(57)【要約】      （修正有）【課題】パーフルオロカーボン材料を含む酸素療法剤の安定化方法の提供。【解決手段】パーフルオロカーボン材料を含む酸素療法剤に、粘度調整剤と緩衝剤とを共存させることによって、前記療法剤を安定化する方法であって、安定化された前記療法剤のｐＨを約６．５〜約７．５の間とし、安定化された前記療法剤の粘度を約２．０〜約３．５ｍＰａｓとし、前記パーフルオロカーボン材料はドデカフルオロペンタンであり、前記粘度調整剤は乳糖、麦芽糖、ラクツロース、トレハロース、ラクツロース、セロビオース、コージビオース、ニゲロース、イソマルトース、ソホロース、ラミナリビオース、ゲンチオビオース、ツラノース、マルツロース、パラチノース、ゲンチオビウロース、マンノビオース、メリビオース、メリビウロース、ルチノース、ルチヌロース及びキシロビオースから選択される、前記方法。【選択図】図１
2019089816.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
パーフルオロカーボン材料を含む酸素療法剤に、粘度調整剤と緩衝剤とを共存させることによって、前記療法剤を安定化する方法であって、
安定化された前記療法剤のｐＨを約６．５〜約７．５の間とし、
安定化された前記療法剤の粘度を約２．０〜約３．５ｍＰａｓとし、
前記パーフルオロカーボン材料はドデカフルオロペンタンであり、
前記粘度調整剤は乳糖、麦芽糖、ラクツロース、トレハロース、ラクツロース、セロビオース、コージビオース、ニゲロース、イソマルトース、ソホロース、ラミナリビオース、ゲンチオビオース、ツラノース、マルツロース、パラチノース、ゲンチオビウロース、マンノビオース、メリビオース、メリビウロース、ルチノース、ルチヌロース及びキシロビオースから選択される、前記方法。
【請求項２】
前記緩衝剤はクエン酸、クエン酸一水和物、第二リン酸カルシウム、エデト酸二ナトリウム、酢酸カリウム、塩化カリウム、クエン酸カリウム、クエン酸三カリウム一水和物、リン酸カリウム、酢酸ナトリウム、重炭酸ナトリウム、塩化ナトリウム及びクエン酸三ナトリウム無水物から選択される、請求項１記載の方法。
【請求項３】
前記緩衝剤はＮａＨ２ＰＯ４及びＮａ２ＨＰＯ４から形成される、請求項１記載の方法。
【請求項４】
安定化された前記療法剤はジパルミトイルホスファチジルコリンを更に含む、請求項１記載の方法。
【請求項５】
安定化された前記療法剤は共有結合したポリ（エチレングリコール）分子量５０００を伴うジパルミトイルホスファチジルエタノールアミンを更に含む、請求項４記載の方法。
【請求項６】
安定化された前記療法剤は均質化され乳剤を形成する、請求項５記載の方法。
【請求項７】
ドデカフルオロペンタンの脂質懸濁液を製造する方法であって、
グリセロール及び水中のＮａＨ２ＰＯ４及びＮａ２ＨＰＯ４の第１の溶液を準備し、
プロピレングリコール中のジパルミトイルホスファチジルコリン（ＤＰＰＣ）及び共有結合したポリ（エチレングリコール）分子量５０００を伴うジパルミトイルホスファチジルエタノールアミン（ＤＰＰＥ−ＰＥＧ  ５０００）の第２の溶液を準備し、
前記第１の溶液及び前記第２の溶液の混合物を形成しそして前記混合物のｐＨを６．５±０．５に調整し、
ドデカフルオロペンタンを前記混合物に添加し、そして
前記混合物をホモジナイズすることを含む、前記方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、パーフルオロカーボン材料を含む酸素療法剤の安定化方法に関する。
【背景技術】
【０００２】
血液はウイルス感染しやすく、かつ献血された血液は保存期限が限られるので、献血された血液は一定の短期間でしか供給されないのが現状である。この現状に鑑み、「代用血液」又は「人工血液」と通常称される組成物の開発に多大な努力が向けられている。これらの組成物はいみじくも「ガス運搬物」と呼ばれている。
マイクロバブルは心臓及び血管の超音波撮像用の造影補助剤として使用するために開発されてきた。これらの造影補助剤であるマイクロバブルのいくつかはパーフルオロカーボン類（ＰＦＣｓ）から形成され超音波画像診断方法に用いられている。マイクロバブルを形成するのに有用であると開示されたＰＦＣｓにはドデカフルオロペンタン（ＤＤＦＰ）が含まれる。
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００３】
本発明は酸素療法剤の安定化に関する驚くべき発見に関連し、前記酸素療法剤は同様に既に記載した他の驚くべき発見に関係する。マイクロバブルは他の材料と比べ単位体積当たりはるかに多くの酸素（又は他の気体）を運搬する。液体パーフルオロカーボン類は血液代用品又は酸素療法剤として大規模に研究されてきた。前記液体パーフルオロカーボン類は高用量を要したので、結果的に臨床開発には失敗している。しかしながら、気体フルオロカーボン類は、マイクロバブルの形態で、酸素療法剤として有効である前記液体フルオロカーボン類の用量の１／１００未満の用量しか必要としない。
【０００４】
ドデカフルオロペンタン（「ＤＤＦＰ」）は酸素送達用にマイクロバブルを形成する薬剤として好ましい。ＤＤＦＰは室温で１ミクロン未満の大きさの液滴を含む水中乳剤（「ＤＤＦＰｅ」）を形成し２９℃で気体に変わる。ＤＤＦＰｅ乳剤の安定性を維持するために、出願人は粘度調整材料を使用すると前記粒子の沈降及び凝集が抑制されることを見出した。出願人は更にショ糖が粘度調整材料として好ましいことも見出した。本発明は酸素療法剤の改良された乳剤の製造に向けられる。
【課題を解決するための手段】
【０００５】
本発明に従って、以下の方法が提供される。
（１）  パーフルオロカーボン材料を含む酸素療法剤に、粘度調整剤と緩衝剤とを共存させることによって、前記療法剤を安定化する方法であって、
安定化された前記療法剤のｐＨを約６．５〜約７．５の間とし、
安定化された前記療法剤の粘度を約２．０〜約３．５ｍＰａｓとし、
前記パーフルオロカーボン材料はドデカフルオロペンタンであり、
前記粘度調整剤は乳糖、麦芽糖、ラクツロース、トレハロース、ラクツロース、セロビオース、コージビオース、ニゲロース、イソマルトース、ソホロース、ラミナリビオース、ゲンチオビオース、ツラノース、マルツロース、パラチノース、ゲンチオビウロース、マンノビオース、メリビオース、メリビウロース、ルチノース、ルチヌロース及びキシロビオースから選択される、前記方法。
（２）  前記緩衝剤はクエン酸、クエン酸一水和物、第二リン酸カルシウム、エデト酸二ナトリウム、酢酸カリウム、塩化カリウム、クエン酸カリウム、クエン酸三カリウム一水和物、リン酸カリウム、酢酸ナトリウム、重炭酸ナトリウム、塩化ナトリウム及びクエン酸三ナトリウム無水物から選択される、前記（１）に記載の方法。
（３）  前記緩衝剤はＮａＨ２ＰＯ４及びＮａ２ＨＰＯ４から形成される、前記（１）に記載の方法。
（４）  安定化された前記療法剤はジパルミトイルホスファチジルコリンを更に含む、前記（１）に記載の方法。
（５）  安定化された前記療法剤は共有結合したポリ（エチレングリコール）分子量５０００を伴うジパルミトイルホスファチジルエタノールアミンを更に含む、前記（４）に記載の方法。
（６）  安定化された前記療法剤は均質化され乳剤を形成する、前記（５）に記載の方法。
（７）  ドデカフルオロペンタンの脂質懸濁液を製造する方法であって、
グリセロール及び水中のＮａＨ２ＰＯ４及びＮａ２ＨＰＯ４の第１の溶液を準備し、
プロピレングリコール中のジパルミトイルホスファチジルコリン（ＤＰＰＣ）及び共有結合したポリ（エチレングリコール）分子量５０００を伴うジパルミトイルホスファチジルエタノールアミン（ＤＰＰＥ−ＰＥＧ  ５０００）の第２の溶液を準備し、
前記第１の溶液及び前記第２の溶液の混合物を形成しそして前記混合物のｐＨを６．５±０．５に調整し、
ドデカフルオロペンタンを前記混合物に添加し、そして
前記混合物をホモジナイズすることを含む、前記方法。
ドデカフルオロペンタン乳剤（ＤＤＦＰｅ）はショ糖溶液中に、フルオロカーボン、ＤＤＦＰを含む。出願人は生物学的に許容されるリン酸緩衝剤を０．０１Ｍの濃度で前記ショ糖溶液に添加することによってショ糖の酸触媒の／時間に依存した分解が阻止されることを見出した。酸素療法剤として使用されるＮＶＸ−１０８（ＤＤＦＰｅ）製剤の長期の物理的安定性に関してこの化学分解の阻止が重要となる。
【０００６】
緩衝剤はフルオロカーボン材料の乳剤を取り囲む懸濁媒体の粘度を安定させるものを準備する。ＮＶＸ−１０８、ドデカフルオロペンタン乳剤（ＤＤＦＰｅ）に０．０１Ｍリン酸緩衝液を添加することによりｐＨが安定化される。出願人は更にこの緩衝液が実際に機能してＮＶＸ−１０８乳剤の所望の粘度を維持することを発見した。その上、前記緩衝液は長期に渡り前記製剤の浸透圧濃度の上昇を抑制する。水溶液中で組織化し乳剤液滴を支持する格子様構造を形成することができるので、ショ糖（３０％ｗ／ｖ）をこの製剤中で増粘剤として用いる。ショ糖分子が加水分解されると、果糖分子とブドウ糖分子となるので、水相の全体の溶質濃度が潜在的に二倍になる。加えて、果糖とブドウ糖がショ糖の足場を不安定にすることでＮＶＸ−１０８の粘度が低下する。最初のショ糖「構造」の完全性を維持することは、一定の浸透圧濃度を維持することによって前記製剤の物理的安定性、及び水中でのショ糖に特異的で本質的な分子の格子に積極的に寄与することであり、粘度が二倍に上昇する。
【０００７】
ＤＤＦＰｅ（以下に記載するような）、パーフルオロオクチルブロミドの乳剤（ＰＦＯＢｅ）及びデカフルオロペンタンの乳剤（ＤＦＰｅ）である乳剤を準備した（以下のＤＤＦＰｅの製造の記載を参照）。異なる乳剤の能力を公開された文献に記載されたように比較した。結果を図１に示す。
【図面の簡単な説明】
【０００８】
本発明は以下の詳細な説明を以下の図面と併せて読むことでより深く理解されるであろう。図中の参照記号は対応する成分を指定するのに用いる。
【図１】図１はＤＤＦＰｅ並びにパーフルオロデカリン及びパーフルオロオクチルブロミドの乳剤の室温で及び生理的温度での酸素吸収を示すグラフである。ＤＤＦＰｅは他の薬剤に比べ室温でより多くの酸素を吸収し、（ＤＤＦＰの沸点よりも高い）生理的温度でもより効果的である。
【図２】図２はＤＤＦＰｅのロットにおけるｐＨ値の比較を示す図である。
【図３】図３はＤＤＦＰｅのロットにおけるｐＨ７．２とｐＨ４．０での糖濃度の比較を示す図である。
【図４】図４はＤＤＦＰｅのロットにおける糖濃度の比較を示す図であり、非緩衝化材料ではわずか３ヶ月の保存期間の後にショ糖濃度が著しく低下することが示されている。
【図５】図５Ａ及び図５Ｂは非緩衝化ＤＤＦＰｅの異なる２つのロットのＨＰＬＣ分析からえられた試料クロマトグラムを示す。
【図６】図６Ａ及び図６Ｂは緩衝化ＤＤＦＰｅの異なる２つのロットのＨＰＬＣ分析からえられた試料クロマトグラムを示す。
【図７】図７はＤＤＦＰｅの水相の粘度比較を示す図である。
【発明を実施するための形態】
【０００９】
本発明を以下の記載における好ましい形態において前記図面を参照して説明する。これらの中で参照記号は同一又は類似の成分を表す。本明細書中を通して「１つの形態」、「形態」又は同様の表現に関する言及は前記形態に関連して記載した特定の性質、構造又は特徴が本発明の少なくとも１つの形態に含まれることを意味する。従って、本明細書を通して「１つの形態における」、「形態における」又は同様の表現における言い回しが出れば、必ずしもこれに限定されないが、全て同一の形態に関すると理解しうる。
【００１０】
本発明の記載した性質、構造又は特徴は１つ又は複数の形態において適切な方法で組み合わせることができる。以下の記載において、本発明の形態についての理解を充分に深めるために多数の特定な詳細を列挙する。しかしながら、１つ以上の前記した特定な詳細がなくても、又は他の方法、成分、材料等を用いて本発明を実施しうることは当業者であれば認識できるであろう。他の例では、本発明の様相が不明瞭になるのを避けるために、既知の構造、材料又は操作を示さず詳細には記載しない。
【００１１】
更に本発明をどのように製造し使用するかを当業者に説明するために以下の実施例を示す。本実施例は限定を目的とするものではなく、本発明の範囲に基づくものである。
【実施例】
【００１２】
実施例１
高純度のショ糖を用いて、３２％ショ糖溶液を調製した。０．０１Ｍリン酸緩衝液を等モル部の（０．００５Ｍ）ＮａＨ２ＰＯ４及び（０．００５Ｍ）Ｎａ２ＨＰＯ４の形態で前記溶液に添加した。次いで、前記溶液のｐＨを生理学的にも相溶性のあるｐＨ＝７．０〜７．３であるリン酸塩のｐＫａに調整する。その後、前記ショ糖溶液を乳剤の水相として用いＤＤＦＰｅの調製物において界面活性剤／ＤＤＦＰ混合物と共に均質化する。
【００１３】
可能性のある分解産物、ブドウ糖及び果糖からショ糖を分離するのに適した糖質カラム（Ｚｏｒｂａｘ，４．６ｘ１５０ｍｍ，５μｍ）を伴うＨＰＬＣを用いて前記製剤のショ糖試料を分析した。前記製剤の粘度は円錐平板粘度計（Ｂｒｏｏｋｆｉｅｌｄ）により評価した。試料の水素イオン濃度はｐＨプローブ及び関連する測定器を用いて測定した。試料中で予測される濃度に適合するようにショ糖、果糖及びブドウ糖の濃度を変えた５つの標準物を１組としＨＰＬＣを行った。前記粘度計は純水で１．０ｍＰａｓ（ミリパスカル秒）に較正した。前記ｐＨプローブはｐＨ４、７及び１０の標準緩衝液を用いて較正を行った。
【００１４】
ＤＤＦＰｅにおけるショ糖の化学安定性に対するｐＨの効果を立証するために、緩衝化したロット＃０２１７０８の９つのバイアルのｐＨを意図的にｐＨ４に下げて調整し２５℃で３７日間保存した。３つの別個のバイアルの各バイアルのショ糖含量を０、１０及び３７日目の時点で分析した。
【００１５】
前述した全ての機器較正は以下の試料の分析前に行った。
１）緩衝化ＤＤＦＰｅ：  
ａ．２５℃で３日間保存した後のリン酸塩で緩衝化された（０．０１Ｍ）ＤＤＦＰｅの１つのロットに由来する３つの試料（３つのバイアル）（ロット＃０８０６１１）。  
ｂ．２５℃で３年間保存した後のリン酸塩で緩衝化された（０．０１Ｍ）ＤＤＦＰｅの１つのロットに由来する３つの試料（３つのバイアル）（ロット＃０２１７０８）。  
２）非緩衝化ＤＤＦＰｅ：  
ａ．２５℃で３ヶ月間保存した後の緩衝化されていないＤＤＦＰｅの２つのロットに由来する６つの試料（６つのバイアル）（ロット＃０３０８０６、＃０６１２０７）。  
ｂ．２５℃で９年間保存した後の緩衝化されていないＤＤＦＰｅの１つのロットに由来する３つの試料（３つのバイアル）（ロット＃３０−６１８−ＤＫ）。
【００１６】
分析に用いるＨＰＬＣ方法はＡＣＮ：Ｈ２Ｏの１３分間かけた勾配分析方法であり、果糖、ブドウ糖およびショ糖が充分に定義され充分に分離されたクロマトグラムがえられる。前記粘度計及び前記ｐＨメーターはそれぞれのユーザー用マニュアルに従って使用した。
【００１７】
ＭｉｃｒｏｓｏｆｔのＥｘｅｌは糖濃度対濃度曲線下面積（ＡＵＣ）の標準曲線を図示するのに使用した。試料の糖濃度はこれらの標準曲線に従って算出した。
【００１８】
図１ではドデカフルオロペンタンの乳剤（ＤＤＦＰｅ）、パーフルオロデカリンの乳剤（ＰＦＤｅ）及びパーフルオロオクチルブロミドの乳剤（ＰＦＯＢｅ）により吸収された酸素量をグラフにより説明する。ＤＤＦＰｅは室温で他のパーフルオロカーボン類よりも性能が優れており、ＤＤＦＰの沸点よりも高い生理的温度でさえもより有効である。これらの結果はマイクロバブルが気体輸送でより有効であるという理論と一致する。
【００１９】
表１に酸素送達薬剤として公開された研究で用いられたフルオロカーボン類の比較用量を示す。これらの研究において、低酸素腫瘍を放射線療法に敏感にするためにフルオロカーボン類は全身投与され酸素は吸入により投与される。ＤＤＦＰｅは液体フルオロカーボン類であるフルオゾール（Ｆｌｕｏｓｏｌ）及びパーフルオロオクチルブロミドの用量の１／１００未満で有効であった。これらの結果により気体フルオロカーボン類が液体フルオロカーボン類よりも酸素送達に関してより効果的である仮説が再度支持される。
【００２０】
【表１】
2019089816.tif 000003
【００２１】
図２はＤＤＦＰｅのロットにおけるｐＨ値の比較を図で説明する。線図２１０及び２２０はｐＨ７．２で０．０１Ｍのリン酸塩で緩衝化したＤＤＦＰｅのロット＃０２１７０８の２５℃で３年間保存前後のｐＨを示す。カーブ２１０及び２２０は本質的に同一である。これに対して、線図２３０及び２４０は非緩衝化ＤＤＦＰｅのロット＃０３０８０６の保存０日目のｐＨ及び非緩衝化ＤＤＦＰｅのロット＃３９５８８ＤＫ０２の２５℃で９年間保存した後のｐＨを示す。エラーバーは３つの試料の±１の標準偏差を示す。
【００２２】
図２に記載したデータによりＤＤＦＰｅのｐＨは約ｐＨ４．５〜５．５で開始され経時的に低下する。しかしながら、ｐＨ緩衝剤と組み合わせると、ＤＤＦＰｅのｐＨは時間が経過しても変化しない。
【００２３】
酸性条件によりＤＤＦＰｅにおける前記ショ糖の分解が促進される。図３はｐＨ７．２及びｐＨ４．でのＤＤＦＰｅのロット＃０２１７０８の糖濃度の比較を図で説明する。図３を参照すると、線図３１０、３２０及び３３０はｐＨ７．２で緩衝化されたＤＤＦＰｅのショ糖濃度を示す。エラーバーは±１の標準偏差を示す。線図３１５は約４．０までｐＨを下げた直後の濃度を示す。線図３２２は約４．０のｐＨで１０日後のショ糖の濃度を示す。線図３３２は約４．０のｐＨで３７日後のショ糖の濃度を示す。線図３２４及び３３４は果糖の濃度を示し、線図３２６及び３３６はブドウ糖の濃度を示す。
【００２４】
当業者はショ糖Ｉが果糖ＩＩ及びブドウ糖ＩＩＩから形成された二糖であることを正しく理解するであろう。
【００２５】
【化１】
2019089816.tif 000004
【００２６】
当業者は酸性条件下で、果糖部分をブドウ糖部分と結合するショ糖Ｉにおけるアセタール結合を開裂させて果糖ＩＩとブドウ糖ＩＩＩを解離させることができることを更に正しく理解するであろう。図３にはショ糖濃度が下がるにつれて、果糖及びブドウ糖の両糖の濃度が上がることが示される。
【００２７】
ＤＤＦＰｅ／ショ糖混合物の製造中にＤＤＦＰｅショ糖溶液のｐＨをｐＨ７．２までに調整すると、ショ糖の分解は観察されなかったが、非緩衝化ＤＤＦＰｅのロットは製造から３ヶ月でショ糖は著しく分解されることが示された。これらのデータは図４、５及び６に例示される。
【００２８】
図４は図５Ａ及び５Ｂに示すロットと同じ２つのロットのＨＰＬＣにより分析した糖濃度を示す。線図４１０は緩衝化ＤＤＦＰｅ／ショ糖混合物中に果糖及び／又はブドウ糖のいずれも全く含まないショ糖の濃度を示す。線図４２０、４２２及び４２４は約９０日後の非緩衝化ＤＤＦＰｅ／ショ糖混合物中のショ糖、果糖及びブドウ糖の濃度を示す。図４には緩衝化ロット（＃０２１７０８）の糖濃度の比較も示される。線図４２０／４２２／４２４及び４３０／４３２／４３４によって示される濃度の混合物は保存期間を変える以外は同条件で保存した。
【００２９】
図５Ａ及び５Ｂは図４の非緩衝化ＤＤＦＰｅの２つのロットのクロマトグラムを示す。室温でのたった３ヶ月の保存でも（ロット＃０３０８０６）、ショ糖の分解が始まっていた。９年後（ロット＃３９５８８ＤＫ０２）、果糖とブドウ糖へのショ糖の転換は更に進んでいた。図４で線図４１０に対応する緩衝化ＤＤＦＰｅ／ショ糖混合物は果糖又はブドウ糖に関するピークを示さなかった。
【００３０】
図６Ａは１．２５年後での緩衝化ロット＃０２１７０８のクロマトグラムを示す。図６Ｂは緩衝剤を用いて新たに作製したロット（＃０２２５１０）のクロマトグラムを示す。両ロットは２５℃で保存した。注目されるのは１年を超えるロット（＃０２１７０８）でショ糖減成の兆候が示されなかったことである。図６Ａ及び６Ｂの２つのクロマトグラムと比較される図５Ａ及び５Ｂのクロマトグラムとの間のショ糖保持時間違いは、ＨＰＬＣ方法を行う間の全体の実行時間を短縮する目的で移動相勾配において行った意図的な変更に起因する。保持時間が異なることはショ糖濃度に変化があることを示すものではない。前記保持時間は各時点で新たに調製した標準物を実行することにより変化した。
【００３１】
出願人はＤＤＦＰｅ／ショ糖混合物の水相の粘度によって、ＤＤＦＰ粒子がより長い期間懸濁され互いに分離されたままであるように最終乳剤の物理的安定性が拡大されることを見出した。出願人は更にＤＤＦＰｅ／ショ糖混合物の水相の粘度は、リン酸緩衝液の両物質が存在しないのに応じて、またショ糖濃度の低下に応じて低下することを見出した。
【００３２】
図７はＮＶＸ−１０８の水相の粘度比較を図で説明する。線図７１０は０．０１Ｍリン酸緩衝液を用いて新たに調製したショ糖溶液の粘度を示す。線図７２０は緩衝剤を用いることなく新たに調製した３２％ショ糖溶液の粘度を示す。線図７３０は緩衝剤を含まない１８％ショ糖、７％果糖及び７％ブドウ糖を含む混合物の濃度を示す。線図７３０の混合物は９年後のＮＶＸ−１０８のロット＃３９５８８ＤＫ０２で観察されたショ糖の分解に対応する。
【００３３】
ｐＨ調整及び緩衝能力がなければ、ＤＤＦＰｅのｐＨは約４．５〜５．５から始まり時間の経過と共に低下する。酸性条件によりＤＤＦＰｅにおけるショ糖の分解は促進される。ＤＤＦＰｅショ糖溶液のｐＨがｐＨ７．２までに調整されかつそこで緩衝化されるとショ糖分解は観察されなかったが、非緩衝化ＤＤＦＰｅのロットでは調製後３ヶ月になるとすぐに顕著なショ糖分解が認められた。０．０１Ｍ濃度のリン酸緩衝液を添加すると、ｐＨが維持され開始時とその後のショ糖の酸触媒による減成を阻止することによりＤＤＦＰｅ製剤の保存期限が著しく延びる。当初のショ糖濃度を維持することは、ひいては浸透圧濃度を安定化することだけでなくＤＤＦＰ粒子を最も安定化させるのに必要な高粘度をももたらすこととなる。
【００３４】
第一リン酸ナトリウムは好ましい緩衝剤であるが、クエン酸、クエン酸一水和物、第二リン酸カルシウム、エデト酸二ナトリウム、酢酸カリウム、塩化カリウム、クエン酸カリウム、クエン酸三カリウム一水和物、リン酸カリウム、酢酸ナトリウム、重炭酸ナトリウム、塩化ナトリウム及びクエン酸三ナトリウム無水物を含む種々の他の緩衝剤も本発明において用いてもよい。一般的に、前記緩衝剤の濃度は約０．００１Ｍ〜約１．０Ｍの範囲にあってもよく、最も好ましいのは約０．１Ｍの濃度である。
【００３５】
本発明における好ましい粘度調整剤である、ショ糖に加えて、乳糖、麦芽糖、ラクツロース、トレハロース、ラクツロース、セロビオース、コージビオース、ニゲロース、イソマルトース、ソホロース、ラミナリビオース、ゲンチオビオース、ツラノース、マルツロース、パラチノース、ゲンチオビウロース(gentiobiulose)、マンノビオース、メリビオース、メリビウロース(melibiulose)、ルチノース、ルチヌロース（rutinulose）及びキシロビオースを含む他の二糖類を用いてもよい。
【００３６】
他の粘度調整剤には、ヒアルロン酸、アカシア、寒天、アラミック酸、アルギン酸、モノステアリン酸アルミニウム、アタパルジャイト（attapulite）、ベントナイト、カルボマー９１０，９３４，９３４Ｐ，９４０，９４１，１３４２及びカルボマー共重合体、カルボマーホモ重合体、カルボマー・インター重合体、カルボキシメチルセルロース、カラギーナン、セルロース、デキストリン、ゼラチン、ジェランガム、ヒドロキシエチル・セルロース、ヒドロキプロピル・セルロース、ハイプロエロース、ケイ酸アルミニウム・マグネシウム・マルトデキストリン、メチルセルロース、ペクチン、ポリエチレン・オキシド、ポリエチレン・グリコール、ポリビニル・アルコール、ポビドン、アルギン酸プロピレングリコール、二酸化ケイ素、アルギン酸ナトリウム、デンプン、トラガカント、アラビアゴム並びにキサンタンゴムが含まれる。
【００３７】
安定化材料及び気泡内に組み込むため又はこれらの内部に封入するためにフッ素化ガス及び／又はフッ素化ガス前駆体として様々な材料を使用することができる。本明細書中において、前記フッ素化ガス前駆体は患者に投与する前に、温度又は圧力によって気体に変えることができる。本発明に用いるフッ素化ガス及びフッ素化ガス前駆体の具体例として、例えば、ヘキサフルオロアセトン、１，３−ジクロロテトラフルオロアセトン、テトラフルオロアレン、三フッ化ホウ素、１，２，３−トリクロロ−２−フルオロ−１，３−ブタジエン、ヘキサフルオロ−１，３−ブタジエン、１−フルオロブタン、パーフルオロブタン、デカフルオロブタン、パーフルオロ−１−ブテン、パーフルオロ−２−ブテン、２−クロロ−１，１，１，４，４，４−ヘキサフルオロブチン、２−クロロ−１，１，１，４，４，４−ヘキサフルオロ−２−ブテン、パーフルオロ−２−ブチン、オクタフルオロシクロブタン、パーフルオロシクロブテン、パーフルオロシクロブタン、パーフルオロシクロペンタン、オクタフルオロシクロペンテン、パーフルオロシクロプロパン、１，１，１−トリフルオロジアゾエタン、ヘキサフルオロジメチルアミン、パーフルオロエタン、パーフルオロプロパン、パーフルオロペンタン、ヘキサフルオロエタン、ヘキサフルオロプロピレン、１，１，２，２，３，３，４，４−オクタフルオロブタン、１，１，１，３，３−ペンタフルオロブタン、オクタフルオロプロパン、オクタフルオロシクロペンテン、１，１−ジシクロフルオロエタン、ヘキサフルオロ−２−ブチン、オクタフルオロ−２−ブテン、ヘキサフルオロブタ−１，３−ジエン、パーフルオロジメチルアミン、４−メチル−１，１，１，２−テトラフルオロエタン、１，１，１−トリフルオロエタン、１，１，２，２−テトラフルオロエタン、１，１，２−トリクロロ−１，２，２−トリフルオロエタン、１，１，１−トリクロロ−２，２，２−トリフルオロエタン、１，１−ジクロロ−１，２−ジフルオロエチレン、１，１−ジクロロ−１，２，２，２−テトラフルオロエタン、１−クロロ−１，１，２，２，２−ペンタフルオロエタン、１，１−ジフルオロ−２−クロロエタン、１，１−ジクロロ−２−フルオロエタン、ジクロロ−１，１，２，２−テトラフルオロエタン、１−クロロ−１，１，２，２−テトラフルオロエタン、２−クロロ−１，１−ジフルオロエタン、１，１，２−トリフルオロ−２−クロロエタン、１，２−ジフルオロクロロエタン、クロロペンタフルオロエタン、ジクロロトリフルオロエタン、フルオロエタン、ニトロペンタフルオロエタン、ニトロソペンタフルオロエタン、パーフルオロエチルアミン、１，２−ジクロロ−２，２−ジフルオロエタン、１，１−ジクロロ−１，２−ジフルオロエタン、１，２−ジクロロ−１，１，３−トリフルオロプロパン、１，２−ジフルオロエタン、１，２−ジフルオロエチレン、トリフルオロメタンスルホニルクロリド、トリフルオロメタンスルフェニルクロリド、（ペンタフルオロチオ）トリフルオロメタン、トリフルオロメタンスルホニルフルオリド、ブロモジフルオロニトロソメタン、ブロモフルオロメタン、ブロモクロロジフルオロメタン、ブロモクロロフルオロメタン、ブロモトリフルオロメタン、ブロモトリフルオロエタン、クロロジフルオロニトロメタン、クロロフルオロメタン、クロロトリフルオロメタン、クロロジフルオロメタン、ジブロモフルオロメタン、ジブロモジフルオロメタン、ジクロロジフルオロメタン、ジクロロフルオロメタン、１−ブロモパーフルオロブタン、ジフルオロメタン、ジフルオロヨードメタン、フルオロメタン、パーフルオロメタン、ヨードトリフルオロメタン、ヨードトリフルオロエチレン、ニトロトリフルオロメタン、ニトロソトリフルオロメタン、テトラフルオロメタン、トリクロロフルオロメタン、トリフルオロメタン、パーフルオロペント−１−エン、１，１，１，２，２，３−ヘキサフルオロプロパン、ヘプタフルオロプロパン、１，１，１，２，３，３，３−ヘプタフルオロプロパン、１，１，２，２，３，３，３−ヘプタフルオロプロパン、２，２−ジフルオロプロパン、ヘプタフルオロ−１−ニトロプロパン、ヘプタフルオロ−１−ニトロソプロパン、ヘプタフルオロ−２−ヨードプロパン、パーフルオロプロパン、ヘキサフルオロプロパン、１，１，１，２，３，３−ヘキサフルオロ−２，３−ジクロロプロパン、１−ブロモ−１，１，２，３，３，３−ヘキサフルオロプロパン、１−ブロモパーフルオロプロパン、２−クロロペンタフルオロ−１，３−ブタジエン、３−フルオロプロパン、３−フルオロプロピレン、パーフルオロプロピレン、パーフルオロテトラヒドロピラン、パーフルオロメチルテトラヒドロフラン、パーフルオロブチルメチル・エーテル、パーフルオロメチル−ｎ−ブチル・エーテル、パーフルオロメチルイソプロピル・エーテル、パーフルオロメチル−ｔ−ブチル・エーテル、パーフルオロブチルエチル・エーテル、パーフルオロメチルペンチル・エーテル、３，３，３−トリフルオロプロピン、３−フルオロスチレン、サルファ（ジ）−デカフルオリド（Ｓ２Ｆ１０）、サルファヘキサフルオリド（六フッ化硫黄）、セレニウムヘキサフルオリド、トリフルオロアセトニトリル、トリフルオロメチルパーオキサイド、トリフルオロメチルサルファイド、タングステンヘキサフルオリド、１−ブロモ−ノナフルオロブタン、１−クロロ−１−フルオロ−１−ブロモメタン、１−ブロモ−２，４−ジフルオロベンゼン、２−ヨード−１，１，１−トリフルオロエタン、ブロモペンタフルオリド（五フッ化臭素）、パーフルオロ−２−メチル−２−ペンテン、１，１，１，３，３−ペンタフルオロペンタン、３−フルオロベンズアルデヒド、２−フルオロ−５−ニトロトルエン、３−フルオロスチレン、３，５−ジフルオロアニリン、２，２，２−トリフルオロエチルアクリレート、３−（トリフルオロメトキシ）−アセトフェノン、ビス（パーフルオロイソプロピル）エーテル、ビス（パーフルオロプロピル）エーテル、パーフルオロイソブチルメチル・エーテル、パーフルオロ・ｎ−プロピルエチル・エーテル、パーフルオロシクロブチルメチル・エーテル、パーフルオロシクロプロピルエチル・エーテル、パーフルオロイソプロピルメチル・エーテル、パーフルオロ・ｎ−プロピルメチル・エーテル、パーフルオロジエチル・エーテル、パーフルオロシクロプロピルメチル・エーテル、パーフルオロメチルエチル・エーテル、パーフルオロジメチル・エーテル及びこれらの混合物が含まれる。
【００３８】
種々のフッ素化された化合物とそれらの沸点の具体例を化合物／沸点（摂氏度）の形式で以下のように記載する。ブロモトリフルオロエタン／−５７．８、クロロトリフルオロメタン／−８１．５、ジクロロジフルオロメタン／−２９．８、ジブロモフルオロメタン／２３、クロロペンタフルオロエタン／−３８．７、ブロモクロロジフルオロメタン／−４、ジクロロ−１，１，２，２−テトラフルオロエタン／３．１−３．６、オクタフルオロシクロブタン／−５．８、デカフルオロブタン／−２、ヘキサフルオロエタン／−７８．１、パーフルオロメタン／−１２９、パーフルオロエタン／−７８．３、パーフルオロプロパン／−３６、パーフルオロブタン／−２、パーフルオロプロピレン／−２８、パーフルオロシクロブタン／−６、パーフルオロ−２−ブチン／−２５、パーフルオロ−２−ブテン／１．２、パーフルオロブタ−ｌ，３−ジエン／６、パーフルオロ・ｎ−プロピルエチル・エーテル／２３．３、パーフルオロジエチル・エーテル／３−４．５、パーフルオロメチルエチル・エーテル／−２３、パーフルオロジメチル・エーテル／−５９、サルファヘキサフルオリド（六フッ化硫黄）／融点−５０．５、昇華点−６３．８、セレニウムヘキサフルオリド／融点−３４．６、昇華点−４６．６、パーフルオロプロピオルクロリド／８、１−ブロモ−１，１，２，３，３，３−ヘキサフルオロプロパン／３５．５、ブロモパーフルオロプロパン／３５．５、２−クロロ−１，１，１，４，４，４−ヘキサフルオロ−２−ブテン／３３、２−クロロペンタフルオロ−１，３−ブタジエン／３７、ヨードトリフルオロエチレン／３０、１，１，２−トリフルオロ−２−クロロエタン／３０、１，２−ジフルオロクロロエタン／３５．５、１，１−ジクロロ−２−クロロエタン／３５．１、１，１−ジクロロフルオロエタン／３１．８、１−ブロモエタン／３７、１−フルオロブタン／３２．５、パーフルオロシクロペンタン／２９．５、パーフルオロテトラヒドロピラン／３４、パーフルオロメチルテトラヒドロフラン／２７、パーフルオロ・ｔ−ブチルメチル・エーテル／３６、パーフルオロ・ｎ−ブチルメチル・エーテル／３５．４、パーフルオロイソプロピルメチル・エーテル／３６、１−ブロモ−ノナフルオロブタン／４３、パーフルオロオクチルヨード／１６０−１６１、パーフルオロオクチルブロミド／１４２、１−クロロ−１−フルオロ−１−ブロモメタン／３８、１，１，１−トリクロロ−２，２，２−トリフルオロエタン／４５．７、１，２−ジクロロ−２，２−ジフルオロエタン／４６、１，１−ジクロロ−１，２−ジフルオロエタン／４５、１，２−ジクロロ−１，１，３−トリフルオロプロパン／５０．４、１−ブロモパーフルオロブタン／４３、１−ブロモ−２，４−ジフルオロベンゼン／４４、２−ヨード−１，１，１−トリフルオロエタン／５３、５−ブロモバレリルクロリド／４３、  １，３−ジクロロテトラフルオロアセトン／４３、ブロモペンタフルオリド（五フッ化臭素）／４０．３、ヘプタフルオロ−２−ヨードプロパン／３９、６−ブロモ−ｌ−ヘキセン／４７、２−ブロモ−２−ニトロプロパン／４５、２−ブロモ−５−ニトロチオフェン／４５、２−ブロモプロペン／４���、３−クロロ−５，５−ジメチル−２−シクロヘキセン／４４、２−クロロ−２−メチルプロパン／５０、パーフルオロ−２−メチル−２−ペンテン／５１、１，１，１，３，３−ペンタフルオロペンタン／４０、パーフルオロトリブチルアミン／１７８、パーフルオロトリプロピルアミン／１３０、３−フルオロベンズアルデヒド／５６、２−フルオロ−５−ニトロトルエン／５３、３−フルオロスチレン／４０、３，５−ジフルオロアニリン／４０、２，２，２−トリフルオロエチルアクリレート／４５、３−（トリフルオロメトキシ）−アセトフェノン／４９、１，１，２，２，３，３，４，４−オクタフルオロブタン／４４．８、１，１，１，３，３−ペンタフルオロブタン／４０、パーフルオロ−４−メチルキノリジジン／１４９、パーフルオロ−Ｎ−メチル−デカヒドロキノン／ｌ５０−１５５、パーフルオロ−Ｎ−メチル−デカヒドロイソキノン／１５０−１５５、パーフルオロ−Ｎ−シクロヘキシル−ピロリジン／１４５−１５２、テトラデカパーフルオロヘプタン／７６、ドデカパーフルオロシクロヘキサン／５２、ｎ−パーフルオロヘキサン／５９−６０、パーフルオロヘプタン／８１、パーフルオロオクタン／１０２、パーフルオロノナン／１２５、パーフルオロデカン／約ｌ４３、パーフルオロドデカン／融点７５−７７、パーフルオロ−２−メチル−２−ペンテン／５１、パーフルオロシクロヘキサン／５２、パーフルオロデカリン／１４２、パーフルオロブチルエチル・エーテル／６０、ビス（パーフルオロイソプロピル）エーテル／５４、及びビス（パーフルオロプロピル）エーテル／５９。
【００３９】
好ましいガス又はガス前駆体は低分子量のアルケン類及びそれらのフッ素化類似体等の、水に難溶性の化合物であるが、場合により、脂溶性であってもよい。好ましいガス又はガス前駆体は例えば、パーフルオロカーボン類、パーフルオロエーテル類及びサルファヘキサフルオリド（六フッ化硫黄）を含む。好ましいパーフルオロカーボン類は１〜約４の炭素原子及び４〜約１０のフッ素原子を有していてもよい。好ましいパーフルオロエーテル類は１〜約４の炭素原子、４〜約１０のフッ素原子、及び１〜約２の酸素原子、好ましくは１つの酸素原子を有していてもよい。本発明に用いる好ましいガス又はガス前駆体はパーフルオロメタン、パーフルオロエタン、パーフルオロプロパン、パーフルオロブタン、パーフルオロシクロブタン、ブロモパーフルオロプロパン、パーフルオロペンタン、パーフルオロネオペンタン、パーフルオロシクロペンタン、パーフルオロヘキサン、パーフルオロヘプタン、パーフルオロオクタン、パーフルオロノナン、パーフルオロデカン、パーフルオロメチルブチル・エーテル（ＣＦ２−−Ｏ−−ＣＦ２ＣＦ２ＣＦ２ＣＦ３）、パーフルオロメチル−ｎ−ブチル・エーテル、パーフルオロメチルイソプロピル・エーテル、パーフルオロメチル−ｔ−ブチル・エーテル、パーフルオロテトラヒドロピラン、パーフルオロメチルテトラヒドロフラン、（ＣＦ３ＣＦ２−−Ｏ−−ＣＦ２ＣＦ３）、パーフルオロメチルペンチル・エーテル及び４〜６の炭素原子、及び任意に１のハライドイオン、好ましくはＢｒ−１を含む他のパーフルオロエーテル類似体を含む。例えば、構造ＣｎＦｙＨｘＯＢｒ（式中、ｎは１〜約６の整数であり、ｙは０〜約１３の整数であり、ｘは０〜約１３の整数である）を有する化合物はガス前駆体として有用である。この式を有する適当なガス前駆体にはパーフルオロプロピルオキシルブロミド及び２−ブロモオキシパーフルオロプロパンが含まれる。
【００４０】
患者に投与するために本発明のフッ素化ガスと併せてフッ素化ガス前駆体及び／又はフッ素化液体を用いてもよい。前記フッ素化された化合物が液体又は気体として用いられるかは概してその液／気相転移温度、又は沸点に依存する。当業者に知られているように、物質の有効沸点はその物質が曝される圧力又は温度に関連しうる。この関係は理想気体の法則：ＰＶ＝ｎＲＴ（式中、Ｐは圧力、Ｖは体積、ｎは物質のモル数、Ｒは気体定数、及びＴは温度である）により実証される。前記理想気体の法則は圧力が上昇すれば、有効沸点も上昇することを示している。逆に言えば、圧力が下がると有効沸点も下がる。ＰＶ＝ｎＲＴ方程式を考慮すると、当業者は生理学的圧力、特に動脈内の圧力により通常の沸点が最大約５℃上昇しうることを理解するであろう。
【００４１】
好ましくは、本発明に用いるフッ素化ガスはブロモトリフルオロエタン、クロロトリフルオロメタン、ジクロロジフルオロメタン、ジブロモフルオロメタン、クロロペンタフルオロエタン、ブロモクロロジフルオロメタン、ジクロロ−１，１，２，２−テトラフルオロエタン、オクタフルオロシクロブタン、デカフルオロブタン、ヘキサフルオロエタン、パーフルオロメタン、パーフルオロエタン、パーフルオロプロパン、パーフルオロブタン、パーフルオロプロピレン、パーフルオロシクロブタン、パーフルオロ−２−ブチン、パーフルオロ−２−ブテン、パーフルオロブタ−１，３−ジエン、パーフルオロ・ｎ−プロピルエチル・エーテル、パーフルオロジエチル・エーテル、パーフルオロメチルエチル・エーテル、パーフルオロジメチル・エーテル、サルファヘキサフルオリド、セレニウムヘキサフルオリド又はパーフルオロプロピニルクロリドである。更に好ましくは、前記フッ素化ガスはパーフルオロメタン、パーフルオロエタン、パーフルオロプロパン、パーフルオロブタン、パーフルオロシクロブタン、パーフルオロ・ｎ−プロピルエチル・エーテル、パーフルオロジエチル・エーテル、パーフルオロメチルエチル・エーテル、パーフルオロジメチル・エーテル又はサルファヘキサフルオリドである。更により好ましくは、前記フッ素化ガスはパーフルオロメタン、パーフルオロエタン、パーフルオロプロパン又はパーフルオロブタンである。特に好ましくは、前記フッ素化ガスはパーフルオロプロパン又はパーフルオロブタンである。
【００４２】
好ましくは、患者に投与する前に、温度又は圧力によって、気体に変換されている、前記ガス前駆体は１−ブロモ−１，１，２，３，３，３−ヘキサフルオロプロパン、ブロモパーフルオロプロパン、２−クロロ−１，１，１，４，４，４−ヘキサフルオロ−２−ブテン、２−クロロペンタフルオロ−１，３−ブタジエン、ヨードトリフルオロエチレン、１，１，２−トリフルオロ−２−クロロエタン、１，２−ジフルオロクロロエタン、１，１−ジフルオロ−２−クロロエタン、１，１−ジクロロフルオロエタン、１−ブロモエタン、１−フルオロブタン、パーフルオロペンタン、パーフルオロテトラヒドロピラン、パーフルオロメチルテトラヒドロフラン、パーフルオロ・ｔ−ブチルメチル・エーテル、パーフルオロ・ｎ−ブチルメチル・エーテル、パーフルオロイソプロピルメチル・エーテル、１−ブロモ−ノナフルオロブタン、１−クロロ−１−フルオロ−１−ブロモメタン、１，１，１−トリクロロ−２，２，２−トリフルオロエタン、１，２−ジクロロ−２，２−ジフルオロエタン、１，１−ジクロロ−１，２−ジフルオロエタン、１，２−ジクロロ−１，１，３−トリフルオロプロパン、１−ブロモパーフルオロブタン、１−ブロモ−２，４−ジフルオロベンゼン、２−ヨード−１，１，１−トリフルオロエタン、５−ブロモバレリルクロリド、１，３−ジクロロテトラフルオロアセトン、ブロミンペンタフルオリド（五フッ化臭素）、ペプタフルオロ−２−ヨードプロパン、６−ブロモ−１−ヘキセン、２−ブロモ−２−ニトロプロパン、２−ブロモ−５−ニトロチオフェン、２−ブロモプロペン、３−クロロ−５，５−ジメチル−２−シクロヘキサン、２−クロロ−２−メチルプロパン、パーフルオロ−２−メチル−２−ペンテン、１，１，１，３，３−ペンタフルオロペンタン、３−フルオロベンズアルデヒド、２−フルオロ−５−ニトロトルエン、３−フルオロスチレン、３，５−ジフルオロアニリン、２，２，２−トリフルオロエチルアクリレート、３−（トリフルオロメトキシ）−アセトフェノン、１，１，２，２，３，３，４，４−オクタフルオロブタン、１，１，１，３，３−ペンタフルオロブタン、テトラデカパーフルオロヘプタン、ドデカパーフルオロシクロヘキサン、ｎ−パーフルオロヘキサン、パーフルオロ−２−メチル−２−ペンテン、パーフルオロシクロヘキサン、パーフルオロブチルエチル・エーテル、ビス（パーフルオロイソプロピル）エーテル及び／又はビス（パーフルオロプロピル）エーテルである。更に好ましくは、患者に投与する前に、温度又は圧力によって、気体に変換されている、前記フッ素化ガス前駆体はブロモパーフルオロプロパン、パーフルオロペンタン、パーフルオロシクロペンタン、パーフルオロブチルメチル・エーテル、パーフルオロメチル・ｎ−ブチル・エーテル、パーフルオロメチルイソプロピル・エーテル、パーフルオロメチル・ｔ−ブチル・エーテル、パーフルオロテトラヒドロピラン及び／又はパーフルオロメチルテトラヒドロフランである。特に好ましくは、気体に変換されている前記フッ素化ガス前駆体はパーフルオロペンタンである。パーフルオロペンタンの好ましい形態はｎ−パーフルオロペンタン及びパーフルオロイソペンタンを含む。
【００４３】
本発明において、例えば、酸素、フッ素化ガス、ガス前駆体及び／又は別のタイプのガス、ガス前駆体及び／又は液体の混合物等の異なるタイプのガスの混合物を用いることができる。本発明の組成物は、具体例には、空気、貴ガス、例えば、ヘリウム、ルビジウム過分極キセノン、過分極アルゴン、過分極ヘリウム、ネオン、アルゴン、キセノン等、二酸化炭素、窒素、イソプロピルアセチレン、アレン、１，２−ブタジエン、２，３−ブタジエン、１，３−ブタジエン、２−メチル−１，３−ブタジエン、ブタジエン、２−メチルブタン、１−ブテン、２−ブテン、２−メチル−１−ブテン、３−メチル−１−ブテン、４−フェニル−３−ブテン−２−オン、２−メチル−１−ブテン−３−イン、硝酸ブチル、１−ブチン、２−ブチン、３−メチル−１−ブチン、２−ブロモブチルアルデヒド、硫化カルボニル、クロトノニトリル、シクロブタン、メチルシクロブタン、シクロプロパン、３−クロロシクロ−ペンテン、ジメチルアミン、１，２−ジメチルシクロプロパン、１，１−ジメチルシクロプロパン、１，２−ジメチルシクロプロパン、エチルシクロプロパン、メチルシクロプロパン、ジアセチレン、３−エチル−３−メチル・ジアジリジン、ジメチルエチルアミン、ビス（ジメチルホスフィン）アミン、ジメチルオキソニウムクロリド、２，３−ジメチル−２−ノルボマン、１，３−ジオキソラン−２−オン、１，１−ジクロロエタン、１，１−ジクロロエチレン、クロロエタン、１，１−ジクロロエタン、メタン、クロロジニトロメタン、ヨードメタン、ジシラノメタン、２−メチルブタン、メチル・エーテル、メチルイソプロピル・エーテル、乳酸メチル、亜硝酸メチル、メチルスルフィド（硫化メチル）、メチルビニル・エーテル、ネオン、ネオペンタン、窒素、亜酸化窒素、１，２，３−ノナデカントリカルボン酸・２−ヒドロキシトリメチルエステル、１−ノネン−３−イン、１，４−ペンタジエン、ｎ−ペンタン、４−アミノ−４−メチルペンタ−２−オン、１−ペンテン、２−ペンテン（シス及びトランス）、３−ブロモペンテ−ｌ−エン、２−クロロプロパン、テトラクロロフタル酸、２，３，６−トリメチル−ピペリジン、プロパン、１−クロロプロパン、１−クロロプロピレン、クロロプロピレン−（トランス）、クロロプロパン−（トランス）、２−クロロプロピレン、２−アミノプロパン、１，２−エポキシプロパン、プロペン、プロピン、２，４−ジアミノトルエン、ビニルアセチレン、ビニルエーテル、エチルビニル・エーテル、５−ブロモバレリルクロリド、１−ブロモエタン、６−ブロモ−１−ヘキセン、２−ブロモ−２−ニトロプロパン、２−ブロモ−５−ニトロチオフェン、２−ブロモプロペン、３−クロロ−５，５−ジメチル−２−シクロヘキセン、２−クロロ−２−メチルプロパン及びこれらの混合物を含んでいてもよい。
【００４４】
特定の好ましい形態において、ガス、例えば、酸素及びパーフルオロカーボン・ガスはフッ素化液体化合物と組み合わせてもよく、これらに限定されないが、前記フッ素化液体化合物はパーフルオロオクチルヨード、パーフルオロオクチルブロミド、１，２−ジクロロ−１，１，３−トリフルオロプロパン、２−ヨード−１，１，１−トリフルオロエタン、２−クロロ−２−メチルプロパン、パーフルオロ−２−メチル−２−ペンテン、パーフルオロトリブチルアミン、パーフルオロトリプロピルアミン、３−フルオロベンズアルデヒド、２−フルオロ−５−ニトロトルエン、パーフルオロ−４−メチルキノリジジン、パーフルオロ−Ｎ−メチル−デカヒドロキノン、パーフルオロ−Ｎ−メチル−デカヒドロイソキノン、パーフルオロ−Ｎ−シクロヘキシル−ピロリジン、テトラデカパーフルオロヘプタン、ドデカパーフルオロシクロヘキサン、パーフルオロヘキサン、パーフルオロヘプタン、パーフルオロオクタン、パーフルオロノナン、パーフルオロデカン、パーフルオロドデカン、パーフルオロ−２−メチル−２−ペンテン、パーフルオロシクロヘキサン、パーフルオロデカリン、パーフルオロブチルエチル・エーテル、ビス（パーフルオロイソプロピル）エーテル及びビス（パーフルオロプロピル）エーテルを含む。  好ましくは、前記フッ素化液体化合物はパーフルオロヘキサン、パーフルオロヘプタン、パーフルオロオクタン、パーフルオロノナン、パーフルオロデカン、パーフルオロドデカン、パーフルオロデカリン、パーフルオロオクチルヨード、パーフルオロオクチルブロミド、パーフルオロトリブチルアミン、パーフルオロトリプロピルアミン、パーフルオロブチルエチル・エーテル、ビス（パーフルオロイソプロピル）エーテル又はビス（パーフルオロプロピル）エーテルである。
【００４５】
酸素療法剤として有用な好ましいフルオロカーボン類はおよそ室温からおよそ生理的温度又は生理的温度付近の間にある沸点を有する。好ましいフルオロカーボンは特に好ましいパーフルオロイソペンタンと共にパーフルオロペンタンである。他の材料にはｎ−パーフルオロペンタン、パーフルオロブタン、パーフルオロシクロヘキサン（ｂｐ５９−６０℃）、パーフルオロメチルシクロペンタン（ｂｐ４８℃）、ｎ−パーフルオロヘキサン（ｂｐ５８−６０℃）、パーフルオロシクロペンタン（ｂｐ４５℃）及びパーフルオロトリエチルアミン及びパーフルオロトリエチルアミンが含まれる。
【００４６】
前記具体例において、フルオロカーボン材料はフッ素系界面活性剤を含む、界面活性剤を用いて安定化される。当業者が認識するように、前記ガス前駆体を安定化するために種々の異なる界面活性剤を用いることができる。フッ素系界面活性剤に加えて、別の好ましいクラスの界面活性剤はリン脂質を含む。他の好ましい界面活性剤は脂肪酸及びステロール類を含有する。以下はリン脂質を用いるＤＤＦＰの乳剤の製造例である。
【００４７】
以下の実施例を当業者に対して本発明をどのように作り使用するかについて更に説明するために示す。これらの実施例は本発明の範囲を限定する意図ではなく、本発明の範囲に基づくものである。
【００４８】
実施例２
ＤＤＦＰの脂質懸濁液の製造例
１００ｍＬの容量フラスコを水で容量線まで満たした。前記フラスコから撹拌子を含むビーカーに移し、水のメニスカスでビーカーに印を付けた。５ｍＬのグリセロール及び８０ｍＬの注射用蒸留水（ＷＦＩ）をビーカーに入れ、撹拌板上に配置し５５℃まで１５分間加熱した。４８８ｍｇのＮａＣｌ、２３４ｍｇのＮａＨ２ＰＯ４及び２１６ｍｇのＮａ２ＨＰＯ４を前記グリセロール／ＷＦＩ混合物に添加した。これを塩が完全に溶解するまで撹拌した。第２の撹拌板上にある第２のビーカーにおいて、１０ｍＬのプロピレングリコールを前記ビーカー内に配置した。撹拌しながら、プロピレングリコールを５５℃まで加熱した。撹拌を続けながらプロピレングリコールに１１４．２４ｍｇのジパルミトイルホスファチジルコリン（「ＤＰＰＣ」）（Ａｖａｎｔｉ  Ｐｏｌａｒ  Ｌｉｐｉｄ  ｃａｔ＃  ８５０３５５Ｐ）を添加し、ＤＰＰＣを完全に分散させた。ＤＰＰＣが完全に溶解した後、共有結合したポリ（エチレングリコール）分子量５０００を伴う１３３．６１ｍｇのジパルミトイルホスファチジルエタノールアミン（「ＤＰＰＥ−ＰＥＧ  ５Ｋ」）（Ａｖａｎｔｉ  Ｐｏｌａｒ  Ｌｉｐｉｄ  ｃａｔ＃  ８８０２００Ｐ）をプロピレングリコールに添加し完全に分散させた。第２の脂質が溶解した後、プロピレングリコール及び脂質が入ったビーカーの内容物を前記塩類、グリセロール及びＷＦＩの入ったビーカーに添加した。脂質混合物の全てを前記ビーカー内にすすぎ入れるのに高温のＷＦＩ混合物の一定分量を用いた。充分量のＷＦＩを１００ｍＬの印に到達するまで加え３０分間撹拌した。脂質混合物を撹拌板から外しｐＨを調べ、１ＭのＨＣｌ及び／又はＮａＯＨを用いて６．５±０．５に調整した。前記脂質混合物を室温まで冷却した。前記混合物を冷却しながら、冷却装置のライン及び管をホモジナイザー及び圧力容器に取り付けた。冷却装置を開始させ４℃に設定した。大量の氷をホモジナイザーの周囲に配置した。
【００４９】
脂質混合物を冷却した後、ホモジナイザーの試料シリンダーに注加した。
【００５０】
凍結させたメスシリンダー内に入った、ＤＤＦＰを冷凍庫から取り出した。２ｍＬのＤＤＦＰを量り取り直ちに前記ホモジナイザーの試料シリンダーに添加した。
【００５１】
前記シリンダーを密封し１４，０００ｐｓｉで均質化を開始した。前記混合物を３０分間循環させた。前記ホモジナイザーを停止し流れをホモジナイザーから圧力容器に向かわせた。前記圧力容器の通気を行った。前記ホモジナイザーを再始動し乳剤の全てを前記圧力容器に移した。前記ホモジナイザーを停止し通気口を閉じ三方弁を閉じた。前記管を取り外し前記圧力容器を充填フードに移した。前記ガス及び充填管を圧力容器に連結した。ポンプを準備し較正してメスシリンダー及び三角フラスコを用いて７．５ｍＬを分散させた。前記バイアルをＤＤＦＰｅで満たし迅速に蓋をし圧着した。
【００５２】
実施例３
ＤＤＦＰｅの脂質懸濁液を３０重量／体積％のショ糖溶液中で製造し約２．８ｍＰａｓの粘度をえたこと以外は前記と同様に製造した。２つの試料を準備し、１つは０．０１Ｍのリン酸ナトリウムを用いてｐＨ７．０の緩衝剤を含み他方は緩衝剤を含まなかった。緩衝剤を含まない溶液においてショ糖はより急速に分解され前記非緩衝化懸濁液ではショ糖の量が低下しブドウ糖及び果糖の濃度がより急速に上昇した。
【００５３】
本発明の好ましい形態を詳細に説明したが、以下の特許請求の範囲に記載した本発明の範囲から逸脱することなく、当業者がこれらの形態に修正及び適応を思い付きうることは明らかである。
【図１】
2019089816.tif 000005
【図２】
2019089816.tif 000006
【図３】
2019089816.tif 000007
【図４】
2019089816.tif 000008
【図５】
2019089816.tif 000009
【図６】
2019089816.tif 000010
【図７】
2019089816.tif 000011