(57)【要約】【課題】取り扱いが容易で、長期保存に優れる、含硫アミノ酸の新形態及びその製造方法や用途の提供。【解決手段】本発明の固形組成物は、アスコルビン酸配糖体と含硫アミノ酸との塩を含む。本発明の固形組成物は化粧料や薬剤として有用である。前記固形組成物は、好適には、アスコルビン酸配糖体と含硫アミノ酸とを含む溶液からスプレードライ法等の固形化処理を施すことで得られる。【選択図】図１
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【特許請求の範囲】
【請求項１】
アシル化されていてもよいアスコルビン酸配糖体と含硫アミノ酸との塩を含む固形組成物。
【請求項２】
前記アシル化されていてもよいアスコルビン酸配糖体が２−Ｏ−α−Ｄ−グリコシル−アスコルビン酸及び／又は６−アシル−２−Ｏ−α―Ｄ−グリコシル−アスコルビン酸を含む請求項１記載の固形組成物。
【請求項３】
前記含硫アミノ酸が、Ｌ−システイン、Ｌ−シスチン、Ｌ−メチオニン及びグルタチオンからなる群の少なくとも一つのアミノ酸を含む請求項１又は２記載の固形組成物。
【請求項４】
請求項１〜３のいずれか１項記載の固形組成物、前記固形組成物の溶液又は前記固形組成物の懸濁液を含有する、化粧料。
【請求項５】
請求項１〜３のいずれか１項記載の固形組成物、前記固形組成物の溶液又は前記固形組成物の懸濁液を含有する、薬剤。
【請求項６】
アシル化されていてもよいアスコルビン酸配糖体と含硫アミノ酸とを含む溶液から固形化処理を施す、アスコルビン酸配糖体と含硫アミノ酸との塩を含む固形組成物の製造方法。
【請求項７】
前記固形化処理がスプレードライ法によるものである請求項６記載の製造方法。
【請求項８】
上記溶液に含まれる、含硫アミノ酸に対するアシル化されていてもよいアスコルビン酸配糖体のモル比率が１／２〜２／１である請求項６又は７記載の製造方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は含硫アミノ酸の塩を含む固形組成物、前記固形組成物の製造方法、及び、前記固形組成物の用途に関する。
【背景技術】
【０００２】
含硫アミノ酸は、還元作用、美白効果他、多くの生理活性を有する、生体に有用なアミノ酸である。これまで、含硫アミノ酸を利用した美白剤等、Ｌ−システインの化粧品としての利用の試みが数多くなされてきた。しかし、含硫アミノ酸は酸化されやすく、化粧料または皮膚外用剤として配合する場合には、安定性の悪さや、悪臭に課題があった。
これらの課題を解決するため、含硫アミノ酸の誘導体の開発が行われているが、酢酸エチルやヘプタンといった環境負荷の大きい溶剤が使用されているという課題があった。
また、ビタミン類を含硫アミノ酸（Ｌ−システイン）に添加した先行文献が開示されているが、安定性及び臭気改善が不十分であるという問題があった。
【先行技術文献】
【特許文献】
【０００３】
【特許文献１】特開２００４−１４９４２６号公報
【特許文献２】特開２００９−２２７６６０号公報
【特許文献３】国際公開ＷＯ２０１３／０８１１９３号公報
【特許文献４】国際公開ＷＯ２０１６／０５６６４８号公報
【特許文献５】国際公開ＷＯ２０１８／０２１５４４号公報
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００４】
従来の含硫アミノ酸の誘導体では環境負荷の大きい溶剤が使用されており、含硫アミノ酸へのビタミンの添加では、所望の安定性及び臭気改善性が得られないという課題があった。上記事情を鑑みて、本発明は、環境負荷が小さく、簡便な工程で、安定性及び臭気改善性に優れた含硫アミノ酸の新形態及びその製造方法や用途の提供をするものである。
【課題を解決するための手段】
【０００５】
本発明者らが鋭意検討した結果、以下の内容の本発明を完成した。
［１］アシル化されていてもよいアスコルビン酸配糖体と含硫アミノ酸との塩を含む固形組成物。
［２］前記アシル化されていてもよいアスコルビン酸配糖体が２−Ｏ−α−Ｄ−グリコシル−アスコルビン酸及び／又は６−アシル−２−Ｏ−α―Ｄ−グリコシル−アスコルビン酸を含む［１］の固形組成物。
［３］前記含硫アミノ酸が、Ｌ−システイン、Ｌ−シスチン、Ｌ−メチオニン及びグルタチオンからなる群の少なくとも一つのアミノ酸を含む［１］又は［２］の固形組成物。
［４］［１］〜［３］のいずれかの固形組成物、前記固形組成物の溶液又は前記固形組成物の懸濁液を含有する、化粧料。
［５］［１］〜［３］のいずれかの固形組成物、前記固形組成物の溶液又は前記固形組成物の懸濁液を含有する、薬剤。
［６］アシル化されていてもよいアスコルビン酸配糖体と含硫アミノ酸とを含む溶液から固形化処理を施す、アスコルビン酸配糖体と含硫アミノ酸との塩を含む固形組成物の製造方法。
［７］前記固形化処理がスプレードライ法によるものである［６］の製造方法。
［８］上記溶液に含まれる、含硫アミノ酸に対するアシル化されていてもよいアスコルビン酸配糖体のモル比率が１／２〜２／１である［６］又は［７］の製造方法。
【発明の効果】
【０００６】
本発明によれば、安定性に優れる含硫アミノ酸の新形態としての固形組成物が提供され、当該固形組成物は、環境負荷の小さい簡便な方法で得ることができる。また、当該固形組成物は、長期保存に優れ、利用時の取り扱いが容易であり、化粧料や薬剤などへの適用に便利である。
【図面の簡単な説明】
【０００７】
【図１】ＴＧ−ＤＴＡ分析の測定例を示す。
【発明を実施するための形態】
【０００８】
本発明では、アスコルビン酸配糖体と含硫アミノ酸との塩を含む固形組成物が提供される。アスコルビン酸配糖体は、アスコルビン酸と糖とがグリコシド結合により結合した化合物の総称である。
【０００９】
本発明では、アスコルビン酸はアシル化されていてもよい。以下、断りなくアスコルビン酸と表記する場合には、アシル化されていないアスコルビン酸及びアシル化されているアスコルビン酸の両方を指すものとする。
【００１０】
アスコルビン酸がアシル化されている場合、アシル化されるのは好ましくは６位の炭素原子である。アシル基（−Ｃ（＝Ｏ）Ｒ）におけるＲで示される炭化水素基は、直鎖、分岐又は環状の、飽和又は不飽和の炭化水素基であってよく、好ましくはアルキル基、アルケニル基、又はアルキニル基であり、より好ましくは直鎖のアルキル基である。前記炭化水素基の炭素数は、アシル基すなわち−Ｃ（＝Ｏ）Ｒ基の炭素数として数えたときに、炭素数が３〜２４、４〜２０、８〜２０、１２〜１８であることが好ましく、１４〜１６であることが特に好ましい。
【００１１】
本発明によれば、糖は特に限定はなく、好ましくはヘキソース（六炭糖）からなる単糖類または多糖類であり、具体例として、グルコース、グルコースの重合体などが挙げられる。グルコースの重合体としては重合度が１〜８又は１〜３が好ましく、１が特に好ましい。
【００１２】
好適なアスコルビン酸配糖体の第１の形態として、下記一般式（１）に示される、２−Ｏ−α−Ｄ−グリコシル−Ｌ−アスコルビン酸が挙げられる。
【化１】
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【００１３】
前記一般式（１）のｎは、Ｌ−アスコルビン酸の２位に結合しているグルコース残基のα位に結合する糖（グルコース）の数を意味する１以上の整数であり、１〜８又は１〜３が好ましく、１が特に好ましい。２−Ｏ−α−Ｄ−グリコシル−Ｌ−アスコルビン酸は、２−Ｏ−α−Ｄ−グルコピラノシル−Ｌ−アスコルビン酸（ｎ＝１）、２−Ｏ−α−Ｄ−マルトシル−Ｌ−アスコルビン酸（ｎ＝２）、２−Ｏ−α−Ｄ−マルトトリオシル−Ｌ−アスコルビン酸（ｎ＝３）、２−Ｏ−α−Ｄ−マルトテトラオシル−Ｌ−アスコルビン酸（ｎ＝４）、２−Ｏ−α−Ｄ−マルトペンタオシル−Ｌ−アスコルビン酸（ｎ＝５）、２−Ｏ−α−Ｄ−マルトヘキサオシル−Ｌ−アスコルビン酸（ｎ＝６）、２−Ｏ−α−Ｄ−マルトヘプタオシル−Ｌ−アスコルビン酸（ｎ＝７）、又は２−Ｏ−α−Ｄ−マルトオクタオシル−Ｌ−アスコルビン酸（ｎ＝８）のいずれか又はそれらの混合物であってよい。２−Ｏ−α−Ｄ−グリコシル−Ｌ−アスコルビン酸は、少なくとも、２−Ｏ−α−Ｄ−グルコピラノシル−Ｌ−アスコルビン酸、２−Ｏ−α−Ｄ−マルトシル−Ｌ−アスコルビン酸、及び／又は２−Ｏ−α−Ｄ−マルトトリオシル−Ｌ−アスコルビン酸を含むことが好ましい。
【００１４】
上記一般式（１）中のｎが特定の値である２−Ｏ−α−Ｄ−グリコシル−Ｌ−アスコルビン酸は、不純物として他の２−Ｏ−α−Ｄ−グリコシル−Ｌ−アスコルビン酸を含んでいてもよいが、９０モル％以上、９５モル％以上、９８モル％以上、９９モル％以上、９９．５モル％以上、９９．９モル％以上の純度であることが好ましい。特に、不純物としてのｎ＝４以上の２−Ｏ−α−Ｄ−グリコシル−Ｌ−アスコルビン酸は、１０モル％以下、５モル％以下、２モル％以下、１モル％以下、０．５モル％、０．１モル％以下であることが好ましく、実質的に含まないことが好ましい。
【００１５】
２−Ｏ−α−Ｄ−グリコシル−Ｌ−アスコルビン酸は公知の方法、例えば特許文献５に記載の方法により製造することができる。一例として、２−Ｏ−α−Ｄ−グルコピラノシル−Ｌ−アスコルビン酸の製造方法を以下に記載する。
（１）Ｌ−アスコルビン酸とα−グルコシル糖化合物とを含有する溶液に、糖転移酵素を作用させ、次いでグルコアミラーゼを作用させることによって２−Ｏ−α−Ｄ−グルコピラノシル−Ｌ−アスコルビン酸含有溶液を得る。
（２）２−Ｏ−α−Ｄ−グルコピラノシル−Ｌ−アスコルビン酸含有溶液を、イオン交換樹脂などを用いて精製し、高純度の２−Ｏ−α−Ｄ−グルコピラノシル−Ｌ−アスコルビン酸含有溶液を得る。
（３）２−Ｏ−α−Ｄ−グルコピラノシル−Ｌ−アスコルビン酸を晶析させて、目的化合物である、２−Ｏ−α−Ｄ−グルコピラノシル−Ｌ−アスコルビン酸を得る。
【００１６】
また、上記一般式（１）におけるｎが４以上である２−Ｏ−α−Ｄ−グリコシル−Ｌ−アスコルビン酸を実質的に含まない、２−Ｏ−α−Ｄ−マルトシル−Ｌ−アスコルビン酸（ｎ＝２）は例えば以下のような工程によって得ることができる。
（１）Ｌ−アスコルビン酸とα−グルコピラノシル糖化合物とを含有する溶液に、糖転移酵素を作用させ、２−Ｏ−α−Ｄ−グリコシル−Ｌ−アスコルビン酸（ｎ＝１〜７）の混合溶液を得て、次いで、当該混合溶液にβ−アミラーゼを作用させることによって、ｎが４以上である糖鎖を切断し、２−Ｏ−α−Ｄ−グリコシル−Ｌ−アスコルビン酸（ｎ＝１〜３）含有溶液を得る。
（２）当該２−Ｏ−α−Ｄ−グリコシル−Ｌ−アスコルビン酸（ｎ＝１〜３）含有溶液を、イオン交換樹脂等を用いて、未反応のＬ−アスコルビン酸と糖類を除去し精製する。
（３）溶媒を除去して粉末の２−Ｏ−α−Ｄ−グリコシル−Ｌ−アスコルビン酸（ｎ＝１〜３）を得る。
このとき、工程（２）の精製の条件によって２−Ｏ−α−Ｄ−マルトシル−Ｌ−アスコルビン酸の含有比率を制御することができる。
【００１７】
好適なアスコルビン酸配糖体の第２の形態として、下記一般式（２）に示される、６−アシル−２−Ｏ−α−Ｄ−グリコシル−Ｌ−アスコルビン酸が挙げられる。
【化２】
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【００１８】
一般式（２）中のＲで示される炭化水素基は、直鎖、分岐又は環状の、飽和又は不飽和の炭化水素基であってよく、好ましくはアルキル基、アルケニル基、又はアルキニル基であり、より好ましくは直鎖のアルキル基である。前記炭化水素基の炭素数は、アシル基すなわち−Ｃ（＝Ｏ）Ｒ基の炭素数として数えたときに、炭素数が３〜２４、４〜２０、８〜２０、１２〜１８であることが好ましく、１４〜１６であることが特に好ましい。
【００１９】
一般式（２）のｎは、一般式（１）の場合と同様に、Ｌ−アスコルビン酸の２位に結合しているグルコース残基のα位に結合する糖（グルコース）の数を意味する１以上の整数であり、１〜８又は１〜３が好ましく、１が特に好ましい。６−アシル−２−Ｏ−α−Ｄ−グリコシル−Ｌ−アスコルビン酸は、６−アシル−２−Ｏ−α−Ｄ−グルコピラノシル−Ｌ−アスコルビン酸（ｎ＝１）、６−アシル−２−Ｏ−α−Ｄ−マルトシル−Ｌ−アスコルビン酸（ｎ＝２）、６−アシル−２−Ｏ−α−Ｄ−マルトトリオシル−Ｌ−アスコルビン酸（ｎ＝３）、６−アシル−２−Ｏ−α−Ｄ−マルトテトラオシル−Ｌ−アスコルビン酸（ｎ＝４）、６−アシル−２−Ｏ−α−Ｄ−マルトペンタオシル−Ｌ−アスコルビン酸（ｎ＝５）、６−アシル−２−Ｏ−α−Ｄ−マルトヘキサオシル−Ｌ−アスコルビン酸（ｎ＝６）、６−アシル−２−Ｏ−α−Ｄ−マルトヘプタオシル−Ｌ−アスコルビン酸（ｎ＝７）、又は６−アシル−２−Ｏ−α−Ｄ−マルトオクタオシル−Ｌ−アスコルビン酸（ｎ＝８）のいずれか又はそれらの混合物であってよい。６−アシル−２−Ｏ−α−Ｄ−グリコシル−Ｌ−アスコルビン酸は、少なくとも、６−アシル−２−Ｏ−α−Ｄ−グルコピラノシル−Ｌ−アスコルビン酸、６−アシル−２−Ｏ−α−Ｄ−マルトシル−Ｌ−アスコルビン酸、及び／又は６−アシル−２−Ｏ−α−Ｄ−マルトトリオシル−Ｌ−アスコルビン酸を含むことが好ましい。
【００２０】
本発明の一つの実施形態において、特定のグルコースの数を有する６−アシル−２−Ｏ−α−Ｄ−グリコシル−Ｌ−アスコルビン酸は、不純物として他の６−アシル−２−Ｏ−α−Ｄ−グリコシル−Ｌ−アスコルビン酸、及び／又は未アシル化体の２−Ｏ−α−Ｄ−グリコシル−Ｌ−アスコルビン酸を含んでいてもよい。６−アシル−２−Ｏ−α−Ｄ−グリコシル−Ｌ−アスコルビン酸は９０モル％以上、９５モル％以上、９８モル％以上、９９モル％以上、９９．５モル％以上、９９．９モル％以上の純度であることが好ましい。不純物としての、ｎ＝４以上の６−アシル−２−Ｏ−α−Ｄ−グリコシル−Ｌ−アスコルビン酸及び／又は２−Ｏ−α−Ｄ−グリコシル−Ｌ−アスコルビン酸は１０モル％以下、５モル％以下、２モル％以下、１モル％以下、０．５モル％以下、０．１モル％以下であることが好ましく、実質的に含まないことが好ましい。不純物としての、未アシル化体である２−Ｏ−α−Ｄ−グリコシル−Ｌ−アスコルビン酸は１０モル％以下、５モル％以下、２モル％以下、１モル％以下、０．５モル％以下、０．１モル％以下であることが好ましく、実質的に含まないことが好ましい。
【００２１】
６−アシル−２−Ｏ−α−Ｄ−グリコシル−Ｌ−アスコルビン酸は、２−Ｏ−α−Ｄ−グリコシル−Ｌ−アスコルビン酸の６位にアシル基を置換させる方法によって製造することができ、６位にアシル基を置換させる方法としては、公知の方法、例えば特許文献５に記載の方法によることができる。
【００２２】
６−アシル−２−Ｏ−α−Ｄ−グリコシル−Ｌ−アスコルビン酸の製造方法としては２−Ｏ−α−Ｄ−グリコシル−Ｌ−アスコルビン酸に有機酸、酸ハライド、酸無水物、酸エステルなどのアシル化剤を用いて化学反応させる方法が挙げられる。前記アシル化剤としては、炭素数が３〜２４、４〜２０、８〜２０、１２〜１８、好ましくは１４〜１６である飽和若しくは不飽和の脂肪酸又はその無水物が好ましく、例えば、ラウリン酸、ミリスチン酸、パルミチン酸、パルミトレイン酸、ステアリン酸、オレイン酸及びリシノレイン酸並びにその無水物などが好ましい。
【００２３】
本発明において、含硫アミノ酸は、化学構造中にイオウ原子を含むアミノ酸であれば特に限定は無く、例えば、Ｌ−メチオニン、Ｌ−システイン、Ｌ−シスチン、ホモシステイン、グルタチオンなどが非限定的に挙げられる。
【００２４】
本発明の固形組成物は、アシル化されていてもよいアスコルビン酸配糖体と含硫アミノ酸との塩を含む。アスコルビン酸配糖体と含硫アミノ酸との単なる混合物ではなく、塩が生成していることは、例えば、生成物の熱分解挙動によって検知することができる。具体的には、ＴＧ−ＤＴＡによる分解点を測定したとき、塩が生成していれば、対応するアスコルビン酸配糖体の分解点とも、含硫アミノ酸の分解点とも異なる、第３の分解点が測定される。
【００２５】
なお、「固形組成物」とは、常温（１５〜２５℃）、常圧において流動性のない組成物を意味する。そのような形態であれば、取り扱い容易であり、保存性に優れる。
【００２６】
本発明では、アシル化されていてもよいアスコルビン酸配糖体と含硫アミノ酸とを含む溶液から固形化処理を施すことにより、好適に、上記塩を得ることができる。
【００２７】
上記溶液の溶媒としては、特に限定は無く、水や各種アルコール等が挙げられ、環境負荷が小さいことから、水が好適である。上記溶液の濃度は特に限定は無く、固形化処理の手法に適した濃度を採り入れることができる。
【００２８】
上記溶液に含まれる、含硫アミノ酸に対するアシル化されていてもよいアスコルビン酸配糖体のモル比率は、好ましくは１／２〜２／１である。
【００２９】
上記溶液から固形組成物を得るための固形化処理については、溶媒を除去し得る手段であれば特に限定は無く、取り扱い粉末を容易に得る点から、スプレードライ法による手段が好ましく挙げられる。
【００３０】
スプレードライ法は、噴霧乾燥法とも呼ばれ、造粒方法のひとつである。対象物質を含む溶液または懸濁液を熱風とともにノズルから噴霧することにより、チャンバー（乾燥室）内で微液滴を生成せしめ、これを乾燥させることによって対象物質の粒子を得る方法である。
【００３１】
スプレードライ法の際の、乾燥室入口における熱風温度（入口温度）は、好ましくは１４０〜２００℃であり、より好ましくは１６０〜１８０℃である。乾燥室出口における排風温度（出口温度）は、好ましくは８０〜１１０℃であり、より好ましくは９０〜１００℃である。スプレードライ法におけるその他の調整要素としては、溶液の投入量、空気（熱風）の投入量、圧力などが挙げられ、これらの調整により、所望の粒子径の固形組成物を得ることができる。これらの調整については、スプレードライ法における従来技術からの教示を適宜採り入れることができる。
【００３２】
スプレードライ法では扱いやすい粉末状の固形組成物を得ることができる。ここで、固形組成物が粉末状であるということは、例えば、生成物の水分量が９％以下であることや、生成物の平均粒子径が１０〜２００μｍであることなどが挙げられる。水分量は少なければ少ないほど好ましい。固形組成物の水分量は、例えば、カールフィッシャー容量滴定法などの方法によって測定することができる。平均粒子径は好ましくは２０〜８０μｍである。平均粒子径は例えば、電子顕微鏡観察像から１００個程度の粒子を選択してそれらのメジアン径を算出することにより得ることができる。
【００３３】
得られる固形組成物の粒子径など、粉体の諸パラメータについては、スプレードライ法における条件を調節することにより制御可能である。例えば、平均粒子径を小さくしたい場合には、原液処理量を少なくしたり、原液濃度を薄くしたりするなどの方策が挙げられ、平均粒子径を大きくしたい場合には前記とは逆の方策が挙げられる。また、水分量を特に下げたい場合には、出口温度を高くしたり、送風量を多くしたりするなどの方策が挙げられる。
【００３４】
本発明で得られる固形組成物は種々の用途に使用することができ、特に、化粧料や薬剤の原料として好適に使用できる。具体的には、固形組成物を含む溶液や懸濁液は、固形組成物を構成する含硫アミノ酸の諸性質が発現し、当該含硫アミノ酸の各種用途にそのまま適用することができる。薬剤はいわゆる医薬品だけではなく、他の用途の薬剤も含まれる。また、本発明の固形組成物を含む溶液や懸濁液は皮膚外用剤としても有用である。ここで、皮膚外用剤とは、薬事法等による厳格な定義によるものではなく、「皮膚に付けるための物質」を広く包含する概念であり、例えば、医薬品、医薬部外品、化粧料等などを特に限定無く含む。本発明において、保存安定性に優れるということは、例えば、不所望な化学変化に起因する変質が生じにくいといったことや、雑菌が繁殖しにくいといったことが挙げられる。
【実施例】
【００３５】
以下に実施例を挙げて本発明について更に詳細を加えるが、本発明がこれら実施例に限定されるわけではない。
【００３６】
＜２−Ｏ−α−Ｄ−グルコピラノシル−Ｌ−アスコルビン酸の合成＞
２−Ｏ−α−Ｄ−グルコピラノシル−Ｌ−アスコルビン酸（以下、「化合物１」とも表記する）を以下のようにして得た。
（ａ）酵素処理工程
澱粉加水分解物２．５部を水６部に加えて加熱溶解し、さらにＬ−アスコルビン酸１．５部を加え、ｐＨを５に調整し、基質溶液とした。これに、ＣＧＴａｓｅ酵素液（ＮＯＶＯＺＹＭＥＳ）を澱粉加水分解物１ｇ当り１５０単位加え、５０℃で４０時間反応させ、２−Ｏ−α−Ｄ−グルコピラノシル−Ｌ−アスコルビン酸とともに、２−Ｏ−α−マルトシル−Ｌ−アスコルビン酸、２−Ｏ−α−マルトトリオシル−Ｌ−アスコルビン酸、２−Ｏ−α−マルトテトラオシル−Ｌ−アスコルビン酸などのα−グリコシル−Ｌ−アスコルビン酸を生成させた。本反応液の酵素反応を停止し、これにグルコアミラーゼ剤（天野エンザイム株式会社販売、商品名「酒造用グルコアミラーゼアマノ」２５０，０００単位/ｇ）を澱粉加水分解物１ｇ当り６００単位加え、６０℃で４時間処理し、α−グリコシル−Ｌ−アスコルビン酸を、２−Ｏ−α−Ｄ−グルコピラノシル−Ｌ−アスコルビン酸にまで、また、混在する糖質をＤ-グルコースまで分解した。
（ｂ）精製工程
上記工程（ａ）で得られた、酵素反応停止後の反応液を、活性炭で脱色濾過した。得られた脱色後の２−Ｏ−α−Ｄ−グルコピラノシル−Ｌ−アスコルビン酸含有水溶液の濃度は４６．５％であった。濾液をカチオン交換樹脂（Ｈ+型）にて脱塩し、次いでアニオン交換樹脂（ＯＨ-型）にＬ−アスコルビン酸を優先的に吸着させることで除去し、次いで２−Ｏ−α−Ｄ−グルコピラノシル−Ｌ−アスコルビン酸をアニオン交換樹脂（ＯＨ-型）に吸着させ、水洗してＤ-グルコースを除いた後、０．１Ｎ水酸化ナトリウム水溶液で溶出した。さらにこの溶出液を固形分約２０％にまで濃縮し、カチオン交換樹脂（Ｈ+型）にて脱塩した。上記工程で得られた２−Ｏ−α−Ｄ−グルコピラノシル−Ｌ−アスコルビン酸の純度は無水物換算で９１％であった。
（ｃ）晶析工程
上記工程（ｂ）で得られた２−Ｏ−α−Ｄ−グルコピラノシル−Ｌ−アスコルビン酸含有水溶液８５部（内、２−Ｏ−α−Ｄ−グルコピラノシル−Ｌ−アスコルビン酸は無水物換算で３９．５部）を加熱減圧濃縮し、水分を留去することで、２−Ｏ−α−Ｄ−グルコピラノシル−Ｌ−アスコルビン酸の濃度が６６％である水溶液６０部を得た。得られた水溶液を攪拌下、４０℃に加熱した後、攪拌しながらエタノールを５０部、種結晶を０．１５部添加した。この水溶液を、４０℃で１時間、３５℃で１時間、３０℃で１時間、２５℃で２０時間攪拌することで、２−Ｏ−α−Ｄ−グルコピラノシル−Ｌ−アスコルビン酸の結晶を晶析させた。
（ｄ）乾燥工程
上記工程（ｃ）で得られたマスキットを遠心分離機にかけて固液分離を行った。分離した２−Ｏ−α−Ｄ−グルコピラノシル−Ｌ−アスコルビン酸の結晶をエタノールで洗浄した後、３５℃で減圧乾燥し、２−Ｏ−α−Ｄ−グルコピラノシル−Ｌ−アスコルビン酸結晶粉末３０部を得た。以上の製造方法による２−Ｏ−α−Ｄ−グルコピラノシル−Ｌ−アスコルビン酸結晶の回収率は７５．９％であった。
【００３７】
＜６−パルミトイル−２−α−Ｄ−グルコピラノシル−Ｌ−アスコルビン酸の合成＞
６−パルミトイル−２−α−Ｄ−グルコピラノシル−Ｌ−アスコルビン酸（以下、「化合物２」とも表記する）を以下のようにして得た。上記で得た２−Ｏ−α−Ｄ−グルコピラノシル−Ｌ−アスコルビン酸の粉末２０ｇを無水ピリジン３００ｍｌに溶解させ、２５℃にて無水パルミチン酸２０ｇを１時間かけて加えた後、さらに２５℃にて１時間反応させた。次いで、上記反応液を水１５００ｍｌ中に加え、生じた沈殿物をろ過にて回収し、水１５００ｍｌにて洗浄した後、４０℃にて減圧乾燥させた。得られた反応物をシリカゲルクロマトグラフィー（シリカゲル６０、ナカライテスク（株）製）に担持させた後、展開溶媒として酢酸エチル：メタノール＝８：２を用いて分離精製を行った。得られた精製液を減圧乾燥にて溶媒を除去した後、エタノールにて溶解、再結晶を行い、得られた結晶を乾燥させることで、６−パルミトイル−２−Ｏ−α−Ｄ−グルコピラノシル−Ｌ−アスコルビン酸１２ｇを得た。
【００３８】
各種の含硫アミノ酸は、和光純薬株式会社から購入した試薬をそのまま用いた。
【００３９】
＜各種塩の製造＞
以下の組合せにて、含硫アミノ酸及びアスコルビン酸配糖体との塩からなる固形組成物を製造した。まず、以下の組合せで、モル比１：１の混合物を含む溶液（１Ｍ）を調製した。
溶液１：Ｌ−システイン及び化合物１、溶媒は水（ｐＨ２．７）
溶液２：メチオニン及び化合物１、溶媒は水（ｐＨ５．７）
溶液３：グルタチオン及び化合物１、溶媒は水（ｐＨ３．２）
溶液４：Ｌ−シスチン及び化合物１、溶媒は水
溶液５：Ｌ−システイン及び化合物２、溶媒は水及びエタノール（質量比１：１）（ｐＨ３．３）
【００４０】
これらの溶液をスプレードライ法に供した。スプレードライヤ装置における導入口温度１６０℃、出口温度９０℃でガス圧力０．１５ＭＰａ、流量１００ｍＬ／ｈｒにて、上記各溶液を導入し、目的の固形組成物を得た（下記記載では「ＳＤ処理」と表記する。）。
【００４１】
別の固形化処理として、エバポレータを用い、バス温度４０℃、減圧度５ｔｏｒｒで上記各溶液を減圧濃縮し、目的の固形組成物を得た（濃縮乾固）。
【００４２】
なお、比較として、含硫アミノ酸と、アスコルビン酸配糖体とを、溶液化せずに、ガラス瓶に充填した後、ローラーミキサーにより１時間混合してなるサンプルも調製した（下記記載では「混合」と表記する）。
【００４３】
＜熱分析データ＞
種々の固形組成物について、ＴＧ−ＤＴＡによる熱分解点を測定した。結果は以下の通りである。
（比較例１）Ｌ−システイン（無処理）：分解点２３２℃
（比較例２）Ｌ−メチオニン（無処理）：分解点２９０℃
（比較例３）グルタチオン（無処理）：分解点２０４℃
（比較例４）Ｌ−シスチン（無処理）：分解点２３８℃
（比較例５）化合物１（無処理）：分解点１９０℃
（比較例６）化合物２（無処理）：分解点２４６℃
（比較例７）Ｌ−システインと化合物１とを混合：分解点１８２℃及び２３０℃
（実施例１）溶液１をＳＤ処理：分解点１６５℃
（実施例２）溶液１を濃縮乾固：分解点１６５℃
（比較例８）Ｌ−システインと化合物２とを混合：分解点１９０℃及び２２５℃
（実施例３）溶液５をＳＤ処理：分解点１７８℃
（実施例４）溶液５を濃縮乾固：分解点１７７℃
（比較例９）Ｌ−シスチンと化合物１とを混合：分解点１７８℃及び２３４℃
（実施例５）溶液４をＳＤ処理：分解点２０５℃
（実施例６）溶液４を濃縮乾固：分解点２０５℃
（比較例１０）Ｌ−メチオニンと化合物１とを混合：分解点１８４℃及び２４６℃
（実施例７）溶液２をＳＤ処理：分解点１４７℃
（実施例８）溶液２を濃縮乾固：分解点１４６℃
（比較例１１）グルタチオンと化合物１とを混合：分解点１８２℃及び１９０℃
（実施例９）溶液３をＳＤ処理：分解点１８０℃
（実施例１０）溶液３を濃縮乾固：分解点１７９℃
【００４４】
上記のように、実施例においては、含硫アミノ酸及びアスコルビン酸配糖体のそれぞれの分解点とは異なる単一の分解点を呈しており、塩の生成が確認された。なお、図１はＴＧ−ＤＴＡ分析の測定例であり、図１（Ａ）は実施例１の固形組成物のデータであり、図１（Ｂ）は比較例７の固形組成物のデータである。
【００４５】
＜保存安定＞
以下の各サンプルをガラス瓶に充填して、６０℃、７５％ＲＨで保存し、２週間後及び４週間後に取り出し、目視による変色具合と、塩の形態を含むアミノ酸の含量を測定した。アミノ酸の含量については、ＨＰＬＣにより定量し、保存開始時との比較により残存率として算出した。
変色具合は、Ａ：変化なし、Ｂ：若干変色を認める、Ｃ：変色ありで評価した。
【００４６】
２週間後の結果は以下のとおりであった。
実施例１  ：残存率９９．５％、変色Ａ
実施例７  ：残存率９９．６％、変色Ａ
実施例９  ：残存率９９．５％、変色Ａ
比較例１２：残存率９９．２％、変色Ｂ
比較例７  ：残存率９９．２％、変色Ｂ
比較例１０：残存率９９．３％、変色Ｂ
比較例１１：残存率９９．３％、変色Ｂ
比較例１  ：残存率９９．８％、変色Ｂ
比較例１３：残存率９９．４％、変色Ｂ
【００４７】
４週間後の結果は以下のとおりであった。
実施例１  ：残存率９８．８％、変色Ａ
実施例７  ：残存率９８．９％、変色Ａ
実施例９  ：残存率９９．０％、変色Ａ
比較例１２：残存率９８．１％、変色Ｃ
比較例７  ：残存率９８．２％、変色Ｂ
比較例１０：残存率９８．２％、変色Ｂ
比較例１１：残存率９８．３％、変色Ｂ
比較例１  ：残存率９７．７％、変色Ｂ
比較例１３：残存率９７．２％、変色Ｂ
【００４８】
なお、比較例１２は化合物１の代わりにＬ−アスコルビン酸を用いたことの他は実施例１と同様にスプレードライ法にて得た固形組成物であり、比較例１３はＬ−システイン塩酸塩の粉末であり、他の実施例・比較例は上述のとおりである。
【００４９】
＜臭気評価＞
評価者５人による官能試験を実施した。不快臭の試験方法及び評価結果は以下のとおりである。
（試験方法）
温度２５℃、湿度４０％の雰囲気下で、板ガラス上にサンプルを５０ｍｇのせて、１０分間放置する。その後、５人のパネラーにサンプルから２０ｃｍの距離で匂いを嗅いでもらい、不快臭の官能評価を行った。以下の基準で判定した。
（評価方法）
３点：不快臭が全く感じられない
２点：不快臭がほとんど感じられない
１点：僅かに不快臭が感じられる
０点：不快臭が感じられる
（ランク付け）
５人のパネラーからの評価を集計して、以下のようにランク付けする。
Ａ＋：５人の平均点が２．５点超〜３．０点
Ａ：５人の平均点が２．０点超〜２．５点以下
Ｂ：５人の平均点が１．５点超〜２．０点以下
Ｃ：５人の平均点が１．５以下
【００５０】
（評価結果）
得られた結果は以下のとおりである。
実施例１：不快臭平均点２．８、ランクＡ＋
比較例７：不快臭平均点１．５、ランクＢ
以上のように、２−Ｏ−α−Ｄ−グルコピラノシル−Ｌ−アスコルビン酸とＬ−システインを単純に混合するより、スプレードライヤに供して塩を形成せしめた方が、不快臭を抑制することが判明した。
【図１】
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