(57)【要約】【課題】フローインジェクション分析により試料液中の目的物質の定量を行う際に、安定して目的物質の定量を行うことができるようにする。【解決手段】試料液中の目的物質を連続的に定量するフローインジェクション分析方法において、イオン交換体に試料液を通液し、反応コイルに向けて送液されているキャリア液に対し、イオン交換体を通過した試料液の一定量を注入し、試料液が注入されたキャリア液に対して１以上の試薬を添加して反応コイル内で目的物質と反応させ、反応コイルから排出される液の吸光度を測定することにより目的物質の定量を行う。【選択図】図１
2019095409.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
試料液中の目的物質を連続的に定量するフローインジェクション分析方法であって、
イオン交換体に試料液を通液し、
反応コイルに向けて送液されているキャリア液に対し、前記イオン交換体を通過した前記試料液の一定量を注入し、
前記試料液が注入されたキャリア液に対して１以上の試薬を添加して前記反応コイル内で前記目的物質と反応させ、
前記反応コイルから排出される液の吸光度を測定することにより前記目的物質の定量を行う、フローインジェクション分析方法。
【請求項２】
前記イオン交換体に供給される試料液、または、前記イオン交換体に通液したのち前記キャリア液に注入される前の試料液に対してフィルター処理を行う、請求項１に記載のフローインジェクション分析方法。
【請求項３】
前記試料液中の目的物質は尿素であり、前記１以上の試薬はジアセチルモノオキシム含有試薬とアンチピリン含有試薬とである、請求項１または２に記載のフローインジェクション分析方法。
【請求項４】
前記イオン交換体は、粒状のアニオン交換樹脂、モノリス状のアニオン交換樹脂、及びアニオン交換繊維のうちの少なくとも１つを含む、請求項１乃至３のいずれか１項に記載のフローインジェクション分析方法。
【請求項５】
前記１以上の試薬を調製後、少なくとも１つの前記試薬を冷蔵する、請求項１乃至４のいずれか１項に記載のフローインジェクション分析方法。
【請求項６】
試料液中の目的物質を定量するフローインジェクション分析装置であって、
キャリア液が連続して供給される反応コイルと、
試料液が通液されるイオン交換体と、
前記反応コイルに供給される前記キャリア液に、前記イオン交換体を通過した前記試料液の一定量を注入するサンプリング弁と、
前記サンプリング弁と前記反応コイルの間の位置において、前記試料液が注入されたキャリア液に１以上の試薬を添加する添加手段と、
前記反応コイルから排出される液の吸光度を測定する検出器と、
を備え、前記反応コイル内において前記目的物質と前記１以上の試薬とを反応させる、フローインジェクション分析装置。
【請求項７】
前記イオン交換体の入口に接続する配管、及び、前記イオン交換体の出口と前記サンプリング弁を接続する配管の少なくとも一方にフィルターを有する、請求項６に記載のフローインジェクション分析装置。
【請求項８】
前記イオン交換体は、粒状のアニオン交換樹脂、モノリス状のアニオン交換樹脂、及びアニオン交換繊維のうちの少なくとも１つを含む、請求項６または７に記載のフローインジェクション分析装置。
【請求項９】
前記試料液中の目的物質は尿素であり、前記１以上の試薬はジアセチルモノオキシム含有試薬とアンチピリン含有試薬とである、請求項６乃至８のいずれか１項に記載のフローインジェクション分析装置。
【請求項１０】
調製された少なくとも１つの前記試薬を貯蔵する貯槽と、
前記貯槽を冷却する冷却手段と、
を備える、請求項６乃至９のいずれか１項に記載のフローインジェクション分析装置。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、フローインジェクション分析（ＦＩＡ；flow injection analysis）方法及び装置に関する。
【背景技術】
【０００２】
液体の連続した流れを細い管の中に形成し、そこに試料液を注入して試薬との反応を生じさせ、管の末端部において反応生成物濃度などを測定するフローインジェクション分析は、試料液中の目的物質の定量分析などに広く用いられている。反応が起きる場である細い管は、一般に反応コイルと呼ばれる。例えば特許文献１は、試料水中の微量の尿素濃度の連続的にモニタリングするために、ジアセチルモノオキシムによる比色法による分析をフローインジェクション分析により実施することを開示している。
【０００３】
ジアセチルモノオキシムを用いた比色法による定量は、尿素の定量法としてはよく知られたものであり、例えば衛生試験法（非特許文献１）において記載されている。ジアセチルモノオキシムを用いる比色法では、反応を促進するなどの目的で他の試薬（例えば、アンチピリン＋硫酸溶液、塩酸セミカルバジド水溶液、塩化マンガン＋硝酸カリウムの水溶液、リン酸二水素ナトリウム＋硫酸溶液など）を併用することができる。アンチピリンを併用する場合には、ジアセチルモノオキシムを酢酸溶液に溶解させてジアセチルモノオキシム酢酸溶液を調製し、アンチピリン（１，５−ジメチル−２−フェニル−３−ピラゾロン）を例えば硫酸に溶解させてアンチピリン含有試薬液を調製し、試料水に対してジアセチルモノオキシム酢酸溶液とアンリピリン含有試薬液とを順次混合し、波長４６０ｎｍ付近での吸光度を測定し、標準液との対照によって定量を行う。ジアセチルモノオキシムを用いた比色法による尿素の定量方法は、元来は例えばプール水や公衆浴場水における尿素の定量を目指して意図されたものであるが、この方法に特許文献１に記載されるようにフローインジェクション分析を適用して吸光度を測定することにより、ｐｐｂ以下から数ｐｐｍの濃度範囲で連続的に尿素を定量することができる。
【先行技術文献】
【特許文献】
【０００４】
【特許文献１】特開２０００−３３８０９９号公報
【非特許文献】
【０００５】
【非特許文献１】日本薬学会編、衛生試験法・注解１９９０．４．１．２．３（１３）１（１９９０年版第４刷付追補（１９９５）、ｐ１０２８）、１９９５年
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００６】
フローインジェクション分析により試料液中の目的物質の定量を行うときに、安定して定量を行えないことがある。例えば、特許文献１に記載される方法によって試料水中の微量の尿素の定量を行うとき、尿素を含まないことが既に分かっている試料水に対しても尿素が含まれているかのような結果が得られることがある。
【０００７】
本発明の目的は、試料液中の目的物質の定量を行うフローインジェクション分析方法及び装置であって、安定して目的物質の定量を行うことができる方法及び装置を提供することにある。
【課題を解決するための手段】
【０００８】
フローインジェクション分析における検出手段として、使用する試薬と目的物質とに応じた特定波長での吸光度を測定することが広く行われている。本発明者らは、試料液中の何らかの妨害物質が試薬と反応して生成した成分が吸光度測定を妨害することがあること、試料液をイオン交換体により処理することによって吸光度測定への妨害を抑制できることを見出し、本発明を完成させた。
【０００９】
したがって本発明のフローインジェクション分析方法は、試料液中の目的物質を連続的に定量するフローインジェクション分析方法であって、イオン交換体に試料液を通液し、反応コイルに向けて送液されているキャリア液に対し、イオン交換体を通過した試料液の一定量を注入し、試料液が注入されたキャリア液に対して１以上の試薬を添加して反応コイル内で目的物質と反応させ、反応コイルから排出される液の吸光度を測定することにより目的物質の定量を行う。
【００１０】
本発明のフローインジェクション分析装置は、試料液中の目的物質を連続的に定量するフローインジェクション分析装置であって、キャリア液が供給される反応コイルと、試料液が通液されるイオン交換体と、反応コイルに供給されるキャリア液に、イオン交換体を通過した試料液の一定量を注入するサンプリング弁と、サンプリング弁と反応コイルの間の位置において、試料液が注入されたキャリア液に１以上の試薬を添加する添加手段と、反応コイルから排出される液の吸光度を測定する検出器と、を備え、反応コイル内において目的物質と１以上の試薬とを反応させる。
【００１１】
本発明では、フローインジェクション分析により試料液中の目的物質を連続的に定量する際に、試料液をイオン交換体に通過させ、その後、この試料液の一定量をキャリア液に注入し、通常のフローインジェクション分析の手順により吸光度測定を行って定量を行う。このとき、イオン交換体の入口側または出口側の位置にフィルターを設け、試料液中の不溶性の微粒子などを濾過除去するフィルター処理を行うことが好ましい。
【発明の効果】
【００１２】
本発明によれば、フローインジェクション分析により試料液中の目的物質の定量を行う際に、安定して定量を行うことができるようになる。
【図面の簡単な説明】
【００１３】
【図１】本発明の実施の一形態のフローインジェクション分析装置の構成を示す図である。
【図２】実施例３における通水日数とピーク強度との関係を示すグラフである。
【発明を実施するための形態】
【００１４】
次に、本発明の実施の形態について、図面を参照して説明する。図１は、本発明の実施の一形態のフローインジェクション分析（ＦＩＡ）装置の構成を示している。ここでは、純水製造に用いる原水、あるいは純水を試料液とし、この試料液（ここでは水であるので試料水ともいえる）に含まれる微量の尿素を目的物質としてオンラインで連続的に定量する場合を例に挙げて本発明を説明する。もちろん、本発明が定量対象とする目的物質は尿素に限られるものではなく、目的物質を含む試料液も水に限られるものではない。また、連続的ではなくバッチで定量する場合にも本発明を適用することができる。
【００１５】
図１に示されるように、純水製造に用いる原水のライン２０が設けられており、このライン２０では、原水がポンプＰ０によって送水される。原水のライン２０から分岐する試料水配管２１が設けられている。試料水配管２１は、原水から分岐した試料水の配管であり、試料水配管２１の先端は、サンプリング弁１０（インジェクター、インジェクション弁ともいう）に接続している。サンプリング弁１０の詳細については後述する。
【００１６】
試料水配管２１には、上流側から、フィルター５１、イオン交換装置５０、開閉弁２２及び流量計ＦＩが設けられている。フィルター５１は、試料水に含まれる不溶性粒子を除去するものである。イオン交換装置５０は、容器内にイオン交換体を配置したものであって、試料水がイオン交換体を通過するように構成されている。イオン交換装置５０に備えられるイオン交換体は、アニオン交換体のみであってもカチオン交換体のみであってもよく、さらには、アニオン交換体とカチオン交換体とを混床または複床にしたものであってもよい。ここでアニオン交換体は、例えば、粒状のアニオン交換樹脂、モノリス状のアニオン交換樹脂、及びアニオン交換繊維のうちの少なくとも１つである。またカチオン交換体は、例えば、粒状のカチオン交換樹脂、モノリス状のカチオン交換樹脂、及びカチオン交換繊維のうちの少なくとも１つである。後述するように本実施形態のＦＩＡ装置では、吸光度測定によって定量を行うが、イオン交換装置５０は、試料水中に含まれていて目的物質（ここでは尿素）の定量のための吸光度測定を妨害する何らかの妨害物質を試料水から除去するために設けられている。図１ではフィルター５１をイオン交換装置５０の入口側に設けているが、フィルター５０をイオン交換装置５０の出口側すなわちイオン交換装置５０と開閉弁２２との間に設けるようにしてもよい。
【００１７】
後述するようにサンプリング弁１０にはポンプＰ４が接続しているが、尿素を連続的に定量するために、開閉弁２２は常時開とされ、ポンプＰ４は常時駆動される。これにより試料水配管２１には試料水が常時流れることになる。
【００１８】
次に、サンプリング弁１０について説明する。サンプリング弁１０を含めてサンプリング弁１０から下流の部分は、ＦＩＡ装置としての構成を有して実際に尿素の定量に関わる部分となる。サンプリング弁１０は、ＦＩＡ法において一般的に用いられる構成のものであり、六方弁１１とサンプルループ１２とを備えている。六方弁１１は、図示丸付き数字で示される６個のポートを備えている。試料水配管２１はポート２に接続している。また、ポンプＰ１を介してキャリア水が供給される配管２３がポート６に接続し、ポンプＰ４を介して試料水を排水するための配管２５がポート３に接続している。ポート１とポート４との間には、所定容量の試料水を採取するためのサンプルループ１２が接続している。ポート５には、サンプリング弁１１の出口となる配管２４の一端が接続している。キャリア水は、尿素を実質含まない水であり、例えば純水である。
【００１９】
六方弁１１においてポートＸとポートＹとが連通することを（Ｘ−Ｙ）と表すこととすると、六方弁１１は、（１−２）、（３−４）、（５−６）である第１の状態と、（２−３）、（４−５）、（６−１）である第２の状態とを切り替えられるようになっている。図１において、第１の状態でのポート間の接続関係は実線で示され、第２の状態でのポート間の接続は点線で示されている。第１の状態においてキャリア水は、配管２３→ポート６→ポート５→配管２４と流れてサンプリング弁１０から下流側に流出する。試料水は、試料水配管２１→ポート２→ポート１→サンプルループ１２→ポート４→ポート３と流れて配管２５から排出される。この第１の状態から第２の状態に切り替わると、試料水は、試料水配管２１→ポート２→ポート３と流れて配管２５から排出され、また、キャリア水は、配管２３→ポート６→ポート１→サンプルループ１２→ポート４→ポート５→配管２４と流れ、下流側へ流出する。このとき、第１の状態であったときに既に流入してサンプルループ１２内を満たしている試料水は、キャリア水に先立ってポート５から配管２４へと流れ込み、サンプリング弁１０の下流側へと流れる。配管２４に流れる試料水の体積は、サンプルループ１２によって規定される。したがって、第１の状態と第２の状態とを繰り返し切り替えることによって（例えば六方弁１１を図示矢印方向に回転することによって）、所定容量の試料水を繰り返して配管２４に送り込むことができる。第１の状態と第２の状態との切り替えは、後述する反応に必要な滞留時間、検出器３２で尿素が検出されるまでの時間を考慮して、所定の時間ごとに行うことができる。また、検出器３２に導入した試料水が検出器３２から排出されたことを検知して切り替えを行うこともできる。このように、第１の状態と第２の状態との切り替えを自動的に行うようにすることで、尿素を連続的に定量することができる。
【００２０】
この装置では、ジアセチルモノオキシムを用いる比色法による尿素の定量に対してＦＩＡ法を適用する。そのため、尿素の定量に用いる反応試薬として、ジアセチルモノオキシム酢酸溶液（以下、試薬Ａともいう）とアンチピリン含有試薬液（以下、試薬Ｂともいう）を使用する。ここではジアセチルモノオキシムと併用される試薬としてアンチピリン含有試薬液を用いる場合を説明するが、ジアセチルモノオキシムと併用される試薬はアンチピリン含有試薬液に限定されるものではない。試薬Ａ，Ｂは、それぞれ、貯槽４１，４２に貯えられる。
【００２１】
本発明者らは、これらの試薬を調製後、尿素の連続定量のために長期間（例えば数日間以上）にわたって室温に保持した場合に吸光度測定でのピーク強度が低下すること、及び、このピーク強度の低下は試薬（特に試薬Ｂ）を冷蔵することにより防ぐことができることを見出している。安定した定量を行うためには吸光度測定でのピーク強度が低下しないことが好ましいので、本実施形態のＦＩＡ装置では、貯槽４１，４２を冷蔵部４０内に設けている。試薬Ａはジアセチルモノオキシムを酢酸溶液に溶解させて調製されるが、冷蔵部４０を設ける場合には、調製自体を貯槽４１で行う、あるいは、試薬Ａをその調製後、貯槽４１に貯えるようにする。同様に、試薬Ｂは、アンチピリンを例えば硫酸に溶解させて調製されるが、調製自体を貯槽４２で行う、あるいは、試薬Ｂをその調製後、貯槽４２に貯えるようにする。冷蔵部４０は、貯槽４１，４２を遮光するとともに、貯槽４１，４２を冷却し、これによって、貯槽４１，４２内の試薬Ａ、試薬Ｂの温度を２０℃以下、好ましくは３℃以上２０℃以下、より好ましくは５℃以上１５℃以下に維持する。なお、試薬Ａを貯える貯槽４１については、遮光保管できるもであれば、必ずしも冷蔵部４０内に配置する必要はない。試薬の冷蔵温度は、５℃未満であっても、試薬において結晶の析出が生じなければ差し支えない。衛生試験法（非特許文献１）には、アンチピリンを硫酸に溶解させたアンチピリン硫酸溶液について、褐色瓶に保管すれば２〜３箇月は使用できることと、結晶が析出し室温に戻しても再溶解しないため冷蔵保管は適さないこととが記載されているが、本発明者らは、衛生試験法にしたがって調整されたアンチピリン硫酸溶液は３℃でも結晶化しないことを実験により確認した。
【００２２】
貯槽４１には配管２６の一端が接続し、配管２６の他端は混合部４３により配管２４に接続している。配管２６には、試薬Ａを所定の流量で配管２４に送り込むためのポンプＰ２が設けられている。同様に貯槽４２には配管２７の一端が接続し、配管２７の他端は混合部４４により配管２４に接続している。配管２７には、試薬Ｂを所定の流量で配管２４に送り込むためのポンプＰ３が設けられている。混合部４３，４４は、それぞれ、試薬Ａ、試薬Ｂを配管２４内の液体の流れに対して均一に混合する機能を有する。配管２４の他端は、反応恒温槽３０内に設けられた反応コイル３１の入口に接続している。反応コイル３１は、その内部においてアンチピリンの存在下での尿素とジアセチルモノオキシムとによる発色反応を起こさせるものであり、その長さと反応コイル３１の内部での流速とは、反応に必要な滞留時間に応じて適宜に選択される。反応恒温槽３０は、反応コイル３１を反応に適した温度まで昇温するものであって、例えば、５０℃以上１５０℃以下、好ましくは９０℃以上１２０℃以下の温度に反応コイル３１を加熱する。
【００２３】
反応コイル３１の末端すなわち出口には、反応コイル３１から流れ出る液を対象として、発色反応によって液中に生じた発色の吸光度を測定するための検出器３２が設けられている。検出器３２によって、例えば、波長４６０ｎｍ付近での吸光度のピーク強度あるいはピーク面積を求める。キャリア水が流れているときの吸光度をベースラインとし、尿素濃度が既知の標準液に対する吸光度から検量線を求めることにより、試料水に対する吸光度から試料水での尿素の濃度を求めることができる。検出器３２の出口には、ポンプＰ１からサンプリング弁１０、配管２４及び反応コイル３１を経て検出器３２に至る管路に対して背圧を与える背圧コイル３３が設けられている。検出器３２の出口と背圧コイル３３の入口との間の位置に対し、圧力計ＰＩが接続している。背圧コイル３３の出口から、このＦＩＡ装置の排液が流出する。
【００２４】
本実施形態の装置では、ＦＩＡ法を利用し、ジアセチルモノオキシムを用いる比色法によって試料水中の尿素をオンラインで連続的に測定することができる。このとき試料水をイオン交換体に通液してからＦＩＡ装置に導入することにより、検出器３２での吸光度測定に影響を与える得る何らかの物質が試料水に含まれていたとしてもその物質はイオン交換装置５０によって除去されるため、後述する実施例から明らかになるように、微量の尿素の連続的な定量を安定して行うことができる。さらに、反応に用いる試薬Ａ（ジアセチルモノオキシム酢酸溶液）及び試薬Ｂ（アンチピリン含有試薬液）として、特に試薬Ｂについて、それらの試薬の調製後、２０℃以下に維持されたものを使用することにより、長期にわたって安定して尿素の連続的な定量を行うことが可能になる。
【実施例】
【００２５】
次に、本発明の効果を示すために発明者らが行った実験の結果を説明する。
【００２６】
（実施例１）
図１に示すＦＩＡ装置を組み立てた。ただし、ライン２０から流量計ＦＩに至る部分は設けず、サンプリング弁１０に対して試料水が直接供給される構成とした。これとは別に、オルガノ株式会社製のイオン交換樹脂ＥＳＰ−１を充填したイオン交換装置を別途設けた。イオン交換樹脂ＥＳＰ−１は、強酸性カチオン交換樹脂と強塩基性アニオン交換樹脂とを体積比１：１で混合した混床のイオン交換樹脂である。また本実施例では、ジアセチルモノオキシム２ｇを１０％酢酸１００ｍＬに溶解させて試薬Ａ（ジアセチルモノオキシム酢酸溶液）を調製し、アンチピリン０．２ｇをとり、９ｍｏｌ／Ｌの硫酸に溶かし、全量を１００ｍＬとして試薬Ｂ（アンチピリン含有試薬液）を調製し、調製後直ちにそれらの試薬をそれぞれ貯槽４１，４２に貯え、貯槽４１，４２から各試薬を配管２４に向けて連続的に供給するようにした。
【００２７】
試料水として、尿素やその他の不純物を含む水である試料水Ａ（半導体工場における超純水製造装置の原水）と、上記のイオン交換装置に対してＳＶ＝１０（Ｌ／Ｌ−ｈ）すなわち１時間当たりの流量がイオン交換樹脂の体積の１０倍となるように試料水Ａを通水して得た水（イオン交換樹脂処理水と呼ぶ）と、イオン交換樹脂処理水に対してさらに尿素分解処理を行って得た水（尿素分解処理水）とを用いた。尿素分解処理は、イオン交換樹脂処理水に対し、尿素分解剤として次亜臭素酸塩を６ｐｐｍ添加し、反応温度２５℃、反応時間２４時間で反応させることによって行った。組み立てたＦＩＡ装置を用いてこれらの試料水の各々における尿素濃度を測定した。尿素濃度の測定に際しては、予め尿素の標準液をＦＩＡ装置に供給して検出器３２で吸光度測定を行って検量線を作成し、試料水ごとの吸光度測定の結果を検量線に当てはめて尿素濃度を決定した。結果を表１に示す。
【００２８】
【表１】
2019095409.tif 000003
（参考例１）
次亜臭素酸塩による尿素分解処理での尿素の分解率を検討するために、尿素を含まない純水に対して濃度が１０ｐｐｂとなるように尿素を添加して模擬水とし、さらに実施例１と同様にこの模擬水からイオン交換樹脂処理水と尿素分解処理水とを生成し、実施例１と同様に、模擬水、イオン交換樹脂処理水及び尿素分解処理水について尿素濃度の測定を行った。結果を表２に示す。
【００２９】
【表２】
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尿素のみを含む模擬水とイオン交換樹脂処理水とでの尿素濃度の測定結果が一致していることから、イオン交換樹脂による処理では尿素は全く除去されないことがわかる。また、尿素分解処理水の結果から、次亜臭素酸を用いる尿素の分解処理により、尿素濃度が１ｐｐｂ未満（検出限界以下）となるまで尿素を除去できることがわかる。
【００３０】
（比較例１）
実施例１での試料水Ａに対し、尿素分解剤として次亜臭素酸塩を６ｐｐｍ添加し、反応温度２５℃、反応時間２４時間で反応させて尿素分解処理を行った後、実施例１と同様の条件で尿素濃度の測定を行ったところ、尿素分解処理後の尿素濃度は２．５ｐｐｂと測定された。
【００３１】
以上の実施例１、参考例１及び比較例１の結果からすると、実施例１において試料水Ａに対して検出された尿素濃度とイオン交換樹脂処理水に対して検出された尿素濃度との差は、波長４６０ｎｍ付近に吸収を有して吸光度測定による尿素の定量に妨害を与える何らかの妨害物質の寄与によるものであると考えられる。このことは、参考例１に示されるように、尿素分解処理により尿素濃度を検出下限以下まで低減できることと、比較例１の結果は、尿素以外の成分すなわち妨害物質のみによる検出結果を示していると考えられるがが、比較例１の結果が実施例１での試料水Ａとイオン交換樹脂処理水とでの尿素濃度の検出結果の差に、測定誤差の範囲内で等しいことからも支持される。したがって、実施例１の結果から、尿素の定量のための吸光度測定に妨害を与える妨害物質はイオン交換樹脂による処理によって除去され、これにより、イオン交換樹脂処理水について測定された尿素濃度は、試料水Ａについての実際の尿素濃度を表していることがわかる。
【００３２】
（実施例２）
実施例１で用いた装置におけるイオン交換装置として、強塩基性アニオン交換樹脂（オルガノ株式会社製Ａｍｂｅｒｊｅｔ  ４００２ＯＨ）を単独（すなわち単床）で充填したもの、強酸性カチオン交換樹脂（オルガノ株式会社製Ａｍｂｅｒｊｅｔ  １０２４Ｈ）を単独で充填したもの、及び強酸性カチオン交換樹脂と強塩基性アニオン交換樹脂とを混合した混床樹脂（オルガノ株式会社製ＥＳＰ−１）を充填したものの３種類を用意した。そして試料水として、試料水Ａとは異なる試料水Ｂ（半導体工場における超純水製造装置の原水）を使用した。試料水Ｂをアニオン交換樹脂に通液して得られたものをアニオン交換樹脂処理水とし、試料水Ｂをカチオン交換樹脂に通液して得られたものをカチオン交換樹脂処理水とし、試料水Ｂを混床樹脂に通液して得られたものを混床樹脂処理水とする。試料水Ｂ、アニオン交換樹脂処理水、カチオン交換樹脂処理水、及び混床樹脂処理水の各々について、実施例１と同様に、尿素濃度の測定を行った。イオン交換装置への通液量はＳＶ＝１０（Ｌ／Ｌ−ｈ）とした。結果を表３に示す。
【００３３】
【表３】
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実施例２からも、イオン交換樹脂による処理を用いることによって、波長４６０ｎｍ付近に吸収を有して吸光度測定による尿素の定量に妨害を与える妨害物質を除去できることがわかる。イオン交換樹脂として強塩基性カチオン交換樹脂を用いた場合には、強酸性アニオン交換樹脂や混床樹脂を用いる場合に比べて妨害物質の影響を受けやすい傾向にあり、試料水に対してイオン交換樹脂による処理を行う際に、イオン交換樹脂として少なくともアニオン交換樹脂を含むものを用いることが好ましいことがわかる。
【００３４】
（実施例３）
次に、試薬を冷蔵することの効果を実証するために、図１に示す装置を組み立てた。ただし、ライン２０から流量計ＦＩに至る部分は設けないようにした。したがって、イオン交換装置５０とフィルター５１とは設けられていない構成となっている。
【００３５】
尿素濃度を６０ｐｐｂに調製した標準液を試料水としてサンプリング弁１０に連続供給できるようにした。そしてこの標準液に関して尿素濃度の連続モニタリングを行った。ここでは、標準液について連続的に測定を行ったときに、検出器３２における吸光度の検出ピークの測定値として得られる尿素濃度がどのように変化するかを調べた。この実施例３では、ジアセチルモノオキシム２ｇを１０％酢酸１００ｍＬに溶解させて試薬Ａ（ジアセチルモノオキシム酢酸溶液）を調製し、アンチピリン０．２ｇをとり、９ｍｏｌ／Ｌの硫酸に溶かし、全量を１００ｍＬとして試薬Ｂ（アンチピリン含有試薬液）を調製し、調製後直ちにそれらの試薬をそれぞれ貯槽４１，４２に貯え、貯槽４１，４２から各試薬を配管２４に向けて連続的に供給するようにした。連続測定の最初に各試薬を貯槽４１，４２に注入した後は、連続測定中には試薬を補充しないようにした。また、試薬Ａの貯槽４１については常温に維持した。試薬Ｂについては、その調製後の保管温度を１０℃とした場合と２５℃とした場合の２通りについて実験を行った。尿素濃度の変化は、波長４６０ｎｍでの吸光度のピーク強度で確認した。結果を図２に示す。図２では、試薬Ａ及び試薬Ｂを調製してそれぞれ貯槽４１，４２に貯えた直後に６０ｐｐｂの尿素標準液を測定した際のピーク強度を１００％として、同じ標準液を測定したときの測定値が日時の経過とともにどのように変化したかを示している。
【００３６】
図２に示すように、アンチピリン含有試薬液（試薬Ｂ）を２５℃に維持した場合には、徐々にピーク強度が低下し、連続測定のための１０日間の運転の間にピーク強度が７２％まで低下した。すなわち、尿素の定量を安定して行えなくなっていた。これに対しアンチピリン含有試薬液を冷蔵保管して１０℃に維持した場合には、１０日間の連続運転の後にもピーク強度が低下せず、長期にわたって安定して尿素の連続定量を行えることが分かった。
【００３７】
（実施例４）
実施例３と同様に試薬Ｂ（アンチピリン含有試薬液）を調製後、５℃、１０℃、１５℃、２０℃及び２５℃でそれぞれ１０日間保管した。そして、この保管の後に試薬Ｂを実施例３の装置に供給した。試薬Ｂを装置に供給したのち直ちにこの装置を用いて尿素濃度６０ｐｐｂの標準液を測定し、そのピーク強度を求めた。その際、試薬Ｂの調製直後に標準液を測定したときのピーク強度を１００％とした。試薬Ａ（ジアセチルモノオキシム酢酸溶液）については実施例３と同様に調製したのち、常温で保管したものを使用した。結果を表４に示す。
【００３８】
【表４】
2019095409.tif 000006
表４に示されるように、保管温度が５℃の場合と１０℃の場合にはピーク強度の低下はほとんど見られず、１５℃で保管した場合には、約１割程度のピーク強度の低下が見られた。２０℃で保管した場合には約２割のピーク強度の低下であったが、２５℃では３割近くピーク強度が低下した。これらから、微量の尿素濃度を連続的に測定するためには、反応に用いる試薬（ジアセチルモノオキシム酢酸溶液及びアンチピリン含有試薬液）のうち少なくともアンチピリン含有試薬液を冷蔵保存すべきであること、その場合、アンチピリン含有試薬液の温度を２０℃以下に維持することが好ましく、３℃以上２０℃以下に維持することがさらに好ましく、５℃以上１５℃以下に維持することがより好ましいことが分かった。
【００３９】
（実施例５）
実施例４の試薬Ａ（ジアセチルモノオキシム酢酸溶液）を実施例４の試薬Ｂ（アンチピリン含有試薬液）と同様の保管温度にて保管したことを除いて、実施例４と同様の試験を行った。
【００４０】
試薬Ａと試薬Ｂの両方を冷蔵して測定を行った場合、試薬Ｂのみを冷蔵して測定を行った結果（表４）と同様の結果が得られた。
【符号の説明】
【００４１】
１０    サンプリング弁
１１    六方弁
１２    サンプルループ
３１    反応コイル
３２    検出器
３３    背圧コイル
４０    冷蔵部
４１，４２    貯槽
４３，４４    混合部
５０    イオン交換装置
５１    フィルター
Ｐ０〜Ｐ４    ポンプ
【図１】
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【図２】
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