(57)【要約】【課題】本発明は、RORγアンタゴニスト活性を有する4-メチルジヒドロピリミジノン化合物又はその製薬上許容される塩、それを含む医薬組成物、及びその医薬用途に関する。【解決手段】式(1)若しくは式(2)の化合物又はその製薬上許容される塩、それを含む医薬組成物、及びその医薬用途が提供される。2019151623.tif 000061【選択図】なし【特許請求の範囲】
【請求項１】
式(1)若しくは式(2)の化合物：
【化１】
2019151623.tif 000058
又はその製薬上許容される塩。
【請求項２】
化合物が式(1)の化合物：
【化２】
2019151623.tif 000059
である、請求項１に記載の化合物又はその製薬上許容される塩。
【請求項３】
化合物が式(2)の化合物：
【化３】
2019151623.tif 000060
である、請求項１に記載の化合物又はその製薬上許容される塩。
【請求項４】
請求項１から３のいずれか一項に記載の化合物又はその製薬上許容される塩と製薬上許容される担体とを含む医薬組成物。
【請求項５】
請求項１から３のいずれか一項に記載の化合物又はその製薬上許容される塩を含む、RORγアンタゴニスト。
【請求項６】
請求項１から３のいずれか一項に記載の化合物又はその製薬上許容される塩を含む、自己免疫疾患、アレルギー性疾患、ドライアイ、線維症、癌、代謝性疾患、虚血、心筋症、高血圧及び歯周病からなる群より選択される疾患の治療剤又は予防剤。
【請求項７】
治療上有効量の請求項１から３のいずれか一項に記載の化合物又はその製薬上許容される塩を哺乳動物に投与することを含む、RORγをアンタゴナイズする方法。
【請求項８】
治療上有効量の請求項１から３のいずれか一項に記載の化合物又はその製薬上許容される塩を哺乳動物に投与することを含む、自己免疫疾患、アレルギー性疾患、ドライアイ、線維症、癌、代謝性疾患、虚血、心筋症、高血圧及び歯周病からなる群より選択される疾患を治療又は予防する方法。
【請求項９】
RORγアンタゴニストを製造するための請求項１から３のいずれか一項に記載の化合物又はその製薬上許容される塩の使用。
【請求項１０】
自己免疫疾患、アレルギー性疾患、ドライアイ、線維症、癌、代謝性疾患、虚血、心筋症、高血圧及び歯周病からなる群より選択される疾患の治療剤又は予防剤を製造するための請求項１から３のいずれか一項に記載の化合物又はその製薬上許容される塩の使用。
【請求項１１】
RORγアンタゴニストとして使用するための請求項１から３のいずれか一項に記載の化合物又はその製薬上許容される塩。
【請求項１２】
自己免疫疾患、アレルギー性疾患、ドライアイ、線維症、癌、代謝性疾患、虚血、心筋症、高血圧及び歯周病からなる群より選択される疾患の治療剤又は予防剤として使用するための請求項１から３のいずれか一項に記載の化合物又はその製薬上許容される塩。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、RORγアンタゴニスト活性を有する4-メチルジヒドロピリミジノン化合物又はその製薬上許容される塩、それを含む医薬組成物、及びそれらの医薬用途に関する。
【背景技術】
【０００２】
RORγ（Retinoid-related Orphan Receptor gamma）は、Th17細胞の分化及び活性化に重要な核内受容体である。また、RORγのスプライシングバリアントとして、RORγtが知られている（非特許文献１）。RORγとRORγtは、Ｎ末端のみが異なり、リガンド結合領域とDNA結合領域は共通である。RORγはTh17細胞以外の組織でも発現が報告されている（非特許文献１）。
【０００３】
RORγの抑制によって、Th17細胞の分化及び活性化を抑制できる。また、Th17細胞から産生されるIL-17は、様々なケモカイン、サイトカイン、メタロプロテアーゼ、そして他の炎症性メディエーターの誘導や、好中球の遊走に関わっており、IL-17を抑制することでこれらの反応を抑制できる（非特許文献２及び３）。Th17細胞は、自己免疫疾患（関節リウマチ、乾癬、炎症性腸疾患（クローン病、潰瘍性大腸炎等）、多発性硬化症、全身性エリテマトーデス（SLE）、ベーチェット病、サルコイドーシス、原田病、強直性脊椎炎、ぶどう膜炎、リウマチ性多発性筋痛症、I型糖尿病、移植片対宿主病、円形脱毛症、白斑等）、アレルギー性疾患、ドライアイ、線維症（肺線維症、原発性胆汁性肝硬変等）及び癌（悪性黒色腫、前立腺癌等）に関与していることが知られている。
脂肪組織におけるRORγは脂肪生成の制御に関わっており、RORγの抑制によってインスリン抵抗性が改善される（非特許文献４）。脂肪組織は、代謝性疾患（肝脂肪症等）に関与していることが知られている。
また、IL-17やTh17細胞は、虚血、心筋症、高血圧及び歯周炎に関与することが知られている。
【０００４】
例えば、関節リウマチに関しては、抗IL-17抗体投与がコラーゲン誘発関節炎における腫脹や関節破壊を改善することが報告されている（非特許文献５）。また、IL-17欠損マウスを用いた試験において、コラーゲン誘発関節炎における腫脹や関節破壊の改善が報告されている（非特許文献６）。
乾癬に関しては、臨床試験において、抗IL-17抗体投与による乾癬での有効性が報告されている（非特許文献７）。抗IL-17抗体は乾癬用途として上市されている（非特許文献８）。
炎症性腸疾患（クローン病、潰瘍性大腸炎等）に関しては、T細胞の移入によって誘発される大腸炎モデルにおいて、RORγ KOマウス由来T細胞の移入により、粘膜におけるIL-17の上昇が認められず、大腸炎の発症が抑制される（非特許文献９）。また、Th17細胞を活性化するIL-23に対する抗体（抗IL-23抗体）が臨床試験でクローン病において有効性を示したことが報告されている（非特許文献２０）。
多発性硬化症に関しては、RORγ KOマウスにおいて、多発性硬化症の動物モデルであるマウス実験的自己免疫性脳脊髄炎モデルの病態が抑制される（非特許文献１０）。また、抗IL-17A抗体が臨床試験で再発寛解型多発性硬化症においてMRI所見を改善したことが報告されている（非特許文献２１）。
全身性エリテマトーデスに関しては、RORγt KOマウスで、抗IL-17抗体投与により糸球体腎炎の動物モデルであるGBM腎炎の発症抑制が認められている（非特許文献１１）。SLEで合併する腎炎の発症もまた、抗IL-17抗体投与により抑制できる可能性がある（非特許文献１２）。
強直性脊椎炎に関しては、抗IL-17抗体投与による強直性脊椎炎での有効性が報告されている（非特許文献１３）。
ぶどう膜炎に関しては、ベーチェット病、サルコイドーシス及び原田病を疾患背景としたぶどう膜炎において抗IL-17抗体投与による有効性が報告されている（非特許文献７）。
リウマチ性多発性筋痛症に関しては、抗IL-17抗体について臨床試験が実施中である。
I型糖尿病に関しては、I型糖尿病モデルのNODマウスにおいて、抗IL-17抗体投与による病態進行の抑制が認められる（非特許文献１４）。また、抗IL-17A抗体について臨床試験が実施中である（非特許文献２２）。
移植片対宿主病に関しては、マウス移植モデルにおいて、生存率や宿主の拒絶反応がRORγ KOマウス由来の細胞を移入することにより改善されることが報告されている（非特許文献１９）。
円形脱毛症に関しては、抗IL-17A抗体について臨床試験が実施中である（非特許文献２５）。
白斑に関しては、患者の血清におけるIL-17の上昇や、病態組織におけるTh17細胞の上昇が認められる（非特許文献３９）。
アレルギー性疾患（喘息等）に関しては、OVA感作モデルにおいて、RORγ KOマウスでは好酸球性肺炎症の減弱、CD4陽性リンパ球の減少、Th2サイトカイン／ケモカインレベルの減少が認められ、アレルギー反応が抑制される（非特許文献１５）。抗IL-17A抗体についてアトピー性皮膚炎に対する臨床試験が実施中である（非特許文献２３）。また、抗IL-23抗体について喘息に対する臨床試験が実施中である（非特許文献２４）。
ドライアイに関しては、Th17細胞がドライアイの動物モデルにおいて増加していること、また抗IL-17抗体についてドライアイ患者を対象に臨床試験が実施中である（非特許文献１６）。
線維症に関しては、肺線維症の動物モデルであるブレオマイシン肺線維症モデルにおいて、抗IL-17抗体投与で肺における炎症又は線維化の抑制及び動物の生存延長が認められる（非特許文献１７）。
原発性胆汁性肝硬変については、Th17細胞が患者の病変部で増加しているとの報告があり、抗IL-23抗体の臨床試験が実施中である（非特許文献１８）。
悪性黒色腫に関しては、抗IL-17抗体について臨床試験が実施中である（非特許文献２６及び２７）。
前立腺癌に関しては、Pten-nullマウスにおいて、抗IL-17抗体による微小侵襲性前立腺癌形成の減少が認められる（非特許文献３３）。
インスリン抵抗性に関しては、RORγ KOマウスにおいて、高脂肪食負荷により誘導されるインスリン抵抗性が抑制される（非特許文献４）。
肝脂肪症に関しては、アルコール性肝疾患モデルにおいて、抗IL-17抗体による脂肪症の改善が病理組織上で認められる（非特許文献３４）。
非アルコール性脂肪肝疾患に関しては、高脂肪食による非アルコール性脂肪肝疾患モデルにおいて、抗IL-17抗体による肝機能の改善、肝脂質蓄積の減弱、Kupffer細胞の活性化抑制及び炎症性サイトカインレベルの低下が認められている（非特許文献３５）。
虚血及び心筋症に関しては、IL-17Aが心筋細胞アポトーシスと好中球浸潤を調節することによって心筋虚血／再潅流障害に寄与するとの報告がある。抗IL-17A抗体またはIL-17Aノックアウトによって、梗塞サイズの縮小および心機能の改善が見られ、虚血／再灌流損傷の改善が認められる（非特許文献３６）。
高血圧に関しては、アンジオテンシンII投与による血圧上昇が、IL-17AやIL-17RAに対する抗体によって低下することが報告されている（非特許文献３７）。
歯周炎に関しては、実験的歯周炎モデルにおいて、Th17細胞やIL-17の上昇が認められる。RORγアンタゴニストであるGSK805や抗IL-17A抗体によって、本モデルの骨量の減少が抑制される（非特許文献３８）。
【０００５】
これらの知見から、RORγアンタゴニストは、自己免疫疾患、アレルギー性疾患、ドライアイ、線維症、癌（悪性黒色腫、前立腺癌等）、代謝性疾患、虚血、心筋症、高血圧及び歯周病の予防又は治療に有益であると考えられる。
【先行技術文献】
【非特許文献】
【０００６】
【非特許文献１】JETTEN, "Retinoid-related orphan receptors (RORs): critical roles in development, immunity, circadian rhythm, and cellular metabolism", Nucl. Recept. Signal., 7: e003 (2009).
【非特許文献２】KOENDERS, et al., "Potential new targets in arthritis therapy: interleukin (IL)-17 and its relation to tumour necrosis factor and IL-1 in experimental arthritis", Ann. Rheum. Dis., 65: iii29-33 (2006).
【非特許文献３】SCHMIDT-WEBER, et al., "Th17 cells in the big picture of immunology", J. Allergy Clin. Immunol., 120: 247-54 (2007).
【非特許文献４】MEISSBURGER, et al., "Adipogenesis and insulin sensitivity in obesity are regulated by retinoid-related orphan receptor gamma", EMBO Mol. Med., 3: 637-51 (2011).
【非特許文献５】KELCHTERMANS et al., "Effector mechanisms of interleukin-17 in collagen-induced arthritis in the absence of interferon-γ and counteraction by interferon-γ", Arthritis Res. Ther., 11(4): R122 (2009).
【非特許文献６】NAKAE, et al., "Suppression of Immune Induction of Collagen-Induced Arthritis in IL-17-Deficient Mice", J. Immunol., 171: 6173-6177 (2003).
【非特許文献７】HUEBER et al., "Effects of AIN457, a Fully Human Antibody to Interleukin-17A, on Psoriasis, Rheumatoid Arthritis, and Uveitis", Sci. Transl. Med., 2(52): 52ra72 (2010).
【非特許文献８】SANFORD et al., "Secukinumab: first global approval", Drugs, 75(3): 329-338 (2015).
【非特許文献９】LEPPKES, et al, "RORγ-Expressing Th17 Cells Induce MurineChronic Intestinal Inflammation via Redundant Effects of IL-17A and IL-17F", Gastroenterology, 136(1): 257-267 (2009).
【非特許文献１０】IVANOV et al., "The Orphan Nuclear Receptor RORγt Directs the Differentiation Program of Proinflammatory IL-17+ T Helper Cells", Cell, 126(6): 1121-1133 (2006).
【非特許文献１１】STEINMETZ et al., "The Th17-Defining Transcription Factor RORγt Promotes Glomerulonephritis", J. Am. Soc. Nephrol., 22(3): 472-483 (2011).
【非特許文献１２】CRISPIN et al., "Interleukin-17-producing T cells in lupus", Curr. Opin. Rheumatol., 22(5): 499-503 (2010).
【非特許文献１３】BAETEN et al., "Anti-interleukin-17A monoclonal antibody secukinumab in treatment of ankylosing spondylitis: a randomised, double-blind, placebo-controlled trial", Lancet, 382(9906): 1705-1713 (2013).
【非特許文献１４】EMAMAULLEE et al., "Inhibition of Th17 Cells Regulates Autoimmune Diabetes in NOD Mice", Diabetes, 58: 1302-1311 (2009).
【非特許文献１５】TILLEY, et al., "Retinoid-Related Orphan Receptor γ Controls Immunoglobulin Production and Th1/Th2 Cytokine Balance in the Adaptive Immune Response to Allergen", J. Immunol., 178: 3208-3218 (2007).
【非特許文献１６】U.S. NATIONAL INSTITUTES OF HEALTH, "The Effects of a Single Intravenous Administration of Secukinumab (AIN457) or Canakinumab (ACZ885) in Dry Eye Patients", ClinicalTrials.gov information for Clinical Trials Identifier NCT01250171 (December 4, 2012).
【非特許文献１７】MI et al., "Blocking IL-17A Promotes the Resolution of Pulmonary Inflammation and Fibrosis Via TGF-β1-Dependent and -Independent Mechanisms", J. Immunol., 187: 3003-3014 (2011).
【非特許文献１８】U.S. NATIONAL INSTITUTES OF HEALTH, "A Study of Efficacy and Safety of Ustekinumab in Patients With Primary Biliary Cirrhosis (PBC) Who Had an Inadequate Response to Ursodeoxycholic Acid", ClinicalTrials.gov information for Clinical Trials Identifier NCT01389973 (April 2, 2015).
【非特許文献１９】FULTON et al., "Attenuation of Acute Graft-versus-Host Disease in the Absence of the Transcription Factor RORγt", J. Immunol., 189(4): 1765-1772 (2012).
【非特許文献２０】Brian G Feagan et al., "Induction therapy with the selective interleukin-23 inhibitor risankizumab in patients with moderate-to-severe Crohn's disease: a randomised, double-blind, placebo-controlled phase 2 study", The Lancet, 389(10080): 1699-1709 (2017).
【非特許文献２１】Eva Havrdova et al., "Activity of secukinumab, an anti-IL-17A antibody, on brain lesions in RRMS: results from a randomized, proof-of-concept study", J. Neurol., 263(7): 1287-1295 (2016).
【非特許文献２２】U.S. NATIONAL INSTITUTES OF HEALTH, "Study of Secukinumab in Patients With Newly-diagnosed Type 1 Diabetes Mellitus", ClinicalTrials.gov information for Clinical Trials Identifier NCT02044848.
【非特許文献２３】U.S. NATIONAL INSTITUTES OF HEALTH, "Secukinumab for Treatment of Atopic Dermatitis", ClinicalTrials.gov information for Clinical Trials Identifier NCT02594098.
【非特許文献２４】U.S. NATIONAL INSTITUTES OF HEALTH, "Efficacy and Safety of BI 655066/ABBV-066 (Risankizumab) in Patients With Severe Persistent Asthma", ClinicalTrials.gov information for Clinical Trials Identifier NCT02443298.
【非特許文献２５】U.S. NATIONAL INSTITUTES OF HEALTH, "A Study of Secukinumab for the Treatment of Alopecia Areata", ClinicalTrials.gov information for Clinical Trials Identifier NCT02599129.
【非特許文献２６】U.S. NATIONAL INSTITUTES OF HEALTH, "An Open-Label, Proof-of-Concept Study of Ixekizumab in the Treatment of Pyoderma Gangrenosum", ClinicalTrials.gov information for Clinical Trials Identifier NCT03137160.
【非特許文献２７】U.S. NATIONAL INSTITUTES OF HEALTH, "Single-arm Study to Assess a Potential Effect of Anti-IL-17 (Secukinumab) in the Treatment of Pyoderma Gangrenosum", ClinicalTrials.gov information for Clinical Trials Identifier NCT02733094.
【非特許文献２８】A. David Rodrigues et al., "Oxidative Metabolism of Clarithromycin in the Presence of Human Liver Microsomes", Drug Metabolism and Disposition, 25(5): 623-630 (1997).
【非特許文献２９】Yukiko Sugaya et al., "Development of Solubility Screening Methods in Drug Discovery", YAKUGAKU ZASSHI, 122(3): 237-246 (2002).
【非特許文献３０】Margareth Marques, "Dissolution Media Simulating Fasted and Fed States", Dissolution Technologies, 11(2): 16 (2004).
【非特許文献３１】Miller SD et al., "Experimental autoimmune encephalomyelitis in the mouse.", Current Protocols in Immunology, Chapter 15: Unit 15.1. (2010)
【非特許文献３２】Fauber BP et al., "Discovery of 1-{4-[3-fluoro-4-((3s,6r)-3-methyl-1,1-dioxo-6-phenyl-[1,2]thiazinan-2-ylmethyl)-phenyl]-piperazin-1-yl}-ethanone (GNE-3500): a potent, selective, and orally bioavailable retinoic acid receptor-related orphan receptor C (RORc or RORγ) inverse agonist.", J. Med. Chem., 58(13): 5308-22 (2015)
【非特許文献３３】Q Zhang et al., "Targeting Th17-IL-17 Pathway in Prevention of Micro-Invasive Prostate Cancer in a Mouse Model", Prostate, 77(8): 888-899 (2017).
【非特許文献３４】W Shi et al., "Anti-IL-17 Antibody Improves Hepatic Steatosis by Suppressing Interleukin-17-Related Fatty Acid Synthesis and Metabolism", Clin. Dev. Immunol., Volume 2013, Article ID 253046 (2013).
【非特許文献３５】R Xu et al., "Neutralization of interleukin-17 attenuates high fat diet-induced non-alcoholic fatty liver disease in mice", Acta Biochim. Biophys. Sin. (Shanghai), 45(9): 726-733 (2013).
【非特許文献３６】Y.H. Lial et al., "Interleukin-17A Contributes to Myocardial Ischemia/Reperfusion Injury by Regulating Cardiomyocyte Apoptosis and Neutrophil Infiltration", J. Am. Coll. Cardiol. 59(4): 420-429 (2012).
【非特許文献３７】M.A. Saleh et al., "Inhibition of Interleukin 17-A but not Interleukin-17F Signaling Lowers Blood Pressure and Reduces End-organ Inflammation in Angiotensin II-induced Hypertension", JACC Basic Transl. Sci. 1(7): 606-616 (2016).
【非特許文献３８】N. Dutzan et al., "A dysbiotic microbiome triggers TH17 cells to mediate oral mucosal immunopathology in mice and humans", Sci. Transl. Med. 10(463): eaat0797 (2018).
【非特許文献３９】R Speeckaert et al., "The many faces of interleukin-17 in inflammatory skin diseases", Br. J. Dermatol. 175(5): 892-901 (2016).
【発明の概要】
【０００７】
本発明は、RORγアンタゴニスト活性を有する4-メチルジヒドロピリミジノン化合物又はその製薬上許容される塩、それを含む医薬組成物、及びその医薬用途を提供する。すなわち、ある側面において、本発明は、以下に例示する態様を含む。
【０００８】
［項１］
式(1)若しくは式(2)の化合物：
【化１】
2019151623.tif 000002
又はその製薬上許容される塩。
【０００９】
［項２］
化合物が式(1)の化合物：
【化２】
2019151623.tif 000003
である、項１に記載の化合物又はその製薬上許容される塩。
【００１０】
［項３］
化合物が式(2)の化合物：
【化３】
2019151623.tif 000004
である、項１に記載の化合物又はその製薬上許容される塩。
【００１１】
［項４］
項１から３のいずれか一項に記載の化合物又はその製薬上許容される塩と製薬上許容される担体とを含む医薬組成物。
【００１２】
［項５］
項１から３のいずれか一項に記載の化合物又はその製薬上許容される塩を含む、RORγアンタゴニスト。
【００１３】
［項６］
項１から３のいずれか一項に記載の化合物又はその製薬上許容される塩を含む、自己免疫疾患、アレルギー性疾患、ドライアイ、線維症、癌、代謝性疾患、虚血、心筋症、高血圧及び歯周病からなる群より選択される疾患の治療剤又は予防剤。
【００１４】
［項７］
治療上有効量の項１から３のいずれか一項に記載の化合物又はその製薬上許容される塩を哺乳動物に投与することを含む、RORγをアンタゴナイズする方法。
【００１５】
［項８］
治療上有効量の項１から３のいずれか一項に記載の化合物又はその製薬上許容される塩を哺乳動物に投与することを含む、自己免疫疾患、アレルギー性疾患、ドライアイ、線維症、癌、代謝性疾患、虚血、心筋症、高血圧及び歯周病からなる群より選択される疾患を治療又は予防する方法。
【００１６】
［項９］
RORγアンタゴニストを製造するための項１から３のいずれか一項に記載の化合物又はその製薬上許容される塩の使用。
【００１７】
［項１０］
自己免疫疾患、アレルギー性疾患、ドライアイ、線維症、癌、代謝性疾患、虚血、心筋症、高血圧及び歯周病からなる群より選択される疾患の治療剤又は予防剤を製造するための項１から３のいずれか一項に記載の化合物又はその製薬上許容される塩の使用。
【００１８】
［項１１］
RORγのアンタゴニストとして使用するための項１から３のいずれか一項に記載の化合物又はその製薬上許容される塩。
【００１９】
［項１２］
自己免疫疾患、アレルギー性疾患、ドライアイ、線維症、癌、代謝性疾患、虚血、心筋症、高血圧及び歯周病からなる群より選択される疾患の治療又は予防に使用するための項１から３のいずれか一項に記載の化合物又はその製薬上許容される塩。
【００２０】
［項１３］
項４に記載の医薬組成物と、当該医薬組成物を自己免疫疾患、アレルギー性疾患、ドライアイ、線維症、癌、代謝性疾患、虚血、心筋症、高血圧及び歯周病からなる群より選択される疾患の治療又は予防に使用できることを記載した当該医薬組成物に関する記載物とを含む商業パッケージ。
【００２１】
［項１４］
項４に記載の医薬組成物と、当該医薬組成物を自己免疫疾患、アレルギー性疾患、ドライアイ、線維症、癌、代謝性疾患、虚血、心筋症、高血圧及び歯周病からなる群より選択される疾患の治療又は予防に使用できることを記載した当該医薬組成物に関する記載物とを含むキット。
【００２２】
［項１５］
ＣｕＫα放射を使用して測定した回折角（２θ）において、７．４±０．２°、９．９±０．２°、１０．５±０．２°、１１．４±０．２°、１１．６±０．２°、１３．４±０．２°、１４．２±０．２°、１７．４±０．２°、１８．３±０．２°、１８．７±０．２°及び１９．４±０．２°からなる群から選ばれる、任意の３個以上のピークを有する粉末Ｘ線回折パターンを示す、式(1)の化合物：
【化４】
2019151623.tif 000005
の結晶形。
【００２３】
［項１６］
式(1)の化合物：
【化５】
2019151623.tif 000006
の１水和物。
【００２４】
［項１７］
ＣｕＫα放射を使用して測定した回折角（２θ）において、４．２±０．２°、９．７±０．２°、１３．７±０．２°、１４．０±０．２°、１５．２±０．２°、１５．４±０．２°、１６．９±０．２°、１８．８±０．２°、２０．５±０．２°、２１．９±０．２°及び２２．４±０．２°からなる群から選ばれる、任意の３個以上のピークを有する粉末Ｘ線回折パターンを示す、式(1)の化合物：
【化６】
2019151623.tif 000007
の１水和物の結晶形。
【図面の簡単な説明】
【００２５】
【図１】図１は、結晶形Aの粉末Ｘ線回折パターンを示す。縦軸に回折強度（cps: counts per second）、横軸に回折角２θ（°）を示す。
【図２】図２は、結晶形Aの示差走査熱量測定（DSC）曲線を示す。縦軸に熱量（Heat Flow：Watt per gram）、横軸に温度（℃）を示す。
【図３】図３は、結晶形Bの粉末Ｘ線回折パターンを示す。縦軸に回折強度（cps: counts per second）、横軸に回折角２θ（°）を示す。
【図４】図４は、結晶形BのDSC曲線を示す。縦軸に熱量（Heat Flow：Watt per gram）、横軸に温度（℃）を示す。
【図５】図５は、結晶形Cの粉末Ｘ線回折パターンを示す。縦軸に回折強度（cps: counts per second）、横軸に回折角２θ（°）を示す。
【図６】図６は、結晶形CのDSC曲線を示す。縦軸に熱量（Heat Flow：Watt per gram）、横軸に温度（℃）を示す。
【図７】図７は、結晶形Dの粉末Ｘ線回折パターンを示す。縦軸に回折強度（cps: counts per second）、横軸に回折角２θ（°）を示す。
【図８】図８は、結晶形DのTG-DTA曲線を示す。縦軸上側に重量（gram）、縦軸下側に温度（℃）、横軸に温度（℃）を示す。
【図９】図９は、結晶形DのDSC曲線を示す。縦軸に熱量（Heat Flow：Watt per gram）、横軸に温度（℃）を示す。
【図１０】図１０は、結晶形Eの粉末Ｘ線回折パターンを示す。縦軸に回折強度（cps: counts per second）、横軸に回折角２θ（°）を示す。
【図１１】図１１は、結晶形EのTG-DTA曲線を示す。縦軸上側に重量（gram）、縦軸下側に温度（℃）、横軸に温度（℃）を示す。
【図１２】図１２は、結晶形EのDSC曲線を示す。縦軸に熱量（Heat Flow：Watt per gram）、横軸に温度（℃）を示す。
【発明を実施するための形態】
【００２６】
本明細書における用語の定義は以下のとおりである。
【００２７】
「式(1)の化合物」及び「式(2)の化合物」はそれぞれ、適宜「化合物(1)」及び「化合物(2)」とも称する。「化合物(1)若しくは化合物(2)又はその製薬上許容される塩」は、化合物(1)若しくは化合物(2)又は化合物(1)若しくは化合物(2)の製薬上許容される塩を意味し、化合物(1)の任意の製薬上許容される塩及び化合物(2)の任意の製薬上許容される塩のいずれをも含むことが意図される。
【００２８】
「製薬上許容される塩」とは、当技術分野で知られている過度の毒性を伴わない塩であればいかなる塩でもよい。具体的には、無機酸との塩、有機酸との塩、無機塩基との塩、有機塩基との塩等が挙げられる。様々な形態の製薬上許容される塩が当技術分野で周知であり、例えば以下の参考文献に記載されている：
(a) Berge et al., J. Pharm. Sci., 66, p1-19 (1977); 
(b) Stahl et al., "Handbook of Pharmaceutical Salts: Properties, Selection, and Use" (Wiley-VCH, Weinheim, Germany, 2002); 
(c) Paulekuhn et al., J. Med. Chem., 50, p6665-6672 (2007)。
公知の方法に従って、化合物(1)又は化合物(2)と、無機酸、有機酸、無機塩基又は有機塩基とを反応させることにより、その製薬上許容される塩を各々得ることができる。
【００２９】
無機酸との塩としては、フッ化水素酸、塩酸、臭化水素酸、ヨウ化水素酸、硝酸、リン酸又は硫酸との塩が例示される。好ましくは、塩酸、硝酸、硫酸、リン酸又は臭化水素酸との塩が挙げられる。
有機酸との塩としては、酢酸、アジピン酸、アルギン酸、４−アミノサリチル酸、アンヒドロメチレンクエン酸、安息香酸、ベンゼンスルホン酸、ショウノウ酸、カンファ−１０−スルホン酸、炭酸、クエン酸、エデト酸、エタン−１，２−ジスルホン酸、ドデシル硫酸、エタンスルホン酸、フマル酸、グルコヘプトン酸、グルコン酸、グルクロン酸、グルコヘプトン酸、グリコリルアルサニル酸、ヒドロキシナフトエ酸、２−ヒドロキシ−１−エタンスルホン酸、乳酸、ラクトビオン酸、リンゴ酸、マレイン酸、マンデル酸、メタンスルホン酸、メチル硫酸、メチル硝酸、メチレンビス（サリチル酸）、ガラクタル酸、ナフタレン−２−スルホン酸、２−ナフトエ酸、１，５−ナフタレンジスルホン酸、オレイン酸、シュウ酸、パモ酸、パントテン酸、ペクチン酸、ピクリン酸、プロピオン酸、ポリガラクツロン酸、サリチル酸、ステアリン酸、コハク酸、タンニン酸、酒石酸、テオクル酸、チオシアン酸、トリフルオロ酢酸、ｐ−トルエンスルホン酸、ウンデカン酸、アスパラギン酸又はグルタミン酸との塩が例示される。好ましくは、シュウ酸、マレイン酸、クエン酸、フマル酸、乳酸、リンゴ酸、コハク酸、酒石酸、酢酸、トリフルオロ酢酸、安息香酸、グルクロン酸、オレイン酸、パモ酸、メタンスルホン酸、ベンゼンスルホン酸、ｐ−トルエンスルホン酸又は２−ヒドロキシ−１−エタンスルホン酸との塩が挙げられる。
【００３０】
無機塩基との塩としては、リチウム、ナトリウム、カリウム、マグネシウム、カルシウム、バリウム、アルミニウム、亜鉛、ビスマス又はアンモニウムとの塩が例示される。好ましくは、ナトリウム、カリウム、カルシウム、マグネシウム又は亜鉛との塩が挙げられる。
有機塩基との塩としては、アレコリン、ベタイン、コリン、クレミゾール、エチレンジアミン、Ｎ−メチルグルカミン、Ｎ−ベンジルフェネチルアミン、トリス（ヒドロキシメチル）メチルアミン、アルギニン又はリジンとの塩が例示される。好ましくは、トリス（ヒドロキシメチル）メチルアミン、Ｎ−メチルグルカミン又はリジンとの塩が挙げられる。
【００３１】
化合物(1)若しくは化合物(2)又はその製薬上許容される塩は、溶媒和物として存在する場合がある。
「溶媒和物」とは、化合物(1)若しくは化合物(2)又はその製薬上許容される塩に、溶媒の分子が配位したものであり、水和物も包含される。溶媒和物は、製薬上許容される溶媒和物が好ましく、化合物(1)若しくは化合物(2)又はその製薬上許容される塩の水和物、エタノール和物、ジメチルスルホキシド和物等が挙げられる。
具体的には、化合物(1)又は化合物(2)の半水和物、１水和物、２水和物又は１エタノール和物、或いは化合物(1)又は化合物(2)の塩酸塩の１水和物又は２塩酸塩の２／３エタノール和物等が挙げられる。好ましくは、化合物(1)の１水和物が挙げられる。これらの溶媒和物は、公知の方法に従って得ることができる。
【００３２】
化合物(1)若しくは化合物(2)又はその製薬上許容される塩は、同位体元素（２Ｈ、３Ｈ、１４Ｃ、３５Ｓ等）で標識されていてもよい。
例えば、化合物(1)又は化合物(2)における任意の水素には、軽水素１Ｈ（Ｈ）、二重水素２Ｈ（Ｄ）、及び三重水素３Ｈ（Ｔ）が含まれる。
【００３３】
化合物(1)若しくは化合物(2)又はその製薬上許容される塩は、実質的に純粋な、化合物(1)若しくは化合物(2)又はその製薬上許容される塩が好ましい。さらに好ましくは、８０％以上の純度を有する、化合物(1)若しくは化合物(2)又はその製薬上許容される塩である。
【００３４】
化合物(1)若しくは化合物(2)又はその製薬上許容される塩の好ましい結晶形としては、ＣｕＫα放射を使用して測定した回折角（２θ）が７．４±０．２°、９．９±０．２°、１０．５±０．２°、１１．４±０．２°、１１．６±０．２°、１３．４±０．２°、１４．２±０．２°、１７．４±０．２°、１８．３±０．２°、１８．７±０．２°又は１９．４±０．２°のいずれかに少なくとも３個（例えば、少なくとも３、４又は５個）のピークを有する粉末Ｘ線回折パターンを示す、化合物(1)の結晶形が挙げられる。より好ましい化合物(1)の結晶形は、７．４±０．２°、９．９±０．２°及び１３．４±０．２°の２θにおいてピークを有する粉末Ｘ線回折パターンを示してもよい。更に好ましい化合物(1)の結晶形は、７．４±０．２°、９．９±０．２°、１３．４±０．２°、１８．７±０．２°及び１９．４±０．２°の２θにおいてピークを有する粉末Ｘ線回折パターンを示してもよい。
【００３５】
化合物(1)若しくは化合物(2)又はその製薬上許容される塩の別の好ましい結晶形としては、ＣｕＫα放射を使用して測定した回折角（２θ）が４．２±０．２°、９．７±０．２°、１３．７±０．２°、１４．０±０．２°、１５．２±０．２°、１５．４±０．２°、１６．９±０．２°、１８．８±０．２°、２０．５±０．２°、２１．９±０．２°又は２２．４±０．２°のいずれかに少なくとも３個（例えば、少なくとも３、４又は５個）のピークを有する粉末Ｘ線回折パターンを示す、化合物(1)の１水和物の結晶形が挙げられる。より好ましい化合物(1)の１水和物の結晶形は、４．２±０．２°、９．７±０．２°及び１６．９±０．２°の２θにおいてピークを有する粉末Ｘ線回折パターンを示してもよい。更に好ましい化合物(1)の１水和物の結晶形は、４．２±０．２°、９．７±０．２°、１３．７±０．２°、１５．２±０．２°及び１６．９±０．２°の２θにおいてピークを有する粉末Ｘ線回折パターンを示してもよい。
【００３６】
粉末Ｘ線回折パターンにおける回折角（２θ）の誤差範囲は、好ましくは±０．２°であり、より好ましくは±０．１°、更に好ましくは±０．０５°である。
【００３７】
本明細書において、医薬組成物は、医薬製剤の技術分野において公知の方法に従って、化合物(1)若しくは化合物(2)又はその製薬上許容される塩を、少なくとも１種以上の製薬上許容される担体等と、適宜、適量混合等することによって製造してもよい。該医薬組成物中の化合物(1)若しくは化合物(2)又はその製薬上許容される塩の含量（本明細書において、「治療上有効量」ともいう）は、剤形、投与量等により異なるが、例えば、組成物全体の０．１から１００重量％である。
【００３８】
化合物(1)若しくは化合物(2)又はその製薬上許容される塩の剤形としては、錠剤、カプセル剤、顆粒剤、散剤、トローチ剤、シロップ剤、乳剤、懸濁剤等の経口剤、及び外用剤、坐剤、注射剤、点眼剤、経鼻剤、経肺剤等の非経口剤が挙げられる。
【００３９】
「製薬上許容される担体」としては、製剤素材として慣用の各種有機又は無機担体物質が挙げられ、固形製剤における賦形剤、崩壊剤、結合剤、流動化剤、滑沢剤等、液状製剤における溶剤、溶解補助剤、懸濁化剤、等張化剤、緩衝剤、無痛化剤等、及び半固形製剤における基剤、乳化剤、湿潤剤、安定剤、安定化剤、分散剤、可塑剤、ｐＨ調節剤、吸収促進剤、ゲル化剤、防腐剤、充填剤、溶解剤、溶解補助剤、懸濁化剤等が挙げられる。更に必要に応じて、保存剤、抗酸化剤、着色剤、甘味剤等の添加物を用いてもよい。
【００４０】
「賦形剤」としては、乳糖、白糖、Ｄ−マンニトール、Ｄ−ソルビトール、トウモロコシデンプン、デキストリン、微結晶セルロース、結晶セルロース、カルメロース、カルメロースカルシウム、カルボキシメチルスターチナトリウム、低置換度ヒドロキシプロピルセルロース、アラビアゴム等が挙げられる。
【００４１】
「崩壊剤」としては、カルメロース、カルメロースカルシウム、カルメロースナトリウム、カルボキシメチルスターチナトリウム、クロスカルメロースナトリウム、クロスポビドン、低置換度ヒドロキシプロピルセルロース、ヒドロキシプロピルメチルセルロース、結晶セルロース等が挙げられる。
【００４２】
「結合剤」としては、ヒドロキシプロピルセルロース、ヒドロキシプロピルメチルセルロース、ポビドン、結晶セルロース、白糖、デキストリン、デンプン、ゼラチン、カルメロースナトリウム、アラビアゴム等が挙げられる。
【００４３】
「流動化剤」としては、軽質無水ケイ酸、ステアリン酸マグネシウム等が挙げられる。
【００４４】
「滑沢剤」としては、ステアリン酸マグネシウム、ステアリン酸カルシウム、タルク等が挙げられる。
【００４５】
「溶剤」としては、精製水、エタノール、プロピレングリコール、マクロゴール、ゴマ油、トウモロコシ油、オリーブ油等が挙げられる。
【００４６】
「溶解補助剤」としては、プロピレングリコール、Ｄ−マンニトール、安息香酸ベンジル、エタノール、トリエタノールアミン、炭酸ナトリウム、クエン酸ナトリウム等が挙げられる。
【００４７】
「懸濁化剤」としては、塩化ベンザルコニウム、カルメロース、ヒドロキシプロピルセルロース、プロピレングリコール、ポビドン、メチルセルロース、モノステアリン酸グリセリン等が挙げられる。
【００４８】
「等張化剤」としては、ブドウ糖、Ｄ−ソルビトール、塩化ナトリウム、Ｄ−マンニトール等が挙げられる。
【００４９】
「緩衝剤」としては、リン酸水素ナトリウム、酢酸ナトリウム、炭酸ナトリウム、クエン酸ナトリウム等が挙げられる。
【００５０】
「無痛化剤」としては、ベンジルアルコール等が挙げられる。
【００５１】
「基剤」としては、水、動植物油（オリーブ油、トウモロコシ油、ラッカセイ油、ゴマ油、ヒマシ油等）、低級アルコール類（エタノール、プロパノール、プロピレングリコール、１，３−ブチレングリコール、フェノール等）、高級脂肪酸及びそのエステル、ロウ類、高級アルコール、多価アルコール、炭化水素類（白色ワセリン、流動パラフィン、パラフィン等）、親水ワセリン、精製ラノリン、吸水軟膏、加水ラノリン、親水軟膏、デンプン、プルラン、アラビアガム、トラガカントガム、ゼラチン、デキストラン、セルロース誘導体（メチルセルロース、カルボキシメチルセルロース、ヒドロキシエチルセルロース、ヒドロキシプロピルセルロース等）、合成高分子（カルボキシビニルポリマー、ポリアクリル酸ナトリウム、ポリビニルアルコール、ポリビニルピロリドン等）、プロピレングリコール、マクロゴール（マクロゴール２００〜６００等）、及びそれらの２種以上の組合せ等が挙げられる。
【００５２】
「保存剤」としては、パラオキシ安息香酸エチル、クロロブタノール、ベンジルアルコール、デヒドロ酢酸ナトリウム、ソルビン酸等が挙げられる。
【００５３】
「抗酸化剤」としては、亜硫酸ナトリウム、アスコルビン酸等が挙げられる。
【００５４】
「着色剤」としては、食用色素（食用赤色２号又は３号、食用黄色４号又は５号等）、β−カロテン等が挙げられる。
【００５５】
「甘味剤」としては、サッカリンナトリウム、グリチルリチン酸二カリウム、アスパルテーム等が挙げられる。
【００５６】
本明細書において、医薬組成物は、ヒト以外の哺乳動物（マウス、ラット、ハムスター、モルモット、ウサギ、ネコ、イヌ、ブタ、ウシ、ウマ、ヒツジ、サル等）及びヒトに対して、経口的又は非経口的（局所、直腸、静脈投与、筋肉内、皮下等）に投与することができる。投与量は、投与対象、疾患、症状、剤形、投与ルート等により異なるが、例えば、成人患者に経口投与する場合の投与量は、有効成分である化合物(1)又は化合物(2)として、１日あたり、通常約０．０１ｍｇから約１ｇの範囲である。これらの量を１回から数回に分けて投与することができる。
【００５７】
化合物(1)若しくは化合物(2)又はその製薬上許容される塩を有効成分又は活性剤として含有する医薬組成物と、該医薬組成物を治療及び／又は予防に使用し得るか又は使用すべきであることを記載した該医薬組成物に関する記載物とを含む、キット（投与、治療及び／又は予防キット等）、パッケージ（包装物等）及び薬剤セット（及び／又は容器）もまた有用である。このようなキット、パッケージ及び薬剤セットは、上記医薬組成物又は上記医薬組成物に用いるための１以上の有効成分及び他の薬剤又は薬物（又は成分）が充填された１以上の容器を備えていてもよい。このようなキット、パッケージ及び薬剤セットの例としては、対象疾患の治療及び／又は予防に適切に向けられた商業用キット、商業用パッケージ及び商業用薬剤セットが挙げられる。このようなキット、パッケージ及び薬剤セットに含まれる記載物としては、医薬又は生物学的製品の製造、使用又は販売を規制する政府機関により指示された形態の注意書又は添付文書であって、ヒトへの投与に関連した製品の製造、使用又は販売に関する該政府機関の承認を示す注意書又は添付文書が挙げられる。上記キット、パッケージ及び薬剤セットには、包装された製品も包含され、また、適切な投与工程（ステップ）のために構成された構造物を包含してもよいし、対象疾患の治療及び／又は予防などを含む、より好ましい医学上の治療及び／又は予防を達成できるようにして構成された構造物を包含してもよい。
【００５８】
化合物(1)若しくは化合物(2)又はその製薬上許容される塩は、RORγをアンタゴナイズする作用を有するので、RORγアンタゴニストとして有用である。
【００５９】
「RORγアンタゴニスト活性を有する」、「RORγアンタゴニスト作用を有する」、又は「RORγをアンタゴナイズする」とは、RORγの機能をアンタゴナイズして（好ましくは特異的にアンタゴナイズして）その活性を消失又は減弱することを意味し、例えば、後述する試験例１の条件に基づいて、RORγの機能をアンタゴナイズ（好ましくは特異的にアンタゴナイズ）することを意味する。
「RORγアンタゴニスト」とは、RORγの機能をアンタゴナイズする物質を意味し、好ましくはRORγの機能を特異的にアンタゴナイズする物質である。
「RORγ」とは、好ましくは「ヒトRORγ」である。
【００６０】
化合物(1)若しくは化合物(2)又はその製薬上許容される塩は、RORγアンタゴニスト作用を有するので、RORγの機能が関与する疾患に対して有効性が期待できる。
すなわち、化合物(1)若しくは化合物(2)又はその製薬上許容される塩は、自己免疫疾患、アレルギー性疾患、ドライアイ、線維症、癌、代謝性疾患、虚血、心筋症、高血圧及び歯周病からなる群より選択される疾患の治療又は予防に有用であることが期待される。
【００６１】
「自己免疫疾患」とは、免疫系が自身の正常な細胞や組織に対してまで過剰に反応し攻撃を加えることにより症状を来す疾患の総称であり、具体的には、関節リウマチ、乾癬、炎症性腸疾患（例えば、クローン病、潰瘍性大腸炎等）、多発性硬化症、全身性エリテマトーデス（Systemic lupus erythematosus： SLE）、ベーチェット病、サルコイドーシス、原田病、強直性脊椎炎、ぶどう膜炎、リウマチ性多発性筋痛症、I型糖尿病、移植片対宿主病、円形脱毛症、白斑等が挙げられる。
「アレルギー性疾患」とは、免疫反応が特定の抗原に対して過剰に起こる事象に由来する疾患であり、具体的には、アトピー性皮膚炎、アレルギー性鼻炎（花粉症等）、アレルギー性結膜炎、アレルギー性胃腸炎、喘息（気管支喘息、小児喘息等）、食物アレルギー、薬物アレルギー、蕁麻疹等が挙げられる。
「線維症」とは、線維性結合組織の増加した状態であり、具体的には、肺線維症、原発性胆汁性肝硬変等が挙げられる。
「癌」としては、具体的には、悪性黒色腫、前立腺癌等が挙げられる。
「代謝性疾患」とは、代謝回転の異常により引き起こされる疾患又は病因を構成する要素として代謝の異常を含む疾患であり、具体的には、糖尿病（I型糖尿病、II型糖尿病等）、肝脂肪症、非アルコール性脂肪肝疾患等が挙げられる。
【００６２】
本明細書において「治療」とは、症状の改善、重症化の防止、寛解の維持、再燃の防止、及び再発の防止も含む。
本明細書において「予防」とは、症状の発症を抑制することを意味する。
【００６３】
化合物(1)若しくは化合物(2)又はその製薬上許容される塩は、以下の特性を有することが実証されている：
(i) 高い代謝安定性（試験例2を参照）；
(ii) 望ましい血漿中半減期（試験例5を参照）を含む有利な薬物動態プロファイル；
(iii) 例えばCYP3A4等の薬物代謝酵素に対する誘導能が小さいこと（試験例3を参照）；
(iv) 望ましく高い溶解度（試験例4を参照）；及び
(v)持続的且つ／又は強力な薬理作用（試験例6及び7を参照）。
【００６４】
これらの特性により、化合物(1)若しくは化合物(2)又はその製薬上許容される塩は特に優位となる。例えば、化合物(1)若しくは化合物(2)又はその製薬上許容される塩は：
(i) 薬理作用が持続するためにより低い頻度又は長い間隔での投与が可能となり、よって患者のコンプライアンスに良好な影響をもたらし、ひいては総合的な治療結果を改善する可能性があり；
(ii) CYP3A4等の薬物代謝酵素が誘導されにくいために、そのような酵素によって代謝される併用薬が代謝されにくくなる可能性があり、よって患者が複数の薬剤を同時に服用するのに本化合物はより適していてもよく；及び
(iii) 溶解度が高いために良好な経口バイオアベイラビリティを有していてもよく、よって、高い投与量においても用量依存的な血漿中濃度の上昇を示し且つ／又は吸収過程における個体差が小さい可能性がある。
【００６５】
本明細書において開示される一つの態様と本明細書の別の箇所で開示される態様とが矛盾のない限り、これらの任意の二以上の組合せも、本発明に包含されることを意図する。
【００６６】
化合物(1)若しくは化合物(2)又はその製薬上許容される塩の製造方法を、以下の実施例にて説明する。しかしながら、化合物(1)若しくは化合物(2)又はその製薬上許容される塩の製造方法は、これらの製造方法に限定されるものではない。
各工程で得られる化合物は、必要に応じて、蒸留、再結晶、カラムクロマトグラフィー等の公知の方法で単離及び／又は精製することができるが、場合によっては、単離及び／又は精製せず次の工程に進むことができる。
本明細書において、室温とは、温度を制御していない状態の温度を指し、一つの態様として、1℃から40℃が挙げられる。
【実施例】
【００６７】
1H-NMRスペクトルはCDCl3又はDMSO-d6中、テトラメチルシランを内部標準として測定し、全δ値をppmで示す。また、スペクトルデータ中の記号は以下の意味である。
s:シングレット（singlet）
d:ダブレット（doublet）
t:トリプレット（triplet）
q：カルテット（quartet）
dd：ダブルダブレット（double doublet）
ddd:ダブルダブルダブレット（double double doublet）
brs：ブロードシングレット（broad singlet）
m:マルチプレット（multiplet）
J:カップリング定数（coupling constant）
【００６８】
［実施例1］
3-{(S)-4-[4-((1R,2R)-2-tert-ブチル-シクロプロピル)-3-クロロ-フェニル]-5-イソプロピル-4-メチル-2-オキソ-3,4-ジヒドロ-2H-ピリミジン-1-イル}-ビシクロ[1.1.1]ペンタン-1-カルボン酸の合成
第1工程
(S)-2-メチル-プロパン-2-スルフィン酸[1-(4-ブロモ-3-クロロ-フェニル)-エト-(E)-イリデン]-アミド
【化７】
2019151623.tif 000008
1-(4-ブロモ-3-クロロ-フェニル)-エタノン(60.0g)及び(S)-(-)-2-メチル-プロパン-2-スルフィン酸アミド(37.3g)をシクロペンチルメチルエーテル(257mL)に混合した。反応液にオルトチタン酸テトラエチル(70.3g)を加え，反応液を100℃で5時間撹拌した。室温にて反応液に40w/v% 乳酸アンモニウム水溶液(308mL)を加え，酢酸エチルで抽出した。有機層を水，飽和食塩水で洗浄した後，硫酸マグネシウムで乾燥した。硫酸マグネシウムを濾去後，減圧濃縮した。得られた残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー(酢酸エチル:n-ヘキサン=1:4→2:3)で精製した。得られた残渣をn-ヘキサン/ジエチルエーテルで固化し，析出した固体を濾取することにより，表題化合物(70.6g)を得た。
1H-NMR (400 MHz, CDCl3) 1.30 (s, 9H), 2.72 (s, 3H), 7.58 (dd, J=8.55, 2.08Hz, 1H), 7.66 (d, J=8.55Hz, 1H), 7.91 (d, J=2.08Hz, 1H)
【００６９】
第2工程
(R)-3-(4-ブロモ-3-クロロ-フェニル)-2-イソプロピル-3-((S)-2-メチル-プロパン-2-スルフィニルアミノ)-ブチル酸  メチルエステル
【化８】
2019151623.tif 000009
アルゴンガス雰囲気下、ジイソプロピルアミン(12.4mL)をテトラヒドロフラン(89.1mL)に混合した。-78℃にて、反応液に2.66M n-ブチルリチウム/n-ヘキサン溶液(33.5mL)を滴下し、反応液を氷冷下で5分間撹拌した。反応液に3-メチル-ブチル酸メチルエステル(11.7mL)をテトラヒドロフラン(44.5mL)に混合した溶液を滴下し、反応液を-78℃で1時間撹拌した。反応液に(S)-2-メチル-プロパン-2-スルフィン酸[1-(4-ブロモ-3-クロロ-フェニル)-エト-(E)-イリデン]-アミド(15.0g)をテトラヒドロフラン(44.5mL)に混合した溶液を滴下し、反応液を2時間撹拌した。反応液に酢酸(5.1mL)をテトラヒドロフラン(25.4mL)に混合した溶液を加え，室温下，撹拌した。反応液に1M クエン酸1ナトリウム塩水溶液(100ml)を加え，分層した。有機層を水(100mL，2回)で洗浄した。合わせた水層を酢酸エチル(100mL，2回)で抽出した。合わせた有機層を1M クエン酸1ナトリウム塩水溶液(100ml)，水(100mL，2回)，飽和食塩水で洗浄した後，硫酸マグネシウムで乾燥した。硫酸マグネシウムを濾去後，減圧濃縮した。得られた残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー(酢酸エチル:n-ヘキサン=1:4→3:2)で精製することにより，表題化合物(18.0g)を得た。
1H-NMR (400 MHz, CDCl3) 0.76 (d, J=6.94Hz, 1.2H), 0.93 (d, J=6.94Hz, 1.8H), 0.95 (d, J=6.94Hz, 1.8H), 1.00 (d, J=6.94Hz, 1.2H), 1.26 (s, 5.4H), 1.34 (s, 3.6H), 1.74-1.81 (m, 0.4H), 1.87 (s, 1.2H), 1.88 (s, 1.8H), 2.04-2.13 (m, 0.6H), 2.46 (d, J=3.93Hz, 0.4H), 2.80 (d, J=3.93Hz, 0.6H), 3.60 (s, 1.8H), 3.70 (s, 1.2H), 5.13 (s, 0.6H), 5.42 (s, 0.4H), 7.17-7.21 (m, 1H), 7.54-7.59 (m, 2H)
【００７０】
第3工程
(S)-2-メチル-プロパン-2-スルフィン酸[(R)-1-(4-ブロモ-3-クロロ-フェニル)-2-ヒドロキシメチル-1,3-ジメチル-ブチル}アミド
【化９】
2019151623.tif 000010
アルゴンガス雰囲気下、(R)-3-(4-ブロモ-3-クロロ-フェニル)-2-イソプロピル-3-((S)-2-メチル-プロパン-2-スルフィニルアミノ)-ブチル酸  メチルエステル(18.0g)をトルエン(39.7mL)に混合した。-78℃にて、反応液に1M 水素化ジイソブチルアルミニウム/トルエン溶液(59.1mL)を滴下し、反応液を-78℃で2時間撹拌し、ついで、0℃へと徐々に昇温した後、30分間撹拌した。-78℃にて，反応液にメタノール(39mL)を加えた。氷冷下、反応液に30w/v% L-酒石酸水溶液(75mL)と酢酸エチル(300mL)を加え，分層した。水層を酢酸エチル(100mL)で抽出した。合わせた有機層を30w/v% L-酒石酸水溶液(80mL，2回)，水(80mL，2回)，飽和食塩水で洗浄した後，硫酸ナトリウムで乾燥した。硫酸ナトリウムを濾去後，減圧濃縮した。得られた残渣をトルエンで共沸することにより、表題化合物(18.5g)を粗生成物として得た。
1H-NMR (400 MHz, CDCl3) 0.70 (d, J=6.94Hz, 1.8H), 0.76 (d, J=6.94Hz, 1.8H), 0.79 (d, J=6.94Hz, 1.2H), 0.83 (d, J=6.94Hz, 1.2H), 1.15 (s, 5.4H), 1.30 (s, 3.6H), 1.56-1.59 (m, 0.4H), 1.71-1.82 (m, 1H), 1.95 (s, 1.8H), 1.98 (s, 1.2H), 2.04-2.08 (m, 0.6H), 3.86-4.13 (m, 2H), 5.13 (s, 0.6H), 5.99 (s, 0.4H), 7.16-7.21 (m, 1H), 7.54-7.58 (m, 2H)
【００７１】
第4工程
(R)-3-アミノ-3-(4-ブロモ-3-クロロ-フェニル)-2-イソプロピル-ブタン-1-オール
【化１０】
2019151623.tif 000011
(S)-2-メチル-プロパン-2-スルフィン酸[(R)-1-(4-ブロモ-3-クロロ-フェニル)-2-ヒドロキシメチル-1,3-ジメチル-ブチル}アミド(18.5g)をメタノール(79.5mL)に混合した。氷冷下、反応液に2M 塩化水素/メタノール溶液(39.8mL)を滴下し、反応液を1.5時間撹拌した。反応液を減圧濃縮し、残渣に10w/v% 炭酸ナトリウム水溶液(50.0mL)を加えた。反応液を酢酸エチル(80mL)で抽出した。水層を酢酸エチル(2回)で抽出した。合わせた有機層を10w/v% 炭酸ナトリウム水溶液(50mL)，水(50mL)，飽和食塩水で洗浄した後，硫酸ナトリウムで乾燥した。硫酸ナトリウムを濾去後，減圧濃縮した有機層を硫酸マグネシウムで乾燥した。硫酸マグネシウムを濾去後、濾液を減圧濃縮した。得られた残渣をトルエンで共沸することにより、表題化合物(15.7g)を粗生成物として得た。
1H-NMR (400 MHz, CDCl3) 0.69 (d, J=6.94Hz, 1.2H), 0.83 (d, J=6.94Hz, 1.8H), 0.85 (d, J=6.94Hz, 1.2H), 0.87 (d, J=6.94Hz, 1.8H), 1.36-1.47 (m, 0.6H), 1.59 (s, 1.2H), 1.60 (s, 1.8H), 1.64 (ddd, J=5.32, 3.24, 2.31Hz, 0.4H), 1.66-1.77 (m, 0.4H), 1.85 (ddd, J=8.79, 3.47, 2.31Hz, 0.6H), 3.69 (dd, J=11.33, 3.47Hz, 0.6H), 3.81 (dd, J=11.79, 5.32Hz, 0.4H), 3.91 (dd, J=11.33, 8.79Hz, 0.6H), 3.96 (dd, J=11.79, 3.47Hz, 0.4H), 7.18-7.20 (m, 1H), 7.50 (d, J=2.31Hz, 0.6H), 7.53 (d, J=2.31Hz, 0.4H), 7.58 (d, J=6.70Hz, 0.6H), 7.60 (d, J=6.70Hz, 0.4H)
【００７２】
第5工程
3-{3-[(R)-1-(4-ブロモ-3-クロロ-フェニル)-2-ヒドロキシメチル-1,3-ジメチル-ブチル]ウレイド}-ビシクロ[1.1.1]ペンタン-1-カルボン酸  メチルエステル
【化１１】
2019151623.tif 000012
窒素ガス雰囲気下，3-(メトキシカルボニル)ビシクロ[1.1.1]ペンタン-1-カルボン酸(4.00g)およびトルエン(47.0mL)を混合し，室温下，ジフェニルリン酸アジド(5.58mL)およびトリエチルアミン(3.60mL)を加えた。反応液を120℃下，50分間撹拌した。反応液を氷冷下，(R)-3-アミノ-3-(4-ブロモ-3-クロロ-フェニル)-2-イソプロピル-ブタン-1-オール(9.77g)のテトラヒドロフラン溶液(47.0mL)へ15分間かけて滴下した。反応液を室温下，1時間撹拌した。反応液に10w/v% クエン酸水溶液(100mL)を加え，分層した。有機層を水(60mL)で洗浄した。合わせた水層を酢酸エチル(2回)で抽出した。合わせた有機層を10w/v% クエン酸水溶液(60mL)，水(60mL)，10w/v% 炭酸ナトリウム水溶液(60mL)，水(60mL)，飽和食塩水で洗浄した後，硫酸ナトリウムで乾燥した。硫酸ナトリウムを濾去後，減圧濃縮した。得られた残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー(酢酸エチル:n-ヘキサン=7:13→100:0)で精製することにより，表題化合物(8.34g)を得た。
1H-NMR (400 MHz, CDCl3) 0.28 (d, J=6.94Hz, 1.2H), 0.79 (d, J=6.94Hz, 1.8H), 0.85 (d, J=6.94Hz, 1.8H), 0.92 (d, J=6.94Hz, 1.2H), 1.52-1.59 (m, 0.6H), 1.79-1.88 (m, 0.4H), 1.84 (s, 1.8H), 1.90 (s, 1.2H), 2.12-2.18 (m, 0.4H), 2.21-2.32 (m, 0.6H), 2.29 (s, 3.6H), 2.29 (s, 2.4H), 3.67 (s, 3H), 3.82-3.75 (m, 1.4H), 3.89 -3.94 (m, 0.6H), 4.61 (s, 0.6H), 4.70 (s, 0.4H), 6.92 (s, 0.4H), 7.04 (s, 0.6H), 7.13-7.16 (m, 1H), 7.44 (d, J=2.31Hz, 0.4H), 7.45 (d, J=2.08Hz, 0.6H), 7.53 (d, J=8.55Hz, 1H)
【００７３】
第6工程
3-[(S)-4-(4-ブロモ-3-クロロ-フェニル)-5-イソプロピル-4-メチル-2-オキソ-3,4-ジヒドロ-2H-ピリミジン-1-イル]- ビシクロ[1.1.1]ペンタン-1-カルボン酸  メチルエステル
【化１２】
2019151623.tif 000013
窒素ガス雰囲気下，3-{3-[(R)-1-(4-ブロモ-3-クロロ-フェニル)-2-ヒドロキシメチル-1,3-ジメチル-ブチル]ウレイド}-ビシクロ[1.1.1]ペンタン-1-カルボン酸 メチルエステル(10.0g)およびクロロホルム(68.4mL)を混合し，室温下，(ジアセトキシヨード)ベンゼン(6.06g)および2,2,6,6-テトラメチルピペリジン-1-オキシルラジカル(0.267g)を加えた。反応液を室温下，3.5時間撹拌した後，室温下，10w/w% 亜硫酸ナトリウム水溶液(50mL)を加え，分層した。水層をクロロホルム(2回)で抽出した。合わせた有機層を水(50mL)，飽和食塩水で洗浄した後，硫酸ナトリウムで乾燥した。硫酸ナトリウムを濾去後，減圧濃縮した。得られた残渣をトルエン共沸した。得られた残渣とトルエン(213mL)を混合し，室温下，ペンタフルオロアニリントリフルオロメタンスルホン酸塩(0.307g)を加えた。反応液を100℃加温下，2時間撹拌した後，室温下，亜硫酸ナトリウム(880mg)および10w/v% 炭酸ナトリウム水溶液(50mL)を加え，分層した。水層を酢酸エチル(2回)で抽出した。合わせた有機層を水(50mL)，飽和食塩水で洗浄した後，硫酸マグネシウムで乾燥した。硫酸マグネシウムを濾去後，減圧濃縮した。得られた残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー(酢酸エチル:n-ヘキサン=1:4→3:2)で精製した。得られた残渣をn-ヘキサンで固化し，析出した固体を濾取することにより，表題化合物(6.35g)を得た。
1H-NMR (400 MHz, CDCl3) 0.72 (d, J=6.94Hz, 3H), 1.06 (d, J=6.94Hz, 3H), 1.70 (s, 3H), 1.81-1.92 (m, 1H), 2.47 (s, 6H), 3.71 (s, 3H), 4.69 (s, 1H), 5.85 (s, 1H), 7.20 (dd, J=8.32, 2.31Hz, 1H), 7.51 (d, J=2.31Hz, 1H), 7.58 (d, J=8.32Hz, 1H)
【００７４】
第7工程
3-{(S)-4-[4-(2-tert-ブチル-シクロプロピル)-3-クロロ-フェニル]-5-イソプロピル-4-メチル-2-オキソ-3,4-ジヒドロ-2H-ピリミジン-1-イル}-ビシクロ[1.1.1]ペンタン-1-カルボン酸  メチルエステル
【化１３】
2019151623.tif 000014
アルゴンガス雰囲気下，3-[(S)-4-(4-ブロモ-3-クロロ-フェニル)-5-イソプロピル-4-メチル-2-オキソ-3,4-ジヒドロ-2H-ピリミジン-1-イル]-ビシクロ[1.1.1]ペンタン-1-カルボン酸 メチルエステル(5.23g)，カリウム trans-2-tert-ブチル-シクロプロピル-トリフルオロホウ酸塩(2.79g)，[1,1'-ビス(ジ-tert-ブチル-ホスフィノ)フェロセン]パラジウム(II)ジクロリド(0.729g)，炭酸セシウム(10.9g)，トルエン(112mL)および水(11.2mL)を混合し，100℃下，2時間撹拌した。反応液に室温下，水(50mL)を加え，分層した。水層を酢酸エチル(2回)で抽出した。合わせた有機層を水(50mL，2回)，飽和食塩水で洗浄した後，硫酸マグネシウムで乾燥した。活性炭を加え，室温下，1時間撹拌した。硫酸マグネシウムおよび活性炭を濾去後，減圧濃縮した。得られた残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー(酢酸エチル:n-ヘキサン=1:9→1:1)で精製した。得られた残渣とメタノールを混合し，室温下，活性炭を加えた。活性炭を濾去後，減圧濃縮した。得られた残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー(酢酸エチル:n-ヘキサン=1:4→1:1)で精製することにより，表題化合物のジアステレオマー混合物(3.70g)を得た。キラル分取カラムにより精製を行い，表題化合物(0.344g)を得た。
分取条件を以下に示す。
分取機器; リサイクル分取液体クロマトグラフ LC-92XX NEXT SERIES 日本分析工業株式会社
カラム; ダイセル CHIRALPAK IA 2.0cmφ×25cmL
移動相; n-ヘキサン:2-プロパノール=93:7
流速; 10.0mL/min
検出; UV(220nm)
キラルカラムを用いて分析したところ、得られた表題化合物の保持時間は8.3分(表題化合物のジアステレオマーの保持時間は7.6分)であり、このときの純度は>99%deであった。キラルカラムを用いた分析条件は、以下の通りである。
測定機器；HPLCシステム  島津製作所  高速液体クロマトグラフ prominence
カラム; ダイセル CHIRALPAK IA-3 0.46cmφ×15cmL
カラム温度; 40℃
移動相; n-ヘキサン:2-プロパノール=93:7
流速; 1.0mL/min
検出; UV(220nm)
1H-NMR (400 MHz, CDCl3) 0.71 (d, J=7.09Hz, 3H), 0.77 -0.83 (m, 1H), 0.90-0.95 (m, 2H), 0.94 (s, 9H), 1.04 (d, J=7.09Hz, 3H), 1.68 (s, 3H), 1.85-1.92 (m, 1H), 2.07-2.12 (m, 1H), 2.48 (s, 6H), 3.71 (s, 3H), 4.56 (s, 1H), 5.83 (s, 1H), 6.86 (d, J=8.31 Hz, 1H), 7.22 (dd, J=8.31, 1.96Hz, 1H), 7.37 (d, J=1.96Hz, 1H)
【００７５】
第8工程
3-{(S)-4-[4-((1R,2R)-2-tert-ブチル-シクロプロピル)-3-クロロ-フェニル]-5-イソプロピル-4-メチル-2-オキソ-3,4-ジヒドロ-2H-ピリミジン-1-イル}-ビシクロ[1.1.1]ペンタン-1-カルボン酸
【化１４】
2019151623.tif 000015
窒素ガス雰囲気下，3-{(S)-4-[4-(2-tert-ブチル-シクロプロピル)-3-クロロ-フェニル]-5-イソプロピル-4-メチル-2-オキソ-3,4-ジヒドロ-2H-ピリミジン-1-イル}-ビシクロ[1.1.1]ペンタン-1-カルボン酸 メチルエステル(49.1g)，テトラヒドロフラン(246mL)およびメタノール(246mL)を混合し，室温下，2N 水酸化ナトリウム水溶液(101mL)を加えた。反応液を室温下，24時間30分間撹拌した。反応液を減圧濃縮し，残渣へ水(400mL)および1N 塩酸(250mL)を加え，酢酸エチル(900mL)を加え，分層した。水層を酢酸エチル(100mLx2)で抽出し，有機層を水(250mL)，飽和食塩水で洗浄した後，硫酸ナトリウムで乾燥した。硫酸ナトリウムを濾去後，減圧濃縮した。
得られた残渣とアセトニトリル(1000mL)を混合し，85℃加温下，1時間15分間撹拌した。その後，室温下，13時間15分間撹拌した後，固体を濾取することにより，表題化合物の結晶（結晶形A）(44.7g)を得た。
同様にして得られた表題化合物の結晶(29.7mg)，酢酸エチル(297μL)及びメタノール(891μL)を混合した。固体を完溶させた後，ロータリーエバポレータを用いて溶媒を減圧濃縮することにより，表題化合物の別の結晶（結晶形B）を得た。
同様にして得られた上記の2種類の結晶(各々10.0mg)と酢酸イソブチル(80μL)を混合し，室温下，1週間スラリー撹拌した後，固体を濾取することにより，表題化合物の更に別の結晶（結晶形C）を得、下記の種晶として用いた。
上記と同様の反応により得られた粗結晶(2.00g)と酢酸イソブチル(10mL)を混合し，90℃下，撹拌した。粗結晶が完溶した後，内温47℃にて種晶を接種し，1時間撹拌した。内温45℃付近にて反応液へn-ヘプタン(30mL)を加え，2時間撹拌した。室温下，24時間撹拌した。析出した固体を濾取することにより，表題化合物（結晶形C）(1.7g)を得た。
1H-NMR (400 MHz, DMSO-D6) 0.71 (d, J=6.94Hz, 3H), 0.86-0.94 (m, 3H), 0.90 (s, 9H), 1.04 (d, J=6.94Hz, 3H), 1.60 (s, 3H), 1.93-2.04 (m, 2H), 2.29 (s, 6H), 5.97 (s, 1H), 6.99 (d, J=7.86Hz, 1H), 7.06 (s, 1H), 7.21 (dd, J=7.86, 1.85Hz, 1H), 7.32 (d, J=1.85Hz, 1H), 12.44 (s, 1H)
表題化合物における不斉炭素の絶対立体配置は，単結晶Ｘ線構造解析に付することにより確認した。
【００７６】
(中間体1の合成)
カリウム  trans-2-tert-ブチル-シクロプロピル-トリフルオロホウ酸塩
【化１５】
2019151623.tif 000016
窒素ガス雰囲気下，2-(trans-2-tert-ブチル-シクロプロピル)-4,4,5,5-テトラメチル-[1,3,2]ジオキサボロラン(8.03g)，メタノール(200mL)および水(40mL)を混合し，室温下，フッ化水素カリウム(14g)を加えた。反応液を100℃下，7時間撹拌した。室温下，終夜静置した後，減圧濃縮した。得られた残渣をトルエン共沸した。得られた残渣とアセトニトリル(120mL)を混合し，60℃下，2時間撹拌した。固体を濾去後，濾液を減圧濃縮した。得られた残渣とジエチルエーテル(80mL)を混合し，室温下，撹拌した。析出した固体を濾取することにより，表題化合物(2.86g)を得た。
1H-NMR (400 MHz, DMSO-D6) -0.94 - -0.87 (m, 1H), -0.26 - -0.23 (m, 2H), 0.25-0.30 (m, 1H), 0.73 (s, 9H)
【００７７】
［実施例1A］
3-{(S)-4-[4-((1R,2R)-2-tert-ブチル-シクロプロピル)-3-クロロ-フェニル]-5-イソプロピル-4-メチル-2-オキソ-3,4-ジヒドロ-2H-ピリミジン-1-イル}-ビシクロ[1.1.1]ペンタン-1-カルボン酸の別法による合成
第1工程
(4S,5S)-2-((E)-3,3-ジメチル-1-ブテニル)-[1,3,2]ジオキサボロラン-4,5-ジカルボン酸  ビスジメチルアミド
【化１６】
2019151623.tif 000017
2M ジブロモボランジメチルスルフィド錯体/トルエン溶液(1250mL)をトルエン(1169mL)に混合した。反応液に水冷下，3,3-ジメチル-1-ブチン(338mL)を45分間滴下した。反応液を水冷下2.5時間撹拌した。遅延性の発熱に対して水浴へ氷を加え，反応液を冷却した。反応液を8N 水酸化カリウム水溶液(969mL)と水(2922mL)を混合した水溶液へ氷冷下，30分間滴下した。水層へトルエン(1461mL)とテトラヒドロフラン(292mL)を加え，氷冷下，6N 塩酸(417mL)を20分間滴下した。塩化ナトリウム(584g)を加え，有機層を分層した。
有機層とトルエン(1581mL)を混合し，L-酒石酸-N,N,N',N'-テトラメチルアミド(562g)を加えた。反応液を130℃加温下，2時間撹拌した。有機層を分層し，減圧濃縮した。濃縮途中に析出した固体を濾別し，濾液を減圧濃縮することにより，表題化合物(599g)を粗生成物として得た。
1H NMR (400 MHz, DMSO-D6) 1.00 (s, 9H), 2.87 (s, 6H), 3.06 (s, 6H), 5.30 (d, J=18.24Hz, 1H), 5.44 (s, 2H), 6.64 (d, J=18.24Hz, 1H)
【００７８】
第2工程
(1R,2R)-2-tert-ブチルシクロプロピルボロン酸
【化１７】
2019151623.tif 000018
アルゴンガス雰囲気下，1.1M ジエチル亜鉛/n-ヘキサン溶液(1892mL)をメチルtert-ブチルエーテル(838mL)に混合した。ドライアイス-アセトン冷却下，反応液にクロロヨードメタン(301mL)を35分間滴下した。反応液をドライアイス-アセトン冷却下，30分間撹拌した。ドライアイス-アセトン冷却下，L-酒石酸-N,N,N',N'-テトラメチルアミド(70.8g)を加え，20分間撹拌した。ドライアイス-アセトン冷却下，反応液に(4S,5S)-2-((E)-3,3-ジメチル-1-ブテニル)-[1,3,2]ジオキサボロラン-4,5-ジカルボン酸  ビスジメチルアミド(222g)をメチルtert-ブチルエーテル(838mL)に混合した溶液を30分間滴下した。ドライアイス-アセトニトリル冷却下，反応液を4.5時間撹拌した。ドライアイス-アセトニトリル冷却下，30w/v% クエン酸水溶液(1438mL)を10分間かけて加えた。反応液に酢酸エチル(1047mL)と塩化ナトリウム(335g)を加え，有機層を水(1047mL)，25w/v% 塩化ナトリウム水溶液(1047mL)で洗浄した後，硫酸マグネシウムで乾燥した。硫酸マグネシウムを濾去後，減圧濃縮することにより，粗生成物(82.6g)を得た。
得られた粗生成物(82.6g)を8N 水酸化カリウム水溶液(87mL)と水(150mL)に混合した。反応液を氷冷下，6N 塩酸(117mL)に1時間滴下した。氷冷下，反応液を1時間撹拌した。析出した固体を濾取することにより，表題化合物(68.8g)を得た。
1H NMR (400 MHz, DMSO-D6) -0.46 (td, J=5.98, 9.27Hz, 1H), 0.30 - 0.37 (m, 2H), 0.70 - 0.82 (m, 1H), 0.79 (s, 9H), 12.94 (br s, 2H)
【００７９】
第3工程
4-((1R,2R)-2-tert-ブチルシクロプロピル)-3-クロロ安息香酸  メチルエステル
【化１８】
2019151623.tif 000019
アルゴンガス雰囲気下，炭酸カリウム(1329g)を水(1600mL)に混合した。反応液にトルエン(4800mL)，4-ブロモ-3-クロロ安息香酸  メチルエステル(800g)，(1R,2R)-2-tert-ブチルシクロプロピルボロン酸(1454g)及びビス(トリフェニルホスフィン)パラジウム(II)ジクロリド(112g)を加え，反応液を80℃加温下，4.5時間撹拌した。反応液を室温にした。反応液に60℃加温下，0.5N 水酸化カリウム水溶液(3200mL)を加え，2時間撹拌した。有機層を分層した後，水層をトルエン(1200mL)で抽出した。合わせた有機層を水(3200mL)で洗浄した後，セライト(800g)を加え，室温下，1時間撹拌した。セライトを濾去後，減圧濃縮した。得られた残渣にイソプロパノール(2000mL)を加え，減圧濃縮することにより，表題化合物(1061g)を粗生成物として得た。
1H NMR (400 MHz, DMSO-D6) 0.91 (s, 9H), 1.02 - 1.07 (m, 3H), 2.13 (td, J=8.07, 5.68Hz, 1H), 3.84 (s, 3H), 7.15 (d, J=8.37Hz, 1H), 7.79 (dd, J=8.37, 1.79Hz, 1H), 7.89 (d, J=1.79Hz, 1H)
【００８０】
第4工程
4-((1R,2R)-2-tert-ブチルシクロプロピル)-3-クロロ安息香酸
【化１９】
2019151623.tif 000020
4-((1R,2R)-2-tert-ブチルシクロプロピル)-3-クロロ安息香酸メチルエステル(1061g)をイソプロパノール(4600mL)に混合した。反応液に2N 水酸化ナトリウム水溶液(4000mL)を加え，反応液を室温下，終夜撹拌した。反応液に活性炭(160g)を加え，30分間撹拌した。セライトろ過後，ろ液に氷冷下，2N 塩酸(4100mL)を加え，酢酸エチル(4800mL)で抽出した。水層を酢酸エチル(1200mL)で抽出し，合わせた有機層を飽和塩化ナトリウム水溶液(1600mL)で洗浄した後，硫酸マグネシウムで乾燥した。硫酸マグネシウムを濾去後，減圧濃縮した。得られた残渣にアセトニトリル(1600mL)を加え，減圧濃縮することにより，表題化合物(920g)を粗生成物として得た。
1H NMR (400 MHz, DMSO-D6) 0.92 (s, 9H), 1.00 - 1.06 (m, 3H), 2.10 - 2.15 (m, 1H), 7.12 (d, J=7.77Hz, 1H), 7.77 (d, J=7.77Hz, 1H), 7.87 (s, 1H), 13.11 (br s, 1H)
【００８１】
第5工程
4-((1R,2R)-2-tert-ブチルシクロプロピル)-3-クロロ安息香酸
【化２０】
2019151623.tif 000021
4-((1R,2R)-2-tert-ブチルシクロプロピル)-3-クロロ安息香酸(920g)をアセトニトリル(7200mL)と水(4000mL)に混合した。反応液を内温67℃加温下，撹拌し，4-((1R,2R)-2-tert-ブチルシクロプロピル)-3-クロロ安息香酸が完溶していることを確認した。水(3700mL)を加え，種晶を接種した。60℃加温下，6時間撹拌した後，室温まで徐冷しながら終夜撹拌した。析出した固体を濾取することにより，表題化合物(518g)を得た。本工程では効率良く結晶を得るために種晶を用いたが、種晶がなくても本工程と同様の手順により当該結晶を得ることができる。
1H NMR (400 MHz, DMSO-D6) 0.92 (s, 9H), 1.00 - 1.06 (m, 3H), 2.10 - 2.15 (m, 1H), 7.12 (d, J=7.77Hz, 1H), 7.77 (d, J=7.77Hz, 1H), 7.87 (s, 1H), 13.11 (br s, 1H)
【００８２】
第6工程
4-((1R,2R)-2-tert-ブチルシクロプロピル)-3-クロロ安息香酸  (S)-フェネチルアミン塩
【化２１】
2019151623.tif 000022
4-((1R,2R)-2-tert-ブチルシクロプロピル)-3-クロロ安息香酸(790g)を酢酸イソプロピル(7900mL)に混合した。内温87℃加温下，(S)-(-)-フェネチルアミン(417g)を10分間滴下した後，種晶を接種した。83℃加温下，2時間撹拌した後，室温まで徐冷しながら終夜撹拌した。析出した固体を濾取することにより，表題化合物(1087g)を得た。本工程では効率良く結晶を得るために種晶を用いたが、種晶がなくても本工程と同様の手順により当該結晶を得ることができる。
1H NMR (400 MHz, DMSO-D6) 0.91 (s, 9H), 0.94 - 1.00 (m, 3H), 1.41 (d, J=6.58Hz, 3H), 2.05 - 2.09 (m, 1H), 4.25 (q, J=6.58Hz, 1H), 6.98 (d, J=8.07Hz, 1H), 7.27 - 7.30 (m, 1H), 7.35 - 7.38 (m, 2H), 7.45 - 7.47 (m, 2H), 7.70 (d, J=8.07Hz, 1H), 7.81 (s, 1H)
【００８３】
第7工程
4-((1R,2R)-2-tert-ブチルシクロプロピル)-3-クロロ安息香酸  (S)-フェネチルアミン塩
【化２２】
2019151623.tif 000023
4-((1R,2R)-2-tert-ブチルシクロプロピル)-3-クロロ安息香酸  (S)-フェネチルアミン塩(1087g)を酢酸イソプロピル(7600mL)に混合した。反応液に(S)-(-)-フェネチルアミン(35.2g)を加えた。83℃加温下，2時間撹拌した後，室温まで徐冷しながら終夜撹拌した。析出した固体を濾取することにより，表題化合物(1044g)を得た。
1H NMR (400 MHz, DMSO-D6) 0.91 (s, 9H), 0.94 - 1.00 (m, 3H), 1.41 (d, J=6.58Hz, 3H), 2.05 - 2.09 (m, 1H), 4.25 (q, J=6.58Hz, 1H), 6.98 (d, J=8.07Hz, 1H), 7.27 - 7.30 (m, 1H), 7.35 - 7.38 (m, 2H), 7.45 - 7.47 (m, 2H), 7.70 (d, J=8.07Hz, 1H), 7.81 (s, 1H)
【００８４】
第8工程
4-((1R,2R)-2-tert-ブチルシクロプロピル)-3-クロロ安息香酸
【化２３】
2019151623.tif 000024
4-((1R,2R)-2-tert-ブチルシクロプロピル)-3-クロロ安息香酸  (S)-フェネチルアミン塩(1044g)をアセトニトリル(5200mL)と水(3800mL)に混合した。2N 塩酸(1470mL)を加え，80℃加温下，2時間撹拌した後，室温まで徐冷しながら終夜撹拌した。水(4200mL)を1時間滴下した後，室温下，2時間撹拌した。析出した固体を濾取することにより，表題化合物(697g)を得た。
1H NMR (400 MHz, DMSO-D6) 0.92 (s, 9H), 1.00 - 1.06 (m, 3H), 2.10 - 2.15 (m, 1H), 7.12 (d, J=7.77Hz, 1H), 7.77 (d, J=7.77Hz, 1H), 7.87 (s, 1H), 13.11 (br s, 1H)
【００８５】
第9工程
4-((1R,2R)-2-tert-ブチルシクロプロピル)-3-クロロ-N-メトキシ-N-メチルベンズアミド
【化２４】
2019151623.tif 000025
4-((1R,2R)-2-tert-ブチルシクロプロピル)-3-クロロ安息香酸(1000g)をN-メチルピロリドン(5000mL)に混合した。反応液にN,O-ジメチルヒドロキシルアミン塩酸塩(540g)，1-ヒドロキシベンゾトリアゾール1水和物(60.6g)及び炭酸水素ナトリウム(465g)を加えた。氷冷下，N-(3-ジメチルアミノプロピル)-N'-エチルカルボジイミド塩酸塩(1099g)を加え，1時間撹拌した。室温下，1時間撹拌した後，シクロペンチルメチルエーテル(5000mL)と水(2500mL)を加えた。水層をシクロペンチルメチルエーテル(400mL)で抽出し，合わせた有機層を水(2500mL)，20w/v% 塩化ナトリウム水溶液(2500mL)で洗浄した後，硫酸ナトリウムで乾燥した。硫酸ナトリウムを濾去後，減圧濃縮した。得られた残渣にシクロペンチルメチルエーテル(3000mL)を加え，減圧濃縮することにより，表題化合物(1356g)を粗生成物として得た。
1H NMR (400 MHz, DMSO-D6) 0.92 (s, 9H), 0.95 - 1.04 (m, 3H), 2.07 - 2.12 (m, 1H), 3.25 (s, 3H), 3.55 (s, 3H), 7.08 (d, J=7.77Hz, 1H), 7.48 (d, J=7.77Hz, 1H), 7.61 (s, 1H)
【００８６】
第10工程
1-[4-((1R,2R)-2-tert-ブチルシクロプロピル)-3-クロロ-フェニル]エタノン
【化２５】
2019151623.tif 000026
4-((1R,2R)-2-tert-ブチルシクロプロピル)-3-クロロ-N-メトキシ-N-メチルベンズアミド(1356g)をテトラヒドロフラン(5900mL)に混合した。氷冷下，反応液に3M メチルマグネシウムクロリド/テトラヒドロフラン溶液(1700mL)を2時間滴下した後，1時間撹拌した。反応液へイソプロパノール(117mL)を加えた後，2N 塩酸(5900mL)を滴下した。トルエン(6000mL)を加え，有機層を20w/v% 塩化ナトリウム水溶液(6000mL)，水(3600mL)で洗浄した後，硫酸ナトリウムで乾燥した。硫酸ナトリウムを濾去後，減圧濃縮した。得られた残渣にシクロペンチルメチルエーテル(3500mL)を加え，減圧濃縮することにより，表題化合物(1193g)を粗生成物として得た。
1H NMR (400 MHz, DMSO-D6) 0.92 (s, 9H), 1.02 - 1.07 (m, 3H), 2.11 - 2.16 (m, 1H), 2.55 (s, 3H), 7.14 (d, J=8.07Hz, 1H), 7.79 (d, J=8.07Hz, 1H), 7.92 (s, 1H)
【００８７】
第11工程
(S)-2-メチル-プロパン-2-スルフィン酸{1-[4-((1R,2R)-2-tert-ブチルシクロプロピル)-3-クロロ-フェニル]-エト-(E)-イリデン}-アミド
【化２６】
2019151623.tif 000027
1-[4-((1R,2R)-2-tert-ブチルシクロプロピル)-3-クロロ-フェニル]エタノン(207g)及び(S)-(-)-2-メチル-プロパン-2-スルフィン酸アミド(116g)をシクロペンチルメチルエーテル(1000mL)に混合した。反応液にオルトチタン酸テトラエチル(335mL)を加え，反応液を110℃加温下，3時間撹拌した。水冷下，反応液にメタノール(1000mL)を加え，10分間撹拌した。28w/w% アンモニア水溶液(100mL)，L-乳酸(178mL)，水(1000mL)を混合した水溶液を内温30℃以下で15分間滴下した。室温下，4時間撹拌した後，終夜静置した。水層へシクロペンチルメチルエーテル(1000mL)を加え，合わせた有機層を25w/v% 塩化ナトリウム水溶液(1000mL)で洗浄した後，硫酸ナトリウムで乾燥した。硫酸ナトリウムを濾去後，減圧濃縮した。残渣にn-ヘキサン(400mL)を加え，減圧濃縮した。残渣にさらにn-ヘキサン(400mL)を加え，減圧濃縮した後、ジメチルスルホキシド(500mL)を加え，減圧濃縮した。残渣へジメチルスルホキシド(500mL)を加え，室温下，水(50mL)を滴下した。室温下，30分間撹拌した後，水(150mL)を滴下した。室温下，12時間撹拌した後，析出した固体を濾取することにより，表題化合物(261g)を得た。
1H NMR (400 MHz, DMSO-D6) 0.91 (s, 9H), 1.01 - 1.05 (m, 3H), 1.21 (s, 9H), 2.12 (td, J=7.63, 5.78Hz, 1H), 2.69 (s, 3H), 7.11 (d, J=8.55Hz, 1H), 7.75 (dd, J=8.55, 1.62Hz, 1H), 7.87 (d, J=1.62Hz, 1H)
【００８８】
第12工程
(R)-3-[4-((1R,2R)-2-tert-ブチルシクロプロピル)-3-クロロ-フェニル]-2-イソプロピル-3-((S)-2-メチル-プロパン-2-スルフィニルアミノ)-ブタン酸  メチルエステル
【化２７】
2019151623.tif 000028
窒素気流下、2M リチウムジイソプロピルアミド/テトラヒドロフラン/n-ヘプタン/エチルベンゼン溶液(740mL)をテトラヒドロフラン(786mL)に混合した。-78℃冷却下、反応液に3-メチル-ブタン酸メチルエステル(224mL)をテトラヒドロフラン(524mL)に混合した溶液を45分間滴下し，反応液を-78℃冷却下，2時間30分撹拌した。反応液に(S)-2-メチル-プロパン-2-スルフィン酸{1-[4-((1R,2R)-2-tert-ブチルシクロプロピル)-3-クロロ-フェニル]-エト-(E)-イリデン}-アミド(261g)をテトラヒドロフラン(393mL)に混合した溶液を40分間滴下し、反応液を4時間撹拌した。反応液にメタノール(131mL)と水(131mL)を5分以内で順次滴下し，室温下，14時間撹拌した。反応液に水冷下，水(786ml)を加え，分層した。水層をトルエン(1048mL)で抽出した。合わせた有機層を1N 硫酸(1309mL)，水(786mL)，5w/v% 炭酸水素ナトリウム水溶液(786mL)，25w/v% 塩化ナトリウム水溶液(786mL)で順次洗浄した後，硫酸ナトリウムで乾燥した。硫酸ナトリウムを濾去後，減圧濃縮した。得られた残渣にトルエン(262mL)を加え，減圧濃縮することにより，表題化合物(348g)を粗生成物として得た。
1H NMR (400 MHz, DMSO-D6) 0.76 - 0.92 (m, 18H), 1.15 (s, 6.3H), 1.20 (s, 2.7H), 1.75 (s, 0.9H), 1.76 (s, 2.1H), 1.93 - 2.04 (m, 2H), 2.68 (d, J=3.59Hz, 0.3H), 2.93 (d, J=3.89Hz, 0.7H), 3.52 (s, 2.1H), 3.58 (s, 0.9H), 5.15 (s, 0.7H), 5.44 (s, 0.3H), 6.97 (d, J=8.37Hz, 0.7H), 6.98 (d, J=8.37Hz, 0.3H), 7.31 (d, J=8.37Hz, 1H), 7.46 (s, 0.7H), 7.49 (s, 0.3H)
【００８９】
第13工程
(S)-2-メチル-プロパン-2-スルフィン酸[(R)-1-[4-((1R,2R)-2-tert-ブチルシクロプロピル)-3-クロロ-フェニル]-2-ヒドロキシメチル-1,3-ジメチル-ブチル}アミド
【化２８】
2019151623.tif 000029
窒素気流下，-78℃冷却下，1M 水素化ジイソブチルアルミニウム/トルエン溶液(2932mL)に(R)-3-[4-((1R,2R)-2-tert-ブチルシクロプロピル)-3-クロロ-フェニル]-2-イソプロピル-3-((S)-2-メチル-プロパン-2-スルフィニルアミノ)-ブタン酸  メチルエステル(348g)をトルエン(1392mL)に混合した溶液を1時間滴下した。反応液を-78℃冷却下，2時間撹拌した。クエン酸1水和物(622g)を水(2088mL)に混合した溶液へ氷冷下，反応液を内温20℃以下で加えた。室温下，15時間撹拌した後，分層した。水層をトルエン(1044mL)で抽出した。合わせた有機層を水(1740mL)，25w/v% 塩化ナトリウム水溶液(1740mL)で順次洗浄した後，硫酸ナトリウムで乾燥した。硫酸ナトリウムを濾去後，減圧濃縮することにより，表題化合物(645g)を粗生成物として得た。
1H NMR (400 MHz, DMSO-D6) 0.65 (d, J=7.09Hz, 2.1H), 0.68 - 0.71 (m, 3H), 0.75 (d, J=7.09Hz, 0.9H), 0.82 - 0.95 (m, 12H), 1.05 (s, 6.3H), 1.18 (s, 2.7H), 1.73 (s, 2.1H), 1.79 (s, 0.9H), 1.84 - 1.88 (m, 0.7H), 1.99 - 2.05 (m, 1.3H), 3.65 - 3.80 (m, 2H), 5.14 (t, J=3.55Hz, 0.3H), 5.50 (t, J=3.91Hz, 0.7H), 6.03 (s, 0.3H), 6.56 (s, 0.7H), 6.93 - 6.99 (m, 1H), 7.28 - 7.34 (m, 1H), 7.38 (d, J=1.96Hz, 0.7H), 7.43 (d, J=1.71Hz, 0.3H)
【００９０】
第14工程
(R)-3-アミノ-3-[4-((1R,2R)-2-tert-ブチルシクロプロピル)-3-クロロ-フェニル]-2-イソプロピル-ブタン-1-オール  塩酸塩
【化２９】
2019151623.tif 000030
(S)-2-メチル-プロパン-2-スルフィン酸[(R)-1-[4-((1R,2R)-2-tert-ブチルシクロプロピル)-3-クロロ-フェニル]-2-ヒドロキシメチル-1,3-ジメチル-ブチル}アミド(327g)をトルエン(1309mL)に混合した。氷冷下，反応液に2M 塩化水素/メタノール溶液(740mL)を20分間滴下し，水冷下にて2時間撹拌した。反応液を減圧濃縮し，残渣にジイソプロピルエーテル(250mL)を加えた。減圧濃縮した後，残渣へジイソプロピルエーテル(4155mL)を加え，90℃加温下，6時間撹拌した。反応液を室温まで徐冷しながら8時間撹拌した後，析出した固体を濾取することにより，表題化合物(195g)を得た。
1H NMR (400 MHz, DMSO-D6) 0.64 (d, J=6.88Hz, 0.9H), 0.67 (d, J=6.88Hz, 2.1H), 0.78 (d, J=6.88Hz, 2.1H), 0.91 (s, 9H), 0.94 - 0.98 (m, 3H), 1.03 (d, J=6.88 Hz, 0.9H), 1.33 - 1.40 (m, 0.7H), 1.66 (s, 0.9H), 1.68 (s, 2.1H), 1.92 - 2.08 (m, 2.3H), 3.31 - 3.35 (m, 0.3H), 3.50 - 3.55 (m, 0.3H), 3.56 - 3.77 (m, 1.4H), 5.14 (br s, 0.3H), 5.29 (br s, 0.7H), 7.06 (d, J=8.37Hz, 0.3H), 7.08 (d, J=8.37Hz, 0.7H), 7.43 (d, J=8.37Hz, 0.3H), 7.49 (d, J=8.37Hz, 0.7H), 7.60 (s, 1H), 8.31 (br s, 2.1H), 8.49 (br s, 0.9H)
【００９１】
第15工程
3-{3-[(R)-1-[4-((1R,2R)-2-tert-ブチルシクロプロピル)-3-クロロ-フェニル]-2-ヒドロキシメチル-1,3-ジメチル-ブチル]ウレイド}-ビシクロ[1.1.1]ペンタン-1-カルボン酸  メチルエステル
【化３０】
2019151623.tif 000031
アルゴンガス気流下，3-(メトキシカルボニル)ビシクロ[1.1.1]ペンタン-1-カルボン酸(63.8g)をトルエン(761mL)に混合し，水冷下，トリエチルアミン(57.5mL)を5分以上かけて滴下した。水冷下，ジフェニルリン酸アジド(89mL)を7分以上かけて滴下し，30分間撹拌した。100℃加温下，1時間30分撹拌した。反応液を，(R)-3-アミノ-3-[4-((1R,2R)-2-tert-ブチルシクロプロピル)-3-クロロ-フェニル]-2-イソプロピル-ブタン-1-オール  塩酸塩(117g)をテトラヒドロフラン(819mL)と混合した後水冷下トリエチルアミン(47.9mL)を5分以下かけて滴下した懸濁液へ，氷冷下，37分間滴下した。氷冷下，30分間撹拌した後，室温下，1時間30分撹拌した。氷冷下，1N 塩酸(1170mL)を15分以上かけて滴下した後，分層した。有機層を水(585mL)，5w/v% 炭酸水素ナトリウム水溶液(585mL，2回)，水(585mL)，25w/v% 塩化ナトリウム水溶液(585mL)で順次洗浄した後，硫酸ナトリウムで乾燥した。硫酸ナトリウムを濾去後，減圧濃縮した。得られた残渣にシクロペンチルメチルエーテルを加え，減圧濃縮することを2回繰り返すことにより，表題化合物(192g)を粗生成物として得た。
1H NMR (400 MHz, CDCl3) 0.27 (d, J=6.94Hz, 0.9H), 0.73 - 0.79 (m, 1H), 0.82 (d, J=6.94Hz, 2.1H), 0.86 - 0.99 (m, 2.9H), 0.89 (d, J=6.94Hz, 2.1H), 0.93 (s, 2.7H), 0.94 (s, 6.3H), 1.49 - 1.55 (m, 1H), 1.84 (s, 2.1H), 1.89 (s, 0.9H), 2.07 (dt, J=8.79, 5.09Hz, 1H), 2.27 (s, 4.2H), 2.28 (s, 1.8H), 2.36 - 2.29 (m, 1H), 3.66 (s, 2.1H), 3.69 (s, 0.9H), 3.73 - 3.82 (m, 1.3H), 3.91 (dd, J=10.98, 7.51Hz, 0.7H), 4.52 (s, 0.7H), 4.59 (s, 0.3H), 6.71 (s, 0.3H), 6.82 - 6.85 (m, 1H), 6.92 (s, 0.7H), 7.14 - 7.18 (m, 1H), 7.30 - 7.31 (m, 1H)
【００９２】
第16工程
3-{(S)-4-[4-((1R,2R)-2-tert-ブチル-シクロプロピル)-3-クロロ-フェニル]-5-イソプロピル-4-メチル-2-オキソ-3,4-ジヒドロ-2H-ピリミジン-1-イル}-ビシクロ[1.1.1]ペンタン-1-カルボン酸メチルエステル
【化３１】
2019151623.tif 000032
窒素ガス気流下，(ジアセトキシヨード)ベンゼン(111g)および2,2,6,6-テトラメチルピペリジン-1-オキシルラジカル(2.44g)を酢酸(632mL)に混合し，室温下，3-{3-[(R)-1-[4-((1R,2R)-2-tert-ブチルシクロプロピル)-3-クロロ-フェニル]-2-ヒドロキシメチル-1,3-ジメチル-ブチル]ウレイド}-ビシクロ[1.1.1]ペンタン-1-カルボン酸  メチルエステル(158g)および2,2,6,6-テトラメチルピペリジン-1-オキシルラジカル(2.44g)をシクロペンチルメチルエーテル(632mL)に混合した溶液を20分間滴下した。反応液を室温下，17時間撹拌した後，水冷下，トリフルオロ酢酸(94mL)を9分間滴下した。反応液を室温下，3時間30分撹拌した後，水冷下，10w/w% 亜硫酸ナトリウム水溶液(474mL)を加え，45分間撹拌した。n-ヘプタン(790mL)を加え，分層した。水層をn-ヘプタン(474mL)で抽出した。合わせた有機層を水(790mL，2回)で洗浄した後，硫酸ナトリウムで乾燥した。硫酸ナトリウムを濾去後，減圧濃縮した。得られた残渣にトルエンを加え，減圧濃縮することを2回繰り返した。得られた残渣にイソプロパノールを加え，減圧濃縮することを3回繰り返すことにより，表題化合物(197g)を粗生成物として得た。
1H-NMR (400 MHz, CDCl3) 0.71 (d, J=7.09Hz, 3H), 0.77 - 0.83 (m, 1H), 0.90 - 0.95 (m, 2H), 0.94 (s, 9H), 1.04 (d, J=7.09Hz, 3H), 1.68 (s, 3H), 1.85 - 1.92 (m, 1H), 2.07 - 2.12 (m, 1H), 2.48 (s, 6H), 3.71 (s, 3H), 4.56 (s, 1H), 5.83 (s, 1H), 6.86 (d, J=8.31 Hz, 1H), 7.22 (dd, J=8.31, 1.96Hz, 1H), 7.37 (d, J=1.96Hz, 1H)
【００９３】
第17工程
3-{(S)-4-[4-((1R,2R)-2-tert-ブチル-シクロプロピル)-3-クロロ-フェニル]-5-イソプロピル-4-メチル-2-オキソ-3,4-ジヒドロ-2H-ピリミジン-1-イル}-ビシクロ[1.1.1]ペンタン-1-カルボン酸
【化３２】
2019151623.tif 000033
窒素ガス気流下，3-{(S)-4-[4-((1R,2R)-2-tert-ブチル-シクロプロピル)-3-クロロ-フェニル]-5-イソプロピル-4-メチル-2-オキソ-3,4-ジヒドロ-2H-ピリミジン-1-イル}-ビシクロ[1.1.1]ペンタン-1-カルボン酸  メチルエステル(197g)をイソプロパノール(437mL)に混合し，水冷下，2N 水酸化ナトリウム水溶液(376mL)を12分間滴下した。反応液を室温下，3時間撹拌した後，n-ヘプタン(730mL)を加え，分層した。水層をn-ヘプタン(730mL)で洗浄した。水層をメチルtert-ブチルエーテル(730mL)に混合し，氷冷下，2N 塩酸(584mL)を滴下した後，分層した。有機層を水(438mL，2回)で洗浄した後，硫酸ナトリウムで乾燥した。硫酸ナトリウムを濾去後，減圧濃縮した。得られた残渣にアセトニトリルを加え，減圧濃縮することにより，表題化合物(152g)を粗生成物として得た。
窒素ガス気流下，得られた粗生成物をアセトニトリル(2127mL)に混合し，90℃加温下，6時間撹拌した。反応液を室温まで徐冷しながら17時間撹拌した後，析出した固体を濾取することにより，表題化合物の結晶形A(110g)を得た。
得られた粗結晶を酢酸イソブチル(659mL)に混合し，105℃加温下，撹拌した。粗結晶が完溶した後，熱時濾過し，酢酸イソブチル(200mL)で洗浄し，濾液を105℃加温下，析出した固体が完溶するまで撹拌した。反応液を50℃加温下，徐冷しながら3時間撹拌した後，種晶を接種した。反応液を45℃加温下，徐冷しながら1時間50分撹拌した。反応液へ55℃加温下，n-ヘプタン(2601mL)を56分間滴下した後，2時間撹拌した。反応液を室温まで徐冷しながら18時間撹拌した後，析出した固体を濾取することにより，表題化合物の結晶形C(153g)を得た。
1H NMR (400 MHz, DMSO-D6) 0.71 (d, J=6.94Hz, 3H), 0.86 - 0.94 (m, 3H), 0.90 (s, 9H), 1.04 (d, J=6.94Hz, 3H), 1.60 (s, 3H), 1.93 - 2.04 (m, 2H), 2.29 (s, 6H), 5.97 (s, 1H), 6.99 (d, J=7.86Hz, 1H), 7.06 (s, 1H), 7.21 (dd, J=7.86, 1.85Hz, 1H), 7.32 (d, J=1.85Hz, 1H), 12.44 (s, 1H)
3-{(S)-4-[4-((1R,2R)-2-tert-ブチル-シクロプロピル)-3-クロロ-フェニル]-5-イソプロピル-4-メチル-2-オキソ-3,4-ジヒドロ-2H-ピリミジン-1-イル}-ビシクロ[1.1.1]ペンタン-1-カルボン酸(50.0mg)をトルエン(0.1mL)とn-ヘプタン(0.1mL)に混合し，80℃加温下，固体が完溶するまで撹拌した。種晶を接種し，反応液を室温まで徐冷しながら6時間撹拌した後，析出した固体を濾取することにより，表題化合物の結晶形B(45.0mg)を得た。
3-{(S)-4-[4-((1R,2R)-2-tert-ブチル-シクロプロピル)-3-クロロ-フェニル]-5-イソプロピル-4-メチル-2-オキソ-3,4-ジヒドロ-2H-ピリミジン-1-イル}-ビシクロ[1.1.1]ペンタン-1-カルボン酸(9.71g)をアセトン(87.5mL)と水(29mL)に混合し，70℃加温下，固体が完溶するまで2時間撹拌した。反応液を42.5℃加温下，徐冷しながら2時間撹拌した。反応液を室温まで徐冷しながら15時間撹拌した後，析出した固体を濾取することにより，表題化合物の結晶形D(7.52g)を得た。
表題化合物の結晶(結晶形D)(50.0mg)をアセトン(0.375mL)と水(0.125mL)に混合し，58℃加温下，固体が完溶するまで攪拌した。反応液を室温まで冷却しながら8日間撹拌した後，固体を濾取することにより，表題化合物の更に別の結晶(結晶形E)(18.6mg)を得、種晶として用いた。
3-{(S)-4-[4-((1R,2R)-2-tert-ブチル-シクロプロピル)-3-クロロ-フェニル]-5-イソプロピル-4-メチル-2-オキソ-3,4-ジヒドロ-2H-ピリミジン-1-イル}-ビシクロ[1.1.1]ペンタン-1-カルボン酸(500mg)をアセトン(3.6mL)と水(0.9mL)に混合し，70℃加温下，固体が完溶するまで撹拌した。50℃加温下，反応液に種晶を接種し、1時間撹拌した。50℃加温下，水(3mL)を加え，2時間撹拌した。反応液を室温まで徐冷しながら3時間撹拌した後，析出した固体を濾取することにより，表題化合物の結晶形E(483mg)を得た。
【００９４】
［実施例2］
3-{(S)-5-((S)-sec-ブチル)-4-[4-(2-tert-ブチル-シクロプロピル)-3-クロロ-フェニル]-4-メチル-2-オキソ-3,4-ジヒドロ-2H-ピリミジン-1-イル}-ビシクロ[1.1.1]ペンタン-1-カルボン酸の合成
第1工程
(S)-2-[(R)-1-(4-ブロモ-3-クロロ-フェニル)-1-((S)-2-メチル-プロパン-2-スルフィニルアミノ)-エチル]-3-メチルペンタン酸  エチルエステル
【化３３】
2019151623.tif 000034
アルゴンガス雰囲気下、2M リチウムジイソプロピルアミド/テトラヒドロフラン/n-ヘプタン/エチルベンゼン溶液(45mL)をテトラヒドロフラン(45mL)に混合した。-78℃冷却下，反応液に(S)-3-メチル-ペンタン酸エチルエステル(12.9g)をテトラヒドロフラン(30mL)に混合した溶液を滴下し，反応液を-78℃冷却下，2時間撹拌した。反応液に(S)-2-メチル-プロパン-2-スルフィン酸[1-(4-ブロモ-3-クロロ-フェニル)-エト-(E)-イリデン]-アミド(15.0g)をテトラヒドロフラン(40mL)に混合した溶液を滴下し，反応液を-78℃冷却下，2時間撹拌した。反応液に飽和塩化アンモニウム水溶液を加え，室温下，撹拌した。反応液を分層し，水層を酢酸エチル(2回)で抽出した。合わせた有機層を飽和食塩水で洗浄した後，硫酸ナトリウムで乾燥した。硫酸ナトリウムを濾去後，濾液を減圧濃縮した。得られた残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー(トルエン:酢酸エチル=4:1)で精製することにより，表題化合物(8.9g)をジアステレオ混合物として得た。
1H-NMR (400 MHz, CDCl3) 0.66 (t, J=7.17Hz, 2.4H), 0.87 (t, J=7.17Hz, 0.6H), 0.92 (d, J=6.94Hz, 0.6H), 1.00 (d, J=6.94Hz, 2.4H), 1.05-1.13 (m, 1.6H), 1.19 (t, J=7.17Hz, 0.6H), 1.24 (s, 1.8H), 1.27 (t, J=7.17Hz, 2.4H), 1.32-1.35 (m, 7.6H), 1.42-1.52 (m, 0.8H), 1.67-1.73 (m, 0.2H), 1.88 (s, 0.6H), 1.90 (s, 2.4H), 2.52 (d, J=3.01Hz, 0.8H), 2.82 (d, J=3.70Hz, 0.2H), 4.07 (q, J=7.17Hz, 0.4H), 4.18 (q, J=7.17Hz, 1.6H), 5.04 (s, 0.2H), 5.49 (s, 0.8H), 7.18-7.21 (m, 1H), 7.55-7.59 (m, 2H)
【００９５】
第2工程
(S)-2-メチル-プロパン-2-スルフィン酸[(1R,3S)-1-(4-ブロモ-3-クロロ-フェニル)-2-ヒドロキシメチル-1,3-ジメチル-ペンチル}アミド
【化３４】
2019151623.tif 000035
アルゴンガス雰囲気下-78℃冷却下、1M 水素化ジイソブチルアルミニウム/トルエン溶液(202mL)に，(S)-2-[(R)-1-(4-ブロモ-3-クロロ-フェニル)-1-((S)-2-メチル-プロパン-2-スルフィニルアミノ)-エチル]-3-メチルペンタン酸  エチルエステル(24.3g)をトルエン(100mL)に混合した溶液を滴下した。反応液を-78℃冷却下，2時間25分撹拌した。-78℃冷却下，反応液にメタノール(24.5mL)を加えた。-78℃冷却下，反応液に飽和(+)-酒石酸ナトリウムカリウム水溶液(250mL)を加え，室温下，2時間撹拌した。反応液を分層し，水層をトルエン(300mL)で抽出した。合わせた有機層を飽和(+)-酒石酸ナトリウムカリウム水溶液(200mL)，水(200mL)，飽和食塩水(200mL)で洗浄した後，硫酸ナトリウムで乾燥した。硫酸ナトリウムを濾去後，濾液を減圧濃縮した。得られた残渣をトルエンで共沸し、表題化合物(24.7g)の粗生成物をジアステレオマー混合物として得た。
1H-NMR (400 MHz, CDCl3) 0.67-0.95 (m, 6H), 1.14 (s, 3.6H), 1.20-1.27 (m, 2H), 1.29 (s, 5.4H), 1.35-1.50 (m, 1H), 1.80-1.82 (m, 0.6H), 1.92 (s, 1.2H), 1.94 (s, 1.8H), 2.02-2.05 (m, 0.4H), 2.73-2.80 (m, 0.6H), 3.18-3.26 (m, 0.4H), 3.78-4.08 (m, 2H), 5.35 (s, 0.6H), 6.23 (s, 0.4H), 7.16-7.20 (m, 1H), 7.52-7.62 (m, 2H)
【００９６】
第3工程
(S)-2-[(R)-1-アミノ-1-(4-ブロモ-3-クロロ-フェニル)-エチル]-3-メチル-ペンタン-1-オール
【化３５】
2019151623.tif 000036
2-メチル-プロパン-2-スルフィン酸[(1R,3S)-1-(4-ブロモ-3-クロロ-フェニル)-2-ヒドロキシメチル-1,3-ジメチル-ペンチル}アミド (24.7g)をトルエン(124mL)に混合した。氷冷下、反応液に2M 塩化水素/メタノール溶液(50.4mL)を滴下し、反応液を水浴下，3時間撹拌した。氷冷下，反応液に4N 水酸化ナトリウム水溶液(25mL)を加えた。氷冷下，反応液に2N 水酸化ナトリウム水溶液を加えpHを12に調整した。反応液を分層し，水層をトルエン(200mL)で抽出した。合わせた有機層を飽和食塩水で洗浄した後，硫酸ナトリウムで乾燥した。硫酸ナトリウムを濾去後，濾液を減圧濃縮した。得られた残渣をトルエンで共沸、表題化合物(19.5g)の粗生成物をジアステレオマー混合物として得た。
1H-NMR (400 MHz, CDCl3) 0.55 (d, J=6.94Hz, 1.8H), 0.75 (t, J=7.28Hz, 1.2H), 0.79 (t, J=7.17Hz, 1.8H), 0.84 (d, J=7.51Hz, 1.2H), 0.86-1.07 (m, 1H), 1.20-1.29 (m, 1H), 1.35-1.45 (m, 1H), 1.59 (s, 1.2H), 1.62 (s, 1.8H), 1.72-1.74 (m, 0.6H), 1.87-1.90 (m, 0.4H), 3.69 (dd, J=12.02, 3.47Hz, 0.4H), 3.75 (dd, J=11.56, 6.24Hz, 0.6H), 3.85 (dd, J=12.02, 3.47Hz, 0.6H), 3.92 (dd, J=11.56, 8.90Hz, 0.4H), 7.18 (dd, J=8.55, 2.31Hz, 0.4H), 7.22 (dd, J=8.55, 2.31Hz, 0.6H), 7.50 (d, J=2.31Hz, 0.4H), 7.56 (d, J=2.31Hz, 0.6H), 7.59 (d, J=8.55Hz, 0.6H), 7.60 (d, J=8.55Hz, 0.4H)
【００９７】
第4工程
3-{3-[(1R,3S)-1-(4-ブロモ-3-クロロ-フェニル)-2-ヒドロキシメチル-1,3-ジメチル-ペンチル]ウレイド}-ビシクロ[1.1.1]ペンタン-1-カルボン酸  メチルエステル
【化３６】
2019151623.tif 000037
アルゴンガス雰囲気下，3-(メトキシカルボニル)ビシクロ[1.1.1]ペンタン-1-カルボン酸(5.2g)およびトルエン(50mL)を混合し，室温下，ジフェニルリン酸アジド(7.2mL)およびトリエチルアミン(4.6mL)を加えた。反応液を110℃加温下，1時間撹拌した。反応液を氷冷下，(S)-2-[(R)-1-アミノ-1-(4-ブロモ-3-クロロ-フェニル)-エチル]-3-メチル-ペンタン-1-オール(9.8g)のテトラヒドロフラン溶液(50mL)へ10分間かけて滴下した。反応液を室温下，4時間撹拌した。反応液に，N,N,N'-トリメチルエチレンジアミン(1.0mL)を加え，減圧濃縮した。得られた残渣に10%クエン酸水溶液を加え，酢酸エチル(2回)で抽出した。合わせた有機層を飽和食塩水で洗浄した後，硫酸ナトリウムで乾燥した。硫酸ナトリウムを濾去後，濾液を減圧濃縮した。得られた残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー(酢酸エチル:n-ヘキサン=1:1)で精製することにより，表題化合物(10.4g)を得た。
1H-NMR (400 MHz, CDCl3) 0.18 (d, J=6.94Hz, 1.8H), 0.76 (d, J=6.94Hz, 1.2H), 0.80 (t, J=7.17Hz, 1.2H), 0.87 (t, J=7.17Hz, 1.8H), 1.23-1.28 (m, 1H), 1.48-1.77 (m, 3H), 1.84 (s, 1.2H), 1.91 (s, 1.8H), 2.29 (s, 2.4H), 2.29 (s, 3.6H), 3.67 (s, 3H), 3.67-3.70 (m, 0.6H), 3.77-3.85 (m, 1H), 3.97 (dd, J=11.33, 8.32Hz, 0.4H), 4.60 (brs, 1H), 7.09-7.16 (m, 1H), 7.40-7.46 (m, 1H), 7.53 (d, J=8.32Hz, 1H)
【００９８】
第5工程
3-[(S)-4-(4-ブロモ-3-クロロ-フェニル)-5-((S)-sec-ブチル)-4-メチル-2-オキソ-3,4-ジヒドロ-2H-ピリミジン-1-イル]-ビシクロ[1.1.1]ペンタン-1-カルボン酸  メチルエステル
【化３７】
2019151623.tif 000038
アルゴンガス雰囲気下，3-{3-[(1R,3S)-1-(4-ブロモ-3-クロロ-フェニル)-2-ヒドロキシメチル-1,3-ジメチル-ペンチル]ウレイド}-ビシクロ[1.1.1]ペンタン-1-カルボン酸  メチルエステル(10.4g)およびジクロロメタン(100mL)を混合し，室温下，(ジアセトキシヨード)ベンゼン(7.3g)および2,2,6,6-テトラメチルピペリジン-1-オキシルラジカル(0.323g)を加えた。反応液を室温下，16.5時間撹拌した。氷冷下，チオ硫酸ナトリウム(0.954g)と水(40mL)の混合液，および飽和炭酸水素ナトリウム水溶液を加えた。反応液を分層し，水層をクロロホルム(2回)で抽出した。合わせた有機層を飽和炭酸水素ナトリウム水溶液，飽和食塩水で洗浄した後，硫酸ナトリウムで乾燥した。硫酸ナトリウムを濾去後，濾液を減圧濃縮した。得られた残渣をトルエンで共沸した。得られた残渣とトルエン(100mL)を混合し，室温下，ペンタフルオロアニリントリフルオロメタンスルホン酸塩(0.345g)を加えた。反応液を110℃加温下，3時間撹拌した。反応液を減圧濃縮した。得られた残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー(酢酸エチル:n-ヘキサン=1:2)で精製することにより，表題化合物(4.6g)を得た。
1H-NMR (400 MHz, CDCl3) 0.64 (d, J=6.70Hz, 3H), 0.86 (t, J=7.28Hz, 3H), 1.25-1.36 (m, 1H), 1.40-1.51 (m, 1H), 1.53-1.63 (m, 1H), 1.67 (s, 3H), 2.47 (s, 6H), 3.71 (s, 3H), 4.61 (s, 1H), 5.77 (s, 1H), 7.21 (dd, J=8.44, 2.31Hz, 1H), 7.52 (d, J=2.31Hz, 1H), 7.58 (d, J=8.44Hz, 1H)
【００９９】
第6工程
3-{(S)-5-((S)-sec-ブチル)-4-[4-(2-tert-ブチル-シクロプロピル)-3-クロロ-フェニル]-4-メチル-2-オキソ-3,4-ジヒドロ-2H-ピリミジン-1-イル}-ビシクロ[1.1.1]ペンタン-1-カルボン酸  メチルエステル
【化３８】
2019151623.tif 000039
アルゴンガス雰囲気下，3-[(S)-4-(4-ブロモ-3-クロロ-フェニル)-5-((S)-sec-ブチル)-4-メチル-2-オキソ-3,4-ジヒドロ-2H-ピリミジン-1-イル]-ビシクロ[1.1.1]ペンタン-1-カルボン酸  メチルエステル(4.6g)，カリウム trans-2-tert-ブチル-シクロプロピル-トリフルオロホウ酸塩(2.4g)，[1,1'-ビス(ジ-tert-ブチル-ホスフィノ)フェロセン]パラジウム(II)ジクロリド(0.62g)，炭酸セシウム(9.4g)，トルエン(50mL)および水(5mL)を混合した。反応液を100℃加温下，3.5時間撹拌した。反応液に水浴下，1-ピロリジンカルボジチオ酸アンモニウム(0.69g)を加え，50分間撹拌した。反応液に室温下，1-ピロリジンカルボジチオ酸アンモニウム(0.69g)を追加し，更に20分間撹拌した。不溶物をセライトで濾過した。濾液を分層し，水層を酢酸エチル(2回)で抽出した。合わせた有機層を飽和食塩水で洗浄した後，硫酸ナトリウムで乾燥した。硫酸ナトリウムを濾去後，濾液を減圧濃縮した。得られた残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー(酢酸エチル:n-ヘキサン=1:2)で精製することにより，ジアステレオマー混合物(3.5g)を得た。得られたジアステレオマー混合物(0.84g)をキラル分取カラムにより精製し，表題化合物(0.29g)を得た。
分取条件を以下に示す。
分取機器; リサイクル分取液体クロマトグラフ LC-9225 NEXT SERIES 日本分析工業株式会社
カラム; ダイセル CHIRALPAK IA 2.0cmφ×25cm
移動相; ヘキサン:2-プロパノール=93:7
流速; 10.0mL/min
検出; UV(220nm)
キラルカラムを用いて分析したところ、得られた表題化合物の保持時間は10.0分(表題化合物のジアステレオマーの保持時間は9.4分)であり、このときの純度は99.0%deであった。キラルカラムを用いた分析条件は、以下の通りである。
測定機器；HPLCシステム  島津製作所  高速液体クロマトグラフ prominence
カラム; ダイセル CHIRALPAK IA-3 0.46cmφ×15cm
カラム温度; 40℃
移動相; ヘキサン:2-プロパノール=95:5
流速; 1.0mL/min
検出; UV(220nm)
1H-NMR (400 MHz, CDCl3) 0.63 (d, J=6.70Hz, 3H), 0.83-0.77 (m, 1H), 0.85 (t, J=7.28Hz, 3H), 0.88-0.94 (m, 11H), 1.25-1.34 (m, 1H), 1.41-1.50 (m, 1H), 1.58-1.63 (m, 1H), 1.66 (s, 3H), 2.08-2.12 (m, 1H), 2.47 (s, 6H), 3.71 (s, 3H), 4.55 (s, 1H), 5.75 (s, 1H), 6.86 (d, J=8.09Hz, 1H), 7.24 (dd, J=8.09, 2.08Hz, 1H), 7.37 (d, J=2.08Hz, 1H)
【０１００】
第7工程
3-{(S)-5-((S)-sec-ブチル)-4-[4-((1R,2R)-2-tert-ブチル-シクロプロピル)-3-クロロ-フェニル]-4-メチル-2-オキソ-3,4-ジヒドロ-2H-ピリミジン-1-イル}-ビシクロ[1.1.1]ペンタン-1-カルボン酸
【化３９】
2019151623.tif 000040
3-{(S)-5-((S)-sec-ブチル)-4-[4-(2-tert-ブチル-シクロプロピル)-3-クロロ-フェニル]-4-メチル-2-オキソ-3,4-ジヒドロ-2H-ピリミジン-1-イル}-ビシクロ[1.1.1]ペンタン-1-カルボン酸  メチルエステル(0.287g)，テトラヒドロフラン(2mL)およびメタノール(2mL)を混合し，室温下，2N 水酸化ナトリウム水溶液(0.58mL)を加えた。反応液を室温下，18時間撹拌した。反応液を濃縮し，得られた残渣に1N 塩酸および水を加え，酢酸エチル(2回)で抽出した。合わせた有機層を飽和食塩水で洗浄した後，硫酸ナトリウムで乾燥した。硫酸ナトリウムを濾去後，濾液を減圧濃縮した。得られた残渣にアセトニトリル(1.5mL)，水(10mL)を加え室温下，撹拌した。析出した固体を濾取することにより，表題化合物(0.268g)を得た。
1H-NMR (400 MHz, DMSO-D6) 0.61 (d, J=6.70Hz, 3H), 0.81 (t, J=7.40Hz, 3H), 0.86-0.91 (m, 12H), 1.22-1.32 (m, 1H), 1.39-1.49 (m, 1H), 1.56 (s, 3H), 1.63-1.71 (m, 1H), 1.98-2.04 (m, 1H), 2.27 (s, 6H), 5.87 (s, 1H), 6.98 (d, J=8.20Hz, 1H), 7.04 (s, 1H), 7.20 (dd, J=8.21, 2.20Hz, 1H), 7.30 (d, J=2.20Hz, 1H), 12.42 (brs, 1H)
表題化合物における不斉炭素の絶対立体配置は，単結晶Ｘ線構造解析に付することにより確認した。
【０１０１】
［実施例3］
3-{(S)-4-[4-((1R,2R)-2-tert-ブチル-シクロプロピル)-3-クロロ-フェニル]-5-イソプロピル-4-メチル-2-オキソ-3,4-ジヒドロ-2H-ピリミジン-1-イル}-ビシクロ[1.1.1]ペンタン-1-カルボン酸の結晶多形
表題化合物の結晶形A〜Eについて、粉末Ｘ線回折測定（XRD）、熱重量示差熱分析（TG-DTA）及び示差走査熱量測定（DSC）を行った。各測定法の測定装置及び測定条件を以下に示す。
粉末Ｘ線回折法：
測定機器：X’pert-PRO-MPD（スペクトリス社製）
測定条件：Ｘ線 Cu/45kV/40mA、透過法にて分析
熱重量示差熱分析：
測定機器：TGA/SDTA851e/SF（メトラー・トレド社製）
測定条件：昇温速度5℃／分
示差走査熱量測定：
測定機器：示差走査熱量測定装置 DSC Q2000型（ティー・エイ・インスツメント・ジャパン社製）
測定条件：昇温速度10℃／分
【０１０２】
各結晶形についての各測定結果は以下のとおりである。
A. 結晶形A
XRDデータ：図１に示す。各ピークの回折角２θ及び回折強度は以下のとおりである。
【表１】
2019151623.tif 000041
DSCデータ：図２に示す。DSC曲線上の吸熱ピークのエンタルピーは、68.5Ｊ／ｇであり、吸熱温度は、195℃であり、補外開始温度は、193℃であった。
【０１０３】
B. 結晶形B
XRDデータ：図３に示す。各ピークの回折角２θ及び回折強度は以下のとおりである。
【表２】
2019151623.tif 000042
DSCデータ：図４に示す。DSC曲線上の吸熱ピークのエンタルピーは、76.0Ｊ／ｇであり、吸熱温度は、230.2℃であり、補外開始温度は、229.6℃であった。
【０１０４】
C. 結晶形C
XRDデータ：図５に示す。各ピークの回折角２θ及び回折強度は以下のとおりである。
【表３】
2019151623.tif 000043
DSCデータ：図６に示す。
【０１０５】
D. 結晶形D
XRDデータ：図７に示す。各ピークの回折角２θ及び回折強度は以下のとおりである。
【表４】
2019151623.tif 000044
TG-DTAデータ：図８に示す。脱水時の重量減少率は、3.6％であった。この数値は表題化合物の１水和物の理論水分量に相当することから、結晶形Dは表題化合物の１水和物であると考えられた。
DSCデータ：図９に示す。DSC曲線上の吸熱ピークのエンタルピーは、118.4Ｊ／ｇであり、吸熱温度は、128.0℃であり、補外開始温度は、118.9℃であった。
【０１０６】
E. 結晶形E
XRDデータ：図１０に示す。各ピークの回折角２θ及び回折強度は以下のとおりである。
【表５】
2019151623.tif 000045
TG-DTAデータ：図１１に示す。融解時の重量減少率は、3.9％であった。この数値は表題化合物の１水和物の理論水分量に相当することから、結晶形Eは表題化合物の１水和物であると考えられた。
DSCデータ：図１２に示す。DSC曲線上の吸熱ピークのエンタルピーは、138.1Ｊ／ｇであり、吸熱温度は、125.9℃であり、補外開始温度は、115.0℃であった。
【０１０７】
［試験例1］
インビトロにおけるRORγ転写活性阻害測定
被験物質のRORγ転写活性阻害作用は、以下のレポータージーンアッセイを用いて評価した。
ヒトRORγ（ジーンバンク（Genbank）登録番号NM_005060.3）、並びにマウスRORγ（ジーンバンク（Genbank）登録番号NM_011281.2）の配列情報を基に、ヒトおよびマウスRORγのリガンド結合部位（Ligand Binding Domain(LBD)）に当たるcDNAを取得した（LBD配列：ヒトRORγの場合、253番目セリン残基から518番目リジン残基まで；マウスRORγの場合、251番目イソロイシン残基から516番目リジン残基まで）。
ヒトおよびマウスRORγのLBD cDNAをGAL4 DNA結合ドメイン融合タンパク発現ベクターであるpFA-CMVベクター（Agilent Technologies社）に挿入した。以後、構築したプラスミドは、それぞれpFA/hRORγプラスミド、pFA/mRORγプラスミドと呼ぶ。
pFA/hRORγプラスミド、或いはpFA/mRORγプラスミドを、GAL4依存的にホタルルシフェラーゼを発現するレポータープラスミドであるpG5-Luc（Promega社）と共にチャイニーズハムスター卵巣細胞（CHO細胞）に一過性に導入した。
プラスミドのCHO細胞への導入は、TransIT（登録商標）CHO Transfection Kit（Mirus社）を用いた。試験前日に、10％(v/v)ウシ胎児血清を含むHAM F-12 Nutrient培地でCHO細胞を懸濁して5.5×106細胞ずつ、225cm2細胞培養用フラスコに播種した。2mLチューブ内で、72μLのTransIT（登録商標）-CHO Reagentを1.55mLのOpti-MEMに加えた。この溶液をよく混和して、室温にて10分間インキュベーションした。これに、300ngのpFA/hRORγプラスミド、12000ngのpG5-Lucプラスミド、11700ngのpcDNA3.1プラスミドを含んだプラスミド溶液50.4μLを加えて穏やかに混和した。なお、マウスアッセイの場合、300ngのpFA/mRORγプラスミド、12000ngのpG5-Lucプラスミド、11700ngのpcDNA3.1プラスミドを含んだプラスミド溶液を代わりに添加した。混合液を室温で10分間インキュベーションした。CHO Mojo Reagentを12μLずつ各チューブに添加して、穏やかに混和した。チューブを室温で10分間インキュベーションした。作製したトランスフェクション試薬溶液を細胞に添加した。37℃、5％CO2にて4時間培養後、トリプシン処理によって、プラスミド導入CHO細胞を回収した。細胞を培地に懸濁して、8,000cells/35μL/wellで384穴白色プレートに播種した。プレートは、1時間室温にて静置後、37℃、5％CO2にてさらに3時間培養した。被験物質は、10mMの濃度でジメチルスルホキシド（DMSO）に溶解した。この溶液をDMSOで系列希釈後、さらに使用直前に培地で希釈して任意の6用量にて細胞に添加した。最終のDMSO濃度は0.2％(v/v)とした。被験物質添加後、細胞は37℃、5％CO2にて2日間培養した。
細胞生存率は、CellTiter-Glo（Promega社）による発光法を用いて測定した。被験物質添加2日後に、CellTiter-Gloを40μLずつ384穴プレートに添加した。添加10分後に，マイクロプレートリーダーを用いて、各ウェルの発光を測定した。なお、被験物質処理後の細胞生存率は、0.2％DMSOのみで処理した細胞の発光カウントを100％とした％-of-controlで表現した。70％以下の細胞生存率を示した場合、被験物質が細胞毒性を有すると判断した。
RORγ転写活性は、SteadyLite HTS Reporter Gene Assay System (Perkin Elmer社)を用いて、細胞中のルシフェラーゼ活性を指標に測定した。StedyLite試薬をExtension緩衝液（10mM Tricine、0.2％(w/v)ウシ血清アルブミン、0.02％(v/v) Tween-20）で2.5倍希釈してルシフェラーゼ基質溶液を作製した。被験物質添加2日後に、ルシフェラーゼ基質溶液を40μLずつ384穴プレートに添加した。室温で10分間インキュベーションした後、マイクロプレートリーダーを用いて、各ウェルの発光を測定した。0.2％DMSOのみで処理した溶媒対照ウェルの発光カウントを100％として、被験物質処理後のルシフェラーゼ活性を％-of-controlとして算出した。被験物質のEC50値は、カーブフィッティングで算出した。なお、細胞毒性を有する濃度での発光カウントは、データ解析から除外した。
【０１０８】
結果を以下の表に示す。
【表６】
2019151623.tif 000046
【０１０９】
［試験例2］
インビトロ代謝安定性の測定
A. 肝ミクロソームでの代謝安定性
(1) 添加溶液の調製
添加溶液は被験物質の10mM DMSO溶液をアセトニトリルにて100倍希釈して調製した。
(2) 肝ミクロソームを用いた代謝安定性試験
リン酸カリウムバッファー(pH7.4)を用いてヒトおよび動物種の肝ミクロソーム（SEKISUI XENOTECH; Human(H2610), Rat (R1000), Mouse (M1000), Monkey (P2000), Dog (D1000)）を反応系において0.2mg/mLとなるように調製した。次に調製した被験物質の添加溶液を反応系に1%添加した。さらにNADPH生成系（非特許文献２８に記載の方法で調製）を添加し、代謝反応を開始した。所定の時間において、0.1%ギ酸アセトニトリル/水（3:1）を添加し、反応を停止した。
(3) LC/MSによる分析
反応停止後のサンプルを遠心分離(1400g, 20min)後に上清をLC/MS（UPLC-SQD(waters)）にて測定し、未変化体の残存率を算出した。
B. 肝細胞での代謝安定性
(1) 添加溶液の調製
添加溶液は被験物質の10mM DMSO溶液をアセトニトリルにて20倍希釈して調製した。
(2) 肝細胞を用いた代謝安定性試験
William's Medium E (SIGMA; W1878)を用いてヒトおよび動物種の凍結保存肝細胞（BIOIVT; Human(IVT-X008000), Rat (IVT-M00005), Monkey (IVT-M00305), Dog (IVT-M00205)）を1x106cells/mLとなるように細胞懸濁液として96wellプレートに添加した。次に調製した被験物質の添加溶液を反応系に1%添加し、代謝反応を開始した。所定の時間において、0.1%ギ酸アセトニトリルを添加し、反応を停止した。
(3) LC/MSによる分析
反応停止後のサンプルを遠心分離(1400g, 20min)後に上清をLC/MS（UPLC-SQD(waters)）にて測定し、未変化体の残存率を算出した。
【０１１０】
結果を以下の表に示す。
【表７】
2019151623.tif 000047
【表８】
2019151623.tif 000048
【０１１１】
［試験例3］
CYP3A4誘導能の測定
CYP3A4誘導能はNuclear Receptor Activation Kits（PURACYP; DPX2-96-002）を用いて付属のプロトコールに従って評価した。
以下の実験にはNuclear Receptor Activation Kits（PURACYP; DPX2-96-002）に付属されているものを用いた。
具体的な測定方法は、以下のとおりである。DPX2細胞を96wellプレートに播種し、24時間CO2インキュベーターにて培養した。添加培地に試験化合物（1, 3, 10mM）およびポジティブコントロールであるリファンピシン(10mM)のDMSO溶液を0.1%添加し、化合物添加培地を調製した。播種から24時間後に96wellプレートの培地をアスピレーターで吸引除去し、調製した化合物添加培地を添加した。化合物添加から48時間後にCellTiter-Fluorを添加し、1時間 CO2インキュベーターにてインキュベーションした後に蛍光測定により細胞生存率を測定した。さらにONE-Gloを添加し、5分間 CO2インキュベーターにてインキュベーションした後に発光測定によりレポーター活性を測定した。得られたレポーター活性を元にDMSOコントロールサンプルとの比較により誘導倍率を算出した。また、% of ポジティブコントロールの値は以下の式にて算出した。
【数１】
2019151623.tif 000049
【０１１２】
結果を以下の表に示す。
【表９】
2019151623.tif 000050
【０１１３】
［試験例4］
溶解度の測定
被験物質の10mM DMSO溶液を96well plateに10μL添加した後に、遠心エバポレーター（Genevac; HT-4X）を用いて濃縮乾固させた。乾固後のウェルに各種溶媒（JP1, JP2, FaSSIF, FeSSIF）（非特許文献２９及び３０参照）を200μL添加し、室温にて2500rpmで4時間振盪させた。その後、マルチスクリーンPCFフィルター（MERCK Millipore; MSSLBPC）を用いて二回に分けて濾過した（50, 100μL）サンプルのうち二回目に濾過したサンプルから40μL採取し、アセトニトリルを300μL添加した後に、遠心分離(4000g, 5min)を行い上清の一部をLC-UV/MS（UPLC-Premier(waters)）にて測定した。
【０１１４】
結果を以下の表に示す。
【表１０】
2019151623.tif 000051
【０１１５】
［試験例5］
ラット薬物動態（PK）試験及び血漿中濃度の測定
(1) ラットPK試験
雄性ラット(7週令)に被験物質(0.3 mg/kg)のDMSO溶液(0.1 mL/kg)を投与し、所定の時間(5, 10, 15, 30min, 1, 2, 4, 8, 25hr)において採血を行った。採血後のサンプルを遠心分離(11000g, 5min)することにより、血漿を採取した。
(2) 血漿中濃度測定
(1)において得られた血漿サンプルに対して、アセトニトリル/水混液(9:1)を2倍量添加し、除タンパク抽出した。抽出後のサンプルを遠心分離(11000g, 5min)し、上清をLC/MSMS（Nexera(Shimadzu)-QTrap5500(AB SCIEX)）にて測定した。同時に検量線も測定し、血漿中濃度を算出した。
血漿中濃度推移における消失相の2時点から消失速度定数(Kel)を算出し、消失速度定数を用いて半減期(T1/2)を計算した。
Kel = -(ln Conc1 - ln Conc2)/(t1-t2)
T1/2 = 0.693/Kel
【０１１６】
結果を以下の表に示す。
【表１１】
2019151623.tif 000052
【０１１７】
［試験例6］
抗原感作マウスにおける血漿中IL-17産生に対する化合物の作用
抗原感作マウスを用いて，化合物による血漿中IL-17産生に対する作用を評価した。抗原感作は非特許文献３１に準じて実施した。実験動物は，9週齢の雌性C57BL/6Jマウス（日本チャールス・リバー株式会社）を用いた。
マウスに，3 mg/mLのミエリンオリゴデンドロサイト糖タンパクペプチド（MOG; ANASPEC社）及び4 mg/mLのフロイント完全アジュバント（CFA; Chondrex社）を等比で混合したエマルジョンを，50 μL/siteの投与量で両側腹部に皮下投与した（day 1）。1 μg/mLの百日咳毒素（PTX; List Biological Laboratories社）を200 μL/headの投与量で腹腔内投与した（day 1及び3）。採血は，day 8に実施した。
投与は，エマルジョンの投与日より1日1回7日間（day 1〜7），Normal群（正常マウス）及びVehicle群（抗原感作マウス）に0.5%（w/v）メチルセルロース（MC）を，化合物投与群に0.5%（w/v）MCに懸濁した0.03 mg/mLまたは0.1 mg/mLの化合物を10 mL/kgの投与量でそれぞれ経口投与した。
血液を遠心分離後，血漿中IL-17濃度をQuantikine（登録商標）Mouse IL-17 ELISA Kit（R&D systems, Inc.）を用いて測定した。
【０１１８】
Normal群及びVehicle群のIL-17濃度をそれぞれ0%及び100%とし，化合物投与群のIL-17濃度の割合（% of control）を以下の数式により算出した。
【数２】
2019151623.tif 000053
その後，IL-17濃度を50%低下させる化合物用量（ED50値）を以下の数式により算出した。
【数３】
2019151623.tif 000054
その結果を以下の表に示した。
【表１２】
2019151623.tif 000055
【０１１９】
［試験例7］
正常マウスにおけるサイトカイン刺激による血漿中IL-17産生に対する化合物の作用
正常マウスを用いて，化合物による血漿中IL-17産生に対する作用を評価した。評価は非特許文献３２に準じて実施した。実験動物は，9週齢の雌性C57BL/6Jマウス（日本チャールス・リバー株式会社）を用いた。
全ての群に，最終濃度がそれぞれ1.5 μg/mLになるように調製したRecombinant Mouse IL-1 beta/IL-1F2 Protein（R&D systems, INC.）及びRecombinant Mouse IL-23 Protein（R&D systems, INC.）混合溶液を，200 μL/headの投与量で尾静脈内投与した。採血は，サイトカイン溶液投与2時間後に実施した。
投与は，サイトカイン溶液投与の28時間前に，Vehicle群は0.5%（w/v）メチルセルロース（MC）を，化合物投与群は0.5%（w/v）MCに懸濁した0.1 mg/mLの化合物を0.2 mL/headの投与量でそれぞれ単回経口投与した。
血液を遠心分離後，血漿中IL-17濃度をQuantikine（登録商標）Mouse IL-17 ELISA Kit（R&D systems, Inc.）を用いて測定した。
【０１２０】
Vehicle群のIL-17濃度を100%とし，Vehicle群に対する化合物投与群のIL-17濃度の割合を以下の数式により算出した。その結果を以下の表に示した。
【数４】
2019151623.tif 000056
【表１３】
2019151623.tif 000057
【０１２１】
［製剤例］
本発明の製剤例としては、例えば、下記の製剤処方が挙げられる。しかしながら、本発明はこれら製剤例によって限定されるものではない。
製剤例１：カプセルの製造
１）実施例１の化合物                  ３０ｍｇ
２）微結晶セルロース                  １０ｍｇ
３）乳糖                              １９ｍｇ
４）ステアリン酸マグネシウム            １ｍｇ
成分１）、２）、３）、及び４）を混合して、ゼラチンカプセルに充填する。
製剤例２：錠剤の製造
１）実施例１の化合物                  １０ｇ
２）乳糖                              ５０ｇ
３）トウモロコシデンプン              １５ｇ
４）カルメロースカルシウム            ４４ｇ
５）ステアリン酸マグネシウム            １ｇ
成分１）、２）、及び３）の全量及び３０ｇの４）を水で練合し、真空乾燥後、整粒を行う。この整粒末に１４ｇの４）及び１ｇの５）を混合し、打錠機により打錠する。このようにして、１錠あたり実施例１の化合物１０ｍｇを含有する錠剤１０００錠を得る。
【産業上の利用可能性】
【０１２２】
式(1)若しくは式(2)の化合物又はその製薬上許容される塩は、自己免疫疾患、アレルギー性疾患、ドライアイ、線維症、癌、代謝性疾患、虚血、心筋症、高血圧及び歯周病の治療又は予防に有用であることが期待される。
【図１】
2019151623.tif 000062
【図２】
2019151623.tif 000063
【図３】
2019151623.tif 000064
【図４】
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【図５】
2019151623.tif 000066
【図６】
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【図７】
2019151623.tif 000068
【図８】
2019151623.tif 000069
【図９】
2019151623.tif 000070
【図１０】
2019151623.tif 000071
【図１１】
2019151623.tif 000072
【図１２】
2019151623.tif 000073