(57)【要約】      （修正有）【課題】中枢神経に作用して安全に抗鬱作用、脳機能改善作用、抗ストレス作用又は抗不安作用を向上できる中枢神経作用改善用組成物、或いは食品の提供。【解決手段】抗鬱作用、脳機能改善作用、抗ストレス作用、抗不安作用、食欲亢進作用又は睡眠改善作用を有する中枢神経作用改善用組成物であって、体重１キログラムに対する投与量として、クルクミンを０．２５〜３２ｍｇ／ｋｇ、Ｌ−カルニチンを２．０８〜２６８．８ｍｇ／ｋｇ含むと共に、イチョウ葉エキスまたはアスタキサンチンの少なくとも一方を更に含み、イチョウ葉エキスを含む場合、イチョウ葉エキスの投与量は１〜１２８ｍｇ／ｋｇ、アスタキサンチンを含む場合、アスタキサンチンの投与量は０．００１２５〜０．１６ｍｇ／ｋｇである中枢神経作用改善用組成物。【選択図】なし【特許請求の範囲】
【請求項１】
抗鬱作用、脳機能改善作用、抗ストレス作用、抗不安作用、食欲亢進作用又は睡眠改善作用を有する中枢神経作用改善用組成物であって、
体重１キログラムに対する投与量として、クルクミンを０．２５〜３２ｍｇ／ｋｇ、Ｌ−カルニチンを２．０８〜２６８．８ｍｇ／ｋｇ含むと共に、
イチョウ葉エキスまたはアスタキサンチンの少なくとも一方を更に含み、
イチョウ葉エキスを含む場合、イチョウ葉エキスの投与量は１〜１２８ｍｇ／ｋｇ、
アスタキサンチンを含む場合、アスタキサンチンの投与量は０．００１２５〜０．１６ｍｇ／ｋｇである中枢神経作用改善用組成物。
【請求項２】
クルクミンとＬ−カルニチンをクルクミン０．５に対してＬ−カルニチン４．２の重量比で含み、
イチョウ葉エキスを含む場合、イチョウ葉エキスの組成割合はクルクミン０．５、Ｌ−カルニチン４．２に対して２．０、
アスタキサンチンを含む場合、アスタキサンチンの組成割合はクルクミン０．５、Ｌ−カルニチン４．２に対して０．００２５である、請求項１に記載の中枢神経作用改善用組成物。
【請求項３】
前記組成物が錠剤、顆粒剤、細粒剤、粉末、カプセル剤、ゼリー剤、クリーム剤、ドリンク剤またはシロップ剤である、請求項１または２に記載の中枢神経作用改善用組成物。
【請求項４】
機能性食品として調製されていることを特徴とする請求項１ないし３の何れか一項に記載の中枢神経作用改善用組成物。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、ヒト及び動物の抗鬱作用、脳機能改善作用、抗ストレス作用又は抗不安作用
を持つ中枢神経作用改善用組成物、あるいは食品に関するものである。
【背景技術】
【０００２】
近年の社会におけるストレスや病気等を要因とする鬱病、不安等の心的障害、或いは加
齢による脳機能の低下等により中枢神経作用に関する障害を訴える患者が増加しており、
社会的に大きな問題となっている。
【０００３】
ここで、中枢神経作用に関する障害とは、鬱状態、躁状態、食欲低下、不眠症、精神活
動の低下、脳機能障害（例、アルツハイマー病、認知障害、記憶障害、言語障害、脳卒中
、脳梗塞、パーキンソン病）、ストレス、不安、イライラ、神経症などが挙げられる。
【０００４】
また、近年、アルツハイマー病などの脳機能障害の原因のひとつに、アミロイドβタン
パク質（Ａβ）凝集が関与していることが報告されており（Salvatore Oddo et aｌ.Neur
on,Vol.43,321-332.）、Ａβ凝集を抑制することで脳機能改善作用を持つことが示唆され
ている。
【０００５】
このため、Ａβ凝集作用の抑制効果を指標にして、中枢神経作用に対する種々の治療・
改善薬の探索が進められている。一方、植物抽出エキスの中枢神経作用に関する研究も進
められている。例えば、Okenらにより、４３０名の被験者に１日１２０mg 〜２４０mgの
イチョウ葉エキスを３〜６カ月間投与するといった、アルツハイマー病に対するイチョウ
葉エキスの効果を検討したメタ分析が報告され、認知症を有意に改善したとの報告がある
［Oken BS et al. Arch Neurol. 1998;55(11):1409-1415.］。このとき、対象となった臨
床試験の患者の間では重篤な有害事象は報告されていない。
【０００６】
したがって、必然的に長期間にわたる服用が求められる認知症改善には、上述のように
有害事象が発生しない範囲のイチョウ葉エキスを使用しつつ、さらに効果を増大する工夫
が望まれる。一方で、クルクミンを含む組成物が酸化ストレスを軽減し、アルツハイマー
病の女性の歩行を改善したことが特許文献１に記載されており、イチョウ葉エキスとクル
クミノイド（ウコン精製物）との併用が特許文献２に記載され、イチョウ葉エキスとクル
クミンを主成分とする健康食品が上市されているが、具体的な脳機能改善効果を示すデー
タは開示されていない。
【０００７】
他方、Ｌ−カルニチンはアルツハイマー病初期症状の改善に効果があると考えられてお
り、Ｌ−カルニチン及びヒペリシンを含む鬱病予防に有効な組成物は特許文献３に記載さ
れている。しかし、アセチルＬ−カルニチンとヒペリシンおよびカルニチン混合物（Ｌ−
カルニチン+アセチルＬ−カルニチン+プロピオニルＬ−カルニチン+イソバレリルＬ−カ
ルニチン）について記載されてはいるが、Ｌ−カルニチンによる相乗的脳機能改善効果は
なんら示されていない。
【０００８】
また、アスタキサンチンが抗鬱効果と記憶改善効果を示したことが特許文献４に記載さ
れているが、その有効量についてヒトでの安全性は確認されていない。
【先行技術文献】
【特許文献】
【０００９】
【特許文献１】特開２０１３−００１６６６号公報
【特許文献２】特開２００４−３３１５３８号公報
【特許文献３】特表２００２−５１８４３８号公報
【特許文献４】特開２００７−１２６４５５号公報
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【００１０】
本発明は、上記従来の課題に鑑みてなしたもので、抗鬱作用、脳機能改善作用、抗スト
レス作用又は抗不安作用を向上できる中枢神経作用改善用組成物、あるいは食品を提供し
ようとするものである。
【課題を解決するための手段】
【００１１】
本発明は、抗鬱作用、脳機能改善作用、抗ストレス作用、抗不安作用、食欲亢進作用又は睡眠改善作用を有する中枢神経作用改善用組成物であって、体重１キログラムに対する投与量として、クルクミンを０．２５〜３２ｍｇ／ｋｇ、Ｌ−カルニチンを２．０８〜２６８．８ｍｇ／ｋｇ含むと共に、イチョウ葉エキスまたはアスタキサンチンの少なくとも一方を更に含み、イチョウ葉エキスを含む場合、イチョウ葉エキスの投与量は１〜１２８ｍｇ／ｋｇ、アスタキサンチンを含む場合、アスタキサンチンの投与量は０．００１２５〜０．１６ｍｇ／ｋｇである中枢神経作用改善用組成物、あるいは食品に関する。
【００１２】
【００１３】
また、前記中枢神経作用改善用組成物、あるいは食品は、クルクミンとＬ−カルニチンをクルクミン０．５に対してＬ−カルニチン４．２の重量比で含み、イチョウ葉エキスを含む場合、イチョウ葉エキスの組成割合はクルクミン０．５、Ｌ−カルニチン４．２に対して２．０、アスタキサンチンを含む場合、アスタキサンチンの組成割合はクルクミン０．５、Ｌ−カルニチン４．２に対して０．００２５とすることができる。
【００１４】
【００１５】
【００１６】
各成分の重量％は小数点以下第２位を四捨五入し算出した。尚、これ以後の重量％の記
載についても同様に示す。
【００１７】
【発明の効果】
【００１８】
本発明の中枢神経作用改善用組成物、あるいは食品によれば、抗鬱作用、脳機能改善作
用、抗ストレス作用又は抗不安作用という優れた効果を奏し得る。
【図面の簡単な説明】
【００１９】
【図１】各植物エキスにＬ−カルニチンを組み合わせた試料のＡβ凝集抑制試験の結果を示すグラフである。
【図２】各アミノ酸誘導体にイチョウ葉エキス、クルクミンおよびアスタキサンチンを組み合わせた試料のＡβ凝集抑制試験の結果を示すグラフである。
【図３】複数の植物エキスとアミノ酸誘導体を組み合わせた試料のＡβ凝集抑制試験の結果を示すグラフである。
【図４】イチョウ葉エキスの配合率を変動させた試料のＡβ凝集抑制試験の結果を示すグラフである。
【図５】クルクミンの配合率を変動させた試料のＡβ凝集抑制試験の結果を示すグラフである。
【図６】アスタキサンチンの配合率を変動させた試料のＡβ凝集抑制試験の結果を示すグラフである。
【図７】Ｌ−カルニチンの配合率を変動させた試料のＡβ凝集抑制試験の結果を示すグラフである。
【図８】各種クルクミン製剤を用いた試料のＡβ凝集抑制作用効果を示すグラフである。
【図９】本発明の各成分の組み合わせが、抗鬱効果に与える影響を示すグラフである。
【図１０】本発明の組成物における摂取量の増加が、抗鬱効果に与える影響を示すグラフである。
【図１１】各種クルクミン製剤を用いた試料の抗鬱効果を示すグラフである。
【図１２】本発明の組成物が、記憶・学習効果に与える影響を示すグラフである。
【図１３】抗不安試験である高架式十字迷路試験によるopen-arm滞在時間を示すグラフである。
【図１４】抗不安試験である高架式十字迷路試験によるopen-arm進入回数を示すグラフである。
【図１５】ヒトボランティア試験の結果を示すグラフである。
【図１６】ヒトボランティア試験の結果を示すグラフである。
【図１７】ヒトボランティア試験で改善か確認された被験者群の唾液中クロモグラニンＡの濃度変化の結果を示すグラフである。
【発明を実施するための形態】
【００２０】
［用語の説明］
本明細書中の「植物エキス」とは、水及び／又は水溶性有機溶媒あるいは油溶性有機溶
媒を用いて抽出したものである。抽出に用いられる水溶性有機溶媒としては、アルコール
類、ブタノール等の一価アルコール；１，３−プロピレングリコール等のプロピレングリ
コール、１，３−ブチレングリコール等の多価アルコールなどが挙げられる。これらの水
溶性有機溶媒は、一種又は二種以上を混合して用いることもできる。また、油溶性有機溶
媒としては、酢酸エチルなどの低級アルキルエステル、ベンゼン及びヘキサンなどの炭化
水素、ジエチルエーテルなどのエーテル類などが挙げられる。
【００２１】
本発明に用いられる「植物エキス」の具体例としては、アスタキサンチン、アシタバエ
キス、アセンヤクエキス、アマチャエキス、アルテアエキス、アルニカエキス、アロエエ
キス、イチョウ葉エキス、イラクサエキス、ウイキョウエキス、エイジツエキス、オウゴ
ンエキス、オウバクエキス、オウレンエキス、オオムギエキス、オトギリソウエキス、オ
ランダカラシエキス、海藻エキス、加水分解コムギタンパク液、カモミラエキス、ガマエ
キス、カラスムギエキス、カワラヨモギエキス、α−カロテン、β−カロテン、γ−カロ
テン、キョウニンエキス、クインスシードエキス、クチナシエキス、クマザサエキス、ク
ロレラエキス、クララエキス、クリプトキサンチン、クルクミン、クレマティスエキス、
クワエキス、ゲンノショウコエキス、紅茶エキス、コウホネエキス、ゴボウエキス、コム
ギ胚芽エキス、コメヌカエキス、コンフリーエキス、サイシンエキス、サボンソウエキス
、サンザシエキス、サンショウエキス、シイタケエキス、ジオウエキス、シコンエキス、
シソエキス、シナノキエキス、シモツケソウエキス、シャクヤクエキス、ショウキョウチ
ンキ、シラカバエキス、スイカズラエキス、スギナエキス、セイヨウキヅタエキス、セイ
ヨウニワトコエキス、セイヨウノコギリソウエキス、セイヨウハッカエキス、セージエキ
ス、ゼニアオイエキス、センキュウエキス、センブリエキス、タイムエキス、チャエキス
、チョウジエキス、チンピエキス、ツボクサエキス、トウガラシチンキ、トウガラシエキ
ス、トウキエキス、トウキンセンカエキス、トウニンエキス、トウヒエキス、ドクダミエ
キス、ニンジンエキス、ノバラエキス、パセリエキス、ハマメリス抽出液、バラエキス、
ヒキオコシエキス、ヒハツエキス、ビワ葉エキス、ブドウ葉エキス、ブクリョウエキス、
ブッチャーブルームエキス、ヘチマエキス、ベニバナエキス、ボタンエキス、ホップエキ
ス、マロニエエキス、メリッサエキス、メリロートエキス、モモ葉エキス、ヤグルマギク
エキス、ユーカリエキス、ユキノシタエキス、ユリエキス、ヨクイニンエキス、ラベンダ
ーエキス、ローズマリーエキス、ローマカミツレエキス、及びワレモコウエキスなどが挙
げられる。
【００２２】
本発明に用いられる「アミノ酸誘導体」はアミノ酸自体も含むものとし、「アミノ酸誘
導体」の具体例としては、グリシン、セリン、アラニン、バリン、ロイシン、イソロイシ
ン、メチオニン、フェニルアラニン、チロシン、トリプトファン、プロリン、トレオニン
、システイン、アスパラギン、グルタミン、アスパラギン酸、グルタミン酸、アルギニン
、リジン、ヒスチジン、オルニチン、テアニン、シトルリン、γ−アミノ酪酸（ＧＡＢＡ
）、タウリン、カルニチン、クレアチン、パントテン酸及び、カルノシンなどが挙げられ
る。
【００２３】
本明細書中の「イチョウ葉エキス」とは、イチョウ（Ginkgo biloba）を水及び／又は
水溶性有機溶媒あるいは油溶性有機溶媒を用いて抽出したものである。使用部位は葉に限
定されず、樹皮、樹液、葉、枝、根、実、種子などが含まれてもよい。
【００２４】
本明細書中の「クルクミン」とは、主にショウガ科ウコン属の多年性草であるウコン（
ターメリック：Curcuma longa）に代表される熱帯、亜熱帯系の植物群に含まれている難
水溶性の物質であり、原料であるウコンを水及び／又は水溶性有機溶媒あるいは油溶性有
機溶媒を用いて抽出し製造される。また、フェノール性分子であるクルクミンは、ジフェ
ルロイルメタン又は（Ｅ，Ｅ）−１，７−ビス（４−ヒドロキシ−３−メトキシフェニル
）−１，６−ヘプタジエン−３，５，−ジオンとしても既知である。
【００２５】
本明細書中の「アスタキサンチン」とはβ-カロテンやリコピンなどと同じくカロテノ
イドの一種で、キサントフィル類に分類される。3,3'-ジヒドロキシ-β,β-カロテン-4,4
'-ジオンとしても既知である。
【００２６】
本明細書中の「ドクダミ」とは、ドクダミ科ドクダミ属の植物を指し、学術名はHouttu
ynia cordataである。
【００２７】
本明細書中の「セイヨウキヅタ」とは、セリ目ウコギ科キヅタ属の耐寒性常緑蔓性低木
を指し、学術名はHedera helixである。
【００２８】
本明細書中の「ホップ」とはアサ科のつる性多年草を指し、学術名はHumulus lupulus
である。和名はセイヨウカラハナソウ（西洋唐花草）である。
【００２９】
本明細書中の「カルニチン」とは、生体の脂質代謝に関与するビタミン様物質で、アミ
ノ酸から生合成される誘導体であり、3-ヒドロキシ-4-トリメチルアンモニオブタン酸と
しても既知である。カルニチンは異性体が存在し、そのうち脂質代謝に利用されるカルニ
チンは、Ｌ−カルニチンである。
【００３０】
本明細書中の「グリシン」とは、アミノ酢酸のことで、別名グリココルと呼ばれるもの
である。示性式は H2NCH2COOHであり、非極性側鎖アミノ酸に分類される。
【００３１】
本明細書中の「グルタミン酸」とは、アミノ酸のひとつで、2-アミノペンタン二酸のこ
とである。別名2-アミノグルタル酸とも呼ばれる。
【００３２】
本明細書中の「ヒト一日当たりの摂取量」とは、成人一人が一日当たりに摂取する量を
指す。
【００３３】
本明細書中における組成物、錠剤等は、１〜数回の摂取により、１日当たりの摂取量が
定められた範囲内となるように対象成分を含有する配合量で調整される。
【００３４】
本明細書中の「機能性食品」とは、例えば、健康食品、健康補助食品、病者用食品、栄
養補助食品、あるいは、厚生労働省の定める保健機能食品（特定保健用食品、栄養機能食
品）のような、通常の食品に比べて優れた生理的特性を有する食品をいう。
【００３５】
さらに、上記の機能性食品に付する表示には、例えば、厚生労働省の定める保健機能食
品に対して認められた表示、あるいは、組成物が膝関節痛の処置のために用いられる旨の
表示が含まれ、それらの表示は、具体的には、例えば機能性食品の包装容器に付される。
ここで、「食品」とは、専ら飲食のために経口的に用いられる形態のものすべてを含み（
例えば、飲料も含む）、錠剤、顆粒剤、細粒剤、粉末、カプセル剤、ゼリー剤、クリーム
剤、ドリンク剤またはシロップ剤などの形態のものであっても、専ら飲食のために用いら
れる限りにおいては、本実施形態における食品に含まれる。
【００３６】
以下、本発明の実施例を図と共に説明する。
【００３７】
本発明者らは、抗鬱作用、脳機能改善作用、抗ストレス作用又は抗不安作用を発揮でき
る安全な薬剤を得るべく研究を重ねた結果、植物エキスとアミノ酸誘導体を含む組成に中
枢神経作用を改善する効果があることを見出し、更に、植物エキスとしては、イチョウ葉
エキス、クルクミン、アスタキサンチン、ドクダミ、セイヨウキヅタ又はホップの少なく
ともいずれか１つを含むことが好ましいこと、及び、アミノ酸誘導体としては、Ｌ−カル
ニチン、グリシン又はグルタミン酸の少なくともいずれか１つを含むことが好ましいこと
を得た。また、クルクミンとＬ−カルニチンを含み、更にイチョウ葉エキスまたはアスタ
キサンチンを含む組成物が高い中枢神経作用改善効果を有することを見出した。更に、イ
チョウ葉エキス、クルクミン、アスタキサンチンおよびＬ−カルニチンを含む組成物が最
も好ましい中枢神経作用改善効果を有することを見出した。
【００３８】
また、イチョウ葉エキス、クルクミン、およびＬ−カルニチンの３成分の総重量のうち
、イチョウ葉エキス９．７〜６３．２重量％を含み、クルクミン３．９〜１４．０重量％
を含み、Ｌ−カルニチン２９．４〜８６．４重量％を含む組成物に、高い中枢神経作用を
改善する効果があることを見出した。
【００３９】
好ましくは、イチョウ葉エキス、クルクミン、およびＬ−カルニチンの３成分の総重量
のうち、イチョウ葉エキス１７．７〜４６．２重量％を含み、クルクミン３．９〜７．５
重量％を含み、Ｌ−カルニチン２９．４〜７８．４重量％を含む組成物に、高い中枢神経
作用を改善する効果があることを見出した。
【００４０】
更に、ヒト一日当たり６０〜４８０mgの摂取量のイチョウ葉エキスと、ヒト一日当たり
１５〜１２０mgの摂取量のクルクミンと、ヒト一日当たり０．０７５〜０．６mgの摂取量
のアスタキサンチンと、ヒト一日当たり１２５〜１０１０mgの摂取量のＬ−カルニチンと
を含む組成物に高い中枢神経作用を改善する効果があることを見出した。
【００４１】
これらに基づいて、本発明の中枢神経作用改善用組成物である下記の各試料を得た。
【実施例１】
【００４２】
本発明の中枢神経作用改善用組成物である以下の各試料を作製し、その有効性確認試験
を以下の如く実施した。
［Ｉ］アミロイドβタンパク質（Ａβ）凝集抑制試験
【００４３】
試験例１
［Ｉ−Ｉ］植物エキスとアミノ酸誘導体の組み合わせによるＡβ凝集抑制
（試料の作製）
【００４４】
はじめにイチョウ葉エキス（イチョウ葉乾燥エキスＦ：丸善製薬社製）１．８ｍｇをPo
tassium phosphate buffer (ＫＰＢ)１．８ｍｌに溶解させ、更にＫＰＢを用いた段階希
釈により１００倍に希釈し、１０．０μｇ/ml溶液を調製した。また、Ｌ−カルニチン（
カルニピュア(登録商標)酒石酸塩CNF：ロンザジャパン社製）１．１４ｍｇをＫＰＢ５．
４７ｍｌに溶解させ、更にＫＰＢを用いた段階希釈により１０倍に希釈し、２０．８μｇ
/ml溶液を調製した。
【００４５】
次に、１０．０μｇ/mlのイチョウ葉エキス２００μｌと２０．８μｇ/mlのＬ−カルニ
チン２００μｌとＫＰＢ４００μｌを混合させ、イチョウ葉エキスとＬ−カルニチンを組
み合わせた試料を作製した。組み合わせた試料中のイチョウ葉エキスの濃度は２．５０μ
ｇ/mlとなり、Ｌ−カルニチンの濃度は５．２０μｇ/mlとなる。
【００４６】
以下、クルクミン(セラクルミン(登録商標)CR-031P：セラバリューズ社製）、アスタキ
サンチン（アスタリール(登録商標)パウダー20F：富士化学工業社製）、ドクダミ（ドク
ダミエキスパウダーMF：丸善製薬社製）、セイヨウキヅタ（西洋キヅタ乾燥エキス：アス
ク薬品社製）、ホップ（ホップ乾燥エキス：アスク薬品社製）も同様に、必要に応じてＫ
ＰＢを用いて段階希釈を行った後、Ｌ−カルニチンと組み合わせ、それぞれ試料を作製し
た。組み合わせた試料中の各植物エキス濃度はそれぞれクルクミンが０．６２５μｇ/ml
、アスタキサンチンが０．００３１３μｇ/ml、ドクダミが２．５０μｇ/ml、セイヨウキ
ヅタが２．５０μｇ/ml、ホップが２．５０μｇ/mlとなる。各試料の配合比を以下の表１
に示す。
【表１】
2019131576.tif 000002
配合比は有効数字３桁で記載した。
【００４７】
前記と同様に、イチョウ葉エキス、クルクミン、アスタキサンチンに各アミノ酸誘導体
を組み合わせた試料を作製した。作製した試料中の各アミノ酸誘導体の濃度は、グリシン
（グリシン：協和発酵バイオ社製）、グルタミン酸（Ｌ−グルタミン酸：協和発酵バイオ
社製）、Ｌ−カルニチン共に５．２０μｇ/mlとなる。従って、試料はイチョウ葉エキス
、クルクミン、アスタキサンチンおよびアミノ誘導体の４成分を含むこととなる。
（試験）
【００４８】
はじめに、ヒトＡβ1-42（ペプチド研究所社製）をジメチルスルホキシド（ＤＭＳＯ）
中に１mMの濃度で溶解し、超音波処置により完全溶解させた。その後、１mM溶液に２４倍
量のＫＰＢを加えて攪拌しＡβ溶液（40μM）を作製した。
【００４９】
次に、９６well black plateを用いて、氷上でイチョウ葉エキス（２．５０μｇ/ml）
とＬ−カルニチン（５．２０μｇ/ml）を組み合わせた試料５０μl/wellとＡβ溶液５０
μl/wellをそれぞれウェルに分注し、ウェル内で混合した。最終濃度は、イチョウ葉エキ
スが１．２５μｇ/ml、Ｌ−カルニチンが２．６０μｇ/ml、Ａβ溶液が２０μＭとなる。
その後、直ちに３７℃にてインキュベーションを開始した。反応時間は０及び２４時間と
した。
【００５０】
インキュベーション後のＡβ凝集レベルは、重合したＡβと蛍光色素Thioflavine T (
ＴｈＴ)との結合により判定した。ＴｈＴ溶液は、ＴｈＴを６０μM濃度でGlycine buffer
(pH８．５)中に溶解して作製した。インキュベーション後の各wellにＴｈＴ溶液を５μl
/well添加（最終濃度：２．９μM）、混合後、室温にて３０分間静置した後、Envision 2
102 multi label counter（パーキンエルマー社製）を用いて、Ex.450 nm/Em.485 nmの蛍
光強度を測定し、反応開始から24時間後のControl(Ａβ溶液)の蛍光強度を100％として、
それぞれのＡβ凝集率を算出した。
【００５１】
イチョウ葉エキスとＬ−カルニチンのほか、各植物エキス（イチョウ葉エキス、クルク
ミン、アスタキサンチン、ドクダミ、セイヨウキヅタ、ホップ）やアミノ酸誘導体（Ｌ−
カルニチン、グリシン、グルタミン酸）を組み合わせた試料についても、前記と同様にＡ
β溶液と混合させた後、Ａβのインキュベーション開始から２４時間後のＡβ凝集率を算
出した。
（結果）
【００５２】
図１に示す如く、各成分単独でのＡβ凝集率は、イチョウ葉エキスが９０．６％、クル
クミンが１１７％、アスタキサンチンが１６４．５％、ドクダミが１００．１％、Ｌ−カ
ルニチンが１４１．５％、セイヨウキヅタが６６．５％、ホップが７９．９％であった。
【００５３】
従って、クルクミン、アスタキサンチン、ドクダミおよびＬ−カルニチンについてはＡ
β凝集抑制作用が見られず、アスタキサンチンとＬ−カルニチンについては、寧ろＡβの
凝集作用を促進した。
【００５４】
各植物エキスとＬ−カルニチンを組み合わせた結果、Ａβ凝集率はそれぞれ、イチョウ
葉エキス＋Ｌ−カルニチンが８５．３％、クルクミン＋Ｌ−カルニチンが８４．１％、ア
スタキサンチン＋Ｌ−カルニチンが７７．８％、ドクダミ＋Ｌ−カルニチンが６０．８％
、セイヨウキヅタ＋Ｌ−カルニチンが５４．５％、ホップ＋Ｌ−カルニチンが６３．９％
となり、それぞれ植物エキス成分単独と比較してＡβ凝集抑制作用が向上した。
【００５５】
以上の結果から、イチョウ葉エキス、クルクミン、アスタキサンチン、ドクダミ、セイ
ヨウキヅタおよびホップ等の任意の植物エキスとＬ−カルニチンとの組成物が、それぞれ
の成分単独に比べ顕著なＡβ凝集抑制作用効果を有した。
【００５６】
従って、イチョウ葉エキス、クルクミン、アスタキサンチン、ドクダミ、セイヨウキヅ
タ、ホップの少なくともいずれか１つを含み、更に、Ｌ−カルニチンを含む組み合わせが
顕著な脳機能改善作用を有することを示唆する。
【００５７】
また、図２に示す如く、各アミノ酸誘導体単独でのＡβ凝集率は、Ｌ−カルニチンが１
４１．５％、グリシンが９９．７％、グルタミン酸が７５．６％であった。従って、Ｌ−
カルニチンとグリシン単独ではＡβ凝集抑制作用が見られなかった。それに対し、イチョ
ウ葉エキスとクルクミンとアスタキサンチンの植物エキス３成分を組み合わせた試料のＡ
β凝集率は７２．１％であった。
【００５８】
植物エキス３成分（イチョウ葉エキス、クルクミンおよびアスタキサンチン）と各アミ
ノ酸誘導体を組み合わせた場合のＡβ凝集率はそれぞれ、植物エキス３成分＋Ｌ−カルニ
チンが４６．１％、植物エキス３成分＋グリシンが４７．１％、植物エキス３成分＋グル
タミン酸が４３．５％となり、いずれの組み合わせも、各アミノ酸誘導体単独と比較して
Ａβ凝集抑制作用が向上した。
【００５９】
以上の結果から、イチョウ葉エキスとクルクミンとアスタキサンチンを含み、更に、Ｌ
−カルニチン、グリシン、グルタミン酸等の任意のアミノ酸誘導体を含む組み合わせが、
アミノ酸誘導体単独に比べ顕著なＡβ凝集抑制作用効果を有した。
【００６０】
従って、イチョウ葉エキスとクルクミンとアスタキサンチンを含み、更に、Ｌ−カルニ
チン、グリシン、グルタミンの少なくともいずれか１つを含む組み合わせが、顕著な脳機
能改善作用を有することを示唆する。
【００６１】
以上、試験例１［Ｉ−Ｉ］の結果から、任意の植物エキスとアミノ酸誘導体の組み合わ
せが、顕著な脳機能改善作用を有することを示唆する。
【００６２】
［Ｉ−ＩＩ］複数の植物エキスとアミノ酸誘導体の組み合わせによるＡβ凝集抑制作用
（試料の作製）
【００６３】
［Ｉ−Ｉ］と同様の手順に従い、植物エキスであるイチョウ葉エキス、クルクミン、ア
スタキサンチン、ドクダミ、セイヨウキヅタ、およびホップとアミノ酸誘導体であるＬ−
カルニチンから３もしくは４成分を組み合わせた試料を作製した。
（試験）
【００６４】
［Ｉ−Ｉ］と同様の手順に従い、それぞれのＡβ凝集率を算出した。尚、括弧内にＡβ
凝集率（％）を示し、以後同様に記載することとした。
（結果）
【００６５】
図３に示す如く、イチョウ葉エキス＋Ｌ−カルニチン：１'＋７'（８５．３％）もしく
はアスタキサンチン＋Ｌ−カルニチン：３'＋７'（７７．８％）にクルクミンを組み合わ
せたいずれの試料もＡβ凝集抑制作用が顕著に向上した（イチョウ葉エキス＋クルクミン
＋Ｌ−カルニチン：１'＋２'＋７'（５９．３％）、クルクミン＋アスタキサンチン＋Ｌ
−カルニチン：２'＋３'＋７'（５７．４％））。
【００６６】
その他の組み合わせによるＡβ凝集率は、ドクダミ＋Ｌ−カルニチン：４'＋７'が６０
．８％、セイヨウキヅタ＋Ｌ−カルニチン：５'＋７'が５４．５％、ホップ＋Ｌ−カルニ
チン：６'＋７'が６３．９％であり、更に、クルクミンを組み合わせた試料のＡβ凝集率
は、クルクミン＋ドクダミ＋Ｌ−カルニチン：２'＋４'＋７'が５８．２％、クルクミン
＋セイヨウキヅタ＋Ｌ−カルニチン：２'＋５'＋７'が５２．３％、クルクミン＋ホップ
＋Ｌ−カルニチン：２'＋６'＋７'が６１．０％であった。
【００６７】
また、イチョウ葉エキス、クルクミン、アスタキサンチンおよびＬ−カルニチンの４成
分を組み合わせた（１'＋２'＋３'＋７'）結果、Ａβ凝集率は４６.１％となり、１成分
と２成分および３成分の組み合わせと比較して顕著なＡβ凝集抑制作用を示した。
【００６８】
クルクミンとＬ−カルニチンを含み、更にイチョウ葉エキスまたはアスタキサンチンを
含めた試料では、Ａβ凝集抑制作用が向上した。一方で、クルクミンとＬ−カルニチンを
含み、更にドクダミ、セイヨウキヅタまたはホップを含めてもＡβ凝集抑制作用が向上し
なかった。
【００６９】
以上の結果から、クルクミンとＬ−カルニチンを含み、更にイチョウ葉エキスまたはア
スタキサンチンを含めた組成物は、顕著な脳機能改善作用を有することを示唆する。
【００７０】
更に、イチョウ葉エキス、クルクミン、Ｌ−カルニチンおよびアスタキサンチンを含む
組成物が、顕著な脳機能改善作用を有することを示唆する。
【００７１】
［Ｉ−ＩＩＩ］各成分の配合率の変動によるＡβ凝集抑制作用
（試料の作製）
【００７２】
［Ｉ−Ｉ］と同様の手順に従い、イチョウ葉エキス、クルクミン、アスタキサンチンお
よびＬ−カルニチンの４成分を組み合わせた試料を作製し、いずれか１成分の配合率を変
動させた試料をそれぞれ作製した。
（試験）
【００７３】
［Ｉ−Ｉ］と同様の手順に従い、それぞれのＡβ凝集率を算出した。
【００７４】
・イチョウ葉エキスの配合率の変動
（結果）
【００７５】
図４に示す如く、イチョウ葉エキスの配合率を変動させたＡβ凝集抑制試験では、イチ
ョウ葉エキスが０．３１２５〜５．０μg/mlの範囲においてＡβ凝集率は４５〜６２％で
あり、Ａβ凝集抑制作用を示した。
【００７６】
従って、イチョウ葉エキスと各成分との組み合わせでは、イチョウ葉エキスは０．３１
２５〜５．０μg/mlであることが望ましい（サンプル２〜６）。これをイチョウ葉エキス
、クルクミン、およびＬ−カルニチンの３成分を総重量としたときの重量％に換算する。
【００７７】
サンプル２ではイチョウ葉エキスの添加量が０．３１２５μｇ/ｍｌ、クルクミンの添
加量が０．３１２５μｇ/ｍｌ、Ｌ−カルニチンの添加量が２．６μｇ/ｍｌであり、合計
すると３成分の総重量が３．２２５μｇ/ｍｌとなる。従って、イチョウ葉エキスの添加
量０．３１２５μｇ/ｍｌが３成分の総重量３．２２５μｇ/ｍｌに占める割合は９．７重
量％となる。
【００７８】
サンプル６では、イチョウ葉エキスの添加量が５．０μｇ/ｍｌ、クルクミンの添加量
が０．３１２５μｇ/ｍｌ、Ｌ−カルニチンの添加量が２．６μｇ/ｍｌであり、合計する
と３成分の総重量が７．９１２５μｇ/ｍｌとなる。従って、イチョウ葉エキスの添加量
５．０μｇ/ｍｌが３成分の総重量７．９１２５μｇ/ｍｌに占める割合は６３．２重量％
となる。尚、他成分の重量％についても、別途記載が無い限り、同様な方法で算出した。
【００７９】
以上から、イチョウ葉エキス、クルクミン、およびＬ−カルニチンの３成分の総重量の
うちイチョウ葉エキスが９．７〜６３．２重量％であることが望ましい。
【００８０】
好ましくは、イチョウ葉エキスは０．６２５〜２．５μg/mlであることが望ましく（サ
ンプル３〜５）、これをイチョウ葉エキス、クルクミン、およびＬ−カルニチンの３成分
を総重量としたときの重量％に換算すると、総重量のうち、イチョウ葉エキスが１７．７
〜４６．２重量％であることが望ましい。
【００８１】
・クルクミンの配合率の変動
（結果）
【００８２】
図５に示す如く、クルクミンの配合率を変動させたＡβ凝集抑制試験では、クルクミン
が０．１５６〜０．６２５μg/mlの範囲において、Ａβ凝集率は５８〜７７％であり、Ａ
β凝集抑制作用を示した。
【００８３】
従って、クルクミンと各成分との組み合わせでは、クルクミンは０．１５６〜０．６２
５μg/mlであることが望ましく（サンプル１０〜１２）、これをイチョウ葉エキス、クル
クミン、およびＬ−カルニチンの３成分を総重量としたときの重量％に換算すると、総重
量のうちクルクミンが３．９〜１４．２重量％であることが望ましい。
【００８４】
好ましくは、クルクミンは０．１５６〜０．３１２５μg/mlであることが望ましく（サ
ンプル１０〜１１）、これをイチョウ葉エキス、クルクミン、およびＬ−カルニチンの３
成分を総重量としたときの重量％に換算すると、総重量のうち、クルクミンが３．９〜７
．５重量％であることが望ましい。
【００８５】
・アスタキサンチンの配合率の変動
（結果）
【００８６】
図６に示す如く、アスタキサンチンの配合率を変動させたＡβ凝集抑制試験では、アス
タキサンチンの割合を増加し続けても顕著なＡβ凝集抑制作用を示した。
【００８７】
従って、アスタキサンチンは、イチョウ葉エキス、クルクミンおよびＬ−カルニチンと
組み合わせることでＡβ凝集抑制作用を示す。
【００８８】
・Ｌ−カルニチンの配合率の変動
（結果）
【００８９】
図７に示す如く、Ｌ−カルニチンの配合率を変動させたＡβ凝集抑制試験では、Ｌ−カ
ルニチンの割合を増加し続けても顕著なＡβ凝集抑制作用を示した。好ましくはＬ−カル
ニチンが５．２μg/ml以上の範囲において、顕著なＡβ凝集抑制作用を示した。
【００９０】
従って、Ｌ−カルニチンは、イチョウ葉エキス、クルクミンおよびアスタキサンチンと
組み合わせることで顕著なＡβ凝集抑制作用を示す。好ましくは、イチョウ葉エキス、ク
ルクミン、およびＬ−カルニチンの３成分を総重量としたときの重量％に換算すると、総
重量のうち、Ｌ−カルニチンが２９．４重量％以上であれば顕著なＡβ凝集抑制作用を示
す。
【００９１】
顕著なＡβ凝集抑制作用を示す場合、イチョウ葉エキスとクルクミンの配合率は、少な
くともそれぞれ９．７重量％、３．９重量％含まれることが望ましいことから、イチョウ
葉エキス、クルクミン、およびＬ−カルニチンの３成分を総重量としたときのＬ−カルニ
チンの配合率の上限は、１００重量％から、少なくとも含まれるイチョウ葉エキスの配合
率９．７重量％とクルクミンの配合率３．９重量％を差し引いた８６．４重量％となるこ
とが望ましい。従って、更に好ましくは、イチョウ葉エキス、クルクミン、およびＬ−カ
ルニチンの３成分の総重量のうち、Ｌ−カルニチンが２９．４〜８６．４重量％であるこ
とが望ましい。
【００９２】
更に好ましくは、イチョウ葉エキスとクルクミンの配合率が、少なくともそれぞれ１７
．７重量％、３．９重量％含まれることが望ましいことから、イチョウ葉エキス、クルク
ミン、およびＬ−カルニチンの３成分を総重量としたときのＬ−カルニチンの配合率の上
限は、１００重量％から、少なくとも含まれるイチョウ葉エキスの配合率１７．７重量％
とクルクミンの配合率３．９重量％を差し引いた７８．４重量％となることが望ましい。
従って、イチョウ葉エキス、クルクミンおよびＬ−カルニチンの３成分の総重量のうち、
Ｌ−カルニチンが２９．４〜７８．４重量％であることが望ましい。
【００９３】
以上の結果から、イチョウ葉エキス、クルクミン、Ｌ−カルニチン及びアスタキサンチ
ンの４成分を組み合わせた試料について、成分の比率もＡβ凝集抑制作用には重要である
。イチョウ葉エキス、クルクミン、およびＬ−カルニチンの３成分の総重量のうち、イチ
ョウ葉エキスが９．７〜６３．２重量％であり、クルクミンが３．９〜１４．０重量％で
あり、Ｌ−カルニチンが２９．４〜８６．４重量％において顕著なＡβ凝集抑制作用効果
を有したことから、前記各成分の重量％の範囲において、顕著な脳機能改善作用を有する
ことを示唆する。
【００９４】
尚、[Ｉ−Ｉ]と同様の手順に従い、各種クルクミン製剤を使用し、最終濃度がそれぞれ
、クルクミン０．３１２５μｇ/ml、Ｌ−カルニチン２．６μｇ/ml、イチョウ葉エキス１
．２５μｇ/ml、アスタキサンチン０．００１５８μｇ/mlとなるように調整した試料のＡ
β凝集抑制作用効果を測定した。
(結果)
【００９５】
図８に示す如く、各種クルクミン製剤を配合した試料のＡβ凝集抑制作用効果を測定し
たところ、セラクルミンと同等もしくはそれ以上のＡβ凝集抑制作用効果を示した。従っ
て、本発明の組成物には、セラクルミンに限定されることなく他のクルクミン製剤につい
ても配合できることが示された。
【００９６】
試験例２
［ＩＩ］抗鬱試験での成分組み合わせによる有効性確認
（試料の作製）
【００９７】
各種植物エキスおよびアミノ酸がイチョウ葉エキス２．０、クルクミン０．５ 、アス
タキサンチン０．００２５、Ｌ−カルニチン４．２の組成割合となるように４成分を混合
して、粉末の試料（Ａ）を作製した。試料（Ａ）の組成割合をイチョウ葉エキス、クルク
ミン、およびＬ−カルニチンの３成分を総重量としたときの重量％に換算すると、総重量
のうち、イチョウ葉エキスが３０．０重量％、クルクミンが７．５重量％、Ｌ−カルニチ
ンが６２．５重量％となる
【００９８】
アスタキサンチンは添加量が微量のため、増量剤として結晶セルロースを添加して各成
分を混合した。結晶セルロースは、下記の試験例３〜５においても同様に添加した。
【００９９】
上記試料（Ａ）と、該試料（Ａ）からイチョウ葉エキス、クルクミン、Ｌ−カルニチン
、アスタキサンチンの各成分を１つずつ除いた試料（Ｂ，Ｃ，Ｄ，Ｅ）を作製した。
【０１００】
また、イチョウ葉エキス８．０、クルクミン２．０ 、ＧＡＢＡ３．３、ピペリン１．
３の組成割合で４成分を混合した粉末からなる他社の既存品を比較対象として作製した（
Ｆ）。
（試験）
【０１０１】
８週齢のICR系雄マウス（日本チャールス・リバー社製）に試料Ａをイチョウ葉エキス
２．０mg/kg、クルクミン０．５mg/kg 、アスタキサンチン０．００２５mg/kg、Ｌ−カル
ニチン４．２mg/kgの投与量となるように１％カルボキシメチルセルロース（CMC）溶媒に
懸濁させ、経口ゾンデを用いて経口投与した。試料Ｂ〜Ｅについても同様に経口投与した
。また、試料Ｆについては、イチョウ葉エキス８．０mg/kg、クルクミン２．０mg/kg 、
ＧＡＢＡ３．３mg/kg、ピペリン１．３mg/kgの投与量となるように１％CMC溶媒に懸濁さ
せ、経口ゾンデを用いて経口投与した。対応するControl群には、溶媒のみを投与した。
各投与群は１群６頭とした。
【０１０２】
投与１時間後に、尾の先端から約１cmの部位をクリップで挟み、マウスを吊り下げた。
そして、吊り下げて２分後から６分後までの無動時間（平均値）を測定した。Control群
と投与群の間で統計学的な有意性を検討する為Dunnet検定を実施した。有意水準は５％と
した。
【０１０３】
試験例２の結果を図９に示す。
（結果）
【０１０４】
図９に示す如く、Control群の無動時間は１１５秒であったのに対し、試料（Ａ）投与
群の無動時間は５５．５秒と有意に短い値を示した。４成分からイチョウ葉エキスを除い
た試料（Ｂ）投与群の無動時間は６２．５秒、アスタキサンチンを除いた試料（Ｅ）投与
群の無動時間は６３秒と何れも有意に短い値を示した。一方、クルクミンを除いた試料（
Ｃ）投与群の無動時間は９１．３秒、Ｌ−カルニチンを除いた試料（Ｄ）投与群の無動時
間は８７．９秒であり、Control群と比べ有意差は得られなかった。また、他社の既存品
（Ｆ）投与群の無動時間は１０２．８秒であり、Control群と比べ有意差は得られなかっ
た。
【０１０５】
以上の結果から、クルクミンとＬ−カルニチンを含み、更にイチョウ葉エキスまたはア
スタキサンチンを加えた３成分の組み合わせ（Ｂ，Ｅ）は、顕著な抗鬱作用を示した。一
方、イチョウ葉エキスとクルクミンを主成分とする比較対象（Ｆ）は、イチョウ葉エキス
の用量をＡ〜Ｅの４倍量投与したにもかかわらず、抗鬱効果を示さなかった。
【０１０６】
従って、抗鬱作用を示すためには、クルクミンとＬ−カルニチンは必須成分であること
が示唆される。
【０１０７】
また、イチョウ葉エキス、クルクミン、アスタキサンチンおよびＬ−カルニチンの４成
分の組み合わせ（Ａ）が、更に顕著な抗鬱作用を示した。
【０１０８】
試験例３
［ＩＩＩ］イチョウ葉エキス、クルクミン、アスタキサンチンおよびＬ−カルニチンの配
合比を一定とした場合の、摂取量の増加が抗鬱作用に与える影響確認
（試料の作製）
【０１０９】
試験例２と同様の手順に従い、試料（Ａ）を作製し、８週齢のＩＣＲ系雄マウス（日本
チャールス・リバー社製）にイチョウ葉エキス０．５mg/kg、クルクミン０．１２５mg/kg
、アスタキサンチン０．０００６２５mg/kg、Ｌ−カルニチン１．０４mg/kg、の投与量と
なるように１％CMC溶媒に懸濁させ、経口ゾンデを用いて経口投与した（Ｉ）。更に、投
与量を２、４、１６、６４、１２８、２５６倍となるように１％CMC溶媒に懸濁させ、経
口ゾンデを用いてそれぞれ経口投与した（ＩＩ〜ＶＩＩ）。対応するControl群には、溶
媒のみを投与した。各投与群は１群１０頭とした。
（試験）
【０１１０】
試験例２と同様の手順に従い、投与１時間後に、尾の先端から約１cmの部位をクリップ
で挟み、マウスを吊り下げた。そして、吊り下げて２分後から６分後までの無動時間（平
均値）を測定した。Control群と投与群の間で統計学的な有意性を検討する為Dunnet検定
を実施し、有意水準は５％とした。
【０１１１】
試験例３の結果を図１０に示す。
（結果）
【０１１２】
図１０に示す如く、Control群の無動時間は１１４秒であったが投与量の増加に伴い無
動時間は減少し、Ｉ群で１０２．１秒、ＩＩ群で８２．７秒と短い値を示した。ＩＩＩ群
での無動作時間は６１．７秒、ＩＶ群での無動時間は５３．６秒と何れもControl群と比
較し有意に短い値を示した。一方、Ｖ群での無動時間は５５．２秒、ＶＩ群の無動時間は
６７．１秒と何れもControl群と比較し有意に短い値を示したものの、無動時間がＩＶ群
よりも短縮されず寧ろ増加した。ＶＩＩ群の無動時間は７８．９秒を示しControl群と比
較し有意差はなかった。
【０１１３】
以上の結果からＩＩ群の投与量から抗鬱効果があらわれ、ＩＶ群の投与量で最も有意な
効果を示した。ＩＩ〜ＩＶ群の摂取量をヒト換算（約６０ｋg）とすると、ヒト一日あた
りのイチョウ葉エキス摂取量は約６０〜４８０mgとなり、クルクミンの摂取量は約１５〜
１２０mgとなり、アスタキサンチンの摂取量は約０．０７５〜０．６mgとなり、Ｌ−カル
ニチンの摂取量は約１２５〜１０１０mgとなる。
【０１１４】
尚、試験例２と同様の手順に従い、各種クルクミン製剤を使用し、クルクミンを０．５
mg/kg、Ｌ−カルニチンを４．２mg/kg、イチョウ葉エキスを２．０mg/kgおよびアスタキ
サンチンを０．００２５mg/kgの投与量となるように調整した試料の抗鬱効果を測定した
。
(結果)
【０１１５】
図１１に示す如く、Control群の無動時間は１０３秒であったが、ウコンＭを用いた試
料の無動時間は２６．８秒、ＢＣＭ-95を用いた試料の無動時間は３７．８秒といずれもC
ontrol群と比較して有意に短い値を示した。
【０１１６】
これらのクルクミン製剤は、図９に示した本試験での対照であるＡ群と同等もしくはそ
れ以上の抗鬱効果を示した。
【０１１７】
試験例４
［ＩＶ］記憶・学習試験での成分組み合わせの有効性確認
（試料の作製）
【０１１８】
試験例２と同様の手順に従い、イチョウ葉エキス２．０mg/kg、アスタキサンチン０．
００２５mg/kgの投与量となるように調整した試料（ａ）、イチョウ葉エキス２．０mg/kg
、クルクミン０．５mg/kg、アスタキサンチン０．００２５mg/kg及びＬ−カルニチン４．
２mg/kgの投与量となるように調整した試料（ｂ）、及び、イチョウ葉エキス２．０mg/kg
の投与量となるように調整した試料（ｃ）を作製した。
（試験）
【０１１９】
８週齢のSprague-Dawley (IGS)系ラット（日本チャールス・リバー社製）を１２時間の
明／暗周期の下、２２℃付近に保たれた室内のケージに４頭ずつ飼育した。食物と水は、
自由に摂取させた。受動的回避装置（ニューロサイエンス社製）は、照明を当てた部屋（
明室）と、より大きな暗室とで構成されており、二つの部屋はギロチン扉により分けられ
ている。
【０１２０】
予備訓練を１日１回２日間（１日目、２日目）行い、翌日（３日目）に習得試験を行っ
た。習得試験ではラットを明室内に静置し、完全に暗室に入った後ドアを閉め、床グリッ
ドに通電し不可避な電気ショック（100V、0.8 mA、連続1.2秒間）を与えた。
【０１２１】
前記試料（ａ）、（ｂ）及び（ｃ）を、１％CMC溶媒に懸濁させ、予備訓練及び習得試
験の６０分前に経口ゾンデを用いて３日間連日経口投与した。記憶障害は、スコポラミン
（SCP）１．５ mg/kgを習得試験の２０分前に腹腔内投与することにより誘発した。対応
するControl群には、溶媒のみを投与した。習得試験及び２４時間後（４日目）の再生試
行では、それぞれのラットを明室に置き、暗室へ入るまでの時間の平均を、反応潜時とし
て計測した（最大300秒）。
【０１２２】
統計学的な有意性を検討する為Mann−Whitney U検定を用い、１％CMC−SCP群と１％CMC
−生理食塩水群との間で比較した。これらの間に有意な差があったとき、認知機能障害が
スコポラミンによって誘発されたと判定し、その後試料−SCP群と１％CMC−SCP群の間でS
teel検定を行った。有意水準は5％とした。
【０１２３】
試験例４の結果を図１２に示す。図１２中、Mann−Whitney U検定の結果を##で示し、S
teel検定の結果を＊で示した。
（結果）
【０１２４】
図１２に示す如く、Control群の反応潜時は２６９．６秒であったが、スコポラミン投
与群の反応潜時は３２．８秒と有意に短い値を示した。試料（ａ）の反応潜時は６１．２
秒と延長されたが、有意な値を示さなかった。試料（ｂ）の反応潜時は１４６．５秒であ
り、スコポラミン投与群と比較し反応潜時が有意に延長された。試料（ｃ）ではスコポラ
ミン投与群よりも反応潜時が短い値（１１．１秒）を示した。
【０１２５】
以上の結果から、イチョウ葉エキスおよびアスタキサンチンを組み合わせた試料では、
有意な認知機能障害改善効果を示さなかったが、更に、クルクミンとＬ−カルニチンを加
え、イチョウ葉エキス、クルクミン、アスタキサンチンおよびＬ−カルニチンの４成分を
組み合わせた試料では、有意な認知機能障害改善効果を示した。
【０１２６】
試験例５
［ＩＶ］抗不安試験
【０１２７】
抗不安試験の一種である高架式十字迷路試験を実施した。この装置はネズミが壁際を好
むという性質を利用したものであり、壁の無い道(open-arm)を恐れずに探索するかをビデ
オ解析して、抗不安作用を評価した。
【０１２８】
Wistar系雄ラット(8週齢)に被験物質を１％CMC溶媒に懸濁させ、経口ゾンデを用いて経
口投与し、投与後60分経過後に5分間のopen-armの探索行動を解析した。被験物質として
、試験例２の試料(Ａ)を７．４mg/kg（イチョウ葉エキスとして２．０mg/kg）、及び２９
．６mg/kgの用量で投与し、一方、不安に対する効果を示す（渡辺貢  他  健康支援;第14
巻1号;1-12, 2012）とされる、市販のカキ肉エキス品（ワタナベ活性型オイスター顆粒製
品；渡辺オイスター研究所）を２.７(mg/kg)、及び１０．８(mg/kg)の用量で投与した。
対応するControl群には溶媒のみを投与した。
【０１２９】
図１３にopen-arm滞在時間を示し、図１４にopen-arm進入回数を示した。
【０１３０】
図１３に示すopen-arm滞在時間はControl群が33.5秒であり、試料7.4mg/kg投与群では3
3.9秒、29.6mg/kg投与群では64.4秒であり、試料29.6mg/kg投与群はControl群と比較して
有意に長い滞在時間を示した。一方、カキ肉エキス2.7mg/kg投与群では40.3秒、10.8mg/k
g投与群では38.8秒であり、Control群よりも長い滞在時間を示したがいずれも有意な効果
を示すものではなかった。試料29.6mg/kg投与群ではControl群よりも1.9倍長い滞在時間
を示し、有意な抗不安効果が得られた。
【０１３１】
図１４に示すopen-arm進入回数はControl群が3.5回であり、試料7.4mg/kg投与群では2.
8回、29.6mg/kg投与群では5.6回であり、試料29.6mg/kg投与群はControl群と比較して1.6
倍多い侵入回数を示した。カキ肉エキス2.7mg/kg投与群では3.5回、10.8mg/kg投与群では
3.4回であり、Control群と比較して同程度若しくは少ない進入回数を示した。何れの群も
Control群と比較して有意な効果を示すものではなかったが、試料29.6mg/kg投与群のみが
Control群よりも1.6倍多い進入回数を示した。
【０１３２】
以上の結果より、イチョウ葉エキス、クルクミン、アスタキサンチンおよびＬ−カルニ
チンの４成分を組み合わせが抗不安効果を有することが示された。
［Ｖ］ヒトを対象とした中枢神経作用改善効果に関する成分組み合わせの有効性確認
【０１３３】
試験例６
［Ｖ−Ｉ］ヒトボランティア試験による中枢神経作用改善効果
（試料の作製）
【０１３４】
各種植物エキスおよびアミノ酸がイチョウ葉エキス２０mg、クルクミン５mg、アスタキ
サンチン０．０２５mg及びＬ−カルニチン４２mgとなるように組み合わせ、更に賦形剤と
なる成分等を加え、混合、造粒、乾燥させたものを打錠し、コーティング剤をコーティン
グした錠剤を作製した。錠剤の組成割合をイチョウ葉エキス、クルクミン、およびＬ−カ
ルニチンの３成分を総重量としたときの重量％に換算すると、総重量のうち、イチョウ葉
エキスが３０．０重量％、クルクミンが７．５重量％、Ｌ−カルニチンが６２．５重量％
となる。
（試験）
【０１３５】
２０〜５０代の男女１３人を対象として、試料を１ヶ月に亘り摂取した場合の主観的な
気分の変化を評価した。試料は上記方法に従って作成した錠剤を１回３粒、１日２回それ
ぞれ朝・夕に水又はぬるま湯にて摂取した。配合成分と一日の摂取量を以下の表２に示す
。
【表２】
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【０１３６】
評価は摂取開始時と、摂取開始後１週（1wk）、２週（2wk）、３週（3wk）、４週（4wk
）の合計５回行った。評価はVAS（Visual Analogue Scale）法により行い、VAS回答値の
平均値を測定した。摂取前（0wk）群と1wk、2wk、3wk、4wk群それぞれの間で統計学的な
有意性を検討する為t検定を実施した。有意水準は１％又は５％とした。
【０１３７】
VAS法の質問内容は産業疲労研究会「自覚症状調べ」及びPOMS（Profile of Mood State
s）に基づき、緊張・抑うつ・怒り・活気・疲労・混乱の６つの尺度から気分・感情（中
枢神経作用）の状態を測定できるように作成した。質問内容は、１）全身がだるい、２）
あくびがでる、３）頭がぼんやりする、４）目が疲れている、５）食欲、６）就寝時の寝
つき、７）朝の目覚めの気分、の７項目で行い、１００ｍｍの線分上で記入時の状態を示
す位置に印を記入させた。線の左端を最も良い状態(０)とし、右端を最も悪い状態（１０
０）として、左端から印までの長さの平均値を数値化した。
【０１３８】
試験６の結果を図１５に示す。
（結果）
【０１３９】
図１５に示す如く、摂取期間中はすべての項目に対して改善効果が確認された。特に全
身がだるいでは摂取４週目に有意な改善効果が認められ、あくびがでるでは摂取３週目に
有意な改善効果が認められ、頭がぼんやりするでは摂取３週および４週に有意な改善効果
が認められ、目が疲れているでは摂取１週、２週、３週および４週で有意な改善効果が認
められ、食欲では摂取３週および４週で有意な改善効果が認められ、就寝時の寝つきでは
摂取３週および４週で有意な改善効果が認められ、朝の目覚めの気分では摂取１週、２週
、３週および４週で有意な改善効果が認められた（P<０．０５、P<０．０１）。
【０１４０】
以上の結果から、イチョウ葉エキス、クルクミン、アスタキサンチンおよびＬ−カルニ
チンの４成分の組み合わせを摂取することで、疲労やストレスが原因の一つと考えられる
中枢神経作用症状の改善効果を示した。
【０１４１】
試験例７
［Ｖ−ＩＩ］ヒトボランティア試験による中枢神経作用改善効果
【０１４２】
組成物の更なる中枢神経作用改善効果を確認するため、年齢２０歳〜５０歳の男性１５
名、女性５名を対象として試験例６と同様の試験を行った。
[調査方法]
【０１４３】
摂取０日(摂取前)と、摂取から１０日目と、摂取から２０日目と、摂取から３０日目の
摂食期間の計４回のアンケート調査を行った。
[アンケート項目]
【０１４４】
アンケート調査の質問内容は産業疲労研究会「自覚症状調べ」及びPOMS（Profile of M
ood States）に基づき、緊張・抑うつ・怒り・活気・疲労・混乱の６つの尺度から気分・
感情（中枢神経作用）の状態を測定できるように作成した。質問内容は、１）ゆううつ、
２）かっかりしてやる気を無くす、３）気持ちが沈んで暗い、４）イライラ、５）頭痛・
肩こり、６）朝の目覚めの気分、の６つの項目について、夫々どのように感じているかを
、ｉ)全くない、ｉｉ）あまりない、ｉｉｉ）どちらでもない、ｉｖ）ややある、ｖ）と
てもある、の５段階で回答してもらい、回答を点数化し、平均値を算出した。
【０１４５】
試験７の結果を図１６に示す。
【０１４６】
図１６に示す如く、摂取期間中はすべての項目に対して改善効果が確認された。特にイ
ライラでは摂取２０日目に有意な改善効果が認められ、頭痛・肩こりでは摂取３０日目で
有意な改善効果が認められ、ゆううつでは摂取１０日目、２０日目及び３０日目で有意な
改善効果が認められ、がっかりしてやる気を無くすでは摂取３０日目で有意な改善効果が
認められ、気持ちが沈んで暗いでは摂取２０日目及び３０日目で有意な改善効果が認めら
れ、朝の目覚めの気分では摂取２０日目及び３０日目で有意な改善効果が認められた（P
<０．０５、P<０．０１）。
【０１４７】
上記のアンケート調査とともに唾液中クロモグラニンの濃度を調査し、前記アンケート
項目に対して顕著な改善効果が確認された被験者群８人(ターゲットグループ)の唾液中ク
ロモグラニンＡの濃度変化の結果を図１７に示した。
【０１４８】
顕著な改善効果が確認された被験者群においては、試料摂取による唾液中クロモグラニ
ンＡの濃度が有意に低下していることが確認された。
【０１４９】
従って、本発明の中枢神経作用改善用組成物、あるいは食品は、４成分の摂取量になる
ように投与することにより、抗鬱作用、脳機能改善作用、抗ストレス作用又は抗不安作用
に有効な効果を発揮することができる。
【０１５０】
尚、本発明の中枢神経作用改善用組成物、あるいは食品は、上述の実施例に示す中枢神
経作用改善用組成物の４成分の各組成割合はその中心値を示すものであることから、各成
分を任意の幅で増減して摂取することができること、その他、本発明の要旨を逸脱しない
範囲内において種々変更を加え得ることは勿論である。
【産業上の利用可能性】
【０１５１】
本発明の中枢神経作用改善用組成物、あるいは食品は、抗鬱作用、脳機能改善作用、抗
ストレス作用又は抗不安作用等の広い中枢神経作用の改善に適用できる。
【図１】
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【図２】
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【図３】
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【図４】
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【図５】
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【図６】
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【図７】
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【図８】
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【図９】
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【図１０】
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【図１１】
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【図１２】
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【図１３】
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【図１４】
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【図１５】
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【図１６】
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【図１７】
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