(57)【要約】      （修正有）【課題】それを必要とするヒト対象における毛髪の成長を促進するための組成物の提供。【解決手段】育毛促進剤を含んでおり、前記ヒト対象の頭皮の領域の外皮攪乱（ｉｎｔｅｇｕｍｅｎｔａｌ  ｐｅｒｔｕｒｂａｔｉｏｎ）との組み合わせにおいて投与されるためのものであって、当該外皮攪乱が極微針を用いて行われ、前記外皮攪乱が、５００μｍ〜３ｍｍの皮膚の深さまでであることを特徴とする組成物。【選択図】図１
2019131558.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
それを必要とするヒト対象における毛髪の成長を促進するための組成物であって、育毛促進剤を含んでおり、
前記ヒト対象の頭皮の領域の外皮攪乱（ｉｎｔｅｇｕｍｅｎｔａｌ  ｐｅｒｔｕｒｂａｔｉｏｎ）との組み合わせにおいて投与されるためのものであって、当該外皮攪乱が極微針を用いて行われ、
前記外皮攪乱が、５００μｍ〜３ｍｍの皮膚の深さまでであることを特徴とする組成物
。
【発明の詳細な説明】
【発明の詳細な説明】
【０００１】
本出願は、２０１０年１２月６日に出願された米国仮特許出願第６１／４２０，２８２号、２０１１年３月１７日に出願された米国仮特許出願第６１／４５３，９１９号、２０１１年３月１７日に出願された米国仮特許出願第６１／４５３，９０２号、２０１１年４月２５日に出願された米国仮特許出願第６１／４７８，６８９号、および２０１１年８月１日に出願された米国仮特許出願第６１／５１３，９０６号への優先権を主張し、これらのそれぞれの全内容は、参照によってその全体が本明細書に組み込まれる。
〔技術分野〕
１．前書き
本発明は、対象（例えばヒト）の皮膚の領域を外皮攪乱（ｉｎｔｅｇｕｍｅｎｔａｌ  ｐｅｒｔｕｒｂａｔｉｏｎ）に供することによって、前記皮膚領域上の禿頭症を治療する、脱毛症を治療する、毛髪の成長を促進する、ならびに／あるいは毛包の成長、および／または活性化を促進する方法に関する。外皮攪乱は、毛髪の成長を促進するための他の処置と組み合わせて使用することができる。本発明は、毛髪の成長を促進するための外皮攪乱用装置を提供し、また毛髪の成長を促進するために外皮攪乱と組み合わせて用いる薬学的組成物を提供する。
〔背景技術〕
２．
成人ヒトの皮膚は、本質的に毛包で覆われ、約５００万の毛包を含み、約１００，０００〜１５０，０００が頭皮を覆っている。目に見える毛髪のないヒトの皮膚の部分は、ほとんどの部分については「軟毛」を生成する毛包を含むが、一方ある特定の他の毛包は、毛髪を含まないか、または生成し得ない（図１を参照）。本質的に、手および足のそれぞれ、手掌側および足底面上の無毛皮膚、ならびに唇および陰唇のみが毛包を欠く。少数のヒト毛包のみが、容易に視認され得る毛髪繊維（「硬毛」）を生成し、これらの特殊化した毛包は皮膚の特定の領域上に局在し、正常な頭皮では、硬毛の毛包は、典型的には、７：１で軟毛の毛包の数を上回る。したがって、ヒトの非無毛皮膚上の目に見える毛髪の存在および不在は共に、特殊化した毛包の活性の調整によって媒介される。
【０００２】
毛包、特に、ヒト毛包は、それぞれがいくつかの異なる特殊化した細胞からなる異なる構成要素からなる腺窩構造体である（図２および３を参照）。毛幹を生成および固定することに関連する細胞および構造体に加えて、毛包の大部分は、皮脂腺（皮脂を生成する）と呼ばれる単位を含有する。いくつかの毛包は、それらに付着したアポクリン腺を有し、腋窩および身体の他の特定部位に位置している。
【０００３】
毛幹に加えて、毛包構造体は、毛包乳頭（ＦＰ）および胚芽上皮（ＧＥ）（一緒に、毛球部）を含む。ＦＰは、間葉細胞（および結合組織）からなる。毛包の他の細胞は、上皮であり、外毛根鞘（ＯＲＳ）、付随層（ＣＬ）、内毛根鞘のヘンレ層（Ｈｅ）、内毛根鞘のハックスレー層（Ｈｕ）、内毛根鞘小皮（Ｃｓｔｈ）、毛幹小皮（Ｃｓｆｔ）、毛幹外皮、および毛幹髄質（Ｍｅｄ）を含む少なくとも８つの細胞家系を含む（Ｓｔｅｎｎ  ＆
Ｐａｕｓ，２００１，Ｐｈｙｓｉｏｌ．Ｒｅｖｓ．８１：４４９−４９４）。（図２〜４も参照のこと）。
【０００４】
ヒトにおける頭皮の毛髪およびある他の毛髪は、毛包単位において成長する傾向がある。頭皮の毛髪の毛包単位は、一般に、２〜４本の硬毛の毛包、１本、稀に、２本の軟毛の毛包、それらの関連した皮脂腺、神経血管叢、起毛筋（ｅｒｅｃｔｏｒ  ｐｉｌｏｒｕｍ）、および「毛包周囲（ｐｅｒｉｆｏｌｌｉｃｕｌｕｍ）」と称される外膜コラーゲンの円周帯からなる（Ｈｅａｄｉｎｇｔｏｎ  ＪＴ，１９８４，Ａｒｃｈ．Ｄｅｒｍａｔｏｌ．１２０：４４９−４５６、Ｂｅｒｎｓｔｅｉｎ  ＲＭ，２００５，“Ｆｏｌｌｉｃｕｌａｒ  Ｕｎｉｔ  Ｈａｉｒ  Ｔｒａｎｓｐｌａｎｔａｔｉｏｎ，”Ｃｈ．３４  ｉｎ  Ｓｕｒｇｅｒｙ  ｏｆ  ｔｈｅ  Ｓｋｉｎ，Ｒｏｂｉｎｓｏｎ  ｅｔ  ａｌ．，ｅｄｓ．，Ｓｔ．Ｌｏｕｉｓ：Ｍｏｓｂｙ，ｐｐ．５４９−５７４）。
【０００５】
毛包は、毛包が、毛髪の生成、抜け毛（放出）、退行、および新しい成長のサイクルを経て進行するとき、毛包の寿命にわたって約２０本の個々の毛幹を生成すると考えられている。毛髪の成長の調整および毛包の再生は、ネズミ系において調査されている。しかしながら、マウスにおける毛包の生物学は、いくつかの重要な局面においてヒトのものとは異なる。マウスでは、厚い毛のコーティングが、健康的な生活には不可欠なものである（毛髪が体温調節および他の機能における役割を果たすため）。マウス皮膚は、硬毛（毛皮）を生成する毛包で覆われているが、一方、ヒト皮膚の重要な領域は、ほとんど見えないか、または目にすら見えない軟毛を生成する毛包で覆われている。マウスおよび他の非霊長類哺乳動物は、若年期において、同期の毛包サイクルを有するが、毛包サイクルが年齢と共にあまり同期しなくなる。ヒト毛包は、非同期様式で、毛包サイクルを経て進行する。成人ヒト頭皮における、任意の特定の期間で、約８０〜９０％が成長期であり、１０〜２０％が退行期、および１〜２％が休止期である。マウスがある特殊化した毛包（例えば、ひげ、ガード（ｇｕａｒｄ）、錐状（ａｗｌ）、オーヘン（ａｕｃｈｅｎｅ）、およびジグザグ（ｚｉｇｚａｇ）毛）を有するが、マウス毛包は、通常、発育上および性特異的な毛髪パターニングには従っていない。対照的に、著しい数のヒト毛包が、発育および老化の異なる時期に、性特異的な様式で生成された毛幹の種類、長さ、および色に影響を及ぼす振り付けられた毛髪パターニングに個々に寄与する。
【０００６】
２．１  毛包の形態形成および再生
毛包形成は一生に一度（子宮内で）生じ、そのため、哺乳動物、および特にヒトは、定数の毛包を持って生まれ、毛包は、通常、その後増加しないと考えられている。胎児の毛包を再現するための成熟哺乳動物の皮膚の再生能の提案にもかかわらず、最近まで、毛包新生は、発生または毛包新生を示すために必要とされるツールの欠如により証明されなかった（Ａｒｇｙｒｉｓ  ｅｔ  ａｌ．，１９５９，Ｄｅｖ．Ｂｉｏｌ．１：２６９−８０、Ｍｉｌｌｅｒ，１９７３，Ｊ．Ｉｎｖｅｓｔ．Ｄｅｒｍａｔｏｌ．５８：１−９、およびＫｌｉｇｍａｎ，１９５９，Ａｎｎ  ＮＹ  Ａｃａｄ  Ｓｃｉ  ８３：５０７−５１１を参照）。
【０００７】
しかしながら、毛包新生が動物（例えば、ウサギ、マウス）における創傷治癒に関与し得ることが提案されている。Ｓｔｅｎｎ  ＆  Ｐａｕｓ，２００１，Ｐｈｙｓｉｏｌ．Ｒｅｖｓ．８１：４４９−４９４を参照されたい。より最近では、一連のマウス実験により、毛包由来の上皮幹細胞の前駆細胞が、毛包から移動し、傷ついた皮膚の再上皮化に寄与することを確実に示した（Ｍｏｒｒｉｓ  ｅｔ  ａｌ．，２００４，Ｎａｔｕｒｅ  Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ  ２２：４１１−４１７、Ｉｔｏ  ｅｔ  ａｌ．，２００４，Ｄｉｆｆｅｒｅｎｔｉａｔｉｏｎ  ７２：５４８−５７、およびＩｔｏ  ｅｔ  ａｌ．，２００５，Ｎａｔｕｒｅ  Ｍｅｄｉｃｉｎｅ  １１：１３５１−１３５４を参照されたい）。毛包発生におけるＷｎｔの役割を研究するために設計された動物研究において、Ｆａｔｈｋｅは、マウスにおける創傷治癒中のＷｎｔシグナル伝達の持続的活性化が、毛包の基盤の生成をもたらしたが、毛包の形成またはさらなる毛髪の成長をもたらさなかったことを示した（Ｆａｔｈｋｅ  ｅｔ  ａｌ．，２００６，ＢＭＣ  Ｃｅｌｌ  Ｂｉｏｌ．７：４）。
【０００８】
Ｆａｔｈｋｅが述べたように、全層創傷後の成熟哺乳動物における皮膚修復は、瘢痕組織をもたらし、毛包の再生能力の喪失に至ることが理解されている。重度の創傷および火傷は、通常、瘢痕組織、および毛包がない状態をもたらす形態の皮膚修復を伴う（Ｆａｔｈｋｅ  ｅｔ  ａｌ．，２００６，ＢＭＣ  Ｃｅｌｌ  Ｂｉｏｌ．７：４を参照）。しかしながら、マウス実験において、Ｃｏｔｓａｒｅｌｉｓは、皮膚および既存の毛包を、ある確定された様式で物理的に攪乱することによって、毛包新生をもたらすことができることを示した（Ｉｔｏ  ｅｔ  ａｌ．，２００７，Ｎａｔｕｒｅ  ４４７：３１６−３２１）。Ｃｏｔｓａｒｅｌｉｓは、マウスにおける全層切除（ＦＴＥ）によって作られた大きな治癒した創傷（１ｃｍ２の正方形の創傷）が閉じた後、新しい毛髪が創傷の中央に形成されたことを示した（Ｉｔｏ  ｅｔ  ａｌ．，２００７，Ｎａｔｕｒｅ  ４４７：３１６−３２１）。（Ａｒｇｙｒｉｓ，１９７６，Ａｍｅｒ  Ｊ  Ｐａｔｈｏｌ  ８３：３２９−３３８）。ヒトでは、顔面皮膚の真皮のほぼ半分の約２ｍｍの深さまで削ることによる削皮術が行われ、軟毛毛包の形成が確認された（Ｋｌｉｇｍａｎ，１９５６，Ｊ  Ｉｎｖｅｓｔ  Ｄｅｒｍａｔｏｌ  ２７：１９−２３）。これらの所見は、脱毛の治療のための臨床的レジメンに生かされていない。
【０００９】
他の前臨床試験は、皮膚が胚期の状態に戻る上皮の攪乱後の治療域を特定しており、化合物の添加によって皮膚および毛包の表現型を操作することができる。例えば、創傷後の新しい毛髪形が予め定められないため、毛包の形成に関連する制御経路（例えばＷｎｔ、ＥＧＦＲ）は、例えば、毛包の数および大きさを増加させるために、劇的な影響を及ぼすことができる。Ｉｔｏ  ｅｔ  ａｌ．Ｎａｔｕｒｅ．２００７；４４７（７１４２）：３１６−３２０、Ｆａｔｈｋｅ  ｅｔ  ａｌ．ＢＭＣ  Ｃｅｌｌ  Ｂｉｏｌ．２００６；７：４、Ｓｎｉｐｐｅｒｔ  ｅｔ  ａｌ．Ｓｃｉｅｎｃｅ．２０１０；３２７（５９７１）：１３８５−１３８９を参照されたい。
【００１０】
皮膚蘇生および瘢痕修復のために削皮術を行うための電動式装置は、数十年間存在している。その間、電動式回転砥石ホイールの従来の実施形態は、あまり変更されていない。本質的に、電力が削皮ホイールに適用されると、所望の臨床効果が達成されるまで、角質層および表皮、時には真皮の一部を研磨する。Ａｒｇｙｒｉｓ  ＴＳ，Ａｍ  Ｊ  Ｐａｔｈｏｌ．１９７７；８８（３）：５７５−５８２を参照されたい。しかしながら、従来の削皮ユニットは、重大な不利点を有する。例えば、回転ホイールは、毛包の成長治療の一部として薄くなっている毛髪の領域において使用されるとき、重要な課題を示す。具体的には、図５Ａおよび５Ｂで見ることができるように、従来の削皮ホイール２０２は３６０度回転するため、回転ホイール２０２が存在する毛髪２０４を巻き上げて引き抜く傾向がある。また、回転ホイールの回転の慣性が、血液および残屑に移動され、それによって、削皮プロセスによって作られた血液および残屑の飛び散りを生じ、安全性の懸念および視覚的不快感を生じる。さらに、図６で見ることができるように、回転ホイール２０２は、回転方向で追跡および移動または「歩行」する傾向があり、技術者による不十分な全体的な制御をもたらす。さらに、従来の削皮器（ｄｅｒｍａｂｒａｄｅｒ）の軸方向の配向で提供される人間工学は乏しい。図７で見ることができるように、従来の削皮ハンドピース２１０では、臨床医の手が持続的に患者に干渉し、標準的な人間工学から、精妙な器具を保持するには良くない方法であることが分かる。
【００１１】
２．２  ヒト毛パターニングは、特定の特徴を有する異なる毛包型によって媒介される
光顕レベルで、ヒトの皮膚は、本質的には、毛包で覆われている。毛髪が容易に見えないヒト皮膚部分は、ほとんどの部分では、薄く、短い（即ち、長さ２ｍｍ未満および／または直径３０ミクロン未満）、きめ細かいまたは「微毛のある」外観を有し得、しばしば無色である、「軟毛」を生成する毛包を含有する。ある他の毛包は、毛髪を含有し得ないか、または毛髪を生成し得ない。少数のヒト毛包のみが、目に見えるほどに容易に認識され得る毛髪繊維（「硬毛」）を生成し、これらの特殊化した毛包は皮膚の特定の領域上に局在する。別の毛包型は、「皮脂」毛包であり、これは、その発端から、非常に小さい毛幹を有する毛包、非常に大きい皮脂腺、ならびに大きい管および毛穴である。
【００１２】
したがって、ヒト皮膚における目に見える毛髪の存在および不在は共に、特殊化した毛包の活性の調整によって媒介される。
【００１３】
ヒト毛髪パターニングの空間的および時間的様相は、胚形成中の独自の特徴を有する特殊化した毛包の局在によって異なると考えられている。毛包のこの補体は、再生または置換されず一生を通じて維持されるとさらに考えられている。ヒト胎児毛包は、妊娠中、産毛を生成し得る。それは中間のきめ細かく、短く、低色素性であり、一般には、正常分娩時までに抜け落ちる。出産時までに、異なる特殊化した毛包型が、皮膚の特定の領域に位置付けられ、それらはそれぞれ、ヒト個人の一生にわたって毛髪パターニングにおいてプログラム化した役割を果たし、構造的に様々な毛髪型（産毛、軟毛、または硬毛）を生じるか、あるいは性ホルモンまたは他の要因等のあるシグナルに依存する（例えば、産毛は、飢餓または神経性無食欲症および過食症等の摂食障害において、また、生後に、先天性毳毛性多毛症において、後者の場合は、癌と関連する後天性毳毛性多毛症において再現し得る）。
【００１４】
性別がヒト毛髪の特異的なパターニングに関連する。皮膚の特定の領域における目に見える毛髪の成長および消失は、型通りの性的二形パターンにおいて、「第二次性徴」と見なされる。この用語は、「第一次性徴」と称される性器および生殖器官への毛髪パターニング等の「第二次」特徴に関する。胚発育中に必要とされる男性および女性の異なる性器および生殖器官は、思春期および更年期／男性更年期においてさらなる変化を受ける。毛髪の成長および消失に加えて、女性における胸部はまた、第二次性徴と見なされる。
【００１５】
あるヒト毛包は、特定の皮膚領域に向けられ、テストステロンおよびジヒドロテストステロン（「アンドロゲン」）ならびに／またはエストロゲン等の性ホルモンの影響下、胚形成中、特殊化した特徴を展開する。さらに、あるヒト毛包は、思春期、および更年期／男性更年期において性ホルモンによって活性を変化させるように駆り立てられる。
【００１６】
ある程度、ホルモン（アンドロゲンおよびエストロゲン）のこれらの群のいずれかが、ある活性を誘発するまたは他の群の作用を阻害する（即ち、アンドロゲンはエストロゲン作用を阻害し、エストロゲンはアンドロゲン作用を阻害する）役割を果たし得るため、第二次性徴の出現および強度は、アンドロゲンとエストロゲンの比率によって調節されると説明され得る。例えば、アンドロゲンは男性特徴を誘発し、女性特徴を抑制するが、一方、エストロゲンは女性特徴を誘発し、男性特徴を抑制する。本明細書に使用される、男性および女性とは、極度の遺伝的な性的二形性を指し、言及することにより、男性および女性特徴のスペクトルを示す様々な条件および状態（ＸＯ症候群または外因性性ステロイド投与に起因する状態等）を含む。
【００１７】
特殊化したヒト毛包は、活性における量的多様性および質的多様性を有する。例えば、性ステロイドは、胚形成または成人期のいずれかあるいはその両方において毛髪パターニングにおける定性的効果を有する（例えば、男性は、思春期後、硬毛を生成する顎髭の毛包を有するが、女性は、有さない）。男性および女性はまた、性特異的な毛髪パターニングの量の点でも異なる（例えば、女性の脚よりもむしろ男性の脚においてより高密度の脚の毛包が、硬毛を生成する）。また、同性の個人も、量的多様性を示す。例えば、男性の胸部および背部の毛髪は、ほとんど無毛から密集した毛まで、および硬毛を生成する毛包の小さな領域から大きな領域まで範囲として異なる個人において存在する。
【００１８】
性特異的なヒト毛髪パターニングは、特定の毛包の異なる生物学的プログラミングを強調する。男性の頭皮および顔面における比較的近接した異なる毛包は、全く正反対の方法において、アンドロゲン／エストロゲンの高い比率に応答する：アンドロゲン／エストロゲンの高い比率は、男性の口髭／顎髭の皮膚における軟毛から硬毛への変換を誘発する（特に、思春期）が、男性型脱毛症において男性の前頭部／側頭部の頭皮における硬毛から軟毛への変換を誘発する（思春期後、徐々に）。
【００１９】
他の領域におけるアンドロゲン／エストロゲンレベルの効果は、特定の毛包の生物学的プログラミングにおけるさらなる多様性を証明する。後頭部の頭皮における毛包は、アンドロゲン／エストロゲンの高い比率に対して比較的感受性が低い（しかし、後に、より長期のアンドロゲン暴露後、加齢による菲薄化を受ける）。腋窩および恥骨部（肛門性器部）における毛包は、口髭／顎髭の毛包よりもアンドロゲンに対してより感受性が高いように思われ、したがって、腋窩部／恥骨部における硬毛が、（ａ）比較的低いレベルのアンドロゲンを有する女性、（ｂ）顎髭／口髭前の男性の思春期早期、および（ｃ）遺伝子の５−α−レダクターゼタイプＩＩの遺伝子欠陥を有する患者において成長する。
【００２０】
２．２．１  男性型脱毛症
男性型脱毛症（ＭＰＨＬ）は、一種の「アンドロゲン性脱毛症」である。アンドロゲン性脱毛症は、５０歳までに男性のうちの約５０％に生じる遺伝子的に媒介された障害である（Ｓｔｏｕｇｈ  ｅｔ  ａｌ，２００５の概説を参照）。女性では、この状態の組織学的特徴は、男性におけるものと同じであるが、感受性、発病時の年齢、進行速度、および脱毛パターンは、性別間で異なる（Ｄｉｎｈ  ａｎｄ  Ｓｉｎｃｌａｉｒ，２００７）。
【００２１】
思春期後、男性は、連続である比較的特徴的なパターンで（例えば、Ｈａｍｉｌｔｏｎ
Ｎｏｒｗｏｏｄスケールによって記載される；図８を参照のこと）、頭頂、頭頂部、および前部／頭骨頭頂部領域にわたって頭皮の毛髪を消失し始める。毛髪脱落のプロセスは、毛包が、深さおよび境界線の両方で進行的により小さくなり、生成した毛幹が、より短く、薄くなる、「縮小化」による毛包のレベルで生じる。硬毛と軟毛のような毛髪の比率は、約７：１から２：１未満に軽減され得る。縮小化は、棍毛の毛幹または軟毛の毛幹の割合の増加をもたらす。男性における頭皮の毛髪の消失は、アンドロゲンジヒドロテストステロン（ＤＨＴ）によって導かれるプロセスであることが知られており、これは５−α−レダクターゼＩＩ（テストステロンをＤＨＴに変換する）を阻害するフィナステライドによって阻害され、ある程度、元に戻され得る。ＭＰＨＬの進行した段階では、頭頂部またはこめかみにおける罹患した毛包は、萎縮、または恐らく取り返しがつかないほどに退縮した（「老化した」）と見なされる。これが生じるプロセスは、完全には理解されていない。ある理論は、アンドロゲンが成長期および休止期の段階の長さを変化させ、したがって、約９：１の成長期と休止期の比率の正常比率は、ＭＰＨＬにおいて約２：１以下になり得る。休止期の毛髪は、より緩く固定されており、抜け落ちやすいか、または引き抜かれやすい（例えば、毛髪を梳くまたはブラッシングすることによって）。休止期の終わりに、完全に角化した毛髪である棍毛が生成される。ＭＰＨＬに罹患した領域の毛包はまた、毛包の縮小化も受け、硬毛の毛包の軟毛の毛包になる割合が増大する。さらに、アンドロゲン性脱毛症は、３本以上の硬毛を有する毛包単位のより少ない硬毛を有する毛包単位への漸進的な変換を伴うと考えられる（例えば２本の硬毛を有する単位が１本の硬毛を有する単位に進む）。若い個人に罹患することに加えて、特に、頭部の頂上部の毛髪の菲薄化は、身体においてテストステロンおよびＤＨＴの量が減少しているとき、高齢の個人においても生じ得る。これは、より早期の年齢からのＭＰＨＬの延長であり得るか、または寿命の後期の数十年において始まる場合さえある（即ち、加齢による毛髪の菲薄化）。
【００２２】
ＭＰＨＬは、アンドロゲン受容体であるＥＤＡ２Ｒ遺伝子の特異的多型と関連する。ＩＩ型５−α−レダクターゼが遺伝的に欠けている男性は、ＭＰＨＬを経験しない（Ｊｅｎｋｉｎｓ  ｅｔ  ａｌ．，１９９２，Ｊ  Ｃｌｉｎ  Ｉｎｖｅｓｔ  ８９：２９３−３００を参照のこと）。
【００２３】
いくつかの系列の研究は、男性の前頭頂部および冠状毛包のアンドロゲンへの感受性の機械的な側面を解明している。アンドロゲン活性は、アンドロゲン受容体Ｈｉｃ−５／ＡＲＡ５５への共同因子によって媒介され得る（Ｉｎｕｉ，２００７，Ｊ  Ｉｎｖｅｓｔ  Ｄｅｒｍａｔｏｌ  １２７：２３０２−２３０６）。Ｈｉｃ−５／ＡＲＡ５５  ｍＲＮＡ発現は、顎髭および禿頭の前頭皮からの皮膚乳頭細胞において高かったが、後頭部の頭皮からの細胞においては低かった。別のアンドロゲン受容体コアクチベータであるＡＲＡ７０／ＥＬＥ１により、禿げていない領域よりも禿げている受容領域において皮膚乳頭内のスプライス変異型（ＡＲＡ７０ベータ／ＥＬＥ１ベータ）の発現が減少した（Ｌｅｅ  ｅｔ  ａｌ．，２００５，Ｊ  Ｃｕｔａｎ  Ｐａｔｈｏｌ  ３２：５６７−５７１）。後頭部の毛包において、アンドロゲン媒介の毛髪脱落からこれらの毛包を保護し得る、Ｈｉｃ−５／ＡＲＡ５５遺伝子の増加したメチル化が存在するという証拠がある。Ｃｏｂｂ  ｅｔ  ａｌ．Ｂｒ  Ｊ  Ｄｅｒｍａｔｏｌ．２０１１；１６５（１）：２１０−２１３を参照のこと。
【００２４】
２．２．２  女性型脱毛症
ＭＰＨＬの進行に加えて、男性および女性の両方は、１２歳〜４０歳で始まる「菲薄化」と称される前頭部／頭頂部の頭皮におけるびまん性脱毛症を発症する。集合的に、男性および女性におけるＭＰＨＬおよびびまん性の菲薄化は、「アンドロゲン性脱毛症」と称される。恐らく、女性は、ＭＰＨＬに苦しまず、前頭部の生え際を保持し、びまん性脱毛症が女性にとってより目立ち、かつ問題となるため、恐らく、男性よりも女性が、男性よりも中年で進行的にびまん性の毛髪の菲薄化に気づく（それを訴える）。女性において、菲薄化は、「女性型脱毛症（ＦＰＨＬ）」として知られ、アンドロゲンによって生じ得るか、または悪化し得る（Ｐｒｉｃｅ，２００３，Ｊ．Ｉｎｖｅｓｔｉｇ．Ｄｅｒｍａｔｏｌ．Ｓｙｍｐ．Ｐｒｏｃ．８：２４−２７）。
【００２５】
機構的に、ＦＰＨＬは、最近の研究がケノゲン（ｋｅｎｏｇｅｎ）の延長を見出しているが、成長期の期間の漸減および進行性の毛包の縮小化においてＭＰＨＬといくつかの特徴を共有すると考えられている。ＭＰＨＬと同様に、特に、頭部の頂上部の毛髪の菲薄化は、若い個人に罹患することに加えて、身体においてテストステロンおよびＤＨＴの量が減少しているとき、より年齢の高い個人においても生じ得る。これは、より早い年齢からのＦＰＨＬの延長であり得るか、または寿命の後期の数十年において始まる場合さえあり（即ち、加齢による毛髪の菲薄化）。
【００２６】
２．２．３  瘢痕性脱毛症
瘢痕性脱毛症脱毛症（ｃｉｃａｔｒｉｃｉａｌ  ａｌｏｐｅｃｉａ）としても知られている瘢痕性脱毛症（ｓｃａｒｒｉｎｇ  ａｌｏｐｅｃｉａ）には、一次性瘢痕性脱毛症（ＰＣＡ）および二次性瘢痕性脱毛症が含まれる。一次性瘢痕性脱毛症は、それ以外では健常な全ての年齢の男性および女性における、毛包の永久的な破壊および瘢痕化を生じる多様な毛髪疾患の稀な群を説明する（ｈｔｔｐ：／／ｗｗｗ．ｃａｒｆｉｎｔｌ．ｏｒｇ／ｆａｑ．ｈｔｍｌ；Ｐｒｉｃｅ  ＶＨ，２００６，“Ｔｈｅ  ｍｅｄｉｃａｌ  ｔｒｅａｔｍｅｎｔ  ｏｆ  ｃｉｃａｔｒｉｃｉａｌ  ａｌｏｐｅｃｉａ，”Ｓｅｍｉｎ  Ｃｕｔａｎ  Ｍｅｄ  Ｓｕｒｇ  ２５：５６−９）。ＰＣＡでは、毛包は、皮脂腺および毛包の幹細胞の破壊および繊維状（瘢痕）組織との置換をもたらす毛包を中心とする(ｆｏｌｌｉｃｕｌｏｃｅｎｔｒｉｃ)炎症性攻撃の初期標的である。二次性瘢痕性症は、重症感染症、腫瘍、火傷、または放射線被爆に続く毛包単位の偶発的破壊を説明する。
【００２７】
一次性瘢痕性脱毛症は、永久的な毛髪脱落を生じる少なくとも８つの稀な疾患を示す。これらの疾患の臨床経過は、極めて変動し、予測不可能である。毛髪脱落は、長年にわたってゆっくりと進行し得るか、または数ヶ月以内で急速に生じ得る。かゆみ、疼痛、およびほてりは、しばしば、深刻であり、身体能力を奪う。一次性瘢痕性脱毛症は、現在、頭皮生検の病理組織学的分析によって分類され、この分析は、主にリンパ球性炎症を伴うものを、主に好中球性炎症を伴うものから、および混合浸潤物を有するものから階層的に分ける。リンパ球媒介性ＰＣＡには、毛孔性扁平苔癬（ＬＰＰ）、前頭部硬化性脱毛症（ＦＦＡ）、中央遠心瘢痕性脱毛症（ＣＣＣＡ）、および萎縮性脱毛症（Ｂｒｏｃｑ）が含まれる。好中球媒介性ＰＣＡには、脱毛性毛包炎および房状毛嚢炎が含まれる。混合炎症性浸潤は、解離性蜂巣炎および頭部乳頭状皮膚炎に生じ、これらの両方は、毛包破裂に続発する。
【００２８】
これらの炎症性疾患の病因および発症は、あまり理解さていない（Ｍｉｒｍｉｒａｎｉ
ｅｔ  ａｌ．，２００５，“Ｐｒｉｍａｒｙ  ｃｉｃａｔｒｉｃｉａｌ  ａｌｏｐｅｃｉａ：ｈｉｓｔｏｐａｔｈｏｌｏｇｉｃ  ｆｉｎｄｉｎｇｓ  ｄｏ  ｎｏｔ  ｄｉｓｔｉｎｇｕｉｓｈ  ｃｌｉｎｉｃａｌ  ｖａｒｉａｎｔｓ，”  Ｊ  Ａｍ  Ａｃａｄ  Ｄｅｒｍａｔｏｌ  ５２：６３７−４３を参照のこと）。それらは接触伝染せず、円形脱毛症およびアンドロゲン性脱毛症とは異なって、遺伝しない。ＰＣＡの臨床的特質には、罹患した頭皮に渡る毛包穴の消失、活性の臨床的指標である「引張試験」における固定の緩い成長期の毛髪の存在が含まれる。同様の特性が、マウスの自然発生突然変異株、即ち、アセビア（Ａｓｅｂｉａ）において記載されており（Ｊｏｓｅｆｏｗｉｃｚ  ＆  Ｈａｒｄｙ，１９７８，“Ｔｈｅ  ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ  ｏｆ  ｔｈｅ  ｇｅｎｅ  ａｓｅｂｉａ
ｉｎ  ｔｈｅ  ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ  ｍｏｕｓｅ．Ｉ．Ｅｐｉｄｅｒｍｉｓ  ａｎｄ
ｄｅｒｍｉｓ，”  Ｇｅｎｅｔ  Ｒｅｓ  ３１：５３−６５）、および脱小胞化（ｄｅｆｏｌｌｉｃｕｌａｔｅｄ）（Ｐｏｒｔｅｒ  ｅｔ  ａｌ．，２００２，“Ｄｅｆｏｌｌｉｃｕｌａｔｅｄ  （Ｄｆｌ）：ａ  ｄｏｍｉｎａｎｔ  ｍｏｕｓｅ  ｍｕｔａｔｉｏｎ
ｌｅａｄｉｎｇ  ｔｏ  ｐｏｏｒ  ｓｅｂａｃｅｏｕｓ  ｇｌａｎｄ  ｄｉｆｆｅｒｅｎｔｉａｔｉｏｎ  ａｎｄ  ｔｏｔａｌ  ｅｌｉｍｉｎａｔｉｏｎ  ｏｆ  ｐｅｌａｇｅ
ｆｏｌｌｉｃｌｅｓ，”  Ｊ  Ｉｎｖｅｓｔ  Ｄｅｒｍａｔｏｌ  １１９：３２−３７））、それらの株は形成不全皮脂腺、毛包の破壊、進行性脱毛症、および毛包の繊維性組織による永久置換を伴う。最近、マイクロアレイデータおよび患者の頭皮生検の免疫組織化学分析、他のインビトロ研究、および瘢痕性脱毛症のマウスモデルにおけるトランスジェニック研究を含む証拠の集積は、発現の低下、または特定の転写因子の機能の消失、ペルオキシソーム増殖因子活性化受容体ガンマ（ＰＰＡＲ−γ）が、ペルオキシソームの進行性消失、炎症性脂質の集積、およびＬＰＰ患者における毛嚢脂腺単位を最終的に破壊する炎症細胞の侵入を誘発するという推測を導いている（Ｋａｒｎｉｋ  ｅｔ  ａｌ．，２００９，“Ｈａｉｒ  ｆｏｌｌｉｃｌｅ  ｓｔｅｍ  ｃｅｌｌ−ｓｐｅｃｉｆｉｃ  ＰＰＡＲ−ｇａｍｍａ  ｄｅｌｅｔｉｏｎ  ｃａｕｓｅｓ  ｓｃａｒｒｉｎｇ  ａｌｏｐｅｃｉａ，”  Ｊ  Ｉｎｖｅｓｔ  Ｄｅｒｍａｔｏｌ  １２９（５）：１２４３−１２５７）。
【００２９】
２．２．４  ドナードミナンス
特殊化したヒト毛包の独自の特徴は、皮膚、毛包、または毛包単位を移植するとき、「ドナードミナンス」と称されるドナー部位の特徴を示し続ける（Ｏｒｅｎｔｒｅｉｃｈ  Ｎ，１９５９，Ａｎｎ  ＮＹ  Ａｃａｄ  Ｓｃｉ．８３：４６３−４７９）。この原理は、アンドロゲンで誘発されたＭＰＨＬに影響されない領域（例えば後頭部頭皮）から、アンドロゲンの影響下で特殊化した毛包が軟毛を形成し始めるか、または毛髪の生成を停止している領域（例えば、前頭部／側頭部；頭頂もしくは頭頂部の頭皮）に、頭皮の毛髪（皮膚、毛包、または毛包単位）を移植する、男性において一般的に行われている処置の結果により証明されている。移植した毛包は、それらの元の位置からの、プログラム化した硬毛生成の特徴を保持する。しかしながら、より最近の研究は、被移植部が移植した毛髪のいくつかの特徴に影響を及ぼし得ることを示唆している。Ｈｗａｎｇ  ｅｔ  ａｌ．，２００２，Ｄｅｒｍａｔｏｌ．Ｓｕｒｇ．２８：７９５−７９９を参照のこと。
【００３０】
２．３  ヒト対象における脱毛症のための現在の治療法
ヒト脱毛症は、（１）性特異的毛髪パターニング、（２）病理学的脱毛症、または（３）創傷後の脱毛症に分類することができ、これらは全て、自尊心および自己像への影響と関連し得、多くの個人が彼らの毛髪脱落プロセスを治療することができるかどうか模索している。現在、提供されている治療法は、先在する毛髪を刺激するか、または移植する化学的および外科的アプローチ等の薬剤およびレジメンの限定された選択肢を含む。
【００３１】
化学治療は、あるＭＰＨＬの治療に対する薬物の使用を含む。これらは、例えば、Ｋ＋チャネルを開口させる抗高血圧薬であるミノキシジル（商標名Ｒｏｇａｉｎｅ）；フィナステライド（商標名Ｐｒｏｐｅｃｉａ、Ｐｒｏｓｃａｒ）、デュタステリド、またはケトコナゾール等の抗アンドロゲンを含む。ミノキシジルおよび抗アンドロゲンは、軟毛の成長を刺激し、あるＭＰＨＬ条件中の毛髪を小型化するのにある程度満足できる程有効である。これらの治療タイプは、ＭＰＨＬを遅延させるのにある程度満足できる程有効であるが、禿頭症が、毛包のある種の最終的な老化または退行期と一致した、進行した後のＭＰＨＬの頭皮において、ＭＰＨＬの防止および有意な硬毛の成長の刺激の両方にはあまり有効ではない。有効であるときでさえ、これらの薬物は、禿げる前にあったような毛包を形成せず、得られる毛包はより小さく、頭皮は、硬毛の密度が低下している。
【００３２】
重要なことには、ミノキシジルおよびフィナステライドの両方は、摂取している間のみ有効であり、得られたまたは維持された毛髪は、治療法を停止してから６〜１２ヶ月以内に消失する。例えば、Ｒｏｓｓｉ，ｅｄ．，２００４，Ａｕｓｔｒａｌｉａｎ  Ｍｅｄｉｃｉｎｅｓ  Ｈａｎｄｂｏｏｋ．Ａｄｅｌａｉｄｅ：Ａｕｓｔｒａｌｉａｎ  Ｍｅｄｉｃｉｎｅｓ  Ｈａｎｄｂｏｏｋを参照のこと。したがって、ミノキシジルおよびフィナステライドは、効果を持続するために継続的な治療を必要とする。加えて、進行したＭＰＨＬに罹患している患者は、統計的には有意であっても、美容上有意でない毛髪数の増加への不満を漏らす場合があり、そのような欲求不満は、不良なコンプライアンスおよびさらなる不満足な結果の一因となり得る。最近、ビマトプロスト（緑内障の進行の制御において、高眼圧症を治療する際に使用されるプロスタグランジン類似体）が、まつ毛を長くすることがＦＤＡで認可され、商標名Ｌａｔｉｓｓｅ（登録商標）で市販され、まつ毛を成長させ、それらをより長く、太く、および濃くなると主張される。
【００３３】
フィナステライドは、女性用には認可されていないが、ミノキシジルは、男性および女性の両方にＦＤＡ認可されている。コペキシル（Ｋｏｐｅｘｉｌ）（例えばＫｅｒａｎｉｑｕｅ）は、副作用がより少ないことが提案されている改良された形態のミノキシジルであり、したがって、女性における毛髪脱落の治療用に提案されている。しかしながら、統計的に有意であるが、美容上有意でない毛髪数の増加への患者の不満は、不良なコンプライアンスおよびさらなる不満足な結果の一因となる。ミノキシジルの使用は、髪の毛がごわつき、残留物を残し得るという事実によってさらに困難である。加えて、多くの患者は、５−α−レダクターゼ阻害剤の場合は、性的機能不全等の、永続的なフィナステライドまたはミノキシジル治療からの副作用への不満がある。
【００３４】
頭皮上に低レベルの光エネルギーを直接使用する装置（ＨａｉｒＭａｘ  Ｌａｓｅｒｃｏｍｂ）は、５１０Ｋ装置としてＦＤＡ認可を受けている。この装置は、「レーザー」として宣伝されているが、頭皮に低レベルの単色光エネルギーを直接適用することによって作動し、これは、毛包の「光バイオ刺激」を通して毛髪の成長を刺激すると考えられている。同様の原理に作用する様々な種類の装置は、ＨａｉｒＭａｘの述語として参照される（Ｌｏｌｉｓ  ｅｔ  ａｌ．，２００６，Ｊ．Ｃｏｓｍｅｔｉｃ  Ｄｅｒｍａｔｏｌ．５：２７４−２７６を参照のこと）。
【００３５】
最終的に、毛髪脱落を治療するためのより抜本的な処置には毛髪移植術が含まれ、後頭部頭皮（ＡＧＡ型脱毛症を誘発時の、アンドロゲンの効果に耐性を示す）から頭皮片、毛包、または毛包単位が切除され、ヒトの禿げつつある、または薄くなっている部位に移植される。使用されている別の外科的方法は、頭皮縮小であり、この処置では、頭皮の禿げ領域を外科的に切除し、周囲の皮膚（毛髪を含む）を一緒に引っ張り、縫合する。外科的方法は、局所の毛髪脱落には最良であり、広範な毛髪脱落にはあまり有効ではなく、女性にはあまり有効ではなく、若年患者は、将来の毛髪脱落のパターンおよび程度が変化するため、理想的な候補者ではない。全ての患者にとって、毛髪移植術は、手術の侵襲性質、回復時間、美容上効果を示す持続時間（約６〜１２ヶ月）、瘢痕の形成、および費用のため、不都合であり得る。毛髪移植術における外科的進歩にもかかわらず、美容上範囲は、患者のドナー部位における毛髪の領域およびその数によって限定される。
【００３６】
一次性瘢痕性脱毛症（ＰＣＡ）疾患は、現在、炎症性疾患として治療されている。リンパ球ＰＣＡを有する患者は、一般に、経口、局所用、または病巣内注射の抗炎症性薬物を処方されている。経口薬物には、ヒドロキシクロロキン、ドキシサイクリン、ミコフェノール酸モフェチル、シクロスポリン、またはコルチコステロイドが含まれ、局所用薬物には、コルチコステロイド、局所用タクロリムス、または局所用ピメクロリムスが含まれ、トリアムシノロンアセトニドは、注射した薬物として使用されている。抗菌性薬物が、培養後、好中球性（好中球に媒介された）ＰＣＡ用に処方され、感受性が、適切な選択を導く。その混合した浸潤物を含む解離性蜂巣炎は、イソトレチノイン治療に応答する。これらの治療のいずれも、治癒的ではなく、せいぜい、症状を抑え、臨床的症候が消失する。毛髪脱落は、多くの場合、ゆっくり、かつ知らない間に進み続ける。円形脱毛症と対照的に、迅速な診断および治療が、永久的な毛髪脱落および瘢痕化を軽減し得、これはその考慮すべき罹患率に寄与する。一部では、毛髪移植術もまた、臨床的選択肢として考慮される。
【００３７】
有効な治療選択肢が限定されているため、毛包新生に至り、目に見える毛髪をもたらすものを含む、毛髪脱落のための新規の安全かつ有効な治療に対するかなりの興味が個人間にある。
〔発明の概要〕
３．
外皮攪乱を用いて、対象、特にヒト対象における毛髪の成長を促進する。外皮攪乱を用いて、毛髪の成長を促進するための装置および方法が、本明細書に提供される。ある特定の態様では、外皮攪乱を用いて、毛髪の成長を促進するために本明細書に提供される方法は、対象の皮膚領域における毛髪の量または厚みの増加をもたらす。ある特定の態様では、外皮攪乱を用いて、毛髪の成長を促進するために本明細書に提供される方法は、対象の皮膚領域における軟毛の増加をもたらす。ある特定の態様では、本明細書に提供される外皮攪乱法は、非閉塞性の局所用薬学的組成物の投与を伴う。ある特定の態様では、外皮攪乱法は、育毛促進剤を含む薬学的組成物の投与を伴う。具体的な態様では、外皮攪乱法は、軟毛の硬毛への移行を促進する薬剤を含む薬学的組成物の投与を伴う。したがって、本発明の一態様では、対象における硬毛の成長を促進するための方法が、本明細書に提供され、その方法は、具体的な一態様では、軟毛の硬毛への移行または休眠しているもしくは休止期の毛包の成長しているもしくは成長期の毛包への移行を促進する薬剤であり得る、１種以上の育毛促進剤の投与を伴う（即ち、前、中、および／または後になされる）、外皮攪乱を含む。ある特定の態様では、１種以上の育毛促進剤と組み合わせて外皮攪乱を用いて、毛髪の成長を促進するために本明細書に提供される方法は、対象の皮膚領域における硬毛の増加をもたらす。ある特定の態様では、外皮攪乱を用いて、その数の軟毛の硬毛への移行を促進し、続いて、そうでなければ、軟毛サイズの毛髪に戻るであろう、攪乱からのこれらの新しい硬毛の大きさを持続および／またはさらに増加させるために、１種以上の育毛促進剤を投与することを含む、方法が本明細書に提供される。ある特定の態様では、外皮攪乱を用いて、その数の新しい硬毛を増加させ、続いて、そうでなければ、大きさが減少し、軟毛サイズの毛髪になる、攪乱からのこれらの新しい硬毛の大きさを持続および／またはさらに増加させるために、１種以上の育毛促進剤を投与することを含む、方法が本明細書に提供される。ある特定の態様では、外皮攪乱を用いて、１種以上の育毛促進剤と組みあわて、毛髪の成長を促進するために本明細書に提供される方法は、対象の皮膚領域における毛髪の量または厚みの増加をもたらす。
【００３８】
本明細書に使用される、外皮攪乱とは、皮膚の創傷清拭、剥離、または創傷、または他の攪乱をもたらす、皮膚および／または外皮系の他の組織のいかなる処置を指す。この処置は、表皮の一部もしくは全て、角質層の一部もしくは全て、または真皮乳頭層、真皮網状層、および／または下皮により深く、攪乱を制限するように制御され得る。一態様では、表皮が除去され、例えば、真皮乳頭層が攪乱される。一態様では、点状出血の発生は、角質層、表皮（またはその一部）、および表層の真皮乳頭層等の真皮の上層の部分の除去を示すであろう。増加した出血の発生は、深層の真皮乳頭層および真皮網状層へのより深い浸透（したがって、攪乱）を示すであろう。したがって、ある特定の態様では、外皮攪乱法は、毛髪の成長が望ましい皮膚の領域への表層創傷のみをもたらす。ある特定の態様では、創傷の範囲は、攪乱の深さを制御することによって最小限に抑えられる。ある特定の態様では、創傷の範囲は、皮膚の攪乱した領域の大きさを制御することによって、例えば、大きな領域の単一の大きな創傷よりもむしろ大きな領域の創傷に影響を及ぼす一連の小さな創傷を作製することによって最小限に抑えられる。これらの態様では、表皮の除去は、皮膚の光沢のある、白っぽい滑らかな層の出現によって検出することができる。表層の真皮乳頭層の攪乱は、例えば、処置した領域における光沢のある、白っぽい滑らかな表面上の小さな点状出血の出現によって検出することができる。深層の真皮乳頭層への攪乱は、さらなる出血をもたらし、処置した表面は、より粗いように見える。真皮網状層に侵入した後、出血は、融合し、活発になり、外観は、深部の真皮乳頭層よりも粗く、露出した皮膚コラーゲンを示す。
【００３９】
ある特定の実施形態では、外皮攪乱は、上皮の部分的除去をもたらす。他の実施形態では、外皮攪乱は、上皮の完全な除去をもたらすが、真皮まで深く入り込んではいない。
【００４０】
一態様では、本明細書に記載される外皮攪乱法は、３０μｍ〜２００μｍの深さ（例えば、３０、４０、５０、６０、７０、８０、８５、９０、９５、１００、１０５、１１０、１２０、１３０、１４０、１５０、１６０、１７０、１８０、１９０、または２００μｍの最大深さ）、好ましくは約１００〜１５０μｍの深さまで皮膚を攪乱する。一態様では、本明細書に記載される外皮攪乱法は、１００μｍの深さまで皮膚を攪乱する。一態様では、本明細書に記載される外皮攪乱法は、１５０μｍの深さまで皮膚を攪乱する。
【００４１】
ある特定の態様では、外皮攪乱は、化学的処置（例えば、炎症性薬剤、腐食剤等）、または削皮術（ＤＡ）、粒子に媒介された削皮術（ＰＭＤＡ）、微細削皮術（ｍｉｃｒｏｄｅｒｍａｂｒａｓｉｏｎ）、極微針、レーザーによるもの（例えば、アブレーション、非アブレーション、フラクショナル、非フラクショナル、表層もしくは深層処置を行うもの、および／またはＣＯ２ベース、もしくはエルビウム−ＹＡＧベース、エルビウムガラスベース（例えばＳｃｉｔｏｎ  Ｌａｓｅｒ）、ネオジム：イットリウムアルミニウムガーネット（Ｎｄ：ＹＡＧ）レーザー等であるレーザー）、低レベル（低強度）レーザー療法処置（例えばＨａｉｒＭａｘ  Ｌａｓｅｒ  ｃｏｍｂ）、レーザーアブレーション、照射、高周波（ＲＦ）アブレーション、デルマトーム（ｄｅｒｍａｔｏｍｅ）のプランニング（例えば皮膚プレーニング（ｄｅｒｍａｐｌａｉｎｇ））、コアニングニードル（ｃｏｒｉｎｇ  ｎｅｅｄｌｅ）、穿刺器具、穿孔ツールもしくは他の外科的ツール、吸引ツールもしくは器具、電気脱毛、電磁気破壊、電気穿孔法、ソノポレーション（ｓｏｎｏｐｏｒａｔｉｏｎ）、低電圧電流、超短パルス光、または外科的処置（例えば、植皮、植毛、ストリップ収穫、頭皮縮小、毛髪移植、毛包単位抽出（ＦＵＥ）、ロボットＦＵＥ等）、あるいは、毛髪の成長を促進する超音波で加速された食塩水（ジェットピール；Ｇｏｌａｎ
ｅｔ  ａｌ．，Ａｎｎ  Ｐｌａｓｔ  Ｓｕｒｇ．２００５；５４（４）：３６９−３７４）が含まれるが、これらに限定されない機械的もしくは電磁気的もしくは物理的処置を用いて達成される。本態様に従う外皮攪乱のための方法および装置は、以下の項５．１に記載されている。
【００４２】
ある特定の態様では、本発明は、外皮攪乱されるべき皮膚の領域を冷凍させること、または化学的に処置することを含まない。ある特定の態様では、外皮攪乱は、ダイヤモンドフライス（ｄｉａｍｏｎｄ  ｆｒａｉｚｅ）を用いて行われる。ある特定の態様では、外皮攪乱は、ＰＥＬおよびＰＥＬＡ構造体の組織学的存在下で生じる深さで行われる。ある特定の態様では、外皮攪乱は、ＡＧＡ型脱毛症に罹患している対象における頭皮の過渡期な領域において行われる。ある特定の態様では、外皮攪乱は、フィッツパトリック皮膚型１〜４を有する対象において行われる。
【００４３】
従来の削皮装置を用いて上で論じられる不利点を対処する削皮ハンドピースに用いる改善された削皮先端部が本明細書に提供される。ある特定の実施形態では、削皮ハンドピースに用いる削皮先端部は、
（ａ）筺体であって、この筺体の長手方向軸と実質的に整列した第１の開口部と、この長手方向軸に対してある角度で配置される第２の開口部とを有する、筺体と、
（ｂ）この筺体中に配置される伝動ユニットであって、
（ｉ）第１の組の歯車と、
（ｉｉ）第１の組の歯車に隣接した連結アセンブリと、
（ｉｉｉ）連結アセンブリに連結した第２の組の歯車と、を備える、伝動ユニットと、（ｃ）削皮ディスクを受容するためのプラットフォームと、を備え、
（ｄ）伝動ユニットは、この削皮ハンドピースの回転運動を、プラットフォームを往復させる往復運動に変換する。
【００４４】
別の実施形態では、削皮ハンドピースに用いる削皮先端部は、
（ａ）筺体であって、この筺体の長手方向軸と実質的に整列した第１の開口部およびこの長手方向軸に対してある角度で配置される第２の開口部を有する、筺体と、
（ｂ）この筺体中に配置される伝動ユニットであって、
（ｉ）第１の組の歯車と、
（ｉｉ）第２の組の歯車と、
（ｉｉｉ）連結アセンブリに連結した第２の組の歯車と、を備える、伝動ユニットと、を備える、伝動ユニットと、
（ｃ）削皮ディスクと、を備え、
（ｄ）伝動ユニットは、この削皮ハンドピースの回転運動を、削皮ディスクを往復させる往復運動に変換し、
（ｅ）削皮ディスクは、この筺体の長手方向軸に対してある角度で配置される。
【００４５】
なお別の実施形態では、削皮ハンドピースに用いる削皮先端部には、
（ａ）筺体であって、この筺体の長手方向軸と実質的に整列した第１の開口部と、この長手方向軸に対してある角度で配置される第２の開口部とを有する、筺体と、
（ｂ）この筺体中に配置される伝動ユニットであって、
（ｉ）第１の組のかさ歯車と、
（ｉｉ）第１の組の歯車に隣接した連結アセンブリであって、入力駆動輪と、出力駆動輪と、少なくとも１つの連結棒を含む、連結アセンブリと、
（ｉｉｉ）連結アセンブリに連結した第２の組のかさ歯車と、を備える、伝動ユニットと、
（ｃ）削皮ディスクと、を備え、
（ｄ）伝動ユニットは、この削皮ハンドピースの回転運動を、削皮ディスクを往復させる往復運動に変換し、
（ｅ）削皮ディスクは、この筺体の長手方向軸に対してある角度で配置される。
【００４６】
さらなる実施形態では、削皮ハンドピースに用いる削皮先端部は、
（ａ）筺体であって、この筺体の長手方向軸と実質的に整列した第１の開口部と、この長手方向軸に対してある角度で配置される第２の開口部とを有する、筺体と、
（ｂ）削皮ハンドピースの回転運動を、往復運動に変換するための手段と、
（ｃ）削皮ディスクと、を備え、
（ｄ）削皮ディスクは、この筺体の長手方向軸に対してある角度で配置される。
【００４７】
別の実施形態では、削皮器は、
（Ａ）制御装置と、
（Ｂ）長手方向軸を有するハンドピースであって、
（ｉ）筺体と、
（ｉｉ）この筺体中に配置される伝動ユニットであって、
（ａ）第１の組の歯車と、
（ｂ）第１の組の歯車に隣接した連結アセンブリと、
（ｃ）連結アセンブリに隣接した第２の組の歯車と、を備える、伝動ユニットと、
（ｉｉｉ）削皮ディスクと、を備える、ハンドピースと、
（Ｃ）ハンドピースを制御装置に接続するコードと、を備え、
（Ｄ）伝動ユニットは、削皮ハンドピースの回転運動を、削皮ディスクを往復させる往復運動に変換し、
（Ｅ）削皮ディスクは、ハンドピースの長手方向軸に対してある角度で配置される。
【００４８】
なおさらなる実施形態では、削皮術のためのキットは、
（Ａ）以下の項５．２、５．３、および／または５．４に記載される薬学的組成物と、
（Ｂ）使い捨て削皮先端部であって、
（ｉ）筺体であって、この筺体の長手方向軸と実質的に整列した第１の開口部と、この長手方向軸に対してある角度で配置される第２の開口部とを有する、筺体と、
（ｉｉ）この筺体中に配置される伝動ユニットであって、
（ａ）第１の組の歯車と、
（ｂ）第２の組の歯車と、
（ｃ）第１の組の歯車と前記第２の組の歯車との間に配置される連結アセンブリと、を備える、伝動ユニットと、
（ｉｉｉ）削皮ディスクと、を備える、使い捨て削皮先端部と、を備え、
（Ｃ）伝動ユニットは、削皮ハンドピースの回転運動を、削皮ディスクを往復させる往復運動に変換し、
（Ｄ）削皮ディスクは、この筺体の長手方向軸に対してある角度で配置される。
【００４９】
別の実施形態では、削皮術のためのキットは、
（Ａ）以下の項５．２、５．３、および／または５．４に記載される薬学的組成物と、
（Ｂ）使い捨て削皮先端部であって、
（ｉ）筺体であって、この筺体の長手方向軸と実質的に整列した第１の開口部と、この長手方向軸に対してある角度で配置される第２の開口部とを有する、筺体と、
（ｉｉ）削皮ハンドピースの回転運動を、往復運動に変換するための手段と、
（ｉｉｉ）削皮ディスクを受容するためのプラットフォームと、を備える、使い捨て削皮先端部と、を備え、
（Ｃ）伝動ユニットは、削皮ハンドピースの回転運動を、プラットフォームを往復させる往復運動に変換し、
（Ｄ）このプラットフォームは、この筺体の長手方向軸に対してある角度で配置される。
【００５０】
また、対象の皮膚の部位における毛髪の成長を促進するために外皮攪乱を用いるための方法も本明細書に提供され、外皮攪乱は、削皮術を含む。特定の実施形態では、削皮術は、削皮先端部、削皮器、および／または以下の項５．１に記載される削皮術のためのキットを用いて達成される。一実施形態では、削皮術は、ダイヤモンドフライス（ｄｉａｍｏｎｄ  ｆｒａｉｚｅ）を用いて行われる。
【００５１】
本発明の目的は、新しい毛包の生成（「毛包新生」）を促進すること；新遺伝子のような（ＮＬ）毛包構造体の形成を促進すること；先在する毛包の活性化（恐らく再構成によって）を促進すること；先在するような（ＰＥＬ）もしくは先在するような付着した（ＰＥＬＡ）毛包構造体の形成を促進すること；毛包の発育を促進すること、例えば硬毛の成長（軟毛よりむしろ）を促進すること；（１つの毛穴当たりの増加した毛幹数として見られる）先在する毛包の分枝を促進すること；毛包の幅を増加させること（それによって、増加した毛幹の幅の成長を促進すること）；ならびに／または毛包の老化を遅延もしくは防止することである。本発明のさらなる目的は、毛髪の成長を促進すること；軟毛の成長を促進すること；軟毛の硬毛への移行を促進すること；成長期における毛包の量を増加させること、成長期を延長させること、休止期を短縮すること、硬毛の成長を促進すること；毛髪の量を増加させること；毛髪の厚みを増加させること；ならびに／または毛髪脱落を減少もしくは予防することである。
【００５２】
本発明のさらなる目的は、毛包単位の活性化、再構成、もしくは再生、または新しい毛包単位の生成を促進すること；毛髪単位の発生を促進すること、例えば、毛包単位の、もしくは毛包単位において（軟毛よりむしろ）硬毛の成長を促進すること；（１つの毛穴当たりの増加した毛幹数として見られる）先在する毛包単位の分枝を促進すること；毛包単位における毛髪の幅を増加させること（それによって、増加した毛幹の幅の成長を促進すること）；ならびに／または毛包単位の老化を遅延もしくは防止することである。本発明のさらなる目的は、毛包単位における毛髪の成長を促進すること；毛包単位における軟毛の成長を促進すること、毛包単位における軟毛の毛包単位における硬毛の移行を促進すること；毛包単位における硬毛の成長を促進すること；毛包単位における毛髪の量を増加させること；毛包単位における毛髪の厚みを増加させること；ならびに／または毛包単位における毛髪脱落もしくは毛髪の縮小化を減少もしくは防止することである。
【００５３】
理論に束縛されることなく、本明細書に記載される治療は、新しい毛包および／もしくは新しい毛包単位を生成するための皮膚の能力を増加させること；毛包および／もしくは毛包単位の発達を再プログラミングするための皮膚の能力を増加させること；存在する毛包および毛包構造体を再構成および活性化するための皮膚の能力を増加させること；目に見える毛髪の成長を制御する独自のヒトプロセスを調節すること；特殊化したヒト毛包および／もしくは毛包単位の活性を調節すること；特殊化したヒト毛包および／もしくは毛包単位の特定の活性を調節すること；性ステロイド調節の影響下でのものを含む性特異的に特殊化したヒト毛包および／もしくは毛包単位を調節すること；時には、移植術と共に特殊化したヒト毛包および／もしくは毛包単位の活性を変化させること；皮膚の標的位置における天然の毛包（例えば、軟毛を有する予め小型化した毛包が存在する硬毛を有する正常の大きさの毛包）とは異なる特性を有する毛包を生じ得る性特異的に特殊化したヒト毛包および／もしくは毛包単位への幹細胞の分化を調節すること；性ステロイド調節の影響下でのものを含むヒト毛包および／もしくは毛包単位および毛髪における加齢による変化を調節もしくは変化させること；あるいは毛包および／もしくは毛包単位のプログラム化した老化を変化、遅延、もしくは防止することによってこれらの結果を達成し得る。
【００５４】
本発明は、一部分において、ヒト皮膚が、一生を通じて、骨髄由来および組織由来幹細胞等の幹細胞によって補充されるという原理に基づいている。毛包幹細胞は、（１）他の毛包幹細胞由来、（２）「プレ毛包幹細胞（ｐｒｅ−Ｆｏｌｌｉｃｌｅ  Ｓｔｅｍ  Ｃｅｌｌ）と称される他の組織幹細胞由来（毛包間皮膚由来）、（３）骨髄由来幹細胞（「ＢＭＳＴ」）由来、および／または（４）脂肪幹細胞等の間充織幹細胞由来であり得る。骨髄由来幹細胞（ＢＭＳＴ）の場合は、それらの毛包幹細胞への分化は、細胞が「ナース細胞」の役割を果たし、骨髄由来幹細胞の毛包幹細胞への分化を誘導する適切なシグナルを提供し得る無傷の毛包を必要とする。外皮攪乱は、（１）新しい毛包を形成するプロセスを開始するように対称的に分割するための毛包幹細胞のシグナルを提供し、（２）幹細胞に分化するために毛包間皮膚から組織幹細胞（「プレ毛包幹細胞」）を動員し、（３）皮膚の罹患領域への骨髄由来幹細胞の輸送を増加させ、存在する毛包におけるナース細胞による毛包幹細胞への分化を促進し、（４）毛包の活性化および発達を誘導するように前駆細胞からのシグナルを可能にし得る、毛包、毛包前駆細胞、および他の種類の誘導細胞の「混合」を促す。一態様では、本明細書に記載される方法は、前駆細胞を誘導細胞と接触させることを含む。
【００５５】
したがって、理論に束縛されることなく、本発明は、一部分において、毛髪の成長は真の毛包新生によって促進され得るが、一方、ネオ毛包の新たな形成から生じる必要がない他の毛包構造体が、毛髪の成長を促進するために刺激され、活性化され、再構成され得るという発見に基づいている。育毛促進のための多くの従来の薬理学的治療は、軟毛から硬毛への変換を促す。本明細書に記載される外皮攪乱法は、硬毛でないにしろ、増加した軟毛と相関する、刺激を受けて、活性化され、再構成した毛包構造体の形成を促進する。刺激を受けて活性化した毛包および軟毛または硬毛の数を増加させることによって、本発明の方法は、これらの薬理学的治療の作用のためにさらなる土台を提供し得る。したがって、ある特定の態様では、外皮攪乱および１つ以上の薬理学的治療の組み合わせは、組み合わせてまたは連続してまたは周期的に投与され得るが、増加した毛髪、増加した毛髪の厚み、および／または長寿命の毛髪を生じる。ある特定の態様では、そのような併用療法は、薬理学的治療のみでの治療と比較して、１．２５倍、１．５倍、２倍、２．５倍、３倍、３．５倍、または４倍もしくはそれ以上の増加を生じる。
【００５６】
ある特定の態様では、本発明は、他の治療剤、例えば育毛促進剤の投与を除外し得る。ある特定の態様では、本発明は、育毛効果を生じるように、薬学的薬剤を用いるまたは用いずに、同じ治療領域における連続攪乱を含む。ある特定の態様では、本発明は、相乗効果を生じる、即ち、いずれかの治療のみの相加効果が期待されるであろうよりもより毛髪を成長させるように、１つ以上の薬学的薬剤を用いるまたは用いずに、同じ治療した領域における１つ以上の攪乱を含む。ある特定の態様では、本発明は、１つ以上のさらなる治療剤と組み合わせた外皮攪乱を含む。ある特定の態様では、本発明は、さらなる治療と組み合わせた外皮攪乱を含み、さらなる治療は、薬学的有効成分を含んでも含まなくてもよい（例えば以下の項５．２を参照）。いくつかの態様では、麻酔または鎮痛作用のある化合物（例えばリドカイン）のみが、さらなる治療において投与される。ある特定の態様では、さらなる治療は、軟毛または硬毛を含む毛髪の成長を促進、感染症を予防、および／または攪乱した皮膚の治癒を促進するための１つまたは複数の薬学的有効成分を含む。本態様に従って用いる方法および薬学的組成物は、以下の項５．２、５．３、および５．４に記載されている。
【００５７】
一態様では、本発明の外皮攪乱法は、毛髪の成長を刺激する他の薬剤または治療剤と組み合わせて使用される。例えば、本発明の外皮攪乱法は、１種以上の育毛促進剤前、それと共に、その後、または交互に投与することができる。本態様に従って、単独でまたは組み合わせて使用するための育毛促進剤としては、プロスタグランジンＦ２α類似体、例えば、ラタノプロスト（商標名Ｘａｌａｔａｎ）、トラボプロスト（商標名Ｔｒａｖａｔａｎ）、タフルプロスト、ウノプロストン、ジノプロスト（商標名Ｐｒｏｓｔｉｎ  Ｆ２  Αｌｐｈａ）、ＡＳ６０４８７２，、ＢＯＬ３０３２５９Ｘ、ＰＦ３１８７２０７、カルボプロスト（商標名Ｈｅｍａｂａｔｅ）等のプロスタグランジンに作用する薬剤；例えばビマトプロスト（商標名Ｌａｔｉｓｓｅ、Ｌｕｍｉｇａｎ）等のプロスタミド；例えば、フルプロステノール（ｆｌｕｐｒｏｓｔｅｎｏｌ）等のプロスタノイド受容体アゴニスト；例えば、ラロピプラント、ＡＭ２１１等のプロスタグランジンＤ２受容体拮抗薬；例えばスルプロストン等のプロスタグランジンＥ２類似体；ならびに例えばブタプロスト等のＥＰ２受容体アゴニスト；例えば、フィナステライド、デュタステリド、ツロステリド、ベキソロステリド、イゾンステリド、エプリステリド、エピガロカテキン、フルリジル（Ｓｏｖａｋ  ｅｔ  ａｌ，Ｄｅｒｍａｔｏｌ  Ｓｕｒｇ．２００２；２８（８）：６７８−６８５）、ＲＵ  ５８８４１（Ｐａｎ  ｅｔ  ａｌ．Ｅｎｄｏｃｒｉｎｅ．１９９８；９（１）：３９−４３）、Ｎ，Ｎ−ジエチル−４−メチル−３−オキソ−４−アザ−５α−アンドロスタン−１７ベータ−カルボキサミド（Ｒｉｔｔｍａｓｔｅｒ  ｅｔ  ａｌ．，Ｊ  Ｃｌｉｎ  Ｅｎｄｏｃｒｉｎｏｌ  Ｍｅｔａｂ．１９８７；６５（１）：１８８−１９３）、ＭＫ−３８６、アゼライン酸、ＦＣＥ  ２８２６０、ＳＫＦ  １０５，１１１等の５α−レダクターゼ阻害剤；ミノキシジル；例えばジアゾキシド等のＡＴＰ感受性カリウムチャンネル開口薬；ならびに本明細書に記載されるもしくはそうでなければ当該技術分野で公知の育毛促進剤、例えばコペキシル（例えば、製品Ｋｅｒａｎｉｑｕｅ（商標））、ＣａＣｌ２、ボツリヌストキシンＡ、アデノシン、ケトコナゾール、ＤｏｘｏＲｘ、ドセタキセル、ＦＫ５０６、ＧＰ１１０４６、ＧＰ１１５１１、ＬＧＤ１３３１、ＩＣＸ−ＴＲＣ、ＭＴＳ−０１、ＮＥＯＳＨ１０１、ＨＹＧ−１０２４４０、ＨＹＧ−４１０、ＨＹＧ−４２０、ＨＹＧ−４３０、ＨＹＧ−４４０、スピロノラクトン、ＣＢ−０３−０１、ＲＫ−０２３、アバタセプト、Ｖｉｖｉｓｃａｌ（登録商標）、ＭｏｒｒＦ、ＡＳＣ−Ｊ９、ＮＰ−６１９、ＡＳ１０１、Ｍｅｔｒｏｎ−Ｆ−１、ＰＳＫ  ３８４１、Ｔａｒｇｒｅｔｉｎ（例えば１％ゲル）、ＭｅｄｉｎＧｅｌ、ＰＦ３１８７２０７、ＢＯＬ３０３２５９Ｘ、ＡＳ６０４８７２、ＴＨＧ１１３３１、ＰＦ−２７７３４３、ＰＦ−３００４４５９、ラプティバ、カフェイン、およびコーヒーが挙げられるが、これらに限定されない。他の育毛促進剤には、アルギニン、イソロイシン、ロイシン、リシン、メチオニン、フェニルアラニン、トレオニン、トリプトファン、バリン、ガンマリノール酸、およびポリフェノールカテキン��銅ペプチドが含まれる。毛髪の洗浄トニックとして製剤化され得る他の育毛促進剤としては、ホホバ油、リンゴ、、ノコギリヤシ、エミュー油、ベータカロチン、および緑茶の抽出物が挙げられるが、これらに限定されない。一態様では、本発明の外皮攪乱法は、ＳＷＩＴＣＨ  Ｂｉｏｔｅｃｈ  ＬＬＣによって開発されている脱毛症のための薬物と組み合わせて使用される。
【００５８】
本態様に従って、前述のもののうちの１つ以上が、その市販の形態で使用され得る。他の態様では、前述のもののうちの１つ以上の用量を調整して、本明細書に記載される併用療法（例えば、外皮攪乱または別の１つもしくは複数の活性成分による治療）を最適化する。他の態様では、前述のもののうちの１つ以上の製剤を調整して、本明細書に記載される併用療法（例えば、外皮攪乱または別の１つもしくは複数の活性成分による治療）を最適化する。特定の態様では、前述のもののうちの１つ以上が、例えば以下の項５．２に記載される攪乱後治療のために薬学的組成物に組み込むことによって局所投与のために製剤化される。
【００５９】
特定の態様では、本態様に従って使用される育毛促進剤は、軟毛の非軟毛への変換を増強する。このような一態様では、育毛促進剤は、軟毛の硬毛への変換を増強する。本態様に従って使用され得る軟毛の非軟毛または硬毛への変換を促進する例示的な育毛促進剤は、プロスタグランジンＦ２α類似体（一態様では、ラタノプロスト）、プロスタミド（一態様では、例えばビマトプロスト）、ミノキシジル等である。一実施形態では、ミノキシジルは、プロスタグランジンＦ２α類似体と組み合わせて投与される。一実施形態では、ミノキシジルは、プロスタミドと組み合わせて投与される。一実施形態では、ミノキシジルは、５α−レダクターゼ阻害剤と組み合わせて投与される。このような一実施形態では、ミノキシジルは、フィナステライドと組み合わせて投与される。本態様に従って使用される「育毛促進剤」を含む方法および薬学的組成物は、以下の項５．３に記載されている。
【００６０】
ある特定の態様では、外皮攪乱を用いて、その数の軟毛の硬毛への移行を促進し、続いて、そうでなければ、軟毛サイズの毛髪に戻るであろう、攪乱からのこれらの新しい硬毛の大きさを持続および／またはさらに増加させるために、育毛促進剤を投与することを含む、方法が本明細書に提供される。ある特定の態様では、外皮攪乱を用いて、その数の新しい硬毛を増加させ、続いて、そうでなければ、大きさが減少し、軟毛サイズの毛髪になる、攪乱からのこれらの新しい硬毛の大きさを持続および／またはさらに増加させるために、育毛促進剤を投与することを含む、方法が本明細書に提供される。ある特定の態様では、外皮攪乱を用いて、育毛促進剤と組みあわて、毛髪の成長を促進するために本明細書に提供される方法は、対象の皮膚領域における毛髪の量または厚みの増加をもたらす。
【００６１】
ある特定の態様では、本発明は、アンドロゲン性脱毛症に罹患している男性または女性対象の頭皮上の毛髪の成長を促進するための方法を提供し、本方法は、（ｉ）外皮攪乱を適用すること、（ｉｉ）外皮攪乱した皮膚領域への非閉塞性創傷被覆材を任意に適用すること、および（ｉｉｉ）ミノキシジルを局所的に投与することの順序で含む。より具体的な実施形態では、外皮攪乱は、１００〜１５０ミクロンの推定深さまで削皮術を用いて行われ、ヒドロゲルが皮膚に投与され、ミノキシジルが５％ミノキシジル発泡体の形態で投与される。ミノキシジルは、２〜５％のミノキシジルの濃度で、液体、ゲル、および／または発泡体として投与され得る。特定の実施形態では、ヒドロゲルは、約１週間、１日２回削皮した直後局所的に投与され、続いて、処置しないで３週間投与され、これは、同様にミノキシジル処置の少なくとも５ヶ月の期間続く。具体的な実施形態では、ヒドロゲルは、１２日間、１日２回削皮した直後局所的に投与され、これは、同様にミノキシジル処置の６ヶ月の期間続く。一実施形態では、治療レジメンは、時間をかけて毛髪の密度を増加させるために複数回繰り返される。
【００６２】
ある特定の態様では、本発明は、アンドロゲン性脱毛症に罹患している男性または女性対象の頭皮上の毛髪の成長を誘発するための方法を提供し、本方法は、
（ｉ）０日目、削皮術（推定深さ１００〜１５０ミクロン）、
（ｉｉ）０日目より、約１１日間、ヒドロゲルの局所投与、
（ｉｉｉ）ステップ（ｉｉ）の直後、少なくとも３ヶ月間、または別の実施形態では、少なくとも６ヶ月間、ミノキシジル２〜５％の溶液および／またはミノキシジル２〜５％のゲルおよび／またはミノキシジル２〜５％の発泡体の局所投与。
（ｉｖ）ある特定の具体的な実施形態では、以下の項５．１に記載されている削皮先端部が、ステップ（ｉ）において使用される。
（ｖ）ある特定の具体的な実施形態では、対象は、０．００５％または０．０１％または０．１％のラタノプロストを局所的に投与されるさらなる治療を受ける。
（ｖｉ）ある特定の具体的な実施形態では、対象は、０．０１％または０．０３％のビマトプロストを局所的に投与されるさらなる治療を受ける。
（ｖｉｉ）ある特定の具体的な実施形態では、対象は、ステップ（ｉｉ）後、ミノキシジルの代わりに０．００５％または０．０１％または０．１％のラタノプロストを局所的に投与されるさらなる治療を受ける。
（ｖｉ）ある特定の具体的な実施形態では、対象は、ステップ（ｉｉ）後、ミノキシジルの代わりに０．０１％または０．０３％のビマトプロストを局所的に投与されるさらなる治療を受ける。
【００６３】
ある特定の態様では、本発明は、再上皮化が完了したらすぐにミノキシジルを開始する治療レジメンを提供する。一実施形態では、再上皮化は、外皮攪乱から１１日から１４日後に完了する。
【００６４】
薬物噴霧装置を含む、育毛促進剤等の治療用化合物を治療した皮膚に送達するために使用することができる装置が、本明細書に提供される。ある特定の態様では、本明細書に開示される薬物噴霧装置は、治療用化合物が投薬されるまで、薬物成分を別々に維持する２つの別個のチャンバを有する薬物カートリッジを含む。ある特定の態様では、本明細書に開示される薬物噴霧装置は、高度に疎水性の閉塞マトリックスを使用せずに、育毛促進剤の持続放出を可能にする。ある特定の態様では、本明細書に開示される薬物噴霧装置は、育毛促進剤の持続放出および痂皮を通じて皮膚による取り込みを可能にする。ある特定の態様では、本明細書に開示される薬物噴霧装置は、２つ以上の薬物の同時送達を可能にする。一態様では、本明細書に開示される薬物噴霧装置は、１つの単一装置を用いて、外皮攪乱した皮膚の洗浄および１つ以上の薬物の投与を可能にする。本発明の本態様の実践のための例示的な装置および例示的な薬学的組成物を用いたそれらの使用は、以下の項５．５．２．１において記載されている。
【００６５】
ある特定の態様では、本明細書に記載される方法を使用して、毛髪移植手術のためのドナー部位として使用されたまたは使用され得る頭皮における毛髪を補充する。
【００６６】
本発明の方法の成功は、例えば、以下によって測定することができる。
・改善された全体の審美的成果（例えば視覚アナログ尺度（ＶＡＳ）を用いて）
・毛髪の成長の患者による評価（例えば、質問表に基づいて）
・患者における育毛の主治医の評価（例えば、評定尺度に基づいて）
・写真における育毛の患者の評価
・患者の写真における育毛の主治医の評価
・毛髪の計数の増加（例えば、皮膚の罹患領域における繊維数の増加として新しい毛髪の成長を測定することによって）
・毛髪密度の増加
・毛髪または毛幹の厚みの増加（例えば直径に基づいて）
・毛髪重量の増加
・毛髪の切断
・より長い毛髪
・硬毛量の増加（例えば、皮膚の罹患領域における繊維数の増加、または厚み（例えば直径）の増加、または毛髪繊維の長さとして新しい毛髪の成長を測定することによって）
・軟毛量の増加（例えば、皮膚の罹患領域における繊維数の増加として新しい毛髪の成長を測定することによって）（例えば写真で測定されるように）
・非軟毛、例えば、中間毛または硬毛量の増加
・硬毛と軟毛の比率の増加
・毛芽数の増加
・毛包数の増加（例えば皮膚生検によって評価されるように）
・発達のより成熟段階での毛包数の増加
・３つ以上の毛包を有する毛包単位数の増加
・毛包の分岐の増加
・新しい毛包の形成（「毛包新生」）
・軟毛サイズの毛幹（即ち、直径３０ミクロン未満の直径を有する毛幹）を有する新しい毛包の形成
・非軟毛サイズの毛幹（即ち、直径３０ミクロン以上の直径を有する毛幹）を有する新しい毛包の形成
・毛包の再生
・存在する毛包の活性化の増加
・毛包数の増加
・活性化した毛包数の増加
・活性化した先在する毛包数の増加
・新遺伝子のような（ＮＬ）毛包の存在またはその数の増加（例えば、生検の試験に基づいてまたは共焦点顕微鏡によって、ベースラインもしくは陰性対照と比較して毛包数を評価することによって、および／または毛包の形態を評価することによって）
・先在する毛包の存在またはその数の増加（例えば、生検の試験に基づいてまたは共焦点顕微鏡によって、ベースラインもしくは陰性対照と比較して毛包数を評価することによって、および／または毛包の形態を評価することによって）
・新遺伝子のような（ＮＬ）、先在するような（ＰＥＬ）、および／または先在するような付着した（ＰＥＬＡ）毛包構造体等の対象となる初期構造体（ＳＯＩ）の存在またはその数の増加（例えば、生検の試験に基づいてまたは共焦点顕微鏡によって、ベースラインもしくは陰性対照と比較して毛包数を評価することによって、および／または毛包の形態を評価することによって、例えば以下の項５．８．４に記載されるように）
・対象の皮膚の治療領域における軟毛サイズの毛幹を有する先在する毛包数の増加
・対象の皮膚の治療領域における軟毛サイズの毛幹を有する新遺伝子のような毛包数の増加
・成長期の毛髪量の増加
・休止期の毛髪量の増加
・成長期の毛包の割合の増加または休止期の毛包の割合の減少（即ち、成長期の毛髪の休止期の毛髪に対する比率の増加）（例えば、生検の試験またはフォトトリコグラム法（ｐｈｏｔｏｔｒｉｃｈｏｇｒａｍ）に基づいて）
・皮膚乳頭の増殖の増加（例えば生検の試験に基づいて）
・幹細胞の毛包への動員または増殖の増加（例えば生検の試験に基づいて）。
【００６７】
本明細書に開示されている治療のための候補者であるヒト対象は、毛髪の成長の増加が望ましいいかなる対象を含み、これには、男性型脱毛症（ＭＰＨＬ）もしくは女性型脱毛症（ＦＰＨＬ）を含むアンドロゲン性脱毛症（ＡＧＡ）等の非瘢痕性（ｎｏｎｓｃａｒｒｉｎｇ、ｎｏｎｃｉｃａｔｒｉｃｉａｌ）脱毛症、加齢による脱毛症（老化）、またはアンドロゲンによって引き起こされる任意の毛髪脱落の任意の他の形態、中毒性脱毛症、円形脱毛症（全身性脱毛症を含む）、瘢痕性（ｓｃａｒｒｉｎｇ、ｃｉｃａｔｒｉｃｉａｌ）脱毛症、病理学的脱毛症（例えば、薬物、化学療法、外傷、創傷、火傷、ストレス、自己免疫疾患により生じる）、抜毛癖、栄養失調症、もしくは内分泌機能不全）、または貧毛症、あるいは以下に論じられる、および／もしくは当該技術分野で公知の毛髪脱落の任意の他の疾患、障害、または形態に罹患している対象が含まれるが、これらに限定されない。
【００６８】
特定の態様では、そのような治療の候補者であるヒト対象は、瘢痕性（ｓｃａｒｒｉｎｇ、ｃｉｃａｔｒｉｃｉａｌ）脱毛症を有するヒト対象である。本明細書に記載される方法に従って治療され得る瘢痕性脱毛症の形態は、原発性瘢痕性脱毛症（ＰＣＡ）および続発性瘢痕性脱毛症を含む。本明細書に記載される方法に従って治療され得る原発性瘢痕性脱毛症には、毛孔性扁平苔癬（ＬＰＰ）、前頭部硬化性脱毛症（ＦＦＡ）、中央遠心瘢痕性脱毛症（ＣＣＣＡ）、および萎縮性脱毛症（Ｂｒｏｃｑ）等のリンパ球媒介性ＰＣＡ；脱毛性毛包炎および房状毛嚢炎等の好中球媒介性ＰＣＡ；ならびに解離性蜂巣炎および頭部乳頭状皮膚炎で生じるような混合炎症性浸潤を含むＰＣＡが含まれる。
【００６９】
特定の態様では、瘢痕性脱毛症に罹患している患者において毛髪の成長を増強するための方法が本明細書に提供され、この方法には、削皮術を用いた制御された外皮攪乱、続いて、７〜１４日間、好ましくは１２日間の１日２回のヒドロゲルの局所的投与、続いて、１種以上の育毛促進剤の投与が含まれる。ある特定の実施形態では、ヒドロゲル処置は、レーザー処置と同日に開始される。一実施形態では、この患者は、原発性瘢痕性脱毛症に罹患している。一実施形態では、この患者は、毛孔性扁平苔癬に罹患している。別の実施形態では、この患者は、前頭部硬化性脱毛症に罹患している。
【００７０】
瘢痕性脱毛症のための治療の成功は、上記の方法を用いて測定され得る。いくつかの実施形態では、治療の成功は、視覚的または写真で検出された毛髪数の増加として決定される。他の実施形態では、成功した治療は、毛包構造体および瘢痕特性のために皮膚生検によって評価される。成功はまた、状態と関連するかゆみ、ほてり、疼痛、および圧痛の減少もしくは消失、または頭皮の赤み、落屑、および／もしくは膿疱の減少として測定することもできる。成功はまた、頭皮の炎症の減少または消失として測定することもできる。
【００７１】
３．１  毛髪のための表現および毛髪の成長の疾患の用語集
以下の用語は、以下に要約される当該分野で認められる意味と一致して本明細書に使用される。
【００７２】
脱毛症：異常な毛髪脱落：
円形脱毛症：成長期の段階で毛包に対する自己免疫応答によって生じると考える断片的な毛髪脱落；この障害の広範な形態は、全頭型円形脱毛症（全頭皮にわたる毛髪脱落）および汎発型円形脱毛症（全身にわたる毛髪脱落）と呼ばれる。
【００７３】
成長期：毛包サイクルの成長期の段階。
【００７４】
成長期脱毛症：活性な毛包の成長の妨害によって生じる急激な毛髪の脱落（例えば、化学療法を受けている患者において）。
【００７５】
アンドロゲン性脱毛症（ＡＧＡ）：ＭＰＨＬ型（前頭部後退および頭頂での菲薄化）またはＦＰＨＬ型（前頭部毛髪のｓｐａｒｉｎｇがある、主として頭頂部上の毛髪脱落）における遺伝的に素因のある毛包の縮小化により生じる禿頭症
毛球（Ｂｕｌｂ）：毛髪を生成する急速に増殖するマトリックス細胞を含有する皮膚乳頭（毛包乳頭としても知られている）を含む毛包の最下部分。
【００７６】
バルジ（Ｂｕｌｇｅ）：起毛筋の挿入部の領域に位置する毛包の外毛根鞘の部分。成長期において毛包を再生するのに関与する上皮幹細胞を含有すると考えられている。
【００７７】
退行期：毛包の退化および退行によって特徴付けられる毛髪周期の段階
棍毛：完全に角化された死滅下毛髪−休止期における毛包の最終生成物であり、５０〜１５０本の棍毛が正常な頭皮から毎日脱落する。
【００７８】
女性型脱毛症（ＦＰＨＬ）：女性における性特異的な毛髪パターニングの形態（時には、女性型脱毛症（ｆｅｍａｌｅ  ｐａｔｔｅｒｎ  ａｌｏｐｅｃｉａ）とも称される）。
【００７９】
毛包の周期：それぞれの毛包における毛髪の成長は、以下の段階を含む周期で生じる：成長期（成長段階）、退行期（退行／退化する段階）、休止期（休止している段階）、離脱期（抜け落ちている段階）、毛包休止期（ｋｅｎｏｇｅｎ）、および成長期への再突入。
【００８０】
毛包休止期（Ｋｅｎｏｇｅｎ）：毛幹が抜け落ちた後の毛髪の周期の潜伏期であり、成長が毛包中で停止している。
【００８１】
多毛症（Ｈｉｒｓｕｔｉｓｍ）：女性におけるアンドロゲン依存性領域における過剰な毛髪の成長。
【００８２】
多毛症（Ｈｙｐｅｒｔｒｉｃｈｏｓｉｓ）：年齢、人種、性別、および皮膚領域に従って正常であると見なされる域を超えて（通常、拡散する）過剰な毛髪の成長。
【００８３】
外皮：皮膚（表皮、真皮、下皮（もしくは皮下））、および由来にかかわらずその中に含まれる全ての細胞、ならびにその付属物（例えば、毛髪および爪を含む）を含む、外皮系に付随するもの。
【００８４】
中間毛：「硬毛」の一種。毛幹直径は、通常、３０μｍ以上であるが、６０μｍ未満である。
【００８５】
産毛：胎児の体上の細い毛髪であり、子宮内でまたは出生後の数週間以内に通常抜け落ちる。
【００８６】
男性型脱毛症（ＭＰＨＬ）：男性における性特異的な毛髪パターニングの形態（時には、男性型脱毛症（ｍａｌｅ  ｐａｔｔｅｒｎ  ａｌｏｐｅｃｉａ）とも称される）。
【００８７】
小型化：大きな（硬毛）毛髪の小さな（軟毛）毛髪への変換をもたらす、アンドロゲン性脱毛症における一次的な病理学的プロセス。
【００８８】
ＮＬ（新遺伝子のような）毛包構造体：ある特定の実施形態では、「小さな」特質である毛幹、皮脂腺、または毛穴のうちの１つのみを有する、付着していない原始的な毛包構造体。皮膚チャンネルは、不在であるか、または決定的ではない。ＮＬのさらなる下位分類には、ＤＰ（皮膚乳頭）を含むＮＬ／活性、ＤＰを含むＮＬ／不活性、ＤＰを含まないＮＬ／活性、およびＤＰを含まないＮＬ／不活性が含まれる。
【００８９】
非軟毛：「硬毛」と同じ。
【００９０】
ＰＥＬ（先在するような）毛包構造体：ある特定の実施形態では、毛幹、皮脂腺、または毛穴の「大きな」特質のうちの１つ以上または「小さな」特質のうちの２つ以上を有する、付着していない原始的な毛包構造体。皮膚チャンネルが存在する。ＰＥＬのさらなる下位カテゴリーには、ＤＰ（皮膚乳頭）を含むＰＥＬ／活性、ＤＰを含むＰＥＬ／不活性、ＤＰを含まないＰＥＬ／活性、およびＤＰを含まないＰＥＬ／不活性が含まれる。
【００９１】
ＰＥＬＡ（先在するような付着した）毛包構造体：ある特定の実施形態では、表皮に延在するより大きな成熟した毛嚢脂腺単位に付着する原始的な毛包構造体。
【００９２】
永久脱毛症：炎症、外傷、線維症、または未知の原因の結果として毛包の破壊によって引き起こされ、例には、毛孔性扁平苔癬および円板状紅斑性狼瘡が含まれる。瘢痕性脱毛症と称される疾患を含む。
【００９３】
休止期：毛周期の休眠段階であり、棍毛が最終生成物であり、最終的には、抜け落ちる。
【００９４】
休止期脱毛症：休止段階に入る毛包の割合の増加によって引き起こされる過剰な脱落であり、一般的原因には、薬物および発熱が含まれる。
【００９５】
硬毛：頭皮および身体上の大きな、通常、色素性のある毛髪。毛幹直径は、一般に、３０μｍ以上である。
【００９６】
軟毛：非常に短い、しばしば、非色素性毛髪（例えば、硬毛の小型化の結果として顔面の髭のない領域および頭髪のない頭皮にわたって拡散的に見出されるもの）。あるいくつかの実施形態では、本明細書で使用される「軟毛」は、長さが２ｍｍ未満で、直径が３０μｍ未満である毛髪である。ある特定の実施形態では、本明細書で使用される「軟毛」は、３０μｍ未満の毛幹の直径を有し、その周囲の内毛根鞘の厚みを超えないことが組織学的に決定される毛髪である。
〔図面の簡単な説明〕
４．
〔図１〕ヒト毛包の種類。
【００９７】
〔図２〕皮膚の構造。
【００９８】
〔図３〕ヒト毛包組織の略図。
【００９９】
〔図４〕ヒト毛球の細胞構造。
【０１００】
〔図５〕図５Ａは、先行技術の削皮回転ホイールを示し、図５Ｂは、使用中の先行技術の削皮回転ホイールを示す。
【０１０１】
〔図６〕使用中の先行技術の削皮回転ホイールを示す。
【０１０２】
〔図７〕使用中の先行技術の削皮ハンドピースを示す。
【０１０３】
〔図８〕男性型脱毛症（ＭＰＨＬ）のＨａｍｉｌｔｏｎ−Ｎｏｒｗｏｏｄ分類。
【０１０４】
〔図９〕従来の削皮ハンドピースに装着した、本発明の実施形態に従う本発明の削皮先端部を示す。
【０１０５】
〔図１０〕従来の削皮器を示す。
【０１０６】
〔図１１〕本発明の実施形態に従う削皮先端部の概略図である。
【０１０７】
〔図１２〕本発明の実施形態に従う連結アセンブリの概略図である。
【０１０８】
〔図１３〕本発明の実施形態に従う削皮先端部を示す。
【０１０９】
〔図１４〕本発明の実施形態に従う削皮先端部を示す。
【０１１０】
〔図１５〕本発明の実施形態に従う、使用中の発明の削皮先端部を示す。
【０１１１】
〔図１６〕本発明の実施形態に従う伝動アセンブリの一部を示す。
【０１１２】
〔図１７〕図１７Ａは、本発明の実施形態に従う噴霧装置の正面斜視図であり、図１７Ｂは、本発明の実施形態に従う噴霧装置の背面斜視図である。
【０１１３】
〔図１８〕本発明の実施形態に従う噴霧装置の背面斜視図。
【０１１４】
〔図１９〕図１９Ａは、図１７Ａおよび１７Ｂに示されるハンドピースの構成部分を示す平面図である。図１９Ｂは、本発明の実施形態に従うハンドピースの背面斜視図である。
【０１１５】
〔図２０〕図２０Ａは、本発明の実施形態に従う薬物カートリッジの平面図である。図２０Ｂは、本発明の実施形態に従う薬物カートリッジおよびハンドピースの前端部の平面図である。図２０Ｃは、本発明の実施形態に従う薬物カートリッジおよびハンドピースの前端部の平面図である。図２０Ｄは、本発明の実施形態に従う薬物カートリッジおよびハンドピースの前端部の平面図である。
【０１１６】
〔図２１〕図２１Ａは、本発明の実施形態に従う薬物カートリッジおよびハンドピースの前端部の平面図であり、図２１Ｂは、本発明の実施形態に従う薬物カートリッジおよびハンドピースの前端部の平面図であり、図２１Ｃは、本発明の実施形態に従う薬物カートリッジおよびハンドピースの前端部の平面図であり、図２１Ｄは、本発明の実施形態に従う薬物カートリッジおよびハンドピースの前端部の平面図であり、図２１Ｅは、本発明の実施形態に従う薬物カートリッジおよびハンドピースの前端部の平面図である。
【０１１７】
〔図２２〕対象となる毛包構造体を分類するための基準。
【０１１８】
〔図２３〕削皮術（「ＤＡ」）による外皮攪乱により治療された、ＤＡ前（図２３Ａ）、ＤＡ後（図２３Ｂ）、ＤＡ後１４日目（生検前）（図２３Ｃ）、ＤＡ後２８日目（縫合抜糸後）（図２３Ｄ）、および点状出血の出現を示すように拡大されたＤＡ後に撮影された別の画像（図２３Ｅ）の対象の皮膚の写真。図２３Ｆは、血管が新生された皮膚乳頭を囲む皮膚の表皮小稜の図を提供する。表皮網状突出（Ｅｐｉｄｅｒｍａｌ  ｒｅｔｅ  ｐｅｇｓ）、皮膚乳頭内のループ状毛細血管、および皮膚乳頭を示す。最上の点線によって印の付いた深さまでの攪乱は、点状出血を生じることが期待され得る。最下の点線によって印の付いた深さまでの攪乱は、皮膚乳頭から表層の血管叢への表皮厚みの移行として点状出血およびより均一な出血を生じることが期待され得る。
【０１１９】
〔図２４〕ＰＥＧ−ＮＨＳ／ＰＥＧ−ＡＭヒドロゲルに対するｐＨの関数としてゲル時間を示すグラフである。
【０１２０】
〔図２５〕図２５Ａおよび２５Ｂは、ＰＥＧ−ＮＨＳ／ＰＥＧ−ＡＭヒドロゲルに対するＰＥＧ濃度の関数としてゲル時間を示すグラフである。
【０１２１】
〔図２６〕ＰＥＧ−ＮＨＳ／ＰＥＬヒドロゲルに対するリン酸緩衝液（０．１Ｍ（ひし形）、０．２Ｍ（三角形）、および０．５Ｍ（正方形））中のＰＥＩ濃度の関数としてゲル時間を示すグラフである。
【０１２２】
〔図２７〕ＰＥＧ−ＮＨＳ／ＰＥＧ−アミンヒドロゲル（ひし形）、ＰＥＧ−ＮＨＳ／ＰＥＧ−アミン／キトサンヒドロゲル（正方形）、およびＰＥＧ−ＮＨＳ／ＰＥＩヒドロゲル（三角形）に対するＰＥＧ濃度（ｘ軸）の関数として膨潤度（ｙ軸）を示すグラフである。
【０１２３】
〔図２８〕温度およびＰＶＡ濃度の関数としてＰＶＡ溶液の粘度を示すグラフである。それぞれの濃度に対する左側の棒（ｘ軸）は、２５℃でのせん断粘度（ｃＰ）を示し、それぞれの濃度に対する右側の棒（ｘ軸）は、３０℃でのせん断粘度（ｃＰ）を示す。
〔発明を実施するための形態〕
５．
対象（例えばヒト対象）における禿頭症または脱毛症を治療するための方法が、本明細書に提供され、本方法には、皮膚の罹患領域を外皮攪乱に供することが含まれる。また、対象（例えばヒト）の皮膚領域における、育毛を増強、刺激、もしくは増加させる、または毛髪の厚みを増強もしくは増加させる（いくつかの実施形態では、本明細書中では集合的に、育毛または毛髪の厚みを「促進する」と称する）方法も本明細書に提供され、本方法は、皮膚の罹患領域を外皮攪乱に供することが含まれる。ある特定の実施形態では、禿頭症もしくは脱毛症を治療する、または毛髪の成長もしくは毛髪の厚みを促進するための方法は、治療領域において、新しい毛包の形成（「毛包新生」）、新遺伝子のような毛包の形成、既存する毛包の活性化、既存する毛包の再構成、軟毛数の増加、非軟毛（例えば、中間毛もしくは硬毛）数の増加、および／または硬毛数の増加をもたらす。いくつかの実施形態では、外皮攪乱ステップは、第２の治療ステップと組み合わせて実行され、第２の治療ステップは、本明細書中では「攪乱後治療」と称される。いくつかの実施形態では、外皮攪乱ステップは、単独でまたは攪乱後治療ステップと組み合わせて、１種以上の育毛促進剤による治療を含むステップと組み合わせて実行される。とりわけ、毛髪の成長を促進するために使用され得る、外皮攪乱のための方法および装置もまた、本明細書に提供される。攪乱後のステップに用いる薬学的組成物、および育毛促進剤の治療ステップに用いる薬学的組成物もまた、本明細書に提供される。
【０１２４】
一実施形態では、本明細書に提供される外皮攪乱法は、対象の皮膚領域における毛髪の成長を促進する。いくつかの実施形態では、本明細書に提供される外皮攪乱法は、対象の皮膚の治療領域における毛髪の量および厚みを増加させる。いくつかの実施形態では、本明細書に提供される外皮攪乱法は、対象の皮膚の治療領域における軟毛の量の増加をもたらす。いくつかの実施形態では、本明細書に提供される外皮攪乱法は、対象の皮膚の治療領域における硬毛の量の増加をもたらす。いくつかの実施形態では、本明細書に提供される外皮攪乱法は、対象の皮膚の治療領域における新しい毛包の形成（「毛包新生」）をもたらす。ある特定の実施形態では、本明細書に提供される外皮攪乱法は、対象の皮膚の治療領域における毛包数の増加をもたらす。特定の実施形態では、外皮攪乱法は、対象の皮膚の治療領域における軟毛サイズの毛幹（即ち、直径３０ミクロン未満の直径を有する毛幹）を有する新しい毛包の形成をもたらす。いくつかの実施形態では、外皮攪乱法は、対象の皮膚の治療領域における先在する毛包等の刺激を受けて活性化した毛包数の増加をもたらす。特定の実施形態では、外皮攪乱法は、対象の皮膚の治療領域における軟毛サイズの毛幹を有する先在する毛包数の増加をもたらす。特定の実施形態では、外皮攪乱法は、ＮＬ、ＰＥＬ、およびＰＥＬＡの毛包構造体の存在および／またはその数の増加をもたらす。
【０１２５】
特定の実施形態では、本明細書に記載される外皮攪乱法は、例えば、本明細書に記載される装置を用いる削皮術を含む。他の実施形態では、外皮攪乱法は、レーザーによる処置を含む。様々な外皮攪乱法は、以下の項５．１に記載されているが、本発明は、そのように限定されるべきではなく、いかなる外皮攪乱法が、本明細書に記載される方法に従って使用され得る。
【０１２６】
「攪乱後」の治療もまた、本明細書に提供される。軟毛または硬毛を含む毛髪の成長を促進、攪乱した皮膚の感染症を予防、および／または治癒を促進するために、攪乱後治療を用いて皮膚の外皮攪乱領域を治療するための方法が、本明細書に提供される。いくつかの実施形態では、攪乱後治療は、瘢痕のない、または瘢痕の軽減を伴う治癒を促進する。ある特定の実施形態では、攪乱後治療は、局所治療である。攪乱後治療法に用いる薬学的組成物もまた、本明細書に提供される。
【０１２７】
いくつかの実施形態では、攪乱後治療ステップは、軟毛、硬毛を含む毛髪の成長を促進、毛髪の厚みを増加、攪乱した皮膚の感染症を予防、および／または治癒、例えば傷跡を残さない治癒を促進することを目的とする薬学的組成物の局所投与を含む。いくつかの実施形態では、攪乱後治療ステップに用いる薬学的組成物は、局所投与用に製剤化される。特定の実施形態では、局所投与用に製剤化された薬学的組成物は、非閉塞性である。いくつかの実施形態では、局所投与用に製剤化された非閉塞性の薬学的組成物は、水性製剤（例えばヒドロゲル）、非水性製剤、軟膏、懸濁剤、またはクリーム（例えば乳剤）である。ある特定の実施形態では、攪乱後の局所投与用に製剤化された薬学的組成物は、薬学的有効成分（ＡＰＩ）を含有しない。ある特定の実施形態では、攪乱後の局所治療は、ＡＰＩを含有しない創傷治癒ゲルを含む。ある特定の実施形態では、創傷治癒ゲルは、外皮攪乱直後および約１週間毎日適用される。ある他の実施形態では、攪乱後の局所投与用に製剤化された薬学的組成物は、本明細書（例えば項５．３または５．４）に記載される、またはそうでなければ当該技術分野で知られている任意の薬剤であり得る、薬学的有効成分または薬学的成分を含有する。
【０１２８】
いくつかの実施形態では、攪乱後治療は、外皮攪乱直後に投与される。いくつかの実施形態では、攪乱後治療は、外皮攪乱後のある期間投与される。本明細書中では、「攪乱後の」治療として称されるが、本明細書に記載される攪乱後治療法は、定義により、外皮攪乱後治療ステップに限定されない。いくつかの実施形態では、攪乱後治療は、外皮攪乱前またはその中に投与される。特定の実施形態では、攪乱後治療は、外皮攪乱前、その中、および／またはその後の１つを超える期間、存在する。
【０１２９】
一実施形態では、外皮攪乱法は、本明細書に提供される攪乱後治療と組み合わせて、対象の皮膚領域における毛髪の成長を促進する。いくつかの実施形態では、外皮攪乱法は、本明細書に提供される攪乱後治療と組み合わせて、対象の皮膚の治療領域における毛髪の量または厚みを増加させる。いくつかの実施形態では、外皮攪乱法は、本明細書に提供される攪乱後治療と組み合わせて、対象の皮膚の治療領域における軟毛の量の増加をもたらす。いくつかの実施形態では、外皮攪乱法は、本明細書に提供される攪乱後治療と組み合わせて、対象の皮膚の治療領域における硬毛の量の増加をもたらす。いくつかの実施形態では、外皮攪乱法は、本明細書に提供される攪乱後治療と組み合わせて、対象の皮膚の治療領域における毛包新生をもたらす。ある特定の実施形態では、外皮攪乱法は、本明細書に提供される攪乱後治療と組み合わせて、対象の皮膚の治療領域における毛包数の増加をもたらす。特定の実施形態では、外皮攪乱法は、攪乱後治療と組み合わせて、対象の皮膚の治療領域における軟毛サイズの毛幹（即ち、直径３０ミクロン未満の直径を有する毛幹）を有する新しい毛包の形成をもたらす。いくつかの実施形態では、外皮攪乱法は、本明細書に提供される攪乱後治療と組み合わせて、対象の皮膚の治療領域における先在する毛包等の刺激を受けたまたは活性化した毛包数の増加をもたらす。特定の実施形態では、外皮攪乱法は、攪乱後治療と組み合わせて、対象の皮膚の治療領域における軟毛サイズの毛幹を有する先在する毛包数の増加をもたらす。特定の実施形態では、外皮攪乱法は、攪乱後治療と組み合わせて、ＮＬ、ＰＥＬ、およびＰＥＬＡの毛包構造体の存在および／またはその数の増加をもたらす。
【０１３０】
いくつかの実施形態では、外皮攪乱法は、本明細書に提供される攪乱後治療と組み合わせて、皮膚の治療領域の感染症を予防する。いくつかの実施形態では、外皮攪乱法は、本明細書に提供される攪乱後治療と組み合わせて、攪乱した皮膚の治癒を促進する。いくつかの実施形態では、外皮攪乱法は、本明細書に提供される攪乱後治療と組み合わせて、瘢痕のない、または瘢痕の軽減を伴う攪乱した皮膚の治癒を促進する。
【０１３１】
様々な攪乱後の薬学的組成物および治療法は、以下の項５．２に記載されているが、本発明は、そのように限定されるべきではなく、いかなる局所用薬学的組成物が、本明細書に記載される攪乱後治療ステップに従って使用され得る。
【０１３２】
対象（例えばヒト対象）における禿頭症または脱毛症を治療する方法もまた、本明細書に提供され、本方法は、（ｉ）皮膚罹患領域を外皮攪乱に供し、任意に攪乱後治療ステップと組み合わせて実行することと、（ｉｉ）１種以上の育毛促進剤による治療を含むステップと組み合わせることと、を含む。対象（例えばヒト）の皮膚領域における毛髪の成長または毛髪の厚みを促進する方法もまた、本明細書に提供され、本方法は、（ｉ）皮膚罹患領域を外皮攪乱に供し、任意に攪乱後治療ステップと組み合わせて実行することと、（ｉｉ）１種以上の育毛促進剤による治療を含むステップと組み合わせることと、を含む。ある特定の実施形態では、外皮攪乱（任意に攪乱後治療ステップと組み合わせて）を含む、禿頭症もしくは脱毛症を治療または毛髪の成長もしくは毛髪の厚みを促進する方法は、１種以上の育毛促進剤による治療を含むステップと組み合わせて、治療領域における、毛包新生、存在する毛包の刺激、活性化、もしくは再構成、ＮＬ、ＰＥＬ、もしくはＰＥＬＡの毛包構造体の形成もしくは増加、軟毛数の増加、硬毛数の増加、ならびに／または硬毛数の増加をもたらす。育毛促進剤の治療ステップに用いる薬学的組成物もまた、本明細書に提供される。
【０１３３】
本明細書に使用される「育毛促進剤」という用語は、毛髪の成長または毛髪の厚みを促進する、またはそのような用途を目的とする、および／または毛髪脱落に関連する疾患もしくは状態を治療する、またはそのようなそのような用途を目的とする、いかなる薬剤をも指す。いくつかの実施形態では、育毛促進剤は、軟毛の硬毛への移行を促進する、または促進することを目的とする薬剤である。いくつかの実施形態では、育毛促進剤は、軟毛の成長を増加させる。いくつかの実施形態では、育毛促進剤は、硬毛の成長を増加させる。いくつかの実施形態では、育毛促進剤は、対象の皮膚領域における硬毛と軟毛の比率を増加させる。いくつかの実施形態では、育毛促進剤は、硬毛の成長を維持し、即ち、硬毛の縮小化を防ぐのに役立つ。いくつかの実施形態では、育毛促進剤は、成長期の毛髪の数を増加させるか、または成長期の毛髪の成長を増加させる。いくつかの実施形態では、育毛促進剤は、対象の皮膚領域における成長期の毛髪の休止期の毛髪に対する比率を増加させる。
【０１３４】
一実施形態では、外皮攪乱法（任意に、攪乱後治療ステップと組み合わせて）は、本明細書に提供される１種以上の育毛促進剤による治療を含むステップと組み合わせて、対象の皮膚領域における毛髪の成長を促進する。いくつかの実施形態では、外皮攪乱法（任意に、攪乱後治療ステップと組み合わせて）は、本明細書に提供される１種以上の育毛促進剤による治療を含むステップと組み合わせて、対象の皮膚の治療領域における毛髪の量または厚みを増加させる。いくつかの実施形態では、外皮攪乱法（任意に、攪乱後治療ステップと組み合わせて）は、本明細書に提供される１種以上の育毛促進剤による治療を含むステップと組み合わせて、対象の皮膚の治療領域における軟毛の量の増加をもたらす。いくつかの実施形態では、外皮攪乱法（任意に、攪乱後治療ステップと組み合わせて）は、本明細書に提供される１種以上の育毛促進剤による治療を含むステップと組み合わせて、対象の皮膚の治療領域における硬毛の量の増加をもたらす。いくつかの実施形態では、外皮攪乱法（任意に、攪乱後治療ステップと組み合わせて）は、本明細書に提供される１種以上の育毛促進剤による治療を含むステップと組み合わせて、硬毛の成長の維持をもたらす、即ち、硬毛の縮小化を防ぐのに役立つ。いくつかの実施形態では、外皮攪乱法（任意に、攪乱後治療ステップと組み合わせて）は、本明細書に提供される１種以上の育毛促進剤による治療を含むステップと組み合わせて、対象の皮膚の治療領域における硬毛と軟毛の比率の増加をもたらす。いくつかの実施形態では、外皮攪乱法（任意に、攪乱後治療ステップと組み合わせて）は、本明細書に提供される１種以上の育毛促進剤による治療を含むステップと組み合わせて、対象の皮膚の治療領域における成長期の毛髪量の増加をもたらすか、または成長期の成長を増加させる。いくつかの実施形態では、外皮攪乱法（任意に、攪乱後治療ステップと組み合わせて）は、本明細書に提供される１種以上の育毛促進剤による治療を含むステップと組み合わせて、対象の皮膚の治療領域における成長期の毛髪の休止期の毛髪に対する比率の増加をもたらす。いくつかの実施形態では、外皮攪乱法（任意に、攪乱後治療ステップと組み合わせて）は、本明細書に提供される１種以上の育毛促進剤による治療を含むステップと組み合わせて、対象の皮膚の治療領域における毛包新生をもたらす。ある特定の実施形態では、外皮攪乱法（任意に、攪乱後治療ステップと組み合わせて）は、本明細書に提供される１種以上の育毛促進剤による治療を含むステップと組み合わせて、対象の皮膚の治療領域における毛包数の増加をもたらす。特定の実施形態では、外皮攪乱法（任意に、攪乱後治療ステップと組み合わせて）は、１種以上の育毛促進剤による治療を含むステップと組み合わせて、対象の皮膚の治療領域における非軟毛サイズの毛幹（即ち、直径３０ミクロン以上の直径を有する毛幹）を有する新しい毛包の形成をもたらす。いくつかの実施形態では、外皮攪乱法（任意に、攪乱後治療ステップと組み合わせて）は、本明細書に提供される１種以上の育毛促進剤による治療を含むステップと組み合わせて、対象の皮膚の治療領域における先在する毛包等の刺激を受けて活性化した毛包数の増加をもたらす。特定の実施形態では、外皮攪乱法（任意に、攪乱後治療ステップと組み合わせて）は、１種以上の育毛促進剤による治療を含むステップと組み合わせて、対象の皮膚の治療領域における非軟毛サイズの毛幹を有する先在する毛包数の増加をもたらす。特定の実施形態では、外皮攪乱法（任意に、攪乱後治療ステップと組み合わせて）は、１種以上の育毛促進剤による治療を含むステップと組み合わせて、ＮＬ、ＰＥＬ、およびＰＥＬＡの毛包構造体の存在ならびに／またはその数の増加をもたらす。
【０１３５】
育毛促進剤を含む様々な薬学的組成物および治療法が、以下の項５．３に記載されているが、本発明は、そのように限定されるべきではなく、いかなる薬学的組成物が、本明細書に記載される育毛促進の治療ステップに従って使用され得る。
【０１３６】
５．１  外皮攪乱
本明細書に使用される、外皮攪乱とは、皮膚の創傷清拭、剥離、または創傷、または他の攪乱をもたらす、皮膚および／または外皮系の他の組織の任意の処置を指す。ある特定の実施形態では、外皮攪乱による治療とは、新遺伝子のような（ＮＬ）毛包数の増加、先在するような（ＰＥＬ）または先在するような付着した（ＰＥＬＡ）毛包構造体等の刺激を受けたもしくは活性化したもしくは再構成した毛包の数の増加をもたらす任意の処置を指す（これらの用語は、本明細書に記載される通りである；例えば、以下の項５．８．４を参照のこと）。ある特定の実施形態では、外皮攪乱による治療は、軟毛または硬毛または成長期の毛髪の数の増加をもたらす任意の処置を指す。外皮攪乱は、当該技術分野で知られているか、もしくは本明細書に記載される、または例えば、化学的、機械的、物理的、または電磁気的手段等を用いて、将来利用可能になり得る任意の手段によって達成することができる。一実施形態では、外皮攪乱の治療は、外皮に攪乱した皮膚部位に隣接した皮膚の領域におけるＮＬ、ＰＥＬ、またはＰＥＬＡの毛包構造体の数を増加させる。別の実施形態では、外皮攪乱の治療は、外皮に攪乱した皮膚部位、例えば外皮攪乱の部位の真下におけるＮＬ、ＰＥＬ、またはＰＥＬＡの毛包構造体の数を増加させる。別の実施形態では、外皮攪乱の治療は、外皮に攪乱した皮膚部位、および外皮に攪乱した皮膚部位に隣接した皮膚の領域におけるＮＬ、ＰＥＬ、またはＰＥＬＡの毛包構造体の数を増加させる。一実施形態では、外皮攪乱は、対象の皮膚を攪乱すること（例えば、対象の皮膚の再上皮化の誘導をもたらすこと）を含む。いくつかの実施形態では、上皮のある領域は、部分的または全体的に攪乱する。いくつかの実施形態では、上皮および角質層の両方のある領域は、部分的または全体的に攪乱する。皮膚を攪乱し、再上皮化を誘導し、検出するための方法を含む、皮膚の破壊および再上皮化の考察については、ＰＣＴ公開第ＷＯ２００８／０４２２１６号および第ＷＯ２００６／１０５１０９号を参照されたく、これらのそれぞれは、参照により本明細書に組み込まれる。外皮攪乱を用いて、例えば、火傷、切除、削皮、全層切除、水膨れ、またはアブレーション（ａｂｒａｓｉｏｎ）もしくは創傷の他の形態を誘発することができる。
【０１３７】
外皮攪乱の化学的手段は、例えば、フェノール、トリクロロ酢酸、アスコルビン酸、基底膜を開裂する酵素（Ｆｅｉｎ  ｅｔ  ａｌ．，Ｄｅｒｍａｔｏｌ  Ｓｕｒｇ．２００５；３１（２）：１３９−４７）；考察１４７−８、または、炎症性薬剤を用いて、達成することができる。一実施形態では、外皮攪乱の化学的手段は、例えばアジュバントの適用によって達成することができる、炎症を誘導することによるものである。一実施形態では、アジュバントは、ドデシル硫酸ナトリウム、アルミニウム塩、モノホスホリルリピドＡ、またはセチルトリアンモニウムブロミド（ＣＴＡＢ）のうちの１つ以上である。一実施形態では、炎症は、サイトカイン（例えばＩＬ−１ベータ）の適用によって誘導される。一実施形態では、炎症は、抗原（例えば破傷風トキソイド）の適用によって誘導される。
【０１３８】
外皮攪乱の物理的および機械的手段は、例えば、削皮術（ＤＡ）、粒子に媒介された削皮術（ＰＭＤＡ）、微細削皮術、極微針、極微針ローラー、デルマトーム（ｄｅｒｍａｔｏｍｅ）のプランニング（例えば皮膚プレーニング（ｄｅｒｍａｐｌａｉｎｇ））、コアニングニードル（ｃｏｒｉｎｇ  ｎｅｅｄｌｅ）、穿刺器具、穿孔ツールもしくは他の外科的ツール、吸引ツールもしくは器具、サンドペーパーの使用、フェルトホイール、超音波、ソノポレーション（ｓｏｎｏｐｏｒａｔｉｏｎ）、超音速で加速した生理食塩水および酸素の混合物、テープストリッピング、スパイキーパッチ（ｓｐｉｋｙ  ｐａｔｃｈ）、またはピーリング、または外科的処置（例えば、生検、植皮、植皮、美容整形、ストリップ収穫、頭皮縮小、毛包単位抽出（ＦＵＥ）、ロボットＦＵＥ等）が含まれる。
【０１３９】
外皮攪乱の電磁気的手段は、例えば、加熱傷または熱傷の使用を含む。いくつかの実施形態では、外皮攪乱の電磁気的手段は、レーザーによるもの（例えば、アブレーション、非アブレーション、フラクショナル、非フラクショナル、表層もしくは深層処置を行うもの、および／またはＣＯ２ベース、もしくはエルビウム−ＹＡＧ−ベース、エルビウムガラス、ネオジム：イットリウムアルミニウムガーネット（Ｎｄ：ＹＡＧ）レーザー等のレーザーを用いて）、低レベルレーザー療法処置（例えばＨａｉｒＭａｘ）、またはレーザーアブレーションによるものである。いくつかの実施形態では、外皮攪乱は、毛包の「光バイオ刺激」によって媒介される。例えば、Ｈａｉｒｍａｘ  ＬａｓｅｒｃｏｍｂまたはＬｅｉｍｏレーザーは、毛髪の成長を刺激するために使用され得、単独で、本明細書に記載される別の形態の外皮攪乱と組み合わせて、あるいは項５．２〜５．４もしくは本明細書の他の箇所に記載される、または当該技術分野で公知の処置と組み合わせて使用され得る装置の限定されない例である。
【０１４０】
外皮攪乱はまた、例えば、照射、例えば、可視、赤外線、紫外線、放射線、またはＸ線の照射等の使用を通して達成され得る。一実施形態では、外皮攪乱は、Ｌｅａｖｉｔｔ  ｅｔ  ａｌ．，２００９，Ｃｌｉｎ．Ｄｒｕｇ．Ｉｎｖｅｓｔ．２９：２８３−２９２に記載される光エネルギーまたは超短パルス光によるものである。表皮の攪乱の電気的または磁気的手段は、例えば、電流の印加、電気穿孔法、高周波（ＲＦ）アブレーション、電気脱毛、低電圧電流、イオン導入法（ｉｏｎｔｏｐｈｏｒｅｓｉｓ）、電気泳動法、または電磁気破壊の任意の他の形態を通して達成することができる。電気的または磁気的手段はまた、電場もしくは磁場、または電磁場の誘導も含むことができる。例えば、電流は、交流磁場の適用によって皮膚に誘導され得る。高周波電源は、導電性素子に連結され得、誘導される電流は、皮膚を過熱し、皮膚の変質または攪乱をもたらす。
【０１４１】
いくつかの実施形態では、フラクショナルのような穴パターン（フラクショナルレーザーまたは全層切除を用いて達成されるものと同様の）は、パンチ生検針のアレイを用いることにより達成される。例えば、１−ｍｍのパンチ生検は、１-ｍｍの穴間隔で配置され得る。治療されるべき頭皮または皮膚の他の部位に挿入されるとき、中空皮膚試料を除去することができ、したがって、全層切除モデルに近似する効果がそれぞれの穴の内部でもたらされる。同様に、より小さな穴については、極微針（例えば１９または２１ゲージ針）および／またはマイクロコアニングニードルが使用され得る。
【０１４２】
一実施形態では、外皮攪乱は、極微針アレイを用いて達成される。そのような一実施形態では、極微針アレイは、ローラーまたはフラットプレートの形態である。一実施形態では、極微針アレイは、１．５ｃｍ×１．５ｃｍ〜１５ｃｍ×１５ｃｍの皮膚部位を攪乱することができる。一実施形態では、極微針アレイは、１００ミクロン〜４０００ミクロンの深さで皮膚を攪乱することができる。いくつかの実施形態では、極微針アレイは、中空針を有する。いくつかの実施形態では、極微針アレイトップは、薬物を送達するために注射器を格納することができるルアーロック器具を有する。ある特定の実施形態では、注射器の容量は、１ｍｌ〜３ｍｌである。
【０１４３】
特定の実施形態では、それぞれ、２０１１年６月２日に公開された米国特許出願公開第２０１１−０１３０７１１号、第２０１１−０１３０７４８号、もしくは第２０１１−０１３０７０６号、または２０１１年６月１０日に公開された国際特許出願公開第１１／１２３２１８号（これらのそれぞれは、参照によってその全体が本明細書に組み込まれる）に記載される外皮攪乱の装置または方法は、本発明に従って使用され得る。
【０１４４】
いくつかの実施形態では、本発明に用いる外皮攪乱技術は、皮膚の冷凍処置を除外する。いくつかの実施形態では、本発明に用いる外皮攪乱技術は、皮膚の冷凍処置を含む。
【０１４５】
一実施形態では、外皮攪乱ステップおよび／または攪乱後治療ステップおよび／または育毛促進剤治療ステップのいずれかによる治療法は、皮膚の小さな領域、例えば、１×１ｃｍ、または１．５×１．５ｃｍ、または２×２ｃｍ、または２．５×２．５ｃｍ、または３×３ｃｍもしくはそれ以上）にわたって実行される。いくつかの実施形態では、その治療法が、例えば、頭皮の禿げ領域全体等の皮膚のより大きな領域にわたって実行される。いくつかの実施形態では、皮膚の小さな領域の治療に続いて、皮膚のより大きな領域の治療を行う。いくつかの実施形態では、１つもしくは複数の治療ステップは、例えば、治療により接触された領域が、処置により接触されない領域と交互になるように処置されるべき領域にメッシュまたは格子のような被覆材を適用することによって、皮膚の交互の領域にわたって実行される。
【０１４６】
５．１．１  削皮術
特定の実施形態では、外皮攪乱は、皮膚表面修復術（ｓｋｉｎ  ｒｅｓｕｒｆａｃｉｎｇ  ｔｅｃｈｎｉｑｕｅ）として数十年間使用されている定評のある皮膚科手術である削皮術（本明細書中では「ＤＡ」とも称される）によるものである（Ｇｒｉｍｅｓ，２００５，Ｍｉｃｒｏｄｅｒｍａｂｒａｓｉｏｎ．Ｄｅｒｍａｔｏｌ  Ｓｕｒｇ  ３１：１３５１−１３５４）。機械的削皮術の人気が、近年、レーザーベースの処置の出現で減少しているが、削皮術は、にきびおよび他の外傷に起因する顔面の瘢痕を除去するために、今もなお使用されている。小型の携帯用機械的削皮術機器は、異なる皮膚の深さレベルの表皮および真皮を除去するために、異なる回転速度で操作される取替え可能なダイヤモンドフライス（ｄｉａｍｏｎｄ  ｆｒａｉｓｅ）を使用する。削皮術により処置された成人ヒト皮膚は、５〜７日で完全に再上皮化され、最長数週間、軽度の赤みを伴う。削皮術は、本明細書の他の場所に記載される（例えば実施例に記載されるような）当該技術分野で公知の、または将来入手可能になる任意の技術を用いて実行され得る。例えば、削皮術は、Ａｓｅｐｔｉｃｏ  Ｅｃｏｎｏ−Ｄｅｒｍａｂｒａｄｅｒ、Ａｄｖａｎｃｅ  Ｍｉｃｒｏｄｅｒｍ  ＤＸシステム、またはＭ２−Ｔシステムを用いて酸化アルミニウム結晶を有する標準的なＤＡ、およびダイヤモンドフライス、ワイヤーブラシ等を備えたＢｅｌｌ  Ｈａｎｄ  Ｅｎｇｉｎｅを用いる標準的なＤＡを用いて実行され得る。具体的な実施形態では、削皮術は、点状の毛細血管出血（推定深さ１００〜１５０ミクロン、瘢痕を生じるとは予想されない）を達成するために、標準的なグリットダイヤモンドフライスを備えた手持ち式削皮器を用いて実行され得る。いくつかの実施形態では、削皮法は、アルミナ、シリカ、または氷ベースの削皮術である（例えばＷｅｂｅｒ、米国特許第６，７６４，４９３号、米国特許第６，７２６，６９３号、および米国特許第６，３０６，１１９号によって記載されるような）。
【０１４７】
いくつかの実施形態では、ＤＡは、砥石車を用いて実行される。いくつかの実施形態では、砥石車を用いたＤＡは、点状出血を達成するために使用される。他の実施形態では、削皮術は、より大きな玉のような出血および擦り切れたコラーゲンを達成するために、砥石車を用いて実行され得る。また、任意選択の同じ終点を達成する研削布等の無動力装置も、削皮術を達成するために使用することもできる。
【０１４８】
いくつかの実施形態では、ＤＡは、微細削皮術（本明細書中では、「ＭＤＡ」とも称される）のために一般的に使用される装置を用いて達成される。例えば、そのようなＤＡプロトコルでは、微細削皮装置を使用して、一般に、微細削皮術用のものよりも皮膚のより大きな深さおよび／または領域を除去する。いくつかの実施形態では、微細削皮装置は、滅菌条件下で使用される。いくつかの実施形態では、削皮術は、真皮乳頭層への角質層および表皮の除去を示す点状出血の観察時に、治療を停止する時点まで微細削皮術用装置を用いることによって達成される。他の実施形態では、削皮術は、深層の真皮乳頭層および真皮網状層への角質層および表皮の除去を示すより大きな玉のような出血および擦り切れたコラーゲンの観察時に、治療を停止する時点まで微細削皮術用装置を用いることによって達成される。いくつかの実施形態では、この延長した使用は、皮膚除去プロセスを加速し得る、出力圧力の増加およびアブレーションの粒径の増加を伴って微細削皮装置を使用することによって軽減される。
【０１４９】
いくつかの実施形態では、ＤＡは、例えば、アルミナ、氷、またはシリカ系粒子を用いた粒子衝突（本明細書中で「粒子に媒介された削皮術」（「ＰＭＤＡ」）としても称される）による表皮の除去によって達成される。いくつかのそのような実施形態では、ミクロンサイズに粒子は、当該技術分野で公知の粒子砲等のハンドピースの短ストロークを介して皮膚の表面に向かって噴射される。粒子の速度は、陽圧または陰圧によって制御される。粒子衝突ＤＡ（例えばＰＭＤＡ）により除去された皮膚の深さは、皮膚に衝突する粒子の体積、吸気圧力または陽圧、ハンドピースの運動速度、および皮膚の面積当たりの通過数の関数である。
【０１５０】
いくつかの実施形態では、本発明に用いる削皮技術は、皮膚の冷凍処置を除外する。いくつかの実施形態では、本発明に用いる削皮技術は、皮膚の冷凍処置を含む。冷凍処置は、より制御され、一貫した削皮を行うために、皮膚をより強固にするために、歯車型削皮器（ｗｈｅｅｌ  ｄｅｒｍａｂｒａｄｅｒ）とともに行われる。
【０１５１】
上で論じられた従来の手持ち式削皮装置の不利点に対処するために、従来の削皮器の回転出力を往復運動に変換する削皮先端部が、本明細書に記載される。さらに、本発明の削皮先端部は、ユーザのための人間工学を改善するために角度オフセットを使用する。本発明の実施形態は、改善された人間工学、出血および飛び散りの減少、より良好な臨床医による制御、毛髪が薄くなりつつある領域に用いる良好な適合性、毛髪の温存（ｈａｉｒ−ｓｐａｒｉｎｇ）、および単回使用の使い捨てユニットを含む、従来の削皮先端部を超えるいくつかの利点を有する。
【０１５２】
図９に、従来の削皮器と共に使用することができ、標準的な削皮器の回転運動を往復運動に変換する削皮先端部２２０の一実施形態を示す。示されるように、本実施形態は、標準的な削皮先端部用の直接交換として互換性があるように設計され、標準的な削皮ハンドピース２２２と共に使用することができる。本発明の削皮先端部を使用することができる標準的な削皮器の一例は、図１０に示され、これはＷｏｏｄｉｎｖｉｌｌｅ，ＷＡのＡｓｅｐｔｉｃｏ，Ｉｎｃ．により製造されるＴｏｒｑｕｅ  Ｐｌｕｓ＋削皮器、Ｍｏｄｅｌ
ＡＥＵ−１２Ｃである。一般的に、削皮器は、制御装置２２３、削皮ハンドピース２２２、およびハンドピース２２２を制御装置２２３に接続するコード２２４を含む。図９で示されるように、本発明の削皮先端部２２０は、従来の削皮ハンドピース２２２の前端部２２５を単に取り付けられ、それによってハンドピースの回転運動を往復運動に変換する。
【０１５３】
本発明の削皮先端部における従来の削皮先端部の回転運動の往復運動への変換は、伝動装置によって達成される。歯車をベースにした伝動、弾性リンクを使用する伝動、または歯車および弾性リンクの両方の組み合わせのような、回転運動を往復運動に変換する手段を構築する多くの方法があるが、伝動の一実施形態が、図１１を参照して説明される。
【０１５４】
図１１で示されるように、本実施形態では、削皮先端部２２０は、歯車／リンクを変換する伝動部２２６を格納する。この実施形態では、第１の組のかさマイター歯車２２８が、ハンドピース２２２の回転出力を、ハンドピース２２２の駆動装置の回転方向に対して本質的には直交する回転出力に変換する。歯車２２８は、ナイロン、アセタールまたは他の好適な耐久性のある低摩擦性プラスチックから構成され得、直径約６．３５ｍｍであり得、一般には、１ｍｍあたり約１．９個の歯を有する。第１の組のかさ歯車２２８は、例えば、ステンレス鋼から作製され得、直径約２．３６ｍｍである、駆動軸２３０によって駆動される。そのような駆動軸２３０は、ハンドピースの駆動装置への接続のためのハンドピース２２２の前端部２２５への挿入に適している。第１の組のかさ歯車２２８は、機関車のリンク機構に類似した連結アセンブリ２３２に接続する。連結アセンブリ２３２は、従来のハンドピース２２２の直交回転運動を直交往復運動に変換する。図１２で見ることができるように、連結アセンブリ２３２は、入力駆動輪２３４、出力駆動輪２３６、および少なくとも１つの連結棒２３８を含む。また、図１２で見ることができるように、連結棒２３８の第１の末端部は、入力駆動輪２３４のエッジ部に取り付け、連結棒２３８の第２の末端部は、出力駆動輪２３６のエッジ部に取り付ける。
【０１５５】
図１２で示されるように、連結アセンブリ２３２では、入力駆動輪２３４は、出力駆動輪２３６の直径よりも小さい半径を通して回転する。したがって、入力駆動輪２３４が３６０度の回転を完了すると、出力駆動輪２３６は、＋／−１８０度未満の動作を通して往復運動する。つまり、出力駆動輪２３４は、完全な３６０度の回転を決して完了せず、その代わりに、矢印２４２によって示されるように、前後に往復運動する。連結アセンブリ３２の入力駆動輪２３４および出力駆動輪２３６の直径を変更することによって、＋／−１８０度から下方に往復運動する振幅を調節することができる。本実施形態では、入力駆動輪２３４は、直径約６．３５ｍｍ（インチ）であり、出力駆動輪２３６は、直径約９．５３ｍｍであり、連結棒２３８は、長さ約１２．７ｍｍである。好ましくは、これは、約＋／−４５度の往復運動する出力を提供する。しかしながら、当業者には容易に明白であるため、入力および出力駆動輪２３４、２３６の直径および／または連結棒２３８の長さは、往復運動の角度を変更するために変更することができ、これは１度から１７９度のいずれの範囲におよび得る。連結アセンブリ２３２は、例えば、ナイロン、アセタールまたは他の好適な耐久性のある低摩擦性プラスチップから構成され得る。
【０１５６】
図１１を再度参照すると、連結アセンブリ２３２の往復運動する出力駆動輪２３６は、連結アセンブリ２３２の往復運動する出力を、本実施形態では、ハンドピース２２２の細長い軸に対して約４５度の角度での往復運動する出力に変換する、第２の組の同様の（大きさ、材料、ピッチ等）かさマイター歯車２４４に接続する。４５度の往復運動する出力は、例えば、ステンレス鋼から作製され得る第２の駆動輪２４６に接続する。この第２の駆動輪２４６は、例えば、ポリプロピレンから作製され得、約１２．７ｍｍの直径を有し得る円形パッド２４８に接続される。２４、３０、または３６の粗い（ｃｏｕｒｓｅ）ＣＡＭＩ粒度を有する結合した酸化アルミニウム粒子から構成され得る削皮ディスク２５０が、パッド２４８によって支持される。加えて、Ｊｏｈｎｓｏｎ  Ａｂｒａｓｉｖｅｓ，Ｊａｆｆｅｒｙ  ＮＨのＷｅｔ−Ｋｕｔの研削材を裏張りした防水布が、３Ｍ−４９５２等の超高接着テープを用いて支持パッドに適切に固定され得る。したがって、図１３および１４で見ることができるように、第２の駆動輪２４６の往復運動は、削皮ディスク２５０に移動される。本明細書に記載される歯車装置は全て、直径は、所望の伝動速度およびトルク変換を達成するために変化させることができる。
【０１５７】
上記の伝動部品は全て、例えば、ポリプロピレン筺体または他の好適な材料から作製される筺体中に格納され得る。筺体は、最大の人間工学を達成するために成形された外部表面を有する長さが約６３．５ｍｍであり得る。内部の近位直径は、約１５ｍｍであるように設計され、これは、図９で示されるように、筺体、ひいては、削皮先端部２２０が従来の削皮ハンドピース２２２の前端部分２２５に挿入することを可能にする。ハンドピース２２２への固定を提供するために、約１４．４ｍｍの内径を有する同時成形された低硬度（ｌｏｗ  ｄｕｒｏｍｅｔｅｒ）の熱可塑性ゴム（ＴＰＲ）または熱可塑性エラストマー（ＴＰＥ）挿入部２５２が、削皮先端部２２０の内側に含まれる。図１１で見ることができるように、挿入部２５２は、従来の削皮ハンドピース２２２の末端平面部２５４に係合し、それによって削皮先端部２２０とハンドピース２２２との間の摩擦適合を形成するように設計される。
【０１５８】
さらに、図１１および１５で見ることができるように、本発明の削皮先端部２２０は、ハンドピースの長手方向軸と先端部との間に約４５度の角度２５６を含む。既に論じられたように、そのような角度は、人間工学を改善し、ハンドピースが、むしろペンまたは画家の絵筆のような握持を可能にする。追加された角度はまた、臨床医の快適性および全体の制御を改善する。当業者には容易に明らかなように、異なる角度を用いて、削皮先端部の人間工学を変化させることができる。さらに、別の実施形態では、臨床医および／または患者および／または行われる処置に削皮先端部２２０をより良好に適応させるために、ハンドピース２２２の長手方向軸と先端部との間の角度が臨床医によって調整することができるように、削皮先端部２２０は、調節可能な先端部を含むことができる。
【０１５９】
さらに、削皮ディスク２５０を含む先端部が皮膚表面により良好に適合することができるように、図１６で示されるように、第２の駆動輪２４６は、複数のノッチ部２５８を含むことができる。これらのノッチ部２５８は、第２の駆動輪２４４が屈曲することを可能にし、それによって、削皮ディスク２５０が皮膚表面に適合することができる。皮膚表面への研削パッド２５０の適合性を達成するための他の方法としては、玉継ぎ手およびソケット継ぎ手または自在継ぎ手の使用が挙げられるが、これらに限定されない。
【０１６０】
削皮先端部の別の実施形態では、単回使用の使い捨て削皮先端部用に前述された全ての安価なプラスチック製の伝動部品は、ステンレス鋼から作製され、再利用可能な削皮先端部の本体に組み込むことができる。本質的には、使用後、剥離して廃棄することができる削皮ディスクを除いて往復する削皮先端部の全ての部分が再利用可能となる。したがって、再利用可能な削皮先端部を清掃した後、新しい削皮ディスクを使用前に取り付けることができる。
【０１６１】
臨床医へのさらなる利便性として、上記の削皮先端部は、処置で使用される薬学的組成物を含有する管（または他の同様の容器）を含むキットに梱包され得、これらの例には、項５．２に記載される攪乱後治療剤、項５．３に記載される育毛促進剤、項５．４または本明細書の他の箇所に記載されるまたはそうでなければ当該技術分野で公知の他の薬物が含まれる。したがって、キットには、診療所において毛包処置を行うために全ての必要な消耗品が含まれる。
【０１６２】
別の実施形態では、本発明は、本明細書に開示される削皮先端部で皮膚表面を攪乱し、その後、項５．２に記載される１種以上の攪乱後治療剤、項５．３に記載される１種以上の育毛促進剤、項５．４または本明細書の他の箇所に記載されるまたはそうでなければ当該技術分野で公知の他の薬物を適用することを含む毛髪の成長を誘発する方法を対象とする。
【０１６３】
５．１．２  レーザー
他の特定の実施形態では、外皮攪乱は、レーザー処置によるものである。外皮攪乱のための例示的なレーザー処置には、フラクショナルレーザー（ｆｒａｃｔｉｏｎａｌ  ｌａｓｅｒ）（例えばＦｒａｘｅｌ）、レーザーアブレーション、エルビウム−ＹＡＧレーザー、エルビウムガラスレーザー、超パルスＣＯ２フラクショナルレーザー、超パルスＣＯ２アブレーションレーザー、スムースピールフル（Ｓｍｏｏｔｈ  Ｐｅｅｌ  Ｆｕｌｌ）アブレーションエルビウムレーザー（Ｃａｎｄｅｌａ）、またはネオジム：イットリウムアルミニウムガーネット（Ｎｄ：ＹＡＧ）レーザーが含まれる。本明細書に記載される、当該技術分野で公知の、または将来記載される任意の他のレーザー処置もまた、本明細書に記載される方法に使用することができる。一実施形態では、達成された外皮攪乱が削皮術（例えば、本明細書に記載される削皮法）によって達成されたものと最も類似しているレーザー処置が選択される。一実施形態では、レーザー処置による外皮攪乱は、フラクショナルレーザーによるものである。例えば、米国仮出願公開第６１／２６２，８２０号、第６１／２６２，８４０号、第６１／２６２，８３１号に記載されるレーザー処置を参照されたく、これらのそれぞれは、参照によってその全体が本明細書に組み込まれる。フラクショナルレーザー処置の一例は、（例えば、Ｆｒａｘｅｌ（登録商標）レーザー（Ｓｏｌｔａ  Ｍｅｄｉｃａｌ）を用いた）約１５４０ｎｍまたは約１５５０ｎｍでのエルビウム−ＹＡＧレーザーによる処置である。１５４０または１５５０ｎｍでのエルビウム−ＹＡＧレーザーによる処置は、一般には、非アブレーションであり、レーザー処置に特有である点状出血は、角質層が無傷で残っているため、観察されない。レーザー処置の進路にある死滅した（表皮および／または真皮）細胞柱は、「凝塊」と称される。別の実施形態では、レーザー処置による外皮攪乱は、例えば、１０，６００ｎｍでＣＯ２レーザーを用いたフラクショナルレーザーによるものである。１０，６００ｎｍでのＣＯ２レーザーは、一般には、アブレーションであり、一般に、点状出血の出現をもたらす。別の実施形態では、レーザーは、例えば１５５０ｎｍで使用されるフラクショナルエルビウムガラスレーザーである。特定の実施形態では、対象は、Ｌｅｅ  ｅｔ  ａｌ．，２０１１，Ｊｏｕｒｎａｌ  ｏｆ  ｔｈｅ  Ｅｕｒｏｐｅａｎ  Ａｃａｄｅｍｙ  ｏｆ  Ｄｅｒｍａｔｏｌｏｇｙ  ａｎｄ  Ｖｅｎｅｒｅｏｌｏｇｙ  ２５：１４５０−１４５４（参照によってその全体が本明細書に組み込まれる）に記載されるように、５〜１０ｍｍのチップを用いて、６ｍＪのパルスエネルギー、８００ｓｐｏｔ／ｃｍ２密度、および静的モードで、２週間間隔で１５５０ｎｍのフラクションＥｒ：ガラスレーザーによる１種以上（２〜１０またはそれ以上）の治療を受容する。Ｋｉｍ  ｅｔ  ａｌ．，２０１１，Ｄｅｒｍａｔｏｌ
Ｓｕｒｇ  ３７：４１−５１を参照されたく、これは参照によってその全体が本明細書に組み込まれる。
【０１６４】
標準的なＣＯ２またはエルビウム−ＹＡＧまたはエルビウムガラスレーザーを用いて、削皮術と同様の、表層および任意に広範囲にわたる外皮攪乱を形成することができる（以下に論じられる）。（特に非アブレーション）レーザーの凝固特性により点状出血の臨床的エンドポイントが達成されない場合があるが、レーザーの使用は、角質層および表皮またはその一部を効果的に除去するために皮膚破壊の特定の深さを選択するのを可能にする利点を有する。
【０１６５】
一実施形態では、レーザー処置はアブレーションである。例えば、組織のフルアブレーションは、ＣＯ２レーザーによる１０，６００ｎｍまたはエルビウム−ＹＡＧレーザーによる２９４０ｎｍの波長で組織の水を標的とすることによって生じる。レーザー処置のこの様式では、表皮が完全に除去され、真皮は熱的組織損傷を受ける。組織アブレーションの深さは、表皮のフルアブレーションであっても、表皮の部分的アブレーションであってもよく、両方の様式は、再生のために不可欠な炎症カスケードを誘発するために皮膚への十分な創傷をもたらす。別の変形では、アブレーションの深さは、深い創傷を作出するために真皮に部分的に延在させてよい。その後、露出した皮膚表面は、１種以上の育毛促進剤により治療され、代替として、１種以上の育毛促進剤は、初期の再上皮化が既に現れてから皮膚に送達し、生物学的な残屑除去プロセスによって組織部位からの育毛促進剤含有持続性薬剤のクリアランスおよび押出を防ぐことができる。一実施形態では、１種以上の育毛促進剤は、組織に適合する生体適合性のある生体吸収性ポリマーからなる持続放出型持続性薬剤によって送達される。
【０１６６】
標準的な全層切除モデルは、動物モデルにおいてはさみまたは外科用メスを用いて作製される（国際特許出願公開第ＷＯ２０１１／０３１９９０号（参照によってその全体が本明細書に組み込まれる）の項２８〜３０および３２の例も参照のこと）。本明細書に使用するために企図されるが、全層切除は、瘢痕化のリスクを伴う。しかしながら、様々なフラクショナルレーザーの様式を使用して、格子パターンにおける同様の深い破壊を達成することができ得る。フラクショナルレーザーを使用して、例えば、１−ｍｍの穴間隔を有する直径１-ｍｍの穴を「開ける」ことができる（フラクショナルレーザーは、より小さな寸法の穴を作製することができる）。皮膚が１-ｍｍの穴の内部で完全に除去されるが、周囲の無傷の皮膚は、瘢痕化を防ぎ、したがって、全層切除モデルがそれぞれの穴の内部で引き起こされる。
【０１６７】
いくつかの実施形態では、レーザーによる外皮攪乱は、非フラクショナルかつアブレーションである。このような一実施形態では、非フラクショナルアブレーション外皮攪乱は、フルバルクアブレーションによるものであり、治療の全領域の組織が取り除かれる。一実施形態では、バルクアブレーションによる非フラクショナルアブレーション外皮攪乱は、１．５ｃｍ×１．５ｃｍ〜１５ｃｍ×１５ｃｍの領域にわたるものである。一実施形態では、バルクアブレーションによる非フラクショナルアブレーション外皮攪乱は、二酸化炭素レーザーを用いて１０，６００ｎｍで達成される。一実施形態では、バルクアブレーションによる非フラクショナルアブレーション外皮攪乱は、エルビウム−ＹＡＧレーザーを用いて２９４０ｎｍで達成される。
【０１６８】
いくつかの実施形態では、レーザー処置は、フラクショナルかつアブレーションである。例えば、フラクショナル組織アブレーションは、１０，６００ｎｍのＣＯ２レーザーまたは２９４０ｎｍのエルビウム−ＹＡＧレーザー（例えば、Ｌｕｘ２９４０レーザー、Ｐｉｘｅｌレーザー、またはプロフラクショナルレーザー）を用いて達成することができる。いくつかのそのような実施形態では、レーザービームは、最長４ｍｍの深さで皮膚に熱傷のマイクロカラムを形成し、プロセスにおいて組織を蒸発させる。フラクショナルレーザーによるアブレーション処置は、皮膚の一部分のアブレーションをもたらし、表皮を迅速に再定着させるために、正常な皮膚の介在領域を無傷のままにしておく。１セッション当たり皮膚の約１５％〜２５％が、処置される。マイクロサーマルゾーン（ｍｉｃｒｏ  ｔｈｅｒｍａｌ  ｚｏｎｅｓ、ＭＴＺ）の密度を変化させて、無傷の皮膚および生存細胞によって囲まれた損傷カラムの密度の高い「格子」を形成することができる。治療領域上の格子の密度は、重要な役割を果たす。格子の密度が高いほど、熱傷が多くなり、創傷の種類が完全なアブレーションに近づく。したがって、本明細書に開示される方法に用いるのに適切である「最適な」ＭＴＺ密度があり得ることが理解されよう。一実施形態では、１種以上の育毛促進剤が、創傷直後または初期再上皮化が生じた後に真皮に送達される。
【０１６９】
一実施形態では、フラクショナルアブレーション外皮攪乱は、皮膚への１００ミクロン〜４０００ミクロンの深さで皮膚のフラクショナルアブレーションをもたらすか、または全層切除創傷の深さに近い深さで皮膚のフラクショナルアブレーションをもたらす。このような一実施形態では、フラクショナルアブレーション外皮攪乱は、１．５ｃｍ×１．５ｃｍ〜１５ｃｍ×１５ｃｍの領域にわたって皮膚のフラクショナルアブレーションをもたらす。別のこのような実施形態では、フラクショナルアブレーション外皮攪乱は、処置の全領域のフルバルクアブレーションの深さ密度に近いフラクショナルアブレーションのマイクロサーマルゾーンの深さ密度で皮膚のフラクショナルアブレーションをもたらす。
【０１７０】
一実施形態では、フラクショナルアブレーション外皮攪乱は、フルバルクアブレーションによるものであり、治療の全領域の組織が取り除かれる。このような一実施形態では、バルクアブレーションによるフラクショナルアブレーション外皮攪乱は、１．５ｃｍ×１．５ｃｍ〜１５ｃｍ×１５ｃｍの領域にわたるものである。このような一実施形態では、バルクアブレーションによるフラクショナルアブレーション外皮攪乱は、二酸化炭素レーザーを用いて、１０，６００ｎｍで達成される。このような一実施形態では、バルクアブレーションによるフラクショナルでアブレーションの外皮攪乱は、エルビウム−ＹＡＧレーザーを用いて、２９４０ｎｍで達成される。
【０１７１】
別の実施形態では、レーザー処置の様式は、非アブレーションであり、角質層および表皮が処置後無傷であり、深い熱処理のために選択された真皮は、組織への必要な損傷を必要とされる。これは、レーザー処置中、表皮を冷却させることによって達成することができる。例えば、寒剤スプレーを用いた表皮の時限冷却を使用し得るが、一方、レーザーは、真皮に深い熱損傷を与える。この適用では、皮膚への処置の深さは、１ｍｍ〜３ｍｍであり得る。また、銅またはサファイアチップ等の接触冷却を使用され得る。非アブレーションであるレーザーは、１０００〜１６００ｎｍの発光波長を有し、熱傷を生じるが、組織を蒸発させないエネルギーフルエンスを有する。非アブレーションレーザーは、バルクであり得、単一のスポットビームを使用して、均一な組織部分を処置することができる。いくつかの実施形態では、所望の効果を達成するために、複数の処置が必要とされる。一実施形態では、１種以上の育毛促進剤は、高分子マイクロデポー（ｍｉｃｒｏ−ｄｅｐｏｔｓ）において真皮に深く送達され、持続様式で放出される。非アブレーションであるレーザーは、１５４０ｎｍまたは１５５０ｎｍのパルス色素レーザー（血管）、１０６４  Ｎｄ：ＹＡＧレーザー、またはエルビウム−ＹＡＧレーザー（例えばＦｒａｘｅｌ（登録商標）レーザー）を含む。約１５４０ｎｍまたは約１５５０ｎｍのエルビウム−ＹＡＧレーザーの使用は、２９４０ｎｍのその使用とは対照的に、真皮および表皮のゾーンを「凝固させ」（「凝固物」を形成する）、角質層を本質的には無傷の状態のままにする。
【０１７２】
別の実施形態では、レーザー処置の様式は、フラクショナルで非アブレーションである。フラクショナルで非アブレーションのレーザーによる処置は、皮膚の一部分の攪乱をもたらし、表皮を迅速に再定着させるために、正常な皮膚の介在領域を無傷のままとする。１セッション当たり皮膚の約１５％〜２５％が、処置される。いかなる非アブレーションプロセスでも見られるように、皮膚の関門機能が維持される一方、真皮の深い熱的加熱を生じ得る。したがって、真皮および表皮のゾーンが凝固され、角質層が本質的には無傷のままの状態となる。このプロセスには、「フラクショナル光熱融解」という新しい名称が付されており、例えば、約１５４０ｎｍまたは１５５０ｎｍの発光を有するエルビウム−ＹＡＧレーザーを用いて達成することができる。一実施形態では、１種以上の育毛促進剤は、組織損傷直後、真皮に深く送達される。別の実施形態では、組織損傷のバルクおよびフラクショナルでアブレーションの様式の組み合わせが使用される。
【０１７３】
特定の実施形態では、レーザーによるフラクショナルで非アブレーションの外皮攪乱が、１５００〜１５９０ｎｍのエルビウム−ＹＡＧレーザーの使用によって行われる。
【０１７４】
特定の実施形態では、例えば、３０〜５０歳の白人男性のためのレーザー処置の様式は、１５５０ｎｍのエルビウム−ＹＡＧレーザーを、５０〜７０Ｊ／ｃｍ２、処置レベル８〜１０（「ドット」の密度）、８回のパスの設定で用いたフラクショナルで非アブレーションの様式である。この点において、レーザー装置は、毛髪の成長を促進するようにレーザーを動作するためのパラメータを設定するために、選択肢のメニューを操作者に提供するタッチパッドスクリーンを装備することができる。例えば、この装置をプログラム化して、育毛対脱毛、皮膚色の選択、毛包密度、電力設定等の選択を操作者に提供することができる。
【０１７５】
別の実施形態では、レーザーの使用を含む治療は、光エネルギーの熱エネルギーへの効率的なチャネリングのために、１０００〜１６００ｎｍの波長で光を吸収する化合物の皮膚への投与を含む。エネルギーをチャネリングするこの方法は、皮膚内で熱傷のマイクロゾーンを生じ得る。化合物は、治療ゾーンにおいて均一に皮膚に送達され、続いて、赤外線の振動エネルギーを効率的に捕捉するために非アブレーションレーザーを用いて照射され得る。この方法は、組織の蒸発を生じることなく、均等に分布し、深い熱傷をもたらし得る。
【０１７６】
別の実施形態では、レーザーの使用を含む治療は、高親水性があり、電荷を有する、例えば、創傷治癒プロセスの一部として、マトリックスが食作用によって除去されるのを防ぐために、共有結合またはイオン結合によって真皮に結合される、マトリックス内にカプセル化される１種以上の育毛促進剤の投与を含む。
【０１７７】
別の実施形態では、レーザーの使用を含む処置は、特に、創傷が深く、大きな領域を覆い、バルクアブレーションされる場合、新しく形成された創傷上に生体適合性のある人工合成代用皮膚を配置するステップを含む。このプロセスは、しばしば、瘢痕組織の形成および皮膚の機能の消失に至る、組織の大きな領域の消失後に生じる急速な創傷の収縮を最小限に抑える、または防ぐのに役立てることができる。一実施形態では、生体適合性のある人工合成代用皮膚は、本明細書に記載される徐放型育毛促進剤製剤の持続性薬剤と共に浸透される。この処置方法は、治療診療所で１回のセッションで頭皮上の大きな禿げ領域を治療することが可能であり得る。いくつかの実施形態では、他の分子もまた、例えば、さらなる疼痛を防ぐためおよび感染症の最小化のための麻酔剤および抗生物質、または本明細書に記載される他の化合物等の代用皮膚を通して部位で共溶出される。代用皮膚はまた、１種以上の育毛促進剤および／または本明細書に記載される他の化合物の存在または不在下で、事前に冷却され、創傷に適用されて、患者への快適さを提供することができる。この治療様式は、１種以上の育毛促進剤または他の化合物が、創傷が治癒するにつれて、創傷部位から剥がれるのを防ぐことができる。
【０１７８】
５．１．３  制御された外皮攪乱
前述の外皮攪乱法は、攪乱の範囲の制御および／または外皮に攪乱した皮膚が治癒する方法の制御を発揮する様式において実行することができる。一実施形態では、外皮攪乱法は、毛髪の成長が望ましい皮膚の領域への表層創傷のみをもたらす。特定の実施形態では、創傷の程度は、攪乱の深さを制御することによって最小限に抑えられる。例えば、本明細書に記載される外皮攪乱の処置は、表皮の一部もしくは全て、角質層の一部もしくは全て、または真皮乳頭層、真皮網状層、および／または下皮により深く、攪乱を制限するように制御され得る。点状出血の発生は、角質層、表皮（またはその一部）、および表層の真皮乳頭層等の真皮の上層の部分の除去を示すであろう。増加した出血の発生は、深層の真皮乳頭層および真皮網状層へのより深い浸透（したがって、攪乱）を示すであろう。
【０１７９】
一実施形態では、外皮攪乱は、表皮を除去しない。いくつかの実施形態では、外皮攪乱は、表皮の一部の除去を達成する。いくつかの実施形態では、外皮攪乱は、全表皮を除去する。いくつかの実施形態では、外皮攪乱は、表皮の全ておよび真皮の一部を除去する。いくつかの実施形態では、外皮攪乱は、角質層の一部を除去する。いくつかの実施形態では、外皮攪乱は、角質層を除去する。いくつかの実施形態では、外皮攪乱は、真皮乳頭層の一部を除去する。いくつかの実施形態では、外皮攪乱は、さらに表層の真皮乳頭層の一部を除去する。いくつかの実施形態では、外皮攪乱は、深層の真皮乳頭層の一部を除去する。いくつかの実施形態では、外皮攪乱は、真皮乳頭層を除去する。いくつかの実施形態では、外皮攪乱は、真皮網状層または真皮網状層の一部を除去する。外皮攪乱の深さは、特定の処置領域での皮膚の厚みによって異なる。例えば、瞼の皮膚は、頭皮の皮膚よりも著しく薄い。点状出血の発生は、表皮および真皮の部分が除去されていることを示す。より深い浸透は、はるかに多い出血をもたらし得、攪乱は、下皮までも深く入り込むことができる。
【０１８０】
特定の実施形態では、外皮攪乱は、点状出血の臨床的終点まで行われる。いくつかの実施形態では、この深さは、毛包乳頭の血管レベルに達する。いくつかの実施形態では、この深さは、例えば、表皮突起間の真皮乳頭層の領域等の皮膚乳頭内のループ状毛細血管の血管レベルよりも深く入り込まない（図２３を参照）。いくつかの実施形態では、外皮攪乱は、真皮を穿孔しない。いくつかの実施形態では、外皮攪乱は、処置した皮膚の領域における毛包の、全て、またはいくつかの実施形態では、ほとんどを完全に除去しない。一実施形態では、外皮攪乱は、真皮網状層を穿孔しない。一実施形態では、外皮攪乱は、真皮乳頭層の半分を超えて穿孔しない。
【０１８１】
いくつかの実施形態では、１つ以上の前述の方法による外皮攪乱は、５〜４０μｍ、４０〜１００μｍ、３０〜２００μｍ、５０〜１５０μｍ、７０〜１３０μｍ、８０〜１２０μｍ、９０〜１１０μｍ、９５〜１０５μｍ、または１００〜１５０μｍの皮膚の深さまでである。
【０１８２】
いくつかの実施形態では、１つ以上の前述の方法による外皮攪乱は、少なくとも３０μｍの皮膚の深さまでである。いくつかの実施形態では、１つ以上の前述の方法による外皮攪乱は、３０μｍの皮膚の深さまでである。いくつかの実施形態では、外皮攪乱は、５０μｍの皮膚の深さまでである。いくつかの実施形態では、１つ以上の前述の方法による外皮攪乱は、６０μｍの皮膚の深さまでである。いくつかの実施形態では、外皮攪乱は、３０〜１００μｍの皮膚の深さまでである。いくつかの実施形態では、外皮攪乱は、６０〜１００μｍの皮膚の深さまでである。いくつかの実施形態では、外皮攪乱は、６０〜２００μｍの皮膚の深さまでである。いくつかの実施形態では、外皮攪乱は、１００μｍの皮膚の深さまでである。いくつかの実施形態では、外皮攪乱は、１００〜１５０μｍの皮膚の深さまでである。いくつかの実施形態では、外皮攪乱は、１５０μｍの皮膚の深さまでである。いくつかの実施形態では、外皮攪乱は、１００〜２００μｍの皮膚の深さまでである。いくつかの実施形態では、外皮攪乱は、３０〜２００μｍの皮膚の深さまでである。いくつかの実施形態では、外皮攪乱は、３０、３５、４０、４５、５０、５５、６０、６５、７０、７５、８０、８５、９０、９５、１００、１０５、１１０、１１５、１２０、１２５、１３０、１３５、１４０、１４５、１５０、１５５、１６０、１６５、１７０、１７５、１８０、１８５、１９０、１９５、または２００μｍの皮膚の深さまでである。いくつかの実施形態では、外皮攪乱の最大深さは、例えば３０、４０、５０、６０、７０、８０、８５、９０、９５、１００、１０５、１１０、１２０、１３０、１４０、１５０、１６０、１７０、１８０、１９０、または２００μｍまでである。
【０１８３】
いくつかの実施形態では、外皮攪乱は、１００〜５００μｍの皮膚の深さまでである。いくつかの実施形態では、外皮攪乱は、５００μｍ未満の皮膚の深さまでである。いくつかの実施形態では、外皮攪乱は、５００〜１０００μｍの皮膚の深さまでである。いくつかの実施形態では、外皮攪乱は、最大約１ｍｍの皮膚の深さまでである。いくつかの実施形態では、外皮攪乱は、約１ｍｍ以上の皮膚の深さまでである。いくつかの実施形態では、外皮攪乱は、最大約２ｍｍの皮膚の深さまでである。いくつかの実施形態では、外皮攪乱は、約２ｍｍ以上の皮膚の深さまでである。いくつかの実施形態では、外皮攪乱は、１ｍｍ〜３ｍｍの皮膚の深さまでである。いくつかの実施形態では、外皮攪乱は、１ｍｍ〜５ｍｍの皮膚の深さまでである。特定の実施形態では、外皮攪乱の深さは、５００μｍを超えない。特定の実施形態では、外皮攪乱の深さは、１ｍｍを超えない。特定の実施形態では、外皮攪乱の深さは、２ｍｍを超えない。
【０１８４】
特定の実施形態では、外皮攪乱は、微細削皮術によるものではない。いくつかの実施形態では、外皮攪乱は、全層切除術によるものではない。いくつかの実施形態では、外皮攪乱は、部分層切除術によるものである。いくつかの実施形態では、外皮攪乱は、部分層切除術によるものではない。
【０１８５】
上述の方法のいずれを使用しても、正確な量の表皮組織を除去することができる。例えば、本明細書に記載される制御された外皮攪乱法を使用して、以下を達成することができる：
・最初の１０〜３０μｍのこれらの死んだ皮膚細胞の除去による角質層の除去。
・最初の３０〜１００μｍの皮膚を除去することによる、角質層および部分的または全ての表皮の除去。これは、存在する毛包構造体の皮脂腺、バルジ、または毛乳頭を除去するのに十分な深さはない。表皮の除去は、皮膚の光沢のある、滑らかな白っぽい層の出現によって検出することができる。
・角質層、全ての表皮の除去、および真皮乳頭層の攪乱（例えば１００μｍ〜１５０μｍの皮膚）。真皮乳頭層の攪乱は、処置した領域における小さな点状出血によって検出することができる。
・角質層、全表皮、および約２００μｍまでの真皮の部分の除去。
【０１８６】
別の実施形態では、外皮攪乱の程度、およびいくつかの場合において、得られる創傷は、皮膚の攪乱領域の大きさを制御することによって、例えば、単一の大きな創傷よりもむしろ大きな領域の創傷に影響を及ぼす一連の小さな創傷を作製することによって、減少される。したがって、ある特定の実施形態では、外皮攪乱の領域は、例えば、幅０〜３ｍｍ（例えば、１ｍｍ、２ｍｍ、３ｍｍ、またはそれ以上）、幅０〜２ｃｍ（例えば、１ｃｍ、１．５ｃｍ、および２．０ｃｍ）、またはそれ以上（例えば、対象の表皮の１０％、３０％、５０％、７０％、９０％、もしくは１００％まで、または眉領域等の毛髪の成長の他の領域）の任意の所望の大きさのものであり得る。任意に、外皮攪乱の領域は、毛包間であり得る。
【０１８７】
いくつかの実施形態では、本明細書に記載される外皮攪乱法は、皮膚において創傷を誘発する。いくつかのそのような実施形態では、創傷した皮膚は、一次癒合によって治癒される。他の実施形態では、創傷した皮膚は、二次癒合によって治癒される。なお他の実施形態では、創傷した皮膚は、三次癒合によって治癒される。ある特定の実施形態では、創傷した皮膚は、そのような創傷に通常示されるよりもさらにゆっくりと治癒される。これは、傷跡を残さない創傷治癒を増強、および／または皮膚の創傷した領域における毛髪の成長が促進される期間を延長し得る。
【０１８８】
５．２  攪乱後治療
外皮攪乱後（および任意にその前またはその間）の皮膚への投与のための薬学的組成物が、本明細書に提供される。そのような薬学的組成物は、本明細書に記載される攪乱後治療ステップに使用され得る。ある特定の実施形態では、攪乱後薬学的組成物は、皮膚への局所投与のために製剤化される。特定の実施形態では、攪乱後治療は、本明細書に記載される方法に従って、外皮攪乱する、外皮攪乱している、または外皮攪乱に供された皮膚の領域に投与される。いくつかの実施形態では、攪乱後治療は、非閉塞性創傷被覆材である。いくつかのそのような実施形態では、攪乱後治療は、一次癒合によって外皮攪乱した皮膚を治癒するために投与される。いくつかのそのような実施形態では、攪乱後治療は、二次癒合によって外皮攪乱した皮膚を治癒するために投与される。いくつかのそのような実施形態では、攪乱後治療は、三次癒合によって外皮攪乱した皮膚を治癒するために投与される。いくつかのそのような実施形態では、攪乱後治療は、そのような創傷に通常示されるよりもさらにゆっくりと外皮攪乱した皮膚を治癒するために投与される。これは、傷跡を残さない創傷治癒を増強、および／または皮膚の創傷した領域における毛髪の成長が促進される期間を延長し得る。いくつかのそのような実施形態では、攪乱後治療は、瘢痕のない、または瘢痕を最小にする、創傷治癒を促進する。
【０１８９】
限定されない実施形態では、攪乱後治療用の薬学的組成物は、ゲル、ヒドロゲル、乳剤、溶液、懸濁液、クリーム剤、軟膏、粉剤、被覆材、エリキシル剤、ローション、懸濁液、チンキ剤、ペースト剤、粉末剤、覚醒剤、泡沫フィルム、エアロゾル剤、洗浄剤、スプレー、坐薬、スティック剤、棒剤、軟膏剤、包帯、創傷被覆材、微細削皮術、または削皮粒子、点滴剤、経皮パッチ剤、または皮膚パッチ剤として局所投与のために製剤化される。特定の実施形態では、攪乱後薬学的組成物は、水性製剤（例えばヒドロゲル）、非水性製剤、軟膏、またはクリーム剤（例えば乳剤）である。一実施形態では、この組成物はヒドロゲルである。いくつかの実施形態では、この組成物は密封するものである。他の実施形態では、この組成物は閉塞しない。これらの組成物は、当該技術分野で公知の送達の任意の局所手段によって投与され得る。特定の実施形態では、この組成物は、以下の項５．５．２．１に記載されるような、包帯または他の創傷被覆材等の製品の一部として投与される。特定の実施形態では、この組成物は、以下の項５．５．４．３に記載されるような、薬物送達系を用いて投与される。
【０１９０】
いくつかの実施形態では、攪乱後治療用の薬学的組成物は、以下の項５．３または５．４に記載されるような、活性成分または活性成分を含有する。
【０１９１】
いくつかの実施形態では、攪乱後治療用の薬学的組成物の製剤は、組成物中に（有する場合）活性成分の放出速度を制御するために変化させられる。これは、例えば、その疎水性を変化させることなく、担体の分子可動性を変化させることによって、例えば、ペトロラタムと鉱油の比率を変えることによって達成され得る。一実施形態では、薬学的製剤は、ペトロラタム、鉱油、およびラノリンアルコールを含む軟膏剤である。そのような実施形態に従って調製される例示的な製剤は、以下の実施例に提供される。別の実施形態では、活性成分の放出は、製剤の疎水性／親水性の比率を変化させることによって、例えば、ペトロラタム／水エマルジョンを調製することによって変調され得る。そのような実施形態に従って調製される例示的な製剤は、以下の実施例に提供される。
【０１９２】
ある特定の実施形態では、本明細書に提供される攪乱後治療用組成物は、以下の成分を列挙する濃度で含むヒドロゲルである：６％〜１０％、７％〜９％で；もしくは８％のクエン酸；１％〜３％、１．５％〜２．５％、もしくは２％のＣＭＣ；０．０５％〜０．１５％、もしくは０．１％のメチルパラベン；０．０１〜０．１％、０．０２〜０．０８％；０．０３％〜０．０６％、もしくは０．０５％のプロピルパラベン；１００％までの蒸留水；ｐＨを調整するための１０％  ＮａＯＨ；０．０５％〜０．３％、０．１％〜０．２％、もしくは０．１６％のアラントイン；０．０５％〜０．２％、０．０８％〜０．１４％、もしくは０．１２％のアルギン酸塩；および５％〜１５％、７％〜１２％、もしくは１０％のグリセリン。
【０１９３】
ある特定の実施形態では、本明細書に提供される攪乱後治療用組成物は、以下の成分を列挙する濃度で含む：６％〜１０％、７％〜９％で；もしくは８％のクエン酸；１％〜３％、１．５％〜２．５％、もしくは２％のヒアルロン酸ナトリウム；０．０５％〜０．１５％、もしくは０．１％のメチルパラベン；０．０１〜０．１％、０．０２〜０．０８％；０．０３％〜０．０６％、もしくは０．０５％のプロピルパラベン；１００％までの蒸留水；ｐＨを調整するための１０％  ＮａＯＨ；０．０５％〜０．３％、０．１％〜０．２％、もしくは０．１６％のアラントイン；０．０５％〜０．２％、０．０８％〜０．１４％、もしくは０．１２％のアルギン酸塩；および５％〜１５％、７％〜１２％、もしくは１０％のグリセリン。
【０１９４】
ある特定の実施形態では、本明細書に提供される攪乱後治療用組成物は、以下の成分を列挙する濃度で含む：６％〜１０％、７％〜９％で；もしくは８％のクエン酸；１％〜３％、１．５％〜２．５％、もしくは２％のコラーゲン；０．０５％〜０．１５％、もしくは０．１％のメチルパラベン；０．０１〜０．１％、０．０２〜０．０８％；０．０３％〜０．０６％、もしくは０．０５％のプロピルパラベン；１００％までの蒸留水；ｐＨを調整するための１０％  ＮａＯＨ；０．０５％〜０．３％、０．１％〜０．２％、もしくは０．１６％のアロエベラゲル；０．０５％〜０．２％、０．０８％〜０．１４％、もしくは０．１２％のアルギン酸塩；および５％〜１５％、７％〜１２％、もしくは１０％のグリセリン。
【０１９５】
ある特定の実施形態では、本明細書に提供される攪乱後治療用組成物は、Ｉ相およびＩＩ相からなるエモリエントクリームであり、１０％〜２０％、１２％〜１８％、１４％〜１６％、１５％〜１７％、もしくは１６％のクエン酸；１％〜３％、１．５％〜２．５％、もしくは２％のヒアルロン酸；５％〜１５％、７％〜１２％、もしくは１０％のグリセリン；０．１％〜１％、０．２％〜０．８％、０．３％〜０．６％、０．３５％〜０．５％、０．４％、もしくは０．３２％のアラントイン；０．１％〜１％、０．３％〜０．７％、もしくは０．５％の塩化ナトリウム；０．１％〜０．３％、０．１５％〜０．２５％、もしくは０．２％のメチルパラベン、０．０５〜０．１５％、０．０７５〜０．１２５％、もしくは０．１％、もしくは０．０９６％のプロピルパラベン；ｐＨを調整するための１０％  ＮａＯＨ；および１００％まで水を含み、ＩＩ相は、１０％〜３０％、１５％〜２５％、１８％〜２２％、もしくは２０％の大豆油；５％〜１５％、７．５％〜１２．５％、９％〜１１％、もしくは１０％の水素化綿実油；４％〜１２％、６％〜１０％、７％〜９％、もしくは８％のポリグリセリル−１０デカオレート；１％〜７％、２％〜６％、３％〜５％、もしくは４％のポリグリセリル−６−オクタステアレート；２％〜８％、３％〜７％、４％〜６％、もしくは５％のホホバ種子油；０．５％〜８％、１％〜６％、２％〜４％、２．５％〜３．５％、もしくは３％のシアバター；５％〜１５％、７％〜１２％、もしくは１０％のオリーブ油を含む。ある特定の実施形態では、エモリエントクリームは、６％〜１０％、７％〜９％；もしくは８％のクエン酸；０．２５％〜２．５％、０．５％〜２％、０．７５％〜１．５％、もしくは１％のヒアルロン酸、１％〜９％、２％〜８％、３％〜８％、４％〜６％、もしくは５％のグリセリン；０．０５％〜０．３％、ａｔ  ０．１％〜０．２％、もしくは０．１６％のアラントイン；０．０５％〜０．５％、０．１％〜０．４％、０．２％〜０．３％、もしくは０．２５％の塩化ナトリウム；０．０５％〜０．１５％、もしくは０．１％のメチルパラベン；０．０１〜０．１％、０．０２〜０．０８％；０．０３％〜０．０６％、もしくは０．０５％のプロピルパラベン；ｐＨを調整するための１０％  ＮａＯＨ；１００％までの水；５％〜１５％、７％〜１２％、もしくは１０％の大豆油；水素化綿実油５％〜１５％、７％〜１２％、もしくは１０％；１％〜６％、２％〜５％、３％〜５％、もしくは４％のポリグリセリル−１０デカオレート；１％〜３％、１．５％〜２．５％、もしくは２％のポリグリセリル−６−オクタステアレート；１％〜５％、１．５％〜４％、２％〜３％、もしくは２．５％のホホバ種子油；０．５％〜４％、１％〜３％、１．２５％〜２％、もしくは１．５％のシアバター；および５％〜１５％、７％〜１２％、もしくは１０％のオリーブ油をさらに含む。
【０１９６】
ある特定の実施形態では、本明細書に提供される攪乱後治療用組成物は、以下の成分を列挙された濃度で含む：６％〜１０％、７％〜９％；もしくは８％のクエン酸；１％〜３％、１．５％〜２．５％、もしくは２％のＣＭＣ；０．０５％〜０．１５％、もしくは０．１％のメチルパラベン；０．０１〜０．１％、０．０２〜０．０８％；０．０３％〜０．０６％、もしくは０．０５％のプロピルパラベン；１００％までの蒸留水；ｐＨを調整するための１０％  ＮａＯＨ；０．０５％〜０．３％、０．１％〜０．２％、もしくは０．１６％のアラントイン；０．０５％〜０．２％、０．０８％〜０．１４％、もしくは０．１２％のアルギン酸塩；および５％〜１５％、７％〜１２％、もしくは１０％のグリセリン。
【０１９７】
ある特定の実施形態では、本明細書に提供される攪乱後治療用組成物は、以下の成分を列挙された濃度で含む：６％〜１０％、７％〜９％；もしくは８％のクエン酸；１％〜３％、１．５％〜２．５％、もしくは２％のヒアルロン酸ナトリウム；０．０５％〜０．１５％、もしくは０．１％のメチルパラベン；０．０１〜０．１％、０．０２〜０．０８％；０．０３％〜０．０６％、もしくは０．０５％のプロピルパラベン；１００％までの蒸留水；ｐＨを調整するための１０％  ＮａＯＨ；０．０５％〜０．３％、０．１％〜０．２％、もしくは０．１６％のアラントイン；０．０５％〜０．２％、０．０８％〜０．１４％、もしくは０．１２％のアルギン酸塩；および５％〜１５％、７％〜１２％、もしくは１０％のグリセリン。
【０１９８】
ある特定の実施形態では、本明細書に提供される攪乱後治療用組成物は、以下の成分を列挙された濃度で含む：６％〜１０％、７％〜９％；もしくは８％でのクエン酸；１％〜３％、１．５％〜２．５％、もしくは２％でのコラーゲン；０．０５％〜０．１５％、もしくは０．１％でのメチルパラベン；０．０１〜０．１％、０．０２〜０．０８％；０．０３％〜０．０６％、もしくは０．０５％でのプロピルパラベン；１００％までの蒸留水；ｐＨを調整するための１０％  ＮａＯＨ；０．０５％〜０．３％、０．１％〜０．２％、もしくは０．１６％でのアロエベラゲル；０．０５％〜０．２％、０．０８％〜０．１４％、もしくは０．１２％でのアルギン酸塩；および５％〜１５％、７％〜１２％、もしくは１０％でのグリセリン。
【０１９９】
ある特定の実施形態では、本明細書に提供される攪乱後治療用組成物は、Ｉ相およびＩＩ相からなるエモリエントクリームであり、Ｉ相が、１０％〜２０％、１２％〜１８％、１４％〜１６％、１５％〜１７％、もしくは１６％のクエン酸；１％〜３％、１．５％〜２．５％、もしくは２％のヒアルロン酸；５％〜１５％、７％〜１２％、もしくは１０％のグリセリン；０．１％〜１％、０．２％〜０．８％、０．３％〜０．６％、０．３５％〜０．５％、０．４％、もしくは０．３２％のアラントイン；０．１％〜１％、０．３％〜０．７％、もしくは０．５％の塩化ナトリウム；０．１％〜０．３％、０．１５％〜０．２５％、もしくは０．２％のメチルパラベン、０．０５〜０．１５％、０．０７５〜０．１２５％、もしくは０．１％、もしくは０．０９６％のプロピルパラベン；ｐＨを調整するための１０％  ＮａＯＨ；および１００％までの水を含み、ＩＩ相が、１０％〜３０％、１５％〜２５％、１８％〜２２％、もしくは２０％の大豆油；５％〜１５％、７．５％〜１２．５％、９％〜１１％、もしくは１０％の水素化綿実油；４％〜１２％、６％〜１０％、７％〜９％、もしくは８％のポリグリセリル−１０デカオレート；１％〜７％、２％〜６％、３％〜５％、もしくは４％のポリグリセリル−６−オクタステアレート；２％〜８％、３％〜７％、４％〜６％、もしくは５％のホホバ種子油；０．５％〜８％、１％〜６％、２％〜４％、２．５％〜３．５％、もしくは３％のシアバター；５％〜１５％、７％〜１２％、もしくは１０％のオリーブ油を含む。ある特定の実施形態では、エモリエントクリームは、６％〜１０％、７％〜９％；もしくは８％のクエン酸；０．２５％〜２．５％、０．５％〜２％、０．７５％〜１．５％、もしくは１％のヒアルロン酸、１％〜９％、２％〜８％、３％〜８％、４％〜６％、もしくは５％のグリセリン；０．０５％〜０．３％、０．１％〜０．２％、もしくは０．１６％のアラントイン；０．０５％〜０．５％、０．１％〜０．４％、０．２％〜０．３％、もしくは０．２５％の塩化ナトリウム；０．０５％〜０．１５％、もしくは０．１％のメチルパラベン；０．０１〜０．１％、０．０２〜０．０８％；０．０３％〜０．０６％、もしくは０．０５％のプロピルパラベン；ｐＨを調整するための１０％  ＮａＯＨ；１００％までの水；５％〜１５％、７％〜１２％、もしくは１０％の大豆油；水素化綿実油５％〜１５％、７％〜１２％、もしくは１０％；１％〜６％、２％〜５％、３％〜５％、もしくは４％のポリグリセリル−１０デカオレート；１％〜３％、１．５％〜２．５％、もしくは２％のポリグリセリル−６−オクタステアレート；１％〜５％、１．５％〜４％、２％〜３％、もしくは２．５％のホホバ種子油；０．５％〜４％、１％〜３％、１．２５％〜２％、もしくは１．５％のシアバター；および５％〜１５％、７％〜１２％、もしくは１０％のオリーブ油をさらに含む。
【０２００】
攪乱後治療に用いる組成物のさらなる例は、以下に従う。
【０２０１】
０．１％〜０．５％、０．１％〜０．３％、０．１５％〜０．２５％、約０．２％、もしくは０．２０６％のメントール；６％〜１０％、７％〜９％；もしくは８％のクエン酸；１％〜３％、１．５％〜２．５％、もしくは２％のＣＭＣ；０．０５％〜０．１５％、もしくは０．１％のメチルパラベン；０．０１〜０．１％、０．０２〜０．０８％；０．０３％〜０．０６％、もしくは０．０５％のプロピルパラベン；１００％までの蒸留水；ｐＨを調整するための１０％  ＮａＯＨ；０．０５％〜０．３％、０．１％〜０．２％、もしくは０．１６％のアラントイン；０．０５％〜０．２％、０．０８％〜０．１４％、もしくは０．１２％のアルギン酸塩；および５％〜１５％、７％〜１２％、もしくは１０％のグリセリンを含む、組成物。
【０２０２】
０．１％〜０．５％、０．１％〜０．３％、０．１５％〜０．２５％、約０．２％、もしくは０．２０６％のメントール；６％〜１０％、７％〜９％；もしくは８％のクエン酸；１％〜３％、１．５％〜２．５％、もしくは２％のヒアルロン酸ナトリウム；０．０５％〜０．１５％、もしくは０．１％のメチルパラベン；０．０１〜０．１％、０．０２〜０．０８％；０．０３％〜０．０６％、もしくは０．０５％のプロピルパラベン；１００％までの蒸留水；ｐＨを調整するための１０％  ＮａＯＨ；０．０５％〜０．３％、０．１％〜０．２％、もしくは０．１６％のアラントイン；０．０５％〜０．２％、０．０８％〜０．１４％、もしくは０．１２％のアルギン酸塩；および５％〜１５％、７％〜１２％、もしくは１０％のグリセリンを含む、組成物。
【０２０３】
０．１％〜０．５％、０．１％〜０．３％、０．１５％〜０．２５％、約０．２％、もしくは０．２０６％のメントール；６％〜１０％、７％〜９％；もしくは８％のクエン酸；１％〜３％、１．５％〜２．５％、もしくは２％のコラーゲン；０．０５％〜０．１５％、もしくは０．１％のメチルパラベン；０．０１〜０．１％、０．０２〜０．０８％；０．０３％〜０．０６％、もしくは０．０５％のプロピルパラベン；１００％までの蒸留水；ｐＨを調整するための１０％  ＮａＯＨ；０．０５％〜０．３％、０．１％〜０．２％、もしくは０．１６％のアロエベラゲル；０．０５％〜０．２％、０．０８％〜０．１４％、もしくは０．１２％のアルギン酸塩；および５％〜１５％、７％〜１２％、もしくは１０％のグリセリンを含む、組成物。
【０２０４】
Ｉ相およびＩＩ相からなるエモリエントクリームであって、Ｉ相が、０．１％〜１％、０．２％〜０．８％、０．３％〜０．６％、０．３５％〜０．５％、もしくは０．４％のメントール；１０％〜２０％、１２％〜１８％、１４％〜１６％、１５％〜１７％、もしくは１６％のクエン酸；１％〜３％、１．５％〜２．５％、もしくは２％のヒアルロン酸；５％〜１５％、７％〜１２％、もしくは１０％のグリセリン；０．１％〜１％、０．２％〜０．８％、０．３％〜０．６％、０．３５％〜０．５％、０．４％、もしくは０．３２％のアラントイン；０．１％〜１％、０．３％〜０．７％、もしくは０．５％の塩化ナトリウム；０．１％〜０．３％、０．１５％〜０．２５％、もしくは０．２％のメチルパラベン、０．０５〜０．１５％、０．０７５〜０．１２５％、もしくは０．１％、もしくは０．０９６％のプロピルパラベン；ｐＨを調整するための１０％  ＮａＯＨ；および１００％までの水を含み、ＩＩ相が、１０％〜３０％、１５％〜２５％、１８％〜２２％、もしくは２０％の大豆油；５％〜１５％、７．５％〜１２．５％、９％〜１１％、もしくは１０％の水素化綿実油；４％〜１２％、６％〜１０％、７％〜９％、もしくは８％のポリグリセリル−１０デカオレート；１％〜７％、２％〜６％、３％〜５％、もしくは４％のポリグリセリル−６−オクタステアレート；２％〜８％、３％〜７％、４％〜６％、もしくは５％のホホバ種子油；０．５％〜８％、１％〜６％、２％〜４％、２．５％〜３．５％、もしくは３％のシアバター；５％〜１５％、７％〜１２％、もしくは１０％のオリーブ油を含む、エモリエントクリーム。ある特定の実施形態では、エモリエントクリームは、０．１％〜０．５％、０．１％〜０．３％、０．１５％〜０．２５％、約０．２％のメントール；６％〜１０％、７％〜９％；もしくは８％のクエン酸；０．２５％〜２．５％、０．５％〜２％、０．７５％〜１．５％、もしくは１％のヒアルロン酸、１％〜９％、２％〜８％、３％〜８％、４％〜６％、もしくは５％のグリセリン；０．０５％〜０．３％、０．１％〜０．２％、もしくは０．１６％のアラントイン；０．０５％〜０．５％、０．１％〜０．４％、０．２％〜０．３％、もしくは０．２５％の塩化ナトリウム；０．０５％〜０．１５％、もしくは０．１％のメチルパラベン；０．０１〜０．１％、０．０２〜０．０８％；０．０３％〜０．０６％、もしくは０．０５％のプロピルパラベン；ｐＨを調整するための１０％  ＮａＯＨ；１００％までの水；５％〜１５％、７％〜１２％、もしくは１０％の大豆油；５％〜１５％、７％〜１２％、もしくは１０％の水素化綿実油；１％〜６％、２％〜５％、３％〜５％、もしくは４％のポリグリセリル−１０デカオレート；１％〜３％、１．５％〜２．５％、もしくは２％のポリグリセリル−６−オクタステアレート；１％〜５％、１．５％〜４％、２％〜３％、もしくは２．５％のホホバ種子油；０．５％〜４％、１％〜３％、１．２５％〜２％、もしくは１．５％のシアバター；および５％〜１５％、７％〜１２％、もしくは１０％のオリーブ油をさらに含む。
【０２０５】
５．２．１  ヒドロゲル
一実施形態では、攪乱後薬学的組成物は、水性ヒドロゲルとして製剤化される。一実施形態では、水性ヒドロゲルは、Ｃａｒｂｏｐｏｌ  ９８０、メチルパラベン、プロピルパラベン、プロピレングリコール、グリセリン、および水を含む。一実施形態では、ヒドロゲル製剤は、クエン酸、ＣＭＣ、メチルパラベン、プロピルパラベン、アラントイン、アルギン酸塩、および水を含む。そのような実施形態に従って調製された例示的な製剤が、以下の実施例に提供される。一実施形態では、ヒドロゲルは、グリコール、カルボキシメチルセルロース、アラントイン、アルギン酸ナトリウム、メチルパラベン、プロピルパラベン、水（適量）、および水酸化ナトリウム（ｐＨを６．５〜７．５に調整）の組成物を有する。ヒドロゲルを製剤化するための方法は、以下の実施例に詳細に記載される。これらの方法は、当該技術分野で公知であり、本明細書に記載される方法を用いて他のヒドロゲル製剤を生成するように適合され得る。
【０２０６】
ある特定の実施形態では、ヒドロゲルは、約７５％、８０％、８５％、９０％、または９５％の水を含有する。特定の実施形態では、ヒドロゲルは、９０％の水を含有する。好ましくは、ヒドロゲルは、以下の特徴のうちの１つ以上または全てを有する：透明、無臭、無色、例えば、２，０００〜１０，０００ｃＰ、２，０００〜８，０００ｃＰ、もしくは６，０００〜１０，０００ｃＰ（例えば血流計を用いて測定される）の粘度（２５℃で）を有する、アッセイおよび用量統一性（例えば、炎光光度法もしくは原子吸収分析法（ＡＡＳ）によって測定され得る）を有する、皮膚軟化剤の「滑らかな手触り」の質感を有する、容易に皮膚に適用され得る、表面上で容易に広がる、周囲の部位への最小の移動を有する、最小の流出を有する、中性ｐＨ（例えばｐＨ６．５〜７．５）を有する、滅菌されている、例えば、強度、粘度、および均一性に関して、１つ以上の温度条件で（例えば、４℃、２５℃、および４０℃）、長期間（例えば１週間以上、２週間以上、４週間以上、８週間以上、１２週間以上、４ヶ月以上、６ヶ月以上、１年以上、２年以上）安定している。一実施形態では、ヒドロゲルは、最長４週間またはそれ以上室温で安定している。一実施形態では、ヒドロゲルは、最長８週間またはそれ以上室温で安定している。一実施形態では、ヒドロゲルは、最長６ヶ月またはそれ以上４℃で安定している。一実施形態では、ヒドロゲルは、最長１年間またはそれ以上４℃で安定している。ある特定の実施形態では、ヒドロゲルは、本明細書に記載される方法に用いる局所製剤用に所望であり得る前述または以下の特性のうちの１つ以上に寄与するように選択された賦形剤および一定量の活性成分で調製され、これらの特性は、粘度（例えばカルボキシメチルセルロースによって付与される）、表面湿潤能および「完全乾燥（ｄｒｙ−ｏｕｔ）」の保護（例えばグリセロールによって付与される）、防腐剤の有効性（例えば、メチルパラベンまたはプロピルパラベン等のパラベンによって付与されるが、ある特定の実施形態では、パラベンが含まれていない製剤もまた、生成され得る）、ｐＨの維持、安定性（例えば、ヒドロゲルに使用される界面活性剤の強度を変化させることによって付与される）、ならびに薬物動態学的特性（製剤からの活性成分の放出速度、皮膚および血液中の活性成分のピークおよびトラフ濃度）である。この製剤が創傷されるまたは創傷され得る皮膚に投与するためのものである特定の実施形態では、滅菌性、創傷治癒に寄与し、ならびに／または細胞接着および／もしくは増殖に役立つ、創傷に適合する賦形剤は、例えば、アラントインまたはアルギン酸ナトリウム等が含まれ得る。
【０２０７】
いくつかの実施形態では、ヒドロゲルは、活性成分（有する場合）を異なる速度で放出するように製剤化される。放出速度は、以下の項５．５．５に記載されるように、製剤を異なる足場に組み込むこと、製剤のいかなる活性成分を含む構成成分の濃度を修正すること、または賦形剤の種類および濃度を修正することのうちの１つ以上によって修正され得る。いくつかの実施形態では、活性成分の大部分または全ては、２時間以内、４時間以内、８時間以内、１０時間以内、１２時間以内、１６時間以内、２４時間以内、３６時間以内、４８時間以内、３日間以内、５日間以内、７日間以内、１０日間以内、１４日間以内、３０日間、または２ヶ月以上以内に製剤から放出される。特定の実施形態では、任意の活性成分の大部分または全ては、１２時間以内に本明細書に記載されるヒドロゲルから放出される。一実施形態では、活性成分の全ては、１２時間以内にヒドロゲルから放出される。別の実施形態では、活性成分の大部分または全ては、２４時間以内に本明細書に記載されるヒドロゲルから放出される。一実施形態では、製剤は、「即効型」製剤であり、即ち、投与の初日のうちに９０〜１００％の活性成分を放出する。別の実施形態では、製剤は、「中間放出」製剤であり、即ち、投与から１〜３日間以内に９０〜１００％の活性成分を放出する。別の実施形態では、製剤は、「持続放出」製剤であり、即ち、投与から３〜７日間以内に９０〜１００％の活性成分を放出する。
【０２０８】
５．２．２  クリーム剤
別の特定の実施形態では、局所投与用に製剤化された攪乱後組成物は、例えばクリーム剤等の乳剤の形態である。一実施形態では、クリーム剤は、油／水型乳剤である。
【０２０９】
ある特定の実施形態では、クリーム剤は、約７５％、８０％、８５％、９０％、または９５％の水を含有する。ある特定の実施形態では、クリーム剤（例えば、分散剤、懸濁剤、コロイド、または乳剤）は、以下の特徴のうちの１つ以上または全てを有する：無臭、皮膚への適用時に無色、例えば、２，０００〜１０，０００ｃＰ、２，０００〜８，０００ｃＰ、もしくは６，０００〜１０，０００ｃＰ（例えば血流計を用いて測定される）の粘度（２５℃で）を有する、アッセイおよび用量統一性（例えば、炎光光度法もしくは原子吸収分析法（ＡＡＳ）によって測定され得る）を有する、皮膚軟化剤の「滑らかな手触り」の質感を有する、容易に皮膚に適用され得る、表面上で容易に広がる、周囲の部位への最小の移動を有する、最小の流出を有する、中性ｐＨ（例えばｐＨ６．５〜７．５）を有する、滅菌されている、例えば、強度、粘度、および均一性に関して、１つ以上の温度条件で（例えば、４℃、２５℃、および４０℃）、長期間（例えば、１週間以上、２週間以上、４週間以上、８週間以上、１２週間以上、４ヶ月以上、６ヶ月以上、１年以上、２年以上）安定している。一実施形態では、クリーム剤は、最長４週間またはそれ以上室温で安定している。一実施形態では、クリーム剤は、最長８週間またはそれ以上室温で安定している。一実施形態では、クリーム剤は、最長６ヶ月間またはそれ以上４℃で安定している。一実施形態では、クリーム剤は、最長１年間またはそれ以上４℃で安定している。ある特定の実施形態では、クリーム剤は、本明細書に記載される方法に用いる局所製剤用に所望であり得る前述または以下の特性のうちの１つ以上に寄与するように選択された賦形剤およびある量の活性成分で調製され、これらの特性は、粘度、表面湿潤能および「完全乾燥（ｄｒｙ−ｏｕｔ）」の保護、防腐剤の有効性、ｐＨの維持、安定性（例えば、クリーム剤に使用される界面活性剤の強度を変化させることによって付与される）、ならびに薬物動態学的特性（製剤からの任意の活性成分の放出速度、皮膚および血液中のピークおよびトラフ濃度）である。この製剤が創傷されるまたは創傷され得る皮膚に投与するためのものである特定の実施形態では、創傷治癒に寄与し、ならびに／または細胞接着および／もしくは増殖に役立つ、創傷に適合する賦形剤は、例えば、アラントインまたはアルギン酸ナトリウム等が含まれ得る。
【０２１０】
クリーム剤からの活性成分の放出速度（有する場合）は、以下の項５．５．５に記載されるように、製剤を異なる足場に組み込むこと、製剤の活性成分の濃度を修正すること、または賦形剤の種類および濃度を修正することのうちの１つ以上によって修正され得る。例えば、一実施形態では、クリーム剤からの活性成分の放出速度は、クリーム剤中の親水性ポリマーの濃度を低下させることによって低下し得る。いくつかの実施形態では、クリーム剤からの活性成分の放出速度は、使用される、セテアリルアルコール、ラノリンアルコールの濃度を変化させることによって、または水性もしくは非水性担体、好ましくは、非水性担体（例えば、シリコーン、鉱油、ペトロラタム等）の種類を変化させることによって変化し得る。
【０２１１】
いくつかの実施形態では、活性成分の大部分または全ては、２時間以内、４時間以内、８時間以内、１０時間以内、１２時間以内、１６時間以内、２４時間以内、３６時間以内、４８時間以内、３日間以内、５日間以内、７日間以内、１０日間以内、１４日間以内、３０日間、または２ヶ月以上以内に製剤から放出される。特定の実施形態では、活性成分の大部分または全ては、１０時間以内に本明細書に記載されるクリーム剤から放出される。一実施形態では、活性成分の全ては、１０時間以内にクリーム剤から放出される。別の実施形態では、活性成分の大部分または全ては、２４時間以内に本明細書に記載されるクリーム剤から放出される。一実施形態では、製剤は、「即効型」製剤であり、即ち、投与の初日のうちに９０〜１００％の活性成分を放出する。別の実施形態では、製剤は、「中間放出」製剤であり、即ち、投与から１〜３日間以内に９０〜１００％の活性成分を放出する。別の実施形態では、製剤は、「持続放出」製剤であり、即ち、投与から３〜７日間以内に９０〜１００％の活性成分を放出する。
【０２１２】
特定の実施形態では、このクリーム剤は、即時放出製剤である。そのような製剤は、（ｉ）任意の活性成分および親水性賦形剤を溶解するための水相と（ｉｉ）疎水性ポリマーを溶解するための非水相の２相システムを用いて生成され得る。例となる一実施形態では、このクリーム剤は、油中水乳剤であり、生体適合のある皮膚エモリエント剤としての役割を果たすだけではなく、任意の活性成分の送達系としての役割も果たす。
【０２１３】
別の実施形態では、このクリーム剤は、中間放出製剤である。一実施形態では、この中間放出製剤は、例えば、上記の中間放出クリーム製剤について記載されるように、２相の均質化によって調製される乳剤である。
【０２１４】
別の実施形態では、このクリーム剤は、持続放出製剤である。一実施形態では、この持続放出製剤は、例えば、上記の即効型および中間放出クリーム製剤について記載されるように、２相（水相および非水相）の均質化によって調製されるが、非水相中の親水性ポリマーの濃度を低下させることによって調製される。
【０２１５】
攪乱後局所投与用の前述の製剤は、本明細書に記載される任意の実施形態に従って投与され得る。例えば、特定の実施形態では、５０ｋｇの患者は、１日２回、３つの部位で本明細書に記載される単一液滴のヒドロゲルを投与される。いくつかの実施形態では、ヒドロゲルは、１日１回投与される。いくつかの実施形態では、ヒドロゲルは、１日２回投与される。１日２回の治療レジメンのいくつかの実施形態では、投与量は、６時間おき、または７時間おき、または８時間おき、または９時間おき、または１０時間おき、または１１時間おき、または１２時間おきに投与される。特定の実施形態では、投与量は、７〜８時間おきに投与される。
【０２１６】
５．３  育毛促進剤
毛髪脱落のための大部分の薬物は、それらの活動周期において存在する毛包を保持すること、または活動周期の成長期まで休止期の毛包を活性化することを目的とする。他の薬物は、軟毛の硬毛への移行を促す。対照的に、それらの活動周期において毛包を保持し得る薬物治療と組み合わせた外皮攪乱治療（「新しい」毛包の成長または存在する毛包の活性化を促し得る）は、禿げつつある個人に著しい価値を提供する。そのような治療は、より有効的で、効率的な、費用効率が高い、利用しやすいものであり得る。例えば、より少ない治療が必要とされ得る。得られる毛髪は、より美容上満足でき、長寿命の、より濃く、より均一で、かつ適切に色素性のある毛髪であり得る。そのような特徴は、軟毛よりむしろ硬毛と関連する。
【０２１７】
上の項５．１に記載される外皮攪乱法は、単独でまたは上の項５．２に記載される攪乱後治療と組み合わせて、育毛促進剤との併用療法、および任意に以下の項５．４に記載される治療と組み合わせて使用され得る。いくつかの実施形態では、本明細書に記載される育毛促進剤は、毛包の発育および成長を促進し、皮膚の部位上の軟毛の非軟毛、例えば中間または硬毛への移行をもたらす。いくつかの実施形態では、本明細書に記載される育毛促進剤は、外皮攪乱法と相乗的に作用して、育毛を促進する。それぞれの治療が提供する効果は、所望の最終結果を達成するために、相加的または相乗的改善、または２つの異なる生物学的に定義された効果の組み合わせであり得る。
【０２１８】
いくつかの実施形態では、育毛促進剤は、育毛を促進および／または過度の毛髪脱落と関連する疾患もしくは状態を治療する治療剤である。育毛を促進、および／または当該技術分野で公知の、もしくはなお開発中である過度の毛髪脱落と関連する疾患もしくは状態を治療する任意の治療が、これらの実施形態に従って用いるために企図される。
【０２１９】
いくつかの実施形態では、育毛促進剤治療は、例えば、ミノキシジル（例えば、ＲｏｇａｉｎｅまたはＲｅｇａｉｎｅとして市販）、ジアゾキシド、もしくはフェニトイン等の、１種以上のチャンネル開口薬（例えば、カリウムチャンネル開口薬、例えばＡＴＰ感受性カリウムチャンネル（ＫＡＴＰ開口薬）、またはそのようなチャンネルのアクチベータ）による治療を含む。特定の実施形態では、育毛促進剤治療は、ミノキシジルによる治療を含む。これらの実施形態に従って使用され得るミノキシジルの一般的に使用される用量形態は、２％のミノキシジルまたは５％のミノキシジルを含む局所用溶液、例えば、局所用ミノキシジル発泡体５％である。
【０２２０】
いくつかの実施形態では、育毛促進剤治療は、１種以上の５α−レダクターゼ阻害剤による治療を含む。５α−レダクターゼ阻害剤の限定されない例には、フィナステライド、デュタステリド（例えばＡｖｏｄａｒｔ）、ツロステリド、ベキソロステリド、イゾンステリド、エプリステリド、エピガロカテキン、ＭＫ−３８６、アゼライン酸、ＦＣＥ２８２６０、およびＳＫＦ１０５，１１１が含まれる。そのような治療で使用され得るフィナステライドの一般的に使用される剤形は、例えば、１ｍｇ／日で経口フィナステライドである。例えば、Ｐｈｙｓｉｃｉａｎｓ’  Ｄｅｓｋ  Ｒｅｆｅｒｅｎｃｅ，２００９，６３ｒｄ  ｅｄ．，Ｍｏｎｔｖａｌｅ，ＮＪ：Ｐｈｙｓｉｃｉａｎｓ’  Ｄｅｓｋ  Ｒｅｆｅｒｅｎｃｅ  Ｉｎｃ．２０９５〜２０９９頁および２１０２〜２１０６頁でのＰｒｏｐｅｃｉａ（登録商標）およびＰｒｏｓｃａｒ（登録商標）のための項目をそれぞれ参照されたく、これらは参照によってその全体が本明細書に組み込まれる。
【０２２１】
いくつかの実施形態では、育毛促進剤治療は、例えば、フィナステライド（例えば、ＰｒｏｐｅｃｉａもしくはＰｒｏｓｃａｒとして市販）、ケトコナゾール、フルコナゾール、スピロノラクトン、フルタミド、ジアゾキシド、１７−α−ヒドロキシプロゲステロン、１１−α−ヒドロキシプロゲステロン、ケトコナゾール、ＲＵ５８８４１、デュタステリド（Ａｖｏｄａｒｔとして市販）、フルリジル、またはＱＬＴ−７７０４等の１つ以上の抗アンドロゲン、または抗アンドロゲンオリゴヌクレオチド、またはＰｏｕｌｏｓ  ＆
Ｍｉｒｍｉｒａｎｉ，２００５，Ｅｘｐｅｒｔ  Ｏｐｉｎ．Ｉｎｖｅｓｔｉｇ．Ｄｒｕｇｓ  １４：１７７−１８４（これらの内容は、参照によって本明細書に組み込まれる）に記載されるその他を含む。
【０２２２】
いくつかの実施形態では、育毛促進剤治療は、１つ以上のプロスタグランジンＦ２α類似体、プロスタグランジン類似体、またはプロスタグランジンによる治療を含む。プロスタグランジンＦ２α類似体の限定されない例には、ビマトプロスト（例えば、Ｌａｔｉｓｓｅ、Ｌｕｍｉｇａｎ）、ラタノプロスト（商標名Ｘａｌａｔａｎ）、トラボプロスト（商標名Ｔｒａｖａｔａｎ）、タフルプロスト、ウノプロストン、ジノプロスト（商標名Ｐｒｏｓｔｉｎ  Ｆ２  Αｌｐｈａ）、ＡＳ６０４８７２、ＢＯＬ３０３２５９Ｘ、ＰＦ３１８７２０７、カルボプロスト（商標名Ｈｅｍａｂａｔｅ）が含まれる。本明細書に記載される方法に従って使用するための例となるプロスタグランジンＦ２α類似体、ならびに製剤、用量、および治療レジメンについては、例えば、米国特許第８，０１７，６５５号、第５，６８８，８１９号、第６，４０３，６４９号、第５，５１０，３８３号、第５，６３１，２８７号、第５，８４９，７９２号、第５，８８９，０５２号、第６，０１１，０６２号、第７，１６３，９５９号、第５，２９６，５０４号、第５，４２２，３６８号、第６，４２９，２２６号、および第６，９４６，１２０号を参照されたく、これらのそれぞれの全内容は、参照によってその全体が本明細書に組み込まれる。また、ラタノプロストに関しては、Ｕｎｏ  ｅｔ  ａｌ．，２００２，Ａｃｔａ  Ｄｅｒｍ  Ｖｅｎｅｒｅｏｌ  ８２：７−１２を参照されたく、この内容は、参照によってその全体が本明細書に組み込まれる。
【０２２３】
いくつかの実施形態では、育毛促進剤治療は、以下の育毛促進剤のうちの１つ以上による治療を含む：コペキシル（例えば、製品Ｋｅｒａｎｉｑｕｅ（商標））、ＣａＣｌ２、ボツリヌストキシンＡ、アデノシン、ケトコナゾール、ＤｏｘｏＲｘ、ドセタキセル、ＦＫ５０６、ＧＰ１１０４６、ＧＰ１１５１１、ＬＧＤ  １３３１、ＩＣＸ−ＴＲＣ、ＭＴＳ−０１、ＮＥＯＳＨ１０１、ＨＹＧ−１０２４４０、ＨＹＧ−４１０、ＨＹＧ−４２０、ＨＹＧ−４３０、ＨＹＧ−４４０、スピロノラクトン、ＣＢ−０３−０１、ＲＫ−０２３、アバタセプト、Ｖｉｖｉｓｃａｌ（登録商標）、ＭｏｒｒＦ、ＡＳＣ−Ｊ９、ＮＰ−６１９、ＡＳ１０１、Ｍｅｔｒｏｎ−Ｆ−１、ＰＳＫ  ３８４１、Ｔａｒｇｒｅｔｉｎ（例えば１％ゲル）、ＭｅｄｉｎＧｅｌ、ＰＦ３１８７２０７、ＢＯＬ３０３２５９Ｘ、ＡＳ６０４８７２、ＴＨＧ１１３３１、ＰＦ−２７７３４３、ＰＦ−３００４４５９、ラプティバ、カフェイン、コーヒー。いくつかの実施形態では、育毛促進剤治療は、ＳＷＩＴＣＨ  Ｂｉｏｔｅｃｈ  ＬＬＣにより開発された脱毛症のための薬物を含む。
【０２２４】
いくつかの実施形態では、育毛促進剤治療は、以下のうちの１つ以上による治療を含むハーブ（例えば、ノコギリヤシ、ツルマメ、朝鮮人参、ヨーロッパグリ、アルニカ、セイヨウキズタ、ワイルド・ゼラニウム等）、トリアムシノロンアセトニド（例えば注射用の２．５〜５ｍｇ／ｍｌの懸濁液）、局所刺激薬（例えば、アントラリン）、または感作剤（例えば、スクアリン酸ジブチルエステル［ＳＡＤＢＥ］もしくはジフェニルシクロプロペニル［ＤＰＣＰ］）、クロミプラミン、不飽和脂肪酸（例えばガンマリノレン酸）、脂肪酸誘導体、増粘剤（例えば、カルボマー、ジステアリン酸グリコール、セテアリルアルコール等）、脱毛コンシーラー、ナイアシン、ニコチン酸エステルおよび塩、アデノシン、ならびにメチオニン。いくつかの実施形態では、育毛促進剤治療は、ニトロキシドスピン標識（例えば、ＴＥＭＰＯおよびＴＥＭＰＯＬ）による治療を含む。米国特許第５，７１４，４８２号を参照されたく、これは参照により本明細書に組み込まれる。
【０２２５】
いくつかの実施形態では、育毛促進剤治療は、頭皮の毛髪の成長を刺激するのに有用であることが示されているアンドロゲン受容体阻害剤による治療を含む（Ｈｕ  ＬＹ，ｅｔ
ａｌ．，２００７，Ｂｉｏｏｒｇ  Ｍｅｄ  Ｃｈｅｍ  Ｌｅｔｔ．２００７  １７：５９８３−５９８８）。
【０２２６】
いくつかの実施形態では、育毛促進剤治療は、好ましくは、局所に適用される銅ペプチドまたはスーパーオキシド不均化活性を有する別の化合物による治療を含む。いくつかの実施形態では、育毛促進剤治療は、一酸化窒素生成を増加させる薬剤（例えば、アルギニン、シトルリン、ニトログリセリン、亜硝酸アミル、またはシルデナフィル（Ｖｉａｇｒａ））による治療を含む。好ましい実施形態では、そのような化合物は、カタラーゼもしくはカタラーゼ模倣剤、他の酸化防止剤、またはフリーラジカル捕捉剤と組み合わせてさらに投与される。
【０２２７】
いくつかの実施形態では、育毛促進剤治療は、骨髄由来幹細胞（例えば、Ｇ−ＣＳＦ等の増殖因子および／もしくはプレリキサフォル（Ｍｏｚｏｂｉｌ（登録商標））等の化学剤）を動員する化合物；ならびに／または、例えば、皮膚の標的位置において天然の毛包とは異なる特性を有する特殊化した毛包の出現をもたらし得る、性特異的に特殊化したヒト毛包へのこれらの幹細胞の分化を調節する化合物（例えば、当該技術分野で公知の、フィナステライド、フルコナゾール、スピロノラクトン、フルタミド、ジアゾキシド、１１−α−ヒドロキシプロゲステロン、ケトコナゾール、ＲＵ５８８４１、デュタステリド、フルリジル、もしくはＱＬＴ−７７０４等の薬剤、抗アンドロゲンオリゴヌクレオチド、チオクトール、局所プロゲステロン、局所エストロゲン、酢酸シプロテロン、ｒｕ５８８４１、５α−レダクターゼ阻害剤の併用、経口避妊薬、およびＰｏｕｌｏｓ  ＆  Ｍｉｒｍｉｒａｎｉ，２００５，Ｅｘｐｅｒｔ  Ｏｐｉｎ．Ｉｎｖｅｓｔｉｇ．Ｄｒｕｇｓ  １４：１７７−１８４（参照によって本明細書に組み込まれる）中のその他、あるいは任意の他の抗エストロゲン、エストロゲン、もしくはエストロゲン様薬物（単独で、または幹細胞可塑性を増加させる薬剤、例えばバルプロエート等と組み合わせて）等の薬剤を用いて）による治療を含む。
【０２２８】
いくつかの実施形態では、育毛促進剤治療は、加齢による毛髪の菲薄化および／または毛包細胞の老化に拮抗する１種以上の薬剤（本明細書中では「抗老化剤」とも称される）、例えば、グルタチオン、アスコルビン酸、トコフェロール、尿酸、もしくはポリフェノール抗酸化剤等の抗酸化剤；スーパーオキシドジスムターゼ阻害剤等の活性酸素種（ＲＯＳ）産生の阻害剤；セレニウム等のＲＯＳ分解の刺激剤；ラパマイシン等のｍＴＯＲ阻害剤；あるいはレスベラトロル等のサーチュインもしくはその活性剤、または他のＳＩＲＴ１、ＳＩＲＴ３活性剤、またはニコチンアミド阻害剤による治療を含む。
【０２２９】
いくつかの実施形態では、育毛促進剤治療は、免疫応答を誘発するまたは炎症を引き起こす１種以上の薬剤、例えば、破傷風トキソイド、非特異的な局所刺激薬（アントラリン）、または感光剤（スクアリン酸ジブチルエステル［ＳＡＤＢＥ］およびジフェニルシクロプロペニル［ＤＰＣＰ］）による治療を含む。いかなる理論に束縛されることをも意図するものではないが、これらの薬剤を皮膚に接触させることによって、リンパ球および毛包幹細胞は、皮膚に動員され得ることが考えられる。いくつかの実施形態では、育毛促進剤治療は、皮膚において炎症プロセスを誘導する化学的または機械的（以下に論じられるもの等）治療による治療を含む。いかなる理論に束縛されることを意図するものではないが、毛髪の成長が所望される部位における炎症の誘導は、新しい毛包の形成を促進する組織に幹細胞を動員するのに役立つ。
【０２３０】
いくつかの実施形態では、育毛促進剤治療は、抗アポトーシス化合物による治療を含む。一実施形態では、抗アポトーシス化合物は、ＷｎｔでもＷｎｔ作動薬でもない。
【０２３１】
いくつかの実施形態では、育毛促進剤治療は、幹細胞療法、毛髪クローニング、植毛、頭皮マッサージ、植皮、毛髪プラグ（ｈａｉｒ  ｐｌｕｇ）、毛包単位抽出、または育毛を目的とする任意の外科的手技による治療を含む。
【０２３２】
ある特定の実施形態では、本明細書に記載される育毛促進剤は、その薬剤のために当該技術分野で公知の用量、または用量の範囲で使用され得る（例えば、添付文書またはＰｈｙｓｉｃｉａｎｓ’  Ｄｅｓｋ  Ｒｅｆｅｒｅｎｃｅにあるような）。他の実施形態では、育毛促進剤の通常の用量を調整して、本明細書に記載される併用療法（例えば、外皮攪乱または別の活性成分による治療）を最適化する。例えば、通常の用量は、医師により指示されるように増加させても、低減させてもよい。例えば、低用量は、本明細書に記載される別の治療との組み合わせの相乗効果のため、より短期間にわたって使用してもよい。
【０２３３】
ある特定の実施形態では、育毛促進剤は、その市販の形態で使用してもよい。他の実施形態では、育毛促進剤の形態を調整して、本明細書に記載される併用療法（例えば、外皮攪乱または別の活性成分による治療）を最適化する。特定の実施形態では、育毛促進剤は、市販されるものとは異なる塩形態として製剤化される。特定の実施形態では、育毛促進剤は、例えば、以下の項５．２に記載される攪乱後治療のための薬学的組成物に組み込むことによって局所投与のために製剤化される。
【０２３４】
いくつかの実施形態では、育毛促進剤は、軟毛の非軟毛への変換を増強する。特定の実施形態では、育毛促進剤は、軟毛の硬毛への変換を増強する。これらの実施形態に従って使用され得る軟毛の非軟毛への変換を促進する例示的な育毛促進剤は、プロスタグランジンＦ２α類似体（一態様では、ラタノプロスト）、ミノキシジル等である。いくつかの実施形態では、育毛促進剤は、休止期の毛髪の成長期の毛髪への変換を増強する。特定の実施形態では、育毛促進剤は、休止期の毛髪の成長期の毛髪への変換を増強する。これらの実施形態に従って使用され得る休止期の毛髪の成長期の毛髪への変換を促進する例となる育毛促進剤は、プロスタグランジンＦ２α類似体（一態様では、ラタノプロスト）、ミノキシジル等である。
【０２３５】
いくつかの実施形態では、育毛促進剤治療は、抗アンドロゲン（例えば５α−レダクターゼ阻害剤）およびチャネル開口剤（例えばミノキシジル）による治療を含む。このような一実施形態では、５α−レダクターゼ阻害剤は、ミノキシジルと組み合わせて投与される。このような一実施形態では、フィナステライドが、ミノキシジルと組み合わせて投与される。いくつかの実施形態では、育毛促進剤治療は、チャネル開口剤（例えばミノキシジル）と組み合わせたプロスタグランジンＦ２αまたはプロスタミド類似体（例えば、ラタノプロスト、ビマトプロスト等）による治療を含む。このような一実施形態では、プロスタグランジンＦ２αまたはプロスタミド類似がは、ミノキシジルと組み合わせて投与される。このような一実施形態では、ラタノプロストが、ミノキシジルと組み合わせて投与される。別のそのような実施形態では、ビマトプロストが、ミノキシジルと組み合わせて投与される。
【０２３６】
いくつかの実施形態では、女性対象において毛髪の成長を促進するために本明細書に記載される治療剤は、フィナステライドもケトコナゾールも含まない。いくつかの実施形態では、妊娠女性対象において毛髪の成長を促進するために本明細書に記載される治療剤は、フィナステライドもケトコナゾールも含まない。
【０２３７】
いくつかの実施形態では、毛髪の成長を促進するために本明細書に記載される治療剤は、ミノキシジルを含まない。いくつかの実施形態では、毛髪の成長を促進するために本明細書に記載される治療剤は、フィナステライドを含まない。いくつかの実施形態では、毛髪の成長を促進するために本明細書に記載される治療剤は、デュタステリドを含まない。いくつかの実施形態では、毛髪の成長を促進するために本明細書に記載される治療剤は、フルリジルを含まない。いくつかの実施形態では、毛髪の成長を促進するために本明細書に記載される治療剤は、スピロノラクトンを含まない。いくつかの実施形態では、毛髪の成長を促進するために本明細書に記載される治療剤は、酢酸シプロテロンを含まない。いくつかの実施形態では、毛髪の成長を促進するために本明細書に記載される治療剤は、ビカルタミドを含まない。いくつかの実施形態では、毛髪の成長を促進するために本明細書に記載される治療剤は、フルタミドを含まない。いくつかの実施形態では、毛髪の成長を促進するために本明細書に記載される治療剤は、ニルタミドを含まない。いくつかの実施形態では、毛髪の成長を促進するために本明細書に記載される治療剤は、アンドロゲン受容体の阻害剤を含まない。いくつかの実施形態では、毛髪の成長を促進するために本明細書に記載される治療剤は、アンドロゲン拮抗薬を含まない。いくつかの実施形態では、毛髪の成長を促進するために本明細書に記載される治療剤は、抗アンドロゲンを含まない。
【０２３８】
５．３．１  育毛促進剤の用量形態
本明細書に記載される実施形態では、育毛促進剤またはその製剤は、局所的、皮下に、静脈内に、経口等に投与され得る。育毛促進剤送達に使用される投与経路に関わらず、投与レジメンは、潜在的副作用を軽減しつつ、最大利益が達成されるように、調整されるべきである。
【０２３９】
いくつかの実施形態では、育毛促進剤の標的濃度は、皮膚または血液中に、好ましくは、皮膚中に少なくとも１日間、少なくとも２日間、少なくとも３日間、少なくとも４日間、少なくとも５日間、少なくとも６日間、少なくとも７日間、少なくとも８日間、少なくとも９日間、少なくとも１０日間、少なくとも１１日間、少なくとも１２日間、少なくとも１３日間、少なくとも１４日間、少なくとも１５日間、少なくとも１６日間、少なくとも１９日間、または少なくとも２１日間、ある特定の実施形態では、２８日間を超えないで維持されなければならない。ある特定の実施形態では、育毛促進剤の標的濃度は、皮膚または血液中に、好ましくは皮膚中に、１ヶ月以上、２ヶ月以上、３ヶ月以上、３〜６ヶ月以上、または６〜１２ヶ月以上持続される。これは、例えば、育毛促進剤の反復使用または持続放出もしくは徐放性育毛促進剤の単独使用を利用して達成され得る。例えば、放出調節形態を使用して、より短い維持期間（即ち、少なくとも１、２、または３日間）、育毛促進剤の標的濃度を達成することができる。３日間よりも長い維持期間は、育毛促進剤治療剤の反復使用を必要とし得る。いくつかの実施形態では、育毛促進剤の濃度を用量間で減少させることができることが好ましい。
【０２４０】
いくつかの実施形態では、育毛促進剤の局所投与が、経口または皮下投与よりも好ましい。使用した製剤に依存して、局所的に投与した育毛促進剤は、血液中よりも皮膚中でより高濃度の育毛促進剤を達成し、それによって、育毛促進剤の血中濃度の上昇に関連し得る毒性のリスクを軽減し得る。反対に、使用した製剤に依存して、皮下または経口投与した育毛促進剤が、血液から皮膚への育毛促進剤の制御放出を達成するために好ましい場合がある。
【０２４１】
投与経路に関わらず、毒性を避けるための注意が払われなければならない。この点において、毒性を最小限に抑えつつ、有効性を最大限にする用量が、選択されなければならない。そのような用量は、項５．３に記載されるアッセイを用いて選択され得る。患者は、標準的な臨床診療に従って中毒性副作用についてモニタリングしなければならない。いくつかの実施形態では、育毛促進剤は、育毛促進剤の最終投与から１２または２４時間後、（慣例により）採血された血中濃度（血清または血漿）に基づいて調整されなければならない。単一の試験量の投与の結果に基づいて個々の患者の必要用量を予測し、続いて、ピーク濃度時間で皮膚および／または血液試料アッセイ（血漿または血清）を行い、続いて、１２時間または２４時間のトラフ濃度、ならびに対照値としての役割を果たす２４、４８、または９６時間後（育毛促進剤が、通常除去されるとき）に毒性をモニタリングするために血液試料アッセイを行うことは可能であり得る。一旦投与量が患者に設定されると、毒性の日常的モニタリングが推奨される。また、ミノキシジルスルホトランスフェラーゼのレベルを確認することによって、ミノキシジルに対してより良好に応答する者を予測することも可能であり得る（Ｂｕｈｌ  ｅｔ  ａｌ．，Ｊ  Ｉｎｖｅｓｔ  Ｄｅｒｍａｔｏｌ．１９９０；９５（５）：５５３−５５７）。
【０２４２】
いくつかの実施形態では、育毛促進剤治療から３０分から１時間後に測定される、血清または血漿中の育毛促進剤の対象濃度が、０．１ｎＭ未満、０．１〜１．０ｎＭ、１．０〜１０ｎＭ、１０〜５０ｎＭ、５０〜１００ｎＭ、１００〜５００ｎＭ、０．５〜１．０μＭ、１．０μＭ〜２．０μＭ、２．０〜２．５μＭ、２．５〜３．０μＭ、または３．０μＭもしくはそれ以上であるように、有効量の育毛促進剤が投与される。いくつかの実施形態では、育毛促進剤治療から８時間、１６時間、１日間、２日間、３日間、１週間、２週間、または１ヶ月後に測定される、血漿または血清中の育毛促進剤の濃度が、０．１ｎＭ未満、０．１〜１ｎＭ、０．５〜１．５ｎＭ、１〜１０ｎＭ、１０〜５０ｎＭ、５０〜１００ｎＭ、１００〜１５０ｎＭ、１５０〜２００ｎＭ、２５０〜３００ｎＭ、１００〜２５０ｎＭ、１００〜５００ｎＭ、２００〜４００ｎＭ、５００〜１０００ｎＭ；または１０００から１０００００ｎＭ未満であるように、有効量の育毛促進剤は投与される。一実施形態では、血漿または血清中の育毛促進剤の濃度は、少なくとも１ｎＭに達する。別の実施形態では、ピーク血漿レベルは、決して、１μＭを超えない。血清中の育毛促進剤の濃度は、当該技分野で公知の液体クロマトグラフィーおよび／または質量分析の方法を用いて測定され得る。
【０２４３】
いくつかの実施形態では、皮膚における育毛促進剤の標的濃度が、０．１ｎＭ〜１ｎＭ、１ｎＭ〜１０ｎＭ、１０〜１００ｎＭ、１００〜５００ｎＭ、５００〜１０００ｎＭ、１〜１．５μＭ、１〜２．５μＭ、１〜５μＭ、５〜１０μＭ、１０〜５０μＭ、５０〜１００μＭ、１００〜１５０μＭ、１５０〜２００μＭ、２５０〜３００μＭ、１００〜２５０μＭ、１００〜５００μＭ、２００〜４００μＭ、５００〜１０００μＭ、１〜１０ｍＭ、１０〜１００ｍＭ、１００〜２００ｍＭ、または５００〜１０００ｍＭであるように、ある量の育毛促進剤量が投与される。いくつかの実施形態では、皮膚において達成される育毛促進剤の濃度は、０．１ｎＭより高い。いくつかの実施形態では、皮膚において達成される育毛促進剤の濃度は、１ｎＭより高い。いくつかの実施形態では、皮膚において達成される育毛促進剤の濃度は、１００ｎＭより高い。いくつかの実施形態では、皮膚において達成される育毛促進剤の濃度は、５００ｎＭより高い。一実施形態では、皮膚において達成される育毛促進剤の濃度は、約１０〜１００ｎＭである。一実施形態では、皮膚において達成される育毛促進剤の濃度は、約１００〜１０００ｎＭである。一実施形態では、皮膚において達成される育毛促進剤の濃度は、約１μｍ〜１０μｍである。一実施形態では、皮膚において達成される育毛促進剤の濃度は、約１０〜１００μｍである。他の実施形態では、皮膚に送達される育毛促進剤の濃度が、０．００００００１ｍｇ／ｍｌ〜０．０００００１ｍｇ／ｍｌ、０．０００００１ｍｇ／ｍｌ〜０．００００１ｍｇ／ｍｌ、０．００００１ｍｇ／ｍｌ〜０．０００１ｍｇ／ｍｌ、０．０００１ｍｇ／ｍｌ〜０．００１ｍｇ／ｍｌ、０．００１ｍｇ／ｍｌ〜０．０１ｍｇ／ｍｌ、０．０１ｍｇ／ｍｌ〜０．１ｍｇ／ｍｌ、０．１ｍｇ／ｍｌ〜１ｍｇ／ｍｌ、１ｍｇ／ｍｌ〜１０ｍｇ／ｍｌであるように、ある量の育毛促進剤量が投与される。いくつかの実施形態では、角質層の送達される育毛促進剤の濃度は、０．００００００１ｍｇ／ｍｌ〜０．０００００１ｍｇ／ｍｌ、０．０００００１ｍｇ／ｍｌ〜０．００００１ｍｇ／ｍｌ、０．００００１ｍｇ／ｍｌ〜０．０００１ｍｇ／ｍｌ、０．０００１ｍｇ／ｍｌ〜０．００１ｍｇ／ｍｌ、０．００１ｍｇ／ｍｌ〜０．０１ｍｇ／ｍｌ、０．０１ｍｇ／ｍｌ〜０．１ｍｇ／ｍｌ、０．１ｍｇ／ｍｌ〜１ｍｇ／ｍｌ、１ｍｇ／ｍｌ〜１０ｍｇ／ｍｌである。当業者は、当該技術分野で公知の技術、例えば、質量分析、例えば、本明細書に使用されるＬＣ／ＭＳ／ＭＳアッセイの誘導結合プラズマ質量分析（ＩＣＰ−ＭＳ）を用いて皮膚における育毛促進剤の濃度を測定することができるであろう。
【０２４４】
他の実施形態では、育毛促進剤の濃度は、当該技術分野で公知の技術、例えば、Ｔｓａｎａｃｌｉｓ  ＆  Ｗｉｃｋｓ，２００７，Ｆｏｒｅｎｓｉｃ  Ｓｃｉｅｎｃｅ  Ｉｎｔｌ．１７６：１９−２２（参照によってその全体が本明細書に組み込まれる）を用いて、毛幹において測定される。
【０２４５】
５．３．１．１  局所用量形態
続く小節に記載される実施形態では、育毛促進剤は、例えば、上の項５．３に記載される、局所投与用のクリーム、軟膏、懸濁剤、または他の形態として局所的に適用され得る。育毛促進剤は、局所投与用の薬学的組成物として製剤化され得る。
【０２４６】
いくつかの実施形態では、局所育毛促進剤は、１日２回投与される。いくつかの実施形態では、局所育毛促進剤は、１日１回投与される。いくつかの実施形態では、局所投与用の育毛促進剤の形態（例えば、ゲル、クリーム剤、軟膏、膏薬等）は、ｗ／ｗ、０．０００００１％、０．００００１％、０．０００１％の育毛促進剤、０．００１％の育毛促進剤、０．０１％の育毛促進剤、０．１％の育毛促進剤、０．５％の育毛促進剤、１％の育毛促進剤、および１０％の育毛促進剤を含む。いくつかの実施形態では、局所投与用の育毛促進剤の形態は、ｗ／ｗ、０．０００００１％〜０．００００１％の育毛促進剤、０．００００１％〜０．０００１％の育毛促進剤、０．０００１％〜０．００１％の育毛促進剤、０．００１％〜０．０１％の育毛促進剤、０．０１％〜０．１％の育毛促進剤、０．１％〜１．０％の育毛促進剤、１．０％〜５％の育毛促進剤、５％〜１０％の育毛促進剤、または１０％〜１５％の育毛促進剤を含む。一実施形態では、局所投与用の育毛促進剤の形態は、０．００００１％〜１．０％ｗ／ｗの育毛促進剤である。
【０２４７】
いくつかの実施形態では、患者体重の１ｋｇ当たり０．０１ｍｇ（ｍｇ／ｋｇ）の育毛促進剤が投与されるか、または０．０２ｍｇ／ｋｇ、０．０５ｍｇ／ｋｇ、０．１ｍｇ／ｋｇ、０．２ｍｇ／ｋｇ、０．５ｍｇ／ｋｇ、１．０ｍｇ／ｋｇ、２ｍｇ／ｋｇ、５．０ｍｇ／ｋｇ、１０ｍｇ／ｋｇ、１５ｍｇ／ｋｇ、２０ｍｇ／ｋｇ、２５ｍｇ／ｋｇ、３０ｍｇ／ｋｇ、３５ｍｇ／ｋｇ、４０ｍｇ／ｋｇ、５０ｍｇ／ｋｇ、７５ｍｇ／ｋｇ、１００ｍｇ／ｋｇ、１２５ｍｇ／ｋｇ、１５０ｍｇ／ｋｇ、１７５ｍｇ／ｋｇ、２００ｍｇ／ｋｇ、２５０ｍｇ／ｋｇ、３００ｍｇ／ｋｇ、３５０ｍｇ／ｋｇ、４００ｍｇ／ｋｇ、４５０ｍｇ／ｋｇ、５００ｍｇ／ｋｇ、５５０ｍｇ／ｋｇ、６００ｍｇ／ｋｇ、６５０ｍｇ／ｋｇ、７００ｍｇ／ｋｇ、７５０ｍｇ／ｋｇ、８００ｍｇ／ｋｇ、８５０ｍｇ／ｋｇ、９００ｍｇ／ｋｇ、９５０ｍｇ／ｋｇ、１０００ｍｇ／ｋｇ、または１５００ｍｇ／ｋｇが投与されるように、局所製剤が製剤化される。いくつかの実施形態では、局所製剤は、約０．０１ｍｇ／ｋｇ〜約０．１ｍｇ／ｋｇ、０．０２ｍｇ／ｋｇ〜約０．２ｍｇ／ｋｇ、０．１ｍｇ／ｋｇ〜約１ｍｇ／ｋｇ、０．２ｍｇ／ｋｇ〜約２ｍｇ／ｋｇ、０．０１ｍｇ／ｋｇ〜約２ｍｇ／ｋｇ、０．１ｍｇ／ｋｇ〜約１００ｍｇ／ｋｇ、約１ｍｇ／ｋｇ〜約２０ｍｇ／ｋｇ、約２ｍｇ／ｋｇ〜約１０ｍｇ／ｋｇ、約１００ｍｇ／ｋｇ〜約１ｇ／ｋｇ、約１２５ｍｇ／ｋｇ〜約５００ｍｇ／ｋｇ、または約１５０ｍｇ／ｋｇ〜約３００ｍｇ／ｋｇの範囲内の育毛促進剤の投与量を含有する。いくつかの実施形態では、局所製剤は、約０．０１ｍｇ／ｋｇ〜約１ｍｇ／ｋｇの範囲内の投与量を含有する。いくつかの実施形態では、局所製剤は、約０．０２ｍｇ／ｋｇ〜約２ｍｇ／ｋｇの範囲内の投与量を含有する。
【０２４８】
目的とする投与量の育毛促進剤を送達するための特定の局所製剤における育毛促進剤の濃度は、育毛促進剤の放出特性、育毛促進剤の疎水性、育毛促進剤の分配係数等によって異なる。前述の濃度の育毛促進剤を用いて局所製剤を生成するための育毛促進剤の量は、当業者によって容易に推測でき、例えば、その塩形態、放出特性、その疎水性、または親水性等を含む、いくつかの要因によって異なる。
【０２４９】
５．３．２  考察
脱毛のための大部分の薬物は、それらの活動周期において存在する毛包を保持すること、または活動周期の成長期まで休止期の毛包を活性化することを目的とする。他の薬物は、軟毛の硬毛への移行を促す。しかしながら、それらの活発に循環する状態において毛包を保持、または軟毛の非軟毛への変換を促進、または新しい硬毛を維持、または新しい硬毛のさらなる成長を増強するものと組み合わせた、新しい毛包の成長および／または軟毛の硬毛への成長（外皮攪乱等）を促す治療は、禿げつつある個人に有意な価値を提供する。治療の併用療法は、それぞれの剤形の交互の治療、または併用治療、または同時治療を含み得る。
【０２５０】
本明細書に記載される育毛促進剤の治療は、新しい毛髪の成長を強化する。さらに、罹患した皮膚組織における外皮攪乱は、常在する毛包が再プログラム化され得るように、先在する毛包を刺激、活性化、または再構成することが可能である。したがって、本発明がいかに作用するかについてのいかなる理論によって束縛されることなく、１種以上の育毛促進剤と組み合わせた外皮攪乱は、所望の特性を有する毛髪の成長および毛包のための環境を提供する。
【０２５１】
新しい毛包は、子孫が毛包の高度に分化した特殊化した細胞に分化することができる少能性前駆細胞の、毛包幹細胞（ＦＳＣ）に由来する（Ａｍｏｈ  Ｙ，ｅｔ  ａｌ．Ｈｕｍａｎ  ｈａｉｒ  ｆｏｌｌｉｃｌｅ  ｐｌｕｒｉｐｏｔｅｎｔ  ｓｔｅｍ（ｈｆＰＳ）ｃｅｌｌｓ  ｐｒｏｍｏｔｅ  ｒｅｇｅｎｅｒａｔｉｏｎ  ｏｆ  ｐｅｒｉｐｈｅｒａｌ−ｎｅｒｖｅ  ｉｎｊｕｒｙ：ａｎ  ａｄｖａｎｔａｇｅｏｕｓ  ａｌｔｅｒｎａｔｉｖｅ
ｔｏ  ＥＳ  ａｎｄ  ｉＰＳ  ｃｅｌｌｓ．Ｊ  Ｃｅｌｌ  Ｂｉｏｃｈｅｍ，２００９，１０７：１０１６−１０２０、およびＡｍｏｈ  Ｙ，ｅｔ  ａｌ．Ｎａｓｃｅｎｔ  ｂｌｏｏｄ  ｖｅｓｓｅｌｓ  ｉｎ  ｔｈｅ  ｓｋｉｎ  ａｒｉｓｅ  ｆｒｏｍ  ｎｅｓｔｉｎ−ｅｘｐｒｅｓｓｉｎｇ  ｈａｉｒ−ｆｏｌｌｉｃｌｅ  ｃｅｌｌｓ．Ｐｒｏｃ  Ｎａｔｌ  Ａｃａｄ  Ｓｃｉ  Ｕ  Ｓ  Ａ．２００４  Ｓｅｐ  ７；１０１（３６）：１３２９１−５．Ｅｐｕｂ  ２００４  Ａｕｇ  ２６）を参照のこと）。皮膚幹細胞集団は、マウスにおける毛包について特定されている（Ｂｉｅｒｎａｓｋｉｅ  Ｊ，Ｐａｒｉｓ  Ｍ，Ｍｏｒｏｚｏｖａ  Ｏ，ｅｔ  ａｌ．ＳＫＰｓ  ｄｅｒｉｖｅ  ｆｒｏｍ  ｈａｉｒ
ｆｏｌｌｉｃｌｅ  ｐｒｅｃｕｒｓｏｒｓ  ａｎｄ  ｅｘｈｉｂｉｔ  ｐｒｏｐｅｒｔｉｅｓ  ｏｆ  ａｄｕｌｔ  ｄｅｒｍａｌ  ｓｔｅｍ  ｃｅｌｌｓ．Ｃｅｌｌ  Ｓｔｅｍ
Ｃｅｌｌ．２００９；５（６）：６１０−６２３を参照のこと）。
【０２５２】
ＦＳＣは、（ｉ）存在する毛包（「毛包由来の毛包幹細胞」もしくは「ＦＤＦＳＣ」）（例えば、Ｔｏｓｃａｎｉ  ｅｔ  ａｌ．，２００９，Ｄｅｒｍａｔｏｌ  Ｓｕｒｇ．２００９を参照、（ｉｉ）皮膚（「組織由来の毛包幹細胞」もしくは「ＴＤＦＳＣ」）（例えば、Ｉｔｏ  Ｍ，２００７，Ｎａｔｕｒｅ  ４４７：３１６−３２０を参照）、（ｉｉｉ）骨髄（「骨髄由来の毛包幹細胞」もしくは「ＢＭＤＦＳＣ」）（例えば、Ｆａｔｈｋｅ  ｅｔ  ａｌ．，２００４，Ｓｔｅｍ  Ｃｅｌｌｓ  ２２：８１２−８２２、およびＲｏｖｏ  ｅｔ  ａｌ．，２００５，Ｅｘｐ  Ｈｅｍａｔｏｌ．３３：９０９−９１１を参照）、ならびに／または（ｉｖ）含脂肪幹細胞等の間葉性幹細胞のうちの１つ以上に由来する。
【０２５３】
ＦＳＣは、皮膚または頭皮のそれぞれの位置を象徴する毛包のタイプを順守する新しい毛包を生成する。例えば、ＭＰＨＬに罹患している男性の冠状頭皮からのＦＳＣは、一般に、軟毛または棍毛を有する萎縮性毛包を生成する。対照的に、同じ男性の後頭部頭皮からのＦＳＣは、一般に、ＤＨＴに応答して退行にさらされていない硬毛を有する毛包を生成する。
【０２５４】
しかしながら、この「デフォルト」プログラムに干渉する外部信号が提供される場合、毛包形成を司るＦＳＣが再プログラム化され得る。非対称性分裂およびそれに続く分化のプロセスにおけるＦＳＣは、それらの分化プログラムを変更する信号（エストロゲンまたはテストステロン等）に対して感受性がある。例えば、ＭＰＨＬに罹患している男性の冠状頭皮からのＦＳＣは、エストロゲンの影響下で、ＤＨＴに応答して退行にさらされていない硬毛を有する毛包を生成することができる。そのような毛包は、通常、（ｉ）前頭部頭皮における脱毛症前の毛包、（ｉｉ）前頭部頭皮における女性型毛包、または（ｉｉｉ）後頭部頭皮型毛包に関連する特徴を有する。あるいは、エストロゲンまたはテストステロンに拮抗することによって、特定の皮膚におけるデフォルト毛髪パターンをとることが、阻止され得る。例えば、女性の望ましくない口髭は、上唇の皮膚を攪乱し、テストステロン拮抗薬を投与することによって軽減することができる。
【０２５５】
したがって、外皮攪乱と組み合わせた１種以上の育毛促進剤による治療は、毛包発育プログラムを変更する第３の治療剤が皮膚の特定領域において毛包の数または性質を有意に変化させるために投与され得る機会を提供する。いくつかの実施形態では、Ｐｏｕｌｏｓ
＆  Ｍｉｒｍｉｒａｎｉ，２００５，Ｅｘｐｅｒｔ  Ｏｐｉｎ．Ｉｎｖｅｓｔｉｇ．Ｄｒｕｇｓ  １４：１７７−１８４（参照によって本明細書に組み込まれる）に記載されるもの等の第３の治療剤（例えば、エストロゲンまたはテストステロンのモジュレータ）は、外皮攪乱と同時に投与される。いくつかの実施形態では、第３の治療剤は、外皮攪乱後に投与される。いくつかの実施形態では、第３の治療剤は、外皮攪乱から１日、２日、３日、５日、７日、１０日、または２週間後に投与される。一実施形態では、第３の治療剤は、外皮攪乱時に投与され、その後、５日間毎日投与される（いくつかの実施形態では、この期間中、痂皮が形成される）。いくつかの実施形態では、第３の治療剤は、痂皮が剥離し始めてから５日間毎日投与される。いくつかの実施形態では、第３の治療剤は、痂皮の表面下を形成する新表皮を調節するために投与される。いくつかのそのような実施形態では、第３の治療剤は、外皮攪乱時および痂皮が剥離してからある期間まで、例えば、外皮攪乱後の５〜１４日間投与される。いくつかの実施形態では、第３の治療剤による治療プロセスは、短い、例えば、痂皮剥離直後の数日間に限定されか、または痂皮がなお付着している間のみ継続される。外皮攪乱、育毛促進剤の投与、および第３の治療剤のタイミングは、最良の結果が達成されるように、モニタリングし、調節され得る。
【０２５６】
５．４  さらなる活性成分
いくつかの実施形態では、外皮攪乱（項５．１）および／もしくは攪乱後治療（項５．２）を含む本発明の方法ならびに／または１種以上の育毛促進剤（項５．３）を含む薬学的組成物の投与は、活性成分を含む１種以上のさらなる治療と組み合わせ得る。活性成分を含む１種以上のさらなる治療は、外皮攪乱、攪乱後治療、および／または育毛促進剤の投与のステップのうちの１つ以上の前、その間、またはその後に投与され得る。ある特定の実施形態では、活性成分は、任意に同じ製剤において、攪乱後薬学的組成物と共に投与される。ある特定の実施形態では、活性成分は、任意に同じ製剤において、育毛促進剤と共に投与される。
【０２５７】
これらの実施形態によれば、さらなる治療のための薬学的組成物への製剤用活性成分は、例えば、細胞療法（幹細胞等）、遺伝子治療用製剤（例えば、ウイルス、ウイルス様粒子、ビロゾーム（ｖｉｒｏｓｏｍｅ））、抗体もしくはその抗原結合性フラグメント、薬草、ビタミン（例えば、ビタミンＥの一形態、例えば、オールトランス型レチノイン酸（ＡＴＲＡ）等のビタミンＡ誘導体、Ｂビタミン類、例えば、イノシトール、パンテノール、もしくはビオチン、もしくはビタミンＤ３類似体等）、鉱油、精油、酸化防止剤もしくはフリーラジカル捕捉剤、アミノ酸もしくはアミノ酸誘導体、シャンプー成分（例えば、カフェイン、塩化アンモニウム、アンモニウムラウリル硫酸、グリコール、ラウレス硫酸ナトリウム、ラウリル硫酸ナトリウム、ケトコナゾール、亜鉛ピリチオン、硫酸セレニウム、コールタール、サリチル酸塩誘導体、ジメチコーン、または植物エキスもしくは油）、コンディショニング剤、石鹸製品、保湿剤、日焼け止め剤、防水剤、粉末、タルク、もしくはシリカ、油調整剤、α−ヒドロキシ酸、β−ヒドロキシ酸（例えばサリチル酸）、ポリヒドロキシ酸、過酸化ベンゾイル、制汗剤成分、例えば、収斂性塩（ａｓｔｒｉｎｇｅｎｔ  ｓａｌｔ）（例えば、亜鉛ピリチオン等の亜鉛塩、アルミニウムの無機もしくは有機塩、ジルコニウム、亜鉛、およびこれらの混合物、塩化アルミニウム、アルミニウムクロロヒドラート、アルミニウムクロロヒドレクス、アルミニウムクロロヒドレクスＰＥＧ、アルミニウムクロロヒドレクスＰＧ、アルミニウムジクロロヒドラート、アルミニウムジクロロヒドレクスＰＥＧ、アルミニウムジクロロヒドレクスＰＧ、アルミニウムセスキクロロヒドラート、アルミニウムセスキクロロヒドレクスＰＥＧ、アルミニウムセスキクロロヒドレクスＰＧ、硫酸アルミニウム、アルミニウムジルコニウムオクタクロロヒドラート、アルミニウムジルコニウムオクタクロロヒドレクスＧＬＹ（グリシンに対する略号）、アルミニウムジルコニウムペンタクロロヒドラート、アルミニウムジルコニウムペンタクロロヒドレクスＧＬＹ、アルミニウムジルコニウムテトラクロロヒドラート、アルミニウムジルコニウムトリクロロヒドラート、アルミニウムジルコニウムテトラクロロヒドラートＧＬＹ、および、アルミニウムジルコニウムトリクロロヒドラートＧＬＹ、硫酸アルミニウムカリウム（ミョウバン（ＫＡｌ（ＳＯ４）２１２Ｈ２Ｏ）としても知られている）、アルミニウムウンデシレノイルコラーゲンアミノ酸、乳酸アルミニウムナトリウム＋硫酸ナトリウム（Ｎａ２ＨＡｌ（ＯＯＣＣＨＯＨＣＨ３）２−（ＯＨ）６）＋Ａｌ２（ＳＯ４）３）、ナトリウムアルミニウムクロロヒドロキシラクタート、アルミニウムブロモヒドラート（Ａｌ２Ｂｒ（ＯＨ）５ｎＨ２Ｏ）、塩化アルミニウム（ＡｌＣｌ３６Ｈ２Ｏ）、亜鉛塩およびナトリウム塩の複合体、ランタンおよびセリウムの複合体、ならびに、リポアミノ酸（Ｒ−ＣＯ−ＮＨ−ＣＨＲ’−ＣＯ−ＯＡｌ−（ＯＨ）２、式中、Ｒ＝Ｃ６−１１およびＲ’＝アミノ酸）のアルミニウム塩、レチノイド（例えば、レチノイン酸、レチノール、レチナール、もしくはレチニルエステル）、日焼け止め剤（例えば、パラ−アミノ安息香酸（ＰＡＢＡ）の誘導体、シンナマートおよびサリチラート、アゾベンゾフェノン（Ｐａｒｓｏｌ１７８９（登録商標））、メトキシケイ皮酸オクチル（Ｐａｒｓｏｌ（商標）ＭＣＸ）、および、２−ヒドロキシ−４−メトキシベンゾフェノン（オキシベンゾフェノンとしても知られており、Ｂｅｎｚｏｐｈｅｎｏｎｅ（商標）、および防腐剤として入手可能である）、抗加齢剤、皮脂産生阻害剤および／もしくは毛穴サイズを減少させる薬剤（例えば、分枝状アルコールおよび／もしくはそのアルコキシラートのカルボキシアルキラート、例えば、トリデシルカルボキシアルキラート、セルレニンおよびセルレニン類似体（この薬学的に許容される塩および溶媒和物を含む）、トリクロサンもしくはその類似体等の別の脂肪酸合成酵素阻害剤、Ｓｉｇｍａ  Ｃｏｒｐｏｒａｔｉｏｎ（Ｓｔ．Ｌｏｕｉｓ，Ｍｉｓｓｏｕｒｉ）から入手可能な緑茶から抽出したポリフェノール（ＥＧＣＧ）、もしくはα−メチレン−γ−ビチロラクトン）、マッサージ剤、エクスフォリアント（ｅｘｆｏｌｉａｎｔ）、かゆみ止め剤、抗炎症剤、免疫刺激剤（例えば、サイトカイン、様々なリガンドのアゴニストもしくはアンタゴニスト、免疫系の受容体およびシグナル変換分子、免疫刺激核酸、免疫応答を刺激するおよび／もしくは貯蔵効果をもたらすアジュバント）、細胞周期調節因子、ホルモンアゴニスト、ホルモンアンタゴニスト（例えば、フルタミド、ビカルタミド、タモキシフェン、ラロキシフェン、酢酸ロイプロリド（ＬＵＰＲＯＮ）、ＬＨ−ＲＨアンタゴニスト）、ホルモン生合成およびプロセシングの阻害剤、ステロイド（例えば、デキサメタゾン、レチノイド、デルトイド、ベータメタゾン、コルチゾール、コルチゾン、プレドニゾン、デヒドロテストステロン、グルココルチコイド、ミネラロコルチコイド、エストロゲン、テストステロン、プロゲスチン）、抗ゲスターゲン（例えば、ミフェプリストン、オナプリストン）、および抗アンドロゲン（例えば、酢酸シプロテロン）、抗エストロゲン、抗ヒスタミン（例えば、メピラミン、ジフェンヒドラミン、およびアンタゾリン）、抗炎症剤（例えば、コルチコステロイド、ＮＴＨＥ、およびＣＯＸ−２阻害剤）、レチノイド（例えば、１３−シス−レチノイン酸、アダパレン、オールトランス型レチノイン酸、およびエトレチネート）、免疫抑制剤（例えば、シクロスポリン、タクロリムス、ラパマイシン、エベロリムス、およびピメクロリムス）、抗生剤、抗癌剤（例えば、フルオロウラシル（５−ＦＵもしくはｆ５Ｕ）または他のピリミジン類似体、メトトレキサート、シクロホスファミド、ビンクリスチン）、気分安定剤（例えば、バルプロ酸もしくはカルバマゼピン）  代謝拮抗物質、抗ウイルス剤、ならびに抗微生物剤（例えば、安息香酸ベンジル、塩化ベンザルコニウム、安息香酸、ベンジルアルコール、ブチルパラベン、エチルパラベン、メチルパラベン、プロピルパラベン、樟脳メタクレゾール、樟脳フェノール、ヘキシルレゾルシノール、塩化メチルベンゼトニウム、セトリミド、クロルヘキシジン、クロロブタノール、クロロクレゾール、クレゾール、グリセリン、イミヅレア、フェノール、フェノキシエタノール、フェニルエチルアルコール、酢酸フ���ニル水銀、ホウ酸フェニル水銀、硝酸フェニル水銀、ソルビン酸カリウム、安息香酸ナトリウム、プロピオン酸ナトリウム、ソルビン酸、およびチオメルサル（チメロサール））から選択することができる。
【０２５８】
一実施形態では、最適な薬物は、ミノキシジル、ミノキシジル硫酸塩、または塩化物、炭酸塩、硝酸塩等の別の塩形態である。別の実施形態では、最適な薬物は、プロスタグランジン、またはプロスタグランジン類似体、プロスタグランジンプロドラッグである。別の実施形態では、この薬物は、５αレダクターゼ阻害剤である。
【０２５９】
いくつかの実施形態では、この薬物は、毛包中に存在する特定のリガンドに標的にされるように、製剤化されよう。別例では、この薬物は、薬物を含有する持続性薬剤として毛包内に存在する正電荷を持つナノスフェアに製剤化されよう。
【０２６０】
いくつかの実施形態では、さらなる治療は、ｐ−ヒドロキシ安息香酸のアルキルエステル、ヒダントイン誘導体、プロピオン酸塩、フェノール、クレゾール、水銀剤、フェノキシエタノール、ベンジルアルコール、クロロブタノール、メチルおよびプロピルｐ−ヒドロキシ安息香酸塩、チメロサール、塩化ベンザルコニウム（例えば塩化ベンゼトニウム）、ブチル、メチルおよびプロピルパラベン、ソルビン酸、ならびに様々な第四アンモニウム化合物のいずれかが含まれるが、これらに限定されない、１種以上の抗菌剤または防腐剤を含む。
【０２６１】
好適な酸化防止剤は、アスコルビン酸塩、亜硫酸水素塩、およびメタ重亜硫酸ナトリウムを含む。
【０２６２】
いくつかの実施形態では、さらなる治療は、１種以上の麻酔用化合物を含む。麻酔用化合物は、局所的に、攪乱の部位に直接的注射によって、または全身的に投与され得る。本明細書に記載される方法および組成物に用いる麻酔用化合物の例には、リドカイン、プリロカイン、ブピバカイン（ｂｕｐｉｖｉｃａｉｎｅ）、レボブピバカイン、ロピバカイン、メピバカイン、ジブカイン、イソフルレン、デスフルレン、セボフルレン、および亜酸化窒素が含まれる。好適な局所麻酔薬としては、塩酸プロカイン、リドカインおよびその塩、ベンゾカインよびその塩、ならびにノバカインおよびその塩が挙げられるが、これらに限定されない。
【０２６３】
いくつかの実施形態では、さらなる治療は、１種以上の鎮痛剤、例えば、非ステロイド抗炎症薬またはアセトアミノフェンを含む。いくつかの実施形態では、さらなる治療は、例えば、アルフェンタニル、ベンジルモルフィン、コデイン、コデインメチルブロミド、リン酸コデイン、硫酸コデイン、デソモルフィン、ジヒドロコレイン、ジヒドロコデイノンエノールアセタート、ジヒドロモルフィン、エチルモルフィン、ヒドロコドン、ヒドロモルフォン、塩酸メタドン、モルヒネ、塩酸モルヒネ、硫酸モルヒネ、ニコモルフィン、ノルメタドン、ノルモルフィン、アヘン、オキシコドン、オキシモルホン、フェノペリジン、およびプロピラムからなる群から選択される１種以上の麻薬性鎮痛剤を含む。いくつかの実施形態では、さらなる治療は、例えば、アセクロフェナク、アセトアミノフェン、アセトアニリド、アセチルサリチルサリチル酸；アスピリン、カルバマゼピン、アセチルサリチル酸ジヒドロキシアルミニウム（ｄｉｈｙｄｒｏｘｙａｌｕｍｉｎｕｍ  ａｃｅｔｙｌｓａｌｉｃｙｌａｔｅ）、フェノプロフェン、フルプロクアゾン、イブフェナック、インドメタシン、ケトロラック、マグネシウムアセチルサリチル酸塩、モルホリンサリチル塩、ナプロキセン、フェナセチン、フェニルサリチル酸塩、サラセタミド（ｓａｌａｃｅｔａｍｉｄｅ）、サリシン、サリチルアミド、サリチル酸ナトリウム、およびトルフェナム酸からなる群から選択される１種以上の非麻薬性鎮痛剤を含む。使用され得る他の疼痛治療は、例えば、Ｌｙｒｉｃａ（プレガバリン）またはＮｅｕｒｏｎｔｉｎ（ガバペンチン）等の神経ブロックまたは非伝統的な鎮痛剤を含む。
【０２６４】
例えば、局所投与用鎮静製剤は、重炭酸ナトリウム（重曹）およびコールタール系の生成物を含有し得る。製剤はまた、任意に、日焼け止め剤もしくは他の皮膚保護薬、または防水加工剤を含有し得る。
【０２６５】
５．５  薬学的製剤および投与様式
５．５．１  製剤
上の項５．２、５．３、および５．４に記載される薬学的組成物は、薬学的に許容される担体（また、薬学的に許容される賦形剤とも称される）、即ち、薬学的に許容される材料、組成物、または液体もしくは固体充填剤、希釈剤、溶媒、封入材料等のビヒクル、または錯化剤と共に製剤化され得る。一実施形態では、合理的な利益／リスク比に対応して、過剰な毒性、刺激、アレルギー反応、免疫原性、または他の問題もしくは合併症を伴うことなく、ヒトおよび動物の生物組織または器官に接触するとき、薬学的製剤の他の成分と化学的に適合し、生体適合性であるという意味では、それぞれの成分は、「薬学的に許容される」。Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ：Ｔｈｅ  Ｓｃｉｅｎｃｅ  ａｎｄ  Ｐｒａｃｔｉｃｅ
ｏｆ  Ｐｈａｒｍａｃｙ，２００５，２１ｓｔ  ｅｄ．，Ｐｈｉｌａｄｅｌｐｈｉａ，ＰＡ：Ｌｉｐｐｉｎｃｏｔｔ  Ｗｉｌｌｉａｍｓ  ＆  Ｗｉｌｋｉｎｓ、Ｒｏｗｅ  ｅｔ
ａｌ．，ｅｄｓ．，２００５，Ｈａｎｄｂｏｏｋ  ｏｆ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｅｘｃｉｐｉｅｎｔｓ，５ｔｈ  ｅｄ．，Ｔｈｅ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｐｒｅｓｓ  ａｎｄ  ｔｈｅ  Ａｍｅｒｉｃａｎ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ａｓｓｏｃｉａｔｉｏｎ、Ａｓｈ  ＆  Ａｓｈ  ｅｄｓ．，２００７，Ｈａｎｄｂｏｏｋ  ｏｆ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ａｄｄｉｔｉｖｅｓ，３ｒｄ  ｅｄ．，Ｇｏｗｅｒ
Ｐｕｂｌｉｓｈｉｎｇ  Ｃｏｍｐａｎｙ、Ｇｉｂｓｏｎ  ｅｄ．，２００９，Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｐｒｅｆｏｒｍｕｌａｔｉｏｎ  ａｎｄ  Ｆｏｒｍｕｌａｔｉｏｎ，２ｎｄ  ｅｄ．，Ｂｏｃａ  Ｒａｔｏｎ，ＦＬ：ＣＲＣ  Ｐｒｅｓｓ  ＬＬＣを参照されたく、これらのそれぞれは参照によって本明細書に組み込まれる。
【０２６６】
好適な賦形剤は、当業者には周知であり、好適な賦形剤の限定されない例が、本明細書に提供される。特定の賦形剤が薬学的組成物または剤形に組み込むのに適しているかどうかは、投与方法が挙げられるが、これに限定されない、当該技術分野で公知の様々な要因によって異なる。例えば、クリーム剤等の局所投与用形態は、経皮または静脈内投与に用いるには適していない賦形剤を含有する場合がある。特定の賦形剤の適合性は、剤形において特定の活性成分によって異なる。本明細書に記載される育毛促進剤製剤に用いる例示的な限定されない薬学的に許容される担体は、国際特許出願公開第ＷＯ２００５／１２０４５１号（参照によってその全体が本明細書に組み込まれる）に提供される美容上許容されるビヒクルである。
【０２６７】
本明細書に開示される薬学的組成物は、水、食塩水、生理食塩水、もしくは緩衝食塩水（例えばリン酸緩衝生理食塩水（ＰＢＳ））、注射用塩化ナトリウム、注射用リンゲル液、注射用等張デキストロース、注射用無菌水、注射用デキストロース乳酸化リンゲル液、重炭酸ナトリウム、または注射用アルブミンが挙げられるが、これらに限定されない、適切な水性ビヒクルを含むように製剤化され得る。好適な非水性ビヒクルとしては、植物由来の固定油、ヒマシ油、トウモロコシ油、綿実油、オリーブ油、ピーナッツ油、ペパーミント油、サフラワー油、ゴマ油、大豆油、水素化植物油、水素化大豆油、およびココナツ油の中鎖トリグリセリド、ラノリン油、ラノリンアルコール、リノール酸、リノレン酸、およびヤシ種油が挙げられるが、これらに限定されない。好適な水混和性ビヒクルとしては、エタノール、羊毛アルコール、１，３−ブタンジオール、液体ポリエチレングリコール（例えばポリエチレングリコール３００およびポリエチレングリコール４００）、プロピレングリコール、グリセリン、Ｎ−メチル−２−ピロリドン（ＮＭＰ）、Ｎ，Ｎ−ジメチルアセトアミド（ＤＭＡ）、およびジメチルスルホキシド（ＤＭＳＯ）が挙げられるが、これらに限定されない。一実施形態では、水混和性ビヒクルはＤＭＳＯではない。
【０２６８】
好適な等張剤としては、塩化ナトリウム、グリセリン、およびデキストロースが挙げられるが、これらに限定されない。好適な緩衝剤としては、リン酸塩、グルタミン酸塩、およびクエン酸塩が挙げられるが、これらに限定されない。好適な懸濁化および分散剤としては、ナトリウムカルボキシメチルセルロース（ＣＭＣ）、ヒドロキシプロピルメチルセルロース（ＨＰＭＣ）、ポリビニルアルコール（ＰＶＡ）、およびポリビニルピロリドン（ＰＶＰ）が挙げられるが、これらに限定されない。好適な乳化剤としては、ポリオキシエチレンソルビタンモノラウレート、ポリオキシエチレンソルビタンモノラウレート８０、およびオレイン酸トリエタノールアミンが挙げられるが、これらに限定されない。好適な金属イオン封鎖剤またはキレート剤としては、ＥＤＴＡが挙げられるが、これに限定されない。好適なｐＨ調整剤としては、水酸化ナトリウム、塩酸、クエン酸、および乳酸が挙げられるが、これらに限定されない。好適な錯化剤としては、α−シクロデキストリン、β−シクロデキストリン、ヒドロキシプロピル−β−シクロデキストリン、スルホブチルエーテル−β−シクロデキストリン、およびスルホブチルエーテル７−β−シクロデキストリン（ＣＡＰＴＩＳＯＬ（登録商標）、ＣｙＤｅｘ，Ｌｅｎｅｘａ，ＫＳ）を含むシクロデキストリンが挙げられるが、これに限定されない。
【０２６９】
頭皮または顔面への適用のための製品は、塩基性環境が毛髪ケラチン中のジスルフィド結合を破壊することによって毛髪を衰弱させるため、その製品が、すすぎ易く、皮膚／目への刺激を最低限に抑え、存在する毛髪への損傷がなく、濃厚および／またはクリーム状の感覚があり、心地良い芳香で低毒性の良好な生分解性のある弱酸性ｐＨ（ｐＨ７未満）を有するように、さらに製剤化され得る。
【０２７０】
５．５．２  投与様式
本明細書に開示される薬学的組成物、例えば、項５．２に記載される攪乱後治療に使用される薬学的組成物、項５．３に記載される育毛促進剤、または項５．４に記載される薬学的薬剤は、局所（例えば、皮膚、経皮、または皮内に直接適用される）、皮下、筋肉内、静脈内、あるいは他の非経口手段による、経口投与、舌下投与、または口内投与に適している形態で製剤化され得る。例えば、本明細書に開示される方法および用途に用いる薬学的組成物は、局所（例えば、皮膚、経皮、または皮内に直接適用される）、皮下、筋肉内、静脈内、あるいは他の非経口手段によって、経口投与、舌下投与、または口内投与に適している形態で製剤化され得る。いくつかの実施形態では、局所（例えば、皮膚、経皮、または皮内に直接適用される）投与は、例えば、イオン導入装置等の機械装置を用いて達成される。本明細書に記載される薬学的組成物はまた、遅延、拡張、延長、持続、パルス状、制御、加速、迅速、標的化、プログラム化放出、および胃貯留の剤形を含む調節放出剤形としても製剤化され得る。これらの剤形は、当業者に公知の従来の方法および技術に従って調製することができる（Ｒａｔｈｂｏｎｅ  ｅｔ  ａｌ．，ｅｄｓ．，２００８，Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ：Ｔｈｅ  Ｓｃｉｅｎｃｅ  ａｎｄ  Ｐｒａｃｔｉｃｅ  ｏｆ  Ｐｈａｒｍａｃｙ，上記参照、Ｍｏｄｉｆｉｅｄ−Ｒｅｌｅａｓｅ  Ｄｒｕｇ  Ｄｅｌｉｖｅｒｙ  Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ，２ｎｄ  ｅｄ．，Ｎｅｗ  Ｙｏｒｋ，ＮＹ：Ｍａｒｃｅｌ  Ｄｅｋｋｅｒ，Ｉｎｃ．を参照のこと）。本明細書に記載される薬学的組成物は、医師によって、または必要に応じて、対象によって投与することができる。いくつかの実施形態では、対象は、彼ら自身に、項５．２に記載される攪乱後治療剤および項５．３に記載される成長促進剤を投与する。
【０２７１】
５．５．２．１  局所投与
好ましい実施形態では、局所投与は、皮膚表面、経皮、あるいは皮内のいずれかの皮膚へのものである。局所投与は、包帯剤または他の種類の被覆材を用いて封鎖してもよいし、封鎖しなくてもよい。いくつかの実施形態では、局所投与は、開口部または粘膜へのものであるか、または結膜、角膜内、眼球内、眼、耳、鼻、膣内、尿道、呼吸器官、および直腸投与である。局所投与用に使用される製剤は、皮膚において育毛促進剤（または他の活性成分）を保持するか、または系統的に育毛促進剤の用量を送達するように設計され得る。いくつかの実施形態では、育毛促進剤の局所投与は、上の項５．１に記載される外皮攪乱技術等があるが、これに限定されない、本明細書に記載される別の治療と組み合わせられる。
【０２７２】
好ましくは局所であるが、可能であれば全身的な効果のための局所投与に適している剤形には、乳剤、溶液、懸濁液、クリーム剤、ゲル剤、ヒドロゲル、軟膏、散粉剤、被覆材、エリキシル剤、ローション、懸濁液、チンキ剤、ペースト、粉末、結晶、泡製剤、フィルム、エアロゾル、潅漑、噴霧剤、坐薬、スティック剤、棒、軟膏、包帯剤、創傷被覆材、微細削皮もしくは削皮用粒子、ドロップ、および経皮もしくは皮膚パッチが含まれる。局所製剤はまた、マイクロおよびナノサイズのカプセル剤、リポソーム、ミセル、マイクロスフェア、微小粒子、ナノシステム、例えば、ナノ粒子、ナノコアセルベート、およびこれらの混合物も含むことができる。例えば、２００５年１１月１７日に公開された国際特許出願公開第ＷＯ２００５／１０７７１０号および２００５年３月１０に公開された国際特許出願公開第ＷＯ２００５／０２０９４０号を参照されたく、これらのそれぞれは、参照によってその全体が本明細書に組み込まれる。一実施形態では、ナノサイズの送達マトリックスは、ポリマー中にカプセル化された育毛促進剤を生成するためのプロセス等の明確なプロセスを通して製造される。別の実施形態では、育毛促進剤は、例えば、リポソーム、ミセル中の水溶液中に自然発生的に会合される。いくつかの実施形態では、局所投与用製剤は、シャンプーもしくは他の毛髪製品、日焼け製品、または日焼け防止剤、スキンローション、または化粧品である。
【０２７３】
選択された製剤は、皮膚に浸透し、毛包に達する。したがって、いくつかの実施形態では、角質層および／または表皮が、本明細書に記載される外皮攪乱法（創傷または瘢痕修正、レーザー、または削皮術もしくは削皮術のあまり激しくない形態である微細削皮術によるものを含む）によって除去され、これにより露出した真皮への直接的な局所投与のための剤形の適用を可能にする。いくつかの実施形態では、局所投与用製剤は、角質層に浸透するように、脂質系である。いくつかの実施形態では、局所投与用製剤は、例えば、プロピレングリコールまたはトランスクトール（ｔｒａｎｓｃｕｔｏｌ）等の皮膚浸透物質を含有する。例えば、２００４年１２月２日に公開された国際特許出願公開第ＷＯ２００４／１０３３５３号を参照されたく、これは参照によってその全体が本明細書に組み込まれる。皮膚への浸透能力は、例えば、国際特許出願公開第ＷＯ２００５／１０７７１０号（参照によってその全体が本明細書に組み込まれる）に記載される方法等の当該技術分野で公知の任意の方法を用いて試験することができる。一実施形態では、軟膏型製剤は、羊毛アルコール（アセチル化ラノリンアルコール）、固形パラフィン、白色軟パラフィン、流動パラフィン、および水の成分のうちの１つ以上を含む。例えば、上記のＬａｎｇｔｒｙらを参照のこと。いくつかの実施形態では、選択された製剤は、皮膚に適用されるとき、例えば、無色、無臭、すぐに吸収するよう等、目立たないものである。いくつかの実施形態では、選択された製剤は、溶液として皮膚表面上に適用され、数分間以内にヒドロゲルに架橋結合することができ、それにより、生体適合性のある被覆材を作製する。ある適用では、ヒドロゲルは生分解性であり得る。別の実施形態では、溶液は、皮膚に吸収し、薬物を放出するデポ剤に架橋結合する。別の実施形態では、育毛促進剤は、ポリマーを架橋結合するために使用され、育毛促進剤の放出がヒドロゲルの分解速度によって制御される。
【０２７４】
例となる一実施形態では、薬物は、例えば、０．１０ミクロン〜２００ミクロン、または０．２０ミクロン〜５０ミクロンの大きさからなるマイクロスフェア内にカプセル化される。別の実施形態では、薬物は、例えば、１０ｎｍ〜５０ミクロン、または５００ｎｍ〜２０ミクロンの大きさからなるリポソーム内にカプセル化される。
【０２７５】
別の実施形態では、薬物は、０．１〜１００ｎｍ、１００〜１０００ｎｍ、１〜１０ミクロン、１０〜１００ミクロンの大きさからなるマルチミセル凝集体等のリポソームまたは自己組織化ベシクルの形態で適用される。
【０２７６】
例示的な一実施形態では、薬物（または例えば攪乱後治療剤）は、３２℃〜３７℃の温度でゲル化する冷却液体として投与される。例えば、薬物は、液体として投与され得、これは、その後、時間をかけて薬物を送達する持続性薬剤に硬化する。別の実施形態では、薬物または攪乱後治療剤は、ヒドロゲルとして投与される。特定の実施形態では、攪乱後治療剤または薬物を含有する組成物は、プロピレングリコール、ポリエチレングリコール、またはエタノールを含む。
【０２７７】
別の実施形態では、薬物を含有する組成物は、薬物に錯化する１種以上の賦形剤を含む。特定の実施形態では、賦形剤は、ヒアルロン酸、ポリアクリル酸、またはアルギン酸を含む。別の実施形態では、組成物は、皮膚内に薬物を可溶化する１種以上の浸透促進剤または担体を含む。
【０２７８】
局所製剤に用いる薬学的に許容される担体および賦形剤としては、水性ビヒクル、水混和性ビヒクル、非水性ビヒクル、微生物の成長に対する抗菌剤または防腐剤、安定剤、可溶促進剤、等張剤、緩衝剤、酸化防止剤、局所麻酔薬、懸濁化剤および分散剤、湿潤剤または乳化剤、錯化剤、金属イオン封鎖剤またはキレート剤、浸透促進剤、凍結防止剤、リオプロテクタント（ｌｙｏｐｒｏｔｅｃｔａｎｔ）、増粘剤、ならびに不活性ガスが挙げられるが、これらに限定されない。
【０２７９】
局所投与用の形態はまた、軟膏、クリーム剤、およびゲル剤の形態であり得る。好適な軟膏ビヒクルには、ラード、安息香豚脂、オリーブ油、綿実油、鉱油、および他の油、白色ワセリン等の油性または炭化水素ビヒクル；親水ワセリン、ヒドロキシステアリンスルフェート、および無水ラノリン等の乳化または吸収ビヒクル；親水軟膏等の水除去性ビヒクル；異なる分子量のポリエチレングリコール等の水溶性軟膏ビヒクル；セチルアルコール、モノステアリン酸グリセリル、ラノリン、羊毛アルコール（アセチル化ラノリンアルコール）、およびステアリン酸等のエマルジョンビヒクル、油中水型（Ｗ／Ｏ）エマルジョンまたは水中油型（Ｏ／Ｗ）エマルジョン（Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ：Ｔｈｅ  Ｓｃｉｅｎｃｅ  ａｎｄ  Ｐｒａｃｔｉｃｅ  ｏｆ  Ｐｈａｒｍａｃｙを参照、上記参照）が含まれる。これらのビヒクルは、皮膚軟化剤であるが、一般に、酸化防止剤および防腐剤の添加を必要とする。
【０２８０】
好適なクリーム基材は、水中油または油中水型であり得る。好適なクリームビヒクルは、水洗浄可能であることができ、油相、乳化剤、および水相を含む。油相は、「内部」相とも呼ばれ、通常、セチルまたはステアリルアルコール等のワセリンおよび脂肪族アルコールから構成される。水相は、通常、容量において油相を（必ずしもそうではないが）超え、一般に、湿潤剤を含む。クリーム製剤中の乳化剤は、非イオン性、アニオン性、カチオン性、または両性界面活性剤であってもよい。
【０２８１】
ゲルは、半固体の懸濁系である。単相ゲルは、液体担体の全体にわたって実質的に均一に分布する有機巨大分子を含む。好適なゲル化剤としては、カルボマー、カルボキシポリアルキレン、およびＣＡＲＢＯＰＯＬ（登録商標）等の架橋アクリル酸ポリマー；ポリエチレンオキシド、ポリオキシエチレン−ポリオキシプロピレンコポリマー、およびポリビニルアルコール等の親水性ポリマー；ヒドロキシプロピルセルロース、ヒドロキシエチルセルロース、ヒドロキシプロピルメチルセルロース、ヒドロキシプロピルメチルセルロースフタラート、およびメチルセルロース等のセルロースポリマー；トラガカンタおよびキサンタンガム等のゴム；アルギン酸ナトリウム；ならびにゼラチンが挙げられるが、これらに限定されない。均一のゲルを調製するために、アルコールまたはグリセリン等の分散剤を加えることできるか、またはゲル化剤を粉砕、機械的混合、および／または撹拌することによって分散することができる。
【０２８２】
（ｉ）機械的手段を含む局所投与の他の手段
本明細書に開示される薬学的組成物の局所投与の他の手段（例えば、上の項５．２、５．３、および５．４を参照）もまた、企図される。局所投与のこれらの方法のそれぞれは、単独で育毛促進剤を投与しても、または本明細書に記載される１種以上の他の治療剤と組み合わせて投与してもよい。
【０２８３】
いくつかの実施形態では、局所投与は、電流、超音波、レーザー光線、または機械的破壊、または外皮攪乱によるものである。これらには、電気穿孔法、ＲＦアブレーション、レーザーポレーション（ｌａｓｅｒｐｏｒａｔｉｏｎ）、レーザーアブレーション（フラクショナルまたは非フラクショナル）、ノンアブレーションレーザーの使用、イオン導入法（ｉｏｎｔｏｐｈｏｒｅｓｉｓ）、音波泳動法、超音波導入法（ｓｏｎｏｐｈｏｒｅｓｉｓ）、超音波ポレーション、または皮膚剥削術（ｓｋｉｎ  ａｂｒａｓｉｏｎ）を達成する装置、または局所用噴射剤もしくはＰＯＷＤＥＲＪＥＣＴ（商標）（Ｃｈｉｒｏｎ  Ｃｏｒｐ．，Ｅｍｅｒｙｖｉｌｌｅ，ＣＡ）、ＢＩＯＪＥＣＴ（商標）（Ｂｉｏｊｅｃｔ
Ｍｅｄｉｃａｌ  Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ  Ｉｎｃ．，Ｔｕａｌａｔｉｎ，ＯＲ）、または超音波で加速した食塩水を使用して表皮を除去するＪｅｔＰｅｅｌ（商標）（ＴａｖＴｅｃｈ，Ｔｅｌ  Ａｖｉｖ，Ｉｓｒａｅｌから市販）等の極微針もしくは無針注射が含まれる。本明細書に記載される方法に従って使用することができる局所投与手段は、当該技術分野で公知であり、例えば、米国特許第５，９５７，８９５号、第５，２５０，０２３号、第６，３０６，１１９号、第６，７２６，６９３号、および第６，７６４，４９３号、ならびに国際特許出願公開第ＷＯ２００９／０６１３４９号、第ＷＯ１９９９／００３５２１号、第ＷＯ１９９６／０１７６４８号、第ＷＯ１９９８／０１１９３７号に記載されており、これらのそれぞれは、参照によってその全体が本明細書に組み込まれる。
【０２８４】
いくつかの実施形態では、局所投与用装置は、継続的に装着されるが、パルス様式または間欠的に育毛促進剤または他の活性成分を送達する自動注入装置である。いくつかの実施形態では、局所投与用装置は、例えば、洋服の下、毛髪中、かつら下等で、過度の不快感を持つことなく装着することができる目立たない自動注入装置である。いくつかの実施形態では、，毛包に達するが、血液循環への侵入を最小限に抑えるように、皮膚内の制御された深さで育毛促進剤または他の活性成分を送達する。
【０２８５】
本明細書に記載される薬学的組成物の投与のための他の方法は、例えば、「遺伝子銃」等の経皮粒子注入システムの使用を含む。そのようなシステムは、一般に、超音速に薬物または薬物粒子を加速し、角質層を介して狭い流れの薬物を「発射する（ｓｈｏｏｔ）」。いくつかの実施形態では、角質層および表皮は、本明細書に記載される外皮攪乱法を用いて予め除去され、それ故に、必要とされる出口圧力および速度を、低減させることができる。この減少は、必要とされる噴射機構の複雑性を軽減する。いくつかの実施形態では、特に、全身送達を達成するために狭い噴射の流れを使用する。他の実施形態では、粒子注射システムは、皮膚の広い領域にわたって薬学的組成物を投与する。広範囲にわたる皮膚送達に適合する例となる粒子送達装置（いくつかの実施形態では、外皮攪乱と共に用いるために、薬物が投与される皮膚の表面が攪乱した領域に対応する）は、幅広い領域に送達するように設計された噴霧ノズルを有する低圧／低速の噴射機構を含む。例えば、２５−ｃｍ２の領域に送達する単一の発射装置は、全領域が治療されるまで、頭皮または他の皮膚表面上に噴射されるか、または複数回使用され得る。
【０２８６】
別の実施形態では、エアブラシまたは小型グリットブラスターに類似する乾燥粒子を噴霧する機構は、攪乱した領域に薬物または薬物粒子を「塗る」ために使用することができる。いくつかの実施形態では、角質層および表皮は、例えば、本明細書に記載される外皮攪乱法によって既に除去され、それ故に、低下した圧力および速度の必要条件を用いた機構の効果的利用により皮膚送達を達成することができる。
【０２８７】
別の実施形態では、育毛促進剤（および／またはさらなる薬物）は、水性懸濁液中に存在し、標準的なエアゾールスプレー缶技術の使用が、所望の皮膚領域に育毛促進剤を送達することを可能にする。
【０２８８】
別の実施形態では、薬学的組成物は、２チャンバ型スプレー装置を用いて投与することができ、育毛促進剤または他の活性成分は、これらのチャンバのうちの１つに収容される液体中に分散、可溶化、または乳化される。この装置のもう一方のチャンバは、第１のチャンバ中において薬物を含有する液体と反応させることができる液体を含有し、物理的に架橋したヒドロゲルまたは共有結合しているヒドロゲルを形成する。共溶出／または共に噴霧するとき、液体は、反応させて、薬物を含有する生体接着性ヒドロゲルを形成して、所望の領域に薬学的組成物を送達することができる。一実施形態では、薬物を含有するヒドロゲルは、細胞接着および増殖を支持するさらなる特性を有する。
【０２８９】
別の実施形態では、薬学的組成物は、下層組織に接着性のある乾燥粉末として噴霧される。
【０２９０】
外皮攪乱と薬学的組成物の送達を組み合わせる装置を用いて投与様式の特定の実施形態が続く。このような装置を用いる利点は、薬学的組成物の投与のための便利な１つのステッププロセスを提供することである。
【０２９１】
一実施形態では、削皮術（例えば、削皮に使用することができる微細削皮装置を含む機械装置を用いる、またはアルミナ、シリカ、もしくは氷ベースの削皮術（Ｗｅｂｅｒによって、米国特許第６，７６４，４９３号、第６，７２６，６９３号、および第６，３０６，１１９号に記載されるような））が、当該技術分野で容易に知られる方法を用いた薬物粒子送達特性を含むように所望に応じて製作される。装置が、皮膚でアブレーション粒子を噴射するとき、露出した真皮に同時に埋め込まれるより小さな薬物粒子も噴射され得る。代替として、内部弁制御によって、装置は、一旦適切な皮膚破壊が生じることが決定されると、薬物粒子を噴射するように切り替えられ得る。国際特許出願公開第ＷＯ２００９／０６１３４９号を参照されたく、これは参照によってその全体が本明細書に組み込まれる。
【０２９２】
別の実施形態では、標準的な削皮装置は、改変されて、本明細書に記載される装置のいずれの、例えば、噴霧／塗装装置をも組み込むことができる。一実施形態では、噴霧ノズルは、削皮輪によって曝露されるとき、薬物が真皮に噴霧されるように、この削皮輪の後方に位置する。代替として、削皮装置は、内部制御によって、一旦適切な皮膚破壊が生じたことが決定されると、この削皮輪をオフにし、薬物塗装モードに変換するために薬物噴霧のスイッチを入れ得る。例えば、上の項５．１に記載される削皮術のための削皮先端部、削皮器、および／またはキットは、これらの実施形態に従って改変され得る。
【０２９３】
別の実施形態では、非フラクショナルＣＯ２またはエルビウム−ＹＡＧレーザーが、皮膚を破壊することなく、皮膚破壊を伴って、あるいは皮膚破壊後のいずれかで噴霧する薬物と組み合わせられる。
【０２９４】
一実施形態では、パルス色素レーザー（５８５〜５９５ｎｍ）が、皮膚攪乱前もしくは皮膚を攪乱することなく、皮膚攪乱を伴って、または皮膚攪乱後のいずれかで噴霧する薬物と組み合わせられる。
【０２９５】
別の実施形態では、フラクショナル非アブレーションレーザー（例えば、１５４０〜１５５０ｎｍで使用されるエルビウム−ＹＡＧレーザー）が、皮膚を攪乱することなく、皮膚攪乱を伴って、または皮膚攪乱後のいずれかで噴霧する薬物と組み合わせられる。別の実施形態では、フラクショナルアブレーションレーザー（例えば、２９４０ｎｍで使用されるエルビウム−ＹＡＧレーザーまたは１０，６００ｎｍで使用されるＣＯ２レーザー）が、皮膚を攪乱することなく、皮膚攪乱を伴って、または皮膚攪乱後のいずれかで噴霧する薬物と組み合わせられる。
【０２９６】
別の実施形態では、皮膚のフラクショナルアブレーションレーザー処置（例えば、２９４０ｎｍで使用されるエルビウム−ＹＡＧレーザーまたは１０，６００ｎｍで使用されるＣＯ２レーザー）が、薬物送達と組み合わせられる。例えば、インクジェット技術を起動させることによって、フラクショナルレーザーが、レーザーが皮膚に穴を形成するとき、インクジェットのような送達部品が、薬物でその同じ穴を充填することができるように、正確な送達手段と組み合わせられ得る。当業者は、適切な統合ソフトウェアおよびソフトウェアの制御は、レーザーアブレーションおよび薬物送達が適切に調節されて、薬物で適切に充填されたそれぞれの新しく形成された穴をもたらすために必要とされることを理解されよう。別の実施形態では、皮膚のフラクショナルアブレーションレーザー処置（例えば、２９４０ｎｍで使用されるエルビウム−ＹＡＧレーザーまたは１０，６００ｎｍで使用されるＣＯ２レーザー）が、薬物送達と組み合わせられる。例えば、インクジェット技術を起動させることによって、フラクショナルレーザーは、レーザーが皮膚に穴を形成するとき、インクジェットのような送達部品が、薬物でその同じ穴を充填することができるように、正確な送達手段と組み合わせられ得る。当業者は、適切な統合ソフトウェアおよびソフトウェアの制御が、レーザー処置および薬物送達が適切に調節されて、薬物で適切に充填されたそれぞれの新しく形成された穴をもたらすために必要とされることを理解されよう。
【０２９７】
いくつかの実施形態では、局所投与は、薬物を含有する粒子の投与を含む。これらの粒子は、本明細書に記載される手段のいずれかと組み合わせて皮膚に送達され得る。一実施形態では、異なる放出特性を有する粒子が、薬物の制御された送達を達成するために同時に送達される。
【０２９８】
別の実施形態では、局所投与は、極微針技術の使用によって作製される経路を通して送達される育毛促進剤を含有する製剤の投与を含む。製剤は、例えば、液体、ゲル、または乾燥スプレーであり得る。別の変形では、局所投与は、中空針を通して育毛促進剤を含有する製剤の送達によるものであり得る。
【０２９９】
別の実施形態では、局所投与は、イオン導入法のパッチにより皮膚に送達される薬物を含有する製剤の投与を含む。この実施形態の一例では、薬物を含有する製剤が組み込まれるパッチが、開発され得る。
【０３００】
別の実施形態では、局所投与は、極微針に成形した生分解性ポリマーに組み込まれる薬物を含有する製剤の投与を含む。このような一実施形態では、生分解性極微針は、標的とする皮膚組織を穿孔し、時間をかけて持続様式で薬物を送達するように、任意に適切な場所に残される。
【０３０１】
皮膚部位に治療用化合物を送達するために使用することができる装置の一例を、図１７Ａ〜２１Ｅに示す。装置または薬物噴霧器２は、制御装置または発生機４、足踏みスイッチ６、ハンドピース８、および電力モジュール１０を含む。
【０３０２】
制御装置４は、足踏みスイッチ６と、ハンドピース８と、電力モジュール１０との間のインターフェースである。それは、接続の中心点としての役割を果たし、システムの電源をオン／オフにする、ハンドピース８に／ハンドピース８から薬物カートリッジを読み込む／取り出す、および薬物送達速度を選択する手段をユーザに提供する。この機能の全てを制御するために、制御装置４は、組み込まれたソフトウェアによってハンドピース８の操作を制御する少なくとも１つの回路基板を含む。
【０３０３】
図１８で見ることができるように、制御装置４は、ハンドピース接続ポート１４、読み込み／取り出しボタン１６、薬物送達または噴霧速度を制御するための手段１８、薬物送達速度を表示するための手段２０、オン／オフスイッチ２２、およびハンドル２４を含む筺体１２を備える。図１８で示される実施形態では、薬物送達速度を制御するための手段１８は、一組の上／下ボタンを含み、薬物送達速度を表示するための手段２０は、薬物送達速度を示すために点火する８つの異なるＬＥＤ（発光ダイオード）を備える。読み込み／取り出しボタン１６、上／下ボタン１８、およびオン／オフスイッチ２２のために使用することができる材料の例としては、シリコーンゴム、プラスチック、および金属等のエラストマー材料が挙げられるが、これらに限定されない。筺体１２は、例えば、アクリロニトリルブタジエンスチレン等の射出成形された熱可塑性プラスチック材料から作製することができる。
【０３０４】
図１９Ａおよび１９Ｂは、薬物噴霧器のハンドピース８の一実施形態を示す。ハンドピース８は、筺体２６、駆動モーター２８、自在継手３０、および少なくとも１つのプランジャー３２を備える。使い捨てまたは再利用可能であり得る薬物カートリッジ３４が、ハンドピース８の末端に取り付けられる。ハンドピースの筺体２６は、例えば、アクリロニトリルブタジエンスチレン等の射出成形された熱可塑性プラスチック材料から作製することができる。他の材料を使用して、ハンドピースの筺体２６を構築し得ることを当業者には容易に理解されよう。
【０３０５】
いくつかの治療用化合物は、それらの成分を混合した後すぐに不安定になり得るか、またはそれらが冷蔵保存されない限り、短い保存期間を有し得るものもある。したがって、これらの化合物の安定性を維持し、保存期間を増加させるために、化合物を一緒に混合して、例えば、ゲル、制御放出、薬物送達マトリックスを形成する際に化合物を投与する準備ができるまで、化合物の成分は、互いに別々にされる。米国特許第４，３８１，７７８号、米国特許第４，６８９，０４２号、米国特許第５，１２２，１１７号、米国特許第５，４２３，７５２号（それぞれの全体の内容はここに参照によって明示的に組み込まれる）に記載されるもの等の先行技術の装置は、別々に薬物成分を保管し、次いで、分注される前に成分を混合するように開発されている。
【０３０６】
図２０Ａ〜２１Ｅは、治療用化合物が分注されるまで、薬物成分を別々にしておく２つの別々のチャンバを有する薬物カートリッジの実施形態を示す。図２０Ａ〜２０Ｄは、２つの液体成分を含む薬物カートリッジ４０およびそれの関連したハンドピース４２を示す。薬物カートリッジ４０は、前端部４６と、後端部４８と、ノズル５０と、混合チャンバ５４およびその後端部４８から延在し、混合チャンバ５４と流体連通している２つの穿孔要素５６を有する静的ミキサー５２と、２つの液体成分チャンバ５８、６０と、第１の成分チャンバ５８中に保存される第１の液体成分６２と、第２の成分チャンバ６０中に保存される第２の液体成分６４と、そのそれぞれの成分チャンバ５８、６０内にそれぞれの液体成分６２、６４を後方に閉じ込めるようにそれぞれの成分チャンバ５８、６０の後端部４８に挿入されるピストン６６と、を有する筺体４４を含む。ピストン６６は、それらのそれぞれの成分チャンバ５８、６０の内壁と気密シールを形成する。それぞれのチャンバ５８、６０の前端部を密封するために、穿孔可能なシール６８が含まれる。したがって、薬物カートリッジ４０をハンドピース４２に取り付けるとき、穿孔要素５６は、第１および第２の成分チャンバ５８、６０の穿孔可能なシール６８を穿孔し、それによって、静的ミキサー５２と第１および第２の成分チャンバ５８、６０との間で流体接続を形成する。２つの液体成分６２、６４の混合を促進するために、混合チャンバ５４は、その中に混合要素７０を含む。例えば、これらの混合要素７０は、混合チャンバ５４の内壁に形成される経路またはチャネルであり得るか、または液体成分６２、６４が混合チャンバ５４を通って移動するとき、旋回させて、乱流流動を得、それによって液体成分６２、６４を一緒に混合する混合翼であり得る。
【０３０７】
薬物噴霧器２を用いて２つの液体成分の薬物カートリッジ４０を使用するために、図２０Ｂ〜２０Ｄで見ることができるように、ユーザは、薬物カートリッジ４０をハンドピース４２の前端部７２に挿入する。挿入するとき、薬物カートリッジ４０上の戻り止め７４がハンドピース４２上の戻り止め７６に係合し、薬物カートリッジ４０およびハンドピース４２を一緒に係合する。図２０Ｃおよび２０Ｄに示されるように、薬物カートリッジ４０がハンドピース４２に完全に挿入されるとき、それぞれのプランジャー８０の接続部分７８が、ピストン６６中の対応する空洞８２に係合し、２つの間の圧入接続を形成する。したがって、プランジャー８０が移動するとき、ピストン６６は、対応する様式で移動する。
【０３０８】
ユーザが治療用化合物を分注することを望むとき、ユーザは、制御装置４によってハンドピース４２を起動させる。同様に、ハンドピース４２の起動によって、駆動モーター２８に動力を与え、駆動モーターは自在継ぎ手を介して作動して（図１９Ａおよび１９Ｂを参照）、薬物カートリッジ４０の前端部４６に向かってプランジャー８０を移動させるか、または駆動する。したがって、図２０Ｄで見ることができるように、プランジャー８０が矢印８３によって示される方向に移動するとき、ピストン６６は、対応する様式で成分チャンバ５８、６０に移動し、それぞれの別々の液体成分６２、６４を、穿孔要素５６を通って混合チャンバ５４に押し進める。液体成分６２、６４が混合チャンバ５４を通って移動するとき、その中に形成された乱流が、液体成分６２、６４を互いに混合させる。次いで、新しく混合した成分は、混合した治療用化合物８１としてノズル５０から出る。
【０３０９】
別の実施形態では、薬物噴霧器２は、液体成分８６および固体成分８８を含有する薬物カートリッジ８４と共に使用することができる。図２１Ａ〜２１Ｅに示されるように、薬物カートリッジ８４は、前端部９２と、後端部９４と、下方チャンバ９６と、ノズル９８と、液体成分８６を収容する液体成分チャンバ１００と、固体成分８８を収容する固体成分チャンバ１０２と、その内に液体成分８６を後方に閉じ込めるように液体成分チャンバ１００の後端部に挿入される第１のピストン１０４と、その内に固体成分８８を後方に閉じ込めるように固体成分チャンバ１０２の後端部に挿入される第２のピストン１０６とを有する筺体９０を含む。第１および第２のピストン１０４、１０６は、液体および固体成分チャンバ１００、１０２の内壁と気密シールを形成する。
【０３１０】
液体成分チャンバ１００の前端部９２は、液体成分８６を閉じ込める第１の一方通行または逆止弁１０８を含む。固体成分チャンバ１０２の前端部９２は、逆止弁を含まない。その代わりに、第２の逆止弁１１０が、下方チャンバ９６の後端部で含まれる。本薬物カートリッジ８４で使用され得るこのような一方通行弁の一例は、ダックビル型バルブ（ｄｕｃｋ  ｂｉｌｌ  ｖａｌｖｅ）である。第１および第２の逆止弁１０８、１１０のこの構成は、液体成分８６および固体成分８８を互いに別々に保存することができ、また、液体および固体成分チャンバ１００、１０２の前端部を封じ込めて、第１および第２のピストン１０４、１０６ならびに第１および第２の逆止弁１０８、１１０を形成する。
【０３１１】
薬物噴霧器２とともに液体成分８６および固体成分８８を含有する薬物カートリッジ８４を使用するために、図２１Ａ〜２１Ｅで見ることができるように、ユーザは、薬物カートリッジ８４をハンドピース１１４の前端部１１２に挿入する。挿入するとき、薬物カートリッジ８４上の戻り止め１１６がハンドピース１１４上の戻り止め１１８に係合し、それによって薬物カートリッジ８４およびハンドピース１１４を一緒に係合する。上に論じられる液体−液体薬物カートリッジ４０と対照的に、液体−固体薬物カートリッジ８４と共に用いるハンドピース１１４は、固体成分チャンバ１０２に挿入される単一プランジャー１２０を含む。図２１Ｂ〜２１Ｅで見ることができるように、薬物カートリッジ８４がハンドピース１１４に完全に挿入されるとき、プランジャー１２０の接続部分１２２を、第２のピストン１０６中の対応する空洞１２４に係合し、２つの間の圧入接続を形成する。したがって、プランジャー１２０が移動するとき、第２のピストン１０６は、対応する様式で移動する。
【０３１２】
ユーザが治療用化合物を分注することを望むとき、このユーザは、制御装置４によってハンドピース１１４を起動させる。ハンドピース１１４の起動により、次いで、駆動モーター２８に動力を与え、駆動モーターは、自在継ぎ手３０を介して作動し（図１９Ａおよび１９Ｂを参照）、プランジャー１２０を移動させる。初めに、プランジャー１２０は図２１Ｄ中の矢印１２６によって示される方向に引っ込められ、対応する様式で第２のピストン１０６を移動させる。第１および第２のピストン１０４、１０６ならびに第１および第２の逆止弁１０８、１１０によって形成される気密シールのため、図２１Ｄで見ることができるように、第２のピストン１０６が引っ込むとき、陰圧または吸引が固体成分チャンバ１０２において形成される。この陰圧または吸引は、第１のピストン１０４を矢印１２８の方向に移動させ、液体成分８６を、第１の逆止弁１０８を通って液体成分チャンバ１０２に押し進める。液体成分８６が固体成分チャンバ１０２に入るとき、乱流流動が形成され、これは液体および固体成分８６、８８を一緒に混合する働きをする。閉塞したシステム内の陰圧は、第２の逆止弁１１０を閉塞した状態に保つ役割を果たす。
【０３１３】
液体および固体成分８６、８８が固体成分のチャンバ１０２内で一緒に混合された後、ユーザは、図２１Ｅ中の矢印１３０によって示されるように、プランジャー１２０の移動する方向を逆転させることによって混合した薬物を分注することができる。これは、第２の逆止弁１１０を通って下方チャンバ９６に混合した治療用化合物１３２を押し出し、ノズル９８を介して出す。第１の逆止弁１０８の前端部に作用する圧力が、第１の逆止弁１０８を押し出し、分注操作中、閉塞した状態を維持する。
【０３１４】
固体成分８８に添加される液体成分８６の量、つまり、混合した薬物の濃度が、プランジャー１２０の移動する方向を逆転させる前にプランジャー１２０が分注される距離を調節することができることは、当業者には容易に理解されよう。したがって、例えば、プランジャー１２０がさらに後方に引っ込められると、さらに体成分８６が固体成分チャンバ１０２に入り、したがって、治療用化合物がさらに希釈される。
【０３１５】
ある特定の実施形態では、第１の液体成分６２は、育毛促進剤塩を含むある溶液であり、第２の液体成分６４は、室温（２０〜２５℃）およびそれを下回る温度ではある溶液であるが、３２〜３７℃の生理的温度ではゲルとなる水溶性ポリマーを含むポリマー溶液である。育毛促進剤溶液中の育毛促進剤の濃度は、最終濃度の濃度の少なくとも１．２倍、１．４倍、１．６倍、１．８倍、２倍、２．２倍、２．４倍、２．６倍、２．８倍、３倍、４倍、または少なくとも５倍であり得る。育毛促進剤溶液は、水性溶液であり得る。
【０３１６】
ある特定の実施形態では、液体成分８６は、室温（２０〜２５℃）およびそれより下回る温度では溶液であるが、３２〜３７℃の生理的温度ではゲルとなる水溶性ポリマーを含むポリマー溶液であり、固体成分８８は、本明細書（例えば項５．１を参照）に記載される育毛促進剤を含む。
【０３１７】
ある特定の実施形態では、薬物噴霧装置、薬物カートリッジのいずれか、またはその両方は、使い捨て装置として製造され得る。ある特定の実施形態では、薬物噴霧装置は、電池式になるように変更することができる。
【０３１８】
当業者には明らかであるように、本装置の成分を改変して、分注前に一緒に混合する必要がある２種を超える成分を含む治療用化合物を分注することができる。
【０３１９】
ある特定の実施形態では、治療用化合物を噴霧するための装置は、
（Ａ）制御装置と、
（Ｂ）フットピースと、
（Ｃ）電力モジュールと、
（Ｄ）ハンドピースであって、
（ｉ）筺体と、
（ｉｉ）第１の接続部分を有する第１のプランジャーと、
（ｉｉｉ）第２の接続部分を有する第２のプランジャーと、を備える、ハンドピースと、
（Ｅ）薬物カートリッジであって、
（ｉ）筺体と、
（ｉｉ）第１の液体成分を収容する第１のチャンバであって、第１の液体成分が端部に形成される第１の空洞を有する第１のピストンによって後方に閉じ込められる、第１のチャンバと、
（ｉｉｉ）第２の液体成分を収容する第２のチャンバであって、第２の液体成分が端部に形成される第２の空洞を有する第２のピストンによって後方に閉じ込められる、第２のチャンバと、
（ｉｖ）静的ミキサーと、
（ｖ）ノズルと、を備える、薬物カートリッジと、を備え、
（Ｆ）第１の接続部分は、第１のプランジャーの移動が、第１のチャンバ内の第１のピストンを対応する様式で移動させるように、第１の空洞に係合し、
（Ｇ）第２の接続部分は、第２のプランジャーの移動が、第２のチャンバ内の第２のピストンを対応する様式で移動させるように、第２の空洞に係合する。
【０３２０】
ある特定の実施形態では、治療用化合物を噴霧するための装置は、
（Ａ）制御装置と、
（Ｂ）フットピースと、
（Ｃ）電力モジュールと、
（Ｄ）筺体と、接続部分を有するプランジャーと、を含む、ハンドピースと、
（Ｅ）薬物カートリッジであって、
（ｉ）前端部および後端部を有する薬物カートリッジ筺体と、
（ｉｉ）液体成分を収容する第１のチャンバであって、この液体成分は、第１のピストンによって第１の端部および第１の一方通行弁によって第２の端部で閉じ込められる、第１のチャンバと、
（ｉｉｉ）固体成分を収容する第２のチャンバであって、この固体成分は、その端部に形成される空洞を有する第２のピストンによって第１の端部ならびに第１の一方通行弁および第２の一方通行弁によって第２の端部で閉じ込められる、第２のチャンバと、
（ｉｖ）底部チャンバと、
（ｖ）ノズルと、を備える、薬物カートリッジと、を備え、
（Ｆ）この接続部分は、プランジャーの移動が第２のチャンバ内の第２のピストンを対応する様式で移動させるように、第２のピストン内の空洞に係合し、
（Ｇ）薬物カートリッジ筺体の前端部から離れたピストンの移動が、第２のチャンバ内に陰圧を形成し、
（Ｈ）第２のチャンバ内に形成された陰圧は、第１の一方通行弁を通じて液体成分を第２のチャンバに引き込む。
【０３２１】
ある特定の実施形態では、治療用化合物を噴霧するための装置に用いる薬物カートリッジは、
（Ａ）前端部および後端部を有する筺体と、
（Ｂ）液体成分を収容する第１のチャンバであって、この液体成分は、第１のピストンによって第１の端部および第１の一方通行弁によって第２の端部で閉じ込められる、第１のチャンバと、
（Ｃ）固体成分を収容する第２のチャンバであって、この固体成分は、その端部に形成される空洞を有する第２のピストンによって第１の端部ならびに第１の一方通行弁および第２の一方通行弁によって第２の端部で閉じ込められる、第２のチャンバと、
（Ｄ）底部チャンバと、
（Ｅ）ノズルと、を備え、
（Ｆ）筺体の前端部から離れた第２のピストンの移動が、第２のチャンバ内に陰圧を形成し、
（Ｇ）第２のチャンバ内に形成された陰圧は、第１の一方通行弁を通じて液体成分を第２のチャンバに引き込む。
（ｉｉ）架橋マイクロスフェアの送達
ある特定の実施形態では、本明細書に開示される薬物噴霧装置は、高度に疎水性の閉塞マトリックスを使用せずに、薬物、例えば、育毛促進剤または他の活性成分等の持続放出を可能にする。特に、この薬物噴霧装置は、マイクロスフェア（例えばＰＬＧマイクロスフェア）中の薬物の送達を可能し、マイクロスフェアが長期間創傷部位でとどまり、食作用によって迅速に除去されないようになる。長期間は、少なくとも１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、または少なくとも２０日であり得る。
【０３２２】
理論に束縛されることなく、薬物噴霧装置は、組織への薬物を含有するマイクロスフェアの投与を可能にし、マイクロスフェアが組織表面で分子結合を形成する原位置で架橋結合するヒドロゲルによって創傷表面に隔離されるようになる。原位置で架橋結合するヒドロゲルは、軟膏またはクリーム剤のように「こすり（ｒｕｂｂｅｄ）」落とすことができない。マイクロスフェアは、持続様式で薬物を放出するヒドロゲル中に隔離されよう。したがって、マイクロスフェアの食作用の問題を克服する。
【０３２３】
ある特定の実施形態では、架橋マイクロスフェアを送達するために、固体成分８８は、ポリマーマクロモノマー（ポリマー１）（別の成分とさらに架橋結合することができるポリマー）と、育毛促進剤を含有するマイクロスフェアと、を含む。液体成分８６は、ポリマー１と反応させることが可能な別のポリマーマクロモノマー（ポリマー２）を含む。ポリマー２は、加水分解的に不安定な結合を含まず、水中で安定している。
【０３２４】
創傷部位に架橋マイクロスフェアを送達するために、本発明に開示された薬物噴霧装置の使用の例示説明となる実施形態を、以下の実施例に記載している。
【０３２５】
（ｉｉｉ）架橋した生分解可能な足場の送達
ある特定の実施形態では、本明細書に開示される薬物噴霧装置は、薬物、例えば、育毛促進剤または他の活性成分等の持続放出、および痂皮を通じて皮膚による取り込みを可能にする。特に、薬物噴霧装置は、送達系が痂皮に組み込まれるように、育毛促進剤の送達を可能にする。これは、新鮮な創傷上に薄いガーセのような柔軟な生分解性足場を含む育毛促進剤を設置することによって達成され得る。足場の材料特性は、そのようなガーゼが創傷からの血液および他の浸出液を吸収することができるように調節される。ある種のさらに特定の実施形態では、生分解性足場は、血液、フィブリン、およびフィブリノゲンを吸収するための高含量の空間を有する。理論に束縛されることなく、その形成中のフィブリン塊への足場の組み込みは、それを凝固した後、痂皮とも呼ばれる、繊維網へのその組み込みをもたらす。創傷への薬物を含有する生分解性足場の設置後、原位置で架橋結合するヒドロゲルは、創傷被覆材として全部位を覆うように上部に適用され得る。
【０３２６】
ある特定の実施形態では、固体成分８８は、ポリマーマクロモノマー（ポリマー１）（別の成分とさらに架橋結合することができるポリマー）を含み、液体成分８６は、ポリマー１と反応させることができる別のポリマーマクロモノマー（ポリマー２）を含む。ポリマー２は、加水分解的に不安定な結合を含まず、水中で安定している。これらの２つの成分の混合により、創傷に適用される架橋ヒドロゲルを得る。架橋ヒドロゲルは、育毛促進剤を含む生分解性足場と共に適用される。生分解性足場は、ＰＬＧポリマーのブレンドである柔軟なガーゼのような材料の形態であり得る。他のポリマーは、生分解性、柔軟性等の特性を得るために、主成分（ＰＬＧ）に添加され得る。特定の実施形態では、育毛促進剤は、生分解性足場に組み込まれ得る。ある特定の実施形態では、架橋ヒドロゲルは、足場が適用される前に創傷に適用され、架橋ヒドロゲルは、足場が適用されると同時に創傷に適用され、架橋ヒドロゲルは、足場が適用された後に創傷に適用される。
【０３２７】
ある特定の実施形態では、生分解性足場は、細胞がそれ自体に接着し、分化し、増殖することが可能である「開細胞（ｏｐｅｎ−ｃｅｌｌ）」構造体を有する。足場は、細胞接着を促すように組み込まれるＲＧＤペプチド等の他の成分を有し得る。足場は、それを「適当な位置に」維持する生体接着特性を有し得る。
【０３２８】
創傷部位に架橋した生分解性足場を送達するために、本発明に開示された薬物噴霧装置の使用の例示的な実施形態を、以下の実施例に記載している。
【０３２９】
（ｉｖ）混合薬の送達
ある特定の実施形態では、本明細書に開示される薬物噴霧装置は、異なる溶解特性および／または物理的／化学的な不適合性（例えば、異なる賦形剤の必要条件；互いに２つ以上の薬物との結合および／または反応等）を有する２つ以上の薬物の同時送達を可能にする。
【０３３０】
ある特定の実施形態では、第１の液体成分６２は、第１の製剤化した薬物であり、第２の液体成分６４は、第２の製剤化した薬物である。ある特定の他の実施形態では、本発明に開示される薬物噴霧装置は、それぞれの薬物を別々に噴霧するために係合され得る。例えば、アルコール溶液（±薬物）を使用して、第１に、徹底的に洗浄し、続いて、本明細書に開示される育毛促進剤製剤を噴霧することによって創傷を「調製」することができる。なお他の実施形態では、両方のチャンバは、同じ薬物を含有するが、異なる形態で、別に製剤化して、異なる放出プロファイルを達成し得る。例えば、第１の液体成分６２は、ＦＤＡ認可された液体賦形剤中に懸濁され微粒化した育毛促進剤を含有し得、第２の液体成分６４は、噴霧可能な水性ゲル中に溶解した育毛促進剤であり得る。同時に噴霧する育毛促進剤の両方の形態は、即座に生物学的に利用可能な育毛促進剤および微粒化した育毛促進剤が溶解する場合に利用される持続型育毛促進剤を提供する。
【０３３１】
創傷部位に架橋した生分解性足場を送達するために、本発明に開示された薬物噴霧装置の使用の例示的な実施形態を、以下の実施例に記載している。
【０３３２】
（ｖ）洗浄および薬物送達
ある特定の実施形態では、本明細書に開示される薬物噴霧装置は、１つの単一装置を用いて洗浄および１種以上の薬物の投与を可能にする。これらの実施形態では、それぞれのチャンバの内容物は、別々に噴霧され得る。一旦チャンバが洗浄溶液を含有し得ると、他のチャンバ内の液体は、育毛促進剤を含有する。当業者に公知のいかなる創傷洗浄溶液は、これらの実施形態と共に使用することができる。
【０３３３】
創傷部位に架橋した生分解性足場足場を送達するために、本発明に開示された薬物噴霧装置の使用の例示的な実施形態を、以下の実施例に記載している。
【０３３４】
上述の薬物送達装置が、架橋マイクロスフェア、架橋した生分解性足場、混合薬の送達、および上述の洗浄溶液による薬物送達には好ましい場合があるが、一方、創傷または非創傷の皮膚へのそれらの送達は、本明細書に記載されるまたは当該技術分野で公知の任意の方法または装置を用いて達成され得ることは当業者には明白であろう。
【０３３５】
（ｖｉ）  具体例
一実施形態では、治療用化合物を噴霧するための装置が本明細書に提供され、
（Ａ）制御装置と、
（Ｂ）フットピースと、
（Ｃ）電力モジュールと、
（Ｄ）ハンドピースであって、
（ｉ）筺体と、
（ｉｉ）第１の接続部分を有する第１のプランジャーと、
（ｉｉｉ）第２の接続部分を有する第２のプランジャーと、を備える、ハンドピースと、
（Ｅ）薬物カートリッジであって、
（ｉ）筺体と、
（ｉｉ）第１の液体成分を収容する第１のチャンバであって、第１の液体成分がその端部に形成される第１の空洞を有する第１のピストンによって後方に閉じ込められる、第１のチャンバと、
（ｉｉｉ）第２の液体成分を収容する第２のチャンバであって、第２の液体成分がその端部に形成される第２の空洞を有する第２のピストンによって後方に閉じ込められる、第２のチャンバと、
（ｉｖ）静的ミキサーと、
（ｖ）ノズルと、を備える、薬物カートリッジと、を備え、
（Ｆ）第１の接続部分が、第１のプランジャーの移動が、第１のチャンバ内の第１のピストンを対応する様式で移動させるように、第１の空洞に係合し、
（Ｇ）第２の接続部分は、第２のプランジャーの移動が、第２のチャンバ内の第２のピストンを移動させるように対応する様式で第２の空洞に係合する。
【０３３６】
別の実施形態では、治療用化合物を噴霧するための装置は、
（Ａ）制御装置と、
（Ｂ）フットピースと、
（Ｃ）電力モジュールと、
（Ｄ）筺体と、接続部分を有するプランジャーと、を含む、ハンドピースと、
（Ｅ）薬物カートリッジであって、
（ｉ）前端部および後端部を有する薬物カートリッジ筺体と、
（ｉｉ）液体成分を収容する第１のチャンバであって、この液体成分は、第１のピストンによって第１の端部および第１の一方通行弁によって第２の端部で閉じ込められる、第１のチャンバと、
（ｉｉｉ）固体成分を収容する第２のチャンバであって、この固体成分は、その端部に形成される空洞を有する第２のピストンによって第１の端部ならびに第１の一方通行弁および第２の一方通行弁によって第２の端部で閉じ込められる、第２のチャンバと、
（ｉｖ）底部チャンバと、
（ｖ）ノズルと、を備える、薬物カートリッジと、を備え、
（Ｆ）この接続部分は、プランジャーの移動が、第２のチャンバ内の第２のピストンを対応する様式で移動させるように、第２のピストン内の空洞に係合し、
（Ｇ）薬物カートリッジ筺体の前端部から離れたピストンの移動が、第２のチャンバ内に陰圧を形成し、
（Ｈ）第２のチャンバ内に形成された陰圧は、第１の一方通行弁を通じて液体成分を第２のチャンバに引き込む。
【０３３７】
ある特定の実施形態では、治療用化合物を噴霧するための装置に用いる薬物カートリッジは、
（Ａ）前端部および後端部を有する筺体と、
（Ｂ）液体成分を収容する第１のチャンバであって、この液体成分は、第１のピストンによって第１の端部および第１の一方通行弁によって第２の端部で閉じ込められる、第１のチャンバと、
（Ｃ）固体成分を収容する第２のチャンバであって、この固体成分は、その端部に形成される空洞を有する第２のピストンによって第１の端部ならびに第１の一方通行弁および第２の一方通行弁によって第２の端部で閉じ込められる、第２のチャンバと、
（Ｄ）底部チャンバと、
（Ｅ）ノズルと、を備え、
（Ｆ）筺体の前端部から離れた第２のピストンの移動が、第２のチャンバ内に陰圧を形成し、
（Ｇ）第２のチャンバ内に形成された陰圧は、第１の一方通行弁を通じて液体成分を第２のチャンバに引き込む。
【０３３８】
ある特定の実施形態では、本明細書に開示される薬物噴霧装置は、高度に疎水性の閉塞マトリックスを使用せずに、育毛促進剤の持続放出を可能にする。特に、この薬物噴霧装置は、マイクロスフェア（例えばＰＬＧマイクロスフェア）中の育毛促進剤の送達を可能にし、マイクロスフェアが長期間創傷部位でとどまり、食作用によって迅速に除去されないようになる。長期間は、少なくとも１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、または少なくとも２０日であり得る。
【０３３９】
ある特定の実施形態では、本明細書に開示される薬物噴霧装置は、育毛促進剤の持続放出および痂皮を通じて皮膚による取り込みを可能にする。特に、薬物噴霧装置は、送達系が痂皮に組み込まれるように、育毛促進剤の送達を可能にする。これは、新鮮な創傷上に薄いガーセのような柔軟な生分解性足場を含む育毛促進剤を設置することによって達成され得る。足場の材料特性は、そのようなガーゼが創傷からの血液および他の浸出液を吸収することができるように調節される。ある特定のさらに具体的な実施形態では、生分解性足場は、血液、フィブリン、およびフィブリノゲンを吸収するための高含量の空間を有する。いくつかの実施形態では、創傷への薬物を含有する生分解性足場の設置後、原位置で架橋結合するヒドロゲルは、創傷被覆材として全部位を覆うように上部に適用され得る。
【０３４０】
ある特定の実施形態では、本明細書に開示される薬物噴霧装置は、異なる溶解特性および／または物理的／化学的な不適合性（例えば、異なる賦形剤の必要条件；互いに２つ以上の薬物との結合および／または反応等）を有する２つ以上の薬物の同時送達を可能にする。
【０３４１】
ある特定の実施形態では、本明細書に開示される薬物噴霧装置は、１つの単一装置を用いて洗浄および１種以上の薬物の投与を可能にする。これらの実施形態では、それぞれのチャンバの内容物は、別々に噴霧され得る。一旦チャンバが洗浄溶液を含有し得ると、他のチャンバ内の液体は、育毛促進剤を含有する。当業者に公知のいかなる創傷洗浄溶液は、これらの実施形態と共に使用することができる。
【０３４２】
５．５．２．２  非経口投与
例えば、上の項５．２、５．３、および５．４における本明細書に記載される薬学的組成物の投与は、局所的または全身投与のために注射、注入、または移植によって非経口的に投与することができる。本明細書で使用される非経口投与は、静脈内、動脈内、腹腔内、鞘内、心室内、尿管内、胸骨内、頭蓋内、筋肉内、滑液嚢内、膀胱内、および皮下投与を含む。非経口投与用組成物は、非経口投与に適している任意の剤形に製剤化することができ、注射前に液体中の溶液または懸濁液に適している、溶液、懸濁液、乳液、ミセル、リポソーム、マイクロスフェア、ナノシステム、および固体の形態を含む。そのような剤形は、医薬科学の当業者に公知の従来の方法に従って調製することができる（Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ：Ｔｈｅ  Ｓｃｉｅｎｃｅ  ａｎｄ  Ｐｒａｃｔｉｃｅ  ｏｆ  Ｐｈａｒｍａｃｙ、上記参照のこと）。非経口投与用組成物は、水性ビヒクル、水混和性ビヒクル、非水性ビヒクル、微生物の成長に対する抗菌剤または防腐剤、安定剤、可溶促進剤、等張剤、緩衝剤、酸化防止剤、局所麻酔薬、懸濁化剤および分散剤、湿潤剤または乳化剤、錯化剤、金属イオン封鎖剤またはキレート剤、凍結防止剤、リオプロテクタント（ｌｙｏｐｒｏｔｅｃｔａｎｔ）、増粘剤、ｐＨ調整剤、ならびに不活性ガスが挙げられるが、これらに限定されない、１種以上の薬学的に許容される担体および賦形剤を含むことができる。全てのそのような組成物は、当該技術分野で公知のように滅菌されなければならない。非経口投与用組成物は、埋込みデポ（ｉｍｐｌａｎｔｅｄ  ｄｅｐｏｔ）としての投与のために、懸濁液、固体、半固体、またはチキソトロピー液体として製剤化することができる。一実施形態では、組成物は、固体内側マトリックスに分散し、体液に不溶性である外側の高分子膜によって囲まれるが、薬学的組成物の有効成分が拡散できる。好適な内側マトリックスとしては、ポリメチルメタクリレート、ポリメタクリル酸ブチル、可塑化または非可塑化ポリ塩化ビニル、可塑化ナイロン、可塑化ポリエチレンテレフタラート、天然ゴム、ポリイソプレン、ポリイソブチレン、ポリブタジエン、ポリエチレン、エチレン−酢酸ビニルコポリマー、シリコーンゴム、ポリジメチルシロキサン、シリコーンカーボネートコポリマー、親水性ポリマー、例えば、アクリルおよびメタアクリル酸のエステルのヒドロゲル、コラーゲン、架橋ポリビニルアルコール、ならびに架橋された部分的加水分解化ポリビニルアセテートが挙げられるが、これらに限定されない。好適な外側の高分子膜としては、ポリエチレン、ポリプロピレン、エチレン／プロピレンコポリマー、エチレン／アクリル酸エチルコポリマー、エチレン／酢酸ビニルコポリマー、シリコーンゴム、ポリジメチルシロキサン、ネオプレンゴム、塩素化ポリエチレン、ポリ塩化ビニル、酢酸ビニルとの塩化ビニルコポリマー、塩化ビニリデン、エチレンおよびプロピレン、イオノマー
ポリエチレンテレフタラート、ブチルゴム  エピクロロヒドリンゴム、エチレン／ビニルアルコールコポリマー、エチレン／酢酸ビニル／ビニルアルコールターポリマー、ならびにエチレン／ビニルオキシエタノールコポリマーが挙げられるが、これらに限定されない。
【０３４３】
５．５．２．３  経口投与
例えば、項５．２に記載される攪乱後治療剤に用いるか、または育毛促進剤（項５．３）および／または本明細書に開示される他の活性成分（項５．４）を含む、本明細書に記載される薬学的組成物は、経口投与のために、経口投与のための固体、半固体、または液体剤形で提供することができる。本明細書に使用される、経口投与はまた、頬、舌、および舌下投与を含む。好適な経口剤形は、錠剤、ファストメルト（ｆａｓｔｍｅｌｔ）、咀嚼錠、カプセル、ピル、ストリップ剤、トローチ、ロゼンジ、パステル、カシェ剤、ペレット、医薬用チューインガム、原料粉末、発泡性もしくは非発泡性粉末または顆粒、口腔ミスト剤、溶液、乳液、懸濁液、ウェーハ、粉砂糖、エリキシル、およびシロップが挙げられるが、これらに限定されない。１種または複数の活性成分に加えて、薬学的組成物は、結合剤、充填剤、希釈剤、崩壊剤、湿潤剤、滑沢剤、流動促進剤、着色剤、色素移動阻害剤、甘味剤、香料、乳化剤、懸濁化剤および分散剤、保存剤、溶媒、非水性液体、有機酸、および二酸化炭素の源が挙げられるが、これらに限定されない、１種以上の薬学的に許容される担体または賦形剤を含むことができる。経口投与用組成物はまた、リポソーム、ミセル、マイクロスフェア、またはナノシステムの形態で提供することもできる。ミセル剤形は、米国特許第６，３５０，４５８号に記載されるように調製することができる。
【０３４４】
５．５．３  エクスビボ送達
本明細書に記載される薬学的組成物はまた、エクスビボで皮膚由来細胞または皮膚組織に投与され得る。例えば、育毛促進剤治療を使用して、新しい創傷へのそれらの移植および瘢痕修正のための培地中の解離された毛包細胞の毛包およびそれらの成長および拡張への再結合を促進させることができる。したがって、いくつかの実施形態では、育毛促進剤治療によって促進された毛包を、外皮攪乱前、その時に、および／またはその後に、皮膚の領域に添加する。これらの方法を用いて、ヒト皮膚移植等の瘢痕修正への伝統的なアプローチを、毛包単位または皮膚からの他のより小さな付属構造体の移植と効率良く置き換えることができる。したがって、毛包は、移動、再構成、刺激、もしくは活性化、もしくは新毛包新生によって、あるいは以下の皮膚要素：全皮膚（異種−；自家移植ヒト）、毛包単位、解離細胞（ドナー優性；受容効果）、エクスビボで拡張した皮膚および／もしくは毛包単位、またはインビボでヒト皮膚同等物（万能ドナー）のうちの１つ以上を移植することによって、創傷に導入することができる。操作されたヒト皮膚または皮膚同等物はまた、毛包の形成および活性化ならびに瘢痕修正プラットフォームのために使用することもできる。
【０３４５】
ヒト皮膚同等物を、インビトロで成長させ、アセンブルすることができ、理論的には、いかなる大きさ／形状に成長させることができ、ケラチン生成細胞（毛包由来および非毛包由来）、真皮細胞（毛包由来および非毛包由来）、他の細胞型（例えば間葉幹細胞）を含む異なる種類の細胞から構成することができ、例えば、マーカーもしくは「誘導」シグナリング分子を含むように遺伝的に改変される細胞を含有することができ、ヒト細胞の無制限かつ均一の源を提供し、組織学およびマーカー研究に基づいた正常皮膚から、皮膚付属物が概してなく、かつ傷つき、インビボと同様の創傷治癒事象を示すことができるという利点を有する。
【０３４６】
５．５．４  改変放出形態
本明細書に開示される育毛促進剤および他の活性成分は、改変放出剤形として製剤化することができる。本明細書で使用される「改変放出」という用語は、同じ経路によって投与されるときに、育毛促進剤または他の活性成分の放出の速度または場所が、即時剤形（ｉｍｍｅｄｉａｔｅ  ｄｏｓａｇｅ  ｆｏｒｍ）のものとは異なる剤形を指す。改変放出剤形としては、遅延、拡張、延長、持続、パルス状、制御、加速、迅速、標的化、プログラム化放出、および胃貯留の剤形が挙げられるが、これらに限定されない。改変放出剤形の組成物は、マトリックス制御放出装置、浸透圧制御放出装置、多粒子制御放出手段、イオン交換樹脂、腸溶コーティング、多層コーティング、マイクロスフェア、リポソーム、およびそれらの組み合わせが挙げられるが、これらに限定されない、様々な改変放出装置、および当業者に公知の方法を用いて調製することができる。活性成分の放出速度は、活性成分の粒径および多形を変化させることにより変更することもできる。いくつかの実施形態では、制御放出は、貯留効果を生じる、即ち、活性剤もしくは抗原を徐々に放出させる、アジュバントを用いることによって達成され、標的細胞または組織への長期曝露（例えば、毛包細胞、または免疫活性化アジュバントの場合、免疫系への長期曝露）をもたらす。
【０３４７】
皮膚または毛髪への改変放出用製剤の例には、２００８年９月２５日に公開された国際特許出願公開第ＷＯ２００８／１１５９６１号（参照によってその全体が本明細書に組み込まれる）に記載されるものが含まれる。改変放出の他の例としては、米国特許第３，８４５，７７０号、第３，９１６，８９９号、第３，５３６，８０９号、第３，５９８，１２３号、第４，００８，７１９号、第５，６７４，５３３号、第５，０５９，５９５号、第５，５９１，７６７号、第５，１２０，５４８号、第５，０７３，５４３号、第５，６３９，４７６号、第５，３５４，５５６号、第５，６３９，４８０号、第５，７３３，５６６号、第５，７３９，１０８号、第５，８９１，４７４号、第５，９２２，３５６号、第５，９５８，４５８号、第５，９７２，８９１号、第５，９８０，９４５号、第５，９９３，８５５号、第６，０４５，８３０号、第６，０８７，３２４号、第６，１１３，９４３号、第６，１９７，３５０号、第６，２４８，３６３号、第６，２６４，９７０号、第６，２６７，９８１号、第６，２７０，７９８号、第６，３７５，９８７号、第６，３７６，４６１号、第６，４１９，９６１号、第６，５８９，５４８号、第６，６１３，３５８号、第６，６２３，７５６号、第６，６９９，５００号、第６，７９３，９３６号、第６，８２７，９４７号、第６，９０２，７４２号、第６，９５８，１６１号、第７，２５５，８７６号、第７，４１６，７３８号、第７，４２７，４１４号、第７，４８５，３２２号、Ｂｕｓｓｅｍｅｒ  ｅｔ  ａｌ．，Ｃｒｉｔ．Ｒｅｖ．Ｔｈｅｒ．Ｄｒｕｇ  Ｃａｒｒｉｅｒ  Ｓｙｓｔ．２００１，１８，４３３−４５８、Ｍｏｄｉｆｉｅｄ−Ｒｅｌｅａｓｅ  Ｄｒｕｇ  Ｄｅｌｉｖｅｒｙ  Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ，２ｎｄ  ｅｄ．、Ｒａｔｈｂｏｎｅ  ｅｔ  ａｌ．，Ｅｄｓ．、Ｍａｒｃｅｌ  Ｄｅｋｋｅｒ  ＡＧ：２００５、Ｍａｒｏｎｉ  ｅｔ  ａｌ．，Ｅｘｐｅｒｔ．Ｏｐｉｎ．Ｄｒｕｇ  Ｄｅｌｉｖ．２００５，２，８５５−８７１、Ｓｈｉ  ｅｔ  ａｌ．，Ｅｘｐｅｒｔ  Ｏｐｉｎ．Ｄｒｕｇ
Ｄｅｌｉｖ．２００５，２，１０３９−１０５８、Ｐｏｌｙｍｅｒｓ  ｉｎ  Ｄｒｕｇ
Ｄｅｌｉｖｅｒｙ、Ｉｊｅｏｍａ  ｅｔ  ａｌ．，Ｅｄｓ．、ＣＲＣ  Ｐｒｅｓｓ  ＬＬＣ：Ｂｏｃａ  Ｒａｔｏｎ，ＦＬ，２００６、Ｂａｄａｗｙ  ｅｔ  ａｌ．，Ｊ．Ｐｈａｒｍ．Ｓｃｉ．２００７，９，９４８−９５９、Ｍｏｄｉｆｉｅｄ−Ｒｅｌｅａｓｅ  Ｄｒｕｇ  Ｄｅｌｉｖｅｒｙ  Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ，上記参照、Ｃｏｎｗａｙ，Ｒｅｃｅｎｔ  Ｐａｔ．Ｄｒｕｇ  Ｄｅｌｉｖ．Ｆｏｒｍｕｌ．２００８，２，１−８、Ｇａｚｚａｎｉｇａ  ｅｔ  ａｌ．，Ｅｕｒ．Ｊ．Ｐｈａｒｍ．Ｂｉｏｐｈａｒｍ．２００８，６８，１１−１８、Ｎａｇａｒｗａｌ  ｅｔ  ａｌ．，Ｃｕｒｒ．Ｄｒｕｇ  Ｄｅｌｉｖ．２００８，５，２８２−２８９、Ｇａｌｌａｒｄｏ  ｅｔ  ａｌ．，Ｐｈａｒｍ．Ｄｅｖ．Ｔｅｃｈｎｏｌ．２００８，１３，４１３−４２３、Ｃｈｒｚａｎｏｗｓｋｉ，ＡＡＰＳ  ＰｈａｒｍＳｃｉＴｅｃｈ．２００８，９，６３５−６３８、Ｃｈｒｚａｎｏｗｓｋｉ，ＡＡＰＳ  ＰｈａｒｍＳｃｉＴｅｃｈ．２００８，９，６３９−６４５、Ｋａｌａｎｔｚｉ  ｅｔ  ａｌ．，Ｒｅｃｅｎｔ  Ｐａｔ．Ｄｒｕｇ  Ｄｅｌｉｖ．Ｆｏｒｍｕｌ．２００９，３，４９−６３、Ｓａｉｇａｌ  ｅｔ  ａｌ．，Ｒｅｃｅｎｔ  Ｐａｔ．Ｄｒｕｇ  Ｄｅｌｉｖ．Ｆｏｒｍｕｌ．２００９，３，６４−７０、ならびにＲｏｙ  ｅｔ
ａｌ．，Ｊ．Ｃｏｎｔｒｏｌ  Ｒｅｌｅａｓｅ  ２００９，１３４，７４−８０が挙げられるが、これらに限定されず、これらのそれぞれは、参照によってその全体が本明細書に組み込まれる。
【０３４８】
５．５．４．１  マトリックス制御放出手段
改変放出剤形は、当業者に公知のマトリックス制御放出手段を用いて製造することができる。Ｔａｋａｄａ  ｅｔ  ａｌ．，１９９９，ｉｎ  Ｅｎｃｙｃｌｏｐｅｄｉａ  ｏｆ
Ｃｏｎｔｒｏｌｌｅｄ  Ｄｒｕｇ  Ｄｅｌｉｖｅｒｙ，Ｍａｔｈｉｏｗｉｔｚ  Ｅ，ｅｄ．，Ｖｏｌ．２，Ｗｉｌｅｙを参照のこと。
【０３４９】
ある特定の実施形態では、改変放出剤形は、多糖およびタンパク質等の合成ポリマーならびに天然ポリマーおよび誘導体を含む、水膨張可能な、侵食可能な、または可溶性ポリマーである、浸食され得るマトリックス装置を用いて製剤化される。浸食され得るマトリックスを形成するのに有用な材料としては、キチン、キトサン、デキストラン、およびプルラン；ゴム寒天、アラビアゴム、ゴムカラヤゴム、ローカストビーンガム、トラガカント、カラゲナン、ガッチゴム、グアーガム、キサンタンガム、およびスクレログルカン；デキストリンおよびマルトデキストリン等のデンプン；ペクチン等の親水コロイド；レシチン等のホスファチド；アルギン酸塩；アルギン酸プロピレングリコール；ゼラチン；コラーゲン；セルロース誘導体、例えば、エチルセルロース（ＥＣ）、メチルエチルセルロース（ＭＥＣ）、カルボキシメチルセルロース（ＣＭＣ）、ＣＭＥＣ、ヒドロキシエチルセルロース（ＨＥＣ）、ヒドロキシプロピルセルロース（ＨＰＣ）、酢酸セルロース（ＣＡ）、プロピオン酸セルロース（ＣＰ）、酪酸セルロース（ＣＢ）、酢酸酪酸セルロース（ＣＡＢ）、ＣＡＰ、ＣＡＴ、ヒドロキシプロピルメチルセルロース（ＨＰＭＣ）、ＨＰＭＣＰ、ＨＰＭＣＡＳ、ヒドロキシプロピルメチル酢酸セルローストリメリタート（ＨＰＭＣＡＴ）、およびエチルヒドロキシエチルセルロース（ＥＨＥＣ）等；ポリビニルピロリドン；ポリビニルアルコール；ポリ酢酸ビニル；グリセロール脂肪酸エステル；ポリアクリルアミド；ポリアクリル酸；エタクリル酸またはメタアクリル酸のコポリマー（ＥＵＤＲＡＧＩＴ（登録商標）、Ｒｏｈｍ  Ａｍｅｒｉｃａ，Ｉｎｃ．，Ｐｉｓｃａｔａｗａｙ，ＮＪ）；ポリ（２−ヒドロキシエチル−メタクリレート）；ポリラクチド；Ｌ−グルタミン酸およびエチル−Ｌ−グルタメートのコポリマー；分解可能な乳酸−グリコール酸コポリマー；ポリ−Ｄ−（−）−３−ヒドロキシ酪酸；および、他のアクリル酸誘導体、例えば、ブチルメタクリレートのホモポリマーおよびコポリマー、メタクリル酸メチル、メタクリル酸エチル、アクリル酸エチル、（２−ジメチルアミノエチル）メタクリレート、および（トリメチルアミノエチル）メタクリレートクロリドが挙げられるが、これらに限定されない。
【０３５０】
ある特定の実施形態では、組成物は、非浸食性マトリックス手段を用いて製剤化される。活性成分は、不活性マトリックスに溶解または分散され、投与されると、不活性マトリックスを通って拡散することによって、最初に放出される。非浸食性マトリックス手段としての用途に適切な材料としては、不溶性プラスチック、例えば、ポリエチレン、ポリプロピレン、ポリイソプレン、ポリイソブチレン、ポリブタジエン、ポリメチルメタクリレート、ポリブチルメタクリレート、塩素化ポリエチレン、ポリ塩化ビニル、アクリル酸メチル−メタクリル酸メチルコポリマー、エチレン−酢酸ビニルコポリマー、エチレン／プロピレンコポリマー、エチレン／アクリル酸エチルコポリマー、酢酸ビニルとの塩化ビニルコポリマー、塩化ビニリデン、エチレンおよびプロピレン、イオノマー  ポリエチレンテレフタラート、ブチルゴム、エピクロロヒドリンゴム、エチレン／ビニルアルコールコポリマー、エチレン／酢酸ビニル／ビニルアルコールターポリマー、エチレン／ビニルオキシエタノールコポリマー、ポリ塩化ビニル、可塑化ナイロン、可塑化ポリエチレンテレフタラート、天然ゴム、シリコーンゴム、ポリジメチルシロキサン、およびシリコーンカーボネートコポリマー；親水性ポリマー、例えば、エチルセルロース、酢酸セルロース、クロスポビドン、および架橋部分的加水分解化ポリ酢酸ビニル；ならびに脂肪族化合物、例えば、カルナバワックス、微結晶性ワックス、およびトリグリセリドが挙げられるが、これらに限定されない。
【０３５１】
マトリックス制御放出システムにおいて、所望の放出動態は、例えば、使用されるポリマー種、ポリマー粘性、ポリマーおよび／または活性成分の粒径、活性成分対ポリマーの比率、ならびに組成物中の他の賦形剤または担体を介して制御することができる。
【０３５２】
改変放出剤形は、直接圧縮、乾式または湿式造粒後の圧縮、および溶融造粒後の圧縮等の当業者に公知の方法によって調製することができる。
【０３５３】
５．５．４．２  浸透圧制御放出手段
改変放出剤形は、一容器系、二容器系、非対称膜技術（ＡＭＴ）、および押出コア系（ｅｘｔｒｕｄｉｎｇ  ｃｏｒｅ  ｓｙｓｔｅｍ）（ＥＣＳ）が挙げられるが、これらに限定されない、浸透圧制御放出手段を用いて製造することができる。一般に、このようなデバイスは、少なくとも２つの成分：（ａ）活性成分を含むコアと、（ｂ）該コアを封入する、少なくとも１つの送達ポートを有する半透膜とを有する。半透膜は、送達ポートによる押出によって薬剤放出するように、使用の水性環境からコアへの水の流入を制御する。
【０３５４】
活性成分に加えて、浸透圧手段のコアは、任意に、使用の環境から手段のコアに水を輸送するための動力を作る浸透圧剤を含む。浸透圧剤の１つの種類は、水膨潤性親水性ポリマーであり、「浸透ポリマー」および「ヒドロゲル」とも呼ばれる。浸透圧剤としての好適な水膨潤性親水性ポリマーとしては、親水性ビニルおよびアクリルポリマー、ポリサッカリド、例えば、アルギン酸カルシウム、ポリエチレンオキシド（ＰＥＯ）、ポリエチレングリコール（ＰＥＧ）、ポリプロピレングリコール（ＰＰＧ）、ポリ（２−ヒドロキシメタクリル酸エチル）、ポリ（アクリル）酸、ポリ（メタクリル）酸、ポリビニルピロリドン（ＰＶＰ）、架橋ＰＶＰ、ポリビニルアルコール（ＰＶＡ）、ＰＶＡ／ＰＶＰコポリマー、疎水性モノマー（例えばメタクリル酸メチルおよび酢酸ビニル）を有するＰＶＡ／ＰＶＰコポリマー、巨大ＰＥＯブロックを含む親水性ポリウレタン、ナトリウムクロスカルメロース、カラゲナン、ヒドロキシエチルセルロース（ＨＥＣ）、ヒドロキシプロピルセルロース（ＨＰＣ）、ヒドロキシプロピルメチルセルロース（ＨＰＭＣ）、カルボキシメチルセルロース（ＣＭＣ）、およびカルボキシエチルセルロース（ＣＥＣ）、アルギン酸ナトリウム、ポリカルボフィル、ゼラチン、キサンタンガム、およびデンプングリコール酸ナトリウムが挙げられるが、これらに限定されない。
【０３５５】
浸透圧剤の他の種類は、周囲のコーティングのバリア全体の浸透圧勾配に影響を及ぼすために水を吸収することができる、オスモゲン（ｏｓｍｏｇｅｎｓ）である。好適なオスモゲンとしては、無機塩、例えば、硫酸マグネシウム、塩化マグネシウム、塩化カルシウム、塩化ナトリウム、塩化リチウム、硫酸カリウム、リン酸カリウム、炭酸ナトリウム、亜硫酸ナトリウム、硫酸リチウム、塩化カリウム、および硫酸ナトリウム；糖、例えば、デキストロース、フルクトース、グルコース、イノシトール、ラクトース、マルトース、マンニトール、ラフィノース、ソルビトール、スクロース、トレハロース、およびキシリトール；有機酸、例えば、アスコルビン酸、安息香酸、フマル酸、クエン酸、マレイン酸、セバシン酸、ソルビン酸、アジピン酸、エデト酸、グルタミン酸、ｐ−トルエンスルホン酸、コハク酸、および酒石酸；尿素；ならびにそれらの混合物が挙げられるが、これらに限定されない。
【０３５６】
異なる溶解速度の浸透圧剤を、活性成分がどれくらい迅速に剤形から最初に送達されるかについて影響を与えるように使用することができる。例えば、ＭＡＮＮＯＧＥＭ（商標）ＥＺ（ＳＰＩ  Ｐｈａｒｍａ，Ｌｅｗｅｓ，ＤＥ）等のアモルファス糖を用いて、最初の数時間の間により迅速な送達を提供し、所望の治療効果を速やかに生じ、かつ残りの量を段階的かつ継続的に放出し、長期間に渡って、所望レベルの治療的または予防的効果を維持することができる。この場合、活性成分は、代謝し、かつ排出される活性成分の量を置き換えるような速度で放出される。
【０３５７】
コアはまた、剤形の性能を向上するか、または安定性もしくは処理を促進するために、本明細書に記載される様々な他の賦形剤および担体を含むこともできる。
【０３５８】
半透膜の形成に有用な材料は、生理的に関連したｐＨで水透過性および水不溶性であるか、または架橋等の化学変化によって水不溶性にされ得る、アクリル、ビニル、エーテル、ポリアミド、ポリエステル、およびセルロース誘導体の様々な等級を含む。コーティングの形成に有用な好適なポリマーの例には、可塑化、非可塑化、および強化された酢酸セルロース（ＣＡ）、二酢酸セルロース、三酢酸セルロース、ＣＡプロピオナート、硝酸セルロース、酢酸酪酸セルロース（ＣＡＢ）、ＣＡカルバミン酸エチル、ＣＡＰ、ＣＡカルバミン酸メチル、ＣＡスクシネート、酢酸セルローストリメリタート（ＣＡＴ）、ＣＡジメチルアミノアセテート、ＣＡ炭酸エチル、ＣＡクロロアセテート、ＣＡシュウ酸エチル、ＣＡスルホン酸メチル、ＣＡスルホン酸ブチル、ＣＡ  ｐ−トルエンスルホネート、寒天アセテート、アミローストリアセテート、βグルカンアセテート、βグルカントリアセテート、アセトアルデヒドジメチルアセテート、イナゴマメゴムのトリアセテート、水酸化エチレン−酢酸ビニル、ＥＣ、ＰＥＧ、ＰＰＧ、ＰＥＧ／ＰＰＧコポリマー、ＰＶＰ、ＨＥＣ、ＨＰＣ、ＣＭＣ、ＣＭＥＣ、ＨＰＭＣ、ＨＰＭＣＰ、ＨＰＭＣＡＳ、ＨＰＭＣＡＴ、ポリ（アクリル）酸およびエステル、およびポリ（メタクリル）酸およびエステル、ならびにそれらのコポリマー、デンプン、デキストラン、デキストリン、キトサン、コラーゲン、ゼラチン、ポリアルケン、ポリエーテル、ポリスルホン、ポリエーテルスルホン、ポリスチレン、ポリビニルハライド、ポリビニルエステルおよびエーテル、天然ワックス、および合成ワックスが含まれる。
【０３５９】
半透膜はまた、疎水性微細孔膜であることもでき、米国特許第５，７９８，１１９号に開示されているように、細孔は、実質的にガスで充填され、水媒体によって浸潤しないが、水蒸気に浸透できる。このような疎水性であるが水蒸気浸透可能な膜は、通常、疎水性ポリマー、例えば、ポリアルケン、ポリエチレン、ポリプロピレン、ポリテトラフルオロエチレン、ポリアクリル酸誘導体、ポリエーテル、ポリスルホン、ポリエーテルスルホン、ポリスチレン、ポリビニルハライド、ポリフッ化ビニリデン、ポリビニルエステルおよびエーテル、天然ワックス、および合成ワックスから構成される。
【０３６０】
半透膜上の送達ポートは、機械的にまたはレーザー穿孔により、コーティング後に形成することができる。送達ポートは、水溶性材料のプラグの浸食によって、またはコアの窪みに渡って膜のより薄い部分の破裂によって、原位置で形成することもできる。加えて、送達ポートは、米国特許第５，６１２，０５９号および第５，６９８，２２０号に開示されている種類の非対称膜コーティングように、コーティングプロセスの間に形成することができる。
【０３６１】
放出される活性成分の総量および放出速度は、半透膜の厚みおよび多孔性、コアの組成物、ならびに送達ポートの数、サイズ、および位置を介して、実質的に調節することができる。
【０３６２】
浸透圧制御放出剤形は、製剤の性能または処理を促進するために、本明細書に記載される付加的な従来の賦形剤または担体をさらに含むことができる。浸透圧制御放出剤形は、当業者に公知の従来法および技術に従って調製することができる。Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ：Ｔｈｅ  Ｓｃｉｅｎｃｅ  ａｎｄ  Ｐｒａｃｔｉｃｅ  ｏｆ  Ｐｈａｒｍａｃｙ，上記参照、Ｓａｎｔｕｓ  ａｎｄ  Ｂａｋｅｒ，Ｊ．Ｃｏｎｔｒｏｌｌｅｄ  Ｒｅｌｅａｓｅ  １９９５，３５，１−２１、Ｖｅｒｍａ  ｅｔ  ａｌ．，Ｄｒｕｇ  Ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔ  ａｎｄ  Ｉｎｄｕｓｔｒｉａｌ  Ｐｈａｒｍａｃｙ  ２０００，２６，６９５−７０８、およびＶｅｒｍａ  ｅｔ  ａｌ．，Ｊ．Ｃｏｎｔｒｏｌｌｅｄ  Ｒｅｌｅａｓｅ  ２００２，７９，７−２７を参照のこと。
【０３６３】
ある特定の実施形態では、組成物は、活性成分および他の薬学的に許容される賦形剤または担体を含むコアを被覆する非対称浸透圧膜を含む、ＡＭＴ制御放出剤形として製剤化される。米国特許第５，６１２，０５９号および国際公開第ＷＯ２００２／１７９１８号を参照のこと。ＡＭＴ制御放出剤形は、直接圧縮、乾式造粒法、湿式造粒、および浸漬塗装方法を含む、当業者に公知の従来法および技術に従って調製することができる。ある特定の実施形態では、組成物は、活性成分、ヒドロキシルエチルセルロース、および他の薬学的に許容される賦形剤または担体を含むコアを被覆する浸透圧膜を含む、ＥＳＣ制御放出剤形として製剤化される。
【０３６４】
５．５．４．３  原位置ゲル化薬物送達系
一実施形態では、上の項５．２、項５．３、および／または項５．４に記載される薬学的組成物は、室温（２０〜２５℃）およびそれを下回る温度では溶液であるが、３２〜３７℃の生理学的温度でゲル化する水溶性ポリマーからなるポリマー溶液として製剤化することができる。ある適用では、この溶液は、２〜８℃まで冷却して、鎮静作用を与えることができる、一方、組織表面上の液体スプレーとして噴霧される。一旦噴霧されると、この溶液は、ゲルまで濃くなり、時間をかけてその中に含有する任意の薬物をゆっくりと放出する。これらの熱ゲル化ポリマーの例は、ポリ（イソプロピルアクリルアミド）、ポリ（ＥＯ）ｘ−（ＰＯ）ｙ−（ＥＯ）ｘ、およびポリ（ＰＯ）ｘ−（ＥＯ）ｙ−（ＰＯ）ｘ（式中、ＥＯ＝エチレンオキシドおよびＰＯ＝プロピレンオキシドである）である。他の例としては、ＰＬＡ−ＰＥＯ−ＰＬＡポリマー（式中、ＰＬＡ＝ポリ乳酸、ＰＥＯ＝ポリエチレンオキシドである）、ポリ（セバシン酸無水物）−ポリ（エチレンオキシド）−ポリ（ステアリン酸塩）、およびポリ（ステアリン酸塩）−ポリ（エチレンオキシド）−ポリ（ステアリン酸塩）が挙げられるが、これらに限定されない。この着想の一変形では、この溶液は、組織内で原位置で蓄積を形成するために、液体として注射することができる。この概念の別の変形では、この溶液は、毛包等の組織の開口部に流動し、その後、ゲルを形成して、ＭＰＨＬ、毛包炎等の毛包に関連する状態、または本明細書に記載される別の状態のために育毛促進剤を放出することができる。ゲル化の温度および時間は、ポリマーを構成するポリマーの濃縮とポリマー遮断の長さに対して相関性があり得る。
【０３６５】
５．５．４．４  多粒子制御放出手段
改変放出剤形は、直径約１０μｍ〜約３ｍｍ、約５０μｍ〜約２．５ｍｍ、または約１００μｍ〜約１ｍｍの多数の粒子、顆粒、またはペレットを含む、多粒子制御放出手段として製造することができる。このような多粒子は、マイクロ流動化（ｍｉｃｒｏｆｌｕｉｄｉｚａｔｉｏｎ）、膜が制御された乳化、水中油型、水−油−水型、油中油型乳化、および均質化工程、複合コアセルベーション、湿式または乾式造粒、押出／スフェロニゼーション（ｓｐｈｅｒｏｎｉｚａｔｉｏｎ）、ローラー圧縮、溶融凝固、およびスプレーコーティングシードコア（ｓｐｒａｙ−ｃｏａｔｉｎｇ  ｓｅｅｄ  ｃｏｒｅｓ）等の当業者に公知の方法によって製造することができる。例えば、Ｇｈｅｂｒｅ−Ｓｅｌｌａｓｓｉｅ，ｅｄ．，１９９４，Ｍｕｌｔｉｐａｒｔｉｃｕｌａｔｅ  Ｏｒａｌ  Ｄｒｕｇ  Ｄｅｌｉｖｅｒｙ，Ｍａｒｃｅｌ  Ｄｅｋｋｅ、およびＧｈｅｂｒｅ−Ｓｅｌｌａｓｓｉｅ
ｅｄ．，１９８９，Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｐｅｌｌｅｔｉｚａｔｉｏｎ  Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ，Ｍａｒｃｅｌ  Ｄｅｋｋｅｒを参照のこと。
【０３６６】
本明細書に記載される他の賦形剤または担体を、多粒子の処理および形成に役立つように、組成物と配合することができる。得られた粒子は、それ自体が多粒子を構成することができるか、または腸溶ポリマー、水膨潤性、および水溶性高分子等の様々なフィルム形成材料により被覆することができる。多粒子は、カプセルまたは錠剤として更に処理することができる。
【０３６７】
５．５．４．５  標的化送達
本明細書に使用される薬学的組成物は、作用部位、例えば特定の組織中の毛包に育毛促進剤または他の活性成分を送達する担体と製剤化することができる。このような標的送達は、育毛促進剤もしくは他の活性成分による両方と関連する副作用を減少する、および／または育毛促進剤もしくは他の活性成分が特定の組織の毛包のみに達することを確実にするために、全身投与用の製剤において好適であり得る。担体は、毛包中の特定のタンパク質または細胞型、抗体またはその抗原結合フラグメント、ウイルス、ウイルス様粒子、ビロゾーム、リポソーム、ミセル、ナノ粒子、または任意の他の好適な化合物に標的化されるアプタマーであり得る。
【０３６８】
本明細書に提供される方法に用いる組成物はまた、リポソーム、再封赤血球（ｒｅｓｅａｌｅｄ  ｅｒｙｔｈｒｏｃｙｔｅ−）、および抗体ベース送達系を含む、治療される対象の身体の特定の組織、毛包、または他の領域に標的化されるように製剤化することもできる。例としては、米国特許第５，７０９，８７４号、第５，７５９，５４２号、第５，８４０，６７４号、第５，９００，２５２号、第５，９７２，３６６号、第５，９８５，３０７号、第６，００４，５３４号、第６，０３９，９７５号、第６，０４８，７３６号、第６，０６０，０８２号、第６，０７１，４９５号、第６，１２０，７５１号、第６，１３１，５７０号、第６，１３９，８６５号、第６，２５３，８７２号、第６，２７１，３５９号、第６，２７４，５５２号、第６，３１６，６５２号、および第７，１６９，４１０号に開示されているものが挙げられるが、これらに限定されない。
【０３６９】
いくつかの実施形態では、標的化は、薬物を含む送達系への特定の標的化部分の接着によって達成される。標的化部分は、特定の組織に発現する特定のタンパク質に結合する抗体、アプタマー、または小分子の形態であり得る。特定または誘導される標的化は、特定の組織型にのみ薬物を「導き（ｃｈａｎｎｅｌ）」、それ故に、全ての組織への分布を最小限に抑えることができる。この概念は、薬物が副作用を生じる場合に特に有用である。毛包への薬物送達については、マイクロスフェアおよびナノスフェアが、薬物を毛包に送達するために利用されている。毛包への侵入は、薬物を含有する球の大きさによって制御され、０．５〜０．７ミクロンの大きさのマイクロスフェアが侵入のためには理想的な大きさである。しかしながら、毛包からの脂肪質の流動体の流出により、毛包において送達系の短い滞留時間を生じ得る。これを最小限に抑えるために、マイクロスフェアの表面は、毛包口において特定の表面に結合する部分で官能化して、その部位でそれらを「保持する」ことができる。これらの部分は、毛包内で細胞に生体接着させるために、疎水性コーティングまたは価値オン性コーティングのように非特異的であり得る。これらの部分は、特定の細胞膜上で特異的に発現するある種のタンパク質に特異的であり、標的化され得る。例えば、毛包リンパ腫細胞表面上に過剰発現したタンパク質は、これらのタンパク質に結合するように設計される抗体またはアプタマーを有する送達系によって標的化され得る。送達系の表面はまた、細胞透過性ペプチド等の細胞を透過する部分である、アニオン性細胞表面に結合する正荷電ポリマーで官能化することもできる。
【０３７０】
５．５．４．６  局所送達
副作用を回避するために、任意の全身投与された薬物の用量が、厳重に制御される。このような副作用が回避され得る別の方法は、毛髪の成長の調節が望ましい部位に局所的に送達することである。
【０３７１】
本明細書に記載される育毛促進剤または他の活性成分は、毛髪の成長の調節が望ましい対象のいかなる部分、例えば、対象の頭部（例えば、頭皮、頬、顎、上唇、下唇、耳、鼻、まつ毛、または眉）、首、腹部、胸部、乳房部（例えば乳首）、背部、腕部、脇の下（脇毛）、腹、生殖器部、臀部、脚部、手、または足部等にも局所的に送達され得る。一実施形態では、育毛促進剤は、創傷または瘢痕した皮膚に適用または投与される。
【０３７２】
育毛促進剤または他の活性成分のこのような局所送達は、局所投与、経皮、皮内、皮下（デポー効果）によって、または全身的に送達された育毛促進剤を所望の毛包に標的化するための製剤で、筋肉内、静脈内、および経口投与によって達成することができる。送達のこのような様式は上に論じられる。
【０３７３】
５．５．５  足場による送達
いくつかの実施形態では、外皮攪乱した皮膚における毛包形成の増強は、創傷治癒を促進するために有機細胞外マトリックス（ＥＣＭ）の形成を増強するための基質としての役割を果たし、それにケラチン生成細胞および上皮細胞の段階的付着を増強し得る事前に設計された生体被覆材と組み合わせて、本明細書に記載される薬学的組み合わせによる治療によって達成される。いかなる理論によって束縛されることなく、有機細胞外マトリックスの形成は、創傷の粒状上皮化の減少をもたらし、したがって、瘢痕化の減少をもたらす。さらに、またはいかなる理論によって束縛されることなく、創傷または攪乱した部位で「足場」の存在は、急速な創傷の収縮を防ぐ。急速な創傷の収縮が起こると、創傷の端部が急速な無計画な様式で収縮し、毛包もしくは汗腺等の任意の付属器の構造体を欠いている粒状のコラーゲンに富むな皮膚を生成し、２次的な意図による急速な創傷収縮は、ほとんどの場合、温度調節、引張、および圧縮強度および関門機能において準最適である線維組織をもたらす。
【０３７４】
本明細書に記載される薬学的組成物による治療と組み合わせて使用するための足場は、細胞が好ましくは容易に認識し、それに付着する生体適合性のある生体吸収性のある材料のメッシュからなり得る。例えば、これらの材料は、コラーゲン型Ｉ／ＩＩＩ、ヒアルロン酸、キトサン、アルギン酸塩、またはそれらの組み合わせおよび誘導体、あるいは本明細書に記載されるまたは当該技術分野で公知の任意の他のそのような材料であり得る。メッシュ足場は、中性であり得るか、または電荷を持ち得る。メッシュが正電荷を持つ場合、細胞（負電荷を持つ）をさらに効果的にそれに接着させることが可能であり得る。メッシュ足場が負電荷を持つ場合、細胞が認識し、付着するシグナル伝達部分を含み得る。例えば、ヒアルロン酸等のポリマーは、皮膚に既に存在し、それ故に、この材料からなるメッシュは、細胞に適合すると考えられる。
【０３７５】
いくつかの実施形態では、足場は、細胞、例えば、足場を通して初めに拡散する赤血球細胞、または上皮細胞、および周囲組織からのケラチン生成細胞の寸法からなる微細構造体で事前に製造される。さらに、「上皮舌」が足場メッシュ上を巡回することによって、より容易に移動し、組織化することができることが想定される。
【０３７６】
いくつかの実施形態では、メッシュ足場は、開細胞型発泡体にそっくりの細孔が相互接続される「開細胞」構造体を有する。足場の開口の相互接続される性質は、最適かつ組織的な創傷治癒が生じ得るように、酸素および細胞の遊離拡散を可能にし得る。
【０３７７】
いくつかの実施形態では、メッシュ足場は、水和させる能力を有し、創傷治癒期間を通して水和状態にある。これは、いかなる理論によって束縛されることなく、創傷の乾燥は、ケラチン生成細胞が「はう（ｃｒａｗｌ  ｕｐｏｎ）」ことができない不浸透性構造体をもたらすため、有用である。
【０３７８】
いくつかの実施形態では、メッシュ足場は、例えば、それらの増殖を助長させる細胞への分子シグナルとしての役割を果たす分子を有する。これらの部分としては、細胞接着およびその後の増殖を促すペプチドグリカンおよびＲＧＤインテグリン認識配列が挙げられるが、これらに限定されない。
【０３７９】
いくつかの実施形態では、メッシュ足場は、その内に１種以上の活性剤、例えば小分子または核酸またはタンパク質等を組み込む。いくつかの実施形態では、さらなる活性剤は、ノギン（ｎｏｇｇｉｎ）もしくはＷＮＴ等のタンパク質、またはノギンもしくはＷＮＴをコードする核酸である。いくつかの実施形態では、小分子は、例えば、育毛促進剤（本明細書に記載される１種以上の育毛促進剤または別の育毛促進剤等）、ＢＭＰ阻害剤、またはＰＰＡＲアンタゴニスト等の足場に組み込まれる。
【０３８０】
いくつかの実施形態では、メッシュ足場に組み込まれる化合物は、本明細書、例えば、項５．２〜５．４に記載される併用療法に用いることが考慮される化合物である。例えば、足場は、炎症の軽減に機能するフリーラジカルを消滅させる分子のスーパーオキシドジスムターゼを組み込み得る。他の実施形態では、化合物は、創傷治癒の動態を変化させる、例えば創傷治癒を遅延させる、メッシュ足場に含まれる。このような化合物は、当該技術分野で公知であり、本明細書の他の箇所に記載されている。メッシュ足場に組み込まれ得る他の化合物には、細胞増殖および組織再生に役立つ増殖因子が含まれる。いくつかの実施形態では、これらの化合物は、外皮攪乱または創傷した部位において毛包移動または新しいもしくは活性化した毛包構造体の形成に役立つ。
【０３８１】
いくつかの実施形態では、育毛促進剤は、メッシュ足場内に組み込まれる。いくつかの実施形態では、育毛促進剤は、多層メッシュ足場のうちの１つ以上の層内に組み込まれる。例えば、一実施形態では、メッシュ足場は、育毛促進剤のパルス送達を達成し得る交互の層において育毛促進剤を含有する。いくつかの実施形態では、育毛促進剤は、足場中のマイクロスフェアに組み込まれ、これは足場からの育毛促進剤の制御放出を可能にする。
【０３８２】
別の実施形態では、メッシュ足場は、育毛促進剤をさらに含有するフィブリンゲルであり得る。フィブリンネットワークは、組織への外傷または他の損傷による創傷を治癒する際にその役割を果たすとき、細胞が遭遇する第１の足場である。順序付けられた様式でゆっくりと組み立てられるコラーゲン、ラミニン、およびプロテオグリカンによって形成される細胞外マトリックスおよび基底膜とは異なって、フィブリンネットワーク（「痂皮」）は、プロテアーゼトロンビンが凝固カスケードにおいて活性化されるとすぐに、血漿の豊富な成分であるフィブリノゲンからの変性重縮合反応によって急速に組み立てられ、その結果は、分枝状繊維の３次元ネットワークである。想定されることは、育毛促進剤、原位置で「ゲル化する」フィブリノゲンおよびトロンビンを含有する、フィブリン送達マトリックスである。直面する１つの問題は、フィブリン「痂皮」を通しての拡散するための育毛促進剤の能力であるが、痂皮の薬物部分がこの問題を解決する。
【０３８３】
別の実施形態では、メッシュ足場は、「スポンジ」としても機能し、創傷またはそうでなければ外皮攪乱した部位からの浸出液／血液を吸収する、合成生分解性被覆材および育毛促進剤の送達系である。合成足場で挿入するこれらの浸出液は、豊富なフィブリノゲン、トロンビン、フィブロネクチン、細胞接着タンパク質、増殖因子、およびヒアルロン酸を含有し、これらの全ては、細胞接着／分化および育毛促進剤の送達のための魅力的なマトリックスである組込構造体を生成する。育毛促進剤の放出速度は、合成足場またはスポンジを含むポリマー組成物を変化させることによって調節され得る。例えば、ポリ（ラクチド）−コ−（グリコリド）（ＰＬＧ）およびポリ（ラクチド）（ＰＬＡ）から製造された合成足場は、育毛促進剤の放出プロファイルを変化させるように発展させることができる。ＰＬＡとＰＬＧの比率の変化は、足場からの育毛促進剤の放出プロファイルを変化させる。合成足場を生成するために利用することができる他のポリマーは、キトサン、カラギナン、アルギン酸塩、ポリ（ビニルアルコール）、ポリ（エチレンオキシド）（ＰＥＯ）、ポリ（エチレンオキシド）−コ−ポリ（プロピレンオキシド）−コ−ポリ（エチレンオキシド）（ＰＥＯ−ＰＰＯ−ＰＥＯ）、ポリ（アクリレート）、およびポリ（ビニルピロリドン）（ＰＶＰ）である。ポリマー組成物を変化させることによって、製剤（例えば足場またはスポンジ）からの育毛促進剤の放出速度は、放出されるべき育毛促進剤の大部分（例えば、８０％以上、８５％以上、９０％以上、９５％以上、９８％以上、または１００％）を２時間から３０日間、どこでも得られるように、制御することができる。いくつかの実施形態では、育毛促進剤の大部分は、２時間以内、４時間以内、８時間以内、１６時間以内、２４時間以内、３６時間以内、４８時間以内、３日間以内、５日間以内、７日間以内、１０日間以内、１４日間以内、３０日間以内、または２ヶ月以上以内に製剤から放出される。
【０３８４】
いくつかの実施形態では、メッシュ足場は、持続放出様式で前述の化合物を放出し、これは上の項５．３．１に記載されるような制御放出製剤として機能する。例えば、これらの化合物は、メッシュ足場に結合され得、その後、メッシュからの脱結合速度の結果として持続放出様式で放出される。いくつかの実施形態では、化合物は、ポリマーに結合され得、その後、これはメッシュ足場に組み込まれ、化合物を低速でメッシュから拡散することが可能であり得、これは持続放出をもたらす。
【０３８５】
いくつかの実施形態では、メッシュ足場は、ゲルとして押し出され、ゲルのある特定の成分が沈殿して、原位置でメッシュを形成する。あるいは、いくつかの実施形態では、原位置でのメッシュは、広範囲に火傷している組織等の創傷したまたはそうでなければ攪乱した表面上に噴霧することができる。大面積をこの様式で網羅することができる。
【０３８６】
いくつかの実施形態では、メッシュ足場は、創傷したまたはそうでなければ攪乱した組織の大面積を網羅するために、被覆材またはラップとして既製される。いくつかのそのような実施形態では、メッシュ足場は、上皮舌の好ましい動作に適合する表面を示すように、創傷したまたは攪乱した部位の大きさに合うような大きさに切断することができる。
【０３８７】
いくつかの実施形態では、足場は、融解紡糸、電気紡糸、マイクロマシニング、製織（ｗｅａｖｉｎｇ）、または開細胞発泡体が製造される当該技術分野で公知の他の方法によって調製される。米国薬局方（ＵＳＰ）で認可された出発材料を用いて、メッシュ足場は、さらなる１つまたは複数の化合物（任意に滅菌された）を任意に組込み、その後、弱性エチレンオキシド滅菌によって滅菌する、これらの方法によって製造することができる。いくつかの実施形態では、さらなる化合物は滅菌され、その後、滅菌メッシュ足場に添加される。
【０３８８】
特定の実施形態では、外皮攪乱、任意に、育毛促進剤製剤もしくは本明細書に記載される他の薬学的組成物の投与と組み合わせて生分解性足場を使用する組み合わせ戦略を適用し、これにより、胚幹細胞の原位置での生成、または創傷または外皮攪乱の他の形態後に治癒を必要とする細胞の動員をもたらし得る。このアプローチは、項５．１に記載される外皮攪乱（例えば、標準的な削皮器またはレーザーによって達成される削皮術、バルク切除レーザーによって達成される深部の全層切除（深い熱傷に関しては））、または急性創傷、慢性創傷、もしくは瘢痕修正のために生成された創傷による外皮攪乱の形態と共に使用することができる。本発明がいかに作用するかを示すいかなる理論によって束縛されることなく、薬物を投与する足場と組み合わせたそのような外皮攪乱は、幹細胞の原位置での生成または創傷治癒プロセスに必要とされる他の細胞の動員をもたらし、瘢痕がほとんどないまたは全くない、より有効な創傷治癒を促進することができる。
【０３８９】
５．５．５．１  足場の生分解性特性
一実施形態では、足場は、生分解性がある。創傷における３次元生分解性足場の配置は、細胞の付着、成長、および分化を支援する。歴史的に、組織修復は、自己細胞／組織移植術によるものであるが、自家移植片は、ドナー部位の罹患率および限定された有用性を伴う。代替法は、同種移植片であるが、これらは免疫応答の影響を受けやすく、疾病伝播の危険性も伴う。したがって、組織工学は、組織を復元するために単独でまたは組み合わせて、生体材料、細胞、および因子を使用する学際的分野として出現している。組織工学戦略は、概して、患者からの正常細胞の単離、続いて、インビトロでそれらの拡張を伴う。次いで、これらの拡張した細胞を、細胞に対して構造支柱を提供する３次元生分解性フレームワークに播種し、細胞湿潤、付着、増殖、および成長を可能にし、最終的には新しい組織をもたらす。ある意味では、自然創傷治癒も、フィブリン塊という「足場」を利用する。フィブリンネットワークは、プロテアーゼトロンビンが凝固カスケードにおいて活性化するとすぐに、血漿の豊富な構成成分であるフィブリノゲンからの重縮合反応のため、急速に形成される自然ネットワークである。次いで、フィブリン塊は、再上皮化のために付着する細胞のための３次元ネットワークを形成する。
【０３９０】
いくつかの実施形態では、足場の生分解性が調節される。理想的には、足場の生分解性は、創傷治癒または外皮攪乱の他の形態による新しい上皮の形成に一致しなければならない。当業者は、合成マトリックスが生分解性であるかどうかを測定するための方法を知っているであろう。例えば、生分解性は、組織学的およびＨＰＬＣ分析によって、移植片におけるエクスビボで、またはラットもしくは別の動物モデルを使用して測定することができる。一実施形態では、加水分解による生分解性を評価することができる。このような実施形態では、最適な足場構造体は、リン酸緩衝生理食塩水中で、ｐＨ７．４および３７℃でインキュベートされる。酵素性分解による分解のために、インキュベーション緩衝液は、酵素を含む。足場は、インキュベーション前に計量される。足場は、所定の時点で２つずつ回収され、真空オーブンで乾燥させる。足場は、それぞれの時点で計量され、重量対時間のプロットを生成して、生分解性速度を生じる。一実施形態では、足場マトリックスの生分解性を調節して、治癒プロセスと一致させて、メッシュを製造するために使用されるポリマー組成物を変化させることによって調節することができる。例えば、ポリエチレングリコール（ＰＥＧ）の割合は、生分解を増加させるＰＬＧを有する組成物に含めることができる（例えば、ＡＳＴＭ  Ｅ１２７９−８９，２００８，Ｓｔａｎｄａｒｄ  Ｔｅｓｔ  Ｍｅｔｈｏｄ  ｆｏｒ  Ｂｉｏｄｅｇｒａｄａｔｉｏｎ  Ｂｙ  ａ  Ｓｈａｋｅ−Ｆｌａｓｋ  Ｄｉｅ−Ａｗａｙ  Ｍｅｔｈｏｄを参照）。
【０３９１】
５．５．５．２  足場の生体模倣特性
生分解性合成マトリックスは、組織再生のために必要な強化された細胞付着のために細胞外微小環境を模倣するように作製することができる。いくつかの実施形態では、ＲＧＤペプチド等の細胞認識モチーフを、細胞が足場に付着するのを促すために組み込んでよい。
【０３９２】
当業者は、生分解性合成マトリックスが生体模倣特性を有するかどうかを測定するための方法を知っているであろう。例えば、一実施形態では、足場の生体模倣性質は、メッシュおよび得られた挿入フィブリンの内容物に基づいて判断される。
【０３９３】
５．５．５．３  足場の物理的特性
合成足場の特性は、３次元形状に、組織型および多孔率とマトリックスの弾性率との合致に依存する。組織型の弾性率が足場の弾性率と一致する場合、分化プロセスを調節することができることが示されている。
【０３９４】
当業者は、生分解性合成マトリックスが最適な物理的特性を有するかどうかを測定するための方法を知っているであろう。例えば、一実施形態では、足場の弾性率は、組織型の弾性率と一致する。一般に、足場またはヒドロゲルの圧縮率は、標準的なインストロン装置によって（例えばＴＡ  Ｉｎｓｔｒｕｍｅｎｔｓ  ＤＭＡ  Ｑ８００を用いて）測定することができる。
【０３９５】
５．５．５．４  足場の生体適合性
さらに、細胞によって形成された微小環境は、その部位に存在する細胞、即ち、皮膚乳頭由来のケラチン生成細胞および幹細胞に最適に高度に生体適合性がある。一実施形態では、これは、水を吸収することができる親水性成分を使用することによって達成することができる。ペトロラタム等の疎水性成分を使用すると閉塞性となり、急速な細胞増殖を妨げる可能性が高い。
【０３９６】
当業者は、生分解性合成マトリックスが生体適合性であるかどうかを測定するための方法を知っているであろう。例えば、一実施形態では、足場は、ヒト包皮線維芽細胞（ＨＦＦ）と共にインビトロでインキュベートされ、細胞がそれらの形状を維持し、適切に付着する場合に生体適合性であるとみなされる。例えば、材料の生体適合性に関する研究については、参照文献：Ａｌｔａｎｋｏｖ  ｅｔ  ａｌ．，１９９６，Ｊｏｕｒｎａｌ  ｏｆ
Ｂｉｏｍｅｄｉｃａｌ  Ｍａｔｅｒｉａｌｓ  Ｒｅｓｅａｒｃｈ  Ｐａｒｔ  Ａ；３０：３８５−３９１を参照されたく、これは参照によってその全体が本明細書に組み込まれる。
【０３９７】
５．５．５．５  足場の酸素透過性
いくつかの実施形態では、生分解性の足場は、水、栄養素、酸素、および増殖因子に透過性であり、組織と細胞との間の栄養素の容易な交換を可能にする（例えばＡＳＴＭ  Ｄ３９８５７を参照）。いくつかの実施形態では、非閉塞性で非透過性のバリアが回避される。
【０３９８】
５．５．５．６  深い創傷における足場の使用
一実施形態では、足場は、深い熱傷において一般的であるように、深い創傷を「埋める」ために使用され、付着、成長、および分化するために細胞のためのマトリックスを提供する。足場の存在は、深い、大きな領域の創傷で通常観察される瘢痕形成を最小限に抑えると思われる。
【０３９９】
５．５．５．７  組み合わせた生物学的／合成メッシュ
別の実施形態では、緩い、乾燥した、高度に多孔質のネットワークまたは足場またはメッシュが、創傷の出血部位、または別の方法で外皮攪乱した部位に、その部位で放出された血液および細胞接着タンパク質を優しく吸収するために置かれる。これは、フィブリノゲンおよびトロンビンと組み合わせた３次元足場の組み合わせからなる高度に豊かな環境の生成をもたらし、最終的には、細胞付着および成長に適している高度に生体適合性のあるヒドロゲルをもたらす。いくつかの実施形態では、ネットワークへの血液成分および細胞接着タンパク質の包含は、特に、大きな領域および深い創傷の場合には、連続的な組織内部成長を形成するために必要なＥＣＭ（細胞外マトリックス）の構築のために重要である。
【０４００】
乾燥した足場は、創傷またはそうでなければ外皮攪乱した部位で血液を吸収するさらなる利点を有する。したがって、処置を受ける人自身の血液成分を使用して、合わせた合成／天然ＥＣＭを作成することができる。実用上、足場は、血液吸収ガーゼとしての役目を果たすさらなる利点を有する。
【０４０１】
別の実施形態では、足場は、細胞をその部位およびその付着に採用するための、ＲＧＤペプチド等の細胞認識モチーフを有する。一旦付着すると、細胞は増殖する。いかなる理論によって束縛されることなく、足場への細胞の一次付着は、早期細胞死を防ぐための重要なステップである。
【０４０２】
一実施形態では、乾燥した滅菌の生分解性足場は、新たに形成された創傷または攪乱した皮膚部位上に置かれる。足場の特性は、それが水吸収時に、粘着性のヒドロゲルに変換するようなものである。
【０４０３】
５．５．５．８  足場の製造および適用
足場を製造するために使用され得る方法は、当該技術分野で公知であり、その方法にはエレクトロスピニング、微細加工等が含まれる。エレクトロスピニング、ヒドロゲルインプリント技術によって製造されたナノ繊維メッシュを使用して、組織型の超分子構造と一致する３次元微細構造が作成されている。原位置で形成する足場もまた、企図される。
【０４０４】
いくつかの実施形態では、活性剤（例えば、単独でまたは本明細書に記載される組み合わせの育毛促進剤）が、活性剤を含有するスプレー式のヒドロゲルを用いて投与される。このような一実施形態では、生分解性足場に配置した後、活性剤が組織上に噴霧される。活性剤（または活性剤の組み合わせ、例えば、育毛促進剤および幹細胞シグナル伝達物質）は、液体として噴霧されるが、組織上に噴霧した後、ヒドロゲルに変形するスプレー式のヒドロゲルに組み込まれ得る。これは、創傷または外皮攪乱の面積が大きく、均一に網羅することが必要とされる場合に特に有用である。
【０４０５】
いくつかの実施形態では、活性剤を含有するスプレー式のヒドロゲルを創傷またはそうでなければ外皮攪乱した部位上に適用し、これにより、治癒期間中にわたって、または短期間もしくは長期間によって、必要に応じて活性剤を放出する架橋結合したヒドロゲルを形成する。必要とされる放出特徴に応じて、活性剤は、マイクロカプセルまたはナノカプセルに組み込まれ、プレヒドロゲル溶液に懸濁される。活性剤はまた、プレヒドロゲル溶液に溶解させることもできる。「プレヒドロゲル」溶液は、組織上に噴霧され、また活性剤を含有する溶液として定義される。
【０４０６】
いくつかの実施形態では、活性剤は、真皮中に存在する負電荷を持つコラーゲンにそれ自身を急速に結合するために正電荷を持つことができるマイクロスフェア内に含まれる。真皮へのマイクロスフェアの結合は、その部位で不動の活性剤を放出する部分を提供する。
【０４０７】
前述の実施形態の変形例では、創傷またはそうでなければ外皮攪乱した部位を、治癒の間、感染からその部位を防ぐために、通気性のある非閉塞性スプレー式のヒドロゲルで覆うことができる。
【０４０８】
５．６  治療レジメン
以下に記載される治療のいずれかについても、特定の実施形態では、特定の治療が、第２（または第３の、またはそれ以上の）治療の投与前に、それと同時に、またはその後で投与することができる。ある特定の実施形態では、第２または第３またはその後の治療は、異なる（例えば、一実施形態では、より高い）用量であるが、同じ活性剤による治療を含む。
【０４０９】
一実施形態では、ある治療は、対象に、他の治療と適度に同じ時点で投与される。本方法は、２つの投与が、互いに１分未満〜約５分間、または最長約６０分の期間、例えば同じ医師の診察時に行われる。
【０４１０】
別の実施形態では、ある治療および別の治療は、ちょうど同時に投与される。
【０４１１】
なお別の実施形態では、ある治療および他の治療は、ある治療および他の治療が一緒に作用して、単独で投与される場合よりも便益の増加をもたらすことができるように、順番に、ある時間間隔内で投与される。別の実施形態では、ある治療および他の治療は、所望の結果を得るのに十分な時間投与される。それぞれは、任意の適切な形態で、任意の好適な経路によって、同時にまたは別々に投与することができる。一実施形態では、ある治療および他の治療は、異なる投与経路によって投与される。代替の実施形態では、それぞれが同じ投与経路によって投与される。ある特定の実施形態では、ある治療および他の治療は、対象の身体の同じまたは異なる部位で投与することができる。同時に投与されるとき、ある治療および他の治療は、単一の製剤、混合製剤で、または同じ投与部位に、または同じ投与経路によって投与されても、投与されなくてもよい。
【０４１２】
様々な実施形態では、ある治療および他の治療は、１時間未満の間隔、約１時間間隔、１時間〜２時間間隔、２時間〜３時間間隔、３時間〜４時間間隔、４時間〜５時間間隔、５時間〜６時間間隔、６時間〜７時間間隔、７時間〜８時間間隔、８時間〜９時間間隔、９時間〜１０時間間隔、１０時間〜１１時間間隔、１１時間〜１２時間間隔、２４時間以下の間隔、または４８時間以下の間隔をあけて投与される。他の実施形態では、ある治療および他の治療は、２〜４日間隔、４〜６日間隔、１週間間隔、１〜２週間間隔、２〜４週間間隔、１ヶ月間隔、１〜２ヶ月間隔、２〜３ヶ月間隔、３〜４ヶ月間隔、４〜５ヶ月間隔、６ヶ月間隔、６ヶ月〜１年間隔、または１年もしくはそれ以上の間隔をあけて投与される。いくつかの実施形態では、ある治療および他の治療は、両方がまだ活性である期間内で投与される。当業者は、それぞれの投与成分の半減期を決定することによってそのような期間を決定することができよう。
【０４１３】
一実施形態では、ある治療および他の治療は、同じ患者の診察時間内に投与される。一実施形態では、ある治療は、他の治療の投与前に投与される。代替の実施形態では、ある治療は、他の治療の投与後に投与される。
【０４１４】
ある特定の実施形態では、ある治療および他の治療は、対象に周期的に投与される。周期的な投与は、１回または一期間の１つ以上の治療の投与、続いて、１回または一期間の他の治療の投与、およびこの連続投与を繰り返すことを含む。第１の治療は、ある治療または他の治療を伴うものであり得、これは対象の以前の治療歴、および本来の成果によって異なる。そのような周期的治療は、本明細書に記載される利点を有するだけではなく、治療のうちの１つ以上への耐性発現を減少させ、治療のうちの１つの副作用を避けるもしくは減少する、および／または治療の有効性を改善することもできる。そのような実施形態では、１つ以上の治療の交互の投与は、１年後、６ヶ月後、３ヶ月後、１ヵ月後、３週間後、２週間後、１週間後、４〜６日後、２〜４日後、または１〜２日後、別の治療の投与（または逆もまた同様に）を行うことができ、そのような周期は、所望に応じて何度でも繰り返され得る。ある特定の実施形態では、ある（またはさらなる）治療および他の治療は、３週間以内の周期で、隔週に１回、１０日間に１回、または１週間に１回、交互に投与される。そのような期間は、治療の特性に応じて、例えば、制御放出製剤を使用するかどうか、および／または治療経過の進展により延長または軽減することができる。
【０４１５】
特定の実施形態では、対象は、現在の治療（例えば、局所的ミノキシジルまたはフィナステライド）を中止し、治療されるべき領域を外皮攪乱し、攪乱後治療を１２日間適用する。１２日間後、攪乱後治療を中止し、現在の治療法（または別の育毛促進剤もしくは育毛促進剤の組み合わせ）による治療が再開される。いくつかの実施形態では、対象は、１０周期のプロトコルで治療され、外皮攪乱、続いて、攪乱後治療（例えば、３ヶ月、４ヶ月、５ヶ月、６ヶ月、７ヶ月、８ヶ月、９ヶ月、１０ヶ月、１１ヶ月、または１２ヶ月間）を行い、例えば、育毛促進剤等の他の治療と交互に行われる（例えば、３ヶ月、４ヶ月、５ヶ月、６ヶ月、７ヶ月、８ヶ月、９ヶ月、１０ヶ月、１１ヶ月、または１２ヶ月）。
【０４１６】
ある特定の実施形態では、治療のタイミングまたは治療の組み合わせは、皮膚の治療領域における毛髪の成長の指標の存在または不在により調整され得る。例えば、１種以上の育毛促進剤の治療前または治療後の外皮攪乱による反復治療のタイミング（任意に、攪乱後治療と組み合わせて）または外皮攪乱による治療（任意に、攪乱後治療と組み合わせて）は、治療した皮膚部位における指標、すなわちＮＬ、ＰＥＬ、および／またはＰＥＬＡ毛包構造体、先在する軟毛、新しい軟毛、軟毛から硬毛への変換、硬毛、硬毛から軟毛への変換等のうちの１つ以上の出現、または予測される出現に基づいて調節され得る。
【０４１７】
毛髪移植術（例えば毛包単位抽出）を含む外皮攪乱が１種以上の育毛促進剤による治療を伴う例示的な実施形態では、例えばミノキシジルまたはフィナステライド等の１種以上の育毛促進剤により事前に処置された頭皮の領域は、移植した毛包の源として使用される。毛包除去前に、攪乱治療は、移植した組織が得られるであろう部位に投与される。この部位は、攪乱後治療を１週間行い、次いで、中断し、続いて、例えばミノキシジルまたはフィナステライドによる治療を３ヶ月間行う。毛髪移植術（例えば毛包単位抽出）を含む外皮攪乱が１種以上の育毛促進剤による治療を伴う別の例示的な実施形態では、前回の毛髪移植術における以前はドナー部位であった頭皮の領域がその後の毛髪移植術前に処置される。前回のドナー部位は、例えばミノキシジルまたはフィナステライド等の１種以上の育毛促進剤により事前に処置され、この部位は、移植した毛包の源として使用されよう。毛包除去前に、攪乱治療は、移植した組織が得られるであろう部位に投与される。この部位は外皮攪乱され、攪乱後治療が１週間適用され、次いで、中断し、続いて、例えばミノキシジルまたはフィナステライドによる治療を３ヶ月間またはそれ以上行う。毛髪移植術（例えば毛包単位抽出）を含む外皮攪乱が１種以上の育毛促進剤による治療を伴う別の例示的な実施形態では、前回の毛髪移植術における以前はドナー部位であった頭皮の領域がその後の毛髪移植術前に処置される。毛包除去前に、攪乱治療は、移植した組織が、例えばミノキシジルまたはフィナステライド等の育毛促進剤によるいかなる事前の処置も行わずに得られるであろう部位に投与される。この部位は外皮攪乱され、攪乱後治療が１週間適用され、次いで、中断し、続いて、例えばミノキシジルまたはフィナステライドによる治療を３ヶ月間またはそれ以上行う。毛髪移植術（例えば毛包単位抽出）を含む外皮攪乱が１種以上の育毛促進剤による治療を伴う別の例示的な実施形態では、前回の毛髪移植においてドナー部位でなかったが、将来は使用されるであろう頭皮の領域がその後の毛髪移植術前に処置される。この部位は、例えばミノキシジルまたはフィナステライド等の１種以上の育毛促進剤により事前に処置され、この部位は、移植した毛包の源として使用されよう。毛包除去前に、攪乱治療は、移植した組織が得られるであろう部位に投与される。この部位は外皮攪乱され、攪乱後治療が１週間適用され、次いで、中断し、続いて、例えばミノキシジルまたはフィナステライドによる治療を３ヶ月間またはそれ以上行う。毛髪移植術（例えば毛包単位抽出）を含む外皮攪乱が１種以上の育毛促進剤による治療を伴う別の例示的な実施形態では、前回の毛髪移植においてドナー部位でなかったが、将来は使用されるであろう頭皮の領域がその後の毛髪移植術前に処置される。毛包除去前に、攪乱治療は、移植した組織が、例えばミノキシジルまたはフィナステライド等の育毛促進剤による事前の処置を行わずに得られるであろう部位に投与され、攪乱後治療が１週間適用され、次いで、中断し、続いて、例えばミノキシジルまたはフィナステライドによる治療を３ヶ月間またはそれ以上行う。
【０４１８】
項５．１、５．２、および５．３にそれぞれ記載される治療ステップに関連する特定の例示的なレジメンが続く。
【０４１９】
５．６．１  外皮攪乱治療レジメン
いくつかの実施形態では、外皮攪乱は、治療されるべき皮膚の部分におけるデピレーション（ｄｅｐｉｌａｔｉｏｎ）（皮膚の表面上の毛髪部分の除去）またはエピレーション（ｅｐｉｌａｔｉｏｎ）（皮膚より下の部分を含む全体の毛髪の除去）の１つ以上の技術と組み合わせて行われる。当該技術分野で公知のいかなる形態のエピレーションまたはデピレーションをも使用することができる。使用することができるデピレーションの方法としては、シェービング、研削材、機械的装置の使用、および髪にその強度を与えるタンパク鎖を連結するジスルフィド結合を破壊し、毛髪を分解することによって作用する化学脱毛剤（例えばＮａｉｒ（登録商標）またはチオグリコール酸）の使用が挙げられるが、これらに限定されない。使用することができるエピレーションの方法としては、ピンセットを用いて引き抜くこと、砂糖脱毛、エピレーション装置、糸脱毛（ｔｈｒｅａｄｉｎｇ）、ホームパルス光、レーザー、電気分解治療が挙げられるが、これらに限定されず、育毛遅延剤（例えばＶａｎｉｑａ（登録商標）（エフロルニチン））の使用を含むことができる。攪乱前に、皮膚を、デピレーションまたはエピレーションを施行することができる。
【０４２０】
いくつかの実施形態では、デピレーションは、外皮攪乱前に行われる。いくつかの実施形態では、デピレーションは、外皮攪乱直前に行われる。いくつかの実施形態では、デピレーションは、外皮攪乱の５分、１０分、１５分、２０分、３０分、１時間、２時間、３時間、４時間、または５時間、６時間、７時間、８時間、９時間、１０時間、１２時間、２４時間、または２日前に行われる。
【０４２１】
いくつかの実施形態では、エピレーションは、外皮攪乱前に行われる。いくつかの実施形態では、エピレーションは、外皮攪乱直前に行われる。いくつかの実施形態では、エピレーションは、外皮攪乱の５分、１０分、１５分、２０分、３０分、１時間、２時間、３時間、４時間、または５時間、６時間、７時間、８時間、９時間、１０時間、１２時間、２４時間、または２日前に行われる。
【０４２２】
いくつかの実施形態では、デピレーションは、外皮攪乱前に行われない。いくつかの実施形態では、エピレーションは、外皮攪乱前に行われない。いくつかの実施形態では、デピレーションおよびエピレーションの両者は、外皮攪乱前に行われない。特定の実施形態では、本明細書に記載される外皮攪乱の方法は、エピレーションもデピレーションも行わずに、実行することができる。このような一実施形態では、削皮術（例えば、本明細書の項５．１．１に記載される削皮先端部を有する装置を用いて）は、エピレーションもデピレーションも行わずに、実行される。
【０４２３】
ある特定の実施形態では、外皮攪乱後の皮膚は、治癒速度を促進するために擦り傷または創傷に通常投与されるいかなる物質（例えば、創傷被覆材、軟膏、包帯剤、または装置）とも長期間接触させない。一実施形態では、皮膚は、例えば、外皮攪乱が治癒するまで（例えば、１日間から３週間のいつでも）、いかなる物質とも接触させない。あるいは、皮膚は、ギブス包帯または包帯剤と接触させることができ、これは、例えば、攪乱した皮膚への血流量の増加、または経皮的な水分損失の低下、または気体（例えば、酸素、二酸化炭素、水蒸気）の皮膚へのおよび／もしくは皮膚からの物質移動の低下、皮膚からの熱移動の低下（例えば、皮膚表面の温度上昇をもたらす）、または皮膚上の圧力の増加をもたらす。
【０４２４】
いくつかの実施形態では、外皮攪乱は、例えば、外科的瘢痕等の瘢痕を軽減する治療と組み合わせて実施され、これは、自然な皮膚張力線（ランゲル線（Ｌａｎｇｅｒ’ｓ  ｌｉｎｅ））に沿って選択的切開の配置、または「ジグザグ形の」パターンにおいて縫合を適用すること、あるいは当該技術分野で公知の他の方法によって達成され得る。いくつかの実施形態では、外皮攪乱は、例えば、理学療法を対象に実施すること、感染症を軽減すること、傷の端の分離を軽減すること、コラーゲン合成、沈着、もしくは集積を最小限に抑えること、またはそうでなければ、一次癒合による治癒にとてもよく類似している二次癒合による治癒のプロセスを生じることによって、瘢痕を最小限に抑える創傷（例えば、外科的創傷）の治療と組み合わせて実施される。瘢痕を軽減し、本明細書に記載される方法と組み合わせて使用され得る他の介入は、除去されるべき血腫量を減少させ、ひいては創傷治癒の炎症段階を減少させる創傷治癒の細心の止血（凝固、乾燥、またはライゲーション技術による出血の制御を含む）、皮膚閉合中に注意を払うこと（例えば、表皮および真皮の鉗子の挫滅外傷を避けること）、炎症を軽減する傷の端で壊死組織の回避、創傷の洗浄、および必要とされる皮膚移植片を適用することを含む。これらの介入は、外皮攪乱前、それと同時に、またはその後に実施され得、外皮攪乱の治療と共に、または項５．２〜５．４に記載される、もしくは本明細書の他の箇所、またはそうでなければ当該技術分野で公知の別の治療の一部として、またはそれと組み合わせて使用することができる。
【０４２５】
５．６．２  攪乱後治レジメン
攪乱後治療は、１回、または時間の間隔を置いて複数回投与することができる。例えば、一実施形態では、攪乱後治療は、１日当たり１回、または１日当たり２回、または１日当たり３回、１週間当たり１回またはそれ以上投与される。治療の正確な用量および持続時間は、治療の種類、治療する患者の年齢、体重、および状態によって異なり得、公知の試験プロトコルを用いて、またはインビボもしくはインビトロ試験もしくは診断データからの外挿法によって経験的に決定され得ることを理解されよう。任意の特定の個人については、特定の投薬レジメンが、個人の必要性、および製剤を投与する、または製剤の投与を監視する者の専門的な判断力に従って時間をかけて調節されなければならないことをさらに理解されよう。
【０４２６】
いくつかの実施形態では、攪乱後治療は、外皮攪乱に供されていない皮膚の領域に投与される。いくつかの実施形態では、攪乱後治療は、外皮攪乱前に投与される。いくつかの実施形態では、攪乱後治療は、外皮攪乱前に投与され、攪乱後治療の投与は、外皮攪乱治療中、中断される。特定の実施形態では、攪乱後治療の投与は、外皮攪乱治療後、再開される。いくつかの実施形態では、攪乱後治療は、外皮攪乱前に投与され、攪乱後治療の投与は、外皮攪乱治療中およびその後、継続される。いくつかの実施形態では、攪乱後治療は、外皮攪乱と同時に投与される。いくつかの実施形態では、攪乱後治療は、既に外皮攪乱に供した皮膚の領域に投与される。いくつかの実施形態では、攪乱後治療は、外皮攪乱直後に投与される。
【０４２７】
いくつかの実施形態では、攪乱後治療は、外皮攪乱直前に投与される。いくつかの実施形態では、攪乱後治療が、外皮攪乱から５分、１０分、１５分、２０分、３０分、１時間、２時間、３時間、４時間、５時間、６時間、７時間、８時間、９時間、１０時間、１２時間、１日、２日、３日、４日、５日、６日、７日、８日、９日、１０日、１１日、１２日、１３日間、１４日、または１ヶ月以内に投与される。
【０４２８】
いくつかの実施形態では、攪乱後治療は、外皮攪乱から５分以内に、または外皮攪乱から５分、１０分、１５分、２０分、３０分、１時間、２時間、３時間、４時間、または５時間、６時間、７時間、８時間、９時間、１０時間、１２時間、２４時間、または２日、３日、４日、５日、６日、７日、８日、９日、１０日、１１日、１２日、１３日、１４日、または１ヶ月もしくはそれ以上後に投与される。
【０４２９】
いくつかの実施形態では、攪乱後治療開始後、治療は、外皮攪乱後１日間、または２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、もしくは１４日間またはそれ以上継続される。いくつかの実施形態では、攪乱後治療開始後、治療は、外皮攪乱後３週間、４週間、１ヶ月、または２、３、４、５、もしくは６ヶ月またはそれ以上継続される。いくつかの実施形態では、攪乱後治療開始後、治療は、外皮攪乱後１年間またはそれ以上継続される。
【０４３０】
いくつかの実施形態では、外皮攪乱は、攪乱後治療を行わずに、５分間、１０分間、１５分間、２０分間、３０分間、１時間、２時間、３時間、４時間、または５時間、６時間、７時間、８時間、９時間、１０時間、１２時間、１日間、または２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、２０、２１、２２、２３、２４、２５、２６、２７、２８、２９、３０、３１、３２、３３、３４、３５、３６、３７、３８、３９、または４０日の期間続く。
【０４３１】
様々な実施形態では、外皮攪乱および攪乱後治療は、１日未満の間隔、約１日間隔、２日間隔、３日間隔、４日間隔、５日間隔、６日間隔、７日間隔、８日間隔、９日間隔、１０日間隔、１１日間隔、１２日間隔、１３日間隔、１４日間隔、または２週間以下の間隔で投与される。他の実施形態では、外皮攪乱および攪乱後治療は、２〜４日間隔、４〜６日間隔、１週間間隔、１〜２週間間隔、２〜４週間間隔、１ヶ月間隔、１〜２ヶ月間隔、２〜３ヶ月間隔、３〜４ヶ月間隔、６ヶ月間隔、または１年以上の間隔をあけて投与される。
【０４３２】
一実施形態では、外皮攪乱および攪乱後治療は、患者の同じ診察時間内に投与される。ある特定の実施形態では、外皮攪乱および攪乱後治療は、対象に周期的に投与される。周期的治療は、１回または一期間の外皮攪乱の投与、続いて、１回または一期間の攪乱後治療の投与、およびこの連続投与を繰り返すことを含む。第１の治療は、外皮攪乱または攪乱後治療を伴うものであり得、これは対象の以前の治療歴、および本来の成果によって異なる。ある特定の実施形態では、外皮攪乱および攪乱後治療は、２年以下の周期で、１年に１回、６ヶ月に１回、３ヶ月に１回、２ヶ月に１回、または１ヶ月に１回、交互に投与される。
【０４３３】
一実施形態では、攪乱後治療は、外皮攪乱時に投与され、その後、１または２または３または４または５または６または７または８または９または１０または１１または１２または１３または１４日間またはそれより長く持続される（いくつかの実施形態では、痂皮はこの期間中形成される）。いくつかの実施形態では、攪乱後治療は、痂皮が剥離したらすぐに投与され、３または４または５日間またはそれより長く持続される。一実施形態では、攪乱後治療は、外皮攪乱時に投与され、その後、７または１０または１２または１４日間持続される（いくつかの実施形態では、痂皮はこの期間中形成される）。いくつかの実施形態では、攪乱後治療は、痂皮が剥離したらすぐに投与され、７または１０または１２または１４日間持続される。一実施形態では、攪乱後治療は、外皮攪乱時に投与され、その後、１９または２１日間持続される（いくつかの実施形態では、痂皮はこの期間中形成される）。いくつかの実施形態では、攪乱後治療は、痂皮が剥離したらすぐに投与され、１９または２１日間持続される。一実施形態では、攪乱後治療は、外皮攪乱時に投与され、その後、１ヶ月、２ヶ月、３ヶ月、最長６ヶ月、または最長１年間もしくはそれより長く持続される。いくつかの実施形態では、攪乱後治療は、痂皮が剥離したらすぐに投与され、１ヶ月、２ヶ月、３ヶ月、最長６ヶ月、または最長１年間もしくはそれより長く持続される。
【０４３４】
いくつかの実施形態では、攪乱後治療は、痂皮の形成をもたらさない外皮攪乱の形態と組み合わされる。このような一実施形態では、攪乱後治療は、外皮攪乱前に投与される。そのような別の実施形態では、攪乱後治療は、外皮攪乱時に投与される。いくつかの実施形態では、攪乱後治療は、外皮攪乱後に投与される。いくつかの実施形態では、攪乱後治療が痂皮の形成をもたらさない外皮攪乱後に投与され、攪乱後治療は、外皮攪乱から１５分間以内、または１５分間、３０分間、４５分間、１時間、２時間、４時間、６時間、８時間、１２時間、１８時間、１日間、２日間、３日間、５日間、７日間、１０日間、２週間、または３週間後に投与される。他の実施形態では、攪乱後治療が痂皮の形成をもたらさない外皮攪乱後に投与され、攪乱後治療は、外皮攪乱から１ヶ月、２ヶ月、３ヶ月、４ヶ月、５ヶ月、６ヶ月、または１年もしくはそれ以上のうちに投与される。
【０４３５】
攪乱後治療が痂皮の形成をもたらす外皮攪乱形態後に投与される一実施形態では、攪乱後治療は、痂皮形成前に投与される。攪乱後治療が痂皮の形成をもたらす外皮攪乱形態後に投与される一実施形態では、攪乱後治療は、痂皮形成中に投与される。攪乱後治療が痂皮の形成をもたらす外皮攪乱形態後に投与される一実施形態では、攪乱後治療は、痂皮剥離前に投与される。攪乱後治療が痂皮の形成をもたらす外皮攪乱形態後に投与される一実施形態では、攪乱後治療は、痂皮剥離直後に投与される。攪乱後治療が痂皮の形成をもたらす外皮攪乱形態後に投与される一実施形態では、攪乱後治療は、痂皮剥離から１時間後に投与される。攪乱後治療が痂皮の形成をもたらす外皮攪乱形態後に投与される一実施形態では、攪乱後治療は、痂皮剥離から最長６時間後に投与される。攪乱後治療が痂皮の形成をもたらす外皮攪乱形態後に投与される一実施形態では、攪乱後治療は、痂皮剥離から６〜１２時間後に投与される。攪乱後治療が痂皮の形成をもたらす外皮攪乱形態後に投与される一実施形態では、攪乱後治療は、痂皮剥離から１２〜１８時間後に投与される。攪乱後治療が痂皮の形成をもたらす外皮攪乱形態後に投与される一実施形態では、攪乱後治療は、痂皮剥離から１８〜２４時間後に投与される。攪乱後治療が痂皮の形成をもたらす外皮攪乱形態後に投与される一実施形態では、攪乱後治療は、外皮攪乱から１日、２日、３日、４日、５日、６日、７日、８日、９日、１０日、１１日、１２日、１３日、２週間、３週間、または４週間、１ヶ月、２ヶ月、３ヶ月、４ヶ月、５ヶ月、６ヶ月、７ヶ月、８ヶ月、９ヶ月、１０ヶ月、１１ヶ月、または１２ヶ月後に投与される。攪乱後治療が痂皮の形成をもたらす外皮攪乱形態後に投与される一実施形態では、攪乱後治療は、外皮攪乱から２ヶ月、３ヶ月、４ヶ月、５ヶ月、６ヶ月、または１年もしくはそれ以上後に投与される。
【０４３６】
攪乱後治療剤は、外皮攪乱と組み合わせて、１回、または繰り返して投与することができる。ある特定の態様では、攪乱後治療剤は、薬学的有効成分を含まない。ある特定の態様では、攪乱後治療剤は、薬学的有効成分を含まないヒドロゲルである。いくつかの実施形態では、攪乱後治療剤は、時間の間隔を置いて投与され、任意に、外皮攪乱による交互の治療剤はまた、時間の間隔を置いて投与される。一変形では、攪乱後治療は、複数回の別個の投与と同様にあるレジメンで、薬物（例えば、上の項５．４に記載されている）を送達することができる、制御放出形態で１回以上投与することができる。ある特定の態様では、本発明は、さらなる治療と組み合わせた外皮攪乱を含み、さらなる治療は、薬学的有効成分を含んでも含まなくてもよい。
【０４３７】
例えば、いくつかの実施形態では、治療間の期間は、少なくとも１日間、少なくとも２日間、少なくとも３日間、少なくとも４日間、少なくとも５日間、少なくとも７日間であり、いくつかの実施形態では、１４日間を超えない。一実施形態では、治療期間は、１週間である。いくつかの実施形態では、攪乱後治療による治療期間は、少なくとも１４日間、２１日間、２８日間、またはそれより長い。
【０４３８】
いくつかの実施形態では、攪乱後治療剤は、痂皮の表面下を形成する新表皮を調節するために投与される。いくつかのそのような実施形態では、攪乱後治療剤は、外皮攪乱時に投与され、痂皮剥離後のある長さの期間まで、例えば、外皮攪乱後５〜１４日間持続される。いくつかの実施形態では、攪乱後治療による治療プロセスは、短い、例えば、痂皮剥離直後１日または数日間に限定されるか、または痂皮がなお付着している間のみ継続される。外皮攪乱および攪乱後治療剤投与のタイミングは、最良の結果が達成されるように好ましくはモニタリングされ、調節される。
【０４３９】
いくつかの実施形態では、外皮攪乱（例えば、項５．１に記載される、またはそうでなければ当該技術分野で公知の方法を用いて）および攪乱後治療投与のタイミングは、毛髪の成長を最適化するために調節される。したがって、一実施形態では、攪乱後治療剤は、外皮攪乱前のある時点で投与され、攪乱後治療は、外皮攪乱後（任意に、項５．３、５．４、または本明細書の他の箇所に記載される、またはそうでなければ当該技術分野で公知の治療のうちの１つと組み合わせて）、再度再開される。一実施形態では、攪乱後治療剤は、外皮攪乱と一緒に、またはその後間もなく、（任意に、項５．３、５．４、または本明細書の他の箇所に記載される、またはそうでなければ当該技術分野で公知の治療のうちの１つと組み合わせて）投与される、例えば、外皮攪乱した皮膚に直接投与される。
【０４４０】
いくつかの実施形態では、攪乱後治療の開始後、治療は、育毛促進剤による治療が開始された際でさえ継続される。例えば、これは、２つの治療剤が同時に投与されることによって達成され得る。これはまた、攪乱後治療用の薬学的組成物と同一である製剤において育毛促進剤を投与することによっても達成され得、この唯一の違いは、それぞれ、育毛促進剤、および／または任意の必要とされる賦形剤、安定剤等の存在もしくは不在である。
【０４４１】
５．６．３  育毛促進剤による治療レジメン
育毛促進剤による治療（「育毛促進剤治療」とも称される）は、１回、または時間の間隔を置いて複数回、投与することができる。例えば、一実施形態では、育毛促進剤治療は、１日当たり１回、または１日当たり２回、または１日当たり３回、または１週間当たり１回またはそれ以上投与される。治療の正確な用量および持続時間は、治療の種類、治療されるべき患者の年齢、体重、および状態によって異なり得、公知の試験プロトコルを用いて、またはインビボもしくはインビトロ試験もしくは診断データからの外挿法によって経験的に決定さえ得ることを理解されよう。任意の特定の個人については、特定の投薬レジメンが、個人の必要性、および製剤を投与する、または製剤の投与を監視する者の専門的な判断力に従って時間をかけて調節されなければならないことをさらに理解されよう。
【０４４２】
本明細書に記載される実施形態では、育毛促進剤による治療は、外皮攪乱と組み合わせて行われるか、外皮攪乱による治療を受けている対象に投与される。これらの治療は、任意に、上の項５．２において記載されている攪乱後治療および／または上の項５．６．２において記載されている攪乱後治療と組み合わせることができる。
【０４４３】
いくつかの実施形態では、育毛促進剤が、外皮攪乱前に投与される。いくつかの実施形態では、育毛促進剤が、外皮攪乱前に投与され、育毛促進剤の投与は、外皮攪乱治療中および治療後に継続される。いくつかの実施形態では、育毛促進剤が、外皮攪乱前に投与され、育毛促進剤の投与は、外皮攪乱治療中、中断される。特定の実施形態では、育毛促進剤の投与は、外皮攪乱治療後に再開される。
【０４４４】
いくつかの実施形態では、１種以上の育毛促進剤が、外皮攪乱前に投与される。いくつかの実施形態では、１種以上の育毛促進剤が、外皮攪乱の前の６ヶ月、１年、２年、３年、４年、５年、または６年以内に投与される。いくつかの実施形態では、１種以上の育毛促進剤が、外皮攪乱前に継続的に投与される。いくつかの実施形態では、１種以上の育毛促進剤は、外皮攪乱前に断続的に投与される。いくつかの実施形態では、２種以上の育毛促進剤が、外皮攪乱前に順次投与される。いくつかの実施形態では、２種以上の育毛促進剤が、外皮攪乱前に同時に投与される。
【０４４５】
いくつかの実施形態では、１種以上の育毛促進剤が、外皮攪乱直前に投与される。いくつかの実施形態では、育毛促進剤が、外皮攪乱前の５分、１０分、１５分、２０分、３０分、１時間、２時間、３時間、４時間、５時間、６時間、７時間、８時間、９時間、１０時間、１２時間、１日、２日、３日、４日、５日、６日、７日、８日、９日、１０日、１１日、１２日、１３日、１４日、または１ヶ月以内に投与される。
【０４４６】
いくつかの実施形態では、育毛促進剤が、外皮攪乱後に投与される。いくつかの実施形態では、育毛促進剤が、外皮攪乱の直後に投与される。創傷した皮膚への育毛促進剤の局所投与のための特定の実施形態では、育毛促進剤が、創傷部位のほてりまたは焦燥を軽減するように製剤化される。いくつかの実施形態では、育毛促進剤が、外皮攪乱の、５分間、１０分、１５分、２０分、３０分、１時、２時、３時、４時、５時、６時、７時、８時、９時、１０時、１２時、１日、２日、３日、４日、５日、６日、７日、８日、９日、１０日、１１日、１２日、１３日、１４日、または１ヶ月後に投与される。いくつかの実施形態では、育毛促進剤は、外皮攪乱後、約１、１．５、２、２．５、３、３．５、４、４．５、５、５．５、または６ヶ月、またはそれより後に投与される。いくつかの実施形態では、外皮攪乱は、育毛促進剤を用いずに、１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、２０、２１、２２、２３、２４、２５、２６、２７、２８、２９、３０、３１、３２、３３、３４、３５、３６、３７、３８、３９、または４０日もしくはそれ以上の期間続く。
【０４４７】
他の実施形態では、１種以上の育毛促進剤による治療のタイミングは、外皮攪乱により治療された領域の皮膚における毛髪の成長の指標の存在または不在する場合に（任意に、本明細書に記載される攪乱後治療と組み合わせて）、調節され得る。例えば、いくつかの実施形態では、１種以上の育毛促進剤は、外皮攪乱により治療された皮膚における軟毛の出現前に投与される。例えば、いくつかの実施形態では、１種以上の育毛促進剤は、外皮攪乱により治療された皮膚における新しい軟毛の出現前に投与される。いくつかの実施形態では、１種以上の育毛促進剤は、外皮攪乱により治療された皮膚部位における新しい軟毛の出現後に投与される。いくつかの実施形態では、１種以上の育毛促進剤は、外皮攪乱により治療された皮膚部位における軟毛の出現後に投与される。いくつかの実施形態では、１種以上の育毛促進剤は、外皮攪乱により治療された皮膚部位における硬毛の出現前に投与される。いくつかの実施形態では、１種以上の育毛促進剤は、外皮攪乱により治療された皮膚部位における硬毛の出現後に投与される。いくつかの実施形態では、１種以上の育毛促進剤は、外皮攪乱により治療された皮膚部位における硬毛の出現後、および硬毛から軟毛への移行前に投与される。いくつかの実施形態では、１種以上の育毛促進剤は、外皮攪乱により治療された皮膚部位におけるＮＬ、ＰＥＬ、および／またはＰＥＬＡ毛包構造体の出現前に投与される。いくつかの実施形態では、１種以上の育毛促進剤は、外皮攪乱により治療された皮膚部位におけるＮＬ、ＰＥＬ、および／またはＰＥＬＡ毛包構造体の出現後に投与される。
【０４４８】
様々な実施形態では、外皮攪乱および育毛促進剤は、１日未満の間隔、約１日間隔、２日間隔、３日間隔、４日間隔、５日間隔、６日間隔、７日間隔、８日間隔、９日間隔、１０日間隔、１１日間隔、１２日間隔、１３日間隔、１４日間隔、または２週間以下の間隔をあけて投与される。他の実施形態では、外皮攪乱および育毛促進剤は、２〜４日間隔、４〜６日間隔、１週間間隔、１〜２週間間隔、２〜４週間間隔、１ヶ月間隔、１〜２ヶ月間隔、２〜３ヶ月間隔、３〜４ヶ月間隔、６ヶ月間隔、または１年以上の間隔をあけて投与される。
【０４４９】
一実施形態では、外皮攪乱および育毛促進剤は、患者の同じ診察時間内に投与される。ある特定の実施形態では、外皮攪乱および育毛促進剤は、対象に周期的に投与される。周期的治療は、一期間の外皮攪乱の投与、続いて、一期間の育毛促進剤の投与、およびこの連続投与を繰り返すことを含む。第１の治療は、外皮攪乱または育毛促進剤を伴うものであり得、これは対象の以前の治療暦、および本来の成果によって異なる。ある特定の実施形態では、外皮攪乱および育毛促進剤治療は、３週間以下の周期で、隔週に１回、１０日間に１回、または１週間１回、交互に投与される。ある特定の実施形態では、外皮攪乱および攪乱後治療は、２年以下の周期で、１年に１回、６ヶ月に１回、３ヶ月に１回、２ヶ月に１回、または１ヶ月に１回、交互に投与される。
【０４５０】
一実施形態では、育毛促進剤治療は、外皮攪乱時に投与され、その後、１または２または３または４または５日間またはそれより長く維持される（いくつかの実施形態では、痂皮はこの期間中形成される）。いくつかの実施形態では、育毛促進剤治療は、痂皮が剥離したらすぐに投与され、３または４または５日間またはそれより長く維持される。一実施形態では、育毛促進剤治療は、外皮攪乱時に投与され、その後、７または１０または１２または１４日間またはそれより長く維持される（いくつかの実施形態では、痂皮はこの期間中形成される）。いくつかの実施形態では、育毛促進剤治療は、痂皮が剥離したらすぐに投与され、７または１０または１２または１４日間またはそれより長く維持される。一実施形態では、育毛促進剤治療は、外皮攪乱時に投与され、その後、１９または２１日間またはそれより長く維持される（いくつかの実施形態では、痂皮はこの期間中形成される）。いくつかの実施形態では、育毛促進剤治療は、痂皮が剥離したらすぐに投与され、１９または２１日間またはそれより長く維持される。一実施形態では、育毛促進剤治療は、外皮攪乱時に投与され、その後、１ヶ月、２ヶ月、３ヶ月、最長６ヶ月、または最長１年間もしくはそれより長く維持される。いくつかの実施形態では、育毛促進剤治療は、痂皮が剥離したらすぐに投与され、１ヶ月、２ヶ月、３ヶ月、最長６ヶ月、または最長１年間もしくはそれより長く維持される。
【０４５１】
いくつかの実施形態では、育毛促進剤治療は、痂皮の形成をもたらさない外皮攪乱の形態と組み合わされる。このような一実施形態では、育毛促進剤治療は、外皮攪乱前に投与される。そのような別の実施形態では、育毛促進剤治療は、外皮攪乱時に投与される。いくつかの実施形態では、育毛促進剤治療は、外皮攪乱後に投与される。育毛促進剤治療が痂皮の形成をもたらさない外皮攪乱後に投与される、いくつかの実施形態では、育毛促進剤治療は、外皮攪乱から１５分間以内、または１５分、３０分、４５分、１時間、２時間、４時間、６時間、８時間、１２時間、１８時間、１日、２日、３日、５日、７日、１０日、２週間、または３週間後に投与される。他の実施形態では、育毛促進剤治療は痂皮の形成をもたらさない外皮攪乱後に投与され、育毛促進剤治療は、育毛促進剤治療は、外皮攪乱から１ヶ月以内で、２ヶ月、３ヶ月、４ヶ月、５ヶ月、６ヶ月、または１年間もしくはそれ以上のうちに投与される。
【０４５２】
育毛促進剤治療が痂皮の形成をもたらす外皮攪乱形態後に投与される一実施形態では、育毛促進剤治療は、痂皮形成前に投与される。育毛促進剤治療が痂皮の形成をもたらす外皮攪乱形態後に投与される一実施形態では、育毛促進剤治療は、痂皮形成中に投与される。育毛促進剤治療が痂皮の形成をもたらす外皮攪乱形態後に投与される一実施形態では、育毛促進剤治療は、痂皮剥離前に投与される。育毛促進剤治療が痂皮の形成をもたらす外皮攪乱形態後に投与される一実施形態では、育毛促進剤治療は、痂皮剥離直後に投与される。育毛促進剤治療が痂皮の形成をもたらす外皮攪乱形態後に投与される一実施形態では、育毛促進剤治療は、痂皮剥離から１時間後に投与される。育毛促進剤治療が痂皮の形成をもたらす外皮攪乱形態後に投与される一実施形態では、育毛促進剤治療は、痂皮剥離から６時間後に投与される。育毛促進剤治療が痂皮の形成をもたらす外皮攪乱形態後に投与される一実施形態では、育毛促進剤治療は、痂皮剥離から６〜１２時間後に投与される。育毛促進剤治療が痂皮の形成をもたらす外皮攪乱形態後に投与される一実施形態では、育毛促進剤治療は、痂皮剥離から１２〜１８時間後に投与される。育毛促進剤治療が痂皮の形成をもたらす外皮攪乱形態後に投与される一実施形態では、育毛促進剤治療は、痂皮剥離から１８〜２４時間後に投与される。育毛促進剤治療が痂皮の形成をもたらす外皮攪乱形態後に投与される一実施形態では、育毛促進剤治療は、外皮攪乱から１日、２日、３日、５日、７日、１０日、２週間、３週間、または４週間後に投与される。育毛促進剤治療が痂皮の形成をもたらす外皮攪乱形態後に投与される一実施形態では、育毛促進剤治療は、外皮攪乱から２ヶ月、３ヶ月、４ヶ月、５ヶ月、６ヶ月、または１年間もしくはそれ以上の後に投与される。
【０４５３】
育毛促進剤治療は、外皮攪乱と組み合わせて、１回、または繰り返して投与することができる。いくつかの実施形態では、育毛促進剤治療は、時間の間隔を置いて投与され、任意に外皮攪乱による交互の治療もまた、時間の間隔を置いて投与される。一変形では、育毛促進剤は、複数回の別個の投与と同様にあるレジメンにおいて、薬物を送達することができる、制御放出形態で１回以上投与することができる。
【０４５４】
例えば、いくつかの実施形態では、治療間の期間は、少なくとも１日間、少なくとも２日間、少なくとも３日間、少なくとも４日間、少なくとも５日間、少なくとも７日間であり、いくつかの実施形態では、１４日間を超えない。一実施形態では、治療間の期間は、１週間である。いくつかの実施形態では、育毛促進剤による治療期間は、少なくとも１４日間、２１日間、２８日間、またはそれより長い。ある特定の実施形態では、治療間の期間は、少なくとも１ヶ月、３ヶ月、６ヶ月、９ヶ月、１２ヶ月、２年間、３年間、４年間、５年間、６年間、７年間、またはそれより長い。
【０４５５】
いくつかの実施形態では、育毛促進剤治療は、痂皮の表面下を形成する新表皮を調節するために投与される。いくつかのそのような実施形態では、育毛促進剤治療は、外皮攪乱時に投与され、痂皮が剥離してからある時点まで、例えば、外皮攪乱後の５〜１４日間持続される。いくつかの実施形態では、育毛促進剤による治療プロセスは、短い、例えば、痂皮剥離直後１日または数日間に限定されるか、または痂皮がなお付着している間のみ継続される。外皮攪乱および育毛促進剤投与のタイミングは、最良の結果が達成されるように好ましくはモニタリングされ、調節される。
【０４５６】
いくつかの実施形態では、外皮攪乱（例えば、項５．１に記載される、またはそうでなければ当該技術分野で公知の方法を用いて）および育毛促進剤の投与のタイミングは、毛髪の成長を最適化するために調節される。したがって、一実施形態では、育毛促進剤は、外皮攪乱前のある期間投与され、育毛促進剤による治療は、外皮攪乱後（任意に、項５．２、５．４、または本明細書の他の箇所に記載される、またはそうでなければ当該技術分野で公知の治療のうちの１つと組み合わせて）、再度再開される。一実施形態では、育毛促進剤は、外皮攪乱と一緒に、またはその後間もなく、（任意に、項５．２、５．４、または本明細書の他の箇所に記載される、またはそうでなければ当該技術分野で公知の治療のうちの１つと組み合わせて）投与される、例えば、外皮攪乱した皮膚に直接投与される。一実施形態では、育毛促進剤は、外皮攪乱に供されている皮膚の領域における新しい軟毛の出現後に、（任意に、項５．２、５．４、または本明細書の他の箇所に記載される、またはそうでなければ当該技術分野で公知の治療のうちの１つと組み合わせて）投与される。一実施形態では、育毛促進剤は、外皮攪乱に供されている皮膚の領域における視覚的に検出可能な新しい毛髪の出現後に、（任意に、項５．２、５．４、または本明細書の他の箇所に記載される、またはそうでなければ当該技術分野で公知の治療のうちの１つと組み合わせて）投与される。一実施形態では、育毛促進剤は、外皮攪乱に供されている皮膚の領域における写真で検出可能な新しい毛髪の出現後に、（任意に、項５．２、５．４、または本明細書の他の箇所に記載される、またはそうでなければ当該技術分野で公知の治療のうちの１つと組み合わせて）投与される。一実施形態では、育毛促進剤は、外皮攪乱に供されている皮膚の領域における新しい硬毛の出現後に、（任意に、項５．２、５．４、または本明細書の他の箇所に記載される、またはそうでなければ当該技術分野で公知の治療のうちの１つと組み合わせて）投与される。
【０４５７】
他の実施形態では、育毛促進剤による治療は、上の項５．２に記載される製剤を用いて行われる。
【０４５８】
ある特定の実施形態では、育毛促進剤による治療は、外皮攪乱と同日に開始され、３日間、４日間、５日間、６日間、７日間、８日間、９日間、１０日間、１１日間、１２日間、１３日間、１４日間、１５日間、１６日間、１７日間、１８日間、１９日間、２０日間、または２１日間、１日１回、２回、３回、４回、または５回継続される。ある特定の実施形態では、育毛促進剤による治療の開始時、治療は、３日間、４日間、５日間、６日間、７日間、８日間、９日間、１０日間、１１日間、１２日間、１３日間、１４日間、１５日間、１６日間、１７日間、１８日間、１９日間、２０日間、または２１日間、１日１回、２回、３回、４回、または５回継続される。ある特定の実施形態では、育毛促進剤による治療の開始時、治療は、１ヶ月、２ヶ月、３ヶ月、４ヶ月、５ヶ月、６ヶ月、７ヶ月、８ヶ月、９ヶ月、１０ヶ月、１１ヶ月、１年間、２年間、３年間、４年間、５年間、６年間、７年間、８年間、９年間、１０年間、１１年間、１２年間、１３年間、または無制限に、１日１回、２回、３回、４回、または５回継続される。
【０４５９】
さらに、１種以上の育毛促進剤が、本明細書（例えば、上の項５．４を参照）に記載される、もしくは参照によって本明細書に組み込まれる、または医師によって適切であると判断される任意のさらなる治療剤と組み合わせて投与され得る。追加の治療剤の量は、所望の効果および選択されるさらなる化合物によって異なる。そのようなさらなる治療剤を投与するための投薬量およびレジメンは、一般に使用される投薬量およびレジメンであり、例えば、製品ラベルまたはＰｈｙｓｉｃｉａｎｓ’  Ｄｅｓｋ  Ｒｅｆｅｒｅｎｃｅ（「ＰＤＲ」）等の医師の手引書（例えば６３ｒｄ  ｅｄｉｔｉｏｎ，２００９，Ｍｏｎｔｖａｌｅ，ＮＪ：Ｐｈｙｓｉｃｉａｎｓ’  Ｄｅｓｋ  Ｒｅｆｅｒｅｎｃｅ）を参考にすることによって容易に決定することができる。
【０４６０】
１種以上の育毛促進剤は、さらなる１種または複数の化合物と同時に、または別々に投与され得るか、または異なる薬物動態学を用いて組織部位に投与および／または送達され得る。一実施形態では、併用療法は、１種以上の育毛促進剤および一緒に製剤化されたさらなる１種または複数の化合物を含む。そのような製剤における育毛促進剤は、さらなる１種または複数の化合物と同時に、または別々に放出され得るか、または異なる薬物動態学を用いて組織部位に放出および／または送達され得る。例えば、いくつかの実施形態では、製剤中の化合物のうちの１種以上は、制御放出を経るが、一方、他の化合物のうちの１種以上は、制御放出を経ない。例えば、製剤中の化合物のうちの１種以上は、持続放出を経るが、一方、他の化合物のうちの１種以上は、遅延放出を経る。
【０４６１】
別の実施形態では、併用療法は、１種以上の育毛促進剤および別々に製剤化されたさらなる１種または複数の化合物を含む。別々の製剤は、同時に、連続して、または交互の順番で投与され得る。例えば、１種以上の育毛促進剤は、連続して、またはフィナステライドもしくはミノキシジル等の別の化合物と同時に投与して、毛髪の保持および成長の望ましい効果を達成することができる。
【０４６２】
ある特定の実施形態では、外皮攪乱と組み合わせた１種以上の育毛促進剤による治療（攪乱後治療を含むまたは含まない）は、ＭＰＨＬ、ＦＰＨＬにおける頭皮の毛髪脱落を防ぐ、遅延する、もしくは逆行させる、および／または加齢による毛髪の菲薄化を拡散する。
【０４６３】
ある特定の実施形態では、１種以上の育毛促進剤による治療前の外皮攪乱による治療（攪乱後治療を含むまたは含まない）は、育毛促進剤の有効性を改善し、治療をより効果的で、効率的な、費用効率が高い、利用しやすくする。例えば、薬剤の有効性は、増加され得る。ある特定の実施形態では、治療の１つは、それ自体では美容上満足できず、利点は長続きしないか、または治療に由来する毛髪が軟毛、または他の薄いもしくは斑点状の毛髪であるか、または不十分な色素形成を有する。これらの治療の１つが、他の治療のうちの１つ以上を有する治療と組み合わせられる場合、生じる毛髪は、そのような特性が劣っている軟毛とは対照的に、より美容上満足し、より長寿命の、より濃く、より均一な、適当な色素性のある毛髪、硬毛、または頭皮毛髪であり得る。ある特定の実施形態では、１本を超える毛髪は、それぞれの毛包から出現し、これはより太い毛髪の出現をもたらす。
【０４６４】
以下の実施形態は、本明細書に記載される方法を示す。外皮攪乱は、本明細書に記載されるように、表皮または皮膚深さへのフラクショナルエルビウム−ＹＡＧレーザー、表皮または皮膚深さへのフラクショナルＣＯ２レーザー、あるいは表皮または皮膚深さへの削皮術のいずれかによる処置によって達成される。この後に、エストロゲン、フィナステライド、またはデュタステリド（Ａｖｏｄａｒｔ（商標））の育毛促進剤のうちの１つ以上による治療を行う。この治療は、刺激、活性化、または再プログラム化される毛包（または毛包幹細胞）を生じ、例えば、男性の側頭部の頭皮毛包（または毛包幹細胞）の小型化を、女性型側頭部の頭皮毛包（または毛包幹細胞）の非小型化に変化させる。その後、任意に、硬毛は、ミノキシジル、ビマトプロスト、またはラタノプロストの適用によってさらに刺激される。代替として、この実施形態では、毛包型は、刺激、活性化、または再プログラム化され得、例えば、男性の側頭部の頭皮毛包の小型化を、男性後頭部の頭皮型毛包の非小型化に変化させ得る。その後、任意に、硬毛は、フィナステライド、デュタステリド、ミノキシジル、ビマトプロスト、またはラタノプロストの適用によってさらに刺激される。別の例示的な実施形態では、外皮攪乱は、本明細書に記載されるように、表皮または皮膚深さへのフラクショナルエルビウム−ＹＡＧレーザー、表皮または皮膚深さへのフラクショナルＣＯ２レーザー、あるいは表皮または皮膚深さへの削皮術のいずれかによる処置によって達成される。この治療は、刺激、活性化、または再プログラム化される毛包および／またはまたは毛包幹細胞を生じて、フィナステライド、デュタステリド、ミノキシジル、ビマトプロスト、またはラタノプロスト等の育毛促進剤の効果を受け入れる新しい毛包を形成する。そのような薬物による再構成および／または新しい毛包の刺激は、その後、硬毛数の増加をもたらす。
【０４６５】
いくつかの実施形態では、毛髪を生成する毛包（例えば、軟毛または硬毛）を既に含有する皮膚の領域の外皮攪乱と１種以上の育毛促進剤による治療の組み合わせは、皮膚のその領域における毛髪の生成を増加させる。いくつかの実施形態では、外皮攪乱と育毛促進剤治療の組み合わせは、損傷し、もはや毛包を含有しない皮膚に投与される。そのような実施形態では、外皮攪乱と育毛促進剤治療の組み合わせは、皮膚のその領域における毛包の生成を修復し得る。このような一実施形態では、瘢痕（例えばケロイド瘢痕）等の正確に治癒していない創傷を含む皮膚の領域は、皮膚のその領域への毛包および／または毛髪の成長を修復するために、外皮攪乱と１種以上の育毛促進剤の併用療法を投与される。これらの効果は、１種以上の育毛促進剤の投薬量を調節することによって達成され得る。
【０４６６】
この組み合わせが、この組み合わせにおいてそれぞれの要素の単に相加的作用から期待されるものを超える効果を有するとき、例えば、分岐した毛包または１つの毛穴当たりの複数の毛幹がこの組み合わせによって生成されたが、いずれかの単独によっては生成されない場合、相助作用が生じる。
【０４６７】
５．６．３．１  外皮攪乱およびミノキシジル治療
この項は、頭皮上の毛髪の成長を誘発する例となる方法を提供する。より具体的には、アンドロゲン性脱毛症に罹患している男性または女性対象の頭皮上の毛髪の成長を誘発する方法が、本明細書に提供される。さらにより具体的には、Ｈａｍｉｌｔｏｎ−Ｎｏｒｗｏｏｄ型３Ｖ、４、５、５Ａ、または５Ｖ、およびＦｉｔｚｐａｔｒｉｃｋ皮膚型１〜４の、硬毛および小型化した毛髪の両方を有する領域として定義される頭頂部の移行ゾーンの存在下で、アンドロゲン性脱毛症に罹患している男性または女性対象の頭皮上の毛髪の成長を誘発する方法が、本明細書に提供される。ある特定の実施形態では、毛髪の成長を誘発するための方法は、（ａ）外皮攪乱と、（ｂ）上の項５．２に記載される攪乱後治療による任意の期間の治療と、（ｃ）ミノキシジルによる任意の期間の治療とを含む。より具体的には、毛髪の成長を誘発するための方法は、（ａ）外皮攪乱、（ｂ）上の項５．２に記載される攪乱後治療による任意の期間の治療、および（ｃ）ミノキシジルによる任意の期間の治療の順序で含む。理論によって束縛されることなく、アンドロゲン性脱毛症に罹患している男性または女性対象における毛髪脱落の領域において、削皮術を用いて制御された外皮攪乱は、新遺伝子（ｎｅｏｇｅｎｉｃ）のような毛包、および／または刺激、活性化、もしくは再構成された先在する毛包をもたらし、ミノキシジルまたは１種または複数の他の育毛促進剤を用いて誘発された新遺伝子のような毛包、および／または刺激、活性化、もしくは再構成された先在する毛包のその後の治療は、より多くの長寿命の、および／またはより濃い毛幹をもたらす。いくつかの実施形態では、アンドロゲン性脱毛症に罹患している男性または女性対象における毛髪脱落の領域において、制御した外皮攪乱前のミノキシジルまたは１種もしくは複数の他の育毛促進剤による治療は、より多くの長寿命の、および／またはより濃い毛幹をもたらす。
【０４６８】
特定の実施形態では、任意の攪乱後治療による治療は、外皮攪乱と同日に開始され、３日間、４日間、５日間、６日間、７日間、８日間、９日間、１０日間、１１日間、１２日間、１３日間、１４日間、１５日間、１６日間、１７日間、１８日間、１９日間、２０日間、または２１日間、１日１回、２回、３回、４回、または５回継続される。
【０４６９】
いくつかの実施形態では、外皮攪乱後には、局所治療を行わない０、１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、２０、２１、２２、２３、２４、２５、２６、２７、２８、２９、３０、３１、３２、３３、３４、３５、３６、３７、３８、３９、または４０日の期間が続く（例えば、攪乱後薬学的組成物による治療を行わないおよびミノキシジルによる治療を行わない攪乱；または攪乱後に攪乱後薬学的組成物による治療を行い、その後、局所的薬剤を用いない一期間があり、続いて、ミノキシジルによる治療；または攪乱後に攪乱後薬学的組成物による一期間の治療を行い、その後、局所ミノキシジルによる治療を行い、攪乱後治療の局所適用後、その日の開始を終了する）。
【０４７０】
いくつかの実施形態では、局所治療を行なわない期間後、ミノキシジルが少なくとも２週間、１ヶ月、２ヶ月、３ヶ月、４ヶ月、５ヶ月、６ヶ月、７ヶ月、８ヶ月、９ヶ月、または少なくとも１０ヶ月間、１日１回、２回、３回、４回、または５回適用されるミノキシジルによる治療が開始される。特定の実施形態では、０．１％、０．５％、１％、２％、３％、４％、５％、６％、７％、または８％の局所ミノキシジル（例えばＲＯＧＡＩＮＥ）を使用することができる。
【０４７１】
ある特定の実施形態では、ミノキシジルによる治療は、上の項５．３および下の項５．４の他の箇所に記載される別の治療と組み合わせて行うことができるか、または例えば、項５．３．１に記載される薬物送達装置を用いて投与することができる。
【０４７２】
ある特定の実施形態では、毛髪の成長を誘発するための方法は、フィナステライド（ＰＲＯＰＥＣＩＡ）の投与をさらに含む。例えば、フィナステライドは、１ｍｇ／日の用量で経口投与することができる。ある特定の実施形態では、フィナステライドの投与は、ミノキシジルによる局所治療と同時に開始する。
【０４７３】
ある特定の実施形態では、毛髪の成長を誘発するための方法は、デュタステリドまたは当業者に公知の任意の他の５−α−レダクターゼ阻害剤の投与をさらに含む。例えば、デュタステリドは、０．０５ｍｇ／日、０．１ｍｇ／日、０．５ｍｇ／日、または２．５ｍｇ／日の用量で経口投与することができる。ある特定の実施形態では、デュタステリドの投与は、ミノキシジルによる局所治療と同時に開始する。
【０４７４】
ある特定の実施形態では、アンドロゲン性脱毛症に罹患している男性または女性対象の頭皮上の毛髪の成長を誘発するための方法は、
（ａ）０日目、削皮術（推定深さ１００ミクロン）、
（ｂ）０日目〜１１日目に、１日２回、上の項５．２に記載されるヒドロゲルの局所投与、
（ｃ）１２日目〜１４日目に、局所治療を行わない期間、
（ｄ）１５日目から開始する少なくとも５．５ヶ月間の５％の局所ミノキシジルの局所投与を含む。
【０４７５】
ある特定の実施形態では、アンドロゲン性脱毛症に罹患している男性または女性対象の頭皮上の毛髪の成長を誘発するための方法は、
（ａ）０日目、削皮術（推定深さ１００ミクロン）、
（ｂ）０日目から開始する約１４日間の１日２回の上の項５．２に記載されるヒドロゲルの局所投与、
（ｃ）一晩、局所治療を行わない期間、
（ｄ）ステップ（ｃ）直後、少なくとも５．５ヶ月間の５％の局所ミノキシジルの局所投与を含む。
【０４７６】
ある特定の実施形態では、アンドロゲン性脱毛症に罹患している男性または女性対象の頭皮上の毛髪の成長を誘発するための方法は、
（ａ）０日目、削皮術（推定深さ１００ミクロン）、
（ｂ）０日目から開始する約１４日間の１日２回の上の項５．２に記載されるヒドロゲルの局所投与、
（ｃ）２週間、局所治療を行わない期間、
（ｄ）２８日目から開始する少なくとも５．５ヶ月間の５％の局所ミノキシジルの局所投与を含む。
【０４７７】
ある特定の実施形態では、本発明は、別々の容器内に、ヒドロゲルおよび局所ミノキシジルを含むキットを提供する。ミノキシジルは、０．１％、０．５％、１％、２％、３％、４％、５％、６％、７％、または８％の局所ミノキシジル（例えばＲＯＧＡＩＮＥ）であり得る。ある特定の実施形態では、このキットは、外皮攪乱用の手段（例えば手持ち式削皮装置）をさらに含む。
【０４７８】
当業者に公知の任意の方法を使用して、毛髪の成長が誘発されることを示すことができる。例えば、検出可能な毛髪は、例えば、広範囲の写真記録またはフォトトリクログラフィック（ｐｈｏｔｏｔｒｉｃｈｏｇｒａｐｈｉｃ）分析（例えば、Ｕｎｏ  ｅｔ  ａｌ．，２００２，Ａｃｔａ  Ｖｅｎｅｒｅｏｌ  ８２：７−１２（参照によって本明細書に組み込まれる）に記載される）による写真によって定量化され得るか、または例えば、評定尺度（Ｋａｕｆｍａｎ  ｅｔ  ａｌ．Ｊ  Ａｍｅｒ  Ａｃａｄ  Ｄｅｒｍａｔｏｌ  １９９８；３９：５７８−８９に記載される）によって視覚的に評価され得る。さらに、写真で検出可能な毛髪の毛幹の厚みの変化を判定することができる。さらに、毛髪の成長の耐久性は、少なくとも３ヶ月、６ヶ月、９ヶ月、１年、１．５年、２年、２．５年、３年、４年、または少なくとも５年の期間にわたってモニタリングされる。
【０４７９】
具体的な実施形態では、０．００５％、．０１％、．０５％、０．１％、０．１５％、または０．２％の局所ラタノプロストを使用することができる。具体的な実施形態では、０．０１％、０．０３％、０．０５％、または０．１％の局所ビマトプロストを使用することができる。具体的な実施形態では、０．０００５％、０．００１５％、０．００５％、または０．０５％の局所タフルプロストを使用することができる。具体的な実施形態では、０．０００１３％、０．０００３３％、０．００１％、０．０．００２６７％、０．００４％、または０．０１％の局所トラボプロストを使用することができる。
【０４８０】
本明細書に記載される方法に用いる併用療法のための他のレジメンには、この項の他の箇所に記載されるものが含まれる。
【０４８１】
５．７  適応症および患者集団
ヒト毛髪パターニングは、対象の人生にわたって生じ、個人間、さらに一般的には、異なる人種および民族的背景のヒト間の程度によって異なる、性特異的変化からなる。思春期前に、男性および女性は、頭皮の毛髪の同様のパターンを有し、彼らの身体の残りの部分は、大部分は目に見えない軟毛で覆われている。前腕および脚は、思春期前でさえ、徐々に薄く、細い硬毛が成長する。男性および女性では、思春期は、腋窩および肛門性器部における硬毛の成長と関連する。思春期中、男性および女性は共に、前腕および脚にわたって硬毛が成長するが、男性は、これらの領域において定量的にさらに成長を有する。思春期後の男性は、口髭／顎髭、胸部、および背部領域にわたって硬毛が成長する。その後、男性は、「ＭＰＨＬ脱毛症」と呼ばれるあるプロセスにおいて、頭皮（頭頂／側頭部、および前頭部／側頭部／頭頂部領域）における異なる度合いの硬毛脱落が現れる。遺伝的感受性を有する男性および女性は共に、「アンドロゲン性脱毛症」と呼ばれるびまん性の頭皮硬毛の菲薄化が現れる。男性は、耳上、鼻の中（鼻孔）、および眉の様々な度合いの硬毛の成長が現れる。更年期後、女性は、口髭／顎髭の毛髪の成長が現れる。男性および女性は共に、年齢と共にびまん性の頭皮毛髪の菲薄化が現れる。遺伝的感受性を有する男性および女性は共に、年齢と共に毛髪の色の変化が現れる。
【０４８２】
性ホルモンであるアンドロゲンおよびエストロゲンは、ヒト毛髪パターニングの多くにおいて重要な役割を果たす。アンドロゲン活性のエストロゲン活性に対する高い比率は、軟毛を硬毛に変換すること（思春期では、例えば、腋窩および肛門性器部；男性の口髭および顎髭）ならびにＭＰＨＬ脱毛症において硬毛（および硬毛の毛包）を軟毛（および小型化した毛包）に変換することの両方のプロセスを促進する。性ホルモンは、局所的に皮膚によって合成され、そこではイントラクリンまたはパラクリン作用を発揮する。（Ｚｏｕｂｏｕｌｉｓ  ＣＣ，Ｃｈｅｎ  ＷＣ，Ｔｈｏｒｎｔｏｎ  ＭＪ，Ｑｉｎ  Ｋ，Ｒｏｓｅｎｆｉｅｌｄ，２００７，“Ｓｅｘｕａｌ  ｈｏｒｍｏｎｅｓ  ｉｎ  ｈｕｍａｎ  ｓｋｉｎ”  Ｈｏｒｍ  Ｍｅｔａｂ  Ｒｅｓ  ３９：８５−９５において再考される）。それぞれの性ステロイドの局所レベルおよび活性は、アンドロゲンおよびエストロゲンを合成する酵素の活性ならびに特異的な細胞型における適切なアンドロゲンおよびエストロゲン受容体の活性によって異なる。アンドロゲンは、５つの主要な酵素によって調節され、アイソザイムの発現において変化するか、または毛髪パターニングを調節するアンドロゲン受容体およびアンドロゲン受容体を転写促進する要因の発現において変化する。エストロゲンは、アンドロゲンを１７−β−エストラジオール（Ｅ２）に変化させるシトクロムＰ４５０アロマターゼ（「アロマターゼ」）を発現する皮脂腺において生成される。エストロゲンは、エストロゲン受容体α（ＥＲα）に作用し、ヒト皮膚におけるエストロゲン受容体α（ＥＲベータ）は、部位特異的な局在性において発現する。毛髪パターニングおよび成長の調節に加えて、アンドロゲンは、皮脂腺の成長および分化、表皮バリアの恒常性および創傷治癒における効果を有し、エストロゲンは、皮膚の老化、色素沈着、毛髪の成長、皮脂産生、および皮膚癌を調節する（Ｏｈｎｅｍｕｓ  ｅｔ  ａｌ．，２００６，Ｅｎｄｏｃｒ  Ｒｅｖ．２７（６）：６７７−７０６，“Ｔｈｅ  ｈａｉｒ  ｆｏｌｌｉｃｌｅ  ａｓ  ａｎ  ｅｓｔｒｏｇｅｎ  ｔａｒｇｅｔ  ａｎｄ  ｓｏｕｒｃｅ．”）。
【０４８３】
特殊化したヒト毛包の位置は、生成された毛髪のタイプ（長さ、カール）を含む異なる特性ならびに生活および性ステロイドによる規制の間に出現／消失を強調する硬毛を生成するこれらの毛包の分類（表１および図１）を導入することを可能にする。この分類は、今後の研究によって正当化されない場合がある同じようなタイプのある男性および女性の毛包として一緒にグループ化することでいくつかの仮定を立てる。例えば、頭皮の毛髪を除いて、ヒトは思春期まで少量の目に見える毛のみを有し、思春期になると、陰部（肛門性器）および脇の下（腋窩）部位に特殊化した毛包は、硬毛を生成し始める。一部では、陰部および腋窩に特殊化した毛包は、男性および女性の両方でアンドロゲンのみに応答してそれらの活性を変化させ、女性陰部および腋窩部位における毛包は、アンドロゲンに非常に感受性が高いと考えられている。分類システムは、本明細書に記載される方法を用いて変更することができるヒトにおける特殊化した毛包の様々な独特の特徴を示すのに有用である。
【０４８４】
【表１】
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【０４８５】
思春期後、男性は、連続である比較的特徴的なパターンで（例えば、Ｈａｍｉｌｔｏｎ
Ｎｏｒｗｏｏｄスケールによって記載される；図８を参照のこと）、頭頂、頭頂部、および前頭部／頭頂部領域にわたって頭皮の毛髪を消失し始める。本明細書に記載される方法に従って治療することができるＨａｍｉｌｔｏｎ−Ｎｏｒｗｏｏｄスケールの異なる段階は以下の通りである：
Ｉ型は、青年期または若年期の生え際を示し、実際には禿げていない。青年期の生え際は、概して、上眉のしわにある。
ＩＩ型は、一部の側頭部の後退を有する上眉のしわ上の指幅（１．５ｃｍ）にある成人または老人の生え際への進行を示す。これもまた、禿げていることを意味しない。
ＩＩＩ型は、男性の毛髪脱落の最初期段階である。深化する側頭部の後退によって特徴付けられる。
ＩＩＩ型の頭頂は、頭頂部（頭頂）において早期毛髪脱落を示す。
ＩＶ型は、さらに前頭部の毛髪脱落および頭頂の拡大によって特徴付けられるが、前部と頭頂部を分ける上部にわたって頑丈な毛髪の束がまだある。
Ｖ型：前部および頭頂部の禿げた領域は、拡大し続け、２つの領域を分ける毛髪の橋梁の崩壊が始まる。
ＶＩ型は、連結する毛髪の橋梁が消失するとき、頭皮の前部および上部の単一の大きな禿げた領域を残す。頭皮の側部にある毛髪は比較的高い状態である。
ＶＩＩ型の患者は、広範囲におよぶ毛髪脱落を有し、わずかに毛髪の冠が頭皮の後部および側部にある状態である。
Ａ型のパターンは、通常のパターンよりもあまり一般的ではない（１０％未満）が、毛髪脱落が前部において最も著しいため、毛髪脱落が最小であっても患者が非常に禿げているように見えるという事実により深刻である。
【０４８６】
いくつかの実施形態では、女性型脱毛症のためのＬｕｄｗｉｇ分類のいかなる段階も、本明細書に記載される方法および治療剤によって治療することができる。Ｌｕｄｗｉｇ分類は、女性型遺伝的脱毛症を説明するために３つの段階：タイプＩ（軽度）、タイプＩＩ（中等度）、タイプＩＩＩ（極度）を使用する。全ての３つのＬｕｄｗｉｇ段階では、前頭部の生え際を相対的に維持する頭皮の前部および上部において毛髪脱落がある。背部および側部は、罹患している場合があるか、または罹患していない場合がある。毛髪脱落の程度にかかわらず、頭皮の背部および側部に安定した毛髪がある女性のみが毛髪移植手術の候補者である。いくつかの実施形態では、本明細書に記載される治療剤を使用して、Ｌｕｄｗｉｇ分類のタイプ１、タイプＩＩ、および／またはタイプＩＩＩの段階にある女性型遺伝的脱毛症を治療することができる。
【０４８７】
いくつかの実施形態では、女性型脱毛症のためのＳａｖｉｎスケールのいかなる段階も、本明細書に記載される方法および治療剤によって治療することができる。段階Ｉ−１では、毛髪脱落はない。Ｓａｖｉｎスケールの段階Ｉ−２、Ｉ−３、Ｉ−４では、分け目部分の幅が次第に広くなり、これは頭皮の中央部に沿って毛髪の菲薄化を示す。Ｓａｖｉｎスケールの段階ＩＩ−１およびＩＩ−２では、頭皮の上部にわたって毛髪のびまん性の菲薄化がある。Ｓａｖｉｎスケールの段階ＩＩＩでは、頭皮の上部の広範囲に及ぶびまん性の毛髪脱落があるが、一部の毛髪は生存している。Ｓａｖｉｎスケールの「進行した」段階では、広範囲に及ぶ毛髪脱落があり、脱毛症に罹患した領域において生存している毛髪がほとんどない。進行した段階に達する女性は極めて少なく、その場合は通常、顕著で異常に過剰なアンドロゲンホルモン生成を引き起こす状態にあるためである。Ｓａｖｉｎスケールの「前頭部強調（ｆｒｏｎｔａｌｌｙ  ａｃｃｅｎｔｕａｔｅｄ）」段階では、頭皮の単なる頭頂正中部ではなく毛髪の分け目の前部および中央部により多くの毛髪脱落がある。
【０４８８】
いくつかの実施形態では、女性型脱毛症のためのＳａｖｉｎスケールのいかなる段階も、本明細書に記載される方法および治療剤によって治療することができる。Ｏｌｓｅｎスケールは、毛髪脱落が前頭部領域により著しく、中央の毛髪部分で見たとき、後頭部に向かって毛髪脱落が徐々に少なくなる前頭部の強調パターンに基づいて、３段階に女性型脱毛症を等級分けする。Ｏｌｓｅｎスケールの段階１では、軽度から中等度の前頭部強調脱毛がある。Ｏｌｓｅｎスケールの段階２では、段階１よりもさらに重度である前頭部強調と、びまん性脱毛症との混合の両方である。Ｏｌｓｅｎスケールの段階３では、脱毛がとても重度であるため、主にびまん性の菲薄化のみが目に留まる。
【０４８９】
５．７．１  禿頭症、脱毛症、および毛髪の成長のための患者集団
本明細書に記載される１つ以上の方法による治療のための候補対象は、毛髪脱落、毛髪の菲薄化、禿頭症に罹患している、またはそれと関連する疾患もしくは状態を有するもしくは有していた、または毛髪の成長もしくは厚みが向上することを望んでいる任意の対象である。
【０４９０】
対象は、いかなる対象、好ましくは、男性、女性、中間／両性具有（例えばＸＯ）、性転換対象を含む、ヒト対象でもあり得る。ある特定の実施形態では、対象は、ヒト若者である。ある特定の実施形態では、対象は、思春期中である。ある特定の実施形態では、対象は、中高年の成人である。ある特定の実施形態では、対象は、閉経前の成人である。ある特定の実施形態では、対象は、更年期中である。ある特定の実施形態では、対象は、高齢者である。ある特定の実施形態では、対象は、１歳以下、２歳以下、２歳、５歳、５〜１０歳、１０〜１５歳、例えば１２歳、１５〜２０歳、２０〜２５歳、２５〜３０歳、３０歳、３０〜３５歳、３５歳以上、３５〜４０歳、４０歳以上、４０〜４５歳、４５〜５０歳、５０歳以上、５０〜５５歳、５５〜６０歳、６０歳以上、６０〜６５歳、例えば６５歳、６５〜７０歳、７０〜７５歳、７５〜８０歳、８０〜８５歳、８５〜９０歳、９０〜９５歳、または９５歳以上のヒトである。いくつかの実施形態では、対象は、２０〜５０歳の男性である。いくつかの実施形態では、対象は、２０〜６０歳の男性である。いくつかの実施形態では、対象は、３０〜６０歳の男性である。いくつかの実施形態では、対象は、４０〜６０歳の男性である。いくつかの実施形態では、対象は、１２〜４０歳の男性または女性である。いくつかの実施形態では、対象は、女性対象ではない。いくつかの実施形態では、対象は、妊娠していないか、または妊娠することが予期されない。いくつかの実施形態では、対象は、妊娠第一期の妊娠女性ではない。いくつかの実施形態では、対象は、授乳中ではない。
【０４９１】
一実施形態では、治療は、毛髪の成長が望ましい、例えば、頭皮、顔（例えば、眉、まつ毛、上唇、下唇、顎、頬、顎髭領域、または口髭領域）、または身体の別の部分、例えば、胸部、腹部、腕部、脇の下（脇毛の部位）、脚部、または生殖器等の領域に送達される。いくつかの実施形態では、治療剤は、頭部に送達される。いくつかの実施形態では、治療剤は、頭皮に送達される。いくつかの実施形態では、治療剤は、禿げつつある頭皮に送達される。一実施形態では、治療剤は、顔には送達されない。一実施形態では、治療剤は、通常、軟毛のみ、またはほとんど軟毛で覆われている皮膚の領域に送達されない。いくつかの実施形態では、皮膚の創傷したまたは瘢痕した部分への毛髪の回復が望ましい。一実施形態では、瘢痕は、顔の持ち上げ手術、皮膚移植術、または植毛術等の外科手術によって生じる。
【０４９２】
対象は、禿頭または毛髪脱落の疾患または障害（毛髪の菲薄化を含む）、ＭＰＨＬまたはＦＰＨＬ（例えば、毛髪の菲薄化、即ち、前頭部／頭頂部の頭皮におけるびまん性脱毛症）を含むアンドロゲン性脱毛症（ＡＧＡ）等の非瘢痕性（ｎｏｎｓｃａｒｒｉｎｇ、ｎｏｎｃｉｃａｔｒｉｃｉａｌ）脱毛症の形態、またはアンドロゲンによって引き起こされる任意の他の形態、中毒性脱毛症、円形脱毛症（全身性脱毛症を含む）、瘢痕性（ｓｃａｒｒｉｎｇ、ｃｉｃａｔｒｉｃｉａｌ）脱毛症、病理学的脱毛症（例えば、薬物、外傷ストレス、自己免疫疾患、栄養失調症、または内分泌機能不全により生じる）、抜毛癖、先天性貧毛症等の貧毛の形態、または毛孔性扁平苔癬、あるいは当該技術分野で公知のまたは以下に記載される毛髪脱落もしくは禿頭の任意の他の障害を有し得る。
【０４９３】
いくつかの実施形態では、対象は、アンドロゲン性脱毛症等の遺伝的または先天的疾患または障害によって引き起こされる毛髪脱落を有する。
【０４９４】
いくつかの実施形態では、対象は、化学療法（例えば、５−フルオロウラシル、メトトレキサート、シクロホスファミド、ビンクリスチン）中に生じるような成長期脱毛症によって引き起こされる毛髪脱落を有する。化学療法薬に加えて、成長期脱毛症は、他の毒素、放射線被爆（過剰被爆を含む）、内分泌疾患、外傷、苦痛、および円形脱毛症等のある種の疾患（成長期の毛包を攻撃する自己免疫疾患）によって引き起こされ得る。
【０４９５】
いくつかの実施形態では、対象は、休止期脱毛症によって引き起こされる毛髪脱落を有する。休止期脱毛症は、リチウムのような薬物ならびにバルプロ酸およびカルバマゼピンのような他の薬物によって頻繁に引き起こされる。精神科薬物に加えて、休止期脱毛症は、出産、摩擦、熱性疾患、外科手術、ストレス、または栄養不足によって誘発され得る。（Ｍｅｒｃｋｅ  ｅｔ  ａｌ．，２０００，Ａｎｎ．Ｃｌｉｎ．Ｐｓｙｃｈ．１２：３５−４２を参照のこと）。
【０４９６】
いくつかの実施形態では、対象は、化学療法（例えば、抗癌治療または細胞毒性薬）、タリウム化合物、ビタミン（例えばビタミンＡ）、レチノイド、抗ウイルス療法、または心理療法、放射線療法（過剰被爆によって生じ得る頭皮の毛髪脱落の横縞パターン等）、外傷、内分泌機能異常、外科手術、身体外傷、ｘ線による萎縮、ほてり、または他の損傷もしくは創傷、ストレス、老化、自己免疫疾患もしくは障害、栄養失調、感染症（例えば、慢性深部細菌もしくは真菌感染症を含む、真菌、ウイルス、もしくは細菌感染症）、皮膚炎、乾癬、アトピー性皮膚炎、妊娠、アレルギー、大病（例えば猩紅熱）、粘液水腫、下垂体機能低下症、初期梅毒、円板状紅斑性狼瘡、皮膚エリテマトーデス、扁平苔癬、深部人工的潰瘍、肉芽腫（例えば、サルコイドーシス、梅毒性ゴム腫、ＴＢ）、炎症性頭部白癬（禿瘡、黄癬）、頭皮のゆっくり増殖する腫瘍もしくは他の皮膚腫瘍、または当該技術分野で公知または以下に記載される禿頭症もしくは毛髪脱落と関連するまたはそれらを引き起こす任意の他の疾患もしくは障害のような薬剤によって引き起こされるまたはそれと関連する毛髪脱落を有する。
【０４９７】
いくつかの実施形態では、対象は、毛髪の菲薄化、または「異常損害（ｓｈｏｃｋ  ｌｏｓｓ）」、または毛髪移植術もしくは毛包単位の移植術のための組織もしくは毛包の源として優先使用によって生じた禿げた部分を有する。
【０４９８】
いくつかの実施形態では、候補対象は、毛髪の成長を増強する、例えば、より多くの毛髪、より迅速な毛髪の成長、より長い毛髪、および／またはより濃い毛髪を有することを望む対象である。いくつかの実施形態では、候補者は、毛髪の色素形成が増加することを望む対象である。いくつかの実施形態では、対象は、過度の毛髪脱落の状態によって影響を受けない。
【０４９９】
５．７．２  瘢痕性脱毛症
いくつかの実施形態では、対象は、瘢痕性（ｓｃａｒｒｉｎｇ、ｃｉｃａｔｒｉｃｉａｌ）脱毛症を有する。本明細書に記載される方法に従って治療され得る瘢痕性脱毛症の形態は、原発性瘢痕性脱毛症（ＰＣＡ）および続発性瘢痕性脱毛症を含む。本明細書に記載される方法に従って治療され得る原発性瘢痕性脱毛症には、毛孔性扁平苔癬（ＬＰＰ）、前頭部硬化性脱毛症（ＦＦＡ）、中央遠心瘢痕性脱毛症（ＣＣＣＡ）、および萎縮性脱毛症（Ｂｒｏｃｑ）等のリンパ球媒介性ＰＣＡ；脱毛性毛包炎および房状毛嚢炎等の好中球媒介性ＰＣＡ；ならびに解離性蜂巣炎および頭部乳頭状皮膚炎で生じるような混合炎症性浸潤を含むＰＣＡが含まれる。
【０５００】
いくつかの実施形態では、治療のための候補対象において、瘢痕性脱毛症によって罹患した領域は、もはや増加していない。いくつかの実施形態では、治療のための候補対象において、罹患領域にある毛髪脱落は、停止している。いくつかの実施形態では、治療のための候補対象は、条件と関連し得る炎症活動に対して臨床的に休止している。一実施形態では、リンパ球媒介性ＰＣＡに罹患している対象について、炎症は、病変の皮膚において検出されるように、例えば、モノクローナル抗体を用いて免疫ペルオキシダーゼ細胞表面を染色することによって、Ｔリンパ球および／またはＴリンパ球サブセットの数として測定される。別の実施形態では、リンパ球媒介性ＰＣＡに罹患している対象について、リンパ球性炎症（ケラチン生成細胞の壊死と共に見出され得る）は、頭皮の組織学的検査によって検出される。別の実施形態では、直接免疫蛍光染色法を利用して、罹患組織に蓄積する抗体を検出する。ある特定の実施形態では、頭皮の臨床評価は、炎症の臨床的休止を決定するために行われる。かゆみ、ほてり、疼痛、または圧痛の症状は、通常、活性が進行中であることを示す。頭皮の炎症の兆候には、赤み、落屑、および膿疱が含まれる。ある特定の実施形態では、頭皮の生検を行って、活動性の炎症またはその不在を示すことができる。ある特定の実施形態では、毛髪の「引張試験」を行って、毛包が容易に引っ張られる、したがって、炎症がなお継続中である活動性疾患の領域を特定する。引っ張られた毛髪を、スライド上に取り付け、毛球を、顕微鏡を用いて観察して、成長する毛髪が何本で、休止している毛髪が何本あるかを決定する。加えて、膿疱が存在する場合、培養を行って、微生物が、もしあれば、炎症に寄与され得ることを特定し得る。ある特定の実施形態では、対象は、毛髪が容易に引っ張られない場合、かゆみ、ほてり、疼痛、圧痛、赤み、落屑、および／または膿疱が罹患した領域に不在である場合、臨床的に休止している。
【０５０１】
いくつかの実施形態では、本明細書に記載される方法を使用して、瘢痕性脱毛症に罹患している患者において毛髪の成長を増強する。いくつかの実施形態では、患者は、続発性瘢痕性脱毛症を有する。いくつかの実施形態では、患者は、毛孔性扁平苔癬（ＬＰＰ）、前頭部硬化性脱毛症（ＦＦＡ）、中央遠心瘢痕性脱毛症（ＣＣＣＡ）、および萎縮性脱毛症（Ｂｒｏｃｑ）等のリンパ球媒介性ＰＣＡ；脱毛性毛包炎および房状毛嚢炎等の好中球媒介性ＰＣＡ；ならびに解離性蜂巣炎および頭部乳頭状皮膚炎で生じるような混合炎症性浸潤を含むＰＣＡのような原発性瘢痕性脱毛症の一形態を有する。
【０５０２】
瘢痕性脱毛症は、男性および女性の両方に影響を及ぼし、全ての年齢に影響を及ぼし得るが、最も一般的には、成人に影響を及ぼす。一般には、それらは稀である。ある家族において生じる瘢痕性脱毛症の数例の報告書がある。しかしながら、瘢痕性脱毛症に罹患している患者の大部分が同様の状態の家族暦がない。毛孔性扁平苔癬は、最も一般的には、中高年女性に影響を及ぼし得る。中央遠心脱毛症は、最も一般的には、黒人女性に影響を及ぼし得る。前頭部硬化性脱毛症は、最も一般的には、更年期後の女性に見られる。したがって、ある特定の実施形態では、本明細書に記載される対象に加えて、瘢痕性脱毛症の治療用の候補対象は、黒人女性（例えば、アフリカ系アメリカ人家系）、中高年女性、または更年期後の女性である。
【０５０３】
いくつかの実施形態では、本発明は、瘢痕性脱毛症に罹患している患者において毛髪の成長を増強するための方法を提供し、この方法には、フラクショナルアブレーションレーザーを用いた制御された外皮攪乱、続いて、１４日間、１日２回の育毛促進剤の局所投与が含まれる。ある特定の実施形態では、育毛促進剤治療は、レーザー処置と同日に開始される。ある特定の実施形態では、育毛促進剤による治療は、外皮攪乱と同日に開始され、３日間、４日間、５日間、６日間、７日間、８日間、９日間、１０日間、１１日間、１２日間、１３日間、１４日間、１５日間、１６日間、１７日間、１８日間、１９日間、２０日間、または２１日間、１日１回、２回、３回、４回、または５回継続される。
【０５０４】
具体的な実施形態では、本発明は、毛孔性扁平苔癬に罹患している患者において毛髪の成長を増強するための方法を提供し、この方法には、フラクショナルアブレーションレーザーを用いた制御された外皮攪乱、続いて、１４日間、１日２回の育毛促進剤の局所投与が含まれる。ある特定の実施形態では、育毛促進剤治療は、レーザー処置と同日に開始される。ある特定の実施形態では、育毛促進剤による治療は、外皮攪乱と同日に開始され、３日間、４日間、５日間、６日間、７日間、８日間、９日間、１０日間、１１日間、１２日間、１３日間、１４日間、１５日間、１６日間、１７日間、１８日間、１９日間、２０日間、または２１日間、１日１回、２回、３回、４回、または５回継続される。
【０５０５】
別の特定の実施形態では、本発明は、前頭部硬化性脱毛症に罹患している患者において毛髪の成長を増強するための方法を提供し、この方法には、フラクショナルアブレーションレーザーを用いた制御された外皮攪乱、続いて、１４日間、１日２回の育毛促進剤の局所投与が含まれる。ある特定の実施形態では、育毛促進剤治療は、レーザー処置と同日に開始される。ある特定の実施形態では、育毛促進剤による治療は、外皮攪乱と同日に開始され、３日間、４日間、５日間、６日間、７日間、８日間、９日間、１０日間、１１日間、１２日間、１３日間、１４日間、１５日間、１６日間、１７日間、１８日間、１９日間、２０日間、または２１日間、１日１回、２回、３回、４回、または５回継続される。
【０５０６】
５．７．２．１  瘢痕性脱毛症のための外皮攪乱および育毛促進剤治療
本明細書に記載される毛髪の成長を増強するための併用療法に加えて、以下のものは、瘢痕性脱毛症に罹患している患者において、毛髪の成長を増強するための外皮攪乱および育毛促進剤治療を含む例となる併用療法である。ある特定の実施形態では、併用療法は、特定の亜類型の瘢痕性脱毛症に対して特異的である。
【０５０７】
いくつかの実施形態では、瘢痕性脱毛症に罹患している患者において、毛髪の成長を増強するための併用療法は、任意に、項５．２に記載される攪乱後治療、項５．３に記載されるような育毛促進剤治療、および／または項５．４もしくは本明細書の他の箇所に記載されるもしくは当該技術分野で公知の１種以上のさらなる治療剤と組み合わせた、項５．１に記載されるような、外皮攪乱の一形態を含む。
【０５０８】
例えば、いくつかの実施形態では、皮膚の罹患領域は、非罹患領域からの毛包が移植される。いくつかの実施形態では、瘢痕毛包を含む組織を、非罹患毛包を含む皮膚の別の領域（例えば頭皮）からの組織と置換するための外科的技術が使用される。美容利点のための外科的処置は、例えば、疾患が１年から２年もしくはそれ以上休止しているような場合における選択肢である。毛髪修復手術または頭皮縮小は、これらの例において考慮され得る。したがって、いくつかの実施形態では、外皮攪乱は、植皮、周囲の皮膚の連続拡張、またはレーザー処置等の瘢痕修正の一形態である。いくつかの実施形態では、外皮攪乱は、瘢痕の再切除の一形態であり、その後、一次癒合、ステロイドによる治療（例えばコルチコステロイド注入）、シリコーン瘢痕治療（例えば、ジメチコーンシリコーンゲルまたはシリコーンシート）、ブタ充填剤または他の美容用充填剤（例えば萎縮性瘢痕下に挿入される）、リボソーム６キナーゼ（ＲＳＫ）アンタゴニスト、ＴＧＦβ２もしくはＴＮＦ等の炎症性サイトカインのアンタゴニスト、オステオポンチンアンタゴニストの使用、加圧服、穿刺、削皮術、コラーゲン注入、低線量の放射線療法、またはビタミン（例えば、ビタミンＥもしくはビタミンＣもしくはそのエステル）の使用によって治癒される。
【０５０９】
いくつかの実施形態では、瘢痕性脱毛症の治療のための外皮攪乱は、例えば、上の項５．１に記載されるような、瘢痕を軽減する創傷治癒を促進する手順により施行される。特定の実施形態では、瘢痕性脱毛症に罹患している患者のための併用療法には、フラクショナルアブレーションレーザーを用いた制御された外皮攪乱、続いて、１４日間、１日２回の育毛促進剤の局所投与が含まれる。ある特定の実施形態では、育毛促進剤治療は、レーザー処置と同日に開始される。一実施形態では、患者は、原発性瘢痕性脱毛症に罹患している。特定の実施形態では、患者は、毛孔性扁平苔癬または前頭部硬化性脱毛症に罹患している。
【０５１０】
いくつかの実施形態では、瘢痕性脱毛症に罹患している患者において毛髪の成長を増強するための併用療法は、任意に、育毛促進剤治療と共に、１種以上の抗炎症薬および抗マラリア薬と組み合わせた、外皮攪乱を含む。経口投与され得る薬剤には、ヒドロキシクロロキン、ドキシサイクリン、ミコフェノール酸モフェチル、シクロスポリン、またはコルチコステロイドが含まれる。局所的に投与され得る薬剤には、コルチコステロイド（例えば、ベータメタゾン、例えばＬｕｘｉｑ（登録商標）等）、タクロリムス、ピメクロリムス、またはＤｅｒｍａ−Ｓｍｏｏｔｈｅ／ＦＳ頭皮オイルが含まれる。注射によって投与され得る薬剤には、トリアムシノロンアセトニド（コルチコステロイド）が含まれ、これは頭皮の炎症を起こした症状を示す領域に注射され得る。特定の限定されない実施形態では、このような組み合わせは、毛孔性扁平苔癬、前頭部硬化性脱毛症、中央遠心脱毛症、および萎縮性脱毛症（Ｂｒｏｃｑ）を含む、リンパ球群の瘢痕性脱毛症に罹患している患者の治療に使用される。
【０５１１】
いくつかの実施形態では、瘢痕性脱毛症に罹患している患者において毛髪の成長を増強するための併用療法は、任意に、育毛促進剤治療と組み合わせた、経口または局所用抗生物質等の１種以上の抗生物質と組み合わせた、外皮攪乱を含む。いくつかの実施形態では、併用療法は、イソトレチノイン、メトトレキサート、タクロリムス、シクロスポリン、またはサリドマイド等の１種以上のレチノイドを含む。特定の限定されない実施形態では、このような組み合わせは、瘢痕性脱毛症（例えば、脱毛性毛包炎、房状毛嚢炎、および解離性蜂巣炎）の好中球群を有する患者において毛髪の成長を増強するのに使用され、成功的治療は、毛髪の成長を増強する一方、炎症プロセスに関与する微生物を減少または排除する。
【０５１２】
いくつかの実施形態では、混合群の瘢痕性脱毛症（例えば頭部乳頭状皮膚炎）に罹患している患者のための併用療法は、抗菌剤、イソトレチノイン、および抗炎症薬が含まれ得る。
【０５１３】
５．７．３  アンドロゲン性脱毛症
男性および女性の両方が、１２歳〜４０歳で始まる「菲薄化」と称される前頭部／頭頂部の頭皮におけるびまん性脱毛症を発症する。女性では、菲薄化は、「女性型脱毛症（ＦＰＨＬ）」として知られており、アンドロゲンによって引き起こされるか、または悪化する  （Ｐｒｉｃｅ  ＶＨ，２００３，Ｊ  Ｉｎｖｅｓｔｉｇ  Ｄｅｒｍａｔｏｌ  Ｓｙｍｐ  Ｐｒｏｃ．８（１）：２４−７，Ａｎｄｒｏｇｅｎｅｔｉｃ  ａｌｏｐｅｃｉａ  ｉｎ  ｗｏｍｅｎ）。
【０５１４】
５．７．４  男性型脱毛症（ＭＰＨＬ）
思春期後、男性は、連続である比較的特徴的なパターンで（例えば、Ｈａｍｉｌｔｏｎ
Ｎｏｒｗｏｏｄスケールによって記載される）、頭頂、頭頂部、および前頭部／頭頂部領域にわたって頭皮の毛髪を消失し始める。男性における頭皮の毛髪の消失は、ＭＰＨＬと呼ばれ、テストステロンのＤＨＴへの変換を阻害するフィナステライドによって阻害され得、ある程度、逆転され得るアンドロゲンのジヒドロテストステロン（ＤＨＴ）によって決定されるプロセスであることが知られている。ミノキシジルはまた、ＭＰＨＬを遅延または逆行させることもできる。
【０５１５】
５．７．５  老化
ヒトの老化は、プログラム化した毛髪パターニングをもたらす。後頭部頭皮の菲薄化を含むびまん性脱毛症は、老化により生じる。これは、早年からのアンドロゲン性脱毛症（ＭＰＨＬまたはＦＰＨＬ）の延長であり得るか、または体内のテストステロンおよびＤＨＴの量が減少しているとき、人生の後期数十年にでさえ始まり得る。
【０５１６】
閉経後の女性における毛髪脱落は、エストロゲンの消失（および／またはエストロゲン／アンドロゲン比率の減少）に関連すると考えられる。したがって、いくつかの実施形態では、加齢に関連した毛髪脱落のための本明細書に開示される併用療法は、１種以上の育毛促進剤による治療およびエストロゲン代償療法またはアンドロゲン阻害療法の組み合わせを含む。
【０５１７】
老化はまた、毛包の周期制御の変化をもたらす。男性では、眉毛が長く成長し、鼻孔の毛髪が長くなるのは、休止期および成長期の長さがもはや厳密に調節されなくなることを示唆している。つまり、加齢に伴って、硬毛を抑制する機能の消失がある。
【０５１８】
５．７．６  毛髪の色の変化
男性および女性の両方における毛髪の色の変化は、徐々に白髪になる（白髪の混在；白色の毛髪および黒色の毛髪）、およびより白髪になる。色の変化は、頭皮の毛髪が顎髭または体毛よりも早く変化するため、パターン化される。顎髭はまた、最終的に均一に白髪に変わる前（一般には、白髪と黒髪の混合）に、口髭ラインを追跡するパターンにおいて色を変化させ得る。これは、（毛包と関連するメラニン細胞により供給される）毛幹のメラニン含有量の減少によるものである。
【０５１９】
５．７．７  毛包細胞の性ホルモン感受性を調節する因子
サイトカインは、毛髪の成長のアンドロゲン調節の標的であると考えられる真皮乳頭の活性を調節する。インターロイキン−１αは、培養された皮膚乳頭細胞中のアンドロゲンに応答する（Ｂｏｉｖｉｎ  ｅｔ  ａｌ．，２００６，Ｅｘｐ  Ｄｅｒｍａｔｏｌ．１５：７８４−７９３）。ＴＧＦ−β１は、培養において、アンドロゲン受容体を過渡的に発現するアンドロゲン性脱毛症（ＡＧＡ）対象からのヒト皮膚乳頭細胞（ＤＰＣ）がケラチン生成細胞（ＫＣ）と共培養され、ＫＣ成長を阻害したＴＧＦ−β１を分泌したため、アンドロゲンに誘発された毛髪の成長の抑制を仲介し得る（Ｉｎｕｉ  ｅｔ  ａｌ．，２００３，Ｊ  Ｉｎｖｅｓｔｉｇ  Ｄｅｒｍａｔｏｌ  Ｓｙｍｐ  Ｐｒｏｃ．８：６９−７１）。
【０５２０】
ある特定の実施形態では、局所サイトカインのアジュバントおよび／または他の刺激剤は、１種以上の育毛促進剤による治療と組み合わせて使用される。いかなる理論によっても束縛されることなく、１種以上の育毛促進剤による治療と組み合わせた局所サイトカインのアジュバントおよび／または他の刺激剤を投与するための１つの理論的根拠は、毛包周期の変化を誘発し、毛包への新しいＦＳＣを採用し得ることである。
【０５２１】
メラトニンは、多くの種で毛髪の成長、色素沈着、および／または脱皮を調節する松果体によって分泌されるタンパク質ホルモンである。成長期におけるヒト頭皮の毛包は、余分な松果体メラトニン合成の重要な部位である。メラトニンはまた、エストロゲン受容体−α発現を阻害するため、毛包周期の制御を調節し得る（Ｆｉｓｃｈｅｒ  ｅｔ  ａｌ．，２００８，Ｐｉｎｅａｌ  Ｒｅｓ．４４：１−１５）。これらの治療は、本明細書に記載される方法と組み合わせて投与することができる。
【０５２２】
５．７．８  ヒト毛髪パターニングを遅延または逆転させるための治療
性ステロイドによってヒト毛髪パターニングの調整を考えると、ヒトは、交配および優性等の相互作用における社会的信号を提供するために毛髪のパターニングを進化させると考えられている。しかしながら、現在の流行は、多くの男性に男性ＭＰＨＬを予防する、遅延させる、または逆転させる動機を与える。
【０５２３】
女性もまた、例えば、女性において男性型の顔面および身体の毛髪をもたらし、これにより、毛髪の除去および軽減する動機を与える、多嚢胞性卵巣等のある条件のような様々な要因により毛髪の菲薄化および毛髪脱落に苦しんでいる。多くの女性はまた、例えば、老化のプロセスのような様々な要因から生じ得る「女性型禿頭症」の予防、遅延、または逆転を望む。
【０５２４】
５．８  治療の有効性を評価するための方法
５．８．１  毒性および有効性アッセイ
単独でまたは外皮攪乱と組み合わせた、本明細書に記載される育毛促進剤または他の薬物を含む組成物の毒性および／または有効性は、例えば、ＬＤ５０（集団の５０％が致死する用量）およびＥＤ５０（集団の５０％に治療的に有効な用量）を決定するために、細胞培養または実験動物における標準的薬学的手順によって決定することができる。毒性と治療効果の間の用量比は、治療指数として知られており、ＬＤ５０／ＥＤ５０比として表すことができる。大きな治療指数を示す投薬レジメンが好ましい。毒性副作用を示す投薬レジメンを使用してもよいが、他の組織への潜在的な損傷を最小限に抑え、それによって副作用を減少させるために、皮膚上の好ましい部位に本明細書に記載される育毛促進剤または他の薬物（例えば、局所製剤を用いて）を標的にする送達系を設計するように注意を払わなければならない。
【０５２５】
本明細書に記載されるインビトロアッセイおよび動物研究から得られたデータは、ヒト対象に用いる本明細書に記載される育毛促進剤または他の薬物の用量範囲を製剤化する際に使用することができる。本明細書に記載される育毛促進剤または他の薬物の投与量は、毒性がほとんどないまたは全くないＥＤ５０を含む皮膚濃度、あるいは血中濃度の範囲内にあることが好ましい。投与量は、使用される剤形および利用される投与経路によって異なるこの範囲内で変わり得る。本明細書に記載される方法による任意の治療については、治療的に有効な用量は、インビトロ（例えば細胞培養）アッセイまたは動物アッセイから最初に推定することができる。このような情報は、より正確にヒト対象における有用な用量を決定するために使用することができる。全血または血漿中レベルは、例えば、高速液体クロマトグラフィーまたは本明細書に記載される任意の他の方法によって測定することができる。皮膚のレベルは、例えば、本明細書に記載されるＬＣ／ＭＳ／ＭＳアッセイによって測定することができる。
【０５２６】
さらに、当業者に公知の任意のアッセイは、単独でまたは本明細書に記載される併用療法において、本明細書に記載される育毛促進剤または他の薬物による治療の有効性を評価するために使用することができる。
【０５２７】
５．８．２  インビトロモデル
皮膚外植片モデル。本明細書に記載される治療の有効性は、例えば、皮膚生検または他の外科的処置から調製された、皮膚外植片を用いて試験され得る。例えば、上記のＢａｌｌａｎｇｅｒらを参照のこと。
【０５２８】
ヒト皮膚同等物は、インビトロで成長させ、アセンブルすることができ、理論的には、いかなる大きさ／形状に成長させることができ、ケラチン生成細胞（毛包由来および非毛包由来）、真皮細胞（毛包由来および非毛包由来）、他の細胞型（例えば間葉幹細胞）を含む異なる種類の細胞から構成することができ、例えば、マーカーもしくは「誘導」シグナリング分子を含むように遺伝的に改変される細胞を含有することができ、ヒト細胞の無制限かつ均一の源を提供し、組織学およびマーカー研究に基づいた正常皮膚から、皮膚付属物が概してなく、インビボと同様に外皮攪乱することができるという利点を有する。
【０５２９】
５．８．３  動物モデル
ヒト皮膚および毛髪は、陸生哺乳動物の中でも比較的に独特な特長を持っている。第１に、ヒト皮膚の大部分が、肉眼では無毛に見えるが、他の陸生哺乳動物の大半は、本質的には目に見える毛髪で覆われている。第２に、目に見えるヒト毛髪は、空間的および時間的な成分を有するパターンにおいて出現したり、消失したりする。第３に、目に見えるヒト毛髪のパターンは、典型的に、男性および女性で異なる（性二形性を示す）。したがって、他の哺乳動物と比較して、ヒトは、異なる毛髪パターニングを有し、ヒトが毛髪の成長を調節し、ヒト毛髪パターニングを制御する対応する異なる分子、細胞、および組織機構を有することは明らかである。ヒト毛包新生の調節、活性化または再構成された毛包構造体の形成、および毛髪の成長に関与する他のプロセスは、ヒトに特有のものであり、そのため、他の動物は不十分なモデルである場合があり得ることを考慮する必要がある。しかしながら、本明細書に記載される治療は、この項に記載され、当該技術分野で公知の動物モデルを用いてヒトにおけるそれらの可能性のある使用について評価され得ることに留意されたい。例えば、２０１１年３月１７日に公開された国際特許出願公開第ＷＯ２０１１／０３１９９０号の、例えば、齧歯動物の削皮術および全層切除モデルを参照のこと。
【０５３０】
ある非ヒト霊長類はヒトとの毛髪パターニングの特長を共有することに留意すべきである。毛髪脱落の最も顕著かつ最大の発生は、青年期後の男性および女性における前頭部頭皮の脱毛症としてベリガオザル（Ｓｔｕｍｐ−ｔａｉｌｅｄ  Ｍａｃａｑｕｅ）において生じる。ベリガオザルおよびヒトにおける禿頭症の発症は、育毛促進剤の慢性局所投与によって両種において同様かつ部分的に可逆であるように思われる（Ｄｉａｎｉ  ｅｔ  ａｌ，１９９２，Ｊ  Ｃｌｉｎ  Ｅｎｄｏｃｒｉｎｏｌ  Ｍｅｔａｂ，７４：３４５−３５０を参照のこと）。旧世界猿（ゴリラおよびチンパンジー）は、目、鼻、および口の周辺の顔に、耳に、ならびに手および足の足底表面上に目に見える毛髪を欠いている皮膚の領域を有する。加えて、アカゲザルは、雄と雌ではパターン化した脱毛を有する。ゴリラは、有力な雄において色に対する毛髪パターニングを有する、即ち、「シルバーバック」である。ある種のこれらの機構はヒトとの同類性を共有するが、ヒトにおける毛髪パターニングの範囲および程度は比較的特有である。
【０５３１】
ヒト皮膚および毛髪の生物学をより綿密に模倣し得る処置を評価するのに用いる別の動物モデルがモルモットモデルである（Ｓｔｅｎｎ  ＆  Ｐａｕｓ，２００１，Ｐｈｙｓｉｏｌ．Ｒｅｖｓ．８１：４４９−４９４を参照のこと）。本明細書に記載される処置を評価するための方法は、当該技術分野で公知の方法に従ってモルモットに適用され得る。例えば、Ｋｒａｍｅｒ  ｅｔ  ａｌ．，１９９０，Ｄｅｒｍａｔｏｌ  Ｍｏｎａｔｓｓｃｈｒ  １７６：４１７−２０、およびＳｉｍｏｎ  ｅｔ  ａｌ．，１９８７，Ａｎｎ  Ｐｌａｓｔ  Ｓｕｒｇ  １９：５１９−２３も参照のこと。本明細書に記載される処置を評価するために用いてもよい他の動物モデルは、ブタ（例えばレッドデュロック（Ｒｅｄ  Ｄｕｒｏｃ））またはネコモデルである。
【０５３２】
動物モデルにおける毛髪の成長を改善することを目的とする処置の成功は、改善された全体の審美的成果；毛髪数の増加；毛髪密度の増加；毛髪もしくは毛幹の厚み（直径）の増加；毛髪重量の増加；毛髪の切断；より長い毛髪；硬毛の量の増加；軟毛の量の増加；硬毛と軟毛の比率の増加；非軟毛、例えば中間毛または硬毛の量の増加；毛包数の増加；発達のより成熟段階での毛包数の増加；３つ以上の毛包を有する毛包単位数の増加；毛包の分岐の増加；新しい毛包の形成（「毛包新生」）；軟毛サイズの毛幹（即ち、直径３０ミクロン未満の直径を有する毛幹）を有する新しい毛包の形成；毛包の再生；刺激を受けたまたは活性化した存在する毛包の増加；刺激を受けたまたは活性化した毛包数の増加；刺激を受けたまたは活性化した既存する毛包数の増加；対象の皮膚の治療領域における軟毛サイズの毛幹を有する既存する毛包数の増加；ＮＬ、ＰＥＬ、およびＰＥＬＡ毛包構造体の存在および／もしくはその数の増加；全体の毛髪密度が前述の非同期の毛髪の成長育毛と比較してより多いように思われるような毛包の同期化；成長期における毛包の割合の増加または休止期における毛包の割合の減少；皮膚乳頭の増殖の増加；幹細胞の毛包への動員または増殖の増加等によって測定することができる。
【０５３３】
当該技術分野で公知の任意の方法を使用して、本明細書に記載される治療の安全性および有効性を評価し得る。一実施形態では、ヒト皮膚異種移植片が使用される。例えば、１種以上の育毛促進剤が、本明細書に記載される全層切除、レーザー、炎症性刺激、または外皮攪乱のための削皮術処置で投与され得る。外皮攪乱治療、１種以上の育毛促進剤による治療、または本明細書に記載される別の治療の相乗効果は、２種以上の治療（例えば、外皮攪乱単独で、攪乱後治療を伴い、または伴わず、１種以上の育毛促進剤単独を伴い、または伴わず）のうちの１種のみを受容する対照対象にわたる改善として測定され得る。
【０５３４】
５．８．３．１  ヒト皮膚異種移植片モデル
毛包新生の予備的証拠は、免疫不全ＳＣＩＤマウスの背部上に移植されたヒト皮膚（顔の持ち上げ手術中に、髪の生え際から得られる）において示されている。このようなヒト皮膚異種移植片モデルは、本明細書に記載される治療の安全性および有効性を試験するのに有用である。
【０５３５】
当該技術分野で公知のヒト皮膚異種移植片を生成するための任意の方法、例えば、２０１１年３月１７日に公開された国際特許出願公開第ＷＯ２０１１／０３１９９０号（参照によってその全体が本明細書に組み込まれる）の１２７頁から始まる項２６に記載される方法を使用することができ、本明細書に記載される治療方法を試験するために適し得る。
【０５３６】
代替として、ヒト皮膚異種移植片（皮膚付属物のない）は、瘢痕と同様であると見なされ得、創傷され、次いで、薬理学的に治療して、毛髪の成長を誘発し得る。異種移植片はまた、誘発できる遺伝的に改変された細胞と組み合わせて、毛包を形成することを知っている経路を活性化することもできる。
【０５３７】
いくつかの実施形態では、本明細書に記載される治療の安全性および有効性は、全層または中間層ヒト皮膚異種移植片（例えば、瘢痕修正から；包皮から；または死体から外科的に得られる）において試験されるか、またはＳＣＩＤマウスにおける３次元器官型ヒト皮膚培養において試験され得る。
【０５３８】
５．８．４  ヒトにおける治療を評価するための方法
本明細書に記載される治療の安全性および有効性はまた、当該技術分野で公知の方法に従ってヒト対象において測定され得る。例えば、２００５年９月１５日に公開された国際特許出願公開第ＷＯ２００５／０８４６２１号（この内容は参照によってその全体が本明細書に組み込まれる）を参照のこと。
【０５３９】
当業者に公知の任意の方法を使用して、本明細書に記載される治療の成功を示すことができる。様々な実施形態では、脱毛症の治療、禿頭症の治療、または毛髪の成長の促進を目的とする治療の成功は、以下の方法のうちの１つ以上に従って測定することができる：改善された全体の審美的成果（例えば視覚アナログ尺度（ＶＡＳ）を用いて）
・毛髪の成長の患者の評価（例えば質問表に基づいて）
・患者における育毛の主治医の評価（例えば、評定尺度に基づいて）
・写真における育毛の患者の評価
患者の写真における育毛の主治医の評価
・毛髪の計数の増加（例えば、皮膚の罹患領域における繊維数の増加として新しい毛髪の成長を測定することによって）
・毛髪密度の増加
・毛髪または毛幹の厚みの増加（例えば直径に基づいて）
・毛髪重量の増加
・毛髪の切断
・より長い毛髪
・写真で検出された毛髪数の増加
・硬毛量の増加（例えば、皮膚の罹患領域における繊維数の増加、または厚み（例えば直径）の増加、または毛髪繊維の長さとして新しい毛髪の成長を測定することによって（例えば、写真で測定されるように））
・軟毛量の増加（例えば、皮膚の罹患領域における繊維数の増加として新しい毛髪の成長を測定することによって）（例えば写真で測定されるように）
・非軟毛、例えば、中間毛または硬毛量の増加（例えば写真で測定されるように）
・硬毛と軟毛の比率の増加
・毛芽数の増加
・毛包数の増加（例えば皮膚生検によって評価されるように）
・発達のより成熟段階での毛包数の増加
・３つ以上の毛包を有する毛包単位数の増加
・毛包の分岐の増加
・新しい毛包の形成（「毛包新生」）
・軟毛サイズの毛幹（即ち、直径３０ミクロン未満の直径を有する毛幹）を有する新しい毛包の形成
・非軟毛サイズの毛幹（即ち、直径３０ミクロン以上の直径を有する毛幹）を有する新しい毛包の形成
・毛包の再生
・存在する毛包の活性化の増加
・毛包数の増加
・活性化したまたは刺激を受けた毛包数の増加
・活性化したまたは刺激を受けた先在する毛包数の増加
・新遺伝子のような（ＮＬ）毛包の存在またはその数の増加（例えば、生検の試験に基づいてまたは共焦点顕微鏡によって、ベースラインもしくは陰性対照と比較して毛包数を評価することによって、および／または毛包の形態を評価することによって）
・先在する毛包の存在またはその数の増加（例えば、生検の試験に基づいてまたは共焦点顕微鏡によって、ベースラインもしくは陰性対照と比較して毛包数を評価することによって、および／または毛包の形態を評価することによって）
・ＮＬ、ＰＥＬ、および／またはＰＥＬＡ毛包構造体の存在またはその数の増加（例えば、生検の試験に基づいてまたは共焦点顕微鏡によって、ベースラインもしくは陰性対照と比較して毛包数を評価することによって、および／または毛包の形態を評価することによって、例えば５．８．４．１および５．８．４．２に記載されるように）
・対象の皮膚の治療領域における軟毛サイズの毛幹を有する先在する毛包数の増加
・対象の皮膚の治療領域における軟毛サイズの毛幹を有する新遺伝子のような毛包数の増加
・成長期の毛髪量の増加
・休止期の毛髪量の増加
・成長期の毛包の割合の増加または休止期の毛包の割合の減少（即ち、成長期の毛髪の休止期の毛髪に対する比率の増加）（例えば、生検の試験またはフォトトリコグラム法（ｐｈｏｔｏｔｒｉｃｈｏｇｒａｍ）に基づいて）
・皮膚乳頭の増殖の増加（例えば生検の試験に基づいて）
・幹細胞の毛包への動員または増殖の増加（例えば生検の試験に基づいて）。
【０５４０】
例えば、ある特定の実施形態では、治療の成功は、対象の皮膚の治療領域における毛包の試験によって評価される。ある特定の実施形態では、毛包は、組織学的に、または毛包の発達または形態のあるマーカーの存在または不在の決定によって試験される。試験のための皮膚の領域は、パンチ生検等の生検によって得られ得るか、代替としてまたは加えて、低侵襲的な方法で、皮膚は、例えば、共焦点顕微鏡または皮膚の表面下で画像化することが可能な他の技術によって直接分析され得る。一実施形態では、本明細書に記載される治療方法の成功は、例えば未治療の対照と比較して（または治療前のベースラインと比較して）、治療領域における毛包数の増加によって決定される。一実施形態では、本明細書に記載される治療方法の成功は、例えば未治療の対照と比較して（または治療前のベースラインと比較して）、新遺伝子のような（ＮＬ）毛包の存在またはその数の増加によって決定される。一実施形態では、本明細書に記載される治療方法の成功は、例えば未治療の対照と比較して（または治療前のベースラインと比較して）、先在するような（ＰＥＬ）または先在するような付着した（ＰＥＬＡ）毛包構造体等の活性化したまたは刺激を受けた先在する毛包の存在またはその数の増加によって決定される。一実施形態では、本明細書に記載される治療方法の成功は、例えば未治療の対照と比較して（または治療前のベースラインと比較して）、ＮＬ、ＰＥＬ、および／またはＰＥＬＡ毛包構造体の存在またはその数の増加によって決定される。
【０５４１】
いくつかのそのような実施形態では、本明細書に記載される治療レジメンは、毛包数を５％以上、１０％以上、１５％以上、２０％以上、２５％以上、３０％以上、４０％以上、５０％以上、７５％以上、または１００％以上増加させる。いくつかの実施形態では、本明細書に記載される外皮攪乱治療は、毛包数を５％以上、１０％以上、１５％以上、２０％以上、２５％以上、３０％以上、４０％以上、５０％以上、７５％以上、または１００％以上増加させる。いくつかの実施形態では、本明細書に記載される攪乱後治療と組み合わせた外皮攪乱治療は、毛包数を５％以上、１０％以上、１５％以上、２０％以上、２５％以上、３０％以上、４０％以上、５０％以上、７５％以上、または１００％以上増加させる。いくつかの実施形態では、本明細書に記載される１種以上の育毛促進剤と組み合わせた外皮攪乱治療（任意に、本明細書に記載される攪乱後治療による）は、毛包数を５％以上、１０％以上、１５％以上、２０％以上、２５％以上、３０％以上、４０％以上、５０％以上、７５％以上、または１００％以上増加させる。
【０５４２】
いくつかのそのような実施形態では、本明細書に記載される治療レジメンは、活性化したまたは刺激を受けた毛包（例えば、ＮＬ、ＰＥＬ、もしくはＰＥＬＡ毛包構造体）数を５％以上、１０％以上、１５％以上、２０％以上、２５％以上、３０％以上、４０％以上、５０％以上、７５％以上、または１００％以上増加させる。いくつかの実施形態では、本明細書に記載される外皮攪乱治療は、活性化したまたは刺激を受けた毛包（例えば、ＮＬ、ＰＥＬ、もしくはＰＥＬＡ毛包構造体）数を、５％以上、１０％以上、１５％以上、２０％以上、２５％以上、３０％以上、４０％以上、５０％以上、７５％以上、または１００％以上増加させる。いくつかの実施形態では、本明細書に記載される攪乱後治療と組み合わせた外皮攪乱治療は、活性化したまたは刺激を受けた毛包（例えば、ＮＬ、ＰＥＬ、もしくはＰＥＬＡ毛包構造体）数を、５％以上、１０％以上、１５％以上、２０％以上、２５％以上、３０％以上、４０％以上、５０％以上、７５％以上、または１００％以上増加させる。いくつかの実施形態では、本明細書に記載される１種以上の育毛促進剤による治療と組み合わせた外皮攪乱治療（任意に、本明細書に記載される攪乱後治療による）は、活性化したまたは刺激を受けた毛包（例えば、ＮＬ、ＰＥＬ、もしくはＰＥＬＡ毛包構造体）数を、５％以上、１０％以上、１５％以上、２０％以上、２５％以上、３０％以上、４０％以上、５０％以上、７５％以上、または１００％以上増加させる。
【０５４３】
特定の前述の実施形態では、毛包、活性化したもしくは刺激を受けた毛包、および／またはＮＬ、ＰＥＬ、もしくはＰＥＬＡ構造体の数の増加は、治療領域、例えば、外皮攪乱により治療された皮膚の領域内で観察される。他の実施形態では、毛包、活性化したもしくは刺激を受けた毛包、および／またはＮＬ、ＰＥＬ、もしくはＰＥＬＡ構造体の数の増加は、治療領域に隣接して観察される。他の実施形態では、毛包、活性化したもしくは刺激を受けた毛包、および／またはＮＬ、ＰＥＬ、もしくはＰＥＬＡ構造体の数の増加は、治療領域内およびそれに隣接して観察される。
【０５４４】
ある特定の実施形態では、前述に従って毛包の測定は、治療レジメンの開始から３日間、または４日間、５日間、６日間、７日間、８日間、９日間、１０日間、１１日間、１２日間、１３日間、１４日間、１５日間、１６日間、１７日間、１８日間、３週間、４週間、または１ヶ月間以内もしくはそれ以上である。一実施形態では、前述に従って毛包の測定は、治療レジメンの開始から３日間、４日間、５日間、６日間、７日間、８日間、９日間、１０日間、１１日間、１２日間、１３日間、１４日間、１５日間、１６日間、１７日間、１８日間、３週間、４週間、または１ヶ月間以内もしくはそれ以上で得られた皮膚生検に基づく。特定の実施形態では、前述に従って毛包の測定は、治療レジメンの開始から１１日間、１２日間、１３日間、１４日間、または１５日間である。特定の実施形態では、前述に従って毛包の測定は、治療レジメンの開始から１１日間、１２日間、１３日間、１４日間、または１５日間で得られた皮膚生検に基づく。
【０５４５】
特定の実施形態では、前述に従って毛包の測定は、外皮攪乱（任意に、攪乱後治療と組み合わせて）方法の成功を評価するための手段を提供する。例示的な限定されない実施形態では、外皮攪乱方法の成功は、例えば、外皮攪乱ステップに供されなかった皮膚領域と比較して、外皮攪乱に供された皮膚領域内の全毛包の測定された増加に基づいて決定される。別の実施形態では、外皮攪乱方法の成功は、例えば、外皮攪乱ステップに供されなかった皮膚領域と比較して、外皮攪乱に供された皮膚領域内のＮＬ、ＰＥＬ、もしくはＰＥＬＡ毛包構造体等の活性化したまたは刺激を受けた毛包の測定された増加に基づいて決定される。毛包（または活性化したもしくは刺激を受けた毛包）の所望の増加が観察されない一実施形態では、この治療は中断される。毛包（または活性化したもしくは刺激を受けた毛包）の所望の増加が観察されない別の実施形態では、外皮攪乱が繰り返される。毛包（または活性化したもしくは刺激を受けた毛包）の所望の増加が観察されない別の実施形態では、外皮攪乱は、異なる方法（例えば、非機械的な手段から機械的な手段への変更もしくはその逆、またはレーザーから削皮術への変更もしくはその逆、または炎症剤を用いた化学的攪乱への変更）を用いて反復される。毛包（または活性化したもしくは刺激を受けた毛包）の所望の増加が観察されない一実施形態では、外皮攪乱が繰り返されるが、例えば、この深さを１０、２０、３０、４０、５０、６０、７０、８０、９０、または１００ミクロンもしくはそれ以上増加させてより深い皮膚の深さまで行う。
【０５４６】
別の特定の実施形態では、前述に従って毛包の測定は、本明細書に記載される方法による、対象が治療用の候補者であるかどうか、または治療を継続するべきかどうかを評価するための手段を提供する。例示的な限定されない実施形態では、例えば、外皮攪乱ステップに供されなかった皮膚領域と比較して、（任意に、攪乱後治療と組み合わせて）外皮攪乱に供された皮膚領域内の全毛包の測定された増加に基づいて候補資格が確立される。別の実施形態では、例えば、外皮攪乱ステップに供されなかった皮膚領域と比較して、（任意に、攪乱後治療と組み合わせて）外皮攪乱に供された皮膚領域内のＮＬ、ＰＥＬ、もしくはＰＥＬＡ毛包構造体等の活性化した毛包の測定された増加に基づいて候補資格が確立される。毛包（または活性化した毛包）の所望の増加が観察されない一実施形態では、その特定の対象の治療は中断される。毛包（または活性化した毛包）の所望の増加が観察されない別の実施形態では、外皮攪乱が繰り返される。毛包（または活性化した毛包）の所望の増加が観察されない別の実施形態では、外皮攪乱は、異なる方法（例えば、非機械的な手段から機械的な手段への変更もしくはその逆、またはレーザーから削皮術への変更もしくはその逆、または炎症剤を用いた化学的攪乱への変更）を用いて反復される。毛包（または活性化した毛包）の所望の増加が観察されない一実施形態では、外皮攪乱が繰り返されるが、例えば、皮膚深さを１０、２０、３０、４０、５０、６０、７０、８０、９０、または１００ミクロン以上増加させてより深い皮膚の深さまで行う。一実施形態では、ある治療方法が、皮膚の小さな面積（例えば、１×１ｃｍ、または１．５×１．５ｃｍ、または２×２ｃｍ、または２．５×２．５ｃｍ、または３×３ｃｍ以上）にわたって行われ、毛包がこれらの方法に従って測定され、候補資格が確立される場合、その治療方法が、より大きな皮膚領域、例えば、頭皮の禿げ領域全体等の皮膚のより大きな面積にわたって実行される。
【０５４７】
いくつかの実施形態では、本明細書に記載される治療レジメンは、成長期と休止期の比率を、５％以上、１０％以上、１５％以上、２０％以上、２５％以上、３０％以上、４０％以上、５０％以上、７５％以上、または１００％以上増加させる。いくつかの実施形態では、本明細書に記載される外皮攪乱治療は、成長期と休止期の比率を、５％以上、１０％以上、１５％以上、２０％以上、２５％以上、３０％以上、４０％以上、５０％以上、７５％以上、または１００％以上増加させる。いくつかの実施形態では、本明細書に記載される攪乱後治療と組み合わせた外皮攪乱治療は、成長期と休止期の比率を、５％以上、１０％以上、１５％以上、２０％以上、２５％以上、３０％以上、４０％以上、５０％以上、７５％以上、または１００％以上増加させる。いくつかの実施形態では、本明細書に記載される１種以上の育毛促進剤による治療と組み合わせた外皮攪乱治療（任意に、本明細書に記載される攪乱後治療による）は、成長期と休止期の比率を、５％以上、１０％以上、１５％以上、２０％以上、２５％以上、３０％以上、４０％以上、５０％以上、７５％以上、または１００％以上増加させる。成長期と休止期の比率のそのような増加は、治療レジメンの開始から１ヶ月、２ヶ月、３ヶ月、４ヶ月、５ヶ月、６ヶ月、７ヶ月、８ヶ月、９ヶ月、１０ヶ月、１１ヶ月、または１年間以内またはその後、またはそれより長く測定され得る。
【０５４８】
ある特定の実施形態では、治療の成功は、皮膚の治療領域内の毛髪数を測定することによって評価される。例えば、検出可能な毛髪は、例えば、広範囲の写真記録またはフォトトリクログラフィック（ｐｈｏｔｏｔｒｉｃｈｏｇｒａｐｈｉｃ）分析（例えば、Ｕｎｏ
ｅｔ  ａｌ．，２００２，Ａｃｔａ  Ｖｅｎｅｒｅｏｌ  ８２：７−１２（参照によって本明細書に組み込まれる）に記載される）による写真によって定量化され得る。さらに、写真で検出可能な毛髪の毛幹の厚みの変化を判定することができる。ある特定の実施形態では、毛髪の成長の耐久性は、少なくとも２ヶ月、３ヶ月、４ヶ月、５ヶ月、６ヶ月、７ヶ月、８ヶ月、９ヶ月、１０ヶ月、１１ヶ月、１年、１．５年、２年、２．５年、３年、４年、または少なくとも５年以上の期間にわたってモニタリングされる。
【０５４９】
いくつかの実施形態では、本明細書に記載される治療レジメンは、毛髪数を、５％以上、１０％以上、１５％以上、２０％以上、２５％以上、３０％以上、４０％以上、５０％以上、７５％以上、または１００％以上増加させる。いくつかの実施形態では、本明細書に記載される治療レジメンは、軟毛を、５％以上、１０％以上、１５％以上、２０％以上、２５％以上、３０％以上、４０％以上、５０％以上、７５％以上、または１００％以上増加させる。いくつかの実施形態では、本明細書に記載される治療レジメンは、硬毛を、５％以上、１０％以上、１５％以上、２０％以上、２５％以上、３０％以上、４０％以上、５０％以上、７５％以上、または１００％以上増加させる。いくつかの実施形態では、本明細書に記載される治療レジメンは、１〜５％、５〜１０％、１０〜１５％、１５〜２０％、２０〜２５％、２５〜３０％、３０〜３５％、３５〜４０％、４０〜４５％、４５〜５０％、５０〜７５％、または７５〜１００％の軟毛の非軟毛（即ち、中間毛または硬毛）への変換をもたらす。いくつかの実施形態では、本明細書に記載される治療レジメンは、毛髪の厚みを、５％以上、１０％以上、１５％以上、２０％以上、２５％以上、３０％以上、４０％以上、５０％以上、７５％以上、または１００％以上増加させる。いくつかの実施形態では、本明細書に記載される治療レジメンは、毛幹の直径を、約１、２、２．５、３、３．５、４、４．５、５、５．５、６、６．５、７、７．５、８、８．５、９、１０、１５、２０、２５、または３０ミクロンもしくはそれ以上増加させる。いくつかの実施形態では、本明細書に記載される治療レジメンは、毛幹の平均直径を、５％以上、１０％以上、１５％以上、２０％以上、２５％以上、３０％以上、４０％以上、５０％以上、７５％以上、または１００％以上増加させる。いくつかの実施形態では、本明細書に記載される治療レジメンは、１〜５％、５〜１０％、１０〜１５％、１５〜２０％、２０〜２５％、２５〜３０％、３０〜３５％、３５〜４０％、４０〜４５％、４５〜５０％、５０〜７５％、または７５〜１００％の毛幹の平均直径の増加をもたらす。いくつかの実施形態では、本明細書に記載される治療レジメンは、硬毛毛包と軟毛毛包の比率を、５％以上、１０％以上、１５％以上、２０％以上、２５％以上、３０％以上、４０％以上、５０％以上、７５％以上、または１００％以上増加させる。毛髪数、軟毛、硬毛、軟毛の非軟毛（例えば、中間毛または硬毛）への変換、毛髪の厚み、毛幹直径、または硬毛と軟毛の比率におけるそのような改善は、治療レジメンの開始から１ヶ月、２ヶ月、３ヶ月、４ヶ月、５ヶ月、６ヶ月、７ヶ月、８ヶ月、９ヶ月、１０ヶ月、１１ヶ月、または１年間以内またはその後、またはそれ以上長く測定され得る。
【０５５０】
いくつかの実施形態では、本明細書に記載される外皮攪乱治療は、毛髪数を、５％以上、１０％以上、１５％以上、２０％以上、２５％以上、３０％以上、４０％以上、５０％以上、７５％以上、または１００％以上増加させる。いくつかの実施形態では、本明細書に記載される外皮攪乱治療は、軟毛を、５％以上、１０％以上、１５％以上、２０％以上、２５％以上、３０％以上、４０％以上、５０％以上、７５％以上、または１００％以上増加させる。いくつかの実施形態では、本明細書に記載される外皮攪乱治療は、硬毛を、５％以上、１０％以上、１５％以上、２０％以上、２５％以上、３０％以上、４０％以上、５０％以上、７５％以上、または１００％以上増加させる。いくつかの実施形態では、本明細書に記載される外皮攪乱治療は、１〜５％、５〜１０％、１０〜１５％、１５〜２０％、２０〜２５％、２５〜３０％、３０〜３５％、３５〜４０％、４０〜４５％、４５〜５０％、５０〜７５％、または７５〜１００％の軟毛の非軟毛（即ち、中間毛または硬毛）への変換をもたらす。いくつかの実施形態では、本明細書に記載される外皮攪乱治療は、毛髪の厚みを、５％以上、１０％以上、１５％以上、２０％以上、２５％以上、３０％以上、４０％以上、５０％以上、７５％以上、または１００％以上増加させる。いくつかの実施形態では、本明細書で外皮攪乱治療は、毛幹の直径を、約１、２、２．５、３、３．５、４、４．５、５、５．５、６、６．５、７、７．５、８、８．５、９、１０、１５、２０、２５、または３０ミクロンもしくはそれ以上増加させる。いくつかの実施形態では、本明細書に記載される外皮攪乱治療は、毛幹の直径を、５％以上、１０％以上、１５％以上、２０％以上、２５％以上、３０％以上、４０％以上、５０％以上、７５％以上、または１００％以上増加させる。いくつかの実施形態では、本明細書に記載される外皮攪乱治療は、硬毛毛包と軟毛毛包の比率を、５％以上、１０％以上、１５％以上、２０％以上、２５％以上、３０％以上、４０％以上、５０％以上、７５％以上、または１００％以上増加させる。毛髪数、軟毛、硬毛、軟毛の非軟毛（例えば、中間毛または硬毛）への変換、毛髪の厚み、毛幹直径、または硬毛と軟毛の比率におけるそのような改善は、治療レジメンの開始から１ヶ月、２ヶ月、３ヶ月、４ヶ月、５ヶ月、６ヶ月、７ヶ月、８ヶ月、９ヶ月、１０ヶ月、１１ヶ月、または１年間以内またはその後、またはそれ以上長く測定され得る。
【０５５１】
いくつかの実施形態では、本明細書に記載される攪乱後治療と組み合わせた外皮攪乱治療は、毛髪数を、５％以上、１０％以上、１５％以上、２０％以上、２５％以上、３０％以上、４０％以上、５０％以上、７５％以上、または１００％以上増加させる。いくつかの実施形態では、本明細書に記載される攪乱後治療と組み合わせた外皮攪乱治療は、軟毛を、５％以上、１０％以上、１５％以上、２０％以上、２５％以上、３０％以上、４０％以上、５０％以上、７５％以上、または１００％以上増加させる。いくつかの実施形態では、本明細書に記載される攪乱後治療と組み合わせた外皮攪乱治療は、硬毛を、５％以上、１０％以上、１５％以上、２０％以上、２５％以上、３０％以上、４０％以上、５０％以上、７５％以上、または１００％以上増加させる。いくつかの実施形態では、本明細書に記載される攪乱後治療と組み合わせた外皮攪乱治療は、１〜５％、５〜１０％、１０〜１５％、１５〜２０％、２０〜２５％、２５〜３０％、３０〜３５％、３５〜４０％、４０〜４５％、４５〜５０％、５０〜７５％、または７５〜１００％の軟毛の非軟毛（即ち、中間毛または硬毛）への変換をもたらす。いくつかの実施形態では、本明細書に記載される攪乱後治療と組み合わせた外皮攪乱治療は、毛髪の厚みを、５％以上、１０％以上、１５％以上、２０％以上、２５％以上、３０％以上、４０％以上、５０％以上、７５％以上、または１００％以上増加させる。いくつかの実施形態では、本明細書に記載される攪乱後治療と組み合わせた外皮攪乱治療は、毛幹の直径を、約１、２、２．５、３、３．５、４、４．５、５、５．５、６、６．５、７、７．５、８、８．５、９、１０、１５、２０、２５、または３０ミクロンもしくはそれ以上増加させる。いくつかの実施形態では、本明細書に記載される攪乱後治療と組み合わせた外皮攪乱治療は、毛幹の直径を、５％以上、１０％以上、１５％以上、２０％以上、２５％以上、３０％以上、４０％以上、５０％以上、７５％以上、または１００％以上増加させる。いくつかの実施形態では、本明細書に記載される攪乱後治療と組み合わせた外皮攪乱治療は、硬毛毛包と軟毛毛包の比率を、５％以上、１０％以上、１５％以上、２０％以上、２５％以上、３０％以上、４０％以上、５０％以上、７５％以上、または１００％以上増加させる。毛髪数、軟毛、硬毛、軟毛の非軟毛（例えば、中間毛または硬毛）への変換、毛髪の厚み、毛幹直径、または硬毛と軟毛の比率におけるそのような改善は、治療レジメンの開始から１ヶ月、２ヶ月、３ヶ月、４ヶ月、５ヶ月、６ヶ月、７ヶ月、８ヶ月、９ヶ月、１０ヶ月、１１ヶ月、または１年間以内またはその後、またはそれ以上長く測定され得る。
【０５５２】
いくつかの実施形態では、本明細書に記載される１種以上の育毛促進剤による治療と組み合わせた外皮攪乱治療（任意に、本明細書に記載される攪乱後治療による）は、毛髪数を、５％以上、１０％以上、１５％以上、２０％以上、２５％以上、３０％以上、４０％以上、５０％以上、７５％以上、または１００％以上増加させる。いくつかの実施形態では、本明細書に記載される１種以上の育毛促進剤による治療と組み合わせた外皮攪乱治療（任意に、本明細書に記載される攪乱後治療による）は、軟毛を、５％以上、１０％以上、１５％以上、２０％以上、２５％以上、３０％以上、４０％以上、５０％以上、７５％以上、または１００％以上増加させる。いくつかの実施形態では、本明細書に記載される１種以上の育毛促進剤による治療と組み合わせた外皮攪乱治療（任意に、本明細書に記載される攪乱後治療による）は、硬毛を、５％以上、１０％以上、１５％以上、２０％以上、２５％以上、３０％以上、４０％以上、５０％以上、７５％以上、または１００％以上増加させる。いくつかの実施形態では、本明細書に記載される１種以上の育毛促進剤による治療と組み合わせた外皮攪乱治療（任意に、本明細書に記載される攪乱後治療による）は、１〜５％、５〜１０％、１０〜１５％、１５〜２０％、２０〜２５％、２５〜３０％、３０〜３５％、３５〜４０％、４０〜４５％、４５〜５０％、５０〜７５％、または７５〜１００％の軟毛の非軟毛（即ち、中間毛または硬毛）への変換をもたらす。いくつかの実施形態では、本明細書に記載される１種以上の育毛促進剤による治療と組み合わせた外皮攪乱治療（任意に、本明細書に記載される攪乱後治療による）は、毛髪の厚みを、５％以上、１０％以上、１５％以上、２０％以上、２５％以上、３０％以上、４０％以上、５０％以上、７５％以上、または１００％以上増加させる。いくつかの実施形態では、本明細書に記載される治療レジメンは、毛幹の直径を、約１、２、２．５、３、３．５、４、４．５、５、５．５、６、６．５、７、７．５、８、８．５、９、１０、１５、２０、２５、または３０ミクロンもしくはそれ以上増加させる。いくつかの実施形態では、本明細書に記載される１種以上の育毛促進剤による治療と組み合わせた外皮攪乱治療（任意に、本明細書に記載される攪乱後治療による）は、毛幹の直径を、５％以上、１０％以上、１５％以上、２０％以上、２５％以上、３０％以上、４０％以上、５０％以上、７５％以上、または１００％以上増加させる。いくつかの実施形態では、本明細書に記載される１種以上の育毛促進剤による治療と組み合わせた外皮攪乱治療（任意に、本明細書に記載される攪乱後治療による）は、硬毛毛包と軟毛毛包の比率を、５％以上、１０％以上、１５％以上、２０％以上、２５％以上、３０％以上、４０％以上、５０％以上、７５％以上、または１００％以上増加させる。毛髪数、軟毛、硬毛、軟毛の非軟毛（例えば、中間毛または硬毛）への変換、毛髪の厚み、毛幹直径、または硬毛と軟毛の比率におけるそのような改善は、治療レジメンの開始から１ヶ月、２ヶ月、３ヶ月、４ヶ月、５ヶ月、６ヶ月、７ヶ月、８ヶ月、９ヶ月、１０ヶ月、１１ヶ月、または１年間以内またはその後、またはそれ以上長く測定され得る。
【０５５３】
特定の前述の実施形態では、毛髪数、軟毛、硬毛、軟毛の非軟毛（例えば、中間毛または硬毛）への変換、毛髪の厚み、毛幹直径、および／または硬毛の軟毛に対する比率の増加は、治療領域、例えば、外皮攪乱により治療された皮膚領域内に観察される。他の実施形態では、毛髪数、軟毛、硬毛、軟毛の非軟毛（例えば、中間毛または硬毛）への変換、毛髪の厚み、毛幹直径、および／または硬毛と軟毛の比率の増加は、治療領域に隣接して観察される。他の実施形態では、毛髪数、軟毛、硬毛、軟毛の非軟毛（例えば、中間毛または硬毛）への変換、毛髪の厚み、毛幹直径、および／または硬毛と軟毛の比率の増加は、治療領域内およびそこに隣接して観察される。
【０５５４】
本明細書に記載される（例えば、項５．１、項５．２、項５．３、および／または項５．４に記載される）１つまたは２つまたは３つまたは４つもしくはそれ以上の治療の組み合わせの相乗効果は、より少ない治療を受容している制御対象（または同じ対象における制御皮膚領域）にわたる改善として測定され得る。ある特定の実施形態では、１年間以上、８ヶ月、６ヶ月間、３ヶ月間、２ヶ月間、１ヶ月間、３週間、２週間、１週間、または外皮攪乱前のわずかな期間の育毛促進剤による治療は、外皮攪乱治療（単独で、または本明細書に記載される他の治療と組み合わせて）の有効性を増大させる。ある特定の実施形態では、１年間以上、８ヶ月、６ヶ月間、３ヶ月間、２ヶ月間、１ヶ月間、３週間、２週間、１週間、または外皮攪乱前のわずかな期間またはより長期間の育毛促進剤による治療は、外皮攪乱治療（単独で、または本明細書に記載される他の治療と組み合わせて）の有効性を増大させる。特定の実施形態では、外皮攪乱による単独治療（または本明細書に記載される他の治療と組み合わせて）と比較して、外皮攪乱（単独で、または本明細書に記載される他の治療と組み合わせて）による治療、続いて、本明細書に記載される育毛促進剤による治療の増大した有効性は、非軟毛および軟毛の数の増加として測定される。より特定の実施形態では、外皮攪乱による単独治療（または本明細書に記載される他の治療と組み合わせて）と比較して、外皮攪乱（単独で、または本明細書に記載される他の治療と組み合わせて）による治療、続いて、本明細書に記載される育毛促進剤による治療の増大した有効性は、非軟毛および軟毛の数の増加として測定される。
【０５５５】
特定の実施形態では、前述に従って毛包の測定は、本明細書に記載される方法による、対象が治療用の候補者であるかどうか、または治療を継続するべきかどうかを評価するための手段を提供する。そのような測定は、治療レジメンの開始から１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、または１２ヶ月もしくはそれ以上の後、または治療レジメンの特定のステップの開始後であり得る。一実施形態では、そのような測定は、外皮攪乱ステップから２、３、または４ヶ月後である。例示的な限定されない実施形態では、例えば、１つまたは複数の治療ステップに供されなかった皮膚領域と比較して、（任意に、攪乱後治療と組み合わせて、任意に１種以上の育毛促進剤の治療と組み合わせて）外皮攪乱に供された皮膚領域内の毛髪（例えば、全毛髪、軟毛、または非軟毛）の測定された増加に基づいて候補資格が確立される。別の実施形態では、例えば、外皮攪乱ステップに供されなかった皮膚領域と比較して、（任意に、攪乱後治療と組み合わせて、任意に１種または複数の育毛促進剤の治療と組み合わせて）外皮攪乱に供された皮膚領域内の毛髪（例えば、全毛髪、軟毛、または非軟毛）の測定された増加に基づいて候補資格が確立される。毛髪の所望の増加が観察されない一実施形態では、その特定の対象の治療は中断される。毛髪の所望の増加が観察されない別の実施形態では、外皮攪乱および／または攪乱後治療および／または１種または複数の育毛促進剤による治療が繰り返される。毛髪の所望の増加が観察されない別の実施形態では、外皮攪乱は、異なる方法（例えば、非機械的な手段から機械的な手段への変更もしくはその逆、またはレーザーから削皮術への変更もしくはその逆、または炎症剤を用いた化学的攪乱への変更）を用いて反復される。毛髪の所望の増加が観察されない一実施形態では、外皮攪乱が繰り返されるが、例えば、皮膚深さを１０、２０、３０、４０、５０、６０、７０、８０、９０、または１００ミクロンもしくはそれ以上増加させてより深い皮膚の深さまで行う。毛髪の所望の増加が観察されない一実施形態では、対象は、攪乱後治療剤、例えば、炎症剤または毛包発達の薬理学的モジュレータを含む局所組成物に変更される。毛髪の所望の増加が観察されない一実施形態では、対象は、異なる育毛促進剤の治療、例えば、薬剤の用量の増加、または異なる薬剤による治療（例えば、ミノキシジルからフィナステライドへの変更もしくはその逆、またはミノキシジルからラタノプロストへの変更もしくはその逆、またはミノキシジル単独からミノキシジルとフィナステライドの組み合わせもしくはミノキシジルとラタノプロストの組み合わせへの変更等）に変更される。
【０５５６】
一実施形態では、ある治療方法は、皮膚の小さな面積（例えば、１×１ｃｍ、または１．５×１．５ｃｍ、または２×２ｃｍ、または２．５×２．５ｃｍ、または３×３ｃｍ以上）にわたって実行され、毛髪が前述の方法に従って測定され、候補資格が確立される場合、その治療方法が、より大きな皮膚領域、例えば、頭皮の禿げつつある領域全体等の皮膚のより大きな面積にわたって実行される。
【０５５７】
５．８．４．１  毛包を評価するための方法
ある特定の実施形態では、毛包は、対象となる構造体（ＳＯＩ）について以下の基準に従って特徴付けられる。
【０５５８】
ＮＬ（新遺伝子のような）：「小さな」特質である毛幹、皮脂腺、または毛穴のうちの１つのみを有する、付着していない原始的な毛包構造体。皮膚チャンネルは、不在であるか、または決定的ではない。ＮＬのさらなる下位カテゴリーには、ＤＰ（皮膚乳頭）を含むＮＬ／活性、ＤＰを含むＮＬ／不活性、ＤＰを含まないＮＬ／活性、およびＤＰを含まないＮＬ／不活性が含まれる。
【０５５９】
ＰＥＬ（先在するような）：毛幹、皮脂腺、または毛穴の「大きな」特質のうちの１つ以上または「小さな」特質のうちの２つ以上を有する、付着していない原始的な毛包構造体。皮膚チャンネルが存在する。ＰＥＬのさらなる下位カテゴリーには、ＤＰ（皮膚乳頭）を含むＰＥＬ／活性、ＤＰを含むＰＥＬ／不活性、ＤＰを含まないＰＥＬ／活性、およびＤＰを含まないＰＥＬ／不活性が含まれる。
【０５６０】
ＰＥＬＡ（先在するような付着した）：表皮に延在するより大きな成熟した毛嚢脂腺単位に付着する原始的な毛包構造体。
【０５６１】
特定の実施形態では、これらの基準は、図３１に概説される対象となる構造体を分類するためのフローチャート／アルゴリズムから算出される。一実施形態では、対象となる構造体を得るおよび分類するために以下の特定のプロトコルを使用する：
生検は、対象の皮膚の治療（および／または対照）部位から採取される。例えば、この生検は、外皮攪乱から１４日後に回収され得る。１つまたは２つもしくはそれ以上のパンチ生検が、それぞれ、例えば、１ｍｍ、２ｍｍ、３ｍｍ、４ｍｍ、５ｍｍもしくはそれ以上の直径で対象から採取される。特定の実施形態では、このパンチ生検は、直径４ｍｍである。生検は、表皮−真皮の位置付けを無傷に維持するように、パンチ生検の正中線を縦方向に下方に二等分にし、４％のパラホルムアルデヒド中で２４時間固定し、１×ＰＢＳ中の３０％  スクロースに２４時間移し、次いで、ＯＣＴ（Ｔｉｓｓｕｅ−Ｔｅｋ）中に二等分した側面を下向きに包埋して、ドライアイスまたは−２０℃の冷凍庫のいずれかで冷凍し続ける。それぞれのｃｒｙｏｂｌｏｃｋは、逐次に分割される。２つの部分が、Ｈ＆Ｅで染色した全て３つのスライドと共にそれぞれのスライド上に収集される。
【０５６２】
Ｈ＆Ｅで染色したスライドは、形態学に基づいて特定された対象となる構造体（ＳＯＩ）について分析される。表皮に延在した別の毛嚢脂腺単位に付着したＳＯＩは、先在する付着した（ＰＥＬＡ）として分類される。次いで、付着しなかったＳＯＩは、皮膚チャネル、毛幹（小さいもしくは大きい）、皮脂腺（小さいもしくは大きい）、および／または毛穴（小さいもしくは大きい）の存在に基づいて分類される。１つ以上の大きな特質または２つ以上の小さな特質は、ＰＥＬとして分類されるＳＯＩをもたらすが、一方、１つのみの小さな特質は、ＮＬとして分類されるＳＯＩをもたらす。皮膚チャネル、毛幹、皮脂腺、または毛穴のいずれも有さない、別の毛嚢脂腺単位に付着しないＳＯＩは、ＡＰ、Ｋｉ６７、Ｂｅｒ−ＥＰ４、およびエラスチンのために染色する。
【０５６３】
ＳＯＩは、それらのマーカー発現に基づいて分類される：アルカリ性ホスファターゼ活性（ＤＰマーカー）の存在もしくは不在；Ｋｉ６７（増殖マーカー）の存在もしくは不在；Ｂｅｒ−ＥＰ４（毛包マーカー）の存在もしくは不在；皮膚チャネル（エラスチンを用いて可視化した細胞外マトリックスマーカー）の存在もしくは不在。皮膚チャネルを有さないＳＯＩはＮＬとして分類されるが、一方、皮膚チャネルを有するものはＰＥＬとして分類される。Ｂｅｒ−ＥＰ４が陰性であるＳＯＩは、非毛包として分類される。ＮＬおよびＰＥＬは、ＤＰの有無（陽性もしくは陰性ＡＰ染色）および活性もしくは不活性（陽性もしくは陰性Ｋｉ６７染色）のようなさらなるカテゴリーに精緻化する。Ｂｅｒ−ＥＰ４に対する決定的でない染色は、Ｂｅｒ−ＥＰ４に対する陽性結果として処理され、アルカリ性ホスファターゼまたはＫｉ６７に対する決定的でない染色は、ＮＬ（皮膚チャネルが存在しない）またはＰＥＬ（皮膚チャネルが存在する）として分類されるＳＯＩをもたらす。
【０５６４】
５．８．４．２  走査型レーザー共焦点顕微鏡
走査型レーザー共焦点顕微鏡（ＣＭ）は、インビボで皮膚を可視化するためにレーザー光線を使用する非侵襲性画像技術である。０日目に開始する治療の進行は、ＣＭを単独で用いてまたは写真撮影と組み合わせてモニタリングされ得る。この顕微鏡浸液は、反射したレーザー光線によって検出されるような組織内の屈折指数の変化を測定するために、油／水の浸水を必要とする。表皮、真皮乳頭層、および表層真皮網状層のリアルタイムの非侵襲性共焦点赤外線画像は、従来の光学顕微鏡検査法に相当する解像度を用いて３５０μｍの最大深さまで可能である。皮膚は、組織学に必要とされる固定、セクショニング、および染色することなくその自然な状態で画像化することができる。したがって、動的プロセスは、長時間にわたって非侵襲的に観察することができる。研究ツールとして、ＲＣＭは、いくつかの色素性（Ｇｒｉｍｅｓ，２００５，Ｍｉｃｒｏｄｅｒｍａｂｒａｓｉｏｎ．Ｄｅｒｍａｔｏｌ  Ｓｕｒｇ  ３１：１３５１−１３５４）および非色素性皮膚病変のインビボ評価を促進することが報告されている。Ｃｕｒｉｅｌ−Ｌｅｗａｎｄｒｏｗｓｋｉ，ｅｔ  ａｌ．，Ｕｓｅ  ｏｆ  ｉｎ  ｖｉｖｏ  ｃｏｎｆｏｃａｌ  ｍｉｃｒｏｓｃｏｐｙ  ｉｎ  ｍａｌｉｇｎａｎｔ  ｍｅｌａｎｏｍａ：ａｎ  ａｉｄ  ｉｎ  ｄｉａｇｎｏｓｉｓ  ａｎｄ  ａｓｓｅｓｓｍｅｎｔ  ｏｆ  ｓｕｒｇｉｃａｌ  ａｎｄ  ｎｏｎｓｕｒｇｉｃａｌ  ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃ  ａｐｐｒｏａｃｈｅｓ，Ａｒｃｈ  Ｄｅｒｍａｔｏｌ  １４０  （２００４），ｐｐ．１１２７−１１３２、Ｇｅｒｇｅｒ  ｅｔ  ａｌ．，Ｄｉａｇｎｏｓｔｉｃ  ａｐｐｌｉｃａｂｉｌｉｔｙ  ｏｆ  ｉｎ  ｖｉｖｏ  ｃｏｎｆｏｃａｌ  ｌａｓｅｒ  ｓｃａｎｎｉｎｇ  ｍｉｃｒｏｓｃｏｐｙ  ｉｎ  ｍｅｌａｎｏｃｙｔｉｃ  ｓｋｉｎ  ｔｕｍｏｒｓ，Ｊ  Ｉｎｖｅｓｔ  Ｄｅｒｍａｔｏｌ  １２４  （２００５），ｐｐ．４９３−４９８、Ｓｗｉｎｄｅｌｌｓ  ｅｔ  ａｌ．Ｒｅｆｌｅｃｔａｎｃｅ  ｃｏｎｆｏｃａｌ  ｍｉｃｒｏｓｃｏｐｙ  ｍａｙ  ｄｉｆｆｅｒｅｎｔｉａｔｅ  ａｃｕｔｅ  ａｌｌｅｒｇｉｃ  ａｎｄ  ｉｒｒｉｔａｎｔ  ｃｏｎｔａｃｔ  ｄｅｒｍａｔｉｔｉｓ  ｉｎ  ｖｉｖｏ，Ｊ  Ａｍ  Ａｃａｄ  Ｄｅｒｍａｔｏｌ  ５０  （２００４），ｐｐ．２２０−２２８、Ａｇｈａｓｓｉ，ｅｔ  ａｌ．，Ｔｉｍｅ−ｓｅｑｕｅｎｃｅ  ｈｉｓｔｏｌｏｇｉｃ  ｉｍａｇｉｎｇ  ｏｆ  ｌａｓｅｒ−ｔｒｅａｔｅｄ  ｃｈｅｒｒｙ  ａｎｇｉｏｍａｓ  ｗｉｔｈ  ｉｎ  ｖｉｖｏ  ｃｏｎｆｏｃａｌ  ｍｉｃｒｏｓｃｏｐｙ，Ｊ  Ａｍ  Ａｃａｄ  Ｄｅｒｍａｔｏｌ  ４３  （２０００），ｐｐ．３７−４１、およびＧｏｎｚａｌｅｚ  ｅｔ  ａｌ．Ｎｏｎ−ｉｎｖａｓｉｖｅ  （ｒｅａｌ−ｔｉｍｅ）  ｉｍａｇｉｎｇ  ｏｆ  ｈｉｓｔｏｌｏｇｉｃ  ｍａｒｇｉｎｓ  ｏｆ  ａ  ｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｖｅ  ｓｋｉｎ  ｌｅｓｉｏｎ．Ｉｎ  Ｖｉｖｏ．Ｊ  Ｉｎｖｅｓｔ  Ｄｅｒｍａｔｏｌ  １９９８  １１１：５３８−５３９を参照のこと。この技術は、マウスにおける毛包新生と関連する構造体を含む、毛包を画像化するために首尾よく使用されており、ヒトにおいて同様の実用性を有し得る。本明細書に記載される治療方法へのＣＭ画像化の組み込みはまた、治療皮膚部位の生検の���適な時期を決定するのにも役立ち得る。
【０５６５】
一実施形態では、ヒト研究のために使用される装置（Ｖｉｖａｓｃｏｐｅ；  Ｌｕｃｉｄ，Ｉｎｃ．）を用いて共焦点顕微鏡検査が行われる。医師によって必要であると考えられ得る例示的なプロトコルが続く。対象は、頭皮の治療領域の可視化を可能にするために傾いたまたは座っている姿勢で位置付けられる。さらに、それぞれの対象は、１人の対象当たり最低１５分間画像化するために画像化する姿勢を維持する。医療グレードの粘着剤は、皮膚の表面に流体浸漬リングを固定する。このリングは、画像期間を通して付着して残り、新しいリングがそれぞれの試験部位に適用される。一実施形態では、治療レジメンの開始から０、７、および１４日目（生検が１４日目に行われなかった場合、１１および１７日目）に、ＣＭが行われる。
【０５６６】
５．８．４．３  瘢痕性脱毛症の治療を評価するための方法
瘢痕性脱毛症のための本明細書に記載される治療の安全性および有効性は、本明細書に記載される方法を用いて測定され得る。いくつかの実施形態では、治療の成功は、視覚的または写真で検出された毛髪数の増加として決定される。他の実施形態では、成功した治療は、毛包構造体および瘢痕特性のために皮膚生検によって評価される。他の実施形態では、頭皮の炎症の症状および兆候が制御され、状態の進行が停止するまで治療は継続される。ある特定の実施形態では、頭皮の炎症は、頭皮の生検によって測定される。例えば、いくつかの実施形態では、例えば、かゆみ、ほてり、疼痛、および圧痛がなくなり、頭皮の赤み、落屑、および／または膿疱がもはや存在せず、毛髪脱落が延在されなくなるまで治療は継続される。一般に、瘢痕性脱毛症は、休眠期間後に再活性され得、治療は、状態の症状または兆候の再発で繰り返さなければならない場合がある。
【０５６７】
６．実施例：毛包構造体における削皮術の効果の臨床評価
以下のプロトコルの目的は、ヒト皮膚において新遺伝子または新遺伝子のような毛包の形成の誘発における削皮術の効果を決定することである。
【０５６８】
あらゆる患者集団が治療され得るが、以下のプロトコルの患者は、２０〜５０歳の白人男性であり、硬毛および小型化した毛髪の両方を有する領域として定義される移行ゾーンの存在下で、アンドロゲン性脱毛症に罹患しており、Ｆｉｔｚｐａｔｒｉｃｋ皮膚型１〜４（これらの対象においてケロイド形成および色素沈着減少の危険性が増加するため、Ｆｉｔｚｐａｔｒｉｃｋ皮膚型等級が高い者は好ましくない）を有し得る。治療が禁忌であり得る患者（特に、臨床試験段階で）は、直接先行治療の３０日以内に治験薬物を用いた任意の臨床研究に現在参加しているもしくは参加したことがある者、イソトレチノイン（Ａｃｃｕｔａｎｅ）の現行もしくは最近の使用（１年未満）がある者、現在ホルモン療法もしくはステロイドもしくは他の免疫刺激剤を施行している者、または過去３０日以内にこれらの薬物を摂取したことがある者（ステロイド剤吸引は許容される）、ＲｏｇａｉｎｅもしくはＰｒｏｐｅｃｉａを現在使用しているまたは過去４５日間においてそれらを使用したことがある者、免疫力が低下したもしくは免疫障害を治療するための療法を受けている者、本明細書に記載されるプロトコルに干渉し得る臨床的に有意な病状を有する者、治療すべき領域における他の活性皮膚疾患（光線性角化症もしくは乾癬等）または皮膚感染（細菌、真菌、もしくはウイルス、特に  ＨＳＶ感染）を有する者、ケロイドもしくは肥大瘢痕の経歴がある者、リドカインへの過感受性、不良な創傷治癒、糖尿病、もしくは凝血障害、現在薬物もしくはアルコール依存症中である、精神機能障害、もしくはコンプライアンスを制限する他の要因を有する者、日焼けした皮膚を有する者、またはアスピリン以外の抗血小板薬を現在摂取している者であり得る。
【０５６９】
アルミナ粒子を用いた削皮術が０日目に行われる。表皮の除去および真皮乳頭層の破壊（光沢のある白っぽい外観によって検出可能）を含み、治療する領域に少量の点状出血の形成を誘発する、削皮術を約１００μｍの深さまで行う。頭頂部領域内の過渡期な禿げ領域（または進行しつつある辺縁部）に相当する頭皮皮膚の２つの部位において、削皮術が行われる。次いで、この部位は、操作することなく治癒させる。１１日目または１４日目のいずれかで４ｍｍのパンチ生検を行い、毛包と関連する構造体は、組織学的評価に基づいてこれらの対象において調べる。組織学的対照としての役割を果たすために、治療領域から１ｃｍ離れた未治療領域上で、第３の生検を１４日目に任意に行う。新しい（または新遺伝子のような）毛包と関連する毛包構造体の限定された証拠が１４日目に観察される場合には、別の生検を１７日目に行ってもよい。１１日目の生検を予定されていて、創傷の痂皮が８日目よりも前に剥がれた対象は、その３日後に生検の予定を組み直す。反対に、痂皮が１０日目までに剥がれなかった対象は、痂皮が剥がれてから３日後に生検の来院の予定を組み直す。痂皮は、およそ６〜１０日目に剥がれることが予測される。
【０５７０】
プロトコルは、所見に従って修正され得る。例えば、削皮術が、例えば、初めの１５人の患者のうちの少なくとも３人において、４ｍｍのパンチ生検において新遺伝子のような毛包の存在をもたらす場合、さらなる患者が、頭頂部上の最も大きな禿げ部位に相当するある部位および頭頂部領域内の過渡期な禿げ部位（または進行しつつある辺縁部）に相当するある部位の２つの部位において治療される。
【０５７１】
６．１  治療部位の決定
それぞれの対象の頭皮における２つの部位は、治療のために特定され、頭頂部領域内の過渡期な禿げ領域（または進行しつつある辺縁部）に両方とも対応する。患者の中には、頭頂部領域内の最も大きな禿げ部位内の治療する者もいる。
【０５７２】
６．２  削皮術
この処置は、治療する領域の存在する毛髪を剃り／刈り込み、続いて、消毒洗浄剤を用いて徹底的な洗浄を行う。しびれ薬、例えばリドカインＨＣＬ  ２％およびエピネフリンを１：１００，０００で注入して、治療する表面を麻酔する。表皮の除去および真皮乳頭層の破壊（光沢のある白っぽい外観によって検出可能である）を含む削皮術を約１００μｍの深さまで行い、治療する領域に小さい点状出血を形成する。削皮された部位はそれぞれ、約１．５ｃｍ×１．５ｃｍの正方形である。削皮術のために好適な装置は、Ｔｉｅｍａｎｎ  ａｎｄ  ＣｏｍｐａｎｙからのＡＳＥＰＴＩＣＯ  ＥＣＯＮＯ−ＤＥＲＭＡＢＲＡＤＥＲ、Ａｄｖａｎｃｅｄ  ＭｉｃｒｏｄｅｒｍからのＤＸシステム（例えばｈｔｔｐ：／／ｗｗｗ．ａｄｖａｎｃｅｄｍｉｃｒｏｄｅｒｍ．ｃｏｍ／ｐｒｏｄｕｃｔｓ／ｔｅｃｈ＿ｓｐｅｃｓ．ｈｔｍｌを参照）、またはＧｅｎｅｓｉｓ  ＢｉｏｓｙｓｔｅｍｓからのＭ２−Ｔシステムである。アルミニウム結晶が眼に侵入することによる合併症（結膜浮腫、羞明、表在性点状角膜炎）を避けるために、粘着性のある眼保護シールドを、処置中患者に装着させて、医師は、安全メガネを装着しなければならない。削皮術ツールを慎重に操作して、所望のレベルに達するまで皮膚の層を慎重に除去する。この処置は、通常、ほんの数分、最長約３０分しかかからない。
【０５７３】
削皮術前、患者は、処置中コンタクトレンズを装着しない、治療を行う３日前にレチノール、グリコール、または他のヒドロキシ酸、サリチル酸、ベータヒドロキシル酸等の市販の剥離製品の使用を中断する、治療を行う３０日前にレチノイドの使用を中断する、治療を行う前の２週間、ボトックスまたはコラーゲン注入を受容しないように求められなければならない。
【０５７４】
処置後、治療した皮膚は、赤く腫れて圧痛があることもあり、創傷は、新しい皮膚の成長が開始する（これは、通常、７〜１０日間かかる）まで以下のことについて注意しなければならない：１）この領域を清潔に保ち、本日中乾燥させる。治療領域を覆ったり、包帯をしたり、あるいは処理しない、２）洗髪する際には、この領域を触らないよう注意する、３）  この領域を軽くたたいて乾燥させる。治療領域を覆ったり、包帯をしたり、あるいは処理しない。
【０５７５】
治療領域は、新しい皮膚が成長するにつれてかゆくなることがあり、削皮術から数週間、少し膨張し、炎症を起こしやすく、鮮やかなピンク色になることがある。
【０５７６】
あらゆる合併症を防ぐために、以下の対策が取られる。
・担当医にいかなる黄色の痂皮形成または痂皮（これは、感染症の始まりである恐れがある）を知らせる。
・腫れおよび赤みは、数日後から１ヶ月で治まらなければならない。領域の持続的な赤みは、瘢痕を形成する兆候であることがあるため、直ちに担当医に連絡を取る。
・削皮術後から初めの７日間、水泳は許可されない。
・異常な色素沈着を避けるために、一旦新しい皮膚が治癒されたら、太陽を避け、微細削皮術後、少なくとも３ヶ月間、毎日、広域日焼け止め剤を適用する。窓ガラスを通した太陽でさえ、望ましくない色素沈着を促す場合がある。
【０５７７】
６．３  パンチ生検
この処置は、消毒洗浄剤を用いて生検する領域を徹底的な洗浄することから始める。リドカインＨＣＬ  ２％およびエピネフリン（それぞれの部位に約０．５ｃｃ）を１：１００，０００で注入して、生検する部位を麻酔する。４ｍｍのパンチ生検を行う。２  ４．０のエチロン縫合糸を用いて生検部位が、閉塞される。ワセリンおよびバンドエイドが適用される。組織試料は、組織学的分析のためにホルマリン中に保存される。
【０５７８】
６．４  主要評価項目
削皮術後、新しいまたは新遺伝子のような毛包と関連する構造体の組織学的分析。帰無仮説は、ヒトにおける現行の定説であるため、このような構造体が形成されないことである。治療への陽性応答は、４ｍｍのパンチ生検における３つ以上の新遺伝子のような毛包の出現として特徴付けられる。
【０５７９】
要因のうちで、治療の成功が決定されるときに評価されるのは、痂皮形成／痂皮、面皰、感染、色素変化（例えば、不在の色素沈着減少（軽度、中等度、もしくは重度）、または色素沈着過度（軽度、中等度、もしくは重度））、瘢痕化、再上皮化の存在または不在、あるいは巨視的観察による毛包の存在である。
【０５８０】
６．５  副次的評価項目
１）外皮攪乱後のいつが、新しい（または新遺伝子のような）毛包の形成が最も活性であるかを決定すること。
【０５８１】
２）それぞれの生検における毛包数を定量化し、毛包の形態を特徴付けること
３）攪乱部位の臨床的特徴付け
６．６  結果
上記のプロトコルに従って、臨床研究が実行された。特に、臨床研究の目的は、表皮およびいくつかの真皮乳頭層の除去を含む削皮術がヒト頭皮において毛包を誘発し得るかどうかを試験することであった。
【０５８２】
簡潔に言えば、０日目に、１５人の対象は、アルミナ粒子を用いた、標準的な粒子に媒介された削皮術（「ＰＭＤＡ」；ＤＸシステム、Ａｄｖａｎｃｅｄ  Ｍｉｃｒｏｄｅｒｍ（商標））を受容した。表皮の除去および真皮乳頭層の破壊（光沢のある白っぽい外観によって検出可能である）を含むＰＭＤＡを約１００ミクロンの深さまで行い、治療領域に小さな点状出血の形成を促した。
【０５８３】
１５人の登録した対象のうち１３人の対象が、２つの削皮部位（右側および左側頭皮）のそれぞれの皮膚生検を有した。これらの１３人の対象のうち２人の対象（１５％）が、２６個の適切な生検の中から合計４個の陽性生検に対して、左側および右側部位の両方に存在する新遺伝子のような毛包を有した（１５％）。１３人の対象のうちの１０人の対象は、第３の対照部位で生検を有した。１０人の対象の中から１人の対象（１０％）が、１０個の適切な生検の中から合計１つの陽性生検に対して、新遺伝子のような毛包を有した（１０％）。
この研究は以下にさらに詳述される。
【０５８４】
６．６．１  方法
１５人の適任な対象を、無作為化することなく、この試験に採用し、２つの部位（頭皮の左側および右側）への削皮術を受容させた。登録前に、対象を、適格性についてスクリーニングし、この時、併用薬を含む完全な病歴、対象の頭皮の基礎評価、およびバイタルサイン（ＶＳ）を含む集中的な健康診断を行った。試験対象患者基準／除外基準を満たした１５人の対象を登録した。有害事象および現行の病状の変化を検出するための評価がこの研究を通して行われた。適切な治療後のケアを確実にするために、全ての対象は、ベースラインとなる来院の終了時に創傷ケア指示用紙（Ｗｏｕｎｄ  Ｃａｒｅ  Ｉｎｓｔｒｕｃｔｉｏｎｓ  Ｆｏｒｍ）が渡された。
【０５８５】
加えて、これらの対象を、Ｆｉｔｚｐａｔｒｉｃｋ皮膚型について評価し、１〜４のＦｉｔｚｐａｔｒｉｃｋ皮膚型を有する対象のみが本研究において認められた。ケロイド形成および色素沈着減少の危険性が増加するため、Ｆｉｔｚｐａｔｒｉｃｋ皮膚型等級が高い者は除外された。
【０５８６】
削皮部位のデジタル写真を、ベースライン、ならびに対象が診療所に戻ったＰＭＤＡ後の日のいずれか、例えば７、１１、１４、１７、２４、および６０日目、または対象が所定外日に戻った場合には他の中間日に撮影した。ベースライン（０日目）に、頭皮部位において１．５ｃｍ×１．５ｃｍの正方形の対角線上に反対側の隅の２点に長さ４ｍｍの２８ゲージ針を用いて入れ墨を入れた。滅菌（プラスチック）材料のテンプレートを用いて入れ墨を誘導した。入れ墨を用いて、この研究を通して異なる時間で得られた写真を登録した。登録のための入れ墨を用いて、高解像度のクローズアップしたデジタル画像（Ｎｉｋｏｎ（商標）ＤＬシリーズカメラ）を用いて、創傷および治癒プロセスの可視的側面を記録した。
【０５８７】
０日目に、１５人の対象は、アルミナ粒子を用いて、粒子に媒介された削皮術（ＰＭＤＡ）（Ａｄｖａｎｃｅｄ  Ｍｉｃｒｏｄｅｒｍ（商標）からのＤＸシステム）を受容した。全ての対象は、眼保護物および処置用麻酔を与えられた。この処置は、治療領域に既存の毛髪を剃り／刈り込むことから始め、続いて、消毒洗浄剤を用いて徹底的な洗浄を行った。リドカインＨＣＬ  ２％＋エピネフリンを１：１００，０００で注入して治療する表面を麻酔した。表皮の除去および真皮乳頭層の破壊（光沢のある白っぽい外観によって検出可能である）を含むＰＭＤＡを約１００μｍの深さまで行い、治療領域に小さい点状出血の形成を促した。２つの削皮部位（右側および左側頭皮の頭頂部領域内の過渡期な禿げ領域または進行しつつある辺縁部）はそれぞれ、約１．５ｃｍ×１．５ｃｍの正方形であった。対象は、その領域を操作することなく治癒させるように指示された。ＰＭＤＡから得られた痂皮は、概して、ＰＭＤＡから６〜１０日後に剥がれた。削皮された領域の位置を下の表２に列挙する。
【０５８８】
【表２】
2019131558.tif 000004
【０５８９】
使用した局所麻酔薬の容量および処置中にコンタクトレンズ装着の有無を、表３に表記する。全ての対象は、アルミニウム結晶が眼に侵入することによる合併症を避けるために、粘着性のある眼保護シールドを使用した。
【０５９０】
【表３】
2019131558.tif 000005
【０５９１】
頭皮は、ベースライン、任意の抜糸日、７、１１、１４、および６０日目のうちのいずれかまたはその全てにおいて視診され、痂皮形成／痂皮、面皰、感染、色素変化、瘢痕化、再上皮化、および巨視的観察による毛包の存在等の特徴を分析した。それぞれの対象に対する頭皮試験の時期および結果を、表４中に見出すことができる。
【０５９２】
【表４】
2019131558.tif 000006
【０５９３】
６．６．２  安全性結果
安全性は、治療部位での局所反応の臨床的かつ写真による評価を用いて本研究を通して評価され、有害事象が報告された。表５中の、本研究の経過中に生じた報告された８例の有害事象（ＡＥ）のうち７例は、試験治療下で発現した有害事象（ＴＥＡＥ）であり、１例は非試験治療下で発現した有害事象（ＮＴＥＡＥ）であり、それぞれの事象は異なる対象において生じた。７例のＴＥＡＥのうち５例（疼痛２例、炎症２例、創傷感染１例）は、ＰＭＤＡに関連していると考えられ、２例（自動車事故および副鼻腔ポリープに続発する頭皮裂傷）は、ＰＭＤＡに関連していないと考えられた。ＮＴＥＡＥの１例は、副鼻腔炎であった。重篤有害事象はなかった。全ての事象は、最後の研究の訪問時にまでには消散した。
【０５９４】
【表５】
2019131558.tif 000007
【０５９５】
６．６．３  毛包分析結果
ＰＭＤＡから１０〜１４日間で、元の１５人の対象のうち１３人は、診療所に戻って、彼らの右側および左側ＰＭＤＡ部位に４ｍｍのパンチ生検を行った。１３人の対象のうち１０人の対象はまた、組織学的対照（対照）としての役割を果たす、削皮された領域から１ｃｍ離れた削皮されていない領域に第３の生検を有することに同意した。
【０５９６】
新遺伝子のような毛包の存在は、通常の組織学的方法を用いて生検標本において評価された。毛髪の毛穴の存在もしくは不在、毛幹の存在もしくは不在、および皮脂腺の存在もしくは不在を含む一般的な形態学的パラメータがヘマトキシリンおよびエオシン（Ｈ＆Ｅ）によって染色された部分から評価された。エラスチン線維の存在は、Ｌｕｎａ染色を用いて判定された。免疫組織化学は、ＢｅｒＥＰ４（胎児毛包マーカー）およびＫｉ６７（細胞増殖マーカー）に対抗する抗体を用いて行われた。アルカリ性ホスファターゼ（ＡＰ）組織化学は、ＨＦの皮膚乳頭を特定するために使用された。
【０５９７】
新遺伝子のような毛包は、以下の基準の一部または全てを用いることによって特徴付けられた：毛髪が、１）軟毛および／もしくは軟毛のような毛包よりも長さが短い、２）先在する毛嚢脂腺単位との接続を欠いている、３）皮膚表面で毛穴を欠いている、４）高分化型の皮脂腺を欠いている、５）毛幹を欠いている、６）エラスチン陰性の「ストリーマ（ｓｔｒｅａｍｅｒ）」または「皮膚チャネル」を欠いている、７）アルカリ性ホスファターゼ、ＢｅｒＥＰ４（胎児毛包マーカー）、およびＫｉ６７（細胞増殖マーカー）に対して陽性染色がある。
【０５９８】
Ｈ＆Ｅ染色は、新遺伝子のような毛包に対して陰性であった場合、他の染色法は行わなかった。新遺伝子のような毛包が様々な染色によって検出された２人の対象（３番および５番）からのデータを、表６に見ることができる。
【０５９９】
【表６】
2019131558.tif 000008
【０６００】
ＰＭＤＡ後に新遺伝子のような毛包を検出することができる時間も考慮された。２７個の生検を１４日目（ＰＭＤＡから１４日後）に得た。新遺伝子のような毛包の証拠となる２人の対象（３番および５番）の生検をそれぞれ、１４日目に生検を得た。また、１４日目に新遺伝子のような毛包に対して陰性である２３個の生検があった（７個の右側ＰＭＤＡ領域、１０個の左側ＰＭＤＡ領域、６個の対照領域）。１０日目の生検（３個の生検）、１１日目の生検（１個の生検）、１３日目の生検（１個の生検）、および２０日目の生検（１個の生検）は、新遺伝子のような毛包に対して陰性であった。対照領域において行われた１０個全ての生検の対象（削皮されない）は、新遺伝子のような毛包に対して陰性であった（１３日目に１個、１４日目に６個、２０日目に１個、および不明日に２個）。
【０６０１】
１３人の対象のうち２人の対象（１５％）が、２６個の適切な生検の中から合計４個の陽性生検に対して、左側および右側部位の両方に存在する新遺伝子のような毛包を有した（１５％）（表６）。合計で、表６に示されるように、１１個の新遺伝子のような構造体が削皮された部位において同定された。対照的に、このような構造体の１個だけが、治療されていない対照部位から採取した生検において（１人の対象において）特定された。組織学的分析では、新遺伝子のような毛包の形態に類似した少数の構造体もあったが、皮膚チャネルがあった可能性が高く、これはこれらの構造体が先在する毛包から起因することを示唆している。
【０６０２】
７．実施例：レーザーまたは削皮術による外皮攪乱後の毛髪の成長の評価
この研究の目的は、例えば、ヒト皮膚における毛包の活性化、刺激、もしくは再構成、および／または新生によって証明される、毛髪の成長を促進する際の削皮術と比較した外皮攪乱法としての３つのレーザー処置の効果を評価することである。
【０６０３】
あらゆる患者集団が治療され得るが、この研究における治療のために選択される患者は、２０〜５０歳の白人男性であり、硬毛および小型化した毛髪の両方を有する領域として定義される移行ゾーンの存在下で、アンドロゲン性脱毛症に罹患しており、Ｆｉｔｚｐａｔｒｉｃｋ皮膚型１〜４（これらの対象においてケロイド形成および色素沈着減少の危険性が増加するため、Ｆｉｔｚｐａｔｒｉｃｋ皮膚型等級が高い者は好ましくない）を有する。治療が禁忌であり得る患者（特に、臨床試験段階で）は、直接先行治療の３０日以内に治験薬物を用いた任意の臨床研究に現在参加しているもしくは参加したことがある者、イソトレチノイン（Ａｃｃｕｔａｎｅ）の現行もしくは最近の使用（１年未満）がある者、現在ホルモン療法もしくはステロイドもしくは他の免疫刺激剤を施行している者、または過去３０日以内にこれらの薬物を摂取したことがある者（ステロイド剤吸引は許容される）、ＲｏｇａｉｎｅもしくはＰｒｏｐｅｃｉａを現在使用しているまたは過去４５日間においてそれらを使用したことがある者、免疫力が低下したもしくは免疫障害を治療するための療法を受けている者、本明細書に記載されるプロトコルに干渉し得る臨床的に有意な病状を有する者、治療すべき領域における他の活性皮膚疾患（光線性角化症もしくは乾癬等）または皮膚感染（細菌、真菌、もしくはウイルス、特にＨＳＶ感染）を有する者、ケロイドもしくは肥大瘢痕の経歴がある者、リドカインへの過感受性、不良な創傷治癒、糖尿病、もしくは凝血障害、現在薬物もしくはアルコール依存症中である、精神機能障害、もしくはコンプライアンスを制限する他の要因を有する者、日焼けした皮膚を有する者、またはアスピリン以外の抗血小板薬を現在摂取している者であり得る。
【０６０４】
適任な対象は、無作為化することなく、この試験に採用される。４つの１．５ｃｍ×１．５ｃｍの治療部位が、頭皮の前部および後部の過渡な領域の左側および右側に選択される。これらの部位は、左前部、左後部、右前部、右後部と指定される。全ての４つの部位は、前部または後部頭皮内の過渡期な禿げ領域（または進行しつつある辺縁部）に相当する。それぞれの部位で使用されるべき外皮攪乱法は、無作為に割り当てる。
【０６０５】
４つの外皮攪乱法は、全表皮の除去および真皮乳頭層の破壊を含み、治療する領域に少量の点状出血の形成を誘発し得る、様々な深さに行われる。外科医は、０日目に頭皮の過渡期な禿げ領域（または進行しつつある辺縁部）に沿って治療部位のそれぞれに無作為化スケジュールに従ってそれぞれの外皮攪乱を行う。対象は、その領域を操作することなく治癒させるように指示される。対象は、戻って、１４日目に４ｍｍのパンチ生検を受けるように求められる。単一の続く来院は、２８日目に行われ、パンチ生検の治癒を文書化し、抜糸を行い、あらゆる有害事象を回収する。新しい毛髪の存在、および新しい活性化した、もしくは再構成された毛包の証拠は、組織学的に検査される。この予備的な試験設計構造は、外皮攪乱のこれらの様々な方法が存在する場合、これらの後に有意な毛髪の成長または毛包の活性化、再構成、または新生を観察するより多くの可能性を提供する。
【０６０６】
７．１  外皮攪乱法
外皮攪乱前、患者は、処置中コンタクトレンズを装着しない、治療を行う３日前にレチノール、グリコール、または他のヒドロキシ酸、サリチル酸、ベータヒドロキシル酸等の市販の剥離製品の使用を中断する、治療を行う３０日前にレチノイドの使用を中断する、治療を行う前の２週間、ボトックスまたはコラーゲン注入を受容しないように求められなければならない。
【０６０７】
それぞれの処置は、治療領域の既存の毛髪を剃り／刈り込みから始め、続いて、消毒洗浄剤を用いて徹底的な洗浄を行う。しびれ薬、例えばリドカインＨＣＬ  ２％およびエピネフリンを１：１００，０００で注入して、治療する表面を麻酔する。
【０６０８】
それぞれの処置後、治療した皮膚は、赤く腫れて圧痛があることもあり、創傷は、新しい皮膚の成長が開始する（これは、通常、７〜１０日間かかる）まで以下のことについて注意しなければならない：１）この領域を清潔に保ち、本日中乾燥させる。治療した領域を覆ったり、包帯をしたり、あるいは処理しない、２）洗髪する際には、この領域を触らないよう注意する、３）この領域を軽くたたいて乾燥させる。治療領域を覆ったり、包帯をしたり、あるいは処理しない。
【０６０９】
治療領域は、新しい皮膚が成長するにつれてかゆくなることがあり、削皮術から数週間、少し膨張し、炎症を起こしやすく、鮮やかなピンク色になることがある。
【０６１０】
あらゆる合併症を防ぐために、以下の対策が取られる。
・担当医にいかなる黄色の痂皮形成または痂皮（これは、感染症の始まりである恐れがある）を知らせる。
・腫れおよび赤みは、数日後から１ヶ月で治まらなければならない。領域の持続的な赤みは、瘢痕を形成する兆候であることがあるため、直ちに担当医に連絡を取る。
・削皮術後から初めの７日間、水泳は許可されない。
・異常な色素沈着を避けるために、一旦新しい皮膚が治癒されたら、太陽を避け、微細削皮術後、少なくとも３ヶ月間、毎日広域日焼け止め剤を適用する。窓ガラスを通した太陽でさえ、望ましくない色素沈着を促す場合がある。
【０６１１】
７．１．１  削皮術
全表皮の除去および真皮乳頭層の攪乱（光沢のある白っぽい外観によって検出可能である）を含む標準的な削皮術を約１００μｍの深さまで行い、治療領域に小さい点状出血の形成を促す。削皮された部位はそれぞれ、約１．５ｃｍ×１．５ｃｍの正方形である。削皮術のために好適な装置は、Ｔｉｅｍａｎｎ  ａｎｄ  ＣｏｍｐａｎｙからのＡＳＥＰＴＩＣＯ  ＥＣＯＮＯ−ＤＥＲＭＡＢＲＡＤＥＲ、Ａｄｖａｎｃｅｄ  ＭｉｃｒｏｄｅｒｍからのＤＸシステム（例えばｈｔｔｐ：／／ｗｗｗ．ａｄｖａｎｃｅｄｍｉｃｒｏｄｅｒｍ．ｃｏｍ／ｐｒｏｄｕｃｔｓ／ｔｅｃｈ＿ｓｐｅｃｓ．ｈｔｍｌを参照）、またはＧｅｎｅｓｉｓ  ＢｉｏｓｙｓｔｅｍｓからのＭ２−Ｔシステムである。アルミニウム結晶が眼に侵入することによる合併症（結膜浮腫、羞明、表在性点状角膜炎）を避けるために、粘着性のある眼保護シールドを、処置中患者に装着させて、医師は、安全メガネを装着しなければならない。削皮術ツールを慎重に操作して、所望のレベルに達するまで皮膚の層を慎重に除去する。この処置は、通常、ほんの数分しかかからない。
【０６１２】
７．１．２  超パルスＣＯ２フラクショナルレーザー
超パルス（フラクショナル様式）ＣＯ２レーザーを用いて、表皮および真皮を約１００〜５００μｍの深さまで破壊する。超パルスレーザーは、削皮術の効果に類似した効果をもたらすが、外皮攪乱は、非瘢痕製フラクショナルアブレーションにおいてより大きなエネルギー量を皮膚のより深い部分に送達する。治療領域は、約１．５ｃｍ×１．５ｃｍの正方形である。超パルスは、パターンサイズ８、密度４を用いて、最大３５０ｍＪ、最大５２．５ワットを送達するように設定され、正方形の治療部位を最大５回のパスで満たす。
【０６１３】
７．１．３  超パルスＣＯ２アブレーションレーザー
超パルスＣＯ２レーザー（アブレーション様式）を用いて、表皮および真皮を約１００〜５００μｍの深さまで攪乱する。超パルスレーザーは、削皮術の効果に類似した効果をもたらすが、この外皮攪乱法は、削皮術に類似する非瘢痕性アブレーションにおいてより大きなエネルギー量を皮膚のより深い部分に送達する。治療領域は、約１．５ｃｍ×１．５ｃｍの正方形である。超パルスは、１ミリ秒当たり最大５００ｍＪ、１ワットまで送達するように設定され、２Ｈｚで３ｍｍのスポットサイズを用いて、正方形の治療部位を満たすためには、最大１５回のパスが必要とされ得る。
【０６１４】
７．１．４  ＣＡＮＤＥＬＡスムースピールフルアブレーションエルビウムレーザー
アブレーションエルビウムレーザーは、最大１５回のパスで最大５００μｍの深さの皮膚の攪乱を引き起こすように、２４０ミリ秒で最大５ジュールのエネルギーをレベル３で送達するように設定される。治療領域は、約１．５ｃｍ×１．５ｃｍの正方形である。
【０６１５】
７．２  パンチ生検
この処置は、消毒洗浄剤を用いて生検されるべき部位を徹底的な洗浄することから始める。リドカインＨＣＬ  ２％およびエピネフリン（それぞれの部位に約０．５ｃｃ）を１：１００，０００で注入して、生検する部位を麻酔する。４ｍｍのパンチ生検を行う。２
４．０のエチロン縫合糸を用いて生検部位が、閉塞される。ワセリンおよびバンドエイドが適用される。組織試料は、組織学的分析のためにホルマリン中に保存される。
【０６１６】
治療を受けた対象は、生検を受けてから１０日で再来院することを求められる。この来院時、抜糸、治療領域の評価、治療領域の写真撮影、対象の病歴および併用薬の見直し、有害事象の文書化、最終評価のような処置および評価が行われる。
【０６１７】
７．３  主要評価項目
主要評価項目は、研究１４日目に４ｍｍのパンチ生検の組織学的分析によって決定される新遺伝子のような毛包構造体の数である。
【０６１８】
７．４  副次的評価項目
１）研究１４日目に４ｍｍのパンチ生検において毛包の形態を決定すること。
【０６１９】
２）破壊された領域の臨床的特徴付けを決定すること。
【０６２０】
７．５  結果
下の表７に示されるように、全て４つの外皮攪乱モードは、活性化した毛包を生成した。削皮術（Ｔｉｅｍａｎｎ  ａｎｄ  ＣｏｍｐａｎｙのＡｓｅｐｔｉｃｏ  Ｅｃｏｎｏ削皮器を用いて）は、最大数の活性化した毛包をもたらし、レーザー処置様式の中で、フラクショナルレーザーによる処置は、最大数の活性化した毛包をもたらした。削皮術研究からの例示的な結果を、図２３Ａ〜Ｄ）に提供し、これは削皮術（「ＤＡ」）による外皮攪乱で治療した対象の皮膚領域における毛髪の成長を示す。図２３Ｅは、この削皮術様式直後に得られた点状出血を示す。図２３Ｆは、血管が新生された皮膚乳頭を囲む皮膚の表皮小稜の画像を提供し、これは、例えば１００〜１５０ミクロンの深さへの削皮術による外皮攪乱が、どのように点状出血を生じさせるかを示す補助となり得る。
【０６２１】
【表７】
2019131558.tif 000009
【０６２２】
８．実施例：毛髪の成長における外皮攪乱の臨床的評価
この実施例は、例えば、アンドロゲン性脱毛症に罹患している男性対象におけるヒト皮膚における毛包の活性化、刺激、または再構成、および／または新生、ならびに／あるいは軟毛および／もしくは硬毛数の増加、および／または毛幹の厚さの増加によって証明されるように、毛髪の成長を促進するために外皮攪乱の使用を試験する臨床的プロトコルを提供する。使用される２つの方法には、削皮術によるより表面型の外皮攪乱およびパンチ生検を用いたより深い（皮下脂肪のレベルまで延在する）全層皮膚切除が含まれる。
【０６２３】
探索的ヒトデータ（項６および７の実施例を参照）に基づいて、このプロトコルの目的を支持する臨床的仮説は、外皮攪乱（この項では、「制御された攪乱」としても称される）が（ｉ）毛包の活性化、刺激、または再構成、および／または新生を増加させる、ならびに／または（ｉｉ）軟毛および／もしくは硬毛数を増加させる、ならびに／または（ｉｉｉ）毛幹の厚さを増加させるというものである。制御された攪乱は、より表面的であり得る（例えば、主に表皮に影響を及ぼす削皮術を用いて）か、またはより深い部分であり得る（例えば、パンチ生検が表皮およびより深い真皮の両方に影響を及ぼすとき）  この種類の刺激は、毛髪の成長の巨視的証拠をもたらすことが可能である。
【０６２４】
８．１  研究プロトコル
以下のプロトコルは、（ｉ）新遺伝子のようなまたは活性化もしくは刺激を受けた毛包構造体（例えば、上の項５．８．４．１に記載されるＮＬ、ＰＥＬ、およびＰＥＬＡ）の形成ならびに（ｉｉ）毛髪の成長における、削皮術、ならびにヒドロゲル（カルボマー（Ｃａｒｂｏｐｏｌ  ９８０）、グリセロール、水酸化ナトリウム、メチルパラベン、プロピルパラベン、および精製水）による攪乱後治療の効果を評価した第ＩＩａ相臨床研究を説明する。
【０６２５】
包含のための診断および主な基準は、Ｈａｍｉｌｔｏｎ−Ｎｏｒｗｏｏｄ型３Ｖ、４、５、５Ａ、または５Ｖ、およびＦｉｔｚｐａｔｒｉｃｋ皮膚型１〜４の、硬毛および小型化した毛髪の両方を有する領域として定義される頭頂部の移行ゾーンの存在下で、アンドロゲン性脱毛症に罹患している、書面によるインフォームドコンセントを提供している２０〜６５歳の白人男性である。
【０６２６】
８．１．１  有効性の目的
主要。削皮術（ＤＡ−より表層の外皮攪乱）＋ヒドロゲルの局所適用を用いて制御された皮膚攪乱により治療された対象の皮膚の標的分析領域における写真で検出された毛髪数でベースラインから８４日目までの変化を評価すること。
【０６２７】
副次的。（ｉ）削皮術（ＤＡ）＋ヒドロゲルの局所適用を用いて制御された皮膚攪乱により治療された対象の皮膚の標的分析領域における写真で検出された毛髪数のベースラインから１６８日目までの変化を評価すること、（ｉｉ）削皮術（ＤＡ）＋局所ヒドロゲルを用いて制御された皮膚攪乱により治療された対象から１４日目に採取された生検の対象となる組織学的に検出された新遺伝子のような毛包および他の毛包構造体数を評価すること、（ｉｉｉ）４ｍｍのパンチ生検＋局所ヒドロゲルを用いて制御された皮膚攪乱により治療された対象における第１の生検の部位から１６８日目に採取された生検（二次癒合によって治癒される）の組織学的に検出された毛包を評価すること。
【０６２８】
探索的項目。（ｉ）４ｍｍのパンチ生検＋ヒドロゲルの局所適用を用いて制御された皮膚攪乱により治療された対象における写真で検出された毛髪数を、ａ）８４日目およびｂ）１６８日目で評価すること、（ｉｉ）４ｍｍのパンチ生検＋ヒドロゲルの局所適用を用いて制御された皮膚攪乱により治療によって誘発された写真で検出された毛髪の毛幹の厚さを、ａ）８４日目およびｂ）１６８日目で評価すること、（ｉｉｉ）削皮術（ＤＡ）＋ヒドロゲルの局所適用を用いて制御された皮膚攪乱により治療された後の写真で検出された毛髪の毛幹の厚さにおけるａ）ベースラインから８４日目まで、およびｂ）ベースラインから１６８日目までの変化を評価すること、（ｉｖ）１６８日目の第２の皮膚パンチ生検における組織学的特徴付け。
【０６２９】
測定の写真の視野には、全分析領域が含まれ、これは、０日目に削皮され、ヒドロゲルによって治療され、１４日目に４ｍｍのパンチ生検を受け、次いで、ヒドロゲルによるさらなる治療を受ける領域の１．１３ｃｍ２の環状領域である。全分析領域（Ｔｏｔａｌ  Ａｎａｌｙｓｉｓ  Ａｒｅａ）内には、４ｍｍのパンチ生検を受ける０．１３ｃｍ２の環状領域である環状生検領域（Ｃｉｒｃｕｌａｒ  Ｂｉｏｐｓｙ  Ａｒｅａ）と、全分析領域から削皮術のみを受けた１．００ｃｍ２の環状領域である環状生検領域を差し引いたものである標的分析領域（Ｔａｒｇｅｔ  Ａｎａｌｙｓｉｓ  Ａｒｅａ）とが存在する。
【０６３０】
８．１．２  安全性の目的
制御された皮膚攪乱（削皮術およびパンチ生検）の設定時にヒドロゲルの安全性および耐容性を評価すること。
【０６３１】
削皮術およびパンチ生検によって局所的に適用されるヒドロゲルゲルおよび表皮破壊の安全性および耐容性は、治療した頭皮部位の標的化された試験からのデータ収集物および有害事象（ＡＥ）の報告書を通してモニタリングされる。１、２、３、１２、１５、１７、１８、１９、２０、および１８２日目の来院は、部位を評価するための安全性の来院である（３、１８、１９、および２０日目の来院が週末に当たる場合、電話で代替され得る）。有害事象はまた、１１２および１４０日目に安全性確認の電話でも報告され得る。加えて、肝臓および腎機能、Ｈｇｂ−Ａ１Ｃ、および検尿が、スクリーニング時および１８２日目に行われる。また、健康診断がスクリーニング時および１８２日目に行われる。バイタルサインおよびＥＣＧがスクリーニング時に行われる。０、１４、１６８日目（削皮術およびパンチ生検が行われるとき）および１８２日目（研究の終了または早期中止時）に、バイタルサインが繰り返される。
【０６３２】
８．１．３  治療方法
この研究の治療は、２つの治療様式からなる：
１．物理的攪乱（削皮術および全層切除）
２．薬理学的介入
対象は、３１日間ヒドロゲルを受容するように予定される：治療期間１（０日目からパンチ生検１の２日前［１１日目］）および治療期間２（１７日目から治療終了時［３５日目］）。ヒドロゲルの用量は、２つの部位に１日２回適用される約０．１ｍＬの量であり、合計で意図される量は０．４ｍＬである。液滴サイズの変動のため、これは、実際の合計容量範囲を０．２７〜０．８８ｍＬに解釈する。
【０６３３】
対象１人につき予定された研究期間は、１４日間のスクリーニング期間、および１８２日間の治療および追跡治療を含む１９６日間である。予定された研究の全期間は、約１２ヶ月である。
【０６３４】
一旦適任性が確認されると（−６／０日目）、対象は、点状の入れ墨および毛髪染色を含むベースラインの写真撮影を有する。２つの部位が割り当てられ、それぞれ、１．５ｃｍ×１．５ｃｍに測定され、２ｃｍの最小距離を有する右側（Ｒ）および左側（Ｌ）を指定され、硬毛の非常に低い密度を有する頭頂部頭皮の過渡期な禿げ領域内に特定される。２つの部位の毛髪密度は、できるだけ同様でなければならない。
【０６３５】
対象１人につき２つの部位の削皮術が、点状の毛細血管出血（推定深さ１００ミクロン、瘢痕を生じるとは予想されない）を達成するために、標準的なグリットダイヤモンドフライスを備えた手持ち式削皮器を用いて実行され得る。削皮術後、ヒドロゲルを２つの部位に適用する。
【０６３６】
１４日目に、２つの削皮された部位は、閉塞することなく、二次癒合によって治癒される全層４ｍｍの皮膚パンチ生検を受容する。ＤＡ（より表層の攪乱）およびヒドロゲルによる治療後、新遺伝子のような毛包および場合により対象となる他の活性化した、刺激を受けた、または再構成された毛包構造体（例えば、上の項５．８．４．１に記載されるＰＥＬおよびＰＥＬＡ）を検出することに加えて、４ｍｍのパンチ生検はまた、新遺伝子のような毛包および対象となる他の毛包構造体の誘導のためにヒドロゲルを用いて試験されるより深い部分の攪乱も提供する。
【０６３７】
対象は、繰り返しの写真撮影および臨床的評価のために３ヶ月後（８４日目）および６ヶ月後（１６８日目）に戻る。月１回の安全性の追跡調査の電話が、１１２および１４０日目に行われる。
【０６３８】
１６８日目に、第２の皮膚パンチ生検が、１４日目に第１のパンチ生検であった２つの削皮された部位上で行われる。有効性の分析のために試料を提供することに加えて、１４日目に４ｍｍのパンチ生検から形成された任意の瘢痕組織は、１６８日目のこの第２の生検によって切除され、縫合によって閉塞される。主治医の判断および対象の意思に従う場合、１６８日目の削皮された部位の穴は、瘢痕除去および写真撮影用の入れ墨除去を確実にするために、５ｍｍまたは６ｍｍの皮膚生検（または手動によるもしくはエクサイダー（ｅｘｃｉｓｏｒ）を用いた同様の大きさの楕円型生検）である。縫合は、安全性の追跡治療の２週間後（１８２日目）に除去されるように予定される。
【０６３９】
８．２  結果
上記のプロトコルに従って、臨床研究が実行された。外皮攪乱および有効成分を含まないヒドロゲルによって治療された対象の人口動態および特徴付けの要約を、表８に示す。
【０６４０】
削皮術＋ヒドロゲルにより治療された対象に対して、以下のことが見出された：
・ベースラインから８４日目（３ヶ月）までの、全ての毛髪の標的領域の毛髪数（「ＴＡＨＣ」としても称される）は、統計的に有意である実質的な増加を示す（表９を参照）。ベースラインからの全ての毛髪数のこの変化は、測定の最終日の１６８日目（６ヶ月、表１０を参照）を通して維持され、この変化は、１６８日目に統計的に有意である。
・ベースラインから８４日目（３ヶ月）までの、直径（写真で測定された幅）で３０ミクロン以上の毛幹を有する非軟毛サイズの毛髪のみの標的領域の毛髪数は、統計的に有意である実質的な増加を示す（表１１を参照）。ベースラインからの非軟毛サイズの毛髪数のこの変化は、測定の最終日の１６８日目（６ヶ月、表１２を参照）を通して維持されない。
ベースラインから８４日目（３ヶ月）までの、直径（写真で測定された幅）で３０ミクロン未満の毛幹を有する非軟毛サイズの毛髪のみの標的領域の毛髪数は、わずかな増加を示す（表１３を参照）。ベースラインから測定の最終日の１６８日目（６ヶ月）までの、軟毛サイズの毛髪のみの標的領域の毛髪数は、おおきな実質的な増加を示す（表１４を参照）。
【０６４１】
表１５および１６に示されるように、６ヶ月の時点での全ての毛髪の持続的な正の変化は、主に、直径（写真で測定された幅）で１０〜２０ミクロンの毛幹を有する毛包の目覚しい増加によって含まれる。２０〜３０ミクロンの毛幹を有する毛包の増加は、この全体的な正の変化にわずかに貢献する（表１４を参照）。
【０６４２】
皮膚の削皮された領域では、新遺伝子のような毛包の誘発、および活性化した、刺激を受けた、または再構成された先在する（軟毛サイズを含む）毛包が、１４日目に皮膚生検によって検出され、分析されるように測定された。非創傷の頭皮皮膚に一般的に見出されるものとは対照的に、この研究において制御された攪乱は、１）新遺伝子のような毛包を誘発し、２）先在する毛包を再構成され、活性化した状態に置いた。１４日目の生検において検出され、計数された対象となる構造体が、わずかに稀に非創傷皮膚において観察される。したがって、それらは、新遺伝子のような、活性化した、刺激を受けた、または再構成された構造体からなる。
【０６４３】
【表８】
2019131558.tif 000010
【０６４４】
【表９】
2019131558.tif 000011
【０６４５】
＊ＣＩおよびＰ値は、郡内平均的変化に対する結果である。
【０６４６】
【表１０】
2019131558.tif 000012
【０６４７】
＊ＣＩおよびＰ値は、郡内平均的変化に対する結果である。
【０６４８】
【表１１】
2019131558.tif 000013
【０６４９】
＊ＣＩおよびＰ値は、郡内平均的変化に対する結果である。
【０６５０】
【表１２】
2019131558.tif 000014
【０６５１】
＊ＣＩおよびＰ値は、郡内平均的変化に対する結果である。
【０６５２】
【表１３】
2019131558.tif 000015
【０６５３】
＊対象１人当たり２つの１ｃｍ２のＴＡＨＣ部位があり、毛髪数は、１ｃｍ２に対して正規化される。
【０６５４】
【表１４】
2019131558.tif 000016
【０６５５】
＊対象１人当たり２つの１ｃｍ２のＴＡＨＣ部位があり、毛髪数は、１ｃｍ２に対して正規化される。
【０６５６】
【表１５】
2019131558.tif 000017
【０６５７】
【表１６】
2019131558.tif 000018
【０６５８】
８．３  考察
これらの結果は、外皮攪乱の削皮術の瘢痕化しない方法が、臨床的に毛髪数によって測定して、軟毛および硬毛の成長をもたらすことを示す。軟毛サイズの毛髪は、この研究の６ヶ月のエンドポイントで検出された。加えて、他の研究における削皮しない皮膚と比較して、削皮術により治療された皮膚は、削皮した皮膚試料において、新遺伝子のような（ＮＬ）、先存するような（ＰＥＬ）、および先存する付着した（ＰＥＬＡ）毛包数の増加の観察に基づいて、活性化した、刺激を受けた、または再構成した毛包数の増加があったことが見出された。このような構造体は、概して、非創傷皮膚において稀に存在する。写真による順次毛髪数において検出されるように、ベースラインと比較して、攪乱から３ヶ月後の硬毛サイズの毛髪の増加はまた、新しい硬毛が外皮攪乱によって現れるように誘発され得ることを示す。
【０６５９】
９．実施例：削皮術／育毛促進剤の脱毛症の臨床プロトコル
本実施例は、削皮術（ＤＡ）および育毛促進剤（ＨＧＰＡ）または毛髪の成長の薬剤による併用療法のための臨床プロトコルを説明する。プロトコルは、第２ａ相の非盲検で単一施設の無作為試験として実行され得、この場合、対象は無作為に選ばれ、頭頂部頭皮の右側または左側においてＤＡを施行する。ＤＡ／ヒドロゲル部位＋ＨＧＰＡは実験部位であり、非ＤＡ／ヒドロゲル部位＋ＨＧＰＡは対照部位である。したがって、それぞれの対象は、自身の対照としての役割を果たす。プロトコルにおいてこれらの対照を含むための任意のステップが、以下の説明を通して提供される。
【０６６０】
９．１  プロトコル設計
育毛促進剤。プロトコル１：市販のミノキシジル発泡体（５％）；１日２回２ｍＬの適用；プロトコルは、先行の刺激試験（ＤＡ＋ミノキシジル）によって支持されるものである。ミノキシジル治療の選択に関しては、Ｏｌｓｅｎ  ｅｔ  ａｌ．Ｊ  Ａｍ  Ａｃａｄ
Ｄｅｒｍａｔｏｌ  ２００７；５７：７６７−７４およびＯｌｓｅｎ  ｅｔ  ａｌ．，Ｊ  Ａｍ  Ａｃａｄ  Ｄｅｒｍａｔｏｌ  ２００２；４７：３７７−８５（これらのそれぞれは参照によってその全体が本明細書に組み込まれる）を参照として使用してもよい。一変形例では、５％溶液または２％溶液を使用してもよい。５％のミノキシジル溶液は、米国およびドイツでは男性用に認可されているが、女性用には認可されていない。
【０６６１】
後続プロトコル２：ラタノプロスト点眼剤（現在、市場に出ている０．００５％の製剤）：１日１回、１滴  プロピレングリコール（２０％）およびエタノール（５０％）を含む０．１％の製剤をこのために使用する。ラタノプロストは、皮膚炎を生じる場合があるため、このプロトコルは、皮膚刺激の先行の動物モデル試験によって支持されるものである（ＤＡおよび非ＤＡ部位）。ラタノプロスト治療の選択に関しては、Ｂｌｕｍｅ−Ｐｅｙｔａｖｉ  ｅｔ  ａｌ．，２０１０，Ａｍｅｒｉｃａｎ  Ａｃａｄｅｍｙ  ｏｆ  Ｄｅｒｍａｔｏｌｏｇｙ，ｄｏｉ：１０．１０１６／ｊ．ｊａａｄ．２０１１．０５．０２６，Ｅｐｕｂ  Ａｕｇ  ２７  ２０１１（参照によってその全体が本明細書に組み込まれ、ラタノプロスト０．１％溶液をプラセボと比較する）を参照として使用してもよい。
【０６６２】
これらの薬物の任意の薬物動態プロファイルを実行することができる。
【０６６３】
参照製品。参照製品を必要としない。任意の対照として、対象は、ＤＡおよび非ＤＡ皮膚部位においてＨＧＰＡ治療を受け得る。したがって、参照治療は、ＨＧＰＡのみである（即ち、非ＤＡ部位における）。
【０６６４】
意図された治療期間（１人の対象当たり）。治療は、２つの様式：（ｉ）ＤＡ／ヒドロゲル；および（ｉｉ）  ＨＧＰＡからなる。対象は、ＤＡ（または対照のために非ＤＡ）を受容し、続いて、ヒドロゲル（例えば、下の項１０の実施例に記載のヒドロゲル）を１１日間適用する。その後、ＨＧＰＡの局所適用を開始し、ＤＡ部位（および該当する場合、非ＤＡ部位）に２４週間継続する。対象は、１４日間のスクリーニング期間、および１８２日間の治療および追跡治療を含む約１９６日間治療を受ける。治療の計画された全体の治療期間は、約１２ヶ月である。
【０６６５】
治療のための診断および適任性  Ｈａｍｉｌｔｏｎ−Ｎｏｒｗｏｏｄ型３Ｖ、４、５、５Ａ、または５Ｖ、およびＦｉｔｚｐａｔｒｉｃｋ皮膚型１〜４の、硬毛および小型化した毛髪の両方を有する領域として定義される頭頂部の移行ゾーンの存在下で、アンドロゲン性脱毛症に罹患している２０〜６５歳の白人男性。対照のために、対象は、両方の治療部位を提供するのに十分大きい頭頂部領域を有さなければならない。
【０６６６】
評価のための方法および基準。一旦治療の適任性が確認されると（−６／０日目）、対象は、ベースラインとなる写真を撮影する。臨床研究のために、これには、正確な位置を示す入れ墨および毛髪染色が含まれる。治療部位は、少なくとも１．５平方センチメートルを測定し、硬毛の非常に低い密度を有する頭頂部頭皮の過渡期な禿げ領域内に位置することが好ましい。２つの治療部位は、２ｃｍの最小距離を有する指定された右側（Ｒ）および左側（Ｌ）を指定することができ、２つの部位の毛髪密度は、可能な限り同様でなければならず、それぞれの対象において、ＤＡに対する部位は右または左に無作為に選ばれ、それぞれの対象が自身の対照（ｉ）ＤＡ／ヒドロゲル＋ＨＧＰＡ（実験部位）；（ｉｉ）非ＤＡ／ヒドロゲル＋ＨＧＰＡ（対照部位）である。
【０６６７】
ＤＡが、点状の毛細血管出血（推定深さ１００ミクロン、したがって、瘢痕を生じるとは予想されない）を達成するために、標準的なグリットダイヤモンドフライスを備えた手持ち式削皮器を用いて行われる。
【０６６８】
ＤＡ後、ヒドロゲルは、１１日間ＤＡ部位（および対照のために、頭皮の反対側の同様の大きさの部位）に適用される。詳細については下のスキームを参照のこと。
【０６６９】
【化１】
2019131558.tif 000019
【０６７０】
１２日目に、ＨＧＰＡの適用をＤＡ治療部位（および対照のために、頭皮の反対側の非ＤＡ部位）に開始する。ＨＧＰＡは、継続して２４週間適用され、対象は、繰り返しの写真撮影および臨床的評価のために８４日目および１６８日目に診療所に戻る。月に１回の安全性についての追跡調査の電話が、２８、５６、１１２、および１４０日目に行われ得る。
【０６７１】
診察に用いる皮膚パンチ生検を、治療部位（対照が存在する場合、両方の治療部位）で行い、例えば、任意に８４日目および／または１６８日目に毛包構造体を分析することができる。生検部位は、縫合して閉塞される。縫合糸は、２週間後の追跡治療で除去される。
【０６７２】
臨床的研究については、プロトコルの終了は、最後の対象の最後の臨床来院として定義される。
【０６７３】
９．２  有効性の目的
主要目的／評価項目
ＤＡ／ヒドロゲル＋ＨＧＰＡ（非ＤＡ／ヒドロゲル＋ＨＧＰＡ治療との任意の比較を有する）によって治療された対象における写真で検出された毛髪数のベースラインから１６８日目の変化を評価すること。
副次的目的／評価項目
（ｉ）ＤＡ／ヒドロゲル＋ＨＧＰＡ（非ＤＡ／ヒドロゲル＋ＨＧＰＡ治療との任意の比較を有する）によって治療された対象における写真で検出された毛髪数のベースラインから８４日目の変化を評価すること。
【０６７４】
（ｉｉ）削皮術／ヒドロゲルによって治療された対象および削皮術／ヒドロゲル＋ＨＧＰＡ（非ＤＡ／ヒドロゲル＋ＨＧＰＡ治療との任意の比較を有する）によって治療された対象から治療部位の生検において組織学的に検出された毛包数を評価すること。
【０６７５】
（ｉｉｉ）ＤＡ／ヒドロゲル＋ＨＧＰＡ（非ＤＡ／ヒドロゲル＋ＨＧＰＡ治療との任意の比較を有する）によって治療された後の治療部位における写真で検出された毛髪の毛幹の厚さの、（ａ）ベースラインから８４日目および（ｂ）ベースラインから１６８日目までの変化を評価すること。毛幹の厚さは、写真によって取り込むことができる。
【０６７６】
前述に従って、測定の写真の視野（対照が含まれる場合、２つの分析領域まで延在し得る）は、ＨＧＰＡ（＋／−ＤＡ）によって治療された部位において１．１３ｃｍ２の環状領域を含むことができる。
【０６７７】
９．３  安全性の目的
ＤＡ（および対照が存在する場合、非ＤＡ）部位に局所的に適用されるＨＧＰＡの安全性および耐容性は、治療する頭皮部位の標的とされる試験からのデータ収集物および有害事象の報告書を通してモニタリングされる。
【０６７８】
安全性の来院は、１、２、３、１２、１５、１７、１８、１９、２０、および１８２日目に行われ得、３、１８、１９、および２０日目の来院が、週末に当たる場合、電話により代替され得）、対象のコンプライアンスにより追加のまたはより少ない日にちが必要となり得る。例えば、対象は、自宅で適用させる前の４週間モニタリングされる場合がある。有害事象はまた、２８、５６、１１２、および１４０日目に安全性の電話でも報告され得る。加えて、肝臓および腎機能、Ｈｇｂ−Ａ１Ｃ、および検尿が、スクリーニング時および１８２日目に行われる。健康診断がスクリーニング時および１８２日目に行われ、バイタルサインおよびＥＣＧがスクリーニング時に行われる。バイタルサインはまた、０、８４、および１６８日目（ＤＡおよび写真撮影が行われるとき）および１８２日目（治療プロトコルの終了または早期中止時）にも測定される。
【０６７９】
９．４  データ分析のための計画／臨床研究のための統計
臨床的研究については、主要評価項目（写真によって取り込まれた１ｃｍ２当たりの毛髪数のベースラインから１６８日目までの変化）における試験（ＤＡ＋ミノキシジル）治療と参照（ミノキシジル）治療との真の差異が、１６本の毛髪／ｃｍ２である場合、７９人の対象は、５％の有意性レベルで、試験治療（ＤＡ＋ミノキシジル）が参照治療（ミノキシジル）に等しいという帰無仮説を否定するために９０％の検出力を提供する。１０％のドロップアウト率が予測され得る場合、さらに８人の対象を登録して、有効性の主要評価項目を達することを確実にし、対象の総数を８７人にすることができる。
【０６８０】
ラタノプロストを用いた臨床的研究については、主要評価項目（写真によって取り込まれた１ｃｍ２当たりの毛髪数のベースラインから１６８日目までの変化）における試験（ＤＡ＋ラタノプロスト）治療と参照（ラタノプロスト）治療との真の差異が、１９本の毛髪／ｃｍ２である場合、５７人の対象は、５％の有意性レベルで、試験治療が参照治療に等しいという帰無仮説を否定するために９０％の検出力を提供する。１０％のドロップアウト率が予測され得る場合、さらに６人の対象を登録して、有効性の主要評価項目を達することを確実にし、対象の総数を６３人にすることができる。
【０６８１】
有効性の主要評価項目の分析は、フルアナリシスセット（Ｆｕｌｌ  Ａｎａｌｙｓｉｓ
Ｓｅｔ）（登録し、少なくとも１用量のＨＧＰＡをＤＡおよび非ＤＡ部位に受容した全ての対象）において行われる。
【０６８２】
主要評価項目。共分散分析法が、写真によって取り込まれた毛髪数のベースラインから１６８日目までの変化において行われる。モデルにおける要因は、治療の固定効果、年齢区分、および対象の変量効果である。対象のベースライン（−６／０日目）の毛髪数は共変量である。
【０６８３】
副次的および探索的評価項目。写真によって取り込まれた毛髪数のベースラインから８４日目までの変化が、主要評価項目と同じように分析される（ベースラインから１６８日目の変化）。生検試料については、一般化線形モデルは、１つの生検当たりの毛包の平均数から推測される。これらのモデルにおける要因は、治療の固定効果、対象の年齢、および対象の変量効果、ならびに共変量としてＨａｍｉｌｔｏｎ−Ｎｏｒｗｏｏｄ分類である。
【０６８４】
安全性および薬物動態学的評価項目。治療ごとに分類する記述統計により、それぞれの安全性、および該当する場合、薬物動態学的評価項目について集計する。
【０６８５】
１０．実施例：ヒドロゲルの生成および特徴付け
本実施例は、創傷治癒のための治療の一部として、外皮攪乱後の投与、局所用育毛促進剤製剤等の生成のために、使用され得る局所用ヒドロゲルの生成および特徴付けを説明する。
【０６８６】
１０．１  製剤
ｉ．ヒドロゲルは、ＦＤＡ  Ｉｎａｃｔｉｖｅ  Ｉｎｇｒｅｄｉｅｎｔｓ  Ｄａｔａｂａｓｅのように、製剤および局所使用に使用される濃度範囲内で、ＧＲＡＳ（一般に安全と認められる）として分類される賦形剤を用いて、約９０％の水で製剤化された。
ｉｉ．製剤調製手順−１００バッチ、ロット番号ＴＨ−００３−０９８ｂ
以下の手順は、１００ｇのバッチのヒドロゲルを調製するためのステップを示す。この製剤を調製するためには４つのステップがある：
ａ）中和ＨＣｌ溶液（溶液Ａ）の調製：１０．５８ｇの１０ｗｔ％  ＨＣｌを、撹拌しながら、ビーカーに添加した。１１．９３ｇの１０ｗｔ％  ＮａＯＨ溶液によりこの溶液を中和する。この溶液のｐＨは、約７である。０．１４ｇのアラントイン、０．１１ｇのアルギン酸ナトリウム、および８．７ｇのグリセリンを、この溶液に逐次添加した。この溶液を滅菌濾過した。
ｂ）１．５ｇの滅菌ヒアルロン酸を、この溶液に徐々に添加した。６７．０４ｇの水を添加した。得られた分散物は、ポリマーが完全に溶解するまで激しく撹拌した。最終溶液は、透明な外観の単一液体相である。
ｃ）残りの材料の添加：８．７ｇのグリセリンをこの溶液に添加し、さらに３０分間撹拌した。
ｄ）ｐＨの測定  混合物のｐＨは、約７でなければならない。
ｅ）粘度：ゲル粘度は、Ｂｒｏｏｋｆｉｅｌｄ  Ｖｉｓｃｏｍｅｔｒｙを用いて測定した。室温での粘度は、４０９３ｃＰであった。
【０６８７】
ヒドロゲルはまた、保存剤としてメチルパラベン（０．１％）およびプロピルパラベン（０．０４８％）で調製することもできる。
【０６８８】
カルボキシメチルセルロースを有するヒドロゲルは、以下の通りに調製した。材料を表１７に記載する。１００ｇのバッチのために、４ｇのクエン酸を、室温で５９．７ｇの蒸留水に添加した。２５℃で撹拌を実行した。溶解のプロセス中、二酸化炭素の気泡が発生した。この溶液は、全ての気泡がシステム（溶液１）から消失するまで撹拌した。次に、０．１０４ｇのメチルパラベンおよび０．０４９ｇのプロピルパラベンを、室温で激しく撹拌しながら、溶液１に添加した。０．１６５ｇのアラントイン、０．１２ｇのアルギン酸ナトリウム、および２ｇのカルボキシメチルセルロースをこの溶液に添加し、激しく撹拌した。溶液の温度は、８０℃まで上昇させ、撹拌した。溶解のために約４時間を要した。透明な溶液を室温まで冷却し、１０．４６ｇのグリセリンをこの溶液に添加した。溶液を室温で２時間撹拌して、均一溶液を得た。適切な量（体積）の１０％のＮａＯＨ溶液をこの溶液に添加し、ｐＨを６．５〜７．５に調節した。
【０６８９】
【表１７】
2019131558.tif 000020
【０６９０】
１０．２  特徴付け
複数の１００ｇのバッチを、上記のプロセスを用いて調製した。バッチは、特性：ｐＨ（標的：７．０±０．５℃）；粘度（ｃＰ、２５℃）（標的範囲６，０００〜１０，０００ｃＰ）、および外観（標的：透明度）について特徴付けされた。特徴付けデータを表１８に概説する。
【０６９１】
【表１８】
2019131558.tif 000021
【０６９２】
粘度の測定
製剤のせん断粘度は、Ｂｒｏｏｋｅｆｉｅｌｄ  ＤＶ−ＩＩＩ  Ｕｌｔｒａ  Ｒｈｅｏｍｅｔｅｒ  ＩＶ、スピンドルＸを用いて測定した。シリコーン油（２５Ｃで１２，４００ｃＰ）を標準品として使用した。最大トルク（＞９８％）を有する試料は、２５Ｃで溶解した。
【０６９３】
製剤の粘度は、２５℃で、２，０００〜８，０００センチポアズ（ｃＰ）として測定された。４℃、２５℃、および４０℃のＩＣＨ温度条件下で行われた１００グラムのバッチにおける安定性研究は、強度、粘度、および均一性に関して８週間安定していた。
【０６９４】
３つの２．５Ｌのバッチをまた、上記のプロセスを用いて、表１９に記載されるような全ての材料のスケールアップ測定を用いて調製した。
【０６９５】
【表１９】
2019131558.tif 000022
【０６９６】
スケールアップバッチの特質には、６．９９のｐＨおよび２８５９ｃＰの粘度（２５℃で、９８％トルク）が含まれる。
【０６９７】
他の特性
上記のヒドロゲル（ヒアルロン酸系）は、表面上に容易に広がる透明で無臭無色の製剤である。周囲の部位への移動および流失は最小限であった。ゲルのｐＨは、皮膚および創傷の適合性に対して中性（７．０±０．５℃）になるように調節された。ヒドロゲルは室温で保存され得る。
【０６９８】
１１．実施例：ミノキシジルを含むペトロラタム系製剤
異なる軟膏製剤からのミノキシジルを、その疎水性を変化させることなく担体の分子流動性を変化させることによって異なるものとすることができる。これは、ペトロラタムの鉱油に対する比率を変化させることによって達成される。ペトロラタム製剤１〜４（表２０）は、（１）８．６、（２）２．８５、（３）０．９２５、および（４）０．２８３の比率で鉱油／ペトロラタムを有する。製剤の規模は、１０グラムである。それぞれの製剤は、５％のミノキシジルを有した。それぞれの製剤は、皮膚軟化剤および乳化剤として１５％のラノリンアルコールを有する。キャップおよび回転棒を備えた４つの２０ｍＬのシンチレーションバイヤルを１〜４のラベル表示を付け、それぞれ、０．５００グラムのミノキシジルおよび１．５００グラムのラノリンアルコールで充填した。この混合物は、流体溶解物に溶解して、容易に撹拌されるまで、８０℃まで加熱する。流体溶解物は、代替として、超音波処理を行い、ミノキシジルの均一な懸濁液が得られるまで撹拌する。鉱油およびペトロラタムの成分を、さらに４つのバイアル（「ペトロラタム型１〜４」）に合わせて、８０℃まで加熱する。１〜４のラベル表示付きのバイアルの内容物を、ペトロラタム型１〜４のラベル表示付きの内容物と合わせて、８０℃で約１５分間撹拌する。次いで、バイアルは加熱を停止し、ローラー上に置き、混合物が濃厚になるまで中速で回転させる。製剤を、２５℃で一晩均衡になるまで放置する。撹拌してから８〜１０時間後、製剤の一部分をへらによって回収し、皮膚感触で２本の指の間で感じられ、「容易に広がる」。製剤は安定した状態である。局所創傷の温度およびｐＨを模擬実験するために、インビトロ放出実験は、３２℃およびｐＨ７．４で設定された溶解チャンバ中で行われる。
【０６９９】
【表２０】
2019131558.tif 000023
【０７００】
１２．実施例：ミノキシジルを有するワセリン／水エマルジョン
本実施例は、エマルジョンクリーム製剤中の疎水性成分と親水性成分の比率を変化させることにより、ミノキシジルの放出を調節することができることを実証する。上記の先の実施例からのワセリン製剤番号２を疎水性の最も高い製剤として選択し、その製剤は、５％のミノキシジル、１５％のラノリンアルコール、および２．８５の鉱油／ワセリン比率を有する。第２の製剤（６０％親水性／４０％疎水性）は、４０％ワセリン／鉱油／ラノリンアルコール相に乳化された（２％のカーボポール９８０を含有する）水相の６０％を有した。５％のミノキシジルを水相中に溶解する。第３の製剤（１００％親水性）は、５％のミノキシジル、１．５％のカーボポール９８０、１０％のグリセロール、および水を含有する１００％の水性ゲルから成る。
【０７０１】
１３．実施例：持続放出送達用のミノキシジル製剤
本実施例は、持続放出送達用のミノキシジルクリーム製剤の生成を報告する。
【０７０２】
本実施例に記載される製剤は全て、水中油型エマルジョンである。以下の薬物放出速度を有する３種類の製剤を製剤賦形剤を変更することによって生成した：即時放出（１日未満）、中間放出（１〜３日間）、および持続放出（３〜７日間）。
【０７０３】
１３．１  即時放出製剤
即時放出製剤は、二相系を用いて生成され、その二相系のうちの一方は親水性賦形剤を溶解する水相であり、他方はミノキシジルおよび疎水性ポリマーを溶解する非水相である。
【０７０４】
製剤調製方法。ＫＩＣ  Ｃｈｅｍｉｃａｌｓのクエン酸（ロット番号２００２０３）を可溶化剤および緩衝剤として使用する。Ｌｕｂｒｉｚｏｌのカーボポール（ロット番号１００６５５６４５）を水相の増粘剤として使用した。非水相について、Ｄｏｗ  Ｃｏｒｎｉｎｇ  Ｃｈｅｍｉｃａｌｓの２つのシリコーン油の混合物（ロット番号６０８０６６０のシリコーン油３５０ｃｔｓおよびロット番号６０１９９８７のシリコーン油１２５００ｃｔｓを本明細書で「Ｓ２５」と称される２５：７５の比率で混合した）を中間粘度の担体として使用し、セテアリルアルコール（Ｃｒｏｄａ、ロット番号３３４４４７）およびラノリンアルコール（Ｃｒｏｄａ、ロット番号２６９１１３）を増粘剤／乳化剤として使用した。Ｓｐａｎ８０（Ｓｉｇｍａ、ロット番号１１４ｋ０１３７）およびtｗｅｅｎ２０（Ｓｐｅｃｔｒｕｍ  Ｃｈｅｍ．、ロット番号ＴＯ０４３４）を、それぞれ、非水相および水相の界面活性剤として使用する。Ｄｏｗ  Ｃｏｒｎｉｎｇの乳化剤１０（ロット番号５８６４６６７）を製剤のさらなる乳化剤として使用する。表２１を参照されたい。
【０７０５】
【表２１】
2019131558.tif 000024
【０７０６】
即時放出製剤を以下の３つのステップを用いて調製する。
【０７０７】
ｉ）１．２ｇのクエン酸を２１．３ｇの脱イオン水に添加する。全てのクエン酸が溶液に入るまで、この混合物をボルテックスし、超音波処理を行う。０．７２ｇのカーボポールおよび０．０４８ｇのＴｗｅｅｎ２０を溶液に添加する。カーボポールが完全に膨潤して水中に分散するまで、激しい撹拌下の結果として得られる系を水浴中で最大９０℃に加熱し、外観が半透明の単一液相をもたらす。
【０７０８】
ｉｉ）非水相（第ＩＩ相、１６Ｇ）：５０ｍｇ／ｍＬのミノキシジル、１．６ｇのセテアリルアルコール、および３．２ｇのラノリンアルコールを、シリコーン油混合物（Ｓ２５、ロット番号６０８０６６０のシリコーン油３５０ｃｔｓおよびロット番号６０１９９８７のシリコーン油１２５００ｃｔｓを２５：７５の比率で混合する）に添加する。０．０３２ｇのＳｐａｎ８０および０．３２ｇの乳化剤１０を添加した後、全ての成分が溶解するまで混合物を水浴中で最大９０℃に加熱し、結果的に（熱い間は）透明な単一相溶液になる。
【０７０９】
ｃ）均質化：（まだ熱いままの）１６ｇの第ＩＩ相を全て２４ｇの第Ｉ相に添加し、それら２つの相を高速ホモジナイザーを用いてともに混合し、単一相クリームを得る。水相（第Ｉ相）と非水相（第ＩＩ相）の比率は６０：４０である。
【０７１０】
即時放出製剤は、表２２に要約される。混合物の水相、非水相、および最終相が表に示されており、４０ｇのバッチ製剤に対して各相で必要とされる賦形剤の量を列記する。
【０７１１】
即時放出製剤中のミノキシジル含量をＨＰＬＣによって測定する。
【０７１２】
【表２２】
2019131558.tif 000025
【０７１３】
１３．２  中間放出製剤
ミノキシジルの中間放出エマルジョンクリーム製剤を以下の方法で開発する。エマルジョンを、即時放出製剤について上で記載されるように、２つの相の均質化によって調製した。
【０７１４】
製剤調製方法。この製剤で使用される原材料は、シリコーン油の代わりに鉱油を使用したことを除いて、上述の即時放出製剤で使用される原材料と同一であった。この中間放出製剤用の賦形剤のロット番号を以下の表２３に列記する。
【０７１５】
【表２３】
2019131558.tif 000026
【０７１６】
４０ｇのバッチの場合、以下の調製方法を使用する。
【０７１７】
ｉ）水相（第Ｉ相、２４Ｇ）：１．２ｇのクエン酸を２１．３２ｇの水を含有する溶液に徐々に添加する。全ての成分が溶解するまで、この混合物をボルテックスし、超音波処理を行った。その後、０．７２ｇのカーボポール９８０および０．０５ｇのＴｗｅｅｎ２０を上の溶液に添加した。カーボポールが完全に膨潤して水中に分散するまで、激しい撹拌下の結果として得られる系を水浴中で最大９０℃に加熱した。第Ｉ相は、外観が半透明の単一液相である。
【０７１８】
ｉｉ）非水相（第ＩＩ相、１６Ｇ）：３．２３ｇのセテアリルアルコールおよび２．５９ｇのラノリンアルコールを９．８９ｇのＤｒａｋｅｏｌ３５０鉱油に添加した。０．０４ｇのＳｐａｎ８０および０．３３ｇの乳化剤１０を上の系に添加した後、ポリマーが溶解するまで、全混合物を水浴中で最大９０℃に加熱した。第ＩＩ相は、透明な単一相溶液である。
【０７１９】
ｉｉ）均質化：相を均質化してともに混合した。水相と非水相の比率は６０：４０である。
【０７２０】
【表２４】
2019131558.tif 000027
【０７２１】
６．１．１  ヒドロゲルＩ
粘性のある透明なヒドロゲルが水和ゲルとして皮膚に適用される。ヒドロゲルは、レーザー処置、微細削皮術、およびケミカルピーリング等の若返り治療後に適用される。
【０７２２】
ヒドロゲルは、激しく撹拌しながら、１５．７９ｇの水中に１．６ｇのクエン酸を溶解することによって調製した。０．０４１ｇのメントールを滴加した。この溶液のｐＨを測定して、ｐＨが６〜８の範囲内であることを確認した。０．０２４ｇのアルギン酸ナトリウムおよび０．４００ｇのＣＭＣを溶液に添加し、次いで、激しく撹拌した。次いで、０．０３２ｇのアラントイン、２ｇのグリセリン、０．０２１ｇのメチルパラベン、および０．０１０のメチルパラベンを製剤に添加した。この溶液のｐＨを測定し、水酸化ナトリウムで中和した。
【０７２３】
【表２５】
2019131558.tif 000028
【０７２４】
６．１．２  ヒドロゲルＩＩ
ヒドロゲルＩＩは、保湿剤としてこの製剤中の材料としてヒアルロン酸ナトリウムを添加したことを除いては、項６．１．１に記載されるヒドロゲルＩと同じ方法で調製した。
【０７２５】
ヒドロゲルは、激しく撹拌しながら、１５．７９ｇの水中に１．６ｇのクエン酸を溶解することによって調製した。０．０４１ｇのメントールを滴加した。この溶液のｐＨを測定して、ｐＨが６〜８の範囲内であることを確認した。０．０２４ｇのアルギン酸ナトリウムおよび０．４００ｇのヒアルロン酸ナトリウムを溶液に添加し、激しく撹拌した。０．０３２ｇのアラントイン、２ｇのグリセリン、０．０２１ｇのメチルパラベン、および０．０１０のメチルパラベンを製剤に添加した。ｐＨを測定し、ヒドロゲルを水酸化ナトリウムで中和した。
【０７２６】
【表２６】
2019131558.tif 000029
【０７２７】
６．１．３  ヒドロゲルＩＩＩ
ヒドロゲルＩＩＩは、皮膚に優しい（ｓｋｉｎ−ｃｏｍｐａｔｉｂｌｅ）組織再生剤としてアロエおよびコラーゲンを含有する。このゲルは、若返りゲルとして皮膚に適用される。
【０７２８】
１．６ｇのクエン酸を、激しく撹拌しながら、１５．７９ｇの水に溶解する。０．０４１ｇのメントールを滴加する。この溶液のｐＨを測定して、ｐＨが６〜８の範囲内であることを確認する。０．０２４ｇのアルギン酸ナトリウム、０．４００ｇのコラーゲン、および１ｇのアロエを、激しく撹拌しながら、溶液に添加する。０．０３２ｇのアラントイン、１ｇのグリセリン、０．０２１ｇのメチルパラベン、および０．０１０のメチルパラベンを製剤に添加する。ｐＨを測定し、ヒドロゲルを水酸化ナトリウムで中和する。
【０７２９】
【表２７】
2019131558.tif 000030
【０７３０】
６．１．４  エモリエントクリーム
エモリエントクリームは、全てが溶解されるまで、表２８（第１相）に記載される全ての材料を混合することによって作製される。１０％のＮａＯＨを用いたｐＨ。混合は、５０℃で維持される容器内で行われる。
【０７３１】
全てが溶解されるまで、表２９（第２相）に記載される全ての材料を混合する。混合は、８０℃で維持される容器内で行われる。これらの材料は、大豆油、水素化綿実油、ポリグリセリル−１０デカオレート、ポリグリセリル−６オクタステアレート、ホホバ油、シアバター、およびオリーブ油である。
【０７３２】
第１相溶液を、振とうし、混合しながら、第２相溶液に添加する。混合物は、混合しながら、室温まで冷却させる。得られたエモリエントクリームの成分を表３０に記載する。
【０７３３】
【表２８】
2019131558.tif 000031
【０７３４】
【表２９】
2019131558.tif 000032
【０７３５】
【表３０】
2019131558.tif 000033
【０７３６】
１４．実施例：ミノキシジルの小胞製剤の生成および特徴付け
従来の局所ミノキシジル製剤は、プロピレングリコール−水−エタノール溶液からなる。しかしながら、これらの製剤の１日２回の適用は、頭皮のかぶれ、火照り、乾燥、赤み、アレルギー性接触皮膚炎等の重篤な有害反応を生じる場合がある。これらの副作用を最小限に抑え、治療効果を増強するために、皮膚において有効荷重（ｐａｙｌｏａｄ）を「堆積する」製剤が好都合である。従来の剤形と比較して、伝統的なリポソーム製剤は、インビトロで高度な皮膚の薬物の蓄積を示す。
【０７３７】
毛包を標的とするように設計されたミノキシジルのナノリポソーム製剤が記載される。大豆レシチン、トランスクトール（ｔｒａｎｓｃｕｔｏｌ）、ジセチルリン酸塩、ラブラゾル（ｌａｂｒａｓｏｌ）、およびシネオールから調製されるリポソーム小胞が開示される。
【０７３８】
ミノキシジル（式Ｃ９Ｈ１５Ｎ５Ｏ、分子量２０９．２５ｇｍｏｌ−１の構造が以下に与えられる。
【０７３９】
【化２】
2019131558.tif 000034
【０７４０】
原材料は、以下の製造業者から得られる。大豆レシチン（ＳＬ）はＧａｌｅｎｏ（Ｐｏｔｅｎｚａ，Ｉｔａｌｙ）から得られ、ミノキシジル（ＭＷ２０９．２５）はＳｉｇｍａ
Ａｌｄｒｉｃｈから購入する。ジセチルリン酸塩（ＤＣＰ）およびシネオールはＡｌｄｒｉｃｈから購入する。トランスクトールおよびラブラゾルはＧａｔｔｅｆｏｓｓｅから得られる。
【０７４１】
小胞は以下の方法で調製される。大豆レシチン、ＣＤＰ、ミノキシジル、および浸透促進剤は、塩化メチレン中に共に溶解した。次いで、脂質薬物溶液を溶媒の回転蒸発によって乾燥させる。フィルムは、塩化メチレンの痕跡に対してガスクロマトグラフィーによって分析される。次いで、フィルムは、機械的撹拌下で蒸留水によって室温で１時間水和される。懸濁液は、超音波プローブを用いて超音波分解し、それを分散する。ナノ小胞を得るために、分散液をマイクロ流動化することができる。次いで、リポソーム分散液は、−２０℃で凍結乾燥させる。凍結乾燥した小胞は水で再構成される。溶液の粘度は、再構成溶液の粘度を変化させることによって調節することができる。
【０７４２】
前のステップで生成されたナノ構造体は、Ｍａｖｅｒｎ  Ｚｅｔａｓｉｚｅｒを用いて大きさ順に並べる。ナノ構造体におけるミノキシジルの取り込みは、ミノキシジルの総量の割合として示される。これは、Ｔｒｉｔｏｎ  Ｘ−１００による構造体の破壊後、高速液体クロマトグラフィー（ＨＰＬＣ）によって決定される。小胞はまた、透過光顕微鏡法（ＴＥＭ）または偏光顕微鏡法によって特徴付けることもできる。製剤を用いたインビトロ皮膚浸透および透過研究は、ブタ皮膚を用いた垂直拡散Ｆｒａｎｚ細胞を用いて非閉塞的に行われる。テープストリッピングを用いて角質層を除去し、皮膚採取して、真皮から表皮を除去して、皮膚の様々な層は、除去することができる。皮膚試料を、メタノール中で均質化し、ミノキシジルを抽出する。試料を、ＨＰＬＣによって定量化し、ミノキシジルの皮膚浸透を評価する。
【０７４３】
１５．実施例：硫酸ミノキシジルのヒドロゲル製剤の生成および特徴付け
本実施例は、硫酸ミノキシジルの可溶性ヒドロゲル製剤を提供する。硫酸ミノキシジルは、ミノキシジルの水溶性塩である。２０ｇ／ｍＬの硫酸ミノキシジルは、２％のヒアルロン酸、０．１％のアラントイン、および５％のグリセロールを含有する水溶液中に溶解する。この溶液は、水酸化ナトリウムを用いてｐＨを中和する。
【０７４４】
１６．実施例：ラタノプロストのナノリポソーム製剤の生成および特徴付け
原材料は、以下の製造業者から得られる。大豆レシチン（ＳＬ）はＧａｌｅｎｏ（Ｐｏｔｅｎｚａ，Ｉｔａｌｙ）から得られ、ラタノプロストはＳｉｇｍａ  Ａｌｄｒｉｃｈから購入する。ジセチルリン酸塩（ＤＣＰ）およびシネオールはＡｌｄｒｉｃｈから購入する。トランスクトールおよびラブラゾルはＧａｔｔｅｆｏｓｓｅから得られる。
【０７４５】
小胞は以下の方法で調製される。大豆レシチン、ＣＤＰ、ラタノプロスト、および浸透促進剤は、塩化メチレン中に共に溶解した。次いで、脂質薬物溶液を溶媒の回転蒸発によって乾燥させる。フィルムは、塩化メチレンの痕跡に対してガスクロマトグラフィーによって分析される。次いで、フィルムは、機械的撹拌下で蒸留水によって室温で１時間水和される。懸濁液は、超音波プローブを用いて超音波分解し、それを分散する。ナノ小胞を得るために、分散液をマイクロ流動化することができる。次いで、リポソーム分散液は、−２０℃で凍結乾燥させる。凍結乾燥した小胞は水で再構成される。溶液の粘度は、再構成溶液の粘度を変化させることによって調節することができる。
【０７４６】
前のステップで生成されたナノ構造は、Ｍａｖｅｒｎ  Ｚｅｔａｓｉｚｅｒを用いて大きさ順に並べる。ナノ構造体におけるミノキシジルの取り込みは、ラタノプロストの総量の割合として示される。これは、Ｔｒｉｔｏｎ  Ｘ−１００による構造体の破壊後、高速液体クロマトグラフィー（ＨＰＬＣ）によって決定される。小胞はまた、透過光顕微鏡法（ＴＥＭ）または偏光顕微鏡法によって特徴付けることもできる。製剤を用いたインビトロ皮膚浸透および透過研究は、ブタ皮膚を用いた垂直拡散Ｆｒａｎｚ細胞を用いて非閉塞的に行われる。テープストリッピングを用いて角質層を除去し、皮膚採取して、真皮から表皮を除去して、皮膚の様々な層は、除去することができる。皮膚試料を、メタノール中で均質化し、ラタノプロストを抽出する。試料を、ＨＰＬＣによって定量化し、ラタノプロストの皮膚浸透を評価する。
【０７４７】
１７．実施例：レーザー＋ミノキシジルを用いた治療プロトコル
Ｈａｍｉｌｔｏｎ−Ｎｏｒｗｏｏｄ型ＶＩの男性型脱毛症を有するＦｉｔｚｇｅｒａｌｄのタイプＩＩの皮膚を有する３０歳の白人男性ヒト対象（タイプＩが最も白く、タイプＶＩが最も濃い（Ｗｅｌｌｅｒ  ｅｔ  ａｌ．，２００８，Ｃｌｉｎｉｃａｌ  Ｄｅｒｍａｔｏｌｏｇｙ，４ｔｈ  ｅｄ．，Ｍａｌｄｅｎ，ＭＡ：Ｂｌａｃｋｗｅｌｌ  Ｐｕｂｌｉｓｈｉｎｇ，ｐｐ．２６８）を参照のこと）は、局所ミノキシジル発泡体５％および／または１ｍｇ／日の経口フィナステライドによる治療にもかかわらず、継続した毛髪脱落の病状を示す。対象の頭皮の禿頭および過渡期な領域は、毛を剃り、１５４０〜１５５０ｎｍの発光を有するフラクショナルおよび非アブレーションエルビウム−ＹＡＧレーザーによる処置によって調製され（５０〜７０Ｊ／ｃｍ２、８〜１０の治療レベル、および８回のパスに設定）、対象は、局所ヒドロゲルが与えられ、局所ミノキシジルを中断し、頭皮の治療した領域に１週間ゲルを適用するように指示される。約１１日間後、ゲルによる治療は、中断し、局所ミノキシジル発泡体および／またはフィナステライドを再開し、３週間後、評価する。
【０７４８】
療法への応答は、新しい毛髪の成長（頭皮の罹患領域における繊維数の増加）、繊維の厚み、毛髪繊維の長さを測定すること、および毛髪の成長の患者の個人的な評価のうちの１つ以上によって決定される。罹患した頭皮の治療領域は、生検を行い、毛包周期（成長期、退行期等）の様々な段階における毛包の分布；細胞周期（例えば、Ｇ２、Ｍ等）の様々な段階における毛包細胞の分布；新しい毛包の成長、分岐毛包；毛包分割を受ける毛包；新しい毛髪繊維を成長させる毛包、毛髪繊維がない毛包について試験される。
【０７４９】
対象は、任意に、例えば、毛髪密度を増加させるために、さらなる１０の周期により治療を行い、例えば、レーザー処置、続いて、約２週間の局所ゲルにより治療を行い、続いて、ミノキシジル発泡体による治療を再開する。療法への応答は、上記の方法によって測定される。
【０７５０】
上記および前述例の項８および９の治療（または上の項５に記載される任意の他の治療）は、代替的には、以下のレーザー処置のうちの１つを適用することによって達成され得る。
【０７５１】
１７．１  アブレーションレーザー処置
アブレーションレーザー処置では、任意の攪乱後ゲルの適用は、滅菌されており、任意に、治療領域は、救急絆によって覆われる。例えば、アブレーションレーザー処置は、２９４０ｎｍでエルビウム−ＹＡＧレーザーまたは１０，６００ｎｍでＣＯ２レーザーを用いて達成され得る。
【０７５２】
１７．２  超パルスＣＯ２フラクショナルレーザー
治療領域の既存の毛髪を剃り／刈り込み、続いて、消毒剤で洗浄した後、リドカインＨＣＬ２％およびエピネフリンを１：１００，０００で注入して、治療する領域の表面を麻酔する。超パルス（フラクショナルモード）ＣＯ２レーザーを用いて、表皮および真皮を約１００〜５００μｍの深さまで攪乱する。超パルスレーザーは、削皮術の効果に類似した効果をもたらすが、攪乱を引き起こすことで、非瘢痕性フラクショナルアブレーションによってより大きいエネルギーを皮膚のより深い部分に送達する。治療領域は、１．５ｃｍ×１．５ｃｍの正方形である。超パルスは、パターンサイズ８、密度４を用いて、最大３５０ｍＪ、最大５２．５ワットを送達するように設定され、正方形の治療部位を最大５回のパスで満たす。
【０７５３】
１７．３  超パルスＣＯ２アブレーションレーザー
治療領域の既存の毛髪を剃り／刈り込み、続いて、消毒剤で洗浄した後、リドカインＨＣＬ２％およびエピネフリンを１：１００，０００で注入して、治療する領域の表面を麻酔する。超パルスＣＯ２レーザー（アブレーションモード）を用いて、表皮および真皮を約１００〜５００μｍの深さまで攪乱する。超パルスレーザーは、削皮術の効果に類似した効果をもたらすが、攪乱を引き起こすことで、削皮術に似た非瘢痕性アブレーションによってより大きいエネルギーを皮膚のより深い部分に送達する。治療領域は、１．５ｃｍ×１．５ｃｍの正方形である。超パルスは、１ミリ秒で最大５００ｍＪ、１ワットを送達するように設定され、２Ｈｚで３ｍｍのスポットサイズを用いて、正方形の治療部位を満たすには、最大１５回のパスを必要とし得る。
【０７５４】
１７．４  ＣＡＮＤＥＬＡスムースピールフルアブレーションエルビウムレーザー
治療領域の既存の毛髪を剃り／刈り込み、続いて、消毒剤で洗浄した後、リドカインＨＣＬ２％およびエピネフリンを１：１００，０００で注入して治療する領域の表面を麻酔する。アブレーションエルビウムレーザーは、最大１５回のパスで最大５００μＭの深さの攪乱を引き起こすように、２４０ミリ秒で最大５ジュールのエネルギーをレベル３で送達するように設定される。１．５ｃｍ×１．５ｃｍの正方形である。
【０７５５】
１８．実施例：削皮治療の変形
前述の実施例の第８、９、および１７項に記載される治療（または上の第５項に記載される任意の他の治療）を、代替的に、レーザー処置の代わりに以下の削皮治療を適用することによって達成することができる。
【０７５６】
治療領域の既存の毛髪を剃り／刈り込み、続いて、消毒剤で洗浄した後、リドカインＨＣＬ２％およびエピネフリンを１：１００，０００で注入して、治療する領域の表面を麻酔する。全表皮の除去および真皮乳頭層の攪乱（光沢のある滑らかな白っぽい外観によって検出可能である）を含む標準の削皮術をＴｉｅｍａｎｎ  ａｎｄ  ＣｏｍｐａｎｙのＡｓｅｐｔｉｃｏ  Ｅｃｏｎｏ削皮器を用いて約１００〜１５０μＭの深さまで行い、治療する領域に小さい血液プールを形成する。削皮された領域はそれぞれ、１．５ｃｍ×１．５ｃｍの正方形である。代替の実施例において、Ｂｅｌｌ  Ｈａｎｄ削皮装置を使用してもよい。別の変形例では、上の第５項に記載される削皮先端部を有する削皮器を使用し、その場合、既存の毛髪を剃るか、または刈り込む必要はない。
【０７５７】
１９．実施例：固液原位置で架橋結合スプレー
閉塞性でもある高度に疎水性のマトリックスを使用することなく、持続した濃度の薬物、具体的には、高度に水溶性の薬物を放出する製剤を調製する際にある問題が存在する。疎水性（２超のｌｏｇ  Ｐ）の薬物を、水媒体中でのそれらの薬物の緩徐な溶解、ならびに細胞および組織脂質におけるそれらの薬物のその後の抽出の結果、持続した様式で組織に送達することができる。しかしながら、水溶性の高い薬物は、組織区画（皮膚または血液）からの迅速なクリアランスを経験する。薬物の放出を遅延させる方法の１つは、ワセリン／鉱油軟膏等の高度に疎水性のマトリックスの使用を伴う。これらのマトリックスは、保管中に高い安定度を提供することができ、それらを容易に皮膚または真皮創傷に適用することができる。さらに、ワセリンベースの軟膏基剤は、薬物の７〜１４日間の持続放出を提供し得る。しかしながら、これらの軟膏ベースの製剤は閉塞性である。閉塞性製剤は、組織に適用した後、酸素と水分の交換を低下させる。創傷治癒プロセス中および育毛プロセス中に表面が「呼吸する」ことが重要である。エマルジョン（油中水型）の閉塞特性をその親水性／疎水性の比率を変化させることによって調節することができるが、これらは、薬物のより迅速な放出をもたらす。
【０７５８】
ミクロスフェアカプセル化薬物が、分子の放出を持続させるための方法として使用されている。薬物をポリ（ラクチド−コ−グリコリド）（ＰＬＧ）マイクロスフェア中にカプセル化して、放出を調節することができる。放出速度はポリマーのＬ／Ｇの関数として変化する。しかしながら、１０ミクロン未満の大きさの微粒子およびマイクロスフェアは、食作用によって３日以内に創傷部位から迅速にクリアされる。したがって、薬物の持続送達を促進するために創傷部位でマイクロスフェアを送達および維持する薬物送達系が必要とされる。
【０７５９】
マイクロスフェアの滞留時間を増加させる方法の１つは、組織表面との分子結合を形成する原位置で架橋結合ヒドロゲルによって、創傷表面に対して送達系を隔離することである。原位置で架橋結合ヒドロゲルを軟膏またはクリームのようにこすり落とすことはできない。マイクロスフェアはヒドロゲル中に隔離され、薬物を持続した様式で放出する。したがって、マイクロスフェアの食作用問題を打開することができる。
【０７６０】
さらに、マイクロスフェアと組織およびヒドロゲルを「結合する」電荷でマイクロスフェアの表面を機能化することによって隔離を強化することができる。真皮の正味電荷は負である。したがって、正に荷電したマイクロスフェアは、薬物を含有するミクロスフェアの隔離プロセスを強化する。塩化セチルピリジニウム、塩化ベンザルコニウム、または臭化セチルトリアンモニウム（ＣＴＡＢ）等のカチオン性界面活性剤で被覆することにより、ＰＬＧマイクロスフェアに正電荷を付与することができる。あるいは、コーティングは、キトサン、またはポリリジン、またはポリ（アルギニン）、またはポリ（アミドアミン）（ＰＡＭＡＭ）、またはポリ（エチレンイミン）（ＰＥＩ）のコーティング等のポリマーコーティングであってもよい。
【０７６１】
創傷被覆材または局所用薬物製剤、例えば、本明細書に記載されるヒドロゲル等と創傷表面との分子結合の形成は、ヒドロゲル成分の反応基のうちのいくつかが真皮中に存在するタンパク質と軽く反応することができる場合にのみ達成され得る。この概念は、ヒドロゲル成分およびマイクロスフェアを創傷表面上に送達し、表面上に均一なコーティングを作成することができる噴霧装置を含む。噴霧後、液体コーティングは架橋結合ヒドロゲルになり、マイクロスフェアはその中で隔離している。噴霧される溶液は、押し出された溶液よりも高いエネルギーを有し、このことは、ヒドロゲルが組織上で架橋結合するときに、ヒドロゲルと真皮との機械的連結を支援する。ヒドロゲルは、生分解性でなければならず、薬物が送達された後に治癒中の創傷から剥がれなければならない。ヒドロゲルの特性、例えば、その生分解性、その成分の「ゲル化時間」、およびその架橋結合密度は、重要な特性であり、必須の送達系に到達するように最適化される必要がある。
【０７６２】
架橋結合ヒドロゲルの形成前に、薬物をヒドロゲル成分中に直接溶解することができる。
【０７６３】
育毛を表皮／真皮レーザーアブレーションによって達成することができる。レーザーは、２９４０ｎｍのエルビウム、または１０，４００ｎｍのＣＯ２であり、フラクショナルまたはバルクアブレーション機能を有する。アブレーション後、臨床医は、乾燥固体を液体溶液で再構成することによって、第１のポリマー（ポリマー１）と第２のポリマー（ポリマー２）を混合し、アブレーションされた領域を、生体適合性かつ生分解性の創傷被覆材および送達系として作用する原位置で架橋結合ヒドロゲルで迅速に噴霧する。これを、一方のチャンバに液体を、他方のチャンバに（薬物を含有するマイクロスフェアを有するか、または有しない）凍結乾燥された固体を含有する２チャンバ型噴霧器を用いて達成することができる。１つ以上の薬物を、液体を含有するチャンバ内で溶解することができることに留意されたい。１つの薬物または薬物の組み合わせをこの方法で投与することができる。
【０７６４】
１９．１  一方のチャンバ内に凍結乾燥された固体を有し、もう一方のチャンバ内に液体を有する２つのチャンバの噴霧器
噴霧器の設計は、凍結乾燥された固体成分と液体成分の均一混合を組み入れる。噴霧器の設計はまた、湿気から成分のそれぞれを保護することも組み入れる。噴霧器の材料は、滅菌を可能にするものから選択される。
【０７６５】
チャンバ１内に収容された凍結乾燥された固体成分は、ポリマーマクロモノマー（ポリマー１）（別の成分とさらに架橋結合することができるポリマー）からなる。このポリマーには、その加水分解的に不安定な結合のため、凍結乾燥することが必要である。したがって、この成分は水中に保存することができない。もう一方のチャンバ（チャンバ２）内の成分は、凍結乾燥されたポリマー（ポリマー１）と反応することが可能な別のポリマーマクロモノマー（ポリマー２）を含有する。ポリマー２は、ｐＨ６〜８のリン酸緩衝液中に溶解される。ポリマー２は、加水分解的に不安定な結合を含まず、水中で安定している。したがって、ポリマー２は水中に保存することができない。この概念では、溶液を含有するポリマー２が噴霧器内で生じる混合によって凍結乾燥されたポリマー１を再構成することが想定される。次いで、混合溶液は、投与部位上に急速に噴霧される。噴霧時、溶液は架橋結合するか、またはヒドロゲルを形成する。相互に反応するポリマーの架橋結合反応は、ゲル化の臨界点まで溶液の粘度を増加させ、この時点で、溶液は、架橋結合した固体ヒドロゲルである。ポリマーは、混合溶液が時期尚早にゲル化しない、または噴霧前に噴霧チャンバ内で架橋結合しないような様式で製剤化する必要がある。
【０７６６】
リン酸緩衝液中に溶解したポリマー２は、ポリマー１の再構成溶液である。噴霧の調製時、チャンバ２の成分は、チャンバ１内の固体と混合して、均一溶液を形成する。成分（ポリマー１＋ポリマー２）は、生分解性ヒドロゲルを形成するために相互に反応することが可能である。「ゲル化までの時間」を変化させることができる様々な手段がある。ポリマーの架橋結合の反応時間は、この反応がより高いｐＨによって引き起こされるため、ｐＨによって調節することができる。再構成溶液のｐＨは、ポリマー１とポリマー２との反応が瞬時に架橋結合しないように、噴霧前に噴霧機内にゲルを形成することができる。架橋結合速度はまた、架橋結合基数によって調節することができる。したがって、高濃度の２つのポリマーは、低濃度のものよりも迅速に架橋結合する。ポリマー分子当たりの架橋結合基数はまた、「ゲル化時間」の調節における要因である。したがって、３重量％の濃度で４つの反応基を有する４本のアームを有するポリマーは、同じ濃度で２本のアームを有するポリマーよりも迅速に反応する。緩衝液ｐＨおよび互いに反応するポリマー構造体の選択は、ゲル化速度を制御する。
【０７６７】
薬物を含有するマイクロスフェアがどのチャンバに存在するかを考慮すると、ポリマーおよびＰＬＧマイクロスフェアの両方が加水分解的に不安定であるため、例えば、ＰＬＧマイクロスフェアが凍結乾燥されたポリマーまたは固体成分を収容するチャンバであるチャンバ１内に保存する必要があることは明白である。また、マイクロスフェア内に含まれる薬物は、マイクロスフェアが水和した後のみ放出されるため、乾燥形態での保存が必要である。したがって、チャンバ１は、ポリマー１および薬物を含有する。他の賦形剤を凍結乾燥された固体の一部に添加して、薬物の分散を助け、固体の「凝集」を最小限に抑え、再構成時間を最小限に抑えることができる。チャンバ２（液体チャンバ）は、水溶液、またはほとんど水性である溶液中にポリマー２を含有する。他の賦形剤を、必要に応じてポリマー２に添加し、得られたヒドロゲルへのさらなる特性を与えることができる。例えば、正電荷を持つ分子をチャンバ２内の水溶液に添加し、ヒドロゲルへのさらなる生体接着性を与えることができる。
【０７６８】
ポリマー１（チャンバ１または固体チャンバ）およびポリマー２（チャンバ２または液体チャンバ）の製剤組成物の例が以下の小項に提供される。
【０７６９】
１９．１．１  ポリエチレングリコールの４本のアームを持つスクシンイミジルエステル（ＰＥＧ−ＮＨＳ）とポリエチレングリコールの４本のアームを持つアミン（ＰＥＧ−ＡＭ）の反応
ＰＥＧ−ＡＭ／ＰＥＧ−ＮＨＳヒドロゲルは、接着防止剤として認可されており、材料のそれぞれは、医薬品グレードで入手できる。さらに、ヒドロゲルは、高度に生体適合性のある創傷被覆材として機能する高い水分含有量を有し、一方、創傷は、その下で治癒する。ヒドロゲルの高い水分含有量はまた、創傷環境で湿潤を維持する。ＰＥＧ−ＡＭおよびＰＥＧ−ＮＨＳは、ｐＨ６〜８で相互に反応して、生分解性のある共有結合的に架橋されたヒドロゲルネットワークを形成する。それぞれの成分は、４本のアームを持ち、それぞれのアームは反応することができる。ＰＥＧ−ＮＨＳは、反応において求電子剤であり、より高いｐＨによって活性化する。ＰＥＧ−ＮＨＳは開裂可能な結合を有し、この材料は、乾燥および固体の状態で維持しなければならない。ＰＥＧ−ＮＨＳは、噴霧機のチャンバ１内で凍結乾燥された凝集状態で保存され得る。ＰＥＧ−ＡＭは、反応において求核試薬である。ＰＥＧ−ＮＨＳのＮ−ヒドロキシスクシンイミド基は、ＰＥＧ−ＡＭのアミン基によって求核置換反応を行う。さらに、ＰＥＧ−ＮＨＳは、真皮のタンパク質に存在するアミノ基に反応性があり、それ故に、ヒドロゲルを連結する分子を組織に生じさせることが可能である。これは、その部位でマイクロスフェアを用いてヒドロゲルを隔離する。
【０７７０】
ＰＥＧ−ＡＭにおいて開裂可能な結合がないため、この成分は、噴霧機のチャンバ２内に保存することができる。混合し、ヒドロゲルに架橋結合した後、反応によって形成されたエステル結合は、加水分解によって生分解性のあるヒドロゲルを提供する。
【０７７１】
ポリマー１：ポリエチレングリコールの４本のアームを持つスクシンイミジルエステル（ＰＥＧ−ＮＨＳ）は、Ｎａｎｏｃｓのカタログ番号４ＡＰＮ０５１２２０１０（分子量１０，０００ダルトン）から購入した。
【０７７２】
ポリマー２：ポリエチレングリコール４本のアームを持つアミン（ＰＥＧ−ＡＭ）は、Ｎａｎｏｃｓのカタログ番号ＰＥＧ４Ａ−ＡＭ−１０Ｋ、ロット番号４ＡＰＭ０９１６２００９（分子量１０，０００ダルトン）から購入した。
【０７７３】
緩衝液成分
・  二塩基性リン酸ナトリウム、無水、Ｓｉｇｍａ、カタログ番号Ｓ−０８７６、ロット番号１２０Ｋ０１２６
・  一塩基性リン酸ナトリウム、無水、Ｓｉｇｍａ、カタログ番号Ｓ−０７５１、ロット番号２０Ｋ０２２８
・  リン酸二水素カリウム、Ａｌｆａ  Ａｅｓａｒ、カタログ番号１１５９４、ロット番号Ｂ０４Ｖ０２５
・  塩化ナトリウム、Ａｌｄｒｉｃｈ、カタログ番号７６４７−１４−５、ロット番号１２５１６ＨＩ
装備
・  温度／ＲＰＭ制御を備えた磁気撹拌機ＩＫＡ  ＬａｂｏｒｔｅｃｈｎｉｋのＲＥＴ  ＤＶＳ１
・  Ａｃｃｕｍｅｎｔ  ｐＨメーター２５
・  水槽
手順
（１）リン酸緩衝液の調製
０．２Ｍの一塩基性リン酸ナトリウム（ＳＰＭ）および０．２Ｍの二塩基性リン酸ナトリウム（ＳＰＤ）の原液は、５．０ｍＬの水中に０．１３９ｇのＳＰＭおよび１０．０ｍＬの水中に０．２８４ｇのＳＰＤを溶解することによって調製した。ＳＰＭおよびＳＰＤが必要である容積（表３１）を混合し、３．０ｍＬの水によって希釈して、ｐＨ７．０、ｐＨ７．５、またはｐＨ８で０．１Ｍのリン酸塩を得た。ｐＨ値は、ｐＨメーターによって確認され、必要に応じて、必要値に調節した。緩衝液の調製のための配合を表３１に提供する。
【０７７４】
【表３１】
2019131558.tif 000035
【０７７５】
（２）リン酸緩衝生理食塩水（ＰＢＳ）の調製
１×ＰＢＳは、１．０Ｌの水中に８．０ｇの塩化ナトリウム、０．２ｇの塩化カリウム、１．４４ｇの二塩基性リン酸ナトリウム、および０．２４ｇの一塩基性リン酸カリウムを溶解することによって調製した。
【０７７６】
（３）ＰＥＧ−ＡＭ／ＰＥＧ−ＮＨＳヒドロゲルの調製および特徴付け
（ａ）ＰＥＧ−ＡＭ／ＰＥＧ−ＮＨＳヒドロゲルの調製
この実験では、水中でＰＥＧ−ＡＭおよびＰＥＧ−ＮＨＳを保存する可能性を、ゲル化時間を試験することによって試験した。
【０７７７】
ＰＥＧ−ＡＭ水溶液およびリン酸緩衝液とＰＥＧ−ＮＨＳ水溶液の混合（架橋結合溶液）  ５重量％のＰＥＧ−ＮＨＳおよび５重量％のＰＥＧ−ＡＭの２つの原液は、１．０ｍＬの水中に５０．０ｍｇのそれぞれのポリマーを溶解することによって調製した。１００μＬのそれぞれの原液を回収し、一緒に混合し、続いて、２００μlのリン酸緩衝液を添加した。このリン酸緩衝液は、２００ｍlの水中に二塩基性リン酸ナトリウム（５．６７８ｇ）およびホウ酸ナトリウム（３．３４０１ｇ）を溶解することによって調製した。緩衝溶液のｐＨは８であった。個々の溶液のそれぞれが３〜１２０分間水中に保存した後、０８−０３−混合３〜０８−０３−混合８の実験は、ＰＥＧ−ＡＭおよびＰＥＧ−ＮＨＳの架橋結合能を試験する。表３２に概説されるように、ゲル化時間は、水中での保存時間の増加と共に増加し、これはＰＥＧ−ＮＨＳが加水分解的に不安定であることを示す。
【０７７８】
【表３２】
2019131558.tif 000036
【０７７９】
不安定であるため、ＰＥＧ−ＮＨＳは、周囲温度で水溶液中に保存することができず、固体形態で保存しなければならない。
【０７８０】
（ｂ）ＰＥＧ−ＡＭ溶液と固体ＰＥＧ−ＮＨＳの混合
二段階のヒドロゲル調製法  この実験は、ＰＥＧ−ＡＭおよびＰＥＧ−ＮＨＳを水中で一緒に製剤化し、その後、凍結乾燥させることができるかどうかを試験した。この実験は、ＰＥＧ−ＡＭおよびＰＥＧ−ＮＨＳの両方を水中で一緒に溶解し、単一チャンバに凍結乾燥するという製品概念を試験するものである。次いで、もう一方のチャンバは、唯一、再構成溶液としてリン酸緩衝液を含有する。この概念は、ＰＥＧ−ＮＨＳおよびＰＥＧ−ＡＭが水中で反応しない（緩衝液を含まずに）場合のみ機能することができる。
【０７８１】
０８−０４−混合１〜０８−０４−混合４の実験では、２．５％のＰＥＧ−ＡＭ／２．５％のＰＥＧ−ＮＨＳの溶液が調製された。混合物の最終ｐＨは６．４であった。混合物を室温で保存し、溶液の寿命を確立した。それぞれの所定時点後の１００μlのアリコートをこの混合物から回収し、ｐＨ８で１００μlの０．１Ｍのリン酸緩衝液に添加し、ゲル化を誘発した。したがって、０８−０４−混合１の実験については、緩衝液を９分後に添加し、ゲル化時間を測定した。実験０８−０４−混合４の実験については、緩衝液を２３分後に添加し、ゲル化時間を測定した。これらの結果を表３３に含める。
【０７８２】
【表３３】
2019131558.tif 000037
【０７８３】
リン酸緩衝液の添加前のＰＥＧ−ＮＨＳのＰＥＧ−ＡＭとの長時間の接触時間は、ゲル化時間の減少をもたらし、これは成分が相互に反応し始めたことを示す。表３３に示された時間＊は、緩衝液の添加前のＰＥＧ−ＮＨＳおよびＰＥＧ−ＡＭを一緒に保存した時間を示す。保存してから１８分後、混合物の粘度の著しい増加があった。接触時間から２３分後、この溶液からアリコートを回収するのは困難であった。３０分後、溶液は、架橋結合したヒドロゲルプラグを形成した。ＰＥＧ−ＮＨＳおよびＰＥＧ−ＡＭは、架橋結合の反応速度がｐＨ６．４で低かったとしても、混合直後に互いに反応を開始し、架橋結合を形成した。しかしながら、ゲル化時間の減少は、架橋結合が生じ、ゲル化時間の減少および粘度の増加（視覚的に）をもたらすことを示した。
【０７８４】
この実験は、水中の２つの成分間の架橋結合反応が、緩衝液の添加前に始まることを示す。実用期間では、この実験は、凍結乾燥されるものであっても、これらの２つの成分が一緒に製剤化することができないことを示す。したがって、ポリマー１（ＰＥＧ−ＮＨＳ）は、製剤化され、凍結乾燥させる必要がある。ポリマー２（ＰＥＧ−ＡＭ）は、別々に製剤化する必要があり、水溶液中に保存することができる。
【０７８５】
一段階のヒドロゲル調製法  この実験は、ｐＨ８でリン酸緩衝液中に製剤化した（および噴霧機のチャンバ２内に収容した）ＰＥＧ−ＡＭは、ＰＥＧ−ＮＨＳ（噴霧器のチャンバ１内に収容した）のための再構成溶液として使用することができることを示す。
【０７８６】
リン酸緩衝液中のＰＥＧ−ＡＭ溶液が調製され、最終ｐＨは８であった。５％（５０ｍｇ／ｍl）または２．５％（２５ｍｇ／ｍl）の濃度でＰＥＧ−ＡＭの原液は、ｐＨ８．０で１．０ｍlまたは２．０ｍlの０．１Ｍのリン酸緩衝液中に５０．０ｍｇを溶解することによって調製した。緩衝化したＰＥＧ−ＡＭを固体ＰＥＧ−ＮＨＳに添加した。ＰＥＧ−ＡＭ緩衝液を、等しい最終濃度の両方の試薬を得るために必要とされる量で固体ＰＥＧ−ＮＨＳに添加した。材料ＰＥＧ−ＡＭまたはＰＥＧ−ＮＨＳのそれぞれの濃度は、５重量％または２．５重量％であった（０８−０５−混合の実験、表３４）。ＰＥＧ−ＡＭを付加する瞬間は、ゲル化時間を決定するための出発点として使用した。混合物は、３００ｒｐｍで磁気撹拌機を用いて撹拌した。ＰＥＧ−ＡＭ緩衝液が、溶解されるべきＰＥＧ−ＮＨＳを再構成するには約３０秒間要した。ＰＥＧ−ＮＨＳの溶解は、全ゲル化時間に含まれた。ゲル化時間は、５％および２．５％の濃度での試薬の濃度のために三重に測定された。
【０７８７】
【表３４】
2019131558.tif 000038
【０７８８】
０８−０５−混合の実験結果は、ＰＥＧ−ＮＨＳの溶解とゲル化との間に干渉がないことを示した。したがって、一段階法を、さらなる研究のために使用した。ゲル化時間は高濃度になるほど速かった。
【０７８９】
実験はまた、ＰＥＧ−ＮＨＳが一方のチャンバ内に固体として含まれ、緩衝化したＰＥＧ−アミンを用いて容易に再構成され、チャンバ２内で再構成溶液として含まれ得ることも示す。
【０７９０】
（４）架橋結合の反応速度の評価基準としてのゲル化時間の決定
全てのゲル化時間の決定については、架橋結合の反応速度の評価基準としてこの試験を標準化するために、ある方法が開発された。固体ＰＥＧ−ＮＨＳ（１０〜２０ｍｇ）を、中に置かれた４ｍｍの磁気撹拌棒を用いて４．０ｍＬの透明ガラスバイアルに添加した。固体ＰＥＧ−ＮＨＳを入れたバイアルは、温度制御のために水槽に入れられた。撹拌速度は、３００ｒｐｍに調節され、水槽内部の温度は、２５〜２６℃に調節された。ＰＥＧ−ＡＭ溶液を、ｐＨ７．０、７．５、または８．０でリン酸緩衝液中に調製し、固体ＰＥＧ−ＮＨＳに添加した。この時点で、ストップウオッチを開始し、溶液が固体と一体化し、その内部に埋め込まれた磁気撹拌棒を用いて１つのものとして継続して回転するとき、停止した。
【０７９１】
（Ａ）ゲル化時間におけるｐＨ効果
異なるｐＨで緩衝化したＰＥＧ−ＡＭ溶液を固体ＰＥＧ−ＮＨＳに添加した場合のゲル化時間におけるｐＨ効果が実験（０８−０６−混合の実験、表３５）において研究された。５％（５０ｍｇ／ｍl）の濃度でのＰＥＧ−ＡＭ溶液は、ｐＨ７．０、７．５、および８．０で、１．０ｍlの０．１Ｍのリン酸緩衝液中に５０．０ｍｇを溶解することによって調製した。ＰＥＧ−ＡＭ溶液を、５重量％の濃度のそれぞれの試薬を得るために必要とされる量で固体ＰＥＧ−ＮＨＳに添加した。混合物は、３００ｒｐｍで磁気撹拌機を用いて撹拌し、ＰＥＧ−ＮＨＳの溶解およびゲル形成をもたらした。ゲル化時間は、それぞれのｐＨに対して三重に測定された。
【０７９２】
前に論じられたように、再構成溶液のｐＨを用いて、架橋結合反応が噴霧前に時期尚早に生じないように、ゲル化時間を制御することができる。表３５および図２４に示されるように、７．５のｐＨは、３．５分間のゲル化時間を提供する。これは、臨床医がゲル化前にこの溶液を用いて創傷に噴霧するのに十分な時間を提供する。
【０７９３】
【表３５】
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【０７９４】
図２４で見ることができるように、７から８のｐＨの増加は、ゲル化時間を７’３２’’から２’１３’’に減少させる。
【０７９５】
（Ｂ）ゲル化時間におけるＰＥＧ濃度の効果
異なる濃度でＰＥＧ−ＡＭを固体ＰＥＧ−ＮＨＳに添加した場合のゲル化時間におけるｐＨ効果が実験（０８−２３−混合の実験、表３６）において研究された。２．５％（２５ｍｇ／ｍl）、５．０％（５０ｍｇ／ｍl）、および７．５％（７５．０ｍｇ／ｍl）の濃度でのＰＥＧ−ＡＭ溶液は、ｐＨ７．５で、０．１Ｍのリン酸緩衝液中に対応する量を溶解することによって調製された。ＰＥＧ−ＡＭ溶液を、２．５％、５％、および７．５％で、両方の化合物の最終濃度を得るために必要とされる量で固体ＰＥＧ−ＮＨＳに添加した。混合物は、３００ｒｐｍで磁気撹拌機を用いて撹拌し、ＰＥＧ−ＮＨＳの溶解およびゲル形成をもたらした。ゲル化時間は、それぞれの濃度に対して三重に測定された。
【０７９６】
【表３６】
2019131558.tif 000040
【０７９７】
表３６および図２５ＡおよびＢで見ることができるように、ＰＥＧ濃度が増加するとき、ゲル化時間は減少する。これは、溶液が噴霧機内で時期尚早に架橋結合しないように、それぞれの噴霧チャンバ内のＰＥＧ濃度の調節を可能にする。
【０７９８】
１９．１．２  ＰＥＧ−ＮＨＳ／ＰＥＩヒドロゲル
以下の実施例は、ＰＥＧ−ＮＨＳ／ＰＥＩ  ヒドロゲルを対象とする。これらのヒドロゲルは、ＰＥＧ−ＮＨＳ／ポリエチレンイミンネットワークであり、ＰＥＧ−ＡＭ／ＰＥＧ−ＮＨＳ  ヒドロゲルへの代替物を提供する。ポリエチレンイミン（ＰＥＩ）は、高密度のアミン基を有する分岐ポリマーである。これらのポリマーは、真皮で低分子結合を形成し、組織表面からヒドロゲルの層間剥離を防ぐ。ＰＥＧ−ＮＨＳ／ＰＥＩヒドロゲルの形成は、前述のＰＥＧ−ＮＨＳ／ＰＥＧ−ＡＭヒドロゲルとして同一の化学反応を利用する。ＰＥＩは、噴霧機のチャンバ２内に含有されるＰＥＧ−ＡＭ溶液に少量で添加することができるか、または完全にＰＥＧ−ＡＭと置き換えることができる。ＰＥＧ−ＡＭの代わりにＰＥＩを用いるか、またはこの材料をＰＥＧ−ＡＭに添加して、ヒト皮膚にゲルのより強力な結合をもたらす極めて正荷電を持つイミン基を導入する。
【０７９９】
以下の実施例では、ゲルは、リン酸緩衝液中のＰＥＩ溶液を固体ＰＥＧ−ＮＨＳに添加することによって調製された。ポリエチレンイミン（ＰＥＩ）は、１２００ダルトンの数平均分子量および１３００の重量平均分子量を有する水中の５０重量％の溶液として、Ａｌｄｒｉｃｈのカタログ番号４８５５９５、ロット番号０５３２９ＫＨから購入した。５重量％のＰＥＧ−ＮＨＳを有する５重量％のＰＥＩの使用は、即時型沈殿物形成をもたらすが、ＰＥＩ濃度の１０〜５０倍の減少は、原位置で架橋結合するヒドロゲルをもたらす。
【０８００】
リン酸塩の３つの濃度、０．１２５重量％、０．２５重量％、および０．５重量％の濃度でのＰＥＩ溶液はそれぞれ、ｐＨ７で、０．１Ｍ、０．２Ｍ、および０．５Ｍのリン酸緩衝液を用いた５％のＰＥＩ原液の希釈によって調製された（表３７  ０８−１３−混合の実験）。ＰＥＩ溶液のｐＨは、ｐＨ計測記録用紙によって測定された。混合物は、３００ｒｐｍで磁気撹拌機を用いて撹拌し、ＰＥＧ−ＮＨＳの溶解およびゲル形成をもたらした。
【０８０１】
０．５重量％のＰＥＩ濃度で、リン酸緩衝液の最大容積は、その溶液のｐＨを７．０で維持するには十分ではなかったが、表３７で見ることができるように、０８−１３−混合４、０８−１３−混合５、および０８−１３−混合６の実験では、ｐＨ７で測定されるであろうよりもより短いゲル化時間をもたらした。しかしながら、これは、ＰＥＩ濃度の効果を変化させない、つまり、図２６に示されるように、ＰＥＩ濃度が全ての３つのリン酸塩濃度に対して増加したとき、ゲル化時間は減少した。
【０８０２】
リン酸塩濃度は、ゲル化時間において逆効果を有するように思われた、つまり、リン酸塩濃度が増加したとき、ゲル化時間は減少した（図２６）。極端な場合、０．１２５％のＰＥＩでの０．５Ｍのリン酸塩は、ゲル生成ができなかった（０８−１３−混合９、表３７（０．５Ｍのリン酸塩中の０．１２５％のＰＥＩ））。
【０８０３】
【表３７】
2019131558.tif 000041
【０８０４】
１９．１．３  ＰＥＧ−ＮＨＳ／ＰＥＧ−ＡＭ／キトサンヒドロゲル
以下の実施例は、ＰＥＧ−ＭＡ／ＰＥＧ−ＮＨＳ／キトサンヒドロゲルを対象とする。キトサンは、皮膚へのヒドロゲルの隔離の目的でヒドロゲルへの正電荷の付与のためにＰＥＧ−ＡＭ／ＰＥＧ−ＮＨＳヒドロゲルに添加することができる。
【０８０５】
ＰＥＧ−ＮＨＳ／キトサンのゲル形成は、キトサンがＰＥＧ−ＡＭで置き換えることができるかどうかを研究された。キトサン、バッチ番号ＦＰ−２１１−０３は、ＮｏｖａＭａｔｒｉｘから購入されたが、キトサンがｐＨ７でリン酸緩衝液中に溶解しないため、水中のキトサン溶液は、ｐＨ５〜６で使用された。０．２５％および０．６５％の濃度でのキトサン水溶液の固体ＰＥＧ−ＮＨＳへの添加は、ゲル生成ができなかった。キトサンとＰＥＧ−ＮＨＳの混合物は、反応開始から２０時間後に液体形態で維持された。この実験は、キトサンがＰＥＧ−ＡＭで置き換えることができなかったことを示した。
【０８０６】
次の実験は、キトサンをＰＥＧ−ＡＭに転嫁することができるかどうかを試験するものであった。したがって、３つの成分システムが開発され、キトサン溶液をＰＥＧ−ＮＨＳおよびＰＥＧ−ＡＭに添加した。
【０８０７】
キトサンをＰＥＧ−ＡＭ／ＰＥＧ−ＮＨＳヒドロゲルに導入する２つの方法を試験した。方法１では、２．５重量％のキトサン水溶液を、ｐＨ７で、０．１Ｍのリン酸緩衝液中の５重量％のＰＥＧ−ＡＭと混合した。この溶液を固体ＰＥＧ−ＮＨＳに添加した。方法２では、２．５重量％のキトサン水溶液を固体ＰＥＧ−ＮＨＳに添加し、溶解した。０．１Ｍリン酸緩衝液中の５重量％のＰＥＧ−ＡＭを、ｐＨ７で、この溶液に添加した。０．２２〜０．２７％および０．５７〜０．６４％のキトサン溶液を、これらの方法を用いて得た（表３８）。ＰＥＧ−ＮＨＳ／ＰＥＧ−ＡＭ／キトサンヒドロゲルについての実験条件、最終試薬濃度、およびゲル化時間を表３８に示す。
【０８０８】
両方の方法では、キトサンの部分的沈殿が観察されたが、ゲルは、反応が進行するにつれて、透明になった。これは、反応が進行するにつれて、キトサンがヒドロゲルマトリックスに取り込まれたことを示した。３つの成分システムのＰＥＧ−ＮＨＳ／ＰＥＧ−ＡＭ／キトサンヒドロゲルのゲル化時間は、対照−２つの成分のＰＥＧ−ＮＨＳ／ＰＥＧ−ＡＭのヒドロゲルシステムと比較された。表３８に概説されるように、０．２２〜０．２７％のキトサン濃度で、ゲル化時間は、対照のゲル化時間よりも長い（キトサン導入の第１の方法）か、あるいはそれに近い（キトサン導入の第２の方法）いずれかであった。０．５７〜０．６４％の濃度でのキトサンについては、ゲル化時間は、キトサンがゲルに導入された方法とは関係なく、対照に対するものよりも長かった。したがって、ＰＥＧ−ＡＭ／ＰＥＧ−ＮＨＳヒドロゲルへのキトサンの取り込みは、高濃度になるほど著しく反応が低下する。
【０８０９】
【表３８】
2019131558.tif 000042
【０８１０】
ＰＥＧ−ＮＨＳ／ＰＥＧ−ＡＭ／キトサンヒドロゲルは、ＰＥＧ−ＮＨＳ／ＰＥＧ−ＡＭヒドロゲルおよびＰＥＧ−ＮＨＳ／ＰＥＩヒドロゲルと比較して不利点を有する。ｐＨ約７で、キトサンが沈殿し、ゲルマトリックスに共有結合することができない。
【０８１１】
（１）平衡膨潤の決定
平衡膨潤は、共有結合的に架橋されたヒドロゲルの架橋密度を測定する。高度に架橋結合したヒドロゲルは、その高メッシュ密度のため、あまり膨潤しない。平衡膨潤を有するヒドロゲルはまた、組織表面から層間剥離することもできる。したがって、組織表面からの層間剥離をふせぐためには、低い平衡膨潤が望ましい。
【０８１２】
平衡膨潤に影響を及ぼす要因には、ＰＥＧ濃度および１分子当たりの反応基数が含まれる。したがって、４本のアームを持つＰＥＧ−ＮＨＳと反応する４本のアームを持つＰＥＧ−ＡＭは、より低い架橋密度のため、２本のアームを持つＰＥＧ−ＡＭ／ＰＥＧ−ＮＨＳヒドロゲルよりも低い平衡膨潤を有する。
【０８１３】
この実験では、固体ＰＥＧ−ＮＨＳは、ＰＥＧ−ＡＭ溶液と混合した。混合溶液を１．０ｍＬの使い捨て注射器（Ｈｅｎｋｅ  Ｓａｓｓ  Ｗｏｌｆ  ＧｍｂＨ）で回収し、ゲルを注射器内に形成した。この方法は、固定形状を有するヒドロゲル型の形成を可能にした。注射器は、小さな円筒状の断片に切断された。ゲルプラグは、長さが５〜６ｍｍで直径が５ｍｍであった。ゲルプラグは、計量し、ｐＨ７．４で、１０ｍＬの１×ＰＢＳで充填したファルコン管に入れた。ファルコン管は、３７℃の水槽に２４時間入れた。２４時間後、ゲルプラグをファルコン管から取り出し、過剰なＰＢＳを拭き取った。ゲルプラグは、膨潤後に計量した。膨潤の割合は、重量の変化を元の重量で割ることにより計算され、割合として結果を示した。
【０８１４】
膨潤の割合（％）＝（（膨潤後の重量−膨潤前の重量）／膨潤前の重量）×１００
表３９に概説されるように、一般規則として、ＰＥＧ−ＡＭ／ＰＥＧ−ＮＨＳヒドロゲルの膨潤は、水とポリエチレングリコールポリマーの高結合により、それぞれのＰＥＧ成分の濃度の増加と共に増加した。
【０８１５】
ａ．ＰＥＧ−ＮＨＳ／ＰＥＧ−ＡＭヒドロゲル：２．５％（２５ｍｇ／ｍl）、５．０％（５０ｍｇ／ｍl）、および７．５％（７５．０ｍｇ／ｍl）で、０．１Ｍのリン酸緩衝液中のＰＥＧ−ＡＭを、ｐＨ７．５で、固体ＰＥＧ−ＮＨＳに添加して、２．５％、５％、および７．５％の両方の試薬の等しい最終濃度を得た。
【０８１６】
ｂ．ＰＥＧ−ＮＨＳ／ＰＥＩヒドロゲル：０．１２５％、０．２５％、および０．５％の濃度で、０．１Ｍのリン酸緩衝液中のＰＥＩを、ｐＨ７．０で、固体ＰＥＧ−ＮＨＳに添加して、５％の濃度を得た。
【０８１７】
ｃ．ＰＥＧ−ＮＨＳ／ＰＥＧ−ＡＭ／キトサンヒドロゲル：キトサン水溶液を、２．５％の濃度で、固体ＰＥＧ−ＮＨＳに添加した。０．１Ｍのリン酸塩中のＰＥＧ−ＡＭを、ｐＨ７で、この溶液に添加した。
【０８１８】
ｄ．ゲルプラグは、室温で平衡膨潤を試験するために製造された。
【０８１９】
【表３９】
2019131558.tif 000043
【０８２０】
ＰＥＧ−ＮＨＳ／ＰＥＧ−ＡＭヒドロゲル、ＰＥＧ−ＮＨＳ／ＰＥＩヒドロゲル、およびＰＥＧ−ＮＨＳ／ＰＥＧ−ＡＭ／キトサンヒドロゲルについての平衡膨潤の結果を表４０および図２７に示す。膨潤度は、５％〜１５％の全ＰＥＧ濃度の増加に伴って６５．３％〜１４６．９％のＰＥＧ−ＮＨＳ／ＰＥＧ−ＡＭヒドロゲルに対して増加した（表４０、図２７）。膨潤度は、架橋結合密度の関数であり、より高い程度はより高い密度に相当する。この場合、より高いＰＥＧ濃度の効果は、架橋結合する密度の増加を圧倒する。これは、水に対するポリエチレングリコールの高親和性によるものである。
【０８２１】
ＰＥＧ−ＮＨＳ／ＰＥＩヒドロゲルについて、ＰＥＩ濃度の増加は、膨潤度を変化させず、ＰＥＧ−ＮＨＳ／ＰＥＧ−ＡＭヒドロゲルの架橋結合度に近く、両ヒドロゲルにおいて同様の架橋結合密度を示した（図２７）。対照的に、ＰＥＧ−ＮＨＳ／ＰＥＧ−ＡＭ／キトサンヒドロゲル（１８７％）の膨潤度は、１０％のＰＥＧ濃度で、ＰＥＧ−ＮＨＳ／ＰＥＧ−ＡＭヒドロゲル（１１２％）の膨潤度よりも著しく高かった。これは、ＰＥＧ−ＮＨＳ／ＰＥＧ−ＡＭ／キトサンヒドロゲルの架橋結合密度がより低いことを示し、ＰＥＧ−ＮＨＳとＰＥＧ−ＡＭとの間の反応におけるキトサンの干渉に起因する。
【０８２２】
ＰＥＧ−ＮＨＳ／ＰＥＧ−ＡＭヒドロゲル、ＰＥＧ−ＮＨＳ／ＰＥＩヒドロゲル、およびＰＥＧ−ＮＨＳ／ＰＥＧ−ＡＭ／キトサンヒドロゲルの膨潤試験の結果が、表４０および図２７に示される。ＰＥＧ−ＮＨＳ／ＰＥＧ−ＡＭヒドロゲルの膨潤度は６５．３％から１４６．９％に増加し、全ＰＥＧ濃度は５％から１５％に増加した（表４０、図２７）。膨潤度は、架橋結合密度の関数であり、より高い膨潤度いは、より高い密度に相当する。この場合、より高いＰＥＧ濃度の効果は、架橋結合密度の増加を圧倒する。
【０８２３】
ＰＥＧ−ＮＨＳ／ＰＥＩヒドロゲルについて、ＰＥＩ濃度の増加は膨潤度を変化させず、ＰＥＧ−ＮＨＳ／ＰＥＧ−ＡＭヒドロゲルの架橋結合度に近く、両ヒドロゲルにおいて同様の架橋結合密度を示した（図２７）。対照的に、ＰＥＧ−ＮＨＳ／ＰＥＧ−ＡＭ／キトサンヒドロゲル（１８７％）の膨潤度は、１０％のＰＥＧ濃度で、ＰＥＧ−ＮＨＳ／ＰＥＧ−ＡＭヒドロゲル（１１２％）の膨潤度よりも著しく高く、これは、後者の系の架橋結合密度がより低いことを示し、ＰＥＧ−ＮＨＳとＰＥＧ−ＡＭとの間の反応を妨害したキトサンの干渉効果によって説明され得る。
【０８２４】
【表４０】
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【０８２５】
１９．２  皮膚上でのヒドロゲル試験
ＰＥＧ−ＮＨＳ／ＰＥＧ−ＡＭヒドロゲル：ｐＨ７．５の０．１Ｍリン酸緩衝液中の５重量％のＰＥＧ−ＡＭを固体ＰＥＧ−ＮＨＳに添加した（表４１）。この混合物を無傷の皮膚に適用した。液体は粘性の溶液を形成し、それは数分以内に合体して薄膜になり、皮膚にうまく付着した。この膜は、皮膚に数時間付着したままであった。
【０８２６】
ＰＥＧ−ＮＨＳ／ＰＥＩヒドロゲル：ｐＨ７．０の０．１Ｍリン酸緩衝液中の０．５％のＰＥＩを固体ＰＥＧ−ＮＨＳに添加した。液体は粘性の溶液を形成し、数分以内に合体して皮膚付着性の薄膜になった。ヒドロゲルを無傷の皮膚に適用し、皮膚に数時間付着したままであった。ＰＥＧ−ＮＨＳ／ＰＥＩヒドロゲルは、ＰＥＧ−ＮＨＳ／ＰＥＧ−ＡＭヒドロゲルと比較して、速く薄膜に変わり、しっかりと皮膚に付着しているようであった。
【０８２７】
ＰＥＧ−ＮＨＳ／ＰＥＧ−ＡＭ／キトサンヒドロゲル：キトサン水溶液（２．５重量％）を固体ＰＥＧ−ＮＨＳに添加した。ＰＥＧ−ＡＭ（ｐＨ７の０．１Ｍリン酸塩中）をこの溶液に添加した。ヒドロゲルを無傷の皮膚に適用した。このゲルは、皮膚にうまく付着しなかった。
【０８２８】
【表４１】
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【０８２９】
２０．実施例：薬物を放出する生分解性足場への固液原位置で架橋結合スプレー
上述は、生分解性の原位置で架橋結合ヒドロゲルを介して真皮に対して隔離されたＰＬＧマイクロスフェアからの薬物持続放出用の製剤である。薬物送達系が動的な創傷治癒環境に適用され得るため、真皮内への薬物取り込みは、皮膚が治癒し、そのバリア機能を緩徐に再確立するにつれて限定的になり得る。したがって、真皮への薬物の持続的な輸送は、厚い線維性の痂皮が創傷上に形成されるにつれて減退し得る。結果的に、薬物は、ヒドロゲル中に隔離されるマイクロスフェアから放出されるが、痂皮を介する薬物の輸送が制限される可能性が高い。
【０８３０】
問題が痂皮を介する薬物の輸送である場合、解決策は、送達系を痂皮内に組み込むことであり得る。いったん送達系が痂皮内に組み込まれると、薬物は、痂皮から治癒中の真皮内に放出される。したがって、痂皮が送達系の一部になる。
【０８３１】
本実施例において、薬物を含有する薄いガーゼ様の柔軟な生分解性足場が新鮮創傷上に設置される。足場の材料特性を、ガーゼが創傷からの血液および他の浸出液を吸収することができるように調節してもよい。したがって、生分解性足場は、血液、フィブリン、およびフィブリノゲンを吸収するために、多くの空きスペースを有する。フィブリン塊の形成中のこの足場のフィブリン塊への組み込みは、結果的に、フィブリン塊が凝固した後に痂皮とも呼ばれる線維網への足場の組み込みになる。薬物を含有する生分解性足場を創傷内に設置した後、原位置で架橋結合ヒドロゲルは、創傷被覆材として、全部位を被覆するために上部に適用される。
【０８３２】
先の実施例において、薬物は、噴霧器のチャンバ１内でポリマー１（ＰＥＧ−ＮＨＳ）と共凍結乾燥されたＰＬＧマイクロスフェア内に含有される。本実施例において、噴霧器は、原位置で架橋結合ポリマー成分のみを含有する。薬物は、生分解性足場内に組み込まれる。
【０８３３】
この概念は有利であり、創傷治癒に重要な意味を持つ。足場は、薬物系の創傷との密接な接触を可能にし、いくつかの実施形態では、薬物系は、抗菌性を有する作用物質を含む。創傷との密接な接触は、創傷感染を予防し、したがって、効果的な創傷治癒を支援し得る。フィブリンが組み込まれた薬物送達系は、細胞が付着する優れた「足場」である。
【０８３４】
２０．１  説明
本実施例において、（ａ）一方のチャンバに液体を、他方のチャンバに凍結乾燥された固体を含有する２チャンバ型噴霧器、および（ｂ）薬物を含有する生分解性の組立足場を使用する。
【０８３５】
生分解性足場は、ＰＬＧポリマーのブレンドである柔軟なガーゼ様の物質の形態である。他のポリマーを主要成分（ＰＬＧ）に添加して、生分解性、柔軟性等の特性を付与してもよい。薬物を生分解性足場内に組み込む。
【０８３６】
生分解性足場は、細胞が（ａ）自ら付着し、（ｂ）分化し、かつ（ｃ）増殖することを可能にする「オープンセル」構造を有する。足場は、細胞付着を促進するために組み込まれるＲＧＤペプチド等の他の成分を有し得る。足場は、それを「適所」に保つために生体接着性を有する。
【０８３７】
２０．２  使用方法
足場を新鮮創傷上に設置した後、部位から滲み出る血液をガーゼに染み込ませる。その後、噴霧器に係合して、チャンバ１およびチャンバ２内に含有される２つの成分を混合する。
【０８３８】
チャンバ１内に含有される凍結乾燥された固体成分は、ポリマーマクロモノマー（ポリマー１）（別の成分とさらに架橋結合することができるポリマー）から成る。他方のチャンバ（チャンバ２）内の成分は、凍結乾燥されたポリマー（ポリマー１）と反応することができる別のポリマーマクロモノマー（ポリマー２）を含有する。ポリマー２をｐＨ６〜８のリン酸緩衝液中に溶解する。ポリマー２は、加水分解の不安定な結合を含有せず、したがって、水中で安定している。したがって、ポリマー２を再構成緩衝液中に保存することができる。結果的に、ポリマー２を含有する溶液は、ポリマーが噴霧器内でともに混合されるときに、凍結乾燥されたポリマー１を再構成する。その後、混合溶液を迅速に創傷部位に噴霧する。噴霧時、溶液は架橋結合し、それによってヒドロゲルを形成する。
【０８３９】
本実施例において、薬物送達担体およびヒドロゲル中の足場は、創傷被覆材である。
【０８４０】
２０．３  実施例
本実験の目的は、薬物を創傷に送達するために創傷組織上に設置され得る生分解性足場パッチの原型を開発することである。「足場」は、細胞付着のために高表面積を提供し得る三次元構造である。足場マトリックスのポリマー組成物を変化させることで、薬物放出速度を３日間〜１４日間に調節することができる。
【０８４１】
薬物を５０ｍｇ／ｍＬの濃度で水中に溶解する。１２０００ｇ／モルの分子量のポリ（ラクチド−コ−グリコリド）（ＰＬＧ）、３０，０００ｇ／モルの分子量のポリ（乳酸）（ＰＬＡ）、およびそれらのブレンドを使用して、線維性足場を調製した。ポリマーブレンドは、それぞれ、１００／０のＰＬＡ／ＰＬＧ、５０／５０のＰＬＡ／ＰＬＧ、２５／７５のＰＬＡ／ＰＬＧ、および０／１００のＰＬＡ／ＰＬＧであった。ＰＬＡおよびＰＬＧをＰｕｒａｃ，Ｉｎｃから購入した。
【０８４２】
綿菓子製造機（Ｇｏｌｄ  Ｍｅｄａｌ  Ｆｌｏｓｓ、カタログ番号３０２４）のセッティングを３に設定した（合計５つのセッティングがあり、温度は４０℃〜２００℃の範囲である）。１ｇの１００／０ＰＬＡブレンドおよび１ｍＬの薬物含有溶液をホッパーに供給し、収集チャンバ内に（クモの巣によく似た）細繊維収集をもたらした。組み込まれた薬物を有するその繊維を収集し、低圧Ｃａｒｖｅｒプレスを用いてプレス加工して、それぞれ１ｇのパッチにする。その後、パッチを１インチ×１インチの正方形に穿孔する。５０／５０のＰＬＡ／ＰＬＧ、２５／７５のＰＬＡ／ＰＬＧ、および０／１００のＰＬＡ／ＰＬＧの他のブレンドにおいても同様の手順に従う。
【０８４３】
パッチの走査型電子顕微鏡写真（ＳＥＭ）を撮影する。ＳＥＭによって、メッシュサイズまたはオープンセルサイズは、約１００〜２００ミクロンであると推定される。製造されたパッチの推定の厚さは、５００〜１０００ミクロンの範囲であり得る。パッチを３７℃およびｐＨ７．４のリン酸緩衝食塩水を含有する溶解槽中のメッシュバケツ内に設置し、生理学的状態を刺激する。溶解媒体のアリコートを所定の時点で回収し、例えば、フレーム発光原子吸着分光法（ＡＡ）で薬物含量について分析することができる。
【０８４４】
２０．４  結果
薬物の溶液を蒸留水中で、５０ｍｇ／ｍlの濃度で調製する。１２０００ｇ／モルの分子量のポリ（ラクチド−コ−グリコリド）（ＰＬＧ）、３０，０００ｇ／モルの分子量のポリ（乳酸）（ＰＬＡ）、およびそれらのブレンドを使用して、線維性足場を調製する。ポリマーブレンドは、それぞれ、１００／０のＰＬＡ／ＰＬＧ、５０／５０のＰＬＡ／ＰＬＧ、２５／７５のＰＬＡ／ＰＬＧ、および０／１００のＰＬＡ／ＰＬＧである。ＰＬＡおよびＰＬＧをＰｕｒａｃ，Ｉｎｃから購入した。
【０８４５】
綿菓子製造機（Ｇｏｌｄ  Ｍｅｄａｌ  Ｆｌｏｓｓ、カタログ番号３０２４）のセッティングを３に設定する（合計５つのセッティングがあり、温度は４０℃〜２００℃の範囲である）。
【０８４６】
１ｇの１００／０ＰＬＡブレンドおよび１ｍlの薬物溶液をホッパー内に供給し、収集チャンバ内に（クモの巣によく似た）細繊維収集をもたらす。組み込まれた薬物を有する繊維を収集し、低圧Ｃａｒｖｅｒプレスを用いてプレス加工して、それぞれ１ｇのパッチにする。その後、パッチを１平方インチの正方形に穿孔する。
【０８４７】
５０／５０のＰＬＡ／ＰＬＧ、２５／７５のＰＬＡ／ＰＬＧ、および０／１００のＰＬＡ／ＰＬＧの他のブレンドにおいても同様の手順に従う。
【０８４８】
走査型電子顕微鏡写真（ＳＥＭ）を用いて、パッチの質感を決定することができる。以下の特性も試験する。
【０８４９】
視覚および曲げモジュール。プレス加工された繊維パッチを、親指と人差し指の間でパッチを曲げる簡単な屈曲方法を用いて、曲げ強度について試験する。ＰＥＧまたはシリコーン等のいくつかの可塑化ポリマーを組み込むことによってパッチの脆度を減少させ、可塑性をパッチに付与することができる。
【０８５０】
放出速度。薬物の放出を、ＰＬＡとＰＬＧの比率を変化させることによって調節することができる。大まかに言うと、ポリ（ラクチド）（ＰＬＡ）の結晶化度が高いほど、マトリックスからの薬物の放出を遅延させる。ポリ（ラクチド−コ−グリコリド）（ＰＬＧ）の非晶質性が薬物放出速度の増加をもたらす。ＰＬＡとＰＬＧを様々な比率でブレンドする手法を効果的に利用して、マトリックスからの薬物放出速度を調節することができる。
【０８５１】
生分解性。パッチの生分解性を、３７℃およびｐＨ７．４のリン酸緩衝食塩水中で予め秤量したパッチをインキュベートすることにより、生体外で試験することができる。時間をかけてパッチを槽から除去し、３０℃で維持した真空オーブン内で乾燥させる。Ｔ＝０およびｔ＝ｔでのパッチの重量は、生物分解性を提供する。ポリマーが加水分解で分解し、酵素分解で分解しないため、分解緩衝液は酵素を含有しない。
【０８５２】
生体接着。パッチを湿組織上に設置し、組織を反転させ、パッチが組織から剥がれる速度を測定することによって、薬物充填パッチの生体接着性を評価することができる。
【０８５３】
細胞粘着。薬物充填パッチが細胞に付着する傾向を、足場の存在下でのＣＯＳ細胞またはケラチン生成細胞の生体外培養によって測定する。
【０８５４】
２１．実施例：２チャンバ型液体−液体噴霧器を介する２つ以上の薬物の同時投与
時折、複数の薬物を同時に投与する必要がある。真皮適用の場合、一方の薬物に続く他方の薬物の適用が可能であるが、第２の薬物の投与中に第１の薬物を偶発的にこすり落とす等の実践上の問題を有する。これらの薬物を共製剤化することができる場合、組み合わせた製剤の単回適用は、使用および投与の容易さを提供する。この例として、２つの薬物が共製剤化された真皮クリームが挙げることができる。しかしながら、１つの薬物と別の薬物の溶解特性の相違、または共製剤化に起因する物理的／化学的不適合性のいずれかのため、多くの薬物を一緒に製剤化することはできない。例えば、その薬物のうちの一方を安定化または可溶化する賦形剤は、他方の薬物の沈殿を起こし得る。相互に対する薬物のイオン結合は、予測不可能な生物学的利用能、吸収、およびクリアランス等のさらなる問題をもたらし得る。したがって、共製剤化することなく、２つの薬物を標的部位で共投与する薬学的に準拠した方法が必要とされる。正確な量の送達および大規模な部位を均質に被覆する能力が、さらに所望される特性である。
【０８５５】
２つの別個の製剤を共投与する薬物送達装置を使用して、複数の薬物の同時投与に関連した上述の問題に対処することができる。複数の薬物を同時に投与することができる薬物送達系の一例として、両方の製剤が一緒に押し出される共軟膏チューブがある。複数の薬物を同時に投与することができる薬物送達系の別の例には、それぞれのチャンバ内に製剤化された薬物を含有し、薬物製剤を正確な量で共噴霧する二重チャンバ送達噴霧装置がある。あるいは、必要に応じて、噴霧装置をそれぞれの薬物を別々に噴霧するように係合することができる。例えば、（薬物を有するか、または有しない）アルコール溶液を用いて、最初に完全に洗浄して創傷を「準備」し、その後、薬物製剤を噴霧してもよい。噴霧機構は、適用に応じて、高エネルギーまたは低エネルギーであってもよい。別の適用では、両方のチャンバは、同一の薬物であるが、異なる形態であり、異なる放出特性を得るように異なって製剤化される薬物を含有し得る。例えば、チャンバ１は、ＦＤＡに認可された液体賦形剤中に懸濁する１つの薬物またはその形態を含有し得る。チャンバ２は、別の形態の溶解薬物（例えば、持続放出のために）、または噴霧可能な水性ゲルの形態の別の薬物を含有し得る。共噴霧は、即座に生物学的利用可能な薬物および薬物の持続形態またはそれが溶解するにつれて利用可能になる第２の薬物の両方を提供する。
【０８５６】
複合薬を適用することができる薬物噴霧器は、皮膚病変の治療に多大な影響を与え、（ａ）正確に組み合わせられた複合薬を送達し、かつ（２）広い領域上で均一の被覆度を提供するために使用することができる。さらに、創傷の治療について、創傷洗浄を、薬物含有ゲルの標的部位への投与と組み合わせてもよい。
【０８５７】
噴霧器のチャンバ１およびチャンバ２内に含有される溶液は、（ａ）噴霧可能でなければならず、（ｂ）皮膚から「流出」してはならず、（ｃ）皮膚上に均一のコーティングを形成しなければならない。最初の２つは、粘度の調節に依存し、最後の１つは、製剤の表面湿潤性に依存する。噴霧することができる程度に流体であるが、「皮膚上に留まる」ことができる程度に粘性の製剤に関して、それらの製剤のうちの１つは、粘度をスプレーに付加するさらなる要件を有する。これを、冷たい間は液体であるが、皮膚温度に達したときに「ゲル」になる特性を有する熱可逆性ポリマーを用いて達成することができる。そのようなポリマーの１つは、ＰＥＯ−ＰＰＯ−ＰＥＯ（ポリエチレンオキシド−コ−ポリプロピレンオキシド−コ−ポリエチレンオキシド）構造である。低温（０〜１５℃）で、ＰＰＯおよびＰＥＯはいずれも完全に溶解し、ポリマーは、ランダムコイル構造で存在する。より高い温度（１５℃超）で、ＰＰＯセグメントは崩壊し始めるが、ＰＥＯセグメントは依然として可溶性である。ポリマーは、より高い温度によって引き起こされる「臨界ゲル化」状態を経験し始める。物理的に、ポリマー溶液は、ゲルのようなより高い粘度を達成する。このことは、引き続き皮膚上に均質のゲルコーティングを達成しながら、薬物含有ポリマー溶液が噴霧されることを可能にする。実施例の第２８項および第２９項において、原位置で架橋結合反応は、事実上、共有結合性であり、ｐＨの変化によって引き起こされた。この概念において、原位置でゲル化は、事実上、非共有結合性であり、ｐＨの変化によって引き起こされる。「ゲル化」現象は、物理的な架橋結合であり、ポリマーセグメントの崩壊に起因し、より粘度の高い溶液を作成する。物理的な架橋結合は、事実上、共有結合性でも永久的でもないが、「流出」を最小限に抑えるか、または予防する課題を達成する。
【０８５８】
投与後に皮膚から「流出」しない噴霧可能な製剤を開発する別の方法は、噴霧中に原位置でゲル化を達成することである。これを、混合されると即座にゲル化するレシチン／ポリエチレングリコール／水溶液を用いて達成することができる。薬物をポリエチレングリコール／水溶液中に溶解し、第１のチャンバ内に含んでもよい。第２のチャンバ内に含まれ、かつ第１のチャンバの内容物と共噴霧されるレシチンは、結果的に皮膚上の「ゲル」になる。
【０８５９】
２チャンバ型液体−液体薬物送達系のいくつかの実施例を以下に提供する。
【０８６０】
２１．１  ２チャンバ型液体−液体噴霧送達系からの薬物ＰＥＯ−ＰＰＯ−ＰＥＯ製剤の送達
本実験は、２つの形態（例えば、イオン化形態および微粒子化形態）の１つの薬物または２つの薬物を原位置でゲル化系から長時間送達することを対象とし、これは、温度の変化によって引き起こされる。ブロックコポリマーの分子量は、１２，６００ダルトンであり、それぞれのポリマーセグメントは、約４０００ダルトンであった。ベンジルアルコールを防腐剤として使用した。アラントインおよびアルギン酸ナトリウムを創傷治癒補助剤として使用した。
【０８６１】
１％のベンジルアルコール、３％のアラントイン、２０％のＦ１２７、および３％のアルギン酸ナトリウム、ならびに水（適量）を含有する溶液中に溶解する薬物を含有する溶液（溶液１）を調製する。７８％のプロピレングリコール、１％のtｗｅｅｎ２０、および１０％のポリエチレングリコール４００を含有する溶液中に分散した微粒子化薬物を含有する別の溶液（溶液２）を調製する。溶液１を液体−液体噴霧器のチャンバ１内に含有し、溶液２をチャンバ２内に含有することができる。それぞれの溶液の粘度を、Ｂｒｏｏｋｅｆｉｅｌｄ粘度計を用いて４℃、２５℃、および３２℃（皮膚温度）で測定する。それぞれの溶液を１：１、１：２、および１：３の比率で混合することによって、ゲル化時間を測定する。ゲル化概念を皮膚上で試験し、ゲル化製剤が表面上に噴霧されるかを推定する。
【０８６２】
溶液２は、水溶性の賦形剤を含有する。溶液２中の成分が、溶液１中の全ての成分と混和可能でなければならないという理由から、賦形剤は全て水溶性である。プロピレングリコールおよびポリエチレングリコールを表面湿潤剤として含む。溶液１の粘度は、温度によって変化すべきでないが、溶液２の粘度は、温度によって著しく変化し得る。最適には、１：１比の溶液１と溶液２の混合は、わずかに「流出」する溶液をもたらす。皮膚上の膜が薄いほど、「流出」の程度は低い。最適には、１：２および１：３比の溶液１と２の混合は、「流出」しない溶液をもたらす。３つ全ての混合物はゲルである。１：３比のゲルの生体外放出実験は、最適には、イオン化薬物のある程度の持続放出を実証する。
【０８６３】
２１．２  噴霧器から噴霧することができる粘度の決定
本実験は、蒸留水中で製剤化される一連のポリビニルアルコール溶液を生成し、かつこれらの溶液が噴霧器具から効果的に噴霧することができるかを確定するためにこれらの溶液の粘度を測定するための実験である。
【０８６４】
材料
・ポリビニルアルコール（ＰＶＡ）：５、１０、１５、２０、２５、３０％の溶液−ロット番号Ｄ１４Ｔ０１７、Ａｌｆａ  Ａｅｓａｒ
・蒸留水
・Ｂｒｏｏｋｆｉｅｌｄ  Ｒｈｅｏｍｅｔｅｒ、ＤＶ  ＩＩＩ
方法
ａ．適切な量のＰＶＡ固体を検量し、それを蒸留水中に溶解して、６個のＰＶＡ溶液を調製した。
【０８６５】
ｂ．粘度を測定するために、Ｂｒｏｏｋｆｉｅｌｄ  ＤＶ−ＩＩＩ超プログラム可能な血流計を利用し、Ｎｅｓｌａｂ  ＲＴＥ−１１１水浴を用いて温度を調整した。温度が２５℃で安定した時点で、９．５、９８、４８００、および１２５００ｃＰの鉱油較正基準を用いて、その計器を較正した。
【０８６６】
ｃ．その後、溶液を適用し、粘度測定値がいくつかのＲＰＭ値にわたって安定した状態を保つまで、ＲＰＭを調節した。その後、この手順を３０℃で繰り返した。
【０８６７】
データ
表４２は、ＰＶＡ溶液によって得られた粘度の範囲を要約し、２５℃で測定したとき、最低粘度は約１５０ｃＰ（５重量／容量％のＰＶＡ）であり、最高粘度は９９００ｃＰ（３０重量／容量％のＰＶＡ）であった。全ての溶液が流動特性を有した。
【０８６８】
【表４２】
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【０８６９】
図２８に示されるように、ニュートン流体の特性と一致して、温度が増加するにつれて、ＰＶＡの粘度が低減する。表４２は、得られた実際の粘度値を含み、それらのバイアルを流動する溶液を観察して、流動特性を質的に記録した。
【０８７０】
本実験の目的は、ＰＶＡの粘度を確定することであり、これを使用して、最終的に標的表面上で凝固してゲルになる液体製剤を排出するように設計された噴霧器具の限度を決定する。試験機構としてのＰＶＡの使用は、噴霧器を故障させるか、または破損することなく、製剤がどの程度粘性であり得るかを決定する。その器具の温度が略室温であるが、体温は３２℃であると理由から、選択した２つの温度は、２５℃および３０℃であった。ＰＶＡの結果は、温度が増加するにつれて粘度が減少するとして、ニュートン流体の既知の特性と一致する。したがって、噴霧器から排出されたＰＶＡ溶液が身体の表面に適用される場合、その粘性はより低くなる。表４２に概説されるように、（ａ）５％および１０％の濃度を有する溶液を容易に噴霧することができ、（ｂ）１５％の濃度を有する溶液は、噴霧困難であり、（ｃ）１５％を超える濃度を有する溶液（約３３７ｃＰ〜９９００ｃＰ）を噴霧することはできなかった。
【０８７１】
本明細書に引用される全ての参考文献は、個々の出版物または特許または特許出願がそれぞれ、全ての目的のために参照によりその全体が本明細書に組み込まれると具体的かつ個別に示される場合と同程度に、全ての目的のために参照によりそれらの全体が本明細書に組み込まれる。
【０８７２】
本発明は、本明細書に記載される特定の実施形態によって範囲を制限されるべきではない。実際に、本明細書に記載される修正に加えて、本発明の様々な修正が、前述の記述および添付の図面から当業者に明らかとなる。そのような修正は、説明的実施形態の範囲および／または添付の特許請求の範囲内に収まるよう意図される。
【図面の簡単な説明】
【０８７３】
【図１】ヒト毛包の種類。
【図２】皮膚の構造。
【図３】ヒト毛包組織の略図。
【図４】ヒト毛球の細胞構造。
【図５Ａ】先行技術の削皮回転ホイールを示す。
【図５Ｂ】使用中の先行技術の削皮回転ホイールを示す。
【図６】使用中の先行技術の削皮回転ホイールを示す。
【図７】使用中の先行技術の削皮ハンドピースを示す。
【図８】男性型脱毛症（ＭＰＨＬ）のＨａｍｉｌｔｏｎ−Ｎｏｒｗｏｏｄ分類。
【図９】従来の削皮ハンドピースに装着した、本発明の実施形態に従う本発明の削皮先端部を示す。
【図１０】従来の削皮器を示す。
【図１１】本発明の実施形態に従う削皮先端部の概略図である。
【図１２】本発明の実施形態に従う連結アセンブリの概略図である。
【図１３】本発明の実施形態に従う削皮先端部を示す。
【図１４】本発明の実施形態に従う削皮先端部を示す。
【図１５】本発明の実施形態に従う、使用中の発明の削皮先端部を示す。
【図１６】本発明の実施形態に従う伝動アセンブリの一部を示す。
【図１７Ａ】本発明の実施形態に従う噴霧装置の正面斜視図である。
【図１７Ｂ】本発明の実施形態に従う噴霧装置の背面斜視図である。
【図１８】本発明の実施形態に従う噴霧装置の背面斜視図。
【図１９Ａ】図１７Ａおよび１７Ｂに示されるハンドピースの構成部分を示す平面図である。
【図１９Ｂ】本発明の実施形態に従うハンドピースの背面斜視図である。
【図２０Ａ】本発明の実施形態に従う薬物カートリッジの平面図である。
【図２０Ｂ】本発明の実施形態に従う薬物カートリッジおよびハンドピースの前端部の平面図である。
【図２０Ｃ】本発明の実施形態に従う薬物カートリッジおよびハンドピースの前端部の平面図である。
【図２０Ｄ】本発明の実施形態に従う薬物カートリッジおよびハンドピースの前端部の平面図である。
【図２１Ａ】本発明の実施形態に従う薬物カートリッジおよびハンドピースの前端部の平面図である。
【図２１Ｂ】本発明の実施形態に従う薬物カートリッジおよびハンドピースの前端部の平面図である。
【図２１Ｃ】本発明の実施形態に従う薬物カートリッジおよびハンドピースの前端部の平面図である。
【図２１Ｄ】本発明の実施形態に従う薬物カートリッジおよびハンドピースの前端部の平面図である。
【図２１Ｅ】本発明の実施形態に従う薬物カートリッジおよびハンドピースの前端部の平面図である。
【図２２】対象となる毛包構造体を分類するための基準。
【図２３Ａ】削皮術（「ＤＡ」）による外皮攪乱により治療された、ＤＡ前（図２３Ａ）、ＤＡ後（図２３Ｂ）、ＤＡ後１４日目（生検前）（図２３Ｃ）、ＤＡ後２８日目（縫合抜糸後）（図２３Ｄ）、および点状出血の出現を示すように拡大されたＤＡ後に撮影された別の画像（図２３Ｅ）の対象の皮膚の写真。
【図２３Ｂ】削皮術（「ＤＡ」）による外皮攪乱により治療された、ＤＡ前（図２３Ａ）、ＤＡ後（図２３Ｂ）、ＤＡ後１４日目（生検前）（図２３Ｃ）、ＤＡ後２８日目（縫合抜糸後）（図２３Ｄ）、および点状出血の出現を示すように拡大されたＤＡ後に撮影された別の画像（図２３Ｅ）の対象の皮膚の写真。
【図２３Ｃ】削皮術（「ＤＡ」）による外皮攪乱により治療された、ＤＡ前（図２３Ａ）、ＤＡ後（図２３Ｂ）、ＤＡ後１４日目（生検前）（図２３Ｃ）、ＤＡ後２８日目（縫合抜糸後）（図２３Ｄ）、および点状出血の出現を示すように拡大されたＤＡ後に撮影された別の画像（図２３Ｅ）の対象の皮膚の写真。
【図２３Ｄ】削皮術（「ＤＡ」）による外皮攪乱により治療された、ＤＡ前（図２３Ａ）、ＤＡ後（図２３Ｂ）、ＤＡ後１４日目（生検前）（図２３Ｃ）、ＤＡ後２８日目（縫合抜糸後）（図２３Ｄ）、および点状出血の出現を示すように拡大されたＤＡ後に撮影された別の画像（図２３Ｅ）の対象の皮膚の写真。
【図２３Ｅ】削皮術（「ＤＡ」）による外皮攪乱により治療された、ＤＡ前（図２３Ａ）、ＤＡ後（図２３Ｂ）、ＤＡ後１４日目（生検前）（図２３Ｃ）、ＤＡ後２８日目（縫合抜糸後）（図２３Ｄ）、および点状出血の出現を示すように拡大されたＤＡ後に撮影された別の画像（図２３Ｅ）の対象の皮膚の写真。
【図２３Ｆ】図２３Ｆは、血管が新生された皮膚乳頭を囲む皮膚の表皮小稜の図を提供する。表皮網状突出（Ｅｐｉｄｅｒｍａｌ  ｒｅｔｅ  ｐｅｇｓ）、皮膚乳頭内のループ状毛細血管、および皮膚乳頭を示す。最上の点線によって印の付いた深さまでの攪乱は、点状出血を生じることが期待され得る。最下の点線によって印の付いた深さまでの攪乱は、皮膚乳頭から表層の血管叢への表皮厚みの移行として点状出血およびより均一な出血を生じることが期待され得る。
【図２４】ＰＥＧ−ＮＨＳ／ＰＥＧ−ＡＭヒドロゲルに対するｐＨの関数としてゲル時間を示すグラフである。
【図２５Ａ】図２５Ａおよび２５Ｂは、ＰＥＧ−ＮＨＳ／ＰＥＧ−ＡＭヒドロゲルに対するＰＥＧ濃度の関数としてゲル時間を示すグラフである。
【図２５Ｂ】図２５Ａおよび２５Ｂは、ＰＥＧ−ＮＨＳ／ＰＥＧ−ＡＭヒドロゲルに対するＰＥＧ濃度の関数としてゲル時間を示すグラフである。
【図２６】ＰＥＧ−ＮＨＳ／ＰＥＬヒドロゲルに対するリン酸緩衝液（０．１Ｍ（ひし形）、０．２Ｍ（三角形）、および０．５Ｍ（正方形））中のＰＥＩ濃度の関数としてゲル時間を示すグラフである。
【図２７】ＰＥＧ−ＮＨＳ／ＰＥＧ−アミンヒドロゲル（ひし形）、ＰＥＧ−ＮＨＳ／ＰＥＧ−アミン／キトサンヒドロゲル（正方形）、およびＰＥＧ−ＮＨＳ／ＰＥＩヒドロゲル（三角形）に対するＰＥＧ濃度（ｘ軸）の関数として膨潤度（ｙ軸）を示すグラフである。
【図２８】温度およびＰＶＡ濃度の関数としてＰＶＡ溶液の粘度を示すグラフである。それぞれの濃度に対する左側の棒（ｘ軸）は、２５℃でのせん断粘度（ｃＰ）を示し、それぞれの濃度に対する右側の棒（ｘ軸）は、３０℃でのせん断粘度（ｃＰ）を示す。
【図１】
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【図２】
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【図３】
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【図４】
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【図５Ａ】
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【図５Ｂ】
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【図６】
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【図７】
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【図８】
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【図９】
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【図１０】
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【図１１】
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【図１２】
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【図１３】
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【図１４】
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【図１５】
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【図１６】
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【図１７Ａ】
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【図１７Ｂ】
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【図１８】
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【図１９Ａ】
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【図１９Ｂ】
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【図２０Ａ】
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【図２０Ｂ】
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【図２０Ｃ】
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【図２０Ｄ】
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【図２１Ａ】
2019131558.tif 000073
【図２１Ｂ】
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【図２１Ｃ】
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【図２１Ｄ】
2019131558.tif 000076
【図２１Ｅ】
2019131558.tif 000077
【図２２】
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【図２３Ａ】
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【図２３Ｂ】
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【図２３Ｃ】
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【図２３Ｄ】
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【図２３Ｅ】
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【図２３Ｆ】
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【図２４】
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【図２５Ａ】
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【図２５Ｂ】
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【図２６】
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【図２７】
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【図２８】
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