(57)【要約】【課題】ナットウキナーゼを含有し、ナットウキナーゼの血栓溶解作用を高めることができる血栓溶解剤を提供する。【解決手段】ナットウキナーゼおよび香辛料を含む血栓溶解剤である。【選択図】なし【特許請求の範囲】
【請求項１】
ナットウキナーゼおよび香辛料を含むことを特徴とする、血栓溶解剤。
【請求項２】
前記香辛料が、唐辛子、マスタードおよび山椒からなる群から選択される少なくとも１つを含有することを特徴とする、請求項１に記載の血栓溶解剤。
【請求項３】
前記香辛料が、唐辛子およびマスタードのうち少なくとも１つを含有することを特徴とする、請求項１に記載の血栓溶解剤。
【請求項４】
前記ナットウキナーゼの含有量に対する前記香辛料の含有量の質量比が１以上であることを特徴とする、請求項１〜３のいずれか一項に記載の血栓溶解剤。
【請求項５】
香辛料を含み、ナットウキナーゼの血栓溶解作用を促進することを特徴とする、血栓溶解作用促進剤。
【請求項６】
前記香辛料が、唐辛子、マスタードおよび山椒からなる群から選択される少なくとも１つを含有することを特徴とする、請求項５に記載の血栓溶解作用促進剤。
【請求項７】
前記ナットウキナーゼに対する質量比が１以上となる量の前記香辛料を添加することを特徴とする、請求項５又は６に記載の血栓溶解作用促進剤。
【請求項８】
ナットウキナーゼと香辛料とを共存させることにより、ナットウキナーゼの血栓溶解作用を促進することを特徴とする、血栓溶解作用促進方法。
【請求項９】
前記香辛料が、唐辛子、マスタードおよび山椒からなる群から選択される少なくとも１つを含有することを特徴とする、請求項８に記載の血栓溶解作用促進方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、血栓溶解剤、血栓溶解作用促進剤および血栓溶解作用促進方法に関する。
【背景技術】
【０００２】
ナットウキナーゼは、納豆菌（Bacillus subtilis natto）が産生する酵素であり、その構造もよく知られている（例えば、非特許文献１−３参照）。また、ナットウキナーゼは、強力な血栓溶解作用を有することが知られている（例えば、非特許文献４−６参照）。
【０００３】
特許文献１には、納豆粉末とキムチ粉末を混合して成り、粉末、粒体又はペレットの形状をしており、血液の流動性の改善機能を有する血液流動性改善機能食品が記載されている。
【０００４】
特許文献２には、（Ａ）ナットウキナーゼ、（Ｂ）野菜粉砕物、並びに（Ｃ）エイコサペンタエン酸および／又はドコサヘキサエン酸を含有し、血栓溶解剤として使用される経口組成物が記載されている。
【先行技術文献】
【特許文献】
【０００５】
【特許文献１】特開２００７−３０６８２４号公報
【特許文献２】特開２０１６−３０６８２４号公報
【非特許文献】
【０００６】
【非特許文献１】H. Sumi, H. Hamada, H. Tsushima, H. Mihara, H. Muraki, A novel fibrinolytic enzyme （nattokinase） in the vegetable cheese Natto; a typical and popular soybean in food of the Japanese diet, Experientia, 43, 1110-1111, 1987
【非特許文献２】Y. Yanagisawa, T. Chatake, K. Chiba, S. Naito, T. Ohsugi, H. Sumi, I. Yasuda and Y. Morimoto, Purification, crystallization and preliminary X-ray diffraction experiment of nattokinase from Bacillus subtilis natto, Acta. Cryst. F66, 1670-1673, 2010
【非特許文献３】Y. Yanagisawa, T. Chatake, S.Naito, T.Ohsugi, C.Yatagai, H. Sumi, A. Kawaguchi, K. Chiba-Kamosida, M. Ogawa, T. Adachi, and Y. Morimoto, X-ray structure determination and deuteration of nattokinase, J Synchrotron Radiat. 20（Pt 6）: 875-879 （2013）
【非特許文献４】H. Sumi, H. Hamada, H. Nakanishi and H. Hiratani, Enhancement of fibrinolytic activity in plasma by oral administration of nattokinase, Acta. Haematol., 84, 139-143, 1990
【非特許文献５】須見洋行，第4章  納豆の食品機能性に関する研究  1．ナットウキナーゼ，第11章  納豆を利用した新商品開発  3．ナットウキナーゼ製剤，納豆の化学，p.53-57，p.244-245，建帛社，東京，2008
【非特許文献６】須見洋行，大豆と日本人の健康，第1章  納豆，p.66-79，幸書房，東京，2014
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００７】
本発明は、ナットウキナーゼを含有し、ナットウキナーゼの血栓溶解作用を高めることができる血栓溶解剤を提供することを目的とする。
【課題を解決するための手段】
【０００８】
本発明の血栓溶解剤は、ナットウキナーゼおよび香辛料を含む。
【０００９】
好適な態様では、香辛料が、唐辛子、マスタードおよび山椒からなる群から選択される少なくとも１つを含有し、更に好適な態様では、香辛料が、唐辛子およびマスタードのうち少なくとも１つを含有する。他の好適な態様では、ナットウキナーゼの含有量に対する香辛料の含有量の質量比が１以上である。
【００１０】
本発明の血栓溶解作用促進剤は、香辛料を含み、ナットウキナーゼの血栓溶解作用を促進する。
【００１１】
好適な態様では、香辛料が、唐辛子、マスタードおよび山椒からなる群から選択される少なくとも１つを含有する。他の好適な態様では、ナットウキナーゼの含有量に対する香辛料の含有量の質量比が１以上である。
【００１２】
本発明の血栓溶解作用促進方法は、ナットウキナーゼと香辛料とを共存させることにより、ナットウキナーゼの血栓溶解作用を促進する。
【００１３】
好適な態様では、香辛料が、唐辛子、マスタードおよび山椒からなる群から選択される少なくとも１つを含有する。
【発明の効果】
【００１４】
本発明の血栓溶解剤によれば、ナットウキナーゼの血栓溶解作用を高めることができる。
【発明を実施するための形態】
【００１５】
本発明の実施の形態について以下説明する。本実施形態は本発明を実施する一例であって、本発明は本実施形態に限定されるものではない。
【００１６】
＜血栓溶解剤＞
本実施形態に係る血栓溶解剤は、ナットウキナーゼおよび香辛料を含むことを特徴とする。
【００１７】
〔ナットウキナーゼ〕
ナットウキナーゼは、納豆菌（学名：Bacillus subtilis natto）が大豆から産生する血栓溶解（線溶）酵素であり、２７５の残基が一本鎖でつながったポリペプチドからなる分子構造を有する（分子量２７，７２４、ｐＩ８．７）。ナットウキナーゼは、血栓の主成分であるフィブリンを溶解するフィブリン溶解作用のほか、血栓溶解酵素であるウロキナーゼの前駆体プロウロキナーゼの活性化作用、血栓溶解酵素プラスミンを産生する組織プラスミノーゲンアクチベーター（ｔ−ＰＡ）の増大作用、血栓溶解阻害物質ＰＡＩ−１の分解作用、オイグロブリン溶解時間の短縮作用等の血栓溶解作用を有することが知られている。
【００１８】
本実施形態で使用されるナットウキナーゼの入手方法は、特に制限されず、例えば、納豆菌の培養によって生産したナットウキナーゼを用いてもよく、また、市販のナットウキナーゼ含有製剤を用いてもよい。本実施形態で使用されるナットウキナーゼとしては、ナットウキナーゼを利用可能である限り、他の成分との混合物であってもよく、例えば、ナットウキナーゼを含有する納豆、および、納豆抽出物等を、本実施形態に係る血栓溶解剤等に用いてもよい。
【００１９】
納豆菌を培養してナットウキナーゼを生産する方法としては、特に制限されず、公知の方法で納豆菌を培養すればよい。納豆菌の培養に用いる培地としては、例えば、乾燥ブイヨン培地、ハイポリペプトンＳ培地等が挙げられる。培地中の主原料に脱脂大豆を使用していることや納豆菌が繁殖しやすいこと等から、ハイポリペプトンＳ培地が好ましい。
【００２０】
培養温度は、例えば、３２℃以上５０℃以下の範囲であり、３７℃以上４５℃以下の範囲が好ましく、３７℃以上４２℃以下の範囲がより好ましい。培養温度が低すぎると、納豆菌の増殖率が低下してナットウキナーゼの生産性に影響を及ぼす場合があり、培養温度が高すぎると、ナットウキナーゼ活性が低下する場合がある。培地のｐＨは、ナットウキナーゼの生産量の観点から、例えば、５．５以上９．５以下の範囲であり、好ましくは、６．５以上８．０以下の範囲である。
【００２１】
培養時間は、例えば、７２時間以上１４４時間以下の範囲であり、９６時間以上１２４時間以下の範囲が好ましい。培養時間が短すぎると、納豆菌の生育が不足する場合があり、培養時間が長すぎると、自己消化によってナットウキナーゼ活性が低下する場合がある。培養は、例えば、振とう培養、静置培養等で行えばよい。次いで、納豆菌の培養により産生したナットウキナーゼを、疎水クロマトグラフィ、陰イオンクロマトグラフィ、または、ゲル濾過クロマトグラフィ等により、精製してもよい。
【００２２】
本実施形態で使用されるナットウキナーゼは、血栓溶解作用を保持している限り、その原料の形態や物性等については特に制限されない。本実施形態では、例えば、ナットウキナーゼの精製物、納豆菌の培養物の粗精製物、当該精製物又は粗精製物に賦形剤および必要に応じて添加剤等を添加してなる製剤等を使用してもよい。
【００２３】
本実施形態で使用される市販のナットウキナーゼ含有製剤としては、例えば、オルガノフードテック株式会社製「ナットウキナーゼＨＴＮＫ−Ｊ」等が挙げられるが、これに限定されない。
【００２４】
〔香辛料〕
本実施形態に係る血栓溶解剤は、ナットウキナーゼおよび香辛料を含有することを特徴とする。本実施形態に係る血栓溶解剤は、香辛料をナットウキナーゼと共存させることにより、香辛料が存在しない場合に比べて、ナットウキナーゼの血栓溶解作用を高めることができる。
【００２５】
本発明者らは、香辛料をナットウキナーゼと共存させることにより、ナットウキナーゼのフィブリン溶解による血栓溶解作用が促進すること、更には、異なる有効成分（辛味成分）を有する香辛料を用いた場合であっても、ナットウキナーゼの血栓溶解作用が促進されることを見出し、本発明を完成させた。香辛料をナットウキナーゼと共存させることにより、ナットウキナーゼのフィブリン溶解による血栓溶解作用が促進する機序等は明らかではないが、本実施形態に係る血栓溶解剤は、例えば、このような増強された血栓溶解作用に基づき、血栓症の予防又は治療の目的で使用することができる。
【００２６】
本実施形態で使用される香辛料としては、特に限定されないが、例えば、唐辛子、マスタード、山椒、わさび、胡椒、豆板醤、カレー粉、ガラムマサラ、キムチ風調味料、七味唐辛子、和がらし、ターメリック、シナモン、クミン、カルダモン、コリアンダー等が挙げられる。
【００２７】
本実施形態で使用する香辛料は、単一の素材から得られる香辛料を単独で使用してもよく、また、異なる素材から得られる２種以上の香辛料を組み合わせてなる混合物であってもよい。
【００２８】
本実施形態に係る血栓溶解剤に使用される香辛料のうち、単一の素材から得られる香辛料としては、例えば、唐辛子、マスタード、山椒、わさび、胡椒、和がらし、ターメリック、シナモン、クミン、カルダモン、コリアンダー等が挙げられるが、これらに限定されない。
【００２９】
唐辛子は、ナス科トウガラシ属（Capsicum）に属する植物の果実等から得られる辛味を有する香辛料であり、主にカプサイシンに由来する辛味成分を有する。果実が唐辛子の原料となるトウガラシ属の植物としては、例えば、トウガラシ種（Capsicum annuum L.）、シネンセ種（Capsicum chinense）、キダチトウガラシ種（Capsicum frutescens L.）等が挙げられるが、これらに限定されない。トウガラシ種に含まれる品種としては、例えば、トウガラシ（Acuminoum）、鷹の爪、ヤラピノ（ハラペーニョ）等が挙げられる。本実施形態では、果実が熟成する前に採取されたいわゆる「青唐辛子」を用いてもよく、果実が熟成した後に採取されたいわゆる「赤唐辛子（レッドペッパー）」を用いてもよい。
【００３０】
マスタードは、カラシナ（イエローマスタード、ブラウンマスタード）（Brassica juncea）およびシロガラシ（ホワイトマスタード）（Sinapis alba）等のアブラナ科（Cruciferae）に属する植物の種子（マスタードシード）を原料とする香辛料である。マスタードは、一般的に、マスタードシード又はその粉末を、水、酢、糖類又は小麦粉等と混ぜて、ペースト状のイエローマスタード又は粒マスタード等として用いられる。
【００３１】
和がらし（オリエンタルマスタード）は、マスタードと同じくカラシナ（セイヨウカラシナともいう）の種子を原料とする香辛料であり、通常、カラシナの種子を粉末にした「粉からし」および水のみを含むペースト状の香辛料である。
【００３２】
山椒は、サンショウ（Zanthoxylum piperitum）、カホクザンショウ（Zanthoxylum bungeanum）等のミカン科サンショウ属（Zanthoxylum）に属する植物の果実又は果皮等から得られる香辛料であり、辛味成分としてサンショールを含有する。また、香辛料としての山椒には、例えば、熟す前のサンショウの果実である実山椒、熟したサンショウの果皮の乾燥粉末である粉山椒等が含まれる。
【００３３】
わさびは、例えば、アブラナ科に属するワサビ（Eutrema japonicum Koidz）およびホースラディッシュ（Armoracia rusticana）等から得られる香辛料である。本実施形態では、わさびは、例えば、ワサビの地下茎をすりおろして得られるいわゆる「本わさび」、および、ホースラディッシュの根をすりおろして得られるいわゆる「西洋わさび」を含む。
【００３４】
胡椒は、コショウ科コショウ属の植物（Piper nigrum）の果実を加工した香辛料であり、辛味成分としてピペリンを含有する。黒胡椒（ブラックペッパー）は未熟果の乾燥物であり、白胡椒（ホワイトペッパー）は成熟果の果皮を除いて乾燥した乾燥物である。胡椒は、乾燥した果実をそのまま又は粉末にして用いられる。
【００３５】
また、本実施形態に係る血栓溶解剤は、例えば、１種以上の香辛料を、水、賦形剤、調味料および他の添加剤等と混合して得られる香辛料組成物を含有してもよい。香辛料組成物は、例えば、粉末状、ペースト状、液状であり、保存安定性および製造時の容易性の観点から、粉末状であることが好ましい。
【００３６】
本実施形態に使用する香辛料の形態は、特に限定されず、例えば、上記の原料植物の果実、果皮、種子、茎および根等の乾燥物、当該乾燥物の粉末等の公知の形態が挙げられる。また、香辛料は、公知の処理が施されたものであってもよく、例えば、原料植物から得られた乾燥物又は粉末等を水性溶媒又は有機溶媒等を用いた公知の抽出処理により得られる抽出物、抽出物を濃縮した濃縮物（エキス）、抽出物又は濃縮物を乾燥した乾燥物（乾燥エキス）等であってもよい。
【００３７】
抽出処理は、香辛料の種類および溶媒の種類等に応じた公知の方法を行えばよい。例えば、粉末状の香辛料を溶媒に添加し、室温又は加熱条件下、所定時間（例えば３０分間から１２時間程度）浸漬することにより抽出した後、混合物の上清を採取するか、又は濾過することにより、香辛料の抽出物が得られる。抽出処理に使用する溶媒としては、例えば、水、並びに、アルコール、アセトン、ヘキサン、酢酸エチル等の極性有機溶媒が挙げられ、人体への安全性と取扱性の観点から水、エタノール又はこれらの混合物が好ましい。抽出の際の香辛料に対する溶媒の割合等は特に制限されず、例えば、香辛料に対して質量比で３倍〜５０倍程度の溶媒を用ればよい。
【００３８】
本実施形態では、ナットウキナーゼの血栓溶解作用を高める効果が特に優れるため、香辛料が、唐辛子、マスタードおよび山椒からなる群から選択される少なくとも１つであることが好ましく、唐辛子およびマスタードのうち少なくとも１つであることがより好ましい。
【００３９】
本実施形態に係る血栓溶解剤に含まれる香辛料の含有量は、特に制限されないが、ナットウキナーゼの血栓溶解作用を促進する効果がより一層向上することから、ナットウキナーゼに対する香辛料の総量（乾燥重量換算）の質量比が、１以上であることが好ましく、１．５以上であることがより好ましく、２以上であることが更に好ましい。香辛料の添加量の上限は、ナットウキナーゼの血栓溶解作用を阻害しない限り、特に制限されないが、血栓溶解剤の総量抑制、香辛料の多量摂取回避等の観点から、例えば、５００以下であることが好ましく、２００以下であることがより好ましい。
【００４０】
本実施形態に係る血栓溶解剤における香辛料の含有量は、血栓溶解剤の剤型、用途、服用量、ナットウキナーゼに対する香辛料の添加量等に応じて適宜設定すればよい。例えば、香辛料の総量（乾燥重量換算）が、血栓溶解剤の総量に対して、０．１質量％以上９９質量％以下であればよく、１０質量％以上９５質量％以下であることが好ましく、４０質量％以上９５質量％以下であることが好ましい。
【００４１】
〔添加剤〕
本実施形態に係る血栓溶解剤は、必要に応じて、ナットウキナーゼおよび香辛料以外の添加剤等を含有していてもよい。添加剤としては、食品や医薬品に使用可能であり、ナットウキナーゼの血栓溶解作用を阻害しないものであれば特に制限されない。添加剤としては、例えば、水、賦形剤、界面活性剤、ｐＨ調整剤、緩衝剤、酸化防止剤、紫外線防止剤、防腐剤、香料、増粘剤、色素、キレート剤、酸味料、ビタミン類、調味料、機能性物質等が挙げられる。これらの添加成分は、１種単独で使用してもよく、また２種以上を組み合わせて使用してもよい。また、添加剤の含有量は、使用する添加剤の種類や用途等に応じて適宜設定すればよい。
【００４２】
本実施形態に係る血栓溶解剤は、ナットウキナーゼ以外に、血栓溶解作用、血小板凝集抑制作用、抗凝固作用等を有する抗血栓剤を含有していてもよく、また、これら抗血栓剤を含有していなくてもよい。
【００４３】
〔血栓溶解剤の形態〕
本実施形態に係る血栓溶解剤が取り得る形態は、特に制限されず、例えば、単独で製剤化してもよく、単独で調味料として使用してもよく、予め飲食品に配合してもよい。
【００４４】
本実施形態に係る血栓溶解剤を単独で製剤化する場合、ナットウキナーゼおよび香辛料を、そのまま又は他の添加成分と組み合わせて所望の剤形に調製すればよい。剤形としては、薬剤又はサプリメント等の製剤において公知の形態であればよく、例えば、錠剤、顆粒、粉剤、カプセル剤、液剤、ゼリー剤、シロップ剤等が挙げられる。
【００４５】
本実施形態に係る血栓溶解剤は香辛料を含有することから、そのまま飲食品の調味料として使用してもよい。例えば、従来の調味料と同様にして、粉末状、ペースト状、液状等の形態を有する本実施形態の血栓溶解剤を１回量毎に分包し、食べる直前に開封して、薬味として飲食品にふりかけてもよい。本実施形態に係る血栓溶解剤を単独で調味料として使用する場合の製造方法および使用方法は、含まれる香辛料において従来行われている方法であればよい。
【００４６】
また、本実施形態に係る血栓溶解剤は、食品、飲料、調味料組成物等の各種飲食品に予め配合してもよい。本実施形態に係る血栓溶解剤は、飲食品に配合する場合、ナットウキナーゼおよび香辛料を、そのまま又は他の食品素材や添加成分と組み合わせて所望の形態に調製すればよい。
【００４７】
食品としては、例えば、ポテトチップスおよびクラッカー等のスナック製品、クッキー、ビスケットおよびパン等のベーカリー製品、納豆、漬物およびキムチ等の発酵食品、シチュー、カレー、スープおよび麺類等の調理済み又は半調理済みの食品、それらのチルドおよび冷凍食品、カップラーメン等のインスタント食品等が挙げられる。飲料としては、例えば、栄養ドリンク、炭酸飲料、乳酸飲料、コーヒー、ココア、紅茶、烏龍茶、緑茶および酒類等が挙げられる。調味料組成物としては、例えば、ドレッシング、たれ、めんつゆ、だしつゆ、味噌、醤油、ソース、ブイヨン、ふりかけおよびマヨネーズ等が挙げられる。なお、飲食品には、一般の飲食品の他、特定保健用食品、栄養補助食品、機能性食品、病者用食品等も含まれる。
【００４８】
本実施形態に係る血栓溶解剤を経口摂取する場合の服用量は、特に制限されないが、例えば、１日当たりのナットウキナーゼの摂取量が５００ＦＵ以上２０００００ＦＵ以下となる量であり、１日当たりのナットウキナーゼの摂取量が１０００ＦＵ以上４０００ＦＵ以下となる量が好ましい。なお、「ＦＵ」とは、フィブリン分解ユニットの略であり、ナットウキナーゼの活性を示す単位である。フィブリン分解ユニットは、公知のフィブリン分解法で測定される。
【００４９】
＜血栓溶解作用促進剤／血栓溶解作用促進方法＞
本実施形態に係るナットウキナーゼの血栓溶解作用を促進する促進剤（以下、単に「促進剤」ともいう）は、香辛料を含むことを特徴とする。また、本実施形態に係るナットウキナーゼの血栓溶解作用を促進する方法（以下、単に「促進方法」ともいう）は、ナットウキナーゼと香辛料とを共存させることを特徴とする。
【００５０】
本実施形態に係る促進剤、および、本実施形態に係る促進方法に用いられる香辛料としては、前述の血栓溶解剤に含まれる香辛料を使用すればよい。また、本実施形態に係る促進剤、および、本実施形態に係る促進方法に用いられる香辛料の説明、例えば、具体的な組成、ナットウキナーゼに対する使用量（添加量）等についても、前述の血栓溶解剤について説明した通りである。
【００５１】
なお、本実施形態に係る促進剤、および、本実施形態に係る促進方法においては、ナットウキナーゼが血栓溶解作用を発揮する際に香辛料がナットウキナーゼと共存していればよい。そのため、ナットウキナーゼおよび香辛料の両者を含有する製剤又は飲食品等の形態を有することが好ましいが、ナットウキナーゼと香辛料とを共存させ得る限り、両者を個別に添加してもよい。
【実施例１】
【００５２】
以下、実施例により本発明をより具体的に詳細に説明するが、本発明は、以下の実施例に限定されるものではない。
【００５３】
＜実施例１＞
ナットウキナーゼを含む各試料の血栓溶解活性を、フィブリン平板法（例えば、非特許文献１参照）により測定した。ホウ酸緩衝液（０．１７Ｍホウ酸−生食緩衝液：ｐＨ７．８）１０ｍＬにフィブリノーゲンを０．０５ｍｇ加え、ダマが残らないように匙で攪拌した。得られたフィブリノーゲン含有液をガーゼで濾過し、濾液をシャーレに移した。シャーレに更にトロンビン（５０Ｕ／ｍＬ）０．０５ｍＬを加え、シャーレ内の液が固まるまで室温で３０分ほど静置し、フィブリン平板を得た。
【００５４】
表１に記載の各成分を含有する各試料３０μＬをフィブリン平板に滴下し、３７℃で４時間静置した。４時間後にフィブリン平板に生じた溶解領域の長径および短径を測定し、長径と短径との積をフィブリン平板の溶解面積（ｍｍ２）として算出した。フィブリン平板法では、算出された溶解面積が広いほど、その試料の血栓溶解活性が高いと判断される。
【００５５】
本明細書の各実施例では、ナットウキナーゼとして、オルガノフードテック株式会社製
「ナットウキナーゼＨＴＮＫ−Ｊ」を使用した。また、実施例１〜３では、豆板醤パウダーとして日研フード株式会社製「豆板醤パウダー」を、レッドペッパーとしてヤスマ株式会社製「レッドペッパーパウダーＣＰ」を、それぞれ使用した。表１に記載のコントロール１−１、１−２および１−３は、表１に記載の濃度でナットウキナーゼを純水に溶解した溶液である。参考例１−１および１−２は、豆板醤パウダーおよびレッドペッパーのそれぞれを、表１に記載の含有量となるように純水に加えた混合液の上清からなる香辛料液である。試料１−１および１−２は、ナットウキナーゼおよび各香辛料が表１に記載の含有量となるように上記ナットウキナーゼ溶液および上記の各香辛料液の濃度を調整して、両者を混合した混合液である。
【００５６】
なお、適正な比較を行うため、実施例１のフィブリン平板法による試験は、表１に記載の各試料について、同じ材料から同時に作製されたフィブリン平板を用いて同時に行った。後述の実施例２〜５についても同様である。
【００５７】
【表１】
2019059705.tif 000002
【００５８】
表１に記載の通り、ナットウキナーゼ溶液に豆板醤パウダーから得られる香辛料液を添加して得られた試料１−１は、ナットウキナーゼの含有量が同じで香辛料を含まないコントロール１−２と比較して溶解面積が１．６倍に増加した。また、ナットウキナーゼ溶液にレッドペッパーから得られる香辛料液を添加して得られた試料１−２は、同じくコントロール１−１と比較して溶解面積が１．３倍に増加した。以上の結果から、香辛料として豆板醤パウダー又はレッドペッパーを共存させることにより、ナットウキナーゼの血栓溶解活性を向上できることがわかった。なお、ナットウキナーゼを含まず、豆板醤パウダー又はレッドペッパーを単独で用いた参考例１−１および１−２では、フィブリン平板におけるフィブリンの溶解が目視で確認されなかった。
【００５９】
＜実施例２＞
表２に記載の各成分を含有する各試料を用いて、実施例１と同様にしてフィブリン平板試験を行った。実施例２で使用したキムチ風調味料とは、豆板醤パウダー、レッドペッパーパウダーおよびマルトデキストリンを、４：１０：１の質量比で混合した混合物である。また、比較例２−１〜２−３では、香辛料液に換えて塩化ナトリウム（ＮａＣｌ）水溶液を用いて、ナットウキナーゼおよび塩化ナトリウムが表２に記載の含有量となる試料を調製し、フィブリン平板法の試験を行った。
【００６０】
【表２】
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【００６１】
表２に記載の通り、豆板醤パウダーから得られる香辛料液を使用した試料２−１〜２−３では、ナットウキナーゼの含有量が同じで香辛料を含まないコントロール２−１と比較して溶解面積が１．１倍〜１．６倍に増加した。また、レッドペッパーから得られる香辛料液を使用した試料２−４〜２−６では、同じくコントロール２−１と比較して溶解面積が１．２倍〜１．５倍に増加した。さらに、キムチ風調味料から得られる香辛料液を使用した試料２−８では、同じくコントロール２−１と比較して溶解面積が１．１倍に増加した。試料２−１〜２−３の比較および試料２−４〜２−６の比較から明らかな通り、香辛料液における香辛料の濃度が増加するにつれて、溶解面積が顕著に増加することがわかった。その一方、香辛料液に換えて塩化ナトリウム水溶液を用いた比較例２−１〜２−３では、ナットウキナーゼの血栓溶解活性を向上する効果は見られなかった。以上の結果から、香辛料として豆板醤パウダーおよびレッドペッパーの少なくとも１つを共存させることにより、ナットウキナーゼの血栓溶解活性を向上できること、並びに、その向上効果は、香辛料の添加量を増やすことにより更に増強できることがわかった。
【００６２】
＜実施例３＞
表３に記載の各成分を含有する各試料を用いて、実施例１と同様にしてフィブリン平板試験を行った。実施例３では、青唐辛子としてヤスマ株式会社製「青唐辛子パウダーＣＰ」を使用した。
【００６３】
【表３】
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【００６４】
表３に記載の通り、豆板醤パウダーから得られる香辛料液を使用した試料３−１および３−２では、ナットウキナーゼの含有量が同じで香辛料を含まないコントロール３−１と比較して溶解面積が１．８倍および２．０倍にそれぞれ増加した。また、レッドペッパーから得られる香辛料液を使用した試料３−３および３−４では、同じくコントロール３−１と比較して溶解面積が２．１倍および２．７倍にそれぞれ増加した。さらに、青唐辛子から得られる香辛料液を使用した試料３−５および３−６では、同じくコントロール３−１と比較して溶解面積が１．４倍および１．７倍にそれぞれ増加した。試料３−１〜３−４の結果から明らかな通り、ナットウキナーゼに対する香辛料の含有量比率が実施例２よりも更に高い試料においても、香辛料濃度の増加に従い、溶解面積が顕著に増加する傾向を有することがわかった。また、香辛料として青唐辛子を使用した場合においてもナットウキナーゼの血栓溶解活性が向上され、その向上効果は、香辛料の添加量の増加に従って更に増強されることがわかった。
【００６５】
＜実施例４＞
表４に記載の各成分を含有する各試料を用いて、実施例１と同様にしてフィブリン平板試験を行った。実施例４および実施例５では、ヤラピノペッパーとしてヤスマ株式会社製「ヤラピノペッパーパウダーＣＰ」を、マスタードシードとしてヤスマ株式会社製「マスタードパウダー」を、カレーパウダーとしてヤスマ株式会社製「カレーパウダーＮｏ．２００  ＮＳ」を、ガラムマサラとしてヤスマ株式会社製「ガラムマサラＨ  ＣＰ」を、山椒としてヤスマ株式会社製「和山椒パウダーＣＰ」を、粉末唐辛子として有限会社ワイファーム製「辛富士（登録商標）（粉末唐辛子）」を、それぞれ使用した。
【００６６】
【表４】
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【００６７】
表４に記載の通り、ヤラピノペッパーから得られる香辛料液を使用した試料４−１および４−２では、ナットウキナーゼの含有量が同じで香辛料を含まないコントロール４−１と比較して溶解面積が１．２倍および１．８倍にそれぞれ増加した。同様に、コントロール４−１と比較して、マスタードシードから得られる香辛料液を使用した試料４−３および４−４では溶解面積が１．２倍および１．７倍に、カレーパウダーから得られる香辛料液を使用した試料４−５〜４−７では溶解面積が１．１倍〜１．８倍に、ガラムマサラから得られる香辛料液を使用した試料４−８および４−９では溶解面積が１．１倍および１．２倍に、山椒から得られる香辛料液を使用した試料４−１０および４−１１では溶解面積が１．１倍および１．３倍に、粉末唐辛子から得られる香辛料液を使用した試料４−１２〜４−１４では溶解面積が１．５倍〜２．５倍に、それぞれ増加した。以上の通り、香辛料としてヤラピノペッパー、マスタードシード、カレーパウダー、ガラムマサラ、山椒、および、粉末唐辛子を使用した場合においても、ナットウキナーゼの血栓溶解活性が向上され、その向上効果は、香辛料の添加量の増加に従って更に増強されることがわかった。
【００６８】
＜実施例５＞
実施例５では、実施例４で用いた各香辛料を単独で用いた場合の血栓溶解活性を確認するため、表５に記載の各成分を含有する各試料を用いて、実施例１と同様にしてフィブリン平板試験を行った。
【００６９】
【表５】
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【００７０】
表５に記載の通り、ナットウキナーゼを含まず、各香辛料を単独で用いた参考例５−１〜５−６では、フィブリン平板におけるフィブリンの溶解が目視で確認されなかった。
【００７１】
実施例１〜５の結果から明らかな通り、ナットウキナーゼおよび香辛料を含有する本実施形態に係る血栓溶解剤では、香辛料とナットウキナーゼとが共存することにより、香辛料が存在しない場合に比べて、ナットウキナーゼの血栓溶解作用が格段に向上した。また、実施例１および５の結果から明らかな通り、香辛料を単独で使用した場合は、フィブリン平板の溶解は観察されなかった。このように、香辛料単独では血栓溶解活性を有さないにもかかわらず、香辛料をナットウキナーゼと共存させると、ナットウキナーゼの血栓溶解作用を格段に向上させる効果が発揮されることは、本発明者らによって初めて見出されたものであり、従前の知見からは到底予期できない効果であるといえる。