(57)【要約】      （修正有）【課題】歯、骨などのヒドロキシアパタイト含有材料を保護する手段の提供。【解決手段】スフィンゴシン系化合物、特にフィトスフィンゴシン化合物又は前記化合物の複合物。当該化合物又は複合物は、う歯（カリエス）、酸蝕（エロージョン）、象牙質過敏及び歯石形成の処置及び防止に特に有用である。スフィンゴシン系化合物を用いてバイオフィルム形成を防止する方法及び装置も提供される。スフィンゴシン系化合物を含む組成物も提供される。【選択図】なし【特許請求の範囲】
【請求項１】
歯又は骨の被覆剤として使用され、
【化１】
2019218378.tif 000007
式Ｉ
式中、Ｘは、８〜２４個の炭素、好ましくは１０から２０個の炭素を有するアルキル又はアルケニル、より好ましくは線状アルキルであり、
Ｒ１は、Ｈ及びＣ（＝Ｏ）Ｃ１〜２０から選択され、好ましくはＲ１はＨであり、
Ｒ２は、Ｈ及びＯＨから選択され、好ましくはＲ２はＯＨであり、
Ｒ３は、リン酸塩、ＯＨ又はＦから選択され、好ましくはＯＨである、
式Ｉを有するスフィンゴシン化合物、又は前記化合物の複合物。
【請求項２】
前記使用が、歯質脱灰、歯質脱灰障害、歯肉疾患及び／又は歯石形成を防止又は軽減する、請求項１に記載のスフィンゴシン化合物。
【請求項３】
前記歯質脱灰障害が象牙質過敏である、請求項２に記載の化合物。
【請求項４】
前記歯質脱灰障害がう蝕である、請求項２に記載の化合物。
【請求項５】
前記スフィンゴシン化合物がフィトスフィンゴシンである、請求項１から４のいずれか一項に記載の化合物。
【請求項６】
好ましくは酸蝕及び／又は塩の沈殿を軽減又は防止するための、ヒドロキシアパタイト表面を被覆する方法であって、
【化２】
2019218378.tif 000008
式Ｉ
式中、Ｘは、８〜２４個の炭素、好ましくは１０から２０個の炭素を有するアルキル又はアルケニル、より好ましくは線状アルキルであり、
Ｒ１は、Ｈ及びＣ（＝Ｏ）Ｃ１〜２０から選択され、好ましくはＲ１はＨであり、
Ｒ２は、Ｈ及びＯＨから選択され、好ましくはＲ２はＯＨであり、
Ｒ３は、リン酸塩、ＯＨ又はＦから選択され、好ましくはＯＨである、
式Ｉを有するスフィンゴシン化合物又は前記化合物の複合物と前記表面を接触させることを含む、方法。
【請求項７】
前記スフィンゴシン化合物がフィトスフィンゴシンである、請求項６に記載の方法。
【請求項８】
前記表面がヒドロキシアパタイトナノ粒子とも接触する、請求項６又は７に記載の方法。
【請求項９】
【化３】
2019218378.tif 000009
式Ｉ
式中、Ｘは、８〜２４個の炭素、好ましくは１０から２０個の炭素を有するアルキル又はアルケニル、より好ましくは線状アルキルであり、
Ｒ１は、Ｈ及びＣ（＝Ｏ）Ｃ１〜２０から選択され、好ましくはＲ１はＨであり、
Ｒ２は、Ｈ及びＯＨから選択され、好ましくはＲ２はＯＨであり、
Ｒ３は、リン酸塩、ＯＨ又はＦから選択され、好ましくはＯＨである、
式Ｉを有するスフィンゴシン化合物又は前記化合物の複合物を含む、口腔ケア組成物。
【請求項１０】
前記スフィンゴシン化合物がフィトスフィンゴシンである、請求項９に記載の口腔ケア組成物。
【請求項１１】
練歯磨、チューインガム又は洗口剤から選択される、請求項９又は１０に記載の口腔ケア組成物。
【請求項１２】
前記練歯磨が非イオン界面活性剤を含む、請求項１１に記載の口腔ケア組成物。
【請求項１３】
前記組成物がさらにヒドロキシアパタイトナノ粒子を含む、請求項９から１２のいずれか一項に記載の口腔ケア組成物。
【請求項１４】
う蝕の防止又は軽減に使用される、請求項９から１３のいずれか一項に記載の口腔ケア組成物。
【請求項１５】
【化４】
2019218378.tif 000010
式Ｉ
式中、Ｘは、８〜２４個の炭素、好ましくは１０から２０個の炭素を有するアルキル又はアルケニル、より好ましくは線状アルキルであり、
Ｒ１は、Ｈ及びＣ（＝Ｏ）Ｃ１〜２０から選択され、好ましくはＲ１はＨであり、
Ｒ２は、Ｈ及びＯＨから選択され、好ましくはＲ２はＯＨであり、
Ｒ３は、リン酸塩、ＯＨ又はＦから選択され、好ましくはＯＨである、
式Ｉを有するスフィンゴシン化合物又は前記化合物の複合物を含む、食品組成物。
【請求項１６】
さらにヒドロキシアパタイトナノ粒子を含む、請求項１５に記載の組成物。
【請求項１７】
口内乾燥又はその症候を防止、軽減又は処置するのに使用され、
【化５】
2019218378.tif 000011
式Ｉ
式中、Ｘは、８〜２４個の炭素、好ましくは１０から２０個の炭素を有するアルキル又はアルケニル、より好ましくは線状アルキルであり、
Ｒ１は、Ｈ及びＣ（＝Ｏ）Ｃ１〜２０から選択され、好ましくはＲ１はＨであり、
Ｒ２は、Ｈ及びＯＨから選択され、好ましくはＲ２はＯＨであり、
Ｒ３は、リン酸塩、ＯＨ又はＦから選択され、好ましくはＯＨである、
式Ｉを有するスフィンゴシン化合物又は前記化合物の複合物。
【請求項１８】
ヒドロキシアパタイトを含む補綴歯であって、
【化６】
2019218378.tif 000012
式Ｉ
式中、Ｘは、８〜２４個の炭素、好ましくは１０から２０個の炭素を有するアルキル又はアルケニル、より好ましくは線状アルキルであり、
Ｒ１は、Ｈ及びＣ（＝Ｏ）Ｃ１〜２０から選択され、好ましくはＲ１はＨであり、
Ｒ２は、Ｈ及びＯＨから選択され、好ましくはＲ２はＯＨであり、
Ｒ３は、リン酸塩、ＯＨ又はＦから選択され、好ましくはＯＨである、
式Ｉを有するスフィンゴシン化合物又は前記化合物の複合物で被覆された補綴歯。
【請求項１９】
前記スフィンゴシン化合物がフィトスフィンゴシンである、請求項１８に記載の補綴歯。
【請求項２０】
歯の変色を防止する美容処置であって、
【化７】
2019218378.tif 000013
式Ｉ
式中、Ｘは、８〜２４個の炭素、好ましくは１０から２０個の炭素を有するアルキル又はアルケニル、より好ましくは線状アルキルであり、
Ｒ１は、Ｈ及びＣ（＝Ｏ）Ｃ１〜２０から選択され、好ましくはＲ１はＨであり、
Ｒ２は、Ｈ及びＯＨから選択され、好ましくはＲ２はＯＨであり、
Ｒ３は、リン酸塩、ＯＨ又はＦから選択され、好ましくはＯＨである、
式Ｉを有するスフィンゴシン化合物又は前記化合物の複合物を前記歯に施すことを含む、美容処置。
【請求項２１】
さらに前記歯にヒドロキシアパタイトナノ粒子を施すことを含む、請求項２０に記載の美容処置。
【請求項２２】
抗歯石剤として使用され、
【化８】
2019218378.tif 000014
式Ｉ
式中、Ｘは、８〜２４個の炭素、好ましくは１０から２０個の炭素を有するアルキル又はアルケニル、より好ましくは線状アルキルであり、
Ｒ１は、Ｈ及びＣ（＝Ｏ）Ｃ１〜２０から選択され、好ましくはＲ１はＨであり、
Ｒ２は、Ｈ及びＯＨから選択され、好ましくはＲ２はＯＨであり、
Ｒ３は、リン酸塩、ＯＨ又はＦから選択され、好ましくはＯＨである、
式Ｉを有するスフィンゴシン化合物又は前記化合物の複合物。
【請求項２３】
表面への細菌付着を軽減又は防止するのに使用され、
【化９】
2019218378.tif 000015
式Ｉ
式中、Ｘは、８〜２４個の炭素、好ましくは１０から２０個の炭素を有するアルキル又はアルケニル、より好ましくは線状アルキルであり、
Ｒ１は、Ｈ及びＣ（＝Ｏ）Ｃ１〜２０から選択され、好ましくはＲ１はＨであり、
Ｒ２は、Ｈ及びＯＨから選択され、好ましくはＲ２はＯＨであり、
Ｒ３は、リン酸塩、ＯＨ又はＦから選択され、好ましくはＯＨである、
式Ｉを有するスフィンゴシン化合物又は前記化合物の複合物。
【請求項２４】
前記化合物が、ＰＨＳ、ＰＨＳリン酸塩、ステアロイルＰＨＳ、スフィンガニン及びスフィンゴシンから選択される、請求項２３に記載の化合物。
【請求項２５】
【化１０】
2019218378.tif 000016
式Ｉ
式中、Ｘは、８〜２４個の炭素、好ましくは１０から２０個の炭素を有するアルキル又はアルケニル、より好ましくは線状アルキルであり、
Ｒ１は、Ｈ及びＣ（＝Ｏ）Ｃ１〜２０から選択され、好ましくはＲ１はＨであり、
Ｒ２は、Ｈ及びＯＨから選択され、好ましくはＲ２はＯＨであり、
Ｒ３は、リン酸塩、ＯＨ又はＦから選択され、好ましくはＯＨである、
式Ｉを有するスフィンゴシン化合物又は前記化合物の複合物で少なくとも部分的に被覆された物品。
【請求項２６】
前記物品が医療機器である、請求項２５に記載の物品。
【請求項２７】
前記化合物が、ＰＨＳ、ＰＨＳリン酸塩、ステアロイルＰＨＳ、スフィンガニン及びスフィンゴシンから選択される、請求項２５又は２６に記載の物品。
【請求項２８】
前記物品がヒドロキシアパタイト粒子で少なくとも部分的に被覆された、請求項２５から２７のいずれか一項に記載の物品。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、表面、及び歯、骨などのヒドロキシアパタイト含有材料などの材料の保護における、スフィンゴシン系化合物、特にフィトスフィンゴシン化合物の使用に関する。かかる化合物は、う歯（カリエス）、酸蝕（エロージョン）、象牙質過敏及び歯石形成の処置及び防止におけるような表面の保護層として特に有用である。スフィンゴシン系化合物を含む組成物も提供される。スフィンゴシン系化合物を用いてバイオフィルム形成を防止する方法及び装置も提供される。
【背景技術】
【０００２】
歯エナメル質の主成分は、基本的無機質であるカルシウムヒドロキシアパタイト（ＨＡＰ：ｈｙｄｒｏｘｙ  ａｐａｔｉｔｅ）、Ｃａ１０（ＰＯ４）６（ＯＨ）２であり、これは、酸の腐食及び溶解作用を本質的に受けやすい。酸に起因するう蝕の例は、う歯及び酸蝕である。う歯においては、歯垢中の嫌気性菌代謝の酸性最終産物が、典型的には歯科衛生の行き届きにくい部位において、歯エナメル質の局所的溶解を引き起こす。酸蝕は、しばしば機械的摩耗（摩擦及び摩滅）と一緒に表層の歯組織の広範な損失を引き起こし得る、食餌又は胃由来の酸による歯表面の化学的溶解である。正常な状態では、唾液は、その緩衝系の中和作用によって、また、歯の表面を覆う唾液（糖）タンパク質の潤滑性膜である歯薄膜を堆積させることによって、酸攻撃の有害作用に対してエナメル質をある程度保護する。現在の消費行動は、唾液の保護能力を超えるレベルまで酸攻撃を増大させている。その結果、世界的に、酸蝕発生率が急増している。
【０００３】
歯エナメル質は、歯石形成（歯石）も受けやすい。歯石とは、唾液、残骸及び無機質の存在によって形成された、歯表面の硬化（ミネラル化）プラークの蓄積を指す。歯石は、歯表面のリン酸カルシウム塩の堆積物である。歯石は、ブルシャイト、リン酸オクタカルシウム、リン酸三カルシウム、生物学的アパタイトなどのリン酸カルシウム無機質の混合物を含む。
【０００４】
練歯磨、洗口剤などの従来の口腔ケア組成物は、う歯及び歯石形成の防止に特に適している。しかし、酸蝕に対して意味のある保護作用を示すことに成功した処方はまだない。
したがって、歯の表面を保護する新しい処方が至急必要である。
【発明の概要】
【課題を解決するための手段】
【０００５】
一態様においては、本開示は、骨、歯などのヒドロキシアパタイト含有材料の被覆剤として使用される、好ましくは歯の被覆剤として使用される、式Ｉを有するスフィンゴシン化合物を提供する。前記化合物は、骨又は歯の被覆用医薬品を調製するのに使用することができる。あるいは、前記化合物は、口腔ケア製品、食品などの非医薬品処方を調製するのに使用することができる。
【０００６】
好ましくは、この化合物及び得られる被覆剤を使用すると、歯質脱灰、（好ましくは、酸蝕、う歯及び象牙質過敏から選択される）歯質脱灰障害、歯肉疾患及び／又は歯石形成が防止又は軽減される。好ましくは、前記化合物を使用して、歯質脱灰障害に付随する酸による侵食から歯を保護する。より好ましくは、この化合物を使用して、歯質脱灰又は（好ましくは、酸蝕、う歯及び象牙質過敏から選択される）歯質脱灰障害を防止又は軽減する。
【０００７】
一態様においては、本開示は、抗歯石剤として使用される式Ｉを有するスフィンゴシン化合物を提供する。
【０００８】
一態様においては、本開示は、抗歯肉炎剤として使用される式Ｉを有するスフィンゴシン化合物を提供する。
【０００９】
一態様においては、本開示は、抗歯周炎剤として使用される式Ｉを有するスフィンゴシン化合物を提供する。
【００１０】
一態様においては、本開示は、口内乾燥を処置又は防止するのに使用される式Ｉを有するスフィンゴシン化合物を提供する。好ましくは、前記化合物は、口内乾燥の症候を軽減又は防止する。
【００１１】
一態様においては、本開示は、ヒドロキシアパタイト表面又はヒドロキシアパタイト含有材料を被覆する方法であって、前記表面又は前記材料を式Ｉを有するスフィンゴシン化合物と接触させることを含む、方法を提供する。好ましくは、ヒドロキシアパタイト表面又はヒドロキシアパタイト含有材料は、骨若しくは歯又は人工若しくは補綴の骨若しくは歯である。好ましくは、この方法は、ヒドロキシアパタイトの酸による侵食を軽減若しくは防止し、又は表面若しくは材料上の塩沈殿の蓄積を軽減若しくは防止する。
【００１２】
一態様においては、本開示は、歯の変色を防止する美容処置であって、式Ｉを有するスフィンゴシン化合物を前記歯に施すことを含む、美容処置を提供する。
【００１３】
一態様においては、本明細書に記載の方法、使用及び処置は、さらに、ヒドロキシアパタイトナノ粒子の供給を含む。
【００１４】
一態様においては、本開示は、式Ｉを有するスフィンゴシン化合物を含む組成物を提供する。好ましくは、この組成物は、好ましくは歯磨剤（歯磨粉、練歯磨など）、チューインガム、人工唾液及び洗口剤から選択される、口腔ケア組成物である。好ましくは、この組成物は、好ましくは乳製品、加工食品、油、栄養及び／又はビタミン補助食品、スナック製品、並びに飲料品から選択される、食品組成物である。好ましくは、この組成物は、さらにヒドロキシアパタイトナノ粒子を含む。
【００１５】
一態様においては、本開示は、式Ｉを有するスフィンゴシン化合物で被覆された補綴の骨又は歯を提供する。好ましくは、歯の骨は、ヒドロキシアパタイトナノ粒子でも被覆される。
【００１６】
一態様においては、本開示は、それを必要とする対象に有効量の本明細書に開示したスフィンゴシン化合物を投与することを含む、歯石形成、口内乾燥、歯質脱灰又は歯質脱灰障害を防止又は軽減する方法を提供する。好ましくは、前記方法は、口内乾燥の症候、酸蝕、う歯、及び／又は象牙質過敏及び歯石を軽減、防止又は緩和する。
【００１７】
一態様においては、本開示は、表面の細菌付着及び／又はバイオフィルム形成を軽減又は防止する方法であって、前記表面の少なくとも一部を式Ｉを有するスフィンゴシン化合物で被覆する方法を提供する。好ましくは、この化合物は、フィトスフィンゴシン（ＰＨＳ）、ＰＨＳリン酸塩、ステアロイルＰＨＳ、スフィンガニン及びスフィンゴシンから選択される。好ましくは、この表面は、ヒドロキシアパタイト含有材料である。好ましくは、この表面としては、プラスチック及びガラスも挙げられる。より好ましくは、この表面は、ヒドロキシアパタイト、プラスチック、ガラス、シリコーン、フッ素リン灰石、シリカート、並びにチタン、（炭酸カルシウムなどの）炭酸塩基、（リン酸カルシウムなどの）リン酸塩基及び／又は（硫酸カルシウムなどの）硫酸塩基を含む表面を含む。好ましくは、この方法は、リン酸塩及び／又は硫酸塩を含有する表面及び材料に対するものである。好ましくは、この表面は、医療機器のものである。好ましくは、この表面は、ヒドロキシアパタイトナノ粒子でも被覆される。
【００１８】
一態様においては、本開示は、リン酸塩及び／又は硫酸塩を含有する表面及び材料の保護被覆剤を提供する。
【００１９】
一態様においては、本開示は、ヒドロキシアパタイト、プラスチック、ガラス、シリコーン、フッ素リン灰石、シリカート、並びにチタン、（炭酸カルシウムなどの）炭酸塩基、（リン酸カルシウムなどの）リン酸塩基及び／又は（硫酸カルシウムなどの）硫酸塩基を含む表面を含む、表面及び材料の保護被覆剤を提供する。好ましくは、前記表面は、医療機器に由来する。
【００２０】
一態様においては、本開示は、式Ｉを有するスフィンゴシン化合物で少なくとも部分的に被覆された物品を提供する。好ましくは、この化合物は、ＰＨＳ、ＰＨＳリン酸塩、ステアロイルＰＨＳ、スフィンガニン及びスフィンゴシンから選択される。好ましくは、前記物品は医療機器である。好ましくは、この表面は、ヒドロキシアパタイトナノ粒子でも被覆される。
【００２１】
一態様においては、本開示は、表面又は材料、特に医療機器又は外科用具を被覆する方法であって、前記表面又は前記材料を式Ｉを有するスフィンゴシン化合物と接触させることを含む、方法を提供する。好ましくは、この化合物は、ＰＨＳ、ＰＨＳリン酸塩、ステアロイルＰＨＳ、スフィンガニン及びスフィンゴシンから選択される。好ましくは、この方法は、細菌付着を軽減若しくは防止し、又は表面若しくは材料上のバイオフィルムの蓄積を軽減若しくは防止する。好ましくは、この表面は、ヒドロキシアパタイトナノ粒子でも被覆される。好ましくは、前記表面又は材料は、ヒドロキシアパタイト、プラスチック、ガラス、シリコーン、フッ素リン灰石、シリカート、並びにチタン、（炭酸カルシウムなどの）炭酸塩基、（リン酸カルシウムなどの）リン酸塩基及び／又は（硫酸カルシウムなどの）硫酸塩基を含む表面を含む。
【００２２】
式Ｉを有するスフィンゴシン化合物は、
【００２３】
【化１】
2019218378.tif 000002
式Ｉ
【００２４】
であり、式中、Ｘは、８〜２４個の炭素、好ましくは１０から２０個の炭素を有するアルキル、より好ましくは線状アルキルであり、
Ｒ１は、Ｈ及びＣ（＝Ｏ）Ｃ１〜２０から選択され、好ましくはＲ１はＨであり、
Ｒ２は、Ｈ及びＯＨから選択され、好ましくはＲ２はＯＨであり、
Ｒ３は、ＯＨ又はＦから選択され、好ましくはＯＨである。好ましくは、Ｘは、１０から２０個の炭素を有する線状アルキルであり、Ｒ１はＨであり、Ｒ２はＯＨであり、Ｒ３はＯＨである。より好ましくは、この化合物はフィトスフィンゴシン（ＰＨＳ）である。
【００２５】
好ましくは、式Ｉは、
【００２６】
【化２】
2019218378.tif 000003
式Ｉ
【００２７】
であり、式中、Ｘは、８〜２４個の炭素、好ましくは１０から２０個の炭素を有するアルキル又はアルケニル、より好ましくは線状アルキルであり、
Ｒ１は、Ｈ及びＣ（＝Ｏ）Ｃ１〜２０から選択され、好ましくはＲ１はＨであり、
Ｒ２は、Ｈ及びＯＨから選択され、好ましくはＲ２はＯＨであり、
Ｒ３は、リン酸塩、ＯＨ又はＦから選択され、好ましくはＯＨである。好ましくは、Ｘは、１０から２０個の炭素を有する線状アルキルであり、Ｒ１はＨであり、Ｒ２はＯＨであり、Ｒ３はＯＨである。
【００２８】
より好ましくは、Ｘは、８〜２４個の炭素、好ましくは１０から２０個の炭素を有するアルキル又はアルケニル、より好ましくは線状アルキルであり、
Ｒ１はＨであり、
Ｒ２は、Ｈ及びＯＨから選択され、好ましくはＲ２はＯＨであり、
Ｒ３は、リン酸塩、ＯＨ又はＦから選択され、好ましくはＯＨである。
【００２９】
好ましくは、Ｘは、８〜２４個の炭素、好ましくは１０から２０個の炭素を有するアルキル又はアルケニルであり、Ｒ１はＨであり、
Ｒ２はＯＨであり、
Ｒ３は、リン酸塩、ＯＨ又はＦから選択され、好ましくはＯＨである。
【００３０】
好ましくは、Ｘは、８〜２４個の炭素、好ましくは１０から２０個の炭素を有するアルキル又はアルケニルであり、
Ｒ１はＨであり、
Ｒ２はＯＨであり、
Ｒ３は、リン酸塩又はＯＨから選択される。
【００３１】
好ましくは、Ｘは、８〜２４個の炭素、好ましくは１０から２０個の炭素を有するアルキル又はアルケニルであり、
Ｒ１はＨであり、
Ｒ２はＯＨであり、
Ｒ３はＯＨである。
【図面の簡単な説明】
【００３２】
【図１】ＨＡＰディスクを１：唾液緩衝剤、２：１％ウシ血清アルブミンを補充した唾液緩衝剤、３：ヒト全唾液、４：１０％ＤＭＳＯを含む唾液緩衝剤（（２ｍＭ  Ｋ２ＨＰＯ４、５０ｍＭ  ＫＣｌ、１ｍＭ  ＣａＣｌ２＆０．１ｍＭ  ＭｇＣｌ２、ｐＨ６．８））、５：１０％ＤＭＳＯを含む唾液緩衝剤中の５００ｕｇ／ｍｌフィトスフィンゴシン（ＰＨＳ））で被覆した。０．１Ｍクエン酸（ｐＨ３．０）に３０分間曝露後、ディスクをリンスし、乾燥させ、秤量した。
【図２】異なる濃度におけるＰＨＳの抗侵食効果。  前もって秤量したＨＡＰディスクを表示濃度（０、５、５０及び５００μｇ／ｍｌ）のＰＨＳと一緒に唾液緩衝剤中で３時間インキュベートした。続いて、ディスクを０．３Ｍクエン酸に３０分間曝露した。脱塩水でリンス後、ディスクを終夜乾燥させ、その重量を測定した。
【図３】クエン酸に異なる期間曝露後のＰＨＳによる保護。ＨＡＰディスク（未処理及び５０μｇ／ｍｌ  ＰＨＳ処理）を０．１Ｍクエン酸と一緒に表示時間（それぞれ、１５、３０及び６０分間）インキュベートした。水洗後、ディスクを乾燥させ、その重量を測定した。（白い点のある棒は未処理ディスクを示し、ブロック模様の棒はＰＨＳ処理ディスクを示す。）
【図４】ＰＨＳの抗侵食活性に対する原液調製物の効果。原料ＰＨＳ溶液（５ｍｇ／ｍｌ）をＤＭＳＯ又はエタノール中で調製した。これらの原液を使用して、３０分間の超音波処理（ｓｏｎ．）を用いて又は用いずに、唾液緩衝剤中の２００μｇ／ｍｌ  ＰＨＳ溶液を調製した。ＨＡＰディスクを表示溶液で３時間処理し、次いで０．１Ｍクエン酸に３０分間曝露した。ディスクをリンスし、乾燥させ、その重量を測定した。
【図５】ＰＨＳの保護作用に対するＨＡＰ上の唾液薄膜の存在の効果。ＨＡＰディスクを唾液（ＨＷＳ）又は唾液緩衝剤（対照）と一緒に３時間インキュベートした。リンス後、続いてディスクを唾液緩衝剤（唾液緩衝剤−唾液緩衝剤、ＨＷＳ−唾液緩衝剤）、ＨＷＳ（唾液緩衝剤−ＨＷＳ）又はＰＨＳ（唾液緩衝剤−ＰＨＳ、ＨＷＳ−ＰＨＳ）と一緒に３時間インキュベートした。次いで、ディスクをリンスし、０．１Ｍクエン酸（ｐＨ＝３．０）に３０分間曝露した。ディスクを脱塩水でリンスし、終夜乾燥させ、その重量を測定した。
【図６Ａ】図７の実験に用いたスフィンゴシンの分子構造。
【図６Ｂ】図７の実験に用いたスフィンゴシンの分子構造。
【図７】唾液緩衝剤中のフィトスフィンゴシン−リン酸塩、スフィンガニン及びＰＨＳ（フィトスフィンゴシン）の効果。
【図８】種々のスフィンゴシンによる保護に対する緩衝剤の効果。ディスクを種々のスフィンゴシン（唾液緩衝剤（＋／−ＣａＣｌ２）及び２０ｍＭ  Ｔｒｉｓ（＋／−ＣａＣｌ２）中５０ｕｇ／ｍｌで処理した。侵食を図７に記載のように求めた。
【図９】唾液被覆ＨＡＰに対するＰＨＳの保護作用。ＨＡＰディスクを０．１％Ｔｗｅｅｎ  ２０を補充した２０ｍＭ  Ｔｒｉｓ（ＴｒｉｓＴ）、２０ｍＭ  Ｔｒｉｓ（Ｔｒｉｓ）、唾液緩衝剤（Ｓａｌ  ｂｕｆ）又は除去ヒト全唾液（ＣＨＷＳ）と一緒にインキュベートした。２０時間後、ディスクをリンスし、ＴｒｉｓＴ（左側の棒、ＴｒｉｓＴ）又は１００μｇ／ｍｌ  ＰＨＳを補充したＴｒｉｓＴ（右側の棒、ＰＨＳ）中で３時間インキュベートした。ディスクをリンスし、０．１Ｍクエン酸に３０分間曝露した。リンス及び乾燥後、ディスクを秤量して、重量減少を求めた。唾液薄膜（ＣＨＷＳ）で覆われたディスクは、ＴｒｉｓＴ、Ｔｒｉｓ又はＳａｌｂｕｆで処理した対照と同程度に保護された。
【図１０】異なる（スフィンゴ）脂質の抗侵食効果。ＨＡＰディスクを３つ組で各脂質１００μｇ／ｍｌと一緒にＴｒｉｓ−Ｔｗｅｅｎ中で３時間インキュベートした。ディスクを０．１Ｍクエン酸（ｐＨ＝３．０）に３０分間曝露し、重量減少を求めた。
【図１１】ＨＡＰ上のＰＨＳ被覆の抗付着効果。ＨＡＰディスクへの細菌の付着を能動付着モデルを用いて調べた。ＨＡＰディスクを、１００μｇ／ｍｌ  ＰＨＳなし（対照）あり（ＰＨＳ被覆）で、３０℃で２０ｍＭ  Ｔｒｉｓ、０．１％Ｔｗｅｅｎ  ２０、ｐＨ６．８中で終夜インキュベートした。ＨＡＰディスクを洗浄して、結合していないＰＨＳを除去した。Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ（ストレプトコッカス）ｍｕｔａｎｓ（ミュータンス）をＢＨＩ培地中で終夜培養し、強度が半分のＢＨＩ（１８．５ｇ  ＢＨＩ／ｌ、５０Ｍｍ／ｌ  ＰＩＰＥＳ、ｐＨ７．０）で１：１０希釈して、最終密度約１０８細胞／ｍｌにした。ＨＡＰディスクの付いた蓋を、希釈菌液１．５ｍｌを含む２４ウェルプレートの上に置き、３７℃で２時間嫌気的にインキュベートした。ＨＡＰディスクをシステインペプトン水（ＣＰＷ）で２回洗浄して、付着していない細菌を除去した。細菌の付着層を１秒パルスで２分間超音波処理して分散させた。得られた懸濁液をＢＨＩプレート上で異なる希釈度で培養し、３７℃で４８時間嫌気的にインキュベートした後、ＣＦＵを数えた。ＰＨＳは、細菌付着を１００倍以上阻害した。
【図１２】ＨＡＰへのＰＨＳ吸着の時間依存性。ＰＨＳをＨＡＰディスクと混合し、０．５、１．５、５、１５、３０、６０、１２０及び１８０分間インキュベートした。ディスクをリンスし、吸着したＰＨＳをエタノールで抽出した。ＯＰＡを用いて誘導体化後、ＰＨＳを蛍光定量法によって測定した。５分以内に最大吸着レベルの６５％超に達した。
【図１３】ＰＨＳ濃度の関数としての吸着（円）及び保護（四角）。異なる濃度のＰＨＳをＨＡＰディスクと一緒に３時間インキュベートした。吸着したＰＨＳの量を、抽出及びＯＰＡ誘導体化後に、蛍光定量法によって測定した。別の実験においては、ＰＨＳ処理ディスクを０．１Ｍクエン酸（ｐＨ３．０）に３０分間曝露し、重量減少を求めた。最大下の結合レベル（約６μｇ／ディスク）でも、ＰＨＳは最大に保護した。
【図１４Ａ】ＰＨＳとＨＡＰの結合。Ａ．ＨＡＰディスクを様々な濃度のＰＨＳと一緒にインキュベートした。３時間後、ディスクをメタノールで抽出し、吸着したＰＨＳの量を蛍光定量によって測定した。Ｂ．ＨＡＰディスクを１００μｇ／ｍｌ  ＰＨＳと一緒にインキュベートした。異なる時点において、ディスクをメタノールで抽出し、吸着したＰＨＳを蛍光定量によって測定した。インキュベーションを３つ組で実施した。
【図１４Ｂ】ＰＨＳとＨＡＰの結合。Ａ．ＨＡＰディスクを様々な濃度のＰＨＳと一緒にインキュベートした。３時間後、ディスクをメタノールで抽出し、吸着したＰＨＳの量を蛍光定量によって測定した。Ｂ．ＨＡＰディスクを１００μｇ／ｍｌ  ＰＨＳと一緒にインキュベートした。異なる時点において、ディスクをメタノールで抽出し、吸着したＰＨＳを蛍光定量によって測定した。インキュベーションを３つ組で実施した。
【図１５】侵食攻撃中にクエン酸中に存在するときのスフィンゴ脂質の保護作用。左側の２本の棒：ＨＡディスクを緩衝剤又は１００ｕｇ／ｍｌ  ＰＨＳで３時間前処理し、次いで０．１Ｍクエン酸（ｐＨ＝３．０）で３０分間処理する。右側の２本の棒：ＨＡディスクを緩衝剤又は１００ｕｇ／ｍｌ  ＰＨＳで前処理し、次いで１００ｕｇ／ｍｌ  ＰＨＳの存在下で０．１Ｍクエン酸に３０分間曝露する。
【図１６】Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ  ｍｕｔａｎｓに対するＨＡディスク上に塗布されたスフィンゴ脂質の防汚活性
【図１７】Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ  ｓａｎｇｕｉｎｉｓ（サングイニス）に対するＨＡディスク上に塗布されたスフィンゴ脂質の防汚活性
【図１８】Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ  ｇｏｒｄｏｎｉｉ（ゴルドニイ）に対するＨＡディスク上に塗布されたスフィンゴ脂質の防汚活性
【図１９Ａ】非イオン性洗剤の例示的リスト
【図１９Ｂ】非イオン性洗剤の例示的リスト
【図１９Ｃ】非イオン性洗剤の例示的リスト
【発明を実施するための形態】
【００３３】
本開示は、スフィンゴシン類に基づく脂質含有化合物による表面／材料の保護作用を示すものである。歯エナメル質の酸に敏感な無機質相であるヒドロキシアパタイトをスフィンゴシン化合物で処理すると、クエン酸による溶解に対して未処理試料よりも８０％を超える保護作用を示した（例えば、図１及び８を参照されたい）。したがって、スフィンゴシン化合物を用いてヒドロキシアパタイト含有材料を保護する方法が提供される。理論に拘泥するものではないが、スフィンゴシン化合物は、ヒドロキシアパタイトに付着して保護障壁を形成すると考えられる。この付着によって、これらの化合物は、例えば、酸による侵食、バイオフィルム形成及び歯質脱灰に対する保護に有用なものになる。
【００３４】
好ましくは、本開示において有用であるスフィンゴシン化合物は、式Ｉを含む。
【００３５】
【化３】
2019218378.tif 000004
【００３６】
式中、Ｘは、８〜２４個の炭素、好ましくは１０から２０個の炭素を有するアルキル、好ましくは線状アルキルであり、
Ｒ１は、Ｈ及びＣ（＝Ｏ）Ｃ１〜２０から選択され、好ましくはＲ１はＨであり、
Ｒ２は、Ｈ、Ｆ及びＯＨから選択され、好ましくはＲ２はＯＨであり、
Ｒ３は、ＯＨ又はＦから選択され、好ましくはＯＨである。
好ましくは、式Ｉは
【００３７】
【化４】
2019218378.tif 000005
式Ｉ
【００３８】
であり、式中、Ｘは、８〜２４個の炭素、好ましくは１０から２０個の炭素を有するアルキル又はアルケニル、より好ましくは線状アルキルであり、
Ｒ１は、Ｈ及びＣ（＝Ｏ）Ｃ１〜２０から選択され、好ましくはＲ１はＨであり、
Ｒ２は、Ｈ及びＯＨから選択され、好ましくはＲ２はＯＨであり、
Ｒ３は、リン酸塩、ＯＨ又はＦから選択され、好ましくはＯＨである。好ましくは、Ｘは、１０から２０個の炭素を有する線状アルキルであり、Ｒ１はＨであり、Ｒ２はＯＨであり、Ｒ３はＯＨである。
【００３９】
より好ましくは、Ｘは、８〜２４個の炭素、好ましくは１０から２０個の炭素を有するアルキル又はアルケニル、より好ましくは線状アルキルであり、
Ｒ１はＨであり、
Ｒ２は、Ｈ及びＯＨから選択され、好ましくはＲ２はＯＨであり、
Ｒ３は、リン酸塩、ＯＨ又はＦから選択され、好ましくはＯＨである。
【００４０】
好ましくは式Ｉは、以下の通りである。
【００４１】
【化５】
2019218378.tif 000006
【００４２】
好ましくは、スフィンゴシン化合物は、フィトスフィンゴシン系化合物である。かかる化合物としては、Ｎ−テトラコサノイルフィトスフィンゴシン、Ｎ−ステアロイルフィトスフィンゴシン、Ｎ−オレオイルフィトスフィンゴシン、Ｎ−リノレオイル−フィトスフィンゴシン、Ｎ−（２−ヒドロキシテトラコサノイルコサノイ−ｌ）、フィトスフィンゴシン（Ｎ−（２−ｈｙｄｒｏｘｙｔｅｔｒａｃｏｓａｎｏｙ−ｌ），  ｐｈｙｔｏｓｐｈｉｎｇｏｓｉｎｅ）、Ｎ−（２−ヒドロキシオクトデカノイル（ｈｙｄｒｏｘｙｏｃｔｄｅｃａｎｏｙｌ））フィトスフィンゴシン、Ｎ−フィトスフィンゴシン、２２（２ヒドロキシオクトデカノイル（ｈｙｄｒｏｘｙｏｃｔｄｅｃａｎｏｙｌ））ヒドロキシオクトデカノイル（ｈｙｄｒｏｘｙｏｃｔｄｅｃａｎｏｙｌ））フィトスフィンゴシン、Ｎ−（２７−ステアロイルオキシ−ヘパトアコンサノイル（ｈｅｐａｔｏａｃｏｎｓａｎｏｙｌ））フィトスフィンゴシン、Ｎ＿（２７−オレオイルオクスヘプタコサノイル（ｏｌｅｏｙｌｏｘｈｅｐｔａｃｏｓａｎｏｙｌ））フィトスフィンゴシン、Ｎ（２７−リノレオイオキシヘプタコンサ−ノイル（ｌｉｎｏｌｅｏｙｏｘｙｈｅｐｔａｃｏｎｓａ−ｎｏｙｌ））フィトスフィンゴシン、Ｎ−（２３−ステアロイルオキシトリコサノイル）フィトスフィンゴシン、Ｎ−アセチル−フィトスフィンゴシン、Ｎ−ヘキサデカノイル−フィトスフィンゴシン、Ｎ−ヘキサノイル−フィトスフィンゴシン、Ｎ−オクタデカノイル−フィトスフィンゴシンが挙げられ、Ｎ−オクタノイル−フィトスフィンゴシンを使用することができる。好ましい実施形態においては、スフィンゴシン化合物は、本明細書に記載のスフィンゴイド塩基を含むスフィンゴ脂質である。最も好ましいスフィンゴシン化合物は、フィトスフィンゴシンである。さらに、好ましい化合物は、フィトスフィンゴシン−リン酸塩、及びＤ−エリスロ−スフィンゴシンＣ１５などのＤ−エリスロ−スフィンゴシンである。
【００４３】
さらに、本開示は、スフィンゴシン化合物が表面への細菌付着を防止し得ることを示すものである。このため、スフィンゴシン化合物は、バイオフィルム形成を軽減又は防止する薬剤として有用である。かかる化合物は、例えば、医療機器及び手術設備の被覆剤として使用することができる。この効果は、口腔ケア及び食品組成物におけるその有用性も増大させる。細菌付着を防止するスフィンゴシン化合物の効果は、殺菌剤としてのどの効果からも区別することができる。本明細書に記載の方法及び組成物（例えば、口腔ケア及び食品組成物）においては、スフィンゴシン化合物は、抗菌剤として使用されるのではなく、細菌付着を防止するのに使用される。好ましくは、これらの適用例及び組成物では、スフィンゴシン化合物は、以下、すなわちＰＨＳ、ＰＨＳリン酸塩、ステアロイルＰＨＳ、スフィンガニン及びスフィンゴシンの１種類以上から選択される。細菌付着の防止に最も好ましいのはスフィンガニンである。好ましくは、１種類を超えるスフィンゴシン化合物を本明細書に記載の方法及び組成物に使用することができる。好ましくは、ＰＨＳとスフィンガニンは、本明細書に記載の方法、組成物に一緒に使用され、又は本明細書に記載の物品に塗布される。好ましくは、経口細菌の付着が軽減される。好ましくは、Ｓ．ｇｏｒｄｏｎｉｉの付着が軽減される。好ましくは、Ｓ．ｓａｎｇｕｉｎｉｓの付着が軽減される。より好ましくは、Ｓ．ｍｕｔａｎｓの付着が軽減される。
【００４４】
スフィンゴシン化合物は、スフィンゴ脂質などの前記化合物の複合物とすることもできる。スフィンゴ脂質は、脂肪酸がアミド結合を介して長鎖塩基又はスフィンゴイドに結合した複雑な範囲の脂質を含む。より正確には、スフィンゴ脂質は、アミド結合によって脂肪酸に、さらに末端ヒドロキシ基を介して複合糖質又はリン含有部分に結合した、長鎖塩基からなる。スフィンゴイド塩基としては、ジヒドロスフィンゴシン（スフィンガニン）、スフィンゴシン及びフィトスフィンゴシンが挙げられる。セラミドは、脂肪酸とのアミド結合中にスフィンゴシン、フィトスフィンゴシン又はジヒドロスフィンゴシンを塩基として含むスフィンゴ脂質の特定のグループである。本発明に適切なスフィンゴ脂質は、本明細書に開示した式Ｉの式を有するスフィンゴイド塩基を有する。
【００４５】
スフィンゴシン化合物の適切な複合物は、タンパク質又はペプチド部分と複合化した式Ｉの化合物も含む。前記部分は、スフィンゴシン化合物の製造、送達、ＨＡＰターゲティング、安定性又は効力を改善することができる。好ましいペプチド部分は、ＨＡＰ結合部分である。スタセリン、唾液凝集素、ポリグルタミン酸及びカゼインペプチドを含めて、幾つかのかかるペプチドが当該技術分野で公知である。好ましくは、前記ペプチドは、配列ＤＳｐＳｐＥＥＫ（スタセリン由来、Ｓｐはリン酸化セリン）、又は唾液凝集素のＨＡＰ結合ドメインを含む。
【００４６】
スフィンゴシン化合物とタンパク質及びペプチドとの複合化は、当該技術分野で周知であり、例えば、参照により本明細書に援用する米国特許第５５４３３９０号に記述されている。
【００４７】
本開示の一態様は、骨又は歯を被覆するスフィンゴシン化合物の使用を提供する。スフィンゴシン化合物は、例えば、酸による侵食や歯石をもたらす塩析の形成に対して保護障壁として作用する。
【００４８】
本開示の一態様は、リン酸塩及び硫酸塩含有材料の被覆のためのスフィンゴシン化合物の使用を提供する。本開示の一態様は、ヒドロキシアパタイト、プラスチック、ガラス、シリコーン、フッ素リン灰石、シリカート、並びにチタン、（炭酸カルシウムなどの）炭酸塩基、（リン酸カルシウムなどの）リン酸塩基及び／又は（硫酸カルシウムなどの）硫酸塩基を含む表面を被覆するスフィンゴシン化合物の使用を提供する。スフィンゴシン化合物は、例えば、酸性液体及びガスなど酸による侵食に対する保護障壁として作用する。
【００４９】
本開示の一態様は、歯質脱灰を防止又は軽減するスフィンゴシン化合物の使用を提供する。歯エナメル質は、脱ミネラル化のプロセスを自然に起こす。脱ミネラル化は、例えば、食品、飲料、胃酸由来の酸、又は細菌によって産生される酸の存在によって増加する。
歯質脱灰は、（本明細書では歯質脱灰障害と称される）う歯、酸蝕及び象牙質過敏の発生に関与する根本的プロセスである。好ましくは、前記歯質脱灰障害は、細菌によって産生されない酸の存在に帰因し、例えば、酸性食品、酸性飲料又は胃酸に由来する。好ましくは、前記スフィンゴシン化合物は、酸性食品若しくは飲料の消費又は胃酸に起因する歯質脱灰障害を防止又は処置する方法に使用される。
【００５０】
ヒドロキシアパタイトは、酸性環境に曝露されると可溶性になる。リン酸カルシウムなどの塩も、ヒドロキシアパタイト上に沈着し得る。したがって、前記表面を本明細書に記載のスフィンゴシン化合物と接触させることを含む、ヒドロキシアパタイト表面を保護する方法が提供される。一部の実施形態においては、表面をスフィンゴシン化合物で前処理する。一部の実施形態においては、スフィンゴシン化合物は、酸性組成物中（例えば、炭酸飲料中）に存在する。この方法は、ヒドロキシアパタイト含有材料を酸による侵食及び沈殿塩の蓄積から保護するのに特に有用である。ヒドロキシアパタイト表面としては、天然及び補綴歯及びウェル及び天然及び補綴骨が挙げられる。
【００５１】
本明細書に記載の方法及び製品の好ましい実施形態においては、スフィンゴシン化合物をヒドロキシアパタイト（ナノ）粒子と一緒に使用する。ヒドロキシアパタイトは、歯の表面に付着し、そのカルシウム再沈着及び強化を促進する。ヒドロキシアパタイトは、エナメル質における穴、亀裂及び病変部を保護及び修復する歯の微細充填法（ｄｅｎｔａｌ  ｆｉｎｅ  ｆｉｌｌｉｎｇ  ｍｅｔｈｏｄ）に首尾よく使用されてきた。
【００５２】
ヒドロキシアパタイトは、日本では１９８０年から練歯磨に使用されており、例えば、アパガード（登録商標）ｎＨＡＰ練歯磨、日本の株式会社サンギ、の名称で市販されている。サンギは、５％及び１０％ヒドロキシアパタイトナノ粒子含有練歯磨を提供している。
【００５３】
ヒドロキシアパタイト粒子の平均粒径は、好ましくは、１から２００ｎｍ、より好ましくは５〜１００ｎｍの範囲である。エナメル質の基本構成要素は、通常、２０〜４０ｎｍのＨＡＰである。好ましくは、本明細書で使用するヒドロキシアパタイト粒子は、平均粒径が１５〜５０ｎｍである。最も好ましくは、リ（Ｌｉ）ら（ジャーナル・オブ・マテリアルズ・ケミストリ（Ｊ  ｏｆ  Ｍａｔｅｒ．Ｃｈｅｍ））２００８  １８，４０７９−４０８４）に記載のように平均粒径が約２０ｎｍである。
【００５４】
ヒドロキシアパタイトナノ粒子は、本明細書に記載の１種類以上のスフィンゴシン化合物で被覆して提供することができる。かかるプレコート粒子を、口腔ケア組成物中に、又は補綴、例えば、補綴歯用の被覆剤として、使用することができる。
【００５５】
う歯においては、歯垢中の嫌気性菌代謝の酸性最終産物が、典型的には歯科衛生の行き届きにくい部位において、歯エナメル質の局所的溶解を引き起こす。う歯としては、停止性う歯、初発性う歯、穴及び亀裂空洞、初期う歯、二次う歯、滑面空洞が挙げられる。一部の実施形態においては、歯質脱灰障害はう歯ではない。酸蝕は、食餌又は胃由来の酸による歯表面の化学的溶解である。象牙質過敏は、露出した象牙質に起因するとう痛又は不快感である。好ましい実施形態においては、本明細書に記載の化合物は、歯の酸による侵食、すなわち、酸蝕を防止、処置又は軽減するのに有用である。脱ミネラル化後のう歯及び侵食の発生の考察については、米国特許出願第２０１０００３４７５０号を参照されたい。
【００５６】
歯質脱灰及び歯石形成は、本明細書に記載のスフィンゴシン化合物の適用によって軽減又は防止することができる。再ミネラル強化は、無機質を歯の表面に戻す天然のプロセスである。歯質脱灰の軽減又は防止は、本明細書では、脱ミネラル化／ミネラル化プロセスの正味の効果が、脱ミネラル化が軽減又は防止されるようなものであるように脱ミネラル化プロセスを減速させることを指す。本明細書に記載のスフィンゴシン化合物又は前記スフィンゴシン化合物を含む組成物を使用すると、脱ミネラル化の正味の効果が対照よりも少なくとも５、少なくとも１０、少なくとも２０、少なくとも３０、少なくとも５０、少なくとも６０、又は少なくとも８０％低下する。本明細書に記載のスフィンゴシン化合物又は前記スフィンゴシン化合物を含む組成物を使用すると、歯石形成も対照より少なくとも５、少なくとも１０、少なくとも２０、少なくとも３０、少なくとも５０、少なくとも６０、又は少なくとも８０％低下する。
【００５７】
スフィンゴシン化合物は、口内乾燥の処置又は防止にも有用である。口内乾燥は、口渇としても知られ、唾液の欠如を指し、不十分な唾液産生に起因し得る。口内乾燥は、糖尿病、自己免疫障害などの基礎疾患の症候、又は投薬の副作用であり得る。口内乾燥は、老齢、脱水及び不安にも付随する。スフィンゴシン化合物は、本明細書に開示した任意の組成物において提供することができるが、好ましくは、この適応症用のチューインガム又は人工唾液製品において提供される。
【００５８】
スフィンゴシン化合物は、酸蝕、う歯、歯石形成、象牙質過敏及び口内乾燥症にかかっている、又はかかるおそれのある対象に使用することができる。この化合物は、前記障害を軽減若しくは防止することができ、又はその症候を緩和することができる。あるいは、この化合物は、かかる状態を発生するリスクを予防するのに、又は脱ミネラル化を抑制して歯を強化するのに、使用することができる。
【００５９】
スフィンゴシン化合物は、薬剤組成物、口腔ケア組成物及び食品組成物を含めて、任意の数の適切な組成物において提供することができる。好ましくは、前記組成物は、特にフィトスフィンゴシン−リン酸塩を使用するときには、Ｔｗｅｅｎ  ８０、Ｔｒｉｔｏｎ  Ｘ−１００、Ｔｒｉｔｏｎ  Ｘ１１４、Ｂｒｉｊ  ３５、Ｂｒｉｊ  ５８、Ｎｏｎｉｄｅｔ  Ｐ４０、オクチルグリコシド及びエトキシル化ステアリルアルコールなどの非イオン性、中性洗剤を含む。
Ｘ１１４、Ｂｒｉｊ  ３５、Ｂｒｉｊ  ５８、Ｎｏｎｉｄｅｔ  Ｐ４０、オクチルグリコシド及びエトキシル化ステアリルアルコール、並びに図１９に列挙した任意の非イオン性洗剤は、共存することができる。
【００６０】
好ましくは、スフィンゴシン化合物は、本明細書に記載の口腔ケア組成物の形で提供される。歯表面の歯エナメル質は、例えば、歯磨剤（練歯磨、歯磨粉など）で歯をブラッシングすることによって、歯磨剤スラリー若しくは洗口液でリンスすることによって、又はガム製品を噛むことによって、前記化合物又は組成物と接触する。別の方法としては、局所的経口ゲル、マウススプレー、又は細片、膜などの別の形態を対象の歯及び口腔粘膜と接触させることが挙げられる。この化合物又は組成物は、歯、歯肉又は他の経口表面にブラシ、ペン形塗布器又は指で直接塗布することができる。スフィンゴシン化合物は、食品において提供することもできる。食品は、ヒト及び／又は動物の消費用の製品を含み、固体製品と液体（飲料）製品の両方を含む。好ましくは、スフィンゴシン化合物は、以下、すなわちＰＨＳ、ＰＨＳリン酸塩、ステアロイルＰＨＳ、スフィンガニン及びスフィンゴシンの１種類以上から選択される。好ましくは、この組成物は、ＰＨＳ、並びに好ましくはＰＨＳリン酸塩、ステアロイルＰＨＳ、スフィンガニン及びスフィンゴシンから選択される、少なくとも１種類の追加のスフィンゴシン化合物を含む。好ましくは、この組成物は、ＰＨＳ及びスフィンガニンを含む。
【００６１】
スフィンゴシン化合物及び前記化合物を含む組成物は、美容用途においても有用である。
【００６２】
スフィンゴシン化合物及び前記化合物を含む組成物は、治療用途（例えば、う歯の防止及び軽減）と非治療用途（例えば、歯の変色を軽減する美容処置）の両方で有用である。
【００６３】
本明細書では「歯」とは、天然の歯、並びにインレー、歯冠、義歯及び歯移植片を含めたヒドロキシアパタイト含有補綴歯を指す。
【００６４】
スフィンゴシン化合物は、家畜、家庭愛玩動物若しくは他の家庭内動物、又は飼育されている動物を含めて、それを必要とする任意の動物に使用することができる。噛むもの、玩具などのペットケア製品を本経口組成物を含むように処方することができる。好ましくは、この化合物はヒトに使用される。
【００６５】
スフィンゴシン化合物は、好ましくは、少なくとも１日１回、より好ましくは１日２回、例えば、朝１回と夕方１回歯に施される。好ましくは、スフィンゴシン化合物は、数日、数週又は数か月間、定期的に、より正確には毎日（又は毎日２回）歯に施される。
【００６６】
好ましくは、スフィンゴシン化合物は、口腔ケア組成物において提供される。したがって、かかる組成物は、ヒト及び動物における使用に適していなければならない。本明細書では、口腔ケア組成物は、歯と接触するのに十分な時間口腔に保持され、全身投与目的で意図的にえん下される。好ましい口腔ケア組成物としては、練歯磨、歯磨剤、歯磨粉、歯磨ゲル、歯肉下ゲル、洗口液、人工唾液、補綴歯製品、マウススプレー、ロゼンジ、経口錠剤又はチューインガムが挙げられる。スフィンゴシン化合物は、経口表面に直接適用又は付着させるために、細片又は膜上に組み入れることもできる。一部のスフィンゴシン化合物は、リン酸塩（例えば、図８のスフィンガニン）を含まない、又は最小限のリン酸塩を含む、緩衝剤中で提供されるとより効果的である。これらの化合物の効力は、リン酸塩を含まない（又は最小量しか含まない）口腔ケア組成物中で提供することによって改善することができる。あるいは、又はそれに加えて、かかる化合物は、唾液に依拠しない製品中で提供することもできる。例えば、（カップ中に置かれるときなど）口の外で補綴歯を処理する補綴歯製品は、唾液と全く接触しないか、又は最小限の接触しかしない。
【００６７】
好ましくは、スフィンゴシン化合物は、口腔ケア組成物中に、５ｕｇ／ｍｌを超える濃度で、好ましくは少なくとも１０ｕｇ／ｍｌ、より好ましくは少なくとも２０ｕｇ／ｍｌ、より好ましくは少なくとも５０ｕｇ／ｍｌ、最も好ましくは少なくとも１００ｕｇ／ｍｌの濃度で存在する。好ましくは、ＰＨＳは、少なくとも２０ｕｇ／ｍｌの濃度で存在する。固体口腔ケア組成物の場合には、スフィンゴシン化合物は、２．５μｇ／グラムを超える濃度で存在する。
【００６８】
好ましくは、口腔ケア組成物は、さらに、本明細書に記載のヒドロキシアパタイト粒子を含む。好ましくは、この組成物は、０．００１〜５０重量％、より好ましくは２〜２０重量％の前記粒子を含む。ヒドロキシアパタイトナノ粒子は、例えば、ｎａｎｏＸＩＭ・ＣａｒｅＰａｓｔｅ（Ｆｌｕｉｄｉｎｏｖａ、ＳＡ）から市販されている。ヒドロキシアパタイト粒子は、スフィンゴシン化合物で前もって被覆することができる。かかるプレコーティングは、効果を示すのに必要なスフィンゴシン化合物の量を削減することができる。
【００６９】
適切な口腔ケア組成物を調製するための組成物及び手段は、当該技術分野で周知である。一部の実施形態においては、製品は、練歯磨、歯磨ゲル、歯磨粉などの歯磨剤の形態である。当業者は、使用する特定のスフィンゴシン化合物に基づく口腔ケア組成物の適切な成分を選択することができる。
【００７０】
かかる練歯磨及び歯磨ゲルの成分は、一般に、歯科用研磨材（５％から５０％）、界面活性剤（０．５％から１０％）、増粘剤（０．１％から５％）、湿潤剤（１０％から５５％）、香味剤（０．０４％から２％）、甘味剤（０．１％から３％）、着色剤（０．０１％から０．５％）及び水（２％から４５％）のうち１種類以上、並びに抗う歯剤（フッ化物イオンとして０．０５％から０．３％）及び防腐剤を含む。歯磨粉は、当然、実質的にすべての非液体成分を含む。
【００７１】
本明細書に開示した練歯磨の適切な成分としては、濃化用及び乳化安定剤として使用されるポリマーであるＣａｒｂｏｍｅｒ  ９５６；増粘剤であるカラゲナン；セルロースガムとしても知られ、増粘剤として使用されるカルボキシメチルセルロースナトリウム；ヤシ油由来の起泡性成分であるコカミドプロピルベタイン；合成染料であるＤ＆Ｃ  Ｙｅｌｌｏｗ＃１０、ＦＤ＆Ｃ  Ｂｌｕｅ＃１及びＤ＆Ｃ  Ｒｅｄ＃３０；水分レベルのバランスを保ち、水分レベルを維持するグリセリン；研磨材であるケイ酸；歯の表面の研磨を助ける穏やかな研磨材である雲母；湿潤剤及び溶媒であるＰＥＧ−８及びＰＥＧ−１２；界面活性剤であるＰｏｌｏｘａｍｅｒ  ４０７；湿潤剤であるプロピレングリコール；結合剤であるＰＶＭ／ＭＡコポリマー；練歯磨中の微生物の蓄積を防止する安息香酸ナトリウム；エナメル質を強化し、う歯の穴を防止し、プラークを予防するフッ化ナトリウム；他の成分のｐＨを中和する水酸化ナトリウム；サッカリン酸ナトリウム；人口甘味料；糖アルコールであり、湿潤及び質感付与剤であるソルビトール；非ゲル練歯磨に明るい白色度を付与する二酸化チタン；歯肉炎を予防するトリクロサン；及び粘性剤であるキサンタンガムが挙げられる。
【００７２】
好ましい一実施形態においては、本開示は、歯科用研磨材、界面活性剤、増粘剤、湿潤剤、及び本明細書に記載のスフィンゴシン化合物を含む、練歯磨を提供する。
【００７３】
適切な歯科用研磨材としては、例えば、ゲル及び沈殿を含めたシリカ、不溶性ポリメタリン酸ナトリウム、アルミナ水和物、炭酸カルシウム、オルトリン酸二カルシウム二水和物、ピロリン酸カルシウム、リン酸三カルシウム、ポリメタリン酸カルシウム、及び尿素とホルムアルデヒドの粒状縮合物などの樹脂研磨材が挙げられる。
【００７４】
練歯磨に現在使用されている最も一般的な界面活性剤は、ドデシル硫酸ナトリウム（ＳＤＳ）である。本発明者らは、ＳＤＳが、スフィンゴシン化合物の保護作用を大きく損なうことを見いだした。したがって、ＳＤＳは、特にフィトスフィンゴシンがスフィンゴシン化合物であるときには、好ましくは、口腔ケア組成物に使用すべきでない。例えば、ＳＤＳがグリチルリジン（Ｔｏｍ’ｓ  ｏｆ  Ｍａｉｎｅ  Ｃｌｅａｎ＆Ｇｅｎｔｌｅ  Ｃａｒｅ  Ｔｏｏｔｈｐａｓｔｅ（登録商標））又はラウロイルサルコシン酸ナトリウム（Ｄｒ．Ｋａｔｚ  ＰｅｒｉｏＴｈｅｒａｐｙ  Ｔｒｅａｔｍｅｎｔ  Ｇｅｌ（登録商標））で置き換えられた、ＳＤＳを含まない練歯磨が市販されている。より好ましくは、口腔ケア組成物は、ＳＤＳ、ＳＬＳ及びグリチルリジンを含まない。好ましくは、界面活性剤は、Ｔｗｅｅｎ  ２０（ポリオキシエチレンソルビタンモノラウラート）、Ｔｒｉｔｏｎ  Ｘ−１００、Ｔｗｅｅｎ  ８０、他のＴｗｅｅｎ洗剤などの非イオン性洗剤である。追加の非イオン性洗剤を１９に列挙する。好ましくは、経口組成物は、イオン性洗剤を含まない。
【００７５】
適切な増粘剤としては、カルボキシビニルポリマー、カラゲナン、ヒドロキシエチルセルロース、ラポナイト（ｌａｐｏｎｉｔｅ）、及びカルボキシメチルセルロースナトリウム、カルボキシメチルヒドロキシエチルセルロースナトリウムなどのセルロースエーテルの水溶性塩、ポリエチレンオキシド、ｖｏｒａヒアルロン酸グルカン（ｖｏｒａ  ｈｙａｌｕｒｏｎｉｃ  ａｃｉｄ  ｇｌｕｃａｎ）、カラヤゴム、キサンタンガム、及びアラビアゴムが挙げられる。
【００７６】
適切な湿潤剤としては、グリセリン、ソルビトール、キシリトール、ブチレングリコール、ポリエチレングリコール、プロピレングリコールなどの食用多価アルコール、特にソルビトール及びグリセリンが挙げられる。
【００７７】
適切な香味剤としては、冬緑油、ハッカ油、スペアミント油、チョウジ油、メントール、アネトール、サリチル酸メチル、ユーカリプトール、カッシア、１−メンチルアセタート、セージ及びオイゲノールが挙げられる。
【００７８】
例示的な洗口剤組成物は、例えば、エタノール（およそ１０％及びおよそ２０重量％）、プロピレングリコール（およそ５％及びおよそ１５重量％）、グリセロール（およそ５％及びおよそ２０重量％）並びに少量の香味剤及び着色剤を含む。
【００７９】
洗口剤組成物の活性成分は、通常、アルコール、グルコン酸クロルヘキシジン、塩化セチルピリジニウム、ヘキセチジン、（緩衝剤として作用する）安息香酸、サリチル酸メチル、塩化ベンザルコニウム、メチルパラベン、過酸化水素、臭化ドミフェンであり、時折、フッ化物、酵素及びカルシウムである。洗口剤組成物の活性成分は、フェノール、チモール、オイゲノール、ユーカリプトール又はメントールのような多少の抗菌性を有する精油を含むこともできる。成分は、水、ソルビトール、スクラロース、サッカリン酸ナトリウム、（細菌阻害剤としても役立つ）キシリトールなどの甘味料も含む。上述したように、非イオン界面活性剤が洗口剤に含まれることが好ましい。
【００８０】
チューインガム組成物は、典型的には、ガムベース（５０％から９９％）、香味剤（０．４％から２％）及び甘味剤（０．０１％から２０％）の１種類以上を含む。
【００８１】
ロゼンジとしては、ブレスミント、トローチ、香錠、マイクロカプセル及び圧縮錠剤が挙げられる。
【００８２】
Ｏｒａｌｕｂｅ（登録商標）などの唾液代替物としても知られる人工唾液は、唾液をまねた溶液である。人工唾液は、通常、水及び電解質（例えば、カリウム、ナトリウム、カルシウム、塩化物、リン酸塩）を含み、酵素、セルロース誘導体及び香味剤を含むこともできる。適切な処方は、当該技術分野で公知であり、参照によりその全体を援用する米国特許第５，５４１，１６５号及び第５，１２８，１３２号に記述されている。
【００８３】
好ましくは、スフィンゴシン化合物は、前記化合物を補充した食品において提供される。適切な食品としては、乳製品、加工食品、油、栄養及び／又はビタミン補充剤、スナック製品、並びに飲料品（スポーツドリンクなど）が挙げられる。
【００８４】
好ましくは、スフィンゴシン化合物は、前記化合物を補充した飲料において提供される。適切な飲料としては、水、アルコール飲料（ビール、ワインなど）、清涼飲料（コーラ、アイスティー、レモネード、フルーツポンチ、ソーダ水など）、フルーツジュース（オレンジジュース、タンジェリンジュース、グレープフルーツジュース、パイナップルジュース、リンゴジュース、ブドウジュース、ライム、レモンジュースなど）、野菜ジュース（ニンジン飲料、トマト飲料など）、温かい飲物（コーヒー飲料、茶、ホットチョコレート、グリューワインなど）が挙げられる。好ましくは、スフィンゴシン化合物は、酸性食品組成物において提供され、好ましくは前記食品組成物は、ｐＨが７未満、６未満、又は好ましくは５未満である。ソーダポップのｐＨは約３である。
【００８５】
食品としては、動物固形飼料（例えば、ドッグフード、キャットフード）及び補助栄養食品（例えば、ビスケット、砂糖菓子）も挙げられる。かかる製品は、当該技術分野で周知であり、例えば、そのすべてを参照によりその全体を援用する米国特許第５，４０５，８３６号、第６，３７９，７２５号及び米国特許出願第２００２／０１１９２４１号及び第２００５０１２３５８５号に記述されている。
【００８６】
好ましくは、スフィンゴシン化合物は、食品中に、５ｕｇ／ｍｌを超える濃度で、好ましくは少なくとも１０ｕｇ／ｍｌ、より好ましくは少なくとも２０ｕｇ／ｍｌ、より好ましくは少なくとも５０ｕｇ／ｍｌ、最も好ましくは少なくとも１００ｕｇ／ｍｌの濃度で存在する。固形食品の場合には、スフィンゴシン化合物は、少なくとも１μｇ／グラム、少なくとも２．５μｇ／グラム、少なくとも５μｇ／グラム、又は少なくとも１００μｇ／グラムの濃度で存在する。
【００８７】
スフィンゴシン化合物は、表面への細菌の付着を防止又は軽減するのにも有用である。特に、これらの化合物は、バイオフィルム形成の防止又は軽減に有用である。バイオフィルムは、典型的には、表面に付着したポリマーマトリックスに包まれた数百万の密集した細菌細胞を含む。バイオフィルムは、工業設備の腐食及び生物付着、並びに医療現場における慢性感染を引き起こす。
【００８８】
一態様においては、表面への細菌の付着を防止又は軽減する方法、及び／又は表面のバイオフィルム形成を防止又は軽減する方法であって、前記表面を本明細書に記載のスフィンゴシン化合物で処理することを含む方法が提供される。スフィンゴシン化合物のこの効果は、幾つかのスフィンゴシン化合物を使用して、唾液抗菌ペプチドの抗菌効果を増強する米国特許出願第２０１１００４５０７３号に報告されたスフィンゴシン化合物の抗微生物特性とは異なる。
【００８９】
好ましくは、医療機器又は外科用具をスフィンゴシン化合物で処理する方法。好ましくは、前記医療機器は、好ましくは数時間以上、ヒト又は動物の体に挿入又は移植される装置である。医療機器としては、例えば、義装具（人工股関節、歯科インプラント、人工関節、ボイスプロテーゼ、ペニスプロテーゼ）機械的心臓弁、心臓ペースメーカー、動静脈シャント、強膜バックル、カテーテル（例えば、中心静脈カテーテル、血管内カテーテル、尿カテーテル、ヒックマンカテーテル、腹膜透析カテーテル、気管内カテーテル）、中耳腔換気用チューブ、気管カニューレ、縫合糸、骨アンカー、骨接合用ネジ、眼内レンズ、コンタクトレンズ、子宮内避妊器具、大動脈大腿動脈移植片、又は血管移植片が挙げられる。外科用具としては、例えば、クランプ、鉗子、はさみ、皮膚フック、管類、針、開創器、歯石除去器、穿孔器、のみ、やすり又はのこぎりが挙げられる。
【００９０】
本開示は、本明細書に開示したスフィンゴシン化合物で少なくとも部分的に被覆された医療機器も提供する。スフィンゴシン化合物で処理される物品は、前記化合物を含む溶液を噴霧されるか、又は該溶液に浸漬することができる。かかる物品、特に医療機器を処理することは当業者の理解の範囲内である。
【００９１】
スフィンゴシン化合物は、ポリステレン（ｐｏｌｙｓｔｅｒｅｎｅ）、ポリエチレン、ケイ素、ガラス、セラミックス、ガラス−セメントイオノマー及びポリメタクリル酸メチル（骨セメント）を含めて、種々の材料を被覆するのに使用することができる。前記化合物は、リン酸塩又は硫酸塩含有材料を被覆するのにも有用である。
【００９２】
定義
本明細書では「含む」及びその複合語は、その非限定的意味で使用され、その後に続く項目が含まれるが、明確に言及されていない項目が除外されないことを意味する。さらに、動詞「からなる」は、「から本質的になる」で置き換えることができ、本明細書に定義された化合物又は補助化合物が、明確に特定されたものとは別の成分（単数又は複数）を含むことができ、前記別の成分（単数又は複数）が本発明の独特な特性を変えないことを意味する。
【００９３】
冠詞「ａ」及び「ａｎ」は、本明細書では、冠詞の文法上の目的語が１又は１を超える（すなわち、少なくとも１）ことを指すのに使用される。例として「要素（ａｎ  ｅｌｅｍｅｎｔ）」は、１個の要素又は１個を超える要素を意味する。数値に付随して使用されるときの用語「約」又は「およそ」（約１０、およそ１０）は、好ましくは、該数値が所与の値１０よりも該数値の１％多い又は少なくてもよいことを意味する。
【００９４】
本明細書に引用したすべての特許及び参考文献を参照によりその全体を援用する。
【００９５】
本発明を以下の実施例においてさらに説明する。これらの実施例は、本発明の範囲を限定するものではなく、単に本発明を明確にするのに役立つにすぎない。
【００９６】
参考文献
アンダーソン（Ａｎｄｅｒｓｏｎ）Ｐ，ボレット−キヴォニュ（Ｂｏｌｌｅｔ−Ｑｕｉｖｏｇｎｅ）ＦＲＧ，ダウカー（Ｄｏｗｋｅｒ）ＳＥＰ，エリオット（Ｅｌｌｉｏｔｔ）ＪＣ．、増加するイオン強度におけるエナメル質及びヒドロキシアパタイト凝集体中の脱ミネラル化（Ｄｅｍｉｎｅｒａｌｉｚａｔｉｏｎ  ｉｎ  ｅｎａｍｅｌ  ａｎｄ  ｈｙｄｒｏｘｙａｐａｔｉｔｅ  ａｇｇｒｅｇａｔｅｓ  ａｔ  ｉｎｃｒｅａｓｉｎｇ  ｉｏｎｉｃ  ｓｔｒｅｎｇｔｈｓ）アーカイブ・オブ・オーラル・バイオロジ（Ａｒｃｈ  Ｏｒａｌ  Ｂｉｏｌ）２００４；４９：１９９−２０７．
イエンスドッティール（Ｊｅｎｓｄｏｔｔｉｒ）Ｔ，アルナドッティール（Ａｒｎａｄｏｔｔｉｒ）ＩＢ，トルスドッティール（Ｔｈｏｒｓｄｏｔｔｉｒ）Ｉら、アイスランド人の酸蝕、清涼飲料消費及び胃食道逆流の関係（Ｒｅｌａｔｉｏｎｓｈｉｐ  ｂｅｔｗｅｅｎ  ｄｅｎｔａｌ  ｅｒｏｓｉｏｎ，  ｓｏｆｔ  ｄｒｉｎｋ  ｃｏｎｓｕｍｐｔｉｏｎ，  ａｎｄ  ｇａｓｔｒｏｅｓｏｐｈａｇｅａｌ  ｒｅｆｌｕｘ  ａｍｏｎｇ  Ｉｃｅｌａｎｄｅｒｓ）クリニカル・オーラル・インベスティゲーションズ（Ｃｌｉｎ  Ｏｒａｌ  Ｉｎｖｅｓｔｉｇ）２００４；８：９１−９６．
フェアマン（Ｖｅｅｒｍａｎ）ＥＣＩ，ファレンタイン−ベンツ（Ｖａｌｅｎｔｉｊｎ−Ｂｅｎｚ）Ｍ，ファント・ホフ（ｖａｎ’ｔ  Ｈｏｆ）Ｗ，ナズミ（Ｎａｚｍｉ）Ｋ，ファント・マルル（ｖａｎ  Ｍａｒｌｅ）Ｊ，ニュー・アメロンゲン（Ｎｉｅｕｗ  Ａｍｅｒｏｎｇｅｎ）ＡＶ．、フィトスフィンゴシンは、カンジダ・アルビカンスの細胞膜を破壊することによってカンジダ・アルビカンスを死滅させる（Ｐｈｙｔｏｓｐｈｉｎｇｏｓｉｎｅ  ｋｉｌｌｓ  Ｃａｎｄｉｄａ  ａｌｂｉｃａｎｓ  ｂｙ  ｄｉｓｒｕｐｔｉｎｇ  ｉｔｓ  ｃｅｌｌ  ｍｅｍｂｒａｎｅ）バイオロジカル・ケミストリ（Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ）２０１０；３９１：６５−７１．
ナヴァゼッシュ（Ｎａｖａｚｅｓｈ）Ｍ，マリガン（Ｍｕｌｌｉｇａｎ）ＲＡ，キプニス（Ｋｉｐｎｉｓ）Ｖ，デニー（Ｄｅｎｎｙ）ＰＡ，デニー（Ｄｅｎｎｙ）ＰＣ．、健康なコーカサス若年成人及び高齢者における全唾液流量及びムチン濃度の比較（Ｃｏｍｐａｒｉｓｏｎ  ｏｆ  ｗｈｏｌｅ  ｓａｌｉｖａ  ｆｌｏｗ  ｒａｔｅｓ  ａｎｄ  ｍｕｃｉｎ  ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎ  ｉｎ  ｈｅａｌｔｈｙ  Ｃａｕｃａｓｉａｎ  ｙｏｕｎｇ  ａｎｄ  ａｇｅｄ  ａｄｕｌｔｓ）ジャーナル・オブ・デンタル・リサーチ（Ｊ
Ｄｅｎｔ  Ｒｅｓ）；１９９２；７１：１２７５−１２７８．
【実施例】
【００９７】
フィトスフィンゴシンの保護作用の測定
歯エナメル質は、主としてヒドロキシアパタイト結晶（Ｃａ１０（ＰＯ４）６（ＯＨ）２からなる。高温で焼結すると、エナメル質に似た物理的特性（例えば、硬度及び密度）を有するヒドロキシアパタイトディスクを製造することができる（アンダーソンら、２００４）。このヒドロキシアパタイトディスクを使用して、侵食性（酸性）溶液に浸漬後のヒドロキシアパタイトの重量減少を測定することによって溶液の侵食性を求めることができる（イエンスドッティールら、２００５）。１２５０℃で焼結された比重９８％のヒドロキシアパタイトディスクをＳｗｅｒｅａ、ストックホルム、スウェーデンから得た。ディスクの側面及び底面は、マニキュア液で覆われており、１面が被覆されていない。次に、ディスクを紙やすり（３Ｍ７３４  Ｐ６００）で磨いて清浄にし、脱塩水でリンスし、３７℃で終夜乾燥させ、秤量して、初期質量を測定した。ヒドロキシアパタイトディスクを１２ウェル細胞培養プレート（グライナー・バイオ−ワン（Ｇｒｅｉｎｅｒ  ｂｉｏ−ｏｎｅ）、フリッケンハウゼン、ドイツ）のウェル中に置き、それにフィトスフィンゴシン（唾液緩衝剤（２ｍＭリン酸カリウム、５０ｍＭ  ＫＣｌ、１ｍＭ  ＣａＣｌ２、０．１ｍＭ  ＭｇＣｌ２、ｐＨ６．８に溶解させた種々の濃度のＰＨＳ）１．５ｍｌを軽く振とうしながら３７℃で３時間添加した。唾液緩衝剤４ｍｌで３回リンスして、結合していないＰＨＳを除去した後、０．１Ｍクエン酸（ｐＨ＝３．０）４ｍｌを含む新しいウェル中にディスクを置いた。３０分後、クエン酸をピペットで取り除き、ディスクを脱塩水４ｍｌで３回リンスし、３７℃で終夜乾燥させ、秤量した。侵食処理の前後の重量差を侵食の尺度とした。実験を３つ組で実施し、少なくとも２回繰り返した。ＨＡＰディスク上の唾液薄膜は以下のように形成された：既述（ナヴァゼッシュ、１９９３）のように、意識的に刺激せずに唾液を収集した。唾液を１０，０００ｇで１０分間遠心分離して細胞破片から取り除いた。上清（ＨＷＳ）を収集し、ＨＡＰディスクを唾液薄膜で被覆するのに用いた。この目的のために、ＨＡＰディスクをＨＷＳ  ４ｍｌと一緒に３７℃でインキュベートした。３時間後、ディスクを蒸留水で３回リンスして、結合していないタンパク質を除去した。続いて、被覆されていないＨＡＰについて上述したように、唾液被覆ＨＡＰに対するＰＨＳの保護作用を試験した。
【００９８】
結果
ＨＡＰへの吸着（Ａｂｓｏｒｂｔｉｏｎ）
本発明者らは、ＨＡＰ上へのＰＨＳ吸着によって、極性化合物の拡散を妨害し、微生物の付着を変える保護膜が形成され得ると予測した。本発明者らは、まず、ＰＨＳが実際にＨＡＰに結合するかどうか確認した。このために、歯エナメル質のモデルとして焼結ＨＡＰディスクを濃度０から５００μｇ／ｍｌのＰＨＳで処理した。ＰＨＳは水に適度に可溶性であるので、本発明者らは、結合実験をＴｒｉｓ−Ｔｗｅｅｎ中で実施した。ＰＨＳはＴｒｉｓ−Ｔｗｅｅｎに完全に可溶性であることが、１０，０００ｇの１０分間の遠心分離ステップ前後のＰＨＳ濃度の測定によって確認された。最大吸着は、ＰＨＳ６０μｇ／ｍｌ以上の濃度で生じた。これらの条件下では、ＰＨＳ約１２μｇがディスク表面に吸着した。ＨＡＰディスクを唾液と一緒に終夜インキュベートし、続いてＰＨＳと一緒にインキュベーション後、対照（ＨＡＰディスクを唾液緩衝剤と一緒にインキュベートした）よりもさらに多量のＰＨＳが吸着した（図１４Ｂ）。図１２は、固定ＰＨＳ濃度における経時的吸着を示す。１分以内に、既にかなりの量のＰＨＳが吸着した。全体的には、結合は二相の時間的経過に従い、最初の速い相では１時間以内に平衡に達し、続いて次の１５時間で徐々に増加した。
【００９９】
脱ミネラル化／侵食に対する保護
種々の薬剤で処理後（図１参照）、ＨＡＰディスクを０．１Ｍクエン酸（ｐＨ＝３）に３０分間侵食曝露した。ウシ血清アルブミン又は唾液でディスクを前処理しても意味のある保護は得られなかった。ＰＨＳが唾液緩衝剤に難溶性である（フェアマンら、２０１０）にもかかわらず、ＨＡＰディスクと一緒にインキュベートすると、それに続く侵食曝露に対してかなりの保護が得られた（未処理対照ディスクよりも７０〜８０％少ない重量減少）。ＰＨＳで前処理すると、クエン酸による溶解に対して、唾液緩衝剤単独で前処理された、又はＰＨＳ溶液を調製するのに使用されたＤＭＳＯを含む唾液緩衝剤で前処理された対照ディスクよりも８０％以上保護された。一方、１ｍｇ／ｍｌ  ＢＳＡ又は全唾液でＨＡＰディスクを前処理しても、３０分間持続する侵食攻撃に対して、たとえあるとしてもほとんど保護作用を示さなかった。保護作用がＨＡＰディスク上の不溶性ＰＨＳ凝集体の沈着に起因するかどうかを調べるために、本発明者らは、Ｔｒｉｓ−Ｔｗｅｅｎに溶解させたＰＨＳで実験を繰り返した。これは本質的に同じ保護を示し、唾液緩衝剤において認められた保護がＨＡＰ表面の不溶性ＰＨＳ凝集体の沈着に帰因しないことが裏付けられた。これは、ＰＨＳがＨＡＰ上に保護被膜を形成し、ＨＡＰがクエン酸による酸攻撃に対して保護されることを示唆している。
【０１００】
次に、本発明者らは、ＰＨＳが保護をもたらす最小濃度を試験した（図２及び１３）。その結果、５００と５０μｇ／ｍｌでは類似した保護作用を示した。ＰＨＳ濃度＞２０μｇ／ｍｌでは、実質的に最大の保護作用が得られた。ＰＨＳ濃度をＰＨＳの臨界ミセル濃度（フェアマンら、２００７）に近い５ｕｇ／ｍｌに更に低下させると、保護作用が急激に低下した。次いで、本発明者らは、効果の持続時間を試験した（図３）。それによれば、クエン酸に１時間曝露後、ＰＨＳは依然として保護作用を示した。練歯磨中に一般に見られる化合物である陰イオン洗剤ＳＤＳ（１％）でディスクを前処理すると、それに続くクエン酸曝露に対して保護作用を示さず（図示せず）、保護作用がＰＨＳの特定の分子的性質に起因することが示された。
【０１０１】
ＰＨＳ原液の調製に用いられる溶媒の効果を調べるために、ＰＨＳを５ｍｇ／ｍｌの濃度までＤＭＳＯ及びエタノールに溶解させた。これらの原液を、超音波処理し、又は超音波処理せずに、唾液緩衝剤で１０倍希釈した。続いて、ＨＡＰディスクを得られた希釈溶液と一緒に３時間インキュベートし、リンスし、クエン酸に曝露した。原液の調製に用いられた種々の条件間の相違は見られなかった（図４）。生体内の歯エナメル質は、唾液タンパク質の被膜で覆われているので、本発明者らは、これがＰＨＳによる保護にどの程度影響を及ぼし得るか試験した。したがって、本発明者らは、ヒト唾液と一緒に前もってインキュベートして、ディスク表面に堅固に付着した唾液タンパク質の膜（唾液薄膜）が形成されたＨＡＰディスクに対するＰＨＳの保護作用を試験した。その結果、ＰＨＳは、被覆されていないＨＡＰと同じ程度に唾液被覆ＨＡＰを保護することが判明した（図５）。
【０１０２】
認められた効果の構造上の要件を更に探求するために、他の２種類の構造的に関連したスフィンゴシン、すなわちスフィンゴシン−リン酸塩とスフィンガニンによる保護を試験した（図６）。ＨＡＰディスクをスフィンゴシン−リン酸塩（２００μｇ／ｍｌ唾液緩衝剤）で処理しても、それに続くクエン酸による侵食攻撃に対して保護作用を示さなかった。フィトスフィンゴシンに比べてＣ４位の１個のヒドロキシル基がない（図６）スフィンガニンでＨＡＰを処理すると、Ｔｒｉｓ緩衝剤中で使用したときにはクエン酸に対して保護作用を示したが（図８）、リン酸イオンを含む緩衝剤中で使用したときには保護作用を示さなかった。Ｔｒｉｓ−Ｔｗｅｅｎ中１００μｇ／ｍｌのスフィンゴシン、スフィンガニン及びフィトスフィンゴシン−リン酸塩で処理すると、ＰＨＳと類似した保護作用を示した。スフィンゴミエリン、ホスファチジルコリン及び種々のＮ−アルキルスフィンゴシンを含めて、試験した他の脂質は、ＨＡＰを保護しなかった。
【０１０３】
細菌付着に対する効果
本発明者らは、さらに、ＨＡＰディスクへの初期細菌付着に対するＰＨＳの効果を生体外でモデル微生物としてＳ．ｍｕｔａｎｓを用いて試験した。ＰＨＳ被覆ディスク及び対照ディスクをＳ．ｍｕｔａｎｓの懸濁液に浸漬し、２時間後、付着細菌の数を平板培養によって求めた。その結果、基剤ＨＡＰに比べてＰＨＳ被覆ＨＡＰに付着した細菌の数は＞１００倍減少することが判明した（図１１））。
【０１０４】
侵食攻撃中にクエン酸中に存在するときのスフィンゴ脂質の保護作用
ＨＡディスクを緩衝剤又は１００ｕｇ／ｍｌ  ＰＨＳで３時間前処理し（図１５、左側の２本の棒）、次いで０．１Ｍクエン酸（ｐＨ＝３．０）で３０分間処理した。ＰＨＳ前処理は、クエン酸の侵食作用に対して保護作用を示す。ＨＡディスクを緩衝剤又は１００ｕｇ／ｍｌ  ＰＨＳで前処理し、次いで１００ｕｇ／ｍｌ  ＰＨＳの存在下で０．１Ｍクエン酸に３０分間曝露した（図１５、右側の２本の棒）。侵食流体中に存在するＰＨＳは、未処理ＨＡＰディスクでも侵食に対して保護作用を示す。（ＰＨＳは、クエン酸のｐＨに影響を及ぼさない。）
【０１０５】
スフィンゴシンの防汚性
ＰＨＳ、ＰＨＳリン酸塩、スフィンゴシン、スフィンガニン、ステアロイルＰＨＳ及びスフィンゴミエリンを含む６種類のスフィンゴ脂質を、２種類の初期生着菌、すなわち、Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ  ｓａｎｇｕｉｎｉｓ及びＳｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ  ｇｏｒｄｏｎｉｉ並びに後期生着菌Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ  ｍｕｔａｎｓに対するその防汚性について試験した。
【０１０６】
ＨＡディスクを１００μｇ／ｍｌ脂質と一緒に３７℃で終夜インキュベートした。続いて、ディスクを洗浄して、結合していない脂質を除去した。次いで、脂質で被覆されたＨＡディスクを約１０７細胞／ｍｌの１．５ｍｌと一緒に２時間インキュベートした。洗浄後、付着細菌細胞を超音波処理によって脱着し、寒天板に移した。４８時間後、ＣＦＵを数えた。
【０１０７】
Ｓ．ｍｕｔａｎｓの場合、ＰＨＳリン酸塩及びステアロイルＰＨＳは、ほぼ２  ｌｏｇ  ＣＦＵ／ｍｌの明瞭な防汚活性を示した。スフィンガニンは３  ｌｏｇの低下を示した（図１６）。
【０１０８】
Ｓ．ｓａｎｇｕｉｎｉｓの場合、スフィンゴミエリンは、細菌付着が１  ｌｏｇ値低下し、スフィンガニンは２  ｌｏｇ値低下した（図１７）。Ｓ．ｇｏｒｄｏｎｉｉの場合、ＰＨＳリン酸塩及びスフィンガニンは１．５  ｌｏｇ値低下した（図１８）。
【０１０９】
材料及び方法
フィトスフィンゴシン（ドーサン・コーポレーション（Ｄｏｏｓａｎ  Ｃｏｒｐｏｒａｔｉｏｎ）、フランス）は、Ｐ．エカルト（Ｅｋｈａｒｔ）博士（イノパクト（Ｉｎｎｏｐａｃｔ）ＢＶ）の好意によって提供され、スフィンガニン、４−ヒドロキシスフィンガニン−１−リン酸塩、Ｎ−アセトイル（ａｃｅｔｏｙｌ）４−ヒドロキシスフィンガニン、Ｎ−オクタノイル４−ヒドロキシスフィンガニン、Ｎ−ステアロイル４−４−ヒドロキシスフィンガニン（すべてサッカロミセス・セレビシエ（Ｓａｃｃｈａｒｏｍｙｃｅｓ  ｃｅｒｅｖｉｓｉａｅ）由来）、スフィンゴミエリン及びスフィンゴシンを、アヴァンティ・ポーラー・リピッド（Ａｖａｎｔｉ  Ｐｏｌａｒ  Ｌｉｐｉｄｓ）（アラバスタ（Ａｌａｂａｓｔｅｒ）、アラバマ）から入手した。ジ−ミロイスチル（ｍｙｒｏｉｓｔｙｌ）ホスファチジルコリンをシグマアルドリッチから入手した。
【０１１０】
１２５０℃で焼結された比重９８％のヒドロキシアパタイトディスク（直径１５ｍｍ、高さ３ｍｍ）をスウェレア（Ｓｗｅｒｅａ）（ストックホルム、スウェーデン）から入手した。このようにして製造されたＨＡＰディスクは、物理的特性（例えば、硬度及び密度）がエナメル質に類似しており（アンダーソンら、２００４）、溶液の侵食性を決定するのに使用することができる。
【０１１１】
侵食試験
侵食に対するＨＡＰの保護は、侵食性（酸性）溶液に浸漬前後のＨＡＰディスクの重量減少をザルトリウス（Ｓａｒｔｏｒｉｕｓ）ＧＤ５０３分析精密天秤で測定することによって、基本的にイエンスドッティールら（２００５）によって記述されたように求められた。侵食実験では、ディスクの側面及び底面がマニキュア液で覆われており、円形の上面が被覆されていないままであった。次に、ディスクを細かい紙やすり（３Ｍ７３４  Ｐ６００）で磨いて清浄にし、脱塩水でリンスし、３７℃で終夜乾燥させ、秤量して、初期質量を測定した。脂質の原液をエタノール中で濃度５ｍｇ／ｍｌまで調製した。これらの原液を、使用緩衝剤で所望の濃度に更に希釈した。ＰＨＳの使用溶液を、唾液緩衝剤（２ｍＭリン酸カリウム、５０ｍＭ  ＫＣｌ、１ｍＭ  ＣａＣｌ２、０．１ｍＭ  ＭｇＣｌ２、ｐＨ６．８）又は０．１％Ｔｗｅｅｎ  ２０を補充した２０ｍＭ  Ｔｒｉｓ（ｐＨ６．８）（Ｔｒｉｓ−Ｔｗｅｅｎ）中で調製した。ＨＡＰディスクを１２ウェル細胞培養プレート（グライナー・バイオ−ワン、フリッケンハウゼン、ドイツ）のウェル中に置き、それに脂質溶液１．５ｍｌを添加し、軽く振とうしながら３７℃で３時間インキュベートした。インキュベーション緩衝剤４ｍｌで３回リンスして結合していない脂質を除去した後、ディスクを０．１Ｍクエン酸（ｐＨ＝３．０）４ｍｌと一緒にインキュベートした。軽く振とうしながら３７℃で３０分間インキュベーション後、クエン酸をピペットで取り除き、ディスクを脱塩水４ｍｌで３回リンスし、３７℃で終夜乾燥させ、秤量した。侵食処理の前後の重量差を侵食の尺度とした。すべてのインキュベーションを３つ組で実施し、各実験を少なくとも２回繰り返した。
【０１１２】
唾液薄膜
ＨＡＰディスク上の唾液薄膜は以下のように形成された：既述（ナヴァゼッシュら、１９９３）のように、意識的に刺激せずに唾液を収集した。ＨＡＰディスクをヒト全唾液（ＨＷＳ：ｈｕｍａｎ  ｗｈｏｌｅ  ｓａｌｉｖａ）４ｍｌと一緒に３７℃でインキュベートした。３時間後、ディスクを蒸留水で３回リンスして、結合していないタンパク質を除去した。続いて、被覆されていないＨＡＰディスクについて上述したように、唾液被覆ＨＡＰに対する脂質の保護作用を試験した。研究は、アムステルダムのアカデミック・ホスピタル自由大学（Ａｃａｄｅｍｉｃ  Ｈｏｓｐｉｔａｌ  Ｖｒｉｊｅ  Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｅｉｔ）の施設倫理委員会（Ｉｎｓｔｉｔｕｔｉｏｎａｌ  Ｅｔｈｉｃａｌ  Ｂｏａｒｄ）によって認可され、インフォームドコンセントをドナーから得た。
【０１１３】
ＨＡＰへのＰＨＳ吸着
ＰＨＳを０．１％Ｔｗｅｅｎ  ２０を補充した２０ｍＭ  Ｔｒｉｓ緩衝剤（ｐＨ６．８）（Ｔｒｉｓ−Ｔｗｅｅｎ）に濃度０から５００μｇ／ｍｌで溶解させた。Ｔｗｅｅｎ  ２０を添加して、ＰＨＳを溶液状態に維持した。ディスクをＰＨＳ溶液と一緒に１８時間インキュベートし、次いで脱塩水で（３回）リンスして結合していないＰＨＳを除去した。ＨＡＰに結合したＰＨＳを、メタノール１．５ｍｌと一緒に９０分間インキュベートすることによって抽出した。マニキュア液はメタノールに溶解するので、結合実験においては、ＨＡＰディスクをマニキュア液なしで使用した。対照インキュベーションをディスクなしで実施することによって、ＰＨＳがプラスチックに吸着しないことを確認した。蒸発後、残留物をメタノール２５０μｌに溶解させた。この溶液１００μｌに、結合したＰＨＳの蛍光定量を可能にするオルト−フタルジアルデヒド試薬（ＯＰＡ、シグマアルドリッチ）２５μｌ。蛍光をＦｌｕｏｓｔａｒマイクロプレートリーダーによって励起／発光波長３８０ｎｍ／４５０ｎｍで測定した。ＰＨＳの検量線を基準にして絶対量を決定した。すべてのインキュベーションを３つ組で実施し、実験を２回繰り返した。
【０１１４】
細菌付着
ＨＡＰディスクへの細菌付着は、基本的に既述（エキスターケイト（Ｅｘｔｅｒｋａｔｅ）ら、２０１０）のように、活性付着モデルを用いて調べられた。このモデルは、Ｓ．ｍｕｔａｎｓの付着の基層としてＰＨＳ処理及び緩衝剤処理ＨＡＰディスクを含む２４個のクランプを有する特注のステンレス鋼蓋からなる。ＨＡＰディスク（直径：９．７ｍｍ直径、厚さ：１．７ｍｍ  ヒメッド（Ｈｉｍｅｄ）、ＮＹ、ＵＳＡ）を、１００μｇ／ｍｌ  ＰＨＳと一緒に、又はＰＨＳを用いずに、２０ｍＭ  Ｔｒｉｓ、０．１％Ｔｗｅｅｎ  ２０、ｐＨ６．８中で３０℃で終夜インキュベートした。続いて、ＨＡＰディスクを、緩衝剤１．６ｍｌを含む２４ウェルプレートに蓋を移すことによって３回洗浄し、１０回上下させて過剰のＰＨＳを除去した。Ｓ  ｍｕｔａｎｓをＢＨＩ培地中で終夜培養し、強度が半分のＢＨＩ（１８．５ｇ  ＢＨＩ／ｌ、５０Ｍｍ／ｌ  ＰＩＰＥＳ、ｐＨ７．０）で１：１０希釈して、最終密度約１０８細胞／ｍｌにした。ＨＡＰディスクの付いた蓋を、希釈菌液１．５ｍｌを含む２４ウェルプレートの上に置き、３７℃で２時間嫌気的にインキュベートした。ＨＡＰディスクを、システインペプトン水（ＣＰＷ：ｃｙｓｔｅｉｎｅ  ｐｅｐｔｏｎｅ  ｗａｔｅｒ）１．６ｍｌを含むプレートに蓋を移すことによって２回洗浄して、付着していない細菌を除去した。続いて、ディスクを蓋から外し、ＣＰＷ２ｍｌに移し、細菌の付着層を１秒パルスで２分間超音波処理して分散させた。得られた懸濁液をＢＨＩプレート上で異なる希釈度で培養し、３７℃で４８時間嫌気的にインキュベートした後、ＣＦＵを数えた。
【図１】
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【図２】
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【図３】
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【図４】
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【図５】
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【図６Ａ】
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【図６Ｂ】
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【図７】
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【図８】
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【図９】
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【図１０】
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【図１１】
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【図１２】
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【図１３】
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【図１４Ａ】
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【図１４Ｂ】
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【図１５】
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【図１６】
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【図１７】
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【図１８】
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【図１９Ａ】
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【図１９Ｂ】
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【図１９Ｃ】
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【手続補正書】
【提出日】令和1年9月4日(2019.9.4)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
【化１】
2019218378.tif 000040
化１の化学式中、Ｘは、８〜２４個の炭素を有するアルキル又はアルケニルであり、
Ｒ１は、Ｈ及びＣ（＝Ｏ）Ｃ１〜２０から選択され、
Ｒ２は、Ｈ及びＯＨから選択され、
Ｒ３は、リン酸塩、ＯＨ又はＦから選択される、
前記化１の化学式を有する化合物、又は前記化合物の複合物を含む、
象牙質過敏の治療・予防又は軽減、歯の浸食、又は口内乾燥の処置又は防止用スフィンゴシン組成物。
【請求項２】
【化２】
2019218378.tif 000041
化２の化学式中、Ｘは、８〜２４個の炭素を有するアルキル又はアルケニルであり、
Ｒ１は、Ｈ及びＣ（＝Ｏ）Ｃ１〜２０から選択され、
Ｒ２は、Ｈ及びＯＨから選択され、
Ｒ３は、リン酸塩、ＯＨ又はＦから選択される、
前記化１の化学式を有する化合物、又は前記化合物の複合物を含む、
歯の変色を予防又は低減するための美容処置用スフィンゴシン組成物。
【請求項３】
【化３】
2019218378.tif 000042
化３の化学式中、Ｘは、８〜２４個の炭素を有するアルキル又はアルケニルであり、
Ｒ１は、Ｈ及びＣ（＝Ｏ）Ｃ１〜２０から選択され、
Ｒ２は、Ｈ及びＯＨから選択され、
Ｒ３は、リン酸塩、ＯＨ又はＦから選択される、
前記化１の化学式を有する化合物、又は前記化合物の複合物を含む、
象牙質過敏の治療・予防又は軽減、歯の浸食、口内乾燥の処置又は防止、及び／又は歯の変色の予防又は低減するための美容処置のために口腔内の歯の表面をコーティングして保護膜を形成する用のスフィンゴシン組成物。
【請求項４】
前記化合物がフィトスフィンゴシンである、
請求項１ないし３のいずれか一項に記載のスフィンゴシン組成物。
【請求項５】
【化４】
2019218378.tif 000043
化４の化学式中、Ｘは、８〜２４個の炭素を有するアルキル又はアルケニルであり、
Ｒ１は、Ｈ及びＣ（＝Ｏ）Ｃ１〜２０から選択され、
Ｒ２は、Ｈ及びＯＨから選択され、
Ｒ３は、リン酸塩、ＯＨ又はＦから選択される、
前記化４の化学式を有する化合物、又は前記化合物の複合物にてエクスビボで表面をコーティングすることを含む、
表面における酸侵食及び／又は塩の沈殿を低減又は防止する方法。
【請求項６】
前記表面がヒドロキシアパタイト表面である、
請求項５に記載の方法。
【請求項７】
前記化合物がフィトスフィンゴシンである、
請求項５または６に記載の方法。
【請求項８】
【化５】
2019218378.tif 000044
化５の化学式中、Ｘは、８〜２４個の炭素を有するアルキル又はアルケニルであり、
Ｒ１は、Ｈ及びＣ（＝Ｏ）Ｃ１〜２０から選択され、
Ｒ２は、Ｈ及びＯＨから選択され、
Ｒ３は、リン酸塩、ＯＨ又はＦから選択される、
前記化５の化学式を有する化合物、又は前記化合物の複合物を含む、
イオン性洗剤を含まない練歯磨。
【請求項９】
前記化合物がフィトスフィンゴシンである、
請求項８に記載の練歯磨。
【請求項１０】
歯科用研磨剤を含む、
請求項８または９に記載の練歯磨。
【請求項１１】
５ｕｇ／ｍｌから１００ｕｇ／ｍｌのフィトスフィンゴシンを含む、
請求項９に記載の練歯磨。
【請求項１２】
ＤＭＳＯ又はエタノールにフィトスフィンゴシンを可溶化させて得られた、
請求項９に記載の練歯磨。
【請求項１３】
非イオン性界面活性剤を含む、
請求項１１に記載の練歯磨。
【請求項１４】
好ましくは象牙質過敏の治療・予防又は軽減、歯の浸食、口内乾燥の処置又は防止、及び／又は歯の変色の予防又は低減するための美容処置用として、口腔内の歯の表面をコーティングしてフィルムを形成するのに適している、
請求項９ないし１３のいずれか一項に記載の練歯磨。
【請求項１５】
象牙質過敏の治療・予防又は軽減、歯の浸食、口内乾燥の処置又は防止、及び／又は歯の変色の予防又は低減するための美容処置用である
請求項１４に記載の練歯磨。
【請求項１６】
【化６】
2019218378.tif 000045
化６の化学式中、Ｘは、８〜２４個の炭素を有するアルキル又はアルケニルであり、
Ｒ１は、Ｈ及びＣ（＝Ｏ）Ｃ１〜２０から選択され、
Ｒ２は、Ｈ及びＯＨから選択され、
Ｒ３は、リン酸塩、ＯＨ又はＦから選択される、
前記化６の化学式を有する化合物、又は前記化合物の複合物を含む、
表面への細菌の付着の低減又は防止、及び/又はバイオフィルム形成の低減用スフィンゴシン組成物。
【請求項１７】
前記化合物が、ＰＨＳ、ＰＨＳリン酸塩、ステアロイルＰＨＳ、スフィンガニン、およびスフィンゴシンから選択される、
請求項１６に記載のスフィンゴシン組成物。
【請求項１８】
医療機器及び／又は外科用具である物品であって、
【化７】
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化７の化学式中、Ｘは、８〜２４個の炭素を有するアルキル又はアルケニルであり、
Ｒ１は、Ｈ及びＣ（＝Ｏ）Ｃ１〜２０から選択され、
Ｒ２は、Ｈ及びＯＨから選択され、
Ｒ３は、リン酸塩、ＯＨ又はＦから選択される、
前記化７の化学式を有する化合物、又は前記化合物の複合物で少なくとも部分的に被覆された物品。
【請求項１９】
前記化合物が、フィトスフィンゴシン、ＰＨＳリン酸塩、ステアロイルＰＨＳ、スフィンガニン、およびスフィンゴシンから選択される、
請求項１８に記載の物品。
【外国語明細書】
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