(57)【要約】【課題】治療用タンパク質を生産するための施設、方法、およびシステムを提供する。【解決手段】本発明の施設は、トランスジェニックトリ（たとえばニワトリ、シチメンチョウ、ウズラ）を収容し、それらの卵から、治療用タンパク質を含有する卵白または卵黄を回収するように設計されることができる。各施設は、生産ユニットおよびタンパク質回収ユニットの両方を収容し、それが、産卵から物質調製までの時間およびコストを減らすことができる。記載される施設、方法およびシステムは、卵白または卵黄が治療用タンパク質を含有する卵の流れを生産ユニットから回収ユニットまで管理して、バイオセキュリティおよび産物安定性を高度に時間および温度に敏感なやり方で提供し、卵白または卵黄回収に関してバイオセキュリティおよび優良製造規範（GMP）準拠環境を維持しながらも、バイオ医薬製造における高い効率を提供する。【選択図】図１
2019131617.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
明細書に記載の発明。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
分野
本開示は、治療用タンパク質を生産するための施設、方法、およびシステムに関する。
【背景技術】
【０００２】
背景
1920年代以降、タンパク質が医薬として使用されている。いくつかのタンパク質はバクテリアから調製される。この手法は、バクテリアが、複雑なタンパク質、たとえば、インビボで活性または安定になるためには翻訳後修飾によって成熟されなければならないモノクローナル抗体または血液凝固因子を合成することができないという事実によって制限される。
【０００３】
いくつかのトランスジェニック動物種は組換えタンパク質を生産することができる。実現されている一つの系がトランスジェニック哺乳動物の乳である。実現されている第二の系がトランスジェニックトリ（たとえばニワトリ、ウズラまたはシチメンチョウ）の卵白である。二つのモノクローナル抗体およびヒトインターフェロン−β1aがニワトリ卵白から回収されている。
【発明の概要】
【０００４】
概要
本開示は、治療用タンパク質を生産するための施設、方法およびシステムに関する。施設は、トランスジェニックトリ（たとえばニワトリ、シチメンチョウ、ウズラ）を収容し、それらの卵から、治療用タンパク質を含有する卵白または卵黄を回収するように設計されることができる。各施設は、生産ユニットおよびタンパク質回収ユニットの両方を収容し、それが、産卵から物質調製までの時間およびコストを減らすことができる。しかし、生産ユニット（たとえば産卵および／または動物管理区域）および卵白または卵黄回収ユニットは、バイオセキュリティおよび指定のレベルの清潔さを提供するために、互いから独立して厳重に管理される。記載される施設、方法およびシステムは、卵白または卵黄が治療用タンパク質を含有する卵の流れを生産ユニットから回収ユニットまで管理して、バイオセキュリティおよび産物安定性を高度に時間および温度に敏感なやり方で提供し、卵白または卵黄回収に関してバイオセキュリティおよび優良製造規範（GMP）準拠環境を維持しながらも、バイオ医薬製造における高い効率を提供する。
【０００５】
一つの局面において、タンパク質を生産する方法は、建物内の生産ユニット中のトランスジェニックトリから卵を収集する工程；卵を建物内の回収ユニットに移す工程；および回収ユニット中で卵から卵白を回収する工程を含むことができる。態様は以下の特徴の一つまたは複数を含むことができる。
【０００６】
いくつかの態様において、方法は、目に見える割れおよびサイズに関して卵を検査する工程を含むことができる。いくつかの場合、方法は、収集から20分以内に、目に見えて汚れた卵を蒸留水を用いて手で拭く工程および／または拭いても取れない汚れまたは物質が付着した卵を廃棄する工程を含むことができる。いくつかの場合、方法は、卵にアルコール（たとえば70％エタノール）を噴霧して卵の殻を完全にずぶ濡れにする工程、殻が目に見えて乾くまで卵を乾燥させる工程、および次いで卵にアルコール（たとえば70％エタノール）を噴霧して殻を完全にずぶ濡れにする工程を含むことができる。
【０００７】
いくつかの態様において、方法は、収集された卵を、生産室識別情報、産物、接合状態および／または産卵日で標識された容器に入れる工程を含むことができる。いくつかの場合、容器は、箱番号、産物、卵の数または世代の少なくとも一つで標識されることができる。
【０００８】
いくつかの態様において、方法は、トランスジェニックトリを、生産ユニット中のバイオセキュリティ区域内の複数の生産室に収容する工程を含むことができる。いくつかの場合、方法は、空気を生産室に導入する前に空気を高性能微粒子吸収（high-efficiency particulate absorption）フィルタに通す工程を含むことができる。方法は、400〜10,000羽（たとえば2,000羽超、4,000羽超、7,500羽未満および／または5,000羽未満）のトランスジェニックトリを収容する工程および／または複数の生産室の各生産室に400〜1,000羽（たとえば500羽超、750羽超、750羽未満および／または600羽未満）のトランスジェニックトリを収容する工程を含むことができる。いくつかの場合、方法は、複数の生産室の各生産室を毎日清掃する工程を含むことができる。いくつかの場合、方法は、複数の生産室内の気圧が複数の生産室からアクセス可能な隣接する室内の気圧より高くなるようにバイオセキュリティ区域への気流を制御する工程（たとえば、複数の生産室それぞれへの気流を独立的に制御する工程）を含むことができる。いくつかの場合、方法は、バイオセキュリティ区域内でトランスジェニックトリを繁殖させる工程および／またはバイオセキュリティ区域内でトランスジェニックトリをふ化させる工程を含むことができる。
【０００９】
いくつかの態様において、方法は、少なくとも1日二回（たとえば三回、いくつかの態様においては四回または五回）卵を収集する工程を含むことができる。いくつかの場合、方法は、卵を手作業で収集する工程を含むことができる。
【００１０】
いくつかの態様において、方法は、卵を、収集から4時間以内（たとえば3時間以内、2時間以内または1時間以内）に、2℃〜10℃（たとえば4℃〜8℃、2℃超、4℃超、8℃未満、6℃未満および／または5℃未満）にセットされた内部温度の貯蔵ユニットに入れる工程を含むことができる。いくつかの場合、方法は、卵を貯蔵する前に卵を回収ユニットに移す工程を含むことができる。
【００１１】
いくつかの態様において、方法は、卵を、収集から4時間以内（たとえば3時間以内、2時間以内または1時間以内）に建物内の回収ユニットに移す工程を含むことができる。
【００１２】
いくつかの態様において、方法は、回収ユニット中の準備室内で卵を清潔にする工程を含むことができる。いくつかの場合、準備室内で卵を清潔にする工程は、卵をアルコール（たとえば70％エタノールリンス）で清潔にする工程を含み得る。いくつかの場合、方法は、卵を準備室から優良製造規範基準に準拠するクリーンルームの中に移す工程を含むことができる。
【００１３】
いくつかの態様において、方法は、卵を手作業で割る工程および中身を無菌組織培養皿に入れる工程を含み得る。いくつかの場合、方法は、無菌組織培養皿から卵白または卵黄を分離する工程を含むことができる。いくつかの場合、方法は、卵白または卵黄を複数の無菌容器に入れる工程を含むことができる。いくつかの場合、方法は、複数の無菌容器の各容器からの卵白または卵黄のサンプルを分析する工程を含むことができる。いくつかの場合、方法はまた、出所の生産室、産物、接合状態および／または産卵日を識別するために複数の無菌容器の各容器を標識する工程を含むことができる。いくつかの場合、方法は、複数の無菌容器の各容器の外部を消毒する工程を含むことができる。いくつかの場合、方法は、卵白を含む複数の無菌容器の各容器を貯蔵フリーザの中に移す工程（たとえば、卵を、手作業で割り始めてから6時間以内（たとえば5時間、4時間、3時間、2時間または1時間以内）に貯蔵フリーザの中に移す工程）を含み得る。
【００１４】
いくつかの態様において、方法は、生産ユニットに入る前にシャワーを浴び、着替えを完了する工程を含むことができる。いくつかの場合、方法は、少なくとも一つの生産室を収容するバイオセキュリティ区域に入る前に使い捨てカバーオールおよびシューズカバーを着用する工程を含むことができる。いくつかの場合、方法は、バイオセキュリティ区域から出る前に使い捨てカバーオールおよびシューズカバーを脱ぐ工程を含むことができる。いくつかの場合、方法は、生産ユニットを離れる前にシャワーを浴び、着替えを完了する工程を含む。
【００１５】
いくつかの態様において、方法は、月に一度トランスジェニックトリから血液を採取する工程およびトリの感染症および／または他の全般的健康に関して分析する工程を含むことができる。いくつかの場合、方法は、トランスジェニックトリから採取した血液のポリメラーゼ連鎖反応分析を実施する工程を含むことができる。
【００１６】
いくつかの態様において、方法は、トランスジェニックトリのための飼料に放射線照射する工程および／または放射線照射飼料をトランスジェニックトリに提供する工程を含むことができる。
【００１７】
一つの局面において、タンパク質生産施設は、建物内の、バイオセキュリティ区域を含む卵生産ユニット；および建物内の卵白／卵黄回収ユニットを含むことができる。回収ユニットの少なくとも一つの区域は、優良製造規範に準拠する室または区画を有する。一つの局面において、回収ユニットは、優良製造規範に準拠する卵白回収室を含むことができる。態様は、以下の特徴の一つまたは複数を含むことができる。
【００１８】
いくつかの態様において、施設は、バイオセキュリティ区域内に400〜20,000羽のトランスジェニックトリを含むことができる。いくつかの態様において、施設は、バイオセキュリティ区域内に200〜30,000羽のトランスジェニックトリを含む。いくつかの態様において、施設は、バイオセキュリティ区域内に2,000羽超、4,000羽超、5,000羽超、7,500羽超、10,000羽超または15,000羽超のトランスジェニックトリを含むことができる。
【００１９】
いくつかの態様において、卵生産ユニットはバイオセキュリティ区域内に複数の生産室を含み得、各生産室は、100〜1,000羽のトリを収容するように構成されている。他の態様において、各生産室は、50〜500羽のトリを収容するように構成されることができる。さらに他の態様において、各生産室は、約100羽、200羽、300羽、400羽、500羽、600羽、700羽、800羽、900羽または1000羽のトリを収容するように構成されることができる。いくつかの場合、施設は、各生産室内に400〜1,000羽のトランスジェニックトリを含むことができる。いくつかの場合、施設は、各生産室内に200〜1,000羽のトランスジェニックトリを含むことができる。いくつかの場合、施設は、高性能微粒子吸収フィルタを含む、生産室のための空気処理システムを含むことができる。空気処理システムは、複数の生産室それぞれ内の気圧が複数の生産室からアクセス可能な隣接する室内の気圧より高くなるようにバイオセキュリティ区域への気流を制御するように動作可能であることができる。
【００２０】
いくつかの態様において、施設は、バイオセキュリティ区域内に繁殖室およびオス収容室を含むことができる。いくつかの場合、施設は、バイオセキュリティ区域内に一つまたは複数のふ化室および一つまたは複数の育雛室を含むことができる。
【００２１】
いくつかの態様において、施設は、回収された卵白を貯蔵するためのフリーザを含むことができる。
【００２２】
いくつかの態様において、施設は、バイオセキュリティ区域と生産ユニットの他の部分との間の人員アクセスのために配置された一つまたは複数のエアロックを含むことができる。いくつかの態様において、施設は、バイオセキュリティ区域と生産ユニットの他の部分との間の人員アクセスのために配置された少なくとも二つのエアロックを含む。
【００２３】
いくつかの態様において、施設は、回収室と卵白回収ユニットの他の部分との間の人員アクセスのために配置された一つまたは複数のエアロックを含むことができる。いくつかの態様において、施設は、回収室と卵白回収ユニットの他の部分との間の人員アクセスのために配置された少なくとも二つのエアロックを含むことができる。いくつかの場合、一つまたは複数のエアロックはHEPAろ過されることができる。一つの態様において、一つまたは複数のエアロックはISOクラス7に準拠することができる。
【００２４】
いくつかの態様において、回収室は、HEPAろ過室である、またはHEPAろ過室を含むことができる。いくつかの場合、HEPAろ過室はISOクラス8規格に準拠することができる。いくつかの場合、HEPAろ過室は軟質壁によって包囲されることができる。いくつかの場合、施設は、軟質壁付きのHEPAろ過室と回収室の外の回収ユニットの一部分との間の共通の壁に開口部を含むことができる。
【００２５】
本発明の一つまたは複数の態様の詳細が添付図面および以下の詳細な説明に述べられる。本発明の他の特徴、目的および利点が詳細な説明および図面ならびに特許請求の範囲から明らかになる。
本発明の実施形態において、例えば以下の項目が提供される。
（項目１）
建物内の生産ユニット中のトランスジェニックトリから卵を収集する工程；
該卵を該建物内の回収ユニットに移す工程；および
該回収ユニット中で該卵から卵白を回収する工程
を含み、該回収ユニットが、優良製造規範に準拠する少なくとも一つの区域を有する、
タンパク質を生産する方法。
（項目２）
目に見える割れおよびサイズに関して卵を検査する工程を含む、項目1記載の方法。
（項目３）
収集から20分以内に、目に見えて汚れた卵を蒸留水を用いて手で拭く工程を含む、項目2記載の方法。
（項目４）
拭いても取れない汚れまたは物質が付着した卵を廃棄する工程を含む、項目3記載の方法。
（項目５）
卵にアルコール（たとえば70％エタノール）を噴霧して該卵の殻を完全にずぶ濡れにする工程、該殻が目に見えて乾くまで該卵を乾燥させる工程、および次いで該卵にアルコール（たとえば70％エタノール）を噴霧して該殻を完全にずぶ濡れにする工程を含む、項目2記載の方法。
（項目６）
収集された卵を、生産室識別情報、産物および産卵日で標識された容器に入れる工程を含む、項目1記載の方法。
（項目７）
容器が、箱番号、卵の数または世代の少なくとも一つで標識されている、項目6記載の方法。
（項目８）
トランスジェニックトリを、生産ユニット中のバイオセキュリティ区域内の複数の生産室に収容する工程を含む、項目1記載の方法。
（項目９）
空気を生産室に導入する前に該空気を高性能微粒子吸収（high-efficiency particulate absorption）フィルタに通す工程を含む、項目8記載の方法。
（項目１０）
400〜20,000羽のトランスジェニックトリを収容する工程を含む、項目8記載の方法。
（項目１１）
複数の生産室の各生産室に100〜1,000羽のトランスジェニックトリを収容する工程を含む、項目8記載の方法。
（項目１２）
複数の生産室の各生産室を毎日清掃する工程を含む、項目8記載の方法。
（項目１３）
複数の生産室内の気圧が該複数の生産室からアクセス可能な隣接する室内より高くなるようにバイオセキュリティ区域への気流を制御する工程を含む、項目8記載の方法。
（項目１４）
複数の生産室それぞれへの気流を独立的に制御する工程を含む、項目13記載の方法。
（項目１５）
バイオセキュリティ区域内でトランスジェニックトリを繁殖させる工程を含む、項目8記載の方法。
（項目１６）
バイオセキュリティ区域内でトランスジェニックトリをふ化させる工程を含む、項目15記載の方法。
（項目１７）
少なくとも1日二回（たとえば三回、四回または五回）卵を収集する工程を含む、項目1記載の方法。
（項目１８）
卵を手作業で収集する工程を含む、項目17記載の方法。
（項目１９）
卵を、収集から4時間、3時間、2時間または1時間以内に、2℃〜10℃にセットされた内部温度の貯蔵ユニットに入れる工程を含む、項目1記載の方法。
（項目２０）
卵を貯蔵する前に該卵を回収ユニットに移す工程を含む、項目19記載の方法。
（項目２１）
卵を、収集から4時間以内、3時間以内、2時間以内または1時間以内に建物内の回収ユニットに移す工程を含む、項目1記載の方法。
（項目２２）
回収ユニット中の準備室内で卵を清潔にする工程を含む、項目1記載の方法。
（項目２３）
準備室内で卵を清潔にする工程が、卵をアルコール（たとえば70％エタノールリンス）で清潔にする工程を含む、項目22記載の方法。
（項目２４）
卵を準備室から優良製造規範基準に準拠するクリーンルームの中に移す工程を含む、項目22記載の方法。
（項目２５）
卵を手作業で割る工程および中身を無菌組織培養皿に入れる工程を含む、項目24記載の方法。
（項目２６）
無菌組織培養皿から卵黄を分離する工程を含む、項目25記載の方法。
（項目２７）
卵白を複数の無菌容器に入れる工程を含む、項目25記載の方法。
（項目２８）
卵黄を複数の無菌容器に入れる工程を含む、項目27記載の方法。
（項目２９）
出所の生産室、産物および産卵日を識別するために複数の無菌容器の各容器を標識する工程を含む、項目27記載の方法。
（項目３０）
複数の無菌容器の各容器の外部を消毒する工程を含む、項目27記載の方法。
（項目３１）
卵白を含む複数の無菌容器の各容器を貯蔵フリーザの中に移す工程を含む、項目27記載の方法。
（項目３２）
卵を、手作業で割り始めてから6時間以内、5時間以内、4時間以内、3時間以内、2時間以内または1時間以内に貯蔵フリーザの中に移す工程を含む、項目31記載の方法。
（項目３３）
生産ユニットに入る前にシャワーを浴び、着替えを完了する工程を含む、項目1記載の方法。
（項目３４）
少なくとも一つの生産室を収容するバイオセキュリティ区域に入る前に使い捨てカバーオールおよびシューズカバーを着用する工程を含む、項目1記載の方法。
（項目３５）
バイオセキュリティ区域から出る前に使い捨てカバーオールおよびシューズカバーを脱ぐ工程を含む。項目34記載の方法。
（項目３６）
生産ユニットを離れる前にシャワーを浴び、着替えを完了する工程を含む、項目33記載の方法。
（項目３７）
月に一度トランスジェニックトリから血液を採取する工程、ならびに該トリの感染症および／または他の全般的健康に関して分析する工程を含む、項目1記載の方法。
（項目３８）
トランスジェニックトリから採取した血液のポリメラーゼ連鎖反応分析を実施する工程を含む、項目37記載の方法。
（項目３９）
トランスジェニックトリのために放射線照射飼料を提供する工程を含む、項目1記載の方法。
（項目４０）
建物内の、バイオセキュリティ区域を含む卵生産ユニット；および
該建物内の、優良製造規範に準拠する少なくとも一つの区域を含む、卵白回収ユニットを含む、タンパク質生産施設。
（項目４１）
卵白回収ユニットが、優良製造規範に準拠する回収室を含む、項目40記載の施設。
（項目４２）
バイオセキュリティ区域内に400〜20,000羽のトランスジェニックトリを含む、項目40記載の施設。
（項目４３）
卵生産ユニットがバイオセキュリティ区域内に複数の生産室を含み、各生産室が、200〜1,000羽のトリを収容するように構成されている、項目40記載の施設。
（項目４４）
各生産室内に400〜1,000羽のトランスジェニックトリを含む、項目43記載の施設。
（項目４５）
高性能微粒子吸収フィルタを含む、生産室のための空気処理システムを含む、項目40記載の施設。
（項目４６）
空気処理システムが、複数の生産室それぞれ内の気圧が該複数の生産室からアクセス可能な隣接する室内より高くなるようにバイオセキュリティ区域への気流を制御するように動作可能である、項目40記載の施設。
（項目４７）
バイオセキュリティ区域内に一つまたは複数の育雛室を含む、項目40記載の施設。
（項目４８）
バイオセキュリティ区域内にオスのトリを収容する繁殖室を含む、項目40記載の施設。
（項目４９）
バイオセキュリティ区域内にふ化室を含む、項目40記載の施設。
（項目５０）
回収された卵白を貯蔵するための一つまたは複数のフリーザを含む、項目40記載の施設。
（項目５１）
バイオセキュリティ区域と生産ユニットの他の部分との間の人員アクセスのために配置された少なくとも二つのエアロックを含む、項目40記載の施設。
（項目５２）
回収室と卵白回収ユニットの他の部分との間の人員アクセスのために配置された少なくとも二つのエアロックを含む、項目40記載の施設。
（項目５３）
エアロックが、HEPAろ過されるか、またはISOクラス7に準拠する、項目51記載の施設。
（項目５４）
回収室が、低バイオバーデン環境を有するか、またはISOクラス7に準拠する、項目40記載の施設。
（項目５５）
回収ユニットが少なくとも一つのHEPAろ室を含む、項目40記載の施設。
（項目５６）
HEPAろ過室が回収室である、項目40記載の施設。
（項目５７）
HEPAろ過室がISOクラス8規格に準拠する、項目54記載の施設。
（項目５８）
HEPAろ過室と回収室の外の回収ユニットの一部分との間の共通の壁に開口部を含む、項目54記載の施設。
（項目５９）
フリーザが、卵白回収ユニット中に位置し、かつ−2℃〜−80℃の温度に維持されている、項目49記載の施設。
（項目６０）
フリーザが、卵白回収ユニット中に位置し、かつ約−20℃の温度に維持されている、項目49記載の施設。
（項目６１）
フリーザが、卵白回収ユニット中に位置し、かつ約−80℃の温度に維持されている、項目49記載の施設。
（項目６２）
卵を貯蔵するためにバイオセキュリティ区域内に低温室を含む、項目40記載の施設。
（項目６３）
低温室が、2℃〜10℃にセットされた内部温度を有する、項目62記載の施設。
【図面の簡単な説明】
【００２６】
【図１】例示的なタンパク質生産施設を示す概略図である。
【図２Ａ】例示的なタンパク質生産施設の部分の平面図である。
【図２Ｂ】例示的なタンパク質生産施設の部分の平面図である。
【図２Ｃ】例示的なタンパク質生産施設の部分の平面図である。
【図２Ｄ】例示的なタンパク質生産施設の部分の平面図である。
【図３Ａ】例示的なタンパク質生産施設の平面図である。
【図３Ｂ】例示的なタンパク質生産施設の平面図である。
【図４】例示的なタンパク質生産施設の平面図である。
【図５】もう一つの例示的なタンパク質生産施設を示す概略図である。
【図６】例示的なタンパク質生産施設の平面図である。
【００２７】
様々な図面中の類似の参照記号は類似の要素を指す。
【発明を実施するための形態】
【００２８】
詳細な説明
本開示は、トランスジェニックトリ（たとえばニワトリ、ウズラまたはシチメンチョウ）を収容し、それらの卵から、治療用タンパク質を含有する卵の中身（たとえば卵白および／または卵黄）を回収するように設計された施設に関する。以下に記す施設設計および生産方法は、生産ユニットとタンパク質回収ユニットとのコロケーションを可能にする。この手法は、卵白回収のためのバイオセキュリティおよびGMP準拠環境を維持しながらも、バイオ医薬製造における高い効率を提供することができる。簡潔に説明するために、以下の開示は、卵白を回収するように描かれた施設および方法を説明する。しかし、方法および施設は、卵の中身全体またはその成分、たとえば卵黄の回収にも適用可能である。
【００２９】
例示的なタンパク質生産施設
図1を参照すると、卵白を工業規模（たとえば少なくとも1日卵白50リットル）で生産するように設計された例示的なタンパク質生産施設100は、生産ユニット110およびタンパク質回収ユニット112を含む。生産施設100内では、卵白生産工程中にバイオセキュリティおよび指定のレベルの清潔さを提供するために、空気、人員および物質の流れが管理される。
【００３０】
卵生産室114が生産ユニット110中のバイオセキュリティ区域116内に位置している。タンパク質生産施設100内の各卵生産室114は、給気ベントと戻しベントとを別々に有する。給気ベントおよび戻しベントはいずれも、卵生産室114に入る粒子（たとえば高性能微粒子吸収（HEPA）フィルタを使用）または卵生産室114から出る粒子（たとえばダストフィルタを使用）の空中浮遊移動を制限するためにろ過される。HVACシステムが給気ベントおよび戻しベントを制御して、卵生産室114内に陽圧を提供する。人員、廃棄物、収集された卵ならびに原料および供給物の一方向の流れがバイオセキュリティを提供するのに役立つ。卵生産室は20〜22.2℃に維持され、卵は産卵から36時間以内（たとえば24時間以内、18時間以内、12時間以内、8時間以内、6時間以内、4時間以内または2時間以内）に収集される。
【００３１】
卵生産室114で生産された卵は、卵準備室120に移される前に、殻の割れおよびサイズに関して検査される。卵準備室120は生産ユニット110中に位置する。いくつかの施設において、卵準備室120は卵白回収ユニットの中に位置する。いくつかのタンパク質生産施設において、卵は、生産ユニット110中の卵準備室内で洗浄されることに加えて、またはその代わりに、回収ユニット112中の卵準備室内で洗浄される。
【００３２】
卵産物の流れを管理し、卵中の産物の安定性を保証するために、卵貯蔵および全卵白回収物貯蔵のための低温室が施設内に戦略的に配置される。検査された卵が卵白回収ユニット112に移される前にそれらの卵を任意で最長14日間貯蔵するための卵貯蔵低温室118が生産ユニット110中に位置している。卵貯蔵低温室118の温度は4〜8℃に維持される。いくつかの施設において、卵貯蔵低温室118は、生産ユニット110中の卵貯蔵低温室118の代わりに、またはそれに加えて、タンパク質回収ユニット112中に位置する。
【００３３】
卵白回収室122が卵白回収ユニット112中に位置する。卵白回収室122は優良製造規範（GMP）である。任意で、特定の態様において、卵白回収室は、国際標準化機構（ISO）スケール7〜8を満たす環境であることができる。卵白回収室の温度は8〜22℃に維持される。卵割り、卵白回収（たとえば卵黄からの卵白の分離）；ボトル詰め、および任意で卵白の前処理（たとえば任意選択のpH調節）が卵白回収室122内で実施される。
【００３４】
回収された卵白を放出または出荷の前に貯蔵するために提供された卵白貯蔵フリーザ124が、卵白回収ユニット112の中、回収ユニット112の外または両方に位置することができる。例示的なタンパク質生産施設100は、タンパク質回収ユニット112の中に位置する、−20℃〜−80℃の温度を維持するようにセットされた卵白貯蔵フリーザ124およびタンパク質回収室／ユニット112の外に位置する、−20℃の温度を維持するようにセットされた第二の卵白貯蔵フリーザ124を含む。いくつかの施設は異なるフリーザ配置を有する。卵白が貯蔵される温度は、生産されるタンパク質の安定性を維持するためにはどのような温度が適切であるかに依存する。少なめの冷却しか要らないときには、少なめのエネルギーしか使用されず、いくつかの例においては、より安価な設備を使用することができる。たとえば、いくつかの施設は、卵白貯蔵のために−20または−80℃フリーザのみを含む。他の施設は、凍結が不必要である低温室のみを含む。
【００３５】
回収された卵白からのタンパク質の精製がただちに開始されるならば、または生産されるタンパク質が凍結温度よりも上で安定であるならば、凍結は不必要である。しかし、回収された卵白は通常、品質保証手続きが実施される間は凍結される。品質保証手続きの実施には3〜6週間を要すると予想される。回収された卵白は、タンパク質精製が始まるまで最長1年間貯蔵することができる。
【００３６】
第二の例示的タンパク質生産施設
図2A〜2Dは、治療用タンパク質を含有する卵白を月に最大3,000（たとえば2,200）リットル生産するように設計された例示的な非限定的タンパク質生産施設200を示す。タンパク質生産施設200のバイオセキュリティ区域116は八つの卵生産室114を有する。複数の別々の卵生産室114への動物の隔離が、入念な清掃のために各室を定期的に分解し、気流を別々に制御し、病気の拡散を抑制することを可能にする。
【００３７】
施設はまた、バイオセキュリティを確保するための多様な他のシステムを含む。施設200は、動物が建物に近づかないことを保証するために、建物の周囲から十分に（たとえば30〜50ヤード）離れた適切なフェンスを含む。この技術がバイオセキュリティのレベルを高める。機械的システムは、100％のバックアップを保証するための完全な冗長性をもって構成されている。地域電力会社の停電の場合には、非常用発電機が自動的に適切な電力を施設に提供する。上述した物質の流れパターンが遵守されていることを確認するために閉回路カメラがモニタされる。最大限の清掃性を保証するために、トランスジェニックトリを収容するための施設全体でエポキシ床材が利用される。
【００３８】
生産ユニット
例示的なタンパク質生産施設200において、生産ユニット110は、バイオセキュリティ区域116内に位置するエアロック126、入口通路128および出口通路130を含む。エアロック126は、バイオセキュリティ区域116と生産ステージング区域152との間のアクセスおよびバイオセキュリティ区域116と卵準備室118に通じる通路との間のアクセスを提供する。卵生産室114は入口通路128から出口通路130まで平行に延びている。各卵生産室114は、卵生産室114を入口通路128から切り離す、対応する控え室132を有する。入口通路128と控え室132との間および控え室132と卵生産室114との間にはドアが設けられている。いくつかの施設においては、各控え室132と対応する卵生産室114との間の壁の中にアクセスハッチ134が存在する。自動的に閉じるドアが出口通路130を隣接する積荷ドック146および対応する室から切り離す。
【００３９】
例示的なタンパク質生産施設200において、バイオセキュリティ区域116はまた、繁殖室140、ふ化室142および育雛室144を収容する。いくつかの施設は自然受精および人工授精の両方が可能であり、いくつかの施設は、タンパク質生産のためのトランスジェニックトリを生産するために人工授精のみを使用し、ふ化設備および育雛設備の両方を含む。トリは、たとえば、参照により全体として本明細書に組み入れられる米国特許第7,511,120号に記載されているように生産することができる。
【００４０】
メンドリおよびそれが産む卵の遺伝子型は接合状態と呼ばれ、接合状態は、生産されるタンパク質をつかさどる遺伝子に関連して、ホモ接合性またはヘミ接合性のいずれかである。両方のトリ染色体組上に存在する遺伝子から発現する関心対象のタンパク質を含有する卵はホモ接合性と呼ばれ、二つのトリ染色体の一方のみに存在する遺伝子から発現する関心対象のタンパク質を含有する卵はヘミ接合性またはヘテロ接合性と呼ばれる。異なる接合状態のトランスジェニックトリおよび卵は互いから隔離状態で保持される。共通の接合状態および関心対象のタンパク質を有する卵は卵の群と呼ばれる。
【００４１】
生産ユニット110に入る人員は厳格なシャワーおよびガウン着用手順に従う。人員は、入口通路158を通ってユニットに入り、外側ロッカールーム160の中で、施設の外で着用していた衣服を脱ぐ。人員は、シャワールーム162でシャワーを浴びたのち、内側ロッカールーム164の中で施設内衣服（施設によって提供され、施設内でのみ装用される）を着用する。施設内衣服は、たとえば、シューズ、ソックス、下着およびカバーオールを含む。動物と接触し得るすべての衣服は施設内に維持され、適切に洗濯される。バイオセキュリティ区域116の中に進む人員は、入るとき、たとえばシューズカバー、使い捨てカバーオール、マスク、ヘアネットおよびグローブを含む個人用防護具（PPE）アンサンブルを着用する。この二次的PPEアンサンブルは、バイオセキュリティ区域116を出たところで脱ぐ。
【００４２】
タンパク質生産施設200内の卵生産室114は約12×50フィートである。各卵生産室114は、専用の給餌装置134、トランスジェニックトリを収容する複数の囲い136および専用の廃棄物装置138を含む（図2Cを参照）。囲い136は、換気、清潔さならびに動物の全般的健康および健全性を最大化するための最先端の装備（たとえば、亜鉛めっき金網製の床および壁、堆肥取り出しのためのベルト、給水ライン、機械化給餌システム）を含む。卵生産室114は、日中および夜間を模倣する能力とともにトランスジェニックトリの全体的ストレスレベルを下げるための特殊なLED照明の使用を組み入れる。
【００４３】
人員の流れは、給餌装置134に近い室入口から廃棄物装置138に近い室出口まで一方向である。これは、室と室との間で相互汚染が起こる危険性を減らす。タンパク質生産施設中の人員の流れは、以下、図3Aを参照しながらさらに詳細に説明する。
【００４４】
各卵生産室114内には、動物の健康を維持するための飲用水および浄化水を供給するための自動給水システムが設置されている。各卵生産室114内のドレインは、高レベルの廃水分離および室間のバイオセキュリティを提供するために、独立して、主ドレインヘッダに配管されている。
【００４５】
卵生産室は、+/-0.5℃の許容差（BODに基づく、ただし、実際には+/-1℃）の個別温度制御下にあり、一般に、20〜22.2℃の温度を維持するようにセットされている。動物を収容する各室は、隣接する通路に対して正である差圧制御下にある。これは、空気が一つの卵生産室114から別の卵生産室に移動する危険性を減らす。施設の異なる部分の相対加圧は、以下、図3Bを参照しながらさらに詳細に説明する。
【００４６】
空気は、厳格な温度・湿度制御の下、タンパク質生産施設の各室に送られ、HEPAフィルタを通過する。HVACシステムが、異なる生産区域を分けるように区域指定された別々のHVACユニットによって完全なバイオセキュリティを維持するのに役立つためのシングルパス設計を提供する。トランスジェニックトリを収容する個々の室のHVACシステム設計は、全囲いレベルで十分な換気および温度制御を保証するために、低レベル帰還の特徴を含む。低レベル帰還は、粉塵および鱗屑がダクトワークに入ることを防ぐ粒子フィルタを有する。
【００４７】
空気処理システムが建物の屋根に位置している。空気処理システムは、側面取り付け吸気口および上部取り付け空気誘導排気送風機を有する。上部取り付け空気誘導排気送風機は、上向きに高い出口速度を提供し、排気が空気処理システム吸気口に引き込まれる危険性を減らす。
【００４８】
動物室は、室内の十分な換気、臭気抑制および鱗屑除去を提供するために1時間に約20回の換気を提供する流量に設計されている。主要なHVAC装備は、メンテナンス活動中にバイオセキュリティを損なうことなく点検修理する能力のために内部施設環境の外に位置している。エネルギー回収施設は、100％外気を施設内で使用することにより、全体的な操業コストを減らすように設計され、設置されている。
【００４９】
卵白回収ユニット
例示的なタンパク質生産施設200において、卵白回収ユニット112は、生産ユニット110からの開口部121と卵白回収室122との間に位置する卵貯蔵低温室120および卵準備室118を含む。開口部は、ステンレス金属でできた約3フィート×2フィートの寸法を有する壁の穴であり、これは、人員が一方の室から他方の室へと移動することを要することなく、一方のユニットから他方のユニットへの物質（たとえば卵）の移送を容易にする。卵白回収室122内の二つの卵割り室166には、卵白回収室122の外側部分から控え室127を通って入る。回収ユニットの卵準備室118と卵割り室166との間には卵の移送のために開口部121が設けられている。生産された卵白は卵白貯蔵フリーザ124に貯蔵される。関心対象の医薬タンパク質を含有する一つまたは複数の卵成分が医薬等級に適した環境で処理されることを保証するために、卵白回収ユニット112の少なくとも一つの区域はGMPに準拠する。
【００５０】
卵白回収室122はGMPに準拠する。卵割り室166は、卵割り室を回収室の残り部分から切り離す壁によって包囲されることができる。卵白割り室166は、軟質壁または硬質壁を有するHEPAろ過室であることができる。卵割り室166および対応する控え室127は、低バイオバーデンHEPAろ過環境として分類されることもできるし、またはISOクラス8規格に準拠することもできる。卵回収室122の外側部分および対応するエアロック126は、低バイオバーデンHEPAろ過環境として分類されることもできるし、またはISOクラス7規格に準拠することもできる。
【００５１】
回収ユニットに入る人員はまた、回収ユニット112のさらに中へと進む前に、回収ユニット112中のロッカールーム160の中でカバーオールを着用することを求めるガウン着用手順に従う。卵回収室122に入る人員は、入るとき、たとえばシューズカバー、使い捨てカバーオール、マスク、ヘアネットおよびグローブを含むPPEアンサンブルを着用する。このPPEアンサンブルは、卵回収室122を出たところで脱ぐ。
【００５２】
供給物は、積荷ドック146および検疫／解放室172を通って回収ユニット112に運び込まれる。
【００５３】
回収ユニットは、生産された卵白に対して品質管理（QC）チェックが実行される検査室168を含み、また、訪問者が、生産室に入り、バイオセキュリティを破ることなく生産室を視察することを許す視察通路170を含む。
【００５４】
物質の流れ
タンパク質生産施設200中の物質の流れは、高度なバイオセキュリティを提供するように構成されている。
【００５５】
原料
原料の流れが、図2A上、霧室154から卵生産室114まで延びる矢印によって示されている。生産ユニット110に運び込まれるすべての物質（たとえば飼料、スペア部品）は、トランスジェニックトリの保護を保証するために、拭き取りまたは噴霧処理を受ける。例示的なタンパク質生産施設200において、これは、室154と室156との間に配置される前またはたとえば生産ステージング室152に運ばれる前に、卵生産ユニット110のための受け取り積荷ドック（図示せず）に隣接して位置する霧室154の中で実施される。受け取り積荷ドック上の人員は、物質を霧室154の入口まで運ぶが、霧室154に立ち入ることはない。霧室154中の人員は、物質を受け取るが、霧室154から出て積荷ドックに立ち入ることはない。
【００５６】
タンパク質生産施設200に提供される飼料は、バイオセキュリティを高めるために、オフサイトで放射線照射されている。
【００５７】
卵生産室114に運び込まれる原料（たとえば飼料）は、ステージング室152に集められたのち、エアロック126を通って入口通路128に運び込まれる。次いで、原料は、目的地の卵生産室114と対応する控え室132に入れられる。控え室132と卵生産室114との間のドアが開き、原料が卵生産室114に運び込まれる前は、控え室132と入口通路128との間のドアは閉じている。卵生産室どうしの間で物質が移されることはなく、卵を除き、物質が卵生産室114から対応する控え室132に戻されることもない。原料および廃棄物はいずれも出口通路に向かって一方向に移動する。
【００５８】
卵生産室114内で、人工授精技術を使用して、各室内または繁殖室140内に収容されたオスからの精液でメンドリを受精させたのち、生産された受精卵をふ化室142に移す。3チーム作業を使用して雛をふ化室142から育雛室144に移す。ふ化室内の一つのチームが雛をクレートに入れ、そのクレートを、ふ化室142と対応する控え室132に運ぶ。このチームは、移送が完了するまでふ化室142内に残り、その後、繁殖室142を通って出口通路130に出る。第二のチームが、クレートを、ふ化室142と対応する控え室132から、育雛室144と対応する控え室132に運ぶ。このチームは、移送が完了するまで入口通路128および控え室132内に残り、その後、育雛室144を通って出口通路130に出る。育雛室144中の第三のチームが、クレートを受け取り、雛を囲いの中に入れる。このチームは、移送が完了するまで育雛室144内に残り、その後、出口通路130に出る。トリが産卵齢に達したときには、同様な作業を使用して若いトランスジェニックトリを育雛室144から卵生産室114に移す。
【００５９】
移送作業で使用される入口通路128および控え室132は清潔であり、移送作業の前後に消毒される。任意の所与の移送作業中、トランスジェニックトリは、一つの出発地室から一つの目的地室に移されるだけである。
【００６０】
中間物質
中間物質（すなわち卵）の流れが、図2A上、卵生産室114から入口通路128を通って生産ユニット110と回収ユニット112との間の開口部121まで延びる矢印によって示されている。卵生産室114で収集された卵は、卵生産室114と対応する控え室132との間のドア134（図2B）に通される。卵を収集する人員は、控え室には戻らず、卵生産室114を通って出口通路130に進む。
【００６１】
卵収集の前に、人員は、適切な数の色分けした卵フラット（flat）を70％エタノールで消毒する。フラットは、生産ステージング室152内で乾燥させる。卵フラットは、異なる卵生産室114で生産される異なる産物に対応するように色分けされている。施設200中、黄色の卵フラットは、ヒトタンパク質Xを生産する卵生産室からの卵を運ぶために使用され、茶色の卵フラットは、ヒトタンパク質Yを生産する卵生産室からの卵を運ぶために使用され、青色の卵フラットは、ヒトタンパク質Zを生産する卵生産室からの卵を運ぶために使用される。特定の卵生産室内で生産される産物は各卵生産室の前面に明記される。
【００６２】
色分けされた卵フラットが卵生産室に運び込まれたのち、卵ロールアウト上に見られるすべての卵を集め、大きい方の端を上にしてフラットに載せる。入れ子式に合わせた三つの空のフラットを使用してフラット1つあたり最大30個の卵を集め、一番上のフラットが満杯になると回転させて次のフラットに入れ、卵を入れたフラット5つ分の高さまで積み上げる。卵は少なくとも1日二回集める。
【００６３】
収集を完了したのち、所与の卵採取ごとに良い卵および悪い卵の総数を決定する。すべての卵を、目に見える割れおよびサイズに関して検査する。大きな割れのある卵、割れた卵および最小サイズ（たとえば39グラム）未満の卵はただちにバイオハザード収集バッグの中に廃棄する。それらの卵は採取個数に含められる。卵は生物学的廃棄物として処理され、卵生産室114内での卵収集が完了すると、バイオハザードバッグを第二のバイオハザードバッグに入れる（ダブルバギングする）。
【００６４】
良い卵は、二つのグループ：目に見えてきれいな卵および汚れた卵に分けられる。汚れた卵は、蒸留水を用いて汚れを手で拭き取り、乾燥させる。卵をごしごしこすってはならない。むしろ、容易には取れない任意の汚れまたは物質が付着した卵は廃棄する。卵は、最初に収集してから20分以内にきれいに拭く。両グループの卵に70％エタノールを噴霧して卵表面をずぶ濡れにし、殻が目に見えて乾くまで卵を乾燥させ、次いで再び70％エタノールを噴霧する。これが、70％エタノールへの二回の別々の暴露をすべての卵に提供する。卵のフラットを蓋付きプラスチック容器に積み込む。容器上にラベルがあるならばそれを剥がし、廃棄し、容器を消毒したのち卵生産室114に運び込む。最大でフラット5つ分の卵が一つの容器に入れられるべきである。
【００６５】
卵生産室番号、産物コード／産物名、世代、産卵日および使用可能な卵の数を卵移送記録に記録し、それを容器蓋に貼り付ける。容器蓋を容器の上に載せ、外れないよう、同色のテープ（すなわち、テープと卵フラットとは同じ色である）で容器に取り付ける。二つのラベルを容器に貼り付ける（一つは上面に、もう一つは前面に）。ラベルは、テープの両端にまたがるように貼り付け、箱番号、産卵日、産物、室番号、卵の数、収集時間（一回目、二回目または三回目）および世代を含む情報を含む。任意で、接合状態に関する情報をラベルに含めることができる。
【００６６】
各月の初めに、使用中の卵生産室114ごとに新たな日別卵収集記録を開始する。日別卵収集記録は、室番号、産物、世代および卵収集月／年で標識する。日別卵収集記録は、採取ごとの月の日付に対応する欄に、卵収集者のイニシャル、時間および良い卵および悪い卵の総数を注記する。ある特定の日に所与の室で卵収集が二回しか実施されないならば、三回目の収集のための区分には一本線を入れ、NAし、イニシャル署名／日付を記す。
【００６７】
卵は、入口通路128と生産ユニット110の卵準備室118に通じる通路との間のエアロック126中に配置される。バイオセキュリティ区域116内の人員はこのエアロック126を越えない。代わりに、通路中の人員が卵をエアロック126から取り出す。タンパク質生産施設200中、これらの人員は一般に、卵を直に開口部121に運んで回収ユニットの中に移す。
【００６８】
いくつかの場合、これらの人員は、以下に記すような処理のために卵を生産ユニット110の卵準備室118に運ぶ。卵は、回収ユニットの中に移されるまで低温室120に貯蔵されてもよいし、または処理ののち運ばれてもよい。卵準備室118に入る人員（たとえば、出所の卵生産室114から運ばれた卵を受け取ったのち）はPPEアンサンブルを着用する。
【００６９】
卵のフラットを生産ユニットの卵貯蔵低温室120に貯蔵する前または回収ユニット112に移す前に、卵準備室118内で、エッグプリンタ（たとえばNuovo Ag Egg Printer）を使用して各フラット上の少なくとも二つの卵を標識することができる。たとえば、黒インクおよび／または産物コードに対応するカラーインクを使用して、各フラットの互いに反対側の隅の卵を産物コード、室番号、世代および日付で識別することができる。一度に一つグループの卵だけが、エッグプリンタを収容する卵準備室118に含まれ得、他の卵生産室114から生まれる卵は分けて保持される。
【００７０】
卵は、すぐに回収ユニット112に移さないならば、卵貯蔵低温室120に貯蔵することができる。卵は、卵貯蔵低温室120内に位置する指定された生産貯蔵冷却器の一つに移される。卵貯蔵低温室120に入る人員は、室のしきいを越えて卵準備室118に入るとき、PPEアンサンブルを着用し、新たなシューズカバーを着用する。指定された各冷却器は、出所の卵生産室番号、産物コードおよび卵を相関させるためのカラーコードを示す標識を有する。異なる卵生産室114からの卵はそれぞれの冷却器中に隔離される。
【００７１】
卵は「先入れ先出し」的に管理される。これを容易にするために、卵を、指定された冷却器内の経時順に最後に残ったフラット（部分的）に移し、卵を、特定の順序で並べる。たとえば、卵をフラットの後方左側部分に載せることができ、各列を左から右かつ後から前に卵で埋めてゆく。フラットは連続5つまで重ねることができ、もっとも古い日付の卵が一番下に来る。フラット5つの各スタックは、後方左側、後方右側、前方左側および前方右側から並べることができる。
【００７２】
指定された各貯蔵冷却器の温度は2℃〜10℃（たとえば4℃〜8℃）に維持される。指定された各貯蔵冷却器の温度をモニタするために温度記録装置（チャートまたはデジタルレコーダ）が使用される。チャートレコーダの場合、チャートは、毎週月曜に各温度記録装置上で交換される。先に示したように、チャートレコードの前面のボックスの中に開始日、「新」およびイニシャルが記録される。産物コード（たとえば「タンパク質X」）が、チャートレコードの前面に位置する別のボックスの中に記録される。チャートレコードの背面は、冷却器ID、産物コード、チャートレコーダシリアル番号、交換日およびサイクルの終了時にチャートを交換する人物のイニシャルで識別される。すべてのチャート記録は、週一回の交換後に管理人によって確認され、署名されたのち、保管される。チャートレコーダおよび卵貯蔵冷却器検査記録は、指定された冷却器ごとに毎日完成させる。冷却器内の温度チャートレコーダの観測に基づいて適切な情報が表に記録される。チャートレコーダが満足に作動しているかどうかを示すために「Sat」または「Unsat」の注記が使用される。「Unsat」観測の場合のコメント（冷却器またはチャートレコーダに関する）は記録され、ただちに監督者に通知される。
【００７３】
前記温度範囲外への任意の変動または標準手順からの逸脱は記録され、調査される。目標温度を達成し、維持する任意の困難の理由が決定され、施設スタッフによって適切な是正措置が講じられる。問題の本質を決定または是正することができないならば、点検修理技術者を呼び寄せて状況を評価し、設備に対して点検修理を開始する。すべての場合、産物の完全性がもっとも重要であり、適切に維持される。
【００７４】
産物にもよるが、卵は、収集から14日以内に開口部121を介して卵白回収ユニット112に移される（たとえば収集直後もしくは標識および／または生産ユニット低温室内での貯蔵ののち）。生産ユニット技術者が回収ユニット技術者と一緒に移送をコーディネートし、移送の日時を卵移送記録に記録する。回収技術者が受け取り日時を卵移送記録に記録する。以下に記す各工程が、その工程を実行する技術者によって卵移送記録に記録され、工程の実行に立ち会う第二の技術者によってイニシャル署名される。
【００７５】
卵は、卵白回収ユニット112への移送ののち、直に卵準備室118に運び込むこともできるが、通常、卵貯蔵低温室118内で貯蔵される。貯蔵される場合、卵が冷却器の外にある時間を最小限にするために、卵は開口部121から直に卵貯蔵低温室118に運ばれる。生産ユニットの卵貯蔵低温室118に関して上述した同じ手順が、回収ユニットの卵貯蔵低温室118における卵取り扱いの場合にも使用される。
【００７６】
卵から卵白を回収する前に、卵を貯蔵室から取り出し（該当するならば）、検査する。移送される卵とともに温度モニタ（たとえばDeltaTRAKモニタ）が含まれるならば、満足な貯蔵温度が確認される。回収ユニット技術者は、容器上の標識情報（たとえば卵生産室番号、産物コード、世代、接合状態および産卵日範囲）が卵移送記録または卵出荷記録と一致することを確認する。卵移送のために温度モニタが使用される場合、温度モニタシリアル番号および対応する出所の卵生産室番号がバッチレコード上に記録される。
【００７７】
キャンドリングとは、卵に光を照射または透過させて卵の内部品質を観察する工程である。通常条件下、光は透明な卵白を透過し、目立つ卵黄を強調する。異物、出血斑、殻の中の割れまたは大きな内部汚染がキャンドリングによって検出され、不十分な内部品質を有するような卵は廃棄される。
【００７８】
タンパク質生産施設200中、回収技術者が卵準備室118内で卵をキャンドリングして、割れ、目に見える出血斑および／または異物を含む卵を識別する。技術者はキャンドリング区域の照明を消す。各卵生産室内で生産された卵の隔離を維持するために一つの卵生産室からの卵だけがいっしょにキャンドリングされる。割れ、目に見える出血斑および／または異物を含む卵はすべて廃棄される。キャンドリングの結果（たとえば箱番号／冷却器番号、各箱番号／冷却器番号に関してキャンドリングされた卵の数、廃棄した卵の数および良い卵の数）を卵検査フォームに記録したのち、技術者および立会人がイニシャル署名し、日付を記す。いくつかの施設においては、回収ユニット112に移す前に卵生産ユニット人員が卵をキャンドリングしてもよい。
【００７９】
検査後、卵を卵準備室118内で清潔にする。約8リットルの、少なくとも米国薬局方（USP）等級の水を容量16リットルの正方形プラスチックトレーに注加する。清潔にした卵を載せた卵フラットを水に浸し、平らなままかく拌して緩いくず／粉塵を除く。トレーを水から出して過剰な水をフラットから抜く。所与のクレートのすべてのフラットが水洗されるまで各トレーをテーブルまたはカートに載せる。白濁が生じたら、技術者が水を交換する。最初の水洗ののち、70％エタノール約8リットルを容量16リットルの正方形プラスチックトレーに注加する（約8リットル）。各卵フラットに70％イソプロピルアルコールを噴霧し、次いでエタノールを含むプラスチックトレーに入れたのち、トレー、フラットおよび卵を開口部121を通して卵割り室166の中に移す。
【００８０】
産物
卵白を回収するための準備において、回収ユニット技術者および立会人は、卵白回収室122および卵割り室166が使用前24時間以内に消毒されていることを確認したのち、バッチレコードにイニシャル署名し、日付を記す。卵白回収室122に入る人員は、控え室127に入るとき、たとえばシューズカバー、使い捨てカバーオール、マスク、ヘアネットおよびグローブを含むPPEアンサンブルを着用する。回収ユニット技術者は、卵白回収室122内で生物粒子計数を開始し、全粒子計数を実施する。
【００８１】
タンパク質生産施設200は、以下に記す工程を使用して卵白を手作業で回収する。しかし、いくつかのタンパク質生産施設は卵白を機械的に回収する。
【００８２】
回収のために卵を割り、卵白を分離したときと定義される開始時間を卵移送記録に記録する。回収ユニット技術者は、一人あたり一度に一つずつ卵を割り、中身を無菌組織培養皿に入れる。破裂した卵黄を有する、または汚染されているように見える卵白があるならば、それは、無菌培養皿に入れられるのではなく、廃棄される。培養皿に任意の汚染があるならば、皿をまるごと廃棄する。無菌スクープを使用して皿から卵黄を取り出して、できるだけ多くの卵白を皿に残す。スクープは、卵の殻、作業台、人の体の任意の部分、任意の他の物品に接触したならば、または目に見える卵黄汚染を有するならば、廃棄される。卵黄、卵の殻および他の廃棄物をバイオハザードバッグに入れる。
【００８３】
回収した卵白を注意深く無菌1リットルボトル（たとえばCorningボトル）に入れる。1リットルボトルが満杯になったのち、卵白を1リットル無菌ボトルから無菌4リットルボトル（たとえばBiotainerボトル）に移す。4リットルボトル中の量が約3．2リットルの最大量に達するまでこの手順を繰り返す。卵割り室166内のすべての卵からの卵白が完了するまでこの工程を繰り返す。完了すると、回収の終了時間を記録し、4リットルボトルを卵割り室166から卵回収室122に移す。
【００８４】
卵割り室166内で、5ミリリットルまたは10ミリリットルピペットを使用して各4リットルボトルから試料を採取する。ピペットは、試料採取ののち廃棄し、異なる容器には決して使用しない。試料採取の前に、各4リットルボトルの内容物を激しく振とうして、卵白の薄い部分および濃い部分がより均一になるように混合する。ピペットを使用して卵白を4リットルボトルから取り出し、試料を1ミリリットルクライオバイアルに入れる。八つの1ミリリットル試料を収集し、クライオバイアルを経時順にクライオボックスに入れる。ピペットは廃棄される。
【００８５】
すべての計量、ラベル貼りおよびバギングは卵割り室166の外で実施される。試料採取が完了したのち、天秤を使用して風袋引き後質量を測定する。卵白を含む4リットルボトルそれぞれに関し、質量（g）を指定するラベルを印刷し、一次識別ラベルの下に配置する。一次識別ラベルは、EW−［タンパク質コード］−日付−［ボトル番号］［施設コード］の形式に従うことができる。たとえば、「EW−タンパク質X−121113−01 H」は、2013年12月11日に施設Hでタンパク質X卵から回収された卵白の最初のボトルということになる。4リットルボトルおよび対応する試料バイアルはそれぞれこの情報で個別に標識される。いくつかの施設において、容器は、データベース中で情報、たとえば卵生産室番号、産物コード、世代、接合状態および産卵日範囲と対応するバーコードまたはシリアル番号で標識される（このような情報がラベルに直に記録される代わりに、またはそれに加えて）。
【００８６】
作製した、貼り付けた、破棄したラベルの数を記録する。ラベルは、一つの試料ラベルに加えて貼り付けたラベルに破棄したラベルの数を加えたものを作製したラベルの総数で割ると100であることを照合確認する。いくつかの場合、さらなる工程、たとえばpH調節、卵白清澄化およびろ過が卵白回収室内で実施される。
【００８７】
各4リットルボトルを卵白の残渣に関して検査し、ボトル外面の任意の目に見える物質を拭き取り、70％IPAで消毒したのち、4リットルボトルをフリーザバッグ（たとえば8インチ×4インチ×22インチのフリーザバッグ）に入れる。フリーザバッグの頂部をねじり、開口端をグースネック状に曲げ、11インチジップタイを使用してバッグを固定して封止する。ボトル番号、産卵日および量を卵白回収記録に入力する。卵生産室番号、受け取った卵の数、破棄した数（卵黄破壊、損傷などによる）、回収数、立会人の全質量および日付を卵計量管理マトリックスに記録する。卵白4リットルボトルおよび試料バイアルを−20℃の貯蔵フリーザに移す。廃棄卵のすべてのバッグは、指定された廃棄物貯蔵所に移して、地域の生物学的廃棄物手順にしたがって適切に処分する。
【００８８】
4リットルボトルに必要な試験ごとに試料要求フォーム（SRF）を完成させ、品質管理（QC）に提出する。著名／日付、日別の試料記述、試料量（たとえば7×1mL）および要求される試験を記録し、試料をQC試料業務日誌に記録する。各試験のSRFを所与の試験ごとに卵移送記録に記録し、完了後、作業者および立会人がイニシャル署名し、日付を記す。4リットルボトルごとに、四つの試料を以下の試験：内毒素、バイオバーデン、ウイルスPCRおよび酵素活性（情報のためのみ）のためにQCに提出し、四つの1ミリリットル試料を保管のために−20℃フリーザに貯蔵する。
【００８９】
ボトル番号（産卵日を含む）、質量、室識別情報、作業者、立会人、日付および初期フリーザ位置を卵白回収記録に記録し、回収識別情報、接合状態、産卵日および対応する質量を適切なデータベースに入力する。
【００９０】
関心対象の同じタンパク質に関するホモ接合性卵白回収とヘミ接合性卵白回収との間に、残る物すべてを卵回収室および卵割り室から廃棄する。異なる関心対象タンパク質の回収の間に、ライン浄化を完了し、卵回収室に固定されたプラカードに時間、日付およびイニシャルを記録する。
【００９１】
廃棄物
廃棄物システムが糞便の半自動的除去を提供し、廃棄物管理への廃棄物の一方向流が生産ユニット110からの適切な除去を保証する。生産ユニット110中の廃棄物の流れが、図2A上、卵生産室114、繁殖室140、ふ化室142および育雛室144から出口通路132を通って排出積荷ドック146まで延びる矢印によって示されている。廃棄物移送は2チーム工程であり、一方のチームが出口通路132中に残り、第二のチームがバイオセキュリティ区域116の外、排出積荷ドック146上にとどまる。廃棄物は、廃棄物貯蔵室148に一時的に保管されてもよく、死んだ動物は、施設200から除かれる前に剖検室150で検査されてもよい。
【００９２】
回収ユニット112中の廃棄物の流れが、図2A中、卵回収室122から回収ユニットの積荷ドック146まで延びる矢印によって示されている。
【００９３】
第三の例示的施設
図3A〜3Bは、治療用タンパク質を含有する卵白を月に最大1500リットル生産するように設計された類似した例示的タンパク質生産施設300を示す。タンパク質生産施設300はタンパク質生産施設200に実質的に類似しているが、タンパク質生産施設300のバイオセキュリティ区域116は四つの卵生産室114しか有しない。タンパク質生産施設300を通過する物質の流れは、タンパク質生産施設200に関して上述したものに実質的に類似している。タンパク質生産施設300中の人員の流れおよびタンパク質生産施設300中の相対加圧もまた、高度なバイオセキュリティを提供するように構成されている。この例示的な施設もまた、卵白回収のためのバイオセキュリティおよびGMP準拠環境を維持しながらも、バイオ医薬製造における高い効率を提供するように設計されている。
【００９４】
人員の流れ
人員は、タンパク質生産施設200、300のタンパク質生産ユニット110と回収ユニット112との間で直には移動しない。側壁開口部121がタンパク質生産ユニット110と回収ユニット112との間の唯一の直接連絡である。タンパク質生産施設中の例示的な人員の流れパターンが図3A上に矢印によって示されている。
【００９５】
人員は入口通路158を通ってタンパク質生産ユニットに入る。上述したように、人員は、外側ロッカールーム160の中で衣服を脱ぎ、シャワールーム162でシャワーを浴びたのち、内側ロッカールーム164の中で施設内衣服を着用する。タンパク質生産施設300から出るとき、この過程は逆になる。
【００９６】
バイオセキュリティ区域116の外では通常の二方向交通が許される（たとえば、卵準備室118、卵貯蔵低温室120、生産ステージング区域152、霧室154および貯蔵室156へ、およびそれらの間を行ったり来たり）。
【００９７】
人員は、生産ステージング区域152と入口通路128との間のエアロック126を通ってのみ、バイオセキュリティ区域116に入る。エアロック126中、人員は、入るとき、たとえばシューズカバー、使い捨てカバーオール、マスク、ヘアネットおよびグローブを含むPPEアンサンブルを着用する。入口通路128に沿って、および入口通路128と控え室132との間では二方向交通が許される。バイオセキュリティ区域116内の人員は、入口通路128と、生産ユニット110の卵準備室118に通じる通路との間のエアロック126を通過しない。その代わり、バイオセキュリティ区域116内の人員が卵をエアロック126の中に置き、通路中の人員がその卵をエアロック126から取り出す。タンパク質生産施設200中、これらの人員は通常、卵を直に開口部121に通して回収ユニットに移す。
【００９８】
バイオセキュリティユニットの残り部分中の人員の流れは一方向である。人員は、ひとたび卵生産室114、育雛室144またはふ化／繁殖室140、142に入ると、これらの室を通って出口通路130に進む。出口通路130中の人員の流れは二方向である。廃棄物を取り扱う人員は、積荷ドック146に通じるドアまで進むが、ドアを通り抜けず、代わりに、廃棄物（たとえばバイオハザードバッグ、糞便）を、バイオセキュリティ区域116と排出積荷ドック146に通じるドアとの境界に配置する。廃棄物移送は、一つのチームが出口通路132内に残り、第二のチームがバイオセキュリティ区域116の外、排出積荷ドック146上にとどまる2チーム工程である。出口通路130中の人員はエアロック126を通ってバイオセキュリティ区域116を離れる。人員はエアロック126中で二次的PPEを脱ぐ。
【００９９】
人員は、視察通路170へのアクセスを含む管理空間を通って回収ユニット112に出入りする。人員は、回収ユニット112の中へとさらに進むためにはロッカールーム160を通過しなければならない。理由は、ロッカールームが、管理空間と回収ユニット112の残り部分との間の唯一の連絡を提供するからである。
【０１００】
非常出口が視察通路170から生産ユニット110の排出積荷ドック146に通じている。この非常出口のドアは、開放されたときそれを示すためのアラームを有し、閉回路カメラによってモニタされる。この備えは非常事態でのみ使用され、このドアを通って回収区域から出る人員は、積荷ドック146を通過し、建物から出る。人員がバイオセキュリティ区域116に入ることはない。
【０１０１】
GMP準拠卵回収室122を通過する人員の流れは一方向である。人員は、卵準備室118と卵回収室122との間のエアロック126を通って卵回収室122に入る。卵白回収室122に入る人員は、エアロック126に入ったとき、たとえばシューズカバー、使い捨てカバーオール、マスク、ヘアネットおよびグローブを含む二次的PPEを着用する。人員は、貯蔵室124と卵回収室122との間のエアロック126を通って卵回収室122から出、エアロック中で二次的PPEを脱ぐ。回収ユニット112の残り部分中の人員の流れは二方向である。
【０１０２】
相対加圧
また、ドアが開放されたときの施設300中の気流を制御するために、特にバイオセキュリティ区域116および卵回収室122中の隣接する室の相対加圧が制御される。
【０１０３】
生産ユニット110中、卵生産室114は、入口通路128および出口通路130に対して陽圧に維持される。入口通路128と卵生産室114との間の控え室132は、入口通路128および卵生産室114に対して陰圧に維持される。生産ステージング室152と入口／出口通路128、130との間のエアロック126は、生産ステージング室152および入口／出口通路128、130に対して陽圧に維持される。受け取り積荷ドック154および対応する貯蔵室156は、生産ユニット110の隣接部分に対して陰圧に維持される。タンパク質生産ユニット110中の卵準備室118は、隣接する通路に対して陰圧に維持される。
【０１０４】
回収ユニット中、卵白回収室122は、卵白回収室122へのおよび卵白回収室122からのアクセスを提供するエアロック126に対して陽圧に維持される。これらのエアロック126は、隣接する通路に対して陽圧に維持される。ロッカールーム160は、それにつながる室に対して陰圧に維持される。
【０１０５】
結び
いくつかの態様が説明された。それにもかかわらず、本開示の精神および範囲を逸脱することなく様々な改変が加えられ得ることが理解されよう。
【０１０６】
たとえば、図4は、卵割り室166の構成を除いてタンパク質生産施設200に実質的に類似している例示的なタンパク質生産施設400を示す。タンパク質生産施設400中、軟質壁を有するHEPAろ過室は中央の硬質Plexiglas壁によって二つの卵割り室166に分割されている。二つの卵割り室166それぞれは、卵準備室118と共通の壁を有する。別々の側壁開口部が卵準備室118から二つの卵割り室166それぞれに延びている。この例示的な施設もまた、卵白回収に関してバイオセキュリティおよびGMP準拠環境を維持しながらも、バイオ医薬製造における高い効率を提供する。
【０１０７】
もう一つの例において、図5は、図1に示すタンパク質生産施設100に実質的に類似している例示的なタンパク質生産施設500を示す。図6は、卵生産施設500の具体的な例示的レイアウトを示す。しかし、タンパク質生産施設500中、卵準備室120は卵白回収ユニット112中にある。卵生産施設110および卵白回収ユニット112はいずれも卵貯蔵低温室118を有する。生産室入口通路128と視察室170との間のドアは非常出口ドアである（厳格に緊急時しか使用されない）。
【０１０８】
したがって、他の態様が以下の特許請求の範囲内である。
【図１】
2019131617.tif 000003
【図２Ａ】
2019131617.tif 000004
【図２Ｂ】
2019131617.tif 000005
【図２Ｃ】
2019131617.tif 000006
【図２Ｄ】
2019131617.tif 000007
【図３Ａ】
2019131617.tif 000008
【図３Ｂ】
2019131617.tif 000009
【図４】
2019131617.tif 000010
【図５】
2019131617.tif 000011
【図６】
2019131617.tif 000012
【外国語明細書】
2019131617000001.pdf