(57)【要約】【課題】本発明の課題は、新規な酸性スフィンゴミエリナーゼ活性向上剤、及び、新規な抗アレルギー用組成物を提供することである。【解決手段】本発明は、エリオジクチオール及びその誘導体、並びに、ヘスペレチン及びその誘導体からなる群から選択される１以上からなる酸性スフィンゴミエリナーゼ活性向上剤を提供する。また、本発明は、エリオジクチオール及びその誘導体、並びに、ヘスペレチン及びその誘導体からなる群から選択される１以上と、カテキン又はその誘導体と、を含む酸性スフィンゴミエリナーゼ活性向上用組成物も提供する。【選択図】図６
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【特許請求の範囲】
【請求項１】
エリオジクチオール及びその誘導体、並びに、ヘスペレチン及びその誘導体からなる群から選択される１以上からなる酸性スフィンゴミエリナーゼ活性向上剤。
【請求項２】
カテキン又はその誘導体と併用される、請求項１に記載の酸性スフィンゴミエリナーゼ活性向上剤。
【請求項３】
エリオジクチオール及びその誘導体、並びに、ヘスペレチン及びその誘導体からなる群から選択される１以上と、カテキン又はその誘導体と、を含む酸性スフィンゴミエリナーゼ活性向上用組成物。
【請求項４】
エリオジクチオール及びその誘導体、並びに、ヘスペレチン及びその誘導体からなる群から選択される１以上と、カテキン又はその誘導体と、を含み、
前記エリオジクチオール又はその誘導体が１日あたり３０ｍｇ／ｋｇ体重未満の用量で投与される、抗アレルギー用組成物。
【請求項５】
前記ヘスペレチン又はその誘導体が１日あたり２４ｍｇ／ｋｇ体重未満の用量で投与される、請求項４に記載の抗アレルギー用組成物。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、酸性スフィンゴミエリナーゼ活性向上剤、酸性スフィンゴミエリナーゼ活性向上用組成物、及び抗アレルギー用組成物に関する。
【背景技術】
【０００２】
従来より、アレルギー疾患を治療するための各種治療剤が開発されている。例えば、特許文献１には、特定のカテキン誘導体を有効成分として含む抗アレルギー剤が開示されている。
【０００３】
他方で、本発明者らは、カテキン（メチル化カテキン等）が以下のような機構によって抗アレルギー作用を奏することを特定した（非特許文献１及び２）。すなわち、カテキンは、細胞膜上のカテキン受容体を介して、酸性スフィンゴミエリナーゼを活性化させることで細胞膜の脂質ラフトを崩壊させる。その結果、カテキンは、脂質ラフト上のシグナル伝達に関与するＩｇＥ受容体（ＦｃεＲ１）のシグナル阻害、さらには、ＦｃεＲ１を介した脱顆粒の阻害、及び、脱顆粒によるヒスタミンの放出抑制等をもたらす。
【先行技術文献】
【特許文献】
【０００４】
【特許文献１】特開２０００−１５９６７０号公報
【非特許文献】
【０００５】
【非特許文献１】Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｙ，１７２（７）：４４８６（２００４）
【非特許文献２】Ｂｉｏｃｈｅｍ  Ｂｉｏｐｈｙｓ  Ｒｅｓ  Ｃｏｍｍｕｎ．３６４（１）：７９（２００７）
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００６】
上記知見を踏まえ、本発明者らは、カテキンと同様に、又は、カテキンとともに酸性スフィンゴミエリナーゼを活性化できる化合物について鋭意検討した。
【０００７】
本発明は、上記の状況に鑑みてなされたものであり、新規な酸性スフィンゴミエリナーゼ活性向上剤、及び、新規な抗アレルギー用組成物を提供することを目的とする。
【課題を解決するための手段】
【０００８】
本発明者らは、特定の化合物によれば上記課題を解決できる点を見出し、本発明を完成するに至った。より具体的には、本発明は以下のものを提供する。
【０００９】
（１）  エリオジクチオール及びその誘導体、並びに、ヘスペレチン及びその誘導体からなる群から選択される１以上からなる酸性スフィンゴミエリナーゼ活性向上剤。
【００１０】
（２）  カテキン又はその誘導体と併用される、（１）に記載の酸性スフィンゴミエリナーゼ活性向上剤。
【００１１】
（３）  エリオジクチオール及びその誘導体、並びに、ヘスペレチン及びその誘導体からなる群から選択される１以上と、カテキン又はその誘導体と、を含む酸性スフィンゴミエリナーゼ活性向上用組成物。
【００１２】
（４）  エリオジクチオール及びその誘導体、並びに、ヘスペレチン及びその誘導体からなる群から選択される１以上と、カテキン又はその誘導体と、を含み、
前記エリオジクチオール又はその誘導体が１日あたり３０ｍｇ／ｋｇ体重未満の用量で投与される、抗アレルギー用組成物。
【００１３】
（５）  前記ヘスペレチン又はその誘導体が１日あたり２４ｍｇ／ｋｇ体重未満の用量で投与される、（４）に記載の抗アレルギー用組成物。
【発明の効果】
【００１４】
本発明によれば、新規な酸性スフィンゴミエリナーゼ活性向上剤、及び、新規な抗アレルギー用組成物を提供することができる。
【図面の簡単な説明】
【００１５】
【図１】メチル化カテキンの単独投与が酸性スフィンゴミエリナーゼ活性に及ぼす影響を示す図である。
【図２】エリオジクチオールの単独投与が酸性スフィンゴミエリナーゼ活性に及ぼす影響を示す図である。
【図３】メチル化カテキン及びエリオジクチオールの併用投与が酸性スフィンゴミエリナーゼ活性に及ぼす影響を示す図である。
【図４】メチル化カテキンの単独投与が抗アレルギー作用に及ぼす影響を示す図である。
【図５】エリオジクチオール配糖体の単独投与が抗アレルギー作用に及ぼす影響を示す図である。
【図６】メチル化カテキン及びエリオジクチオール配糖体の併用投与が抗アレルギー作用に及ぼす影響を示す図である。
【図７】ヘスペレチンの単独投与が酸性スフィンゴミエリナーゼ活性に及ぼす影響を示す図である。
【図８】カテキン及びヘスペレチンの併用投与が酸性スフィンゴミエリナーゼ活性に及ぼす影響を示す図である。
【図９】糖転移ヘスペリジンの単独投与が抗アレルギー作用に及ぼす影響を示す図である。
【図１０】メチル化カテキン及び糖転移ヘスペリジンの併用投与が抗アレルギー作用に及ぼす影響を示す図である。
【図１１】メチル化カテキン及び非メチル化カテキンの有効量を比較した図である。
【発明を実施するための形態】
【００１６】
以下、本発明の実施形態について詳細に説明する。なお、本発明は以下の実施形態に限定されない。
【００１７】
＜酸性スフィンゴミエリナーゼ活性向上剤＞
本発明の酸性スフィンゴミエリナーゼ活性向上剤（以下、「本発明の剤」ともいう。）は、エリオジクチオール及びその誘導体、並びに、ヘスペレチン及びその誘導体からなる群から選択される１以上からなる。エリオジクチオール及びヘスペレチンは、いずれも、柑橘類に含まれることが知られるフラバノンの１種である。以下、「エリオジクチオール及びその誘導体、並びに、ヘスペレチン及びその誘導体からなる群から選択される１以上」を「本発明のフラバノン」ともいう。本発明のフラバノンは１種単独で使用してもよく、２種以上を組み合わせて使用してもよい。
【００１８】
本発明者らは、エリオジクチオール及びその誘導体、並びに、ヘスペレチン及びその誘導体が、それぞれ、酸性スフィンゴミエリナーゼ活性（以下、「ＡＳＭ活性」ともいう。）を向上させることを見出した。本発明において「酸性スフィンゴミエリナーゼ活性（ＡＳＭ活性）が向上する」とは、本発明の剤の投与により、投与前と比較して酸性スフィンゴミエリナーゼ活性が増加することを意味する。酸性スフィンゴミエリナーゼ活性が増加したかどうかは、吸光度分析によって特定する。
【００１９】
本発明の剤によれば、酸性スフィンゴミエリナーゼ活性の不足によって生じる諸症状を抑制することができる。このような症状としては、例えば、酸性スフィンゴミエリナーゼ活性不足によって生じるアレルギー、アトピー性皮膚炎、花粉症等が挙げられる。
【００２０】
（エリオジクチオール及びその誘導体）
エリオジクチオールの構造式を以下に示す。
【００２１】
【化１】
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【００２２】
エリオジクチオールの誘導体としては特に限定されないが、エリオジクチオールの配糖体、エリオシトリン、エリオジクチオール７−Ｏ−グルコシド、ネオエリオシトリン、及びホモエリオジクチオール、並びに、これらのメチル化体及びプレニル化体等が挙げられる。これらのうち、酸性スフィンゴミエリナーゼ活性を特に増強させやすいという観点から、エリオジクチオールの配糖体が好ましい。
【００２３】
（ヘスペレチン及びその誘導体）
ヘスペレチンの構造式を以下に示す。
【００２４】
【化２】
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【００２５】
ヘスペレチンの誘導体としては特に限定されないが、糖転移ヘスペリジン、ヘスペリジン、及びネオヘスペリジン、並びに、これらのメチル化体及びプレニル化体等が挙げられる。これらのうち、酸性スフィンゴミエリナーゼ活性を特に増強させやすいという観点から、糖転移ヘスペリジンが好ましい。
【００２６】
本発明の剤がエリオジクチオール又はその誘導体を含む場合、その上限は過度でなくともよく、１日あたり、好ましくは１０００ｍｇ／ｋｇ体重以下、より好ましくは５００ｍｇ／ｋｇ体重以下、さらにより好ましくは３００ｍｇ／ｋｇ体重以下、最も好ましくは１００ｍｇ／ｋｇ体重以下の用量で投与されるように本発明の剤を調製してもよい。
【００２７】
本発明の剤がエリオジクチオール又はその誘導体を含む場合、その下限は、十分なＡＳＭ活性向上効果を奏する観点から、１日あたり、好ましくは３０ｍｇ／ｋｇ体重以上、より好ましくは４０ｍｇ／ｋｇ体重以上、さらにより好ましくは５０ｍｇ／ｋｇ体重以上、最も好ましくは６０ｍｇ／ｋｇ体重以上の用量で投与されるように本発明の剤を調製してもよい。
【００２８】
本発明の剤がヘスペレチン又はその誘導体を含む場合、その上限は過度でなくともよく、１日あたり、好ましくは５００ｍｇ／ｋｇ体重以下、より好ましくは３００ｍｇ／ｋｇ体重以下、さらにより好ましくは２００ｍｇ／ｋｇ体重以下、最も好ましくは１００ｍｇ／ｋｇ体重以下の用量で投与されるように本発明の剤を調製してもよい。
【００２９】
本発明の剤がヘスペレチン又はその誘導体を含む場合、その下限は、十分なＡＳＭ活性向上効果を奏する観点から、１日あたり、好ましくは２４ｍｇ／ｋｇ体重以上、より好ましくは３０ｍｇ／ｋｇ体重以上、さらにより好ましくは５０ｍｇ／ｋｇ体重以上、最も好ましくは６０ｍｇ／ｋｇ体重以上の用量で投与されるように本発明の剤を調製してもよい。
【００３０】
本発明の剤は、単独で使用してもよいが、その他の剤や成分等と併用して用いてもよい。また、本発明の剤は、飲食品や医薬品の成分として用いてもよい。これらの態様において、本発明の剤の使用量は、他の成分の量や、得ようとする効果等に応じて適宜調整できる。
【００３１】
本発明の効果が奏されやすいという観点から、本発明の剤は、カテキン又はその誘導体と併用されることが好ましい。カテキン又はその誘導体及び使用量としては、後述する酸性スフィンゴミエリナーゼ活性向上用組成物におけるものを採用できる。
【００３２】
＜酸性スフィンゴミエリナーゼ活性向上用組成物＞
本発明の酸性スフィンゴミエリナーゼ活性向上用組成物（以下、「本発明の活性向上用組成物」ともいう。）は、本発明のフラバノンと、カテキン又はその誘導体と、を含む。
【００３３】
本発明者らの検討の結果、意外にも、カテキン又はその誘導体と、本発明のフラバノンとを併用すると、本発明のフラバノンが有するＡＳＭ活性向上効果が増強されることがわかった。
【００３４】
本発明の剤の項で説明したとおり、本発明のフラバノンは、いずれか１種を単独で用いてもＡＳＭ活性を向上させることができる。他方で、本発明のフラバノンを、カテキン又はその誘導体と併用すると、それぞれの成分を単独で用いた場合よりも高いＡＳＭ活性向上効果が奏され得る。
【００３５】
（カテキン又はその誘導体）
カテキン又はその誘導体としては特に限定されず、重合カテキン（高分子ポリフェノール）であってもよく、非重合カテキン（カテキン、ガロカテキン、カテキンガレート（ＣＧ）、ガロカテキンガレート（ＧＣＧ）、エピカテキン（ＥＣ）、エピガロカテキン（ＥＧＣ）、エピカテキンガレート（ＥＣＧ）及びエピガロカテキンガレート（ＥＧＣＧ）等）であってもよい。カテキン又はその誘導体は１種単独で使用してもよく、２種以上を組み合わせて使用してもよい。
【００３６】
本発明の効果が奏されやすいという観点から、カテキン又はその誘導体としては、茶葉抽出物等に含まれるもの（ＥＧＣＧ、ＥＣ、ＥＣＧ、ＥＧＣ等）が好ましい。
【００３７】
カテキンの誘導体としては、例えば、メチル化カテキン、エチル化カテキン等が挙げられる。これらのうち、本発明の効果が奏されやすいという観点から、カテキンの誘導体としては、メチル化カテキンが好ましい。
【００３８】
メチル化カテキンとしては、例えば、エピガロカテキン−３−Ｏ−（３−Ｏ−メチル）ガレート（ＥＧＣＧ３”Ｍｅ）、エピカテキン−３−Ｏ−（３−Ｏ−メチル）ガレート（ＥＣＧ３”Ｍｅ）、エピカテキン−３−Ｏ−（４−Ｏ−メチル）ガレート（ＥＣＧ４”Ｍｅ）、エピガロカテキン−３−Ｏ−（４−Ｏ−メチル）ガレート（ＥＧＣＧ４”Ｍｅ）、ガロカテキン−３−Ｏ−（３−Ｏ−メチル）ガレート（ＧＣＧ３”Ｍｅ）、カテキン−３−Ｏ−（３−Ｏ−メチル）ガレート（ＣＧ３”Ｍｅ）、カテキン−３−Ｏ−（４−Ｏ−メチル）ガレート（ＣＧ４”Ｍｅ）、及び、ガロカテキン−３−Ｏ−（４−Ｏ−メチル）ガレート（ＧＣＧ４”Ｍｅ）、並びに、これらの異性化体等が挙げられる。
【００３９】
（本発明の活性向上用組成物の組成）
本発明の活性向上用組成物は、本発明のフラバノン、及びカテキン又はその誘導体が含まれていれば特に限定されないが、本発明のフラバノン、及びカテキン又はその誘導体それぞれを単独で使用した場合の有効量と同等、又は、より低い量を配合してもよい。上記のとおり、本発明のフラバノンと、カテキン又はその誘導体とを併用することで、カテキン又はその誘導体を単独で使用した場合と比較して高いＡＳＭ活性向上効果が奏されることから、本発明によれば、より少ない含有量で、より高い効果を奏し得る。
【００４０】
本発明の活性向上用組成物に含まれる、本発明のフラバノンと、カテキン又はその誘導体との比率（質量比）は特に限定されない。本発明のフラバノンとしてエリオジクチオール又はその誘導体を含む場合、十分なＡＳＭ活性向上効果を奏する観点から、カテキン又はその誘導体に対する本発明のフラバノンの比率の下限が好ましくは０．１以上、より好ましくは０．４以上、上限が２０以下、好ましくは１０以下であってもよい。本発明のフラバノンとしてヘスペレチン又はその誘導体を含む場合、十分なＡＳＭ活性向上効果を奏する観点から、カテキン又はその誘導体に対する本発明のフラバノンの比率の下限が好ましくは０．１以上、より好ましくは０．２以上、上限が１０以下、好ましくは５以下であってもよい。
【００４１】
本発明のフラバノンの含有量の下限は、十分なＡＳＭ活性向上効果を奏する観点から、本発明の活性向上用組成物に対して、好ましくは０．０５質量％以上、より好ましくは０．１０質量％以上であってもよい。本発明のフラバノンの含有量の上限は、過度でなくとも十分なＡＳＭ活性向上効果を奏することができるため、本発明の活性向上用組成物に対して、好ましくは１０．０質量％以下、より好ましくは５．００質量％以下であってもよい。本発明のフラバノンとして２種以上を使用する場合、その総量が上記の範囲であればよい。
【００４２】
カテキン又はその誘導体の含有量の下限は、十分なＡＳＭ活性向上効果を奏する観点から、本発明の活性向上用組成物に対して、好ましくは０．０５質量％以上、より好ましくは０．１０質量％以上であってもよい。カテキン又はその誘導体の含有量の上限は、過度でなくとも十分なＡＳＭ活性向上効果を奏することができるため、本発明の活性向上用組成物に対して、好ましくは１０．０質量％以下、より好ましくは５．００質量％以下であってもよい。カテキン又はその誘導体として２種以上を使用する場合、その総量が上記の範囲であればよい。
【００４３】
本発明のフラバノンとしてエリオジクチオール又はその誘導体を含む場合、その上限は、１日あたり、好ましくは３０ｍｇ／ｋｇ体重未満、より好ましくは２０ｍｇ／ｋｇ体重以下、さらに好ましくは１０ｍｇ／ｋｇ体重以下、さらに好ましくは８．０ｍｇ／ｋｇ体重以下、さらに好ましくは５．０ｍｇ／ｋｇ体重以下、さらに好ましくは４．０ｍｇ／ｋｇ体重以下、さらに好ましくは２．０ｍｇ／ｋｇ体重以下、最も好ましくは１．０ｍｇ／ｋｇ体重以下の用量で投与されるように本発明の活性向上用組成物を調製してもよい。本発明によれば、このように少ない量のエリオジクチオール又はその誘導体しか含まれなくとも、カテキン又はその誘導体との組み合わせにおいて十分なＡＳＭ活性向上効果を奏することができる。
【００４４】
本発明のフラバノンとしてエリオジクチオール又はその誘導体を含む場合、その下限は、十分なＡＳＭ活性向上効果を奏する観点から、１日あたり、好ましくは０．１０ｍｇ／ｋｇ体重以上、より好ましくは０．１５ｍｇ／ｋｇ体重以上、さらにより好ましくは０．２０ｍｇ／ｋｇ体重以上、最も好ましくは０．２５ｍｇ／ｋｇ体重以上の用量で投与されるように本発明の活性向上用組成物を調製してもよい。
【００４５】
本発明のフラバノンとしてヘスペレチン又はその誘導体を含む場合、その上限は、１日あたり、好ましくは２４ｍｇ／ｋｇ体重未満、より好ましくは１２ｍｇ／ｋｇ体重以下、さらに好ましくは８．０ｍｇ／ｋｇ体重以下、さらに好ましくは６．０ｍｇ／ｋｇ体重以下、さらに好ましくは３．５ｍｇ／ｋｇ体重以下、さらに好ましくは３．０ｍｇ／ｋｇ体重以下、最も好ましくは２．０ｍｇ／ｋｇ体重以下の用量で投与されるように本発明の活性向上用組成物を調製してもよい。本発明によれば、このように少ない量のヘスペレチン又はその誘導体しか含まれなくとも、カテキン又はその誘導体との組み合わせにおいて十分なＡＳＭ活性向上効果を奏することができる。
【００４６】
本発明のフラバノンとしてヘスペレチン又はその誘導体を含む場合、その下限は、十分なＡＳＭ活性向上効果を奏する観点から、１日あたり、好ましくは０．０５ｍｇ／ｋｇ体重以上、より好ましくは０．０７ｍｇ／ｋｇ体重以上、さらにより好ましくは０．１０ｍｇ／ｋｇ体重以上、最も好ましくは０．１５ｍｇ／ｋｇ体重以上の用量で投与されるように本発明の活性向上用組成物を調製してもよい。
【００４７】
カテキン又はその誘導体の含有量の上限は、カテキン又はその誘導体がメチル化カテキンである場合、１日あたり、好ましくは５．０ｍｇ／ｋｇ体重以下、より好ましくは３．０ｍｇ／ｋｇ体重以下、さらに好ましくは０．１ｍｇ／ｋｇ体重以下、最も好ましくは０．０５ｍｇ／ｋｇ体重以下の用量で投与されるように本発明の活性向上用組成物を調製してもよい。カテキン又はその誘導体の含有量の上限は、カテキン又はその誘導体がメチル化カテキン以外のものである場合、１日あたり、好ましくは２５ｍｇ／ｋｇ体重以下、より好ましくは１５ｍｇ／ｋｇ体重以下、さらに好ましくは０．５ｍｇ／ｋｇ体重以下、最も好ましくは０．２５ｍｇ／ｋｇ体重以下の用量で投与されるように本発明の活性向上用組成物を調製してもよい。本発明によれば、このように少ない量のカテキン又はその誘導体しか含まれなくとも、本発明のフラバノンとの組み合わせにおいて十分なＡＳＭ活性向上効果を奏することができる。なお、メチル化カテキンの有効量は、通常、メチル化カテキン以外のカテキン又はその誘導体（エピガロカテキンガレート等）の有効量の約５分の１の量である（下記「参考例：メチル化カテキン、及び、メチル化カテキン以外のカテキン又はその誘導体（非メチル化カテキン）の有効量の比較」を参照。）。
【００４８】
カテキン又はその誘導体の含有量の下限は、十分なＡＳＭ活性向上効果を奏する観点から、１日あたり、好ましくは０．００１ｍｇ／ｋｇ体重以上、より好ましくは０．００５ｍｇ／ｋｇ体重以上、さらに好ましくは０．０１０ｍｇ／ｋｇ体重以上、最も好ましくは０．０２０ｍｇ／ｋｇ体重以上の用量で投与されるように本発明の活性向上用組成物を調製してもよい。
【００４９】
（その他の成分）
本発明の活性向上用組成物には、本発明の効果を阻害しない範囲で、飲食品や医薬品に通常配合される成分が含まれていてもよい。配合される成分の種類や量は、得ようとする効果や、剤型に応じて適宜設定できる。
【００５０】
（剤型）
本発明の活性向上用組成物は、所望の形態に調製できる。具体的な形態としては、食品（菓子（飴、アイスクリーム等）、乳製品等）、飲料（緑茶、ウーロン茶、紅茶、コーヒー、ココア、その他の嗜好飲料）、医薬品（錠剤、丸剤、粉剤、カプセル剤等）等の任意の形態が挙げられる。
【００５１】
本発明の活性向上用組成物は、そのまま飲食や摂取できる形態でもよいが、不織布の袋（ティーバッグ等）に詰めて湯等で抽出することで摂取できる形態でもよい。
【００５２】
＜抗アレルギー用組成物＞
本発明の抗アレルギー用組成物は、本発明のフラバノンと、カテキン又はその誘導体と、を含み、本発明のフラバノンとしてエリオジクチオール又はその誘導体が含まれる場合、該エリオジクチオール又はその誘導体は、１日あたり３０ｍｇ／ｋｇ体重未満（好ましくは２０ｍｇ／ｋｇ体重以下、さらに好ましくは１０ｍｇ／ｋｇ体重以下、さらに好ましくは８．０ｍｇ／ｋｇ体重以下、さらに好ましくは５．０ｍｇ／ｋｇ体重以下、さらに好ましくは４．０ｍｇ／ｋｇ体重以下、さらに好ましくは２．０ｍｇ／ｋｇ体重以下、最も好ましくは１．０ｍｇ／ｋｇ体重以下）の用量で投与される。本発明によれば、このように少ない量のエリオジクチオール又はその誘導体しか含まれなくとも、カテキン又はその誘導体との組み合わせにおいて十分な抗アレルギー作用を奏することができる。本発明において「抗アレルギー作用を奏する」とは、本発明の抗アレルギー用組成物の投与により、投与前と比較して、アレルギーの諸症状が緩和又は治療されることを意味する。
【００５３】
本発明の抗アレルギー用組成物によれば、酸性スフィンゴミエリナーゼ活性不足に起因するアレルギーの諸症状だけではなく、アトピー性皮膚炎、花粉症等に起因するアレルギーの諸症状を緩和又は治療できる。
【００５４】
本発明の抗アレルギー用組成物に含まれる本発明のフラバノンの種類及び配合量（本発明のフラバノンの配合量の上下限値等）は、エリオジクチオール又はその誘導体が含まれる場合に上記投与量を満たす必要がある点以外は、本発明の活性向上用組成物におけるものと同様である。
【００５５】
本発明の抗アレルギー用組成物にヘスペレチン又はその誘導体が含まれる場合、該ヘスペレチン又はその誘導体は、１日あたり、好ましくは２４ｍｇ／ｋｇ体重未満、より好ましくは１２ｍｇ／ｋｇ体重以下、さらに好ましくは８．０ｍｇ／ｋｇ体重以下、さらに好ましくは６．０ｍｇ／ｋｇ体重以下、さらに好ましくは３．５ｍｇ／ｋｇ体重以下、さらに好ましくは３．０ｍｇ／ｋｇ体重以下、最も好ましくは２．０ｍｇ／ｋｇ体重以下の用量で投与されることが好ましい。本発明によれば、このように少ない量のヘスペレチン又はその誘導体しか含まれなくとも、カテキン又はその誘導体との組み合わせにおいて十分な抗アレルギー作用を奏することができる。
【００５６】
本発明の抗アレルギー用組成物に含まれるカテキン又はその誘導体の配合量の種類及び配合量は、本発明の活性向上用組成物におけるものと同様である。
【００５７】
本発明の抗アレルギー用組成物に含まれるその他の成分（つまり、本発明のフラバノン及びカテキン又はその誘導体以外の成分）や、本発明の抗アレルギー用組成物の剤型は、本発明の活性向上用組成物におけるものと同様である。
【実施例】
【００５８】
以下、実施例を示し、本発明を具体的に説明するが、本発明はこれらの実施例に限定されるものではない。
【００５９】
＜試験１：カテキン及びエリオジクチオールが酸性スフィンゴミエリナーゼ活性に及ぼす影響＞
下記の方法に基づき、カテキン又はエリオジクチオールの単独投与、並びに、カテキン及びエリオジクチオールの併用投与が、ｉｎ  ｖｉｔｒｏにおける酸性スフィンゴミエリナーゼ（ＡＳＭ）活性に及ぼす影響を検討した。
【００６０】
（細胞の準備）
ヒト好塩基球細胞株（ＫＵ８１２）を、２×１０５  ｃｅｌｌｓ／ｍＬとなるように、１％ウシ胎児血清（ＦＣＳ）ＲＰＭＩ  １６４０培地（５Ｕ／ｍＬスーパーオキシドディスムターゼ（ＳＯＤ）及び２００Ｕ／ｍＬカタラーゼを含む。）を入れた２４ｗｅｌｌ  ｐｌａｔｅの各ウェルに播種した。
【００６１】
（サンプルの準備）
サンプルとして、メチル化カテキン（エピガロカテキン−３−Ｏ−（３−Ｏ−メチル）ガレート；ＥＧＣＧ３”Ｍｅ、長良サイエンス社製）及び、エリオジクチオール（東京化成工業社製）を用いた。上記ＲＰＭＩ  １６４０培地に１〜１０μＭのメチル化カテキン、及び０．１〜２μＭのエリオジクチオールを添加して各サンプルを準備した。また、陰性対照として、培地のみのサンプル（つまり、カテキン及びエリオジクチオールを含まないサンプル）を準備した。
【００６２】
ＥＧＣＧ３”Ｍｅの構造式を以下に示す。
【００６３】
【化３】
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【００６４】
（ＡＳＭ活性の測定）
細胞を播種した各ウェルにメチル化カテキン及び／又はエリオジクチオールを添加した。次いで、３７℃で３時間培養した後、細胞を細胞溶解バッファー（ｐＨ４．５）で回収した。細胞溶解液にＢＯＤＹＰＹ−Ｃ−１２−Ｓｐｈｉｎｇｏｍｙｅｌｉｎを添加し、３７℃で１８時間インキュベートした後、吸光度分析によりＡＳＭ活性を測定した（ｎ＝３）。
【００６５】
（結果）
メチル化カテキンの単独投与の結果を図１に、エリオジクチオールの単独投与の結果を図２に、カテキン及びエリオジクチオールの併用投与の結果を図３に示す。
【００６６】
図１に示されるとおり、２μＭ以上のメチル化カテキン（ＥＧＣＧ３”Ｍｅ）を単独投与した場合、ＡＳＭ活性が有意に向上した。
【００６７】
図２に示されるとおり、０．５μＭ以上のエリオジクチオールを単独投与した場合、ＡＳＭ活性が有意に向上した。
【００６８】
他方で、図３に示されるとおり、驚くべきことに、０．５μＭのメチル化カテキン及び０．１μＭのエリオジクチオールを併用投与すると、ＡＳＭ活性が有意に向上した。０．５μＭのメチル化カテキン、又は０．１μＭのエリオジクチオールをそれぞれ単独投与した場合にはＡＳＭ活性の向上が認められなかったにもかかわらず、これらを組み合わせるとＡＳＭ活性が顕著に向上したことは、意外な結果である。
【００６９】
以上から、低濃度のカテキン及びエリオジクチオールであっても、これらを組み合わせることで、ＡＳＭ活性を向上できることがわかった。
【００７０】
＜試験２：カテキン及びエリオジクチオールによる抗アレルギー作用の検討＞
下記の方法に基づき、カテキン又はエリオジクチオールの単独投与、並びに、カテキン及びエリオジクチオールの併用投与による、ｉｎ  ｖｉｖｏにおける抗アレルギー作用を検討した。
【００７１】
本試験では、以下の系を用いた。まず、マウスの耳介にＩｇＥ抗体を投与した。これにより、マウス体内の肥満細胞等の表面に存在するＩｇＥ受容体（ＦｃεＲ１）と、投与されたＩｇＥ抗体とが結合する。次いで、マウスへ、抗原及び色素（Ｅｖａｎｓ  ｂｌｕｅ）を尾静脈投与した。これにより、ＩｇＥ受容体を介して肥満細胞等の表面上に結合したＩｇＥ抗体に、抗原が結合する。その結果、肥満細胞等で脱顆粒が生じ、血管透過性の亢進や、ヒスタミン等の放出が起こり、アレルギーが発生する。脱顆粒の際には血管透過性が亢進し、これにともない、Ｅｖａｎｓ  ｂｌｕｅと血中のアルブミンとが結合して表皮に滲出するので、アレルギーの発生を、耳介の変色（青色化）として検出することができる。
【００７２】
（実験動物の準備）
雌性ＢＡＬＢ／ｃ  マウスにおいて、左耳介皮内に抗ＤＮＰ−ＩｇＥ抗体（９０ｎｇ／１０μＬ−ＰＢＳ）を投与し、右耳介皮内に、対照（Ｃｏｎｔｒｏｌ）としてＰＢＳ  １０ｍＬを投与した。２４時間後、抗原としてＤＮＰ−ＨＳＡ（２００ｍｇ／２００ｍＬ−０．５％  Ｅｖａｎｓ  ｂｌｕｅ  含有ＰＢＳ）を尾静脈注射により投与した。
【００７３】
（サンプルの準備）
サンプルとして、べにふうき茶抽出物の粉末乾燥物（メチル化カテキンを含む。エリオジクチオール、ヘスペレチン及びこれらの誘導体を含まない。）、及び、レモン果皮抽出物の濃縮粉末化物（エリオジクチオール配糖体を含む。カテキンを含まない。）を用いた。各マウスへ、抗原投与１時間前にサンプルを強制経口投与により投与した。
【００７４】
エリオジクチオール配糖体の構造式を以下に示す。
【００７５】
【化４】
2019151568.tif 000006
【００７６】
投与したサンプルを、メチル化カテキン及びエリオジクチオール配糖体の量に換算した値を以下に示す。
【００７７】
【表１】
2019151568.tif 000007
【００７８】
【表２】
2019151568.tif 000008
【００７９】
【表３】
2019151568.tif 000009
【００８０】
（抗アレルギー作用の評価）
抗原投与３０分後にマウスをイソフルラン過麻酔下で屠殺して耳介を採取し、それらを６３℃のホルムアミド溶液（４００ｍＬ）に一晩浸漬し、Ｅｖａｎｓ  ｂｌｕｅ色素を抽出した。抽出液を遠心（１２，０００×ｇ、１０ｍｉｎ）後、上澄み各１００ｍＬをプレートリーダーに供し、６１５ｎｍにおける吸光度を測定し定量を行った。
【００８１】
（結果）
メチル化カテキンの単独投与の結果を図４に示し、エリオジクチオール配糖体の単独投与の結果を図５に示し、メチル化カテキン及びエリオジクチオール配糖体の併用投与の結果を図６に示す。図中、「Ｅｖａｎｓ  ｂｌｕｅ」の値が低いほど（つまり、耳介の青みが少ないほど）、抗アレルギー作用が高いことを意味する。
【００８２】
図４及び５に示されるとおり、メチル化カテキン又はエリオジクチオール配糖体の単独投与による抗アレルギー作用は、ほぼ認められなかった。
【００８３】
他方、図６に示されるとおり、メチル化カテキン及びエリオジクチオール配糖体を併用投与することで、有意な抗アレルギー作用が認められた。
【００８４】
以上から、カテキン及びエリオジクチオールを組み合わせることで、ｉｎ  ｖｉｖｏにおける抗アレルギー作用が奏されることがわかった。
【００８５】
＜試験３：カテキン及びヘスペレチンが酸性スフィンゴミエリナーゼ活性に及ぼす影響＞
下記のサンプルを用いて、上記試験１と同様の方法で、ヘスペレチンの単独投与、並びに、カテキン及びヘスペレチンの併用投与が、ｉｎ  ｖｉｔｒｏにおけるＡＳＭ活性に及ぼす影響を検討した。
【００８６】
（サンプルの準備）
サンプルとして、メチル化カテキン（エピガロカテキン−３−Ｏ−（３−Ｏ−メチル）ガレート；ＥＧＣＧ３”Ｍｅ、０．５μＭ、長良サイエンス社製）、及び、ヘスペレチン（東京化成工業社製）を用いた。上記ＲＰＭＩ  １６４０培地に０．０１〜５μＭのヘスペレチンを添加して各サンプルを準備した。また、陰性対照として、培地のみのサンプル（つまり、カテキン及びヘスペレチンを含まないサンプル）を準備し、陽性対照としてエピガロカテキン  ３−ガレート（ＥＧＣＧ、１０μＭ、長良サイエンス社製）を準備した。
【００８７】
（結果）
ヘスペレチンの単独投与の結果を図７に、メチル化カテキン及びヘスペレチンの併用投与の結果を図８に示す。
【００８８】
図７に示されるとおり、０．０５μＭ以上のヘスペレチンを単独投与した場合、ＡＳＭ活性が有意に向上した。
【００８９】
他方で、図８に示されるとおり、驚くべきことに、０．５μＭのメチル化カテキン及び０．０１μＭのヘスペレチンを併用投与すると、ＡＳＭ活性が有意に向上した。０．５μＭのメチル化カテキン、又は０．０１μＭのヘスペレチンをそれぞれ単独投与した場合にはＡＳＭ活性の向上が認められなかったにもかかわらず、これらを組み合わせるとＡＳＭ活性が顕著に向上したことは、意外な結果である。
【００９０】
以上から、低濃度のカテキン及びヘスペレチンであっても、これらを組み合わせることで、ＡＳＭ活性を向上できることがわかった。
【００９１】
＜試験４：カテキン及びヘスペレチンによる抗アレルギー作用の検討＞
下記のサンプルを用いて、上記試験２と同様の方法で、ヘスペレチンの単独投与、並びに、カテキン及びヘスペレチンの併用投与による、ｉｎ  ｖｉｖｏにおける抗アレルギー作用を検討した。
【００９２】
（サンプルの準備）
サンプルとして、べにふうき茶抽出物の粉末乾燥物（メチル化カテキンを含む。エリオジクチオール、ヘスペレチン及びこれらの誘導体を含まない。）、及び、レモン果皮抽出物（糖転移ヘスペリジンを含む。カテキンを含まない。）を用いた。
【００９３】
糖転移ヘスペリジンの構造式を以下に示す。
【００９４】
【化５】
2019151568.tif 000010
【００９５】
投与したサンプルを、メチル化カテキン及び糖転移ヘスペリジンの量に換算した値を以下に示す。
【００９６】
【表４】
2019151568.tif 000011
【００９７】
【表５】
2019151568.tif 000012
【００９８】
（結果）
糖転移ヘスペリジンの単独投与の結果を図９に示し、メチル化カテキン及び糖転移ヘスペリジンの併用投与の結果を図１０に示す。
【００９９】
図９に示されるとおり、糖転移ヘスペリジンの単独投与による抗アレルギー作用は、ほぼ認められなかった。
【０１００】
他方、図１０に示されるとおり、メチル化カテキン及び糖転移ヘスペリジンを併用投与することで、有意な抗アレルギー作用が認められた。
【０１０１】
以上から、カテキン及びヘスペレチンを組み合わせることで、ｉｎ  ｖｉｖｏにおける抗アレルギー作用が奏されることがわかった。
【０１０２】
＜参考例：メチル化カテキン、及び、メチル化カテキン以外のカテキン又はその誘導体（非メチル化カテキン）の有効量の比較＞
下記のサンプルを用いて、上記試験１と同様の方法で、メチル化カテキンの単独投与、及び、非メチル化カテキン（エピガロカテキンガレート）の単独投与を行い、ＡＳＭ活性に及ぼす影響を検討することで、メチル化カテキン、及び、非メチル化カテキンの有効量を評価した。
【０１０３】
（サンプルの準備）
サンプルとして、メチル化カテキン（エピガロカテキン−３−Ｏ−（３−Ｏ−メチル）ガレート；ＥＧＣＧ３”Ｍｅ、長良サイエンス社製）、非メチル化カテキン（エピガロカテキンガレート；ＥＧＣＧ、１０μＭ、長良サイエンス社製）を用いた。上記ＲＰＭＩ  １６４０培地に１〜１０μＭのメチル化カテキンを添加して各サンプルを準備した。また、陰性対照として、培地のみのサンプル（つまり、メチル化カテキン及び非メチル化カテキンを含まないサンプル）を準備した。
【０１０４】
（結果）
メチル化カテキンの単独投与、及び、非メチル化カテキン（エピガロカテキンガレート）の単独投与の結果を図１１に示す。
【０１０５】
図１１に示されるとおり、メチル化カテキンの有効量は、非メチル化カテキン（エピガロカテキンガレート）の有効量の約５分の１の量だった。
【図１】
2019151568.tif 000013
【図２】
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【図３】
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【図４】
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【図５】
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【図６】
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【図７】
2019151568.tif 000019
【図８】
2019151568.tif 000020
【図９】
2019151568.tif 000021
【図１０】
2019151568.tif 000022
【図１１】
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