(57)【要約】【課題】  妊娠前から使用可能な、妊娠中の母体の肥満及び高血糖の予防及び改善、妊娠及び出産の異常を低減又は防止するための剤及び方法を提供する。【解決手段】  アスタキサンチン又はラクトフェリンを有効成分として含有することを特徴とする、妊娠中の母体及び胎児の健康状態改善用剤。【選択図】なし【特許請求の範囲】
【請求項１】
アスタキサンチン及び／又はラクトフェリンを有効成分として含有することを特徴とする、妊娠中の母体及び胎児の健康状態改善用剤。
【請求項２】
医薬組成物又は飲食物である、請求項１記載の剤。
【請求項３】
健康状態改善が、体重増加抑制、血糖値制御、流産率低下又は胎児体重正常化を含む、請求項１又は２記載の剤。
【請求項４】
妊娠中の母体及び胎児の健康状態改善用剤を製造するための、アスタキサンチン及び／又はラクトフェリンの使用。
【請求項５】
アスタキサンチン及び／又はラクトフェリンを有効成分として含有することを特徴とする、妊娠中の母体及び胎児の体重増加抑制又は体重正常化用剤。
【請求項６】
アスタキサンチン及び／又はラクトフェリンを有効成分として含有することを特徴とする、妊娠中の母体及び胎児の血糖値制御用剤。
【請求項７】
アスタキサンチン及び／又はラクトフェリンを有効成分として含有することを特徴とする、流産予防用剤。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、妊娠中の母体の健康状態及び胎児ないし新生児の健康状態の改善に有効な剤に関する。
【背景技術】
【０００２】
女性が妊娠時に最も心配する事柄のひとつに体重変動がある。妊娠することにより女性の体は物理的・内分泌的に大きく変化し、食欲不振・つわりによる体重減少、又は食べづわり・運動不足などによる過剰な体重増加が起こるため、基準のＢＭＩ範囲を逸脱するケースは多い。
【０００３】
妊娠成立前の妊婦の体型は、生まれてくる新生児の成長に大きく影響を与える。女性の肥満は、妊娠率の低下をもたらす。妊娠成立を目的とした減量は、妊娠率の向上をもたらさないことも報告されている。
また、妊婦が肥満や糖尿病を有する場合、胎児のサイズは妊娠６か月時点で既に大きくなっており、ＢＭＩ≧３０である肥満女性が妊娠した場合、胎児が巨大になることによる難産、妊婦の高血圧症候群や糖尿病の発症、胎児の神経管閉鎖障害、死産などのリスクが高くなる傾向が統計学的にも示されている。さらに、そのような母親から生まれる新生児は、過大に育ちがちで、巨大児になることも報告されている。
【０００４】
妊娠糖尿病については、高血糖が胎盤を通して胎児に伝わり、周産期合併症としては、胎児仮死・死亡、先天奇形、肥大型心筋症など、成長期合併症としては、肥満、耐糖能異常、糖尿病などが生じやすくなるほか、早産、死産などのリスクも増加することが知られている。なお、妊娠糖尿病は、妊娠中に初めて発見又は発症した糖尿病にいたっていない糖代謝異常と定義され、妊娠前に診断された明らかな糖尿病は含めないとされている。
【０００５】
しかし、妊娠中の体重コントロールは非常に困難であり、多くの人を悩ませる原因となっている。妊娠時の肥満、糖尿病の改善を目的として、運動・食事療法などが行われ、治療薬としてインスリン様薬が処方される。しかし、インスリンは胎盤を通過できず、胎児への改善は見られにくい。
【０００６】
糖尿病を発症していない妊婦及び妊娠成立前の女性は、肥満や食生活による高血糖を制御することが重要であるが、このような時期にはインスリンを投与することは不可能である。したがって、未病状態の女性又は妊婦においても使用可能な、高血糖を制御する物質や方法の開発が必要である。
【０００７】
特許文献１には、タンパク源、炭水化物系、脂質源を含み、タンパク源として乳清タンパク質単離物を含有する妊婦向けの栄養組成物が記載されている。この組成物は妊娠期間及び授乳期間の血糖症及びインスリン血症を改善し後年の耐糖能異常を防止又は低減すると記載されているが、この組成物の効果及び有効成分は具体的に特定されていない。
【先行技術文献】
【特許文献】
【０００８】
【特許文献１】特表２０１６−５３６０１０号公報
【非特許文献】
【０００９】
【非特許文献１】「科学的根拠に基づく糖尿病診療ガイドライン２０１３」、南江堂、２１７〜２３２頁（２０１３）
【非特許文献２】伊東宏晃他、産婦人科診療ガイドライン解説、日産婦誌６３巻１２号、Ｎ−３１５〜Ｎ−３２０（２０１１）
【非特許文献３】Mutsaerts, et al., Engl. J. Med. 374; 20 pp. 1942-53 (2016)
【非特許文献４】Wassef and Quadro, J. Biol. Chem., 286(37), pp.32198-32207 (2011)
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【００１０】
本発明は、妊娠前から使用可能な、妊娠中の母体の肥満及び高血糖の予防及び改善、妊娠及び出産の異常を低減又は防止するための剤及び方法を提供することを目的とする。
【課題を解決するための手段】
【００１１】
ラクトフェリン（ＬＦ）がＬＲＰ−１を受容体とし、血液脳関門（ＢＢＢ）を通過すること、胎盤にはＬＲＰ−１が発現されていることが報告されている。本発明者らは、胎盤ＬＲＰ−１と胎児の成育に着目し、ラクトフェリンは母体から胎児へ移行できるものと推察して鋭意研究を重ねた結果、本発明を完成した。
【００１２】
本発明は、
〔１〕  アスタキサンチン及び／又はラクトフェリンを有効成分として含有することを特徴とする、妊娠中の母体及び胎児の健康状態改善用剤；
〔２〕  医薬組成物又は飲食物である、前記〔１〕又は〔２〕記載の剤；
〔３〕  健康状態改善が、体重増加抑制、血糖値制御、流産率低下又は胎児体重正常化を含む、前記〔１〕又は〔２〕記載の剤；
〔４〕  妊娠中の母体及び胎児の健康状態改善用剤を製造するための、アスタキサンチン及び／又はラクトフェリンの使用；
〔５〕  アスタキサンチン及び／又はラクトフェリンを有効成分として含有することを特徴とする、妊娠中の母体及び胎児の体重増加抑制又は体重正常化用剤；
〔６〕  アスタキサンチン及び／又はラクトフェリンを有効成分として含有することを特徴とする、妊娠中の母体及び胎児の血糖値制御用剤；
〔７〕  アスタキサンチン及び／又はラクトフェリンを有効成分として含有することを特徴とする、流産予防用剤
を提供する。
【発明の効果】
【００１３】
本発明により、妊娠中の母体の健康状態、特に体重増加や高血糖などを改善し、肥満状態の母体において生じる胎児異常を抑制することで、正常出産率を向上し、健康な新生児を出産できるようにすることに有効な剤、組成物、たとえば医薬組成物及び飲食物が提供される。また、本発明により、妊娠前及び妊娠中の母体及び胎児の健康状態の改善方法が提供される。
【００１４】
本発明の剤は、未病の状態、たとえば高血糖や肥満を発症する前又は妊娠前から使用可能であり、食品やサプリメントとして簡便に摂取することも可能である。
【００１５】
本発明の剤の有効成分であるラクトフェリンは、いろいろな哺乳動物の乳汁中に含まれていると共に、ヒトでは、母乳、涙、鼻汁、唾液などの外分泌液や、血漿、尿、子宮内液、羊水などの体液にも含まれている蛋白質である。また、アスタキサンチンは抗酸化作用を有することが知られ、主にエビ・カニなど甲殻類、サケ・マスの身、タイ・コイの表皮などに含まれるカロテノイドの一種で、長年の食経験がある食品に含有される成分である。したがって、本発明の剤は、安全性が非常に高い。
【図面の簡単な説明】
【００１６】
【図１】本発明の効果を調べるための実験方法の概略を示す図である。
【図２】親マウスの体重に対するラクトフェリン又はアスタキサンチンの摂取の効果を表す図である。横軸は上段が飲み水、下段が飼料の種類であり、Ｎ＝水道水又は通常飼料、ＬＦ＝ラクトフェリン添加水、ＡＳ＝アスタキサンチン添加水、ＨＦ＝高脂肪飼料を表す（図２〜９まで共通）。
【図３】親マウスの餌摂取量に対するラクトフェリン又はアスタキサンチンの摂取の効果を表す図である。
【図４】親マウスの水摂取量に対するラクトフェリン又はアスタキサンチンの摂取の効果を表す図である。
【図５】親マウスの血中グルコース濃度に対するラクトフェリン又はアスタキサンチンの摂取の効果を表す図である。
【図６】仔マウスの体重に対するラクトフェリン又はアスタキサンチンの摂取の効果を表す図である。
【図７】親マウスの体重（横軸）と仔マウスの体重（縦軸）との相関関係を表す図である。
【図８】親マウスの流産率に対するラクトフェリン又はアスタキサンチンの摂取の効果を表す図である。
【図９】親マウスの産仔数に対するラクトフェリン又はアスタキサンチンの摂取の効果を表す図である。
【発明を実施するための形態】
【００１７】
本発明の剤の有効成分は、精製、分画、単離又は抽出されたラクトフェリン又はアスタキサンチンである。本発明において使用されるラクトフェリンは、ラクトフェリンの生物活性があるものであればよい。その例を挙げると、ヒトを初めとする各種哺乳動物（例えば、ウシ、ウマ、ブタ、ヒツジ、ヤギ、ラクダなど）から得られる天然のラクトフェリン（例えば、ウシの乳に含まれるウシラクトフェリン）、ラクトフェリンから常法によって鉄を除去したアポラクトフェリン、アポラクトフェリンに金属（鉄、銅、亜鉛、マンガンなど）イオンをキレートさせた金属飽和又は非飽和ラクトフェリン、遺伝子工学技術により生産されるラクトフェリン、これらのラクトフェリンにポリエチレングリコール鎖を結合させたものなどがある。なお、遺伝子工学技術により生産されるラクトフェリンには、改変されたラクトフェリン遺伝子に基づいて産生される組換え型ラクトフェリンのほか、トランスジェニック動植物が生産するラクトフェリン、ラクトフェリンの活性フラグメントなどの機能的等価物も包含される。本発明に関してラクトフェリンという場合、インタクトなラクトフェリンのほか、上記のような種々のラクトフェリンの誘導体、改変物などの機能的等価物を含む。
【００１８】
ラクトフェリンは公知の物質であるので、市販品を用いることができる。また、ラクトフェリンを含有する乳などから、公知の方法、例えばスルホン化担体を用いてラクトフェリンを精製する方法（特開平３−１０９４００号公報）によって精製したラクトフェリンを使用することができる。さらに、用途によっては、乳などからの分画物であってラクトフェリンを高濃度で含有するもの（例えば、乳から糖類を除去した分画物）を使用することもできる。
【００１９】
本発明において使用されるアスタキサンチンは、天然由来のものであっても合成されたものであってもよく、供給源や抽出又は製造方法を問わない。例えば、本発明に用いられるアスタキサンチンは、サケ、マス、甲殻類、ヘマトコッカス藻類、真菌等の天然物由来のものであってもよい。本発明に用いられるアスタキサンチンは、誘導体であってもよく、例えばエステル化された形態のアスタキサンチン等であってもよい。アスタキサンチンは公知の物質であるので、市販品を用いることができる。本発明に関してアスタキサンチンという場合、インタクトなアスタキサンチンのほか、上記のような種々のアスタキサンチンの誘導体、改変物などの機能的等価物を含む。
【００２０】
本発明では、上記のようなラクトフェリン又はアスタキサンチンの中から、１種又は２種以上の組合せを適宜選択して用いることができる。
【００２１】
本発明の剤は、ラクトフェリン又はアスタキサンチンを唯一の必須成分とするが、所望により、製薬又は食品業界で公知の種々の成分や添加剤であって、ラクトフェリン又はアスタキサンチンと配合禁忌ではない成分や添加剤を含んでいてもよい。したがって、本発明の剤は、医薬組成物、飲食物等の組成物であることができる。ここで、「飲食物」は、ヒト用に限定されず、ペットや家畜として飼育されている犬や猫などの哺乳動物用の飼料を含む。また、「飲食物」の概念には、通常の飲料や食品の他、いわゆるサプリメントや健康食品、経腸栄養食品、特別用途食品、栄養機能食品、特定保健用食品などが包含される。「飲料」の概念には、液体のみならず、摂取直前に水などの液体に混合又は溶解されて摂取される、粉末、顆粒、錠剤などの形態のものも包含される。
【００２２】
本発明の剤が含んでいてもよい添加剤としては、製薬又は食品業界で日常的に使用されている賦形剤、崩壊剤、滑沢剤、結合剤、界面活性剤、流動性促進剤、着色剤、香料などを挙げることができる。これらの添加剤は、所望の剤型に応じて、適宜選択される。
【００２３】
本発明の剤の形態は、特に限定されない。したがって、本発明の剤が、粉末剤、顆粒剤、錠剤、カプセル剤などの経口組成物形態である場合には、ラクトフェリン及び／又はアスタキサンチンと共に、一般的には澱粉、スクロース、マンニット、カルボキシメチルセルロース、コーンスターチ、無機塩類などの賦形剤を使用する。また、必要に応じ、前記賦形剤の他に、結合剤、崩壊剤、界面活性剤、滑沢剤、流動性促進剤、着色料、香料などを適宜使用することができる。より具体的には、結合剤としては、例えば、澱粉、デキストリン、アラビアガム末、ゼラチン、ヒドロキシプロピルスターチ、カルボキシメチルセルロースナトリウム、メチルセルロース、結晶性セルロース、エチルセルロース、ポリビニルピロリドンが挙げられる。また、崩壊剤としては、例えば、澱粉、ヒドロキシプロピルスターチ、カルボキシメチルセルロースナトリウム、架橋カルボキシメチルセルロースナトリウム、結晶性セルロース、カルボキシメチルセルロース、ポリビニルピロリドンが挙げられる。界面活性剤としては、大豆レシチン、蔗糖脂肪酸エステルなどが、滑沢剤としては、タルク、ロウ、蔗糖脂肪酸エステル、水素添加植物油、ステアリン酸カルシウム、ステアリン酸マグネシウムなどが、流動性促進剤としては、無水ケイ酸、乾燥水酸化アルミニウム、ケイ酸マグネシウムなどが、それぞれ挙げられる。
【００２４】
本発明の剤の投与経路は、例えば、経口、経皮、注射、経腸、直腸内投与などである。本発明の剤の好ましい投与経路は経口投与又は注射である。
【００２５】
また、本発明は、ラクトフェリン又はアスタキサンチンを摂取させることを含む、妊娠前又は妊娠中の母体及び胎児の健康状態の改善方法に関する。ラクトフェリン又はアスタキサンチンを摂取させる、すなわち投与の対象は、哺乳動物、特にペットや家畜として飼育されている犬や猫などの哺乳動物（ヒトを除く）である。ラクトフェリン又はアスタキサンチンは、例えば上記のような任意の医薬組成物、飲食物等の形態で投与又は摂取させることができる。
【００２６】
妊娠前又は妊娠中の母体の健康状態の改善に有効なラクトフェリンの１日あたりの投与又は摂取量は、その製剤形態、投与方法、対象の体重などによって異なるが、ヒトでは、好ましくは１０mg乃至１５，０００mg／日であり、より好ましくは５０mg乃至６，０００mg／日である。また、ペット等の哺乳動物（ヒトを除く）では、好ましくは０．２mg乃至３００mg／kg体重／日である。妊娠前又は妊娠中の母体の健康状態の改善に有効なアスタキサンチンの１日あたりの投与又は摂取量は、その製剤形態、投与方法、対象の体重などによって異なるが、ヒトでは、好ましくは１０mg乃至１５，０００mg／日であり、より好ましくは５０mg乃至６，０００mg／日である。また、ペット等の哺乳動物（ヒトを除く）では、好ましくは０．２mg乃至３００mg／kg体重／日である。
【００２７】
以下に、本発明の実施例を示して、本発明をより具体的に説明する。
【００２８】
［実施例１］  ラクトフェリン錠の製造
牛乳から抽出したラクトフェリン原末（蛋白質として純度９５％以上；蛋白質中のラクトフェリンは９０％以上）２０kgに、乳糖４５．６kg、結晶セルロース（商品名：アビセル）１６kg、カルボキシメチルセルロース・カルシウム塩１．６kg、ショ糖脂肪酸エステル０．８kgを加え、得られた混合物をミキサーで粉砕し、１００メッシュを通過する粉末とした。この混合粉末を打錠機により打錠して、長径８.５mm、重量２１０mgの錠剤とした。１錠中には、ラクトフェリン原末５０mgが含有されている。
【００２９】
［実施例２］  腸溶性ラクトフェリン錠の製造
コーティング機（フロイント産業（株）製、ハイコーターＨＣＴ−４８Ｎ）に、実施例１で製造した錠剤を入れた。この錠剤に、シェラック９.６質量％、Ｌ−アルギニン１．５質量％、ソルビトール１．９質量％、ショ糖脂肪酸エステル２．４質量％、エタノール４．８質量％、精製水７９．８％よりなる腸溶性コーティング液を噴霧し、対錠剤比で８〜９質量％の腸溶性コーティングを施して製品とした。
【００３０】
［実施例３］
＜マウスの飼育方法＞
４週齢のＩＣＲメスマウスを３０匹購入し、体重のばらつきが均等になるように４群に分けた。動物飼育環境は、温度２３．５±２℃、湿度５０±１０％、１２時間照明（明期６：００−１８：００、暗期１８：００−６：００）に制御した。
【００３１】
各群に対し、それぞれ、飼料は通常の飼料（日本クレア、ＣＥ−２）又は高脂肪飼料（日本クレア、ＨＦＤ３２）のいずれか、水は水道水、８％（w/v）ラクトフェリン（Ｔａｔｕｒａ−Ｂｉｏ  Ｌａｃｔｏｆｅｒｒｉｎ  Ｐｏｗｄｅｒ  ５００２０１）添加水、４mg/l（v/v）アスタキサンチンＡＳ（富士化学工業、アスタリール（登録商標）１０ＷＳ液）添加水のいずれかの組み合わせを与えた。自由摂取・飲水とした。
【００３２】
上記の処理群で４週間飼育した後、ＩＣＲオスマウスと同居させて妊娠させた。妊娠１９．５日後に産仔数および産仔の体重を測定し、産後１週間で母マウスを麻酔条件下で放血し安楽死させた。実験のアウトラインを図１に示す。
【００３３】
＜体重測定＞
４週齢から１５週齢までの間、週に一度の頻度で体重を測定し、餌・水の種類による体重増加を調べた。また産仔の体重は、産後１日目に測定し、出生時体重とした。
【００３４】
＜水及び餌の摂取量の測定＞
４週齢から１５週齢までの間、餌の摂取量は週に２回、水の摂取量は週に３回、消費量を測定した。測定値をケージ内のマウス匹数で割り算をし、１匹あたりの１日摂取量を算出した。
【００３５】
＜血中グルコース濃度の測定＞
出産１週間後のマウスを安楽死させる際、血液を採取した。その血液の一部を実験動物用グルコース測定装置（ＬＡＢ  Ｇｌｕｃｏ、４２３９Ｒ１００１、ＬＧ用センサー、４２３９Ｒ１００２、株式会社フォラケアジャパン）で測定し、血中グルコース濃度を調べた。
【００３６】
＜マウスの解剖＞
出産１週間後のマウスを安楽死させた後、子宮を観察して着床痕の数を調べた。実際に生んだ数を着床痕の数で割った値（％）を出産率とし、１００％から出産率を引いた値を流産率とした。
【００３７】
＜結果＞
結果を図２〜９に示す。
高脂肪飼料を与えた群（Ｎ−ＨＦ）は、通常飼料を与えた群（Ｎ−Ｎ）と比較して、有意に体重が増加した（ｐ＜０．０１）。それに対し、高脂肪飼料とラクトフェリンを同時摂取させると（ＬＦ−ＨＦ）、高脂肪飼料のみを与えた群（Ｎ−ＨＦ）に比べて体重が減少し、通常飼料群（Ｎ−Ｎ）に近くなる傾向となった（図２）。
【００３８】
飼料摂取量については、高脂肪飼料を与えた場合は通常飼料を与えた場合よりも少なくなったが、高脂肪飼料を与えた群同士での比較では、ラクトフェリン又はアスタキサンチンの摂取の有無にかかわらず、摂取量に変化がなかった（図３）。同様に、水摂取量についても、高脂肪飼料を与えた場合は通常飼料を与えた場合よりも少なくなったが、高脂肪飼料を与えた群同士での比較では、ラクトフェリン又はアスタキサンチンの摂取の有無にかかわらず、摂取量に変化がなかった（図４）。
【００３９】
体重の場合と同様に、高脂肪飼料を与えた群（Ｎ−ＨＦ）は、通常飼料群（Ｎ−Ｎ）と比べて血中グルコース濃度が有意に高くなっていたが（ｐ＜０．０５）、高脂肪飼料とラクトフェリンを同時摂取させると（ＬＦ−ＨＦ）、母親の血中グルコース濃度は有意に減少しており正常値の範囲まで回復していた（図５）。
【００４０】
また、通常飼料を与えた群（Ｎ−Ｎ）と比べて高脂肪飼料を与えた親（Ｎ−ＨＦ）から生まれた産仔は巨大児となったが（ｐ＜０．００１）、高脂肪飼料と同時にラクトフェリンを摂取させることで（ＬＦ−ＨＦ）正常な体重の産仔を得ることができた（図６）。
【００４１】
図７に、親の体重と産仔の体重との相関関係を示す。図７においては、Ｘ軸は母の体重、Ｙ軸は産仔の平均体重を表す。通常飼料と水道水を与えた群（Ｎ−Ｎ）では、母親の体重が重くなると、子供の体重は低下する（相関係数−０．３４９）が、高脂肪飼料と水道水を与えた群（Ｎ−ＨＦ）では、逆に、母親の体重が重くなると子供の体重も重くなる傾向が見られた（相関係数０．５２８）。これに対し、高脂肪飼料とともにラクトフェリンを与えた群（ＬＦ−ＨＦ）では、Ｎ−Ｎと同じ傾向を示すことが分かる。
【００４２】
高脂肪飼料を与えた群（Ｎ−ＨＦ）は、通常飼料を与えた群（Ｎ−Ｎ）と比較して、有意に流産率が増加した（ｐ＜０．００１）。それに対し、高脂肪飼料とラクトフェリン（ＬＦ−ＨＦ）又はアスタキサンチン（ＡＳ−ＨＦ）を同時摂取させると、高脂肪飼料のみを与えたマウスに比べて流産率が低減し、通常飼料群（Ｎ−Ｎ）に近くなった（図８）。なお、試験した投与量では、マウスの妊娠率（オスと交配したマウスのうち妊娠した個体の割合）・出産率（妊娠したマウスのうち出産した個体の割合）には、ラクトフェリン又はアスタキサンチンの影響は見られなかった。
【００４３】
さらに、高脂肪飼料を与えた群（Ｎ−ＨＦ）は、通常飼料を与えた群（Ｎ−Ｎ）と比較して、産仔数が減少する傾向があったが、この実験では有意差はなかったものの、高脂肪飼料とラクトフェリン（ＬＦ−ＨＦ）又はアスタキサンチン（ＡＳ−ＨＦ）を同時摂取させると、産仔数が増加する傾向が見られた（図９）。
【００４４】
以上の結果から、本発明の剤は、妊娠成立前及び／又は妊娠中に摂取させることによって、妊娠中の母体の健康状態及び胎児ないし新生児の健康状態を改善すること、さらに具体的には、妊娠中の母体の肥満又は糖代謝に関連する母子の異常を予防又は低減することが示された。特に、母体の体重の増加を抑制する効果、高血糖を改善する効果、流産（特に肥満関連の流産）を予防又は低減する効果、及び胎児ないし新生児の巨大化を抑制し、正常体重を維持する効果を有することが示された。
【図１】
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【図２】
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【図３】
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【図４】
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【図５】
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【図６】
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【図７】
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【図８】
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【図９】
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