(57)【要約】【課題】特定の肌状態と相関のある特定の環境由来菌の菌量によって、直接肌を検査することなく、非侵襲的に、肌状態を診断すること。【解決手段】特定の肌状態の診断方法であって、皮膚常在細菌叢に存在する菌の菌種を同定する菌種同定工程と、同定した菌種と、環境由来菌情報と、に基づき前記皮膚常在細菌叢における前記特定の肌状態と相関のある特定の環境由来菌の菌量を計測する計測工程と、計測結果に基づき、前記特定の環境由来菌の菌量が多いほど、前記特定の肌状態が好ましいと判定する判定工程と、を有し、前記環境由来菌情報は、菌種又は菌属に関する情報と、その菌種又は菌属の検出された環境に関する情報と、を紐づけた情報であることを特徴とする、診断方法。【選択図】なし【特許請求の範囲】
【請求項１】
特定の肌状態の診断方法であって、
皮膚常在細菌叢に存在する菌の菌種を同定する菌種同定工程と、
同定した菌種と、環境由来菌情報と、に基づき前記皮膚常在細菌叢における前記特定の肌状態と相関のある特定の環境由来菌の菌量を計測する計測工程と、
計測結果に基づき、前記特定の環境由来菌の菌量が多いほど、前記特定の肌状態が好ましいと判定する判定工程と、
を有し、
前記環境由来菌情報は、菌種又は菌属に関する情報と、その菌種又は菌属の検出された環境に関する情報と、を紐づけた情報であることを特徴とする、診断方法。
【請求項２】
前記特定の肌状態がＴＥＷＬ（経皮水分蒸散量）のパラメータに基づくものであり、
前記特定の環境由来菌は、国立遺伝研究所（National Institute of Genetics）の細菌データベース（MicrobeDB.jp）において規定される以下のＡ群から選ばれる環境に由来する環境由来菌のうち、１又は２以上であることを特徴とする請求項１に記載の診断方法。
（なお、菌又は該菌の属する菌属が検出された環境のうち、菌又は該菌の属する菌属の平均存在比率の最も高い環境を、該菌が由来する環境であるという。）
（Ａ群）
［plant body associated 若しくは symbiotic microbe］、［agriculture associated］、［aquatic area 若しくは fluid in state］、［animal associated］、［animal body associated］、［land feature］
【請求項３】
前記特定の肌状態が皮膚の明るさ（Ｌ＊）のパラメータに基づくものであり、
前記特定の環境由来菌は、国立遺伝研究所（National Institute of Genetics）の細菌データベース（MicrobeDB.jp）において規定される以下のＢ群から選ばれる環境に由来する環境由来菌のうち、１又は２以上であることを特徴とする請求項１に記載の診断方法。
（なお、菌又は該菌の属する菌属が検出された環境のうち、菌又は該菌の属する菌属の平均存在比率の最も高い環境を、該菌が由来する環境であるという。）
（Ｂ群）
［plant body associated 若しくは symbiotic microbe］、［agriculture associated］、［water associated］、［land feature］
【請求項４】
前記特定の肌状態が肌の弾力性（Ｕｒ／Ｕｆ）のパラメータに基づくものであり、
前記特定の環境由来菌は、国立遺伝研究所（National Institute of Genetics）の細菌データベース（MicrobeDB.jp）において規定される以下のＣ群から選ばれる環境に由来する環境由来菌のうち、１又は２以上であることを特徴とする請求項１に記載の診断方法。
（なお、菌又は該菌の属する菌属が検出された環境のうち、菌又は該菌の属する菌属の平均存在比率の最も高い環境を、該菌が由来する環境であるという。）
（Ｃ群）
［plant body associated 若しくは symbiotic microbe］、［agriculture associated］、［water associated］、［animal associated］、［park associated］、［land area］
【請求項５】
前記特定の肌状態がシミの少なさに基づくものであり、
前記特定の環境由来菌は、国立遺伝研究所（National Institute of Genetics）の細菌データベース（MicrobeDB.jp）において規定される以下のＤ群から選ばれる環境に由来する環境由来菌のうち、１又は２以上であることを特徴とする請求項１に記載の診断方法。
（なお、菌又は該菌の属する菌属が検出された環境のうち、菌又は該菌の属する菌属の平均存在比率の最も高い環境を、該菌が由来する環境であるという。）
（Ｄ群）
［plant body associated 若しくは symbiotic microbe］、［water associated］、［animal associated］、［animal body associated］、［land feature］
【請求項６】
前記特定の肌状態が角層水分量の多さに基づくものであり、
前記特定の環境由来菌は、国立遺伝研究所（National Institute of Genetics）の細菌データベース（MicrobeDB.jp）において規定される以下のＥ群から選ばれる環境に由来する環境由来菌のうち、１又は２であることを特徴とする請求項１に記載の診断方法。
（なお、菌又は該菌の属する菌属が検出された環境のうち、菌又は該菌の属する菌属の平均存在比率の最も高い環境を、該菌が由来する環境であるという。）
（Ｅ群）
［plant body associated 若しくは symbiotic microbe］、［agriculture associated］
【請求項７】
前記特定の肌状態が肌の黄味の少なさに基づくものであり、
前記特定の環境由来菌は、国立遺伝研究所（National Institute of Genetics）の細菌データベース（MicrobeDB.jp）において規定される［plant body associated 若しくは symbiotic microbe］に由来する環境由来菌であることを特徴とする請求項１に記載の診断方法。
（なお、菌又は該菌の属する菌属が検出された環境のうち、菌又は該菌の属する菌属の平均存在比率の最も高い環境を、該菌が由来する環境であるという。）
【請求項８】
前記特定の肌状態が頬部の凹凸の少なさに基づくものであり、
前記特定の環境由来菌は、国立遺伝研究所（National Institute of Genetics）の細菌データベース（MicrobeDB.jp）において規定される以下のＦ群から選ばれる環境に由来する環境由来菌のうち、１又は２以上であることを特徴とする請求項１に記載の診断方法。
（なお、菌又は該菌の属する菌属が検出された環境のうち、菌又は該菌の属する菌属の平均存在比率の最も高い環境を、該菌が由来する環境であるという。）
（Ｆ群）
［plant body associated 若しくは symbiotic microbe］、［agriculture associated］、［aquatic area 若しくは fluid in state］、［water associated］、［aquatic feature］、［animal associated］、［animal body associated］、［park associated］、［land area］、［land feature］、［fungi body associated］
【請求項９】
前記特定の肌状態が目立つ毛穴個数の少なさに基づくものであり、
前記特定の環境由来菌は、国立遺伝研究所（National Institute of Genetics）の細菌データベース（MicrobeDB.jp）において規定される以下のＧ群から選ばれる環境に由来する環境由来菌のうち、１又は２以上であることを特徴とする請求項１に記載の診断方法。
（なお、菌又は該菌の属する菌属が検出された環境のうち、菌又は該菌の属する菌属の平均存在比率の最も高い環境を、該菌が由来する環境であるという。）
（Ｇ群）
［plant body associated 若しくは symbiotic microbe］、［agriculture associated］、［aquatic area 若しくは fluid in state］、［water associated］、［aquatic feature］、［animal associated］、［animal body associated］、［park associated］、［land area］、［land feature］
【請求項１０】
前記特定の肌状態が紅斑指数の低さに基づくものであり、
前記特定の環境由来菌は、国立遺伝研究所（National Institute of Genetics）の細菌データベース（MicrobeDB.jp）において規定される以下のＨ群から選ばれる環境に由来する環境由来菌のうち、１又は２以上であることを特徴とする請求項１に記載の診断方法。
（なお、菌又は該菌の属する菌属が検出された環境のうち、菌又は該菌の属する菌属の平均存在比率の最も高い環境を、該菌が由来する環境であるという。）
（Ｈ群）
［plant body associated 若しくは symbiotic microbe］、［agriculture associated］、［water associated］、［animal associated］、［animal body associated］、［land feature］
【請求項１１】
前記特定の肌状態がキメ状態の良さに基づくものであり、
前記特定の環境由来菌は、国立遺伝研究所（National Institute of Genetics）の細菌データベース（MicrobeDB.jp）において規定される以下のＩ群から選ばれる環境に由来する環境由来菌のうち、１又は２以上であることを特徴とする請求項１に記載の診断方法。
（なお、菌又は該菌の属する菌属が検出された環境のうち、菌又は該菌の属する菌属の平均存在比率の最も高い環境を、該菌が由来する環境であるという。）
（Ｉ群）
［plant body associated 若しくは symbiotic microbe］、［agriculture associated］、［water associated］、［animal associated］、［land area］、［land feature］、［fungi body associated］
【請求項１２】
前記特定の肌状態が皮脂量の少なさに基づくものであり、
前記特定の環境由来菌は、国立遺伝研究所（National Institute of Genetics）の細菌データベース（MicrobeDB.jp）において規定される以下のＪ群から選ばれる環境に由来する環境由来菌のうち、１又は２以上であることを特徴とする請求項１に記載の診断方法。
（なお、菌又は該菌の属する菌属が検出された環境のうち、菌又は該菌の属する菌属の平均存在比率の最も高い環境を、該菌が由来する環境であるという。）
（Ｊ群）
［plant body associated 若しくは symbiotic microbe］、［agriculture associated］、［aquatic area 若しくは fluid in state］、［water associated］、［animal associated］、［animal body associated］、［land area］、［land feature］
【請求項１３】
前記特定の肌状態がシワ本数の少なさに基づくものであり、
前記特定の環境由来菌は、国立遺伝研究所（National Institute of Genetics）の細菌データベース（MicrobeDB.jp）において規定される以下のＫ群から選ばれる環境に由来する環境由来菌のうち、１又は２以上であることを特徴とする請求項１に記載の診断方法。
（なお、菌又は該菌の属する菌属が検出された環境のうち、菌又は該菌の属する菌属の平均存在比率の最も高い環境を、該菌が由来する環境であるという。）
（Ｋ群）
［plant body associated 若しくは symbiotic microbe］、［agriculture associated］、［animal associated］、［animal body associated］、［land feature］
【請求項１４】
前記特定の肌状態がメラニン指数の低さに基づくものであり、
前記特定の環境由来菌は、国立遺伝研究所（National Institute of Genetics）の細菌データベース（MicrobeDB.jp）において規定される以下のＬ群から選ばれる環境に由来する環境由来菌のうち、１又は２以上であることを特徴とする請求項１に記載の診断方法。
（なお、菌又は該菌の属する菌属が検出された環境のうち、菌又は該菌の属する菌属の平均存在比率の最も高い環境を、該菌が由来する環境であるという。）
（Ｌ群）
［agriculture associated］、［water associated］、［animal associated］、［animal body associated］、［land feature］
【請求項１５】
皮膚常在細菌叢の多様性の推測方法であって、
皮膚常在細菌叢に存在する菌の菌種を同定する菌種同定工程と、
同定した菌種と、環境由来菌情報と、に基づき前記皮膚常在細菌叢における特定の肌状態と相関のある特定の環境由来菌の菌量を計測する計測工程と、
計測結果に基づき、前記特定の環境由来菌の菌量が多いほど、皮膚常在細菌叢の多様性に富んでいると判定する判定工程と、を有し、
前記環境由来菌情報は、菌種又は菌属に関する情報と、その菌種又は菌属の検出された環境に関する情報と、を紐づけた情報であり、
前記特定の肌状態は、前記多様性と相関のある肌状態であることを特徴とする、推測方法。
【請求項１６】
皮膚常在細菌叢における多様性を解析する多様性解析工程と、
解析結果に基づき、前記多様性に富んでいるほど、前記皮膚常在細菌叢における特定の肌状態と相関のある特定の環境由来菌の菌量が多いと判定する判定工程と、
を有し、
前記特定の肌状態は、前記多様性と相関のある肌状態であることを特徴とする、皮膚常在細菌叢における前記特定の環境由来菌の菌量の推測方法。
【請求項１７】
特定の肌状態と相関のある菌の属性を解析する方法であって、
前記特定の肌状態の良い被験者群と悪い被験者群の皮膚常在細菌叢に存在する菌において、両群間で菌量に差のある菌種又は菌属を特定する特定工程と、
前記特定工程で特定された菌種又は菌属の属性に関する情報を取得することを特徴とする、解析方法。
【請求項１８】
前記属性が、前記特定工程で特定された菌の由来環境であることを特徴とする、請求項１７に記載の方法。
【請求項１９】
肌状態の改善作用を有する物質又は美容方法のスクリーニング方法であって、
特定の肌状態と相関のある特定の環境由来菌の菌量が増えるほど、肌状態の改善作用に優れると判定することを特徴とする、肌状態の改善作用を有する物質又は美容方法のスクリーニング方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
口腔の細菌叢が様々な疾患と関連を有することが近年報告されている。たとえば、特許文献１には、細菌叢における菌種の多様性を身体状態の指標とする技術が開示されている。
【０００２】
また、特許文献２、３にあるように、特定の菌種と肌状態の関係についても従来知られている。
【先行技術文献】
【特許文献】
【０００３】
【特許文献１】特開２０１７−２９１３３号公報
【特許文献２】特開２０１７−２０９０５５号公報
【特許文献３】特表２０１６−５２８８８０号公報
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００４】
前述の特許文献１に記載の技術では、多様性のみを指標とし、皮膚細菌叢中の菌の種類を問わないため、肌状態の診断結果にブレが生じることが課題としてあった。
そのため、皮膚常在細菌叢を利用し行われる肌状態の診断方法において、より効率よくかつ的確に肌状態を診断する技術が求められていた。
【０００５】
肌状態をより効率よくかつ的確に診断するための指標を求め鋭意研究に励んだ結果、肌状態が良好な被験者の細菌叢に存在する菌の種類に偏りがあることを見出し、本発明を完成させた。
【課題を解決するための手段】
【０００６】
すなわち、本発明は、
特定の肌状態の診断方法であって、
皮膚常在細菌叢に存在する菌の菌種を同定する菌種同定工程と、
同定した菌種と、環境由来菌情報と、に基づき前記皮膚常在細菌叢における前記特定の肌状態と相関のある特定の環境由来菌の菌量を計測する計測工程と、
計測結果に基づき、前記特定の環境由来菌の菌量が多いほど、前記特定の肌状態が好ましいと判定する判定工程と、
を有し、
前記環境由来菌情報は、菌種又は菌属に関する情報と、その菌種又は菌属の検出された環境に関する情報と、を紐づけた情報であることを特徴とする、診断方法である。
【０００７】
本発明によれば、特定の肌状態と相関のある特定の環境由来菌の菌量によって、直接肌を検査することなく、非侵襲的に、肌状態を診断することができる。
【０００８】
本発明の好ましい形態では、
前記特定の肌状態がＴＥＷＬ（経皮水分蒸散量）のパラメータに基づくものであり、
前記特定の環境由来菌は、国立遺伝研究所（National Institute of Genetics）の細菌データベース（MicrobeDB.jp）において規定される以下のＡ群から選ばれる環境に由来する環境由来菌のうち、１又は２以上であることを特徴とする。
（なお、菌又は該菌の属する菌属が検出された環境のうち、菌又は該菌の属する菌属の平均存在比率の最も高い環境を、該菌が由来する環境であるという。）
（Ａ群）
［plant body associated 若しくは symbiotic microbe］、［agriculture associated］、［aquatic area 若しくは fluid in state］、［animal associated］、［animal body associated］、［land feature］
【０００９】
本発明の好ましい形態によれば、上記Ａ群から選ばれる環境に由来する環境由来菌の菌量によって、直接肌を検査することなく、非侵襲的に、ＴＥＷＬ（経皮水分蒸散量）のパラメータに基づく肌状態を診断することができる。
【００１０】
また、本発明の好ましい形態では、
前記特定の肌状態が皮膚の明るさ（Ｌ＊）のパラメータに基づくものであり、
前記特定の環境由来菌は、国立遺伝研究所（National Institute of Genetics）の細菌データベース（MicrobeDB.jp）において規定される以下のＢ群から選ばれる環境に由来する環境由来菌のうち、１又は２以上であることを特徴とする。
（なお、菌又は該菌の属する菌属が検出された環境のうち、菌又は該菌の属する菌属の平均存在比率の最も高い環境を、該菌が由来する環境であるという。）
（Ｂ群）
［plant body associated 若しくは symbiotic microbe］、［agriculture associated］、［water associated］、［land feature］
【００１１】
本発明の好ましい形態によれば、上記Ｂ群から選ばれる環境に由来する環境由来菌の菌量によって、直接肌を検査することなく、非侵襲的に、皮膚の明るさ（Ｌ＊）のパラメータに基づく肌状態を診断することができる。
【００１２】
また、本発明の好ましい形態では、
前記特定の肌状態が肌の弾力性（Ｕｒ／Ｕｆ）のパラメータに基づくものであり、
前記特定の環境由来菌は、国立遺伝研究所（National Institute of Genetics）の細菌データベース（MicrobeDB.jp）において規定される以下のＣ群から選ばれる環境に由来する環境由来菌のうち、１又は２以上であることを特徴とする。
（なお、菌又は該菌の属する菌属が検出された環境のうち、菌又は該菌の属する菌属の平均存在比率の最も高い環境を、該菌が由来する環境であるという。）
（Ｃ群）
［plant body associated 若しくは symbiotic microbe］、［agriculture associated］、［water associated］、［animal associated］、［park associated］、［land area］
【００１３】
本発明の好ましい形態によれば、上記Ｃ群から選ばれる環境に由来する環境由来菌の菌量によって、直接肌を検査することなく、非侵襲的に、肌の弾力性（Ｕｒ／Ｕｆ）のパラメータに基づく肌状態を診断することができる。
【００１４】
また、本発明の好ましい形態では、
前記特定の肌状態がシミの少なさに基づくものであり、
前記特定の環境由来菌は、国立遺伝研究所（National Institute of Genetics）の細菌データベース（MicrobeDB.jp）において規定される以下のＤ群から選ばれる環境に由来する環境由来菌のうち、１又は２以上であることを特徴とする。
（なお、菌又は該菌の属する菌属が検出された環境のうち、菌又は該菌の属する菌属の平均存在比率の最も高い環境を、該菌が由来する環境であるという。）
（Ｄ群）
［plant body associated 若しくは symbiotic microbe］、［water associated］、［animal associated］、［animal body associated］、［land feature］
【００１５】
本発明の好ましい形態によれば、上記Ｄ群から選ばれる環境に由来する環境由来菌の菌量によって、直接肌を検査することなく、非侵襲的に、シミの少なさに基づく肌状態を診断することができる。
【００１６】
また、本発明の好ましい形態では、
前記特定の肌状態が角層水分量の多さに基づくものであり、
前記特定の環境由来菌は、国立遺伝研究所（National Institute of Genetics）の細菌データベース（MicrobeDB.jp）において規定される以下のＥ群から選ばれる環境に由来する環境由来菌のうち、１又は２であることを特徴とする。
（なお、菌又は該菌の属する菌属が検出された環境のうち、菌又は該菌の属する菌属の平均存在比率の最も高い環境を、該菌が由来する環境であるという。）
（Ｅ群）
［plant body associated 若しくは symbiotic microbe］、［agriculture associated］
【００１７】
本発明の好ましい形態によれば、上記Ｅ群から選ばれる環境に由来する環境由来菌の菌量によって、直接肌を検査することなく、非侵襲的に、角層水分量の多さに基づく肌状態を診断することができる。
【００１８】
また、本発明の好ましい形態では、
前記特定の肌状態が肌の黄味の少なさに基づくものであり、
前記特定の環境由来菌は、国立遺伝研究所（National Institute of Genetics）の細菌データベース（MicrobeDB.jp）において規定される［plant body associated 若しくは symbiotic microbe］に由来する環境由来菌であることを特徴とする。
【００１９】
本発明の好ましい形態によれば、上記環境由来菌の菌量によって、直接肌を検査することなく、非侵襲的に、肌の黄味の少なさに基づく肌状態を診断することができる。
【００２０】
また、本発明の好ましい形態では、
前記特定の肌状態が頬部の凹凸の少なさに基づくものであり、
前記特定の環境由来菌は、国立遺伝研究所（National Institute of Genetics）の細菌データベース（MicrobeDB.jp）において規定される以下のＦ群から選ばれる環境に由来する環境由来菌のうち、１又は２以上であることを特徴とする。
（なお、菌又は該菌の属する菌属が検出された環境のうち、菌又は該菌の属する菌属の平均存在比率の最も高い環境を、該菌が由来する環境であるという。）
（Ｆ群）
［plant body associated 若しくは symbiotic microbe］、［agriculture associated］、［aquatic area 若しくは fluid in state］、［water associated］、［aquatic feature］、［animal associated］、［animal body associated］、［park associated］、［land area］、［land feature］、［fungi body associated］
【００２１】
本発明の好ましい形態によれば、上記Ｆ群から選ばれる環境に由来する環境由来菌の菌量によって、直接肌を検査することなく、非侵襲的に、頬部の凹凸の少なさに基づく肌状態を診断することができる。
【００２２】
また、本発明の好ましい形態では、
前記特定の肌状態が目立つ毛穴個数の少なさに基づくものであり、
前記特定の環境由来菌は、国立遺伝研究所（National Institute of Genetics）の細菌データベース（MicrobeDB.jp）において規定される以下のＧ群から選ばれる環境に由来する環境由来菌のうち、１又は２以上であることを特徴とする。
（なお、菌又は該菌の属する菌属が検出された環境のうち、菌又は該菌の属する菌属の平均存在比率の最も高い環境を、該菌が由来する環境であるという。）
（Ｇ群）
［plant body associated 若しくは symbiotic microbe］、［agriculture associated］、［aquatic area 若しくは fluid in state］、［water associated］、［aquatic feature］、［animal associated］、［animal body associated］、［park associated］、［land area］、［land feature］
【００２３】
本発明の好ましい形態によれば、上記Ｇ群から選ばれる環境に由来する環境由来菌の菌量によって、直接肌を検査することなく、非侵襲的に、目立つ毛穴個数の少なさに基づく肌状態を診断することができる。
【００２４】
また、本発明の好ましい形態では、
前記特定の肌状態が紅斑指数の低さに基づくものであり、
前記特定の環境由来菌は、国立遺伝研究所（National Institute of Genetics）の細菌データベース（MicrobeDB.jp）において規定される以下のＨ群から選ばれる環境に由来する環境由来菌のうち、１又は２以上であることを特徴とする。
（なお、菌又は該菌の属する菌属が検出された環境のうち、菌又は該菌の属する菌属の平均存在比率の最も高い環境を、該菌が由来する環境であるという。）
（Ｈ群）
［plant body associated 若しくは symbiotic microbe］、［agriculture associated］、［water associated］、［animal associated］、［animal body associated］、［land feature］
【００２５】
本発明の好ましい形態によれば、上記Ｈ群から選ばれる環境に由来する環境由来菌の菌量によって、直接肌を検査することなく、非侵襲的に、紅斑指数の低さに基づく肌状態を診断することができる。
【００２６】
また、本発明の好ましい形態では、
前記特定の肌状態がキメ状態の良さに基づくものであり、
前記特定の環境由来菌は、国立遺伝研究所（National Institute of Genetics）の細菌データベース（MicrobeDB.jp）において規定される以下のＩ群から選ばれる環境に由来する環境由来菌のうち、１又は２以上であることを特徴とする。
（なお、菌又は該菌の属する菌属が検出された環境のうち、菌又は該菌の属する菌属の平均存在比率の最も高い環境を、該菌が由来する環境であるという。）
（Ｉ群）
［plant body associated 若しくは symbiotic microbe］、［agriculture associated］、［water associated］、［animal associated］、［land area］、［land feature］、［fungi body associated］
【００２７】
本発明の好ましい形態によれば、上記Ｉ群から選ばれる環境に由来する環境由来菌の菌量によって、直接肌を検査することなく、非侵襲的に、キメ状態の良さに基づく肌状態を診断することができる。
【００２８】
また、本発明の好ましい形態では、
前記特定の肌状態が皮脂量の少なさに基づくものであり、
前記特定の環境由来菌は、国立遺伝研究所（National Institute of Genetics）の細菌データベース（MicrobeDB.jp）において規定される以下のＪ群から選ばれる環境に由来する環境由来菌のうち、１又は２以上であることを特徴とする。
（なお、菌又は該菌の属する菌属が検出された環境のうち、菌又は該菌の属する菌属の平均存在比率の最も高い環境を、該菌が由来する環境であるという。）
（Ｊ群）
［plant body associated 若しくは symbiotic microbe］、［agriculture associated］、［aquatic area 若しくは fluid in state］、［water associated］、［animal associated］、［animal body associated］、［land area］、［land feature］
【００２９】
本発明の好ましい形態によれば、上記Ｊ群から選ばれる環境に由来する環境由来菌の菌量によって、直接肌を検査することなく、非侵襲的に、皮脂量の少なさに基づく肌状態を診断することができる。
【００３０】
また、本発明の好ましい形態では、
前記特定の肌状態がシワ本数の少なさに基づくものであり、
前記特定の環境由来菌は、国立遺伝研究所（National Institute of Genetics）の細菌データベース（MicrobeDB.jp）において規定される以下のＫ群から選ばれる環境に由来する環境由来菌のうち、１又は２以上であることを特徴とする。
（なお、菌又は該菌の属する菌属が検出された環境のうち、菌又は該菌の属する菌属の平均存在比率の最も高い環境を、該菌が由来する環境であるという。）
（Ｋ群）
［plant body associated 若しくは symbiotic microbe］、［agriculture associated］、［animal associated］、［animal body associated］、［land feature］
【００３１】
本発明の好ましい形態によれば、上記Ｋ群から選ばれる環境に由来する環境由来菌の菌量によって、直接肌を検査することなく、非侵襲的に、シワ本数の少なさに基づく肌状態を診断することができる。
【００３２】
また、本発明の好ましい形態では、
前記特定の肌状態がメラニン指数の低さに基づくものであり、
前記特定の環境由来菌は、国立遺伝研究所（National Institute of Genetics）の細菌データベース（MicrobeDB.jp）において規定される以下のＬ群から選ばれる環境に由来する環境由来菌のうち、１又は２以上であることを特徴とする。
（なお、菌又は該菌の属する菌属が検出された環境のうち、菌又は該菌の属する菌属の平均存在比率の最も高い環境を、該菌が由来する環境であるという。）
（Ｌ群）
［agriculture associated］、［water associated］、［animal associated］、［animal body associated］、［land feature］
【００３３】
本発明の好ましい形態によれば、上記Ｌ群から選ばれる環境に由来する環境由来菌の菌量によって、直接肌を検査することなく、非侵襲的に、メラニン指数の低さに基づく肌状態を診断することができる。
【００３４】
また、本発明は、
皮膚常在細菌叢の多様性の推測方法であって、
皮膚常在細菌叢に存在する菌の菌種を同定する菌種同定工程と、
同定した菌種と、環境由来菌情報と、に基づき前記皮膚常在細菌叢における特定の肌状態と相関のある特定の環境由来菌の菌量を計測する計測工程と、
計測結果に基づき、前記特定の環境由来菌の菌量が多いほど、皮膚常在細菌叢の多様性に富んでいると判定する判定工程と、を有し、
前記環境由来菌情報は、菌種又は菌属に関する情報と、その菌種又は菌属の検出された環境に関する情報と、を紐づけた情報であり、
前記特定の肌状態は、前記多様性と相関のある肌状態であることを特徴とする、推測方法でもある。
【００３５】
本発明によれば、特定の肌状態と相関のある特定の環境由来菌の菌量によって、直接肌を検査することなく、非侵襲的に、皮膚常在細菌叢の多様性を推測することができる。
【００３６】
また、本発明は、
皮膚常在細菌叢における多様性を解析する多様性解析工程と、
解析結果に基づき、前記多様性に富んでいるほど、前記皮膚常在細菌叢における特定の肌状態と相関のある特定の環境由来菌の菌量が多いと判定する判定工程と、
を有し、
前記特定の肌状態は、前記多様性と相関のある肌状態であることを特徴とする、皮膚常在細菌叢における前記特定の環境由来菌の菌量の推測方法でもある。
【００３７】
本発明によれば、皮膚常在細菌叢における多様性によって、直接肌を検査することなく、非侵襲的に、特定の肌状態と相関のある特定の環境由来菌の菌量を推測することができる。
【００３８】
また、本発明は、
特定の肌状態と相関のある菌の属性を解析する方法であって、
前記特定の肌状態の良い被験者群と悪い被験者群の皮膚常在細菌叢に存在する菌において、両群間で菌量に差のある菌種又は菌属を特定する特定工程と、
前記特定工程で特定された菌種又は菌属の属性に関する情報を取得することを特徴とする、解析方法でもある。
【００３９】
また、本発明の好ましい形態では、
前記属性が、前記特定工程で特定された菌の由来環境であることを特徴とする。
【００４０】
また、本発明は、肌状態の改善作用を有する物質又は美容方法のスクリーニング方法であって、
特定の肌状態と相関のある特定の環境由来菌の菌量が増えるほど、肌状態の改善作用に優れると判定することを特徴とする、肌状態の改善作用を有する物質又は美容方法のスクリーニング方法でもある。
本発明によれば、特定の肌状態と相関のある特定の環境由来菌の菌量に依って、直接肌を検査することなく、非侵襲的に、肌状態の改善作用を有する物質又は美容方法をスクリーニングすることができる。
【発明の効果】
【００４１】
本発明によれば、特定の肌状態と相関のある特定の環境由来菌の菌量によって、直接肌を検査することなく、非侵襲的に、肌状態を診断することができる。
【図面の簡単な説明】
【００４２】
【図１】国立遺伝研究所（National Institute of Genetics）の細菌データベース（MicrobeDB.jp）において規定される、「Environmental composition of Meta 16s」のリストデータを示す参考図である。
【図２】ＴＥＷＬ（経皮水分蒸散量）の良好な被験者群に存在する環境由来菌の菌量を示すグラフである。
【図３】皮膚の明るさ（Ｌ＊）の良好な被験者群に存在する環境由来菌の菌量を示すグラフである。
【図４】肌の弾力性（Ｕｒ／Ｕｆ）の良好な被験者群に存在する環境由来菌の菌量を示すグラフである。
【図５】シミの少ない被験者群に存在する環境由来菌の菌量を示すグラフである。
【図６】角層水分量の多い被験者群に存在する環境由来菌の菌量を示すグラフである。
【図７】黄味の少ない被験者群に存在する環境由来菌の菌量を示すグラフである。
【図８】頬部の凹凸の少ない被験者群に存在する環境由来菌の菌量を示すグラフである。
【図９】目立つ毛穴個数の少ない被験者群に存在する環境由来菌の菌量を示すグラフである。
【図１０】紅斑指数の低い被験者群に存在する環境由来菌の菌量を示すグラフである。
【図１１】キメ状態の良い被験者群に存在する環境由来菌の菌量を示すグラフである。
【図１２】皮脂量の少ない被験者群に存在する環境由来菌の菌量を示すグラフである。
【図１３】シワ本数の少ない被験者群に存在する環境由来菌の菌量を示すグラフである。
【図１４】メラニン指数の低い被験者群に存在する環境由来菌の菌量を示すグラフである。
【図１５】目立つ毛穴個数の少ない被験者群と、目立つ毛穴個数の多い被験者群との間の、皮膚常在細菌叢における多様性を比較したグラフである。
【図１６】皮脂量の少ない被験者群と、皮脂量の多い被験者群との間の、皮膚常在細菌叢における多様性を比較したグラフである。
【図１７】紅斑指数の低い被験者群と、紅斑指数の高い被験者群との間の、皮膚常在細菌叢における多様性を比較したグラフである。
【図１８】ＴＥＷＬ（経皮水分蒸散量）の良好な被験者群と、ＴＥＷＬ（経皮水分蒸散量）の悪い被験者群との間の、皮膚常在細菌叢における多様性を比較したグラフである。
【図１９】メラニン指数の低い被験者群と、メラニン指数の高い被験者群との間の、皮膚常在細菌叢における多様性を比較したグラフである。
【図２０】皮膚の明るさ（Ｌ＊）の良好な被験者群と、皮膚の明るさ（Ｌ＊）の悪い被験者群との間の、皮膚常在細菌叢における多様性を比較したグラフである。
【発明を実施するための形態】
【００４３】
＜１＞肌状態の診断方法
以下、本発明の肌状態の診断方法における、好ましい実施形態について説明するが、本発明の技術的範囲は以下の実施形態に限定されないことは言うまでもない。
【００４４】
本発明の診断方法は、
皮膚常在細菌叢に存在する菌の菌種を同定する菌種同定工程と、
同定した菌種と、環境由来菌情報と、に基づき皮膚常在細菌叢における特定の肌状態と相関のある特定の環境由来菌の菌量を計測する計測工程と、
計測結果に基づき、特定の環境由来菌の菌量が多いほど、特定の肌状態が好ましいと判定する判定工程と、を有することを特徴とする。
ここで、環境由来菌情報は、菌種又は菌属に関する情報と、その菌種又は菌属の検出された環境に関する情報と、を紐づけた情報であることを特徴とする。
【００４５】
以下、本実施例の診断方法の各工程について、詳細に説明する。
【００４６】
（１）菌種同定工程
本発明の実施形態において、菌種同定工程は皮膚常在細菌叢に存在する菌の菌種を同定する工程である。
【００４７】
皮膚常在細菌叢を採取する方法は、皮膚常在細菌叢を採取することができれば特に制限はないが、Ｓｗａｂ法を好ましく例示できる。
【００４８】
採取した皮膚常在細菌叢を解析する方法としては、皮膚常在細菌叢における細菌の様態について解析できる方法であれば特に制限はなく、免疫学的手法、質量分析法、ＰＣＲ法、ＤＮＡシークエンスなどを利用する方法が挙げられるが、特に好ましくは次世代シークエンサーを用いた１６ＳｒＲＮＡ系統解析を好ましく例示できる。
【００４９】
１６ＳｒＲＮＡ系統解析は、次世代シークエンサーを用いてサンプル中に含まれる細菌種の同定を行う解析手法である。当該解析においては、まず、サンプルからＤＮＡを抽出し、リボソーム１６Ｓサブユニット領域をＰＣＲで増幅した後、次世代シークエンサーを用いて高速かつ大量にアンプリコンのＤＮＡ配列を読み取る。その後、低クオリティリードやキメラ配列の除去を行った後、配列同士をクラスタリングしてＯＴＵ（Ｏｐｅｒａｔｉｏｎａｌ  Ｔａｘｏｎｏｍｉｃ  Ｕｎｉｔ）解析を行う。ＯＴＵとは、ある一定以上の類似性（一般的には９６−９７％）を持つ配列同士を一つの菌種のように扱うための操作上の分類単位である。そして、各ＯＴＵのＤＮＡ配列を菌のＤＮＡ配列データベースと照合することにより、属種名の同定を行うことができる。
【００５０】
また、ＯＴＵ数はサンプル中に含まれる菌叢を構成する菌種の数を表し、同一のＯＴＵに属するリードの数はその種の相対的な存在量を表す。したがって、同一のＯＴＵに属するリードの数に基づき、サンプルに含まれる細菌叢における特定の菌種の占有率を算出することができる。
【００５１】
さらに、それぞれの菌種の占有率のデータに基づき、たとえばＳｉｍｐｓｏｎ  ＩｎｄｅｘやＳｈａｎｎｏｎ  ｄｉｖｅｒｓｉｔｙ  ｉｎｄｅｘなどの指数を算出することにより、皮膚常在細菌叢の多様性も算出することができる。
【００５２】
ＯＴＵ解析に基づく、皮膚常在細菌叢に存在する特定の菌種の占有率の算出も、皮膚常在細菌叢の多様性の算出も、市販の１６ＳｒＲＮＡ系統解析ソフトにより容易に行うことができる。
【００５３】
なお、１６ＳｒＲＮＡ系統解析により皮膚常在細菌叢に存在する特定の菌種の解析を行う場合であっても、皮膚常在細菌叢に存在する特定の菌種の占有率の算出、並びに、皮膚常在細菌叢の多様性の算出はＯＴＵ解析以外の手法によって行ってもよい。
【００５４】
（２）計測工程
計測工程は、同定した菌種と、環境由来菌情報と、に基づき皮膚常在細菌叢における特定の肌状態と相関のある特定の環境由来菌の菌量を計測する工程である。
【００５５】
計測工程は環境由来菌情報を備えるデータベースに同定した菌種を照合する工程を含む形態とすることがより好ましい。
【００５６】
また、計測工程は環境由来菌情報を備えるデータベースが備える検索欄に同定した菌種を記入する工程を含む形態とすることがさらに好ましい。
【００５７】
また、環境由来菌情報を備えるデータベースは、各細菌の環境中での平均存在比率に関する情報を有するデータベースであることが好ましい。ここで、各細菌の環境中での平均存在比率は、既に報告された文献情報をメタ解析することにより算出されたものであることが、より好ましい。
【００５８】
また、環境由来菌情報を備えるデータベースは、国立遺伝研究所（National Institute of Genetics）の細菌データベース（MicrobeDB.jp）であることがさらに好ましい。
【００５９】
本発明において、国立遺伝研究所（National Institute of Genetics）の細菌データベース（MicrobeDB.jp）において規定される、「Environmental composition of Meta 16s」のリストデータのうち、最上位の環境をその細菌の由来環境とすることがより好ましい（図１  参照）。
【００６０】
また、本明細書において、「特定の肌状態と相関のある特定の環境由来菌の菌量を計測する」とは、同一の由来環境の菌の総量を計測することをいう。
【００６１】
また、本発明でいう環境由来菌情報は、菌種又は菌属に関する情報と、その菌種又は菌属の検出された環境に関する情報と、を紐づけた情報である。
【００６２】
環境由来菌情報は、菌種又は菌属に関する情報と、国立遺伝研究所（National Institute of Genetics）の細菌データベース（MicrobeDB.jp）において規定される菌の由来環境であって、菌が検出された環境のうち該菌の平均存在比率の最も高い環境に関する情報とを、紐づけた情報であることが好ましい。
【００６３】
本発明においては、２以上の環境由来菌の菌量を計測する形態とすることが好ましい。
このような形態とすることで、より効率よく肌状態を診断することができる。
【００６４】
（３）判定工程
判定工程は、計測結果に基づき、特定の環境由来菌の菌量が多いほど、特定の肌状態が好ましいと判定する工程である。
【００６５】
ここで、特定の環境由来菌の菌量が多いほど、特定の肌状態が好ましいと判定するための方法は特に限定されない。
【００６６】
たとえば、統計学的に有意な人数に対して、従来の手法による肌状態の診断と、皮膚常在細菌叢の解析を行うことで、皮膚常在細菌叢に存在する特定の菌の菌量と肌状態の相関についてのデータベースを予め作成しておき、被験者の皮膚常在細菌叢に存在する特定の菌の菌量を当該データベースと照合することにより被験者の肌状態を診断する実施の形態が好ましく挙げられる。
【００６７】
複数の被験者の皮膚常在細菌叢に存在する特定の菌の菌量に基づき、被験者間での肌状態の優劣を診断する実施の形態としてもよい。
また、同一被験者から取得した複数の皮膚常在細菌叢に存在する特定の菌の菌量に基づき、相対的に肌状態を診断する実施の形態としてもよい。
また、被験者から取得した皮膚常在細菌叢を、既に用意された指標と照らし合わせることにより、肌状態を診断する実施の形態としてもよい。
【００６８】
上述の通り、皮膚常在細菌叢における前記特定の肌状態と相関のある特定の環境由来菌の菌量を指標とし、肌状態を診断する。
【００６９】
以下、本発明の診断方法における、好ましい実施の形態について詳述する。
【００７０】
本発明の実施の形態では、国立遺伝研究所（National Institute of Genetics）の細菌データベース（MicrobeDB.jp）において規定される以下のＡ群から選ばれる環境に由来する環境由来菌のうち、１又は２以上の環境由来菌の菌量が多いほど、ＴＥＷＬ（経皮水分蒸散量）のパラメータに基づく肌状態が好ましいと判定する形態とすることが好ましい。
ここで、菌又は該菌の属する菌属が検出された環境のうち、菌又は該菌の属する菌属の平均存在比率の最も高い環境を、該菌が由来する環境であるとする。
（Ａ群）
［plant body associated 若しくは symbiotic microbe］、［agriculture associated］、［aquatic area 若しくは fluid in state］、［animal associated］、［animal body associated］、［land feature］
【００７１】
本発明の好ましい実施の形態によれば、上記Ａ群から選ばれる環境に由来する環境由来菌の菌量によって、直接肌を検査することなく、非侵襲的に、ＴＥＷＬ（経皮水分蒸散量）のパラメータに基づく肌状態を診断することができる。
【００７２】
本発明の実施の形態では、Ａ群から選ばれる環境に由来する環境由来菌のうち、２以上、より好ましくは３以上、さらに好ましくは４以上、さらに好ましくは５以上、さらに好ましくは全ての環境由来菌の菌量が多いほど、ＴＥＷＬ（経皮水分蒸散量）のパラメータに基づく肌状態が好ましいと判定することが好ましい。
【００７３】
本発明の実施の形態では、［plant body associated 若しくは symbiotic microbe］、［agriculture associated］、［animal body associated］の環境から選ばれる環境に由来する環境由来菌のうち、１又は２以上の環境由来菌の菌量が多いほど、ＴＥＷＬ（経皮水分蒸散量）のパラメータに基づく肌状態が好ましいと判定する形態とすることがより好ましい。
【００７４】
また、［aquatic area 若しくは fluid in state］及び／又は［animal associated］の環境に由来する環境由来菌の菌量が、［plant body associated 若しくは symbiotic microbe］、［agriculture associated］、［animal body associated］、［land feature］の環境から選ばれる環境に由来する環境由来菌のうち、１又は２以上の環境由来菌のそれぞれの菌量の３分の１以下であるときに、ＴＥＷＬ（経皮水分蒸散量）のパラメータに基づく肌状態が好ましいと判定する形態とすることがさらに好ましい。
【００７５】
本発明の実施の形態では、［plant body associated 若しくは symbiotic microbe］、［agriculture associated］、［animal body associated］の環境から選ばれる環境に由来する環境由来菌のうち、２以上、さらに好ましくは全ての環境由来菌の菌量が多いほど、ＴＥＷＬ（経皮水分蒸散量）のパラメータに基づく肌状態が好ましいと判定することが好ましい。
【００７６】
本発明は、Ａ群のうち、好ましくは［plant body associated 若しくは symbiotic microbe］の環境に由来する菌の菌量が多いほど、ＴＥＷＬ（経皮水分蒸散量）のパラメータに基づく肌状態が好ましいと判定する形態とすることがさらに好ましい。
【００７７】
また、［agriculture associated］、［aquatic area 若しくは fluid in state］、［animal associated］、［animal body associated］、［land feature］の環境から選ばれる環境に由来する環境由来菌のうち、１又は２以上の環境由来菌のそれぞれの菌量が、［plant body associated 若しくは symbiotic microbe］の環境から選ばれる環境に由来する環境由来菌のうち、１又は２以上の環境由来菌のそれぞれの菌量の１０分の１以下であるときに、ＴＥＷＬ（経皮水分蒸散量）のパラメータに基づく肌状態が好ましいと判定する形態とすることがさらに好ましい。
【００７８】
本発明の肌状態の診断方法は、国立遺伝研究所（National Institute of Genetics）の細菌データベース（MicrobeDB.jp）において規定される以下のＢ群の環境から選ばれる環境に由来する環境由来菌のうち、１又は２以上の環境由来菌の菌量が多いほど、皮膚の明るさ（Ｌ＊）のパラメータに基づく肌状態が好ましいと判定する形態とすることが好ましい。
ここで、菌又は該菌の属する菌属が検出された環境のうち、菌又は該菌の属する菌属の平均存在比率の最も高い環境を、該菌が由来する環境であるとする。
（Ｂ群）
［plant body associated 若しくは symbiotic microbe］、［agriculture associated］、［water associated］、［land feature］
【００７９】
本発明の好ましい形態によれば、上記Ｂ群から選ばれる環境に由来する環境由来菌の菌量によって、直接肌を検査することなく、非侵襲的に、皮膚の明るさ（Ｌ＊）のパラメータに基づく肌状態を診断することができる。
【００８０】
本発明の実施の形態では、Ｂ群から選ばれる環境に由来する環境由来菌のうち、２以上、より好ましくは３以上、さらに好ましくは全ての環境由来菌の菌量が多いほど、皮膚の明るさ（Ｌ＊）のパラメータに基づく肌状態が好ましいと判定することが好ましい。
【００８１】
また、本発明は、Ｂ群のうち、［agriculture associated］の環境に由来する環境由来菌の菌量が多いほど、皮膚の明るさ（Ｌ＊）のパラメータに基づく肌状態が好ましいと判定する形態とすることがさらに好ましい。
【００８２】
また、［plant body associated 若しくは symbiotic microbe］、［water associated］、［land feature］の環境から選ばれる環境に由来する環境由来菌のうち、１又は２以上の環境由来菌のそれぞれの菌量が、［agriculture associated］から選ばれる環境に由来する環境由来菌の菌量の１０分の１以下であるときに、皮膚の明るさ（Ｌ＊）のパラメータに基づく肌状態に基づく肌状態が好ましいと判定する形態とすることがさらに好ましい。
【００８３】
本発明の肌状態の診断方法は、国立遺伝研究所（National Institute of Genetics）の細菌データベース（MicrobeDB.jp）において規定される以下のＣ群から選ばれる環境に由来する環境由来菌のうち、１又は２以上の環境由来菌の菌量が多いほど、肌の弾力性（Ｕｒ／Ｕｆ）のパラメータに基づく肌状態が好ましいと判定する形態とすることが好ましい。
（Ｃ群）
［plant body associated 若しくは symbiotic microbe］、［agriculture associated］、［water associated］、［animal associated］、［park associated］、［land area］
【００８４】
本発明の好ましい形態によれば、上記Ｃ群から選ばれる環境に由来する環境由来菌の菌量によって、直接肌を検査することなく、非侵襲的に、肌の弾力性（Ｕｒ／Ｕｆ）のパラメータに基づく肌状態を診断することができる。
【００８５】
本発明の実施の形態では、Ｃ群から選ばれる環境に由来する環境由来菌のうち、２以上、より好ましくは３以上、さらに好ましくは４以上、さらに好ましくは５以上、さらに好ましくは全ての環境由来菌の菌量が多いほど、肌の弾力性（Ｕｒ／Ｕｆ）のパラメータに基づく肌状態が好ましいと判定することが好ましい。
【００８６】
また、本発明は、Ｃ群のうち、［agriculture associated］の環境に由来する環境由来菌の菌量が多いほど、肌の弾力性（Ｕｒ／Ｕｆ）のパラメータに基づく肌状態が好ましいと判定する形態とすることがさらに好ましい。
【００８７】
また、［plant body associated 若しくは symbiotic microbe］、［water associated］、［animal associated］［park associated］、［land area］の環境から選ばれる環境に由来する環境由来菌のうち、１又は２以上の環境由来菌のそれぞれの菌量が、［agriculture associated］から選ばれる環境に由来する環境由来菌の菌量の１０分の１以下であるときに、肌の弾力性（Ｕｒ／Ｕｆ）のパラメータに基づく肌状態に基づく肌状態が好ましいと判定する形態とすることがさらに好ましい。
【００８８】
本発明の肌状態の診断方法は、国立遺伝研究所（National Institute of Genetics）の細菌データベース（MicrobeDB.jp）において規定される以下のＤ群から選ばれる環境に由来する環境由来菌のうち、１又は２以上の環境由来菌の菌量が多いほど、シミの少なさに基づく肌状態が好ましいと判定する形態とすることが好ましい。
ここで、菌又は該菌の属する菌属が検出された環境のうち、菌又は該菌の属する菌属の平均存在比率の最も高い環境を、該菌が由来する環境であるとする。
（Ｄ群）
［plant body associated 若しくは symbiotic microbe］、［water associated］、［animal associated］、［animal body associated］、［land feature］
【００８９】
本発明の好ましい形態によれば、上記Ｄ群から選ばれる環境に由来する環境由来菌の菌量によって、直接肌を検査することなく、非侵襲的に、シミの少なさに基づく肌状態を診断することができる。
【００９０】
本発明の実施の形態では、Ｄ群から選ばれる環境に由来する環境由来菌のうち、２以上、より好ましくは３以上、さらに好ましくは４以上、さらに好ましくは全ての環境由来菌の菌量が多いほど、シミの少なさに基づく肌状態が好ましいと判定することが好ましい。
【００９１】
また、本発明は、Ｄ群のうち、［plant body associated 若しくは symbiotic microbe］及び／又は［land feature］から選ばれる環境に由来する環境由来菌の菌量が多いほど、シミの少なさに基づく肌状態が好ましいと判定する形態とすることがさらに好ましい。
【００９２】
また、［water associated］、［animal associated］、［animal body associated］の環境から選ばれる環境に由来する環境由来菌のうち、１又は２以上の環境由来菌のそれぞれの菌量が、［plant body associated 若しくは symbiotic microbe］及び／又は［land feature］から選ばれる環境に由来する環境由来菌のそれぞれの菌量の１０分の１以下であるときに、シミの少なさに基づく肌状態が好ましいと判定する形態とすることがさらに好ましい。
【００９３】
本発明の実施の形態では、［plant body associated 若しくは symbiotic microbe］及び／又は［land feature］から選ばれる環境に由来する環境由来菌のうち、全ての環境由来菌の菌量が多いほど、シミの少なさに基づく肌状態が好ましいと判定することが好ましい。
【００９４】
本発明の肌状態の診断方法は、国立遺伝研究所（National Institute of Genetics）の細菌データベース（MicrobeDB.jp）において規定される以下のＥ群から選ばれる環境に由来する環境由来菌のうち、１又は２以上の環境由来菌の菌量が多いほど、角層水分量の多さに基づく肌状態が好ましいと判定する形態とすることが好ましい。
ここで、菌又は該菌の属する菌属が検出された環境のうち、菌又は該菌の属する菌属の平均存在比率の最も高い環境を、該菌が由来する環境であるとする。
（Ｅ群）
［plant body associated 若しくは symbiotic microbe］、［agriculture associated］
【００９５】
本発明の好ましい形態によれば、上記Ｅ群から選ばれる環境に由来する環境由来菌の菌量によって、直接肌を検査することなく、非侵襲的に、角層水分量の多さに基づく肌状態を診断することができる。
【００９６】
本発明の実施の形態では、Ｅ群から選ばれる環境に由来する環境由来菌のうち、好ましくは全ての環境由来菌の菌量が多いほど、角層水分量の多さに基づく肌状態が好ましいと判定することが好ましい。
【００９７】
本発明の肌状態の診断方法は、国立遺伝研究所（National Institute of Genetics）の細菌データベース（MicrobeDB.jp）において規定される［plant body associated 若しくは symbiotic microbe］の環境に由来する環境由来菌の菌量が多いほど、黄味の少なさに基づく肌状態が好ましいと判定する形態とすることが好ましい。
ここで、菌又は該菌の属する菌属が検出された環境のうち、菌又は該菌の属する菌属の平均存在比率の最も高い環境を、該菌が由来する環境であるとする。
【００９８】
本発明の好ましい形態によれば、［plant body associated 若しくは symbiotic microbe］の環境に由来する環境由来菌の菌量によって、直接肌を検査することなく、非侵襲的に、肌の黄味の少なさに基づく肌状態を診断することができる。
【００９９】
本発明の肌状態の診断方法は、国立遺伝研究所（National Institute of Genetics）の細菌データベース（MicrobeDB.jp）において規定される以下のＦ群から選ばれる環境に由来する環境由来菌のうち、１又は２以上の環境由来菌の菌量が多いほど、頬部の凹凸の少なさに基づく肌状態が好ましいと判定する形態とすることが好ましい。
ここで、菌又は該菌の属する菌属が検出された環境のうち、菌又は該菌の属する菌属の平均存在比率の最も高い環境を、該菌が由来する環境であるとする。
（Ｆ群）
［plant body associated 若しくは symbiotic microbe］、［agriculture associated］、［aquatic area 若しくは fluid in state］、［water associated］、［aquatic feature］、［animal associated］、［animal body associated］、［park associated］、［land area］、［land feature］、［fungi body associated］
【０１００】
本発明の好ましい形態によれば、上記Ｆ群から選ばれる環境に由来する環境由来菌の菌量によって、直接肌を検査することなく、非侵襲的に、頬部の凹凸の少なさに基づく肌状態を診断することができる。
【０１０１】
本発明の実施の形態では、Ｆ群から選ばれる環境に由来する環境由来菌のうち、２以上、より好ましくは３以上、さらに好ましくは４以上、さらに好ましくは５以上、さらに好ましくは６以上、さらに好ましくは７以上、さらに好ましくは８以上、さらに好ましくは９以上、さらに好ましくは１０以上、さらに好ましくは全ての環境由来菌の菌量が多いほど、頬部の凹凸の少なさに基づく肌状態が好ましいと判定することが好ましい。
【０１０２】
本発明は、［plant body associated 若しくは symbiotic microbe］、［agriculture associated］、［water associated］、［aquatic feature］、［animal associated］、［animal body associated］、［land feature］から選ばれる環境に由来する環境由来菌の菌量が多いほど、頬部の凹凸の少なさに基づく肌状態が好ましいと判定する形態とすることがより好ましい。
【０１０３】
また、［aquatic area 若しくは fluid in state］、［park associated］、［land area］、［fungi body associated］の環境から選ばれる環境に由来する環境由来菌のうち、１又は２以上の環境由来菌のそれぞれの菌量が、［plant body associated 若しくは symbiotic microbe］、［agriculture associated］、［water associated］、［aquatic feature］、［animal associated］、［animal body associated］、［land feature］の環境から選ばれる環境に由来する環境由来菌のうち、１又は２以上の環境由来菌のそれぞれの菌量の５分の１以下であるときに、頬部の凹凸の少なさに基づく肌状態が好ましいと判定する形態とすることがさらに好ましい。
【０１０４】
本発明の実施の形態では、［plant body associated 若しくは symbiotic microbe］、［agriculture associated］、［water associated］、［aquatic feature］、［animal associated］、［animal body associated］、［land feature］から選ばれる環境に由来する環境由来菌のうち、２以上、より好ましくは３以上、さらに好ましくは４以上、さらに好ましくは５以上、さらに好ましくは６以上、さらに好ましくは全ての環境由来菌の菌量が多いほど、頬部の凹凸の少なさに基づく肌状態が好ましいと判定することが好ましい。
【０１０５】
また、本発明は、［animal body associated］の環境に由来する環境由来菌の菌量が多いほど、頬部の凹凸の少なさに基づく肌状態が好ましいと判定する形態とすることがさらに好ましい。
【０１０６】
また、［plant body associated 若しくは symbiotic microbe］、［agriculture associated］、［aquatic area 若しくは fluid in state］、［water associated］、［aquatic feature］、［animal associated］、［park associated］、［land area］、［land feature］、［fungi body associated］の環境から選ばれる環境に由来する環境由来菌のうち、１又は２以上の環境由来菌のそれぞれの菌量が、［animal body associated］から選ばれる環境に由来する環境由来菌の菌量の５分の１以下であるときに、頬部の凹凸の少なさに基づく肌状態が好ましいと判定する形態とすることがさらに好ましい。
【０１０７】
本発明の肌状態の診断方法は、国立遺伝研究所（National Institute of Genetics）の細菌データベース（MicrobeDB.jp）において規定される以下のＧ群から選ばれる環境に由来する環境由来菌のうち、１又は２以上の環境由来菌の菌量が多いほど、目立つ毛穴個数の少なさに基づく肌状態が好ましいと判定する形態とすることが好ましい。
ここで、菌又は該菌の属する菌属が検出された環境のうち、菌又は該菌の属する菌属の平均存在比率の最も高い環境を、該菌が由来する環境であるとする。
（Ｇ群）
［plant body associated 若しくは symbiotic microbe］、［agriculture associated］、［aquatic area 若しくは fluid in state］、［water associated］、［aquatic feature］、［animal associated］、［animal body associated］、［park associated］、［land area］、［land feature］
【０１０８】
本発明の好ましい形態によれば、上記Ｇ群から選ばれる環境に由来する環境由来菌の菌量によって、直接肌を検査することなく、非侵襲的に、目立つ毛穴個数の少なさに基づく肌状態を診断することができる。
【０１０９】
本発明の実施の形態では、Ｇ群から選ばれる環境に由来する環境由来菌のうち、２以上、より好ましくは３以上、さらに好ましくは４以上、さらに好ましくは５以上、さらに好ましくは６以上、さらに好ましくは７以上、さらに好ましくは８以上、さらに好ましくは９以上、さらに好ましくは全ての環境由来菌の菌量が多いほど、目立つ毛穴個数の少なさに基づく肌状態が好ましいと判定することが好ましい。
【０１１０】
本発明は、［plant body associated 若しくは symbiotic microbe］、［water associated］、［animal associated］、［animal body associated］、［land feature］から選ばれる環境に由来する環境由来菌の菌量が多いほど、目立つ毛穴個数の少なさに基づく肌状態が好ましいと判定する形態とすることがより好ましい。
【０１１１】
また、［agriculture associated］、［aquatic area 若しくは fluid in state］、［aquatic feature］、［park associated］、［land area］の環境から選ばれる環境に由来する環境由来菌のうち、１又は２以上の環境由来菌のそれぞれの菌量が、［plant body associated 若しくは symbiotic microbe］、［water associated］、［animal associated］、［animal body associated］、［land feature］の環境から選ばれる環境に由来する環境由来菌のうち、１又は２以上の環境由来菌のそれぞれの菌量の３分の１以下であるときに、目立つ毛穴個数の少なさに基づく肌状態が好ましいと判定する形態とすることがさらに好ましい。
【０１１２】
本発明の実施の形態では、［plant body associated 若しくは symbiotic microbe］、［water associated］、［animal associated］、［animal body associated］、［land feature］から選ばれる環境に由来する環境由来菌のうち、２以上、より好ましくは３以上、さらに好ましくは４以上、さらに好ましくは全ての環境由来菌の菌量が多いほど、目立つ毛穴個数の少なさに基づく肌状態が好ましいと判定することが好ましい。
【０１１３】
また、本発明は、［animal body associated］の環境に由来する環境由来菌の菌量が多いほど、目立つ毛穴個数の少なさに基づく肌状態が好ましいと判定する形態とすることがさらに好ましい。
【０１１４】
また、［plant body associated 若しくは symbiotic microbe］、［agriculture associated］、［aquatic area 若しくは fluid in state］、［water associated］、［aquatic feature］、［animal associated］、［park associated］、［land area］、［land feature］の環境から選ばれる環境に由来する環境由来菌のうち、１又は２以上の環境由来菌のそれぞれの菌量が、［animal body associated］の環境に由来する環境由来菌の菌量の１０分の１以下であるときに、目立つ毛穴個数の少なさに基づく肌状態が好ましいと判定する形態とすることがさらに好ましい。
【０１１５】
本発明の肌状態の診断方法は、国立遺伝研究所（National Institute of Genetics）の細菌データベース（MicrobeDB.jp）において規定される以下のＨ群から選ばれる環境に由来する環境由来菌のうち、１又は２以上の環境由来菌の菌量が多いほど、紅斑指数の低さに基づく肌状態が好ましいと判定する形態とすることが好ましい。
ここで、菌又は該菌の属する菌属が検出された環境のうち、菌又は該菌の属する菌属の平均存在比率の最も高い環境を、該菌が由来する環境であるとする。
（Ｈ群）
［plant body associated 若しくは symbiotic microbe］、［agriculture associated］、［water associated］、［animal associated］、［animal body associated］、［land feature］
【０１１６】
本発明の好ましい形態によれば、特定の環境由来菌が上記Ｈ群から選ばれる環境に由来する環境由来菌の菌量によって、直接肌を検査することなく、非侵襲的に、紅斑指数の低さに基づく肌状態を診断することができる。
【０１１７】
本発明の実施の形態では、Ｈ群から選ばれる環境に由来する環境由来菌のうち、２以上、より好ましくは３以上、さらに好ましくは４以上、さらに好ましくは５以上、さらに好ましくは全ての環境由来菌の菌量が多いほど、紅斑指数の低さに基づく肌状態が好ましいと判定することが好ましい。
【０１１８】
本発明は、［plant body associated 若しくは symbiotic microbe］、［agriculture associated］、［water associated］、［animal body associated］から選ばれる環境に由来する環境由来菌の菌量が多いほど、紅斑指数の低さに基づく肌状態が好ましいと判定する形態とすることがより好ましい。
【０１１９】
また、［animal associated］及び／又は［land feature］の環境に由来する環境由来菌のそれぞれの菌量が、［plant body associated 若しくは symbiotic microbe］、［agriculture associated］、［water associated］、［animal body associated］の環境から選ばれる環境に由来する環境由来菌のうち、１又は２以上の環境由来菌のそれぞれの菌量の７分の１以下であるときに、紅斑指数の低さに基づく肌状態が好ましいと判定する形態とすることがさらに好ましい。
【０１２０】
本発明の実施の形態では、［plant body associated 若しくは symbiotic microbe］、［agriculture associated］、［water associated］、［animal body associated］から選ばれる環境に由来する環境由来菌のうち、２以上、より好ましくは３以上、さらに好ましくは全ての環境由来菌の菌量が多いほど、紅斑指数の低さに基づく肌状態が好ましいと判定することが好ましい。
【０１２１】
また、本発明は、［animal body associated］の環境に由来する環境由来菌の菌量が多いほど、紅斑指数の低さに基づく肌状態が好ましいと判定する形態とすることがさらに好ましい。
【０１２２】
また、［plant body associated 若しくは symbiotic microbe］、［agriculture associated］、［water associated］、［animal associated］、［land feature］の環境から選ばれる環境に由来する環境由来菌のうち、１又は２以上の環境由来菌のそれぞれの菌量が、［animal body associated］の環境に由来する環境由来菌の菌量の８分の１以下であるときに、紅斑指数の低さに基づく肌状態が好ましいと判定する形態とすることがさらに好ましい。
【０１２３】
本発明の肌状態の診断方法は、国立遺伝研究所（National Institute of Genetics）の細菌データベース（MicrobeDB.jp）において規定される以下のＩ群から選ばれる環境に由来する環境由来菌のうち、１又は２以上の環境由来菌の菌量が多いほど、キメ状態の良さに基づく肌状態が好ましいと判定する形態とすることが好ましい。
ここで、菌又は該菌の属する菌属が検出された環境のうち、菌又は該菌の属する菌属の平均存在比率の最も高い環境を、該菌が由来する環境であるとする。
（Ｉ群）
［plant body associated 若しくは symbiotic microbe］、［agriculture associated］、［water associated］、［animal associated］、［land area］、［land feature］、［fungi body associated］
【０１２４】
本発明の好ましい形態によれば、上記Ｉ群から選ばれる環境に由来する環境由来菌の菌量によって、直接肌を検査することなく、非侵襲的に、キメ状態の良さに基づく肌状態を診断することができる。
【０１２５】
本発明の実施の形態では、Ｉ群から選ばれる環境に由来する環境由来菌のうち、２以上、より好ましくは３以上、さらに好ましくは４以上、さらに好ましくは５以上、さらに好ましくは６以上、さらに好ましくは全ての環境由来菌の菌量が多いほど、キメ状態の良さに基づく肌状態が好ましいと判定することが好ましい。
【０１２６】
本発明は、［plant body associated 若しくは symbiotic microbe］、［agriculture associated］、［water associated］、［land area］、［land feature］、［fungi body associated］から選ばれる環境に由来する環境由来菌の菌量が多いほど、キメ状態の良さに基づく肌状態が好ましいと判定する形態とすることがより好ましい。
【０１２７】
また、［animal associated］から選ばれる環境に由来する環境由来菌の菌量が、［plant body associated 若しくは symbiotic microbe］、［agriculture associated］、［water associated］、［land area］、［land feature］、［fungi body associated］の環境から選ばれる環境に由来する環境由来菌のうち、１又は２以上の環境由来菌のそれぞれの菌量の５分の１以下であるときに、キメ状態の良さに基づく肌状態が好ましいと判定する形態とすることがさらに好ましい。
【０１２８】
本発明の実施の形態では、［plant body associated 若しくは symbiotic microbe］、［agriculture associated］、［water associated］、［land area］、［land feature］、［fungi body associated］から選ばれる環境に由来する環境由来菌のうち、２以上、より好ましくは３以上、さらに好ましくは４以上、さらに好ましくは全ての環境由来菌の菌量が多いほど、キメ状態の良さに基づく肌状態が好ましいと判定することが好ましい。
【０１２９】
また、本発明は、［water associated］の環境に由来する環境由来菌の菌量が多いほど、キメ状態の良さに基づく肌状態が好ましいと判定する形態とすることがさらに好ましい。
【０１３０】
また、［plant body associated 若しくは symbiotic microbe］、［agriculture associated］、［animal associated］、［land area］、［land feature］、［fungi body associated］の環境から選ばれる環境に由来する環境由来菌のうち、１又は２以上の環境由来菌のそれぞれの菌量が、［water associated］の環境に由来する環境由来菌の菌量の３分の１以下であるときに、キメ状態の良さに基づく肌状態が好ましいと判定する形態とすることがさらに好ましい。
【０１３１】
本発明の肌状態の診断方法は、国立遺伝研究所（National Institute of Genetics）の細菌データベース（MicrobeDB.jp）において規定される以下のＪ群から選ばれる環境に由来する環境由来菌のうち、１又は２以上の環境由来菌の菌量が多いほど、皮脂量の少なさに基づく肌状態が好ましいと判定する形態とすることが好ましい。
ここで、菌又は該菌の属する菌属が検出された環境のうち、菌又は該菌の属する菌属の平均存在比率の最も高い環境を、該菌が由来する環境であるとする。
（Ｊ群）
［plant body associated 若しくは symbiotic microbe］、［agriculture associated］、［aquatic area 若しくは fluid in state］、［water associated］、［animal associated］、［animal body associated］、［land area］、［land feature］
【０１３２】
本発明の好ましい形態によれば、上記Ｊ群から選ばれる環境に由来する環境由来菌の菌量によって、直接肌を検査することなく、非侵襲的に、皮脂量の少なさに基づく肌状態を診断することができる。
【０１３３】
本発明の実施の形態では、Ｊ群から選ばれる環境に由来する環境由来菌のうち、２以上、より好ましくは３以上、さらに好ましくは４以上、さらに好ましくは５以上、さらに好ましくは６以上、さらに好ましくは７以上、さらに好ましくは全ての環境由来菌の菌量が多いほど、皮脂量の少なさに基づく肌状態が好ましいと判定することが好ましい。
【０１３４】
本発明は、［plant body associated 若しくは symbiotic microbe］、［agriculture associated］、［water associated］、［animal associated］、［animal body associated］、［land feature］から選ばれる環境に由来する環境由来菌の菌量が多いほど、皮脂量の少なさに基づく肌状態が好ましいと判定する形態とすることがより好ましい。
【０１３５】
また、［aquatic area 若しくは fluid in state］及び／又は［land area］の環境に由来する環境由来菌のそれぞれの菌量が、［plant body associated 若しくは symbiotic microbe］、［agriculture associated］、［water associated］、［animal associated］、［animal body associated］、［land feature］の環境から選ばれる環境に由来する環境由来菌のうち、１又は２以上の環境由来菌のそれぞれの菌量の３分の１以下であるときに、皮脂量の少なさに基づく肌状態が好ましいと判定する形態とすることがさらに好ましい。
【０１３６】
本発明の実施の形態では、［plant body associated 若しくは symbiotic microbe］、［agriculture associated］、［water associated］、［animal associated］、［animal body associated］、［land feature］から選ばれる環境に由来する環境由来菌のうち、２以上、より好ましくは３以上、さらに好ましくは４以上、さらに好ましくは５以上、さらに好ましくは全ての環境由来菌の菌量が多いほど、皮脂量の少なさに基づく肌状態が好ましいと判定することが好ましい。
【０１３７】
また、本発明は、［animal body associated］の環境に由来する環境由来菌の菌量が多いほど、皮脂量の少なさに基づく肌状態が好ましいと判定する形態とすることがさらに好ましい。
【０１３８】
また、［plant body associated 若しくは symbiotic microbe］、［agriculture associated］、［aquatic area 若しくは fluid in state］、［water associated］、［animal associated］、［land area］、［land feature］の環境から選ばれる環境に由来する環境由来菌のうち、１又は２以上の環境由来菌のそれぞれの菌量が、［animal body associated］から選ばれる環境に由来する環境由来菌の菌量の３分の１以下であるときに、皮脂量の少なさに基づく肌状態が好ましいと判定する形態とすることがさらに好ましい。
【０１３９】
本発明の肌状態の診断方法は、国立遺伝研究所（National Institute of Genetics）の細菌データベース（MicrobeDB.jp）において規定される以下のＫ群から選ばれる環境に由来する環境由来菌のうち、１又は２以上の環境由来菌の菌量が多いほど、シワ本数の少なさに基づく肌状態が好ましいと判定する形態とすることが好ましい。
ここで、菌又は該菌の属する菌属が検出された環境のうち、菌又は該菌の属する菌属の平均存在比率の最も高い環境を、該菌が由来する環境であるとする。
（Ｋ群）
［plant body associated 若しくは symbiotic microbe］、［agriculture associated］、［animal associated］、［animal body associated］、［land feature］
【０１４０】
本発明の好ましい形態によれば、上記Ｋ群から選ばれる環境に由来する環境由来菌の菌量によって、直接肌を検査することなく、非侵襲的に、シワ本数の少なさに基づく肌状態を診断することができる。
【０１４１】
本発明の実施の形態では、Ｋ群から選ばれる環境に由来する環境由来菌のうち、２以上、より好ましくは３以上、さらに好ましくは４以上、さらに好ましくは全ての環境由来菌の菌量が多いほど、シワ本数の少なさに基づく肌状態が好ましいと判定することが好ましい。
【０１４２】
本発明は、［agriculture associated］、［animal associated］、［animal body associated］、［land feature］から選ばれる環境に由来する環境由来菌の菌量が多いほど、シワ本数の少なさに基づく肌状態が好ましいと判定する形態とすることがより好ましい。
【０１４３】
また、［plant body associated 若しくは symbiotic microbe］の環境に由来する環境由来菌の菌量が、［agriculture associated］、［animal associated］、［animal body associated］、［land feature］の環境から選ばれる環境に由来する環境由来菌のうち、１又は２以上の環境由来菌のそれぞれの菌量の１０分の１以下であるときに、シワ本数の少なさに基づく肌状態が好ましいと判定する形態とすることがさらに好ましい。
【０１４４】
本発明の実施の形態では、［agriculture associated］、［animal associated］、［animal body associated］、［land feature］から選ばれる環境に由来する環境由来菌のうち、２以上、より好ましくは３以上、さらに好ましくは全ての環境由来菌の菌量が多いほど、シワ本数の少なさに基づく肌状態が好ましいと判定することが好ましい。
【０１４５】
また、本発明は、［agriculture associated］及び／又は［land feature］から選ばれる環境に由来する環境由来菌の菌量が多いほど、シワ本数の少なさに基づく肌状態が好ましいと判定する形態とすることがさらに好ましい。
【０１４６】
また、［plant body associated 若しくは symbiotic microbe］、［animal associated］、［animal body associated］の環境から選ばれる環境に由来する環境由来菌のうち、１又は２以上の環境由来菌のそれぞれの菌量が、［agriculture associated］及び／又は［land feature］から選ばれる環境に由来する環境由来菌のそれぞれの菌量の２分の１以下であるときに、シワ本数の少なさに基づく肌状態が好ましいと判定する形態とすることがさらに好ましい。
【０１４７】
本発明の実施の形態では、［agriculture associated］及び／又は［land feature］から選ばれる環境に由来する環境由来菌のうち、全ての環境由来菌の菌量が多いほど、シワ本数の少なさに基づく肌状態が好ましいと判定することが好ましい。
【０１４８】
本発明の肌状態の診断方法は、国立遺伝研究所（National Institute of Genetics）の細菌データベース（MicrobeDB.jp）において規定される以下のＬ群から選ばれる環境に由来する環境由来菌のうち、１又は２以上の環境由来菌の菌量が多いほど、メラニン指数の低さに基づく肌状態が好ましいと判定するする形態とすることが好ましい。
ここで、菌又は該菌の属する菌属が検出された環境のうち、菌又は該菌の属する菌属の平均存在比率の最も高い環境を、該菌が由来する環境であるとする。
（Ｌ群）
［agriculture associated］、［water associated］、［animal associated］、［animal body associated］、［land feature］
【０１４９】
本発明の好ましい形態によれば、特定の環境由来菌が上記Ｌ群から選ばれる環境に由来する環境由来菌の菌量によって、直接肌を検査することなく、非侵襲的に、メラニン指数の低さに基づく肌状態を診断することができる。
【０１５０】
本発明の実施の形態では、Ｌ群から選ばれる環境に由来する環境由来菌のうち、２以上、より好ましくは３以上、さらに好ましくは４以上、さらに好ましくは全ての環境由来菌の菌量が多いほど、メラニン指数の低さに基づく肌状態が好ましいと判定することが好ましい。
【０１５１】
本発明は、［agriculture associated］、［animal associated］、［animal body associated］、の環境に由来する環境由来菌の菌量が多いほど、メラニン指数の低さに基づく肌状態が好ましいと判定する形態とすることがより好ましい。
【０１５２】
また、［water associated］、［land feature］の環境から選ばれる環境に由来する環境由来菌のうち、１又は２以上の環境由来菌のそれぞれの菌量が、［agriculture associated］、［animal associated］、［animal body associated］の環境から選ばれる環境に由来する環境由来菌のうち、１又は２以上の環境由来菌のそれぞれの菌量の２分の１以下であるときに、メラニン指数の低さに基づく肌状態が好ましいと判定する形態とすることがさらに好ましい。
【０１５３】
本発明の実施の形態では、［agriculture associated］、［animal associated］、［animal body associated］から選ばれる環境に由来する環境由来菌のうち、２以上、さらに好ましくは全ての環境由来菌の菌量が多いほど、メラニン指数の低さに基づく肌状態が好ましいと判定することが好ましい。
【０１５４】
＜２＞皮膚常在細菌叢の多様性の推測方法
本発明は、特定の肌状態と相関のある特定の環境由来菌の菌量に基づく、皮膚常在細菌叢の多様性の推測方法にも関する。
【０１５５】
本発明の皮膚常在細菌叢の多様性の推測方法は、
皮膚常在細菌叢に存在する菌の菌種を同定する菌種同定工程と、
同定した菌種と、環境由来菌情報と、に基づき前記皮膚常在細菌叢における特定の肌状態と相関のある特定の環境由来菌の菌量を計測する計測工程と、
計測結果に基づき、前記特定の環境由来菌の菌量が多いほど、皮膚常在細菌叢の多様性に富んでいると判定する判定工程と、を有し、
前記環境由来菌情報は、菌種又は菌属に関する情報と、その菌種又は菌属の検出された環境に関する情報と、を紐づけた情報であり、
前記特定の肌状態は、前記多様性と相関のある肌状態であることを特徴とする。
【０１５６】
ここで、上述の診断方法に関する技術的事項のうち、皮膚常在細菌叢の多様性の推測方法に妥当する技術的事項については、前述した＜１＞肌状態の診断方法における説明を準用することができる。
【０１５７】
以下、本発明の皮膚常在細菌叢の多様性の推測方法における、好ましい実施の形態について詳述する。
【０１５８】
本発明の実施の形態では、国立遺伝研究所（National Institute of Genetics）の細菌データベース（MicrobeDB.jp）において規定される上記のＧ群から選ばれる環境に由来する環境由来菌のうち、１又は２以上の環境由来菌の菌量が多いほど、皮膚常在細菌叢の多様性に富んでいると推測する形態とすることが好ましい。
ここで、菌又は該菌の属する菌属が検出された環境のうち、菌又は該菌の属する菌属の平均存在比率の最も高い環境を、該菌が由来する環境であるとする。
【０１５９】
本発明の好ましい実施の形態によれば、上記のＧ群から選ばれる環境に由来する環境由来菌の菌量によって、直接肌を検査することなく、非侵襲的に、皮膚常在細菌叢の多様性を推測することができる。
【０１６０】
本発明の実施の形態では、上記のＧ群から選ばれる環境に由来する環境由来菌のうち、２以上、より好ましくは３以上、さらに好ましくは４以上、さらに好ましくは５以上、さらに好ましくは６以上、さらに好ましくは７以上、さらに好ましくは８以上、さらに好ましくは９以上、さらに好ましくは全ての環境由来菌の菌量が多いほど、皮膚常在細菌叢の多様性に富んでいると推測する形態とすることが好ましい。
【０１６１】
本発明は、［plant body associated 若しくは symbiotic microbe］、［water associated］、［animal associated］、［animal body associated］、［land feature］から選ばれる環境に由来する環境由来菌のうち、１又は２以上の環境由来菌の菌量が多いほど、皮膚常在細菌叢の多様性に富んでいると推測する形態とすることが好ましい。
【０１６２】
また、本発明は、［animal body associated］の環境に由来する環境由来菌の菌量が多いほど、皮膚常在細菌叢の多様性に富んでいると推測する形態とすることが好ましい。
ここで、菌又は該菌の属する菌属が検出された環境のうち、菌又は該菌の属する菌属の平均存在比率の最も高い環境を、該菌が由来する環境であるとする。
【０１６３】
本発明の実施の形態では、国立遺伝研究所（National Institute of Genetics）の細菌データベース（MicrobeDB.jp）において規定される上記のＪ群から選ばれる環境に由来する環境由来菌のうち、１又は２以上の環境由来菌の菌量が多いほど、皮膚常在細菌叢の多様性に富んでいると推測する形態とすることが好ましい。
ここで、菌又は該菌の属する菌属が検出された環境のうち、菌又は該菌の属する菌属の平均存在比率の最も高い環境を、該菌が由来する環境であるとする。
【０１６４】
本発明の好ましい実施の形態によれば、上記のＪ群から選ばれる環境に由来する環境由来菌の菌量によって、直接肌を検査することなく、非侵襲的に、皮膚常在細菌叢の多様性を推測することができる。
【０１６５】
本発明の実施の形態では、上記のＪ群から選ばれる環境に由来する環境由来菌のうち、２以上、より好ましくは３以上、さらに好ましくは４以上、さらに好ましくは５以上、さらに好ましくは６以上、さらに好ましくは７以上、さらに好ましくは全ての環境由来菌の菌量が多いほど、皮膚常在細菌叢の多様性に富んでいると推測する形態とすることが好ましい。
【０１６６】
本発明は、［plant body associated 若しくは symbiotic microbe］、［agriculture associated］、［water associated］、［animal associated］、［animal body associated］、［land feature］から選ばれる環境に由来する環境由来菌のうち、１又は２以上の環境由来菌の菌量が多いほど、皮膚常在細菌叢の多様性に富んでいると推測する形態とすることが好ましい。
【０１６７】
本発明の実施の形態では、［plant body associated 若しくは symbiotic microbe］、［agriculture associated］、［water associated］、［animal associated］、［animal body associated］、［land feature］から選ばれる環境に由来する環境由来菌のうち、２以上、より好ましくは３以上、さらに好ましくは４以上、さらに好ましくは５以上、さらに好ましくは全ての環境由来菌の菌量が多いほど、皮膚常在細菌叢の多様性に富んでいると推測する形態とすることが好ましい。
【０１６８】
また、本発明は、［animal body associated］の環境に由来する環境由来菌の菌量が多いほど、皮膚常在細菌叢の多様性に富んでいると推測する形態とすることが好ましい。
【０１６９】
本発明の実施の形態では、国立遺伝研究所（National Institute of Genetics）の細菌データベース（MicrobeDB.jp）において規定される上記のＨ群から選ばれる環境に由来する環境由来菌のうち、１又は２以上の環境由来菌の菌量が多いほど、皮膚常在細菌叢の多様性に富んでいると推測する形態とすることが好ましい。
ここで、菌又は該菌の属する菌属が検出された環境のうち、菌又は該菌の属する菌属の平均存在比率の最も高い環境を、該菌が由来する環境であるとする。
【０１７０】
本発明の好ましい実施の形態によれば、上記のＨ群から選ばれる環境に由来する環境由来菌の菌量によって、直接肌を検査することなく、非侵襲的に、皮膚常在細菌叢の多様性を推測することができる。
【０１７１】
本発明の実施の形態では、上記のＨ群から選ばれる環境に由来する環境由来菌のうち、２以上、より好ましくは３以上、さらに好ましくは４以上、さらに好ましくは５以上、さらに好ましくは全ての環境由来菌の菌量が多いほど、皮膚常在細菌叢の多様性に富んでいると推測する形態とすることが好ましい。
【０１７２】
本発明は、［plant body associated 若しくは symbiotic microbe］、［agriculture associated］、［water associated］、［animal body associated］から選ばれる環境に由来する環境由来菌のうち、１又は２以上の環境由来菌の菌量が多いほど、皮膚常在細菌叢の多様性に富んでいると推測する形態とすることが好ましい。
【０１７３】
本発明の実施の形態では、［plant body associated 若しくは symbiotic microbe］、［agriculture associated］、［water associated］、［animal body associated］から選ばれる環境に由来する環境由来菌のうち、２以上、より好ましくは３以上、さらに好ましくは全ての環境由来菌の菌量が多いほど、皮膚常在細菌叢の多様性に富んでいると推測する形態とすることが好ましい。
【０１７４】
また、本発明は、［animal body associated］の環境に由来する環境由来菌の菌量が多いほど、皮膚常在細菌叢の多様性に富んでいると推測する形態とすることが好ましい。
【０１７５】
本発明の実施の形態では、国立遺伝研究所（National Institute of Genetics）の細菌データベース（MicrobeDB.jp）において規定される上記のＡ群から選ばれる環境に由来する環境由来菌のうち、１又は２以上の環境由来菌の菌量が多いほど、皮膚常在細菌叢の多様性に富んでいると推測する形態とすることが好ましい。
ここで、菌又は該菌の属する菌属が検出された環境のうち、菌又は該菌の属する菌属の平均存在比率の最も高い環境を、該菌が由来する環境であるとする。
【０１７６】
本発明の好ましい実施の形態によれば、上記のＡ群から選ばれる環境に由来する環境由来菌の菌量によって、直接肌を検査することなく、非侵襲的に、皮膚常在細菌叢の多様性を推測することができる。
【０１７７】
本発明の実施の形態では、上記のＡ群から選ばれる環境に由来する環境由来菌のうち、２以上、より好ましくは３以上、さらに好ましくは４以上、さらに好ましくは５以上、さらに好ましくは全ての環境由来菌の菌量が多いほど、皮膚常在細菌叢の多様性に富んでいると推測する形態とすることが好ましい。
【０１７８】
本発明は、Ａ群のうち、好ましくは［plant body associated 若しくは symbiotic microbe］の環境に由来する環境由来菌の菌量が多いほど、皮膚常在細菌叢の多様性に富んでいると推測する形態とすることが好ましい。
【０１７９】
本発明の実施の形態では、国立遺伝研究所（National Institute of Genetics）の細菌データベース（MicrobeDB.jp）において規定される上記のＬ群から選ばれる環境に由来する環境由来菌のうち、１又は２以上の環境由来菌の菌量が多いほど、皮膚常在細菌叢の多様性に富んでいると推測する形態とすることが好ましい。
ここで、菌又は該菌の属する菌属が検出された環境のうち、菌又は該菌の属する菌属の平均存在比率の最も高い環境を、該菌が由来する環境であるとする。
【０１８０】
本発明の好ましい実施の形態によれば、上記のＬ群から選ばれる環境に由来する環境由来菌の菌量によって、直接肌を検査することなく、非侵襲的に、皮膚常在細菌叢の多様性を推測することができる。
【０１８１】
本発明の実施の形態では、上記のＬ群から選ばれる環境に由来する環境由来菌のうち、２以上、より好ましくは３以上、さらに好ましくは４以上、さらに好ましくは５以上、さらに好ましくは全ての環境由来菌の菌量が多いほど、皮膚常在細菌叢の多様性に富んでいると推測する形態とすることが好ましい。
【０１８２】
本発明は、［agriculture associated］、［animal associated］、［animal body associated］、の環境に由来する環境由来菌の菌量が多いほど、皮膚常在細菌叢の多様性に富んでいると推測する形態とすることが好ましい。
【０１８３】
本発明の実施の形態では、［agriculture associated］、［animal associated］、［animal body associated］から選ばれる環境に由来する環境由来菌のうち、２以上、さらに好ましくは全ての環境由来菌の菌量が多いほど、皮膚常在細菌叢の多様性に富んでいると推測する形態とすることが好ましい。
【０１８４】
本発明の実施の形態では、国立遺伝研究所（National Institute of Genetics）の細菌データベース（MicrobeDB.jp）において規定される上記のＢ群から選ばれる環境に由来する環境由来菌のうち、１又は２以上の環境由来菌の菌量が多いほど、皮膚常在細菌叢の多様性に富んでいると推測する形態とすることが好ましい。
ここで、菌又は該菌の属する菌属が検出された環境のうち、菌又は該菌の属する菌属の平均存在比率の最も高い環境を、該菌が由来する環境であるとする。
【０１８５】
本発明の好ましい実施の形態によれば、上記のＢ群から選ばれる環境に由来する環境由来菌の菌量によって、直接肌を検査することなく、非侵襲的に、皮膚常在細菌叢の多様性を推測することができる。
ここで、菌又は該菌の属する菌属が検出された環境のうち、菌又は該菌の属する菌属の平均存在比率の最も高い環境を、該菌が由来する環境であるとする。
【０１８６】
本発明の実施の形態では、上記のＢ群から選ばれる環境に由来する環境由来菌のうち、２以上、より好ましくは３以上、さらに好ましくは全ての環境由来菌の菌量が多いほど、皮膚常在細菌叢の多様性に富んでいると推測する形態とすることが好ましい。
【０１８７】
また、本発明は、Ｂ群のうち、［agriculture associated］の環境に由来する環境由来菌の菌量が多いほど、皮膚常在細菌叢の多様性に富んでいると推測する形態とすることが好ましい。
【０１８８】
＜３＞特定の環境由来菌の菌量の推測方法
本発明は、特定の肌状態と相関のある特定の環境由来菌の菌量の推測方法にも関する。
【０１８９】
本発明の特定の環境由来菌の菌量の推測方法は、皮膚常在細菌叢における多様性を解析する多様性解析工程と、
解析結果に基づき、前記多様性に富んでいるほど、前記皮膚常在細菌叢における特定の肌状態と相関のある特定の環境由来菌の菌量が多いと判定する判定工程と、
を有し、
前記特定の肌状態は、前記多様性と相関のある肌状態であることを特徴とする。
【０１９０】
ここで、多様性解析工程は、前述した菌種同定工程と同様の方法により行うことができる。
【０１９１】
なお、上述の診断方法に関する技術的事項のうち、特定の環境由来菌の菌量の推測方法に妥当する技術的事項については、前述した＜２＞皮膚常在細菌叢の多様性の推測方法における説明を準用することができる。
【０１９２】
＜４＞特定の肌状態と相関のある菌の属性を解析する方法
本発明は、特定の肌状態と相関のある菌の属性を解析する方法にも関する。
【０１９３】
本発明の特定の肌状態と相関のある菌の属性を解析する方法は、
前記特定の肌状態の良い被験者群と悪い被験者群の皮膚常在細菌叢に存在する菌において、両群間で菌量に差のある菌種又は菌属を特定する特定工程と、
前記特定工程で特定された菌種又は菌属の属性に関する情報を取得することを特徴とする。
【０１９４】
本発明によれば、皮膚常在細菌叢における多様性によって、直接肌を検査することなく、非侵襲的に、特定の肌状態と相関のある特定の環境由来菌の菌量を推測することができる。
以下、本発明の、特定の肌状態と相関のある菌の属性を解析する方法の実施形態について説明するが、本発明の技術的範囲は以下の実施形態に限定されないことは言うまでもない。
【０１９５】
本発明の特定の肌状態と相関のある菌の属性を解析する方法における、被験者は、アトピーなどの疾患を有しない被験者であることが望ましい。
【０１９６】
特定の肌状態の良い被験者群と悪い被験者群のグループ分けは、取得した被験者の肌状態に関するパラメータに基づき、測定値が下位１０％であった被験者群と、測定値が上位１０％であった被験者群とに、グループ分けを行う形態とすることが望ましい。なお、特定の肌状態の良い被験者群と悪い被験者群とにグループ分けをすることができれば、その方法、基準に特に制限はない。
【０１９７】
ここで、被験者の皮膚常在細菌叢における、菌種又は菌属を特定（同定）する方法についての好ましい形態は前述した通りである。
【０１９８】
本発明の特定の肌状態と相関のある菌の属性を解析する方法の好ましい実施の形態では、解析する属性が菌の由来環境であることが望ましい。
【０１９９】
なお、上述の診断方法に関する技術的事項のうち、特定の肌状態と相関のある菌の属性を解析する方法に妥当する技術的事項については、前述した＜１＞肌状態の診断方法、前述した＜２＞皮膚常在細菌叢の多様性の推測方法における説明を準用することができる。
【０２００】
＜５＞肌状態改善作用を有する物質又は美容方法のスクリーニング方法
本発明は、肌状態と相関性のある特定の肌状態と相関のある特定の環境由来菌の菌量に基づく、肌状態改善作用を有する物質又は美容方法のスクリーニング方法にも関する。
【０２０１】
本発明によれば、特定の肌状態と相関のある特定の環境由来菌の菌量に基づき、肌状態を改善する物質又は美容方法をスクリーニングすることができる。
以下、本発明のスクリーニング方法の実施形態について説明するが、本発明の技術的範囲は以下の実施形態に限定されないことは言うまでもない。
【０２０２】
本発明のスクリーニング方法におけるスクリーニング対象としては、特に限定されず、たとえば、市販の化合物（ペプチドを含む）、公知化合物（ペプチドを含む）、コンビナトリアル・ケミストリー技術によって得られた化合物群、植物や海洋生物由来の天然成分、動物組織抽出物などの物質を挙げることができる。
また、顔面パックやマッサージなどの美容方法も本発明のスクリーニング方法のスクリーニング対象とすることができる。
【０２０３】
本発明は以下のような工程を有する実施の形態とすることが好ましい。すなわち、スクリーニング対象の物質又は美容方法を被験者に適用する適用工程と、適用工程前後の皮膚常在細菌叢に存在する菌の菌種を同定する菌種同定工程と、
同定した菌種と、環境由来菌情報と、に基づき皮膚常在細菌叢における特定の肌状態と相関のある特定の環境由来菌の菌量を計測する計測工程と、
特定の肌状態と相関のある特定の環境由来菌の菌量が増えるほど、肌状態の改善作用に優れると判定する判定工程と、を有する実施の形態とすることが好ましい。
【０２０４】
適用工程における、物質又は美容方法の適用態様、適用期間、適用頻度については特に制限はない。なお、スクリーニング対象が物質である場合には、たとえば、液剤、粉末剤、顆粒剤、錠剤などの経口剤の形態として被験者に経口投与してもよいし、注射剤、外用液剤、軟膏等の皮膚外用剤等の形態として非経口的に投与してもよい。
【０２０５】
なお、上述の診断方法に関する技術的事項のうち、特定の肌状態と相関のある菌の属性を解析する方法に妥当する技術的事項については、前述した＜１＞肌状態の診断方法における説明を準用することができる。
【実施例】
【０２０６】
以下、本発明の基礎となる知見を裏付ける各種試験結果を示す。
【０２０７】
＜試験１＞各環境由来菌の菌量と、各肌状態との関連
以下の肌状態に関するパラメータと皮膚表面の細菌叢との関連性を調べた。なお、以下、に記載の菌量は、特に断りのない限り、各細菌のリード数でありその細菌種の存在量を表す。
【０２０８】
（１）被験者の肌状態の測定
被験者となる女性は３０代のアトピーなどの疾患を有しない健常日本人女性２９３名である。
まず、被験者の肌状態に関するパラメータの取得を行った。取得したパラメータは、ＴＥＷＬ（経皮水分蒸散量）、皮膚の明るさ（Ｌ＊）、肌の弾力性（Ｕｒ／Ｕｆ）、シミの少なさ、角層水分量の多さ、肌の黄味の少なさ、頬部の凹凸の少なさ、目立つ毛穴個数の少なさ、紅斑指数の低さ、キメ状態の良さ、皮脂量の少なさ、シワ本数の少なさ、メラニン指数の低さ、である。
【０２０９】
被験者のＴＥＷＬ（経皮水分蒸散量）に関するパラメータは、ＴＥＷＬ（CK electronic GmbH社製、TEWAMETER TM300）を用いることにより得た。
【０２１０】
被験者の皮膚の明るさに関するパラメータは、分光測色計（コニカミノルタセンシング（株）製、ＣＭ２６００ｄ）を用いて、光源Ｄ−６５、視野１０度、SCE法にてＬ＊ａ＊ｂ＊表色系により、Ｌ＊値を測定し、評価することにより得た。
【０２１１】
被験者の皮膚の弾力性に関するパラメータは、皮膚粘弾性測定装置（CK electronic GmbH社製Ｃｕｔｏｍｅｔｅｒ  ＭＰＡ５８０）を用いて皮膚を、吸引圧４００ｍｂ、吸引時間２秒、開放時間２秒を１サイクルとする測定を１回行い、得られた「Ｒ０」〜「Ｒ８」の結果のうちＲ７（戻り率：Ｕｒ／Ｕｆ）の結果から得た。
【０２１２】
被験者のシミの少なさに関するパラメータは、皮膚画像解析カウンセリングシステム（Canfield社製、ＶＩＳＩＡ−ＥＶＯＬＵＴＩＯＮ）を用いて皮膚画像を採取し、画像解析することにより得た。
【０２１３】
被験者の角層水分量の多さに関するパラメータは、I.B.S社製のＳｋｉｃｏｎ−２００ＥＸを用いて、頬を5回ずつ測定して、平均値を測定値として評価することにより得た。
【０２１４】
被験者の肌の黄味の少なさに関するパラメータは、分光測色計（コニカミノルタセンシング（株）製、ＣＭ２６００ｄ）を用いて、光源Ｄ−６５、視野１０度、SCE法にてＬ＊ａ＊ｂ＊表色系により、ｂ＊値を測定し、評価することにより得た。
【０２１５】
被験者の頬部の凹凸の少なさに関するパラメータは、皮膚画像解析カウンセリングシステム（Canfield社製、ＶＩＳＩＡ−ＥＶＯＬＵＴＩＯＮ）を用いて皮膚画像を採取し、画像解析することにより得た。
【０２１６】
被験者の目立つ毛穴個数の少なさに関するパラメータは、皮膚画像解析カウンセリングシステム（Canfield社製、ＶＩＳＩＡ−ＥＶＯＬＵＴＩＯＮ）を用いて皮膚画像を採取し、画像解析することにより得た。
【０２１７】
被験者の紅斑指数の低さに関するパラメータは、分光測色計（コニカミノルタセンシング（株）製、ＣＭ２６００ｄ）を用いて、吸光度（Ａｂｓｏｒｂａｎｃｅ：Ａ）を測定し、その後、紅斑指数（ＥＩ）算出式（ＥＩ＝｛［Ａ５６０＋１．５（Ａ５４３）＋Ａ５７６］−２．０（Ａ５１０＋Ａ６１０）｝、Ｆｅａｔｈｅｒの公式）を用いて紅斑指数を算出・評価することにより得た。
【０２１８】
被験者のキメ状態の良さに関するパラメータは、シリコーンラバー等の樹脂を用いて、肌表面形状を写し取る等の手法でレプリカを作成し、予め定めたスコア（例えば１０段階）に照らし合わせることで得た。
【０２１９】
被験者の皮脂量の少なさに関するパラメータは、Sebumeter  ＳＭ８１５を用いて、洗顔後約４０分後の額と頬部の皮脂量を各１回ずつ測定し、「回復皮脂量」を評価することにより得た。
【０２２０】
被験者のシワ本数の少なさに関するパラメータは、皮膚画像解析カウンセリングシステム（Canfield社製、ＶＩＳＩＡ−ＥＶＯＬＵＴＩＯＮ）を用いて皮膚画像を採取し、画像解析することにより得た。
【０２２１】
被験者のメラニン指数の低さに関するパラメータは、分光測色計（コニカミノルタセンシング（株）製、ＣＭ２６００ｄ）を用いて、吸光度（Ａｂｓｏｒｂａｎｃｅ：Ａ）を測定し、その後、メラニン指数（ＭＩ）算出式（ＭＩ＝Ａ６４０−Ａ６７０、Ｆｅａｔｈｅｒの公式）を用いてメラニン指数を算出し、評価することにより得た。
【０２２２】
（２）被験者群の肌状態によるグループ分け
次に前述の被験者全データを計算し、測定値が下位１０％であった被験者群と、測定値が上位１０％であった被験者群とに、グループ分けを行った。
【０２２３】
（３）被験者の皮膚常在細菌叢の採取、解析
同時に、被験者の女性頬部から菌採取用のシール又は綿棒（Swab法）にて、細菌叢を採取した。次に、採取した細菌叢よりDNAの抽出を行い、細菌が保有する１６ＳｒＲＮＡ  Ｖ１−Ｖ２領域をＰＣＲにて増幅した。ｑＰＣＲにより各サンプルの濃度を計測した後ランを行う全てのサンプルを混合、ライブラリ調整を経てMiseqでのランを行った。得られたDNA配列をNCBIのデータベースと照合し、菌種を同定した。
【０２２４】
同定した菌種を、国立遺伝研究所（National Institute of Genetics）の細菌データベース（MicrobeDB.jp）において規定される由来環境と照合し、菌が検出された環境のうち該菌の平均存在比率の最も高い環境（図１  参照）を特定した。
【０２２５】
（４）肌状態によってグループ分けした被験者群と、皮膚常在細菌叢における菌の由来環境の相関についての統計解析
前述の（２）の工程で肌状態によってグループ分けした被験者群のうち、肌状態が良好であった被検者群と、前述の（３）の工程で算出した各環境由来菌の菌量の相関を統計解析した。統計解析した結果のうち、グループ分けした被験者群間で菌量に有意な差のあった環境由来菌を選び出した。ここで、菌量の計測は、ＯＴＵ（Ｏｐｅｒａｔｉｏｎａｌ  Ｔａｘｏｎｏｍｉｃ  Ｕｎｉｔ）解析を行い、各ＯＴＵに属するリード数を計測することにより、行った。
【０２２６】
（５）菌量の計測
選び出した環境由来菌について、肌状態が良好な被験者群の皮膚常在細菌叢における菌量を計測した。
結果を図２〜図１４に示す。なお、各図においては選び出した環境由来菌、すなわち被験者群間で菌量に有意な差のあった環境由来菌についてのみ、棒グラフによりその菌量を示している。被験者群間で菌量に有意な差のなかった環境由来菌については、棒グラフによる菌量の表示を省略している。
【０２２７】
［考察］
図２の結果より、ＴＥＷＬ（経皮水分蒸散量）の良好な被験者群（肌測定値下位10％群）には、国立遺伝研究所（National Institute of Genetics）の細菌データベース（MicrobeDB.jp）において規定される以下のＡ群から選ばれる環境に由来する環境由来菌の菌量が多いことがわかった。
（Ａ群）
［plant body associated 若しくは symbiotic microbe］、［agriculture associated］、［aquatic area 若しくは fluid in state］、［animal associated］、［animal body associated］、［land feature］
【０２２８】
すなわち、国立遺伝研究所（National Institute of Genetics）の細菌データベース（MicrobeDB.jp）において規定される以上のＡ群の環境のうち、１又は２以上の環境に由来する菌の菌量が多いほど、ＴＥＷＬ（経皮水分蒸散量）のパラメータに基づく肌状態が好ましいと判定することができることがわかった。
【０２２９】
さらに、国立遺伝研究所（National Institute of Genetics）の細菌データベース（MicrobeDB.jp）において規定される以上のＡ群から選ばれる環境に由来する環境由来菌のうち、１又は２以上の環境由来菌の菌量を増加させる物質若しくは美容方法ほど、ＴＥＷＬ（経皮水分蒸散量）のパラメータに基づく肌状態を改善することができる物質若しくは美容方法であるといえる。
【０２３０】
図３の結果より、皮膚の明るさ（Ｌ＊）の良好な被験者群（肌測定値上位10％群）には、国立遺伝研究所（National Institute of Genetics）の細菌データベース（MicrobeDB.jp）において規定される以下のＢ群から選ばれる環境に由来する環境由来菌の菌量が多いことがわかった。
（Ｂ群）
［plant body associated 若しくは symbiotic microbe］、［agriculture associated］、［water associated］、［land feature］
【０２３１】
すなわち、国立遺伝研究所（National Institute of Genetics）の細菌データベース（MicrobeDB.jp）において規定される以上のＢ群から選ばれる環境に由来する環境由来菌のうち、１又は２以上の環境由来菌の菌量が多いほど、皮膚の明るさ（Ｌ＊）のパラメータに基づく肌状態が好ましいと判定することができることがわかった。
【０２３２】
さらに、国立遺伝研究所（National Institute of Genetics）の細菌データベース（MicrobeDB.jp）において規定される以上のＢ群から選ばれる環境に由来する環境由来菌のうち、１又は２以上の環境由来菌の菌量を増加させる物質若しくは美容方法ほど、皮膚の明るさ（Ｌ＊）のパラメータに基づく肌状態を改善することができる物質若しくは美容方法であるといえる。
【０２３３】
図４の結果より、肌の弾力性（Ｕｒ／Ｕｆ）の良好な被験者群（肌測定値上位10％群）には、国立遺伝研究所（National Institute of Genetics）の細菌データベース（MicrobeDB.jp）において規定される以下のＣ群から選ばれる環境に由来する環境由来菌の菌量が多いことがわかった。
（Ｃ群）
［plant body associated 若しくは symbiotic microbe］、［agriculture associated］、［water associated］、［animal associated］、［park associated］、［land area］
【０２３４】
すなわち、国立遺伝研究所（National Institute of Genetics）の細菌データベース（MicrobeDB.jp）において規定される以上のＣ群から選ばれる環境に由来する環境由来菌のうち、１又は２以上の環境由来菌の菌量が多いほど、肌の弾力性（Ｕｒ／Ｕｆ）のパラメータに基づく肌状態が好ましいと判定することができることがわかった。
【０２３５】
さらに、国立遺伝研究所（National Institute of Genetics）の細菌データベース（MicrobeDB.jp）において規定される以上のＣ群から選ばれる環境に由来する環境由来菌のうち、１又は２以上の環境由来菌の菌量を増加させる物質若しくは美容方法ほど、肌の弾力性（Ｕｒ／Ｕｆ）のパラメータに基づく肌状態を改善することができる物質若しくは美容方法であるといえる。
【０２３６】
図５の結果より、シミの少ない被験者群（肌測定値下位10％群）には、国立遺伝研究所（National Institute of Genetics）の細菌データベース（MicrobeDB.jp）において規定される以下のＤ群から選ばれる環境に由来する環境由来菌の菌量が多いことがわかった。
（Ｄ群）
［plant body associated 若しくは symbiotic microbe］、［water associated］、［animal associated］、［animal body associated］、［land feature］
【０２３７】
すなわち、国立遺伝研究所（National Institute of Genetics）の細菌データベース（MicrobeDB.jp）において規定される以上のＤ群から選ばれる環境に由来する環境由来菌のうち、１又は２以上の環境由来菌の菌量が多いほど、シミの少なさに基づく肌状態が好ましいと判定することができることがわかった。
【０２３８】
さらに、国立遺伝研究所（National Institute of Genetics）の細菌データベース（MicrobeDB.jp）において規定される以上のＤ群から選ばれる環境に由来する環境由来菌のうち、１又は２以上の環境由来菌の菌量を増加させる物質若しくは美容方法ほど、シミの少なさに基づく肌状態を改善することができる物質若しくは美容方法であるといえる。
【０２３９】
図６の結果より、角層水分量の多い被験者群（肌測定値上位10％群）には、国立遺伝研究所（National Institute of Genetics）の細菌データベース（MicrobeDB.jp）において規定される以下のＥ群から選ばれる環境に由来する環境由来菌の菌量が多いことがわかった。
（Ｅ群）
［plant body associated 若しくは symbiotic microbe］、［agriculture associated］
【０２４０】
すなわち、国立遺伝研究所（National Institute of Genetics）の細菌データベース（MicrobeDB.jp）において規定される以上のＥ群から選ばれる環境に由来する環境由来菌のうち、１又は２以上の環境由来菌の菌量が多いほど、角層水分量の多さに基づく肌状態が好ましいと判定することができることがわかった。
【０２４１】
さらに、国立遺伝研究所（National Institute of Genetics）の細菌データベース（MicrobeDB.jp）において規定される以上のＥ群から選ばれる環境に由来する環境由来菌のうち、１又は２以上の環境由来菌の菌量を増加させる物質若しくは美容方法ほど、角層水分量の多さに基づく肌状態を改善することができる物質若しくは美容方法であるといえる。
【０２４２】
図７の結果より、黄味の少ない被験者群（肌測定値下位10％群）には、国立遺伝研究所（National Institute of Genetics）の細菌データベース（MicrobeDB.jp）において規定される［plant body associated 若しくは symbiotic microbe］の環境に由来する環境由来菌の菌量が多いことがわかった。
【０２４３】
すなわち、国立遺伝研究所（National Institute of Genetics）の細菌データベース（MicrobeDB.jp）において規定される［plant body associated 若しくは symbiotic microbe］の環境に由来する環境由来菌のうち、１又は２以上の環境由来菌の菌量が多いほど、黄味の少なさに基づく肌状態が好ましいと判定することができることがわかった。
【０２４４】
さらに、国立遺伝研究所（National Institute of Genetics）の細菌データベース（MicrobeDB.jp）において規定される［plant body associated 若しくは symbiotic microbe］の環境に由来する環境由来菌のうち、１又は２以上の環境由来菌の菌量を増加させる物質若しくは美容方法ほど、黄味の少なさに基づく肌状態を改善することができる物質若しくは美容方法であるといえる。
【０２４５】
図８の結果より、頬部の凹凸の少ない被験者群（肌測定値下位10％群）には、国立遺伝研究所（National Institute of Genetics）の細菌データベース（MicrobeDB.jp）において規定される以下のＦ群から選ばれる環境に由来する環境由来菌の菌量が多いことがわかった。
（Ｆ群）
［plant body associated 若しくは symbiotic microbe］、［agriculture associated］、［aquatic area 若しくは fluid in state］、［water associated］、［aquatic feature］、［animal associated］、［animal body associated］、［park associated］、［land area］、［land feature］、［fungi body associated］
【０２４６】
すなわち、国立遺伝研究所（National Institute of Genetics）の細菌データベース（MicrobeDB.jp）において規定される以上のＦ群から選ばれる環境に由来する環境由来菌のうち、１又は２以上の環境由来菌の菌量が多いほど、頬部の凹凸の少なさに基づく肌状態が好ましいと判定することができることがわかった。
【０２４７】
さらに、国立遺伝研究所（National Institute of Genetics）の細菌データベース（MicrobeDB.jp）において規定される以上のＦ群から選ばれる環境に由来する環境由来菌のうち、１又は２以上の環境由来菌の菌量を増加させる物質若しくは美容方法ほど、頬部の凹凸の少なさに基づく肌状態を改善することができる物質若しくは美容方法であるといえる。
【０２４８】
図９の結果より、目立つ毛穴個数の少ない被験者群（肌測定値下位10％群）には、国立遺伝研究所（National Institute of Genetics）の細菌データベース（MicrobeDB.jp）において規定される以下のＧ群から選ばれる環境に由来する環境由来菌の菌量が多いことがわかった。
（Ｇ群）
［plant body associated 若しくは symbiotic microbe］、［agriculture associated］、［aquatic area 若しくは fluid in state］、［water associated］、［aquatic feature］、［animal associated］、［animal body associated］、［park associated］、［land area］、［land feature］
【０２４９】
すなわち、国立遺伝研究所（National Institute of Genetics）の細菌データベース（MicrobeDB.jp）において規定される以上のＧ群から選ばれる環境に由来する環境由来菌のうち、１又は２以上の環境由来菌の菌量が多いほど、目立つ毛穴個数の少なさに基づく肌状態が好ましいと判定することができることがわかった。
【０２５０】
さらに、国立遺伝研究所（National Institute of Genetics）の細菌データベース（MicrobeDB.jp）において規定される以上のＧ群から選ばれる環境に由来する環境由来菌のうち、１又は２以上の環境由来菌の菌量を増加させる物質若しくは美容方法ほど、目立つ毛穴個数の少なさに基づく肌状態を改善することができる物質若しくは美容方法であるといえる。
【０２５１】
図１０の結果より、紅斑指数の低い被験者群（肌測定値下位10％群）には、国立遺伝研究所（National Institute of Genetics）の細菌データベース（MicrobeDB.jp）において規定される以下のＨ群から選ばれる環境に由来する環境由来菌の菌量が多いことがわかった。
（Ｈ群）
［plant body associated 若しくは symbiotic microbe］、［agriculture associated］、［water associated］、［animal associated］、［animal body associated］、［land feature］
【０２５２】
すなわち、国立遺伝研究所（National Institute of Genetics）の細菌データベース（MicrobeDB.jp）において規定される以上のＨ群から選ばれる環境に由来する環境由来菌のうち、１又は２以上の環境由来菌の菌量が多いほど、紅斑指数の低さに基づく肌状態が好ましいと判定することができることがわかった。
【０２５３】
さらに、国立遺伝研究所（National Institute of Genetics）の細菌データベース（MicrobeDB.jp）において規定される以上のＨ群から選ばれる環境に由来する環境由来菌のうち、１又は２以上の環境由来菌の菌量を増加させる物質若しくは美容方法ほど、紅斑指数の低さに基づく肌状態を改善することができる物質若しくは美容方法であるといえる。
【０２５４】
図１１の結果より、キメ状態の良い被験者群（肌測定値下位10％群）には、国立遺伝研究所（National Institute of Genetics）の細菌データベース（MicrobeDB.jp）において規定される以下のＩ群から選ばれる環境に由来する環境由来菌の菌量が多いことがわかった。
（Ｉ群）
［plant body associated 若しくは symbiotic microbe］、［agriculture associated］、［water associated］、［animal associated］、［land area］、［land feature］、［fungi body associated］
【０２５５】
すなわち、国立遺伝研究所（National Institute of Genetics）の細菌データベース（MicrobeDB.jp）において規定される以上のＩ群から選ばれる環境に由来する環境由来菌のうち、１又は２以上の環境由来菌の菌量が多いほど、キメ状態の良さに基づく肌状態が好ましいと判定することができることがわかった。
【０２５６】
さらに、国立遺伝研究所（National Institute of Genetics）の細菌データベース（MicrobeDB.jp）において規定される以上のＩ群から選ばれる環境に由来する環境由来菌のうち、１又は２以上の環境由来菌の菌量を増加させる物質若しくは美容方法ほど、キメ状態の良さに基づく肌状態を改善することができる物質若しくは美容方法であるといえる。
【０２５７】
図１２の結果より、皮脂量の少ない被験者群（肌測定値下位10％群）には、国立遺伝研究所（National Institute of Genetics）の細菌データベース（MicrobeDB.jp）において規定される以下のＪ群から選ばれる環境に由来する環境由来菌の菌量が多いことがわかった。
（Ｊ群）
［plant body associated 若しくは symbiotic microbe］、［agriculture associated］、［aquatic area 若しくは fluid in state］、［water associated］、［animal associated］、［animal body associated］、［land area］、［land feature］
【０２５８】
すなわち、皮脂量の少ない被験者群には、国立遺伝研究所（National Institute of Genetics）の細菌データベース（MicrobeDB.jp）において規定される以上のＪ群から選ばれる環境に由来する環境由来菌のうち、１又は２以上の環境由来菌の菌量が多いほど、皮脂量の少なさに基づく肌状態が好ましいと判定することができることがわかった。
【０２５９】
さらに、国立遺伝研究所（National Institute of Genetics）の細菌データベース（MicrobeDB.jp）において規定される以上のＪ群から選ばれる環境に由来する環境由来菌のうち、１又は２以上の環境由来菌の菌量を増加させる物質若しくは美容方法ほど、皮脂量の少なさに基づく肌状態を改善することができる物質若しくは美容方法であるといえる。
【０２６０】
図１３の結果より、シワ本数の少ない被験者群（肌測定値下位10％群）には、国立遺伝研究所（National Institute of Genetics）の細菌データベース（MicrobeDB.jp）において規定される以下のＫ群から選ばれる環境に由来する環境由来菌の菌量が多いことがわかった。
（Ｋ群）
［plant body associated 若しくは symbiotic microbe］、［agriculture associated］、［animal associated］、［animal body associated］、［land feature］
【０２６１】
すなわち、国立遺伝研究所（National Institute of Genetics）の細菌データベース（MicrobeDB.jp）において規定される以上のＫ群から選ばれる環境に由来する環境由来菌のうち、１又は２以上の環境由来菌の菌量が多いほど、シワ本数の少なさに基づく肌状態が好ましいと判定することができることがわかった。
【０２６２】
さらに、国立遺伝研究所（National Institute of Genetics）の細菌データベース（MicrobeDB.jp）において規定される以上のＫ群から選ばれる環境に由来する環境由来菌のうち、１又は２以上の環境由来菌の菌量を増加させる物質若しくは美容方法ほど、シワ本数の少なさに基づく肌状態を改善することができる物質若しくは美容方法であるといえる。
【０２６３】
図１４の結果より、メラニン指数の低い被験者群（肌測定値下位10％群）には、国立遺伝研究所（National Institute of Genetics）の細菌データベース（MicrobeDB.jp）において規定される以下のＬ群から選ばれる環境に由来する環境由来菌の菌量が多いことがわかった。
（Ｌ群）
［agriculture associated］、［water associated］、［animal associated］、［animal body associated］、［land feature］
【０２６４】
すなわち、国立遺伝研究所（National Institute of Genetics）の細菌データベース（MicrobeDB.jp）において規定される以上のＬ群から選ばれる環境に由来する環境由来菌のうち、１又は２以上の環境由来菌の菌量が多いほど、メラニン指数の低さに基づく肌状態が好ましいと判定することができることがわかった。
【０２６５】
さらに、国立遺伝研究所（National Institute of Genetics）の細菌データベース（MicrobeDB.jp）において規定される以上のＬ群から選ばれる環境に由来する環境由来菌のうち、１又は２以上の環境由来菌の菌量を増加させる物質若しくは美容方法ほど、メラニン指数の低さに基づく肌状態を改善することができる物質若しくは美容方法であるといえる。
【０２６６】
＜試験２＞皮膚常在細菌叢における菌の多様性と、各肌状態との関連
以下の肌状態に関するパラメータと皮膚表面の細菌叢との関連性を調べた。なお、以下、に記載の菌量は、特に断りのない限り、各細菌のリード数でありその細菌種の存在量を表す。
【０２６７】
（１）被験者の肌状態の測定
被験者となる女性は３０代のアトピーなどの疾患を有しない健常日本人女性２９３名である。
まず、被験者の肌状態に関するパラメータの取得を行った。取得したパラメータは、目立つ毛穴個数の少なさ、皮脂量の少なさ、紅斑指数の低さ、ＴＥＷＬ（経皮水分蒸散量）、メラニン指数の低さ、皮膚の明るさ（Ｌ＊）である。
なお、被験者の肌状態に関するパラメータは、試験１と同様の方法により、取得した。
【０２６８】
（２）被験者群の肌状態によるグループ分け
次に前述の被験者全データを計算し、測定値が下位１０％であった被験者群と、測定値が上位１０％であった被験者群とに、グループ分けを行った。
【０２６９】
（３）被験者の皮膚常在細菌叢の採取、解析
次に、試験１と同様の方法により被験者の女性頬部の細菌叢を取得し、菌種の同定を行った。
【０２７０】
同定した菌種に関する情報に基づき、細菌の多様性を示すＳｉｍｐｓｏｎ  ｉｎｄｅｘを算出した。
（４）肌状態によってグループ分けした被験者群と、細菌叢における菌に関するパラメータとの相関についての統計解析
前述の（２）の工程で肌状態によってグループ分けした被験者群と、前述の（３）の工程で算出した各細菌種の占有率及びＳｉｍｐｓｏｎ  ｉｎｄｅｘの相関を統計解析した。
結果を図１５〜図２０に示す。
【０２７１】
［結果・考察］
図１５の結果より、目立つ毛穴個数の少ない被験者群は、目立つ毛穴個数の多い被験者群に比して、皮膚常在細菌叢の菌種の多様性に優れていることがわかった。
試験１の図９の結果より、目立つ毛穴個数の少ない被験者群には、国立遺伝研究所（National Institute of Genetics）の細菌データベース（MicrobeDB.jp）において規定される上記のＧ群から選ばれる環境に由来する環境由来菌の菌量が多い。
すなわち、上記のＧ群から選ばれる環境に由来する環境由来菌のうち、１又は２以上の環境由来菌の菌量が多いほど、皮膚常在細菌叢の多様性に富んでいると判定することができることがわかった。
また、皮膚常在細菌叢における多様性に富んでいるほど、上記のＧ群から選ばれる環境に由来する環境由来菌のうち、１又は２以上の環境由来菌の菌量が多いと判定することができることがわかった。
【０２７２】
図１６の結果より、皮脂量の少ない被験者群は、皮脂量の多い被験者群に比して、皮膚常在細菌叢の菌種の多様性に優れていることがわかった。
試験１の図１２の結果より、皮脂量の少ない被験者群には、国立遺伝研究所（National Institute of Genetics）の細菌データベース（MicrobeDB.jp）において規定される上記のＪ群から選ばれる環境に由来する環境由来菌の菌量が多い。
すなわち、上記のＪ群から選ばれる環境に由来する環境由来菌のうち、１又は２以上の環境由来菌の菌量が多いほど、皮膚常在細菌叢の多様性に富んでいると判定することができることがわかった。
また、皮膚常在細菌叢における多様性に富んでいるほど、上記のＪ群から選ばれる環境に由来する環境由来菌のうち、１又は２以上の環境由来菌の菌量が多いと判定することができることがわかった。
【０２７３】
図１７の結果より、紅斑指数の低い被験者群は、紅斑指数の高い被験者群に比して、皮膚常在細菌叢の菌種の多様性に優れていることがわかった。
試験１の図１０の結果より、紅斑指数の低い被験者群には、国立遺伝研究所（National Institute of Genetics）の細菌データベース（MicrobeDB.jp）において規定される上記のＨ群から選ばれる環境に由来する環境由来菌の菌量が多い。
すなわち、上記のＨ群から選ばれる環境に由来する環境由来菌のうち、１又は２以上の環境由来菌の菌量が多いほど、皮膚常在細菌叢の多様性に富んでいると判定することができることがわかった。
また、皮膚常在細菌叢における多様性に富んでいるほど、上記のＨ群から選ばれる環境に由来する環境由来菌のうち、１又は２以上の環境由来菌の菌量が多いと判定することができることがわかった。
【０２７４】
図１８の結果より、ＴＥＷＬ（経皮水分蒸散量）の良好な被験者群は、ＴＥＷＬ（経皮水分蒸散量）の良くない被験者群に比して、皮膚常在細菌叢の菌種の多様性に優れていることがわかった。
試験１の図２の結果より、ＴＥＷＬ（経皮水分蒸散量）の良好な被験者群には、国立遺伝研究所（National Institute of Genetics）の細菌データベース（MicrobeDB.jp）において規定される上記のＡ群から選ばれる環境に由来する環境由来菌の菌量が多い。
すなわち、上記のＡ群から選ばれる環境に由来する環境由来菌のうち、１又は２以上の環境由来菌の菌量が多いほど、皮膚常在細菌叢の多様性に富んでいると判定することができることがわかった。
また、皮膚常在細菌叢における多様性に富んでいるほど、上記のＡ群から選ばれる環境に由来する環境由来菌のうち、１又は２以上の環境由来菌の菌量が多いと判定することができることがわかった。
【０２７５】
図１９の結果より、メラニン指数の低い被験者群は、メラニン指数の高い被験者群に比して、皮膚常在細菌叢の菌種の多様性に優れていることがわかった。
試験１の図１４の結果より、メラニン指数の低い被験者群には、国立遺伝研究所（National Institute of Genetics）の細菌データベース（MicrobeDB.jp）において規定される上記のＬ群から選ばれる環境に由来する環境由来菌の菌量が多い。
すなわち、上記のＬ群から選ばれる環境に由来する環境由来菌のうち、１又は２以上の環境由来菌の菌量が多いほど、皮膚常在細菌叢の多様性に富んでいると判定することができることがわかった。
また、皮膚常在細菌叢における多様性に富んでいるほど、上記のＬ群から選ばれる環境に由来する環境由来菌のうち、１又は２以上の環境由来菌の菌量が多いと判定することができることがわかった。
【０２７６】
図２０の結果より、皮膚の明るさ（Ｌ＊）の良好な被験者群は、皮膚の明るさ（Ｌ＊）の良くない被験者群に比して、皮膚常在細菌叢の菌種の多様性に優れていることがわかった。
試験１の図３の結果より、メラニン指数の低い被験者群には、国立遺伝研究所（National Institute of Genetics）の細菌データベース（MicrobeDB.jp）において規定される上記のＢ群から選ばれる環境に由来する環境由来菌の菌量が多い。
すなわち、上記のＢ群から選ばれる環境に由来する環境由来菌のうち、１又は２以上の環境由来菌の菌量が多いほど、皮膚常在細菌叢の多様性に富んでいると判定することができることがわかった。
また、皮膚常在細菌叢における多様性に富んでいるほど、上記のＢ群から選ばれる環境に由来する環境由来菌のうち、１又は２以上の環境由来菌の菌量が多いと判定することができることがわかった。
【産業上の利用可能性】
【０２７７】
本発明によれば、特定の肌状態と相関のある特定の環境由来菌の菌量によって、直接肌を検査することなく、非侵襲的に、肌状態を診断することができる。
【図１】
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【図２】
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【図３】
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【図４】
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【図５】
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【図６】
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【図７】
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【図８】
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【図９】
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【図１０】
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【図１１】
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【図１２】
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【図１３】
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【図１４】
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【図１５】
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【図１６】
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【図１７】
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【図１８】
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【図１９】
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【図２０】
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