(57)【要約】【課題】新規のヘマトクリット値測定デバイス及びヘマトクリット値測定方法の提供。【解決手段】血球成分と血漿成分とを分離可能な多孔質メンブレンを備えた流路と、前記流路に血液試料を導入する導入口と、前記血球成分が前記多孔質メンブレンを移動した距離の指標となる目盛と、を備えたヘマトクリット値測定デバイス。また、（ａ）血球成分と血漿成分とを分離可能な多孔質メンブレンを備えた流路に、血液試料を導入する工程と、（ｂ）前記血液試料中の血球成分が前記多孔質メンブレンを移動した距離に基づいて、前記血液試料のヘマトクリット値を求める工程と、を含む、ヘマトクリット値の測定方法。【選択図】図２
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【特許請求の範囲】
【請求項１】
血球成分と血漿成分とを分離可能な多孔質メンブレンを備えた流路と、
前記流路に血液試料を導入する導入口と、
前記血球成分が前記多孔質メンブレンに浸潤した距離の指標となる目盛と、
を備えたヘマトクリット値測定デバイス。
【請求項２】
前記流路内の空気を排出する排出口をさらに備える、請求項１に記載のヘマトクリット値測定デバイス。
【請求項３】
前記流路の断面積に対する前記多孔質メンブレンの断面積の比の値（多孔質メンブレン断面積／流路断面積）が、０．９５〜１．６である、請求項１又は２に記載のヘマトクリット値測定デバイス。
【請求項４】
前記流路の高さに対する前記多孔質メンブレンの厚さの比の値（多孔質メンブレン厚さ／流路高さ）が、０．８以上である、請求項１〜３のいずれか一項に記載のヘマトクリット値測定デバイス。
【請求項５】
前記流路の幅に対する前記多孔質メンブレンの幅の比の値（多孔質メンブレン幅／流路幅）が、０．８以上である、請求項１〜４のいずれか一項に記載のヘマトクリット値測定デバイス。
【請求項６】
（ａ）血球成分と血漿成分とを分離可能な多孔質メンブレンを備えた流路に、血液試料を導入する工程と、
（ｂ）前記血液試料中の血球成分が前記多孔質メンブレンに浸潤した距離に基づいて、前記血液試料のヘマトクリット値を求める工程と、
を含む、ヘマトクリット値の測定方法。
【請求項７】
前記工程（ａ）の後、前記工程（ｂ）の前に、（ｃ）前記流路内の空気を吸引する工程をさらに含む、請求項６に記載のヘマトクリット値の測定方法。
【請求項８】
前記工程（ａ）が、請求項１〜５のいずれか一項に記載のヘマトクリット測定デバイスの前記流路に、前記血液試料を導入する工程であり、
前記工程（ｂ）が、前記目盛を指標として、前記血液試料中の血球成分が前記多孔質メンブレンに浸潤した距離に基づき、前記血液試料のヘマトクリット値を求める工程である、
請求項７に記載のヘマトクリット値の測定方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、ヘマトクリット値測定デバイス及びにヘマトクリット値の測定方法に関する。
【背景技術】
【０００２】
ヘマトクリット値（血液中に占める血球の容積の割合）は、救急時の輸血の必要性の有無を判断したり、貧血の種類をおおよそ診断するために測定される。ヘマトクリット値の測定方法としては、ヘマトクリット遠心機を用いる方法、自動血球計測器を用いる方法等がある。しかし、これらの方法は特殊な遠心分離機や自動血球計測機を使用するため、これらの装置が無いと測定できない。
また、例えば、特許文献１には、応答電流の変化に基づいて血液検体を検出する検出部を備え、血液検体が該検出部に到達するまでの時間から該血液検体のヘマトクリット値を測定する血液成分分析装置が記載されている。特許文献１に記載の装置は、応答電流を測定するために、電流測定装置が無いと測定できない。
【先行技術文献】
【特許文献】
【０００３】
【特許文献１】特開２００１−９１５１２号公報
【発明の概要】
【０００４】
本発明の一実施態様は、血球成分と血漿成分とを分離可能な多孔質メンブレンを備えた流路と、前記流路に血液試料を導入する導入口と、前記血球成分が前記多孔質メンブレンに浸潤した距離の指標となる目盛と、を備えたヘマトクリット値測定デバイスである。
【０００５】
また、本発明の一実施態様は、（ａ）血球成分と血漿成分とを分離可能な多孔質メンブレンを備えた流路に、血液試料を導入する工程と、（ｂ）前記血液試料中の血球成分が前記多孔質メンブレンに浸潤した距離に基づいて、前記血液試料のヘマトクリット値を求める工程と、を含む、ヘマトクリット値の測定方法である。
【図面の簡単な説明】
【０００６】
【図１】ヘマトクリット値測定デバイスの一例を示す斜視図である。
【図２】ヘマトクリット値測定デバイスの一例を示す上面図である。
【図３】ヘマトクリット値測定デバイスの製造方法の一例を示す模式図である。
【図４】ヘマトクリット値測定デバイスの使用方法の一例を示す模式図である。
【図５】ヘマトクリット値測定デバイスの使用方法の一例を示す模式図である。
【発明を実施するための形態】
【０００７】
以下、場合により図面を参照しつつ、本発明の実施形態について詳細に説明する。なお、図面中、同一又は相当部分には同一又は対応する符号を付し、重複する説明は省略する。なお、各図における寸法比は、説明のため誇張している部分があり、必ずしも実際の寸法比とは一致しない。
【０００８】
［ヘマトクリット値測定デバイス］
１実施形態において、本発明は、血球成分と血漿成分とを分離可能な多孔質メンブレンを備えた流路と、前記流路に血液試料を導入する導入口と、前記血球成分が前記多孔質メンブレンを移動した距離の指標となる目盛と、を備えたヘマトクリット値測定デバイスを提供する。
【０００９】
図１は、本実施形態のヘマトクリット値測定デバイスの一例を示す斜視図である。図２は、本実施形態のヘマトクリット値測定デバイスの一例を示す上面図である。
ヘマトクリット値測定デバイス１００は、流路１０と、流路１０に試料を導入するための導入口１２とを備えている。また、流路１０には、多孔質メンブレン１１が設置されている。さらに、多孔質メンブレン１１の一部に沿って、目盛２が設けられている。ヘマトクリット値測定デバイス１００では、さらに排出口１３を備えている。
【００１０】
ヘマトクリット値測定デバイス１００において、流路１０は、基板１中に形成されている。基板１は、プレート１ａとプレートシール１ｂとから構成されている。プレート１ａの一面には、溝が設けられており、当該溝をプレートシール１ｂで蓋することにより、流路１０が形成されている。
【００１１】
プレート１ａの材質は、特に限定されず、流路１０を視認できるものであればよい。プレート１ａの材質としては、例えば、ガラス、樹脂等が挙げられる。樹脂としては、例えば、ポリオレフィン樹脂（ポリプロピレンなど）；ポリエステル樹脂（ポリエチレンテレフタレートなど）；アクリル樹脂（ポリメタクリル酸メチルなど）；ポリカーボネート等が挙げられるが、これらに限定されない。また、後述するプレートシール１ｂ側から流路１０を観察できる場合には、プレート１ａは、不透明材料で構成されていてもよい。
また、プレート１ａは、全て同じ材質で形成されている必要はなく、一部が異なる材質で形成されていてもよい。例えば、流路１０の周辺をガス溶解度の高い材質（以下、「ガス溶解性材料」ということがある）で形成してもよい。一例として、流路１０の側壁及び上壁の少なくとも一部をガス溶解性材料で形成することができる。ガス溶解性材料を配置する場所としては、流路１０の側壁及び／又は上壁全体、流路１０の多孔質メンブレン１１が配置されていない部分の側壁及び／又は上壁全体、流路１０の多孔質メンブレン１１が配置されていない部分の側壁及び／又は上壁の一部等が挙げられる。流路１０の周囲に配置されたガス溶解性材料は、真空下では脱気される。これを大気圧に戻すと、ガス溶解性材料は、流路１０内の空気を吸収する。この吸気作用により、血液試料の多孔質メンブレンへの浸潤速度を速めることができる。ガス溶解性材料としては、ポリジメチルシロキサン（ＰＤＭＳ）が例示される。
【００１２】
プレートシール１ｂは、樹脂シート等を用いることができる。例えば、樹脂としては、上述のプレート１ａで例示したものと同様のものが例示される。
プレートシール１ｂは、必ずしも、プレート１ａの底面全体をカバーする必要はなく、プレート１ａ上に形成された溝に蓋をして、流路１０を形成し得る大きさであればよい。
【００１３】
プレート１ａとプレートシール１ｂとは、接着剤や熱圧着等により接着手段により接着されて、基板１を形成している。
【００１４】
図１に示す例では、流路１０は、直線形状であり、断面形状が矩形状である。しかし、流路１０の形状は、これに限定されない。例えば、流路１０は、直線形状であってもよく、曲線形状であってもよく、直線形状と曲線形状が組み合わされた形状であってもよい。また、流路１０の断面形状は、矩形状であってもよく、半円形状であってもよく、円形状であってもよい。
【００１５】
流路１０の断面積は、特に限定されないが、例えば、０．０５〜１０ｍｍ２、０．１〜５ｍｍ２、０．５〜１ｍｍ２等が例示される。流路１０の断面積を小さくすると、少ない血液量で、より細かい数値までヘマトクリット値を測定することができる。一方、流路１０のの断面積を大きくすると、流路１０内の血液試料の移動速度が速くなり、ヘマトクリット値測定時間を短縮し得る。流路１０が矩形形状の場合、流路１０の幅として、例えば、０．１〜１０ｍｍ、０．３〜５ｍｍ、０．５〜３ｍｍ等が例示される。また、流路１０の高さとして、例えば、０．０５〜１０ｍｍ、０．１〜５ｍｍ、０．３〜３ｍｍ等が例示される。
【００１６】
流路１０の長さは、血液試料中の血球成分と血漿成分とを分離するのに十分な長さの多孔質メンブレンを設置できる長さであればよい。流路１０の長さは、流路１０の断面積、多孔質メンブレンの種類等により、適宜選択することができる。流路１０の長さとしては、例えば、１０ｍｍ以上、１５ｍｍ以上、２０ｍｍ以上等が挙げられる。流路１０の長さの上限値は、特に限定されないが、流路１０が長くなるとデバイスのサイズが大きくなるため、例えば、１００ｍｍ以下、５０ｍｍ以下、４０ｍｍ以下等が例示される。
【００１７】
流路１０内には、多孔質メンブレン１１が設置されている。多孔質メンブレン１１は、血球成分と血漿成分とを分離し得る孔径を有している。多孔質メンブレン１１に血液試料を導入すると、血球成分は多孔質メンブレン１１に捕捉されつつ多孔質メンブレン１１中移動するため、血漿成分と比較して移動速度が遅くなる。これにより、血球成分と血漿成分とが分離される。
後述する実施例で示すように、血液試料中のヘマトクリット値が高いほど、血球成分が多孔質メンブレン１１に浸潤する距離（以下、「浸潤長」ともいう。）が長くなる。そのため、血球成分の浸潤長に基づいて、ヘマトクリット値を算出することができる。
【００１８】
多孔質メンブレン１１の材質は、特に限定されず、公知の多孔質メンブレンを用いることができる。多孔質メンブレン１１の材質としては、例えば、ガラス繊維、セルロース（木材パルプ、綿パルプなどを含む）、樹脂（ポリエステル、ポリカーボネート、ナイロン、ポリプロピレンなど）等が挙げられる。多孔質メンブレン１１の保留粒子径は、血球成分（特に赤血球）を適度に補足し得る保留粒子径であれば特に限定されない。すなわち、赤血球（１０μｍ×２μｍ程度）が、目詰まりを起こさず、且つ、素通りしない程度の保留粒子径であればよい。そのようなの保留粒子径としては、例えば、０．５〜１０μｍ程度、０．７〜８μｍ程度、１〜５μｍ程度等が例示される。
【００１９】
多孔質メンブレン１１は、例えば、流路１０内に、流路１０の内壁との間に隙間が生じないように設置されている。また、例えば、多孔質メンブレン１１は、流路１０内に、多孔質構造の変形が生じないように設置されている。前記のように多孔質メンブレン１１を流路１０内に設置する場合、例えば、流路１０の断面積に対する多孔質メンブレン１１の断面積の比の値（多孔質メンブレン断面積／流路断面積）が、０．９５〜１．６となるようにしてもよい。あるいは、例えば、流路１０の高さに対する多孔質メンブレン１１の厚さの比の値（多孔質メンブレン厚さ／流路高さ）が、０．８以上、例えば、０．８〜１．４となるようにしてもよい。あるいは、例えば、流路１０の幅に対する多孔質メンブレン１１の幅の比の値（多孔質メンブレン幅／流路幅）が、０．８以上、例えば、０．８〜１．１９、又は０．８〜１．１４となるようにしてもよい。また、一例として、多孔質メンブレン１１は、流路１０の高さに対する多孔質メンブレン１１の厚さの比の値（多孔質メンブレン厚さ／流路高さ）が、０．８以上（例えば、０．８〜１．４）であり、かつ流路１０の幅に対する多孔質メンブレン１１の幅の比の値（多孔質メンブレン幅／流路幅）が、０．８以上（例えば、０．８〜１．１９又は０．８〜１．１４）であってもよい。
【００２０】
多孔質メンブレン１１の長さは、血液試料中の血球成分と血漿成分とを分離し得る長さであればよい。多孔質メンブレン１１の長さは、多孔質メンブレン１１の種類に応じて、適宜選択することができる。多孔質メンブレン１１の長さとしては、例えば、１０ｍｍ以上、１５ｍｍ以上、２０ｍｍ以上等が挙げられる。多孔質メンブレン１１の長さの上限値は、特に限定されないが、多孔質メンブレン１１が長くなるとデバイスのサイズが大きくなるため、例えば、１００ｍｍ以下、５０ｍｍ以下、４０ｍｍ以下等が例示される。
多孔質メンブレン１１の長さは、流路１０の長さとほぼ同じであってもよく、流路１０よりも短い長さであってもよい。多孔質メンブレン１１が、流路１０よりも短い場合、多孔質メンブレン１１は、流路１０内のいずれの位置に設置してもよい。一例として、多孔質メンブレン１１は、導入口１２に隣接する位置に設置されている。多孔質メンブレン１１を導入口１２に隣接して配置すると、導入口１２から導入された血液試料がすぐに多孔質メンブレン１１に浸潤するため、測定時間を短くするともに、測定に要する血液試料の量を少なくすることができる。
【００２１】
導入口１２は、流路１０に血液試料を導入するためのものである。導入口１２は、一例として、流路１０の一端に設けられている。この場合、多孔質メンブレン１１も流路１０の一端に接するように配置してもよい。ヘマトクリット値測定デバイス１００において、導入口１２は、流路１０に通じる開口部として、プレート１ａに形成されている。導入口１２は、血液試料を滴下しやすいように、漏斗形状としてもよい。
【００２２】
ヘマトクリット値測定デバイス１００は、さらに、目盛２を備えている。目盛２は、多孔質メンブレン１１における血球成分の浸潤長の指標として用いられる。血球成分は、大部分が赤血球であるため、血球成分が多孔質メンブレン１１に浸潤すると、浸潤した部分は赤く視認される。すなわち、多孔質メンブレン１１が赤く視認される部分の長さが、血球成分の浸潤長である。当該血球成分の浸潤長は、目盛２を指標として、計測することができる。
【００２３】
目盛２は、血球成分の多孔質メンブレン１１における浸潤長の指標となり得る限り、配置、形状等は特に限定されない。目盛２は、例えば、図２に例示するように多孔質メンブレン１１に沿って配置される。目盛２は、流路１０の境界から外側に向かって伸びていてもよく、流路１０の境界から内側に向かって伸びていてもよい。
図２の例では、目盛２の目盛ラベルとして、ヘマトクリット値が記載されている。このヘマトクリット値は、多孔質メンブレンにおける血球成分の浸潤長から換算される値が記載されている。ただし、目盛ラベルはこれに限定されず、例えば、多孔質メンブレンにおける血液試料の浸潤開始点からの距離を目盛ラベルとしてもよい。この場合、例えば、別途用意される浸潤長とヘマトクリット値との換算表等を用いて、ヘマトクリット値を求めることができる。
【００２４】
ヘマトクリット値測定デバイス１００は、図２の例のように、さらに、体調表示３を備えていてもよい。体調表示３は、血球成分の浸潤長から求められるヘマトクリット値に対応する体調を、簡易に示すものである。図２の例では、体調表示３は、笑顔（快調）、泣き顔（不調）等のフェイスマークとなっている。体調表示３は、フェイスマークに限らず、「快調」、「不調」等のを文字で表示してもよく、色（赤：不調、緑：快調  など）等により体調を示すものであってもよい。
目盛２や体調表示３は、例えば、プレート１ａの上面に印字することができる。
【００２５】
ヘマトクリット値測定デバイス１００は、上記構成に加えて、排出口１３を備えている。排出口１３は、流路１０内の空気を排出するためのものである。流路内の空気が排出されることにより、血液試料が、多孔質メンブレン１１にスムーズに浸潤する。排出口１３は、一例として、流路１０の一端に設けられている。例えば、流路１０の一端に導入口１２を配置し、他端に排出口１３を配置する構成としてもよい。排出口１３の形状は、特に限定されないが、チューブ等を接続できるように、管状のチューブ接続部１３ａの周囲に凹部１３ｂを設ける構成としてもよい。この構成によれば、チューブ接続部１３ａにチューブを接続し、該チューブの他端を吸引装置に接続して、該吸引装置を稼働させることにより流路１０内の空気を吸引することができる。流路１０内の空気を排出口１３から吸引することにより、血液試料の多孔質メンブレン１１への浸潤が促進され、ヘマトクリット値測定時間を短縮することができる。
【００２６】
（製造方法）
上記のような構成を備えたヘマトクリット値測定デバイス１００の製造方法の一例を図３を参照して説明する。
【００２７】
まず、プレート１ａの一方の面に、流路１０に対応する溝１０ａを形成する。さらに、プレート１ａに、導入口１２及び排出口１３を形成する。溝１０ａ、導入口１２及び排出口１３の形成は、例えば、切削等により行うことができる。
【００２８】
次に、多孔質メンブレン１１を溝１０ａの任意の位置に充填する。一例として、多孔質メンブレン１１は、導入口１２に隣接した位置に設置してもよい。多孔質メンブレン１１は、例えば、流路１０の断面積に対する多孔質メンブレン１１の断面積の比の値（多孔質メンブレン断面積／流路断面積）が、０．９５〜１．６であるものを用いることができる。あるいは、例えば、流路１０の高さに対する多孔質メンブレン１１の厚さの比の値（多孔質メンブレン厚さ／流路高さ）が、０．８以上、例えば、０．８〜１．４であるものを用いることができる。あるいは、例えば、流路１０の幅に対する多孔質メンブレン１１の幅の比の値（多孔質メンブレン幅／流路幅）が、０．８以上、例えば、０．８〜１．１９、又は０．８〜１．１４であるものを用いることができる。また、多孔質メンブレン１１は、流路１０の高さに対する多孔質メンブレン１１の厚さの比の値（多孔質メンブレン厚さ／流路高さ）が、０．８以上（例えば、０．８〜１．４）であり、かつ流路１０の幅に対する多孔質メンブレン１１の幅の比の値（多孔質メンブレン幅／流路幅）が、０．８以上（例えば、０．８〜１．１９又は０．８〜１．１４）であるものを用いてもよい。
【００２９】
次に、プレートシール１ｂで、多孔質メンブレン１１を固定し、溝１０ａに蓋をする。これにより、流路１０が形成される。プレートシール１ｂは、例えば、接着剤や熱圧着等により、プレート１ａに固定することができる。
以上のようにして、ヘマトクリット値測定デバイス１００を製造することができる。
【００３０】
目盛２の形成方法は、特に限定されず、プレート１ａ側に形成してもよく、プレートシール１ｂ側に形成してもよい。目盛２をプレート１ａ側に形成する場合、プレート１ａの上面（プレートシール１ｂ側とは逆側の面）又は下面（プレートシール１ｂ側の面）に印字することにより形成してもよく、プレート１ａの上面に目盛を印字したシール等を貼付することにより形成してもよい。目盛２をプレートシール１ｂ側に形成する場合、プレートシール１ｂの上面（プレート１ａ側の面）又は下面（プレート１ａ側とは逆側の面）に印字することにより形成してもよく、プレートシール１ｂの下面に目盛を印字したシール等を貼付することにより形成してもよい。あるいは、プレート１ａとプレートシール１ｂとの間に目盛シート等を設置することにより、目盛２を形成してもよい。目盛２の形成は、上記工程中の任意の段階で行うことができる。
【００３１】
（使用方法）
上記のように構成されたヘマトクリット値測定デバイス１００の使用方法の一例を図４及び図５を参照して説明する。
【００３２】
まず、図４に示すように、血液試料をピペット２２等を用いて、導入口１２から流路１０に導入する。血液試料としては、全血が挙げられるが、全血に前処理等が施されたものであってもよい。前処理としては、例えば、繊維成分の除去が挙げられる。
流路１０への血液試料の導入量は、例えば、多孔質メンブレン１１が充填された部分の流路１０の容量以上の量で且つ流路１０全体の容量以下の量とすることができる。あるいは、血液試料の導入量は、多孔質メンブレン１１の容量以上の量で且つ流路１０全体の容量以下の量とすることができる。血液試料の導入量を前記の量とすることにより、多孔質メンブレン１１への血液試料の浸潤が、多孔質メンブレン１１の途中で止まることを回避することができる。
血液試料の導入量は、通常、血液成分の浸潤長の指標となる目盛２に基づき、ヘマトクリット値測定デバイス１００の種類毎に、予め適切な量が設定される。
【００３３】
流路１０内に導入された血液試料は、多孔質メンブレン１１に浸潤していく。このとき、任意に、排出口１３のチューブ接続部１３ａにチューブ２１を接続し、チューブ２１の他端を吸引装置に接続して、流路１０内の空気を吸引してもよい。これにより、血液試料の多孔質メンブレン１１への浸潤速度を速めることができる。吸引に用いる負圧は特に限定されず、流路径等に応じて適宜設定すればよい。吸引に用いる負圧としては、例えば、０〜５０Ｋｐａ、０〜３０Ｋｐａ、１〜１０Ｋｐａ、１〜５Ｋｐａ等が挙げられる。また、吸引時間は、０〜５分、０〜３分、０〜２分、０〜１分等が例示される。吸引時間は、０〜４０秒、０〜３０秒、０〜２０秒等であってもよい。例えば、血液試料の粘度が高い場合に、吸引を行うようにしてもよい。
【００３４】
多孔質メンブレン１１に血液試料が浸潤すると、血球成分は、多孔質メンブレン１１に捕捉される一方、血漿成分は多孔質メンブレン１１を通過するため、図５に示すように、血球成分と、血漿成分とが分離する。血球成分の多くは赤血球であるため、多孔質メンブレン１１において血球成分が浸潤した部分は、赤く視認される。すなわち、多孔質メンブレン１１において赤く視認される部分の長さが、血球成分の浸潤長である。赤く視認される部分の境界を、目盛２を指標として読み取ることにより、ヘマトクリット値を測定することができる。
なお、目盛２の目盛ラベルが血球成分の浸潤長を示すものである場合には、ヘマトクリット値測定デバイス１００毎に用意される換算表により、当該目盛ラベルにより読み取った浸潤長からヘマトクリット値を求めることができる。
【００３５】
本実施形態のヘマトクリット値測定デバイスによれば、特別な機器を必要とせず、簡便に短時間でヘマトクリット値を測定することができる。また、流路１０の断面積を調節することにより、少量の血液でヘマトクリット値の測定を行うことができる。
【００３６】
（変形例）
上述したヘマトクリット値測定デバイス１００では、導入口１２及び排出口１３が基板１（プレート１ａ）の上面に設けられる構成となっていた。しかしながら、導入口及び排出口が、基板の側面に配置される構成としてもよい。例えば、流路が、基板の長さ方向に基板を貫通するように形成され、流路の一端を導入口とし、他端を排出口とする構成であってもよい。あるいは、導入口及び排出口のいずれか一方を基板の上面に形成し、他方を基板の側面に形成する構成であってもよい。
【００３７】
上述したヘマトクリット値測定デバイス１００では、排出口１３を設ける構成となっていたが、排出口を設けない構成としてもよい。また、排出口を設けず、流路の周囲にＰＤＭＳ等のガス溶解性材料を配置する構成としてもよい。このようなヘマトクリット測定装置は、例えば、真空パックにて保管され、使用時に真空パックを開封して用いてもよい。
真空パック下では、ガス溶解性材料は脱気されている。これを開封すると大気圧下に戻るため、ガス溶解性材料は流路内の空気を吸収する。そこで、真空パックの開封後すぐに、血液試料を流路に導入すれば、ガス溶解性材料の吸気作用により、血液試料の多孔質メンブレンへの浸潤を促進することができる。
【００３８】
［ヘマトクリット値測定方法］
１実施形態において、本発明は、ヘマトクリット値の測定方法を提供する。本実施形態のヘマトクリット値の測定方法は、（ａ）血球成分と血漿成分とを分離可能な多孔質メンブレンを備えた流路に、血液試料を導入する工程と、（ｂ）前記血液試料中の血球成分が前記多孔質メンブレンに浸潤した距離に基づいて、前記血液試料のヘマトクリット値を求める工程と、を含む。
本実施形態の方法は、上述の実施形態のヘマトクリット値測定デバイスを用いて行うことができる。
【００３９】
（工程ａ）
工程（ａ）は、血球成分と血漿成分とを分離可能な多孔質メンブレンを備えた流路に、血液試料を導入する工程である。
【００４０】
多孔質メンブレンは、上記［ヘマトクリット値測定デバイス］における多孔質メンブレン１１で例示したものと同様のものが使用可能である。また、流路の断面積、幅、高さについても、上記［ヘマトクリット値測定デバイス］における流路１０で例示したものと同様のものが例示される。血液試料は、全血が例示されるが、全血に前処理等が施されたものであってもよい。
【００４１】
本実施形態の方法を、上述のヘマトクリット値測定デバイスを用いて行う場合、本工程は、例えば、ヘマトクリット値測定デバイス１００の流路１０に、血液試料を導入する工程であるといえる。
【００４２】
（工程ｂ）
工程（ｂ）は、血液試料中の血球成分が多孔質メンブレンに浸潤した距離（浸潤長）に基づいて、血液試料のヘマトクリット値を求める工程である。
【００４３】
前記工程（ａ）において、流路に導入された血液試料は、多孔質メンブレンに浸潤し、血球成分と血漿成分とが分離される。多孔質メンブレンにおいて赤く視認される部分が、血球成分が浸潤した部分であり、その浸潤長はヘマトクリット値に基づき変化する。そこで、多孔質メンブレンにおける血球成分の浸潤長に基づいて、ヘマトクリット値を求めることができる。
例えば、同一の条件の多孔質メンブレンを設置した同一条件の流路において、予め、ヘマトクリット値が異なる複数の血液試料を用いて、各試料について血球成分の浸潤長を測定しておく。各試料の浸潤長の測定値から、ヘマトクリット値と浸潤長との換算表又は検量線を作成しておく。
その後、ヘマトクリット値を調べたい血液試料について、上記と同様の多孔質メンブレン及び流路により、多孔質メンブレンにおける血球成分の浸潤長を測定する。そして、前記の換算表又は検量線から、血球成分の浸潤長に基づいて、対象血液試料のヘマトクリット値を求めることができる。
【００４４】
本実施形態の方法を、上述のヘマトクリット値測定デバイスを用いて行う場合、本工程は、例えば、ヘマトクリット値測定デバイス１００の目盛２を指標として、血液試料中の血球成分が前記多孔質メンブレンに浸潤した距離に基づき、血液試料のヘマトクリット値を求める工程であるといえる。
【００４５】
（任意工程）
本実施形態の方法は、上記工程（ａ）及び（ｂ）に加えて、他の工程を含んでいてもよい。他の工程としては、（ｃ）前記流路内の空気を吸引する工程が挙げられる。
例えば、流路内の空気を導入口の逆側から吸引することにより、多孔質メンブレンへの血液試料の浸潤速度を早くすることができる。これにより、測定時間を短縮することができる。
【００４６】
本実施形態の方法を、上述のヘマトクリット値測定デバイスを用いて行う場合、工程（ｃ）は、例えば、ヘマトクリット値測定デバイス１００の流路１０内の空気を、排出口１３から吸引する工程であるといえる。
【００４７】
本実施形態のヘマトクリット値測定方法によれば、特別な機器を必要とせず、簡便に短時間でヘマトクリット値の測定を実施することができる。また、流路の断面積を調節することにより、少量の血液でヘマトクリット値の測定を行うことができる。
【００４８】
以上、本発明の実施形態について図面を参照して詳述したが、具体的な構成はこの実施形態に限られるものではなく、この発明の要旨を逸脱しない範囲の設計等も含まれる。
【実施例】
【００４９】
以下、実施例により本発明を説明するが、本発明は以下の実施例に限定されるものではない。
【００５０】
［実験例１］
表１に示すガラス繊維ろ紙（幅：１．７、長さ：１５．０ｍｍ）を多孔質メンブレンとして用い、流路（幅：１．５ｍｍ、高さ：０．５ｍｍ、長さ：４０ｍｍ）に充填し、プレートシールで固定した（メンブレン幅／流路幅＝約１．１３３）。流路の一端に導入口を設け、当該導入口に隣接させて、多孔質メンブレンを設置した。流路の他端は、排出口とした。
【００５１】
上記のように作製したヘマトクリット値測定デバイスを用いて、導入口から兎脱繊維血（ビジコムジャパン）１５μＬを流路に導入した。排出口をチューブを介して吸引装置に接続し、３分間又は血球が多孔質メンブレンから漏出するまで負圧５．０ＫＰａで吸引した。吸引終了後、下記評価基準に基づいて、各デバイスを評価した。各デバイスは、それぞれ３個ずつ作製し、それらの総合評価とした。結果を表１に示す。
【００５２】
評価基準
Ａ：溶血、血球漏れがなく、血球成分と血漿成分とが分離
Ｂ：溶血又は血球漏れが発生。又は、血球成分と血漿成分との分離困難
【００５３】
【表１】
2019174145.tif 000003
【００５４】
上記の結果より、流路断面積に対する多孔質メンブレンの断面積の比の値（膜断面積／流路断面積）は、０．９５〜１．６の範囲が良好であった。また、流路高さに対する多孔質メンブレン厚さ（膜厚）の比の値（膜厚／流路高さ）は、０．８以上が良好であった。Ｎｏ．１は、いずれも前記範囲内であるが、保留粒子径が小さすぎるために、血球成分が目詰まりし、血球成分と血漿成分との分離がうまくいかなかったと考えられた。
【００５５】
［実験例２］
ガラス繊維ろ紙ＧＦ／Ｄ（＃１８２３−１５０／ＧＥヘルスケア；保留粒子径：２．７μｍ、膜厚：０．６７５ｍｍ、長さ：９．０ｍｍ）を多孔質メンブレンとして用いた。前記ガラス繊維ろ紙を表２に示す幅で裁断し、流路（幅１．５ｍｍ、高さ０．５ｍｍ、長さ６５ｍｍ）に充填し、プレートシールで固定した（膜厚／流路高さ＝１．３５）。その他の構成は、上記実験例１と同様とした。
【００５６】
上記のように作製したヘマトクリット値測定デバイスを用いて、導入口から兎脱繊維血（ビジコムジャパン）１０μＬを流路に導入した。排出口をチューブを介して吸引装置に接続し、２分間又は血球が多孔質メンブレンから漏出するまで負圧２．５ＫＰａで吸引した。吸引終了後、上記実験例１と同様の評価基準に基づいて、各デバイスを評価した。各デバイスは、それぞれ３個ずつ作製し、それらの総合評価とした。結果を表２に示す。
【００５７】
【表２】
2019174145.tif 000004
【００５８】
上記の結果より、流路断面積に対する多孔質メンブレンの断面積の比の値（膜断面積／流路断面積）は、実験例１と同様に、０．９５〜１．６の範囲が良好であった。また、流路幅に対する多孔質メンブレン幅（膜幅）の比の値（膜幅／流路幅）は、１．２未満が良好であった。
【００５９】
［実験例３］
ガラス繊維ろ紙ＧＦ／Ｄ（＃１８２３−１５０／ＧＥヘルスケア；保留粒子径：２．７μｍ、膜厚：０．６７５ｍｍ、幅：１．７ｍｍ、長さ：１５．０ｍｍ）を多孔質メンブレンとして用いた。前記ガラス繊維ろ紙を、流路（幅１．５ｍｍ、高さ０．５ｍｍ、長さ６５ｍｍ）に充填し、プレートシールで固定した。その他の構成は、上記実験例１と同様とした。
【００６０】
血液試料として、表３に示すヘマトクリット値を有する兎脱繊維血（ビジコムジャパン）を用いた。上記のように作製したヘマトクリット値測定デバイスを用いて、導入口から兎全血１５μＬを流路に導入した。排出口をチューブを介して吸引装置に接続し、負圧５ＫＰａで、３分間吸引した。吸引終了後、血球成分の浸潤長を測定した。結果を表３に示す。
【００６１】
【表３】
2019174145.tif 000005
【００６２】
表３に示すように、ヘマトクリット値の増加に伴って、血球成分の浸潤長が大きくなることが確認された。
【００６３】
［実験例４］
血液試料として、ヘマトクリット値が同じ（約４０％）で、血液粘度が異なる２種類の兎脱繊維血（ビジコムジャパン）を用いた。上記実験例３と同じ構成のヘマトクリット値測定デバイスを用いて、導入口から兎全血１５μＬを流路に導入した。排出口からの吸引は行わずに（負圧０ＫＰａ）、多孔質メンブレンに兎全血を浸潤させて、血球成分の浸潤長を測定した。結果を表４に示す。
【００６４】
【表４】
2019174145.tif 000006
【００６５】
表４に示すように、ヘマトクリット値が同じであれば、血液粘度にかかわらず、血球成分の浸潤長は同じであることが確認された。
【００６６】
［実験例５］
血液試料として、ヘマトクリット値（ふつう：４０％、高：６０％）と血液粘度（ふつう：２．８９ｍＰａ・ｓ、低：２．５８ｍＰａ・ｓ）がそれぞれ異なる４種類の兎脱繊維血（ビジコムジャパン）を用いた。上記実験例３と同じ構成のヘマトクリット値測定デバイスを用いて、導入口から兎全血１５μＬを流路に導入した。吸引を行わずに（負圧０ＫＰａ）、又は負圧５ＫＰａで吸引し、多孔質メンブレンに兎全血を浸潤させた。結果を表５に示す。
【００６７】
【表５】
2019174145.tif 000007
【００６８】
表５に示すように、ヘマトクリット値が同じであれば、吸引の有無及び血液粘度にかかわらず、血球成分の浸潤長は同じであることが確認された。ただし、吸引を行った場合には、浸潤速度が速くなった。また、血液粘度が高い場合には、吸引を行った方が、血球成分と血漿成分との分離面が見やすくなった。
【００６９】
［実験例６］
血液試料として、高いヘマトクリット値（６０％）及び低い血液粘度（２．５８ｍＰａ・ｓ）を有する兎脱繊維血（ビジコムジャパン）を用いた。上記実験例３と同じ構成のヘマトクリット値測定デバイスを用いて、導入口から兎全血１５μＬを流路に導入した。負圧２ＫＰａ、５ＫＰａ又は５０ＫＰａで吸引し、多孔質メンブレンに兎全血を浸潤させた。
【００７０】
吸引の負圧が大きいほど、浸潤速度が速くなった。一方、血球成分と血漿成分との分離面は、２ＫＰａのときに最も乱れが小さかった。負圧５０ＫＰａで吸引したときは、吸引時間が長くなると、血球成分の漏出が認められた。
【符号の説明】
【００７１】
１…基板、１ａ…プレート、１ｂ…プレートシール、２…目盛、３…体調表示、１０…流路、１１…多孔質メンブレン、１２…導入口、１３…排出口、１３ａ…チューブ接続部、１３ｂ…凹部、２１…チューブ、２２ピペット、１００…ヘマトクリット値測定デバイス
【図１】
2019174145.tif 000008
【図２】
2019174145.tif 000009
【図３】
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【図４】
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【図５】
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