(57)【要約】      （修正有）【課題】貯蔵または輸送時に柑橘類果実に付着したカビの菌糸の成長を抑制することができ、かつ、カビの増殖により腐敗した果実と健全果が隣接することで起こる共腐れを防止できる菌糸成長抑制剤の提供。【解決手段】（１−フェニル−２，４−ヘキサジイレ−１−オン）カピリンを有効成分とするカワラヨモギエキスと、ＨＬＢが８〜２０の界面活性剤及び脂肪酸グリセリドを含有した水性溶液からなる菌糸成長抑制剤。更に、ペクチン分解酵素阻害作用を示すタンニン等のポリフェノールを含有させることができる菌糸成長抑制剤。【選択図】なし【特許請求の範囲】
【請求項１】
カピリンを有効成分とするカワラヨモギエキスを含有することを特徴とする菌糸成長抑制剤。
【請求項２】
ＨＬＢが８〜２０の界面活性剤及び脂肪酸グリセリドを含有することを特徴とする請求項１記載の菌糸成長抑制剤。
【請求項３】
さらに、ペクチン分解酵素活性阻害作用を示すポリフェノールを含有することを特徴とする請求項１又は２記載の菌糸成長抑制剤。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、柑橘類果実に発生したカビの菌糸成長抑制剤に関し、柑橘類果実に付着、またはこれらを収納する袋、容器、箱、部屋、倉庫、輸送用コンテナ等に付着したカビの菌糸成長抑制剤に関する。
【背景技術】
【０００２】
収穫された柑橘類果実は多量の水分を含んでおり、カビが発生・増殖する宿主となる。果実にカビが発生し、増殖すると腐敗が生じると共に外観を損ねるため、腐敗は果実の商品価値を低下させる上、産地評価を失墜させるものとなる。従って、果実の腐敗が抑制されていること、即ち、カビの発生・増殖が抑制されていることは重要である。
【０００３】
カビの発生とは、食べ物などに付着したカビの胞子が発芽した状態のことである。発芽した胞子は栄養源や水分を摂取するため、菌糸を縦横に成長させていく。そして、新たに形成された胞子が食べ物の表面に付着し発芽することで増殖する。
【０００４】
従来、収穫後の農作物に対してカビの発芽を抑制するためにカピリンを有効成分として含むことを特徴とする農作物の腐敗防止剤（特許文献１）が提案されている。また、カピリンとペクチン分解酵素活性阻害作用を示すポリフェノールを併用することを特徴とする青果物用腐敗防止組成物（特許文献２）、カピリン、ポリフェノール、界面活性剤を含む組成物を果皮表面に接触させて処理したことを特徴とする柑橘類果実（特許文献３）が提案されている。
【０００５】
さらに、収穫された柑橘類果実は段ボールに入れて貯蔵される。段ボール内で果実表皮に付着していたカビが増殖し腐敗果が出来ると、腐敗果の表皮上の菌糸が成長することで隣接する健全果に菌糸が付着し腐敗を招くという共腐れ現象が起こる。段ボール内で起こる共腐れは見つけにくいため、市場に並んだ時には甚大な被害が及んでいる場合がある。
【０００６】
カビなど真菌の菌糸成長を抑制する方法としては、精油に含まれる成分を用い真菌の呼吸活性を阻害する方法（特許文献４）、モンモリロナイト、珪藻土、及びシリカゲルから１種以上を含有する病害予防剤もしくは病害処置剤により病害の発生した部位を乾燥させる方法（特許文献５）等が提案されている。また、一般的にＵＶ−Ａをカットすることで胞子形成が抑制されることが知られており、さらにＵＶ−Ｂ光を照射することによりカビの発芽を抑制する方法が挙げられている（特許文献６）。
【先行技術文献】
【特許文献】
【０００７】
【特許文献１】特開２００４−１６８６６９号公報
【特許文献２】特許第４１６３６９４号
【特許文献３】特開２００６−２３０２８３号公報
【特許文献４】特開平１０−３３８６３０号公報
【特許文献５】特開２００４−３１５４０７号公報
【特許文献６】特開２００５−３２８７３４号公報
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００８】
上述の事情に鑑み、本発明は、柑橘類果実に付着したカビの菌糸の成長を抑制し、病害の拡大、共腐れを防止できる菌糸成長抑制剤を提供できることを目的とする。
【課題を解決するための手段】
【０００９】
本発明は、カピリンを有効成分として含むカワラヨモギエキスにより、菌糸の成長を抑制することを見出し、本発明を完成するに至った。
【発明の効果】
【００１０】
上記の菌糸成長抑制剤によれば、果実表面に付着した菌糸の成長を抑制し、共腐れを防止することが出来るため、果実の商品価値を低下させないことが可能となる。
【発明を実施するための形態】
【００１１】
以下、本発明を実施形態に基づき詳細に説明する。本実施形態における菌糸成長抑制剤は、カピリンを含有し、好適には、界面活性剤及び脂肪酸グリセリドを含有し、さらに好適にはポリフェノールを含有する組成物である。この組成物は、菌糸の成長抑制に利用される。なお、範囲を表す表記「〜」は、上限と下限を含むものである。
【００１２】
本実施形態の組成物は、カピリンを含有するカワラヨモギエキスを使用する。前記組成物におけるカピリン濃度は特に限定されるものではないが、０．０００５〜０．２重量％が好ましく、０．００３〜０．０３重量％が特に好ましい。カピリン濃度が０．０００５〜０．２重量％の範囲では、果実への使用の際に薬害が生じることなく、菌糸の成長抑制効果が均一に現われる。
【００１３】
カワラヨモギエキスは、カワラヨモギ（学名：Ａｒｔｅｍｉｓｉａ ｃａｐｉｌｌａｒｉｓ  Ｔｈｕｍｂ．）を溶媒に浸漬した後、カワラヨモギを溶媒から除去、次いで、この除去した溶媒を留去して残る精油残渣として得られる。また、水蒸気中にカワラヨモギを暴露後、この水蒸気を集めることによって、カワラヨモギエキスを得ることができる。なお、カワラヨモギエキスをエタノール等に希釈して使用することができる。更に、カラムクロマトグラフィーや高速液体クロマトグラフィー等により、カワラヨモギエキスからカピリンを分取してエタノール等に希釈して使用しても良い。
【００１４】
カワラヨモギエキスを得るために使用するカワラヨモギは、植生しているカワラヨモギの地上部の部分を使用すると良く、乾燥した花穂を使用することが好適である。
【００１５】
カワラヨモギを浸漬する溶媒には、一価又は多価アルコール、ケトン類、エーテル類、炭化水素等の有機溶媒や水を単独又は混合して使用すると良い。一価のアルコールには、メタノール、エタノール、イソプロピルアルコールが例示される。多価アルコールには、エチレングリコール、プロピレングリコール、１，３−ブチレングリコール、グリセリンが例示される。また、ケトン類には、アセトン、メチルエチルケトンが、エーテル類には、メチルエーテル、石油エーテルが、炭化水素には、ヘキサン、シクロヘキサンが例示される。中でもエタノール、又は含水エタノールを使用することが好適である。
【００１６】
界面活性剤には、Ｇｒｉｆｆｉｎの経験式から計算されるＨＬＢ値（Ｈｙｄｒｏｐｈｉｌｅ−Ｌｉｐｏｐｈｉｌｅ  Ｂａｌａｎｃｅ  Ｖａｌｕｅ値）が８〜２０、好ましくは１４〜２０のものが選択される。この界面活性剤を本実施形態の菌糸成長抑制剤に含有していると、菌糸の成長抑制効果が一層向上する。これは、界面活性剤を含有することにより、果実表皮内にカピリンがより浸透し、カビの菌糸成長を抑制することができるためと推測される。
【００１７】
本実施形態で選択される界面活性剤としては、グリセリンモノカプリレート等のモノグリセリド、ジグリセリンモノカプリレート、ジグリセリンモノミリステート、ジグリセリンモノパルミテート、ジグリセリンモノステアレート、ジグリセリンモノオレエート、デカグリセリンモノカプリレート、デカグリセリンモノラウレート、デカグリセリンモノミリステート、デカグリセリンモノステアレート、デカグリセリンモノオレエート等のポリグリセリン脂肪酸エステル、クエン酸モノグリセリド、ジアセチル酒石酸モノグリセリド等のグリセリン有機酸脂肪酸エステル、アルキレングリコール脂肪酸エステル、ポリオキシエチレンソルビタンモノラウレート等のポリオキシエチレンソルビタン脂肪酸エステル、ショ糖カプリン酸エステル、ショ糖カプリル酸エステル、ショ糖ステアリン酸エステル、ショ糖パルミチン酸エステル、ショ糖ミリスチン酸エステル、ショ糖ラウリン酸エステル等のショ糖脂肪酸エステルが例示される。ポリグリセリン脂肪酸エステルを選択するときには、デカグリセリンモノミリステートが選択されていることが好適であり、ショ糖脂肪酸エステルを選択するときには、ショ糖モノミリスチン酸エステルを含有するショ糖エステルを選択することが好適である。なお、ポリグリセリン脂肪酸エステルが選択されているとき、その濃度が高まるにつれて果実表面のべた付く触感が生じ易くなるが、ショ糖脂肪酸エステルが選択されているとき、ポリグリセリン脂肪酸エステルよりも果実表面のべた付く触感が抑制される。
【００１８】
なお、界面活性剤にポリグリセリン脂肪酸エステルを選択するとき、これを構成するポリグリセリンは、水酸基価から算出される平均重合度が２〜２０のポリグリセリンであると良い。この水酸基価から算出される平均重合度（ｎ）とは、末端分析法によって算出される値であり、次式（式１）及び（式２）から算出される。
（式１）分子量＝７４ｎ＋１８
（式２）水酸基価＝５６１１０（ｎ＋２）／分子量
前記水酸基価とは、エステル化物中に含まれる水酸基数の大小の指標となる数値であり、１ｇのエステル化物に含まれる遊離のヒドロキシル基をアセチル化するために必要な酢酸を中和するのに要する水酸化カリウムのミリグラム数をいい、水酸化カリウムのミリグラム数は、社団法人日本油化学会編纂、「日本油化学会制定、基準油脂分析試験法、２００３年度版」に準じて算出される。なお、ケン価は、３０〜１４０の範囲であると良い。
【００１９】
本実施形態の組成物における界面活性剤の濃度は、特に限定されるものではないが、カピリンとの重量濃度比がカピリン：界面活性剤＝１：１０００より小さいと良く、１：２０〜２００が特に好ましい。前記組成物において、果実への使用時には界面活性剤濃度は５．０重量％以下が好ましく、０．１〜２．０重量％が特に好ましい。この界面活性剤が組成物に含有されている時、果実に組成物が均一に付着しやすくなり菌糸の成長抑制効果が一層向上する。
【００２０】
脂肪酸グリセリドは、グリセリンと脂肪酸とのエステルであり、モノグリセリド、ジグリセリド及びトリグリセリドのうち一種又は二種以上を含有する脂肪酸グリセリドが使用される。なお、脂肪酸グリセリドが固体の場合は、これを加熱する等して融解させた後に組成物調製に使用すると良い。
【００２１】
脂肪酸グリセリドには、例えば、公知の脂肪酸とグリセリンをエステル化する方法によって製造されたものを使用すると良い。脂肪酸グリセリドを製造する場合に使用する脂肪酸は、酪酸、カプリル酸、ペラルゴン酸、カプリン酸、ウンデシル酸、ラウリン酸、ラウリル酸、ミリスチン酸、パルミチン酸、パルミトレイン酸、ステアリン酸、オレイン酸、リノール酸、リノレン酸、ノクチン酸、アラギン酸等が使用され、これらの脂肪酸のうち一種又は二種以上選択して使用すると良い。
【００２２】
また脂肪酸グリセリドには、主成分にトリグリセリドを含有する天然油脂を使用しても良い。天然油脂には、動物脂や動物油である動物油脂、又は、植物脂や植物油である植物油脂のいずれを使用しても良い。
【００２３】
動物脂としては、牛乳脂、ヤギ乳脂、牛脂、豚脂、羊脂が例示される。動物油としては、イワシ油、サバ油、サメ肝油が例示される。植物脂としては、ヤシ油、パーム油等である。植物油としては、乾性油、半乾性油及び不乾性油を使用することが可能であり、乾性油としては、アマニ油、キリ油、サフラワー油が例示され、半乾性油としては、大豆油、コーン油、ゴマ油、菜種油、ヒマワリ油、綿実油が例示され、不乾性油としては、オリーブ油、カラシ油、ツバキ油、ヒマシ油、落花生油が例示される。また、前記天然油脂に含まれる構成油脂を分別して使用することも可能である。
【００２４】
好適な脂肪酸グリセリドは、一種又は二種以上の炭素数が８〜１２の脂肪酸とグリセリンとをエステル化した脂肪酸グリセリドである。
【００２５】
本実施形態の組成物における脂肪酸グリセリドの濃度は、特に限定されるものではないが、カピリンとの重量濃度比がカピリン：脂肪酸グリセリド＝１：５０００より小さいと良く、１：２５〜４００が特に好ましい。前記組成物において、果実への使用時には脂肪酸グリセリドの濃度は５．０重量％以下が好ましく、０．１〜２．０重量％が特に好ましい。この脂肪酸グリセリドが組成物に含有されている時、カピリンの揮発や蒸散が抑制されて菌糸の成長抑制効果が一層向上する。
【００２６】
ポリフェノールは、同一分子内に複数のフェノール性水酸基（ヒドロキシ基）をもつ化合物の総称で、光合成により生成された色素や苦味などの成分としてほとんどの植物に含まれており、抗酸化能力に優れた水溶性（一部は脂溶性）物質である。ペクチン分解酵素活性阻害作用を示すポリフェノールとしては、タンニンが挙げられる。特に、縮合型タンニンよりもタンニン酸、チョウジ等の加水分解型タンニンがより好ましい。最適には、タンニン酸が選択される。
【００２７】
本実施形態の組成物におけるポリフェノールの濃度は、特に限定されるものではないが、カピリンとの重量濃度比がカピリン：ポリフェノール＝１：１０００より小さいと良く、１：２００より小さいことが特に好ましい。前記組成物において、果実への使用時にはポリフェノールの濃度は１．０重量％以下が好ましく、０．１〜０．８重量％が特に好ましい。
【００２８】
界面活性剤、脂肪酸グリセリド、ポリフェノールを含有する組成物を調製する場合には、結果として界面活性剤、脂肪酸グリセリド、ポリフェノールを組成物が含有していると良く、混合手順を問わない。なお、本実施形態における組成物は、その他に、水、エタノール、グリセリン、プロピレングリコール等の食品に使用できる溶媒やカワラヨモギより溶媒抽出したカワラヨモギ抽出液のうちの一種又は二種以上を含有するものであっても良く、この場合においても、混合する手順を問うものでもない。水を含有する場合には、エタノールも含有させることが、カピリンや脂肪酸グリセリドが組成物中に均一に分散し、果実に組成物成分が均等に分散して菌糸成長抑制効果が安定したものとなるので好適である。また、キサンタンガム等の増粘剤も組成物中に含有させることにより、組成物が保管中に相分離することが抑制され、組成物の各成分が果実に均等に存在することになる。
【００２９】
上記組成物を収穫後のみならず収穫前の果実に対しても使用することができ、貯蔵、輸送、市場、及び、店頭陳列の間、並びに、消費者による購入後に使用することができる。また、プレハーベストやポストハーベストの代替として使用することができる。本実施形態における組成物が菌糸成長抑制効果ならびに共腐れ防止効果を発揮する果実は、ミカン科の温州ミカン、夏ミカン、レモン、伊予柑等のカンキツ属、キンカン属、カラタチ属等が挙げられる。
【００３０】
組成物で果実を処理するとき、組成物が果実と接触する処理であれば良い。処理方法としては、果実を組成物中に浸漬する浸漬法、果実に向けて組成物を噴霧や散布するスプレー法、刷毛などで果実表面に組成物を塗りつける塗布法や予め果実収納容器に組成物を付着させておく方法が挙げられる。果実のカビが発生し易い部分には、集中的な処理を行うこともできる。
【００３１】
組成物で処理された果実は、緑カビ病を誘発する緑カビ（Ｐｅｎｉｃｉｌｌｉｕｍ ｄｉｇｉｔａｔｕｍ）、青カビ病を誘発する青カビ（Ｐｅｎｉｃｉｌｌｉｕｍ ｉｔａｌｉｃｕｍ）、軸腐病を誘発する黒点病菌（Ｄｉａｐｏｒｔｈｅ ｃｉｔｒｉ）、黒腐病を誘発する腐生菌（Ａｌｔｅｒｎａｒｉａ ａｌｔｅｒｎａｔａ）、灰色カビ病を誘発する病原菌（Ｂｏｔｒｙｔｉｓ ｃｉｎｅｒｅａ）、白カビ病を誘発する病原菌（Ｇｅｏｔｒｉｃｈｕｍ ｃａｎｄｉｄｕｍ）、黒班病を誘発する病原菌（Ｐｈｏｍａ ｃｉｔｒｉｃａｒｐａ ｖａｒ． ｍｉｋａｎ）、炭そ病を誘発する病原菌（Ｃｏｌｌｅｔｏｔｒｉｃｈｕｍ ｇｌｏｅｏｓｐｏｒｉｏｉｄｅｓ）等の菌糸の成長を抑制したものとなる。
【実施例】
【００３２】
以下に本発明を実施例に基づき具体的に説明するが、本発明はこれらの実施例により限定されるものではない。
【００３３】
（製造例１：カワラヨモギ抽出エキスの調製）
乾燥したカワラヨモギの花穂１００ｇにエタノール５００ｇを加えて常温にて２４時間浸漬して抽出後、ろ過し、カピリンを含有するカワラヨモギ抽出液４００ｇを得た。このカワラヨモギ抽出液のカピリン濃度は０．０２重量％であった。本カワラヨモギ抽出液をカワラヨモギ抽出エキスとした。尚、カピリンの濃度は、下記条件の高速液体クロマトグラフィーにて分析し、カピリンの検量線から濃度を求めた。
高速液体クロマトグラフィーの分析条件
（株）島津製作所製  ＬＣ−１０Ａシステム
カラム：信和化工（株）製  ＳＴＲ  ＯＤＳ−２
４．６ｍｍＩ．Ｄ．×１５０ｍｍＬ
移動相：０．５％酢酸水溶液５５％＋エタノール４５％、０．８ｍＬ／ｍｉｎ
検出器：ＵＶ２８０ｎｍ
試  料：移動相により１０％に希釈し、２０μＬ注入
【００３４】
（製造例２：カワラヨモギ濃縮エキスの調製）
乾燥したカワラヨモギの花穂２ｋｇにエタノール１０ｋｇを加えて常温にて２４時間浸漬して抽出後、ろ過し、カワラヨモギ抽出エキス８ｋｇを得た。これよりエタノールを留去し、全量を４００ｇとし、カワラヨモギ濃縮エキスを得た。このカワラヨモギ濃縮エキスのカピリン濃度は０．４重量％であった。
【００３５】
（実施例１）
製造例１に記載のカワラヨモギ抽出エキス、タンニン酸、トリ（カプリル酸・カプリン酸）グリセリルを混合してカピリン溶解物を調製した。また別途、ショ糖モノミリステート、エタノール、水を混合して乳化剤溶液を調製した。乳化剤溶液にカピリン溶解物を添加及び撹拌することによってこれらを混合し、実施例１の菌糸成長抑制剤を調製した。
【００３６】
（実施例２）
実施例１で使用したカワラヨモギ抽出エキスの配合量を変えた以外は、実施例１と同様にして菌糸成長抑制剤を調製した。
【００３７】
（実施例３及び実施例４）
実施例１で使用したカワラヨモギ抽出エキスに変えて製造例２に記載のカワラヨモギ濃縮エキスを使用したこと以外は、実施例１と同様にして菌糸成長抑制剤を調製した。
【００３８】
（実施例５〜９）
実施例２で使用したタンニン酸、界面活性剤、脂肪酸グリセリドの配合量や種類を変えた以外は、実施例２と同様にして菌糸成長抑制剤を調製した。
【００３９】
（実施例１０）
製造例１に記載のカワラヨモギ抽出エキス、タンニン酸、トリ（カプリル酸・カプリン酸）グリセリル、ショ糖モノミリステートを混合し、実施例１０の菌糸成長抑制剤を調製した。
【００４０】
（実施例１１）
実施例１０で使用したタンニン酸を除いたこと以外は、実施例１０と同様にして菌糸成長抑制剤を調製した。
【００４１】
実施例１〜１１の菌糸成長抑制剤の配合量、カピリン含有量を表１に示した。
【００４２】
【表１】
2019131466.tif 000002
【００４３】
（試験例１）
収穫直後の温州ミカン果実（品種：宮川早生）を使用し、傷がなく且つ大きさや成熟度が同等な６０個の果実を選別した。選別後、実施例１〜９の菌糸成長抑制剤を各５個の果実にウエスで塗布し、風乾させた。実施例１０の菌糸成長抑制剤は水で１４倍に希釈した後、希釈後の組成物を各５個の果実にウエスで塗布し、風乾させた。実施例１１の菌糸成長抑制剤は水で４倍に希釈した後、希釈後の組成物を各５個の果実にウエスで塗布し、風乾させた。残りの５個の果実には処理を行わなかった。風乾後、各果実の表面の３ヶ所に虫ピンで深さ２ｍｍ程度の傷を付け、ＰＤＡ培地で培養して１０５個／ｍｌに調製した緑カビ（Ｐｅｎｉｃｉｌｌｉｕｍ ｄｉｇｉｔａｔｕｍ）の胞子懸濁液を１滴ずつ果実表面の傷に接種した。接種後、果実を１個ずつプラスチック容器へ入れ、フタを閉じて２５℃で貯蔵した。貯蔵開始から１、２、３日後に、緑カビの胞子を接種した箇所の腐敗直径を測り、処理区ごとの平均値で評価した。その結果を表２に示す。
【００４４】
（試験例２）
果実を収穫直後のレモン果実（品種：リスボン）に変えて、試験例１と同様の作業を行った。結果を表２に示す。
【００４５】
【表２】
2019131466.tif 000003
【００４６】
表２より明らかなように、実施例１〜１１の菌糸成長抑制剤で処理された果実は、無処理と比べて腐敗直径が小さく、腐敗の広がりが遅いことから、優れた菌糸成長抑制効果を示すことが確認された。
【００４７】
（試験例３）
収穫直後の温州ミカン果実（品種：宮川早生）を使用し、傷がなく且つ大きさや成熟度が同等な７２０個の果実を選別した。選別後、実施例１〜９の菌糸成長抑制剤を各６０個の果実にウエスで塗布し、風乾させた。実施例１０の菌糸成長抑制剤は水で１４倍に希釈した後、希釈後の組成物を各６０個の果実にウエスで塗布し、風乾させた。実施例１１の菌糸成長抑制剤は水で４倍に希釈した後、希釈後の組成物を各６０個の果実にウエスで塗布し、風乾させた。残りの６０個の果実には処理を行わなかった。風乾後、果実を処理区ごとに段ボール箱へ入れた後、緑カビ（Ｐｅｎｉｃｉｌｌｉｕｍ ｄｉｇｉｔａｔｕｍ）の胞子が全面に形成している腐敗果を各箱の果実の上に１つずつ静置し、箱のフタを閉じて２５℃で貯蔵した。貯蔵開始から７、１１日後に、初めに静置した腐敗果からの共腐れによる腐敗果数を評価した。その結果を表３に示す。
【００４８】
（試験例４）
果実を収穫直後のレモン果実（品種：リスボン）に変えて、試験例３と同様の作業を行った。結果を表３に示す。
【００４９】
【表３】
2019131466.tif 000004
【００５０】
表３より明らかなように、実施例１〜１１の菌糸成長抑制剤で処理された果実は、無処理の果実と比べて共腐れによる腐敗果の増加数が少なく、優れた菌糸成長抑制効果を示すことが確認された。