を評価する工程（以下、「評価工程」と称することがある）とを含むことを特徴とする。すなわち、本発明のスクリーニング方法は、腋臭原因菌が腋臭原因物質前駆体を分解して腋臭原因物質を産生することを抑制する物質（腋臭原因物質産生抑制物質）を探索する方法である。さらに、培養工程の後に、培地中の腋臭原因菌の生菌数を測定する工程（以下、「生菌数測定工程」と称することがある）を含んでいてもよい。
【００２０】
［培養工程］
本発明の培養工程は、腋臭原因物質前駆体及び被検物質の存在下、腋臭原因菌を培養する工程であれば特に限定されず、例えば、腋臭原因物質前駆体と被検物質とを培地に加え、さらに該培地に腋臭原因菌を植菌した後に培養する工程や、培地に腋臭原因菌を植菌し、さらに腋臭原因物質前駆体と被検物質とを培地に加えた後に培養する工程などが挙げられる。
【００２１】
腋臭原因物質前駆体としては、腋臭原因物質の前駆体であって０７ＨＳ又は４０ＨＳにより分解されるものであれば特に限定されないが、スクリーニングの精度の観点からは、３−ヒドロキシ−３−メチルヘキサン酸の前駆体であることが好ましく、より好ましくは３−ヒドロキシ−３−メチルヘキサノイル−グルタミンである。
【００２２】
被検物質は特に限定されないが、例えば、無機化合物、有機化合物、動植物抽出物などが挙げられる。被検物質は、そのまま用いてもよく、必要に応じて、溶媒に溶解させて用いてもよい。被検物質を溶解させる溶媒としては、例えば、エタノール、生理的食塩水、リン酸緩衝液、培地（後述の液体培地）などが挙げられる。
【００２３】
培地は、一般的に腋臭原因菌の培養に用いられる培地であれば特に限定されず、合成培地、天然培地のいずれであっても使用することができる。培地は固体培地及び液体培地のいずれであってもよいが、スクリーニングの精度の観点からは液体培地であることが好ましい。培地の炭素源としては、例えば、グルコース、デンプン、デキストリン、マンノース、フルクトース、スクロース、ラクトース、キシロース、アラビノース、マンニトールなどを単独又は組み合わせて用いることができる。培地の窒素源としては、塩化アンモニウム、硝酸アンモニウム、硝酸ナトリウム、尿素、ペプトン、肉エキス、酵母エキス、乾燥酵母、コーンスティープリカー、大豆粉、カザミノ酸などを単独又は組み合わせて用いることができる。その他、塩化ナトリウム、塩化カリウム、塩化マンガン、塩化鉄、塩化カルシウム、硫酸マグネシウム、硫酸マンガン、硫酸第一鉄、硫酸亜鉛、硫酸銅炭酸カルシウム、リン酸二水素カリウム、リン酸水素二カリウムなどの無機塩類などを単独又は組み合わせて用いることができる。
【００２４】
培地における腋臭原因物質前駆体の濃度は、特に限定されないが、０．００１〜１００ｍＭが好ましく、より好ましくは０．０１〜１０ｍＭである。なお、この場合の腋臭原因物質前駆体の濃度は、培養開始直前の培地におけるものを意味する。
【００２５】
培地における被検物質の含有率は、特に限定されないが、０．０００００１〜１０質量％が好ましく、より好ましくは０．００００１〜５質量％である。なお、この場合の被検物質の含有率は、培養開始直前の培地におけるものを意味する。
【００２６】
培養時間は、腋臭原因菌の種類や使用する培地の種類などによって適宜設定することができ、特に限定されないが、腋臭原因菌による腋臭原因物質前駆体の分解に要する時間を確保する観点から、０．５〜７２時間が好ましく、より好ましくは３〜４８時間である。
【００２７】
培養温度は、腋臭原因菌の種類や使用する培地の種類などによって適宜設定することができ、特に限定されないが、腋臭原因菌を良好に生育可能な観点から、好ましくは２０〜５０℃、より好ましくは３０〜４０℃である。
【００２８】
［評価工程］
評価工程とは、培養工程後、培地中の腋臭原因物質前駆体及び／又は腋臭原因物質の量を測定して、被検物質の腋臭原因物質産生抑制効果を評価する工程である。つまり、培養工程後の培地に含まれる腋臭原因物質前駆体の量を測定して、被検物質の腋臭原因物質産生抑制効果を評価する工程、培養工程後の培地に含まれる腋臭原因物質の量を測定して、被検物質の腋臭原因物質産生抑制効果を評価する工程、培養工程後の培地に含まれる腋臭原因物質前駆体と腋臭原因物質の量を測定して、被検物質の腋臭原因物質産生抑制効果を評価する工程の何れか１つを意味する。なお、評価工程は、後述の評価方法［３］及び［４］の様に、培地中の腋臭原因物質前駆体及び／又は腋臭原因物質の量を測定する工程と、腋臭原因物質前駆体及び／又は腋臭原因物質の測定量から被検物質の腋臭原因物質産生抑制効果を評価する工程とに分かれていてもよい。
【００２９】
腋臭原因物質前駆体の存在下で腋臭原因菌を培養すると、腋臭原因物質前駆体が腋臭原因菌により分解され、腋臭原因物質が産生する。ここで、被検物質が培地中に存在することにより腋臭原因物質前駆体や腋臭原因物質の量が変化し得る。例えば、被検物質の存在により腋臭原因菌による腋臭原因物質の代謝経路が阻害され、腋臭原因物質の産生能が低下した場合、培地中の腋臭原因物質前駆体の減少（分解）は抑制される。また、被検物質が殺菌効果を有することより腋臭原因菌が死滅した場合は、腋臭原因物質の産生量が低下し、培地中の腋臭原因物質前駆体の減少は抑制される。さらに、被検物質が腋臭原因物質前駆体に直接的に作用することにより、腋臭原因菌が腋臭原因物質前駆体を分解することができなくなり、その結果、腋臭原因物質前駆体の減少が抑制されるということも考えられる。なお、腋臭原因物質前駆体の挙動について、腋臭原因物質前駆体の減少が抑制される場合についてのみ例を挙げて説明したが、本発明の評価工程では、被検物質の存在により、腋臭原因菌による腋臭原因物質の産生能が向上する場合（腋臭原因物質前駆体の減少が促進される場合）であっても評価することが可能である。上記の通り、本発明の評価工程は、腋臭原因物質前駆体や腋臭原因物質の挙動を総合勘案して、被検物質の腋臭原因物質産生抑制効果を評価する工程であるといえる。
【００３０】
培地中の腋臭原因物質前駆体や腋臭原因物質の量を測定する方法としては、例えば、分析機器を用いた方法や、腋臭原因物質が発する臭いを官能試験により判断する方法が挙げられる。ここで、分析機器を用いた方法は、官能試験を用いた方法と比較して、絶対評価が可能であることからスクリーニングの精度が高いという点、必要とする腋臭原因物質前駆体などの量が少ないことから一度に多くの被検物質について評価を行うことができるという点で有効である。一方、官能試験を用いた方法は、分析機器を用いた方法と比較して、煩雑な操作を行うことなく簡便に評価を行うことができるという点で有効である。
【００３１】
分析機器を用いた方法としては、例えば、ガスクロマトグラフィー−質量分析法、ガスクロマトグラフィー−水素炎イオン検出法、ガスクロマトグラフィー−電子捕獲式検出法、高速液体クロマトグラフィー−紫外可視分光法、高速液体クロマトグラフィー−質量分析法等のクロマトグラフを用いた分析法や、半導体センサを用いた検出法などが挙げられる。クロマトグラフを用いた分析法では、腋臭原因物質前駆体に対応するピークの面積から培地中の腋臭原因物質前駆体の含有量を算出することができる。また、腋臭原因物質に対応するピークの面積から培地中の腋臭原因物質の含有量を算出することができる。
【００３２】
本発明の評価工程における、被検物質の腋臭原因物質産生抑制効果を評価する方法としては、例えば、以下の評価方法［１］〜［４］の方法などが挙げられる。
［１］腋臭原因物質前駆体及び／又は腋臭原因物質の測定量そのものから評価する方法
［２］腋臭原因物質前駆体及び／又は腋臭原因物質の測定量と、腋臭原因物質前駆体の使用量との比較から評価する方法
［３］２以上の被検物質から得られた腋臭原因物質前駆体及び／又は腋臭原因物質の測定量を比較して評価する方法
［４］腋臭原因物質前駆体及び／又は腋臭原因物質の測定量と、被検物質を使用しないこと以外は同様にして得られた腋臭原因物質前駆体及び／又は腋臭原因物質の測定量とを比較して評価する方法
【００３３】
評価方法［１］は、培地中の腋臭原因物質前駆体及び／又は腋臭原因物質の量を測定することと同時に実施されるものである。例えば、測定の結果、腋臭原因物質前駆体が全部消失していることが確認できた場合は、該被検物質が腋臭原因物質産生抑制効果を有しないと評価することができる。また、測定の結果、腋臭原因物質が産生していないことが確認できた場合は、該被検物質が良好な腋臭原因物質産生抑制効果を有していると評価することができる。よって、本評価方法は、評価方法［２］〜［４］の様な煩雑な操作が必要でなく、簡便に実施することが可能である。その一方で、本評価方法は定性的なものであり、被検物質の腋臭原因物質産生抑制効果の有無についての判断は可能であるものの、被検物質の腋臭原因物質産生抑制効果を定量的に判断する場合は評価方法［２］〜［４］を行うことが望ましい。
【００３４】
評価方法［２］は、［２−１］腋臭原因物質前駆体の測定量と、腋臭原因物質前駆体の使用量との比較から被検物質の腋臭原因物質産生抑制効果を評価する方法、又は［２−２］腋臭原因物質の測定量と、腋臭原因物質前駆体の使用量との比較から被検物質の腋臭原因物質産生抑制効果を評価する方法である。ここで、「腋臭原因物質前駆体の使用量」とは、培養工程における培養開始前の培地に含まれる腋臭原因物質前駆体の量を意味する。つまり、培養工程終了後の培地中の腋臭原因物質前駆体の量を測定ないし算出するとともに、培養開始前の培地に含まれる腋臭原因物質前駆体の量を測定ないし算出し、これらの量の変化から被検物質の腋臭原因物質産生抑制効果を評価する方法である。なお、前記［２−２］では、例えば、培養工程終了後の培地中の腋臭原因物質の測定量から未分解の腋臭原因物質前駆体の量を算出し、これと腋臭原因物質前駆体の使用量とを比較することにより、被検物質の腋臭原因物質産生抑制効果を評価することが可能である。本評価方法は、評価方法［３］及び［４］の様に比較対象を改めて用意する必要が無い点で簡便に実施することが可能である。その一方で、本評価方法は、被検物質や腋臭原因菌が存在すること以外の影響（例えば、熱による腋臭原因物質前駆体の自己分解など）を考慮していないため、被検物質の腋臭原因物質産生抑制効果をより精密に判断する必要がある場合は評価方法［３］及び［４］を行うことが望ましい。
【００３５】
評価方法［２］における評価工程としては、具体的には以下の通りである。
培養工程後、培地中の腋臭原因物質前駆体及び／又は腋臭原因物質の量を測定すると共に、使用した腋臭原因物質前駆体の量を測定ないし算出し、これらの量の変化から被検物質の腋臭原因物質産生抑制効果を評価する工程
【００３６】
評価方法［３］は、２以上の被検物質から得られた腋臭原因物質前駆体及び／又は腋臭原因物質の測定量を比較して被検物質の腋臭原因物質産生抑制効果を評価する方法である。つまり、対象とする被検物質と、該被検物質以外の被検物質（「その他の被検物質」と称することがある）とについて培養工程を実施し、それぞれの培地中の腋臭原因物質前駆体及び／又は腋臭原因物質の量を測定して、これらの比較から被検物質の腋臭原因物質産生抑制効果を評価する方法である。本評価方法は、被検物質の腋臭原因物質産生抑制効果を精密に評価することが可能な点で優れる。特に、２以上の被検物質についての腋臭原因物質産生抑制効果を精密に比較することが可能な点で優れる。
【００３７】
評価方法［３］における評価工程を採用した場合の本発明のスクリーニング方法としては、具体的には以下の通りである。
腋臭原因物質前駆体及び被検物質の存在下、腋臭原因菌を培養する工程
上記培養工程後、培地中の腋臭原因物質前駆体及び／又は腋臭原因物質の量を測定する工程
腋臭原因物質前駆体及びその他の被検物質の存在下、腋臭原因菌を培養する工程
上記培養工程後、培地中の腋臭原因物質前駆体及び／又は腋臭原因物質の量を測定する工程
被検物質を使用した場合の腋臭原因物質前駆体及び／又は腋臭原因物質の測定量と、その他の被検物質を使用した場合の腋臭原因物質前駆体及び／又は腋臭原因物質の測定量との比較から被検物質の腋臭原因物質産生抑制効果を評価する工程
【００３８】
評価方法［４］は、腋臭原因物質前駆体及び／又は腋臭原因物質の測定量と、被検物質を使用しないこと以外は同様にして得られた腋臭原因物質前駆体及び／又は腋臭原因物質の測定量とを比較して被検物質の腋臭原因物質産生抑制効果を評価する方法である。つまり、対象とする被検物質について培養工程を行うと共に、被検物質を使用しないこと以外は同様にして培養工程を実施し、それぞれの培地中の腋臭原因物質前駆体及び／又は腋臭原因物質の量を測定して、これらの比較から被検物質の腋臭原因物質産生抑制効果を評価する方法である。本評価方法は、被検物質の腋臭原因物質産生抑制効果を定量的に且つ精密に評価することが可能な点で優れる。
【００３９】
評価方法［４］における評価工程を採用した場合の本発明のスクリーニング方法としては、具体的には以下の通りである。
腋臭原因物質前駆体及び被検物質の存在下、腋臭原因菌を培養する工程
上記培養工程後、培地中の腋臭原因物質前駆体及び／又は腋臭原因物質の量を測定する工程
腋臭原因物質前駆体の存在下、腋臭原因菌を培養する工程
上記培養工程後、培地中の腋臭原因物質前駆体及び／又は腋臭原因物質の量を測定する工程
被検物質を使用した場合の腋臭原因物質前駆体及び／又は腋臭原因物質の測定量と、被検物質を使用しない場合の腋臭原因物質前駆体及び／又は腋臭原因物質の測定量との比較から被検物質の腋臭原因物質産生抑制効果を評価する工程
【００４０】
［生菌数測定工程］
本発明のスクリーニング方法は前記培養工程の後、生菌数測定工程をさらに含んでいてもよい。生菌数測定工程は、培地中の腋臭原因菌の生菌数を測定する工程であって、評価工程の前後のいずれにおいて実施してもよく、評価工程と同時に実施してもよい。
【００４１】
被検物質が腋臭原因菌における腋臭原因物質の産生を抑制（阻害）する効果（腋臭原因物質産生抑制効果）を評価する場合、該効果は腋臭原因菌を殺菌すること（死滅させること）により、腋臭原因物質の産生を抑制する効果（「殺菌効果」と称する）と、腋臭原因菌による代謝経路を阻害することにより、腋臭原因物質の産生を抑制する効果（「代謝阻害効果」と称する）とに分類されるが、本発明のスクリーニング方法に生菌数測定工程が含まれる場合は腋臭原因菌の生死を判断することができるため、被検物質の殺菌効果及び代謝阻害効果のそれぞれについて評価することが可能となる。つまり、腋臭原因物質産生抑制効果が存し、腋臭原因菌が死滅している場合は、被検物質が殺菌効果を有していると判断でき、腋臭原因物質産生抑制効果が存し、腋臭原因菌が生存している場合は、被検物質が代謝阻害効果を有していると判断できる。
【００４２】
生菌数の測定方法は特に限定されないが、例えば、培地の一部を寒天培地に塗布し、一定時間培養後に生成したコロニーの数を計測するコロニーカウント法、顕微鏡観察によって培地における菌数を測定する方法などが挙げられる。
【００４３】
＜腋臭原因物質産生抑制剤＞
本発明の腋臭原因物質産生抑制剤は、オリーブエキス、サルビアエキス、センブリエキス、及びローズマリーエキスからなる群より選択される少なくとも１種の腋臭原因物質産生抑制物質を含有する。前記腋臭原因物質産生抑制物質は本発明のスクリーニング方法により得られたものであることから、該腋臭原因物質産生抑制物質を含有することを特徴とする本願の腋臭原因物質産生抑制剤は、腋臭原因菌による腋臭原因物質（例えば、３−ヒドロキシ−３−メチルヘキサン酸）の産生を抑制することができる。すなわち、高い腋臭抑制効果を有している。特に、腋臭原因物質の産生能が高い腋臭原因菌である０７ＨＳ及び４０ＨＳによる腋臭原因物質の産生を抑制することから、腋臭抑制効果に非常に優れることがわかる。
【００４４】
オリーブエキスとは、オリーブ（Ｏｌｅａ  ｅｕｒｏｐａｅａ）の葉や果実から抽出されたエキスである。サルビアエキスとは、セージ（Ｓａｌｖｉａ  ｏｆｆｉｃｉｎａｌｉｓ）の葉から抽出されたエキスである。センブリエキスは、リンドウ科植物センブリ（Ｓｗｅｒｔｉａ  ｊａｐｏｎｉｃａ）の全草から抽出されたエキスである。ローズマリーエキスとはマンネンロウ（Ｒｏｓｍａｒｉｎｕｓ  ｏｆｆｉｃｉｎａｌｉｓ  Ｌｉｎｎｅ）の葉や花から抽出されたエキスである。以下、オリーブエキス、サルビアエキス、センブリエキス、及びローズマリーエキスを植物エキスと総称することがある。
【００４５】
前記植物エキスの抽出方法は特に限定されず、公知の各種抽出方法を用いることができる。抽出方法としては、常温で又は加温して、抽出溶媒により抽出することなどが挙げられる。抽出溶媒としては、通常の植物の抽出に用いられる溶媒であれば特に限定されず、例えば、メタノール、エタノールなどの低級一価アルコール、グリセリン、プロピレングリコール、ジプロピレングリコール、１，３−ブチレングリコールなどの液状多価アルコール、酢酸エチルなどの低級アルキルエステル、水などが例示され、これらの１種又は２種以上の混合溶媒を用いることができる。
【００４６】
前記植物エキスは、そのまま用いてもよいが、必要に応じてろ過、濃縮してもよい。また、カラムクロマト法などにより、分画、精製して用いることもできる。また、前記植物エキスは、減圧乾燥又は凍結乾燥した後、粉末又はペースト状に調製し、適宜製剤化して用いることもできる。
【００４７】
オリーブエキスとしては、例えば、「オリーブ葉抽出液ＢＧ」（丸善製薬株式会社製）などの市販品を使用することができる。サルビアエキスとしては、例えば、「サルビア抽出液」、「サルビア抽出液ＢＧ−Ｊ」、及び「サルビア抽出液ＬＡ」（以上、丸善製薬株式会社製）などの市販品を使用することができる。センブリエキスとしては、例えば、「センブリ抽出リキッドＥＴ」及び「センブリ抽出リキッドＳＳ」（以上、丸善製薬株式会社製）などの市販品を使用することができる。ローズマリーエキスとしては、例えば、「ローズマリーエキスＭＦ」（丸善製薬株式会社製）などの市販品を使用することができる。
【００４８】
本発明の腋臭原因物質産生抑制剤は、腋臭原因菌による腋臭原因物質の産生を抑制する効果を有し、高い腋臭抑制効果を発揮することから、化粧料、医薬部外品、医薬品に用いることが好ましく、特にデオドラント剤（例えば、デオドラントローション、デオドラントジェル、デオドラントスプレー、デオドラントロールオン、デオドラントペーパー、デオドラントスティックなど）、ボディーローション、化粧水、乳液、スキンケアクリーム、トニック、スティック化粧料、リップクリーム、ボディー用洗浄料（例えば、ボディーシャンプー、固形石鹸など）、シート化粧料（例えば、拭き取り用シート、シートパック剤など）、洗髪用化粧料（例えば、シャンプー、リンスなど）、貼付剤などに用いることが好ましい。
【実施例】
【００４９】
以下に、実施例に基づいて本発明をより詳細に説明するが、本発明はこれらの実施例により限定されるものではない。
【００５０】
（実施例１）
１．新規コリネバクテリウム属細菌の選抜
ヒトから採取した腋窩皮膚から常法により分離培養して、８２５種類の常在菌株を得た。該常在菌株の中から、Ｃｏｒｙｎｅｂａｃｔｅｒｉｕｍに属する菌株を、腋臭原因物質前駆体である３−ヒドロキシ−３−メチルヘキサノイル−グルタミンを最終濃度２ｍＭとなるように加えた培地に植菌し、菌懸濁液を調製した。その後、菌懸濁液を３６℃、２４時間培養して培養物を得た。培養物を滅菌フィルターで濾過滅菌した後、８０℃、１５ｍｉｎで加温処理して得られたサンプル中の腋臭原因物質前駆体の残存量を、ガスクロマトグラフィーにより分析した。この結果、腋臭原因物質前駆体の著しい減少が見られた０７ＨＳ及び４０ＨＳを見出した。
【００５１】
２．０７ＨＳ及び４０ＨＳの表現形質解析
得られた０７ＨＳ及び４０ＨＳの表現形質の解析を行った。なお、硝酸塩還元活性、ピラジンアミダーゼ活性、ピロリドニルアリルアミダーゼ活性、アルカリフォスフォターゼ活性、β−グルクロニダーゼ活性、β−ガラクトシダーゼ活性、α−グルコシダーゼ活性、Ｎ−アセチル−β−グルコサミニダーゼ活性、エスクリン（β−グルコシダーゼ）活性、ウレアーゼ活性、及びゼラチン加水分解活性、並びに、グルコース、リボース、キシロース、マンニトール、ラクトース、サッカロース、及びグリコーゲンによる酸産生活性は、コリネバクテリウム用の細菌同定検査キット「アピ  コリネ」（シスメックス・ビオメリュー社製）により解析を行った。
［０７ＨＳ］
・０．６〜０．７μｍ×１．２〜１．５μｍ
・グラム陽性桿菌である。
・運動性は陰性である。
・ヒツジ血液寒天培地上で３７℃、７２時間培養した際、１．０ｍｍ以下で白色円形の不透明な集落を呈する。
・好気性である。
・下記の表１に示すような酵素活性及び酸産生活性を示す。
［４０ＨＳ］
・０．７〜０．８μｍ×１．２〜２．０μｍ
・グラム陽性のＶ字型の配列を形成する桿菌である。
・運動性は陰性である。
・ヒツジ血液寒天培地上で３７℃、７２時間培養した際、１．０ｍｍ以下で淡黄色円形の不透明な集落を呈する。
・好気性である。
・下記の表１に示すような酵素活性及び酸産生活性を示す。
【００５２】
【表１】
2019054774.tif 000002
【００５３】
３．０７ＨＳ及び４０ＨＳの塩基配列解析
０７ＨＳ及び４０ＨＳを培養した後にゲノムＤＮＡを抽出・精製し、以下のプライマーを用いてＰＣＲにより増幅した。
プライマー：２７Ｆ（ＡＧＡＧＴＴＴＧＡＴＣＣＴＧＧＣＴＣＡＧ）、５２０Ｆ（ＧＴＧＣＣＡＧＣＡＧＣＣＧＣＧＧ）、１１００Ｆ（ＧＣＡＡＣＧＡＧＣＧＣＡＡＣＣＣ）、１４９２Ｒ（ＧＧＴＴＡＣＣＴＴＧＴＴＡＣＧＡＣＴＴ）、９２０Ｒ（ＧＴＣＡＡＴＴＣＣＴＴＴＧＡＧＴＴＴ）
【００５４】
増幅されたＤＮＡの配列をシーケンサーを用いて決定し、特定された配列に基づいてホモロジー検索を行った。塩基配列に基づく分子系統計学的解析から、本発明の細菌は共にＣｏｒｙｎｅｂａｃｔｅｒｉｕｍ（コリネバクテリウム属）に属する細菌の一種であることを確認した。なお、０７ＨＳ及び４０ＨＳの１６Ｓ  ｒＤＮＡの塩基配列は下記の表２（配列番号１）及び表３（配列番号２）の通りである。
【００５５】
【表２】
2019054774.tif 000003
【００５６】
【表３】
2019054774.tif 000004
【００５７】
（実施例２）
０７ＨＳ及び４０ＨＳにおける腋臭原因物質前駆体の分解（代謝）能を以下の方法で評価した。なお、腋臭原因物質前駆体である３−ヒドロキシ−３−メチルヘキサノイル−グルタミン（以下、単に「前駆体」と称することがある）の分解能を有することが知られている以下の細菌を対照として用いた。
【００５８】
［対照細菌］
Ｃｏｒｙｎｅｂａｃｔｅｒｉｕｍ  ｘｅｒｏｓｉｓ  ＮＢＲＣ  １２６８４
Ｃｏｒｙｎｅｂａｃｔｅｒｉｕｍ  ｍｉｎｕｔｉｓｓｉｍｕｍ  ＡＴＣＣ  ２３３４８
Ｃｏｒｙｎｅｂａｃｔｅｒｉｕｍ  ｓｔｒｉａｔｕｍ  ＡＴＣＣ  ６９４０
Ｃｏｒｙｎｅｂａｃｔｅｒｉｕｍ  ｊｅｉｋｅｉｕｍ  ＡＴＣＣ  ＢＡＡ  ９４９
Ｃｏｒｙｎｅｂａｃｔｅｒｉｕｍ  ｊｅｉｋｅｉｕｍ  ＡＴＣＣ  ＢＡＡ  ９５０
Ｃｏｒｙｎｅｂａｃｔｅｒｉｕｍ  ｊｅｉｋｅｉｕｍ  ＡＴＣＣ  ４３２１６
Ｃｏｒｙｎｅｂａｃｔｅｒｉｕｍ  ｊｅｉｋｅｉｕｍ  ＡＴＣＣ  ４３２１７
【００５９】
［前駆体入り培養液の調製］
０．２ｇの酵母エキス（ベクトンディッキンソン社製）、３．０ｇのリン酸二水素カリウム、１．９ｇのリン酸水素二カリウム、０．２ｇの硫酸マグネシウム七水和物、１．４ｇの塩化ナトリウム、１．０ｇの塩化アンモニウム、１５．７ｍｇの塩化マンガン（ＩＩ）四水和物、１．７ｍｇの塩化鉄（ＩＩＩ）六水和物、及び１．３ｍｇの塩化カルシウム二水和物（以上、和光純薬（株）製）に全量１Ｌとなるように精製水を加えて溶解し、さらにＴｗｅｅｎ８０（和光純薬（株）製）を０．０５質量％となるように加えて培養液を調製した。次に、３−ヒドロキシ−３−メチルヘキサノイル−グルタミンを最終濃度２ｍＭとなるように培養液に溶解し、滅菌フィルターで濾過滅菌し、前駆体入り培養液を調製した。
【００６０】
［菌懸濁液の調製・培養］
前培養した０７ＨＳ、４０ＨＳ、及び対照細菌を、それぞれ前駆体入り培養液に植菌し、ＯＤ６２０を約０．２〜０．３程度に調整することにより、菌懸濁液を調製した。その後、菌懸濁液を３６℃、２４時間培養して培養物を得た。
【００６１】
［前駆体残存量分析］
それぞれの培養物を滅菌フィルターで濾過滅菌した後、８０℃、１５ｍｉｎで加温処理し、氷冷した後、室温に戻し、下記の「分析条件」にて前駆体残存量を分析した。この結果を以下の表４に記載する。
【００６２】
［分析条件］
装置：Ｓｈｉｍａｄｚｕ  ＣＬＡＳＳ−ＶＰ
カラム：ＹＭＣ  Ｈｙｄｒｏｓｐｈｅｒ  Ｃ１８  ＨＳ１２Ｓ０５−２５４６ＷＴ，４．６×２５０ｍｍ
移動相：ポンプＡ  アセトニトリル：１０ｍＭリン酸水溶液（ｐＨ２）＝５：９５、ポンプＢ  アセトニトリル：１０ｍＭリン酸水溶液（ｐＨ２）＝３５：６５（体積比）
カラム温度：４０℃
カラム流量：１ｍＬ／ｍｉｎ
試料注入量：２０μＬ
検出波長：２１０ｎｍ
【００６３】
「前駆体残存率（％）」＝「２４時間培養した後の培養物における、前駆体に対応するカラムピークの面積から算出した前駆体残存量（質量）」／「使用した前駆体の量（質量）」×１００
【００６４】
［生菌数測定］
０．９ｍＬの０．９％生理食塩水に培養物（０及び２４時間培養後の培養物）をそれぞれ０．１ｍＬずつ分注した。生菌数測定用の菌懸濁液は１．０×１０-4〜１．０×１０-5に希釈し、その懸濁液をヒツジ血液寒天培地に０．１ｍＬ滴下しコンラージ棒で塗抹した。３５℃で３日以上培養し、コロニーカウントを行った。この結果を以下の表４に記載する。
【００６５】
【表４】
2019054774.tif 000005
【００６６】
表４に示される通り、４０ＨＳと０７ＨＳは、他のコリネバクテリウム属の菌株よりも、前駆体残存率において低い値が得られた。即ち、４０ＨＳと０７ＨＳは高い前駆体分解能を持つ菌株であることが明らかになった。
【００６７】
（実施例３）
以下の手順に従って被検物質のスクリーニングを行った。
【００６８】
［腋臭原因物質前駆体入り培養液の調製］
０．２ｇの酵母エキス（ベクトンディッキンソン社製）、３．０ｇのリン酸二水素カリウム、１．９ｇのリン酸水素二カリウム、０．２ｇの硫酸マグネシウム七水和物、１．４ｇの塩化ナトリウム、１．０ｇの塩化アンモニウム、１５．７ｍｇの塩化マンガン（ＩＩ）四水和物、１．７ｍｇの塩化鉄（ＩＩＩ）六水和物、及び１．３ｍｇの塩化カルシウム二水和物（以上、和光純薬（株）製）に全量１Ｌとなるように精製水を加えて溶解し、さらにＴｗｅｅｎ８０（和光純薬（株）製）を０．０５ｗｔ％となるように加えて培養液を調製した。次に、腋臭原因物質前駆体である３−ヒドロキシ−３−メチルヘキサノイル−グルタミン（以下、単に「前駆体」と称することがある）を最終濃度２ｍＭとなるように培養液に溶解し、滅菌フィルターで濾過滅菌し、腋臭原因物質前駆体入り培養液を調製した。
【００６９】
［菌懸濁液の調製］
２２５ｍＬ遠心管に腋臭原因物質前駆体入り培養液を６ｍＬずつ分注した。次にヒツジ血液寒天培地（平板）を用いて前培養した０７ＨＳと４０ＨＳを白金耳でかきとり、それぞれ前駆体入り培養液に懸濁させた。その後、ＯＤ６２０を測定し、ＯＤを約０．２〜０．３に調整し、菌懸濁液（０７ＨＳ懸濁液と４０ＨＳ懸濁液）を調製した。
【００７０】
［腋臭原因菌の培養］
菌懸濁液１．９ｍＬを分注したセラムチューブを試験原料数用意し、そこに被検物質０．１ｍＬを加えて攪拌し、５体積％被検物質入り菌懸濁液とした。次に菌懸濁液４ｍＬを加えた滅菌試験管に５体積％被検物質入り菌懸濁液１ｍＬを加えよく攪拌し、１体積％被検物質入り菌懸濁液とした。これらの滅菌試験管を３６℃のインキュベーターにセットし２１０ｒｐｍ（往復）で２４時間培養し、被検物質それぞれに対応する培養物を得た。また、被検物質を加えないこと以外は同様の操作を行い、陰性対照の培養物を得た。
【００７１】
つまり、本操作により、３−ヒドロキシ−３−メチルヘキサノイル−グルタミン及び下記の１６９種の被検物質の存在下、０７ＨＳを培養して得られた培養物、３−ヒドロキシ−３−メチルヘキサノイル−グルタミンの存在下、０７ＨＳを培養して得られた培養物（陰性対照の培養物）、３−ヒドロキシ−３−メチルヘキサノイル−グルタミン及び下記の１６９種の被検物質の存在下、４０ＨＳを培養して得られた培養物、３−ヒドロキシ−３−メチルヘキサノイル−グルタミンの存在下、４０ＨＳを培養して得られた培養物（陰性対照の培養物）を得た。なお、以下ではこれらの３４０種の培養物を、単に「培養物」と記載する。
【００７２】
［被検物質］
被検物質は以下の１６９種を用いた。なお、アカブドウ（ブドウ葉）からカミツレ、キナからボタンピ、及びトウガラシチンキは丸善製薬（株）社製であり、キシロビオースは北海道糖業社製であり、その他は一丸ファルコス（株）社製である。
アカブドウ（ブドウ葉）、アシタバ、アセンヤク、甘草、アロエ、イチョウ、イラクサ、インチンコウ（カワラヨモギ）、ウイキョウ、ウーロン茶、ウコン、ウスベニアオイ（ゼニアオイ）、エイジツ、エンメイソウ、オウゴン、オウバク、オノニス、オリーブ、ガイヨウ（ヨモギ）、カミツレ、キシロビオース、キナ、キュウリ、キラヤ、クスノハガシワ、ゲンチアナ、ゲンノショウコ、酵母、コメヌカ、サボンソウ、サルビア、サンシシ（クチナシ）、シイタケ、ジオウ、シソ、シナノキ、シャクヤク、ジユ（ワレモオコウ）、ジュウヤク（ドクダミ）、シラカバ、真珠、スギナ、スターフルーツ、セイヨウキズタ、センキュウ、センブリ、ソウハクヒ、タイソウ、タチジャコウソウ、チンピ、月桃葉、甜茶、テンニンカ、トウキ、トウキンセンカ、トゲナシ（イザヨイバラ）、トルメンチラ、ニンジン、ハス、パセリ、ハマメリス、バラ、ヒノキ、ヒマラヤンラズベリー、ビワ、フキタンポポ、ヘチマ、ベニバナ、ペパーミント、ホップ、マジョラム（マヨナラ）、マチルス、マロニエ、ムクロジ、メリッサ、モモ、ヤグルマギク、ユーカリ、ユキノシタ、ユリ、ヨクイニン、ライム、ラベンダー、緑茶、リンゴ、ルイボス、レイシ、レタス、レモン、ローズヒップ（ノバラ）、ローズマリー、ローヤルゼリー、紫玄米、キョウニン、クマザサ、ケイヒ、紅茶、サンショウ、ショウキョウ、ショウブ、チョウジ、ブッチャーブルーム、冬中夏草、ボタンピ、アーティチョーク、アボガド、アマチャ、アマチャヅル、アルテア、アルニカ、オウレン、オクラ、オドリコソウ、オランダカラシ、オレンジ、海藻（２種）、カッコン、ヒバマタ、カロット、カワラヨモギ、キイチゴ、キウイ、クララ（クジン）、グレープフルーツ、クレマティス、クロレラ、コーヒー、ゴボウ、コンフリー、サイシン、サクラ、シコン、シモツケソウ、スイカズラ、セイヨウオオバコ、セイヨウサンザシ、セイヨウシロヤナギ、セイヨウニワトコ、セイヨウノコギリソウ、セージ、ゼニアオイ、ダイズ、タイム、トウニン、トウヒ、トマト、ニーム、ノバラ、ヒオウギ、ヒメフウロ、ビルベリー、ブクリョウ、ブドウ、プルーン、ボダイジュ、マツ、メマツヨイグサ、レモングラス、ローマカミツレ、ワイルドタイム、エチナシ、カノコソウ、ゴバイシ、トウガシ、ニンニク、ヨモギ、レンゲソウ、トウガラシチンキ
【００７３】
［前駆体残存量分析］
培養物のそれぞれを滅菌フィルターで濾過滅菌した後、８０℃、１５ｍｉｎで加温処理し、氷冷した後、室温に戻し、下記の「分析条件１」にて前駆体残存量を分析した。なお、「前駆体残存量」は下記式に従って、前駆体に対応するピークの面積から算出した。
【００７４】
［分析条件１］
装置：Ｓｈｉｍａｄｚｕ  ＣＬＡＳＳ−ＶＰ
カラム：ＹＭＣ  Ｈｙｄｒｏｓｐｈｅｒ  Ｃ１８  ＨＳ１２Ｓ０５−２５４６ＷＴ，４．６×２５０ｍｍ
移動相：ポンプＡ  アセトニトリル：１０ｍＭリン酸水溶液（ｐＨ２）＝５：９５、ポンプＢ  アセトニトリル：１０ｍＭリン酸水溶液（ｐＨ２）＝３５：６５（体積比）
カラム温度：４０℃
カラム流量：１ｍＬ／ｍｉｎ
試料注入量：２０μＬ
検出波長：２１０ｎｍ
【００７５】
「前駆体残存率（％）」＝「前駆体に対応するカラムピークの面積から算出した前駆体残存量（質量）」／「使用した前駆体の量（質量）」×１００
【００７６】
０７ＨＳ及び４０ＨＳを用いた試験サンプルのうち、少なくとも一方のサンプルの前駆体残存率が１０％以上を示したサンプルは、２４種であった。その中でも前駆体残存率が高かった４種の植物エキスを表５に示す。この様に、オリーブエキス、サルビアエキス、センブリエキス、及びローズマリーエキスが高い前駆体残存率を示したため、これらのエキスが良好な腋臭原因物質産生抑制効果を有することが明らかとなった。
【表５】
2019054774.tif 000006
【手続補正書】
【提出日】平成29年12月15日(2017.12.15)
【手続補正１】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００５５
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００５５】
【表２】
2019054774.tif 000007
【手続補正２】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００５６
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００５６】
【表３】
2019054774.tif 000008