(57)【要約】【課題】がんの治療用組成物及び方法を提供すること。【解決手段】いくつかの実施形態では、本発明は、骨髄異形成症候群（ＭＤＳ）、急性骨髄性白血病（ＡＭＬ）、急性リンパ性白血病（ＡＬＬ）、成人Ｔ細胞白血病（ＡＴＬＬ）、リンパ腫、胃がん、多発性骨髄腫、またはそれらの組み合わせ、または異常活性のＣＤＸ２−ＫＬＦ４シグナル伝達経路と関連した状態を治療するために、ＣＤＸ２−ＫＬＦ４シグナル伝達経路中で成分を調節することができる薬剤の使用に関する。【選択図】なし【特許請求の範囲】
【請求項１】
本明細書に記載の発明。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
（関連出願の相互参照）
本出願は、２０１３年１０月４日に出願された米国特許仮出願第６１／８８７，２８５号、２０１３年１２月２０日に出願された米国特許仮出願第６１／９１９，０２３号、２０１４年６月２６日に出願された米国特許仮出願第６２／０１７，５０５号、及び２０１４年８月１５日に出願された米国特許仮出願第６２／０３７，８６８号の利益を主張するものであり、それらの各内容は、それら全体が引用により本明細書中に組み込まれている。
【０００２】
本発明は、広義には、がんの治療用組成物及び方法に関する。
【背景技術】
【０００３】
いくつかの小分子化合物を含む多くの薬剤または薬剤候補が、様々ながんの治療のために開発されている。しかしながら、多くのがんの現在の治療は、がんの特異的サブセットを持つ患者にはあまり効果的ではなく、またはそのような患者または一般的に毒性が強すぎる。
【０００４】
骨髄異形成症候群（ＭＤＳ）は、骨髄及び血液に影響を及ぼす疾患の群である。ＭＤＳのいくつかのタイプは、軽度で管理しやすいが、他のタイプは重度で命に関わる。骨髄異形成症候群（ＭＤＳ）は滅多に治癒せず；ほとんどの患者は治療が実際に完了することは決してない。ＭＤＳの現在の治療は、疾患過程の特定のフェーズを支配する疾患のステージ及び機序に基づいている。骨髄移植は、予後不良のＭＤＳまたは末期のＭＤＳである患者に使用されている（非特許文献１）。しかしながら、このタイプの治療は、侵襲性手順が関与しているため、ドナー及びレシピエントの双方にとって痛みを伴い、特に、同種移植及び関連移植片対宿主病（ＧＶＨＤ）の場合には、レシピエントに深刻かつさらには致命的な合併症を引き起こすことがある。従って、ＧＶＨＤのリスクによって、そうでなければ致死的な疾患を持つ患者に骨髄移植を用いることが制限されてしまう。さらに、ほとんどの患者が高齢であり、かつ、ほんの数人の若いＭＤＳ患者にしか適合ドナーがいないため、骨髄移植の使用は制限される。ＭＤＳ及びその関連疾病を治療するためのより効果的な方法が必要とされている。
【０００５】
軽度のＭＤＳは、時間をかけてより深刻になり得る。急激に成長する深刻な白血病である急性骨髄性白血病（ＡＭＬ）に発展することもあり得る。ＡＭＬは、白血病サブセットである。これは、成人白血病（血液がん）の最も一般的な形態であり、５年生存率は＜２０％であり、患者の年齢が＞６５の場合には５％未満である。ＡＭＬの現在の治療は、鈍くかつ過酷な化学療法（すなわち、シタラビン、アントラサイクリンなど）であり、これは、目標が定められておらず、的外れの制限毒性を持つ。従って、特定の治療に対して感受性がある可能性がある患者とそうでない患者とを区別するための深刻なアンメット・メディカル・ニーズが存在する。
本発明は、このニーズを満たし、がんを効果的に治療する組成物及び方法を提供する。
【先行技術文献】
【非特許文献】
【０００６】
【非特許文献１】Ｅｐｓｔｅｉｎａｎｄ  Ｓｌｅａｓｅ，  １９８５，  Ｓｕｒｇ．  Ａｎｎ．  １７：１２５
【発明の概要】
【課題を解決するための手段】
【０００７】
本発明は、がんの治療用組成物及び方法を提供する。いくつかの実施形態では、本発明は、一部は、尾側型ホメオボックスタンパク質ＣＤＸ２−Ｋｒuｉｐｐｅｌ様因子４（Ｋ
ＬＦ４）シグナル伝達経路（「ＣＤＸ−ＫＬＦ４シグナル伝達経路」）ががんの群の病因に重要であり、ＣＤＸ２−ＫＬＦ４シグナル伝達経路を調節する能力を持つ活性薬剤が、そのようながんを効率的に治療するために使用することができるという発見に基づいている。
【０００８】
一態様では、本発明は、がんの治療用組成物を提供する。いくつかの実施形態では、組成物は、ヒト対象においてＣＤＸ２−ＫＬＦ４シグナル伝達経路を調節することができる少なくとも１つの抗がん活性薬剤を含む。任意の特定の理論に束縛されることを望まなければ、本発明の抗がん剤は、１つ以上の機序を介して作用することができる。そのような機序としては、限定的ではないが、（１）ＣＤＸ２活性の阻害；（２）ＫＬＦ４活性の誘導；（３）ｐ２１  ＣＤＫ阻害剤の誘導；（４）Ｇｌ／Ｓ細胞周期停止の誘導；（５）カスパーゼ３酵素の誘導；及び（６）アポトーシスの誘導が挙げられる。本明細書で用いる場合、ＣＤＸ２−ＫＬＦ４シグナル伝達経路における成分の「活性」なる用語は、ゲノムＤＮＡレベル、転写レベル、転写後レベル、翻訳レベル、翻訳後レベルでのパラメーターであってもよく、例えば、限定的ではないが、遺伝子活性、ＲＮＡ活性、及びタンパク質活性である。遺伝子活性は、遺伝子コピー数、遺伝子増幅数、またはプロモーター活性などであってもよい。ＲＮＡ活性は、ｍＲＮＡ存在度、合成速度、及び／または安定性などであってもよい。タンパク質活性は、タンパク質存在度、合成速度、安定性、酵素活性、リン酸化速度、改変、結合活性などであってもよい。
【０００９】
いくつかの実施形態では、活性薬剤は、小分子医薬化合物である。いくつかの実施形態では、医薬化合物は、ＵＳ２００７／０１２３５５３Ａ１に記載の２，４，５−三置換イミダゾール化合物、またはＵＳ８，１４８，３９２に記載の２−インドリルイミダゾ［４，５−ｄ］フェナントロリン化合物、またはその機能性誘導体である。いくつかの実施形態では、医薬化合物は、式Ｉ：
【化１】
2019218373.tif 000002
の構造を有し、
式中、Ｒ１は、Ｃ１−Ｃ４アルキルであり、Ｒ２は、ハロゲンである。
【００１０】
いくつかの実施形態では、Ｒ１は、メチル、イソプロピル、またはｔ−ブチルである。
【００１１】
いくつかの実施形態では、医薬化合物は、
【化２】
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からなる群から選択される。
【００１２】
いくつかの実施形態では、医薬化合物は、式ＩＩ：
【化３】
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の構造を有する。
（ＩＩ）。（ＬＯＲ−２５３またはＡＰＴＯ−２５３としても知られる）
【００１３】
いくつかの実施形態では、がんは、ヒト対象におけるＣＤＸ２−ＫＬＦ４シグナル伝達経路の異常活性と関連している。いくつかの実施形態では、ＣＤＸ２−ＫＬＦ４シグナル伝達経路における１つ以上の成分は、対照群の活性と比較した場合、異常活性を有する。いくつかの実施形態では、がんは、白血病／リンパ腫である。いくつかの実施形態では、がんは、骨髄異形性症候群（ＭＤＳ）である。いくつかの実施形態では、ＭＤＳは、高リスクＭＤＳである。いくつかの実施形態では、がんは、急性骨髄性白血病（ＡＭＬ）である。いくつかの実施形態では、ＡＭＬは、不応性ＡＭＬである。いくつかの実施形態では、ＡＭＬは、高齢者ＡＭＬである。いくつかの他の実施形態では、がんは、急性リンパ性白血病（ＡＬＬ）である。いくつかの実施形態では、ＡＬＬは、小児ＡＬＬである。いくつかの実施形態では、小児ＡＬＬは、小児Ｔ細胞ＡＬＬまたは小児Ｂ細胞ＡＬＬである。いくつかの他の実施形態では、がんは、慢性骨髄性白血病（ＣＭＬ）である。いくつかの実施形態では、がんは、成人Ｔ細胞白血病（ＡＴＬＬ）である。いくつかの実施形態では、がんは、ヒトＴ細胞白血病ウイルス１型により引き起こされる。いくつかの実施形態では、がんは、リンパ腫、胃がん、または多発性骨髄腫である。いくつかの実施形態では、リンパ腫は、ホジキンリンパ腫、非ホジキンリンパ腫（ＮＨＬ）、バーキットリンパ腫、またはＢ細胞リンパ腫である。いくつかの実施形態では、がんは、本明細書に記載のがんのいずれかの組み合わせである。
【００１４】
いくつかの実施形態では、ヒト対象は、ＭＤＳの１つ以上の症状を有する。いくつかの実施形態では、治療されるヒト対象は、骨髄血液細胞などの血液細胞の産生に効果がない。いくつかの実施形態では、ヒト対象は、貧血を有する。いくつかの実施形態では、ヒト対象は、骨髄不全によって引き起こされる低い血球数を有する。
【００１５】
いくつかの実施形態では、がんは、急性骨髄性白血病（ＡＭＬ）である。いくつかの実施形態では、ＡＭＬは、不応性ＡＭＬである。いくつかの実施形態では、ＡＭＬは、高齢ＡＭＬである。本明細書で用いる場合、高齢ＡＭＬ患者は、６０歳を超える年齢の、ＡＭＬを有するかまたは有していてもよい患者である。いくつかの実施形態では、高齢ＡＭＬ患者は、１回目の再発である。いくつかの実施形態では、ＡＭＬは、非高齢ＡＭＬである。本明細書で用いる場合、非高齢ＡＭＬ患者は、６０歳に等しいかまたはそれ未満の年齢の、ＡＭＬを有するかまたは有していてもよい患者である。いくつかの実施形態では、非高齢ＡＭＬ患者は、２回目の再発である。
【００１６】
いくつかの実施形態では、がんは、急性リンパ性白血病（ＡＬＬ）である。いくつかの実施形態では、ＡＬＬは、小児または子供ＡＬＬである。本明細書で用いる場合、小児または子供ＡＬＬ患者は、２１歳未満の年齢の、ＡＬＬを有するかまたは有していてもよい患者である。いくつかの実施形態では、ＡＬＬは、非小児または非子供ＡＬＬである。本明細書で用いる場合、非小児ＡＬＬ患者は、２１歳に等しいかまたはそれ超の年齢の、ＡＬＬを有するかまたは有していてもよい患者である。
【００１７】
いくつかの実施形態では、本発明の抗がん化合物は、併用療法の一部としてそれを必要とするヒト対象に投与される。いくつかの実施形態では、併用療法は、放射線治療を含む。いくつかの実施形態では、併用療法は、化学療法を含む。
【００１８】
いくつかの実施形態では、本発明の抗がん剤または薬理学的に許容される塩またはその溶媒和物の有効量をヒト対象に投与する。いくつかの実施形態では、抗がん剤の有効量は、がんまたはがんの症状を発症しやすい及び／または発症し得る対象に投与した場合に、がんまたはがんの症状を治療するのに有効、がん細胞増殖を阻害するのに有効、またはがんの将来の発生の重症度を防ぐかまたは減少させるのに有効である。いくつかの実施形態では、抗がん剤の投与は、がんを治療するための統計的に有意な治療効果または臨床効果をもたらす。いくつかの実施形態では、本発明の抗がん化合物は、約０．０１〜約２００ｍｇの用量で投与される。いくつかの実施形態では、本発明の抗がん化合物は、約０．０５〜約１００ｍｇの用量で投与される。いくつかの実施形態では、本発明の抗がん化合物は、約１．０〜約５０ｍｇの用量で投与される。いくつかの実施形態では、本発明の化合物の１日投与量は、通常、１回または分割投与で、約０．０１〜約１００ｍｇ／体重ｋｇの範囲内、または約２０ｍｇ／ｍ２〜約４００ｍｇ／ｍ２の範囲内である。いくつかの実施形態では、本発明の抗がん化合物は、１日に１回、２回、３回またはそれ以上投与される。
【００１９】
いくつかの実施形態では、治療は、１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０以上のサイクルで続ける。いくつかの実施形態では、各サイクルは、少なくとも１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０以上の日で続ける。いくつかの実施形態では、２回のサイクル間の間隔は、少なくとも１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０以上の日である。
【００２０】
いくつかの実施形態では、抗がん剤は、単位用量形態である。
【００２１】
いくつかの実施形態では、治療されるがんは、ＡＭＬであり、化合物は、ＬＯＲ−２５３（ＡＰＴＯ−２５３としても知られる）であり、化合物は、約１２５ｍｇ／ｍ２の用量で投与される。特定の実施形態では、化合物は、１週間に２回、４週間投与される。
【００２２】
本発明は、ＣＤＸ２−ＫＬＦ４シグナル伝達経路の異常活性と関連した状態を治療するための方法を提供する。いくつかの実施形態では、状態は、ヒト対象におけるＣＤＸ２−ＫＬＦ４シグナル伝達経路の１つ以上の成分、例えば、ＣＤＸ２、ＫＬＦ４、ｐ２１、及び／またはｐ５３の異常活性と関連している。いくつかの実施形態では、状態は、ＫＬＦ４活性の異常（例えば、正常未満）レベルと関連している。いくつかの実施形態では、状態は、ＣＤＸ２活性の異常（例えば、正常よりも高い）レベルと関連している。いくつかの実施形態では、ＣＤＸ２の異常なレベルは、ＣＤＸ２の遺伝子変化によるものである。
【００２３】
いくつかの実施形態では、本発明の方法は、治療前、治療中、及び／または治療後にヒト対象中のＣＤＸ２−ＫＬＦ４シグナル伝達経路における成分の活性、例えば、ＫＬＦ４活性及び／またはＣＤＸ２活性を決定することをさらに含む。いくつかの実施形態では、本発明の方法は、ＣＤＸ２の遺伝子変化の存在または不在を決定することをさらに含む。
【００２４】
本発明のさらなる態様及び実施形態は、以下の詳細な説明から明らかになるであろう。
【図面の簡単な説明】
【００２５】
【図１】本発明の活性薬剤（例えば、式Ｉ、ＬＯＲ−２５３またはＡＰＴＯ−２５３としても知られる）ががんをどのように治療するかの非限定的な機序の図である。任意の特定の理論に束縛されることを望まなければ、固形腫瘍などの特定のがん型において、ＫＬＦ４はダウンレギュレートされ、これは、急激な細胞増殖、上皮間葉転換（ＥＭＴ）、及び転移に重要なあり、特定の血液がんにおいて、ＫＬＦ４はダウンレギュレートされ、これは、白血病誘発に重要である。ＬＯＲ−２５３は、ＫＬＦ４発現を誘発することで、がん細胞増殖、ＥＭＴ、及び転移を阻害する、及び／またはアポトーシスを引き起こす。
【００２６】
【図２】ＣＤＸ２がどのように特定のがんにおいて機能し、ＬＯＲ−２５３がどのようにそのようながんを治療するかの非限定的な機序を示す図である。任意の特定の理論に束縛されることを望まなければ、造血系の正常細胞において、ＣＤＸ２遺伝子は、オフにされるかまたは比較的低レベルで発現される。ＡＭＬを含む特定のがんでは、ＣＤＸ２は、オンにされるかまたは増加し、ＣＤＸ２転写因子の異常な発現をもたらす。ＣＤＸ２は、ＫＬＦ４遺伝子のプロモーター領域に結合して、ＫＬＦ４発現を阻害し、これは、白血病誘発を促進するのに必須な段階である。ＬＯＲ−２５３は、ＫＬＦ４発現を誘発し、これは次いで、がん性白血球のアポトーシスを引き起こす。
【００２７】
【図３】多くのがん細胞株のインビトロ増殖におけるＬＯＲ−２５３の効果のグラフ図である。様々ながん細胞株の細胞を実施例に記載のようにＬＯＲ−２５３でインキュベートし、ＬＯＲ−２５３のよる細胞増殖の最大阻害の５０％（ＧＩ５０）に対する様々な細胞株の細胞濃度を決定し、図に示す。
【００２８】
【図４】２つの細胞株、ＴＨＰ−１及びＨＬ６０におけるＫＬＦ４の発現レベルにおけるＬＯＲ−２５３の効果のグラフ図である。
【００２９】
【図５】ＤＭＳＯまたはＬＯＲ−２５３で処理したＴＨＰ１及びＨＬ−６０  ＡＭＬ細胞株のＢＤ  ＦＡＣＳＣａｌｉｂｕｒフローサイトメーターアッセイ結果を示す（左側パネル）。ＴＨＰ１及びＨＬ−６０細胞株のＧｌ／Ｓ細胞周期停止におけるＬＯＲ−２５３結果の治療も示す（右側パネル）。
【００３０】
【図６】ＤＭＳＯ、０．５ｕＭのＬＯＲ−２５３、または１ｕＭのＬＯＲ−２５３で処理したＴＨＰ−１細胞のＢＤ  ＦＡＣＳＣａｎｔｏフローサイトメトリー獲得プロットを示す。ＬＯＲ−２５３で処理したＴＨＰ−１細胞は、アネキシンＶ染色の上昇を示し、これは、アポトーシスの誘導（Ｑ３：アネキシンＶ＋／ＰＩ−）を示すものである。
【００３１】
【図７】ＤＭＳＯまたはＬＯＲ−２５３で処理したＴＨＰ１及びＨＬ−６０  ＡＭＬ細胞株におけるカスパーゼ３発現レベルを示す。
【００３２】
【図８】ＤＭＳＯまたは０．５μΜ  ＬＯＲ−２５３で処理したＴＨＰ１細胞におけるＢＡＸ及びＢＣＬ２の発現倍数変化を示す。
【００３３】
【図９】Ｈ２２６異種移植モデルマウスにおけるＬＯＲ−２５３  ＨＣＬのインビボ有効性を示す。示される日に測定した、ＬＯＲ−２５３  ＨＣＬで処理したＨ２２６異種移植マウスまたは陰性対照の腫瘍サイズを示す。
【００３４】
【図１０】１、５、または１５ｍｇ／ｋｇの用量でＬＯＲ−２５３により処理されたＣＤ−１ヌードマウスの薬物動態（ＰＫ）を示す。ＬＯＲ−２５３の血清レベルは、用量依存的な増加を有する。
【００３５】
【図１１】１、５、及び１５ｍｇ／ｋｇのＬＯＲ−２５３で５日連続で処理したマウスの薬力学（ＰＤ）反応を示す。ＫＬＦ４タンパク質レベルは、最後の用量の後に１６時間測定した。
【００３６】
【図１２】治療前（上パネルを参照）及び治療後（下パネルを参照）のＮＳＣＬＣ（低分化腺がん）を持つ患者における腫瘍の縮小を示す。
【００３７】
【図１３】サイレンシングＫＬＦ４遺伝子または遺伝子産物が様々なヘム悪性腫瘍においてどのように中心的な役割を果たすかの非限定的な機序を示す図である。例えば、ＫＬＦ４遺伝子のエピジェネティックメチル化は、成人Ｔ細胞リンパ腫患者に関し、ＫＬＦ４遺伝子またはタンパク質の突然変異は、小児Ｔ細胞ＡＬＬ患者に関し、マイクロＲＮＡ−２９０９の上昇は、小児Ｂ細胞ＡＬＬ患者に関し、ＣＤＸ２の異常発現は、ＡＭＬ、ＡＬＬ、及びＭＤＳ患者に関し、これらは全て、ＫＬＦ４活性（限定的ではないが、発現活性及び機能活性を含む）のサイレンシングをもたらす。ＫＬＦ４のサイレンシングは、様々なリンパ腫でも観察されている。図の下部には、サイレンシングＫＬＦ４により、様々な「細胞運命遺伝子」を介したがん細胞増殖の増大がもたらされることを示す。
【００３８】
【図１４】ＫＬＦ４遺伝子活性をどのように遺伝的突然変異またはエピジェネティック事象によってサイレンシングすることができ、かつ、ＬＯＲ−２５３／ＡＰＴＯ−２５３がどのようにＫＬＦ４発現を誘発することができるかの非限定的な機序を示す図である。そのようなエピジェネティック事象としては、限定的ではないが、ＤＮＡ低メチル化または脱メチル化、ＫＬＦ４遺伝子の上流調節領域においてデメチラーゼＫＤＭ５Ｂの存在の増加をもたらし得るＣＤＸ２の異常／過剰発現、及びｍｉＲ−２９０９の量の増大が挙げられる。ＬＯＲ−２５３／ＡＰＴＯ−２５３は、少なくともＣＤＸ２／ＫＤＭ５Ｂ及び／または他の機序によって引き起こされる遺伝子サイレンシングの緩和することによってＫＬＦ４発現を誘発することができる。
【００３９】
【図１５】Ｋａｓｕｍｉ−１異種移植モデルマウスにおけるＬＯＲ−２５３  ＨＣＬのインビボ有効性を示す。示される日に測定した、ＬＯＲ−２５３  ＨＣＬで処理したＫａｓｕｍｉ−１異種移植または陰性対照の腫瘍サイズを示す。
【００４０】
【図１６】ＬＯＲ−２５３  ＨＣＬで処理したＫａｓｕｍｉ−１担腫瘍マウスまたは陰性対照の示される日における体重測定を示す。
【００４１】
【図１７】ＨＬ−６０異種移植モデルマウスにおけるＬＯＲ−２５３  ＨＣＬの単剤としてまたはアザシチジンと組み合わせたインビボ有効性を示す。示される日に測定し、示される状態で処理したＨＬ−６０異種移植マウスの腫瘍サイズを示す。
【００４２】
【図１８】図１７の試験の始め（１日目）と終わり（１９日目）それぞれの個々の動物の腫瘍サイズを示す。
【図１９】図１７の試験の始め（１日目）と終わり（１９日目）それぞれの個々の動物の腫瘍サイズを示す。
【００４３】
【図２０】ＫＧ−１異種移植モデルマウスにおけるＬＯＲ−２５３  ＨＣＬのインビボ有効性を示す。示される日に測定した、ＬＯＲ−２５３  ＨＣＬで処理したＫＧ−１異種移植マウスまたは陰性対照の腫瘍サイズを示す。
【００４４】
【図２１】ＴＨＰ−１異種移植モデルマウスにおけるＬＯＲ−２５３  ＨＣＬの単剤としてまたはアザシチジンと組み合わせたインビボ有効性を示す。示される日に測定し、示される状態で処理したＴＨＰ−１異種移植マウスの腫瘍サイズを示す。
【発明を実施するための形態】
【００４５】
定義
本明細書及びその特許請求の範囲において、「含む」という動詞及びその活用形は、当該語に続く事項が含まれるが、具体的に述べられていない事項も除外されないことを意味する、その非限定的意味で使用される。
【００４６】
「ａ」または「ａｎ」という用語は、１つ以上のそのエンティティを指し、例えば、「遺伝子」は、１つ以上の遺伝子または少なくとも１つの遺伝子を指す。このように、「ａ」（または「ａｎ」）、「１つ以上」、及び「少なくとも１つ」という用語は、本明細書で区別なく使用される。さらに、不定冠詞「ａ」または「ａｎ」によって言及される要素は、文脈上明らかに要素が１つだけあることを必要とするのでない限り、１つを超える要素が存在する可能性を除外するものではない。
【００４７】
本発明は、単離された、キメラ、組み換え、または合成ポリヌクレオチド配列を提供する。本明細書で用いる場合、「ポリヌクレオチド」、「ポリヌクレオチド配列」、「核酸配列」、「核酸断片」、及び「単離された核酸断片」という用語は、本明細書で区別なく使用され、一本鎖または二本鎖であるかどうかにかかわらず、ＤＮＡ、ＲＮＡ、ｃＤＮＡ、並びにその化学改変を包含する。これらの用語は、ヌクレオチド配列などを包含する。ポリヌクレオチドは、合成、非天然、または改変ヌクレオチド塩基を場合により含有する、一本鎖または二本鎖であるＲＮＡまたはＤＮＡのポリマーであってもよい。ＤＮＡのポリマーの形態のポリヌクレオチドは、ｃＤＮＡ、ゲノムＤＮＡ、合成ＤＮＡ、またはそれらの混合物の１つ以上のセグメントからなっていてもよい。ヌクレオチド（通常それらの５’一リン酸塩形態で存在する）は、次のような一文字記号によって言及される：アデニレートまたはデオキシアデニレート（それぞれＲＮＡまたはＤＮＡ）を示す「Ａ」、シチジレートまたはデオキシシチジレートを示す「Ｃ」、グアニレートまたはデオキシグアニレートを示す「Ｇ」、ウリジレートを示す「Ｕ」、デオキシチミジレートを示す「Ｔ」、プリン（ＡまたはＧ）を示す「Ｒ」、ピリミジン（ＣまたはＴ）を示す「Ｙ」、ＧまたはＴを示す「Ｋ」、ＡまたはＣまたはＴを示す「Ｈ」、イノシンの「Ｉ」、及びあらゆるヌクレオチドを示す「Ｎ」。いくつかの実施形態では、単離された、キメラ、組み換え、または合成ポリヌクレオチド配列は、本発明の遺伝子マーカーから誘導される。
【００４８】
本発明は、タンパク質またはポリペプチドも提供する。いくつかの実施形態では、タンパク質またはポリペプチドは、単離された、精製された、キメラ、組み換え、または合成されたものである。本明細書で用いる場合、用語「ポリペプチド」または「タンパク質」は、任意の長さのアミノ酸ポリマーを指す。ポリマーは、線状であっても分枝状であってもよく、改変アミノ酸を含むものであってもよく、非アミノ酸が割り込んでいてもよい。該用語は、天然に、または介入；例えば、ジスルフィド結合の形成、グリコシル化、脂質化、アセチル化、リン酸化、あるいは任意の他の操作もしくは改変、例えば、標識成分とのコンジュゲーションによって改変されたアミノ酸ポリマーも包含している。また、例えば、１つ以上のアミノ酸類似体（例えば、非天然アミノ酸など）、並びに当該技術分野で公知の他の改変を含むポリペプチドもこの定義に包含される。ポリペプチドは、一本鎖または関連鎖として起こり得る。本発明のポリペプチドは、様々な形態をとることができる（例えば、天然、融合、グリコシル化、非グリコシル化、脂質化、非脂質化、リン酸化、非リン酸化、ミリストイル化、非ミリストイル化、モノマー状、マルチマー状、粒子状、変性など）。いくつかの実施形態では、タンパク質またはポリペプチドの配列は、本発明の遺伝子マーカーから誘導される。
【００４９】
本明細書で用いられる一文字アミノ酸略語は、当該技術分野において標準の意味を有し、本明細書に記載の全てのペプチド配列は、Ｎ末端が左に、Ｃ末端が右にある慣習に従って記載している。
【００５０】
本明細書で用いる場合、用語「ＣＤＸ２−ＫＬＦ４シグナル伝達経路における成分」とは、ＣＤＸ２及び／またはＫＬＦ４の活性を直接的または間接的に調節することができるＣＤＸ２、ＫＬＦ４、または他の遺伝子、遺伝子産物（限定的ではないが、ＲＮＡ及びタンパク質を含む）、または他の生体分子、もしくはＣＤＸ２及び／またはＫＬＦ４によって直接的または間接的に調節され得る遺伝子、遺伝子産物、または他の生体分子を指す。調節とは、所与の遺伝子の活性レベルの増加または減少のいずれかをもたらすことができる。そのような成分としては、限定的ではないが、ＣＤＸ２、ＫＬＦ４、ＫＤＭ５Ｂ、ｍｉＲ−２９０９、ｐ５３、ｐ２１、カスパーゼ−３、アネキシンＶ、ＢＡＸ、ＢＣＬ２、ＢＣＬ３、ＢＭＰ、Ｗｎｔ、ＨＮＦ４α、Ｆｇｆ、Ｈｏｘ、ＳＰ１、ＭＹＣ、ＣＣＮＤ１、ＡＡＴＦ、及びＳｃｈｏｌｌらに記載のものが挙げられる（「ホメオボックス遺伝子ＣＤＸ２は、ほとんどの場合の急性骨髄性白血病で異常発現され、白血病誘発を促進する」、Ｊ．Ｃｌｉｎ．Ｉｎｖｅｓｔ．１１７：１０３７−１０４８（２００７）．）、Ｙｏｏｎら（Ｋｒuｐｐｅｌ様因子４は、ＤＮＡ損傷に応答してｐ５３依存的なＧｌ／Ｓ細胞周期停止を仲介する、Ｖｏｌ．２７８、Ｎｏ．４、Ｉｓｓｕｅｏｆ  Ｊａｎｕａｒｙ  ２４，ｐｐ．２１０１−２１０５，  ２００３）、Ｆａｂｅｒら（ＣＤＸ２主導の白血病誘発は、ＫＬＦ４抑制と無秩序なＰＰＡＲγシグナル伝達を伴う、ＪＣｌｉｎ  Ｉｎｖｅｓｔ．  ｄｏｉ：  １０．  １１７２／ＪＣＩ６４７４５）、Ｒｏｕｈｉら（「ＣＤＸ２−ＫＬＦ４の脱調節は、急性骨髄性白血病及び結腸がんをもたらす」、Ｏｎｃｏｔａｒｇｅｔ．２０１３  Ｆｅｂ；４（２）：１７４−１７５．）、Ｌｅｎｇｅｒｋｅら（「ＢＭＰ及びＷｎｔは、Ｃｄｘ−Ｈｏｘ経路の活性化によって造血細胞への運命を特定する」、ＣｅｌｌＳｔｅｍ  Ｃｅｌｌ．  ２００８  Ｊａｎ  １０；２（１）：７２−８２．）、Ｓａａｎｄｉら（「直腸がんにおけるＨＮＦ４αによる腫瘍抑制ホメオ遺伝子Ｃｄｘ２の調節」、Ｏｎｃｏｇｅｎｅ．２０１３  Ａｕｇ  ８；３２（３２）：３７８２−８．）、Ｍａｌｉｋら、（ＫＬＦ４のｍｉＲ−２９０９介在調節：Ｂ細胞とＴ細胞小児急性リンパ性白血病とを区別するための新規の分子機構。ＭｏｌＣａｎｃｅｒ．１３：１７５、２０１４）、及びＲｏｗｌａｎｄら（「がんにおけるＫＬＦ４、ｐ２１、及びコンテキスト依存の相反する力」、Ｎａｔ  Ｒｅｖ  Ｃａｎｃｅｒ．２００６Ｊａｎ；  ６（１）：１１−２３）、これらの各々はあらゆる目的のためにその全体が参照により本明細書中に援用される。ＫＬＦ４は、ＳＰ１、ＭＹＣ、ＢＣＬ３、ＣＣＮＤ１、及びＡＡＴＦの活性を直接的または間接的に負に調節する（または抑制する）が、ｐ２１の活性を正に調節する。さらに、ＫＬＦ４は、いくつかのがん型（例えば、Ｒｏｗｌａｎｄらに記載されるように乳がん、ＫＬＦ４腫瘍サプレッサーは、コンテキスト依存のがん遺伝子として作用するｐ５３の転写リプレッサーである。ＮａｔＣｅｌｌ  Ｂｉｏｌ．  ２００５．  ７：１０７４−８２）においてｐ５３の活性を負に調節するが、いくつかの他のがん型（例えば、Ｇｈａｌｅｂらに記載されるように結���がん及び多発性骨髄腫（Ｋｒuｐｐｅｌ様因子４は、ガンマ線誘発ＤＮＡ損傷後に抗アポトーシス活性を呈する。Ｏｎｃｏｇｅｎｅ．  ２００７．  ２６：２３６５−７３）、及びＳｃｈｏｅｎｈａｌｓら（Ｋｒuｐｐｅｌ様因子４は、腫瘍細胞増殖を遮断し、多発性骨髄腫において薬剤耐性を促進する。Ｈａｅｍａｔｏｌｏｇｉｃａ．  ２０１３．９８：１４４２−９））においてｐ５３の活性を正に調節する。ＫＬＦ４によって調節される多くの遺伝子は、「細胞運命遺伝子」と呼ばれている。ＫＬＦ４によって調節されたいくつかの遺伝子におけるサイレンシングＫＬＦ４遺伝子の発現または活性のいくつかの考えられる効果の実例は、図１３から分かるであろう。ＣＤＸ２−ＫＬＦ４シグナル伝達経路におけるいくつかの他の成分は、ＫＬＦ４の発現を調節することができる。そのような成分の例としては、限定的ではないが、ＣＤＸ２、ＫＤＭ５Ｂ（デメチラーゼ）、及びｍｉＲＮＡ「ｍｉＲ−２９０９」が挙げられる。これらのＫＬＦ４モジュレーターがどのように様々ながん型においてＫＬＦ４遺伝子発現または活性に影響を及ぼし得るかのいくつかの考えられる機序の実例は、図１３及び図１４から分かるであろう。ＣＤＸ２−ＫＬＦ４シグナル伝達経路における成分は、がんの治療用、特に、ＬＯＲ−２５３／ＡＰＴＯ−２５３などの本発明の抗がん剤によるがんの治療用の本明細書に記載の方法に従ってバイオマーカーとして使用される。
【００５１】
本明細書で用いる場合、用語「ＣＤＸ２−ＫＬＦ４シグナル伝達経路を調節する」とは、ＣＤＸ２−ＫＬＦ４シグナル伝達経路における１つ以上の成分が薬剤または事象（突然変異を含む）によって調節されるプロセスを指す。いくつかの実施形態では、そのような調節は、ＣＤＸ２−ＫＬＦ４シグナル伝達経路における１つ以上の成分の活性を増加、減少、正常化、及び／または安定化させる。
【００５２】
用語「低級アルキル」とは、（Ｃ１−Ｃ６）アルキルを指す。低級アルキルには、メチル、エチル、プロピル、イソプロピル、ブチル、イソブチル、ｓｅｃ−ブチル、ペンチル、３−ペンチル、ヘキシル、（Ｃ３−Ｃ６）シクロアルキル（例えば、シクロプロピル、シクロブチル、シクロペンチル、またはシクロヘキシル）、（Ｃ３−Ｃ６）シクロアルキル（Ｃ１−Ｃ６）アルキル（例えば、シクロプロピルメチル、シクロブチルメチル、シクロペンチルメチル、シクロヘキシルメチル、２−シクロプロピルエチル、２−シクロブチルエチル、２−シクロペンチルエチル、または２−シクロヘキシルエチル）、（Ｃ１−Ｃ６）アルコキシ（例えば、メトキシ、エトキシ、プロポキシ、イソプロポキシ、ブトキシ、イソブトキシ、ｓｅｃ−ブトキシ、ペントキシ、３−ペントキシ、またはヘキシルオキシ）（Ｃ２−Ｃ６）アルケニル（例えば、ビニル、アリル、１−プロペニル、２−プロペニル、１−ブテニル、２−ブテニル、３−ブテニル、１−ペンテニル、２−ペンテニル、３−ペンテニル、４−ペンテニル、１−ヘキセニル、２−ヘキセニル、３−ヘキセニル、４−ヘキセニル、または５−ヘキセニル）、（Ｃ２−Ｃ６）アルキニル（例えば、エチニル、１−プロピニル、２−プロピニル、１−ブチニル、２−ブチニル、３−ブチニル、１−ペンチニル、２−ペンチニル、３−ペンチニル、４−ペンチニル、１−ヘキシニル、２−ヘキシニル、３−ヘキシニル、４−ヘキシニル、または５−ヘキシニル）、（Ｃ１−Ｃ６）アルカノイル（例えば、アセチル、プロパノイルまたはブタノイル）、ハロ（Ｃ１−Ｃ６）アルキル（例えば、ヨードメチル、ブロモメチル、クロロメチル、フルオロメチル、トリフルオロメチル、２−クロロエチル、２−フルオロエチル、２，２，２−トリフルオロエチル、またはペンタフルオロエチル）、ヒドロキシ（Ｃ１−Ｃ６）アルキル（例えば、ヒドロキシメチル、１−ヒドロキシエチル、２−ヒドロキシエチル、１−ヒドロキシプロピル、２−ヒドロキシプロピル、３−ヒドロキシプロピル、１−ヒドロキシブチル、４−ヒドロキシブチル、１−ヒドロキシペンチル、５−ヒドロキシペンチル、１−ヒドロキシヘキシル、または６−ヒドロキシヘキシル）、（Ｃ１−Ｃ６）アルコキシカルボニル（例えば、メトキシカルボニル、エトキシカルボニル、プロポキシカルボニル、イソプロポキシカルボニル、ブトキシカルボニル、ペントキシカルボニル、またはヘキシルオキシカルボニル）、（Ｃ１−Ｃ６）アルキルチオ（例えば、メチルチオ、エチルチオ、プロピルチオ、イソプロピルチオ、ブチルチオ、イソブチルチオ、ペンチルチオ、またはヘキシルチオ）、及び／または（Ｃ２−Ｃ６）アルカノイルオキシ（例えば、アセトキシ、プロパノイルオキシ、ブタノイルオキシ、イソブタノイルオキシ、ペンタノイルオキシ、またはヘキサノイルオキシ）が含まれる。
【００５３】
本明細書に記載の化合物またはその機能誘導体は、本発明に従って使用することができる。本明細書で用いられる場合、用語「誘導体」には、所与の化合物の誘導体、類似体、プロドラッグ、及び非天然前駆体が含まれる。
【００５４】
本明細書で用いる場合、用語「治療効果」及びその変形は、疾患と関連した１つ以上の兆候または症状の緩和によって一般に示され、当業者により容易に判断することができる。「治療有効性」とは、疾患の標準または非標準治療と一般に関連した毒性の兆候及び症状の予防または改善のことも言う。治療効果の判断は、通常、症状及び疾患特異的であり、治療が対象に有益な効果をもたらしていると判断するための公知かつ当該技術分野において利用可能な任意の方法を含むことができる。例えば、治療効果のエビデンスとしては、限定的ではないが、対象の健康全般における全般的改善（例えば、限定的ではないが、患者の生活の質の向上、予測される対象生存率の増加、抑鬱の減少、疾患から得られた１つ以上の症状の重症度及び／または頻度の減少、疾患の度合いの低減、疾患の安定化（例えば、疾患の悪化の予防または遅延）、疾患の進行の遅延または減速、疾患状態の改善などを含むことができる。本発明のいくつかの実施形態では、治療効果は、臨床効果または統計的に有意である。
【００５５】
本明細書で用いられる場合、用語「治療する」及び「治療」とは、臨床結果を含む有益または所望の結果を得るための手法を指し、治療している疾患または状態の１つ以上の測定可能なマーカーの微少変化または改善さえも含み得る。治療は、通常、状態、疾患、疾病、傷害、または損傷の少なくとも１つの症状を減少させるのに効果的である。臨床改善の例示的マーカーは、当業者には明らかであろう。マーカーの例、限定的ではないが、以下のもの：疾患から得られた１つ以上の症状の重症度及び／または頻度の減少、疾患の度合いの低減、疾患の安定化（例えば、疾患の悪化の予防または遅延）、疾患の進行の遅延または減速、疾患状態の改善、疾患の治療に必要な１つ以上の他の薬剤の用量の減少、及び／または生活の質の向上などの１つ以上が挙げられる。
【００５６】
「予防（ｐｒｏｐｈｙｌａｘｉｓ）」、「予防的（ｐｒｏｐｈｙｌａｃｔｉｃ）治療」、または「予防的（ｐｒｅｖｅｎｔｉｖｅ）治療」とは、１つ以上の症状の発生または重症度及び／またはそれらの根本原因を予防または減少させることを言い、例えば、疾患または状態を（例えば、伝的疾病素因、環境要因、素因疾患または疾病などの結果としてより高リスクで）発症しやすい対象における疾患または状態の予防を指す。
【００５７】
用語「疾病」または「疾患」は、本明細書で区別なく使用され、身体状態またはその器官及び／または組織の１つにおける任意の変化を指し、器官機能及び／または組織機能の性能を中断したりもしくは妨害すること（例えば、器官機能不全を引き起こす）、及び／または疾患を患っている対象に不快感、機能不全、苦痛などの症状もしくは死さえも引き起こすことを指す。
【００５８】
「医薬的に許容される」という用語により、生物学的にまたは別の点で望ましくないものではない材料が意味され、すなわち、その材料が、重大な望ましくない生物学的作用を引き起こすことなく、またはそれが含有される組成物のその他のいかなる成分とも有害に相互作用することなく、医薬組成物に組み込まれ、患者に投与され得ることが意味される。用語「医薬的に許容される」が医薬担体または賦形剤を指すために使用される場合、それは、その担体または賦形剤が毒性学的試験及び製造試験の要求される基準に適合していることまたはその担体または賦形剤が米国食品医薬品局に作成された「不活性成分ガイド（ＩｎａｃｔｉｖｅＩｎｇｒｅｄｉｅｎｔ  Ｇｕｉｄｅ）」に含まれることが意味される
。
【００５９】
用語「有効量」とは、所望の治療結果をもたらす１つ以上の化合物の量を指す。「有効量」は、１回または複数回の用量であり得る。すなわち、所望の治療終点を達成するために単回用量または複数回用量を必要とし得る。
【００６０】
本明細書で用いられる場合、用語「治療有効量」とは、場合により、重大な悪影響または有害な副作用効果を引き起こすことなく、状態を治療するかまたは傷害または損傷を減らすもしくは予防するのに必要な１つ以上の薬剤のレベルまたは量を指す。
【００６１】
「予防有効量」とは、疾患または状態を発症しやすい及び／または発症し得る対象に投与した場合、将来の疾患または状態の重症度を予防または軽減するのに十分な薬剤の量を指す。
【００６２】
本発明の方法によれば、本明細書で用いられる場合、用語「対象」及びその変異体には、疾患または状態を有すると疑われるかまたは、該疾患または状態を有する危険性がある任意の対象が含まれる。適した対象（または患者）としては、実験動物（例えば、マウス、ラット、ウサギ、モルモット）、農業動物、及び家畜またはペット（例えばネコ、イヌ）などの哺乳動物が挙げられる。非ヒト霊長類、及び好ましくはヒト患者が含まれる。「リスクのある」対象は、本明細書に記載の診断または治療方法の前に検出可能な疾患を有していても有していなくてもよく、検出可能な疾患を示していても示していなくてもよい。「リスクのある」は、対象が１つ以上のいわゆる危険因子を有することを示し、危険因子は、本明細書に記載の状態の発症と相関する測定可能なパラメーターである。１つ以上のこれらの危険因子を有する対象は、これらの危険因子（または複数）を持たない対象よりも本明細書に記載の状態を発症する可能性が高い。そのような危険因子の一例は、臨床的に正常な試料と比較した場合に、本発明のバイオマーカーの増加または減少である。
【００６３】
特定の実施形態では、治療のＣＤＸ２−ＫＬＦ４シグナル伝達経路における成分の活性レベルを測定する場合、「増加した」または「減少した」量またはレベルは、「統計的に有意な」量を含み得る。いくつかの実施形態では、ＬＯＲ−２５３などの抗がん剤の投与は、がんを治療するための「統計的に有意な」治療効果または臨床効果をもたらす。いくつかの実施形態では、そのような統計的に有意な治療効果または臨床効果には、対照ビヒクルと比較した場合に、抗がん剤によって引き起こされたがん細胞増殖または腫瘍増殖の遅延が含まれる。結果は、通例、偶然に現れたと思われない場合には、統計的に有意であると呼ばれる。試験または結果の有意レベルは、伝統的に、事象が偶然に現れたと思われないことを採用するのに必要なエビデンスの量に関する。特定の場合では、統計的有意性は、帰無仮説が実際に真であるときに、帰無仮説を棄却する判定（第１種過誤、すなわち「偽陽性決定」として公知の判定）を行う確率として定義され得る。本判定は、ｐ値を使用してなされることが多い：ｐ値が有意レベルよりも低い場合、ここで帰無仮説は棄却される。ｐ値が小さければ小さいほど、結果はより有意である。ベイズ因子も利用されて、統計的有意性が決定され得る（例えば、ＧｏｏｄｍａｎＳ．，  Ａｎｎ  Ｉｎｔｅｒｎ  Ｍｅｄ  １３０：  １００５−１３，  １９９９を参照）。いくつかの実施形態では、「増加した」または「減少した」量またはレベルは、以前または早い時点に対して所定の基準の量または決定した時点の量の約１．１×、１．２×、１．３×、１．４×、１．５×、２×、２．５×、３×、３．５×、４×、４．５×、５×、６×、７×、８×、９×、１０×、１５×、２０×、２５×、３０×、４０×、または５０×超または未満である。
【００６４】
本発明のいくつかの実施形態によれば、本発明の方法によるＬＯＲ−２５３などの抗がん剤を投与することは、統計的に有意な治療効果をもたらす。一実施形態では、統計的に有意な治療効果は、米国の１つ以上の規制当局、例えば、ＦＤＡまたは他の国々によって提供される１つ以上の基準または尺度に基づいて決定される。他の実施形態では、統計的に有意な治療効果は、規制当局が承認した臨床試験セットアップ及び／または手順から得られた結果に基づいて決定される。
【００６５】
いくつかの実施形態では、統計的に有意な治療効果は、少なくとも３００、４００、５００、６００、７００、８００、９００、１０００または２０００人の患者集団に基づいて決定される。いくつかの実施形態では、統計的に有意な治療効果は、無作為化及び二重盲検臨床試験セットアップから得られたデータに基づいて決定される。いくつかの実施形態では、統計的に有意な治療効果は、約０．０５、０．０４、０．０３、０．０２または０．０１未満または等しいｐ値を持つデータに基づいて決定される。いくつかの実施形態では、統計的に有意な治療効果は、９５％、９６％、９７％、９８％、または９９％を超えるかまたは等しい信頼区間を持つデータに基づいて決定される。いくつかの実施形態では、統計的に有意な治療効果は、例えば、米国のＦＤＡによって、本発明により提供された方法の第ＩＩＩ相臨床試験の承認で決定される。
【００６６】
いくつかの実施形態では、統計的に有意な治療効果は、標準治療と組み合わせたＬＯＲ−２５３などの抗がん剤で治療した少なくとも３００または３５０人の患者集団の無作為化二重盲検臨床試験によって決定される。いくつかの実施形態では、統計的に有意な治療効果は、２８日死亡率、病院内死亡率、ＩＣＵ死亡率、ＩＣＵ期間、ＩＣＵ不要日数、逐次器官不全評価スコア（ＳＯＦＡ）、死亡相対リスク、ＩＣＵ頻度、換気期間、換気頻度、換気不要日数、またはその任意の組み合わせ、または敗血症評価に対する任意の他の一般に許容された尺度を用いて、少なくとも３００または３５０人の患者集団の無作為化臨床試験によって決定される。
【００６７】
一般的に、統計分析は、規制当局、例えば、米国のＦＤＡまたは中国または任意の他の国によって認可された任意の適切な方法を含むことができる。いくつかの実施形態では、統計分析には、非層別分析、例えば、カプラン−マイヤー法（Ｋａｐｌａｎ−Ｍｅｉｅｒ）、ヤコブソン−トルアックス法（Ｊａｃｏｂｓｏｎ−Ｔｒｕａｘ）、グリケン−ロード−ノビック法（Ｇｕｌｌｉｋｅｎ−Ｌｏｒｄ−Ｎｏｖｉｃｋ）、エドワーズ−ナナリー法（Ｅｄｗａｒｄｓ−Ｎｕｎｎａｌｌｙ）、ハゲマン−アリンデル法（Ｈａｇｅｍａｎ−Ａｒｒｉｎｄｅｌ）、及び階層線形モデル（ＨｉｅｒａｒｃｈｉｃａｌＬｉｎｅａｒＭｏｄｅｌｉｎｇ：ＨＬＭ）に基づくログランク分析、並びにコックス（Ｃｏｘ）回帰分析が含まれる。
【００６８】
本明細書で用いる場合、語句「１日に」とは、薬剤を投与した日に投与された量を指す。語句「１日に」とは、量が毎日投与されることを示唆していない。
【００６９】
本明細書で用いられる場合、語句「医薬的に許容される塩（または複数）」は、他に指示がない限り、化合物に存在するかもしれない酸性基または塩基性基の塩を含む。天然において塩基性である化合物は、様々な無機酸及び有機酸を用いて広範な異なった塩を形成することができる。このような塩基性化合物の医薬的に許容される酸付加塩を製造するために使用され得る酸は、非毒性の酸付加塩、すなわち、酢酸塩、ベンゼンスルホン酸塩、安息香酸塩、重炭酸塩、重硫酸塩、ビストシレート、重酒石酸塩、ホウ酸塩、臭化物塩、エデト酸カルシウム塩、カンシル酸塩、炭酸塩、塩化物塩、クラブラン酸塩、クエン酸塩、二塩酸塩、エデト酸塩、エジシル酸塩、エストレート塩、エシレート塩、エチルコハク酸塩、フマル酸塩、グルセプテート塩、グルコン酸塩、グルタミン酸塩、グリコールアニサレート塩、ヘキシルレゾルシン酸塩、ヒドラバミン塩、臭化水素酸塩、塩酸塩、ヨウ化物、イセチオン酸塩、乳酸塩、ラクトビオン酸塩、ラウリン酸塩、マレイン酸塩、リンゴ酸塩、マンデル酸塩、メシル酸塩、メチル硫酸塩、ムケート塩、ナプシル酸塩、硝酸塩、オレイン酸塩、シュウ酸塩、パモ酸塩（エンボネート塩）、パルミチン酸塩、パントテン酸塩、リン酸塩／二リン酸塩、ポリガラクツロン酸塩、サリチル酸塩、ステアリン酸塩、塩基性酢酸塩、コハク酸塩、タンニン酸塩、酒石酸塩、テオクレート塩、トシル酸塩、トリエチオダイド塩、及びバレリアン酸塩のような薬理学的に許容される陰イオンを含有する塩を形成するものである。
【００７０】
本明細書で用いられる場合、用語「プロドラッグ」とは、他に指示がない限り、薬の前駆体である化合物を意味し、プロドラッグは、投与された後に化学的または生理学的プロセスを介してインビボで当該薬を放出する（例えば、生理学的ｐＨに曝されるプロドラッグは、所望の薬形態へと変換される）。
【００７１】
本明細書で用いられる場合、「連続投与スケジュール」とは、他に指示がない限り、投与スケジュールを指し、本発明の化合物または前記化合物を含む剤形を休息期間なしで治療期間中に投与する。連続投与スケジュールの治療期間を通じて、化合物または化合物を含む剤形を、例えば、毎日、１日おきに、２日おきに、３日おきに、４日おきになどで投与することができる。化合物または化合物を含む剤形を投与した日に、単回用量または複数回用量で１日中投与することができる。
【００７２】
本明細書で用いられる場合、「間欠投与スケジュール」とは、他に指示がない限り、治療期間と休息期間を含む投与スケジュールを指す。間欠投与スケジュールの治療期間を通じて、本発明の化合物または前記化合物を含む剤形を、例えば、毎日、または１日おきに、２日おきに、３日おきに、４日おきになどで投与することができる。化合物または化合物を含む剤形を投与した日に、単回用量または複数回用量で１日中投与することができる。休息期間中、化合物または化合物を含む剤形は投与されない。いくつかの実施形態では、休息期間は、少なくとも１日、少なくとも２日、少なくとも３日、少なくとも４日、少なくとも５日、少なくとも６日、少なくとも１週間、少なくとも１．５週間、少なくとも２週間、少なくとも３週間、少なくとも４週間、少なくとも１カ月、少なくとも２カ月、少なくとも３カ月、少なくとも４カ月、少なくとも５カ月、少なくとも半年、少なくとも１年、少なくとも２年、またはそれ以上続く。いくつかの間欠投与レジメンでは、治療期間は通常、約１日〜３０日、例えば、約１０日〜３０日、例えば、約２、３、または４週間であり、休息期間は通常、１〜３０日、例えば、３日〜１５日、例えば、１または２週間である。１０日〜３０日の任意の治療期間と、３日〜１５日の任意の休息期間の組み合わせが考えられる。間欠投与レジメンは、何週間の治療期間／何週間の休息期間として表すことができる。例えば、４／１間欠投与スケジュールとは、治療期間が４週間で、休息期間が１週間である間欠投与スケジュールを指す。４／２間欠投与スケジュールとは、治療期間が４週間で、休息期間が２週間である間欠投与スケジュールを指す。同様に、３／１間欠投与スケジュールとは、治療期間が３週間で、休息期間が１週間である間欠投与スケジュールを指す。
【００７３】
本発明の抗がん剤で治療されたヒト対象は、完全寛解または部分寛解を示し得る。本明細書で用いられる場合、完全寛解（ＣＲ）とは、他に指示がない限り、治療中の患者において全ての測定可能かつ測定不能な症状が消失し、かつ、新規症状が現れないことを指す。本明細書で用いられる場合、部分寛解（ＰＲ）とは、他に指示がない限り、治療中の患者において少なくとも１つの測定可能かつ測定不能な症状が有意に減少し、または新規症状が現れないことを指す。
【００７４】
投与レジメンは、そのような調節が治療的に許容可能であれば、当業者によって投与レジメン及び追加の治療薬の調整により好都合に適合するように調節することができることをさらに理解すべきである。
【００７５】
本明細書で用いる場合、「Ｃｍａｘ」とは、最大血漿濃度を指し；「ｔｍａｘ」とは、用量を投与した後にＣｍａｘが発生する時間を指し；ＡＵＣとは、時間０から無限時間までの血漿濃度−時間曲線下の面積を指し；ｔ１／２とは、血漿消失半減期を指し；％ＣＶとは、変動係数率を指し；Ｃ（トラフ２４ｈ）とは、投与後２４時間でのトラフ血漿濃度を指し；ＱＤとは、１日１回を示す。
がん
【００７６】
従って、本発明の一実施形態に従って治療することができるがんとしては、限定的ではないが、白血病；扁平上皮がんを含む腺がん及びがん腫が挙げられる。がん腫は、上述のように「固形腫瘍」と呼ぶことも多く、本発明に従って治療することができる一般に発生する固形腫瘍の例としては、限定的ではないが、肛門がん、膀胱がん、結腸がん、大腸がん、十二指腸がん、胃（腹部）がん、肺（非小細胞）がん、食道がん、前立腺がん、直腸がん、及び小腸がんが挙げられる。従って、本発明の一実施形態では、白血病、膀胱がん、肺（非小細胞）がん、前立腺がん、及び消化管のがんからなる群から選択されるがんの治療において式Ｉの化合物が使用されており、消化管のがんとしては、限定的ではないが、肛門がん、結腸がん、大腸がん、十二指腸がん、胃（腹部）がん、食道がん、直腸がん、及び小腸がんが挙げられる。本明細書で用いる場合、「Ｃｍａｘ」とは、最大血漿濃度を指し；ｔｍａｘとは、用量を投与した後にＣｍａｘが発生する時間を指し；ＡＵＣとは、時間０から無限時間までの血漿濃度−時間曲線下の面積を指し；ｔ１／２とは、血漿消失半減期を指し；％ＣＶとは、変動係数率を指し；Ｃ（トラフ２４ｈ）とは、投与後２４時間でのトラフ血漿濃度を指し；ＱＤとは、１日１回を示す。
【００７７】
用語「白血病（ｌｅｕｋａｅｍｉａ）」または「白血病（ｌｅｕｋｅｍｉａ）」は、広く、血液を形成する器官の進行性悪性疾患を指す。白血病は、一般に、血液及び骨髄中での白血球及びこれらの前駆体のゆがんだ増殖及び発育によって特徴づけられるが、未成熟赤血球に影響を及ぼす、赤血球白血病のような他の血液細胞の悪性疾患についても当てはまる。白血病は、一般に、（１）疾患の継続期間及び特徴−急性または慢性；（２）関与する細胞のタイプ−骨髄性（骨髄発生性（ｍｙｅｌｏｇｅｎｏｕｓ））、リンパ様（リンパ行性（ｌｙｍｐｈｏｇｅｎｏｕｓ））または単球性；及び（３）血液中の異常細胞の数の増加または非増加−白血病性または非白血病性（亜白血病性）に基づいて、臨床的に分類される。白血病としては、例えば、急性白血病、慢性白血病、成人白血病、小児／子供白血病、リンパ性白血病、骨髄性白血病、急性リンパ性白血病（ＡＬＬ）、急性非リンパ性白血病、慢性リンパ性白血病、急性顆粒球性白血病、慢性顆粒球性白血病、急性前骨髄球性白血病、慢性骨髄性白血病（ＣＭＬ）、Ｔ細胞白血病、Ｂ細胞白血病、成人Ｔ細胞白血病、小児Ｔ細胞ＡＬＬ、小児Ｂ細胞ＡＬＬ、非白血病性白血病（ａｌｅｕｋａｅｍｉｃｌｅｕｋａｅｍｉａ）、非白血病性白血病（ａｌｅｕｃｏｃｙｔｈｅｍｉｃ  ｌｅｕｋａｅｍｉａ）、好塩基球性白血病（ｂａｓｏｐｈｙｌｉｃ  ｌｅｕｋａｅｍｉａ）、芽細胞性白血病、ウシ白血病、慢性骨髄性白血病、皮膚白血病、胎生細胞性白血病、好酸球性白血病、グロス白血病、毛様細胞性白血病、血芽球性白血病、血球芽細胞性白血病、組織球性白血病、幹細胞性白血病、急性単球性白血病、白血球減少性白血病、リンパ性白血病（ｌｙｍｐｈａｔｉｃｌｅｕｋａｅｍｉａ）、リンパ芽球性白血病、リンパ球性白血病（ｌｙｍｐｈｏｃｙｔｉｃ  ｌｅｕｋａｅｍｉａ）、リンパ行性白血病、リンパ性白血病（ｌｙｍｐｈｏｉｄ  ｌｅｕｋａｅｍｉａ）、リンパ肉腫細胞性白血病、マスト細胞白血病、巨核球性白血病、小骨髄芽球性白血病、単球性白血病、骨髄芽球性白血病、骨髄球性白血病、骨髄性顆粒球性白血病、骨髄性単球性白血病、ネーゲリ白血病、形質細胞性白血病（ｐｌａｓｍａｃｅｌｌ  ｌｅｕｋａｅｍｉａ）、形質細胞性白血病（ｐｌａｓｍａｃｙｔｉｃ  ｌｅｕｋａｅｍｉａ）、前骨髄球性白血病、リーダー細胞性白血病、シリング白血病、幹細胞性白血病、亜白血性白血病、及び未分化細胞性白血病が挙げられる。
【００７８】
用語「がん腫」とは、組織の周りに浸潤し、転移を引き起こす傾向のある上皮細胞で構成される悪性新成長を指す。用語「がん腫」は、腺がんも包含している。腺がんは、腺（分泌）の特性を有する器官を作る細胞内に由来するか、または、胃腸管もしくは気管支上皮のような中空の内臓の内側を覆っている細胞に由来するがん腫であり、肺及び前立腺の腺がんが含まれる。
【００７９】
本発明の方法は、中間期のがんの治療、及び例えば、病気の進行を減速する、転移を減少させる、患者の生存を増加させるなど、進行性及び／または転移性及び／または悪性度の高い新生物を含む後期がんの治療のみならず、例えば、病気の治療またはがんの後退を引き起こす目的で、小さい、成長が遅い、局所的、及び／または非侵攻性であるかもしれない早期新生物を含む早期がんの治療に適用することができる。同様に、組み合わせは、低悪性度のがん、中悪性度のがん、及び／または高悪性度のがんの治療に使用してもよい。
【００８０】
本発明の方法は、進行が遅いがん、局所再発性、遠位再発性、及び／または不応性がん（すなわち、治療に反応してしないがん）を含む再発がん、転移がん、局所進行性がん、及び侵攻性がんの治療に使用することもできる。従って、「進行性」がんは、局所進行性がん及び転移がんを含み、患者における顕性疾患を指し、そのような顕性疾患は、外科手術または放射線治療などの局所的な治療に適していない。用語「転移がん」は、体の一部から他の部分へ広がったがんを指す。進行がんは切除不可能でもあり、つまり周囲の組織まで広がり外科的に排除できない。
【００８１】
本発明の方法は、多剤耐性腫瘍を含む薬剤耐性がんを治療するためにも使用することができる。当該技術分野で周知のように、化学療法に対するがん細胞の抵抗性は、がんの管理における中心問題の一つである。
【００８２】
当業者には、例えば、侵攻性がんは、通常は転移性でもあるなど、これらのカテゴリーの多くが重複していることが分かるであろう。本明細書で用いられる場合、「侵攻性がん」とは、急速に成長するがんを指す。当業者には、乳がんまたは前立腺がんなどのいくつかのがんに対して、用語「侵攻性がん」は、所与のがんに対する再発時間の範囲のうち最初の約３分の２の内で再発した進行がんのこと言うが、他のがん型に対しては、ほとんどすべての場合、侵攻性とみなされる急速に成長するがんのこと言うことが分かるであろう。従って、この用語は、特定のがん型の小区分を対象にすることができ、または全ての他のがん型を含む場合がある。
【００８３】
いくつかの実施形態では、がんは、白血病／リンパ腫である。いくつかの実施形態では、がんは、急性骨髄性白血病（ＡＭＬ）である。いくつかの実施形態では、がんは、リンパ腫、胃がん、多発性骨髄腫、骨髄異形成症候群、またはそれらの組み合わせである。いくつかの他の実施形態では、がんは、Ｔ細胞白血病、例えば、ＫＬＦ４遺伝子のエピジェネティックメチル化と関連した成人Ｔ細胞白血病である。いくつかの他の実施形態では、がんは、ＡＬＬ、例えば、小児ＡＬＬである。いくつかの他の実施形態では、がんは、ＫＬＦ４遺伝子またはタンパク質における１つ以上の突然変異と関連した小児Ｔ細胞ＡＬＬである。いくつかの他の実施形態では、がんは、ｍｉＲＮＡ−２９０２の上昇と関連した小児Ｂ細胞ＡＬＬである。いくつかの他の実施形態では、がんは、ＡＭＬ、ＡＬＬ、またはＭＤＳ、例えば、高リスクＭＤＳであり、これら全ては、正常よりも高いＣＤＸ２活性と関連している。いくつかの他の実施形態では、がんは、ホジキン、バーキット、またはＢ細胞リンパ腫であり、これら全ては、ＫＬＦ４遺伝子のメチル化と関連している。
【００８４】
急性骨髄性白血病（ＡＭＬ）：これは、急性骨髄性白血病または急性非リンパ性白血病（ＡＮＬＬ）としても知られ、骨髄に蓄積し、正常な血液細胞の産生を妨げる、異常な白血球の急速な増殖によって特徴付けられる血液細胞の骨髄系のがんである。ＡＭＬの症状は、正常な骨髄が白血病細胞で置き換えられ、これによって赤血球、血小板、及び正常な白血球が減少することからもたらされる。これらの症状には、疲労、息切れ、あざ及び出血しやすいこと、並びに感染症の危険性の増加が含まれる。いくつかの危険因子及び染色体異常は同定されているが、特異的原因は不明である。急性白血病として、ＡＭＬは急速に進行し、治療せずにいると典型的には数週間または数カ月内で致死的となる。ＡＭＬを発症するいくつかの危険因子としては、限定的ではないが、骨髄異形成症候群または骨髄増殖性疾患などの前白血病の血液疾患；抗がん化学療法への暴露；大量の電離放射線の暴露などの放射線；及びＴａｙｌｏｒらに記載のものなどの遺伝的理由が挙げられる（「ヒト白血病の遺伝性基盤」．Ｉｎ  Ｈｅｎｄｅｒｓｏｎ  ＥＳ，  Ｌｉｓｔｅｒ  ＴＡ，  Ｇｒｅａｖｅｓ  ＭＦ．  Ｌｅｕｋｅｍｉａ（第６版）．  Ｐｈｉｌａｄｅｌｐｈｉａ：  ＷＢ  Ｓａｕｎｄｅｒｓ，ｐ．２１０．ＩＳＢＮ  ０−７２１６−５３８１−２）、Ｈｏｒｗｉｔｚら（「家族性白血病における予測」．  Ａｍ．  Ｊ．  Ｈｕｍ．  Ｇｅｎｅｔ．  ５９（５）：９９０−８．ＰＭＣ  １９１４８４３．  ＰＭＩＤ  ８９００２２５）、Ｃｒｉｔｔｅｎｄｅｎ（「多くの遺伝的要因及び環境要因に基づいた家族集積性の解釈」．  Ａｎｎ．  Ｎ．  Ｙ．Ａｃａｄ．  Ｓｃｉ．  ９１（３）：７６９−８０）、及びＨｏｒｗｉｔｚ（「家族性白血病の遺伝学」．  Ｌｅｕｋｅｍｉａ  １１（８）：１３４７−５９）。世界保健機関（ＷＨＯ）による急性骨髄性白血病の分類は、ＦＡＢ基準よりもより臨床的に有用であり、かつより意味のある予測情報を生成するように試みている。ＷＨＯカテゴリーの各々は、血液病理学者及びがん専門医が関心を寄せる多くの記述的なサブカテゴリーを含むが、ＷＨＯスキームにおける臨床的に有意な情報のほとんどは、以下に列挙した亜型の１つにカテゴリー分類を介して伝達される：
【表１−１】
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【表１−２】
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【００８５】
フランス−アメリカ−イギリス（ＦＡＢ）分類系は、白血病が発症した細胞の型及びその成熟度に基づいてＡＭＬを８つの亜型、Ｍ０〜Ｍ７に分類する。ＷＨＯ分類（上記を参照）はより有用であり得るが、ＦＡＢ系も広く用いられている。
【表２−１】
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【表２−２】
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【００８６】
ＡＭＬを治療するための従来の方法は、ＢｉｓｈｏｐＪ（「成人急性骨髄性白血病の治療」．Ｓｅｍｉｎ  Ｏｎｃｏｌ  ２４（１）：  ５７−６９．１９９７）、Ｗｅｉｃｋら（「急性骨髄性白血病を以前に治療していない患者におけるダウノルビシンと高用量対標準用量シトシンアラビノシドの無作為化調査：サウスウエストオンコロジーグループ研究」（ＰＤＦ）．Ｂｌｏｏｄ  ８８（８）：  ２８４１−５１，  １９９６）、Ｂｉｓｈｏｐら（「急性骨髄性白血病の誘導における高用量シタラビンの無作為化試験」  Ｂｌｏｏｄ  ８７（５）：１７１０−７，  １９９６）、Ｈｕａｎｇら（「急性前骨髄球性白血病の治療における全トランス型レチノイン酸の使用」．  Ｂｌｏｏｄ  ７２（２）：  ５６７−７２，  １９８８）、Ｔａｌｌｍａｎら（「急性前骨髄球性白血病における全トランス型レチノイン酸」．Ｎ．  Ｅｎｇｌ．  Ｊ．  Ｍｅｄ．  ３３７（１５）：  １０２１−８，  １９９７）、Ｆｅｎａｕｘら（「全トランス型レチノイン酸（ＡＴＲＡ）後の化学療法とＡＴＲＡ＋化学療法との無作為化比較、及び新しく診断された急性前骨髄球性白血病における維持療法の役割。ＴｈｅＥｕｒｏｐｅａｎ  ＡＰＬ  Ｇｒｏｕｐ」．  Ｂｌｏｏｄ  ９４（４）：  １１９２−２００，  １９９９）、Ｅｓｔｅｙ  Ｅ（「急性骨髄性白血病の治療」．  Ｏｎｃｏｌｏｇｙ（ＷｉｌｌｉｓｔｏｎＰａｒｋ）  １６（３）：３４３−５２，  ３５５−６；  ｄｉｓｃｕｓｓｉｏｎ  ３５７，  ３６２，  ３６５−６，  ２００２）、及びＣａｓｓｉｌｅｔｈら（「維持化学療法は、成人急性非リンパ性白血病の寛解持続期間を延ばす」．Ｊ  Ｃｌｉｎ  Ｏｎｃｏｌ  ６（４）：  ５８３−７，  １９８８）に記載されている。
【００８７】
急性リンパ性白血病（ＡＬＬ）：これは、急性リンパ芽球性白血病としても知られ、骨髄及び様々な骨髄外部位における白血病リンパ球／リンパ芽球（早期Ｂ−及びＴ−リンパ球前駆細胞などの未成熟な白血球）の無調節な増殖及び蓄積によって特徴付けられる急性白血病である。ＡＬＬは、子供では最も一般的なタイプのがんであり、成人では比較的珍しいがんである。ＡＬＬを発症するリスク因子としては、限定的ではないが、遺伝性疾患／突然変異、及びＩａｃｏｂｕｃｃｉら（「急性リンパ性白血病の結果の細胞遺伝学的及び分子予測因子：最近の成果」、ＣｕｒｒＨｅｍａｔｏｌ  Ｍａｌｉｇ  Ｒｅｐ．  ２０１２  Ｊｕｎ；７（２）：  １３３−４３．）、及びＦｌｏｒｅａｎら（「白血病のエピゲノミクス：機序から治療への応用」．Ｅｐｉｇｅｎｏｍｉｃｓ．  ２０１１  Ｏｃｔ；  ３（５）：  ５８１−６０９）に記載のものなどの様々なエピジェネティック改変が挙げられ
る。
【００８８】
慢性骨髄性白血病（ＣＭＬ）：これは、慢性骨髄性白血病としても知られ、様々な血液細胞、主に、末梢血中の骨髄細胞、及び骨髄中のそれら前駆体の無調節／増大した増殖により血液中に蓄積をもたらすことによって特徴付けられる慢性白血病である。西欧諸国の成人では慢性リンパ性白血病（ＣＬＬ）よりもそれほど頻繁ではなく、ＣＭＬ発症の年齢の中央値は、５０〜６０歳である。ＣＭＬを発症するリスク因子としては、限定的ではないが、遺伝性疾患／突然変異、及びＦｌｏｒｅａｎらによって記載のものなどの様々なエピジェネティック改変が挙げられる。疾病経過は、初期段階から始まって、慢性期（ＣＰ）疾患としても知られる三相性である。その後、白血病幹細胞は、付加的遺伝子異常を獲得することができる。
【００８９】
成人Ｔ細胞白血病（ＡＴＬＬ）：これは、成人Ｔ細胞リンパ腫としても知られ、Ｑａｙｙｕｍらによって記載されるようにレトロウイルスヒトＴ細胞白血病ウイルス１型（ＨＴＬＶ−１）により引き起こされる成熟ＣＤ４＋Ｔ細胞の珍しいリンパ増殖性疾患である（「成人Ｔ細胞白血病／リンパ腫」．Ａｒｃｈ  Ｐａｔｈｏｌ  Ｌａｂ  Ｍｅｄ．  ２０１４  Ｆｅｂ；  １３８（２）：  ２８２−６）。現在、世界中で約２０００万人の人々が、ＨＴＬＶ−１キャリアであり、もっとも感染しやすい個体は、南日本、アフリカ、カリブ海地域、及び中南米などの流行地に居住している。生涯ウイルス保菌者である状態や長期潜伏（２０〜４０年）は、ＨＴＬＶ−１感染後に一般的であるため、このタイプの白血病／リンパ腫は、ほとんど排他的に成人で見られ、子供では非常にまれである。ＨＴＬＶ−１陽性患者においてＡＴＬＬに進行する生涯リスクは、女性で２．１％、男性で６．６％である。発症の平均年齢は、６０歳（２０〜８０歳の範囲）である。ＡＴＬＬケースの圧倒的多数は、生後間もない時期に感染した患者に発生し、これは、恐らくは、この年齢層における免疫応答が効率的ではないためである。さらに、長期感染は、その後の突然変異を生じる確率が増し、最終的には悪性転換をもたらす。ウイルス伝播の主要な経路は、授乳、血液暴露、及び無防備な性交渉である。造血及びリンパ系組織の腫瘍の世界保健機関分類は、２００８年に、ＡＴＬＬを下山分類に従って４つの異なる変異体：急性型（６０％）、リンパ腫型（２０％）、慢性型（１５％）、及びくすぶり型（５％）に下位分類した。各変異体には絶対に必要な特徴はなく、重複が見られる。急性型の変異体は、異型リンパ球及び好酸球増多による白血球の著しい増加として現れる。症状としては、溶骨性病変の有無にかかわらない高カルシウム血症、腎機能障害及び神経精神病学的障害、上昇した乳酸脱水素酵素レベル、中枢神経リング状増強病変、及び二次的な呼吸器合併症が挙げられる。リンパ腫型の変異体は、急性発症亜型に似ている侵攻性進行性疾患であり、白血病のない著しいリンパ節症が、この変異体の際立った特徴である。慢性型の変異体は、通常、皮膚発疹、絶対的リンパ球増加を伴う白血球増加、軽度のリンパ球増加、及び高カルシウム血症を伴う。くすぶり型の変異体は、無症候であり、皮膚及び肺障害は起こることが多いが、異型リンパ細胞が５％未満で循環し、かつ、高カルシウム血症または臓器肥大症を伴わない正常な白血球数によって特徴付けられる。くすぶり型の変異体から急性型の変異体への進行は、起こり得る。
【００９０】
リンパ腫：リンパ腫は、Ｂリンパ球またはＴリンパ球（免疫系の一部を形成し、かつ、感染及び疾患から身体を守るのを助ける白血球）が正常細胞よりも早く分離するかまたは予定よりも長く生きる場合に起こる血液がんのタイプである。通常、リンパ腫は、リンパ細胞の固形腫瘍として現れる。２００１年に公表され、２００８年に更新された現在のＷＨＯ分類は、リンパ腫の最新の分類であり、「ＲｅｖｉｓｅｄＥｕｒｏｐｅａｎ−Ａｍｅｒｉｃａｎ  Ｌｙｍｐｈｏｍａ分類」（ＲＥＡＬ）の基礎に基づくものである：
Ａ．成熟Ｂ細胞新生物：
・  慢性リンパ性白血病／小リンパ球性リンパ腫
・  Ｂ細胞前リンパ球性白血病
・  リンパ形質細胞性リンパ腫（ヴァルデンストレームマクログロブリン血症など）
・  脾性辺縁帯リンパ腫
・  形質細胞新生物：
・  形質細胞性骨髄腫
・  形質細胞腫
・  単クローン性免疫グロブリン沈着症
・  重鎖病
・  節外性辺縁帯Ｂ細胞リンパ腫、ＭＡＬＴリンパ腫とも呼ばれる
・  節性辺縁帯Ｂ細胞リンパ腫（ＮＭＺＬ）
・  濾胞性リンパ腫
・  マントル細胞リンパ腫
・  びまん性大細胞型Ｂ細胞リンパ腫
・  縦隔（胸腺）大細胞型Ｂ細胞リンパ腫
・  血管内大細胞型Ｂ細胞リンパ腫
・  原発性滲出液リンパ腫
・  バーキットリンパ腫／白血病
Ｂ．成熟Ｔ細胞及びナチュラルキラー（ＮＫ）細胞新生物
・  Ｔ細胞前リンパ球性白血病
・  Ｔ細胞大型顆粒リンパ球性白血病
・  侵攻性ＮＫ細胞白血病
・  成人Ｔ細胞白血病／リンパ腫
・  節外性ＮＫ／Ｔ細胞リンパ腫、鼻型
・  腸症型Ｔ細胞リンパ腫
・  肝脾Ｔ細胞リンパ腫
・  芽球性ＮＫ細胞リンパ腫
・  菌状息肉腫／セザライー症候群
・  皮膚原発ＣＤ３０陽性Ｔ細胞リンパ増殖性疾患
・  皮膚原発未分化大細胞リンパ腫
・  リンパ腫様丘疹症
・  血管免疫芽球性Ｔ細胞ンパ腫
・  詳細不明の末梢Ｔ細胞リンパ腫
・  未分化大細胞リンパ腫
Ｃ．ホジキンリンパ腫
・  古典的ホジキンリンパ腫：
・  結節性硬化症
・  混合細胞型
・  リンパ球豊富型
・  リンパ球減少型または非減少型
・  結節性リンパ球優位型ホジキンリンパ腫
Ｄ．免疫不全関連リンパ増殖異常症
・  原発性免疫不全疾患に関連
・  ヒト免疫不全ウイルス（ＨＩＶ）に関連
・  移植後
・  メトトレキサート療法に関連
・  原発性中枢神経系リンパ腫は、免疫障害を持つ患者、特に、ＡＩＤＳ患者でもっともよく起こるが、免疫正常者にも起こり得る。特に、ＡＩＤＳ患者では予後不良である。治療は、メトトレキサートと共に、コルチコステロイド、放射線治療、及び化学療法から構成することができる。
相対発生率、組織病理、免疫表現型、ｔ年後の全生存率によるリンパ腫の亜型を以下に示す（Ｒｏｂｂｉｎｓｂａｓｉｃ  ｐａｔｈｏｌｏｇｙ（第８版）．  Ｐｈｉｌａｄｅｌｐｈｉａ：  Ｓａｕｎｄｅｒｓ／Ｅｌｓｅｖｉｅｒ．  ２００７．  ｐｐ．  Ｔａｂｌｅ  １２−８．）：
【表３−１】
2019218373.tif 000009
【表３−２】
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【表３−３】
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【表３−４】
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【００９１】
胃がん：これは、腹部がんとしても知られ、腹部の任意の部分から生じるがんを指す。腹部がんは、初期においては、無症候（目立った症状がない）であるかまたは非特異的症状（腹部がんだけでなく、他の関連または無関連疾病にも非特異的である症状）しか引き起こさないことが多い。胃カメラ検査、上部消化管撮影、またはコンピューター断層撮影またはＣＴスキャンによって診断することができる。外科手術、化学療法、及び放射線で予め治療される。
【００９２】
大腸がん：これは、結腸がん、直腸がん、大腸がんまたは結腸直腸腺がんとしても知られ、結腸または直腸（大腸の一部）、または虫垂における制御されない細胞増殖由来のがんである。７５〜９５％を超える結腸がんは、遺伝的リスクがほとんどないかまたは全くない人々で起こる。他の危険因子としては、加齢、男性、脂肪、アルコールまたは赤身肉の摂り過ぎ、肥満、喫煙、及び運動不足が挙げられる。おおよそ１０％の場合が、不十分な活性と関連がある。アルコールのリスクは、一日一杯よりも多い飲酒で増すと思われる。大腸がんは、胃腸管の結腸または直腸内壁の上皮細胞に起因する疾患であり、シグナル伝達活性を人工的に増加させるＷｎｔシグナル伝達経路の突然変異の結果として最も頻繁に起こる。突然変異は、受け継ぐかまたは獲得する場合があり、腸陰窩幹細胞で起こる確率が最も高い。大腸がんに関連するＷｎｔシグナル伝達経路の遺伝子としては、限定的ではないが、ＡＰＣ、β−カテニン、ＡＸＩＮ１、ＡＸＩＮ２、ＴＣＦ７Ｌ２、またはＮＫＤ１が挙げられる。Ｗｎｔ−ＡＰＣ−ベータ−カテニンシグナル伝達経路の欠損に加えて、細胞をがん性にするには他の突然変異が起きなければならない。ＴＰ５３遺伝子により産生されるｐ５３タンパク質は、通常、細胞分裂を監視し、Ｗｎｔ経路欠損があれば、それらの細胞を殺傷する。最後には、細胞株が、ＴＰ５３遺伝子中の突然変異を獲得し、組織を腺腫から侵襲性がん腫へと変化させる。大腸がんで一般に失活される他のアポトーシスタンパク質は、ＴＧＦ−β及びＤＣＣである。大腸がんで過剰発現される他のがん遺伝子としては、通常、細胞を刺激して、増殖因子に応答して分裂させるタンパク質ＫＲＡＳ、ＲＡＦ、及びＰＩ３Ｋをコードする遺伝子が挙げられ、細胞増殖の過剰活性化をもたらす突然変異を獲得することができる。上記遺伝子に対して記載した発がん及び不活性化突然変異に加えて、非過剰変異試料は、変異ＣＴＮＮＢ１、ＦＡＭ１２３Ｂ、ＳＯＸ９、ＡＴＭ、及びＡＲＩＤ１Ａも含む。異なる一連の遺伝的事象を通じて進行することで、過剰変異腫瘍は、ＡＣＶＲ２Ａ、ＴＧＦＢＲ２、ＭＳＨ３、ＭＳＨ６、ＳＬＣ９Ａ９、ＴＣＦ７Ｌ２、及びＢＲＡＦの突然変異型形態を示す。療法の腫瘍型にわたるこれらの遺伝子間に共通のテーマは、ＷＮＴ及びＴＧＦ−βシグナル伝達経路への関与であり、これは次いで、大腸がんの中心であるＭＹＣの活性増大をもたらす。
【００９３】
多発性骨髄腫：これは、形質細胞性骨髄腫またはカーレル病としても知られ、通常は抗体の産生を司る白血球のタイプである形質細胞のがんである。症候性骨髄腫、無症候骨髄腫、及びＭＧＵＳ（意義不明の単クローン性高ガンマグロブリン血症）である場合がある。骨髄腫は、血液検査（血清タンパク質電気泳動、無血清カッパ／ラムダ軽鎖アッセイ）、骨髄検査、尿中タンパク質電気泳動、及び一般に侵された骨のＸ線で診断する。ステロイド、化学療法、プロテアソーム阻害剤、サリドマイドまたはレナリドミドなどの免疫調節薬剤（ＩＭｉＤ）、及び幹細胞移植で予め治療される。
【００９４】
骨髄異形成症候群（ＭＤＳ）：骨髄異形成症候群（「ＭＤＳ」）は、造血幹細胞疾患のさまざまな群を指し、血液細胞の骨髄クラスの産生が無効（または異形成）な血液学的（血液−関連）医学的状態である。ＭＤＳは、形態及び成熟（骨髄細胞の形態異常）に障害のある骨髄細胞、末梢血血球減少症、並びに急性白血病に進行する可変リスクを特徴とし、結果として血球産生が無効になる。ＴｈｅＭｅｒｃｋ  Ｍａｎｕａｌ  ９５３  （第１７版、１９９９年）、及びＬｉｓｔら、１９９０年、Ｊ．  Ｃｌｉｎ．  Ｏｎｃｏｌ．  Ｓ  ：１４２４。いくつかのタイプのＭＤＳは、「低リスクＭＤＳ」と呼ばれ、ゆっくりと進行し、軽度から中等度の貧血を引き起こすかまたは他のタイプの細胞を減少させる場合がある。いくつかの他のタイプのＭＤＳは、「高リスクＭＤＳ」と呼ばれ、深刻な問題を引き起こす場合がある。高リスクＭＤＳを有する患者では、芽細胞と呼ばれる未熟細胞が、骨髄中で５パーセントを超える細胞を占め、正常な赤血球、白血球、及び血小板に成長しないと、これらの細胞／血小板においてより深刻な不全を引き起こすことが多い。ＭＤＳ患者が２０パーセントを超える芽細胞を発現すると、３血球系の異形成（ＡＭＬ−ＴＬＤ）によるＡＭＬを有するものとして再分類される。
【００９５】
初期の造血幹細胞損傷は、これらに限定されるものではないが、細胞傷害性化学療法、放射線、ウイルス、化学薬品への暴露、及び遺伝的疾病素因などに起因し得る。骨髄にクローン変異が生じ、健常幹細胞が抑制される。ＭＤＳの初期段階では、血球減少症の主な要因は、プログラムされた細胞死（アポトーシス）の増加である。この疾患が白血病へ進行及び変化した場合には、遺伝子変異の発生は稀であり、白血病細胞の増殖によって健全な骨髄が壊滅される。疾患経過は、緩慢性疾患として特性を示す一部の症例と、急性白血病の形態に変化する、臨床経過が非常に短い進行性疾患として特性を示すそれ以外の症例とで異なる。ＭＤＳを有する患者は、重度の貧血を発症し、輸血を要する場合がある。場合によっては、疾患が悪化し、患者は、進行性の骨髄不全に起因した血球減少症（低い血球数）を発症する。
【００９６】
１９７６年に公表され、１９８２年に改訂したフランス・アメリカ・イギリス分類によれば、ケースを５つのカテゴリーに分類した：
【表４】
2019218373.tif 000013
【００９７】
世界保健機関（ＷＨＯ）は、いくつかの新たな疾患カテゴリーを導入し、他のものを排除するように、この分類を改変した。最も最近では、ＷＨＯは、遺伝的発見により基づく新しい分類スキーム（２００８）を生み出している：
【表５−１】
2019218373.tif 000014
【表５−２】
2019218373.tif 000015
【００９８】
ＭＤＳの兆候及び症状としては、限定的ではないが、慢性疲労、息切れ、冷感、時々胸痛を伴う貧血（低赤血球数または還元ヘモグロビン）；感染症にかかりやすくなることを伴う倦怠感または疲労感、肌が青白い、あざや出血しやすい、点状出血、熱、好中球減少（低好中球数）；出血及び斑状出血（あざ）並びに皮下大量出血しやすくなることで紫斑または溢血点をもたらすことを伴う血小板減少症（低血小板数）；脾腫または稀に肝腫大；細胞中の異常顆粒、異常核形状及びサイズ；及び／または染色体転座及び異常染色体数を含む染色体異常が挙げられる。
【００９９】
多くの因子には、ＭＤＳのリスクを増す場合があり、これには、限定的ではないが、男性または白人であること、６０歳以上であること、化学療法または放射線療法の治療後、たばこの煙、農薬、ベンゼンなどの溶媒を含む特定の化学物質へ暴露すること、及び水銀または鉛などの重金属へ暴露することが挙げられる。
【０１００】
ＭＤＳの従来の治療方法としては、骨髄移植、レシピエントにおいて血球発現を刺激する造血増殖因子またはサイトカイン、例えば、エリスロポエチン（ＥＰＯ）、顆粒球マクロファージコロニー刺激因子（ＧＭ−ＣＳＦ）、及び顆粒球コロニー刺激因子（Ｇ−ＣＳＦ）の使用が挙げられる（Ｍｅｔｃａｌｆ，１９８５，  Ｓｃｉｅｎｃｅ  ２２９：１６；Ｄｅｘｔｅｒ，１９８７，Ｊ．  Ｃｅｌｌ  Ｓｃｉ．  ８８：１；  Ｇｏｌｄｅ  ａｎｄ  Ｇａｓｓｏｎ，  １９８８，  ＳｃｉｅｎｔｉｆｉｃＡｍｅｒｉｃａｎ，  Ｊｕｌｙ：６２；  Ｔａｂｂａｒａ  ａｎｄ  Ｒｏｂｉｎｓｏｎ，  １９９１，  Ａｎｔｉ−Ｃａｎｃｅｒ  Ｒｅ  ｓ．  １１：８１；  Ｏｇａｗａ，  １９８９，Ｅｎｖｉｒｏｎ．  Ｈｅａｌｔｈ  Ｐｒｅｓｐ．  ８０：１９９；及び  Ｄｅｘｔｅｒ，  １９８９，  Ｂｒ．  Ｍｅｄ．  Ｂｕｌｌ．  ４５：  ３３７．）。残念なことに、骨髄移植は、ドナー及びレシピエントにとって痛みを伴い、造血増殖因子は、多くの臨床設定において効果的であるとは証明されていない。他の方法としては、５−アザシチジン、デシタビン、レナリドミド、免疫抑制、白血病療法、及び治験アプローチが挙げられる。
【０１０１】
いくつかの実施形態では、がんの組織構造は、治療前、治療中、または治療後に決定される。任意の適切な検査を用いて、がんの組織構造を決定することができる。そのような検査及び試験としては、限定的ではないが、食道がんの一般的な兆候及び症状が挙げられ、限定的ではないが、例えば、食道及び恐らくは口を介した食物の吐き戻し（逆流）、食事に関連しない胸痛、固形物または液体の嚥下困難、胸焼け、吐血、嗄声、慢性咳、しゃっくり、肺炎、骨の痛み、食道への出血、及び体重減少、病歴及び身体検査、画像検査、胸部Ｘ線、コンピューター断層撮影（ＣＴ）スキャン、磁気共鳴イメージング（ＭＲＩ）スキャン、ポジトロン放出断層撮影法（ＰＥＴ）スキャン、骨のスキャン、喀痰細胞診、針生検、気管支鏡検査法、気管支内超音波、内視鏡食道超音波、縦隔鏡検査法及び縦隔切開術、胸腔穿刺、胸腔鏡検査、免疫組織化学、分子検査、血液検査、食道造影、超音波内視鏡検査、食道胃十二指腸内視鏡検査（ＥＧＤ）及び生検、またはそれらから誘導される任意の適切な方法が挙げられる。
ＣＤＸ２−ＫＬＦ４シグナル伝達経路
【０１０２】
本明細書で用いられる場合、用語「ＣＤＸ２−ＫＬＦ４シグナル伝達経路」とは、ＣＤＸ２及び／またはＫＬＦ４を介するかまたは本明細書に記載のＣＤＸ２またはＫＬＦ４の発現または活性に直接的または間接的に影響を及ぼすことによって、１つ以上の細胞機能を制御するように共に働く生体分子の群を指す。場合によっては、ＣＤＸ２及び／またはＫＬＦ４の発現レベル及び／または活性は、「ＣＤＸ２−ＫＬＦ４アクシス」とも呼ばれている。
【０１０３】
ＣＤＸ２は、尾側型ホメオボックス２、ＣＤＸ３、尾側型ホメオボックス転写因子２、尾側型ホメオボックスタンパク質２、またはホメオボックスタンパク質ＣＤＸ−２としても知られ、尾側関連性ホメオボックス転写因子遺伝子ファミリーのメンバーである。コード化タンパク質は、細胞増殖及び分化に関与する腸特異的遺伝子の主な調節因子である。このタンパク質も、腸管の初期胚発生に役割を果たす。この遺伝子の異常な発現は、腸炎及び腫瘍形成と関連している。ＣＤＸ２と関連した疾病には、萎縮性胃炎及び印環細胞がんが含まれ、その関連超経路のうち、骨粗しょう症及びアクチン細胞骨格の細胞骨格再構築調節に関与する遺伝子のＲｈｏ  ＧＴＰａｓｅｓによる調節におけるＶＤＲの転写の役割である。この遺伝子に関連するＧＯ注釈には、転写調節領域配列特異的ＤＮＡ結合、及び配列特異的ＤＮＡ結合転写因子活性が含まれる。この遺伝子の重要なパラログは、ＣＤＸ１である。これは、腸上皮で発現される多遺伝子の転写調節に関与し、小腸及び大腸の両方の腸上皮層の早期分化から維持までの広範囲の機能において重要である。ヒトＣＤＸ２のＤＮＡ及びタンパク質配列は、以前に報告されており、ＧｅｎＢａｎｋ番号ＮＣ＿００００１３．１０、ＮＣ＿０１８９２４．２、ＮＴ＿０２４５２４．１４、ＮＰ＿００１２５６．３、ＥＮＳＰ０００００３７０４０８、及びＵｎｉｐｒｏｔ番号Ｑ９９６２６を参照されたい。これらの各々はあらゆる目的のためにその全体が参照により本明細書中に援用される。そのような配列を利用して、当業者に知られている方法でＣＤＸ２活性レベルを検出及び分析する手順を設計することができる。ＣＤＸ２は、急性骨髄性白血病のほとんどの場合で異常発現され、ｍＲＮＡコピー数が約３０コピー〜約８９，０００コピーの間で変化する白血病誘発（Ｓｃｈｏｌｌら．，Ｔｈｅ  Ｊｏｕｒｎａｌ  ｏｆ  Ｃｌｉｎｉｃａｌ  Ｉｎｖｅｓｔｉｇａｔｉｏｎ，  １７（４）：  １０３７−１０４８）を促進する。本明細書で用いる場合、語句「ＣＤＸ２遺伝子がオンになる」または「ＣＤＸ２活性がオンである」とは、ヒト対象におけるＣＤＸ２のｍＲＮＡコピーが少なくとも約３０コピーであることを指す。そうでなければ、ＣＤＸ２遺伝子は、オフになっていると考えられる。
【０１０４】
クルッペル様因子４（ＫＬＦ４）は、Ｇｕｔ、ＥＺＦ、ＧＫＬＦ、上皮ジンクフィンガータンパク質ＥＺＦ、腸に多いクルッペル様因子、上皮クルッペル様ジンクフィンガータンパク質、またはクルッペル様因子４としても知られ、限定的ではないが、白血病、皮膚扁平上皮がん、及び家族性腺腫様ポリープを含む疾患と関連している。この遺伝子の重要なパラログは、ＫＬＦ１である。ＫＬＦ４は、活性化因子及びリプレッサーの両方として作用することができる。ＫＬＦ４は、それ自体の遺伝子のプロモーター領域などの５’−ＣＡＣＣＣ−３’コア配列に結合する。ＫＬＦ４は、胚発生中の重要な転写因子の発現を調節し、胚幹細胞の維持や分化の阻止に重要な役割を果たす。皮膚の関門機能を確立したり、眼表面の出生後成熟及び維持をする必要がある。ＫＬＦ４は、上皮細胞の分化にも関与しており、骨格の発達や腎臓発生にも機能することがある。ＫＬＦ４はさらに、ｐ５３／ＴＰ５３転写のダウンレギュレーションや、及びｐ２１の誘導にも寄与する。ヒトＫＬＦ４のＤＮＡ及びタンパク質配列は、以前に報告されており、ＧｅｎＢａｎｋ番号ＮＣ＿０００００９．１１、ＮＴ＿００８４７０．１９、ＮＣ＿０１８９２０．２、及びＵｎｉｐｒｏｔ番号Ｏ４３４７４を参照されたい。これらの各々はあらゆる目的のためにその全体が参照により本明細書中に援用される。そのような配列を利用して、当業者に知られている方法でＫＬＦ４活性レベルを検出及び分析する手順を設計することができる。
【０１０５】
ｐ２１は、サイクリン依存性キナーゼ阻害剤１Ａ、Ｃｉｐ１、ＣＤＪＮ１、ＣＩＰ１、ＷＡＦ１、ＣＡＰ２０、ＭＤＡ−６、ＳＤＩ１、ＣＤＫと相互作用するタンパク質１、ＣＤＫ相互作用タンパク質１、サイクリン依存性キナーゼ阻害剤１、ＤＮＡ合成阻害剤、メラノーマ分化関連タンパク質、ｐ２１ＣＩＰ、野生型Ｐ５３活性化断片、ｍＤＡ６、またはＰＣＩ１としても知られ、強力なサイクリン依存性キナーゼ阻害剤をコードする。コード化タンパク質は、サイクリン−ＣＤＫ２または−ＣＤＫ４複合体に結合し、サイクリン−ＣＤＫ２または−ＣＤＫ４複合体の活性を阻害するため、Ｇ１での細胞周期の進行の調節因子として機能する。この遺伝子の発現は、腫瘍抑制タンパク質ｐ５３によって厳密に制御され、このタンパク質は、様々なストレス刺激に応答してＧ１期におけるｐ５３−依存性細胞周期停止を介在する。このタンパク質は、増殖性細胞核抗原（ＰＣＮＡ）、ＤＮＡポリメラーゼ補助因子と相互作用することができ、Ｓ期におけるＤＮＡ複製及びＤＮＡ損傷修復に調節的な役割を果たす。このタンパク質は、ＣＡＳＰ３様スペースによって特異的に開裂することが報告されているため、ＣＤＫ２の著しい活性化をもたらし、カスパーゼ活性化後のアポトーシスの実行に役立つ場合がある。多数の選択的にスプライスされた変異体が、この遺伝子に対して分かっている。ヒトｐ２１のＤＮＡ及びタンパク質配列は、以前に報告されており、ＧｅｎＢａｎｋ番号ＮＣ＿０００００６．１１、ＮＴ＿００７５９２．１５、ＮＣ＿０１８９１７．２、及びＵｎｉｐｒｏｔ番号Ｐ３８９３６を参照されたい。これらの各々はあらゆる目的のためにその全体が参照により本明細書中に援用される。そのような配列を利用して、当業者に知られている方法でｐ２１活性レベルを検出及び分析する手順を設計することができる。
【０１０６】
ＣＤＸ２−ＫＬＦ４シグナル伝達経路のいくつかの他の成分は、Ｈ３Ｋ４デメチラーゼであるＪａｒｉｄ１ｂ（ＫＤＭ５Ｂ、Ｐｌｕ−１またはＲｂｐ２−ｈｌとしても知られる）、マイクロＲＮＡ  ｍｉＲ−２９０９、腫瘍抑制因子ｐ５３（ＴＰ５３または腫瘍タンパク質（ＥＣ：２．７．１．３７）としても知られる）、システイン−アスパラギン酸プロテアーゼカスパーゼ−３、アネキシンＶ、Ｂ細胞ＣＬＬ／リンパ腫２（ＢＣＬ２）、Ｂ細胞ＣＬＬ／リンパ腫３（ＢＣＬ３）、ＢＣＬ２関連Ｘタンパク質（ＢＡＸ）、骨形成タンパク質（ＢＭＰｓ）、Ｗｎｔ（マウスｉｎｔ−１としても知られる）、肝細胞核因子４α（ＨＮＦ４α）、線維芽細胞増殖因子（Ｆｇｆ）、ホメオボックス（Ｈｏｘ）、転写因子ＳＰ１、転写因子ＭＹＣ、サイクリンＤｌ（ＣＣＮＤ１、ＰＲＡＤ１としても知られる）、及びアポトーシス拮抗性の転写因子転写因子（ＡＡＴＦ）である。
【０１０７】
本発明の活性薬剤は、ＣＤＸ２−ＫＬＦ４シグナル伝達経路における１つ以上の成分の活性を調節することができる。いくつかの実施形態では、活性薬剤は、小分子である。いくつかの実施形態では、活性薬剤は、抗体などのポリペプチドである。いくつかの実施形態では、活性薬剤は、ｓｉＲＮＡなどのポリヌクレオチドである。
【０１０８】
いくつかの実施形態では、活性薬剤は、ＣＤＸ２−ＫＬＦ４シグナル伝達経路における成分の遺伝子コピー数を調節する。いくつかの実施形態では、活性薬剤は、治療前の遺伝子コピー数と比べた場合に、遺伝子コピー数を０．５×、１．０×、１．５×、２×、３×、４×、５×、６×、７×、８×、９×、１０×、１００×、１０００×、１００００×またはそれ超に増加または減少させることができる。
【０１０９】
いくつかの実施形態では、活性薬剤は、ＣＤＸ２−ＫＬＦ４シグナル伝達経路における成分ｍＲＮＡ存在度を調節する。いくつかの実施形態では、活性薬剤は、治療前のｍＲＮＡ存在度と比べた場合に、ｍＲＮＡ存在度を０．５×、１．０×、１．５×、２×、３×、４×、５×、６×、７×、８×、９×、１０×、１００×、１０００×、１００００×またはそれ超に増加または減少させることができる。
【０１１０】
いくつかの実施形態では、活性薬剤は、ＣＤＸ２−ＫＬＦ４シグナル伝達経路における成分のタンパク質レベルを調節する。いくつかの実施形態では、活性薬剤は、治療前のタンパク質レベルと比べた場合に、タンパク質レベルを０．５×、１．０×、１．５×、２×、３×、４×、５×、６×、７×、８×、９×、１０×、１００×、１０００×、１００００×またはそれ超に増加または減少させることができる。
【０１１１】
いくつかの実施形態では、活性薬剤は、ＣＤＸ２−ＫＬＦ４シグナル伝達経路における成分のｍＲＮＡ及び／またはタンパク質の安定性を調節する。いくつかの実施形態では、活性薬剤は、治療前の安定性と比べた場合に、安定性を増加または減少させることができる。
【０１１２】
いくつかの実施形態では、活性薬剤は、ＣＤＸ２−ＫＬＦ４シグナル伝達経路における成分の酵素活性を調節する。いくつかの実施形態では、活性薬剤は、治療前の安定性と比べた場合に、酵素活性を増加または減少させることができる。
【０１１３】
ＣＤＸ２−ＫＬＦ４シグナル伝達経路における成分の活性は、当業者に公知の任意の適切な方法によって決定することができる。いくつかの実施形態では、生体試料は、対象から採取され、分析される。いくつかの実施形態では、生体試料は、遺伝子増幅数、ＲＮＡ、ｍＲＮＡ、ｃＤＮＡ、ｃＲＮＡ、タンパク質などのＣＤＸ２−ＫＬＦ４シグナル伝達経路における成分の活性について評価される。
【０１１４】
いくつかの実施形態では、生体試料からのｍＲＮＡは、活性のレベルを決定するのに直接使用される。いくつかの実施形態では、レベルは、ハイブリダイゼーションによって決定される。いくつかの実施形態では、ＲＮＡは、当該技術分野で公知の方法を用いて、ｃＤＮＡ（相補的ＤＮＡ）コピーへと変換される。いくつかの特定の実施形態では、ｃＤＮＡを蛍光標識または他の検出可能な標識で標識する。ｃＤＮＡは、目的の複数のプローブを含む基質とハイブリダイズする。目的のプローブは、通常、遺伝子署名の少なくとも１つのＤＮＡ配列にストリンジェントなハイブリダイゼーション条件下でハイブリダイズする。特定の実施形態では、複数のプローブは、ハイブリダイゼーション条件下で、遺伝子バイオマーカーから導出された配列にハイブリダイズすることが可能である。いくつかの実施形態では、条件としては、６５℃で６×ＳＳＣ（０．９Ｍ  ＮａＣｌ、０．０９Ｍクエン酸ナトリウム、ｐＨ７．４）を用いることが挙げられる。プローブは、核酸を含んでもよい。用語「核酸」は、既知のヌクレオチド類似体または修飾バックボーン残基またはリンケージを含む核酸を包含し、該用語は、合成由来、天然、及び非天然由来であり、参照核酸と同様の結合特性を有し、参照ヌクレオチドと同様の様式で代謝される。このような類似体の例としては、ホスホロチオエート、ホスホルアミデート、メチルホスホネート、キラル−メチルホスホネート、及びペプチド−核酸（ＰＮＡ）が挙げられるが、これらに限定されない。ＤＮＡの検出方法としては、限定的ではないが、ＲＴ−ＰＣＲ、ノーザンブロット分析、遺伝子発現解析、マイクロアレイ解析、遺伝子発現チップ解析、ハイブリダイゼーション技術（ＦＩＳＨを含む）、発現ビーズチップアレイ、及びクロマトグラフィー、並びに当該技術分野で公知の任意の他の技術を挙げることができる。ＤＮＡの検出方法としては、限定的ではないが、ＰＣＲ、リアルタイムＰＣＲ、デジタルＰＣＲ、ハイブリダイゼーション（ＦＩＳＨを含む）、マイクロアレイ解析、ＳＮＰ検出アッセイ、ＳＮＰ遺伝子型決定アッセイ、及びクロマトグラフィー、並びに当該技術分野で公知の任意の他の技術を挙げることができる。
【０１１５】
いくつかの実施形態では、タンパク質発現レベルは、活性のレベルを決定するのに使用される。ＣＤＸ２−ＫＬＦ４シグナル伝達経路における成分のタンパク質発現レベルは、当業者に公知の任意の適切な方法によって決定することができる。タンパク質を検出、計量、及び比較する任意の適切な方法は、Ｔｓｃｈｅｓｃｈｅ（タンパク質生化学における方法、ＩＳＢＮＷａｌｔｅｒ  ｄｅ  Ｇｒｕｙｔｅｒ，  ２０１１，  ＩＳＢＮ  ３１１０２５２３６８，  ９７８３１１０２５２３６１）、Ｇｏｌｕｃｈら（タンパク質がんマーカーのチップベースの検出、ＰｒｏＱｕｅｓｔ，２００７，  ＩＳＢＮ  ０５４９４６３４５３，  ９７８０５４９４６３４５０）、Ｓｐｅｉｃｈｅｒ（プロテオーム解析：ゲノムの解釈、Ｅｌｓｅｖｉｅｒ，  ２００４，  ＩＳＢＮ００８０５１５３０４，  ９７８００８０５１５３０４）、Ａｌｂａｌａら（タンパク質アレイ，  バイオチップ及びプロテオミクス，  ＣＲＣ  Ｐｒｅｓｓ，  ２００３，  ＩＳＢＮ０２０３９１１１２１，  ９７８０２０３９１１１２９）、Ｗａｌｋｅｒ（タンパク質プロトコルハンドブック，  Ｓｐｒｉｎｇｅｒ，  ２００２，  ＩＳＢＮ  ０８９６０３９４０４，９７８０８９６０３９４０７）、Ｆｕｎｇ（タンパク質アレイ：方法及びプロトコル，  Ｓｐｒｉｎｇｅｒ，  ２００４，ＩＳＢＮ  １５９２５９７５９９，  ９７８１５９２５９７５９８）、及びＢｉｅｎｖｅｎｕｔ（質量分析によるタンパク質同定の加速化及び改善，Ｓｐｒｉｎｇｅｒ，  ２００５，  ＩＳＢＮ  １４０２０３３１８４，  ９７８１４０２０３３１８６）に記載のものを使用することができ、それらの各内容は、それら全体が引用により本明細書中に組み込まれている。いくつかの実施形態では、バイオマーカーのタンパク質発現レベルは、免疫組織化学（ＩＨＣ）、ウエスタンブロット法、タンパク質免疫染色、タンパク質免疫沈降、免疫電気泳動法、免疫ブロット法、ＢＣＡアッセイ、分光測光法、質量分析法または酵素アッセイ、またはそれらの組み合わせによって検出され、測定される。バイオマーカーレベルの検出、計量、及び比較に関連するさらなる方法については、例えば、ＣｕｒｒｅｎｔＰｒｏｔｏｃｏｌｓ  ｉｎ  Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｂｉｏｌｏｇｙ，  Ｅｄ。Ａｕｓｕｂｅｌ，  Ｆｒｅｄｅｒｉｃｋ  Ｍ．  （２０１０）；  Ｃｕｒｒｅｎｔ  Ｐｒｏｔｏｃｏｌｓｉｎ  Ｐｒｏｔｅｉｎ  Ｓｃｉｅｎｃｅ  Ｌａｓｔ，  Ｅｄ．  Ｃｏｌｉｇａｎ，  Ｊｏｈｎ  Ｅ．ら（２０１０）；  Ｃｕｒｒｅｎｔ  Ｐｒｏｔｏｃｏｌｓ  ｉｎ  ＮｕｃｌｅｉｃＡｃｉｄＣｈｅｍｉｓｔｒｙ，  Ｅｄ．  Ｅｇｌｉ，  Ｍａｒｔｉｎ  （２０１０）；  Ｃｕｒｒｅｎｔ  Ｐｒｏｔｏｃｏｌｓ  ｉｎ  Ｂｉｏｉｎｆｏｒｍａｔｉｃｓ，  Ｅｄ．Ｂａｘｅｖａｎｉｓ，  Ａｎｄｒｅａｓ  Ｄ．  （２０１０）；及びＭｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｃｌｏｎｉｎｇ：  Ａ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ  Ｍａｎｕａｌ，  Ｔｈｉｒｄ  Ｅｄｉｔｉｏｎ，Ｓａｍｂｒｏｏｋ，  Ｊｏｓｅｐｈ  （２００１）を参照されたい。これらの全ては、それら全体が引用により本明細書中に組み込まれている。
【０１１６】
いくつかの実施形態では、ＣＤＸ２−ＫＬＦ４シグナル伝達経路における成分の抗体は、活性薬剤として使用される。いくつかの実施形態では、ＫＬＦ４及び／またはｐ２１を負に制御するＣＤＸ２−ＫＬＦ４シグナル伝達経路における成分の抗体、またはＫＬＦ４及び／またはｐ２１によって負に制御されるＣＤＸ２−ＫＬＦ４シグナル伝達経路における成分の抗体は、活性薬剤として使用される。例えば、ＣＤＸ２の抗体を用いて、本発明のがんを治療することができる。
【０１１７】
いくつかの実施形態では、ＣＤＸ２−ＫＬＦ４シグナル伝達経路における成分の抗体を用いて、成分のタンパク質レベルを検出することができる。いくつかの実施形態では、検出用キットを用いる。そのような抗体及びキットは、ＥＭＤＭｉｌｌｉｐｏｒｅ、ＯｒｉＧｅｎｅ  Ｃｕｓｔｏｍ  Ａｓｓａｙ  Ｓｅｒｖｉｃｅｓ、Ｒ＆Ｄ  Ｓｙｓｔｅｍｓ  ｆｏｒ  ｂｉｏｃｈｅｍｉｃａｌ  ａｓｓａｙｓ、ＧｅｎＳｃｒｉｐｔＣｕｓｔｏｍ  Ａｓｓａｙ  Ｓｅｒｖｉｃｅｓ、Ｅｎｚｏ  Ｌｉｆｅ  Ｓｃｉｅｎｃｅｓ  ｆｏｒ  ｋｉｔｓ  ＆  ａｓｓａｙｓ、Ｃｌｏｕｄ−Ｃｌｏｎｅ  Ｃｏｒｐ．  ＥＬＩＳＡｓ、またはＣｌｏｕｄ−ＣｌｏｎｅＣｏｒｐ．  ＣＬＩＡｓから入手可能である。本明細書で用いられる場合、用語「抗体」とは、モノクローナル抗体、ポリクローナル抗体、及びキメラ抗体を含むものとする。抗体は、組み換えに由来してもよく、及び／またはトランスジェニック動物で産生されてもよい。本明細書で用いられる場合、用語「抗体断片」とは、Ｆａｂ、Ｆａｂ’、Ｆ（ａｂ’）２、ｓｃＦｖ、ｄｓＦｖ、ｄｓ−ｓｃＦｖ、ダイマー、ミニボディ、ダイアボディ、及びその多量体並びに二重特異性抗体断片を含むものとする。抗体は、従来の技術を用いて断片にすることができる。例えば、Ｆ（ａｂ’）２断片は、抗体をペプシンで処理することによって作製することができる。得られたＦ（ａｂ’）２断片を、ジスルフィド架橋を還元するよう処理すると、Ｆａｂ’断片を作製することができる。パパイン消化を行えば、Ｆａｂ断片を形成することができる。Ｆａｂ、Ｆａｂ’及びＦ（ａｂ’）２、ｓｃＦｖ、ｄｓＦｖ、ｄｓ−ｓｃＦｖ、ダイマー、ミニボディ、ダイアボディ、二重特異性抗体断片、及び他の断片は、組み換え技術によって合成することもできる。
【０１１８】
本発明に従って行なわれるイムノアッセイは、均一系アッセイまたは不均一系アッセイであってもよい。均一系アッセイでは、免疫反応は通常、特異的抗体、標識された分析物、及び該当する目的の試料を伴う。標識から生じるシグナルは、抗体が標識された分析物に結合すると、直接的または間接的に変化する。免疫反応及びその規模の検出の両方を、均一系溶液中で実施することができる。使用することができる免疫化学的標識には、遊離ラジカル、放射性同位体、蛍光染料、酵素、バクテリオファージ、補酵素などが包含される。
【０１１９】
不均一系アッセイ手法では、試薬は通常、試料、抗体、及び検出可能なシグナルを生じさせるための手段である。上述の試料を使用することができる。抗体は、ビーズ（タンパク質Ａ及びタンパク質Ｇアガロースビーズなど）、プレート、またはスライドなどの支持体に固定化し、抗原を含有すると考えられる試料と液相で接触させることができる。次いで、支持体を液相から分離し、支持体相または液相を検出可能なシグナルについて、そのようなシグナルを生じさせる手段を使用して検査する。シグナルは、試料中の分析物の存在に関連している。検出可能なシグナルを生じさせるための手段には、放射性標識、蛍光標識、または酵素標識の使用が含まれる。例えば、検出される抗原が、第２結合部位を含有する場合、分離ステップの前に、その部位に結合する抗体を、検出可能な基にコンジュゲートさせ、液相反応溶液に加えることができる。固体支持体上での検出可能な基の存在は、検査試料中に抗原が存在することを示している。適切なイムノアッセイの例としては、限定的ではないが、オリゴヌクレオチド、免疫ブロット法、免疫沈降、免疫蛍光法、化学発光法、電気化学発光（ＥＣＬ）または酵素結合免疫測定法が挙げられる。
【０１２０】
本明細書に開示されている方法を実施するために有用であり得る多くの特異的イムノアッセイフォーマット及びその変形形態は、当業者に周知であろう。一般には、Ｅ．Ｍａｇｇｉｏ、Ｅｎｚｙｍｅ−Ｉｍｍｕｎｏａｓｓａｙ（１９８０）（ＣＲＣＰｒｅｓｓ，Ｉｎｃ．、Ｂｏｃａ  Ｒａｔｏｎ、Ｆｌａ．）を参照されたい；米国特許第４，７２７，０２２号、米国特許第４，６５９，６７８号、米国特許第４，３７６，１１０号、米国特許第４，２７５，１４９号、米国特許第４，２３３，４０２号、米国特許第４，２３０，７６７号も参照されたい、これらの各々はあらゆる目的のためにその全体が参照により本明細書中に援用される。
【０１２１】
抗体は、診断アッセイに好適な固体支持体（例えば、タンパク質Ａまたはタンパク質Ｇアガロースなどのビーズ、ラテックスまたはポリスチレンなどの材料から形成されたマイクロスフェア、プレート、スライドまたはウェル）に、受動結合などの公知の技術に従ってコンジュゲートすることができる。本明細書に記載されるとおりの抗体は、同様に、放射標識（例えば、３５Ｓ、１２５Ｉ、１３１Ｉ）、酵素標識（例えば、西洋ワサビペルオキシダーゼ、アルカリホスファターゼ）、及び蛍光標識（例えば、フルオレセイン、アレクサ（Ａｌｅｘａ）、緑色蛍光タンパク質、ローダミン）などの検出可能な標識または基と、公知の技術に従ってコンジュゲートしてもよい。
【０１２２】
抗体は、チロシンリン酸化、スレオニンリン酸化、セリンリン酸化、グリコシル化（例えばＯ−ＧｌｃＮＡｃ）などのタンパク質、ポリペプチド、変異体、及び多型の翻訳後修飾を検出するためにも有用であり得る。そのような抗体は、目的のタンパク質（単数または複数）におけるリン酸化アミノ酸を特異的に検出し、本明細書に記載の免疫ブロット、免疫蛍光、及びＥＬＩＳＡアッセイにおいて使用することができる。これらの抗体は、当業者に周知であり、市販されている。反射装置マトリックス支援レーザ離脱イオン化−飛行時間質量分析（ＭＡＬＤＩ−ＴＯＦ）において準安定イオンを用いても、翻訳後修飾を決定することができる（Ｗｉｒｔｈ，Ｕ．ら（２００２）Ｐｒｏｔｅｏｍｉｃｓ２（１０）：１４４５−５１）。
【０１２３】
いくつかの実施形態では、検出試薬は、少なくとも１つの検出部位を形成するために多孔性ストリップのような固相マトリックスに固定することができる。いくつかの実施形態では、バイオマーカーのヌクレオチドまたはポリペプチドにハイブリダイズする複数の検出剤を含むポリヌクレオチドアレイまたはポリペプチドアレイまたはマイクロアレイを利用する。あるいは、基質アレイは、例えば、固相基質上、例えば、米国特許第５，７４４，３０５号に記載の「チップ」上に存在し得る。あるいは、基質アレイは、溶液アレイであってもよい。
【０１２４】
ＣＤＸ２−ＫＬＦ４シグナル伝達経路における成分を検出するための組成物及び方法の非限定的な例は、米国特許第４７６２７０６号、同第５０８１２３０号、同第５３００６３１号、同第５４４３９５６号、同第７６９５９２６号、同第７７８５８１７号、同第７４７９３７６号、同第７３６４８６８号、及び米国特許出願公開第２００５０１９６７９３号、同第２０１１０２８１２７７号、同第２０１２０２５１５０９号、同第２００５０１８６６４２号、同第２０１４００１１２７９号、同第２０１１０１７１２２１号、同第２００４０２３５０７３号、同第２０１３００１１４１１号、及び同第２０１３００３４８６２号に記載されており、これらの各々はあらゆる目的のためにその全体が参照により本明細書中に援用される。
抗がん組成物
【０１２５】
本発明で利用することができる抗がん組成物は、少なくとも１つの活性薬剤を含む。いくつかの実施形態では、活性薬剤は、ＣＤＸ２−ＫＬＦ４シグナル伝達経路の活性を調節することができる。本明細書で用いる場合、用語「調節する」とは、組成物がＣＤＸ２−ＫＬＦ４シグナル伝達経路における成分の活性を増加、減少、排除、増強、遅延、減らす、または遮断することができることを指す。いくつかの実施形態では、化合物は、ＣＤＸ２活性を減少させる、及び／またはヒト対象におけるＫＬＦ４活性を増加させることができる。いくつかの実施形態では、化合物は、シグナル伝達経路における１つ以上の上流または下流成分の活性を増加または減少させることができる。いくつかの実施形態では、化合物は、ＫＬＦ４（例えば、ｐ２１）によって正に調節される１つ以上の下流成分の活性を増加させるかまたはＫＬＦ４（例えば、ＳＰ１）によって負に調節される１つ以上の下流成分の活性を減少させることができる。いくつかの実施形態では、化合物は、ＣＤＸ２によって正に調節される１つ以上の下流成分の活性を減少させるかまたはＣＤＸ２によって負に調節されるシグナル伝達経路における１つ以上の下流成分の活性を増加させることができる。
【０１２６】
任意の特定の理論に束縛されることを望まなければ、本発明の抗がん剤は、１つ以上の機序を介して作用することができる。そのような機序としては、限定的ではないが、（１）ＣＤＸ２活性の阻害；（２）ＫＬＦ４活性の誘導；（３）ｐ２１  ＣＤＫ阻害剤の誘導；（４）Ｇｌ／Ｓ細胞周期停止の誘導；（５）カスパーゼ３酵素の誘導；及び（６）アポトーシスの誘導が挙げられる。
【０１２７】
活性薬剤は、化合物または組成物、生体分子、またはそれらの組み合わせであってもよい。いくつかの実施形態では、活性薬剤は、小分子である。本明細書で用いる場合、用語「小分子」とは、５００ＭＷ未満の分子量を有する分子を指し、薬剤は、非ペプチジルまたはペプチド剤である。いくつかの実施形態では、活性薬剤は、抗体である。いくつかの実施形態では、活性薬剤は、抗体である。いくつかの実施形態では、活性薬剤は、ｓｉＲＮＡなどのポリヌクレオチドである。
【０１２８】
いくつかの実施形態では、活性薬剤は、ＣＤＸ２の活性を、例えば、ＤＮＡ、ＲＮＡ、タンパク質レベル、またはそれらの組み合わせで阻害または減少させることができる１つ以上のエンティティを含有する。
【０１２９】
いくつかの実施形態では、活性薬剤は、ＫＬＦ４を負に調節するかまたはＫＬＦ４によって負に調節されるＣＤＸ２−ＫＬＦ４シグナル伝達経路における成分の活性を減少、阻害または遅延させることができる１つ以上の抗体を含有する。いくつかの実施形態では、成分は、ＣＤＸ２、ｐ５３、ｐ２１、カスパーゼ−３、アネキシンＶ、ＢＡＸ、ＢＣＬ２、ＢＣＬ３、ＢＭＰ、Ｗｎｔ、ＨＮＦ４α、Ｆｇｆ、Ｈｏｘ、ＳＰ１、ＭＹＣ、ＣＣＮＤ１、またはＡＡＴＦであってもよい。いくつかの実施形態では、活性薬剤は、抗体である。いくつかの実施形態では、活性薬剤は、ｓｉＲＮＡである。例えば、抗ＣＤＸ２剤は、抗ＣＤＸ２抗体である。本発明によれば、抗ＣＤＸ２抗体は、１つ以上の抗ＣＤＸ２  ＣＤＲを少なくとも含む。
【０１３０】
ＣＤＸ２−ＫＬＦ４シグナル伝達経路における１つ以上の成分のＲＮＡ転写産物を標的にするため、例えば、アンチセンスＲＮＡ、リボザイム、ｄｓＲＮＡｉ、ＲＮＡ干渉（ＲＮＡｉ）技術を本発明で使用することができる。アンチセンスＲＮＡ技術には、細胞中の特定のｍＲＮＡで見られる配列に相補的であるかまたはアンチセンスであるＲＮＡ分子（またはＲＮＡ誘導体）を細胞中で発現させるかまたは細胞中に導入することを伴う。ｍＲＮＡと関連付けることで、アンチセンスＲＮＡは、コード化遺伝子産物の翻訳を阻害することができる。例えば、抗ＣＤＸ２剤は、Ｗａｎｇらにより開示されるもの（「Ｃｄｘ２のｓｉＲＮＡ標的化により、ヒト胃がんＭＧＣ−８０３細胞の増殖を阻害する」、ＷｏｒｌｄＪ  Ｇａｓｔｒｏｅｎｔｅｒｏｌ．  Ａｐｒ  ２８、２０１２；  １８（１６）：  １９０３−１９１４．）などの小さい干渉ＲＮＡ分子であってもよい。
【０１３１】
ＲＮＡ干渉（ＲＮＡｉ）は、動物及び植物における配列特異的、転写後遺伝子サイレンシングまたは転写遺伝子サイレンシングのプロセスであり、サイレンシングされる遺伝子と配列が相同な二本鎖ＲＮＡ（ｄｓＲＮＡ）により開始される。ＲＮＡｉ技術は、例えば、Ｅｌｉｂａｓｈｉｒら、ＭｅｔｈｏｄｓＥｎｚｙｍｏｌ．  ２６：１９９（２００２）；  ＭｃＭａｎｕｓ  ＆  Ｓｈａｒｐ，  Ｎａｔｕｒｅ  Ｒｅｖ．  Ｇｅｎｅｔｉｃｓ  ３：７３７（２００２）；  ＰＣＴ出願ＷＯ０１／７５１６４；Ｍａｒｔｉｎｅｚら、Ｃｅｌｌ  １１０：５６３（２００２）；  Ｅｌｂａｓｈｉｒら．、ｓｕｐｒａ；  Ｌａｇｏｓ−Ｑｕｉｎｔａｎａら、Ｃｕｒｒ．  Ｂｉｏｌ．  １２：７３５（２００２）；Ｔｕｓｃｈｌら、Ｎａｔｕｒｅ  Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌ．  ２０：４４６（２００２）；  Ｔｕｓｃｈｌ、Ｃｈｅｍｂｉｏｃｈｅｍ．  ２：２３９（２００１）；  Ｈａｒｂｏｒｔｈら、Ｊ．ＣｅｌｌＳｃｉ．  １１４：４５５７（２００１）；ら、ＥＭＢＯ  Ｊ．  ２０：６８７７（２００１）；  Ｌａｇｏｓ−Ｑｕｉｎｔａｎａら、Ｓｃｉｅｎｃｅ  ２９４：８５３８（２００１）；Ｈｕｔｖａｇｎｅｒら、ｌｏｃ  ｃｉｔ，  ８３４；  Ｅｌｂａｓｈｉｒら、Ｎａｔｕｒｅ  ４１１：  ４９４（２００１）に記載されている。
【０１３２】
用語「ｄｓＲＮＡ」または「ｄｓＲＮＡ分子」または「二本鎖ＲＮＡエフェクター分子」とは、二本鎖高次構造である少なくとも約１９ヌクレオチドまたはそれより長いヌクレオチドの領域を含有する少なくとも部分的に二本鎖のリボ核酸分子を指す。二本鎖ＲＮＡエフェクター分子は、２本の別々のＲＮＡ鎖から形成された二重鎖の二本鎖ＲＮＡであり得る、または少なくとも部分的に二本鎖のヘアピン高次構造（すなわち、ヘアピンｄｓＲＮＡまたはステムループｄｓＲＮＡ）を採ることができる自己相補性領域を有する単一のＲＮＡ鎖であり得る。様々な実施形態では、ｄｓＲＮＡは、リボヌクレオチドから完全になる、またはＲＮＡ／ＤＮＡハイブリッドなど、リボヌクレオチド及びデオキシヌクレオチドの混合物からなる。ｄｓＲＮＡは、分子のある１セグメントにおけるヌクレオチドが、分子の別の１セグメントにおけるヌクレオチドと塩基対形成するように、自己相補性領域を有する単一の分子であってもよい。一態様では、自己相補性領域同士は、分子の別の部分に対する相補性を欠き、よって一本鎖を維持する、少なくとも約３〜４ヌクレオチドまたは約５、６、７、９〜１５ヌクレオチドもしくはそれより長い領域（すなわち、「ループ領域」）によって連結される。そのような分子は、短い一本鎖５’及び／または３’末端を場合によって有する、部分的に二本鎖のステムループ構造をとる。一態様では、ヘアピンｄｓＲＮＡの自己相補性領域または二重鎖ｄｓＲＮＡの二本鎖領域は、エフェクター配列及びエフェクター相補体（例えば、ヘアピンｄｓＲＮＡにおける一本鎖ループ領域によって連結された）を含む。エフェクター配列またはエフェクター鎖は、ＲＩＳＣに組み入れられるまたはこれと会合する二本鎖領域または二重鎖の鎖である。一態様では、二本鎖ＲＮＡエフェクター分子は、標的遺伝子のＲＮＡに対する逆向きの相補体、または逆鎖複製中間体、または標的遺伝子の抗ゲノムプラス鎖または非ｍＲＮＡプラス鎖配列である、少なくとも１９連続したヌクレオチドエフェクター配列、好ましくは、１９〜２９、１９〜２７もしくは１９〜２１ヌクレオチドを含む。
【０１３３】
いくつかの実施形態では、本発明のｄｓＲＮＡエフェクター分子は、「ヘアピンｄｓＲＮＡ」、「ｄｓＲＮＡヘアピン」、「低分子ヘアピンＲＮＡ」または「ｓｈＲＮＡ」、すなわち、少なくとも１５〜１００ヌクレオチド（ｎｔ）（例えば、１７〜５０ｎｔ、１９〜２９ｎｔ）の少なくとも１ストレッチが、同じＲＮＡ分子に位置する相補配列と塩基対形成し（単一ＲＮＡ鎖）、前記配列及び相補配列が、少なくとも約４〜７ヌクレオチド（または約９〜約１５ｎｔ、約１５〜約１００ｎｔ、約１００〜約１０００ｎｔ）の不対領域により離間されている、おおよそ４００〜５００ヌクレオチド未満（ｎｔ）または１００〜２００ｎｔ未満のＲＮＡ分子であり、これは、塩基相補性の２領域により作製されるステム構造の上に一本鎖ループを形成する。ｓｈＲＮＡ分子は、阻害しようとする標的配列と相同かつ相補的な約１７〜約１００ｂｐ；約１７〜約５０ｂｐ；約４０〜約１００ｂｐ；約１８〜約４０ｂｐ；または約１９〜約２９ｂｐの二本鎖ステム領域と、塩基相補性の２領域により作製されたステム構造の上に一本鎖ループを形成する少なくとも約４〜７ヌクレオチドまたは約９〜約１５ヌクレオチド、約１５〜約１００ｎｔ、約１００〜約１０００ｎｔの不対ループ領域とを含む、少なくとも１個のステムループ構造を含む。しかしながら、ある配列とその直後にその逆向きの相補体を含むＲＮＡ分子は、無意味な「スタッファー（ｓｔｕｆｆｅｒ）」配列により離間していなくてもステムループ高次構造を採る傾向があるため、「ループ領域」または「ループ配列」を含むことが厳密には必要とされないことが分かるであろう。
【０１３４】
いくつかの実施形態では、活性薬剤は、ＫＬＦ４の活性を増加させる、またはＫＬＦ４によって正に調節されるＣＤＸ２−ＫＬＦ４シグナル伝達経路におけるエンティティの活性を増加させる、ＫＬＦ４を正に調節ことができるエンティティのの活性を、例えば、ＤＮＡ、ＲＮＡ、タンパク質レベル、またはそれらの組み合わせで増加させることができる１つ以上のエンティティを含有する。いくつかの実施形態では、本発明の活性薬剤は、２−インドリルイミダゾ［４，５−ｄ］フェナントロリン誘導体、例えば、米国特許第８，１４８，３９２号または米国特許出願公開第２００７／０１２３５５３Ａ１号に記載のものであり、それらの各々はあらゆる目的のためにその全体が参照により本明細書中に援用される。
【０１３５】
いくつかの実施形態では、化合物は、式Ｉの構造またはその塩を有し：
【化４】
2019218373.tif 000016
式中、Ｒ１は、Ｃ１−Ｃ４アルキルであり、Ｒ２は、ハロゲンである。いくつかの実施形態では、Ｒ１は、メチル、イソプロピル、またはｔ−ブチルである。
【０１３６】
いくつかの実施形態では、化合物は、式ＩＩの構造またはその塩を有する：
【化５】
2019218373.tif 000017
【０１３７】
いくつかの実施形態では、化合物は、構造式（ＩＩＩ）の構造またはその塩を有し：
【化６】
2019218373.tif 000018
式中、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ６、及びＲ７は、水素、ハロゲン、ヒドロキシル、チオール、低級アルキル、置換低級アルキル、低級アルケニル、置換低級アルケニル、低級アルキニル、置換低級アルキニル、アルコキシ、アルキルチオ、アシル、アリールオキシ、アミノ、アミド、カルボキシル、アリール、置換アリール、複素環、置換複素環、ヘテロアルキル、置換ヘテロアルキル、ヘテロアリール、置換ヘテロアリール、シクロアルキル、置換シクロアルキル、ニトロ、またはシアノまたは−Ｓ（Ｏ）１−２Ｒから独立して選択され、Ｒは、アルキル、置換アルキル、アリール、置換アリール、複素環、ヘテロアリール、置換複素環、または置換ヘテロアリールであり；及びＲ５は、Ｈ、アルキル、置換アルキル、アルケニル、置換アルケニル、アルキニル、置換アルキニル、アリール、置換アリール、ヘテロアリール、置換ヘテロアリール、アシル、−ＣＨ２−アリール、−ＣＨ２−ヘテロアリールである。
【０１３８】
いくつかの実施形態では、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４は、独立して水素；ハロゲン；Ｃ１−Ｃ４アルキル；Ｃ１−Ｃ４アルコキシ；またはＣ６−Ｃ１４アリールであり；Ｒ５は、水素；Ｃ１−Ｃ４アルキル；Ｃ６−Ｃ１４アリールで置換したＣ１−Ｃ４アルキル；またはＣ４−Ｃ６シクロアルキルであり；Ｒ６は、水素；ハロゲン；Ｃ１−Ｃ４アルキル；Ｃ５−Ｃ６ヘテロシクロアルキルで置換したＣ１−Ｃ４アルキルであり、ヘテロ原子は、Ｎ；Ｃ６−Ｃ１４アリール；Ｃ１−Ｃ４アルキルまたはハロで置換したＣ６−Ｃ１４アリール；Ｃ５−Ｃ６シクロアルキル；Ｃ５−Ｃ６ヘテロシクロアルキル；またはポリシクロアルキルである。いくつかの他の実施形態では、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４は、独立して水素；ハロゲン；Ｃ１−Ｃ４アルキル；Ｃ１−Ｃ４アルコキシ；またはフェニルであり；Ｒ５は、水素；Ｃ１−Ｃ４アルキル；フェニルで置換したＣ１−Ｃ４アルキル；またはシクロペンチルであり；Ｒ６は、水素；ハロゲン；Ｃ１−Ｃ４アルキル；Ｃ５−Ｃ６ヘテロシクロアルキルで置換したＣ１−Ｃ４アルキルであり、ヘテロ原子は、Ｎ；フェニル；Ｃ１−Ｃ４アルキルまたはハロで置換したフェニル；Ｃ５−Ｃ６シクロアルキル；Ｃ５−Ｃ６ヘテロシクロアルキル；またはアダマンタンであり；Ｒ７は、Ｈである。
【０１３９】
いくつかの実施形態では、前記化合物は、
【化７】
2019218373.tif 000019
からなる群から選択される式を有する。
【０１４０】
本発明の活性薬剤は、通常、投与前に製剤化される。従って、本発明は、本発明の１つ以上の活性薬剤を含む医薬組成物を提供する。いくつかの実施形態では、医薬組成物は、医薬的に許容される担体、希釈剤、または賦形剤を含む。医薬組成物は、周知かつ簡単に入手可能な成分を使用する公知の手順によって調製される。
【０１４１】
本発明の活性薬剤、または活性薬剤を含む医薬組成物は、任意の適切な方法を介して投与してもよく、限定的ではないが、投与量単位製剤における経口投与、局所投与、非経口投与、吸入またはスプレーによる投与、または直腸投与が挙げられる。一実施形態では、医薬組成物は、非経口的に、癌化細胞の近くに（ｐａｒａｃａｎｃｅｒａｌｌｙ）、経粘膜的に、経皮的に、筋肉内に、静脈内に、皮内に、皮下に、腹腔内に、心室内に、頭蓋内に、及び腫瘍内に投与される。いくつかの実施形態では、投与量単位製剤は、従来の非毒性の医薬的に許容される担体、アジュバント、及びビヒクルを含有する。通常の治療過程では、活性薬剤を、許容されるビヒクルに組み込み、患部に局所投与するための組成物、例えば、疎水性または親水性クリームまたはローション、または経口、直腸または非経口投与に適切な形態、例えば、シロップ剤、エリキシル剤、錠剤、トローチ剤、ロゼンジ剤、硬または軟カプセル剤、ピル、坐薬、油性または水性懸濁液、分散性粉末または顆粒、エマルジョン、注射物質、または溶液を形成する。本明細書で用いられる場合、用語「非経口」とは、限定的ではないが、皮下注射、皮内、関節内、静脈内、筋肉内、血管内、胸骨内、髄膜注射または注入技術が含まれる。
【０１４２】
本発明は、本発明の１つ以上の活性薬剤と、人工膜小胞（リポソーム、脂質ミセルなどを含む）、微粒子またはマイクロカプセルなどのビヒクルを含む医薬組成物も提供する。
【０１４３】
経口用途が意図される組成物は、固体または液体のいずれかの単位用量形態で調製してもよい。液体単位用量形態は、医薬組成物の製造のための当該技術分野で公知の手順によって調製することができ、そのような組成物は、薬学的に上品（ｅｌｅｇａｎｔ）でかつ口当たりがいい（ｐａｌａｔａｂｌｅ）の製剤を提供するために、甘味剤、香味剤、着色剤、及び保存剤からなる群から選択される１つ以上の薬剤を含有していてもよい。エリキシル剤は、芳香香味剤と共に、砂糖やサッカリンなどの適切な甘味料と共に含水アルコール（例えば、エタノール）ビヒクルを用いて調製される。懸濁液は、アカシア、トラガカント、メチルセルロースなどの懸濁剤の力を借りて水性ビヒクルと共に調製することができる。
【０１４４】
錠剤などの固形製剤は、錠剤の製造に適する無毒性の医薬的に許容される賦形剤との混合物として活性成分を含有する。これらの賦形剤は、例えば、炭酸カルシウム、炭酸ナトリウム、ラクトース、リン酸カルシウム、またはリン酸ナトリウムなどの不活性希釈剤；コーンスターチまたはアルギン酸などの造粒剤及び崩壊剤；デンプン、ゼラチン、アカシアなどの結合剤；ステアリン酸マグネシウム、ステアリン酸、またはタルクなどの滑沢剤；及びリン酸二カルシウム、ケイ酸アルミニウムマグネシウム、硫酸カルシウム、デンプン、乳糖、メチルセルロース、及び機能的に類似した物質などの他の従来の成分であってもよい。錠剤は、コーティングされていなくてよく、または胃腸管での崩壊及び吸収を遅延させ、それによってより長い期間にわたって作用を持続させるために、公知の技術によってコーティングされていてもよい。例えば、モノステアリン酸グリセリルまたはジステアリン酸グリセリルなどの時間遅延物質を用いてもよい。
【０１４５】
経口使用のための製剤は、活性成分が不活性固形希釈剤、例えば、炭酸カルシウム、リン酸カルシウム、またはカオリンと混合された硬質ゼラチンカプセルとして、または、活性成分が水、または、例えばピーナッツオイル、液体パラフィン、またはオリーブオイルのような油性媒体と混合された軟質ゼラチンカプセルとして提供することができる。軟質ゼラチンカプセルは、許容される植物油、軽質流動パラフィン、または他の不活性油で化合物のスラリーの機械カプセル化によって調製される。
【０１４６】
水性懸濁液は、水性懸濁液の製造に適切な賦形剤と混合した活性物質を含有する。そのような賦形剤は、例えば、カルボキシメチルセルロースナトリウム、メチルセルロース、ヒドロプロピルメチルセルロース、アルギン酸ナトリウム、ポリビニルピロリドン、トラガカントゴム、及びアカシアゴムなどの懸濁剤；天然に存在するホスファチド、例えば、レシチン、またはアルキレンオキシドと脂肪酸の縮合生成物、例えば、ポリオキシエチレンステアレート、またはエチレンオキシドと長鎖脂肪族アルコールの縮合生成物、例えば、ヘプタ−デカエチレンオキシエタノール、またはエチレンオキシドと脂肪酸及びヘキシトールから誘導される部分エステルとの縮合生成物、例えば、ポリオキシエチレンソルビトールモノオレエート、またはエチレンオキシドと脂肪酸及び無水ヘキシトールから誘導される部分エステルとの縮合生成物、例えば、ポリエチレンソルビタンモノオレエートのような分散剤または湿潤剤である。水性懸濁液は、１つ以上の保存剤、例えば、ｐ−ヒドロキシ安息香酸エチル若しくはｐ−ヒドロキシ安息香酸ｎ−プロピル、１つ以上の着色剤、１つ以上の香味剤、またはスクロース若しくはサッカリンのような１つ以上の甘味料も含有することができる。
【０１４７】
油性懸濁液は、活性成分を、植物油、例えば、落花生油、オリーブオイル、ごま油、またはココナッツオイルに、または、液体パラフィンのような鉱物油に懸濁することによって配合することができる。油性懸濁液は、濃化剤、例えば、蜜蝋、硬質パラフィン、またはセチルアルコールを含有していてもよい。上述のような甘味料、及び香味剤を添加して風味のよい経口製剤を提供することができる。これらの組成物は、アスコルビン酸などの抗酸化剤の添加によって腐敗を防ぐことができる。
【０１４８】
水を加えて水性懸濁液を調製するのに適した分散可能な粉末及び顆粒は、分散剤若しくは湿潤剤、懸濁剤、及び１つ以上の保存剤と混合して活性成分を提供する。適切な分散剤若しくは湿潤剤、及び懸濁剤は、すでに上で述べたものによって例示されている。追加の賦形剤、例えば、甘味料、香味剤、及び着色剤を存在させてもよい。
【０１４９】
本発明の医薬組成物は、水中油型エマルジョンの形態であってもよい。油相は、オリーブ油またはラッカセイ油などの植物油、または液体パラフィンなどの鉱物油、またはこれらの混合物であってもよい。適切な乳化剤は、アカシアガムもしくはトラガカントガムなどの天然に存在するガム、大豆、レシチンなどの天然ホスファチド、並びにソルビタンモノオレエートなどの脂肪酸とヘキシトール無水物とから誘導されるエステルもしくは部分エステル、及びポリオキシエチレンソルビタンモノオレエートなどの前記部分エステルとエチレンオキシドとの縮合生成物であってもよい。エマルジョンは、甘味剤及び香味剤を含有していてもよい。
【０１５０】
医薬組成物は、水性または油性懸濁液の無菌注射剤形態であってもよい。この懸濁液は、適切な分散剤または湿潤剤、及び上述したような懸濁剤を用いて、公知の技術に従って配合することができる。無菌の注射製剤は、非毒性の非経口的に許容される希釈剤または溶媒中の無菌の注射可能な溶液または懸濁液であってもよく、例えば、１，３−ブタンジオール中の溶液としてである。使用してもよい許容されるビヒクル及び溶媒としては、水、リンゲル溶液、及び等張性塩化ナトリウム溶液である。さらに、無菌の固定油は、従来から、溶媒または懸濁媒体として使用されている。この目的のため、合成モノグリセリドまたはジグリセリドを含む任意の刺激の少ない固定油を使用することができる。さらに、オレイン酸などの脂肪酸は、注射剤の調製における使用が見いだされている。局部麻酔薬、保存剤、及び緩衝液などのアジュバントも、注射液または懸濁液に含めることができる。
【０１５１】
いくつかの実施形態では、適切な送達系としては、持続放出（ｔｉｍｅ−ｒｅｌｅａｓｅ）、遅延放出、持続放出、または制御放出送達系が挙げられる。いくつかの実施形態では、本発明の組成物は、除放性マトリックスなどの制御放出系で送達することができる。除放性マトリックスの非限定的な例としては、ポリエステル、ヒドロゲル（例えば、Ｌａｎｇｅｒら，１９８１，Ｊ．Ｂｉｏｍｅｄ．Ｍａｔｅｒ．Ｒｅｓ．１５：１６７−２７７及びＬａｎｇｅｒ，１９８２，Ｃｈｅｍ．Ｔｅｃｈ．１２：９８−１０５に記載されるようなポリ（２−ヒドロキシエチル−メタクリレート）、またはポリ（ビニルアルコール））、ポリラクチド（米国特許第３，７７３，９１９号及びＥＰ５８，４８１）、Ｌ−グルタミン酸とγエチル−Ｌ−グルタメートとのコポリマー（Ｓｉｄｍａｎら、１９８３，Ｂｉｏｐｏｌｙｍｅｒｓ２２：５４７−５６）、非分解性エチレン−酢酸ビニル（Ｌａｎｇｅｒら、前出）、ＬＵＰＲＯＮ  ＤＥＰＯＴ商標（乳酸−グリコール酸コポリマーと酢酸リュープロリドの注射可能な小球）などの分解性乳酸−グリコール酸コポリマー、及びポリ−Ｄ（−）−３−ヒドロキシ酪酸（ＥＰ１３３，９８８）が挙げられる。いくつかの実施形態では、組成物は、静脈内注射、移植可能な浸透圧ポンプ、経皮貼布、リポソーム、または他の投与様式を用いて投与してもよい。一実施形態では、ポンプを使用してもよい（Ｌａｎｇｅｒ、前出；Ｓｅｆｔｏｎ、ＣＲＣＣｒｉｔ．  Ｒｅｆ．  Ｂｉｏｍｅｄ．  Ｅｎｇ．  １４：２０１（１９８７）；Ｂｕｃｈｗａｌｄら、Ｓｕｒｇｅｒｙ  ８８：５０７（１９８０）；Ｓａｕｄｅｋら、Ｎ．  Ｅｎｇｌ．Ｊ．  Ｍｅｄ．  ３２１  ：５７４（１９８９）を参照されたい）。別の実施形態では、ポリマー材料を使用することができる。さらに別の実施形態では、制御放出系は、治療標的、例えば、肝臓に近接して配置することができるため、全身用量のごく一部しか必要としない（例えば、Ｇｏｏｄｓｏｎ、ＭｅｄｉｃａｌＡｐｐｌｉｃａｔｉｏｎｓ  ｏｆ  Ｃｏｎｔｒｏｌｌｅｄ  Ｒｅｌｅａｓｅ、前出、ｖｏｌ．２、ｐｐ．１１５−１３８、１９８４を参照されたい）。他の制御放出系は、Ｌａｎｇｅｒによる総説（Ｓｃｉｅｎｃｅ２４９：１５２７−１５３３（１９９０）において考察されている。
【０１５２】
いくつかの実施形態では、組成物の放出は、一気に起こる。放出が一気に起こる系の例としては、例えば、高分子マトリックス中に封入され、特定の刺激、例えば、温度、ｐＨ、光、または分解酵素に対して感受性を有するリポソームに組成物が捕捉されている系や、組成物がマイクロカプセルコア分解酵素と共にイオンコートマイクロカプセルで被包されている系がある。
【０１５３】
いくつかの実施形態では、組成物の放出は、漸進的／連続的である。阻害剤の放出が漸進的かつ連続的である系の例としては、例えば、組成物がマトリックス内にある形態で含まれる浸蝕系、組成物が、例えば、ポリマーを通じて制御された速度で浸透する浸出系が挙げられる。このような持続放出系は、例えば、ペレットまたはカプセルの形態であり得る。
【０１５４】
本発明に従って投与される組成物の他の実施形態は、様々な投与経路（非経口、経肺、経鼻及び経口）のための微粒子形態、防護被覆、プロテアーゼ阻害剤、または透過促進剤を含む。
【０１５５】
本発明の医薬組成物は、薬剤を直腸内投与するための坐剤の形態で、一緒または別々に投与してもよい。これらの組成物は、薬剤を、常温では固体であるが、直腸内温度では液体になり、従って直腸内で融解し、薬剤を放出する、適切な非刺激性賦形剤と混合することによって調製することができる。そのような材料としては、ココアバター及びポリエチレングリコールが挙げられる。
【０１５６】
他の医薬組成物、及び医薬組成物を調製するための方法は、当該技術分野で公知であり、例えば、「Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ：Ｔｈｅ  Ｓｃｉｅｎｃｅ  ａｎｄ  Ｐｒａｃｔｉｃｅ  ｏｆ  Ｐｈａｒｍａｃｙ」（形式的には、「Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎｓ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｓｃｉｅｎｃｅｓ」）；Ｇｅｎｎａｒｏ，Ａ．，  Ｌｉｐｐｉｎｃｏｔｔ，  Ｗｉｌｌｉａｍｓ  ＆  Ｗｉｌｋｉｎｓ，  Ｐｈｉｌｉｄｅｌｐｈｉａ，  ＰＡ  （２０００）に記載されている。
【０１５７】
本発明の医薬組成物は、治療されるがんに応じて様々な経路で対象に投与してもよく、例えば、組成物は、投与量単位製剤で、経口投与、局所投与、非経口投与、吸入またはスプレーによる投与、または直腸投与してもよい。一実施形態では、化合物は、例えば、対象の血流へのボーラス注射または注入によって、または経口投与によって対象に体系的に投与される。１つ以上の公知の化学療法剤と併用する場合、化合物は、化学療法剤の投与前または投与後に投与することができ、または化学療法剤と同時に投与することができる。１つ以上の化学療法剤は、例えば、ボーラス注射、注入、または経口投与によって体系的に投与してもよい。
【０１５８】
本発明の医薬組成物は、（一次療法に対する）ネオアジュバント療法の一部として、またはアジュバント療法レジメンの一部として使用してもよい。本発明は、腫瘍発生及び進行における様々なステージ、限定的ではないが、進行性及び／または侵攻性新生物（すなわち、外科手術または放射線治療などの治療の局所モダリティによる治療に適していない対象における顕性疾患）、転移性疾患、局所進行性疾患、及び／または不応性腫瘍（すなわち、治療に応答していないがんまたは腫瘍）の治療において、本発明の医薬組成物の使用が考えられる。本明細書で用いる場合、用語「一次療法」とは、対象におけるがんの初期診断での第一線の治療を指す。典型的な一次療法は、外科手術、広範囲の化学療法、及び放射線治療を伴う場合がある。「アジュバント療法」とは、一次療法に続いて行われ、再発のリスクにある対象に投与される療法を指す。アジュバント全身療法は、一次療法の直後に開始し、再発を遅延させる、生存期間を延長させる、または対象を治療する。
【０１５９】
本発明の医薬組成物は、一次療法またはアジュバント療法の一部として、単独で、または１つ以上の他の抗がん剤（例えば、化学治療薬）と併用で使用することができる。本発明の医薬組成物、及び標準的化学療法剤の組み合わせは、化学療法剤の効果を改善するために作用してよいため、標準的がん治療を改善するために使用することができる。この応用は、標準治療に応答しない薬剤耐性がんの治療において重要になり得る。薬剤耐性がんは、例えば、腫瘍細胞集団の不均一性、化学療法への応用による変化、及び高まる悪性の可能性から生じることがある。そのような変化は、病気の進行したステージで頻繁にさらに顕著になることが多い。
【０１６０】
本発明の医薬組成物は、単独で、または放射線療法と組み合わせて使用することができる。いくつかの実施形態では、放射線療法は、約４０Ｇｙ〜約８０Ｇｙの用量で投与される。いくつかの実施形態では、用量は、約５０Ｇｙ〜約７０Ｇｙである。いくつかの実施形態では、用量は、約５０Ｇｙ〜約６５Ｇｙである。いくつかの実施形態では、放射線療法は、約５０Ｇｙ、約５５Ｇｙ、約６０Ｇｙ、または約６５Ｇｙの用量で投与される。
【０１６１】
投与する用量は、定義された制限に従わないが、通常は有効量である。それは、その所望の薬理学的及び生理学的効果を得る活性遊離薬の代謝放出で用量製剤から生成される薬理的活性遊離型とモルベースで同等のものである。組成物は、単位用量形態に調製してもよい。用語「単位用量形態」は、ヒト対象及び他の哺乳動物に対する単位用量として適当な物理的不連続単位を指し、各単位は、適当な医薬品賦形剤とともに所望の治療効果を得るために計算された活性物質の所定の量を含有する。
【０１６２】
いくつかの実施形態では、活性薬剤は、本明細書に記載の式の構造を有する化合物である。しかしながら、投与する化合物（または複数）の実際の量は、治療する状態、選択した投与経路、実際に投与する化合物、個々の患者の年齢、体重、及び応答、並びに患者の症状の重症度を含む、関連する状況を考慮して医師によって判断されることが理解されるであろう。上述の用量範囲は単に一例として提示され、本発明の範囲を制限することを目的にしてはいない。場合によっては、前記範囲の下限を下回る用量レベルで十分であるかもしれず、一方、別の場合では、さらに多い用量が、例えば、その多い量をまずいくつかの少ない量に分け１日かけて投与することによって、有害な副作用を引き起こさずに使用される場合がある。
【０１６３】
特定の患者に対する用量は、従来の考慮事項を使用して（例えば、適切な、従来の薬理学的プロトコルにより）、当業者によって決定され得る。医師は、例えば、最初に比較的低用量を処方し、次いで適切な応答が得られるまで用量を増加させ得る。個体に投与される用量は、施用に応じて、経時的に個体において有益な治療反応をもたらす、または、例えば、症状を減少させる、或いは他の適切な活性をもたらすのに十分である。用量は、特定の製剤の有効性、及び組成物の活性、安定性または血清中半減期、及び個体の状態、並びに処置される個体の体重または表面積によって決定される。用量の大きさは、特定の個体における、特定のベクター、製剤などの投与に伴う任意の有害な副作用の存在、性質、及び程度によっても決定される。
【０１６４】
いくつかの実施形態では、本発明の化合物の用量単位は、約０．００１ｍｇ、約０．００２ｍｇ、約０．００３ｍｇ、約０．００４ｍｇ、約０．００５ｍｇ、約０．００６ｍｇ、約０．００７ｍｇ、約０．００８ｍｇ、約０．００９ｍｇ、約０．０１ｍｇ、約０．０２ｍｇ、約０．０３ｍｇ、約０．０４ｍｇ、約０．０５ｍｇ、約０．０６ｍｇ、約０．０７ｍｇ、約０．０８ｍｇ、約０．０９ｍｇ、約０．１ｍｇ、約０．２ｍｇ、約０．３ｍｇ、約０．４ｍｇ、約０．５ｍｇ、約０．６ｍｇ、約０．７ｍｇ、約０．８ｍｇ、約０．９ｍｇ、約１ｍｇ、約２ｍｇ、約３ｍｇ、約４ｍｇ、約５ｍｇ、約６ｍｇ、約７ｍｇ、約８ｍｇ、約９ｍｇ、約１０ｍｇ、約１５ｍｇ、約２０ｍｇ、約３０ｍｇ、約３５ｍｇ、約４０ｍｇ、約４５ｍｇ、約５０ｍｇ、約６０ｍｇ、約７０ｍｇ、約８０ｍｇ、約９０ｍｇ、約１００ｍｇ、約２００ｍｇ、約３００ｍｇ、約４００ｍｇ、約５００ｍｇまたはそれ超であってもよい。
【０１６５】
いくつかの実施形態では、本発明の化合物の１日投与量は、通常、約０．００１ｍｇ／体重ｋｇ、約０．００２ｍｇ／体重ｋｇ、約０．００３ｍｇ／体重ｋｇ、約０．００４ｍｇ／体重ｋｇ、約０．００５ｍｇ／体重ｋｇ、約０．００６ｍｇ／体重ｋｇ、約０．００７ｍｇ／体重ｋｇ、約０．００８ｍｇ／体重ｋｇ、約０．００９ｍｇ／体重ｋｇ、約０．０１ｍｇ／体重ｋｇ、約０．０２ｍｇ／体重ｋｇ、約０．０３ｍｇ／体重ｋｇ、約０．０４ｍｇ／体重ｋｇ、約０．０５ｍｇ／体重ｋｇ、約０．０６ｍｇ／体重ｋｇ、約０．０７ｍｇ／体重ｋｇ、約０．０８ｍｇ／体重ｋｇ、約０．０９ｍｇ／体重ｋｇ、約０．１ｍｇ／体重ｋｇ、約０．２ｍｇ／体重ｋｇ、約０．３ｍｇ／体重ｋｇ、約０．４ｍｇ／体重ｋｇ、約０。５ｍｇ／体重ｋｇ、約０．６ｍｇ／体重ｋｇ、約０．７ｍｇ／体重ｋｇ、約０．８ｍｇ／体重ｋｇ、約０．９ｍｇ／体重ｋｇ、約１ｍｇ／体重ｋｇ、約２ｍｇ／体重ｋｇ、約３ｍｇ／体重ｋｇ、約４ｍｇ／体重ｋｇ、約５ｍｇ／体重ｋｇ、約６ｍｇ／体重ｋｇ、約７ｍｇ／体重ｋｇ、約８ｍｇ／体重ｋｇ、約９ｍｇ／体重ｋｇ、約１０ｍｇ／体重ｋｇ、約１５ｍｇ／体重ｋｇ、約２０ｍｇ／体重ｋｇ、約３０ｍｇ／体重ｋｇ、約３５ｍｇ／体重ｋｇ、約４０ｍｇ／体重ｋｇ、約４５ｍｇ／体重ｋｇ、約５０ｍｇ／体重ｋｇ、約６０ｍｇ／体重ｋｇ、約７０ｍｇ／体重ｋｇ、約８０ｍｇ／体重ｋｇ、約９０ｍｇ／体重ｋｇ、約１００ｍｇ／体重ｋｇ、約２００ｍｇ／体重ｋｇ、約３００ｍｇ／体重ｋｇ、約４００ｍｇ／体重ｋｇ、約５００ｍｇ／体重ｋｇまたはそれ超である。単回投与または分割投与のいずれかで使用することができる。
【０１６６】
いくつかの実施形態では、本発明の剤形は、化合物の遊離塩基等価物の前記ヒト対象における最大全血漿濃度をわずか約１ｐｇ／ｍＬ、約５ｐｇ／ｍＬ、約１０ｐｇ／ｍＬ、約５０ｐｇ／ｍＬ、約１００ｐｇ／ｍＬ、約５００ｐｇ／ｍＬ、約１ｎｇ／ｍＬ、約５ｎｇ／ｍＬ、約１０ｎｇ／ｍＬ、約５０ｎｇ／ｍＬ、約１００ｎｇ／ｍＬ、約５００ｎｇ／ｍＬ、約１μｇ／ｍＬ、約５μｇ／ｍＬ、約１０μｇ／ｍＬ、約５０μｇ／ｍＬ、約１００μｇ／ｍＬ、約５００μｇ／ｍＬ、約１ｍｇ／ｍＬ未満またはそれ超とするのに有効である。
【０１６７】
本明細書に記載の剤形のいずれかの別の態様では、剤形は、経口剤形である。さらに別の態様では、剤形は、静脈内剤形である。剤形は、特に、本明細書に記載の疾病のいずれかの治療における使用時に、ヒト対象への投与に適している。いくつかの実施形態では、剤形は、皮下剤形である。
【０１６８】
１つ以上の他の抗がん剤と組み合わせた本明細書に記載の１つ以上の化合物を含む医薬組成物も使用することができる。そのような共同治療は、当該治療の個々の成分の同時、逐次、または個別投与により達成してもよい。
【０１６９】
いくつかの実施形態では、抗がん剤は、化学療法剤である。いくつかの実施形態では、化学療法剤は、アルキル化剤、代謝拮抗薬、抗微小管剤、トポイソメラーゼ阻害剤、及び細胞傷害性抗生物質から選択される。化学療法剤の例としては、限定的ではないが、パクリタキセル（タキソール（登録商標））、ドセタキセル（タキソテール（登録商標））、シスプラチン、カルボプラチン（パラプラチン（登録商標））、ゲムシタビン塩酸塩（ジェムザール（登録商標））、ドキソルビシン、エトポシド（エトポホス（登録商標）、ベペシド（登録商標））、ペメトレキセド（アリムタ（登録商標））、トポテカン（ハイカムチン（登録商標））、ビンブラスチン（ベルベ（登録商標））、ビンデシン（エルジシン（登録商標））、ビノレルビン（ナベルビン（登録商標））、イホスファミド（ミトキサナ（登録商標））、マイトマイシン、及びゲムシタビンが挙げられる。これらの薬剤は、例えば、ビノレルビン及びシスプラチンまたはカルボプラチン；ゲムシタビンとシスプラチンまたはカルボプラチンまたはパクリタキセル；ＭＩＣ（マイトマイシン、イホスファミド及びシスプラチン）；ＭＶＰ（マイトマイシン、ビンブラスチン及びシスプラチン）；及びＥＣ（エトポシド及びカルボプラチン）と組み合わせて与えてもよい。有用な化学療法薬の例としては、限定的ではないが、ヒドロキシウレア、ブスルファン、シスプラチン、カルボプラチン、クロラムブシル、メルファラン、シクロホスファミド、イホスファミド、ダウノルビシン、ドキソルビシン、エピルビシン、ミトキサントロン、ビンクリスチン、ビンブラスチン、ナベルビン（登録商標）（ビノレルビン）、エトポシド、テニポシド、パクリタキセル、ドセタキセル、ゲムシタビン、シトシン、アラビノシド、ブレオマイシン、ネオカルシノスタチン、スラミン、タキソール、マイトマイシンＣなどが挙げられる。
【０１７０】
本明細書で用いる場合、用語「アルキル化剤」とは、タンパク質、ＲＮＡ、及びＤＮＡを含む、対象中の分子をアルキル化する能力を持つ薬剤を指す。アルキル化剤の非限定的な例としては、ナイトロジェンマスタード類、ニトロソウレア類、テトラジン類、アジリジン類、シスプラチン類及び誘導体、及び非古典的アルキル化剤が挙げられる。ナイトロジェンマスタード類としては、メクロレタミン、シクロホスファミド、メルファラン、クロラムブシル、イホスファミド、及びブスルファンが挙げられる。ニトロソウレア類としては、Ｎ−ニトロソ−Ｎ−メチルウレア（ＭＮＵ）、カルムスチン（ＢＣＮＵ）、ロムスチン（ＣＣＮＵ）、セムスチン（ＭｅＣＣＮＵ）、フォテムスチン、及びストレプトゾトシンが挙げられる。テトラジン類としては、ダカルバジン、ミトゾロミド、及びテモゾロミドが挙げられる。アジリジン類としては、チオテパ、マイトマイシン、及びジアジコン（ＡＺＱ）が挙げられる。シスプラチン類及び誘導体としては、シスプラチン、カルボプラチン、及びオキサリプラチンが挙げられる。これらは、生物学的に重要な分子中のアミノ基、カルボキシル基、スルフヒドリル基、及びリン酸基と共有結合を形成することで細胞機能を害する。［２０］非古典的アルキル化剤としては、プロカルバジン及びヘキサメチルメラミンが挙げられる。
【０１７１】
本明細書で用いる場合、用語「代謝拮抗薬」とは、ＤＮＡ、ＲＮＡ、またはタンパク質の合成を妨げる分子を指す。いくつかの実施形態では、代謝拮抗薬は、核酸塩基またはヌクレオシド（リン酸基のないヌクレオチド）のいずれかと似ているが、化学基が変化している。これらの薬剤は、ＤＮＡ合成に必要な酵素を阻害するかまたはＤＮＡもしくはＲＮＡに組み込まれるかのいずれかによって効果を発揮する。ＤＮＡ合成に関わる酵素を阻害することで、ＤＮＡがそれ自体を複製できなくなるため、有糸分裂を防ぐ。分子がＤＮＡに誤取り込みされた後、ＤＮＡ損傷が起こり得、プログラムされた細胞死（アポトーシス）が誘発される。いくつかの実施形態では、代謝拮抗薬は、抗葉酸剤、フルオロピリミジン類、デオキシヌクレオシド類似体、及びチオプリンである。いくつかの実施形態では、代謝拮抗薬は、メトトレキサート、ペメトレキセド、フルオロウラシル、カペシタビン、シタラビン、ゲムシタビン、デシタビン、ビダーザ、フルダラビン、ネララビン、クラドリビン、クロファラビン、ペントスタチン、チオグアニン、及びメルカプトプリンから選択される。
【０１７２】
本明細書で用いる場合、用語「抗微小管剤」とは、微小管機能を阻止することによって細胞分裂を遮断する化学物質を指す。そのような薬剤の代表的な例としては、タキサン類（例えば、パクリタキセル（以下により詳細に記載される）及びドセタキセル）（Ｓｃｈｉｆｆら．，Ｎａｔｕｒｅ  ２７７：  ６６５−６６７，  １９７９；  Ｌｏｎｇ  ａｎｄ  Ｆａｉｒｃｈｉｌｄ，  Ｃａｎｃｅｒ  Ｒｅｓｅａｒｃｈ  ５４：  ４３５５−４３６１，  １９９４；Ｒｉｎｇｅｌ  ａｎｄ  Ｈｏｒｗｉｔｚ，  Ｊ．  Ｎａｔｌ．  Ｃａｎｃｅｒ  Ｉｎｓｔ．  ８３（４）：  ２８８−２９１，  １９９１；  Ｐａｚｄｕｒら，  ＣａｎｃｅｒＴｒｅａｔ．  Ｒｅｖ．  １９（４）：  ３５１−３８６，  １９９３）、カンポテシン、ミトキサントロン、エレウテロビン（例えば、米国特許第５，４７３，０５７号）、サルコディクチン類（サルコディクチンＡを含む）、エポチロン類Ａ及びＢ（Ｂｏｌｌａｇら．，Ｃａｎｃｅｒ  Ｒｅｓｅａｒｃｈ  ５５：  ２３２５−２３３３，  １９９５）、ディスコデルモライド（ｔｅｒ  Ｈａａｒら．，  Ｂｉｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ  ３５：  ２４３−２５０，１９９６）、酸化重水素（Ｄ２Ｏ）（Ｊａｍｅｓａｎｄ  Ｌｅｆｅｂｖｒｅ，  Ｇｅｎｅｔｉｃｓ  １３０（２）：  ３０５−３１４，  １９９２；  Ｓｏｌｌｏｔｔら．，  Ｊ．  Ｃｌｉｎ．  Ｉｎｖｅｓｔ．  ９５：  １８６９−１８７６，１９９５）、ヘキシレングリコール（２−メチル−２，４−ペンタンジオール）（Ｏｋａら，  Ｃｅｌｌ  Ｓｔｒｕｃｔ．  Ｆｕｎｃｔ．  １６（２）：  １２５−１３４，  １９９１）、ツベルシジン（７−デアザアデノシン）（Ｍｏｏｂｅｒｒｙら．，Ｃａｎｃｅｒ  Ｌｅｔｔ．  ９６（２）：  ２６１−２６６，  １９９５）、ＬＹ２９０１８１（２−アミノ−４−（３−ピリジル）−４Ｈ−ナフト（１，２−ｂ）ピラン−３−カルボニトリル）（Ｐａｎｄａら．，Ｊ．  Ｂｉｏｌ．  Ｃｈｅｍ．  ２７２（１２）：  ７６８１−７６８７，  １９９７；  Ｗｏｏｄら，  Ｍｏｌ．  Ｐｈａｒｍａｃｏｌ．  ５２（３）：  ４３７−４４４，１９９７）、フッ化アルミニウム（Ｓｏｎｇら，  Ｊ．  Ｃｅｌｌ．  Ｓｃｉ．  Ｓｕｐｐｌ．  １４：  １４７−１５０，  １９９１）、エチレングリコールビス−（スクシンイミジルスクシネート）（Ｃａｐｌｏｗａｎｄ  Ｓｈａｎｋｓ，  Ｊ．  Ｂｉｏｌ．  Ｃｈｅｍ．  ２６５（１５）：  ８９３５−８９４１，  １９９０）、グリシンエチルエステル（Ｍｅｊｉｌｌａｎｏら，  Ｂｉｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ３１（１３）：  ３４７８−３４８３，  １９９２）、ノコダゾール（Ｄｉｎｇら，  Ｊ．  Ｅｘｐ．  Ｍｅｄ  １７１（３）：  ７１５−７２７，  １９９０；  Ｄｏｔｔｉら．，Ｊ．  Ｃｅｌｌ  Ｓｃｉ．  Ｓｕｐｐｌ．  １５：  ７５−８４，  １９９１；Ｏｋａら．，  Ｃｅｌｌ  Ｓｔｒｕｃｔ．  Ｆｕｎｃｔ．  １６（２）：  １２５−１３４，１９９１；  Ｗｅｉｍｅｒら，  Ｊ．  Ｃｅｌｌ．  Ｂｉｏｌ．  １３６（１），  ７１−８０，  １９９７）、サイトカラシンＢ（Ｉｌｌｉｎｇｅｒら，  Ｂｉｏｌ．  Ｃｅｌｌ７３（２−３）：  １３１−１３８，  １９９１）、コルヒチン及びＣＩ９８０（Ａｌｌｅｎら，Ａｍ．  Ｊ．  Ｐｈｙｓｉｏｌ．  ２６１（４Ｐｔ．１）：Ｌ３１５−Ｌ３２１，１９９１；  Ｄｉｎｇら，  Ｊ．  Ｅｘｐ．  Ｍｅｄ．  １７１（３）：７１５−７２７，  １９９０；Ｇｏｎｚａｌｅｚら，  Ｅｘｐ．  Ｃｅｌｌ．  Ｒｅｓ．  １９２（１）：１０−１５，１９９１；  Ｓｔａｒｇｅｌｌら．，  Ｍｏｌ．  Ｃｅｌｌ．  Ｂｉｏｌ．  １２（４）：  １４４３−１４５０，  １９９２；Ｇａｒｃｉａら，  Ａｎｔｉｃａｎ．  Ｄｒｕｇｓ６（４）：５３３−５４４，  １９９５）、コルセミド（Ｂａｒｌｏｗら．，  Ｃｅｌｌ．  Ｍｏｔｉｌ．  Ｃｙｔｏｓｋｅｌｅｔｏｎ  １９（１）：  ９−１７，  １９９１；Ｍｅｓｃｈｉｎｉら，  Ｊ．  Ｍｉｃｒｏｓｃ．  １７６（Ｐｔ．３）：  ２０４−２１０，  １９９４；  Ｏｋａら，  Ｃｅｌｌ  Ｓｔｒｕｃｔ．  Ｆｕｎｃｔ．  １６（２）：１２５−１３４，  １９９１）、ポドフィロトキシン（Ｄｉｎｇら，  Ｊ．  Ｅｘｐ．  Ｍｅｄ．  １７１（３）：  ７１５−７２７，  １９９０）、ベノミル（Ｈａｒｄｗｉｃｋら．，Ｊ．  Ｃｅｌｌ．  Ｂｉｏｌ．  １３１（３）：  ７０９−７２０，  １９９５；  Ｓｈｅｒｏら．，  Ｇｅｎｅｓ  Ｄｅｖ．  ５（４）：  ５４９−５６０，  １９９１）、オリザリン（Ｓｔａｒｇｅｌｌら，Ｍｏｌ．  Ｃｅｌｌ．  Ｂｉｏｌ．  １２（４）：  １４４３−１４５０，  １９９２）、マジュスクラミドＣ（Ｍｏｏｒｅ，  Ｊ．  Ｉｎｄ．  Ｍｉｃｒｏｂｉｏｌ．  １６（２）：１３４−１４３，  １９９６）、デメコルシン（Ｖａｎ  Ｄｏｌａｈ  ａｎｄ  Ｒａｍｓｄｅｌｌ，  Ｊ．  Ｃｅｌｌ．  Ｐｈｙｓｉｏｌ．  １６６（１）：  ４９−５６，  １９９６；Ｗｉｅｍｅｒら，  Ｊ．  Ｃｅｌｌ．  Ｂｉｏｌ．  １３６（１）：  ７１−８０，  １９９７）、メチル−２−ベンズイミダゾールカルバミン酸（ＭＢＣ）（Ｂｒｏｗｎら．，Ｊ．  Ｃｅｌｌ．  Ｂｉｏｌ．  １２３（２）：  ３８７−４０３，  １９９３）、ＬＹ１９５４４８（Ｂａｒｌｏｗ  ＆  Ｃａｂｒａｌ，  Ｃｅｌｌ  Ｍｏｔｉｌ．  Ｃｙｔｏｓｋｅｌ．１９：  ９−１７，  １９９１）、サブチリシン（Ｓａｏｕｄｉら．，  Ｊ．  Ｃｅｌｌ  Ｓｃｉ．  １０８：  ３５７−３６７，  １９９５）、１０６９Ｃ８５（Ｒａｙｎａｕｄら，Ｃａｎｃｅｒ  Ｃｈｅｍｏｔｈｅｒ  Ｐｈａｒｍａｃｏｌ．  ３５：  １６９−１７３，  １９９４）、ステガナシン（Ｈａｍｅｌ，  Ｍｅｄ．  Ｒｅｓ．  Ｒｅｖ．  １６（２）：２０７−２３１，  １９９６）、コンブレタスタチン類（Ｈａｍｅｌ，  Ｍｅｄ  Ｒｅｓ．  Ｒｅｖ．  １６（２）：  ２０７−２３１，  １９９６）、クラシン類（Ｈａｍｅｌ，Ｍｅｄ．  Ｒｅｓ．  Ｒｅｖ．  １６（２）：  ２０７−２３１，  １９９６）、エストラジオール（Ａｉｚｕ−Ｙｏｋａｔａら．，  Ｃａｒｃｉｎｏｇｅｎ．  １５（９）：１８７５−１８７９，  １９９４）、２−メトキシエストラジオール（Ｈａｍｅｌ，  Ｍｅｄ．  Ｒｅｓ．  Ｒｅｖ．  １６（２）：  ２０７−２３１，  １９９６）、フラバノール類（Ｈａｍｅｌ，Ｍｅｄ．  Ｒｅｓ．  Ｒｅｖ．  １６（２）：  ２０７−２３１，  １９９６）、ロテノン（Ｈａｍｅｌ，  Ｍｅｄ  Ｒｅｓ．  Ｒｅｖ．  １６（２）：  ２０７−２３１，  １９９６）、グリセオフルビン（Ｈａｍｅｌ，Ｍｅｄ  Ｒｅｓ．  Ｒｅｖ．  １６（２）：  ２０７−２３１，  １９９６）、ビンカアルカロイド類、例えば、ビンブラ��チン及びビンクリスチン（Ｄｉｎｇら．，  Ｊ．  Ｅｘｐ．Ｍｅｄ  １７１（３）：  ７１５−７２７，  １９９０；Ｄｉｒｋら．，  Ｎｅｕｒｏｃｈｅｍ．  Ｒｅｓ．  １５（１１）：  １１３５−１１３９，  １９９０；  Ｈａｍｅｌ，Ｍｅｄ．  Ｒｅｓ．  Ｒｅｖ．  １６（２）：  ２０７−２３１，  １９９６；  Ｉｌｌｉｎｇｅｒら．，  Ｂｉｏｌ．  Ｃｅｌｌ  ７３（２−３）：  １３１−１３８，  １９９１；Ｗｉｅｍｅｒら，  Ｊ．  Ｃｅｌｌ．  Ｂｉｏｌ．  １３６（１）：  ７１−８０，  １９９７）、メイタンシノイド類及びアンサマイトシン類（Ｈａｍｅｌ，  Ｍｅｄ  Ｒｅｓ．Ｒｅｖ．  １６（２）：  ２０７−２３１，  １９９６）、リゾキシン（Ｈａｍｅｌ，  Ｍｅｄ．  Ｒｅｓ．  Ｒｅｖ．  １６（２）：  ２０７−２３１，  １９９６）、ホモプシンＡ（Ｈａｍｅｌ，Ｍｅｄ．  Ｒｅｓ．  Ｒｅｖ．  １６（２）：  ２０７−２３１，  １９９６）、ウスチロキシン類（Ｈａｍｅｌ，  Ｍｅｄ．  Ｒｅｓ．  Ｒｅｖ．  １６（２）：  ２０７−２３１，１９９６）、ドラスタチン１０（Ｈａｍｅｌ，  Ｍｅｄ  Ｒｅｓ．  Ｒｅｖ．  １６（２）：  ２０７−２３１，  １９９６）、ドラスタチン１５（Ｈａｍｅｌ，  Ｍｅｄ．  Ｒｅｓ．Ｒｅｖ．  １６（２）：  ２０７−２３１，  １９９６）、ハリコンドリン類及びハリスタチン類（Ｈａｍｅｌ，  Ｍｅｄ．  Ｒｅｓ．  Ｒｅｖ．  １６（２）：  ２０７−２３１，１９９６）、スポンジスタチン類（Ｈａｍｅｌ，  Ｍｅｄ．  Ｒｅｓ．  Ｒｅｖ．  １６（２）：  ２０７−２３１，  １９９６）、クリプトフィシン類（Ｈａｍｅｌ，  Ｍｅｄ．Ｒｅｓ．  Ｒｅｖ．  １６（２）：  ２０７−２３１，  １９９６）、ラジニラム（Ｈａｍｅｌ，  Ｍｅｄ．  Ｒｅｓ．  Ｒｅｖ．  １６（２）：  ２０７−２３１，  １９９６）、ベタイン（Ｈａｓｈｉｍｏｔｏら，Ｚｏｏｌ．  Ｓｃｉ．  １：  １９５−２０４，  １９８４）、タウリン（Ｈａｓｈｉｍｏｔｏら，  Ｚｏｏｌ．  Ｓｃｉ．  １：  １９５−２０４，  １９８４）、イセチオネート（Ｈａｓｈｉｍｏｔｏら，Ｚｏｏｌ．  Ｓｃｉ．  １：  １９５−２０４，  １９８４）、ＨＯ−２２１（Ａｎｄｏら，  Ｃａｎｃｅｒ  Ｃｈｅｍｏｔｈｅｒ  Ｐｈａｒｍａｃｏｌ．  ３７：  ６３−６９，１９９５）、アドシアスルフェート−２（Ｓａｋｏｗｉｃｚら．，  Ｓｃｉｅｎｃｅ  ２８０：  ２９２−２９５，  １９９８）、エストラムスチン（Ｐａｎｄａら．，  Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．  Ａｃａｄ．  Ｓｃｉ．  ＵＳＡ  ９４：  １０５６０−１０５６４，  １９９７）、モノクローナル抗イディオタイプ抗体（Ｌｅｕら．，  Ｐｒｏｃ．  Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．  Ｓｃｉ．  ＵＳＡ  ９１（２２）：  １０６９０−１０６９４，  １９９４）、微小管重合促進タンパク質（タキソール様タンパク質、ＴＡＬＰ）（Ｈｗａｎｇら．，Ｂｉｏｃｈｅｍ．  Ｂｉｏｐｈｙｓ．  Ｒｅｓ．Ｃｏｍｍｕｎ．  ２０８（３）：  １１７４−１１８０，  １９９５）、低張により誘発された細胞膨張（１９０ｍｏｓｍｏｌ／Ｌ）条件、インスリン（１００ｍｍｏｌ／Ｌ）またはグルタミン（１０ｍｍｏｌ／Ｌ）（Ｈａｕｓｓｉｎｇｅｒら．，Ｂｉｏｃｈｅｍ．  Ｃｅｌｌ．  Ｂｉｏｌ．  ７２（１−２）：１２−１９，  １９９４）、ダイニン結合（Ｏｈｂａら，  Ｂｉｏｃｈｉｍ．  Ｂｉ��ｐｈｙｓ．  Ａｃｔａ  １１５８（３）：３２３−３３２，  １９９３）、ジベレリン（Ｍｉｔａ  ａｎｄ  Ｓｈｉｂａｏｋａ，  Ｐｒｏｔｏｐｌａｓｍａ  １１９（１／２）：  １００−１０９，  １９８４）、ＸＣＨＯＩ（キネシン様タンパク質）（Ｙｏｎｅｔａｎｉら，Ｍｏｌ．  Ｂｉｏｌ．  Ｃｅｌｌ  ７（ｓｕｐｐｌ）：  ２１１Ａ，  １９９６）、リゾホスファチジン酸（Ｃｏｏｋら．，  Ｍｏｌ．  Ｂｉｏｌ．  Ｃｅｌｌ  ６（ｓｕｐｐｌ）：２６０Ａ，  １９９５）、リチウムイオン（Ｂｈａｔｔａｃｈａｒｙｙａ  ａｎｄ  Ｗｏｌｆｆ，  Ｂｉｏｃｈｅｍ．  Ｂｉｏｐｈｙｓ．  Ｒｅｓ．  Ｃｏｍｍｕｎ．  ７３（２）：３８３−３９０，  １７６）、植物細胞壁成分（例えば、ポリ−Ｌ−リシン及びエクステンシン）（Ａｋａｓｈｉら，  Ｐｌａｎｔａ  １８２（３）：  ３６３−３６９，  １９９０）、グリセロール緩衝液（Ｓｃｈｉｌｓｔｒａら，Ｂｉｏｃｈｅｍ．  Ｊ．  ２７７（Ｐｔ．３）：  ８３９−８４７，  １９９１；Ｆａｒｒｅｌｌ  ａｎｄ  Ｋｅａｔｅｓ，  Ｂｉｏｃｈｅｍ．  Ｃｅｌｌ．  Ｂｉｏｌ．  ６８（１１）：１２５６−１２６１，  １９９０；  Ｌｏｐｅｚら．，  Ｊ．  Ｃｅｌｌ．  Ｂｉｏｃｈｅｍ．  ４３（３）：  ２８１−２９１，  １９９０）、Ｔｒｉｔｏｎ  Ｘ−１００微小管安定化緩衝液（Ｂｒｏｗｎら，Ｊ．  Ｃｅｌｌ  Ｓｃｉ．  １０４（Ｐｔ．２）：  ３３９−３５２，  １９９３；  Ｓａｆｉｅｊｋｏ−Ｍｒｏｃｚｋａ  ａｎｄ  Ｂｅｌｌ，  Ｊ．  Ｈｉｓｔｏｃｈｅｍ．Ｃｙｔｏｃｈｅｍ．  ４４（６）：  ６４１−６５６，  １９９６）、微小管関連タンパク質（例えば、ＭＡＰ２、ＭＡＰ４、ｔａｕ、ｂｉｇ、ｔａｕ、エンスコンシン、延長因子−１−α（ＥＦ−１α）、及びＥ−ＭＡＰ−１１５）（Ｂｕｒｇｅｓｓら，ＣｅｌｌＭｏｔｉｌ．  Ｃｙｔｏｓｋｅｌｅｔｏｎ  ２０（４）：  ２８９−３００，  １９９１；  Ｓａｏｕｄｉら．，  Ｊ．  Ｃｅｌｌ．  Ｓｃｉ．  １０８（Ｐｔ．１）：３５７−３６７，１９９５；  Ｂｕｌｉｎｓｋｉ  ａｎｄ  Ｂｏｓｓｉｅｒ，  Ｊ．  Ｃｅｌｌ．  Ｓｃｉ．
１０７（Ｐｔ．１０）：  ２８３９−２８４９，  １９９４；Ｏｏｋａｔａら，  Ｊ．  Ｃｅｌｌ  Ｂｉｏｌ．  １２８（５）：  ８４９−８６２，  １９９５；  Ｂｏｙｎｅら，  Ｊ．  Ｃｏｍｐ．  Ｎｅｕｒｏｌ  ３５８（２）：  ２７９−２９３，１９９５；  Ｆｅｒｒｅｉｒａａｎｄ  Ｃａｃｅｒｅｓ，  Ｊ．  Ｎｅｕｒｏｓｃｉ．  １１（２）：  ３９２−４００，  １９９１；  Ｔｈｕｒｓｔｏｎら．，  Ｃｈｒｏｍｏｓｏｍａ１０５（１）：  ２０−３０，  １９９６；  Ｗａｎｇら．，  Ｂｒａｉｎ  Ｒｅｓ．  Ｍｏｌ．Ｂｒａｉｎ  Ｒｅｓ．  ３８（２）：  ２００−２０８，  １９９６；  Ｍｏｏｒｅａｎｄ  Ｃｙｒ，  Ｍｏｌ．  Ｂｉｏｌ．  Ｃｅｌｌ  ７  （ｓｕｐｐｌ）：  ２２１−Ａ，  １９９６；  Ｍａｓｓｏｎ  ａｎｄ  Ｋｒｅｉｓ，  Ｊ．  Ｃｅｌｌ  Ｂｉｏｌ．１２３（２），  ３５７−３７１，  １９９３）、細胞体（例えば、ヒストンＨ１、ミエリン塩基性タンパク質、及び動原体）（Ｓａｏｕｄｉら，  Ｊ．  Ｃｅｌｌ．  Ｓｃｉ．１０８（Ｐｔ．１）：  ３５７−３６７，  １９９５；  Ｓｉｍｅｒｌｙら．，  Ｊ．  Ｃｅｌｌ  Ｂｉｏｌ．  １１１（４）：  １４９１−１５０４，  １９９０）、内因性微小管構造（例えば、軸糸構造、プラグ、及びＧＴＰキャップ）、（Ｄｙｅら．，Ｃｅｌｌ  Ｍｏｔｉｌ．  Ｃｙｔｏｓｋｅｌｅｔｏｎ  ２１（３）：  １７１−１８６，  １９９２；  Ａｚｈａｒ  ａｎｄ  Ｍｕｒｐｈｙ，Ｃｅｌｌ  Ｍｏｔｉｌ．  Ｃｙｔｏｓｋｅｌｅｔｏｎ１５（３）：  １５６−１６１，  １９９０；  Ｗａｌｋｅｒら，  Ｊ．  Ｃｅｌｌ  Ｂｉｏｌ．  １１４（１）：  ７３−８１，  １９９１；  Ｄｒｅｃｈｓｅｌ  ａｎｄ  Ｋｉｒｓｃｈｎｅｒ，Ｃｕｒｒ．  Ｂｉｏｌ．  ４（１２）：  １０５３−１０６１，  １９９４）、ポリペプチドのみの安定な管（例えば、ＳＴＯＰ１４５及びＳＴＯＰ２２０）（Ｐｉｒｏｌｌｅｔら，Ｂｉｏｃｈｉｍ．  Ｂｉｏｐｈｙｓ．  Ａｃｔａ  １１６０（１）：  １１３−１１９，  １９９２；  Ｐｉｒｏｌｌｅｔら，  Ｂｉｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ  ３１（３７）：  ８８４９−８８５５，１９９２；  Ｂｏｓｃら，  Ｐｒｏｃ．  Ｎａｔｌ．  Ａｃａｄ．  Ｓｃｉ．  ＵＳＡ  ９３（５）：  ２１２５−２１３０，  １９９６；  Ｍａｒｇｏｌｉｓら．，  ＥＭＢＯＪ．  ９（１２）：  ４０９５−４１０２，  １９９０）、及び有糸分裂力の張力（Ｎｉｃｋｌａｓ  ａｎｄ  Ｗａｒｄ，  Ｊ．  Ｃｅｌｌ  Ｂｉｏｌ．  １２６（５）：  １２４１−１２５３，１９９４）、並びに上記の任意の類似体及び誘導体が挙げられる。そのような化合物は、微小管（例えば、コルヒチン及びビンブラスチン）を解重合するかまたは微小管形成（例えば、パクリタキセル）を安定化させることで作用することができる。
【０１７３】
いくつかの実施形態では、抗腫瘍剤としては、分裂阻害剤、例えば、ビンブラスチン、ビノレルビン、ビンデシン、及びビンクリスチンなどのビンカアルカロイド誘導体；コルヒン、アロコチン、ハリコンドリン、Ｎ−ベンゾイルトリメチル−メチルエーテルコルヒチン酸、ドラスタチン１０、メイスタンシン、リゾキシン、タキソール（パクリタキセル）、ドセタキセル（タキソテール）、２’−Ｎ−［３−（ジメチルアミノ）プロピル］グルタルアマート（タキソール誘導体）などのタキサン、チオコルヒチン、トリチルシステイン、テニポシド、メトトレキセート、アザチオプリン、フルオロウラシル、シトシンアラビノシド、２’２’−ジフルオロデオキシシチジン（ゲムシタビン）、アドリアマイシン、及びミタマイシンが挙げられる。アルキル化剤としては、例えば、シスプラチン、カルボプラチン、オキシプラチン、イプロプラチン、Ｎ−アセチル−ＤＬ−サルコシル−Ｌ−ロイシンのエチルエステル（ＡｓａｌｅｙまたはＡｓａｌｅｘ）、１，４−シクロヘキサジエン−１，４−ジカルバミン酸、２，５−ビス（１−アジリニジル）−３，６−ジオキソ−、ジエチルエーテル（ジアジクオン）、１，４−ビス（メタンスルホニルオキシ）ブタン（ビスルファンまたはロイコスルファン）クロロゾトシン、クロメソン、シアノモルホリノドキソルビシン、シクロジソン、ジアンヒドログラシトール、フルオロドパン、ヘプスルファム、マイトマイシンＣ、ヒカントン、マイトマイシンＣ、ミトゾラミド、１−（２−クロロエチル）−４−（３−クロロプロピル）−ピペラジン二塩酸塩、ピペラジンジオン、ピポブロマン、ポルフィロマイシン、スピロヒダントインマスタード、テロキシロン、テトラプラチン、チオテパ、トリエチレンメラミン、ウラシルナイトロジェンマスタード、ビス（３−メシルオキシプロピル）アミン塩酸塩、マイトマイシン、シクロヘキシル−クロロエチルニトロソウレア、メチルシクロヘキシル−クロロエチルニトロソウレア、１−（２−クロロエチル）−３−（２，６−ジオキソ−３−ピペリジル）−１−ニトロソ−ウレア、ビス（２−クロロエチル）ニトロソウレアなどのニトロソウレア剤、プロカルバジン、ダカルバジン、メクロロエタミン、シクロホスファミド、イホスアミド、メルファラン、クロラムブシル、リン酸エストラムスチンナトリウム、ストレプトゾトシン、及びテモゾラミドなどのナイトロジェンマスタード関連化合物が挙げられる。ＤＮＡ代謝拮抗薬としては、例えば、５−フルオロウラシル、シトシンアラビノシド、ヒドロキシウレア、２−［（３ヒドロキシ−２−ピリノジニル）メチレン］−ヒドラジンカルボチオアミド、デオキシフルオロウリジン、５−ヒドロキシ−２−ホルミルピリジンチオセミカルバゾン、α−２’−デオキシ−６−チオグアノシン、アフィディコリングリシン酸塩、５−アザデオキシシチジン、β−チオグアニンデオキシリボシド、サイクロシチジン、グアナゾール、イノシングリコジアルデヒド、マクベシンＩＩ、ピラゾールイミダゾール、クラドリビン、ペントスタチン、チオグアニン、メルカプトプリン、ブレオマイシン、２−クロロデオキシアデノシン、ラルチトレキセド及びペメトレキセド２ナトリウム、クロファラビン��フロクスウリジン及びフルダラビンなどのチミジル酸合成酵素の阻害剤が挙げられる。ＤＮＡ／ＲＮＡ代謝拮抗薬としては、例えば、Ｌ−アラノシン、５−アザシチジン、アシビシン、アミノプテリン、及びＮ−［２−クロロ−５−［［（２，４−ジアミノ−５−メチル−６−キナゾリニル）メチル］アミノ］ベンゾイル］−Ｌ−アスパラギン酸、Ｎ−［４−［［（２，４−ジアミノ−５−エチル−６−キナゾリニル）メチル］アミノ］ベンゾイル］−Ｌ−アスパラギン酸、Ｎ−［２−クロロ−４−［［（２，４−ジアミノプテリジニル）メチル］アミノ］ベンゾイル］−Ｌ−アスパラギン酸などのその誘導体、可溶性ベイカーアンチホル、ジクロロアリルローソン、ブレキナル、フトラフ、ジヒドロ−５−アザシチジン、メトトレキセート、Ｎ−（ホスホノアセチル）−Ｌ−アスパラギン酸４ナトリウム塩、ピラゾフラン、トリメトレキセート、プリカマイシン、アクチノマイシンＤ、クリプトフィシン、及びクリプトフィシン−５２または、例えば、Ｎ−（５−［Ｎ−（３，４−ジヒドロ−２−メチル−４−オキソキナゾリン−６−イルメチル）−Ｎ−メチルアミノ］−２−テノイル）−Ｌ−グルタミン酸などの欧州特許出願第２３９３６２号に開示されている好ましい代謝拮抗薬のうちの１つなどの類似体；成長因子阻害剤；細胞周期阻害剤；インターカレート抗生物質、例えば、アドリアマイシン及びブレオマイシン；タンパク質、例えば、インターフェロン；及び抗ホルモン剤、例えば、ノルバデックス商標（タモキシフェン）などの抗エストロゲン剤または、例えば、カソデックス商標（４’−シアノ−３−（４−フルオロフェニルスルホニル）−２−ヒドロキシ−２−メチル−３’−（トリフルオロメチル）プロピオンアニリド）などの抗アンドロゲン剤が挙げられる。
【０１７４】
本明細書で用いる場合、用語「トポイソメラーゼ阻害剤」とは、トポイソメラーゼＩ及び／またはトポイソメラーゼＩＩの活性を調節することができる薬剤を指す。いくつかの実施形態では、本発明のトポイソメラーゼ阻害剤は、トポイソメラーゼＩ阻害剤であってもよく、いくつかの実施形態では、カンプトテシン誘導体であってもよい。本発明のカンプトテシン誘導体は、限定的ではないが、ベロテカン（ＣＫＤ６０２）、カンプトテシン、７−エチル−１０−ヒドロキシ−ＣＰＴ、１０−ヒドロキシ−ＣＰＴ、ルビテカン（９−ニトロ−ＣＰＴ）、７−エチル−ＣＰＴ、トポテカン、イリノテカン、シラテカン（ＤＢ６７）、及び任意のそれらの組み合わせであってもよい。本発明のいくつかの実施形態では、トポイソメラーゼＩ阻害剤は、インデノイソキノリン誘導体であってもよく、限定的ではないが、ＮＳＣ７０６７４４、ＮＳＣ７２５７７６、ＮＳＣ７２４９９８、及び任意のそれらの組み合わせであってもよい。本発明の別の実施形態では、トポイソメラーゼ阻害剤は、トポイソメラーゼＩＩ阻害剤であり、いくつかの実施形態では、アクリジン誘導体であってもよく、限定的ではないが、アムサクリンであってもよく、いくつかの実施形態では、トポイソメラーゼＩＩ阻害剤は、ポドフィロトキシン誘導体であってもよく、限定的ではないが、エトポシドであってもよく、いくつかの実施形態では、トポイソメラーゼＩＩ阻害剤は、ビスジオキソピペラジン誘導体であってもよく、限定的ではないが、ＩＣＲＦ−１９３、デクスラゾキサン（ＩＣＲＦ−１８７）、及び任意のそれらの組み合わせであってもよい。本発明のさらに別の実施形態では、トポイソメラーゼ阻害剤は、レスベラトロール（ＰＭＩＤ：２０３０４５５３；ＰＭＩＤ：１５７９６５８４）４１、没食子酸エピガロカテキン（ＰＭＩＤ：１８２９３９４０；ＰＭＩＤ：１１５９４７５８；ＰＭＩＤ：１１５５８５７６；ＰＭＩＤ：１３１３２３２）４２，４３、ゲニステイン（ＰＭＩＤ：１７４５８９４１）４４、ダイゼイン（ＰＭＩＤ：１７４５８９４１）４５、ケルセチン（ＰＭＩＤ：１３１３２３２；ＰＭＩＤ：１６９５０８０６；ＰＭＩＤ：１５３１２０４９）、トポイソメラーゼを阻害する天然フラボン関連ケルセチン、例えば、アカセチン、アピゲニン、ケンフェロール、及びモリン（ＰＭＩＤ：８５６７６８８）４６−４８、ルテオリン（ＰＭＩＤ：１２０２７８０７；ＰＭＩＤ：１６９５０８０６；ＰＭＩＤ：１５３１２０４９）４６；ミリセチン（ＰＭＩＤ：２００２５９９３）４９、及び任意のそれらの組み合わせであってもよい。特定の実施形態では、トポイソメラーゼ阻害剤は、トポイソメラーゼＩ、トポイソメラーゼＩＩ、または両方を標的にする干渉ＲＮＡ（ＲＮＡｉ）分子であってもよい。ＲＮＡｉ分子の非限定的な例としては、当該技術分野で公知のように小干渉ＲＮＡ（ｓｉＲＮＡ）、短ヘアピンＲＮＡ（ｓｈＲＮＡ）、マイクロＲＮＡ（ｍｉＲＮＡ）、アンチセンス核酸分子などが挙げられる。本発明のｓｉＲＮＡｓ及びｓｈＲＮＡｓの非限定的な例としては、表２に提供される。いくつかの実施形態では、ジンクフィンガーヌクレアーゼ、抗体、及び／またはリボザイムを用いて、本発明の方法でトポイソメラーゼ活性を阻害することができる。
【０１７５】
本明細書で用いる場合、用語「細胞毒性抗生物質」細胞毒性抗生物質s  としては、限定的ではないが、が挙げられるアンチノマイシン、ブレオマイシン、マイトマイシン、プリカマイシンなど。チロシンキナーゼ阻害剤の例としては、限定的ではないが、ニロチニブ、イマチニブ、ゲフィチニブ、エルロチニブ、セツキシマブ、パニツムマブ、ザルツムマブ、ニモツズマブ、マツズマンなどが挙げられる。
【０１７６】
いくつかの実施形態では、他の抗がん剤は、アレムツズマブ、ベバシズマブ、セツキシマブ、ゲムツズマブ、リツキシマブ、及びトラスツズマブなどのモノクローナル抗体；アミノレブリン酸、アミノレブリン酸メチル、ポルフィマーナトリウム、及びベルテポルフィンなどの光増感剤；及び、アリトレチノイン、アルトレタミン、アムサクリン、アナグレリド、三酸化ヒ素、アスパラギナーゼ、ベキサロテン、ボルテゾミブ、セレコキシブ、デニロイキンジフチトクス、エルロチニブ、エストラムスチン、ゲフィチニブ、ヒドロキシカルバミド、イマチニブ、ペントスタチン、マソプロコール、ミトタン、ペガスパルガーゼ、及びトレチノインなどの他の薬剤である。
【０１７７】
いくつかの実施形態では、他の抗がん剤は、急性リンパ芽球性白血病（ＡＬＬ）、急性骨髄性白血病（ＡＭＬ）、慢性リンパ性白血病（ＣＬＬ）、慢性骨髄性白血病（ＣＭＬ）、及び髄膜白血病の薬剤など、白血病の治療に使用することができるものであり、限定的ではないが、アビトレキサート（メトトレキサート）、アドリアマイシンＰＦＳ（塩酸ドキソルビシン）、アドリアマイシンＲＤＦ（塩酸ドキソルビシン）、アラノン（ネララビン）、エルウィニア・クリサンテミ由来アスパラギナーゼ、セルビジン（塩酸ダウノルビシン）、クラフェン（シクロホスファミド）、クロファラビン、クロファレックス（クロファラビン）、クロラール（クロファラビン）、シクロホスファミド、シタラビン、サイトサール−Ｕ（シタラビン）、サイトキサン（シクロホスファミド）、ダサチニブ、塩酸ダウノルビシン、塩酸ドキソルビシン、エルウィナーゼ（エルウィニア・クリサンテミ由来アスパラギナーゼ）、フォレックス（メトトレキサート）、フォレックスＰＦＳ（メトトレキサート）、グリベック（メシル酸イマチニブ）、イクルシグ（ポナチニブ塩酸塩）、メシル酸イマチニブ、マルキボ（硫酸ビンクリスチンリポソーム）、メルカプトプリン、メトトレキサート、メトトレキサートＬＰＦ（メトトレキセート）、メキサート（メトトレキサート）、メキサート−ＡＱ（メトトレキサート）、ネララビン、ネオサール（シクロホスファミド）、オンカスパー（ペグアスパラガーゼ）、ペグアスパラガーゼ、プリネトール（メルカプトプリン）、ルビドマイシン（塩酸ダウノルビシン）、スプリセル（ダサチニブ）、タラビンＰＦＳ（シタラビン）、ビンカサールＰＦＳ、硫酸ビンクリスチン）、硫酸ビンクリスチン、硫酸ビンクリスチンリポソーム、ハイパーＣＶＡＤ、アドリアマイシンＰＦＳ（塩酸ドキソルビシン）、アドリアマイシンＲＤＦ（塩酸ドキソルビシン）、三酸化ヒ素、セルビジン（塩酸ダウノルビシン）、クラフェン（シクロホスファミド）、シクロホスファミド、シタラビン、サイトサール−Ｕ（シタラビン）、サイトキサン（シクロホスファミド）、塩酸ダウノルビシン、塩酸ドキソルビシン、ネオサール（シクロホスファミド）、ルビドマイシン（塩酸ダウノルビシン）、タラビンＰＦＳ（シタラビン）、トリセノックス（三酸化ヒ素）、ビンカサールＰＦＳ（硫酸ビンクリスチン）、硫酸ビンクリスチン、ＡＤＥ、アレムツズマブ、アンボクロリン（クロラムブシル）、アンボクロリン（クロラムブシル）、アルゼラ（オファツムマブ）、ベンダムスチン、ヒドロクロリド、カンパス（アレムツズマブ）、クロラムブシル、クラフェン（シクロホスファミド）、シクロホスファミド、サイトキサン（シクロホスファミド）、フルダラ（リン酸フルダラビン）、リン酸フルダラビン、ガジバ（オビヌツズマブ）、イブルチニブ、インブルビカ（イブルチニブ）、ロイケラン（クロラムブシル）、リンフォリジン（クロラムブシル）、ネオサール（シクロホスファミド）、オビヌツズマブ、オファツムマブ、トレアンダ（塩酸ベンダムスチン）、クロラムブシル−プレドニソン、ＣＶＰ、ボスリフ（ボスチニブ）、ボスチニブ、ブスルファン、ブスルフェックス（ブスルファン）、クラフェン（シクロホスファミド）、シクロホスファミド、シタラビン、サイトサール−Ｕ（シタラビン）、サイトキサン（シクロホスファミド）、ダサチニブ、グリベック（メシル酸イマチニブ）、イクルシグ（ポナチニブ塩酸塩）、メシル酸イマチニブ、マイレラン（ブスルファン）、ネオサール（シクロホスファミド）、ニロチニブ、オマセタキシンメペスクシナート、ポナチニブ塩酸塩、スプリセル（ダサチニブ）、シンリボ（オマセタキシンメペスクシナート）、タラビンＰＦＳ（シタラビン）、タシグナ（ニロチニブ）、シタラビン、サイトサール−Ｕ（シタラビン）、及びタラビンＰＦＳ（シタラビン）が挙げられる。
【０１７８】
いくつかの実施形態では、本発明の化合物と共に使用することができる追加の抗がん剤としては、ＥＧＦＲ（上皮成長因子受容体）の反応を阻害することができる薬剤、例えば、ＥＧＦＲ抗体、ＥＧＦ抗体、及びＥＧＦＲ阻害剤である分子；ＶＥＧＦ（血管内皮成長因子）阻害剤；並びにｅｒｂＢ２受容体阻害剤、例えば、ｅｒｂＢ２受容体に結合する有機分子または抗体が挙げられる。ＥＧＦＲ阻害剤は、例えば、ＷＯ９５／１９９７０、ＷＯ９８／１４４５１、ＷＯ９８／０２４３４、及び米国特許第５，７４７，４９８号に記載されている。ＥＧＦＲ阻害剤としては、限定的ではないが、モノクローナル抗体であるＣ２２５と抗ＥＧＦＲ２２Ｍａｂ（米国ニューヨーク州ニューヨークのインクローン・システムズ・インコーポレーテッド）、化合物ＺＤ−１８３９（アストラゼネカ）、化合物ＢＩＢＸ−１３８２（ベーリンガー・インゲルハイム）、化合物ＭＤＸ−４４７（米国ニュージャージー州アナンデールのメダレックス社）、化合物ＯＬＸ−１０３（米国ニュージャージー州ホワイトハウスステーションのメルク＆Ｃｏ．）、ＶＲＣＴＣ−３１０（ヴェンテック・リサーチ）、及びＥＧＦ融合毒素（マサチューセッツ州ホプキントンのセラゲン社）が挙げられる。ＶＥＧＦ阻害剤、例えば、ＡＧ−１３７３６（ファイザー社）は、化合物と組み合わせかまたは併用投与することもできる。ＶＥＧＦ阻害剤は、例えば、ＷＯ９９／２４４４０、ＷＯ９５／２１６１３、ＷＯ９９／６１４２２、米国特許第５，８３４，５０４号、ＷＯ９８／５０３５６（１９９８年１１月１２日に公表）、米国特許第５，８８３，１１３号、米国特許第５，８８６，０２０号、米国特許第５，７９２，７８３号、米国特許第６，５３４，５２４号、ＷＯ９９／１０３４９、ＷＯ９７／３２８５６、ＷＯ９７／２２５９６、ＷＯ９８／５４０９３、及びＷＯ９８／０２４３７に記載されており、これらの全ては、それら全体が参照により本明細書中に組み込まれる。いくつかの特定のＶＥＧＦ阻害剤の他の例としては、ＩＭ８６２（米国ワシントン州カークランドのサイトラン社）；アバスチン商標またはベバシズマブ、抗ＶＥＧＦモノクローナル抗体（カリフォルニア州サウス・サンフランシスコのジェネンテック社）；及びアンギオザイム、リボザイム（コロラド州ボウルダー）とチロン  （カリフォルニア州エメリービル）からの合成リボザイムがある。ＧＷ−２８２９７４（グラクソ・ウェルコムｐｌｃ）及びモノクローナル抗体であるＡＲ−２０９（米国テキサス州ウッドランドのアロネックス・ファーマスーティカルズ社）と２Ｂ−１（チロン）などのＥｒｂＢ２受容体阻害剤は、組成物と組み合わせて投与してもよい。そのようなｅｒｂＢ２阻害剤としては、ＷＯ９８／０２４３４、ＷＯ９９／３５１４６、ＷＯ９９／３５１３２、ＷＯ９８／０２４３７、ＷＯ９７／１３７６０、ＷＯ９５／１９９７０、米国特許第５，５８７，４５８号、及び米国特許第５，８７７，３０５号に記載のものが挙げられ、これらの各々は、その全体が参照により本明細書中に援用される。
【０１７９】
いくつかの実施形態では、連続投与スケジュールを治療に用いる。いくつかの実施形態では、本発明の化合物を含む剤形の化合物を１日１回、１日２回、１日３回、または１日４回以上、または１日連続的に、または１日中ずっと連続的に、毎日、または１日おきに、２日おきに、３日おきに、４日おきに、５日おきに、または週１回投与する。治療は、がん細胞が完全にまたは著しく阻害されるまで、医者によって決められた期間継続してもよい。
【０１８０】
いくつかの実施形態では、間欠投与スケジュールを治療に用いる。そのような治療は、毒性の懸念がある場合、特に有用である。いくつかの実施形態では、
【実施例】
【０１８１】
以下の実施例は、本発明の様々な態様を示す。当然のことながら、実施例は、本発明の特定の実施形態のみを説明することだけを目的とし、本発明の範囲を限定しようとするものではないことを理解すべきである。
実施例１−白血病、リンパ腫、及び多発性骨髄腫細胞株におけるＬＯＲ−２５３のインビトロ抗増殖活性
【０１８２】
ＬＯＲ−２５３の抗増殖活性は、次のようなＸＴＴアッセイによって決定した。増殖培地１００μＬ中の細胞（４×１０３／ウェル）を９６ウェル細胞培養プレートに播種し、３７℃で一晩インキュベートした。各実験で記載したように、培地を除去し、ＬＯＲ−２５３（または０．１％ＤＭＳＯビヒクル対照）を含有する総容量１００μＬの増殖培地と交換した。懸濁細胞細胞を５０μＬ増殖培地中に載置し（４−６×１０３／ウェル）、ＬＯＲ−２５３（または０．１％ＤＭＳＯビヒクル対照）を含有する５０μＬ増殖培地を各ウェルに加えた。細胞を３７℃で５日間インキュベーション後、ナトリウム３’−［１−（フェニルアミノ−カルボニル）−３，４−テトラゾリウム｝−ビス（４−メトキシ−６−ニトロ）ベンゼンスルホン酸水和物（ＸＴＴ）比色分析アッセイ（Ｒｏｃｈｅ）を用いて、細胞生存を定量化した。ＸＴＴ標識試薬（１ｍｇ／ｍＬ）を製造者の指示書に従って電子共役用試薬と混合し、混合物５０μＬを細胞に直接加えた。プレートを３７℃で４時間さらにインキュベートし、各ウェルの吸光度をマルチウェル分光光度計（Ｂｉｏ−ＴｅｋＩｎｓｔｒｕｍｅｎｔｓ  Ｉｎｃ．）により４９０ｎｍで測定した。データをブランクに対して調整し、ビヒクル対照と比べた細胞増殖の割合として表した（Ｒｅｆ．  Ｈｕｅｓｃａら．，Ｍｏｌ  Ｃａｎｃｅｒ  Ｔｈｅｒ．  ２００９．  ８：２５８６−９６；  Ｌｏｒｕｓ  ｐｕｂｌｉｃａｔｉｏｎ  ｏｎ  ＬＯＲ−１３３）。
【０１８３】
インビトロアッセイ結果（図３）は、ＨＬ−６０、ＭＶ４１１、ＴＨＰ−１、ＨＥＬ９２．１．７、ＣＣＲＦ−ＣＥＭ、ＭＯＬＴ−４、Ｊｕｒｋａｔ、Ｋ−５６２、Ｒａｍｏｓ、及びＲａｊｉなどのＡＭＬ細胞株を含む白血病／リンパ腫がＬＯＲ−２５３に対して最も感受性が高い細胞株であるが、肺がん、膀胱がん、結腸がん、前立腺がん、黒色腫、及び乳がんの他の細胞株はＬＯＲ−２５３に対する感受性が低いことを示している。ＬＯＲ−２５３に対する感受性の変動は、先天性のＫＬＦ４抑制の度合いに起因してもよい。各白血病及びリンパ腫細胞株に対するＬＯＲ−２５３のＩＣ５０値を以下に示す。
【表６】
2019218373.tif 000020
【表７−１】
2019218373.tif 000021
【表７−２】
2019218373.tif 000022
実施例２−インビトロでのＡＭＬ細胞株におけるＫＬＦ４／ｐ２１誘発
【０１８４】
ＫＬＦ４及び／またはｐ２１発現がＬＯＲ−２５３によって誘発されたかどうか判断するため、ＡＭＬ細胞（ＴＨＰ１、ＨＬ−６０）をＤＭＳＯ（ビヒクル対照）または０．５μΜ  ＬＯＲ−２５３で１６時間処理した。製造者の指示書に従って、全ＲＮＡをＴＲＩｚｏｌプラスＲＮＡ精製キット（Ａｍｂｉｏｎ、ＬｉｆｅＴｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ）を用いて抽出した。ランダムヘキサマープライマー（Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ）及びＳｕｐｅｒＳｃｒｉｐｔ  ＩＩ逆転写酵素キット（Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ）を用いて、一本鎖ｃＤＮＡを１〜２ｕｇ全ＲＮＡから合成した。ｃＤＮＡを用いて、ＡＢＩプリズム７０００配列検出システムで定量的ＲＴ−ＰＣＲを行い、ヒトＴａｑＭａｎ遺伝子発現アッセイプライマー／プローブをクルッペル様因子４（ＫＬＦ４）、サイクリン依存性キナーゼ阻害剤１Ａ（ｐ２１）、及びＡＢＩ  ＴａｑＭａｎユニバーサルＰＣＲマスターミックスプロトコルに対して設定する。遺伝子発現を、同じ試料中でβ−アクチン遺伝子発現で正規化し、ＫＬＦ４またはｐ２１における倍数変化を、比較ＣＴ法を用いて、ＤＭＳＯ処理した試料中の対応する発現レベルに対して表した。ＴＨＰ１及びＨＬ−６０  ＡＭＬ細胞株をＬＯＲ−２５３で処理することで、ＫＬＦ４及びｐ２１発現の増加がもたらされる（図４を参照）。
実施例３−ＬＯＲ−２５３による処理は、ＡＭＬ細胞株におけるＧ１／Ｓ細胞周期停止をもたらす。
【０１８５】
ＴＨＰ１及びＨＬ−６０  ＡＭＬ細胞株をＤＭＳＯ（ビヒクル対照）または０．５μΜ  ＬＯＲ−２５３で１６時間処理した。細胞をＰＢＳ＋１％ＦＣＳで１回洗浄し、氷冷７０％エタノールを用いて一晩固定した。固定した細胞を２回洗浄し、２０μｇ／ｍＬヨウ化プロピジウムと２５０μｇ／ｍＬ  ＲＮａｓｅＡを含有するＰＩ／ＲＮａｓｅＡ溶液中で再懸濁させ、３７℃で３０分間染色した。染色した細胞を、ＢＤ  ＦＡＣＳＣａｌｉｂｕｒフローサイトメーターを用いて分析した。ＬＯＲ−２５３による処理が、ＡＭＬ細胞株におけるＧ１／Ｓ細胞周期停止をもたらすことを結果は示している（図５）
実施例４−ＬＯＲ−２５３による処理は、細胞株におけるアポトーシスを誘発する。
【０１８６】
ＴＨＰ−１細胞をＤＭＳＯ、０．５または１ｕＭのＬＯＲ−２５３で１６時間処理した。細胞を冷たいＰＢＳで２回洗浄し、アネキシンＶ結合緩衝液中に再懸濁させた。１００μＬ中１×１０５細胞をＦＩＴＣ−アネキシンＶ及びヨウ化プロピジウムで染色し、室温で１５分間インキュベートした。染色後、結合緩衝液４００ｕｌを加え、ＢＤ  ＦＡＣＳＣａｎｔｏフローサイトメーター上で分析されるまで、細胞を氷上に保持した。ＬＯＲ−２５３で処理したＴＨＰ−１細胞は、アネキシンＶ染色の上昇を示し、これは、アポトーシスの誘導を示すものである。細胞を処理するのに用いたＬＯＲ−２５３の濃度を増すことで、早期アポトーシス集団（Ｑ３：アネキシンＶ＋／ＰＩ−）の増加をもたらした。ＬＯＲ−２５３による処理は、ＡＭＬ細胞株におけるアポトーシスを誘発したことを結果は示している（図６）。
【０１８７】
ＴＨＰ１及びＨＬ−６０細胞をＤＭＳＯ（ビヒクル対照）または０．５μΜ  ＬＯＲ−２５３で４８時間処理した。細胞溶解物を、１％Ｔｒｉｔｏｎ−Ｘ１００溶解物を用いて回収した。製造者のプロトコルに従って、細胞溶解物５μｇによるＥｎｚＣｈｅｋカスパーゼ−３アッセイキット＃１（ＬｉｆｅＴｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ）を用いてカスパーゼ３活性を測定した。ＴＨＰ１及びＨＬ−６０細胞をＬＯＲ−２５３で処理することで、カスパーゼ３活性の上昇をもたらし、これは、アポトーシスの誘導を示すものである（図７）。
【０１８８】
ＴＨＰ１細胞をＤＭＳＯ（ビヒクル対照）または０．５μΜ  ＬＯＲ−２５３で４８時間処理した。製造者の指示書に従って、全ＲＮＡをＴＲＩｚｏｌプラスＲＮＡ精製キット（Ａｍｂｉｏｎ、ＬｉｆｅＴｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ）を用いて抽出した。ランダムヘキサマープライマー（Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ）及びＳｕｐｅｒＳｃｒｉｐｔ  ＩＩ逆転写酵素キット（Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ）を用いて、一本鎖ｃＤＮＡを１〜２ｕｇ全ＲＮＡから合成した。ｃＤＮＡを用いて、ＡＢＩプリズム７０００配列検出システムで定量的ＲＴ−ＰＣＲを行い、ヒトＴａｑＭａｎ遺伝子発現アッセイプライマー／プローブをＢＣＬ２関連Ｘタンパク質（ＢＡＸ）、Ｂ細胞ＣＬＬ／リンパ腫２（ＢＣＬ２）、及びＡＢＩ  ＴａｑＭａｎユニバーサルＰＣＲマスターミックスプロトコルに対して設定する。遺伝子発現を、同じ試料中でβ−アクチン遺伝子発現で正規化し、ＢＡＸまたはＢＣＬ２における倍数変化を、比較ＣＴ法を用いて、ＤＭＳＯ処理した試料中の対応する発現レベルに対して表した。ＴＨＰ１細胞をＬＯＲ−２５３で処理した際のＢＡＸの上昇及びＢＣＬ２の抑制は、アポトーシスの誘導を示している（図８）。
実施例５−Ｈ２２６異種移植モデルにおけるＬＯＲ−２５３  ＨＣＬのインビボ効果−用量及びスケジュール。
【０１８９】
Ｈ２２６モデルマウスを以下の表に示すようないくつかの投与スケジュールに従って処理した。
【表８】
2019218373.tif 000023
【０１９０】
群２、３、及び４は、ＬＯＲ−２５３によって効率的に処理されることを結果は示している（図９）。１週間隔のスケジュールは、２週間隔よりも優れていることを結果は示しており、週間投与スケジュールが好ましいいことを示している。
実施例６−ＬＯＲ−２５３  ＨＣＬで処理された異種移植ＣＤ−１ヌードマウスにおけるインビボの用量依存性薬物動態（ＰＫ）及び薬力学（ＰＤ）反応
【０１９１】
ＬＯＲ−２５３で処理された腫瘍細胞の薬物動態（ＰＫ）を試験するため、ＣＤ−１ヌードマウスを１、５、及び１５ｍｇ／ｋｇでＬＯＲ−２５３  ＨＣ１の静脈内ボーラス注射によって処理した。ＬＯＲ−２５３の血清レベルを測定した。ＬＯＲ−２５３の血清レベルは用量依存的に増加することを結果は示している（図１０）。
【０１９２】
薬力学（ＰＤ）反応を試験するため、マウスを１、５、及び１５ｍｇ／ｋｇ  ＬＯＲ−２５３で５日連続で処理した。腫瘍を最後の用量の１６時間後に測定し、ＫＬＦ−４タンパク質レベルを測定した。平均ＫＬＦ４タンパク質レベルは、用量依存的に増加し、腫瘍生体内分布と用量応答抗腫瘍活性と相関していた（図１１）。
実施例７−ＡＭＬを治療するためのＬＯＲ−２５３。フェーズＩ臨床試験。
【０１９３】
前臨床試験によりＬＯＲ−２５３に対する広範な治療指数を確立し：ＬＯＲ−２５３の有効性を多発性腫瘍型に対する異種移植モデルで実証し；広範なＧＬＰ安全性及びＰＫ試験をネズミ及びイヌで行い；試験した最も高用量ではイヌの反復投与毒性試験において治療関連の心血管効果は観察されず（データ不図示）；ｈＥＲＧテール電流密度またはＣＹＰ４５０酵素の有意な阻害はなく；ＧＬＰ血液適合性試験によりＩＶ製剤の適合性が確認された。
【０１９４】
フェーズＩ：これは、進行性または転移性の固形腫瘍を持つ患者にＬＯＲ−２５３  ＨＣｌの推奨フェーズ２用量を識別するための最大耐量（ＭＴＤ）に到達していない場合に、最大耐量（ＭＴＤ）すなわち適当な標的用量を決定するための非盲検のフェーズ１試験であった。最初の用量セットでは、最大投与用量または適当な標的用量に到達するまで、ＬＯＲ−２５３  ＨＣｌを漸増用量で与えた。他の用量セットでは、最大投与用量または適当な標的用量に到達するまで、ＬＯＲ−２５３  ＨＣｌを２０ｍｇ／ｍ２から開始して漸増用量で与えた。患者は、ＬＯＲ−２５３  ＨＣｌで２サイクル処置して、評価した。他の名称：他の名称は使用しない。
試験の種類：介入
試験デザイン：項目分類：安全性試験
介入モデル：単群割り付け
マスクキング：非盲検
主要目的：処置
正式なタイトル：進行性または転移性の固形腫瘍を持つ患者におけるＬＯＲ−２５３  ＨＣｌの非盲検フェーズ１試験
主要な結果評価項目：
・進行性または転移性の固形腫瘍を持つ患者にＬＯＲ−２５３  ＨＣｌの推奨フェーズ２用量を識別するための最大耐量（ＭＴＤ）に到達していない場合に、最大耐量（ＭＴＤ）すなわち適当な標的用量を決定する。［タイムフレーム：８週間］
副次的な結果評価項目：
・進行性または転移性の固形腫瘍を持つ患者に投与した場合のＬＯＲ−２５３  ＨＣｌの安全性プロファイルを特徴付ける。［タイムフレーム：８週間］
選択基準：
１．１８歳またはそれ以上の男性または女性。
２．効果的な治療が全く使用できないかまたは従来の治療に反応しない固形腫瘍の組織学的に確認された診断。
３．治験登録時に検査パラメーター要件を満たす。
除外基準：
１．化学療法、放射線治療、生物学的療法、免疫療法、またはＬＯＲ−２５３  ＨＣ１による治験処置開始してから２１日以内の任意の他の治験薬。
２．血液悪性腫瘍。
３．脳または他の中枢神経系への転移の病歴。
４．有意感染の存在を有する。
５．臨床的に有意な自己免疫疾患。
６．無制御の併発疾患。
７．鉄や銅の過負荷症候群を持つ。
８．妊婦または授乳期の女性。
【０１９５】
フェーズＩトライアルで実証された安全性及び抗腫瘍活性：
・進行固形腫瘍を持つ患者における用量漸増試験
・７つの用量レベルにわたる優れた安全性プロファイル（Ｎ＝２７人の患者）
・最も一般的なＡＥ及びＳＡＥ：疲労及び１ケースの回復可能な低リン血症
・評価した患者の４１％で疾患の安定化が達成された；ＲＥＣＩＳＴ  ＰＲなし
・ＮＳＣＬＣ（低分化腺がん）や従来の標準治療及び試験的治療に不応性の広範な転移を持つ患者における腫瘍の縮小（図１２）
【０１９６】
ＬＯＲ−２５３が固形腫瘍の治療に対して安全かつ有効な薬剤であることが、フェーズＩトライアル結果により実証された。
実施例８−骨髄異形成症候群（ＭＤＳ）、急性リンパ性白血病（ＡＬＬ）、慢性骨髄性白血病（ＣＭＬ）、成人Ｔ細胞白血病（ＡＴＬＬ）、リンパ腫、胃がん、及び多発性骨髄腫細胞株におけるＬＯＲ−２５３のインビトロ抗増殖活性。
【０１９７】
ＭＤＳ、ＡＬＬ、ＣＭＬ、ＡＴＬＬ、リンパ腫、胃がん、及び多発性骨髄腫細胞株におけるＬＯＲ−２５３の抗増殖活性は、実施例１に記載のようにＸＴＴアッセイによって決定される。
【０１９８】
アッセイで試験したＭＤＳ細胞株としては、限定的ではないが、ＴＥＲ−３（Ｍｉｓｈｉｍａら．，新規のヒト骨髄異形成細胞株、ＴＥＲ−３：Ｃａ２＋／カルモジュリン−依存性タンパク質キナーゼＩＶのＧ−ＣＳＦ特異的下方調節、ＪＣｅｌｌ  Ｐｈｙｓｉｏｌ．  ２００２  Ｍａｙ；１９１（２）：１８３−９０）、ＭＤＳ９２（Ｔｏｈｙａｍａら．，新規の因子依存性ヒト骨髄異形成細胞株、ＭＤＳ９２は、いくつかの系統の造血細胞を含有する、ＢｒＪ  Ｈａｅｍａｔｏｌ．  １９９５  Ｄｅｃ；９１（４）：７９５−９）、及びＳＫＭ−１（Ｋｉｍｕｒａら．，ヒト骨髄異形成症候群由来細胞株ＳＫＭ−１に対するアザシチジンの抗増殖及び抗腫瘍効果、ＡｎｔｉｃａｎｃｅｒＲｅｓｅａｒｃｈ  ３２：７９５−７９８、２００２）が挙げられ、これらの各々は、その全体が参照により本明細書中に援用される。
【０１９９】
アッセイで試験したＡＬＬ細胞株としては、限定的ではないが、ＣＣＲＦ−ＣＥＭ（Ｆｏｌｅｙら．，急性白血病を持つ子供の末梢血由来のヒトリンパ芽球の連続培養。Ｃａｎｃｅｒ１９６５  １８：５２２−５２９）、ＭＯＬＴ−４（Ｍｉｎｏｗａｄａら．，ロゼット形成ヒトリンパ細胞株。Ｉ。胸腺由来リンパ球の起源の確立及びエビデンス。Ｊｏｕｒｎａｌｏｆ  ｔｈｅ  Ｎａｔｉｏｎａｌ  Ｃａｎｃｅｒ  Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅ  １９７２  ４９（３）：８９１−８９５）、及びＪｕｒｋａｔ（Ｓｃｈｎｅｉｄｅｒら．，急性リンパ性白血病及び白血病性形質転換非ホジキンリンパ腫を持つ子供から誘導されたＥＢＶ−ゲノム陰性「ヌル」及び「Ｔ」細胞株の特性化。ＩｎｔＪ  Ｃａｎｃｅｒ．  １９７７  Ｍａｙ  １５；１９（５）：６２１−６）が挙げられる。
【０２００】
アッセイで試験したＣＭＬ細胞株としては、限定的ではないが、Ｋ５６２（Ｄｒｅｘｌｅｒ、白血病細胞株：慢性骨髄性白血病の試験用のインビトロモデル。ＬｅｕｋＲｅｓ．１９９４  Ｄｅｃ；１８（１２）：９１９−２７）が挙げられる。
【０２０１】
アッセイで試験したリンパ腫細胞株としては、限定的ではないが、Ｒａｍｏｓ、Ｒａｊｉ、ＣＡ４６、Ｔｏｌｅｄｏ、ＤＢ、Ｍｉｎｏ、及びＲＬが挙げられる。
【０２０２】
アッセイで試験した胃がん細胞株としては、限定的ではないが、ＡＧＳ（ＡＴＣＣ受託番号ＣＲＬ−１７３９ＴＭ）、ＳＮＵ−１（ＡＴＣＣ受託番号ＣＲＬ−５９７１ＴＭ）、ＳＮＵ−５（ＡＴＣＣ受託番号ＣＲＬ−５９７３ＴＭ）、ＳＮＵ−１６（ＡＴＣＣ受託番号ＣＲＬ−５９７４ＴＭ）、Ｈｓ７４６Ｔ（ＡＴＣＣ受託番号ＨＴＢ−１３５ＴＭ）、ＮＣＩ−Ｎ８７（Ｎ８７；ＡＴＣＣ受託番号ＣＲＬ−５８２２ＴＭ）、ＫＡＴＯＩＩＩ（ＡＴＣＣ受託番号ＨＴＢ−１０３ＴＭ）、ＳＮＵ−５２０、ＳＮＵ−７１９、ＮＵＧＣ−４、ＳＴＫＭ−２、ＭＫＮ−４５、ＭＫＮ−７４、２０Ｍ、ＡＫＧ、ＥＣＣ４、Ｇ４２ＬＡＴＥ、ＧＣＩＹ、ＧＣＩＹ、ＧＴ３ＴＫＢ、Ｈ−１１１、Ｈ−１６２、Ｈ−３０、Ｈ−５５、ＨＧＣ−２７、ＨＳＣ−３９、ＨＵＧ−ＩＮ、ＪＲ１、ＫＷＳ、ＭＫＮ−１、ＭＫＮ−２８、ＭＫＮ−７、ＭＫＮ−７４、ＭＫＮ−７４、ＭＫＮ−７４、ＮＣＩ−Ｎ８７、ＮＵＧＣ−３、ＯＫＡＪＩＭＡ、ＳＫ−ＧＴ−１、ＳＫ−ＧＴ−２、ＳＫ−ＧＴ−５、ＳＮＵ−１６、ＳＮＵ−２１６、ＳＮＵ−４８４、ＳＮＵ−５５、ＳＮＵ−６０１、ＳＮＵ−６３８、ＳＮＵ−６６８、ＴＧＢＣ１１ＴＫＢ、ＴＧＢＣ１１ＴＫＢ、ＴＭＫ−１、及びＹＣＣ−３が挙げられる。
【０２０３】
アッセイで試験した多発性骨髄腫細胞株としては、限定的ではないが、Ｌｏｍｂａｒｄｉらに記載のＨＭＣＬ（統合的ゲノムによるヒト多発性骨髄腫細胞株の分子特性化：疾患の生物学についての洞察。ＧｅｎｅｓＣｈｒｏｍｏｓｏｍｅｓ  Ｃａｎｃｅｒ．  ２００７Ｍａｒ；４６（３）：２２６−３８．）、ＸＧ、ＮＡＮ、ＢＣＮ、ＭＤＮ、ＳＢＮ  ＨＭＣＬ、Ｕ２６６、ＲＰＭＩ８２２６、ＲＰＭＩ１６４０、ＡＮＢＬ−６、ＫＭＳ−１１、ＫＭＳ１２−ＢＭ、ＫＭＳ１２−ＰＥ、ＫＭＭ１、ＬＰ１、Ｌ３６３、ＯＰＭ２、ＮＣＩ−Ｈ９２９、ＪＩＭ３、ＭＯ−１、ＬＰ１、Ｌ３６３、ＮＣＩＨ９２９、ＯＰＭ２、ＵＨＫＴ−８９、ＳＫＭＭ２、Ｕ２６６Ｂ１（Ｎｉｌｓｓｏｎら．，ＩｇＥ骨髄腫患者由来の確立された免疫グロブリン産生骨髄腫（ＩｇＥ）及びリンパ芽球様（ＩｇＧ）細胞株。ＣｌｉｎＥｘｐ  Ｉｍｍｕｎｏｌ．  １９７０  Ｏｃｔ；７（４）：４７７−８９）、ＭＭ．１Ｒ（Ｇｒｅｅｎｓｔｅｉｎら，ＭＭ．１ヒト多発性骨髄腫（ＭＭ）細胞株の特性化：ステロイド感受性及び耐性のＭＭ細胞の特徴、挙動、及びシグナル伝達を解明するためのモデルシステム。ＥｘｐＨｅｍａｔｏｌ．  ２００３  Ａｐｒ；３１（４）：２７１−８２）、及びＨｕＮＳｌ（Ｗｉｎｋｅｌｈａｋｅ，ヒト／ヒトハイブリドーマを産生する骨髄腫。１９８８年１月１９日に付与された米国特許第４，７２０，４５９号）が挙げられる。
【０２０４】
インビトロアッセイ結果は、ＭＤＳ、ＡＬＬ、ＣＭＬ、ＡＴＬＬ、リンパ腫、胃がん、または多発性骨髄腫細胞株の１つ以上の細胞株はＬＯＲ−２５３に対して感受性があることを示している。
実施例９−骨髄異形成症候群（ＭＤＳ）、ＡＬＬ、ＣＭＬ、ＡＴＬＬ、リンパ腫、胃がん、及び多発性骨髄腫細胞株のインビトロＫＬＦ４／ｐ２１誘発。
【０２０５】
ＫＬＦ４及び／またはｐ２１発現がＬＯＲ−２５３によって誘発されたかどうか判断するため、実施例８に記載の骨髄異形成症候群（ＭＤＳ）、ＡＬＬ、ＣＭＬ、ＡＴＬＬ、リンパ腫、胃がん、及び多発性骨髄腫細胞株をＤＭＳＯ（ビヒクル対照）または０．１、０．２、０．５、または１μΜ  ＬＯＲ−２５３で１６時間処理する。製造者の指示書に従って、全ＲＮＡをＴＲＩｚｏｌプラスＲＮＡ精製キット（Ａｍｂｉｏｎ、Ｌｉｆｅ  Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ）を用いて抽出する。ランダムヘキサマープライマー（Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ）及びＳｕｐｅｒＳｃｒｉｐｔ  ＩＩ逆転写酵素キット（Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ）を用いて、一本鎖ｃＤＮＡを１〜２ｕｇ全ＲＮＡから合成する。ｃＤＮＡを用いて、ＡＢＩプリズム７０００配列検出システムで定量的ＲＴ−ＰＣＲを行い、ヒトＴａｑＭａｎ遺伝子発現アッセイプライマー／プローブをクルッペル様因子４（ＫＬＦ４）、サイクリン依存性キナーゼ阻害剤１Ａ（ｐ２１）、及びＡＢＩ  ＴａｑＭａｎユニバーサルＰＣＲマスターミックスプロトコルに対して設定する。遺伝子発現を、同じ試料中でβ−アクチン遺伝子発現で正規化し、ＫＬＦ４またはｐ２１における倍数変化を、比較ＣＴ法を用いて、ＤＭＳＯ処理した試料中の対応する発現レベルに対して表す。骨髄異形性症候群（ＭＤＳ）、ＡＬＬ、ＣＭＬ、ＡＴＬＬ、リンパ腫、胃がん、または多発性骨髄腫細胞株の１つ以上をＬＯＲ−２５３で処理することで、ＫＬＦ４及びｐ２１発現の増加がもたらされる。
実施例１０−ＬＯＲ−２５３による処理は、骨髄異形成症候群（ＭＤＳ）、ＡＬＬ、ＣＭＬ、ＡＴＬＬ、リンパ腫、胃がん、及び多発性骨髄腫細胞株におけるＧ１／Ｓ細胞周期停止をもたらす。
【０２０６】
実施例８に記載の骨髄異形成症候群（ＭＤＳ）、ＡＬＬ、ＣＭＬ、ＡＴＬＬ、リンパ腫、胃がん、及び多発性骨髄腫細胞株をＤＭＳＯ（ビヒクル対照）または０．１、０．２、０．５、または１μΜ  ＬＯＲ−２５３で１６時間処理する。細胞をＰＢＳ＋１％ＦＣＳで１回洗浄し、氷冷７０％エタノールを用いて一晩固定する。固定した細胞を２回洗浄し、２０μｇ／ｍＬヨウ化プロピジウムと２５０μｇ／ｍＬ  ＲＮａｓｅＡを含有するＰＩ／ＲＮａｓｅＡ溶液中で再懸濁させ、３７℃で３０分間染色する。染色した細胞を、ＢＤ  ＦＡＣＳＣａｌｉｂｕｒフローサイトメーターを用いて分析する。ＬＯＲ−２５３による処理が、骨髄異形成症候群（ＭＤＳ）、ＡＬＬ、ＣＭＬ、ＡＴＬＬ、リンパ腫、胃がん、または多発性骨髄腫細胞株の１つ以上におけるＧ１／Ｓ細胞周期停止をもたらすことを結果は示している。
実施例１１−ＬＯＲ−２５３による処理は、骨髄異形成症候群（ＭＤＳ）、ＡＬＬ、ＣＭＬ、ＡＴＬＬ、リンパ腫、胃がん、及び多発性骨髄腫細胞株におけるアポトーシスを誘発する。
【０２０７】
実施例８に記載の骨髄異形成症候群（ＭＤＳ）、ＡＬＬ、ＣＭＬ、ＡＴＬＬ、リンパ腫、胃がん、及び多発性骨髄腫細胞株をＤＭＳＯ、０．１、０．２、０．５、または１μＭ  ＬＯＲ−２５３で１６時間処理する。細胞を冷たいＰＢＳで２回洗浄し、アネキシンＶ結合緩衝液中に再懸濁させる。１００μＬ中１×１０５細胞をＦＩＴＣ−アネキシンＶ及びヨウ化プロピジウムで染色し、室温で１５分間インキュベートする。染色後、結合緩衝液４００ｕｌを加え、ＢＤ  ＦＡＣＳＣａｎｔｏフローサイトメーター上で分析されるまで、細胞を氷上に保持する。ＬＯＲ−２５３で処理した１つまたはそれ以上の細胞株は、アネキシンＶ染色の上昇を示し、これは、アポトーシスの誘導を示すものである。細胞を処理するのに用いたＬＯＲ−２５３の濃度を増すことで、早期アポトーシス集団（Ｑ３：アネキシンＶ＋／ＰＩ−）の増加をもたらす。
【０２０８】
細胞株をＤＭＳＯ（ビヒクル対照）または０．１、０．２、０．５または１  μΜ  ＬＯＲ−２５３で４８時間処理した。細胞溶解物を、１％Ｔｒｉｔｏｎ−Ｘ１００溶解物を用いて回収する。製造者のプロトコルに従って、細胞溶解物５μｇによるＥｎｚＣｈｅｋカスパーゼ−３アッセイキット＃１（Ｌｉｆｅ  Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ）を用いてカスパーゼ３活性を測定する。１つ以上の細胞株をＬＯＲ−２５３で処理することで、カスパーゼ３活性の上昇をもたらし、これは、アポトーシスの誘導を示すものである。
【０２０９】
製造者の指示書に従って、全ＲＮＡをＴＲＩｚｏｌプラスＲＮＡ精製キット（Ａｍｂｉｏｎ、Ｌｉｆｅ  Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ）を用いて抽出する。ランダムヘキサマープライマー（Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ）及びＳｕｐｅｒＳｃｒｉｐｔ  ＩＩ逆転写酵素キット（Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ）を用いて、一本鎖ｃＤＮＡを１〜２μｇ全ＲＮＡから合成する。ｃＤＮＡを用いて、ＡＢＩプリズム７０００配列検出システムで定量的ＲＴ−ＰＣＲを行い、ヒトＴａｑＭａｎ遺伝子発現アッセイプライマー／プローブをＢＣＬ２関連Ｘタンパク質（ＢＡＸ）、Ｂ細胞ＣＬＬ／リンパ腫２（ＢＣＬ２）、及びＡＢＩ  ＴａｑＭａｎユニバーサルＰＣＲマスターミックスプロトコルに対して設定する。遺伝子発現を、同じ試料中でβ−アクチン遺伝子発現で正規化し、ＢＡＸまたはＢＣＬ２における倍数変化を、比較ＣＴ法を用いて、ＤＭＳＯ処理した試料中の対応する発現レベルに対して表す。骨髄異形成症候群（ＭＤＳ）、ＡＬＬ、ＣＭＬ、ＡＴＬＬ、リンパ腫、胃がん、または多発性骨髄腫細胞株の１つ以上をＬＯＲ−２５３で処理した際のＢＡＸの上昇及びＢＣＬ２の抑制は、アポトーシスの誘導を示している。
実施例１２−骨髄異形成症候群（ＭＤＳ）、ＡＬＬ、ＣＭＬ、ＡＴＬＬ、リンパ腫、胃がん、及び多発性骨髄腫の異種移植モデルにおけるＬＯＲ−２５３  ＨＣＬのインビボ効果。
【０２１０】
骨髄異形成症候群（ＭＤＳ）、ＡＬＬ、ＣＭＬ、ＡＴＬＬ、リンパ腫、胃がん、及び多発性骨髄腫のモデルマウスを標準手順に従って作製する。モデルマウスを以下の表に示すようないくつかの投与スケジュールに従って処理する。
【表９】
2019218373.tif 000024
【０２１１】
１つ以上の群は、ＬＯＲ−２５３によって効率的に処理されることを結果は示している。
実施例１３−ＬＯＲ−２５３  ＨＣＬで処理された、骨髄異形成症候群（ＭＤＳ）、ＡＬＬ、ＣＭＬ、ＡＴＬＬ、リンパ腫、胃がん、及び多発性骨髄腫を持つ異種移植モデルマウスにおけるインビボの用量依存性薬物動態（ＰＫ）及び薬力学（ＰＤ）反応
【０２１２】
ＬＯＲ−２５３で処理された骨髄異形性症候群（ＭＤＳ）、ＡＬＬ、ＣＭＬ、ＡＴＬＬ、リンパ腫、胃がん、及び多発性骨髄腫の腫瘍細胞の薬物動態（ＰＫ）を試験するため、ＣＤ−１ヌードマウスを１、５、及び１５ｍｇ／ｋｇでＬＯＲ−２５３  ＨＣ１の静脈内ボーラス注射によって処理する。各治療におけるＬＯＲ−２５３の血清レベルを測定する。
【０２１３】
薬力学（ＰＤ）反応を試験するため、マウスを１、５、及び１５ｍｇ／ｋｇ  ＬＯＲ−２５３で５日連続で処理する。腫瘍を最後の用量の１６時間後に測定し、ＫＬＦ−４タンパク質レベルを測定する。１つ以上の治療における平均ＫＬＦ４タンパク質レベルは、用量依存的に増加し、腫瘍生体内分布と用量応答抗腫瘍活性と相関していることをこの結果は示している。
実施例１４−Ｋａｓｕｍｉ−１  ＡＭＬ異種移植モデルにおけるＬＯＲ−２５３  ＨＣＬのインビボ効果
【０２１４】
ＬＯＲ−２５３  ＨＣｌの抗腫瘍活性は、ヒトＡＭＬの別のインビボ動物モデルで評価した。ヒトＡＭＬ細胞株Ｋａｓｕｍｉ−１を無胸腺ヌードマウスの皮下に埋め込んだ。何匹かの担腫瘍マウスに３０ｍｇ／ｋｇ（１５ｍｇ／ｋｇを１日２回）のＬＯＲ−２５３  ＨＣｌを１週間に２日連続で４週間処理した（「ＬＯＲ−２５３治療群」）。ＬＯＲ−２５３を、６０％水中の２０％ポリエチレングリコール４００、１０％プロピレングリコール、及び１０％ソルトールＨＳで製剤化された塩酸塩形態（ＬＯＲ−２５３−ＨＣ１）として静脈内（ｉ．ｖ．）ボーラス注射で投与した。他の担腫瘍マウスは、ＬＯＲ−２５３を有さない製剤で処理した（「ビヒクル対照群」）。
【０２１５】
主要項目は、ＬＯＲ−２５３  ＨＣ１での治療後に腫瘍増殖阻害を観察し、異なる投与スケジュールの抗腫瘍効果を比較することであった。腫瘍サイズは、腫瘍細胞接種後１０日から１週間に３回測定した。キャリパーを用いて腫瘍を３次元測定し、容積を式：Ｖ＝０．５ａ×ｂ×ｃを用いて立方ミリメートルで表した。ここで、ａ、ｂ、及びｃは、それぞれ、腫瘍の長さ、幅、及び高さである。各測定から平均腫瘍容積＋／−標準誤差（ＳＥ）を算出し、標準グラフにプロットし、薬物療法の抗腫瘍効果を対照のものと比較した（図１５）。毒性は、試験期間にわたる臨床観察と、１週間に２回グラムでのマウスの体重測定とによって評価した。各測定から平均体重を算出し、プロットし、薬物治療群の体重変化を対照のものと比較した（図１６）。
【０２１６】
図１５に示す腫瘍阻害結果は、ＬＯＲ−２５３処理群が、ビヒクル対照群と比較して、このモデルにおいて統計的に有意に増加した阻害効果が得られたことを示している（スチューデントｔ検定によるｐ＝０．０２８）。さらに、図１６に示す毒性結果は、治療群のマウスが体重減少を示さなかったことを示している。治療群のマウスも、毒性の他の明らかな兆候を示さなかった。これらの結果は、この治療スケジュールが耐容性良好であったことを示している。ＬＯＲ−２５３  ＨＣ１は、単剤として１週間に２回の用量で、毒性の明らかな兆候なく有意な腫瘍増殖阻害を示し、これは、ＬＯＲ−２５３  ＨＣ１が十分な治療濃度域を有し、かつ、この薬剤がＡＭＬの治療用の強力な化学療法剤であることを示唆している。
実施例１５−ＨＬ−６０  ＡＭＬ異種移植モデルにおけるＬＯＲ−２５３  ＨＣＬのインビボ効果
【０２１７】
ＬＯＲ−２５３  ＨＣ１の抗腫瘍活性は、単剤及びアザシチジンと組み合わせて、ヒトＡＭＬの別のインビボ動物モデルで評価した。ヒトＡＭＬ細胞株ＨＬ−６０を無胸腺ヌードマウスの皮下に埋め込んだ。担腫瘍マウスを、ＬＯＲ−２５３  ＨＣｌを単独またはアザシチジンと組み合わせて、アザシチジンを単独で、または陰性対照ビヒクルで処理した。治療条件の詳細は、以下のとおりである。
１群：陰性対照群。ＬＯＲ−２５３  ＨＣｌ対照ビヒクル、２×／日、２日連続で３サイクル、サイクルの間は５日間、ｉ．ｖ．＋１％Ｄ−マンニトールを４日おきに皮下注射
２群：アザシチジン（１％Ｄ−マンニトール中）を１日、４日、８日、１１日、１５日、及び１８日に１０ｍｇ／ｋｇ  １Ｘで皮下（ｓ．ｃ．）注射
３群：ＬＯＲ−２５３  ＨＣｌを１５ｍｇ／ｋｇ  ｂｉｄで３サイクル、各サイクルは１週間に２日連続で投与し、５日間は非投与、ｉ．ｖ．、ｎ＝９（２Ｔ−５Ｂ）
４群：ＬＯＲ−２５３  ＨＣｌを１５ｍｇ／ｋｇ  ２×／日（ｂｉｄ）で３サイクル、各サイクルは１週間に１日投与し、６日間は非投与、ｉ．ｖ．、ｎ＝９（１Ｔ−６Ｂ）
５群：ＬＯＲ−２５３（２Ｔ−５Ｂ）とアザシチジンの組み合わせ。ＬＯＲ−２５３  ＨＣｌを１５ｍｇ／ｋｇ  ｂｉｄで３サイクル、各サイクルは１週間に２日連続で投与し、５日間は非投与、ｉ．ｖ．、ｎ＝９（２Ｔ−５Ｂ）＋アザシチジンを１０ｍｇ／ｋｇ  １×で４日おきに皮下注射
６群：ＬＯＲ−２５３（１Ｔ−６Ｂ）とアザシチジンの組み合わせ。ＬＯＲ−２５３  ＨＣｌを１５ｍｇ／ｋｇ  ｂｉｄで３サイクル、各サイクルは１週間に１日投与し、６日間は非投与、ｉ．ｖ．、ｎ＝９（１Ｔ−６Ｂ）＋アザシチジンを１０ｍｇ／ｋｇ  １×で４日おきに皮下注射
【０２１８】
主要項目は、アザシチジンと組み合わせたＬＯＲ−２５３  ＨＣ１での治療後に腫瘍増殖阻害を観察することであった。腫瘍サイズは、１週間に３回測定した。キャリパーを用いて腫瘍を３次元測定し、容積を式：Ｖ＝０．５ａ×ｂ×ｃを用いて立方ミリメートルで表した。ここで、ａ、ｂ、及びｃは、それぞれ、腫瘍の長さ、幅、及び高さである。各測定から平均腫瘍容積＋／−標準誤差（ＳＥ）を算出し、標準グラフにプロットし、薬物療法の抗腫瘍効果を対照のものと比較した（図１７）。
【０２１９】
図１７に示す腫瘍阻害結果は、ＬＯＲ−２５３  ＨＣｌを単独で１週間に１日（４群）または２日連続（３群）のいずれかで１日２回１５ｍｇ／ｋｇを投与することで、アザシチジン単独とおおよそ同程度もしくはそれよりもわずかに多くＨＬ−６０腫瘍の増殖を阻害したことを示している。アザシチジンと組み合わせたＬＯＲ−２５３  ＨＣｌの週１回投与及び週２回投与（それぞれ、６群及び５群）の両方とも、いずれかの単剤単独（スチューデントｔ検定によって決定された際に、対照と比較した１×及び２×ＬＯＲ−２５３  ＨＣｌ治療はそれぞれｐ＝０．０００２及びｐ＝０．０００６）と比較して、有意に高いレベルの腫瘍増殖阻害をもたらした。図１８及び図１９は、この試験の始め（１日目）と終わり（１９日目）での個々の動物からの腫瘍サイズデータを示す。
【０２２０】
アザシチジンと組み合わせたＬＯＲ−２５３  ＨＣｌは、いずれかの単剤単独よりもさらに高レベルの腫瘍増殖阻害をもたらしたため、ＬＯＲ−２５３  ＨＣｌは、血液学的悪性腫瘍に対する化学療法の標準治療に対してさらなる抗がん有効性をもたらし得る。
実施例１６−ＫＧ−１  ＡＭＬ異種移植モデルにおけるＬＯＲ−２５３  ＨＣＬのインビボ効果
【０２２１】
ＬＯＲ−２５３  ＨＣｌの抗腫瘍活性は、ヒトＡＭＬのさらに別のインビボ動物モデルで評価した。ＡＭＬ細胞株ＫＧ−１の異種移植モデルマウスは、実施例１４及び１５と同様に同じ方法で生成し、以下のレジームに従ってＬＯＲ−２５３  ＨＣｌまたは対照で処理した。
対照−ＩＶ−１日目
ＬＯＲ−２５３−１５ｍｇ／ｋｇ−ｉｖ、ｂｉｄ、２Ｔ／ｗｋ−１日目
対照−ＩＶ−８日目
ＬＯＲ−２５３−１５ｍｇ／ｋｇ−ｉｖ、ｂｉｄ、２Ｔ／ｗｋ−８日目
対照−ＩＶ−１３日目
ＬＯＲ−２５３−１５ｍｇ／ｋｇ−ｉｖ、ｂｉｄ、２Ｔ／ｗｋ−１３日目
対照−ＩＶ−１６日目
ＬＯＲ−２５３−１５ｍｇ／ｋｇ−ｉｖ、ｂｉｄ、２Ｔ／ｗｋ−１６日目
対照−ＩＶ−２０日目
ＬＯＲ−２５３−１５ｍｇ／ｋｇ−ｉｖ、ｂｉｄ、２Ｔ／ｗｋ−２０日目
対照−ＩＶ−２６日目
ＬＯＲ−２５３−１５ｍｇ／ｋｇ−ｉｖ、ｂｉｄ、２Ｔ／ｗｋ−２６日目
【０２２２】
腫瘍サイズは、実施例１４及び１５に記載のように測定し、結果を図２０に示す。ＬＯＲ−２５３  ＨＣｌは、このＡＭＬ動物モデルにおいても単剤として有意な腫瘍増殖阻害を示した。
実施例１７−ＴＨＰ−１  ＡＭＬ異種移植モデルにおけるＬＯＲ−２５３  ＨＣＬのインビボ効果
【０２２３】
ＬＯＲ−２５３  ＨＣ１の抗腫瘍活性は、単剤及びアザシチジンと組み合わせて、ヒトＡＭＬのさらに別のインビボ動物モデルで評価した。ＡＭＬ細胞株ＴＨＰ−１の異種移植モデルマウスは、実施例１４及び１５と同様に同じ方法で生成し、ＬＯＲ−２５３  ＨＣｌを単独またはアザシチジンと組み合わせて、アザシチジンを単独で、または陰性対照ビヒクルで処理し、腫瘍サイズを実施例１４及び１５に記載のように測定した。治療条件の詳細を以下に示し、結果を図２１に示す。
１群対照：１日目、２日目、８日目、９日目、１５日目、１６日目にＬＯＲ−２５３対照ビヒクル（ＣＶ）でｉ．ｖ．治療を受けた；１日目、４日目、８日目、１１日目、１５日目、１８日目、２２日目、２５日目、２９日目、３２日目にアザシチジン対照ビヒクルで皮下（ＳＣ）治療を受けた；２２日目、２３日目、２４日目、２５日目、２９日目、３０日目にＬＯＲ−２５３−ＣＶで腹腔内（ＩＰ）治療を受けた。
２群−ＬＯＲ−２５３：１日目、２日目、８日目、９日目、１５日目、１６日目にｉ．ｖ．治療を受けた；２２日目、２３日目、２４日目、２５日目、２９日目、３０日目にＩＰ治療を受けた。
３群−アザシチジン：１日目、４日目、８日目、１１日目、１５日目、１８日目、２２日目、２５日目、２９日目、３２日目にＳＣ治療を受けた。
４群−組み合わせ：１日目、２日目、８日目、９日目、１５日目、１６日目にＬＯＲ−２５３でｉ．ｖ．治療を受けた；２２日目、２３日目、２４日目、２５日目にＬＯＲ−２５３でＩＰ治療を受けた；１日目、４日目、８日目、１１日目、１５日目、１８日目、２２日目、２５日目にアザシチジンでＳＣ治療を受けた。
【０２２４】
この実施例の腫瘍阻害結果は、ＬＯＲ−２５３  ＨＣｌを単独で投与することで、アザシチジン単独とおおよそ同程度もしくはそれよりもわずかに多くＴＨＰ−１腫瘍の増殖を阻害したことを示している。アザシチジンと組み合わせて用いた場合、ＬＯＲ−２５３  ＨＣｌも有意に高いレベルの腫瘍増殖阻害をもたらした。
【０２２５】
本明細書に引用される各々及び全ての特許、特許出願、及び刊行物の特許請求の範囲、図面、及び／または図面の説明の開示は、参照のためその全体が本明細書に組み込まれる。
【０２２６】
他に定義しない限り、本明細書で用いられる全ての技術的及び科学的用語は、本発明が属する分野において当業者により一般に理解されるものと同一の意味を有する。本明細書に記載のものと同様または等価の任意の方法及び材料を本発明の実施または試験において使用することができるが、好ましい方法及び材料が本明細書に記載する。本明細書に記載の、全ての刊行物、特許文献、及び特許公報は、あらゆる目的のためにそれら全体が参照により本明細書中に援用される。
【０２２７】
本明細書において考察される出版物は、本出願の出願日の前のその開示に関してのみ提供する。本明細書に記載するもののいずれも、以前の発明によりこのような出版物に先行するものとは本発明が見なされないことを受け入れるものとして解釈されるべきではない。
【０２２８】
本発明をその具体的な実施形態に関連して説明してきたが、これはさらなる改変が可能であり、かつ本出願は、一般に本発明の原理に従い、本発明の属する当業界に既知でありまたは慣習的に実施されるような、前述の本質的特徴に適用できるような、並びに付随の特許請求の範囲の範囲に従うような、このような開示からの脱却を含む、本発明のいずれかの変動、使用、または適応を網羅することを意図することが理解されるであろう。
例えば、本発明は以下の項目を提供する。
（項目１）
ヒト対象における骨髄異形成症候群（ＭＤＳ）の治療方法であって、
化合物または薬理学的に許容される塩またはその溶媒和物の有効量をそのような治療を必要とするヒト対象に投与することを含み、
前記化合物は、式Ｉを有し：
【化８】
2019218373.tif 000025
式中、
Ｒ１は、Ｃ１−Ｃ４アルキルであり；
Ｒ２は、ハロゲンである、前記治療方法。
（項目２）
前記ヒト対象が、骨髄血液細胞の産生に効果がない、項目１に記載の方法。
（項目３）
前記ヒト対象が、貧血を有する、項目１に記載の方法。
（項目４）
前記ヒト対象が、骨髄不全によって引き起こされる低い血球数を有する、項目１に記載の方法。
（項目５）
Ｒ１が、メチル、イソプロピル、またはｔ−ブチルである、項目１〜４のいずれか１項に記載の方法。
（項目６）
前記化合物が、
【化９】
2019218373.tif 000026
からなる群から選択される式を有する、項目５に記載の方法。
（項目７）
前記化合物が、式ＩＩ：
【化１０】
2019218373.tif 000027
を有する、項目６に記載の方法。
（項目８）
前記ヒト対象が、ＭＤＳの１つ以上の症状を有する、項目１に記載の方法。
（項目９）
前記ＭＤＳが、高リスクＭＤＳである、項目１に記載の方法。
（項目１０）
ヒト対象の治療方法であって、
化合物または薬理学的に許容される塩またはその溶媒和物の有効量をヒト対象に投与すること、
を含み、
前記ヒト対象が、急性骨髄性白血病（ＡＭＬ）、急性リンパ性白血病（ＡＬＬ）、成人Ｔ細胞白血病（ＡＴＬＬ）、リンパ腫、胃がん、及び多発性骨髄腫からなる群から選択される状態を有し、前記化合物が、式ＩＩ：
【化１１】
2019218373.tif 000028
を有する、前記治療方法。
（項目１１）
前記状態が、ＡＭＬである、項目１０に記載の方法。
（項目１２）
前記ヒト対象が、６０歳超である、項目１１に記載の方法。
（項目１３）
前記ＡＭＬが、不応性ＡＭＬである、項目１１に記載の方法。
（項目１４）
前記状態が、ＡＬＬである、項目１０に記載の方法。
（項目１５）
前記ＡＬＬが、小児Ｔ細胞ＡＬＬまたは小児Ｂ細胞ＡＬＬである、項目１４に記載の方法。
（項目１６）
前記状態が、ＡＴＬＬである、項目１０に記載の方法。
（項目１７）
前記状態が、リンパ腫である、項目１０に記載の方法。
（項目１８）
前記リンパ腫が、ホジキンリンパ腫、非ホジキンリンパ腫（ＮＨＬ）、バーキットリンパ腫、またはＢ細胞リンパ腫である、項目１７に記載の方法。
（項目１９）
前記状態が、胃がんである、項目１０に記載の方法。
（項目２０）
前記状態が、多発性骨髄腫である、項目１０に記載の方法。
（項目２１）
前記化合物が、併用療法の一部として投与される、項目１〜２０のいずれか１項に記載の方法。。
（項目２２）
前記併用療法が、放射線治療を含む、項目２１に記載の方法。
（項目２３）
前記併用療法が、化学療法を含む、項目２１に記載の方法。
（項目２４）
前記化合物が、約１２５ｍｇ／ｍ２の用量で投与される、項目１１に記載の方法。
（項目２５）
前記化合物が、１週間に２回、４週間投与される、項目１１に記載の方法。
（項目２６）
正常なレベル未満のＫＬＦ４活性と関連した状態の治療方法であって、
式ＩＩ：
【化１２】
2019218373.tif 000029
を有する化合物の有効量をそのような治療を必要とするヒト対象に投与することを含む、前記治療方法。
（項目２７）
異常なレベルのＣＤＸ２活性と関連した状態の治療方法であって、
式ＩＩ：
【化１３】
2019218373.tif 000030
を有する化合物の有効量をそのような治療を必要とするヒト対象に投与することを含む、前記治療方法。
【図１】
2019218373.tif 000031
【図２】
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【図３】
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【図４】
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【図５】
2019218373.tif 000035
【図６】
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【図７】
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【図８】
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【図９】
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【図１０】
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【図１１】
2019218373.tif 000041
【図１２】
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【図１３】
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【図１４】
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【図１５】
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【図１６】
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【図１７】
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【図１８】
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【図１９】
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【図２０】
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【図２１】
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【外国語明細書】
2019218373000001.pdf