(57)【要約】      （修正有）【課題】抗精神病薬のレベルを判定するための他の方法、特に、処方医師の診療所で行うことができ（その結果、個々の患者に対する治療をより迅速に調整することができる）、及びＬＣ若しくはＧＣ／ＭＳ設備を欠いているか又は迅速な試験結果を必要とする他の医療現場において行うことができる方法の提供。【解決手段】競合的イムノアッセイ方法等において、試料中のクエチアピンを検出するために使用することができる、クエチアピンに結合する抗体が開示される。本抗体は、単一の側方流動アッセイ装置におけるアリピプラゾール、オランザピン、クエチアピン、及びリスペリドンの多重検出を含む、クエチアピンのポイントオブケア検出のために、側方流動アッセイ装置において使用することができる。【選択図】なし【特許請求の範囲】
【請求項１】
クエチアピンに結合し、
（ｉ）式Ｉの化合物と免疫原性担体とのコンジュゲートに応答して生成されるか、又は
（ｉｉ）式Ｉの化合物と免疫原性担体とのコンジュゲートに応答して生成される抗体に
より結合されるエピトープと同じであるエピトープに対して競合する、単離抗体又はその
結合断片であって、
式Ｉ：
【化１】
2019073513.tif 000090
式中、
Ｒ1は、Ｈ、
【化２】
2019073513.tif 000091
ＣＨ2ＮＨ2、若しくはＣＨ2ＮＨＣ（Ｏ）（ＣＨ2）mＣＯ2Ｈであるか、又は
Ｚ−（Ｙ）p−Ｇであり、
Ｒ2は、Ｈ、
【化３】
2019073513.tif 000092
ＣＨ2ＮＨ2、若しくはＣＨ2ＮＨＣ（Ｏ）（ＣＨ2）mＣＯ2Ｈであるか、
又はＺ−（Ｙ）p−Ｇであり、
Ｒ3は、Ｈ、又はＷ−（Ｙ）p−Ｇであるが、但し、Ｒ1、Ｒ2、Ｒ3のうちの２つがＨで
なければならないものとし、かつ更に、Ｒ1、Ｒ2、及びＲ3が全て同時にＨであってはな
らないものとし、
式中、
Ｚは、
−Ｎ（Ｒ4）−、−Ｏ−、−Ｓ−、−アルキル−、−アミノアルキル−、−チオアルキ
ル−、−ヘテロアルキル−、−アルキルカルボニル−、
【化４】
2019073513.tif 000093
からなる群から選択され、
Ｒ4は、Ｈ、アルキル基、シクロアルキル基、アラルキル基、又は置換若しくは非置換
アリール基であり、
式中、
Ｗは、
−Ｃ（Ｏ）−、アルキル−、−アミノアルキル−、−チオアルキル−、−ヘテロアルキ
ル−、−アルキルカルボニル−からなる群から選択され、
Ｙは、有機スペーサ基であり、
Ｇは、担体に結合することができる官能性連結基であり、
ｐは、０又は１であり、
ｍは、１、２、３、４、又は５であり、
ｎは、１、２、３、４、又は５である、抗体又はその結合断片。
【請求項２】
前記抗体が、式Ｉの化合物と免疫原性担体とのコンジュゲートに応答して生成される、
請求項１に記載の抗体。
【請求項３】
前記抗体断片が、Ｆｖ、Ｆ（ａｂ’）、Ｆ（ａｂ’）２、ｓｃＦｖ、ミニボディ、及び
ダイアボディ断片からなる断片の群から選択される、請求項１に記載の抗体。
【請求項４】
前記抗体が、モノクローナル抗体である、請求項１に記載の抗体。
【請求項５】
請求項１に記載の抗体を含む、アッセイキット。
【請求項６】
請求項１に記載の抗体を含む、アッセイ装置。
【請求項７】
前記装置は、側方流動アッセイ装置である、請求項６に記載のアッセイ装置。
【請求項８】
クエチアピンに結合する抗体を産生する方法であって、
（ｉ）抗体産生のための宿主を選択することと、
（ｉｉ）前記宿主に式Ｉの化合物と免疫原性担体とのコンジュゲートを接種することと
、を含み、前記宿主が、クエチアピンに結合する抗体を産生し、
式Ｉ：
【化５】
2019073513.tif 000094
式中、
Ｒ1は、Ｈ、
【化６】
2019073513.tif 000095
ＣＨ2ＮＨ2、若しくはＣＨ2ＮＨＣ（Ｏ）（ＣＨ2）mＣＯ2Ｈであるか、又は
Ｚ−（Ｙ）p−Ｇであり、
Ｒ2は、Ｈ、
【化７】
2019073513.tif 000096
ＣＨ2ＮＨ2、若しくはＣＨ2ＮＨＣ（Ｏ）（ＣＨ2）mＣＯ2Ｈであるか、
又はＺ−（Ｙ）p−Ｇであり、
Ｒ3は、Ｈ、又はＷ−（Ｙ）p−Ｇであるが、但し、Ｒ1、Ｒ2、Ｒ3のうちの２つがＨで
なければならないものとし、かつ更に、Ｒ1、Ｒ2、及びＲ3が全て同時にＨであってはな
らないものとし、
式中、
Ｚは、
−Ｎ（Ｒ4）−、−Ｏ−、−Ｓ−、−アルキル−、−アミノアルキル−、−チオアルキ
ル−、−ヘテロアルキル−、−アルキルカルボニル−、
【化８】
2019073513.tif 000097
からなる群から選択され、
Ｒ4は、Ｈ、アルキル基、シクロアルキル基、アラルキル基、又は置換若しくは非置換
アリール基であり、
式中、
Ｗは、
−Ｃ（Ｏ）−、アルキル−、−アミノアルキル−、−チオアルキル−、−ヘテロアルキ
ル−、−アルキルカルボニル−からなる群から選択され、
Ｙは、有機スペーサ基であり、
Ｇは、担体に結合することができる官能性連結基であり、
ｐは、０又は１であり、
ｍは、１、２、３、４、又は５であり、
ｎは、１、２、３、４、又は５である、方法。
【請求項９】
クエチアピンに結合するモノクローナル抗体を産生することができるハイブリドーマ細
胞株を産生する方法であって、
（ｉ）抗体産生のための宿主を選択することと、
（ｉｉ）前記宿主に式Ｉの化合物と免疫原性担体とのコンジュゲートを接種することと
、
（ｉｉｉ）前記接種された宿主からの細胞株を連続的に分裂している細胞と融合させて
、クエチアピンに結合するモノクローナル抗体を産生することができる融合細胞を作製す
ることと、
（ｉｖ）ハイブリドーマ細胞株を得るために、前記融合細胞をクローニングすることと
、を含み、
式Ｉ：
【化９】
2019073513.tif 000098
式中、
Ｒ1は、Ｈ、
【化１０】
2019073513.tif 000099
ＣＨ2ＮＨ2、若しくはＣＨ2ＮＨＣ（Ｏ）（ＣＨ2）mＣＯ2Ｈであるか、又は
Ｚ−（Ｙ）p−Ｇであり、
Ｒ2は、Ｈ、
【化１１】
2019073513.tif 000100
ＣＨ2ＮＨ2、若しくはＣＨ2ＮＨＣ（Ｏ）（ＣＨ2）mＣＯ2Ｈであるか、
又はＺ−（Ｙ）p−Ｇであり、
Ｒ3は、Ｈ、又はＷ−（Ｙ）p−Ｇであるが、但し、Ｒ1、Ｒ2、Ｒ3のうちの２つがＨで
なければならないものとし、かつ更に、Ｒ1、Ｒ2、及びＲ3が全て同時にＨであってはな
らないものとし、
式中、
Ｚは、
−Ｎ（Ｒ4）−、−Ｏ−、−Ｓ−、−アルキル−、−アミノアルキル−、−チオアルキ
ル−、−ヘテロアルキル−、−アルキルカルボニル−、
【化１２】
2019073513.tif 000101
からなる群から選択され、
Ｒ4は、Ｈ、アルキル基、シクロアルキル基、アラルキル基、又は置換若しくは非置換
アリール基であり、
式中、
Ｗは、
−Ｃ（Ｏ）−、アルキル−、−アミノアルキル−、−チオアルキル−、−ヘテロアルキ
ル−、−アルキルカルボニル−からなる群から選択され、
Ｙは、有機スペーサ基であり、
Ｇは、担体に結合することができる官能性連結基であり、
ｐは、０又は１であり、
ｍは、１、２、３、４、又は５であり、
ｎは、１、２、３、４、又は５である、方法。
【請求項１０】
サンプル中のクエチアピンを検出する方法であって、
（ｉ）サンプルを検出可能なマーカーで標識された請求項１に記載の抗体と接触させる
ことと、ここで、前記標識された抗体と前記サンプル中に存在するクエチアピンとが標識
された複合体を形成する、
（ｉｉ）前記サンプル中のクエチアピンを検出するために、前記標識された複合体を検
出することと、を含む、方法。
【請求項１１】
サンプル中のクエチアピンを検出するための競合的イムノアッセイ方法であって、
（ｉ）サンプルを、請求項１に記載の抗体と、及びクエチアピン又はクエチアピンの競
合結合パートナーと、接触させることと、ここで、前記抗体及び前記クエチアピン又はそ
の競合結合パートナーのうちの１つが、検出可能なマーカーで標識され、サンプルのクエ
チアピンが、前記抗体への結合に対して、前記クエチアピン又はその競合結合パートナー
と競合する、
（ｉｉ）サンプルのクエチアピンを検出するために、前記標識を検出することと、を含
む、方法。
【請求項１２】
前記クエチアピン又はその競合結合パートナーが、前記検出可能なマーカーで標識され
る、請求項１１に記載の方法。
【請求項１３】
前記抗体が、検出可能なマーカーで標識される、請求項１１に記載の方法。
【請求項１４】
前記イムノアッセイが、側方流動アッセイ装置において行われ、前記サンプルが、前記
装置に適用される、請求項１１に記載の方法。
【請求項１５】
クエチアピンに加えて１つ以上の検体の存在を検出することを更に含む、請求項１０又
は１１に記載の方法。
【請求項１６】
前記１つ以上の検体が、クエチアピン以外の抗精神病薬である、請求項１５に記載の方
法。
【請求項１７】
クエチアピン以外の前記抗精神病薬が、リスペリドン、パリペリドン、アリピプラゾー
ル、オランザピン、及びそれらの代謝産物からなる群から選択される、請求項１６に記載
の方法。
【請求項１８】
クエチアピンの前記検出が、処方されたクエチアピン療法の患者の順守の指標である、
請求項１０又は１１に記載の方法。
【請求項１９】
クエチアピンの前記検出が、患者が経口クエチアピンのレジメンから、注入可能な抗精
神病薬のレジメンへと切り替えられるべきかどうかを判定するために使用される、請求項
１０又は１１に記載の方法。
【請求項２０】
クエチアピンの前記検出が、有効又は安全な薬物レベルの到達又は維持を確実にするた
めに、経口又は注入可能なクエチアピンの用量レベル又は投薬間隔を増加させるべきか、
それとも減少させるべきかを判定するために使用される、請求項１０又は１１に記載の方
法。
【請求項２１】
クエチアピンの前記検出が、最小限のｐＫレベルの到達の証拠を提供することにより、
クエチアピン療法の開始時の一助になる、請求項１０又は１１に記載の方法。
【請求項２２】
クエチアピンの前記検出が、複数の製剤中又は複数の源からのクエチアピンの生物学的
同等性を判定するために使用される、請求項１０又は１１に記載の方法。
【請求項２３】
クエチアピンの前記検出が、多剤投与及び潜在的な薬物−薬物相互作用の影響を評価す
るために使用される、請求項１０又は１１に記載の方法。
【請求項２４】
クエチアピンの前記検出が、患者が臨床治験から除外されるべきか、又は含まれるべき
かの指標であり、臨床治験の投薬必要条件の順守のその後のモニタリングの一助になる、
請求項１０又は１１に記載の方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
（関連出願の相互参照）
本願は２０１２年８月２１日に出願された米国仮特許出願第６１／６９１，５９８号の
利益を主張するものである。
【０００２】
（発明の分野）
本発明は、イムノアッセイの分野、具体的には、クエチアピンの検出のためにイムノア
ッセイに使用することができるクエチアピンに結合する抗体に関する。
【背景技術】
【０００３】
統合失調症は、慢性かつ消耗性の精神障害であり、世界人口の約０．４５〜１％が罹患
している（ｖａｎ  Ｏｓ，Ｊ．、Ｋａｐｕｒ，Ｓ．「Ｓｃｈｉｚｏｐｈｒｅｎｉａ」Ｌａ
ｎｃｅｔ  ２００９，３７４，６３５〜６４５）。治療の主な目的は、精神病の症状から
持続的寛解を達成し、再発のリスク及び影響を低減し、患者の機能及び全体的な生活の質
を向上することである。統合失調症に罹患している多くの患者は、抗精神病薬の投薬によ
り症状の安定を得ることができるが、投薬の順守不足が、毎日投与される経口投薬での再
発の一般的な理由である。非順守の結果を調査するいくつかの研究（Ａｂｄｅｌ−Ｂａｋ
ｉ，Ａ．；Ｏｕｅｌｌｅｔ−Ｐｌａｍｏｎｄｏｎ，Ｃ．；Ｍａｌｌａ，Ａ．「Ｐｈａｒｍ
ａｃｏｔｈｅｒａｐｙ  Ｃｈａｌｌｅｎｇｅｓ  ｉｎ  Ｐａｔｉｅｎｔｓ  ｗｉｔｈ  Ｆ
ｉｒｓｔ−Ｅｐｉｓｏｄｅ  Ｐｓｙｃｈｏｓｉｓ」Ｊｏｕｒｎａｌ  ｏｆ  Ａｆｆｅｃｔ
ｉｖｅ  Ｄｉｓｏｒｄｅｒｓ  ２０１２，１３８，Ｓ３〜Ｓ１４）は、処方されたように
薬物治療を行わない統合失調症に罹患している患者は再発、入院、及び自殺の割合がより
高く、死亡率が増加することを示している。統合失調症に罹患している患者の４０〜７５
％が、毎日の経口治療レジメンの順守に困難を有することが推定されている（Ｌｉｅｂｅ
ｒｍａｎ，Ｊ．Ａ．、Ｓｔｒｏｕｐ，Ｔ．Ｓ．、ＭｃＥｖｏｙ，Ｊ．Ｐ．、Ｓｗａｒｔｚ
，Ｍ．Ｓ．；Ｒｏｓｅｎｈｅｃｋ，Ｒ．Ａ．、Ｐｅｒｋｉｎｓ，Ｄ．Ｏ．、Ｋｅｅｆｅ，
Ｒ．Ｓ．Ｅ．、Ｄａｖｉｓ，Ｓ．Ｍ．、Ｄａｖｉｓ，Ｃ．Ｅ．、Ｌｅｂｏｗｉｔｚ，Ｂ．
Ｄ．、Ｓｅｖｅｒｅ，Ｊ．、Ｈｓｉａｏ，Ｊ．Ｋ．「Ｅｆｆｅｃｔｉｖｅｎｅｓｓ  ｏｆ
Ａｎｔｉｐｙｓｃｈｏｔｉｃ  Ｄｒｕｇｓ  ｉｎ  Ｐａｔｉｅｎｔｓ  ｗｉｔｈ  Ｃｈ
ｒｏｎｉｃ  Ｓｃｈｉｚｏｐｈｒｅｎｉａ」Ｎｅｗ  Ｅｎｇｌａｎｄ  Ｊｏｕｒｎａｌ  
ｏｆ  Ｍｅｄｉｃｉｎｅ  ２００５，３５３（１２），１２０９〜１２２３）。
【０００４】
治療薬物モニタリング（ＴＤＭ）は、治療モニタリング及び治療最適化のための、抗精
神病薬を含む薬物の血清又は血漿濃度の定量である。そのようなモニタリングは、例えば
、薬物治療レジメンに従わない、治療用量に達していない、治療用量で反応していない、
準最適な忍容性を有する、薬物動態学的な薬物−薬物相互作用を有する、又は不適切な血
漿濃度をもたらす異常代謝を有する、患者の識別を可能にする。抗精神病薬を吸収、分配
、代謝、及び排出する患者の能力において、かなりの個人差がある。そのような差異は、
併発症、年齢、併用薬、又は遺伝的特徴により生じ得る。異なる薬物製剤もまた、抗精神
病薬の代謝に影響を及ぼし得る。ＴＤＭは、個々の患者に対する用量の最適化を可能にし
、治療的帰結及び機能的帰結を改善する。ＴＤＭは、処方する医師が、処方した投与量の
順守及び有効な血清濃度の達成を確実にすることを更に可能にする。
【０００５】
今日まで、抗精神病薬の血清又は血漿濃度のレベルを判定するための方法は、紫外線又
は質量分析法検出による液体クロマトグラフィー（ＬＣ）の使用、及びラジオイムノアッ
セイを伴う（例えば、Ｗｏｅｓｔｅｎｂｏｒｇｈｓ  ｅｔ  ａｌ．，１９９０「Ｏｎ  ｔ
ｈｅ  ｓｅｌｅｃｔｉｖｉｔｙ  ｏｆ  ｓｏｍｅ  ｒｅｃｅｎｔｌｙ  ｄｅｖｅｌｏｐｅ
ｄ  ＲＩＡ’ｓ」ｉｎ  Ｍｅｔｈｏｄｏｌｏｇｉｃａｌ  Ｓｕｒｖｅｙｓ  ｉｎ  Ｂｉｏ
ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ  ａｎｄＡｎａｌｙｓｉｓ  ２０：２４１〜２４６．Ａｎａｌｙｓｉ
ｓ  ｏｆ  Ｄｒｕｇｓ  ａｎｄ  Ｍｅｔａｂｏｌｉｔｅｓ，Ｉｎｃｌｕｄｉｎｇ  Ａｎｔ
ｉ−ｉｎｆｅｃｔｉｖｅ  Ａｇｅｎｔｓ、Ｈｅｙｋａｎｔｓ  ｅｔ  ａｌ．，１９９４「
Ｔｈｅ  Ｐｈａｒｍａｃｏｋｉｎｅｔｉｃｓ  ｏｆ  Ｒｉｓｐｅｒｉｄｏｎｅ  ｉｎ  Ｈ
ｕｍａｎｓ：Ａ  Ｓｕｍｍａｒｙ」，Ｊ  Ｃｌｉｎ  Ｐｓｙｃｈｉａｔｒｙ  ５５／５，
ｓｕｐｐｌ：１３〜１７、Ｈｕａｎｇ  ｅｔ  ａｌ．，１９９３「Ｐｈａｒｍａｃｏｋｉ
ｎｅｔｉｃｓ  ｏｆ  ｔｈｅ  ｎｏｖｅｌ  ａｎｔｉ−ｐｓｙｃｈｏｔｉｃ  ａｇｅｎｔ
ｒｉｓｐｅｒｉｄｏｎｅ  ａｎｄ  ｔｈｅ  ｐｒｏｌａｃｔｉｎ  ｒｅｓｐｏｎｓｅ  
ｉｎ  ｈｅａｌｔｈｙ  ｓｕｂｊｅｃｔｓ」，Ｃｌｉｎ  Ｐｈａｒｍａｃｏｌ  Ｔｈｅｒ
５４：２５７〜２６８を参照されたい）。ラジオイムノアッセイは、リスペリドン及び
パリペリドンのうちの一方又は両方を検出する。米国特許第８，０８８，５９４号におい
て、Ｓａｌａｍｏｎｅらは、リスペリドン及びパリペリドンの両方を検出するが、薬理学
的に不活性な代謝産物を検出しない抗体を使用した、リスペリドンに対する競合的イムノ
アッセイを開示する。競合的イムノアッセイに使用される抗体は、特定の免疫原に対して
開発されている。ＩＤ  Ｌａｂｓ  Ｉｎｃ．（Ｌｏｎｄｏｎ，Ｏｎｔａｒｉｏ，Ｃａｎａ
ｄａ）は、別の抗精神病薬であるオランザピンのためのＥＬＩＳＡを市販しており、これ
もまた、競合形式を使用する。使用説明書は、アッセイがスクリーニングのために設計さ
れ、法医学又は研究での使用を意図するが、特に、治療での使用を意図しないことを示す
。この説明書は、全ての陽性試料がガスクロマトグラフィー／質量分析法（ＧＣ−ＭＳ）
で確認されるべきであることを推奨し、使用される抗体がオランザピン及びクロザピンを
検出することを示す（ＩＤ  Ｌａｂｓ  Ｉｎｃ．，「Ｉｎｓｔｒｕｃｔｉｏｎｓ  Ｆｏｒ
Ｕｓｅ  Ｄａｔａ  Ｓｈｅｅｔ  ＩＤＥＬ−Ｆ０８３」，Ｒｅｖ．Ｄａｔｅ  Ａｕｇ．
８，２０１１を参照されたい）。これらの方法のうちのいくつか、即ち、ＨＰＬＣ及びＧ
Ｃ／ＭＳは、高価かつ労働集約的であり得、一般的に、適切な設備を有する大規模又は専
門研究所でのみ行われる。
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００６】
抗精神病薬のレベルを判定するための他の方法、特に、処方医師の診療所で行うことが
でき（その結果、個々の患者に対する治療をより迅速に調整することができる）、及びＬ
Ｃ若しくはＧＣ／ＭＳ設備を欠いているか又は迅速な試験結果を必要とする他の医療現場
において行うことができる方法が必要である。
【０００７】
クエチアピンは、である。
【０００８】
【化１】
2019073513.tif 000002
【課題を解決するための手段】
【０００９】
本発明は、クエチアピンに結合し、（ｉ）式Ｉの化合物と免疫原性担体との複合体に応
答して生成されるか、又は（ｉｉ）（ｉ）の抗体により結合されるエピトープと同じであ
るエピトープに対して競合する、単離抗体又はその結合断片に関する。
【００１０】
式Ｉ：
【００１１】
【化２】
2019073513.tif 000003
式中、
Ｒ1は、Ｈ、
【００１２】
【化３】
2019073513.tif 000004
ＣＨ2ＮＨ2、若しくはＣＨ2ＮＨＣ（Ｏ）（ＣＨ2）mＣＯ2Ｈであるか、又は
Ｚ−（Ｙ）p−Ｇであり、
Ｒ2は、Ｈ、
【００１３】
【化４】
2019073513.tif 000005
ＣＨ2ＮＨ2、若しくはＣＨ2ＮＨＣ（Ｏ）（ＣＨ2）mＣＯ2Ｈであるか、
又はＺ−（Ｙ）p−Ｇであり、
Ｒ3は、Ｈ、又はＷ−（Ｙ）p−Ｇであるが、但し、Ｒ1、Ｒ2、Ｒ3のうちの２つがＨで
なければならないものとし、かつ更に、Ｒ1、Ｒ2、及びＲ3が全て同時にＨであってはな
らないものとし、
式中、
Ｚは、
−Ｎ（Ｒ4）−、−Ｏ−、−Ｓ−、−アルキル−、−アミノアルキル−、−チオアルキ
ル−、−ヘテロアルキル−、−アルキルカルボニル−、
【００１４】
【化５】
2019073513.tif 000006
からなる群から選択され、
Ｒ4は、Ｈ、アルキル基、シクロアルキル基、アラルキル基、又は置換若しくは非置換
アリール基であり、
式中、
Ｗは、
−Ｃ（Ｏ）−、アルキル−、−アミノアルキル−、−チオアルキル−、−ヘテロアルキ
ル−、−アルキルカルボニル−からなる群から選択され、
Ｙは、有機スペーサ基であり、
Ｇは、担体に結合することができる官能性連結基であり、
ｐは、０又は１であり、
ｍは、１、２、３、４、又は５であり、
ｎは、１、２、３、４、又は５である。
【００１５】
本発明の抗体の現在好ましい実施形態は、式ＩＩを有する化合物に対して生成された１
１、８９−３、８９−５、及び８９−１３と指定される抗体である。別の好適な免疫原は
、式ＩＩＩを有する化合物である。
【００１６】
式ＩＩ（化合物９）：
【００１７】
【化６】
2019073513.tif 000007
【００１８】
式ＩＩＩ（化合物８）：
【００１９】
【化７】
2019073513.tif 000008
【００２０】
本発明の抗体は、アッセイキット及びアッセイ装置において提供され得、現在好ましい
装置は、ポイントオブケア分析を提供する側方流動アッセイ装置である。
【００２１】
本発明は、クエチアピンに結合する抗体を産生する方法を更に提供し、本方法は、（ｉ
）抗体産生のための宿主細胞を選択することと、（ｉｉ）宿主に式Ｉの化合物と免疫原性
担体との複合体を接種することと、を含み、この宿主は、クエチアピンに結合する抗体を
産生する。クエチアピンに結合するモノクローナル抗体を産生することができるハイブリ
ドーマ細胞株を産生する方法が、更に提供される。本方法は、（ｉ）抗体産生のための宿
主を選択することと、（ｉｉ）宿主に式Ｉの化合物と免疫原性担体との複合体を接種する
ことと、（ｉｉｉ）接種された宿主からの細胞株を連続的に分裂している細胞と融合させ
て、クエチアピンに結合するモノクローナル抗体を産生することができる融合細胞を作製
することと、（ｉｖ）ハイブリドーマ細胞株を得るために、融合細胞をクローニングする
ことと、を含む。
【００２２】
本発明は、試料中のクエチアピンを検出する方法を更に提供する。本方法は、（ｉ）試
料を検出可能なマーカーで標識された本発明による抗体と接触させることであって、標識
された抗体と試料中に存在するクエチアピンとが標識された複合体を形成する、接触させ
ることと、（ｉｉ）試料中のクエチアピンを検出するために、標識された複合体を検出す
ることと、を含む。
【００２３】
試料中のクエチアピンを検出するための競合的イムノアッセイ方法が更に提供される。
本方法は、（ｉ）試料を、本発明による抗体と、及びクエチアピン又はクエチアピンの競
合結合パートナーと、接触させることであって、抗体及びクエチアピン又はその競合結合
パートナーのうちの１つが、検出可能なマーカーで標識され、試料のクエチアピンが、抗
体への結合に対して、クエチアピン又はその競合結合パートナーと競合する、接触させる
ことと、（ｉｉ）試料のクエチアピンを検出するために、標識を検出することと、を含む
。
【００２４】
本発明の更なる目的、特徴及び利点が、以下の好ましい実施形態の詳細な考察から、当
業者に明白となるであろう。
【図面の簡単な説明】
【００２５】
【図１】種々のハイブリドーマにより生成された競合的ＥＬＩＳＡの結果を示す。
【図２】種々のハイブリドーマにより生成された競合的ＥＬＩＳＡの結果を示す。
【図３】側方流動アッセイ装置において使用される競合的イムノアッセイ形式を示す。
【図４】クエチアピンサブクローン８９−３、８９−１３、及び８９−５により生成された典型的な用量反応曲線を示す。
【図５】本発明による側方流動アッセイ装置のチップ設計を示す。
【図６】抗体５Ｃ７及び標識されたアリピプラゾールの競合結合パートナーにより生成された、アリピプラゾールの陽性対照についての典型的な用量反応曲線を示す。
【図７】抗体４Ｇ９−１及び標識されたオランザピンの競合結合パートナーにより生成された、オランザピンの陽性対照についての典型的な用量反応曲線を示す。
【図８】抗体１１及び標識されたクエチアピンの競合結合パートナーにより生成された、クエチアピンの陽性対照についての典型的な用量反応曲線を示す。
【図９】抗体５−９及び標識されたリスペリドンの競合結合パートナーにより生成された、リスペリドンの陽性対照についての典型的な用量反応曲線を示す。
【図１０】標識されたアリピプラゾールの競合結合パートナーの存在下で、アリピプラゾール抗体５Ｃ７により生成された、アリピプラゾールを含有する試料についての典型的な用量反応曲線を示し、オランザピン、クエチアピン、又はリスペリドンについての、それぞれの標識された競合結合パートナーの存在下での用量反応曲線はない。
【図１１】標識されたオランザピンの競合結合パートナーの存在下で、オランザピン抗体４Ｇ９−１により生成された、オランザピンを含有する試料についての典型的な用量反応曲線を示し、アリピプラゾール、クエチアピン、又はリスペリドンについての、それぞれの標識された競合結合パートナーの存在下での用量反応曲線はない。
【図１２】標識されたクエチアピンの競合結合パートナーの存在下で、クエチアピン抗体１１により生成された、クエチアピンを含有する試料についての典型的な用量反応曲線を示し、アリピプラゾール、オランザピン、又はリスペリドンについての、それぞれの標識された競合結合パートナーの存在下での用量反応曲線はない。
【図１３】標識されたリスペリドンの競合結合パートナーの存在下で、リスペリドン抗体５−９により生成された、リスペリドンを含有する試料についての典型的な用量反応曲線を示し、アリピプラゾール、オランザピン、又はクエチアピンについての、それぞれの標識された競合結合パートナーの存在下での用量反応曲線はない。
【図１４】標識されたアリピプラゾールの競合結合パートナーの存在下で、アリピプラゾール抗体５Ｃ７により生成された、アリピプラゾールを含有する試料についての典型的な用量反応曲線を示し、オランザピン、クエチアピン、又はリスペリドンについての、それぞれの抗体及び標識された競合結合パートナーの存在下での用量反応曲線はない。
【図１５】標識されたオランザピンの競合結合パートナーの存在下で、オランザピン抗体４Ｇ９−１により生成された、オランザピンを含有する試料についての典型的な用量反応曲線を示し、アリピプラゾール、クエチアピン、又はリスペリドンについての、それぞれの抗体及び標識された競合結合パートナーの存在下での用量反応曲線はない。
【図１６】標識されたクエチアピンの競合結合パートナーの存在下で、クエチアピン抗体１１により生成された、クエチアピンを含有する試料についての典型的な用量反応曲線を示し、アリピプラゾール、オランザピン、又はリスペリドンについての、それぞれの抗体及び標識された競合結合パートナーの存在下での用量反応曲線はない。
【図１７】標識されたリスペリドン競合結合パートナーの存在下で、リスペリドン抗体５−９により生成された、リスペリドンを含有する試料についての典型的な用量反応曲線を示し、アリピプラゾール、オランザピン、又はクエチアピンについての、それぞれの抗体及び標識された競合結合パートナーの存在下での用量反応曲線はない。
【図１８】多重形式で生成されたアリピプラゾールの用量反応曲線に対する、陽性対照として生成されたアリピプラゾールの用量反応曲線の比較を示す。
【図１９】多重形式で生成されたオランザピンの用量反応曲線に対する、陽性対照として生成されたオランザピンの用量反応曲線の比較を示す。
【図２０】多重形式で生成されたクエチアピンの用量反応曲線に対する、陽性対照として生成されたクエチアピンの用量反応曲線の比較を示す。
【図２１】多重形式で生成されたリスペリドンの用量反応曲線に対する、陽性対照として生成されたリスペリドンの用量反応曲線の比較を示す。
【発明を実施するための形態】
【００２６】
本発明は、クエチアピンに結合する単離抗体を提供する。本発明は、抗体を含むアッセ
イキット及びアッセイ装置を提供する。また、抗体を産生する方法及び抗体を産生するこ
とができるハイブリドーマ細胞株を産生する方法も提供する。競合的イムノアッセイ方法
を含む、試料中のクエチアピンを検出する方法が更に提供される。
【００２７】
一実施形態において、本発明は、クエチアピンに結合し、（ｉ）式Ｉの化合物と免疫原
性担体との複合体に応答して生成されるか、又は（ｉｉ）（ｉ）の抗体により結合される
エピトープと同じであるエピトープに対して競合する、単離抗体又はその結合断片を目的
とする。
【００２８】
式Ｉ：
【００２９】
【化８】
2019073513.tif 000009
式中、
Ｒ1は、Ｈ、
【００３０】
【化９】
2019073513.tif 000010
ＣＨ2ＮＨ2、若しくはＣＨ2ＮＨＣ（Ｏ）（ＣＨ2）mＣＯ2Ｈであるか、又は
Ｚ−（Ｙ）p−Ｇであり、
Ｒ2は、Ｈ、
【００３１】
【化１０】
2019073513.tif 000011
ＣＨ2ＮＨ2、若しくはＣＨ2ＮＨＣ（Ｏ）（ＣＨ2）mＣＯ2Ｈであるか、
又はＺ−（Ｙ）p−Ｇであり、
Ｒ3は、Ｈ、又はＷ−（Ｙ）p−Ｇであるが、但し、Ｒ1、Ｒ2、Ｒ3のうちの２つがＨで
なければならないものとし、かつ更に、Ｒ1、Ｒ2、及びＲ3が全て同時にＨであってはな
らないものとし、
式中、
Ｚは、
−Ｎ（Ｒ4）−、−Ｏ−、−Ｓ−、−アルキル−、−アミノアルキル−、−チオアルキ
ル−、−ヘテロアルキル−、−アルキルカルボニル−、
【００３２】
【化１１】
2019073513.tif 000012
からなる群から選択され、
Ｒ4は、Ｈ、アルキル基、シクロアルキル基、アラルキル基、又は置換若しくは非置換
アリール基であり、
式中、
Ｗは、
−Ｃ（Ｏ）−、アルキル−、−アミノアルキル−、−チオアルキル−、−ヘテロアルキ
ル−、−アルキルカルボニル−からなる群から選択され、
Ｙは、有機スペーサ基であり、
Ｇは、担体に結合することができる官能性連結基であり、
ｐは、０又は１であり、
ｍは、１、２、３、４、又は５であり、
ｎは、１、２、３、４、又は５である。
【００３３】
更なる実施形態において、本発明は、クエチアピンに結合し、（ｉ）式Ｉの化合物と免
疫原性担体との複合体に応答して生成されるか、又は（ｉｉ）（ｉ）の抗体により結合さ
れるエピトープと同じであるエピトープに対して競合する、単離抗体又はその結合断片を
目的とし、式中、
Ｒ1は、Ｈ、
【００３４】
【化１２】
2019073513.tif 000013
ＣＨ2ＮＨ2、若しくはＣＨ2ＮＨＣ（Ｏ）（ＣＨ2）mＣＯ2Ｈであるか、又はＺ（Ｙ）p
Ｇであり、
Ｒ2は、Ｈ、
【００３５】
【化１３】
2019073513.tif 000014
ＣＨ2ＮＨ2、若しくはＣＨ2ＮＨＣ（Ｏ）（ＣＨ2）mＣＯ2Ｈであるか、
又はＺ−（Ｙ）p−Ｇであり、
Ｒ3は、Ｈであるが、Ｒ1又はＲ2のいずれかがＨでなければならないものとし、かつ更
に、Ｒ1及びＲ2の両方が同時にＨであってはならないものとし、
式中、
Ｚは、
−Ｎ（Ｒ4）−、−Ｏ−、−Ｓ−、−アルキル−、−アミノアルキル−、−チオアルキ
ル−、−ヘテロアルキル−、−アルキルカルボニル−、
【００３６】
【化１４】
2019073513.tif 000015
からなる群から選択され、
Ｒ4は、Ｈ、アルキル基、シクロアルキル基、アラルキル基、又は置換若しくは非置換
アリール基であり、
Ｙは、有機スペーサ基であり、
Ｇは、担体に結合することができる官能性連結基であり、
ｐは、０又は１であり、
ｍは、１、２、３、４、又は５であり、
ｎは、１、２、３、４、又は５である。
【００３７】
更なる実施形態において、本発明は、クエチアピンに結合し、（ｉ）式Ｉの化合物と免
疫原性担体との複合体に応答して生成されるか、又は（ｉｉ）（ｉ）の抗体により結合さ
れるエピトープと同じであるエピトープに対して競合する、単離抗体又はその結合断片を
目的とし、式中、
Ｒ1は、Ｈ、又はＣＨ2ＮＨ−（Ｙ）p−Ｇであり、
Ｒ2は、Ｈ、又はＣＨ2ＮＨ−（Ｙ）p−Ｇであるが、但し、Ｒ1又はＲ2のいずれかがＨ
でなければならないものとし、かつ更に、Ｒ1及びＲ2の両方が同時にＨであってはならな
いものとし、
Ｒ3は、Ｈであり、
式中、
Ｙは、有機スペーサ基であり、
Ｇは、担体に結合することができる官能性連結基であり、
ｐは、１である。
【００３８】
更なる実施形態において、本発明は、クエチアピンに結合し、（ｉ）式Ｉの化合物と免
疫原性担体との複合体に応答して生成されるか、又は（ｉｉ）（ｉ）の抗体により結合さ
れるエピトープと同じであるエピトープに対して競合する、単離抗体又はその結合断片を
目的とし、式中、
Ｒ1は、Ｈ、
【００３９】
【化１５】
2019073513.tif 000016
ＣＨ2ＮＨ2、又はＣＨ2ＮＨＣ（Ｏ）（ＣＨ2）mＣＯ2Ｈであり、
Ｒ2は、Ｈ、
【００４０】
【化１６】
2019073513.tif 000017
ＣＨ2ＮＨ2、又はＣＨ2ＮＨＣ（Ｏ）（ＣＨ2）mＣＯ2Ｈであるが、但し、Ｒ1又はＲ2の
いずれかがＨでなければならないものとし、かつ更に、Ｒ1及びＲ2の両方が同時にＨであ
ってはならないものとし、
Ｒ3は、Ｈであり、
ｍは、１、２、３、４、又は５であり、
ｎは、１、２、３、４、又は５である。
【００４１】
更なる実施形態において、本発明は、クエチアピンに結合し、（ｉ）式Ｉの化合物と免
疫原性担体との複合体に応答して生成されるか、又は（ｉｉ）（ｉ）の抗体により結合さ
れるエピトープと同じであるエピトープに対して競合する、単離抗体又はその結合断片を
目的とし、式中、
Ｒ1は、Ｈ、
【００４２】
【化１７】
2019073513.tif 000018
又はＣＨ2ＮＨ2であり、
Ｒ2は、Ｈ、
【００４３】
【化１８】
2019073513.tif 000019
又はＣＨ2ＮＨ2であるが、但し、Ｒ1又はＲ2のいずれかがＨでなければならないものと
し、かつ更に、Ｒ1及びＲ2の両方が同時にＨであってはならないものとし、
Ｒ3は、Ｈであり、
ｍは、１、２、３、４、又は５であり、
ｎは、１、２、３、４、又は５である。
【００４４】
好ましい実施形態において、本発明は、クエチアピンに結合し、（ｉ）式ＩＶの化合物
と免疫原性担体との複合体に応答して生成されるか、又は（ｉｉ）（ｉ）の抗体により結
合されるエピトープと同じであるエピトープに対して競合する、単離抗体又はその結合断
片を目的とする。
【００４５】
【化１９】
2019073513.tif 000020
【００４６】
好ましい実施形態において、本発明は、クエチアピンに結合し、（ｉ）式Ｖの化合物と
免疫原性担体との複合体に応答して生成されるか、又は（ｉｉ）（ｉ）の抗体により結合
されるエピトープと同じであるエピトープに対して競合する、単離抗体又はその結合断片
を目的とする。
【００４７】
【化２０】
2019073513.tif 000021
【００４８】
好ましい実施形態において、本発明は、クエチアピンに結合し、（ｉ）式ＶＩの化合物
と免疫原性担体との複合体に応答して生成されるか、又は（ｉｉ）（ｉ）の抗体により結
合されるエピトープと同じであるエピトープに対して競合する、単離抗体又はその結合断
片を目的とする。
【００４９】
【化２１】
2019073513.tif 000022
【００５０】
好ましい実施形態において、本発明は、クエチアピンに結合し、（ｉ）式ＶＩＩの化合
物と免疫原性担体との複合体に応答して生成されるか、又は（ｉｉ）（ｉ）の抗体により
結合されるエピトープと同じであるエピトープに対して競合する、単離抗体又はその結合
断片を目的とする。
【００５１】
【化２２】
2019073513.tif 000023
【００５２】
好ましくは、本発明の抗体は、式Ｉ、式ＩＶ、式Ｖ、式ＶＩ、及び式ＶＩＩの化合物か
ら選択される化合物と免疫原性担体との複合体に応答して生成される。
【００５３】
上記の式により説明される化合物、及び化合物と免疫原性担体により形成される複合体
の更なる詳細は、以下の「化合物、複合体、及び免疫原」と題する節に提供される。
【００５４】
本発明の抗体の更なる詳細は、以下の「抗体」と題する節に提供される。
【００５５】
本発明は、抗体を含むアッセイキット、並びに抗体を含むアッセイ装置を更に提供する
。好ましくは、アッセイ装置は、側方流動アッセイ装置である。アッセイキット及びアッ
セイ装置の更なる詳細は、以下の「アッセイキット及び装置」と題する節に提供される。
【００５６】
本発明は、クエチアピンに結合する抗体を産生する方法を更に提供し、本方法は、（ｉ
）抗体産生のための宿主細胞を選択することと、（ｉｉ）宿主に式Ｉの化合物と免疫原性
担体との複合体を接種することと、を含み、この宿主は、クエチアピンに結合する抗体を
産生する。更なる実施形態において、本方法において使用される複合体は、式ＩＶ、式Ｖ
、式ＶＩ、及び式ＶＩＩの化合物から選択される化合物と免疫原性担体との複合体であり
得る。本発明の抗体の産生における更なる詳細は、以下の「抗体」と題する節に提供され
る。
【００５７】
クエチアピンに結合するモノクローナル抗体を産生することができるハイブリドーマ細
胞株を産生する方法が、更に提供される。本方法は、（ｉ）抗体産生のための宿主を選択
することと、（ｉｉ）宿主に式Ｉの化合物と免疫原性担体との複合体を接種することと、
（ｉｉｉ）接種された宿主からの細胞株を連続的に分裂している細胞と融合させて、クエ
チアピンに結合するモノクローナル抗体を産生することができる融合細胞を作製すること
と、（ｉｖ）ハイブリドーマ細胞株を得るために、融合細胞をクローニングすることと、
を含む。更なる実施形態において、本方法において使用される複合体は、式ＩＶ、式Ｖ、
式ＶＩ、及び式ＶＩＩの化合物から選択される化合物と免疫原性担体との複合体であり得
る。本発明によるハイブリドーマの産生の更なる詳細は、以下の「抗体」と題する節に提
供される。
【００５８】
本発明は、試料中のクエチアピンを検出する方法を更に提供する。本方法は、（ｉ）試
料を検出可能なマーカーで標識された本発明による抗体と接触させることであって、標識
された抗体と試料中に存在するクエチアピンとが標識された複合体を形成する、接触させ
ることと、（ｉｉ）試料中のクエチアピンを検出するために、標識された複合体を検出す
ることと、を含む。本発明によるクエチアピンを検出する方法の更なる詳細は、以下の「
イムノアッセイ」と題する節に提供される。
【００５９】
試料中のクエチアピンを検出するための競合的イムノアッセイ方法が更に提供される。
本方法は、（ｉ）試料を、本発明による抗体と、及びクエチアピン又はクエチアピンの競
合結合パートナーと、接触させることであって、抗体及びクエチアピン又はその競合結合
パートナーのうちの１つが、検出可能なマーカーで標識され、試料のクエチアピンが、抗
体への結合に対して、クエチアピン又はその競合結合パートナーと競合する、接触させる
ことと、（ｉｉ）試料のクエチアピンを検出するために、標識を検出することと、を含む
。本発明によるクエチアピンを検出する競合的イムノアッセイ方法の更なる詳細は、以下
の「イムノアッセイ」と題する節に提供される。
【００６０】
本発明の好ましい実施形態において、クエチアピンの検出は、クエチアピンに加えて１
つ以上の検体の検出を伴う。好ましくは、１つ以上の追加の検体は、クエチアピン以外の
抗精神病薬であり、より好ましくは、クエチアピン以外の抗精神病薬は、アリピプラゾー
ル、リスペリドン、パリペリドン、オランザピン、及びそれらの代謝産物からなる群から
選択される。
【００６１】
上述のように、本発明の抗体は、患者試料中の抗精神病薬の存在及び／又はその量を検
出するためのアッセイにおいて使用することができる。そのような検出は、治療薬物の全
ての便益を有効にする治療薬物モニタリングを可能にする。抗精神病薬のレベルの検出は
、多くの目的のために有用であり得、これらのそれぞれは、本発明の別の実施形態を表し
、処方された治療薬の患者の順守又は服薬遵守の判定、患者が経口抗精神病薬レジメンか
ら持続性のある注入可能な抗精神病薬レジメンに切り替えるべきかどうかを判定するため
の決定ツールとしての使用、有効又は安全な薬物レベルの到達又は維持を確実にするため
に、経口又は注入可能な抗精神病薬の用量レベル又は投薬間隔を増加させるべきか、それ
とも減少させるべきかを判定するための決定ツールとしての使用、最小のｐＫレベルの到
達の証拠を提供することによる抗精神病薬の開始時の一助としての使用、複数の製剤中又
は複数の源からの抗精神病薬の生物学的同等性を判定するための使用、多剤投与及び潜在
的な薬物間相互作用の影響を評価するための使用、並びに患者が臨床治験から除外される
べきか、又は含まれるべきかの指標、及び臨床治験の投薬必要条件の順守のその後のモニ
タリングの一助としての使用が含まれる。
【００６２】
化合物、複合体、及び免疫原
化合物及び複合体及び免疫原に関連して、次の略号が使用される：ＡＭＡＳは、Ｎ−（
α−マレイミドアセトキシ）スクシンイミドエステルであり、ＢＩＮＡＰは、２，２’−
ビス（ジフェニルホスフィノ）−１，１’−ビナプチル（binapthyl）であり、Ｂｏｃ又
はＢＯＣは、ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルであり、ＢＴＧは、ウシサイログロブリンで
あり、Ｂｕ3Ｎは、トリブチルアミンであり、ＤＣＣは、ジシクロヘキシルカルボジイミ
ドであり、ＤＣＭは、ジクロロメタンであり、ＤＩＥＡは、ジイソプロピルエチルアミン
であり、ＤＭＦは、Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミドであり、ＥＤＣＩ又はＥＤＣは、１−
（３−ジメチルアミノプロピル）−３−エチルカルボジイミド塩酸塩であり、ＥＤＴＡは
、エチレンジアミン四酢酸であり、ＨＯＢＴ又はＨＯＢｔは、１−ヒドロキシベンゾトリ
アゾール水和物であり、ＫＬＨは、キーホールリンペットヘモシニアンであり、Ｐｄ2（
ｄｂａ）3は、トリス（ジベンジリデンアセトン）ジパラジウム（０）であり、ＳＡＴＡ
は、Ｎ−スクシンイミジルＳ−アセチルチオ酢酸塩であり、ＴＥＡ又はＥｔ３Ｎは、トリ
エチルアミンであり、ＴＨＦは、テトラヒドロフランであり、ＴＦＡは、トリフルオロ酢
酸であり、ｒ．ｔ．は、室温であり、ＤＥＡＤは、アゾジカルボン酸ジエチルであり、Ｄ
ＩＣは、ジイソプロピルカルボジイミドであり、ＮＨＳは、Ｎ−ヒドロキシスクシンイミ
ドであり、ＴＦＰは、テトラフルオロフェニルであり、ＰＮＰは、ｐ−ニトロフェニルで
あり、ＴＢＴＵは、Ｏ−（ベンゾトリアゾール−１−イル）−Ｎ，Ｎ，Ｎ’，Ｎ’−テト
ラメチルウロニウムテトラフルオロボラートであり、ＤＥＰＢＴは、３−（ジエトキシホ
スホリルオキシ）−１，２，３−ベンゾトラジン−４（３Ｈ）−オンであり、ＢＯＰ−Ｃ
ｌは、ビス（２−オキソ−３−オキサゾリジニル）五塩化リンであり、ＤＴＴは、ジチオ
エリトリトールである。
【００６３】
用語「複合体」は、別々の部分を一緒に結合することで形成される任意の物質を指す。
代表的な複合体には、式Ｉの化合物等の小分子を、担体又はポリアミンポリマー、特にタ
ンパク質等の大分子と一緒に結合することにより形成されるものが含まれる。複合体にお
いて、小分子は、大分子上の１つ以上の活性部位で結合することができる。
【００６４】
用語「ハプテン」は、部分的又は不完全な抗原を指す。ハプテンは、抗体形成を刺激で
きないが、抗体と反応する、タンパク質不含物質である。抗体は、高分子量の免疫原性担
体にハプテンを結合し、この結合した生成物、即ち、免疫原をヒト又は動物対象に注射す
ることにより形成される。
【００６５】
用語「免疫原」は、生物体において免疫応答を誘発する、生じる、又は生成することが
できる物質を指す。
【００６６】
本明細書で使用される「免疫原性担体」は、免疫原性物質、一般的に、ハプテンと１つ
以上の位置で結合し、それにより、これらのハプテンと結合し得る抗体の産生を可能にす
るタンパク質である。免疫原性担体物質の例としては、タンパク質、糖タンパク質、複合
ポリアミノ−多糖類、粒子、及び外来物質として認識され、結果として宿主から免疫学的
な応答を誘発する核酸が挙げられるが、これらに限定されない。ポリアミノ−多糖類は、
この調製に関して知られている従来の手段のいずれかを使用して多糖類から調製され得る
。
【００６７】
アルブミン、血清タンパク質、リポタンパク質等を含むが、これらに限定されない、様
々な型のタンパク質が、免疫原性担体として使用され得る。例示的なタンパク質には、ウ
シ血清アルブミン、キーホールリンペットヘモシアニン、卵オボアルブミン、ウシチログ
ロブリン、第Ｖ画分ヒト血清アルブミン、ウサギアルブミン、カボチャ種子グロブリン、
ジフテリア毒素、テタヌス毒素、ボチリヌス毒素、サクシニル化タンパク質、及びポリリ
シン等の合成ポリ（アミノ酸）が含まれる。
【００６８】
免疫原性担体はまた、ポリアミノ−多糖類を含み得、これらは、単糖類の反復的な縮合
により構築された、高分子量のポリマーである。多糖類の例は、デンプン、グリコーゲン
、セルロース、アラビアガム等の炭水化物ガム、寒天等である。多糖類はまた、ポリ（ア
ミノ酸）残基及び／又は脂質残基も含有する。
【００６９】
免疫原性担体はまた、単独の又は上述のポリ（アミノ酸）又は多糖類のうちの１つに複
合化されているポリ（核酸）であり得る。
【００７０】
免疫原性担体はまた、固体粒子も含むことができる。粒子は、一般に、直径が少なくと
も約０．０２マイクロメートル（μｍ）で約１００μｍ以下、通常、約０．０５μｍ〜１
０μｍである。粒子は、最適には水に近似する密度、一般に約０．７〜１．５ｇ／ｍＬの
、有機又は無機の膨張可能又は非膨張可能な多孔質又は非多孔質の粒子であり得、透明、
部分的透明、又は不透明な材料から構成され得る。粒子は、細胞及び微生物等の生物学的
材料であり得、非限定的な例として、赤血球、白血球、リンパ球、ハイブリドーマ、スト
レプ卜コッカス属、スタヒロコッカスアウレウス、大腸菌、及びウイルス等が挙げられる
。粒子はまた、有機及び無機ポリマー、リポソーム、ラテックス、リン脂質小胞、又はリ
ポタンパク質からも構成され得る。
【００７１】
用語「誘導体」は、１つ以上の化学反応により親化合物から作られた化学化合物又は分
子を指す。
【００７２】
化学化合物の用語「類似体」は、炭素原子鎖及び参照化合物と同じ特定の官能基を含有
する化学化合物を指すが、類似体の炭素鎖は、参照化合物の鎖よりも長い又は短い。
【００７３】
「標識」、「検出分子」、「レポーター」、又は「検出可能なマーカー」は、検出可能
なシグナルを生成する又は誘発されて生成することができる任意の分子である。標識は、
検体、免疫原、抗体に、又は受容体等の別の分子若しくはリガンド等の受容体に結合し得
る分子、特にハプテン又は抗体に、複合化され得る。標識は、直接的に、又は連結部分若
しくは架橋部分を用いて間接的に、結合され得る。標識の非限定的な例としては、放射能
アイソトープ（例えば、125Ｉ）、酵素（例えば、β−ガラクトシダーゼ、ペルオキシダ
ーゼ）、酵素断片、酵素基質、酵素阻害剤、コエンザイム、触媒、フルオロフォア（例え
ば、ローダミン、フルオレセインイソチオシアネート、若しくはＦＩＴＣ、若しくはＤｙ
ｌｉｇｈｔ  ６４９）、染料、化学発光物質及び発光物質（例えば、ジオキセタン、ルシ
フェリン）、又は増感剤が挙げられる。
【００７４】
本明細書で使用される場合、「スペーサ」は、官能性連結基を介してハプテン、担体、
免疫原、標識、又は結合パートナー等の２つ以上の部分構造体を接続する化学構造の部分
を指す。これらのスペーサ基は、一般的に存在する原子からなり、有機化合物に一般的に
見られる方法で組立てられるため、「有機スペーサ基」として称され得る。スペーサを組
立てるために使用される化学的成分は、本出願において以下に記載されよう。好ましいス
ペーサの中には、直鎖状又は分枝状の飽和又は不飽和炭素鎖がある。これらの炭素鎖はま
た、鎖内に１つ以上のヘテロ原子、鎖内に又は鎖の末端で任意の炭素原子の１つ以上の水
素を置き換える１つ以上のヘテロ原子も含み得る。「ヘテロ原子」とは、酸素、窒素、リ
ン、及び硫黄からなる群から選択される炭素以外の原子を意味し、この窒素、リン、及び
硫黄原子は、任意の酸化状態で存在し得、炭素若しくはそれらに結合する他のヘテロ原子
を有し得る。スペーサはまた、鎖の一部として、又は鎖の中の原子のうちの１つの上の置
き換えとして環式又は芳香族基も含み得る。
【００７５】
スペーサ基の原子の数は、水素以外の原子を計数することにより決定される。スペーサ
基の内部の鎖の原子の数は、接続されている部分構造体の間の最短経路に沿って水素以外
の原子の数を計数することにより決定される。好ましい鎖の長さは、１〜２０個の原子で
ある。
【００７６】
「官能性連結基」とは、ハプテン上に存在する反応基を指し、この反応基を使用して、
利用可能な反応部位を提供し得、この反応部位を通じて、ハプテン部分が共有化学結合の
形成により別の部分に連結されて、ハプテンと別の部分（標識若しくは担体等）との複合
体を生成し得る。ハプテンは、このようにして、ビオチン等の部分に連結して、競合結合
パートナーを形成し得る。
【００７７】
スペーサ基を使用して、ハプテンを担体に連結し得る。異なる長さのスペーサにより、
抗体形成プロセスの最適化のために、免疫化されている動物又はヒトの免疫系への提示の
ために、担体から様々な距離でハプテンを結合させることができる。ハプテン分子中の異
なる位置への結合により、抗体認識に影響を及ぼす免疫系にハプテン上の特定部位を示す
機会を与える。スペーサは、水性培地中でより可溶性であるハプテン誘導体を作製するた
めに親和性可溶化基を含み得る。親水性可溶化基の例としては、ポリオキシアルキルオキ
シ基、例えば、ポリエチレングリコール鎖、ヒドロキシル基、カルボキシレート基、及び
スルホネート基が挙げられるが、これらに限定されない。
【００７８】
用語「求核基」又は「求核剤」は、電子対を提供して、反応において化学結合を形成す
る種を指す。用語「求電子性基」又は「求電子剤」は、求電子剤から電子対を受容して、
反応において化学結合を形成する種を指す。
【００７９】
用語「置換」は、親分子上の任意の位置で炭素原子上の水素原子の代わりに、１個の原
子又は原子群の置換を指す。置換基の非限定的な例には、ハロゲン原子、アミノ基、ヒド
ロキシ基、カルボキシ基、アルキル基、アリール基、ヘテロアルキル基、ヘテロアリール
基、シアノ基、アルコキシ基、ニトロ基、アルデヒド基、及びケトン基が挙げられる。
【００８０】
用語「アルキル」は、別途記載のない限り、最大で１２個の炭素原子の飽和又は不飽和
の直鎖及び分枝鎖ラジカルを指し、具体的には、飽和の任意の程度又はレベルを有するラ
ジカルを含むことが意図される。アルキルとしては、メチル、エチル、プロピル、イソプ
ロピル、ブチル、イソブチル、ｓｅｃ−ブチル、ｔｅｒｔ−ブチル、ペンチル、イソペン
チル、ヘキシル、イソヘキシル、ヘプチル、オクチル、２，２，４−トリメチルペンチル
、ノニル、デシル、ウンデシル、及びドデシルが挙げられるが、これらに限定されない。
【００８１】
用語「シクロアルキル」は、３〜１０個の炭素原子からなる飽和又は部分的に不飽和の
単環式又は二環式の炭化水素環ラジカルを指す。アルキル置換基は、任意に、環上に存在
し得る。例としては、シクロプロピル、１，１−ジメチルシクロブチル、１，２，３−ト
リメチルシクロペンチル、シクロヘキシル、及びシクロヘキセニルが挙げられる。
【００８２】
用語「ヘテロアルキル」は、鎖内に１つ以上のヘテロ原子を含むアルキル基を指し、１
つ以上のヘテロ原子は鎖内又は鎖の末端で任意の炭素原子に１つ以上の水素を置換する。
【００８３】
用語「アミノアルキル」は、アルキル鎖に沿って任意の炭素原子に結合される少なくと
も第１級又は２級アミノ基を指す。
【００８４】
用語「アルコキシ」は、別途記載のない限り、酸素原子に結合される最高で１２個の炭
素原子の直鎖及び分枝鎖ラジカルを指す。例としては、メトキシ、エトキシ、プロポキシ
、イソプロポキシ、及びブトキシが挙げられるが、これらに限定されない。
【００８５】
用語「アルコキシアルキル」は、アルキル鎖に沿って任意の炭素原子に結合される少な
くとも１つのアルコキシ基を指す。
【００８６】
用語「チオアルキル」は、アルキル鎖に沿って任意の炭素原子に結合される少なくとも
１つの硫黄基を指す。硫黄基は、いずれかの酸化状態であり得、スルホキシド、スルホン
、及び硫酸塩を含む。
【００８７】
用語「カルボキシレート基」には、カルボン酸、アルキル、シクロアルキル、アリール
、又はアラルキルカルボキシレートエステルが含まれる。
【００８８】
用語「アルキルカルボニル」は、アルキル鎖に沿って任意の炭素原子に結合されるカル
ボニル基を有する基を指す。
【００８９】
用語「ヘテロアリール」は、５員〜７員の単環式、又は８員〜１０員の二環式芳香環ラ
ジカルを指し、これらの任意の環は、Ｎ、Ｏ、又はＳから選択される１〜４個のヘテロ原
子からなり得、窒素及び硫黄原子は、許容されるいずれかの酸化状態で存在し得る。例と
しては、ベンゾイミダゾリル、ベンゾチアゾリル、ベンゾチエニル、ベンゾオキサゾリル
、フリル、イミダゾリル、イソチアゾリル、イソオキサゾリル、オキサゾリル、ピラジニ
ル、ピラゾリル、ピリジル、ピリミジニル、ピロリル、キノリニル、チアゾリル、及びチ
エニルが挙げられる。
【００９０】
用語「アリール」は、環内に６〜１２個の炭素を含有する単環式又は二環式芳香環ラジ
カルを指す。アルキル置換基は、任意に、環上に存在し得る。例としては、フェニル、ビ
フェニル、及びナフタレン（napththalene）が挙げられる。
【００９１】
用語「アラルキル」は、アリール置換基を含有するＣ1〜6アルキル基を指す。例として
は、ベンジル、フェニルエチル、又は２−ナフチルメチルが挙げられる。
【００９２】
用語「アシル」は、基−Ｃ（Ｏ）Ｒaを指し、式中、Ｒaは、水素、アルキル、シクロア
ルキル、ヘテロアルキル、アリール、アラルキル、及びヘテロアリールである。「アシル
化剤」は、分子に−Ｃ（Ｏ）Ｒa基を付加する。
【００９３】
用語「スルホニル」は、基−Ｓ（Ｏ）2Ｒbを指し、式中、Ｒbは、水素、アルキル、シ
クロアルキル、ヘテロアルキル、ハロアルキル、アリール、アラルキル、及びヘテロアリ
ールである。「スルホニル化剤」は、分子に−Ｓ（Ｏ）2Ｒa基を付加する。
【００９４】
担体部分へのハプタンの結合のための反応性官能性連結基を担持するスペーサは、様々
な方法により調製され得る。このスペーサは、ハプテンと担体との選択的な逐次反応を可
能にするようにいずれかの末端で基と特異的に官能化されるか又は活性化される分子を使
用して形成され得るが、同じ反応性部分は、両末端でも使用され得る。ハプテンと担体に
結合されるべき官能性連結基との反応のために選択される基は、ハプテンとハプテンが結
合される担体の官能性基の種類により判定される。スペーサ並びにハプテン及び担体への
結合の方法としては、Ｂｒｉｎｋｌｅｙ，Ｍ．，Ａ．，Ｂｉｏｃｏｎｊｕｇａｔｅ  Ｃｈ
ｅｍ．１９９２，３：２〜１３，Ｈｅｒｍａｎｓｏｎ，Ｇｒｅｇ  Ｔ．，Ｂｉｏｃｏｎｊ
ｕｇａｔｅ  Ｔｅｃｈｎｉｑｕｅｓ，．Ａｃａｄｅｍｉｃ  Ｐｒｅｓｓ，Ｌｏｎｄｏｎ，
Ａｍｓｔｅｒｄａｍ，Ｂｕｒｌｉｎｇｔｏｎ，ＭＡ，ＵＳＡ，２００８及びＴｈｅｒｍｏ
Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ  Ｐｉｅｒｃｅ  Ｃｒｏｓｓｌｉｎｋｉｎｇ  Ｔｅｃｈｎｉｃａ
ｌ  Ｈａｎｄｂｏｏｋ；Ｔｈｅｒｍｏ  Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ  ３７４７  Ｎ  Ｍｅｒｉ
ｄｉａｎ  Ｒｄ，Ｒｏｃｋｆｏｒｄ，ＩＬ  ＵＳＡ  ６１１０１，ｐｈ  ８００−８７４
−３７２３、又はｈｔｔｐ：／／ｗｗｗ．ｐｉｅｒｃｅｎｅｔ．ｃｏｍ／からダウンロー
ド若しくはハードコピーの要求で利用可能、及びその中の参考文献により記載されるもの
が挙げられるが、これらに限定されない。スペーサ基の形成のための多くの特異的に活性
化された分子は、供給メーカー、例えば、Ｔｈｅｒｍｏ  Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃから市販
されている。
【００９５】
アミノ基を担持するハプテンについては、ハプテンへのスペーサの結合モードには、ハ
プテン上のアミンとハロゲン化アシル又は活性エステルを担持するスペーサ構築ブロック
との反応が含まれる。「活性エステル」は、安定した連結を形成する緩やかな条件下で、
求核基、例えば、アミノ基との反応を行うエステルとして定義される。安定した連結は、
例えば、その後の合成工程、免疫原としての使用、又は生化学的アッセイにおいて、更な
る使用の条件下で、無傷の状態のままでいるものとして定義される。安定した連結の好ま
しい例は、アミド結合である。活性エステル及び形成の方法は、Ｂｅｎｏｉｔｏｎ，Ｎ．
Ｌ．，ｉｎ  Ｈｏｕｂｅｎ−Ｗｅｙｌ，Ｍｅｔｈｏｄｓｏｆ  Ｏｒｇａｎｉｃ  Ｃｈｅｍ
ｉｓｔｒｙ，Ｔｈｉｅｍｅ  Ｓｔｕｔｔｇａｒｔ，Ｎｅｗ  Ｙｏｒｋ，ｖｏｌ  Ｅ２２  
ｓｅｃｔｉｏｎ  ３．２：４４３及びＢｅｎｏｉｔｏｎ，Ｎ．Ｌ．，Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ
ｏｆ  Ｐｅｐｔｉｄｅ  Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ，Ｔａｙｌｏｒ  ａｎｄ  Ｆｒａｎｃｉｓ
，ＮＹ，２００６により記載される。好ましい活性エステルとしては、ｐ−ニトロフェニ
ルエステル（ＰＮＰ）、Ｎ−ヒドロキシスクシンイミドエステル（ＮＨＳ）、及びテトラ
フルオロフェニルエステル（ＴＦＰ）が挙げられる。アシルハロゲン化物は、当業者に既
知の多くの方法、例えば、カルボン酸の塩化チオニル又は塩化オキサリルとの反応によっ
て、調製され得る。Ｆｉｅｓｅｒ，Ｌ．Ｆ．ａｎｄ  Ｆｉｅｓｅｒ，Ｍ．Ｒｅａｇｅｎｔ
ｓ  ｆｏｒ  Ｏｒｇａｎｉｃ  Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ，Ｊｏｈｎ  Ｗｉｌｅｙ  ａｎｄ  Ｓ
ｏｎｓ，ＮＹ，１９６７及びその中の参考文献を参照されたい。これらは、Ｗｕ  ｅｔ．
ａｌ，Ｏｒｇａｎｉｃ  Ｌｅｔｔｅｒｓ，２００４，６（２４）：４４０７により記載さ
れる活性二官能性スペーサにも使用され得るｐ−ニトロフェニルエステル（ＰＮＰ）等の
他の活性エステルに変換され得る。Ｎ−ヒドロキシスクシンイミド（ＮＨＳ）エステルは
、非プロトン性溶媒中のトリエチルアミン又はジイソプロピルエチルアミン等の有機塩基
の存在下で、国際公開第ＷＯ２０１２０１２５９５号の実施例３５に記載される無水条件
下で、Ｎ，Ｎ−ジスクシンイミジルカーボネート（ＣＡＳ  ７４１２４−７９−１）と化
合物のカルボン酸との反応により、あるいは、無水条件下で、Ｎ−ヒドロキシスクシンイ
ミド及びジシクロヘキシルカルボジイミド（ＤＣＣ）又は他の脱水剤を使用することによ
り調製され得る。テトラフルオロフェニルエステル（ＴＦＰ）は、非プロトン性溶媒中の
トリエチルアミン又はジイソプロピルエチルアミン等の有機塩基の存在下で、Ｗｉｌｂｕ
ｒ，ｅｔ．ａｌ，Ｂｉｏｃｏｎｊｕｇａｔｅ  Ｃｈｅｍ．，２００４，１５（１）：２０
３により報告される無水条件下で、カルボン酸と２，３，５，６−テトラフルオロフェニ
ルトリフルオロアセテートとの反応により調製され得る。当業者により、とりわけ、表１
に示されるスペーサが、既知の方法を使用して得ることができ、通常の反応条件の最適化
のために使用するアミノを担持するハプテンに結合させることできることを認識されよう
。これらのスペーサは、担体におけるチオール基へのハプテンの結合を可能にする。
【００９６】
【表１】
2019073513.tif 000024
【００９７】
カップリング剤の存在下で、ハプテン上のアミンとスペーサ構築ブロック上のカルボン
酸官能基の直接カップリングはまた、結合モードとして使用され得る。好ましい試薬は、
ペプチド合成において一般的に使用されるものである。ペプチドカップリング試薬として
は、Ｏ−（ベンゾトリアゾール−１−イル）−Ｎ，Ｎ，Ｎ’，Ｎ’−テトラメチルウロニ
ウムテトラフルオロボレート（ＴＢＴＵ，ＣＡＳ  ＃１２５７００−６７−６）、Ｐｒｕ
ｈｓ，Ｓ．，Ｏｒｇ．Ｐｒｏｃｅｓｓ．Ｒｅｓ．偏差２００６，１０：４４１を参照され
たい）、カルボジイミド脱水剤を含むＮ−ヒドロキシベンゾトリアゾール（ＨＯＢＴ，Ｃ
ＡＳ  ＃２５９２−９５−２）、例えば、Ｎ−Ｎ−ジシクロヘキシルカルボジイミド（Ｄ
ＣＣ）、ジイソプロピルカルボジイミド（ＤＩＣ）、又は１−エチル−３（３−ジメチル
アミノプロピル）カルボジイミド塩酸塩（ＥＤＣ）、（Ｋｏｎｉｇ  Ｗ．，Ｇｅｉｇｅｒ
，Ｒ．Ｃｈｅｍ．Ｂｅｒ．，１９７０，１０３（３）：７８８を参照されたい）、３−（
ジエトキシホスホリルオキシ）−１，２，３−ベンゾトラジン−４（３Ｈ）−オン（ＤＥ
ＰＢＴ，ＣＡＳ＃１６５５３４−４３−０）、（Ｌｉｕ，Ｈ．ｅｔ．ａｌ．，Ｃｈｉｎｅ
ｓｅ  Ｃｈｅｍｉｃａｌ  Ｌｅｔｔｅｒｓ，２００２，１３（７）：６０１を参照された
い）、ビス（２−オキソ−３−オキサゾリジニル）ホスホニッククロリド（ＢＯＰ−Ｃｌ
，ＣＡＳ＃  ６８６４１−４９−６）、（Ｄｉａｇｏ−Ｍｅｓｅｇｕｅｒ，Ｊ  ｅｔ．ａ
ｌ．Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ，１９８０，７：５４７〜５１、及びＢｅｎｏｉｔｏｎ  ｉｎ  
Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ  ｏｆ  Ｐｅｐｔｉｄｅ  Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ，ＣＲＣ  Ｐｒｅｓｓ
，Ｂｏｃａ  Ｒａｔｏｎ，ＦＬ，２００５，Ｃｈａｐｔｅｒ  ２により詳述されるもの、
Ａｄｖａｎｃｅｄ  Ａｕｔｏｍａｔｅｄ  Ｐｅｐｔｉｄｅ  Ｐｒｏｔｅｉｎ  Ｔｅｃｈｎ
ｏｌｏｇｉｅｓ（ａａｐｐｔｅｃ），６３０９  Ｓｈｅｐａｒｄｓｖｉｌｌｅ  Ｒｄ．，
Ｌｏｕｉｓｖｉｌｌｅ  ＫＹ  ４０２２８，ｐｈ  ８８８  ６９２  ９１１１により提供
される技術告示、ｗｗｗ．ａａｐｐｔｅｃ．ｃｏｍ、及びその中の参考文献を参照された
い）等が挙げられるが、これらに限定されない。これらの方法は、スペーサにハプテンを
結合する安定したアミド連結を形成する。既知の方法を使用して得ることができ、上に記
載及び言及される方法を利用する通常の反応条件の最適化のために使用するアミノを担持
するハプテンに結合させることできるスペーサの例を、表２に示すが、表２中のものに限
定されない。これらのスペーサは、担体におけるチオール基へのハプテンの結合を可能に
する。
【００９８】
【表２】
2019073513.tif 000025
【００９９】
スペーサはまた、段階的な様式で、ハプテンへの適切な化学基の逐次結合により構成さ
れ得、担体に結合することができる官能性連結基を形成する工程が含まれる。一般的な反
応スキーム下、例示的な例を参照されたい。
【０１００】
更に、ハプテンが求核基、例えば、スペーサの結合点になるであろうチオール基、アミ
ノ基、又はヒドロキシル基を有する場合、スペーサはまた、チオール基、アミン基、又は
ヒドロキシル基のアルキル化により構成され得る。置換反応を行うことができる部分で適
切に置換される任意のアルキル基、例えば、ハロゲン化アルキル、又はｐ−トルエンスル
ホネート等のスルホン酸エステルは、スペーサを結合させるために使用され得る。アルキ
ル化反応の多くの例は、当業者には知られており、特定の例は、一般の化学文献において
見出され、通常の実験を通して最適化され得る。多くの参考文献によるアルキル化反応の
考察は、Ｃｈａｐｔｅｒ  １０  ｏｆ  Ｍａｒｃｈ’ｓ  Ａｄｖａｎｃｅｄ  Ｏｒｇａｎ
ｉｃ  Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ，Ｓｍｉｔｈ，Ｍ．Ｂ．，ａｎｄ  Ｍａｒｃｈ，Ｊ．，Ｊｏｈ
ｎ  Ｗｉｌｅｙ  ＆  ｓｏｎｓ，Ｉｎｃ．ＮＹ，２００１において見出され得る。他の連
結はまた、求核部分、例えば、ハプテン上のアミンと、尿素を形成するためのイソシアネ
ートとの反応、又はチオ尿素連結を形成するためのイソチオシアネートとの反応を使用さ
れ得る、Ｌｉ，Ｚ．，ｅｔ．ａｌ．，Ｐｈｏｓｐｈｏｒｕｓ，Ｓｕｌｆｕｒ  ａｎｄ  Ｓ
ｉｌｉｃｏｎ  ａｎｄ  ｔｈｅ  Ｒｅｌａｔｅｄ  Ｅｌｅｍｅｎｔｓ，２００３，１７８
（２）：２９３〜２９７を参照されたい。スペーサを、ヒドロキシル基を担持するハプテ
ンに結合させて、イソシアネート基との反応により、カルバメート又はウレタン連結を形
成し得る。スペーサは、ある末端上でイソシアネート官能性基と、担体と反応させること
ができる官能性連結基と特異的に活性化され得る（Ａｎｎｕｎｚｉａｔｏ，Ｍ．Ｅ．，Ｐ
ａｔｅｌ，Ｕ．Ｓ．，Ｒａｎａｄｅ，Ｍ．ａｎｄ  Ｐａｌｕｍｂｏ，Ｐ．Ｓ．，Ｂｉｏｃ
ｏｎｊｕｇａｔｅ  Ｃｈｅｍ．，１９９３，４：２１２〜２１８を参照されたい）。
【０１０１】
カルボン酸基を担持するハプテンについては、ハプテンへのスペーサ部分の結合モード
には、ハロゲン化アルキル若しくは活性エステルとしてカルボン酸基の活性化が含まれ、
この例を表３に示し、この調製は、上述されており、続いて、アミド、ヒドラジド、ジア
シルヒドラジン、若しくはエステル連結を形成するために、スペーサ部分上でのアミノ（
−ＮＨ2−）、ヒドラジノ（−ＮＨ−ＮＨ2−）、ヒドラジド（−Ｃ（Ｏ）−ＮＨ−ＮＨ2
−）、又はヒドロキシル基（−ＯＨ）との反応、あるいはスペーサ部分上での又は上述さ
れるペプチドカップリング試薬及び／若しくはカルボジイミド脱水剤により担体上での直
接的な、アミノ基とのカルボン酸基の直接カップリングが含まれ、これらの例を表４及び
５に示す。活性化エステルの形成及びペプチドカップリング剤の使用のために上に言及さ
れる参考文献に見出される手順は、スペーサ構築ブロックへのカルボンサンを担持するハ
プテン、及び通常の反応条件の最適化のために使用する利用可能なアミノ基とのタンパク
質担体の結合のために使用され得る。
【０１０２】
【表３】
2019073513.tif 000026
【０１０３】
【表４】
2019073513.tif 000027
【０１０４】
【表５】
2019073513.tif 000028
【０１０５】
他の求電子基は、スペーサ、例えば、ハロゲン化スルホニル
【０１０６】
【化２３】
2019073513.tif 000029
又は、求電子リン基、例えば、
【０１０７】
【化２４】
2019073513.tif 000030
【０１０８】
（Ｍａｌａｃｈｏｗｓｋｉ，Ｗｉｌｌｉａｍ  Ｐ．，Ｃｏｗａｒｄ，Ｊａｍｅｓ  Ｋ．
，Ｊｏｕｒｎａｌ  ｏｆ  Ｏｒｇａｎｉｃ  Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ，１９９４，５９（２５
）：７６１６を参照されたい）、
又は
【０１０９】
【化２５】
2019073513.tif 000031
である、Ｒcは、アルキル、シクロアルキル、アリール、置換アリール、アラルキルで
ある、スペーサに結合させるために、ハプテン上に存在し得る。
【０１１０】
Ａｌｉｏｕａｎｅ，Ｌ．，ｅｔ．ａｌ，Ｔｅｔｒａｈｅｄｒｏｎ  Ｌｅｔｔｅｒｓ，２
０１１，５２（２８）：８６８１を参照されたい。
【０１１１】
アルデヒド基又はケトン基を担持するハプテンは、スペーサ上でのヒドラジド基Ｈ2Ｎ
−ＮＨ−Ｃ（Ｏ）−との反応を含むが、これに限定されない方法を使用して、スペーサに
結合されて、アシルヒドラゾンを形成し得る。Ｃｈａｍｏｗ，Ｓ．Ｍ．，Ｋｏｇａｎ，Ｔ
．Ｐ．，Ｐｅｅｒｓ，Ｄ．Ｈ．，Ｈａｓｔｉｎｇｓ，Ｒ．Ｃ．，Ｂｙｒｎ，Ｒ．Ａ．ａｎ
ｄ  Ａｓｋｅｎａｓｚｉ，Ａ．，Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．，１９９２，２６７（２２）
：１５９１６を参照されたい。担体上でのチオール基への結合を可能にする二官能性ヒド
ラジドスペーサ基の例を表６に示す。
【０１１２】
【表６】
2019073513.tif 000032
【０１１３】
ハプテンはまた、担体と反応し得るチオール基を含有し得るが、但し、この担体は、チ
オールと反応し得る基を提供するために修飾されるものとする。担体基は、担体上のアミ
ノ基と、Ｎ−スクシンイミジルマレイミドアセテート（ＡＭＡＳ，ＣＡＳ＃５５７５０−
６１−３）、スクシンイミジルヨードアセテート（ＣＡＳ＃  １５１１９９−８１−４）
との反応による、マレイミド官能性基を含有する基の結合、又は担体へのハプテンの結合
をもたらす反応を経ることがある基を導入するための、表１に示される二官能性スペーサ
基のうちのいずれかの結合が含まれるが、これに限定されない方法により修飾され得る。
【０１１４】
担体との結合を形成することができる官能性連結基は、安定した連結を形成することが
できる任意の基であり得、担体上で多くの異なる基と反応し得る。官能性連結基は、好ま
しくは、担体上でアミノ基、カルボン酸基、若しくはチオール基、又はその誘導体と反応
し得る。官能性連結基の非限定的な例は、カルボン酸基、ハロゲン化アシル、活性エステ
ル（上で定義されるように）、イソシアネート、イソチオシアネート、ハロゲン化アルキ
ル、アミノ基、チオール基、マレイミド基、アクリル酸基（Ｈ2Ｃ＝ＣＨ−Ｃ（Ｏ）−）
、又はビニルスルホン基Ｈ2Ｃ＝ＣＨ−ＳＯ2−）である。Ｐａｒｋ，Ｊ．Ｗ．，ｅｔ．ａ
ｌ．，Ｂｉｏｃｏｎｊｕｇａｔｅ  Ｃｈｅｍ．，２０１２，２３（３）：３５０を参照さ
れたい。官能性連結基は、ハプテンと段階的に反応し得る特異的に活性化したスペーサ構
築ブロックの一部として存在し得、得られたハプテン誘導体は、担体と反応し得る。ある
いは、ハプテンは、その後の反応により官能性連結基に形質転換され得る前駆体基を担持
するスペーサで誘導体化され得る。スペーサ上の官能性連結基がアミン又はカルボン酸基
であるとき、担体上のカルボン酸基又はアミンとのカップリング反応は、これらの試薬に
ついて上で言及される参考文献の手順に従って、ペプチドカップリング試薬の使用を通し
て直接行われ得る。
【０１１５】
特定のジスルフィド基、例えば、ピリジルジスルフィドは、スペーサ上で官能性連結基
として使用され得、担体上でチオール基との交換を行い、混合ジスルフィド結合を形成し
得る。Ｇｈｅｔｉｅ，Ｖ．，ｅｔ  ａｌ．，Ｂｉｏｃｏｎｊｕｇａｔｅ  Ｃｈｅｍ．，１
９９０，１：２４〜３１を参照されたい。これらのスペーサは、アミンを担持するハプテ
ンと、ピリジルジスルフィド基を担持するスペーサに結合される活性エステルとの反応に
より結合され得、これらの例には、表７に示されるものが含まれるが、これらに限定され
ない。
【０１１６】
【表７】
2019073513.tif 000033
【０１１７】
ほとんどの場合、担体は、タンパク質であり、アミン反応性官能性連結基による反応に
より直接、又はＮ−スクシンイミジルＳ−アセチルチオアセテート（ＳＡＴＡ，ＣＡＳ  
７６９３１−９３−６）若しくはその類似体を含むチオール含有基で誘導体化した後、ヒ
ドロキシルアミンによりアセテート基を開裂し、ハプテン上での官能性連結基との反応の
ためにチオール基を曝露することにより、リシン残基のε−アミノ基が、結合のために使
用され得る。チオール基はまた、２−メルカプトエチルアミン（Ｂｉｌａｈ，Ｍ．，ｅｔ
．ａｌ．，Ｂｉｏｅｌｅｃｔｒｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ，２０１０，８０（１）：４９を参
照されたい）、ホスフィン試薬、（Ｋｉｒｌｅｙ，Ｔ．Ｌ．，Ａｎａｌｙｔｉｃａｌ  Ｂ
ｉｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ，１９８９，１８０（２）：２３１を参照されたい）、又はジチ
オエリトリトール（ＤＴＴ，ＣＡＳ３４８３−１２−３）（Ｃｌｅｌａｎｄ，Ｗ．，Ｂｉ
ｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ，１９６４，３：４８０〜４８２を参照されたい）が含まれるが、
これらに限定されない、穏やかな還元試薬を用いて、タンパク質担体内でのジスルフィド
結合の還元により担体に導入され得る。
【０１１８】
一般的な反応スキーム
本発明による抗体を産生するために有用な化合物は、以下に記載される一般的な合成方
法に従って合成することができる。式（ｉ）の化合物は、当業者に既知の方法により調製
することができる。以下の反応スキームは、本発明の代表的な実施例であるということの
みを意味し、本発明の限定であることは全く意味しない。
【０１１９】
クエチアピンの誘導体は、幾つかの方法によって調製され得る。スキーム１に示される
出発化合物（Ｒ1及びＲ2＝Ｈ）である、クエチアピンにおける第一ヒドロキシル基は、例
えば、無水コハク酸、及びＦｉｅｄｌｅｒ，Ｈ．，ｅｔ．ａｌ．，Ｌａｎｇｍｕｉｒ，１
９９４，１０：３９５９によって記載される方法を使用して、アシル化され得る。得られ
た酸を、本開示内の他の箇所に記載されるように更に官能化してもよく、又は後続の実施
例に示される方法を含む任意の数の上述の方法を使用して、担体に直接結合してもよい。
【０１２０】
【化２６】
2019073513.tif 000034
【０１２１】
クエチアピンの第一ヒドロキシル基はまた、米国特許公開第２０１０００６９３５６号
の手順に従って、スキーム２に示されるように、硫酸水素テトラブチルアンモニウム及び
水酸化ナトリウム水溶液の存在下で４−ブロモメチルペンタノエート等の、アルキルハロ
ゲン化物又はスルホン酸エステルを使用してアルキル化して、エーテルを形成して、酸を
得てもよく、この酸を上述のように使用してもよい。
【０１２２】
【化２７】
2019073513.tif 000035
【０１２３】
式Ｉの化合物（式中、Ｒ2は、ＣＨ2ＮＨＣ（Ｏ）（ＣＨ2）mＣＯ2Ｈである）は、スキ
ーム３に従って作製され得る。実施例１に記載されるように調製された、２−（２−（２
−（アミノメチル）−４−（ジベンゾ［ｂ，ｆ］［１，４］チアゼピン−１１−イル）ピ
ペラジン−１−イル）エトキシ）エタノールの反応は、無水コハク酸又は無水グルタル酸
等の環状無水化合物と共に、ピリジン等の溶媒中、室温から６０℃の範囲の温度で約４８
時間進行する。当業者であれば、同じ化学反応を使用して、式Ｉの化合物（式中、Ｒ1は
、ＣＨ2ＮＨＣ（Ｏ）（ＣＨ2）mＣＯ2Ｈである）を作製し得ることを認識するであろう。
【０１２４】
【化２８】
2019073513.tif 000036
【０１２５】
式Ｉの化合物（式中、Ｒ2は、
【０１２６】
【化２９】
2019073513.tif 000037
である）は、スキーム４に従って作製され得る。スキーム１に記載されるように調製さ
れた、式Ｉの化合物（式中、Ｒ2は、ＣＨ2ＮＨＣ（Ｏ）（ＣＨ2）mＣＯ2Ｈである）を、
Ｎ−ｔ−ブトキシカルボニルピペラジン、シアノホスホン酸ジエチル、及びジイソプロピ
ルエチルアミン等の塩基で処理する。反応は、ジクロロメタン等の溶媒中、室温で約２時
間行う。ピペラジニル基の脱保護を、スキーム４に記載されるように無水トリフルオロ酢
酸により遂行し、続いて無水コハク酸又は無水マレイン酸等の適切な無水物との反応を、
ジイソプロピルエチルアミン等の好適な塩基の存在下で行う。当業者であれば、同じ化学
反応を使用して、式Ｉの化合物（式中、Ｒ1は、
【０１２７】
【化３０】
2019073513.tif 000038
である）を作製し得ることを認識するであろう。
【０１２８】
【化３１】
2019073513.tif 000039
【０１２９】
式Ｉの化合物（式中、Ｒ1は、
【０１３０】
【化３２】
2019073513.tif 000040
である）は、スキーム５に従って作製され得る。マレイミドは、当該技術分野において
既知の任意の方法により導入され得る。２，５−ジオキソピロリジン−１−イル２−（２
，５−ジオキソ−２，５−ジヒドロ−１Ｈ−ピロール−１−イル）酢酸塩（式中、ｍは、
１である）等のマレイミド官能基を、ＤＭＦ又はＣＨ2Ｃｌ2等の溶媒、及びトリブチルア
ミン又はトリエチルアミン等の塩基中で使用してもよい。別の方法として、スキーム４に
記載される脱保護されたピペラジニル基は、スキーム５に記載されるようにマレイミド官
能基により産生して、式Ｉの化合物（式中、Ｒ1は、
【０１３１】
【化３３】
2019073513.tif 000041
である）を得てもよい。当業者であれば、同じ化学反応を使用して、式Ｉの化合物（式
中、Ｒ2は、
【０１３２】
【化３４】
2019073513.tif 000042
である）を作製し得ることを認識するであろう。
【０１３３】
【化３５】
2019073513.tif 000043
【０１３４】
マレイミド官能化ハプテン（式中、Ｒ1又はＲ2は、
【０１３５】
【化３６】
2019073513.tif 000044
である）は、スキーム６に示される方法に従ってタンパク質に複合化され得る。Ｎ−ス
クシンイミジルＳ−アセチルチオアセテート（ＳＡＴＡ）によるε−窒素のアシル化、続
いて、ヒドロキシルアミンによるＳ−アセチル基の加水分解によるタンパク質リシン残基
の活性化により、求核スルフヒドリル基を生成する。スルフヒドリルで活性化したタンパ
ク質とマレイミドで誘導体化されたハプテン（一般スキーム３に記載されるように調製さ
れた）とのコンジュゲーションは、マイケル付加反応により発生する。好適なタンパク質
は、当業者には既知であり、キーホールリンペットヘモシアニン、ウシサイログロブリン
、及びオボアルブミンが含まれる。同じ手法を使用して、タンパク質をマレイミド官能化
ハプテン（式中、Ｒ1又はＲ2は、
【０１３６】
【化３７】
2019073513.tif 000045
である）に複合化してもよい。
【０１３７】
【化３８】
2019073513.tif 000046
【０１３８】
カルボン酸官能化ハプテン（式中、Ｒ1又はＲ2は、ＣＨ2ＮＨＣ（Ｏ）（ＣＨ2）mＣＯ2
Ｈである）を、スキーム７に示される方法に従ってタンパク質に複合化してもよい。ＤＭ
Ｆ等の溶媒中、Ｎ−ヒドロキシスクシンイミドと、ジシクロヘキシルカルボジイミド等の
好適なカップリング剤と、トリブチルアミン等の塩基との、約２０℃の温度で約１８時間
の反応により、ヒドロキシピロリジン−２，５−ジオン離脱基でカルボン酸を活性化する
。活性化したリンカー及びハプテンを次いで、ｐＨ  ７．５のリン酸緩衝液等の溶媒中、
約２０℃で約２．５時間、タンパク質に複合化してもよい。好適なタンパク質は、当業者
には既知であり、キーホールリンペットヘモシアニン、ウシサイログロブリン、及びオボ
アルブミンが含まれる。同じ手法を使用して、タンパク質をカルボン酸官能化ハプテン（
式中、Ｒ1又はＲ2は、
【０１３９】
【化３９】
2019073513.tif 000047
である）に複合化してもよい。
【０１４０】
抗体
本発明は、クエチアピンに結合し、（ｉ）式Ｉの化合物と免疫原性担体との複合体に応
答して生成されるか、又は（ｉｉ）（ｉ）の抗体により結合されるエピトープと同じであ
るエピトープに対して競合する、単離抗体又はその結合断片に関する。用語「抗体」は、
抗原又はその部分に結合することができる（本発明に従って、抗精神病薬又はその代謝産
物に結合することができる）特異的タンパク質を指す。抗体は、注射により、宿主、例え
ば、動物又はヒトに導入され得る免疫原に応答して産生される。一般的用語「抗体」は、
ポリクローナル抗体、モノクローナル抗体、及び抗体断片が含まれる。
【０１４１】
「抗体」又は「抗原結合抗体断片」は、結合について無傷抗体と競合する、無傷抗体、
又はその断片を指す。一般的に言えば、抗体又は抗原結合抗体断片は、解離定数が、１μ
Ｍ以下、好ましくは、１００ｎＭ以下、最も好ましくは、１０ｎＭ以下であるときに、抗
原と特異的に結合すると言われている。結合は、当業者に知られている方法により測定す
ることができ、一例は、ＢＩＡｃｏｒｅ（商標）計器の使用である。
【０１４２】
抗体断片は、無傷抗体の一部、好ましくは、無傷抗体の抗原結合又は可変領域を含む。
結合断片には、Ｆａｂ、Ｆａｂ’、Ｆ（ａｂ’）2、及びＦｖ断片、ダイアボディ、線状
抗体、一本鎖抗体分子、並びに抗体断片から形成される多重特異性抗体が含まれる。「二
重特異性」又は「二官能性」抗体以外の抗体は、その結合部位のそれぞれが同一であるこ
とが理解される。
【０１４３】
本明細書で使用される場合、「エピトープ」は、免疫グロブリン又はＴ細胞受容体への
特異的結合が可能な任意のタンパク質決定基を含む。エピトープの決定基は通常、アミノ
酸又は糖側鎖等の分子の化学的に活性な表面基からなり、かつ、通常、特定の三次元構造
特性並びに特定の電荷特性を有する。２つの抗体は、当業者によく知られている方法のう
ちのいずれか（例えば、上で言及されるＢＩＡｃｏｒｅ（商標）方法）により、ある抗体
が競合結合アッセイにおいて第２の抗体と競合することが示される場合、「同じエピトー
プを結合する」と言われる。ハプテン（クエチアピン又は他の抗精神病薬等）に関して、
抗体は、ハプテンを免疫原性担体に複合化することにより非抗原性ハプテン分子に対して
生成され得る。次いで、ハプテンにより定義される「エピトープ」として認識する抗体が
生成される。
【０１４４】
抗体の文脈において使用される場合、「単離された」とは、任意の自然状態から「人工
により」変化させる、即ち、それが自然に生じる場合、変化させるか、又はその元の環境
から除去される、又はその両方であることを意味する。例えば、その自然状態で生きてい
る動物に自然に存在する自然発生抗体は、「単離され」ないが、その用語が本明細書に使
用されるように、その自然状態の共存する材料から切り離された同じ抗体が「単離される
」。抗体は、自然発生の組成物ではない、イムノアッセイ試薬等の組成物に生じ得、それ
が本明細書に使用されるように、その用語の意味内で単離された抗体をその中に維持する
。
【０１４５】
「交差反応性」とは、抗体と、その抗体を誘発させるために使用されなかった抗原との
反応を指す。
【０１４６】
好ましくは、本発明の抗体は、薬物及び任意の所望の薬理学的に活性な代謝産物と結合
するであろう。本発明の化合物への免疫原性担体の結合の位置を変化させることにより、
代謝産物による選択性及び交差反応性は、抗体に改変され得る。クエチアピンについて、
Ｎ−デスアルキルクエチアピン（ノルクエチアピン（norquetiapine））、クエチアピン
（quatiapine）スルホキシド、Ｏ−デスアルキルクエチアピン、又は７−ヒドロキシクエ
チアピン等のクエチアピン代謝産物との交差反応性は、望ましいこともあれば、望ましく
ないこともある。これらの薬物及び／又は代謝産物の複数のものを検出する抗体が生成さ
れ得るか、それぞれを別々に検出する抗体が生成され得る（そのため、「特異的な結合」
特性を定義する）。抗体は、１つ以上の化合物の結合が等モル又は実質的に等モルである
とき、１つ以上の化合物を特異的に結合する。
【０１４７】
そのような抗体を産生する方法は、宿主に本明細書に記載の複合体を接種することを含
む。好適な宿主としては、マウス、ラット、ハムスター、モルモット、ウサギ、ニワトリ
、ロバ、ウマ、サル、チンパンジー、オランウータン、ゴリラ、ヒト、及び成熟免疫応答
を呈し得る任意の種が挙げられるが、これらに限定されない。免疫化手順は、当技術分野
で十分に確立されており、多くの専門書及び刊行物、例えば、Ｄａｖｉｄ  Ｗｉｌｄによ
り編集された「Ｔｈｅ  Ｉｍｍｕｎｏａｓｓａｙ  Ｈａｎｄｂｏｏｋ」，２ｎｄ  Ｅｄｉ
ｔｉｏｎ（Ｎａｔｕｒｅ  Ｐｕｂｌｉｓｈｉｎｇ  Ｇｒｏｕｐ，２０００）及びそこに引
用されている参考文献に記載されている。
【０１４８】
好ましくは、本発明の特徴を具現化した免疫原は、アジュバントと組み合わせて、宿主
対象、例えば、動物又はヒト対象に投与される。好適なアジュバントとしては、フロイン
トアジュバント、粉末水酸化アルミニウム（ミョウバン）、百日咳菌と組み合わせた水酸
化アルミニウム、及びモノホスホリルリピドＡ−合成トレハロースジコリノミコレート（
ＭＰＬ−ＴＤＭ）が挙げられるが、これらに限定されない。
【０１４９】
典型的には、免疫原又は免疫原とアジュバントとの組み合わせは、１回若しくは複数回
の皮下注射又は腹腔内注射により、哺乳動物宿主に注入される。好ましくは、免疫化計画
は、少なくとも１週間かけて、より好ましくは、２週間以上かけて行う。このようにして
産生されたポリクローナル抗体は、当技術分野でよく知られている方法を利用して単離及
び精製することができる。
【０１５０】
モノクローナル抗体は、Ｋｏｈｌｅｒ及びＭｉｌｓｔｅｉｎの十分に確立されたハイブ
リドーマ法、例えば、Ｎａｔｕｒｅ  ２５６：４９５〜４９７（１９７５）により産生す
ることができる。ハイブリドーマ法は、典型的には、宿主又は宿主に由来するリンパ球を
免疫化することと、リンパ球を分泌するか又はリンパ球を分泌する能力を有するモノクロ
ーナル抗体を採取することと、不死化細胞にリンパ球を融合させることと、所望のモノク
ローナル抗体を分泌する細胞の選択することと、を含む。
【０１５１】
宿主を免疫化することにより、免疫原に特異的な抗体を産生するか、又は産生し得るリ
ンパ球を惹起することができる。あるいは、リンパ球をインビトロで免疫化することもで
きる。ヒト細胞が望ましい場合、末梢血リンパ球を使用することができるが、他の哺乳動
物源に由来する脾臓細胞又はリンパ球が好ましい。
【０１５２】
リンパ球を不死化細胞系に融合させて、ハイブリドーマ細胞を形成することができ、こ
のプロセスは、融合剤、例えば、ポリエチレングリコールの使用により容易に行うことが
できる。例示として、トランスフォーメーションにより不死化された突然変異型の齧歯動
物、ウシ、又はヒトの骨髄腫細胞を使用することができる。非融合不死化細胞に対して実
質的に純粋なハイブリドーマ細胞集団が好ましい。したがって、融合後、例えば、酵素ヒ
ポキサンチングアニンホスホリボシルトランスフェラーゼ（ＨＧＰＲＴ）が欠如している
突然変異骨髄腫細胞を使用することにより、非融合不死化細胞の増殖又は生存を阻害する
好適な培地中で、細胞を増殖させることができる。その場合、ヒポキサンチン、アミノプ
テリン、及びチミジンを、培地（ＨＡＴ培地）に添加して、ハイブリドーマの増殖を可能
にした状態で、ＨＧＰＲＴ欠損細胞の増殖を防止することができる。
【０１５３】
好ましくは、不死化細胞は、効率的に融合し、ＨＡＴのような培地中における選択によ
り混合集団から単離することが可能であり、融合後、安定かつ高レベルの抗体発現を支持
する。好ましい不死化細胞系には、Ａｍｅｒｉｃａｎ  Ｔｙｐｅ  Ｃｕｌｔｕｒｅ  Ｃｏ
ｌｌｅｃｔｉｏｎ，Ｍａｎａｓｓａｓ，ＶＡから入手可能な骨髄腫細胞系が含まれる。
【０１５４】
ハイブリドーマ細胞は典型的には細胞外に抗体を分泌するため、抗精神病薬に特異的な
モノクローナル抗体の存在について培養培地をアッセイすることができる。免疫沈降アッ
セイ又はインビトロ結合アッセイ、例えば、ラジオイムノアッセイ（ＲＩＡ）又は酵素結
合免疫吸着測定法（ＥＬＩＳＡ）を使用して、モノクローナル抗体の結合特異性を測定す
ることができる。
【０１５５】
モノクローナル抗体を分泌するハイブリドーマ細胞は、限界希釈手順により単一クロー
ンとして単離し、継代培養することができる。好適な培養培地としては、ダルベッコ変法
イーグル培地、ＲＰＭＩ−１６４０、及び無ポリペプチド培地、低ポリペプチド培地、又
は無血清培地、例えば、Ｂｉｏｗｈｉｔｔａｋｅｒ，Ｗａｌｋｅｒｓｖｉｌｌｅ，ＭＤか
ら入手可能なＵｌｔｒａ  ＤＯＭＡ  ＰＦ若しくはＨＬ−１が挙げられるが、これらに限
定されない。あるいは、ハイブリドーマ細胞を腹水としてインビボで増殖させることもで
きる。
【０１５６】
モノクローナル抗体は、ポリペプチドＡ−ＳＥＰＨＡＲＯＳＥ、ヒドロキシルアパタイ
トクロマトグラフィー、ゲル電気泳動、透析、硫酸アンモニウム沈澱、及びアフィニティ
クロマトグラフィーが含まれるが、これらに限定されない、従来の免疫グロブリン（Ｉｇ
）精製手順により、培養培地又は腹水から単離及び／又は精製することができる。
【０１５７】
モノクローナル抗体はまた、米国特許第４，１６６，４５２号に記載されるような組み
換え法により産生することもできる。モノクローナル抗体をコードするＤＮＡは、従来の
手順を使用して、例えば、マウス重鎖及び軽鎖抗体遺伝子に特異的に結合するオリゴヌク
レオチドプローブを使用して、好ましくは、抗精神病薬に特異的な抗体を分泌するモノク
ローナル抗体ハイブリドーマ細胞系から単離されたＤＮＡをプローブするために、単離及
び配列決定することができる。
【０１５８】
抗精神病薬に対して特異的な結合部位を含む抗体断片もまた、生成され得る。そのよう
な断片としては、抗体分子のペプシン消化により産生され得るＦ（ａｂ’）2断片、及び
Ｆ（ａｂ’）2断片のジスルフィド架橋を還元することにより産生され得るＦａｂ断片が
挙げられるが、これらに限定されない。あるいは、Ｆａｂ発現ライブラリーを構成して、
所望の特異性を有するモノクローナルＦａｂ断片の迅速かつ容易な特定を可能にし得る（
Ｈｕｓｅ  ｅｔ  ａｌ．，Ｓｃｉｅｎｃｅ  ２５６：１２７０〜１２８１（１９８９））
。Ｆａｂ、Ｆｖ、及びＳｃＦｖ抗体断片はすべて、大腸菌に発現し、それから分泌し得、
多量のこれらの断片の産生を可能にする。あるいは、Ｆａｂ’−ＳＨ断片は、大腸菌から
直接回収され、化学的に結合して、Ｆ（ａｂ’）2断片を形成し得る（Ｃａｒｔｅｒ  ｅ
ｔ  ａｌ．，ＢｉｏＴｅｃｈｎｏｌｏｇｙ  １０：１６３〜１６７（１９９２））。抗体
断片の産生のための他の技術は、当業者には既知である。また、単鎖Ｆｖ断片（ｓｃＦｖ
）も構想される（米国特許第５，７６１，８９４号及び同第５，５８７，４５８号を参照
されたい）。Ｆｖ及びｓＦｖ断片は、定常領域を欠いている無傷混合部位を有する唯一の
種であり、そのため、非特異的結合の減少を示す可能性がある。例えば、抗体断片はまた
、例えば、米国特許第５，６４２，８７０号に記載されるような「直鎖抗体」であり得る
。そのような直鎖抗体断片は、単一特異的であっても、二重特異的であってもよい。
【０１５９】
アッセイキット及び装置
上述の抗体を含むアッセイキット（試薬キットとも称される）もまた、提供され得る。
代表的な試薬キットは、抗精神病薬、クエチアピンに結合する抗体、標識部分に結合され
る抗精神病薬の類似体若しくはその誘導体を含む複合体を含み得、任意に、既知の量の抗
精神病薬若しくは関連標準を含む１つ以上の較正器も含み得る。
【０１６０】
語句「アッセイキット」は、アッセイを行う際に使用される材料及び試薬のアセンブリ
を指す。試薬は、それらの交差反応性及び安定性に応じて、同一又は別箇の容器にて、液
体又は凍結乾燥形態で、パッケージ化された組み合わせで提供することができる。キット
で提供される試薬の量及び割合を、特定の用途に対する最適な結果をもたらすように選択
することができる。本発明の特徴を具現化するアッセイキットは、クエチアピンに結合す
る抗体を含む。キットは、クエチアピンの競合結合パートナー、並びに較正及び対照材料
を更に含み得る。
【０１６１】
語句「較正及び対照材料」は、既知の量の検体を含有する任意の標準又は対照材料を指
す。検体及び対応する較正材料を含有する疑いがある試料は、同様の条件下でアッセイさ
れる。検体の濃度は、未知の被検物について得られた結果と、標準について得られた結果
とを比較することによって計算される。これは、一般には、較正曲線を作成することによ
って行われる。
【０１６２】
本発明の特徴を具現化する抗体は、キット、容器、パック、又はディスペンサー内に、
それらの利用についての取扱説明書と共に含まれ得る。抗体がキット内に供給される場合
、イムノアッセイの異なる成分は、別箇の容器内にパッケージ化され得るか、又は使用前
に混合され得る。成分のそのようなパッケージ化は、活性成分の機能を実質的に低下させ
ることなく、長期間保存を可能にし得る。更に、試薬は、不活性環境下で、例えば、窒素
ガス、アルゴンガス等の正圧下でパッケージ化することができ、これは、空気及び／又は
水分に敏感な試薬に特に好ましい。
【０１６３】
本発明の特徴を具現化するキット内に含まれる試薬は、異なる成分の活性が実質的に保
持されるが、成分自体が容器の材料により実質的に吸着されたり改変されたりしないよう
に、すべての方式の容器内に供給することができる。好適な容器としては、アンプル、ボ
トル、試験管、バイアル、フラスコ、シリンジ、エンベロープ（例えば、ホイルでライニ
ングされた）等が挙げられるが、これらに限定されない。容器は、ガラス、有機ポリマー
（例えばポリカーボネート、ポリスチレン、ポリエチレン等）、セラミック、金属（例え
ばアルミニウム）、金属合金（例えばスチール）、コルク等が挙げられるが、これらに限
定されない任意の好適な材料で構成され得る。加えて、容器は、セプタムにより提供され
得るような、例えば、針によりアクセスするための１つ以上の滅菌アクセスポートを備え
得る。セプタムの好ましい材料には、ゴム及びＤｕＰｏｎｔ（Ｗｉｌｍｉｎｇｔｏｎ，Ｄ
Ｅ）により商品名ＴＥＦＬＯＮとして販売されているタイプのポリテトラフルオロエチレ
ンが挙げられる。加えて、容器は、成分を混合できるように取り外すことができるパーテ
ィション又は膜により仕切られた２つ以上のコンパートメントを備え得る。
【０１６４】
本発明の特徴を具現化する試薬キットはまた、取扱説明書と共に供給され得る。取扱説
明書は、例えば、紙面上等に印刷されたもの及び／又は電子可読媒体として供給されたも
のであってもよい。あるいは、取扱説明書は、例えば、キットの製造業者又は販売業者に
より指定されたサイトインターネットウェブサイトにユーザーを案内することにより、及
び／又は電子メールを介して、提供され得る。
【０１６５】
抗体はまた、アッセイ装置の一部として提供され得る。そのようなアッセイ装置は、側
方流動アッセイ装置を含む。一般的な種類の使い捨て側方流動アッセイ装置は、液体試料
を受ける区画又は領域、複合体区画、及び反応区画を含む。これらのアッセイ装置は一般
に、側方流動試験ストリップとして既知である。これらは、毛管流を支持し得る、流体流
の経路を画定する多孔質材料、例えば、ニトロセルロースを利用する。実施例には、米国
特許第５，５５９，０４１号、同第５，７１４，３８９号、同第５，１２０，６４３号、
及び同第６，２２８，６６０号に示されるものが挙げられ、これらは本明細書において参
照によりその全体が組み込まれる。
【０１６６】
アッセイ装置の別の種類は、毛管流を含むべく突起部を有する非多孔質アッセイ装置で
ある。このようなアッセイ装置の例としては、ＰＣＴ国際公開第２００３／１０３８３５
号、同第２００５／０８９０８２号、同第２００５／１１８１３９号、及び同第２００６
／１３７７８５号に開示される、開いた側方流動装置が挙げられ、これらは全て、本明細
書において参照によりその全体が組み込まれる。
【０１６７】
非多孔質アッセイ装置において、アッセイ装置は、一般的に、少なくとも１つの試料添
加区画、少なくとも１つの複合体区画、少なくとも１つの反応区画、及び少なくとも１つ
の吸上区画を有する。区画は、試料添加区画から吸上区画まで試料が流れる流路を形成す
る。任意で装置に堆積される（例えば、コーティングにより）検体に結合することができ
る、反応区画内の抗体等の捕捉要素、及び複合体区画内で装置に堆積される検体の濃度の
判定を可能にする反応に関与することができる標識された複合体材料も含み、この場合、
標識された複合体材料は反応区画内の検出のための標識を有する。試料が複合体区画を通
って流れる際に、複合体材料は溶解して、反応区画へと下流に流れる溶解した標識された
複合体材料及び試料の複合体プルームを形成する。複合体プルームが反応区画へと流れる
と、複合体材料が、例えば複合体材料と検体の複合体を介して（「サンドイッチ」アッセ
イにおいて）、又は直接的に（「競合」アッセイにおいて）捕捉要素により捕捉される。
拘束されない溶解した複合体材料は、反応区画を通過して少なくとも１つの吸上区画へと
流される。そのような装置は、流路において、突起部又はマイクロ柱を含み得る。
【０１６８】
米国特許出願公開第２００６０２８９７８７Ａ１号、及び同第２００７０２３１８８３
Ａ１号、並びに米国特許第７，４１６，７００号、及び同第６，１３９，８００号（これ
らは全て、本明細書において参照によりその全体が組み込まれる）は、反応区画内におい
て結合した複合体材料を検出することができる。一般的な標識としては、蛍光染料を励起
し、蛍光染料を感知することができる検出器を組み込む器具により検出され得る、蛍光染
料が挙げられる。
【０１６９】
イムノアッセイ
このようにして産生された抗体は、抗精神病薬を認識／結合するためにイムノアッセイ
に使用され、それにより、患者試料中の薬物の存在及び／又は量を検出することができる
。好ましくは、アッセイ形式は、競合的イムノアッセイ形式である。そのようなアッセイ
形式及び他のアッセイは、Ｈａｍｐｔｏｎ  ｅｔ  ａｌ．（Ｓｅｒｏｌｏｇｉｃａｌ  Ｍ
ｅｔｈｏｄｓ，Ａ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ  Ｍａｎｕａｌ，ＡＰＳ  Ｐｒｅｓｓ，Ｓｔ．
Ｐａｕｌ，ＭＮ  １９９０）及びＭａｄｄｏｘ  ｅｔ  ａｌ．（Ｊ．Ｅｘｐ．中央値１５
８：１２１１１，１９８３）における他の箇所において記載されている。
【０１７０】
用語「検体」は、任意の物質又は物質の群を指し、これらの存在又は量は判定されるべ
きである。代表的な抗精神病薬検体としては、リスペリドン、パリペリドン、オランザピ
ン、アリピプラゾール、及びクエチアピンが挙げられるが、これらに限定されない。
【０１７１】
用語「競合結合パートナー」は、抗体への結合親和性に関して検体に似た振る舞いをす
る、競合的イムノアッセイに使用され得るような物質、又は物質の群を指す。代表的な競
合結合パートナーとしては、抗精神病薬誘導体等が挙げられるが、これに限定されない。
【０１７２】
検体と共に使用される場合、用語「検出すること」は、任意の定量的、半定量的、又は
定質的方法、並びに一般に、検体、とりわけ、抗精神病薬を判定するためのすべての他の
方法を指す。例えば、試料中の抗精神病薬の存在又は非存在を単に検出する方法は本発明
の範囲内にあり、また、試料中の抗精神病薬の量又は濃度についてのデータを提供する方
法もある。用語「検出すること」、「判定すること」、及び「特定すること」等は、本明
細書で同意語として使用され、すべてが本発明の範囲内にある。
【０１７３】
本発明の好ましい実施形態は、競合的イムノアッセイであり、抗精神病薬に結合する抗
体、又は薬物若しくはその競合結合パートナーは、それぞれ、固体支持体（側方流動アッ
セイ装置内の反応区画等）、及び標識された薬物若しくはその競合結合パートナー、又は
標識された抗体に結合し、宿主由来の試料は、固体支持体の上を通過し、固体支持体に結
合した検出された標識の量は、試料中のある量の薬物に相関させることができる。
【０１７４】
検体、例えば、抗精神病薬を含有する疑いがある任意の試料は、本発明の好ましい実施
形態の方法に従って分析することができる。試料は、必要に応じて前処理することができ
、アッセイを妨げない任意の好都合な培地中に調製することができる。好ましくは、試料
は、宿主由来の体液、最も好ましくは、血漿又は血清等の水性培地を含む。
【０１７５】
抗体を使用するイムノアッセイのすべての様式が本発明の好ましい実施形態に従って使
用するために企図され、これには、抗体が固相に結合されるアッセイ、及び抗体が液体培
地中にあるアッセイが含まれる。本発明の特徴を具現化する抗体を使用する検体を検出す
るために使用することができるイムノアッセイの方法としては、試料中の標識された検体
（検体類似体）及び検体が、抗体について競合する競合的（試薬を限定した）アッセイ、
及び抗体が検出される一部位イムノメトリックアッセイ等が挙げられるが、これらに限定
されない。
【０１７６】
本発明を以下の実施例により更に説明する。本実施例は、特定の実施形態を参照するこ
とにより本発明を単に例示するためだけに提供される。本発明のある特定の態様を示すが
、これらの例示は、開示される本発明の範囲を限定せず、又は制限しない。
【０１７７】
詳述されることを除いて、当業者によく知られ、常用である標準技術を使用するすべて
の実施例が実施される。以下の実施例の常用の分子生物学技術は、Ｓａｍｂｒｏｏｋ  ｅ
ｔ  ａｌ．，Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｃｌｏｎｉｎｇ：Ａ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ  Ｍａｎ
ｕａｌ，２ｎｄ  Ｅｄ．，Ｃｏｌｄ  Ｓｐｒｉｎｇ  Ｈａｂｏｒ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ
Ｐｒｅｓｓ，Ｃｏｌｄ  Ｓｐｒｉｎｇ  Ｈａｒｂｏｒ，ＮＹ（１９８９）等の標準実験
室的なマニュアルに記載されるように、実施することができる。
【０１７８】
同時係属出願の表題「Ｈａｐｔｅｎｓ  ｏｆ  Ａｒｉｐｉｐｒａｚｏｌｅ」（代理人整
理番号ＰＲＤ３２６５ＵＳＰＳＰ、２０１２年８月２１日に出願された米国仮特許出願第
６１／６９１，４５０号）、「Ｈａｐｔｅｎｓ  ｏｆ  Ｏｌａｎｚａｐｉｎｅ」（代理人
整理番号ＰＲＤ３２６６ＵＳＰＳＰ、２０１２年８月２１日に出願された米国仮特許出願
第６１／６９１，４５４号）、「Ｈａｐｔｅｎｓ  ｏｆ  Ｐａｌｉｐｅｒｉｄｏｎｅ」（
代理人整理番号ＰＲＤ３２６７ＵＳＰＳＰ、２０１２年８月２１日に出願された米国仮特
許出願第６１／６９１，４５９号）、「Ｈａｐｔｅｎｓ  ｏｆ  Ｑｕｅｔｉａｐｉｎｅ」
（代理人整理番号ＰＲＤ３２６８ＵＳＰＳＰ、２０１２年８月２１日に出願された米国仮
特許出願第６１／６９１，４６２号）、「Ｈａｐｔｅｎｓ  ｏｆ  Ｒｉｓｐｅｒｉｄｏｎ
ｅ  ａｎｄ  Ｐａｌｉｐｅｒｉｄｏｎｅ」（代理人整理番号ＰＲＤ３２６９ＵＳＰＳＰ、
２０１２年８月２１日に出願された米国仮特許出願第６１／６９１，４６９号）、「Ａｎ
ｔｉｂｏｄｉｅｓ  ｔｏ  Ａｒｉｐｉｐｒａｚｏｌｅ  Ｈａｐｔｅｎｓ  ａｎｄ  Ｕｓｅ
Ｔｈｅｒｅｏｆ」（代理人整理番号ＣＤＳ５１２８ＵＳＰＳＰ、２０１２年８月２１日
に出願された米国仮特許出願第６１／６９１，５４４号）、「Ａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ  ｔ
ｏ  Ｏｌａｎｚａｐｉｎｅ  Ｈａｐｔｅｎｓ  ａｎｄ  Ｕｓｅ  Ｔｈｅｒｅｏｆ」（代理
人整理番号ＣＤＳ５１３２ＵＳＰＳＰ、２０１２年８月２１日に出願された米国仮特許出
願第６１／６９１，５７２号）、「Ａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ  ｔｏＰａｌｉｐｅｒｉｄｏｎ
ｅ  Ｈａｐｔｅｎｓ  ａｎｄ  Ｕｓｅ  Ｔｈｅｒｅｏｆ」（代理人整理番号ＣＤＳ５１２
６ＵＳＰＳＰ、２０１２年８月２１日に出願された米国仮特許出願第６１／６９１，６３
４号）、「Ａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ  ｔｏ  Ｒｉｓｐｅｒｉｄｏｎｅ  Ｈａｐｔｅｎｓ  ａ
ｎｄ  Ｕｓｅ  Ｔｈｅｒｅｏｆ」（代理人整理番号ＣＤＳ５１３０ＵＳＰＳＰ、２０１２
年８月２１日に出願された米国仮特許出願第６１／６９１，６１５号）、「Ａｎｔｉｂｏ
ｄｉｅｓ  ｔｏ  Ａｒｉｐｉｐｒａｚｏｌｅ  ａｎｄ  Ｕｓｅ  Ｔｈｅｒｅｏｆ」（代理
人整理番号ＣＤＳ５１２９ＵＳＰＳＰ、２０１２年８月２１日に出願された米国仮特許出
願第６１／６９１，５２２号）、「Ａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ  ｔｏ  Ｏｌａｎｚａｐｉｎｅ
ａｎｄ  Ｕｓｅ  Ｔｈｅｒｅｏｆ」（代理人整理番号ＣＤＳ５１３３ＵＳＰＳＰ、２０
１２年８月２１日に出願された米国仮特許出願第６１／６９１，６４５号）、「Ａｎｔｉ
ｂｏｄｉｅｓ  ｔｏ  Ｐａｌｉｐｅｒｉｄｏｎｅ  ａｎｄ  Ｕｓｅ  Ｔｈｅｒｅｏｆ」（
代理人整理番号ＣＤＳ５１２７ＵＳＰＳＰ、２０１２年８月２１日に出願された米国仮特
許出願第６１／６９１，６９２号）、「Ａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ  ｔｏ  Ｑｕｅｔｉａｐｉ
ｎｅ  ａｎｄ  Ｕｓｅ  Ｔｈｅｒｅｏｆ」（代理人整理番号ＣＤＳ５１３５ＵＳＰＳＰ、
２０１２年８月２１日に出願された米国仮特許出願第６１／６９１，６５９号）、「Ａｎ
ｔｉｂｏｄｉｅｓ  ｔｏ  Ｒｉｓｐｅｒｉｄｏｎｅ  ａｎｄ  Ｕｓｅ  Ｔｈｅｒｅｏｆ」
（代理人整理番号ＣＤＳ５１３１ＵＳＰＳＰ、２０１２年８月２１日に出願された米国仮
特許出願第６１／６９１，６７５号）、及び「Ａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ  ｔｏ  Ｒｉｓｐｅ
ｒｉｄｏｎｅ  ａｎｄ  Ｕｓｅ  Ｔｈｅｒｅｏｆ」（代理人整理番号ＣＤＳ５１４５ＵＳ
ＰＳＰ、２０１３年３月１５日に出願された米国仮特許出願第６１／７９０，８８０号）
はすべて、参照することによりそれらの全体が本明細書に組み込まれる。
【実施例】
【０１７９】
（実施例１）
２−（２−（２−（アミノメチル）−４−（ジベンゾ［ｂ，ｆ］［１，４］チアゼピン
−１１−イル）ピペラジン−１−イル）エトキシ）エタノール
【０１８０】
工程Ａ
ピペラジン−２−カルボニトリル
【０１８１】
【化４０】
2019073513.tif 000048
【０１８２】
３０℃のテトラヒドロフラン（３００ｍＬ）及びエチレンジアミン（１０８．２ｇ）の
撹拌した溶液を、２−クロロアクリロニトリル（１０５．０ｇ）の液滴で２時間の期間に
わたって処理し、３０℃で更に６時間撹拌した。反応混合物を２０℃まで冷却し、沈殿物
が形成された。反応を濾過し、３５％塩酸を添加することによって濾液のｐＨを４に調整
した。得られた沈殿物を濾過によって収集した。組み合わせた沈殿物を２０％塩酸溶液中
に溶解させ、次いでＴＨＦ溶液中に注いで表題化合物を沈殿させ、それを減圧下により乾
燥させ、更に精製することなく次の反応において使用した。1Ｈ  ＮＭＲ：（Ｄ2Ｏ、４０
０ＭＨｚ）：δ（ｐｐｍ）５．００〜４．９７（ｍ、１Ｈ）、３．７９（ｄ、Ｊ＝４．８
Ｈｚ、２Ｈ）、３．６２〜３．４４（ｍ、４Ｈ）。
【０１８３】
工程Ｂ
ｔｅｒｔ−ブチル３−シアノピペラジン−１−カルボン酸塩
【０１８４】
【化４１】
2019073513.tif 000049
【０１８５】
前の工程に記載されるように調製された、化合物ピペラジン−２−カルボニトリルの溶
液（９０．６ｇ、０．４９２ｍｏｌ）に、トリエチルアミン（２０６ｍＬ、１．４７６ｍ
ｏｌ）及びＢｏｃ2Ｏ（１１７ｇ、０．５４２ｍｏｌ）を添加した。反応混合物を室温で
一晩撹拌し、次いで濃縮した。残渣をシリカゲルクロマトグラフィーによって精製して、
表題化合物を得た。
【０１８６】
1Ｈ  ＮＭＲ：（ＣＤＣｌ3、４００ＭＨｚ）：δ（ｐｐｍ）４．０６〜３．９１（ｍ、
３Ｈ）、３．２８〜２．８３（ｍ、４Ｈ）、１．４７（ｓ、９Ｈ）。
【０１８７】
工程Ｃ
ｔｅｒｔ−ブチル３−シアノ−４−（２−（２−ヒドロキシエトキシ）エチル）ピペラ
ジン−１−カルボン酸塩
【０１８８】
【化４２】
2019073513.tif 000050
【０１８９】
前の工程に記載されるように調製された、ｔｅｒｔ−ブチル３−シアノピペラジン−１
−カルボン酸塩（１０ｇ、０．０４７ｍｏｌ）及び２−（２−ヒドロキシエトキシ）アセ
トアルデヒド（１４．８ｇ）のジクロロメタン中溶液（Ｂｏｄｉｎ，Ａ．，Ｃｏｎｔａｃ
ｔ  Ｄｅｒｍａｔｉｔｉｓ，２００１，４４：２０７を参照されたい）をギ酸（１２．７
ｇ）で処理し、反応混合物を室温で一晩撹拌した。シアノ水素化ホウ素ナトリウム（７．
２ｇ、０．１１８ｍｏｌ）を部分量に分けて添加した。反応混合物を室温で３時間撹拌し
、続いて水の添加及びジクロロメタンでの抽出を行った。有機層をブラインで洗浄し、硫
酸ナトリウムにより乾燥させ、濾過し、濃縮した。粗生成物をカラムクロマトグラフィー
によって精製して、生成物を得た。
【０１９０】
1Ｈ  ＮＭＲ：（ＣＤＣｌ3、４００ＭＨｚ）：δ（ｐｐｍ）４．１５（ｓ、１Ｈ）、３
．６９〜３．６３（ｍ、４Ｈ）、３．５８（ｄ、Ｊ＝４．４  Ｈｚ、２Ｈ）、３．４７〜
３．４４（ｍ、４Ｈ）、２．６１（ｄ、Ｊ＝５．２Ｈｚ、２Ｈ）、２．５１〜２．４８（
ｍ、４Ｈ）、１．４３（ｓ、９Ｈ）。
【０１９１】
工程Ｄ
ｔｅｒｔ−ブチル３−（アミノメチル）−４−（２−（２−ヒドロキシエトキシ）エチ
ル）ピペラジン−１−カルボン酸塩
【０１９２】
【化４３】
2019073513.tif 000051
【０１９３】
前の工程に記載されるように調製された、ｔｅｒｔ−ブチル３−シアノ−４−（２−（
２−ヒドロキシエトキシ）エチル）ピペラジン−１−カルボン酸塩のメタノール（２０ｍ
Ｌ）中溶液（９．９ｇ、３３．１ｍｍｏｌ）に、ラネーニッケル（１５ｇ）を添加した。
反応溶液を室温で一晩、窒素雰囲気下（３４４．７ｋＰａ（５０ｐｓｉ））で撹拌した。
混合物を濾過及び濃縮して、生成物を得、それを更に精製することなく次の工程で使用し
た。
【０１９４】
ＥＳＩ−ＭＳ（Ｍ＋１）：３０４  Ｃ14Ｈ29Ｎ3Ｏ4についての計算値３０３。
【０１９５】
工程Ｅ
ｔｅｒｔ−ブチル４−（２−（２−ヒドロキシエトキシ）エチル）−３−（（２，２，
２−トリフルオロアセトアミド）メチル）ピペラジン−１−カルボン酸塩
【０１９６】
【化４４】
2019073513.tif 000052
【０１９７】
前の工程に記載されるように調製された、ｔｅｒｔ−ブチル３−（アミノメチル）−４
−（２−（２−ヒドロキシエトキシ）エチル）ピペラジン−１−カルボン酸塩（８．８ｇ
）のジクロロメタン（１００ｍＬ）中溶液に、トリエチルアミン（８．８ｇ、８７．０ｍ
ｍｏｌ）及び無水トリフルオロ酢酸（６．１ｇ、２９．０ｍｍｏｌ）を添加した。反応混
合物を室温で１２時間撹拌し、ジクロロメタンで希釈し、水で洗浄した。有機層をブライ
ンで洗浄し、硫酸ナトリウムにより乾燥させ、濾過し、濃縮して、粗生成物を得、それを
カラムクロマトグラフィーによって精製して、表題化合物を得た。
【０１９８】
ＥＳＩ−ＭＳ（Ｍ＋１）：４００  Ｃ16Ｈ28Ｆ3Ｎ3Ｏ5についての計算値３９９。
【０１９９】
工程Ｆ
２，２，２−トリフルオロ−Ｎ−（（１−（２−（２−ヒドロキシエトキシ）エチル）
ピペラジン−２−イル）メチル）アセトアミド
【０２００】
【化４５】
2019073513.tif 000053
【０２０１】
前の工程に記載されるように調製された、ｔｅｒｔ−ブチル４−（２−（２−ヒドロキ
シエトキシ）エチル）−３−（（２，２，２−トリフルオロアセトアミド）メチル）ピペ
ラジン−１−カルボン酸塩（８．６ｇ、粗）のメタノール塩化水素（２０ｍＬ）中溶液を
室温で１時間撹拌し、続いて濃縮を行って、表題化合物を得、それを更に精製することな
く使用した。
【０２０２】
ＥＳＩ−ＭＳ（Ｍ＋１）：３００  Ｃ11Ｈ20Ｆ3Ｎ3Ｏ3についての計算値２９９。
【０２０３】
工程Ｇ
２−（（２−ニトロフェニル）チオ）安息香酸
【０２０４】
【化４６】
2019073513.tif 000054
【０２０５】
室温の２−メルカプト−安息香酸（３０ｇ、０．１９５ｍｏｌ）のイソプロパノール（
５００ｍＬ）中溶液に、１−フルオロ−２−ニトロ−ベンゼン（３０．２ｇ、０．２１４
ｍｏｌ）、水（１００ｍＬ）、及び水酸化カリウム（３１．１ｇ、０．５５５ｍｏｌ）を
添加した。反応混合物を室温で一晩撹拌し、水で反応停止処理し、酢酸エチルで希釈した
。水相を酢酸エチル（３×４００ｍＬ）で抽出し、組み合わせた有機抽出物を飽和塩化ナ
トリウム水溶液（５００ｍＬ）で洗浄し、硫酸マグネシウムにより乾燥させ、濾過し、濃
縮した。粗残渣をシリカゲル上のフラッシュカラムクロマトグラフィーによって精製して
、表題化合物を得た。ＥＳＩ−ＭＳ（Ｍ＋１）：２７６  Ｃ13Ｈ9ＮＯ4Ｓについての計算
値２７５。1Ｈ  ＮＭＲ：（ＣＤＣｌ3、４００ＭＨｚ）：δ（ｐｐｍ）８．１２〜８．０
７（ｍ、２Ｈ）、７．５４〜７．４３（ｍ、２Ｈ）、７．４２〜７．３９（ｍ、２Ｈ）、
７．３５〜７．３１（ｍ、１Ｈ）、７．１２〜７．０９（ｍ、１Ｈ）。
【０２０６】
工程Ｈ
２−（（２−アミノフェニル）チオ）安息香酸
【０２０７】
【化４７】
2019073513.tif 000055
【０２０８】
前の工程に記載されるように調製された、２−（（２−ニトロフェニル）チオ）安息香
酸（４３．３ｇ、０．１５７ｍｏｌ）の酢酸エチル（５００ｍＬ）中溶液に、Ｐｄ／Ｃ（
８ｇ）を添加した。反応溶液を室温で一晩、水素ガス雰囲気下で撹拌した。混合物を濾過
及び濃縮して、表題化合物を得た。ＥＳＩ−ＭＳ（Ｍ＋１）：２４６  Ｃ13Ｈ11ＮＯ2Ｓ
についての計算値２４５。1Ｈ  ＮＭＲ：（ＣＤＣｌ3、４００ＭＨｚ）：δ（ｐｐｍ）８
．２０〜８．１７（ｍ、１Ｈ）、７．５１〜７．４８（ｍ、１Ｈ）、７．３６〜７．３０
（ｍ、２Ｈ）、７．２１〜７．１７（ｍ、１Ｈ）、６．８８〜６．８０（ｍ、３Ｈ）。
【０２０９】
工程Ｉ
ジベンゾ［ｂ，ｆ］［１，４］チアゼピン−１１（１０Ｈ）−オン
【０２１０】
【化４８】
2019073513.tif 000056
【０２１１】
前の工程に記載されるように調製された、２−（（２−アミノフェニル）チオ）安息香
酸（３０ｇ、０．１２２ｍｏｌ）のジクロロメタン（３００ｍＬ）中溶液に、ＥＤＣＩ（
３５．２ｇ、０．１８３ｍｏｌ）、トリエチルアミン（５１ｍＬ、０．３６６ｍｏｌ）、
及びＨＯＢＴ（２４．７ｇ、０．１８３ｍｏｌ）を添加した。反応混合物を室温で１２時
間撹拌し、１Ｍ  ＨＣＩ水溶液、飽和炭酸水素ナトリウム水溶液、飽和塩化ナトリウム水
溶液で洗浄し、ＭｇＳＯ4により乾燥させた。溶液を濾過し、濃縮し、カラムクロマトグ
ラフィーによって精製して、表題化合物を得た。ＥＳＩ−ＭＳ（Ｍ＋１）：２２８  Ｃ13
Ｈ9ＮＯＳについての計算値２２７。1Ｈ  ＮＭＲ：（ＣＤＣｌ3、４００ＭＨｚ）：δ（
ｐｐｍ）７．７０〜７．６７（ｍ、１Ｈ）、７．５８〜７．５２（ｍ、２Ｈ）、７．５０
〜７．４２（ｍ、２Ｈ）、７．３９〜７．３５（ｍ、１Ｈ）、７．２４〜７．２２（ｍ、
１Ｈ）、７．１７〜７．１３（ｍ、１Ｈ）。
【０２１２】
工程Ｊ
１１−クロロジベンゾ［ｂ，ｆ］［１，４］チアゼピン
【０２１３】
【化４９】
2019073513.tif 000057
【０２１４】
前の工程に記載されるように調製された、ジベンゾ［ｂ，ｆ］［１，４］チアゼピン−
１１（１０Ｈ）−オン（１４．６ｇ、６４ｍｍｏｌ）のオキシ塩化リン（２０ｍＬ）中溶
液を、２時間加熱還流させた。混合物を濃縮して、粗生成物を得、それを更に精製するこ
となく直接使用した。ＥＳＩ−ＭＳ（Ｍ＋１）：２４６  Ｃ13Ｈ8ＣｌＮＳについての計
算値２４５。
【０２１５】
工程Ｋ
Ｎ−（（４−（ジベンゾ［ｂ，ｆ］［１，４］チアゼピン−１１−イル）−１−（２−
（２−ヒドロキシエトキシ）エチル）ピペラジン−２−イル）メチル）−２，２，２−ト
リフルオロアセトアミド
【０２１６】
【化５０】
2019073513.tif 000058
【０２１７】
前の工程に記載されるように調製された、１１−クロロジベンゾ［ｂ，ｆ］［１，４］
チアゼピン（２ｇ、粗）のジオキサン（２０ｍＬ）中溶液に、Ｐｄ2（ｄｂａ）3（３２７
ｍｇ、０．３５７ｍｍｏｌ）、ＢＩＮＡＰ（２２５ｍｇ、０．３５７ｍｍｏｌ）、トリエ
チルアミン（６ｍＬ、４２．９ｍｍｏｌ）、及び工程Ｆに記載されるように調整された、
２，２，２−トリフルオロ−Ｎ−（（１−（２−（２−ヒドロキシエトキシ）エチル）ピ
ペラジン−２−イル）メチル）アセトアミド（２．４ｇ、粗）を添加した。得られた混合
物を窒素雰囲気下で一晩加熱還流させ、ＣＥＬＩＴＥ（商標）を通して濾過し、濃縮した
。残渣をシリカゲルクロマトグラフィーによって精製して、表題化合物を得た。ＥＳＩ−
ＭＳ（Ｍ＋１）：５０９  Ｃ24Ｈ27Ｆ3Ｎ4Ｏ3Ｓについての計算値５０８。
【０２１８】
工程Ｌ
２−（２−（２−（アミノメチル）−４−（ジベンゾ［ｂ，ｆ］［１，４］チアゼピン
−１１−イル）ピペラジン−１−イル）エトキシ）エタノール
【０２１９】
【化５１】
2019073513.tif 000059
【０２２０】
前の工程に記載されるように調製された、Ｎ−（（４−（ジベンゾ［ｂ，ｆ］［１，４
］チアゼピン−１１−イル）−１−（２−（２−ヒドロキシエトキシ）エチル）ピペラジ
ン−２−イル）メチル）−２，２，２−トリフルオロアセトアミド（２．０ｇ）及び炭酸
カリウム水溶液（５％）（１５ｍＬ）のメタノール（２０ｍＬ）中混合物を室温で１８時
間撹拌し、酢酸エチルで抽出した。有機層を飽和塩化ナトリウム水溶液で洗浄し、硫酸ナ
トリウムにより乾燥させ、濾過し、蒸発させて、粗生成物を得、それをカラムクロマトグ
ラフィーによって精製し、続いて分取ＨＰＬＣを行って、黄色の固体として表題化合物を
得た。ＥＳＩ−ＭＳ（Ｍ＋１）：４１３  Ｃ22Ｈ28Ｎ4Ｏ2Ｓについての計算値４１２。1
Ｈ  ＮＭＲ：（ＣＤＣｌ3、４００ＭＨｚ）：δ（ｐｐｍ）７．５２〜７．５０（ｍ、１
Ｈ）、７．４１〜７．３１（ｍ、４Ｈ）、７．１７〜７．１２（ｍ、１Ｈ）、７．０２〜
７．００（ｍ、１Ｈ）、６．８９〜６．８４（ｍ、１Ｈ）、３．６６〜３．５９（ｍ、５
Ｈ）、３．５４〜３．５１（ｍ、２Ｈ）、３．４９〜３．３８（ｍ、１Ｈ）、３．１９〜
３．１２（ｍ、１Ｈ）、３．０３〜２．８８（ｍ、２Ｈ）、２．７９〜２．５３（ｍ、５
Ｈ）。
【０２２１】
（実施例２）
Ｎ−（（４−（ジベンゾ［ｂ，ｆ］［１，４］チアゼピン−１１−イル）−１−（２−
（２−ヒドロキシエトキシ）エチル）ピペラジン−２−イル）メチル）−２−（２，５−
ジオキソ−２，５−ジヒドロ−１Ｈ−ピロール−１−イル）アセトアミド
【０２２２】
【化５２】
2019073513.tif 000060
【０２２３】
実施例１に記載されるように調製された、２−（２−（２−（アミノメチル）−４−（
ジベンゾ［ｂ，ｆ］［１，４］チアゼピン−１１−イル）ピペラジン−１−イル）エトキ
シ）エタノール（７．８ｍｇ、１９．０μｍｏｌ）の、４１０μＬのＤＭＦ及び８．９μ
Ｌのトリブチルアミン中溶液に、Ｎ−（α−マレイミドアセトキシ）スクシンイミドエス
テル（ＡＭＡＳ、１０ｍｇ／ｍＬ、４．８ｍｇ、１９．０μｍｏｌ）の４８０μＬのＤＭ
Ｆ溶液を添加した。得られた溶液を２０℃で６０分間撹拌し、次いで、チオール活性化タ
ンパク質による抱合反応においてそのまま使用した。
【０２２４】
（実施例３）
２−｛２−［４−（３−アミノメチル−ジベンゾ［ｂ，ｆ］［１，４］チアゼピン−１
１−イル）−ピペラジン−１−イル］−エトキシ｝−エタノール
【０２２５】
【化５３】
2019073513.tif 000061
【０２２６】
工程Ａ
１１−オキソ−１０，１１−ジヒドロジベンゾ［ｂ，ｆ］［１，４］チアゼピン−３−
カルボン酸
【０２２７】
【化５４】
2019073513.tif 000062
【０２２８】
２−アミノ−ベンゼンチオール（１．３４ｍＬ、１２．５ｍｍｏｌ）、２−ブロモ−テ
レフタル酸（１．５４ｇ、６．３ｍｍｏｌ）、亜酸化銅（０．５０ｇ、３．５ｍｍｏｌ）
、キノリン（６．３ｍＬ）、及びピリジン（０．６３ｍＬ）の混合物を１８０℃の油浴中
、窒素下で２０時間加熱し、次いで室温まで冷却した。濃縮塩酸（２０ｍＬ）を、撹拌と
共に、冷水中で冷却しながら緩徐に添加した。得られた沈殿物を濾過し、水で洗浄し、乾
燥させて、粗表題化合物（２ｇ）を得た。ＬＣ−ＭＳ：ｍ／ｚ  ２７０（Ｍ−１）。
【０２２９】
工程Ｂ
１１−クロロ−ジベンゾ［ｂ，ｆ］［１，４］チアゼピン−３−塩化カルボニル
【０２３０】
【化５５】
2019073513.tif 000063
【０２３１】
前の工程に記載されるように調製された、１１−オキソ−１０，１１−ジヒドロジベン
ゾ［ｂ，ｆ］［１，４］チアゼピン−３−カルボン酸（０．４１ｇ）のトルエン（６．５
ｍＬ）中懸濁液に、ＤＭＦ（０．１２５ｍＬ）及び塩化チオニル（６．５ｍＬ）を添加し
た。混合物を８０℃の油浴中、窒素下で一晩加熱した。得られた溶液を濃縮乾固。粗生成
物を次の工程に使用した。
【０２３２】
工程Ｃ
１１−クロロ−ジベンゾ［ｂ，ｆ］［１，４］チアゼピン−３−カルボン酸アミド
【０２３３】
【化５６】
2019073513.tif 000064
【０２３４】
前の工程に記載されるように調製された、１１−クロロ−ジベンゾ［ｂ，ｆ］［１，４
］チアゼピン−３−塩化カルボニル、（約１．５ｍｍｏｌ）のジクロロメタン（１０ｍＬ
）中溶液’を、アンモニアの１，４−ジオキサン溶液（０．５Ｍ、９ｍＬ）により氷浴下
で処理した。得られた懸濁液を室温で１時間撹拌し、この反応物を水（１０ｍＬ）で反応
停止処理した。得られた沈殿物を濾過し、水及びジクロロメタンで洗浄し、乾燥させた。
濾液の有機層を飽和炭酸水素ナトリウム水溶液で洗浄し、追加の灰白色の生成物にまで濃
縮し、それを更に精製することなく次の工程で使用した。ＬＣ−ＭＳ：ｍ／ｚ  ２８９（
Ｍ＋１）。1Ｈ  ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ6、４００ＭＨｚ）：δ（ｐｐｍ）８．１９（ｂｒ
、１Ｈ）、８．００〜７．９６（ｍ、２Ｈ）、７．９０（ｄ、１Ｈ）、７．６４（ｂｒ、
１Ｈ）、７．５６（ｍ、１Ｈ）、７．４７（ｍ、１Ｈ）、７．３１（ｍ、２Ｈ）。
【０２３５】
工程Ｄ
１１−｛４−［２−（２−ヒドロキシ−エトキシ）−エチル］−ピペラジン−１−イル
｝−ジベンゾ［ｂ，ｆ］［１，４］チアゼピン−３−カルボン酸アミド
【０２３６】
【化５７】
2019073513.tif 000065
【０２３７】
前の工程に記載されるように調製された、１１−クロロ−ジベンゾ［ｂ，ｆ］［１，４
］チアゼピン−３−カルボン酸アミド（０．４０ｇ）のＤＭＦ（１．５ｍＬ）及びトルエ
ン（１．５ｍＬ）中溶液に、２−（２−ピペラジン−１−イル−エトキシ）−エタノール
（０．５０ｇ、２．９ｍｍｏｌ）を添加した。溶液を１１０℃の油浴中、窒素下で５時間
加熱し、濃縮し、精製して（シリカゲル、アンモニア溶離剤を含有する２〜５％メタノー
ル−ジクロロメタン）、灰白色の固体として表題化合物を得た。ＬＣ−ＭＳ：ｍ／ｚ  ４
２７（Ｍ＋１）。
【０２３８】
工程Ｅ
２−｛２−［４−（３−アミノメチル−ジベンゾ［ｂ，ｆ］［１，４］チアゼピン−１
１−イル）−ピペラジン−１−イル］−エトキシ｝−エタノール
【０２３９】
【化５８】
2019073513.tif 000066
【０２４０】
前の工程に記載されるように調製された、２−｛２−［４−（３−アミノメチル−ジベ
ンゾ［ｂ，ｆ］［１，４］チアゼピン−１１−イル）−ピペラジン−１−イル］−エトキ
シ｝−エタノール（０．２４ｇ、０．５６ｍｍｏｌ）のＴＨＦ（１５ｍＬ）中溶液に、１
Ｍリチウムアルミニウム水素化物のＴＨＦ溶液（６ｍＬ、６ｍｍｏｌ）を添加した。白色
の懸濁液を７０℃の油浴中、窒素下で２時間加熱した。反応懸濁液を、飽和硫酸ナトリウ
ム水溶液の緩徐な添加により氷浴下で反応停止処理した。溶液相を分離し、固体をＴＨＦ
（５×１０ｍＬ）で抽出した。組み合わせた有機相を濃縮及び精製して（シリカゲル、ア
ンモニア溶離剤を含有する２〜５％メタノール−ジクロロメタン）、灰白色の固体として
表題化合物を得た。ＬＣ−ＭＳ：ｍ／ｚ  ４１３（Ｍ＋１）。1Ｈ  ＮＭＲ（ＣＤＣｌ3、
４００ＭＨｚ）δ（ｐｐｍ）７．４７（ｓ、１Ｈ）、７．３８（ｍ、１Ｈ）、７．２６（
ｍ、２Ｈ、溶媒と重複）、７．１７（ｍ、１Ｈ）、７．０６（ｍ、１Ｈ）、６．８８（ｍ
、１Ｈ）、３．８５（ｓ、２Ｈ）、３．７６〜３．４６（ｍ、１１Ｈ、交換可能な陽子を
含有）、２．６６〜２．５７（ｍ、８Ｈ）。
【０２４１】
（実施例４）
２−（２，５−ジオキソ−２，５−ジヒドロ−１Ｈ−ピロール−１−イル）−Ｎ−（（
１１−（４−（２−（２−ヒドロキシエトキシ）エチル）ピペラジン−１−イル）ジベン
ゾ［ｂ，ｆ］［１，４］チアゼピン−３−イル）メチル）アセトアミド
【０２４２】
【化５９】
2019073513.tif 000067
【０２４３】
実施例３に記載されるように調製された、２−｛２−［４−（３−アミノメチル−ジベ
ンゾ［ｂ，ｆ］［１，４］チアゼピン−１１−イル）−ピペラジン−１−イル］−エトキ
シ｝−エタノール（５．６ｍｇ、１３．６μｍｏｌ）の、２９５μＬのＤＭＦ及び６．４
μＬのトリブチルアミン中溶液に、Ｎ−（α−マレイミドアセトキシ）スクシンイミドエ
ステル（ＡＭＡＳ、１０ｍｇ／ｍＬ、３．４ｍｇ、１３．６μｍｏｌ）の３４０μＬのＤ
ＭＦ溶液を添加した。得られた溶液を２０℃で６０分間撹拌し、次いで、チオール活性化
タンパク質による抱合反応においてそのまま使用した。
【０２４４】
（実施例５）
Ｎ−（（４−（ジベンゾ［ｂ，ｆ］［１，４］チアゼピン−１１−イル）−１−（２−
（２−ヒドロキシエトキシ）エチル）ピペラジン−２−イル）メチル）−２−（２，５−
ジオキソ−２，５−ジヒドロ−１Ｈ−ピロール−１−イル）アセトアミド−ウシサイログ
ロブリン−複合体
【０２４５】
工程Ａ
ＳＡＴＡとのウシサイログロブリン（ＢＴＧ）反応：
ウシサイログロブリン（ＢＴＧ、２０．０ｍｇ、０．０３μｍｏｌ）の、３．０ｍＬの
１００ｍＭリン酸緩衝液（ｐＨ  ７．５）中溶液に、Ｎ−スクシンイミジル−Ｓ−アセチ
ルチオ酢酸塩（ＳＡＴＡ、２５ｍｇ／ｍＬ、６．９ｍｇ、３０．０μｍｏｌ）の２７６．
０μＬのＤＭＦ溶液を添加した。得られた溶液を、ローラーミキサー上で２０℃で１時間
インキュベートした。この反応物をＳｅｐｈａｄｅｘ  Ｇ−２５カラム上で、ｐＨ  ６．
０で１００ｍＭリン酸緩衝液、５ｍＭ  ＥＤＴＡを使用して精製した。６．０ｍＬのＢＴ
Ｇ−ＳＡＴＡ（１８．０ｍｇ、０．０２７μｍｏｌ）に、６００μＬの２．５Ｍヒドロキ
シルアミン、５０ｍＭ  ＥＤＴＡ（ｐＨ  ７．０）を添加した。得られた溶液を、ローラ
ーミキサー上で２０℃で１時間インキュベートした。
【０２４６】
工程Ｂ
前の工程に記載されるように調製された、ＢＴＧ−ＳＨ溶液のアリコート（６．６ｍＬ
、０．０２７μｍｏｌ）に、実施例２において調製された溶液のアリコート（８９８．９
μＬ、１９．０μｍｏｌ）を添加した。得られた混濁混合物を、ローラーミキサー上で２
０℃で３時間インキュベートした。この反応物を、０．４５μｍシリンジフィルター通し
て濾過し、次いでＳｅｐｈａｄｅｘ  Ｇ−２５カラム上で、ｐＨ  ７．４で１００ｍＭリ
ン酸緩衝液、０．１４Ｍ塩化ナトリウムを使用して精製した。
【０２４７】
（実施例６）
２−（２，５−ジオキソ−２，５−ジヒドロ−１Ｈ−ピロール−１−イル）−Ｎ−（（
１１−（４−（２−（２−ヒドロキシエトキシ）エチル）ピペラジン−１−イル）ジベン
ゾ［ｂ，ｆ］［１，４］チアゼピン−３−イル）メチル）アセトアミド−ウシサイログロ
ブリン−複合体
【０２４８】
実施例５、工程Ａに記載されるように調製された、ＢＴＧ−ＳＨ溶液のアリコート（３
．４ｍＬ、０．０１４μｍｏｌ）に、実施例４に記載されるように調製された、６４１．
４μＬの２−（２，５−ジオキソ−２，５−ジヒドロ−１Ｈ−ピロール−１−イル）−Ｎ
−（（１１−（４−（２−（２−ヒドロキシエトキシ）エチル）ピペラジン−１−イル）
ジベンゾ［ｂ，ｆ］［１，４］チアゼピン−３−イル）メチル）アセトアミド（１３．６
μｍｏｌ）を添加した。得られた混濁混合物を、ローラーミキサー上で２０℃で３時間イ
ンキュベートした。この反応物をＳｅｐｈａｄｅｘ  Ｇ−２５カラム上で、ｐＨ  ７．４
で１００ｍＭリン酸緩衝液、０．１４Ｍ塩化ナトリウムを使用して精製した。
【０２４９】
（実施例７）
Ｎ−（（４−（ジベンゾ［ｂ，ｆ］［１，４］チアゼピン−１１−イル）−１−（２−
（２−ヒドロキシエトキシ）エチル）ピペラジン−２−イル）メチル）−２−（２，５−
ジオキソ−２，５−ジヒドロ−１Ｈ−ピロール−１−イル）アセトアミド−キーホールリ
ンペットヘモシニアン−複合体
【０２５０】
工程Ａ
ＳＡＴＡとのキーホールリンペットヘモシニアン（ＫＬＨ）反応
キーホールリンペットヘモシアニン（ＫＬＨ、１５．６ｍｇ、０．１５６μｍｏｌ）の
、１００ｍＭリン酸緩衝液、０．４６Ｍ塩化ナトリウム中の３．１８ｍＬの溶液に、ｐＨ
７．４で、７２．１μＬのＮ−スクシンイミジル−Ｓ−アセチルチオアセテオートのＤ
ＭＦ溶液（ＳＡＴＡ、２５ｍｇ／ｍＬ、１．８ｍｇ、７．８０μｍｏｌ）を添加した。得
られた溶液を、ローラーミキサー上で２０℃で１時間インキュベートした。１００ｍＭリ
ン酸緩衝液、０．４６Ｍ塩化ナトリウム、５ｍＭ  ＥＤＴＡを使用して、この反応物を、
ｐＨ  ６．０で、Ｓｅｐｈａｄｅｘ  Ｇ−２５カラム上で精製した。６．２７ｍＬの得ら
れたＫＬＨ−ＳＡＴＡ溶液（１３．３ｍｇ、０．１３３μｍｏｌ）に、ｐＨ  ７．０で６
２７μＬの２．５Ｍヒドロキシルアミン、５０ｍＭ  ＥＤＴＡを添加した。得られた溶液
を、ローラーミキサー上で２０℃で１時間インキュベートした。この反応物をマレイミド
活性化ハプテンによる抱合反応においてそのまま使用した。
【０２５１】
工程Ｂ
前の工程に記載されるように調製された、ＫＬＨ−ＳＨ溶液のアリコート（６．９ｍＬ
、０．１３３μｍｏｌ）に、実施例２において調製された溶液のアリコート（６２４．３
μＬ、１３．３μｍｏｌ）を添加した。得られた混濁混合物を、ローラーミキサー上で２
０℃で３時間インキュベートした。この反応物を、０．４５μｍシリンジフィルターを通
して濾過し、次いでＳｅｐｈａｄｅｘ  Ｇ−２５カラム上で、ｐＨ  ７．４で１００ｍＭ
リン酸緩衝液、０．４６Ｍ塩化ナトリウムを使用して精製した。
【０２５２】
（実施例８）
２−（２，５−ジオキソ−２，５−ジヒドロ−１Ｈ−ピロール−１−イル）−Ｎ−（（
１１−（４−（２−（２−ヒドロキシエトキシ）エチル）ピペラジン−１−イル）ジベン
ゾ［ｂ，ｆ］［１，４］チアゼピン−３−イル）メチル）アセトアミド−キーホールリン
ペットヘモシニアン−複合体
【０２５３】
実施例７、工程Ａに記載されるように調製された、ＫＬＨ−ＳＨ溶液のアリコート（３
．２ｍＬ、０．０６１μｍｏｌ）に、実施例４において調製された溶液のアリコート（２
８３．０μＬ、６．１０μｍｏｌ）を添加した。得られた混濁混合物を、ローラーミキサ
ー上で２０℃で３時間インキュベートした。この反応物をＳｅｐｈａｄｅｘ  Ｇ−２５カ
ラム上で、ｐＨ  ７．４で１００ｍＭリン酸緩衝液、０．４６Ｍ塩化ナトリウムを使用し
て精製した。
【０２５４】
（実施例９）
クエチアピンに対する競合的イムノアッセイ、並びにアリピプラゾール、オランザピン
、クエチアピン、及びリスペリドン／パリペリドンに対する多重競合的イムノアッセイ
クエチアピン免疫原を用いた一連の免疫付与後、マウスの尾からの採血を、反応性につ
いて、ＥＬＩＳＡを使用して試験した。ハイブリドーマ上清もまた試験し、下の表８及び
９に示されるＥＬＩＳＡデータは、いくつかのハイブリドーマの反応性を示す（融合パー
トナーはＮＳＯ細胞であった）。
【０２５５】
【表８】
2019073513.tif 000068
【０２５６】
【表９】
2019073513.tif 000069
【０２５７】
上清を次いで競合ＥＬＩＳＡによって試験して、シグナルがクエチアピンに特異的であ
ったかどうかを判定した。図１及び２は、代表的なハイブリドーマからの結果を示す。デ
ータは、クエチアピンへの特異的反応性である。
【０２５８】
図３は、側方流動アッセイ装置に使用される競合的イムノアッセイ形式を示し、この装
置において、捕捉抗体であるクエチアピンクローンを、フルオロフォアに複合化されたク
エチアピンからなる検出複合体と共にチップ上に堆積させた。図３に示されるようなこの
競合的形式において、低レベルの検体（クエチアピン）は、高いシグナルを生じるが、一
方で、高レベルの検体（クエチアピン）は、低いシグナルを生じる。試料中のクエチアピ
ンの量は、薬物が存在しない対照試料と比較した蛍光の消失から計算することができる。
クエチアピンサブクローン８９〜３、８９〜１３、及び８９〜５により生成された典型的
な用量反応曲線が、図４に示される。
【０２５９】
図５は、本発明の一実施形態に従う側方流動アッセイ装置のチップ設計を示す。装置は
、試料を受容するための区画又は領域、複合体区画（所望の標識された競合結合パートナ
ー（複数を含む）を含む）、及び反応区画（反応区画内の８つの領域を示す、それぞれの
領域は、別々の所望の抗体を含むことができる）を含む。試料は、複合体区画を通って試
料区画から反応区画に流れる。
【０２６０】
図６〜９は、反応区画２内に堆積された抗体５Ｃ７及び複合体区画内の標識されたアリ
ピプラゾール競合結合パートナーにより生成された、アリピプラゾール陽性対照（アリピ
プラゾールを含有する試料）（図６）、反応区画４内に堆積された抗体４Ｇ９−１及び複
合体区画内の標識されたオランザピン競合結合パートナーにより生成された、オランザピ
ン陽性対照（オランザピンを含有する試料）（図７）、反応区画６内に堆積された抗体１
１及び複合体区画内の標識されたクエチアピン競合結合パートナーにより生成された、ク
エチアピン陽性対照（クエチアピンを含有する試料）（図８）、並びに反応区画８内に堆
積された抗体５−９及び複合体区画内の標識されたリスペリドン競合結合パートナーによ
り生成された、リスペリドン陽性対照（リスペリドンを含有する試料）（図９）について
の典型的な用量反応曲線を示す。複合体区画内の標識された競合結合パートナーは、抗体
への結合に対して、試料中に存在する薬物と競合する。標識の量を検出し、それは試料中
に存在する薬物の量の指標である（シグナルの量は試料中の薬物の量に反比例する−図３
を参照されたい）。
【０２６１】
標識された競合結合パートナーの複合体は反応区画内に堆積した抗体に結合しないこと
を確認するために、陰性対照は、薬物を含有しない試料を使用することにより行われた。
表１０を参照すると、アリピプラゾールを含有しない試料は、試料区画内に堆積され、毛
管現象により複合体区画（この時、標識されたオランザピン、標識されたクエチアピン、
及び標識されたリスペリドンを含有するが、標識されたアリピプラゾールは含有しない）
を通って反応区画に移動する。反応区画は、反応区画２内にアリピプラゾール抗体（５Ｃ
７）を再度含有する。下の表１０は、用量反応がなく、毛管現象により反応区画を通って
移動するオランザピン、クエチアピン、及びリスペリドンの複合体がアリピプラゾール抗
体に結合しないことを確認する、結果を示す。
【０２６２】
【表１０】
2019073513.tif 000070
【０２６３】
表１１を参照すると、オランザピンを含有しない試料は、試料区画内に堆積され、毛管
現象により複合体区画（この時、標識されたアリピプラゾール、標識されたクエチアピン
、及び標識されたリスペリドンを含有するが、標識されたオランザピンは含有しない）を
通って反応区画に移動する。反応区画は、反応区画４内にオランザピン抗体（４Ｇ９−１
）を再度含有する。下の表１１は、用量反応がなく、毛管現象により反応区画を通って移
動するアリピプラゾール、クエチアピン、及びリスペリドンの複合体がオランザピン抗体
に結合しないことを確認する、結果を示す。
【０２６４】
【表１１】
2019073513.tif 000071
【０２６５】
表１２を参照すると、クエチアピンを含有しない試料は、試料区画内に堆積され、毛管
現象により複合体区画（この時、標識されたアリピプラゾール、標識されたオランザピン
、及び標識されたリスペリドンを含有するが、標識されたクエチアピンは含有しない）を
通って反応区画に移動する。反応区画は、反応区画６内にクエチアピン抗体（１１）を再
度含有する。下の表１２は、用量反応がなく、毛管現象により反応区画を通って移動する
アリピプラゾール、オランザピン、及びリスペリドンの複合体がクエチアピン抗体に結合
しないことを確認する、結果を示す。
【０２６６】
【表１２】
2019073513.tif 000072
【０２６７】
表１３を参照すると、リスペリドンを含有しない試料は、試料区画内に堆積され、毛管
現象により複合体区画（この時、標識されたアリピプラゾール、標識されたオランザピン
、及び標識されたクエチアピンを含有するが、標識されたリスペリドンは含有しない）を
通って反応区画に移動する。反応区画は、反応区画８内にリスペリドン抗体（５−９）を
再度含有する。以下の表１３は、用量反応がなく、毛管現象により反応区画を通って移動
するアリピプラゾール、オランザピン、及びクエチアピンの複合体がリスペリドン抗体に
結合しないことを確認する、結果を示す。
【０２６８】
【表１３】
2019073513.tif 000073
【０２６９】
標識された競合結合パートナーの複合体が反応区画内に堆積されたそれらのそれぞれの
抗体にのみ結合することを確認するために、更なる陰性対照を薬物を含有しない試料を使
用することにより行った。表１４を参照すると、アリピプラゾールを含有しない試料は、
試料区画内に堆積され、毛管現象により複合体区画（この時、標識されたアリピプラゾー
ルを含有する）を通って反応区画に移動する。反応区画は、反応区画２内にアリピプラゾ
ール抗体（５Ｃ７）、並びに反応区画４内にオランザピン抗体（４Ｇ９−１）、反応区画
６内にクエチアピン抗体（１１）、及び反応区画８内にリスペリドン抗体（５−９）を再
度含有する。以下の表１４は、アリピプラゾール抗体５Ｃ７（反応区画２内）を除いては
、用量反応がないことを確認する結果を示す。
【０２７０】
【表１４】
2019073513.tif 000074
【０２７１】
表１５を参照すると、オランザピンを含有しない試料は、試料区画内に堆積され、毛管
現象により複合体区画（この時、標識されたオランザピンを含有する）を通って反応区画
に移動する。反応区画は、反応区画２内にアリピプラゾール抗体（５Ｃ７）、並びに反応
区画４内にオランザピン抗体（４Ｇ９−１）、反応区画６内にクエチアピン抗体（１１）
、及び反応区画８内にリスペリドン抗体（５−９）を再度含有する。下の表１５は、オラ
ンザピン抗体４Ｇ９−１（反応区画４内）を除いては、用量反応がないことを確認する結
果を示す。
【０２７２】
【表１５】
2019073513.tif 000075
【０２７３】
表１６を参照すると、クエチアピンを含有しない試料は、試料区画内に堆積され、毛管
現象により複合体区画（この時、標識されたクエチアピンを含有する）を通って反応区画
に移動する。反応区画は、反応区画２内にアリピプラゾール抗体（５Ｃ７）、並びに反応
区画４内にオランザピン抗体（４Ｇ９−１）、反応区画６内にクエチアピン抗体（１１）
、及び反応区画８内にリスペリドン抗体（５−９）を再度含有する。下の表１６は、クエ
チアピン抗体１１（反応区画６内）を除いては、用量反応がないことを確認する結果を示
す。
【０２７４】
【表１６】
2019073513.tif 000076
【０２７５】
表１７を参照すると、リスペリドンを含有しない試料は、試料区画内に堆積され、毛管
現象により複合体区画（この時、標識されたリスペリドンを含有する）を通って反応区画
に移動する。反応区画は、反応区画２内にアリピプラゾール抗体（５Ｃ７）、並びに反応
区画４内にオランザピン抗体（４Ｇ９−１）、反応区画６内にクエチアピン抗体（１１）
、及び反応区画８内にリスペリドン抗体（５−９）を再度含有する。下の表１７は、リス
ペリドン抗体５−９（反応区画８内）を除いては、用量反応がないことを確認する結果を
示す。
【０２７６】
【表１７】
2019073513.tif 000077
【０２７７】
上に示される結果は、標識された競合結合パートナーの複合体が反応区画内のそれらの
それぞれの抗体にのみ結合することを確認する。
【０２７８】
図１０〜１３は、特定の抗体反応区画内の典型的な用量反応曲線、及び他の複合体の存
在下でのそれぞれの特定のアッセイについての、低／高濃度の用量反応の証拠を示す。図
１０において、アリピプラゾールを含有する試料は、試料区画内に堆積され、毛管現象に
より複合体区画（今度は、標識されたアリピプラゾール、標識されたオランザピン、標識
されたクエチアピン、及び標識されたリスペリドンを含有する）を通って反応区画に移動
する。反応区画は、反応区画２内にアリピプラゾール抗体（５Ｃ７）を再度含有する。典
型的な用量反応曲線が、オランザピン、クエチアピン、又はリスペリドンについてではな
く、アリピプラゾールのみについて、図１０に示されるように生成された。
【０２７９】
図１１において、オランザピンを含有する試料は、試料区画内に堆積され、毛管現象に
より複合体区画（今度は、標識されたアリピプラゾール、標識されたオランザピン、標識
されたクエチアピン、及び標識されたリスペリドンを含有する）を通って反応区画に移動
する。反応区画は、反応区画４内にオランザピン抗体（４Ｇ９−１）を再度含有する。典
型的な用量反応曲線が、アリピプラゾール、クエチアピン、又はリスペリドンについてで
はなく、オランザピンのみについて、図１１に示されるように生成された。
【０２８０】
図１２において、クエチアピンを含有する試料は、試料区画内に堆積され、毛管現象に
より複合体区画（今度は、標識されたアリピプラゾール、標識されたオランザピン、標識
されたクエチアピン、及び標識されたリスペリドンを含有する）を通って反応区画に移動
する。反応区画は、反応区画６内にクエチアピン抗体（１１）を再度含有する。典型的な
用量反応曲線が、アリピプラゾール、オランザピン、又はリスペリドンについてではなく
、クエチアピンのみについて、図１２に示されるように生成された。
【０２８１】
図１３において、リスペリドンを含有する試料は、試料区画内に堆積され、毛管現象に
より複合体区画（今度は、標識されたアリピプラゾール、標識されたオランザピン、標識
されたクエチアピン、及び標識されたリスペリドンを含有する）を通って反応区画に移動
する。反応区画は、反応区画８内にリスペリドン抗体（５−９）を再度含有する。典型的
な用量反応曲線が、アリピプラゾール、オランザピン、又はクエチアピンについてではな
く、リスペリドンのみについて、図１３に示されるように生成された。
【０２８２】
図１４〜１７は、他の複合体及び抗体の存在下での、それぞれのアッセイについて典型
的な用量反応曲線を示す。図１４において、アリピプラゾールを含有する試料は、試料区
画内に堆積され、毛管現象により複合体区画（再び、標識されたアリピプラゾール、標識
されたオランザピン、標識されたクエチアピン、及び標識されたリスペリドンを含有する
）を通って反応区画に移動する。反応区画は、反応区画２内にアリピプラゾール抗体（５
Ｃ７）、並びに反応区画４内にオランザピン抗体（４Ｇ９−１）、反応区画６内にクエチ
アピン抗体（１１）、及び反応区画８内にリスペリドン抗体（５−９）を再度含有する。
図１４に示されるように、アリピプラゾールについて典型的な用量反応曲線を生成した。
オランザピンを含有する試料をこのチップの試料区画内に堆積した場合、図１５に示され
るように、オランザピンについて典型的な用量反応曲線を生成した。クエチアピンを含有
する試料をこのチップの試料区画内に堆積した場合、図１６に示されるように、クエチア
ピンについて典型的な用量反応曲線を生成した。リスペリドンを含有する試料をこのチッ
プの試料区画内に堆積した場合、図１７に示されるように、リスペリドンについて典型的
な用量反応曲線を生成した。
【０２８３】
図１８〜２１は、陽性対照として生成された用量反応曲線（図６〜９）の、多重形式で
生成された用量反応曲線（図１４〜１７）との比較を示す。アリピプラゾールについての
比較を図１８に、オランザピンについては図１９に、クエチアピンについては図２０に、
リスペリドンについては図２１に示す。これらの図は、陽性対照曲線が多重曲線に類似し
ていることを示す。
【０２８４】
これらのデータは、本発明の側方流動アッセイ装置を使用し、ある携帯型のポイントオ
ブケア装置において患者からの単一試料を使用して、複数の抗精神病薬を検出することが
できることを示す。
本発明は、以下の態様を包含し得る。
［１］  クエチアピンに結合し、
（ｉ）式Ｉの化合物と免疫原性担体とのコンジュゲートに応答して生成されるか、又は
（ｉｉ）式Ｉの化合物と免疫原性担体とのコンジュゲートに応答して生成される抗体に
より結合されるエピトープと同じであるエピトープに対して競合する、単離抗体又はその
結合断片であって、
式Ｉ：
【化６０−１】
2019073513.tif 000078
式中、
Ｒ１は、Ｈ、
【化６０−２】
2019073513.tif 000079
ＣＨ２ＮＨ２、若しくはＣＨ２ＮＨＣ（Ｏ）（ＣＨ２）ｍＣＯ２Ｈであるか、又は
Ｚ−（Ｙ）ｐ−Ｇであり、
Ｒ２は、Ｈ、
【化６０−３】
2019073513.tif 000080
ＣＨ２ＮＨ２、若しくはＣＨ２ＮＨＣ（Ｏ）（ＣＨ２）ｍＣＯ２Ｈであるか、
又はＺ−（Ｙ）ｐ−Ｇであり、
Ｒ３は、Ｈ、又はＷ−（Ｙ）ｐ−Ｇであるが、但し、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３のうちの２つが
Ｈでなければならないものとし、かつ更に、Ｒ１、Ｒ２、及びＲ３が全て同時にＨであっ
てはならないものとし、
式中、
Ｚは、
−Ｎ（Ｒ４）−、−Ｏ−、−Ｓ−、−アルキル−、−アミノアルキル−、−チオアルキ
ル−、−ヘテロアルキル−、−アルキルカルボニル−、
【化６０−４】
2019073513.tif 000081
からなる群から選択され、
Ｒ４は、Ｈ、アルキル基、シクロアルキル基、アラルキル基、又は置換若しくは非置換
アリール基であり、
式中、
Ｗは、
−Ｃ（Ｏ）−、アルキル−、−アミノアルキル−、−チオアルキル−、−ヘテロアルキ
ル−、−アルキルカルボニル−からなる群から選択され、
Ｙは、有機スペーサ基であり、
Ｇは、担体に結合することができる官能性連結基であり、
ｐは、０又は１であり、
ｍは、１、２、３、４、又は５であり、
ｎは、１、２、３、４、又は５である、抗体又はその結合断片。
［２］  前記抗体が、式Ｉの化合物と免疫原性担体とのコンジュゲートに応答して生成さ
れる、上記［１］に記載の抗体。
［３］  前記抗体断片が、Ｆｖ、Ｆ（ａｂ’）、Ｆ（ａｂ’）２、ｓｃＦｖ、ミニボディ
、及びダイアボディ断片からなる断片の群から選択される、上記［１］に記載の抗体。
［４］  前記抗体が、モノクローナル抗体である、上記［１］に記載の抗体。
［５］  上記［１］に記載の抗体を含む、アッセイキット。
［６］  上記［１］に記載の抗体を含む、アッセイ装置。
［７］  前記装置は、側方流動アッセイ装置である、上記［６］に記載のアッセイ装置。
［８］  クエチアピンに結合する抗体を産生する方法であって、
（ｉ）抗体産生のための宿主を選択することと、
（ｉｉ）前記宿主に式Ｉの化合物と免疫原性担体とのコンジュゲートを接種することと
、を含み、前記宿主が、クエチアピンに結合する抗体を産生し、
式Ｉ：
【化６０−５】
2019073513.tif 000082
式中、
Ｒ１は、Ｈ、
【化６０−６】
2019073513.tif 000083
ＣＨ２ＮＨ２、若しくはＣＨ２ＮＨＣ（Ｏ）（ＣＨ２）ｍＣＯ２Ｈであるか、又は
Ｚ−（Ｙ）ｐ−Ｇであり、
Ｒ２は、Ｈ、
【化６０−７】
2019073513.tif 000084
ＣＨ２ＮＨ２、若しくはＣＨ２ＮＨＣ（Ｏ）（ＣＨ２）ｍＣＯ２Ｈであるか、
又はＺ−（Ｙ）ｐ−Ｇであり、
Ｒ３は、Ｈ、又はＷ−（Ｙ）ｐ−Ｇであるが、但し、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３のうちの２つが
Ｈでなければならないものとし、かつ更に、Ｒ１、Ｒ２、及びＲ３が全て同時にＨであっ
てはならないものとし、
式中、
Ｚは、
−Ｎ（Ｒ４）−、−Ｏ−、−Ｓ−、−アルキル−、−アミノアルキル−、−チオアルキ
ル−、−ヘテロアルキル−、−アルキルカルボニル−、
【化６０−８】
2019073513.tif 000085
からなる群から選択され、
Ｒ４は、Ｈ、アルキル基、シクロアルキル基、アラルキル基、又は置換若しくは非置換
アリール基であり、
式中、
Ｗは、
−Ｃ（Ｏ）−、アルキル−、−アミノアルキル−、−チオアルキル−、−ヘテロアルキ
ル−、−アルキルカルボニル−からなる群から選択され、
Ｙは、有機スペーサ基であり、
Ｇは、担体に結合することができる官能性連結基であり、
ｐは、０又は１であり、
ｍは、１、２、３、４、又は５であり、
ｎは、１、２、３、４、又は５である、方法。
［９］  クエチアピンに結合するモノクローナル抗体を産生することができるハイブリド
ーマ細胞株を産生する方法であって、
（ｉ）抗体産生のための宿主を選択することと、
（ｉｉ）前記宿主に式Ｉの化合物と免疫原性担体とのコンジュゲートを接種することと
、
（ｉｉｉ）前記接種された宿主からの細胞株を連続的に分裂している細胞と融合させて
、クエチアピンに結合するモノクローナル抗体を産生することができる融合細胞を作製す
ることと、
（ｉｖ）ハイブリドーマ細胞株を得るために、前記融合細胞をクローニングすることと
、を含み、
式Ｉ：
【化６０−９】
2019073513.tif 000086
式中、
Ｒ１は、Ｈ、
【化６０−１０】
2019073513.tif 000087
ＣＨ２ＮＨ２、若しくはＣＨ２ＮＨＣ（Ｏ）（ＣＨ２）ｍＣＯ２Ｈであるか、又は
Ｚ−（Ｙ）ｐ−Ｇであり、
Ｒ２は、Ｈ、
【化６０−１１】
2019073513.tif 000088
ＣＨ２ＮＨ２、若しくはＣＨ２ＮＨＣ（Ｏ）（ＣＨ２）ｍＣＯ２Ｈであるか、
又はＺ−（Ｙ）ｐ−Ｇであり、
Ｒ３は、Ｈ、又はＷ−（Ｙ）ｐ−Ｇであるが、但し、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３のうちの２つが
Ｈでなければならないものとし、かつ更に、Ｒ１、Ｒ２、及びＲ３が全て同時にＨであっ
てはならないものとし、
式中、
Ｚは、
−Ｎ（Ｒ４）−、−Ｏ−、−Ｓ−、−アルキル−、−アミノアルキル−、−チオアルキ
ル−、−ヘテロアルキル−、−アルキルカルボニル−、
【化６０−１２】
2019073513.tif 000089
からなる群から選択され、
Ｒ４は、Ｈ、アルキル基、シクロアルキル基、アラルキル基、又は置換若しくは非置換
アリール基であり、
式中、
Ｗは、
−Ｃ（Ｏ）−、アルキル−、−アミノアルキル−、−チオアルキル−、−ヘテロアルキ
ル−、−アルキルカルボニル−からなる群から選択され、
Ｙは、有機スペーサ基であり、
Ｇは、担体に結合することができる官能性連結基であり、
ｐは、０又は１であり、
ｍは、１、２、３、４、又は５であり、
ｎは、１、２、３、４、又は５である、方法。
［１０］  サンプル中のクエチアピンを検出する方法であって、
（ｉ）サンプルを検出可能なマーカーで標識された上記［１］に記載の抗体と接触させ
ることと、ここで、前記標識された抗体と前記サンプル中に存在するクエチアピンとが標
識された複合体を形成する、
（ｉｉ）前記サンプル中のクエチアピンを検出するために、前記標識された複合体を検
出することと、を含む、方法。
［１１］  サンプル中のクエチアピンを検出するための競合的イムノアッセイ方法であっ
て、
（ｉ）サンプルを、上記［１］に記載の抗体と、及びクエチアピン又はクエチアピンの
競合結合パートナーと、接触させることと、ここで、前記抗体及び前記クエチアピン又は
その競合結合パートナーのうちの１つが、検出可能なマーカーで標識され、サンプルのク
エチアピンが、前記抗体への結合に対して、前記クエチアピン又はその競合結合パートナ
ーと競合する、
（ｉｉ）サンプルのクエチアピンを検出するために、前記標識を検出することと、を含
む、方法。
［１２］  前記クエチアピン又はその競合結合パートナーが、前記検出可能なマーカーで
標識される、上記［１１］に記載の方法。
［１３］  前記抗体が、検出可能なマーカーで標識される、上記［１１］に記載の方法。
［１４］  前記イムノアッセイが、側方流動アッセイ装置において行われ、前記サンプル
が、前記装置に適用される、上記［１１］に記載の方法。
［１５］  クエチアピンに加えて１つ以上の検体の存在を検出することを更に含む、上記
［１０］又は［１１］に記載の方法。
［１６］  前記１つ以上の検体が、クエチアピン以外の抗精神病薬である、上記［１５］
に記載の方法。
［１７］  クエチアピン以外の前記抗精神病薬が、リスペリドン、パリペリドン、アリピ
プラゾール、オランザピン、及びそれらの代謝産物からなる群から選択される、上記［１
６］に記載の方法。
［１８］  クエチアピンの前記検出が、処方されたクエチアピン療法の患者の順守の指標
である、上記［１０］又は［１１］に記載の方法。
［１９］  クエチアピンの前記検出が、患者が経口クエチアピンのレジメンから、注入可
能な抗精神病薬のレジメンへと切り替えられるべきかどうかを判定するために使用される
、上記［１０］又は１１に記載の方法。
［２０］  クエチアピンの前記検出が、有効又は安全な薬物レベルの到達又は維持を確実
にするために、経口又は注入可能なクエチアピンの用量レベル又は投薬間隔を増加させる
べきか、それとも減少させるべきかを判定するために使用される、上記［１０］又は［１
１］に記載の方法。
［２１］  クエチアピンの前記検出が、最小限のｐＫレベルの到達の証拠を提供すること
により、クエチアピン療法の開始時の一助になる、上記［１０］又は［１１］に記載の方
法。
［２２］  クエチアピンの前記検出が、複数の製剤中又は複数の源からのクエチアピンの
生物学的同等性を判定するために使用される、上記［１０］又は［１１］に記載の方法。
［２３］  クエチアピンの前記検出が、多剤投与及び潜在的な薬物−薬物相互作用の影響
を評価するために使用される、上記［１０］又は［１１］に記載の方法。
［２４］  クエチアピンの前記検出が、患者が臨床治験から除外されるべきか、又は含ま
れるべきかの指標であり、臨床治験の投薬必要条件の順守のその後のモニタリングの一助
になる、上記［１０］又は［１１］に記載の方法。
【図１】
2019073513.tif 000102
【図２】
2019073513.tif 000103
【図３】
2019073513.tif 000104
【図４】
2019073513.tif 000105
【図５】
2019073513.tif 000106
【図６】
2019073513.tif 000107
【図７】
2019073513.tif 000108
【図８】
2019073513.tif 000109
【図９】
2019073513.tif 000110
【図１０】
2019073513.tif 000111
【図１１】
2019073513.tif 000112
【図１２】
2019073513.tif 000113
【図１３】
2019073513.tif 000114
【図１４】
2019073513.tif 000115
【図１５】
2019073513.tif 000116
【図１６】
2019073513.tif 000117
【図１７】
2019073513.tif 000118
【図１８】
2019073513.tif 000119
【図１９】
2019073513.tif 000120
【図２０】
2019073513.tif 000121
【図２１】
2019073513.tif 000122
【手続補正書】
【提出日】平成30年12月21日(2018.12.21)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
クエチアピンに特異的に結合し、
免疫原性担体と以下：
【化１−１】
2019073513.tif 000123
【化１−２】
2019073513.tif 000124
【化１−３】
2019073513.tif 000125
（式中、ｍは１、２、３、４又は５であり、ｎは１、２、３、４又は５である）
からなる群から選択される化合物とのコンジュゲートに応答して生成される、単離抗体又はその結合断片を含む組成物。
【請求項２】
前記抗体が、モノクローナル抗体である、請求項１に記載の組成物。
【請求項３】
前記抗体結合断片が、Ｆｖ、Ｆ（ａｂ’）、Ｆ（ａｂ’）２、ｓｃＦｖ、ミニボディ、及びダイアボディ断片からなる断片の群から選択される、請求項１に記載の組成物。
【請求項４】
前記免疫原性担体がタンパク質である、請求項１〜３のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項５】
前記タンパク質が、キーホールリンペットヘモシアニン、ウシチログロブリン、又はオボアルブミンである、請求項４に記載の組成物。
【請求項６】
請求項１〜５のいずれか１項に記載の組成物を含む、アッセイキット。
【請求項７】
請求項１〜５のいずれか１項に記載の組成物を含む、アッセイ装置。
【請求項８】
前記装置は、側方流動アッセイ装置である、請求項７に記載のアッセイ装置。
【請求項９】
サンプル中のクエチアピンを検出する方法であって、
（ｉ）サンプルを請求項１〜５のいずれか１項に記載の組成物と接触させることと、ここで、前記抗体又はその結合断片は検出可能なマーカーで標識されており、前記標識された抗体又はその結合断片と前記サンプル中に存在するクエチアピンとが標識された複合体を形成する、
（ｉｉ）前記サンプル中のクエチアピンを検出するために、前記標識された複合体を検出することと、を含む、方法。
【請求項１０】
サンプル中のクエチアピンを検出するための競合的イムノアッセイ方法であって、
（ｉ）サンプルを、請求項１〜５のいずれか１項に記載の組成物と、クエチアピン又はクエチアピンの競合結合パートナーと、接触させることと、ここで、前記抗体又はその結合断片及び前記クエチアピン又はその競合結合パートナーのうちの１つが、検出可能なマーカーで標識され、サンプルのクエチアピンが、前記抗体又はその結合断片への結合に対して、前記クエチアピン又はその競合結合パートナーと競合する、
（ｉｉ）サンプルのクエチアピンを検出するために、前記標識を検出することと、を含む、方法。
【請求項１１】
前記クエチアピン又はその競合結合パートナーが、前記検出可能なマーカーで標識される、請求項１０に記載の方法。
【請求項１２】
前記抗体又はその結合断片が、検出可能なマーカーで標識される、請求項１０に記載の方法。
【請求項１３】
前記イムノアッセイが、側方流動アッセイ装置において行われ、前記サンプルが、前記装置に適用される、請求項１０に記載の方法。
【請求項１４】
クエチアピンに加えて１つ以上の検体の存在を検出することを更に含む、請求項９〜１３のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１５】
前記１つ以上の検体が、クエチアピン以外の抗精神病薬である、請求項１４に記載の方法。
【請求項１６】
クエチアピン以外の前記抗精神病薬が、リスペリドン、パリペリドン、アリピプラゾール、オランザピン、及びそれらの代謝産物からなる群から選択される、請求項１５に記載の方法。
【請求項１７】
クエチアピンの前記検出が、処方されたクエチアピン療法の患者の順守の指標である、請求項９〜１６のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１８】
クエチアピンの前記検出が、患者が経口クエチアピンのレジメンから、注入可能な抗精神病薬のレジメンへと切り替えられるべきかどうかを判定するのを補助するために使用される、請求項９〜１６のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１９】
クエチアピンの前記検出が、有効又は安全な薬物レベルの到達又は維持を確実にするために、経口又は注入可能なクエチアピンの用量レベル又は投薬間隔を増加させるべきか、それとも減少させるべきかを判定するのを補助するために使用される、請求項９〜１６のいずれか一項に記載の方法。
【請求項２０】
クエチアピンの前記検出が、最小限のｐＫレベルの到達の証拠を提供することにより、クエチアピン療法の開始時の一助になる、請求項９〜１６のいずれか一項に記載の方法。
【請求項２１】
クエチアピンの前記検出が、複数の製剤中又は複数の源からのクエチアピンの生物学的同等性を判定するのを補助するために使用される、請求項９〜１６のいずれか一項に記載の方法。
【請求項２２】
クエチアピンの前記検出が、多剤投与及び潜在的な薬物−薬物相互作用の影響を評価するのを補助するために使用される、請求項９〜１６のいずれか一項に記載の方法。
【請求項２３】
クエチアピンの前記検出が、患者が臨床治験から除外されるべきか、又は含まれるべきかの指標であり、臨床治験の投薬必要条件の順守のその後のモニタリングの一助になる、請求項９〜１６のいずれか一項に記載の方法。