(57)【要約】【課題】  本発明の課題は、試料中の標的タンパク質を、非侵襲的に、非標的タンパク質と区別してイメージングする方法の提供である。【解決手段】  実施形態に従うタンパク質をイメージングする方法は、以下の工程を含む。１．イメージング剤を決定する。２．イメージング剤と結合親和性を有する非標的タンパク質を決定する。３．標識イメージング剤を用意する。４．マスキング剤を用意する。マスキング剤は、標的タンパク質及び非標的タンパク質と結合親和性を有し、標的タンパク質との結合親和性が、イメージング剤よりも低く、非標的タンパク質との結合親和性が、イメージング剤よりも高い。５．試料にマスキング剤及び標識イメージング剤を投与する。６．標識からの信号を検出し、画像を作成する。【選択図】図１
2019100945.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
試料中の標的タンパク質をイメージングする方法であって、
（Ｓ１）前記標的タンパク質と結合親和性を有するイメージング剤を決定すること、
（Ｓ２）前記イメージング剤と結合親和性を有する非標的タンパク質を決定すること、
（Ｓ３）前記イメージング剤を標識物質で標識した標識イメージング剤を用意すること、
（Ｓ４）前記標的タンパク質及び前記非標的タンパク質と結合親和性を有し、前記標的タンパク質との結合親和性が、前記イメージング剤のそれよりも低く、前記非標的タンパク質との結合親和性が、前記イメージング剤のそれよりも高いマスキング剤を用意すること、
（Ｓ５）前記試料に、前記マスキング剤及び前記標識イメージング剤を投与すること、及び
（Ｓ６）前記標識物質からの信号を検出し、前記検出の結果に基づいて画像を作成すること
を含むタンパク質をイメージングする方法。
【請求項２】
前記工程（Ｓ５）において、前記マスキング剤を投与した後に、前記標識イメージング剤を投与する請求項１に記載の方法。
【請求項３】
前記標的タンパク質がバイオマーカーである請求項１又は２に記載の方法。
【請求項４】
前記バイオマーカーが、診断マーカー、予後マーカー、薬力学マーカー、モニタリング用マーカー又は治療マーカーである請求項３に記載の方法。
【請求項５】
前記標識物質が、陽電子を放出する放射性同位元素である請求項１〜４の何れか１項に記載の方法。
【請求項６】
試料中の第１〜第ｎの標的タンパク質をイメージングする方法であって、ここで、ｎは２以上の整数であり、
（Ｓ２１）前記第１〜第ｎの標的タンパク質とそれぞれ結合親和性を有する第１〜第ｎのイメージング剤をそれぞれ決定すること、
（Ｓ２２）前記第１〜第ｎのイメージング剤とそれぞれ結合親和性を有する非標的タンパク質を決定すること、
（Ｓ２３）前記第１〜第ｎのイメージング剤を第１〜第ｎの標識物質で標識した第１〜第ｎの標識イメージング剤を用意すること、
（Ｓ２４）前記第１〜第ｎの標的タンパク質及び前記非標的タンパク質と結合親和性を有し、前記第１〜第ｎの標的タンパク質との結合親和性がそれぞれ、前記第１〜第ｎのイメージング剤のそれよりも低く、前記非標的タンパク質との結合親和性が、前記第１〜第ｎのイメージング剤のそれよりも高いマスキング剤を用意すること、
（Ｓ２５）前記試料に、前記マスキング剤及び前記第１〜第ｎの標識イメージング剤を投与すること、及び
（Ｓ２６）前記第１〜第ｎの標識物質からの信号を検出し、前記検出の結果に基づいて画像を作成すること
を含むタンパク質をイメージングする方法。
【請求項７】
試料中の標的タンパク質をイメージングする方法であって、
（Ｓ３１）前記標的タンパク質とそれぞれ結合親和性を有するイメージング剤を決定すること、
（Ｓ３２）前記イメージング剤とそれぞれ結合親和性を有する第１〜第ｎの非標的タンパク質を決定すること、
（Ｓ３３）前記イメージング剤を標識物質で標識した標識イメージング剤を用意すること、
（Ｓ３４）前記標的タンパク質及び前記第１〜第ｎの非標的タンパク質と結合親和性を有し、前記標的タンパク質との結合親和性が、前記イメージング剤のそれよりもそれぞれ低く、前記第１〜第ｎの非標的タンパク質との結合親和性がそれぞれ、前記イメージング剤のそれよりもそれぞれ高い第１〜第ｎのマスキング剤を用意すること、
（Ｓ３５）前記試料に、前記第１〜第ｎのマスキング剤及び前記標識イメージング剤を投与すること、及び
（Ｓ３６）前記標識物質からの信号を検出し、前記検出の結果に基づいて画像を作成すること
を含むタンパク質をイメージングする方法。
【請求項８】
試料中の変異型ＥＧＦＲのＴ７９０Ｍ変異型（以下、「変異型ＥＧＦＲ／Ｔ７９０Ｍ」と称する）をイメージングする方法であって、
（Ｓ４１）オシメルチニブを標識物質で標識した標識オシメルチニブを用意すること、
（Ｓ４２）アファチニブを用意すること、
（Ｓ４３）前記試料に、前記アファチニブ及び前記標識オシメルチニブを投与すること、及び
（Ｓ４４）前記標識物質からの信号を検出し、前記検出の結果に基づいて画像を作成すること
を含むタンパク質をイメージングする方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明の実施形態は、タンパク質をイメージングする方法に関する。
【背景技術】
【０００２】
肺癌の原因の一つとして上皮成長因子受容体（Ｅｐｉｄｅｒｍａｌ Ｇｒｏｗｔｈ Ｆａｃｔｏｒ Ｒｅｃｅｐｔｏｒ：ＥＧＦＲ）の変異がある。ＥＧＦＲ変異陽性肺癌の患者に、その分子標的治療薬であるアファチニブやゲフィチニブを数ヶ月〜１年半ほど継続的に投与すると、変異型ＥＧＦＲが更に変異し、治療薬が効かなくなる症例がある。このような更なる変異の一例として、変異型ＥＧＦＲのエクソン２０における７９０番目のスレオニンがメチオニンに変異したＴ７９０Ｍ変異がある。Ｔ７９０Ｍ変異は、日本人患者においては、耐性を有する変異型ＥＧＦＲの変異の約５０％を占める。Ｔ７９０Ｍ変異に対する治療薬としてオシメルチニブが知られている。オシメルチニブの投与は、Ｔ７９０Ｍ変異陽性症例の患者へは認められているが、陰性症例への投与は保険医療では認められていない。そのため、Ｔ７９０Ｍ変異を高感度で検出する方法が求められている。Ｔ７９０Ｍ変異を検出する方法として、例えば、病巣の組織を採取してＴ７９０Ｍ変異を検出する組織生検や血液を採取してＴ７９０Ｍ変異由来の遺伝子を検出するリキッド・バイオプシーなどが行われている。
【０００３】
一方、癌などの疾患を検出する方法の一つとして、画像診断装置を用いて疾患に関連するタンパク質などのバイオマーカーなどをイメージングする方法がある。イメージングでは、バイオマーカーに結合する、標識した低分子化合物又は抗体などを患者に投与し、低分子化合物又は抗体から得られる信号を画像診断装置によって検出する。イメージングは、例えば、疾患の診断又は層別化治療において重要な技術であり、より正確にバイオマーカーを検出する方法の開発が求められている。
【先行技術文献】
【非特許文献】
【０００４】
【非特許文献１】Hirano et al. （2015） Oncotarget, Vol.6, No 36, 38789-38803「In vitro modeling to determine mutation specificity of EGFR tyrosine kinase inhibitors against clinically relevant EGFR mutants in non-small-cell lung cancer」
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００５】
組織生検は、組織採取の際に検査対象のＴ７９０Ｍ変異が含まれていない部位を採取してしまう可能性や、全ての病巣から組織を採取できない場合があるため、正確にＴ７９０Ｍ変異を検出することができない。リキッド・バイオプシーについては、対象とするＴ７９０Ｍ変異由来の遺伝子が必ずしも血中に流出するとは限らず、また遺伝子が採取できたとしてもそれが原発巣由来のものであるのか、転移巣由来のものであるのか区別がつかない。加えて、これらの検査方法の検査対象が進行癌患者である場合に、患者が組織や血液の採取に耐えられないこともある。
【０００６】
イメージングは、組織や血液を採取することなく一度に全身の病巣を検出できるため、組織生検及びリキッド・バイオプシーの問題点を克服できる。しかしながら、イメージングに用いられる低分子化合物や抗体は、検査対象のバイオマーカーと似た構造を有する検査対象外のバイオマーカーにも結合する場合がほとんどである。そのために、検査結果が偽陽性となり、正確に対象のバイオマーカーを検出することができないことが問題であった。
【０００７】
本発明が解決しようとする課題は、試料中の標的タンパク質を、非侵襲的に、非標的タンパク質と区別してイメージングする方法を提供することである。
【課題を解決するための手段】
【０００８】
実施形態に従うタンパク質をイメージングする方法は、試料中の標的タンパク質をイメージングする方法であり、以下の工程を含む。（Ｓ１）標的タンパク質と結合親和性を有するイメージング剤を決定すること。（Ｓ２）イメージング剤と結合親和性を有する非標的タンパク質を決定すること。（Ｓ３）イメージング剤を標識物質で標識した標識イメージング剤を用意すること。（Ｓ４）マスキング剤を用意すること。ここで、マスキング剤は、標的タンパク質及び非標的タンパク質と結合親和性を有し、標的タンパク質との結合親和性が、イメージング剤のそれよりも低く、非標的タンパク質との結合親和性が、イメージング剤のそれよりも高い。（Ｓ５）試料に、マスキング剤及び標識イメージング剤を投与すること。（Ｓ６）標識物質からの信号を検出し、検出の結果に基づいて画像を作成すること。
【図面の簡単な説明】
【０００９】
【図１】第１の実施形態の方法の一例を示すフローチャートである。
【図２】第１の実施形態の方法におけるイメージングの原理を説明する図である。
【図３】第２の実施形態の方法の一例を示すフローチャートである。
【図４】第２の実施形態の方法におけるイメージングの原理を説明する図である。
【図５】第２の実施形態の方法におけるイメージングの原理を説明する図である。
【図６】第３の実施形態の方法の一例を示すフローチャートである。
【図７】第４の実施形態の方法の一例を示すフローチャートである。
【図８】第５の実施形態の方法の一例を示すフローチャートである。
【図９】第５の実施形態の方法におけるイメージングの原理を説明する図である。
【図１０】第５の実施形態の方法におけるイメージングの原理を説明する図である。
【発明を実施するための形態】
【００１０】
以下に、図面を参照しながら種々の実施形態について説明する。
【００１１】
実施形態に従うタンパク質をイメージングする方法は、試料中の標的タンパク質をイメージングする方法である。
【００１２】
試料は、実施形態のイメージング方法による検査を実施される対象であり、イメージングの標的である標的タンパク質を含む可能性のあるものであればよい。試料は、例えば、動物である。動物は、例えば、哺乳類、鳥類、両生類、爬虫類又は魚類に属する生物である。哺乳類は、例えば、サル及びヒト等の霊長類、マウス、ラット及びモルモット等の齧歯類、イヌ、ネコ及びウサギ等の伴侶動物、ウマ、ウシ及びブタ等の家畜動物、或いは展示動物などに属する哺乳動物である。試料は、例えば、上記動物に由来する組織又は培養細胞などであってもよい。
【００１３】
標的タンパク質は、試料中に存在する可能性のある、実施形態のイメージング方法においてイメージングされるべきタンパク質である。標的タンパク質は、例えば、特定の疾患の病巣又は病変などの存在、性質、経過又は薬剤に対する反応などを判断するための指標となるタンパク質であり、特定の疾患の病巣又は病変で、或いはその付近で特異的に発現されるタンパク質である。そのような標的タンパク質は、例えば、バイオマーカーであってもよい。バイオマーカーは、例えば、診断マーカー、予後マーカー、薬力学マーカー、モニタリング用マーカー又は治療マーカーなどであってもよい。例えば、治療マーカーは、特定の疾患の分子標的治療の標的である。
【００１４】
特定の疾患は、例えば、増殖性疾患、炎症性疾患、自己免疫性疾患、精神疾患などである。増殖性疾患は、例えば、癌又は腫瘍である。癌又は腫瘍は、例えば、結腸直腸癌、結腸癌、大腸癌、胃癌、乳癌、肺癌、小細胞肺癌、非小細胞肺癌、肝臓癌、膵臓癌、甲状腺癌、腎臓癌、脳腫瘍、頚部癌、頭頸部扁平上皮癌、中枢神経系（ＣＮＳ）癌、膀胱癌、前立腺癌、精巣腫瘍、子宮癌、子宮頸癌、卵巣癌、リンパ腫、神経芽腫、骨髄腫及び／又は白血病などである。
・第１の実施形態
以下、第１の実施形態に従うタンパク質をイメージングする方法について、図１を参照して説明する。図１は、第１の実施形態の方法の一例を示す概略フローチャートである。
【００１５】
まず、工程（Ｓ１）において、イメージング剤を決定する。イメージング剤は、標的タンパク質をイメージングするための物質である。即ち、イメージング剤は標的タンパク質と結合親和性を有する物質であり、標識したイメージング剤を標的タンパク質に結合させることによって標的タンパク質をイメージングすることができる。
【００１６】
標的タンパク質と「結合親和性を有する」とは、例えば、標的タンパク質と結合することができることをいう。結合親和性を有するかどうかは、例えば、ｉｎ ｖｉｔｒｏにおける５０％阻害濃度（ＩＣ５０）値、解離定数又は結合定数などを測定又は算出することによって決定することができる。例えば、イメージング剤として、標的タンパク質との結合のＩＣ５０値や解離定数がより小さい物質を用いることが好ましく、結合定数については、値がより大きい物質を用いることが好ましい。つまり、より標的タンパク質に結合しやすい物質を用いることが好ましい。
【００１７】
イメージング剤は、標的タンパク質と親和性を有することが予想される物質であってもよい。例えば、標的タンパク質の構造によってイメージング剤を決定してもよいし、実際の薬学的効果又は試験的に行ったイメージングの結果などから標的タンパク質と親和性を有する物質を推測し、それをイメージング剤としてもよい。或いは、標的タンパク質と結合親和性を有することが知られている物質をイメージング剤として用いてもよい。
【００１８】
イメージング剤として、例えば、低分子化合物、抗体、ペプチド又はＤＮＡアプタマーを用いることができる。
【００１９】
低分子化合物は、例えば、標的タンパク質と結合親和性を有する分子量が約２００〜約１０００の化合物である。例えば、標的タンパク質が酵素である場合、低分子化合物は酵素阻害剤であってもよい。標的タンパク質が受容体である場合、低分子化合物はリガンドであってもよい。又は、低分子化合物は、標的タンパク質に対する分子標的治療薬として用いられる「低分子医薬品」又は「低分子薬」などと称される化合物であってもよい。そのような低分子化合物は、例えば、チロシンキナーゼ阻害剤、未分化リンパ腫キナーゼ阻害剤、ヤヌスキナーゼ阻害剤、ポリＡＤＰリボースポリメラーゼ（ＰＡＲＰ）阻害剤、Ｒａｆキナーゼ阻害剤、ＭＥＫ阻害剤、ＣＤＫ阻害剤又はプロテアソーム阻害剤などであってもよい。
【００２０】
抗体は、例えば、標的タンパク質と結合親和性を有する抗体である。抗体は、標的タンパク質に対する分子標的治療薬として用いられる「抗体医薬品」又は「抗体薬」などと称される抗体であってもよい。抗体は、例えば、モノクローナル抗体である。抗体は、例えば、マウス抗体、キメラ抗体、ヒト化抗体又はヒト型抗体、或いはこれらのフラグメント抗体などであってもよい。
【００２１】
イメージング剤は、例えば、１種の標的タンパク質に対して１種選択される。
【００２２】
次に、工程（Ｓ２）において非標的タンパク質を決定する。
【００２３】
非標的タンパク質は、試料中に存在し、イメージング剤と結合親和性を有するタンパク質である。非標的タンパク質は、標的タンパク質をイメージング剤でイメージングしようとする際に、イメージング剤と結合親和性を有するためにイメージング剤が結合してしまい、標的タンパク質の特異的なイメージングを妨げるイメージングの対象外のタンパク質である。即ち、非標的タンパク質は、イメージングの結果が偽陽性となる原因となり得るタンパク質である。
【００２４】
例えば、非標的タンパク質と標的タンパク質とは、それぞれがイメージング剤と結合できる結合部位を有し得る。例えば、非標的タンパク質と標的タンパク質とは、正常なタンパク質とその変異型とであってもよい。また例えば、非標的タンパク質と標的タンパク質とは、変異型のタンパク質とその更なる変異型のタンパク質とであってもよい。
【００２５】
非標的タンパク質は、イメージング剤と親和性を有することが予想されるタンパク質であってもよい。例えば、構造によって非標的タンパク質を決定してもよいし、実際の薬学的効果又は試験的に行ったイメージングの結果などからイメージング剤と親和性を有するタンパク質を推測し、それを非標的タンパク質としてもよい。或いは、イメージング剤と親和性を有することが知られている標的タンパク質以外のタンパク質を非標的タンパク質としてもよい。
【００２６】
次に、工程（Ｓ３）において、標識イメージング剤を用意する。
【００２７】
標識イメージング剤は、イメージング剤を標識物質によって標識したものである。標識物質は、例えば、陽電子（ポジトロン）を放出する放射性同位元素である。陽電子を放射する放射性同位元素は、例えば、１１Ｃ（炭素１１）、１３Ｎ（窒素１３）、１５Ｏ（酸素１５）、１８Ｆ（フッ素１８）などである。陽電子を放出する放射性同位元素は、例えば、陽電子断層撮影法（ｐｏｓｉｔｒｏｎ ｅｍｉｓｓｉｏｎ ｔｏｍｏｇｒａｐｈｙ、ＰＥＴ）で検出することができる放射性同位元素である。
【００２８】
陽電子を放出する放射性同位元素で標識された標識イメージング剤は、例えば、イメージング剤に含まれる何れかの炭素、窒素、酸素などの元素をその放射性同位元素に置き換えたものである。イメージング剤の複数の同じ種類の原子が、同じ種類の放射性同位元素で置換されていてもよい。或いは、イメージング剤の、標的タンパク質との結合親和性に影響しない何れかの位置に、上記の何れかの放射性同位元素を付加したものであってもよい。
【００２９】
或いは、標識物質は、ガンマ線を放出する金属放射性同位元素を含む化合物であってもよい。このような金属放射性同位元素として、９９ｍＴｃ（テクネチウム９９ｍ）、１１１Ｉｎ（インジウム１１１）、６７Ｇａ（ガリウム６７）又は２０１Ｔｌ（タリウム２０１）などを用いることができる。ガンマ線を放出する金属放射性同位元素は、例えば、単一光子放射段増撮影法（Ｓｉｎｇｌｅ ｐｏｔｏｎ ｅｍｉｓｓｉｏｎ ｃｏｍｐｕｔｅｄ ｔｏｍｏｇｒａｐｈｙ：ＳＰＥＣＴ）によって検出することができる放射性同位元素である。
【００３０】
金属放射性同位元素を含む化合物は、例えば、錯体である。錯体は、上記の何れかの金属放射性同位元素を中心金属として有し、試料に投与するものとして適切な構造を有する。例えば、好ましい９９ｍＴｃの錯体は、オキソコア錯体、モノオキソコア錯体又はＮ２Ｓ２型錯体、Ｎ３Ｓ型錯体、Ｎ４錯体又はジオキソコア錯体などである。
【００３１】
上記のような金属放射性同位元素で標識された標識イメージング剤は、例えば、イメージング剤の何れかの位置に、上記の何れかの金属放射性同位元素を含む化合物を付加したものである。標識物質として金属放射性同位元素の錯体を用いる場合、イメージング剤は、抗体であることが好ましい。
【００３２】
或いは、標識物質は、ガンマ線を放出するヨウ素の放射性同位元素であってもよい。ヨウ素の放射性同位元素は、例えば、１２３Ｉ又は１３１Ｉなどである。このような標識物質で標識された標識イメージング剤は、例えば、イメージング剤の何れかの位置に、上記の何れかのヨウ素の放射性同位元素を付加したものである。
【００３３】
工程（Ｓ４）において、マスキング剤を用意する。
【００３４】
マスキング剤は、非標的タンパク質をマスキングするためのタンパク質である。即ち、マスキング剤は、試料中の非標的タンパク質に結合し、標識イメージング剤が非標的タンパク質に結合することを防ぐ物質である。マスキング剤は、非標的タンパク質と結合親和性を有する物質である。また、マスキング剤は、標的タンパク質とも結合親和性を有する。そして、マスキング剤と標的タンパク質との結合親和性は、イメージング剤と標的タンパク質との結合親和性よりも低く、マスキング剤と非標的タンパク質との結合親和性は、イメージング剤と非標的タンパク質との結合親和性よりも低い。この関係性については、詳しくは後述する。
【００３５】
マスキング剤として、例えば、低分子化合物、抗体、ペプチド又はＤＮＡアプタマーを用いることができる。
【００３６】
低分子化合物は、例えば、非標的タンパク質と結合親和性を有する分子量が約２００〜約１０００の化合物である。例えば、非標的タンパク質が酵素である場合、低分子化合物は酵素阻害剤であってもよい。非標的タンパク質が受容体である場合、低分子化合物はリガンドであってもよい。又は、低分子化合物は、非標的タンパク質に対する分子標的治療薬として用いられる「低分子医薬品」又は「低分子薬」などと称される化合物であってもよい。そのような低分子化合物は、例えば、チロシンキナーゼ阻害剤、未分化リンパ腫キナーゼ阻害剤、ヤヌスキナーゼ阻害剤、ポリＡＤＰリボースポリメラーゼ（ＰＡＲＰ）阻害剤、Ｒａｆキナーゼ阻害剤、ＭＥＫ阻害剤、ＣＤＫ阻害剤又はプロテアソーム阻害剤などであってもよい。
【００３７】
抗体は、例えば、非標的タンパク質と結合親和性を有する抗体である。抗体は、非標的タンパク質に対する分子標的治療薬として用いられる「抗体医薬品」又は「抗体薬」などと称される抗体であってもよい。抗体は、例えば、モノクローナル抗体である。抗体は、例えば、マウス抗体、キメラ抗体、ヒト化抗体又はヒト型抗体、或いはこれらのフラグメント抗体などであってもよい。
【００３８】
マスキング剤は、例えば、１種の非標的タンパク質に対して１種選択される。
【００３９】
イメージング剤及びマスキング剤は、互いに異なる物質である。しかしながら、同種の物質であってもよい。例えば、イメージング剤及びマスキング剤が両方とも低分子化合物であってもよい。又は、イメージング剤及びマスキング剤は、異なる種類のものであってもよい。例えば、イメージング剤が低分子化合物であり、マスキング剤が抗体であってもよい。
【００４０】
以下に、イメージング剤及びマスキング剤の、標的タンパク質及び非標的タンパク質への親和性の関係について詳細に説明する。イメージング剤及びマスキング剤は、それぞれ非標的タンパク質及び標的タンパク質と結合親和性を有する。そして、標的タンパク質とマスキング剤との結合親和性は、標的タンパク質とイメージング剤との結合親和性よりも低く、非標的タンパク質とマスキング剤との結合親和性は、非標的タンパク質とイメージング剤との結合親和性よりも低い。即ち、以下の表１に示すように、標的タンパク質とイメージング剤との結合親和性の度合いを「Ａ」、標的タンパク質とマスキング剤との結合親和性の度合いを「Ｂ」、非標的タンパク質とイメージング剤との結合親和性の度合いを「Ｃ」、非標的タンパク質とマスキング剤との結合親和性の度合いを「Ｄ」とすると、Ａ＞Ｂ及びＣ＜Ｄの関係式が成り立つ。
【００４１】
【表１】
2019100945.tif 000003
【００４２】
また例えば、ｉｎ  ｖｉｔｒｏにおけるＩＣ５０値については、結合親和性が高いほど低い値を示すため、標的タンパク質への結合のＩＣ５０値は、イメージング剤の方がマスキング剤よりも小さく、非標的タンパク質への結合のＩＣ５０値は、マスキング剤の方がイメージング剤よりも小さい。即ち、以下の表２に示すように、標的タンパク質とイメージング剤とのＩＣ５０値を「ａ」、標的タンパク質とマスキング剤とのＩＣ５０値を「ｂ」、非標的タンパク質とイメージング剤とのＩＣ５０値を「ｃ」、非標的タンパク質とマスキング剤とのＩＣ５０値を「ｄ」とすると、ａ＜ｂ及びｃ＞ｄの関係式が成り立つ。
【００４３】
【表２】
2019100945.tif 000004
【００４４】
標識イメージング剤及びマスキング剤は、後述する工程（Ｓ５）において試料へ投与するために適切な形態で用意されることが好ましい。例えば、標識イメージング剤とマスキング剤とは、１つの医薬組成物に含まれた形態で用意される。又は標識イメージング剤とマスキング剤とは、別々の医薬組成物に含まれた形態で用意される。医薬組成物は、例えば、薬学的に許容され得る担体、希釈剤及び賦形剤などを含む。医薬組成物は、例えば、静脈注射用の液体の形態などである。
【００４５】
陽電子を放出する放射性同位元素で標識された標識イメージング剤を含む医薬組成物は、例えば、ＰＥＴ用製剤などである。ガンマ線を放出する放射性同位元素で標識された標識イメージング剤を含む医薬組成物は、例えば、ＳＰＥＣＴ用製剤などである。
【００４６】
医薬組成物は、例えば、商業的に入手してもよいし、実施形態のイメージング方法を実施する場所で調製してもよい。陽電子を放出する放射性同位元素で標識された標識イメージング剤を含む医薬組成物は放射性同位元素の半減期が短いため、実施形態のイメージング方法を行う場所で、例えば、医療用サイクロトロンなどを用いて調製することが好ましい。
【００４７】
次に、工程（Ｓ５）について、それぞれ図２を用いて説明する。まず試料１にマスキング剤２及び標識イメージング剤３を投与する（図２の（ａ））。標識イメージング剤３は、イメージング剤４を標識物質５で標識したものである。投与は、工程（Ｓ４）において用意した医薬組成物の静脈内への注射などによって行うことができる。標識イメージング剤３及びマスキング剤２が別々に用意されている場合、一方を投与した後に連続して他方を投与してもよい。標識イメージング剤３及びマスキング剤２の両方が含まれる医薬組成物を用意した場合、それを投与すればよい。
【００４８】
投与された標的タンパク質６に対する結合親和性の度合いは、標識イメージング剤３の方がマスキング剤２よりも高いことから、標識イメージング剤３が標的タンパク質６に優先的に結合する（図２の（ｂ））。また、非標的タンパク質７に対する結合親和性の度合いは、マスキング剤２の方が高いことから、マスキング剤２が非標的タンパク質７に優先的に結合する（図２の（ｂ））。しかしながら、マスキング剤２は、標的タンパク質６とも親和性を有することから、標的タンパク質６にも結合し得る（図２の（ｂ）中の矢印８）。その場合、そのマスキング剤２は、標識イメージング剤３が近づくと標的タンパク質６から解離し、そこに標識イメージング剤３が結合する（図２の（ｃ））。また、標識イメージング剤３は、非標的タンパク質７とも親和性を有することから、非標的タンパク質７にも標識イメージング剤３が結合し得る（図２の（ｂ）中の矢印９）。その場合、その標識イメージング剤３は、マスキング剤２が近づくと解離し、そこにマスキング剤２が結合する（図２の（ｃ））。その後、非標的タンパク質７及び標的タンパク質６に結合していないマスキング剤２及び標識イメージング剤３は流失する（図２の（ｄ））。このようにして、標識イメージング剤３は、非標的タンパク質７に結合することなく、標的タンパク質６に結合することができる。その結果、標的タンパク質６が標識物質５によって標識される。
【００４９】
例えば、マスキング剤２及び標識イメージング剤３の標的タンパク質６に対する親和性の差、即ち、前記表１に示される「Ａ」及び「Ｂ」、又は表２に示される「ａ」及び「ｂ」の差が大きいほど、標的タンパク質６にマスキング剤２が結合する可能性が低く、また標的タンパク質６に結合したマスキング剤２が標識イメージング剤３に置き換わる可能性が高くなる。例えば、表２の「ａ」の値は、「ｂ」の値の１０分の１以下であることが好ましい。１００分の１以下であれば更に好ましい。
【００５０】
また例えば、マスキング剤２及び標識イメージング剤３の非標的タンパク質７に対する親和性の差、即ち、表１に示される「Ｃ」及び「Ｄ」、又は表２に示される「ｃ」及び「ｄ」の差が大きいほど、非標的タンパク質７に標識イメージング剤３が結合する可能性が低く、また非標的タンパク質７に結合したイメージング剤３がマスキング剤２と入れ替わる可能性が高くなる。例えば、表２の「ｄ」の値は、「ｃ」の値の１０分の１以下であることが好ましい。１００分の１以下であれば更に好ましい。
【００５１】
次に、工程（Ｓ６）において、標識物質からの信号を検出し、検出の結果に基づいて画像を作成する。
【００５２】
標識物質が陽電子（ポジトロン）を放射する放射性同位元素である場合、信号は、放射性同位元素から放出された陽電子が近傍の電子と対消滅した結果として生じる、１８０度反対の方向に放射される２本の消滅放射線（ガンマ線）である。例えば、このような２方向に放射されたガンマ線を同時計数することによって、信号を検出し、画像化することができる。即ち、２本のガンマ線を、試料の周囲にリング状に配置された複数のガンマ線検出器によって同時に検出することによって、ガンマ線が検出されたガンマ線検出器同士を結ぶ線上に放射性同位元素が存在するというデータ、例えば、サイノグラムを得ることができる。得られたデータを画像再構成することによって、放射性同位元素の分布を断層画像として得ることができる。例えば、このような消滅放射線の検出及び画像の作成は、陽電子放出断層撮影（Ｐｏｓｉｔｏｒｏｎ ｅｍｍｉｓｓｉｏｎ ｔｏｍｏｇｒａｐｈｙ：ＰＥＴ）装置、ＰＥＴ装置とＸ線コンピュータ断層撮影（Ｃｏｍｐｕｔｅｄ Ｔｏｍｏｇｒａｐｈｙ：ＣＴ）装置とを組み合わせたＰＥＴ−ＣＴ装置、又はＴＯＦ−ＰＥＴ（ｔｉｍｅ−ｏｆ−ｆｌｉｇｈｔ ＰＥＴ）装置などの核医学診断装置によって行うことができる。
【００５３】
標識物質が、ガンマ線を放出する放射性同位元素である場合、信号は、放射性同位元素から放射されるガンマ線である。例えば、このようなガンマ線を、試料側にコリメータ、例えば、平行型コリメータを備えるガンマ線検出器によって検出することによって、ガンマ線が到達して電力パルスが出力されたガンマ線検出器の位置及び電力パルスが検出された回数などのデータを得ることができる。得られたデータから平面画像を作成することができる。ガンマ線検出器で試料の様々な方向からガンマ線を検出して平面画像を収集し、コンピュータで画像再構成することによって放射性同位元素の分布を断層画像として得ることができる。例えば、このようなガンマ線の検出及び画像の作成は、単一光子放射断層撮影（Ｓｉｎｇｌｅ ｐｏｔｏｎ ｅｍｉｓｓｉｏｎ ｃｏｍｐｕｔｅｄ ｔｏｍｏｇｒａｐｈｙ：ＳＰＥＣＴ）装置、又はＳＰＥＣＴ装置とＣＴ装置とを組み合わせたＳＰＥＣＴ−ＣＴ装置などの核医学診断装置を用いて行うことができる。
【００５４】
信号の検出及び画像の作成は、試料の全体に亘って行ってもよいし、試料の一部において行ってもよい。
【００５５】
以上に説明したタンパク質をイメージングする方法によれば、イメージング対象外の非標的タンパク質にイメージング剤が結合するのを効率的に防止することができる。その結果、イメージング結果が偽陽性となることが防止され、標的タンパク質を高感度に検出することができる。また、実施形態の方法によれば、組織や血液を採取に耐えられない試料においても、非侵襲的に、試料全体に亘って標的タンパク質の有無又は分布を一度に検出することが可能である。
【００５６】
標的タンパク質が特定の疾患に関連するタンパク質であり、実施形態の方法によって標的タンパク質がイメージングされた場合は、例えば、試料が特定の疾患に罹患していると診断することができる。また、イメージングされた標的タンパク質の位置や量によって、その疾患の発症している器官、転移の有無若しくは浸潤性の有無などの疾患の特性、疾患の重症度、経過及び／又は医薬品に対する効果若しくは副作用などを診断することが可能である。そのような診断は、例えば、コンパニオン診断であってもよい。また、その診断によって試料を層別化することが可能である。実施形態の方法によれば、このような診断が偽陽性となることが無く、より精度よく診断を行うことが可能である。
【００５７】
・第２の実施形態
実施形態のイメージング方法の更なる実施形態を図４に示す。図４は、第２の実施形態の方法の一例を示す概略フローチャートである。
【００５８】
まず、工程（Ｓ１１）においてイメージング剤を決定し、工程（Ｓ１２）において非標的タンパク質を決定する。工程（Ｓ１１）及び（Ｓ１２）はそれぞれ、例えば、上記工程（Ｓ１）及び（Ｓ２）と同じ方法で行うことができる。
【００５９】
次に、工程（Ｓ１３）において標識イメージング剤を用意し、工程（Ｓ１４）においてマスキング剤を用意する。工程（Ｓ１３）及び工程（Ｓ１４）はそれぞれ、例えば、上記工程（Ｓ３）及び（Ｓ４）と同じ方法で行うことができる。第２の実施形態において、標識イメージング剤及びマスキング剤は、別々の医薬組成物に含まれた形態で用意される。
【００６０】
次に、工程（Ｓ１５）及び工程（Ｓ１６）について図４及び図５を参照して説明する。
【００６１】
工程（Ｓ１５）において、試料１にマスキング剤２を投与する（図４の（ａ））。投与は、例えば、マスキング剤を含む医薬組成物の静脈内への注射などによって行うことができる。投与方法は、標的タンパク質、非標的タンパク質及びマスキング剤の種類などに依存して選択される。
【００６２】
投与されたマスキング剤２は、非標的タンパク質７に結合する（図４の（ｂ））。例えば、非標的タンパク質７にマスキング剤２が結合するまで、試料を放置することが好ましい。マスキング剤２は標的タンパク質６とも結合親和性を有することから、標的タンパク質６にも結合し得る（図４の（ｂ）中の矢印）。その後、非標的タンパク質７又は標的タンパク質６に結合していないマスキング剤２は流失する（図４（ｃ））。このようにして、マスキング剤２によって非標的タンパク質７がマスキングされる。
【００６３】
次に、工程（Ｓ１６）において、試料１に、イメージング剤４を標識物質５で標識した標識イメージング剤３を投与する（図５（ｄ））。投与は、標識イメージング剤３を含む医薬組成物の静脈内への注射などによって行うことができる。投与方法は、標的タンパク質、非標的タンパク質及びマスキング剤の種類に依存して選択される。
【００６４】
投与された標識イメージング剤３は、標的タンパク質６に結合する（図５の（ｅ））。例えば、標的タンパク質６に標識イメージング剤３が結合するまで、試料１を放置することが好ましい。標的タンパク質６にマスキング剤２が結合している場合（図５の（ｅ）中の矢印）、標的タンパク質６に対する結合親和性の度合いは、標識イメージング剤３の方が高いことから、標的タンパク質６に結合したマスキング剤２に標識イメージング剤３が近づくと、そのマスキング剤２が解離し、そこに標識イメージング剤３が結合する（図５の（ｆ））。その後、非標的タンパク質７及び標的タンパク質６に結合していないマスキング剤２及び標識イメージング剤３は流失する（図５の（ｇ））。このようにして、標識イメージング剤３は、非標的タンパク質７に結合することなく、標的タンパク質６に結合することができる。その結果、標的タンパク質６が標識物質５によって標識される。
【００６５】
例えば、第１の実施形態において説明したように、マスキング剤及び標識イメージング剤の標的タンパク質に対する親和性の差大きいほど、標的タンパク質６にマスキング剤２が結合する可能性が低く、また標的タンパク質６に結合したマスキング剤２が標識イメージング剤３に置き換わる可能性が高くなる。
【００６６】
次に、工程（Ｓ１５）において、標識物質からの信号を検出し、検出の結果に基づいて画像を作成する。この工程は、上記工程（Ｓ６）と同じ方法で行うことができる。
【００６７】
以上に説明した実施形態の方法によれば、非標的タンパク質を、マスキング剤でマスキングした状態で標識イメージング剤を投与するため、標識イメージング剤が非標的タンパク質に結合する可能性がより低くなる。その結果、標的タンパク質を更に高感度に検出することができる。
【００６８】
・第３の実施形態
更なる実施形態において、標的タンパク質及びイメージング剤は、それぞれ複数種類であってもよい。そのような例について、図６を参照して説明する。図６は、第３の実施形態の方法の一例を示す概略フローチャートである。
【００６９】
この例の場合、実施形態のイメージング方法は、試料中の第１〜第ｎの標的タンパク質をイメージングする方法であり、図６に示す工程（Ｓ２１）〜（Ｓ２６）を含む。ここで、ｎは２以上の整数である。
【００７０】
まず、工程（Ｓ２１）において、第１〜第ｎの標的タンパク質それぞれと結合親和性を有する第１〜第ｎのイメージング剤をそれぞれ決定する。この工程は、例えば、第１〜第ｎの標的タンパク質に対して、上記工程（Ｓ１）と同じ方法で、それぞれの標的タンパク質に対応する第１〜第ｎのイメージング剤を決定することにより行うことができる。１〜ｎの何れかの値をｔとすると、第ｔの標的タンパク質に対する第ｔのイメージング剤の親和性は、第ｔの標的タンパク質に対する第ｔ以外のイメージング剤の親和性の何れよりも高い。
【００７１】
次に、工程（Ｓ２２）において、第１〜第ｎのイメージング剤と結合親和性を有する非標的タンパク質を決定する。この工程は、例えば、上記工程（Ｓ２）と同じ方法によって第１〜第ｎのイメージング剤と親和性を有する非標的タンパク質を決定することができる。非標的タンパク質は、第１〜第ｎのイメージング剤の何れかと親和性を有するタンパク質であってもよいし、或いは、第１〜第ｎのイメージング剤の全てと結合親和性を有するタンパク質であってもよい。
【００７２】
次に、工程（Ｓ２３）において、第１〜第ｎの標識イメージング剤を用意する。第１〜第ｎの標識イメージング剤は、それぞれ第１〜第ｎの標識物質により標識された第１〜第ｎのイメージング剤である。第１〜第ｎのイメージング剤の第１〜第ｎの標識物質による標識はそれぞれ、例えば、上記（Ｓ３）と同じ方法によって行うことができる。
【００７３】
第１〜第ｎの標識物質は互いにエネルギーが異なる標識物質である。それによって、複数種類の標的タンパク質を区別して画像化することができる。しかしながら、第１〜第ｎの標識物質は全てが陽電子を放出する放射性同位元素であるか、又は全てがガンマ線を放射する放射性同位元素であることが好ましい。それによって一度に同じ装置を用いて標的タンパク質を画像化できる。
【００７４】
工程（Ｓ２４）において、マスキング剤を用意する。マスキング剤は、第１〜第ｎの標的タンパク質及び非標的タンパク質と結合親和性を有する。そして、マスキング剤と第１〜第ｎの標的タンパク質との結合親和性はそれぞれ、第１〜第ｎのイメージング剤と第１〜第ｎの標的タンパク質とのそれぞれの親和性の何れよりも低い。また、マスキング剤と非標的タンパク質との結合親和性は、第１〜第ｎのイメージング剤と非標的タンパク質との親和性の何れよりも高い。
【００７５】
例えば、２種類の標的タンパク質及び１種類の非標的タンパク質、並びに２種類のイメージング剤及び１種類のマスキング剤を用いる場合の各物質の結合親和性の関係について説明する。例えば、表３に示すように、第１の標的タンパク質と、第１のイメージング剤、第２のイメージング剤及びマスキング剤との結合親和性の度合いをそれぞれ「Ｅ」、「Ｆ」、「Ｇ」とし、第２の標的タンパク質と、第１のイメージング剤、第２のイメージング剤及びマスキング剤との結合親和性の度合いをそれぞれ「Ｈ」、「Ｉ」、「Ｊ」とし、非標的タンパク質と、第１のイメージング剤、第２のイメージング剤及びマスキング剤との結合親和性の度合いをそれぞれ「Ｋ」、「Ｌ」、「Ｍ」とすると、「Ｅ＞Ｆ，Ｇ」、「Ｉ＞Ｈ，Ｊ」、「Ｍ＞Ｋ，Ｌ」の式が成り立つ。
【００７６】
【表３】
2019100945.tif 000005
【００７７】
第１〜第ｎの標識イメージング剤及びマスキング剤は、後述する工程（Ｓ２５）で投与されるのに適切な医薬組成物に含まれた形態で用意されることが好ましい。第１〜第ｎの標識イメージング剤は、全て別々の医薬組成物に含まれていてもよいし、全てが一つの医薬組成物に含まれていてもよいし、何れかの組み合わせで複数の医薬組成物に含まれていてもよい。
【００７８】
工程（Ｓ２５）において、第１〜第ｎの標識イメージング剤及びマスキング剤を投与する。第１〜第ｎの標識イメージング剤が別々の医薬組成物に含まれている場合は、それらの医薬組成物を同時に投与するか又は間隔を空けずに連続して投与してもよい。全ての標識イメージング剤が一つの医薬組成物に含まれている場合、その医薬組成物を投与すればよい。例えば、第１〜第ｎの標識イメージング剤及びマスキング剤を含む医薬組成物を調製し、それを投与してもよい。投与は、例えば、上記工程（Ｓ５）と同じ方法で行うことができる。或いは、マスキング剤を投与した後に、第１〜第ｎの標識イメージング剤を投与してもよい。
【００７９】
工程（Ｓ２６）において、第１〜第ｎの標識物質からの信号を検出し、検出の結果に基づいて画像を作成する。この工程は、例えば、工程（Ｓ６）と同じ方法によって、第１〜第ｎの標識物質からの信号をそれぞれ検出し、画像を作成することによって行うことができる。この例においては、第１〜第ｎの標識物質からの信号のエネルギーが異なるため、信号を区別することができる。エネルギーの異なる標識物質から得られた信号それぞれにおいて別々の画像を作成してもよいし、各信号によって得られたデータを統合した画像を作成してもよい。統合する場合は、信号毎に別の色を用いて画像化することによって第１〜第ｎの標識物質を区別して画像化することができる。
【００８０】
以上に説明した第３の実施形態の方法によれば、複数種類の標識物質を一度に、区別してイメージングすることができる。
【００８１】
・第４の実施形態
更なる実施形態において、非標的タンパク質及びマスキング剤は、それぞれ複数種類であってもよい。そのような例について、図７を参照して説明する。図７は、第４の実施形態の方法の一例を示す概略フローチャートである。
【００８２】
この例の場合、実施形態のイメージング方法は、試料中の標的タンパク質をイメージングする方法であり、図７に示す工程（Ｓ３１）〜（Ｓ３６）を含む。
【００８３】
まず、工程（Ｓ３１）において、標的タンパク質と結合親和性を有するイメージング剤を決定する。この工程は、例えば、上記工程（Ｓ１）とおなじ方法によって行うことができる。
【００８４】
次に、工程（Ｓ３２）において、イメージング剤と結合親和性を有する第１〜第ｎの非標的タンパク質を決定する。この工程は、例えば、上記工程（Ｓ２）と同じ方法で、イメージング剤と結合親和性を有する・BR>^ンパク質を複数種類選択することによって、行うことができる。
【００８５】
工程（Ｓ３３）において、イメージング剤を標識物質で標識した標識イメージング剤を用意する。標識イメージング剤は、例えば、上記工程（Ｓ３）と同じ方法で用意することができる。
【００８６】
工程（Ｓ３４）において、第１〜第ｎのマスキング剤を用意する。第１〜第ｎのマスキング剤はそれぞれ、標的タンパク質及び第１〜第ｎの非標的タンパク質と結合親和性をそれぞれ有する。即ち、１〜ｎの何れかの値をｐとすると、第ｐのマスキング剤は、標的タンパク質及び対応する第ｐの非標的タンパク質と結合親和性を有する。そして、第ｐの非標的タンパク質に対する第ｐのマスキング剤の親和性は、第ｐの非標的タンパク質に対する第ｐ以外のイメージング剤の親和性の何れよりも高い。
【００８７】
また、標的タンパク質と第１〜第ｎのマスキング剤との結合親和性は、標的タンパク質とイメージング剤との結合親和性よりもそれぞれ低く、第１〜第ｎの非標的タンパク質と、対応する第１〜第ｎのマスキング剤との結合親和性はそれぞれ、第１〜第ｎの非標的タンパク質とイメージング剤との親和性よりもそれぞれ高い。
【００８８】
例えば、１種類の標的タンパク質及び２種類の非標的タンパク質、並びに１種類のイメージング剤及び２種類のマスキング剤を用いる場合の各物質の結合親和性について説明する。例えば、表４に示すように、標的タンパク質と、イメージング剤、第１のマスキング剤及び第２のマスキング剤との結合親和性の度合いをそれぞれ「Ｏ」、「Ｐ」、「Ｑ」とし、第１の非標的タンパク質と、イメージング剤、第１のマスキング剤及び第２のマスキング剤との結合親和性の度合いをそれぞれ「Ｒ」、「Ｓ」、「Ｔ」とし、第２の非標的タンパク質と、イメージング剤、第１のマスキング剤及び第２のマスキング剤との結合親和性の度合いをそれぞれ「Ｕ」、「Ｖ」、「Ｗ」とすると、「Ｏ＞Ｐ，Ｑ」、「Ｓ＞Ｒ，Ｔ」、「Ｗ＞Ｕ，Ｖ」の式が成り立つ。
【００８９】
【表４】
2019100945.tif 000006
【００９０】
標識イメージング剤及び第１〜第ｎのマスキング剤は、後述する工程（Ｓ３５）で投与されるのに適切な、医薬組成物に含まれた形態で用意されることが好ましい。第１〜第ｎのマスキング剤は、全て別々の医薬組成物に含まれていてもよいし、全てが一つの医薬組成物に含まれていてもよいし、何れかの組み合わせで複数の医薬組成物に含まれていてもよい。
【００９１】
工程（Ｓ３５）において、試料に第１〜第ｎのマスキング剤及び標識イメージング剤を投与する。第１〜第ｎのマスキング剤が別々の医薬組成物に含まれている場合は、それらの医薬組成物を同時に投与するか又は間隔を空けずに連続して投与してもよい。全てのマスキング剤が一つの医薬組成物に含まれている場合、その医薬組成物を投与すればよい。例えば、標識イメージング剤及び第１〜第ｎのマスキング剤を含む医薬組成物を調製し、それを投与してもよい。この工程は、例えば、上記工程（Ｓ５）と同じ方法で行うことができる。或いは、第１〜第ｎのマスキング剤を投与した後に、標識イメージング剤を投与してもよい。
【００９２】
次に、工程（Ｓ３６）において、標識物質からの信号を検出し、検出の結果に基づいて画像を作成する。この工程は例えば、上記工程（Ｓ６）と同じ方法によって行うことができる。
【００９３】
以上に説明した第４の実施形態によれば、複数種類の非標的タンパク質を同時に効率よくマスキングすることができ、検出の精度がより向上する。非標的タンパク質をより多く選択すれば、より標的タンパク質のイメージングの感度が向上する。
【００９４】
或いは、標的タンパク質及びイメージング剤が複数種類であり、かつ非標的タンパク質及びマスキング剤が複数種類であってもよい。
【００９５】
・第５の実施形態
ある実施形態において、標的タンパク質は変異型ＥＧＦＲのＴ７９０Ｍ変異型（以下、「変異型ＥＧＦＲ／Ｔ７９０Ｍ」と称する）であり、非標的タンパク質は変異型ＥＧＦＲであり、イメージング剤はオシメルチニブ（Ｏｓｉｍｅｒｔｉｎｉｂ）であり、マスキング剤はアファチニブ（Ａｆａｔｉｎｉｂ）である。そのような例について、図８を参照して説明する。図８は、第５の実施形態の方法の一例を示す概略フローチャートである。この例における方法は、試料中の変異型ＥＧＦＲ／Ｔ７９０Ｍをイメージングする方法であり、図８に示す工程（Ｓ４１）〜（Ｓ４４）を含む。
【００９６】
まず、工程（Ｓ４１）において、標識オシメルチニブを用意する。オシメルチニブは、下記の化学式であらわされる化合物である。
【００９７】
【化１】
2019100945.tif 000007
【００９８】
標識オシメルチニブは、標識物質で標識されている。標識物質は、例えば、上述の何れかの陽電子を放射する放射性同位元素であることが好ましい。このような標識物質で標識された標識オシメルチニブの一例の化学式を以下に示す。
【００９９】
【化２】
2019100945.tif 000008
【０１００】
この例では、１つの炭素を放射性同位元素の１１Ｃに置き換えることで標識したオシメルチニブを示した。放射性同位元素で置き換えられる炭素の位置は、上記の化学式に示される位置でなくてもよい。また、複数の炭素が１１Ｃに置き換えられていてもよい。また、何れかの窒素が１３Ｎであってもよいし、何れかの酸素が１５Ｏであってもよい。
【０１０１】
工程（Ｓ４２）において、アファチニブを用意する。アファチニブは、下記の化学式であらわされる化合物である。
【０１０２】
【化３】
2019100945.tif 000009
【０１０３】
変異型ＥＧＦＲ及び変異型ＥＧＦＲ／Ｔ７９０Ｍのアファチニブ及びオシメルチニブとの結合のＩＣ５０値は、例えば、表５に示すとおりである。
【０１０４】
【表５】
2019100945.tif 000010
【０１０５】
表１に示されるように、オシメルチニブ及びアファチニブはそれぞれ、変異型ＥＧＦＲ／Ｔ７９０Ｍ及び変異型ＥＧＦＲへの結合親和性をそれぞれ有する。そして、アファチニブの変異型ＥＧＦＲ／Ｔ７９０Ｍに対する結合親和性は、オシメルチニブにおけるよりも低く、アファチニブの変異型ＥＧＦＲに対する結合親和性は、オシメルチニブにおけるよりも高い。
【０１０６】
標識オシメルチニブ及びアファチニブは、例えば、工程（Ｓ４２）において試料に投与されるのに適切な形態で用意されることが好ましい。例えば、標識オシメルチニブ及びアファチニブは、１つの医薬組成物に含まれた形態で用意される。又は標識オシメルチニブ及びアファチニブは、別々の医薬組成物に含まれた形態で用意される。医薬組成物は、例えば、薬学的に許容され得る担体、希釈剤及び賦形剤などを含む。医薬組成物は、例えば、ＰＥＴ用製剤であってもよい。
【０１０７】
次に、工程（Ｓ４３）において、標識オシメルチニブ及びアファチニブを試料に投与する。例えば、標識オシメルチニブ及びアファチニブを含む医薬組成物を投与してもよいし、別々に用意された標識オシメルチニブ及びアファチニブを連続して投与してもよいが、アファチニブを投与した後、標識オシメルチニブを投与することが好ましい。そのような例について、図９及び図１０を用いて説明する。
【０１０８】
まず、試料１１にアファチニブ１２を投与する（図９の（ａ））。投与は、例えば、静脈内注射によって行われる。投与されたアファチニブ１２は、変異型ＥＧＦＲ１３に結合する（図９の（ｂ））。例えば、変異型ＥＧＦＲ１３にアファチニブ１２が結合するまで、試料を放置することが好ましい。アファチニブ１２は変異型ＥＧＦＲ／Ｔ７９０Ｍ１４とも結合親和性を有することから、変異型ＥＧＦＲ／Ｔ７９０Ｍ１４にも結合し得る（図９の（ｂ）中の矢印）。その後、変異型ＥＧＦＲ１３又は変異型ＥＧＦＲ／Ｔ７９０Ｍ１４に結合していないアファチニブ１２は、流失する（図９の（ｃ））。このようにして、アファチニブ１２によって変異型ＥＧＦＲ１３がマスキングされる。
【０１０９】
次に、試料１１に標識オシメルチニブ１７を投与する（図１０の（ｄ））。標識オシメルチニブ１７は、１１Ｃ１６によって標識されたオシメルチニブである。投与は、例えば、静脈内注射によって行われる。投与された標識オシメルチニブ１７は、変異型ＥＧＦＲ１３に結合する（図１０の（ｅ））。変異型ＥＧＦＲ／Ｔ７９０Ｍ１４とアファチニブ１２が結合している場合（図１０の（ｅ）中の矢印）、そのアファチニブ１２は、標識オシメルチニブ１７に置き換わり、変異型ＥＧＦＲ／Ｔ７９０Ｍ１４に標識オシメルチニブ１７が結合する（図１０の（ｆ））。その後、変異型ＥＧＦＲ１３及び変異型ＥＧＦＲ／Ｔ７９０Ｍ１４に結合していないアファチニブ１２及び標識オシメルチニブ１７は、流失する（図１０の（ｇ））。このようにして、標識オシメルチニブ１７は、変異型ＥＧＦＲ１３に結合することなく、変異型ＥＧＦＲ／Ｔ７９０Ｍ１４に結合することができる。その結果、変異型ＥＧＦＲ／Ｔ７９０Ｍ１４が１１Ｃ１６によって標識される。
【０１１０】
次に、工程（Ｓ４４）において、標識物質からの信号を検出し、画像を作成する。この例の場合、信号は、標識物質である放射性同位元素から放出された陽電子と、近傍の電子とが対消滅して生じる２本のガンマ線である。ガンマ線の検出及び画像の作成は、例えば、上記工程（Ｓ６）と同じ方法によって、例えば、ＰＥＴ装置などを用いて行うことができる。
【０１１１】
以上に説明した第５の実施形態の方法によれば、変異型ＥＧＦＲがアファチニブによってマスキングされ、変異型ＥＧＦＲにオシメルチニブが結合することが防止される。その結果、変異型ＥＧＦＲ／Ｔ７９０Ｍを変異型ＥＧＦＲと区別して正確にイメージングすることができる。この方法によれば、組織や血液の採取に耐えられない試料であっても、試料全体における変異型ＥＧＦＲ／Ｔ７９０Ｍの有無又は分布を非侵襲的に検出することが可能である。
【０１１２】
実施形態の方法によって変異型ＥＧＦＲ／Ｔ７９０Ｍがイメージングされた場合は、例えば、試料が変異型ＥＧＦＲ／Ｔ７９０Ｍ陽性肺癌に罹患していると診断することができる。また、イメージングされた変異型ＥＧＦＲ／Ｔ７９０Ｍの位置や量によって、変異型ＥＧＦＲ／Ｔ７９０Ｍが発症している器官、原発巣及び転移巣における変異型ＥＧＦＲ／Ｔ７９０Ｍの有無、肺癌の進行度及び重症度、経過及び／又は医薬品に対する効果などを診断することが可能である。実施形態の方法によれば、変異型ＥＧＦＲ／Ｔ７９０Ｍの診断が偽陽性となることが無く、より精度よく変異型ＥＧＦＲ／Ｔ７９０Ｍの診断を行うことが可能である。
【符号の説明】
【０１１３】
１…試料  ２…マスキング剤  ３…標識イメージング剤  ４…イメージング剤
５…標識物質  ６…標的タンパク質  ７…非標的タンパク質
１１…試料  １２…アファチニブ  １３…変異型ＥＧＦＲ
１４…変異型ＥＧＦＲ／Ｔ７９０Ｍ  １５…オシメルチニブ
１６…１１Ｃ  １７…標識オシメルチニブ
【図１】
2019100945.tif 000011
【図２】
2019100945.tif 000012
【図３】
2019100945.tif 000013
【図４】
2019100945.tif 000014
【図５】
2019100945.tif 000015
【図６】
2019100945.tif 000016
【図７】
2019100945.tif 000017
【図８】
2019100945.tif 000018
【図９】
2019100945.tif 000019
【図１０】
2019100945.tif 000020