(57)【要約】【課題】紫外線吸収作用を有する天然由来の新規化合物を提供する。【解決手段】式（Ｉ）：【化１】2019006679.tif 000023［式（Ｉ）中、Ｑ１は酸素原子またはアミノ酸残基である、ここでＱ１がアミノ酸残基である場合、該アミノ酸残基は窒素原子を介して環に結合しているものである；Ｑ２はアミノ酸残基である、ここで該アミノ酸残基は窒素原子を介して環に結合しているものである。］で示される化合物、またはその医薬上許容される塩もしくはプロドラッグ。【選択図】なし【特許請求の範囲】
【請求項１】
式（Ｉ）：
【化１】
2019006679.tif 000018
［式（Ｉ）中、Ｑ１は酸素原子またはアミノ酸残基であり、Ｑ１がアミノ酸残基である場合、該アミノ酸残基は窒素原子を介して環に結合しているものであり；Ｑ２はアミノ酸残基であり、該アミノ酸残基は窒素原子を介して環に結合しているものである。］
で示される化合物、またはその医薬上許容される塩もしくはプロドラッグ。
【請求項２】
Ｑ１が、酸素原子、グリシン、アラニン、バリン、セリン、スレオニン、ロイシン、イソロイシン、アスパラギン、アスパラギン酸、グルタミン、およびグルタミン酸からなる群から選択され、Ｑ２が、バリン、アスパラギン、アスパラギン酸、スレオニン、ロイシン、イソロイシン、アラニン、グリシン、セリン、グルタミン、およびグルタミン酸、からなる群から選択される、請求項１に記載の化合物、またはその医薬上許容される塩もしくはプロドラッグ。
【請求項３】
Ｑ１およびＱ２の組み合わせが以下の表のいずれか一つの組み合わせである、請求項２に記載の化合物、またはその医薬上許容される塩もしくはプロドラッグ。
【表１−１】
2019006679.tif 000019
【表１−２】
2019006679.tif 000020
【表１−３】
2019006679.tif 000021
【請求項４】
Ｑ１およびＱ２の組み合わせが以下の表のいずれか一つの組み合わせである、請求項３に記載の化合物、またはその医薬上許容される塩もしくはプロドラッグ。
【表２】
2019006679.tif 000022
【請求項５】
請求項１〜４のいずれか一項に記載の化合物、またはその医薬上許容される塩もしくはプロドラッグを含む、組成物。
【請求項６】
シノリンまたはポルフィラ−３３４の少なくとも１つをさらに含む、請求項５に記載の組成物。
【請求項７】
紫外線吸収用組成物である、請求項５または６に記載の組成物。
【請求項８】
化粧品用組成物である、請求項７に記載の組成物。
【請求項９】
請求項８に記載の組成物を含む、化粧品。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、新規なマイコスポリン様アミノ酸、その医薬上許容される塩およびプロドラッグ、ならびにそれらを含む組成物等に関する。
【背景技術】
【０００２】
紫外線（ＵＶ）は、紅斑などの急性皮膚反応、皮膚老化および皮膚癌を誘発することが知られている。太陽光線に含まれる紫外線は、その波長によって、ＵＶ−Ａ（３２０ｎｍ−４００ｎｍ）、ＵＶ−Ｂ（２８０ｎｍ−３２０ｎｍ）およびＵＶ−Ｃ（２００−２８０ｎｍ）の３種類に分類される。この中で、生体への影響があるのはＵＶ−ＡとＵＶ−Ｂであり、ＵＶ−Ｃは通常は大気を通過することができないため問題とならない。
【０００３】
ＵＶ−Ｂは、屋外での日焼けの主因であり、ＵＶ−Ａと比べて相対的にエネルギーが大きいことが知られている。皮膚層に吸収されると、角質層および表皮に到達し、シミ・ソバカスなどの急性皮膚色素沈着を引き起こす。また、老化や皮膚癌の発症に関与する、免疫抑制を引き起こすことも知られている。
【０００４】
ＵＶ−Ａは、ＵＶ−Ｂに比べて波長が長くエネルギーは小さいが、ＵＶ−Ｂよりも皮膚のさらに深いところまで浸透し、真皮にまで到達することが知られている。その結果、シミ・ソバカスなどの急性皮膚色素沈着だけでなく、真皮の弾力低下（光線性弾性線維症）を引き起こし、しわ・たるみといった早期皮膚老化現象を引き起こす。さらに近年、ＵＶ−Ａも免疫抑制を引き起こし、前癌性の皮膚病変および皮膚癌の発症に関与することがわかってきている。
【０００５】
ＵＶ−Ｂは、季節、天候、緯度などによってその量が異なるのに対し、ＵＶ−Ａは一年を通して一定量が地表に達する。そのため、ＵＶ−Ａから皮膚を保護することも、重要である。
【０００６】
現行の紫外線防御剤は、紫外線吸収剤と紫外線散乱剤に分類することができる。紫外線吸収剤は、紫外線エネルギーを熱エネルギーに変換して放出するものであり、例えば、４−ｔｅｒｔ−ｂｕｔｙｌ−４’−ｍｅｔｈｏｘｙｄｉｂｅｎｚｏｙｌｍｅｔｈａｎｅなどの合成有機化合物が挙げられる。紫外線散乱剤は、酸化チタン（ＴｉＯ２）、酸化亜鉛（ＺｎＯ）などの無機粒子を含み、皮膚に塗布した場合、皮膚表面に存在する無機粒子が紫外線を反射するバリアとして機能する。
【０００７】
紫外線吸収剤には、（１）光で分解されやすく安定性が悪い、（２）分子励起を起こし、メラニン生成を促進することで、かゆみやアレルギーを引き起こす、（３）化学合成物質であるため、使用者に与えるイメージが悪い、といった問題点がある。紫外線散乱剤には、（１）皮膚に塗布した際、白くなりやすく、皮膚に重たい感じを与えやすい、（２）活性酸素の生成を引きおこす、（３）皮膚の毛穴を塞ぎ、皮膚呼吸が阻害される懸念がある、といった問題点がある。このような問題点から、天然由来の安全な紫外線吸収物質への期待が高まっている。
【０００８】
マイコスポリン様アミノ酸（Ｍｙｃｏｓｐｏｒｉｎｅ−ｌｉｋｅ  Ａｍｉｎｏ  Ａｃｉｄ、以下「ＭＡＡ」とする）は、サンゴ、紅藻類、魚の内臓、微細藻類等、水生生物に広く存在することが知られている、天然のＵＶ吸収物質である。
【０００９】
公知のＭＡＡとしては、シノリンおよびポルフィラ−３３４などが挙げられる。特許文献１には、ミクロコッカス属の微生物の培養物から、シノリンおよびＭＡＡに属する他の化合物が得られたことが記載されている。しかしながら、これらの他の化合物の具体的な構造は特定されていない。非特許文献１には、放線菌の培養物から、シノリンおよびポルフィラ−３３４、ならびに新規ＭＡＡとしてマイコスポリン−グリシン−アラニンが得られたことが記載されている。特許文献２〜４もまた、ＭＡＡに属する化合物の構造式を開示しているが、具体的に構造決定されている化合物は公知のＭＡＡのみである。
【先行技術文献】
【特許文献】
【００１０】
【特許文献１】特開平６−６２８７８号公報
【特許文献２】特開２００８−２４７９０１号公報
【特許文献３】国際公開第２００２／０３９９７４号
【特許文献４】英国特許出願公開第２４７２０２１号明細書
【非特許文献】
【００１１】
【非特許文献１】Ａｐｐｌ  Ｅｎｖｉｒｏｎ  Ｍｉｃｒｏｂｉｏｌ．  ２０１４  Ａｕｇ；８０（１６）：５０２８−３６
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【００１２】
本発明の解決課題は、紫外線吸収作用を有する天然由来の新規化合物を提供することである。特に、本発明の解決課題は、新規なマイコスポリン様アミノ酸、その医薬上許容される塩およびプロドラッグ、ならびにそれらを含む組成物を提供することを包含する。
【課題を解決するための手段】
【００１３】
本発明者らは、鋭意研究を行った結果、放線菌の培養物中にマイコスポリン様アミノ酸に属する新規な化合物が含まれること、およびこれらの化合物が紫外線吸収作用を有することを見出し、本発明を完成させた。
【００１４】
すなわち、本発明は以下を提供する：
［１］式（Ｉ）：
【化１】
2019006679.tif 000002
［式（Ｉ）中、Ｑ１は酸素原子またはアミノ酸残基であり、Ｑ１がアミノ酸残基である場合、該アミノ酸残基は窒素原子を介して環に結合しているものであり；Ｑ２はアミノ酸残基であり、該アミノ酸残基は窒素原子を介して環に結合しているものである。］
で示される化合物、またはその医薬上許容される塩もしくはプロドラッグ；
［２］Ｑ１が、酸素原子、グリシン、アラニン、バリン、セリン、スレオニン、ロイシン、イソロイシン、アスパラギン、アスパラギン酸、グルタミン、およびグルタミン酸からなる群から選択され、Ｑ２が、バリン、アスパラギン、アスパラギン酸、スレオニン、ロイシン、イソロイシン、アラニン、グリシン、セリン、グルタミン、およびグルタミン酸、からなる群から選択される、［１］に記載の化合物、またはその医薬上許容される塩もしくはプロドラッグ；
［３］Ｑ１およびＱ２の組み合わせが以下の表のいずれか一つの組み合わせである、［２］に記載の化合物、またはその医薬上許容される塩もしくはプロドラッグ；
【表１−１】
2019006679.tif 000003
【表１−２】
2019006679.tif 000004
［４］Ｑ１およびＱ２の組み合わせが以下の表のいずれか一つの組み合わせである、［３］に記載の化合物、またはその医薬上許容される塩もしくはプロドラッグ；
【表２】
2019006679.tif 000005
［５］［１］〜［４］のいずれか一つに記載の化合物、またはその医薬上許容される塩もしくはプロドラッグを含む、組成物；
［６］シノリンまたはポルフィラ−３３４の少なくとも１つをさらに含む、［５］に記載の組成物；
［７］紫外線吸収用組成物である、［５］または［６］に記載の組成物；
［８］化粧品用組成物である、［７］に記載の組成物；
［９］［８］に記載の組成物を含む、化粧品。
［１０］急性皮膚反応、皮膚老化および皮膚癌からなる群から選択される一以上の症状または疾患を予防するための、［５］または［６］に記載の組成物；
［１１］急性皮膚反応、皮膚老化および皮膚癌からなる群から選択される一以上の症状または疾患を予防するための医薬の製造のための、［１］〜［４］のいずれか一つに記載の化合物、またはその医薬上許容される塩もしくはプロドラッグの使用；
［１２］急性皮膚反応、皮膚老化および皮膚癌からなる群から選択される一以上の症状または疾患の予防方法における使用のための、［１］〜［４］のいずれか一つに記載の化合物、またはその医薬上許容される塩もしくはプロドラッグ；および
［１３］［１］〜［４］のいずれか一つに記載の化合物、またはその医薬上許容される塩もしくはプロドラッグを含む組成物を対象の皮膚に塗布することを含む、急性皮膚反応、皮膚老化および皮膚癌からなる群から選択される一以上の症状または疾患を予防する方法。
【発明の効果】
【００１５】
本発明の新規マイコスポリン様アミノ酸は、紫外線吸収作用を有することから、化粧品、医薬部外品および医薬品などの有効成分として有用である。また、各種工業製品の紫外線による劣化からの保護にも有用である。
【発明を実施するための形態】
【００１６】
１つの実施態様において、本発明は、式（Ｉ）：
【化２】
2019006679.tif 000006
［式（Ｉ）中、Ｑ１は酸素原子またはアミノ酸残基であり、Ｑ１がアミノ酸残基である場合、該アミノ酸残基は窒素原子を介して環に結合しているものであり；Ｑ２はアミノ酸残基であり、該アミノ酸残基は窒素原子を介して環に結合しているものである。］
で示される化合物、またはその医薬上許容される塩もしくはプロドラッグを提供する。
【００１７】
本明細書において使用するとき、用語「化合物」は、式（Ｉ）で示される化合物、ならびにそれらの医薬上許容される塩、プロドラッグ、オキシド、エーテル、エステル、配糖体、または複合体を意味する。
【００１８】
本明細書中における「医薬上許容される塩」には、硫酸、塩酸、フッ化水素酸、臭化水素酸、ヨウ化水素酸、リン酸、硝酸、過塩素酸、炭酸などの無機酸との塩、あるいは、
酢酸、安息香酸、シュウ酸、乳酸、リンゴ酸、酒石酸、コハク酸、フマル酸、マレイン酸、クエン酸、マロン酸、マンデル酸、グルコン酸、ガラクタル酸、グルコヘプトン酸、グリコール酸、アスパラギン酸、グルタミン酸、トリフルオロ酢酸、メタンスルホン酸、エタンスルホン酸、ベンゼンスルホン酸、ｐ−トルエンスルホン酸、カンファースルホン酸、又はナフタレン−２−スルホン酸などの有機酸との塩、リチウムイオン、ナトリウムイオン、カリウムイオン、カルシウムイオン、マグネシウムイオン、亜鉛イオン、アルミニウムイオン、銀イオンなどの１種または複数の金属イオンとの塩、アンモニア、アルギニン、リシン、ピペラジン、Ｎ−メチルピペラジン、１−（２−ヒドロキシエチル）ピペラジン、１，３−ジアミノプロパン、コリン、ジエチルアミン、トリメチルアミン、トリエチルアミン、ジシクロヘキシルアミン、４−フェニルシクロヘキシルアミン、エタノールアミン、ジエタノールアミン、２−アミノ−１−プロパノール、１，３−ジアミノ−２−プロパノール、ベンザチン、Ｎ−メチルモルホリン、プロリノール、２−ピペリジンメタノールなどのアミンとの塩が含まれる。これらの塩は、従来公知の方法にしたがって製造することができる。
【００１９】
「プロドラッグ」は、対象に投与したとき、本発明の化合物またはその活性代謝産物もしくはその残基を直接的または間接的に得ることができる、本発明の化合物の何れかの誘導体を意味する。プロドラッグは、以下の利点を有し得る：化合物の生物学的利用能の向上；化合物の副作用および／または毒性の低減；化合物の生物学的領域への送達の促進；本発明の化合物の半減期の延長；化合物の安定化；化合物の味・においの改善。プロドラッグには、例えば、本発明の化合物のエステル形態が挙げられる。エステルプロドラッグの例として、ホルメート、アセテート、プロピオネート、ブチレート、アクリレート、ファルネシレートおよびエチルスクシネート誘導体が挙げられる。プロドラッグの一般的な説明については、Ｔ．  Ｈｉｇｕｃｈｉ  ａｎｄ  Ｖ．  Ｓｔｅｌｌａ，  Ｐｒｏ−ｄｒｕｇｓ  ａｓ  Ｎｏｖｅｌ  Ｄｒｕｇ  Ｄｅｌｉｖｅｒｙ  Ｓｙｓｔｅｍｓ，  Ｖｏｌ．  １４  ｏｆ  ｔｈｅ  Ａ．Ｃ．Ｓ．  Ｓｙｍｐｏｓｉｕｍ  ＳｅｒｉｅｓおよびＥｄｗａｒｄ  Ｂ．  Ｒｏｃｈｅ，  ｅｄ．，  Ｂｉｏｒｅｖｅｒｓｉｂｌｅ  Ｃａｒｒｉｅｒｓ  ｉｎ  Ｄｒｕｇ  Ｄｅｓｉｇｎ，  Ａｍｅｒｉｃａｎ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ａｓｓｏｃｉａｔｉｏｎ  ａｎｄ  Ｐｅｒｇａｍｏｎ  Ｐｒｅｓｓ，  １９８７を参照のこと（いずれも出典明示により本明細書に引用する）。
【００２０】
「化合物」はさらに、化合物の構造異性体（例えば鎖型異性体、位置異性体）、立体異性体（例えば回転異性体）、および互変異性体などの異性体を含む。この場合、「化合物」には、いずれか一方の異性体も異性体の混合物も含まれる。これらの異性体は、従来公知の合成手法、分離手法（濃縮、溶媒抽出、カラムクロマトグラフィー、再結晶など）により、それぞれ単品として得ることができる。さらに、「化合物」には、全ての可能な共鳴形態も含まれる。またさらに、「化合物」には、全ての可能な同位体標識された化合物も含まれる。
【００２１】
「構造異性体」は、組成式は等しいが原子間の結合関係が異なる分子を意味する。構造異性体には、直鎖と分岐鎖による「鎖型異性体」、置換基の結合位置による「位置異性体」などが含まれる。
【００２２】
従って、式（Ｉ）に含まれるアミノ酸残基は、任意のアミノ酸の構造異性体を包含する。例えば、式（Ｉ）に含まれるアミノ酸残基がアラニンである場合、該アミノ酸残基はα−アラニンであってもよく、β−アラニンであってもよい。式（Ｉ）に含まれるアミノ酸残基がリシンである場合、該アミノ酸残基はα−リシンであってもよく、β−リシンであってもよい。式（Ｉ）に含まれるアミノ酸残基がロイシンまたはイソロイシンである場合、該アミノ酸残基はノルロイシンであってもよい。式（Ｉ）に含まれるアミノ酸残基がバリンである場合、該アミノ酸残基はノルバリンであってもよく、イソバリンであってもよい。
【００２３】
また、式（Ｉ）に含まれるＱ１とＱ２の両方がアミノ酸残基である場合、これらのアミノ酸残基は互いに入れ替わってもよい。
【００２４】
「立体異性体」は、１個以上の立体中心のキラリティーが異なる分子を意味する。立体異性体には、エナンチオマー、ジアステレオマーおよびラセミ体が含まれる。また、立体異性体には「回転異性体」も含まれる。「回転異性体」とは、大きな立体障害などが原因で、単結合周りの回転障壁が大きくなったことにより分離することが可能となった、異なる立体配座を有する分子同士を意味する。
【００２５】
従って、式（Ｉ）に含まれるアミノ酸残基は、任意のアミノ酸の立体異性体を包含する。すなわち、式（Ｉ）に含まれるアミノ酸残基は、Ｌ−アミノ酸残基であってもよく、Ｄ−アミノ酸残基であってもよい。式（Ｉ）に含まれるアミノ酸残基が２個以上の不斉炭素原子を有する任意のアミノ酸である場合には、式（Ｉ）に含まれるアミノ酸残基は、当該任意のアミノ酸のジアステレオマーも包含する。例えば、式（Ｉ）に含まれるアミノ酸残基がイソロイシンである場合、該アミノ酸残基はＬ−イソロイシンであってもよく、Ｄ−イソロイシンであってもよい。該アミノ酸残基はまた、Ｌ−アロイソロイシンであってもよく、Ｄ−アロイソロイシンであってもよい。式（Ｉ）に含まれるアミノ酸残基がスレオニンである場合、該アミノ酸残基はＬ−スレオニンであってもよく、Ｄ−スレオニンであってもよい。該アミノ酸残基はまた、Ｌ−アロスレオニンであってもよく、Ｄ−アロスレオニンであってもよい。
【００２６】
式（Ｉ）に含まれるＱ１とＱ２が互いに異なる残基である場合、下記式（Ｉ’）中にアスタリスク(＊)を付した炭素原子は不斉炭素原子となる。この場合、その立体配置はＳ配置およびＲ配置のいずれであってもよい。
【化３】
2019006679.tif 000007
【００２７】
「互変異性体」とは、異性体同士が互いに変換する異性化の速度が速く、どちらの異性体も共存する平衡状態に達しうるものを指す。互変異性には、例えばプロトンの１，３−転位によるプロトン互変異性が含まれる。
【００２８】
１つの実施形態では、本発明は、上記式（Ｉ）において、Ｑ１が、酸素原子、グリシン、アラニン、バリン、セリン、スレオニン、ロイシン、イソロイシン、アスパラギン、アスパラギン酸、グルタミン、およびグルタミン酸からなる群から選択され、Ｑ２が、バリン、アスパラギン、アスパラギン酸、スレオニン、ロイシン、イソロイシン、アラニン、グリシン、セリン、グルタミン、およびグルタミン酸、からなる群から選択される、化合物、またはその医薬上許容される塩もしくはプロドラッグを提供する。この場合、Ｑ１およびＱ２の組み合わせは、全ての可能な組み合わせを含む。
【００２９】
他の実施形態では、本発明は、上記式（Ｉ）において、Ｑ１およびＱ２の組み合わせが以下の表のいずれか一つの組み合わせである、化合物、またはその医薬上許容される塩もしくはプロドラッグを提供する。
【表３−１】
2019006679.tif 000008
【表３−２】
2019006679.tif 000009
【表３−３】
2019006679.tif 000010
【００３０】
別の実施形態では、本発明は、上記式（Ｉ）において、１およびＱ２の組み合わせが以下の表のいずれか一つの組み合わせである、化合物、またはその医薬上許容される塩もしくはプロドラッグを提供する。
【表４】
2019006679.tif 000011
【００３１】
本発明の化合物は、本発明の化合物を産生する微生物から得てもよい。「微生物」とは、例えば、放線菌、大腸菌（Ｅｓｃｈｅｒｉｃｈｉａ  ｃｏｌｉ）および枯草菌（Ｂａｃｉｌｌｕｓ  ｓｕｂｔｉｌｉｓ）などの細菌、カビおよび酵母などの真菌、ラン藻（Ｃｙａｎｏｂａｃｔｅｒｉａ）などの微細藻類、およびラビリンチュラ類（Ｌａｂｙｒｉｎｔｈｕｌｅａ）が挙げられるが、これらに限定されない。
【００３２】
「放線菌」とは、放線菌門（Ａｃｔｉｎｏｂａｃｔｅｒｉａ）に属するグラム陽性の真正細菌を指す。「放線菌」には、例えば、ストレプトマイセス・リビダンス（Ｓｔｒｅｐｔｏｍｙｃｅｓ  ｌｉｖｉｄａｎｓ）、ストレプトマイセス・バイオラセオルバー（Ｓｔｒｅｐｔｏｍｙｃｅｓ  ｖｉｏｌａｃｅｏｒｕｂｅｒ）、ストレプトマイセス・セリカラー（Ｓｔｒｅｐｔｏｍｙｃｅｓ  ｃｏｅｌｉｃｏｌｏｒ）、ストレプトマイセス・エバメチルス（Ｓｔｒｅｐｔｏｍｙｃｅｓ  ａｖｅｒｍｉｔｉｌｉｓ）、およびストレプトマイセス・グリセウス（Ｓｔｒｅｐｔｏｍｙｃｅｓ  ｇｒｉｓｅｕｓ）などのストレプトマイセス（Ｓｔｒｅｐｔｏｍｙｃｅｓ）属、アクチノシネマ・プレチオスム（Ａｃｔｉｎｏｓｙｎｎｅｍａ  ｐｒｅｔｉｏｓｕｍ）およびアクチノシネマ・ミルム（Ａｃｔｉｎｏｓｙｎｎｅｍａ  ｍｉｒｕｍ）などのアクチノシネマ（Ａｃｔｉｎｏｓｙｎｎｅｍａ）属、シュードノカルディア・オートトロフィカ（Ｐｓｅｕｄｏｎｏｃａｒｄｉａ  ａｕｔｏｔｒｏｐｈｉｃａ）、シュードノカルディア・サーモフィラ（Ｐｓｅｕｄｏｎｏｃａｒｄｉａ  ｔｈｅｒｍｏｐｈｉｌａ）などのシュードノカルディア（Ｐｓｅｕｄｏｎｏｃａｒｄｉａ）属、ならびにコリネバクテリウム・グルタミカム（Ｃｏｒｙｎｅｂａｃｔｅｒｉｕｍ  ｇｌｕｔａｍｉｃｕｍ）などのコリネバクテリウム（Ｃｏｒｙｎｅｂａｃｔｅｒｉｕｍ）属が含まれる。放線菌は、例えば、土中から分離することができ、また微生物寄託分譲機関から入手することもできる。
【００３３】
「酵母」には、有子嚢胞子酵母、担子胞子形成酵母、および不完全菌類に属する酵母が含まれる。例えばサッカロミセス・セレビシエ（Ｓａｃｃｈａｒｏｍｙｃｅｓ  ｃｅｒｅｖｉｓｉａｅ）などのサッカロミセス（Ｓａｃｃｈａｒｏｍｙｃｅｓ）属、シゾサッカロミセス・ポンベ（Ｓｃｈｉｚｏｓａｃｃｈａｒｏｍｙｃｅｓ  ｐｏｍｂｅ）などのシゾサッカロミセス（Ｓｃｈｉｚｏｓａｃｃｈａｒｏｍｙｃｅｓ）属、キサントフィロミセス・デンドロハウス（Ｘａｎｔｈｏｐｈｉｌｌｏｍｙｃｅｓ  ｄｅｎｄｒｏｈｏｕｓ）などのキサントフィロミセス（Ｘａｎｔｈｏｐｈｉｌｌｏｍｙｃｅｓ）属、クルイベロマイセス・マーキシアンス（Ｋｌｕｙｖｅｒｏｍｙｃｅｓ  ｍａｒｘｉａｎｕｓ）などのクルイベロマイセス（Ｋｌｕｙｖｅｒｏｍｙｃｅｓ）属、ヤロウィア・リポリティカ（Ｙａｒｒｏｗｉａ  ｌｉｐｏｌｙｔｉｃａ）などのヤロウィア（Ｙａｒｒｏｗｉａ）属、ピキア・スティピティス（Ｐｉｃｈｉａ  ｓｔｉｐｉｔｉｓ）などのピキア（Ｐｉｃｈｉａ）属、ならびにカンジダ・ユチリス（Ｃａｎｄｉｄａ  ｕｔｉｌｉｓ）などのカンジダ（Ｃａｎｄｉｄａ）属が含まれる。酵母は、例えば、植物、動物、土中などから分離することができ、また微生物寄託分譲機関から入手することもできる。
【００３４】
「微細藻類（ｍｉｃｒｏａｌｇａｅ）」とは、藻類（ａｌｇａｅ）から多細胞生物である海藻類を除いた、微視的な構造を持つ藻類を指す。「藻類（ａｌｇａｅ）」とは、酸素発生型光合成を行う生物のうち、主に地上に生息するコケ植物、シダ植物、種子植物を除いたもの全てを指す。藻類には、様々な単細胞生物及び多細胞生物が含まれる。例えば、海藻類、原核生物であるラン藻（Ｃｙａｎｏｂａｃｔｅｒｉａ）、真核生物である灰色植物門（Ｇｌａｕｃｏｐｈｙｔａ）、紅色植物門（紅藻）（Ｒｈｏｄｏｐｈｙｔａ）、緑色植物門（Ｃｈｌｏｒｏｐｈｙｔａ）などが含まれる。微細藻類には、複数個の細胞が群体を形成するものも含まれる。また、必ずしも水中に生息するとは限らず、土壌中や動物の体表などで生息しているものも存在する。「ラン藻（Ｃｙａｎｏｂａｃｔｅｒｉａ）」には、例えば、アナベナ・バリアビリス（Ａｎａｂａｅｎａ  ｖａｒｉａｂｉｌｉｓ）、ノストク・パンクチフォルメ（Ｎｏｓｔｏｃ  ｐｕｎｃｔｉｆｏｒｍｅ）、ノストク・リンキア（Ｎｏｓｔｏｃ ｌｉｎｃｋｉａ）、ノストク・コミューン(Ｎｏｓｔｏｃ  ｃｏｍｍｕｎｅ)、ノストク・ベルコスム（Ｎｏｓｔｏｃ  ｖｅｒｒｕｃｏｓｕｍ）およびノストク・ムスコルム（Ｎｏｓｔｏｃ  ｍｕｓｃｏｒｕｍ）などが含まれる。ラン藻は、例えば、自然界から分離することができ、また微生物寄託分譲機関から入手することもできる。
【００３５】
「ラビリンチュラ類（Ｌａｂｙｒｉｎｔｈｕｌｅａ）」は、ストラメノパイル（Ｓｔｒａｍｅｎｏｐｉｌｅｓ）に含まれるアメーバ様の真核生物である。ラビリンチュラ類には、例えば、オーランチオキトリウム（Ａｕｒａｎｔｉｏｃｈｙｔｒｉｕｍ）属、シゾキトリウム（Ｓｃｈｉｚｏｃｈｙｔｒｉｕｍ）属、スラウストキトリウム（Ｔｈｒａｕｓｔｏｃｈｙｔｒｉｕｍ）属、ウルケニア（Ｕｌｋｅｎｉａ）属が含まれる。ラビリンチュラ類は、例えば、海藻や陸上植物など自然界から分離することができ、また微生物寄託分譲機関から入手することもできる。
【００３６】
本発明の化合物を産生する微生物は、例えば、ＭＡＡを産生する微生物である。「ＭＡＡを産生する微生物」とは、ＭＡＡを生合成する能力を有する微生物、例えば、ＭＡＡ生合成酵素遺伝子を有する微生物を指す。これらの「ＭＡＡを産生する微生物」は、野生株であってもよく、あるいは人工的に変異処理が施された株であってもよい。人工的な変異処理としては、遺伝子組換え、ＵＶ照射、Ｘ線照射、変異剤での処理等が挙げられる。また、「ＭＡＡを産生する微生物」は、自然発生による突然変異株であってもよい。「ＭＡＡを産生する微生物」には、同種または異種由来のＭＡＡ生合成酵素遺伝子を有する微生物も含まれる。例えば、異種由来のＭＡＡ生合成酵素遺伝子が遺伝子組換えにより導入された微生物であってもよい。上述した微生物への異種遺伝子の導入には、当技術分野において広く知られている方法が用いられ得る。
【００３７】
同種または異種由来のＭＡＡ生合成酵素遺伝子を遺伝子組換えにより微生物に導入する場合、例えばプロモーター、５’非翻訳領域（ＵＴＲ）、形質転換体選択用マーカー遺伝子、３’非翻訳領域（ＵＴＲ）またはそれらの一部分を、当該遺伝子と共に導入してもよい。この場合、各微生物で用いられるものとして当業者に広く知られているプロモーター等を用いてもよい。さらに、ＭＡＡ生合成酵素遺伝子が導入される微生物のコドン使用頻度に応じて、当該遺伝子のコドンを適宜改変して用いてもよい。当業者であれば、ある微生物のコドン使用頻度を、例えば、かずさＤＮＡ研究所のデーターベースＣｏｄｏｎ  Ｕｓａｇｅ  Ｄａｔａｂａｓｅ（ｈｔｔｐ：／／ｗｗｗ．ｋａｚｕｓａ．ｏｒ．ｊｐ／ｃｏｄｏｎ／）を利用して、調査することができる。あるいは、ＧＥＮＥＡＲＴ社の遺伝子配列設計プログラムＧｅｎｅＯｐｔｉｍｉｚｅｒ（登録商標）などを用いて、コドン使用頻度を調査することもできる。さらに、そのようにして得られたコドン使用頻度の情報に基づいて、常套的な手段を用いて、対象の遺伝子のコドンを最適化することができる。
【００３８】
マイコスポリン様アミノ酸生合成酵素遺伝子には、例えば、アクチノシネマ・ミルム（Ａｃｔｉｎｏｓｙｎｎｅｍａ  ｍｉｒｕｍ）  ＤＳＭ４３８２７由来のａｍｉｒ＿４２５６（配列番号１）、ａｍｉｒ＿４２５７（配列番号２）、ａｍｉｒ＿４２５８（配列番号３）およびａｍｉｒ＿４２５９（配列番号４）遺伝子、シュードノカルディア属菌（Ｐｓｅｕｄｏｎｏｃａｒｄｉａ  ｓｐ．）  Ｐ１由来のｐｓｅＰ１＿０１０１０００３１４２５（配列番号５）、ｐｓｅＰ１＿０１０１０００３１４３０（配列番号６）、ｐｓｅＰ１＿０１０１０００３１４３５（配列番号７）、ｐｓｅＰ１＿０１０１０００３１４４０（配列番号８）遺伝子、アナベナ・バリアビリス（Ａｎａｂａｅｎａ  ｖａｒｉａｂｉｌｉｓ）  ＡＴＣＣ２９４１３由来のＡｖａ３８５５、Ａｖａ３８５６、Ａｖａ３８５７およびＡｖａ３８５８遺伝子（Ｂａｌｓｋｕｓ  ＥＰら、Ｓｃｉｅｎｃｅ、（２０１０）、３２９：１６５３−１６５６を参照のこと）、ノストク・パンクチフォルメ（Ｎｏｓｔｏｃ  ｐｕｎｃｔｉｆｏｒｍｅ）  ＡＴＣＣ２９１３３由来ｍｙｓＡ、ｍｙｓＢ、ｍｙｓＣおよびｍｙｓＤ遺伝子（ＪＯＵＲＮＡＬ  ＯＦ  ＢＡＣＴＥＲＩＯＬＯＧＹ，  Ｎｏｖ．  ２０１１，  Ｖｏｌ．１９３，  Ｎｏ．２１，  ｐ．５９２３−５９２８を参照のこと）などが挙げられるが、これらに限定されない。例えば、ラビリンチュラ類が用いられる場合、一実施形態では、マイコスポリン様アミノ酸生合成酵素遺伝子として、コドン改変されたａｍｉｒ＿４２５６（配列番号９）、コドン改変されたａｍｉｒ＿４２５７（配列番号１０）、コドン改変されたａｍｉｒ＿４２５８（配列番号１１）およびコドン改変されたａｍｉｒ＿４２５９（配列番号１２）遺伝子が用いられる。
【００３９】
あるいは、上記式（Ｉ）で示される化合物は、従来公知の方法に従って、化学合成によって合成してもよい。例えば、国際公開第０２／３９９７４号を参照のこと。
【００４０】
化合物の同定方法は、従来公知の方法が用いられ得る。例えば、高速液体クロマトグラフ−飛行時間型質量分析法（ＨＰＬＣ−ＴＯＦＭＳ）を用いてもよい。あるいは、高分解能質量分析法（ＨＲ−ＭＳ：Ｈｉｇｈ  Ｒｅｓｏｌｕｔｉｏｎ  Ｍａｓｓ  Ｓｐｅｃｔｒｏｍｅｔｒｙ）および核磁気共鳴（ＮＭＲ：Ｎｕｃｌｅａｒ  Ｍａｇｎｅｔｉｃ  Ｒｅｓｏｎａｎｃｅ）法を組み合わせることで、新規化合物を同定してもよい。また、ＨＰＬＣを用いて、保持時間およびＵＶスペクトルの結果から新規化合物を同定してもよい。あるいは、フォトダイオードアレイ検出器とＨＲ−ＭＳ検出器を備えたＨＰＬＣを用いて、紫外吸収スペクトルと精密質量を測定することにより、新規化合物を同定してもよい。
【００４１】
他の実施態様において、本発明は、上述した本発明の化合物、またはその医薬上許容される塩もしくはプロドラッグを含む、組成物を提供する。１つの実施形態では、本発明の組成物はシノリンまたはポルフィラ−３３４の少なくとも１つをさらに含んでもよい。他の実施形態では、本発明の組成物は紫外線吸収用組成物である。このような組成物は、化粧品、医薬品分野のほか、塗料組成物やその他のコーティング剤として使用され得る。例えば、本発明の紫外線吸収用組成物は、ヒトの皮膚に適用される場合、本発明の化合物を約０．０５〜１０重量％含み、かつ油相媒質を約５〜４０重量％、乳化剤を約１〜１０重量％、微量の補助剤および水などの水相媒質を含み得る。例えば、本発明の組成物は、医薬品、医薬部外品、または化粧品用組成物である。特に、本発明の組成物は化粧品用組成物である。
【００４２】
別の実施態様において、本発明は、上述した本発明の組成物を含む、医薬品、医薬部外品、または化粧品を提供する。特に、本発明は、上述した本発明の組成物を含む化粧品を提供する。医薬部外品や化粧品としては、例えば、化粧水、乳液、ジェル、美容液、クリーム、日焼け止めクリーム、パック、マスク、ファンデーション、おしろい、浴用剤、ボディローション、シャンプー、リンス、ヘアトリートメント、ヘアコンディショナー、整髪料、ヘアトニック等が挙げられるが、これらに限定されるものではない。
【００４３】
別の実施態様において、本発明は、急性皮膚反応、皮膚老化および皮膚癌からなる群から選択される一以上の症状または疾患を予防するための、上述した本発明の化合物、またはその医薬上許容される塩もしくはプロドラッグを含む、組成物を提供する。当該組成物は、活性成分として、有効量の本発明の化合物、またはその医薬上許容される塩もしくはプロドラッグを含む。
【００４４】
例えば、上述した本発明の組成物は、クリーム、ローション、ペースト、軟膏、エマルジョン（水中油型エマルジョン、油中水型エマルジョン、多重エマルジョン、ミクロエマルジョン、ＰＥＴ−エマルジョン、ピッカリング・エマルジョン）、ゲル（ヒドロゲル、アルコールゲル）、懸濁液、フォーム、スプレー、錠剤または粉末などの形態である。
【００４５】
また、上述した本発明の組成物は、化粧品、医薬部外品または医薬品に許容される他の成分をさらに含んでもよい。このような成分としては、塩化ベンザルコニウム、塩化ベンゼトニウム、塩化ヘキサメトニウム、ブチルアルコール、ベンジルアルコール、メチルパラベンもしくはプロピルパラベンなどのアルキルパラベン、カテコール、レゾルシノール、シクロヘキサノール、およびｍ−クレゾールなどの保存料；アスコルビン酸およびメチオニンなどの酸化防止剤；リン酸、クエン酸および他の有機酸などのバッファー；ソルビタンエステル、Ｔｗｅｅｎ（登録商標）、シリコンポリオール、ポタシウムステアレートおよびエトキシル化脂肪酸エステルなどの乳化剤；乳化安定剤；アニオン性、カチオン性、非イオン性または両性ポリマー；ＥＤＴＡなどのキレート剤；油相媒質（ミネラルオイルなどの炭化水素系オイル、パラフィンワックス、天然オイル、シリコンオイル、イソプロピルパルミテートなどの脂肪酸エステル、ステアリルアルコールなどの脂肪酸アルコール）；増粘剤；保湿剤；エモリエント剤；ポリエチレングリコール（ＰＥＧ）などの界面活性剤；酸性化または塩基性化剤；香料；芳香剤；染料；着色剤；あるいは化粧品、医薬部外品または医薬品に通常配合される他の成分など、通常の化粧品、医薬部外品または医薬品の補助剤および添加剤を含み得る。
【００４６】
本発明の組成物は、例えば、上述した本発明の化合物を産生する微生物の培養物の粗抽出物そのものであってもよく、粗抽出物を含むものであってもよい。あるいは、本発明の化合物を単離または合成し、それらを混合することによって本発明の組成物を調製してもよい。
【００４７】
別の実施態様において、本発明は、急性皮膚反応、皮膚老化および皮膚癌からなる群から選択される一以上の症状または疾患を予防するための医薬の製造のための、本発明の化合物、またはその医薬上許容される塩もしくはプロドラッグの使用を提供する。
【００４８】
別の実施態様において、本発明は、急性皮膚反応、皮膚老化および皮膚癌からなる群から選択される一以上の症状または疾患の予防方法における使用のための、本発明の化合物、またはその医薬上許容される塩もしくはプロドラッグを提供する。
【００４９】
別の実施態様において、本発明は、本発明の化合物、またはその医薬上許容される塩もしくはプロドラッグを含む組成物を対象の皮膚に塗布することを含む、急性皮膚反応、皮膚老化および皮膚癌からなる群から選択される一以上の症状または疾患を予防する方法を提供する。
【実施例】
【００５０】
以下に実施例を示して本発明を具体的かつ詳細に説明するが、実施例は本発明の例示のために用いられるものであり、本発明の限定を意図するものではない。
【実施例１】
【００５１】
１−１．ストレプトマイセス・リビダンスの前培養
５ｍＬのＴＳＢ培地（以下の表を参照のこと）に、マイコスポリン様アミノ酸生合成酵素遺伝子を有する、ストレプトマイセス・リビダンス（Ｓｔｒｅｐｔｏｍｙｃｅｓ  ｌｉｖｉｄａｎｓ）  １３２６株のグリセロールストックを添加した。２８℃、１６０ｒｐｍで４８時間、振盪培養した。
【表５】
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【００５２】
１−２．ストレプトマイセス・リビダンスの本培養
０．１％量の前培養液を、５００ｍＬバッフル付フラスコ中の１００ｍＬのＴＳＢｔ培地（以下の表を参照のこと）２０本に添加した。なお、グルコースの初期濃度が５０ｇ／Ｌとなるように、培養開始時にＴＳＢｔ培地へグルコースをさらに追加した。２８℃、１６０ｒｐｍで２週間、振盪培養した。
【表６】
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【表７】
2019006679.tif 000014
【００５３】
１−４．ＭＡＡの測定
培養終了後、菌体を含んだ培養液を回収し、物理的に破砕した。破砕液を８０００ｒｐｍで２０分間遠心分離することで残渣と培養液とに分離した。分離した培養液を濃縮してサンプル水溶液とし、ＨＰＬＣによりサンプル溶液中の化合物の分析を行った。ＨＰＬＣ測定条件は以下の表の通りである。
【表８】
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【００５４】
１−５．結果
得られた化合物は以下の式（Ｉ’）で表され、マイコスポリン様アミノ酸の構造を有していた。式（Ｉ’）中、Ｑ１およびＱ２は以下の表に示す通りであった。各化合物の最大吸収波長（λｍａｘ）も以下の表に示す。なお、表中、別途記載した場合を除き、式（Ｉ’）中にアスタリスク(＊)を付した不斉炭素原子の立体配置はＳ配置およびＲ配置の両方を包含する。
【化４】
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【表９】
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【００５５】
化合物１、５〜８および１１は既知の化合物であった。具体的には、化合物１はポルフィラ−３３４、化合物５はシノリン、化合物６はマイコスポリン−グリシン−アラニン、化合物７はマイコスポリン−アラニン、化合物８はマイコスポリン−グリシン、化合物１１はマイコスポリン−グリシン−バリンであった。その他の化合物は新規に同定された化合物である。
【産業上の利用可能性】
【００５６】
本発明によれば、紫外線吸収作用を有する天然由来の新規化合物を得ることができる。得られた化合物、その医薬上許容される塩およびプロドラッグは、紫外線吸収用組成物の有効成分として利用可能である。従って、本発明は、各種工業製品の紫外線による劣化からの保護、ならびに化粧品および医薬品などの分野において利用可能である。
【配列表フリーテキスト】
【００５７】
SEQ ID NO:9: Codon-optimized amir_4256 for SAM2179
SEQ ID NO:10: Codon-optimized amir_4257 for SAM2179
SEQ ID NO:11: Codon-optimized amir_4258 for SAM2179
SEQ ID NO:12: Codon-optimized amir_4259 for SAM2179
【配列表】
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