(57)【要約】      （修正有）【課題】ＧＤ２陽性がんの治療において、抗ＧＤ２抗体と併用することにより重症の有害作用、例えば、発熱、アレルギー反応、低血圧、毛細管漏出症候群等を引き起こすことが知られているＩＬ−２等のサイトカインを用いない、新規治療方法の提供。【解決手段】キメラ又はヒト化抗ＧＤ２抗体を含む、ＧＤ２陽性がんの処置のための医薬組成物。前記抗ＧＤ２抗体としてはｃｈ１４.１８/ＣＨＯ又はｃｈ１４.１８/ＳＰ２/０が好ましく、持続点滴で患者に投与されることが好ましい。前記抗ＧＤ２抗体はイソトレチノイン等のレチノイドと併用することが好ましく、副作用である疼痛を緩和するためにモルヒネを投与してもよい。【選択図】なし【特許請求の範囲】
【請求項１】
患者におけるＧＤ２陽性がんの処置方法であって、キメラまたはヒト化抗ＧＤ２抗体を含む製剤を、ＩＬ−２を併用して投与することなく該患者に投与することを含む、患者における該ＧＤ２陽性がんを処置する、方法。
【請求項２】
該抗ＧＤ２抗体を１日につき２４時間、持続点滴として該患者に投与する、請求項１に記載の方法。
【請求項３】
該抗ＧＤ２抗体の投与の前、同時、および/または後で、該患者を１回以上レチノイドで処置することをさらに含む、請求項１または２に記載の方法。
【請求項４】
該患者を同じ処置サイクル内で、レチノイドにより処置する、請求項３に記載の方法。
【請求項５】
該抗ＧＤ２抗体が１４.１８抗体である、請求項１〜４のいずれか一項に記載の方法。
【請求項６】
該抗ＧＤ２抗体がｃｈ１４.１８/ＣＨＯまたはｃｈ１４.１８/Ｓｐ２/０である、請求項５に記載の方法。
【請求項７】
該抗ＧＤ２抗体が配列番号３の軽鎖アミノ酸配列および/または配列番号４の重鎖アミノ酸配列または、同じもしくは類似の天然活性を有するその断片またはホモログを有する、請求項６に記載の方法。
【請求項８】
該製剤を、１０、２０、２５、５０、６０、６５、６８、７０、７５、８０、１００、１２０、１５０、２００、２１０、２５０または３００mg/m２/サイクルの用量で該患者に投与する、請求項１〜７のいずれか一項に記載の方法。
【請求項９】
該製剤を、１〜１５、１〜２０、１〜２５、１〜３０または１〜３５mg/m２の１日用量で該患者に投与する、請求項１〜８のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１０】
該製剤を７、７.５、８、９、１０、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１７.５、１８、１９、２０、２５、３０、３２または３５mg/m２の１日用量で該患者に投与する、請求項１〜９のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１１】
該製剤が５０、４０、３０または２５mg/m２未満の１日用量で該患者に投与する、請求項１〜１０のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１２】
該製剤を、１０mg/m２/日の用量で１０日間連続して、または１５、１７.５、２０または２５mg/m２/日の用量で４日間連続して該患者に投与する、請求項１〜１１のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１３】
該抗ＧＤ２抗体を２回以上の処置サイクルの間、該患者に投与する、請求項１〜１２のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１４】
該患者にＧＭ−ＣＳＦを併用処置しない、請求項１〜１３のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１５】
該患者にサイトカインを併用処置しない、請求項１〜１４のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１６】
同じ処置サイクルおよび/または同じ全処置期間内において、ＩＬ−２、および/またはＧＭ−ＣＳＦおよび/またはサイトカインにより該患者を処置しない、請求項１〜１５のいずれか記載の方法。
【請求項１７】
副作用が、ＩＬ−２、ＧＭ−ＣＳＦおよびまたは１種以上の他のサイトカインによる併用処置を含む処置スケジュールと比較して、実質的に低下している、請求項１〜１６のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１８】
疼痛の副作用が、ＩＬ−２、ＧＭ−ＣＳＦおよびまたは１種以上の他のサイトカインによる併用処置を含む処置スケジュールと比較して実質的に低下している、請求項１〜１７のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１９】
ＧＤ２陽性がんが神経芽細胞腫、神経膠芽腫、髄芽腫、星状細胞腫、黒色腫、小細胞肺がん、線維形成性小円形細胞腫瘍、骨肉腫、横紋筋肉腫または他の軟部肉腫である、請求項１〜１８のいずれか一項に記載の方法。
【請求項２０】
該患者が原発性難治性または再発性のハイリスク神経芽細胞腫またはハイリスク神経芽細胞腫の微小残存病変に罹患している、請求項１〜１９のいずれか一項に記載の方法。
【請求項２１】
本発明の、該抗ＧＤ２抗体を含む製剤の１日以上の投与の間に投与されるモルヒネの１日用量および/または全モルヒネ処置日のモルヒネの１日用量が、ＩＬ−２、ＧＭ−ＣＳＦおよび/または他のサイトカインを用いる投与スケジュールの間のモルヒネの１日用量よりも低い、請求項１〜２０のいずれか一項に記載の方法。
【請求項２２】
モルヒネを、該抗ＧＤ２抗体を含む製剤を投与する全ての日ではなく、いくつかの日にのみ投与する、請求項１〜２１のいずれか一項に記載の方法。
【請求項２３】
本発明の、該抗ＧＤ２抗体を含む製剤の投与を含む１回以上の処置サイクルの間に投与される、処置サイクルあたりのモルヒネ用量が、ＩＬ−２、ＧＭ−ＣＳＦおよび/または他のサイトカインを用いる投与スケジュールにおける処置サイクルあたりのモルヒネ用量より低い、請求項１〜２２のいずれか一項に記載の方法。
【請求項２４】
全処置期間のモルヒネ用量が、ＩＬ−２、ＧＭ−ＣＳＦおよび/または他のサイトカインを用いる投与スケジュールにおける全処置期間のモルヒネ用量より低い、請求項１〜２３のいずれか一項に記載の方法。
【請求項２５】
１種以上の鎮痛剤、特にモルヒネの用量が、全処置期間内、処置サイクル内、処置サイクル内の抗体処置期間の間、処置サイクル内のある抗体処置日から次の抗体処置日まで、および/または１回の処置サイクルから次の処置サイクルまでにおいて減少している、請求項１〜２４のいずれか一項に記載の方法。
【請求項２６】
請求項１〜２５のいずれか一項に記載の方法で用いるための、抗ＧＤ２抗体または抗ＧＤ２抗体を含む製剤。
【請求項２７】
請求項１〜２５のいずれか一項に記載の方法のための医薬の製造における、抗ＧＤ２抗体または抗ＧＤ２抗体を含む製剤の使用。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、抗ＧＤ２抗体を含む製剤を患者に投与することを含む、ＧＤ２陽性がんを処置するための製剤および方法であって、ここで該患者が、インターロイキン−２（ＩＬ−２）により併用処置されない、製剤および方法に関する。具体的には、本発明は、キメラまたはヒト化抗ＧＤ２抗体を含む製剤を患者に投与することにより、ＧＤ２陽性がんを処置するための製剤および方法であって、該患者が、インターロイキン−２（ＩＬ−２）により併用処置されず、特定の態様においては、顆粒球マクロファージコロニー刺激因子（ＧＭ−ＣＳＦ）および/または１種以上の他のサイトカインによっても処置されない、製剤および方法に関する。さらに、本発明は、患者におけるＧＤ２陽性がんを処置するための製剤および方法であって、抗ＧＤ２抗体を含む製剤を、該患者に、併用してＩＬ−２を投与することなく、持続点滴として１日以上にわたって投与する、製剤および方法に関する。本発明はさらに、患者におけるＧＤ２陽性がんを、併用してＩＬ−２を投与することなく、抗ＧＤ２抗体を含む製剤を該患者に投与することにより処置するための製剤および方法であって、該抗体による１回以上の処置期間に、レチノイドによる１回以上の処置期間が先行するか、レチノイドによる１回以上の処置期間を同時に伴うか、および/または、レチノイドによる１回以上の処置期間が後に続く、製剤および方法に関する。本発明はまた、抗ＧＤ２抗体を含む製剤を、持続点滴として１日につき２４時間患者に投与することによる、ＧＤ２陽性がんを処置するための製剤および方法であって、該患者がインターロイキン２（ＩＬ−２）による併用処置を受けず、該抗体による１回以上の処置期間に、１回以上のレチノイドによる処置期間が先行するか、１回以上のレチノイドによる処置期間を同時に伴うか、および/または１回以上のレチノイドによる処置期間が後に続いてよい、製剤および方法に関する。
【背景技術】
【０００２】
神経芽細胞腫は、脳がんに次いで、５歳未満の子供で最も頻度の高い固形がんである。ハイリスク神経芽細胞腫では、標準的な治療を受けた患者の半分より多くにおいて、再発が見られ、最終的に、該疾患により死亡する。症例の９０％は、０歳〜６歳において発症する。先進国における、世界全体での発症率は、１年あたり約２０００件である。
【０００３】
腫瘍学において、特定の抗原に対するモノクローナル抗体の使用が増加している。該モノクローナル抗体は、トラスツズマブ、セツキシマブ、ベバシズマブおよびリツキシマブ等のような先駆的なものに示されるように、細胞傷害性のある治療法と比較して、作用機序が完全に異なることにより、有用なものとなっている。ジシアロガングリオシドＧＤ２は、主に細胞表面に発現するスフィンゴ糖脂質である。正常な組織においては、ＧＤ２発現は珍しく、主に中枢神経系（ＣＮＳ）、末梢神経およびメラノサイトに限定されている。がん細胞において、ＧＤ２は神経芽細胞腫および殆どの黒色腫において、均一に発現しており、骨肉腫および軟部肉腫では、発現の程度に差がある (Navid et al., Curr Cancer Drug Targets 2010; 10:200-209)。細胞表面に存在することに加えて、比較的腫瘍選択的な発現をすることから、ＧＤ２は、抗体ベースのがん免疫療法の有望な標的である。
【０００４】
したがって、いくつかの抗ＧＤ２抗体について、神経芽細胞腫、黒色腫および他のＧＤ２関連がんにおける、前臨床または臨床試験が行われている。
【０００５】
ＡＰＮ３１１は、市販される抗体の作製のための標準的な哺乳類細胞株であるチャイニーズハムスター卵巣（ＣＨＯ）細胞において、組換えにより作製された、キメラモノクローナル抗ＧＤ２抗体ｃｈ１４.１８の製剤である。再発性/難治性の神経芽細胞腫患者における第Ｉ相臨床試験において、この抗体を単一の剤として用いることにより、退縮が達成された。ＡＰＮ３１１による処置を含む、第ＩＩＩ相の臨床試験が、２００６年にSIOPEN (International Society of Paediatric Oncology European Neuroblstoma)により開始され、現在、イソトレチノイン、すなわちｃｉｓ-レチノイン酸(ｃｉｓ-ＲＡ)をともに用いた、ＩＬ−２を皮下に用いるか、または用いないＡＰＮ３１１処置に関する、無再発生存率および全生存率に対する効果について調べている。４つの薬剤、すなわち、ＳＰ２/０マウスハイブリドーマ細胞で産生される関連抗体と、静注のインターロイキン２（ＩＬ−２またはＩＬ２）、顆粒球マクロファージコロニー刺激因子(ＧＭ−ＣＳＦ)およびイソトレチノイのパッケージを用いた同等の米国における試験において、神経芽細胞腫の子供において、最初の療法の後に完全な退縮が見られ、疾患エビデンスが全く見られないという興味深い生存改善が見られた。
【０００６】
ＡＰＮ３０１は、ヒト化抗ＧＤ２抗体 (ｈｕ１４.１８)およびＩＬ−２を融合蛋白質として含む、免疫サイトカインの製剤である。該抗体部分は、神経芽細胞腫およびいくつかの他のがんで強く発現するＧＤ２抗原に特異的に結合する。ＩＬ−２は、多数の免疫エフェクター細胞種をリクルートするサイトカインである。神経芽細胞腫の患者において、ＡＰＮ３０１は、抗体成分を介してＧＤ２陽性腫瘍細胞に局在するように設計されている。その後、融合しているＩＬ−２がＮＫ細胞およびＴ細胞の両方を活性化させることにより、腫瘍に対する免疫系を刺激し、該抗体のＦｃ部分は、抗体依存性細胞傷害（ＡＤＣＣ）および補体依存性細胞傷害（ＣＤＣ）による腫瘍細胞殺傷を引き起こすように設計されている。免疫サイトカインは、再発性/難治性の神経芽細胞腫の子供における第ＩＩ相臨床試験において、活性を示しており (Shusterman et al.; JCO 2010 28(33):4969-75.)、後期の悪性黒色腫の第Ｉ相/第ＩＩ相試験でも試験されており、免疫活性化を示すことが示されている。
【０００７】
研究または開発されている他の抗ＧＤ２抗体は、例えばモノクローナル抗体３Ｆ８ (マウス抗体は第ＩＩ相、ヒト化抗体は第Ｉ相)および ８Ｂ６ (Ｏ−アセチル化ＧＤ２に特異的、前臨床)である。さらに、抗イディオタイプ抗体、例えば４Ｂ５、１Ａ７およびＡ１Ｇ４が、腫瘍ワクチンの可能性があるとして調べられているが、開発は中止されたとみられている。国際公開第2008/049643号はまた、ＧＤ２エピトープを模倣した、抗イディオタイプ抗体、すなわちＧＤ２ミモトープを記載している。
【０００８】
１４.１８抗ＧＤ２抗体の他のバージョンは、国際公開第2005/070967号に記載されているｈｕ１４.１８Ｋ３２２Ａであり、これは、ＣＤＣを低下させるが、例えばＡＤＣＣを増強させるのに適当な細胞株、例えばＹＢ２/０で発現させることにより、ＡＤＣＣを維持するために、Ｆｃ領域に点変異を有する。ＣＤＣの低下は、抗体処置に伴う疼痛を低下させると考えられている。
【０００９】
抗体の抗腫瘍活性は、一般的に、補体依存性細胞傷害（ＣＤＣまたは補体固定）か、抗体依存性細胞傷害（ＡＤＣＣ）のいずれかにより生じる。これらの２つの活性は、当該分野において、「エフェクター機能」として知られており、抗体、特にＩｇＧクラスの抗体により媒介される。ＩｇＧ４以外の全てのＩｇＧサブクラス (ＩｇＧ１、ＩｇＧ２、ＩｇＧ３)は、ある程度ＡＤＣＣおよび補体固定を媒介し、その両方の活性について、ＩｇＧ１およびＩｇＧ３が最も強力である。ＡＤＣＣは、ナチュラルキラー（ＮＫ）細胞および/またはＦｃ受容体を有する他の免疫細胞（エフェクター細胞）上のＦｃ受容体が、細胞表面の抗原に結合した抗体のＦｃ領域に結合したときに起こると考えられている。Ｆｃ受容体結合は、エフェクター細胞に、標的細胞を殺すようにシグナルを伝える。ＣＤＣは、複数の機構により起こると考えられており、１つの機構は、抗体が細胞表面上の抗原に結合するときに開始する。抗原抗体複合体が形成されると、Ｃ１ｑ分子が該抗原抗体複合体に結合する。次いで、Ｃ１ｑは、それ自体を切断して、酵素活性化のカスケードおよび、他の補体蛋白質の切断を開始させ、該補体蛋白質は次いで標的細胞表面に結合し、例えば、細胞溶解および/またはマクロファージによる摂取により該細胞の死を促進すると考えられている。
【００１０】
抗体依存性細胞傷害 (ＡＤＣＣ)は、免疫療法において重要な役割を果たすと考えられている。不幸なことに、ＡＤＣＣは、がん患者ではしばしば抑制されている。サイトカインは、免疫細胞を直接活性化するか、または、腫瘍細胞上の腫瘍関連抗原（ＴＡＡ）を増強させることにより、ＡＤＣＣを増強させると考えられている。例えば、アルデスロイキン(ＩＬ−２)は、ナチュラルキラー (ＮＫ)細胞の活性化、リンホカイン活性化キラー（ＬＡＫ）細胞の生成を引き起こし、ＡＤＣＣを増強させる。アルデスロイキン(ＩＬ−２)は、腎細胞がんおよび黒色腫の患者において、測定可能な抗腫瘍応答を誘発するのに有効である。さらに、ＧＭ−ＣＳＦは、単球、マクロファージ、樹状細胞および抗体依存性細胞傷害 (ＡＤＣＣ)の直接的な活性化および、ＴＮＦ、インターフェロンおよびインターロイキン１（ＩＬ−１）を介した間接的なＴ細胞活性化を介して、試験管内および生体内の両方において、抗腫瘍免疫を増強することが示されている。ＧＭ−ＣＳＦは、腫瘍細胞に対する免疫活性化に重要な細胞の機能を、単独で、または他のサイトカインまたはモノクローナル抗体とともに増強すると考えられている。
【００１１】
したがって、抗ＧＤ２抗体、特にｃｈ１４.１８を調べるための現在の臨床試験において、該抗体処置を、サイトカイン処置（およびレチノイド処置）、特に、ＩＬ−２および/またはＧＭ-ＣＳＦによる処置と組み合わせている。したがって、サイトカインをＧＤ−２陽性がん患者に投与すること、特に抗ＧＤ２抗体処置と組み合わせて投与することは、有利なことであることが先行技術によって示されている。
【００１２】
対照的に、本発明の重要な特徴は、該患者を、抗ＧＤ２抗体により、ＩＬ−２を用いずに、特にいずれのサイトカイン処置も行わずに処置し得ることである。
【００１３】
抗体と組み合わせた、１種以上のサイトカインによる処置は、重症の有害作用、例えば、発熱、アレルギー反応、低血圧、毛細管漏出症候群等を引き起こす場合があり、該副作用により、死に至る場合すらある。両方の薬剤の副作用に相乗作用があるため、サイトカイン処置を共に行うことにより、抗体処置による有害事象、例えば、発熱がさらに増強される。しかし、本発明の製剤および方法では、いずれのサイトカインをも完全に除くことが可能である。したがって、本発明は、抗体による処置の有害作用を実質的に低下させるものである。
【先行技術文献】
【特許文献】
【００１４】
【特許文献１】国際公開第2008/049643号
【特許文献２】国際公開第2005/070967号
【非特許文献】
【００１５】
【非特許文献１】Navid et al., Curr Cancer Drug Targets 2010; 10:200-209
【非特許文献２】Shusterman et al.; JCO 2010 28(33):4969-75.
【発明の概要】
【課題を解決するための手段】
【００１６】
第一の局面において、本発明は、患者におけるＧＤ２陽性のがんの処置に用いるための、抗ＧＤ２抗体を含む製剤であって、該キメラまたはヒト化抗ＧＤ２抗体を含む製剤が、併用してＩＬ−２を投与することなく該患者に投与され、ＧＤ２陽性がんが処置される、方法に関する。
【００１７】
さらに、本発明は、患者におけるＧＤ２陽性がんの処置のための製剤および方法であって、キメラまたはヒト化抗ＧＤ２抗体を含む製剤が、併用してＩＬ−２を投与することなく、持続点滴として、１日に２４時間該患者に投与される、製剤および方法に関する。本発明はさらに、患者におけるＧＤ２陽性がんを処置するための製剤および方法であって、キメラまたはヒト化抗ＧＤ２抗体を含む製剤が、併用してＩＬ−２を投与することなく該患者に投与され、１回以上の抗ＧＤ２抗体処置期間に、１回以上のレチノイドによる処置期間が先行するか、１回以上のレチノイドによる処置期間を同時に伴うか、および/または１回以上のレチノイドによる処置期間がその後に続く、製剤および方法に関する。特定の態様において、該患者は、ＧＭ−ＣＳＦおよび/または、１種以上の他のサイトカインによる処置を、特に同一の処置サイクル中では受けない。
【００１８】
本発明はさらに、特定の態様および特許請求の範囲により規定される。本明細書にさらに記載される本発明の態様は全て、等しく本発明の全ての局面に関し、これらの局面は全て組み合わせて、例えば第一の局面を第二または第三の局面と組み合わせて、第一の局面を第二および第三の局面と組み合わせて、第二の局面を第三の局面と組み合わせて、これらの局面のエレメントを組み合わせた方法のための製剤；または組み合わせた方法を形成してよい。
【図面の簡単な説明】
【００１９】
【図１】ＡＰＮ３１１およびイソトレチノインによる処置を受けたが、ＩＬ−２による処置を受けていない患者（赤で示す）および、ＡＰＮ３１１およびイソトレチノインおよびＩＬ−２による処置を受けた患者 (青で示す)の、３２８人の神経芽細胞腫患者における、無再発生存率(ＥＦＳ、図１Ａ)および全生存率（ＯＳ、図１Ｂ）のデータ（時間ごとの％で示す）のカプランマイヤー曲線を示す。
【図２】処置の開始時に完全寛解(ＣＲ) を示した、実施例２の１２８人の患者のＥＦＳデータ（時間ごとの％で表す；図２Ａ、右側の図）と、Yu et al. 2010, New England Journal of Medicine 363:1324-1334に記載のＥＦＳ データ (時間ごとの％で表す；図２Ａ、左側の図、完全寛解者のデータも含む))の比較を示す。図２Ｂは、比較のために重ね合わせた図を示す。
【図３】処置の開始時に完全寛解（ＣＲ）を示した、実施例２の１２８人の患者のＯＳデータ（時間ごとの％で表す；図３Ａ、右側の図）と、Yu et al. 2010のＯＳデータ (時間ごとの％で表す；図３Ａ、左側の図)の比較を示す。図３Ｂは、比較のために重ね合わせた図を示す。
【図４】ＩＬ−２を用いる、および用いない、それぞれのスケジュールで処置し、総合評価した患者において観察される毒性(グレード３および４のみに対する全グレードの毒性；％で表す）の概要の表を示す。
【図５】ＩＬ−２を用いる、および用いない、それぞれのスケジュールで処置し、総合評価した患者において観察される毒性(各処置サイクルについての全グレードの毒性；％で表す）の概要の表を示す。
【図６】ＩＬ−２を用いる、および用いない、それぞれのスケジュールで処置し、総合評価した患者の、全ての処置サイクルで観察される毒性(全グレードの毒性；％で表す)の図を示す。
【図７】ＩＬ−２を用いる、および用いない、それぞれのスケジュールで処置し、総合評価した患者の、全ての処置サイクルで観察される毒性(グレード３および４のみ；％で表す)の図を示す。
【図８】ＩＬ−２を用いないスケジュールにおいて処置し、総合評価した患者の処置サイクル毎の全グレードの毒性（％で表す）を示す図である。
【図９】ＩＬ−２を用いたスケジュールにおいて処置し、総合評価した患者の処置サイクル毎の全グレードの毒性（％で表す）を示す図である。
【図１０】ＩＬ−２を用いた、およびＩＬ−２を用いないそれぞれのスケジュールにおいて処置し、総合評価した患者の処置サイクル(サイクル１)において観察される毒性（％で表す）を示す図である。
【図１１】ＩＬ−２を用いた、およびＩＬ−２を用いないそれぞれのスケジュールにおいて処置し、総合評価した患者の処置サイクル(サイクル２) において観察される毒性（％で表す）を示す図である。
【図１２】ＩＬ−２を用いた、およびＩＬ−２を用いないそれぞれのスケジュールにおいて処置し、総合評価した患者の処置サイクル(サイクル３) において観察される毒性（％で表す）を示す図である。
【図１３】ＩＬ−２を用いた、およびＩＬ−２を用いないそれぞれのスケジュールにおいて処置し、総合評価した患者の処置サイクル(サイクル４) において観察される毒性（％で表す）を示す図である。
【図１４】ＩＬ−２を用いた、およびＩＬ−２を用いないそれぞれのスケジュールにおいて処置し、総合評価した患者の処置サイクル(サイクル５) において観察される毒性（％で表す）を示す図である。
【図１５】ＩＬ−２を用いた、およびＩＬ−２を用いないそれぞれのスケジュールにおいて処置し、総合評価した患者の処置サイクル(サイクル６) において観察される毒性（％で表す）を示す図である。
【図１６】抗ＧＤ２抗体を用いるが、ＩＬ−２およびｃｉｓレチノイン酸処置を用いない処置の間の、神経芽細胞腫患者の血液試料の、補体依存性細胞傷害（ＣＤＣ）アッセイ（青い点、図１６Ａ）および全血試験（赤い点、ＷＢＴ、図１６Ｂ）の結果を示す。紫および灰色の点は、非特異的な溶解の可能性があるもの（すなわち、抗体により媒介されていない標的細胞溶解）を区別するために、抗ｉｄ抗体で処置した患者試料のアリコートである。橙色のバーは、抗体による処置期間を示す。
【図１７】常用量のＩＬ−２およびｃｉｓレチノイン酸処置を伴う、抗ＧＤ２抗体処置の間の神経芽細胞腫患者の血液試料の、補体依存性細胞傷害（ＣＤＣ）アッセイ（青い点、図１７Ａ）および全血試験（赤い点、ＷＢＴ、図１７Ｂ）の結果を示す。紫および灰色の点は、非特異的な溶解の可能性があるもの（すなわち、抗体により媒介されていない標的細胞溶解）を区別するために、抗ｉｄ抗体で処置した患者試料のアリコートである。橙色のバーは、抗体による処置期間を示し、緑色の三角形は、ＩＬ−２処置期間を示し、黄緑色の星印は、ｃｉｓレチノイン酸処置期間を示す。
【発明を実施するための形態】
【００２０】
驚くべきことに、抗ＧＤ２抗体およびレチノイド投与と組み合わせた、１種以上のサイトカインによる処置は、抗ＧＤ２抗体とレチノイドによる、ＩＬ−２を用いない、またはＩＬ−２およびＧＭ−ＣＳＦを用いない、またはいずれのサイトカインも用いない処置を超える臨床面の利点をもたらさないことが明らかになった。さらに、抗ＧＤ２抗体を含む製剤の持続点滴にＩＬ−２または他のサイトカインを組み合わせない処置スケジュールは、特に、副作用、特に疼痛の減少において高度に有利であることが示された。
【００２１】
一の局面において、本発明は、患者におけるＧＤ２陽性がんの処置に用いるための抗ＧＤ２抗体を含む製剤（抗体製剤とも称する）であって、抗ＧＤ２抗体を含む製剤が、併用してＩＬ−２を投与することなく該患者に投与され、該患者においてＧＤ２陽性がんが処置される、製剤に関する。
【００２２】
他の局面において、本発明は、患者におけるＧＤ２陽性がんを処置する方法であって、ＩＬ−２を併用して投与することなく抗ＧＤ２抗体を含む製剤を患者に投与することを含み、該患者におけるＧＤ２陽性がんが処置される、方法を含む。
【００２３】
他の局面において、本発明は、本明細書に記載の方法のための医薬の製造における、抗ＧＤ２抗体の使用を含む。
【００２４】
特定の態様において、抗ＧＤ２抗体は、持続点滴として、１日につき２４時間患者に投与される。特定の態様において、該抗ＧＤ２抗体は、持続点滴として１日以上、患者に投与される。いくつかの態様において、該患者は、抗ＧＤ２抗体の投与よりも先に、同時に、および/または後に続けて、１回以上レチノイドにより処置される。いくつかの態様において、抗ＧＤ２抗体はキメラまたはヒト化抗ＧＤ２抗体である。
【００２５】
本明細書において、「患者」という語は、ＧＤ２陽性がんに罹患しているヒト対象を指すものとする。本明細書において「処置」または「処置すること」という語は、薬剤または処置がそれを必要とする患者にとうよされることを指すものとする。
【００２６】
「患者においてＧＤ２陽性がんが処置される」ことは、該患者において下記でさらに規定する治療効果が達成されることを指す。
【００２７】
本明細書において、「併用処置する」または「併用して投与する」は、特に、同一の処置サイクルおよび/または同一の全処置期間（例えば、抗ＧＤ２抗体を投与する処置期間）において、１つの処置(例えば、抗ＧＤ２抗体および/または抗ＧＤ２抗体を含む製剤による処置、抗体処置と称する) に、他の１つ以上の処置（例えば、１種以上の鎮痛薬による処置および/または１つ以上の薬剤または処置による処置）が先行するか、他の１つ以上の処置を同時に伴うか、および/または他の１つ以上の処置がその後に続くことを意味するものとする。併用処置の処置期間は、他の処置期間（例えば抗体処置期間）と部分的または全体的に、重なっていても重なっていなくてもよい。したがって、併用処置（例えば鎮痛剤処置）の処置期間は、他の処置（例えば抗体処置）の処置期間に先行していても、同時であっても、および/またはその後に続いていてもよい。一の態様において、併用処置の処置期間は、同一の処置サイクル内にある。
【００２８】
したがって、本明細書において、「併用処置を行わない」「併用して投与することなく」または「併用して投与しない」という記載は、それぞれ、１つの処置に、１つ以上の他の処置が、先行するか、１つ以上の他の処置を同時に伴うか、または１つ以上の他の処置が後に続くことがないことを指すものとする。一の態様において、上で定義した語は、患者が、同じ処置サイクル内および/または同じ全処置期間内で、該薬剤または処置による処置を受けないこと（すなわち、該薬剤または処置は、該患者に投与されないこと）を指す。したがって、該非併用処置（例えばサイトカイン処置）の処置期間は、他の処置期間（例えば抗体処置期間）と部分的にも全体的にも重複し得ない。一の態様において、非併用処置の処置期間は、他の処置の処置期間（例えば抗体処置期間）に先行する、他の処置の処置期間を同時に伴う、および/または他の処置の処置期間の後に続くことはない。一の態様において、非併用処置の処置期間は、同一の処置サイクル中にない。しかしながら、薬剤または処置（例えば１種以上のサイトカイン）で併用処置されていない患者は、以前の処置サイクルおよび/または以前の全処置期間において、該薬剤または処置（例えば１種以上のサイトカイン）で処置されていてもよい。
【００２９】
本明細書において、「サイトカイン」という語は、ナノモル〜ピコモルの濃度でホルモン調節因子またはシグナル伝達分子として作用し、細胞シグナル伝達に有用である蛋白質、ペプチドまたは糖蛋白質を指す。一の態様において、１種以上のサイトカインを、免疫調節剤、例えば、インターロイキンおよび/またはインターフェロンから選択する。一の態様において、１種以上のサイトカインを、ＩＬ−２、ＧＭ−ＣＳＦ、顆粒球コロニー刺激因子(Ｇ−ＣＳＦ)、ＩＬ−１２および/またはＩＬ−１５からなる群から選択する。一の態様において、１種以上のサイトカインは、抗体、特に抗ＧＤ２抗体と融合していない。
【００３０】
本明細書において、「低減した用量」または「低用量」という語は、同じまたは類似の状況、すなわち、同じまたは類似の処置を受ける同じまたは類似の患者群に投与される同じ薬剤の常用量よりも有意に低い、例えば、少なくとも１０％、２０％、３０％、４０％、５０％、６０％、７０％、８０％、９０％または１００％ (またはこの用量間の任意の範囲)低い、各薬剤の用量を指す。常用量は、過去に頻繁に用いられた、および/または同じまたは類似の状況で、すなわち、同じまたは類似の処置を受ける同じまたは類似の患者群において主に用いられる用量であってよい。該用量は、１日の用量を減らすことにより、および/または、投与の頻度および/または期間を低下させることにより低減させ得る。例えば、５０％の用量低下については、各薬剤を、通常と同じ頻度または期間で投与するが、１日の常用量の半分のみを投与するか、または、各薬剤を１日の常用量で投与するが、例えば、通常毎日投与している場合は、１日おきにのみ投与してよい。他の例において、１日の常用量の５０％を、通常の毎日の投与ではなく、１日おきに投与することによって、常用量よりも７５％用量を低減させてよい。したがって、当業者は、本発明の適当な用量および投与スケジュールを容易に決定することができる。
【００３１】
本明細書において、特定の製剤または処置による「処置期間(treatment period)」は、かかる特定の製剤または処置が、１回の処置サイクル内で患者に投与される期間、例えば、連続した数日の処置期間を指す。例えば、サイトカインを含む製剤を、通常、５日間連続して投与し、その後に、サイトカインを含む製剤を投与しない日が１日以上続く場合、サイトカインを含む該製剤による処置期間には、５日間が含まれる。他の例において、抗ＧＤ２抗体を含む製剤を連続的に、１０日間連続して２４時間投与し、その後、抗ＧＤ２抗体を含む該製剤を投与しない日が１日以上続く場合、抗ＧＤ２抗体を含む製剤による処置期間には、１０日間が含まれる。他の例において、イソトレチノインを１日に２回１４日間投与し、その後に、イソトレチノインを投与することがない日が１日以上続く場合、イソトレチノインによる処置期間には１４日間が含まれる。該処置期間は、他の薬剤または処置の処置期間と全体的または部分的に重複させて繰り返しても、かつ/または、処置を行わない期間が先行していても、および/または後に続いていてもよい。例えば、処置サイクルは、ＩＬ−２による５日間の処置を２回含み、２回目が、ｃｈ１４.１８ (ＡＰＮ３１１)による１０日間（または１４日、１５日または２１日間）の処置と重複しており、その後に１４日間のイソトレチノインによる処置が続いていてよい。
【００３２】
本明細書において、処置期間に関する「組み合わせた」または「組み合わせ」という語は、同じおよび/または異なる薬剤または処置による２回以上の処置期間が、１回の処置サイクル中に含まれることを指す。異なる薬剤または処置を用いた、かかる２回以上の処置期間は、部分的または全体的に重複していても、または重複していなくてもよい。該処置期間は、同じおよび/または異なる薬剤または処置による処置をしていない１つ以上の間隔期と組み合わせて（または該間隔により分離して）よい。
【００３３】
本明細書において、「処置サイクル」という語は、規則的なスケジュールで繰り返す、１つ以上の処置または処置期間を指し、該処置または処置期間の間に、休止（処置を行わない）期間を含んでいてよい。例えば、１週間の処置の後に、３週間の休止が続いて、１回の処置サイクルとなる。一の態様において、１回の処置サイクルは、抗ＧＤ２抗体を含む製剤による１回の処置期間を含む。抗ＧＤ２抗体を含む製剤による１回の処置期間を含む処置サイクルは、さらに、１種以上の他の薬剤または処置（サイトカイン処置は除く）、例えばレチノイドおよび/または鎮痛剤による１回以上の処置期間を含んでいてよい。１回の処置サイクル内の１種以上の薬剤または処置による処置期間は、全体的および/または部分的に重複していてよい。処置サイクルは、いずれの処置も行わない期間を１回以上含んでいてもよい。休止期間は、例えば少なくとも１日、または２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１２、１３または１４日以上であってよい。それとは別に、または組み合わせて、該休止期間は、例えば最長で８週間、７週間、６週間、５週間、４週間、３週間、２週間または１週間またはそれより短くてよい。処置サイクル中の各処置は、好ましくは、本明細書において定義する、第一、第二、第三の局面または任意の組み合わせた局面の処置であってよい。本発明の処置スケジュールは、１つ以上の処置サイクル、具体的には、２つ以上、または３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９または２０以上の処置サイクルを含んでいてよい。
【００３４】
本明細書において、「全処置期間 (overall treatment time)」または「全処置期間 (overall treatment period)」は、１つ以上の連続した処置サイクルを含む連続的な処置期間を指すものとする。処置サイクルは、同一の、または修正した形態で、例えば、異なる用量またはスケジュール、または１つ以上の異なるおよび/または付加的な処置（例えば１つ以上の他の鎮痛剤による処置）を用いて繰り返してよい。全処置期間は、少なくとも１つまたは２以上のサイクル、例えば、１０まで、または２０まで、またはそれより多くの処置サイクルを含んでいてよい。一の態様において、全体処置期間は、１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、または２０以上のサイクルを含む。上述のように、処置サイクルは、処置を行わない期間（患者に何の処置も行わない、すなわち、抗体、サイトカインおよび他の薬剤を全く投与しない、間隔期）を含んでいてよい。したがって、本明細書において、全処置期間は、処置サイクル中および/または処置サイクル間に、処置を全く行わない該間隔期を含んでいてもよい。一の態様において、処置サイクルは、その前の処置サイクルに直接続いている、すなわち、処置サイクル間に全く期間をおかなくてもよい。しかし、処置サイクルの最後に、次の処置サイクルが始まる前に、処置を行わない期間を含んでいてもよい。全処置期間の例は、例えば少なくとも６ヶ月、８ヶ月、１０ヶ月、１２ヶ月、１４ヶ月、１６ヶ月、１８ヶ月、２０ヶ月、２２ヶ月、２４ヶ月、２６ヶ月、３０ヶ月またはそれより長くてよい。
【００３５】
本明細書において、範囲が特定されている場合、かかる任意の範囲は、かかる特定の範囲（すなわち、範囲の下限および上限）の間の任意の範囲を含んでいてよいものとする。例えば、範囲を例えば１〜５日間と特定する場合、この範囲は、１日、２日、３日、４日および５日間を含むものとする。同じことが、他の任意の範囲、例えば他の期間（例えば点滴時間（時間単位））、任意の用量範囲（例えば体表面積１ｍ２あたり、体重１ｋｇあたり、１日あたり、処置サイクルあたり等）、点滴速度、濃度、パーセンテージ、係数、比率および数に当てはまるが、これらに限定されない。
【００３６】
該抗ＧＤ２抗体または該抗体製剤は、それを必要とする患者に投与してよい。一の態様において、該患者は、ＧＤ２陽性がんの患者である。ＧＤ２陽性がんは、ＧＤ２が腫瘍細胞に発現している種類のがんである。ＧＤ２陽性がんは、例えば、神経芽細胞腫、神経膠芽腫、髄芽腫、星状細胞腫、黒色腫、小細胞肺がん、線維形成性小円形細胞腫瘍、骨肉腫、横紋筋肉腫および/または他の軟部肉腫である。一の態様において、該患者は、神経芽細胞腫、特に、ハイリスク神経芽細胞腫と診断されている。一の態様において、該患者は、(神経芽細胞腫国際病期分類；INSS (International Neuroblastoma Staging System) による) ステージ４の神経芽細胞腫と診断されている。一の態様において、該患者は、微小残存病変を有すると診断されている。一の態様において、該患者は、完全寛解者である、すなわち、処置に対して完全寛解を示す患者であると診断されている。他の態様において、該患者は、再発性または難治性疾患に罹患していると診断されている。一の態様において、該患者は、原発性の難治性または再発性のハイリスク神経芽細胞腫に罹患しているか、ハイリスク神経芽細胞腫の微小残存病変を有する。該患者は、１種以上の他の治療法、例えば外科手術、化学療法、放射線照射、骨髄破壊治療、メタヨードベンジルグアニジンシンチグラフィー (ｍＩＢＧ)、ワクチン療法、幹細胞移植、および/またはレチノイド処置（例えばイソトレチノインを用いる）により以前に処置されていても、または同時に処置されていてもよい。
【００３７】
一の態様において、該患者は、第Ｉ相、第ＩＩ相または第ＩＩＩ相の臨床試験に登録されていない。他の態様において、該患者はいずれの臨床試験にも登録されていない。具体的には、該患者は、世界のいずれの国におけるいずれの臨床試験にも登録されていない。したがって、該患者は、いずれの薬剤または処置についての安全性および有効性データを作製する、医薬研究および薬剤開発の、いずれの体系調査および/または公的に（例えば任意の適格性の国立または地域の保健当局によって）認められた試験にも参加していない。一の態様において、該患者は、いずれの保健介入（例えば診断、デバイス等）のための、いずれの体系調査および/または公的に（例えば任意の適格性の国立または地域の保健当局によって）認められた試験にも参加していない。抗ＧＤ２抗体を用いて、ＩＬ−２および/または他の任意のサイトカインの併用処置を用いない先行技術に記載されている、以前の臨床試験は、さらなる調査を行うための基礎として、該抗体の一般的な効果、有害作用および用量を調べるために行われている。しかしながら、該先行技術は、最終的に、抗ＧＤ２抗体を、少なくとも１種のサイトカイン、特にＩＬ−２と組み合わせて患者を処置するよう明確に記載している。したがって、現在用いられている、抗ＧＤ２抗体を用いる処置レジメンは、少なくとも１種のサイトカイン、特にＩＬ−２を含み、また、ＧＭ−ＣＳＦとも組み合わされている (例えば、上述のYu et al.を参照のこと)。
【００３８】
一の態様において、本発明の抗ＧＤ２抗体は、ＧＤ２抗原に特異的に結合する。ＧＤ２は、神経外胚葉性起源の腫瘍に発現するジシアロガングリオシドである。該抗体は、組換え抗体、または人工抗体、例えば、一本鎖抗体、哺乳類抗体、ヒトまたはヒト化抗体の群から選択してよい。該抗体は、抗体の定常領域および/または、可変領域、特に、Ｆｃ、Ｆｃ様、Ｆｖ、Ｆａｂ、Ｆ(ａｂ)２、Ｆａｂ’、Ｆ(ａｂ’)２、ｓｃＦｖ、ｓｃｆｃ、ＶＨＨから選択される可変領域を含むか、またはこれらから選択されてよい。しかし、該抗体断片のいずれも、補体結合の原因となり、そのために、天然の（または生体内の）エフェクター機能を媒介し得る、Ｆｃ部分を含んでいなければならない。該抗体は、抗体の軽鎖および重鎖を含んでいることが好ましい。該抗体は、１つまたは２つの、抗原結合領域を含んでいてよく、該抗原結合領域は、同じまたは異なる抗原、例えばＧＤ２に結合してよく、該抗原は、特異的に結合されてよい。本発明の抗体は、上述の抗原に対するもの、例えば該抗原に対する免疫化により作製されたものであってよい。該抗ＧＤ２抗体は、ヒト化またはキメラＧＤ２抗体、例えばヒト化またはキメラ１４.１８、３Ｆ８または８Ｂ６抗体、または同じ特異性を有するマウス抗体、または、天然のエフェクター機能を媒介する、これらのいずれの抗原結合断片であってもよい。一の態様において、該抗体は、１４Ｇ２ａ抗体ではない。該抗ＧＤ２抗体は、１つ以上のアミノ酸改変、例えば、改変Ｆｃ領域を有していてよい。一の態様において、該抗ＧＤ２抗体は、ｈｕ１４.１８Ｋ３２２Ａである。他の態様において、該抗ＧＤ２抗体はキメラ１４.１８抗体である。一の態様において、該抗ＧＤ２抗体は配列番号１および/または２の核酸配列および/または配列番号３および/または４のアミノ酸配列または、その断片またはホモログによりコードされている。一の態様において、該抗ＧＤ２抗体は、配列番号３および/または４のアミノ酸またはその断片もしくはホモログによりコードされている。
【００３９】
「その断片またはホモログ」という語は、同じまたは類似の天然の活性を有する、各配列の任意の断片またはホモログを指すものとする。一の態様において、該断片またはホモログは、天然の活性の少なくとも７０、７５、８０、８５、９０、９５、９６、９７、９８または９９％を有する。一の態様において、該断片またはホモログは、少なくとも８０、８５、９０、９５、９６、９７、９８または９９％の配列同一性を有する。
【００４０】
態様の一において、該抗ＧＤ２抗体は、配列番号１の軽鎖ヌクレオチド配列 (実施例１も参照のこと) および配列番号２の重鎖ヌクレオチド配列 (実施例１も参照のこと) を有する。一の態様において、該抗ＧＤ２抗体は、配列番号３の軽鎖アミノ酸配列 (実施例１も参照のこと) および配列番号４の重鎖アミノ酸配列 (実施例１も参照のこと) を有する。２つの軽鎖および２つの重鎖を含む抗体の相対的分子質量は、約１５０,０００ダルトンであってよい。一の態様において、該抗ＧＤ２抗体を含む製剤はＡＰＮ３１１である。一の態様において、該抗ＧＤ２抗体はジヌツキシマブである。該抗ＧＤ２抗体は、ＣＨＯ細胞、ＳＰ２/０細胞または他の適当な細胞、例えばＨＥＫ−２９３、ＭＲＣ−５、Ｖｅｒｏ、ＰｅｒＣ６またはＮＳ０に発現していてよい。一の態様において、該抗ＧＤ２抗体は、１４.１８抗体である。一の態様において、該抗ＧＤ２抗体は、ＳＰ２/０細胞に発現した、キメラ１４.１８抗体である (ｃｈ１４.１８/Ｓｐ２/０)。他の態様において、該抗ＧＤ２抗体は、ＣＨＯ細胞に発現したキメラ１４.１８抗体である (ｃｈ１４.１８/ＣＨＯ)。一の態様において、該抗ＧＤ２抗体は、配列番号１、２、３および/または４にコードされる抗体の、同じまたは類似の天然の活性を有する、断片またはホモログであってもよい。
【００４１】
特定の態様において、該抗ＧＤ２抗体はいずれの他の部分にも融合していない。特定の態様において、該抗ＧＤ２抗体は、免疫サイトカインではない。特定の態様において、抗ＧＤ２抗体を含む製剤は、免疫サイトカインを含まない。特定の態様において、該患者は、特に、該抗体処置を含む、同じ処置サイクルおよび/または同じ全処置期間内で、免疫サイトカインにより併用処置されない。
【００４２】
抗ＧＤ２抗体を含む製剤はさらに、塩およびＷＦＩを含んでいてよく、さらに、場合によって、アミノ酸、特に、ヒスチジン、アルギニンおよび/またはリジンのような塩基性アミノ酸を含んでいてよい。一の態様において、抗ＧＤ２抗体を含む製剤は、さらに、緩衝剤、例えば、該塩およびＷＦＩを含む、リン酸緩衝食塩水を含んでいてよい。抗ＧＤ２抗体を含む製剤は、さらに、安定化剤、保存量および他の担体または賦形剤を含んでいてよい。一の態様において、抗ＧＤ２抗体を含む製剤は、抗ＧＤ２抗体 (例えばｃｈ１４.１８) を含み、さらに、スクロース、ポリソルベート２０、ヒスチジンおよび塩酸を含む。一の態様において、該抗体はｃｈ１４.１８/ＣＨＯであり、該抗体を含む製剤は、ＡＰＮ３１１ (修正した処方) であり、該製剤は、４.５mg/mL 抗体、５０mg/mL スクロース、０.１mg/mL ポリソルベート２０および３.１mg/mL ヒスチジンを含む。抗ＧＤ２抗体を含む製剤は、凍結乾燥していてよい。再構成した溶液は、６±０.５のｐＨを有していてよい。一の態様において、抗ＧＤ２抗体を含む製剤はさらに、スクロース、Ｌ−アルギニン、クエン酸一水和物、ポリソルベート２０および塩酸を含む。一の態様において、該製剤は、４mg/mL 抗ＧＤ２抗体、２０mg/mL スクロース、１３.９mg/mL Ｌ−アルギニン、２mg/mL ポリソルベート２０および２.１mg/mL クエン酸一水和物を含む。一の態様において、該製剤は凍結乾燥されており、０.９％ 塩化ナトリウム ４mLで再構成してよく、得られた溶液は、ｐＨ５.５を示す (ｐＨは塩酸 (ＨＣＬ) で調製してよい)。一の態様において、抗ＧＤ２抗体を含む製剤は、安定化剤、保存料および他の賦形剤を含まない。抗ＧＤ２抗体を含む製剤を、輸液バッグ、例えば通常生理食塩溶液、すなわち生理ＮａＣｌ溶液 (０.９％) を含み、場合によってヒト血清アルブミン (ＨＡＳ、ヒトアルブミンとも称する) を含んでいてよい輸液バッグに添加してよい。一例において、該輸液バッグは、通常生理食塩溶液および、０.２５〜５％または、これらの濃度間の任意の範囲のヒト血清アルブミンを含む。一例において、該輸液バッグは、最終体積２５０mlの０.９％ ＮａＣｌおよび５mlの２０％ ヒトアルブミンまたは、１００mlの０.９％ＮａＣｌおよび５mlの２０％ヒトアルブミンまたは５０mlの０.９％ ＮａＣｌおよび２mlの２０％ヒトアルブミンを含む。
【００４３】
該抗ＧＤ２抗体または抗ＧＤ２抗体を含む製剤は、１〜３０mg/m２、１〜３５mg/m２、１〜５０mg/m２または１〜６０mg/m２、例えば１、２、３、４、５、６、７、７.５、８、９、１０、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１７.５、１８、１９、２０、２５、３０、３２、３５、４０、４５、５０もしくは６０mg/m２またはこれらの用量間の任意の範囲の１日の抗体用量で投与してよい。一の態様において、該抗ＧＤ２抗体または抗ＧＤ２抗体を含む製剤を、７、７.５、８、９、１０、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１７.５、１８、１９、２０、２５、３０、３２または３５mg/m２またはこれらの用量間の任意の範囲の１日の抗体用量で投与してよい。例えば、１０mg/m２の１日用量は、該患者が、１日あたり、体表面積１m２あたり１０mgの抗ＧＤ２抗体の投与を受けることを意味する。本明細書において、用量 (例えばmgまたはμgで示す) は、有効成分の用量、すなわち、該製剤中の有効成分の量を指す。例えば、特定する用量は、抗ＧＤ２抗体を含む製剤中の抗ＧＤ２抗体の量、または、サイトカインを含む製剤中の該サイトカインの量、または、モルヒネまたは他の鎮痛剤を含む製剤中のモルヒネまたは他の鎮痛剤の量等を指していてよい。上述の例で特定するように、１０mg/m２の１日用量は、該患者が、１日につき、体表１m２あたり１０mgの抗ＧＤ２抗体 (特定の体積の、該抗ＧＤ２抗体を含む製剤中に含まれていてよい) の投与を受けることを指す。本明細書において、１m２あたりの用量は、該患者の体表面積（ＢＳＡ）１m２あたりの用量を指す。本明細書において、kgあたりの用量は、該患者の体重１kgあたりの用量を指す。
【００４４】
いくつかの態様において、抗ＧＤ２抗体を含む製剤を、１日の用量１〜１５、１〜２０、１〜２５、１〜３０または１〜３５mg/m２またはこれらの１日の用量間の任意の範囲で投与する。特定の態様において、抗ＧＤ２抗体を含む製剤は、５０、４０、３０または２５mg/m２より低い１日用量で投与する。特定の態様において、抗ＧＤ２抗体を含む製剤を、７、１０、１５、１７.５または２０mg/m２までの１日用量で投与する。一の態様において、抗体製剤を、１５、１７.５、２０または２５mg/m２/日の用量で、４日間投与する。一の態様において、該抗体製剤を、５０mg/m２/日の用量で４日間投与する。該抗ＧＤ２抗体を、１０、２０、２５、５０、６０、６５、６８、７０、７５、８０、１００、１２０、１５０、２００、２１０、２５０または３００mg/m２/サイクルの用量、またはこれらの用量間の任意の範囲で投与してよい。１回の処置サイクルあたりの患者１人あたりの全用量を、予め決定した、全患者用量と定義してよい。
【００４５】
いくつかの態様において、抗ＧＤ２抗体を含む製剤を、１日につき５時間以上、例えば１日あたり５.７５時間以上、１日あたり８時間以上、１日あたり１０時間以上または１日あたり２０時間まで、または１日あたり２４時間まで、またはこれらの期間の任意の範囲において、例えば４日または５日以上、静脈点滴として投与する。他の態様において、抗ＧＤ２抗体を含む製剤を、１日につき２４時間にわたる静脈内持続点滴として投与する。特定の態様において、該抗ＧＤ２抗体を、予め決定した全患者用量が投与されるまで、１日につき２４時間にわたって、静脈内持続点滴として投与する。特定の態様において、該抗ＧＤ２抗体を、１日につき２４時間にわたって、１日以上、例えば４、５、１０、１４、１５日間、または２１日まで、もしくはそれより長く、静脈内持続点滴として投与する。
【００４６】
いくつかの態様において、抗ＧＤ２抗体を含む製剤を、特定の治療効果が達成されるまで、一定の処置期間の間投与する。いくつかの態様において、該治療効果は、例えば、免疫系のバイオマーカー（例えば血液パラメーター、例えばリンパ球数および/またはＮＫ細胞数；および/またはサイトカイン）の上昇により決定される、腫瘍に対する免疫応答の上昇であってよい。いくつかの態様において、該治療効果は、腫瘍マーカー（例えばカテコールアミン）の低下であってよい。いくつかの態様において、該治療効果は、メタヨードベンジルグアニジンシンチグラフィー (ｍＩＢＧ)、磁気共鳴画像法 (ＭＲＩ)、Ｘ線コンピュータ断層撮影 (ＣＴ) および/または骨髄組織診断（吸引またはトレフィン生検により評価）および/またはＣＤＣアッセイおよび/またはＷＢＴ等の方法により決定し得る。
【００４７】
特定の態様において、該治療効果は、病態安定（stable disease）（すなわち、病変、腫瘍組織および/またはサイズにさらなる上昇が見られない）、部分寛解（すなわち、病変、腫瘍組織および/またはサイズの減少）、および/または完全寛解（すなわち、全ての病変および腫瘍組織の完全な退縮）として定義してよい。
【００４８】
完全寛解 (ＣＲ) は、さらに次のように定義し得る:
・  全ての測定および評価可能な疾患が完全に消失すること、
・  新規の病変が見られないこと、
・  疾患に関連する症状が見られないことおよび/または
・  例えばマーカーおよび/または他の異常な臨床検査値の正常化を含む、評価できる疾患のエビデンス、が見られないこと。
【００４９】
いくつかの態様において、測定可能、評価可能および評価不可能な全ての病変および部位は、ベースラインと同じ技術を用いて評価しなければならない。
【００５０】
部分寛解 (ＰＲ) はさらに次のように定義し得る:
・  少なくとも１つの測定可能な病変を有する患者にのみ当てはまること
・  全ての測定可能な病変の垂直直径の積和のべースラインより、５０％以上低下すること、
・  評価可能な疾患の進行が見られないこと
・  新規の病変がみられないこと。
【００５１】
いくつかの態様において、全ての測定可能および評価可能な病変および部位は、ベースラインと同じ技術を用いて評価しなければならない。
【００５２】
抗ＧＤ２抗体を含む製剤は、PCT/EP2012/061618またはPCT/EP2012/064970に記載のように投与してよい。例えば、抗ＧＤ２抗体を含む製剤を、１日につき２４時間、静脈内持続点滴として投与してよい。したがって、一の局面において、本発明は、患者におけるＧＤ２陽性がんの処置に用いるための、抗ＧＤ２抗体を含む製剤であって、抗ＧＤ２抗体を含む製剤が、１日以上、１つ、２つまたはそれ以上の処置サイクルにわたって、併用してＩＬ−２を投与することなく投与される、製剤に関する。他の局面において、本発明は、患者におけるＧＤ２陽性がんの処置に用いるための、抗ＧＤ２抗体を含む製剤であって、抗ＧＤ２抗体を含む製剤は、併用してＩＬ−２を投与することなく、持続点滴として該患者に投与され、該抗ＧＤ２抗体は、１４Ｇ２ａ抗体ではないか、または、該抗ＧＤ２抗体がキメラまたはヒト化抗ＧＤ２抗体である、製剤に関する。
【００５３】
抗ＧＤ２抗体を含む製剤は、４、５、１０、１４、１５または２１日間連続して、またはこれらの期間の間の任意の範囲にわたって投与してよい。また、抗ＧＤ２抗体を含む製剤は、１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、２０、２１日以上、連続して投与してよい。特定の態様において、抗ＧＤ２抗体を含む製剤を、全処置サイクルにわたって、例えば３５日間投与する。いくつかの態様において、抗ＧＤ２抗体を含む製剤を、全処置期間、例えば、それぞれが３５日間の５回の処置サイクル、すなわち全体で１８０日にわたって、静脈内持続点滴として投与する。１日あたりの抗体用量は、予め決定した該抗体の患者用量が投与されるように、適宜減少させてよい。一の態様において、予め決定した、該抗体の患者用量は、１００mg/m２/サイクルである。一の態様において、全処置期間は、５つのサイクルを含む。したがって、この例において、全処置期間についての該抗体用量は、５００mg/m２である。一の態様において、全処置期間あたり５００mg/m２という、この全抗体用量を、１８０日間にわたって、すなわち、２.７７mg/m２/日で投与する。抗ＧＤ２抗体を含む製剤を、１日につき２４時間にわたって静脈内持続点滴として投与してよい。かかる持続点滴のために、浸透圧ミニポンプを使用してよい。一の態様において、抗ＧＤ２抗体を含む製剤を、１日につき２４時間、静脈内持続点滴として、４、５、１０、１４、１５または２１日間連続して、またはこれらの期間の間の任意の範囲で、上で特定する１日用量 (例えば７、１０、１５、１７.５、２０または２５mg/m２/日) で、例えば１５、１７.５、２０または２５mg/m２/日で４日間、２０mg/m２/日で５日間、１０mg/m２/日で１０日間、１５mg/m２/日で１０日間、７mg/m２/日で１４日間、１５mg/m２/日で１４日間、１０mg/m２/日で１５日間、７mg/m２/日で２１日間、または１０mg/m２/日で２１日間またはこれらの用量間の任意の範囲で投与する。特定の態様において、抗ＧＤ２抗体を含む製剤は、１日用量４０mg/m２で５日間、静脈内持続点滴として投与しない。特定の態様において、抗ＧＤ２抗体を含む製剤を、静脈内持続点滴として５日間、すなわち１２０時間の点滴として投与しない。いくつかの態様において、抗ＧＤ２抗体を含む製剤を、静脈内持続点滴として、５日間より長く投与する。いくつかの態様において、抗ＧＤ２抗体を含む製剤を、静脈内持続点滴として６日間以上投与する。
【００５４】
一の態様において、該抗ＧＤ２抗体を含む製剤はＡＰＮ３１１であり、１０mg/m２/日の用量で１０日間投与される。一の態様において、該抗ＧＤ２抗体を含む製剤はＡＰＮ３１１であり、１０mg/m２/日の用量で、１０日間連続して、１、２、３、４、５もしくは６またはそれより多くの処置サイクルにわたって投与される。
【００５５】
本発明によれば、該患者は、ＩＬ−２により併用処置さらない。特定の態様において、該患者は、ＩＬ−２ともＧＭ−ＣＳＦとも併用処置さらない。特定の態様において、該患者はいずれのサイトカインによっても併用処置されない。したがって、「患者がＩＬ−２、ＧＭ−ＣＳＦおよび/または他のサイトカインと併用して処置されない」という記載は、上述の各処置スケジュール、すなわち、ＩＬ−２を用いない、ＩＬ−２およびＧＭ−ＣＳＦを用いない、および/またはいずれのサイトカインも用いない処置スケジュールを含む。一の態様において、該患者は、同一の処置サイクル内において、ＩＬ−２、ＧＭ−ＣＳＦおよび/または他のサイトカインにより併用処置されない。一の態様において、該患者は、同一の全処置期間内において、ＩＬ−２、ＧＭ−ＣＳＦおよび/または他のサイトカインにより併用処置されない。いくつかの態様において、該患者は、１以上の以前の処置サイクルおよび/または全処置期間において、ＩＬ−２、ＧＭ−ＣＳＦおよび/または１種以上の他のサイトカインにより処置されていてよい。いくつかの態様において、該患者は、１つ以上の以前の処置サイクルおよび/または全処置期間において、ＩＬ−２、ＧＭ−ＣＳＦおよび/または他の１種以上のサイトカインにより処置されていない。一の態様において、該抗体処置期間に、ＩＬ−２、ＧＭ−ＣＳＦおよび/または１種以上の他のサイトカインを用いた１回以上の処置期間が先行する、同時である、および/または後に続くことはない、すなわち、抗ＧＤ２抗体を含む製剤は、ＩＬ−２、ＧＭ−ＣＳＦおよびまたは１つ以上の他のサイトカインを併用して投与することなく該患者に投与される。一の態様において、抗ＧＤ２抗体を含む製剤を用いる処置期間が、サイトカイン（または１種以上のサイトカインを含む製剤）を用いた１回以上の処置期間を、特に同一の処置サイクル内および/または（抗体処置を含む）同一の全処置期間内に伴うことはない。例えば、該患者は、顆粒球コロニー刺激因子 (Ｇ−ＣＳＦ)、ＧＭ−ＣＳＦ、ＩＬ−２、ＩＬ−１２および/またはＩＬ−１５により併用処置されない。一の態様において、抗ＧＤ２抗体を含む製剤は、ＩＬ−２を併用して投与することなく、該患者に投与される。一の態様において、抗ＧＤ２抗体を含む製剤は、ＧＭ−ＣＳＦを併用して投与することなく、該患者に投与される。一の態様において、ＩＬ−２および/またはＧＭ−ＣＳＦ (またはＩＬ−２および/またはＧＭ−ＣＳＦを含む製剤) を、抗体処置期間を含む同一の処置サイクル内で該患者に投与しない。一の態様において、抗ＧＤ２抗体を含む製剤を、ＩＬ−２および/またはＧＭ−ＣＳＦを併用して投与することなく、該患者に投与する。一の態様において、抗ＧＤ２抗体を含む製剤を、サイトカインを併用して投与することなく、該患者に投与する。
【００５６】
抗ＧＤ２抗体を含む製剤を用いる処置期間に、レチノイド（またはレチノイドを含む製剤）を用いた１回以上の処置期間が先行しているか、同時であるか、または後に続いていてよい。一の態様において、抗ＧＤ２抗体を含む製剤を用いる１回以上の処置期間の後に、レチノイドを用いる１回以上の処置期間が続く。レチノイドを用いるかかる１回以上の処置期間が、１回以上の抗体処置期間を含む同一の１回以上の処置サイクル内で、後に続いていてよいか、またはその後、すなわち、１回以上の抗体処置期間を含む１回以上の処置サイクルが終わった後、特に、１回以上の抗体処置期間を含む最後の処置サイクルの後、すなわち、該抗体を用いる全処置期間の最後に、続いていてよい。したがって、一の態様において、抗体処置期間とレチノイド処置期間の間に期間があり、該期間は処置を行わない期間であるか、または、１種以上の他の薬剤または処置を用いた１回以上の処置期間を含んでいてよい。
【００５７】
一の態様において、抗ＧＤ２抗体を含む製剤を用いる１回以上の処置期間に、同じ処置サイクル内で、レチノイドを用いる１回以上の処置期間が続いていている。一の態様において、該処置サイクルは、抗ＧＤ２抗体を含む製剤を用いる少なくとも１回の処置期間および、レチノイドを用いる少なくとも１回の処置期間を含む。一の態様において、該処置サイクルは、処置を行わない１回以上の期間をさらに含んでいてよい。一の態様において、該処置サイクルは、レチノイドを用いる少なくとも１回の処置期間が後に続く、抗ＧＤ２抗体を含む製剤による少なくとも１回の処置期間を含んでいてよい。一の態様において、該処置サイクルは、抗ＧＤ２抗体を含む製剤を用いる少なくとも１回の処置期間と、レチノイドを用いる少なくとも１回の処置期間の間に、何も処置を行わない少なくとも１回の期間を含んでいてよい。
【００５８】
一の態様において、レチノイドは、レチノイン酸 (ＲＡ)、例えばイソトレチノイン (ｃｉｓ-ＲＡ)である。レチノイドは、第一世代のレチノイド（例えばレチノール、レチナール、トレチノイン（レチノイン酸、レチン−Ａ）、イソトレチノインおよびアリトレチノイン）、第二世代レチノイド（例えばエトレチナートおよびその代謝物アシトレチン)、および/または第三世代レチノイド (例えばタザロテン、ベキサロテンおよびアダパレン) であってよい。該レチノイドは、レチノイド誘導体、特に、合成レチノイド誘導体、例えば、フェンレチニドであってもよい。先行するまたは後に続く、レチノイドによる１回以上の処置期間は、抗体および/またはＩＬ−２（またはサイトカイン）投与を伴わない処置期間であってよい。
【００５９】
該処置期間は繰り返してよい。該処置期間の後に、同じおよび/または異なる薬剤または処置による処置を行わない間隔期が続いていてよい。一の態様において、該間隔期は、いずれの処置も行わない間隔であってよい。他の態様において、該間隔は、同じ製剤または処置の投与を行わないが、他の製剤または処置をその間に投与してもよい。
【００６０】
さらに、本発明の処置には、１種以上の鎮痛剤（または１種以上の鎮痛剤を含む製剤）、例えば非ステロイド抗炎症剤（ＮＳＡＩＤ、例えばインドメタシン）、および/または１種以上のオピオイド、および/または１種以上の他の鎮痛薬またはその任意の組み合わせを用いる処置が先行するかおよび/または付随していてよい。一の態様において、該鎮痛剤はオピオイド、例えばモルヒネおよび/またはモルヒネ誘導体、例えばヒドロモルホンである。他のオピオイドは、例えばトラマドール、ペチジン、コデイン、ピリトラミド、レボメサドンならびにフェンタニル、アルフェンタニル、レミフェンタニルおよびスフェンタニルである。
【００６１】
上述のように、通常、抗ＧＤ２抗体は、（常用量の）１つ以上のサイトカイン、特にＩＬ−２および/またはＧＭ−ＣＳＦと併用して投与されている。しかし、抗体処置と通常のサイトカイン処置の組み合わせは、該抗体処置の副作用、特に疼痛を強める。したがって、１つ以上の鎮痛剤、特にモルヒネによる処置が必要であった。ここで、驚くべきことに、抗ＧＤ２抗体処置は、サイトカイン処置を行わなくても効率的であることが明らかになった。したがって、いずれのサイトカイン処置も完全に除くことにより、該疼痛副作用（および他の副作用）を有意に低下させることができ、それにより、モルヒネおよび/または他の鎮痛剤の投与も減少させることができる。本発明の製剤および方法を用いれば、用量を低下させること、投与経路を変えること（例えば静脈内点滴から経口）、鎮痛薬処置の期間を減少させることおよび/または１種以上の鎮痛薬の調製の種類を変えることが可能である。したがって、本発明により、抗ＧＤ２抗体を含む製剤の処置を受けている患者が、該処置サイクルの少なくとも一部の間、外来処置を行うことすら可能である。
【００６２】
一の態様において、本発明の投与スケジュール、すなわち、ＩＬ−２、ＧＭ−ＣＳＦ、および/または他のサイトカインを併用して投与することなく抗ＧＤ２抗体を投与することによって、ＩＬ−２、ＧＭ−ＣＳＦおよび/または１種以上の他のサイトカインの併用処置を含む処置スケジュールと比較して、副作用が実質的に低下する。他の態様において、疼痛の副作用が、ＩＬ−２、ＧＭ−ＣＳＦおよびまたは１種以上の他のサイトカインの併用処置を含む処置スケジュールと比較して、実質的に低下する。
【００６３】
したがって、一の態様において、全処置期間内、処置サイクル内、処置サイクル内の抗体処置の間、処置サイクル内の抗体処置の日から次の抗体処置の日まで、および/または１つの処置サイクルから次の処置サイクルまでの間、１種以上の鎮痛薬、特にモルヒネの用量を低下させる。
【００６４】
鎮痛剤の用量は、PCT/EP2012/061618およびPCT/EP2012/064970および本明細書に記載するように、該抗ＧＤ２抗体の長期間点滴、例えば１日あたり２４時間にわたる静脈内持続点滴により、さらに低下させることができる。したがって、該抗体の持続点滴と組み合わせて、ＩＬ−２を全く用いない、特定の態様においては、ＧＭ−ＣＳＦも全く用いない、および、特定の態様においては、他のサイトカインを全く用いない本発明の処置スケジュールにおいて、鎮痛剤の用量を実質的に低下させてよい。本明細書において、「他のサイトカインを全く用いない」または「サイトカインを全く用いない」という記載は、ＩＬ−２およびＧＭ−ＣＳＦを全く用いないこと、および、他のサイトカインも用いない、すなわち、個々の処置スケジュールにおいて、および/または規定の処置期間、例えば同一の処置サイクルおよび/または同一の全処置期間内で、サイトカインを全く用いないことを指すものとする。したがって、いくつかの態様において、ＩＬ−２を全く用いない。いくつかの態様において、ＩＬ−２およびＧＭ−ＣＳＦを全く用いない。いくつかの態様において、サイトカインを全く用いない。したがって「ＩＬ−２を全く用いない、および特定の態様において、ＧＭ−ＣＳＦを全く用いない、および、特定の態様において他のサイトカインを全く用いない」という記載は、上述の個々の態様、すなわち、ＩＬ−２を用いない、ＩＬ−２およびＧＭ−ＣＳＦを用いない、および/またはサイトカインを全く用いない、処置（例えば処置期間、処置サイクルおよび/または全処置期間）を指すものとする。
【００６５】
１種以上の鎮痛剤を、経口投与してよい。１種以上の鎮痛薬を、静脈内点滴、特に持続静脈内点滴として１日につき２４時間投与してもよい。１種以上の鎮痛剤による処置期間は、抗ＧＤ２抗体を含む製剤による処置期間に先立っていても、および/または同時であってもよい。
【００６６】
いくつかの態様において、１つ以上の鎮痛剤は、例えばガバペンチンのようなＧＡＢＡ類似体から選択してよい。したがって、該患者は、例えば抗体処置期間を開始するよりも前に３日間、ガバペンチンで処置してもよい。
【００６７】
鎮痛剤処置の次に示す例およびその用量は、常用量であって、本明細書に記載するように減量してよい。この条件下において、通常、この状況において、ガバペンチンは、１日１回、２回または３回、１０mg/kg/投与の用量で経口投与する。ガバペンチンは、３００mg/kg/投与までの用量で投与してよい。ガバペンチンは、２５０mg/５mLのガバペンチンを含む経口液剤またはカプセル剤 (１００mg、３００mgおよび４００mg)として入手可能であり、投与してよい。ガバペンチン処置は、モルヒネおよび/他の鎮痛剤の処置の代わりに、または該処置に加えて行ってよい。さらに、該患者を、パラセタモール (１０〜１５mg/kg/投与、４時間毎、または１日に４回、経口または静脈内)、イブプロフェン(５〜１０mg/kg/投与、６〜１２時間毎、経口)、メタミゾール(１０〜１５mg/kg/投与、経口、４時間毎)、ジフェンヒドラミン(０.５〜１mg/kg/投与、経口または静脈内)および/またはインドメタシン (例えば０.３〜０.５mg/kg/投与または、２５もしくは５０mg/投与、経口または静脈内、６時間毎)で処置してよい。パラセタモール、イブプロフェン、メタミゾールおよび/またはインドメタシンによるかかる処置は、モルヒネおよび/またはガバペンチンおよび/または他の鎮痛剤との処置の代わりに、または該処置に加えて行ってよい。
【００６８】
いくつかの態様において、モルヒネは、鎮痛薬として用いられており、場合によって１種以上の他の鎮痛薬と組み合わせてよい。例として、抗ＧＤ２抗体を含む製剤を用いる処置期間よりも前、および/または該処置期間の間に投与する、モルヒネ常用量をいくつか表１に示す。常用量の例において、ｃｈ１４.１８/ＣＨＯ (ＡＰＮ３１１)は、１日につき８時間の点滴として、２０mg/m２/日で連続して５日間、すなわち１００mg/m２/サイクルの用量で投与し、ＩＬ−２は、６MIU/m２/日で、連続して５日間、１サイクルあたり２回 (すなわち６０MIU/m２/サイクル)、５サイクルにあたって皮下投与し、モルヒネ塩酸塩は、各抗体処置日 (すなわち、抗ＧＤ２抗体を含む製剤を患者に投与する、処置サイクルのそれぞれの日)に、急速投与量０.０５mg/kg/時間で、ＡＰＮ３１１点滴を開始する前に２時間投与し、ＡＰＮ３１１点滴の間は、点滴速度０.０３mg/kg/時間で８時間投与し、間隔点滴速度０.０１mg/kg/時間で、ＡＰＮ３１１処置の最初の日は１４時間、耐用性を示す場合は、その後の処置日は４時間（モルヒネ処置を行わない１０時間の間隔がある）投与する。必要に応じて、用量を増加させる(例えば抗体点滴間の点滴速度の上昇)および/または追加の急速投与を行う。したがって、予め規定するモルヒネ用量は、１日につき少なくとも０.３８mg/kg、処置サイクル（抗体処置期間５日間を含む）につき少なくとも２mg/kgおよび、全処置期間（３回のサイクルを含む）あたり少なくとも１０mg/kgであった。
【表１】
2019218359.tif 000002
【００６９】
常用量の他の例において、ＡＰＮ３１１は、１０、２０および３０mg/m２/日および５０、１００、１５０mg/m２/サイクルの用量で、１日あたり８時間の点滴として、連続して５日間、３サイクルにわたって投与され、ＩＬ−２は、６MIU/m２/日で、連続して５日間、１サイクルにつき２回皮下投与され (すなわち６０MIU/m２/サイクル)、モルヒネ塩酸塩は、各抗体処置日に、０.５〜１.０mg/kg/投与の急速投与量で(抗体点滴を開始する直前)、かつ、ＡＰＮ３１１点滴の間は、０.０５mg/kg/時間の速度の持続点滴で投与する。必要に応じて、該用量を増加させ (例えば、抗体点滴の間の点滴速度の上昇) かつ/または追加の急速投与を行う。したがって、予め規定したモルヒネの用量（またはモルヒネの常用量）は、１日あたり少なくとも０.９mg/kg、処置サイクル(５日間の抗体処置を含む)あたり４.５mg/kgおよび、全処置期間（３回のサイクルを含む）あたり少なくとも１３.５mg/kgである。
【００７０】
ｃｈ１４.１８および１種以上のサイトカインによる通常の処置の他の例において、モルヒネは、１.２mg/kg/時間までの点滴速度で、２４時間にわたって投与されている。
【００７１】
常用量のさらに他の例において、ｃｈ１４.１８/Ｓｐ２/０を、２５mg/m２/日の用量で、連続して４日間投与する。一の態様において、ｃｈ１４.１８/Ｓｐ２/０の各用量は、１.２５mg/m２/時間 x ０.５時間から開始し、次いで２.５mg/m２/時間 x ０.５時間、さらに、場合によって、点滴速度を３.７５mg/m２/時間 x ０.５時間、次いで、耐用性を示す場合は、残りの用量について５mg/m２/時間に上昇させて、５.７５時間以上(最長２０時間まで延長してよい)または１０時間以上(最長２０時間まで延長してよい)にわたって、静脈内に投与する。ＩＬ−２は、１サイクルおき（例えばサイクル２および４）に、該処置サイクルの１週目は３MIU/m２/日、該処置サイクルの２週目は４.５MIU/m２/日で４日間（９６時間；すなわち、３０MIU/m２/サイクル）で、静脈内持続点滴として投与する。ＧＭ−ＣＳＦは２５０mcg/m２の１日用量で皮下投与する。一の態様において、各処置サイクルは０日目に開始し、処置サイクルの０日目は、各サイトカインによる処置の最初の日である。全処置期間は、１、２、３、４もしくは５回またはそれ以上の処置サイクルを含んでいてよい。表２、３および４は、慣用的な処置スケジュールの例を示す。
【表２】
2019218359.tif 000003
【００７２】
かかる常用量の例において、ｃｈ１４.１８/Ｓｐ２/０処置は、全て５サイクルについて、２８日毎に、２５mg/m２/日x ４日間; ＧＭ−ＣＳＦは２５０μg/m２/日で１４日間; アルデスロイキン(ＩＬ−２)は第１週については３MIU/m２/日および、第２週については４.５MIU/m２/日で投与される。
【表３】
2019218359.tif 000004
【００７３】
かかる常用量の例において、ＧＭ−ＣＳＦは、２５０μg/m２/日で皮下注射として(強く推奨される)、または０日目〜１３日目の間の毎日２時間の静脈内点滴として(ｃｈ１４.１８/Ｓｐ２/０の点滴とともに毎日、抗体処置の前３日間および抗体処置後７日間)投与する。
【表４】
2019218359.tif 000005
【００７４】
アルデスロイキンサイクルの２８〜３１日目は、処置を全く行わない。３２日目に、次の処置サイクル (ＧＭ−ＣＳＦを用いる) を開始する(３２日目＝次のサイクルの０日目)。
【００７５】
常用量の例として、各サイクルの第１週の間、アルデスロイキン (インターロイキン-２、ＩＬ−２)は、(CADD（登録商標） Ambulatory Infusion Pumpまたは類似の点滴ポンプを用いた)持続点滴によって、３MIU/m２/日の用量で４日間(０〜３日目)投与してよい。各サイクルの第２週の間、アルデスロイキン (ＩＬ−２) は、４.５MIU/m２/日の用量で４日間(７〜１０日目、ｃｈ１４.１８/Ｓｐ２/０の点滴を伴う)投与してよい。アルデスロイキンは、５％デキストロース水溶液（必要であれば０.１％ヒト血清アルブミンを含んでいてもよい）中で携帯型点滴ポンプを介して、カテーテルを通して持続的に静脈内へ点滴してよく、全体積は、該ポンプに依存する。
【００７６】
６回目の処置サイクルに、処置を行わない１４日間（５回目のサイクルの２４日目であり、６回目のサイクルの０日目に開始し）を追加してよく、その後に、イソトレチノインのみの投与を行う１４日間が続く。
【００７７】
この状況下(すなわち、上述の処置)における常用量の例において、ヒドロキシジン(１ mg/kg; 最大用量５０mg) またはジフェンヒドラミン (０.５〜１.０mg/kg; 最大用量 ５０mg)を、ｃｈ１４.１８/Ｓｐ２/０点滴の２０分前に開始して１０分間静脈内投与し; アセトアミノフェン (１０mg/kg; 最大用量 ６５０mg) を、ｃｈ１４.１８/Ｓｐ２/０点滴の２０分前に経口投与し; かつ/または、負荷用量５０mcg/kgのモルヒネ硫酸塩をｃｈ１４.１８/Ｓｐ２/０投与の直前に投与した後、２０〜５０μg/kg/時間の点滴速度で、ｃｈ１４.１８/Ｓｐ２/０点滴が完了してから２時間の間続くように、モルヒネ硫酸塩の点滴を続ける。さらに、他の麻薬、例えばヒドロモルホンまたはフェンタニルを用いてよい。あるいは、必要であれば、リドカイン点滴を、モルヒネの静脈内急速投与と組み合わせて用いてよい。リドカイン点滴についての投与指針については次に示す：
【００７８】
リドカインの投与(常用量):
a.  ｃｈ１４.１８/Ｓｐ２/０点滴を開始する前に、３０分間、通常生理食塩溶液(NS) ５０cc中、２mg/kgで、リドカインを静脈内へ急速投与する；
b.  ｃｈ１４.１８/Ｓｐ２/０点滴の開始時に、リドカインの静脈内点滴を１mg/kg/時間で開始し、ｃｈ１４.１８/Ｓｐ２/０点滴が完了した２時間後まで続ける；
c.  必要に応じて、２時間毎に、２５〜５０μg/kgでモルヒネを静脈内へ急速投与してよい。
【００７９】
かかる常用量の例において、ガバペンチンを負荷用量のモルヒネとともに投与することを考慮して、モルヒネ点滴/急速投与を必要に応じて行ってもよく；ガバペンチンは１０ mg/kg/日の用量で開始し、臨床的な応答によって、３０〜６０mg/kg/日まで用量を上げて設定してよい。
【００８０】
かかる常用量の例において、ヒドロキシジン(またはジフェンヒドラミン) およびアセトアミノフェンの投与を、必要に応じて、静脈内または経口により、６時間毎に繰り返してよい。
【００８１】
かかる常用量の例において、ｃｈ１４.１８/Ｓｐ２/０点滴の間、神経性疼痛を処置するために、モルヒネ硫酸の点滴速度を上昇させることによりさらなる用量のモルヒネを投与してよいが、患者を注意深く観察しなければならない。患者がモルヒネに耐用性を示し得ない場合（例えば掻痒感）、フェンタニルまたはヒドロモルホンを、モルヒネに代用してよい。あるいは、必要であれば、リドカイン点滴を、モルヒネの静脈内急速投与と組み合わせて用いてよい。
【００８２】
本明細書において、「モルヒネ用量」という語は、患者の体重１kgあたりのモルヒネの量(mgまたはmcg)を指す。したがって、１日のモルヒネ用量という場合、該用量は、１日あたりの、患者の体重１kgあたりのモルヒネの量 (mgまたはmcg) であり、または、１時間あたりのモルヒネ用量という場合は、該用量は、１時間あたりの該患者の体重１１kgあたりのモルヒネの量 (mgまたはmcg；またはモルヒネ点滴速度)であり、処置サイクルあたりのモルヒネ用量という場合は、処置サイクルあたりの該患者の体重１kgあたりのモルヒネの量 (mgまたはmcg) であり、または、全処置期間あたりのモルヒネ用量という場合は、該用量は、全処置期間あたりの該患者の体重１kgあたりのモルヒネの量（mgまたはmcg）である。
【００８３】
いくつかの態様において、モルヒネおよび/または他の鎮痛剤を、１日の常用量で投与してよいが、投与頻度を、例えば、通常は各日投与する場合は、１日おきに低下させて投与してよい。モルヒネおよび/または他の鎮痛剤が、通常は静脈内持続点滴として数日間投与される他の例において、１日あたりの点滴時間を低下させる（非持続点滴とする）か、または、持続点滴の持続時間、すなわち、持続点滴の日数を低下させる。
【００８４】
いくつかの態様において、本発明の処置サイクル（ＩＬ−２を全く用いない、および特定の態様においては、ＩＬ−２およびＧＭ−ＣＳＦを全く用いない、および特定の態様においては、サイトカイン処置を全く行わない）における、１日以上の抗体処置日（すなわち抗ＧＤ２抗体を含む製剤を患者に投与する、処置サイクルの１日）における１種以上の鎮痛剤の１日用量は、通常の処置サイクル（通常のサイトカイン処置を行う）で、１日以上の抗体投与日に投与される常用量よりも低い。
【００８５】
いくつかの態様において、本発明の処置サイクル（ＩＬ−２を全く用いない、および特定の態様においては、ＩＬ−２およびＧＭ−ＣＳＦを全く用いない、および特定の態様においては、サイトカイン処置を全く行わない）における、１日以上の鎮痛剤処置日（すなわち、１種以上の鎮痛剤、例えばモルヒネを患者に投与する処置サイクルの日であって、抗体投与の前であっても後であってもよい）における、１種以上の鎮痛剤の１日用量は、通常の処置サイクル（通常のサイトカイン処置を行う）における、１日以上の鎮痛剤処置日に投与される１日用量よりも低い。
【００８６】
特定の態様において、１種以上の鎮痛剤（例えばモルヒネ）の用量 (例えば１日用量) を、長時間にわたって、例えば全処置期間内、処置サイクル内、処置サイクル内の抗体処置期間の間、処置サイクル内のある抗体または鎮痛剤による処置日から次の抗体または鎮痛剤による処置日まで、および/または１つの処置サイクルから次の処置サイクルまで、減少させる。いくつかの態様において、該鎮痛剤の用量、特にモルヒネ用量を、処置サイクル内、処置サイクル内の抗体処置期間の間、および/または、処置サイクル内のある抗体または鎮痛剤/モルヒネ処置日から次の抗体または鎮痛剤/モルヒネ処置日において、持続的に減少させる。
【００８７】
いくつかの態様において、ＩＬ−２を全く用いない、および特定の態様においてはＧＭ−ＣＳＦ(およびＩＬ−２)を全く用いない、および特定の態様においては他のサイトカインも全く用いない、本発明の点滴スケジュールにおける、１日以上の抗体投与日の間に投与されるモルヒネの１日用量および/または全ての抗体またはモルヒネ処置日のモルヒネ用量は、常用量の１種以上のサイトカインとともに該抗体を投与する間のモルヒネの１日用量より低い。特定の態様において、ＩＬ−２を全く用いない、および、特定の態様においては、ＧＭ−ＣＳＦを全く用いない、および、特定の態様においてはサイトカインを全く用いない、抗体点滴スケジュールにおいて投与される、モルヒネの１日用量またはサイクルあたりのモルヒネ用量は、常用量のサイトカインを用いる抗体点滴スケジュールにおいて投与される、または予め決定されているモルヒネ用量の９０％以下、８０％以下、７０％以下、６０％以下または５０％以下または４０％以下または３０％以下または２０％以下または１０％以下である。いくつかの態様において、ＩＬ−２を全く用いない、および、特定の態様においては、ＧＭ−ＣＳＦも全く用いない、および、特定の態様においては他のサイトカインも全く用いない、本発明による抗体の静脈内持続点滴において１日以上投与されるモルヒネの１日用量、および/または全ての抗体またはモルヒネ処置日のモルヒネの１日用量は、０.９、０.７２、０.４８、０.３８、０.４３７５および/または０.２０５mg/kg/日より低い。
【００８８】
いくつかの態様において、モルヒネは、該抗体を投与する日のうちの全てではない何日かのみ、例えば、ＩＬ−２を全く用いない、および、特定の態様においてはＧＭ−ＣＳＦを全く用いない、および、特定の態様においては他のサイトカインを全く用いない、抗体投与の最初の１、２、３、４、５、６または７日間のみ投与する。いくつかの態様において、該抗体投与の１日以上または、処置サイクル全体において、モルヒネを全く投与しない。いくつかの態様において、モルヒネを、全ての処置サイクルではなく、いくつかの処置サイクルにおいてのみ投与する。
【００８９】
いくつかの態様において、モルヒネ点滴速度、すなわち、ＩＬ−２を全く用いない、および特定の態様において、ＧＭ−ＣＳＦを全く用いない、および特定の態様において他のサイトカインを全く用いない、本発明による抗体の静脈内点滴の１時間以上の間に投与される、および/または、モルヒネ処置の全ての時間および日の、１時間あたりの患者の体重１kgあたりのモルヒネ量（またはモルヒネ用量）は、常用量のサイトカインを用いたスケジュールについて予め決定した標準的なモルヒネ点滴速度より低い、かつ/または、上述の常用量のサイトカインの例におけるモルヒネ点滴速度より低い。いくつかの態様において、ＩＬ−２を全く用いない、および特定の態様においてＧＭ−ＣＳＦを全く用いない、および、特定の態様において他のサイトカインを全く用いない、本発明による該抗体の静脈内点滴において１日以上の間投与されるモルヒネ点滴速度および/または全ての抗体またはモルヒネ処置日のモルヒネ点滴速度は、５０、４０、３０、２０、１０mcg/kg/時間および/または５mcg/kg/時間より低く、かつ/またはこれらの点滴速度間の任意の範囲よりも低い。いくつかの態様において、ＩＬ−２を全く用いない、および特定の態様においてＧＭ−ＣＳＦを全く用いない、および、特定の態様において他のサイトカインを全く用いない、本発明による、該抗体の静脈内点滴の１日以上の間に投与されるモルヒネ点滴速度および/または全ての抗体またはモルヒネ処置日のモルヒネ点滴速度は、最初の処置サイクルおよび、場合によってはその後の処置サイクルにおいて、５０mcg/kg/時間より低く、２回目の処置サイクルおよび場合によってはその後の処置サイクルにおいて、４０mcg/kg/時間より低く、３回目の処置サイクルおよび場合によってはその後の処置サイクルにおいては３０mcg/kg/時間より低く、４回目の処置サイクルおよび場合によってはその後の処置サイクルにおいては２０mcg/kg/時間より低く、５回目の処置サイクルおよび場合によってはその後の処置サイクルにおいては、１０mcg/kg/時間よりも低い。
【００９０】
特定の態様において、ＩＬ−２を全く用いない、および特定の態様においてＧＭ−ＣＳＦを全く用いない、および、特定の態様において他のサイトカインを全く用いない、本発明による、該抗体の静脈内点滴を含む１回以上の処置サイクルの間に投与される、処置サイクルあたりのモルヒネ用量は、通常のサイトカイン処置を用いた点滴スケジュールにおける処置サイクルあたりのモルヒネ用量よりも低く、例えば１回目の処置サイクルにおいては９０％以下、８０％以下、７０％以下であり; ２回目の処置サイクルにおいては８０％以下、７０％以下、６０％以下であり; ３回目の処置サイクルにおいては６０％以下、５０％以下、４０％以下であり、４回目の処置サイクルにおいては４５％以下、３５％以下、２５％以下; かつ/または５回目の処置サイクルにおいては３０％以下、２０％以下、１０％以下である。特定の態様において、ＩＬ−２を全く用いない、および、特定の態様においてＧＭ−ＣＳＦを全く用いない、および、特定の態様において他のサイトカインを全く用いない、本発明による抗体の静脈内点滴を含む、１回以上の処置サイクルの間に投与される、２回目および任意のそれ以降の処置サイクルの、処置サイクルあたりのモルヒネ用量は、常用量のサイトカインを用いた抗体点滴スケジュールにおける処置サイクルあたりのモルヒネ用量よりも低い。特定の態様において、該処置サイクルおよび任意のそれ以降の処置サイクルのモルヒネ用量および/または全処置期間のモルヒネ用量は、通常の点滴スケジュールにおける、処置サイクルあたりのモルヒネ用量より低い。いくつかの態様において、ＩＬ−２を全く用いない、および特定の態様においてＧＭ−ＣＳＦを全く用いない、および、特定の態様において他のサイトカインを全く用いない、本発明による抗体の静脈内点滴を含む、１回以上の処置サイクルの間に投与される処置サイクルあたりのモルヒネ用量は、７.２、４.８、４.５、２、１.７５および/または０.８２mg/kg/サイクルより低いか、またはこれらの用量の間の任意の範囲よりも低い。
【００９１】
いくつかの態様において、本発明の点滴スケジュール（すなわち、ＩＬ−２を全く用いない、および、特定の態様においてＧＭ−ＣＳＦを全く用いない、および、特定の態様において他のサイトカインを全く用いない、本発明による該抗体の静脈内点滴の適用）における全処置期間のモルヒネ用量は、通常の点滴スケジュール（すなわち、常用量のサイトカインを用いた抗体点滴スケジュール）における、全処置期間のモルヒネ用量より低い。一の態様において、本発明の点滴スケジュールにおける全処置期間のモルヒネ用量は、通常の点滴スケジュールにおける全処置期間のモルヒネ用量の９０％以下、８０％以下、７０％以下、６０％以下、または５０％以下、４０％以下、３０％以下、２０％以下、１０％以下であり、かつ/または、これらの用量の間の任意の範囲よりも低い。いくつかの態様において、サイトカイン処置を行わない本発明の点滴スケジュールにおける全処置期間のモルヒネ用量は、４３.２、２８.８、１３.５、１０、８.７５および/または４.１mg/kg/全処置期間より低く、かつ/または、これらの用量の間のいずれの範囲よりも低い。
【００９２】
いくつかの態様において、本明細書において本発明の点滴スケジュールにおけるモルヒネ用量と比較する、通常の点滴スケジュールにおける参照モルヒネ用量と称する用量は、該スケジュールにおける標準的なモルヒネ用量または、該スケジュールについて（例えば臨床試験プロトコールに特定されているように）予め決定したモルヒネ用量を指す。いくつかの態様において、本明細書における参照モルヒネ用量は、本発明の、および/または通常の、抗体点滴スケジュールの処置サイクルにおける抗ＧＤ２抗体を含む製剤による処置の最初の日に投与されるモルヒネ用量を指し、「開始モルヒネ用量」と称する。
【００９３】
したがって、本明細書において、「参照モルヒネ用量」は、本発明のものとは異なる処置スケジュール（例えば、サイトカイン処置を伴う）のモルヒネ用量および/または（例えばサイトカイン処置を伴うまたは伴わない処置スケジュールの）開始モルヒネ用量を含むものとし;ＩＬ−２を全く用いない、および特定の態様においてＩＬ−２およびＧＭ−ＣＳＦを全く用いない、および特定の態様においてはサイトカインを全く用いない、本発明による抗体点滴スケジュールにおける他のモルヒネ用量と比較した、該モルヒネ用量の例を全て含むものとする。
【００９４】
特定の態様において、該抗体の投与期間の間の点滴１時間あたりの参照モルヒネ用量、すなわち、参照点滴速度は、５０mcg/kg/時間である。特定の態様において、該抗体の投与期間の点滴１時間あたりの参照モルヒネ用量、すなわち参照点滴速度は、３０mcg/kg/時間である。特定の態様において、参照モルヒネ用量は５０、４０、３０および/または２０mcg/kg/時間である。特定の態様において、参照モルヒネ用量は、０.９、０.７２、０.４８、０.３８、０.４３７５および/または０.２０５mg/kg/日である。特定の態様において、参照モルヒネ用量は、７.２、４.８、４.５、２、１.７５および/または０.８２mg/kg/サイクルである。特定の態様において、参照モルヒネ用量は、４３.２、２８.８、１３.５、１０、８.７５、および/または４.１mg/kg/全処置期間である。特定の態様において、参照インドメタシン用量は、経口または静脈内、６時間毎で、０.３〜０.５mg/kg/投与または、２５もしくは５０mg/投与である。いくつかの態様において、本発明の点滴スケジュール（サイトカイン処置を伴わない）におけるモルヒネ用量と比較される、通常の点滴スケジュール（サイトカイン処置を伴う）における上述の参照モルヒネ用量は、患者に実際に投与されたモルヒネ用量 (例えば、同じ状況で処置された群の全ての処置された患者に投与されたモルヒネ用量の各平均)を指す。
【００９５】
本明細書において、通常の点滴スケジュールと比較して、本発明の点滴スケジュールにおけるモルヒネ用量と称する用量は、かかる本発明のスケジュールについての低減した標準モルヒネ用量、または、該スケジュールについて（例えば臨床試験プロトコールに特定されているように）予め決定した低減したモルヒネ用量を指していてよい。特定の態様において、本発明のスケジュールにおける、点滴１時間あたりの低下したモルヒネ用量、すなわち、ＩＬ−２を全く用いない、および、特定の態様においてはＧＭ−ＣＳＦを全く用いない、および特定の態様においては、サイトカインを全く用いない、本発明の抗体投与の１時間以上または１日以上の間の点滴速度は、５０mcg/kg/時間より低い。特定の態様において、本発明の抗体投与の１時間以上または１日以上の間の点滴１時間あたりのモルヒネ用量、すなわち点滴速度は、３０mcg/kg/時間より低い。いくつかの態様において、本明細書において通常の点滴スケジュールにおけるモルヒネ用量と比較される、上述の本発明の点滴スケジュールのモルヒネ用量は、患者に実際に投与されたモルヒネ用量(例えば、同じ状況で処置される群の全ての処置された患者に投与されたモルヒネ用量の各平均)を指す。
【００９６】
一般的に、個々の鎮痛剤の用量は、個々の患者の疼痛耐性により変わり得る。投与は、最適の鎮痛を得るために適応させてよい。
【００９７】
抗ＧＤ２抗体を含む製剤を用いる処置期間は、レチノイドを用いる１回以上の処置期間、鎮痛剤を用いる１回以上の処置期間、他の薬剤または処置（サイトカイン処置を除く）を用いる１回以上の処置期間および/または処置を行わない１回以上の処置期間と組み合わせてよい。一の態様において、１回以上のかかる他の処置期間と組み合わせた、抗ＧＤ２抗体を含む製剤を用いる処置期間が、１回の処置サイクルとなる。したがって、一の態様において、処置サイクルは、抗ＧＤ２抗体を含む製剤を用いる処置期間を含み、場合によって、他の薬剤、剤および/または処置（サイトカイン処置を除く）を用いる処置期間を含んでいてよい。１回の処置サイクル内のかかる処置期間は、本明細書にさらに記載するように、部分的および/または全体的に重複していてもよい。
【００９８】
一の態様において、該抗体により処置される患者は、レチノイド（例えばイソトレチノイン）によっても処置され、場合によっては、モルヒネおよび/または１種以上のモルヒネ誘導体および/または１種以上の他の鎮痛剤により処置されてよい。一の態様において、抗ＧＤ２抗体を含む製剤による処置期間に、１種以上のサイトカインによる処置期間が先行することおよび/または後に続くことはない。一の態様において、抗ＧＤ２抗体を含む製剤による処置期間は、モルヒネおよび/または１種以上の鎮痛剤による処置期間を伴うことはない。一の態様において、抗ＧＤ２抗体を含む製剤を用いる処置期間は、１種以上のサイトカインを用いる処置期間を伴うことはない。一の態様において、抗ＧＤ２抗体を含む製剤を用いる処置期間に、１種以上のサイトカインを用いる処置期間が先行することおよび/または後に続くことはなく、１種以上のサイトカインを用いる処置期間を同時に伴うこともない。
【００９９】
一の態様において、１回の処置サイクルは、２８〜４９日間、例えば、２８、３５、４２または４９日間もしくはこれらの期間の間の任意の範囲を含む。該処置サイクルは、該患者が該サイクルに含まれる処置、例えば、抗ＧＤ２抗体を含む製剤および/または任意の他の製剤または処置（サイトカイン処置は除く）を初めて受けた日に開始する（０日目または１日目と指定してよい）。
【０１００】
該抗ＧＤ２抗体を用いる処置期間に、レチノイド（例えばイソトレチノイン）による処置期間が、直接的もしくは、１日以上の処置を行わない間隔期、例えば、１、２、３、４または５日間の処置を行わない間隔期を伴って間接的に、先行するか、同時であるか、および/または、後に続いてよい。一の態様において、レチノイド（例えばイソトレチノイン）を、１日２回、１６０mg/m２/日の用量で(等しい用量で、すなわち２ x ８０mg/m２で)経口投与する。一の態様において、レチノイド（例えばイソトレチノイン）を１４日間、例えば処置サイクルの１日目〜１４日目、または該処置サイクルの１９日目〜３２日目に投与する。レチノイド（例えばイソトレチノイン）を用いる処置期間の後に、処置を行わない１日以上の間隔期、例えば処置を行わない１、２、３、４または５日間の間隔期が続いてよい。
【０１０１】
一の態様において、処置サイクルは、レチノイド（例えばイソトレチノイン）による１４日間、例えば該処置サイクルの１〜１４日目における１回の処置期間、それに続く、処置を行わない７日間（処置サイクルの１５〜２１日間）、および該抗ＧＤ２抗体を用いた５日間、例えば該処置サイクルの２２〜２６日目の処置期間 (例えば、１００mg/m２/サイクルの用量を投与するために、８時間にわたって２０mg/m２/日で点滴する)を、次のサイクルが、次の処置サイクルの１日目となる２９日目に開始するよりも前に含む。他の態様において、該処置サイクルは、例えば処置サイクルの１〜１４日目の、レチノイド（例えばイソトレチノイン）を用いた１４日間の処置期間を１回、それに続く、該抗ＧＤ２抗体を用いた５日間、例えば処置サイクルの２２〜２８日目における１回の処置期間(例えば、１００mg/m２/サイクルの用量を投与するために、２０mg/m２/日で点滴する)を、次の処置サイクルの１日目となる、２９日目に次のサイクルが開始するより前に含む。
【０１０２】
一の態様において、該処置サイクルは、該抗ＧＤ２抗体を用いた１０日間、例えば処置サイクルの８〜１７日目における１回の処置期間(例えば１００または１５０mg/m２/サイクルの用量を投与するために、１０または１５mg/m２/日で用いる)および、レチノイド（例えばイソトレチノイン）を用いた１４日間、例えば処置サイクルの１９〜３２日目における１回の処置期間、それに続く、処置を行わない３日間を、２回目のサイクルの１日目となる３６日目に次のサイクルが開始するよりも前に含む。
【０１０３】
一の態様において、該処置サイクルは、該抗ＧＤ２抗体を用いた１４日間、例えば、該処置サイクルの８〜２１日目における、１回の処置期間 (例えば、１００または２１０ mg/m２/サイクルの用量を投与するために、７または１５mg/m２/日を用いる)、および、レチノイド（例えばイソトレチノイン）を用いた、１４日間、例えば処置サイクルの２６〜３９日目における、１回の処置期間、および、それに続く、処置を行わない３日間を、２回目の処置サイクルの１日目となる４３日目に次のサイクルが開始するよりも前に含む。
【０１０４】
一の態様において、該処置サイクルは、該抗ＧＤ２抗体を用いた１５日間、例えば処置サイクルの８〜２２日における、１回の処置期間(例えば、１５０mg/m２/サイクルの用量を投与するために、１０mg/m２/日を用いる)および、レチノイド（例えばイソトレチノイン）を用いた、１４日間、例えば処置サイクルの８〜２２日目における１回の処置期間および、レチノイド（例えばイソトレチノイン）を用いた、１４日間、例えば処置サイクルの２６〜３９日目における１回の処置期間、それに続く、処置を行わない３日間を、２回目の処置サイクルの１日目となる４３日目に、次のサイクルが開始するよりも前に含む。
【０１０５】
一の態様において、該処置サイクルは、該抗ＧＤ２抗体を用いた２１日間、例えば処置サイクルの８〜２８日目における、１回の処置期間 (例えば、１５０または２１０mg/m２/サイクルの用量を投与するために７または１０mg/m２/日を用いる)および、レチノイド（例えばイソトレチノイン）を用いた、１４日間、例えば処置サイクルの３３〜４６日目における、１回の処置期間、それに続く、処置を行わない３日間を、２回目の処置サイクルの１日目となる５０日目に、次のサイクルが開始するよりも前に含む。
【０１０６】
一の態様において、該処置サイクルは、該抗ＧＤ２抗体 (例えばｃｈ１４.１８/Ｓｐ２/０)を含む製剤を用いた４日間、例えば０日に開始する２４日間の処置サイクルの３〜６日目、または０日目に開始する３２日間の処置サイクルの７〜１０日目における、２５、２０、１７.５または１５mg/m２/日の用量で投与する、１回の処置期間; ＲＡ、例えばイソトレチノインを用いた、例えば０日目に開始する処置サイクルの１０〜２３日目、または、０日目に開始する処置サイクルの１４〜２７日目における、１回の処置期間を含む。一の態様において、処置スケジュールは、表２、３および/または４で特定するとおりであるが、ＩＬ−２を全く用いず、および、特定の態様においては、ＩＬ−２およびＧＭ−ＣＳＦを全く用いず、および、特定の態様においては、サイトカイン投与を全く用いない。したがって、一の態様において、該処置スケジュールは、表２、３および/または４で特定するとおりであるが、サイトカインを全く用いない。
【０１０７】
該処置サイクルを、同じ内容で、または、修正した形態で、例えば、異なる用量もしくはスケジュールで、または、異なる追加的な処置（例えば１以上の他の鎮痛剤を用いる）を用いて繰り返してよい。したがって、全処置期間 (例えば、引き続く全ての処置サイクルまたは、全ての連続的な処置期間を含む期間) は、少なくとも１、または２以上のサイクルまたは１０以上のサイクルを含んでいてよい。一の態様において、抗ＧＤ２抗体を含む製剤を、２回以上の処置サイクルにおいて、該患者に投与する。一の態様において、抗ＧＤ２抗体を含む製剤を、２回以上の処置サイクルにおいて該患者に持続点滴として投与する。一の態様において、抗ＧＤ２抗体を含む製剤を、ＩＬ−２を併用として投与することなく、２回以上の処置サイクルにおいて持続点滴として該患者に投与する。一の態様において、抗ＧＤ２抗体を含む製剤を、ＩＬ−２を併用として投与することなく、１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９または２０以上のサイクルにおいて、持続点滴として該患者に投与する。一の態様において、全処置期間は、１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９または２０以上のサイクルを含む。全処置期間は、２０まで、またはそれより多い処置サイクルを含んでいてもよい。上述するように、処置サイクルは、処置を行わない期間（患者に対して何の処置も行わない、すなわち、抗体、サイトカイン、他の薬剤を全く投与しない間隔期）を含んでいてよい。したがって、本明細書において、全処置期間は、処置サイクル内に、処置を行わない該間隔期を含んでいてもよい。
【０１０８】
一の態様において、継続的な処置期間全体が、少なくとも５回または６回の処置サイクルを含むように、上記で特定した３５、４２または４９日間の処置サイクルを、少なくとも４回または５回繰り返す。
【０１０９】
１種以上のサイトカインを用いない抗体処置の効果を、補体依存性細胞溶解(ＣＤＣ) アッセイまたは全血試験(ＷＢＴ)により決定し得る。ＷＢＴは、標的細胞または標的成分 (すなわち、細胞、リポソームまたは溶解する他の細胞様コンパートメント) を、適当なように抗凝固処理した、患者由来の全血と接触させるアッセイである。ＣＤＣアッセイは、例えば当該分野で公知の標準的なＣＤＣアッセイ(例えば、Indusogie et al., J Immunol 2000; 164(8):4178-84; Zeng et al. Molecular Immunology 2005; 42(11):1311-9;または国際公開第2005/070967号に記載)であってよい。ＣＤＣアッセイおよび/またはＷＢＴは、ＧＤ２陽性標的細胞、例えば、処置するＧＤ２陽性がんの腫瘍細胞株を用いて行ってよい。例えば、処置する患者が神経芽細胞腫に罹患している場合、該細胞株は神経芽細胞腫細胞株、例えばＬＡＮ−１ ヒト神経芽細胞腫細胞であってよい。他の例において、処置をする患者が黒色腫に罹患している場合、該細胞株は黒色腫細胞株、例えばＭ２１ヒト黒色腫細胞であってよい。さらに他の例において、ＣＤＣアッセイおよび/またはＷＢＴの標的細胞は、該患者から得た腫瘍細胞、すなわち、該患者の自家腫瘍細胞である。他の態様において、ＣＤＣアッセイおよび/またはＷＢＴの標的成分は、表面にＧＤ２を提示するリポソームである。標的細胞または標的成分を、シグナル伝達成分、例えば放射活性成分、例えば５１Ｃｒ、または蛍光成分、例えばカルセインで標識する。シグナル伝達成分は、該標的細胞または標的成分に含まれる、すなわち、標的細胞または標的成分の内側にあり（例えば、シグナル伝達成分を充填し、表面にＧＤ２を提示するリポソーム）、標的細胞または標的成分の溶解時に放出される。したがって、シグナル伝達成分により、該アッセイの計測値(readout)が得られる。シグナル伝達化合物を充填した標的細胞または成分を、全血、血清または血漿と特定の比率で接触させる。該全血、血漿または血清は、ＣＤＣまたはＷＢＴのために、試料に添加するより前に、例えば１：２以上、例えば１：４、１：５または１：１０、またはこれらの比率の間の任意の範囲に希釈してよい。しかし、希釈せずに試料に添加してもよい。ＣＤＣまたはＷＢＴ試料中の全血、血漿または血清の最終濃度は、例えば、１０〜５０％の範囲にあってよい。標的細胞または標的成分の溶解は、該シグナル伝達成分の放出によって、シンチレーションカウンターまたは分光々度法により測定し得る。例えば、該標的細胞または標的成分の溶解を、上清に放出された５１Ｃｒの量を、シンチレーションカウンターによって決定することにより測定し得る。溶解パーセンテージは、以下の等式により決定し得る: 
１００ x (試験における放出−自発的な放出)/(最大放出−自発的な放出)。
【０１１０】
ＣＤＣアッセイについては、細胞溶解成分(またはエフェクター成分)は、患者または、補体系成分を含む、ドナーより得た、血清または適当に抗凝固処理を行った血漿より得る。ＷＢＴについては、細胞溶解成分 (またはエフェクター成分) は、該患者または、補体系成分ならびに全ての細胞成分ならびに、標的細胞溶解に関連があり得る、全血に含まれる任意のさらなる成分ならびに全ての成分の相互作用(例えば補体活性化は、特定のエフェクター細胞、例えば顆粒球を活性化させることが知られている)を含むドナーより得られる、適当に抗凝固処理を行った全血より得る。ＣＤＣおよび/またはＷＢＴのために、血清、血漿または全血を標的細胞または標的成分に異なる希釈率で添加してよい。
【０１１１】
さらに、１つ以上のＣＤＣアッセイおよび/またはＷＢＴの試料に、例えば標準曲線の作製のために、異なる濃度の抗ＧＤ２抗体を添加してよい。
【０１１２】
他の態様において、抗ＧＤ２抗体の可変ドメインを認識する、１種以上の抗イディオタイプ (抗ｉｄ) 抗ＧＤ２抗体を、例えば陰性対照として該抗体により媒介される標的細胞の溶解を阻害するために、または、該アッセイの特異性および、抗ｉｄ抗体を添加せずに測定した標的細胞溶解が、抗体に媒介されるか、または抗体依存的であることを示すために試料に添加してよい。
【０１１３】
特定の態様において、１日以上の最初の抗体処置日後の（抗体処置前の細胞溶解レベルと比較した）細胞溶解のレベルの上昇は、処置サイクル全体を通して維持される。いくつかの態様において、該細胞溶解レベルの上昇は、全処置期間、すなわち、該患者が抗ＧＤ２抗体を含む製剤により処置されていない期間、すなわち、抗ＧＤ２抗体を含む製剤による処置期間の間の間隔期 (間隔期がある場合、すなわち、該患者が抗ＧＤ２抗体を含む製剤で、処置期間全体にわたって連続的に処置されていない場合) においても、維持される。
【０１１４】
一の態様において、本発明により処置される患者の血液試料の細胞溶解のレベル (例えばＣＤＣアッセイまたはＷＢＴで測定される、標的細胞溶解のレベル)は、該抗体を含む製剤による最初の処置期間の前の細胞溶解レベルと比較して、最初の抗体処置期間の最後から、最後の処置サイクルの最後までの期間全体にわたって、すなわち、抗体処置期間の間においても、上昇している。一の態様において、細胞溶解のレベルは、１回目の抗体処置期間の最後から、最後の処置サイクルの最後までの期間全体にわたって、少なくとも１０％、２０％、３０％、４０％、５０％、６０％、７０％、８０％、９０％または１００％であるか、またはこれらのレベルの間の任意の範囲にある。一の態様において、該抗ＧＤ２抗体による１回目、２回目、３回目、４回目、５回目、６回目、７回目、８回目、９回目および/または１０回目の処置期間の後の細胞溶解レベルは、少なくとも１０％、２０％、３０％、４０％、５０％、６０％、７０％、８０％、９０％または１００％であるか、または、これらのレベルの間の任意の範囲にある。一の態様において、該抗ＧＤ２抗体による２回目、３回目、４回目、５回目、６回目、７回目、８回目、９回目および/または１０回目の処置期間の前の細胞溶解レベルは、少なくとも１０％、２０％、３０％、４０％、５０％、６０％、７０％、８０％、９０％または１００％であるか、または、これらのレベルの間の任意の範囲にある。
【実施例】
【０１１５】
実施例１: ＡＰＮ３１１配列および関連データ
ＡＰＮ３１１配列データ
【表５】
2019218359.tif 000006
【０１１６】
ヌクレオチド配列 (ｃＤＮＡ、リーダーを含む)
「ＴＡＧ」は「停止コドン」として機能するため、ペプチド配列に翻訳されない。
【０１１７】
軽鎖 (配列番号:１):
【化１】
2019218359.tif 000007
【０１１８】
重鎖 (配列番号２):
【化２】
2019218359.tif 000008
【０１１９】
ペプチド配列 (シグナルペプチドを含む)
該シグナルペプチドは、翻訳後プロセシングの間に切り離され、それ以降は最終組換え蛋白質の一部ではない。
【０１２０】
軽鎖 (配列番号３):
【化３】
2019218359.tif 000009
【０１２１】
重鎖 (配列番号４):
【化４】
2019218359.tif 000010
【０１２２】
ｃｈ１４.１８/ＣＨＯ (ＡＰＮ３１１)抗体の２つのＧＭＰを遵守したバッチを作製した。作製した該薬剤のこれらの２つのバッチは、ロットT651204-A (４.３ml (４.６mg/ml)抗体を含む)およびロットT900310-A (４.５ml (４.５mg/ml)抗体を含む)である。ＡＰＮ３１１モノクローナル抗体バルク製剤は、静脈内点滴の調製のための濃縮液として製造する。
【表６】
2019218359.tif 000011
【０１２３】
製造指針
抗体は無菌条件下で調製しなければならない。ｃｈ１４.１８/ＣＨＯ抗体(ＡＰＮ３１１)の適当な体積を、バイアルから取り出さなければならない。抗体溶液を患者に注射する前に、（いくつかの施設が通常行っているように）点滴の間にインラインフィルターを用いるか、または、該溶液を粒子フィルター（例えばNr. MF1830フィルター、Impromediform, Germany）を用いることによって、ろ過（０.２〜１.２μm）することが推奨される。該体積の抗体を、０.９％ ＮａＣｌおよび１％ヒト血清アルブミン(ＨＳＡ)、例えば０.９％ ＮａＣｌ １００mlおよび２０％ヒト血清アルブミン ５mlを含む点滴バッグに添加する。
【０１２４】
希釈するｃｈ１４.１８/ＣＨＯ (ＡＰＮ３１１) の量の算出
投与するｃｈ１４.１８/ＣＨＯ (ＡＰＮ３１１) の量は次のように算出する: 
用量: １０mg/m２/日、８〜１７日目、２４時間点滴として
計算例: 患者の体表面積 (ＢＳＡ)が０.７である場合、該患者は、１日あたり７mg (１０ x ０.７)または、１０日の処置日（１サイクル）につき７０mgを必要とする。
【０１２５】
実施例２: Yu et al. 2010, NEJM (上記)のデータと比較する、ＩＬ−２を用いず (および、他のサイトカインを用いず) ＡＰＮ３１１で処置した患者
この実施例の基礎となるデータは、SIOPEN(SIOP-Europe)のハイリスク神経芽細胞腫試験（High Risk Neuroblastoma Study） 1.5、EudraCT number 2006-001489-17において作製された。骨髄破壊療法 (ＭＡＴ) および自家幹細胞による救済 (ＡＳＣＲ)および、場合によっては、他の処置、例えば放射線照射、他の化学療法、外科手術等も受けた後のハイリスク神経芽細胞腫の患者が、２８日間のサイクルで、８時間の静脈内点滴として５日間連続して（該処置サイクルの２２〜２６日目に）投与される、２０mg/m２/日のｃｈ１４.１８/ＣＨＯの投与を５サイクルまで受けた。これは、全用量１００mg/m２/サイクルのｃｈ１４.１８/ＣＨＯに相当する。ｃｉｓ-ＲＡを、処置サイクルの１〜１４日目に、１６０mg/m２/日の用量で１日２回 (１日につき、２つの等しい用量、すなわち２ x ８０mg/m２で)経口投与した。一群では、処置サイクルの間、および処置期間全体にわたって、ＩＬ−２を全く投与しなかった。他の群の患者は、処置サイクルの１５〜１９日目および、２２〜２６日目に、６ x １０６IU/m２/日の用量のＩＬ−２の投与を受けた。該患者は、６回の処置サイクルで処置を受け、ここで、上述の１〜５回目の処置サイクルおよび６回目の処置サイクルは、イソトレチノインのみの処置期間(抗体およびＩＬ−２を全く投与しない)を含んでいた。
【０１２６】
無再発生存率および全生存率を解析した。また、抗体処置の開始時に完全寛解者であった患者のサブグループ(適用したいずれの検査においてもエビデンスが見られない)においても、ＥＦＳおよびＯＳを解析した。このサブグループのＥＦＳおよびＯＳデータを、Yu et al. (NEJM 2010、上記)に記載されているように、抗体、ＩＬ−２、ＧＭ−ＣＳＦおよびイソトレチノイン（ｃｉｓ-ＲＡ）を用いた処置スケジュールのＥＦＳおよびＯＳデータと比較し、表７に記載する。
【０１２７】
Yu et al.に記載の患者は、４日間連続して、２５mg/m２/日の用量で投与されるｃｈ１４.１８/Ｓｐ２/０により処置を受けており、各用量のｃｈ１４.１８/Ｓｐ２/０を、５.７５時間または１０時間 (予測される毒性について、２０時間まで延長してもよい)にわたって、静脈内点滴する。ＩＬ−２を、１サイクルおき (例えばサイクル２および４)に、持続静脈内点滴として、処置サイクルの第１週には、３MIU/m２/日および、処置サイクルの２週目には４.５MIU/m２/日で、４日間 (９６時間)にわたって投与する (すなわち３０MIU/m２/サイクル)。ＧＭ−ＣＳＦを、１日用量２５０mcg/m２で１４日間 (０日目から１３日目まで)皮下投与する。全処置期間は、５回の処置サイクルを含む。各処置スケジュールについては、表２、３および４も参照のこと。本明細書において、比較のために図２および３において示す、Yu et al.のＥＦＳおよびＯＳのデータは、上述の処置の完全寛解者のみを含む。したがって、本発明の処置に対する完全寛解者のサブグループのみを直接比較に用いた。
【表７】
2019218359.tif 000012
【０１２８】
結果を(Yu et al.との比較とともに)図１、２および３および、(毒性についてのさらなる詳細、すなわち観察される有害作用または副作用について) 図４〜１５にも示す。これらのデータによれば、ＩＬ−２は、抗ＧＤ２抗体処置の有効性に寄与しない。しかし、ＩＬ−２の併用処置は、実質的に副作用および毒性を増大させる。免疫療法の開始時における完全なレスポンダーのＡＰＮ３１１＋ｃｉｓ-ＲＡ処置により、NEJM 2010 (Yu et al. 2010、上記)の試験におけるｃｈ１４.１８/Ｓｐ２-０+ＩＬ２+ＧＭ−ＣＳＦ+ｃｉｓ-ＲＡ群でみられるのと同等の、２年無再発生存率および全生存率ならびに全生存曲線が得られる。
【０１２９】
このことにより、ＩＬ２およびＧＭ−ＣＳＦがともに、NEJM 2010に記載の組合せ処置の有効性レベルの達成に必要ではないことが示される。
【０１３０】
ＡＰＮ３１１+ｃｉｓ-ＲＡについてのＥＦＳおよびＯＳ(免疫療法の開始時における完全寛解者)はともに、ｃｉｓ-ＲＡのみの投与を受けたNEJM 2010の患者のＥＦＳおよびＯＳと比較して改善している (２ｙ ＥＦＳ: ７０％ 対 ４６％; ２ｙ ＯＳ: ８１％ 対 ７５％; 表７も参照のこと)。これは、ＡＰＮ３１１単剤の有効性を示す。
【０１３１】
したがって、リスクおよび利点の全体的な評価において、免疫療法の開始時の完全なレスポンダーにおけるＡＰＮ３１１+ｃｉｓ-ＲＡは、特に副作用プロファイルの実質的な低下および、ＩＬ２およびＧＭ−ＣＳＦを除いたことによる処置の複雑さの低下ならびに、ＥＦＳおよびＯＳについて、類似の臨床有効性が示されることにより、NEJM 2010に記載の４成分の免疫療法よりもはるかに優位であり得ると結論付けられる。
【０１３２】
実施例３: 抗体で処置した神経芽細胞腫患者のＣＤＣおよびＷＢＴアッセイ
神経芽細胞腫患者を、持続点滴スケジュールにおいてＡＰＮ３１１で処置した、すなわち、該患者は、持続点滴として、１日あたり２４時間、連続して１０日間 (処置サイクルの１日目〜１０日目)、１０mg/m２/日の用量で、連続して６サイクルにわたって該抗体の投与を受けた。各処置サイクルは３５日間を含んでいた。各処置サイクルの間および、かかる６回の連続的なサイクルの全処置期間の間、該患者は、抗体処置のみを受け、いずれのサイトカインでもレチノイドでも処置されなかった。
【０１３３】
血液試料は、指定のタイムポイントにおいて該患者から得、実施例４および５に記載するように、ＣＤＣアッセイおよびＷＢＴで解析した。結果を図１６に示す。図１６は、サイトカイン処置を全く伴わない抗体処置が、腫瘍細胞溶解レベルの上昇を引き起こすことを示す。これらの腫瘍細胞溶解のレベルは、抗体およびＩＬ−２で処置した患者の該レベルと同等である (１人の代表的な患者を図１７に示す)。図１７に示す患者を、図１６に示す患者と同じ処置スケジュールにより処置したが、さらに、１〜５日目および８〜１２日目に、６ x １０６ IU/m２/日の用量の皮下投与のＩＬ−２で処置を行った。
【０１３４】
図１６Ｂに特に示すように、全血試験(ＷＢＴ)における、レベルが上昇した標的細胞溶解は、全処置期間における、患者が抗ＧＤ２抗体を含む製剤で処置されていない期間、すなわち、抗ＧＤ２抗体を含む製剤による処置期間の間の間隔期においても維持されている。
【０１３５】
実施例４: ＣＤＣアッセイ法
ＣＤＣ (補体依存性細胞傷害)の原理
ＡＰＮ３０１またはＡＰＮ３１１の存在下における正常なヒト血清または血漿の、またはこれらの抗体のうちの１つを点滴した後の患者の血清または血漿の、ＧＤ２抗原陽性ＬＡＮ−１神経芽細胞腫がん細胞株(標的細胞)に対する、腫瘍細胞傷害性の誘発を、５１クロム放出アッセイにより決定した。標的細胞は、細胞膜を透過し、還元されたＣｒ-ＩＩＩ価の形態で細胞質蛋白質に結合することにより、インタクトな細胞から漏出することがないＮａ２５１Ｃｒ(ＶＩ)Ｏ４とともにインキュベーションした。これらの細胞を血清または血漿および抗体または、患者の血清または血漿とともにインキュベーションした後に溶解させるときに、試験試料中の溶解能に依存して、放射活性が上清中に放出される。
【０１３６】
自発的なバックグラウンド溶解および界面活性剤による全溶解 (達成可能な最大の細胞溶解または、可能な最大の標的細胞溶解) を、個々の試験において決定した。自発的な溶解を引いた後、試験試料により誘発された溶解を、全溶解の％として算出した。
【０１３７】
血清または血漿のサンプリング:
正常なヒトドナーまたは患者由来の全血を、血漿についてはヘパリン処置したバキュテナーバイアル、血清については血清凝固バイアルを用いてサンプリングした。バイアルは、２０００gで２０分間遠心分離させた。上清の血漿または血清を、アッセイに即時使用しても、または-２０℃で保存してもよい (融解し、再凍結することはできない)。
【０１３８】
標的細胞の５１Ｃｒによる標識:
ＬＡＮ−１細胞を、１０％熱不活化ＦＣＳを含むRPMI 1640中で培養した。アッセイの前日に、該細胞を新しいフラスコおよび新しい培地中に移した。該アッセイは、１ウェルあたり８００nCi ５１Ｃｒの活性を有する、４x１０４個/ウェルの標識細胞を用いて、９６ウェル平底細胞培養プレートで行った。必要な量の細胞を培養フラスコから集め、懸濁液を遠心分離して、０,１％ ＥＤＴＡおよび１％ ＦＣＳを含むＰＢＳ ｄｅｆ. １mlに再懸濁した。算出した体積の５１Ｃｒ溶液を添加し、細胞を３７℃および５％ ＣＯ２下で、穏やかにチューブを回転させながら９０分間インキュベーションした。
【０１３９】
次いで、該細胞懸濁液を、細胞培養培地で２回洗浄し、細胞外部の放射活性を除いた。この培地はさらに、１００U/ml ペニシリンＧおよび１００μg/ml 硫酸ストレプトマイシンを含んでいた。洗浄工程の後、標識細胞のペレットを、所望の濃度である４x１０５個/mlに再懸濁した。
【０１４０】
アッセイ手法:
抗体の細胞溶解能を評価するために、次のものをピペットで取った:
試料（抗体希釈液）  ５０μl
１:４に前希釈した正常なヒト血清または血漿  １００μl
５１Ｃｒ標識細胞懸濁液(４x１０５/ml)  １００μl
【０１４１】
患者の血漿または血清の細胞障害能の評価のために、次のものをピペットで取った:
培地  ５０μl
１:４に前希釈した患者の血漿または血清  １００μl
５１Ｃｒ標識した細胞懸濁液(４x１０５/mL)  １００μl
【０１４２】
ＣＤＣのためのアッセイプレートを、３７℃、５％ ＣＯ２下で、ＣＯ２インキュベーター内で４時間インキュベーションするか、またはＷＢＴと直接比較するときは２０時間インキュベーションした。
【０１４３】
さらに、各血液試料のアリコートを、モノクローナルマウス抗ｃｈ１４.１８抗体(抗イディオタイプ抗体)であるガングリジオマブ（ganglidiomab）とともに事前にインキュベーションした後、さらに上述のように処理する。ガングリジオマブは本抗体の患者への投与後に血液試料中に存在する該抗体に特異的に結合する。それにより、該抗イディオタイプ抗体は、血液細胞（ＷＢＴ）および/または血漿成分（ＣＤＣ）との組み合わせで、本抗体の腫瘍標的細胞の溶解能を阻害する。残存する溶解は、抗体を介さない効果であると決定し得る。
【０１４４】
その後、各ウェルの上清を、吸収カートリッジおよび収集プレスを備えた収集フレーム(skatron)を用いて収集する。細胞上清に浸したこれらのカートリッジを、γカウンターの計数バイアル中に移す。放射活性は、標識標的細胞の損傷後の５１クロムの放出に比例し、全ての試料から測定し、カウント毎分(cpm)で表す。結果は、全試料の値から自発的な溶解のcpmを引き、界面活性剤を用いた達成可能な最大の溶解のcpmを１００％としてそれに対する溶解％として算出する。
【数１】
2019218359.tif 000013
【０１４５】
上述のＣＤＣアッセイ法を、図１６Ａに示す結果を得るために用いた。
【０１４６】
実施例５: ＷＢＴ法
ＷＢＴ (全血試験)の原理:
ＡＰＮ３０１またはＡＰＮ３１１の存在下における正常なヒト全血の、または、これらの抗体の１つを点滴した後の患者の全血の、ＧＤ２抗原陽性ＬＡＮ−１ 神経芽細胞腫がん細胞株 (標的細胞)に対する細胞傷害性の誘発を５１クロム放出アッセイにおいて決定した。
【０１４７】
標的細胞は、細胞膜を透過し、還元されたＣｒ-ＩＩＩ価の形態で細胞質蛋白質に結合することにより、インタクトな細胞から漏出することがないＮａ２５１Ｃｒ(ＶＩ)Ｏ４とともにインキュベーションした。これらの細胞を全血および、抗体または、患者の全血とともにインキュベーションした後に溶解させるときに、試験試料中の溶解能に依存して、放射活性が上清中に放出される。
【０１４８】
自発的なバックグラウンド溶解および界面活性剤による全溶解 (達成可能な最大の細胞溶解または、可能な最大の標的細胞溶解) を、個々の試験において決定した。自発的な溶解を引いた後、試験試料により誘発された溶解を、全溶解の％として算出した。
【０１４９】
血液サンプリング：
正常なヒトドナーまたは患者由来の全血は、ヘパリン処置したバキュテナーバイアルを用いてサンプリングした。
【０１５０】
標的細胞の５１Ｃｒによる標識:
ＬＡＮ−１細胞を、１０％熱不活化ＦＣＳを含むRPMI 1640中で培養した。アッセイの前日に、該細胞を新しいフラスコおよび新しい培地中に移した。該アッセイは、１ウェルあたり８００nCi ５１Ｃｒの活性を有する、４x１０４個/ウェルの標識細胞を用いて、９６ウェル平底細胞培養プレートで行った。必要な量の細胞を培養フラスコから集め、懸濁液を遠心分離して、０.１％ ＥＤＴＡおよび１％ ＦＣＳを含むＰＢＳ ｄｅｆ. １mlに再懸濁した。算出した体積の５１Ｃｒ溶液を添加し、細胞を３７℃および５％ＣＯ２下で、穏やかにチューブを回転させながら９０分間インキュベーションした。
【０１５１】
次いで、該細胞懸濁液を、細胞培養培地で２回洗浄し、細胞外部の放射活性を除いた。この培地はさらに、１００U/ml ペニシリンＧおよび１００μg/ml 硫酸ストレプトマイシンを含んでいた。洗浄工程の後、標識細胞のペレットを、所望の濃度である４x１０５個/mlに再懸濁した。
【０１５２】
アッセイ手法:
抗体の細胞溶解能の評価のために、次のものをピペットで取った:
試料（抗体希釈液）  ５０μl
１:２に前希釈した正常ヒト全血  １００μl
５１Ｃｒ標識細胞懸濁液(４x１０５個/ml)  １００μl
【０１５３】
患者の全血の細胞溶解能の評価のために、次のものをピペットで取った:
培地  ５０μl
１:２に前希釈した患者全血  １００μl
５１Ｃｒ標識細胞懸濁液(４x１０５個/ml)  １００μl
【０１５４】
アッセイプレートを３７℃、５％ ＣＯ２下で２０時間、ＣＯ２インキュベーター内でインキュベーションした。
【０１５５】
さらに、各血液試料のアリコートを、モノクローナルマウス抗ｃｈ１４.１８抗体(抗イディオタイプ抗体)であるガングリジオマブとともに事前にインキュベーションした後、さらに上述のように処理する。ガングリジオマブは本抗体の患者への投与後に血液試料中に存在する該抗体に特異的に結合する。それにより、該抗イディオタイプ抗体は、血液細胞（ＷＢＴ）および/または血漿成分（ＣＤＣ）との組み合わせで、本抗体の腫瘍標的細胞の溶解能を阻害する。残存する溶解は、抗体を介さない効果であると決定し得る。
【０１５６】
その後、各ウェルの上清を、吸収カートリッジおよび収集プレスを備えた収集フレーム(skatron)を用いて収集する。細胞上清に浸したこれらのカートリッジを、γカウンターの計数バイアル中に移す。放射活性は、標識標的細胞の損傷後の５１クロムの放出に比例し、全ての試料から測定してカウント毎分(cpm)で表す。結果は、全試料の値から自発的な溶解のcpmを引き、界面活性剤を用いた達成可能な最大の溶解のcpmを１００％としてそれに対する溶解％として算出する。
【数２】
2019218359.tif 000014
【０１５７】
上述のＷＢＴ法は、図１６Ｂに示す結果を得るために用いた。
【０１５８】
本発明はさらに、請求項のいずれか１つと容易に組み合わせることができる次の態様によりさらに例示される：
１．患者におけるＧＤ２陽性がんの処置に用いるための抗ＧＤ２抗体を含む製剤であって、ＩＬ−２を併用して投与することなく該患者に投与され、該抗体を用いた１回以上の処置期間に、レチノイドを用いた１回以上の処置期間が先行するか、レチノイドを用いた１回以上の処置期間を同時に伴うか、および/またはレチノイドを用いた１回以上の処置期間が後に続く、製剤。
２．患者におけるＧＤ２陽性がんの処置に用いるための抗ＧＤ２抗体を含む製剤であって、ＩＬ−２を併用して投与することなく該患者に投与され、該抗体を用いた１回以上の処置期間に、レチノイドを用いた１回以上の処置期間が、同じ処置サイクル内で、先行するか、レチノイドを用いた１回以上の処置期間を同時に伴うか、および/またはレチノイドを用いた１回以上の処置期間が後に続く、製剤。
３．患者におけるＧＤ２陽性がんの処置に用いるための抗ＧＤ２抗体を含む製剤であって、ＩＬ−２を併用して投与することなく、持続点滴として１日以上該患者に投与される、製剤。
４．患者におけるＧＤ２陽性がんの処置に用いるための抗ＧＤ２抗体を含む製剤であって、ＩＬ−２を併用して投与することなく、１日以上、および２回以上のサイクルの間、持続点滴として該患者に投与される、製剤。
５．患者におけるＧＤ２陽性がんの処置に用いるためのキメラまたはヒト化抗ＧＤ２抗体を含む製剤であって、抗ＧＤ２抗体を含む製剤がＩＬ−２を併用して投与することなく、１日以上持続点滴として該患者に投与される、製剤。
６．患者におけるＧＤ２陽性がんの処置に用いるための抗ＧＤ２抗体を含む製剤であって、ＩＬ−２を併用して投与することなく、持続点滴として該患者に投与される、該抗ＧＤ２抗体が１４Ｇ２ａ抗体ではない、製剤。
７．患者におけるＧＤ２陽性がんの処置方法であって、ＩＬ−２を併用して投与することなく該患者に抗ＧＤ２抗体を投与することを含む、ＧＤ２陽性がんが処置される、方法。
８．抗ＧＤ２抗体を含む製剤を患者に投与することによってＧＤ２陽性がんを処置する方法であって、該患者がＩＬ−２により併用処置されることがなく、該抗体を用いた１回以上の処置期間に、レチノイドを用いた１回以上の処置期間が先行するか、レチノイドを用いた１回以上の処置期間を同時に伴うか、および/または、レチノイドを用いた１回以上の処置期間が後に続く、方法。
９．抗ＧＤ２抗体を含む製剤を患者に投与することによってＧＤ２陽性がんを処置する方法であって、該患者がＩＬ−２により併用処置されることがなく、該抗体を用いた１回以上の処置期間に、同じ処置サイクル内で、レチノイドを用いた１回以上の処置期間が先行するか、レチノイドを用いた１回以上の処置期間を同時に伴うか、および/または、レチノイドを用いた１回以上の処置期間が後に続く、方法。
１０．抗ＧＤ２抗体を含む製剤を患者に投与することによりＧＤ２陽性がんを処置する方法であって、抗ＧＤ２抗体を含む製剤が、ＩＬ−２を併用して投与することなく、持続点滴として、１日以上該患者に投与される、方法。
【０１５９】
１１．患者におけるＧＤ２陽性がんを処置する方法であって、抗ＧＤ２抗体を含む製剤が、持続点滴として１日以上および、２回以上の処置サイクルの間該患者に投与され、該患者がＩＬ−２による併用処置を受けない、方法。
１２．患者におけるＧＤ２陽性がんを処置する方法であって、キメラまたはヒト化抗ＧＤ２抗体を含む製剤が、ＩＬ−２を併用して投与することなく、持続点滴として１日以上該患者に投与される、方法。
１３．患者におけるＧＤ２陽性がんの処置方法であって、抗ＧＤ２抗体を含む製剤が持続点滴として該患者に投与され、該患者がＩＬ−２により併用処置されることがなく、該抗ＧＤ２抗体が１４Ｇ２ａ抗体ではない、方法。
１４．該患者がＧＭ−ＣＳＦにより併用処置されない、上述の態様のいずれか１つに記載の製剤または方法。
１５．該患者がサイトカインで処置されない、上述の態様のいずれか１つに記載の製剤または方法。
１６．該患者が同じ処置サイクル内で該サイトカインにより処置されない、上述の態様のいずれか１つに記載の製剤または方法。
１７．該患者が同じ全処置期間内で、該サイトカインにより処置されない、上述の態様のいずれか１つに記載の製剤または方法。
１８．該患者が１回以上の以前の処置サイクルおよび/または全処置期間において、ＩＬ−２、ＧＭ−ＣＳＦおよび/または１種以上の他のサイトカインによる処置を受けたことがあってよい、上述の態様のいずれか１つに記載の製剤または方法。
１９．該ＧＤ２陽性がんが、神経芽細胞腫、神経膠芽腫、髄芽腫、星状細胞腫、黒色腫、小細胞肺がん、線維形成性小円形細胞腫瘍、骨肉腫、横紋筋肉腫および/または他の軟部肉腫である、上述の態様のいずれか１つに記載の製剤または方法。
２０．該ＧＤ２陽性がんが神経芽細胞腫である、上述の態様のいずれか１つに記載の製剤または方法。
【０１６０】
２１．該患者が、ハイリスク神経芽細胞腫および/またはステージ４神経芽細胞腫と診断されている、上述の態様のいずれか１つに記載の製剤または方法。
２２．該患者が微小残存病変と診断されている、上述の態様のいずれか１つに記載の製剤または方法。
２３．該患者が再発性および/または難治性の疾患と診断されている、上述の態様のいずれか１つに記載の製剤または方法。
２４．抗ＧＤ２抗体を含む製剤が、１日あたり２４時間、持続静脈内点滴として投与される、上述の態様のいずれか１つに記載の製剤または方法。
２５．抗ＧＤ２抗体を含む製剤が、１〜１５、１〜２０、１〜２５、１〜３０、１〜３５、１〜５０、または１〜６０mg/m２の１日用量で投与される、上述の態様のいずれか１つに記載の製剤または方法。
２６．抗ＧＤ２抗体を含む製剤が、１〜３０mg/m２、１〜３５mg/m２、１〜５０mg/m２または１〜６０mg/m２の１日用量で投与される、上述の態様のいずれか１つに記載の製剤または方法。
２７．抗ＧＤ２抗体を含む製剤が１０、２０、２５、５０、６０、６５、６８、７０、７５、８０、１００、１２０、１５０、２００、２１０、２５０または３００mg/m２/サイクルの用量で投与される、上述の態様のいずれか１つに記載の製剤または方法。
２８．抗ＧＤ２抗体を含む製剤がミニポンプを用いて投与される、上述の態様のいずれか１つに記載の製剤または方法。
２９．該抗ＧＤ２抗体が１４.１８抗体である、上述の態様のいずれか１つに記載の製剤または方法。
３０．該抗ＧＤ２抗体が配列番号３および/または４のアミノ酸配列、または同一のまたは類似の天然活性を有するその断片またはホモログによりコードされる、上述の態様のいずれか１つに記載の製剤または方法。
【０１６１】
３１．該抗ＧＤ２抗体がｃｈ１４.１８/ＣＨＯまたはｃｈ１４.１８/Ｓｐ２/０である、上述の態様のいずれか１つに記載の製剤または方法。
３２．該抗ＧＤ２抗体を含む製剤がＡＰＮ３１１である、上述の態様のいずれか１つに記載の製剤または方法。
３３．該抗ＧＤ２抗体がジヌツキシマブである、上述の態様のいずれか１つに記載の製剤または方法
３４．抗ＧＤ２抗体を含む製剤が７、１０、１５、１７.５、２０または２５mg/m２/日の用量で投与される、上述の態様のいずれか１つに記載の製剤または方法。
３５．抗ＧＤ２抗体を含む製剤が４、５、１０、１４、１５または２１日間連続して投与される、上述の態様のいずれか１つに記載の製剤または方法。
３６．抗ＧＤ２抗体を含む製剤が、３、４、５、６、７、８または９回以上の処置サイクルの間投与される、上述の態様のいずれか１つに記載の製剤または方法。
３７．抗ＧＤ２抗体を含む製剤がＡＰＮ３１１であり、１０mg/m２/日の用量で、１０日間連続して、６回以上の処置サイクルの間投与される、上述の態様のいずれか１つに記載の製剤または方法。
３８．該抗ＧＤ２抗体がｃｈ１４.１８/Ｓｐ２/０であり、２５、２０、１７.５または１５mg/m２/日の用量で４日間連続して、５回以上の処置サイクルの間投与される、上述の態様のいずれか１つに記載の製剤または方法。
３９．抗ＧＤ２抗体を含む製剤の投与期間の後に、イソトレチノインまたは他のレチノイドの投与期間が続いていてよい、上述の態様のいずれか１つに記載の製剤または方法。
４０．抗ＧＤ２抗体を含む製剤の投与が、モルヒネおよび/または１種以上の他の鎮痛剤の投与を伴う、上述の態様のいずれか１つに記載の製剤または方法。
４１．抗ＧＤ２抗体を含む製剤の投与が、低下させた用量のモルヒネおよび/または１種以上の他の鎮痛剤の投与を伴う、上述の態様のいずれかに記載の製剤または方法。
４２．抗ＧＤ２抗体を含む製剤の投与が、モルヒネおよび/または１種以上の他の鎮痛剤の投与を伴わない、上述の態様のいずれか１つに記載の製剤または方法。
【図１】
2019218359.tif 000015
【図２】
2019218359.tif 000016
【図３】
2019218359.tif 000017
【図４】
2019218359.tif 000018
【図５】
2019218359.tif 000019
【図６】
2019218359.tif 000020
【図７】
2019218359.tif 000021
【図８】
2019218359.tif 000022
【図９】
2019218359.tif 000023
【図１０】
2019218359.tif 000024
【図１１】
2019218359.tif 000025
【図１２】
2019218359.tif 000026
【図１３】
2019218359.tif 000027
【図１４】
2019218359.tif 000028
【図１５】
2019218359.tif 000029
【図１６】
2019218359.tif 000030
【図１７】
2019218359.tif 000031
【配列表】
2019218359000001.app
【手続補正書】
【提出日】令和1年8月30日(2019.8.30)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
ＩＬ−２を併用して投与することなく患者に投与される、患者におけるＧＤ２陽性がんの処置における使用のための、キメラまたはヒト化抗ＧＤ２抗体を含む、医薬組成物。
【請求項２】
抗ＧＤ２抗体が１日につき２４時間、持続点滴として患者に投与される、請求項１に記載の医薬組成物。
【請求項３】
抗ＧＤ２抗体の投与の前、同時、および/または後で、患者が１回以上レチノイドで処置される、請求項１または２に記載の医薬組成物。
【請求項４】
患者が同じ処置サイクル内で、レチノイドにより処置される、請求項３に記載の医薬組成物。
【請求項５】
抗ＧＤ２抗体が１４.１８抗体である、請求項１〜４のいずれか一項に記載の医薬組成物。
【請求項６】
抗ＧＤ２抗体がｃｈ１４.１８/ＣＨＯまたはｃｈ１４.１８/ＳＰ２/０である、請求項５に記載の医薬組成物。
【請求項７】
抗ＧＤ２抗体が配列番号３の軽鎖アミノ酸配列および/または配列番号４の重鎖アミノ酸配列または、同じもしくは類似の天然活性を有するその断片またはホモログを有する、請求項６に記載の医薬組成物。
【請求項８】
１０、２０、２５、５０、６０、６５、６８、７０、７５、８０、１００、１２０、１５０、２００、２１０、２５０または３００mg/m２/サイクルの用量で患者に投与される、請求項１〜７のいずれか一項に記載の医薬組成物。
【請求項９】
１〜１５、１〜２０、１〜２５、１〜３０または１〜３５mg/m２の１日用量で患者に投与される、請求項１〜８のいずれか一項に記載の医薬組成物。
【請求項１０】
７、７.５、８、９、１０、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１７.５、１８、１９、２０、２５、３０、３２または３５mg/m２の１日用量で患者に投与される、請求項１〜９のいずれか一項に記載の医薬組成物。
【請求項１１】
５０、４０、３０または２５mg/m２未満の１日用量で患者に投与される、請求項１〜１０のいずれか一項に記載の医薬組成物。
【請求項１２】
１０mg/m２/日の用量で１０日間連続して、または１５、１７.５、２０または２５mg/m２/日の用量で４日間連続して患者に投与される、請求項１〜１１のいずれか一項に記載の医薬組成物。
【請求項１３】
抗ＧＤ２抗体が２回以上の処置サイクルの間、患者に投与される、請求項１〜１２のいずれか一項に記載の医薬組成物。
【請求項１４】
患者がＧＭ−ＣＳＦで併用処置されない、請求項１〜１３のいずれか一項に記載の医薬組成物。
【請求項１５】
患者がサイトカインで併用処置されない、請求項１〜１４のいずれか一項に記載の医薬組成物。
【請求項１６】
同じ処置サイクルおよび/または同じ全処置期間内において、ＩＬ−２、および/またはＧＭ−ＣＳＦおよび/またはサイトカインにより患者が処置されない、請求項１〜１５のいずれか記載の医薬組成物。
【請求項１７】
副作用が、ＩＬ−２、ＧＭ−ＣＳＦおよびまたは１種以上の他のサイトカインによる併用処置を含む処置スケジュールと比較して、実質的に低下している、請求項１〜１６のいずれか一項に記載の医薬組成物。
【請求項１８】
疼痛の副作用が、ＩＬ−２、ＧＭ−ＣＳＦおよびまたは１種以上の他のサイトカインによる併用処置を含む処置スケジュールと比較して実質的に低下している、請求項１〜１７のいずれか一項に記載の医薬組成物。
【請求項１９】
ＧＤ２陽性がんが神経芽細胞腫、神経膠芽腫、髄芽腫、星状細胞腫、黒色腫、小細胞肺がん、線維形成性小円形細胞腫瘍、骨肉腫、横紋筋肉腫または他の軟部肉腫である、請求項１〜１８のいずれか一項に記載の医薬組成物。
【請求項２０】
患者が原発性難治性または再発性のハイリスク神経芽細胞腫またはハイリスク神経芽細胞腫の微小残存病変に罹患している、請求項１〜１９のいずれか一項に記載の医薬組成物。
【請求項２１】
本発明の、抗ＧＤ２抗体を含む医薬組成物の１日以上の投与の間に投与されるモルヒネの１日用量および/または全モルヒネ処置日のモルヒネの１日用量が、ＩＬ−２、ＧＭ−ＣＳＦおよび/または他のサイトカインを用いる投与スケジュールの間のモルヒネの１日用量よりも低い、請求項１〜２０のいずれか一項に記載の医薬組成物。
【請求項２２】
モルヒネが、抗ＧＤ２抗体を含む医薬組成物が投与される全ての日ではなく、いくつかの日にのみ投与される、請求項１〜２１のいずれか一項に記載の医薬組成物。
【請求項２３】
本発明の、抗ＧＤ２抗体を含む医薬組成物の投与を含む１回以上の処置サイクルの間に投与される、処置サイクルあたりのモルヒネ用量が、ＩＬ−２、ＧＭ−ＣＳＦおよび/または他のサイトカインを用いる投与スケジュールにおける処置サイクルあたりのモルヒネ用量より低い、請求項１〜２２のいずれか一項に記載の医薬組成物。
【請求項２４】
全処置期間のモルヒネ用量が、ＩＬ−２、ＧＭ−ＣＳＦおよび/または他のサイトカインを用いる投与スケジュールにおける全処置期間のモルヒネ用量より低い、請求項１〜２３のいずれか一項に記載の医薬組成物。
【請求項２５】
１種以上の鎮痛剤、特にモルヒネの用量が、全処置期間内、処置サイクル内、処置サイクル内の抗体処置期間の間、処置サイクル内のある抗体処置日から次の抗体処置日まで、および/または１回の処置サイクルから次の処置サイクルまでにおいて減少している、請求項１〜２４のいずれか一項に記載の医薬組成物。
【外国語明細書】
【０００１】
2019218359.tif 000032
2019218359.tif 000033
2019218359.tif 000034
2019218359.tif 000035
2019218359.tif 000036
2019218359.tif 000037
2019218359.tif 000038
2019218359.tif 000039
2019218359.tif 000040
2019218359.tif 000041
2019218359.tif 000042
2019218359.tif 000043
2019218359.tif 000044
2019218359.tif 000045
2019218359.tif 000046
2019218359.tif 000047
2019218359.tif 000048
2019218359.tif 000049
2019218359.tif 000050
2019218359.tif 000051
【０００２】
2019218359.tif 000052
2019218359.tif 000053
2019218359.tif 000054
2019218359.tif 000055
2019218359.tif 000056
2019218359.tif 000057
2019218359.tif 000058
2019218359.tif 000059
2019218359.tif 000060
2019218359.tif 000061
2019218359.tif 000062
2019218359.tif 000063
2019218359.tif 000064
2019218359.tif 000065
2019218359.tif 000066
2019218359.tif 000067
2019218359.tif 000068
2019218359.tif 000069
2019218359.tif 000070
2019218359.tif 000071
【０００３】
2019218359.tif 000072
2019218359.tif 000073
2019218359.tif 000074
2019218359.tif 000075
2019218359.tif 000076
2019218359.tif 000077
2019218359.tif 000078
2019218359.tif 000079
2019218359.tif 000080
2019218359.tif 000081
2019218359.tif 000082
2019218359.tif 000083
2019218359.tif 000084
2019218359.tif 000085
2019218359.tif 000086
2019218359.tif 000087
2019218359.tif 000088
2019218359.tif 000089
2019218359.tif 000090
2019218359.tif 000091
2019218359.tif 000092
2019218359.tif 000093
2019218359.tif 000094
2019218359.tif 000095
2019218359.tif 000096
2019218359.tif 000097
2019218359.tif 000098
2019218359.tif 000099
2019218359.tif 000100
2019218359.tif 000101
2019218359.tif 000102
2019218359.tif 000103
2019218359.tif 000104
2019218359.tif 000105
2019218359.tif 000106
【配列表】
2019218359000002.app