(57)【要約】      （修正有）【課題】肝臓Ｘレセプターモジュレーターである新規化合物及び医薬的に許容されるその塩の提供。【解決手段】１−イソプロピル−７−（メチルスルホニル）−２−（４−（トリフルオロメチル）ピリミジン−２−イル）−１，２，３，４−テトラヒドロベンゾ［４，５］イミダゾ［１，２−ａ］ピラジン等の化合物、又は医薬的に許容される塩。【選択図】なし【特許請求の範囲】
【請求項１】
以下の構造式：
【化１】
2019023196.tif 000068
によって表される化合物、又は医薬的に許容されるその塩（式中、
ＸはＮ又はＣＲｃであり；
Ｒ１はアルキル又は−ＮＲａＲｂであり；
Ｒ２はＨ；ハロゲン；−ＣＮ；−ＮＲＣ（Ｏ）Ｒ；−Ｃ（Ｏ）ＯＲ；−Ｃ（Ｏ）ＮＲａＲｂ；アルキル、−ＣＮ、−ＮＲＣ（Ｏ）Ｒ、−Ｃ（Ｏ）ＯＲ、−Ｃ（Ｏ）ＮＲａＲｂ及びハロゲンから選択される１つ又は複数の基で置換されていてもよい単環式複素芳香族；アルキル、ハロゲン、−ＣＮ及び＝Ｏから選択される１つ又は複数の基で置換されていてもよい単環式非芳香族複素環；又はハロゲン、ヒドロキシ、アルコキシ、−ＮＲａＲｂ、−ＮＲＣ（Ｏ）Ｒ、−ＮＲＣ（Ｏ）Ｏ（アルキル）、−ＮＲＣ（Ｏ）Ｎ（Ｒ）２、−Ｃ（Ｏ）ＯＲ、チオール、アルキルチオール、ニトロ、−ＣＮ、＝Ｏ、−ＯＣ（Ｏ）Ｈ、−ＯＣ（Ｏ）（アルキル）、−ＯＣ（Ｏ）Ｏ（アルキル）、−ＯＣ（Ｏ）Ｎ（Ｒ）２及び−Ｃ（Ｏ）ＮＲａＲｂから選択される１つ又は複数の基によって置換されていてもよいアルキルであり；
Ｒ３はアルキル、ハロアルキル、ヒドロキシアルキル、アルコキシアルキル、シクロアルキル、単環式非芳香族複素環、単環式複素芳香族又はフェニルであり、Ｒ３によって表されるフェニル、単環式非芳香族複素環及び単環式複素芳香族基は、アルキル、ハロゲン、ハロアルキル、アルコキシ、ハロアルコキシ、ニトロ及び−ＣＮから選択される１つ又は複数の基で置換されていてもよく；
Ｒ４はハロゲン、−ＣＮ、−ＯＲ、−ＳＲ、−Ｎ（Ｒ）２、−Ｃ（Ｏ）Ｒ、−Ｃ（Ｏ）ＯＲ、−ＯＣ（Ｏ）Ｏ（アルキル）、−Ｃ（Ｏ）Ｏ（ハロアルキル）、−ＯＣ（Ｏ）Ｒ、−Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ）２、−ＯＣ（Ｏ）Ｎ（Ｒ）２、−ＮＲＣ（Ｏ）Ｒ、−ＮＲＣ（Ｏ）Ｏ（アルキル）、−Ｓ（Ｏ）Ｒ、−ＳＯ２Ｒ、−ＳＯ２Ｎ（Ｒ）２、−ＮＲＳ（Ｏ）Ｒ、−ＮＲＳＯ２Ｒ、−ＮＲＣ（Ｏ）Ｎ（Ｒ）２、−ＮＲＳＯ２Ｎ（Ｒ）２、ハロアルキル、ハロアルコキシ、シクロアルコキシ、シクロアルキル、単環式非芳香族複素環、単環式複素芳香族又はアルキルであり、Ｒ４によって表される単環式非芳香族複素環、単環式複素芳香族及びアルキル基は、−ＣＮ、−ＯＲ、−ＳＲ、−Ｎ（Ｒ）２、
＝Ｏ、−Ｃ（Ｏ）Ｒ、−Ｃ（Ｏ）ＯＲ、−Ｃ（Ｏ）Ｏ（ハロアルキル）、
−ＯＣ（Ｏ）Ｒ、−ＯＣ（Ｏ）Ｏ（アルキル）、−Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ）２、−ＯＣ（Ｏ）Ｎ（Ｒ）２、−ＮＲＣ（Ｏ）Ｒ、−ＮＲＣ（Ｏ）Ｏ（アルキル）、−Ｓ（Ｏ）Ｒ、−ＳＯ２Ｒ、−ＳＯ２Ｎ（Ｒ）２、−ＮＲＳ（Ｏ）Ｒ、−ＮＲＳＯ２Ｒ、−ＮＲＣ（Ｏ）Ｎ（Ｒ）２及び−ＮＲＳＯ２Ｎ（Ｒ）２から選択される１つ又は複数の基で置換されていてもよく；
各Ｒは独立にＨ又はアルキルであり；
Ｒａ及びＲｂは独立にＨ、アルキルであり、又はＲａ及びＲｂは、それらが結合している窒素と一緒になって、単環式非芳香族複素環を形成することができ；
ＲｃはＨ、アルキル又はハロゲンである）。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
関連出願の参照
本出願は、２０１２年３月１６日に出願された米国特許仮出願第６１／６１２，０５１号の出願日の利益を主張し、その内容全体を参照により本明細書に組み込む。
【０００２】
本発明は、肝臓Ｘレセプターの活性をモジュレートする化合物に関する。
【背景技術】
【０００３】
アテローム性動脈硬化症は先進国の主な死因であり、２１世紀では、アテローム性動脈硬化症は発展途上国の主な死因と予想される。肝臓Ｘレセプター（ＬＸＲ）は、リガンドにより活性化される転写因子であり、脂質代謝及び細胞のコレステロール恒常性に関与する遺伝子の発現調節において重要な役割を果たす。ＬＸＲアゴニストは、コレステロール逆輸送（ＲＣＴ）を増強すること、すなわち処理及び排出のためにコレステロールを末梢から肝臓に戻す輸送を助長することが示されている。ＲＣＴは、末梢のマクロファージにおけるコレステロール輸送体（ＡＴＰ結合カセット：ＡＢＣＡ１及びＡＢＣＧ１）のアップレギュレーションを介して起こる。活性ＲＣＴは、アテローム性動脈硬化症の進行を阻害する可能性がある。
【０００４】
別々の遺伝子にコードされる２つのＬＸＲアイソフォーム、ＬＸＲα（ＮＲ１Ｈ３）及びＬＸＲβ（ＮＲ１Ｈ２）が存在する。ＬＸＲαの発現は組織選択的であり、肝臓、腸、腎臓、脂肪組織及び副腎で検出することができ、それらすべてが脂質恒常性に重要である。一方、ＬＸＲβは普遍的に発現する。ＬＸＲは両方とも、４ヌクレオチド（ＤＲ４）によって分けられた６量体コア配列の２つのダイレクトリピートからなるＬＸＲ応答エレメント（ＬＸＲＥ）を認識し、且つそれと協調的に結合するために、必須のヘテロ二量体のパートナーとして、レチノイドＸレセプター（ＲＸＲ）を必要とする。２つのＬＸＲのリガンド結合ドメインはかなり良く保存されており（約７８％のアミノ酸相同性）、ステロイドホルモン及び胆汁酸合成の中間体として働くコレステロールの酸化誘導体（オキシステロール）からなる内在性リガンドに応答する。その中でも、２２（Ｒ）−ヒドロキシコレステロール、２４（Ｓ）−ヒドロキシコレステロール及び２４（Ｓ），２５−エポキシコレステロールは最も強力である。これらのデータによって、ＬＸＲはコレステロールの調節において重要な役割を果たす可能性があることが示唆され、このことは、マウスにおける遺伝子ノックアウト研究を通して後に確証された。非ステロイド性リガンドも同定されており、これらを化学プローブとして使用して、多くのＬＸＲに調節される遺伝子が発見されている。いくつかのＬＸＲＥ含有遺伝子は、コレステロール代謝、コレステロール逆輸送（ＲＣＴ）及び脂質生成に関与する。炎症及び糖質代謝に関与する他の遺伝子はＬＸＲＥを欠くが、リガンド依存的にＬＸＲによって抑制される。これらの発見に基づいて、肝臓Ｘレセプターは、細胞内コレステロールセンサーとして働く新奇な標的として最近浮上し、これは、アテローム性動脈硬化症、糖尿病、アルツハイマー病、皮膚障害、生殖障害及び癌を含めた種々の疾患の治療の基礎を提供するものである（Ｖｉｅｎｎｏｉｓら、２０１１、Ｅｘｐｅｒｔ  Ｏｐｉｎ．Ｔｈｅｒ．Ｔａｒｇｅｔｓ、１５（２）：２１９〜２３２）。さらに、ＬＸＲアゴニストは、腸及び腎臓のリン酸ナトリウム（ＮａＰｉ）輸送、ひいては血清リン酸レベルをモジュレートすることが確認された（Ｃａｌｄａｓら、２０１１、Ｋｉｄｎｅｙ  Ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ、８０：５３５〜５４４）。したがって、ＬＸＲはまた、腎臓障害の標的であり、特に高リン酸血症及び付随する心血管系の合併症を予防するための標的である。最近ＬＸＲは、骨粗鬆症及び関連疾患の治療の標的として同定された（Ｋｌｅｙｅｒら、２０１２、Ｊ．Ｂｏｎｅ  Ｍｉｎｅｒ．Ｒｅｓ．、２７（１２）：２４４２〜５１）。
【０００５】
アルツハイマー病は認知症の最も一般的な形態のうちの１つであり、アミロイドβ（Ａβ）ペプチドの脳での蓄積及び沈着に特徴付けられ、罹患者の脳におけるシナプス機能の撹乱及びニューロンの脱落につながる。脳のニューロンは、アミロイド前駆体タンパク質（ＡＰＰ）の切断を介してＡβペプチドを産生し、Ａβペプチドは、末梢循環への流出を通して、及び脳内のプロテイナーゼによる分解によって、通常は取り除かれる。
【０００６】
アポリポタンパク質Ｅ（ａｐｏＥ）は、アルツハイマー病に対する加齢に関連した危険性と関係があり、Ａβ恒常性で重要な役割を果たす。ＬＸＲはａｐｏＥの発現を増大させ、ａｐｏＥの脂質化を増進させる。細胞内及び細胞外の両方でのＡβの分解は、脂質が付加されたａｐｏＥによって増強される。ＡＰＰを発現するトランスジェニックマウスでのＬＸＲアゴニスト処理によって、Ａβのタンパク質分解が刺激され、斑病状が軽減され、記憶が改善された（Ｊｉａｎｇら、２００８、Ｎｅｕｒｏｎ、５８：６８１〜６９３）。
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００７】
皮膚では、ケラチノサイトは表皮の重要な成分である。外層である角質層は、水及び電解質の通過に対する透過性バリアに主として関与する。表皮のケラチノサイトは、角質層において、ケラチノサイトの角化（「レンガ」）及び脂質に富んだ細胞外層状膜（「モルタル」）の形成に至る分化を受ける。ＬＸＲαとＬＸＲβの両方ともケラチノサイトで発現し、ＬＸＲの発現及び活性化は、表皮バリア機能を促進する。ＬＸＲの活性化は、ケラチノサイト分化、層状膜の形成、及び表皮性バリア機能の全体的な改善に関与する。したがって、ＬＸＲの活性化は、ケラチノサイト分化を増進させ、（ＡＢＣＡ１、ＡＢＣＡ１２を介する）脂質分泌を増大させ、層状体形成を増進させることが期待され、このことは、健康な表皮（滑らかな肌）につながる。
【０００８】
ＬＸＲアゴニストの潜在的な治療的有用性によって、両方のレセプターサブタイプに対して強力なアゴニズムを有するいくつかの高親和性ＬＸＲリガンドが開発された。ＬＸＲアゴニストの治療的有用性は、ステロール応答エレメント結合タンパク１ｃ（ＳＲＥＢＰ１ｃ）及び脂肪酸合成酵素（ＦＡＳ）を含めた脂質生成遺伝子を誘導する、その潜在力に限定される。前臨床試験によって、肝臓脂質生成の増大が制限されたアテローム性動脈硬化症のマウスモデルにおいて、ＬＸＲの合成モジュレーターが病変の進行を遅らせることが実証された。現在のＬＸＲアゴニストの抗アテローム性動脈硬化効力を保持するが、脂質生成活性のない新規なＬＸＲ化学種が、明らかに必要である。ＲＣＴに陽性効果を与えるが、脂質生成遺伝子に対して中立又は抑制的である薬理学的プロファイルを示す化合物が、アテローム性動脈硬化性脂質異常症の患者において価値ある治療薬である。
【課題を解決するための手段】
【０００９】
本発明は、肝臓Ｘレセプターアゴニストであり、患者において、コレステロール逆輸送を促進し且つ肝臓脂質生成を抑制するための、並びにアテローム性動脈硬化症、アルツハイマー病、皮膚炎及び脂質異常症を含めた疾患又は障害を予防、回復又は治療するための治療薬として有用な化合物を提供する。
【００１０】
発明の概要
対象においてコレステロール逆輸送を促進し且つ肝臓脂質生成を抑制するための、並びにアテローム性動脈硬化症及び脂質異常症を含めた疾患又は障害を予防、回復又は治療するための治療薬として有用であるＬＸＲモジュレーターが開示される。開示されるＬＸＲモジュレーターは、ＬＸＲαサブタイプよりもＬＸＲβサブタイプに対して選択的である（例えば、実施例２、アイソマー１、及び実施例４、アイソマー１を参照されたい）。
【００１１】
本発明の一実施形態は、構造式Ｉ：
【００１２】
【化１】
2019023196.tif 000002
【００１３】
によって表される化合物、又は医薬的に許容されるその塩である。
ＸはＮ又はＣＲｃである。
Ｒ１はアルキル又は−ＮＲａＲｂである。
【００１４】
Ｒ２は、Ｈ；ハロゲン；−ＣＮ；−ＮＲＣ（Ｏ）Ｒ；−Ｃ（Ｏ）ＯＲ；−Ｃ（Ｏ）ＮＲａＲｂ；アルキル、−ＣＮ、−ＮＲＣ（Ｏ）Ｒ、−Ｃ（Ｏ）ＯＲ、−Ｃ（Ｏ）ＮＲａＲｂ及びハロゲンから選択される１つ又は複数の基で置換されていてもよい単環式複素芳香族；アルキル、ハロゲン、−ＣＮ及び＝Ｏから選択される１つ又は複数の基で置換されていてもよい単環式非芳香族複素環；又はハロゲン、ヒドロキシ、アルコキシ、−ＮＲａＲｂ、−ＮＲＣ（Ｏ）Ｒ、−ＮＲＣ（Ｏ）Ｏ（アルキル）、−ＮＲＣ（Ｏ）Ｎ（Ｒ）２、−Ｃ（Ｏ）ＯＲ、チオール、アルキルチオール、ニトロ、−ＣＮ、＝Ｏ、−ＯＣ（Ｏ）Ｈ、−ＯＣ（Ｏ）（アルキル）、−ＯＣ（Ｏ）Ｏ（アルキル）、−ＯＣ（Ｏ）Ｎ（Ｒ）２及び−Ｃ（Ｏ）ＮＲａＲｂから選択される１つ又は複数の基によって置換されていてもよいアルキルである。
【００１５】
Ｒ３はアルキル、ハロアルキル、ヒドロキシアルキル、アルコキシアルキル、シクロアルキル、単環式非芳香族複素環、単環式複素芳香族又はフェニルであり、Ｒ３によって表されるフェニル、単環式非芳香族複素環及び単環式複素芳香族基は、アルキル、ハロゲン、ハロアルキル、アルコキシ、ハロアルコキシ、ニトロ及び−ＣＮから選択される１つ又は複数の基で置換されていてもよい。
【００１６】
Ｒ４はハロゲン、−ＣＮ、−ＯＲ、−ＳＲ、−Ｎ（Ｒ）２、−Ｃ（Ｏ）Ｒ、−Ｃ（Ｏ）ＯＲ、−ＯＣ（Ｏ）Ｏ（アルキル）、−Ｃ（Ｏ）Ｏ（ハロアルキル）、−ＯＣ（Ｏ）Ｒ、−Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ）２、−ＯＣ（Ｏ）Ｎ（Ｒ）２、−ＮＲＣ（Ｏ）Ｒ、−ＮＲＣ（Ｏ）Ｏ（アルキル）、−Ｓ（Ｏ）Ｒ  −ＳＯ２Ｒ、−ＳＯ２Ｎ（Ｒ）２、−ＮＲＳ（Ｏ）Ｒ、−ＮＲＳＯ２Ｒ、−ＮＲＣ（Ｏ）Ｎ（Ｒ）２、−ＮＲＳＯ２Ｎ（Ｒ）２、ハロアルキル、ハロアルコキシ、シクロアルコキシ、シクロアルキル、単環式非芳香族複素環、単環式複素芳香族又はアルキルであり、Ｒ４によって表される単環式非芳香族複素環、単環式複素芳香族及びアルキル基は、−ＣＮ、−ＯＲ、−ＳＲ、−Ｎ（Ｒ）２、＝Ｏ、−Ｃ（Ｏ）Ｒ、−Ｃ（Ｏ）ＯＲ、−Ｃ（Ｏ）Ｏ（ハロアルキル）、−ＯＣ（Ｏ）Ｒ、−ＯＣ（Ｏ）Ｏ（アルキル）、−Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ）２、−ＯＣ（Ｏ）Ｎ（Ｒ）２、−ＮＲＣ（Ｏ）Ｒ、−ＮＲＣ（Ｏ）Ｏ（アルキル）、−Ｓ（Ｏ）Ｒ、−ＳＯ２Ｒ、−ＳＯ２Ｎ（Ｒ）２、−ＮＲＳ（Ｏ）Ｒ、−ＮＲＳＯ２Ｒ、−ＮＲＣ（Ｏ）Ｎ（Ｒ）２及び−ＮＲＳＯ２Ｎ（Ｒ）２から選択される１つ又は複数の基で置換されていてもよい。
【００１７】
各Ｒは独立にＨ又はアルキルである。
Ｒａ及びＲｂは独立にＨ、アルキルであり、又はＲａ及びＲｂは、それらが結合してい
る窒素と一緒になって、単環式非芳香族複素環を形成することができる。
【００１８】
ＲｃはＨ、アルキル又はハロゲンである。
本発明の別の態様は、本発明の化合物及び医薬的に許容される担体又は希釈剤を含む医薬組成物である。
【００１９】
本発明のさらなる態様は、ＬＸＲ活性をアップレギュレートすることによって治療可能な疾患又は障害を有する対象を治療する方法も提供する。この方法は、有効量の本発明の化合物又は医薬的に許容されるその塩を、それらを必要とする対象に投与することを含む。
【００２０】
その医薬を必要とする対象おけるＬＸＲ活性をアップレギュレートすることによって治療可能な疾患又は障害を有する対象を治療するための医薬を製造するための、本発明の化合物の使用も、本発明で提供される。
【００２１】
その化合物を必要とする対象におけるＬＸＲ活性をアップレギュレートすることによって治療可能な疾患又は障害の治療で使用するための本発明の化合物も、本明細書に開示される。
【発明を実施するための形態】
【００２２】
Ａ．化合物
本明細書で提供される本発明の化合物（複数可）は、中性型及び医薬的に許容されるその塩の両方を含む。
【００２３】
一実施形態では、化合物は、構造式ＩＩ、ＩＩＩ、ＩＶ、Ｖ又はＶＩによって表され、変数についての値は、上記の式Ｉについて定義した通りである。
【００２４】
【化２】
2019023196.tif 000003
【００２５】
式ＩからＶＩの任意の化合物に関する第１の代替実施形態では、変数は次のように定義される。
Ｒ３はアルキル、ハロアルキル、ヒドロキシアルキル、アルコキシアルキル、シクロアルキル又はフェニルであり、Ｒ３によって表されるフェニルは、アルキル、ハロゲン、ハロアルキル、アルコキシ、ハロアルコキシ、ニトロ及び−ＣＮから選択される１つ又は複
数の基で置換されていてもよく、Ｒ４はハロゲン、−ＣＮ、−ＯＲ、−ＳＲ、
−Ｎ（Ｒ）２、−Ｃ（Ｏ）Ｒ、−Ｃ（Ｏ）ＯＲ、−ＯＣ（Ｏ）Ｏ（アルキル）、−Ｃ（Ｏ）Ｏ（ハロアルキル）、−ＯＣ（Ｏ）Ｒ、−Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ）２、−ＯＣ（Ｏ）Ｎ（Ｒ）２、−ＮＲＣ（Ｏ）Ｒ、−ＮＲＣ（Ｏ）Ｏ（アルキル）、−Ｓ（Ｏ）Ｒ、−ＳＯ２Ｒ、−ＳＯ２Ｎ（Ｒ）２、−ＮＲＳ（Ｏ）Ｒ、−ＮＲＳＯ２Ｒ、−ＮＲＣ（Ｏ）Ｎ（Ｒ）２、−ＮＲＳＯ２Ｎ（Ｒ）２、ハロアルキル、ハロアルコキシ、シクロアルコキシ、シクロアルキル又はアルキルであり、Ｒ４によって表されるアルキル基は、−ＣＮ、−ＯＲ、−ＳＲ、−Ｎ（Ｒ）２、＝Ｏ、−Ｃ（Ｏ）Ｒ、−Ｃ（Ｏ）ＯＲ、−Ｃ（Ｏ）Ｏ（ハロアルキル）、−ＯＣ（Ｏ）Ｒ、−ＯＣ（Ｏ）Ｏ（アルキル）、−Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ）２、−ＯＣ（Ｏ）Ｎ（Ｒ）２、−ＮＲＣ（Ｏ）Ｒ、−ＮＲＣ（Ｏ）Ｏ（アルキル）、−Ｓ（Ｏ）Ｒ、−ＳＯ２Ｒ、−ＳＯ２Ｎ（Ｒ）２、−ＮＲＳ（Ｏ）Ｒ、−ＮＲＳＯ２Ｒ、−ＮＲＣ（Ｏ）Ｎ（Ｒ）２及び−ＮＲＳＯ２Ｎ（Ｒ）２から選択される１つ又は複数の基で置換されていてもよい。
【００２６】
残りの変数についての値は、式Ｉについて定義した通りである。
式ＩからＶＩの任意の化合物に関する第２の代替実施形態では、変数は次のように定義される。
【００２７】
Ｒ１はメチル又は−ＮＨ２である。
Ｒ２はＨ又はメチルであり、Ｒ２によって表されるメチル基は、ハロゲン、ヒドロキシル、アルコキシ、−ＮＲａＲｂ、−ＮＲＣ（Ｏ）Ｒ、−ＮＲＣ（Ｏ）Ｏ（アルキル）、−ＮＲＣ（Ｏ）Ｎ（Ｒ）２、−Ｃ（Ｏ）ＯＲ、チオール、アルキルチオール、ニトロ、−ＣＮ、＝Ｏ、−ＯＣ（Ｏ）Ｈ、−ＯＣ（Ｏ）（アルキル）、−ＯＣ（Ｏ）Ｏ（アルキル）、−Ｃ（Ｏ）ＮＲａＲｂ及び−ＯＣ（Ｏ）Ｎ（Ｒ）２から選択される１つ又は複数の基で置換されていてもよく、好ましくは、Ｒ２はＨ又は−ＣＨ２ＯＨである。
【００２８】
Ｒ３はメチル、エチル、プロピル、イソプロピル、ｔｅｒｔ−ブチル、ｓｅｃ−ブチル、ｉｓｏ−ブチル、−ＣＨ２ＣＦ３、−ＣＨ（ＣＨ２Ｆ）２、−ＣＨ（ＣＨＦ２）２、−ＣＨ（ＣＦ３）２、−ＣＦ（ＣＨ３）２、−ＣＦ３、シクロプロピル、シクロブチル、シクロペンチル、シクロヘキシル、−Ｃ（ＯＨ）（ＣＨ３）２、−ＣＨ（ＯＨ）（ＣＨ３）又はフェニルであり、Ｒ３によって表されるフェニル基は、アルキル、ハロゲン、ハロアルキル、アルコキシ、ハロアルコキシ、ニトロ及び−ＣＮから選択される１つ又は複数の基で置換されていてもよい。
【００２９】
Ｒｃは、存在する場合はＨである。
残りの変数についての値は、式Ｉについて又は第１の代替実施形態で定義した通りである。
【００３０】
式ＩからＶＩの任意の化合物に関する第３の代替実施形態では、Ｒ１はメチルであり、Ｒ２は−ＣＨ２ＯＨであり、Ｒ３はイソプロピルである。残りの変数についての値は、式Ｉについて又は第１若しくは第２の代替実施形態について定義した通りである。
【００３１】
式ＩからＶＩの任意の化合物に関する第４の代替実施形態では、Ｒ４はハロゲン、ヒドロキシ、アルキル、シクロアルキル、シクロアルコキシ、アルコキシ、ハロアルコキシ、ハロアルキル、−Ｎ（Ｒ）２、−Ｃ（Ｏ）ＯＨ、−Ｃ（Ｏ）Ｏ（アルキル）、−Ｃ（Ｏ）Ｏ（ハロアルキル）、−Ｃ（Ｏ）（アルキル）、−Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ）２、−ＮＲＣ（Ｏ）Ｒ、−ＳＯ２Ｎ（Ｒ）２、−ＯＣ（Ｏ）Ｎ（Ｒ）２、−ＣＮ、ヒドロキシアルキル又はジヒドロキシアルキルである。残りの変数についての値は、式Ｉについて又は第１、第２若しくは第３の代替実施形態について定義した通りである。
【００３２】
式ＩからＶＩの任意の化合物に関する第５の代替の実施形態では、Ｒ４はアルキル、ハロアルキル、シクロアルキル、アルコキシ又はハロアルコキシである。残りの変数についての値は、式Ｉについて又は第１、第２若しくは第３の代替の実施形態について定義した通りである。
【００３３】
式ＩからＶＩの任意の化合物に関する第６の代替の実施形態では、Ｒ４はメチル、エチル、ヒドロキシ、−ＣＦ３、イソプロピル、シクロプロピル、−ＣＨ２ＯＨ、−ＣＨ（ＯＨ）（ＣＨ２）（ＯＨ）、−Ｃ（ＯＨ）（ＣＨ３）２、−ＣＨ（ＯＨ）（ＣＨ３）、−ＣＨ（ＯＨ）（ＣＨ２）（ＣＨ３）、−ＣＨ（ＯＨ）（ＣＨ２）２（ＣＨ３）、−Ｃ（Ｏ）ＮＨ２、−Ｃ（Ｏ）Ｎ（ＣＨ３）２、−Ｃ（Ｏ）ＯＨ、−Ｃ（Ｏ）ＮＨ（ＣＨ３）、−Ｃ（Ｏ）ＣＨ３、−Ｃ（Ｏ）ＣＨ２ＣＨ３、−Ｃ（Ｏ）Ｏ（ＣＨ２）（ＣＨ３）、−Ｃ（Ｏ）Ｏ（ｔｅｒｔ−ブチル）、−Ｃ（Ｏ）Ｏ（Ｃ）（ＣＨ３）２（ＣＦ３）、−ＮＨＣ（Ｏ）ＣＨ３、−ＯＣＨＦ２、−ＯＣＦ３、−ＯＣＨ２ＣＨ３、−ＯＣＨ（ＣＨ３）２又は−ＯＣＨ３である。好ましくは、Ｒ５は−Ｃ（ＣＨ３）２ＯＨである。残りの変数についての値は、式Ｉについて又は第１、第２若しくは第３の実施形態について定義した通りである。
【００３４】
式ＩからＶＩの任意の化合物に関する第７の代替実施形態では、Ｒ４はメチル、ハロゲン化メチル、シクロプロピル、−ＯＣＨＦ２又は−ＯＣＨ３である。好ましくは、Ｒ４はＣＦ３である。残りの変数についての値は、式Ｉについて又は第１、第２若しくは第３の代替実施形態について定義した通りである。
【００３５】
本発明の別の実施形態は、式Ｉ、ＩＩ、ＩＩＩ、ＩＶ、Ｖ若しくはＶＩによって表される化合物又は医薬的に許容されるそれらの塩であり、変数は式（Ｉ）について又は第１、第２若しくは第３の代替の実施形態で定義する通りである。但し化合物が、−Ｃ（Ｏ）ＯＲによって表される少なくとも１つの基を含むものとする。
【００３６】
本発明の別の実施形態は、式Ｉ、ＩＩ、ＩＩＩ、ＩＶ、Ｖ若しくはＶＩによって表される化合物又は医薬的に許容されるそれらの塩であり、変数は、式（Ｉ）について又は第１、第２、第３、第４、第５、第６若しくは第７の代替実施形態で定義する通りである。但し、化合物が−Ｃ（Ｏ）ＯＲによって表される基を含まないものとする。
【００３７】
本発明の化合物は、少なくとも１つのキラル中心を含むので、鏡像異性体として存在する。立体化学を示すことなしに本発明の化合物が示される又は命名される場合は、鏡像異性体的に純粋な形態、及びラセミ混合物を含めた鏡像異性体の混合物が含まれることを理解されたい。
【００３８】
単一の鏡像異性体を示す名前又は構造で化合物が指定される場合は、別段指示がない限り、その化合物は、少なくとも５０％、６０％、７０％、８０％、９０％、９５％、９９％、９９．５％又は９９．９％光学的に純粋（「鏡像異性体的に純粋」とも言われる）であり、光学純度は、命名又は示された鏡像異性体の混合物の重量÷両方の鏡像異性体の混合物の総重量である。
【００３９】
第７の代替実施形態では、本発明の化合物は、表１の化合物又は医薬的に許容されるその塩で示される。
【００４０】
【表１】
2019023196.tif 000004
【００４１】
Ｂ．定義
別段の指定がない限り、本明細書で使用する以下の用語は次のように定義される。
「対象」、「患者」及び「哺乳動物」は、本明細書で互換的に使用される。一実施形態では、対象は、非ヒト霊長類（例えば、サル、チンパンジー）、家畜（例えば、ウマ、ウ
シ、ブタ、ニワトリ若しくはヒツジ）、実験動物（例えば、ラット若しくはマウス）又は伴侶動物（例えば、イヌ、ネコ、モルモット若しくはウサギ）などの非ヒト動物である。好ましい実施形態では、対象はヒトである。
【００４２】
「本発明の化合物（複数可）」は、構造式Ｉ、ＩＩ、ＩＩＩ、ＶＩ、Ｖ、ＶＩによって表される化合物、表１に示される化合物、実施例の最終的な化合物（複数可）として本明細書の実施例で命名若しくは示される化合物、又は医薬的に許容されるそれらの塩を指す。「本発明の化合物（複数可）」には、本明細書に示される化合物の中性型も含まれる。
【００４３】
「医薬的に許容される」は、健全な医学的判断の範囲内で、過度の毒性、刺激、アレルギー反応などなしで、ヒト及び他の哺乳動物などの対象の組織と接触して使用するのに適しており、妥当な利益／危険比に見合った成分を指す。
【００４４】
本明細書に開示される化合物の医薬的に許容される塩は、本発明に含まれる。開示される化合物は塩基性アミン基を有するので、医薬的に許容される酸（複数可）を有する医薬的に許容される塩を形成することができる。本発明の化合物の適切な医薬的に許容される酸付加塩としては、無機酸（例えば、塩酸、臭化水素酸、リン酸、メタリン酸、硝酸及び硫酸）の塩、並びに有機酸（例えば、酢酸、ベンゼンスルホン酸、安息香酸、クエン酸、エタンスルホン酸、フマル酸、グルコン酸、グリコール酸、イセチオン酸、乳酸、ラクトビオン酸、マレイン酸、リンゴ酸、メタンスルホン酸、コハク酸、ｐ−トルエンスルホン酸及び酒石酸）の塩が挙げられる。カルボン酸などの酸性基を有する本発明の化合物は、医薬的に許容される塩基（複数可）を有する医薬的に許容される塩を形成することができる。適切な医薬的に許容される塩基性塩としては、アンモニウム塩、アルカリ金属塩（例えば、ナトリウム塩及びカリウム塩）並びにアルカリ土類金属塩（例えば、マグネシウム塩及びカルシウム塩）が挙げられる。適切な塩のリストは、Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ’ｓ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｓｃｉｅｎｃｅｓ、第１８版、Ｍａｃｋ  Ｐｕｂｌｉｓｈｉｎｇ  Ｃｏｍｐａｎｙ、Ｅａｓｔｏｎ、ＰＡ、１９９０、１４４５頁に見られ、その開示は参照により本明細書に組み込まれる。
【００４５】
「肝臓Ｘレセプター又はＬＸＲ」は、肝臓Ｘレセプターのα及びβサブタイプの両方を含む。一実施形態では、開示される化合物は、ＬＸＲαサブタイプよりもＬＸＲβサブタイプに選択的に結合し、その活性をアップレギュレートする。レセプターを「モジュレートする」ことは、目的の分子の活性、例えば、肝臓Ｘレセプターの生物活性において変化又は変質があることを意味する。モジュレーションは、目的の分子の特定の活性又は機能の規模のアップレギュレーション（増大）でも良いし、ダウンレギュレーション（低下）でも良い。分子の例示的な活性及び機能としては、これらに限定されないが、結合特性、酵素活性、細胞レセプター活性化、転写活性及びシグナル伝達が挙げられる。一実施形態では、本発明の化合物は、例えばＬＸＲの転写標的（すなわち「ＬＸＲの標的遺伝子」）である遺伝子をアップレギュレート又はダウンレギュレートする、ＬＸＲアゴニストである。
【００４６】
「治療」又は「治療する」は、治療及び予防的治療の両方を含み、疾患（例えば、本明細書に叙述した疾患又は障害）の発達又は進行を良くする、低下させる、抑制する、減弱する、縮小する、抑止する若しくは安定化する、疾患の重症度を減らす、又は疾患に付随する症状を改善することを意味する。
【００４７】
「疾患」又は「障害」は、ＬＸＲ活性によってモジュレートされる若しくは影響を受ける、又はＬＸＲ活性が関与する、任意の状態を意味する。疾患又は障害としては、異常なコレステロール輸送、コレステロールの逆輸送、脂肪酸代謝、コレステロール吸収、コレステロール再吸収、コレステロール分泌、コレステロール排出若しくはコレステロール代
謝に付随する疾患若しくは障害、又はこれらの合併症から生じる症状が挙げられる。
【００４８】
「有効量」は、標的とする障害を治療（治療的又は予防的）するのに十分な化合物量、又は適した投薬レジメンで対象に化合物を投与する場合に有益な臨床転帰が達成される化合物量である。当業者が認識するように、有効用量はまた、治療される疾患、疾患の重症度、投与経路、患者の性別、年齢及び全身の健康状態、賦形剤の使用、他の薬剤の使用などの他の治療処置と共に使用する可能性、並びに治療担当医師又は他の医療提供者の判断に応じて変動する。例えば、有効量は、治療を受ける障害の重症度、持続期間若しくは進行を低減若しくは良くする、治療を受ける障害の進行を予防する、治療を受ける障害を退行させる、又は別の療法の予防的若しくは治療的効果（複数可）を増強若しくは改善するのに十分である。例えば、本発明の化合物を、癌を罹患する対象に投与する場合は、「有益な臨床転帰」としては、治療を行わない時と比較した際の、腫瘍量の減少、転移の減少、癌に付随する症状の重症度の低減、及び／又は対象の寿命の延長が挙げられる。アテローム性動脈硬化症などの障害を有する対象に本発明の化合物を投与する場合は、「有益な臨床転帰」としては、治療を行わない時と比較した際の、重症度若しくは障害に付随する症状数の低減、コレステロールの低下、又は対象の寿命の延長が挙げられる。障害の治療に現在使用されている薬剤の推奨される投薬量は、当技術分野の様々な参考文献から得ることができ、参考文献には、これらに限定されないが、Ｈａｒｄｍａｎら編、１９９６、Ｇｏｏｄｍａｎ＆Ｇｉｌｍａｎ’ｓ  Ｔｈｅ  Ｐｈａｒｍａｃｏｌｏｇｉｃａｌ  Ｂａｓｉｓ  Ｏｆ  Ｂａｓｉｓ  Ｏｆ  Ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃｓ第９版、Ｍｃ−Ｇｒａｗ−Ｈｉｌｌ、Ｎｅｗ  Ｙｏｒｋ；Ｐｈｙｓｉｃｉａｎ’ｓ  Ｄｅｓｋ  Ｒｅｆｅｒｅｎｃｅ（ＰＤＲ）第５７版、２００３、Ｍｅｄｉｃａｌ  Ｅｃｏｎｏｍｉｃｓ  Ｃｏ．，Ｉｎｃ．、Ｍｏｎｔｖａｌｅ、ＮＪが含まれ、これらのそれぞれは、参照によりその全体が本明細書に組み込まれる。特定の実施形態では、有効量の本発明の化合物は、治療あたり、０．５ｍｇから２０００ｍｇ又は０．５ｍｇから１０００ｍｇ又は０．５ｍｇから５００ｍｇ又は０．５ｍｇから１００ｍｇ又は１００ｍｇから１０００ｍｇ又は２０ｍｇから２０００ｍｇの範囲である。治療は、典型的には毎日１から３回投与する。
【００４９】
「ハロ」又は「ハロゲン」は、クロロ、ブロモ、フルオロ又はヨードを意味する。一実施形態では、ハロはフルオロである。
「アルキル」は、鎖中に１から１５個の炭素原子を有する直鎖状又は分枝状の炭化水素基を意味する。一実施形態では、アルキル基は、鎖中に１から１２個の炭素原子を有する。別の実施形態では、アルキル基は、１から６個の炭素原子を有する。例示的なアルキル基としては、これらに限定されないが、メチル、エチル、ｎ−プロピル、イソプロピル、ｎ−ブチル、ｔｅｒｔ−ブチル、ｓｅｃ−ブチル、ｎ−ペンチル、３−ペンチル、ヘプチル、オクチル、ノニル、デシル及びドデシルが挙げられる。
【００５０】
「アルコキシ」は、酸素リンカー（−Ｏ（アルキル））を介して別の部分に結合しているアルキル基である。非限定例としては、メトキシ、エトキシ、プロポキシ及びブトキシが挙げられる。
【００５１】
「ハロアルキル」又は「ハロゲン化アルキル」は、水素基の１つ又は複数（すべてを含む）がハロ基で置き換えられ、各ハロ基が、−Ｆ、−Ｃｌ、−Ｂｒ及び−Ｉから独立に選択されるアルキル基を意味する。例えば、「ハロメチル」又は「ハロゲン化メチル」という用語は、１から３個の水素基がハロ基で置き換えられたメチルを意味する。代表的な、ハロアルキル基としては、フルオロメチル、ジフルオロメチル、トリフルオロメチル、ブロモメチル、１，２−ジクロロエチル、４−ヨードブチル、２−フルオロペンチルなどが挙げられる。他の例としては、これらに限定されないが、−ＣＨ２ＣＦ３、−ＣＨ（ＣＨ２Ｆ）２、−ＣＨ（ＣＨＦ２）２、−ＣＨ（ＣＦ３）２、−ＣＦ（ＣＨ３）２、−ＣＦ３などの基が挙げられる。
【００５２】
「ハロアルコキシ」は、これらに限定されないが−ＯＣＨＣＦ２又は−ＯＣＦ３などの酸素リンカーを介して別の部分に結合している、ハロアルキル基である。
「アルコキシアルキル」は、アルキルリンカーを介して別の部分に結合しているアルコキシ基である。「ヒドロキシアルキル」又は「ジヒドロキシアルキル」は、アルキルリンカーを介して別の部分に結合している、それぞれ１又は２個のヒドロキシ基である。代表的な、「ヒドロキシアルキル」又は「ジヒドロキシアルキル」としては、−ＣＨ２ＯＨ、−ＣＨ（ＯＨ）（ＣＨ２）（ＯＨ）、−Ｃ（ＯＨ）（ＣＨ３）２、−ＣＨ（ＯＨ）（ＣＨ３）、−ＣＨ（ＯＨ）（ＣＨ２）（ＣＨ３）、−ＣＨ（ＯＨ）（ＣＨ２）２（ＣＨ３）、−Ｃ（ＣＨ３）２（ＯＨ）などが挙げられる。
【００５３】
「シクロアルキル」は、３から１０個の炭素原子の非芳香族単環系を意味する。一実施形態では、シクロアルキル基は、３から６個の炭素原子を有する。例示的なシクロアルキル環としては、シクロプロピル、シクロブチル、シクロペンチル及びシクロヘキシルが挙げられる。
【００５４】
「シクロアルコキシ」は、酸素リンカー（−Ｏ（シクロアルキル））を介して別の部分に結合しているシクロアルキル基を意味する。
「単環式非芳香族複素環」は、単一の飽和複素環を意味し、典型的には３から１０員、より典型的には３から７員を環に有し、環の中の少なくとも１つの原子はヘテロ原子、例えば、窒素、酸素、硫黄（スルホキシド及びスルホンを含む）などである。３から４員の単環式非芳香族複素環は２個までのヘテロ原子を含むことができ、５から６員の単環式複素環は、３個までのヘテロ原子を含むことができ、７から１０員の単環式非芳香族複素環は、４個までのヘテロ原子を含むことができる。単環式非芳香族複素環は、単環式非芳香族複素環の任意のヘテロ原子又は炭素原子を介して別の基に結合していてもよい。代表的な単環式非芳香族複素環としては、モルホリニル、チオモルホリニル、ピロリジノニル、ピロリジニル、ピペリジニル、ピペラジニル、イミダゾリジニル、ピラゾリジニル、オキサゾリジニル、イソチアゾリジニル、ヒダントイニル、バレロラクタミル、オキシラニル、オキセタニル、テトラヒドロフラニル、テトラヒドロピラニル、テトラヒドロピリンジニル、テトラヒドロピリミジニル、テトラヒドロチオフェニル、テトラヒドロチオピラニルなどが挙げられる。一実施形態では、単環式非芳香族複素環は、４、５、６又は７員の複素環である。
【００５５】
「単環式複素芳香族」は、炭素原子環員及び１つ又は複数のヘテロ原子環員を含む。各ヘテロ原子は、窒素、酸素及び硫黄（スルホキシド及びスルホンを含む）から独立に選択される。単環式複素芳香環の別の基への結合点は、複素芳香族の炭素原子又はヘテロ原子のいずれかでもよい。一実施形態では、単環式複素芳香環は、５から８員の単環式複素芳香環から選択される。代表的な単環式複素芳香族基としては、ピリジル、１−オキソ−ピリジル、フラニル、チエニル、ピロリル、オキサゾリル、イミダゾリル、チアゾリル、イソオキサゾリル、ピラゾリル、イソチアゾリル、ピリダジニル、ピリミジニル、ピラジニル、トリアジニル、トリアゾリル、チアジアゾリル及びテトラゾリルが挙げられる。
【００５６】
Ｃ．医薬組成物、製剤及び投薬量  一実施形態では、本発明の化合物及び医薬的に許容される担体又は希釈剤を含む医薬組成物を本明細書で提供する。
本発明の医薬組成物では、本発明の化合物は有効量で存在する。動物及びヒトに対する投薬量（体表の平方メートルあたりのミリグラムに基づく）の相互関係は、Ｆｒｅｉｒｅｉｃｈら、Ｃａｎｃｅｒ  Ｃｈｅｍｏｔｈｅｒ．Ｒｅｐ、１９６６、５０：２１９に記載されている。体表面積は、患者の身長及び体重からおおよそ決定することができる。例えば、Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ  Ｔａｂｌｅｓ、Ｇｅｉｇｙ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｓ、Ａｒｄｓｌｅｙ、Ｎ．Ｙ．、１９７０、５３７を参照されたい。
【００５７】
本明細書のＬＸＲモジュレーター（例えば、本発明の化合物（複数可））は、選択される投与経路に適する種々の形態で、医薬組成物として製剤化することができ、ヒトなどの対象に投与することができる。そうした医薬組成物を投与する典型的な経路としては、限定はされないが、経口、局所、バッカル、経皮、吸入、非経口、舌下、直腸、腟及び鼻腔内が挙げられる。本明細書で使用する場合、非経口という用語は、皮下注射、静脈内、筋肉内、髄腔内、胸骨内の注射又は注入の手法を含む。医薬組成物を製剤化する方法は、例えば、「Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ：Ｔｈｅ  Ｓｃｉｅｎｃｅ  ａｎｄ  Ｐｒａｃｔｉｃｅ  ｏｆ  Ｐｈａｒｍａｃｙ」、Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ  ｏｆ  ｔｈｅ  Ｓｃｉｅｎｃｅｓ  ｉｎ  Ｐｈｉｌａｄｅｌｐｈｉａ編、第２１版、２００５、Ｌｉｐｐｉｎｃｏｔｔ、Ｗｉｌｌｉａｍｓ＆Ｗｉｌｋｉｎｓ、Ｐｈｉｌａｄｅｌｐｈｉａ、ＰＡに開示されているように、当技術分野で周知である。各ＬＸＲモジュレーターは、単独で又は本発明の医薬組成物の一部として組み合わせて使用することができる。
【００５８】
本発明の医薬組成物は、本発明の化合物を医薬的に許容される担体、希釈剤又は賦形剤と組み合わせて調製することができ、固体、半固体、液体又はガス状の形態の調整物、例えば、錠剤、カプセル剤、粉末剤、顆粒剤、軟膏剤、液剤、坐剤、注射剤、吸入剤、ゲル剤、マイクロスフェア剤及びエアゾール剤の中に製剤化することができる。したがって、本化合物は、例えば経口的に、医薬的に許容される適切な賦形剤、例えば不活性な希釈剤又は吸収可能な食用担体と組み合わせて、全身的に投与することができる。これらは、硬殻又は軟殻のゼラチンカプセルに封入してもよいし、錠剤中に圧縮してもよいし、患者の食事の食物と直接的に組み合わせてもよい。治療的経口投与については、活性化合物は、１種又は複数の賦形剤と組み合わせてもよく、摂取可能な錠剤、バッカル錠、トローチ剤、カプセル剤、エリキシル剤、懸濁剤、シロップ剤、ウェハー剤などの形で使用してもよい。
【００５９】
適切な錠剤は、例えば、１種又は複数の本発明の化合物を既知の賦形剤、例えば不活性な希釈剤、担体、崩壊剤、補助剤、界面活性剤、結合剤及び／又は滑沢剤と混合することによって、得てもよい。錠剤はいくつかの層からなってもよい。
【００６０】
本発明の化合物は、対象に投与するための医薬組成物中に適宜製剤化することができる。そのために、本発明の医薬組成物は、１種又は複数の医薬的に許容される担体及び／又は希釈剤、例えば、乳糖、でんぷん、セルロース及びブドウ糖を含む。他の賦形剤、例えば、着香剤、甘味剤、並びにメチルパラベン、エチルパラベン、プロピルパラベン及びブチルパラベンなどの防腐剤を含んでいてもよい。適切な賦形剤のより完全なリストは、Ｈａｎｄｂｏｏｋ  ｏｆ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｅｘｃｉｐｉｅｎｔｓ（第５版、Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｐｒｅｓｓ（２００５））に見出すことができる。当業者なら、様々な型の投与経路に適した製剤の調製方法を知っているはずである。適切な製剤を選択及び調整するための従来の方法及び処方成分は、例えば、Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ’ｓ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｓｃｉｅｎｃｅｓ（２００３−第２０版）及び米国薬局方：１９９９年に出版された国民医薬品集（ＵＳＰ  ２４  ＮＦ１９）に記載されている。担体、希釈剤及び／又は賦形剤は、医薬組成物の他の処方成分と適合性であり、それらの受容者に有害でないという意味で、「許容される」。
【００６１】
典型的には、治療的経口投与については、本発明の化合物は、賦形剤と組み合わせてもよく、摂取可能な錠剤、バッカル錠、トローチ剤、カプセル剤、エリキシル剤、懸濁剤、シロップ剤、ウェハー剤などの形で使用してもよい。
【００６２】
典型的には、非経口投与については、本発明の化合物の溶液は、一般に、ヒドロキシプロピルセルロースなどの界面活性剤と適切に混合した水の中で調製することができる。分
散液も、アルコールの有無にかかわらず、グリセロール、液状ポリエチレングリコール、ＤＭＳＯ及びそれらの混合物中で、並びに油中で調製することができる。通常の保管及び使用条件下では、こうした調整物は、微生物の増殖を防止するために防腐剤を含む。
【００６３】
典型的には、注射使用については、滅菌した注射液又は分散液の即時調製のための本発明の化合物の滅菌水溶液又は分散液、及び滅菌粉末。
経鼻投与については、本発明の化合物は、エアゾール剤、滴剤、ゲル剤及び粉末剤として製剤化することができる。エアゾール剤は、生理学的に許容される水性又は非水性溶媒中に、活性物質の溶液又は微細懸濁液を典型的には含み、密閉容器中に滅菌した形態で、単回又は多回用量で通常提供され、噴霧装置と共に使用するためにカートリッジ又はリフィルの形態をとってもよい。あるいは密閉容器は、例えば、使用後に処分することが企図された定量バルブが装着された単回用量の鼻吸入器又はエアゾールディスペンサーなどの単位分配装置（ｕｎｉｔａｒｙ  ｄｉｓｐｅｎｓｉｎｇ  ｄｅｖｉｃｅ）でもよい。剤形がエアゾールディスペンサーを含む場合は、それは噴霧剤を含み、噴霧剤は圧縮空気などの圧縮ガス又はフルオロクロロ炭化水素などの有機噴霧剤でもよい。エアゾール剤形は、ポンプ噴霧器の形態をとってもよい。
【００６４】
バッカル又は舌下投与については、本発明の化合物は、担体、例えば糖、アラビアゴム、トラガント又はゼラチン及びグリセリンと共に、錠剤、ロゼンジ剤、又は香錠として製剤化することができる。
【００６５】
直腸内投与については、本発明の化合物は、ココアバターなどの従来の坐剤ベースを含む坐剤の形で製剤化することができる。
本発明の化合物の局所及び／又は局部投与は、種々の方法で達成することができ、その方法には、これらに限定されないが、軟膏剤、ローション剤、ペースト剤、クリーム剤、ゲル剤、粉末剤、滴剤、スプレー剤、液剤、吸入剤、パッチ剤、坐剤、停留浣腸、咀しゃく又は舐めることが可能な錠剤又はペレット剤及びエアゾール剤が含まれる。局所及び／又は局部投与は、経皮パッチ又はイオン導入装置（ｉｏｎｔｏｐｈｏｒｅｓｉｓ  ｄｅｖｉｃｅ）などの経皮投与の使用を含んでもよい。局所及び／又は局部投与については、本発明の化合物は、軟膏剤、クリーム剤、乳剤、膏薬、粉末剤、含浸パッド、合成洗剤、液剤、ゲル剤、スプレー剤、フォーム剤、懸濁剤、ローション剤、スティック剤、洗髪剤又は洗浄基剤として製剤化することができる。本発明の化合物は、制御放出のために、脂質小胞若しくはポリマー小胞又はナノスフェア若しくはマイクロスフェア又はポリマーパッチの懸濁剤及びハイドロゲルの形で投与してもよい。
【００６６】
Ｄ．治療方法及びＬＸＲモジュレーターの使用
ＬＸＲのモジュレーションによって治療可能な疾患又は障害を有する対象の治療方法を本明細書で提供する。一実施形態では、ＬＸＲは、ＬＸＲ活性をアップレギュレートすることによってモジュレートされる。この方法は、有効量の本発明の化合物を投与することを含む。さらに、その医薬を必要とする対象におけるＬＸＲ活性をアップレギュレートすることによって治療可能な疾患又は障害を有する対象を治療するための医薬の製造のための本発明の化合物の使用を、本明細書で提供する。
【００６７】
本明細書で提供される方法は、ＬＸＲのモジュレーション、特にＬＸＲのアゴニズムを用いて治療可能な障害にとって有用であり得る。
本発明の化合物は、異常なコレステロール輸送、コレステロール逆輸送、脂肪酸代謝、コレステロール吸収、コレステロール再吸収、コレステロール分泌、コレステロール排出又はコレステロール代謝に付随する疾患又は障害の治療又は予防に有用である。代表的な疾患又は障害としては、これらに限定されないが、脂質障害；癌、特に卵巣癌、乳癌及び前立腺癌を含めたホルモン依存性癌；ざ瘡様皮膚状態；皮膚炎症性疾患；免疫障害；表皮
性バリア機能の撹乱に特徴付けられる状態；表皮若しくは粘膜の分化が乱れた状態又は表皮若しくは粘膜の過剰増殖状態；心血管疾患；生殖器系障害；視神経及び網膜の病態；疾患において起こる変性神経障害；自己免疫疾患；中枢神経系又は末梢神経系への外傷性損傷；神経変性疾患；老化による変性過程；腎臓の疾患又は障害；及び骨粗鬆症並びに関連疾患が挙げられる。
【００６８】
別の実施形態では、疾患又は障害は、高脂質血症、高コレステロール血症、高リポタンパク質血症、高トリグリセリド血症、脂肪ジストロフィ、脂肪肝、非アルコール性脂肪性肝炎（ＮＡＳＨ）、非アルコール性脂肪性肝疾患（ＮＡＦＬＤ）、高血糖症、インスリン抵抗性、真性糖尿病、脂質異常症、アテローム性動脈硬化症、胆石症、尋常性ざ瘡、皮膚炎（これらに限定されないが、乾癬、接触性皮膚炎、アトピー性皮膚炎及び湿疹を含む）、皮膚創傷、皮膚老化、光老化、しわ、糖尿病、ニーマン・ピック病Ｃ型、パーキンソン病、アルツハイマー病、炎症、黄色腫、肥満症、代謝症候群、Ｘ症候群、脳卒中、末梢閉塞性疾患、記憶喪失、糖尿病性神経障害、タンパク尿症、糸球体症（これらに限定されないが、糖尿病性腎障害、高血圧性腎障害、ＩＧＡ腎障害、巣状分節性糸球体硬化症を含む）、高リン酸血症、高リン酸血症の心血管系の合併症、癌、多発性硬化症又は骨粗鬆症である。
【００６９】
別の実施形態では、疾患又は障害は、尋常性ざ瘡；面皰；多型性ざ瘡；赤瘡；結節嚢腫性ざ瘡；集簇性ざ瘡（ａｃｎｅ  ｃｏｎｇｌｏｂａｔｅ）；老人性ざ瘡；二次性ざ瘡（これらに限定されないが、日光性、医薬性及び職業性ざ瘡を含む）；魚鱗癬；魚鱗癬様状態；ダリエー病；掌蹠角化症；白斑症；白斑症様状態；皮膚又は粘液性（口腔）苔癬；細胞増殖障害の有無を問わない、炎症性免疫アレルギー成分を伴う皮膚科学的状態又は苦痛（これらに限定されないが、皮膚乾癬、粘液性乾癬、爪乾癬、乾癬性リウマチ、皮膚アトピー（湿疹、呼吸性アトピー及び歯肉肥大症を含む）；ウイルス性又は非ウイルス性起源の良性又は悪性の真皮性又は表皮性増殖（これらに限定されないが、尋常性疣贅、扁平疣贅、疣贅状表皮発育異常症、口腔乳頭腫症（ｏｒａｌ  ｏｒ  ｆｌｏｒｉｄ  ｐａｐｉｌｌｏｍａｔｏｓｅｓ）、及びＴリンパ腫又は皮膚性Ｔ細胞リンパ腫を含む）；紫外線光によって誘導される増殖（これらに限定されないが、基底細胞上皮腫及び有棘細胞上皮腫を含む）；前癌の皮膚病変（これに限定されないが、角化棘細胞腫を含む）；免疫性皮膚炎（これに限定されないが、紅斑性狼瘡を含む）；水疱性免疫疾患；膠原病（これに限定されないが、強皮症を含む）；免疫学的成分を伴う、皮膚科学的又は全身的な状態又は苦痛；紫外線への曝露による皮膚障害；光線誘発性又は経時的な皮膚の老化；光線性色素沈着；角化症；経時的又は光線性老化に付随する病態（これに限定されないが、乾燥症を含む）；皮脂腺機能障害（これらに限定されないが、ざ瘡の過剰脂漏、単純な脂漏及び脂漏性皮膚炎を含む）；瘢痕形成障害（これに限定されないが、伸展裂創を含む）；色素沈着障害（これらに限定されないが、過色素沈着症、黒皮症、低色素症及び白斑を含む）；並びに脱毛症（これらに限定されないが、化学療法に付随する脱毛症及び放射線に付随する脱毛症を含む）である。
【００７０】
一実施形態では、疾患又は障害は、高コレステロール血症、アテローム性動脈硬化症又は脂質異常症である。別の実施形態では、疾患又は障害は、アテローム性動脈硬化症又は脂質異常症である。さらに別の実施形態では、疾患又は障害は、アテローム性動脈硬化症、アルツハイマー病又は皮膚炎である。
【００７１】
本発明はまた、コレステロール逆輸送を増大させるための、及び／又はアテローム性動脈硬化症の進行を阻害する若しくは退行を促進するための方法を提供する。
本発明はまた、高密度リポタンパク質（ＨＤＬ）コレステロールレベルを増大させる必要性に関係がある疾患又は障害を治療する方法であって、有効量の本発明の化合物を、それらを必要とする哺乳動物（特にヒト）に投与することを含む方法を提供する。
【００７２】
本発明はまた、低密度リポタンパク質（ＬＤＬ）コレステロールレベルを低下させる必要性と関係がある疾患又は障害を治療する方法であって、有効量の本発明の化合物を、それらを必要とする哺乳動物（特にヒト）に投与することを含む方法を提供する。
【００７３】
さらに、本発明の化合物及び組成物を使用して、ＡＴＰ結合カセットタンパク質の発現を対象の細胞で増大させ、それによって、対象のコレステロール逆輸送を増大させる方法を、本明細書で提供する。
【００７４】
標準的な生理的、薬理学的及び生化学的な方法が当分野で知られており、ＬＸＲ活性をモジュレートする能力について本発明の化合物を評価するのに利用可能である。そうしたアッセイとしては、例えば、結合アッセイ、蛍光偏光アッセイ、ＦＲＥＴベースのコアクチベーター動員アッセイ及び細胞ベースの同時トランスフェクションアッセイが挙げられる。ＬＸＲによってモジュレートされると知られている遺伝子の発現をモジュレートする能力について、本発明の化合物を評価することができる。確立された動物モデルを使用して、アテローム性動脈硬化症、アルツハイマー病及び皮膚状態を含めた疾患又は障害に直接的に関係があるパラメーターに関して、本発明の化合物のプロファイルを研究することができる。したがって、本発明の化合物は、種々の投与経路、例えば、経口、強制栄養によって、動物モデルにおいてインビボで試験することができる。典型的には、インビボでの化合物の曝露を、血漿及び目的の組織で調べることができる。（ＬＸＲ応答性遺伝子の遺伝子発現によって検出される）ＬＸＲ活性を、全血及び目的の組織で調べることができる。血漿及び肝臓で脂質を定量化することができる。
【００７５】
特に、本発明の化合物は、ＡＢＣＡ１及びＡＢＣＧ１などのＡＴＰ結合カセット（ＡＢＣ）コレステロール輸送体及びＳＲＥＢＰ１ｃなどの脂質生成マーカーに関するその活性を、遺伝子発現及びタンパク質発現レベルで試験することができる。ＡＢＣトランスポーター誘導の機能的帰結は、コレステロール流出について細胞モデルで調べることができ、コレステロール逆経路及びアテローム性動脈硬化症について動物モデルで調べることができる。脂質生成マーカーは、血漿及び肝臓のトリグリセリドレベルを測定することによって、動物モデルで調べることができる。
【００７６】
本発明の化合物は、単独で（すなわち単独療法として）、又は上記の適応症のいずれかを治療するのに有効な１種若しくは複数の他の治療薬と組み合わせて使用することができる。医薬組成物は、開示される化合物を医薬として唯一の活性な薬剤として単独で含んでもよいし、１種又は複数のさらなる医薬として活性な薬剤を含んでもよい。
【００７７】
本発明はまた、本明細書に記載の疾患又は障害を治療する又は回復させるための併用療法を提供する。幾つかの実施形態では、併用療法は、構造式Ｉ、ＩＩ、ＩＩＩ、ＩＶ、Ｖ又はＶＩによって表される少なくとも１つの化合物を、本明細書に記載の疾患又は障害を治療する又は回復させるための１種又は複数の薬剤と組み合わせて投与することを含む。幾つかの実施形態では、併用療法は、構造式Ｉ、ＩＩ、ＩＩＩ、ＩＶ、Ｖ又はＶＩによって表される少なくとも１つの化合物を、疾患を治療するための１種又は複数の薬剤と組み合わせて投与することを含み、疾患には、高脂質血症、高コレステロール血症、高リポタンパク質血症、高トリグリセリド血症、脂肪ジストロフィ、脂肪肝、ＮＡＳＨ、ＮＡＦＬＤ、高血糖症、インスリン抵抗性、真性糖尿病、脂質異常症、アテローム性動脈硬化症、胆石症、尋常性ざ瘡、皮膚炎（これらに限定されないが、乾癬、接触性皮膚炎、アトピー性皮膚炎及び湿疹を含む）、皮膚創傷、皮膚老化、光老化、しわ、糖尿病、ニーマン・ピック病Ｃ型、パーキンソン病、アルツハイマー病、炎症、黄色腫、肥満症、代謝症候群、Ｘ症候群、脳卒中、末梢性閉塞性疾患、記憶喪失、糖尿病性神経障害、タンパク尿症、糸球体症（これらに限定されないが、糖尿病性腎障害、高血圧性腎障害、ＩＧＡ腎障害、巣状分節性糸球体硬化症を含む）、高リン酸血症、高リン酸血症の心血管系の合併症、癌、多発性硬化症又は骨粗鬆症が挙げられる。
【００７８】
幾つかの実施形態では、本発明の化合物は、糖尿病、脂質異常症、心血管疾患、高血圧症又は肥満症を治療するための１種又は複数のさらなる薬剤と組み合わせて使用される。糖尿病を治療するための薬剤としては、以下が挙げられる。インスリン、例えばＨｕｍｕｌｉｎ（登録商標）（Ｅｌｉ  Ｌｉｌｌｙ）、Ｌａｎｔｕｓ（登録商標）（Ｓａｎｏｆｉ
Ａｖｅｎｔｉｓ）、Ｎｏｖｏｌｉｎ（登録商標）（Ｎｏｖｏ  Ｎｏｒｄｉｓｋ）及びＥｘｕｂｅｒａ（登録商標）（Ｐｆｉｚｅｒ）；ＰＰＡＲγアゴニスト、例えばＡｖａｎｄｉａ（登録商標）（マレイン酸ロシグリタゾン（ｒｏｓｉｇｌｉｔｉｚｏｎｅ  ｍａｌｅａｔｅ）、ＧＳＫ）及びＡｃｔｏｓ（登録商標）（塩酸ピオグリタゾン、Ｔａｋｅｄａ／Ｅｌｉ  Ｌｉｌｌｙ）；スルホニル尿素、例えばＡｍａｒｙｌ（登録商標）（グリメピリド、Ｓａｎｏｆｉ  Ａｖｅｎｔｉｓ）、Ｄｉａｂｅｔａ（登録商標）（グリブリド、Ｓａｎｏｆｉ  Ａｖｅｎｔｉｓ）、Ｍｉｃｒｏｎａｓｅ（登録商標）／Ｇｌｙｎａｓｅ（登録商標）（グリブリド、Ｐｆｉｚｅｒ）、及びＧｌｕｃｏｔｒｏｌ（登録商標）／Ｇｌｕｃｏｔｒｏｌ  ＸＬ（登録商標）（グリピジド、Ｐｆｉｚｅｒ）；メグリチニド、例えばＰｒａｎｄｉｎ（登録商標）／ＮｏｖｏＮｏｒｍ（登録商標）（レパグリニド、Ｎｏｖｏ  Ｎｏｒｄｉｓｋ）、Ｓｔａｒｌｉｘ（登録商標）（ナテグリニド、Ｎｏｖａｒｔｉｓ）及びＧｌｕｆａｓｔ（登録商標）（ミチグリニド、Ｔａｋｅｄａ）；ビグアニド、例えばＧｌｕｃｏｐｈａｇｅ（登録商標）／Ｇｌｕｃｏｐｈａｇｅ  ＸＲ（登録商標）（塩酸メトホルミン、Ｂｒｉｓｔｏｌ  Ｍｙｅｒｓ  Ｓｑｕｉｂｂ）及びＧｌｕｍｅｔｚａ（登録商標）（塩酸メトホルミン持続放出錠剤、Ｄｅｐｏｍｅｄ）；チアゾリジンジオン；アミリン類似体、ＧＬＰ−１類似体又はアゴニスト（Ｂｙｅｔｔａ（登録商標）（エクセナチド、Ａｍｙｌｉｎ／Ｅｌｉ  Ｌｉｌｌｙ）及びＶｉｃｔｏｚａ（登録商標）（組換えリラグルチド、Ｎｏｖｏ  Ｎｏｒｄｉｓｋ）を含む）；ＤＰＰ−ＩＶ阻害剤（Ｔｒａｄｊｅｎｔａ（商標）（Ｅｌｉ  Ｌｉｌｌｙ／Ｂｏｅｈｒｉｎｇｅｒ  Ｉｎｇｅｌｈｅｉｍ）、Ｊａｎｕｖｉａ（登録商標）（Ｍｅｒｃｋ）、Ｇａｌｖｕｓ（登録商標）（Ｎｏｖａｒｔｉｓ）、及びＯｎｇｌｙｚａ（登録商標）（Ｂｒｉｓｔｏｌ−Ｍｙｅｒｓ  Ｓｑｕｉｂｂ／ＡｓｔｒａＺｅｎｅｃａ）を含む）；ＰＴＢ−１Ｂ阻害剤；プロテインキナーゼ阻害剤（ＡＭＰ活性化プロテインキナーゼ阻害剤を含む）；グルカゴンアンタゴニスト、グリコーゲン合成酵素キナーゼ−３β阻害剤；グルコース−６−ホスファターゼ（ｇｌｕｃｏｓｅ−６−ｐｈｏｓｈａｔａｓｅ）阻害剤；グリコーゲンホスホリラーゼ阻害剤；ナトリウムグルコース共輸送体阻害剤、並びにα−グルコシダーゼ阻害剤、例えば、Ｐｒｅｃｏｓｅ（登録商標）／Ｇｌｕｃｏｂａｙ（登録商標）／Ｐｒａｎｄａｓｅ（登録商標）／Ｇｌｕｃｏｒ（登録商標）（アカルボース、Ｂａｙｅｒ）及びＧｌｙｓｅｔ（登録商標）（ミグリトール、Ｐｆｉｚｅｒ）。脂質異常症及び心血管疾患を治療するための薬剤としては、スタチン、フィブラート及びエゼチミブ（ｅｚｅｔｉｍｂｅ）が挙げられる。高血圧症を治療するための薬剤としては、α−遮断薬、β−遮断薬、カルシウムチャネル遮断薬、利尿剤、アンジオテンシン変換酵素（ＡＣＥ）阻害剤、二重ＡＣＥ及び中性エンドペプチダーゼ（ＮＥＰ）阻害剤、アンジオテンシンレセプター遮断薬（ＡＲＢ）、アルドステロン合成酵素阻害剤、アルドステロンレセプターアンタゴニスト又はエンドセリンレセプターアンタゴニストが挙げられる��肥満症を治療するための薬剤としては、オルリスタット、フェンテルミン、シブトラミン及びリモナバンが挙げられる。
【００７９】
本発明の一実施形態は、併用製品、例えばＡｖａｎｄａｍｅｔ（登録商標）（塩酸メトホルミン及びマレイン酸ロシグリタゾン、ＧＳＫ）、Ａｖａｎｄａｒｙｌ（登録商標）（グリメピリド及びマレイン酸ロシグリタゾン、ＧＳＫ）、Ｍｅｔａｇｌｉｐ（登録商標）（グリピジド及び塩酸メトホルミン、Ｂｒｉｓｔｏｌ  Ｍｙｅｒｓ  Ｓｑｕｉｂｂ）並びにＧｌｕｃｏｖａｎｃｅ（登録商標）（グリブリド及び塩酸メトホルミン、Ｂｒｉｓｔｏｌ  Ｍｙｅｒｓ  Ｓｑｕｉｂｂ）を用いた併用療法において、本発明のＬＸＲモジュレーター化合物又はその組成物を投与することを含む。
【００８０】
幾つかの実施形態では、併用療法は、少なくとも１つの本発明の化合物を、以下の群から選択される１種又は複数の化合物と組み合わせて投与することを含む。例えば、βセクレターゼ（ＢＡＣＥ１）阻害剤；γセクレターゼ阻害剤；アミロイド凝集阻害剤（例えばＥＬＮＤ−００５）；直接的又は間接的に作用する神経保護及び／又は疾患修飾物質；抗酸化剤（例えば、ビタミンＥ又はギンコライド（ｇｉｎｋｏｌｉｄｅ））；抗炎症性物質（例えば、Ｃｏｘ阻害剤、ＮＳＡＩＤ）；ＨＭＧ−ＣｏＡ還元酵素阻害剤（スタチン）；アセチルコリンエステラーゼ阻害剤（例えば、ドネペジル、リバスチグミン、タクリン、ガランタミン、メマンチン；タクリン）；ＮＭＤＡレセプターアンタゴニスト（例えばメマンチン）；ＡＭＰＡレセプターアゴニスト；ＡＭＰＡレセプターポジティブモジュレーター、ＡＭＰＡｋｉｎｅ、モノアミンレセプター再取り込み阻害剤、神経伝達物質の濃度又は放出をモジュレートする物質；成長ホルモンの分泌を誘発する物質（例えば、イブタモレンメシレート及びカプロモレリン）；ＣＢ−１レセプターアンタゴニスト又はインバースアゴニスト；抗生物質（例えば、ミノサイクリン又はリファンピシン）；ＰＤＥ２、ＰＤＥ４、ＰＤＥ５、ＰＤＥ９、ＰＤＥ１０阻害剤、ＧＡＢＡＡレセプターインバースアゴニスト、ＧＡＢＡＡレセプターアンタゴニスト、ニコチンレセプターアゴニスト又は部分的アゴニスト又はポジティブモジュレーター、α４β２ニコチンレセプターアゴニスト又は部分的アゴニスト又はポジティブモジュレーター、α７ニコチンレセプターアゴニスト又は部分的アゴニスト又はポジティブモジュレーター；ヒスタミンＨ３アンタゴニスト、５ＨＴ−４アゴニスト又は部分的アゴニスト、５ＨＴ−６アンタゴニスト、α２−アドレノレセプターアンタゴニスト、カルシウムアンタゴニスト、ムスカリン様レセプターＭ１アゴニスト又は部分的アゴニスト又はポジティブモジュレーター、ムスカリン様レセプターＭ２アンタゴニスト、ムスカリン様レセプターＭ４アンタゴニスト、代謝型グルタミン酸レセプター５ポジティブモジュレーター、抗うつ剤、例えば、シタロプラム、フルオキセチン、パロキセチン、セルトラリン及びトラゾドン；抗不安薬、例えば、ロラゼパム及びオキサゼパム；抗精神病薬（ａｎｔｉｐｈｙｃｈｏｔｉｃｓ）、例えば、アリピプラゾール、クロザピン、ハロペリドール、オランザピン、クエチアピン、リスペリドン及びジプラシドン、並びに本発明による化合物の有効性及び／若しくは安全性が増大し、且つ／又は望まれない副作用が低減するような方法でレセプター又は酵素をモジュレートする他の物質。本発明による化合物は、本明細書に開示される疾患又は障害を治療するための免疫療法と組み合わせて使用してもよい。
【００８１】
併用療法は、本発明の化合物と１種若しくは複数の他の薬剤の共投与、本発明の化合物と１種若しくは複数の他の薬剤の連続投与、本発明の化合物及び１種若しくは複数の他の薬剤を含有する組成物の投与、又は本発明の化合物及び１種若しくは複数の他の薬剤を含有する別々の組成物の同時投与を含む。
【００８２】
Ｅ．例示的合成
合成方法の概要
本発明の化合物は、容易に利用可能な出発材料、試薬及び従来の合成方法を使用して、以下の反応スキーム及び実施例又はそれらの改変に従って、容易に調製することができる。反応の多くは、マイクロ波条件下で、又は従来の加熱を使用して、又は固相試薬／スカベンジャー若しくはフローケミストリーなどの他の技術を利用して行うこともできる。こうした反応では、それ自身当業者に知られている変異型を使用することも可能であるが、さらに詳細には言及しない。さらに、本発明の化合物を調製するための他の方法は、以下の反応スキーム及び実施例を考慮すれば、当業者に容易に明らかになるであろう。合成の中間体及び最終生成物が所望の反応を妨げる可能性がある潜在的に反応性の官能基、例えば、アミノ基、ヒドロキシ基、チオール基及びカルボン酸基を含む場合は、中間体の保護形態を用いるのが有利であり得る。保護基の選択、導入、及び引き続く除去の方法は当業者に周知である。以下の議論では、Ｘ、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３及びＲ４は、別段指示がない限り、上で示された意味を有する。これらの実験の詳細で使用される略称は以下に列挙され、さらなる略称は合成分野の当業者に知られているはずである。さらに、以下の参考文献、Ｍａｒｃｈ、Ａｄｖａｎｃｅｄ  Ｏｒｇａｎｉｃ  Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ、第３版、Ｊｏｈｎ  Ｗｉｌｅｙ＆Ｓｏｎｓ、１９８５、Ｇｒｅｅｎｅ及びＷｕｔｓ、Ｐｒｏｔｅｃｔｉｖｅ  Ｇｒｏｕｐｓ  ｉｎ  Ｏｒｇａｎｉｃ  Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ、第２版、Ｊｏｈｎ  Ｗｉｌｅｙ＆Ｓｏｎｓ、１９９１、並びにＲｉｃｈａｒｄ  Ｌａｒｏｃｋ、Ｃｏｍｐｒｅｈｅｎｓｉｖｅ  Ｏｒｇａｎｉｃ  Ｔｒａｎｓｆｏｒｍａｔｉｏｎｓ、第４版、ＶＣＨ  ｐｕｂｌｉｓｈｅｒｓ  Ｉｎｃ．、１９８９に記載されているような適切な合成方法について参照することができる。
【００８３】
一般に、反応スキーム中の試薬は、等モル量で使用する。しかし、特定の場合には、反応を完了させるために１つの試薬を過剰量で使用するのが望ましい場合もある。これは、蒸発又は抽出によって過剰な試薬を容易に除去することができる場合に、特に当てはまる。反応混合物中のＨＣｌを中和するのに用いる塩基は、一般に、わずかに過剰からかなり過剰まで（１．０５〜５当量）使用する。
【００８４】
ＮＭＲデータが提供される場合は、スペクトルは、Ｖａｒｉａｎ４００（４００ＭＨｚ）又は３００（３００ＭＨｚ）で獲得され、重水素化溶媒に対するリファレンスと一緒に、括弧付きで示されるプロトン数、多重度及びカップリング定数と共に、テトラメチルシランからのダウンフィールドでｐｐｍとして報告される。
【００８５】
ＬＣ−ＭＳデータは、以下のクロマトグラフィー条件の１つ又は複数を利用して得た。方法１（１０〜８０、２分）
【００８６】
【表２】
2019023196.tif 000005
【００８７】
方法２（３０〜９０、２分）
【００８８】
【表３】
2019023196.tif 000006
【００８９】
方法３（０〜６０、２分）
【００９０】
【表４】
2019023196.tif 000007
【００９１】
方法４：
ＨＰＬＣシステム：Ｗａｔｅｒｓ  ＡＣＱＵＩＴＹ；カラム：Ｗａｔｅｒｓ  ＡＣＱＵＩＴＹ  ＣＳＨ（商標）Ｃ１８  １．７μＭ  Ｇｕａｒｄカラム：Ｗａｔｅｒｓ  Ａｓｓｙ．Ｆｒｉｔ、０．２μＭ、２．１ｍｍ；カラム温度：４０℃。
【００９２】
移動相：Ａ：ＴＦＡ：水（１：１０００、ｖ：ｖ）移動相Ｂ：ＴＦＡ：ＡＣＮ（１：１０００、ｖ：ｖ）；流速：０．６５ｍＬ／ｍｉｎ；注入容量：２μＬ；収集時間：約１．５分。
【００９３】
勾配プログラム：
時間（分）    Ｂ％、
０          １０
０．８      ９０
１．２０    ９０
１．２１    １０
質量分析計のパラメーター
質量分析計：Ｗａｔｅｒｓ  ＳＱＤ；イオン化：ポジティブエレクトロスプレーイオン化（ＥＳＩ）；モードスキャン（０．２秒毎に１００〜１４００ｍ／ｚ）；ＥＳキャピラリー電圧：３．５ｋｖ；ＥＳコーン電圧：２５ｖソース温度：１２０℃；脱溶媒和（Ｄｉｓｏｌｖａｔｉｏｎ）温度：５００℃；脱溶媒和ガス流：窒素設定６５０（Ｌ／ｈｒ）；コーンガス流：窒素設定５０（Ｌ／ｈｒ）。
【００９４】
本発明の化合物のＳＦＣ分離は、以下の方法の下に行った。
方法Ａ：
機器：Ｔｈａｒ  ＳＦＣ８０；カラム：ＡＤ  ２５０ｍｍ＊３０ｍｍ、５μｍ；移動相：Ａ：超臨界ＣＯ２、Ｂ：ＩＰＡ（０．０５％ＤＥＡ）、６０ｍｌ／ｍｉｎでＡ：Ｂ＝８０：２０；カラム温度：３８℃；ノズル圧力：１００バール；ノズル温度：６０℃；蒸発器温度：２０℃；トリマー温度：２５℃；波長：２２０ｎｍ。
【００９５】
方法Ｂ：
機器：ＳＦＣ  ＭＧ２；カラム：ＯＪ  ２５０ｍｍ＊３０ｍｍ、５μｍ；移動相：Ａ：超臨界ＣＯ２、Ｂ：ＭｅＯＨ（０．０５％ＤＥＡ）、７０ｍｌ／ｍｉｎでＡ：Ｂ＝９０：１０；カラム温度：３８℃；ノズル圧力：１００バール  ノズル温度：６０℃；蒸発器温度：２０℃；トリマー温度：２５℃；波長：２２０ｎｍ。
【００９６】
本発明の化合物のキラル純度は、分析的キラルＨＰＬＣによって決定し、これは、Ｃｈｉｒａｌｃｅｌ（登録商標）カラム又はＣｈｉｒａｌｐａｋ（登録商標）カラムを使用して、溶出液としての、０．０５％ＤＥＡを含有する５％から４０％のメタノール、エタノール又はイソプロパノールと共に、ＣＯ２を使用して行った。
分析的キラルＨＰＬＣ
【００９７】
【表５】
2019023196.tif 000008
【００９８】
以下の実施例を通して本発明を例示し、ここでは以下の略称を用いる場合がある。
【００９９】
【表６−Ａ】
2019023196.tif 000009
【０１００】
【表６−Ｂ】
2019023196.tif 000010
【０１０１】
第１の方法では、式２の中間体との、１の試薬のＳＮＡＲ又はパラジウム触媒反応によって式Ｉの化合物を調製することができ、Ｇ１はＣｌ、ＢＲ、Ｉ、ＯＴｆ又はＯＴｓである。試薬１は、市販品として入手可能であるか、又は市販品として入手可能な前駆物質から、文献の先例に基づいて容易に調製することができる。
【０１０２】
【化３】
2019023196.tif 000011
【０１０３】
中間体２は、以下に示すいくつかの異なる方法のうちの１つによって調製することができる。
Ｘ＝Ｎの場合は、式２の中間体は、式３ａの中間体を環化し、それに続いて、Ｇ２が水素でない場合にＧ２を除去することによって、調製することができる。Ｇ２はアミン保護基、例えばＢｏｃ、Ｃｂｚ及びトリフルオロアセタミドなどである。
【０１０４】
【化４】
2019023196.tif 000012
【０１０５】
式３ａの中間体は、１）ピペラジノン４ａとアニリン５ａとの銅媒介性カップリングであって、Ｇ３がＢＲ、Ｉ、Ｃｌ又はＯＴｆであるカップリング；２）４ａとフッ素化ニトロベンゼン６ａとの間でＳＮＡＲ反応を行い、式７ａの中間体を得て、それに続いてニトロ基を還元すること、の２つの方法のうちの１つによって調製することができる。中間体７ａは、アルカンスルフィン酸ナトリウム（Ｒ１ＳＯ２Ｎａ）又はアルキルスルフィドナトリウム（Ｒ１ＳＮａ）のいずれかでフッ素を置換し、それに続いて、生成したチオエーテルを酸化させることによって、式８ａの中間体から調製することもできる。さらには、中間体８ａは、ピペラジノン４ａ及びジフルオロニトロベンゼン９ａから調製することができ、これらは市販品として入手可能であるか、又は市販の前駆物質から、当業者に周知の文献の方法に基づいて容易に調製することができる。
【０１０６】
【化５】
2019023196.tif 000013
【０１０７】
例えば、Ｒ３＝イソプロピルの場合は、ピペラジノン４ａは、以下に提示する方法のうちの１つによって調製することができる。
【０１０８】
【化６】
2019023196.tif 000014
【０１０９】
Ｘ＝ＣＨの場合は、式２の中間体は、Ｇ２を脱保護し、それに続いて還元的アミノ化を行うことによって、式３ｂの中間体から調製することができる。Ｇ２はアミン保護基、例えば、Ｂｏｃ、Ｃｂｚ及びトリフルオロアセタミドなどである。
【０１１０】
【化７】
2019023196.tif 000015
【０１１１】
式３ｂの中間体は、市販品として入手可能なアルキルハライド５ｂでインドール４ｂをＮ−アルキル化することによって調製することができ、Ｇ３はＢｒ又はＩである。式４ｂの中間体は、式６ｂの中間体からＧ４を除去することによって調製することができ、Ｇ４はメタンスルホン酸又はフェニルスルホン酸である。
【０１１２】
【化８】
2019023196.tif 000016
【０１１３】
式６ｂの中間体は、ハロゲン化アリール７ｂ（Ｇ５はＢｒ又はＩである）とプロパルギルアルコール８ｂとの間で連続的に薗頭カップリング反応を行い、それに続いて環化して式９ｂの中間体を得て、続いてアルコールを酸化させることによって調製することができる。
【０１１４】
【化９】
2019023196.tif 000017
【０１１５】
式７ｂの中間体は、市販品として入手可能なアニリン１０ｂから、以下の変換を介して調製することができる。１）アルキルスルフィドナトリウムＲ１ＳＮａでフッ素を置換する（１１ｂを得る）；２）ハロゲン化する（１２ｂを得る）；３）アニリンを保護する（１３ｂを得る）；４）硫化物を酸化する（７ｂを得る）。
【０１１６】
【化１０】
2019023196.tif 000018
【０１１７】
第２の方法では、Ｒ１＝アルキル、Ｒ２＝Ｈ及びＸ＝ＣＨである式Ｉの化合物を、式１ｃの中間体のチオエーテル基を酸化させることによって調製することができる。さらには中間体１ｃを、ＳＮＡＲ又はパラジウム触媒反応を介して、試薬１と式２ｃの中間体をカップリングすることから調製することができる。
【０１１８】
【化１１】
2019023196.tif 000019
【０１１９】
中間体２ｃは、以下のスキームに従って調製することができる。
【０１２０】
【化１２】
2019023196.tif 000020
【０１２１】
本明細書中に引用するすべての特許、特許出願、書籍及び文献は、参照によりその全体が本明細書に組み込まれる。何らかの不一致が存在する場合、本開示が、その中の任意の定義を含めて、優先する。
【０１２２】
本発明を以下の詳細な実施例を参照することによりさらに説明する。これは本発明の例示のためのものであり、本発明を制限することを意図するものではない。
【実施例１】
【０１２３】
１−イソプロピル−７−（メチルスルホニル）−２−（４−（トリフルオロメチル）ピリミジン−２−イル）−１，２，３，４−テトラヒドロベンゾ［４，５］イミダゾ［１，２−ａ］ピラジン
【０１２４】
【化１３】
2019023196.tif 000021
【０１２５】
ステップ１：
【０１２６】
【化１４】
2019023196.tif 000022
【０１２７】
（Ｒ）−２−（（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ）−３−メチルブタン酸（２．０ｇ、９．２０ｍｍｏｌ）をＣＨ２Ｃｌ２（４０ｍＬ）に入れた溶液に、２−（ベンジルアミノ）エタノール（１．３ｇ、８．８０ｍｍｏｌ）、ＨＡＴＵ（５．３０ｇ、１３．８ｍｍｏｌ）及びＥｔ３Ｎ（２．８０ｇ、２７．６ｍｍｏｌ）を、Ｎ２下で加えた。この混合物を、室温で一晩撹拌した。この混合物に水（２０ｍＬ）を加え、ＥｔＯＡｃ（３×３０ｍＬ）で抽出した。合わせた有機層を、ブライン（２０ｍＬ）で洗浄し、無水Ｎａ２ＳＯ４で脱水し、濾過し、濃縮し、次いでシリカゲルによるカラムクロマトグラフィーによって精製して、白色固体として、（Ｒ）−ｔｅｒｔ−ブチル（１−（ベンジル（２−ヒドロキシエチル）アミノ）−３−メチル−１−オキソブタン−２−イル）カルバミン酸（２．８０ｇ、収率８８％）を得た。ＬＣ−ＭＳ  ｍ／ｚ３５１．２［Ｍ＋Ｈ］＋。
【０１２８】
ステップ２：
【０１２９】
【化１５】
2019023196.tif 000023
【０１３０】
（Ｒ）−ｔｅｒｔ−ブチル（１−（ベンジル（２−ヒドロキシエチル）アミノ）−３−メチル−１−オキソブタン−２−イル）カルバミン酸（２．８０ｇ、８．０ｍｍｏｌ）を
ＣＨ２Ｃｌ２（２０ｍＬ）に入れた溶液に、Ｅｔ３Ｎ（１．６０ｇ、１６ｍｍｏｌ）及びＭｓＣｌ（１．４０ｇ、１２．０ｍｍｏｌ）を、−１０℃でＮ２下で滴下（ｄｒｏｐｗｓｅ）した。この混合物を、室温で一晩撹拌した。この混合物を、水（２０ｍＬ）でクエンチし、ＣＨ２Ｃｌ２（３×２０ｍＬ）で抽出した。合わせた有機層を、ブライン（２０ｍＬ）で洗浄し、無水Ｎａ２ＳＯ４で脱水し、濾過し、濃縮して、黄色固体として、（Ｒ）−ｔｅｒｔ−ブチル（１−（ベンジル（２−クロロエチル）アミノ）−３−メチル−１−オキソブタン−２−イル）カルバミン酸（３．０ｇ、収率１００％）を得た。これ以上精製せずに、これを次のステップに使用した。LC-MS m/z 369.2 [M+H]+.  1H NMR (CDCl3400MHz): δ 7.37-7.28 (m, 3H), 7.22-7.20 (m, 2H), 5.27-5.18 (m, 1H), 4.93-4.86 (m, 1H), 4.64-4.39 (m, 2H), 3.85-3.66 (m, 2H), 3.61-3.39 (m, 2H), 2.03-1.97 (m, 1H), 1.45 (s, 9H), 0.98 (d, J = 6.8Hz, 3H), 0.93 (d, J = 6.8Hz, 3H).
ステップ３：
【０１３１】
【化１６】
2019023196.tif 000024
【０１３２】
（Ｒ）−ｔｅｒｔ−ブチル（１−（ベンジル（２−クロロエチル）アミノ）−３−メチル−１−オキソブタン−２−イル）カルバミン酸（２．０ｇ、５．４０ｍｍｏｌ）をＤＭＦ（３０ｍＬ）に入れた溶液に、ＮａＨ（１．０ｇ、２７．０ｍｍｏｌ、鉱油中６０％）を、０℃でＮ２下で加えた。この混合物を室温で２時間撹拌した。この混合物を、水（２０ｍＬ）でクエンチし、ＥｔＯＡｃ（３×２０ｍＬ）で抽出した。合わせた有機層をブライン（２０ｍＬ）で洗浄し、無水Ｎａ２ＳＯ４で脱水し、濾過し、濃縮し、カラムクロマトグラフィーで精製して、白色固体として、（Ｒ）−ｔｅｒｔ−ブチル４−ベンジル−２−イソプロピル−３−オキソピペラジン−１−カルボキシレート（１．１３ｇ、収率６３％）を得た。LC-MS m/z 277.1 [M-56+H]+.  1H NMR (CDCl3400MHz): δ 7.38-7.29 (m, 3H), 7.29-7.22 (m, 2H), 5.02-4.86 (m, 1H), 4.49-4.39 (m, 1H), 4.31-4.06 (m, 2H), 3.41-3.18 (m, 3H), 2.42-2.31 (m, 1H), 1.46 (s, 9H), 1.12 (d, J = 6.8Hz, 3H), 1.00 (d, J = 6.8Hz, 3H).
ステップ４：
【０１３３】
【化１７】
2019023196.tif 000025
【０１３４】
ＴＨＦ（１０ｍＬ）を含む３つ口ボトルを、ＮＨ３（ガス）を用いて、−７８℃で５分間バブリングした。次いで、Ｎａ（３００ｍｇ、１３．０ｍｍｏｌ）を−７８℃でゆっくりと混合物に加えた。３０分間撹拌してから、（Ｒ）−ｔｅｒｔ−ブチル４−ベンジル−２−イソプロピル−３−オキソピペラジン−１−カルボキシレート（７００ｍｇ、２．１１ｍｍｏｌ）を−７８℃で滴下した。この混合物を、−７８℃で３０分間撹拌した。この混合物を飽和ＮＨ４Ｃｌ水溶液（１０ｍＬ）でクエンチし、ＥｔＯＡｃ（３×１０ｍＬ）で抽出した。合わせた有機層をブライン（１０ｍＬ）で洗浄し、無水Ｎａ２ＳＯ４で脱水し、濾過し、濃縮し、１／１の石油エーテル／ＥｔＯＡｃを用いた分取ＴＬＣで精製して、白色固体として、ｔｅｒｔ−ブチル２−イソプロピル−３−オキソピペラジン−１−カルボキシレート（３００ｍｇ、収率５９％）を得た。この生成物はラセミ混合物であることが分かった。ラセミ化の原因は検討しなかった。LC-MS m/z 187.1 [M-56+H]+, 265.1 [M+Na]+.  1H NMR (CDCl3400MHz): δ 6.29 (s, 1H), 4.55-3.99 (m, 2H), 3.51-3.36 (m, 1H), 3.32-3.12 (m, 2H), 2.34-2.29 (m, 1H), 1.46 (s, 9H), 1.09 (d, J = 6.8Hz, 3H), 0.99 (d, J = 7.2Hz, 3H).
ステップ５：
【０１３５】
【化１８】
2019023196.tif 000026
【０１３６】
ｔｅｒｔ−ブチル２−イソプロピル−３−オキソピペラジン−１−カルボキシレート（２００ｍｇ、０．８３ｍｍｏｌ）を入れたＮＭＰ（３ｍＬ）溶液に、２−ブロモ−４−（メチルスルホニル）アニリン（２０７ｍｇ、０．８３ｍｍｏｌ）、（１Ｒ，２Ｓ）−Ｎ１，Ｎ２−ジメチルシクロヘキサン−１，２−ジアミン（１２．０ｍｇ、０．０８ｍｍｏｌ）、Ｋ３ＰＯ４．３Ｈ２Ｏ（６６０ｍｇ、２．４８ｍｍｏｌ）及びＣｕｌ（１６ｍｇ、０．０８ｍｍｏｌ）を加えた。この混合物を、マイクロ波オーブン中で１５０℃で１時間撹拌した。この混合物を水（１０ｍＬ）で希釈し、ＥｔＯＡｃ（３×１０ｍＬ）で抽出した。合わせた有機層をブライン（１０ｍＬ）で洗浄し、無水Ｎａ２ＳＯ４で脱水し、濾過し、濃縮し、３５／１のＣＨ２Ｃｌ２／ＭｅＯＨを用いる分取ＴＬＣで精製して、白色固体として、ｔｅｒｔ−ブチル１−イソプロピル−７−（メチルスルホニル）−３，４−ジヒドロベンゾ［４，５］イミダゾ［１，２−ａ］ピラジン−２（１Ｈ）−カルボキシレート（１１０ｍｇ、収率３４％）を得た。LC-MS m/z 394.1 [M+H]+.  1H NMR (CDCl3400MHz): δ 7.94 (s, 1H), 7.83-7.76 (m, 2H), 5.35-5.17 (m, 1H), 4.73-4.42 (m, 1H), 4.22-4.12 (m, 1H), 4.11-3.99 (m, 1H), 3.53-3.37 (m, 1H), 3.03 (s, 3H), 2.38-2.27 (m, 1H), 1.42 (s, 9H), 1.19 (d, J = 6.8Hz, 3H), 0.97 (d, J = 6.8Hz, 3H).
ステップ６：
【０１３７】
【化１９】
2019023196.tif 000027
【０１３８】
ｔｅｒｔ−ブチル１−イソプロピル−７−（メチルスルホニル）−３，４−ジヒドロベンゾ［４，５］イミダゾ［１，２−ａ］ピラジン−２（１Ｈ）−カルボキシレート（２０．ｍｇ、０．０５ｍｍｏｌ）をＣＨ２Ｃｌ２（１ｍＬ）に入れた溶液に、ＴＦＡ（０．３ｍＬ）をＮ２下で加えた。この混合物を室温で１時間撹拌した。この混合物を濃縮して、黄色固体として、１−イソプロピル−７−（メチルスルホニル）−１，２，３，４−テトラヒドロベンゾ［４，５］イミダゾ［１，２−ａ］ピラジン（２０ｍｇ、ＴＦＡ塩、収率１００％）を得た。これ以上精製せずに、これを次のステップに使用した。ＬＣ−ＭＳ  ｍ／ｚ３５２．１［Ｍ＋Ｈ］＋。
【０１３９】
ステップ７：
【０１４０】
【化２０】
2019023196.tif 000028
【０１４１】
１−イソプロピル−７−（メチルスルホニル）−１，２，３，４−テトラヒドロベンゾ［４，５］イミダゾ［１，２−ａ］ピラジン（１５ｍｇ、０．０５ｍｍｏｌ）をＤＭＳＯ（３ｍＬ）に入れた溶液に、２−クロロ−４−（トリフルオロメチル）ピリミジン（１９ｍｇ、０．１０ｍｍｏｌ）及びＤＩＥＡ（２０ｍｇ、０．１５ｍｍｏｌ）をＮ２下で加えた。この混合物を１００℃で２時間撹拌した。水（１０ｍＬ）を加え、ＥｔＯＡｃ（３×１０ｍＬ）で混合物を抽出した。合わせた有機層をブライン（１０ｍＬ）で洗浄し、無水Ｎａ２ＳＯ４で脱水し、濾過し、濃縮し、次いで分取ＴＬＣによって精製して、白色固体として、１−イソプロピル−７−（メチルスルホニル）−２−（４−（トリフルオロメチル）ピリミジン−２−イル）−１，２，３，４−テトラヒドロベンゾ［４，５］イミダゾ［１，２−ａ］ピラジン（５．１０ｍｇ、収率２３％）を得た。LC-MS m/z 440.2 (MH+).
1H NMR (CDCI3400MHz): δ 8.58 (d, J = 4.8Hz, 1H), 8.01 (d, J = 0.8Hz, 1H), 7.90-7.81 (m, 2H), 6.89 (d, J = 4.8Hz, 1H), 6.12 (d, J = 8.0Hz, 1H), 5.39 (dd, J = 4.0及び14.0Hz, 1H), 4.34-4.30 (m, 1H), 4.23-4.16 (m, 1H), 3.83-3.75 (m, 1H), 3.09 (s, 3H), 2.55-2.49 (m, 1H), 1.33 (d, J = 6.8Hz, 3H), 1.09 (d, J = 6.8Hz, 3H).
【実施例２】
【０１４２】
（Ｒ）−（１−イソプロピル−７−（メチルスルホニル）−２−（４−（トリフルオロメチル）ピリミジン−２−イル）−１，２，３，４−テトラヒドロベンゾ［４，５］イミダゾ［１，２−ａ］ピラジン−８−イル）メタノール、及び（Ｓ）−（１−イソプロピル−７−（メチルスルホニル）−２−（４−（トリフルオロメチル）ピリミジン−２−イル）−１，２，３，４−テトラヒドロベンゾ［４，５］イミダゾ［１，２−ａ］ピラジン−８−イル）メタノール
【０１４３】
【化２１】
2019023196.tif 000029
【０１４４】
ステップ１：
【０１４５】
【化２２】
2019023196.tif 000030
【０１４６】
Ｃｂｚ−Ｄ−バリン（５００ｇ、１．９９ｍｏｌ）とＮ−メチルモルホリン（２０１．８ｇ、１．９９ｍｏｌ）を無水ＴＨＦ（８Ｌ）に入れた溶液を−１５℃に冷却し、ｉ−ブチルクロロホルメート（ｃｈｌｏｒｏｆｏｍａｔｅ）（２９９ｇ、２．１９ｍｏｌ）を、撹拌しながら滴下した。３０分後、１−アミノ−２，２−ジメトキシエタン（ｄｉｍｅｔｈｙｏｘｙｅｔｈａｎｅ）（２０９．５ｇ、１．９９ｍｏｌ）をＴＨＦ（１Ｌ）に入れた溶液をゆっくりと加え、−１５℃で２時間温度を維持した。この反応混合物をブライン（２Ｌ）で洗浄し、有機相を濃縮して、ＴＨＦを除去した。残留物を、ＥｔＯＡｃ（４Ｌ）で希釈し、１Ｎ  ＨＣｌ水溶液（２×２Ｌ）、飽和ＮａＨＣＯ３水溶液（２Ｌ）及び飽和Ｎａ２ＣＯ３水溶液（２Ｌ）並びにブライン（１．５Ｌ）で洗浄した。Ｎａ２ＳＯ４で脱水してから、減圧下で有機溶媒を除去して、白色固体として、（Ｒ）−ベンジル（１−（（２，２−ジメトキシエチル）アミノ）−３−メチル−１−オキソブタン−２−イル）カルバミン酸を得た（６７０ｇ、収率９９．５％）。これ以上精製せずに、これを次のステップに使用した。LC-MS m/z 360.9 [M+Na]+.
1H NMR (CD3OD 300MHz): δ 7.35-7.30 (m, 5H), 5.08 (s, 2H), 4.45-4.35 (m, 1H), 3.
95-3.85 (m, 1H), 3.34-3.25 (m, 8H), 2.10-1.90 (m, 1H), 0.94-0.91 (m, 6H).
ステップ２：
【０１４７】
【化２３】
2019023196.tif 000031
【０１４８】
（Ｒ）−ベンジル（１−（（２，２−ジメトキシエチル）アミノ）−３−メチル−１−オキソブタン−２−イル）カルバミン酸（３３５ｇ、０．９９ｍｏｌ）を、冷却したＴＦＡ−Ｈ２Ｏ（温度＜５℃、ＶＴＦＡ／ＶＨ２Ｏ＝７／３、２Ｌ）に少しずつ添加し、この溶液を室温で１２時間撹拌した。この溶液を、撹拌中の冷却した飽和Ｎａ２ＣＯ３水溶液（２．５Ｌ）にゆっくりと加えて、ｐＨ＞８に保った。混合物をＥｔＯＡｃ（５×２Ｌ）で抽出した。合わせた有機層を、ブライン（２Ｌ）で洗浄し、無水Ｎａ２ＳＯ４で脱水し、濾過し、真空下で蒸発させて、白色固体として、（Ｒ）−ベンジル２−イソプロピル−３−オキソ−３，４−ジヒドロピラジン−１（２Ｈ）−カルボキシレートを得た（２５９ｇ、９５．４％）。これ以上精製せずに、これを次のステップに使用した。LC-MS m/z 274.9 [M+H]+.1H NMR (CD3OD 300MHz): δ7.36-7.34 (m, 5H), 6.33-6.30 (m, 1H), 5.79-5.68 (m, 1H), 5.26-5.13 (m, 2H), 4.38-4.29 (m, 1H), 2.01-1.96 (m, 1H), 1.00-0.84 (m, 6H).
ステップ３：
【０１４９】
【化２４】
2019023196.tif 000032
【０１５０】
（Ｒ）−ベンジル２−イソプロピル−３−オキソ−３，４−ジヒドロピラジン−１（２Ｈ）−カルボキシレート（４００ｇ、１．４６ｍｏｌ）をＤＣＥ（２Ｌ）に入れた撹拌溶液に、Ｅｔ３ＳｉＨ（４２４ｇ、３．６５ｍｏｌ）及びＴＦＡ（６６５ｇ、５．８ｍｏｌ）を室温で加えた。この反応物を、還流させながら３６時間撹拌した。室温まで冷却させてから、この溶液を濃縮して溶媒を除去した。残留物を、ＥｔＯＡｃ（２Ｌ）で希釈し、撹拌中の冷却した飽和ＮａＨＣＯ３水溶液（２Ｌ）にゆっくりと加えて、確実にｐＨ＞８にした。混合物をＥｔＯＡｃ（２×２．５Ｌ）で抽出した。合わせた有機層を、ブラインで洗浄し、無水Ｎａ２ＳＯ４で脱水し、濾過し、濃縮して、（Ｒ）−ベンジル２−イソプロピル−３−オキソピペラジン−１−カルボキシレート（４０２ｇ、収率９９．７５％）を得た。これ以上精製せずに、これを次のステップに使用した。LC-MS m/z 276.9 [M+H]+.1H NMR (DMSO-d6400MHz): δ 7.93 (s, 1H), 7.39-7.31 (m, 5H), 5.09 (s, 2H), 4.06-4.01 (m, 1H), 3.99-3.92 (m, 1H), 3.23-3.14 (m, 3H), 2.20-2.12 (m, 1H), 0.96-0.94 (m, 3H), 0.85 (d, J = 6.0Hz, 3H).
ステップ４：
【０１５１】
【化２５】
2019023196.tif 000033
【０１５２】
（Ｒ）−ベンジル２−イソプロピル−３−オキソピペラジン−１−カルボキシレート（
５０ｇ、０．１８１ｍｏｌ）をＭｅＯＨ（８００ｍＬ）に入れたものを含む１Ｌの丸底フラスコに、Ｐｄ／Ｃ（無水、１５％ｗ／ｗ、５ｇ）を加えた。この混合物を、Ｈ２（１ａｔｍ）下で室温で一晩撹拌した。ＴＬＣ及びＬＣ−ＭＳによって出発材料が消費されたことが示された時に、（Ｂｏｃ）２Ｏ（７６．７４ｇ、０．３５２ｍｏｌ）をこの反応混合物に加えた、この混合物を、中間体の（Ｒ）−３−イソプロピルピペラジン−２−オンがなくなるまで、室温で一晩撹拌した。この混合物を濾過し、真空下で濃縮した。残留物をシリカゲルによるカラムクロマトグラフィー（石油：ＥｔＯＡｃ＝３：１で溶出）で精製して、白色固体として、（Ｒ）−ｔｅｒｔ−ブチル２−イソプロピル−３−オキソピペラジン−１−カルボキシレートを得た（２６ｇ、収率６１％）。
【０１５３】
（Ｒ）−３−イソプロピルピペラジン−２−オンについては：
LC-MS m/z 143.2 [M+H]+.1H NMR (HCl塩, CD3OD 400MHz): δ 3.95 (d, J = 3.6Hz, 1H),
3.65-3.39 (m, 4H), 2.63-2.54 (m, 1H), 1.15 (d, J = 6.8Hz, 3H), 1.09 (d, J = 7.2Hz, 3H).
（Ｒ）−ｔｅｒｔ−ブチル２−イソプロピル−３−オキソピペラジン−１−カルボキシレートについては：
LC-MS m/z 186.9 [M-56+H]+.  1H NMR (DMSO-d6400MHz): δ 7.93 (s, 1H), 4.02-3.82 (m, 2H), 3.17-3.15 (m, 3H), 2.16 (s, 1H), 1.41 (s, 9H), 0.98 (d, J = 6.8Hz, 3H), 0.89 (d, J = 6.4Hz, 3H).
ステップ５：
【０１５４】
【化２６】
2019023196.tif 000034
【０１５５】
Ｎ２雰囲気下で、ＮａＨ（８．８ｇ、０．２２ｍｏｌ、鉱油中６０％、１．１ｅｑ．）を、（Ｒ）−ｔｅｒｔ−ブチル２−イソプロピル−３−オキソピペラジン−１−カルボキシレート（２６．６６ｇ、０．１１ｍｏｌ）をＤＭＦ（３００ｍＬ）に入れたものを含む１Ｌの３つ口フラスコに、−１０℃で少しずつ添加した。この混合物を、−１０℃で３０分間撹拌した。次いでこの混合物を、メチル２，４−ジフルオロ−５−ニトロ安息香酸（２６．３ｇ、０．１２１ｍｏｌ、１．１ｅｑ．）をＤＭＦ（２００ｍＬ）に入れたものを含む１Ｌの３つ口フラスコに、−２０℃で１０分かけて滴下した。滴下後に、生成した混合物を、−２０℃から−３０℃の間でさらに１０分間撹拌した。この反応を飽和ＮＨ４Ｃｌ水溶液（２００ｍＬ）、次いで水（８００ｍＬ）でクエンチした。水性層をＥｔＯＡｃ（３×１Ｌ）で抽出した。合わせた有機層を、水（３×１Ｌ）及びブラインで洗浄し、無水Ｎａ２ＳＯ４で脱水した。この混合物を濾過し、濾液を真空下で蒸発させた。残留物を８：１〜４：１の石油エーテル／ＥｔＯＡｃで溶出するシリカゲルによるカラムクロマトグラフィーで精製して、黄色固体として、（Ｒ）−ｔｅｒｔ−ブチル４−（５−フルオロ−４−（メトキシカルボニル）−２−ニトロフェニル）−２−イソプロピル−３−オキソピペラジン−１−カルボキシレート（３２ｇ、収率６６．３％）を得た。LC-MS MS (ESI) m/z 384.1 [M - 56 +H]+, 462.1 [M + Na]+.1H NMR (CDCl3 300MHz): δ 8.63 (d, J = 6.9Hz, 1H), 7.16 (d, J = 10.2Hz, 1H), 4.61-4.30 (m, 2H), 3.97-3.89 (m, 4H), 3.62-3.48 (m, 2H), 2.40-2.34 (m, 1H), 1.49 (s, 9H), 1.08 (d, J = 6.9Hz, 3H), 1.01 (d, J = 6.9Hz, 3H).
ステップ６：
【０１５６】
【化２７】
2019023196.tif 000035
【０１５７】
（Ｒ）−ｔｅｒｔ−ブチル４−（５−フルオロ−４−（メトキシカルボニル）−２−ニトロフェニル）−２−イソプロピル−３−オキソピペラジン−１−カルボキシレートを含む１Ｌの丸底フラスコに、ＮａＳＭｅ（１４．３ｇ、０．２０４ｍｍｏｌ、３ｅｑ．）を加えた。この混合物を室温で１時間撹拌した。水（５００ｍＬ）を加え、この混合物を真空下で濃縮して、ＴＨＦを除去した。水性層をＥｔＯＡｃ（３×８００ｍＬ）で抽出した。合わせた有機層をブラインで洗浄し、無水Ｎａ２ＳＯ４で脱水し、濾過し、真空下で濃縮して、黄色固体として、（Ｒ）−ｔｅｒｔ−ブチル２−イソプロピル−４−（４−（メトキシカルボニル）−５−（メチルチオ）−２−ニトロフェニル）−３−オキソピペラジン−１−カルボキシレート（３１．９ｇ、収率１００％）を得た。これ以上精製せずに、この残留物を次のステップに直接に使用した。ＬＣ−ＭＳ  ＭＳ（ＥＳＩ）  ｍ／ｚ４１２．１［Ｍ−５６＋Ｈ］＋、４９０．２［Ｍ＋Ｎａ］＋。
【０１５８】
ステップ７：
【０１５９】
【化２８】
2019023196.tif 000036
【０１６０】
（Ｒ）−ｔｅｒｔ−ブチル２−イソプロピル−４−（４−（メトキシカルボニル）−５−（メチルチオ）−２−ニトロフェニル）−３−オキソピペラジン−１−カルボキシレート（粗製９１．７ｇ、０．１９６ｍｏｌ）をＣＨ２Ｃｌ２（１Ｌ）に入れたものを含む２Ｌの丸底フラスコに、ｍ−ＣＰＢＡ（８４．６ｇ、０．４９ｍｍｏｌ、２．５ｅｑ）を加えた。この混合物を、室温で一晩撹拌した。飽和Ｎａ２Ｓ２Ｏ３溶液をゆっくりと加えて、反応をクエンチした。混合物をＣＨ２Ｃｌ２（４×３Ｌ）で抽出した。合わせた有機層を、Ｎａ２Ｓ２Ｏ３溶液（５００ｍＬ）、ＮａＨＣＯ３溶液（５００ｍＬ）及びブラインで連続的に洗浄し、無水Ｎａ２ＳＯ４で脱水し、濾過し、真空下で濃縮した。残留物を、ジクロロメタンで溶出するシリカゲルによるカラムクロマトグラフィーで精製して、黄色固体として、（Ｒ）−ｔｅｒｔ−ブチル２−イソプロピル−４−（４−（メトキシカルボニル）−５−（メチルスルホニル）−２−ニトロフェニル）−３−オキソピペラジン−１−カルボキシレート（８３．７ｇ、収率８５．４％）を得た。LC-MS MS (ESI) m/z 444.0
[M - 56 + H]+, 522.1 [M + Na]+.1H NMR (CDCl3 300MHz): δ 8.29 (s, 1H), 8.12 (s,
1H), 4.61-4.17 (m, 2H), 4.00-3.94 (m, 4H), 3.70-3.60 (m, 1H), 3.51-3.43 (m, 4H), 2.39-2.32 (m, 1H), 1.50 (s, 9H), 1.07 (d, J = 6.9Hz, 3H), 1.01 (d, J = 6.9Hz, 3H).
ステップ８：
【０１６１】
【化２９】
2019023196.tif 000037
【０１６２】
（Ｒ）−ｔｅｒｔ−ブチル２−イソプロピル−４−（４−（メトキシカルボニル）−５−（メチルスルホニル）−２−ニトロフェニル）−３−オキソピペラジン−１−カルボキシレート（２６．３ｇ、０．０５２６ｍｏｌ）をＴＨＦ（２００ｍＬ）とメタノール（２００ｍＬ）に入れたものを含む１Ｌの丸底フラスコに、ラネーニッケル（Ｈ２Ｏ中、４ｇ）を加えた。この混合物を、Ｈ２（３０ｐｓｉ）下で、室温で一晩撹拌した。混合物を濾過し、真空下で濃縮して、黄色固体として、（Ｒ）−ｔｅｒｔ−ブチル４−（２−アミノ−４−（メトキシカルボニル）−５−（メチルスルホニル）フェニル）−２−イソプロピル−３−オキソピペラジン−１−カルボキシレート（２４．７ｇ、収率１００％）を得た。これ以上精製せずに、この残留物を次のステップに直接使用した。LC-MS MS (ESI) m/z 414.0 [M - 56 + H]+, 492.0 [M + Na]+.1H NMR (CDCl3 300MHz): δ 7.77 (brs, 1H), 7.04 (s, 1H), 4.68-4.45 (m, 1H), 4.45-4.38 (m, 2H), 3.92 (s, 3H), 3.70-3.58 (m, 1H), 3.58-3.41 (m, 1H), 3.30 (s, 3H), 2.49-2.25 (m,1H), 1.50 (s, 9H), 1.12 (d, J = 6.9Hz, 3H), 1.05 (d, J = 6.9Hz, 3H).
ステップ９：
【０１６３】
【化３０】
2019023196.tif 000038
【０１６４】
（Ｒ）−ｔｅｒｔ−ブチル４−（２−アミノ−４−（メトキシカルボニル）−５−（メチルスルホニル）フェニル）−２−イソプロピル−３−オキソピペラジン−１−カルボキシレート（２５ｇ、０．０５３２ｍｏｌ）をジクロロメタン（５００ｍＬ）に入れたものを含む１Ｌの丸底フラスコに、Ｅｔ３Ｎ（６４．５ｇ、０．６３８ｍｏｌ、１２ｅｑ．）及びＳｉＣｌ４（２７．１ｇ、０．１６０ｍｏｌ、３ｅｑ．）を加えた。この混合物を室温で一晩撹拌した。この混合物を、ＮａＨＣＯ３水溶液（水１Ｌ中５４．１ｇ、０．６４４ｍｏｌ、１２．１ｅｑ．）に０℃でゆっくりと滴下し、ｐＨ＝８に調整した。この混合物を濾過し、水性層をジクロロメタン（３×６００ｍＬ）で抽出した。合わせた有機層をブラインで洗浄し、次いで無水Ｎａ２ＳＯ４で脱水した。この混合物を濾過し、真空下で濃縮して、残留物を得た。この残留物を、２：１の石油エーテル／ＥｔＯＡｃで溶出するシリカゲルによるクロマトグラフィーで精製して、淡黄色固体として、（Ｒ）−２−ｔｅｒｔ−ブチル８−メチル１−イソプロピル−７−（メチルスルホニル）−３，４−ジヒドロベンゾ［４，５］イミダゾ［１，２−ａ］ピラジン−２，８（１Ｈ）−ジカルボキシレート（１３．２ｇ、収率５５％）を得た。分析的キラルＨＰＬＣ：１５分のクロマトグラフィーでｔＲ＝９．０３分（方法：ＯＤ−３＿３＿５＿４０＿２．５ＭＬ）。LC-MS MS (ESI) m/z 452.2 [M + H]+.1H NMR (CD3OD 400MHz): δ 8.31 (s, 1H), 8.01 (s, 1H), 5.30-5.18 (m, 1H), 4.70-4.52 (m, 1H), 4.47 (dd, J = 3.2及び12.4Hz, 1H), 4.18 (dt, J = 5.2及び11.6Hz, 1H), 3.98 (s, 3H), 3.70-3.52 (m, 1H), 3.44 (s, 3H), 2.50-2.38 (m,1H), 1.53 (s, 9H), 1.25 (d, J = 6.8Hz, 3H), 1.06 (d, J = 6.8Hz, 3H).
ステップ１０：
【０１６５】
【化３１】
2019023196.tif 000039
【０１６６】
ＴＦＡ（４ｍＬ）を、（Ｒ）−２−ｔｅｒｔ−ブチル８−メチル１−イソプロピル−７−（メチルスルホニル）−３，４−ジヒドロベンゾ［４，５］イミダゾ［１，２−ａ］ピ
ラジン−２，８（１Ｈ）−ジカルボキシレート（２．０ｇ、４．４ｍｍｏｌ）をＤＣＭ（２０ｍＬ）に入れたものを含む溶液に、２分かけて室温で滴下した。この混合物を３時間室温で撹拌した。ＴＬＣによって、出発材料が完全に消費されたことが示された。溶媒を真空中で３０℃で除去し、次いでＤＣＭ（１０ｍＬ）を加えた。この混合物を飽和ＮａＨＣＯ３水溶液でｐＨ＝７に中和した。混合物をＤＣＭ（３×２０ｍＬ）で抽出し、合わせた有機層を無水Ｎａ２ＳＯ４で脱水し、濾過し、真空下で濃縮して、白色固体として、（Ｒ）−メチル１−イソプロピル−７−（メチルスルホニル）−１，２，３，４−テトラヒドロベンゾ［４，５］イミダゾ［１，２−ａ］ピラジン−８−カルボキシレート（１．５ｇ、収率９６．４％）を得た。LC-MS m/z 351.9 [M+H]+, 374.0 [M+Na]+.  1H NMR (CDCl3300MHz): δ 8.15 (s, 1H), 8.07 (s, 1H), 4.26-4.05 (m, 3H), 3.97 (s, 3H), 3.63-3.50 (m, 1H), 3.44 (s, 3H), 3.32-3.16 (m, 1H), 2.85-2.66 (m, 1H), 1.16 (d, J = 6.9Hz, 3H), 0.88 (d, J = 6.6Hz, 3H).
ステップ１１：
【０１６７】
【化３２】
2019023196.tif 000040
【０１６８】
（Ｒ）−メチル１−イソプロピル−７−（メチルスルホニル）−１，２，３，４−テトラヒドロベンゾ［４，５］イミダゾ［１，２−ａ］ピラジン−８−カルボキシレート（０．９ｇ、２．５６ｍｍｏｌ）と２−クロロ−４−（トリフルオロメチル）ピリミジン（１．０ｇ、５．１ｍｍｏｌ、２ｅｑ．）とＤＩＥＡ（１．０ｇ、７．７ｍｍｏｌ、３ｅｑ．）とをｉ−ＰｒＯＨ（６ｍＬ）に入れた混合物を、マイクロ波（ｍｉｃｒｏｖａｖｅ）オーブン中で、１５０℃で２時間撹拌した。ＴＬＣによって、出発材料が完全に消費されたことが示された（ＰＥ：ＥｔＯＡｃ＝３：１）。溶媒を真空中で４０℃で除去し、残留物を、ＰＥ／ＥｔＯＡｃ＝６／１で溶出するシリカゲルによるカラムクロマトグラフィーで精製して、白色固体として、（Ｒ）−メチル１−イソプロピル−７−（メチルスルホニル）−２−（４−（トリフルオロメチル）ピリミジン−２−イル）−１，２，３，４−テトラヒドロベンゾ［４，５］イミダゾ［１，２−ａ］ピラジン−８−カルボキシレート（１．０ｇ、収率７８％）を得た。LC-MS m/z 498.1 [M+H]+.  1H NMR (CDCl3300MHz): δ 8.52 (d, J = 4.8Hz, 1H), 8.13 (s, 1H), 8.06 (s, 1H), 6.83 (d, J = 4.8Hz, 1H), 6.06 (d, J = 7.8Hz,1H), 5.39-5.28 (m, 1H), 4.33-4.24 (m, 1H), 4.20-4.12 (m, 1H), 3.93 (s, 3H), 3.77-3.65 (m, 1H), 3.39 (s, 3H), 2.52-2.38 (m, 1H), 1.25 (d, J = 6.9Hz, 3H), 1.02 (d, J = 6.6Hz, 3H).
ステップ１２：
【０１６９】
【化３３】
2019023196.tif 000041
【０１７０】
（Ｒ）−メチル１−イソプロピル−７−（メチルスルホニル）−２−（４−（トリフルオロメチル）ピリミジン−２−イル）−１，２，３，４−テトラヒドロベンゾ［４，５］イミダゾ［１，２−ａ］ピラジン−８−カルボキシレート（１．３ｇ、２．６ｍｍｏｌ）を入れたＤＣＭ（１５ｍＬ）の溶液に、ＤＩＢＡＬ−Ｈ（トルエン中１Ｍ、１０．４ｍＬ
、１０．４ｍｍｏｌ、４ｅｑ．）を−７８℃で加えた。この混合物を、−７８℃で２時間撹拌した。飽和ＮＨ４Ｃｌ水溶液（２５ｍＬ）を加え、この混合物を濾過した。水性層をＤＣＭ（３×２０ｍＬ）で抽出した。合わせた有機層をブラインで洗浄し、無水Ｎａ２ＳＯ４で脱水し、濾過し、真空下で濃縮した。残留物を、ＤＣＭ／ＭｅＯＨ＝３０／１で溶出するシリカゲルによるカラムクロマトグラフィーで精製して、白色固体として、部分的にラセミ化した混合物（１．１ｇ、収率９１．６％）を得た。このラセミ化した混合物を、キラルカラムによるＳＦＣ分離によって精製して、白色固体として、（Ｒ）−（１−イソプロピル−７−（メチルスルホニル）−２−（４−（トリフルオロメチル）ピリミジン−２−イル）−１，２，３，４−テトラヒドロベンゾ［４，５］イミダゾ［１，２−ａ］ピラジン−８−イル）メタノール（アイソマー１）（０．６５ｇ、収率５４．１％）を、及び白色固体として、（Ｓ）−（１−イソプロピル−７−（メチルスルホニル）−２−（４−（トリフルオロメチル）ピリミジン−２−イル）−１，２，３，４−テトラヒドロベンゾ［４，５］イミダゾ［１，２−ａ］ピラジン−８−イル）メタノール（アイソマー２）（０．１５ｇ、収率１２．５％）を得た。
【０１７１】
アイソマー１：（Ｒ）−（１−イソプロピル−７−（メチルスルホニル）−２−（４−（トリフルオロメチル）ピリミジン−２−イル）−１，２，３，４−テトラヒドロベンゾ［４，５］イミダゾ［１，２−ａ］ピラジン−８−イル）メタノール：
分析的キラルＨＰＬＣ：１５分のクロマトグラフィーでｔＲ＝８．７６８分（方法：ＡＤ−Ｈ＿５＿５＿４０＿２．３５ＭＬ）。LC-MS m/z 470.1 [M+H]+.  1H NMR (CDCl3400MHz): δ 8.58 (d, J = 4.8Hz, 1H), 8.13 (s, 1H), 7.89 (s, 1H), 6.89 (d, J = 4.8Hz, 1H), 6.12 (d, J = 8.0Hz, 1H), 5.40-5.36 (m, 1H), 5.06-5.03 (m, 2H), 4.35-4.31 (m, 1H), 4.21-4.16 (m, 1H), 3.82-3.76 (m, 1H), 3.23 (s, 3H), 3.09 (t, J = 6.8Hz, 1H), 2.52-2.50 (m, 1H), 1.32 (d, J = 6.8Hz, 3H), 1.08 (d, J = 6.8Hz, 3H).1H NMR (CD3OD 400MHz): δ 8.69 (d, J = 4.8Hz, 1H), 8.22 (s, 1H), 7.94 (s, 1H), 7.02 (d, J = 4.8Hz, 1H), 6.05 (d, J = 8.0Hz, 1H), 5.34 (d, J = 10.0Hz, 1H), 5.10 (s, 2H), 4.50 (dd, J1 = 12.0Hz, J2 = 3.6Hz, 1H), 4.22 (td, J1= 12.0Hz, J2 = 5.2Hz, 1H), 3.88 (dddd, J1 = 14.4Hz, J2= 10.0Hz, J3 = 4.4Hz, 1H), 3.26 (s, 3H), 2.60 - 2.52 (m, 1H), 1.28 (d, J = 6.8Hz, 3H), 1.06 (d, J = 6.8Hz, 3H).
アイソマー１を以下の方法によって結晶性固体として再結晶した。
【０１７２】
（Ｒ）−（１−イソプロピル−７−（メチルスルホニル）−２−（４−（トリフルオロメチル）ピリミジン−２−イル）−１，２，３，４−テトラヒドロベンゾ［４，５］イミダゾ［１，２−ａ］ピラジン−８−イル）メタノール（４７０ｍｇ）をＥｔＯＡｃ（３．０ｍＬ）に溶解し、それに続いて、ヘキサン（約５ｍＬ）を、溶液が混濁するまでゆっくりと加えた。ＥｔＯＡｃを数滴加えて、混濁を消した。結晶が形成されるまでこの溶液を室温で静置した。結晶固体は、濾過によって収集した。融点は１８８〜１８９℃。
【０１７３】
アイソマー２：（Ｓ）−（１−イソプロピル−７−（メチルスルホニル）−２−（４−（トリフルオロメチル）ピリミジン−２−イル）−１，２，３，４−テトラヒドロベンゾ［４，５］イミダゾ［１，２−ａ］ピラジン−８−イル）メタノール：
分析的キラルＨＰＬＣ：１５分のクロマトグラフィーでｔＲ＝７．７８０分（方法：ＡＤ−Ｈ＿５＿５＿４０＿２．３５ＭＬ）。LC-MS m/z 470.1 [M+H]+.  1H NMR (CDCl3400MHz): δ 8.58 (d, J = 5.2Hz, 1H), 8.12 (s, 1H), 7.88 (s, 1H), 6.89 (d, J = 4.8Hz, 1H), 6.11 (d, J = 8.0Hz, 1H), 5.40-5.35 (m, 1H), 5.04-5.00 (m, 2H), 4.34-4.31 (m, 1H), 4.21-4.16 (m, 1H), 3.82-3.75 (m, 1H), 3.22 (s, 3H), 2.52-2.50 (m, 1H), 1.31 (d, J = 6.8Hz, 3H), 1.08 (d, J = 6.8Hz, 3H).
あるいは、メチル１−イソプロピル−７−（メチルスルホニル）−２−（４−（トリフルオロメチル）ピリミジン−２−イル）−１，２，３，４−テトラヒドロベンゾ［４，５］イミダゾ［１，２−ａ］ピラジン−８−カルボキシレートのラセミ混合物は、以下の方法で調製した。
【０１７４】
（ｒａｃ）−メチル１−イソプロピル−７−（メチルスルホニル）−２−（４−（トリフルオロメチル）ピリミジン−２−イル）−１，２，３，４−テトラヒドロベンゾ［４，５］イミダゾ［１，２−ａ］ピラジン−８−カルボキシレート
【０１７５】
【化３４】
2019023196.tif 000042
【０１７６】
ステップ１：
【０１７７】
【化３５】
2019023196.tif 000043
【０１７８】
（Ｒ）−３−イソプロピルピペラジン−２−オン塩酸塩（２．６１ｇ、１４．６２ｍｍｏｌ）及びｉＰｒ２ＮＥｔ（７．６０ｍＬ、４３．８６ｍｍｏｌ）を入れたＤＭＦ（２０ｍＬ）溶液に、２−クロロ−４−（トリフルオロメチル）ピリミジン（３．４７ｇ、１９．００ｍｍｏｌ）をＤＭＦ（２ｍＬ）に入れた溶液を加えた。生成した溶液を、Ｎ２下で３時間、１００℃で撹拌し、その時点で、ＬＣ−ＭＳによって反応が完全に完了したとみなされた。飽和ＮＨ４Ｃｌ水溶液（３０ｍＬ）を加えて反応をクエンチし、それに続いてＥｔＯＡｃ（３０ｍＬ）を加えた。ＥｔＯＡｃ層を分離し、水性層をＥｔＯＡｃ（３×２０ｍＬ）で抽出した。ＥｔＯＡｃ層を混合し、Ｎａ２ＳＯ４を使用して乾燥させ、蒸発させて、ほとんど純粋な粗生成物を得た。１００％ＥｔＯＡｃで溶出するＩＳＣＯ  ＦＣＣを使用するシリカカートリッジによる精製によって、わずかにオレンジ色の濃い油として、４．０３グラムの（Ｒ）−３−イソプロピル−４−（４−（トリフルオロメチル）ピリミジン−２−イル）ピペラジン−２−オン（９６％）を得た。LC-MS m/z 289.17 [M + H]+.1H NMR (CDCl3, 400MHz): δ 8.52 (d, J = 4.8Hz, 1H), 6.82 (d, J = 4.4Hz, 1H), 6.56 (br, 1H), 5.20 (d, J = 6.8Hz, 1H), 4.83-4.77 (m, 1H), 3.55-3.37 (m, 3H), 2.49-2.41 (m, 1H), 1.15 (d, J = 6.8Hz, 3H), 1.04 (d, J = 6.8Hz, 3H).
ステップ２及び３：
【０１７９】
【化３６】
2019023196.tif 000044
【０１８０】
（Ｒ）−３−イソプロピル−４−（４−（トリフルオロメチル）ピリミジン−２−イル）ピペラジン−２−オン（９８６ｍｇ、３．４２ｍｍｏｌ）をＤＭＦ（５ｍＬ）に入れた溶液に、ＫＯｔＢｕをＴＨＦ（２．１４ｍＬ、４．２８ｍｍｏｌ）に入れた２Ｍの溶液を、０℃で滴下した。この反応物を０℃で１時間撹拌し、次いで−７８℃まで冷却した。別のフラスコで、メチル２，４−ジフルオロ−５−ニトロ安息香酸（９２８ｍｇ、４．２８ｍｍｏｌ）をＤＭＦ（１５ｍＬ）に入れた溶液を−７８℃に冷却した。この溶液に、上記のアニオンの溶液を、カニューレを介して−７８℃で５分かけて加えた。この反応物を−５０℃まで温め、この温度で２時間撹拌した。飽和ＮＨ４Ｃｌ水溶液（２０ｍＬ）を加えて反応をクエンチし、それに続いてＥｔＯＡｃ（３０ｍＬ）を加えた。ＥｔＯＡｃ層を分離し、水性層をＥｔＯＡｃ（３×１５ｍＬ）で抽出した。ＥｔＯＡｃ層を混合し、乾燥させ、蒸発させて、粗製の（Ｒ）−メチル−２−フルオロ−４−（３−イソプロピル−２−オキソ−４−（４−（トリフルオロメチル）ピリミジン−２−イル）ピペラジン−１−イル）−５−ニトロ安息香酸を得た。これ以上精製せずに、これを、次のステップに直接用いた。
ＬＣ−ＭＳ  ｍ／ｚ４８６．２０［Ｍ＋Ｈ］＋
上記の粗製の（Ｒ）−メチル２−フルオロ−４−（３−イソプロピル−２−オキソ−４−（４−（トリフルオロメチル）ピリミジン−２−イル）ピペラジン−１−イル）−５−ニトロ安息香酸をＤＭＦ（１５ｍＬ）に入れた溶液に、ＮａＳＯ２Ｍｅ（１．０５ｇ、１０．３０ｍｍｏｌ）を一度に室温で加えた。３時間撹拌後に、ＬＣ−ＭＳ分析によって反応が完全に完了したとみなされた。水（１００ｍＬ）を加え、混合物を勢いよく２０分間撹拌してから、固形物質を濾別した。この固形物質に２０％ＥｔＯＡｃのヘキサン溶液を加え、この混合物を、勢いよく１０分間撹拌した。ＥｔＯＡｃ／ヘキサン濾液を収集し、蒸発させて、灰白色固体として、１．４５ｇの（Ｒ）−メチル４−（３−イソプロピル−２−オキソ−４−（４−（トリフルオロメチル）ピリミジン−２−イル）ピペラジン−１−イル）−２−（メチルスルホニル）−５−ニトロ安息香酸を得た（７８％、２ステップ）。LC-MS m/z 546.27 [M + H]+.1H NMR (CDCl3, 400MHz): δ 8.59 (d, J = 4.4Hz, 1H), 8.32 (s, 1H), 8.14 (s, 1H), 6.92 (d, J = 5.2Hz, 1H), 5.32 (d, J = 6.8Hz, 1H), 5.04-5.00 (m, 1H), 4.12-4.02 (m, 1H), 4.03 (s, 3H), 3.88-3.80 (m, 2H), 3.44 (s, 3H), 2.55-2.50 (m, 1H), 1.15 (d, J = 6.8Hz, 3H), 1.06 (d, J = 6.8Hz, 3H).
ステップ４：
【０１８１】
【化３７】
2019023196.tif 000045
【０１８２】
（Ｒ）−メチル−４−（３−イソプロピル−２−オキソ−４−（４−（トリフルオロメチル）ピリミジン−２−イル）ピペラジン−１−イル）−２−（メチルスルホニル）−５−ニトロ安息香酸（１．４５ｇ、２．６６ｍｍｏｌ）を氷酢酸（１７ｍＬ）に入れた溶液に、鉄粉末（４４５ｍｇ、７．９７ｍｍｏｌ）を加えた。この混合物を１００℃まで加熱した。５分後に、懸濁した鉄は溶液に溶解した。この混合物を１００℃で４８時間撹拌し、その時点でフラスコを室温まで冷却し、内容物を氷中に注いだ。混合物をＥｔＯＡｃ（２×７５ｍＬ）で抽出し、次いで、合わせた有機層を水（２×５０ｍＬ）及びブライン（５０ｍＬ）で洗浄した。この溶液をＭｇＳＯ４で脱水し、綿を通して濾過し、真空濃縮した。残留物をシリカカートリッジ（０％ＥｔＯＡｃのヘキサン、次いで５０％）によって精製して、ラセミ混合物（５１％）として、６８０ｍｇのメチル−１−イソプロピル−７−（メチルスルホニル）−２−（４−（トリフルオロメチル）ピリミジン−２−イル）−１，２，３，４−テトラヒドロベンゾ［４，５］イミダゾ［１，２−ａ］ピラジン−８−カルボキシレートを得た。LC-MS: m/z 498.32 (M + H]+.1H NMR (CDCl3, 400MHz):  δ8.58 (d, J = 4.8Hz, 1H), 8.20 (s, 1H), 8.12 (s, 1H), 6.90 (d, J = 4.8Hz, 1H), 6. 13 (d, J = 8.4Hz, 1H), 5.39 (dd, J = 4.8Hz, 14.4Hz, 1H), 4.35 (ddd, J = 1.2Hz, 4.4Hz, 12.0Hz, 1H), 4.21 (dt, J = 4.8Hz, 12.0Hz, 1H), 4.00 (s, 3H), 3.78 (ddd, J = 4.4Hz, 11.6Hz, 14.4Hz, 1H), 3.45 (s, 3H), 2.48 (sept, J = 7.2Hz, 1H), 1.32 (d, J = 6.4Hz, 3H), 1.08 (d, J = 6.8Hz, 3H).
【実施例３】
【０１８３】
（Ｒ）−１−イソプロピル−７−（メチルスルホニル）−２−（４−（トリフルオロメチル）ピリミジン−２−イル）−１，２，３，４−テトラヒドロピラジノ［１，２−ａ］インドール、及び（Ｓ）−１−イソプロピル−７−（メチルスルホニル）−２−（４−（トリフルオロメチル）ピリミジン−２−イル）−１，２，３，４−テトラヒドロピラジノ［１，２−ａ］インドール
【０１８４】
【化３８】
2019023196.tif 000046
【０１８５】
ステップ１：
【０１８６】
【化３９】
2019023196.tif 000047
【０１８７】
６−ブロモ−１Ｈ−インドール（５ｇ、２５．５０ｍｍｏｌ）を無水ＴＨＦ（６０ｍＬ）に入れた溶液に、ＫＨ（６．８０ｇ、５１．００ｍｍｏｌ、鉱油中３０％ｗｔ）を０℃で加えた。３０分間撹拌してから、この混合物を−７８℃に冷却し、ｔ−ＢｕＬｉ（３９．２３ｍＬ、５１．０ｍｍｏｌ、１．３Ｍ）を窒素下で加えた。３０分後、１，２−ジメチルジスルファン（４．８０ｇ、５１．０ｍｍｏｌ）を混合物に加えた。この反応混合物を−７８℃で１時間撹拌し、飽和ＮＨ４Ｃｌ水溶液（３０ｍＬ）を用いて−７８℃でゆっくりとクエンチし（注意：炎）、１Ｎリン酸水溶液でｐＨ＝７を調整し、ＥｔＯＡｃ（５０ｍＬ×３）で抽出した。合わせた有機層を無水Ｎａ２ＳＯ４で脱水し、濾過し、濃縮し、（石油エーテル／ＥｔＯＡｃ  １０：１）で溶出されるシリカゲルによるカラムクロマトグラフィーによって精製して、灰色固体として、６−（メチルチオ）−１Ｈ−インドール（３．９ｇ、収率９３．６７％）を得た。LC-MS MS (ESI) m/z 164.1 [M + H]+.1H NMR (CDCl3400MHz): δ 8.14 (brs, 1H), 7.56 (d, J = 8.0Hz, 1H), 7.37 (s, 1H), 7.18-7.11 (m, 1H), 6.56-6.51 (m, 1H), 2.52 (s, 3H).
ステップ２：
【０１８８】
【化４０】
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【０１８９】
６−（メチルチオ）−１Ｈ−インドール（１ｇ、６．１３ｍｍｏｌ）とＮａＯＨ（４．９０ｇ、１２２．６ｍｍｏｌ）とＢｕ４ＮＨＳＯ４（２０７．８ｍｇ、０．６１３ｍｍｏｌ）とをジクロロメタン（２０ｍＬ）に入れた溶液に、ベンゼンスルホニルクロリド（１．２９ｇ、７．３６ｍｍｏｌ）を加えた。この反応混合物を室温で一晩撹拌した。この混合物を、水（３０ｍＬ）でクエンチし、ＣＨ２Ｃｌ２（３０ｍＬ×３）で抽出した。合わせた有機層を無水Ｎａ２ＳＯ４で脱水し、濾過し、濃縮して、（石油エーテル／ＥｔＯＡｃ  １０：１）で溶出されるシリカゲルによるカラムクロマトグラフィーによって精製して、白色固体として６−（メチルチオ）−１−（フェニルスルホニル）−１Ｈ−インドール（１．１ｇ、収率５９．１８％）を得た。LC-MS MS (ESI) m/z 304.0 [M + H]+.1H NMR (CDCl3400MHz): δ 7.93-7.75 (m, 3H), 7.58-7.41 (m, 5H), 7.17 (dd, J1 = 8.0Hz, J2 = 1.6Hz, 1H), 6.63-6.60 (m, 1H), 2.53 (s, 3H).
ステップ３：
【０１９０】
【化４１】
2019023196.tif 000049
【０１９１】
６−（メチルチオ）−１−（フェニルスルホニル）−１Ｈ−インドール（８９０ｍｇ、２．９３ｍｍｏｌ）を無水ＴＨＦ（１０ｍＬ）に入れた溶液に、ｎ−ＢｕＬｉ（５．８６ｍＬ、１４．６５ｍｍｏｌ、２．５Ｍ）を窒素下０℃で加えた。３０分間撹拌してから、イソブチルアルデヒド（１．０５ｇ、１４．６５ｍｍｏｌ）を加えた。この反応混合物を０℃で１時間撹拌し、飽和ＮＨ４Ｃｌ水溶液（１０ｍＬ）を用いて０℃でクエンチし、ＥｔＯＡｃ（２０ｍＬ×３）で抽出した。合わせた有機層を無水硫酸ナトリウムで脱水し、濾過し、濃縮し、（石油エーテル／ＥｔＯＡｃ  ２０：１）で溶出されるシリカゲルによるクロマトグラフィーによって精製して、無色の油として、２−メチル−１−（６−（メチルチオ）−１Ｈ−インドール−２−イル）プロパン−１−オン（４４０ｍｇ、収率６４．２８％）を得た。
LC-MS MS (ESI) m/z 234.1 [M + H]+.1H NMR (CDCl3 400MHz): δ 8.86 (brs, 1H), 7.52
(d, J = 8.4Hz, 1H), 7.19 (s, 1H), 7.14-7.11 (m, 1H), 7.01 (dd, J1 = 8.4Hz, J2= 1.6, 1H), 3.42-3.38 (m, 1H), 2.47 (s, 3H), 1.20 (d, J = 6.8Hz, 6H).
ステップ４：
【０１９２】
【化４２】
2019023196.tif 000050
【０１９３】
２−メチル−１−（６−（メチルチオ）−１Ｈ−インドール−２−イル）プロパン−１−オン（６００ｍｇ、２．５７ｍｍｏｌ）とＢｕ４ＮＢｒ（４．１２ｇ、１２．８５ｍｍｏｌ）とを９Ｎ  ＮａＯＨ（１０ｍＬ、冷却）に入れた溶液に、ｔｅｒｔ−ブチル（２−ブロモエチル）カルバミン酸（２．８７ｇ、１２．８５ｍｍｏｌ）を加えた。この反応混合物を室温で７２時間撹拌した。この混合物を０℃で水（２０ｍＬ）で希釈し、ＥｔＯＡｃ（２０ｍＬ×３）で抽出した。合わせた有機層を無水Ｎａ２ＳＯ４で脱水し、濾過し、濃縮し、（石油エーテル／ＥｔＯＡｃ  １０：１）で溶出するシリカゲルによるカラムクロマトグラフィーによって精製し、無色の油として、ｔｅｒｔ−ブチル（２−（２−イソブチリル−６−（メチルチオ）−１Ｈ−インドール−１−イル）エチル）カルバミン酸（２００ｍｇ、収率２０．６６％）を得た。LC-MS MS (ESI) m/z 321.1 [M -56 + H]+, 277.1 [M - 100 + H]+.1H NMR (CDCl3 400MHz): δ 7.57 (d, J = 8.4Hz, 1H), 7.38 (s, 1H), 7.29 (s, 1H), 7.10 (d, J = 8.4Hz, 1H), 4.80 (brs, 1H), 4.62 (t, J = 6.4Hz, 2H), 3.58-3.42 (m, 3H), 2.58 (s, 3H), 1.38 (s, 9H), 1.24 (d, J = 6.8Hz, 6H).
ステップ５：
【０１９４】
【化４３】
2019023196.tif 000051
【０１９５】
ｔｅｒｔ−ブチル（２−（２−イソブチリル−６−（メチルチオ）−１Ｈ−インドール−１−イル）エチル）カルバミン酸（２００ｍｇ、０．５３ｍｍｏｌ）を入れたＣＨ２Ｃｌ２（９ｍＬ）溶液に、ＴＦＡ（１ｍＬ）を０℃で加えた。この反応混合物を室温で１時間撹拌した。この混合物を濃縮し（Ｔ＜２５℃）、水（５ｍＬ）で処理し、飽和ＮａＨＣＯ３でｐＨ＝１１に調整し、ＥｔＯＡｃ（２０ｍＬ×３）で抽出した。合わせた有機層を、無水Ｎａ２ＳＯ４で脱水し、濾過し、濃縮して、無色の油として、１−（１−（２−アミノエチル）−６−（メチルチオ）−１Ｈ−インドール−２−イル）−２−メチルプロパン−１−オン（２１０ｍｇ、収率１００％）を得た。ＬＣ−ＭＳ  ＭＳ（ＥＳＩ）、ｍ／ｚ２５８．８［Ｍ−１８＋Ｈ］＋。
【０１９６】
ステップ６：
【０１９７】
【化４４】
2019023196.tif 000052
【０１９８】
１−（１−（２−アミノエチル）−６−（メチルチオ）−１Ｈ−インドール−２−イル）−２−メチルプロパン−１−オン（２００ｍｇ、０．７２４ｍｍｏｌ）をＭｅＯＨ（５ｍＬ）に入れた溶液に、Ｅｔ３Ｎ（２１９．３ｍｇ、２．１７２ｍｍｏｌ）を加えた。この反応混合物を６０℃で１時間撹拌した。ＮａＢＨ４（８２．５３ｍｇ、２．１７２ｍｍｏｌ）を加えた。この混合物を６０℃で１時間撹拌した。この混合物を濃縮し、水（１０ｍＬ）で処理し、ＥｔＯＡｃ（２０ｍＬ×３）で抽出した。合わせた有機層を、無水Ｎａ２ＳＯ４で脱水し、濾過し、濃縮し、（石油エーテル／ＥｔＯＡｃ  １：１）で溶出されるシリカゲルによる分取ＴＬＣで精製して、無色の油として、１−イソプロピル−７−（メチルチオ）−１，２，３，４−テトラヒドロピラジノ［１，２−ａ］インドール（８０ｍｇ、収率４２．４６％、０℃で保管）を得た。
【０１９９】
１−イソプロピル−７−メチルスルファニル−３，４−ジヒドロ−ピラジノ［１，２−ａ］インドールのＬＣ−ＭＳ  ＭＳ（ＥＳＩ）  ｍ／ｚ２５９．１［Ｍ＋Ｈ］＋。１−イソプロピル−７−（メチルチオ）−１，２，３，４−テトラヒドロピラジノ［１，２−ａ］インドールのＬＣ−ＭＳ  ＭＳ（ＥＳＩ）  ｍ／ｚ２６１．２［Ｍ＋Ｈ］＋。1H NMR (CDCl3 400MHz): δ 7.41 (d, J = 8.4Hz, 1H), 7.20 (s, 1H), 7.05 (dd, J1 = 8.4Hz, J2 = 1.6Hz, 1H), 6.12 (s, 1H), 4.02-3.97 (m, 2H), 3.86-3.80 (m, 1H), 3.46-3.42 (m, 1H), 3.16-3.10 (m, 1H), 2.48 (s, 3H), 2.32-2.27 (m, 1H), 1.09 (d, J = 6.8Hz, 3H), 0.86 (d, J = 6.8Hz, 3H).
ステップ７：
【０２００】
【化４５】
2019023196.tif 000053
【０２０１】
１−イソプロピル−７−（メチルチオ）−１，２，３，４−テトラヒドロピラジノ［１，２−ａ］インドール（５０ｍｇ、０．１９ｍｍｏｌ）を入れたｉＰｒＯＨ（２ｍＬ）溶液に、２−クロロ−４−（トリフルオロメチル）ピリミジン（１０５ｍｇ、０．５８ｍｍｏｌ）とＤＩＥＡ（１８５ｍｇ、０．９６ｍｍｏｌ）とを加えた。この混合物を１００℃で４時間撹拌した。この混合物を真空下で濃縮し、残留物を分取ＴＬＣによって精製して、黄色油として、１−イソプロピル−７−（メチルチオ）−２−（４−（トリフルオロメチル）ピリミジン−２−イル）−１，２，３，４−テトラヒドロピラジノ［１，２−ａ］インドール（４５ｍｇ、収率５７．７％）を得た。ＬＣ−ＭＳ  ＭＳ（ＥＳＩ）  ｍ／ｚ４０７．１［Ｍ＋Ｈ］＋。
【０２０２】
ステップ８：
【０２０３】
【化４６】
2019023196.tif 000054
【０２０４】
１−イソプロピル−７−（メチルチオ）−１，２，３，４−テトラヒドロピラジノ［１，２−ａ］インドール（４５ｍｇ、０．１１ｍｍｏｌ）をＭｅＯＨ（１ｍＬ）に入れた溶液に、ＮａＭｏＯ４−２Ｈ２Ｏ（６１ｍｇ、０．３３ｍｍｏｌ）と３０％Ｈ２Ｏ２（６７ｍｇ、０．５５ｍｍｏｌ）を０℃で加えた。この混合物を室温で２時間撹拌した。飽和Ｎａ２Ｓ２Ｏ３（５ｍＬ）を加え、この混合物を真空下で濃縮した。水性層をＥｔＯＡｃ（３×１０ｍＬ）で抽出した。合わせた有機層をブラインで洗浄し、無水Ｎａ２ＳＯ４で脱水し、濾過し、真空下で濃縮した。残留物を分取ＴＬＣ及びキラルカラムによるＳＦＣ分離によって精製して、白色固体としてアイソマー１（２０．１０ｍｇ、収率４６．６％）を、及び白色固体としてアイソマー２（２０．３０ｍｇ、収率４７．１％）を得た。
【０２０５】
アイソマー１：分析的キラルＨＰＬＣ：１５分のクロマトグラフィーでｔＲ＝６．６４分（方法：ＡＤ−Ｈ＿５＿５＿４０＿２．３５ＭＬ）。LC-MS MS (ESI) m/z 439.0 [M + H]+.1H NMR (CD3OD 300MHz): δ 8.63 (d, J = 4.8Hz, 1H), 7.98 (s, 1H), 7.69 (d, J = 8.4Hz, 1H), 7.57 (dd, J = 1.5及び8.4Hz, 1H), 6.94 (d, J = 4.8Hz, 1H), 6.50 (s,
1H), 5.88 (d, J = 8.4Hz, 1H), 5.11-5.07 (m, 1H), 4.45-4.38 (m, 1H), 4.05 (dt, J
= 4.8及び11.4Hz, 1H), 3.91-3.83 (m, 1H), 3.11 (s, 3H), 2.35-2.27 (m, 1H), 1.14 (d, J = 6.6Hz, 3H), 1.01 (d, J = 6.6Hz, 3H).
アイソマー２：分析的キラルＨＰＬＣ：１５分のクロマトグラフィーでｔＲ＝７．３７分（方法：ＡＤ−Ｈ＿５＿５＿４０＿２．３５ＭＬ）。LC-MS MS (ESI) m/z 439.0 [M + H]+, 461.0 [M + Na]+.1H NMR (CD3OD 300MHz): δ 8.63 (d, J = 4.5Hz, 1H), 7.98 (s,
1H), 7.68 (d, J = 8.4Hz, 1H), 7.57 (dd, J = 1.5及び8.4Hz, 1H), 6.94 (d, J = 4.8Hz, 1H), 6.49 (s, 1H), 5.87 (d, J = 8.1Hz, 1H), 5.10-5.06 (m, 1H), 4.44-4.37 (m, 1H), 4.03 (dt, J = 4.8及び11.4Hz, 1H), 3.90-3.80 (m, 1H), 3.11 (s, 3H), 2.34-2.26 (m, 1H), 1.14 (d, J = 6.6Hz, 3H), 1.00 (d, J = 6.6Hz, 3H).
【実施例４】
【０２０６】
（Ｒ）−（１−イソプロピル−７−（メチルスルホニル）−２−（４−（トリフルオロメチル）ピリミジン−２−イル）−１，２，３，４−テトラヒドロピラジノ［１，２−ａ］インドール−８−イル）メタノール及び（Ｓ）−（１−イソプロピル−７−（メチルスルホニル）−２−（４−（トリフルオロメチル）ピリミジン−２−イル）−１，２，３，４−テトラヒドロピラジノ［１，２−ａ］インドール−８−イル）メタノール
【０２０７】
【化４７】
2019023196.tif 000055
【０２０８】
ステップ１：
【０２０９】
【化４８】
2019023196.tif 000056
【０２１０】
エチル４−アミノ−２−フルオロ安息香酸（１２ｇ、６５．５ｍｍｏｌ）を入れたＤＭＦ（１００ｍＬ）溶液に、ＮａＳＭｅ（９．１７ｇ、１３１ｍｍｏｌ）を加え、この混合物を６０℃で２０時間撹拌した。室温まで冷却させてから、この反応物をＨ２Ｏで希釈し、ＥｔＯＡｃ（３×１００ｍＬ）で抽出した。合わせた有機相をブラインで洗浄し、無水Ｎａ２ＳＯ４で脱水し、濾過し、真空濃縮して、エチル４−アミノ−２−（メチルチオ）安息香酸を得た。
【０２１１】
エチル４−アミノ−２−（メチルチオ）安息香酸（６５ｍｍｏｌ）を入れた、前もって温めておいた６０℃の酢酸（１５０ｍＬ）溶液に、ＩＣｌ／ＡｃＯＨ溶液（１Ｍ、７２ｍＬ、７２ｍｍｏｌ）を４０分間滴下し、６０℃で３時間温度を維持した。室温まで冷却させてから、この反応物をＥｔＯＡｃ（５００ｍＬ）で希釈し、５％Ｎａ２Ｓ２Ｏ３溶液（３×１００ｍＬ）及びブライン（２００ｍＬ）で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで脱水し、濾過し、真空濃縮した。この粗生成物をシリカゲルクロマトグラフィー（０〜２０％ＥｔＯＡｃ／ヘキサン）によって精製して、エチル４−アミノ−５−ヨード−２−（メチルチオ）安息香酸（１３．６７ｇ、収率５３％）を得た。
【０２１２】
エチル４−アミノ−２−（メチルチオ）安息香酸について：ＬＣ−ＭＳ  ｍ／ｚ２１２［Ｍ＋Ｈ］＋。エチル４−アミノ−５−ヨード−２−（メチルチオ）安息香酸について：LC-MS m/z 338 [M+H]+.  1H NMR (400MHz, CDCl3): δ 8.29 (s, 1H), 6.47 (s, 1H), 4.49 (br s, 2H), 4.31 (q, J = 7.2Hz, 2H), 2.38 (s, 3H), 1.37 (t, J = 7.2Hz, 3H).
ステップ２：
【０２１３】
【化４９】
2019023196.tif 000057
【０２１４】
エチル４−アミノ−５−ヨード−２−（メチルチオ）安息香酸（１３．６ｇ、４０ｍｍｏｌ）をＤＣＭ（１００ｍＬ）に入れた溶液に、Ｅｔ３Ｎ（１３．８ｍＬ、１００ｍｍｏｌ）を、それに続いてＭｓＣｌ（７．７ｍＬ、１００ｍｍｏｌ）を０℃で加えた。加えてから、この混合物を室温で２時間撹拌した。１Ｎ  ＨＣｌ溶液（５０ｍＬ）を混合物に加え、水相をＤＣＭ（１×１００ｍＬ）で抽出した。有機溶液をブラインで洗浄し、無水Ｎａ２ＳＯ４で脱水し、濾過し、真空濃縮して、エチル５−ヨード−４−（Ｎ−（メチルスルホニル）メチルスルホンアミド）−２−（メチルチオ）安息香酸を得た。
【０２１５】
上記の粗反応混合物を１００ｍＬのＴＨＦに溶解した。この溶液にＴＢＡＦのＴＨＦ（１Ｍ、１００ｍＬ）溶液を加え、この混合物を室温で２時間撹拌した。Ｈ２Ｏをこの混合物に加え、水相をＥｔＯＡｃ（３×１００ｍＬ）で抽出した。合わせた有機溶液をブラインで洗浄し、無水Ｎａ２ＳＯ４で脱水し、濾過し、真空濃縮して、エチル５−ヨード−４−（メチルスルホンアミド）−２−（メチルチオ）安息香酸を得た。これ以上精製せずに、これを次のステップに使用した。エチル５−ヨード−４−（Ｎ−（メチルスルホニル）メチルスルホンアミド）−２−（メチルチオ）安息香酸については：ＬＣ−ＭＳ  ｍ／ｚ４９４［Ｍ＋Ｈ］＋。エチル５−ヨード−４−（メチルスルホンアミド）−２−（メチルチオ）安息香酸については：ＬＣ−ＭＳ  ｍ／ｚ４１５［Ｍ＋Ｈ］＋。
【０２１６】
ステップ３：
【０２１７】
【化５０】
2019023196.tif 000058
【０２１８】
エチル５−ヨード−４−（メチルスルホンアミド）−２−（メチルチオ）安息香酸（粗
製、ステップ２由来）を無水トルエン（２００ｍＬ）に入れた溶液に、ジイソブチルアルミニウムヒドリド（トルエン中１．０Ｍ、１００ｍＬ、１００ｍｍｏｌ）を０℃でゆっくりと加えた。加えてから、この混合物を０℃で３時間撹拌し、メタノール／Ｈ２Ｏ（１／１）でクエンチした。この反応混合物を、勢いよく撹拌される酒石酸カリウムナトリウム溶液（１Ｍ、３００ｍＬ）に注ぎ、勢いよく２時間撹拌し、その後これは、はっきりした２つの相に定まった。有機層を分離し、水層をＥｔＯＡｃ（３×２００ｍＬ）で抽出した。合わせた有機溶液をブラインで洗浄し、無水硫酸ナトリウムで脱水し、濾過し、真空濃縮した。この粗生成物を、シリカゲルクロマトグラフィー（０〜４０％ＥｔＯＡｃ／ヘキサン）によって精製して、Ｎ−（４−（ヒドロキシメチル）−２−ヨード−５−（メチルチオ）フェニル）メタンスルホンアミド（１１．９ｇ、２ステップに対して収率８０％）を得た。LC-MS m/z 356 [M+H]+.  1H NMR (400MHz, CDCl3): δ 7.82 (s, 1H), 7.49 (s, 1H), 4.67 (s, 2H), 2.99 (s, 3H), 2.50 (s, 3H).
ステップ４：
【０２１９】
【化５１】
2019023196.tif 000059
【０２２０】
Ｎ−（４−（ヒドロキシメチル）−２−ヨード−５−（メチルチオ）フェニル）メタンスルホンアミド（６．４ｇ、１７．２ｍｍｏｌ）とイミダゾール（１．７６ｇ、２５．８ｍｍｏｌ）を入れたＣＨ２Ｃｌ２（１００ｍＬ）とＤＭＦ（５０ｍＬ）との撹拌溶液に、ｔｅｒｔ−ブチルジフェニルシリルクロリド（５．８ｍＬ、２２．４ｍｍｏｌ）を０℃で加えた。この混合物を室温で一晩撹拌した。この混合物をＣＨ２Ｃｌ２（１００ｍＬ）で希釈し、１Ｎ  ＨＣｌ溶液、飽和ＮａＨＣＯ３水溶液及びブラインで洗浄し、無水Ｎａ２ＳＯ４で脱水し、濾過し、真空濃縮して、Ｎ−（４−（（（ｔｅｒｔ−ブチルジフェニルシリル）オキシ）メチル）−２−ヨード−５−（メチルチオ）フェニル）メタンスルホンアミドを得た。これ以上精製せずに、これを次のステップに使用した。
【０２２１】
粗製のＮ−（４−（（（ｔｅｒｔ−ブチルジフェニルシリル）オキシ）メチル）−２−ヨード−５−（メチルチオ）フェニル）メタンスルホンアミドとｍＣＰＢＡ（８．９ｇ、５１．６ｍｍｏｌ）をＣＨ２Ｃｌ２（１００ｍＬ）に入れた懸濁液を、２時間室温で撹拌した。飽和ＮａＨＣＯ３水溶液（５０ｍＬ）とＮａ２Ｓ２Ｏ３（５０ｍＬ）とを加え、層を分離した。水性層をＣＨ２Ｃｌ２（２×１００ｍＬ）で抽出した。合わせた有機層を、無水Ｎａ２ＳＯ４で脱水し、濾過し、減圧下で濃縮した。残留物を、ＥｔＯＡｃ／ヘキサン（３／７）で溶出するシリカゲルのフラッシュクロマトグラフィーによって精製して、Ｎ−（４−（（（ｔｅｒｔ−ブチルジフェニルシリル）オキシ）メチル）−２−ヨード−５−（メチルスルホニル）フェニル）メタンスルホンアミド（８．８ｇ、２ステップに対して収率８０％）を得た。Ｎ−（４−（（（ｔｅｒｔ−ブチルジフェニルシリル）オキシ）メチル）−２−ヨード−５−（メチルチオ）フェニル）メタンスルホンアミドについて：ＬＣ−ＭＳ  ｍ／ｚ６１２［Ｍ＋Ｈ］＋。Ｎ−（４−（（（ｔｅｒｔ−ブチルジフェニルシリル）オキシ）メチル）−２−ヨード−５−（メチルスルホニル）フェニル）メタンスルホンアミドについて：LC-MS m/z 644 [M+H]+.  1H NMR (400MHz, CDCl3): δ 8.25 (s, 1H), 8.08 (s, 1H), 7.67 - 7.65 (m, 4H), 7.46 - 7.37 (m, 6H), 6.77 (s, 1H), 5.05 (s, 2H), 3.11 (s, 3H), 2.83 (s, 3H), 1.12 (s, 9H).
ステップ５：
【０２２２】
【化５２】
2019023196.tif 000060
【０２２３】
ＰｄＣｌ２（ＰＰｈ３）２（２７７ｍｇ、０．３８ｍｍｏｌ）及びＣｕＩ（７３ｍｇ、０．３８ｍｍｏｌ）を、Ｎ−（４−（（（ｔｅｒｔ−ブチルジフェニルシリル）オキシ）メチル）−２−ヨード−５−（メチルスルホニル）フェニル）メタンスルホンアミド（２．４５ｇ、３．８ｍｍｏｌ）を入れたＴＨＦ（２０ｍＬ）とＥｔ３Ｎ（１０ｍＬ）の溶液に加えた。この混合物を１０分間窒素でパージし、それに続いて、４−メチルペンタ−１−イン−３−オール（７４５ｍｇ、７．６ｍｍｏｌ）を加え、６５℃で８時間撹拌した。この反応混合物をＥｔＯＡｃ（５０ｍＬ）で希釈し、１Ｎ  ＨＣｌ（５０ｍＬ）で洗浄した。有機層を分離し、水層をＥｔＯＡｃ（３×５０ｍＬ）で抽出した。合わせた有機溶液をブラインで洗浄し、無水硫酸ナトリウムで脱水し、濾過し、減圧下で濃縮した。残留物を、ＥｔＯＡｃ／ヘキサン（３／７）で溶出するシリカゲルのフラッシュクロマトグラフィーによって精製して、１−（５−（（（ｔｅｒｔ−ブチルジフェニルシリル）オキシ）メチル）−１，６−ビス（メチルスルホニル）−１Ｈ−インドール−２−イル）−２−メチルプロパン−１−オール（２．１ｇ、収率９０％）を得た。LC-MS m/z 614 [M+H]+.  1H NMR (400MHz, CDCl3): δ 8.68 (s, 1H), 7.90 (s, 1H), 7.71 - 7.67 (s, 4H), 7.46 - 7.35 (m, 6H), 6.77 (s, 1H), 5.21 (d, J = 3.2Hz, 2H), 6.94 (t, J = 6.8Hz, 1H), 3.22 (s, 3H), 2.90 (s, 3H), 2.61 (d, J = 6.8Hz, 1H), 2.37 - 2.32 (m, 1H), 1.12 (s, 9H), 1.05 (d, J = 6.8Hz, 3H), 1.03 (d, J = 6.8Hz, 3H). 13C NMR (100MHz, CDCl3): δ 147.25, 135.54, 135.28, 135.00, 133.66, 133.00, 132.89, 129.96, 127.85, 121.68, 115.96, 108.69, 72.30, 62.98, 44.33, 41.59, 32.88, 26.89, 20.23, 19.30, 17.61.
ステップ６：
【０２２４】
【化５３】
2019023196.tif 000061
【０２２５】
１−（５−（（（ｔｅｒｔ−ブチルジフェニルシリル）オキシ）メチル）−１，６−ビス（メチルスルホニル）−１Ｈ−インドール−２−イル）−２−メチルプロパン−１−オール（２．３ｇ、３．８ｍｍｏｌ）を無水ＣＨ２Ｃｌ２（２５ｍＬ）に入れた撹拌溶液に、デス・マーチン・ペルヨージナン（ｐｅｒｉｏｄｉａｎｅ）（１．９４ｇ、４．５６ｍｍｏｌ）を一度に加えた。この混合物を室温で２時間撹拌した。この反応をＮａ２Ｓ２Ｏ３（３０ｍＬのＨ２Ｏ中５ｇ）と飽和ＮａＨＣＯ３水溶液（４０ｍＬ）の溶液でクエンチした。混合物をＥｔＯＡｃ（３×８０ｍＬ）で抽出した。合わせた有機溶液をブラインで洗浄し、無水Ｎａ２ＳＯ４で脱水し、濾過し、減圧下で濃縮した。残留物を、ＥｔＯＡｃ／ヘキサン（２／８）で溶出するシリカゲルのフラッシュクロマトグラフィーで精製して、１−（５−（（（ｔｅｒｔ−ブチルジフェニルシリル）オキシ）メチル）−１，６−ビス（メチルスルホニル）−１Ｈ−インドール−２−イル）−２−メチルプロパン−１−オン（２．０ｇ、収率８６％）を得た。LC-MS m/z 612 [M+H]+.  1H NMR (400MHz, CDCl3): δ 8.69 (s, 1H), 8.03 (s, 1H), 7.70 - 7.68 (m, 4H), 7.46 - 7.36 (m, 6H), 7.22 (s, 1H), 5.20 (s, 2H), 3.80 (s, 3H), 3.36 (m, 1H), 2.89 (s, 3H), 1.29 (d, J = 6.8Hz, 6H), 1.13 (s, 9H).  13C NMR (100MHz, CDCl3): δ 197.83, 141.53, 136.69, 136.05, 135.50, 135.04, 132.81, 131.14, 129.99, 127.88, 123.17, 117.12, 114.21, 62.87, 44.19, 44.03, 39.09, 26.88, 19.30, 18.41.
ステップ７：
【０２２６】
【化５４】
2019023196.tif 000062
【０２２７】
１−（５−（（（ｔｅｒｔ−ブチルジフェニルシリル）オキシ）メチル）−１，６−ビス（メチルスルホニル）−１Ｈ−インドール−２−イル）−２−メチルプロパン−１−オン（７８０ｍｇ、１．２７ｍｍｏｌ）をＴＨＦ／メタノール（１５ｍＬ／１５ｍＬ）に入れた撹拌溶液に、Ｃｓ２ＣＯ３（１．２５ｇ、３．８３ｍｍｏｌ）を一度に加えた。この混合物を室温で４時間撹拌し、真空濃縮して、粗生成物の１−（５−（（（ｔｅｒｔ−ブチルジフェニルシリル）オキシ）メチル）−６−（メチルスルホニル）−１Ｈ−インドール−２−イル）−２−メチルプロパン−１−オンを得た。これ以上精製せずに、これを次のステップの反応に使用した。粗製の１−（５−（（（ｔｅｒｔ−ブチルジフェニルシリル）オキシ）メチル）−６−（メチルスルホニル）−１Ｈ−インドール−２−イル）−２−メチルプロパン−１−オン、２−（Ｂｏｃ−アミノ）エチルブロマイド（２．８ｇ、１２ｍｍｏｌ）、ヨウ化テトラブチルアンモニウム（２３５ｍｇ、０．６３ｍｍｏｌ）をＣＨ２Ｃｌ２／トルエン（２ｍＬ／４ｍＬ）に入れた溶液に、４０％ＮａＯＨ水溶液（２０ｍＬ）を加えた。この混合物を室温で２０時間撹拌した。この反応混合物をＣＨ２Ｃｌ２（４０ｍＬ）で希釈し、Ｈ２Ｏ（５０ｍＬ）で洗浄した。有機層を分離し、水性層をＣＨ２Ｃｌ２（４×５０ｍＬ）で抽出した。合わせた有機溶液をブラインで洗浄し、無水硫酸ナトリウムで脱水し、濾過し、減圧下で濃縮した。残留物を、ＣＨ２Ｃｌ２／メタノール（９５／５）で溶出するシリカゲルのフラッシュクロマトグラフィーで精製して、ｔｅｒｔ−ブチル（２−（５−（（（ｔｅｒｔ−ブチルジフェニルシリル）オキシ）メチル）−２−イソブチリル−６−（メチルスルホニル）−１Ｈ−インドール−１−イル）エチル）カルバミン酸（３００ｍｇ、２ステップに対して収率３５％）を得た。
【０２２８】
１−（５−（（（ｔｅｒｔ−ブチルジフェニルシリル）オキシ）メチル）−６−（メチルスルホニル）−１Ｈ−インドール−２−イル）−２−メチルプロパン−１−オンについては：ＬＣ−ＭＳ  ｍ／ｚ５５６［Ｍ＋Ｎａ］＋。
【０２２９】
ｔｅｒｔ−ブチル（２−（５−（（（ｔｅｒｔ−ブチルジフェニルシリル）オキシ）メチル）−２−イソブチリル−６−（メチルスルホニル）−１Ｈ−インドール−１−イル）エチル）カルバミン酸については：LC-MS m/z 699 [M+Na]+.  1H NMR (400MHz, CDCl3): δ 8.20 (s, 1H), 7.93 (s, 1H), 7.72 (dd, J1 = 8.0Hz, J2 = 1.6Hz, 4H), 7.47 - 7.35 (m, 7H), 5.21 (s, 2H), 4.72 (d, J = 6.8Hz, 2H), 3.55 (d, J = 6.8Hz, 2H), 3.33 - 3.26 (m, 1H), 3.00 (s, 3H), 1.46 (s, 9H), 1.30 (d, J = 6.4Hz, 3H), 1.28 (d, J = 6.4Hz, 3H), 1.11 (s, 9H).
ステップ８：
【０２３０】
【化５５】
2019023196.tif 000063
【０２３１】
ｔｅｒｔ−ブチル（２−（５−（（（ｔｅｒｔ−ブチルジフェニルシリル）オキシ）メチル）−２−イソブチリル−６−（メチルスルホニル）−１Ｈ−インドール−１−イル）エチル）カルバミン酸（２５０ｍｇ、０．３７ｍｍｏｌ）をＣＨ２Ｃｌ２（５．０ｍＬ）に入れた溶液に、トリフルオロ酢酸（１．０ｍＬ）を加え、この混合物を室温で１時間撹拌した。過剰量のＴＦＡを、減圧下でトルエンと共に共沸蒸発して除去した。残留物をＣＨ２Ｃｌ２（５ｍＬ）に再溶解し、Ｅｔ３Ｎ（０．５ｍＬ）を加えた。この反応混合物を室温で４５分間撹拌し、真空濃縮した。残留物を、ＣＨ２Ｃｌ２／メタノール（９８／２）で溶出するシリカゲルのフラッシュクロマトグラフィーで精製して、８−（（（ｔｅｒｔ−ブチルジフェニルシリル）オキシ）メチル）−１−イソプロピル−７−（メチルスルホニル）−３，４−ジヒドロピラジノ［１，２−ａ］インドール（１３５ｍｇ、収率６５％）を得た。ＬＣ−ＭＳ  ｍ／ｚ５５９［Ｍ＋Ｈ］＋。
【０２３２】
ステップ９：
【０２３３】
【化５６】
2019023196.tif 000064
【０２３４】
８−（（（ｔｅｒｔ−ブチルジフェニルシリル）オキシ）メチル）−１−イソプロピル−７−（メチルスルホニル）−３，４−ジヒドロピラジノ［１，２−ａ］インドール（１４０ｍｇ、０．２５ｍｍｏｌ）と、１０％パラジウム炭素（ｐａｌｌａｄｉｕｍ  ｏｎ  ｃｈａｒｃｏａｌ）（３７ｍｇ、０．０２５ｍｍｏｌ）とメタノール（５ｍＬ）との溶液を、１気圧の水素下で室温で３時間撹拌した。この混合物を、Ｃｅｌｉｔｅ（登録商標）を通して濾過し、Ｃｅｌｉｔｅ（登録商標）をメタノールで十分に洗浄した。混合溶媒を減圧下で除去して、８−（（（ｔｅｒｔ−ブチルジフェニルシリル）オキシ）メチル）−１−イソプロピル−７−（メチルスルホニル）−１，２，３，４−テトラヒドロピラジノ［１，２−ａ］インドールを得た。これ以上精製せずに、これを直接的使用した。生成物のごく一部をクロマトグラフィーで精製して、特性評価した。LC-MS m/z 561 [M+H]+.  1H NMR (400MHz, CD3OD): δ 8.00 (s, 1H), 7.73 - 7.70 (m, 5H), 7.47 - 7.40 (m, 6H), 6.36 (s, 1H), 5.20 (d, J = 2.0Hz, 2H), 4.24 - 4.19 (m, 1H), 4.11 - 4.00 (m, 2H), 3.52 - 3.47 (m, 1H), 3.20 - 3.13 (m, 1H), 3.03 (s, 3H), 2.47 - 2.39 (m, 1H), 1.18 (d, J = 6.8Hz, 3H), 1.09 (s, 9H), 0.96 (d, J = 6.8Hz, 3H).13C NMR (100MHz, CDCl3): δ 143.06, 135.68, 134.04, 133.31, 131.52, 130.26, 129.79, 129.51, 127.77, 121.39, 111.22, 97.14, 63.76, 59.28, 45.00, 42.94, 42.47, 31.55, 26.94, 19.72, 19.31, 16.49.
ステップ１０：
【０２３５】
【化５７】
2019023196.tif 000065
【０２３６】
２−クロロ−４−（トリフルオロメチル）ピリミジン（８０ｍｇ、０．４４ｍｍｏｌ）と、８−（（（ｔｅｒｔ−ブチルジフェニルシリル）オキシ）メチル）−１−イソプロピル−７−（メチルスルホニル）−１，２，３，４−テトラヒドロピラジノ［１，２−ａ］インドール（粗製、ステップ９由来）と、ＤＩＥＡ（１１５μＬ、０．６６ｍｍｏｌ）と
をｉ−ＰｒＯＨ／ＣＨ２Ｃｌ２（２ｍＬ／１ｍＬ）に入れた混合物を、１１０℃で３０時間撹拌した。溶媒を減圧下除去し、粗残留物を、シリカクロマトグラフィー及びキラルカラムによるＳＦＣ分離によって精製して、（１−イソプロピル−７−（メチルスルホニル）−２−（４−（トリフルオロメチル）ピリミジン−２−イル）−１，２，３，４−テトラヒドロピラジノ［１，２−ａ］インドール−８−イル）メタノール（７５ｍｇ、２ステップに対して収率７２％）のアイソマーを得た。
【０２３７】
アイソマー１：分析的キラルＨＰＬＣ：ｔＲ＝１５分のクロマトグラフィーで１１．８分（方法：ＡＤ−Ｈ＿５＿５＿４０＿２．３５ＭＬ）。LC-MS m/z 469 [M+H]+.  1H NMR (400MHz, CD3OD): δ 8.65 (d, J = 4.8Hz, 1H), 8.10 (s, 1H), 7.78 (s, 1H), 6.95 (d, J = 4.8Hz, 1H), 6.52 (s, 1H), 5.91 - 5.89 (m, 1H), 5.14 - 5.09 (m, 1H), 5.06 (s, 2H), 4.47 - 4.42 (m, 1H), 4.12 - 4.05 (m, 1H), 3.94 - 3.86 (m, 1H), 3.26 (s, 3H), 2.37 - 2.29 (m, 1H), 1.17 (d, J = 6.8Hz, 3H), 1.03 (d, J = 6.8Hz, 3H).
アイソマー２：分析的キラルＨＰＬＣ：１５分のクロマトグラフィーでｔＲ＝９．７分（方法：ＡＤ−Ｈ＿５＿５＿４０＿２．３５ＭＬ）。LC-MS m/z 469 [M+H]+.  1H NMR (400MHz, CD3OD): δ 8.65 (d, J = 4.8Hz, 1H), 8.10 (s, 1H), 7.78 (s, 1H), 6.95 (d, J = 4.8Hz, 1H), 6.52 (s, 1H), 5.91 - 5.89 (m, 1H), 5.14 - 5.09 (m, 1H), 5.06 (s, 2H), 4.47 - 4.42 (m, 1H), 4.12 - 4.05 (m, 1H), 3.94 - 3.86 (m, 1H), 3.26 (s, 3H), 2.37 - 2.29 (m, 1H), 1.17 (d, J = 6.8Hz, 3H), 1.03 (d, J = 6.8Hz, 3H).
【実施例５】
【０２３８】
ＬＸＲα／β放射性リガンド結合アッセイ
本発明の化合物を競合結合アッセイで評価し、様々な濃度の化合物を、放射標識されたＬＸＲリガンドの［３Ｈ］ＴＯ９０１３１７の存在下で、ＬＸＲリガンド結合ドメイン（ＬＢＤ）と共にインキュベートした。［３Ｈ］Ｔ０９０１３１７と複合体形成したＬＸＲ−ＬＢＤの量を、ポリリジンでコーティングしたケイ酸イットリウムビーズへのＬＸＲ−ＬＢＤの非特異的結合を用いるシンチレーション近接アッセイ（ＳＰＡ）によって測定した。部分精製したＬＸＲα又はβのＬＢＤタンパク質（１５〜４５ｎＭ）を、９６ウェルプレート中において、２．５％ＤＭＳＯ、１％グリセロール、２ｍＭ  ＥＤＴＡ、２ｍＭ  ＣＨＡＰＳ及び５ｍＭ  ＤＴＴを含む８０μＬのリン酸緩衝食塩水（ＰＢＳ）緩衝液中で、１５ｎＭ［３Ｈ］ＴＯ９０１３１７（２５〜４０Ｃｉ／ｍｍｏｌ）及び様々な濃度の試験化合物と共に、室温で３０分間インキュベートした。ポリリジンＳＰＡビーズ（５０μｇ）を各ウェルに加え、総容積を１２０μＬに調整した。プレートを旋回シェーカー上で２０分間振盪し、次いで、あと１０分間室温で沈降させてから、２，０００ｒｐｍで１分間、短時間の遠心分離を行った。ＳＰＡのシグナルを、ＭｉｃｒｏＢｅｔａ（登録商標）液体シンチレーションカウンター（Ｐｅｒｋｉｎ  Ｅｌｍｅｒ、Ｗａｌｔｈａｍ、ＭＡ）で測定し、その結果を使用して、全結合（ＤＭＳＯコントロール）及び非特異的結合（５μＭの非標識ＴＯ９０１３１７）コントロールに基づいてＩＣ５０値を計算した。Ｋｉ値は、方程式１に従って計算し、［ＲＬ］は、アッセイにおける［３Ｈ］ＴＯ９０１３１７の終濃度であり、ＬＸＲα及びＬＸＲβのＬＢＤに対する、２０ｎＭ及び１０ｎＭのＴＯ９０１３１７のＫｄ値はそれぞれ、これらのタンパク質を用いた放射性リガンドの直接滴定によって決定した。
【０２３９】
【数１】
2019023196.tif 000066
【実施例６】
【０２４０】
ＬＸＲルシフェラーゼ転写レポーター遺伝子アッセイ
ＬＸＲルシフェラーゼ転写レポーター遺伝子アッセイは、ＬＸＲリガンドが、ＬＸＲのリガンド結合ドメイン（ＬＢＤ）を介して転写活性化を促進する能力を測定する。ＨＥＫ２９３細胞を、１０％ＦＢＳ（Ｇｉｂｃｏ（登録商標）、＃１１９９５−０６５）及び１ｘＰｅｎＳｔｒｅｐ（Ｇｉｂｃｏ（登録商標）、＃１５１４０）を含むＤＭＥＭ培地中で、５％ＣＯ２雰囲気で３７℃で増殖させた。１５０ｍｍシャーレ由来の９０％集密状態の細胞を、６つの１００ｍｍシャーレに播種した。この細胞を、ＬＸＲα又はＬＸＲβのＬＢＤのいずれかに融合したＧａｌ４ＤＮＡ結合ドメインを含む発現プラスミド、及びホタルルシフェラーゼ遺伝子（ｌｕｃ＋）の上流にＧａｌ４応答エレメントを有するルシフェラーゼレポータープラスミド、ｐＧ５−Ｌｕｃ（Ｐｒｏｍｅｇａ、Ｍａｄｉｓｏｎ、ＷＩ）でバッチトランスフェクトした。トランスフェクションは、製造業者が示したプロトコールに従ってＬｉｐｏｆｅｃｔａｍｉｎｅ（商標）２０００（Ｇｉｂｃｏ（登録商標））を用いて達成した。トランスフェクションしてから５時間後に、ＤＭＥＭに入れた１０％活性炭処理したＦＢＳ（Ｈｙｃｌｏｎｅ、＃ＳＨ３００７０．０３）を１５ｍＬ、トランスフェクション培地を取り除くことなしにトランスフェクトしたシャーレに加え、次いで、細胞を３７℃で一晩インキュベートする。翌日、トランスフェクトしたシャーレ由来の細胞をトリプシン処理し、ＰＢＳで洗浄し、１０％活性炭処理したＤＭＥＭ培地に再懸濁し、ウェルあたり６０，０００細胞／１００μＬで、９６ウェルプレートに播いた。この細胞を３７℃で約４時間インキュベートしてから、様々な濃度（最終的なＤＭＳＯ濃度は０．２％）で、１００μＬの試験化合物又はコントロールリガンドを加えた。物質と共に細胞を１６時間インキュベートした後、培養培地を捨て、Ｂｒｉｇｈｔ−Ｇｌｏ（商標）ルシフェラーゼ試薬（Ｐｒｏｍｅｇａ、Ｃａｔ．＃Ｅ２６１０）を加えて、細胞を溶解し、ルシフェラーゼ反応を惹起した。ルシフェラーゼ活性の測定として、プレートリーダー（Ｖｉｃｔｏｒ２、ＰＥ−Ｗａｌｌａｃ）中で発光を検出した。試験物質の存在下での転写活性化を、その物質の非存在下でインキュベートした細胞のものと比較して、発光のフォールドチェンジとして表した。ＥＣ５０値は、ＸＬｆｉｔ（商標）プログラム（ＩＤＢＳ、Ｇｕｉｌｆｏｒｄ、ＵＫ）を使用し計算した。
【実施例７】
【０２４１】
本発明の化合物を、実施例５及び６に記載されているように試験した。生物学的データを以下の表に提供する。
【０２４２】
【表７】
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