(57)【要約】【課題】本発明の課題は、汎用性を備えながら、血糖値の調節機能を有する食品素材を提供することにある。【解決手段】本発明は、高圧加工米を原料として含む、慢性炎症を抑制するため、および／または、生活習慣病を治療、予防または改善するための、食品用または医薬用組成物であって、高圧加工米が、籾または玄米を、該籾または玄米の量に対して少なくとも５０重量％の水に浸漬した状態で、加圧することにより、糠成分を糠から胚乳に浸透移行させ、胚乳に該糠成分を富化し、得られた成分富化籾または成分富化玄米、あるいは、得られた成分富化籾または成分富化玄米を精米してなる成分富化精白米である、前記組成物などに関する。【選択図】図５
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【特許請求の範囲】
【請求項１】
高圧加工米を原料として含む、慢性炎症を抑制するため、および／または、生活習慣病を治療、予防または改善するための、食品用または医薬用組成物であって、
高圧加工米が、籾または玄米を、該籾または玄米の量に対して少なくとも５０重量％の水に浸漬した状態で、加圧することにより、糠成分を糠から胚乳に浸透移行させ、胚乳に該糠成分を富化し、得られた成分富化籾または成分富化玄米、あるいは、得られた成分富化籾または成分富化玄米を精米してなる成分富化精白米である、前記組成物。
【請求項２】
水に浸漬された籾または玄米を加温する工程をさらに含む、請求項１に記載の組成物。
【請求項３】
高圧加工米を製粉した米粉を原料として含む、請求項１または２に記載の組成物。
【請求項４】
糠成分が、ポリフェノール類、チアミン、ナイアシン、遊離アミノ酸、γ−アミノ酪酸およびフィチン酸を含む、請求項１〜３のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項５】
生活習慣病が、糖尿病、高血圧または肥満である、請求項１〜４のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項６】
中強度または高強度の負荷の運動と併用するための、請求項１〜５のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項７】
高圧加工米を原料として含む、慢性炎症を抑制し、中強度または高強度の負荷の運動による血糖値上昇抑制効果を増強するための、食品用または医薬用組成物であって、
高圧加工米が、籾または玄米を、該籾または玄米の量に対して少なくとも５０重量％の水に浸漬した状態で、加圧することにより、糠成分を糠から胚乳に浸透移行させ、胚乳に該糠成分を富化し、得られた成分富化籾または成分富化玄米、あるいは、得られた成分富化籾または成分富化玄米を精米してなる成分富化精白米である、前記組成物。
【請求項８】
中強度または高強度の負荷の運動が、インターバル速歩トレーニングである、請求項６または７に記載の組成物。
【請求項９】
籾または玄米を、該籾または玄米の量に対して少なくとも５０重量％の水に浸漬した状態で、加圧することにより、糠成分を糠から胚乳に浸透移行させ、胚乳に該糠成分を富化し、得られた成分富化籾または成分富化玄米、あるいは、得られた成分富化籾または成分富化玄米を精米してなる成分富化精白米である高圧加工米であって、慢性炎症を抑制するため、および／または、生活習慣病を治療、予防または改善するための、前記高圧加工米。
【請求項１０】
請求項９に記載の高圧加工米を炊飯してなる、慢性炎症を抑制するため、および／または、生活習慣病を治療、予防または改善するための、米飯。
【請求項１１】
慢性炎症を抑制し、中強度または高強度の負荷の運動による血糖値上昇抑制効果を増強するための高圧加工米であって、籾または玄米を、該籾または玄米の量に対して少なくとも５０重量％の水に浸漬した状態で、加圧することにより、糠成分を糠から胚乳に浸透移行させ、胚乳に該糠成分を富化し、得られた成分富化籾または成分富化玄米、あるいは、得られた成分富化籾または成分富化玄米を精米してなる成分富化精白米である、前記高圧加工米。
【請求項１２】
中強度または高強度の負荷の運動が、インターバル速歩トレーニングである、請求項１１に記載の高圧加工米。
【請求項１３】
請求項１１または１２に記載の高圧加工米を炊飯してなる、慢性炎症を抑制し、中強度または高強度の負荷の運動による血糖値上昇抑制効果を増強するための、米飯。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、高圧加工技術により糠成分を糠から胚乳に浸透移行させた高圧加工米の新たな用途に関する。
【背景技術】
【０００２】
従来、米に由来する材料や成分を用いて、血糖上昇の抑制や、糖尿病の予防や改善を試みた例が知られている。具体的には、例えば、発芽玄米に含有されるステロール配糖体に着目し、発芽玄米糠由来のステロール配糖体を有効成分とする血糖値上昇抑制剤（特許文献１）や、大豆タンパク質と米糠を発酵させた発酵物をプロテアーゼで処理したものを抗糖尿病組成物として利用すること（特許文献２）が検討されている。
【０００３】
また、米を味噌懸濁液に浸漬し、次いで１０００気圧以上の高圧処理を施し、その後に炊飯することにより、食後血糖上昇抑制効果の期待できる米飯を提供することが試みられている（特許文献３）。
しかし、これらの文献に記載の技術は、米に由来する成分を抽出、発酵するものであるか、白米としては利用できない加工米とするものであって、いずれも食品素材としては汎用性に欠けるものであった。
【０００４】
一方、本発明者らは、これまで、外皮付き穀物を加圧下などで水に浸漬することにより、ポリフェノール成分を増加させると共に外皮から内側に浸透移行させ、内側の可食部分にポリフェノール成分を富化することに成功した（特許文献４）。さらにこれを応用し、玄米を水に浸漬した状態で加圧することにより、糠成分を糠から胚乳に浸透移行させ、胚乳に該糠成分を富化することにより、成分富化玄米を製造し、さらに精米した成分富化精白米を提供している（特許文献５および６）。
【先行技術文献】
【特許文献】
【０００５】
【特許文献１】特開２０１１−５７５９７号公報
【特許文献２】特開２０１３−３２３３４号公報
【特許文献３】特開２０１７−４２０８９号公報
【特許文献４】特開２０１０−６３４５４号公報
【特許文献５】特開２０１５−８４６５８号公報
【特許文献６】特開２０１７−２１７０１５号公報
【非特許文献】
【０００６】
【非特許文献１】Handschin C et al. "The role of exercise and PGC1α in inflammation and chronic disease", Nature 454(7203): 463-469, 2008.
【非特許文献２】Zhang Y et al. “NFκB2 Gene as a Novel Candidate that Epigenetically Responds to Interval Walking Training.”, Int J Sports Med 36(9): 769-75, 2015.
【非特許文献３】Morikawa M et al. “The effects of interval walking training for 10 years on physical fitness in elderly people; comparison with the results in dropouts during the period.”, J Physical Fit Sports Med 6(6): 532, 2017.
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００７】
したがって、本発明の課題は、汎用性を備えながら、血糖値の調節機能を有する食品素材を提供することにある。
【課題を解決するための手段】
【０００８】
本発明者らは、前記の課題を解決するために鋭意研究する中で、意外にも、本発明者らが提供する成分富化玄米およびそれを精米した成分富化精白米が、血糖値の調節機能を有し、さらに慢性炎症を抑制すること、さらには成分富化籾が成分富化玄米と同様の成分を有することを見出し、さらに研究を進めた結果、本発明を完成するに至った。
【０００９】
すなわち、本発明は、以下の発明に関する。
［１］  高圧加工米を原料として含む、慢性炎症を抑制するため、および／または、生活習慣病を治療、予防または改善するための、食品用または医薬用組成物であって、
高圧加工米が、籾または玄米を、該籾または玄米の量に対して少なくとも５０重量％の水に浸漬した状態で、加圧することにより、糠成分を糠から胚乳に浸透移行させ、胚乳に該糠成分を富化し、得られた成分富化籾または成分富化玄米、あるいは、得られた成分富化籾または成分富化玄米を精米してなる成分富化精白米である、前記組成物。
［２］  水に浸漬された籾または玄米を加温する工程をさらに含む、前記［１］に記載の組成物。
［３］  高圧加工米を製粉した米粉を原料として含む、前記［１］または［２］に記載の組成物。
［４］  糠成分が、ポリフェノール類、チアミン、ナイアシン、遊離アミノ酸、γ−アミノ酪酸およびフィチン酸を含む、前記［１］〜［３］のいずれか一項に記載の組成物。
［５］  生活習慣病が、糖尿病、高血圧または肥満である、前記［１］〜［４］のいずれか一項に記載の組成物。
［６］  中強度または高強度の負荷の運動と併用するための、前記［１］〜［５］のいずれか一項に記載の組成物。
［７］  高圧加工米を原料として含む、慢性炎症を抑制し、中強度または高強度の負荷の運動による血糖値上昇抑制効果を増強するための、食品用または医薬用組成物であって、
高圧加工米が、籾または玄米を、該籾または玄米の量に対して少なくとも５０重量％の水に浸漬した状態で、加圧することにより、糠成分を糠から胚乳に浸透移行させ、胚乳に該糠成分を富化し、得られた成分富化籾または成分富化玄米、あるいは、得られた成分富化籾または成分富化玄米を精米してなる成分富化精白米である、前記組成物。
［８］  中強度または高強度の負荷の運動が、インターバル速歩トレーニングである、前記［６］または［７］に記載の組成物。
【００１０】
［９］  籾または玄米を、該籾または玄米の量に対して少なくとも５０重量％の水に浸漬した状態で、加圧することにより、糠成分を糠から胚乳に浸透移行させ、胚乳に該糠成分を富化し、得られた成分富化籾または成分富化玄米、あるいは、得られた成分富化籾または成分富化玄米を精米してなる成分富化精白米である高圧加工米であって、慢性炎症を抑制するため、および／または、生活習慣病を治療、予防または改善するための、前記高圧加工米。
［１０］  前記［９］に記載の高圧加工米を炊飯してなる、慢性炎症を抑制するため、および／または、生活習慣病を治療、予防または改善するための、米飯。
［１１］  慢性炎症を抑制し、中強度または高強度の負荷の運動による血糖値上昇抑制効果を増強するための高圧加工米であって、籾または玄米を、該籾または玄米の量に対して少なくとも５０重量％の水に浸漬した状態で、加圧することにより、糠成分を糠から胚乳に浸透移行させ、胚乳に該糠成分を富化し、得られた成分富化籾または成分富化玄米、あるいは、得られた成分富化籾または成分富化玄米を精米してなる成分富化精白米である、前記高圧加工米。
［１２］  中強度または高強度の負荷の運動が、インターバル速歩トレーニングである、前記［１１］に記載の高圧加工米。
［１３］  前記［１１］または［１２］に記載の高圧加工米を炊飯してなる、慢性炎症を抑制し、中強度または高強度の負荷の運動による血糖値上昇抑制効果を増強するための、米飯。
【００１１】
また本発明は、一態様として、以下の発明に関する。
［Ａ］  玄米を、該玄米の量に対して少なくとも５０重量％の水に浸漬した状態で、加圧することにより、糠成分を糠から胚乳に浸透移行させ、胚乳に該糠成分を富化し、得られた成分富化玄米を精米してなる高圧加工米であって、生活習慣病を予防または改善するための、前記高圧加工米。
［Ｂ］  糠成分が、ポリフェノール類、チアミン、ナイアシン、遊離アミノ酸、γ−アミノ酪酸およびフィチン酸を含む、前記［Ａ］に記載の高圧加工米。
［Ｃ］  生活習慣病が、糖尿病、高血圧または肥満である、前記［Ａ］または［Ｂ］に記載の高圧加工米。
［Ｄ］  前記［Ａ］〜［Ｃ］のいずれか一項に記載の高圧加工米を炊飯してなる、米飯。
［Ｅ］  保存用容器に収容された、前記［Ｄ］に記載の米飯。
［Ｆ］  インターバル速歩トレーニングと併用するための、前記［Ｄ］または［Ｅ］に記載の米飯。
【発明の効果】
【００１２】
本発明に係る高圧加工米によれば、生活習慣病の治療、予防または改善効果が得られる。とくに、運動処方を実施してもなお、生活習慣病の改善効果が頭打ちになっている対象者に対し、生活習慣病の改善効果が得られる。本発明に係る高圧加工米は、持続的に摂取することにより、生活習慣病の改善の中でも、食事後の血糖上昇が抑制され、血糖調節機能の改善において、とくに優れている。
【００１３】
さらに本発明に係る高圧加工米は、炎症促進性遺伝子であるNFκB2遺伝子のメチル化を亢進し、慢性炎症を抑制することができる。慢性炎症は、種々の疾患と関連しており、例えば、脂肪細胞への影響がインシュリン抵抗性およびII型糖尿病に、免疫細胞への影響が動脈硬化に、脳細胞への影響が認知症に、全身性サイトカインの上昇を介して癌に関連することが知られている（非特許文献１）。本発明に係る高圧加工米は、生活習慣病の改善に止まらず、他の慢性炎症に関連する疾患に対しても改善効果が期待できる。
【００１４】
本発明に係る高圧加工米の奏する生活習慣病の改善効果は、中強度または高強度の負荷の運動、とくに緩急運動の１種であるインターバル速歩トレーニングと並行して行うことにより、さらに優れている。５ヵ月間のインターバル速歩トレーニングによって、体力(筋力)が向上し、高血圧、高血糖、肥満の症状が改善し、炎症促進性遺伝子であるNFκB2遺伝子のメチル化がおき、体内の炎症反応が抑制されるところ（非特許文献２）、これらの改善効果は、約６ヵ月以降頭打ちになることが課題であったが（非特許文献３）、本発明に係る高圧加工米を摂取することにより、インターバル速歩トレーニングの改善効果をさらに促進することができる。
【００１５】
玄米や発芽玄米は、炊飯準備の困難さ、食味や食感の低下、消化性の悪さにより持続的な摂取が容易ではない場合があるが、本発明に係る高圧加工米のうち成分富化精白米は、これらの問題を生じることなく、炊飯により良食味の白米として摂取が容易であることから、生活習慣病の治療、予防または改善に効果的である。
【図面の簡単な説明】
【００１６】
【図１】本発明に係る成分富化玄米の、水の量ごとの精米歩留まりを示すグラフである。
【図２】本発明に係る成分富化精白米およびコントロール精白米のチアミンの含有量を示すグラフである。
【図３】本発明に係る成分富化精白米およびコントロール精白米のナイアシンの含有量を示すグラフである。
【図４】持続血糖測定・自己血糖測定のプロトコールの概要を示す図である。
【図５】血糖調節機能（ＳＭＢＧ）の測定結果を示すグラフである。
【図６】血糖調節機能（ＳＭＢＧ）の測定結果を示すグラフである。
【図７】持続血糖測定の典型例を示すグラフである。
【図８】血糖調節機能（持続血糖測定）の測定結果を示すグラフである。
【図９】血糖調節機能（持続血糖測定）の測定結果を示すグラフである。
【図１０】パイロシークエンス法により測定したNFκB2遺伝子のメチル化率を示すグラフである。
【図１１】本発明に係る成分富化籾から精米した成分富化精白米の（ａ）総ポリフェノール量および（ｂ）ＧＡＢＡ量の含有量を示すグラフである。
【発明を実施するための形態】
【００１７】
本発明に係る高圧加工米は、成分富化籾、成分富化玄米、および、成分富化籾または成分富化玄米から精米した成分富化精白米を含む。
以下、成分富化精白米の精白前の成分富化玄米を中心に説明するが、成分富化籾についても同様である。
【００１８】
本発明に係る成分富化玄米は、ポリフェノール、ビタミン類等任意の糠成分を通常の米と比較して高濃度に含有していることに加えて、浸漬等によって成分が富化された穀類と比較して、粒割れの割合が低く、精米歩留まりが向上している。また、炊飯した際の食感が従来の成分富化玄米と比較して改良されており、これによって、炊飯した際の食感が改良されている。
【００１９】
本発明において、その加工過程において、所定量の水に浸漬することによって、製造された成分富化玄米の精米歩留まりを向上させることが可能になる。水の量は、玄米の場合、一般的な玄米の吸水量である３０重量％以上が望ましく、５０重量％以上であると更に望ましい。籾の場合は、５０重量％以上であることが望ましい。
【００２０】
本発明において、浸漬に使用する水には、所望の成分を添加することが可能である。これにより、前記所望の成分が製造された成分富化玄米に移行し、富化させることが可能になる。ここで、「所望の成分」の用語は、本来種皮に含まれる成分（例えば、ビタミンＢ１、ビタミンＢ３、γ―オリザノール等）と、本来種皮には含まれず、加工時に添加することにより富化される成分、例えば、コチニールやアントシアニン等の色素とのいずれも含む意味で使用する。従って、本発明の製造方法においては、種皮に含有されている成分のみでなく、加工処理の段階で適宜添加された成分も富化された成分富化玄米を製造することが可能である。
【００２１】
本発明において、その加工過程において、浸漬は、密閉容器に封入した状態で行われることが望ましい。これにより、浸漬に使用する水の量を正確に制御することが可能となり、かつ、加工時に玄米全体に均一に静水圧を加えることが可能になる。
【００２２】
本発明において、その加工過程において、所定の圧力で加圧することによって、成分富化玄米のでんぷん損傷率を０〜１５％に抑えることが可能となる。これにより、炊飯した際のでんぷんの糊化、流出が抑えられ、食感を向上させることが可能となる。また同時に、精米時の精米歩留まりを向上させることが可能となる。この際の圧力は、０．２ＭＰａ以上が望ましく、１００ＭＰａ以上であるとさらに望ましい。
【００２３】
本発明において、その加工過程において、所定の時間加圧することが望ましい。これにより、精米歩留まりを向上させ、同時により多くの成分を富化させることが可能になる。この時間の長さは、３時間以上であることが望ましく、作業効率等を勘案すると、１２時間程度が望ましい。
【００２４】
本発明において、その加工過程において、所定の温度で加温することが望ましい。これにより、製造された成分富化玄米に富化する成分の量を増加させることが可能になる。加温時の温度は、所望の効果を得るために２０℃以上が望ましく、４０℃以上であると更に望ましい。温度の上限は、一般的に玄米のでんぷんが糊化する６５℃以下である必要があり、６０℃以下であると更に望ましい。加温は、浸漬と同時にあるいは順次行われ、浸漬時に加温する場合、加工される玄米に上記温度が加温される程度となるよう、水温を調整する必要がある。
【００２５】
本発明において、濃度が向上している糠成分としては、ポリフェノール類が挙げられる。向上する程度は、処理の際の圧力、温度等の条件によって異なり、通常は、総ポリフェノール量として２倍から４倍程度であるが、成分や条件によっては、１０倍程度まで向上する。例えば、フェルラ酸は未処理時の５倍から６倍まで向上し、ｐ−クマル酸では、未処理時の１０倍まで向上する。また、γ−アミノ酪酸については、未処理の精白米からは検出されない成分であって、本発明に係る成分富化玄米を製造する過程において、はじめて定量される成分である。また、本発明に係る成分富化玄米では、上記に示す成分以外のビタミン類等の成分が富化されていても良く、これらの成分には、種皮に含有されている成分のみでなく、加工処理の段階で適宜添加された成分も含まれる。つまり、本発明に係る成分富化玄米では、加工時に浸漬する水に所望の成分を添加することで、種皮由来ではない成分を胚乳部分に浸透移行することが可能である。
【００２６】
本発明において、成分富化玄米の表面や内部のでんぷんは、電子顕微鏡で観察すると、その外形から角がとれており、角丸の状態、あるいは形状が略球状または略偏球状となっている。このため、本発明に係る成分富化玄米は、口に入れた際の食感が良く、また、製粉して米粉として使用した際にも、手触りや食感が良好である。
【００２７】
本発明の高圧加工米（成分富化籾、成分富化玄米および成分富化精白米）の原料として使用する米は、とくに限定はされず、日本および外国で食用として用いられる米であれば、いずれも適用可能である。本発明により製造された高圧加工米は、食用米として好適に使用することが可能である。また、本発明により製造された成分富化精白米を製粉することにより、成分富化米粉として、好適に使用することが可能である。さらに、本発明により製造された成分富化米粉は、その用途として、成分が富化された加工食品として、好適に使用することが可能である。
【００２８】
本発明の高圧加工米は、生活習慣病を治療、予防または改善するための、食品用または医薬用組成物の原料として用いることができる。また本発明の高圧加工米は、生活習慣病を治療、予防または改善するための食材として、とくに主食として摂取することができる。
ここで生活習慣病とは、生活習慣が発症原因に深く関与していると考えられている疾患の総称であり、糖尿病、高血圧または肥満などを包含するものである。本発明の高圧加工米は、とくに血糖調節機能に優れ、とくに、糖尿病や肥満の治療、予防または改善に優れている。
【００２９】
本発明の高圧加工米は、慢性炎症を抑制するための、食品用または医薬用組成物の原料として用いることができる。また本発明の高圧加工米は、慢性炎症を抑制するための食材として、とくに主食として摂取することができる。
【００３０】
さらに本発明の高圧加工米は、慢性炎症を抑制し、中強度または高強度の負荷の運動による血糖値上昇抑制効果を増強するために用いることができる。
ここで中強度または高強度の負荷の運動とは、最大体力の７０％以上のややきつい運動のことで、血糖値上昇抑制効果が期待できる運動などが含まれ、例えば、速い歩行、ジョギング、水泳、エアロビクスなどの他、ウェイト・トレーニングや水中歩行など運動療法に取り入れられている各種の運動を含み得る。本発明の高圧加工米を併用する中強度または高強度の負荷の運動とは、前記の各種の運動の他、ゆっくり歩きと速歩を交互に繰り返す緩急ウォーキングなどの緩急運動が含まれ、とくにインターバル速歩トレーニングとの併用が好ましい。
【００３１】
本発明の高圧加工米は、慢性炎症を抑制することができることから、例えば、インシュリン抵抗性およびII型糖尿病、動脈硬化、認知症、癌に対して、改善効果が期待できる。
【００３２】
本発明の高圧加工米は、一般の精白米と同様に製品化が可能である。例えば、精白米を袋詰めした製品や、精白米を炊飯し、米飯として製品とすることができる。とくに米飯とする場合は、レトルトパックなどの保存容器に収容されていてもよい。
【００３３】
また本発明の高圧加工米は、加工食品、機能性食品などの食材としても用いることができ、一般の精白米が利用される態様において利用することができる。
また、飼料用として用いることも可能である。
以下、実施例を示して、本発明をさらに具体的に説明するが、本発明の範囲は、これら実施例の記載に何ら限定されるものではない。
【実施例】
【００３４】
［実験例１  成分富化玄米および成分富化精白米の製造］
原料となる米は、信州大学農学部の圃場で収穫された、２０１５年度または２０１６年度産コシヒカリ玄米を用いた。玄米は実験に使用するまで、ポリエチレン袋に入れて密封し、冷蔵庫に貯蔵した。加圧装置は、株式会社東洋高圧製の高圧処理装置「まるごとエキス（登録商標）」を使用した。加圧処理時の圧力保持と、温度調整は、前記高圧処理装置の制御装置を未補正で使用した。処理玄米の乾燥は、送風乾燥器（VTRL-1000-2Tいすゞ製作所製）を用いて実施した。
【００３５】
玄米３ｋｇと、所定量の蒸留水をポリエチレン袋に入れ、袋の中の空気が残らないよう減圧に保ちながら密閉し、シーラーを用いて封入した。その後、直ちに５５℃に設定しておいた高圧処理装置に入れ、温度を保ちながら、１００ＭＰａ下で６時間処理を行った。処理後の玄米を成分富化玄米試料とし、この玄米を乾燥後精米したものを、本実施例における成分富化精白米（高圧加工米）の試料とした。
【００３６】
［実験例２  コントロール米の製造］
実験例１と同様のコシヒカリ玄米をコントロール玄米とした。また、これを精米して、未処理の精白米を製造し、これをコントロール精白米の試料とした。
【００３７】
（精米歩留まりの測定）
実験例１と同様に製造した成分富化玄米について、加工時に浸漬する水量による精米歩留まりの変化を測定した。加工した玄米を乾燥後、家庭用精米機（RSKM5B 株式会社サタケ製）により精米した。図１は、添加水量と、玄米の吸水率、精米歩留まりの関係を示すグラフを示す。この結果から、添加水量が増加するに従って精米歩留まりも向上し、添加水量が５０重量％以上となると、精米歩留まりが８０％を超えることが認められた。
【００３８】
（総ポリフェノール量の測定）
本発明に係る成分富化精白米の可溶性総ポリフェノール量およびフェノール酸量を定量した。米試料中の総ポリフェノール量はChandrikaらの方法を参考に、一部改変したFolin-Ciocalteu法で測定した。米に含まれるポリフェノール類の主要な成分はフェルラ酸であることから、総ポリフェノール量をフェルラ酸当量で表した。
【００３９】
フェルラ酸１００ｍｇに５０％アセトン水を加えて１００ｍｌに定容し、１ｍｇ／ｍｌのフェルラ酸標準溶液を調製した。この標準溶液に純水を加えて適宜希釈し、複数の濃度のフェルラ酸標準溶液を調製した。各フェルラ酸標準溶液０．５ｍｌに純水を加えた後、フォリン・チオカルト−フェノール試薬１．０ｍｌ、２０％炭酸ナトリウム水溶液（ｗ／ｖ）１．０ｍｌ、純水４．５ｍｌを加えて反応させた。その後、遠心分離（５，０００×ｇ，５分間）し、得られた上清の７２５ｎｍにおける吸光度を分光光度計（UV-1800 UV/VIS Spectrophotometer 株式会社島津製作所製）を用いて測定し、吸光度の値とフェルラ酸濃度から検量線を作成した。
【００４０】
成分富化精白米、およびコントロール精白米について、総ポリフェノール量を上記と同様の方法で吸光度から定量した。測定は各処理試料溶液につき２回ずつ行い、各試料溶液の測定値はフェルラ酸を標準物質として作成した検量線に代入して、可溶性の総ポリフェノール量を算出した。実験では、総ポリフェノール量は、精白米、玄米および米糠１００ｇ当たりのフェルラ酸当量（ＦＡＥ ｍｇ／精白米１００ｇ）で表した。
【００４１】
表１は、加工時に加温する温度ごとの成分富化玄米およびコントロール玄米それぞれの精米歩留まり、成分富化玄米およびコントロール玄米をそれぞれ精米した、成分富化精白米およびコントロール精白米１００ｇ中に含まれるフェルラ酸当量を表した表である。表中、成分富化玄米と書かれた項目では、付加する圧力と温度を変更してそれぞれの数値を示している。表から、加温する温度を上げるに従って、精米歩留まりと総ポリフェノール量が向上していることが認められた。特に、５５℃、１００ＭＰａで処理した成分富化精白米においては、総ポリフェノール量が８６．０ｍｇ／１００ｇと、コントロール米の３１．０ｍｇ／１００ｇと比較して、約３倍の量のポリフェノールを含有することが認められた。また、本発明に係る成分富化玄米を製造する際には、付加する圧力、および温度が高いほど、ポリフェノール量が増加し、同時に、精米歩留まりが向上することが認められた。
【００４２】
【表１】
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【００４３】
（チアミンの測定）
本発明に係る成分富化精白米に富化された成分として、チアミンの定量を行った。測定は、ＨＰＬＣ法を用いて行い、チアミン塩酸塩として定量した。図２は、成分富化精白米およびコントロール精白米それぞれ１００ｇ中に含まれるチアミンの量を表したグラフである。グラフ中、未処理とされるデータがコントロール米を示し、水／温／圧とされるデータが成分富化精白米を示している。この結果から、成分富化精白米において、０．２２ｍｇ／１００ｇと、コントロール米の０．０９ｍｇ／１００ｇと比較して、約２．４倍の量のチアミンを含有することが認められた。
【００４４】
（ナイアシンの測定）
成分富化玄米に富化された成分として、ナイアシンの定量を行った。測定は、Lactobacillus plantarum ATCC8014菌株を使用した微生物定量法を用いて行った。なお、この際、ニコチン酸相当量、トリプトファンは考慮していない。図３は、成分富化精白米およびコントロール精白米それぞれ１００ｇ中に含まれるナイアシンの量を表したグラフである。グラフ中、未処理とされるデータがコントロール精白米を示し、水／温／圧とされるデータが成分富化精白米を示している。この結果から、成分富化精白米において、４．３２ｍｇ／１００ｇと、コントロール米の１．７８ｍｇ／１００ｇと比較して、約２．４倍の量のナイアシンを含有することが認められた。
【００４５】
（γ−アミノ酪酸の測定）
成分富化玄米に富化された成分として、γ−アミノ酪酸の定量を行った。測定は、アミノ酸自動分析法を用いて行った。その結果、コントロール精白米では、含有量が検出限界以下であったため、定量できなかったのに対し、成分富化精白米では、１６ｍｇ／１００ｇ検出され、成分富化精白米では、コントロール精白米よりも多くのγ−アミノ酪酸を含有することが認められた。
【００４６】
（フィチン酸の測定）
成分富化玄米に富化された成分として、フィチン酸の定量を行った。測定は、バナドモリブデン酸吸光光度法を用いて行い、メソイノシットヘキサリン酸として定量した。その結果、コントロール精白米では、１５５ｍｇ／１００ｇであったのに対し、成分富化精白米では、１８３ｍｇ／１００ｇ検出され、成分富化精白米では、コントロール精白米よりも多くのフィチン酸を含有することが認められた。
【００４７】
（米粉試料の物性の分析）
成分富化玄米および成分富化米粉の物性を評価するため、米粉の平均粒径と、でんぷん損傷率を測定した。粒度の測定には、レーザー回折・散乱式粒度分析計（MT3000LOW-DRY 日機装株式会社製）を使用し、乾式法による粒度分布計測値から、平均粒径を求めた。粒度分布の測定は、各試料３回ずつ行い、平均値（μｍ）を算出した。また、でんぷん損傷率の測定には、STARCH DAMAGE KIT（K-SDAM Megazyme社製）を使用した。結果を表２に示す。
【００４８】
【表２】
2019030294.tif 000004
【００４９】
表２は、成分富化米粉およびコントロール米粉の平均粒径およびでんぷん損傷率を測定した結果を示す。表から、成分富化米粉の平均粒径とでんぷん損傷率が、いずれもコントロール米粉の値よりも低いことが認められた。これは、成分富化玄米の製造を行う加工時に、加圧をする工程があるため、これにより米の密度が高まったことによる。米の密度が高いこと、およびでんぷん損傷率が低いことは、炊飯時のでんぷんの糊化、溶出を抑制し、食味を向上させるのに寄与している。
【００５０】
［実験例３  高圧加工米摂取による生活習慣病の治療、予防または改善効果］
実験例１と同様に製造した成分富化精白米（高圧加工米）の生活習慣病の治療、予防または改善効果を検証した。
＜方法＞
６か月以上インターバル速歩（ＩＷＴ）トレーニングを継続しているにもかかわらず、血糖と血圧が高止まりしている、すなわち、空腹時血糖値＞１１０ｍｇ／ｄｌまたはＨｂＡ１ｃ＞６．２％、かつ、ＳＢＰ＞１３５またはＤＢＰ＞８５ｍｍＨｇである３０人（８０歳未満の男女）を被験者とした。被験者を、高圧加工米群（ｎ＝１５）と通常米群（白米群；ｎ＝１５）とに無作為に割り付けた。
【００５１】
なお、インターバル速歩（ＩＷＴ）とは、息があがるように“さっさか”歩く速歩き（さっさか歩き）と、呼吸を整えてリフレッシュするように“ゆっくり”歩くゆっくり歩き（ゆっくり歩き）を交互に数分間ずつ（例えば、３分間ずつ）繰り返し行うトレーニング方法をいう（ＮＰＯ法人熟年体育大学リサーチセンター；URL: http://www.jtrc.or.jp/interval/）。
被験者は、週４回以上（１回速歩時間１５分以上）を目標に実施した。
【００５２】
両群ともＩＷＴをさらに４ヶ月間（２０１６年１２月〜２０１７年４月）実施させた（ＩＷＴ＋試験米摂取期間）。その間、高圧加工米群は、朝・夕の食事にレトルトパックした高圧加工米を１食当たり１７５ｇ（０．５合）摂取させ、通常米群は、朝・夕の食事にレトルトパックした通常米を１食当たり１７５ｇ（０．５合）摂取させた。
介入前後に、６日間の血糖値の連続測定（酵素電極）を実施し、５日目にすべての被験者に同じ食事（統制食）を摂取させた。また、以下の測定項目についても測定を行った。
【００５３】
測定項目
・体力測定：
身長、体重、ＢＭＩ、体脂肪率、腹囲周囲長、伸展筋力、屈曲筋力、最大運動量、
・血液検査：
赤血球、白血球、ヘマトクリット、ヘモグロビン、血小板数、アルブミン、総コレステロール、ＴＧ、ＬＤＬ−Ｃ、ＨＤＬ−Ｃ、尿酸、高感度ＣＲＰ
・血糖調節機能：
血液検査（空腹時血糖、ＨｂＡ１ｃ、グリコアルブミン、空腹時インスリン濃度）、ＣＧＭ（持続血糖測定）６日間、ＳＭＢＧ（自己血糖測定）６日間
・循環調節機能：
最高血圧（ＳＢＰ）、最低血圧（ＤＢＰ）、ＰＷＶ（脈波伝播速度）、ＡＢＩ（足関節上腕血圧比）、安静時心拍数
【００５４】
（持続血糖測定・自己血糖測定のプロトコール）
持続血糖測定は、腹部にセンサーを留置し、グルコース濃度を５分間隔で測定した。また、センサーで測定するグルコース濃度の較正のため、１日４回の自己血糖測定を行った。プロトコールの概要を図４に示す。
（循環調節機能測定の方法）
仰向けになり、血圧計カフ、心電図電極、心音マイクを装着し、測定した。
【００５５】
以下、各測定結果を示すが、ＩＷＴ＋試験米摂取期間の前の測定結果を「Pre」、後の測定結果を「Post」として示す。
体力測定の結果を表３に示す。
【表３】
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【００５６】
血液検査の結果を表４に示す。
【表４】
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【００５７】
血糖調節機能の結果を表５に示す。
【表５】
2019030294.tif 000007
【００５８】
循環調節機能の結果を表６に示す。
【表６】
2019030294.tif 000008
【００５９】
持続血糖測定・自己血糖測定の測定結果を図５〜９に示す。
６日間の朝食前の血糖値は、高圧加工米群でのみ介入後に低下した（Ｐ＝０．０４）（図５、６）。また、５日目の朝食開始から３時間の血糖値の上昇も、同群でのみ介入後に低下した（Ｐ＝０．０２）。すべての被験者が介入の前後で同じ食事を摂取したにもかかわらず、食後血糖（ＢＧ）の増加は、介入後の高圧加工米群においてのみ抑制された（図８）。介入後の高圧加工米群においてのみＪ−ｉｎｄｅｘが有意に低下した（図９）。
【００６０】
結果から、生活習慣病患者において、本発明に係る高圧加工米の摂取により血糖調節能を改善することが示された。とくに、インターバル速歩（ＩＷＴ）トレーニングと並行して持続的に行うことにより、より高い効果が得られることが明らかになった。
【００６１】
［実験例４  高圧加工米摂取によるNFκB2遺伝子のメチル化］
インターバル速歩トレーニングと並行して高圧加工米を摂取した場合において、NFκB2遺伝子のメチル化に及ぼす影響を調査した。
実験例３と同様に得た血液サンプルからPLC DNA Isol. Kit Large Volume((株)ロシュ・ダイアグノスティックス、東京)を用いてＤＮＡを抽出し、パイロシークエンス(PyroMarkQ24ID, QIAGEN、Germany)により、介入前後におけるNFκB2遺伝子のメチル化率を測定した。ＰＣＲおよびシークエンスプライマーは、PyroMark Assay Design 2.0 software (QIAGEN、Germany)により作成され、全ての実験操作は推奨されているプロトコールに沿って行った。NFκB2遺伝子のプロモーター領域(-1281 to -1018 upstream of the transcription start site)はPCRにより増幅した。
使用したプライマーを表７に示す。
【表７】
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【００６２】
哺乳類において、DNAメチル化はCpGアイランドに存在するシトシンにおいて、優先的に起こる。それゆえ、NFκB2のターゲット領域は、
5’- AAAGGGCGCGAGGCGTGACGCACGGAAACGTCA - 3’（配列番号４）
(-1238 to -1206 upstream of the transcription start site)
とした。
【００６３】
EpiTect Buisulfite Kit(QIAGEN、Germany)を用いて、ゲノムＤＮＡにバイサルファイト処理を行った。バイサルファイト処理後のＤＮＡを精製し、Nano Dropを用いて、ＤＮＡ濃度を１０ｎｇ／μｌに調整した。バイサルファイト処理済ＤＮＡはPyroMark PCR Master Mix kit(QIAGEN、Germany)を用いて、５’末端がビオチン化されたプライマーでＰＣＲ増幅した。ビオチン化されたＰＣＲ産物は、ストレプトアビジンビーズ(GE Healthcare、Sweden)の上に固定化し、ＤＮＡ鎖はDenaturation Solution(QIAGEN、Germany)を用いて分離した。それを洗浄後、PyroMark Q24 Vacuum Workstationによって中和し、シークエンスプライマーは固定化した鎖にアニーリングした。
【００６４】
パイロシークエンスにより得られた波形（パイログラム）から、PyroMark Q24 system (QIAGEN, Germany)のPyroMark Q24 softwareを用いて、波形のピーク（高さ）からターゲット領域におけるメチル化シトシンと非メチル化シトシンの割合を求めることでNFκB2のメチル化率を算出した。Reportタブから、「CpG analysis report」を決定し小数第二位までを有効数字として解析に使用した。本発明ではNFκB2遺伝子のプロモーター領域における６か所(sites 1〜6)のメチル化変異（非メチル化シトシンからメチル化シトシンへの変異）部位を解析した。なお、この６か所のメチル化変異部位は、先行研究において、インターバル速歩によりメチル化が亢進した部位である（非特許文献２）。この際、同一被験者のトレーニング前後のサンプルは、一度にＰＣＲ・シークエンスを行い、測定条件の違いによって生じるメチル化率の誤差が介入前後の変化量に影響するリスクを極力抑えるようにした。解析は、sites 1〜6のメチル化率を平均して行った。
【００６５】
図１０に介入前後に採取した血液サンプルより抽出したＤＮＡを対象に、パイロシークエンス法により測定したNFκB2遺伝子のsites 1〜6のメチル化率の平均値について、通常米群、高圧加工米群それぞれ、１５名の平均値と標準誤差で示した。図１０中、Ａは介入前（白抜き）、介入後（黒塗り）のぞれぞれのメチル化率を示し、Ｂは介入による変化量を示す。測定には、両群ともに介入前後のメチル化率に有意差を認めなかった（Ｐ＞０．１）。しかし、各siteにおける介入前後の変化量の平均値を群間比較したところ、高圧加工米群では、通常米群と比較して、NFκB2遺伝子のメチル化が亢進した（Ｐ＝０．０４５）。
【００６６】
［実験例５  成分富化籾の製造］
原料となる米は、信州大学農学部の圃場で収穫された、２０１６年度または２０１７年度産コシヒカリの籾を用いた。
籾３ｋｇと、所定量の蒸留水をポリエチレン袋に入れ、袋の中の空気が残らないよう減圧に保ちながら密閉し、シーラーを用いて封入した。その後、直ちに所定の温度（５７℃、６０℃または６２℃）に設定しておいた高圧処理装置に入れ、温度を保ちながら、所定の圧力下（１００ＭＰａ〜１５０ＭＰａ）で所定の時間（２時間〜８時間）処理を行った。処理後の籾を成分富化籾試料とした。
【００６７】
［実験例６  成分富化籾の外観］
（ａ）成分富化籾の外観（１）
実験例５と同様に製造した成分富化籾（５７℃、１２０ＭＰａ、２、４または６時間、水分添加量７０％）および未処理籾について、夫々１０００粒を採取し、整粒、胴割粒および砕粒を計数した。結果を表８に示す。なお、表中、「その他」は半粉状質粒などを示す。
【表８】
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【００６８】
（ｂ）成分富化籾の外観（２）
実験例５と同様に製造した成分富化籾（５７℃または６０℃、１２０ＭＰａ、４時間、水分添加量４０％〜７０％）、成分富化玄米（５７℃、１２０ＭＰａ、４時間、水分添加量５６％）および未処理籾について、夫々１０００粒を採取し、整粒、胴割粒および砕粒を計数した。結果を表９に示す。なお、表中、「その他」は半粉状質粒などを示す。
【表９】
2019030294.tif 000011
【００６９】
表８および表９に示すとおり、成分富化籾は、未処理籾や成分富化玄米に比べて、整粒数が増加し、精白米としての利用に優れた外観品質を有することが示されるものであった。
【００７０】
［実験例７  高圧加工籾から精米した高圧加工精白米の外観］
実験例５と同様に製造した成分富化籾（５７℃、１２０ＭＰａ、６時間、水分添加量７０％）、成分富化玄米（５７℃、１２０ＭＰａ、６時間、水分添加量５６％）および未処理籾の夫々を精米し、夫々１０００粒を採取し、整粒、胴割粒および砕粒を計数した。結果を表１０に示す。なお、表中、「その他」は半粉状質粒などを示す。
【表１０】
2019030294.tif 000012
【００７１】
表１０に示すとおり、成分富化籾は、未処理籾や成分富化玄米に比べて、整粒数が増加し、精白米としての利用に優れた外観品質を有することが示されるものであった。
【００７２】
［実験例８  高圧加工籾の機能性成分］
実験例５と同様に製造した成分富化籾から精米した高圧加工精白米（５７℃、１２０ＭＰａ、４時間、水分添加量４０％〜７０％）、成分富化玄米（５７℃、１００ＭＰａ、６時間、水分添加量５６％）、未処理玄米および未処理白米について、夫々、総ポリフェノール量およびＧＡＢＡ量を測定した。結果を図１１に示す。
なお、総ポリフェノール量およびＧＡＢＡ量の測定は、実験例２と同様の方法で行った。
【００７３】
図１１に示すとおり、成分富化籾から精米した高圧加工精白米は、成分富化玄米に比べて総ポリフェノール量は７割程度であるが、未処理白米に比べて１．５倍程度の増加が認められるものであり、ＧＡＢＡ量は成分富化玄米に比べて１．１倍程度、未処理白米に比べて５倍以上の増加が認められるものであった。
【００７４】
実験例８の結果から、成分富化籾は、成分富化玄米および成分富化精白米と同程度の成分を含んでおり、これらと同様に生活習慣病を治療、予防または改善するため、および／または、慢性炎症を抑制するための食材として摂取することができる。
【産業上の利用可能性】
【００７５】
本発明の高圧加工米は、生活習慣病を治療、予防または改善するため、および／または、慢性炎症を抑制するための食材として、とくに一般の精白米と同様に、主食として容易に持続的に摂取することができる。
【図１】
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【図２】
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【図３】
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【図４】
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【図５】
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【図６】
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【図７】
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【図８】
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【図９】
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【図１０】
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【図１１】
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【配列表】
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