(57)【要約】【課題】化粧水、乳液、ローション、クリーム、ジェル、エッセンス、リップクリーム、パック、ヘアトニック、ヘアクリームなどの化粧品や薬用化粧品及び頭皮用剤などの皮膚の外用に供する医薬部外品又は皮膚外用薬の基剤を含む皮膚外用料に利用することができる保湿効果や肌荒れ改善効果に優れ、しかも刺激感も少ないオステオカルシンを含有する骨抽出物を提供する。【解決手段】保湿効果や肌荒れ改善効果に優れ、しかも刺激性もすくないオステオカルシンを含有する骨抽出物を配合することを特徴とする皮膚外用料に関する。【選択図】なし【特許請求の範囲】
【請求項１】
オステオカルシンを含有する骨抽出物を配合することを特徴とする皮膚外用料。
【請求項２】
前記オステオカルシンが不活性型の非または低カルボキシル化オステオカルシン、活性型オステオカルシンの１種類以上を含むことを特徴とする請求項１記載の皮膚外用料。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】  本発明は、化粧水、乳液、ローション、クリーム、ジェル、エッセンス、リップクリーム、パック、ヘアトニック、ヘアクリームなどの化粧品や薬用化粧品及び頭皮用剤などの皮膚の外用に供する医薬部外品又は皮膚外用薬の基剤を含む皮膚外用料に関し、更に詳しくはオステオカルシンを含有する骨抽出物を配合した肌の保湿性と肌荒れ改善効果に優れ、しかも刺激性の低い皮膚外用料に関する。更に詳しくは不活性型の非または低カルボキシル化オステオカルシン、活性型オステオカルシンを含む皮膚外用料に関する。
【背景技術】
【０００２】  現代の生活環境においては、冬の暖房や夏の冷房などの影響により、肌は一年中乾燥環境に晒されており、肌荒れが慢性化している。手、腕、顔、体、足、脚などの皮膚の肌荒れが美容上の重大な関心事であることは、女性向けだけでなく、男性向け化粧品の製品数の増加に顕著に現われている。特に、顔は第一印象を決定づける大きな要因となることから老若男女を問わずいつまでも艶やかでしっとりして張りのある若い美肌や白い肌になりたいと願う人は多く、肌荒れを改善し予防する皮膚外用料への関心が高まっている。【０００３】  肌荒れや乾燥肌、各種皮膚疾患の原因は、加齢に伴う皮膚のターンオーバーの低下と老化、血行不良、ストレス、紫外線や温度、気象条件などの外的要因など種々であるが、皮膚の細胞の新陳代謝が低下し新しい細胞の再生機能が落ちることが直接的な原因である。従来から化粧品においては、皮膚のカサツキなどの肌荒れを防止し、改善するためにグリセリン等の多価アルコール類、糖類、ヒアルロン酸、ピロリドンカルボン酸塩、ヘチマ水、酵母培養液、酵母エキスなどの保湿剤や油成分を配合することにより肌の保湿効果を高め、艶やかな肌にすることが多く試みられてきた。【０００４】  また、従来より肌荒れを予防あるいは改善するためにコラーゲンが多くの皮膚外用剤に配合されている。例えば、無色素の魚の皮から抽出したコラーゲンが優れた保湿効果をもつことから皮膚の乾燥、肌荒れ、ヒビ、アカギレ、炎症性疾患などの予防、軽減、改善に有効なことが知られている（特許文献１）。また、コラーゲンとの併用による皮膚外用剤としては、海洋性コラーゲンと海藻抽出物を配合した皮膚外用剤（特許文献２）、植物抽出物と併用した皮膚外用剤（特許文献３）、ヒアルロン酸およびコンドロイチン硫酸と併用した保湿用組成物（特許文献４）などが知られている。【０００５】  これらの皮膚外用剤に用いられるコラーゲンは通常、牛、豚、鶏、魚類などの骨、皮、腱ウロコ（魚）などの部位を水洗後、酸又はアルカリ溶液による抽出、ペプシン、トリプシンやヒアロニダーゼなどの酵素による処理抽出して、塩析や透析などの精製工程を経て製造されたものである。【０００６】  最近の研究から、骨はホルモンを分泌している重要な内分泌器官であることが明らかにされており、中でもオステオカルシンは骨芽細胞から分泌され、代謝調節および骨形成促進性に働くものと考えられている。オステオカルシンは骨中に存在する非コラーゲン性タンパク質であり、ヒトでは４９のアミノ酸からなる分子量約５５００のタンパク質である。オステオカルシンは、分子内のグルタミン酸基がカルボキシル化されていない非カルボキシル化オステオカルシン（不活性型）、一部カルボキシル化された低カルボキシル化オステオカルシン（不活性型）、グルタミン酸基３個がすべてカルボキシル化された活性型オステオカルシンが知られている。活性型オステオカルシンは骨の非コラーゲン性タンパク質の１０〜２０％を占めていると言われている。非カルボキシル化オステオカルシン、一部カルボキシル化された低カルボキシル化オステオカルシンなどの不活性型オステオカルシンは、グルコース及びエネルギー代謝を活発化することが知られており、また、��性型オステオカルシンはカルシウムを骨に蓄積する作用があることが知られている。【０００７】  オステオカルシンは通常、牛、豚、鶏、魚類などの骨からエチレンジアミン四酢酸（ＥＤＴＡ）を含む溶媒（非特許文献１）、酸性溶媒による抽出法（非特許文献２）が知られている。また、塩酸やリン酸水溶液、炭酸ナトリウムや炭酸水素ナトリウム水溶液による抽出方法も知られている（特許文献５、特許文献６）。【０００８】  骨は、熱水の抽出による食品用スープや天然調味料の素材として利用されているが、ほとんどのオステオカルシンは骨に残存したままであり、スープを抽出した後の抽出残渣の骨はほとんど廃棄されるか、あるいは肥料として利用されている。そのために、抽出残渣の骨に残存するオステオカルシンの有効利用法が提案されている。不活性型の非又は低カルボキシル化オステオカルシン（不活性化型オステオカルシン）は、グルコース及びエネルギー代謝を活発化することから、糖尿病予防、肥満防止、メタボリックシンドロームの予防への応用が期待され、サプリメント、飲料などの食品が開発されている（特許文献５）。また、活性型オステオカルシンはカルシウムの骨への蓄積作用があることから、成育増強、骨強化や骨粗鬆症の予防の目的で飲食品、医薬、口腔用組成物、飼料などへの応用が知られている（特許文献６）。【０００９】  このように、骨から抽出された不活性型の非または低カルボキシル化オステオカルシン、活性型オステオカルシンを含む抽出物は食品、飲料、医薬品、サプリメント、飼料などに利用されているが、皮膚外用料や化粧品には利用されていない。【０００１０】
【先行技術文献】
【特許文献】
【０００１１】
【特許文献１】特開２００２−２２６３５６号公報
【特許文献２】特開２０００−２２９８３２号公報
【特許文献３】特開２００１−３９３８５２号公報
【特許文献４】特開２００２−１４５７５３号公報
【特許文献５】特開２０１７−３９６５２号公報
【特許文献６】再表ＷＯ２００８−１０８３９５号公報
【００１２】
【非特許文献】
【００１３】
【非特許文献１】Ｃａｌｃｉｆ  Ｔｉｓｓｕｅ  Ｉｎｔ．、第５５巻、第２３０−２３５頁（１９９４）
【非特許文献２】Ｍｅｔｈｏｄｓ  Ｅｎｚｙｍｏｌ．、第１０７巻、第５１６−５４４頁（１９８４）
【００１４】
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【００１５】  本発明者らは、鋭意検討を行ったところ、オステオカルシンを含有する骨抽出物が、皮膚に対する優れた保湿効果や肌荒れの予防、改善効果に優れ、しかも皮膚への刺激性も少ないことを見出した。【００１６】  本発明の目的は、化粧水、乳液、ローション、クリーム、ジェル、エッセンス、リップクリーム、パック、ヘアトニック、ヘアクリームなどの化粧品や薬用化粧品及び頭皮用剤などの皮膚の外用に供する医薬部外品又は皮膚外用薬の基剤を含む皮膚外用料に使用できる保湿効果や肌荒れ・シワ・キメ・くすみ形成の予防、改善効果に優れ、しかも皮膚への刺激性も少ないオステオカルシンを含有する骨抽出物を提供することを目的とする。【００１７】  本発明の要旨は、保湿効果や肌荒れ・シワ・キメ・くすみ形成の予防、改善効果に優れ、しかも皮膚への刺激性も少ない皮膚外用料に関し、更にオステオカルシンを含有する骨抽出物を配合する化粧水、乳液、ローション、クリーム、ジェル、エッセンス、リップクリーム、パック、ヘアトニック、ヘアクリームなどの化粧品や薬用化粧品及び頭皮用剤などの皮膚の外用に供する医薬部外品又は皮膚外用薬の基剤を含む皮膚外用料に関する。
【課題を解決するための手段】
【００１８】  請求項１に係る発明は、オステオカルシンを含有する骨抽出物を配合することを特徴とする皮膚外用料に関する。【００１９】  請求項２に係る発明は、前記オステオカルシンが不活性型の非または低カルボキシル化オステオカルシン、活性型オステオカルシンの１種類以上を含むことを特徴とする請求項１記載の皮膚外用料に関する。
【発明の効果】
【００２０】  請求項１に係る発明によれば、肌荒れ・シワ・キメ・くすみ形成の予防、改善効果に優れ、しかも皮膚への刺激性も少ないことを特徴とするオステオカルシンを含有する骨抽出物を配合することにより、保湿効果や肌荒れの予防、改善効果に優れ、しかも皮膚への刺激性も少ない皮膚外用料を提供することができる。【００２１】  請求項２に係る発明によれば、不活性型の非または低カルボキシル化オステオカルシン、活性型オステオカルシンの１種類以上を含む骨抽出物により保湿効果や肌荒れ・シワ・キメ・くすみ形成の予防、改善効果に優れ、しかも皮膚への刺激性も少ないことを特徴とする化粧水、乳液、ローション、クリーム、ジェル、エッセンス、リップクリーム、パック、ヘアトニック、ヘアクリームからなる群より選択される化粧品や薬用化粧品及び頭皮用剤などの皮膚の外用に供する医薬部外品又は皮膚外用薬の基剤を含む皮膚外用料を提供することができる。
【発明を実施するための形態】
【００２２】  本発明のオステオカルシンを含有する骨抽出物に用いられる原料の骨は、ほ乳類、鳥類、魚類の脊椎動物の骨であり、具体的には豚、牛、魚の骨が使用でき、中でも豚の骨が好ましく、付着した肉を取り除いた骨を使用することが好ましい。
【００２３】  本発明の原料である骨以外の皮、腱、ウロコからのコラーゲンを含む抽出物には、オステオカルシンは含まれていないことが知られている。
【００２４】  本発明の原料としての骨は加熱していない生のもの（生骨）でも、熱水処理や加圧熱水処理などの加熱処理した後の骨であってもよく、加熱処理した骨は余分な脂肪分が少ないことからより好ましいものである。加熱処理した骨は、骨からスープ、エキスなどを製造した煮骨と言われる抽出残渣が挙げられる。
【００２５】  本発明の原料として加熱処理の骨を用いる場合、その加熱処理条件としては７０℃〜１５０℃、より好ましくは１１０℃〜１３０℃であり、１５分から２４時間、より好ましくは１時間〜８時間で処理することが望ましい。
【００２６】  本発明に使用する骨は、オステオカルシンの抽出効率を高める目的で細断、粗砕、粉砕したものが好ましい。
【００２７】  本発明のオステオカルシンを含む骨抽出物の製造においては、特に抽出溶媒に限定されないが、炭酸塩、重炭酸塩、水酸化ナトリウム、水酸化カリウムなどのアルカリ性水溶液、塩酸、酢酸、リン酸、クエン酸などの有機酸などの酸性水溶液が挙げられ、より好ましくは炭酸塩、重炭酸塩のアルカリ性水溶液が挙げられる。
【００２８】  アルカリ性水溶液に用いられる炭酸塩としては、炭酸ナトリウム、炭酸カリウム、炭酸マグネシウム、炭酸カルシウム、炭酸アンモニウムが挙げられ、炭酸ナトリウム、炭酸カリウムの水溶液が好ましい。重炭酸塩としては、炭酸水素ナトリウム、炭酸水素カリウムが挙げられる。これらのアルカリ塩は単独でもまたその混合物でも使用することができる。
【００２９】  本発明の骨から抽出するに際に使用されるアルカリ性水溶液は、ｐＨ７．５〜１４であり、好ましくはｐＨ８〜１３であり、より好ましくはｐＨ９〜１１である。本発明の骨から抽出するに際に使用される酸性水溶液は、ｐＨ１〜６．９であり、好ましくはｐＨ３〜６．８である。
【００３０】  本発明の抽出条件としては、その抽出温度は０〜１３０℃であり、好ましくは１〜８０℃であり、より好ましくは４〜４０℃である。また、その抽出時間は６０分以上であり、好ましくは６〜４８時間であり、より好ましくは１２〜２４時間である。
【００３１】  本発明のオステオカルシンを含む骨抽出物の製造において、粗砕や粉砕した骨をアルカリ水溶液で抽出処理した抽出液を、塩酸、硫酸、リン酸などの無機酸、乳酸、クエン酸、酢酸、アスコルビン酸などの有機酸などで中和することができ、塩酸やクエン酸で中和することが望ましい。また、酸性水溶液で抽出した液を炭酸塩、重炭酸塩、水酸化ナトリウム、水酸化カリウムなどのアルカリ性水溶液で中和することができる。
【００３２】  本発明のアルカリ水溶液や酸性水溶液で抽出した骨抽出物は、酸又はアルカリで中和した後、ろ過や遠心分離などによる固形物の分離操作や限界ろ過、電気透析、逆浸透膜、イオン交換樹脂などによる脱塩操作を行うことができる。更に、オステオカルシンの含量を高めるために、分別沈殿、限界ろ過膜やナノろ過膜による分画操作を行うことができる。更に又、混入するタンパク質やコラーゲンを分解する目的でコラーゲナーゼ、システインプロテアーゼ、ペプシン、トリプシン、パンクレアチン、パパイン、ブロメライン、アクイニジンなどの植物由来のエンドペプチターゼ、糸状菌およびバチルス属由来のペプチターゼのエキソペプチターゼなどの酵素を用いることができる。また、熱水だけで抽出される豚骨スープや豚骨エキスを化粧品グレードに脱臭して使用することもできる。
【００３３】本発明の骨抽出物は、骨抽出物を脱色、脱臭する目的で活性炭、活性白土、アルミナ、シリカゲル、ゼオライトなどの吸着剤を用いることができる。更に、長期保存を行うために無菌ろ過を行うことができる。更に又、ソルビン酸、パラオキシ安息香酸メチル、安息香酸ナトリウム、フェノキシエタノールなどの防腐剤を配合することもできる。更に、凍結乾燥して粉体にすることもできるものである。
【００３４】  本発明のオステオカルシンを含む骨抽出物は、不活性型の非または低カルボキシル化オステオカルシンや活性型オステオカルシンからなるオステオカルシンを含むものであり、コラーゲンやその他の骨由来のタンパク質、酵素で分解したペプチドやアミノ酸が含まれていても良く、固形物換算で０．０００１重量％以上のオステオカルシンを含む骨抽出物を提供することができる。
【００３５】  本発明に用いられるオステオカルシンを含有する骨抽出物は、本発明の化粧水、乳液、ローション、クリーム、ジェル、エッセンス、リップクリーム、パック、ヘアトニック、ヘアクリームからなる群より選択される化粧品や薬用化粧品及び頭皮用剤などの皮膚の外用に供する医薬部外品又は皮膚外用薬の基剤を含む皮膚外用料に、オステオカルシンとして０．０００００１〜０．５重量％、より好ましくは０．０００００５〜０．３重量％配合する。０．０００００１重量％未満では本発明の肌荒れの予防、改善効果が得られず、０．５重量％を超える場合は、肌荒れの予防、改善効果の増加は望めず、皮膚刺激が大きくなり、経済的にも適当でない。
【００３６】  本発明の皮膚外用料には、本発明のオステオカルシンを含有する骨抽出物の他に、通常、化粧品や医薬部外品に用いられるグリセリン、１，３ブチレングリコールなどの多価アルコール類、ピドリドンカルボン酸ナトリウム、ヒアルロン酸ナトリウム、クエン酸などの保湿剤、油成分、界面活性剤、分散安定剤、増粘剤、湿潤剤、生理活性成分、血行促進剤、美白剤、ビタミン類、アミノ酸、酵素、酵母培養液、酵母エキス、海藻抽出物、ミネラル、色素、顔料、香料、防腐剤、酸化防止剤、紫外線吸収剤、キレート剤、ｐＨ調整剤、精製水、アルコールなどを本発明の目的を達成する範囲内で組み合わせて配合することができる。
【００３７】  本発明の皮膚外用料は、常法に従って製造することができる。本発明の皮膚外用料としては化粧水、乳液、ローション、クリーム、ジェル、エッセンス、リップクリーム、パック、ヘアトニック、ヘアクリームからなる群より選択される化粧品や薬用化粧品及び頭皮用剤などの皮膚の外用に供する医薬部外品又は皮膚外用薬の基剤を含む外用医薬品などが挙げられ、剤形も目的に応じて液状、クリーム状、ジェル状、乳液状、シート状、エアゾール状など任意に選択することができる。本発明の皮膚外用料は、一般の化粧品や薬用化粧品に限定されるものではなく、医薬部外品、外用医薬品及びその基剤などを包含するものである。
【００３８】  次に、本発明を実施例により具体的に説明するが、本発明は当該実施例のみに限定されるものではない。
【実施例】
【００３９】実施例１  豚骨からオステオカルシンの製造−１
生の豚骨に付着している肉をナイフで除去したもの１ｋｇに水３リットルを加えて補水しながら１００℃で６０分間加熱した後、生豚骨加熱抽出液を約３ｋｇ得た。取り出した煮骨を切断機でカットした後、粗粉砕し、煮骨粗粉砕品を約９００ｇ調製した。この煮骨粗粉砕品１０ｇに３重量％の炭酸ナトリウム水溶液（ｐＨ１１．４）４０ｍｌを加え、室温で２４時間抽出を行った。得られた抽出液をろ過し、骨残渣を分離してろ過液を得た。このろ過液を１Ｍ塩酸水溶液で中和した後、活性炭２ｇを加え、室温で３０分間攪拌し、ろ過助剤を加えてろ過し、淡黄色の豚煮骨抽出液４２ｍｌを得た。この豚煮骨抽出液についてオステオカルシンの含有量をＥＬＩＳＡ法（ＥＩＡキット：タカラバイオ社製）によって測定したところ、２５００μｇであり、原料の煮骨１ｇから２５０μｇのオステオカルシンが得られていることが分かった（活性型オステオカルシン：２３０μｇ、不活性型オステオカルシ：２０μｇ）。豚煮骨抽出液を乾燥させて分析したところ、乾燥固形分１．９５重量％（０．８１９ｇ）オステオカルシン０．００５９重量％（０．００２５ｇ）であった。
又、最初に得られた生豚骨加熱抽出液中のオステオカルシンの含有量をＥＬＩＳＡ法（ＥＩＡキット：タカラバイオ社製）によって測定したところ、２μｇであった。生豚骨加熱抽出液の乾燥固形分は、０．５６重量％であった。【００４０】実施例２  豚骨からオステオカルシンの製造−２
実施例１で得られたこの煮骨粗粉砕品１０ｇに２重量％の炭酸ナトリウム水溶液２０ｍｌと１．７重量％の炭酸水素ナトリウム２０ｍｌの混合液４０ｍｌ（ｐＨ１０．１）を加え、室温で２４時間抽出を行った。得られた抽出液をろ過し、骨残渣を分離してろ過液を得た。このろ過液を１Ｍ塩酸水溶液で中和した後、ペプチターゼ（フレーバーザイム１０００Ｌ：ノボザイム（株）製）を０．２５ｍｇ加えて、５０℃で１５時間反応させて含まれるコラーゲンをコラーゲンペプチドに変換させた、その後、活性炭２ｇを加え、室温で３０分間攪拌し、ろ過助剤を加えてろ過し、淡黄色の酵素分解豚煮骨抽出液４０ｍｌを得た。この酵素分解豚煮骨抽出液についてオステオカルシンの含有量をＥＬＩＳＡ法（ＥＩＡキット：タカラバイオ社製）によって測定したところ、２１００μｇであり、原料の煮骨１ｇから２１０μｇのオステオカルシンが得られていることが分かった（活性型オステオカルシン：１８５μｇ、不活性型オステオカルシ：２５μｇ）。酵素分解豚煮骨抽出液を乾燥させて分析したところ、乾燥固形分１．５７５重量％（０．６３ｇ）オステオカルシン０．００５２５重量％（０．００２１ｇ）であった。【００４１】実施例３  豚骨からオステオカルシンの製造−３
生の豚骨に付着している肉をナイフで除去した生骨５００ｇを切断機でカットした後、粗粉砕し、生豚骨粗粉砕品を約４５０ｇ調製した。沸騰した熱水１０００ｍｌにこの生豚骨粗粉砕品３００ｇを加え、発生するアクを取り除きながら、補水し沸騰状態で６時間加熱した。その後、ろ過して骨残渣を分離して生豚骨エキス１０００ｇを得た。この豚骨エキスを一晩冷蔵して、上層の油性成分を除去し冷蔵豚骨エキス９００ｇを得た。この冷蔵豚骨エキス５０ｇに活性炭２ｇを加え、室温で３０分間攪拌し、ろ過助剤を加えてろ過し、淡黄色の生豚骨精製エキス４０ｇを得た。この生豚骨精製エキスについてオステオカルシンの含有量をＥＬＩＳＡ法（ＥＩＡキット：タカラバイオ社製）によって測定したところ４２５μｇであり、原料の煮骨１ｇから約２５μｇのオステオカルシンが得られた（活性型オステオカルシン：５μｇ、不活性型オステオカルシ：２０μｇ）。
生豚骨精製エキスを乾燥させて分析したところ、乾燥固形分０．８７５重量％（０．３５ｇ）オステオカルシン０．００１０６重量％（０．０００４２５ｇ）であった。【００４２】実施例４
本発明のオステオカルシンを含有する骨抽出物を含有する化粧品の処方例を示す。尚、配合量は重量％である。
（処方１：化粧水）
グリセリン                                                    ３．０
プロピレングリコール                                          ２．０
オレイルアルコール                                            ０．１
ポリオキシエチレン（２０）ソルビタンモノラウリン酸エステル    １．５
エタノール                                                  ２０．０
豚煮骨抽出液（実施例１）                                      １．０
香料・防腐剤                                                    適量
精製水                                                  全量  １００
（処方２：化粧水）
グリセリン                                                    ３．０
プロピレングリコール                                          ２．０
オレイルアルコール                                            ０．１
ポリオキシエチレン（２０）ソルビタンモノラウリン酸エステル    １．５
エタノール                                                  ２０．０
豚煮骨抽出液（実施例１）                                      ０．００１
香料・防腐剤                                                    適量
精製水                                                  全量  １００
（処方３：乳液）
流動パラフィン                                    １０．０
ステアリン酸                                        ０．２
セタノール                                          １．５
ワセリン                                            ３．０
ラノリンアルコール                                  ２．０
ポリオキシエチレン（１０）モノオレイン酸エステル    ２．０
グリセリン                                          ３．０
プロピレングリコール                                ５．０
トリエタノールアミン                                １．０
酵素分解豚煮骨抽出液（実施例２）                    １．０
香料・防腐剤                                        適量
精製水                                        全量  １００
（処方４：ローション）
グリセリン                                                    ５．０
１，３−ブチレングリコール                                    ２．０
プロピレングリコール                                          ２．０
オレイルアルコール                                            ０．１
ポリオキシエチレン（２０）ソルビタンモノラウリン酸エステル    ０．５
エタノール                                                  １０．０
生豚骨精製エキス（実施例３）                                  １．０
香料・防腐剤・ｐＨ調整剤                                      適量
精製水                                                  全量  １００
（処方５：クリーム）
スクワラン                                    ５．０
ステアリン酸                                  ２．０
ステアリルアルコール                          ７．０
還元ラノリン                                  ２．０
オクチルドデカノール                          ６．０
ポリオキシエチレン（２５）セチルアルコール    ３．０
親油型モノステアリン酸グリセリン              ２．０
プロピレングリコール                          ５．０
豚煮骨抽出液（実施例１）                      １．０
香料・防腐剤                                  適量
精製水                                  全量  １００
（処方６：コールドクリーム）
固形パラフィン                                              ５．０
流動パラフィン                                            ３５．０
ワセリン                                                  １５．０
ミツロウ                                                  １０．０
ホホバ油                                                    ５．０
親油型モノステアリン酸グリセリン                            ２．０
ポリオキシエチレン（２０）ソルビタンモノラウリン酸エステル  １．５
ステアリルアルコール                                        ５．０
石鹸粉末                                                    ０．１
豚煮骨抽出液（実施例１）                                    ０．５
香料・防腐剤                                                ０．１
精製水                                              全量  １００
（処方７：ジェル）
ポリアクリル酸アルキル粉末              ５．０
エタノール                              ８．０
カルボキシビニルポリマー                ０．２
酵素分解豚煮骨抽出液（実施例２）        ５．０
水酸化カリウム                          ０．０２
香料・防腐剤                            適量
精製水                            全量  １００
（処方８：エッセンス）
グリセリン                                                    ５．０
１，３−ブチレングリコール                                    ２．０
ヒアルロン酸ナトリウム                                        ０．０１
キシリトール                                                  ０．５
海藻エキス                                                    ０．１
生豚骨精製エキス（実施例３）                                  ５．０
香料・防腐剤。ｐＨ調整剤                                      適量
精製水                                                  全量  １００
（処方９：リップクリーム）
固形パラフィン                        １０．４
ひまし油                              ２０．０
ラノリン                              １５．０
ミツロウ                                ５．０
キャデリラロウ                        １０．０
カルナバロウ                            ５．０
２−エチルヘキサン酸セチル            ２０．０
ミリスチン酸イソプロピル              １３．０
豚煮骨抽出液（実施例１）                ０．５
香料・防腐剤                            ０．１
（処方１０：パック）
ポリビニルアルコール                          １５．０
カルボキシメチルセルロースナトリウム            ５．０
プロピレングリコール                            ３．０
エタノール                                    １０．０
豚煮骨抽出液（実施例１）                        ０．１
香料・防腐剤                                    適量
精製水                                    全量  １００
（処方１１：ヘアトニック）
酢酸ＤＬ−α−トコフェノール                        ０．１
ポリエチレングリコール３００                        ０．１
ポリオキシエチレンステアリルエーテル（２０ＥＯ）    ２．０
ミリスチン酸イソプロピル                              ３．０
Ｌ−メントール                                        ０．２
エタノール                                          ８０．０
豚煮骨抽出液（実施例１）                              ０．１
香料・防腐剤                                          適量
精製水                                          全量  １００
（処方１２：ヘアクリーム）
酢酸ＤＬ−α−トコフェノール                            ０．１
ジメチルシリコーンガム（重合度１２０００）              １．０
オレイン酸エチル                                        ２．０
ミリスチン酸イソプロピル                                ２．０
流動パラフィン                                          １．０
モノステアリン酸ポリエチレングリコール（４０ＥＯ）      ３．０
親油型モノステアリン酸グリセリン                        １．５
ステアリルアルコール                                    ２．０
Ｌ−メントール                                          ０．３
ポリエチレングリコール１５００                          １．０
１，３−ブチレングリコール                              ２．０
豚煮骨抽出液（実施例１）                                １．０
香料・防腐剤                                            適量
精製水                                            全量  １００
（処方１３：ヘアローション）
グリセリン                                                    ２．０
１，３−ブチレングリコール                                    ２．０
プロピレングリコール                                          ２．０
オレイルアルコール                                            ０．１
ポリオキシエチレン（２０）ソルビタンモノラウリン酸エステル    ０．５
エタノール                                                  ３０．０
豚煮骨抽出液（実施例１）                                      ０．７
香料・防腐剤                                                適量
精製水                                                  全量  １００【００４３】比較例１
（比較処方１：化粧水）
グリセリン                                                    ３．０
プロピレングリコール                                          ２．０
オレイルアルコール                                            ０．１
ポリオキシエチレン（２０）ソルビタンモノラウリン酸エステル    １．５
エタノール                                                  ２０．０
香料・防腐剤                                                    適量
精製水                                                  全量  １００
（比較処方２：化粧水）
グリセリン                                                    ３．０
プロピレングリコール                                          ２．０
オレイルアルコール                                            ０．１
ポリオキシエチレン（２０）ソルビタンモノラウリン酸エステル    １．５
豚真皮由来コラーゲン                                          ０．２
エタノール                                                  ２０．０
香料・防腐剤                                                    適量
精製水                                                  全量  １００
（比較処方３：化粧水  オステオカルシン：０．０００００１重量％）
グリセリン                                                    ３．０
プロピレングリコール                                          ２．０
オレイルアルコール                                            ０．１
ポリオキシエチレン（２０）ソルビタンモノラウリン酸エステル    １．５
豚煮骨抽出液（実施例１）                                      ０．０００２
エタノール                                                  ２０．０
香料・防腐剤                                                    適量
精製水                                                  全量  １００【００４４】試験例１  肌荒れ改善試験
５人のヒトの上腕に、０．１％ラウリル硫酸ナトリウム水溶液を３日間連続して塗布して、人工的に肌荒れの状態をつくった。その後、第１表に示すように実施例で得られたオステオカルシン水溶液を毎日１回、３週間連続して前期上腕に塗布し、その部分の肌荒れ状態を目視で観察し、肌荒れ改善効果の度合いを評価した。比較のために純水、豚真皮由来のコラーゲンも同様に評価した。
肌荒れ改善効果を評価した判定基準
４：顕著な改善効果が認められた（有効大）
３：かなり改善効果が認められた（有効）
２：やや改善効果が認められた（やや有効）
１：あまり改善効果が認められなかった（有効小）
０：改善効果が認められなかった（無効）【００４５】
【表１】
2019001769.tif 000002
【００４６】  表１の試験結果から分かるように、本発明のオルテオカルシンを含む豚骨抽出液の方が比較対象のものよりも明らかに肌荒れ改善効果が認められることが分かる。【００４７】試験例２  保湿効果（潤い感）改善試験、肌荒れの改善試験および刺激感の評価試験
下肢の肌が乾燥しやすく、肌荒れに悩む中高年女性の被験者１０名をパネラーとして、実施例１の処方１の化粧水を片方の下肢に、比較例１の化粧水（比較処方１，２，３）をもう片方の下肢に、入浴後に１日１回塗布した。試験実施前と１ケ月間塗布した箇所の皮膚の状態により以下の判定基準に従って、パネラー自身が評価し回答を得た。その結果を表２に示す。
肌の保湿効果を潤い感として評価した判定基準
＋＋＋    ：使用前に比べて潤い感が非常に改善した（有効大）
＋＋      ：使用前に比べて潤い感がかなり改善した（有効）
＋        ：使用前に比べて潤い感がやや改善した（やや有効）
−        ：使用前と比べて潤い感が同等以下である（無効）
肌の滑らかさ、肌理の細やかさ（キメ、くすみ、シワ）の判定基準
＋＋＋    ：使用前に比べて非常に改善した（有効大）
＋＋      ：使用前に比べてかなり改善した（有効）
＋        ：使用前に比べてやや改善した（やや有効）
−        ：使用前と比べて同等以下である（無効）
皮膚の刺激感の判定基準
＋＋＋  ：かなりの刺激を感じる  （刺激感大）
＋＋    ：刺激感を感じる        （刺激感）
＋      ：わずかに刺激感を感じる（やや刺激感）
−      ：刺激感を感じない      （刺激感無）【００４８】  表２の試験結果からから分かるように、本発明品を含む化粧水の方が比較対象の化粧水よりも明らかに肌の保湿改善効果や肌の肌荒れ・シワ・キメ・くすみなどの改善効果が認められ、刺激感もないことが分かる。【００４９】
【表２】
2019001769.tif 000003
【００５０】  本発明のオステオカルシンを含む豚骨抽出物を配合した皮膚外用料は、肌の保湿性、肌の滑らかさや肌理の細やかさ、シワ・キメ・くすみなどを改善することから、肌の保湿性、肌荒れの改善効果を有し、刺激感も少ないことは明らかである。本発明のオステオカルシンを含む骨抽出物を配合した皮膚外用料は、加齢に伴う皮膚のターンオーバーの低下と老化、血行不良、ストレス、紫外線や温度、気象条件などの外的要因による皮膚の細胞の新陳代謝の低下や、新しい細胞の再生機能の低下を改善するために、荒れた肌や乾燥肌、しわのある肌を肌が潤って滑らかで肌理の細かい弾力性のある艶やかで張りのある若い美肌になるものと考えられる。更に、本発明に配合するオステオカルシンはホルモン作用を有することから血行促進作用や毛髪細胞の活性化や再生が期待され、養毛剤や育毛剤に配合することができる。【００５１】
【産業上の利用可能性】
【００５２】  本発明のオステオカルシンを含む骨抽出物は、化粧水、乳液、ローション、クリーム、ジェル、エッセンス、リップクリーム、パック、ヘアトニック、ヘアクリームからなる群より選択される化粧品や薬用化粧品及び頭皮用剤などの皮膚の外用に供する医薬部外品又は皮膚外用薬の基剤を含む皮膚外用料に利用することができる。