(57)【要約】      （修正有）【課題】天然由来成分を有効成分として、様々な種類の真菌を含む菌及びウイルスに対して有効な抗菌抗ウイルス薬の提供。【解決手段】ヨモギ又は明日葉由来のラクトバシラス（Ｌａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓ）属を備える抗菌抗ウイルス薬。抗菌作用として、白癬菌やカンジダ等の真菌を減少させる効果があり、抗ウイルス作用として、インフルエンザウイルスのようなエンベロープウイルスや、ノロウイルスのようなノンエンベロープウイルスを減少させる効果がある。【選択図】なし【特許請求の範囲】
【請求項１】
ヨモギ由来のラクトバシラス（Ｌａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓ）属を備える抗菌抗ウイルス薬。
【請求項２】
ヨモギ由来のラクトバシラス（Ｌａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓ）属の分泌物を備える抗菌抗ウイルス薬。
【請求項３】
ラクトバシラス（Ｌａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓ）属を備える抗菌抗ウイルス薬であって、
前記ラクトバシラス属の種が、ｐａｒａｆａｒｒａｇｉｎｉｓ種、ｐａｒａｂｕｃｈｎｅｒｉ種、ｂｕｃｈｎｅｒｉ種、ｈａｒｂｉｎｅｎｓｉｓ種、ｖｉｎｉ種、及びｎａｇｅｌｉｉ種からなる群から選択される少なくとも一つである、抗菌抗ウイルス薬。
【請求項４】
ラクトバシラス（Ｌａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓ）属の分泌物を備える抗菌抗ウイルス薬であって、
前記ラクトバシラス属の種が、ｐａｒａｆａｒｒａｇｉｎｉｓ種、ｐａｒａｂｕｃｈｎｅｒｉ種、ｂｕｃｈｎｅｒｉ種、ｈａｒｂｉｎｅｎｓｉｓ種、ｖｉｎｉ種、及びｎａｇｅｌｉｉ種からなる群から選択される少なくとも一つである、抗菌抗ウイルス薬。
【請求項５】
前記ラクトバシラス属がヨモギ又は明日葉由来である、請求項３又は４に記載の抗菌抗ウイルス薬。
【請求項６】
真菌を減少させる、請求項１から５のいずれか１項に記載の抗菌抗ウイルス薬。
【請求項７】
前記真菌を２４時間以内に減少させる、請求項６に記載の抗菌抗ウイルス薬。
【請求項８】
前記真菌が白癬菌である、請求項６又は７に記載の抗菌抗ウイルス薬。
【請求項９】
前記真菌がカンジダである、請求項６又は７に記載の抗菌抗ウイルス薬。
【請求項１０】
エンベロープウイルスを減少させる、請求項１から９のいずれか１項に記載の抗菌抗ウイルス薬。
【請求項１１】
前記エンベロープウイルスを２４時間以内に減少させる、請求項１０に記載の抗菌抗ウイルス薬。
【請求項１２】
前記エンベロープウイルスがインフルエンザウイルスである、請求項１０又は１１に記載の抗菌抗ウイルス薬。
【請求項１３】
ノンエンベロープウイルスを減少させる、請求項１から１２のいずれか１項に記載の抗菌抗ウイルス薬。
【請求項１４】
前記ノンエンベロープウイルスを２４時間以内に減少させる、請求項１３に記載の抗菌抗ウイルス薬。
【請求項１５】
前記ノンエンベロープウイルスがノロウイルスである、請求項１３又は１４に記載の抗菌抗ウイルス薬。
【請求項１６】
前記ラクトバシラス属が死菌である、請求項１又は３に記載の抗菌抗ウイルス薬。
【請求項１７】
前記ラクトバシラス属が加熱処理されている、請求項１又は３に記載の抗菌抗ウイルス薬。
【請求項１８】
前記ラクトバシラス属が菌体乾燥物である、請求項１又は３に記載の抗菌抗ウイルス薬。
【請求項１９】
部材と、
前記部材表面に配置された、請求項１から１８のいずれか１項に係る抗菌抗ウイルス薬と、
を備える、抗菌抗ウイルス部材。
【請求項２０】
植物を発酵させ、ラクトバシラス（Ｌａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓ）属を備える発酵液を得ることを備える、抗菌抗ウイルス薬の製造方法。
【請求項２１】
前記植物がヨモギ又は明日葉である、請求項２０に記載の抗菌抗ウイルス薬の製造方法。
【請求項２２】
前記ラクトバシラス属の種が、ｐａｒａｆａｒｒａｇｉｎｉｓ種、ｐａｒａｂｕｃｈｎｅｒｉ種、ｂｕｃｈｎｅｒｉ種、ｈａｒｂｉｎｅｎｓｉｓ種、ｖｉｎｉ種、及びｎａｇｅｌｉｉ種からなる群から選択される少なくとも一つである、請求項２０又は２１に記載の抗菌抗ウイルス薬の製造方法。
【請求項２３】
前記発酵液に含まれる前記ラクトバシラス属を死菌にすることを更に備える、請求項２０から２２のいずれか１項に記載の抗菌抗ウイルス薬の製造方法。
【請求項２４】
前記発酵液を加熱することを更に備える、請求項２０から２３のいずれか１項に記載の抗菌抗ウイルス薬の製造方法。
【請求項２５】
前記発酵液を乾燥させ、菌体乾燥物を得ることを更に備える、請求項２０から２４のいずれか１項に記載の抗菌抗ウイルス薬の製造方法。
【請求項２６】
前記ラクトバシラス属の分泌物を得ることを更に備える、請求項２０から２２のいずれか１項に記載の抗菌抗ウイルス薬の製造方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、抗菌抗ウイルス薬、抗菌抗ウイルス部材、及び抗菌抗ウイルス薬の製造方法に関する。
【背景技術】
【０００２】
乳酸菌の一部は、ヒトや動物に対して有害な病原菌に対抗することが知られている。例えば、特許文献１は、月桃由来の菌であるラクトバシラス属のｐｅｎｔｏｓｕｓ種をピロリ菌を除菌するために利用することを記載している。ただし、特許文献１は、月桃濃縮発酵液は、カンジダ菌に対しては全く効果が無いと記載している。
【０００３】
特許文献２は、ラクトバシラス属のｒｅｕｔｅｒｉ種が、ロイテリンと称される抗微生物物質を産生し、サルモネラ菌のような細菌やいくつかの真菌の増殖を阻害すると記載している。また、特許文献２は、皮膚障害の治療や予防のために、ラクトバシラス属のｆｅｒｍｅｎｔｕｍ種を使用することを記載している。さらに、特許文献２は、ラクトバシラス属のｒｅｕｔｅｒｉ種を、黄色ブドウ球菌、化膿連鎖球菌、及びざ瘡プロピオンバクテリウム等を病原菌とする皮膚障害の予防又は治療、並びにメチシリン耐性黄色ブドウ球菌（ＭＲＳＡ）感染症の予防又は治療に使用することも記載している。
【０００４】
特許文献３は、ラクトバシラス属のｐｌａｎｔａｒｕｍ種が、大腸菌、肺炎桿菌、緑膿菌、及び黄色ブドウ球菌等のグラム陰性細菌及びグラム陽性細菌の増殖を抑制するものの、カンジダ・アルビカンス、及びカンジダ・パラプシロシス等の真菌の増殖を抑制しないことを記載している。
【０００５】
特許文献４は、ラクトバシラス−カゼイＫＥ０１株が、大腸菌を数週間かけて減少させることを記載している。特許文献５は、ラクトバシラス属のｇａｓｓｅｒｉ種が、サルモネラ・エンテリティディスを減少させることを記載している。特許文献６は、酵母と、ラクトバチルス・プランタラムＭＬ１１−１１株からなるバイオフィルムが、枯草菌を減少させることを記載している。
【０００６】
特許文献７は、ラクトバシルス属のｐｅｎｔｏｓｕｓ種が、カンジダの増殖を抑制することを記載している。しかし、特許文献７は、ラクトバシルス属のｐｅｎｔｏｓｕｓ種が、カンジダを減少させることは記載していない。
【先行技術文献】
【特許文献】
【０００７】
【特許文献１】特開２０１５−１９３６１９号公報
【特許文献２】特開２０１４−２３０５４１号公報
【特許文献３】特開２０１０−２１５６４１号公報
【特許文献４】特開２０１０−１９５７７８号公報
【特許文献５】特開２０１２−１４７７５９号公報
【特許文献６】特開２０１３−１５０５９８号公報
【特許文献７】特開２００７−３０８５０４号公報
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００８】
抗菌剤としてアルコールが用いられることがあるが、セレウス菌、枯草菌、及び納豆菌のような芽胞を形成する細菌は、アルコール耐性を有する。また、アルコールは、発疹、及び皮膚の刺激症状等の副作用をもたらす場合がある。さらに、合成化合物を有効成分とする抗菌薬も、患部を刺激したり、かゆみや痛み等を伴うかぶれ症状を引き起こしたりするおそれがある。そのため、天然由来成分を有効成分とする、様々な種類の真菌を含む菌及びウイルスに対して有効な抗菌抗ウイルス薬が望まれている。本発明はこのような事情に鑑みてなされたものであり、天然由来成分を有効成分とする、様々な種類の真菌を含む菌及びウイルスに対して有効な抗菌抗ウイルス薬、抗菌抗ウイルス部材、及び抗菌抗ウイルス薬の製造方法を提供することを目的とする。
【課題を解決するための手段】
【０００９】
本発明の一側面に係る抗菌抗ウイルス薬は、ヨモギ由来のラクトバシラス（Ｌａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓ）属を備える。また、本発明の一側面に係る抗菌抗ウイルス薬は、ヨモギ由来のラクトバシラス属の分泌物を備える。また、本発明の一側面に係る抗菌抗ウイルス薬は、ラクトバシラス属を備え、ラクトバシラス属の種が、ｐａｒａｆａｒｒａｇｉｎｉｓ種、ｐａｒａｂｕｃｈｎｅｒｉ種、ｂｕｃｈｎｅｒｉ種、ｈａｒｂｉｎｅｎｓｉｓ種、ｖｉｎｉ種、及びｎａｇｅｌｉｉ種からなる群から選択される少なくとも一つである。また、本発明の一側面に係る抗菌抗ウイルス薬は、ラクトバシラス属の分泌物を備え、ラクトバシラス属の種が、ｐａｒａｆａｒｒａｇｉｎｉｓ種、ｐａｒａｂｕｃｈｎｅｒｉ種、ｂｕｃｈｎｅｒｉ種、ｈａｒｂｉｎｅｎｓｉｓ種、ｖｉｎｉ種、及びｎａｇｅｌｉｉ種からなる群から選択される少なくとも一つである。さらに、本発明の一側面に係る抗菌抗ウイルス部材は、部材と、部材表面に配置された、上記の抗菌抗ウイルス薬と、を備える。またさらに、本発明の一側面に係る抗菌抗ウイルス薬の製造方法は、植物を発酵させ、ラクトバシラス属を備える発酵液を得ることを備える。
【発明の効果】
【００１０】
本発明によれば、天然由来成分を有効成分として、様々な種類の真菌を含む菌及びウイルスに対して有効な抗菌抗ウイルス薬、抗菌抗ウイルス部材、及び抗菌抗ウイルス薬の製造方法を提供することが可能となる。
【図面の簡単な説明】
【００１１】
【図１】実施例１に係る発酵液に含まれる菌の解析結果を示すグラフと表である。
【図２】実施例２に係る発酵液に含まれる菌の解析結果を示すグラフと表である。
【図３】実施例４に係る発酵液の抗菌効果を示すグラフと表である。
【図４】実施例５に係る発酵液の抗真菌効果を示すグラフと表である。
【図５】実施例６に係る発酵液の抗ウイルス効果を示すグラフと表である。
【図６】実施例６に係る発酵液の抗ウイルス効果を示すグラフと表である。
【図７】実施例７に係る発酵液の抗白癬菌効果を示すグラフと表である。
【発明を実施するための形態】
【００１２】
以下、本発明の実施の形態について詳細に説明する。なお以下の示す実施の形態は、この発明の技術的思想を具体化するための装置や方法を例示するものであって、この発明の技術的思想は構成部材の組み合わせ等を下記のものに特定するものではない。この発明の技術的思想は、特許請求の範囲において種々の変更を加えることができる。
【００１３】
（第１の実施の形態）
本発明の第１の実施の形態に係る抗菌抗ウイルス薬は、ラクトバシラス（Ｌａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓ）属及びラクトバシラス属の分泌物からなる群から選択される少なくとも一つを含む。ラクトバシラス属は、乳酸桿菌の一種であり、グラム陽性の通性嫌気性菌である。ラクトバシラス属は、糖を発酵して乳酸を産生する。ラクトバシラス属は、ヒトを含む動物の体内にも生息しているが、第１の実施の形態に係るラクトバシラス属としては、植物由来のラクトバシラス属が好ましい。
【００１４】
例えば、第１の実施の形態に係るラクトバシラス属は、植物を発酵させて、抽出される。植物としては、ヨモギ、明日葉、延命草、及びココア等が挙げられるが、これらに限定されない。ヨモギ由来のラクトバシラス属は、例えば、ｐａｒａｆａｒｒａｇｉｎｉｓ種、ｐａｒａｂｕｃｈｎｅｒｉ種、ｂｕｃｈｎｅｒｉ種、及びｈａｒｂｉｎｅｎｓｉｓ種等を含む。明日葉由来のラクトバシラス属は、例えば、ｖｉｎｉ種、及びｎａｇｅｌｉｉ種を含む。第１の実施の形態に係る抗菌抗ウイルス薬は、ラクトバシラス属の複数の種を含んでいてもよい。
【００１５】
第１の実施の形態に係る抗菌抗ウイルス薬は、真菌（カビ）を減少させる。第１の実施の形態に係る抗菌抗ウイルス薬は、例えば、真菌を、２４時間以内に、８０％以上、８５％以上、９０％以上、あるいは９５％以上減少させる。真菌としては、白癬菌、カンジダ、クリプトコックス、及びアスペルギルス等が挙げられるが、これらに限定されない。第１の実施の形態に係る抗菌抗ウイルス薬は、真菌症の治療薬として使用可能である。真菌症としては、白癬、カンジダ症、クリプトコックス症、及びアスペルギルス症等が挙げられるが、これらに限定されない。
【００１６】
第１の実施の形態に係る抗菌抗ウイルス薬は、グラム陰性菌及びグラム陽性菌を減少させる。第１の実施の形態に係る抗菌抗ウイルス薬は、例えば、グラム陰性菌及びグラム陽性菌を、２４時間以内に、８０％以上、８５％以上、９０％以上、あるいは９５％以上減少させる。グラム陰性菌としては、大腸菌、サルモネラ菌、腸炎ビブリオ菌、肺炎桿菌、及び緑膿菌等が挙げられるが、これらに限定されない。グラム陽性菌としては、メチシリン耐性黄色ブドウ球菌（ＭＲＳＡ）、芽胞を形成するセレウス菌、及び枯草菌等が挙げられるが、これらに限定されない。第１の実施の形態に係る抗菌抗ウイルス薬は、グラム陰性菌及びグラム陽性菌の消毒薬として使用可能である。
【００１７】
第１の実施の形態に係る抗菌抗ウイルス薬は、ウイルスを減少させる。第１の実施の形態に係る抗菌抗ウイルス薬は、例えば、ウイルスを、２４時間以内に、８０％以上、８５％以上、９０％以上、あるいは９５％以上減少させる。ウイルスは、エンベロープを有するウイルスであるエンベロープウイルス、及びエンベロープを有さないウイルスであるノンエンベロープウイルスを含む。また、ウイルスは、ＤＮＡウイルス及びＲＮＡウイルスを含む。
【００１８】
エンベロープを有するＤＮＡウイルスとしては、ヒトヘルペスウイルス、ワクシニアウイルス、及びＢ型肝炎ウイルス等が挙げられるが、これらに限定されない。
【００１９】
エンベロープを有するＲＮＡウイルスとしては、インフルエンザウイルス、ＳＡＲＳコロナウイルス、ＲＳウイルス、ムンプスウイルス、ラッサウイルス、デングウイルス、風疹ウイルス、ヒト免疫不全ウイルス、麻疹ウイルス、Ｃ型肝炎ウイルス、エボラウイルス、黄熱ウイルス、及び日本脳炎ウイルス等が挙げられるが、これらに限定されない。
【００２０】
エンベロープを有さないＤＮＡウイルスとしては、アデノウイルス、Ｂ１９ウイルス、パポバウイルス、及びヒトパピローマウイルス等が挙げられるが、これらに限定されない。
【００２１】
エンベロープを有さないＲＮＡウイルスとしては、ノロウイルス、ポリオウイルス、エコーウイルス、Ａ型肝炎ウイルス、Ｅ型肝炎ウイルス、ライノウイルス、アストロウイルス、ロタウイルス、コクサッキーウイルス、エンテロウイルス、及びサポウイルス等が挙げられるが、これらに限定されない。
【００２２】
第１の実施の形態に係る抗菌抗ウイルス薬は、ウイルスの消毒薬として使用可能である。
【００２３】
第１の実施の形態に係る抗菌抗ウイルス薬は、有効量のラクトバシラス属、及び／又は有効量のラクトバシラス属の分泌物を含む。有効量とは、抗菌又は抗ウイルス効果を奏するために必要な量であり、対象とする菌、ウイルス、及び症状によって適宜決定される。第１の実施の形態に係る抗菌抗ウイルス薬は、例えば０．００１重量％以上、０．００５重量％以上、あるいは０．０１重量％以上の濃度でラクトバシラス属を含む。また、第１の実施の形態に係る抗菌抗ウイルス薬は、例えば２０重量％以下、１５重量％以下、あるいは１０重量％以下の濃度でラクトバシラス属を含むが、より高濃度でラクトバシラス属を含んでもよい。ただし、ラクトバシラス属の濃度が高いと、粘度が高くなる傾向にある。
【００２４】
第１の実施の形態に係る抗菌抗ウイルス薬に含まれるラクトバシラス属は、生菌であってもよいし、例えば加熱処理された死菌であってもよい。したがって、第１の実施の形態に係る抗菌抗ウイルス薬は、ラクトバシラス属の死菌を含んでいてもよい。ラクトバシラス属は、菌体乾燥物であってもよい。ラクトバシラス属の死菌、あるいは菌体乾燥物も、抗菌抗ウイルス効果を奏する。また、ラクトバシラス属の死菌、あるいは菌体乾燥物は、運搬や、長期にわたる保管が容易である。
【００２５】
第１の実施の形態に係る抗菌抗ウイルス薬は、例えば、液体、クリーム、軟膏、硬膏、ジェル、ワックス、及びスプレーであってもよい。また、第１の実施の形態に係る抗菌抗ウイルス薬は、例えば、消毒薬、塗布治療薬等の皮膚外用薬、点眼剤、及び内服薬として供される。第１の実施の形態に係る抗菌抗ウイルス薬は、例えば、手足指を含む人体の皮膚、毛、口腔、及び眼球等に適用される。また、第１の実施の形態に係る抗菌抗ウイルス薬は、例えば、調理器具、病院等の建物の壁や床、及び机等の家具にも適用される。
【００２６】
第１の実施の形態に係る抗菌抗ウイルス薬は、ラクトバシラス属の他に、液体油脂、固体油脂、ロウ、炭化水素、高級脂肪酸、高級アルコール、エステル、シリコーン、アニオン界面活性剤、カチオン界面活性剤、両性界面活性剤、非イオン性界面活性剤、保湿剤、水溶性高分子、増粘剤、被膜剤、金属イオン封鎖剤、低級アルコール、多価アルコール、糖類、アミノ酸類、有機アミン類、ｐＨ調整剤、皮膚栄養剤、ビタミン類、酸化防止剤、香料、粉体、色材、及び水等の化粧品及び医薬品の配合成分を目的に応じて適宜含んでいてもよい。
【００２７】
第１の実施の形態に係る抗菌抗ウイルス薬は、ラクトバシラス属の他に、抗菌性物質あるいは抗ウイルス性物質を目的に応じて適宜含んでいてもよい。
【００２８】
第１の実施の形態に係る抗菌抗ウイルス薬が有効成分とするラクトバシラス属及びその分泌物は、食中毒等の様々な病気の原因になる、様々な種類の真菌を含む菌及びウイルスを減少させることが可能である。また、第１の実施の形態に係る抗菌抗ウイルス薬が有効成分とするラクトバシラス属及びその分泌物は、アルコール耐性である芽胞を形成するセレウス菌も減少させることが可能である。
【００２９】
さらに、第１の実施の形態に係る抗菌抗ウイルス薬が有効成分とするラクトバシラス属は、天然由来の乳酸菌であるため、ヒトに適用しても、副作用等の悪影響がないか、少なく、安全である。またさらに、例えば皮膚外用薬として供された第１の実施の形態に係る抗菌抗ウイルス薬を、仮に、乳児、小児、あるいは老人等が誤飲した場合にも、ラクトバシラス属は飲食可能な乳酸菌であり、腸管内の消化酵素で容易に分解されるため、副作用等の悪影響がないか、少ない。分泌物についても、同様である。
【００３０】
第１の実施の形態に係る抗菌抗ウイルス薬は、植物を発酵させ、ラクトバシラス属を含む発酵液を得ることにより製造される。植物を発酵させる際には、塩、及び糖蜜等の糖が植物に添加される。発酵温度は、例えば３０℃である。得られる発酵液の水素イオン指数（ｐＨ）は、４．０前後である。発酵液から、ラクトバシラス属の分泌物を抽出してもよい。
【００３１】
得られた発酵液を加熱し、発酵液に含まれるラクトバシラス属を死菌にしてもよい。また、発酵液を噴霧乾燥し、ラクトバシラス属の菌体乾燥物を得てもよい。菌体乾燥物は、凍結乾燥法及び熱風乾燥法等によっても作製可能である。
【００３２】
さらに、得られた発酵液、ラクトバシラス属の菌体、あるいはラクトバシラス属の菌体乾燥物を豆乳に添加し、豆乳を発酵させて豆乳発酵液を得てもよい。豆乳発酵液も、抗菌抗ウイルス効果を奏する。
【００３３】
（第２の実施の形態）
第２の実施形態以降では第１の実施形態と共通の事柄についての記述を省略し、異なる点についてのみ説明する。特に、同様の構成による同様の作用効果については実施形態毎には逐次言及しない。
【００３４】
第２の実施の形態に係る抗菌抗ウイルス部材は、部材と、部材表面に配置された、第１の実施の形態に係る抗菌抗ウイルス薬と、を備える。部材とは、固体であり、例えば、金属、樹脂、ガラス、セラミック、及び木材等の材料からなるが、材料はこれらに限定されない。例えば、第２の実施の形態に係る抗菌抗ウイルス部材を製造する際には、第１の実施の形態に係る抗菌抗ウイルス薬を、塗料、染料、顔料、各種樹脂、合成ゴム、ラテックス、フィルム、及び繊維等に配合し、抗菌抗ウイルス薬を配合された材料を、部材表面に塗布、配置、あるいは積層等する。
【００３５】
材料における抗菌抗ウイルス薬の配合濃度は、例えば、０．００１重量％以上、０．００５重量％以上、あるいは０．０１重量％以上であり、２０重量％以下、１５重量％以下、あるいは１０重量％以下であり得るが、これらに限定されない。
【実施例】
【００３６】
以下に本発明の実施の形態を説明する。ただし、本発明は以下の実施例に限定されないことはもちろんである。
【００３７】
（実施例１：ヨモギ由来のラクトバシラス属）
ヨモギの葉においては、一日のうち、日の出時間を挟む前後１時間、合計２時間の間に、乳酸菌の数が最大化するとされている。また、この時間帯以外においては、乳酸菌が減少し、光合成菌が増加するとされている。したがって、この２時間の間に、ヨモギの葉の先端から約２０ｃｍの部分を採取した。採取した６．３ｋｇのヨモギの葉を、すぐさま、中にビニールの袋を敷いた第１の漬物樽に入れ、ヨモギの葉に、３．２ｋｇの糖蜜と０．６ｋｇの粗塩を振りかけた後、ビニール袋の口を閉じて密封した。ビニール袋の上から、重石を載せ、ヨモギの葉を漬け込んだ。
【００３８】
漬け汁がヨモギの葉の上まで上がった数日後、重石を外した。次に、第２の漬物樽に、すすぎ洗い出し用の塩素を含まない１０Ｌの水を入れ、水の中に、ヨモギの葉の漬物と、１０ｋｇの漬け汁を入れた。さらに、第３の漬物樽を用意し、第３の漬物樽の開口上に金網フィルタを載せた。第２の漬物樽から、手でもみ洗いしながら少しずつヨモギの葉を取り出し、第３の漬物樽の開口上の金網フィルタにヨモギの葉を軽く掌で押さえて、漬け汁を絞った。
【００３９】
ヨモギの葉を全て絞った後、第２の漬物汁に残っていた漬け汁を金網フィルタに通してろ過した。次に、第３の漬物樽の中の漬け汁に、糖蜜（波照間黒糖）を終濃度が１０重量％となるよう、また粗塩を終濃度が３重量％となるよう溶かし入れた。その後、第３の漬物樽の周囲温度を約３０℃にすることにより、発酵を開始させた。最初に大きな泡の発泡が確認され、徐々に細かい泡の発泡に変わっていき、最後に発泡が収まった。約１週間後、発泡が収まった時のｐＨは、３．８付近であった。このときの漬け汁を、ヨモギ発酵液とした。得られたヨモギ発酵液の一部を７０℃で３０分間加熱し、菌を死滅させた熱処理ヨモギ発酵液を得た。
【００４０】
熱処理をしていないヨモギ発酵液を次世代シーケンサ（ＭｉＳｅｑ、Ｉｌｌｕｍｉｎａ社）で解析したところ、図１に示すように、ヨモギ発酵液は、ラクトバシラス属のｐａｒａｆａｒｒａｇｉｎｉｓ種、ｐａｒａｂｕｃｈｎｅｒｉ種、ｂｕｃｈｎｅｒｉ種、及びｈａｒｂｉｎｅｎｓｉｓ種等を含んでいた。なお、次世代シーケンサは、ハイスループットシーケンサとも呼ばれる。また、図１の表中の数値は、ヨモギ発酵液に含まれていた菌種の菌数を反映している。
【００４１】
（実施例２：明日葉由来のラクトバシラス属）
明日葉においては、一日のうち、日の出時間を挟む前後１時間、合計２時間の間に、乳酸菌の数が最大化するとされている。また、この時間帯以外においては、乳酸菌が減少し、光合成菌が増加するとされている。したがって、この２時間の間に、明日葉の新芽の葉茎を採取した。採取した６．３ｋｇの明日葉を、すぐさま、中にビニールの袋を敷いた第１の漬物樽に入れ、明日葉に、３．２ｋｇの糖蜜と０．６ｋｇの粗塩を振りかけた後、ビニール袋の口を閉じて密封した。ビニール袋の上から、重石を載せ、明日葉を漬け込んだ。
【００４２】
漬け汁が明日葉の上まで上がった数日後、重石を外した。次に、第２の漬物樽に、すすぎ洗い出し用の塩素を含まない１０Ｌの水を入れ、水の中に、明日葉の漬物と、１０ｋｇの漬け汁を入れた。さらに、第３の漬物樽を用意し、第３の漬物樽の開口上に金網フィルタを載せた。第２の漬物樽から、手でもみ洗いしながら少しずつ明日葉を取り出し、第３の漬物樽の開口上の金網フィルタに明日葉を軽く掌で押さえて、漬け汁を絞った。
【００４３】
明日葉を全て絞った後、第２の漬物汁に残っていた漬け汁を金網フィルタに通してろ過した。次に、第３の漬物樽の中の漬け汁に、糖蜜を終濃度が１０重量％となるよう、また粗塩を終濃度が３重量％となるよう溶かし入れた。その後、第３の漬物樽の周囲温度を約３０℃にすることにより、発酵を開始させた。最初に大きな泡の発泡が確認され、徐々に細かい泡の発泡に変わっていき、最後に発泡が収まった。約１週間後、発泡が収まった時のｐＨは、４．０付近であった。このときの漬け汁を、明日葉発酵液とした。得られた明日葉発酵液の一部を７０℃で３０分間加熱し、菌を死滅させた熱処理明日葉発酵液を得た。
【００４４】
熱処理していない明日葉発酵液を次世代シーケンサ（ＭｉＳｅｑ、Ｉｌｌｕｍｉｎａ社）で解析したところ、図２に示すように、明日葉発酵液は、ｖｉｎｉ種、及びｎａｇｅｌｉｉ種等を含んでいた。なお、図２の表中の数値は、明日葉発酵液に含まれていた菌種の菌数を反映している。
【００４５】
（実施例３：ラクトバシラス属を用いた豆乳発酵液）
豆乳を７０℃に加熱し、約３０分間過熱滅菌処理を行った。加熱滅菌処理した豆乳に、実施例１で用意した熱処理していないヨモギ発酵液を、終濃度が約１０ｗｔ％となるよう加え、十分攪拌した。その後、熱処理ヨモギ発酵液を添加した豆乳を、３７℃で２４時間発酵させた。発酵させた後、濾過によって固形分を除去し、ラクトバシラス属を含む豆乳発酵液を得た。
【００４６】
（実施例４：ラクトバシラス属の抗菌効果）
グラム陽性球菌として黄色ブドウ球菌及びＭＲＳＡを用意し、グラム陽性桿菌として枯草菌及びセレウス菌を用意し、グラム陰性球菌として大腸菌、サルモネラ菌、腸炎ビブリオ菌、及び肺炎桿菌を用意し、グラム陰性桿菌として緑膿菌を用意した。
【００４７】
実施例１で用意した１０ｍＬのラクトバシラス属を含む豆乳発酵液に、上記の菌のいずれかを１０7個／ｍＬの濃度で含む０．１ｍＬの菌液を接種し、２５℃で作用させ経時的に接種した菌の生菌数を２４時間測定した。また、コントロールとして、濃度が１／１５ｍｏｌ／Ｌ、ｐＨ７．２の１０ｍＬのリン酸緩衝液に０．１ｍＬの菌液を接種し、２５℃で作用させ経時的に接種した菌の生菌数を２４時間測定した。その結果、図３に示すように、ラクトバシラス属を含む豆乳発酵液は、用意した全ての種類の細菌を２４時間以内に減少させた。
【００４８】
（実施例５：ラクトバシラス属の抗真菌効果）
真菌として、白癬菌及びカンジダを用意した。実施例１で用意した１０ｍＬのラクトバシラス属を含む豆乳発酵液に、白癬菌又はカンジダを１０7個／ｍＬの濃度で含む０．１ｍＬの菌液を接種し、２５℃で作用させ経時的に接種した菌の生菌数を２４時間測定した。また、コントロールとして、濃度が１／１５ｍｏｌ／Ｌ、ｐＨ７．２の１０ｍＬのリン酸緩衝液に０．１ｍＬの菌液を接種し、２５℃で作用させ経時的に接種した菌の生菌数を２４時間測定した。その結果、図４に示すように、ラクトバシラス属を含む豆乳発酵液は、用意した白癬菌及びカンジダを２４時間以内に減少させた。
【００４９】
（実施例６：ラクトバシラス属の抗ウイルス効果）
エンベロープウイルスとして、インフルエンザウイルスＡ型（Ｈ１Ｎ１）の培養液を用意した。また、ノンエンベロープウイルスとして、ノロウイルス（ネコカリシウイルス）の培養液を用意した。ウイルスの培養液は、精製水で、１０倍ずつ段階希釈した。その後、５０％組織培養感染量（ＴＣＩＤ５０：５０％  Ｔｉｓｓｕｅ  Ｃｕｌｔｕｒｅ  Ｉｎｆｅｃｔｉｏｕｓ  Ｄｏｓｅ）に従い、抗ウイルス試験を室温で実施した。抗ウイルス試験は、日本食品分析センターで実施された。
【００５０】
その結果、図５に示すように、ラクトバシラス属を含む豆乳発酵液は、１時間以内でインフルエンザウイルスの感染価を減少させた。また、図６に示すように、ラクトバシラス属を含む豆乳発酵液は、２４時間以内でノロウイルスの感染価を減少させた。
【００５１】
（実施例７：ラクトバシラス属の抗白癬菌効果）
実施例１で得られた熱処理していないヨモギ発酵液を噴霧乾燥して、ラクトバシラス属の乾燥菌体を得た。菌体乾燥物が１０重量部になるように、得られた菌体乾燥物を水とグリセリンに懸濁し、実施例７に係るラクトバシラス属の懸濁液を得た。ラクトバシラス属の懸濁液を白癬菌に添加し、白癬菌のコロニー形成単位（ＣＦＵ）を計測したところ、図７に示すように、ラクトバシラス属の懸濁液は、２４時間以内に白癬菌を死滅させた。
【００５２】
以上説明した各実施形態及び実施例は、本発明の理解を容易にするためのものであり、本発明を限定して解釈するためのものではない。本発明は、その趣旨を逸脱することなく、変更／改良され得るととともに、本発明にはその等価物も含まれる。即ち、各実施形態及び実施例に当業者が適宜設計変更を加えたものも、本発明の特徴を備えている限り、本発明の範囲に包含される。例えば、各実施形態及び実施例が備える各要素などは、例示したものに限定されるわけではなく適宜変更することができる。また、各実施形態及び実施例は例示であり、異なる実施形態で示した構成の部分的な置換または組み合わせが可能であることは言うまでもなく、これらも本発明の特徴を含む限り本発明の範囲に包含される。
【図１】
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【図２】
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【図３】
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【図４】
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【図５】
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【図６】
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【図７】
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【手続補正書】
【提出日】平成30年10月31日(2018.10.31)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
ヨモギ又は明日葉由来のラクトバシラス（Ｌａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓ）属。
【請求項２】
前記ラクトバシラス属の種が、ｐａｒａｆａｒｒａｇｉｎｉｓ種、ｐａｒａｂｕｃｈｎｅｒｉ種、ｂｕｃｈｎｅｒｉ種、ｈａｒｂｉｎｅｎｓｉｓ種、ｖｉｎｉ種、及びｎａｇｅｌｉｉ種からなる群から選択される少なくとも一つである、請求項１に記載のラクトバシラス属。
【請求項３】
前記ラクトバシラス属が死菌である、請求項１又は２に記載のラクトバシラス属。
【請求項４】
前記ラクトバシラス属が加熱処理されている、請求項１又は２に記載のラクトバシラス属。
【請求項５】
前記ラクトバシラス属が菌体乾燥物である、請求項１又は２に記載のラクトバシラス属。
【請求項６】
ヨモギ又は明日葉由来のラクトバシラス（Ｌａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓ）属を含む、発酵液。
【請求項７】
前記ラクトバシラス属の種が、ｐａｒａｆａｒｒａｇｉｎｉｓ種、ｐａｒａｂｕｃｈｎｅｒｉ種、ｂｕｃｈｎｅｒｉ種、ｈａｒｂｉｎｅｎｓｉｓ種、ｖｉｎｉ種、及びｎａｇｅｌｉｉ種からなる群から選択される少なくとも一つである、請求項６に記載の発酵液。
【請求項８】
前記ラクトバシラス属が死菌である、請求項６又は７に記載の発酵液。
【請求項９】
前記ラクトバシラス属が加熱処理されている、請求項６又は７に記載の発酵液。
【請求項１０】
前記ラクトバシラス属が菌体乾燥物である、請求項６又は７に記載の発酵液。
【請求項１１】
ヨモギ又は明日葉を発酵させ、ラクトバシラス（Ｌａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓ）属を備える発酵液を得ることを備える、ラクトバシラス属の製造方法。
【請求項１２】
前記ラクトバシラス属の種が、ｐａｒａｆａｒｒａｇｉｎｉｓ種、ｐａｒａｂｕｃｈｎｅｒｉ種、ｂｕｃｈｎｅｒｉ種、ｈａｒｂｉｎｅｎｓｉｓ種、ｖｉｎｉ種、及びｎａｇｅｌｉｉ種からなる群から選択される少なくとも一つである、請求項１１に記載のラクトバシラス属の製造方法。
【請求項１３】
前記発酵液に含まれる前記ラクトバシラス属を死菌にすることを更に備える、請求項１１又は１２に記載のラクトバシラス属の製造方法。
【請求項１４】
前記発酵液を加熱することを更に備える、請求項１１から１３のいずれか１項に記載のラクトバシラス属の製造方法。
【請求項１５】
前記発酵液を乾燥させ、菌体乾燥物を得ることを更に備える、請求項１１から１４のいずれか１項に記載のラクトバシラス属の製造方法。