(57)【要約】【課題】抗血栓性と細胞接着性を両立することにより、早期の内皮化による抗血栓性の維持が可能なインプラント用の医療材料を提供すること。【解決手段】本発明は、平均繊維径が１μｍ〜１５μｍの単繊維を含み、かつ、以下の式１の条件を満たすマルチフィラメントと、アルキレンイミンを構成モノマーとして含む窒素含有ポリマーと、重量平均分子量が２０００〜７０００の低分子量ヘパリンと、を備え、上記アルキレンイミンを構成モノマーとして含む窒素含有ポリマーは、上記マルチフィラメント中の上記単繊維と共有結合し、上記低分子量ヘパリンは、上記アルキレンイミンを構成モノマーとして含む窒素含有ポリマーとイオン結合している、インプラント用の医療材料を提供する。  （Ｙ／Ｘ）×１００≧５０  ・・・式１［式中、Ｘは、交差平均角度を調べた単繊維の本数を表し、Ｙは、Ｘの内で交差平均角度が２５度以下の単繊維の本数を表す。］【選択図】なし【特許請求の範囲】
【請求項１】
平均繊維径が１μｍ〜１５μｍの単繊維を含み、かつ、以下の式１の条件を満たすマルチフィラメントと、アルキレンイミンを構成モノマーとして含む窒素含有ポリマーと、重量平均分子量が２０００〜７０００の低分子量ヘパリンと、を備え、
前記アルキレンイミンを構成モノマーとして含む窒素含有ポリマーは、前記マルチフィラメント中の前記単繊維と共有結合し、
前記低分子量ヘパリンは、前記アルキレンイミンを構成モノマーとして含む窒素含有ポリマーとイオン結合している、インプラント用の医療材料。
（Ｙ／Ｘ）×１００≧５０  ・・・式１
［式中、Ｘは、交差平均角度を調べた単繊維の本数を表し、Ｙは、Ｘの内で交差平均角度が２５度以下の単繊維の本数を表す。］
【請求項２】
前記低分子量ヘパリンの抗Ｘａ因子活性と抗トロンビン活性との比は、２．０〜１０．０である、請求項１記載のインプラント用の医療材料。
【請求項３】
請求項１又は２記載の医療材料を備える、心血管インプラント用の医療器材。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、インプラント用の医療材料に関する。
【背景技術】
【０００２】
脳卒中はガン、心臓病に次いで本邦における死因の第３位である。脳卒中の患者数は現在約１７０万人といわれており、毎年２５万人以上が新たに発症していると推察されている。一旦脳卒中を罹患すると寝たきり状態となることが多く、寝たきりの原因の約３割近くが脳卒中等の脳血管疾患というデータもある。さらには、今後の高齢者の増加や糖尿病、高脂血症等の生活習慣病の増加により脳卒中の患者は増加の一途をたどっている状況であり、その対策は急務となっている。
【０００３】
脳卒中の一種である「心原性脳塞栓症」は、脳梗塞の中の２０〜２５％を占めており、心房細動等により心臓の拍動のリズムが乱れ、血液が鬱滞して血栓を形成し、それが脳へと飛散することで発症する。この時の血栓形成の大部分は、心臓の左心耳と呼ばれる、左肺静脈の根元と僧帽弁の間の左心房の前外側壁に連結された小さい親指又は吹き流し様の閉鎖した空洞で発生するか又はそこを原発とする。
【０００４】
心房細動患者に対する経皮的左心耳閉鎖治療では、左心耳閉塞デバイスの留置後デバイスの表面が生体由来の組織又は新生内膜により被覆されるまでは、血栓形成を阻害するため、一定期間の抗凝固剤や抗血小板薬の投与が必須である。
【０００５】
留置後デバイスの表面上で血栓が形成する原因は、留置後デバイスが生体側に異物として認識され、その表面で血液凝固反応が進行することである。一定期間の抗凝固剤や抗血小板薬の投与以外で血栓の形成を阻害する方法としては、カチオン性ポリマーを基材に固定し、そのカチオン性ポリマーを介して抗凝固剤であるヘパリン又はヘパリン誘導体を基材の表面上に固定化する方法が報告されている（特許文献１及び２）。また、カチオン性ポリマーを介して固定化するヘパリンとして、ヘパリンの中でも未分画ヘパリン、平均分子量が４０００〜６０００である低分子量ヘパリンやアンチトロンビンＩＩＩに高親和性のヘパリン等のヘパリンを用いてもよいことが報告されている（特許文献３）。
【０００６】
血栓形成を抑制する別の方法としては、留置後デバイスの表面を早期に血管内皮細胞で被覆させる方法が知られている。具体的には、繊維繊度が０．５ｄｔｅｘ以下の極細繊維を用いた上で、極細繊維に抗血栓性材料を結合する人工血管（特許文献４）、繊維の配向を揃えることで細胞の接着性及び増殖性を向上させた細胞足場材料（特許文献５）が報告されている。
【０００７】
一方、ヘパリンに代表される硫酸糖は、生体内で生理活性を示す多くのサイトカインや増殖因子と親和性が高く、これらの因子の局在化を生じ、造血作用を含む種々の生理作用を促進していると言われている。この作用を利用して、動物細胞が接着する基質表面にヘパリンを固定化することにより、動物細胞の近傍にサイトカインを局在化させ、より効果的に細胞培養を促進しようとする試みもなされてきた（非特許文献１）。
【先行技術文献】
【特許文献】
【０００８】
【特許文献１】ＷＯ２０１５／０８０１７７
【特許文献２】ＷＯ２０１６／１９０４０７
【特許文献３】ＷＯ２０１４／１６８１９８
【特許文献４】ＷＯ２０１５／１２２４２９
【特許文献５】ＷＯ２０１６／０６８２７９
【非特許文献】
【０００９】
【非特許文献１】Ｖ．Ｓｕｎｄａｒａｒａｊａｎ  ｅｔ  ａｌ．、Ｓｔｅｍ  Ｃｅｌｌｓ、１９９９年、第１７巻、第２９５頁
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【００１０】
しかしながら、特許文献１〜３はカチオン性ポリマーを介してヘパリンがイオン結合にて繊維表面に強固に固定化する方法が開示されており、繊維表面上での血栓形成は阻害できる。しかしながら、一般的にヘパリンは血管内皮細胞の接着・増殖を阻害することが知られているため、これらの技術を単純にインプラント用に用いた場合、血管内皮細胞による被覆時期が遅くなってしまう可能性がある。
【００１１】
また、特許文献４には、極細繊維を用いることで細胞親和性を向上させた織物が開示されているが、繊維の配向性に関する開示はなく、細胞の増殖にとって最適な足場となっていない可能性がある。
【００１２】
さらに、特許文献５には、マルチフィラメント中の単繊維の配向及び繊維径という物理的性質を制御することで細胞増殖に適した足場材料を提供することが開示されているが、血栓形成を防止する方法については記載がない。
【００１３】
非特許文献１は、ヘパリンを表面に固定化した基質を細胞培養方法又は基材として用いることを示唆しているが、生体インプラント用の材料に応用することについて具体的な記載はない。また、キトサンを固定化し、固定化したキトサンにヘパリンをイオン結合させることにより固定化したヘパリンを含む表面が、ヘパリンを含まない表面に比べて高い接着性を示すのは細胞播種後２週間までであり、４週間後以降の接着性はヘパリンを含まない表面と同程度となることから、当該技術を生体インプラント材料に適用した場合、長期間の生体適合性を発揮する可能性は低い。
【００１４】
このように、従来技術を用いても、繊維表面に固定化したヘパリンの親水性により細胞の接着性が低下する効果のため、抗血栓性と細胞接着性の両立によってインプラント用の医療材料に求められる早期の内皮化による抗血栓性を達成することはできなかった。
【００１５】
そこで、本発明は、抗血栓性と細胞接着性を兼ね備えることにより、早期の内皮化による抗血栓性の維持が可能なインプラント用の医療材料を提供することを目的とする。
【課題を解決するための手段】
【００１６】
本発明は、上記課題を解決するため鋭意研究を重ねた結果、（１）〜（３）の発明を見出した。
（１）  平均繊維径が１μｍ〜１５μｍの単繊維を含み、かつ、以下の式１の条件を満たすマルチフィラメントと、アルキレンイミンを構成モノマーとして含む窒素含有ポリマーと、重量平均分子量が２０００〜７０００の低分子量ヘパリンと、を備え、上記アルキレンイミンを構成モノマーとして含む窒素含有ポリマーは、上記マルチフィラメント中の上記単繊維と共有結合し、上記低分子量ヘパリンは、上記アルキレンイミンを構成モノマーとして含む窒素含有ポリマーとイオン結合している、インプラント用の医療材料。
（Ｙ／Ｘ）×１００≧５０  ・・・式１
［式中、Ｘは、交差平均角度を調べた単繊維の本数を表し、Ｙは、Ｘの内で交差平均角度が２５度以下の単繊維の本数を表す。］
（２）  上記低分子量ヘパリンの抗Ｘａ因子活性と抗トロンビン活性との比は、２．０〜１０．０である、（１）記載のインプラント用の医療材料。
（３）  （１）又は（２）記載の医療材料を備える、心血管インプラント用の医療器材。
【００１７】
また、本発明者らは、上記課題を解決すべく鋭意研究を重ねた結果、（４）〜（６）の発明を見出した。
（４）  平均繊維径が１μｍ〜１５μｍの単繊維を含み、かつ、以下の式１の条件を満たすマルチフィラメントと、アルキレンイミンを構成モノマーとして含む窒素含有ポリマーと、重量平均分子量が４０００〜７０００の低分子量ヘパリンと、を備え、上記アルキレンイミンを構成モノマーとして含む窒素含有ポリマーは、上記マルチフィラメント中の上記単繊維と共有結合し、上記低分子量ヘパリンは、上記アルキレンイミンを構成モノマーとして含む窒素含有ポリマーとイオン結合している、インプラント用の医療材料。
（Ｙ／Ｘ）×１００≧５０  ・・・式１
［式中、Ｘは、交差平均角度を調べた単繊維の本数を表し、Ｙは、Ｘの内で交差平均角度が２５度以下の単繊維の本数を表す。］
（５）  上記低分子量ヘパリンの抗Ｘａ因子活性と抗トロンビン活性との比は、２．０〜４．５である、（４）記載のインプラント用の医療材料。
（６）  （４）又は（５）記載の医療材料を備える、心血管インプラント用の医療器材。
【発明の効果】
【００１８】
本発明の医療材料によれば、抗血栓性と細胞接着性を両立することができ、早期の内皮化による抗血栓性の維持が可能なインプラント用の医療材料として使用でき、特に心血管インプラント用の医療器材として好適に使用できる。
【発明を実施するための形態】
【００１９】
本発明のインプラント用の医療材料は、平均繊維径が１μｍ〜１５μｍの単繊維を含み、かつ、以下の式１の条件を満たすマルチフィラメントと、アルキレンイミンを構成モノマーとして含む窒素含有ポリマーと、重量平均分子量が２０００〜７０００の低分子量ヘパリンと、を備え、上記アルキレンイミンを構成モノマーとして含む窒素含有ポリマーは、上記マルチフィラメント中の上記単繊維と共有結合し、上記低分子量ヘパリンは、上記アルキレンイミンを構成モノマーとして含む窒素含有ポリマーとイオン結合していることを特徴としている。
（Ｙ／Ｘ）×１００≧５０  ・・・式１
［式中、Ｘは、交差平均角度を調べた単繊維の本数を表し、Ｙは、Ｘの内で交差平均角度が２５度以下の単繊維の本数を表す。］
【００２０】
医療器材とは、医療機器及び医療器具を示す。ここで、医療機器及び医療器具として、具体的には、人工肺、人工心臓、人工弁、左心耳閉塞デバイス、ペースメーカー、人工血管、ステント、ステントグラフト、血管カテーテル、遊離血栓捕獲器具、血管閉塞器具、血管内視鏡、縫合糸、人工腎臓、血液回路、チューブ類、カニューレ、血液バッグ及び注射器等が挙げられるが、特に生体への埋め込み後に表面の組織による被覆又は新生内膜による被覆を促進するため、上記のインプラント用の医療材料は、人工肺、人工心臓、人工弁、左心耳閉塞デバイス、ペースメーカー、人工血管、ステント、ステントグラフト、血管カテーテル、遊離血栓捕獲器具、血管閉塞器具等のインプラント用の医療器材に好適に用いることができる。さらに、本発明のインプラント用の医療材料は、繊維を用いることで伸縮性、柔軟性及び耐圧性等の特性を有することから、左心耳閉塞デバイス等の心血管インプラント用の医療器材により好適に利用することができる。
【００２１】
上記の医療材料とは、医療器材を構成する材料として用いることができる材料である。本発明のインプラント用の医療材料は、マルチフィラメントと、アルキレンイミンを構成モノマーとして含む窒素含有ポリマー及び重量平均分子量が２０００〜７０００の低分子量ヘパリンを有しており、上記医療器材は、上記医療材料を備えている。
【００２２】
マルチフィラメントとは、単繊維を複数本束ねることで形成された繊維束を意味し、交差平均角度Ｓが２５度以下の単繊維とは、マルチフィラメントに含まれる各単繊維同士が交差しており、かつ、交差平均角度Ｓが２５度以下である単繊維、若しくは、マルチフィラメントを構成する各単繊維同士が交差していない（交差平均角度Ｓ＝０度）単繊維を意味している。
【００２３】
低分子量ヘパリンとは、重量平均分子量が２０００〜７０００の範囲の低分子量であるヘパリンを意味している（以下、低分子量ヘパリンは通常、重量平均分子量が２０００〜７０００の範囲のヘパリンを指す）。上記医療材料において、低分子量ヘパリンは、重量平均分子量が２０００〜７０００の範囲の低分子量ヘパリンを用いることが好ましく、重量平均分子量が４０００〜７０００の範囲の低分子量ヘパリンを用いることがより好ましく、重量平均分子量が４４００〜５０００の範囲の低分子量ヘパリンを用いることがさらにより好ましい。また、低分子量ヘパリンの重量平均分子量は、液体クロマトグラフィーにより測定することができる。
【００２４】
交差平均角度Ｓとは、インプラント用の医療材料中から任意に選んだマルチフィラメントを、４００倍に拡大した写真（視野範囲の面積：約０．４８ｍｍ２）をもとに、マルチフィラメント中の単繊維が、隣接する単繊維と交差している箇所に着目し、交差する角度の大きいものから３つをピックアップし、その３つの交差角度から平均値を算出したものを意味している。なお、交差角度は、２本の単繊維が交差して形成される２つの角度のうち小さい方の角度、すなわち０度〜９０度の値をとる角度とする。さらに、マルチフィラメント内において交差角度が２５度以上となる箇所がまったく見当たらない場合、マルチフィラメントを構成する各単繊維同士が交差していない（交差平均角度Ｓ＝０度）ものとした。
【００２５】
マルチフィラメントに含まれる各単繊維同士の交差平均角度Ｓが２５度以上になると、単繊維の配向が異なることにより、細胞接着性及び細胞増殖性が低下する。単繊維の配向を揃えるためには、編物や織物を製造する際にマルチフィラメントの糸切れや毛羽等の繊維方向の乱れがないように留意し、マルチフィラメントの部分での起毛やウォータージェットパンチ等の外力付加を行う工程を避けることが好ましい。また、交差平均角度Ｓが０度であることが、単繊維の配向の点で最も好ましい。
【００２６】
本発明の医療材料は、マルチフィラメント中の交差平均角度Ｓが２５度以下の単繊維の比率が以下の式１を満たす。Ｘ＝４０の場合、試料を交点の角度が９０度になるように４等分にし、それぞれの箇所で１０本ずつの単繊維（全体で４０本の単繊維）の交差平均角度を測定（１本あたり３箇所観察して全体で１２０箇所を測定）する。
（Ｙ／Ｘ）×１００≧５０  ・・・式１
［式中、Ｘは、交差平均角度を調べた単繊維の本数を表し、Ｙは、Ｘの内で交差平均角度が２５度以下の単繊維の本数を表す。］
【００２７】
上記の式１において、（Ｙ／Ｘ）×１００の値は、５０以上であると、細胞が単繊維の配向に沿って増殖できるため好ましく、１００であることが最も好ましい。
【００２８】
平均繊維径とは、マルチフィラメント中の単繊維の断面を走査型電子顕微鏡（株式会社日立ハイテクノロジーズ製）で任意の１０箇所を観察し、その直径の平均値から算出したものである。
【００２９】
上記マルチフィラメント中の単繊維の平均繊維径は、細胞の接着性を向上させるため、１μｍ〜１５μｍであることが好ましく、さらに好ましくは１μｍ〜１０μｍであることが好ましい。
【００３０】
上記マルチフィラメントは、例えば、不織布、織物、編物又は組みひも等の繊維構造体を構成していることが好ましい。上記マルチフィラメントを心血管インプラント用の医療材料に用いる場合、心臓の拍動に追従するため伸縮性及び柔軟性が要求され、また血圧に耐える耐圧性が要求されることから、編物又は織物の繊維構造体を構成していることがより好ましい。
【００３１】
上記単繊維の種類は限定されないが、マルチフィラメントの表面に配置された単繊維が、ポリエステル、ポリプロピレン、ナイロン、アクリル、ポリアミド及びポリスチレンからなる群から選択されるポリマーからなる単繊維であることが好ましく、コストと細胞接着性の観点から、ポリエステルからなる単繊維であることがより好ましい。
【００３２】
上記単繊維は、ポリエチレンテレフタレート、ポリブチレンテレフタレート又はナイロンからなる単繊維であることが好ましく、ポリエチレンテレフタレート又はポリブチレンテレフタレートからなる単繊維であることがより好ましい。
【００３３】
上記アルキレンイミンを構成モノマーとして含む窒素含有ポリマーの構成モノマーであるアルキレンイミンは、カチオン性の窒素原子を有するため、窒素含有ポリマーはカチオン性を示し、一方、低分子量ヘパリンはアニオン性を示すため、イオン結合することが可能である。ここで、構成モノマーとは、ポリマーを構成する繰り返し単位の由来となるモノマーを指し、アルキレンイミンを構成モノマーとして含むポリマーの場合であれば、アルキレンイミンが由来の繰り返し単位を有する。
【００３４】
アルキレンイミンを構成モノマーとして含む窒素含有ポリマーは、単独重合体であってもよく、共重合体であってもよい。ポリマーが共重合体である場合には、ランダム共重合体、ブロック共重合体、グラフト共重合体又は交互共重合体のいずれであってもよいが、低分子量ヘパリンと多点的にイオン結合できるため、窒素原子を含んだ繰り返し単位が連続するブロック重合体であることがより好ましい。
【００３５】
単独重合体とは、１種類の構成モノマーを重合して得られる高分子化合物をいい、共重合体とは、２種類以上のモノマーを共重合して得られる高分子化合物をいう。中でもブロック共重合体とは、繰り返し単位の異なる少なくとも２種類以上のポリマーが共有結合でつながり、長い連鎖になったような分子構造の共重合体をいい、ブロックとは、ブロック共重合体を構成する「繰り返し単位の異なる少なくとも２種類以上のポリマー」のそれぞれを指す。
【００３６】
アルキレンイミンを構成モノマーとして含む窒素含有ポリマーは直鎖状でもよいし、分岐状でもよいが、低分子量ヘパリンと多点的にイオン結合を形成しやすくなるため、分岐状であることがより好ましい。
【００３７】
低分子量ヘパリンとイオン相互作用に基づく吸着量が多いことから、アルキレンイミンを構成モノマーとして含む窒素含有ポリマーとしてポリアルキレンイミンを用いることが好ましい。ポリアルキレンイミンは、ポリエチレンイミン、ポリプロピレンイミン、ポリブチレンイミン及びアルコキシル化されたポリアルキレンイミン等が挙げられるが、カチオン性の窒素原子が最も高密度で存在するため、アルキレンイミンを構成モノマーとして含む窒素含有ポリマーは、ポリエチレンイミンがより好ましい。
【００３８】
ポリエチレンイミンの具体例としては、“ＬＵＰＡＳＯＬ”（登録商標）（ＢＡＳＦ社製）や“ＥＰＯＭＩＮ”（登録商標）（株式会社日本触媒製）等が挙げられるが、本発明の効果を妨げない範囲で他のモノマーとの共重合体であってもよく変性体であってもよい。ここでいう変性体とは、ポリマーを構成するモノマーの繰り返し単位は同じであるが、例えば、後述する放射線の照射により、その一部がラジカル分解や再結合等を起こしているものを指す。
【００３９】
アルキレンイミンを構成モノマーとして含む窒素含有ポリマーは、特に限定されるものではないが、性能に影響を与えない範囲で他のモノマーを含んでいてもよく、例えば、エチレングリコール、プロピレングリコール、ビニルピロリドン、ビニルアルコール、ビニルカプロラクタム、酢酸ビニル、スチレン、メチルメタクリレート、ヒドロキシエチルメタクリレート及びシロキサン等のモノマーを含んでいてもよい。
【００４０】
上記のアルキレンイミンを構成モノマーとして含む窒素含有ポリマーの重量平均分子量は、６００以上であることが好ましく、１，０００以上であることがより好ましく、１０，０００以上であることがさらにより好ましい。また、アルキレンイミンを構成モノマーとして含む窒素含有ポリマーの重量平均分子量は、２，０００，０００以下であることが好ましく、１，５００，０００以下であることがより好ましく、１，０００，０００以下であることがさらに好ましい。アルキレンイミンを構成モノマーとして含む窒素含有ポリマーの重量平均分子量は、例えば、ゲル・パーミエーション・クロマトグラフィー法や、光散乱法等により測定することができる。
【００４１】
上記インプラント用の医療材料において、上記低分子量ヘパリンは、アルキレンイミンを構成モノマーとして含む窒素含有ポリマーと、低分子量ヘパリンとをイオン結合させてからマルチフィラメント中の単繊維と共有結合させてもよいし、アルキレンイミンを構成モノマーとして含む窒素含有ポリマーをマルチフィラメント中の単繊維と共有結合させてから、アルキレンイミンを構成モノマーとして含む窒素含有ポリマーと、低分子量ヘパリンとをイオン結合させてもよい。
【００４２】
本発明に用いた低分子量ヘパリンの重量平均分子量は、日本薬局方「パルナパリンナトリウム」の「分子量」の項記載の方法により、液体クロマトグラフィーにより測定することができる。
【００４３】
上記低分子量ヘパリンは、酸性溶媒中のヘパリンに亜硝酸ナトリウムを添加しヘパリンを分解する方法、ヘパリンが持つエステル結合をアルカリ処理してヘパリンを分解する方法、過酸化水素水の存在下で発生するフリーラジカルによりヘパリンを分解する方法、非水性溶媒中で強塩基を用いることでヘパリンの四級アンモニウム塩部位でβ脱離反応を起こしヘパリンを分解する方法及びヘパリナーゼを用いて酵素特異的にヘパリンを分解する方法等の化学的手法によるヘパリンの解重合により得ることができる。
【００４４】
上記低分子量ヘパリンのうち、臨床で一般的に用いられている例としては、レビパリン、エノキサパリン、パルナパリン、セルトパリン、ダルテパリン及びチンザパリン等を挙げることができる。
【００４５】
上記低分子量ヘパリンは、未分画ヘパリンに比べて糖鎖が短いため、アンチトロンビンには結合できるがトロンビンには結合できないことから、抗トロンビン活性に対して抗ファクターＸａ活性が高い。そのため、低分子量ヘパリンの抗ファクターＸａ活性と抗トロンビン活性との比は、２．０〜１０．０が好ましく、２．０〜４．５がより好ましい。
【００４６】
抗ファクターＸａ活性は日本薬局方「パルナパリンナトリウム」の「定量法」の項に記載の方法に準じて、“テストチーム（登録商標）  ヘパリンＳ”（積水メディカル株式会社製）を用いて測定することにより、低分子量ヘパリン１ｍｇ中の抗ファクターＸａ活性を測定することができる。
【００４７】
抗トロンビン活性は、日本薬局方「パルナパリンナトリウム」の「抗第ＩＩａ因子活性」の項に記載の方法に準じて、自動血液凝固装置ＣＡ−５０（シスメックス株式会社製）を用いて、低分子量ヘパリンの生理食塩液溶液およびヒト血漿（血液凝固試験用標準ヒト血漿、シスメックス株式会社製）を等量混合した溶液５０μＬを３７℃で１分間加温し、活性部分トロンボプラスチン時間測定用試液（アクチンＦＳＬ、シスメックス株式会社製）５０μＬを添加し、３７℃で２分間インキュベートした後に塩化カルシウム溶液（０．０２Ｍ塩化カルシウム液、シスメックス株式会社製）５０μＬを添加して、フィブリンの凝固が起こるまでの時間を測定することにより、低分子量ヘパリン１ｍｇ中の抗トロンビン活性を測定することができる。
【００４８】
抗ファクターＸａ活性と抗トロンビン活性との比は、低分子量ヘパリン１ｍｇ中の抗ファクターＸａ活性の値を低分子量ヘパリン１ｍｇ中の抗トロンビン活性の値で除して求めることができる。
【００４９】
アルキレンイミンを構成モノマーとして含む窒素含有ポリマーが血液等の体液中に溶出すると、アニオン性の抗凝固活性を有する有機硫黄化合物を単繊維の表面に保持できなくなるため、アルキレンイミンを構成モノマーとして含む窒素含有ポリマーは単繊維の表面と共有結合している。
【００５０】
本発明においては、アルキレンイミンを構成モノマーとして含む窒素含有ポリマー及び単繊維の表面が有する原子（具体的には炭素、窒素、酸素、硫黄等）同士の共有結合であり、単結合であっても多重結合であってもよい。アルキレンイミンを構成モノマーとして含む窒素含有ポリマーが単繊維と共有結合していることは、アルキレンイミンを構成モノマーとして含む窒素含有ポリマーの良溶媒で洗浄した際の洗浄液中にアルキレンイミンを構成モノマーとして含む窒素含有ポリマーが溶出しないことから判定することができる。ここで、アルキレンイミンを構成モノマーとして含む窒素含有ポリマーの良溶媒としては、単繊維を溶解せず、共有結合を化学的に切断しない溶媒を選択する。
【実施例】
【００５１】
以下、実施例及び比較例を挙げて詳細に説明するが、本発明はこれらに限定されるものではない。また、実施例及び比較例中の単糸繊度は、ＪＩＳ  Ｌ  １０１３（２０１０）８．３．１  Ａ法に従って、所定荷重０．０４５ｃＮ／ｄｔｅｘで正量繊度を測定して総繊度とし、それを単繊維数で除することで単糸繊度を算出している。
【００５２】
（実施例１）
総繊度が６６ｄｔｅｘ、９フィラメントの海島複合繊維であるマルチフィラメント糸を経糸及び緯糸として使用し、脱海処理後の織密度が経糸１６９本／２．５４ｃｍ、緯糸１２４本／２．５４ｃｍの平織物を作製した。
【００５３】
ここで、海島複合繊維は、島成分がポリエチレンテレフタレートで構成され、海成分が５−ナトリウムスルホイソフタル酸を共重合したポリエチレンテレフタレートで構成される。
【００５４】
次に、経糸及び緯糸の脱海処理を行うため、平織物に対し次の（ｃ−１）酸処理工程及び（ｃ−２）アルカリ処理工程を行い、マルチフィラメントからなる平織物で構成された繊維構造体１を得た。
（ｃ−１）酸処理工程
酸としてマレイン酸を使用した。平織物を０．２重量％のマレイン酸水溶液に浸漬し、１３０℃まで昇温した後、３０分加熱することで酸処理を行った。
（ｃ−２）アルカリ処理工程
アルカリとして水酸化ナトリウムを使用した。平織物を１重量％の水酸化ナトリウム水溶液に浸漬し、８０℃まで昇温した後、９０分加熱することでアルカリ処理を行った。
【００５５】
得られた繊維構造体１の経糸及び緯糸のポリエチレンテレフタレート製のマイクロファイバーマルチフィラメント糸の総繊度は、５２．８ｄｔｅｘ、６３０フィラメントであった。
【００５６】
繊維構造体１に抗血栓処理を行った。硫酸を０．６ｍｏｌ／Ｌ、過マンガン酸カリウム（和光純薬工業株式会社製）を３．０重量％含む水溶液に繊維構造体１を浸漬し、６０℃で３時間反応させて繊維構造体１の表面を加水分解及び酸化した（加水分解及び酸化する工程）。反応後に水溶液を除去し、塩酸を６ｍｏｌ／Ｌ含む水溶液で３回、蒸留水で１回洗浄した。
【００５７】
４（−４，６−ジメトキシ−１，３，５−トリアジン−２−イル）−４−メチルモルフォリニウムクロリドｎ水和物（以下、「ＤＭＴ−ＭＭ」）（和光純薬工業株式会社製）を２．０重量％、ポリエチレンイミン（ＬＵＰＡＳＯＬ（登録商標）  Ｐ；ＢＡＳＦ社製、重量平均分子量：７５０，０００）を５．０重量％含む水溶液に繊維構造体１を浸漬し、５０℃で２時間反応させて繊維構造体１にポリエチレンイミンを縮合反応により共有結合させた。反応後に水溶液を除去し、５０℃の蒸留水及びＰＢＳ（−）（日水製薬株式会社製）で洗浄した。
【００５８】
臭化エチルを１．０容量％、メタノールを３０容量％含む水溶液に繊維構造体１を浸漬し、３５〜５０℃で５時間反応させ、繊維構造体の表面に共有結合されたポリエチレンイミンを第４級アンモニウム化した。ポリエチレンイミンを第４級アンモニウム化した後に水溶液を除去し、メタノールを３０容量％含む水溶液及び蒸留水で洗浄した。
【００５９】
ダルテパリンナトリウム（ダルテパリンＮａ静注５０００単位／５ｍＬ「サワイ」、沢井製薬株式会社製）を５４国際単位／ｍＬ、塩化ナトリウムを０．１ｍｏｌ／Ｌ含む水溶液を調製し、ｐＨ４に調整した。繊維構造体１をこの水溶液に浸漬し、７０℃で６時間反応させて、ポリエチレンイミンとイオン結合させた。水溶液を除去し、蒸留水で洗浄後、真空乾燥した。真空乾燥後にエチレンオキシドガス滅菌を行い、これを実施例１とした。実施例１において使用したダルテパリンナトリウムの走査型電子顕微鏡（株式会社日立ハイテクノロジーズ製）で単繊維の平均繊維径を評価した結果、単繊維の平均繊維径は２．５μｍであった。また、交差平均角度ＳをマイクロスコープＶＨＸ‐２０００（株式会社キーエンス製）を用いて測定したところ、実施例１において、上記式１の（Ｙ／Ｘ）×１００の値は、１００であった。
【００６０】
また、実施例１に用いたダルテパリンナトリウムの抗ファクターＸａ活性を“テストチーム（登録商標）  ヘパリンＳ”（積水メディカル株式会社製）を用いて測定し、抗トロンビン活性を自動血液凝固装置ＣＡ−５０（シスメックス株式会社製）を用いて測定し、抗ファクターＸａ活性と抗トロンビン活性の比を算出したところ、抗ファクターＸａ活性と抗トロンビン活性の比は、２．４であった。未分画ヘパリンに比べて糖鎖が短く分子量が小さい低分子量ヘパリンは、アンチトロンビンＩＩＩとは結合できるがトロンビンとは結合できない。抗ファクターＸａ活性を発揮するためには、ヘパリンとアンチトロンビンＩＩＩとの結合のみで十分であるが、抗トロンビン活性を発揮するためには、ヘパリンがアンチトロンビンとトロンビンの両者に結合する必要がある。抗トロンビン活性が強すぎると出血の副作用が発現することから、抗ファクターＸａ活性と抗トロンビン活性の比は、１．０よりも大きい場合、副作用を低減するためにより好ましいと考えられる。
【００６１】
実施例１に固定化されたダルテパリンナトリウムの重量平均分子量を、ゲル浸透クロマトグラフィー（以下、ＧＰＣ）によって測定した。塩化ナトリウムを０．０１ｍｏｌ／Ｌ、ホウ酸を０．６ｍｏｌ／Ｌを含む水溶液を調製し、ｐＨ９に調整した。この水溶液に実施例１を２４時間浸漬した後、実施例１を除去し、溶液を凍結乾燥して溶出物を回収した。
【００６２】
［前処理条件］
溶出物を０．１Ｍ塩化ナトリウム水溶液に１ｍｇ／ｍＬの濃度となるよう溶解し、ＨＰＬＣ用メンブレンフィルター“ＤＩＳＭＩＣ−１３ＨＰ”（孔径０．４５μｍ、アドバンテック東洋株式会社製）にて不溶物除去し、測定サンプルとした。実施例１に用いたダルテパリンナトリウム１ｍｇ／ｍＬを０．１Ｍ塩化ナトリウム水溶液に溶解し、上記と同様の操作を行って測定サンプルとした。
【００６３】
［測定条件］
装置：高速液体クロマトグラフＰｒｏｍｉｎｅｎｃｅ（株式会社島津製作所製）
移動相：０．１Ｍ塩化ナトリウム水溶液（ＨＰＬＣ）（和光純薬工業株式会社製）
流速：０．５ｍＬ／分
注入量: １００μＬ
カラム：ＯＨ−ＰＡＫ  ＳＢ−８０４ＨＱ（φ７．８ｍｍ×３００ｍｍ、昭和電工株式会社製）
検出器：ＲＩ
カラム、検出器温度：４０℃
標準物質：プルラン（Ｓｈｏｄｅｘ  Ｓｔａｎｄａｒｄ  Ｐｕｌｌｕｌａｎ  Ｐ−８２およびＰ−１、昭和電工株式会社製）
【００６４】
実施例１から溶出物中のダルテパリンナトリウムの分子量は１５１９９と算出されたのに対し、実施例１に用いた固定化前のダルテパリンナトリウムの分子量は１５８６２と算出された。両者の間に差がなかったことから、本発明記載の医療材料に固定化された低分子量ヘパリンの重量平均分子量は、固定化前の低分子量ヘパリンの重量平均分子量と同等のものであると判断した。
【００６５】
（実施例２）
製織工程において、下記の経糸（経糸Ａ及びＢ）並びに緯糸（緯糸Ｃ及びＤ）を使用した。
経糸Ａ（海島複合繊維）：ポリエチレンテレフタレート繊維、６６ｄｔｅｘ、９フィラメント（脱海処理後：５２．８ｄｔｅｘ、６３０フィラメント）
経糸Ｂ（溶解糸）：５−ナトリウムスルホイソフタル酸を共重合した易アルカリ溶解性のポリエステル繊維、８４ｄｔｅｘ、２４フィラメント
緯糸Ｃ（内層）（海島複合繊維）：ポリエチレンテレフタレート繊維、６６ｄｔｅｘ、９フィラメント（脱海処理後：５２．８ｄｔｅｘ、６３０フィラメント）
緯糸Ｄ（外層）：ポリエチレンテレフタレート繊維、５６ｄｔｅｘ、１８フィラメント
【００６６】
そして、製織時において、ジャガードシャトル織機を用いて、経糸Ｂの張力を０．９ｃＮ／ｄｔｅｘ、経糸Ａの張力を０．１ｃＮ／ｄｔｅｘとして、経糸Ａ（後加工後の織密度が２０１本／２．５４ｃｍ）、緯糸Ｃ（後加工後の織密度が１２１本／２．５４ｃｍ）、緯糸Ｄ（後加工後の織密度が１２１本／２．５４ｃｍ）となる、内径３ｍｍの筒状織物を製織した。なお、経糸Ａと経糸Ｂの配置は、経糸Ａ３本に対して経糸Ｂ１本の比率で配置した。また、経糸Ｂは、内層に位置する緯糸Ｃと外層に位置する緯糸Ｄの間に配置した。
【００６７】
次に、下記の工程により、後加工を行い、人工血管１を得た。
（ａ）湯洗工程
筒状織物を９８℃のお湯に２０分浸漬し、筒状織物を湯洗した。
（ｂ）プレ熱セット工程
外径２．８ｍｍの丸棒（材質：ステンレス鋼）を筒状織物の内腔に挿入し、両端を針金で固定した。筒状織物及び丸棒をオーブンに入れ、丸棒に取り付けた温度計が１８０℃であることを確認してから５分間加熱することで、プレ熱セットを行った。
（ｃ）脱海処理工程
経糸Ａ及び緯糸Ｃの脱海処理を行うとともに、経糸Ｂの溶解除去を行うため、（ｃ−１）酸処理工程及び（ｃ−２）アルカリ処理工程を行った。
（ｃ−１）酸処理工程
酸としてマレイン酸を使用した。筒状織物を０．２重量％のマレイン酸水溶液に浸漬し、１３０℃まで昇温した後、３０分加熱することで酸処理を行った。
（ｃ−２）アルカリ処理工程
アルカリとして水酸化ナトリウムを使用した。筒状織物を１重量％の水酸化ナトリウム水溶液に浸漬し、８０℃まで昇温した後、９０分加熱することでアルカリ処理を行った。
（ｄ）熱セット（１回目）工程
外径３ｍｍの丸棒（材質：ステンレス鋼）を筒状織物の内腔に挿入し、経糸Ａ方向にシワが入らないよう最大限圧縮した状態で、両端を針金等で固定した。筒状織物及び丸棒をオーブンに入れ、丸棒に取り付けた温度計が１８０℃であることを確認してから５分間加熱することで、熱セット（１回目）を行った。
（ｅ）熱セット（２回目）工程
【００６８】
外径３ｍｍの丸棒（材質：ステンレス鋼）を筒状織物の内腔に挿入し、経糸Ａ方向に３０％伸長した状態で、両端を針金等で固定した。筒状織物及び丸棒をオーブンに入れ、丸棒に取り付けた温度計が１７０℃であることを確認してから５分間加熱することで、熱セット（２回目）を行った。
【００６９】
繊維構造体１に変えて、上記で得られた人工血管１を用いた点を除き、実施例１と同様の抗血栓処理及びエチレンオキシドガス滅菌を行い、実施例２を得た。片刃カミソリを用いて実施例２を長軸方向に切開し、内表面の繊維について走査型電子顕微鏡（株式会社日立ハイテクノロジーズ製）で単繊維の平均繊維径を評価した結果、単繊維の平均繊維径は２．５μｍであった。交差平均角度ＳをマイクロスコープＶＨＸ‐２０００（株式会社キーエンス製）を用いて測定したところ、実施例２において、上記式１の（Ｙ／Ｘ）×１００の値は、１００であった。
【００７０】
（実施例３）
実施例１の抗血栓性処理において、ダルテパリンナトリウム（ダルテパリンＮａ静注５０００単位／５ｍＬ「サワイ」、沢井製薬株式会社製）を５４国際単位／ｍＬ、塩化ナトリウムを０．１ｍｏｌ／Ｌ含む水溶液をｐＨ６に調整した点を除き、実施例１と同様の抗血栓処理を行った。抗血栓処理後にエチレンオキシドガス滅菌を行い、これを実施例３とした。走査型電子顕微鏡（株式会社日立ハイテクノロジーズ製）で単繊維の平均繊維径を評価した結果、単繊維の平均繊維径は、２．５μｍであった。交差平均角度ＳをマイクロスコープＶＨＸ‐２０００（株式会社キーエンス製）を用いて測定したところ、実施例３において、上記式１の（Ｙ／Ｘ）×１００の値は、１００であった。
【００７１】
（実施例４）
実施例１の繊維構造体１の代わりに、ポリエステル繊維からなる単繊維から構成された、単糸繊度が約２．３３ｄｔｅｘ、総繊度８４ｄｔｅｘのマルチフィラメントを用いて作製した編物を用いた以外は、実施例１に記載の抗血栓処理と同様の抗血栓処理及びエチレンオキシドガス滅菌を行い、実施例４を得た。走査型電子顕微鏡（株式会社日立ハイテクノロジーズ製）で単繊維の平均繊維径を評価した結果、単繊維の平均繊維径は１５μｍであった。交差平均角度ＳをマイクロスコープＶＨＸ‐２０００（株式会社キーエンス製）を用いて測定したところ、実施例４において、上記式１の（Ｙ／Ｘ）×１００の値は、１００であった。
【００７２】
（実施例５）
実施例１のダルテパリンナトリウムの代わりに、レビパリンナトリウム（クリバリン透析用１０００単位／ｍＬ  バイアル５ｍＬ、マイランＥＰＤ合同会社）を５４国際単位／ｍＬ、塩化ナトリウムを０．１ｍｏｌ／Ｌ含み、ｐＨ４に調整した水溶液を用いた以外は、実施例１に記載と同様の抗血栓処理を行った。抗血栓処理後にエチレンオキシドガス滅菌を行い、これを実施例５とした。走査型電子顕微鏡（株式会社日立ハイテクノロジーズ製）で単繊維の平均繊維径を評価した結果、単繊維の平均繊維径は２．５μｍであった。交差平均角度ＳをマイクロスコープＶＨＸ‐２０００（株式会社キーエンス製）を用いて測定したところ、実施例３において、上記式１の（Ｙ／Ｘ）×１００の値は１００となった。実施例５に用いたレビパリンナトリウムの抗ファクターＸａ活性を“テストチーム（登録商標）  ヘパリンＳ”（積水メディカル株式会社製）を用いて測定し、抗トロンビン活性を自動血液凝固装置ＣＡ−５０（シスメックス株式会社製）を用いて測定し、抗ファクターＸａ活性と抗トロンビン活性との比を算出したところ、抗ファクターＸａ活性と抗トロンビン活性との比は、４．３であった。
【００７３】
（実施例６）
実施例１の繊維構造体１の１０分の１部分をアブレイシブペーパーで起毛して、上記式１の（Ｙ／Ｘ）×１００の値が９０となるようにし、これを繊維構造体２とした。実施例１の繊維構造体１の代わりに、繊維構造体２を用いた以外は、実施例１に記載の抗血栓処理と同様の抗血栓処理及びエチレンオキシドガス滅菌を行い、実施例６を得た。走査型電子顕微鏡（株式会社日立ハイテクノロジーズ製）で単繊維の平均繊維径を評価した結果、単繊維の平均繊維径は２．５μｍであった。交差平均角度ＳをマイクロスコープＶＨＸ‐２０００（株式会社キーエンス製）を用いて測定したところ、実施例６において、上記式１の（Ｙ／Ｘ）×１００の値は、９０であった。
【００７４】
（実施例７）
実施例１の繊維構造体１の５分の１部分をアブレイシブペーパーで起毛して、上記式１の（Ｙ／Ｘ）×１００の値が８０となるようにし、これを繊維構造体３とした。実施例１の繊維構造体１の代わりに、繊維構造体３を用いた以外は、実施例１に記載の抗血栓処理と同様の抗血栓処理及びエチレンオキシドガス滅菌を行い、実施例７を得た。走査型電子顕微鏡（株式会社日立ハイテクノロジーズ製）で単繊維の平均繊維径を評価した結果、単繊維の平均繊維径は２．５μｍであった。交差平均角度ＳをマイクロスコープＶＨＸ‐２０００（株式会社キーエンス製）を用いて測定したところ、実施例７において、上記式１の（Ｙ／Ｘ）×１００の値は、８０であった。
【００７５】
（実施例８）
実施例２の人工血管１の内表面５分の１部分をアブレイシブペーパーで起毛して、上記式１の（Ｙ／Ｘ）×１００の値が８０となるようにし、これを人工血管２とした。実施例２の人工血管１の代わりに、人工血管２を用いた以外は、実施例２に記載の抗血栓処理と同様の抗血栓処理及びエチレンオキシドガス滅菌を行い、実施例８を得た。片刃カミソリを用いて実施例８を長軸方向に切開し、内表面の繊維について走査型電子顕微鏡（株式会社日立ハイテクノロジーズ製）で単繊維の平均繊維径を評価した結果、単繊維の平均繊維径は２．５μｍであった。交差平均角度ＳをマイクロスコープＶＨＸ‐２０００（株式会社キーエンス製）を用いて測定したところ、実施例８において、上記式１の（Ｙ／Ｘ）×１００の値は、８０であった。
【００７６】
（実施例９）
下記の（ａ）〜（ｅ）の工程を連続的に行なうことで、生成物１を得た。
（ａ）過ヨウ素酸によるヘパリン鎖の切断工程
ヘパリンナトリウム（Ｏｒｇａｎｏｎ  ＡＰＩ社製）を４重量％含む、４０℃の水溶液を調製し、塩酸を６ｍｏｌ／Ｌ含む水溶液を用いて溶液のｐＨを５．０に調節した。この溶液に、メタ過ヨウ素酸ナトリウム（和光純薬工業株式会社製）を４重量％含む、４℃の水溶液を攪拌しながら添加した。塩酸を６ｍｏｌ／Ｌ含む水溶液を用いて、溶液のｐＨを５．０に調節した。溶液を４℃で２４時間保存した。
（ｂ）残留過ヨウ素酸塩の除去工程
過ヨウ素酸によるヘパリン鎖の切断工程で得た溶液を、再生セルロース製の透析チューブ（多孔率３〜２０００Ｄａ）内に分散させ、蒸留水に対して１５時間透析を行った。
（ｃ）塩基性溶媒中での解重合工程
水酸化ナトリウムを１０ｍｏｌ／Ｌ含む水溶液を、残留過ヨウ素酸塩の除去工程で得た溶液に対して２容量％となるよう添加し、２０℃で３時間攪拌した。
（ｄ）還元工程
塩基性溶媒中での解重合工程で得た溶液に、水素化ホウ素ナトリウム（和光純薬工業株式会社製）を０．０６２５重量％となるよう添加し、２０℃で４時間攪拌した。塩酸を６ｍｏｌ／Ｌ含む水溶液を用いて溶液のｐＨを４．０に調節した。１５分間攪拌した後、水酸化ナトリウムを１０ｍｏｌ／Ｌ含む水溶液を用いてｐＨ７．０に調整した。この溶液に、塩化ナトリウム（和光純薬工業株式会社製）を２重量％となるよう添加し、さらに１．５倍容のエタノールを添加し、混合した。溶液を３時間静置した後、２５００回転で２０分間、遠心分離した。沈殿物を回収し、９９．５容量％エタノール（和光純薬工業株式会社製）２００ｍＬ中に懸濁させ、ホモジナイザーを用いて破砕し、ブフナーロートを用いて減圧濾過により回収した。回収物を４０℃で真空乾燥させた。
（ｅ）アルコール分画工程
還元工程で得た回収物８．９ｇを蒸留水１２０ｍＬに溶解させた。回収物の２０倍重量の塩化ナトリウムを添加し、塩酸を６ｍｏｌ／Ｌ含む水溶液を用いて溶液のｐＨを３．５に調節した。溶液中の塩化ナトリウム濃度が１ｇ／ｍＬとなるよう蒸留水を添加した。溶液量の５０％容の９９．５容量％エタノールを攪拌しながら添加した。さらに１５分間攪拌し、その後、溶液を室温で１０時間静置した。溶液を２５００回転で２０分間、遠心分離した。沈殿物を回収し、９９．５容量％エタノール１５０ｍＬ中に懸濁させ、ホモジナイザーを用いて破砕し、ブフナーロートを用いて減圧濾過により回収した。回収物を９９．５容量％エタノール３００ｍＬで洗浄し、４０℃で２４時間、真空乾燥させ、生成物１を得た。
【００７７】
生成物１の抗ファクターＸａ活性を“テストチーム（登録商標）  ヘパリンＳ”（積水メディカル株式会社製）を用いて測定し、抗トロンビン活性を自動血液凝固装置ＣＡ−５０（シスメックス株式会社製）を用いて測定し、抗ファクターＸａ活性と抗トロンビン活性の比を算出したところ、抗ファクターＸａ活性と抗トロンビン活性の比は、９．１であった。
【００７８】
生成物１の重量平均分子量を、日本薬局方「パルナパリンナトリウム」の「分子量」の項記載の方法により測定したところ、生成物１の重量平均分子量は、２５００であった。
【００７９】
実施例１のダルテパリンナトリウムの代わりに、生成物１を５４国際単位／ｍＬ、塩化ナトリウムを０．１ｍｏｌ／Ｌ含み、ｐＨ４に調整した水溶液を用いた以外は、実施例１に記載と同様の抗血栓処理を行った。抗血栓処理後にエチレンオキシドガス滅菌を行い、これを実施例９とした。走査型電子顕微鏡（株式会社日立ハイテクノロジーズ製）で単繊維の平均繊維径を評価した結果、単繊維の平均繊維径は２．５μｍであった。交差平均角度ＳをマイクロスコープＶＨＸ‐２０００（株式会社キーエンス製）を用いて測定したところ、実施例９において、上記式１の（Ｙ／Ｘ）×１００の値は、１００となった。
【００８０】
（実施例１０）
実施例２の抗血栓性処理において、生成物１を５４国際単位／ｍＬ、塩化ナトリウムを０．１ｍｏｌ／Ｌ含む水溶液をｐＨ６に調整した点を除き、実施例２と同様の抗血栓処理を行った。抗血栓処理後にエチレンオキシドガス滅菌を行い、これを実施例１０とした。片刃カミソリを用いて実施例１０を長軸方向に切開し、内表面の繊維について走査型電子顕微鏡（株式会社日立ハイテクノロジーズ製）で単繊維の平均繊維径を評価した結果、単繊維の平均繊維径は２．５μｍであった。交差平均角度ＳをマイクロスコープＶＨＸ‐２０００（株式会社キーエンス製）を用いて測定したところ、実施例１０において、上記式１の（Ｙ／Ｘ）×１００の値は、１００であった。
【００８１】
（実施例１１）
下記の（ａ）〜（ｃ）の工程を連続的に行なうことで、生成物２を得た。
（ａ）ヘパリンの解重合工程
ヘパリンナトリウム（Ｏｒｇａｎｏｎ  ＡＰＩ社製）１ｇを蒸留水５０ｍＬに溶解させ、ヘパリンナトリウムと同量の酢酸ナトリウム（和光純薬工業株式会社製）と、ヘパリンナトリウムの１０％量の塩化カルシウム（和光純薬工業株式会社製）を添加した。次亜塩素酸を０．５ｍｏｌ／Ｌ含む水溶液を用いてｐＨ７．２に調整した。ヘパリナーゼＩＩ（デクストララボラトリーズ社製）を０．４ｍｇ添加し、３０度で１５時間インキュベートした。９９．５容量％エタノール１０容にて沈殿させた後、得られた解重合生成物を乾燥した。
（ｂ）ゲル濾過による解重合混合物の分画工程
ＤＥＡＥセファデックス（登録商標）Ａ−２５（ＧＥヘルスケア・ジャパン株式会社製）５０ｍＬを充填したカラムを、塩化ナトリウムを０．１ｍｏｌ／Ｌ含み、ｐＨ７．０に調製した水溶液で平衡化させた。ヘパリンの解重合工程で得られた解重合生成物を、９０ｍｇ／ｍＬとなるよう塩化ナトリウムを０．１ｍｏｌ／Ｌ含み、ｐＨ７．０に調製した水溶液に溶解させ、カラムの頂部に載せた。塩化ナトリウムを０．１ｍｏｌ／Ｌ含み、ｐＨ７．０に調製した水溶液２５０ｍＬから、塩化カルシウムを０．５ｍｏｌ／Ｌ含み、ｐＨ７．０に調製した水溶液２５０ｍＬまでの勾配で溶出した。溶出液を１０ｍＬずつ採取し、波長２３２ｎｍにおける吸光度の最も高かった画分を集めた。
（ｃ）クロマトグラフィーによる生成物２の選択工程
アンチトロンビンを固定化したアガロースを充填したカラムを、塩化ナトリウムを０．１ｍｏｌ／Ｌ含む水溶液と０．０２５ｍｏｌ／Ｌのトリス−塩酸緩衝液（ｐＨ７．４）で平衡化した。ゲル濾過による解重合混合物の分画工程で得た画分を、カラム頂部に載せた。塩化カルシウムを２ｍｏｌ／Ｌ含む水溶液を用いて溶出し、１個のピークを得た。ピークを示す画分を含む溶出液に５倍容の９９．５容量％エタノールを添加し、形成された沈殿物を遠心分離により回収し、９９．５容量％エタノールで洗浄し、減圧下、６０度で乾燥させ、生成物２を得た。
【００８２】
生成物２の抗ファクターＸａ活性を“テストチーム（登録商標）  ヘパリンＳ”（積水メディカル株式会社製）を用いて測定し、抗トロンビン活性を自動血液凝固装置ＣＡ−５０（シスメックス株式会社製）を用いて測定し、抗ファクターＸａ活性と抗トロンビン活性の比を算出したところ、抗ファクターＸａ活性と抗トロンビン活性の比は、２５．０であった。
【００８３】
生成物２の重量平均分子量を、日本薬局方「パルナパリンナトリウム」の「分子量」の項記載の方法により測定したところ、生成物２の重量平均分子量は、４５００であった。
【００８４】
実施例１のダルテパリンナトリウムの代わりに、生成物２を５４国際単位／ｍＬ、塩化ナトリウムを０．１ｍｏｌ／Ｌ含み、ｐＨ４に調整した水溶液を用いた以外は、実施例１に記載と同様の抗血栓処理を行った。抗血栓処理後にエチレンオキシドガス滅菌を行い、これを実施例１１とした。走査型電子顕微鏡（株式会社日立ハイテクノロジーズ製）で単繊維の平均繊維径を評価した結果、単繊維の平均繊維径は２．５μｍであった。交差平均角度ＳをマイクロスコープＶＨＸ‐２０００（株式会社キーエンス製）を用いて測定したところ、実施例１１において、上記式１の（Ｙ／Ｘ）×１００の値は、１００となった。
【００８５】
（比較例１）
硫酸を０．６ｍｏｌ／Ｌ、過マンガン酸カリウム（和光純薬工業株式会社製）を５．０重量％含む水溶液に実施例１の繊維構造体１を浸漬し、６０℃で３時間反応させて繊維構造体１の表面を加水分解及び酸化した（加水分解及び酸化する工程）。反応後に水溶液を除去し、塩酸及び蒸留水で洗浄した。
【００８６】
続いて、ＤＭＴ−ＭＭ（和光純薬工業株式会社製）を０．５重量％、ポリエチレンイミン（ＬＵＰＡＳＯＬ（登録商標）  Ｐ；ＢＡＳＦ社製、重量平均分子量：７５０，０００）を５．０重量％含む水溶液に繊維構造体１を浸漬し、３０℃で２時間反応させて繊維構造体１にポリエチレンイミンを縮合反応により共有結合させた。反応後に水溶液を除去し、蒸留水等で洗浄した。
【００８７】
続いて、臭化エチルを１重量％、メタノールを３０重量％含む水溶液に繊維構造体１を浸漬し、３５℃で１時間反応させた後、５０℃に加温して４時間反応させ、ポリエチレンイミンを第４級アンモニウム化した。反応後の水溶液を除去し、メタノールや蒸留水で洗浄した。
【００８８】
最後に、ヘパリンナトリウム（Ｏｒｇａｎｏｎ  ＡＰＩ社製）を０．７５重量％、塩化ナトリウムを０．１ｍｏｌ／Ｌ含む水溶液（ｐＨ４に調整）に浸漬し、７０℃で６時間反応させて、アルキルスルホン酸化ポリエチレンイミンとイオン結合させた。水溶液を除去し、蒸留水で洗浄後、真空乾燥した。
【００８９】
真空乾燥後にエチレンオキシドガス滅菌を行い、これを比較例１とした。走査型電子顕微鏡（株式会社日立ハイテクノロジーズ製）で単繊維の平均繊維径を評価した結果、単繊維の平均繊維径は２．５μｍであった。交差平均角度ＳをマイクロスコープＶＨＸ‐２０００（株式会社キーエンス製）を用いて測定したところ、比較例１において、上記式１の（Ｙ／Ｘ）×１００の値は、１００であった。
【００９０】
比較例１に用いたヘパリンナトリウムの抗ファクターＸａ活性を“テストチーム（登録商標）  ヘパリンＳ”（積水メディカル株式会社製）を用いて測定し、抗トロンビン活性を自動血液凝固装置ＣＡ−５０（シスメックス株式会社製）を用いて測定し、抗ファクターＸａ活性と抗トロンビン活性との比を算出したところ、抗ファクターＸａ活性と抗トロンビン活性との比は、１．１であった。
【００９１】
（比較例２）
実施例２の人工血管１に対し、比較例１と同様の抗血栓処理を行い、抗血栓処理後にエチレンオキシドガス滅菌を行い、これを比較例２とした。走査型電子顕微鏡（株式会社日立ハイテクノロジーズ製）で単繊維の平均繊維径を評価した結果、単繊維の平均繊維径は２．５μｍであった。交差平均角度ＳをマイクロスコープＶＨＸ‐２０００（株式会社キーエンス製）を用いて測定したところ、比較例２において、上記式１の（Ｙ／Ｘ）×１００の値は、１００であった。
【００９２】
（比較例３）
実施例１の繊維構造体１にエチレンオキシドガス滅菌を行い、これを比較例３とした。走査型電子顕微鏡（株式会社日立ハイテクノロジーズ製）で単繊維の平均繊維径を評価した結果、単繊維の平均繊維径は２．５μｍであった。交差平均角度ＳをマイクロスコープＶＨＸ‐２０００（株式会社キーエンス製）を用いて測定したところ、比較例３において、上記式１の（Ｙ／Ｘ）×１００の値は、１００であった。
【００９３】
（比較例４）
ポリエステル繊維からなる単繊維から構成された単糸繊度が約５．６ｄｔｅｘ、総繊度８４ｄｔｅｘのマルチフィラメントが、経糸及び緯糸として構成されている織物を作製し、繊維構造体４とした。エチレンオキシドガス滅菌を行い、これを比較例４とした。走査型電子顕微鏡（株式会社日立ハイテクノロジーズ製）で単繊維の平均繊維径を評価した結果、単繊維の平均繊維径は２３μｍであった。交差平均角度ＳをマイクロスコープＶＨＸ‐２０００（株式会社キーエンス製）を用いて測定したところ、繊維構造体４において、上記式１の（Ｙ／Ｘ）×１００の値は、１００であった。
【００９４】
（比較例５）
走査型電子顕微鏡（株式会社日立ハイテクノロジーズ製）で実施例１の繊維構造体１中の単繊維の平均繊維径を評価した結果、単繊維の平均繊維径は２．５μｍであった。繊維構造体１の４分の３部分をアブレイシブペーパーで起毛して、上記式１の（Ｙ／Ｘ）×１００の値が２５となるように、境界部分を打抜きポンチで打ち抜き、これを繊維構造体５とした。繊維構造体５にエチレンオキシドガス滅菌を行い、これを比較例５とした。交差平均角度ＳをマイクロスコープＶＨＸ‐２０００（株式会社キーエンス製）を用いて測定したところ、比較例５において、上記式１の（Ｙ／Ｘ）×１００の値は、２５であった。
【００９５】
（比較例６）
実施例１の繊維構造体１の代わりに、比較例４の繊維構造体４を用いた以外は、実施例１に記載の抗血栓処理と同様の抗血栓処理及びエチレンオキシドガス滅菌を行い、比較例６を得た。走査型電子顕微鏡（株式会社日立ハイテクノロジーズ製）で単繊維の平均繊維径を評価した結果、単繊維の平均繊維径は２３μｍであった。交差平均角度ＳをマイクロスコープＶＨＸ‐２０００（株式会社キーエンス製）を用いて測定したところ、比較例６において、上記式１の（Ｙ／Ｘ）×１００の値は、１００であった。
【００９６】
（比較例７）
実施例１の繊維構造体１の代わりに、比較例５の繊維構造体５を用いた以外は、実施例１に記載の抗血栓処理と同様の抗血栓処理及びエチレンオキシドガス滅菌を行い、比較例７を得た。走査型電子顕微鏡（株式会社日立ハイテクノロジーズ製）で単繊維の平均繊維径を評価した結果、単繊維の平均繊維径は２．５μｍであった。交差平均角度ＳをマイクロスコープＶＨＸ‐２０００（株式会社キーエンス製）を用いて測定したところ、比較例７において、上記式１の（Ｙ／Ｘ）×１００の値は、２５であった。
【００９７】
（比較例８）
実施例２の抗血栓性処理において、ダルテパリンナトリウム（ダルテパリンＮａ静注５０００単位／５ｍＬ「サワイ」、沢井製薬株式会社製）を５４国際単位／ｍＬ、塩化ナトリウムを０．１ｍｏｌ／Ｌ含む水溶液を調製し、ｐＨ４に調整する代わりに、ヘパリンナトリウム（Ｏｒｇａｎｏｎ  ＡＰＩ社製）を０．７５重量％、塩化ナトリウムを０．１ｍｏｌ／Ｌ含む水溶液をｐＨ７に調整した点を除き、実施例２と同様の抗血栓処理を行った。抗血栓処理後にエチレンオキシドガス滅菌を行い、これを比較例８とした。片刃カミソリを用いて比較例８を長軸方向に切開し、内表面の繊維について走査型電子顕微鏡（株式会社日立ハイテクノロジーズ製）で単繊維の平均繊維径を評価した結果、単繊維の平均繊維径は２．５μｍであった。交差平均角度ＳをマイクロスコープＶＨＸ‐２０００（株式会社キーエンス製）を用いて測定したところ、比較例８において、上記式１の（Ｙ／Ｘ）×１００の値は、１００であった。
【００９８】
（比較例９）
実施例２におけるダルテパリンナトリウムをポリエチレンイミンとイオン結合させる工程の代わりに、０．７５重量％のヘパリンナトリウム（Ｏｒｇａｎｏｎ  ＡＰＩ社製）、５ｍｇ／ｍＬのＤＭＴ−ＭＭ（和光純薬工業株式会社製）を含む水溶液に人工血管１を浸漬し、３０℃で２時間反応させて、ＰＢＳで洗浄後に真空乾燥させた点を除き、実施例２と同様の抗血栓処理を行った。抗血栓処理後にエチレンオキシドガス滅菌を行い、これを比較例９とした。片刃カミソリを用いて比較例９を長軸方向に切開し、内表面の繊維について走査型電子顕微鏡（株式会社日立ハイテクノロジーズ製）で単繊維の平均繊維径を評価した結果、単繊維の平均繊維径は２．５μｍであった。交差平均角度ＳをマイクロスコープＶＨＸ‐２０００（株式会社キーエンス製）を用いて測定したところ、比較例９において、上記式１の（Ｙ／Ｘ）×１００の値は、１００であった。
【００９９】
（比較例１０）
ヘパリンナトリウム（Ｏｒｇａｎｏｎ  ＡＰＩ社製）６０ｇを２重量％となるよう４℃の蒸留水に溶解させ、亜硝酸ナトリウム（和光純薬工業株式会社製）を０．０５ｍｏｌ／Ｌとなるよう添加し、塩酸を６ｍｏｌ／Ｌ含む水溶液を用いてｐＨ２．５に調整した。４℃で１０分間攪拌し、水酸化ナトリウムを５ｍｏｌ／Ｌ含む水溶液を用いてｐＨ７．５に調整した。５倍容の９９．５容量％エタノールを添加し、形成された沈殿物を遠心分離により回収し、９９．５容量％エタノールで洗浄し、６０度で減圧乾燥させ、生成物３を得た。
【０１００】
生成物３の抗ファクターＸａ活性を“テストチーム（登録商標）  ヘパリンＳ”（積水メディカル株式会社製）を用いて測定し、抗トロンビン活性を自動血液凝固装置ＣＡ−５０（シスメックス株式会社製）を用いて測定し、抗ファクターＸａ活性と抗トロンビン活性の比を算出したところ、抗ファクターＸａ活性と抗トロンビン活性の比は、８６．７であった。
【０１０１】
生成物３の重量平均分子量を、日本薬局方「パルナパリンナトリウム」の「分子量」の項記載の方法により測定したところ、生成物３の重量平均分子量は、１０００であった。
【０１０２】
実施例１のダルテパリンナトリウムの代わりに、生成物３を５４国際単位／ｍＬ、塩化ナトリウムを０．１ｍｏｌ／Ｌ含み、ｐＨ４に調整した水溶液を用いた以外は、実施例１に記載と同様の抗血栓処理を行った。抗血栓処理後にエチレンオキシドガス滅菌を行い、これを比較例１０とした。走査型電子顕微鏡（株式会社日立ハイテクノロジーズ製）で単繊維の平均繊維径を評価した結果、単繊維の平均繊維径は２．５μｍであった。交差平均角度ＳをマイクロスコープＶＨＸ‐２０００（株式会社キーエンス製）を用いて測定したところ、比較例１０において、上記式１の（Ｙ／Ｘ）×１００の値は、１００となった。
【０１０３】
（比較例１１）
下記の（ａ）〜（ｃ）の工程を連続的に行なうことで、生成物４を得た。
（ａ）ヘパリンの解重合工程
ヘパリンナトリウム（Ｏｒｇａｎｏｎ  ＡＰＩ社製）を、酢酸ナトリウムを０．１５ｍｏｌ／Ｌ、塩化ナトリウムを０．１５ｍｏｌ／Ｌ、塩化カルシウムを０．００５ｍｏｌ／Ｌ含み、ｐＨ６．９に調整した水溶液に２重量％となるよう溶解させ、３０℃で２４時間静置した。ヘパリナーゼＩＩ（デクストララボラトリーズ社製）を０．４ｍｇ添加し、８時間後にさらに０．２ｍｇ、２４時間後に０．２ｍｇ、３６時間後に０．２ｍｇ添加した。９９．５容量％エタノール１０容にて沈殿させた後、得られた解重合生成物を乾燥した。
（ｂ）クロマトグラフィーによる選択工程
アンチトロンビンを固定化したセファロース（登録商標）を充填したカラムを、塩化ナトリウムを０．１ｍｏｌ／Ｌ含む水溶液と０．０５ｍｏｌ／Ｌのトリス−塩酸緩衝液（ｐＨ７．５）で平衡化した。ヘパリンの解重合工程で得た解重合生成物をカラム頂部に乗せた。平衡化に用いた溶液でカラムを洗浄して非固定化成分を除去したのち、塩化カルシウムを１ｍｏｌ／Ｌ含み、ｐＨ７．２に調整した水溶液で溶出した。ピークを示す画分を含む溶出液に５倍容の９９．５容量％エタノールを添加し、形成された沈殿物を遠心分離により回収し、９９．５容量％エタノールで洗浄し、減圧下で６０度で乾燥させた。
（ｃ）ゲル濾過工程
クロマトグラフィーによる選択工程で得た生成物２５ｇをセファデックス（登録商標）Ｇ５０スーパーファイン（ＧＥヘルスケア・ジャパン株式会社製）に乗せ、塩化カルシウムを０．２ｍｏｌ／Ｌ含む水溶液で溶出される画分を回収した。これをセファデックスＧ２５を用いて脱塩し、凍結乾燥させて生成物４を得た。
【０１０４】
生成物４の抗ファクターＸａ活性を“テストチーム（登録商標）  ヘパリンＳ”（積水メディカル株式会社製）を用いて測定し、抗トロンビン活性を自動血液凝固装置ＣＡ−５０（シスメックス株式会社製）を用いて測定し、抗ファクターＸａ活性と抗トロンビン活性の比を算出したところ、抗ファクターＸａ活性と抗トロンビン活性の比は、１．５であった。
【０１０５】
生成物４の重量平均分子量を、日本薬局方「パルナパリンナトリウム」の「分子量」の項記載の方法により測定したところ、生成物４の重量平均分子量は、１２００であった。
【０１０６】
実施例１のダルテパリンナトリウムの代わりに、生成物４を５４国際単位／ｍＬ、塩化ナトリウムを０．１ｍｏｌ／Ｌ含み、ｐＨ４に調整した水溶液を用いた以外は、実施例１に記載と同様の抗血栓処理を行った。抗血栓処理後にエチレンオキシドガス滅菌を行い、これを比較例１１とした。走査型電子顕微鏡（株式会社日立ハイテクノロジーズ製）で単繊維の平均繊維径を評価した結果、単繊維の平均繊維径は２．５μｍであった。交差平均角度ＳをマイクロスコープＶＨＸ‐２０００（株式会社キーエンス製）を用いて測定したところ、比較例１１において、上記式１の（Ｙ／Ｘ）×１００の値は、１００となった。
【０１０７】
（評価１：細胞接着性試験１）
実施例１、３〜７、９及び１１並びに比較例１、３〜７及び１０〜１１を打抜ポンチで直径１５ｍｍの円形に打ち抜いたものを３枚ずつ準備し、これをサンプルとした。細胞培養用の２４ウェルマイクロプレート（住友ベークライト株式会社製）のウェルに１枚ずつ入れ、上から肉厚１ｍｍの金属パイプ状錘を乗せた。１０容量％ウシ胎児血清（ＭＰ  Ｂｉｏｃｈｅｍｉｃａｌｓ，ＬＬＣ．製）含有ＤＭＥＭ培地（和光純薬工業株式会社）（以下、「培地」）を１ｍＬ添加し、３７℃、５％ＣＯ２の環境下で１時間静置した後、培地を除去した。１ｍＬの培地に懸濁したＮＩＨ／３Ｔ３細胞（ＡＴＣＣ（登録商標））を１ウェル当たり１．５×１０５個になるように添加し、３７℃、５％ＣＯ２の環境下で９６時間培養した。その後、サンプルを新しいウェルに移し、ＰＢＳ（−）（日水製薬株式会社製）でリンスした後に、１ｍＬの培地を添加し、Ｃｅｌｌ  Ｃｏｕｎｔｉｎｇ  Ｋｉｔ−８（株式会社同仁化学研究所製）を７５μＬ添加して３７℃、５％ＣＯ２の環境下で９０分間培養した。その後、４５０ｎｍの吸光度をマイクロプレートリーダ（ＳｐｅｃｔｒａＭＡＸ（登録商標）  Ｍ３；モレキュラーデバイスジャパン株式会社製）で測定して、以下の式２に示すように、吸光度Ａｓ１を算出した。
Ａｓ１  ＝  Ａｔ１−Ａｂ１  ・・・式２
Ａｔ１  ：  測定値の吸光度
Ａｂ１  ：  ブランク溶液の吸光度（培地及びＣｅｌｌ  Ｃｏｕｎｔｉｎｇ  Ｋｉｔ−８の溶液のみで細胞なし。）
Ａｓ１  ：  算出された吸光度
【０１０８】
実施例１、３〜７、９及び１１並びに比較例１、３〜７及び１０〜１１について、各３枚のサンプルのＡｓ１の平均値を求め、表１に示した。Ａｓ１の平均値はサンプルの細胞接着性を示すため高い程よく、Ａｓ１の平均値は、０．７以上であることが好ましい。
【０１０９】
（評価２：細胞接着性試験２）
実施例２、８及び１０並びに比較例２、８及び９を打抜ポンチで直径４ｍｍの円形に打ち抜いたものを３枚ずつ準備し、これをサンプルとした。“３Ｍ（商標）両面粘着テープ１５２２”（スリーエム  ヘルスケア株式会社製）を打抜ポンチで直径４ｍｍの円形に打ち抜き、細胞培養用の９６ウェルマイクロプレート（住友ベークライト株式会社製）のウェル底面に１枚ずつ接着させた。サンプルの内表面側が上になるようにウェルに入れ、サンプルとテープ接着面を接着させ、サンプルをウェルに固定した。１０容量％ウシ胎児血清（ＭＰ  Ｂｉｏｃｈｅｍｉｃａｌｓ，ＬＬＣ．製）含有ＤＭＥＭ培地（和光純薬工業株式会社）（以下、「培地」）を０．２ｍＬ添加し、３７℃、５％ＣＯ２の環境下で１時間静置した後、培地を除去した。０．２ｍＬの培地に懸濁したＮＩＨ／３Ｔ３細胞（ＡＴＣＣ（登録商標））を１ウェル当たり２．５×１０４個になるように添加し、３７℃、５％ＣＯ２の環境下で９６時間培養した。その後、サンプルを新しいウェルに移し、ＰＢＳ（−）（日水製薬株式会社製）でリンスした後に、０．２ｍＬの培地を添加し、Ｃｅｌｌ  Ｃｏｕｎｔｉｎｇ  Ｋｉｔ−８（株式会社同仁化学研究所製）を１５μＬ添加して３７℃、５％ＣＯ２の環境下で９０分間培養した。その後、４５０ｎｍの吸光度をマイクロプレートリーダ（ＳｐｅｃｔｒａＭＡＸ（登録商標）  Ｍ３；モレキュラーデバイスジャパン株式会社製）で測定して、以下の式３に示すように、吸光度Ａｓ２を算出した。
Ａｓ２  ＝  Ａｔ２−Ａｂ２  ・・・式３
Ａｔ２  ：  測定値の吸光度
Ａｂ２  ：  ブランク溶液の吸光度（培地及びＣｅｌｌ  Ｃｏｕｎｔｉｎｇ  Ｋｉｔ−８の溶液のみで細胞なし。）
Ａｓ２  ：  算出された吸光度
【０１１０】
実施例２、８及び１０並びに比較例２、８及び９について、各３枚のサンプルのＡｓ２の平均値を求め、表１に示した。Ａｓ２の平均値はサンプルの細胞接着性を示すため高い程よく、Ａｓ２の平均値は、０．７以上であることが好ましい。
【０１１１】
（評価３：ヒト全血液凝固試験）
実施例１、３〜７、９及び１１並びに比較例１、３〜７及び１０〜１１を表面積が１．０ｃｍ２となるようカットし、各実施例及び比較例のヒト全血液凝固試験用のサンプルを得た。各サンプルを生理食塩水で３７℃、３０分間洗浄してから２ｍＬのマイクロチューブに入れた。ヒト新鮮血に０．４Ｕ／ｍＬとなるようにヘパリンナトリウム注（味の素製薬株式会社製）を添加した後、このヒト血液を２ｍＬ添加し、３７℃で２時間インキュベートした。インキュベート後に血液を採取し、サンプル添加前の血液と共に４℃、２５００×ｇで２０分間、遠心分離し、上清を採取し測定まで−３０℃で保存した。アセラクロムβ−ＴＧ（ロシュ・ダイアグノスティックス株式会社製）を用いて上清中のβ−ＴＧ活性を測定し、サンプル添加前のβ−ＴＧ活性に対するインキュベート後のβ−ＴＧ活性の比を算出した。実施例１、３、４及び５並びに比較例１及び３〜７の各サンプルにおけるサンプル添加前のβ−ＴＧ活性に対するインキュベート後のβ−ＴＧ活性の比を表１に示した。サンプル添加前のβ−ＴＧ活性に対するインキュベート後のβ−ＴＧ活性の比は血小板活性化抑制効果の指標であるため１に近いほどよく、サンプル添加前のβ−ＴＧ活性に対するインキュベート後のβ−ＴＧ活性の比は、１０以下であることが好ましい。
（評価４：イヌ移植実験における開存率評価）
【０１１２】
実施例２、８及び１０並びに比較例２、８及び９の人工血管を、イヌの左右の頸動脈に移植し、移植３ヶ月後の開存率を検討した。雄のビーグル犬に移植２日前から摘出日までアスピリン及びジピリダモールを投与した。イソフルラン吸入麻酔を行った。頸部を切開して頸動脈を露出させた後、ヘパリン１００ＩＵ／ｋｇを静脈内投与により全身ヘパリン化した。血流を遮断し、人工血管を端端吻合にて頸動脈に移植した。血流を再開させ、閉創し、麻酔から覚醒させた。移植１ヶ月後までは週１回、その後は移植３ヶ月後まで月１回、エコー装置（デジタル超音波画像診断装置Ｎｏｂｌｕｓ（登録商標）、株式会社日立製作所）を用いて移植３ヶ月後までに閉塞した人工血管の数を確認した。その結果から、以下の式４を用いて開存率（％）を計算した。
Ｐ＝（Ｎａ−Ｎp）／Ｎａ×１００  ・・・式４
Ｐ：開存率（％）
Ｎｐ：移植３ヶ月後までに閉塞した人工血管の数（本）
Ｎａ：移植した人工血管の数（本）
【０１１３】
ここで、一般的に移植３ヶ月後までに閉塞が起こらなければ長期開存が可能と言われていることから、イヌ移植実験における開存率評価については移植期間を３ヶ月間と設定した。
【０１１４】
一方、評価の指標としては開存率を用いた。ヒト臨床において、下肢の閉塞性動脈硬化症に対するバイパス手術では代用血管として人工血管を用いた場合の開存率は６０％であるのに対し、自家静脈を用いた場合は８０％と報告されている。心臓の冠動脈バイパス術等の心血管インプラントでは、術後の閉塞や狭窄を考慮して人工血管ではなく自家静脈が選ばれていることから、心血管インプラントにおいて、開存率の２０％程度の差は臨床においては大きな意味を持つと言える。
【０１１５】
一方、現在市販されている内径３ｍｍの小口径人工血管のイヌにおける移植３ヶ月後の開存率は７５％と報告されている。当該人工血管をヒト下肢に使用した場合、移植３年後以降の開存成績は自家静脈より悪くなると報告されていることから、臨床において自家静脈より良好な開存成績を得るためには、イヌでの移植３ヶ月後の開存率は７５％より高いことが求められる。
【０１１６】
また、長期に開存するためには基材内表面が早期に内皮細胞で被覆され、抗血栓性を発揮することが必要であることから、開存率は、基材内表面において早期の内皮化が起こり、抗血栓性が維持されていることの指標となると言える。
【０１１７】
得られた実施例２、８及び１０並びに比較例２、８及び９の人工血管の開存率（％）を表１に示した。
【０１１８】
【表１】
2019213842.tif 000002
【産業上の利用可能性】
【０１１９】
本発明のインプラント用の医療材料は、医療器材に好適に用いることができ、特に、左心耳閉塞デバイス等の心血管インプラント用の医療器材に用いることができる。