(57)【要約】【課題】安全性が高く、長期に適用可能なコラーゲン産生促進剤を提供する。【解決手段】グルコラファニン及び／又はスルフォラファン、又はこれを含有する植物若しくはその加工品を有効成分とするコラーゲン産生促進剤。【選択図】なし【特許請求の範囲】
【請求項１】
グルコラファニン及び／又はスルフォラファン、又はこれを含有する植物若しくはその加工品を有効成分とするコラーゲン産生促進剤。
【請求項２】
グルコラファニン及び／又はスルフォラファン、又はこれを含有する植物若しくはその加工品を有効成分とするコラーゲン産生促進用食品。
【請求項３】
グルコラファニン及び／又はスルフォラファン、又はこれを含有する植物若しくはその加工品を有効成分とする皮膚のシワ若しくはタルミ予防又は改善剤。
【請求項４】
グルコラファニン及び／又はスルフォラファン、又はこれを含有する植物若しくはその加工品を有効成分とする皮膚のシワ若しくはタルミ予防又は改善用食品。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明はコラーゲンの産生を促進するコラーゲン産生促進剤に関する。
【背景技術】
【０００２】
シワやタルミといった皮膚の老化の原因は様々あるが、その一つに真皮マトリックス成分量の低下が挙げられる。コラーゲンは真皮マトリックスの主要成分であり、皮膚にハリを与え、タルミなどを抑制する作用があるが、加齢や紫外線の照射によりその量が低下することが知られている（非特許文献１）。コラーゲン量の減少の原因としては、真皮の線維芽細胞によるコラーゲンの産生能の低下が挙げられ、その結果、皮膚のシワやタルミが発生する。
【０００３】
そこで、コラーゲン産生を促進する素材を天然物から探索する試みがなされ、植物の抽出物（特許文献１、特許文献２）やその成分（特許文献３）の他、種々の物質にコラーゲン産生促進作用があることがこれまでに報告されている。
【０００４】
一方、ブロッコリー等のアブラナ科の植物には、スルフォラファンの前駆体グルコシノレートであるグルコラファニンが多く含まれ、当該植物の組織中に含まれるグルコラファニンは、組織が破壊されると内在性の酵素ミロシナーゼにより加水分解され、スルフォラファンを生じることが知られている（非特許文献２）。また、ヒトがグルコラファニンを摂取した場合においても、腸内細菌の働きによって、スルフォラファンに変換されて、腸管から吸収されると考えられている。
【０００５】
斯かるスルフォラファンやその前駆体グルコシノレートであるグルコラファニンには、体内の代謝過程で生じる発ガン物質の活性化を打消す第二相解毒酵素を強く誘導する作用があること、ガン治療に対して有効であること（特許文献４）等が報告されている。
しかしながら、グルコラファニンやスルフォラファンにコラーゲン産生促進作用や皮膚のシワやタルミを防止・改善する作用があることはこれまでに知られていない。
【先行技術文献】
【特許文献】
【０００６】
【特許文献１】特開２０１０−２３５４８２号公報
【特許文献２】特開２０１２−１４８９９１号公報
【特許文献３】特開２０１０−０３０９１１号公報
【特許文献４】特表２０１６−５１４１３５号公報
【非特許文献】
【０００７】
【非特許文献１】American Journal of Pathology. 2006;168:1861-1868.
【非特許文献２】J. Agric. Food Chem., 52: 916-926 (2004)
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００８】
本発明の課題は、安全性が高く、長期に適用可能なコラーゲン産生促進剤を提供することにある。
【課題を解決するための手段】
【０００９】
本発明者は、多くの天然物の中からコラーゲン産生促進剤を見出すべく検討した結果、グルコラファニン及びスルフォラファンが線維芽細胞におけるコラーゲン産生を促進する作用があることを見出し、本発明を完成した。
【００１０】
すなわち、本発明は、以下の１）〜４）に係るものである。
１）グルコラファニン及び／又はスルフォラファン、又はこれを含有する植物若しくはその加工品を有効成分とするコラーゲン産生促進剤。
２）グルコラファニン及び／又はスルフォラファン、又はこれを含有する植物若しくはその加工品を有効成分とするコラーゲン産生促進用食品。
３）グルコラファニン及び／又はスルフォラファン、又はこれを含有する植物若しくはその加工品を有効成分とする皮膚のシワ若しくはタルミ予防又は改善剤。
４）グルコラファニン及び／又はスルフォラファン、又はこれを含有する植物若しくはその加工品を有効成分とする皮膚のシワ若しくはタルミ予防又は改善用食品。
【発明の効果】
【００１１】
グルコラファニン及びスルフォラファンは、ブロッコリーやケールから容易に取得可能であり、長期投与又は摂取可能である。したがって、本発明によれば、安全性の高いコラーゲン産生促進剤が提供され、コラーゲンの減少に起因ないし関連する皮膚のシワやタルミの予防又は改善、皮膚の弾力性改善の効果が奏される。
【図面の簡単な説明】
【００１２】
【図１】グルコラファニンのコラーゲン産生促進効果を示す図。
【図２】スルフォラファンのコラーゲン産生促進効果を示す図。
【発明を実施するための形態】
【００１３】
本発明のグルコラファニン（Ｇｌｕｃｏｒａｐｈａｎｉｎ）は、別名：１−チオ−β−Ｄ−グルコピラノース１−［Ｎ−（ヒドロキシスルホニルオキシ）−５−（メチルスルフィニル）ペンタンイミダート］であり、スルフォラファン（Ｓｕｌｆｏｒａｐｈａｎｅ）は４−（メチルスルフィニル）ブチルイソチオシアナートである。
前述したとおり、グルコラファニンは、スルフォラファンの前駆体グルコシノレートであり、アブラナ科植物中で酵素ミロシナーゼにより加水分解されてスルフォラファンを生じる。また、ヒトがグルコラファニンを摂取した場合においても、スルフォラファンに変換されて、腸管から吸収される。
【００１４】
グルコラファニン及びスルフォラファンは、グルコラファニン及び／又はスルフォラファンを含有する植物から公知の方法で単離精製することにより取得することができる。
【００１５】
グルコラファニン及び／又はスルフォラファンを含有する植物としては、例えばアブラナ科（Ｂｒａｓｓｉｃａｃｅａｅ）植物、好ましくはアブラナ科アブラナ属（Ｂｒａｓｓｉｃａ）の植物が挙げられる。具体的には、ケール、ブロッコリー、カリフラワー、キャベツ等が挙げられる。これらの植物においては、グルコラファニン又はスルフォラファンの含有量の点で、ケールやキャベツではその葉や茎、ブロッコリーやカリフラワーではその花蕾を使用することが望ましい。ケールの品種は、ハイパール（農林水産省品種登録第２０５５５号）、ハイクロップ、エステ、エキストラ・カールド・スコッチ等が利用できる。また、グルコラファニン又はスルフォラファンの含有量を高めたケールに属する新品種を使用することもできる。さらに、グルコラファニン又はスルフォラファンの含有量を指標とすることで、コラーゲン産生促進作用が高いケールに属する新品種の開発を行うこともできる。
【００１６】
また、単離精製されたグルコラファニン及びスルフォラファンは市販されており、本発明においては、当該市販品を使用することもできる。
【００１７】
本発明において、グルコラファニン又はスルフォラファンは、単離されたグルコラファニン、スルフォラファンのみならず、上記のグルコラファニン又はスルフォラファンを含有する植物又はその加工品（例えば、該植物の粉砕物、該植物の凍結乾燥物、該植物の搾汁、該植物の抽出物等）を使用することができる。例えば、ケール搾汁物やその乾燥物等が使用可能である。
【００１８】
グルコラファニン及び／又はスルフォラファンを含有する植物の加工品、すなわちその粉砕物、凍結乾燥物、及び搾汁は、当業者によって通常用いられる処理方法で、上記植物を処理することにより得ることができる。また、抽出物は、上記の植物から当業者によって通常用いられる抽出処理方法によって得ることができる。例えば、当該植物を粉砕し、水又は含水溶媒（水−アルコール混合溶液等）で含浸又は抽出する方法が挙げられる。
【００１９】
斯くして得られた植物の加工品は、必要に応じて、合成吸着剤による処理、ろ過処理、濃縮処理等の分離・精製工程に供することにより、グルコラファニン及び／又はスルフォラファンの含有割合を高めてもよい。
【００２０】
本発明のグルコラファニン及びスルフォラファンは、後記実施例に示すように、正常ヒト皮膚線維芽細胞におけるコラーゲン産生を促進する。したがって、グルコラファニン及び／又はスルフォラファン、又はこれを含有する植物若しくはその加工品は、コラーゲン産生促進剤となり、コラーゲン産生促進のために使用できる。
本発明において、コラーゲンの産生促進とは、ヒト皮膚真皮の繊維芽細胞のコラーゲンの産生能、好ましくはＩ型コラーゲンの産生能を促進または改善し、これにより、ヒト皮膚真皮においてコラーゲン量が増大し得ることを意味する。真皮のコラーゲン量を増加させることによって、シワの改善や防止効果が得られ、また、皮膚の弾力性を向上させることができる。したがって、グルコラファニン及び／又はスルフォラファン、又はこれを含有する植物若しくはその加工品は、コラーゲンの減少に起因又は関連する皮膚のシワやタルミの予防又は改善剤にもなり得る。
【００２１】
上記コラーゲン産生促進剤は、コラーゲン産生を促進するため、皮膚のシワやタルミを予防又は改善するための医薬品、医薬部外品、化粧品、サプリメント又は食品（コラーゲン産生促進用食品、皮膚のシワ若しくはタルミ予防又は改善用食品）となり、或いはこれらへ配合するための素材又は製剤となり得る。また、本発明のグルコラファニン及びスルフォラファンは何れも経口摂取した場合に体内に吸収されることから、細胞評価試験の結果と同じ効果を奏すると考えられる。
尚、上記食品には、一般飲食品のほか、コラーゲン産生、皮膚のシワやタルミの予防又は改善をコンセプトとし、必要に応じてその旨を表示した食品、機能性表示食品、特定保健用食品等が包含される。
【００２２】
本発明のグルコラファニン及びスルフォラファンを含む上記医薬品（医薬部外品を含む）は、任意の投与形態で投与され得る。投与に際しては、有効成分を経口、直腸内、注射、外用等の投与方法に適した固体又は液体の医薬用無毒性担体と混合して、慣用の医薬品製剤の形態で投与することができる。
【００２３】
例えば、経口投与製剤としては、錠剤、顆粒剤、散剤、カプセル剤等の固形剤、溶液剤、懸濁剤、乳剤等の液剤、凍結乾燥剤等が挙げられる。これらの製剤は製剤上の常套手段により調製することができる。上記の医薬用無毒性担体としては、例えば、グルコース、乳糖、ショ糖、澱粉、マンニトール、デキストリン、脂肪酸グリセリド、ポリエチレングリコール、ヒドロキシエチルデンプン、エチレングリコール、ポリオキシエチレンソルビタン脂肪酸エステル、アミノ酸、ゼラチン、アルブミン、水、生理食塩水等が挙げられる。また、必要に応じて、安定化剤、湿潤剤、乳化剤、結合剤、等張化剤、賦形剤等の慣用の添加剤を適宜添加することもできる。
【００２４】
また、外用剤（化粧品、医薬品および医薬部外品を含む。）の形態としては、軟膏剤、クリーム剤、外用液剤の他、各種化粧品の形態（例えば、化粧水、乳液、各種クリーム、パック、美容液等の基礎化粧料、シャンプー、リンス、トリートメント、ヘアトニック、ヘアリキッド、ヘアクリーム、ヘアミルク等の頭髪用製品、入浴剤等の浴用化粧品、ファンデーション、口紅、マスカラ、アイシャドウ等のメーキャップ化粧品、日焼け止め等）が挙げられる。
【００２５】
また、上記外用剤には、必須成分であるグルコラファニン及び／又はスルフォラファン、又はこれを含有する植物若しくはその加工品の他に、通常、外用剤に配合される任意成分を配合することができる。このような任意成分としては、界面活性剤、油分、アルコール類、保湿剤、増粘剤、防腐剤、酸化防止剤、キレート剤、ｐＨ調整剤、香料、色素、紫外線吸収・散乱剤、粉体、ビタミン類、アミノ酸類、水溶性高分子、発泡剤、顔料、植物抽出物、動物由来成分、海藻抽出物、各種薬剤、添加剤、水等を挙げることができる。
【００２６】
また、グルコラファニン及び／又はスルフォラファン、又はこれを含有する植物若しくはその加工品を配合した上記食品の形態は、各種食品組成物の他、上述した経口投与製剤と同様の形態（錠剤、カプセル剤、シロップ等）が挙げられる。
種々の形態の食品を調製するには、本発明のグルコラファニン及び／又はスルフォラファン、又はこれを含有する植物若しくはその加工品を単独で、又は他の食品材料や、溶剤、軟化剤、油、乳化剤、防腐剤、香科、安定剤、着色剤、酸化防止剤、保湿剤、増粘剤等を適宜組み合わせて用いることができる。
【００２７】
上記の医薬品（医薬部外品を含む）、化粧品及び食品中のグルコラファニン及び／又はスルフォラファン、又はこれを含有する植物若しくはその加工品の含有量は、その使用形態により異なるが、通常、グルコラファニン及び／又はスルフォラファンとして、製剤全質量の０．０１〜１０質量％、好ましくは０．１〜１質量％ある。
【００２８】
本発明のグルコラファニン及び／又はスルフォラファン、又はこれを含有する植物若しくはその加工品を医薬品、化粧品又は食品として、或いは医薬品や食品に配合して使用する場合の投与量は、患者の状態、体重、性別、年齢又はその他の要因に従って変動し得るが、経口投与の場合の成人１人当たりの１日の投与量は、通常、グルコラファニン及び／又はスルフォラファンとして、好ましくは０．１ｍｇ〜１００ｇ、より好ましくは１ｍｇ〜１０ｇである。
また、上記製剤は、任意の投与計画に従って投与され得るが、１日１回〜数回に分け、数週間〜数ヶ月間継続して投与することが好ましい。
【実施例】
【００２９】
実施例１．コラーゲン産生促進作用の評価
（１）試験品
・グルコラファニン：Ｇｌｕｃｏｒａｐｈａｎｉｎ、Ｃａｙｍａｎ  Ｃｈeｍｉｃａｌ社
・スルフォラファン：Ｒ，Ｓ−Ｓｕｌｆｏｒａｐｈａｎｅ、ＬＫＴ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓ社
【００３０】
（２）細胞及び培養条件 
細胞株：正常ヒト皮膚線維芽細胞（ＮＨＤＦ、クラボウ）
細胞は、３７℃、５％二酸化炭素の雰囲気下にて培養を行った。培地は、Ｄｕｌｂｅｃｃｏ’ｓ  Ｍｏｄｉｆｉｅｄ  Ｅａｇｌｅ  Ｍｅｄｉｕｍ（Ｌｉｆｅ  Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ社）を使用した。 
【００３１】
（３）試験品溶液の調製
エタノールにグルコラファニン、スルフォラファンを各々溶解し、以下に示す濃度の試験品溶液を調製した。
・グルコラファニン：１５．６２５、３．９０６μｇ／ｍＬ
・スルフォラファン：０．３９、０．０９７μｇ／ｍＬ
【００３２】
（４）コラーゲン産生試験 
ＮＨＤＦを９６ｗｅｌｌ  ｍｉｃｒｏ  ｐｌａｔｅに１×１０４ｃｅｌｌｓ／１００μＬ／ｗｅｌｌの濃度で播種し、２４時間、前培養した。前培養後、上記で調製した各試験品溶液を各ｗｅｌｌに加え４８時間の培養を行った。培養上清を回収し、ＥＬＩＳＡ法（ヒトコラーゲン  タイプＩ  ＥＬＩＳＡ  Ｋｉｔ（エーセル社））にてコラーゲン量を測定した。試験品未添加群（コントロール）のコラーゲン量を１００％として、各試験品添加群のコラーゲン量産生率を、全細胞の総タンパク質量を測定しタンパク質量当たりのコラーゲン産生量で求めた。試験は、３回実施しその平均値を算出した（ｎ＝３）。
【００３３】
（５）結果
結果を図１及び２に示す。
グルコラファニン及びスルフォラファンには、コントロールと比較して有意なコラーゲン産生率の増加が認められた。
【図１】
2019052114.tif 000002
【図２】
2019052114.tif 000003