(57)【要約】  【課題】脂質代謝が低下した対象におけるグルカゴンの分泌を促進し、脂質代謝を促進するための組成物、および当該組成物を含む飲食品の提供。  【解決手段】アルギニン、アラニンおよびフェニルアラニンを有効成分として含有する、脂質代謝が低下した対象における脂質代謝促進のための組成物であって、組成物中の全アミノ酸のモル数の合計を１００モルとした場合のアルギニン、アラニンおよびフェニルアラニンのモル数の合計が６０モル以上である組成物、ならびに当該組成物を含む飲食品。【選択図】図４
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【特許請求の範囲】
【請求項１】
アルギニン、アラニンおよびフェニルアラニンを有効成分として含有する、脂質代謝が低下した対象における脂質代謝促進のための組成物であって、組成物中の全アミノ酸のモル数の合計を１００モルとした場合のアルギニン、アラニンおよびフェニルアラニンのモル数の合計が６０モル以上である、組成物。
【請求項２】
アルギニン、アラニンおよびフェニルアラニンのモル比が５．０〜９０．０：５．０〜９０．０：５．０〜９０．０である、請求項１に記載の組成物。
【請求項３】
前記アルギニン、アラニンおよびフェニルアラニンのモル比が１０．０〜３０．０：２０．０〜６０．０：１０．０〜７０．０である、請求項２に記載の組成物。
【請求項４】
前記全アミノ酸のモル数の合計を１００モルとした場合のアルギニン、アラニンおよびフェニルアラニンのモル数の合計が９０〜１００モルである、請求項１〜３のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項５】
グルカゴンの分泌を亢進するための、請求項１〜４のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項６】
血中インスリン濃度に対する血中グルカゴン濃度の比を増大させるための、請求項１〜５のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項７】
請求項１〜６のいずれか一項に記載の組成物を含有させてなる、飲食品。
【請求項８】
飲料、顆粒、粉末および流動食からなる群から選択されるいずれか１つの形態である、請求項７に記載の飲食品。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、アルギニン、アラニンおよびフェニルアラニンを有効成分として含有する、脂質代謝が低下した対象における脂質代謝促進のための組成物およびそれを含む飲食品に関する。
【背景技術】
【０００２】
食生活やライフスタイルの欧米化に伴い、肥満人口は増加の一途をたどっている。厚生労働省「国民健康・栄養調査結果の概要（２０１０）」によると、日本人の肥満の割合は男性で３０．４％、女性で２１．１％である。さらに、推計２３００万人に達している肥満人口のうち約半分にあたる１１００万人が、高血糖や高脂血症、高血圧症といったメタボリックシンドローム（生活習慣病）を併発しており、生活の質（ＱＯＬ）を大きく低下させている。これらの疾患の予防・改善には、食事量の制限を介した摂取カロリーのコントロールだけではなく、食品中の栄養素による生体調節機能と運動によるエネルギー消費が、近年大いに注目されている（非特許文献１）。
【０００３】
一方、近年、アミノ酸の機能性が注目されている。例えば、スズメバチ成虫のエネルギー源となる幼虫の分泌する唾液中のアミノ酸組成を再現したアミノ酸組成物である「Ｖｅｓｐａ  Ａｍｉｎｏ  Ａｃｉｄ  Ｍｉｘｔｕｒｅ（Ｖ．Ａ．Ａ．Ｍ．）」は、摂取後に運動すると、血中リパーゼ活性が上昇して、血中遊離脂肪酸が上昇することなどが知られている（特許文献１〜３および非特許文献２）。また、アルギニン、アラニンおよびフェニルアラニンを主に含有する、運動時の脂質代謝促進剤が知られている（特許文献４）。また、アルギニン、グルタミンおよび分岐鎖アミノ酸を一定以上の量で含有するアミノ酸組成物（特許文献５）が知られている。また、脂質代謝に関与するグルカゴンの分泌を促進する特定のアミノ酸類、キサンチン誘導体、イソフラボン類およびカルニチン類もしくはカルニチン前駆体を含有するメタボリックシンドローム、脂質代謝異常または肥満の予防、改善または治療のための組成物が開示されており、グルカゴンの分泌を促進するアミノ酸としてアルギニン、アラニンおよびロイシンが開示されている（特許文献６）。
【０００４】
しかしながら、アルギニン、アラニンおよびフェニルアラニンを特定の量で含有する組成物が、脂質代謝が低下した対象におけるグルカゴンの分泌を促進し、脂質代謝を促進（改善）することができることについては従来知られていなかった。
【先行技術文献】
【特許文献】
【０００５】
【特許文献１】特開平４−１１２８２５号公報
【特許文献２】特開平６−２４９７７号公報
【特許文献３】特開平５−１２７２５８号公報
【特許文献４】特開２０１６−１０２０６４号公報
【特許文献５】特開２００５−２７５２４号公報
【特許文献６】特開２００８−２９１００２号公報
【非特許文献】
【０００６】
【非特許文献１】河田照雄ら編集、日本栄養・食料学会監修 「肥満と脂肪エネルギー代謝−メタボリックシンドロームへの戦略−」、建帛社、ｐｐ．２１７−２３８（２００８）
【非特許文献２】Tsuchita H et al., Effects of a Vespa amino acid mixture identical to hornet larval saliva on the blood biochemical indices of running rats., Nutr. Res., 17(6), pp.999-1012 (1997)
【発明の概要】
【０００７】
このような状況下、本発明者らは、脂質代謝が低下した対象における脂質の代謝を促進し、体脂肪を効率的に減少させるような素材について鋭意研究を行った。その結果、食経験のある主要なアミノ酸である、アルギニン、フェニルアラニンおよびアラニンを高濃度で含有する組成物が、脂質代謝が低下した対象においてグルカゴンの分泌を促進し、高い脂質代謝促進作用および抗肥満作用を奏することを見出した。具体的には、アルギニン、フェニルアラニンおよびアラニンを従来のアミノ酸組成物よりも高い濃度で含有する組成物を脂質代謝が低下した対象に投与した場合に、組成物を投与しない場合と比べて、投与後に低強度の運動を実施することによりグルカゴンの分泌が促進され、高い脂質代謝が観察されることを見出した。本発明は、かかる知見に基づくものである。
【０００８】
したがって、本発明は、脂質代謝が低下した対象におけるグルカゴンの分泌を促進し、ひいては脂質代謝を促進（改善）するための組成物および当該組成物を含む飲食品を提供することを目的とする。
【０００９】
本発明によれば、具体的に以下の発明が提供される。
（１）アルギニン、アラニンおよびフェニルアラニンを有効成分として含有する、脂質代謝が低下した対象における脂質代謝促進のための組成物であって、組成物中の全アミノ酸のモル数の合計を１００モルとした場合のアルギニン、アラニンおよびフェニルアラニンのモル数の合計が６０モル以上である、組成物。
（２）アルギニン、アラニンおよびフェニルアラニンのモル比が５．０〜９０．０：５．０〜９０．０：５．０〜９０．０である、（１）に記載の組成物。
（３）前記アルギニン、アラニンおよびフェニルアラニンのモル比が１０．０〜３０．０：２０．０〜６０．０：１０．０〜７０．０である、（２）に記載の組成物。
（４）前記全アミノ酸のモル数の合計を１００モルとした場合のアルギニン、アラニンおよびフェニルアラニンのモル数の合計が９０〜１００モルである、（１）〜（３）のいずれかに記載の組成物。
（５）グルカゴンの分泌を亢進するための、（１）〜（４）のいずれかに記載の組成物。
（６）血中インスリン濃度に対する血中グルカゴン濃度の比を増大させるための、（１）〜（５）のいずれかに記載の組成物。
（７）（１）〜（６）のいずれかに記載の組成物を含有させてなる、飲食品。
（８）飲料、顆粒、粉末および流動食からなる群から選択されるいずれか１つの形態である、（７）に記載の飲食品。
【００１０】
本発明の脂質代謝促進のための組成物は、グルカゴンの分泌を促進し、健常者と比較して脂質の分解が遅くかつ少ない傾向にある対象においても脂質を効率的に分解することができる。
【図面の簡単な説明】
【００１１】
【図１】組成物の摂取、採血および運動のスケジュールを示す概略図である。
【図２】組成物摂取後の血中の各成分の濃度の経時変化を示すグラフである。
【図３】組成物摂取後の血中の各成分の濃度の経時変化を示すグラフである。
【図４】血中インスリン濃度に対する血中グルカゴン濃度の比と、血中総ケトン濃度との相関関係を示すグラフである。
【００１２】
【発明の具体的説明】
【００１３】
以下、本発明を詳細に説明する。ただし、本発明は以下の好ましい実施態様に限定されず、本発明の効果を発揮する範囲内で自由に変更できるものである。
【００１４】
本発明の脂質代謝促進のための組成物（以下、「本発明の組成物」ともいう）は、アルギニン、アラニンおよびフェニルアラニンを有効成分として含有する。
【００１５】
アルギニン（Ａｒｇｉｎｉｎｅ）は非必須アミノ酸の１つであり、Ｄ体とＬ体とが存在する。Ｌ−アルギニンのＣａｓ  Ｎｏ．は７４−７９−３であり、（Ｓ）−２−アミノ−５−グアニジノペンタン酸、（Ｓ）−２−アミノ−５−（アミジノアミノ）吉草酸、Ｌ−（＋）−アルギニンまたはアルギＵと称されることもある。アルギニンの略号として「Ａｒｇ」または「Ｒ」を用いる場合もある。アルギニンは水や蟻酸に溶けやすく、希塩酸に溶け、エタノールにはほとんど溶けない（第十六改正日本薬局方）。アルギニンは、肉類等の多種のタンパク質などの様々な素材や食品に含まれていることが知られている。アルギニンは尿素回路の中間体として生合成されるが、速やかに分解されるため、子供では必須アミノ酸とされている。アルギニンは、成長ホルモンの分泌促進、免疫機能の向上に関与することが知られている。
【００１６】
アラニン（Ａｌａｎｉｎｅ）は非必須アミノ酸の１つであり、Ｄ体とＬ体とが存在する。Ｌ−アラニンのＣａｓ  Ｎｏ．は５６−４１−７であり、（Ｓ）−２−アミノプロピオン酸、（２Ｓ）−２−アミノプロパン酸、α−アラニンまたはＬ−（＋）−アラニンと称されることもある。アラニンの略号として「Ａｌａ」または「Ａ」を用いる場合もある。アラニンは水や蟻酸に溶けやすく、エタノールにはほとんど溶けない（第十六改正日本薬局方）。アラニンは、肉類等の多種のタンパク質などの様々な素材や食品に含まれていることが知られている。アラニンはタンパク質の構成アミノ酸の一種であり、結合組織の材料であることが知られている。
【００１７】
フェニルアラニン（Ｐｈｅｎｙｌａｌａｎｉｎｅ）は必須アミノ酸の１つであり、Ｄ体とＬ体とが存在する。Ｌ−フェニルアラニンのＣａｓ  Ｎｏ．は６３−９１−２であり、（Ｓ）−α−アミノベンゼンプロパン酸、（２Ｓ）−２−アミノ−３−フェニルプロパン酸、（Ｓ）−３−フェニル−２−アミノプロピオン酸、Ｌ−β−フェニルアラニンまたはＬ−（−）−フェニルアラニンと称されることもある。フェニルアラニンの略号として「Ｐｈｅ」または「Ｆ」を用いる場合もある。フェニルアラニンは蟻酸に溶けやすく、水にやや溶けにくく、希塩酸に溶け、エタノールにはほとんど溶けない（第十六改正日本薬局方）。フェニルアラニンは、肉類等の多種のタンパク質などの様々な素材や食品に含まれていることが知られている。
【００１８】
本発明の組成物におけるアルギニン、アラニンおよびフェニルアラニンの含有量は、組成物に含有される全アミノ酸のモル数の合計を１００モルとした場合に、６０モル以上であり、７０モル以上であることが好ましく、８０モル以上であることがより好ましく、９０モル以上であることがさらに好ましく、１００モルであることが特に好ましい。
【００１９】
また、本発明の組成物に含有されるアルギニン、アラニンおよびフェニルアラニンのモル比（アルギニン：アラニン：フェニルアラニン）は、本発明の効果が損なわれない限り特に限定されないが、５．０〜９０．０：５．０〜９０．０：５．０〜９０．０であることが好ましく、５．０〜５０．０：５．０〜５０．０：５．０〜８０．０であることがより好ましく、１０．０〜３０．０：２０．０〜６０．０：１０．０〜７０．０であることがより好ましく、１９．５〜２０．４：３７．５〜３８．４：４１．５〜４２．４であることがさらにより好ましく、２０：３８：４２であることが特に好ましい。
【００２０】
本発明の組成物におけるアルギニン、アラニンおよびフェニルアラニンの配合量は、組成物の形態、組成物を摂取する対象の年齢、体重および状態、ならびに用途などに応じて適宜決定することができる。本発明の組成物におけるアルギニン、アラニンおよびフェニルアラニンの配合量としては、本発明の効果が損なわれない限り特に限定されないが、組成物に対するアルギニン、アラニンおよびフェニルアラニンの合計量が０．２〜１００重量％であることが好ましく、０．３〜１００重量％であることがより好ましく、０．４〜１００重量％であることが特に好ましい。
【００２１】
本発明の組成物に含有されるアルギニン、フェニルアラニンおよびアラニンは、Ｄ体とＬ体のいずれであってもよい。
【００２２】
アルギニン、アラニンおよびフェニルアラニンは、味や臭いが飲食や経口摂取に適しているため、これらを高濃度で含有する本発明の組成物は風味に優れる。よって、本発明の組成物は、これを添加した飲食品や医薬品の風味を損なわないという利点を有する。
【００２３】
本発明の組成物は、アルギニン、フェニルアラニンおよびアラニン以外に他のアミノ酸をさらに含有することもできる。他のアミノ酸としては、本発明の効果が損なわれない限り特に限定されないが、グリシン、プロリン、リジン、チロシン、スレオニン、ロイシン、バリン、イソロイシン、グルタミン酸、トリプトファン、ヒスチジン、セリン、メチオニンおよびアスパラギン酸等が挙げられる。他のアミノ酸は、いずれか１種を本発明の組成物に含有させてもよく、２種以上を組み合わせて含有させてもよい。
【００２４】
本発明の組成物が他のアミノ酸をさらに含有する場合、他のアミノ酸の含有量は、本発明の効果が損なわれない限り特に限定されないが、前記全アミノ酸のモル数の合計を１００モルとした場合に、他のアミノ酸の１種または２種以上をそれぞれ
グリシン０．０１〜４モル
プロリン０．０１〜４モル
リジン０．０１〜２モル
チロシン０．０１〜２モル
スレオニン０．０１〜２モル
ロイシン０．０１〜２モル
バリン０．０１〜２モル
イソロイシン０．０１〜２モル
グルタミン酸０．０１〜１モル
トリプトファン０．０１〜１モル
ヒスチジン０．０１〜１モル
セリン０．０１〜１モル
メチオニン０．０１〜０．２モル
アスパラギン酸０．０１〜０．１モル
の量で含有することが好ましい。
【００２５】
本発明の組成物に含有されるアルギニン、フェニルアラニン、アラニンおよび他のアミノ酸は、いずれもフリーベースの形態であってもよく、水和物や塩の形態であってもよい。塩としては、本発明の効果が損なわれない限り特に限定されないが、例えば、有機酸（酢酸、酒石酸、脂肪酸など）、有機塩基、無機酸（塩酸、臭化水素酸、硝酸、硫酸、過塩素酸など）、無機塩基（カリウム、ナトリウム、亜鉛など）との塩が挙げられる。
【００２６】
また、本発明の組成物に含有されるアルギニン、フェニルアラニン、アラニンおよび他のアミノ酸は、それらのアミノ酸を含む素材や食品などから、搾汁、濃縮、精製、結晶化および抽出などの公知の手法を用いて得ることができる。さらに、微生物を用いて生産したものや、化学的に合成されたものを用いることも可能である。素材や食品などからの抽出に用いられる溶媒としては、本発明の効果が損なわれない限り特に限定されないが、例えば、水や、アルコール類、炭化水素類、有機酸、有機塩基、無機酸、無機塩基および超臨界流体などの抽出に通常に用いられる溶媒が挙げられる。これらの溶媒は１種を単独で用いてもよく、２種以上を組み合わせて用いてもよい。
【００２７】
また、本発明の組成物は、所望により薬学的に許容可能な添加剤を用いてさらに製剤化してもよく、本発明にはかかる態様も包含される。薬学的に許容可能な添加剤としては、本発明の効果が損なわれない限り特に限定されないが、例えば、賦形剤、結合剤、崩壊剤、滑沢剤、矯臭剤、溶解補助剤、懸濁剤、コーティング剤、溶剤および等張化剤などが挙げられる。また、本発明の組成物を含有する剤としては、例えば、錠剤（タブレット）、カプセル剤、顆粒剤、散剤、シロップ剤、液剤および懸濁剤などの剤形のものが挙げられる。さらに、これらに剤には、本発明の効果が損なわれない範囲において、適当量のビタミン、ミネラル、有機酸、糖類、ペプチド類および／または前記に挙げられていないアミノ酸などを配合してもよい。また、これらの剤を経口、経管および経静脈などの経路により摂取あるいは投与することができる。
【００２８】
また、本発明の組成物は、本発明の効果が損なわれない限り特に限定されることなく種々の形態をとることができ、好適には経口摂取される形態とすることができる。具体的には、本発明の組成物は、粉末や顆粒等の固体状、ペースト状、ゲル状、液状および懸濁液状などの形態をとることができる。
【００２９】
本発明によれば、本発明の組成物を含有させてなる医薬品、飲食品、栄養組成物およびサプリメントなどが提供される。これらのうち、本発明の組成物を含有させてなる飲食品が好ましく、飲食品としては、例えば、特別用途食品、栄養機能食品、栄養補助食品、健康食品、医薬品添加物、特定保健用食品および機能性表示食品などが挙げられる。より具体的には、各種の食品（牛乳、清涼飲料、発酵乳、ヨーグルト、チーズ、パン、ビスケット、クラッカー、ピッツァクラスト、調製粉乳、流動食、病者用食品、栄養食品、冷凍食品、加工食品およびその他の市販食品など）が挙げられる。なお、本明細書において、本発明の組成物を「含有させてなる」とは、本発明の組成物を「含む」および「原料とする」という意味を包含するものである。
【００３０】
本発明の組成物を含有させてなる飲食品には、水、タンパク質、糖質、脂質、ビタミン類、ミネラル類、有機酸、有機塩基、果汁およびフレーバー類等を配合することができる。タンパク質としては、例えば、全脂粉乳、脱脂粉乳、部分脱脂粉乳、カゼイン、ホエイ粉、ホエイタンパク質、ホエイタンパク質濃縮物、ホエイタンパク質分離物、ホエイタンパク質加水分解物、α−カゼイン、β−カゼイン、κ−カゼイン、β−ラクトグロブリン、α−ラクトアルブミン、ラクトフェリン、大豆タンパク質、鶏卵タンパク質、肉タンパク質等の動植物性タンパク質、これらの分解物、バター、乳清ミネラル、クリーム、ホエイ、非タンパク態窒素、シアル酸、リン脂質、乳糖等の各種の乳由来成分等が挙げられる。カゼインホスホペプチド等のペプチドやアミノ酸を含んでいてもよい。糖質としては、例えば、糖類、加工澱粉（テキストリンのほか、可溶性澱粉、ブリティッシュスターチ、酸化澱粉、澱粉エステル、澱粉エーテル等）、食物繊維等が挙げられる。脂質としては、例えば、ラード、魚油等に、これらの分別油、水素添加油、エステル交換油等の動物性油脂、パーム油、サフラワー油、コーン油、ナタネ油、ヤシ油等に、これらの分別油、水素添加油、エステル交換油等の植物性油脂等が挙げられる。ビタミン類としては、例えば、ビタミンＡ、カロチン類、ビタミンＢ群、ビタミンＣ、ビタミンＤ群、ビタミンＥ、ビタミンＫ群、ビタミンＰ、ビタミンＱ、ナイアシン、ニコチン酸、パントテン酸、ビオチン、イノシトール、コリン、葉酸等が挙げられる。ミネラル類としては、例えば、カルシウム、カリウム、マグネシウム、ナトリウム、銅、鉄、マンガン、亜鉛、セレン等が挙げられる。有機酸としては、例えば、リンゴ酸、クエン酸、乳酸、酒石酸、エリソルビン酸等が挙げられる。これらの成分は、単独で、あるいは複数種類を組み合わせて用いることができ、合成品及び／又はこれらを多く含む食品を用いてもよい。これらの食品の形態としては、液状、ペースト状、ゲル状、固形状、粉末状などを問わない。
【００３１】
本発明の組成物の一日当たりの摂取量は、組成物中の有効成分の含有量、組成物を摂取する対象の年齢、体重および状態、ならびに用途などに応じて適宜決定することができる。本発明の組成物の一日当たりの摂取量は、本発明の効果が損なわれない限り特に限定されないが、組成物に含有されるアミノ酸の合計量が、固形分として０．３〜３０ｇ、０．８〜８ｇ、１〜５ｇ、１．３〜３．５ｇ、１．５ｇまたは３ｇとなる摂取量とすることが好ましい。
【００３２】
また、本発明の組成物は、従来公知の脂質代謝促進効果がある飲食品や医薬品などと同時に摂取してもよく、それらの摂取の前後に摂取してもよい。
【００３３】
本発明には、脂質代謝促進のための組成物を製造するための、アルギニン、アラニンおよびフェニルアラニンの使用（使用方法）であって、組成物中の全アミノ酸のモル数の合計を１００モルとした場合のアルギニン、アラニンおよびフェニルアラニンのモル数の合計が６０モル以上である使用も包含される。
【００３４】
さらに、本発明には、本発明の組成物を対象に投与することを含む、対象における脂質代謝の促進方法も包含される。
【実施例】
【００３５】
以下、本発明を実施例を挙げてより具体的に説明するが、本発明はこれら実施例により限定されるものではない。
【００３６】
グルカゴンの分泌促進と脂肪の分解メカニズムは、以下のように概説することができる。
まず、グルカゴンが脂肪細胞膜上のレセプターに結合すると、細胞膜内面に存在するアデニル酸シクラーゼが活性化されて、ＡＴＰからサイクリックＡＭＰ（ｃＡＭＰ）が合成される。細胞内ｃＡＭＰ濃度が上昇した結果、ｃＡＭＰ依存性のプロテインキナーゼＡが活性化され、このプロテインキナーゼＡにより脂肪細胞の中で、ホルモン感受性リパーゼがリン酸化されて活性化する。ホルモン感受性リパーゼが、トリアシルグリセロールを遊離脂肪酸とモノアシルグリセロールに変換する。モノアシルグリセロールリパーゼが、モノアシルグリセロールをグリセロールと遊離脂肪酸に変換する。遊離脂肪酸は細胞に取り込まれてβ酸化によりアセチルＣｏＡに変換され、ＴＣＡ回路でさらに代謝される。この時、肝臓において過剰のアセチルＣｏＡがケトン体に変換される。
【００３７】
実施例１：本発明の組成物の調製
アルギニン、アラニンおよびフェニルアラニンを１０：１９：２１のモル比（全アミノ酸のモル数の合計を１００モルとした場合のアルギニン、アラニンおよびフェニルアラニンのモル数の合計が１００モル）で含む混合物３ｇを、カプセル（日本薬局方セルロースホワイトカプセル（植物性）、株式会社松屋製）に封入し、本発明の組成物とした。一方、デキストリン（ＴＫ−１６、松谷化学工業株式会社製）３ｇを同様のカプセルに封入し、対照組成物とした。
【００３８】
実施例２：本発明の組成物と従来のアミノ酸組成物の脂質代謝促進効果の比較
本実施例においては、実施例１において調製した本発明の組成物と対照組成物をそれぞれ摂取させた場合の、血中のグリセロール、遊離脂肪酸、ＴＧ、総ケトン体、グルコース、乳酸、インスリン、グルカゴン、成長ホルモン、アドレナリン、ノルアドレナリンおよびコルチゾールの濃度を測定し、脂質代謝促進効果の比較・検討を行った。なお、本実施例は、二重盲検クロスオーバー比較試験として行った。
【００３９】
本実施例は、運動習慣がない肥満度Ｉ度（ＢＭＩ２５以上３０未満）の中年男性（年齢３０歳以上５０歳未満）を対象として、図１に示すスケジュールに従って行った。
【００４０】
まず、図１において、ＶＳ０では医師の問診後に採血（１０ｍＬ）および採尿（１０ｍＬ）を行った。さらに自転車運動を実施し７５％最大心拍数までの時間を測定し、測定値から最大酸素摂取量（ＶＯ２最大）を推測し、算出した。さらに事前アンケートで既往歴、アレルギーの有無、医薬品・健康食品摂取状況、飲酒・運動習慣等の確認を行い、これらの結果から下記に示す「除外基準」に該当しない被験者の選抜を行った。
［除外基準］
・重篤な既往歴のある者、および罹患者
・アルコール多飲者（具体的には１日当たり２単位（アルコールとして４０ｇ、ビール中瓶２本（１Ｌ）、日本酒２合（３６０ｍＬ））以上を毎日摂取している者
・喫煙者
・食生活が極度に不規則な者
・交代勤務制勤務者および深夜勤務者
・試験に影響を及ぼす薬剤、健康食品およびサプリメントを日常的に服用・摂取している者（具体的には、コレステロール低下作用、中性脂肪上昇抑制作用、体脂肪低減作用を標榜する医薬品および食品類を日常的に服用・摂取している者）
・直近６ヶ月以内に献血を行った者
・フェニルケトン尿症および高フェニルアラニン血症の者
・その他、事前の一般血液検査と尿検査結果より、試験責任医師の判断によって被験者として不適と判断された者
【００４１】
選抜された１１名の被験者のバックグラウンドを表１に示す。
【表１】
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【００４２】
選抜された被験者に対し、ＶＳ０から６日以上の間隔をあけて試験１回目（ＶＳ１）を実施した。規定食（炭水化物：脂質：タンパク質比＝７１：１６：１３）を摂取後６時間以上の絶食時間を設けた後、ＶＳ１では２種類の組成物（本発明の組成物または比較例組成物）のうち一方を摂取し、自転車運動、採血を行った。自転車運動は、組成物摂取後３０〜９０分までの６０分間、最大酸素摂取量（ＶＯ２最大）の４０％の運動強度（低強度の運動）にて実施した。採血は組成物摂取前に１９ｍＬ、組成物摂取後３０分、６０分、９０分および１２０分に各１５ｍＬ、摂取後１５０分に１９ｍＬの計６回行い、合計９８ｍＬを採血した。ＶＳ１およびＶＳ２では、被験者の脱水対策として組成物摂取６０分後の採血終了後に、２００ｍＬの水を摂取させた。なお、本実施例において、自転車運動は恒温恒湿実験室内の、温度２３±２℃、湿度４５±５％の条件下で行った。
【００４３】
ＶＳ１から６日以上の間隔をあけて試験２回目（ＶＳ２）を行った。ＶＳ２ではＶＳ１とは異なる群の組成物を摂取し、自転車運動、採血をＶＳ１と同じスケジュールで行った。
【００４４】
採血により得られた各血液について、各成分の濃度をそれぞれ以下の方法により測定した。
グルカゴンの濃度は、Glucagon RIA SML（Euro-Diagnostica AB製）を用いた二重抗体ラジオイムノアッセイにより測定した。
インスリンの濃度は、Architect Insulin（アボットジャパン株式会社製）を用いた化学発光イムノアッセイにより測定した。
グルコース、総ケトン体、グリセロールおよび乳酸の濃度は、それぞれイアトロＬＱ  ＧＬＵ（ユニチカ株式会社製）、３−ＨＢカイノス（株式会社カイノス製）、Glycerol Colorimetric Assay Kit（Cayman Chemical製）およびデタミナー−ＬＡ（協和メデックス株式会社製）を用いた酵素法により測定した。
遊離脂肪酸の濃度は、ＮＥＦＡ−ＳＳ栄研（栄研化学株式会社製）を用いた酵素−ＵＶ法により測定した。
成長ホルモンおよびコルチゾールの濃度は、それぞれAccess hGH（Beckman Coulter, Inc.製）およびAccess cortisol（Beckman Coulter, Inc.製）を用いた化学発光酵素イッムノアッセイにより測定した。
アドレナリンおよびノルアドレナリンの濃度は、いずれもHLC-725CAΠ（東ソー株式会社製）を用いた高速液体クロマトグラフィーにより測定した。
なお、グリセロール濃度を株式会社イミューに委託をして測定を行った。また、遊離脂肪酸、ＴＧ、総ケトン体、グルコース、乳酸、インスリン、グルカゴン、成長ホルモン、アドレナリン、ノルアドレナリンおよびコルチゾールの濃度については、株式会社ＬＳＩメディエンスに委託して測定を行った。
【００４５】
血液中の各成分の測定値の経時変化を図２および図３に示す。
なお、各成分の測定結果は平均値±標準偏差で示す。また、組成物摂取からの経過時間および組成物の種類の二元配置分散分析を行い、交互作用があった場合にはTukeyの手法により群間比較を行った。
【００４６】
また、運動前、運動中および運動後のそれぞれに期間を分け、各成分についてArea Under the Curve（ＡＵＣ）を算出した。ＡＵＣはＦ検定により等分散であるかどうかを判定し、等分散の場合にはスチューデントのｔ検定（Student’s t-test）を、また、不等分散の場合はWilcoxon signed-rank testを行った。なお、Ｐ＜０．０５を有意な差と判断した。ＡＵＣの算出結果を表２および表３に示す。
【００４７】
【表２】
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【００４８】
【表３】
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【００４９】
二元配置分散分析の結果、血中グルカゴン濃度において交互作用があった。また、図３Ａに示すように、Tukeyの手法による二群間比較の結果、各組成物の摂取３０分後に本発明の組成物を摂取した群では、血中グルカゴン濃度の有意な上昇が確認された。
【００５０】
また、表２および表３にそれぞれ示されるように、本発明の組成物を摂取した群では、運動中（組成物摂取３０−９０分後）において、血中総ケトン体濃度ＡＵＣおよび血中グルカゴン濃度の有意な上昇が確認された。
【００５１】
一方、血中のグリセロール、遊離脂肪酸、ＴＧ、グルコース、乳酸、インスリン、成長ホルモン、アドレナリン、ノルアドレナリンおよびコルチゾールの濃度は、二元配置分散分析における交互作用がなく、またＡＵＣにおける群間比較においても有意な差は認められなかった。
【００５２】
ケトン体は脂質の代謝（異化）により生成するものであるため、上記結果から、本発明の組成物を摂取することにより、低強度の運動により脂質代謝が促進されることが示された。このことは、脂質代謝が低下した老年の人や肥満者のような高強度の運動が困難な対象においても、より身体に負担をかけることなく効率的に脂質代謝を促進できることを示唆すると言える。
【００５３】
さらに、本発明の組成物は、インスリン、成長ホルモンアドレナリンおよびノルアドレナリンの分泌に影響を及ぼすことなく脂質代謝促進効果を奏することも示された。このことは、本組成物を摂取した場合に、ホルモン分泌のかく乱などの副作用が生じにくいことを示唆すると言える。
【００５４】
次に、血中インスリン濃度に対する血中グルカゴン濃度の比と、血中総ケトン濃度との相関関係を図４に示す。なお、両者の相関関係についてピアソンの相関係数を算出した。
【００５５】
図４の結果から、運動中の血中インスリン濃度に対する血中グルカゴン濃度の比（血中グルカゴン濃度／血中インスリン濃度）と血中総ケトン体濃度との間に有意な正の相関（ｒ＝０．４４、ｐ＝０．０３８）が認められた。この結果から、本発明の組成物が、血中のグルカゴン濃度の分泌を促進することにより脂質代謝を促進するものであることが示唆された。
【産業上の利用可能性】
【００５６】
本発明によれば、脂質代謝が低下した対象において効果的に脂肪を消費し、また低強度の運動負荷によっても体脂肪減少の効果が期待できる脂質代謝促進のための剤、飲食品および医薬品などの開発が可能となる。
【図１】
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【図２】
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【図３】
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【図４】
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