(57)【要約】【課題】本発明は、特定の共通配列又は構造を有する単離された分子、ペプチド及びポリペプチドに関し、またそのような分子、ペプチド及びポリペプチドを含み、又はこれからなり、プロテオグリカン、特にコンドロイチン−４−硫酸（Ｃ４Ｓ）を特異的に認識するトランスポーター分子として振る舞い得る化合物にも関する。【解決手段】本発明の単離された分子、ペプチド、ポリペプチド及び化合物は、生物活性部分（ＢＡＭ）とコンジュゲート、あるいは連結されてもよい。従って、ＢＡＭコンジュゲートは、特異的なターゲティング、又はインビトロ及びインビボで、Ｃ４Ｓを発現する細胞の細胞質又は核への、例えばペプチド、化学物質又は核酸であってもよいＢＡＭの送達を可能とする。【選択図】図２
2019001814.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
分子又は化合物であって、以下の共通構造（Ｉ）〜（ＩＶ）：
（Ｉ）  Ａｒｇ１−（ＳＰＡ）−Ａｒｇ５−（ＳＰＢ）−Ｘ−（ＳＰＣ）−Ａｒｇ９−（ＬＤ１０）ｎ−（ＸＤ１１）ｍ；
（ＩＩ）  Ａｒｇ１−（ＳＰＣ）−Ｘ−（ＳＰＢ）−Ａｒｇ５−（ＳＰＡ）−Ａｒｇ９−（ＬＤ１０）ｎ−（ＸＤ１１）ｍ；
（ＩＩＩ）  （ＸＤ−２）ｍ−（ＬＤ  −１）ｎ−Ａｒｇ１−（ＳＰＡ）−Ａｒｇ５−（ＳＰＢ）−Ｘ−（ＳＰＣ）−Ａｒｇ９；又は
（ＩＶ）  （ＸＤ−２）ｍ−（ＬＤ  −１）ｎ−Ａｒｇ１−（ＳＰＣ）−Ｘ−（ＳＰＢ）
−Ａｒｇ５−（ＳＰＡ）−Ａｒｇ９；
［式中、
（ａ）  ＬＤ１０又はＬＤ−１は、Ｄ−アルギニン、Ｄ−リシン；Ｌ−アルギニン又はＬ−リシン以外のＬ−又はＤ−アミノ酸のいずれかを表し、ｎは、０〜１０の数字である；
（ｂ）ＸＤ１１又はＸＤ−２は、Ｄ−アルギニン又はＤ−リシン以外のＤ−アミノ酸のいずれかを表し、ｍは０又は１の数字である；
（ｃ）（ｉ）Ａｒｇ１、Ａｒｇ５、及びＡｒｇ９はＬ−アルギニンを表し；ＸはＬ−リシン又はＬ−アルギニンを表す、又は（ｉｉ）Ａｒｇ１、Ａｒｇ５、及びＡｒｇ９は、Ｄ−アルギニンを表し；Ｘ  はＤ−リシン又はＤ−アルギニンを表す；
（ｄ）（ＳＰＡ）は化学リンカーを表し、（ｉ）３アミノ酸残基のペプチド鎖からなり、各残基は、Ｄ−アルギニン、Ｄ−リシン、Ｌ−アルギニン又はＬ−リシン以外の任意のアミノ酸残基から独立して選択されてもよい；又は（ｉｉ）隣接するアミノ酸残基を１２．９＋１．５  Åの間隔で隔離する；
（ｅ）（ＳＰＣ）は化学リンカーを表し、（ｉ）１個のアミノ酸残基で構成され、当該アミノ酸は、Ｄ−アルギニン、Ｄ−リシン、Ｌ−アルギニン又はＬ−リシン以外の任意のアミノ酸残基であってもよい；又は（ｉｉ）隣接するアミノ酸残基を７．５＋１．５  Åの間隔で隔離する；
（ｆ）（ＳＰＢ）−Ｘ−（ＳＰＣ）又はその反対の（ＳＰＣ）−Ｘ−（ＳＰＢ）は化学リンカーを表し、（ｉ）ＳＰＢ及びＳＰＣはそれぞれ１個のアミノ酸残基で構成され、当該アミノ酸は、Ｄ−アルギニン、Ｄ−リシン、Ｌ−アルギニン又はＬ−リシン以外の任意のアミノ酸残基から独立して選択されてもよい；又は（ｉｉ）隣接するアミノ酸残基Ａｒｇ１及びＡｒｇ５又はＡｒｇ５及びＡｒｇ９を１２．９＋１．５  Åの間隔で隔離する；
（ｇ）そして、（ｉ）Ａｒｇ１、Ａｒｇ５、及びＡｒｇ９はＬ−アルギニンを表し；ＸはＬ−リシン又はＬ−アルギニンを表す；（ｉｉ）（ＳＰＡ）は３アミノ酸残基のペプチド鎖からなり；及び（ｉｉｉ）（ＳＰＢ）及び（ＳＰＣ）は、それぞれ１つのアミノ酸残基を表す］
のいずれか１つを含み、又はこれからなり、当該共通構造（Ｉ）〜（ＩＶ）は、
（Ｖ）  Ａｒｇ１−Ｘ２−Ｘ３−Ｘ４−Ａｒｇ５−  Ｘ６−Ｘ７−Ｘ８−Ａｒｇ９−（ＬＤ１０）ｎ−（ＸＤ１１）ｍ；又は
（ＶＩ）  （ＸＤ−２）ｍ−（ＬＤ  −１）ｎ−Ａｒｇ１−  Ｘ２−Ｘ３−Ｘ４−Ａｒｇ
５−  Ｘ６−Ｘ７−Ｘ８−Ａｒｇ９；
［式中、
Ａｒｇ１、Ａｒｇ５及びＡｒｇ９は前記のようにＬ−アルギニンであり；Ｘ３又はＸ７は、前記のようにＬ−リシン又はＬ−アルギニンである］
で表されてもよく、構造（Ｖ）又は（ＶＩ）において、Ｘ４又はＸ６はＤ−アミノ酸である、分子又は化合物。
【請求項２】
（ＳＰＡ）は、隣接するアミノ酸残基を１２．９＋１．５  Åの間隔で隔離し；
（ＳＰＣ）は、隣接するアミノ酸残基を７．５＋１．５  Åの間隔で隔離する化学リンカーを表し；
（ＳＰＢ）−Ｘ−（ＳＰＣ）又はその反対の（ＳＰＣ）−Ｘ−（ＳＰＢ）は、は、隣接するアミノ酸残基Ａｒｇ１  及びＡｒｇ５又はＡｒｇ５及びＡｒｇ９を１２．９＋１．５  Åの間隔で隔離する；
請求項１に記載の分子又は化合物。
【請求項３】
前記１つ以上の化学リンカーが、ベータ−ペプチド、糖−アミノ酸ベース足場、ベータ−ヘアピンペプチド模倣物、アルファ−ヘリックス模倣物又はシクロチドである、請求項１又は２のいずれか１項に記載の分子又は化合物。
【請求項４】
（ＳＰＡ）が、Ｄ−アルギニン、Ｄ−リシン、Ｌ−アルギニン又はＬ−リシン以外の任意のアミノ酸残基からそれぞれ独立して選択される３つのアミノ酸残基からなるペプチド鎖を表し；（ＳＰＢ）及び（ＳＰＣ）が、Ｄ−アルギニン、Ｄ−リシン、Ｌ−アルギニン又はＬ−リシン以外の任意のアミノ酸残基から独立して選択され得る１つのアミノ酸残基を表す、請求項１に記載の分子又は化合物。
【請求項５】
（ＳＰＡ）、（ＳＰＢ）及び（ＳＰＣ）が共に３つ以上のアラニン残基を含まない請求項１又は４のいずれか１項に記載の分子又は化合物。
【請求項６】
（ＳＰＡ）、（ＳＰＢ）及び（ＳＰＣ）が共にプロリン残基を含まない請求項１、４又は５のいずれか１項に記載の分子又は化合物。
【請求項７】
（ＳＰＡ）、（ＳＰＢ）及び（ＳＰＣ）が共にＰｈｅ、Ｔｒｐ、Ｔｙｒ、Ｖａｌ、Ｍｅｔ、Ｉｌｅ、及びＬｅｕから選択される１つ以上のアミノ酸を含む、請求項１及び４〜６のいずれか１項に記載の分子又は化合物。
【請求項８】
（ＳＰＢ）がＤ−アミノ酸を表す、請求項１及び４〜７のいずれか１項に記載の分子又は化合物。
【請求項９】
ＬＤ１０がＬ−又はＤ−ヒスチジンを表す、請求項１〜８のいずれか１項に記載の分子又は化合物。
【請求項１０】
ＸＤ１１がＤ−ヒスチジンを表す、請求項１〜９のいずれか１項に記載の分子又は化合物。
【請求項１１】
ｍが１である、請求項１〜１０のいずれか１項に記載の分子又は化合物。
【請求項１２】
ｎが０である、請求項１〜１１のいずれか１項に記載の分子又は化合物。
【請求項１３】
以下の配列：
ＲＳＴｑＲＹＲＶＲｈ  （配列番号：１）；
ＲＹＦｖＲＩＫＹＲｈ  （配列番号：２）；
ＲＹＦｖＲＩＫＡＲｈ  （配列番号：３）；
ＲＡＡｖＲＡＫＹＲｈ  （配列番号：４）；
ＲＡＡｖＲＩＫＹＲｈ  （配列番号：５）；
ＲＳＴｑＲＹＲＶＲｈ  （配列番号：６）；
ＲＳＴｑＲＹＫＶＲｈ  （配列番号：７）；
ＲＧＧｇＲＧＫＧＲｈ  （配列番号：８）；
ＲＨＨｈＲＨＫＨＲｈ  （配列番号：９）；
ＲＶＶｖＲＶＫＶＲｈ  （配列番号：１０）；
ＲＬＬｌＲＬＫＬＲｈ  （配列番号：１１）；
ＲＭＭｍＲＭＫＭＲｈ  （配列番号：１２）；
ＲＩＩｉＲＩＫＩＲｈ  （配列番号：１３）；
ＲＹＦＶＲｉＫＹＲｈ  （配列番号：２５）；
ＲＳＴｑＲＹＲＶＲ    （配列番号：２６）；
ＲＹＦｖＲＩＫＹＲ    （配列番号：１５）；
ＲＹＦｖＲＩＫＡＲ    （配列番号：２７）；
ＲＡＡｖＲＡＫＹＲ    （配列番号：２８）；
ＲＡＡｖＲＩＫＹＲ    （配列番号：２９）；
ＲＳＴｑＲＹＲＶＲ    （配列番号：３０）；
ＲＳＴｑＲＹＫＶＲ    （配列番号：３１）；
ＲＧＧｇＲＧＫＧＲ    （配列番号：３２）；
ＲＨＨｈＲＨＫＨＲ    （配列番号：３３）；
ＲＶＶｖＲＶＫＶＲ    （配列番号：３４）；
ＲＬＬｌＲＬＫＬＲ    （配列番号：３５）；
ＲＭＭｍＲＭＫＭＲ    （配列番号：３６）；
ＲＩＩｉＲＩＫＩＲ    （配列番号：３７）；又は
ＲＹＦＶＲｉＫＹＲ    （配列番号：１６）；
を有する、請求項１又は４〜８のいずれか１項に記載の分子又は化合物。
【請求項１４】
更に生物活性部分（ＢＡＭ）がコンジュゲートした、請求項１〜１３のいずれか１項に記載の分子又は化合物。
【請求項１５】
請求項１４に記載のＢＡＭコンジュゲートであって、前記ＢＡＭが、以下の共通構造：
（ＶＩＩ）（ＢＡＭ）−（ＬＩＮＫ）−Ａｒｇ１−（ＳＰＡ）−Ａｒｇ５−（ＳＰＢ）−Ｘ−（ＳＰＣ）−Ａｒｇ９−（ＬＤ１０）ｎ−（ＸＤ１１）ｍ；
（ＩＩ）  （ＢＡＭ）−（ＬＩＮＫ）−Ａｒｇ１−（ＳＰＣ）−Ｘ−（ＳＰＢ）−Ａｒｇ５−（ＳＰＡ）−Ａｒｇ９−（ＬＤ１０）ｎ−（ＸＤ１１）ｍ；
（ＩＩＩ）  （ＸＤ−２）ｍ−（ＬＤ  −１）ｎ−Ａｒｇ１−（ＳＰＡ）−Ａｒｇ５−（ＳＰＢ）−Ｘ−（ＳＰＣ）−Ａｒｇ９−（ＬＩＮＫ）−（ＢＡＭ）；又は
（ＩＶ）  （ＸＤ−２）ｍ−（ＬＤ  −１）ｎ−Ａｒｇ１−（ＳＰＣ）−Ｘ−（ＳＰＢ）
−Ａｒｇ５−（ＳＰＡ）−Ａｒｇ９−（ＬＩＮＫ）−（ＢＡＭ）；
［式中、
（ａ）（ＢＡＭ）は生物活性部分を表す；
（ｂ）（ＬＩＮＫ）は任意のリンカー基を表す；
（ｃ）  ＬＤ１０又はＬＤ−１は、Ｄ−アルギニン、Ｄ−リシン；Ｌ−アルギニン又はＬ−リシン以外のＬ−又はＤ−アミノ酸のいずれかを表し、ｎは、０〜１０の数字である；
（ｄ）ＸＤ１１又はＸＤ−２は、Ｄ−アルギニン又はＤ−リシン以外のＤ−アミノ酸のいずれかを表し、ｍは０又は１の数字である；
（ｅ）（ｉ）Ａｒｇ１、Ａｒｇ５、及びＡｒｇ９はＬ−アルギニンを表し；ＸはＬ−リシン又はＬ−アルギニンを表す、又は（ｉｉ）Ａｒｇ１、Ａｒｇ５、及びＡｒｇ９は、Ｄ−アルギニンを表し；Ｘ  はＤ−リシン又はＤ−アルギニンを表す；
（ｆ）（ＳＰＡ）は化学リンカーを表し、（ｉ）３アミノ酸残基のペプチド鎖からなり、各残基は、Ｄ−アルギニン、Ｄ−リシン、Ｌ−アルギニン又はＬ−リシン以外の任意のアミノ酸残基から独立して選択されてもよい；又は（ｉｉ）隣接するアミノ酸残基を１２．９＋１．５  Åの間隔で隔離する；
（ｇ）（ＳＰＣ）は化学リンカーを表し、（ｉ）１個のアミノ酸残基で構成され、当該アミノ酸は、Ｄ−アルギニン、Ｄ−リシン、Ｌ−アルギニン又はＬ−リシン以外の任意のアミノ酸残基であってもよい；又は（ｉｉ）隣接するアミノ酸残基を７．５＋１．５  Åの間隔で隔離する；
（ｈ）（ＳＰＢ）−Ｘ−（ＳＰＣ）又はその反対の（ＳＰＣ）−Ｘ−（ＳＰＢ）は化学リンカーを表し、（ｉ）ＳＰＢ及びＳＰＣはそれぞれ１個のアミノ酸残基で構成され、当該アミノ酸は、Ｄ−アルギニン、Ｄ−リシン、Ｌ−アルギニン又はＬ−リシン以外の任意のアミノ酸残基から独立して選択されてもよい；又は（ｉｉ）隣接するアミノ酸残基Ａｒｇ１及びＡｒｇ５又はＡｒｇ５及びＡｒｇ９を１２．９＋１．５  Åの間隔で隔離する；
（ｉ）そして、（ｉ）Ａｒｇ１、Ａｒｇ５、及びＡｒｇ９はＬ−アルギニンを表し；ＸはＬ−リシン又はＬ−アルギニンを表す；（ｉｉ）（ＳＰＡ）は３アミノ酸残基のペプチド鎖からなり；及び（ｉｉｉ）（ＳＰＢ）及び（ＳＰＣ）は、それぞれ１つのアミノ酸残基を表す］
のいずれか１つで表され、当該共通構造（ＶＩＩ）〜（Ｘ）は、
（ＸＩ）  （ＢＡＭ）−（ＬＩＮＫ）−Ａｒｇ１−Ｘ２−Ｘ３−Ｘ４−Ａｒｇ５−  Ｘ６−Ｘ７−Ｘ８−Ａｒｇ９−（ＬＤ１０）ｎ−（ＸＤ１１）ｍ；又は
（ＸＩＩ）  （ＸＤ−２）ｍ−（ＬＤ  −１）ｎ−Ａｒｇ１−  Ｘ２−Ｘ３−Ｘ４−Ａｒ
ｇ５−  Ｘ６−Ｘ７−Ｘ８−Ａｒｇ９−（ＬＩＮＫ）−（ＢＡＭ）；
［式中、
Ａｒｇ１、Ａｒｇ５及びＡｒｇ９は前記のようにＬ−アルギニンであり；Ｘ３又はＸ７は
、前記のようにＬ−リシン又はＬ−アルギニンである］
で表されてもよく、構造（ＸＩ）又は（ＸＩＩ）において、Ｘ４又はＸ６はＤ−アミノ酸である、１つの共通構造の末端にコンジュゲートしている、ＢＡＭ−コンジュゲート。
【請求項１６】
前記リンカー基（ＬＩＮＫ）がＬ−又はＤ−Ｇｌｕである、請求項１５に記載のＢＡＭ−コンジュゲート。
【請求項１７】
前記ＢＡＭが、Ｎ−末端アミド結合又はＣ−末端エステル結合によりＡｒｇ１又はＡｒｇ９とコンジュゲートしている、請求項１４〜１６のいずれか１項に記載のＢＡＭ−コンジュゲート。
【請求項１８】
前記ＢＡＭが、（ＳＰＡ）、（ＳＰＢ）又は（ＳＰＣ）の中のアミノ酸残基及び／又は化学基とコンジュゲートしている、請求項１４に記載のＢＡＭコンジュゲート。
【請求項１９】
前記コンジュゲートが、前記ペプチド配列の内側の残基への直接のコンジュゲート、又はリンカー基を介した間接的コンジュゲートである、請求項１６に記載のＢＡＭコンジュゲート。
【請求項２０】
前記ＢＡＭが、単糖類又は多糖類、毒素、抗腫瘍剤、抗炎症剤、抗ウイルス剤、抗細菌剤、又は原生動物感染の治療剤である、請求項１４〜１９のいずれか１項に記載のＢＡＭ−コンジュゲート。
【請求項２１】
前記ＢＡＭがデオキシリボース又はリボースである、請求項１４〜１９のいずれか１項に記載のＢＡＭ−コンジュゲート。
【請求項２２】
請求項１４に記載の分子又は化合物、又は請求項１５〜２１のいずれか１項に記載のＢＡＭ−コンジュゲートを含有する、医薬組成物。
【請求項２３】
腫瘍性疾患、炎症性疾患、自己免疫性疾患、免疫不全性疾患、ウイルス、細菌、原生動物又は寄生虫の感染から選択される白血球が関与する障害の治療に使用される医薬組成物であって、当該医薬組成物が、分子又は化合物であって、以下の共通構造（Ｉ）〜（ＩＶ）：
（Ｉ）  Ａｒｇ１−（ＳＰＡ）−Ａｒｇ５−（ＳＰＢ）−Ｘ−（ＳＰＣ）−Ａｒｇ９−（ＬＤ１０）ｎ−（ＸＤ１１）ｍ；
（ＩＩ）  Ａｒｇ１−（ＳＰＣ）−Ｘ−（ＳＰＢ）−Ａｒｇ５−（ＳＰＡ）−Ａｒｇ９−（ＬＤ１０）ｎ−（ＸＤ１１）ｍ；
（ＩＩＩ）  （ＸＤ−２）ｍ−（ＬＤ  −１）ｎ−Ａｒｇ１−（ＳＰＡ）−Ａｒｇ５−（ＳＰＢ）−Ｘ−（ＳＰＣ）−Ａｒｇ９；又は
（ＩＶ）  （ＸＤ−２）ｍ−（ＬＤ  −１）ｎ−Ａｒｇ１−（ＳＰＣ）−Ｘ−（ＳＰＢ）
−Ａｒｇ５−（ＳＰＡ）−Ａｒｇ９；
［式中、
（ａ）  ＬＤ１０又はＬＤ−１は、Ｄ−アルギニン、Ｄ−リシン；Ｌ−アルギニン又はＬ−リシン以外のＬ−又はＤ−アミノ酸のいずれかを表し、ｎは、０〜１０の数字である；
（ｂ）ＸＤ１１又はＸＤ−２は、Ｄ−アルギニン又はＤ−リシン以外のＤ−アミノ酸のいずれかを表し、ｍは０又は１の数字である；
（ｃ）（ｉ）Ａｒｇ１、Ａｒｇ５、及びＡｒｇ９はＬ−アルギニンを表し；ＸはＬ−リシン又はＬ−アルギニンを表す、又は（ｉｉ）Ａｒｇ１、Ａｒｇ５、及びＡｒｇ９は、Ｄ−アルギニンを表し；Ｘ  はＤ−リシン又はＤ−アルギニンを表す；
（ｄ）（ＳＰＡ）は化学リンカーを表し、（ｉ）３アミノ酸残基のペプチド鎖からなり、各残基は、Ｄ−アルギニン、Ｄ−リシン、Ｌ−アルギニン又はＬ−リシン以外の任意のアミノ酸残基から独立して選択されてもよい；又は（ｉｉ）隣接するアミノ酸残基を１２．９＋１．５  Åの間隔で隔離する；
（ｅ）（ＳＰＣ）は化学リンカーを表し、（ｉ）１個のアミノ酸残基で構成され、当該アミノ酸は、Ｄ−アルギニン、Ｄ−リシン、Ｌ−アルギニン又はＬ−リシン以外の任意のアミノ酸残基であってもよい；又は（ｉｉ）隣接するアミノ酸残基を７．５＋１．５  Åの間隔で隔離する；
（ｆ）（ＳＰＢ）−Ｘ−（ＳＰＣ）又はその反対の（ＳＰＣ）−Ｘ−（ＳＰＢ）は化学リンカーを表し、（ｉ）ＳＰＢ及びＳＰＣはそれぞれ１個のアミノ酸残基で構成され、当該アミノ酸は、Ｄ−アルギニン、Ｄ−リシン、Ｌ−アルギニン又はＬ−リシン以外の任意のアミノ酸残基から独立して選択されてもよい；又は（ｉｉ）隣接するアミノ酸残基Ａｒｇ１及びＡｒｇ５又はＡｒｇ５及びＡｒｇ９を１２．９＋１．５  Åの間隔で隔離する］
のいずれか１つを含み、又はこれからなり、更にＢＡＭとコンジュゲートしている、分子又は化合物を含有する、医薬組成物。
【請求項２４】
ＨＩＶ、エプスタインバーウイルス、麻疹ウイルス、パラミクソウイルス、ルビウイルス、ヘルペスウイルス、デングウイルス、単純ヘルペスウイルス、パルボウイルス、呼吸器合胞体ウイルス、天然痘ウイルス、水痘、フラビウイルス、ヒトＴ−リンパ球ウイルス、Ａ、Ｂ、Ｃ、Ｄ、又はＥ型肝炎ウイルス、ラッサウイルス、又はインフルエンザウイルスの治療に使用される、請求項２２又は２３のいずれか１項に記載の医薬組成物。
【請求項２５】
白血球が以下の病理的関与：好中球増加症、好中球減少症、白血球減少症、好塩基球減少症、好塩基球増加症、好酸球減少症、好酸球増加症、突発性好酸球増多症候群、リンパ球性白血球増加症、リンパ球増加症、リンパ球減少症、単球増加症、単球減少症、メイ−ヘグリン異常、ペルゲル−フエット異常、アルダー−ライリー異常、チェディアック−東症候群、ヨブ症候群（高ＩｇＥ症候群）、怠けもの白血球症候群、先天性補体第３成分欠損症、慢性肉芽腫症、白血球グルコース６−リン酸デヒドロゲナーゼ欠損症、良性ミエロペルオキシダーゼ欠損症、重症複合型免疫欠損症、ディ・ジョージ症候群、ネゼロフ症候群、乳児伴性無ガンマグロブリン血症、分類不能型低ガンマグロブリン血症、ムコ多糖体症、リポドーズ（ｌｉｐｏｄｏｓｅｓ）、ゴーシェ病、ニーマン−ピック病、ファブリー病、ファーバー病、ガングリオシドーシス、テイ−サックス病、ザントホフ病、クラッベ病、異染色性白質萎縮症、ウォルマン病、白血病、急性リンパ性白血病（Ｌ１、Ｌ２、Ｌ３）、慢性リンパ性白血病、急性骨髄性白血病（ＡＭＬ）、未分化ＡＭＬ（Ｍ０）、骨髄芽球性白血病（Ｍ１）、骨髄芽球性白血病（Ｍ２）、前骨髄球性白血病（Ｍ３）、骨髄単球性白血病（Ｍ４）、単芽球性白血病（Ｍ５）、赤白血病（Ｍ６）、巨核芽球性白血病（Ｍ７）、慢性骨髄球性白血病、ホジキンリンパ腫、Ｔ細胞リンパ腫、Ｂ細胞リンパ腫、リンパ形質細胞リンパ腫、ワルデンシュトレームマクログロブリン血症、多発性骨髄腫、濾胞性リンパ腫を有する疾患又は症状の治療に使用される、請求項２２又は２３のいずれか１項に記載の医薬組成物。
【請求項２６】
リーシュマニア症の治療に使用される、請求項２２又は２３のいずれか１項に記載の医薬組成物。
【請求項２７】
生物活性分子の骨髄性細胞への輸送を促進するための、請求項１〜１４のいずれか１項に記載の分子又は化合物の使用、又は分子又は化合物であって、以下の共通構造（Ｉ）〜（ＩＶ）：
（Ｉ）  Ａｒｇ１−（ＳＰＡ）−Ａｒｇ５−（ＳＰＢ）−Ｘ−（ＳＰＣ）−Ａｒｇ９−（ＬＤ１０）ｎ−（ＸＤ１１）ｍ；
（ＩＩ）  Ａｒｇ１−（ＳＰＣ）−Ｘ−（ＳＰＢ）−Ａｒｇ５−（ＳＰＡ）−Ａｒｇ９−（ＬＤ１０）ｎ−（ＸＤ１１）ｍ；
（ＩＩＩ）  （ＸＤ−２）ｍ−（ＬＤ  −１）ｎ−Ａｒｇ１−（ＳＰＡ）−Ａｒｇ５−（ＳＰＢ）−Ｘ−（ＳＰＣ）−Ａｒｇ９；又は
（ＩＶ）  （ＸＤ−２）ｍ−（ＬＤ  −１）ｎ−Ａｒｇ１−（ＳＰＣ）−Ｘ−（ＳＰＢ）
−Ａｒｇ５−（ＳＰＡ）−Ａｒｇ９；
［式中、
（ａ）  ＬＤ１０又はＬＤ−１は、Ｄ−アルギニン、Ｄ−リシン；Ｌ−アルギニン又はＬ−リシン以外のＬ−又はＤ−アミノ酸のいずれかを表し、ｎは、０〜１０の数字である；
（ｂ）ＸＤ１１又はＸＤ−２は、Ｄ−アルギニン又はＤ−リシン以外のＤ−アミノ酸のいずれかを表し、ｍは０又は１の数字である；
（ｃ）（ｉ）Ａｒｇ１、Ａｒｇ５、及びＡｒｇ９はＬ−アルギニンを表し；ＸはＬ−リシン又はＬ−アルギニンを表す、又は（ｉｉ）Ａｒｇ１、Ａｒｇ５、及びＡｒｇ９は、Ｄ−アルギニンを表し；Ｘ  はＤ−リシン又はＤ−アルギニンを表す；
（ｄ）（ＳＰＡ）は化学リンカーを表し、（ｉ）３アミノ酸残基のペプチド鎖からなり、各残基は、Ｄ−アルギニン、Ｄ−リシン、Ｌ−アルギニン又はＬ−リシン以外の任意のアミノ酸残基から独立して選択されてもよい；又は（ｉｉ）隣接するアミノ酸残基を１２．９＋１．５  Åの間隔で隔離する；
（ｅ）（ＳＰＣ）は化学リンカーを表し、（ｉ）１個のアミノ酸残基で構成され、当該アミノ酸は、Ｄ−アルギニン、Ｄ−リシン、Ｌ−アルギニン又はＬ−リシン以外の任意のアミノ酸残基であってもよい；又は（ｉｉ）隣接するアミノ酸残基を７．５＋１．５  Åの間隔で隔離する；
（ｆ）（ＳＰＢ）−Ｘ−（ＳＰＣ）又はその反対の（ＳＰＣ）−Ｘ−（ＳＰＢ）は化学リンカーを表し、（ｉ）ＳＰＢ及びＳＰＣはそれぞれ１個のアミノ酸残基で構成され、当該アミノ酸は、Ｄ−アルギニン、Ｄ−リシン、Ｌ−アルギニン又はＬ−リシン以外の任意のアミノ酸残基から独立して選択されてもよい；又は（ｉｉ）隣接するアミノ酸残基Ａｒｇ１及びＡｒｇ５又はＡｒｇ５及びＡｒｇ９を１２．９＋１．５  Åの間隔で隔離する］
のいずれか１つを含み、又はこれからなる、分子又は化合物の使用。
り、当該共通構造（Ｉ）〜（ＩＶ）は、
（Ｖ）  Ａｒｇ１−Ｘ２−Ｘ３−Ｘ４−Ａｒｇ５−  Ｘ６−Ｘ７−Ｘ８−Ａｒｇ９−（ＬＤ１０）ｎ−（ＸＤ１１）ｍ；又は
（ＶＩ）  （ＸＤ−２）ｍ−（ＬＤ  −１）ｎ−Ａｒｇ１−  Ｘ２−Ｘ３−Ｘ４−Ａｒｇ
５−  Ｘ６−Ｘ７−Ｘ８−Ａｒｇ９；
［式中、
Ａｒｇ１、Ａｒｇ５及びＡｒｇ９は前記のようにＬ−アルギニンであり；Ｘ３又はＸ７は、前記のようにＬ−リシン又はＬ−アルギニンである］
で表されてもよく、構造（Ｖ）又は（ＶＩ）において、Ｘ４又はＸ６はＤ−アミノ酸である、分子又は化合物の使用。
【請求項２８】
薬物ペプチドコンジュゲートの調製のための、請求項１〜１４のいずれか１項に記載の分子又は化合物の使用。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、特定の共通配列又は構造を有する単離された分子、ペプチド及びポリペプチドに関し、またそのような分子、ペプチド及びポリペプチドを含み、又はこれからなり、プロテオグリカン、特にコンドロイチン−４−硫酸（Ｃ４Ｓ）を特異的に認識するトランスポーター分子として振る舞い得る化合物にも関する。本発明の単離された分子、ペプチド、ポリペプチド及び化合物は、生物活性部分（ＢＡＭ）とコンジュゲート、あるいは連結されてもよい。従って、ＢＡＭコンジュゲートは、特異的なターゲティング、又はインビトロ及びインビボで、Ｃ４Ｓを発現する細胞の細胞質又は核への、例えばペプチド、化学物質又は核酸であってもよいＢＡＭの送達を可能とする。
【背景技術】
【０００２】
細胞膜は一般に、タンパク質や核酸等の巨大分子を透過しない。更に、より小さい分子であっても生細胞への侵入は非常に遅く、高い強力な毒性の細胞外濃度で存在する必要がある。特定の細胞又は組織を特異的にターゲティングし、その中に所望の化合物を送達する方法の欠如は、細胞内に作用部位を有する潜在的に多くの生物活性分子の、治療的、予防的及び診断的又は実験的使用の障害となっていた。
【０００３】
十年ほど前から、外部的媒体から組織又は細胞内に所望の物質を効率的に輸送することを促進する試みが探求されている。最も一般的な送達構築物は、膜結合及び輸送活性が見出された、抗体（又は抗体断片）又はウイルス及び細菌ペプチドに基づくものである。例えば、トランスポーター構築物は、ヘルペスウイルスＶＰ２２タンパク質；ヒト免疫不全ウイルス（ＨＩＶ）ＴＡＴタンパク質を含むポリペプチド、及びＡｎｔｅｎｎａｐｅｄｉａタンパク質のホメオドメイン（Ａｎｔｐ  ＨＤ）を含むポリプチド、またそれらの機能的断片や改変物に基づいて開発されている。
【０００４】
前記送達構築物で調査されたウイルス及び細菌ペプチド（細胞穿孔ペプチド（ＣＰＰ）とも呼ばれる）の大半は、リシン及び／又はアルギニン等の塩基性残基に富んだカチオン性ペプチド、又はアルファへリックス促進アミノ酸を含むペプチドを含む。幾つかの実験的動物モデルにおいて、ＣＰＰがインビトロでの細胞へのトランスフェクションに使用されたが、臨床試験において、限定的な成功しか実証されなかった。臨床段階での不十分な成功は、特定の細胞型又は組織に対する特異性の欠如、あるいはインビボでのこれらのペプチドの内在的不安定性（半減期が数分のオーダーである）に起因すると考えられる。インビボでの安定性の欠如を克服するために、化学修飾された、又はＤアミノ酸を含む非天然アミノ酸を含む、幾つかの安定化ＣＰＰが開発された。例えば、典型的な「ＴＡＴ」ペプチドのＤ−レトロ−インベルソフォーム（Ｄ−ＴＡＴ）は、第ＩＩ相臨床試験に達しているが、このペプチドの潜在的に極端に長い耐久性は、その使用を、例えば、耳への、又は眼の炎症の治療の為の眼球内への局所投与における使用に限定している。
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００５】
「Ｄ−ＴＡＴ」ペプチド中の特定の位置のみＬ−アミノ酸で置換することにより、潜在的に臨床開発により適した中程度半減期を有するペプチドが取得された。ＷＯ ２０１０／０７２４０６、ＷＯ  ２０１０／０７２２２８又はＷＯ２０１０／０７２２７５に開示されているトランスポーター構築物は、Ｌ−及びＤ−アミノ酸をいずれも含み、その標的部位に荷物部分が輸送される前にプロテアーゼにより分解されるのを防ぐのには十分に安定である。更に、これらのトランスポーター構築物は、細胞内に永続的に維持されず、ある程度プロテアーゼ消化を受けるように見受けられる。しかしながら、効果的な膜透過トランスポーター活性が実証されたものの、取り込まれたとき、荷物−トランスポーター構築物の荷物部分は、一般的に荷物部分が生物的に動作するのに邪魔になるトランスポーター部分から容易には切り離されないことが見出されている。更に、荷物−トランスポーター構築物の分解が遅いと、標的細胞にそれが蓄積される傾向があることが見出されている。従って、取り付けられた荷物分子が最終的に放出され、又は代謝されたとしても、当該トランスポーター構築物は、更に長期間細胞内に保持され、細胞間、及び細胞内プロセスに干渉して、未知の望ましくない副作用をもたらす可能性がある。従って、所望の荷物部分を細胞内に送達するための改善された化合物の開発に、需要が存在する。
【課題を解決するための手段】
【０００６】
発明者らは、驚くべきことに、単離されたペプチド及び／又はポリペプチドの特定の共通配列は、プロテオグリカンＣ４Ｓに特異的に結合し、他のプロテオグリカン（例えばヘパリン、デルマタン、ケラチン）と比較してＣ４Ｓに選択的であり、更に、同程度のサイズのペプチドと比較して改善されたインビトロ安定性を有し、それらとコンジュゲートした（例えば化学的コンジュゲート又は組換え融合）分子の細胞及び細胞内送達のための改善された担体ペプチドとして作用することが出来ることを見出した。ペプチド又はポリペプチドは、以下の（ｉ）又は（ｉｉ）：
（ｉ）        Ａｒｇ１−Ｘ２−Ｘ３−Ｘ４−Ａｒｇ５−Ｘ６−Ｘ７−Ｘ８−Ａｒｇ９−（ＬＤ１０）ｎ−（ＸＤ１１）ｍ、又は
（ｉｉ）        （ＸＤ−２）ｍ−（ＬＤ  −１）ｎ−Ａｒｇ１−Ｘ２−Ｘ３−Ｘ４−Ａｒｇ５−Ｘ６−Ｘ７−Ｘ８−Ａｒｇ９
［式中、
（ａ）Ａｒｇ１、Ａｒｇ５、及びＡｒｇ９はＬ−アルギニンを表し；  ＬＤ１０又はＬＤ  −１は、Ｄ−アルギニン、Ｄ−リシン；Ｌ−アルギニン又はＬ−リシン以外の任意のＬ−又はＤ−アミノ酸を表し、ｎ  は０〜１０であり；ＸＤ１１又はＸＤ−２は、Ｄ−アルギニン又はＤ−リシン以外の任意のＤ−アミノ酸を表し、ｍは０又は１であり；残りのアミノ酸は、Ｌ−リシン、Ｄ−リシン、Ｌ−アルギニン又はＤ−アルギニン以外の任意のＬ−又はＤ−アミノ酸であってもよく、但し、Ｘ３又はＸ７のいずれか一方が、Ｌ−リシン又はＬ−アルギニンを表す；
又は（ｂ）Ａｒｇ１、Ａｒｇ５、及びＡｒｇ９はＤ−アルギニンを表し；  ＬＤ１０又はＬＤ  −１は、Ｄ−アルギニン、Ｄ−リシン；Ｌ−アルギニン又はＬ−リシン以外の任意のＬ−又はＤ−アミノ酸を表し、ｎ  は０〜１０であり；ＸＤ１１又はＸＤ−２は、Ｄ−アルギニン又はＤ−リシン以外の任意のＤ−アミノ酸を表し、ｍは０又は１であり；残りのアミノ酸は、Ｌ−リシン、Ｄ−リシン、Ｌ−アルギニン又はＤ−アルギニン以外の任意のＬ−又はＤ−アミノ酸であってもよく、但し、Ｘ３又はＸ７のいずれか一方が、Ｄ−リシン又はＤ−アルギニンを表す］
の共通配列、又はその逆の配列を有する。
【０００７】
上記共通配列（ｉ）は、条件（ａ）において、配列番号：１７の配列で表され、条件（ｂ）において、配列番号：１９で表される。上記共通配列（ｉｉ）は、条件（ａ）において、配列番号：１８の配列で表され、条件（ｂ）において、配列番号：２０で表される。
【０００８】
本発明は、更に、上記共通ルールに反映されるように、位置２、４、６、８及び３（但し位置７はルール（ｂ）に従い基底され／選択される）又は７（但し位置３はルール（ｂ）に従い基底され／選択される）は、ペプチドの結合活性に貢献しないことが見出されている。従って、Ａｒｇ１−Ｘ２−Ｘ３−Ｘ４−Ａｒｇ５−Ｘ６−Ｘ７−Ｘ８−Ａｒｇ９で表され、但し位置３又は７（両方ではない）がリシン又はアルギニンである、上記ペプチドのターゲティング部分は、共通配列に包含される全ての可能なペプチドにおいて同一であるように見える（３Ｄ空間において、１、５、９及び３又は７での側鎖の提示に関する）。実際に、位置１、５及び９でのアルギニン残基と、位置３又は７（両方ではない）でのリシン又はアルギニン残基の３Ｄ線形配置及び／又は３Ｄ構造が、標的部分の配列の結合活性を構築し、他のプロテオグリカンと比較してＣ４Ｓへの特異的且つ選択的な結合に貢献する。残りのアミノ酸残基、即ち位置２、４、６、８及び３（位置７がルール（ｂ）に従い規定／選択される場合）又は７（（位置３がルール（ｂ）に従い規定／選択される場合）は、主に、標的部分における位置１、５及び９でのアルギニン残基と、位置３又は７（両方ではない）でのリシン又はアルギニン残基との間の適切な距離及び相対的構造を維持するための、構造的骨格と見做される。従って、これらの残基の３Ｄ空間的配向、特にアミノ酸残基側鎖の３Ｄ提示が維持される場合、本発明のペプチド及び／又は組成物は、プロテオグリカン、特にＣ４Ｓへの特異的及び選択的結合を呈し得る。
【０００９】
また、本発明は、一般に、上記（ｉ）又は（ｉｉ）の共通配列を含む、又はこれからなる単離されたペプチド及びポリペプチド、又はそのようなペプチド及びポリペプチドを含む、又はこれからなる化合物、並びに共通配列（ｉ）及び（ｉｉ）のペプチド及び／又は標的部分と同等の、３つのアルギニン残基（即ちＡｒｇ１、Ａｒｇ５、及びＡｒｇ９）及び１つのアルギニン又はリシン（即ち両方ではないがＡｒｇ／Ｌｙｓ３又はＡｒｇ／Ｌｙｓ７）を有するアミノ酸残基構築物（又はそれらを含む化合物）に関する。従って、本発明は、共通配列（ｉ）及び（ｉｉ）の標的部分中の自由に選択できる位置（即ち２、４、６、８及び３（位置７が上記ルール（ｂ）に従いＤ−若しくはＬ−リシン又はＤ−若しくはＬ−アルギニンとして規定／選択される場合）又は７（位置３が上記ルール（ｂ）に従いＤ−若しくはＬ−リシン又はＤ−若しくはＬ−アルギニンとして規定／選択される場合））におけるアミノ酸残基の使用、及びこれらの残基の、前記３つのアルギニン残基（即ちＡｒｇ１、Ａｒｇ５、及びＡｒｇ９）と、１つのアルギニン又はリシン（即ち両方ではないがＡｒｇ／Ｌｙｓ３又はＡｒｇ／Ｌｙｓ７）の間の空間及び相対的３Ｄ配向／提示を同等に維持するのに適した任意の適切な化学的リンカー又は化学的スペーサーでの置換の、いずれも想定する。本発明は、アミノ酸残基を含み、又はこれからなる分子を包含し、またアミノ酸残基と、化学リンカー／スペーサーの両方を含む分子を包含し、当該分子は、共通配列（ｉ）及び（ｉｉ）の標的部分と同様の位置１、５、及び９並びに位置３又は７（両方ではない）のリシン又はアルギニンと同一又は同等の相対的３次元構造で、３つのアルギニン及び１つのリシン又はアルギニンを呈する。本開示中、化学リンカー／スペーサーによる１つ以上のアミノ酸残基の置換を含む分子は、残基−スペーサー構築物と呼ぶ。
【００１０】
本開示中、便宜のため、共通配列（ｉ）及び（ｉｉ）のアルギニン１、５及び９に対応する残基−スペーサー構築物中のアルギニンを、それぞれＡｒｇ１、Ａｒｇ５及びＡｒｇ９と称する。同様に、本発明のペプチド及び化合物の共通配列（ｉ）及び（ｉｉ）の位置３又は７（両方ではない）のアルギニン又はリシンに対応する残基−スペーサー構築物中のアルギニン又はリシンを、それぞれＡｒｇ／Ｌｙｓ３又はＡｒｇ／Ｌｙｓ７と称する。
【００１１】
上記を考慮して、本発明は、一般に、Ａｒｇ１が１つ以上の化学リンカー（１つ以上のアミノ酸残基のみからなってもよく、又はアミノ酸残基及び化学スペーサー／リンカーの両方を含んでもよい）を介してＡｒｇ５と連結し、Ａｒｇ１とＡｒｇ５の距離が、当該分子／構築物が伸長したコンフォーメーションをとるときに、１２．９＋１．５Åであり；Ａｒｇ５が１つ以上の化学リンカー（１つ以上のアミノ酸残基のみからなってもよく、又はアミノ酸残基及び化学スペーサー／リンカーの両方を含んでもよい）を介して更にＡｒｇ９と連結し、Ａｒｇ５とＡｒｇ９の距離が、当該分子／構築物が伸長したコンフォーメーションをとるときに、１２．９＋１．５Åである、分子に関する。当該連結は、最終的な分子Ａｒｇ１−Ａｒｇ５−Ａｒｇ９が、伸長したコンフォーメーションをとるときに線形の分子であるように選択されなければならない。本発明の分子は、更に、（１）Ａｒｇ１とＡｒｇ５の間の１つ以上の化学リンカーの中にＡｒｇ／Ｌｙｓ３を含み、当該分子が伸長したコンフォーメーションをとるとき、Ａｒｇ１とＡｒｇ／Ｌｙｓ３との間の距離は、約７．５＋１．５Åである；又は（２）Ａｒｇ５とＡｒｇ９の間の１つ以上の化学リンカーの中にＡｒｇ／Ｌｙｓ７を含み、当該分子が伸長したコンフォーメーションをとるとき、Ａｒｇ９とＡｒｇ／Ｌｙｓ７との間の距離は、約７．５＋１．５Åである。明細書中に記載の方法に従い１つ以上の残基を化学リンカーで置換するとき、Ａｒｇ１、Ａｒｇ５、Ａｎｇ９及びＡｒｇ／Ｌｙｓ３又はＡｒｇ／Ｌｙｓ７の側鎖が、共通配列（ｉ）及び（ｉｉ）のペプチド及びポリペプチド中の対応する側鎖と同一又は類似の３Ｄ提示を保持するように注意を要する。従って、残基−スペーサー構築物中のＡｒｇ１、Ａｒｇ５、Ａｎｇ９及びＡｒｇ／Ｌｙｓ３又はＡｒｇ／Ｌｙｓ７の側鎖は、伸長したコンフォーメーションをとるときに、３Ｄ空間中で線形又はほぼ線形の構造で存在すべきである。従って、Ａｒｇ１及びＡｎｇ９の間の距離は、当該分子／構築物が伸長した位置にあるとき、２５．８＋３．０  Åであり得る。好ましい態様において、Ａｒｇ１、Ａｒｇ５、Ａｎｇ９及びＡｒｇ／Ｌｙｓ３又はＡｒｇ／Ｌｙｓ７は、それぞれ（ｉ）Ｌ−アミノ酸残基、又は（ｉｉ）Ｄ−アミノ酸残基のいずれかである。
【００１２】
本発明は、一般に、１つ以上の単離された分子、又は当該分子を含む、又はこれからなる化合物に関し、当該分子は、以下の共通配列（ｉｉｉ）〜（ｖｉ）
（ｉｉｉ）    Ａｒｇ１−（ＳＰＡ）−Ａｒｇ５−（ＳＰＢ）−Ｘ−（ＳＰＣ）−Ａｒｇ
９−（ＬＤ１０）ｎ−（ＸＤ１１）ｍ；
（ｉｖ）      Ａｒｇ１−（ＳＰＣ）−Ｘ−（ＳＰＢ）−Ａｒｇ５−（ＳＰＡ）−Ａｒｇ
９−（ＬＤ１０）ｎ−（ＸＤ１１）ｍ；
（ｖ）（ＸＤ−２）ｍ−（ＬＤ  −１）ｎ−Ａｒｇ１−（ＳＰＡ）  Ａｒｇ５−（ＳＰＢ
）−Ｘ−（ＳＰＣ）−Ａｒｇ９；又は
（ｖｉ）      （ＸＤ−２）ｍ−（ＬＤ  −１）ｎ−Ａｒｇ１−（ＳＰＣ）−Ｘ−（ＳＰ
Ｂ）−Ａｒｇ５−（ＳＰＡ）−Ａｒｇ９
又はこの逆の配列を有し、ＬＤ１０又はＬＤ−１は、Ｄ−アルギニン、Ｄ−リシン；Ｌ−アルギニン又はＬ−リシン以外のＬ−又はＤ−アミノ酸を表し、ｎは０〜１０であり；ＸＤ１１又はＸＤ−２はＤ−アルギニン又はＤ−リシン以外のＤ−アミノ酸であり、ｍは０又は１であり；
（ａ）Ａｒｇ１、Ａｒｇ５、及びＡｒｇ９はＬ−アルギニンを表し；ＸはＬ−リシン又はＬ−アルギニンを表し、又は
（ｂ）Ａｒｇ１、Ａｒｇ５、及びＡｒｇ９はＤ−アルギニンを表し；ＸはＤ−リシン又はＤ−アルギニンを表し、
（ＳＰＡ）は化学リンカーであり、
（ａ）３つのアミノ酸残基のペプチド鎖からなり、各残基は、Ｄ−アルギニン、Ｄ−リシン、Ｌ−アルギニン又はＬ−リシン以外の任意のアミノ酸残基から独立して選択されてもよく；又は
（ｂ）隣接するアミノ酸残基間の間隔は１２．９＋１．５Åであり；
（ＳＰｃ）は化学リンカーであり、
（ａ）１つのアミノ酸残基からなり、当該残基は、Ｄ−アルギニン、Ｄ−リシン、Ｌ−アルギニン又はＬ−リシン以外の任意のアミノ酸残基であり；又は
（ｂ）当該分子が伸長したコンフォーメーションをとるとき隣接するアミノ酸残基との間隔は７．５＋１．５Åであり；
（ＳＰＢ）−Ｘ−（ＳＰＣ）又はその逆の（ＳＰＣ）−Ｘ−（ＳＰＢ）は、化学リンカーであり、
（ａ）ＳＰＢ及びＳＰＣがそれぞれ独立してＤ−アルギニン、Ｄ−リシン、Ｌ−アルギニン又はＬ−リシン以外のアミノ酸残基から選択され得る単一のアミノ酸残基を表し；又は
（ｂ）当該構築物が伸長したコンフォーメーションをとるとき、隣接するアミノ酸残基Ａｒｇ１及びＡｒｇ５又はＡｒｇ５及びＡｒｇ９の間隔が１２．９＋１．５Åである。
【００１３】
共通配列（ｉ）又は（ｉｉ）において１つ以上のアミノ酸残基を化学スペーサー／リンカーで置き換える（即ち共通配列（ｉｉｉ）〜（ｖｉ）の１つ以上の分子を形成する）とき、Ａｒｇ１、Ａｒｇ５、Ａｎｇ９及びＡｒｇ／Ｌｙｓ３又はＡｒｇ／Ｌｙｓ７の側鎖が、共通配列（ｉ）及び（ｉｉ）のペプチド及びポリペプチド中の対応する側鎖と同一又は類似の３Ｄ提示を保持するように注意を要する。従って、本発明の方法に係る残基−スペーサー構築物中のＡｒｇ１、Ａｒｇ５、Ａｎｇ９及びＡｒｇ／Ｌｙｓ３又はＡｒｇ／Ｌｙｓ７の側鎖は、伸長したコンフォーメーションをとるときに、３Ｄ空間中で線形又はほぼ線形の構造で存在すべきである。
【００１４】
幾つかの態様において、本発明の共通構造（ｉｉｉ）〜（ｖｉ）の分子は、化学スペーサー／リンカーを含有せず、アミノ酸残基のみ含有する。そのような態様において、本発明は、１つ以上の単離されたペプチド又はポリペプチド、及び／又は当該１つ以上の単離されたペプチド又はポリペプチドを含む、又はこれからなる化合物に関し、当該ペプチド又はポリペプチドは、以下の共通配列（ｉ）又は（ｉｉ）：
（ｉ）  Ａｒｇ１−Ｘ２−Ｘ３−Ｘ４−Ａｒｇ５−Ｘ６−Ｘ７−Ｘ８−Ａｒｇ９−（ＬＤ１０）ｎ−（ＸＤ１１）ｍ又は
（ｉｉ）  （ＸＤ−２）ｍ−（ＬＤ  −１）ｎ−Ａｒｇ１−Ｘ２−Ｘ３−Ｘ４−Ａｒｇ５−Ｘ６−Ｘ７−Ｘ８−Ａｒｇ９
又はその逆の配列を有し、
（ａ）Ａｒｇ１、Ａｒｇ５、及びＡｒｇ９はＬ−アルギニンを表し；ＬＤ１０又はＬＤ  −１はＤ−アルギニン、Ｄ−リシン；Ｌ−アルギニン又はＬ−リシン以外のＬ−又はＤ−アミノ酸を表し、ｎは０〜１０であり；ＸＤ１１又はＸＤ−２はＤ−アルギニン又はＤ−リシン以外のＤ−アミノ酸であり、ｍは０又は１であり；そして残りのアミノ酸Ｘ２〜Ｘ４及びＸ６〜Ｘ８はＬ−リシン、Ｄ−リシン、Ｌ−アルギニン又はＤ−アルギニン以外の任意のＬ−又はＤ−アミノ酸であり、但し両方ではないがＸ３又はＸ７がＬ−リシン又はＬ−アルギニンを表し；又は
（ｂ）Ａｒｇ１、Ａｒｇ５、及びＡｒｇ９はＤ−アルギニンを表し；ＬＤ１０又はＬＤ  −１はＤ−アルギニン、Ｄ−リシン；Ｌ−アルギニン又はＬ−リシン以外のＬ−又はＤ−アミノ酸を表し、ｎは０〜１０であり；ＸＤ１１又はＸＤ−２はＤ−アルギニン又はＤ−リシン以外のＤ−アミノ酸であり、ｍは０又は１であり；そして残りのアミノ酸Ｘ２〜Ｘ４及びＸ６〜Ｘ８はＬ−リシン、Ｄ−リシン、Ｌ−アルギニン又はＤ−アルギニン以外の任意のＬ−又はＤ−アミノ酸であり、但し両方ではないがＸ３又はＸ７がＤ−リシン又はＤ−アルギニンを表す。
【００１５】
上記共通配列（ｉ）は、条件（ａ）の場合に配列番号：１７で表され、条件（ｂ）の場合に配列番号１９で表される。上記共通配列（ｉｉ）は、条件（ａ）の場合に配列番号：１８で表され、条件（ｂ）の場合に配列番号２０で表される。
【００１６】
幾つかの態様において、本発明の共通構造（ｉｉｉ）〜（ｖｉ）の分子は、ＳＰＡ、ＳＰＢ、及びＳＰＣとして、化学リンカー／スペーサーを有し、アミノ酸残基を有さない。そのような態様において、本発明は、１つ以上の残基−スペーサー構築物、又はそれらを含む、又はそれらからなる化合物に関するものとして定義され得る。当該構築物は、以下の（ｖｉｉ）〜（ｘ）
（ｖｉｉ）      Ａｒｇ１−（ＣＬＡ）−Ａｒｇ５−（ＣＬＢ）−Ｘ−（ＣＬＣ）−Ａｒｇ９−（ＬＤ１０）ｎ−（ＸＤ１１）ｍ；
（ｖｉｉｉ）    Ａｒｇ１−（ＣＬＣ）−Ｘ−（ＣＬＢ）−Ａｒｇ５−（ＣＬＡ）−Ａｒｇ９−（ＬＤ１０）ｎ−（ＸＤ１１）ｍ；
（ｉｘ）        （ＸＤ−２）ｍ−（ＬＤ  −１）ｎ−Ａｒｇ１−（ＣＬＡ）  Ａｒｇ５−（ＣＬＢ）−Ｘ−（ＣＬＣ）−Ａｒｇ９；又は
（ｘ）  （ＸＤ−２）ｍ−（ＬＤ  −１）ｎ−Ａｒｇ１−（ＣＬＣ）−Ｘ−（ＣＬＢ）−Ａｒｇ５−（ＣＬＡ）−Ａｒｇ９
のいずれかの共通構造を有し、ＬＤ１０又はＬＤ  −１はＤ−アルギニン、Ｄ−リシン；Ｌ−アルギニン又はＬ−リシン以外のＬ−又はＤ−アミノ酸を表し、ｎは０〜１０であり；ＸＤ１１又はＸＤ−２はＤ−アルギニン又はＤ−リシン以外のＤ−アミノ酸であり、ｍは０又は１であり；
（ａ）Ａｒｇ１、Ａｒｇ５、及びＡｒｇ９はＬ−アルギニンを表し；ＸはＬ−リシン又はＬ−アルギニンを表し、又は
（ｂ）Ａｒｇ１、Ａｒｇ５、及びＡｒｇ９はＤ−アルギニンを表し；ＸはＤ−リシン又はＤ−アルギニンを表し、
（ＳＰＡ）は化学リンカーであり、隣接するアミノ酸残基を１２．９＋１．５Å隔て；
（ＳＰｃ）は化学リンカーであり、当該分子が伸長したコンフォーメーションをとるとき隣接するアミノ酸残基を７．５＋１．５Å隔て；
（ＳＰＢ）−Ｘ−（ＳＰＣ）又はその逆の（ＳＰＣ）−Ｘ−（ＳＰＢ）は、化学リンカーであり、当該構築物が伸長したコンフォーメーションをとるとき、隣接するアミノ酸残基Ａｒｇ１及びＡｒｇ５又はＡｒｇ５及びＡｒｇ９の間隔が１２．９＋１．５Åである。
【００１７】
本発明の分子又は化合物が、アミノ酸残基のみではない１つ以上の化学スペーサー／リンカーを含む場合、Ａｒｇ１、Ａｒｇ５、Ａｎｇ９及びＡｒｇ／Ｌｙｓ３又はＡｒｇ／Ｌｙｓ７の側鎖が、共通配列（ｉ）及び（ｉｉ）のペプチド及びポリペプチド中の対応する側鎖と同一又は類似の３Ｄ提示を保持するように注意を要する。従って、本発明の方法に係る残基−スペーサー構築物中のＡｒｇ１、Ａｒｇ５、Ａｎｇ９及びＡｒｇ／Ｌｙｓ３又はＡｒｇ／Ｌｙｓ７の側鎖は、当該分子及び／又は構築物が伸長したコンフォーメーションをとるときに、３Ｄ空間中で線形又はほぼ線形の構造で存在すべきである。
【００１８】
共通配列に記載の分子及び化合物（共通配列（ｉ）及び（ｉｉ）のアミノ酸残基のみを含む、及び／又は共通構造（ｖｉｉ）〜（ｘ）の化学リンカー及びアミノ酸残基を含む、幾つかの態様を含む）は、例えば細胞の表面に発現しているプロテオグリカンを特異的に認識及び／又は結合する、特に他のプロテオグリカンよりもプロテオグリカンＣ４Ｓに選択的に結合する、本明細書中で記載の分子及び化合物中の輸送及び／標的部分としての特定の使用を見出す。Ｃ４Ｓプロテオグリカンと特異的に結合する標的部分として機能する上記共通配列（ｉｉｉ）〜（ｖｉ）の部分は、Ａｒｇ１−（ＳＰＡ）−Ａｒｇ５−（ＳＰＢ）−Ｘ−（ＳＰＣ）−Ａｒｇ９又はＡｒｇ１−（ＳＰＣ）−Ｘ−（ＳＰＢ）−Ａｒｇ５−（ＳＰＡ）−Ａｒｇ９として表され（Ａｒｇ１−Ｘ２−Ｘ３−Ｘ４−Ａｒｇ５−Ｘ６−Ｘ７−Ｘ８−Ａｒｇ９  （配列番号：１７又は配列番号：１８の断片の場合に配列番号：２１；  配列番号：１９又は配列番号：２１の断片の場合に配列番号：２０）、Ａｒｇ１−（ＣＬＡ）−Ａｒｇ５−（ＣＬＢ）−Ｘ−（ＣＬＣ）−Ａｒｇ９及びＡｒｇ１−（ＣＬＣ）−Ｘ−（ＣＬＢ）−Ａｒｇ５−（ＣＬＡ）−Ａｒｇ９）の標的部分共通配列又は構造を有する特定の態様を含む）、Ａｒｇ１、Ａｒｇ５、Ａｒｇ９及びＡｒｇ／Ｌｙｓ３又はＡｒｇ／Ｌｙｓ７、特にこれらの残基の側鎖に対応するアミノ酸残基の３Ｄ提示に関して同一の分子である。従って、共通配列（ｉｉｉ）〜（ｖｉ）の３つのアルギニン残基及び１つのリシン残基を含むいずれかの分子は、以下のルールに従い、標的部分として開発出来る。
（１）Ａｒｇ１、Ａｒｇ５、Ａｒｇ９は、同一のアルギニンの光学異性体でなければならない。即ち、それぞれＬ−アルギニンであるか、それぞれＤ−アルギニンでなければならない。
（２）Ａｒｇ１は、Ａｒｇ５と１つ以上の化学スペーサー（１つ以上のアミノ酸残基のみからなってもよく、アミノ酸残基及び化学スペーサー／リンカーの両方を含んでもよい）を用いて連結してもよく、それらの間隔は、伸長したコンフォーメーションをとるときに１２．９＋１．５Åである；Ａｒｇ５は、Ａｒｇ９と１つ以上の化学スペーサー（１つ以上のアミノ酸残基のみからなってもよく、アミノ酸残基及び化学スペーサー／リンカーの両方を含んでもよい）を用いて更に連結してもよく、それらの間隔も、伸長したコンフォーメーションをとるときに１２．９＋１．５Åである；
（３）標的部分は、Ａｒｇ１及びＡｒｇ５の間、又はＡｒｇ５及びＡｒｇ９の間（両方ではない）の連結中に存在する、Ａｒｇ１、Ａｒｇ５及びＡｒｇ９と同一のキラリティ―である、１つのリシン又はアルギニンも有しなければならない（この残基は、共通配列（ｉ）及び（ｉｉ）における位置３又は７（両方ではない）としての残基、及び共通配列（ｉｉｉ）〜（ｘ）における残基「Ｘ」に対応する）。言い換えると、Ａｒｇ１、Ａｒｇ５及びＡｒｇ９がＬ−アルギニンである場合、リシン／アルギニンはＬ−リシン又はＬ−アルギニンでなければならず；Ａｒｇ１、Ａｒｇ５及びＡｒｇ９がＤ−アルギニンである場合、リシン／アルギニンはＤ−リシン又はＤ−アルギニンでなければならない。
（４）リシン／アルギニンがＡｒｇ１及びＡｒｇ５の間に位置している場合、それはＡｒｇ１から７．５＋１．５Å隔てられており；リシン／アルギニンがＡｒｇ５及びＡｒｇ９の間に位置している場合、それはＡｒｇ９から７．５＋１．５Å隔てられている。
（５）残りの連結は、Ａｒｇ１、Ａｒｇ５及びＡｒｇ９及びＸの所望の間隔を維持するのに適し、かつ共通配列（ｉ）及び（ｉｉ）における対応する残基と類似又は同様のアミノ酸及びそれらの側鎖の３Ｄ構造及び／又は３Ｄ提示を維持するのに適した、当該技術分野で公知の、及び／又は本明細書中に記載の、（１つ以上のアミノ酸残基のみからなってもよく、アミノ酸残基及び化学スペーサー／リンカーの両方を含んでもよい）任意の化学的スペーサー又はリンカーを含んでもよい。Ａｒｇ１、Ａｒｇ５及びＡｒｇ９及びＸの間の連結は、好ましくは正に荷電するものではない。Ａｒｇ１、Ａｒｇ５及びＡｒｇ９及びＸの間の連結がアミノ酸残基であるか、アミノ酸残基を含む場合、当該残基は、Ｄ−若しくはＬ−アルギニン又はＤ−若しくはＬ−リシン以外のＤ−又はＬ−アミノ酸であり得る。
【００１９】
本発明の共通構造がアミノ酸からなり、又はアミノ酸のみを含む場合、標的部分は、以下のように設計できる。共通構造（ｉｉｉ）〜（ｖｉ）中の標的部分の配列は、当該構造がアミノ酸残基からなる、又はのみを含む場合、Ａｒｇ１−Ｘ２−Ｘ３−Ｘ４−Ａｒｇ５−Ｘ６−Ｘ７−Ｘ８−Ａｒｇ９で表される（例えば共通配列（ｉ）及び（ｉｉ）を参照されたい）。当該構造は、上記ルール（２）を満たす。Ａｒｇ１とＡｒｇ５、並びにＡｒｇ５とＡｒｇ９の間を、伸長したコンフォーメーションをとった場合に１２．９＋１．５Å隔てる連結は、３つのアミノ酸残基からなるペプチドである。更にペプチド共通配列に適用される上記ルールは：
（Ｐ１）Ａｒｇ１、Ａｒｇ５、Ａｒｇ９は、同一のアルギニンの光学異性体でなければならない。即ち、それぞれＬ−アルギニンであるか、それぞれＤ−アルギニンでなければならない（上記ルール（１）に対応する）。
（Ｐ２）残基Ｘ３又はＸ７は（両方ではない）は、Ａｒｇ１、Ａｒｇ５及びＡｒｇ９と同一のキラリティーであるリシン又はアルギニン。即ち、Ａｒｇ１、Ａｒｇ５及びＡｒｇ９がＬ−アルギニンである場合、Ｘ３又はＸ７（両方ではない）はＬ−リシン又はＬ−アルギニンでなければならず；Ａｒｇ１、Ａｒｇ５及びＡｒｇ９がＤ−アルギニンである場合、Ｘ３又はＸ７（両方ではない）はＤ−リシン又はＤ−アルギニンでなければならない（上記ルール３及び４に対応する）。
（Ｐ３）残りの残基、即ちＸ２、Ｘ４、Ｘ６、Ｘ８及びＸ３（Ｘ７が上記Ｐ２に従い選択される場合）又はＸ７（Ｘ３が上記Ｐ２に従い選択される場合）は、Ｌ−又はＤ−アルギニン又はＬ−又はＤ−リシン以外の任意のアミノ酸であってもよい。
【００２０】
本発明の、即ち共通配列（ｉｉｉ）〜（ｖｉ）（態様（ｉ）、（ｉｉ）、及び（ｖｉｉ）〜（ｘ）を含む）のいずれかを含む、又はこれからなる、全ての分子及び化合物において、必須ではないが、更に、ＬＤ−１０又はＬＤ−１が、Ｌ−又はＤ−アルギニン又はＬ−又はＤ−リシン以外のＬ−又はＤ−アミノ酸を表し、ＸＤ−１１又はＸＤ−２が、Ｄ−アルギニン又はＤ−リシン以外のＤ−アミノ酸を表すのが好ましい。最も好ましくは、ＬＤ−１０又はＬＤ−１がＬ−又はＤ−ヒスチジンを表し、ＸＤ−１１又はＸＤ−２がＤ−ヒスチジンを表す。
【００２１】
本発明の共通構造がアミノ酸のみ（即ち共通配列（ｉ）又は（ｉｉ）に対応する）を含む、又はこれからなる場合、必須ではないが、好ましくは、Ｄ−アミノ酸は、位置４又は６、即ちＸ４又はＸ６に存在する。更に好ましい態様において、「自由に選択できる位置」、即ち２、４、６、８及び３（位置７が、Ｄ−又はＬ−リシン又はＤ−又はＬ−アルギニンとして、上記ルール（ｂ）に従い規定／選択される場合）又は７（位置３が、Ｄ−又はＬ−リシン又はＤ−又はＬ−アルギニンとして、上記ルール（ｂ）に従い規定／選択される場合）は、それぞれ独立して、アミノ酸フェニルアラニン、トリプトファン、バリン、メチオニン、イソロイシン及びロイシンから選択される。上記自由に選択できる位置の３つ以下がアラニン残基であることも好ましい。加えて、上記自由に選択できる位置にプロリン残基が存在しないことが好ましい。
【００２２】
特に上記に規定した、本明細書中に開示の方法に従い使用され得る非限定的なペプチドの例を、表１において提供する。
【表１】
2019001814.tif 000003
【００２３】
共通配列（ｉ）又は（ｉｉ）のペプチドを含む、又はこれからなるペプチド、ポリペプチド及び化合物に加えて、本発明は、更に、本明細書中に明示した例示的ペプチド配列の変異体を包含する。そのような変異体は、「自由に選択できる位置」、即ち２、４、６、８及び３（位置７が、Ｄ−又はＬ−リシン又はＤ−又はＬ−アルギニンとして、上記ルール（ｂ）に従い規定／選択される場合）又は７（位置３が、Ｄ−又はＬ−リシン又はＤ−又はＬ−アルギニンとして、上記ルール（ｂ）に従い規定／選択される場合）を、保存的アミノ酸置換により置換したものを含む。当該技術分野で公知のように、「保存的置換」は、類似の特性を有する他のアミノ酸による置換、例えば、小さいアミノ酸を小さいアミノ酸で、酸性アミノ酸を酸性アミノ酸で置換することであり、極性アミノ酸、塩基性アミノ酸、疎水性アミノ酸、芳香族アミノ酸等、様々なアミノ酸のクラスにおいて行われ得る。本発明の特定の残基における好ましい置換は、その保存的置換群の他のメンバーの中から選択され得る。当該技術分野において、６つの保存的置換群が通常認識されている。（１）アラニン（Ａ）、グリシン（Ｇ）、セリン（Ｓ）及びスレオニン（Ｔ）；（２）アスパラギン酸（Ｄ）及びグルタミン酸（Ｅ）；（３）アスパラギン（Ｎ）及びグルタミン（Ｑ）；（４）アルギニン（Ｒ）、ヒスチジン（Ｈ）及びリシン（Ｋ）；（５）イソロイシン（Ｉ）、ロイシン（Ｌ）、メチオニン（Ｍ）及びバリン（Ｖ）；（６）フェニルアラニン（Ｆ）、チロシン（Ｙ）及びトリプトファン（Ｗ）。
【００２４】
しかしながら、本明細書中に開示される共通配列（ｉ）及び（ｉｉ）のいずれかのペプチド配列の自由に選択できる位置における置換は、その保存的置換群のメンバーによりなされることを必要としない。本発明は、「自由に選択できる位置」、即ち２、４、６、８及び３（位置７が、Ｄ−又はＬ−リシン又はＤ−又はＬ−アルギニンとして、上記ルール（ｂ）に従い規定／選択される場合）又は７（位置３が、Ｄ−又はＬ−リシン又はＤ−又はＬ−アルギニンとして、上記ルール（ｂ）に従い規定／選択される場合）におけるいずれかが、本明細書中に示した共通配列のルールに従い、Ｄ−又はＬ−リシン又はＤ−又はＬ−アルギニン以外の任意の他のＬ−又はＤ−リシンで置換されることも想定する。本明細書中に詳述するように、規定されない位置は、実質的に標的効果に貢献しない。
【００２５】
本発明の全ての態様において、共通配列（ｉ）〜（ｘ）のいずれかの中の、例えば本明細書中に規定された化学リンカー／スペーサーの中の、アミノ酸プロリン（Ｐ）の使用は、当該残基が、当該分子又はペプチドの３次元的コンフォーメーションを破壊又は変形して、結合活性又は親和性を顕著に減少させるおそれがあると考えられるため、避けられるべきである。
【００２６】
当該技術分野で知られ、又は本明細書中に記載される、共通配列（ｉ）及び（ｉｉ）中の対応する残基と同等の、３つのアルギニン残基（即ちＡｒｇ１、Ａｒｇ５、及びＡｒｇ９）及び１つのアルギニン又はリシン（即ち両方ではないがＡｒｇ／Ｌｙｓ３又はＡｒｇ／Ｌｙｓ７）の空間配置及び相対的３Ｄ配置／提示を維持するのに適した任意の適切な化学リンカー又は化学スペーサーは、共通構造（ｉｉｉ）〜（ｖｉ）（共通構造（ｖｉｉ）〜（ｘ）のいずれかを有する態様を含む）に係る本発明の分子の構築に使用され得る。適切な化学リンカー／スペーサーの非限定的な例は、ベータ−及びガンマ−ペプチド（限定されないが、Ｘ、Ｘ及びＸを含む）；糖アミノ酸ベースのスキャフォード（限定されないが、Ｘ、Ｘ及びＸを含む）；ベータ−ヘアピンペプチド模倣物（ｐｅｐｔｉｄｏｍｅｔｉｃｓ）（限定されないが、Ｘ、Ｘ及びＸを含む）；アルファ−ヘリックス模倣物、ベータ−シート／ベータ−スタンド模倣物及びベータ−ターン模倣物（限定されないが、Ｘ、Ｘ及びＸを含む）；及びシクロチド（限定されないが、Ｘ、Ｘ及びＸを含む）；を含む。好ましい態様において、当該化学リンカー／スペーサーは、正に荷電していない。当該リンカーは、代謝分解され、無毒性であり（代謝物も）、本発明の化合物の溶解性を顕著に減少させない。
【００２７】
本願全体に記載される態様は、好ましい（最も好ましいを含む）ものと示されているか否かに拘らず、独立して実施され、及び／又は本発明のペプチドの設計又は選択において開示される他の態様と組み合わせられる。従って、本発明のペプチド、ポリペプチド、分子又は化合物の標的部分の配列又は構造は、上記ルール（１）〜（５）を満たし、好ましいものか否かに拘らず、本明細書中に開示の他の態様において言及された条件の１つ、又はそれ以上を任意で満たしてもよく、満たさなくてもよい。
【００２８】
本発明は、共通配列（ｉｉｉ）〜（ｖｉ）（共通配列（ｉ）及び（ｉｉ）及び共通構造（ｖｉｉ）〜（ｘ）に係る態様を含む）に係る、単離された分子及び化合物（単離された分子、ペプチド及び／又はポリペプチド、及び当該分子、ペプチド及び／又はポリペプチドを含む、又はこれからなる化合物を含む）を含んでもよく、更に生物活性部分（ＢＡＭ；標的部分の「荷物」とも称される）を含んでもよい。（ＢＡＭ）−（標的部分）構築物は、本開示全体で、本発明のＢＡＭ−コンジュゲートとも称され得る。ＢＡＭは、本発明の化合物、ペプチド、ポリペプチド及び／又は分子と、直接化学的にコンジュゲートされ、及び／又はリンカー基を通じて連結されてもよい。
【００２９】
本開示の全体で使用されるとき、直接のコンジュゲートは、ＢＡＭ部分と、共通配列（ｉｉｉ）〜（ｖｉ）（共通配列（ｉ）及び（ｉｉ）及び共通構造（ｖｉｉ）〜（ｘ）に係る態様を含む）内の任意のアミノ酸残基との、又はその中の任意のアミノ酸残基又は適切な化学基との間の、当該技術分野で知られた、又は本明細書中に記載の、ＢＡＭ部分と、アミノ酸残基（例えばアミノ酸側鎖）、及び／又は化学基とのコンジュゲートに適した、任意の化学カップリングを使用した、コンジュゲートを示す。従って、直接のカップリングは、ＢＡＭ部分と、当該残基−スペーサー構築物のアミノ酸（例えばアミノ酸側鎖）又は化学基との間に間隔を空ける１つ以上の化学基をもたらし、当該化学基は、当該技術分野で公知のように、カップリング反応の結果として形成される。
【００３０】
あるいは、本明細書中、ＢＡＭ部分は、リンカー基を介して間接的に、共通配列（ｉｉｉ）〜（ｖｉ）（共通配列（ｉ）及び（ｉｉ）及び共通構造（ｖｉｉ）〜（ｘ）に係る態様を含む）内の任意のアミノ酸残基とコンジュゲートしてもよい。従って、本開示全体において使用されるとき、間接的なコンジュゲートは、ＢＡＭがリンカー基とコンジュゲートしており、当該リンカー基が、本明細書中に定義される共通配列内のアミノ酸残基又は化学基とコンジュゲートしていることを意味する。ＢＡＭとリンカー基との間、及びリンカー基と共通配列（ｉｉｉ）〜（ｖｉ）（共通配列（ｉ）及び（ｉｉ）及び共通構造（ｖｉｉ）〜（ｘ）に係る態様を含む）内のアミノ酸残基又は化学基との間のコンジュゲートは、本明細書中に記載のコンジュゲートを実施するのに適した、又は当該技術分野で知られた、任意のコンジュゲート方法及び／又は化合物を用いるものであってもよい。
【００３１】
ＢＡＭ部分の直接又は間接のコンジュゲートは、本発明の分子内の任意のアミノ酸残基又は化学リンカー／スペーサー基に対するものであってもよい。従って、ＢＡＭ部分は、共通配列（ｉｉｉ）〜（ｖｉ）（共通配列（ｉ）及び（ｉｉ）及び共通構造（ｖｉｉ）〜（ｘ）に係る態様を含む）のＮ又はＣ末端であるアミノ酸残基と直接又は間接的にコンジュゲートしてもよい。あるいは、又は加えて、ＢＡＭ部分は、本発明の分子中の内側のアミノ酸残基又は化学リンカー／スペーサー基と直接又は間接的にコンジュゲートしてもよい。本開示の全体において、内側の残基又は内側の化学基とは、線形のペプチド鎖又は線形の残基−スペーサー構築物の末端ではない、共通配列（ｉｉｉ）〜（ｖｉ）（共通配列（ｉ）及び（ｉｉ）及び共通構造（ｖｉｉ）〜（ｘ）に係る態様を含む）のアミノ酸残基又は化学基を意味する。当該技術分野で知られているように、コンジュゲート方法（直接又は間接の）は、コンジュゲート部位の一方又は両方の化学的修飾を要する場合もある（例えば、本発明の分子内の、アミノ酸残基の修飾、化学基の修飾、及び／又はＢＡＭの修飾）。従って、本発明は、本発明の分子、当該分子を含む、又はこれからなる化合物、及び／又はコンジュゲート構成物の、化学的修飾も包含する。
【００３２】
好ましい態様において、本発明の化合物は、ペプチド−コンジュゲート、例えばＢＡＭ−コンジュゲートであって、本明細書中の共通配列又は構造（ｉ）〜（ｘ）の末端にコンジュゲートしたＢＡＭを有するものを含み、又はこれからなる。従って、これらの好ましい態様において、ＢＡＭ−コンジュゲートは、以下の共通構造（ｘｉ）〜（ｘｉｖ）：
（ｘｉ）        （ＢＡＭ）−（ＬＩＮＫ）−Ａｒｇ１−（ＳＰＡ）−Ａｒｇ５−（ＳＰＢ）−Ｘ−（ＳＰＣ）−Ａｒｇ９−（ＬＤ１０）ｎ−（ＸＤ１１）ｍ；
（ｘｉｉ）      （ＢＡＭ）−（ＬＩＮＫ）−Ａｒｇ１−（ＳＰＣ）−Ｘ−（ＳＰＢ）−Ａｒｇ５−（ＳＰＡ）−Ａｒｇ９−（ＬＤ１０）ｎ−（ＸＤ１１）ｍ；
（ｘｉｉｉ）    （ＸＤ−２）ｍ−（ＬＤ  −１）ｎ−Ａｒｇ１−（ＳＰＡ）  Ａｒｇ５−（ＳＰＢ）−Ｘ−（ＳＰＣ）−Ａｒｇ９−（ＬＩＮＫ）−（ＢＡＭ）；又は
（ｘｉｖ）      （ＸＤ−２）ｍ−（ＬＤ  −１）ｎ−Ａｒｇ１−（ＳＰＣ）−Ｘ−（ＳＰＢ）−Ａｒｇ５−（ＳＰＡ）−Ａｒｇ９−（ＬＩＮＫ）−（ＢＡＭ）；
又はその逆で表される共通構造を有し、（ＢＡＭ）は、生物活性部分を表し；（ＬＩＮＫ）は任意のリンカー基を表し；ＬＤ１０又はＬＤ−１は任意のＬ−又はＤ−アミノ酸を表し、ｎは、０〜１０の数字であり；ＸＤ１１又はＸＤ−２はＤ−アミノ酸を表し、ｍは０又は１の数字であり；
（ａ）  Ａｒｇ１、Ａｒｇ５、及びＡｒｇ９はＬ−アルギニンを表し；ＸはＬ−リシン又はＬ−アルギニンを表し、又は
（ｂ）  Ａｒｇ１、Ａｒｇ５、及びＡｒｇ９はＤ−アルギニンを表し；ＸはＤ−リシン又はＤ−アルギニンを表し；
（ＳＰＡ）は化学リンカーを表し
（ａ）３アミノ酸残基のペプチド鎖からなり、各残基は、Ｄ−アルギニン、Ｄ−リシン、Ｌ−アルギニン又はＬ−リシン以外の任意のアミノ酸残基から独立して選択されてもよい；又は
（ｂ）隣接するアミノ酸残基を１２．９＋１．５  Åの間隔で隔離する；
（ＳＰＣ）は化学リンカーを表し
（ａ）１個のアミノ酸残基で構成され、当該アミノ酸は、Ｄ−アルギニン、Ｄ−リシン、Ｌ−アルギニン又はＬ−リシン以外の任意のアミノ酸残基であってもよい；又は
（ｂ）隣接するアミノ酸残基を、当該分子が伸長したコンフォーメーションをとるとき７．５＋１．５  Åの間隔で隔離する；そして
（ＳＰＢ）−Ｘ−（ＳＰＣ）又はその反対の（ＳＰＣ）−Ｘ−（ＳＰＢ）は化学リンカーを表し
（ａ）ＳＰＢ及びＳＰＣはそれぞれ１個のアミノ酸残基で構成され、当該アミノ酸は、Ｄ−アルギニン、Ｄ−リシン、Ｌ−アルギニン又はＬ−リシン以外の任意のアミノ酸残基から独立して選択されてもよい；又は
（ｂ）隣接するアミノ酸残基Ａｒｇ１及びＡｒｇ５又はＡｒｇ５及びＡｒｇ９を当該構築物が伸長したコンフォーメーションをとるとき１２．９＋１．５  Åの間隔で隔離する。
【００３３】
共通配列（ｘｉ）〜（ｘｉｖ）は、共通配列（ｉｉｉ）〜（ｖｉ）とそれぞれ同一であるが、ＢＡＭ‐部分及び任意のリンカー基（ＬＩＮＫ）が存在する点が異なる。従って、化学スペーサー（ＳＰＡ）、（ＳＰＢ）及び（ＳＰＣ）（本明細書中に記載のように、アミノ酸残基のみからなり、又は含んでもよく、又は化学リンカー及びアミノ酸残基の両方を含んでもよい）の選択は、共通配列（ｉｉｉ）〜（ｖｉ）に関して本明細書中に記載されるように進行し、
・本開示全体に詳述される共通配列（ｉ）及び（ｉｉ）の態様（及びそれらの組み合わせ）に従い、これらの化学スペーサーがアミノ酸残基のみからなり、又は含むことの選択、及び
・本開示全体に詳述される共通構造（ｖｉ）〜（ｘ）の態様（及びそれらの組み合わせ）に従い、これらの化学スペーサーがアミノ酸残基及び化学リンカーの両方を含むことの選択
を含む。
【００３４】
リンカー基が存在する場合（例えば共通配列（ｘｉ）〜（ｘｉｖ）中の（ＬＩＮＫ））、及び／又は、共通配列／構造（ｉ）〜（ｘ）のいずれかにおけるアミノ酸残基とＢＡＭ、又は化学基とＢＡＭとの間接的な連結に使用されるリンカー基は、任意のリンカー、例えば当該技術分野で知られた、又はＢＡＭを残りの標的部分と連結するのに適した本明細書中に開示のペプチドリンカーであってもよい。ＢＡＭは連結基と化学的にコンジュゲートしてもよく、又は、例えば、連結基（例えば共通配列（ｘｉ）〜（ｘｉｖ）中の（ＬＩＮＫ））とＢＡＭの両方がペプチド又はポリペプチドである場合、ＢＡＭは、ペプチド結合を介して連結基と連結してもよく、連結器は、ペプチド結合を介して共通配列／構造の標的部分と連結してもよい。リンカー基の非限定的な例は、例えば、グルタミン酸、グリシン、セリン、システイン及びそれらの組み合わせの１つ以上の残基を含む。幾つかの態様において、構造（ｘｉ）〜（ｘｉｖ）の連結基（ＬＩＮＫ）は、Ｌ−又はＤ−グルタミン酸である１つのアミノ酸である。
【００３５】
また、本発明は、連結基を含まないペプチド−コンジュゲート／残基−スペーサー−コンジュゲート／ＢＡＭ−コンジュゲート等、即ち、（ＬＩＮＫ）部分を欠く共通構造（ｘｉ）〜（ｘｉｖ）及び／又はＢＡＭ部分と任意の共通配列／構造（ｉ）〜（ｘ）内の任意のアミノ酸残基又は化学基との直接連結等の、分子、及び当該分子からなる、又はこれを含む化合物をも包含する。本発明のＢＡＭ−コンジュゲートが連結基を欠く場合、ＢＡＭは、当該分子のアミノ酸残基又は化学基（例えば化学リンカーの化学基）と直接、例えば化学的にコンジュゲートされてもよい。そのような化学的なコンジュゲートの非限定的な例として、アミド結合を介したＮ末端付近及び／又はＮ末端アミノ酸残基における、又はエステル結合を介したＣ末端付近及び／又はＣ末端アミノ酸残基における、当該分子との共有結合を含む。ＢＡＭがペプチド又はポリペプチドである場合、ＢＡＭは、ペプチド結合を介して、Ｎ末端付近及び／又はＮ末端アミノ酸と、又はＣ末端付近及び／又はＣ末端アミノ酸と、直接コンジュゲートしてもよい。
【００３６】
本発明は、インビトロ又はインビボで、生物に投与されたとき、又は生物の１つ以上の細胞に送達されたとき、治療的に意味のある活性をもたらすことが期待される任意のＢＡＭを包含する。従って、本発明に包含されるＢＡＭの非限定的な例は、単糖類又は多糖類、毒素、抗腫瘍剤、抗炎症剤、抗ウイルス剤、抗細菌剤、又は原生動物感染の治療剤を含む。また、ＢＡＭは、デオキシリボース又はリボースであってもよい。
【００３７】
本発明のＢＡＭとして使用されてもよい抗腫瘍剤の非限定的な例は、限定されないが、アルデスロイキン、アレムツズマブ、アリトレチノイン、アロプリノール、アルトレタミン、アミフォスチン、アナストロゾール、アビラテロン、アルセニック、アキシチニブ、アザシチジン、ベンダムスチン、ベキサロテン、ブレオマイシン、ボルテゾミブ、ブスルファン、カバジタキセル、カルステロン、カペシタビン、カルボプラチン、カルフィルゾミブ、カルムスチン、カルムスチン、セレコキシブ、クロラムブシル、シスプラチン、クラドリビン、クロファラビン、クリゾチニブ、シクロフォスファミド、シタラビン、ダカルバジン、ダクチノマイシン、アクチノマイシンＤ、ダサチニブ、ダウノルビシン、デシタビン、デキサゾキサン、ドケタキセル、ドキソルビシン、エンチノスタット、エピルビシン、エリブリン、エルロチニブ、エストラムスチン、エトポシド、エベロリムス、エキセメスタン、フォスタマチニブ、フロクスウリジン、フルダラビン、フルオロウラシル、５−ＦＵ，フルベストラント、ゲフィチニブ、ケミシタビン、ハイドロキシウレア、イダルビシン、レナリドミド、イフォスファミド、イマチニブ、イオムスチン、イリノテカン、イソトレチノイン、イクサベピロン、ラパチニブ、レナリドミド、レトロゾール、ロイコボリン、レバミソール、ロムスチン、ＣＣＮＵ，マリゾミブ、メクロレタミン、ナイトロジェンマスタード、メルファラン、Ｌ−ＰＡＭ、メルカプトプリン、６−ＭＰ、メルタンシン、メンサ、メトトレキサート、メトキシサレン、マイトマイシン、マイトタン、マイトキサントロン、ナンドロロン、ネララビン、ニロチニブ、オキサリプラチン、パクリタキセル、パミドロナート、パゾパニブ、ペガデマセ、ペメトレキセド、ペントスタチン、ピポブロマン、プレリキサフォル、プリカマイシン、ミツラマイシン、ポルフィメル、プララトレキサート、プロカルバジン、キナクリン、ラパマイシン、ロミデプシン、ルクソリチニブ、ソルファネニブ、ストレプトゾシン、スニチニブ、タモキシフェン、テモゾロミド、テムシロリムス、テニポシド、ＶＭ−２６、テストラクトン、タリドミド、チオグアニン、６−ＴＧ、チオテパ、トポテカン、トレミフェン、トレチノイン、ＡＴＲＡ、ウラシルマスタード、バルルビシン、バンデタニブ、ベムラフェニブ、ベルテポルフィン、ビンブラスチン、ビンクリスチン、ビノレルビン、ビスモデギブ、ボリノスタット、ゾレドロナート、ヌクレオシドアナログＡＺＴ、ｂ−Ｄ−アラビノフラノース、ビダラビン、２−クロロデオキシアデノシン、挿入薬物（ｉｎｔｅｒｃａｌａｔｉｎｇ  ｄｒｕｇｓ）、キナーゼ阻害剤、コファラビン、ラロムスチン、クロフォスファミド、アスパラギナーゼ、デキサメタゾン、プレドニゾン及びレスタウルチニブを含む。上記で挙げた抗腫瘍剤は、腫瘍性疾患に関連してだけでなく、当業者に知られているように、他の疾患の、治療、予防及び／又は緩和、例えば抗炎症性又は自己免疫性疾患、及び／又はそれらの症状の、治療、予防及び／又は緩和に関連して、本明細書中に開示される方法に従い使用されてもよい。
【００３８】
本発明の方法においてＢＡＭとして使用され得る抗炎症剤の例として、限定されないが、ＣＯＸ−２阻害剤、プレドニゾン、パゾパニブ、ファモチジン、ダルファムプリジン、ペグロチカーゼ、エソメプラゾール、アスピリン、セレコキシブ、ジクロフェナク、バルデコキシブ、ロフェコキシブ、ジフルニザール、エトドラク、フェノプロフェン、フルルビプロフェン、イブプロフェン、インドメタシン、ケトプロフェン、ケトロラク、メフェナミン酸、メロキシカム、ナブメトン、ナプロキセン、オキサプロジン、ピロキシカム、スリンダクトルメチン、ランソプラゾール、メクロフェナマート、トリアムシノロン、メチルプレドニソロン、ベタメタソン、ブデソニド、プレドニソロン、ハイドロコルチソン、デキサメタソン及びコルチソンを含む。
【００３９】
本発明の方法においてＢＡＭとして使用され得る抗原生動物剤の例は、限定されないが、クロロキン、メフロキン、プリマキン、塩酸プログアニル、アトバクオンと塩酸プログアニル、ピリメタミン、スルファドキシン、キニン、キノリン、ドキシサイクリン、クリンダマイシン、アルテスナート、ジロキサニド、メトロニダゾール、チニダゾール、塩酸メパクリン、アンフォテリシン、ペンタミジン、ピリメタミン、スルファジアジン、アジスロマイシン、アトバクオン、トリメトプリム−スルファメトキサゾール、トリメトプリム、ダプソン、アトバクオン、イセチオン酸ペンタミジン、アモジアキン、クロログアニド、エフロルニチン、ハイドロキシクロロキン、ヨードキノル、アンチモン酸メグルミン、メラルソプロール、ニフルチモックス、パロモマイシン、スチボグルコン酸ナトリウム、スラミン、及びトリパルサミドを含む。
【００４０】
本明細書中に詳述するように、本発明の化合物は、ＢＡＭの細胞内への輸送に作用し得るＢＡＭ−コンジュゲート（即ち標的部分とコンジュゲートしたＢＡＭ；ペプチド−コンジュゲートとも称する）を含み、又はこれからなる。従って、好ましい態様において、本発明は、本発明の化合物、例えばＢＡＭ−コンジュゲート、及び医薬として許容される担体を含有する、医薬組成物を包含する。例えばＢＡＭ−コンジュゲートを含有する本発明の医薬組成物は、ＢＡＭを用いて治療できると知られ、又は予想される、任意の症状に使用されてもよい。例えば、ＢＡＭが抗ウイルス剤である場合、ＢＡＭ−コンジュゲートを含有する医薬組成物は、限定されないが、ＨＩＶ、エプスタインバーウイルス、麻疹ウイルス、パラミクソウイルス、ルビウイルス、ヘルペスウイルス、デングウイルス、単純ヘルペスウイルス、パルボウイルス、呼吸器合胞体ウイルス、天然痘ウイルス、水痘、フラビウイルス、ヒトＴ−リンパ球ウイルス、Ａ、Ｂ、Ｃ、Ｄ、又はＥ型肝炎ウイルス、ラッサウイルス、及び／又はインフルエンザウイルスを含む、ウイルス感染又はその症状の治療に使用されてもよい。ＢＡＭが抗原生動物剤である場合、ＢＡＭ−コンジュゲートを含有する医薬組成物は、リーシュマニア症及び／又はマラリア等の、原生動物の感染の治療に使用されてもよい。
【００４１】
共通配列（ｉ）〜（ｘｉｖ）の標的部分は、プロテオグリカン、特にコンドロイチン−４−硫酸（Ｃ４Ｓ）と、特異的に相互作用する。Ｃ４Ｓは、例えばＣＤ６８等の特定の細胞表面マーカーと関連して優勢に発現し、また、白血球や骨髄球等の特定の細胞種において、他のプロテオグリカンと比較して優勢に発現している。従って、本発明は、前記分子及び化合物、例えばＢＡＭ−コンジュゲートの、ＣＤ６８及び／又はＣ４Ｓを発現する細胞を特異的に標的とするための使用を包含する。本発明は、前記分子及び化合物、例えばＢＡＭ−コンジュゲートの、ＣＤ６８及び／又はＣ４Ｓを発現する細胞、例えば骨髄球及び白血球等の中への、ＢＡＭ部分の輸送を促進するための使用を包含する。
【００４２】
本発明の分子及び化合物（共通配列（ｉ）〜（ｘｉｖ）のいずれかを含み、又はこれからなる、単離された分子、ペプチド、ポリペプチド及び化合物を含む）は、白血球及び／又は骨髄球の標的化における特定の使用を見出し、故に、白血球が病理学的関与を有する疾患又は症状に関連する兆候の治療、予防又は緩和における特定の使用を見出す。そのような疾患又は症状の非限定的な例は、好中球増加症、好中球減少症、白血球減少症、好塩基球減少症、好塩基球増加症、好酸球減少症、好酸球増加症、突発性好酸球増多症候群、リンパ球性白血球増加症、リンパ球増加症、リンパ球減少症、単球増加症、単球減少症、メイ−ヘグリン異常、ペルゲル−フエット異常、アルダー−ライリー異常、チェディアック−東症候群、ヨブ症候群（高ＩｇＥ症候群）、怠けもの白血球症候群、先天性補体第３成分欠損症、慢性肉芽腫症、白血球グルコース６−リン酸デヒドロゲナーゼ欠損症、良性ミエロペルオキシダーゼ欠損症、重症複合型免疫欠損症、ディ・ジョージ症候群、ネゼロフ症候群、乳児伴性無ガンマグロブリン血症、分類不能型低ガンマグロブリン血症、ムコ多糖体症、リポドーズ（ｌｉｐｏｄｏｓｅｓ）、ゴーシェ病、ニーマン−ピック病、ファブリー病、ファーバー病、ガングリオシドーシス、テイ−サックス病、ザントホフ病、クラッベ病、異染色性白質萎縮症、ウォルマン病、白血病、急性リンパ性白血病（Ｌ１、Ｌ２、Ｌ３）、慢性リンパ性白血病、急性骨髄性白血病（ＡＭＬ）、未分化ＡＭＬ（Ｍ０）、骨髄芽球性白血病（Ｍ１）、骨髄芽球性白血病（Ｍ２）、前骨髄球性白血病（Ｍ３）、骨髄単球性白血病（Ｍ４）、単芽球性白血病（Ｍ５）、赤白血病（Ｍ６）、巨核芽球性白血病（Ｍ７）、慢性骨髄球性白血病、及び未分化又は混合型急性白血病（リンパ球性及び骨髄性の両方の特徴を有する白血病）、並びにホジキンリンパ腫、Ｔ細胞リンパ腫、Ｂ細胞リンパ腫、リンパ形質細胞性リンパ腫、ワルデンシュトレームマクログロブリン血症、多発性骨髄腫、濾胞性リンパ腫を含む全ての型のリンパ腫を含む。
【００４３】
４．定義
本明細書中で使用されるとき、用語「白血球が病理学的関与を有する疾患又は症状」及びこれに類似する用語は、ｉ）全ての種類の白血病を含む悪性の形質転換、及び白血球の機能の遺伝的障害を含む非悪性の白血球障害等の、疾患の病院が骨髄球系又はリンパ球系細胞内に主に存在する場合の症状；ｉｉ）毒物の投与、又はウイルス、細菌、原生動物若しくは他の寄生生物の白血球への感染による、白血球の二次的な障害；又はｉｉｉ）一般的な炎症及び免疫応答における白血球の普遍的な関与による、疾患及び症状又はそれらの兆候であって、白血球によって一次的又は二次的に引き起こされるものではなく、白血球の活性を調整する（刺激又は阻害）ことにより治療、予防、無害化又は緩和され得るもの；を示す。
【００４４】
本明細書中で使用されるとき、「化学的誘導体」という用語は、アミノ酸、アミノ酸側鎖及びペプチド結合（共通配列／構造の骨格内のＮ末端、Ｃ末端にあるものを含む）の（化学的）修飾、並びに共通構造（ｉｉｉ）〜（ｘｉｖ）の化学的スペーサー／リンカー内の任意の化学基の修飾を示す。当該用語は、アミノ酸又はペプチド鎖における、いかなるアミノ酸の付加、置換又は欠失も意味しない。Ｌ−アミノ酸又はＬ−エナンチオマーアミノ酸からの化学的誘導体は、典型的には、限定されないが、アセチル化（リシン残基等の（ポリ−）ペプチド配列のＮ−末端において）、脱アセチル化、アルキル化、例えばメチル化、エチル化等（好ましくは（ポリ−）ペプチド配列内のリシン又はアルギニン残基で）、脱アルキル化、例えば脱メチル化、脱エチル化等、アミド化（好ましくは（ポリ−）ペプチド配列のＣ−末端で）、ホルミル化、ガンマ−カルボキシル化、グルタミル化、グリコシル化（好ましくは（ポリ−）ペプチド配列内のアスパラギン、リシン、ヒドロキシリシン、セリン又はスレオニン残基等で）、ヘム（ｈｅｍｅ又はｈａｅｍ）部分の追加、水酸化、ヨウ素化、イソプレニル化（ファルネシル又はゲラニルゲラニオール等のイソプレノイド部分の付加）、リポイル化（リポ酸官能基の付加）、例えばプレニル化、ミリストイル化、ファルネシル化、ゲラニルゲルナイル化（ｇｅｒａｎｙｌｇｅｒｎａｙｌａｔｉｏｎ）等を含むＧＰＩアンカーの形成、酸化、リン酸化（例えば（ポリ−）ペプチド配列内のセリン、チロシン、スレオニン又はヒスチジン部分に）、硫酸化（例えばチロシンの）、セレノイル化、硫酸化等を含む、転写後修飾又は合成修飾を含む上記で定義したアミノ酸を含む、天然又は非天然のこれらのアミノ酸の誘導体を含む。また、アミノ酸の化学的誘導体は、限定されないが、放射性標識を含む標識、色素若しくは蛍光基、又は化学発光基を導入することにより修飾された、修飾アミノ酸も含む。
【００４５】
本明細書中で使用されるとき、「自由に選択できる位置」、「自由に選択できるアミノ酸」、及びそれらに類似する用語は、明確に定義されていない共通配列（ｉ）及び（ｉｉ）を包含する態様の標的部分内の位置を示す。共通配列（ｉ）及び（ｉｉ）の標的部分は、Ａｒｇ１−Ｘ２−Ｘ３−Ｘ４−Ａｒｇ５−Ｘ６−Ｘ７−Ｘ８−Ａｒｇ９で表され、Ａｒｇ１、Ａｒｇ５、及びＡｒｇ９は、Ｄ−又はＬ−アルギニンであり（全て同じキラリティー）、残りのアミノ酸Ｘ２〜Ｘ４及びＸ６〜Ｘ８は、Ｌ−リシン、Ｄ−リシン、Ｌ−アルギニン又はＤ−アルギニン以外の任意のＬ−又はＤ−アミノ酸であってもよく、但し、Ｘ３又はＸ７のいずれか（両方ではない）は、Ａｒｇ１、Ａｒｇ５、及びＡｒｇ９と同一のキラリティーを有するリシン又はアルギニンである。従って、共通配列（ｉ）及び（ｉｉ）には、５つの自由に選択できる位置が存在し、それらは、Ｘ２、Ｘ４、Ｘ６、Ｘ８及びＸ３（位置Ｘ７がＤ−若しくはＬ−リシン又はＤ−若しくはＬ−アルギニンとして定義／選択される場合）又はＸ７（位置Ｘ３がＤ−若しくはＬ−リシン又はＤ−若しくはＬ−アルギニンとして定義／選択される場合）である。本明細書中に更に定義されるように、本発明は、自由に選択できるアミノ酸を、化学スペーサー（アミノ酸残基を含んでもよい）で置き換えて、残基スペーサー構築物を形成し、３つのアルギニン及び１つのリシン又はアルギニンの相対的３Ｄ配置が、共通配列（ｉ）及び（ｉｉ）（即ち全体で残基−スペーサー構築物と称される）の、Ａｒｇ１、Ａｒｇ５及びＡｒｇ９及び位置３又は７（両方ではない）のＡｒｇ／Ｌｙｓのものと同等であることも包含する。本発明の分子（例えば残基−スペーサー構築物）中の自由に選択できるアミノ酸を置き換え得る化学スペーサー／リンカーは、共通構造（ｉｉｉ）〜（ｖｉ）及び（ｘｉ）〜（ｘｉｖ）において、（ＳＰＡ）、（ＳＰＢ）、及び（ＳＰＣ）で、並びに共通構造（ｖｉｉ）〜（ｘ）において、（ＣＬＡ）、（ＣＬＢ）及び（ＣＬＣ）で表される。
【００４６】
本発明の文脈において、Ｌ−アミノ酸（Ｌ−エナンチオマーアミノ酸とも称される）は、好ましくは、天然に存在するアミノ酸又はそれらの誘導体から選択されるアミノ酸である。天然に存在するアミノ酸は、アラニン、アルギニン、アスパラギン、アスパラギン酸、システイン、グルタミン、グルタミン酸、グリシン、ヒスチジン、イソロイシン、ロイシン、リシン、メチオニン、フェニルアラニン、プロリン、セリン、スレオニン、トリプトファン、チロシン及びバリンの標準的な（タンパク質を構成する）アミノ酸として認識されるが、非標準的アミノ酸、例えばオルニチン、シトルリン、ホモシステイン、Ｓ−アデノシルメチオニオン、ヒドロキシプロリン、セレノシステイン、ピロリシン、ランチオニン、２−アミノイソ酪酸、デヒドロアラニン及びガンマ−アミノ酪酸等をも含む。
【００４７】
同様に、本発明の文脈において、Ｄ−アミノ酸（当該技術分野及び本明細書中ではＤ−エナンチオマーアミノ酸とも称される）は、好ましくは、非天然（タンパク質を構成しない）「レトロインベルソ（ｒｅｔｒｏ−ｉｎｖｅｒｓｏ）」アミノ酸であり、これらの非天然（タンパク質を構成しない）「レトロインベルソ（ｒｅｔｒｏ−ｉｎｖｅｒｓｏ）」アミノ酸は、上記に定義した天然に存在するＬ−アミノ酸及び／又はそれらの誘導体に由来して認識される。この文脈において、「レトロインベルソ」という用語は、上記の天然に存在するＬ−アミノ酸（及ぼいそのペプチド）の異性体であって、当該天然に存在するＬ−アミノ酸残基のキラリティーが、対応するＤ−アミノ酸において反転しているものを意味する。言い換えると、Ｄ―アミノ酸のペプチド結合において、カルボニル及びアミノ基の位置が入れ替わっており、各アルファ炭素における側鎖の位置がそのままである。従って、Ｄ‐アミノ酸は、Ｌ−アミノ酸からなり、又はこれを含むペプチド配列内に挿入されてもよく、故に、当該技術分野で知られた、又は本明細書中で定義された方法により、上記のように、Ｌ−アミノ酸とコンジュゲートしてもよい。
【００４８】
本開示において使用されるアミノ酸の略称を、以下の対応表に示す。本開示全体で使用され、下記表で詳述するように、大文字の一文字表記はＬ−アミノ酸を表し、小文字の一文字表記はＤ−アミノ酸を表す。
【表２】
2019001814.tif 000004
【００４９】
本明細書中で使用されるとき、「白血球」という用語は、本明細書中で定義され、又は当該技術分野で知られる、任意の種類の白血球細胞を意味する。当該用語は、白血球の前駆細胞及び／又は様々な分化段階のものをも包含する。典型的には、「白血球」は、顆粒球、リンパ球、単球、マクロファージ、樹状細胞、マスト細胞及び／又はマイクログリア細胞を含む。顆粒球は、限定されないが、好中球、好酸球及び好塩基球を含む。リンパ球は、限定されないが、ＮＫ細胞、ヘルパーＴ細胞、細胞傷害性Ｔ細胞γδＴ細胞及びＢ細胞を含む。
【００５０】
本明細書中で使用されるとき、「ペプチド」「ポリペプチド」及び「タンパク質」は、当該技術分野で一般的に理解される意味で、即ちアミノ酸の鎖という意味で用いられる。しかしながら、これらの用語は、アミノ酸鎖の長さを限定するものとして理解されるべきではない。
【図面の簡単な説明】
【００５１】
【図１Ａ】ＴＡＴペプチドを伸長したコンフォーメーションで表しており、モデル予測に従い、特定の化学基の間の計算された距離を示している。
【図１Ｂ】Ｃ４Ｓを伸長したコンフォーメーションで表しており、モデル予測に従い、特定の化学基の間の計算された距離を示している。
【図２】本発明の標的部分（即ち９量体ペプチド）（左の分子）と、Ｃ４Ｓプロテオグリカン（右の分子）との間の相互作用のモデリングを三次元で表現したものを示す。
【図３】Ｃ４Ｓ及び本発明の標的ペプチドとの間の相互作用の模式図を示す。
【図４】配列ＲＹＦｖＲＩＫＹＲｈ（「ＲＹＦ」）を有する本発明のペプチドの、様々なプロテオグリカンに対する結合を（４Ａ）、ＴＡＴペプチドの結合（４Ｂ）と比較している。ＨＳは硫酸ヘパラン、Ｃ４Ｓはコンドロイチン−４−硫酸、Ｃ６Ｓはコンドロイチン−６−硫酸、ＨＡはヒアルロン酸を表す。本発明のＲＹＦは、他のプロテオグリカンよりも特異的かつ選択的にＣ４Ｓに結合する。
【図５】本発明のペプチドのＣ４Ｓに対する結合を示す。大文字はＬ−エナンチオマー、小文字はＤ−エナンチオマーを表す。Ｃ４Ｓに対する結合は、位置１、５、９及び３又は７が同一のキラリティーである場合にのみ維持される。
【図６】本発明のペプチドのＣ４Ｓに対する結合を示す。大文字はＬ−エナンチオマー、小文字はＤ−エナンチオマーを表す。ヘパリン及びヒアルロン酸のプロテオグリカンよりもＣ４Ｓに対する選択的な結合は、ペプチドの負電荷の減少に関連している。
【図７】ＦＩＴＣで標識した本発明のペプチド：ＲＹＦｖＲＩＫＹＲｈ（「ＲＹＦ」；配列番号：２）で予めインキュベーションしたＣ４Ｓ発現ＣＨＯ細胞とＣ４Ｓ欠損Ｓｏｇ９細胞の、ＬＵＭＡＳＣＯＰＥ（商標）蛍光顕微鏡イメージを示す。ＲＹＦはＣ４Ｓを発現しないＳｏｇ９細胞に結合できなかった。
【図８】ＦＩＴＣで標識した本発明のペプチド：ＲＹＦｖＲＩＫＹＲｈ（「ＲＹＦ」；配列番号：２）の、スルホトランスフェラーゼの阻害剤（Ｃ４Ｓ発現の阻害剤）である塩素酸塩０、３、１０又は３０μＭで１６時間予めインキュベーションしたマクロファージに対する結合を示す、ＬＵＭＡＳＣＯＰＥ（商標）蛍光顕微鏡イメージを示す。
【図９】ＡｔｌａｓアレイからのＣＨＳＴ１１遺伝子発現データを示す。
【図１０】マクロファージ抽出物に晒した本発明のペプチドからのＮ−末端にコンジュゲートしたＦＩＴＣの放出を示す。ペプチド１、５及び６は共通構造：ＲＸＸｘＲＸＸＸＲｈ；ペプチド１４、１５及び１６は共通構造：ＲＸｘＸＲＸＸＸＲｈ；ペプチド２３、２４及び２５は共通構造：ｒＸＸＸｒＸＸＸｒ；を有する。前記ペプチド及びＦＩＴＣの間のコンジュゲートは、当該ペプチドのＮ末端アミノ酸に対する標準の共有ペプチド結合を介して形成された。＋／−は、細胞抽出物の存在又は非存在を示す。
【図１１】フェノールレッド存在下で、２．５μＭの表示されたヌクレオシド類似体又はＲＹＦ（配列番号：２）ペプチドとのコンジュゲートとしての当該類似体でインキュベーションした無処理のマクロファージ由来の細胞の増殖を示す。分裂する細胞を含有する培養物は透明になるが、分裂しない細胞を含有する培養物は暗い色のままである（活性化合物）（図１１Ａ）。ＬＤＨの相対的含有量を測定することにより増殖パーセンテージも判定された（図１１Ｂ）。
【図１２】フェノールレッド存在下で、３’アミノβ−Ｄ−アラビノフラノシド単体又はＲＹＦ（配列番号：２）ペプチドとのコンジュゲート形態に晒された無処理マクロファージ由来の細胞の増殖を示す。分裂する細胞を含有する培養物は透明になるが、分裂しない細胞を含有する培養物は暗い色のままである（活性化合物）。Ｄ−アミノ酸連結を介したＲＹＦ（配列番号：２）のコンジュゲートのみ細胞毒性を示した。
【図１３】フェノールレッド存在下で、３’ＡｄＴ（３’アミノデオキシチミジン）及び３’アミノβ−Ｄ−アラビノフラノシド単体又はＲＹＦ（配列番号：２）ペプチドとのコンジュゲート形態に晒された無処理マクロファージ由来の細胞の増殖を示す。分裂する細胞を含有する培養物は透明になるが、分裂しない細胞を含有する培養物は暗い色のままである。Ｄ−エナンチオマー「ｅ」との連結は、不活性な化合物を高度に細胞増殖抑制性の化合物に変化させた。
【図１４】表示された化合物又は当該化合物のＲＹＦ（配列番号：２）ペプチド（本発明の例ｊ的ペプチド）とのコンジュゲートに晒されたＭＯＬＴ４細胞の増殖を示す。
【図１５】ＴＡＴ及びＣ４Ｓの潜在的に相互作用する化学残基の間の平均距離を詳述する模式図を示す。四角内の番号は、シミュレーションで使用され、本明細書中に記載された、各分子における残基の番号を同定する。
【図１６】ＴＡＴ及びＣ４Ｓの潜在的に相互作用する化学残基の間の平均距離を詳述する模式図を示す。四角内の番号は、シミュレーションで使用され、本明細書中に記載された、各分子における残基の番号を同定する。
【図１７】ＴＡＴ及びＣ４Ｓの残基のペアの間の相互作用の発生する頻度を、３０回以上のＭＤシミュレーションで計算し、それぞれのシミュレーションは長さ２０ｎｓであり、（Ａ）相互作用するＴＡＴ／Ｃ４Ｓのペア１／４；３／５；及び５／６のトリプレット；及び（Ｂ）相互作用するＴＡＴ／Ｃ４Ｓのペア３／４；５／５；及び７／６の各トリプレット；から出発する。計算された発生の頻度は、９０−１００％（□）、８０−９０％（×）、７０−８０％（△）、５０−７０％（＊）及び３０−５０％（◇）である。実線の円は、ＭＤシミュレーションの開始時点で導入された相互作用する残基のペアを示し、点線の円は、予想された相互作用のスキームが正しい場合に自然に形成されるべき期待される相互作用する残基のペアを示す。
【図１８Ａ】ＭＤシミュレーションを開始するのに使用されるＴＡＴ／Ｃ４Ｓ複合体の当初のコンフォーメーションを示す（それらの結果は図１７Ａに示す）。ＴＡＴ／Ｃ４Ｓの１／４；３／５；及び５／６の残基だけが相互作用する。
【図１８Ｂ】ＴＡＴの残基７及び９と、残基７及び８を含むＣ４Ｓの高い番号が付けられた（ｈｉｇｈｌｙ−ｎｕｍｂｅｒｅｄ）残基との間の相互作用の自然な形成を示すＭＤシミュレーションの１つから抽出された１つのフレームを示す。
【発明を実施するための形態】
【００５２】
６．発明の詳細な説明
本発明は、特定の共通配列又は構造を有する、分子、ペプチド、ポリペプチド及びそのような分子、ペプチド、ポリペプチドを含有し、又はこれからなる化合物、並びにそれらの、生物活性部分（ＢＡＭ）の、細胞内環境、即ち細胞質及び／又は核への特異的な輸送のための使用に関する。驚くべきことに、発明者らは、分子及びペプチドの特定の共通構造又は配列が、特定のプロテオグリカン、特にコンドロイチン−４−硫酸（Ｃ４Ｓ）を選択的に標的にし得ることを発見した。従って、本明細書中に開示の、１つ以上の共通配列を含有する、又はこれからなる、分子、タンパク質、ポリペプチド、及びそのような分子、タンパク質、ポリペプチドを含有する、又はこれからなる化合物は、ＢＡＭの、Ｃ４Ｓを発現する細胞への標的化された送達のための、輸送部分としての特有の使用を見出し得る。
【００５３】
幾つかのペプチドがプロテオグリカン及びリン脂質に結合することは知られているが、従来は、そのような結合は、主に普遍的な静水力学的相互作用（ｈｙｄｒｏｓｔａｔｉｃ  ｉｎｔｅｒａｃｔｉｏｎ）による非特異的なプロセスと考えられていた。また、そのような相互作用は、選択性をもたすように操作できるとは考えられておらず、当該ペプチドが特異的な標的に使用されることを妨げていた。これらの相互作用の理解された普遍的な性質に拘らず、本発明は、驚くべきことに、特定のペプチド配列が、一般的なリン脂質よりも特定のプロテオグリカンに選択性を呈することを発見した。具体的には、本発明は、アルギニンを位置１、５、及び９に、かつリシン又はアルギニンを位置３又は７に有する９残基の配列を含むペプチド、又はこれらの４つの残基と同等の相対的３Ｄコンフォーメーションを呈する分子構築物（例えば残基−スペーサー構築物）は、任意で、Ｃ４Ｓのアミノグリカン単位上の硫酸基と静電気的架橋を介して相互作用する。更に、残りの位置に無電荷アミノ酸又は正電荷を有しない化学スペーサーを含むことは、選択性を提供し、他のプロテオグリカン及び／又はリン脂質に対する当該ペプチドの非特異的相互作用を阻害し、又は実質的に減少させる。従って、残基及び／又は特定の残基の３Ｄ提示の特有の組み合わせは、ペプチド及び残基−スペーサー構築物が、他のプロテオグリカン及び他のリン脂質よりも、Ｃ４Ｓプロテオグリカンに対する選択的な結合を呈するように設計されることを可能とする。
【００５４】
Ｃ４Ｓは、部分的にのみ硫酸化していることが知られており、これは、硫酸化しうる全ての部位が硫酸化されているわけではないことを意味する。分子相互作用のコンピューターシミュレーションにより、９量体ペプチドの少なくとも１、５及び９の位置（及び／又は、例えば残基スペーサー構築物における９量体ペプチドの３Ｄ位置の同等の位置）のアルギニンが、Ｃ４Ｓに特異的な硫酸化パターンと特異的に相互作用することが判明した。特に両方ではないが位置３又は７（及び／又はその３Ｄ位置の同等の位置）のアルギニン又はリシンである、追加的に荷電したアミノ酸も、特異的な結合に必須であることが見出された。モデルシミュレーションは、位置３又は位置７が、９量体中、特に相互作用のための他の関連する残基、即ち位置１、５及び９の空間的配置中で、３次元的に同等であることを示唆する。
【００５５】
残りの残基は、モデルにより、Ｃ４Ｓへのペプチドの結合に関与しないことが予想され、残基１、５、９及び（３又は７）の三次元的線形コンフォーメーションが、当該ペプチド中で撹乱されない限り、自由に選択できる位置２、４、６、８及び（３（７がリシン又はアルギニンとして選択される場合）又は７（３がリシン又はアルギニンとして選択される場合））での広範なアミノ酸（Ｄ−アミノ酸等の非天然アミノ酸を含む）による置換は、Ｃ４Ｓに対する特異的結合に殆ど、又は全く影響しなかった。従って、驚くべきことに、発明者らは、これらの３つのアルギニン残基及び１つのリシン又はアルギニン残基の３Ｄ提示及び／又は配置が当該分子中で維持されている場合、Ｃ４Ｓ特異的結合が維持され得ることを発見した。従って、本発明は、これらの自由に選択できる位置の残基を化学スペーサーで置換することを想定し、但し、位置１、５、９のアルギニン並びに位置３又は７のアルギニン又はリシンの相対的３Ｄ配置は、共通配列（ｉ）及び（ｉｉ）と同じに維持される。しかしながら、これらの自由に選択できる位置（アミノ酸残基が存在する場合）における荷電したアミノ酸アルギニン又はリシン、及び／又は荷電した連結基、特に正に荷電した基の使用は、他のプロテオグリカンやリン脂質との非特異的な相互作用を増大させる可能性がある。従って、特異性を維持するために、自由に選択できる位置におけるアルギニン及びリシンの使用は、本発明のペプチドにおいて避けられ、及び／又は、本発明の残基−リンカー構築物において、１つ以上の自由に選択できる残基が化学リンカーにより置換される場合、荷電したリンカー基の使用は避けられる。
【００５６】
加えて、Ｃ４Ｓ結合に関連する位置、即ちＡｒｇ１、Ａｒｇ５、Ａｒｇ９及び（Ａｒｇ／Ｌｙｓ３又はＡｒｇ／Ｌｙｓ７）においてＤ−アミノ酸を使用して、但し、全ての位置が同一のキラリティーを有する場合、本発明の分子（例えばペプチド又は残基−スペーサー構築物）における特異性が維持されることが見出された。これらの位置における単一のキラリティーの使用は、アミノ酸側鎖の同一の三次元的構造を提示すると考えられる。これらの１つ以上の位置のキラリティーが異なる場合、三次元的線形配置は歪められる。従って、本発明は、３つのアルギニン残基と１つのアルギニン又はリシンの残基を有する分子を包含し、当該４つの残基がそれぞれＬ−残基であり、又は当該４つの残基がそれぞれＤ−残基であり、但し、当該分子は、共通配列（ｉ）及び（ｉｉ）におけるＡｒｇ１、Ａｒｇ５、Ａｒｇ９及びＡｒｇ／Ｌｙｓ３又はＡｒｇ／Ｌｙｓ７と同一又は類似の３Ｄ配置及び構造を呈する（特に当該分子が溶液の形態にあるとき）。
【００５７】
本発明の共通配列は、好ましくは、結合した荷物分子／部分の細胞内輸送におけるトランスポーター部分として想定される。ＣＤ６８等のプロテオグリカンを含む細胞表面分子は、エンドソームを介して循環することが知られている。エンドソームからの本発明の化合物の放出を促進するため、１つ又は複数のプロトンスポンジとして作用できるアミノ酸残基が、トランスポーター部分のＮ−又はＣ−末端に任意で追加され得る。当該プロトンスポンジは、エンドソームのオスモル濃度を増大させて、膨張及び破裂を引き起こし、その内容物を分解させずに細胞質内に放出させる。プロトンスポンジとして機能できる当該技術分野で知られ、又は本明細書中に記載のアミノ酸残基又は残基の組み合わせは、本発明において使用できる。この任意の一連のプロトンスポンジ残基の最後のアミノ酸（即ちプロトンスポンジ残基（存在する場合）の最後のＮ−末端又はＣ−末端残基）も、プロトンスポンジ残基の分解／開裂を避けるため、任意でＤ−エナンチオマーであってもよい。従って、本発明は、トランスポーター部分のＮ−又はＣ−末端に追加される１つ以上のアミノ酸残基の任意の使用を包含し、ここで各Ｎ−又はＣ−末端残基は、任意でＤ−エナンチオマーである。好ましい態様において、プロトンスポンジ残基の１つ以上の残基は、リシン又はアルギニン残基ではない。本明細書中に記載のプロトンスポンジの任意の残基は、本発明の共通配列（ｉ）〜（ｘｉｖ）において、ＬＤ１０又はＬＤ−１で表される。プロトンスポンジの任意のＮ−又はＣ−末端残基は、本発明の共通配列（ｉ）〜（ｘｉｖ）において、ＸＤ１１又はＸＤ−２で表される。従って、好ましい態様において、共通配列（ｉ）〜（ｘｉｖ）のＬＤ１０又はＬＤ−１（存在する場合）は、Ｌ−又はＤ−アルギニン又はＬ−又はＤ−リシン以外のＬ−又はＤ−アミノ酸を表し；これらの好ましい態様と関連して、又は独立した態様として、共通配列（ｉ）〜（ｘｉｖ）のＸＤ１１又はＸＤ−２（存在する場合）は、好ましくは、Ｄ−アルギニン又はＤ−リシン以外の任意のＤ−アミノ酸である。最も好ましい態様において、プロトンスポンジ残基の１つ以上の残基は、ヒスチジン残基である。従って、最も好ましい態様において、共通配列（ｉ）〜（ｘｉｖ）のＬＤ１０又はＬＤ−１は、Ｌ−又はＤ−ヒスチジンであり；これらの最もの好ましい態様と関連して、又は独立した態様として、共通配列（ｉ）〜（ｘｉｖ）のＸＤ１１又はＸＤ−２は、最も好ましくは、Ｄ−ヒスチジンである。
【００５８】
６．１  分子共通構造
本発明の上記発見は、共通構造として表現されてもよい。本発明は、一般に、１つ以上の単離された分子、又は当該分子を含む、又はこれからなる化合物に関し、当該分子は、以下の共通配列（ｉｉｉ）〜（ｖｉ）
（ｉｉｉ）    Ａｒｇ１−（ＳＰＡ）−Ａｒｇ５−（ＳＰＢ）−Ｘ−（ＳＰＣ）−Ａｒｇ
９−（ＬＤ１０）ｎ−（ＸＤ１１）ｍ；
（ｉｖ）      Ａｒｇ１−（ＳＰＣ）−Ｘ−（ＳＰＢ）−Ａｒｇ５−（ＳＰＡ）−Ａｒｇ
９−（ＬＤ１０）ｎ−（ＸＤ１１）ｍ；
（ｖ）（ＸＤ−２）ｍ−（ＬＤ  −１）ｎ−Ａｒｇ１−（ＳＰＡ）  Ａｒｇ５−（ＳＰＢ
）−Ｘ−（ＳＰＣ）−Ａｒｇ９；又は
（ｖｉ）      （ＸＤ−２）ｍ−（ＬＤ  −１）ｎ−Ａｒｇ１−（ＳＰＣ）−Ｘ−（ＳＰ
Ｂ）−Ａｒｇ５−（ＳＰＡ）−Ａｒｇ９
又はこの逆の配列を有し、ＬＤ１０又はＬＤ−１は、Ｄ−アルギニン、Ｄ−リシン；Ｌ−アルギニン又はＬ−リシン以外のＬ−又はＤ−アミノ酸を表し、ｎは０〜１０であり；ＸＤ１１又はＸＤ−２はＤ−アルギニン又はＤ−リシン以外のＤ−アミノ酸であり、ｍは０又は１であり；
（ａ）Ａｒｇ１、Ａｒｇ５、及びＡｒｇ９はＬ−アルギニンを表し；ＸはＬ−リシン又はＬ−アルギニンを表し、又は
（ｂ）Ａｒｇ１、Ａｒｇ５、及びＡｒｇ９はＤ−アルギニンを表し；ＸはＤ−リシン又はＤ−アルギニンを表し、
（ＳＰＡ）は化学リンカーであり、
（ａ）３つのアミノ酸残基のペプチド鎖からなり、各残基は、Ｄ−アルギニン、Ｄ−リシン、Ｌ−アルギニン又はＬ−リシン以外の任意のアミノ酸残基から独立して選択されてもよく；又は
（ｂ）隣接するアミノ酸残基間の間隔は１２．９＋１．５Åであり；
（ＳＰｃ）は化学リンカーであり、
（ａ）１つのアミノ酸残基からなり、当該残基は、Ｄ−アルギニン、Ｄ−リシン、Ｌ−アルギニン又はＬ−リシン以外の任意のアミノ酸残基であり；又は
（ｂ）当該分子が伸長したコンフォーメーションをとるとき隣接するアミノ酸残基との間隔は７．５＋１．５Åであり；
（ＳＰＢ）−Ｘ−（ＳＰＣ）又はその逆の（ＳＰＣ）−Ｘ−（ＳＰＢ）は、化学リンカーであり、
（ａ）ＳＰＢ及びＳＰＣがそれぞれ独立してＤ−アルギニン、Ｄ−リシン、Ｌ−アルギニン又はＬ−リシン以外のアミノ酸残基から選択され得る単一のアミノ酸残基を表し；又は
（ｂ）当該構築物が伸長したコンフォーメーションをとるとき、隣接するアミノ酸残基Ａｒｇ１及びＡｒｇ５又はＡｒｇ５及びＡｒｇ９の間隔が１２．９＋１．５Åである。
【００５９】
本発明の分子又は化合物が、アミノ酸残基のみで構成されていない１つ以上の化学スペーサー／リンカーを含む場合、Ａｒｇ１、Ａｒｇ５、Ａｒｇ９及びＡｒｇ／Ｌｙｓ３又はＡｒｇ／Ｌｙｓ７の側鎖が、共通配列（ｉ）及び／又は（ｉｉ）のペプチド及び／又はポリペプチド中のそれらの対応する側鎖と同一又は類似の３Ｄ提示を維持するように注意しなければならない。従って、本発明の方法に係る残基−スペーサー内のＡｒｇ１、Ａｒｇ５、Ａｒｇ９及びＡｒｇ／Ｌｙｓ３又はＡｒｇ／Ｌｙｓ７の側鎖は、当該分子及び／又は構築物が伸長したコンフォーメーションをとるとき、３Ｄ空間内で線形又はほぼ線形の配置で存在すべきである。
【００６０】
６．２  ペプチド共通配列
共通構造（ｉｉｉ）〜（ｖｉ）のいずれかの分子及び／又は化合物がアミノ酸残基のみを含み、又はこれからなる本発明の態様において、当該共通構造は、ペプチド又はポリペプチドの共通配列により表されてもよい。従って、幾つかの態様において、本発明は、以下の共通配列（ｉ）又は（ｉｉ）：
（ｉ）  Ａｒｇ１−Ｘ２−Ｘ３−Ｘ４−Ａｒｇ５−Ｘ６−Ｘ７−Ｘ８−Ａｒｇ９−（ＬＤ１０）ｎ−（ＸＤ１１）ｍ又は
（ｉｉ）  （ＸＤ−２）ｍ−（ＬＤ  −１）ｎ−Ａｒｇ１−Ｘ２−Ｘ３−Ｘ４−Ａｒｇ５−Ｘ６−Ｘ７−Ｘ８−Ａｒｇ９
又はその逆の配列を有する１つ以上の単離されたペプチド又はポリペプチドを含み、又はこれからなる化合物に関し、
（ａ）Ａｒｇ１、Ａｒｇ５、及びＡｒｇ９はＬ−アルギニンを表し；ＬＤ１０又はＬＤ  −１はＤ−アルギニン、Ｄ−リシン；Ｌ−アルギニン又はＬ−リシン以外のＬ−又はＤ−アミノ酸を表し、ｎは０〜１０であり；ＸＤ１１又はＸＤ−２はＤ−アルギニン又はＤ−リシン以外のＤ−アミノ酸であり、ｍは０又は１であり；そして残りのアミノ酸Ｘ２〜Ｘ４及びＸ６〜Ｘ８はＬ−リシン、Ｄ−リシン、Ｌ−アルギニン又はＤ−アルギニン以外の任意のＬ−又はＤ−アミノ酸であり、但し両方ではないがＸ３又はＸ７がＬ−リシン又はＬ−アルギニンを表し；又は
（ｂ）Ａｒｇ１、Ａｒｇ５、及びＡｒｇ９はＤ−アルギニンを表し；ＬＤ１０又はＬＤ  −１はＤ−アルギニン、Ｄ−リシン；Ｌ−アルギニン又はＬ−リシン以外のＬ−又はＤ−アミノ酸を表し、ｎは０〜１０であり；ＸＤ１１又はＸＤ−２はＤ−アルギニン又はＤ−リシン以外のＤ−アミノ酸であり、ｍは０又は１であり；そして残りのアミノ酸Ｘ２〜Ｘ４及びＸ６〜Ｘ８はＬ−リシン、Ｄ−リシン、Ｌ−アルギニン又はＤ−アルギニン以外の任意のＬ−又はＤ−アミノ酸であり、但し両方ではないがＸ３又はＸ７がＤ−リシン又はＤ−アルギニンを表す。
【００６１】
上記共通配列（ｉ）で条件（ａ）のものは配列番号：１７であり、条件（ｂ）のものは配列番号：１９である。上記共通配列（ｉｉ）で条件（ａ）のものは配列番号：１８であり、条件（ｂ）のものは配列番号：２０である。
【００６２】
６．３  残基−スペーサー共通構造
共通構造（ｉｉｉ）〜（ｖｉ）のいずれかにおいてＳＰＡ、ＳＰＢ、及びＳＰＣで表される化学リンカー／スペーサーがアミノ酸残基を含まない本発明の態様において、当該共通構造は、残基−スペーサー構築物における共通構造により表されてもよい。そのような態様において、本発明は、１つ以上の残基−スペーサー構築物、又はそれらを含む、又はそれらからなる化合物に関するものとして定義され得る。当該構築物は、以下の（ｖｉｉ）〜（ｘ）
（ｖｉｉ）      Ａｒｇ１−（ＣＬＡ）−Ａｒｇ５−（ＣＬＢ）−Ｘ−（ＣＬＣ）−Ａｒｇ９−（ＬＤ１０）ｎ−（ＸＤ１１）ｍ；
（ｖｉｉｉ）    Ａｒｇ１−（ＣＬＣ）−Ｘ−（ＣＬＢ）−Ａｒｇ５−（ＣＬＡ）−Ａｒｇ９−（ＬＤ１０）ｎ−（ＸＤ１１）ｍ；
（ｉｘ）        （ＸＤ−２）ｍ−（ＬＤ  −１）ｎ−Ａｒｇ１−（ＣＬＡ）  Ａｒｇ５−（ＣＬＢ）−Ｘ−（ＣＬＣ）−Ａｒｇ９；又は
（ｘ）  （ＸＤ−２）ｍ−（ＬＤ  −１）ｎ−Ａｒｇ１−（ＣＬＣ）−Ｘ−（ＣＬＢ）−Ａｒｇ５−（ＣＬＡ）−Ａｒｇ９
又はその逆のいずれかの共通構造を有し、ＬＤ１０又はＬＤ  −１はＤ−アルギニン、Ｄ−リシン；Ｌ−アルギニン又はＬ−リシン以外のＬ−又はＤ−アミノ酸を表し、ｎは０〜１０であり；ＸＤ１１又はＸＤ−２はＤ−アルギニン又はＤ−リシン以外のＤ−アミノ酸であり、ｍは０又は１であり；
（ａ）Ａｒｇ１、Ａｒｇ５、及びＡｒｇ９はＬ−アルギニンを表し；ＸはＬ−リシン又はＬ−アルギニンを表し、又は
（ｂ）Ａｒｇ１、Ａｒｇ５、及びＡｒｇ９はＤ−アルギニンを表し；ＸはＤ−リシン又はＤ−アルギニンを表し、
（ＳＰＡ）は化学リンカーであり、隣接するアミノ酸残基を１２．９＋１．５Å隔て；
（ＳＰｃ）は化学リンカーであり、当該分子が伸長したコンフォーメーションをとるとき隣接するアミノ酸残基を７．５＋１．５Å隔て；
（ＳＰＢ）−Ｘ−（ＳＰＣ）又はその逆の（ＳＰＣ）−Ｘ−（ＳＰＢ）は、化学リンカーであり、当該構築物が伸長したコンフォーメーションをとるとき、隣接するアミノ酸残基Ａｒｇ１及びＡｒｇ５又はＡｒｇ５及びＡｒｇ９の間隔が１２．９＋１．５Åである
【００６３】
本発明の分子又は化合物がアミノ酸残基のみからならない１つ以上の化学スペーサー／リンカーを含む場合、Ａｒｇ１、Ａｒｇ５、Ａｒｇ９及びＡｒｇ／Ｌｙｓ３又はＡｒｇ／Ｌｙｓ７の側鎖が、共通配列（ｉ）及び／又は（ｉｉ）のペプチド及び／又はポリペプチド中のそれらの対応する側鎖と同一又は類似の３Ｄ提示を維持するように注意しなければならない。従って、本発明の方法に係る残基−スペーサー内のＡｒｇ１、Ａｒｇ５、Ａｒｇ９及びＡｒｇ／Ｌｙｓ３又はＡｒｇ／Ｌｙｓ７の側鎖は、当該分子及び／又は構築物が伸長したコンフォーメーションをとるとき、３Ｄ空間内で線形又はほぼ線形の配置で存在すべきである。
【００６４】
６．４  標的部分
共通配列（ｉｉｉ）〜（ｖｉ）に記載の分子及び化合物は、例えば細胞の表面に発現しているプロテオグリカンを特異的に認識及び／又は結合する、特に他のプロテオグリカンよりもプロテオグリカンＣ４Ｓに選択的に結合する、輸送及び／標的部分としての特定の使用を見出す。Ｃ４Ｓプロテオグリカンと特異的に結合する標的部分として機能する上記共通配列（ｉｉｉ）〜（ｖｉ）の部分は、Ａｒｇ１−（ＳＰＡ）−Ａｒｇ５−（ＳＰＢ）−Ｘ−（ＳＰＣ）−Ａｒｇ９又はＡｒｇ１−（ＳＰＣ）−Ｘ−（ＳＰＢ）−Ａｒｇ５−（ＳＰＡ）−Ａｒｇ９として表され（Ａｒｇ１−Ｘ２−Ｘ３−Ｘ４−Ａｒｇ５−Ｘ６−Ｘ７−Ｘ８−Ａｒｇ９  （配列番号：１７又は配列番号：１８の断片の場合に配列番号：２１；  配列番号：１９又は配列番号：２１の断片の場合に配列番号：２０）、Ａｒｇ１−（ＣＬＡ）−Ａｒｇ５−（ＣＬＢ）−Ｘ−（ＣＬＣ）−Ａｒｇ９及びＡｒｇ１−（ＣＬＣ）−Ｘ−（ＣＬＢ）−Ａｒｇ５−（ＣＬＡ）−Ａｒｇ９）の標的部分共通配列又は構造を有する特定の態様を含む）、Ａｒｇ１、Ａｒｇ５、Ａｒｇ９及びＡｒｇ／Ｌｙｓ３又はＡｒｇ／Ｌｙｓ７、特にこれらの残基の側鎖に対応するアミノ酸残基の３Ｄ提示に関して同一の分子である。従って、共通配列（ｉｉｉ）〜（ｖｉ）の３つのアルギニン残基及び１つのリシン残基を含むいずれかの分子は、以下のルールに従い、標的部分として開発出来る。
（１）Ａｒｇ１、Ａｒｇ５、Ａｒｇ９は、同一のアルギニンの光学異性体でなければならない。即ち、それぞれＬ−アルギニンであるか、それぞれＤ−アルギニンでなければならない。
（２）Ａｒｇ１は、Ａｒｇ５と１つ以上の化学スペーサー（１つ以上のアミノ酸残基のみからなってもよく、アミノ酸残基及び化学スペーサー／リンカーの両方を含んでもよい）を用いて連結してもよく、それらの間隔は、伸長したコンフォーメーションをとるときに１２．９＋１．５Åである；Ａｒｇ５は、Ａｒｇ９と１つ以上の化学スペーサー（１つ以上のアミノ酸残基のみからなってもよく、アミノ酸残基及び化学スペーサー／リンカーの両方を含んでもよい）を用いて更に連結してもよく、それらの間隔も、伸長したコンフォーメーションをとるときに１２．９＋１．５Åである；
（３）標的部分は、Ａｒｇ１及びＡｒｇ５の間、又はＡｒｇ５及びＡｒｇ９の間（両方ではない）の連結中に存在する、Ａｒｇ１、Ａｒｇ５及びＡｒｇ９と同一のキラリティ―である、１つのリシン又はアルギニンも有しなければならない（この残基は、共通配列（ｉ）及び（ｉｉ）における位置３又は７（両方ではない）としての残基、及び共通配列（ｉｉｉ）〜（ｘ）における残基「Ｘ」に対応する）。言い換えると、Ａｒｇ１、Ａｒｇ５及びＡｒｇ９がＬ−アルギニンである場合、リシン／アルギニンはＬ−リシン又はＬ−アルギニンでなければならず；Ａｒｇ１、Ａｒｇ５及びＡｒｇ９がＤ−アルギニンである場合、リシン／アルギニンはＤ−リシン又はＤ−アルギニンでなければならない。
（４）リシン／アルギニンがＡｒｇ１及びＡｒｇ５の間に位置している場合、それはＡｒｇ１から７．５＋１．５Å隔てられており；リシン／アルギニンがＡｒｇ５及びＡｒｇ９の間に位置している場合、それはＡｒｇ９から７．５＋１．５Å隔てられている。
（５）残りの連結は、Ａｒｇ１、Ａｒｇ５及びＡｒｇ９及びＸの所望の間隔を維持するのに適し、かつ共通配列（ｉ）及び（ｉｉ）における対応する残基と類似又は同様のアミノ酸及びそれらの側鎖の３Ｄ構造及び／又は３Ｄ提示を維持するのに適した、当該技術分野で公知の、及び／又は本明細書中に記載の、（１つ以上のアミノ酸残基のみからなってもよく、アミノ酸残基及び化学スペーサー／リンカーの両方を含んでもよい）任意の化学的スペーサー又はリンカーを含んでもよい。Ａｒｇ１、Ａｒｇ５及びＡｒｇ９及びＸの間の連結は、好ましくは正に荷電するものではない。Ａｒｇ１、Ａｒｇ５及びＡｒｇ９及びＸの間の連結がアミノ酸残基であるか、アミノ酸残基を含む場合、当該残基は、Ｄ−若しくはＬ−アルギニン又はＤ−若しくはＬ−リシン以外のＤ−又はＬ−アミノ酸であり得る。
【００６５】
本発明の共通構造がアミノ酸からなり、又はこれのみを含む場合、上記標的部分は、下記のように設計され得る。標的構造（ｉｉｉ）〜（ｖｉ）中の標的部分の配列は、当該構造がアミノ酸からなり、又はこれのみを含む場合、Ａｒｇ１−Ｘ２−Ｘ３−Ｘ４−Ａｒｇ５−Ｘ６−Ｘ７−Ｘ８−Ａｒｇ９（例えば共通配列（ｉ）及び（ｉｉ））で表される。当該構造は、上記ルール（２）を満たす。即ち、当該分子が伸長したコンフォーメーションをとる場合、当該連結は、Ａｒｇ１及びＡｒｇ５、並びにＡｒｇ５及びＡｒｇ９を、１２．９  ＋  １．５  Å隔て、当該間隔は、アミノ酸３残基分である。更にペプチド共通配列に適用される上記ルールは：
（Ｐ１）Ａｒｇ１、Ａｒｇ５、Ａｒｇ９は、同一のアルギニンの光学異性体でなければならない。即ち、それぞれＬ−アルギニンであるか、それぞれＤ−アルギニンでなければならない（上記ルール（１）に対応する）。
（Ｐ２）残基Ｘ３又はＸ７は（両方ではない）は、Ａｒｇ１、Ａｒｇ５及びＡｒｇ９と同一のキラリティーであるリシン又はアルギニン。即ち、Ａｒｇ１、Ａｒｇ５及びＡｒｇ９がＬ−アルギニンである場合、Ｘ３又はＸ７（両方ではない）はＬ−リシン又はＬ−アルギニンでなければならず；Ａｒｇ１、Ａｒｇ５及びＡｒｇ９がＤ−アルギニンである場合、Ｘ３又はＸ７（両方ではない）はＤ−リシン又はＤ−アルギニンでなければならない（上記ルール３及び４に対応する）。
（Ｐ３）残りの残基、即ちＸ２、Ｘ４、Ｘ６、Ｘ８及びＸ３（Ｘ７が上記Ｐ２に従い選択される場合）又はＸ７（Ｘ３が上記Ｐ２に従い選択される場合）は、Ｌ−又はＤ−アルギニン又はＬ−又はＤ−リシン以外の任意のアミノ酸であってもよい。
【００６６】
化学リンカー
共通配列（ｉｉｉ）〜（ｘｉｖ）中のＳＰＡ、ＳＰＢ、及びＳＰＣは、本発明の分子の骨格の一部を形成し、１つ以上のアミノ酸残基を含み、又はこれのみからなってもよく；１つ以上の化学リンカー（即ちアミノ酸残基ではない）を含み、又はこれからなってもよく；又はアミノ酸残基及び化学リンカーの両方を含んでもよい、化学リンカー／スペーサーを表す。本発明の方法に使用されるアミノ酸残基ではない化学リンカーは、共通配列（ｉ）及び（ｉｉ）中の対応する残基と同等の、３つのアルギニン残基（即ちＡｒｇ１、Ａｒｇ５、及びＡｒｇ９）及び１つのアルギニン又はリシン（即ち両方ではないがＡｒｇ／Ｌｙｓ３又はＡｒｇ／Ｌｙｓ７）の空間配置及び相対的３Ｄ配置／提示を維持するのに適した任意の適切な化学リンカー又は化学スペーサーであってもよい。当該技術分野で知られ、又は本明細書中に記載の、任意のそのような化学リンカー／スペーサーは、本発明の分子の構築に使用されてもよく、そのようなリンカーを本発明の方法に選択し、適合させることは、当業者の能力の範疇である。適切な化学リンカー／スペーサーの非限定的な例は、例えばＳｅｅｂａｃｈ  ｅｔ  ａｌ．．，  Ｃｈｅｍ．  Ｂｉｏｄｉｖｅｒｓ．  １（２００４），  １１１１−１２３９に開示及び記載されるベータ−及びガンマ−ペプチド；例えばＣｈａｋｒａｂｏｒｔｙ  ｅｔ  ａｌ．，  Ｃｏｍｂ．  Ｃｈｅｍ．  Ｈｉｇｈ  Ｔｈｒｏｕｇｈｐｕｔ  Ｓｃｒｅｅｎ．  ５（２００２），  ３７３−３８７に開示及び記載される糖アミノ酸ベースの足場；例えばＲｏｂｉｎｓｏｎ，  Ａｃｃ．  Ｃｈｅｍ．  Ｒｅｓ．  ４１（２００８），  １２７８−１２８８に開示及び記載されるベータ−ヘアピンペプチド模倣物；例えばＨｅｒｓｈｂｅｒｇｅｒ  ｅｔ  ａｌ．，  Ｃｕｒｒ．  Ｔｏｐ．  Ｍｅｄ．  Ｃｈｅｍ．  ７（２００７），  ９２８−９２４に開示及び記載されるアルファ−ヘリックス模倣物、ベータ−シート／ベータ−スタンド模倣物及びベータ−ターン模倣物；並びに例えばＪａｇａｄｉｓｈ  ａｎｄ  Ｃａｍａｒｅｒｏ，  Ｂｉｏｐｏｌｙｍｅｒｓ  ９４（２０１０），  ６１１−６１６に開示及び記載されるシクロチドである。好ましい態様において、化学リンカー／スペーサーは正に荷電していない。
【００６７】
６．６  ＢＡＭコンジュゲート
本明細書中に記載されるとき、共通配列及び構造（ｉ）〜（ｘ）の分子、ペプチド及び／又はポリペプチドを含有し、又はこれからなる本発明の分子及び化合物は、好ましい態様において、結合している荷物分子／部分を特異的に輸送できるトランスポーター部分として機能することが想定される。好ましい態様において、本発明の分子及び化合物は、共通配列（ｉ）〜（ｘ）のいずれかの配列及び／又は構造が、更に、生物活性部分（ＢＡＭ）とコンジュゲートしたものを含み、又はこれからなり；当該構造は、本記載全体で、ＢＡＭ−コンジュゲートと称される。ＢＡＭは、生物に投与され、又はインビトロ又はインビボで細胞に導入されたときに、治療的効果を呈することが知られ、又は期待される任意の部分である。好ましい態様において、本発明の化合物は、ＢＡＭ−コンジュゲートを含み、又はこれからなり、本明細書中に記載されるとき、共通配列又は構造（ｉ）〜（ｘ）の末端にＢＡＭがコンジュゲートしている。従って、好ましい態様において、
Ｔｈｅｒｅｆｏｒｅ，  ｉｎ  ｔｈｅｓｅ  ｐｒｅｆｅｒｒｅｄ  ｅｍｂｏｄｉｍｅｎｔｓ，  ｔｈｅ  ＢＡＭ−ｃｏｎｊｕｇａｔｅ  ｈａｓ  ａ  ｃｏｎｓｅｎｓｕｓ  ｓｔｒｕｃｔｕｒｅ  ａｃｃｏｒｄｉｎｇ  ｔｏ  ｔｈｅ  ｆｏｌｌｏｗｉｎｇ  ｃｏｎｓｅｎｓｕｓ  ｓｔｒｕｃｔｕｒｅｓ  （ｘｉ）〜（ｘｉｖ），  ｏｒ  ｔｈｅ  ｒｅｖｅｒｓｅｓ  ｔｈｅｒｅｏｆ：
以下の共通構造（ｘｉ）〜（ｘｉｖ）：
（ｘｉ）        （ＢＡＭ）−（ＬＩＮＫ）−Ａｒｇ１−（ＳＰＡ）−Ａｒｇ５−（ＳＰＢ）−Ｘ−（ＳＰＣ）−Ａｒｇ９−（ＬＤ１０）ｎ−（ＸＤ１１）ｍ；
（ｘｉｉ）      （ＢＡＭ）−（ＬＩＮＫ）−Ａｒｇ１−（ＳＰＣ）−Ｘ−（ＳＰＢ）−Ａｒｇ５−（ＳＰＡ）−Ａｒｇ９−（ＬＤ１０）ｎ−（ＸＤ１１）ｍ；
（ｘｉｉｉ）    （ＸＤ−２）ｍ−（ＬＤ  −１）ｎ−Ａｒｇ１−（ＳＰＡ）  Ａｒｇ５−（ＳＰＢ）−Ｘ−（ＳＰＣ）−Ａｒｇ９−（ＬＩＮＫ）−（ＢＡＭ）；又は
（ｘｉｖ）      （ＸＤ−２）ｍ−（ＬＤ  −１）ｎ−Ａｒｇ１−（ＳＰＣ）−Ｘ−（ＳＰＢ）−Ａｒｇ５−（ＳＰＡ）−Ａｒｇ９−（ＬＩＮＫ）−（ＢＡＭ）；
又はその逆で表される共通構造を有し、（ＢＡＭ）は、生物活性部分を表し；（ＬＩＮＫ）は任意のリンカー基を表し；ＬＤ１０又はＬＤ−１は任意のＬ−又はＤ−アミノ酸を表し、ｎは、０〜１０の数字であり；ＸＤ１１又はＸＤ−２はＤ−アミノ酸を表し、ｍは０又は１の数字であり；
（ａ）  Ａｒｇ１、Ａｒｇ５、及びＡｒｇ９はＬ−アルギニンを表し；ＸはＬ−リシン又はＬ−アルギニンを表し、又は
（ｂ）  Ａｒｇ１、Ａｒｇ５、及びＡｒｇ９はＤ−アルギニンを表し；ＸはＤ−リシン又はＤ−アルギニンを表し；
（ＳＰＡ）は化学リンカーを表し
（ａ）３アミノ酸残基のペプチド鎖からなり、各残基は、Ｄ−アルギニン、Ｄ−リシン、Ｌ−アルギニン又はＬ−リシン以外の任意のアミノ酸残基から独立して選択されてもよい；又は
（ｂ）隣接するアミノ酸残基を１２．９＋１．５  Åの間隔で隔離する；
（ＳＰＣ）は化学リンカーを表し
（ａ）１個のアミノ酸残基で構成され、当該アミノ酸は、Ｄ−アルギニン、Ｄ−リシン、Ｌ−アルギニン又はＬ−リシン以外の任意のアミノ酸残基であってもよい；又は
（ｂ）隣接するアミノ酸残基を、当該分子が伸長したコンフォーメーションをとるとき７．５＋１．５  Åの間隔で隔離する；そして
（ＳＰＢ）−Ｘ−（ＳＰＣ）又はその反対の（ＳＰＣ）−Ｘ−（ＳＰＢ）は化学リンカーを表し
（ａ）ＳＰＢ及びＳＰＣはそれぞれ１個のアミノ酸残基で構成され、当該アミノ酸は、Ｄ−アルギニン、Ｄ−リシン、Ｌ−アルギニン又はＬ−リシン以外の任意のアミノ酸残基から独立して選択されてもよい；又は
（ｂ）隣接するアミノ酸残基Ａｒｇ１及びＡｒｇ５又はＡｒｇ５及びＡｒｇ９を当該構築物が伸長したコンフォーメーションをとるとき１２．９＋１．５  Åの間隔で隔離する。
【００６８】
６．６．１  任意の連結基
共通配列（ｘｉ）〜（ｘｉｖ）は、共通配列（ｉｉｉ）〜（ｖｉ）と同一であるが、ＢＡＭ−部分及び任意のリンカー基（ＬＩＮＫ）が存在している。従って、化学スペーサー（ＳＰＡ）、（ＳＰＢ）及び（ＳＰＣ）（本明細書中に記載される、アミノ酸残基からなり、又はこれのみを含み、又は化学リンカー及びアミノ酸残基の両方を含むものであってもよい）の選択は、共通配列（ｉｉｉ）〜（ｖｉ）に関して本明細書中に記載されるように進行し、
・本開示全体に詳述される共通配列（ｉ）及び（ｉｉ）の態様（及びそれらの組み合わせ）に従い、これらの化学スペーサーがアミノ酸残基のみからなり、又は含むことの選択、及び
・本開示全体に詳述される共通構造（ｖｉ）〜（ｘ）の態様（及びそれらの組み合わせ）に従い、これらの化学スペーサーがアミノ酸残基及び化学リンカーの両方を含むことの選択
を含む。
【００６９】
任意の連結基（ＬＩＮＫ）は、ペプチドリンカーであってもよい。ペプチドリンカー配列が使用される場合、好ましくはリンカー配列は、２〜１０残基、より好ましくは１〜５残基の柔軟な配列を形成する。好ましい態様において、リンカー配列は、２０％以上、より好ましくは４０％以上、尚もより好ましくは５０％以上のＧｌｙ又はβ−アラニン残基を含む。連結基の非限定的な例は、ＧｌｙＧｌｙＧｌｙＧｌｙＧｌｙ  （配列番号：２３）、ＧｌｙＧｌｙＧｌｙＧｌｙ  （配列番号：２４）、ＧｌｙＧｌｙＧｌｙ、ＣｙｓＧｌｙＧｌｙ又はＧｌｙＧｌｙＣｙｓ等を含む。適切なリンカー配列は、当業者に周知、又は容易に選択及び調製できる。任意のリンカー基は、Ｄ−アミノ酸、Ｌアミノ酸及び／又はそれらの組み合わせからなってもよい。
【００７０】
あるいは、ＢＡＭ及びトランスポーター部分は、架橋方法等の、当該技術分野で知られた、又は本明細書中に記載の、適切な手段による化学的カップリングにより連結されてもよい。しかしながら、多くの化学的架橋方法は非特異的、即ちそれらは担体／トランスポーター部分又は荷物部分（例えばＢＡＭ）上の特定の部位にカップリングする点を決定しない点は注意が必要である。従って、非特異的架橋剤は、機能部位を攻撃し、又は活性部位を立体的に阻害して、本発明のＢＡＭ−コンジュゲート分子の１つ又は両方のＢＡＭ／  トランスポーター成分を生物学的に不活性にする場合がある。適切な保護基を使用して潜在的に反応性の基をブロックすることは、当業者の知識の範疇である。あるいは、成分（Ａ）を成分（Ｂ）と架橋するために利用される化学選択的な存在である、強力で多用途のオキシム及びヒドラゾンライゲーション技術の使用が採用されてもよい。当該連結技術は、例えばＲｏｓｅ  ｅｔ  ａｌ．  （１９９４），  ＪＡＣＳ  １１６，  ３０に記載されている。
【００７１】
カップリングの特異性は、ＢＡＭ成分及びトランスポーター部分中１回だけ又は数回発見される官能基との直接の化学カップリングにより増大させられる。本発明のペプチド−コンジュゲート分子の２つの成分のカップリングは、当該技術分野で知られた、標準的な（ポリ−）ペプチド合成カップリング剤、例えばＨＯＢｔ、ＨＢＴＵ、ＤＩＣＩ、ＴＢＴＵ等を含む、カップリング又はカップリング剤により達成できる。利用できる幾つかの分子間架橋剤が存在する。例えばＭｅａｎｓ  ａｎｄ  Ｆｅｅｎｅｙ，  Ｃｈｅｍｉｃａｌ  Ｍｏｄｉｆｉｃａｔｉｏｎ  ｏｆ  Ｐｒｏｔｅｉｎｓ，  Ｈｏｌｄｅｎ−Ｄａｙ，  １９７４，  ｐｐ．  ３９−４３を参照されたい。これらの試薬は、限定されないが、３−（２−ピリジルジチオ）プロピオン酸Ｎ−スクシニミジル（ＳＰＤＰ）又はＮ，Ｎ’−（１，３−フェニレン）ビスマレイミド；Ｎ，Ｎ’−エチレン−ビス−（ヨードアセタミド）又は他の６〜１１個の炭素メチレン橋を有する試薬；並びに１，５−ジフルオロ−２，４−ジニトロベンゼンを含む。この目的に使用できる他の架橋剤は、限定されないが：ｐ，ｐ’−ジフルオロ−ｍ，ｍ’−ジニトロジフェニルスルホン；アジピミド酸ジメチル；フェノール−１，４−ジスルホニルクロライドヘキサメチレンジイソシアネート又はジイソチオシアネート、又はアゾフェニル−ｐ−ジイソシアネート；グルタルアルデヒド及びジスジアゾベンジジンを含む。架橋剤は、ホモ二官能性（ｈｏｍｏｂｉｆｕｎｃｔｉｏｎａｌ）、即ち同一の反応が起こる２つの官能基を有してもよい。好ましいホモ二官能性架橋剤は、ビスマレイミドヘキサン（ＢＭＨ）である。ＢＭＨは２つのマレイミド官能基を含み、それらは、穏和な条件下（ｐＨ６．５〜７．７）でスルフヒドリル含有化合物と特異的に反応する。これらの２つのマレイミド基は、炭化水素鎖により連結されている。従って、ＢＭＨは、システイン残基を含有するタンパク質（又はポリペプチド）の不可逆的架橋に有用である。架橋剤は、ヘテロ二官能性（ｈｅｔｅｒｏｂｉｆｕｎｃｔｉｏｎａｌ）であってもよい。ヘテロ二官能性架橋剤は、例えばアミン反応性基及びチオール反応性基等の２つの異なる官能基を有し、それぞれ遊離アミン及びチオールを有する２つのタンパク質を架橋し得る。ヘテロ二官能性架橋剤の非限定的な例は、スクシンイミジル−４−（Ｎ−マレイミドメチル）−シクロヘキサン−１−カルボキシレート（ＳＭＣＣ）、ｍ−マレイミドベンゾイル−Ｎ−ヒドロキシスクシンイミドエステル（ＭＢＳ）、及びスクシンイミド４−（ｐ−マレイミドフェニル）ブチレート（ＳＭＰＢ）、ＭＢＳの伸長鎖類似体である。これらの架橋剤のスクシンイミジル基は、主にアミンと反応し、チオール−反応性マレイミドは、システイン残基のチオール結合と共有結合を形成する。架橋剤はしばしば水に対し溶解性が低いため、スルホン酸基等の親水性部分を当該架橋剤に付加して、その溶解性を改善させる。スルホ−ＭＢＳ及びスルホ−ＳＭＣＣは、水溶性を改変した架橋剤の例である。多くの架橋剤は、好ましくない、細胞条件下で実質的に開裂しないコンジュゲートを生じる。従って、幾つかの架橋剤は、細胞条件下で開裂するジスルフィド結合等の共有結合を含���。例えば、Ｔｒａｕｔ試薬、ジチオビス（スクシンイミジルプロピオネート）（ＤＰＳ）、及び３−（２−ピリジルジチオ）プロピオン酸Ｎ−スクシニミジル（ＳＰＤＰ）は、周知の開裂架橋剤である。開裂架橋剤の使用は、標的細胞内に運搬された後、新規トランスポーター部分からＢＡＭ等の荷物部分を切り離すことを可能とする。この目的のため、直接のジスルフィド結合も有用である。化学架橋は、スペーサー腕の使用も含む。スペーサー腕は、分子内の柔軟性、又はコンジュゲートされた部分の間の分子間距離の調整を提供し、生物活性の維持を助ける。スペーサー腕は、スペーサーアミノ酸、例えばプロリンを含むタンパク質（又はポリペプチド）部分の形態であってもよい。あるいは、スペーサー腕は、「長鎖ＳＰＤＰ」中等の架橋剤の部分であってもよい（例えばＰｉｅｒｃｅ  Ｃｈｅｍ．  Ｃｏ．，  Ｒｏｃｋｆｏｒｄ，  Ｉｌｌ．，  ｃａｔ．  Ｎｏ．  ２１６５１  Ｈ）。上記のようなものを含む様々な架橋試薬は、市販されている。それらの使用の詳細な指示は、販売者から容易に入手できる。タンパク質架橋及びコンジュゲート調製の一般的参照は：Ｗｏｎｇ，  Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ  ｏｆ  Ｐｒｏｔｅｉｎ  Ｃｏｎｊｕｇａｔｉｏｎ  ａｎｄ  Ｃｒｏｓｓ−Ｌｉｎｋｉｎｇ，  ＣＲＣ  Ｐｒｅｓｓ  （１９９１）である。
【００７２】
ＢＡＭ−コンジュゲート分子の異なる成分は、当該異なる成分が、少なくとも部分的に、それらの個別の活性及び／又は特性を、トランスポーター荷物コンジュゲート分子となっても依然として維持するようにカップリングするべきであることが好ましい。例えば、成分のカップリングは、好ましくは、Ｃ４Ｓに対する標的化の完全な欠失をもたらさない。
【００７３】
６．６．２  ＢＡＭ部分
本発明は、疾患、障害又は症状の治療又は予防、又はそれらの兆候の緩和のための、治療活性化合物として知られ、又は予想される、例えば化合物、タンパク質、リポソーム、ナノ粒子及び（ポリ−）ペプチド等の、任意のＢＡＭを包含する。加えて、又は或いは、当該ＢＡＭは、蛍光色素、放射性標識又は化学発光基等の、疾患又は症状の診断に使用される検出マーカーであってもよい。
【００７４】
Ａ．  細胞毒性薬物
好ましくは、本発明の「ＢＡＭ−コンジュゲート」のＢＡＭは、例えば化学治療薬剤として適切な細胞毒性又は抗腫瘍剤から選択される、医薬的薬剤である。一般に、成分（Ｂ）として適切な化学治療薬剤は、それらの作用機序に基づいて以下の３つの主要なカテゴリーに分類できる。
（ａ）プレＤＮＡ分子構築ブロックの合成の停止
これらの薬剤は、多くの異なる方法で作用する。ＤＮＡ構築ブロックは、葉酸、複素環塩基、及びヌクレオチドであり、細胞内で天然に生産される。これらの薬剤の全ては、ヌクレオチド又はデオキシリボヌクレオチド（ＤＮＡの形成に必須）の形成における幾つかの工程を阻害するように作用する。これらの工程が阻害されると、ＤＮＡ及びＲＮＡの構築ブロックであるヌクレオチドが合成できない。従って、細胞がヌクレオチド無しにＤＮＡを合成できないため、細胞が複製できない。このクラスにおける薬物の例は、メトトレキサート（Ａｂｉｔｒｅｘａｔｅ（登録商標））、フルオロウラシル（Ａｄｒｕｃｉｌ（登録商標））、ハイドロキシウレア（Ｈｙｄｒｅａ（登録商標））、及びメルカプトプリン（Ｐｕｒｉｎｅｔｈｏｌ（登録商標））、チオグアニン、トコフェロール、又はより一般的には、任意のヌクレオチド類似体、例えば２’−デオキシシチジン類似体を含む。
（ｂ）細胞の核内のＤＮＡに直接ダメージを与える
これらの薬剤は、ＤＮＡ及びＲＮＡを化学的に攻撃するものである。これらは、ＤＮＡの複製を阻害して、増幅を完全に停止させ、又はナンセンスＤＮＡ又はＲＮＡの形成を引き起こす（即ち、新しいＤＮＡが意味のあるコードを有しない）。このクラスの薬剤の例は、シスプラチン（Ｐｌａｔｉｎｏｌ（登録商標））及び抗生物質−ダウノルビシン（Ｃｅｒｕｂｉｄｉｎｅ（登録商標））、抗サイクリン抗腫瘍剤に属するドキソルビシン（Ａｄｒｉａｍｙｃｉｎ（登録商標））及びエトポシド（ＶｅＰｅｓｉｄ（登録商標））、又は任意のインターカレーターを含み；更に、標的癌治療に通常用いられる放射性ヌクレオチド（例えばアルファ−放射性ヌクレオチド）（例えばＢｉｓｍｕｔｈ−２１３）を含む。
（ｃ）有糸分裂紡錘体の合成又は分解の阻害
有糸分裂紡錘体は、細胞が２つの新しい細胞に分裂を開始するとき、細胞内に「北極及び南極」への線路を形成する分子である。これらの紡錘体は、細胞分裂の過程で新しい２つの細胞のそれぞれに納まる新しくコピーされたＤＮＡが分配されるのを助けるので、非常に重要である。これらの薬物は、この紡錘体の形成を阻害し、細胞分裂を阻害する。このクラスの有糸分裂阻害剤は：ビンブラスチン（Ｖｅｌｂａｎ（登録商標））、ビンクリスチン（Ｏｎｃｏｖｉｎ（登録商標））及びパクリタキセル（Ｔａｘｏｌ（登録商標））を含む。
【００７５】
本発明の「ＢＡＭ−コンジュゲート」のＢＡＭは、上記作用機序の１つに従って、作用し得る。言い換えると、抗腫瘍剤のクラスの各薬剤、即ちアルキル化剤、ニトロソウレア、抗代謝物質、植物アルカロイド、抗腫瘍抗生物質、及びステロイドホルモン等が、本発明のトランスポーター荷物コンジュゲート分子のＢＡＭ成分として使用されてもよい。より詳細にこれらの薬物のクラスを記載するために、各抗癌剤は、上記のように、その細胞周期及び細胞化学に対する作用に従って分類されてもよい。アルキル化剤は、ＤＮＡを直接攻撃することにより細胞を死滅させる。
【００７６】
特に、慢性白血病、ホジキン症、リンパ腫並びに肺、胸部、前立腺及び卵巣の癌腫の治療において、アルキル化剤が使用されてもよい。ニトロソウレアもアルキル化剤と同様に作用し、ＤＮＡ修復に必要な変化を阻害する。これらの薬剤は、脳血管障壁を横切るため、脳腫瘍、リンパ腫、多発性骨髄腫及び悪性骨髄腫の治療に使用される。カルムスチン及びロムスチンは、このカテゴリーの主要な薬物である。抗代謝物質は、特定の活性、特にＤＮＡ合成に干渉することにより、細胞増殖をブロックする薬物である。それらは細胞に取り込まれると、細胞の通常の分化及び増殖を停止させる。このカテゴリーの全ての薬物は、細胞周期のＳ期にある細胞に影響を及ぼす。抗代謝物質は、急性及び慢性の白血病、絨毛癌、及び消化管、胸部及び卵巣の幾つかの腫瘍の治療に使用されてもよい。通常使用される抗代謝物質の非限定的な例は、６−メルカプトプリン及び５−フルオロウラシル（５−ＦＵ）である。抗腫瘍抗生物質は、様々な化合物である。一般に、それらは、ＤＮＡに結合してＲＮＡ合成を阻害することにより作用する。これらの薬剤は、様々な癌の治療に広く使用される。このグループで最も一般に使用される薬物は、ドキソルビシン（Ａｄｒｉａｍｙｃｉｎ）、マイトマイシン−Ｃ及びブレオマイシンである。植物（ビンカ）アルカロイドは、植物由来の抗腫瘍剤である。これらの薬物は、具体的には、有糸分裂において細胞分裂をブロックすることにより作用する。それらは、急性リンパ性白血病、ホジキン及び非ホジキンリンパ腫、神経芽細胞腫、ウィルムス腫瘍、並びに肺、胸部及び精巣の癌の治療に通常使用される。ビンクリスチン及びビンブラスチンは、このグループで通常使用される。ステロイドホルモンは、幾つかの種類の腫瘍の治療に有用である。このクラスは、アドレノコルチコステロイド、エストロゲン、アンチエストロゲン、プロゲステロン、及びアンドロゲンを含む。それらの具体的作用機序は不明であるが、ステロイドホルモンは、幾つかのホルモン依存性癌の増殖を制御する。タモキシフェンは一例であり、エストロゲン依存性乳癌に使用される。上記腫瘍種の全ては、上記抗腫瘍剤のいずれかをＢＡＭとして含む本発明のＢＡＭコンジュゲート分子により治療され得る。
【００７７】
本発明のＢＡＭ−コンジュゲートのＢＡＭ成分として使用され得る抗腫瘍薬又は細胞毒性薬の１つの群は、アルキル化剤、抗代謝物質、細胞増殖抑制剤又はホルモン治療に関連する薬物から選択される。この文脈において、金属の化合物、特にプラチン（誘導体）及びタキソールクラスが抗腫瘍薬又は細胞毒性薬として選択されるのが好ましい。特に、薬物部分は、シスプラチン、トランスプラチン、サトラプラチン、オキサリプラチン、カルボプラチン、ネダプラチン、クロラムブシル、シクロホスファミド、メファラン、アザトイオプリン（ａｚａｔｈ  ｉｏｐｒｉｎ）、フルオロウラシル、（６）−メルカプトプリン、メトレキサート、ナンドロロン、アミノグルテミド、メドロキシプロゲステロン、メゲストロラセタート、プロカルバジン、ドセタキセル、パクリタキセル、イリノテカン、エピポドフィロトキシン、ポドフィロトキシン、ビンクリスチン、ビンブラスチン、ドセタキセル、ダウノマイシン、ダウノルビシン、ドキソルビシン、マイトタントロン、トポテカン、ブレオマイシン、ゲムシタビン、フルダラビン、ナベルビン及び５−ＦＵＤＲ等である。特に好ましくは、金属含有抗癌剤のクラス、例えばプラチナ化合物のクラスである。
【００７８】
本発明のＢＡＭ−コンジュゲートのＢＡＭ成分として使用され得る更なる抗腫瘍薬又は細胞毒性薬は、アリトレチノイン、アルトレタミン、アザチオプリン、ビカルタミド、ブスルファン、ボルテゾミブ、カペシタビン、カルフィルゾミブ、シクロホスファミド、エキセメスタン、レトロゾール、フィナステリド、フォスタマチニブ、ゲフィチニブ、イマチニブ、レエナリドミド、マリゾミブ、酢酸メゲストロール、ニロチニブ、トリプロレリン、テモゾロミド、ミフェプリストン、トレチノイン、タモキシフェン、テニポシド、硫酸ぺプロマイシン又はカムプトテシンのクラスである。
【００７９】
本発明のＢＡＭ−コンジュゲートのＢＡＭ成分として使用され得る更なる抗腫瘍薬又は細胞毒性薬は、例えば当該技術分野で周知の標的癌療法に通常使用される核種（例えばアルファ粒子を放出する放射性核種）である。本発明で使用され得るそのような核種の非限定的な例は、モリブデン−９９、テクネチウム−９９ｍ、ビスマス−２１３、クロム−５１、コバルト−６０、銅−６４、ジスプロシウム−１６５、エルビウム−１６９、ホルミウム−１６６、ヨウ素−１２５、ヨウ素−１３１、イリジウム−１９２、鉄−５９、ルテチウム−１７７、パラジウム−１０３、リン−３２、カリウム−４２、レニウム−１８６、レニウム−１８８、サマリウム−１５３、セレン−７５、ナトリウム−２４、ストロンチウム−８９、キセノン−１３３、イッテルビウム−１６９、イッテルビウム−１７７、イットリウム−９０、セシウム、金及びルテニウムの放射性同位体である。炭素−１１、窒素−１３、酸素−１５、フッ素−１８、コバルト−５７、ガリウム−６７、インジウム−１１１、ヨウ素−１２３、クリプトン−８１ｍ、ルビジウム−８２、ストロンチウム−９２、タリウム−２０１も含まれる。あるいは、又は加えて、上記非限定的な例のいずれかは、診断又は画像化のための使用も想定され得る。
【００８０】
本発明のＢＡＭ−コンジュゲートのＢＡＭ成分として使用され得る他の抗腫瘍薬又は細胞毒性薬は、スタウロポリン（及びその類似体）及びレベッカマイシン等のインドロカルバゾール化合物である。アニリノキナゾリンのクラスに属する化合物（例えばゲフィチニブ）は、本発明のＢＡＭ−コンジュゲートのＢＡＭ成分としても特に好ましい。
【００８１】
本発明のＢＡＭ−コンジュゲートのＢＡＭ成分として使用され得る更なる抗腫瘍薬又は細胞毒性薬の群は、イリノテカン、又はミトチキネシン又はＤＨＦＲ等のトポイソメラーゼの阻害剤から選択され得る。
【００８２】
本発明のＢＡＭ−コンジュゲートのＢＡＭ成分として使用され得る更なる抗腫瘍薬又は細胞毒性薬は、細胞増殖  （ＰＤＧＦ）、細胞内シグナル経路、例えばＲＡＳ／ＲＡＦシグナル経路、例えばＲＡＦ／ＭＥＫ／ＥＲＫシグナル経路（例えばＲＡＦ−１）又は有糸分裂活性化タンパク質キナーゼ経路、ＯＭＧＣキナーゼファミリー（ＣＤＫ（サイクリン依存性キナーゼ）、ＭＡＰＫ、ＧＳＫ３、ＣＬＫを含む）、ＰＫＡ、ＰＫＧ、ＰＫＣキナーゼファミリーを含むＡＧＣキナーゼファミリーに属するＳｅｒ／Ｔｈｒキナーゼ、例えば血管新生及び腫瘍進行等に関与する受容体チロシンキナーゼ、例えば血管内皮増殖因子受容体（ＶＥＧＦＲ）−２、ＶＥＧＦＲ−３、血小板由来増殖因子受容体β、Ｆｌｔ−３、ＥＴ−１、ＥＴ−２、ＥＴ−３を含むエンドセリン（ＥＴ）系、ＥＴＡ受容体（ＥＴＡＲ）及びＥＴＢＲ、及びｃ−ＫＩＴ、それらは、例えばそれらの機能を阻害することにより標的化され、及びＩＧＦ−ファミリー、例えばＩＧＦ−１、ＩＧＦ−２、ＩＧＦ−１Ｒ、ＩＧＦ２Ｒ等を阻害又は刺激する因子から選択されてもよく、それらは、例えばそれらの機能を阻害することにより標的化される。
【００８３】
本発明のＢＡＭ−コンジュゲートのＢＡＭ成分として使用され得る他の抗腫瘍薬又は細胞毒性薬は、腫瘍細胞の増殖及び腫瘍の血管新生を標的とする阻害剤から選択されてもよい。この文脈で特に好ましいのは、悪性細胞及び／又は血管細胞に対して抗血管新生活性を有する低分子抗腫瘍キナーゼ阻害剤である。ＥＧＦＲ、Ｈｅｒ２／ｎｅｕ、ＢＣＲ−ＡＢＬ、ｃ−ＫＩＴ、ＰＫＣ、Ｒａｆ及びＰＩ３等に対する低分子抗腫瘍キナーゼ阻害剤は、悪性細胞が分泌する血管新生因子をブロックすることにより血管新生を阻害する。ＶＥＧＦＲ２、ＶＥＧＦＲ１、ＰＤＧＦＲ、ＰＫＣ、Ｒａｆ及びＰＩ３等に対するキナーゼ阻害剤は、血管細胞に対して作用することにより血管新生を阻害する。サイクリン依存性キナーゼ（ＣＤＫＩ）の合成阻害剤の例は、例えば、オロモウシン、フラボピリドル、ブチロラクトン及びそれらの誘導体であって、それらは腫瘍細胞の増殖を抑制する。一方、本発明のペプチド−コンジュゲート／ＢＡＭ−コンジュゲート分子のＢＡＭ成分として適切な抗腫瘍化合物は、癌細胞中のアポトーシスプログラムの活性化因子、又は抗アポトーシスタンパク質、例えばＢｃｌ−２を下方制御する因子から選択されてもよい。
【００８４】
６．７  自由に選択できる位置
本明細書中、構造（ｉｉｉ）〜（ｖｉ）の本発明の分子又は化合物の共通構造がアミノ酸残基からなり、又はそれのみを含む場合、Ｃ４Ｓと特異的に相互作用する標的部分は、以下の配列
Ａｒｇ１−Ｘ２−Ｘ３−Ｘ４−Ａｒｇ５−Ｘ６−Ｘ７−Ｘ８−Ａｒｇ９
（配列番号：２１、配列番号：１７又は配列番号：１８のルールに従う；  配列番号２２、配列番号：１９又は配列番号：２０のルールに従う）
で表される。
【００８５】
本明細書中に詳述するように、位置２、４、６、８及び３（位置７が、Ｄ−又はＬ−リシン又はアルギニンとして本明細書中に記載のルールに従い規定／選択される場合）又は７（位置３が、Ｄ−又はＬ−リシン又はアルギニンとして本明細書中に記載のルールに従い規定／選択される場合）は、Ｃ４Ｓプロテオグリカンに対する本発明の化合物の特異的結合に殆ど影響を有さず、故に、これらの位置は、本明細書中、自由に選択できるものと示される。本明細書中に記載されるように、荷電したアミノ酸アルギニン又はリシンの使用は、これらが一般にプロテオグリカンとの非特異的な相互作用を増大させる傾向があるため、避けられる。
それぞれ独立して、アミノ酸フェニルアラニン、トリプトファン、バリン、メチオニン、イソロイシン及びロイシンから選択される。上記自由に選択できる位置の３つ以下がアラニン残基であることも好ましい。加えて、上記自由に選択できる位置にプロリン残基が存在しないことが好ましい。
【００８６】
加えて、標的部分は、位置１、５、９のアルギニン及び位置３又は７のアルギニン又はリシンの最適な線形的配置により、Ｃ４Ｓに対して特異性を呈するため、残りのアミノ酸は、好ましくは、３次元的な構造、例えばα−ヘリックス等の誘導を避けるように選択されるのが好ましい。天然に存在するペプチドを構成するアミノ酸におけるα−ヘリックスを形成する傾向は公知であり、例えばに記載されており、α−ヘリックスを形成する能力の順位は、以下のようになる：
Ａｌａ  ＞  Ａｒｇ＋  ＞  Ｌｅｕ  ＞  Ｌｙｓ＋  ＞  Ｇｌｕｏ  ＞  Ｍｅｔ  ＞  Ｇｌｎ  ＞  Ｇｌｕ−  ＞  Ｉｌｅ  ＞  Ｔｙｒ  ＞  Ｈｉｓｏ  ＞  Ｓｅｒ  ＞  Ｃｙｓ  ＞  Ａｓｎ  ＞  Ａｓｐ−  ＞  Ａｓｐ  ＞  Ｔｒｐ  ＞  Ｐｈｅ  ＞  Ｖａｌ  ＞  Ｔｈｒ  ＞Ｈｉｓ＋  ＞Ｇｌｙ  ＞  Ｐｒｏ
【００８７】
従って、α−ヘリックスを形成する能力が高いアミノ酸が自由に選択できる位置に３つ以上使用されないことが好ましい。故に、好ましい態様において、自由に選択できる位置において、３つ以上のアラニンが選択されない。加えて、又はあるいは、更なる好ましい態様において、自由に選択できる位置において、プロリンは使用されるべきではない。
【００８８】
自由に選択できる位置は、かさばる（ｂｕｌｋｙ）及び／又は疎水性のアミノ酸が、膜挿入及び細胞穿孔を補助し得るため、好ましい（例えばＲｏｔｈｂａｒｄ，  Ｃｅｌｌ−Ｐｅｎｅｔｒａｔｉｎｇ  Ｐｅｐｔｉｄｅｓ：  Ｐｒｏｃｅｓｓｅｓ  ａｎｄ  Ａｐｐｌｉｃａｔｉｏｎｓ．  Ｌａｎｅｌ  Ｕ  （Ｅｄ），  ＣＲＣ  Ｐｒｅｓｓ  （２０００）を参照されたい）。従って、好ましい態様において、本発明の分子又は化合物が共通配列（ｉ）又は（ｉｉ）の配列からなり、又はこれを含む場合、位置２、４、６、８及び３（位置７が、Ｄ−又はＬ−リシン又はアルギニンとして本明細書中に記載のルールに従い規定／選択される場合）又は７（位置３が、Ｄ−又はＬ−リシン又はアルギニンとして本明細書中に記載のルールに従い規定／選択される場合）は、Ｐｈｅ、Ｔｒｐ、Ｔｙｒ、Ｖａｌ、Ｍｅｔ、Ｉｌｅ及びＬｅｕから独立して選択される。
【００８９】
Ｄ−アミノ酸が、プロテアーゼ及び／又は他のタンパク質消化手段に対する耐性を増大させることは公知である。故に、更に好ましい態様において、位置４又は位置６は、Ｄ−アミノ酸である。
【００９０】
本発明の化合物の共通配列は、プロトンスポンジとして作用する任意のアミノ酸残基を含むことも留意すべきである。共通配列（ｉ）〜（ｘｉｖ）において、（ＸＤ１１）ｍ又は（ＸＤ−２）ｍ及び（ＬＤ１０）ｎ又は（ＬＤ−１）ｎ（ｍは０又は１、ｎは０〜１０である）は、任意のプロトンスポンジアミノ酸を表す。プロトンスポンジの残基は、プロトンスポンジとして作用できることが当該技術分野で知られ、又は本明細書中に記載されている任意の残基又はその組み合わせから選択されてもよい。好ましい態様において、ＸＤ１１又はＸＤ−２は、Ｄ−アルギニン又はＤ−リシン以外の任意のＤ−アミノ酸を表し（当該残基が存在する場合）、ＬＤ１０又はＬＤ−１は、Ｌ−又はＤ−アルギニン又はＬ−又はＤ−リシン以外のＬ−又はＤ−アミノ酸を表す（当該残基が存在する場合）。最も好ましい態様において、ＸＤ１１又はＸＤ−２はＤ−ヒスチジンを表し（当該残基が存在する場合）、ＬＤ１０又はＬＤ−１は、Ｌ−又はＤ−ヒスチジンを表す（当該残基が存在する場合）。当該技術分野で認識されているように、エンドソーム等の酸性の小胞の内側の特定のアミノ酸残基（ヒスチジン等）の蓄積は、プロトンスポンジ効果を生じる。例えば、ヒスチジンのイミダゾール環は、環境のｐＨが６を切ったときにカチオン電荷を獲得する能力を有し、これは、膜の融合及びエンドソームの脱出を更に促進する。
【００９１】
この項目及び本願全体に記載の態様が、好ましい（最も好ましいを含む）と示されているか否かに拘らず、本発明の化合物の設計又は選択において、独立して実施され、又は他の態様と組み合わせられてもよいことは、明確に想定される。従って、前記化合物の共通配列及び／又は標的部分は、任意で、０、１、又はそれ以上の、この項目及び／又は本明細書全体に記載の態様を任意で充足してもよい。そのような組み合わせの非限定的な一例として、任意で選択できる位置は、それぞれ、Ｐｈｅ、Ｔｒｐ、Ｔｙｒ、Ｖａｌ、Ｍｅｔ、Ｉｌｅ及びＬｅｕから独立して選択されてもよく、位置４はＤ−アミノ酸であってもよく、（ＬＤ１０）ｎのｎは０で、（ＸＤ１１）ｍのｍは１であってもよい。
【００９２】
本発明の化合物の新規のＤ／Ｌアミノ酸配置及び／又は新規の化学リンカー／スペーサーの組み合わせ及び／又は組み合わせは、当業者が、例えばプロテアーゼによるトランスポーター構築物の消化の前に細胞又は核内にＢＡＭを送達できるような細胞内半減期に半減期をマッチさせるように、本発明の分子又は化合物のインビボ又はインビトロでの持続性を設定することを可能とする。
【００９３】
本発明の文脈において、ペプチド及び／又はポリペプチドの変異体及び／又は断片は、好ましくは、本明細書に明示される（ポリ）ペプチドの配列の全長に対して１０％、２０％、３０％、４０％、５０％、６０％、７０％、８０％、又は８５％以上、好ましくは９０％以上、より好ましくは９５％以上、最も好ましくは９９％以上の配列同一性を有する（ポリ）ペプチド配列を含み、又はこれからなり、共通配列のルールに従う。
【００９４】
６．８  本発明の化合物の使用
本発明の共通配列（ｉ）〜（ｘ）は、細胞の細胞質及び／又は核内に、細胞膜を透過して輸送されるトランスポーター部分として想定される。本明細書中に開示の治療化合物（即ちＢＡＭ）が、抗癌剤として作用するために、細胞膜を透過しなければならないことは、それらの全てで共通している。これらのクラスに属する化合物（細胞の核内のＤＮＡを直接攻撃し、有糸分裂紡錘体の合成又は分解に影響し、又はプレＤＮＡ分子構築ブロックの合成を停止させる化合物）と、本発明の共通配列（ｉ）〜（ｘ）とのカップリングにより、当該抗癌化合物の細胞内への侵入が促進され、及び／又はそれらの溶解性が促進され、それにより、これらの治療化合物の有効性が増大する。一方、増大した細胞への取り込み、及び好ましくは水性環境（例えば細胞質）中のこれらの化合物の良好な溶解性は、治療的抗癌化合物の用量の減少を達成し得る。
【００９５】
本発明の化合物の標的部分の共通配列は、特に、Ｃ４Ｓプロテオグリカンを標的とする。これらのプロテオグリカンは、好ましくは、例えば白血球のＣＤ６８の表面タンパク質と結合して提示される。実際に、白血球は、これ以外のプロテオグリカンを提示していない。従って、本発明の分子及び化合物は、白血球の特異的な標的化を可能とする。従って、本発明の分子、化合物及び方法は、荷物分子、例えばＢＡＭの白血球への効果的な送達を促進し、白血球内に所望の物質を選択的に送達する一般的手段を提供する。故に、当業者は、トランスポーター部分とコンジュゲートするＢＡＭは、治療効果（疾患の治療、予防、緩和又は遅延等）を含む白血球の活性に影響を及ぼすことが知られ、又は期待されるもの、又は診断目的又は科学的研究の目的等で白血球を標識するためのものであることが好ましいと認識する。特に、骨髄性細胞を標的化することが好ましい。
【００９６】
本発明のＢＡＭ−コンジュゲートは、白血球が病理学的関与を有する様々な疾患又は症状の治療、予防又は緩和に使用され得る。そのような症状の非限定的な例は、原発性又は続発性白血球機能不全、例えば：好中球増加症、好中球減少症、白血球減少症、好塩基球減少症、好塩基球増加症、好酸球減少症、好酸球増加症、突発性好酸球増多症候群、リンパ球性白血球増加症、リンパ球増加症、リンパ球減少症、単球増加症、単球減少症、メイ−ヘグリン異常、ペルゲル−フエット異常、アルダー−ライリー異常、チェディアック−東症候群、ヨブ症候群（高ＩｇＥ症候群）、怠けもの白血球症候群、先天性補体第３成分欠損症、慢性肉芽腫症、白血球グルコース６−リン酸デヒドロゲナーゼ欠損症、良性ミエロペルオキシダーゼ欠損症、重症複合型免疫欠損症、ディ・ジョージ症候群、ネゼロフ症候群、乳児伴性無ガンマグロブリン血症、分類不能型低ガンマグロブリン血症、ムコ多糖体症、リポドーズ（ｌｉｐｏｄｏｓｅｓ）、ゴーシェ病、ニーマン−ピック病、ファブリー病、ファーバー病、ガングリオシドーシス、テイ−サックス病、ザントホフ病、クラッベ病、異染色性白質萎縮症、ウォルマン病、白血病、急性リンパ性白血病（Ｌ１、Ｌ２、Ｌ３）、慢性リンパ性白血病、急性骨髄性白血病（ＡＭＬ）、未分化ＡＭＬ（Ｍ０）、骨髄芽球性白血病（Ｍ１）、骨髄芽球性白血病（Ｍ２）、前骨髄球性白血病（Ｍ３）、骨髄単球性白血病（Ｍ４）、単芽球性白血病（Ｍ５）、赤白血病（Ｍ６）、巨核芽球性白血病（Ｍ７）、慢性骨髄球性白血病、及び未分化又は混合型急性白血病（リンパ球性及び骨髄性の両方の特徴を有する白血病）、並びにホジキンリンパ腫、Ｔ細胞リンパ腫、Ｂ細胞リンパ腫、リンパ形質細胞性リンパ腫、ワルデンシュトレームマクログロブリン血症、多発性骨髄腫、濾胞性リンパ腫を含む全ての型のリンパ腫を含む。
【００９７】
本発明のＢＡＭ−コンジュゲートは、骨髄細胞又はリンパ性細胞の機能不全が主な原因である疾患の治療に、追加的に、又は代替的に使用される。そのような疾患の非限定的な例は、様々な型の急性骨髄性白血病（ＡＭＬ）、特に急性リンパ芽球性白血病、急性骨髄芽球性白血病、急性前骨髄球性白血病、急性未分化白血病、Ｂ−細胞慢性リンパ球性白血病、Ｂ−細胞（急性）白血病、慢性リンパ球性白血病、慢性骨髄球性白血病、骨髄性白血病、前Ｂ−細胞白血病、Ｔ−細胞白血病、Ｔ−細胞急性リンパ芽球性白血病、Ｔ＝細胞白血病（肺癌中）、皮膚Ｔ−細胞白血病、ヒト単球白血病、マスト細胞白血病、混合血統白血病、有毛細胞白血病、Ｔ−細胞前リンパ球性白血病、大型顆粒リンパ球白血病、成人Ｔ−細胞白血病及び全ての型のリンパ腫、例えばホジキンリンパ腫、Ｔ−細胞リンパ腫、Ｂ−細胞リンパ腫、リンパ形質細胞性リンパ腫、ワルデンシュトレームマクログロブリン血症、及び濾胞性リンパ腫が挙げられる。
【００９８】
続発性白血球機能不全に関する例示的な症状としては、以下の病原体：ＨＩＶ、エプスタインバーウイルス、麻疹ウイルス（はしか）、パラミクソウイルス、ルビウイルス、６型ヘルペスウイルス、ヘルペスウイルス、デングウイルス、単純ヘルペスウイルス１、単純ヘルペスウイルス２、パルボウイルス、呼吸器合胞体ウイルス、天然痘ウイルス、水痘、フラビウイルス、１、２、３、４型ヒトＴ−リンパ球ウイルス、Ａ、Ｂ、Ｃ、Ｄ、又はＥ型肝炎ウイルス、ラッサウイルス、インフルエンザＡ、Ｈ１Ｎ１型及びＨ３Ｎ２型インフルエンザＡ、インフルエンザＢ、又はインフルエンザＣウイルス、又はリーシュマニア（Ｌｅｉｓｈｍａｎｉａ）を含むトリパノソーマ原虫のいずれか１つによる感染を含む。最も好ましくは、続発性白血球機能不全に関する疾患は、ＨＩＶ感染及びＡＩＤＳ又はリーシュマニア症である。
【００９９】
白血球の活性を変化させることにより治療、予防、緩和又は無毒化され得る症状及び疾患の例として、急性又は慢性炎症性症状、例えば慢性閉塞性肺疾患（ＣＯＰＤ）、関節リウマチ（ＲＡ）、乾癬性関節炎、炎症性腸疾患、乾癬、紅斑性狼瘡、喘息、アレルギー反応、及び自己免疫性疾患、限定されないが、急性散在性脳脊髄炎（ＡＤＥＭ）、アディソン症、無ガンマグロブリン血症、円形脱毛症、筋萎縮性側索硬化症、強直性脊椎炎、抗リン脂質症候群、抗シンセターゼ症候群、アトピー性アレルギー、アトピー性皮膚炎、自己免疫性再生不良性貧血、自己免疫性心筋症、自己免疫性腸疾患、自己免疫性溶血性貧血、自己免疫性肝炎、自己免疫性内耳疾患、自己免疫性リンパ増殖症候群、自己免疫性末梢神経障害、自己免疫性膵炎、自己免疫性多内分泌腺症候群、自己免疫性プロゲステロン皮膚炎、自己免疫性血小板減少性紫斑病、自己免疫性蕁麻疹、自己免疫性ブドウ膜炎、バロー病／バロー同心円性硬化症、ベーチェット病、ベルジェ病、ビッカースタッフ型脳炎、ブラウ症候群、水疱性類天疱瘡、癌、キャッスルマン病、セリアック病、シャーガス病、慢性炎症性脱髄性多発ニューロパチー、慢性再発性多巣性骨髄炎、慢性閉塞性肺疾患、チャーグ・ストラウス症候群、瘢痕性類天疱瘡、コーガン症候群、寒冷凝集素症、補体成分２欠乏症、接触性皮膚炎、頭部動脈炎、ＣＲＥＳＴ症候群、クローン病（２種類の特発性炎症性腸疾患「ＩＢＤ」を含む）、クッシング症候群、皮膚白血球破砕性血管炎、デゴス病、ダーカム病、ヘルペス状皮膚炎、皮膚筋炎、１型糖尿病、汎発性皮膚全身性硬化症、ドレスラー症候群、薬物誘導性ループス、円板状エリテマトーデス、湿疹、子宮内膜症、腱付着部炎付随関節炎、好酸球性筋膜炎、好酸球性胃腸炎、後天性表皮水疱症、結節性紅斑、胎児赤芽球症、本態性混合型クリオグロブリン血症、エヴァンス症候群、進行性骨化性線維異形成症、線維性肺胞炎（又は特発性肺線維症）、胃炎、胃腸性類天疱瘡、巨細胞性動脈炎、糸球体腎炎、グッドパスチャー症候群、グレーブス病、ギラン・バレー症候群（ＧＢＳ）、橋本脳症、橋本甲状腺炎、ヘノッホ・シェーンライン紫斑病、妊娠性類天疱瘡としても知られている妊娠性疱疹、化膿性汗腺炎、ヒューズ・ストーヴィン症候群、低ガンマグロブリン血症、特発性炎症性脱髄疾患、特発性肺線維症、特発性血小板減少性紫斑病（自己免疫性血小板減少性紫斑病を参照）、ＩｇＡネフロパシー、封入体筋炎、慢性炎症性脱髄性多発ニューロパチー、間質性膀胱炎、若年性関節リウマチとしても知られている若年性特発性関節炎、川崎病、ランバート・イートン筋無力症候群、白血球破壊性血管炎、扁平苔癬、硬化性苔癬、線状ＩｇＡ病（ＬＡＤ）、ルー・ゲーリック病（また筋萎縮性側索硬化症）、自己免疫性肝炎としても知られているルポイド肝炎、エリテマトーデス、マジード症候群、メニエール病、顕微鏡的多発血管炎、ミラー・フィッシャー症候群、ギラン・バレー症候群、混合型結合組織疾患、モルフェア、急性痘瘡状苔癬状粃糠疹としても知られているムッハ・ハーベルマン病、多発性硬化症、重症筋無力症、筋炎、ナルコレプシー、視神経脊髄炎（またデビック病）、神経性筋強直症、眼部瘢痕性類天疱瘡、眼球クローヌス・ミオクローヌス症候群、オード甲状腺炎、回帰性リウマチ、ＰＡＮＤＡＳ（連鎖球菌に付随する小児自己免疫神経精神病学的障害）、傍腫瘍性小脳変性症、発作性夜間血色素尿症（ＰＮＨ）、ペイリーロンベルグ病、パーソネージ・ターナー症候群、毛様体扁平部炎、尋常性天疱瘡、悪性貧血、静脈周囲脳脊髄炎、ＰＯＥＭＳ症候群、結節性多発性動脈炎、リウマチ性多発筋痛症、多発性筋炎、原発性胆汁性肝硬変、原発性硬化性胆管炎、進行性炎症性神経障害、乾癬、乾癬性関節炎、壊疽性膿皮症、赤芽球癆、ラスムッセン脳炎、レイノー現象、再発性多発性軟骨炎、ライター症候群、下肢静止不能症候群、後腹膜線維症、関節リウマチ、リウマチ熱、サルコイドーシス、統合失調症、ＡＰＳの別の形態であるシュミット症候群、シュニッツラー症候群、強膜炎、強皮症、血清病、シェーグレン症候群、脊椎関節症、スチル病、若年性関節リウマチ、全身硬直症候群、亜急性細菌性心内膜炎（ＳＢＥ）、スザック症候群、スイート症候群、シデナム舞踏病、ＰＡＮＤＡＳ、交感性眼炎、全身性エリテマトーデス、エリテマトーデス、高安動脈炎、側頭動脈炎（また「巨細胞性動脈炎」としても知られている）、血小板減少症、トロサ・ハント症候群、横断性脊髄炎、潰瘍性大腸炎（２種の特発性炎症性腸疾患「ＩＢＤ」のうちの１つ）、混合型結合組織疾患とは異なる未分化結合組織疾患、未分化脊椎関節症、蕁麻疹様血管炎、血管炎、白斑、及び／又はウェゲナー肉芽腫症が挙げられる。
【０１００】
６．８．１  悪性血液疾患
好ましい態様において、本発明の「ＢＡＭ−コンジュゲート」は、急性リンパ芽球白血病（ＡＬＬ）、慢性リンパ球性白血病、慢性骨髄性白血病（ＣＭＬ）、全ての型のリンパ腫及び骨髄腫、特に、全ての型の旧姓骨髄性白血病（ＡＭＬ）等の、様々な悪性血液疾患の治療又は緩和に使用されてもよい。
【０１０１】
ＡＭＬは、癌性前駆細胞のクローンの無秩序な増殖及び通常の造血の阻害、及び好中球減少症、貧血、及び赤血球減少症をもたらすことにより特徴付けられる疾患の不均一な群である。国際保健機構（ＷＨＯ）は、予防及び治療のため、ＡＭＬを以下のように広く分類している。
・８番及び２１番染色体の間の転位を有するＡＭＬ
・１６番染色体に転移又は逆位を有するＡＭＬ
・１１番染色体に変化を有するＡＭＬ
・しばしば１５番及び１７番染色体の間の転位を有するＡＰＬ（Ｍ３）
を含む遺伝的以上を有するＡＭＬ；
多血球系異形成（ｍｕｌｔｉｌｉｎｅａｇｅ  ｄｙｓｐｌａｓｉａ）を有する（２つ以上の異常な骨髄細胞型が含まれる）ＡＭＬ；
事前の化学療法又は放射線照射に関連するＡＭＬ；
・未分化ＡＭＬ（Ｍ０）
・骨髄芽球性白血病（Ｍ１）
・骨髄芽球性白血病（Ｍ２）
・前骨髄球性白血病（Ｍ３）
・骨髄単球性白血病（Ｍ４）
・単芽球性白血病（Ｍ５ａ）急性単球性白血病（Ｍ５ｂ）
・赤白血病（Ｍ６）
・巨核芽球性白血病（Ｍ７）
・急性好塩基球性白血病
・線維症を伴う急性汎骨髄症
・骨髄性肉腫（顆粒球性肉腫又は緑色腫としても知られる）
を含む、特定不能のＡＭＬ；
未分化又は混合型急性白血病（リンパ球性及び骨髄性の両方の特徴を有する白血病）。
【０１０２】
未分化又は混合型急性白血病（リンパ球性及び骨髄性の両方の特徴を有する白血病）。骨髄性マーカーを用いてＡＬＬと呼ばれ、白血球性マーカーを用いてＡＭＬと呼ばれ、又は混合系統白血病と呼ばれる。
【０１０３】
上記で特定したように、任意の公知の化学治療剤は、ＡＭＬの治療のために本発明のトランスポーターペプチドとコンジュゲートした生物活性部分として使用されてもよい。
【０１０４】
好ましくは、ＡＭＬの治療のため、ＢＡＭは、以下の化学治療剤の１つから選択される：
・シタラビンを含むシトシンアラビノシド等の抗代謝物質、チオグアニン等のプリン類似体、トリメトピン及びペメトレドを含む抗葉酸剤、又はゲムシタビン及びフルオロウラシルを含むピリミジンアナログ；
・ダウノルビシン、アドリアマイシン（ドキソルビシン）エピルビシン、イダルビシン、アナマイシン及びＭＥＮ１０７５５を含むアントラサイクリン等のトポイソメラーゼ阻害剤；カムプトテシン、ＳＮ−３８、ＤＸ−８９５１ｆ、トポテカン、９−アミノカムプトテシン、ＢＮ８０９１５、イリノテカン、ＤＢ６７、ＢＮＰ１３５０、エキサテカン、ルルトテカン、、ＳＴ１４８１及びＣＤＫ６０２を含むキノリンアルカロイド；ポドフィロトキシン類似体エトポシド及びテニポシド、及びアントラセンジオン、ミトキサントロン及びアムサクリン又は他の天然の産物、例えばアザチオプリン；ブレキナル；フェノキシゾンビスシクロペプチド、例えばダクチノマイシン；塩基性糖ペプチド、例えばブレオマイシン；アントラキノングリコシド、例えばプリカマイシン（ミツルマイシン）；アントラセジオン、例えばミトキサントロン；アジリノピロロインドレジオン、例えばマイトマイシン；大環状免疫抑制剤、例えばシクロスポリン、ＦＫ−５０６（タクロリムス、プログラフ）、ラパマイシン等；並びにそれらに類するもの；
・微小管構築に干渉する薬剤、例えばビンカアルカロイドのファミリー、例えばビンブラスチン、ビンクリスチン；ビノレルビン、ビノデシン；ビンドリネアンドビンカミン；テキサン及びジテルペン、例えばパクリタキセル及びドセタキセル、
・金属複合体、例えばシスプラチン（ｃｉｓ−ＤＤＰ）、カルボプラチン等；尿素、例えばヒドロキシウレア；及びヒドラジン、例えばＮ−メチルヒドラジン、三酸化ヒ素；
・レチノイド、例えばビタミンＡ、１３−ｃｉｓ−レチノイン酸、トランス−レチノイン酸、イソトレチノイン等；カロテノイド、例えばベータ−カロテン、ビタミンＤ等。
【０１０５】
様々な型のＡＭＬを含む悪性骨髄疾患がシグナル伝達に関与する構成的に活性の酵素の遺伝的変異により引き起こされることを示す多くの文献が存在する。従って、幾つかの態様において、本発明のＢＡＭ−コンジュゲートは、これらの酵素、これらの酵素の下流のメディエーター又はそれらの構成的活性の１つ以上の後遺症（ｓｅｑｕｅｌａｅ）を標的とするように設計された、ＢＡＭ部分を含んでもよい。そのような酵素及び／又は下流のエフェクターの非限定的な例は、ファルネシルトランスフェラーゼ；血管内皮増殖因子及び他の血管新生タンパク質；白血病芽球の増殖及び生存能力の亢進に関与する酵素、例えばＦＬＴ３又はＲＡＳ；造血細胞の分化の障害に関与する酵素、例えばＨＤＡＣ阻害剤、抗アポトーシス遺伝子ＢＣＬ−２、Ｍ−ＣＳＦ、ａｆ１０、ａｌｏｘ  １２、ａｒｈｇｅｆ１２、ａｒｎｔ、ａｘｌ、ｂａｘ、ｂａｄ、ｂｃｌ、ｂｃｌ３、ｂｃｌ６、ｂｔｇ１、ｃａｖ１、ｃｂｆｂ、ｃｄｃ２３、ｃｄｈ１７、ｃｄｘ２、ｃｅｂｐａ、ｃｌｃ、ｃｒ１、ｃｒｅｂｂｐ、ｄｅｋ、ｄｌｅｕ１、ｄｌｅｕ２、ｅｇｆｒ、ｅｔｓ１、ｅｖｉ２ａ、ｅｖｉ２ｂ、ｆｏｘｏ３ａ、ｆｕｓ、ｇｌｉ２、ｇｍｐｓ、ｈｏｘ１１、ｈｏｘａ９、ｉｒｆ１、ｋｉｔ、ｌａｆ４  、ｌｃｐ１、ｌｄｂ１、ｌｍｏ１、ｌｍｏ２、ｌｙｌ１、ｍａｄｈ５、ｍｌｌ３、ｍｌｌｔ２、ｍｌｌｔ３、ｍｏｖ１０ｌ１、ｍｔｃｐ１、ｍｙｃ、ｎｆｋｂ２、ｎｏｔｃｈ１、ｎｏｔｃｈ３、ｎｐｍ１、ｎｕｐ２１４  、ｎｕｐ９８、ｐ５３、ｐｂｘ１、ｐｂｘ２、ｐｂｘ３、ｐｂｘｐ１、ｐｉｔｘ２、ｐｍｌ、ｒａｂ７、ｒｇｓ２、ｒｕｎｘ１、ｓｅｔ、ｓｐ１４０、ｔａｌ１、ｔａｌ２、ｔｃｌ１ｂ、ｔｃｌ６、ｔｈｒａ、ｔｒａ、及びｚｎｆｎ１ａ１の阻害剤が挙げられる。
【０１０６】
同様に、最近、様々な型のＡＭＬの治療のための遺伝型特異的薬物標的が同定されている。そのような標的化された治療は、特にタンパク質キナーゼ阻害剤、例えばチロシンキナーゼ（Ｆｌｔ３、ｃ−ｋｉｔ、ＢＣＲ−ＡＢＬ）、Ａｕｒｏｒａキナーゼ及び他の細胞内シグナル経路の成分（例えばＲａｓ）の阻害剤を含む。
【０１０７】
好ましい態様において、本発明のトランスポーター部分にコンジュゲートされる生物活性部分は、以上なシグナル伝達を抑制する薬剤、例えばファルネシルトランスフェラーゼ、ヒストンデアセチラーゼ及びプロテオソーム阻害剤、抗血管新生剤、ＦＬＴ３阻害剤、アポトーシス阻害剤又はＭ−ＣＳＦの阻害剤であってもよい。
【０１０８】
これらの薬剤は、シグナル経路の特定の要素を選択的に阻害し、又はマルチキナーゼ阻害剤ソラフェニブのように様々な要素に作用してもよい。
【０１０９】
本発明で使用され得るタンパク質キナーゼ阻害剤は、クリゾチニブ、ゲフィチニブ、イマチニブ、エルロチニブ、パゾパニブ、スニチニブ、ソラフェニブ、ダサテニブ、ラパチニブ、レスタウルチニブ、ニロチニブ、ルクソリチニブ、タンズチニブ、バンデタニブ、セジラニブ、セリシクリブ、ミドスタウリン、Ｌ−２１６４９、ＡＢＴ−８６９、ドビチニブ及びＰＫＣ４１２、チピファルニブ、ＡＦＧ２０６、ＡＦＧ２１０、及びＡＨＬ１９６、ＡＵＺ４５４、及びＡＴＨ６８６、ＳＵ５４１６、及びＳＵ６６６８を含む。
【０１１０】
本明細書中に開示される方法に係る急性骨髄性白血病以外の悪性血液疾患の治療に使用され得るＢＡＭの非限定的な例は、プロテアーゼ阻害剤（例えばボルテゾミブ、カルフィルゾミブ、マリゾミブ）、ｍＴＯＲ阻害剤（例えばラパマイシン）、白血球で主に発現するタンパク質キナーゼの阻害剤（例えばフォスタマチニブ）及びエピジェネティック調節薬（エピジェネッティックコードの書き込み及び／又は消去に作用する化合物、例えばボリノスタット）が挙げられる。
【０１１１】
６．８．２  炎症性症状及び自己免疫疾患
本発明の分子及び化合物は、炎症性症状；自己免疫疾患及び障害に関連する疾患又は症状の治療又は予防；及び／又はそのような炎症性症状及び／又は自己免疫疾患の緩和にも使用されてもよい。  本発明の化合物及び方法を用いて治療され得る症状の非限定的な例は、急性散在性脳脊髄炎（ＡＤＥＭ）、アディソン症、無ガンマグロブリン血症、円形脱毛症、筋萎縮性側索硬化症、強直性脊椎炎、抗リン脂質症候群、抗シンセターゼ症候群、アトピー性アレルギー、アトピー性皮膚炎、自己免疫性再生不良性貧血、自己免疫性心筋症、自己免疫性腸疾患、自己免疫性溶血性貧血、自己免疫性肝炎、自己免疫性内耳疾患、自己免疫性リンパ増殖症候群、自己免疫性末梢神経障害、自己免疫性膵炎、自己免疫性多内分泌腺症候群、自己免疫性プロゲステロン皮膚炎、自己免疫性血小板減少性紫斑病、自己免疫性蕁麻疹、自己免疫性ブドウ膜炎、バロー病／バロー同心円性硬化症、ベーチェット病、ベルジェ病、ビッカースタッフ型脳炎、ブラウ症候群、水疱性類天疱瘡、癌、キャッスルマン病、セリアック病、シャーガス病、慢性炎症性脱髄性多発ニューロパチー、慢性再発性多巣性骨髄炎、慢性閉塞性肺疾患、チャーグ・ストラウス症候群、瘢痕性類天疱瘡、コーガン症候群、寒冷凝集素症、補体成分２欠乏症、接触性皮膚炎、頭部動脈炎、ＣＲＥＳＴ症候群、クローン病（２種類の特発性炎症性腸疾患「ＩＢＤ」の１つ）、クッシング症候群、皮膚白血球破砕性血管炎、デゴス病、ダーカム病、ヘルペス状皮膚炎、皮膚筋炎、１型糖尿病、汎発性皮膚全身性硬化症、ドレスラー症候群、薬物誘導性ループス、円板状エリテマトーデス、湿疹、子宮内膜症、腱付着部炎付随関節炎、好酸球性筋膜炎、好酸球性胃腸炎、後天性表皮水疱症、結節性紅斑、胎児赤芽球症、本態性混合型クリオグロブリン血症、エヴァンス症候群、進行性骨化性線維異形成症、線維性肺胞炎（又は特発性肺線維症）、胃炎、胃腸性類天疱瘡、巨細胞性動脈炎、糸球体腎炎、グッドパスチャー症候群、グレーブス病、ギラン・バレー症候群（ＧＢＳ）、橋本脳症、橋本甲状腺炎、ヘノッホ・シェーンライン紫斑病、妊娠性類天疱瘡としても知られている妊娠性疱疹、化膿性汗腺炎、ヒューズ・ストーヴィン症候群、低ガンマグロブリン血症、特発性炎症性脱髄疾患、特発性肺線維症、特発性血小板減少性紫斑病（自己免疫性血小板減少性紫斑病を参照）、ＩｇＡネフロパシー、封入体筋炎、慢性炎症性脱髄性多発ニューロパチー、間質性膀胱炎、若年性関節リウマチとしても知られている若年性特発性関節炎、川崎病、ランバート・イートン筋無力症候群、白血球破壊性血管炎、扁平苔癬、硬化性苔癬、線状ＩｇＡ病（ＬＡＤ）、ルー・ゲーリック病（また筋萎縮性側索硬化症）、自己免疫性肝炎としても知られているルポイド肝炎、エリテマトーデス、マジード症候群、メニエール病、顕微鏡的多発血管炎、ミラー・フィッシャー症候群、ギラン・バレー症候群、混合型結合組織疾患、モルフェア、急性痘瘡状苔癬状粃糠疹としても知られているムッハ・ハーベルマン病、多発性硬化症、重症筋無力症、筋炎、ナルコレプシー、視神経脊髄炎（またデビック病）、神経性筋強直症、眼部瘢痕性類天疱瘡、眼球クローヌス・ミオクローヌス症候群、オード甲状腺���、回帰性リウマチ、ＰＡＮＤＡＳ（連鎖球菌に付随する小児自己免疫神経精神病学的障害）、傍腫瘍性小脳変性症、発作性夜間血色素尿症（ＰＮＨ）、ペイリーロンベルグ病、パーソネージ・ターナー症候群、毛様体扁平部炎、尋常性天疱瘡、悪性貧血、静脈周囲脳脊髄炎、ＰＯＥＭＳ症候群、結節性多発性動脈炎、リウマチ性多発筋痛症、多発性筋炎、原発性胆汁性肝硬変、原発性硬化性胆管炎、進行性炎症性神経障害、乾癬、乾癬性関節炎、壊疽性膿皮症、赤芽球癆、ラスムッセン脳炎、レイノー現象、再発性多発性軟骨炎、ライター症候群、下肢静止不能症候群、後腹膜線維症、関節リウマチ、リウマチ熱、サルコイドーシス、統合失調症、ＡＰＳの別の形態であるシュミット症候群、シュニッツラー症候群、強膜炎、強皮症、血清病、シェーグレン症候群、脊椎関節症、スチル病、若年性関節リウマチ、全身硬直症候群、亜急性細菌性心内膜炎（ＳＢＥ）、スザック症候群、スイート症候群、シデナム舞踏病、ＰＡＮＤＡＳ、交感性眼炎、全身性エリテマトーデス、エリテマトーデス、高安動脈炎、側頭動脈炎（また「巨細胞性動脈炎」としても知られている）、血小板減少症、トロサ・ハント症候群、横断性脊髄炎、潰瘍性大腸炎（２種の特発性炎症性腸疾患「ＩＢＤ」のうちの１つ）、混合型結合組織疾患とは異なる未分化結合組織疾患、未分化脊椎関節症、蕁麻疹様血管炎、血管炎、白斑、及びウェゲナー肉芽腫症を含む。
【０１１２】
そのような症状の治療に使用され得るＢＡＭの非限定的な例は、ＣＯＸ−２阻害剤、プレドニゾン、パゾパニブ、ファモチジン、ダルファムプリジン、ペグロチカーゼ、エソメプラゾール、アスピリン、セレコキシブ、ジクロフェナク、バルデコキシブ、ロフェコキシブ、ジフルニザール、エトドラク、フェノプロフェン、フルルビプロフェン、イブプロフェン、インドメタシン、ケトプロフェン、ケトロラク、メフェナミン酸、メロキシカム、ナブメトン、ナプロキセン、オキサプロジン、ピロキシカム、スリンダクトルメチン、ランソプラゾール、メクロフェナマート、トリアムシノロン、メチルプレドニソロン、ベタメタソン、ブデソニド、プレドニソロン、ハイドロコルチソン、デキサメタソン及びコルチソンを含む。
【０１１３】
６．８．３  原虫症及び感染性症状
本発明の分子及び化合物は、原生動物の感染に関連する疾患及び症状、又は他の感染性症状の治療又は予防、及び／又はそれらに関連する兆候の改善にも使用されてもよい。本発明の化合物及び方法を用いて治療され得るそのような疾患及び症状の非限定的な例は、アシネトバクター感染、放線菌症、アフリカ睡眠病（アフリカトリパノソーマ症）、ＡＩＤＳ（後天性免疫不全症候群）、アシネトバクター感染症、放線菌症、アデノウイルス感染症、アフリカ睡眠病（アフリカトリパノソーマ症）、ＡＩＤＳ、アメーバ症、アナプラズマ症、炭疽菌、アルカノバクテリウム・ヘモリティクム（Ａｒｃａｎｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ  ｈａｅｍｏｌｙｔｉｃｕｍ）感染症、アルゼンチン出血熱、回虫症、アスペルギルス症、アストロウイルス感染症、バベシア症、バチルス・セレウス感染症、細菌性肺炎、細菌性腟症（ＢＶ）、バクテロイデス感染症、バランチジウム症、ベイリスアスカリス感染症、ＢＫウイルス感染症、黒色砂毛症、ブラストシスチス・ホミニス（Ｂｌａｓｔｏｃｙｓｔｉｓ  ｈｏｍｉｎｉｓ）感染症、ブラストミセス症、ボリビア出血熱、ボレリア感染症、ボツリヌス症、ブラジル出血熱、ブルセラ症、バークホルデリア感染症、カリシウイルス感染症、カンピロバクター症、カンジダ症（モニリア症；鵞口瘡）、ネコひっかき病、蜂巣炎、シャーガス病、軟性下疳、水疱、クラミジア感染症、クラミジア・ニューモニエ感染症、コレラ、クロモブラストミコーシス、肝吸虫症、クロストリジウム・ディフィシル感染症、コクシジオイデス真菌症、コロラドダニ熱、感冒、クロイツフェルト・ヤコブ病、クリミア・コンゴ出血熱、クリプトコッカス症、クリプトスポリジウム症、皮膚幼虫移行症（ＣＬＭ）、シクロスポラ症、嚢虫症、サイトメガロウイルス感染症、デング熱、二核アメーバ症、ジフテリア、裂頭条虫症、メジナ虫症、エボラ出血熱、エキノコックス症、エールリヒア症、ぎょう虫症（ぎょう虫感染）、エンテロコッカス感染症、エンテロウイルス感染症、発疹チフス、伝染性紅斑、突発性発疹、肥大吸虫症、肝蛭症、致死性家族性不眠症（ＦＦＩ）、フィラリア症、食中毒、自由生活性アメーバ性感染症、フゾバクテリウム感染症、ガス壊疽（クロストリジウム性筋壊死）、ゲオトリクム症、ゲルストマン・シュトロイスラー・シャインカー症候群（ＧＳＳ）、ジアルジア鞭毛虫症、鼻疽、顎口虫症、淋病、鼠径肉芽腫（ドノヴァン症）、Ａ型連鎖球菌感染症、Ｂ型連鎖球菌感染症、インフルエンザ菌感染症、手足口病（ＨＦＭＤ）、ハンタウイルス肺症候群（ＨＰＳ）、ヘリコバクター・ピロリ感染症、溶血性尿毒症症候群（ＨＵＳ）、腎症候性出血熱（ＨＦＲＳ）、Ａ型肝炎、Ｂ型肝炎、Ｃ型肝炎、Ｄ型肝炎、またはＥ型肝炎、単純ヘルペス、ヒストプラスマ症、鉤虫感染症、ヒトボカウイルス感染症、ヒトエーリキア・エウィンギ症（Ｈｈｍａｎ  ｅｗｉｎｇｉｉ  ｅｈｒｌｉｃｈｉｏｓｉｓ）、ヒト顆粒球アナプラズマ症（ｈｕｍａｎ  ｇｒａｎｕｌｏｃｙｔｉｃ  ａｎａｐｌａｓｍｏｓｉｓ）（ＨＧＡ）、ヒトメタニューモウイルス感染症、ヒト単球エールリヒア症、ヒトパピローマウイルス（ＨＰＶ）感染症、ヒトパラインフルエンザウイルス感染症、膜様条虫症、エプスタイン−バーウイルス伝染性単核球症（Ｍｏｎｏ）、インフルエンザ（ｆｌｕ）、イソスポラ症、川崎病、角膜炎、キンゲラ・キンゲ（Ｋｉｎｇｅｌｌａ  ｋｉｎｇａｅ）感染症、クールー、ラッサ熱、レジオネラ症、リーシュマニア症、らい病、レプトスピラ症、リステリア症、ライム病、リンパ管フィラリア、リンパ球性脈絡髄膜炎、マラリア、マールブルグ出血熱（ＭＨＦ）、麻疹、類鼻疽（ウィットモア病）、髄膜炎、髄膜炎菌病、横川吸虫症、微胞子虫症、微胞子虫類、伝染性軟属腫（ＭＣ）、おたふくかぜ、発疹熱、マイコプラズマ肺炎、菌腫、ハエウジ病、新生児結膜炎（新生児眼炎）、（Ｎｅｗ）変異クロイツフェルド−ヤコブ病（ｖＣＪＤ、ｎｖＣＪＤ）、ノカルジア症、オンコセルカ症（河川盲目症）、パラコクシジオイドミコーシス（南アメリカブラストミセス症）、肺吸虫症、パスツレラ症、骨盤腹膜炎（ＰＩＤ）、百日咳（Ｐｅｒｔｕｓｓｉｓ）（百日咳（Ｗｈｏｏｐｉｎｇ  ｃｏｕｇｈ））、ペスト、肺炎球菌感染症、ニューモシスチス肺炎（ＰＣＰ）、肺炎、ポリオ、プレボテラ感染、原発性アメーバ性髄膜脳炎（ＰＡＭ）、進行性多中心性白質脳症、オウム病、Ｑ熱、狂犬病、鼠咬熱、呼吸器合胞体ウイルス感染、リノスポリジウム症、ライノウイルス感染症、リケッチア感染症、リケッチア痘、リフトバレー熱（ＲＶＦ）、ロッキー山紅斑熱（ＲＭＳＦ）、ロタウイルス感染症、風疹、サルモネラ症、ＳＡＲＳ（重症急性呼吸器症候群）、疥癬、住血吸虫症、敗血症、細菌性赤痢、帯状疱疹（帯状ヘルペス）、天然痘、スポロトリクス症、ブドウ球菌食中毒、ブドウ球菌感染症、糞線虫症、梅毒、条虫症、破傷風（開口障害）、須毛白癬（毛瘡）、頭部白癬（Ｔｉｎｅａ  ｃａｐｉｔｉｓ）（頭部白癬（Ｒｉｎｇｗｏｒｍ  ｏｆ  ｔｈｅ  Ｓｃａｌｐ））、体部白癬（Ｔｉｎｅａ  ｃｏｒｐｏｒｉｓ）（体部白癬（Ｒｉｎｇｗｏｒｍ  ｏｆ  ｔｈｅ  Ｂｏｄｙ））、股部白癬（たむし）、手白癬（Ｔｉｎｅａ  ｍａｎｕｕｍ）（手白癬（Ｒｉｎｇｗｏｒｍ  ｏｆ  ｔｈｅ  Ｈａｎｄ））、黒癬、足白癬（汗疱状白癬）、爪白癬（爪真菌症）、黒なまず（癜風）、トキソカラ症（眼幼虫移行症（ＯＬＭ））、トキソカラ症（内臓幼虫移行症（ＶＬＭ））、トキソプラスマ症、旋毛虫症、トリコモナス症、鞭虫症（鞭虫病感染症）、結核、ツラレミア、ウレアプラズマ・ウレアリチカム（Ｕｒｅａｐｌａｓｍａ  ｕｒｅａｌｙｔｉｃｕｍ）感染症、ベネズエラウマ脳炎、ベネズエラ出血熱、ウイルス性肺炎、西ナイル熱、白色砂毛（Ｔｉｎｅａ  ｂｌａｎｃａ）、エルシニア・シュードツベルクローシス、エルジニア症、黄熱病、及び接合真菌症を含む。
【０１１４】
そのような症状の治療に使用され得るＢＡＭの非限定的な例は、クロロキン、メフロキン、プリマキン、塩酸プログアニル、アトバクオンと塩酸プログアニル、ピリメタミン、スルファドキシン、キニン、キノリン、ドキシサイクリン、クリンダマイシン、アルテスナート、ジロキサニド、メトロニダゾール、チニダゾール、塩酸メパクリン、アンフォテリシン、ペンタミジン、ピリメタミン、スルファジアジン、アジスロマイシン、アトバクオン、トリメトプリム−スルファメトキサゾール、トリメトプリム、ダプソン、アトバクオン、イセチオン酸ペンタミジン、アモジアキン、クロログアニド、エフロルニチン、ハイドロキシクロロキン、ヨードキノル、アンチモン酸メグルミン、メラルソプロール、ニフルチモックス、パロモマイシン、スチボグルコン酸ナトリウム、スラミン、及びトリパルサミドを含む。
【０１１５】
６．８．４  ＨＩＶ／ＡＩＤＳ
白血球、特にマクロファージがＨＩＶ−１感染に重要な役割を果たすことは周知である。それらはＨＩＶ−１に最初に感染する細胞で、感染者内でＨＩＶ−１の受容体を提示している。それらは、脳等の他の組織にウイルスを拡散する。更に、当該ウイルスはマクロファージ内に保持されて、中和抗体や他の免疫応答から隠れ続ける。
【０１１６】
上記を踏まえて、マクロファージを選択的に標的とし、細胞内への輸送を促進する、本発明の輸送部分は、細胞内ＨＩＶ薬剤の担体部分として理想的に適している。
【０１１７】
従って、本発明の輸送部分にコンジュゲートされ得るＢＡＭは、特に、以下のものであってもよい。
・ＮＲＴＩ（ヌクレオシド又はヌクレオチドリバーストランスフェラーゼ阻害剤）、例えばジドブジン、ジダノシン、スタブジン、ラミブジン、エムトリシタビン、アバカビル及びテノフォビル、アプリシタビンエルブシタビン、ＯＢＰ−６０１、アムドキソビル、エピビル、レトロビル、スタブジン、ザルシタビン、ＡＺＴ；、スタブジン、４−Ｅｄ４Ｔ、アムドキソビル、デキセルブシタビン、ＤＯＴ（ジオキソランチミジン）、フォサルブジン、ＧＳ−９１３１、ＧＳ−９１４８、ＩＤＸ１２８９９、ＩＤＸ１２９８９、キノロン、ラシビル、チオビル、ＴＳＡＯ−Ｔ誘導体；
・ＮＮＲＴＩ（非ヌクレオシドリバーストランスフェラーゼ阻害剤）、例えばネビラピン、デラビラドム、エファビレンズ、エトラビン及びリルピビ（ピ）ン、エトラビリン、ＨＢＹ０９７、ＩＤＸ８９９、Ｖ０２６０４８、ＲＤＥＡ８０６、ＲＤＥＡ４２７、ＲＤＥＡ６４０、ＵＫ−４３５０６１；又は
・プロテアーゼ阻害剤、例えばリトナビル、チプラナビル、サキナビル、ネルフィナビル、インジナビル、アムプレナビル、フォサムプレナビル、アタザナビル、ロピナビル、ダルナビル（ＴＭＣ−１１４）、ラシナビル及びブレカナビル（ＶＸ−３８５）、ＧＲＬ−０２０３１、ＳＰＩ−２５６。
【０１１８】
６．８．５  抗原生動物剤／リーシュマニア症
リーシュマニアは、キネトプラスチダ（Ｋｉｎｅｔｏｐｌａｓｔｉｄａ）及びトリパノソマチダエ（Ｔｒｙｐａｎｏｓｏｍａｔｉｄａｅ）科に属する原生動物である。リーシュマニア症は、サシチョウバエにより媒介される生物媒介性の疾患である。ヒトへの感染は、哺乳類に感染する約３０種の当該原生動物により引き起こされる。これらは、３種のＬ．  ｄｏｎｏｖａｎｉコンプレックス（Ｌ．  ｄｏｎｏｖａｎｉ、Ｌ．  ｉｎｆａｎｔｕｍ、及びＬ．  ｃｈａｇａｓｉ）；３つの主要な種を含むＬ．  ｍｅｘｉｃａｎａコンプレックス（Ｌ．  ｍｅｘｉｃａｎａ、Ｌ．  ａｍａｚｏｎｅｎｓｉｓ、及びＬ．  ｖｅｎｅｚｕｅｌｅｎｓｉｓ）；Ｌ．  ｔｒｏｐｉｃａ；Ｌ．  ｍａｊｏｒ；Ｌ．  ａｅｔｈｉｏｐｉｃａ；及び４つの主要な種を含むＶｉａｎｎｉａ亜属（Ｌ．（Ｖ．）  ｂｒａｚｉｌｉｅｎｓｉｓ、Ｌ．（Ｖ．）  ｇｕｙａｎｅｎｓｉｓ、Ｌ．（Ｖ．）  ｐａｎａｍｅｎｓｉｓ、及びＬ．（Ｖ．）  ｐｅｒｕｖｉａｎａ）を含む。異なる種は形態的には区別し難いが、それらはアイソザイム解析、分子的手法、又はモノクローナル抗体を用いて区別できる。
【０１１９】
リーシュマニア症は、内臓リーシュマニア症、皮膚リーシュマニア症（局所性又はびまん性）、及び粘膜皮膚リーシュマニア症を含む、様々な種類の疾患を引き起こす。斯かる臨床的な特徴の広範さは、リーシュマニア種の多様性及び宿主の免疫応答の両方によるものである。
【０１２０】
ヒト及び他の哺乳類において、寄生生物は、その媒介節足動物により、有鞭毛型、細胞外プロマスチゴートとして、皮膚を通じて接種される。その哺乳類宿主中で、リーシュマニアプロマスチゴートは、それらがマクロファージによって貪食されるまで、補体誘導性の溶解を免れなければならない。そして、リーシュマニアプロマスチゴートは、より耐性のあるアマスチゴート段階に分化し、単球／マクロファージ系統の造血細胞に感染する偏性の細胞内病原体を維持する。宿主の細胞内に隔離されることは、リーシュマニアが、それに対する多くの免疫応答を回避することを可能とする。しかしながら、その宿主細胞の抗微生物活性から生き残り、効果的な免疫応答の活性化を阻害するために、様々なリーシュマニア種は、例えばタンパク質又は遺伝子発現レベルでの免疫学的監視及びマクロファージ活性化等の通常のマクロファージ機能を破壊する複雑なメカニズムを進化させてきた。
【０１２１】
宿主のマクロファージの殺微生物活性の抑制に加えて、リーシュマニアは、宿主細胞が免疫系の他の成分に対して寄生生物の抗原を提示する能力を阻害する。従って、リーシュマニアは、多くのサイトカイン、特に免疫応答に関与するもの（ＩＬ−１及び腫瘍壊死因子アルファ（ＴＮＦ−α））、又はＴ−リンパ球活性化に関与するもの（ＩＬ−１２）の生産を阻害することにより、効果的な免疫応答の活性化を阻害する。リーシュマニアがマクロファージの抗微生物機構を遮断するこの強力な能力は、当該寄生生物が最初の自然免疫応答を回避し、増殖するのに安全な環境を形成することを可能とする。更に、宿主マクロファージ内の隠れ場所は、それが治療薬物の到達を阻害するため、効果的な化学療法を妨げる主要な原因となる。
【０１２２】
抗リーシュマニア活性を亢進し、医薬の毒性を減少させるため、リポソーム薬物送達系が、単核食細胞系を標的とするように開発された。故に、例えば、リポソームアンフォテリシンＢは、内臓リーシュマニア症の治療に使用されている。
【０１２３】
しかしながら、５０年以上前に開発された５価アンチモン（Ｓｂ）は、効率が悪く副作用を有するにもかかわらず、現在もリーシュマニア症の第一線の治療法である。従って、マクロファージ宿主細胞を選択的に標的とすることにより抗リーシュマニア活性を増大させ毒性を減少させる効果的な抗リーシュマニア剤の実質的需要が存在する。骨髄細胞を特異的に標的とする能力によって、本発明の化合物は、抗リーシュマニア活性を有する薬剤を感染したマクロファージ宿主細胞に送達するのに使用され得る。
【０１２４】
従って、本発明の好ましい態様において、本発明のＢＡＭ−コンジュゲートを形成するためにコンジュゲートされ得るＢＡＭは、抗原生動物活性を有する薬剤であり、限定されないが、クロロキン、メフロキン、プリマキン、塩酸プログアニル、アトバクオンと塩酸プログアニル、ピリメタミン、スルファドキシン、キニン、キノリン、ドキシサイクリン、クリンダマイシン、アルテスナート、ジロキサニド、メトロニダゾール、チニダゾール、塩酸メパクリン、アンフォテリシン、ペンタミジン、ピリメタミン、スルファジアジン、アジスロマイシン、アトバクオン、トリメトプリム−スルファメトキサゾール、トリメトプリム、ダプソン、アトバクオン、イセチオン酸ペンタミジン、アモジアキン、クロログアニド、エフロルニチン、ハイドロキシクロロキン、ヨードキノル、アンチモン酸メグルミン、メラルソプロール、ニフルチモックス、パロモマイシン、スチボグルコン酸ナトリウム、スラミン、及びトリパルサミドを含む。
【０１２５】
６．９  医薬組成物及びその投与
本発明は、ＢＡＭ−コンジュゲート等の本発明の分子及び化合物を含有する医薬組成物にも関する。そのような組成物は、治療有効量の前記化合物及び医薬として許容される担体又は賦形剤を含有する。そのような担体又は賦形剤は、限定されないが、生理食塩水、緩衝生理食塩水、デキストロース、水、グリセロール、エタノール、及び／又はそれらの組み合わせである。また、当該医薬組成物は、治療される所定の疾患の治療のための追加の治療剤を含有してもよい。当該製剤は、投与様式に沿うように作製される。一般に、ポリペプチド投与方法は当業者に周知であり、本発明のコンジュゲートの投与に適用できる。
【０１２６】
投与は、分子を最終的に血液と接触させるように導入するのに通常使用される任意の経路により行われる。本発明の文脈においてそのようなコンジュゲートを患者に投与する適切な方法は、経口及び非経口経路を含み利用可能である。特定の組成物を投与するのに２つ以上の経路が使用されてもよいが、特定の経路が、もう一つの経路よりもより迅速かつより効果的な作用又は反応を提供できる。
【０１２７】
好ましくは、本発明のＢＡＭ−コンジュゲートは、非経口の投与形式により、特に静脈内、腹腔内、筋肉内、皮膚内、皮下、髄腔内、眼内、球後、肺内又は関節内投与により投与される。そのような投与経路及び適切な製剤は、一般に当業者が承知している。非経口投与に適した製剤は、水性及び非水性、等張滅菌注射溶液を含み、抗酸化剤、緩衝剤、静菌剤、及び所望の患者の血液と等張な製剤を調製する溶質、及び懸濁剤、可溶化剤、増粘剤、安定化剤、保存料を含み得る、水性及び非水性滅菌懸濁物を含有し得る。担体ポリペプチド−標的ポリペプチドコンジュゲートも、リポソームを用いて投与され得る。
【０１２８】
本発明の分子及び化合物は、単独で、又は他の適切な成分と組み合わせて、吸引により投与されるエアロゾル製剤（即ち「霧状」になり得る）として調製される場合もある。エアロゾル製剤は、ジクロロジフルオロメタン、プロパン、窒素等の、与圧された許容される推進剤中に置かれてもよい。
【０１２９】
好ましい態様において、本発明の医薬として許容される組成物は、投与前に再構築される凍結乾燥形態で提供される。医薬組成物の構築のための緩衝剤及び溶液は、投与のための本発明の水性組成物を生産するための医薬製剤と同様に提供されてもよい。
【０１３０】
「医薬として又は薬学的に許容される」という語句は、動物又はヒトに投与されたとき、副作用、アレルギー又は他の有害な反応を生じない分子及び組成物を意味する。本明細書中で使用されるとき、「医薬として許容される担体」は、任意の及び全ての溶媒、分散媒体、抗細菌及び抗真菌剤、等張及び吸収遅延剤等を含む。
【０１３１】
医薬として許容される担体は、投与される具体的な組成物により、又は当該組成物を投与するのに使用される具体的な方法により、部分的に規定される。従って、本発明の医薬組成物の様々な適切な製剤が存在する。当該技術分野で周知の医薬として許容される担体及び本発明の１つ以上のコンジュゲートは、周知の方法により医薬組成物に製剤化され得る（例えばＲｅｍｉｎｇｔｏｎ：  Ｔｈｅ  Ｓｃｉｅｎｃｅ  ａｎｄ  Ｐｒａｃｔｉｃｅ  ｏｆ  Ｐｈａｒｍａｃｙ，  ２１ｓｔ  ｅｄｉｔｉｏｎ，  Ａ．  Ｒ．  Ｇｅｎｎａｒｏ，  Ｅｄ．，  Ｍａｃｋ  Ｐｕｂｌｉｓｈｉｎｇ  Ｃｏｍｐａｎｙ  （２００５）；  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｆｏｒｍｕｌａｔｉｏｎ  Ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔ  ｏｆ  Ｐｅｐｔｉｄｅｓ  ａｎｄ  Ｐｒｏｔｅｉｎｓ，  Ｓ．  Ｆｒｏｋｊａｅｒ  ａｎｄ  Ｌ．  Ｈｏｖｇａａｒｄ，  Ｅｄｓ．，  Ｔａｙｌｏｒ  ＆  Ｆｒａｎｃｉｓ  （２０００）；及びＨａｎｄｂｏｏｋ  ｏｆ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｅｘｃｉｐｉｅｎｔｓ，  ３ｒｄ  ｅｄｉｔｉｏｎ，  Ａ．  Ｋｉｂｂｅ，  Ｅｄ．，  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｐｒｅｓｓ  （２０００）を参照されたい）。
【０１３２】
本発明の１つ以上のＢＡＭ−コンジュゲートを含有する医薬組成物は、有効性、組織代謝を確認するため、及び用量を推定するために、当該技術分野で周知の方法に従い、１つ以上の適切なインビトロ及び／又はインビボの疾患の動物モデルにおいて任意で試験される。従って、本発明の組成物の適切な用量は、対象の年齢、健康状態及び体重、存在する場合、並行して行う治療の種類、治療の頻度、及び所望の効果の質に依存し得る。しかしながら、当該用量は、過剰な実験を要さずに、当業者により、個々の対照に合わせて決定され得る。治療剤の合計の用量は、複数又は単発用量で投与され得る。幾つかの態様において、前記組成物は、疾患に対する、又はその他の症状に対する、他の治療剤と組み合わせて投与される。
【０１３３】
本発明の文脈において、患者に投与される用量は、適用に依存して、一定期間患者に有益な治療効果をもたらすのに、又は例えば病原体の感染を阻害し、疾患の兆候を減少又は予防し、又は他の適切な活性をもたらすのに充分な用量である。当該用量は、具体的な組成物／製剤の効果、及び採用されるＢＡＭポリペプチドコンジュゲートの活性、安定性又は血清半減期、及び患者の体調、治療される患者の体重又は表面積により規定される。用量のサイズも、具体的な患者における具体的な組成物／製剤等の投与に伴う、何らかの有害な副作用の存在、性質及び範囲によっても規定される。
【０１３４】
本発明は、以下の事項にも関する。
【０１３５】
１．Ｌ及びＤアミノ酸を含む以下：
Ａｒｇ１−（ＳＰＡ）−Ａｒｇ５−（ＳＰＢ）−Ｘ−（ＳＰＣ）−Ａｒｇ９−（ＬＤ１０）ｎ−（ＸＤ１１）ｍ；
Ａｒｇ１−（ＳＰＣ）−Ｘ−（ＳＰＢ）−Ａｒｇ５−（ＳＰＡ）−Ａｒｇ９−（ＬＤ１０）ｎ−（ＸＤ１１）ｍ；
（ＸＤ−２）ｍ−（ＬＤ  −１）ｎ−Ａｒｇ１−（ＳＰＡ）  Ａｒｇ５−（ＳＰＢ）−Ｘ−（ＳＰＣ）−Ａｒｇ９；又は
（ＸＤ−２）ｍ−（ＬＤ  −１）ｎ−Ａｒｇ１−（ＳＰＣ）−Ｘ−（ＳＰＢ）−Ａｒｇ５−（ＳＰＡ）−Ａｒｇ９；
の共通構造の１つを含み、又はこれからなる分子又は化合物。ここで、ＬＤ１０又はＬＤ−１は、Ｄ−アルギニン、Ｄ−リシン；Ｌ−アルギニン又はＬ−リシン以外のＬ−又はＤ−アミノ酸を表し、ｎは０〜１０であり；ＸＤ１１又はＸＤ−２はＤ−アルギニン又はＤ−リシン以外のＤ−アミノ酸であり、ｍは０又は１であり；
（ａ）Ａｒｇ１、Ａｒｇ５、及びＡｒｇ９はＬ−アルギニンを表し；ＸはＬ−リシン又はＬ−アルギニンを表し、又は
（ｂ）Ａｒｇ１、Ａｒｇ５、及びＡｒｇ９はＤ−アルギニンを表し；ＸはＤ−リシン又はＤ−アルギニンを表し、
（ＳＰＡ）は化学リンカーであり、
（ａ）３つのアミノ酸残基のペプチド鎖からなり、各残基は、Ｄ−アルギニン、Ｄ−リシン、Ｌ−アルギニン又はＬ−リシン以外の任意のアミノ酸残基から独立して選択されてもよく；又は
（ｂ）隣接するアミノ酸残基間の間隔は１２．９＋１．５Åであり；
（ＳＰｃ）は化学リンカーであり、
（ａ）１つのアミノ酸残基からなり、当該残基は、Ｄ−アルギニン、Ｄ−リシン、Ｌ−アルギニン又はＬ−リシン以外の任意のアミノ酸残基であり；又は
（ｂ）当該分子が伸長したコンフォーメーションをとるとき隣接するアミノ酸残基との間隔は７．５＋１．５Åであり；
（ＳＰＢ）−Ｘ−（ＳＰＣ）又はその逆の（ＳＰＣ）−Ｘ−（ＳＰＢ）は、化学リンカーであり、
（ａ）ＳＰＢ及びＳＰＣがそれぞれ独立してＤ−アルギニン、Ｄ−リシン、Ｌ−アルギニン又はＬ−リシン以外のアミノ酸残基から選択され得る単一のアミノ酸残基を表し；又は
（ｂ）当該構築物が伸長したコンフォーメーションをとるとき、隣接するアミノ酸残基Ａｒｇ１及びＡｒｇ５又はＡｒｇ５及びＡｒｇ９の間隔が１２．９＋１．５Åである。
【０１３６】
２．（ＳＰＡ）は、隣接するアミノ酸残基を１２．９＋１．５  Åの間隔で隔離し；
（ＳＰＣ）は、隣接するアミノ酸残基を７．５＋１．５  Åの間隔で隔離する化学リンカーを表し；
（ＳＰＢ）−Ｘ−（ＳＰＣ）又はその反対の（ＳＰＣ）−Ｘ−（ＳＰＢ）は、は、隣接するアミノ酸残基Ａｒｇ１  及びＡｒｇ５又はＡｒｇ５及びＡｒｇ９を１２．９＋１．５  Åの間隔で隔離する
項目１に記載の分子又は化合物。
【０１３７】
３．前記１つ以上の化学リンカーが、ベータ−ペプチド、糖−アミノ酸ベース足場、ベータ−ヘアピンペプチド模倣物、アルファ−ヘリックス模倣物又はシクロチドである、項目１又は２のいずれか１項に記載の分子又は化合物。
【０１３８】
４．  （ＳＰＡ）が、Ｄ−アルギニン、Ｄ−リシン、Ｌ−アルギニン又はＬ−リシン以外の任意のアミノ酸残基からそれぞれ独立して選択される３つのアミノ酸残基からなるペプチド鎖を表し；（ＳＰＢ）及び（ＳＰＣ）が、Ｄ−アルギニン、Ｄ−リシン、Ｌ−アルギニン又はＬ−リシン以外の任意のアミノ酸残基から独立して選択され得る１つのアミノ酸残基を表す、項目１に記載の分子又は化合物。
【０１３９】
５．（ＳＰＡ）、（ＳＰＢ）及び（ＳＰＣ）が共に３つ以上のアラニン残基を含まない項目１又は４のいずれか１項に記載の分子又は化合物。
【０１４０】
６．（ＳＰＡ）、（ＳＰＢ）及び（ＳＰＣ）が共にプロリン残基を含まない項目１、４又は５のいずれか１項に記載の分子又は化合物。
【０１４１】
７．（ＳＰＡ）、（ＳＰＢ）及び（ＳＰＣ）が共にＰｈｅ、Ｔｒｐ、Ｔｙｒ、Ｖａｌ、Ｍｅｔ、Ｉｌｅ、及びＬｅｕから選択される１つ以上のアミノ酸を含む、項目１及び４〜６のいずれか１項に記載の分子又は化合物。
【０１４２】
８．（ＳＰＢ）がＤ−アミノ酸を表す、項目１及び４〜７のいずれか１項に記載の分子又は化合物。
【０１４３】
９．ＬＤ１０がＬ−又はＤ−ヒスチジンを表す、項目１〜８のいずれか１項に記載の分子又は化合物。
【０１４４】
１０．ＸＤ１１がＤ−ヒスチジンを表す、項目１〜９のいずれか１項に記載の分子又は化合物。
【０１４５】
１１．ｍが１である、項目１〜１０のいずれか１項に記載の分子又は化合物。
【０１４６】
１２．ｎが０である、項目１〜１１のいずれか１項に記載の分子又は化合物。
【０１４７】
１３．以下の配列：
ＲＳＴｑＲＹＲＶＲｈ  （配列番号：１）；
ＲＹＦｖＲＩＫＹＲｈ  （配列番号：２）；
ＲＹＦｖＲＩＫＡＲｈ  （配列番号：３）；
ＲＡＡｖＲＡＫＹＲｈ  （配列番号：４）；
ＲＡＡｖＲＩＫＹＲｈ  （配列番号：５）；
ＲＳＴｑＲＹＲＶＲｈ  （配列番号：６）；
ＲＳＴｑＲＹＫＶＲｈ  （配列番号：７）；
ＲＧＧｇＲＧＫＧＲｈ  （配列番号：８）；
ＲＨＨｈＲＨＫＨＲｈ  （配列番号：９）；
ＲＶＶｖＲＶＫＶＲｈ  （配列番号：１０）；
ＲＬＬｌＲＬＫＬＲｈ  （配列番号：１１）；
ＲＭＭｍＲＭＫＭＲｈ  （配列番号：１２）；
ＲＩＩｉＲＩＫＩＲｈ  （配列番号：１３）；
ＲＹＦＶＲｉＫＹＲｈ  （配列番号：２５）；
ＲＳＴｑＲＹＲＶＲ    （配列番号：２６）；
ＲＹＦｖＲＩＫＹＲ    （配列番号：１５）；
ＲＹＦｖＲＩＫＡＲ    （配列番号：２７）；
ＲＡＡｖＲＡＫＹＲ    （配列番号：２８）；
ＲＡＡｖＲＩＫＹＲ    （配列番号：２９）；
ＲＳＴｑＲＹＲＶＲ    （配列番号：３０）；
ＲＳＴｑＲＹＫＶＲ    （配列番号：３１）；
ＲＧＧｇＲＧＫＧＲ    （配列番号：３２）；
ＲＨＨｈＲＨＫＨＲ    （配列番号：３３）；
ＲＶＶｖＲＶＫＶＲ    （配列番号：３４）；
ＲＬＬｌＲＬＫＬＲ    （配列番号：３５）；
ＲＭＭｍＲＭＫＭＲ    （配列番号：３６）；
ＲＩＩｉＲＩＫＩＲ    （配列番号：３７）；又は
ＲＹＦＶＲｉＫＹＲ    （配列番号：１６）；
を有する、項目１又は４〜８のいずれか１項に記載の分子又は化合物。
【０１４８】
１４．更に生物活性部分（ＢＡＭ）がコンジュゲートした、項目１〜１３のいずれか１項に記載の分子又は化合物。
【０１４９】
１５．項目１４に記載のＢＡＭコンジュゲートであって、前記ＢＡＭが、以下の共通構造：
（ＶＩＩ）（ＢＡＭ）−（ＬＩＮＫ）−Ａｒｇ１−（ＳＰＡ）−Ａｒｇ５−（ＳＰＢ）−Ｘ−（ＳＰＣ）−Ａｒｇ９−（ＬＤ１０）ｎ−（ＸＤ１１）ｍ；
（ＩＩ）  （ＢＡＭ）−（ＬＩＮＫ）−Ａｒｇ１−（ＳＰＣ）−Ｘ−（ＳＰＢ）−Ａｒｇ５−（ＳＰＡ）−Ａｒｇ９−（ＬＤ１０）ｎ−（ＸＤ１１）ｍ；
（ＩＩＩ）  （ＸＤ−２）ｍ−（ＬＤ  −１）ｎ−Ａｒｇ１−（ＳＰＡ）−Ａｒｇ５−（ＳＰＢ）−Ｘ−（ＳＰＣ）−Ａｒｇ９−（ＬＩＮＫ）−（ＢＡＭ）；又は
（ＩＶ）  （ＸＤ−２）ｍ−（ＬＤ  −１）ｎ−Ａｒｇ１−（ＳＰＣ）−Ｘ−（ＳＰＢ）
−Ａｒｇ５−（ＳＰＡ）−Ａｒｇ９−（ＬＩＮＫ）−（ＢＡＭ）；
［式中、
（ａ）（ＢＡＭ）は生物活性部分を表す；
（ｂ）（ＬＩＮＫ）は任意のリンカー基を表す；
（ｃ）  ＬＤ１０又はＬＤ−１は、Ｄ−アルギニン、Ｄ−リシン；Ｌ−アルギニン又はＬ−リシン以外のＬ−又はＤ−アミノ酸のいずれかを表し、ｎは、０〜１０の数字である；
（ｄ）ＸＤ１１又はＸＤ−２は、Ｄ−アルギニン又はＤ−リシン以外のＤ−アミノ酸のいずれかを表し、ｍは０又は１の数字である；
（ｅ）（ｉ）Ａｒｇ１、Ａｒｇ５、及びＡｒｇ９はＬ−アルギニンを表し；ＸはＬ−リシン又はＬ−アルギニンを表す、又は（ｉｉ）Ａｒｇ１、Ａｒｇ５、及びＡｒｇ９は、Ｄ−アルギニンを表し；Ｘ  はＤ−リシン又はＤ−アルギニンを表す；
（ｆ）（ＳＰＡ）は化学リンカーを表し、（ｉ）３アミノ酸残基のペプチド鎖からなり、各残基は、Ｄ−アルギニン、Ｄ−リシン、Ｌ−アルギニン又はＬ−リシン以外の任意のアミノ酸残基から独立して選択されてもよい；又は（ｉｉ）隣接するアミノ酸残基を１２．９＋１．５  Åの間隔で隔離する；
（ｇ）（ＳＰＣ）は化学リンカーを表し、（ｉ）１個のアミノ酸残基で構成され、当該アミノ酸は、Ｄ−アルギニン、Ｄ−リシン、Ｌ−アルギニン又はＬ−リシン以外の任意のアミノ酸残基であってもよい；又は（ｉｉ）隣接するアミノ酸残基を７．５＋１．５  Åの間隔で隔離する；
（ｈ）（ＳＰＢ）−Ｘ−（ＳＰＣ）又はその反対の（ＳＰＣ）−Ｘ−（ＳＰＢ）は化学リンカーを表し、（ｉ）ＳＰＢ及びＳＰＣはそれぞれ１個のアミノ酸残基で構成され、当該アミノ酸は、Ｄ−アルギニン、Ｄ−リシン、Ｌ−アルギニン又はＬ−リシン以外の任意のアミノ酸残基から独立して選択されてもよい；又は（ｉｉ）隣接するアミノ酸残基Ａｒｇ１及びＡｒｇ５又はＡｒｇ５及びＡｒｇ９を１２．９＋１．５  Åの間隔で隔離する；
（ｉ）そして、（ｉ）Ａｒｇ１、Ａｒｇ５、及びＡｒｇ９はＬ−アルギニンを表し；ＸはＬ−リシン又はＬ−アルギニンを表す；（ｉｉ）（ＳＰＡ）は３アミノ酸残基のペプチド鎖からなり；及び（ｉｉｉ）（ＳＰＢ）及び（ＳＰＣ）は、それぞれ１つのアミノ酸残基を表す］
のいずれか１つで表され、当該共通構造（ＶＩＩ）〜（Ｘ）は、
（ＸＩ）  （ＢＡＭ）−（ＬＩＮＫ）−Ａｒｇ１−Ｘ２−Ｘ３−Ｘ４−Ａｒｇ５−  Ｘ６−Ｘ７−Ｘ８−Ａｒｇ９−（ＬＤ１０）ｎ−（ＸＤ１１）ｍ；又は
（ＸＩＩ）  （ＸＤ−２）ｍ−（ＬＤ  −１）ｎ−Ａｒｇ１−  Ｘ２−Ｘ３−Ｘ４−Ａｒ
ｇ５−  Ｘ６−Ｘ７−Ｘ８−Ａｒｇ９−（ＬＩＮＫ）−（ＢＡＭ）；
［式中、
Ａｒｇ１、Ａｒｇ５及びＡｒｇ９は前記のようにＬ−アルギニンであり；Ｘ３又はＸ７は
、前記のようにＬ−リシン又はＬ−アルギニンである］
で表されてもよく、構造（ＸＩ）又は（ＸＩＩ）において、Ｘ４又はＸ６はＤ−アミノ酸である、１つの共通構造の末端にコンジュゲートしている、ＢＡＭ−コンジュゲート。
【０１５０】
１６．前記リンカー基（ＬＩＮＫ）がＬ−又はＤ−Ｇｌｕである、項目１５に記載のＢＡＭ−コンジュゲート。
【０１５１】
１７．前記ＢＡＭが、Ｎ−末端アミド結合又はＣ−末端エステル結合によりＡｒｇ１又はＡｒｇ９とコンジュゲートしている、項目１４〜１６のいずれか１項に記載のＢＡＭ−コンジュゲート。
【０１５２】
１８．前記ＢＡＭが、（ＳＰＡ）、（ＳＰＢ）又は（ＳＰＣ）の中のアミノ酸残基及び／又は化学基とコンジュゲートしている、項目１４に記載のＢＡＭコンジュゲート。
【０１５３】
１９．前記コンジュゲートが、前記ペプチド配列の内側の残基への直接のコンジュゲート、又はリンカー基を介した間接的コンジュゲートである、項目１６に記載のＢＡＭコンジュゲート。
【０１５４】
２０．前記ＢＡＭが、単糖類又は多糖類、毒素、抗腫瘍剤、抗炎症剤、抗ウイルス剤、抗細菌剤、又は原生動物感染の治療剤である、項目１４〜１９のいずれか１項に記載のＢＡＭ−コンジュゲート。
【０１５５】
２１．前記ＢＡＭがデオキシリボース又はリボースである、項目１４〜１９のいずれか１項に記載のＢＡＭ−コンジュゲート。
【０１５６】
２２．項目１４に記載の分子又は化合物、又は項目１５〜２１のいずれか１項に記載のＢＡＭ−コンジュゲートを含有する、医薬組成物。
【０１５７】
２３．腫瘍性疾患、炎症性疾患、自己免疫性疾患、免疫不全性疾患、ウイルス、細菌、原生動物又は寄生虫の感染から選択される白血球が関与する障害の治療に使用される医薬組成物であって、当該医薬組成物が、分子又は化合物であって、以下の共通構造（Ｉ）〜（ＩＶ）：
（Ｉ）  Ａｒｇ１−（ＳＰＡ）−Ａｒｇ５−（ＳＰＢ）−Ｘ−（ＳＰＣ）−Ａｒｇ９−（ＬＤ１０）ｎ−（ＸＤ１１）ｍ；
（ＩＩ）  Ａｒｇ１−（ＳＰＣ）−Ｘ−（ＳＰＢ）−Ａｒｇ５−（ＳＰＡ）−Ａｒｇ９−（ＬＤ１０）ｎ−（ＸＤ１１）ｍ；
（ＩＩＩ）  （ＸＤ−２）ｍ−（ＬＤ  −１）ｎ−Ａｒｇ１−（ＳＰＡ）−Ａｒｇ５−（ＳＰＢ）−Ｘ−（ＳＰＣ）−Ａｒｇ９；又は
（ＩＶ）  （ＸＤ−２）ｍ−（ＬＤ  −１）ｎ−Ａｒｇ１−（ＳＰＣ）−Ｘ−（ＳＰＢ）
−Ａｒｇ５−（ＳＰＡ）−Ａｒｇ９；
［式中、
（ａ）  ＬＤ１０又はＬＤ−１は、Ｄ−アルギニン、Ｄ−リシン；Ｌ−アルギニン又はＬ−リシン以外のＬ−又はＤ−アミノ酸のいずれかを表し、ｎは、０〜１０の数字である；
（ｂ）ＸＤ１１又はＸＤ−２は、Ｄ−アルギニン又はＤ−リシン以外のＤ−アミノ酸のいずれかを表し、ｍは０又は１の数字である；
（ｃ）（ｉ）Ａｒｇ１、Ａｒｇ５、及びＡｒｇ９はＬ−アルギニンを表し；ＸはＬ−リシン又はＬ−アルギニンを表す、又は（ｉｉ）Ａｒｇ１、Ａｒｇ５、及びＡｒｇ９は、Ｄ−アルギニンを表し；Ｘ  はＤ−リシン又はＤ−アルギニンを表す；
（ｄ）（ＳＰＡ）は化学リンカーを表し、（ｉ）３アミノ酸残基のペプチド鎖からなり、各残基は、Ｄ−アルギニン、Ｄ−リシン、Ｌ−アルギニン又はＬ−リシン以外の任意のアミノ酸残基から独立して選択されてもよい；又は（ｉｉ）隣接するアミノ酸残基を１２．９＋１．５  Åの間隔で隔離する；
（ｅ）（ＳＰＣ）は化学リンカーを表し、（ｉ）１個のアミノ酸残基で構成され、当該アミノ酸は、Ｄ−アルギニン、Ｄ−リシン、Ｌ−アルギニン又はＬ−リシン以外の任意のアミノ酸残基であってもよい；又は（ｉｉ）隣接するアミノ酸残基を７．５＋１．５  Åの間隔で隔離する；
（ｆ）（ＳＰＢ）−Ｘ−（ＳＰＣ）又はその反対の（ＳＰＣ）−Ｘ−（ＳＰＢ）は化学リンカーを表し、（ｉ）ＳＰＢ及びＳＰＣはそれぞれ１個のアミノ酸残基で構成され、当該アミノ酸は、Ｄ−アルギニン、Ｄ−リシン、Ｌ−アルギニン又はＬ−リシン以外の任意のアミノ酸残基から独立して選択されてもよい；又は（ｉｉ）隣接するアミノ酸残基Ａｒｇ１及びＡｒｇ５又はＡｒｇ５及びＡｒｇ９を１２．９＋１．５  Åの間隔で隔離する］
のいずれか１つを含み、又はこれからなり、更にＢＡＭとコンジュゲートしている、分子又は化合物を含有する、医薬組成物。
【０１５８】
２４．ＨＩＶ、エプスタインバーウイルス、麻疹ウイルス、パラミクソウイルス、ルビウイルス、ヘルペスウイルス、デングウイルス、単純ヘルペスウイルス、パルボウイルス、呼吸器合胞体ウイルス、天然痘ウイルス、水痘、フラビウイルス、ヒトＴ−リンパ球ウイルス、Ａ、Ｂ、Ｃ、Ｄ、又はＥ型肝炎ウイルス、ラッサウイルス、又はインフルエンザウイルスの治療に使用される、項目２２又は２３のいずれか１項に記載の医薬組成物。
【０１５９】
２５．白血球が以下の病理的関与：好中球増加症、好中球減少症、白血球減少症、好塩基球減少症、好塩基球増加症、好酸球減少症、好酸球増加症、突発性好酸球増多症候群、リンパ球性白血球増加症、リンパ球増加症、リンパ球減少症、単球増加症、単球減少症、メイ−ヘグリン異常、ペルゲル−フエット異常、アルダー−ライリー異常、チェディアック−東症候群、ヨブ症候群（高ＩｇＥ症候群）、怠けもの白血球症候群、先天性補体第３成分欠損症、慢性肉芽腫症、白血球グルコース６−リン酸デヒドロゲナーゼ欠損症、良性ミエロペルオキシダーゼ欠損症、重症複合型免疫欠損症、ディ・ジョージ症候群、ネゼロフ症候群、乳児伴性無ガンマグロブリン血症、分類不能型低ガンマグロブリン血症、ムコ多糖体症、リポドーズ（ｌｉｐｏｄｏｓｅｓ）、ゴーシェ病、ニーマン−ピック病、ファブリー病、ファーバー病、ガングリオシドーシス、テイ−サックス病、ザントホフ病、クラッベ病、異染色性白質萎縮症、ウォルマン病、白血病、急性リンパ性白血病（Ｌ１、Ｌ２、Ｌ３）、慢性リンパ性白血病、急性骨髄性白血病（ＡＭＬ）、未分化ＡＭＬ（Ｍ０）、骨髄芽球性白血病（Ｍ１）、骨髄芽球性白血病（Ｍ２）、前骨髄球性白血病（Ｍ３）、骨髄単球性白血病（Ｍ４）、単芽球性白血病（Ｍ５）、赤白血病（Ｍ６）、巨核芽球性白血病（Ｍ７）、慢性骨髄球性白血病、ホジキンリンパ腫、Ｔ細胞リンパ腫、Ｂ細胞リンパ腫、リンパ形質細胞リンパ腫、ワルデンシュトレームマクログロブリン血症、多発性骨髄腫、濾胞性リンパ腫を有する疾患又は症状の治療に使用される、項目２２又は２３のいずれか１項に記載の医薬組成物。
【０１６０】
２６．リーシュマニア症の治療に使用される、項目２２又は２３のいずれか１項に記載の医薬組成物。
【０１６１】
２７．生物活性分子の骨髄性細胞への輸送を促進するための、項目１〜１４のいずれか１項に記載の分子又は化合物の使用、又は分子又は化合物であって、以下の共通構造（Ｉ）〜（ＩＶ）：
（Ｉ）  Ａｒｇ１−（ＳＰＡ）−Ａｒｇ５−（ＳＰＢ）−Ｘ−（ＳＰＣ）−Ａｒｇ９−（ＬＤ１０）ｎ−（ＸＤ１１）ｍ；
（ＩＩ）  Ａｒｇ１−（ＳＰＣ）−Ｘ−（ＳＰＢ）−Ａｒｇ５−（ＳＰＡ）−Ａｒｇ９−（ＬＤ１０）ｎ−（ＸＤ１１）ｍ；
（ＩＩＩ）  （ＸＤ−２）ｍ−（ＬＤ  −１）ｎ−Ａｒｇ１−（ＳＰＡ）−Ａｒｇ５−（ＳＰＢ）−Ｘ−（ＳＰＣ）−Ａｒｇ９；又は
（ＩＶ）  （ＸＤ−２）ｍ−（ＬＤ  −１）ｎ−Ａｒｇ１−（ＳＰＣ）−Ｘ−（ＳＰＢ）
−Ａｒｇ５−（ＳＰＡ）−Ａｒｇ９；
［式中、
（ａ）  ＬＤ１０又はＬＤ−１は、Ｄ−アルギニン、Ｄ−リシン；Ｌ−アルギニン又はＬ−リシン以外のＬ−又はＤ−アミノ酸のいずれかを表し、ｎは、０〜１０の数字である；
（ｂ）ＸＤ１１又はＸＤ−２は、Ｄ−アルギニン又はＤ−リシン以外のＤ−アミノ酸のいずれかを表し、ｍは０又は１の数字である；
（ｃ）（ｉ）Ａｒｇ１、Ａｒｇ５、及びＡｒｇ９はＬ−アルギニンを表し；ＸはＬ−リシン又はＬ−アルギニンを表す、又は（ｉｉ）Ａｒｇ１、Ａｒｇ５、及びＡｒｇ９は、Ｄ−アルギニンを表し；Ｘ  はＤ−リシン又はＤ−アルギニンを表す；
（ｄ）（ＳＰＡ）は化学リンカーを表し、（ｉ）３アミノ酸残基のペプチド鎖からなり、各残基は、Ｄ−アルギニン、Ｄ−リシン、Ｌ−アルギニン又はＬ−リシン以外の任意のアミノ酸残基から独立して選択されてもよい；又は（ｉｉ）隣接するアミノ酸残基を１２．９＋１．５  Åの間隔で隔離する；
（ｅ）（ＳＰＣ）は化学リンカーを表し、（ｉ）１個のアミノ酸残基で構成され、当該アミノ酸は、Ｄ−アルギニン、Ｄ−リシン、Ｌ−アルギニン又はＬ−リシン以外の任意のアミノ酸残基であってもよい；又は（ｉｉ）隣接するアミノ酸残基を７．５＋１．５  Åの間隔で隔離する；
（ｆ）（ＳＰＢ）−Ｘ−（ＳＰＣ）又はその反対の（ＳＰＣ）−Ｘ−（ＳＰＢ）は化学リンカーを表し、（ｉ）ＳＰＢ及びＳＰＣはそれぞれ１個のアミノ酸残基で構成され、当該アミノ酸は、Ｄ−アルギニン、Ｄ−リシン、Ｌ−アルギニン又はＬ−リシン以外の任意のアミノ酸残基から独立して選択されてもよい；又は（ｉｉ）隣接するアミノ酸残基Ａｒｇ１及びＡｒｇ５又はＡｒｇ５及びＡｒｇ９を１２．９＋１．５  Åの間隔で隔離する］
のいずれか１つを含み、又はこれからなる、分子又は化合物の使用。
【０１６２】
２８．薬物ペプチドコンジュゲートの調製のための、項目１〜１４のいずれか１項に記載の分子又は化合物の使用。
【０１６３】
本発明は、本明細書中の特定の態様によりその範囲が限定されるべきではない。実際に、本明細書中に記載の態様に加えて、本発明の様々な改変が、上述の記載、及び付随する図面から当業者にとって自明なはずである。そのような改変は、本願発明の範囲内である。
【０１６４】
様々な文献が本明細書中で引用されており、それらの開示は、全て参照により援用される。
【実施例】
【０１６５】
７．１  Ｃ４Ｓに結合するペプチド
Ｃ４Ｓと相互作用するＴＡＴペプチドの推定は、コンピューターシミュレーション中のモデルにより実施された。このシミュレーションは、溶液中の最も一般的な形態である伸長したコンフォーメーションのＴＡＴペプチド及びＣ４Ｓ分子をモデル化した。モデルの結果は、本発明の９量体（例えばＡｒｇ１−Ｘ２−Ｘ３−Ｘ４−Ａｒｇ５−Ｘ６−Ｘ７−Ｘ８−Ａｒｇ９（配列番号：２１、配列番号：１７又は配列番号：１８のルールに従う；  配列番号２２、配列番号：１９又は配列番号：２０のルールに従う））の位置１、５及び９の位置のアルギニンに対応するＴＡＴ残基のＡｒｇ残基は、Ｃ４Ｓの反復する硫酸基と任意で相互作用するための望ましい間隔で配置されていたことを示唆する。ＴＡＴのＡｒｇ残基間の距離は１３．２Åであり、１２．９Åの間隔で隔離されているＣ４Ｓ上の硫酸基の反復する位置と最適に適合する（図１）。加えて、同等な位置Ｘ３又はＸ７のリシン又はアルギニンは、Ａｒｇ１又はＡｒｇ９からそれぞれ約６．６Å離れており、Ｃ４Ｓ上に硫酸基から７．５Åに位置するカルボン酸基と最適に相互作用する（図１）。このモデルは、ＴＡＴ配列がＣ４Ｓと相互作用する伸長したコンフォーメーションを有し、効果的かつ選択的な結合にとって制約となるヘリックスを有しないことを示唆した。
【０１６６】
コンピューターシミュレーション中のモデルによって、本発明のペプチドとＣ４Ｓとの相互作用の推定も行われた。上記モデルの結果により予想された通り、シミュレーション結果は、図２で示す構造のシミュレーション上で、本発明の９量体ペプチドの位置１、５、９のアルギニンが、Ｃ４Ｓの糖上の硫酸基（例えば位置１、３及び７）と良好に相互作用することを示した。加えて、図２のモデルが示すように、９量体ペプチドの位置３のリシンは、Ｃ４Ｓの位置２の糖上のカルボン酸塩と相互作用することが出来た。
【０１６７】
本発明の標的ペプチドの位置１、５及び９におけるＣ４Ｓ分子との好適な相互作用は、ウイルスＴＡＴペプチドを使用して、図３に模式的に表される。前記モデルにより判定され、及び図３に表されるように、位置１、５及び９のＡｒｇ（図３の球）、及び３のＬｙｓのみ、それぞれ１，３及び７のＣ４Ｓの糖上の硫酸基、及び位置２のカルボン酸基と相互作用により連結される。更に、これらの構造は対称であるため、Ｌｙｓ＋３が＋７に移動しても同様な結果が得られる。
【０１６８】
前記モデルにより予測される本発明の９量体のＣ４Ｓへの結合は、特に、他のプロテオグリカンに対する結合と比較して、ＥＬＩＳＡプロトコルを改変して使用して試験した。ＥＬＩＳＡプレートを１ｍｇ／ｍｌのＰＢＳ中の硫酸ヘパリン（ＨＳ）、コンドロイチン−４−硫酸（Ｃ４Ｓ）、コンドロイチン−６−硫酸（Ｃ６Ｓ）又はヒアルロン酸（ＨＡ）で一晩コーティングした。このウェルをＰＢＳで洗浄し、１ｍｇ／ｍｌの配列ＲＹＦｖＲＩＫＹＲｈ  （「ＲＹＦ」；  配列番号：２）を有する本発明の例示的なペプチド又は標準的なＴＡＴペプチドで、室温で１時間インキュベーションした。このプレートをＰＢＳで徹底的に洗浄し、続いてＬＵＭＡＳＣＯＰＥ（商標）発光顕微鏡で撮像した。画像を、ＩｍａｇｅＪソフトウエアを使用して定量した（図４）。当該結果を図４に示す。この図は、標準的なＴＡＴペプチドと対照的に（図４Ｂ）、本発明のＲＹＦペプチドはＣ４Ｓプロテオグリカンに特異的に結合し、特に、他の試験されたプロテオグリカンよりも選択的にＣ４Ｓに結合することを示す（図４Ａ）。
【０１６９】
位置１、５、９及び３又は７のアミノ酸残基のキラリティーの変化のＣ４Ｓへの当該ペプチドの結合に対する影響を試験するために、同一の改変ＥＬＩＳＡプロトコルが使用された。図５は、位置Ａｒｇ１、Ａｒｇ５、Ａｒｇ９及びＡｒｇ／Ｌｙｓ３又はＡｒｇ／Ｌｙｓ７が全て同一のキラリティーである（即ちこれらの全ての位置のアミノ酸がＤ−アミノ酸であるか、全ての位置のアミノ酸がＬ−アミノ酸である）場合にのみ、高い結合活性が維持されたことを実証する。図５において、大文字はＬ−エナンチオマーを示し、小文字はＤ−エナンチオマーを示す。
【０１７０】
Ｃ４Ｓへの選択的結合に対するペプチドの正味荷電の影響を調査するため、同一の改変ＥＬＩＳＡが使用された。図６の結果は、ペプチドの「自由に選択できる位置」における負に荷電した残基の数がプロテオグリカンへの非特異的結合に直接関連すること、及びこれらの位置での負に荷電した残基の数の減少が、Ｃ４Ｓに対する特異性及び／又は選択性を増大させたことを示す。
【０１７１】
７．２  細胞表面に発現したＣ４Ｓに対するペプチドの結合
本明細書全体で説明したように、本発明の分子は、他のプロテオグリカンよりも、Ｃ４Ｓに選択的に結合できる。本発明のＦＩＴＣコンジュゲートペプチドＲＹＦｖＲＩＫＹＲｈ  （“ＲＹＦ”；  配列番号：２）の結合選択性は、Ｃ４Ｓを発現する細胞（ＣＨＯ細胞）及びＣ４Ｓを発現しない細胞（Ｓｏｇ９細胞；コンドロイチン４−ｏ−スルホトランスフェラーゼ１（Ｃ４ＳＴ−１、別名ＣＨＳＴ１１）が欠損した細胞）において評価された。Ｓｏｇ９（Ｃ４ＳＴ−）及びＣＨＯ細胞を、ＲＹＦ（配列：ＲＹＦｖＲＩＫＹＲｈ）ペプチド（２．５Ｍ）の存在下で２４時間インキュベーションした。細胞をＰＢＳで３回洗浄し、メタノール−アセトン（１：１）中で固定し、ＵＭＡＳＣＯＰＥ（商標）蛍光顕微鏡で撮像した。図７は、本発明のＲＹＦペプチドがＣ４Ｓを発現しないＳｏｇ９細胞に結合せず；対照的に、Ｃ４Ｓを発現するＣＨＯ細胞は、強力で均一な結合を呈することを示す。
【０１７２】
塩素酸塩で前処理したＣ４Ｓを発現する細胞へのＦＩＴＣ−ＲＹＦペプチドの結合を評価するために、同様の蛍光顕微鏡手順が使用された。塩素酸塩はスルホトランスフェラーゼの阻害剤であるため、塩素酸塩処理は、Ｃ４Ｓ発現を阻害する。マクロファージを、０、３、１０又は３０μＭ塩素酸塩で１６時間処理し、これらを洗浄し、ＲＹＦ  （配列番号：２）ペプチドとインキュベーションし、上記のように撮像した。図８は、ＲＹＦ  （配列番号：２）の結合が、コンドロイチン硫酸の発現と関連していることを示す。
【０１７３】
図７及び８に示す実験は、本発明のペプチドが、他のプロテオグリカンよりもＣ４Ｓに高度に選択的であったことを示す。従って、当該ペプチドは、Ｃ４Ｓのみを発現する、又は他のプロテオグリカンと比較してＣ４Ｓのレベルが高い細胞を特異的に標的にすることが出来る。コンドロイチンの４−硫酸化に関与する、即ちＣ４Ｓの生産に関与する主な酵素はＣＨＳＴ１１である。Ａｔｌａｓアレイからの発現データは、ＣＨＳＴ１１遺伝子は、白血球系譜に由来する細胞中で優勢に発現していることを明らかにした（図９）。従って、本発明のペプチド及び方法は、白血球を標的とすることを可能とする。
【０１７４】
７．３  治療剤の担体分子としての本発明のペプチドの使用
担体部分として作用する本発明のペプチドの能力及びその中のＤ−アミノ酸残基のレベル及び配置への依存を、マクロファージ抽出物によるペプチドからのＦＩＴＣ部分の放出により試験した。Ｄ−アミノ酸のレベル及び位置の異なる本発明のＦＩＴＣ−標識ペプチド１μｇを、「生の」マクロファージ抽出物（例えばＪ  Ｅｘｐ  Ｍｅｄ．  １２９（１９６９），  ２２７-２４５参照）中３７℃で、最大４８時間インキュベーションした。対照となる遊離ＦＩＴＣと共に０．５μｇのペプチドをセルロース紙（Ｗｈｉｔｍａｎ  ＃１）に滴下し、溶媒としてｎ−ブタノール、酢酸、水（４：１：１）を使用して、（薄層）クロマトグラフィーに供した。残りの試料０．５μｇは、ＨＰＬＣ−ＭＳ／ＭＳ解析に使用した。図１０に使用されるペプチドの構成は、以下のようになる。ペプチド１，５及び６は共通配列：ＲＸＸｘＲＸＸＸＲｈを有し；ペプチド１４、１５及び１６は共通配列：ＲＸｘＸＲＸＸＸＲｈを有し；ペプチド２３、２４及び２５は共通配列：ｒＸＸＸｒＸＸＸｒを有する（例えばＷＯ  ２０１０／０７２２２８を参照されたい）。前記ペプチドとＦＩＴＣとの間のコンジュゲートは、当該ペプチドのＮ末端のアミノ酸に結合する通常の共有結合ペプチドを介して形成される。Ｎ末端の「ｒ」（「ｄ」−アミノ酸）にコンジュゲートするため、ペプチド２３、２４及び２５において分解は観察されなかった。前記ペプチドから放出される遊離ＦＩＴＣの量は、１００％（＃５）（共通配列：ＲＸＸｘＲＸＸＸＲｈ）〜３０％（＃１５）（共通配列：ＲＸｘＸＲＸＸＸＲｈ）であった。当該データは、前記ペプチドの位置４のＤ−アミノ酸の存在が安定性及び遊離ＢＡＭ部分を放出する能力を変化させ得ることを示唆した。
【０１７５】
担体部分としての本発明の例示的なペプチドの使用は、細胞増殖アッセイにおいても試験された。生のマクロファージ由来の細胞を、２．５μＭの所定のヌクレオチド類似体又はＲＹＦペプチドとのコンジュゲートとしての類似体と共に、フェノールレッドの存在下、４８時間インキュベーションした。分裂する細胞を含有する培養物の培地は澄んでくるが、分裂しない細胞を含有する培養物の培地は暗い色のままである（活性化合物）。培養物の画像を図１１Ａに示す。増殖のパーセンテージも、ＬＤＴの相対両を測定して判定された（図１１Ｂ）。この実験は、本発明のペプチド−細胞毒物コンジュゲートが腫瘍マクロファージ細胞（即ち生のマクロファージ由来の細胞）を死滅させられること、及び当該ペプチドが、細胞内に細胞毒物を輸送し、不活性な化合物を活性な細胞毒性剤に変換させられることを実証した。例えば、「ｒｉｂｏ」及び「ｔｇ」（チオグアニン）化合物は、試験された濃度（２．５μＭ）では効果を有しないが、本発明の例示的なペプチドトランスポーター（即ちＲＹＦ）とコンジュゲートすると強力な細胞毒性を発揮する。
【０１７６】
上記実験は、ＢＡＭ部分の細胞毒性に対するＬ−又はＤ−連結の効果を調査するために反復された。細胞を、３’アミノβ−Ｄ−アラビノフラノシド単独又はこれをＲＹＦペプチドとコンジュゲートしたものと共にインキュベーションした。図１２が示すように、当該化合物は、コンジュゲートの形態で存在した場合のみ内在化した。加えて、驚くべきことに、Ｄ−連結残基（即ち「ｅ」はＤ−グルタミン酸を表す）を使用した場合に限り細胞毒性であることが見出された。これは、Ｌ−エナンチオマー（即ちＬ−アミノ酸）を介したヌクレオシド糖の３’位との連結はプロテアーゼにより除去され、改変されたヌクレオシドが「通常の」もの（即ち、チェーンターミネーターとして機能しない３’位の−ＯＨ基を有するもの）に変換されることを示す。しかしながら、３’位がＤ−エナンチオマーとコンジュゲートすると、これはプロテアーゼにより除去出来ず、ＤＮＡ鎖に組み込まれると更なるＤＮＡ伸長を妨げるように機能し得る。
【０１７７】
前記実験は、３’ＡｄＴ（３’アミノデオキシチミジン）及び３’アミノβ−Ｄ−アラビノフラノシド（Ｒｉｂｏ）を用いて反復された。細胞をそれらの化合物単独又はＬ−Ｇｌｕ（Ｅ）又はＤ−Ｇｌｕ（ｅ）のいずれかを介してＲＹＦペプチドとＮ−末端で連結したコンジュゲートと共にインキュベーションした。そして細胞を７２時間インキュベーションした後、ＬＤＨ含有量を測定した。図１３は、Ｄ−エナンチオマーのＤ−グルタミン酸（ｅ）との連結が、不活性な化合物を高度に細胞毒性なものに変換したことを示す。
【０１７８】
ＭＯＬＴ４細胞を使用して類似のアッセイを実施した。ＭＯＬＴ４細胞を所定の化合物又はそれらの化合物のＰＹＦペプチドとのコンジュゲートと共に５日間インキュベーションした。ＭＯＬＴ４細胞は凝集するため、細胞増殖の容易な可視化が可能である。図１４は、生のマクロファージ由来の細胞と同様に、ＲＹＦ−細胞毒物コンジュゲートが、インビトロで腫瘍細胞を死滅させることを示す。
【０１７９】
７．４  Ｃ４Ｓ−ＴＡＴ相互作用のモデリング
本明細書中に記載のＴＡＴの変異形成の研究は、残基Ａｒｇ１、Ｌｙｓ／Ａｒｇ３又は７、Ａｒｇ５、及びＡｒｇ９が、Ｃ４Ｓへの結合に最も重要な残基であることを実証した。加えて、伸長したコンフォーメーションでのＴＡＴ及びＣ４Ｓの３Ｄ構造の比較は、ＴＡＴの側鎖ｎ及びｎ＋３の間の平均距離が、Ｃ３Ｓの残基ｎ及びｎ＋１の硫酸基及びカルボン酸基の間の平均距離に非常に近いことを明らかにした（図１５）。
【０１８０】
これらの知見は、ＴＡＴ及びＣ４Ｓが、恐らくそれぞれ１／ｎ；  ３／ｎ＋１；  ５／ｎ＋２；  ７／ｎ＋３；  及び９／ｎ＋４の残基のペアの間で良好な静電気的相互作用をすることにより結合することを明らかにした。Ａ／Ｂのペアという表記において、記号Ａ及びＢはそれぞれＴＡＴ及びＣ４Ｓの残基を表し；例えば図１５及び１６にあるように、残基が本明細書中で使用される番号付に従って指示されるＴＡＴ及びＣ４Ｓ分子の模式図を提供する。これらの残基のセットの間の良好な相互作用は、ＴＡＴのＡｒｇ１が硫酸基又はカルボン酸基を担持する糖部分のいずれと結合し得るかに依存して、２つのメカニズムにより説明され得る（それらは必ずしも相互排他的ではない）。
【０１８１】
２つのパートナーの性質、サイズ及び柔軟性のため、ドッキングソフトウエアを使用した最適な結合様式を特定することは出来なかった。従って、我々は、以下：（ｉ）両分子の伸長した３Ｄコンフォーマーから出発し；（ｉｉ）上記のように３つの隣接する接触を形成するように（例えば３／ｎ＋１、５／ｎ＋２、７／ｎ＋３）それらの分子を手動で位置決定し；（ｉｉｉ）選択した３組の相互作用を維持しつつ、３００ＫでＭｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｄｙｎａｍｉｃｓ  （ＭＤ）シミュレーションを合計６００ｎｓ実行し；そして最終的に（ｉｖ）当該ＭＤシミュレーションの間に新しい相互作用が発生するか、及びその頻度を計算する；からなる方策を使用した。重要なことに、ＭＤシミュレーションの開始時点で、ＴＡＴ及びＣ４Ｓとの間に、選択された開始時の相互作用以外に相互作用は起こらなかった。
【０１８２】
このアプローチを支持する理由付けは、もし主要な５組の相互作用する残基のペアにより構成される予想された相互作用のスキームが正しく、そして例えばＴＡＴのＡｒｇ１がＣ４Ｓの硫酸化部分と好ましく結合する場合、３組の相互作用（１／ｎ、３／ｎ＋１、５／ｎ＋２）のみを有する複合体から出発するＭＤシミュレーションは、より好ましい相互作用、例えば、Ｃ４Ｓのｎ残基が硫酸残基である場合だけであるが、７／ｎ＋３及び９／ｎ＋４の自発的な形成をもたらし得ることである。
【０１８３】
ＴＡＴ及びＣ４Ｓの間の相互作用は、ＣＨＡＲＭＭ分子モデリングパッケージバージョンｃ３６ｂ１（Ｂｒｏｏｋｓ  ｅｔ  ａｌ．，  Ｊ．  Ｃｏｍｐｕｔ．  Ｃｈｅｍ．  ３０（２００９），  １５４５−１６１４）を使用してモデリングされた。ＴＡＴペプチド（配列：）は、ＣＨＡＲＭＭ２２全水素力場（Ｍａｃｋｅｒｅｌｌ  ｅｔ  ａｌ．，    Ｊ．  Ｐｈｓｙ．  Ｃｈｅｍ．  Ｂ  １０２（１９９８），  ３５８６−３６１６）を使用して記載され、トポロジー及びパラメーターは、Ｃ４Ｓ分子においてＳｗｉｓｓＰａｒａｍを使用して取得された（Ｚｏｅｔｅ  ｅｔ  ａｌ．，  Ｊ．  Ｃｏｍｐｕｔ．  Ｃｈｅｍ．  ３２（２０１１），  ２３５９−２３６８）。Ｃ４Ｓ分子は、例えば図１６に模式的に表されるように、１０個の糖部分を含有するようにモデル化された。
【０１８４】
ＭＤシミュレーションの出発点は、所望の相互作用スキームを形成するように、即ちＣ４Ｓの３つの連続した残基及びＴＡＴの３酸基（例えば残基１，３，５又は３，５，７又は５，７，９）を含むので、ＵＣＳＦ  Ｃｈｉｍｅｒａ画像化ソフトウエアを使用して、ＴＡＴ及びＣ４Ｓを手動で位置決定することにより生産した（Ｐｅｔｔｅｒｓｅｎ  ｅｔ  ａｌ．，    Ｊ．  Ｃｏｍｐｕｔ．  Ｃｈｅｍ．  ２５（２００４），  １６０５−１６１２）。ＭＤシミュレーションの過程で選択されたＴＡＴ／Ｃ４Ｓ残基のペアの間の相互作用を維持するために、ＮＯＥ距離制限をそれらに適用し；ＲＭＩＮ及びＲＭＡＸはそれぞれ５及び７Åに設定し；そしてＫＭＩＮは、１０００ｋｃａｌ  ｍｏｌ−１  Å−２に設定した。そして、このシステムは、５０００ステップのＡＢＮＲを使用して最小化した。最後に、相互作用スキームをそれぞれ開始するために、３０の独立した、長さ２０ｎｓのＭＤシミュレーションを３００Ｋで実行して、Ｃ４Ｓ及びＴＡＴの間で追加の相互作用が起こるか否かをチェックした。溶媒の効果は、溶質において誘電率１としてＦＡＣＴＳ潜在溶媒和（ｉｍｐｌｉｃｉｔ  ｓｏｌｖａｔｉｏｎ）モデルにより推定した。各ＭＤシミュレーションにおいて、一定間隔で隔離した１０００フレームを、軌道ファイルから抽出した。各フレームにおいて、相互作用する残基のペアは、５Åより小さい距離で、重い原子を有するものとして同定された。最後に、相互作用する残基の可能な各ペアの存在の頻度は、各プールの３０のＭＤシミュレーションから抽出された全てのフレームに渡って平均化された。
【０１８５】
図１７は、それぞれＴＡＴ分子とＣ４Ｓとの間の、（Ａ）残基１／４、３／５及び５／６により形成される３つの接触点、又は（Ｂ）３／４、５／５及び７／６により形成される３つの接触点から出発する、ＭＤシミュレーションの過程で形成される相互作用スキームの２つの例を提供する。図に示されるように、（Ａ）に示されるＭＤシミュレーションの過程で、当該系は、ＴＡＴのＣ末端とＣ４Ｓの大きい番号の残基との間で自発的に相互作用を形成し、特に、上記仮説に従い予想された、相互作用ペア７／７及び９／８を形成した。対照的に、（Ｂ）に示されるＭＤシミュレーションにおいて、新しい相互作用の形成は限定的であった。重要なことに、２つの予想された相互作用１／３及び９／７は形成されなかった。（Ａ）に示されるＭＤシミュレーションにおいて、重要なことに、当該相互作用スキームはＡｒｇ１がＣ４Ｓの硫酸化残基と相互作用すると予想される場合のものに対応する一方、（Ｂ）に対応するＭＤシミュレーションにおいて、Ａｒｇ１は、Ｃ４Ｓのカルボン酸化残基と相互作用することが予想された。
【０１８６】
たの幾つかのグループのシミュレーションが実施され、それぞれ異なる相互作用スキームが使用された。スキームがＡｒｇ１とＳ４Ｓの硫酸化残基との相互作用を含んでいたすべての場合で、上記の我々の仮説に従い予想されたほぼ全ての相互作用が、ＭＤシミュレーションの過程で自発的に生じた。対照的に、出発スキームがＡｒｇ１とカルボン酸化Ｃ４Ｓ残基との間の相互作用を含むとき、予想された相互作用は生じなかった。これらのシミュレーションの結果は、ＴＡＴとＣ４Ｓが、残基のペア１／ｎ、３／ｎ＋１、５／ｎ＋２、７／ｎ＋３及び９／ｎ＋４（ここでＣ４Ｓの残基ｎ、ｎ＋２及びｎ＋４が硫酸化部分で、残基ｎ＋１及びｎ＋３がカルボン酸化部分である）との間の良好な静電気的相互作用によって相互作用することを支持する。
【０１８７】
７．５  複数の細胞株における担体分子としての本発明のペプチドの使用
担体分子としての本発明のペプチドの使用が、ヒト癌細胞株のスクリーニングパネルにおいて調査された。癌スクリーニングパネルのヒト腫瘍細胞株は、５％ウシ胎児血清及び２ｍＭ  Ｌ−グルタミンを含有するＲＰＭＩ１６４０中で培養された。典型的なスクリーニング実験のために、細胞は、個別の細胞株のダブリングタイムに依存して、５０００〜４００００細胞／ウェルの播種密度で１００μＬの体積の９６ウェルマイクロタイタープレートに播種された。細胞の播種後、当該マイクロタイタープレートを、３７℃、５％ＣＯ２、９５％大気及び１００％相対湿度で２４時間インキュベーションし、その後、実験の薬物を添加した。
【０１８８】
２４時間後、各細胞株の２つのプレートをＴＣＡでｉｎ  ｓｉｔｕで固定し、薬物添加の時点（Ｔｚ）での細胞集団の測定に供した。実験された治療剤は、所望の最大試験濃度の４００倍でジメチルスルホキシド中に溶解され、使用時まで凍結保存された。治療剤の添加時点で、凍結濃縮物のアリコートを溶解し、５０μｇ／ｍｌゲンタマイシンを添加した完全培地を使用して、所望の最大試験濃度の２倍に希釈した。４つの更なる１０倍又は１／２ログ連続希釈も実施して、全部で５つの試験濃度及び対照を提供した。異なる希釈率の１００μｌアリコートを１００μｌの培地が入っている適切なマイクロタイターウェルに添加して、所望の最終試験濃度がもたらされる。
【０１８９】
試験化合物の添加後、プレートを更に４８時間、３７℃、５％ＣＯ２、９５％大気、１００％相対湿度でインキュベーションした。接着性の細胞において、このアッセイは、冷却ＴＣＡの添加により終結した。細胞は、冷却５０％（Ｗ／Ｖ）ＴＣＡ５０μｌを静かに添加してｉｎ  ｓｉｔｕで固定し（最終濃度１０％ＴＣＡ）、６０分間４℃でインキュベーションした。上澄を捨て、プレートを水で５回洗浄し、通風乾燥した。１％酢酸中の０．４％（ｗ／ｖ）のスルホローダミンＢ（ＳＲＢ）溶液（１００μｌ）を各ウェルに添加し、当該プレートを１０分間室温でインキュベーションした。染色後、未結合の色素を１％酢酸で５回洗浄して除去し、通風乾燥した。結合した色素を１０ｍＭトリス塩基で可溶化し、自動プレートリーダーで５１５ｎｍの波長の吸光度を読み取った。懸濁細胞において、上記アッセイが５０μｌの８０％ＴＣＡ（最終濃度１６％ＴＣＡ）を静かに添加することによりウェルの底に沈んだ細胞を固定することにより終結させる点を除いて、上記方法と同一とした。７つの吸光度測定を使用して（０時間（Ｔｚ）、対照増殖（Ｃ）、及び５つの濃度レベルでの化合物の存在下の試験増殖（Ｔｉ））、増殖パーセントが、各化合物の濃度レベルで計算された。増殖阻害パーセントは、以下のように計算された：
Ｔｉ≧Ｔｚの場合［（Ｔｉ−Ｔｚ）／（Ｃ−Ｔｚ）］  ｘ  １００
Ｔｉ＜Ｔｚの場合［（Ｔｉ−Ｔｚ）／Ｔｚ］  ｘ  １００
【０１９０】
試験された各細胞株において計算された増殖パーセントを表２に示す。
【表３】
2019001814.tif 000005
【０１９１】
各実験薬剤において、３つの用量応答パラメーターも計算された（データ無し）。５０％増殖阻害（ＧＩ５０）は、［（Ｔｉ−Ｔｚ）／（Ｃ−Ｔｚ）］  ｘ  １００  ＝  ５０から計算され、これは、薬物インキュベーションの過程で対照細胞中の正味のタンパク質の増大（ＳＲＢ染色による測定）の５０％の減少をもたらす薬物の濃度である。合計の増殖抑制（ＴＧＩ）をもたらす薬物濃度は、Ｔｉ  ＝  Ｔｚから計算した。ＬＣ５０（薬物処理の終了時点で測定されたタンパク質が開始時点と比較して５０％減少する薬物の濃度）は、処理後の細胞の正味の損失を示し、［（Ｔｉ−Ｔｚ）／Ｔｚ］  ｘ  １００  ＝  −５０から計算された。活性のレベルが達した場合はこれらの３つの各パラメーターの数値が計算されたが、効果が達していないか過剰である場合、そのパラメーターの数値は、試験された最大又は最小の濃度よりも大きい又は小さいとして表された。
【０１９２】
表２が示すように、前記実験は、ＲＹＦ部分と２つの活性化合物（３’ＡｄＴ及びチオグアニン）とをコンジュゲートして形成した、本明細書中に記載のＢＡＭコンジュゲートを試験した。当該ＢＡＭコンジュゲートは、６０種類の細胞株（白血病、非小細胞肺癌、直腸癌、ＣＮＳ癌、黒色腫、卵巣癌、腎臓癌、前立腺癌、乳癌）における増殖抑制が試験された。陰性対照として、１つの非活性コンジュゲート（５’ＡｄＴ、不活性ヌクレオチド類似体）が含まれた。増殖阻害（未処理細胞の８５％未満の増殖）を検出するための任意の閾値として、非白血病／リンパ腫細胞株の中での標準偏差の２倍が使用された。
【０１９３】
予想されたように、陰性対照は細胞増殖を阻害せず：６０種類の細胞株のいずれも未処理細胞の８５％未満とならなかった。これは、本発明のペプチドが、この実験設定において内生的な増殖阻害を有しないことを証明している。
【０１９４】
両方の活性化合物のコンジュゲートに対する増殖阻害が、６種類の白血病／リンパ腫細胞株中５種類で観察された（３’ＡｄＴ：未処理の場合の７１％の平均増殖率；チオグアニン：４４．１３％）。対照的に、他の細胞系列由来の５４種類の細胞の内、増殖が８５％以下にまで阻害されたのは僅か３種類だけであった（３’ＡｄＴ：未処理の場合の９８．２６％の平均増殖率；チオグアニン：未処理の場合の８６．６５％）。この、白血病細胞株と他の起源の癌細胞株との間の増殖阻害の違いは、３’ＡｄＴ（ｐ＝  ０．０１０）及びチオグアニン（ｐ＝０．００３）の両方において統計的に有意であったが、陰性対照５’ＡｄＴ（ｐ＞０．０５）ではそうではなかった。
【０１９５】
増殖阻害の応答プロフィールは、正常及び腫瘍骨髄細胞において、並びに腫瘍リンパ細胞における、ＣＨＳＴ１１遺伝子及びＣ４Ｓの予想される発現に対応していた。結論としては、当該結果は、本発明のペプチドが、ＣＨＳＴ１１遺伝子及びＣ４Ｓの両方を発現する骨髄及びリンパ系統の腫瘍細胞を選択的に標的とすることを実証した。
【図１Ａ】
2019001814.tif 000006
【図１Ｂ】
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【図２】
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【図３】
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【図４】
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【図５】
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【図６】
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【図７】
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【図８】
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【図９】
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【図１０】
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【図１１】
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【図１２】
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【図１３】
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【図１４】
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【図１５】
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【図１６】
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【図１７】
2019001814.tif 000023
【図１８Ａ】
2019001814.tif 000024
【図１８Ｂ】
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【配列表】
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【手続補正書】
【提出日】平成30年10月10日(2018.10.10)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
分子又は化合物であって、以下の共通構造（Ｉ）〜（ＩＶ）：
（Ｉ）  Ａｒｇ１−（ＳＰＡ）−Ａｒｇ５−（ＳＰＢ）−Ｘ−（ＳＰＣ）−Ａｒｇ９−（ＬＤ１０）ｎ−（ＸＤ１１）ｍ；
（ＩＩ）  Ａｒｇ１−（ＳＰＣ）−Ｘ−（ＳＰＢ）−Ａｒｇ５−（ＳＰＡ）−Ａｒｇ９−（ＬＤ１０）ｎ−（ＸＤ１１）ｍ；
（ＩＩＩ）  （ＸＤ−２）ｍ−（ＬＤ−１）ｎ−Ａｒｇ１−（ＳＰＡ）−Ａｒｇ５−（ＳＰＢ）−Ｘ−（ＳＰＣ）−Ａｒｇ９；又は
（ＩＶ）  （ＸＤ−２）ｍ−（ＬＤ−１）ｎ−Ａｒｇ１−（ＳＰＣ）−Ｘ−（ＳＰＢ）−Ａｒｇ５−（ＳＰＡ）−Ａｒｇ９；
［式中、
（ａ）ＬＤ１０又はＬＤ−１は、Ｄ−アルギニン、Ｄ−リシン；Ｌ−アルギニン又はＬ−リシン以外のＬ−又はＤ−アミノ酸のいずれかを表し、ｎは、０〜１０の数字である；
（ｂ）ＸＤ１１又はＸＤ−２は、Ｄ−アルギニン又はＤ−リシン以外のＤ−アミノ酸のいずれかを表し、ｍは０又は１の数字である；
（ｃ）（ｉ）Ａｒｇ１、Ａｒｇ５、及びＡｒｇ９はＬ−アルギニンを表し；ＸはＬ−リシン又はＬ−アルギニンを表す、又は（ｉｉ）Ａｒｇ１、Ａｒｇ５、及びＡｒｇ９は、Ｄ−アルギニンを表し；ＸはＤ−リシン又はＤ−アルギニンを表す；
（ｄ）（ＳＰＡ）は化学リンカーを表し、（ｉ）３アミノ酸残基のペプチド鎖からなり、各残基は、Ｄ−アルギニン、Ｄ−リシン、Ｌ−アルギニン又はＬ−リシン以外の任意のアミノ酸残基から独立して選択されてもよい；又は（ｉｉ）隣接するアミノ酸残基を１２．９±１．５Åの間隔で隔離する；
（ｅ）（ＳＰＣ）は化学リンカーを表し、（ｉ）１個のアミノ酸残基で構成され、当該アミノ酸は、Ｄ−アルギニン、Ｄ−リシン、Ｌ−アルギニン又はＬ−リシン以外の任意のアミノ酸残基であってもよい；又は（ｉｉ）隣接するアミノ酸残基を７．５±１．５Åの間隔で隔離する；
（ｆ）（ＳＰＢ）−Ｘ−（ＳＰＣ）又はその反対の（ＳＰＣ）−Ｘ−（ＳＰＢ）は化学リンカーを表し、（ｉ）ＳＰＢ及びＳＰＣはそれぞれ１個のアミノ酸残基で構成され、当該アミノ酸は、Ｄ−アルギニン、Ｄ−リシン、Ｌ−アルギニン又はＬ−リシン以外の任意のアミノ酸残基から独立して選択されてもよい；又は（ｉｉ）隣接するアミノ酸残基Ａｒｇ１及びＡｒｇ５又はＡｒｇ５及びＡｒｇ９を１２．９±１．５Åの間隔で隔離する；
（ｇ）そして、（ｉ）Ａｒｇ１、Ａｒｇ５、及びＡｒｇ９はＬ−アルギニンを表し；ＸはＬ−リシン又はＬ−アルギニンを表す；（ｉｉ）（ＳＰＡ）は３アミノ酸残基のペプチド鎖からなり；及び（ｉｉｉ）（ＳＰＢ）及び（ＳＰＣ）は、それぞれ１つのアミノ酸残基を表す］
のいずれか１つを含み、又はこれからなり、当該共通構造（Ｉ）〜（ＩＶ）は、
（Ｖ）  Ａｒｇ１−Ｘ２−Ｘ３−Ｘ４−Ａｒｇ５−Ｘ６−Ｘ７−Ｘ８−Ａｒｇ９−（ＬＤ１０）ｎ−（ＸＤ１１）ｍ；又は
（ＶＩ）  （ＸＤ−２）ｍ−（ＬＤ−１）ｎ−Ａｒｇ１−Ｘ２−Ｘ３−Ｘ４−Ａｒｇ５−Ｘ６−Ｘ７−Ｘ８−Ａｒｇ９；
［式中、
Ａｒｇ１、Ａｒｇ５及びＡｒｇ９は前記のようにＬ−アルギニンであり；Ｘ３又はＸ７は、前記のようにＬ−リシン又はＬ−アルギニンである］
で表されてもよく、構造（Ｖ）又は（ＶＩ）において、Ｘ４又はＸ６はＤ−アミノ酸である、分子又は化合物。
【外国語明細書】
2019001814000001.pdf