(57)【要約】      （修正有）【課題】トランス−クロミフェン代謝物およびその使用。【解決手段】下式に例示されるような化合物は続発性性腺機能低下症、２型糖尿病、高コレステロール症、高トリグリセリド症、衰弱、脂肪異栄養症、女性および男性の不妊症、良性前立腺肥大症、前立腺がん、乳がん、卵巣がんなどを含む障害の治療に使用できる。2019023210.tif 0000332019023210.tif 000034【選択図】なし【特許請求の範囲】
【請求項１】
明細書中に記載の発明。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本願は、米国特許法第１１９条（ｅ）により、２０１１年８月４日出願の米国特許仮出願第６１／５１５，２７８号の優先権を主張し、その全内容が参照により本明細書に援用される。
【０００２】
本発明は、実質的に純粋な形態のトランス−クロミフェンの代謝物、それを含む医薬組成物、ならびに種々のホルモン依存障害の治療方法に関する。
【背景技術】
【０００３】
クロミフェンは、タモキシフェンに関連する、選択的エストロゲン受容体モジュレータである。クロミフェンはエストロゲン受容体に結合して、正常な視床下部のエストロゲン・フィードバックおよびそれに続く脳下垂体のネガティブ・フィードバックを遮断する。これは、黄体形成ホルモン（ＬＨ）および卵胞刺激ホルモン（ＦＳＨ）の上昇に繋がる。男性においては、これらの性腺刺激ホルモンの濃度の上昇が、精巣のライディヒ細胞を刺激し、テストステロン濃度を上昇させる。例えば、非特許文献１および非特許文献２は、若年および老年男性の両方において、クロミフェンによる治療の後、ＦＳＨ、ＬＨの上昇を見出した。彼らはまた、男性において、フリーテストステロンおよび全テストステロンの上昇を示すことを、若年男性については顕著な上昇を示すことを見出した。
【０００４】
女性においては、クロミフェンは現在、シス−異性体が約３０％〜５０％存在する（メルクマニュアル）シス−およびトランス−両異性体の混合物として、無排卵症の女性における排卵誘発に対して認可されている。無排卵症の女性における、クロミフェンの投与に続くＬＨおよびＦＳＨの上昇は、卵胞を成長させ、最終的には排卵を誘発する。この医薬は、１日当たり１００ｍｇまでの用量において５日間投与されることが推奨されている。
【０００５】
非特許文献３は、クロミフェンは、彼らが呼ぶところの、シス、−Ｚ−、クロミフェン（シス−クロミフェンまたはズクロミフェン）およびトランス−、Ｅ−、クロミフェン（トランス−クロミフェンまたはエンクロミフェン）の２種の幾何異性体の混合物であることを示している。Ｅｒｎｓｔらよれば、トランス−クロミフェンＨＣｌは１４９℃〜１５０．５℃の融点を有するのに対して、シス−クロミフェンＨＣｌは１５６．５℃〜１５８℃の融点を有する。Ｅｒｎｓｔらはまた、（トランス−異性体）は抗エストロゲン性（ＡＥ）である一方、シス−異性体は、より効能が高い、そしてよりエストロゲン性の形態であり、抗エストロゲン活性を有することもまた報告されている。この著者らは、混合物の方がトランス−クロミフェン単独よりもより効果的であると述べ、この医薬の排卵作用に対する効果が、両方の形態に帰するとしている。トランス−異性体は、視床下部のレベルにおいて排卵を促進する。エストロゲン性のシス−異性体は、排卵に繋がる生理的経路中のどこか他所において、排卵の増進に寄与する。これらの異性体は、異なる生体内での半減期を有することも報告されている。シス−異性体は、１回の投与の後、１ヶ月以上の間、血液中の残存濃度があることが報告されている。
【０００６】
クロミフェンは、視力障害、腹部の不快感、女性化乳房症、精巣腫瘍、血管運動性紅潮、吐き気および頭痛を含む多くの副作用と関連付けられてきた。更に他の研究は、クロミフェンが遺伝毒性および腫瘍増進作用の両方を有することを示唆している。これらの検証の最終的な結果は、男性におけるテストステロン欠乏症の治療に対する長期的な療法に関しては、３０％と５０％の間のシス異性体を有する現在の形式のクロミフェンでは、受け入れられないであろうというものである。
【先行技術文献】
【非特許文献】
【０００７】
【非特許文献１】Ｔｅｎｏｖｅｒら、Ｊ．  Ｃｌｉｎ．  Ｅｎｄｏｃｒｉｎｏｌ．  Ｍｅｔａｂ．  ６４：１１０３、（１９８７）
【非特許文献２】Ｔｅｎｏｖｅｒら、Ｊ．  Ｃｌｉｎ．  Ｅｎｄｏｃｒｉｎｏｌ．  Ｍｅｔａｂ．  ６４：１１１８  （１９８７）
【非特許文献３】Ｅｒｎｓｔら、Ｊ．  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔ．  Ｓｃｉ．  ６５：１４８  （１９７６
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００８】
クロミフェンのトランス−異性体（トランス−クロミフェンまたはエンクロミフェン）の経口投与は、男性における続発性性機能不全症から無排卵症の女性における排卵誘発に至る、多種多様な障害の治療において有効であることが実証されてきた。しかし、この薬剤の肝臓による初回通過代謝から、治療効果を得るにためには、比較的大きな用量の経口投与が必要とされる。トランス−クロミフェンの活性な代謝物が発見されれば、本技術分野における重要な進歩となる。
【課題を解決するための手段】
【０００９】
本発明は、実質的に純粋な、トランス−クロミフェンの代謝物およびその塩、好ましくはクエン酸塩を提供する。また、実質的に純粋な、トランス−クロミフェンの代謝物またはその塩および薬学的に許容される担体を含む医薬組成物も提供される。
【００１０】
また、本発明は、有効な量のトランス−クロミフェンの投与によって改善される障害の治療方法
および／または予防方法にも関する。換言すれば、本発明は、トランス−クロミフェンにより治療され得る任意の障害の治療方法であって、治療上有効な量の、実質的に純粋なトランス−クロミフェン代謝物またはそれを含む医薬組成物を、そのような治療を必要とする患者に投与するステップを含む、前記治療方法を提供する。
【００１１】
有効な量のトランス−クロミフェンの投与によって改善される障害（従って本発明によって治療され得る障害）の例としては、限定するものではないが、続発性性機能不全症、２型糖尿病、高コレステロール症、高トリグリセリド症、衰弱、脂肪異栄養症、女性および男性の不妊症、良性前立腺肥大症、前立腺がん、乳がん、子宮がんおよび卵巣がんが挙げられる。
本発明は、例えば、以下を提供する。
（項目１）
実質的に純粋な、Ｃ２６Ｈ３０ＮＯ３Ｃｌ、Ｃ２６Ｈ２８ＮＯ２Ｃｌ、Ｃ２７Ｈ３０ＮＯ３Ｃｌ、およびＣ２４Ｈ２４ＮＯＣｌからなる群より選択される化学式を有する化合物またはその薬学的に許容される塩。
（項目２）
【化１】
2019023210.tif 000002
、
【化２】
2019023210.tif 000003
、
【化３】
2019023210.tif 000004
、
【化４】
2019023210.tif 000005
、
【化５】
2019023210.tif 000006
、
【化６】
2019023210.tif 000007
、
【化７】
2019023210.tif 000008
【化８】
2019023210.tif 000009
および
【化９】
2019023210.tif 000010
、
からなる群より選択される構造式を有する項目１記載の実質的に純粋な化合物、またはその薬学的に許容される塩。
（項目３）
項目２記載の１種または２種以上の化合物と薬学的に許容される担体とを含む医薬組成
物。
（項目４）
治療を必要とするヒト男性患者における続発性性腺機能低下症またはそれに伴う障害の治療方法であって、有効な量の項目３の医薬組成物を前記患者に投与することを含む、治療方法。
（項目５）
前記組成物が断続的に投与される、項目４記載の方法。
（項目６）
前記組成物が、３〜３０日に１回の間隔で前記患者に投与される、項目５記載の方法。（項目７）
前記間隔の間、少なくとも３００ｎｇ／ＤＬの血清テストステロン濃度が維持される、項目６記載の方法。
（項目８）
続発性性腺機能低下症に伴う障害が、筋肉量の減少、骨密度の減少、性欲減退、精液過少症、および無精子症より選択される、項目４記載の方法。
（項目９）
ヒト女性における不妊症の治療方法であって、有効な量の項目３の医薬組成物を前記女性に投与することを含む、不妊症の治療方法。
（項目１０）
前記組成物が、毎日の投薬として、５日間連続で前記女性に投与される、項目９記載の方法。
（項目１１）
前記女性が無排卵症である、項目９記載の方法。
（項目１２）
前記組成物が、月経周期の初期卵胞期の間に投与される、項目９記載の方法。
（項目１３）
前記連続する５日間の投与期間が、自発的な月経または誘発された月経の開始後２日目〜５日目に開始される、項目１０記載の方法。
（項目１４）
ヒト男性における代謝症候群から２型糖尿病への移行の予防方法であって、有効な量の項目３の組成物を、代謝症候群を有するヒト男性に投与することを含む、予防方法。
（項目１５）
ヒト男性における空腹期血糖濃度の低減方法であって、有効な量の項目３の組成物を、前記低減を必要とするヒト男性に投与することを含む、低減方法。
（項目１６）
ヒト男性における２型糖尿病の治療方法であって、有効な量の項目３の組成物を、２型糖尿病を有する前記ヒト男性に投与することを含む、治療方法。
（項目１７）
ヒト女性における乳がんの予防方法であって、有効な量の項目３の組成物を、乳がん発生の危険が高い女性に投与することを含む、予防方法。
（項目１８）
ヒト女性における乳がんの治療方法であって、有効な量の項目３の組成物を、乳がんを有する女性に投与することを含む、治療方法。
（項目１９）
ヒト女性における子宮内膜がん、子宮がんまたは卵巣がんの治療方法であって、有効な量の項目３の組成物を、前記治療を必要とする女性に投与することを含む、治療方法。
（項目２０）
前記化合物の塩がクエン酸塩である、項目２記載の化合物またはその薬学的に許容される塩。
（項目２１）
式
【化１０】
2019023210.tif 000011
を有する、項目２記載の化合物またはその薬学的に許容される塩。
（項目２２）
式
【化１１】
2019023210.tif 000012
を有する、項目２記載の化合物またはその薬学的に許容される塩。
【図面の簡単な説明】
【００１２】
【図１】健常男性（若年および老年）における正常な分泌全血清テストステロンプロファイルの代表的なグラフである。
【図２】トランス−クロミフェンの化学構造を示す。
【発明を実施するための形態】
【００１３】
本発明は、様々な形態において実施されることが可能であるが、本開示は本発明の例示であるとみなされるべきであり、本発明を、説明がなされる特定の実施形態に限定することを意図しないものであるとの理解に立って、以下のいくつかの実施形態の記載がなされる。見出しは利便性のためのみに付されており、本発明を何ら限定するものと解釈されるべきではない。どの見出しで説明する実施形態は、他のどの見出しで説明する実施形態と組み合わせることができる。
【００１４】
本明細書中に提示されるいずれの数値またはデータによって設定され得るいずれの範囲
、比率および比率の範囲も、本発明の更なる実施形態を代表することが理解されるべきである。これは、限定の上限および／または下限を含んでも含まなくてもよく設定され得る範囲を含む。従って、当業者は、多くのそのような比率、範囲および比率の範囲が明確に、本明細書に提示されるデータおよび数値に由来し得ること、およびそれらの全てが本発明の実施形態を代表することを認識する。
【００１５】
本化合物、本組成物および本方法が開示および記載される前に、本明細書中で用いられる用語は、特定の実施形態を記載することのみを目的とするものであり、それに限定することを意図するものではないことが理解されるべきである。本明細書および添付される特許請求の範囲中において用いられる、単数形「ａ」、「ａｎ」および「ｔｈｅ」は、文脈がそれとは異なることを明確に規定しない限り、複数の対象物を包含する点に留意が必要である。
【００１６】
定義
【００１７】
用語「経口」投与とは、活性物質が、経口摂取される、すなわち、吸収のため消化器系へ送達されるように設計された製剤中に存在することを意味する。
【００１８】
用語「有効用量」とは、特定の症状を治療するために十分な組成物の活性成分の量を意味する。
【００１９】
本明細書中において使用される用語「治療する」または「治療」とは、任意の黄体ホルモン依存の障害または疾患の治療をいい、限定するものではないが、障害または疾患の進展を阻止して障害または疾患を抑制すること、障害または疾患を和らげること、例えば、障害または疾患の後退を起こすこと、あるいは、障害または疾患により引き起こされる症状を和らげること、障害または疾患の症状を和らげることを含む。
【００２０】
黄体ホルモン依存の障害または疾患との関係において、用語「予防する」または「予防」とは、障害または疾患が生じていない場合には、それらの発生の開始を防止すること、障害または疾患が既に存在する場合には、更なる障害または疾患の発生を防止することを意味する。
【００２１】
用語「実質的に純粋な」とは、高速液体クロマトグラフィー（ＨＰＬＣ）によって測定される本発明の化合物の純度が、約８０％を超える、好ましくは約９０％を超える、より好ましくは９５％を超える、そして最も好ましくは約９９％を超えることを意味する。
【００２２】
用語「薬学的に許容される塩」とは、薬学的に許容される無毒性の無機酸または有機酸から調製される塩をいう。無機酸としては、限定するものではないが、塩酸、臭化水素酸、ヨウ化水素酸、硝酸、硫酸、およびリン酸が挙げられる。有機酸としては、限定するものではないが、ギ酸、酢酸、プロピオン酸、コハク酸、安息香酸カンファースルホン酸、クエン酸、フマル酸、グルコン酸、イセチオン酸、酪酸、リンゴ酸、ムチン酸、酒石酸、パラトルエンスルホン酸、グリコール酸、グルクロン酸、マレイン酸、フロン酸、グルタミン酸、安息香酸、アンスラニル酸、サリチル酸、フェニル酢酸、マンデル酸、エンボニン酸（パモ酸）、メタンスルホン酸、エタンスルホン酸、パントテン酸、ベンゼンスルホン酸、ステアリン酸、スルファニル酸、アルギニン酸、およびガラクツロン酸などの、脂肪族酸、芳香族酸、カルボン酸およびスルホン有機酸が挙げられる。好ましい塩は、クエン酸塩である。
【００２３】
様々な実施形態において、本発明は、実質的に純粋な形態のトランス−クロミフェンの代謝物を提供する。代謝物は、適当な供給源から精製されても、または精製され単離され
た形態で合成的に製造されてもよい。例えば、本発明の代謝物は、トランス−クロミフェンの投与に続いて、実験動物の体組織または体液から同定され、単離または分離されてもよい。代わりに、本発明の代謝物は、トランス−クロミフェンを用いた培養に続いて、動物の肝細胞から、同定され、単離されてもよい。
【００２４】
一つの態様において、代謝物は、チトクロームＰ４５０（ＣＹＰ）ファミリーの肝酵素の作用に由来してもよい。経口薬剤の代謝は、多くの場合、肝臓肝細胞内に存在するこれらの酵素の作用に基づく。そのような、薬剤が体内に分配される前に消化管から肝臓を通過する「初回通過」代謝は、消化管から血流への活性な医薬物質の移動に対する潜在的な障壁を代表する。ＣＹＰ酵素は明確な種類として分類され、全哺乳類を通じて類似体を有する。
【００２５】
様々な実施形態において、本発明は、ＣＹＰ２またはＣＹＰ３ファミリーを構成する酵素の触媒作用によって生成されるトランス−クロミフェン代謝物を提供する。好ましい実施形態において、代謝物は、主としてＣＹＰ２Ｄ６および／またはＣＹＰ３Ａ４および／またはＣＹＰ３Ａ５の触媒作用を通じて生成される。
【００２６】
一つの実施形態において、本発明は、Ｃ２６Ｈ２９ＮＯ４、Ｃ２７Ｈ３１ＮＯ３、Ｃ２６Ｈ３０ＮＯ３Ｃｌ、Ｃ３２Ｈ３６ＮＯ８Ｃｌ、Ｃ２６Ｈ３０ＮＯ３Ｃｌ、Ｃ２７Ｈ３０ＮＯ３Ｃｌ、Ｃ３２Ｈ３６ＮＯ８Ｃｌ、Ｃ２６Ｈ２８ＮＯ３Ｃｌ、Ｃ３６Ｈ４３Ｎ４Ｏ７ＳＣｌ、Ｃ２６Ｈ３０ＮＯ３Ｃｌ、Ｃ３６Ｈ４３Ｎ４Ｏ７ＳＣｌ、Ｃ２７Ｈ３１ＮＯ３、Ｃ２４Ｈ２４ＮＯ２Ｃｌ、Ｃ２６Ｈ２８ＮＯ２Ｃｌ、Ｃ２７Ｈ３０ＮＯ３Ｃｌ、Ｃ２７Ｈ３０ＮＯ６ＣｌＳ、Ｃ２６Ｈ２８ＮＯ３Ｃｌ、Ｃ２６Ｈ２８ＮＯ７Ｃｌ、Ｃ２６Ｈ２８ＮＯ２Ｃｌ、Ｃ２７Ｈ３０ＮＯ３Ｃｌ、Ｃ２４Ｈ２４ＮＯＣｌ、Ｃ２６Ｈ２８ＮＯ２Ｃｌ、およびＣ２４Ｈ２４ＮＯ２Ｃｌから選択される化学式を有するトランス−クロミフェン代謝物を提供する。
【００２７】
好ましい実施形態において、トランス−クロミフェン代謝物は、Ｃ２６Ｈ３０ＮＯ３Ｃｌ、Ｃ２６Ｈ２８ＮＯ２Ｃｌ、Ｃ２７Ｈ３０ＮＯ３Ｃｌ、およびＣ２４Ｈ２４ＮＯＣｌから選択される化学式を有する。
【００２８】
特に好ましい実施形態において、本発明は、実質的に純粋なトランス−クロミフェン代謝物であり、ＣＹＰ２Ｄ６の触媒作用によって生成され、式
【化１】
2019023210.tif 000013
を有する、４−ヒドロキシ−トランス−クロミフェン（または４−ＯＨ−トランス−クロミフェン）およびその薬学的に許容される塩を提供する。この代謝物は、トランス−クロミフェンのフェニル環のパラ位における４−ヒドロキシル化によって生成される。
【００２９】
好ましい実施形態において、本発明は、実質的に純粋なトランス−クロミフェン代謝物であり、ＣＹＰ２Ｂ６の触媒作用によって生成され、式
【化２】
2019023210.tif 000014
を有する、４’−ヒドロキシ−トランス−クロミフェン（または４’−ＯＨ−トランス−クロミフェン）およびその薬学的に許容される塩を提供する。この代謝物は、トランス−クロミフェンのフェニル環のパラ位における４’−ヒドロキシル化によって生成される。
【００３０】
他の好ましい実施形態において、本発明は、実質的に純粋なトランス−クロミフェン代謝物であり、ＣＹＰ３Ａ４またはＣＹＰ３Ａ５の触媒作用によって生成され、式
【化３】
2019023210.tif 000015
を有する、３−ヒドロキシ−トランス−クロミフェン（または３−ＯＨ−トランス−クロミフェン）およびその薬学的に許容される塩を提供する。
【００３１】
他の好ましい実施形態において、本発明は、実質的に純粋なトランス−クロミフェン代謝物であり、ＣＹＰ３Ａ４またはＣＹＰ３Ａ５の触媒作用によって生成され、式
【化４】
2019023210.tif 000016
を有する、Ｎ−デスエチル−トランス−クロミフェンおよびその薬学的に許容される塩を提供する。この代謝物は、トランス−クロミフェンから、エチル基のＮ−デスアルキル化によって生成される。
【００３２】
他の好ましい実施形態において、本発明は、実質的に純粋なトランス−クロミフェン代謝物であり、ＣＹＰ３Ａ４／５およびＣＹＰ２Ｄ６の逐次的触媒作用によって生成され、式
【化５】
2019023210.tif 000017
を有する、３，４−ジヒドロキシ−トランス−クロミフェンおよびその薬学的に許容される塩を提供する。
【００３３】
関連する好ましい実施形態において、ＣＹＰ３Ａ４／５およびＣＹＰ２Ｄ６の逐次的触媒作用によって生成される代謝物は、二重結合が還元されるように更に修飾される。従って、また、本発明は、式
【化６】
2019023210.tif 000018
（Ｃ２６Ｈ３０ＮＯ３Ｃｌ）を有する、実質的に純粋なトランス−クロミフェン代謝物をも提供する。
【００３４】
関連する他の好ましい実施形態において、ＣＹＰ３Ａ４／５およびＣＹＰ２Ｄ６の逐次的触媒作用によって生成される代謝物は、モノメチル化される。従って、また、本発明は、化学式Ｃ２７Ｈ３０ＮＯ３Ｃｌを有する、実質的に純粋なトランス−クロミフェン代謝物をも提供する。モノメチル化された代謝物は、次の構造式の任意の１種を有することができる。
【化７】
2019023210.tif 000019
【化８】
2019023210.tif 000020
【化９】
2019023210.tif 000021
【化１０】
2019023210.tif 000022
【００３５】
他の好ましい実施形態において、本発明は、ＣＹＰ３Ａ４／５およびＣＹＰ２Ｂ６の逐次的触媒作用によって生成され、式
【化１１】
2019023210.tif 000023
を有する、実質的に純粋なトランス−クロミフェン代謝物およびその薬学的に許容される塩を提供する。
【００３６】
他の好ましい実施形態において、本発明は、ＣＹＰ２Ｄ６およびＣＹＰ２Ｂ６の逐次的触媒作用によって生成され、式
【化１２】
2019023210.tif 000024
を有する、実質的に純粋なトランス−クロミフェン代謝物およびその薬学的に許容される塩を提供する。
【００３７】
様々な実施形態において、また、本発明は、記載されるような１種または２種以上のトランス−クロミフェン代謝物またはその塩及び薬学的に許容される担体を含み、本明細書中に記載される方法において用いることができる医薬組成物をも提供する。
【００３８】
様々な実施形態において、また、本発明は、トランス−クロミフェン代謝物またはその塩（またはそれらを含む医薬組成物）の、患者におけるトランス−クロミフェン応答性障害の治療における使用を提供する。
【００３９】
一つの実施形態において、テストステロン濃度を高める方法であって、有効な量のトランス−クロミフェン代謝物またはその塩（あるいはそれを含む医薬組成物）をそのような治療を必要とする患者に投与するステップを含む、方法が提供される。関連する実施形態において、限定されないが、精液過少症、無精子症、衰弱および憂うつを含む、テストステロン欠乏に関係する障害の治療方法が提供される。哺乳類におけるテストステロン濃度を高めるためのトランス−クロミフェンの使用が、その全ての内容が本明細書に援用される米国特許第７，７５９，３６０号、特に第４カラム第５１行から第６カラム第５行に記載される。一つの好ましい実施形態において、トランス−クロミフェン代謝物は、４−ＯＨ−トランス−クロミフェンである。他の好ましい実施形態において、患者は、続発性性腺機能低下症のヒト男性である。
【００４０】
関連する実施形態において、ヒト男性における続発性性腺機能低下症の治療方法であって、有効な量のトランス−クロミフェン代謝物またはその塩（またはそれらを含む医薬組成物）をそのような治療を必要とする患者に投与するステップを含む、治療方法が提供される。好ましい実施形態において、トランス−クロミフェン代謝物は、４−ＯＨ−トランス−クロミフェンである。
【００４１】
他の実施形態において、コレステロール濃度を低下させる方法であって、有効な量のトランス−クロミフェン代謝物またはその塩（またはそれらを含む医薬組成物）をそのような治療を必要とする患者に投与するステップを含む、方法が提供される。コレステロール濃度を低下させるためのトランス−クロミフェンの使用が、その全ての内容が本明細書に援用される米国特許第７，３６８，４８０号、特に第４カラム第６６行から第６カラム第１０行までに記載される。一つの好ましい実施形態において、トランス−クロミフェン代謝物は、４−ＯＨ−トランス−クロミフェンである。他の好ましい実施形態において、患者は、続発性性腺機能低下症のヒト男性である。
【００４２】
他の実施形態において、良性前立腺肥大症、前立腺がんおよび高トリグリセリド症からなる群より選択される症状の治療および／または予防方法であって、有効な量のトランス−クロミフェン代謝物またはその塩（またはそれらを含む医薬組成物）をそのような治療
を必要とする患者に投与するステップを含む、治療および／または予防方法が提供される。良性前立腺肥大症、前立腺がんおよび高トリグリセリド症の治療のためのトランス−クロミフェンの使用が、その全ての内容が本明細書に援用される米国特許出願公開第２００８／０２４２７２６号、特に３ページ、［００３０］段落から４ページ、［００４１］段落までに記載される。一つの好ましい実施形態において、トランス−クロミフェン代謝物は、４−ＯＨ−トランス−クロミフェンである。他の好ましい実施形態において、患者は、続発性性腺機能低下症のヒト男性である。
【００４３】
他の実施形態において、ヒト男性の不妊症の治療方法であって、有効な量のトランス−クロミフェン代謝物またはその塩（またはそれらを含む医薬組成物）をそのような治療を必要とするヒト男性に投与するステップを含む、治療方法が提供される。男性の不妊症の治療のためのトランス−クロミフェンの使用が、その全ての内容が本明細書に援用される米国特許出願公開第２００９／０２１５９０６号、特に２ページ、［００２９］段落から３ページ、［００３４］段落までに、記載される。一つの好ましい実施形態において、トランス−クロミフェン代謝物は、４−ＯＨ−トランス−クロミフェンである。他の好ましい実施形態において、患者は、続発性性腺機能低下症のヒト男性である。
【００４４】
他の実施形態において、有効な量のトランス−クロミフェン代謝物またはその塩（またはそれらを含む医薬組成物）を続発性性腺機能低下症のヒト男性に投与するステップを含む、代謝症候群から２型糖尿病への移行を予防する方法が提供される。そのような患者集団における、代謝症候群から２型糖尿病への移行を予防するためのトランス−クロミフェンの使用が、その全ての内容が本明細書に援用される米国特許出願公開第２００９／００９９２６５号、特に３ページ、［００４０］段落に、記載される。好ましい実施形態において、トランス−クロミフェン代謝物は、４−ＯＨ−トランス−クロミフェンである。
【００４５】
更に他の実施形態において、有効な量のトランス−クロミフェン代謝物またはその塩（またはそれらを含む医薬組成物）を続発性性腺機能低下症のヒト男性に投与するステップを含む、空腹期血糖濃度を低減する方法が提供される。そのような患者集団における、空腹期血糖濃度を低減するためのトランス−クロミフェンの使用が、米国特許出願公開第２００９／００９９２６５号の［００４１］段落に記載される。好ましい実施形態において、トランス−クロミフェン代謝物は、４−ＯＨ−トランス−クロミフェンである。
【００４６】
更に他の実施形態において、有効な量のトランス−クロミフェン代謝物またはその塩（またはそれらを含む医薬組成物）を続発性性腺機能低下症のヒト男性に投与するステップを含む、２型糖尿病の治療方法が提供される。そのような患者集団における、２型糖尿病の治療のためのトランス−クロミフェンの使用が、米国特許出願公開第２００９／００９９２６５号の［００４２］段落に記載される。好ましい実施形態において、トランス−クロミフェン代謝物は、４−ＯＨ−トランス−クロミフェンである。
【００４７】
他の実施形態において、女性の不妊症の治療方法であって、有効な量のトランス−クロミフェン代謝物またはその塩（またはそれらを含む医薬組成物）をそのような治療を必要とする女性に投与するステップを含む、治療方法が提供される。好ましくは、トランス−クロミフェン代謝物が、月経周期の初期卵胞期において、毎日の投薬として連続する５日間投与される。例えば、投与スケジュールは、月経周期の５〜９日目または３〜７日目の投与を含むものとすることができる。好ましくは、患者は無排卵症の女性である。
【００４８】
他の実施形態において、乳がんの治療および／または予防方法であって、有効な量のトランス−クロミフェン代謝物またはその塩（またはそれらを含む医薬組成物）をそのような治療を必要とする女性に投与するステップを含む、治療および／または予防方法が提供される。この実施形態に従って、乳がん発生の危険が高い女性に、乳がん発生を予防する
ために、トランス−クロミフェン代謝物が投与されてもよい。代わりに、乳がんをもつ女性に、乳がんを治療するために、トランス−クロミフェン代謝物が投与されてもよい。トランス−クロミフェン代謝物はまた、再発の可能性を最小化するために、最初の手術による治療に続く術後補助療法として投与されてもよい。好ましくは、術後補助療法として投与される場合は、トランス−クロミフェンは、約５年間の期間投与される。
【００４９】
他の実施形態において、子宮内膜（または子宮）がんの治療方法であって、有効な量のトランス−クロミフェン代謝物またはその塩（またはそれらを含む医薬組成物）をそのような治療を必要とする女性に投与するステップを含む、治療方法が提供される。
【００５０】
更に他の実施形態において、卵巣がんの治療方法であって、有効な量のトランス−クロミフェン代謝物またはその塩（またはそれらを含む医薬組成物）をそのような治療を必要とする女性に投与するステップを含む、治療方法が提供される。
【００５１】
様々な実施形態において、本発明は、本明細書中に記載される治療方法において有用な、断続的な投薬処置を提供する。
【００５２】
「断続的な投与」とは、治療上有効な用量のトランス−クロミフェン代謝物を投与する期間、それに続く中断の期間、次にそれに続く再度の、治療上有効な用量の投与期間、等々を意味する。
【００５３】
治療上有効な用量の投与期間は、例えば徐放性製剤を用いるような、連続的な投薬からなってもよく、また、例えば、投与期間中の投薬間隔が中断期間よりも短い限りにおいて、１日当たり１錠、２錠またはそれ以上の錠剤というような、毎日、毎週、毎月、またはそれらの間の投薬からなってもよい。
【００５４】
中断期間の好ましい長さは、投与期間中の有効な用量の投与の濃度および頻度に依存し、いずれの場合においても、治療期間中に、所望の治療効果が得られるように選択されるべきである。例えば、トランス−クロミフェン代謝物またはその塩（またはそれらを含む医薬組成物）が、テストステロン濃度を上昇させるために投与される場合には、中断期間は、テストステロン濃度が約３００ｎｇ／ＤＬ未満に低下する前に終了されるべきである。
【００５５】
本発明による医薬組成物は、約１ｍｇから２００ｍｇの間の用量の本発明のトランス−クロミフェン代謝物を含むか、または実質的に当該代謝物からなる（ただし、最適な用量の決定は当業者のレベルにより行われる）。該組成物は、約１ｍｇ、２ｍｇ、３ｍｇ、４ｍｇ、５ｍｇ、１０ｍｇ、１５ｍｇ、２０ｍｇ、２５ｍｇ、３０ｍｇ、３５ｍｇ、４０ｍｇ、４５ｍｇ、５０ｍｇ、５５ｍｇ、６０ｍｇ、６５ｍｇ、７０ｍｇ、７５ｍｇ、８０ｍｇ、８５ｍｇ、９０ｍｇ、９５ｍｇ、１００ｍｇ、１１０ｍｇ、１２０ｍｇ、１３０ｍｇ、１４０ｍｇ、１５０ｍｇ、１６０ｍｇ１７０ｍｇ、１８０ｍｇ、１９０ｍｇ、２００ｍｇまたは上記範囲の間の用量の、本発明のトランス−クロミフェン代謝物を含む。
【００５６】
医薬組成物は、１００％ｗ／ｗのトランス−クロミフェン代謝物を含んでもよく、またはそれに加えて、所望の治療効果を得ることに有用なその他の活性物質を含んでもよい。医薬組成物が１００％ｗ／ｗのトランス−クロミフェン代謝物を含む場合は、所望の治療効果を得るために、１種又は２種以上の追加の活性物質が、続けてまたは同時に同時投与されてもよい。
【００５７】
投薬は、好ましくは（必ずしもではなく）、投与期間中に、そして好ましくは中断期間中も同様に、図１に記載される正常な分泌全血清テストステロンプロファイルに類似する
か、またはそれに相当する血清テストステロン濃度を高めるために設計された薬剤投与計画の一部として行われる。例えば、図１に従い、好ましい組成物の投薬は、午前８時付近の血清テストステロンのピーク濃度を高める製剤処方中でなされてもよい。そのような製剤処方は、例えば、米国特許第６，２２１，３９９号、特開平４−３１２５２２号公報、Ｍｅｓｈａｌｉら、Ｉｎｔ．  Ｊ．  Ｐｈａｒ．  ８９：１７７−１８１  （１９９３）、Ｋｈａｒｅｎｋｏら、Ｉｎｔｅｒｎ．  Ｓｙｍｐ．  Ｃｏｎｔｒｏｌ  Ｒｅｌ．  Ｂｉｏａｃｔ．  Ｍａｔｅｒ．  ２２：２３２−２３３  （１９９５）、ＷＯ９５／３５０９３、Ｄａｎｇｐｒａｓｉｔら、Ｄｒｕｇ．  Ｄｅｖｅｌ．  ａｎｄ  Ｉｎｃｌ．  Ｐｈａｒｍ．  ２１  （２０）：２３２３−２３３７  （１９９５）、米国特許第６，１４３，３５３号、第６，１９０，５９１号、第６，０９６，３３８、第６，１２９，９３３号、第６，１２６，９６９号、第６，２４８，３６３号に記載のように調製された徐放性処方、およびその他の、本分野において周知の徐放性処方の形態であってもよい。
【００５８】
本願中で用いられる用語「治療する」または「治療」とは、治療学的な治療および、続発性性腺機能低下症に伴う症状などの望ましくない生理学的または心理学的変化または障害を予防するまたは遅延させる（低減させる）ことを目的とする、予防的または防護的方法の両方をいう。本発明の目的にとって、有益な、または望ましい臨床結果としては、限定するものではないが、検知可能であっても検知不可であっても、症状の緩和、疾患の範囲の縮小化、疾患の安定（すなわち、悪化しない）状態、疾患の進展の遅延または緩慢化、疾患の症状の改善または一時的な緩和および軽減（一部または全部）が挙げられる。「治療」は、治療を受けないとした場合に予想される生存期間に比較しての生存の長期化をも意味することができる。治療を要する人としては、既に症状または障害をもっている人、並びに、症状または障害が発生しやすい人またはその人の中で症状または障害を予防すべき人が挙げられる。
【００５９】
好適な医薬組成物または単位用量の形態は、全て経口使用用で、錠剤または充填されたカプセルなどの固体または溶液、懸濁液、乳化液、甘味液またはそれらが充填されたカプセルの形態である。組成物はまた、（皮下を含む）注射使用用の無菌注射液または乳化液であってもよい。組成物はまた、局所投与用に処方されてもよい。例えば、組成物は、外用液薬、クリーム、軟膏、ジェル、発泡物、または経皮型貼付剤であってもよい。一つの好ましい実施形態において、組成物は、経皮投与用（例えば、陰嚢に対する）のジェル（例えば、水・アルコール性ジェル）として処方されてもよい。そのような医薬組成物およびそれらの単位用量の形態は、成分を従来の比率で含むことができる。
【００６０】
経口投与は好ましい経路であるが、本発明に係る組成物は、限定するものではないが、静脈投与、皮下投与、頬側投与、粘膜投与、クモ膜下腔内投与、皮内投与、大槽内投与、筋肉内投与、経皮投与、腹膜内投与、硬膜外投与、膣投与、直腸投与、鼻腔内投与、舌下投与、関節内投与、内部脳脊髄投与および内部滑液投与を含む任意の投与経路によって投与することができる。組成物の投与後、血清テストステロン濃度を上述のようにして測定することができ、血清テストステロン濃度の十分な上昇を達成して、上述の正常なテストステロンに近付いた所望の生理学的結果を得るために、容量を変更してもよい。
【００６１】
また、本発明の組成物は、速放性処方、徐放性処方、または、少なくとも１層の速放性層および少なくとも１層の徐放性層を含む多層錠剤などの、速放性および徐放性処方の混合物として投与されてもよい。
【００６２】
本明細書中で議論される全ての引用文献は、それらの全てが援用される。
【実施例】
【００６３】
以下の実施例は、本発明を説明することを意図するものであり、添付の特許請求の範囲
に提示される本発明の範囲を限定することを意図するものではない。
【００６４】
実施例１
生体外におけるＡｎｄｒｏｘａｌ（登録商標）（トランス−クロミフェン）代謝物のプロファイル
Ｓｐｒａｇｕｅ−Ｄａｗｌｅｙラット、ビーグル犬、カニクイザル、およびヒト由来の冷凍保存肝細胞におけるＡｎｄｒｏｘａｌ（登録商標）の代謝プロファイルを特定するために、検討を行った。この肝臓は薬剤代謝の主たる部位であり、肝臓の薬剤代謝酵素の全て（ＣＹＰ  Ｐ４５０ファミリーの肝酵素を含む）が完全細胞中に維持されている。単離された肝臓の肝細胞は、代謝などの肝臓に関係する薬剤の特性の評価のための、生理学的に適切な実験モデルとなる。肝細胞の冷凍保存は、研究目的の肝細胞の入手の可能性を大きく高める。
【００６５】
それぞれの動物種に対して数体のドナーから、および５名のヒトのドナーから単離された一次肝細胞を、種毎にまとめ、凍結保存した。肝細胞を解凍し、パーコール密度勾配遠心分離に供してきょう雑物を除去し、収率を測定するための計数を行った。トリパン青排除法を用いて、生存率を測定した。肝細胞をＣＹＰ分析緩衝液（クレブス−ヘンゼライト緩衝液）により希釈して、２×２．０×１０６生存細胞／ｍｌ細胞懸濁液を調製した。２×肝細胞懸濁液（１．０×１０６の細胞を含む０．５ｍｌ）の分割液を、最終的な１×細胞密度１．０×１０６細胞／ウェルに適したウェルに移した。全ての培養は、１２ウェルの被覆なしの培養プレート中、３７±１℃、９５％空気／５％ＣＯ２、および飽和湿度で行った。２×Ａｎｄｒｏｘａｌ（登録商標）添加溶液の分割液（６μＭおよび６０μＭのＡｎｄｒｏｘａｌ（登録商標）を含む０．５ｍｌ）をそれぞれの然るべきウェルに添加し、最終的な容積１ｍｌとした。この培養液を１時間および４時間培養した。試料の数はＮ＝２での再現であった。
【００６６】
培養母体対照試料は、代謝物の同定を支援するための、バックグランドである培養母体成分の基として加えた。等容積の２×肝細胞懸濁液およびＡｎｄｒｏｘａｌ（登録商標）を含まないＣＹＰ分析緩衝液を一つに合わせて、４時間培養した。
【００６７】
化学的な分解対照試料は、細胞が存在しない場合の、Ａｎｄｒｏｘａｌ（登録商標）の化学的な分解の可能性を評価するために加えた。等容積の２×Ａｎｄｒｏｘａｌ（登録商標）添加溶液（６μＭおよび６０μＭ）およびＣＹＰ緩衝液を一つに合わせて、４時間培養した。
【００６８】
それぞれの種由来の凍結保存された肝細胞の代謝能を評価するために、代謝陽性対照試料は、加えた。等容積の２×７−エトキシクマリン添加溶液（１５０μＭ）および２×肝細胞懸濁液を一つに合わせて、４時間培養した。
【００６９】
培養の停止は、以下のようにして行った。代謝陽性対照試料の培養は、等容量のメタノールの添加によって停止した。その他の全ての培養は、プレートを氷上に置くことによって停止した。各ウェルの内容物を完全に混合し、５本のクライオバイアルに分割採取した。１本のクライオバイアルには、等容量の有機溶媒を添加した。試料は速やかに分析を行ったか、またはクライオバイアル中、−７０±１０℃における分析まで保存したかのいずれかであった。
【００７０】
すべての試料を、逆相ＨＰＬＣによって分析した。試料のＵＶ変化を得て、次に精密な質量測定の実施が可能である、Ｍｉｃｒｏｍａｓｓ（登録商標）Ｑ−Ｔｏｆ−２質量分光分析装置を用いた液体クロマトグラフィー−質量分光（ＬＣ／ＭＳ）分析を行った。Ｍｅｔａｂｏｌｙｎｘ（登録商標）ソフトウェアを使用して、予備的な代謝物の同定を、補助
した。
【００７１】
代謝陽性対照試料において、検証済みのＨＰＬＣ生化学分析法を用いて、７−ヒドロキシクマリンおよびその抱合型の誘導体である７−ヒドロキシクマリン・グルクロン酸抱合体および７−ヒドロキシクマリン・硫酸塩抱合体の生成を測定することによって、それぞれの種由来の肝細胞の代謝能を評価した。本検討に使用した冷凍保存された肝細胞は、代謝上活性であり、培養は満足できるものと考えられた。
【００７２】
１時間および４時間の培養後のＡｎｄｒｏｘａｌおよびその代謝物の相対量を、以下の表１〜４に報告する。
【００７３】
ヒト肝細胞を用いた培養において、観測された主要な代謝上の変換であるヒドロキシル化、脱アルキル化および脱水素化による、Ａｎｄｒｏｘａｌ（登録商標）の４種の主要な代謝物（Ｃ２６Ｈ３０ＮＯ３Ｃｌ（Ｍ３）、Ｃ２６Ｈ２８ＮＯ２Ｃｌ（Ｍ１４）、Ｃ２７Ｈ３０ＮＯ３Ｃｌ（Ｍ１５）およびＣ２４Ｈ２４ＮＯＣｌ（Ｍ２２）、以下の表１〜４を見られたい。）が観測された。代謝物Ｃ２４Ｈ２４ＮＯ２Ｃｌ、Ｃ２６Ｈ２８ＮＯ２Ｃｌ、Ｃ２７Ｈ３０ＮＯ３ＣｌおよびＣ２４Ｈ２４ＮＯＣｌは、ラット、犬およびサル肝細胞を用いた培養においても観測された。Ｃ２６Ｈ３０ＮＯ３Ｃｌは、３０ｍＭのＡｎｄｒｏｘａｌ（登録商標）添加による犬およびサル肝細胞培養において観測された。低用量Ａｎｄｒｏｘａｌ（登録商標）においては、臨床試験（３μＭ）において見られた血中濃度と整合して、ヒドロキシル化された代謝物が主である（以下の表３および４を見られたい。）。低用量においては、１時間および４時間においてそれぞれ、回収された全ての代謝物の８５％および９１％が、ヒドロキシル化された化合物（例えばＣ２６Ｈ２８ＮＯ２Ｃｌ）であることが特定された。Ａｎｄｒｏｘａｌ（登録商標）のより高用量（３０μＭ）では、脱エチル化が重要となり、回収された全ての代謝物の約半分が脱エチル化（２×脱メチル化）された化合物（例えばＣ２４Ｈ２４ＮＯＣｌ）であった。理論に拘束されるものではないが、ＣＹＰ３Ａ４は、トランス−クロミフェンに対して、より高い結合定数／より低い親和性を有し得ると考えられる。あるいは、より高いトランス−クロミフェンの濃度は、これらの肝細胞におけるＣＹＰ  ２Ｄ６系の能力を圧倒するのかも知れない。ＣＹＰ  ２Ｄ６は、ヒドロキシル化の多くを担っており、脱エチル化は、多くはＣＹＰ  ３Ａ４を介してなされる。このデータは、トランス−クロミフェンの主要な活性代謝物は、ＣＹＰ  ２Ｄ６の作用によって生成される４−ＯＨ−トランス−クロミフェンおよびＣＹＰ
３Ａ４の作用によって生成されるＮ−デスエチル−トランス−クロミフェンであることを示唆している。これらの代謝物の治療的投与は、トランス−クロミフェンの投与に伴ってトランス−クロミフェンおよび以下に示すその代謝成分の個々の作用から生じる副作用を低減しつつ、本明細書中に記載される障害を改善することが期待される。
【表１−１】
2019023210.tif 000025
【表１−２】
2019023210.tif 000026
【表２−１】
2019023210.tif 000027
【表２−２】
2019023210.tif 000028
【表３−１】
2019023210.tif 000029
【表３−２】
2019023210.tif 000030
【表４−１】
2019023210.tif 000031
【表４−２】
2019023210.tif 000032
【図１】
2019023210.tif 000035
【図２】
2019023210.tif 000036
【外国語明細書】
2019023210000001.pdf