(57)【要約】【課題】アトピー性皮膚炎に関係する肌状態を非侵襲的に、簡便かつ的確に評価する、アトピー性皮膚炎の評価方法を提供する。【解決手段】被験体の皮膚表面から揮散するガス中のアセトン量を指標として、被験体のアトピー性皮膚炎に関係する肌状態を評価する、アトピー性皮膚炎に関係する肌状態の評価方法。【選択図】図１
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【特許請求の範囲】
【請求項１】
被験体の皮膚表面から揮散するガス中のアセトン量を指標として、被験体のアトピー性皮膚炎に関係する肌状態を評価する、アトピー性皮膚炎に関係する肌状態の評価方法。
【請求項２】
アトピー性皮膚炎に関係する肌状態を評価するために、被験体の皮膚表面から揮散するガスからアセトン量を測定する方法。
【請求項３】
被験体の皮膚表面から揮散するガスを採取し、採取したガスに含まれるアセトン量を測定する、請求項１又は２に記載の方法。
【請求項４】
アトピー性皮膚炎に関係する肌状態として、アトピー性皮膚炎の発症の有無、アトピー性皮膚炎の発症の可能性、アトピー性皮膚炎の予防の状態、アトピー性皮膚炎の進行度若しくは重症度、局所におけるアトピー性皮膚炎の進行度若しくは重症度、アトピー性皮膚炎の悪化の予兆、アトピー性皮膚炎の傾向（素因）の有無、アトピー性皮膚炎の治癒状況、又はアトピー性皮膚炎に対する治療効果を評価若しくは予測する、請求項１〜３のいずれか１項に記載の方法。
【請求項５】
アトピー性皮膚炎の皮疹部、アトピー性皮膚炎の無疹部、アトピー性皮膚炎の皮疹部に隣接した無疹部、又はアトピー性皮膚炎を発症していない被験体の健常部から、皮膚表面から揮散するガスを採取する、請求項１〜４のいずれか１項に記載の方法。
【請求項６】
被験体の皮膚表面から揮散するガス中のアセトン量を測定する、測定手段と、
測定したアセトン量を指標として、被験体のアトピー性皮膚炎に関係する肌状態を評価する、演算手段、
とを備えた、アトピー性皮膚炎に関係する肌状態の評価システム。
【請求項７】
被験体の皮膚表面から揮散するガスを採取する、ガス採取手段を備え、
前記測定手段が、ガス採取手段により採取したガスに含まれるアセトン量を測定する、
請求項６に記載のシステム。
【請求項８】
アトピー性皮膚炎に関係する肌状態として、アトピー性皮膚炎の発症の有無、アトピー性皮膚炎の発症の可能性、アトピー性皮膚炎の予防の状態、アトピー性皮膚炎の進行度若しくは重症度、局所におけるアトピー性皮膚炎の進行度若しくは重症度、アトピー性皮膚炎の悪化の予兆、アトピー性皮膚炎の傾向（素因）の有無、アトピー性皮膚炎の治癒状況、又はアトピー性皮膚炎に対する治療効果を評価若しくは予測する、請求項６又は７に記載のシステム。
【請求項９】
アトピー性皮膚炎の皮疹部、アトピー性皮膚炎の無疹部、アトピー性皮膚炎の皮疹部に隣接した無疹部、又はアトピー性皮膚炎を発症していない被験体の健常部から、皮膚表面から揮散するガスを採取する、請求項６〜８のいずれか１項に記載のシステム。
【請求項１０】
アトピー性皮膚炎の予防若しくは改善剤の候補となる物質を被験体の皮膚に適用し、請求項１〜９のいずれか１項に記載の方法を実施して、又はシステムを利用して、アトピー性皮膚炎の予防若しくは改善剤の候補となる物質の適用前後での皮膚の肌状態の変化を確認し、アトピー性皮膚炎の予防若しくは改善作用を奏する物質をアトピー性皮膚炎の予防又は改善剤として選択する、アトピー性皮膚炎の予防若しくは改善剤のスクリーニング方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、アトピー性皮膚炎に関係する肌状態の評価方法、及びアトピー性皮膚炎に関係する肌状態の評価システムに関する。
【背景技術】
【０００２】
アトピー性皮膚炎の発症の有無や重症度などの皮膚の健康状態は、皮膚の目視観察や皮膚表面の画像解析によりある程度の評価ができる。また、皮膚の角層を構成する脂質成分の分析によって、被験者の健康の現状を評価し、今後の皮膚の健康状態を予測し、将来的に起こり得る皮膚疾患を予測することが提案されている（特許文献１参照）。
【０００３】
現在、アトピー性皮膚炎の重症度を客観的に判断することができる方法として、血中のＴＡＲＣ(thymus and activation-regulated chemokine)値を指標とする検査法が用いられている。ＴＡＲＣはケモカインの一種である。ＴＡＲＣによりＴｈ２細胞が病変局所に誘引されアレルギー反応を亢進させることで、アトピー性皮膚炎の病態形成に関与し、症状を憎悪させると考えられている。アトピー性皮膚炎の重症度スコアが高ければ血中ＴＡＲＣ値が高くなることが知られており、皮膚外用剤等の使用によりアトピー性皮膚炎の症状がおさまってくると、血中ＴＡＲＣ値は低くなる（非特許文献１参照）。
しかしながら、血中のＴＡＲＣ値を指標とする検査法は採血を必要とするため、侵襲的な方法である。さらに、結果が出るまでに時間を要するなどの課題がある。
【０００４】
ヒトの健康状態を評価する指標として、皮膚ガスが注目されている。皮膚ガスとは、皮膚表面から揮散、放出され、低分子有機化合物や無機化合物などを構成成分とする、生命活動に伴い産生されるガスである。皮膚ガスの採取は非侵襲的であり簡便であることから、健康状態を評価する指標としての皮膚ガスは、ヘルスケア領域や医療領域での診断技術への応用が期待されている。例えば、体脂肪の燃焼状態を評価するために、皮膚ガスに含まれるアセトンの濃度を測定することが提案されている（特許文献２及び３参照）。さらに、パーキンソン病の早期診断を行うために、皮膚ガス中のベンジルアルコールと安息香酸エステルの比を測定することも提案されている（特許文献４参照）。
しかし、皮膚ガスについての研究はまだ歴史が浅く、基礎的な研究もあまりなされていないのが現状である。特に、皮膚ガスと皮膚性状との関連性に関してはほとんど報告がされていない。
【先行技術文献】
【特許文献】
【０００５】
【特許文献１】国際公開第２０１７／１６８９０２号
【特許文献２】国際公開第２０１３／０３８９５９号
【特許文献３】特開２０１４−１００４６号公報
【特許文献４】特開２０１５-５５６２０号公報
【非特許文献】
【０００６】
【非特許文献１】Journal of Allergy and Clinical Immunology, 2001, vol. 107(3), pp. 535-541
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００７】
本発明は、アトピー性皮膚炎に関係する肌状態を非侵襲的に、簡便かつ的確に評価する、アトピー性皮膚炎に関係する肌状態の評価方法の提供を課題とする。
また本発明は、アトピー性皮膚炎に関係する肌状態を非侵襲的に、簡便かつ的確に評価することができ、前記のアトピー性皮膚炎に関係する肌状態の評価方法に好適に用いることができる、アトピー性皮膚炎に関係する肌状態の評価システムの提供を課題とする。
【課題を解決するための手段】
【０００８】
本発明者は、上記課題に鑑み鋭意検討を行った。具体的には、皮膚表面から揮散、放出される皮膚ガスに着目し、ヒトの皮膚の肌の健康状態を示す指標としての検討を行った。その結果、皮膚ガスに含まれる各種低分子有機化合物及び無機化合物のうち、アセトンがアトピー性皮膚炎との相関性が高いことを見出した。そして、皮膚ガス中のアセトン量を指標とすることで、アトピー性皮膚炎に係る肌状態を非侵襲的に、簡便かつ的確に評価できることを見出した。
本発明はこれらの知見に基づき完成されるに至ったものである。
【０００９】
本発明は、被験体の皮膚表面から揮散するガス中のアセトン量を指標として、被験体のアトピー性皮膚炎に関係する肌状態を評価する、アトピー性皮膚炎に関係する肌状態の評価方法に関する。
さらに本発明は、被験体の皮膚表面から揮散するガス中のアセトン量を測定する、測定手段と、測定したアセトン量を指標として、被験体のアトピー性皮膚炎に関係する肌状態を評価する、演算手段、とを備えた、アトピー性皮膚炎に関係する肌状態の評価システムに関する。
【発明の効果】
【００１０】
本発明の肌状態の評価方法によれば、アトピー性皮膚炎に関係する肌状態を非侵襲的に、簡便かつ的確に評価することができる。
また本発明の肌状態の評価システムによれば、アトピー性皮膚炎に関係する肌状態を非侵襲的に、簡便かつ的確に評価することができ、前記の肌状態の評価方法に好適に用いることができる。
【図面の簡単な説明】
【００１１】
【図１】図１（Ａ）は、本発明の実施態様を説明するフローチャートである。図１（Ｂ）は、本発明の好ましい実施態様を説明するフローチャートである。
【図２】皮膚ガス中のアセトンの相対濃度を、健常者群とアトピー性皮膚炎患者群との間で比較した結果を示すグラフである。
【図３】皮膚ガス中のアセトンの相対濃度と血中TARC値との相関性を示すグラフである。
【発明を実施するための形態】
【００１２】
本発明のアトピー性皮膚炎に関係する肌状態の評価方法は、図１（Ａ）に示すように、被験体の皮膚表面から揮散するガス（以下、「皮膚ガス」ともいう）に含まれるアセトン量を測定し（S1）、測定したアセトン量を指標として、被験体のアトピー性皮膚炎に関係する肌状態を評価する（S2）。本発明では、アトピー性皮膚炎に関係する肌状態を評価するための指標とする成分量を、皮膚ガスから測定するので、アトピー性皮膚炎に関係する肌状態を非侵襲的にかつ簡便に評価できる。さらに、皮膚ガスに含まれる各種低分子有機化合物及び無機化合物のうち、特定成分を指標とすることで、アトピー性皮膚炎に関係する肌状態を的確に評価することができる。
また後述する本発明のアトピー性皮膚炎に関係する肌状態の評価システムは、前記のアトピー性皮膚炎に関係する肌状態の評価方法に好適に用いることができる。
尚、本発明の方法及びシステムを適用することができる被験体としては、ヒト、及びヒト以外の哺乳動物が挙げられる。このうち、ヒトのアトピー性皮膚炎に関係する肌状態を評価するために適用することが好ましい。
【００１３】
本明細書において「アトピー性皮膚炎に関係する肌状態を評価する」とは、アトピー性皮膚炎の発症の有無、アトピー性皮膚炎の発症の可能性、アトピー性皮膚炎の予防の状態、アトピー性皮膚炎の進行度若しくは重症度、局所におけるアトピー性皮膚炎の進行度若しくは重症度、アトピー性皮膚炎の悪化の予兆、アトピー性皮膚炎の傾向（素因）の有無、アトピー性皮膚炎の治癒状況、アトピー性皮膚炎に対する治療効果等、アトピー性皮膚炎に関係する肌の状態を評価、判定若しくは予測することを言う。
【００１４】
アセトン量の測定を容易に行うために、皮膚ガスを採取し（S0）、採取した皮膚ガスに含まれるアセトン量を測定することが好ましい（図１（Ｂ）参照）。
皮膚ガスの採取は常法に従い行うことができる。例えば、皮膚ガスを採取する部位を密閉空間で覆い、皮膚表面から揮散する皮膚ガスを該空間内の空気と共に回収することにより採取される。例えば、市販の皮膚ガス採取キット（皮膚ガス自動サンプリング装置、皮膚ガス採取用バッグ等を含む）を用いて皮膚ガスを採取することができる。あるいは、特開２０１０−１４８６９２号公報、特開２０１４−１００４６号公報に記載の方法に従い、皮膚ガスを採取することができる。
皮膚ガスを採取する部位としては、体表面であれば特に限定されないが、具体的には、額や頬等の顔面部や頸部、手掌部、肘部、上腕部、体幹部、下肢、膝等が挙げられ、これらの部位から評価の目的応じて、適宜採取部位を選択すれば良い。これら部位のうち、アトピー症状の実態が把握し易く、且つ皮膚ガスの採取が容易であるという観点から、頬部、手掌部、肘部、膝部が好ましく、手掌部、肘部がさらに好ましい。
皮膚ガスを採取する時間については、短いと十分なアセトンが採取できず正確な測定ができず、長いと被験者の負担となってしまうという観点から、５分以上が好ましく、１０分以上がさらに好ましい。また３０分以下が好ましく、２０分以下がさらに好ましい。
【００１５】
本発明において、皮膚ガスを採取する部位とアトピー性皮膚炎に関係する肌状態を評価する部位とが同じであることが好ましい。したがって、アトピー性皮膚炎に関係する肌状態を評価したい部位又はその近傍部位から、皮膚ガスを採取することが好ましい。
具体的な皮膚ガスの採取部位としては、アトピー性皮膚炎の発症部位（以下、「皮疹部」ともいう）やアトピー性皮膚炎の症状が見られない部位（以下、「無疹部」ともいう）、並びに皮疹部に隣接した無疹部などが挙げられる。また、アトピー性皮膚炎を発症していない健常者の皮膚（以下、「健常部」ともいう）を採取部位とすることも可能である。これらの皮膚部位から皮膚ガスを採取することにより、アトピー性皮膚炎に関係する肌状態（発症の有無、発症の可能性、病態の進行度、治癒の程度や治療効果など）が判定若しくは予測できる。またアトピー性皮膚炎を発症していない健常者における素因（アトピー性皮膚炎の傾向）の解析が、遺伝子解析や血中成分の分析を行わなくても予測でき、健常者においてアトピー性皮膚炎の発症の可能性や予防の状態が簡便に判断できる。
【００１６】
皮膚ガス中のアセトン量を測定する方法は、常法から適宜選択することができる。例えば、ガスクロマトグラフなどの市販のガス成分検出装置を用いて、アセトンを分離しアセトン量を測定することができる。あるいは、特開２０１０−１４８６９２号公報（ガスセンサーを用いた測定方法）、特開２０１４−１００４６号公報に記載の方法に従い、アセトン量を測定することができる。
本発明において、測定したアセトン量から、採取した皮膚ガス中のアセトン濃度に換算してもよい。アセトン濃度に換算した数値を指標とすることで、被験体のアトピー性皮膚炎に関係する肌状態を客観的に評価することができる。
【００１７】
本発明において、アトピー性皮膚炎の評価は、測定したアセトンの量と、アトピー性皮膚炎に関係する肌状態との関連づけから予め設定した評価基準に基づいて行うことが好ましい。本発明では、皮膚ガスから測定したアセトンの量若しくは濃度から、前記評価基準に基づき被験体の肌状態を評価する。
【００１８】
評価基準は、以下のように設定することができるが、これに制限するものではない。
評価するアトピー性皮膚炎に関係する肌状態を、目視評価やTARCなどのアトピー性皮膚炎のバイオマーカーなどによる解析、機器分析等の手段により評価する。これとは別途、前述の方法によりアセトン量を算出する。そしてアトピー性皮膚炎に関係する肌状態の評価結果と、アセトン量との相関性に基づき、アトピー性皮膚炎に関係する肌状態を評価するのに適した基準値を決定し、その基準値により評価基準を設定する。
具体的には、予め、評価しようとするアトピー性皮膚炎に関係する肌状態に応じて、２つ以上の群を設け、各群におけるアセトン量の算出値の平均値、標準偏差、標準誤差等の統計学的データから基準値を決定し、肌状態の評価基準を設定すれば良い。例えば、特定の肌状態の群のアセトン量の平均値（Ａ）と標準偏差（ＳＤ）から決定される、Ａ＋ＳＤ、Ａ＋1/2ＳＤ、Ａ＋1/4ＳＤ、Ａ−ＳＤ、Ａ−1/2ＳＤ、及びＡ−1/4ＳＤ等からなる群より選ばれる好適な値を基準値として決定する。そして、基準値よりも実際に測定したアセトン量が大きいか又は小さいかによって特定の肌状態にあるか否か、その可能性が大きいか小さいか等に関する評価基準を設定する。そして、この評価基準に基き、アトピー性皮膚炎に関係する肌状態を評価しようとする被験体におけるアセトン量から、その被験体のアトピー性皮膚炎に関係する肌状態を評価することができる。
評価基準は、アトピー性皮膚炎に関係する肌状態を評価する対象となる被験体や、評価の目的に応じて、人種別毎、性別毎、被験者の年代別毎、被験部位毎に設定することが可能である。
【００１９】
後述の実施例で示すように、皮膚ガスに含まれるアセトン量はアトピー性皮膚炎と高い相関性を示す。また該アセトン量は、アトピー性皮膚炎の重症度の判定マーカーとして一般的に使用される血中ＴＡＲＣ量と高い相関性を示す。
したがって、皮膚ガスに含まれるアセトン量はアトピー性皮膚炎に関係する肌状態を評価するための指標となり、これを測定することにより簡便かつ的確にアトピー性皮膚炎に関係する肌状態を評価することができる。さらに本発明のアトピー性皮膚炎に関係する肌状態の評価方法によれば、皮膚外用剤の塗布試験や、何らかの機能性食品や医薬品、医薬部外品の摂取試験等において、これらの被験物質の塗布又は摂取によって生じる皮膚ガスにおけるアセトン量を測定することにより、その被験物質のアトピー性皮膚炎の予防若しくは改善、肌質の改善に対する有効性を判断することができる。さらに、本発明の評価方法若しくは評価システムを利用することで、アトピー性皮膚炎の予防又は改善剤をスクリーニングすることができる。また、複数のアトピー性皮膚炎の予防又は改善剤や予防又は改善が見込まれる剤に関して、その有効性を比較・評価するために、本発明の評価方法若しくは評価システムを利用することができる。
本明細書において「予防」とは、個体における疾患若しくは症状の発症の防止若しくは遅延、又は個体の疾患若しくは症状の発症の危険性を低下させることをいう。また、本明細書において「改善」とは、疾患、症状若しくは肌質状態の好転若しくは緩和、疾患、症状若しくは肌質状態の悪化の防止若しくは遅延、又は疾患、症状若しくは肌質状態の進行の逆転、防止若しくは遅延をいう。
【００２０】
本発明のアトピー性皮膚炎に関係する肌状態の評価システムは、被験体の皮膚ガスに含まれるアセトン量を測定する測定手段と、測定したアセトン量を指標として、被験体のアトピー性皮膚炎に関係する肌状態を評価する、演算手段とを備える。
アセトン量の測定手段の詳細については、前述のアセトン量の測定方法で説明したとおりである。
また、前記演算手段には、皮膚ガスに含まれるアセトン量の情報と、アトピー性皮膚炎に関係する肌状態とを関連づけたデータベースが格納されていることが好ましい。そこで、算出したアセトン量から、前記データベースに格納された関連付けに基づいて、評価対象となる被験体のアトピー性皮膚炎に関係する肌状態を評価する。前記演算手段には、前述の評価基準が設定されていることが好ましい。
本発明のシステムはいわゆるコンピュータであり、例えば、バスで相互に接続される、ＣＰＵ（Central Processing Unit）、メモリ、入出力インタフェース等を有する。メモリは、ＲＡＭ（Random Access Memory）、ＲＯＭ（Read Only Memory）、ハードディスク、可搬型記憶媒体等である。入出力インタフェースは、表示装置や入力装置等のようなユーザインタフェース装置と接続される。入出力インタフェースは、ネットワークを介して他のコンピュータと通信を行う通信装置等と接続されてもよい。
【００２１】
本発明のシステムは、皮膚ガスを採取するガス採取手段を備え、前記測定手段がガス採取手段により採取した皮膚ガスに含まれるアセトン量を測定することが好ましい。さらに、前記演算手段が、測定手段が算出したアセトン量を指標として、被験体のアトピー性皮膚炎に関係する肌状態を評価することが好ましい。
【００２２】
上述した実施形態に関し、本発明はさらに以下のアトピー性皮膚炎に関係する肌状態の評価方法、アトピー性皮膚炎に関係する肌状態の評価システム、及びアトピー性皮膚炎の予防若しくは改善剤のスクリーニング方法を開示する。
【００２３】
＜１＞被験体の皮膚表面から揮散するガス中のアセトン量を指標として、被験体のアトピー性皮膚炎に関係する肌状態を評価する、アトピー性皮膚炎に関係する肌状態の評価方法。
＜２＞アトピー性皮膚炎に関係する肌状態を評価するために、被験体の皮膚表面から揮散するガスからアセトン量を測定する方法。
【００２４】
＜３＞被験体の皮膚表面（好ましくは額や頬等の顔面部、頸部、手掌部、肘部、上腕部、体幹部、下肢又は膝、より好ましくは頬部、手掌部、肘部又は膝部、さらに好ましくは手掌部又は肘部）から揮散するガスを、好ましくは５分以上、より好ましくは１０分以上、好ましくは３０分以下、より好ましくは２０分以下、採取し、採取したガスに含まれるアセトン量を測定する、前記＜１＞又は＜２＞項に記載の方法。
＜４＞採取したガス中のアセトン量をアセトン濃度に換算し、アセトン濃度を前記指標とする、前記＜３＞項に記載の方法。
＜５＞評価しようとするアトピー性皮膚炎に関係する肌状態に応じて２つ以上の群を設け、各群におけるアセトン量の統計学的データから基準値を決定して肌状態の評価基準を設定し、評価基準に基き被験体におけるアセトン量から被験体のアトピー性皮膚炎に関係する肌状態を評価する、前記＜１＞〜＜４＞のいずれか１項に記載の方法。
【００２５】
＜６＞被験体の皮膚表面から揮散するガス中のアセトン量を測定する、測定手段と、
測定したアセトン量を指標として、被験体のアトピー性皮膚炎に関係する肌状態を評価する、演算手段、
とを備えた、アトピー性皮膚炎に関係する肌状態の評価システム。
【００２６】
＜７＞被験体の皮膚表面から揮散するガスを採取する、ガス採取手段を備え、
前記測定手段が、ガス採取手段により採取したガスに含まれるアセトン量を測定する、
前記＜６＞項に記載のシステム。
＜８＞前記測定手段が、採取したガス中のアセトン量をアセトンに換算する、前記＜７＞項に記載のシステム。
＜９＞前記演算手段において、評価しようとするアトピー性皮膚炎に関係する肌状態に応じて設けた２つ以上の各群に対して、アセトン量の統計学的データから決定した基準値に基づく肌状態の評価基準が設定されており、評価基準に基き被験体におけるアセトン量から被験体のアトピー性皮膚炎に関係する肌状態を評価する、前記＜６＞〜＜８＞のいずれか１項に記載のシステム。
【００２７】
＜１０＞アトピー性皮膚炎に関係する肌状態として、アトピー性皮膚炎の発症の有無、アトピー性皮膚炎の発症の可能性、アトピー性皮膚炎の予防の状態、アトピー性皮膚炎の進行度若しくは重症度、局所におけるアトピー性皮膚炎の進行度若しくは重症度、アトピー性皮膚炎の悪化の予兆、アトピー性皮膚炎の傾向（素因）の有無、アトピー性皮膚炎の治癒状況、又はアトピー性皮膚炎に対する治療効果を評価若しくは予測する、前記＜１＞〜＜９＞のいずれか１項に記載の方法又はシステム。
＜１１＞ヒト又はヒト以外の哺乳動物のアトピー性皮膚炎を評価するための、前記＜１＞〜＜１０＞のいずれか１項に記載の方法又はシステム。
＜１２＞アトピー性皮膚炎の皮疹部、アトピー性皮膚炎の無疹部、アトピー性皮膚炎の皮疹部に隣接した無疹部、又はアトピー性皮膚炎を発症していない被験体の健常部から、皮膚表面から揮散するガスを採取する、前記＜１＞〜＜１１＞のいずれか１項に記載の方法又はシステム。
【００２８】
＜１３＞アトピー性皮膚炎の予防若しくは改善剤の候補となる物質を被験体の皮膚に適用し、前記＜１＞〜＜１２＞のいずれか１項に記載の方法を実施して、又はシステムを利用して、アトピー性皮膚炎の予防若しくは改善剤の候補となる物質の適用前後での皮膚の肌状態の変化を確認し、アトピー性皮膚炎の予防若しくは改善作用を奏する物質をアトピー性皮膚炎の予防又は改善剤として選択する、アトピー性皮膚炎の予防若しくは改善剤のスクリーニング方法。
【実施例】
【００２９】
以下、本発明を実施例に基づきさらに詳細に説明するが、本発明はこれに限定されるものではない。
【００３０】
（アトピー性皮膚炎と皮膚ガス中のアセトン量との相関性）
（１）被験者
アトピー性皮膚炎の治療のためにステロイド外用剤を使用している軽症から重症のアトピー性皮膚炎患者27名（25〜48歳）、並びにその年齢に対応する健常ボランティア15名（29〜49歳）。
【００３１】
（２）皮膚ガスの採取
筒状に細工した皮膚ガス採取用バッグ（PD-01  ピコデバイス社製）に被験者の腕を通して装着し、肘部の上下部分にパラフィルム（PF-2  Bemis社製）を巻いて固定することにより、密閉空間とした。密閉後、クリーンガス（純空気G3グレード 太陽日酸社製）100mLを注入及び回収することにより、バッグ内の空気を洗浄した。バッグ内の洗浄を2回行い、陰圧にしてバッグ内の空気を完全に除去した後、皮膚ガス採取用のクリーンガス100mLを注入し、10分間放置して皮膚ガスを採集した。
10分後、採集した皮膚ガスをクリーンガスと共に回収して別の分析用バッグに移し、分析に用いた。
【００３２】
（３）皮膚ガス中のアセトン量の分析
皮膚ガス中のアセトン量の分析は、低温濃縮装置（NIT-P型、ピコデバイス社製）を接続したGC/MS（GCMS-QP2010  島津製作所製）を用いて実施した。
分析前に試料サンプルの入った分析用バッグを3分間、50℃にて加温した後、サンプル25mLを分析装置に注入した。カラムはDB-WAXETR（長さ30m、内径0.32mm、膜厚1μm、Agilent Technology社製）を使用し、濃縮時のトラップ温度は-100℃、カラムへの注入温度は100℃とした。初期のカラム温度を40℃で3分間に設定し、その後8分間にわたり、1分間毎に20℃ずつ、200℃にまで上昇させ、その後6分間その温度を維持し、測定を行った。キャリアガスにはヘリウムを使用し、流量は1.71mL/minとした。
得られたクロマトグラフよりピーク面積を算出し、算出したピーク面積を皮膚から採取したアセトンの相対濃度とした。
【００３３】
（４）血液の採取
医師により、各被験者の正中皮静脈若しくはそれ以外の適切な部位から採血した。採血量は1回につき5mL（血液分離用採血管5mLを1本）とした。採血した血液から血清を分離し、TARC値の分析に供した。
【００３４】
（５）TARC値の定量
採血により得られた血清から、Human CCL17/TARC Quantikine ELISA Kit（R&D systems社製）を用いてTARC値を定量した。
【００３５】
（６）健常者とアトピー性皮膚炎患者との、皮膚ガス中のアセトン量の比較
皮膚ガスの分析により算出した皮膚アセトンガスの相対濃度を、健常者群とアトピー性皮膚炎患者群（以下、「ＡＤ群」ともいう）との２群で比較した。Mann-whitney のU検定を実施し、p値が0.05未満のものを有意であると判定した。
その結果を図２に示す。
【００３６】
図２に示すように、ＡＤ群では健常者群と比べて、皮膚ガス中のアセトンの相対濃度が有意に高かった。
このように、皮膚ガス中のアセトンの相対濃度について、健常者とアトピー性皮膚炎患者との間で顕著な差が認められた。
【００３７】
（７）皮膚ガス中のアセトンの相対濃度と血中TARC値との相関係数の算出
皮膚ガスの分析により算出したアセトンの相対濃度と、血中TARC値との間で、Spearmanの順位相関係数を算出した。なお、p値が0.05未満のものを有意であると判定した。
その結果を図３に示す。
【００３８】
図３に示すように、アトピー性皮膚炎患者において、皮膚ガス中のアセトンの相対濃度と、アトピー性皮膚炎重症度マーカーとして既知である血中TARC値との間に、有意な相関性が認められた。
【００３９】
以上のように、皮膚ガスに含まれるアセトン量を測定し、測定したアセトン量を指標とすることで、アトピー性皮膚炎に関係する肌状態を非侵襲的に、簡便かつ的確に評価することができる。
また、皮膚ガス成分の変化を捉えることで、皮膚の内部で起こっている変化を把握することができる。よって、本発明によれば、現在表れているアトピー性皮膚炎に関係する肌状態だけではなく、将来起こりうるアトピー性皮膚炎の症状の表在化を予測することもできる。
【図１】
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【図２】
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【図３】
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