(57)【要約】【課題】安価、かつ、簡易に大量のフルボ酸を得るための評価方法、及び、フルボ酸溶液の製造方法を提供すること【解決手段】菌床の主成分が木質チップである培養後きのこ菌床を用い、前記きのこ菌床の良否を菌床の外観と脆性から判断し、かつ、前記きのこ菌床からの溶液の良否をｐＨと色彩から判断するフルボ酸溶液の良否評価方法、及び前記評価方法に基づくフルボ酸溶液の製造方法。【選択図】図１
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【特許請求の範囲】
【請求項１】
培養後きのこ菌床からのフルボ酸溶液の抽出において、
前記菌床の主成分が木質チップであり、
前記きのこ菌床の外観を確認する第１ステップと、
前記きのこ菌床の脆性を確認する第２ステップと、
前記第１ステップで確認された外観と前記第２ステップで確認された脆性に基づいて前記きのこ菌床の良否を判断する第３ステップと、
前記きのこ菌床を容器に封入した後、前記容器底部に溶出した溶液のｐＨを確認する第４ステップと、
前記溶液の色彩を確認する第５ステップと、
前記第４ステップで確認されたｐＨと前記第５ステップで確認された色彩に基づいて前記溶液の良否を判断する第６ステップからなることを特徴とするフルボ酸溶液の良否評価方法。
【請求項２】
請求項１の記載において、前記第３ステップで良と評価されたきのこ菌床について、前記第４ステップのｐＨが４．０以下、かつ、前記第３ステップで良と判断されたきのこ菌床からの溶液と前記第３ステップで否と判断されたきのこ菌床からの溶液についての前記第５ステップの色彩が、マンセル表色系のマンセル色相環（４０色相）においていずれか一方の色相を０とし、前記色相に対して右廻り＋２０、左廻り−２０で表示した際に、他方の色相が＋４〜＋６、又は−４〜−６の色相範囲にあるものを前記第６ステップで良と評価してフルボ酸溶液を得るものであることを特徴とするフルボ酸溶液の製造方法。
【請求項３】
請求項１の記載において、前記第３ステップで良と評価されたきのこ菌床を木酢液、又は竹酢液、又は木酢竹酢混合液とともに容器に封入し、前記第４ステップのｐＨ＜前記木酢液（又は前記竹酢液、又は前記木酢竹酢混合液）ｐＨ、かつ、前記容器封入後の木酢液（又は竹酢液、又は木酢竹酢混合液）の色彩と前記第５ステップの色彩が、マンセル表色系のマンセル色相環（４０色相）においていずれか一方の色相を０とし、前記色相に対して右廻り＋２０、左廻り−２０で表示した際に、他方の色相が＋４〜＋６、又は−４〜−６の色相範囲にあるものを前記第６ステップで良と評価してフルボ酸溶液を得るものであることを特徴とするフルボ酸溶液の製造方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、フルボ酸溶液の良否評価方法及びフルボ酸溶液の製造方法に関するものである。
【背景技術】
【０００２】
フルボ酸とは植物が死滅して腐朽した腐植物質の群を総称したものである。フルボ酸については国際腐植物質学会（Ｉｎｔｅｒｎａｔ ｉｏｎａｌ  Ｈｕｍｉｃ  Ｓｕｂｓｔａｎｃｅｓ  Ｓｏｃｉｅｔｙ、以下ＩＨＳＳと略記）によって定義が定められている。
【０００３】
フルボ酸の利用については、水耕栽培における収穫量増加を目的としたもの（特許文献１）をはじめとし、魚介類飼育を目的としたもの、サプリメント成分や化粧品成分として健康や美容の向上を目的としたもの等様々である。
【０００４】
しかしながら、腐植物質の主成分はフミン酸であり、微量成分であるフルボ酸の研究はフミン酸に比べて進んでいないのが現状である。特に、フルボ酸の製造面ではＩＨＳＳが示す方法に従うと時間と費用がかかってしまう問題がある。
【０００５】
この点に関し、腐植化が進行していない未熟なバーク堆肥、おがくず、稲わら、もみ殻、脱水ケーキ等の有機質資材を酸性溶液に浸透させて製造する製造方法（特許文献２）、低品位炭から高温高圧の空気で腐植物質を酸化分解して高温熱水により抽出する製造方法（特許文献３）、地中から採取した腐植土と水から熟成採取する製造方法（特許文献４）が示されている。
【０００６】
しかしながら、特許文献２の発明は硫酸溶液、塩酸、酢酸等の強酸性溶液を必要とする点で費用の問題や取扱いに細心の注意が必要になる問題がある。特許文献３の発明も同様である。特許文献４の発明は腐植土と水を利用しているがビニルハウス内での加熱乾燥や年単位のフルボ酸水溶液熟成工程を必要とする。
【０００７】
フルボ酸製造のため安価な原材料としては、きのこ廃菌床（きのこ培養後の菌床）の利用可能性が示されている（非特許文献１）。しかしながら、ＩＨＳＳが示す方法、又は、これに準じた方法によると前記と同様の問題がある。
【先行技術文献】
【特許文献】
【０００８】
【特許文献１】特開２００６−１５１７０６号公報
【特許文献２】特開２０１０−１４８３９８号公報
【特許文献３】特開２００４−２６９４８４号公報
【特許文献４】特開２０１４−１６２７２３号公報
【非特許文献】
【０００９】
【非特許文献１】平成２８年度 ＣＯ２ 排出削減対策強化誘導型技術開発・実証事業  廃菌床のバイオマス燃料化技術開発による廃棄物の資源化および地産地消モデルの実証  成果報告書（平成２９年３月）（株式会社上野村きのこセンター、明星大学、日本工業大学）
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【００１０】
本発明が解決しようとする課題は、高価な原料や薬品、複雑な操作を必要とせず、かつ、専門知識がなくても簡易に大量のフルボ酸を得るための評価方法、及び、前記評価方法に基づくフルボ酸溶液の製造方法を提供することにある。
【課題を解決するための手段】
【００１１】
前記課題を解決するためになされた第１の発明は、培養後きのこ菌床からのフルボ酸溶液の抽出において、前記菌床の主成分が木質チップであり、前記きのこ菌床の外観を確認する第１ステップと、前記きのこ菌床の脆性を確認する第２ステップと、前記第１ステップで確認された外観と前記第２ステップで確認された脆性に基づいて前記きのこ菌床の良否を判断する第３ステップと、前記きのこ菌床を容器に封入した後、前記容器底部に溶出した溶液のｐＨを確認する第４ステップと、前記溶液の色彩を確認する第５ステップと、前記第４ステップで確認されたｐＨと前記第５ステップで確認された色彩に基づいて前記溶液の良否を判断する第６ステップからなることを特徴とするフルボ酸溶液の良否評価方法である。また、第２の発明は、前記第３ステップで良と評価されたきのこ菌床について、前記第４ステップのｐＨが４．０以下、かつ、前記第３ステップで良と判断されたきのこ菌床からの溶液と前記第３ステップで否と判断されたきのこ菌床からの溶液についての前記第５ステップの色彩が、マンセル表色系のマンセル色相環（４０色相）においていずれか一方の色相を０とし、前記色相に対して右廻り＋２０、左廻り−２０で表示した際に、他方の色相が＋４〜＋６、又は−４〜−６の色相範囲にあるものを前記第６ステップで良と評価してフルボ酸溶液を得るものであることを特徴とするフルボ酸溶液の製造方法である。また、第３の発明は、前記第３ステップで良と評価されたきのこ菌床を木酢液、又は竹酢液、又は木酢竹酢混合液とともに容器に封入し、前記第４ステップのｐＨ＜前記木酢液（又は前記竹酢液、又は前記木酢竹酢混合液）ｐＨ、かつ、前記容器封入後の木酢液（又は竹酢液、又は木酢竹酢混合液）の色彩と前記第５ステップの色彩が、マンセル表色系のマンセル色相環（４０色相）においていずれか一方の色相を０とし、前記色相に対して右廻り＋２０、左廻り−２０で表示した際に、他方の色相が＋４〜＋６、又は−４〜−６の色相範囲にあるものを前記第６ステップで良と評価してフルボ酸溶液を得るものであることを特徴とするフルボ酸溶液の製造方法である。本発明において色彩とは色の構成要素を指すものであり、例えば色相、彩度、明度と呼ばれる三属性が挙げられる。本発明において色彩とは色の構成要素のうち前記良否判断に有用な一つについてのものであっても良いし、総合的なものであっても良い。
【発明の効果】
【００１２】
本発明は、フルボ酸原料となる培養後きのこ菌床の良否を菌床の外観と脆性から評価し、溶液の良否をｐＨと色彩から評価するものであるため、安価、かつ、簡易に大量のフルボ酸を得ることが期待できる。特に、廃菌床の酸性化は堆肥化の阻害要因であるとしてこれまで着目されてこなかったが、酸性化が進行した廃菌床の有用性を前記評価によって見出したことで、農作物育成目的や魚介類の飼育目的等にフルボ酸を安価で供給することが期待できる。
【図面の簡単な説明】
【００１３】
【図１】図１はシイタケ廃菌床からの溶液の３Ｄ蛍光スペクトルである（横軸は蛍光波長（ｎｍ）、縦軸は励起波長（ｎｍ）、以下同様）。
【図２】図２はフルボ酸標準液の３Ｄ蛍光スペクトルである。
【図３】図３はシイタケ育成中の菌床からの溶液の３Ｄ蛍光スペクトルである。
【図４】図４はシイタケ廃菌床をオートクレーブで処理した後に得られた液の３Ｄ蛍光スペクトルである。
【発明を実施するための形態】
【実施例１】
【００１４】
本発明の実施の形態を以下に説明する。
（１）菌床
木質チップとしては、主成分の広葉樹オガクズ、その他補助成分としてフスマ、コーンブラン、貝化石等からなるシイタケ菌床を用いた。菌床の木質チップについては構成物を限定するものではなく、例えば、オガクズのみで構成されていてもよい。また、同一菌床におけるシイタケの栽培回数についても限定するものではないが、栽培回数が多いほど溶液中のフルボ酸濃度が大きい傾向にあり望ましい。なお、本発明における廃菌床、菌、以下に記載するフルボ酸の分析方法は非特許文献１の内容と同一である。
【００１５】
（２）廃菌床の効果検証
シイタケ廃菌床（非特許文献１の北研式菌床）、及び、シイタケ育成中の菌床からの溶液に含まれる成分をフィルター（ＡＤＶＡＮＴＥＣ ０．４５マイクロフィルター）で濾過した後に３Ｄ蛍光スペクトル分析に供した（分析結果は表１：主な溶出成分について）（装置：日立社製Ｆ−４５００型分光蛍光光度計）。溶液は時間経過とともに菌床から自然としみ出してきたものである。
【表１】
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分析の結果、廃菌床溶液は励起波長３４０ｎｍ付近、蛍光波長４００ｎｍ付近にピークが確認された（図１：横軸が蛍光波長、縦軸が励起波長、以下同様）。これはフルボ酸に強く見られるピーク（図２）であることから溶液中にフルボ酸が存在することが示唆された。育成中の菌床からの溶液は蛍光波長５３０ｎｍ付近、励起波長４３０ｎｍ付近にピークが確認され、蛍光位置が前記廃菌床溶液と大きくずれており、フルボ酸に比較して腐植成分の主成分であるフミン酸の存在量が多い可能性が示唆された（図３）。以上から菌床からの水によるフルボ酸抽出に関し、育成中の菌床からよりも廃菌床から方がより多くのフルボ酸が得られ、かつ、不純物が少ないこと（フルボ酸製造の原料としてより良質であること）が示唆された。また、本実施例ではシイタケ菌床を用いているが、その他のきのこ菌床についても同様の効果が示唆される。
【００１６】
（３）廃菌床の良否判断
菌床含有水分中のフルボ酸分析を様々な菌床を用いて繰り返し行った結果、より純度が高く、多量のフルボ酸を得るための良質な菌床は、外観から、すなわち、菌床表面における菌糸の分布状態から目視で判断できることがわかった。具体的には、白色から乳白色をした菌糸が菌床表面に全体的に分布していると視認できる場合はフルボ酸の溶出が認められた。ここで、全体的に分布、とは必ずしも菌糸が菌床表面全体を覆うような状態のものを意味するものではなく、菌床の縦、横、長さ方向全体に概ね菌糸が届いていると視認できるものであればよい。また、菌糸の色はきのこの種類によって異なるため、白色から乳白色、というのは、あくまで一例である。また、本分析に供した廃菌床について、良質な菌床そのものの色彩は、そうでない菌床の色彩と比べて濃く見えることがわかっており、色彩で判断することもできる。このように廃菌床の外観情報は良否判断要素として有用であることがわかった。
【００１７】
また、菌糸の外観だけでなく、菌床の脆性とともに確認することでフルボ酸を得るために良質な菌床であるか否かの判断ができることがわかった。本発明において、脆性、とは菌床の壊れやすさを意味する。植菌前、又は菌糸育成中の菌床は、菌床上部を片手でつかんで上に持ち上げようとする程度の力により、つかんだ部分が容易に剥がれるほど脆い。一方、フルボ酸を多く得ることができる菌床は表面全体がコーティングされたように固まっており、前記菌床に加えた力と同程度、又はそれ以上の力で菌床をつかんだとしても容易に剥がれることはない。菌床の脆性を厳密に定義するのは困難である。しかしながら、本発明に関して繰り返し行った分析を通じて、厳密な検査をすることなく簡易的に評価するには、菌床表面を直に触り、「かたい（菌床表面が固まっている状態で、テーブル上に置いた菌床側面を菌床が横に動く程度の力で指で押しても指が菌床にめり込まない）」、「やわらかい（菌床表面がやわらかい状態で、前記同様に指で押すと指が菌庄内部に容易にめりこむ）」、「どちらでもない」といった官能的な評価で足りるものである。脆性が低い（脆い）菌床の場合、得られたフルボ酸溶液にはフミン酸やオガクズ等の菌床構成物から溶出した不純物が混じっていることが示唆された。脆性が高い（壊れにくい）菌床の場合、得られたフルボ酸溶液は高さ方向で異なる色彩領域を有していた。ここで、異なる色彩領域を有し、とは例えば、溶液の色相が異なる部分があればよいことを意味するものである（溶液底部には沈殿物が溜まっている場合が多く、必ずしも溶液全体が同一の色相であるわけではない）。すなわち、脆性が高い菌床は不純物が少ないフルボ酸溶液が得られることが示唆された。
【００１８】
これらの知見からフルボ酸を得るための菌床の良否判断を下表のように考えることができる（表２）。良と判断された菌床においては、フミン酸は溶出しにくく、フルボ酸は溶出しやすい傾向にある。ここで、本発明における菌床の良否判断は下表の文言を厳密に解釈するべきではなく、実質的に均等である他の指標等によって代替できるものである。
【表２】
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【００１９】
（４）フルボ酸溶液の良否判断
フルボ酸溶液の採取方法としては菌床を容器に封入し、菌床の水分が時間経過とともに容器底部に流出したものを採取する方法、容器に菌床を水に浸漬した状態で封入し、フルボ酸が流出するのを待って採取する方法がある。ここで容器については限定するものではなく、金属製容器、ガラス製容器、樹脂製容器であってもよいし、容量についても限定するものではない。容器を密閉するか否かについては、溶液の気化を防止するため密閉状態である方が望ましいが、厳密な密閉状態を意味するものではない。溶液採取環境は常温、常圧で問題ないが、微生物の繁殖を避けるため１５℃以下であることが望ましい。ここで、細かく砕いた廃菌床約２０ｇに精製水３００ｇを加えて、オートクレーブにより１２１℃、２気圧で２０分間処理したところ、前記フルボ酸溶液とは色相が異なる（黒色の）液が得られた。３Ｄスペクトル分析結果（図４）からはフルボ酸とともに多くの不純物が溶出していることが認められ、高温環境による強制的なフルボ酸抽出では純度の高いフルボ酸を得るには適していないことが示唆された。
【００２０】
菌床からの溶液、菌床を水に浸漬した場合の浸漬水について３Ｄ蛍光スペクトル分析を行い、ｐＨとフルボ酸の存否の関係を確認した。この結果、ｐＨが４．０以下の場合に（ｐＨがより低くなるほど）にフルボ酸の量が多くなること、ｐＨが５．０以上ではフルボ酸の量は少なく、フミン酸の量が多くなることが確認された。前記（３）で良と判断された菌床から得られた溶液は時間経過とともにｐＨが４．０以下まで低下する傾向にある。
【００２１】
同様に、菌床からの溶液、菌床を水に浸漬した場合の浸漬水の色とフルボ酸の存否の関係を確認した。マンセル表色系のマンセル色相環（４０色相）において、前記第３ステップで良と判断されたきのこ菌床からの溶液と否と判断されたきのこ菌床からの溶液についていずれかの色相を０とし、右廻り＋２０、左廻り−２０で表示した際に、当該色相０を基準に他方の色相が＋４〜＋６、又は−４〜−６の色相範囲にある場合に、良と判断されたきのこ菌床からの溶液にフルボ酸の量が多くなること、それ以外の色相範囲の場合にはフミン酸の量が多くなることが確認された。なお、良と判断された菌床からの溶液の色相は２．５ＹＲ〜１０ＹＲ、明度は５、彩度は５付近を、否と判断された菌床からの溶液の色相は１０ＲＰ〜１０Ｒ、明度は２、彩度は２付近を有する傾向にあった。
【００２２】
フルボ酸溶液の良否判断は下表のように考えることができる（表３）。良と判断された溶液は、フミン酸は溶出しにくく、フルボ酸は溶出しやすい傾向にある。ここで、本発明における菌床の良否判断は下表のマンセル色相環（４０色相）の色相範囲のみを厳密に解釈するべきではなく、実質的に均等である他の指標等によって代替できるものである。
【表３】
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【００２３】
前記分析に供した菌床の含水率は概ね５０〜６０（重量）％であった。少なくとも５０％以上の含水率があれば十分な量の溶液が回収できた。本分析に供した主な廃菌床は栽培後に風雨、直射日光を避けるべくカバーをかけて保管されていたものである。これらの廃菌床に熟成期間は必要なく、栽培後のものをできるだけ早く溶液回収に供した方が望ましい。破砕する必要はないが、溶液回収容器のサイズに合わせる場合や水に浸漬する場合は破砕してもよい。本発明において、前記の含水とは良否評価に供する菌床が水分を含んでいる場合だけでなく、乾燥状態の菌床に水を投与したものも意味するものとする。水を投与して容器中に菌床を浸漬する場合、投与量の上限を限定するものではない。
【００２４】
また水の代わりに木酢液、又は竹酢液、又は木酢竹酢混合液を投与してもよい。木酢液としては限定するものではないが、例えば、アラカシから抽出したものを挙げることができる。木酢液、又は竹酢液、又は木酢竹酢混合液を用いた場合、水に比べてフルボ酸の溶出が促進され、より短時間で多量のフルボ酸が得られる利点がある。木酢竹酢混合液は任意の混合割合のものを用いてよい。ここで廃菌床をｐＨ４．０の木酢液に浸漬した場合、少なくともｐＨが４．０より低くなったことがフルボ酸溶出判断の第１の条件となる。また、マンセル表色系のマンセル色相環（４０色相）において、廃菌床に浸漬に使用する前の木酢液の色相とフルボ酸溶出後の色相のいずれかの色相を０とし、右廻り＋２０、左廻り−２０で表示した際に、当該色相０を基準に他方の色相が＋４〜＋６、又は−４〜−６の色相範囲にあるものがフルボ酸溶出判断の第２の条件となる。前記第１、第２条件のいずれも満たす場合に良と判断される。なお、繰り返し試験においてフルボ酸溶出に用いた木酢液の色相は７．５Ｒ〜７．５ＹＲ、明度は７、彩度は１２、溶出フルボ酸溶液の色相は１０ＹＲ〜10Ｙ、明度は２、彩度は１が主であった。木酢液のｐＨ、投与量、浸漬時間については制限するものではないが、ｐＨは４．０以下であることが好ましい。なお、竹酢液を用いた場合も木酢液を用いた場合と概ね同様の結果が確認された。
【産業上の利用可能性】
【００２５】
本発明によれば、培養後きのこ菌床の良否を菌床の外観と脆性から判断し、溶液の良否をｐＨと色相から判断するものであるため、安価、かつ、簡易に大量のフルボ酸を得る技術として有用である。
【図１】
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【図２】
2019094297.tif 000007
【図３】
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【図４】
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【手続補正書】
【提出日】平成30年3月27日(2018.3.27)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
培養後きのこ菌床からのフルボ酸溶液の抽出において、
前記菌床の主成分が木質チップであり、
前記きのこ菌床を容器に封入した後、前記容器底部に溶出した溶液のｐＨを確認するステップと、
前記溶液の色彩を確認するステップと、
前記ｐＨ確認ステップで確認されたｐＨと前記色彩確認ステップで確認された色彩に基づいて前記溶液をｐＨが４．０以下であり、色彩がマンセル表色系のマンセル色相環（４０色相）において水による溶出のときに色相２．５ＹＲ〜１０ＹＲ、木酢液、又は竹酢液、又は木酢竹酢混合液による溶出のときに色相１０ＹＲ〜１０Ｙの場合に良と判断するステップからなることを特徴とするフルボ酸溶液の良否評価方法。
【請求項２】
培養後きのこ菌床からのフルボ酸溶液の製造方法において、
前記菌床の主成分が木質チップであり、前記菌床の縦、横、長さ方向全体に概ね菌糸が届いていると視認でき、かつ、脆性が高いと官能評価されたきのこ菌床を良とし、それ以外を否とする第１ステップと、
前記きのこ菌床を容器に封入し、前記容器底部に溶液を溶出させる第２ステップと、
前記第１ステップで良と評価されたきのこ菌床について前記第２ステップの溶出液のｐＨを確認する第３ステップと、
前記第３ステップで確認されたｐＨが４．０以下の溶液の色彩と前記１ステップで否と評価されたきのこ菌床の前記第２ステップの溶液の色彩が、マンセル表色系のマンセル色相環（４０色相）においていずれか一方の色相を０とし、前記色相に対して右廻り＋２０、左廻り−２０で表示した際に、他方の色相が＋４〜＋６、又は−４〜−６の色相範囲にあるものを良と判断する第４ステップからなり、前記第４ステップで良と判断されたものをフルボ酸溶液とすることを特徴とするフルボ酸溶液の製造方法。
【請求項３】
培養後きのこ菌床からのフルボ酸溶液の製造方法において、
前記菌床の主成分が木質チップであり、前記菌床の縦、横、長さ方向全体に概ね菌糸が届いていると視認でき、かつ、脆性が高いと官能評価されたきのこ菌床を良とし、それ以外を否とする第１ステップと、
前記きのこ菌床を木酢液、又は竹酢液、又は木酢竹酢混合液とともに容器に封入し、前記容器底部に溶液を溶出させる第２ステップと、
前記第１ステップで良と評価されたきのこ菌床について前記第２ステップの溶出液のｐＨを確認する第３ステップと、
前記第３ステップで確認されたｐＨが前記木酢液（又は前記竹酢液、又は前記木酢竹酢混合液）のｐＨより低い溶液の色彩と前記木酢液（又は前記竹酢液、又は前記木酢竹酢混合液）の色彩が、マンセル表色系のマンセル色相環（４０色相）においていずれか一方の色相を０とし、前記色相に対して右廻り＋２０、左廻り−２０で表示した際に、他方の色相が＋４〜＋６、又は−４〜−６の色相範囲にあるものを良と判断する第４ステップからなり、前記第４ステップで良と判断されたものをフルボ酸溶液とすることを特徴とするフルボ酸溶液の製造方法。
【手続補正２】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００１１
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００１１】
前記課題を解決するためになされた第１の発明は、培養後きのこ菌床からのフルボ酸溶液の抽出において、前記菌床の主成分が木質チップであり、前記きのこ菌床を容器に封入した後、前記容器底部に溶出した溶液のｐＨを確認するステップと、前記溶液の色彩を確認するステップと、前記ｐＨ確認ステップで確認されたｐＨと前記色彩確認ステップで確認された色彩に基づいて前記溶液をｐＨが４．０以下であり、色彩がマンセル表色系のマンセル色相環（４０色相）において水による溶出のときに色相２．５ＹＲ〜１０ＹＲ、木酢液、又は竹酢液、又は木酢竹酢混合液による溶出のときに色相１０ＹＲ〜１０Ｙの場合に良と判断するステップからなることを特徴とするフルボ酸溶液の良否評価方法である。また、第２の発明は、培養後きのこ菌床からのフルボ酸溶液の製造方法において、前記菌床の主成分が木質チップであり、前記菌床の縦、横、長さ方向全体に概ね菌糸が届いていると視認でき、かつ、脆性が高いと官能評価されたきのこ菌床を良とし、それ以外を否とする第１ステップと、前記きのこ菌床を容器に封入し、前記容器底部に溶液を溶出させる第２ステップと、前記第１ステップで良と評価されたきのこ菌床について前記第２ステップの溶出液のｐＨを確認する第３ステップと、前記第３ステップで確認されたｐＨが４．０以下の溶液の色彩と前記１ステップで否と評価されたきのこ菌床の前記第２ステップの溶液の色彩が、マンセル表色系のマンセル色相環（４０色相）においていずれか一方の色相を０とし、前記色相に対して右廻り＋２０、左廻り−２０で表示した際に、他方の色相が＋４〜＋６、又は−４〜−６の色相範囲にあるものを良と判断する第４ステップからなり、前記第４ステップで良と判断されたものをフルボ酸溶液とすることを特徴とするフルボ酸溶液の製造方法である。また、第３の発明は、培養後きのこ菌床からのフルボ酸溶液の製造方法において、前記菌床の主成分が木質チップであり、前記菌床の縦、横、長さ方向全体に概ね菌糸が届いていると視認でき、かつ、脆性が高いと官能評価されたきのこ菌床を良とし、それ以外を否とする第１ステップと、前記きのこ菌床を木酢液、又は竹酢液、又は木酢竹酢混合液とともに容器に封入し、前記容器底部に溶液を溶出させる第２ステップと、前記第１ステップで良と評価されたきのこ菌床について前記第２ステップの溶出液のｐＨを確認する第３ステップと、前記第３ステップで確認されたｐＨが前記木酢液（又は前記竹酢液、又は前記木酢竹酢混合液）のｐＨより低い溶液の色彩と前記木酢液（又は前記竹酢液、又は前記木酢竹酢混合液）の色彩が、マンセル表色系のマンセル色相環（４０色相）においていずれか一方の色相を０とし、前記色相に対して右廻り＋２０、左廻り−２０で表示した際に、他方の色相が＋４〜＋６、又は−４〜−６の色相範囲にあるものを良と判断する第４ステップからなり、前記第４ステップで良と判断されたものをフルボ酸溶液とすることを特徴とするフルボ酸溶液の製造方法である。本発明において色彩とは色の構成要素を指すものであり、例えば色相、彩度、明度と呼ばれる三属性が挙げられる。本発明において色彩とは色の構成要素のうち前記良否判断に有用な一つについてのものであっても良いし、総合的なものであっても良い。
【手続補正３】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００１２
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００１２】
本発明は、フルボ酸原料となる培養後きのこ菌床溶液の良否をｐＨと色彩から評価するものであるため、安価、かつ、簡易に大量のフルボ酸を得ることが期待できる。特に、廃菌床の酸性化は堆肥化の阻害要因であるとしてこれまで着目されてこなかったが、酸性化が進行した廃菌床の有用性を前記評価によって見出したことで、農作物育成目的や魚介類の飼育目的等にフルボ酸を安価で供給することが期待できる。