(57)【要約】【課題】抗菌および／または創傷治癒等の活性が高い剤を提供する。【解決手段】オゾンジェルおよびキチンナノファイバーまたは表面キトサン化キチンナノファイバーを含む抗菌剤および／または創傷治癒剤。【選択図】なし【特許請求の範囲】
【請求項１】
オゾンジェルおよびキチンナノファイバーまたは表面キトサン化キチンナノファイバーを含む抗菌剤および／または創傷治癒剤。
【請求項２】
キチンナノファイバーまたは表面キトサン化キチンナノファイバーの幅が２ｎｍ〜２０ｎｍである請求項１記載の剤。
【請求項３】
キチンナノファイバーまたは表面キトサン化キチンナノファイバーのアスペクト比が１００以上である請求項１または２に記載の剤。
【請求項４】
キチンナノファイバーまたは表面キトサン化キチンナノファイバーの結晶状態が伸びきり鎖微結晶である請求項１〜３のいずれか１項記載の剤。
【請求項５】
医薬品である請求項１〜４のいずれか１項記載の剤。
【請求項６】
医薬部外品である請求項１〜４のいずれか１項記載の剤。
【請求項７】
化粧品である請求項１〜４のいずれか１項記載の剤。
【請求項８】
オゾンジェルおよびキチンナノファイバーまたは表面キトサン化キチンナノファイバーを混合することを特徴とする、抗菌剤および／または創傷治癒剤の製造方法。
【請求項９】
キチンナノファイバーまたは表面キトサン化キチンナノファイバーが、脱水された分散媒に分散されている、請求項８記載の方法。
【請求項１０】
分散媒が、グリセリン、プロピレングリコール、ブチレングリコール、ポリエチレングリコール、ポリビニルアルコール、ポリビニルピロリドン、Ｎ−メチルピロリドン、Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド、Ｎ，Ｎ−ジメチルアセトアミド、ジメチルスルホキシドからなる群より選択される１種またはそれ以上のものである、請求項９記載の方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、新規な抗菌剤および／または創傷治癒剤に関する。詳細には、本発明は、オゾン溶存グリセリン溶液（以下、「オゾンジェル」という）およびキチンナノファイバーまたは表面キトサン化キチンナノファイバーを含む抗菌剤および／または創傷治癒剤に関する。
【背景技術】
【０００２】
既存の創傷治癒剤は感染を排除することが困難である。また抗生物質を用いる抗菌剤は耐性菌の出現の危険性がある。そのため抗生物質の使用削減が必要とされている。
【０００３】
オゾンは強力な酸化作用を有し、真菌、細菌を問わず抗菌および殺菌を目的として使用されることが多い。特許文献１および２には、オゾンジェルを用いた化粧水や美容液および創傷部への治療薬ならびにそれらの製法が記載されている。しかし、オゾンジェルは、グリセリンという高粘度液体をベースにしているため高い保湿力を持つ一方、満足な使用感が得られない場合もあり、スプレーなどには不向きである。
【０００４】
キチンナノファイバーおよび表面キトサン化キチンナノファイバーは分散性が良く、創傷治癒や化粧品等にも用いることができる（特許文献３）。しかし、キチンナノファイバーおよび表面キトサン化キチンナノファイバーに配合できる成分が限られ、処方レパートリーが少ない。また、キチンナノファイバーおよび表面キトサン化キチンナノファイバーを長期保存するには防腐剤が必要である。また、使用した表面が乾燥しすぎてしまう課題があった。
【先行技術文献】
【特許文献】
【０００５】
【特許文献１】日本国特許第４６７７１９２号公報
【特許文献２】日本国特許第５２２２３４４号公報
【特許文献３】特開２０１６−１１７６７９号公報
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００６】
上記オゾンジェルの問題点およびキチンナノファイバーおよび表面キトサン化キチンナノファイバーの問題点の両方を解決し、しかも優れた抗菌および／または創傷治癒活性を有する医薬品、医薬部外品および化粧品等を得る必要があった。
【課題を解決するための手段】
【０００７】
本発明者らは、上記課題を解決するために鋭意研究を行った。オゾンは強力な酸化能を有しているため、共存している物質を酸化・分解することが知られている。オゾンがキチンや表面キトサン化キチンなどの物質と共存する場合においても、これらの物質がオゾンにより分解が促進されると考えられた。しかし、驚くべきことに、キチンおよび表面キトサン化キチンは、オゾンにより分解が促進されなかった。しかも、オゾン、グリセリンおよびキチンナノファイバーまたは表面キトサン化キチンナノファイバーを混合した場合に各成分がよくなじみ、しかも各成分の分解が抑制されるという知見も得た。さらに、オゾンジェルおよびキチンナノファイバーまたは表面キトサン化キチンナノファイバーを含む剤は、優れた抗菌および／または創傷治癒活性を有し、長期保存後でもその効果が持続することがわかった。また、関節など可動部にかかる創部においても、グリセリンを含む本剤は適度な柔軟性を示すため、有効性を発揮しやすい利点がある。本発明者らは、かかる知見に基づいて、本発明を完成した。
【０００８】
すなわち、本発明は以下のものを提供する：
（１）オゾンジェルおよびキチンナノファイバーまたは表面キトサン化キチンナノファイバーを含む抗菌剤および／または創傷治癒剤；
（２）キチンナノファイバーまたは表面キトサン化キチンナノファイバーの幅が２ｎｍ〜２０ｎｍである（１）記載の剤；
（３）キチンナノファイバーまたは表面キトサン化キチンナノファイバーのアスペクト比が１００以上である（１）または（２）記載の剤；
（４）キチンナノファイバーまたは表面キトサン化キチンナノファイバーの結晶状態が伸びきり鎖微結晶である（１）〜（３）のいずれか記載の剤；
（５）医薬品である（１）〜（４）のいずれか記載の剤；
（６）医薬部外品である（１）〜（４）のいずれか記載の剤；
（７）化粧品である（１）〜（４）のいずれか記載の剤。
（８）オゾンジェルおよびキチンナノファイバーまたは表面キトサン化キチンナノファイバーを混合することを特徴とする、抗菌剤および／または創傷治癒剤の製造方法。
（９）キチンナノファイバーまたは表面キトサン化キチンナノファイバーが、脱水された分散媒に分散されている、（８）記載の方法。
（１０）分散媒が、グリセリン、プロピレングリコール、ブチレングリコール、ポリエチレングリコール、ポリビニルアルコール、ポリビニルピロリドン、Ｎ−メチルピロリドン、Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド、Ｎ，Ｎ−ジメチルアセトアミド、ジメチルスルホキシド、からなる群より選択される１種またはそれ以上のものである、（９）記載の方法。
【発明の効果】
【０００９】
本発明によれば、オゾンジェルのもつ抗菌性と、キチンナノファイバーおよび表面キトサン化キチンナノファイバーの持つ創傷治癒促進効果、皮膚バリア機能改善効果と高いスプレー分散性による使用感や使い勝手の向上を兼ね備えた抗菌および／また創傷治癒剤が提供される。本発明の剤は、スプレーをはじめとする多くの種類の剤形に処方することができる。本発明の剤は、アトピー性皮膚炎などの皮膚疾患、創傷治癒、口腔ケア、頭皮ケアなどに有効である。本発明の剤は、食品添加物に認められている成分のみで構成することができ、高齢者や新生児に対しても優しいケアを提供することができる。また、本発明の剤を使用することにより、抗生物質、防腐剤またはステロイド剤の使用を低減またはなくすことができる。抗生物質の使用を低減または使用しないことにより、耐性菌が出現する心配を低減またはなくすことができる。防腐剤の使用を低減または使用しないことにより、本発明の剤の安全性を高めることができる。ステロイドの使用を低減または使用しないことにより、その副作用を低減またはなくすことができる。さらに、経時や加熱に伴う黄変が抑制された本発明の剤の製造方法も提供される。
【図面の簡単な説明】
【００１０】
【図１】図１は、キチンナノファイバーのみの抗菌効果を示すグラフである。黒三角はEscherichia coliの菌数、黒四角はPseudomonas aeruginosaの菌数、黒丸はCandida albicansの菌数を示す。
【図２】図２は、１％のオゾンジェルを含む本発明の剤の抗菌効果を示すグラフである。黒三角はEscherichia coliの菌数、黒四角はPseudomonas aeruginosaの菌数、黒丸はCandida albicansの菌数を示す。
【図３】図３は、１０％のオゾンジェルを含む本発明の剤の抗菌効果を示すグラフである。黒三角はEscherichia coliの菌数、黒四角はPseudomonas aeruginosaの菌数、黒丸はCandida albicansの菌数を示す。
【図４】図４は、オゾンジェルのみの抗菌効果を示すグラフである。黒三角はEscherichia coliの菌数、黒四角はPseudomonas aeruginosaの菌数、黒丸はCandida albicansの菌数を示す。
【発明を実施するための形態】
【００１１】
本発明は、１の態様において、オゾンジェルおよびキチンナノファイバーまたは表面キトサン化キチンナノファイバーを含む抗菌剤および／または創傷治癒剤に関するものである。本明細書において、キチンナノファイバーまたは表面キトサン化キチンナノファイバーという場合は、これらのうちのいずれか一方だけでなく、これら両方をも包含しうる。
【００１２】
本発明の剤は、オゾンジェルのもつ抗菌性と創傷治癒促進効果、キチンナノファイバーおよび表面キトサン化キチンナノファイバーの持つ皮膚バリア機能改善効果、創傷治癒促進効果と高いスプレー分散性による使用感や使い勝手の向上を兼ね備えた抗菌および／または創傷治癒剤である。また、本発明の剤は強力な殺菌力を有するオゾンを含むため、防腐剤を含有しなくてもよい。
【００１３】
本発明において使用されるオゾンジェルは、高濃度のグリセリン溶液とオゾン濃度の高い気体とを気液接触させることで製造することができる。
【００１４】
オゾン濃度の高い気体は、例えば酸素ガスに無声放電することでオゾンを生成するオゾン発生装置で製造することができる。酸素ガスを用いる場合には、医療用の酸素ボンベを用いてもよいし、また酸素発生装置で製造された酸素ガスを用いてもよい。
【００１５】
高濃度のグリセリン溶液としては、グリセリン濃度７５％以上のグリセリン溶液を用いることができるが、日本薬局方品の８４〜８７重量％のグリセリンが好ましく、日本薬局方品のグリセリン濃度９８％以上の濃グリセリンを用いることがより好ましい。また、濃度９８．５％以上の精製グリセリンを用いることがさらに好ましい。グリセリン濃度が高いと、オゾンをより高濃度に溶存させることができるからである。
【００１６】
高濃度のグリセリン溶液とオゾン濃度の高い気体とを気液接触させる方法としては、例えばタンクに高濃度（例えば９８％以上）のグリセリン溶液を入れ、散気管を用いてタンク内にオゾン濃度の高い気体を微細な気泡として放出する方法がある。例えば、オゾン濃度８０ｇ／ｋＬ（約３７０００ｐｐｍ）の気体を濃グリセリン中に約７日間曝気することにより、オゾン濃度約３０００ｐｐｍのオゾンジェルを製造することができる。
【００１７】
オゾンの終濃度はグリセリン濃度に依存して定まり、前述の方法の場合、グリセリン濃度７５％ではオゾンの終濃度は約４００ｐｐｍ以上、グリセリン濃度８５％ではオゾンの終濃度は約５００ｐｐｍ以上、グリセリン濃度９０％ではオゾンの終濃度は約１０００ｐｐｍ以上、グリセリン濃度９８％ではオゾンの終濃度は約３０００ｐｐｍ以上となる。グリセリンが高濃度であるほど、オゾンを高濃度にすることができ、抗菌および殺菌効果ならびに創傷治癒効果を高めることができるとともに、オゾン濃度の半減期を長くし、オゾンの効果を長期間にわたり維持することができる。上記方法で得られたオゾンジェル（オゾン終濃度３０００ｐｐｍの場合）中のオゾンの半減期は、常温で約３ヶ月である。
【００１８】
また、オゾン濃度の半減期が長いことからわかるように、このオゾンジェルから放出されるオゾンの量は極めて少ない。したがって、オゾンジェルの使用部位、到達部位においてオゾンを少しずつ長期間にわたり放出させることができる。また、放出されるオゾンの量が極めて少ないため、このオゾンジェルは、高濃度のオゾンが溶存しているのにもかかわらず、全くオゾン臭がしない。
【００１９】
任意のオゾン濃度のオゾンジェルを冷蔵保存または冷凍保存することで、オゾン濃度をより長期間、高濃度に維持することができる。オゾンジェルを冷却して固化物としてもよい。なお、オゾンジェル中のグリセリンは、溶存するオゾンにより酸化されないことが本発明者らによって確認されている。
【００２０】
本発明において使用されるキチンナノファイバーは天然界から、例えばキチン含有生物由来の材料から得ることができる。キチン含有生物としては、エビ、カニなどの甲殻類、昆虫類またはオキアミなどが例示されるが、これらに限定されない。好ましくは、キチン含量の多い生物、例えばエビ、カニなどの甲殻類の殻および外皮からキチンナノファイバーを得てもよい。ただし、生体中のキチンナノファイバーは、その周囲および間隙に存在する蛋白および炭酸カルシウムを含むマトリクスを有しているので、脱マトリクス処理を行わなければ得ることができない。上で説明した工程によりナノファイバー化されるキチンは、カニ殻やエビ殻由来のキチンなどのα型の結晶構造を有するキチンであってもよく、イカの甲由来のキチンなどのβ型の結晶構造を有するキチンであってもよい。
【００２１】
本発明において使用されるキチンナノファイバーはいずれの方法・手段にて製造されたものであってもよい。本発明において使用されるキチンナノファイバーの好ましい製造方法としては、例えば国際公開ＷＯ２０１０／０７３７５８の明細書（参照により本明細書にその内容を一体化させる）に記載された方法、あるいは高圧湿式粉砕機、湿式超高圧微粒化装置、ブレンダー、コロイドミル、ビーズミル、ボールミルなどを用いる方法などがある。
【００２２】
本発明において使用される表面キトサン化キチンナノファイバーは、上記キチンナノファイバーの製造工程のいずれかにおいてキチン材料を脱アセチル化することにより、あるいは上記工程で得られたキチンナノファイバーを脱アセチル化することにより得ることができる。脱アセチル化方法はいくつかの方法が公知であるが、例えばアルカリ処理法が挙げられる。
【００２３】
本発明において使用されるキチンナノファイバーまたはキトサンナノファイバーは修飾または誘導体化されていてもよい。例えば、糖の３位の水酸基、６位の水酸基、または糖鎖の末端の水酸基の水素が、アルキル基などの他の基に置換されていてもよい。あるいはキチンの糖の２位のアセチル基中のメチル基が、エチル基などの他の基に置換されていてもよい。あるいはキトサンの糖の２位のアミノ基の水素はアルキル基などの他の基で置換されていてもよく、ハロゲン化物イオンなどの陰イオンとの間で塩を形成してもよい。これらの修飾体、誘導体および塩はあくまでも例示であり、限定的なものではない。本明細書では、これらの修飾体、誘導体および塩もキチンナノファイバーまたは表面キトサン化キチンナノファイバーに包含されるものとする。このような誘導体および修飾体は当業者に知られており、それらの製造方法も公知である。
【００２４】
本発明において使用されるキチンナノファイバーまたは表面キトサン化キチンナノファイバーは、幅（または径）が約２ｎｍ〜約２００ｎｍ、好ましくは約２ｎｍ〜約１００ｎｍ、より好ましくは約２ｎｍ〜約５０ｎｍ、例えば、約５ｎｍ〜約２０ｎｍ、約２ｎｍ〜約２０ｎｍ等である。
【００２５】
本発明において使用されるキチンナノファイバーまたは表面キトサン化キチンナノファイバーのアスペクト比（繊維の長さ/繊維の幅）は約５０以上、好ましくは約１００以上である。
【００２６】
本発明において用いられる表面キトサン化キチンナノファイバーの平均脱アセチル化度は約１５％以上、好ましくは約２０％以上、より好ましくは約２５％以上、さらに好ましくは約３０％以上である。キチンナノファイバーの平均脱アセチル化度は元素分析、電気伝導度滴定、ＦＴ−ＩＲなどによって測定することができる。平均脱アセチル化度の計算式の例としては以下の式が挙げられる。
【００２７】
平均脱アセチル化度（％）＝［（キチンナノファイバーに含まれるアミノ基数）／（キチ
ンナノファイバーに含まれるアミノ基数＋アセトアミド基数）］ｘ１００
【００２８】
本発明において使用されるキチンナノファイバーまたは表面キトサン化キチンナノファイバーの結晶状態はα型の伸びきり鎖微結晶であることが好ましい。「伸び切り鎖微結晶」とは無数のキチン分子が伸び切った状態で規則的に配列して結晶化した状態のことをいう。
【００２９】
本明細書において、例えば、「キチンナノファイバーまたは表面キトサン化キチンナノファイバーの幅（または径）が約２ｎｍ〜約２０ｎｍ」とは、幅（または径）が約２ｎｍ〜約２０ｎｍであるキチンナノファイバーまたは表面キトサン化キチンナノファイバーが全体の約５０％以上、好ましくは約６０％以上、さらに好ましくは約７０％以上を占める状態をいう。また例えば、「キチンナノファイバーまたは表面キトサン化キチンナノファイバーのアスペクト比が約１００以上」とは、アスペクト比が約１００以上であるキチンナノファイバーまたは表面キトサン化キチンナノファイバーが全体の約５０％以上、好ましくは約６０％以上、さらに好ましくは約７０％以上を占める状態をいう。
【００３０】
本発明の剤は、オゾンジェルとキチンナノファイバーまたは表面キトサン化キチンナノファイバーを混合することにより得ることができる。したがって、本発明は、もう１つの態様において、オゾンジェルおよびキチンナノファイバーまたは表面キトサン化キチンナノファイバーを混合することを特徴とする、抗菌剤および／または創傷治癒剤の製造方法を提供する。混合方法および混合手段は公知のものを用いることができる。多種多様なブレンダーやミキサーが知られており、これらを適宜選択して用いることができる。
【００３１】
混合に際して、オゾンジェルをそのまま用いてもよく、あるいは希釈剤と混合して用いてもよい。希釈剤はいずれのものであってもよいが、好ましくはオゾンにより酸敗しにくいものであり、水、ワセリン、ポリエチレングリコールなどが例示されるが、これらに限らない。できるだけ不純物の少ない希釈剤を使用することが好ましい。希釈剤として水を用いると、剤の粘度が低下し、液剤やローション、スプレー、あるいは化粧水などの形態に適したものとなる。水を使用する場合は精製水または超純水が好ましく、ワセリンを使用する場合は精製ワセリンが好ましく、ポリエチレングリコールを使用する場合は日本薬局方で定められたマクロゴール軟膏が好ましい。
【００３２】
混合に際して、キチンナノファイバーまたは表面キトサン化キチンナノファイバーをそのまま用いてもよく、水やグリセリン等の分散媒に分散させて用いてもよい。分散媒に酢酸等の酸を添加して分散を促進してもよい。
【００３３】
キチンナノファイバーまたは表面キトサン化キチンナノファイバーが分散されている分散媒が脱水されていることが好ましい。脱水された分散媒を使用することによって、本発明の剤の経時に伴う黄変を抑制することができる。
【００３４】
分散媒の脱水は、キチンナノファイバーまたは表面キトサン化キチンナノファイバーを分散させる前に行ってもよく、キチンナノファイバーまたは表面キトサン化キチンナノファイバーを分散させた後に行ってもよい。例えば、キチンナノファイバーまたは表面キトサン化キチンナノファイバーの水分散液をグリセリンと混合した後、混合物を脱水し、オゾンジェルと混合してもよい。分散媒の脱水は公知の方法で行うことができる。脱水の方法としては、減圧処理、昇温などが例示されるが、これらの方法に限定されない。本明細書において、脱水された分散媒は、水分含量が１０％（ｗ／ｖ）以下、好ましくは５％（ｗ／ｖ）以下の分散媒をいう。本明細書において、脱水された分散媒は、脱水処理を施された分散媒のほか、水分含量が少なく脱水処理を要しない分散媒も包含する。脱水処理を施された分散媒または脱水処理を要しない分散媒の場合は、キチンナノファイバーまたは表面キトサン化キチンナノファイバーを直接添加して分散させ、オゾンジェルと混合してもよい。
【００３５】
分散媒としては、グリセリン、プロピレングリコール、ブチレングリコールなどの多価アルコールのほか、ポリエチレングリコール、ポリビニルアルコール、ポリビニルピロリドンなどの水に可溶な液状高分子、あるいはＮ−メチルピロリドン、Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド、Ｎ，Ｎ−ジメチルアセトアミド、ジメチルスルホキシドなどの非プロトン性極性溶媒などが例示されるが、これらに限定されない。分散媒は１種類であってもよく、２種類以上の混合物であってもよい。
【００３６】
抗菌力の観点からは、本発明の剤中のオゾンジェルの割合が高いほど好ましい。創傷治癒力およびオゾン分解抑制の観点からは、本発明の剤中のナノファイバーの割合が高いほど好ましい。また、オゾン濃度が高すぎると創傷治癒に関与する表皮角化細胞などの細胞の増殖が阻害される可能性がある。オゾンジェルおよびキチンナノファイバーまたは表面キトサン化キチンナノファイバーの混合割合は、必要とされる抗菌および／または創傷治癒効果、剤の物性、形状、ならびに剤の用途、適用部位等を考慮して、適宜決定、変更することができる。
【００３７】
オゾンジェルとキチンナノファイバーまたは表面キトサン化キチンナノファイバーを混合して得られた混合物を、そのまま抗菌剤および／または創傷治癒剤として用いてもよい。あるいは、得られた混合物を、医薬分野、医薬部外品分野または化粧品分野で使用されている担体、賦形剤または希釈剤等と混合して、所望の剤形に処方してもよい。
【００３８】
本発明の剤はいずれの剤形にしてもよく、例えばスプレー、ローション、シャンプー、軟膏、ジェル、クリーム、パスタ、パッチ等であってもよい。これらの剤形の製造方法は公知である。
【００３９】
本発明の剤は、約６ヶ月冷蔵保存した後でも十分な抗菌および創傷治癒効果を有する。
【００４０】
本発明の剤を医薬品として用いてもよく、医薬部外品として用いてもよく、化粧品として用いてもよい。
【００４１】
本発明の剤をヒト以外の動物に用いてもよい。例えば、イヌ、ネコなどのペットや、ブタ、ウシ、ヤギ、ヒツジなどの家畜に本発明の剤を用いてもよい。したがって、本発明の剤を獣医用の医薬品またはペット用のスキンケア用品として用いてもよい。
【００４２】
本発明の剤は広範な微生物に対して抗菌作用を有する。本発明の剤は、例えば黄色ブドウ球菌、緑膿菌、大腸菌などの細菌、カンジダなどの酵母、マラセチア、白癬菌などのカビに対して抗菌作用を有するが、これらの菌以外に対しても抗菌作用を有する。本明細書において、抗菌とは静菌および殺菌の両方を含む。
【００４３】
また本発明の剤は創傷治癒効果を発揮する。創傷の種類は特に限定されず、擦過傷、切創、裂創、刺創、座創などのほかやけども包含する。本明細書において、創傷治癒とは創傷の完治のみならず症状の改善も包含する。
【００４４】
本発明の剤を、抗菌作用および／または創傷治癒作用が望まれる関節を含む身体のあらゆる部分に適用することができ、例えば皮膚、口腔内、頭皮などに適用してもよい。
【００４５】
従来のキチン粉末、あるいはキチンナノファイバー、表面キトサン化キチンナノファイバーを水に分散させたものは適用部位においてフィルム状になるため、可動部、特に関節などでは使いにくかった。本発明の剤は、グリセリンを溶媒としたオゾンジェルを含むため、柔軟性があり、可動部や関節にも使用可能である。
【００４６】
本発明の剤の皮膚への適用例としては、アトピー性皮膚炎の治療がある。アトピー性皮膚炎の治療においては、抗生物質に頼らず黄色ブドウ球菌を除菌することが重要と言われている。またアトピー性皮膚炎の患部には引っ掻き傷が見られることが多い。オゾンジェルは黄色ブドウ球菌に有効なことが確認されており、またキチンナノファイバーは皮膚のバリア機能の改善を促進し、創傷治癒も促進することが確認されているので、本発明の剤はアトピー性皮膚炎の治療に好ましく用いられる。本発明の剤は、アトピー性皮膚炎以外にも、褥瘡、熱傷、乾癬、糖尿病性潰瘍、リューマチ潰瘍などの難治性皮膚疾患の治療に用いることができる。
【００４７】
以下に実施例を示して本発明をさらに詳細かつ具体的に説明するが、実施例は本発明の範囲を限定するものではない。
【実施例１】
【００４８】
実施例１．本発明の剤の抗菌効果
Escherichia coli、Pseudomonas aeruginosaおよびCandida albicansを、オゾンジェルおよび表面キトサン化キチンナノファイバー（脱アセチル化度約３０％）を混合して得られた本発明の剤を含む培地にて、遮光下、２２．５±２．５℃で培養し、０日目、１日目、４日目、７日目に生菌数（ｃｆｕ／ｇ）を測定した。本発明の剤中のオゾンジェル（オゾンを１０００ｐｐｍ含有）の配合量は０．１％、１％、１０％とした。表面キトサン化キチンナノファイバーのみ、オゾンジェルのみを用いた場合についても検討した。本願実施例において特に断らない限り、％はｗ／ｖである。
【００４９】
結果を図１〜４に示す。剤中のオゾンジェルが増加すると抗菌効果も増加した。剤中のオジンジェルが１％の場合、P. aeruginosaに対して強い抗菌効果が見られ、E. coliおよびC. albicansに対しても適切な抗菌効果が見られた（図２）。剤中のオジンジェルが１０％の場合、これらの菌に対する抗菌効果はさらに増加した（図３）。オゾンジェルのみを用いた場合はこれらの菌に対して非常に強い抗菌効果が見られた（図４）。表面キトサン化キチンナノファイバーのみの場合は、剤中のオジンジェルが１％の場合よりもE. coliおよびP. aeruginosaに対する抗菌効果が弱く、C. albicansに対しては抗菌効果が不足していた（図１）。オゾンジェルが０．１％の場合は、表面キトサン化キチンナノファイバーのみの場合と同様の結果であった（データ示さず）。
【実施例２】
【００５０】
実施例２．キチンナノファイバーを用いることの効果
キチンナノファイバーにオゾンジェルを配合した本発明の剤と、キチン粉末にオゾンジェルを配合した剤におけるオゾンの分解について検討した。
【００５１】
キチンナノファイバー０．５ｇにオゾンジェル１９．５ｇを混合して剤を調製した。混合直後と混合３６時間後の剤中のオゾン濃度を測定した。混合直後のオゾン濃度は１５００ｐｐｍ、混合３６時間後のオゾン濃度は１０００ｐｐｍであった。比較のため、キチン粉末０．５ｇにオゾンジェル１９．５ｇを混合して剤を調製した。混合直後と混合３６時間後の剤中のオゾン濃度を測定した。混合直後のオゾン濃度は１５００ｐｐｍ、混合３６時間後のオゾン濃度は５００ｐｐｍであった。これらの結果から、キチンナノファイバーを用いて調製された剤においてオゾン分解が抑制されることが確認された。
【実施例３】
【００５２】
実施例３．脱水された分散媒を用いることの効果
脱水された分散媒に分散させたキチンナノファイバーを用いて本発明の剤を製造し、経時に伴う剤の黄変について調べた。
【００５３】
以下の１％キチンナノファイバー分散液を実験に使用した。
（１）キチンナノファイバー／０．５％乳酸水分散液
（２）キチンナノファイバー／０．５％クエン酸水分散液
（３）キチンナノファイバー／ブチレングリコール分散液
（４）キチンナノファイバー／グリセリン分散液
【００５４】
キチンナノファイバー／ブチレングリコール分散液（３）、およびキチンナノファイバー／グリセリン分散液（４）を以下のようにして調製した（以下の工程１〜３）。
１．キチンナノファイバー（１％）水分散液とブチレングリコールあるいはグリセリンを同重量混合しマグネチックスターラーで一晩撹拌した。
２．工程１で得られた試料をロータリーエバポレーターに供して水分を除去した。ウォーターバス温度は６０℃、脱水時間は２時間である。
３．工程２で得られた試料を真空ポンプで減圧しながら６０℃で２時間加温し、さらに水分を除去した。
【００５５】
得られたキチンナノファイバー分散液をオゾン溶存グリセリン（オゾンジェル）と混合して本発明の剤を調製し、得られた剤の色を評価した（以下の工程４〜６）。
４．ナノファイバー分散液（１）〜（４）とオゾンジェルを４：１および１：１（体積比）になるよう混合した。
５．工程４で得られた試料を４０℃および冷蔵で２２日間保存した。
６．工程５で得られた試料について色測定評価を行った。測定機器はＫＯＮＩＣＡＭＩＮＯＬＴＡのＣＭ−５を使用し、ブランクとして純水を使用した。サンプルは純水で２０倍希釈し、Ｌ＝明るさ、ａ＝明るみ、ｂ＝黄色みを測定した。色差（ＤＬ、Ｄａ、Ｄｂ）はそれぞれ４０℃の恒温槽と冷蔵で２２日間保存した試料のＬ、ａ、ｂ値の差である。
総合色差（ＤＥ）はＤＥ＝ＤＬ２＋Ｄａ２＋Ｄｂ２より見積もった。
【００５６】
各試料の色差（ＤＬ、Ｄａ、Ｄｂ）ならびに総合色差（ＤＥ）を表１に示す。
【表１】
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【００５７】
キチンナノファイバー水分散液を用いて調製された試料はＤｂ値が高く、それに伴い総合色差（ＤＥ）も高値であった。すなわち、著しい黄変が見られた。一方、脱水したブチレングリコールあるいはグリセリンに分散されたキチンナノファイバーを用いて調製された試料のＤｂ値は低く、それに伴い、総合色差（ＤＥ）も低値であった。すなわち、脱水した分散媒を用いることにより、剤の黄変を抑制できることが確認された。
【産業上の利用可能性】
【００５８】
本発明の剤は抗菌力および創傷治癒力を合わせ持ち、しかも効果が優れ、安全性が高いものである。したがって、本発明の剤を医薬品、医薬部外品、化粧品等の分野において利用することができる。
【図１】
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【図２】
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【図３】
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【図４】
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