(57)【要約】【課題】新規な整腸用組成物の提供。【解決手段】ラクトバチルス・パラカゼイNITE BP-01633を有効成分とする、整腸用組成物。【選択図】図１
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【特許請求の範囲】
【請求項１】
ラクトバチルス・パラカゼイＮＩＴＥ  ＢＰ−０１６３３を有効成分として含有する、整腸用組成物。
【請求項２】
前記ラクトバチルス・パラカゼイＮＩＴＥ  ＢＰ−０１６３３が加熱殺菌された、請求項１に記載の整腸用組成物。
【請求項３】
前記加熱殺菌されたラクトバチルス・パラカゼイＮＩＴＥ  ＢＰ−０１６３３が、破砕されている、請求項２に記載の整腸用組成物。
【請求項４】
排便障害の予防又は治療に用いられる、請求項１〜３のいずれか１項に記載の整腸用組成物。
【請求項５】
前記排便障害が、便秘又は下痢である、請求項４に記載の整腸用組成物。
【請求項６】
前記便秘又は下痢が、過敏性腸症候群、骨盤底機能不全、先天性消化管機能異常、腸閉塞、結腸腫瘍、代謝性疾患、中枢神経系疾患、末梢神経系疾患又は全身性疾患に起因する、便秘又は下痢である、請求項５に記載の整腸用組成物。
【請求項７】
前記便秘が、通過遅延型便秘、機能性便秘、器質性便秘又は薬剤誘発性便秘である、請求項５又は６に記載の整腸用組成物。
【請求項８】
前記下痢が、食中毒、感染性腸炎、潰瘍性大腸炎又は食物アレルギーに起因する、請求項５または６に記載の整腸用組成物。
【請求項９】
さらに、ビフィドバクテリウム属細菌及び／又はラクトバチルス属細菌（但し、ラクトバチルス・パラカゼイＮＩＴＥ  ＢＰ−０１６３３を除く。）を含有する、請求項１〜８のいずれか１項に記載の整腸用組成物。
【請求項１０】
前記ビフィドバクテリウム属細菌が哺乳動物の腸管由来である、請求項９に記載の整腸用組成物。
【請求項１１】
前記哺乳動物がヒトである、請求項１０に記載の整腸用組成物。
【請求項１２】
前記ビフィドバクテリウム属細菌が、ビフィドバクテリウム・ロンガム・サブスピーシーズ・ロンガム、ビフィドバクテリウム・インファンティス、ビフィドバクテリウム・ブレーベ、又はビフィドバクテリウム・ビフィダムである、請求項９〜１１のいずれか１項に記載の整腸用組成物。
【請求項１３】
前記ラクトバチルス属細菌（但し、ラクトバチルス・パラカゼイＮＩＴＥ  ＢＰ−０１６３３を除く。）が、ラクトバチルス・プランタラム、ラクトバチルス・カゼイ、ラクトバチルス・アシドフィルス、ラクトバチルス・デルビリッキィ・サブスピーシーズ・ブルガリクス、又はラクトバチルス・ラクチスである、請求項９〜１２のいずれか１項に記載の整腸用組成物。
【請求項１４】
飲食品組成物である、請求項１〜１３のいずれか１項に記載の整腸用組成物。
【請求項１５】
医薬品組成物である、請求項１〜１３のいずれか１項に記載の整腸用組成物。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、整腸用組成物に関する。詳細には、ラクトバチルス・パラカゼイNITE BP-01633を有効成分として含有する、整腸用組成物に関する。
【背景技術】
【０００２】
腸内細菌は腸内細菌叢を構成し、生理状態に影響を及ぼしている。腸機能は、不規則な生活や運動不足などの不摂生、ホルモンバランスの崩れ、精神的ストレスの負荷等によって悪化し、便秘や下痢といった排便障害につながる。また、排便障害が原因となって、腹痛、吐き気等を発症することがある。さらに、重篤な疾患や症候、症状又は障害等に起因して腸機能が悪化し、排便障害となることもある。そのため、腸機能を改善する効果、すなわち整腸効果を有する有効成分の探索が行われている。
【０００３】
これまでに、ラクトバチルス・ブレビスの死菌とラクトフェリンとを有効成分として含有する排便回数・排便量改善剤が知られている（特許文献１）。
また、ビフィズス菌、乳酸菌及び納豆菌を含有する排便促進剤が知られている（特許文献２）。
さらに、プラセンタ、乳酸菌、及び水素源を有効成分として含有することを特徴とする経口組成物が知られており、該乳酸菌は、ラクトバチルス・パラカゼイMCC1849であることが好ましいとされている（特許文献３）。
しかし、ラクトバチルス・パラカゼイNITE BP-01633が、それを摂取した（「投与された」場合を含む。）対象において整腸作用を発揮することは知られていない。
【０００４】
また、これまで、ラクトバチルス属細菌の死菌体を有効成分とする、乳酸菌の増殖促進剤が知られている（特許文献４）。
また、プロピオン酸菌の培養上清液又はその処理物を有効成分とする、ビフィズス菌増殖促進物質が知られている（特許文献５）。
さらに、ラクトバチルス・ガセリNY0509の生菌及び／又はラクトバチルス・カゼイNY1301の生菌が、ビフィドバクテリウム・ロンガムJCM 1217T、ビフィドバクテリウム・アドレセンティスJCM 1275T、ビフィドバクテリウム・ブレーベJCM 1192Tと混合培養されることにより、ビフィズス菌の増殖を促進する効果を奏することが知られている（非特許文献１）。
また、乳酸菌の死菌体を物理的に破壊して菌径を小さくすることにより、抗原提示細胞からのインターフェロンα産生能を増強する作用を有するナノ型乳酸菌が知られている（特許文献６）。
さらに、乳酸菌の菌体破壊物を有効成分として含有する脂質代謝改善剤であって、該菌体破壊物における菌体の平均長径が破壊前の0〜70%である、脂質代謝改善剤が知られている（特許文献７）。
しかし、ラクトバチルス・パラカゼイNITE BP-01633が、ビフィドバクテリウム属細菌の増殖を促進すること、及びラクトバチルス属細菌の増殖を促進することは知られていない。
【先行技術文献】
【特許文献】
【０００５】
【特許文献１】特開２０１４−１１１６６８号公報
【特許文献２】特開２００１−１６９７４９号公報
【特許文献３】特開２０１７−０１２１０４号公報
【特許文献４】特許第５５９２０４８号公報
【特許文献５】特許第３１２１０４６号公報
【特許文献６】特許第４０５４６９７号公報
【特許文献７】特許第５８０１８０２号公報
【非特許文献】
【０００６】
【非特許文献１】日本食品科学工学会誌，第48巻，第9号（2001）
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００７】
本発明は、新規な整腸用組成物の提供を課題とする。
【課題を解決するための手段】
【０００８】
本発明者らは、ラクトバチルス・パラカゼイNITE BP-01633が、該菌体を摂取した（「投与された」場合を含む。）対象において整腸作用を発揮することを見出して、本発明を完成するに至った。
【０００９】
すなわち、本発明は、ラクトバチルス・パラカゼイＮＩＴＥ  ＢＰ−０１６３３を有効成分として含有する、整腸用組成物である。
前記整腸用組成物は、前記ラクトバチルス・パラカゼイＮＩＴＥ  ＢＰ−０１６３３が加熱殺菌されたものであることを好ましい態様としている。
前記整腸用組成物は、前記加熱殺菌されたラクトバチルス・パラカゼイＮＩＴＥ  ＢＰ−０１６３３が、破砕されていることを好ましい態様としている。
前記整腸用組成物は、排便障害の予防又は治療に用いられることを好ましい態様としている。
前記整腸用組成物は、前記排便障害が、便秘又は下痢であることを好ましい態様としている。
前記整腸用組成物は、前記便秘又は下痢が、過敏性腸症候群、骨盤底機能不全、先天性消化管機能異常、腸閉塞、結腸腫瘍、代謝性疾患、中枢神経系疾患、末梢神経系疾患又は全身性疾患に起因する、便秘又は下痢であることを好ましい態様としている。
前記整腸用組成物は、前記便秘が、通過遅延型便秘、機能性便秘、器質性便秘又は薬剤誘発性便秘であることを好ましい態様としている。
前記整腸用組成物は、前記下痢が、食中毒、感染性腸炎、潰瘍性大腸炎又は食物アレルギーに起因することを好ましい態様としている。
前記整腸用組成物は、さらに、ビフィドバクテリウム属細菌及び／又はラクトバチルス属細菌（但し、ラクトバチルス・パラカゼイＮＩＴＥ  ＢＰ−０１６３３を除く。）を含有することを好ましい態様としている。
前記整腸用組成物は、前記ビフィドバクテリウム属細菌が哺乳動物の腸管由来であることを好ましい態様としている。
前記整腸用組成物は、前記哺乳動物がヒトであることを好ましい態様としている。
前記整腸用組成物は、前記ビフィドバクテリウム属細菌が、ビフィドバクテリウム・ロンガム・サブスピーシーズ・ロンガム、ビフィドバクテリウム・インファンティス、ビフィドバクテリウム・ブレーベ、又はビフィドバクテリウム・ビフィダムであることを好ましい態様としている。
前記整腸用組成物は、前記ラクトバチルス属細菌（但し、ラクトバチルス・パラカゼイＮＩＴＥ  ＢＰ−０１６３３を除く。）が、ラクトバチルス・プランタラム、ラクトバチルス・カゼイ、ラクトバチルス・アシドフィルス、ラクトバチルス・デルビリッキィ・サブスピーシーズ・ブルガリクス、又はラクトバチルス・ラクチスであることを好ましい態様としている。
前記整腸用組成物は、飲食品組成物であることを好ましい態様としている。
前記整腸用組成物は、医薬品組成物であることを好ましい態様としている。
【発明の効果】
【００１０】
本発明によれば、新規な整腸用組成物が提供できる。
【図面の簡単な説明】
【００１１】
【図１】ラクトバチルス・パラカゼイNITE BP-01633の加熱殺菌末を配合したゼリーを摂取した群と、該加熱殺菌末を配合しないプラセボゼリーを摂取した群（対照群）とについて、前観察期間に対する排便回数の平均値を表す図。
【図２】ラクトバチルス・パラカゼイNITE BP-01633の加熱殺菌体又はその超音波破砕物を含む場合と、いずれをも含まない場合とにおける、所定時間の培養後のビフィドバクテリウム・ビフィダムATCC 29521の菌数を表す図。
【図３】ラクトバチルス・パラカゼイNITE BP-01633の加熱殺菌体又はその超音波破砕物を含む場合と、いずれをも含まない場合とにおける、所定時間の培養後のビフィドバクテリウム・アドレセンティスATCC 15703の菌数を表す図。
【図４】ラクトバチルス・パラカゼイNITE BP-01633の加熱殺菌体又はその超音波破砕物を含む場合と、いずれをも含まない場合とにおける、所定時間の培養後のラクトバチルス・プランタラムATCC 14917の菌数を表す図。
【発明を実施するための形態】
【００１２】
以下、本発明を詳細に説明する。
本発明の整腸用組成物は、ラクトバチルス・パラカゼイNITE BP-01633を含む。以下、同菌体を「本発明の菌体」や「本菌体」、「NITE BP-01633」と記載することがある。
【００１３】
本発明の整腸用組成物は、混合物を含む概念であり、整腸用組成物の成分が均一であるか不均一であるかを問わない。
【００１４】
本発明の整腸用組成物の有効成分であるNITE BP-01633は、整腸作用を有する。本発明における整腸作用とは、腸機能を改善する作用をいう。具体的には、例えば、後述する便秘の場合のように、対象の排便回数及び／又は排便量が少ない場合には、対象の排便回数及び／又は排便量を増加させる排便促進作用を意味し、対象が本菌体を摂取した（本明細書では、「投与された」場合を含む。）ときに、摂取しない（本明細書では、「投与しない」場合を含む。）ときよりも、排便回数及び／又は排便量が多いことを意味する。具体的には、排便回数については週当たりの回数で、対象が本菌体を摂取したときに摂取しないときよりも、２回以上多いことが好ましく、３回以上多いことが好ましく、さらに４回以上多いことが好ましい。
一方、後述する下痢の場合のように、対象の排便回数及び／又は排便量が多い場合には、対象の排便回数及び／又は排便量を減少させる排便抑制作用を意味し、対象が本菌体を摂取した（本明細書では、「投与された」場合を含む。）ときに、摂取しない（本明細書では、「投与しない」場合を含む。）ときよりも、排便回数及び／又は排便量が少ないことを意味する。具体的には、排便回数については、１日あたりの回数で、対象が本菌体を摂取したときに摂取しないときよりも、１回以上少ないことが好ましく、２回以上少ないことがより好ましく、３回以上少ないことがさらに好ましい。
【００１５】
本菌体は、2013年6月6日に、独立行政法人製品評価技術基盤機構バイオテクノロジーセンター特許微生物寄託センター（NPMD）（〒292-0818  千葉県木更津市かずさ鎌足2-5-8 122号室）に寄託され、NITE P-01633の受託番号が付与され、2013年12月19日にブダペスト条約に基づく国際寄託に移管され、NITE BP-01633の受託番号が付与されている。
【００１６】
本菌体は、上記寄託菌体に制限されず、上記寄託菌体と実質的に同等の細菌であってもよい。上記寄託菌体と実質的に同等の細菌とは、ラクトバチルス・パラカゼイであって、
対象がその細菌を摂取したときにその対象において整腸作用を発揮することができ、さらにその１６ＳｒＲＮＡ遺伝子の塩基配列が、上記寄託菌体の１６ＳｒＲＮＡ遺伝子の塩基配列に対して、好ましくは９８％以上、さらに好ましくは９９％以上、より好ましくは１００％の相同性を有し、且つ、好ましくは上記寄託菌体と同一の菌学的性質を有する細菌である。また、本菌体には、同菌体を親株とする変異株及び遺伝子組換え株も含まれる。
【００１７】
本菌体は、例えば、同菌体を培養することにより容易に取得することができる。培養する方法は、本菌体が増殖できる限り特に限定されず、ラクトバチルス属細菌（乳酸菌）の培養に通常用いられる方法を必要により適宜修正して用いることができる。例えば、培養温度は２５〜５０℃でよく、３５〜４２℃であることが好ましい。また培養は好気条件下、及び嫌気条件下のいずれで行ってもよいが、嫌気条件下で行うことが好ましく、例えば、炭酸ガス等の嫌気ガスを通気しながら培養することができる。また、液体静置培養等の微好気条件下で培養してもよい。
【００１８】
本菌体を培養する培地は特に限定されず、ラクトバチルス属細菌（乳酸菌）の培養に通常用いられる培地を必要により適宜修正して用いることができる。すなわち、炭素源としては、例えば、ガラクトース、グルコース、フルクトース、マンノース、セロビオース、マルトース、ラクトース、スクロース、トレハロース、デンプン、デンプン加水分解物、廃糖蜜等の糖類を資化性に応じて使用できる。窒素源としては、例えば、アンモニア、硫酸アンモニウム、塩化アンモニウム、硝酸アンモニウムなどのアンモニウム塩類や硝酸塩類を使用できる。また、無機塩類としては、例えば、塩化ナトリウム、塩化カリウム、リン酸カリウム、硫酸マグネシウム、塩化カルシウム、硝酸カルシウム、塩化マンガン、硫酸第一鉄等を用いることができる。また、ペプトン、大豆粉、脱脂大豆粕、肉エキス、酵母エキス等の有機成分を用いてもよい。また、調製済みの培地としては、例えばＭＲＳ培地を好適に用いることができる。
【００１９】
本菌体は、培養後、得られた培養物をそのまま用いてもよく、希釈又は濃縮して用いてもよく、培養物から回収した菌体を用いてもよい。また、本発明の効果を損なわない限り、培養後に加熱、及び凍結乾燥等の種々の追加操作を行うことができる。また、本菌体は、生菌であっても死菌であってもよいが、死菌であることが好ましく、死菌としては、加熱や凍結乾燥等により殺菌された死菌が挙げられる。その他の死菌体の調製法として、噴霧乾燥法（スプレードライ法）、レトルト殺菌法、凍結乾燥法、ＵＨＴ殺菌法、加圧殺菌法、高圧蒸気滅菌法、乾熱滅菌法、流通蒸気消毒法、電磁波殺菌法、電子線滅菌法、高周波滅菌法、放射線滅菌法、紫外線殺菌法、酸化エチレンガス滅菌法、過酸化水素ガスプラズマ滅菌法、化学的殺菌法（アルコール殺菌法、ホルマリン固定法、電解水処理法）等が挙げられる。また、本菌体は、破砕物であってもよい。破砕物は、生菌を破砕したものでも死菌を破砕したものでもよく、破砕後に加熱や凍結乾燥等を施したものでもよい。
【００２０】
また、破砕は、当技術分野で公知の方法及び機器を使用した、例えば、物理的破砕、酵素溶解処理、薬品処理、自己溶解処理などによる破砕を選択することができる。
物理的破砕は、菌体懸濁液の状態での処理、菌体粉末の状態での処理のいずれによってもよい。物理的破砕の例として、超音波ホモジナイザー、ホモジナイザー、ボールミル、ビーズミル、ダイノミル、遊星ミル等を使用した撹拌による破砕、ジェットミル、フレンチプレス、細胞破砕機等を使用した圧力による破砕、フィルター濾過処理により菌体を損傷させることによる破砕を選択することができる。
酵素溶解処理としては、例えばリゾチームなどの酵素を用いて、乳酸菌菌体の細胞構造を破壊することができる。
薬品処理としては、ダイズリン脂質、グリセリン脂肪酸エステルなどの界面活性剤を使用して、乳酸菌菌体の細胞構造を破壊することができる。
自己溶解処理としては、一部の乳酸菌自身の酵素により乳酸菌菌体を溶解することがで
きる。
なお、本発明においては、他の薬品や化合物を添加する必要がないため物理的破砕が好ましい。
【００２１】
後述するように、本菌体は、ビフィドバクテリウム属細菌及び／又はラクトバチルス属細菌（ただし、本菌体を除く。）の増殖を促進することから、本発明における整腸作用は、本菌体を摂取した対象においてビフィドバクテリウム属細菌及び／又はラクトバチルス属細菌（ただし、本菌体を除く。）の増殖が促進されることによるものと考えられる。
よって、本発明の整腸用組成物は、さらに、ビフィドバクテリウム属細菌及び／又はラクトバチルス属細菌（但し、本菌体を除く。）を含有することが好ましい。尚、ビフィドバクテリウム属細菌もラクトバチルス属細菌（但し、本菌体を除く。）も、一種または複数種であってよい。また、後述するように、本菌体は、ビフィドバクテリウム属細菌及び／又はラクトバチルス属細菌の増殖促進用組成物としても用いられる。
【００２２】
ビフィドバクテリウム属細菌としては、哺乳動物の腸管由来であることが好ましい。例えば、ビフィドバクテリウム・ロンガム・サブスピーシーズ・ロンガム（Bifidobacterium longum subsp. longum）、ビフィドバクテリウム・インファンティス（Bifidobacterium infantis）、ビフィドバクテリウム・ブレーベ（Bifidobacterium breve）、ビフィドバクテリウム・ビフィダム（Bifidobacterium bifidum）、ビフィドバクテリウム・アドレセンティス（Bifidobacterium adolescentis）、ビフィドバクテリウム・カテヌラートム（Bifidobacterium catenulatum）、ビフィドバクテリウム・アニマリス（Bifidobacterium animalis）、ビフィドバクテリウム・シュードロンガム（Bifidobacterium pseudolongum）、ビフィドバクテリウム・ボウム（Bifidobacterium boum）等が挙げられる。
【００２３】
哺乳動物としては、ヒト、ウシ、ヒツジ、ヤギ、ブタ、イヌ、ネコ、ウマ等が挙げられる。
尚、上記ビフィドバクテリウム属細菌のうち、ヒト腸管由来のビフィドバクテリウム属細菌は、ビフィドバクテリウム・ロンガム・サブスピーシーズ・ロンガム（Bifidobacterium longum subsp. longum）、ビフィドバクテリウム・インファンティス（Bifidobacterium infantis）、ビフィドバクテリウム・ブレーベ（Bifidobacterium breve）、ビフィドバクテリウム・ビフィダム（Bifidobacterium bifidum）、ビフィドバクテリウム・アドレセンティス（Bifidobacterium adolescentis）、ビフィドバクテリウム・カテヌラートム（Bifidobacterium catenulatum）である。
【００２４】
このうち、ビフィドバクテリウム・ビフィダム（Bifidobacterium bifidum）の具体例としては、ビフィドバクテリウム・ビフィダムATCC 29521（Bifidobacterium bifidum ATCC 29521）、及びそれらの変異株菌体等が挙げられる。また、ビフィドバクテリウム・アドレセンティス（Bifidobacterium adolescentis）の具体例としては、ビフィドバクテリウム・アドレセンティスATCC 15703（Bifidobacterium adolescentis ATCC 15703）、及びそれらの変異株菌体等が挙げられる。上記菌体はいずれも、アメリカン・タイプ・カルチャー・コレクション（住所：12301  Parklawn Drive, Rockville, Maryland 20852, United States of America）から入手することができる。
【００２５】
ラクトバチルス属細菌（ただし、本菌体を除く。）としては、例えば、ラクトバチルス・プランタラム（Lactobacillus plantarum）、ラクトバチルス・カゼイ（Lactobacillus
casei）、ラクトバチルス・アシドフィルス（Lactobacillus acidophilus）、ラクトバチルス・デルビリッキィ・サブスピーシーズ・ブルガリクス（Lactobacillus delbrueckii subsp. bulgaricus）、ラクトバチルス・ラクチス（Lactococcus lactis）等が挙げられる。
【００２６】
このうち、ラクトバチルス・プランタラム（Lactobacillus plantarum）の具体例としては、ラクトバチルス・プランタラムATCC 14917（Lactobacillus plantarum ATCC 14917）、及びそれらの変異株菌体等が挙げられる。上記菌体は、アメリカン・タイプ・カルチャー・コレクション（住所：12301  Parklawn Drive, Rockville, Maryland 20852, United States of America）から入手することができる。
【００２７】
本発明の整腸用組成物は、整腸作用を有しており、整腸によって予防又は治療され得る疾患、症候、症状又は障害等の予防又は治療に使用することができる。換言すれば、腸機能を改善することによって予防又は治療され得る疾患、症候、症状又は障害等の予防又は治療に使用することができる。尚、「治療」には、改善も含まれる。また、対象は、一又は複数の疾患、症候、症状又は障害等を有していてよい。
このうち、障害としては、例えば、排便障害が挙げられる。
排便障害としては、例えば、便秘、下痢等が挙げられる。尚、本明細書においては、下痢は便失禁を含むものとする。
便秘とは、排便が困難になっている状態を指す障害であり、便が固い、排便に苦労する、何日も排便がない場合等が挙げられ、排便回数及び／又は排便量が少ない。
下痢とは、健常時の便と比較して非常に緩いゲル（粥）状又は液体状の便が排泄される障害であり、軟便や泥状便、水様便等と称され、排便回数及び／又は排便量が多い。
便失禁とは、無意識又は意に反して排便してしまう障害であり、排便回数及び／又は排便量が多い。便失禁としては、例えば、腹圧性便失禁、切迫性便失禁、溢流性便失禁、機能性便失禁等が挙げられる。
【００２８】
便秘、下痢の具体例としては、過敏性腸症候群、骨盤底機能不全、先天性消化管機能異常、腸閉塞、結腸腫瘍、代謝性疾患、中枢神経系疾患、末梢神経系疾患又は全身性疾患等に起因する、便秘又は下痢が挙げられる。腸閉塞としては、例えば、腸管麻痺性イレウス等が挙げられる。また、下痢の具体例としては、さらに、食中毒、感染性腸炎、潰瘍性大腸炎又は食物アレルギー等に起因する、下痢が挙げられる。
また、便秘としては、例えば、通過遅延型便秘、機能性便秘、器質性便秘又は薬剤誘発性便秘等が挙げられる。
【００２９】
本発明の整腸用組成物は、飲食品組成物、医薬組成物、又は飼料組成物として利用できる。例えば、整腸用飲食品組成物、整腸用医薬組成物、整腸用飼料組成物を提供することができる。
尚、本発明の整腸用組成物としては、プラセンタ、ラクトバチルス・パラカゼイNITE BP-01633及び水素源を含有する、整腸剤（経口用を含む。）及び整腸用組成物（経口用を含む。）を除くことが好ましい。
【００３０】
本発明の整腸用飲食品組成物は、本菌体を含有する限り特に制限されない。飲食品組成物としては、液状、ペースト状、ゲル状固体、粉末等の形態を問わず、飲食品であってもよく、錠菓、流動食等のほか、例えば、パン、マカロニ、スパゲッティ、めん類、ケーキミックス、から揚げ粉、パン粉等の小麦粉製品；即席めん、カップめん、レトルト・調理食品、調理缶詰め、電子レンジ食品、即席スープ・シチュー、即席みそ汁・吸い物、スープ缶詰め、フリーズ・ドライ食品、その他の即席食品等の即席食品類；農産缶詰め、果実缶詰め、ジャム・マーマレード類、漬物、煮豆類、農産乾物類、シリアル（穀物加工品）等の農産加工品；水産缶詰め、魚肉ハム・ソーセージ、水産練り製品、水産珍味類、つくだ煮類等の水産加工品；畜産缶詰め・ペースト類、畜肉ハム・ソーセージ等の畜産加工品；加工乳、乳飲料、ヨーグルト類、乳酸菌飲料類、チーズ、アイスクリーム類、調製粉乳類、クリーム、その他の乳製品等の乳・乳製品；バター、マーガリン類、植物油等の油脂類；しょうゆ、みそ、ソース類、トマト加工調味料、みりん類、食酢類等の基礎調味料；調理ミックス、カレーの素類、たれ類、ドレッシング類、めんつゆ類、スパイス類、その
他の複合調味料等の複合調味料・食品類；素材冷凍食品、半調理冷凍食品、調理済冷凍食品等の冷凍食品；キャラメル、キャンディー、グミ、チューインガム、チョコレート、クッキー、ビスケット、ケーキ、パイ、スナック、クラッカー、和菓子、米菓子、豆菓子、デザート菓子、ゼリー、その他の菓子などの菓子類；炭酸飲料、天然果汁、果汁飲料、果汁入り清涼飲料、果肉飲料、果粒入り果実飲料、野菜系飲料、豆乳、豆乳飲料、コーヒー飲料、お茶飲料、粉末飲料、濃縮飲料、スポーツ飲料、栄養飲料、アルコール飲料、その他の嗜好飲料等の嗜好飲料類、ベビーフード、ふりかけ、お茶潰けのり等のその他の市販食品等；育児用調製粉乳；経腸栄養食；特別用途食品、保健機能食品（特定保健用食品、栄養機能食品、機能性表示食品）；栄養補助食品等が挙げられる。
また、飲食品組成物は、サプリメントであってもよく、例えばタブレット状のサプリメントであってもよい。サプリメントである場合には、一日当りの食事量及び摂取カロリーについて他の食品に影響されることなく、本菌体を摂取できる。
【００３１】
本発明の整腸用飲食品組成物は、通常の飲食品の原料に本菌体を添加することにより製造することができ、本菌体を添加すること以外は、通常の飲食品と同様にして製造することができる。本菌体の添加は、飲食品組成物の製造工程のいずれの段階で行ってもよい。また、添加した本菌体による発酵工程を経て、飲食品組成物が製造されてもよい。そのような飲食品組成物としては、乳酸菌飲料、及び発酵乳等が挙げられる。
飲食品組成物の原料としては、通常の飲食品に用いられる原料を使用することができる。製造された飲食品組成物は、経口的に摂取することが可能である。
【００３２】
本発明の整腸用飲食品組成物には、飲食品組成物製造のための原料、及び食品添加物等、飲食品組成物の製造工程又は製造後に飲食品組成物に添加されるものも含まれる。例えば、本菌体は、発酵乳製造用スターターとして使用することができる。また、本菌体を、製造された発酵乳に後から添加することもできる。
【００３３】
また、本発明の整腸用飲食品組成物には、本発明の効果を損なわない限り、公知の又は将来的に見出されるプロバイオティクス効果を有する成分又はプロバイオティクス効果を補助する成分を使用することができる。例えば、本発明の整腸用飲食品組成物は、ホエイタンパク質、カゼインタンパク質、大豆タンパク質、若しくはエンドウ豆タンパク質（ピープロテイン）等の各種タンパク質若しくはその混合物、分解物；ロイシン、バリン、イソロイシン若しくはグルタミン等のアミノ酸；ビタミンＢ６若しくはビタミンＣ等のビタミン類；クレアチン；クエン酸；フィッシュオイル；又は、イソマルトオリゴ糖、ガラクトオリゴ糖、キシロオリゴ糖、大豆オリゴ糖、フラクトオリゴ糖、ラクチュロース等のオリゴ糖等の成分と、本菌体とを配合して製造することができる。
【００３４】
本発明の整腸用飲食品組成物における本菌体の含有量は、飲食品組成物の態様によって適宜設定されるが、通常、飲食品組成物中に、１×１０4〜１×１０13ｃｆｕ／ｇまたは１×１０4〜１×１０13ｃｆｕ／ｍｌの範囲内であることが好ましく、１×１０7〜１×１０11ｃｆｕ／ｇまたは１×１０7〜１×１０11ｃｆｕ／ｍｌの範囲内であることがより好ましい。「ｃｆｕ」は、colony forming unit（コロニー形成単位）を表す。本菌体が死菌の場合、ｃｆｕ／ｇまたはｃｆｕ／ｍｌは、個細胞／ｇまたは個細胞／ｍｌと置き換えることができる。本菌体が破砕物の場合、ｃｆｕ／ｇもしくはｃｆｕ／ｍｌまたは個細胞／ｇもしくは個細胞／ｍｌは、上記ｃｆｕ／ｇもしくはｃｆｕ／ｍｌまたは個細胞／ｇもしくは個細胞／ｍｌの生菌又は死菌の破砕物と置き換えることができる。
【００３５】
本発明の整腸用飲食品組成物は、単独で摂取してもよいし、他の飲食品組成物若しくは飲食品又は医薬組成物若しくは医薬、例えば、他の整腸用飲食品組成物若しくは飲食品又は医薬組成物若しくは医薬、前記整腸によって予防又は治療され得る疾患、症候、症状又は障害等の予防又は治療のための飲食品組成物若しくは飲食品又は医薬組成物若しくは医
薬等と共に摂取してもよい。
【００３６】
本発明の整腸用飲食品組成物は、整腸用との用途が表示された飲食品組成物又は飲食品として販売することができる。また、本発明の整腸用飲食品組成物は、前記整腸によって予防又は治療され得る疾患、症候、症状又は障害等の予防用又は治療用との用途が表示された飲食品組成物又は飲食品として販売することができる。また、本発明の整腸用飲食品組成物又は飲食品には、「整腸用」等の表示をすることができる。また、これ以外でも、整腸によって二次的に生じる効果を表す文言であれば、使用できることはいうまでもない。
【００３７】
また、本発明の整腸用飲食品組成物は、プロバイオティクス等の用途（保健用途を含む）が表示された飲食品組成物又は飲食品として提供・販売されることが可能である。また、飲食品組成物又は飲食品の摂取対象として、「ビフィズス菌と暮らす生活を望む方」、「腸内環境を改善したい方」、「お腹の調子を整えたい方」、「良好な腸内環境を形成したい方」等と表示して提供・販売されることが可能である。
【００３８】
前記「表示」とは、需要者に対して上記用途を知らしめるための全ての行為を意味し、上記用途を想起・類推させうるような表示であれば、表示の目的、表示の内容、表示する対象物及び媒体等の如何に拘わらず、すべて本発明の「表示」に該当する。しかしながら、需要者が上記用途を直接的に認識できるような表現により表示することが好ましい。
具体的には、本発明の整腸用飲食品組成物又は整腸用飲食品に係る商品又は商品の包装に上記用途を記載する行為、商品又は商品の包装に上記用途を記載したものを譲渡し、引渡し、譲渡若しくは引渡しのために展示し、輸入する行為、商品に関する広告、価格表若しくは取引書類に上記用途を記載して展示し、若しくは頒布し、又はこれらを内容とする情報に上記用途を記載して電磁気的（インターネット等）方法により提供する行為等が例示でき、特に包装、容器、カタログ、パンフレット、ＰＯＰ等の販売現場における宣伝材、その他の書類等への表示が好ましい。
【００３９】
また、表示としては、行政等によって許可された表示（例えば、行政が定める各種制度に基づいて認可を受け、そのような認可に基づいた態様で行う表示）であることが好ましい。例えば、保健機能食品など、より具体的には保健機能食品、健康食品、機能性食品、経腸栄養食品、特別用途食品、栄養機能食品、医薬用部外品等としての表示を例示することができ、その他消費者庁によって認可される表示、例えば、特定保健用食品、栄養機能食品、機能性表示食品、これに類似する制度にて認可される表示を例示できる。後者の例としては、特定保健用食品としての表示、条件付き特定保健用食品としての表示、身体の構造や機能に影響を与える旨の表示、疾病リスク低減表示、科学的根拠に基づいた機能性の表示等を例示することができる。さらに詳細には、健康増進法に規定する特別用途表示の許可等に関する内閣府令（平成二十一年八月三十一日内閣府令第五十七号）に定められた特定保健用食品としての表示（特に保健の用途の表示）、及びこれに類する表示等を例示することができる。
【００４０】
本発明の整腸用医薬組成物は、本菌体を含有する限り特に制限されない。本発明の整腸用医薬組成物としては、本菌体をそのまま使用してもよく、生理的に許容される液体又は固体の製剤担体を配合し製剤化して使用してもよい。
【００４１】
本発明の整腸用医薬組成物の剤形は特に制限されず、具体的には、錠剤、丸剤、散剤、液剤、懸濁剤、乳剤、顆粒剤、カプセル剤、シロップ剤、坐剤、注射剤、軟膏剤、貼付剤、点眼剤、及び点鼻剤等を例示できる。また、製剤化にあたっては、製剤担体として通常使用される賦形剤、結合剤、崩壊剤、滑沢剤、安定剤、矯味矯臭剤、希釈剤、界面活性剤、又は注射剤用溶剤等の添加剤を使用することができる。
【００４２】
また、前記製剤担体としては、剤形に応じて、各種有機又は無機の担体を用いることができる。固形製剤の場合の担体としては、例えば、賦形剤、結合剤、崩壊剤、滑沢剤、安定剤、矯味矯臭剤等が挙げられる。
【００４３】
賦形剤としては、例えば、乳糖、白糖、ブドウ糖、マンニット、ソルビット等の糖誘導体；トウモロコシデンプン、馬鈴薯デンプン、α‐デンプン、デキストリン、カルボキシメチルデンプン等のデンプン誘導体；結晶セルロース、ヒドロキシプロピルセルロース、ヒドロキシプロピルメチルセルロース、カルボキシメチルセルロース、カルボキシメチルセルロースカルシウム等のセルロース誘導体；アラビアゴム；デキストラン；プルラン；軽質無水珪酸、合成珪酸アルミニウム、メタ珪酸アルミン酸マグネシウム等の珪酸塩誘導体；リン酸カルシウム等のリン酸塩誘導体；炭酸カルシウム等の炭酸塩誘導体；硫酸カルシウム等の硫酸塩誘導体等が挙げられる。
【００４４】
結合剤としては、例えば、上記賦形剤の他、ゼラチン；ポリビニルピロリドン；マクロゴール等が挙げられる。
【００４５】
崩壊剤としては、例えば、上記賦形剤の他、クロスカルメロースナトリウム、カルボキシメチルスターチナトリウム、架橋ポリビニルピロリドン等の化学修飾されたデンプン又はセルロース誘導体等が挙げられる。
【００４６】
滑沢剤としては、例えば、タルク；ステアリン酸；ステアリン酸カルシウム、ステアリン酸マグネシウム等のステアリン酸金属塩；コロイドシリカ；ピーガム、ゲイロウ等のワックス類；硼酸；グリコール；フマル酸、アジピン酸等のカルボン酸類；安息香酸ナトリウム等のカルボン酸ナトリウム塩；硫酸ナトリウム等の硫酸塩類；ロイシン；ラウリル硫酸ナトリウム、ラウリル硫酸マグネシウム等のラウリル硫酸塩；無水珪酸、珪酸水和物等の珪酸類；デンプン誘導体等が挙げられる。
【００４７】
安定剤としては、例えば、メチルパラベン、プロピルパラベン等のパラオキシ安息香酸エステル類；クロロブタノール、ベンジルアルコール、フェニルエチルアルコール等のアルコール類；塩化ベンザルコニウム；無水酢酸；ソルビン酸等が挙げられる。
【００４８】
矯味矯臭剤としては、例えば、甘味料、酸味料、香料等が挙げられる。
なお、経口投与用の液剤の場合に使用する担体としては、水等の溶剤、矯味矯臭剤等が挙げられる。
【００４９】
本発明の整腸用医薬組成物における本菌体の含有量は、剤形、用法、対象の年齢、性別、疾患や症候、症状又は障害の種類、その程度、及びその他の条件等により適宜設定されるが、通常、１×１０4〜１×１０13ｃｆｕ／ｇまたは１×１０4〜１×１０13ｃｆｕ／ｍｌの範囲内であることが好ましく、１×１０7〜１×１０11ｃｆｕ／ｇまたは１×１０7〜１×１０11ｃｆｕ／ｍｌの範囲内であることがより好ましい。本菌体が死菌の場合、ｃｆｕ／ｇまたはｃｆｕ／ｍｌは、個細胞／ｇまたは個細胞／ｍｌと置き換えることができる。本菌体が破砕物の場合、ｃｆｕ／ｇもしくはｃｆｕ／ｍｌまたは個細胞／ｇもしくは個細胞／ｍｌは、上記ｃｆｕ／ｇもしくはｃｆｕ／ｍｌまたは個細胞／ｇもしくは個細胞／ｍｌの生菌又は死菌の破砕物と置き換えることができる。
【００５０】
本発明の整腸用医薬組成物の投与時期は特に限定されず、対象となる疾患や症候、症状又は障害の予防方法又は治療方法に従って、適宜投与時期を選択することが可能である。また、予防的に投与してもよく、維持療法に用いてもよい。また、投与形態は製剤形態、患者の年齢、性別、その他の条件、患者の症状の程度等に応じて決定されることが好まし
い。なお、本発明の整腸用医薬組成物は、いずれの場合も１日１回又は複数回に分けて投与することができ、また、数日又は数週間に１回の投与としてもよい。対象としては、ヒト、ウシ、ヒツジ、ヤギ、ブタ、イヌ、ネコ、ウマ等が挙げられる。
【００５１】
本発明の整腸用医薬組成物は、単独で投与してもよいし、他の医薬組成物若しくは医薬又は飲食品組成物若しくは飲食品、例えば、他の整腸用医薬組成物若しくは医薬又は飲食品組成物若しくは飲食品、前記整腸によって予防又は治療され得る疾患や症候、症状又は障害に対する医薬組成物若しくは医薬（例えば、抗がん剤等）又は飲食品組成物若しくは飲食品、便秘薬、胃腸薬、下剤、下痢止め、鎮痛剤等と併用してもよい。
【００５２】
本発明の整腸用飼料組成物としては、ペットフード、家畜飼料、及び養魚飼料等が例示される。本発明の整腸用飼料組成物は、一般的な飼料又はその原料、例えば、穀類、粕類、糠類、魚粉、骨粉、油脂類、脱脂粉乳、ホエー、鉱物質飼料、又は酵母類等に本菌体を混合することにより製造することができる。また、例えばサイレージの様に、添加した本菌体による発酵工程を経て、飼料組成物が製造されてもよい。製造された飼料組成物は、一般的な哺乳動物、家畜類、養魚類、及び愛玩動物等に経口的に投与することが可能である。
【００５３】
本発明の整腸用飼料組成物における本菌体の含有量は、飼料組成物の態様や投与対象によって適宜設定されるが、１×１０6〜１×１０12ｃｆｕ／ｇまたは１×１０6〜１×１０12ｃｆｕ／ｍｌの範囲内であることが好ましく、１×１０7〜１×１０11ｃｆｕ／ｇまたは１×１０7〜１×１０11ｃｆｕ／ｍｌの範囲内であることがより好ましい。本菌体が死菌の場合、ｃｆｕ／ｇまたはｃｆｕ／ｍｌは、個細胞／ｇまたは個細胞／ｍｌと置き換えることができる。本菌体が破砕物の場合、ｃｆｕ／ｇもしくはｃｆｕ／ｍｌまたは個細胞／ｇもしくは個細胞／ｍｌは、上記ｃｆｕ／ｇもしくはｃｆｕ／ｍｌまたは個細胞／ｇもしくは個細胞／ｍｌの生菌又は死菌の破砕物と置き換えることができる。
【００５４】
本発明の他の態様は、整腸用組成物の製造における、ラクトバチルス・パラカゼイNITE
BP-01633の使用である。
また、本発明の他の態様は、整腸用に用いられるラクトバチルス・パラカゼイNITE BP-01633である。
また、本発明の他の態様は、ラクトバチルス・パラカゼイNITE BP-01633を適用対象に投与する段階又は本発明の整腸用組成物を適用対象に投与する段階を含む、対象の腸機能を改善する方法である。
また、本発明の他の態様は、ラクトバチルス・パラカゼイNITE BP-01633を適用対象に投与する段階又は本発明の整腸用組成物を適用対象に投与する段階を含む、整腸によって予防又は治療され得る疾患や症候、症状又は障害の予防方法又は治療方法である。
【００５５】
本発明の他の態様は、ラクトバチルス・パラカゼイNITE BP-01633を有効成分とする、ビフィドバクテリウム属細菌の増殖促進用組成物である。
本発明に用いられるラクトバチルス・パラカゼイNITE BP-01633は、ビフィドバクテリウム属細菌の増殖を促進する作用を有する。「増殖を促進する」とは、本菌体を摂取した（本明細書では、「投与された」場合を含む。）ときに、摂取しない（本明細書では、「投与しない」場合を含む。）ときよりも、ビフィドバクテリウム属細菌の菌数が多いことを意味する。また、ビフィドバクテリウム属細菌を培地で培養したときに、本菌体を含む培地の方が、本菌体を含まない培地よりも菌数が多いことを意味する。
【００５６】
本態様についての詳細な説明は、下記を除き、本発明の整腸用組成物における詳細な説明を援用する。
本菌体の破砕物の平均粒径は、例えば、レーザ回折／散乱式粒子径分布測定装置（LA-9
50V2、HORIBA社製）により測定した場合に、破砕前の本菌体の平均粒径の80 ％以下であることが好ましく、70 ％以下であることがより好ましく、60 ％以下であることがさらに好ましく、一方で、1 ％以上であることが好ましく、2 ％以上であることがより好ましく、4 ％以上であることがさらに好ましい。
また、ビフィドバクテリウム属細菌としては、例えば、本発明の整腸用組成物における詳細な説明に記載したものが挙げられる。具体的には、ビフィドバクテリウム・ブレーベFERM BP-11175（Bifidobacterium breve FERM BP-11175）、ビフィドバクテリウム・ブレーベBCCM LMG 23729（Bifidobacterium breve BCCM LMG 23729）、ビフィドバクテリウム・ロンガム・サブスピーシーズ・ロンガムATCC BAA-999（Bifidobacterium longum subsp. longum ATCC BAA-999）、ビフィドバクテリウム・ビフィダムATCC 29521（Bifidobacterium bifidum ATCC 29521）、ビフィドバクテリウム・アドレセンティスATCC 15703（Bifidobacterium adolescentis ATCC 15703）、及びそれらの変異株菌体等が挙げられる。
FERM BP-11175の受託番号が付された菌体は、２００９年８月２５日付で、独立行政法人産業技術総合研究所特許生物寄託センター（現  独立行政法人製品評価技術基盤機構特許生物寄託センター、郵便番号：292-0818、住所：千葉県木更津市かずさ鎌足2-5-8 120号室）にブダペスト条約に基づく国際寄託がなされている。
BCCMの受託番号が付された菌体は、ベルギーの保存機関であるBelgian Coordinated Collections of Microorganisms（住所：ベルギー、B-1000 ブリュッセル シアンス通り（ウェーテンスカップ通り）８）から入手することができる。
ATCCの受託番号が付された菌体は、アメリカン・タイプ・カルチャー・コレクション（住所：12301  Parklawn Drive, Rockville, Maryland 20852, United States of America）から入手することができる。
【００５７】
本発明の他の態様は、本菌体を有効成分とする、ラクトバチルス属細菌（ただし、本菌体を除く。）の増殖促進用組成物である。本菌体は、ラクトバチルス属細菌（ただし、本菌体を除く。）の増殖を促進する作用を有する。「増殖を促進する」とは、ビフィドバクテリウム属細菌の増殖促進用組成物における「増殖を促進する」と同様に定義される。
【００５８】
本態様についての詳細な説明は、下記を除き、上記本菌体を有効成分とする、ビフィドバクテリウム属細菌の増殖促進用組成物についての詳細な説明を援用する。
ラクトバチルス属細菌（ただし、本菌体を除く。）としては、例えば、本発明の整腸用組成物における詳細な説明に記載したものが挙げられる。具体的には、ラクトバチルス・プランタラムATCC 14917（Lactobacillus plantarum ATCC 14917）、及びその変異株菌体等が挙げられる。本菌体は、アメリカン・タイプ・カルチャー・コレクション（住所：12301  Parklawn Drive, Rockville, Maryland 20852, United States of America）から入手することができる。
【００５９】
前記ビフィドバクテリウム属細菌の増殖促進用組成物と前記ラクトバチルス属細菌（ただし、本菌体を除く。）の増殖促進用組成物は、いずれも飲食品組成物、医薬組成物、又は飼料組成物として利用できる。例えば、増殖促進用飲食品組成物、増殖促進用医薬組成物、増殖促進用飼料組成物を提供することができる。
尚、いずれの増殖促進用組成物も、プラセンタ、ラクトバチルス・パラカゼイNITE BP-01633及び水素源を含有する、増殖促進剤（経口用を含む。）及び増殖促進用組成物（経口用を含む。）を除くことが好ましい。
増殖促進用飲食品組成物、増殖促進用医薬組成物、増殖促進用飼料組成物についての詳細な説明は、それぞれ、本発明の整腸用飲食品組成物、整腸用医薬組成物、整腸用飼料組成物についての詳細な説明を援用する。
【００６０】
本発明の他の態様は、ビフィドバクテリウム属細菌の増殖促進用組成物の製造における、ラクトバチルス・パラカゼイNITE BP-01633の使用である。
また、本発明の他の態様は、ビフィドバクテリウム属細菌の増殖促進用に用いられるラクトバチルス・パラカゼイNITE BP-01633である。
また、本発明の他の態様は、ラクトバチルス・パラカゼイNITE BP-01633を適用対象に投与する段階、又はビフィドバクテリウム属細菌の増殖促進用組成物を適用対象に投与する段階を含む、ビフィドバクテリウム属細菌の増殖を促進する方法である。
また、本発明の他の態様は、ラクトバチルス・パラカゼイNITE BP-01633を適用対象に投与する段階、又はビフィドバクテリウム属細菌の増殖促進用組成物を適用対象に投与する段階を含む、ビフィドバクテリウム属細菌の増殖促進によって予防又は治療され得る疾患や症候、症状又は障害の予防方法又は治療方法である。
いずれの態様も、その具体的な説明としては、本発明の整腸用組成物、及びラクトバチルス・パラカゼイNITE BP-01633を有効成分とするビフィドバクテリウム属細菌の増殖促進用組成物の説明を援用する。
【００６１】
本発明の他の態様は、ラクトバチルス属細菌（ただし、本菌体を除く。）の増殖促進用組成物の製造における、ラクトバチルス・パラカゼイNITE BP-01633の使用である。
また、本発明の他の態様は、ラクトバチルス属細菌（ただし、本菌体を除く。）の増殖促進用に用いられるラクトバチルス・パラカゼイNITE BP-01633である。
また、本発明の他の態様は、ラクトバチルス・パラカゼイNITE BP-01633を適用対象に投与する段階、又はラクトバチルス属細菌（ただし、本菌体を除く。）の増殖促進用組成物を適用対象に投与する段階を含む、ラクトバチルス属細菌（ただし、本菌体を除く。）の増殖を促進する方法である。
また、本発明の他の態様は、ラクトバチルス・パラカゼイNITE BP-01633を適用対象に投与する段階、又はラクトバチルス属細菌（ただし、本菌体を除く。）の増殖促進用組成物を適用対象に投与する段階を含む、ラクトバチルス属細菌（ただし、本菌体を除く。）の増殖促進によって予防又は治療され得る疾患や症候、症状又は障害の予防方法又は治療方法である。
いずれの態様も、その具体的な説明としては、本発明の整腸用組成物、及びラクトバチルス・パラカゼイNITE BP-01633を有効成分とするラクトバチルス属細菌（ただし、本菌体を除く。）の増殖促進用組成物の説明を援用する。
【実施例】
【００６２】
以下に、実施例を用いて本発明をさらに具体的に説明するが、本発明はこれら実施例に限定されるものではない。
【００６３】
〔製造例１〕ラクトバチルス・パラカゼイNITE BP-01633の加熱殺菌体の調製
ラクトバチルス・パラカゼイNITE BP-01633の菌体をMRS（de Man Rogosa Sharpe）培地（BD社製）で16時間培養し、PBSで2回洗浄し、さらに蒸留水で1回洗浄した後に蒸留水に懸濁し、100℃、15分間の加熱処理を行った。加熱処理後、菌体を蒸留水で2回洗浄した後に蒸留水に懸濁し、凍結乾燥を行い、加熱殺菌体とした。
【００６４】
〔試験例１〕ラクトバチルス・パラカゼイNITE BP-01633によるヒトの排便促進への効果
65歳以上の高齢者を対象にプラセボ対照二重盲検ランダム化比較試験を行った。
高齢者42名を下記摂取群と対照群とに分けた。摂取群は、ラクトバチルス・パラカゼイNITE BP-01633の菌体を加熱して得た殺菌末（100億個）を配合したゼリーを1日1個摂取する21名からなり、対照群は、該殺菌末を配合しないプラセボゼリーを1日1個摂取する21名からなる。このうち、摂取群20名、対照群15名について、摂取前2週間の前観察期間、および摂取期間中の6週間、摂取後2週間の後観察期間の排便回数を記録した。
表１及び図１に、摂取期間中の第1週から第6週までと後観察期間とにおける、前観察期間に対する排便回数の変化（回／週）の平均値を示した。対照群では排便回数に変化が見られなかったが、摂取群では摂取期間中の第1週から第6週までに排便回数の顕著な増加が
見られ、後観察期間においても対照群を顕著に上回った。以上の結果より、ラクトバチルス・パラカゼイNITE BP-01633の経口摂取による排便回数の増加が確認された。
【００６５】
【表１】
2019116423.tif 000003
【００６６】
〔試験例２〕ラクトバチルス・パラカゼイNITE BP-01633によるビフィドバクテリウム属細菌の増殖促進効果
（１）ラクトバチルス・パラカゼイNITE BP-01633の加熱殺菌体を含む溶液およびその超音波破砕物を含む溶液の調製
製造例１で調製したラクトバチルス・パラカゼイNITE BP-01633の加熱殺菌体を、0.5 g/mlとなるように滅菌水に溶解して加熱殺菌体を含む溶液50 mLを調製した。
また、同様に加熱殺菌した菌末を、超音波ホモジナイザー（BRABSON SONIFIER（登録商標）450、BRABSON Ultrasonic社製）を用いて破砕し（出力60％、ダイアル3）、0.5 g/mlとなるように滅菌水に溶解して50 mLの加熱殺菌体の破砕物を含む溶液を調製した。破砕後の菌径は、レーザ回折／散乱式粒子径分布測定装置（LA-950V2、HORIBA社製）にて測定した。
【００６７】
【表２】
2019116423.tif 000004
【００６８】
（２）ビフィドバクテリウム属細菌の前培養
ビフィドバクテリウム属細菌として、ビフィドバクテリウム・ビフィダムATCC 29521、ビフィドバクテリウム・アドレセンティスATCC 15703の前培養を行った。具体的には、表３に示したLB発酵試験培地 （光岡知足著「ビフィズス菌の研究」p.309, （財）ビフィズス菌センター, 1994年発行）に１％グルコースを加えて調製して、滅菌処理後にビフィドバクテリウム属に属する上記各菌体を３％接種し、37℃で嫌気的に16時間前培養した。
【００６９】
【表３】
2019116423.tif 000005
【００７０】
（３）ビフィドバクテリウム属細菌との混合培養から培養後のビフィドバクテリウム属細菌の菌数測定
１％グルコース添加LB発酵試験培地（光岡知足著「ビフィズス菌の研究」p.309, （財）ビフィズス菌センター, 1994年発行）を調製して、オートクレーブ滅菌処理後、96穴プレートに無菌的に分注した。分注した培地にラクトバチルス・パラカゼイNITE BP-01633の加熱殺菌体またはその超音波破砕物を0.01％、2.5×109cells/well （1×1010cells/mL）になるよう添加し、さらにビフィドバクテリウム属に属する上記菌体の生菌を106〜108CFU/mLで接種し、37℃で嫌気的に8、16、24時間培養した。尚、上記菌体の生菌の代わりに等量の培地を用いたものを対照とした。
8、16、24時間培養したウェルの菌体を回収し、DNA抽出を行った。DNA抽出はビーズ・フェノール法（松木隆広著「糞便サンプルからのDNAの抽出法」腸内細菌学雑誌、20: 259-262，2006）で行った。属特異的プライマー（江崎孝行著「腸内フローラの同定： DNAプローブとプライマー」腸内細菌学雑誌、20: 245-258，2006）を用いた、定量PCR法によりビフィドバクテリウム属に属する上記菌体の増殖菌数を解析した。
【００７１】
（４）結果
ビフィドバクテリウム・ビフィダムATCC 29521の結果を表４及び図２に、ビフィドバクテリウム・アドレセンティスATCC 15703の結果を表５及び図３に示す。ビフィドバクテリウム・ビフィダムATCC 29521、及びビフィドバクテリウム・アドレセンティスATCC 15703ともに、ラクトバチルス・パラカゼイNITE BP-01633が加熱殺菌体である場合もその超音波破砕物の場合も、増殖が促進されることが確認された。
【００７２】
【表４】
2019116423.tif 000006
【００７３】
【表５】
2019116423.tif 000007
【００７４】
〔試験例３〕ラクトバチルス・パラカゼイNITE BP-01633によるラクトバチルス属細菌（ただし、本菌体を除く。）の増殖促進効果
試験例２において、ビフィドバクテリウム属細菌の代わりに、ラクトバチルス属細菌としてラクトバチルス・プランタラムATCC 14917を用いたこと以外は、試験例２と同様にした。
結果を表６及び図４に示す。ラクトバチルス・プランタラムATCC 14917は、ラクトバチルス・パラカゼイNITE BP-01633が加熱殺菌体である場合もその超音波破砕物の場合も、増殖が促進されることが確認された。
【００７５】
【表６】
2019116423.tif 000008
【００７６】
〔製造例２〕
ラクトバチルス・パラカゼイNITE BP-01633をMRS液体培地3 mLに添加し、37℃で16時間嫌気培養後、菌体を遠心分離及び蒸留水に再懸濁により3回洗浄した後に、蒸留水で10 mg
(菌体乾燥重量換算)/mlになるように懸濁し、100℃、15分の加熱殺菌を行い、加熱殺菌体を含む溶液とする。該加熱殺菌体を含む溶液を濃縮し、凍結乾燥を行い、各細菌の凍結乾燥粉末（菌末）を得る。各菌末と、ホエイタンパク質濃縮物（Whey protein concentrate； WPC）とを均一に混合して組成物を得る。当該組成物20 gを200 gの水に溶かし、整腸用組成物を得る。
本組成物の投与により、整腸効果が期待できる。さらに、過敏性腸症候群、骨盤底機能不全、先天性消化管機能異常、腸閉塞、結腸腫瘍、代謝性疾患、中枢神経系疾患、末梢神経系疾患又は全身性疾患に起因する、便秘又は下痢の予防又は治療に用いることが出来る。また、食中毒、感染性腸炎、潰瘍性大腸炎又は食物アレルギーに起因する、下痢の予防又は治療に用いることが出来る。
【００７７】
〔製造例３〕
ラクトバチルス・パラカゼイNITE BP-01633をMRS液体培地3 mLに添加し、37℃で16時間嫌気培養後、菌体を遠心分離及び蒸留水に再懸濁により3回洗浄した後に、蒸留水で10 mg
(菌体乾燥重量換算)/mlになるように懸濁し、100℃、15分の加熱殺菌を行い、加熱殺菌体を含む溶液とする。該加熱殺菌体を含む溶液を濃縮し、凍結乾燥を行い、各細菌の凍結乾燥粉末（菌末）を得る。次に、結晶セルロースを撹拌造粒機に投入し混合する。その後、精製水を加え造粒、造粒物を乾燥し、各細菌の抽出成分を含有し、賦形剤を含有してなる造粒物を得る。本組成物の投与により、整腸効果が期待できる。さらに過敏性腸症候群、骨盤底機能不全、先天性消化管機能異常、腸閉塞、結腸腫瘍、代謝性疾患、中枢神経系疾患、末梢神経系疾患又は全身性疾患に起因する、便秘又は下痢の予防又は治療に用いることが出来る。また、食中毒、感染性腸炎、潰瘍性大腸炎又は食物アレルギーに起因する、下痢の予防又は治療に用いることが出来る。
【００７８】
〔製造例４〕
ラクトバチルス・パラカゼイNITE BP-01633をMRS液体培地3 mLに添加し、37℃で16時間嫌気培養後、菌体を遠心分離及び蒸留水に再懸濁により3回洗浄した後に、蒸留水で10 mg
(菌体乾燥重量換算)/mlになるように懸濁し、100℃、15分の加熱殺菌を行い、加熱殺菌体を含む溶液とする。加熱殺菌体を含む溶液を濃縮し、凍結乾燥を行い、該細菌の凍結乾燥粉末（菌末）を得る。該菌末と、オリゴ糖とを均一に混合して組成物を得る。当該組成物を、プレバイオティクス素材として提供する。ラクトバチルス・パラカゼイNITE BP-01633の摂取量が１×１０８〜１×１０１０ＣＦＵ／ｋｇ体重／日になるようにし、１週間
毎日朝食で提供する。ラクトバチルス・パラカゼイNITE BP-01633が死菌の場合、ＣＦＵ／ｋｇ体重／日は、個細胞／ｋｇ体重／日と置き換えることができる。なお、発酵乳等の飲食物と混合してもよい。オリゴ糖としてはイソマルトオリゴ糖、ラクチュロース、ラフィノース、フラクトオリゴ糖、ガラクトオリゴ糖、大豆オリゴ糖が使用出来る。
本組成物の投与により、整腸効果が期待できる。さらに過敏性腸症候群、骨盤底機能不全、先天性消化管機能異常、腸閉塞、結腸腫瘍、代謝性疾患、中枢神経系疾患、末梢神経系疾患又は全身性疾患に起因する、便秘又は下痢の予防又は治療に用いることが出来る。また、食中毒、感染性腸炎、潰瘍性大腸炎又は食物アレルギーに起因する、下痢の予防又は治療に用いることが出来る。
【００７９】
〔製造例５〕
ラクトバチルス・パラカゼイNITE BP-01633、MRS液体培地3 mLに添加し、37℃で16時間嫌気培養後、菌体を遠心分離及び蒸留水に再懸濁により3回洗浄した後に、蒸留水で10 mg
(菌体乾燥重量換算)/mlになるように懸濁し、100℃、15分の加熱殺菌を行い、加熱殺菌体を含む溶液とする。加熱殺菌体を含む溶液を濃縮し、凍結乾燥を行い、該細菌の凍結乾燥粉末（菌末）を得る。該菌末と、調整されたビフィドバクテリウム・ロンガム・サブスピーシーズ・ロンガムBB536（ATCC BAA-999）及び/または、ビフィドバクテリウム・ブレーベＬＭＧ２３７２９をオリゴ糖とを均一に混合して組成物を得る。当該組成物を、プレバイオティクス素材として提供する。ラクトバチルス・パラカゼイNITE BP-01633の摂取量が１×１０８〜１×１０１０ＣＦＵ／ｋｇ体重／日になるようにし、１週間毎日朝食で提供する。ラクトバチルス・パラカゼイNITE BP-01633が死菌の場合、ＣＦＵ／ｋｇ体重／日は、個細胞／ｋｇ体重／日と置き換えることができる。なお、発酵乳等の飲食物と混合してもよい。オリゴ糖としてはイソマルトオリゴ糖、ラクチュロース、ラフィノース、フラクトオリゴ糖、ガラクトオリゴ糖、大豆オリゴ糖が使用出来る。
本組成物の投与により、整腸効果が期待できる。さらに過敏性腸症候群、骨盤底機能不全、先天性消化管機能異常、腸閉塞、結腸腫瘍、代謝性疾患、中枢神経系疾患、末梢神経系疾患又は全身性疾患に起因する、便秘又は下痢の予防又は治療に用いることが出来る。また、食中毒、感染性腸炎、潰瘍性大腸炎又は食物アレルギーに起因する、下痢の予防又は治療に用いることが出来る。
【００８０】
〔製造例６〕
ラクトバチルス・パラカゼイNITE BP-01633を添加した発酵乳の製造法を下記に示す。
まず、乳原料、および必要に応じた水、その他の成分等を混合し、好ましくは均質化処理を行い、加熱殺菌処理する。均質化処理および加熱殺菌処理は常法により行うことができる。加熱殺菌された 殺菌調乳液に乳酸菌スターターを添加（接種）し、所定の発酵温度に保持して発酵させ、発酵物を得る。発酵によりカードが形成される。
乳酸菌スターターとしては、例えば、ラクトバチルス・ブルガリクス（Lactobacillus bulgaricus）、ラクトコッカス・ラクチス（Lactococcus lactis）、ストレプトコッカス・サーモフィラス（Streptococcus thermophilus）等のヨーグルト製造に通常用いられている乳酸菌を用いることができる。ｐＨが目標の値に達したら、形成されたカードを撹拌により破砕し、１０℃以下に冷却して発酵物を得る。１０℃以下に冷却することにより、乳酸菌の活性を低下させて酸の生成を抑制することができる。
次いで、発酵工程で得られた発酵物を加熱処理して加熱後発酵物（加熱処理後の発酵物）を得る。発酵物を適度に加熱することにより、加熱後発酵物中の乳酸菌による酸の生成を抑えることができる。これによって、その後の製造工程中および／またはビフィズス菌入り濃縮発酵乳の保存中のｐＨの低下を抑えることができ、その結果、ビフィズス菌の生残性を向上させることができる。
次いで、加熱処理工程で得られた加熱後発酵物に、本発明のラクトバチルス・パラカゼイNITE BP-01633を添加する。ラクトバチルス・パラカゼイNITE BP-01633の添加量は、加熱後発酵物に対して１×１０７〜１×１０１１ＣＦＵ／ｍｌが好ましく、１×１０８〜１
×１０１０ＣＦＵ／ｍｌがより好ましい。ラクトバチルス・パラカゼイNITE BP-01633が死菌の場合、ＣＦＵ／ｍｌは、個細胞／ｍｌと置き換えることができる。
加熱後発酵物にラクトバチルス・パラカゼイNITE BP-01633を添加した後、濃縮を行う。濃縮工程は公知の濃縮方法を適宜用いて行うことができる。例えば遠心分離法または膜分離法を用いることができる。
上述のようにして得られた発酵乳を摂取することにより、整腸効果が期待できる。さらに過敏性腸症候群、骨盤底機能不全、先天性消化管機能異常、腸閉塞、結腸腫瘍、代謝性疾患、中枢神経系疾患、末梢神経系疾患又は全身性疾患に起因する、便秘又は下痢の予防又は治療に用いることが出来る。また、食中毒、感染性腸炎、潰瘍性大腸炎又は食物アレルギーに起因する、下痢の予防又は治療に用いることが出来る。
【図１】
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【図２】
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【図３】
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【図４】
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