(57)【要約】      （修正有）【課題】細胞結合因子へ結合するためのリンカーを有するピロロベンゾジアゼピンダイマー化合物を含むコンジュゲートの提供。【解決手段】式（Ａ）のコンジュゲート化合物：2019069947.tif 000108（式中、Ｒが付いた基は特定の置換基を表し、Ｙは、細胞結合因子を含む置換基、Ｚは、ＣＨ又はＮであり；Ｔ及びＴ’は、単結合又はＣ1-9アルキレンから独立して選択され、；Ｘ及びＸ’は、Ｏ、Ｓ及びＮ（Ｈ）から独立して選択される。）。【選択図】なし【特許請求の範囲】
【請求項１】
次の式（Ａ）のコンジュゲート：
【化１】
2019069947.tif 000093
（式中、Ｒ2は
【化２】
2019069947.tif 000094
であり、
式中、Ｒ36a及びＲ36bは、それぞれ独立に、Ｈ、Ｆ、Ｃ1-4飽和アルキル、Ｃ2-3アルケニルから選択され、アルキル基及びアルケニル基は、Ｃ1-4アルキルアミド及びＣ1-4アルキルエステルから選択される基によって任意に置換され；又は
Ｒ36a及びＲ36bの一方がＨである場合、他方は、ニトリル及びＣ1-4アルキルエステルから選択され；
Ｒ6及びＲ9は、それぞれ独立して、Ｈ、Ｒ、ＯＨ、ＯＲ、ＳＨ、ＳＲ、ＮＨ2、ＮＨＲ、ＮＲＲ’、ＮＯ2、Ｍｅ3Ｓｎ及びハロから選択され；
Ｒ7は、独立して、Ｈ、Ｒ、ＯＨ、ＯＲ、ＳＨ、ＳＲ、ＮＨ2、ＮＨＲ、ＮＲＲ’、ＮＯ2、Ｍｅ3Ｓｎ及びハロから選択され；
Ｙは、式Ａ１、Ａ２、Ａ３、Ａ４、Ａ５及びＡ６から選択され：
【化３】
2019069947.tif 000095
Ｌは、細胞結合因子に結合されたリンカーであり；
ＣＢＡは、細胞結合因子であり；
ｎは、０から４８の範囲で選択される整数であり；
ＲA4はＣ1-6アルキレン基であり；
さらに以下のいずれかであり：
（ａ）Ｒ10はＨであり、Ｒ11はＯＨ、ＯＲAであり、式中、ＲAはＣ1-4アルキルである；又は
（ｂ）Ｒ10及びＲ11は、それらが結合されている窒素原子と炭素原子との間に窒素−炭素二重結合を形成する；又は
（ｃ）Ｒ10がＨであり、Ｒ11がＯＳＯzＭであり、式中、ｚは２又は３であり、Ｍは１価の医薬的に許容されるカチオンである；
Ｒ及びＲ’は、それぞれ独立して、任意に置換されたＣ1-12アルキル基、Ｃ3-20ヘテロシクリル基及びＣ5-20アリール基より選択され、任意に基ＮＲＲ’に関し、Ｒ及びＲ’は、それらが結合している窒素原子と共に、任意に置換された４員、５員、６員又は７員複素環を形成し；
Ｒ16、Ｒ17、Ｒ19、Ｒ20、Ｒ21及びＲ22は、Ｒ6、Ｒ7、Ｒ9、Ｒ10、Ｒ11及びＲ2についてそれぞれ定義した通りであり；
Ｚは、ＣＨ又はＮであり；
Ｔ及びＴ’は、それぞれ独立して、単結合又はＣ1-9アルキレンから選択され、該アルキレン鎖は、１個以上のヘテロ原子、例えばＯ、Ｓ、Ｎ（Ｈ）、ＮＭｅによって割り込まれてよく、ただし、ＸとＸ’との間の最も短い原子鎖中の原子の数が３〜１２個原子であり；
Ｘ及びＸ’は、それぞれ独立して、Ｏ、Ｓ及びＮ（Ｈ）から選択される。）。
【請求項２】
Ｒ9がＨである、請求項１に記載のコンジュゲート。
【請求項３】
Ｒ6がＨである、請求項１又は請求項２に記載のコンジュゲート。
【請求項４】
Ｒ7がＯＲ7Aであり、Ｒ7Aが任意に置換されたＣ1-4アルキルである、請求項１から３のいずれか一項に記載のコンジュゲート。
【請求項５】
Ｒ7AがＭｅである、請求項４に記載のコンジュゲート。
【請求項６】
ＸがＯである、請求項１から５のいずれか一項に記載のコンジュゲート。
【請求項７】
Ｔが単結合、Ｃ1及びＣ2アルキレン基から選択される、請求項１から６のいずれか一項に記載のコンジュゲート。
【請求項８】
ＴがＣ1アルキレン基である、請求項７に記載のコンジュゲート。
【請求項９】
Ｒ36a及びＲ36bがどちらもＨである、請求項１から８のいずれか一項に記載のコンジュゲート。
【請求項１０】
Ｒ36a及びＲ36bがどちらもメチルである、請求項１から８のいずれか一項に記載のコンジュゲート。
【請求項１１】
Ｒ36a及びＲ36bの一方がＨであり、他方がＣ1-4飽和アルキル、Ｃ2-3アルケニルから選択され、前記アルキル基及びアルケニル基が任意に置換されている、請求項１から８のいずれか一項に記載のコンジュゲート。
【請求項１２】
Ｈではない前記Ｒ36a及びＲ36bの基がメチル及びエチルから選択される、請求項１１に記載のコンジュゲート。
【請求項１３】
Ｒ10がＨであり、Ｒ11がＯＨである、請求項１から１２のいずれか一項に記載のコンジュゲート。
【請求項１４】
Ｒ10及びＲ11が、それらが結合されている窒素原子と炭素原子との間に窒素−炭素二重結合を形成する、請求項１から１２のいずれか一項に記載のコンジュゲート。
【請求項１５】
Ｒ16、Ｒ17、Ｒ19、Ｒ20、Ｒ21、Ｒ22、Ｘ’及びＴ’が、Ｒ6、Ｒ7、Ｒ9、Ｒ10、Ｒ11、Ｒ2、Ｘ及びＴとそれぞれ同じである、請求項１から１４のいずれか一項に記載のコンジュゲート。
【請求項１６】
前記基Ｌが、以下から選択される求電子性官能基に由来する部分を含有する、請求項１から１５のいずれか一項に記載のコンジュゲート：（ｉ）マレイミド基、（ｉｉ）活性化ジスルフィド、（ｉｉｉ）活性エステル、例えばＮＨＳ（Ｎ−ヒドロキシスクシンイミド）エステル、ＨＯＢｔ（Ｎ−ヒドロキシベンゾトリアゾール）エステル、ハロホルメート及び酸ハライド；（ｉｖ）アルキル及びベンジルハライド、例えばハロアセトアミド；並びに（ｖ）アルデヒド、ケトン、カルボキシル。
【請求項１７】
Ｌが次の式である、請求項１から１５いずれか一項に記載のコンジュゲート：
−ＬA−（ＣＨ2）m−  （Ｌ１）
式中、ｍが０から６であり；
ＬAが以下から選択され：
【化４】
2019069947.tif 000096
式中、ＡｒがＣ5-6アリーレン基を表す。
【請求項１８】
ＬAがＬA1-1及びＬA3-2から選択される、請求項１７に記載のコンジュゲート。
【請求項１９】
ｍが２、３又は５である、請求項１７又は請求項１８に記載のコンジュゲート。
【請求項２０】
Ｌが次の式である、請求項１から１５のいずれか一項に記載のコンジュゲート：
−ＬA−（ＣＨ2）m−Ｏ−  （Ｌ２）
式中、ｍが０から６であり；
ＬAが請求項１７で定義した基から選択される。
【請求項２１】
ＬAがＬA3-2である、請求項２０に記載のコンジュゲート。
【請求項２２】
ｍが１である、請求項２０又は２１に記載のコンジュゲート。
【請求項２３】
Ｌが次の式である、請求項１から１５のいずれか一項に記載のコンジュゲート：
−ＬA−（ＣＨ2）q−Ｏ−Ｃ（＝Ｏ）−ＮＨ−（ＣＨ2）p−  （Ｌ３）
式中、ｑが１から３であり、ｐが１から３であり；
ＬAが請求項１７で定義した基から選択される。
【請求項２４】
ＬAが、ＬA7、ＬA8-1及びＬA8-2から選択される、請求項２３に記載のコンジュゲート。
【請求項２５】
ｑが１である、請求項２３又は請求項２４に記載のコンジュゲート。
【請求項２６】
ｐが２である、請求項２３から２５のいずれか一項に記載のコンジュゲート。
【請求項２７】
Ｌが次の式である、請求項１から１５のいずれか一項に記載のコンジュゲート：
【化５】
2019069947.tif 000097
式中、ｍが０から６であり；
Ｘ1及びＸ2が、修飾されていてもよい、天然アミノ酸から選択されるアミノ酸基であり；
ＬAが、請求項１７で定義した基から選択される。
【請求項２８】
前記基−Ｘ1−Ｘ2−が以下から選択される、請求項２７に記載のコンジュゲート：
−Ｐｈｅ−Ｌｙｓ−、
−Ｖａｌ−Ａｌａ−、
−Ｖａｌ−Ｌｙｓ−、
−Ａｌａ−Ｌｙｓ−、
−Ｖａｌ−Ｃｉｔ−。
【請求項２９】
ｍが５である、請求項２７又は請求項２８に記載のコンジュゲート。
【請求項３０】
ｎが０から１６の間の整数である、請求項１から２９のいずれか一項に記載のコンジュゲート。
【請求項３１】
ｎが０から８の間の整数である、請求項１から３０のいずれか一項に記載のコンジュゲート。
【請求項３２】
ｎが３又は４である、請求項１から３１のいずれか一項に記載のコンジュゲート。
【請求項３３】
前記細胞結合因子が抗体又はその活性断片である、請求項１から３２のいずれか一項に記載のコンジュゲート。
【請求項３４】
前記抗体又は抗体断片が、腫瘍関連抗原に対する抗体又は抗体断片である、請求項３３に記載のコンジュゲート。
【請求項３５】
前記抗体又は抗体断片が、（１）−（３８）から選択される１つ以上の腫瘍関連抗原又は細胞表面受容体に結合する、抗体又は抗体断片である、請求項３４に記載のコンジュゲート：
（１）ＢＭＰＲ１Ｂ（骨形成タンパク質受容体ＩＢ型）；
（２）Ｅ１６（ＬＡＴ１、ＳＬＣ７Ａ５）；
（３）ＳＴＥＡＰ１（前立腺の６回膜貫通上皮抗原）；
（４）０７７２Ｐ（ＣＡ１２５、ＭＵＣ１６）；
（５）ＭＰＦ（ＭＰＦ、ＭＳＬＮ、ＳＭＲ、巨核球増強因子、メソテリン）；
（６）Ｎａｐｉ３ｂ（ＮＡＰＩ−３Ｂ、ＮａＰｉ２Ｂ、ＮＰＴＩＩｂ、ＳＬＣ３４Ａ２、溶質担体ファミリー３４（リン酸ナトリウム）、メンバー２、ＩＩ型ナトリウム依存性リン酸トランスポータ３ｂ）；
（７）Ｓｅｍａ  ５ｂ（ＦＬＪ１０３７２、ＫＩＡＡ１４４５，Ｍｍ．４２０１５、ＳＥＭＡ５Ｂ、ＳＥＭＡＧ、セマフォリン５ｂ  Ｈｌｏｇ、セマドメイン、７トロンボスポンジンリピート（１型及び１型様）、膜貫通ドメイン（ＴＭ）及び短細胞質ドメイン、（セマフォリン）５Ｂ）；
（８）ＰＳＣＡ  ｈｌｇ（２７０００５０Ｃ１２Ｒｉｋ、Ｃ５３０００８Ｏ１６Ｒｉｋ、ＲＩＫＥＮ  ｃＤＮＡ  ２７０００５０Ｃ１２、ＲＩＫＥＮ  ｃＤＮＡ  ２７０００５０Ｃ１２遺伝子）；
（９）ＥＴＢＲ（エンドセリンＢ型受容体）；
（１０）ＭＳＧ７８３（ＲＮＦ１２４、仮想タンパク質ＦＬＪ２０３１５）；
（１１）ＳＴＥＡＰ２（ＨＧＮＣ＿８６３９、ＩＰＣＡ−１、ＰＣＡＮＡＰ１、ＳＴＡＭＰ１、ＳＴＥＡＰ２、ＳＴＭＰ、前立腺癌関連遺伝子１、前立腺癌関連タンパク質１、前立腺２の６回膜貫通上皮抗原、６回膜貫通前立腺タンパク質）；
（１２）ＴｒｐＭ４（ＢＲ２２４５０、ＦＬＪ２００４１、ＴＲＰＭ４、ＴＲＰＭ４Ｂ、一過性受容体ポテンシャルカチオンチャネル、サブファミリーＭ、メンバー４）；
（１３）ＣＲＩＰＴＯ（ＣＲ、ＣＲ１、ＣＲＧＦ、ＣＲＩＰＴＯ、ＴＤＧＦ１、奇形癌腫由来成長因子）；
（１４）ＣＤ２１（ＣＲ２（補体受容体２）又はＣ３ＤＲ（Ｃ３ｄ／エプスタインバーウイルス受容体）又はＨｓ７３７９２）；
（１５）ＣＤ７９ｂ（ＣＤ７９Ｂ、ＣＤ７９β、ＩＧｂ（免疫グロブリン関連ベータ）、Ｂ２９）；
（１６）ＦｃＲＨ２（ＩＦＧＰ４、ＩＲＴＡ４、ＳＰＡＰ１Ａ（ＳＨ２ドメイン含有ホスファターゼアンカータンパク質１ａ）、ＳＰＡＰ１Ｂ、ＳＰＡＰ１Ｃ）；
（１７）ＨＥＲ２；
（１８）ＮＣＡ；
（１９）ＭＤＰ；
（２０）ＩＬ２０Ｒα；
（２１）ブレビカン；
（２２）ＥｐｈＢ２Ｒ；
（２３）ＡＳＬＧ６５９；
（２４）ＰＳＣＡ；
（２５）ＧＥＤＡ；
（２６）ＢＡＦＦ−Ｒ（Ｂ細胞活性化因子受容体、ＢＬｙＳ受容体３、ＢＲ３）；
（２７）ＣＤ２２（Ｂ細胞受容体ＣＤ２２−Ｂアイソフォーム）；
（２８）ＣＤ７９ａ（ＣＤ７９Ａ、ＣＤ７９α、免疫グロブリン関連アルファ）；
（２９）ＣＸＣＲ５（バーキットリンパ腫受容体１）；
（３０）ＨＬＡ−ＤＯＢ（ＭＨＣクラスＩＩ分子（Ｉａ抗原）のベータサブユニット）；
（３１）Ｐ２Ｘ５（プリン受容体Ｐ２Ｘリガンド開口型イオンチャネル５）；
（３２）ＣＤ７２（Ｂ細胞分化抗原ＣＤ７２、Ｌｙｂ−２）；
（３３）ＬＹ６４（リンパ球抗原６４（ＲＰ１０５）、ロイシンリッチリピート（ＬＲＲ）ファミリーのＩ型膜タンパク質）；
（３４）ＦｃＲＨ１（Ｆｃ受容体様タンパク質１）；
（３５）ＩＲＴＡ２（免疫グロブリンスーパーファミリー受容体転座関連２）；
（３６）ＴＥＮＢ２（推定膜貫通プロテオグリカン）；
（３７）ＣＤ３３（ＣＤ３３分子、ＳＩＧＬＥＣ−３、ＳＩＧＬＥＣ３、ｐ６７；ＣＤ３３抗原（ｇｐ６７）；ｇｐ６７；骨髄細胞表面抗原ＣＤ３３；シアル酸結合Ｉｇ様レクチン３；シアル酸結合Ｉｇ様レクチン）；及び
（３８）ＬＧＲ５／ＧＰＲ４９。
【請求項３６】
前記抗体又は抗体断片がシステイン操作抗体である、請求項３３に記載のコンジュゲート。
【請求項３７】
前記抗体又は抗体断片がＥｒｂＢ受容体に結合する抗体である、請求項３３又は請求項３６に記載のコンジュゲート。
【請求項３８】
前記抗体がトラスツズマブである、請求項３７に記載のコンジュゲート。
【請求項３９】
Ａｂが抗ＨＥＲ２、抗Ｓｔｅａｐ１又は抗ＣＤ２２抗体である、請求項３３又は請求項３６に記載のコンジュゲート
【請求項４０】
抗体（Ａｂ）に対する薬剤（Ｄ）の薬剤負荷（ｐ）が１から約８の整数である、請求項３３に記載のコンジュゲート。
【請求項４１】
ｐが１、２、３又は４である、請求項４０に記載のコンジュゲート。
【請求項４２】
前記抗体−薬剤コンジュゲート化合物の混合物を含む、請求項４１に記載のコンジュゲートであって、前記抗体−薬剤コンジュゲート化合物の混合物中の抗体当たりの平均薬剤負荷が約２から約５である。
【請求項４３】
療法で使用するための、請求項１から４２のいずれか一項に記載のコンジュゲート。
【請求項４４】
請求項１から４２のいずれか一項に記載のコンジュゲート、医薬的に許容される希釈剤、担体又は賦形剤を含む、医薬組成物。
【請求項４５】
対象の増殖性疾患の処置で使用するための、請求項１から４２のいずれか一項に記載のコンジュゲート又は請求項４４に記載の医薬組成物。
【請求項４６】
前記疾患が癌である、請求項４５に記載のコンジュゲート。
【請求項４７】
医療処置方法における、請求項１から４２のいずれか一項に記載のコンジュゲート又は請求項４５又は請求項４６に記載の医薬の使用。
【請求項４８】
請求項４５又は請求項４６に記載の医薬組成物を患者へ投与することを含む、医療処置方法。
【請求項４９】
前記医療処置方法が癌を処置するためである、請求項４８に記載の方法。
【請求項５０】
前記コンジュゲートと組み合わせて化学療法剤が患者へ投与される、請求項４９に記載の方法。
【請求項５１】
増殖性疾患の処置のための医薬の製造方法における、請求項１から４２のいずれか一項に記載の化合物の使用。
【請求項５２】
請求項１から４２のいずれか一項に記載の化合物又は請求項４５又は請求項４６に記載の医薬組成物の有効量を投与することを含む、増殖性疾患を有する哺乳動物を処置する方法。
【請求項５３】
次の式（Ｂ）の化合物：
【化６】
2019069947.tif 000098
（式中、Ｒ2、Ｒ6、Ｒ7、Ｒ9、Ｒ10、Ｒ11、Ｒ22、Ｒ16、Ｒ17、Ｒ19、Ｒ20、Ｒ21、Ｚ、Ｔ、Ｔ’、Ｘ及びＸ’は、請求項１から１５のいずれか一項で定義した通りであり；
ＹLは、式Ｂ１、Ｂ２、Ｂ３、Ｂ４、Ｂ５及びＢ６の群から選択され：
【化７】
2019069947.tif 000099
Ｇは、細胞結合因子に結合される反応性基であり、
ｎ及びＲA4は、請求項１から３２のいずれか一項で定義した通りである）。
【請求項５４】
前記基Ｇが以下から選択される求電子性基を含有する、請求項５３に記載の化合物：  （ｉ）マレイミド基、（ｉｉ）活性化ジスルフィド、（ｉｉｉ）活性エステル、例えばＮＨＳ（Ｎ−ヒドロキシスクシンイミド）エステル、ＨＯＢｔ（Ｎ−ヒドロキシベンゾトリアゾール）エステル、ハロホルメート及び酸ハライド；（ｉｖ）アルキル及びベンジルハライド、例えばハロアセトアミド；並びに（ｖ）アルデヒド、ケトン、カルボキシル。
【請求項５５】
Ｇが次の式である、請求項５３又は請求項５４に記載の化合物：
ＧA−（ＣＨ2）m−  （Ｇ１）
式中、ｍは０から６であり；
ＧAが以下から選択され：
【化８】
2019069947.tif 000100
式中、ＡｒがＣ5-6アリーレン基を表す。
【請求項５６】
ＧAがＧA1-1及びＧA3-3から選択される、請求項４５に記載の化合物。
【請求項５７】
ｍが２、３又は５である、請求項５５又は請求項５６に記載の化合物。
【請求項５８】
Ｇが次の式である、請求項５３又は請求項５４に記載の化合物：
ＧA−（ＣＨ2）m−Ｏ−  （Ｇ２）
式中、ｍが０から６であり；
ＧAが請求項５５で定義した通りである。
【請求項５９】
ＧAがＧA3-2である、請求項５８に記載の化合物。
【請求項６０】
ｍが１である、請求項５８又は請求項５９に記載の化合物。
【請求項６１】
Ｇが次の式である、請求項５３又は請求項５４に記載の化合物：
ＧA−（ＣＨ2）q−Ｏ−Ｃ（＝Ｏ）−ＮＨ−（ＣＨ2）p−  （Ｇ３）
式中、ｑが１から３であり、ｐが１から３であり；
ＧAが請求項５５で定義した通りである。
【請求項６２】
ＧAがＧA7及びＧA8から選択される、請求項６１に記載の化合物。
【請求項６３】
ｑが１である、請求項６１又は請求項６２に記載の化合物。
【請求項６４】
ｐが２である、請求項６１から６３のいずれか一項に記載の化合物。
【請求項６５】
Ｇが次の式である、請求項５３又は請求項５４に記載の化合物：
【化９】
2019069947.tif 000101
式中、ｍが０から６であり；
Ｘ1及びＸ2が、修飾されてよい、天然アミノ酸から選択されるアミノ酸基であり；
ＧAが請求項５５で定義した通りである。
【請求項６６】
ｍが５である、請求項６５に記載の化合物。
【請求項６７】
次の式（Ｃ）の化合物：
【化１０】
2019069947.tif 000102
（式中、Ｒ2、Ｒ6、Ｒ7、Ｒ9、Ｒ22、Ｒ16、Ｒ17、Ｒ19、Ｚ、Ｔ、Ｔ’、Ｘ及びＸ’は、請求項１から１５のいずれか一項で定義した通りであり；
ＹCは、式Ｃ１、Ｃ２、Ｃ３、Ｃ４、Ｃ５及びＣ６の群から選択され：
【化１１】
2019069947.tif 000103
式中、ｎ及びＲA4は、請求項１から３２のいずれか一項で定義した通りであり；
さらに以下のいずれかであり：
（ａ）Ｒ30はＨであり、Ｒ31はＯＨ、ＯＲA、であり、式中、ＲAはＣ1-4アルキルである；又は
（ｂ）Ｒ30及びＲ31は、それらが結合されている窒素原子と炭素原子との間に窒素−炭素二重結合を形成する；又は
（ｃ）Ｒ30はＨであり、Ｒ31はＯＳＯzＭであり、式中、ｚは２若しく３であり、Ｍは１価の医薬的に許容されるカチオンである；又は
（ｄ）Ｒ30は、窒素保護基であり、Ｒ31はＯＰｒｏｔOであり、式中、ＰｒｏｔOはヒドロキシ保護基である；
Ｒ40及びＲ41は、Ｒ30及びＲ31についてそれぞれ定義した通りである。）。
【請求項６８】
Ｒ30がＨであり、Ｒ31がＯＨである、請求項６７に記載の化合物。
【請求項６９】
Ｒ30及びＲ41が、それらが結合されている窒素原子と炭素原子との間に窒素−炭素二重結合を形成する、請求項６７に記載の化合物。
【請求項７０】
Ｒ30が窒素保護基であり、Ｒ31がＯＰｒｏｔOであり、式中、ＰｒｏｔOがヒドロキシル保護基である、請求項６７に記載の化合物。
【請求項７１】
前記窒素保護基がＢｏｃである、請求項７０に記載の化合物。
【請求項７２】
前記ヒドロキシル保護基がＴＨＰである、請求項７０又は請求項７１に記載の化合物。
【請求項７３】
式（Ｄ）の化合物：
【化１２】
2019069947.tif 000104
（式中、Ｒ2、Ｒ6、Ｒ7、Ｒ9、Ｒ22、Ｒ16、Ｒ17、Ｒ19、Ｚ、Ｔ、Ｔ’、Ｘ及びＸ’は、請求項１から１５のいずれか一項で定義した通りであり；
Ｒ30、Ｒ31、Ｒ40及びＲ41は、請求項４７から５２のいずれか一項で定義した通りであり；
ＹDは、式Ｄ２、Ｄ３、Ｄ４及びＤ６の群から選択され：
【化１３】
2019069947.tif 000105
式中、ＲA4は、請求項１から３２のいずれか一項で定義した通りである。）。
【請求項７４】
式（Ｅ）の化合物：
【化１４】
2019069947.tif 000106
（式中、Ｒ2、Ｒ6、Ｒ7、Ｒ9、Ｒ22、Ｒ16、Ｒ17、Ｒ19、Ｚ、Ｔ、Ｔ’、Ｘ及びＸ’は、請求項１から１５のいずれか一項で定義した通りであり；
Ｒ30、Ｒ31、Ｒ40及びＲ41は、請求項６７から７２のいずれか一項で定義した通りであり；
ＹEは、式Ｅ１、Ｅ２及びＥ５の群から選択され：
【化１５】
2019069947.tif 000107
式中、ＲE1は、Ｈ及びＴＭＳから選択され；
ＲE2は、Ｂｒ、Ｃｌ及びＩから選択される。）。
【請求項７５】
請求項５３から６６のいずれか一項に記載の薬剤−リンカーを細胞結合因子にコンジュゲートする工程を含む、請求項１から５２のいずれか一項に記載の化合物を合成する方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、ピロロベンゾジアゼピン（ＰＢＤ）、特に細胞結合因子に結合されたリンカー基を有するピロロベンゾジアゼピンに関する。
【背景技術】
【０００２】
ピロロベンゾジアゼピン
一部のピロロベンゾジアゼピン（ＰＢＤ）は、ＤＮＡの特定の配列を認識し、これに結合する能力を有する。好ましい配列はＰｕＧＰｕである。最初のＰＢＤ抗腫瘍抗生物質であるアントラマイシンは、１９６５年に発見された（非特許文献１、非特許文献２）。それ以来、いくつかの天然型ＰＢＤが報告され、様々な類似体への１０を超える合成経路が開発されてきた（非特許文献３、非特許文献４）。ファミリーのメンバーとしては、アッベイマイシン（非特許文献５）、チカマイシン（非特許文献６）、ＤＣ−８１（特許文献１、非特許文献７、非特許文献８）、マゼトラマイシン（非特許文献９）、ネオトラマイシンＡ及びＢ（非特許文献１０）、ポロトラマイシン（非特許文献１１）、プロトラカルシン（非特許文献１２；非特許文献１３）、シバノマイシン（ＤＣ−１０２）（非特許文献１４、非特許文献１５）、シビロマイシン（非特許文献１６）及びトママイシン（特許文献１７）が含まれる。ＰＢＤの一般式は以下の通りである：
【化１】
2019069947.tif 000002
【０００３】
ＰＢＤは、その芳香族Ａ環及びピロールＣ環の両方における置換基の数、種類及び位置が、並びにＣ環の飽和度が異なる。Ｂ環には、ＤＮＡのアルキル化に寄与する求電子中心であるＮ１０−Ｃ１１位に、イミン（Ｎ＝Ｃ）、カルビノールアミン（ＮＨ−ＣＨ（ＯＨ））又はカルビノールアミンメチルエーテル（ＮＨ−ＣＨ（ＯＭｅ））のいずれかが存在する。これらの公知天然物は全て、キラルＣ１１ａ位に（Ｓ）−配置を有し、これは、Ｃ環からＡ環に向かって見た場合に時計回りのねじれを該天然物に与える。これにより、Ｂ型ＤＮＡの小溝と等しいらせん性とするための適切な三次元形状が該天然物に付与されて、結合部位でぴったり適合するようになる（非特許文献１８、非特許文献１９）。それらが該小溝内で付加体を形成することができることによって、それらがＤＮＡプロセシングを妨害できるようになり、そのため抗腫瘍剤としてのその使用が可能となる。
特に有利なピロロベンゾジアゼピン化合物は、Ｇｒｅｇｓｏｎら（非特許文献２０）によって化合物１として、Ｇｒｅｇｓｏｎら（非特許文献２１）によって化合物４ａとして記載されている。ＳＪＧ−１３６としても公知のこの化合物は、以下のように示される：
【化２】
2019069947.tif 000003
。
【０００４】
他のダイマー性ＰＢＤ化合物、例えば、特許文献２の、Ｃ２アリール置換基を持つものが開示されていて、例えば：
【化３】
2019069947.tif 000004
である。
これらの化合物は、非常に有用な細胞毒性剤であることが示されている。
【０００５】
抗体−薬剤コンジュゲート
抗体療法は、癌、免疫疾患及び血管新生疾患の患者の標的化処置のために確立されている（非特許文献２２）。細胞毒性剤又は細胞分裂阻害剤、すなわち癌の処置において腫瘍細胞を死滅させる又は阻害するための薬剤を局所送達するための抗体−薬剤コンジュゲート（ＡＤＣ）、すなわち免疫コンジュゲートの使用は、腫瘍への薬剤部分の送達と、腫瘍内での細胞内蓄積を標的とするのに対して、これらの非コンジュゲート薬剤の全身性投与は、正常な細胞並びに根絶が求められる腫瘍細胞に対して許容できないレベルの毒性が生じることがある（非特許文献２３；非特許文献２４；非特許文献２５；非特許文献２６；非特許文献２７；非特許文献２８；非特許文献２９；非特許文献３０；非特許文献３１）。
【０００６】
最小限の毒性で最大の効能が求められている。ＡＤＣを設計及び改良するための努力が、モノクローナル抗体（ｍＡｂ）の選択性並びに、薬剤の作用機序、薬剤結合、薬剤／抗体比（充填）及び薬剤放出遊離特性に集中されてきた（非特許文献３２；非特許文献３３；特許文献３；特許文献４；特許文献５；非特許文献３４；非特許文献３５；非特許文献３６；非特許文献３７；非特許文献３８；非特許文献３９）。薬剤部分は、チューブリン結合、ＤＮＡ結合又はトポイソメラーゼ阻害を含む機序によってその細胞毒性効果又は細胞分裂阻害効果を付与し得る。ある細胞毒性剤は、大型の抗体又はタンパク質受容体リガンドにコンジュゲートされたときに、不活性になるか又は活性が低下する傾向がある。
【０００７】
ＡＤＣにおけるＰＢＤ
ダイマー性ＰＢＤが薬剤コンジュゲートにおける薬剤として開示されてきた。例えば、特許文献６では、細胞結合因子、例えば抗体へ結合するためのリンカー基を有するダイマーＰＢＤ化合物であって、リンカー基が利用可能なＮ１０位の１つに結合され、一般にリンカー基の酵素の作用によって切断される、ダイマーＰＢＤ化合物が開示されている。
【０００８】
これに対して、特許文献７及び特許文献８では、細胞結合因子、例えば抗体に結合するためのリンカー基を有するダイマーＰＢＤ化合物であって、リンカー基がＣ２位の１つにおける芳香族基を介して結合され、一般にリンカー基の酵素の作用によって切断される、ダイマーＰＢＤ化合物が開示されている。このような抗体薬剤コンジュゲートは、他の種類の抗体薬剤コンジュゲートについても記載している、非特許文献４０にも記載されている。
【０００９】
更なるアプローチは特許文献９に記載され、このアプローチでは、トママイシン用ダイマーが細胞結合因子、例えば抗体への結合のためのリンカー基を有し、該リンカー基がトママイシン単位間のつなぎ部分（ｔｅｔｈｅｒ）に結合されて、一般にリンカー基の酵素の作用によって切断される。
【先行技術文献】
【特許文献】
【００１０】
【特許文献１】特公昭５８−１８０４８７号公報
【特許文献２】国際公開第２００５／０８５２５１号パンフレット
【特許文献３】米国特許第７５２１５４１号明細書
【特許文献４】米国特許第７７２３４８５号明細書
【特許文献５】国際公開第２００９／０５２２４９号パンフレット
【特許文献６】国際公開第２０１１／１３０５９８号パンフレット
【特許文献７】国際公開第２０１１／１３０６１３号パンフレット
【特許文献８】国際公開第２０１１／１３０６１６号パンフレット
【特許文献９】国際公開第２００７／０８５９３０号パンフレット
【非特許文献】
【００１１】
【非特許文献１】Ｌｅｉｍｇｒｕｂｅｒ，ｅｔ  ａｌ．，Ｊ．Ａｍ．Ｃｈｅｍ．Ｓｏｃ．，８７，５７９３−５７９５（１９６５）
【非特許文献２】Ｌｅｉｍｇｒｕｂｅｒ，ｅｔ  ａｌ．，Ｊ．Ａｍ．Ｃｈｅｍ．Ｓｏｃ．，８７，５７９１−５７９３（１９６５）
【非特許文献３】Ｔｈｕｒｓｔｏｎ，ｅｔ  ａｌ．，Ｃｈｅｍ．Ｒｅｖ．１９９４，４３３−４６５（１９９４）
【非特許文献４】Ａｎｔｏｎｏｗ，Ｄ．ａｎｄ  Ｔｈｕｒｓｔｏｎ，Ｄ．Ｅ．，Ｃｈｅｍ．Ｒｅｖ．２０１１  １１１（４），２８１５−２８６４
【非特許文献５】Ｈｏｃｈｌｏｗｓｋｉ，ｅｔ  ａｌ．，Ｊ．Ａｎｔｉｂｉｏｔｉｃｓ，４０，１４５−１４８（１９８７）
【非特許文献６】Ｋｏｎｉｓｈｉ，ｅｔ  ａｌ．，Ｊ．Ａｎｔｉｂｉｏｔｉｃｓ，３７，２００−２０６（１９８４）
【非特許文献７】Ｔｈｕｒｓｔｏｎ，ｅｔ  ａｌ．，Ｃｈｅｍ．Ｂｒｉｔ．，２６，７６７−７７２（１９９０）
【非特許文献８】Ｂｏｓｅ，ｅｔ  ａｌ．，Ｔｅｔｒａｈｅｄｒｏｎ，４８，７５１−７５８（１９９２）
【非特許文献９】Ｋｕｍｉｎｏｔｏ，ｅｔ  ａｌ．，Ｊ．Ａｎｔｉｂｉｏｔｉｃｓ，３３，６６５−６６７（１９８０）
【非特許文献１０】Ｔａｋｅｕｃｈｉ，ｅｔ  ａｌ．，Ｊ．Ａｎｔｉｂｉｏｔｉｃｓ，２９，９３−９６（１９７６）
【非特許文献１１】Ｔｓｕｎａｋａｗａ，ｅｔ  ａｌ．，Ｊ．Ａｎｔｉｂｉｏｔｉｃｓ，４１，１３６６−１３７３（１９８８）
【非特許文献１２】Ｓｈｉｍｉｚｕ，ｅｔ  ａｌ，Ｊ．Ａｎｔｉｂｉｏｔｉｃｓ，２９，２４９２−２５０３（１９８２）
【非特許文献１３】Ｌａｎｇｌｅｙ  ａｎｄ  Ｔｈｕｒｓｔｏｎ，Ｊ．Ｏｒｇ．Ｃｈｅｍ．，５２，９１−９７（１９８７）
【非特許文献１４】Ｈａｒａ，ｅｔ  ａｌ．，Ｊ．Ａｎｔｉｂｉｏｔｉｃｓ，４１，７０２−７０４（１９８８）
【非特許文献１５】Ｉｔｏｈ，ｅｔ  ａｌ．，Ｊ．Ａｎｔｉｂｉｏｔｉｃｓ，４１，１２８１−１２８４（１９８８）
【非特許文献１６】Ｌｅｂｅｒ，ｅｔ  ａｌ．，Ｊ．Ａｍ．Ｃｈｅｍ．Ｓｏｃ．，１１０，２９９２−２９９３（１９８８）
【非特許文献１７】Ａｒｉｍａ，ｅｔ  ａｌ．，Ｊ．Ａｎｔｉｂｉｏｔｉｃｓ，２５，４３７−４４４（１９７２）
【非特許文献１８】Ｋｏｈｎ，Ｉｎ  Ａｎｔｉｂｉｏｔｉｃｓ  ＩＩＩ．Ｓｐｒｉｎｇｅｒ−Ｖｅｒｌａｇ、Ｎｅｗ  Ｙｏｒｋ，ｐｐ．３−１１（１９７５）
【非特許文献１９】Ｈｕｒｌｅｙ  ａｎｄ  Ｎｅｅｄｈａｍ−ＶａｎＤｅｖａｎｔｅｒ，Ａｃｃ．Ｃｈｅｍ．Ｒｅｓ．，１９，２３０−２３７（１９８６）
【非特許文献２０】Ｇｒｅｇｓｏｎ  ｅｔ  ａｌ．，Ｃｈｅｍ．Ｃｏｍｍｕｎ．１９９９，７９７−７９８
【非特許文献２１】Ｇｒｅｇｓｏｎ  ｅｔ  ａｌ．，Ｊ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．２００１，４４，１１６１−１１７４
【非特許文献２２】Ｃａｒｔｅｒ，Ｐ．（２００６）Ｎａｔｕｒｅ  Ｒｅｖｉｅｗｓ  Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｙ  ６：３４３−３５７
【非特許文献２３】Ｘｉｅ  ｅｔ  ａｌ（２００６）Ｅｘｐｅｒｔ．Ｏｐｉｎ．Ｂｉｏｌ．Ｔｈｅｒ．６（３）：２８１−２９１
【非特許文献２４】Ｋｏｖｔｕｎ  ｅｔ  ａｌ（２００６）Ｃａｎｃｅｒ  Ｒｅｓ．６６（６）：３２１４−３１２１
【非特許文献２５】Ｌａｗ  ｅｔ  ａｌ（２００６）Ｃａｎｃｅｒ  Ｒｅｓ．６６（４）：２３２８−２３３７
【非特許文献２６】Ｗｕ  ｅｔ  ａｌ（２００５）Ｎａｔｕｒｅ  Ｂｉｏｔｅｃｈ．２３（９）：１１３７−１１４５
【非特許文献２７】Ｌａｍｂｅｒｔ  Ｊ．（２００５）Ｃｕｒｒｅｎｔ  Ｏｐｉｎ．ｉｎ  Ｐｈａｒｍａｃｏｌ．５：５４３−５４９
【非特許文献２８】Ｈａｍａｎｎ  Ｐ．（２００５）Ｅｘｐｅｒｔ  Ｏｐｉｎ．Ｔｈｅｒ．Ｐａｔｅｎｔｓ  １５（９）：１０８７−１１０３
【非特許文献２９】Ｐａｙｎｅ，Ｇ．（２００３）Ｃａｎｃｅｒ  Ｃｅｌｌ  ３：２０７−２１２
【非特許文献３０】Ｔｒａｉｌ  ｅｔ  ａｌ（２００３）Ｃａｎｃｅｒ  Ｉｍｍｕｎｏｌ．Ｉｍｍｕｎｏｔｈｅｒ．５２：３２８−３３７
【非特許文献３１】Ｓｙｒｉｇｏｓ  ａｎｄ  Ｅｐｅｎｅｔｏｓ（１９９９）Ａｎｔｉｃａｎｃｅｒ  Ｒｅｓｅａｒｃｈ  １９：６０５−６１４
【非特許文献３２】Ｊｕｎｕｔｕｌａ，ｅｔ  ａｌ．，２００８ｂ  Ｎａｔｕｒｅ  Ｂｉｏｔｅｃｈ．，２６（８）：９２５−９３２
【非特許文献３３】Ｄｏｒｎａｎ  ｅｔ  ａｌ（２００９）Ｂｌｏｏｄ  １１４（１３）：２７２１−２７２９
【非特許文献３４】ＭｃＤｏｎａｇｈ（２００６）Ｐｒｏｔｅｉｎ  Ｅｎｇ．Ｄｅｓｉｇｎ＆Ｓｅｌ．１９（７）：２９９−３０７
【非特許文献３５】Ｄｏｒｏｎｉｎａ  ｅｔ  ａｌ（２００６）Ｂｉｏｃｏｎｊ．Ｃｈｅｍ．１７：１１４−１２４
【非特許文献３６】Ｅｒｉｃｋｓｏｎ  ｅｔ  ａｌ（２００６）Ｃａｎｃｅｒ  Ｒｅｓ．６６（８）：１−８
【非特許文献３７】Ｓａｎｄｅｒｓｏｎ  ｅｔ  ａｌ（２００５）Ｃｌｉｎ．Ｃａｎｃｅｒ  Ｒｅｓ．１１：８４３−８５２
【非特許文献３８】Ｊｅｆｆｒｅｙ  ｅｔ  ａｌ（２００５）Ｊ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．４８：１３４４−１３５８
【非特許文献３９】Ｈａｍｂｌｅｔｔ  ｅｔ  ａｌ（２００４）Ｃｌｉｎ．Ｃａｎｃｅｒ  Ｒｅｓ．１０：７０６３−７０７０
【非特許文献４０】Ｆｌｙｇａｒｅ，Ｊ．，ｅｔ  ａｌ，Ｃｈｅｍ．Ｂｉｏｌ．Ｄｒｕｇ  Ｄｅｓ．８１：１１３−１２１（２０１３）
【発明の概要】
【００１２】
本発明者らは、細胞結合因子とのＰＢＤコンジュゲート、特にＰＢＤ抗体コンジュゲートを形成する新規アプローチを開発した。
【００１３】
一般的な態様において、本発明は、細胞結合因子へ結合するためのリンカーを有するＰＢＤダイマー化合物を含むコンジュゲートであって、該リンカーが２個のＰＢＤモノマーを連結する架橋結合においてフェニレン又はピリイジレン（ｐｙｒｉｙｄｙｌｅｎｅ）に結合されたトリアゾール基、ピペラジン基、プロパルギレ基又はオキシム基を有する、コンジュゲートを提供する。細胞結合因子は、好ましくは抗体である。
【００１４】
第１の態様において、本発明は、式（Ａ）の新規コンジュゲート化合物を提供し：
【化４】
2019069947.tif 000005
【００１５】
式中：Ｒ2は
【化５】
2019069947.tif 000006
であり、式中、Ｒ36a及びＲ36bは、Ｈ、Ｆ、Ｃ1-4飽和アルキル、Ｃ2-3アルケニルから独立して選択され、アルキル基及びアルケニル基は、Ｃ1-4アルキルアミド及びＣ1-4アルキルエステルから選択される基によって任意に置換され；又はＲ36a及びＲ36bの一方がＨである場合、他方は、ニトリル及びＣ1-4アルキルエステルから選択され；
【００１６】
Ｒ6及びＲ9は、Ｈ、Ｒ、ＯＨ、ＯＲ、ＳＨ、ＳＲ、ＮＨ2、ＮＨＲ、ＮＲＲ’、ＮＯ2、Ｍｅ3Ｓｎ及びハロから独立して選択され；
Ｒ7は、Ｈ、Ｒ、ＯＨ、ＯＲ、ＳＨ、ＳＲ、ＮＨ2、ＮＨＲ、ＮＲＲ’、ＮＯ2、Ｍｅ3Ｓｎ及びハロから独立して選択され；
【００１７】
Ｙは、式Ａ１、Ａ２、Ａ３、Ａ４、Ａ５及びＡ６から選択され：
【化６】
2019069947.tif 000007
【００１８】
Ｌは、細胞結合因子に結合されたリンカーであり；
ＣＢＡは、細胞結合因子であり；
ｎは、０から４８の範囲で選択される整数であり；
ＲA4はＣ1-6アルキレン基であり；
【００１９】
さらに以下のいずれかであり；
（ａ）Ｒ10はＨであり、Ｒ11はＯＨ、ＯＲAであり、式中、ＲAはＣ1-4アルキルである；又は
（ｂ）Ｒ10及びＲ11は、それらが結合されている窒素原子と炭素原子との間に窒素−炭素二重結合を形成する；又は
（ｃ）Ｒ10がＨであり、Ｒ11がＯＳＯzＭであり、式中、ｚは２又は３であり、Ｍは１価の医薬的に許容されるカチオンである；
【００２０】
Ｒ及びＲ’は、任意に置換されたＣ1-12アルキル基、Ｃ3-20ヘテロシクリル基及びＣ5-20アリール基よりそれぞれ独立して選択され、任意に基ＮＲＲ’に関して、Ｒ及びＲ’は、それらが結合している窒素原子と共に、任意に置換された４員、５員、６員又は７員複素環を形成し；
【００２１】
式中、Ｒ16、Ｒ17、Ｒ19、Ｒ20、Ｒ21及びＲ22は、Ｒ6、Ｒ7、Ｒ9、Ｒ10、Ｒ11及びＲ2についてそれぞれ定義した通りであり；
式中、Ｚは、ＣＨ又はＮであり；
式中、Ｔ及びＴ’は、単結合又はＣ1-9アルキレンから独立して選択され、該アルキレン鎖は、１個以上のヘテロ原子、例えばＯ、Ｓ、Ｎ（Ｈ）、ＮＭｅによって割り込まれてよく、ただし、ＸとＸ’との間の最も短い原子鎖中の原子の数が３〜１２個原子であり；
Ｘ及びＸ’は、Ｏ、Ｓ及びＮ（Ｈ）から独立して選択される。
【００２２】
このため、式Ａは、Ｙに応じて、以下の式Ａ−Ｉ、Ａ−ＩＩ、Ａ−ＩＩＩ、Ａ−ＩＶ、Ａ−Ｖ及びＡ−ＶＩから選択される：
【００２３】
【表１−１】
2019069947.tif 000008
【表１−２】
2019069947.tif 000009
【００２４】
本発明の第２の態様は、式（Ｂ）：の新規薬剤−リンカー化合物を提供する：
【化７】
2019069947.tif 000010
式中、全ての基は、本発明の第１の態様で定義する通りであり；
【００２５】
ＹLは、式Ｂ１、Ｂ２、Ｂ３、Ｂ４、Ｂ５及びＢ６の群から選択され：
【化８】
2019069947.tif 000011
式中、Ｇは、細胞結合因子へ結合するための反応性基である。
【００２６】
本発明の第３の態様は、本発明の化合物及びコンジュゲート化合物の調製に使用してよい式（Ｃ）の化合物を提供し：
【化９】
2019069947.tif 000012
【００２７】
式中、ＹCは、式Ｃ１、Ｃ２、Ｃ３、Ｃ４及びＣ５の群から選択され：
【化１０】
2019069947.tif 000013
【００２８】
以下のいずれかであり：
（ａ）Ｒ30はＨであり、Ｒ31はＯＨ、ＯＲA、であり、式中、ＲAはＣ1-4アルキルである；又は
（ｂ）Ｒ30及びＲ31は、それらが結合されている窒素原子と炭素原子との間に窒素−炭素二重結合を形成する；又は
（ｃ）Ｒ30はＨであり、Ｒ31はＯＳＯzＭであり、式中、ｚは２若しく３であり、Ｍは１価の医薬的に許容されるカチオンである；又は
（ｄ）Ｒ30は、窒素保護基であり、Ｒ31はＯＰｒｏｔOであり、式中、ＰｒｏｔOはヒドロキシ保護基である；
【００２９】
Ｒ40及びＲ41は、Ｒ30及びＲ31についてそれぞれ定義した通りであり；
残りの基全ては、本発明の第１の態様で定義した通りである。
【００３０】
本発明の第４の態様は、本発明の第２及び第３の態様の化合物の調製で使用してよい、式（Ｄ）の化合物を提供し：
【化１１】
2019069947.tif 000014
【００３１】
ＹDは、式Ｄ２、Ｄ３、Ｄ４及びＤ６の群から選択され：
【化１２】
2019069947.tif 000015
残りの基全ては、本発明の第３の態様で定義した通りである。
【００３２】
本発明の第５の態様は、本発明の第２、第３及び第４の態様の化合物の調製で使用してよい、式（Ｅ）の化合物を提供し：
【化１３】
2019069947.tif 000016
【００３３】
ＹEは、式Ｅ１、Ｅ２及びＥ５の群から選択され：
【化１４】
2019069947.tif 000017
式中、ＲE1はＨ及びＴＭＳから選択され；
ＲE2は、Ｂｒ、Ｃｌ及びＩから選択され；
残りの基全ては、本発明の第３の態様で定義した通りである。
【００３４】
本発明の第６の態様は、医療処置方法における、本発明の第１の態様の化合物の使用を提供する。第４の態様は、第１の態様の化合物及び医薬的に許容される賦形剤を含む医薬組成物も提供する。
【００３５】
本発明の第７の態様は、増殖性疾患の処置方法で使用するための、本発明の第１の態様の化合物又は本発明の第４の態様の医薬組成物を提供する。第５の態様は、増殖性疾患の処置のための医薬品の製造方法での第１の態様の化合物の使用、及び第１の態様の化合物又は第４の態様の医薬組成物の有効量を投与することを含む、増殖性疾患を有する哺乳動物を処置する方法も提供する。
【００３６】
本発明の第８の態様は、第２の態様の薬剤リンカーを細胞結合因子とコンジュゲートする工程を含む、本発明の第１の態様の化合物の合成方法を提供する。
【００３７】
本発明は、本発明の第３、第４又は第５の態様の化合物からの第２の態様の化合物の合成であって、これらを好適な試薬と反応させることによる合成も提供する。
【図面の簡単な説明】
【００３８】
【図１】図１は、ＣＲＬ  ｎｕ／ｎｕマウスに接種した乳癌モデルＭＭＴＶ−ＨＥＲ２  Ｆｏ５乳腺同種移植腫瘍の、第０日に単回静脈内投薬した後の、生体内平均腫瘍体積の変化の時間に対するプロットを示すグラフである。
【図２】図２は、ＣＲＬ  ｎｕ／ｎｕマウスに接種した乳癌モデルＭＭＴＶ−ＨＥＲ２  Ｆｏ５乳腺同種移植腫瘍の、第０日に単回静脈内投薬した後の、生体内平均腫瘍体積の変化の時間に対するプロットを示すグラフである。
【図３】図３は、ＣＲＬ  ｎｕ／ｎｕマウスに接種した乳癌モデルＭＭＴＶ−ＨＥＲ２  Ｆｏ５乳腺同種移植腫瘍の、第０日に単回静脈内投薬した後の、生体内平均腫瘍体積の変化の時間に対するプロットを示すグラフである。
【発明を実施するための形態】
【００３９】
本発明は、特定のリンカーによりダイマー架橋部を通じて細胞結合因子に結合されているＰＢＤダイマーを含むコンジュゲートを提供する。
本発明は、ＰＢＤコンジュゲートを対象の好ましい部位に提供するための使用に好適である。
【００４０】
窒素保護基
窒素保護基は、当分野で周知である。本発明で使用するための好ましい窒素保護基は、一般式：
【化１５】
2019069947.tif 000018
を有するカルバメート保護基であり、式中、Ｒ’30は、任意に置換されたアルキル（例えばＣ1-20アルキル）、アリール（例えばＣ5-20アリール）基又はヘテロアリール（例えばＣ3-20ヘテロシクリル）基である。
【００４１】
多数の考えられるカルバメート窒素保護基が、参照により本明細書に組み入れられている、Ｇｒｅｅｎｅ’ｓ  Ｐｒｏｔｅｃｔｉｖｅ  Ｇｒｏｕｐｓ  ｉｎ  Ｏｒｇａｎｉｃ  Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ，４th  Ｅｄｉｔｉｏｎ，Ｊｏｈｎ  Ｗｉｌｅｙ＆Ｓｏｎｓ，Ｉｎｃ．，２００７（ＩＳＢＮ  ９７８−０−４７１−６９７５４−１）の７０６〜７７２頁に挙げられている。
特に好ましい保護基としては、Ａｌｌｏｃ、Ｔｒｏｃ、Ｔｅｏｃ、ＢＯＣ、ＴｃＢＯＣ、Ｆｍｏｃ、１−Ａｄｏｃ及び２−Ａｄｏｃが挙げられる。
【００４２】
ヒドロキシル保護基
ヒドロキシル保護基は当分野で周知である。多数の好適な基は、参照により本明細書に組み入れられている、Ｇｒｅｅｎｅ’ｓ  Ｐｒｏｔｅｃｔｉｖｅ  Ｇｒｏｕｐｓ  ｉｎ  Ｏｒｇａｎｉｃ  Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ，４th  Ｅｄｉｔｉｏｎ，Ｊｏｈｎ  Ｗｉｌｅｙ＆Ｓｏｎｓ，Ｉｎｃ．，２００７（ＩＳＢＮ  ９７８−０−４７１−６９７５４−１）の２４〜２９８頁に記載されている。
特に興味深いクラスとしては、シリルエーテル、メチルエーテル、アルキルエーテル、ベンジルエーテル、エステル、安息香酸塩、炭酸塩及びスルホン酸塩が挙げられる。特に好ましいヒドロキシル保護基としては、ＴＨＰが挙げられる。
【００４３】
好適な実施の態様
以下の好適な実施の態様は、上記した通りの本発明の全ての態様に当てはまり得るか、又は単一の態様に関連し得る。該好適な実施の態様は、任意の組合せにおいて、一緒に組み合わせることができる。
【００４４】
Ｒ2
いくつかの実施形態において、Ｒ36a及びＲ36bはどちらもＨである。
他の実施形態において、Ｒ36a及びＲ36bはどちらもメチルである。
更なる実施形態において、Ｒ36a及びＲ36bの一方はＨであり、他方はＣ1-4飽和アルキル、Ｃ2-3アルケニルから選択され、アルキル基及びアルケニル基は任意に置換されている。これらの更なる実施形態のいくつかにおいて、Ｈでない基は、メチル及びエチルから選択されてよい。
【００４５】
Ｒ22
Ｒ2についての上の好適な実施の態様は、Ｒ22に等しく適用される。
【００４６】
Ｒ6
一実施形態において、Ｒ6は、Ｈ、Ｒ、ＯＨ、ＯＲ、ＳＨ、ＳＲ、ＮＨ2、ＮＨＲ、ＮＲＲ’、ＮＯ2、Ｍｅ3Ｓｎ−及びハロから独立して選択される。
一実施形態において、Ｒ6は、Ｈ、ＯＨ、ＯＲ、ＳＨ、ＮＨ2、ＮＯ2及びハロから独立して選択される。
一実施形態において、Ｒ6は、Ｈ及びハロから独立して選択される。
一実施形態において、Ｒ6は独立してＨである。
一実施形態において、Ｒ6及びＲ7は基−Ｏ−（ＣＨ2）p−Ｏを共に形成し、式中、ｐは１又は２である。
これらの実施形態は、Ｒ16にも適用される。
【００４７】
Ｒ7
Ｒ7は、Ｈ、Ｒ、ＯＨ、ＯＲ、ＳＨ、ＳＲ、ＮＨ2、ＮＨＲ、ＮＲＲ’、ＮＯ2、Ｍｅ3Ｓｎ及びハロから独立して選択される。
一実施形態において、Ｒ7は独立してＯＲである。
一実施形態において、Ｒ7は独立してＯＲ7Aであり、式中、Ｒ7Aは独立して任意に置換されたＣ1-6アルキルである。
一実施形態において、Ｒ7Aは独立して任意に置換された飽和Ｃ1-6アルキルである。
一実施形態において、Ｒ7Aは独立して任意に置換されたＣ2-4アルケニルである。
一実施形態において、Ｒ7Aは独立してＭｅである。
一実施形態において、Ｒ7Aは独立してＣＨ2Ｐｈである。
一実施形態において、Ｒ7Aは独立してアリルである。
これらの実施形態は、Ｒ17にも適用される。
【００４８】
Ｒ9
一実施形態において、Ｒ9は、Ｈ、Ｒ、ＯＨ、ＯＲ、ＳＨ、ＳＲ、ＮＨ2、ＮＨＲ、ＮＲＲ’、ＮＯ2、Ｍｅ3Ｓｎ−及びハロから独立して選択される。
一実施形態において、Ｒ9は独立してＨである。
一実施形態において、Ｒ9は独立してＲ又はＯＲである。
これらの実施形態は、Ｒ19にも適用される。
【００４９】
Ｎ１０−Ｃ１１
いくつかの実施形態において、Ｒ10はＨであり、Ｒ11はＯＨ、ＯＲAであり、式中、ＲAはＣ1-4アルキルである。これらの実施形態のいくつかにおいて、Ｒ11はＯＨである。これらの実施形態の他において、Ｒ11はＯＲAであり、式中、ＲAはＣ1-4アルキルである。これらの実施形態のいくつかにおいて、ＲAはメチルである。
いくつかの実施形態において、Ｒ10及びＲ11は、それらが結合されている窒素原子と炭素原子との間に窒素−炭素二重結合を形成する。
いくつかの実施形態において、Ｒ10はＨであり、Ｒ11はＯＳＯzＭであり、式中、ｚは２又は３であり、Ｍは１価の医薬的に許容されるカチオンである。これらの実施形態のいくつかにおいて、Ｍは、１価の医薬的に許容されるカチオンであり、Ｎａ+であってよい。更に、いくつかの実施形態において、ｚは３である。
上の好適な実施の態様は、Ｒ20及びＲ21に等しく適用される。
【００５０】
いくつかの実施形態において、Ｒ30はＨであり、Ｒ31はＯＨ、ＯＲAであり、式中、ＲAはＣ1-4アルキルである。これらの実施形態のいくつかにおいて、Ｒ31はＯＨである。これらの実施形態の他において、Ｒ31はＯＲAであり、式中、ＲAはＣ1-4アルキルである。これらの実施形態のいくつかにおいて、ＲAはメチルである。
いくつかの実施形態において、Ｒ30及びＲ31は、それらが結合されている窒素原子と炭素原子との間に窒素−炭素二重結合を形成する。
いくつかの実施形態において、Ｒ30はＨであり、Ｒ31はＯＳＯzＭであり、式中、ｚは２又は３であり、Ｍは１価の医薬的に許容されるカチオンである。これらの実施形態のいくつかにおいて、Ｍは、１価の医薬的に許容されるカチオンであり、Ｎａ+であってよい。更に、いくつかの実施形態において、ｚは３である。
いくつかの実施形態において、Ｒ30は窒素保護基であり、Ｒ31はＯＰｒｏｔOであり、式中、ＰｒｏｔOはヒドロキシ保護基である。
【００５１】
これらの実施形態のいくつかにおいて、窒素保護基は、Ａｌｌｏｃ、Ｔｒｏｃ、Ｔｅｏｃ、ＢＯＣ、ＴｃＢＯＣ、Ｆｍｏｃ、１−Ａｄｏｃ及び２−Ａｄｏｃから選択されてよく、より好ましくはＢｏｃであってよい。
これらの実施形態のいくつかにおいて、窒素保護基はＴＨＰであってよい。
式Ｄの化合物では、Ｒ30及びＲ31が、それらが結合されている窒素原子と炭素原子との間に窒素−炭素二重結合を形成することが好ましいことがある。
式Ｅの化合物では、Ｒ30が窒素保護基であり、Ｒ31がＯＰｒｏｔOであり、ＰｒｏｔOがヒドロキシ保護基であることが好ましいことがある。
ＹCが式Ｃ２、Ｃ３又はＣ４である式Ｃの化合物では、Ｒ30及びＲ31が、それらが結合されている窒素原子と炭素原子との間に窒素−炭素二重結合を形成することが好ましいことがある。
ＹCが式Ｃ１又はＣ５である式Ｃの化合物では、Ｒ30が窒素保護基であり、Ｒ31がＯＰｒｏｔOであり、ＰｒｏｔOがヒドロキシ保護基であることが好ましいことがある。
上の好適な実施の態様は、Ｒ40及びＲ41に等しく適用される。
【００５２】
Ｔ及びＴ’
Ｔ及びＴ’はそれぞれ、単結合又はＣ1-9アルキレン基から独立して選択され、該アルキレン鎖は、１個以上のヘテロ原子、例えばＯ、Ｓ、Ｎ（Ｈ）、ＮＭｅによって割り込まれてよく、ただし、ＸとＸ’との間の最も短い原子鎖中の原子の数が３〜１２個の原子である。
一実施形態において、Ｔ及びＴ’の各アルキレン基は、Ｏ、Ｓ及びＮＭｅから選択される１個以上のヘテロ原子によって任意に割り込まれる。
一実施形態において、Ｔ及びＴ’はそれぞれ、単結合及びＣ1-9アルキレン基から独立して選択される。
一実施形態において、Ｔは単結合、Ｃ1、Ｃ2、Ｃ3及びＣ4アルキレン基から選択され、Ｔ’は単結合、Ｃ1、Ｃ2、Ｃ3及びＣ4アルキレン基から選択される。
一実施形態において、Ｔは単結合、Ｃ1及びＣ2アルキレン基から選択され、Ｔ’は単結合、Ｃ1及びＣ2アルキレン基から選択される。
一実施形態において、Ｔは単結合及びＣ1アルキレン基から選択され、Ｔ’は単結合及びＣ1アルキレン基から選択される。
一実施形態において、Ｔは単結合であり、Ｔ’は単結合である。
一実施形態において、ＴはＣ1アルキレン基であり、Ｔ’はＣ1アルキレン基である。
いくつかの実施形態において、Ｔ及びＴ’は同じである。
上に挙げたアルキレン基は、１個以上のヘテロ原子によって任意に割り込まれてよい。
上に挙げたアルキレン基は、非置換直鎖脂肪族アルキレン基であってよい。
【００５３】
Ｘ
一実施形態において、ＸはＯ、Ｓ又はＮ（Ｈ）から選択される。
好ましくはＸはＯである。
【００５４】
ダイマー
いくつかの実施形態において、基Ｒ22、Ｒ16、Ｒ17、Ｒ19、Ｒ20及びＲ21は、基Ｒ2、Ｒ6、Ｒ9、Ｒ7、Ｒ10及びＲ11とそれぞれ同じである。これらの実施形態において、ＰＢＤモノマー単位は同じ置換基を有する。
【００５５】
本発明の第１の態様の特に好ましい化合物は、式Ｉａの化合物であってよく：
【化１６】
2019069947.tif 000019
式中、Ｒ10、Ｒ11、Ｒ20、Ｒ21及びＹは、上で定義した通りであり；
ｔ1及びｔ2は、０、１及び２から独立して選択され；
Ｒ7a及びＲ17aは、メチル及びフェニルから独立して選択される。
【００５６】
本発明の第２の態様の特に好ましい化合物は、式ＩＩａの化合物であってよく：
【化１７】
2019069947.tif 000020
式中、Ｒ10、Ｒ11、Ｒ20、Ｒ21及びＹLは上で定義した通りであり；
ｔ1及びｔ2は、０、１及び２から独立して選択され；
Ｒ7a及びＲ17aは、メチル及びフェニルから独立して選択される。
【００５７】
本発明の第３の態様の特に好ましい化合物は、式ＩＩＩａの化合物であってよく：
【化１８】
2019069947.tif 000021
式中、Ｒ10、Ｒ11、Ｒ20、Ｒ21及びＹCは上で定義した通りであり；
ｔ1及びｔ2は０、１及び２から独立して選択され；
Ｒ7a及びＲ17aは、メチル及びフェニルから独立して選択される。
【００５８】
ｎ（Ｙ、ＹL）
いくつかの実施形態において、（Ｙ又はＹLにおける）ｎは、０から２４の間の整数である。
いくつかの実施形態において、（Ｙ又はＹLにおける）ｎは、０から１２の間の整数である。
いくつかの実施形態において、（Ｙ又はＹLにおける）ｎは、０から８の間の整数である。
いくつかの実施形態において、（Ｙ又はＹLにおける）ｎは、０から６の間の整数である。
いくつかの実施形態において、（Ｙ又はＹLにおける）ｎは０である。
いくつかの実施形態において、（Ｙ又はＹLにおける）ｎは１である。
いくつかの実施形態において、（Ｙ又はＹLにおける）ｎは２である。
いくつかの実施形態において、（Ｙ又はＹLにおける）ｎは３である。
いくつかの実施形態において、（Ｙ又はＹLにおける）ｎは４である。
いくつかの実施形態において、（Ｙ又はＹLにおける）ｎは５である。
いくつかの実施形態において、（Ｙ又はＹLにおける）ｎは６である。
いくつかの実施形態において、（Ｙ又はＹLにおける）ｎは７である。
いくつかの実施形態において、（Ｙ又はＹLにおける）ｎは８である。
いくつかの実施形態において、（Ｙ又はＹLにおける）ｎは９である。
いくつかの実施形態において、（Ｙ又はＹLにおける）ｎは１０である。
いくつかの実施形態において、（Ｙ又はＹLにおける）ｎは１１である。
いくつかの実施形態において、（Ｙ又はＹLにおける）ｎは１２である。
いくつかの実施形態において、（Ｙ又はＹLにおける）ｎは１３である。
いくつかの実施形態において、（Ｙ又はＹLにおける）ｎは１４である。
いくつかの実施形態において、（Ｙ又はＹLにおける）ｎは１５である。
【００５９】
いくつかの実施形態において、ＹがＡ１である、又はＹLがＢ１である場合、ｎは３から６から選択されてよい。
いくつかの実施形態において、ＹがＡ２である、又はＹLがＢ２である場合、ｎは４から６から選択されてよい。
いくつかの実施形態において、ＹがＡ３である、又はＹLがＢ３である場合、ｎは４であってよい。
いくつかの実施形態において、ＹがＡ４である、又はＹLはＢ４である場合、ｎは４であってよい。
いくつかの実施形態において、ＹがＡ５である、又はＹLがＢ５である場合、ｎは１１であってよい。
いくつかの実施形態において、ＹがＡ６である、又はＹLがＢ６である場合、ｎは２であってよい。
【００６０】
Ｌ及びＧ
Ｌは、コンジュゲート化合物（ｃｏｎｍｐｏｕｎｄ）中の細胞結合因子に結合されたリンカーである。Ｇは、ＰＢＤダイマーを細胞結合因子に結合してコンジュゲート化合物を形成するための反応性基である。
【００６１】
好ましくは、リンカー／反応性基は、細胞結合因子上の求核性官能基と結合するための求電子性官能基を含有する。抗体上の求核性基としては：（ｉ）Ｎ末端アミン基、（ｉｉ）側鎖アミン基、例えばリジン、（ｉｉｉ）側鎖チオール基、例えばシステイン及び（ｉｖ）抗体がグリコシル化されている糖ヒドロキシル基又はアミノ基が挙げられるが、これに限定されない。アミン基、チオール基及びヒドロキシル基は求核性であり、反応して（ｉ）マレイミド基；（ｉｉ）活性化ジスルフィド；（ｉｉｉ）活性エステル、例えばＮＨＳ（Ｎ−ヒドロキシスクシンイミド）エステル、ＨＯＢｔ（Ｎ−ヒドロキシベンゾトリアゾール）エステル、ハロホルメート及び酸ハライド；（ｉｖ）ハロアセトアミドなどのアルキル及びベンジルハライド、例えばハロアセトアミド並びに（ｖ）アルデヒド、ケトン、カルボキシルを含む、リンカー部分及びリンカー試薬上の求電子基と共有結合を形成することが可能であり、そのいくつかを以下に例示する：
【００６２】
【化１９】
2019069947.tif 000022
【００６３】
ある抗体は、還元性鎖間ジスルフィド、すなわちシステイン架橋を有する。抗体は、ＤＴＴ（ジチオスレイトール）などの還元剤を用いる処理によってリンカー試薬とのコンジュゲーションに対して反応性とされてよい。各システイン架橋はこのため、理論的に２種類の反応性チオール求核試薬を形成する。追加の求核性基を、リジンと２−イミノチオラン（トラウト試薬）との反応を通じて抗体に導入して、アミンのチオールへの変換を生じることができる。１、２、３、４個又はそれ以上のシステイン残基を導入する（例えば、１個以上の非天然システインアミノ酸残基を含む突然変異体抗体を調製する）ことによって、反応性チオール基を抗体（又はその断片）に導入することができる。米国特許第７５２１５４１号は、反応性システインアミノ酸の導入による抗体の操作を教示している。
いくつかの実施形態において、リンカーは、抗体上に存在する求電子性基と反応性である反応性求核性基を有する。抗体上の有用な求電性子基としては、アルデヒド基及びケトンカルボニル基が挙げられるが、これに限定されない。リンカーの求核性基のヘテロ原子は、抗体上の求電子性基と反応して、抗体単位上に共有結合を形成することができる。リンカー上の有用な求核性基としては、ヒドラジド、オキシム、アミノ、ヒドロキシル、ヒドラジン、チオセミカルバゾン、ヒドラジンカルボキシレート及びアリールヒドラジドが挙げられるが、これに限定されない。抗体上の求電子性基は、リンカーへ結合するための便利な部位を提供する。
【００６４】
一実施形態において、基Ｌは：
【化２０】
2019069947.tif 000023
であり、式中、アスタリスクは基Ｙの残部への結合点を示し、波線は細胞結合因子への結合点を示し、ｍは０から６の範囲から選択される整数である。一実施形態において、ｍは２、３、４及び５から選択される。
【００６５】
一実施形態において、細胞結合因子とＬとの間の結合は、細胞結合因子のチオール残基及びＬのマレイミド基を通じて行う。
【００６６】
一実施形態において、細胞結合因子とＬとの間の結合は：
【化２１】
2019069947.tif 000024
であり、式中、アスタリスクは、Ｌ基の残部又はＹ基の残部への結合点を示し、波線は、細胞結合因子の残部への結合点を示す。本実施形態において、Ｓ原子は通例、細胞結合因子から誘導される。
【００６７】
上の実施形態それぞれにおいて、以下に示すマレイミド誘導基の代わりに、代替官能基を使用してよく：
【化２２】
2019069947.tif 000025
式中、波線は、上と同様に細胞結合因子への結合点を示し、アスタリスクは、Ｌ基の残部又はＹ基の残部への結合を示す。
【００６８】
一実施形態において、マレイミド誘導基は、基：
【化２３】
2019069947.tif 000026
で代替され、式中、波線は細胞結合因子への結合点を示し、アスタリスクは、Ｌ基の残部又はＹ基の残部への結合を示す。
【００６９】
一実施形態において、マレイミド誘導基は、任意に細胞結合因子と共に：
−Ｃ（＝Ｏ）ＮＨ−、
−Ｃ（＝Ｏ）Ｏ−、
−ＮＨＣ（＝Ｏ）−、
−ＯＣ（＝Ｏ）−、
−ＯＣ（＝Ｏ）Ｏ−、
−ＮＨＣ（＝Ｏ）Ｏ−、
−ＯＣ（＝Ｏ）ＮＨ−、
−ＮＨＣ（＝Ｏ）ＮＨ−、
−ＮＨＣ（＝Ｏ）ＮＨ、
−Ｃ（＝Ｏ）ＮＨＣ（＝Ｏ）−、
−Ｓ−、
−Ｓ−Ｓ−、
−ＣＨ2Ｃ（＝Ｏ）−
−Ｃ（＝Ｏ）ＣＨ2−、
＝Ｎ−ＮＨ−  及び
−ＮＨ−Ｎ＝
から選択される基によって置き換えられる。
【００７０】
一実施形態において、マレイミド誘導基は、任意に細胞結合因子と共に：
【化２４】
2019069947.tif 000027
から選択される基によって置き換えられ、式中、波線は、細胞結合因子への結合点又はＬ基の残部若しくはＹ基の残部への結合を示し、アスタリスクは、細胞結合因子への結合点又はＬ基の残部若しくはＹ基の残部への結合の他方を示す。
【００７１】
Ｙ基の残部を細胞結合因子に結合するためにＬとして使用できる他の基は、国際公開第２００５／０８２０２３号に記載されている。
【００７２】
このため、本発明の実施形態において、Ｌは、式：
−ＬA−（ＣＨ2）m−  （Ｌ１）
であり、
式中、ｍは０から６であり；
ＬAは、以下から選択され：
【００７３】
【表２】
2019069947.tif 000028
【００７４】
式中、ＡｒはＣ5-6アリーレン基、例えばフェニレンである。
ＬがＬ１であるいくつかの実施形態において、ｍは２、３又は５であってよい。
ＬがＬ１であるいくつかの実施形態において、ＬAはＬA1-1であってよい。
【００７５】
本発明の実施形態において、Ｌは、式：
−ＬA−（ＣＨ2）m−Ｏ  （Ｌ２）
であり、
式中、ｍは０から６であり；
ＬAは上の基から選択される。
【００７６】
理論に拘束されることを望むものではないが、このような基は、カルバメート基が末端アミンを生じるように、抗体から切断されてよい。
いくつかの実施形態において、ＬがＬ２である場合、ＬAはＬA3-2であってよい。
いくつかの実施形態において、ＬがＬ２である場合、ｍは１であってよい。
【００７７】
本発明の実施形態において、Ｌは、式：
−ＬA−（ＣＨ2）q−Ｏ−Ｃ（＝Ｏ）−ＮＨ−（ＣＨ2）p−  （Ｌ３）
であり、
式中、ｑは１から３であり、ｐは１から３であり；
ＬAは、上の基から選択される。
【００７８】
理論に拘束されることを望むものではないが、このような基は、カルバメート基が基：
Ｈ2Ｎ−（ＣＨ2）p−  （Ｌ３’）
を生じるように、抗体から切断されてよい。
いくつかの実施形態において、ＬがＬ３である場合、ｑは１であってよく、ｐは２であってよい。
いくつかの実施形態において、ＬがＬ３である場合、ＬAは、ＬA7、ＬA8-1及びＬA8-2から選択されてよい。
【００７９】
本発明の実施形態において、Ｌは、式：
【化２５】
2019069947.tif 000029
であり、
式中、ｍは０から６であり；
Ｘ1及びＸ2は、修飾されてよい、天然アミノ酸から選択されるアミノ酸基であり；
ＬAは、上の基から選択される。
天然アミノ酸は、ジペプチド基がカテプシン不安定性であるように選択されてよい。
【００８０】
一実施形態において、基−Ｘ1−Ｘ2−は：
−Ｐｈｅ−Ｌｙｓ−、
−Ｖａｌ−Ａｌａ−、
−Ｖａｌ−Ｌｙｓ−、
−Ａｌａ−Ｌｙｓ−、
−Ｖａｌ−Ｃｉｔ−、
−Ｐｈｅ−Ｃｉｔ−、
−Ｌｅｕ−Ｃｉｔ−、
−Ｉｌｅ−Ｃｉｔ−、
−Ｐｈｅ−Ａｒｇ−、
−Ｔｒｐ−Ｃｉｔ−
から選択され、
Ｃｉｔはシトルリンである。
【００８１】
好ましくは、基−Ｘ1−Ｘ2−は：
−Ｐｈｅ−Ｌｙｓ−、
−Ｖａｌ−Ａｌａ−、
−Ｖａｌ−Ｌｙｓ−、
−Ａｌａ−Ｌｙｓ−、
−Ｖａｌ−Ｃｉｔ−
から選択される。
【００８２】
最も好ましくは、基−Ｘ1−Ｘ2−は、−Ｐｈｅ−Ｌｙｓ−又は−Ｖａｌ−Ａｌａ−である。
いくつかの実施形態において、ＬがＬ４である場合、ｍは１であってよい。
【００８３】
参照により本明細書に組み入れられている、Ｄｕｂｏｗｃｈｉｋ  ｅｔ  ａｌ．，Ｂｉｏｃｏｎｊｕｇａｔｅ  Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ，２００２，１３，８５５−８６９によって記載されているものを含む、他のジペプチドの組合せも使用してよい。
【００８４】
一実施形態において、アミノ酸側鎖は、適切な場合、誘導体化される。例えば、アミノ酸側鎖のアミノ基又はカルボキシル基は誘導体化されてよい。
一実施形態において、側鎖アミノ酸、例えばリジンのアミノ基ＮＨ2は、ＮＨＲ及びＮＲＲ’からなる群から選択される誘導体化形態である。
一実施形態において、側鎖アミノ酸、例えばアスパラギン酸のカルボキシ基ＣＯＯＨは、ＣＯＯＲ、ＣＯＮＨ2、ＣＯＮＨＲ及びＣＯＮＲＲ’からなる群から選択される誘導体化形態である。
【００８５】
一実施形態において、アミノ酸側鎖は、適切な場合には、化学的に保護される。側鎖保護基は、基ＲLに関して以下で論じられる基であってよい。本発明者らは、保護アミノ酸配列が酵素によって切断可能であることを確証した。例えば、Ｂｏｃ側鎖保護Ｌｙｓ残基を含むジペプチド配列がカテプシンによって切断可能であることを確証した。
【００８６】
アミノ酸の側鎖のための保護基は当分野において周知であり、Ｎｏｖａｂｉｏｃｈｅｍ  Ｃａｔａｌｏｇに記載されている。追加の保護基戦略は、Ｐｒｏｔｅｃｔｉｖｅ  Ｇｒｏｕｐｓ  ｉｎ  Ｏｒｇａｎｉｃ  Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ，Ｇｒｅｅｎｅ  ａｎｄ  Ｗｕｔｓで述べられている。
【００８７】
反応性側鎖官能基を有するアミノ酸の考えられる側鎖保護基を以下に示す：
Ａｒｇ：Ｚ、Ｍｔｒ、Ｔｏｓ；
Ａｓｎ：Ｔｒｔ、Ｘａｎ；
Ａｓｐ：Ｂｚｌ、ｔ−Ｂｕ；
Ｃｙｓ：Ａｃｍ、Ｂｚｌ、Ｂｚｌ−ＯＭｅ、Ｂｚｌ−Ｍｅ、Ｔｒｔ；
Ｇｌｕ：Ｂｚｌ、ｔ−Ｂｕ；
Ｇｌｎ：Ｔｒｔ、Ｘａｎ；
Ｈｉｓ：Ｂｏｃ、Ｄｎｐ、Ｔｏｓ、Ｔｒｔ；
Ｌｙｓ：Ｂｏｃ、Ｚ−Ｃｌ、Ｆｍｏｃ、Ｚ、Ａｌｌｏｃ；
Ｓｅｒ：Ｂｚｌ、ＴＢＤＭＳ、ＴＢＤＰＳ；
Ｔｈｒ：Ｂｚ；
Ｔｒｐ：Ｂｏｃ；
Ｔｙｒ：Ｂｚｌ、Ｚ、Ｚ−Ｂｒ。
【００８８】
このため、本発明の実施形態において、Ｇは式：
ＧA−（ＣＨ2）m−  （Ｇ１）
であり、
式中、ｍは０から６であり；
ＧAは以下から選択される：
【００８９】
【表３】
2019069947.tif 000030
【００９０】
式中、ＡｒはＣ5-6アリーレン基、例えばフェニレンを表す。
いくつかの実施形態において、ＧがＧ１である場合、ｍは２、３又は５であってよい。
いくつかの実施形態において、ＧがＧ１である場合、ＧAはＧA1-1であってよい。
【００９１】
本発明の実施形態において、Ｇは、式：
ＧA−（ＣＨ2）m−Ｏ−  （Ｇ２）
であり、
式中、ｍは０から６であり；ＧAは上の基から選択される。
いくつかの実施形態において、ＧがＧ２である場合、ＧAはＧA3-2であってよい。
いくつかの実施形態において、ＧがＧ２である場合、ｍは１であってよい。
本発明の実施形態において、Ｇは式：
ＧA−（ＣＨ2）q−Ｏ−Ｃ（＝Ｏ）−ＮＨ−（ＣＨ2）p−  （Ｇ３）
であり、
式中、ｑは１から３であり、ｐは１から３であり；ＧAは、上の基から選択される。
いくつかの実施形態において、ＧがＧ３である場合、ｑは１であってよく、ｐは２であってよい。
いくつかの実施形態において、ＧがＧ３である場合、ＧAはＧA7及びＧA8から選択されてよい。
本発明の実施形態において、Ｇは、式：
【化２６】
2019069947.tif 000031
であり、
式中、ｍは０から６であり；
Ｘ1及びＸ2は、Ｌ４について上で定義した通りであり；
ＧAは、上の基から選択される。
【００９２】
Ｒ及びＲ’
一実施形態において、Ｒは、任意に置換されたＣ1-12アルキル、Ｃ3-20ヘテロシクリル及びＣ5-20アリール基から独立して選択される。これらの基はそれぞれ、以下の置換基の節で定義する。
一実施形態において、Ｒは独立して任意に置換されたＣ1-12アルキルである。
一実施形態において、Ｒは独立して任意に置換されたＣ3-20ヘテロシクリルである。
一実施形態において、Ｒは独立して任意に置換されたＣ5-20アリールである。
一実施形態において、Ｒは独立して任意に置換されたＣ1-12アルキルである。
Ｒについての好適な実施の態様はＲ’にも適用される。
【００９３】
本発明のいくつかの実施形態において、置換基−ＮＲＲ’を有する化合物が提供される。一実施形態において、Ｒ及びＲ’は、それらが結合されている窒素原子と共に、任意に置換された４員、５員、６員又は７員複素環を形成する。環は、更なるヘテロ原子、例えばＮ、Ｏ又はＳを含有してよい。
一実施形態において、複素環はそれ自体、基Ｒによって置換されている。更なるＮヘテロ原子が存在する場合、置換基はＮヘテロ原子上にあってよい。
【００９４】
ＲA4
一実施形態において、ＲA4はＣ2-4アルキレン基である。
一実施形態において、ＲA4はＣ2アルキレン基である。
一実施形態において、ＲA4はＣ3アルキレン基である。
一実施形態において、ＲA4は非置換Ｃ1-6アルキレン基である。
一実施形態において、ＲA4は直鎖Ｃ1-6アルキレン基である。
一実施形態において、ＲA4は、−ＣＨ2ＣＨ2−、−ＣＨ2ＣＨ2ＣＨ2−及び−ＣＨ2ＣＨ2ＣＨ2ＣＨ2−からなる群から選択される。
【００９５】
細胞結合因子
細胞結合因子は、いずれの種類でもよく、ペプチド及び非ペプチドが挙げられてよい。これらとしては、抗体又は少なくとも１個の結合部位を含有する抗体の断片、リンホカイン、ホルモン、成長因子、栄養素輸送分子、又は他のいずれの細胞結合子又は物質を挙げることができる。
【００９６】
「抗体」という用語は本明細書において、それらが所望の生物活性を呈する限り、最も広範な意味で使用され、具体的にはモノクローナル抗体、ポリクローナル抗体、ダイマー、マルチマー、多重特異性抗体（例えば二重特異性抗体）及び抗体断片を含む（Ｍｉｌｌｅｒ  ｅｔ  ａｌ（２００３）Ｊｏｕｒ．ｏｆ  Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｙ  １７０：４８５４−４８６１）。抗体は、マウス、ヒト、ヒト化、キメラであってよく、又は他の種に由来してよい。抗体は、特異的抗原を認識及び結合することができる免疫系によって産生されるタンパク質である  （Ｊａｎｅｗａｙ、Ｃ．，Ｔｒａｖｅｒｓ，Ｐ．，Ｗａｌｐｏｒｔ，Ｍ．，Ｓｈｌｏｍｃｈｉｋ（２００１）Ｉｍｍｕｎｏ  Ｂｉｏｌｏｇｙ，５ｔｈ  Ｅｄ．，Ｇａｒｌａｎｄ  Ｐｕｂｌｉｓｈｉｎｇ、Ｎｅｗ  Ｙｏｒｋ）。標的抗原は、一般に、複数の抗体上でＣＤＲによって認識される、エピトープとも呼ばれる多数の結合部位を有する。異なるエピトープに特異的に結合する各抗体は、異なる構造を有する。このため、１種類の抗原は、１を超える対応する抗体を有することがある。抗体には、全長免疫グロブリン分子又は全長免疫グロブリン分子の免疫活性部分、すなわち興味のある標的の抗原又はその一部を免疫特異的に結合する抗原結合部位を含有する分子が含まれ、このような標的としては、癌細胞又は自己免疫疾患と関連する自己免疫抗体を産生する細胞が挙げられるが、これに限定されない。免疫グロブリンは、免疫グロブリン分子の任意の型（例えばＩｇＧ、ＩｇＥ、ＩｇＭ、ＩｇＤ及びＩｇＡ）、クラス（例えばＩｇＧ１、ＩｇＧ２、ＩｇＧ３、ＩｇＧ４、ＩｇＡ１及びＩｇＡ２）、又はサブクラスであることができる。免疫グロブリンは、ヒト、マウス又はウサギ源を含む、いずれの種に由来することもできる。
【００９７】
「抗体断片」は、全長抗体の一部、一般にその抗原結合又は可変領域を含む。抗体断片の例としては、Ｆａｂ、Ｆａｂ’、Ｆ（ａｂ’）2及びＦｖの断片；ダイアボディ；直鎖抗体；Ｆａｂ発現ライブラリによって産生される断片、抗イディオタイプ（抗Ｉｄ）抗体、ＣＤＲ（相補性決定領域）、及び癌細胞抗原、ウイルス性抗原又は微生物抗原に免疫特異的に結合する上記の任意のエピトープ結合断片、単鎖抗体分子；並びに抗体断片から形成される多重特異性抗体が挙げられる。
【００９８】
「モノクローナル抗体」という用語は、本発明で使用する場合、実質的に均質な抗体の集団から得られる抗体を示し、すなわち該集団を構成する個々の抗体は、少量で存在し得る考えられる自然発生突然変異を除いて、同一であるモノクローナル抗体は、高度に特異的であり、単一の抗原部位に対して作られている。更に、異なる決定因子（エピトープ）に対して作られた異なる抗体を含むポリクローナル抗体調製物とは対照的に、各モノクローナル抗体は、抗原上の単一の決定因子に対して作られている。モノクローナル抗体は、その特異性に加えて、他の抗体によって汚染されずに合成され得る点で有利である。修飾語「モノクローナル」は、実質的に均質な抗体集団から得られたような抗体の特徴を示し、いずれかの特定の方法による抗体の産生を必要とするとして解釈すべきではない。例えば、本発明に従って使用されるモノクローナル抗体は、Ｋｏｈｌｅｒ  ｅｔ  ａｌ（１９７５）Ｎａｔｕｒｅ  ２５６：４９５によって最初に記載されたハイブリドーマ法によって作製してよく、又は組換えＤＮＡ法（米国特許第４８１６５６７号を参照のこと。）によって作製してよい。モノクローナル抗体は、Ｃｌａｃｋｓｏｎ  ｅｔ  ａｌ（１９９１）Ｎａｔｕｒｅ，３５２：６２４−６２８；Ｍａｒｋｓ  ｅｔ  ａｌ（１９９１）Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．，２２２：５８１−５９７に記載されている技術を使用してファージ抗体ライブラリから単離してもよい。
【００９９】
本明細書のモノクローナル抗体は、具体的には、重鎖及び／若しくは軽鎖の一部が特定の種に由来する又は特定の抗体クラス若しくはサブクラスに属する抗体中の対応する配列と同一若しくは相同であると同時に、（複数の）鎖の残部が別の種に由来するまた別の抗体クラス若しくはサブクラスに属する抗体中の対応する配列と同一若しくは相同であるキメラ抗体、並びにこのような抗体を、それらが所望の生物活性を呈する限り含む（米国特許第４８１６５６７号；及びＭｏｒｒｉｓｏｎ  ｅｔ  ａｌ（１９８４）Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ，８１：６８５１−６８５５）。キメラ抗体としては、非ヒト霊長類（例えば旧世界サル又は類人猿）に由来する可変ドメイン抗原結合配列及びヒト定常領域配列を含む「霊長類化」抗体が挙げられる。
【０１００】
「インタクト抗体」とは本明細書では、ＶＬドメイン及びＶＨドメイン並びに軽鎖定常ドメイン（ＣＬ）及び重鎖定常ドメインＣＨ１、ＣＨ２及びＣＨ３を含む抗体である。定常ドメインは、未変性配列定常ドメイン（例えばヒト未変性配列定常ドメイン）又はそのアミノ酸配列変異体であってよい。インタクト抗体は、抗体のＦｃ領域（未変性配列Ｆｃ領域又はアミノ酸配列変異体Ｆｃ領域）に起因し得るこれらの生物活性を示す１つ以上の「エフェクタ機能」を有することがある。抗体エフェクタ機能の例としては、Ｃ１ｑ結合、補体依存性細胞傷害、Ｆｃ受容体結合、抗体依存性細胞媒介細胞毒性（ＡＤＣＣ）、ファゴサイトーシス、並びにＢ細胞受容体及びＢＣＲなどの細胞表面受容体の下方調節が挙げられる。
【０１０１】
インタクト抗体は、その重鎖の定常ドメインのアミノ酸配列に応じて、異なる「クラス」に帰属させることができる。インタクト抗体には５つの主要なクラス：ＩｇＡ、ＩｇＤ、ＩｇＥ、ＩｇＧ及びＩｇＭがあり、これらのいくつかは更に「サブクラス」（アイソタイプ）、例えばＩｇＧ１、ＩｇＧ２、ＩｇＧ３、ＩｇＧ４、ＩｇＡ及びＩｇＡ２に細分できる。異なるクラスの抗体に相当する重鎖定常ドメインは、それぞれα、δ、ε、γ及びμと呼ばれる。免疫グロブリンの異なるクラスのサブユニット構造及び三次元立体配置が周知である。
【０１０２】
細胞結合因子の例としては、本明細書に組み入れられている国際公開第２００７／０８５９３０号での使用について記載されている因子が挙げられる。
細胞結合因子はポリペプチドであってよいか、又はポリペプチドを含んでよい。該ポリペプチドは、環式ポリペプチドであってよい。細胞結合因子は抗体であってよい。このため、一実施形態において、本発明は、抗体−薬剤コンジュゲート（ＡＤＣ）を提供する。
【０１０３】
薬剤負荷
薬剤負荷は、抗体当たりのＰＢＤ薬剤の平均数である。薬剤負荷は、抗体（Ａｂ）当たり１から８個の薬剤（Ｄ）の範囲に及んでよく、すなわち１、２、３、４、５、６、７及び８個の薬剤部分が抗体に共有結合されている。ＡＤＣの組成物には、１から８個の薬剤の範囲でコンジュゲートされた抗体の集合が含まれる。コンジュゲーション反応からのＡＤＣの調製物における抗体当たりの薬剤の平均数は、従来の手段、例えば質量分析、ＥＬＩＳＡアッセイ、電気泳動法及びＨＰＬＣによって特徴付けることができる。ｐに関するＡＤＣの定量的分布も決定してよい。ＥＬＩＳＡによって、ＡＤＣの特定の調製物におけるｐの平均値を決定してよい（Ｈａｍｂｌｅｔｔ  ｅｔ  ａｌ（２００４）Ｃｌｉｎ．Ｃａｎｃｅｒ  Ｒｅｓ．１０：７０６３−７０７０；Ｓａｎｄｅｒｓｏｎ  ｅｔ  ａｌ（２００５）Ｃｌｉｎ．Ｃａｎｃｅｒ  Ｒｅｓ．１１：８４３−８５２）。しかし、ｐ（薬剤）値の分布は、抗体−抗原結合及びＥＬＩＳＡの検出限界によって識別不可能である。また、抗体−薬剤コンジュゲートを検出するためのＥＬＩＳＡアッセイは、薬剤部分がどこで、例えば重鎖若しくは軽鎖の断片、又は特定のアミノ酸残基で抗体に結合されているかを決定しない。いくつかの例において、ｐが他の薬剤負荷を伴うＡＤＣからのある値である、均質なＡＤＣの分離、精製及び特徴付けは、逆相ＨＰＬＣ又は電気泳動法などの手段によって達成することができる。
【０１０４】
いくつかの抗体−薬剤コンジュゲートでは、ｐは、抗体上の結合部位の数によって限定されることがある。例えば、抗体は、１個のみ若しくは複数のシステインチオール基を有してよく、又はリンカーがそれを通じて結合してよい１個のみの若しくは複数の十分な反応性のチオール基を有してよい。より高い薬剤負荷は、例えばｐが５より大である場合、ある抗体−薬剤コンジュゲートの凝集、不溶性、毒性、又は細胞透過性の損失を引き起こすことがある。
【０１０５】
通例、理論的最大より少ない薬剤部分が、コンジュゲーション反応中に抗体にコンジュゲートされる。抗体は、例えば薬剤−リンカー中間体（Ｄ−Ｌ）又はリンカー試薬と反応しない多くのリジン残基を含有することがある。最も反応性の高いリジン基のみが、アミン反応性リンカー試薬と反応することがある。また、最も反応性の高いシステインチオール基のみが、チオール反応性リンカー試薬と反応することがある。一般に、抗体は、薬剤部分に連結され得る遊離及び反応性システインチオール基を含有するとしても、多くは含有していない。該化合物の抗体中の大半のシステインチオール残基は、ジスルフィド架橋として存在し、部分又は完全還元条件下にてジチオスレイトール（ＤＴＴ）又はＴＣＥＰなどの還元剤で還元する必要がある。ＡＤＣの負荷（薬剤／抗体比）は、（ｉ）抗体に対する薬剤−リンカー中間体（Ｄ−Ｌ）又はリンカー試薬のモル過剰を限定すること、（ｉｉ）コンジュゲーション反応の時間又は温度を限定すること、及び（ｉｉｉ）システインチオール修飾のための部分又は限定還元的条件を含めて、いくつかの異なる方法において制御されてよい。
【０１０６】
システインアミノ酸は、抗体中にあり、鎖内又は分子間のジスルフィド連結を形成しない反応性部位で操作してよい（Ｊｕｎｕｔｕｌａ，ｅｔ  ａｌ．，２００８ｂ  Ｎａｔｕｒｅ  Ｂｉｏｔｅｃｈ．，２６（８）：９２５−９３２；Ｄｏｒｎａｎ  ｅｔ  ａｌ（２００９）Ｂｌｏｏｄ  １１４（１３）：２７２１−２７２９；米国特許第７５２１５４１号；米国特許第７７２３４８５号；国際公開第２００９／０５２２４９号、Ｓｈｅｎ  ｅｔ  ａｌ（２０１２）Ｎａｔｕｒｅ  Ｂｉｏｔｅｃｈ．，３０（２）：１８４−１９１；Ｊｕｎｕｔｕｌａ  ｅｔ  ａｌ（２００８）Ｊｏｕｒ  ｏｆ  Ｉｍｍｕｎ．Ｍｅｔｈｏｄｓ  ３３２：４１−５２）。操作されたシステインチオールは、リンカー試薬、又はマレイミド若しくはアルファ−ハロアミドなどのチオール反応性求電子性基を有する本発明の薬剤−リンカー試薬と反応することで、システインを操作された抗体（ＴｈｉｏＭａｂ）及びＰＢＤ薬剤部分を有するＡＤＣを形成することがある。このため、薬剤部分の位置を設計、制御及び認知することができる。操作されたシステインチオール基が通例、チオール反応性リンカー試薬又は薬剤−リンカー試薬と高収率で反応するため、薬剤負荷を制御することができる。重鎖又は軽鎖上の単一部位での置換によって、ＩｇＧ抗体を操作してシステインアミノ酸を導入することで、対称抗体上に２個の新規のシステインを与える。２に近く、コンジュゲーション生成物ＡＤＣの均質性に近い薬剤負荷を達成することができる。
【０１０７】
抗体の１を超える求核性基又は求電子性基が、薬剤−リンカー中間体又はリンカー試薬、続いて薬剤部分試薬と反応する場合、生じる生成物は、例えば１、２、３などの、抗体に結合された薬剤部分の分布を有するＡＤＣ化合物の混合物である。ポリマー逆相（ＰＬＲＰ）及び疎水性相互作用（ＨＩＣ）などの液体クロマトグラフィー法では、薬剤負荷値によって混合物中の化合物を分離し得る。単一の薬剤負荷値（ｐ）を有するＡＤＣの調製物は単離され得るが、これらの単一負荷値ＡＤＣは、薬剤部分がリンカーを介して抗体上の異なる部位に結合されていることがあるため、未だ不均質混合物であり得る。
【０１０８】
このため、本発明の抗体−薬剤コンジュゲート組成物には、抗体が１個以上のＰＢＤ薬剤部分を有し、薬剤部分が各種のアミノ酸残基にて抗体に結合され得る、抗体−薬剤コンジュゲート化合物の混合物が含まれる。
一実施形態において、細胞結合因子当たりのダイマーピロロベンゾジアゼピン基の数は、１から２０の範囲にある。いくつかの実施形態において、該範囲は、１から８、２から８、２から６、２から４及び４から８から選択される。
いくつかの実施形態において、細胞結合因子当たり１個のダイマーピロロベンゾジアゼピン基がある。
【０１０９】
ペプチド
一実施形態において、細胞結合因子は、４−２０個の、好ましくは６−２０個の隣接アミノ酸残基を含む、直鎖又は環状ペプチドである。本実施形態において、１個の細胞結合因子が１個のモノマー又はダイマーピロロベンゾジアゼピン化合物に連結されることが好ましい。
一実施形態において、細胞結合因子は、インテグリンαvβ6を結合するペプチドを含む。該ペプチドは、ＸＹＳ上のαvβ6に対して選択的であり得る。
一実施形態において、細胞結合因子は、Ａ２０ＦＭＤＶ−Ｃｙｓポリペプチドを含む。Ａ２０ＦＭＤＶ−Ｃｙｓは、配列：ＮＡＶＰＮＬＲＧＤＬＱＶＬＡＱＫＶＡＲＴＣを有する。又は、Ａ２０ＦＭＤＶ−Ｃｙｓ配列の変異体は、１、２、３、４、５、６、７、８、９又は１０個のアミノ酸残基が別のアミノ酸残基で置換されている場合に使用してよい。
【０１１０】
一実施形態において、抗体はキメラ抗体、ヒト化抗体、完全ヒト抗体又は単鎖抗体である。一実施形態、抗体は、生物活性を有するこれらの抗体のうちの１つの断片である。これらの断片の例としては、Ｆａｂ断片、Ｆａｂ’断片、Ｆ（ａｂ’）2断片及びＦｖ断片が挙げられる。
これらの実施形態において、各抗体は、１個又は複数のダイマーピロロベンゾジアゼピン基に連結されてよい。ピロロベンゾジアゼピンの細胞結合因子に対する好ましい比を上に示している。
抗体はドメイン抗体（ＤＡＢ）であってよい。
一実施形態において、抗体はモノクローナル抗体である。
本発明で使用するための抗体としては、本明細書に組み入れられている、国際公開第２００５／０８２０２３号に記載された抗体が挙げられる。特に好ましいのは、腫瘍関連抗原に対する抗体である。当分野で公知のこれらの抗体の例としては、国際公開第２００５／０８２０２３号に記載されている腫瘍関連抗原が挙げられるが、これらに限定されない。例えば４１−５５頁を参照のこと。
【０１１１】
本発明のコンジュゲートは、その細胞表面抗原によって腫瘍細胞を標的とするように設計されている。抗原は通常、過剰発現されるか、又は異常な回数で発現されるかのどちらかである、正常な細胞表面抗原である。理想的には、標的抗原は、増殖性細胞（好ましくは腫瘍細胞）のみで発現されるが、このことが実際には見られるのはまれである。結果として、標的抗原は、通常、増殖性組織と健常組織との間での発現差に基づいて選択される。
腫瘍関連抗原（ＴＡＡ）は、公知であり、当分野で周知である方法及び情報を使用した抗体の産生に使用するために調製できる。癌の診断及び治療法のための有効な細胞標的を発見する試みにおいて、研究者らは、１種類以上の正常な非癌性細胞上と比較して、１種類以上の特定の型の癌細胞の表面上で特異的に発現される膜貫通ポリペプチド又はそれ以外の様式の腫瘍関連ポリペプチドを同定しようとしてきた。このような腫瘍関連ポリペプチドは、非癌性細胞の表面上と比較して、癌細胞の表面上で豊富に発現されることが多い。このような腫瘍関連細胞表面抗原ポリペプチドの同定によって、抗体ベースの治療法を介して破壊する癌細胞を特異的に標的とすることが可能となる。
【０１１２】
ＴＡＡの例には、下記に列挙されているＴＡＡ（１）〜（３６）が含まれるが、これに限定されない。便宜上、全てが当分野において公知であるこれらの抗原に関連する情報は、下に挙げられ、国立バイオテクノロジー情報センター（ＮＣＢＩ）の核酸及びタンパク質配列同定規約に従った名称、代替名、Ｇｅｎｂａｎｋアクセッション番号及び（複数の）主要文献を含む。ＴＡＡ（１）〜（３６）に対応する核酸及びタンパク質配列は、ＧｅｎＢａｎｋなどの公開データベースにおいて入手できる。抗体が標的とする腫瘍関連抗原には、引用文献において同定された配列に対して少なくとも約７０％、８０％、８５％、９０％又は９５％の配列同一性を所有する、又は引用文献において見出された配列を有するＴＡＡと同じ生物学的特性若しくは特徴を実質的に呈する、全てのアミノ酸配列変異体及びアイソフォームが含まれる。例えば、変異体配列を有するＴＡＡは、一般に、挙げられた対応配列を有するＴＡＡに特異的に結合する抗体に、特異的に結合することができる。本明細書で具体的に列挙された参考文献における配列及び開示は、参照により明示的に組み入れられている。
【０１１３】
腫瘍関連抗原（１）−（３６）：
（１）ＢＭＰＲ１Ｂ（骨形成タンパク質受容体ＩＢ型、Ｇｅｎｂａｎｋアクセッション番号ＮＭ＿００１２０３）ｔｅｎ  Ｄｉｊｋｅ，Ｐ．，ｅｔ  ａｌ  Ｓｃｉｅｎｃｅ  ２６４（５１５５）：１０１−１０４（１９９４），Ｏｎｃｏｇｅｎｅ  １４（１１）：１３７７−１３８２（１９９７））；ＷＯ２００４／０６３３６２（Ｃｌａｉｍ  ２）；ＷＯ２００３／０４２６６１（Ｃｌａｉｍ  １２）；ＵＳ２００３／１３４７９０−Ａ１（Ｐａｇｅ  ３８−３９）；ＷＯ２００２／１０２２３５（Ｃｌａｉｍ  １３；Ｐａｇｅ  ２９６）；ＷＯ２００３／０５５４４３（Ｐａｇｅ  ９１−９２）；ＷＯ２００２／９９１２２（Ｅｘａｍｐｌｅ  ２；Ｐａｇｅ  ５２８−５３０）；ＷＯ２００３／０２９４２１（Ｃｌａｉｍ  ６）；ＷＯ２００３／０２４３９２（Ｃｌａｉｍ  ２；Ｆｉｇ  １１２）；ＷＯ２００２／９８３５８（Ｃｌａｉｍ  １；Ｐａｇｅ  １８３）；ＷＯ２００２／５４９４０（Ｐａｇｅ  １００−１０１）；ＷＯ２００２／５９３７７（Ｐａｇｅ  ３４９−３５０）；ＷＯ２００２／３０２６８（Ｃｌａｉｍ  ２７；Ｐａｇｅ  ３７６）；ＷＯ２００１／４８２０４（Ｅｘａｍｐｌｅ；Ｆｉｇ  ４）；ＮＰ＿００１１９４    ｂｏｎｅ  ｍｏｒｐｈｏｇｅｎｅｔｉｃ  ｐｒｏｔｅｉｎ  ｒｅｃｅｐｔｏｒ，ｔｙｐｅ  ＩＢ  ／ｐｉｄ＝ＮＰ＿００１１９４．１．Ｃｒｏｓｓ−ｒｅｆｅｒｅｎｃｅｓ：ＭＩＭ：６０３２４８；ＮＰ＿００１１９４．１；ＡＹ０６５９９４
【０１１４】
（２）Ｅ１６（ＬＡＴ１、ＳＬＣ７Ａ５、Ｇｅｎｂａｎｋアクセッション番号ＮＭ＿００３４８６）Ｂｉｏｃｈｅｍ．Ｂｉｏｐｈｙｓ．Ｒｅｓ．Ｃｏｍｍｕｎ．２５５（２），２８３−２８８（１９９９），Ｎａｔｕｒｅ  ３９５（６６９９）：２８８−２９１（１９９８），Ｇａｕｇｉｔｓｃｈ，Ｈ．Ｗ．，ｅｔ  ａｌ（１９９２）Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．２６７（１６）：１１２６７−１１２７３）；ＷＯ２００４／０４８９３８（Ｅｘａｍｐｌｅ  ２）；ＷＯ２００４／０３２８４２（Ｅｘａｍｐｌｅ  ＩＶ）；ＷＯ２００３／０４２６６１（Ｃｌａｉｍ  １２）；ＷＯ２００３／０１６４７５（Ｃｌａｉｍ  １）；ＷＯ２００２／７８５２４（Ｅｘａｍｐｌｅ  ２）；ＷＯ２００２／９９０７４（Ｃｌａｉｍ  １９；Ｐａｇｅ  １２７−１２９）；ＷＯ２００２／８６４４３（Ｃｌａｉｍ  ２７；Ｐａｇｅｓ  ２２２，３９３）；ＷＯ２００３／００３９０６（Ｃｌａｉｍ  １０；Ｐａｇｅ  ２９３）；ＷＯ２００２／６４７９８（Ｃｌａｉｍ  ３３；Ｐａｇｅ  ９３−９５）；ＷＯ２０００／１４２２８（Ｃｌａｉｍ  ５；Ｐａｇｅ  １３３−１３６）；ＵＳ２００３／２２４４５４（Ｆｉｇ  ３）；ＷＯ２００３／０２５１３８（Ｃｌａｉｍ  １２；Ｐａｇｅ  １５０）；ＮＰ＿００３４７７    ｓｏｌｕｔｅ  ｃａｒｒｉｅｒ  ｆａｍｉｌｙ  ７（ｃａｔｉｏｎｉｃ  ａｍｉｎｏ  ａｃｉｄ  ｔｒａｎｓｐｏｒｔｅｒ，ｙ＋ｓｙｓｔｅｍ），ｍｅｍｂｅｒ  ５  ／ｐｉｄ＝ＮＰ＿００３４７７．３−Ｈｏｍｏ  ｓａｐｉｅｎｓ；Ｃｒｏｓｓ−ｒｅｆｅｒｅｎｃｅｓ：ＭＩＭ：６００１８２；ＮＰ＿００３４７７．３；ＮＭ＿０１５９２３；ＮＭ＿００３４８６＿１
【０１１５】
（３）ＳＴＥＡＰ１（前立腺の６回膜貫通上皮抗原、Ｇｅｎｂａｎｋアクセッション番号ＮＭ＿０１２４４９）；Ｃａｎｃｅｒ  Ｒｅｓ．６１（１５），５８５７−５８６０（２００１），Ｈｕｂｅｒｔ，Ｒ．Ｓ．，ｅｔ  ａｌ（１９９９）Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．Ｕ．Ｓ．Ａ．９６（２５）：１４５２３−１４５２８）；ＷＯ２００４／０６５５７７（Ｃｌａｉｍ  ６）；ＷＯ２００４／０２７０４９（Ｆｉｇ  １Ｌ）；ＥＰ１３９４２７４（Ｅｘａｍｐｌｅ  １１）；ＷＯ２００４／０１６２２５（Ｃｌａｉｍ  ２）；ＷＯ２００３／０４２６６１（Ｃｌａｉｍ  １２）；ＵＳ２００３／１５７０８９（Ｅｘａｍｐｌｅ  ５）；ＵＳ２００３／１８５８３０（Ｅｘａｍｐｌｅ  ５）；ＵＳ２００３／０６４３９７（Ｆｉｇ  ２）；ＷＯ２００２／８９７４７（Ｅｘａｍｐｌｅ  ５；Ｐａｇｅ  ６１８−６１９）；ＷＯ２００３／０２２９９５（Ｅｘａｍｐｌｅ  ９；Ｆｉｇ  １３Ａ，Ｅｘａｍｐｌｅ  ５３；Ｐａｇｅ  １７３，Ｅｘａｍｐｌｅ  ２；Ｆｉｇ  ２Ａ）；ＮＰ＿０３６５８１  ｓｉｘ  ｔｒａｎｓｍｅｍｂｒａｎｅ  ｅｐｉｔｈｅｌｉａｌ  ａｎｔｉｇｅｎ  ｏｆ  ｔｈｅ  ｐｒｏｓｔａｔｅ；Ｃｒｏｓｓ−ｒｅｆｅｒｅｎｃｅｓ：ＭＩＭ：６０４４１５；ＮＰ＿０３６５８１．１；ＮＭ＿０１２４４９＿１
【０１１６】
（４）０７７２Ｐ（ＣＡ１２５、ＭＵＣ１６、Ｇｅｎｂａｎｋアクセッション番号ＡＦ３６１４８６）；Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．２７６（２９）：２７３７１−２７３７５（２００１））；ＷＯ２００４／０４５５５３（Ｃｌａｉｍ  １４）；ＷＯ２００２／９２８３６（Ｃｌａｉｍ  ６；Ｆｉｇ  １２）；ＷＯ２００２／８３８６６（Ｃｌａｉｍ  １５；Ｐａｇｅ  １１６−１２１）；ＵＳ２００３／１２４１４０（Ｅｘａｍｐｌｅ  １６）；Ｃｒｏｓｓ−ｒｅｆｅｒｅｎｃｅｓ：ＧＩ：３４５０１４６７；ＡＡＫ７４１２０．３；ＡＦ３６１４８６＿１
【０１１７】
（５）ＭＰＦ（ＭＰＦ、ＭＳＬＮ、ＳＭＲ、巨核球増強因子、メソテリン、Ｇｅｎｂａｎｋアクセッション番号ＮＭ＿００５８２３）Ｙａｍａｇｕｃｈｉ，Ｎ．，ｅｔ  ａｌ  Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．２６９（２），８０５−８０８（１９９４），Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．Ｕ．Ｓ．Ａ．９６（２０）：１１５３１−１１５３６（１９９９），Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．Ｕ．Ｓ．Ａ．９３（１）：１３６−１４０（１９９６），Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．２７０（３７）：２１９８４−２１９９０（１９９５））；ＷＯ２００３／１０１２８３（Ｃｌａｉｍ  １４）；（ＷＯ２００２／１０２２３５（Ｃｌａｉｍ  １３；Ｐａｇｅ  ２８７−２８８）；ＷＯ２００２／１０１０７５（Ｃｌａｉｍ  ４；Ｐａｇｅ  ３０８−３０９）；ＷＯ２００２／７１９２８（Ｐａｇｅ  ３２０−３２１）；ＷＯ９４／１０３１２（Ｐａｇｅ  ５２−５７）；Ｃｒｏｓｓ−ｒｅｆｅｒｅｎｃｅｓ：ＭＩＭ：６０１０５１；ＮＰ＿００５８１４．２；ＮＭ＿００５８２３＿１
【０１１８】
（６）Ｎａｐｉ３ｂ（ＮＡＰＩ−３Ｂ、ＮａＰｉ２Ｂ、ＮＰＴＩＩｂ、ＳＬＣ３４Ａ２、溶質担体ファミリー３４（リン酸ナトリウム）、メンバー２、ＩＩ型ナトリウム依存性リン酸トランスポータ３ｂ、Ｇｅｎｂａｎｋアクセッション番号ＮＭ＿００６４２４）Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．２７７（２２）：１９６６５−１９６７２（２００２），Ｇｅｎｏｍｉｃｓ  ６２（２）：２８１−２８４（１９９９），Ｆｅｉｌｄ，Ｊ．Ａ．，ｅｔ  ａｌ（１９９９）Ｂｉｏｃｈｅｍ．Ｂｉｏｐｈｙｓ．Ｒｅｓ．Ｃｏｍｍｕｎ．２５８（３）：５７８−５８２）；ＷＯ２００４／０２２７７８（Ｃｌａｉｍ  ２）；ＥＰ１３９４２７４（Ｅｘａｍｐｌｅ  １１）；ＷＯ２００２／１０２２３５（Ｃｌａｉｍ  １３；Ｐａｇｅ  ３２６）；ＥＰ０８７５５６９（Ｃｌａｉｍ  １；Ｐａｇｅ  １７−１９）；ＷＯ２００１／５７１８８（Ｃｌａｉｍ  ２０；Ｐａｇｅ  ３２９）；ＷＯ２００４／０３２８４２（Ｅｘａｍｐｌｅ  ＩＶ）；ＷＯ２００１／７５１７７（Ｃｌａｉｍ  ２４；Ｐａｇｅ  １３９−１４０）；Ｃｒｏｓｓ−ｒｅｆｅｒｅｎｃｅｓ：ＭＩＭ：６０４２１７；ＮＰ＿００６４１５．１；ＮＭ＿００６４２４＿１．ある実施形態において、本発明のコンジュゲート化合物は、抗ＮａＰｉ２Ｂ抗体を含む。本発明の一実施形態において、本発明のＡＤＣの抗ＮａＰｉ２Ｂ抗体は、（ａ）配列番号１のＣＤＲ  Ｌ１；（ｂ）配列番号２のＣＤＲ  Ｌ２；（ｃ）配列番号３のＣＤＲ  Ｌ３；（ｄ）配列番号４のＣＤＲ  Ｈ１；（ｅ）配列番号５のＣＤＲ  Ｈ２；（ｆ）配列番号６のＣＤＲ  Ｈ３を含む。一実施形態において、抗体は、配列番号８及び配列番号７それぞれにＶＨ配列及びＶＬ配列を、これらの配列の翻訳後修飾を含めて含む。一実施形態において、抗体は、配列番号１０及び配列番号９それぞれに重鎖配列及び軽鎖配列を、これらの配列の翻訳後修飾を含めて含む。
【０１１９】
【表４】
2019069947.tif 000032
【０１２０】
（７）Ｓｅｍａ  ５ｂ（ＦＬＪ１０３７２、ＫＩＡＡ１４４５、Ｍｍ．４２０１５、ＳＥＭＡ５Ｂ、ＳＥＭＡＧ，、セマフォリン５ｂ  Ｈｌｏｇ、セマドメイン、７トロンボスポンジンリピート（１型及び１型様）、膜貫通ドメイン（商標）及び短細胞質ドメイン、（セマフォリン）５Ｂ、Ｇｅｎｂａｎｋアクセッション番号ＡＢ０４０８７８）；Ｎａｇａｓｅ  Ｔ．，ｅｔ  ａｌ（２０００）ＤＮＡ  Ｒｅｓ．７（２）：１４３−１５０）；ＷＯ２００４／０００９９７（Ｃｌａｉｍ  １）；ＷＯ２００３／００３９８４（Ｃｌａｉｍ  １）；ＷＯ２００２／０６３３９（Ｃｌａｉｍ  １；Ｐａｇｅ  ５０）；ＷＯ２００１／８８１３３（Ｃｌａｉｍ  １；Ｐａｇｅ  ４１−４３，４８−５８）；ＷＯ２００３／０５４１５２（Ｃｌａｉｍ  ２０）；ＷＯ２００３／１０１４００（Ｃｌａｉｍ  １１）；Ａｃｃｅｓｓｉｏｎ：Ｑ９Ｐ２８３；ＥＭＢＬ；ＡＢ０４０８７８；ＢＡＡ９５９６９．１．Ｇｅｎｅｗ；ＨＧＮＣ：１０７３７
【０１２１】
（８）ＰＳＣＡ  ｈｌｇ（２７０００５０Ｃ１２Ｒｉｋ、Ｃ５３０００８Ｏ１６Ｒｉｋ、ＲＩＫＥＮ  ｃＤＮＡ  ２７０００５０Ｃ１２、ＲＩＫＥＮ  ｃＤＮＡ  ２７０００５０Ｃ１２  ｇｅｎｅ、Ｇｅｎｂａｎｋアクセッション番号ＡＹ３５８６２８）；Ｒｏｓｓ  ｅｔ  ａｌ（２００２）Ｃａｎｃｅｒ  Ｒｅｓ．６２：２５４６−２５５３；ＵＳ２００３／１２９１９２（Ｃｌａｉｍ  ２）；ＵＳ２００４／０４４１８０（Ｃｌａｉｍ  １２）；ＵＳ２００４／０４４１７９（Ｃｌａｉｍ  １１）；ＵＳ２００３／０９６９６１（Ｃｌａｉｍ  １１）；ＵＳ２００３／２３２０５６（Ｅｘａｍｐｌｅ  ５）；ＷＯ２００３／１０５７５８（Ｃｌａｉｍ  １２）；ＵＳ２００３／２０６９１８（Ｅｘａｍｐｌｅ  ５）；ＥＰ１３４７０４６（Ｃｌａｉｍ  １）；ＷＯ２００３／０２５１４８（Ｃｌａｉｍ  ２０）；Ｃｒｏｓｓ−ｒｅｆｅｒｅｎｃｅｓ：ＧＩ：３７１８２３７８；ＡＡＱ８８９９１．１；ＡＹ３５８６２８＿１
【０１２２】
（９）ＥＴＢＲ（エンドセリンＢ型受容体、Ｇｅｎｂａｎｋアクセッション番号ＡＹ２７５４６３）；Ｎａｋａｍｕｔａ  Ｍ．，ｅｔ  ａｌ  Ｂｉｏｃｈｅｍ．Ｂｉｏｐｈｙｓ．Ｒｅｓ．Ｃｏｍｍｕｎ．１７７，３４−３９，１９９１；Ｏｇａｗａ  Ｙ．，ｅｔ  ａｌ  Ｂｉｏｃｈｅｍ．Ｂｉｏｐｈｙｓ．Ｒｅｓ．Ｃｏｍｍｕｎ．１７８，２４８−２５５，１９９１；Ａｒａｉ  Ｈ．，ｅｔ  ａｌ  Ｊｐｎ．Ｃｉｒｃ．Ｊ．５６，１３０３−１３０７，１９９２；Ａｒａｉ  Ｈ．，ｅｔ  ａｌ  Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．２６８，３４６３−３４７０，１９９３；Ｓａｋａｍｏｔｏ  Ａ．，Ｙａｎａｇｉｓａｗａ  Ｍ．，ｅｔ  ａｌ  Ｂｉｏｃｈｅｍ．Ｂｉｏｐｈｙｓ．Ｒｅｓ．Ｃｏｍｍｕｎ．１７８，６５６−６６３，１９９１；Ｅｌｓｈｏｕｒｂａｇｙ  Ｎ．Ａ．，ｅｔ  ａｌ  Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．２６８，３８７３−３８７９，１９９３；Ｈａｅｎｄｌｅｒ  Ｂ．，ｅｔ  ａｌ  Ｊ．Ｃａｒｄｉｏｖａｓｃ．Ｐｈａｒｍａｃｏｌ．２０，ｓ１−Ｓ４，１９９２；Ｔｓｕｔｓｕｍｉ  Ｍ．，ｅｔ  ａｌ  Ｇｅｎｅ  ２２８，４３−４９，１９９９；Ｓｔｒａｕｓｂｅｒｇ  Ｒ．Ｌ．，ｅｔ  ａｌ  Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．Ｕ．Ｓ．Ａ．９９，１６８９９−１６９０３，２００２；Ｂｏｕｒｇｅｏｉｓ  Ｃ．，ｅｔ  ａｌ  Ｊ．Ｃｌｉｎ．Ｅｎｄｏｃｒｉｎｏｌ．Ｍｅｔａｂ．８２，３１１６−３１２３，１９９７；Ｏｋａｍｏｔｏ  Ｙ．，ｅｔ  ａｌ  Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．２７２，２１５８９−２１５９６，１９９７；Ｖｅｒｈｅｉｊ  Ｊ．Ｂ．，ｅｔ  ａｌ  Ａｍ．Ｊ．Ｍｅｄ．Ｇｅｎｅｔ．１０８，２２３−２２５，２００２；Ｈｏｆｓｔｒａ  Ｒ．Ｍ．Ｗ．，ｅｔ  ａｌ  Ｅｕｒ．Ｊ．Ｈｕｍ．Ｇｅｎｅｔ．５，１８０−１８５，１９９７；Ｐｕｆｆｅｎｂｅｒｇｅｒ  Ｅ．Ｇ．，ｅｔ  ａｌ  Ｃｅｌｌ  ７９，１２５７−１２６６，１９９４；Ａｔｔｉｅ  Ｔ．，ｅｔ  ａｌ，Ｈｕｍ．Ｍｏｌ．Ｇｅｎｅｔ．４，２４０７−２４０９，１９９５；Ａｕｒｉｃｃｈｉｏ  Ａ．，ｅｔ  ａｌ  Ｈｕｍ．Ｍｏｌ．Ｇｅｎｅｔ．５：３５１−３５４，１９９６；Ａｍｉｅｌ  Ｊ．，ｅｔ  ａｌ  Ｈｕｍ．Ｍｏｌ．Ｇｅｎｅｔ．５，３５５−３５７，１９９６；Ｈｏｆｓｔｒａ  Ｒ．Ｍ．Ｗ．，ｅｔ  ａｌ  Ｎａｔ．Ｇｅｎｅｔ．１２，４４５−４４７，１９９６；Ｓｖｅｎｓｓｏｎ  Ｐ．Ｊ．，ｅｔ  ａｌ  Ｈｕｍ．Ｇｅｎｅｔ．１０３，１４５−１４８，１９９８；Ｆｕｃｈｓ  Ｓ．，ｅｔ  ａｌ  Ｍｏｌ．Ｍｅｄ．７，１１５−１２４，２００１；Ｐｉｎｇａｕｌｔ  Ｖ．，ｅｔ  ａｌ（２００２）Ｈｕｍ．Ｇｅｎｅｔ．１１１，１９８−２０６；ＷＯ２００４／０４５５１６（Ｃｌａｉｍ  １）；ＷＯ２００４／０４８９３８（Ｅｘａｍｐｌｅ  ２）；ＷＯ２００４／０４００００（Ｃｌａｉｍ  １５１）；ＷＯ２００３／０８７７６８（Ｃｌａｉｍ  １）；ＷＯ２００３／０１６４７５（Ｃｌａｉｍ  １）；ＷＯ２００３／０１６４７５（Ｃｌａｉｍ  １）；ＷＯ２００２／６１０８７（Ｆｉｇ  １）；ＷＯ２００３／０１６４９４（Ｆｉｇ  ６）；ＷＯ２００３／０２５１３８（Ｃｌａｉｍ  １２；Ｐａｇｅ  １４４）；ＷＯ２００１／９８３５１（Ｃｌａｉｍ  １；Ｐａｇｅ  １２４−１２５）；ＥＰ０５２２８６８（Ｃｌａｉｍ  ８；Ｆｉｇ  ２）；ＷＯ２００１／７７１７２（Ｃｌａｉｍ  １；Ｐａｇｅ  ２９７−２９９）；ＵＳ２００３／１０９６７６；ＵＳ６５１８４０４（Ｆｉｇ  ３）；ＵＳ５７７３２２３（Ｃｌａｉｍ  １ａ；Ｃｏｌ  ３１−３４）；ＷＯ２００４／００１００４
【０１２３】
（１０）ＭＳＧ７８３（ＲＮＦ１２４，ｈｙｐｏｔｈｅｔｉｃａｌ  ｐｒｏｔｅｉｎ  ＦＬＪ２０３１５，Ｇｅｎｂａｎｋ  ａｃｃｅｓｓｉｏｎ  ｎｏ．ＮＭ＿０１７７６３）；ＷＯ２００３／１０４２７５（Ｃｌａｉｍ  １）；ＷＯ２００４／０４６３４２（Ｅｘａｍｐｌｅ  ２）；ＷＯ２００３／０４２６６１（Ｃｌａｉｍ  １２）；ＷＯ２００３／０８３０７４（Ｃｌａｉｍ  １４；Ｐａｇｅ  ６１）；ＷＯ２００３／０１８６２１（Ｃｌａｉｍ  １）；ＷＯ２００３／０２４３９２（Ｃｌａｉｍ  ２；Ｆｉｇ  ９３）；ＷＯ２００１／６６６８９（Ｅｘａｍｐｌｅ  ６）；Ｃｒｏｓｓ−ｒｅｆｅｒｅｎｃｅｓ：ＬｏｃｕｓＩＤ：５４８９４；ＮＰ＿０６０２３３．２；ＮＭ＿０１７７６３＿１
【０１２４】
（１１）ＳＴＥＡＰ２（ＨＧＮＣ＿８６３９、ＩＰＣＡ−１、ＰＣＡＮＡＰ１、ＳＴＡＭＰ１、ＳＴＥＡＰ２、ＳＴＭＰ、前立腺癌関連遺伝子１、前立腺癌関連タンパク質１、前立腺２の６回膜貫通上皮抗原、６回膜貫通前立腺タンパク質、Ｇｅｎｂａｎｋアクセッション番号ＡＦ４５５１３８）；Ｌａｂ．Ｉｎｖｅｓｔ．８２（１１）：１５７３−１５８２（２００２））；ＷＯ２００３／０８７３０６；ＵＳ２００３／０６４３９７（Ｃｌａｉｍ  １；Ｆｉｇ  １）；ＷＯ２００２／７２５９６（Ｃｌａｉｍ  １３；Ｐａｇｅ  ５４−５５）；ＷＯ２００１／７２９６２（Ｃｌａｉｍ  １；Ｆｉｇ  ４Ｂ）；ＷＯ２００３／１０４２７０（Ｃｌａｉｍ  １１）；ＷＯ２００３／１０４２７０（Ｃｌａｉｍ  １６）；ＵＳ２００４／００５５９８（Ｃｌａｉｍ  ２２）；ＷＯ２００３／０４２６６１（Ｃｌａｉｍ  １２）；ＵＳ２００３／０６０６１２（Ｃｌａｉｍ  １２；Ｆｉｇ  １０）；ＷＯ２００２／２６８２２（Ｃｌａｉｍ  ２３；Ｆｉｇ  ２）；ＷＯ２００２／１６４２９（Ｃｌａｉｍ  １２；Ｆｉｇ  １０）；Ｃｒｏｓｓ−ｒｅｆｅｒｅｎｃｅｓ：ＧＩ：２２６５５４８８；ＡＡＮ０４０８０．１；ＡＦ４５５１３８＿１
【０１２５】
（１２）ＴｒｐＭ４（ＢＲ２２４５０、ＦＬＪ２００４１、ＴＲＰＭ４、ＴＲＰＭ４Ｂ、一過性受容体電位カチオンチャネル、サブファミリーＭ、メンバー４、Ｇｅｎｂａｎｋアクセッション番号ＮＭ＿０１７６３６）；Ｘｕ，Ｘ．Ｚ．，ｅｔ  ａｌ  Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．Ｕ．Ｓ．Ａ．９８（１９）：１０６９２−１０６９７（２００１），Ｃｅｌｌ  １０９（３）：３９７−４０７（２００２），Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．２７８（３３）：３０８１３−３０８２０（２００３））；ＵＳ２００３／１４３５５７（Ｃｌａｉｍ  ４）；ＷＯ２０００／４０６１４（Ｃｌａｉｍ  １４；Ｐａｇｅ  １００−１０３）；ＷＯ２００２／１０３８２（Ｃｌａｉｍ  １；Ｆｉｇ  ９Ａ）；ＷＯ２００３／０４２６６１（Ｃｌａｉｍ  １２）；ＷＯ２００２／３０２６８（Ｃｌａｉｍ  ２７；Ｐａｇｅ  ３９１）；ＵＳ２００３／２１９８０６（Ｃｌａｉｍ  ４）；ＷＯ２００１／６２７９４（Ｃｌａｉｍ  １４；Ｆｉｇ  １Ａ−Ｄ）；Ｃｒｏｓｓ−ｒｅｆｅｒｅｎｃｅｓ：ＭＩＭ：６０６９３６；ＮＰ＿０６０１０６．２；ＮＭ＿０１７６３６＿１
【０１２６】
（１３）ＣＲＩＰＴＯ（ＣＲ、ＣＲ１、ＣＲＧＦ、ＣＲＩＰＴＯ、ＴＤＧＦ１、奇形癌腫由来成長因子、Ｇｅｎｂａｎｋアクセッション番号ＮＰ＿００３２０３  ｏｒ  ＮＭ＿００３２１２）；Ｃｉｃｃｏｄｉｃｏｌａ，Ａ．，ｅｔ  ａｌ  ＥＭＢＯ  Ｊ．８（７）：１９８７−１９９１（１９８９），Ａｍ．Ｊ．Ｈｕｍ．Ｇｅｎｅｔ．４９（３）：５５５−５６５（１９９１））；ＵＳ２００３／２２４４１１（Ｃｌａｉｍ  １）；ＷＯ２００３／０８３０４１（Ｅｘａｍｐｌｅ  １）；ＷＯ２００３／０３４９８４（Ｃｌａｉｍ  １２）；ＷＯ２００２／８８１７０（Ｃｌａｉｍ  ２；Ｐａｇｅ  ５２−５３）；ＷＯ２００３／０２４３９２（Ｃｌａｉｍ  ２；Ｆｉｇ  ５８）；ＷＯ２００２／１６４１３（Ｃｌａｉｍ  １；Ｐａｇｅ  ９４−９５，１０５）；ＷＯ２００２／２２８０８（Ｃｌａｉｍ  ２；Ｆｉｇ  １）；ＵＳ５８５４３９９（Ｅｘａｍｐｌｅ  ２；Ｃｏｌ  １７−１８）；ＵＳ５７９２６１６（Ｆｉｇ  ２）；Ｃｒｏｓｓ−ｒｅｆｅｒｅｎｃｅｓ：ＭＩＭ：１８７３９５；ＮＰ＿００３２０３．１；ＮＭ＿００３２１２＿１
【０１２７】
（１４）ＣＤ２１（ＣＲ２（補体受容体２）又はＣ３ＤＲ（Ｃ３ｄ／エプスタインバーウイルス受容体）又はＨｓ．７３７９２  Ｇｅｎｂａｎｋアクセッション番号Ｍ２６００４）；Ｆｕｊｉｓａｋｕ  ｅｔ  ａｌ（１９８９）Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．２６４（４）：２１１８−２１２５）；Ｗｅｉｓ  Ｊ．Ｊ．，ｅｔ  ａｌ  Ｊ．Ｅｘｐ．Ｍｅｄ．１６７，１０４７−１０６６，１９８８；Ｍｏｏｒｅ  Ｍ．，ｅｔ  ａｌ  Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．Ｕ．Ｓ．Ａ．８４，９１９４−９１９８，１９８７；Ｂａｒｅｌ  Ｍ．，ｅｔ  ａｌ  Ｍｏｌ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．３５，１０２５−１０３１，１９９８；Ｗｅｉｓ  Ｊ．Ｊ．，ｅｔ  ａｌ  Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．Ｕ．Ｓ．Ａ．８３，５６３９−５６４３，１９８６；Ｓｉｎｈａ  Ｓ．Ｋ．，ｅｔ  ａｌ（１９９３）Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．１５０，５３１１−５３２０；ＷＯ２００４／０４５５２０（Ｅｘａｍｐｌｅ  ４）；ＵＳ２００４／００５５３８（Ｅｘａｍｐｌｅ  １）；ＷＯ２００３／０６２４０１（Ｃｌａｉｍ  ９）；ＷＯ２００４／０４５５２０（Ｅｘａｍｐｌｅ  ４）；ＷＯ９１／０２５３６（Ｆｉｇ  ９．１−９．９）；ＷＯ２００４／０２０５９５（Ｃｌａｉｍ  １）；Ａｃｃｅｓｓｉｏｎ：Ｐ２００２３；Ｑ１３８６６；Ｑ１４２１２；ＥＭＢＬ；Ｍ２６００４；ＡＡＡ３５７８６．１．
【０１２８】
（１５）ＣＤ７９ｂ（ＣＤ７９Ｂ、ＣＤ７９β、ＩＧｂ（免疫グロブリン関連ベータ）、Ｂ２９、Ｇｅｎｂａｎｋアクセッション番号ＮＭ＿０００６２６又は１１０３８６７４）；Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．Ｕ．Ｓ．Ａ．（２００３）１００（７）：４１２６−４１３１，Ｂｌｏｏｄ（２００２）１００（９）：３０６８−３０７６，Ｍｕｌｌｅｒ  ｅｔ  ａｌ（１９９２）Ｅｕｒ．Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．２２（６）：１６２１−１６２５）；ＷＯ２００４／０１６２２５（ｃｌａｉｍ  ２，Ｆｉｇ  １４０）；ＷＯ２００３／０８７７６８，ＵＳ２００４／１０１８７４（ｃｌａｉｍ  １，ｐａｇｅ  １０２）；ＷＯ２００３／０６２４０１（ｃｌａｉｍ  ９）；ＷＯ２００２／７８５２４（Ｅｘａｍｐｌｅ  ２）；ＵＳ２００２／１５０５７３（ｃｌａｉｍ  ５，ｐａｇｅ  １５）；ＵＳ５６４４０３３；ＷＯ２００３／０４８２０２（ｃｌａｉｍ  １，ｐａｇｅｓ  ３０６  ａｎｄ  ３０９）；ＷＯ９９／５８６５８，ＵＳ６５３４４８２（ｃｌａｉｍ  １３，Ｆｉｇ  １７Ａ／Ｂ）；ＷＯ２０００／５５３５１（ｃｌａｉｍ  １１，ｐａｇｅｓ  １１４５−１１４６）；Ｃｒｏｓｓ−ｒｅｆｅｒｅｎｃｅｓ：ＭＩＭ：１４７２４５；ＮＰ＿０００６１７．１；ＮＭ＿０００６２６＿１
【０１２９】
（１６）ＦｃＲＨ２（ＩＦＧＰ４、ＩＲＴＡ４、ＳＰＡＰ１Ａ（ＳＨ２ドメイン含有ホスファターゼアンカータンパク質１ａ）、ＳＰＡＰ１Ｂ、ＳＰＡＰ１Ｃ、Ｇｅｎｂａｎｋアクセッション番号ＮＭ＿０３０７６４、ＡＹ３５８１３０）；Ｇｅｎｏｍｅ  Ｒｅｓ．１３（１０）：２２６５−２２７０（２００３），Ｉｍｍｕｎｏｇｅｎｅｔｉｃｓ  ５４（２）：８７−９５（２００２），Ｂｌｏｏｄ  ９９（８）：２６６２−２６６９（２００２），Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．Ｕ．Ｓ．Ａ．９８（１７）：９７７２−９７７７（２００１），Ｘｕ，Ｍ．Ｊ．，ｅｔ  ａｌ（２００１）Ｂｉｏｃｈｅｍ．Ｂｉｏｐｈｙｓ．Ｒｅｓ．Ｃｏｍｍｕｎ．２８０（３）：７６８−７７５；ＷＯ２００４／０１６２２５（Ｃｌａｉｍ  ２）；ＷＯ２００３／０７７８３６；ＷＯ２００１／３８４９０（Ｃｌａｉｍ  ５；Ｆｉｇ  １８Ｄ−１−１８Ｄ−２）；ＷＯ２００３／０９７８０３（Ｃｌａｉｍ  １２）；ＷＯ２００３／０８９６２４（Ｃｌａｉｍ  ２５）；Ｃｒｏｓｓ−ｒｅｆｅｒｅｎｃｅｓ：ＭＩＭ：６０６５０９；ＮＰ＿１１０３９１．２；ＮＭ＿０３０７６４＿１
【０１３０】
（１７）ＨＥＲ２（ＥｒｂＢ２、Ｇｅｎｂａｎｋアクセッション番号Ｍ１１７３０）；Ｃｏｕｓｓｅｎｓ  Ｌ．，ｅｔ  ａｌ  Ｓｃｉｅｎｃｅ（１９８５）２３０（４７３０）：１１３２−１１３９）；Ｙａｍａｍｏｔｏ  Ｔ．，ｅｔ  ａｌ  Ｎａｔｕｒｅ  ３１９，２３０−２３４，１９８６；Ｓｅｍｂａ  Ｋ．，ｅｔ  ａｌ  Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．Ｕ．Ｓ．Ａ．８２，６４９７−６５０１，１９８５；Ｓｗｉｅｒｃｚ  Ｊ．Ｍ．，ｅｔ  ａｌ  Ｊ．Ｃｅｌｌ  Ｂｉｏｌ．１６５，８６９−８８０，２００４；Ｋｕｈｎｓ  Ｊ．Ｊ．，ｅｔ  ａｌ  Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．２７４，３６４２２−３６４２７，１９９９；Ｃｈｏ  Ｈ．−Ｓ．，ｅｔ  ａｌ  Ｎａｔｕｒｅ  ４２１，７５６−７６０，２００３；Ｅｈｓａｎｉ  Ａ．，ｅｔ  ａｌ（１９９３）Ｇｅｎｏｍｉｃｓ  １５，４２６−４２９；ＷＯ２００４／０４８９３８（Ｅｘａｍｐｌｅ  ２）；ＷＯ２００４／０２７０４９（Ｆｉｇ  １Ｉ）；ＷＯ２００４／００９６２２；ＷＯ２００３／０８１２１０；ＷＯ２００３／０８９９０４（Ｃｌａｉｍ  ９）；ＷＯ２００３／０１６４７５（Ｃｌａｉｍ  １）；ＵＳ２００３／１１８５９２；ＷＯ２００３／００８５３７（Ｃｌａｉｍ  １）；ＷＯ２００３／０５５４３９（Ｃｌａｉｍ  ２９；Ｆｉｇ  １Ａ−Ｂ）；ＷＯ２００３／０２５２２８（Ｃｌａｉｍ  ３７；Ｆｉｇ  ５Ｃ）；ＷＯ２００２／２２６３６（Ｅｘａｍｐｌｅ  １３；Ｐａｇｅ  ９５−１０７）；ＷＯ２００２／１２３４１（Ｃｌａｉｍ  ６８；Ｆｉｇ  ７）；ＷＯ２００２／１３８４７（Ｐａｇｅ  ７１−７４）；ＷＯ２００２／１４５０３（Ｐａｇｅ  １１４−１１７）；ＷＯ２００１／５３４６３（Ｃｌａｉｍ  ２；Ｐａｇｅ  ４１−４６）；ＷＯ２００１／４１７８７（Ｐａｇｅ  １５）；ＷＯ２０００／４４８９９（Ｃｌａｉｍ  ５２；Ｆｉｇ  ７）；ＷＯ２０００／２０５７９（Ｃｌａｉｍ  ３；Ｆｉｇ  ２）；ＵＳ５８６９４４５（Ｃｌａｉｍ  ３；Ｃｏｌ  ３１−３８）；ＷＯ９６３０５１４（Ｃｌａｉｍ  ２；Ｐａｇｅ  ５６−６１）；ＥＰ１４３９３９３（Ｃｌａｉｍ  ７）；ＷＯ２００４／０４３３６１（Ｃｌａｉｍ  ７）；ＷＯ２００４／０２２７０９；ＷＯ２００１／００２４４（Ｅｘａｍｐｌｅ  ３；Ｆｉｇ  ４）；Ａｃｃｅｓｓｉｏｎ：Ｐ０４６２６；ＥＭＢＬ；Ｍ１１７６７；ＡＡＡ３５８０８．１．ＥＭＢＬ；Ｍ１１７６１；ＡＡＡ３５８０８．１．ある実施形態において、本発明のコンジュゲート化合物は、抗ＨＥＲ２抗体を含む。本発明の一実施形態において、本発明のＡＤＣの抗ＨＥＲ２抗体は、ヒト化抗ＨＥＲ２抗体、例えば米国特許第５８２１３３７号の表３に記載されているように、ｈｕＭＡｂ４Ｄ５−１、ｈｕＭＡｂ４Ｄ５−２、ｈｕＭＡｂ４Ｄ５−３、ｈｕＭＡｂ４Ｄ５−４、ｈｕＭＡｂ４Ｄ５−５、ｈｕＭＡｂ４Ｄ５−６、ｈｕＭＡｂ４Ｄ５−７及びｈｕＭＡｂ４Ｄ５−８を含む。これらの抗体は、ヒトフレームワーク領域を、ＨＥＲ２に結合するマウス抗体（４Ｄ５）の相補性決定領域と共に含有する。ヒト化抗体ｈｕＭＡｂ４Ｄ５−８は、商品名ハーセプチンで市販されている、トラスツズマブとも呼ばれる。本発明の別の実施形態において、本発明のＡＤＣの抗ＨＥＲ２抗体は、ヒト化抗ＨＥＲ２抗体、例えば米国特許第７８６２８１７号に記載されているヒト化２Ｃ４を含む。ヒト化２Ｃ４抗体の例は、商品名パージェタで市販されているペルツズマブである。
【０１３１】
（１８）ＮＣＡ（ＣＥＡＣＡＭ６、Ｇｅｎｂａｎｋアクセッション番号Ｍ１８７２８）；Ｂａｒｎｅｔｔ  Ｔ．，ｅｔ  ａｌ  Ｇｅｎｏｍｉｃｓ  ３，５９−６６，１９８８；Ｔａｗａｒａｇｉ  Ｙ．，ｅｔ  ａｌ  Ｂｉｏｃｈｅｍ．Ｂｉｏｐｈｙｓ．Ｒｅｓ．Ｃｏｍｍｕｎ．１５０，８９−９６，１９８８；Ｓｔｒａｕｓｂｅｒｇ  Ｒ．Ｌ．，ｅｔ  ａｌ  Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．Ｕ．Ｓ．Ａ．９９：１６８９９−１６９０３，２００２；ＷＯ２００４／０６３７０９；ＥＰ１４３９３９３（Ｃｌａｉｍ  ７）；ＷＯ２００４／０４４１７８（Ｅｘａｍｐｌｅ  ４）；ＷＯ２００４／０３１２３８；ＷＯ２００３／０４２６６１（Ｃｌａｉｍ  １２）；ＷＯ２００２／７８５２４（Ｅｘａｍｐｌｅ  ２）；ＷＯ２００２／８６４４３（Ｃｌａｉｍ  ２７；Ｐａｇｅ  ４２７）；ＷＯ２００２／６０３１７（Ｃｌａｉｍ  ２）；Ａｃｃｅｓｓｉｏｎ：Ｐ４０１９９；Ｑ１４９２０；ＥＭＢＬ；Ｍ２９５４１；ＡＡＡ５９９１５．１．ＥＭＢＬ；Ｍ１８７２８
【０１３２】
（１９）ＭＤＰ（ＤＰＥＰ１、Ｇｅｎｂａｎｋアクセッション番号ＢＣ０１７０２３）；Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．Ｕ．Ｓ．Ａ．９９（２６）：１６８９９−１６９０３（２００２））；ＷＯ２００３／０１６４７５（Ｃｌａｉｍ  １）；ＷＯ２００２／６４７９８（Ｃｌａｉｍ  ３３；Ｐａｇｅ  ８５−８７）；ＪＰ０５００３７９０（Ｆｉｇ  ６−８）；ＷＯ９９／４６２８４（Ｆｉｇ  ９）；Ｃｒｏｓｓ−ｒｅｆｅｒｅｎｃｅｓ：ＭＩＭ：１７９７８０；ＡＡＨ１７０２３．１；ＢＣ０１７０２３＿１
【０１３３】
（２０）ＩＬ２０Ｒα（ＩＬ２０Ｒａ、ＺＣＹＴＯＲ７、Ｇｅｎｂａｎｋアクセッション番号ＡＦ１８４９７１）；Ｃｌａｒｋ  Ｈ．Ｆ．，ｅｔ  ａｌ  Ｇｅｎｏｍｅ  Ｒｅｓ．１３，２２６５−２２７０，２００３；Ｍｕｎｇａｌｌ  Ａ．Ｊ．，ｅｔ  ａｌ  Ｎａｔｕｒｅ  ４２５，８０５−８１１，２００３；Ｂｌｕｍｂｅｒｇ  Ｈ．，ｅｔ  ａｌ  Ｃｅｌｌ  １０４，９−１９，２００１；Ｄｕｍｏｕｔｉｅｒ  Ｌ．，ｅｔ  ａｌ  Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．１６７，３５４５−３５４９，２００１；Ｐａｒｒｉｓｈ−Ｎｏｖａｋ  Ｊ．，ｅｔ  ａｌ  Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．２７７，４７５１７−４７５２３，２００２；Ｐｌｅｔｎｅｖ  Ｓ．，ｅｔ  ａｌ（２００３）Ｂｉｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ  ４２：１２６１７−１２６２４；Ｓｈｅｉｋｈ  Ｆ．，ｅｔ  ａｌ（２００４）Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．１７２，２００６−２０１０；ＥＰ１３９４２７４（Ｅｘａｍｐｌｅ  １１）；ＵＳ２００４／００５３２０（Ｅｘａｍｐｌｅ  ５）；ＷＯ２００３／０２９２６２（Ｐａｇｅ  ７４−７５）；ＷＯ２００３／００２７１７（Ｃｌａｉｍ  ２；Ｐａｇｅ  ６３）；ＷＯ２００２／２２１５３（Ｐａｇｅ  ４５−４７）；ＵＳ２００２／０４２３６６（Ｐａｇｅ  ２０−２１）；ＷＯ２００１／４６２６１（Ｐａｇｅ  ５７−５９）；ＷＯ２００１／４６２３２（Ｐａｇｅ  ６３−６５）；ＷＯ９８／３７１９３（Ｃｌａｉｍ  １；Ｐａｇｅ  ５５−５９）；Ａｃｃｅｓｓｉｏｎ：Ｑ９ＵＨＦ４；Ｑ６ＵＷＡ９；Ｑ９６ＳＨ８；ＥＭＢＬ；ＡＦ１８４９７１；ＡＡＦ０１３２０．１．
【０１３４】
（２１）ブレビカン（ＢＣＡＮ、ＢＥＨＡＢ、Ｇｅｎｂａｎｋアクセッション番号ＡＦ２２９０５３）；Ｇａｒｙ  Ｓ．Ｃ．，ｅｔ  ａｌ  Ｇｅｎｅ  ２５６，１３９−１４７，２０００；Ｃｌａｒｋ  Ｈ．Ｆ．，ｅｔ  ａｌ  Ｇｅｎｏｍｅ  Ｒｅｓ．１３，２２６５−２２７０，２００３；Ｓｔｒａｕｓｂｅｒｇ  Ｒ．Ｌ．，ｅｔ  ａｌ  Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．Ｕ．Ｓ．Ａ．９９，１６８９９−１６９０３，２００２；ＵＳ２００３／１８６３７２（Ｃｌａｉｍ  １１）；ＵＳ２００３／１８６３７３（Ｃｌａｉｍ  １１）；ＵＳ２００３／１１９１３１（Ｃｌａｉｍ  １；Ｆｉｇ  ５２）；ＵＳ２００３／１１９１２２（Ｃｌａｉｍ  １；Ｆｉｇ  ５２）；ＵＳ２００３／１１９１２６（Ｃｌａｉｍ  １）；ＵＳ２００３／１１９１２１（Ｃｌａｉｍ  １；Ｆｉｇ  ５２）；ＵＳ２００３／１１９１２９（Ｃｌａｉｍ  １）；ＵＳ２００３／１１９１３０（Ｃｌａｉｍ  １）；ＵＳ２００３／１１９１２８（Ｃｌａｉｍ  １；Ｆｉｇ  ５２）；ＵＳ２００３／１１９１２５（Ｃｌａｉｍ  １）；ＷＯ２００３／０１６４７５（Ｃｌａｉｍ  １）；ＷＯ２００２／０２６３４（Ｃｌａｉｍ  １）
【０１３５】
（２２）ＥｐｈＢ２Ｒ（ＤＲＴ、ＥＲＫ、Ｈｅｋ５、ＥＰＨＴ３、Ｔｙｒｏ５、Ｇｅｎｂａｎｋアクセッション番号ＮＭ＿００４４４２）；Ｃｈａｎ，Ｊ．ａｎｄ  Ｗａｔｔ，Ｖ．Ｍ．，Ｏｎｃｏｇｅｎｅ  ６（６），１０５７−１０６１（１９９１）Ｏｎｃｏｇｅｎｅ  １０（５）：８９７−９０５（１９９５），Ａｎｎｕ．Ｒｅｖ．Ｎｅｕｒｏｓｃｉ．２１：３０９−３４５（１９９８），Ｉｎｔ．Ｒｅｖ．Ｃｙｔｏｌ．１９６：１７７−２４４（２０００））；ＷＯ２００３０４２６６１（Ｃｌａｉｍ  １２）；ＷＯ２０００５３２１６（Ｃｌａｉｍ  １；Ｐａｇｅ  ４１）；ＷＯ２００４０６５５７６（Ｃｌａｉｍ  １）；ＷＯ２００４０２０５８３（Ｃｌａｉｍ  ９）；ＷＯ２００３００４５２９（Ｐａｇｅ  １２８−１３２）；ＷＯ２０００５３２１６（Ｃｌａｉｍ  １；Ｐａｇｅ  ４２）；Ｃｒｏｓｓ−ｒｅｆｅｒｅｎｃｅｓ：ＭＩＭ：６００９９７；ＮＰ＿００４４３３．２；ＮＭ＿００４４４２＿１
【０１３６】
（２３）ＡＳＬＧ６５９（Ｂ７ｈ、Ｇｅｎｂａｎｋアクセッション番号ＡＸ０９２３２８）；ＵＳ２００４／０１０１８９９（Ｃｌａｉｍ  ２）；ＷＯ２００３１０４３９９（Ｃｌａｉｍ  １１）；ＷＯ２００４０００２２１（Ｆｉｇ  ３）；ＵＳ２００３／１６５５０４（Ｃｌａｉｍ  １）；ＵＳ２００３／１２４１４０（Ｅｘａｍｐｌｅ  ２）；ＵＳ２００３／０６５１４３（Ｆｉｇ  ６０）；ＷＯ２００２／１０２２３５（Ｃｌａｉｍ  １３；Ｐａｇｅ  ２９９）；ＵＳ２００３／０９１５８０（Ｅｘａｍｐｌｅ  ２）；ＷＯ２００２／１０１８７（Ｃｌａｉｍ  ６；Ｆｉｇ  １０）；ＷＯ２００１／９４６４１（Ｃｌａｉｍ  １２；Ｆｉｇ  ７ｂ）；ＷＯ２００２／０２６２４（Ｃｌａｉｍ  １３；Ｆｉｇ  １Ａ−１Ｂ）；ＵＳ２００２／０３４７４９（Ｃｌａｉｍ  ５４；Ｐａｇｅ  ４５−４６）；ＷＯ２００２／０６３１７（Ｅｘａｍｐｌｅ  ２；Ｐａｇｅ  ３２０−３２１，Ｃｌａｉｍ  ３４；Ｐａｇｅ  ３２１−３２２）；ＷＯ２００２／７１９２８（Ｐａｇｅ  ４６８−４６９）；ＷＯ２００２／０２５８７（Ｅｘａｍｐｌｅ  １；Ｆｉｇ  １）；ＷＯ２００１／４０２６９（Ｅｘａｍｐｌｅ  ３；Ｐａｇｅｓ  １９０−１９２）；ＷＯ２０００／３６１０７（Ｅｘａｍｐｌｅ  ２；Ｐａｇｅ  ２０５−２０７）；ＷＯ２００４／０５３０７９（Ｃｌａｉｍ  １２）；ＷＯ２００３／００４９８９（Ｃｌａｉｍ  １）；ＷＯ２００２／７１９２８（Ｐａｇｅ  ２３３−２３４，４５２−４５３）；ＷＯ０１／１６３１８
（２４）ＰＳＣＡ（前立腺幹細胞抗原前駆体、Ｇｅｎｂａｎｋアクセッション番号ＡＪ２９７４３６）；Ｒｅｉｔｅｒ  Ｒ．Ｅ．，ｅｔ  ａｌ  Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．Ｕ．Ｓ．Ａ．９５，１７３５−１７４０，１９９８；Ｇｕ  Ｚ．，ｅｔ  ａｌ  Ｏｎｃｏｇｅｎｅ  １９，１２８８−１２９６，２０００；Ｂｉｏｃｈｅｍ．Ｂｉｏｐｈｙｓ．Ｒｅｓ．Ｃｏｍｍｕｎ．（２０００）２７５（３）：７８３−７８８；ＷＯ２００４／０２２７０９；ＥＰ１３９４２７４（Ｅｘａｍｐｌｅ  １１）；ＵＳ２００４／０１８５５３（Ｃｌａｉｍ  １７）；ＷＯ２００３／００８５３７（Ｃｌａｉｍ  １）；ＷＯ２００２／８１６４６（Ｃｌａｉｍ  １；Ｐａｇｅ  １６４）；ＷＯ２００３／００３９０６（Ｃｌａｉｍ  １０；Ｐａｇｅ  ２８８）；ＷＯ２００１／４０３０９（Ｅｘａｍｐｌｅ  １；Ｆｉｇ  １７）；ＵＳ２００１／０５５７５１（Ｅｘａｍｐｌｅ  １；Ｆｉｇ  １ｂ）；ＷＯ２０００／３２７５２（Ｃｌａｉｍ  １８；Ｆｉｇ  １）；ＷＯ９８／５１８０５（Ｃｌａｉｍ  １７；Ｐａｇｅ  ９７）；ＷＯ９８／５１８２４（Ｃｌａｉｍ  １０；Ｐａｇｅ  ９４）；ＷＯ９８／４０４０３（Ｃｌａｉｍ  ２；Ｆｉｇ  １Ｂ）；Ａｃｃｅｓｓｉｏｎ：Ｏ４３６５３；ＥＭＢＬ；ＡＦ０４３４９８；ＡＡＣ３９６０７．１
【０１３７】
（２５）ＧＥＤＡ（Ｇｅｎｂａｎｋアクセッション番号ＡＹ２６０７６３）；ＡＡＰ１４９５４    ｌｉｐｏｍａ  ＨＭＧＩＣ  ｆｕｓｉｏｎ−ｐａｒｔｎｅｒ−ｌｉｋｅ  ｐｒｏｔｅｉｎ  ／ｐｉｄ＝ＡＡＰ１４９５４．１−Ｈｏｍｏ  ｓａｐｉｅｎｓ（ｈｕｍａｎ）；ＷＯ２００３／０５４１５２（Ｃｌａｉｍ  ２０）；ＷＯ２００３／０００８４２（Ｃｌａｉｍ  １）；ＷＯ２００３／０２３０１３（Ｅｘａｍｐｌｅ  ３，Ｃｌａｉｍ  ２０）；ＵＳ２００３／１９４７０４（Ｃｌａｉｍ  ４５）；Ｃｒｏｓｓ−ｒｅｆｅｒｅｎｃｅｓ：ＧＩ：３０１０２４４９；ＡＡＰ１４９５４．１；ＡＹ２６０７６３＿１
【０１３８】
（２６）ＢＡＦＦ−Ｒ（Ｂ細胞活性化因子受容体、ＢＬｙＳ受容体３、ＢＲ３、Ｇｅｎｂａｎｋアクセッション番号ＡＦ１１６４５６）；ＢＡＦＦ  ｒｅｃｅｐｔｏｒ  ／ｐｉｄ＝ＮＰ＿４４３１７７．１−Ｈｏｍｏ  ｓａｐｉｅｎｓ：Ｔｈｏｍｐｓｏｎ，Ｊ．Ｓ．，ｅｔ  ａｌ  Ｓｃｉｅｎｃｅ  ２９３（５５３７），２１０８−２１１１（２００１）；ＷＯ２００４／０５８３０９；ＷＯ２００４／０１１６１１；ＷＯ２００３／０４５４２２（Ｅｘａｍｐｌｅ；Ｐａｇｅ  ３２−３３）；ＷＯ２００３／０１４２９４（Ｃｌａｉｍ  ３５；Ｆｉｇ  ６Ｂ）；ＷＯ２００３／０３５８４６（Ｃｌａｉｍ  ７０；Ｐａｇｅ  ６１５−６１６）；ＷＯ２００２／９４８５２（Ｃｏｌ  １３６−１３７）；ＷＯ２００２／３８７６６（Ｃｌａｉｍ  ３；Ｐａｇｅ  １３３）；ＷＯ２００２／２４９０９（Ｅｘａｍｐｌｅ  ３；Ｆｉｇ  ３）；Ｃｒｏｓｓ−ｒｅｆｅｒｅｎｃｅｓ：ＭＩＭ：６０６２６９；ＮＰ＿４４３１７７．１；ＮＭ＿０５２９４５＿１；ＡＦ１３２６００
【０１３９】
（２７）ＣＤ２２（Ｂ細胞受容体ＣＤ２２−Ｂアイソフォーム、ＢＬ−ＣＡＭ、Ｌｙｂ−８、Ｌｙｂ８、ＳＩＧＬＥＣ−２、ＦＬＪ２２８１４、Ｇｅｎｂａｎｋアクセッション番号ＡＫ０２６４６７）；Ｗｉｌｓｏｎ  ｅｔ  ａｌ（１９９１）Ｊ．Ｅｘｐ．Ｍｅｄ．１７３：１３７−１４６；ＷＯ２００３／０７２０３６（Ｃｌａｉｍ  １；Ｆｉｇ  １）；相互参照：ＭＩＭ：１０７２６６；ＮＰ＿００１７６２．１；ＮＭ＿００１７７１＿１．ある実施形態において、本発明のコンジュゲート化合物は、抗ＣＤ２２抗体を含む。本発明の一実施形態において、本発明のＡＤＣの抗ＣＤ２２抗体は、米国特許第８２２６９４５号による、３個の軽鎖超可変領域（ＨＶＲ−Ｌ１、ＨＶＲ−Ｌ２及びＨＶＲ−Ｌ３）及び３個の重鎖可変領域（ＨＶＲ−Ｈ１、ＨＶＲ−Ｈ２及びＨＶＲ−Ｈ３）を含む：
【０１４０】
ＨＶＲ−Ｌ１    ＲＳＳＱＳＩＶＨＳＶＧＮＴＦＬＥ        （配列番号１１）
ＨＶＲ−Ｌ２    ＫＶＳＮＲＦＳ                          （配列番号１２）
ＨＶＲ−Ｌ３    ＦＱＧＳＱＦＰＹＴ                      （配列番号１３）
ＨＶＲ−Ｈ１    ＧＹＥＦＳＲＳＷＭＮ                    （配列番号１４）
ＨＶＲ−Ｈ２    ＧＲＩＹＰＧＤＧＤＴＮＹＳＧＫＦＫＧ    （配列番号１５）
ＨＶＲ−Ｈ３    ＤＧＳＳＷＤＷＹＦＤＶ                  （配列番号１６）
【０１４１】
（２８）ＣＤ７９ａ（ＣＤ７９Ａ、ＣＤ７９α、免疫グロブリン関連アルファ、Ｉｇベータ（ＣＤ７９Ｂ）と共有結合的に相互作用して、表面でＩｇＭ分子と共に複合体を形成し、Ｂ細胞分化に関与するシグナルを変換する、Ｂ細胞特異的タンパク質）、ｐＩ：４．８４、ＭＷ：２５０２８  ＴＭ：２［Ｐ］遺伝子染色体：１９ｑ１３．２、Ｇｅｎｂａｎｋアクセッション番号ＮＰ＿００１７７４．１０）；ＷＯ２００３／０８８８０８，ＵＳ２００３／０２２８３１９；ＷＯ２００３／０６２４０１（ｃｌａｉｍ  ９）；ＵＳ２００２／１５０５７３（ｃｌａｉｍ  ４，ｐａｇｅｓ  １３−１４）；ＷＯ９９／５８６５８（ｃｌａｉｍ  １３，Ｆｉｇ  １６）；ＷＯ９２／０７５７４（Ｆｉｇ  １）；ＵＳ５６４４０３３；Ｈａ  ｅｔ  ａｌ（１９９２）Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．１４８（５）：１５２６−１５３１；Ｍｕｌｌｅｒ  ｅｔ  ａｌ（１９９２）Ｅｕｒ．Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．．２２：１６２１−１６２５；Ｈａｓｈｉｍｏｔｏ  ｅｔ  ａｌ（１９９４）Ｉｍｍｕｎｏｇｅｎｅｔｉｃｓ  ４０（４）：２８７−２９５；Ｐｒｅｕｄ’ｈｏｍｍｅ  ｅｔ  ａｌ（１９９２）Ｃｌｉｎ．Ｅｘｐ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．９０（１）：１４１−１４６；Ｙｕ  ｅｔ  ａｌ（１９９２）Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．１４８（２）６３３−６３７；Ｓａｋａｇｕｃｈｉ  ｅｔ  ａｌ（１９８８）ＥＭＢＯ  Ｊ．７（１１）：３４５７−３４６４
【０１４２】
（２９）ＣＸＣＲ５（バーキットリンパ腫受容体１、ＣＸＣＬ１３ケモカインによって活性化され、リンパ球の移動及び体液性防御において機能し、ＨＩＶ−２感染及びおそらくＡＩＤＳ、リンパ腫、骨髄腫及び白血病の発症で役割を果たす、Ｇタンパク質共役受容体）；３７２ａａ、ｐＩ：８．５４  ＭＷ：４１９５９  ＴＭ：７［Ｐ］遺伝子染色体：１１ｑ２３．３、Ｇｅｎｂａｎｋアクセッション番号ＮＰ＿００１７０７．１）；ＷＯ２００４／０４００００；ＷＯ２００４／０１５４２６；ＵＳ２００３／１０５２９２（Ｅｘａｍｐｌｅ  ２）；ＵＳ６５５５３３９（Ｅｘａｍｐｌｅ  ２）；ＷＯ２００２／６１０８７（Ｆｉｇ  １）；ＷＯ２００１／５７１８８（Ｃｌａｉｍ  ２０，ｐａｇｅ  ２６９）；ＷＯ２００１／７２８３０（ｐａｇｅｓ  １２−１３）；ＷＯ２０００／２２１２９（Ｅｘａｍｐｌｅ  １，ｐａｇｅｓ  １５２−１５３，Ｅｘａｍｐｌｅ  ２，ｐａｇｅｓ  ２５４−２５６）；ＷＯ９９／２８４６８（ｃｌａｉｍ  １，ｐａｇｅ  ３８）；ＵＳ５４４００２１（Ｅｘａｍｐｌｅ  ２，ｃｏｌ  ４９−５２）；ＷＯ９４／２８９３１（ｐａｇｅｓ  ５６−５８）；ＷＯ９２／１７４９７（ｃｌａｉｍ  ７，Ｆｉｇ  ５）；Ｄｏｂｎｅｒ  ｅｔ  ａｌ（１９９２）Ｅｕｒ．Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．２２：２７９５−２７９９；Ｂａｒｅｌｌａ  ｅｔ  ａｌ（１９９５）Ｂｉｏｃｈｅｍ．Ｊ．３０９：７７３−７７９
【０１４３】
（３０）ＨＬＡ−ＤＯＢ（ペプチドを結合して、それらをＣＤ４＋Ｔリンパ球に提示するＭＨＣクラスＩＩ分子（Ｉａ抗原）のベータサブユニット）；２７３ａａ、ｐＩ：６．５６、ＭＷ：３０８２０．ＴＭ：１［Ｐ］遺伝子染色体：６ｐ２１．３、Ｇｅｎｂａｎｋアクセッション番号ＮＰ＿００２１１１．１）；Ｔｏｎｎｅｌｌｅ  ｅｔ  ａｌ（１９８５）ＥＭＢＯ  Ｊ．４（１１）：２８３９−２８４７；Ｊｏｎｓｓｏｎ  ｅｔ  ａｌ（１９８９）Ｉｍｍｕｎｏｇｅｎｅｔｉｃｓ  ２９（６）：４１１−４１３；Ｂｅｃｋ  ｅｔ  ａｌ（１９９２）Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．２２８：４３３−４４１；Ｓｔｒａｕｓｂｅｒｇ  ｅｔ  ａｌ（２００２）Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ  ＵＳＡ  ９９：１６８９９−１６９０３；Ｓｅｒｖｅｎｉｕｓ  ｅｔ  ａｌ（１９８７）Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．２６２：８７５９−８７６６；Ｂｅｃｋ  ｅｔ  ａｌ（１９９６）Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．２５５：１−１３；Ｎａｒｕｓｅ  ｅｔ  ａｌ（２００２）Ｔｉｓｓｕｅ  Ａｎｔｉｇｅｎｓ  ５９：５１２−５１９；ＷＯ９９／５８６５８（ｃｌａｉｍ  １３，Ｆｉｇ  １５）；ＵＳ６１５３４０８（Ｃｏｌ  ３５−３８）；ＵＳ５９７６５５１（ｃｏｌ  １６８−１７０）；ＵＳ６０１１１４６（ｃｏｌ  １４５−１４６）；Ｋａｓａｈａｒａ  ｅｔ  ａｌ（１９８９）Ｉｍｍｕｎｏｇｅｎｅｔｉｃｓ  ３０（１）：６６−６８；Ｌａｒｈａｍｍａｒ  ｅｔ  ａｌ（１９８５）Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．２６０（２６）：１４１１１−１４１１９
【０１４４】
（３１）Ｐ２Ｘ５（細胞外ＡＴＰによって開閉されるイオンチャネルである、プリン受容体Ｐ２Ｘリガンド開口型イオンチャネル５は、シナプス伝達及びニューロン新生に関与することがあり、欠乏すると、特発性排尿筋不安定の病態の一因となることがある）；４２２ａａ）、ｐＩ：７．６３、ＭＷ：４７２０６  ＴＭ：１［Ｐ］遺伝子染色体：１７ｐ１３．３、Ｇｅｎｂａｎｋアクセッション番号ＮＰ＿００２５５２．２）；Ｌｅ  ｅｔ  ａｌ（１９９７）ＦＥＢＳ  Ｌｅｔｔ．４１８（１−２）：１９５−１９９；ＷＯ２００４／０４７７４９；ＷＯ２００３／０７２０３５（ｃｌａｉｍ  １０）；Ｔｏｕｃｈｍａｎ  ｅｔ  ａｌ（２０００）Ｇｅｎｏｍｅ  Ｒｅｓ．１０：１６５−１７３；ＷＯ２００２／２２６６０（ｃｌａｉｍ  ２０）；ＷＯ２００３／０９３４４４（ｃｌａｉｍ  １）；ＷＯ２００３／０８７７６８（ｃｌａｉｍ  １）；ＷＯ２００３／０２９２７７（ｐａｇｅ  ８２）
【０１４５】
（３２）ＣＤ７２（Ｂ細胞分化抗原ＣＤ７２、Ｌｙｂ−２）；３５９ａａ，ｐＩ：８．６６、ＭＷ：４０２２５、ＴＭ：１［Ｐ］遺伝子染色体：９ｐ１３．３、Ｇｅｎｂａｎｋアクセッション番号ＮＰ＿００１７７３．１）ＷＯ２００４０４２３４６（ｃｌａｉｍ  ６５）；ＷＯ２００３／０２６４９３（ｐａｇｅｓ  ５１−５２，５７−５８）；ＷＯ２０００／７５６５５（ｐａｇｅｓ  １０５−１０６）；Ｖｏｎ  Ｈｏｅｇｅｎ  ｅｔ  ａｌ（１９９０）Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．１４４（１２）：４８７０−４８７７；Ｓｔｒａｕｓｂｅｒｇ  ｅｔ  ａｌ（２００２）Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ  ＵＳＡ  ９９：１６８９９−１６９０３．
【０１４６】
（３３）ＬＹ６４（ロイシンリッチリピート（ＬＲＲ）ファミリーのＩ型膜タンパク質である、リンパ球抗原６４（ＲＰ１０５）は、Ｂ細胞活性化及びアポトーシスを調節し、機能の損失は全身性紅斑性狼瘡患者における疾患活動性の上昇に関連している）；６６１ａａ、ｐＩ：６．２０、ＭＷ：７４１４７  ＴＭ：１［Ｐ］遺伝子染色体：５ｑ１２、Ｇｅｎｂａｎｋアクセッション番号ＮＰ＿００５５７３．１）；ＵＳ２００２／１９３５６７；ＷＯ９７／０７１９８（ｃｌａｉｍ  １１，ｐａｇｅｓ  ３９−４２）；Ｍｉｕｒａ  ｅｔ  ａｌ（１９９６）Ｇｅｎｏｍｉｃｓ  ３８（３）：２９９−３０４；Ｍｉｕｒａ  ｅｔ  ａｌ（１９９８）Ｂｌｏｏｄ  ９２：２８１５−２８２２；ＷＯ２００３／０８３０４７；ＷＯ９７／４４４５２（ｃｌａｉｍ  ８，ｐａｇｅｓ  ５７−６１）；ＷＯ２０００／１２１３０（ｐａｇｅｓ  ２４−２６）
【０１４７】
（３４）ＦｃＲＨ１（Ｃ２型Ｉｇ様ドメイン及びＩＴＡＭドメインを含有する免疫グロブリンＦｃドメインに対する推定受容体である、Ｆｃ受容体様タンパク質１は、Ｂリンパ球分化で役割を有することがある）；４２９ａａ，ｐＩ：５．２８，ＭＷ：４６９２５  ＴＭ：１［Ｐ］遺伝子染色体：１ｑ２１−１ｑ２２、Ｇｅｎｂａｎｋアクセッション番号ＮＰ＿４４３１７０．１）；ＷＯ２００３／０７７８３６；ＷＯ２００１／３８４９０（ｃｌａｉｍ  ６，Ｆｉｇ  １８Ｅ−１−１８−Ｅ−２）；Ｄａｖｉｓ  ｅｔ  ａｌ（２００１）Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ  ＵＳＡ  ９８（１７）：９７７２−９７７７；ＷＯ２００３／０８９６２４（ｃｌａｉｍ  ８）；ＥＰ１３４７０４６（ｃｌａｉｍ  １）；ＷＯ２００３／０８９６２４（ｃｌａｉｍ  ７）
【０１４８】
（３５）ＩＲＴＡ２（Ｂ細胞発生及びリンパ腫発生で考えられる役割を有する推定免疫受容体である、免疫グロブリンスーパーファミリー受容体転座関連２；転座による遺伝子の調節解除は、一部のＢ細胞悪性腫瘍において生じる）；９７７ａａ、ｐＩ：６．８８，ＭＷ：１０６４６８、ＴＭ：１［Ｐ］遺伝子染色体：１ｑ２１、Ｇｅｎｂａｎｋアクセッション番号ヒト：ＡＦ３４３６６２，ＡＦ３４３６６３，ＡＦ３４３６６４，ＡＦ３４３６６５，ＡＦ３６９７９４，ＡＦ３９７４５３，ＡＫ０９０４２３，ＡＫ０９０４７５，ＡＬ８３４１８７，ＡＹ３５８０８５；Ｍｏｕｓｅ：ＡＫ０８９７５６，ＡＹ１５８０９０，ＡＹ５０６５５８；ＮＰ＿１１２５７１．１；ＷＯ２００３／０２４３９２（ｃｌａｉｍ  ２，Ｆｉｇ  ９７）；Ｎａｋａｙａｍａ  ｅｔ  ａｌ（２０００）Ｂｉｏｃｈｅｍ．Ｂｉｏｐｈｙｓ．Ｒｅｓ．Ｃｏｍｍｕｎ．２７７（１）：１２４−１２７；ＷＯ２００３／０７７８３６；ＷＯ２００１／３８４９０（ｃｌａｉｍ  ３，Ｆｉｇ  １８Ｂ−１−１８Ｂ−２）
【０１４９】
（３６）ＴＥＮＢ２（ＴＭＥＦＦ２、トモレグリン、ＴＰＥＦ、ＨＰＰ１、ＴＲ、推定膜貫通プロテオグリカン、成長因子及びフォリスタチンのＥＧＦ／ヘレグリンファミリー関連）；３７４ａａ、ＮＣＢＩアクセッション：ＡＡＤ５５７７６，ＡＡＦ９１３９７，ＡＡＧ４９４５１，ＮＣＢＩ  ＲｅｆＳｅｑ：ＮＰ＿０５７２７６；ＮＣＢＩ  Ｇｅｎｅ：２３６７１；ＯＭＩＭ：６０５７３４；ＳｗｉｓｓＰｒｏｔ  Ｑ９ＵＩＫ５；Ｇｅｎｂａｎｋアクセッション番号ＡＦ１７９２７４；ＡＹ３５８９０７，ＣＡＦ８５７２３，ＣＱ７８２４３６；ＷＯ２００４／０７４３２０；ＪＰ２００４１１３１５１；ＷＯ２００３／０４２６６１；ＷＯ２００３／００９８１４；ＥＰ１２９５９４４（ｐａｇｅｓ  ６９−７０）；ＷＯ２００２／３０２６８（ｐａｇｅ  ３２９）；ＷＯ２００１／９０３０４；ＵＳ２００４／２４９１３０；ＵＳ２００４／０２２７２７；ＷＯ２００４／０６３３５５；ＵＳ２００４／１９７３２５；ＵＳ２００３／２３２３５０；ＵＳ２００４／００５５６３；ＵＳ２００３／１２４５７９；Ｈｏｒｉｅ  ｅｔ  ａｌ（２０００）Ｇｅｎｏｍｉｃｓ  ６７：１４６−１５２；Ｕｃｈｉｄａ  ｅｔ  ａｌ（１９９９）Ｂｉｏｃｈｅｍ．Ｂｉｏｐｈｙｓ．Ｒｅｓ．Ｃｏｍｍｕｎ．２６６：５９３−６０２；Ｌｉａｎｇ  ｅｔ  ａｌ（２０００）Ｃａｎｃｅｒ  Ｒｅｓ．６０：４９０７−１２；Ｇｌｙｎｎｅ−Ｊｏｎｅｓ  ｅｔ  ａｌ（２００１）Ｉｎｔ  Ｊ  Ｃａｎｃｅｒ．Ｏｃｔ  １５；９４（２）：１７８−８４．
【０１５０】
（３７）ＣＤ３３（ＣＤ３３分子、ＳＩＧＬＥＣ−３、ＳＩＧＬＥＣ３、ｐ６７；ＣＤ３３抗原（ｇｐ６７）；ｇｐ６７；骨髄細胞表面抗原ＣＤ３３；シアル酸結合Ｉｇ様レクチン３；シアル酸結合Ｉｇ様レクチン）；ヌクレオチド：Ｇｅｎｂａｎｋアクセッション番号Ｍ＿２３１９７；Ｇｅｎｂａｎｋバージョン番号ＮＭ＿２３１９７．１  ＧＩ：１８００９７；Ｇｅｎｂａｎｋ  ｒｅｃｏｒｄ  ｕｐｄａｔｅ  ｄａｔｅ：Ｊｕｎ  ２３，２０１０  ０８：４７  ＡＭ；Ｐｏｌｙｐｅｐｔｉｄｅ：Ｇｅｎｂａｎｋアクセッション番号ＡＡＡ５１９４８；Ｇｅｎｂａｎｋバージョン番号ＡＡＡ５１９４８．１  ＧＩ：１８８０９８；Ｇｅｎｂａｎｋ  ｒｅｃｏｒｄ  ｕｐｄａｔｅ  ｄａｔｅ：Ｊｕｎ  ２３，２０１０  ０８：４７  ＡＭ；Ｓｉｍｍｏｎｓ  Ｄ．，ｅｔ  ａｌ  Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．１４１（８），２７９７−２８００（１９８８）；Ａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ：Ｈ１９５（Ｌｉｎｔｕｚｕｍａｂ）−  Ｒａｚａ  Ａ．，ｅｔ  ａｌ  Ｌｅｕｋ  Ｌｙｍｐｈｏｍａ．２００９  Ａｕｇ；５０（８）：１３３６−４４；ＵＳ６，７５９，０４５（Ｓｅａｔｔｌｅ  Ｇｅｎｅｔｉｃｓ／Ｉｍｍｕｎｏｍｅｄｉｃｓ）；ｍＡｂ  ＯＫＴ９：Ｓｕｔｈｅｒｌａｎｄ，Ｄ．Ｒ．ｅｔ  ａｌ．Ｐｒｏｃ  Ｎａｔｌ  Ａｃａｄ  Ｓｃｉ  ＵＳＡ  ７８（７）：４５１５−４５１９  １９８１，Ｓｃｈｎｅｉｄｅｒ，Ｃ．，ｅｔ  ａｌ  Ｊ  Ｂｉｏｌ  Ｃｈｅｍ  ２５７，８５１６−８５２２（１９８２）；ｍＡｂ  Ｅ６：Ｈｏｏｇｅｎｂｏｏｍ，Ｈ．Ｒ．，ｅｔ  ａｌ  Ｊ  Ｉｍｍｕｎｏｌ  １４４，３２１１−３２１７（１９９０）；ＵＳ６，５９０，０８８（Ｈｕｍａｎ  Ｇｅｎｏｍｅ  Ｓｃｉｅｎｃｅｓ）−例えば配列番号１及び２並びにＡＴＣＣアクセッション番号９７５２１；米国特許第７，５５７，１８９号（Ｉｍｍｕｎｏｇｅｎ）−例えば（ｆＦｏｒ  ｅｘａｍｐｌｅ）抗体又は配列番号：１−３のアミノ酸配列を有する３個のＣＤＲを含む重鎖可変領域及び配列番号：４−６のアミノ酸配列を有する３個のＣＤＲを含む軽鎖可変領域を含むその断片。
【０１５１】
いくつかの実施形態において、抗ＣＤ３３抗体は、（ａ）配列番号２０のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ１；（ｂ）配列番号２１のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ２；（ｃ）配列番号２２のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ３；（ｄ）配列番号１７のアミノ酸配列を含む  ＨＶＲ−Ｌ１；（ｅ）配列番号１８のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｌ２；及び（ｆ）配列番号１９のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｌ３を含む。
いくつかの実施形態において、抗ＣＤ３３抗体は、配列番号２４及び配列番号２３それぞれに、ＶＨ配列及びＶＬ配列を、これらの配列の翻訳後修飾を含めて含む。
いくつかの実施形態において、抗ＣＤ３３抗体は、（ａ）配列番号２８のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ１；（ｂ）配列番号２９のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ２；（ｃ）配列番号３０のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ３；（ｄ）配列番号２５のアミノ酸配列を含む  ＨＶＲ−Ｌ１；（ｅ）配列番号２６のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｌ２；及び（ｆ）配列番号２７のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｌ３を含む。
いくつかの実施形態において、抗ＣＤ３３抗体は、配列番号３２及び配列番号３１それぞれに、ＶＨ配列及びＶＬ配列を、これらの配列の翻訳後修飾を含めて含む。いくつかの実施形態において、抗ＣＤ３３抗体は、配列番号３４及び配列番号３３それぞれに、ＶＨ配列及びＶＬ配列を、これらの配列の翻訳後修飾を含めて含む。いくつかの実施形態において、抗ＣＤ３３抗体は、配列番号３６及び配列番号３５それぞれに、ＶＨ配列及びＶＬ配列を、これらの配列の翻訳後修飾を含めて含む。一実施形態において、いくつかの実施形態において、抗ＣＤ３３抗体は、配列番号３８及び配列番号３７それぞれに、ＶＨ配列及びＶＬ配列を、これらの配列の翻訳後修飾を含めて含む。
【０１５２】
【表５−１】
2019069947.tif 000033
【表５−２】
2019069947.tif 000034
【０１５３】
（３８）ＬＧＲ５／ＧＰＲ４９；ヌクレオチド：Ｇｅｎｂａｎｋアクセッション番号ＮＭ＿００３６６７；Ｇｅｎｂａｎｋバージョン番号ＮＭ＿００３６６７．２  ＧＩ：２４４７５８８６；Ｇｅｎｂａｎｋ  ｒｅｃｏｒｄ  ｕｐｄａｔｅ  ｄａｔｅ：Ｊｕｌ  ２２，２０１２  ０３：３８  ＰＭ；ポリペプチド：Ｇｅｎｂａｎｋアクセッション番号ＮＰ＿００３６５８；Ｇｅｎｂａｎｋバージョン番号ＮＰ＿００３６５８．１  ＧＩ：４５０４３７９；Ｇｅｎｂａｎｋ  ｒｅｃｏｒｄ  ｕｐｄａｔｅ  ｄａｔｅ：Ｊｕｌ  ２２，２０１２  ０３：３８  ＰＭ。
【０１５４】
いくつかの実施形態において、抗ＬＧＲ５抗体は、（ａ）配列番号４６のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ１；（ｂ）配列番号４７のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ２；（ｃ）配列番号４８のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ３；（ｄ）配列番号４３のアミノ酸配列を含む  ＨＶＲ−Ｌ１；（ｅ）配列番号４４のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｌ２；及び（ｆ）配列番号４５のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｌ３を含む。
一実施形態において、抗体は、配列番号４０及び配列番号３９それぞれにＶＨ配列及びＶＬ配列を、これらの配列の翻訳後修飾を含めて含む。
いくつかの実施形態において、抗ＬＧＲ５は、（ａ）配列番号５２のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ１；（ｂ）配列番号５３のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ２；（ｃ）配列番号５４のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ３；（ｄ）配列番号４９のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｌ１；（ｅ）配列番号５０のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｌ２；及び（ｆ）配列番号５１のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｌ３を含む。
いくつかの実施形態において、抗ＬｇＲ５抗体は、上で提供した実施形態のいずれかと同様のＶＨ及び上で提供した実施形態のいずれかと同様のＶＬを含む。一実施形態において、抗体は、配列番号４２及び配列番号４１それぞれにＶＨ配列及びＶＬ配列を、これらの配列の翻訳後修飾を含めて含む。
【０１５５】
【表６】
2019069947.tif 000035
【０１５６】
親抗体は、アルブミン結合ペプチド（ＡＢＰ）配列を含む融合タンパク質であってもよい（Ｄｅｎｎｉｓ  ｅｔ  ａｌ．（２００２）「Ａｌｂｕｍｉｎ  Ｂｉｎｄｉｎｇ  Ａｓ  Ａ  Ｇｅｎｅｒａｌ  Ｓｔｒａｔｅｇｙ  Ｆｏｒ  Ｉｍｐｒｏｖｉｎｇ  Ｔｈｅ  Ｐｈａｒｍａｃｏｋｉｎｅｔｉｃｓ  Ｏｆ  Ｐｒｏｔｅｉｎｓ」  Ｊ  Ｂｉｏｌ  Ｃｈｅｍ．２７７：３５０３５−３５０４３；国際公開第０１／４５７４６号）。本発明の抗体には、（ｉ）Ｄｅｎｎｉｓ  ｅｔ  ａｌ（２００２）Ｊ  Ｂｉｏｌ  Ｃｈｅｍ．２７７：３５０３５−３５０４３、３５０３８頁、表ＩＩＩ及びＩＶ；（ｉｉ）米国特許出願第２００４／０００１８２７号、［００７６］；並びに（ｉｉｉ）国際公開第０１／４５７４６号、１２−１３頁によって教示されているＡＢＰ配列を有する融合タンパク質が含まれ、これらの全ては参照により本明細書に組み入れられている。
【０１５７】
一実施形態において、抗体は、腫瘍関連抗原αvβ6を特異的に標的とするように産生された。
細胞結合因子は、コンジュゲート又はコンジュゲートの一部のどちらかとして包含される前に、例えば該因子の検出又は精製を補助するために標識されてよい。標識はビオチン標識であってよい。別の実施形態において、細胞結合因子は、放射性同位体で標識してよい。
【０１５８】
置換基
「任意に（所望により）置換された」という句は、本明細書で使用する場合、非置換であってよい又は置換されていてよい親基に関する。
別途規定しない限り、「置換された」という用語は、本明細書で使用する場合、１個以上の置換基を有する親基に関する。「置換基」という用語は、本明細書において従来の意味で使用され、共有結合されているか又は適切な場合には親基に縮合されている化学的部分を示す。多種多様な置換基が周知であり、それらの形成及び様々な親基への導入のための方法も周知である。
【０１５９】
好ましい実施形態において、本明細書に記載する置換基（任意の置換基を含む）は、細胞結合因子に対して反応性でない基に限定される。本事例における細胞結合因子への連結は、２個のＰＢＤ部分の間の架橋からリンカー基を通じて細胞結合因子まで形成される。ＰＢＤ構造の他の部分に位置する反応性官能基は、細胞結合因子への追加の結合（これは架橋と呼んでもよい）を形成することができる場合がある。これらの追加の結合は、コンジュゲートの輸送及び生物活性を変更することがある。いくつかの実施形態において、追加の置換基は、反応性官能性がないものに限定される。
【０１６０】
一実施形態において、置換基は、Ｒ、ＯＲ、ＳＲ、ＮＲＲ’、ＮＯ2、ハロ、ＣＯ2Ｒ、ＣＯＲ、ＣＯＮＨ2、ＣＯＮＨＲ及びＣＯＮＲＲ’からなる群から選択される。
一実施形態において、置換基は、Ｒ、ＯＲ、ＳＲ、ＮＲＲ’、ＮＯ2、ＣＯ2Ｒ、ＣＯＲ、ＣＯＮＨ2、ＣＯＮＨＲ及びＣＯＮＲＲ’からなる群から選択される。
一実施形態において、置換基は、Ｒ、ＯＲ、ＳＲ、ＮＲＲ’、ＮＯ2及びハロからなる群から選択される。
一実施形態において、置換基は、Ｒ、ＯＲ、ＳＲ、ＮＲＲ’及びＮＯ2からなる群から選択される。
上述した実施形態のいずれか１つを、本明細書に記載する置換基のいずれか１つに適用してよい。又は、置換基は、下に挙げる基１つ以上から選択してよい。
置換基の例を以下でより詳細に説明する。
【０１６１】
Ｃ1-12アルキル：「Ｃ1-12アルキル」という用語は、本明細書で使用される場合、脂肪族又は脂環式であってよく、飽和又は不飽和であってよい（例えば部分的不飽和、完全不飽和）１個から１２個の炭素原子を有する炭化水素化合物の炭素原子から水素原子を除去することによって得られる一価の部分に関する。このため、「アルキル」という用語は、下で論じるサブクラスのアルケニル、アルキニル、シクロアルキルなどを含む。
【０１６２】
飽和アルキル基の例としては、メチル（Ｃ1）、エチル（Ｃ2）、プロピル（Ｃ3）、ブチル（Ｃ4）、ペンチル（Ｃ5）、ヘキシル（Ｃ6）及びへプチル（Ｃ7）が挙げられるが、これに限定されない。
飽和直鎖アルキル基の例としては、メチル（Ｃ1）、エチル（Ｃ2）、Ｎ−プロピル（Ｃ3）、Ｎ−ブチル（Ｃ4）、Ｎ−ペンチル（アミル）（Ｃ5）、Ｎ−ヘキシル（Ｃ6）及びｎ−へプチル（Ｃ7）が挙げられるが、これに限定されない。
飽和分枝アルキル基の例としては、イソプロピル（Ｃ3）、イソブチル（Ｃ4）、ｓｅｃ−ブチル（Ｃ4）、ｔｅｒｔ−ブチル（Ｃ4）、イソペンチル（Ｃ5）及びネオペンチル（Ｃ5）が挙げられるが、これに限定されない。
【０１６３】
アルキル基は、Ｏ、Ｎ（Ｈ）及びＳから選択される１個以上のヘテロ原子によって任意に割り込まれてよい。このような基は、「ヘテロアルキル」と呼んでよい。
Ｃ2-12ヘテロアルキル：「Ｃ2-12ヘテロアルキル」という用語は、本明細書で使用する場合、２個から１２個の炭素原子並びにＯ、Ｎ（Ｈ）及びＳ、好ましくはＯ及びＳから選択される１個以上のヘテロ原子を有する炭化水素化合物の炭素原子から水素原子を除去することによって得られる一価部分に関する。
ヘテロアルキル基の例としては、−（ＯＣＨ2ＣＨ2）−型の１個以上のエチレングリコール単位を含むものが挙げられるが、これに限定されない。ヘテロアルキル基の末端は、ヘテロ原子の主な形態、例えば−ＯＨ、−ＳＨ又は−ＮＨ2であってよい。好ましい実施形態において、末端は−ＣＨ3である。
【０１６４】
Ｃ2-12アルケニル：「Ｃ2-12アルケニル」という用語は、本明細書で使用する場合、１個以上の複数の炭素−炭素二重結合を有するアルキル基に関する。
不飽和アルケニル基の例としては、エテニル（ビニル、−ＣＨ＝ＣＨ2）、１−プロペニル（−ＣＨ＝ＣＨ−ＣＨ3）、２−プロペニル（アリル、−ＣＨ−ＣＨ＝ＣＨ2）、イソプロペニル（１−メチルビニル、−Ｃ（ＣＨ3）＝ＣＨ2）、ブテニル（Ｃ4）、ペンテニル（Ｃ5）及びヘキセニル（Ｃ6）が挙げられるが、これに限定されない。
Ｃ2-12アルキニル：「Ｃ2-12アルキニル」という用語は、本明細書で使用する場合、１個以上の炭素−炭素三重結合を有するアルキル基に関する。
不飽和アルキニル基の例としては、エチニル（−Ｃ≡ＣＨ）及び２−プロピニル（プロパルギル、−ＣＨ2−Ｃ≡ＣＨ）が挙げられるが、これに限定されない。
【０１６５】
Ｃ3-12シクロアルキル：「Ｃ3-12シクロアルキル」という用語は、本明細書で使用する場合、シクリル基でもあるアルキル基、すなわち環式炭化水素（炭素環）化合物の脂環原子から水素原子を除去することによって得られる１価部分に関し、この部分は、３個から７個の環原子を含めて、３個から７個の炭素原子を有する。
【０１６６】
シクロアルキル基の例としては、
飽和単環式炭化水素化合物：
シクロプロパン（Ｃ3）、シクロブタン（Ｃ4）、シクロペンタン（Ｃ5）、シクロヘキサン（Ｃ6）、シクロヘプタン（Ｃ7）、メチルシクロプロパン（Ｃ4）、ジメチルシクロプロパン（Ｃ5）、メチルシクロブタン（Ｃ5）、ジメチルシクロブタン（Ｃ6）、メチルシクロペンタン（Ｃ6）、ジメチルシクロペンタン（Ｃ7）及びメチルシクロヘキサン（Ｃ7）；
不飽和単環式炭化水素化合物：
シクロプロペン（Ｃ3）、シクロブテン（Ｃ4）、シクロペンテン（Ｃ5）、シクロヘキセン（Ｃ6）、メチルシクロプロペン（Ｃ4）、ジメチルシクロプロペン（Ｃ5）、メチルシクロブテン（Ｃ5）、ジメチルシクロブテン（Ｃ6）、メチルシクロペンテン（Ｃ6）、ジメチルシクロペンテン（Ｃ7）及びメチルシクロヘキセン（Ｃ7）；
並びに飽和多環式炭化水素化合物：
ノルカラン（Ｃ7）、ノルピナン（Ｃ7）、ノルボルナン（Ｃ7）
から誘導されるものが挙げられるが、これに限定されない。
【０１６７】
Ｃ3-20ヘテロシクリル：「Ｃ3-20ヘテロシクリル」という用語は、本明細書で使用する場合、複素環式化合物の環原子から水素原子を除去することによって得られる１価部分に関し、この部分は３から２０個の環原子を有し、そのうち１から１０個が環ヘテロ原子である。好ましくは、各環は３から７個の環原子を有し、そのうち１から４個が環ヘテロ原子である。
この文脈において、接頭辞（例えばＣ3-20、Ｃ3-7、Ｃ5-6など）は、炭素原子又はヘテロ原子に関わらず、環原子の数又は環原子の数の範囲を示す。例えば、「Ｃ5-6ヘテロシクリル」という用語は、本発明で使用する場合、５又は６個の環原子を有するヘテロシクリル基に関する。
【０１６８】
単環式ヘテロシクリル基の例としては：
Ｎ1：アジリジン（Ｃ3）、アゼチジン（Ｃ4）、ピロリジン（テトラヒドロピロール）（Ｃ5）、ピロリン（例えば３−ピロリン，２，５−ジヒドロピロール）（Ｃ5）、２Ｈ−ピロール又は３Ｈ−ピロール（イソピロール、イソアゾール）（Ｃ5）、ピペリジン（Ｃ6）、ジヒドロピリジン（Ｃ6）、テトラヒドロピリジン（Ｃ6）、アゼピン（Ｃ7）；
Ｏ1：オキシラン（Ｃ3）、オキセタン（Ｃ4）、オキソラン（テトラヒドロフラン）（Ｃ5）、オキソール（ジヒドロフラン）（Ｃ5）、オキサン（テトラヒドロピラン）（Ｃ6）、ジヒドロピラン（Ｃ6）、ピラン（Ｃ6）、オキセピン（Ｃ7）；
Ｓ1：チイラン（Ｃ3）、チエタン（Ｃ4）、チオラン（テトラヒドロチオフェン）（Ｃ5）、チアン（テトラヒドロチオピラン）（Ｃ6）、チエパン（Ｃ7）；
Ｏ2：ジオキソラン（Ｃ5）、ジオキサン（Ｃ6）及びジオキセパン（Ｃ7）；
Ｏ3：トリオキサン（Ｃ6）；
Ｎ2：イミダゾリジン（Ｃ5）、ピラゾリジン（ジアゾリジン）（Ｃ5）、イミダゾリン（Ｃ5）、ピラゾリン（ジヒドロピラゾール）（Ｃ5）、ピペラジン（Ｃ6）；
Ｎ1Ｏ1：テトラヒドロオキサゾール（Ｃ5）、ジヒドロオキサゾール（Ｃ5）、テトラヒドロイソオキサゾール（Ｃ5）、ジヒドロイソオキサゾール（Ｃ5）、モルホリン（Ｃ6）、テトラヒドロオキサジン（Ｃ6）、ジヒドロオキサジン（Ｃ6）、オキサジン（Ｃ6）；
Ｎ1Ｓ1：チアゾリン（Ｃ5）、チアゾリジン（Ｃ5）、チオモルホリン（Ｃ6）；
Ｎ2Ｏ1：オキサジアジン（Ｃ6）；
Ｏ1Ｓ1：オキサチオール（Ｃ5）及びオキサチアン（チオキサン）（Ｃ6）；並びに
Ｎ1Ｏ1Ｓ1：オキサチアジン（Ｃ6）
が挙げられるが、これに限定されない。
【０１６９】
置換単環式ヘテロシクリル基の例としては、環状形態の糖類、例えばフラノース（Ｃ5）、例えばアラビノフラノース、リキソフラノース、リボフラノース及びキシロフラノース並びにピラノース（Ｃ6）、例えばアロピラノース、アルトロピラノース、グルコピラノース、マンノピラノース、グロピラノース、イドピラノース、ガラクトピラノース及びタロピラノースから誘導されるものが挙げられる。
【０１７０】
Ｃ5-20アリール：「Ｃ5-20アリール」という用語は、本発明で使用する場合、芳香族化合物の芳香環原子から水素原子を除去することによって得られる１価部分に関し、この部分は３個から２０個の環原子を有する。好ましくは、各環は５個から７個の環原子を有する。
この文脈において、接頭辞（例えばＣ3-20、Ｃ5-7、Ｃ5-6など）は、炭素原子又はヘテロ原子に関わらず、環原子の数又は環原子の数の範囲を示す。例えば、「Ｃ5-6アリール」という用語は、本発明で使用する場合、５又は６個の環原子を有するアリール基に関する。
【０１７１】
環原子は、「カルボアリール基」におけるように、全て炭素原子であってよい。
カルボアリール基の例としては、ベンゼン（すなわちフェニル）（Ｃ6）、ナフタレン（Ｃ10）、アズレン（Ｃ10）、アントラセン（Ｃ14）、フェナントレン（Ｃ14）、ナフタセン（Ｃ18）及びピレン（Ｃ16）から誘導される基が挙げられるが、これに限定されない。
縮合環を含み、その少なくとも１個が芳香環であるアリール基の例としては、インダン（例えば２，３−ジヒドロ−１Ｈ−インデン）（Ｃ9）、インデン（Ｃ9）、イソインデン（Ｃ9）、テトラリン（１，２，３，４−テトラヒドロナフタレン（Ｃ10）、アセナフテン（Ｃ12）、フルオレン（Ｃ13）、フェナレン（Ｃ13）、アセフェナントレン（Ｃ15）及びアセアントレン（Ｃ16）から誘導される基が挙げられるが、これに限定されない。
【０１７２】
又は、環原子には、「ヘテロアリール基」におけるように、１個以上のヘテロ原子が含まれてよい。単環式ヘテロアリール基の例としては：
Ｎ1：ピロール（アゾール）（Ｃ5）、ピリジン（アジン（Ｃ6）；
Ｏ1：フラン（オキソール）（Ｃ5）；
Ｓ1：チオフェン（チオール）（Ｃ5）；
Ｎ1Ｏ1：オキサゾール（Ｃ5）、イソオキサゾール（Ｃ5）、イソキサジン（Ｃ6）；
Ｎ2Ｏ1：オキサジアゾール（フラザン）（Ｃ5）；
Ｎ3Ｏ1：オキサトリアゾール（Ｃ5）；
Ｎ1Ｓ1：チアゾール（Ｃ5）、イソチアゾール（Ｃ5）；
Ｎ2：イミダゾール（１，３−ジアゾール）（Ｃ5）、ピラゾール（１，２−ジアゾール）（Ｃ5）、ピリダジン（１，２−ジアジン）（Ｃ6）、ピリミジン（１，３−ジアジン）（Ｃ6）（例えばシトシン、チミン、ウラシル）、ピラジン（１，４−ジアジン）（Ｃ6）；
Ｎ3：トリアゾール（Ｃ5）、トリアジン（Ｃ6）；及び
Ｎ4：テトラゾール（Ｃ5）
から誘導される基が挙げられるが、これに限定されない。
【０１７３】
縮合環を含むヘテロアリールの例としては：
ベンゾフラン（Ｏ1）、イソベンゾフラン（Ｏ1）、インドール（Ｎ1）、イソインドール（Ｎ1）、インドリジン（Ｎ1）、インドリン（Ｎ1）、イソインドリン（Ｎ1）、プリン（Ｎ4）（例えばアデニン、グアニン）、ベンゾイミダゾール（Ｎ2）、インダゾール（Ｎ2）、ベンゾオキサゾール（Ｎ1Ｏ1）、ベンゾイソオキサゾール（Ｎ1Ｏ1）、ベンゾジオキソール（Ｏ2）、ベンゾフラン（Ｎ2Ｏ1）、ベンゾトリアゾール（Ｎ3）、ベンゾチオフラン（Ｓ1）、ベンゾチアゾール（Ｎ1Ｓ1）、ベンゾチアジアゾール（Ｎ2Ｓ）から誘導されるＣ9（２個の縮合環を有する）；
クロメン（Ｏ1）、イソクロメン（Ｏ1）、クロマン（Ｏ1）、イソクロマン（Ｏ1）、ベンゾジオキサン（Ｏ2）、キノリン（Ｎ1）、イソキノリン（Ｎ1）、キノリジン（Ｎ1）、ベンゾオキサジン（Ｎ1Ｏ1）、ベンゾジアジン（Ｎ2）、ピリドピリジン（Ｎ2）、キノキサリン（Ｎ2）、キナゾリン（Ｎ2）、シンノリン（Ｎ2）、フタラジン（Ｎ2）、ナフチリジン（Ｎ2）、プテリジン（Ｎ4）から誘導されるＣ10（２個の縮合環を有する）；
ベンゾジアゼピン（Ｎ2）から誘導されるＣ11(２個の縮合環を有する）；
カルバゾール（Ｎ1）、ジベンゾフラン（Ｏ1）、ジベンゾチオフェン（Ｓ1）、カルボリン（Ｎ2）、ペリミジン（Ｎ2）、ピリドインドール（Ｎ2）から誘導されるＣ13（３個の縮合環を有する）；及び
アクリジン（Ｎ1）、キサンテン（Ｏ1）、チオキサンテン（Ｓ1）、オキサントレン（Ｏ2）、フェノキサチイン（Ｏ1Ｓ1）、フェナジン（Ｎ2）、フェノキサジン（Ｎ1Ｏ1）、フェノチアジン（Ｎ1Ｓ1）、チアントレン（Ｓ2）、フェナントリジン（Ｎ1）、フェナントロリン（Ｎ2）、フェナジン（Ｎ2）
から誘導されるＣ14（３個の縮合環を有する）が挙げられるが、これに限定されない。
【０１７４】
上記の基は、単独であるか又は別の置換基の一部であるかに関わらず、それら自体及び下に挙げた追加の置換基から選択される１個以上の基でそれら自体が任意に置換されていてよい。
【０１７５】
ハロ：−Ｆ、−Ｃｌ、−Ｂｒ及び−Ｉ。
ヒドロキシ：−ＯＨ。
エーテル：−ＯＲ、式中、Ｒはエーテル置換基、例えばＣ1-7アルキル基（下で論じる、Ｃ1-7アルコキシ基とも呼ばれる）、Ｃ3-20ヘテロシクリル基（Ｃ3-20ヘテロシクリルオキシ基とも呼ばれる）又はＣ5-20アリール基（Ｃ5-20アリールオキシ基とも呼ばれる）、好ましくはＣ1-7アルキル基である。
【０１７６】
アルコキシ：−ＯＲ、式中、Ｒはアルキル基、例えばＣ1-7アルキル基である。Ｃ1-7アルコキシ基の例としては、−ＯＭｅ（メトキシ）、−ＯＥｔ（エトキシ）、−Ｏ（ｎＰｒ）（ｎ−プロポキシ）、−Ｏ（ｉＰｒ）（イソプロポキシ）、−Ｏ（ｎＢｕ）（ｎ−ブトキシ）、−Ｏ（ｓＢｕ）（ｓｅｃ−ブトキシ）、−Ｏ（ｉＢｕ）（イソブトキシ）及び−Ｏ（ｔＢｕ）（ｔｅｒｔ−ブトキシ）が挙げられるが、これに限定されない。
【０１７７】
アセタール：−ＣＨ（ＯＲ1）（ＯＲ2）、式中、Ｒ1及びＲ2は、独立してアセタール置換基、例えば、Ｃ1-7アルキル基、Ｃ3-20ヘテロシクリル基若しくはＣ5-20アリール基、好ましくはＣ1-7アルキル基であるか、又は「環式」アセタール基の場合、Ｒ1及びＲ2は、それらが結合されている２個の酸素原子及びそれらが結合されている炭素原子とひとまとめにされて、４から８個の環原子を有する複素環を形成する。アセタール基の例としては、−ＣＨ（ＯＭｅ）2、−ＣＨ（ＯＥｔ）2及び−ＣＨ（ＯＭｅ）（ＯＥｔ）が挙げられるが、これに限定されない。
【０１７８】
ヘミアセタール：−ＣＨ（ＯＨ）（ＯＲ1）、式中、Ｒ1はヘミアセタール置換基、例えばＣ1-7アルキル基、Ｃ3-20ヘテロシクリル基又はＣ5-20アリール基、好ましくはＣ1-7アルキル基である。ヘミアセタール基の例としては、−ＣＨ（ＯＨ）（ＯＭｅ）及び−ＣＨ（ＯＨ）（ＯＥｔ）が挙げられるが、これに限定されない。
【０１７９】
ケタール：−ＣＲ（ＯＲ1）（ＯＲ2）、式中、Ｒ1及びＲ2は、アセタールで定義した通りであり、Ｒは、水素以外のケタール置換基、例えばＣ1-7アルキル基、Ｃ3-20ヘテロシクリル基又はＣ5-20アリール基、好ましくはＣ1-7アルキル基である。ケタール基の例としては、−Ｃ（Ｍｅ）（ＯＭｅ）2、−Ｃ（Ｍｅ）（ＯＥｔ）2、−Ｃ（Ｍｅ）（ＯＭｅ）（ＯＥｔ）、−Ｃ（Ｅｔ）（ＯＭｅ）2、−Ｃ（Ｅｔ）（ＯＥｔ）2及び−Ｃ（Ｅｔ）（ＯＭｅ）（ＯＥｔ）が挙げられるが、これに限定されない。
【０１８０】
ヘミケタール：−ＣＲ（ＯＨ）（ＯＲ1）、式中、Ｒ1はヘミアセタールで定義した通りであり、Ｒは、水素以外のヘミケタール置換基、例えばＣ1-7アルキル基、Ｃ3-20ヘテロシクリル基又はＣ5-20アリール基、好ましくはＣ1-7アルキル基である。ヘミアセタール基の例としては、−Ｃ（Ｍｅ）（ＯＨ）（ＯＭｅ）、−Ｃ（Ｅｔ）（ＯＨ）（ＯＭｅ）、−Ｃ（Ｍｅ）（ＯＨ）（ＯＥｔ）及び−Ｃ（Ｅｔ）（ＯＨ）（ＯＥｔ）が挙げられるが、これに限定されない。
【０１８１】
オキソ（ケト、−オン）：＝Ｏ。
チオン（チオケトン）：＝Ｓ。
イミノ（イミン）：＝ＮＲ、式中、Ｒはイミノ置換基、例えば水素、Ｃ1-7アルキル基、Ｃ3-20ヘテロシクリル基又はＣ5-20アリール基、好ましくは水素又はＣ1-7アルキル基である。エステル基の例としては、＝ＮＨ、＝ＮＭｅ、＝ＮＥｔ及び＝ＮＰｈが挙げられるが、これに限定されない。
ホルミル（カルバルデヒド、カルボキシアルデヒド）：−Ｃ（＝Ｏ）Ｈ。
【０１８２】
アシル（ケト）：−Ｃ（＝Ｏ）Ｒ、式中、Ｒはアシル置換基、例えばＣ1-7アルキル基（Ｃ1-7アルキルアシル又はＣ1-7アルカノイルとも呼ばれる）、Ｃ3-20ヘテロシクリル基（Ｃ3-20ヘテロシクリルアシルとも呼ばれる）又はＣ5-20アリール基（Ｃ5-20アリールアシルとも呼ばれる）、好ましくはＣ1-7アルキル基である。アシル基の例としては、−Ｃ（＝Ｏ）ＣＨ3（アセチル）、−Ｃ（＝Ｏ）ＣＨ2ＣＨ3（プロピオニル）、−Ｃ（＝Ｏ）Ｃ（ＣＨ3）3（ｔ−ブチリル）及び−Ｃ（＝Ｏ）Ｐｈ（ベンゾイル、フェノン）が挙げられるが、これに限定されない。
【０１８３】
カルボキシ（カルボン酸）：−Ｃ（＝Ｏ）ＯＨ。
チオカルボキシ（チオカルボン酸）：−Ｃ（＝Ｓ）ＳＨ。
チオロカルボキシ（チオロカルボン酸）：−Ｃ（＝Ｏ）ＳＨ。
チオノカルボキシ（チオノカルボン酸）：−Ｃ（＝Ｓ）ＯＨ。
イミド酸：−Ｃ（＝ＮＨ）ＯＨ。
ヒドロキサム酸：−Ｃ（＝ＮＯＨ）ＯＨ。
【０１８４】
エステル（カルボキシレート、カルボン酸エステル、オキシカルボニル）：−Ｃ（＝Ｏ）ＯＲ、式中、Ｒはエステル置換基、例えばＣ1-7アルキル基、Ｃ3-20ヘテロシクリル基又はＣ5-20アリール基、好ましくはＣ1-7アルキル基である。エステル基の例としては、−Ｃ（＝Ｏ）ＯＣＨ3、−Ｃ（＝Ｏ）ＯＣＨ2ＣＨ3、−Ｃ（＝Ｏ）ＯＣ（ＣＨ3）3及び−Ｃ（＝Ｏ）ＯＰｈが挙げられるが、これに限定されない。
【０１８５】
アシルオキシ（逆エステル）：−ＯＣ（＝Ｏ）Ｒ、式中、Ｒはアシルオキシ置換基、例えばＣ1-7アルキル基、Ｃ3-20ヘテロシクリル基又はＣ5-20アリール基、好ましくはＣ1-7アルキル基である。アシルオキシ基の例としては、−ＯＣ（＝Ｏ）ＣＨ3（アセトキシ）、−ＯＣ（＝Ｏ）ＣＨ2ＣＨ3、−ＯＣ（＝Ｏ）Ｃ（ＣＨ3）3、−ＯＣ（＝Ｏ）Ｐｈ及び−ＯＣ（＝Ｏ）ＣＨ2Ｐｈが挙げられるが、これに限定されない。
【０１８６】
オキシカルボイルオキシ：−ＯＣ（＝Ｏ）ＯＲ、式中、Ｒはエステル置換基、例えばＣ1-7アルキル基、Ｃ3-20ヘテロシクリル基又はＣ5-20アリール基、好ましくはＣ1-7アルキル基である。エステル基の例としては、−ＯＣ（＝Ｏ）ＯＣＨ3、−ＯＣ（＝Ｏ）ＯＣＨ2ＣＨ3、−ＯＣ（＝Ｏ）ＯＣ（ＣＨ3）3及び−ＯＣ（＝Ｏ）ＯＰｈが挙げられるが、これに限定されない。
【０１８７】
アミノ：−ＮＲ1Ｒ2、式中、Ｒ1及びＲ2は、独立してアミノ置換基、例えば水素、Ｃ1-7アルキル基（Ｃ1-7アルキルアミノ又はジＣ1-7アルキルアミノとも呼ばれる）、Ｃ3-20ヘテロシクリル基又はＣ5-20アリール基、好ましくはＨ又はＣ1-7アルキル基であるか、又は「環式」アミノ基の場合、Ｒ1及びＲ2は、それらが結合されている窒素原子とひとまとめにされて、４から８個の環原子を有する複素環を形成する。アミノ基は、１級（−ＮＨ2）、２級（−ＮＨＲ1）又は３級（−ＮＨＲ1Ｒ2）であってよく、カチオン形態において、４級（−+ＮＲ1Ｒ2Ｒ3）であってよい。アミノ基の例としては、−ＮＨ2、−ＮＨＣＨ3、−ＮＨＣ（ＣＨ3）2、−Ｎ（ＣＨ3）2、−Ｎ（ＣＨ2ＣＨ3）2及び−ＮＨＰｈが挙げられるが、これに限定されない。環式アミノ基の例としては、アジリジノ、アゼチジノ、ピロリジノ、ピペリジノ、ピペラジノ、モルホリノ及びチオモルホリノが挙げられるが、これに限定されない。
【０１８８】
アミド（カルバモイル、カルバミル、アミノカルボニル、カルボキサミド）：−Ｃ（＝Ｏ）ＮＲ1Ｒ2、式中、Ｒ1及びＲ2は独立して、アミノ基で定義された通りのアミノ置換基である。アミド基の例としては、−Ｃ（＝Ｏ）ＮＨ2、−Ｃ（＝Ｏ）ＮＨＣＨ3、−Ｃ（＝Ｏ）Ｎ（ＣＨ3）2、−Ｃ（＝Ｏ）ＮＨＣＨ2ＣＨ3及び−Ｃ（＝Ｏ）Ｎ（ＣＨ2ＣＨ3）2、並びにＲ1及びＲ2が、それらが結合されている窒素原子とひとまとめにされて、例えばピペリジノカルボニル、モルホリノカルボニル、チオモルホリノカルボニル及びピペラジノカルボニルにおけるような複素環構造を形成するアミド基が挙げられるが、これに限定されない。
【０１８９】
チオアミド（チオカルバミル）：−Ｃ（＝Ｓ）ＮＲ1Ｒ2、式中、Ｒ1及びＲ2は独立して、アミノ基で定義されたようなアミノ置換基である。アミド基の例としては、−Ｃ（＝Ｓ）ＮＨ2、−Ｃ（＝Ｓ）ＮＨＣＨ3、−Ｃ（＝Ｓ）Ｎ（ＣＨ3）2及び−Ｃ（＝Ｓ）ＮＨＣＨ2ＣＨ3が挙げられるが、これに限定されない。
【０１９０】
アシルアミド（アシルアミノ）：−ＮＲ1Ｃ（＝Ｏ）Ｒ2、式中、Ｒ1はアミド置換基、例えば、水素、Ｃ1-7アルキル基、Ｃ3-20ヘテロシクリル基又はＣ5-20アリール基、好ましくは水素又はＣ1-7アルキル基であり、Ｒ2はアシル置換基、例えばＣ1-7アルキル基、Ｃ3-20ヘテロシクリル基又はＣ5-20アリール基、好ましくは水素又はＣ1-7アルキル基である。アシルアミド基の例としては、−ＮＨＣ（＝Ｏ）ＣＨ3、−ＮＨＣ（＝Ｏ）ＣＨ2ＣＨ3及び−ＮＨＣ（＝Ｏ）Ｐｈが挙げられるが、これに限定されない。Ｒ1及びＲ2は共に、例えばスクシンイミジル、マレイミジル及びフタルイミジルにおけるような環構造を形成することがある：
【０１９１】
【化２７】
2019069947.tif 000036
スクシンイミジル  マレイミジル  フタルイミジル
【０１９２】
アミノカルボニルオキシ：−ＯＣ（＝Ｏ）ＮＲ1Ｒ2、式中、Ｒ1及びＲ2は独立して、アミノ基で定義した通りのアミノ置換基である。アミノカルボニルオキシ基の例としては、−ＯＣ（＝Ｏ）ＮＨ2、−ＯＣ（＝Ｏ）ＮＨＭｅ、−ＯＣ（＝Ｏ）ＮＭｅ2及び−ＯＣ（＝Ｏ）ＮＥｔ2が挙げられるが、これに限定されない。
【０１９３】
ウレイド：−Ｎ（Ｒ1）ＣＯＮＲ2Ｒ3、式中、Ｒ2及びＲ3は独立して、アミノ基で定義した通りのアミノ置換基であり、Ｒ1はウレイド置換基、例えば、水素、Ｃ1-7アルキル基、Ｃ3-20ヘテロシクリル基又はＣ5-20アリール基、好ましくは水素又はＣ1-7アルキル基である。ウレイド基の例としては、−ＮＨＣＯＮＨ2、−ＮＨＣＯＮＨＭｅ、−ＮＨＣＯＮＨＥｔ、−ＮＨＣＯＮＭｅ2、−ＮＨＣＯＮＥｔ2、−ＮＭｅＣＯＮＨ2、−ＮＭｅＣＯＮＨＭｅ、−ＮＭｅＣＯＮＨＥｔ、−ＮＭｅＣＯＮＭｅ2及び−ＮＭｅＣＯＮＥｔ2が挙げられるが、これに限定されない。
【０１９４】
グアニジノ：−ＮＨ−Ｃ（＝ＮＨ）ＮＨ2。
テトラゾリル：４個の窒素原子及び１個の炭素原子を有する５員芳香環、
【化２８】
2019069947.tif 000037
【０１９５】
イミノ：＝ＮＲ、式中、Ｒはイミノ置換基、例えば、例えば例えば水素、Ｃ1-7アルキル基、Ｃ3-20ヘテロシクリル基又はＣ5-20アリール基、好ましくはＨ又はＣ1-7アルキル基である。イミノ基の例としては、＝ＮＨ、＝ＮＭｅ及び＝ＮＥｔが挙げられるが、これに限定されない。
アミジン（アミジノ）：−Ｃ（＝ＮＲ）ＮＲ2、式中、各Ｒは、アミジン置換基、例えば水素、Ｃ1-7アルキル基、Ｃ3-20ヘテロシクリル基又はＣ5-20アリール基、好ましくはＨ又はＣ1-7アルキル基である。アミジン基の例としては、−Ｃ（＝ＮＨ）ＮＨ2、−Ｃ（＝ＮＨ）ＮＭｅ2及び−Ｃ（＝ＮＭｅ）ＮＭｅ2が挙げられるが、これに限定されない。
【０１９６】
ニトロ：−ＮＯ2。
ニトロソ：−ＮＯ。
アジド：−Ｎ3。
シアノ（ニトリル、カルボニトリル）：−ＣＮ。
イソシアノ：−ＮＣ。
シアナト：−ＯＣＮ。
イソシアナト：−ＮＣＯ。
チオシアノ（チオシアナト）：−ＳＣＮ。
イソチオシアノ（イソチオシアナト）：−ＮＣＳ。
スルフヒドリル（チオール、メルカプト）：−ＳＨ。
【０１９７】
チオエーテル（スルフィド）：−ＳＲ、式中、Ｒはチオエーテル置換基、例えばＣ1-7アルキル基（Ｃ1-7アルキルチオ基とも呼ばれる）、Ｃ3-20ヘテロシクリル基又はＣ5-20アリール基、好ましくはＣ1-7アルキル基である。Ｃ1-7アルキルチオ基の例としては、−ＳＣＨ3及び−ＳＣＨ2ＣＨ3が挙げられるが、これに限定されない。
【０１９８】
ジスルフィド：−ＳＳ−Ｒ、式中、Ｒはジスルフィド置換基、例えばＣ1-7アルキル基、Ｃ3-20ヘテロシクリル基又はＣ5-20アリール基、好ましくはＣ1-7アルキル基（本明細書でＣ1-7アルキルジスルフィドとも呼ばれる）。Ｃ1-7アルキルジスルフィド基の例としては、−ＳＳＣＨ3及び−ＳＳＣＨ2ＣＨ3が挙げられるが、これに限定されない。
【０１９９】
スルフィン（スルフィニル、スルホキシド）：−Ｓ（＝Ｏ）Ｒ、式中、Ｒはスルフィン置換基、例えばＣ1-7アルキル基、Ｃ3-20ヘテロシクリル基又はＣ5-20アリール基、好ましくはＣ1-7アルキル基である。スルフィン基の例としては、−Ｓ（＝Ｏ）ＣＨ3及び−Ｓ（＝Ｏ）ＣＨ2ＣＨ3が挙げられるが、これに限定されない。
【０２００】
スルホン（スルホニル）：−Ｓ（＝Ｏ）2Ｒ、式中、Ｒはスルホン置換基、例えばＣ1-7アルキル基、Ｃ3-20ヘテロシクリル基又はＣ5-20アリール基、好ましくは、例えばフッ素化又は過フッ素化Ｃ1-7アルキル基を含む、Ｃ1-7アルキル基である。スルホン基の例としては、−Ｓ（＝Ｏ）2ＣＨ3（メタンスルホニル、メシル）、−Ｓ（＝Ｏ）2ＣＦ3（トリフリル）、−Ｓ（＝Ｏ）2ＣＨ2ＣＨ3（エシル）、−Ｓ（＝Ｏ）2Ｃ4Ｆ9（ノナフリル）、−Ｓ（＝Ｏ）2ＣＨ2ＣＦ3（トレシル）、−Ｓ（＝Ｏ）2ＣＨ2ＣＨ2ＮＨ2（タウリル）、−Ｓ（＝Ｏ）2Ｐｈ（フェニルスルホニル、ベシル）、４−メチルフェニルスルホニル（トシル）、４−クロロフェニルスルホニル（クロシル）、４−ブロモフェニルスルホニル（ブロシル）、４−ニトロフェニル（ノシル）、２−ナフタレンスルホネート（ナプシル）及び５−ジメチルアミノ−ナフタレン−１−イルスルホネート（ダンシル）が挙げられるが、これに限定されない。
【０２０１】
スルフィン酸（スルフィノ）：−Ｓ（＝Ｏ）ＯＨ、−ＳＯ2Ｈ。
スルホン酸（スルホ）：−Ｓ（＝Ｏ）2ＯＨ、−ＳＯ3Ｈ。
スルフィネート（スルフィン酸エステル）：−Ｓ（＝Ｏ）ＯＲ；式中、Ｒはスルフィネート置換基、例えばＣ1-7アルキル基、Ｃ3-20ヘテロシクリル基又はＣ5-20アリール基、好ましくはＣ1-7アルキル基である。スルフィネート基の例としては、−Ｓ（＝Ｏ）ＯＣＨ3（メトキシスルフィニル；メチルスルフィネート）及び−Ｓ（＝Ｏ）ＯＣＨ2ＣＨ3（エトキシスルフィニル；エチルスルフィネート）が挙げられるが、これに限定されない。
【０２０２】
スルホネート（スルホン酸エステル）：−Ｓ（＝Ｏ）2ＯＲ、式中、Ｒはスルホネート置換基、例えばＣ1-7アルキル基、Ｃ3-20ヘテロシクリル基又はＣ5-20アリール基、好ましくはＣ1-7アルキル基である。スルホネート基の例としては、−Ｓ（＝Ｏ）2ＯＣＨ3（メトキシスルホニル；メチルスルホネート）及び−Ｓ（＝Ｏ）2ＯＣＨ2ＣＨ3（エトキシスルホニル；エチルスルホネート）が挙げられるが、これに限定されない。
【０２０３】
スルフィニルオキシ：−ＯＳ（＝Ｏ）Ｒ、式中、Ｒはスルフィニルオキシ置換基、例えばＣ1-7アルキル基、Ｃ3-20ヘテロシクリル基又はＣ5-20アリール基、好ましくはＣ1-7アルキル基である。スルフィニルオキシ基の例としては、−ＯＳ（＝Ｏ）ＣＨ3及び−ＯＳ（＝Ｏ）ＣＨ2ＣＨ3が挙げられるが、これに限定されない。
【０２０４】
スルホニルオキシ：−ＯＳ（＝Ｏ）2Ｒ、式中、Ｒはスルホニルオキシ置換基、例えばＣ1-7アルキル基、Ｃ3-20ヘテロシクリル基又はＣ5-20アリール基、好ましくはＣ1-7アルキル基である。スルホニルオキシ基の例としては、−ＯＳ（＝Ｏ）2ＣＨ3（メシレート）及び−ＯＳ（＝Ｏ）2ＣＨ2ＣＨ3（エシレート）が挙げられるが、これに限定されない。
【０２０５】
サルフェート：−ＯＳ（＝Ｏ）2ＯＲ；式中、Ｒはサルフェート置換基、例えばＣ1-7アルキル基、Ｃ3-20ヘテロシクリル基又はＣ5-20アリール基、好ましくはＣ1-7アルキル基である。サルフェート基の例としては、−ＯＳ（＝Ｏ）2ＯＣＨ3及び−ＳＯ（＝Ｏ）2ＯＣＨ2ＣＨ3が挙げられるが、これに限定されない。
【０２０６】
スルファミル（スルファモイル；スルフィン酸アミド；スルフィンアミド）：−Ｓ（＝Ｏ）ＮＲ1Ｒ2、式中、Ｒ1及びＲ2は独立して、アミノ基で定義した通りのアミノ置換基である。スルファミル基の例としては、−Ｓ（＝Ｏ）ＮＨ2、−Ｓ（＝Ｏ）ＮＨ（ＣＨ3）、−Ｓ（＝Ｏ）Ｎ（ＣＨ3）2、−Ｓ（＝Ｏ）ＮＨ（ＣＨ2ＣＨ3）、−Ｓ（＝Ｏ）Ｎ（ＣＨ2ＣＨ3）2及び−Ｓ（＝Ｏ）ＮＨＰｈが挙げられるが、これに限定されない。
【０２０７】
スルホンアミド（スルフィナモイル；スルホン酸アミド；スルホンアミド）：−Ｓ（＝Ｏ）2ＮＲ1Ｒ2、式中、Ｒ1及びＲ2は独立して、アミノ基で定義した通りのアミノ置換基である。スルホンアミド基の例としては、−Ｓ（＝Ｏ）2ＮＨ2、−Ｓ（＝Ｏ）2ＮＨ（ＣＨ3）、−Ｓ（＝Ｏ）2Ｎ（ＣＨ3）2、−Ｓ（＝Ｏ）2ＮＨ（ＣＨ2ＣＨ3）、−Ｓ（＝Ｏ）2Ｎ（ＣＨ2ＣＨ3）2及び−Ｓ（＝Ｏ）2ＮＨＰｈが挙げられるが、これに限定されない。
【０２０８】
スルファミノ：−ＮＲ1Ｓ（＝Ｏ）2ＯＨ、式中、Ｒ1は、アミノ基で定義した通りのアミノ置換基である。スルファミノ基の例としては、−ＮＨＳ（＝Ｏ）2ＯＨ及び−Ｎ（ＣＨ3）Ｓ（＝Ｏ）2ＯＨが挙げられるが、これに限定されない。
【０２０９】
スルホンアミノ：−ＮＲ1Ｓ（＝Ｏ）2Ｒ、式中、Ｒ1は、アミノ基で定義した通りのアミノ置換基であり、Ｒはスルホンアミノ置換基、例えばＣ1-7アルキル基、Ｃ3-20ヘテロシクリル基又はＣ5-20アリール基、好ましくはＣ1-7アルキル基である。スルホンアミノ基の例としては、−ＮＨＳ（＝Ｏ）2ＣＨ3及び−Ｎ（ＣＨ3）Ｓ（＝Ｏ）2Ｃ6Ｈ5が挙げられるが、これに限定されない。
【０２１０】
スルフィンアミノ：−ＮＲ1Ｓ（＝Ｏ）Ｒ、式中、Ｒ1は、アミノ基で定義した通りのアミノ置換基であり、Ｒはスルフィンアミノ置換基、例えばＣ1-7アルキル基、Ｃ3-20ヘテロシクリル基又はＣ5-20アリール基、好ましくはＣ1-7アルキル基である。スルフィンアミノ基の例としては、−ＮＨＳ（＝Ｏ）ＣＨ3及び−Ｎ（ＣＨ3）Ｓ（＝Ｏ）Ｃ6Ｈ5が挙げられるが、これに限定されない。
【０２１１】
ホスフィノ（ホスフィン）：−ＰＲ2、式中、Ｒはホスフィノ置換基、例えば−Ｈ、Ｃ1-7アルキル基、Ｃ3-20ヘテロシクリル基又はＣ5-20アリール基、好ましくは−Ｈ、Ｃ1-7アルキル基又はＣ5-20アリール基である。ホスフィノ基の例としては、−ＰＨ2、−Ｐ（ＣＨ3）2、−Ｐ（ＣＨ2ＣＨ3）2、−Ｐ（ｔ−Ｂｕ）2及び−Ｐ（Ｐｈ）2が挙げられるが、これに限定されない。
【０２１２】
ホスホ：−Ｐ（＝Ｏ）2。
ホスフィニル（ホスフィンオキシド）：−Ｐ（＝Ｏ）Ｒ2、式中、Ｒはホスフィニル置換基、例えばＣ1-7アルキル基、Ｃ3-20ヘテロシクリル基又はＣ5-20アリール基、好ましくはＣ1-7アルキル基又はＣ5-20アリール基である。ホスフィニル基の例としては、−Ｐ（＝Ｏ）（ＣＨ3）2、−Ｐ（＝Ｏ）（ＣＨ2ＣＨ3）2、−Ｐ（＝Ｏ）（ｔ−Ｂｕ）2及び−Ｐ（＝Ｏ）（Ｐｈ）2が挙げられるが、これに限定されない。
【０２１３】
ホスホン酸（ホスホノ）：−Ｐ（＝Ｏ）（ＯＨ）2。
ホスホネート（ホスホノエステル）：−Ｐ（＝Ｏ）（ＯＲ）2、式中、Ｒはホスホネート置換基、例えば、−Ｈ、Ｃ1-7アルキル基、Ｃ3-20ヘテロシクリル基又はＣ5-20アリール基、好ましくは−Ｈ、Ｃ1-7アルキル基又はＣ5-20アリール基である。ホスホネート基の例としては、−Ｐ（＝Ｏ）（ＯＣＨ3）2、−Ｐ（＝Ｏ）（ＯＣＨ2ＣＨ3）2、−Ｐ（＝Ｏ）（Ｏ−ｔ−Ｂｕ）2及び−Ｐ（＝Ｏ）（ＯＰｈ）2が挙げられるが、これに限定されない。
【０２１４】
リン酸（ホスホノオキシ）：−ＯＰ（＝Ｏ）（ＯＨ）2。
ホスフェート（ホスホノオキシエステル）：−ＯＰ（＝Ｏ）（ＯＲ）2、式中、Ｒはホスフェート置換基、例えば、−Ｈ、Ｃ1-7アルキル基、Ｃ3-20ヘテロシクリル基又はＣ5-20アリール基、好ましくは−Ｈ、Ｃ1-7アルキル基又はＣ5-20アリール基である。ホスフェート基の例としては、−ＯＰ（＝Ｏ）（ＯＣＨ3）2、−ＯＰ（＝Ｏ）（ＯＣＨ2ＣＨ3）2、−ＯＰ（＝Ｏ）（Ｏ−ｔ−Ｂｕ）2及び−ＯＰ（＝Ｏ）（ＯＰｈ）2が挙げられるが、これに限定されない。
【０２１５】
亜リン酸：−ＯＰ（ＯＨ）2。
ホスファイト：−ＯＰ（ＯＲ）2、式中、Ｒはホスファイト置換基、例えば−Ｈ、Ｃ1-7アルキル基、Ｃ3-20ヘテロシクリル基又はＣ5-20アリール基、好ましくは−Ｈ、Ｃ1-7アルキル基又はＣ5-20アリール基である。ホスファイト基の例としては、−ＯＰ（ＯＣＨ3）2、−ＯＰ（ＯＣＨ2ＣＨ3）2、−ＯＰ（Ｏ−ｔ−Ｂｕ）2及び−ＯＰ（ＯＰｈ）2が挙げられるが、これに限定されない。
【０２１６】
ホスホラミダイト：−ＯＰ（ＯＲ1）−ＮＲ22、式中、Ｒ1及びＲ2はホスホラミダイト置換基、例えば、−Ｈ、（任意に置換された）Ｃ1-7アルキル基、Ｃ3-20ヘテロシクリル基又はＣ5-20アリール基、好ましくは−Ｈ、Ｃ1-7アルキル基又はＣ5-20アリール基である。ホスホラミダイト基の例としては、−ＯＰ（ＯＣＨ2ＣＨ3）−Ｎ（ＣＨ3）2、−ＯＰ（ＯＣＨ2ＣＨ3）−Ｎ（ｉ−Ｐｒ）2及び−ＯＰ（ＯＣＨ2ＣＨ2ＣＮ）−Ｎ（ｉ−Ｐｒ）2が挙げられるが、これに限定されない。
【０２１７】
ホスホルアミデート：−ＯＰ（＝Ｏ）（ＯＲ1）−ＮＲ22、式中、Ｒ1及びＲ2はホスホルアミデート置換基、例えば、−Ｈ、（任意に置換された）Ｃ1-7アルキル基、Ｃ3-20ヘテロシクリル基又はＣ5-20アリール基、好ましくは−Ｈ、Ｃ1-7アルキル基又はＣ5-20アリール基である。ホスホルアミデート基の例としては、−ＯＰ（＝Ｏ）（ＯＣＨ2ＣＨ3）−Ｎ（ＣＨ3）2、−ＯＰ（＝Ｏ）（ＯＣＨ2ＣＨ3）−Ｎ（ｉ−Ｐｒ）2及び−ＯＰ（＝Ｏ）（ＯＣＨ2ＣＨ2ＣＮ）−Ｎ（ｉ−Ｐｒ）2が挙げられるが、これに限定されない。
【０２１８】
アルキレン
Ｃ3-12アルキレン：「Ｃ3-12アルキレン」という用語は、本発明で使用する場合、脂肪族又は脂環式であってよく、飽和、部分不飽和又は完全不飽和であってよい３個から１２個の炭素原子（別途規定しない限り）を有する炭化水素化合物の２個の水素原子を、両方とも同じ炭素原子から又は１個ずつ２個の異なる炭素原子それぞれから除去することによって得られる２座部分に関する。このため、「アルキレン」という用語は、下で論じるサブクラスのアルケニレン、アルキニレン、シクロアルキレンなどを含む。
【０２１９】
直鎖飽和Ｃ3-12アルキレン基の例としては、ｎが３から１２の整数である−（ＣＨ2）n−、例えば−ＣＨ2ＣＨ2ＣＨ2−（プロピレン）、−ＣＨ2ＣＨ2ＣＨ2ＣＨ2−（ブチレン）、−ＣＨ2ＣＨ2ＣＨ2ＣＨ2ＣＨ2−（ペンチレン）及び−ＣＨ2ＣＨ2ＣＨ2ＣＨ−2ＣＨ2ＣＨ2ＣＨ2−（ヘプチレン）が挙げられるが、これに限定されない。
【０２２０】
分枝飽和Ｃ3-12アルキレン基の例としては、−ＣＨ（ＣＨ3）ＣＨ2−、−ＣＨ（ＣＨ3）ＣＨ2ＣＨ2−、−ＣＨ（ＣＨ3）ＣＨ2ＣＨ2ＣＨ2−、−ＣＨ2ＣＨ（ＣＨ3）ＣＨ2−、−ＣＨ2ＣＨ（ＣＨ3）ＣＨ2ＣＨ2−、−ＣＨ（ＣＨ2ＣＨ3）−、−ＣＨ（ＣＨ2ＣＨ3）ＣＨ2−及び−ＣＨ2ＣＨ（ＣＨ2ＣＨ3）ＣＨ2−が挙げられるが、これに限定されない。
【０２２１】
直鎖部分不飽和Ｃ3-12アルキレン基（Ｃ3-12アルケニレン及びアルキニレン基）の例としては、−ＣＨ＝ＣＨ−ＣＨ2−、−ＣＨ2−ＣＨ＝ＣＨ2−、−ＣＨ＝ＣＨ−ＣＨ2−ＣＨ2−、−ＣＨ＝ＣＨ−ＣＨ2−ＣＨ2−ＣＨ2−、−ＣＨ＝ＣＨ−ＣＨ＝ＣＨ−、−ＣＨ＝ＣＨ−ＣＨ＝ＣＨ−ＣＨ2−、−ＣＨ＝ＣＨ−ＣＨ＝ＣＨ−ＣＨ2−ＣＨ2−、−ＣＨ＝ＣＨ−ＣＨ2−ＣＨ＝ＣＨ−、−ＣＨ＝ＣＨ−ＣＨ2−ＣＨ2−ＣＨ＝ＣＨ−及び−ＣＨ2−Ｃ≡Ｃ−ＣＨ2−が挙げられるが、これに限定されない。
【０２２２】
分枝部分不飽和Ｃ3-12アルキレン基（Ｃ3-12アルケニレン及びアルキニレン基）の例としては、−Ｃ（ＣＨ3）＝ＣＨ−、−Ｃ（ＣＨ3）＝ＣＨ−ＣＨ2−、−ＣＨ＝ＣＨ−ＣＨ（ＣＨ3）−及び−Ｃ≡Ｃ−ＣＨ（ＣＨ3）−が挙げられるが、これに限定されない。
脂環式飽和Ｃ3-12アルキレン基（Ｃ3-12シクロアルキレン）の例としては、シクロペンチレン（例えばシクロペンタ−１，３−イルエン）及びシクロヘキシレン（例えばシクロヘキサ−１，４−イルエン）が挙げられるが、これに限定されない。
【０２２３】
脂環式部分不飽和Ｃ3-12アルキレン基（Ｃ3-12シクロアルキレン）の例としては、シクロペンテニレン（例えば４−シクロペンテン−１，３−イルエン）、シクロヘキセニレン（例えば２−シクロヘキセン−１，４−イルエン；３−シクロヘキセン−１，２−イルエン；２，５−シクロヘキサジエン−１，４−イルエン）が挙げられるが、これに限定されない。
【０２２４】
他の形態を含む
別途規定しない限り、上記に含まれるのは、これらの置換基の周知のイオン性形態、塩形態、溶媒和物形態及び保護形態である。例えば、カルボン酸（−ＣＯＯＨ）と言うと、そのアニオン性（カルボキシレート）形態（−ＣＯＯ-）、塩又は溶媒和物、並びに従来の保護形態も含まれる。同様に、アミノ基と言うと、アミノ基のプロトン化形態（−Ｎ+ＨＲ1Ｒ2）塩又は溶媒和物、例えば塩酸塩、並びにアミノ基の従来の保護形態が含まれる。同様に、ヒドロキシル基と言うと、そのアニオン性形態（−Ｏ-）、塩又は溶媒和物、並びに従来の保護形態も含まれる。
【０２２５】
塩
該活性化合物の対応する塩、例えば医薬的に許容される塩を調製、精製及び／又は取り扱うことが便利である又は望ましいことがある。医薬的に許容される塩の例は、Ｂｅｒｇｅ，ｅｔ  ａｌ．，Ｊ．Ｐｈａｒｍ．Ｓｃｉ．，６６，１−１９（１９７７）で論じられている。
【０２２６】
例えば、化合物がアニオン性である、又はアニオン性であってよい官能基を有する（例えば−ＣＯＯＨはＣＯＯ-であってよい）場合、好適なカチオンと共に塩が形成され得る。好適な無機カチオンの例としては、Ｎａ+及びＫ+などのアルカリ金属イオン、Ｃａ2+及びＭｇ2+などのアルカリ土類カチオン並びにＡｌ+3などの他のカチオンが挙げられるが、これに限定されない。好適な有機カチオンの例としては、アンモニウムイオン（すなわちＮＨ4+）及び置換アンモニウムイオン（例えばＮＨ3Ｒ+、ＮＨ2Ｒ2+、ＮＨＲ3+、ＮＲ4+）が挙げられるが、これに限定されない。いくつかの好適な置換アンモニウムイオンの例は：エチルアミン、ジエチルアミン、ジシクロヘキシルアミン、トリエチルアミン、ブチルアミン、エチレンジアミン、エタノールアミン、ジエタノールアミン、ピペラジン、ベンジルアミン、フェニルベンジルアミン、コリン、メグルミン及びトロメタミン並びにリジン及びアルギニンなどのアミノ酸から誘導されるものである。通常の第４級アンモニウムイオンの一例はＮ（ＣＨ3）4+である。
【０２２７】
化合物がカチオン性である、又はカチオン性であってよい官能基を有する場合（例えば−ＮＨ2は−ＮＨ3+であってよい）、好適なアニオンと共に塩が形成され得る。好適な無機アニオンの例としては、以下の無機酸：塩酸、臭化水素酸、ヨウ化水素酸、硫酸、亜硫酸、硝酸、亜硝酸、リン酸及び亜リン酸から誘導されるものが挙げられるが、これに限定されない。
【０２２８】
好適な有機アニオンの例としては、以下の有機酸：２−アセチオキシ（ａｃｅｔｙｏｘｙ）安息香酸、酢酸、アスコルビン酸、アスパラギン酸、安息香酸、カンファースルホン酸、桂皮酸、クエン酸、エデト酸、エタンジスルホン酸、エタンスルホン酸、フマル酸、グルコヘプタン酸、グルコン酸、グルタミン酸、グリコール酸、ヒドロキシマレイン酸、ヒドロキシナフタレンカルボン酸、イセチオン酸、乳酸、ラクトビオン酸、ラウリン酸、マレイン酸、リンゴ酸、メタンスルホン酸、粘液酸、オレイン酸、シュウ酸、パルミチン酸、パモ酸、パントテン酸、フェニル酢酸、フェニルスルホン酸、プロピオン酸、ピルビン酸、サリチル酸、ステアリン酸、コハク酸、スルファニル酸、酒石酸、トルエンスルホン酸、トリフルオロ酢酸及び吉草酸から誘導されるものが挙げられるが、これに限定されない。好適なポリマー有機アニオンの例としては、以下のポリマー酸：タンニン酸、カルボキシメチルセルロースから誘導されるものが挙げられるが、これに限定されない。
【０２２９】
溶媒和物
該活性化合物の対応する溶媒和物を調製、精製及び／又は取り扱うことは便利である又は望ましいことがある。「溶媒和物」という用語は、本明細書において、溶質（例えば活性化合物、活性化合物の塩）及び溶媒の複合体を示す従来の意味で使用される。溶媒が水である場合、溶媒和物は、便利には水和物、例えば一水和物、二水和物、三水和物などと呼んでよい。
【０２３０】
本発明には、下に例示する、溶媒がＰＢＤ部分のイミン結合にわたって加わる化合物が含まれ、ここで溶媒は水又はアルコール（ＲAＯＨ、式中、ＲAはＣ1-4アルキルである）である：
【化２９】
2019069947.tif 000038
【０２３１】
これらの形態は、（上記のＲ10に関連する項に記載されている通り）ＰＢＤのカルビノールアミン形態及びカルビノールアミンエーテル形態と呼ぶことができる。これらの平衡のバランスは、化合物が見出される条件並びに該部分自体の性質に依存する。
これらの特別な化合物は、例えば凍結乾燥によって固形形態で単離することができる。
【０２３２】
異性体
本発明の特定の化合物は、以下「異性体」（又は「異性体形態」）と呼ばれる、シス及びトランス形態、Ｅ及びＺ形態、ｃ、ｔ及びｒ形態、エンド及びエキソ形態、Ｒ、Ｓ及びメソ形態、Ｄ及びＬ形態、ｄ及びｌ形態、（＋）及び（−）形態、ケト、エノール及びエノラート形態、ｓｙｎ及びａｎｔｉ形態、向斜及び背斜形態、α及びβ形態、アキシアル及びエクアトリアル形態、舟、椅子、ねじれ、エンベロープ及び半椅子形態、並びにその組合せを含むが、これに限定されない、１つ以上の特定の幾何形態、光学形態、エナンチオマー形態、ジアステレオマー形態、エピマー形態、アトロプ形態、立体異性体形態、互変異性体形態、立体配座形態又はアノマー形態で存在し得る。
【０２３３】
「キラル」という用語は、鏡像パートナーの重ねられない特性を有する分子を示し、一方「アキラル」という用語は、鏡像パートナー上に重ねられる分子を示す。
「立体異性体」という用語は、同一の化学構成を有するが、空間における原子又は基の配列に関して異なる化合物を示す。
「ジアステレオマー」は、２つ以上のキラリティー中心を有し、その分子が相互の鏡像ではない立体異性体を示す。ジアステレオマーは、異なる物性、例えば融点、沸点、スペクトル特性及び反応性を有する。ジアステレオマーの混合物は、電気泳動法及びクロマトグラフィーなどの高分解能分析手順の下で分離され得る。
「エナンチオマー」は、相互に重ねられない鏡像化合物の２つの立体異性体を示す。
【０２３４】
本明細書において使用される立体化学的な定義及び慣例は、一般にＳ．Ｐ．Ｐａｒｋｅｒ，Ｅｄ．，ＭｃＧｒａｗ−Ｈｉｌｌ  Ｄｉｃｔｉｏｎａｒｙ  ｏｆ  Ｃｈｅｍｉｃａｌ  Ｔｅｒｍｓ（１９８４）ＭｃＧｒａｗ−Ｈｉｌｌ  Ｂｏｏｋ  Ｃｏｍｐａｎｙ、Ｎｅｗ  Ｙｏｒｋ；ａｎｄ  Ｅｌｉｅｌ，Ｅ．及びＷｉｌｅｎ，Ｓ．，「Ｓｔｅｒｅｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ  ｏｆ  Ｏｒｇａｎｉｃ  Ｃｏｍｐｏｕｎｄｓ」，Ｊｏｈｎ  Ｗｉｌｅｙ＆Ｓｏｎｓ，Ｉｎｃ．、Ｎｅｗ  Ｙｏｒｋ，１９９４に従う。本発明の化合物は、不斉中心又はキラル中心を含有し、したがって異なる立体異性体形態で存在することがある。ジアステレオマー、エナンチオマー及びアトロプ異性体並びにラセミ混合物などのその混合物を含むが、これに限定されない、本発明の化合物の全ての立体異性体形態は、本発明の一部を形成することが意図される。多くの有機化合物は光学活性形態で存在し、すなわち、それらは平面偏光の平面を回転させる能力を有する。光学活性化合物を説明する際、Ｄ及びＬ又はＲ及びＳという接頭辞は、その（複数の）キラル中心について分子の絶対配置を表すために使用する。ｄ及びｌ又は（＋）及び（−）という接頭辞は、該化合物による平面偏光の回転の符号を示す用いられ、（−）又はｌは、化合物が左旋性であることを意味する。（＋）又はｄが接頭辞として付いた化合物は、右旋性である。所与の化学構造に関し、これらの立体異性体は、互いの鏡像であることを除いて同一である。特異的立体異性体はエナンチオマーと称されることもあり、こうした異性体の混合物はしばしばエナンチオマー混合物と呼ばれる。エナンチオマーの５０：５０の混合物は、ラセミ混合物又はラセミ体と称され、これは化学反応又は化学プロセスにおいて立体選択又は立体特異性がなかった場合に生じ得る。「ラセミ混合物」及び「ラセミ体」という用語は、光学活性を欠いている二つのエナンチオマー種の等モル混合物を示す。
【０２３５】
互変異性体形態に関して下で論じる場合を除き、本明細書で使用する場合、「異性体」という用語から特に除外されるのは、構造（又は構成）異性体（すなわち、単に空間での原子の位置によってではなく、むしろ原子間の結合が異なる異性体）であることに留意されたい。例えばメトキシ基、−ＯＣＨ3と言う場合、その構造異性体であるヒドロキシメチル基、−ＣＨ2ＯＨを指すと解釈されるべきではない。同様に、オルト−クロロフェニルという場合、その構造異性体であるメタ−クロロフェニルを指すと解釈されるべきではない。しかし、構造のクラスという場合、そのクラスに含まれている構造異性体形態を含むことも理解できる（例えばＣ1-7アルキルにはｎ−プロピル及びイソプロピルが含まれ、ブチルにはｎ−、イソ−、ｓｅｃ−及びｔｅｒｔ−ブチルが含まれ、メトキシフェニルにはオルト−、メタ−及びパラ−メトキシフェニルが含まれる）。
【０２３６】
上記の除外は、例えば以下の互変異性対：ケト／エノール（下に示す）、イミン／エナミン、アミド／イミノアルコール、アミジン／アミジン、ニトロソ／オキシム、チオケトン／エンチオール、Ｎ−ニトロソ／ヒドロキシアゾ、及びニトロ／ａｃｉ−ニトロにおけるような、互変異性体形態、例えばケト形態、エノール形態及びエノラート形態に関するものではない。
【化３０】
2019069947.tif 000039
ケト        エノール        エノラート
【０２３７】
「互変異性体」又は「互変異性体形態」という用語は、低いエネルギー障壁を介して相互変換可能である異なるエネルギーの構造異性体を示す。例えばプロトン互変異性体（プロトトロピー互変異性体としても公知）としては、ケト−エノール及びイミン−エナミン異性化などプロトンの移動を介する相互変換が挙げられる。原子価互変異性体としては、結合性電子の一部の再編成による相互変換が挙げられる。
【０２３８】
「異性体」という用語に特に含まれるのは、１つ以上の同位体置換を有する化合物であることに留意されたい。例えばＨは、1Ｈ、2Ｈ（Ｄ）及び3Ｈ（Ｔ）を含むいずれの異性体形態であってもよく；Ｃは、12Ｃ、13Ｃ及び14Ｃを含むいずれの異性体形態であってもよく；Ｏは、16Ｏ及び18Ｏを含むいずれの異性体形態であってもよいなどである。
【０２３９】
本発明の化合物中に包含させることができる同位体の例としては、水素、炭素、窒素、酸素、リン、フッ素及び塩素の異性体、例えば2Ｈ（重水素、Ｄ）、3Ｈ（トリチウム）、11Ｃ、13Ｃ、14Ｃ、15Ｎ、18Ｆ、31Ｐ、32Ｐ、35Ｓ、36Ｃｌ及び125Ｉであるが、これに限定されない。本発明の各種の同位体標識化合物、例えば放射性同位体、例えば3Ｈ、13Ｃ及び14Ｃなどの異性体が組み入れられているもの。このような同位体標識化合物は、薬剤若しくは基質組織分布アッセイを含む、陽電子放射断層撮影法（ＰＥＴ）若しくは単光子放射型コンピューター断層撮影法（ＳＰＥＣＴ）などの代謝研究、反応動態研究、検出技術若しくは造影技術において、又は患者の放射性治療において有用であり得る。本発明の重水素標識又は重水素置換された治療的化合物は、分布、代謝及び排出（ＡＤＭＥ）に関連する改善されたＤＭＰＫ（薬物代謝及び薬物動態）特性を有することができる。重水素などのより重い同位体での置換は、より大きな代謝的安定性、例えばインビボ半減期の増加又は投薬量要求の低減から生じる、ある治療的利点が得ることがある。１８Ｆ標識化合物は、ＰＥＴ又はＳＰＥＣＴの研究に有用なことがある。本発明の同位体標識化合物及びそのプロドラッグは、非同位体標識試薬をただちに利用可能な同位体標識試薬で代用することによって、下記のスキーム又は実施例及び調製において開示されている手順を実施することによって、一般に調製できる。さらに、より重い同位体、特に重水素（すなわち２Ｈ又はＤ）での置換で、より大きな代謝的安定性、例えばインビボ半減期の増加又は投薬量要求の低減又は治療指数の向上から生じる、ある治療的利点が得られることがある。重水素は、この文脈において、置換基と見なされると理解される。このようなより重い同位体、特に重水素の濃度は、同位体濃縮因子によって定義してよい。本発明の化合物において、特定の同位体として特に指定されていない任意の原子は、その原子の任意の安定同位体を表すことを意味する。
【０２４０】
別途規定しない限り、特定の化合物を言う場合、（全体的に又は部分的に）そのラセミ混合物及び他の混合物を含む、全てのこのような異性体形態が含まれる。このような異性体形態の調製（例えば不斉合成）及び分離（例えば分別結晶及びクロマトグラフィー手段）の方法は、当分野で公知であるか、又は本明細書で教示されている方法、若しくは公知の方法を公知の様式で適応させることによってただちに得られるかのいずれかである。
【０２４１】
生物活性
インビトロ細胞増殖アッセイ
一般に、抗体−薬剤コンジュゲート（ＡＤＣ）の細胞毒性活性又は細胞分裂阻害活性は、受容体タンパク質、例えばＨＥＲ２を有する哺乳動物細胞を、細胞培養培地におけるＡＤＣの抗体に曝露し、細胞を約６時間から約５日の期間培養し、細胞生存能を測定することによって測定される。細胞ベースのインビトロアッセイを使用することで、本発明のＡＤＣの生存能（増殖）、細胞毒性及びアポトーシスの誘発（カスパーゼ活性化）を測定する。
抗体−薬剤コンジュゲートのインビトロ効力は、細胞増殖アッセイによって測定することができる。ＣｅｌｌＴｉｔｅｒ−Ｇｌｏ（登録商標）Ｌｕｍｉｎｅｓｃｅｎｔ  Ｃｅｌｌ  Ｖｉａｂｉｌｉｔｙアッセイは、鞘翅目ルシフェラーゼの組換え発現に基づく市販（プロメガ社、ウィスコンシン州マディソン）の均質アッセイ法である（米国特許第５５８３０２４号、同第５６７４７１３号及び同第５７００６７０号）。この細胞増殖アッセイは、存在するＡＴＰの定量化に基づく培養液中の生細胞の数、代謝的に活性な細胞の指標を決定する（Ｃｒｏｕｃｈ  ｅｔ  ａｌ（１９９３）Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．Ｍｅｔｈ．１６０：８１−８８；米国特許第６６０２６７７号）。ＣｅｌｌＴｉｔｅｒ−Ｇｌｏ（登録商標）アッセイは、自動ハイスループットスクリーニング（ＨＴＳ）に適用できるように、９６ウェルのフォーマット中で行う（Ｃｒｅｅ  ｅｔ  ａｌ（１９９５）ＡｎｔｉＣａｎｃｅｒ  Ｄｒｕｇｓ  ６：３９８−４０４）。均質アッセイ手順は、単一試薬（ＣｅｌｌＴｉｔｅｒ−Ｇｌｏ（登録商標）試薬）を、血清補充培地中で培養された細胞に直接添加することを含む。細胞洗浄工程、培地の除去工程及び複数のピペッティング工程は必要とされない。該系は、試薬の添加及び混合の１０分後に、３８４ウェルのフォーマットでわずか１５細胞／ウェルを検出する。該細胞はＡＤＣで連続的に処理されてよいか、又は細胞は処理されてＡＤＣから分離されてよい。一般に、短時間で、すなわち３時間処理された細胞は、連続的に処理された細胞と同じ効力効果を示した。
【０２４２】
均質「添加−混合−測定」フォーマットは、細胞溶解、及び存在するＡＴＰの量に比例した発光シグナルの発生をもたらす。ＡＴＰの量は、培養液中に存在する細胞の数に直接比例する。ＣｅｌｌＴｉｔｅｒ−Ｇｌｏ（登録商標）アッセイは、これは細胞型及び使用培地に応じて、一般に５時間を超える半減期を有する、ルシフェラーゼ反応によって生成される「グロー型」発光シグナルを発生させる。生細胞は相対発光単位（ＲＬＵ）に反映される。該基質のカブトムシルシフェリンは、ＡＭＰへのＡＴＰの同時変換及び光子の発生とともに、組換えホタルルシフェラーゼによって酸化的に脱炭酸される。
【０２４３】
インビボ効能
本発明の抗体−薬剤コンジュゲート（ＡＤＣ）のインビボ効能は、マウスにおける腫瘍異種移植研究によって測定することができる。例えば、本発明の抗ＨＥＲ２  ＡＤＣのインビボ効能は、高発現性ＨＥＲ２トランスジェニック外植マウスモデルによって測定することができる。同種移植片は、ハーセプチン（登録商標）療法に応答しないか、又は応答が不十分であるＦｏ５  ｍｍｔｖトランスジェニックマウスから増殖させる。対象を、ある用量レベル（ｍｇ／ｋｇ）のＡＤＣ及びＰＢＤ薬剤曝露（μｇ／ｍ2）、並びにプラセボ緩衝剤対照（ビヒクル）で１回処置して、２週間以上モニタリングして、腫瘍倍加、対数細胞死滅及び腫瘍収縮までの時間を測定した。
【０２４４】
使用
本発明のコンジュゲートは、ＰＢＤ化合物を標的位置に提供するために使用してよい。
標的位置は、好ましくは増殖性細胞集団である。抗体は、増殖性細胞集団中に存在する抗原に対する抗体である。
一実施形態において、抗原は非増殖性細胞集団に、存在しないか、又は増殖性細胞集団、例えば腫瘍細胞集団に存在する抗原の量と比較して低いレベルで存在する。
標的位置はインビトロ、インビボで又はエクスビボであってよい。
本発明の抗体−薬剤コンジュゲート（ＡＤＣ）化合物には、抗癌活性に有用性を有するものがある。特に、該化合物は、リンカーによってＰＢＤ薬物部分にコンジュゲートされた、すなわち共有結合された抗体を含む。
【０２４５】
標的位置において、リンカーは切断されなくてよい。本発明の抗体−薬剤コンジュゲート（ＡＤＣ  化合物は、リンカーを切断することなくＰＢＤ薬物部分を放出する細胞毒性効果を有することがある。本発明の抗体−薬剤コンジュゲート（ＡＤＣ）は、細胞毒性剤の有効量を腫瘍組織に選択的に送達することにより、より高い選択性、すなわちより低い有効用量を達成し得る。
【０２４６】
このため、一態様において、本発明は、療法で使用するための（治療に使用するための）、本明細書に記載するコンジュゲート化合物を提供する。
【０２４７】
更なる態様において、増殖性疾患の処置に使用するための、本明細書に記載するコンジュゲート化合物も提供される。本発明の第２の態様は、増殖性疾患を処置する医薬品の製造におけるコンジュゲート化合物の使用を提供する。
【０２４８】
当業者は、候補コンジュゲートが任意の特定の細胞型に対する増殖状態を処置するか否かをただちに判定できる。例えば、特定の化合物によって提供された活性を評価するために便利に使用され得るアッセイが、下の実施例に記載されている。
【０２４９】
「増殖性疾患」という用語は、インビトロ又はインビボに関わらず、腫瘍性又は過形成性成長などの、所望されない過剰又は異常な細胞の望まれないまた制御されない細胞増殖に関する。
【０２５０】
増殖状態の例としては、新生物及び腫瘍（例えば組織球腫、神経膠腫、星状細胞腫、骨腫）、癌（例えば肺癌、小細胞肺癌、消化管癌、腸癌、結腸癌、乳癌、卵巣癌、前立腺癌、精巣癌、肝臓癌、腎臓癌、膀胱癌、膵臓癌、脳腫瘍、肉腫、骨肉腫、カポジ肉腫、メラノーマ）、白血病、乾癬、骨疾患、（例えば結合組織の）線維増殖性障害並びにアテローム性動脈硬化を含むが、これに限定されない良性、前悪性及び悪性の細胞増殖が挙げられるが、これに限定されない。特に興味のある癌としては、白血病及び卵巣癌が挙げられるが、これに限定されない。
【０２５１】
肺、胃腸管（例えば腸、結腸を含む）、胸部（乳房）、卵巣、前立腺、肝臓（肝性）、腎臓（腎性）、膀胱、膵臓、脳及び皮膚を含むが、これに限定されない、いずれの種類の細胞も処置されてよい。
一実施形態において、処置は、膵臓癌の処置である。
一実施形態において、処置は、細胞の表面上にαvβ6インテグリンを有する腫瘍の処置である。
【０２５２】
本発明の抗体−薬剤コンジュゲート（ＡＤＣ）は、例えば腫瘍抗原の過剰発現を特徴とする各種の疾患又は障害の処置に使用してよいと考えられる。例示的な状態又は過剰増殖性障害としては、良性又は悪性腫瘍；白血病、血液系及びリンパ系悪性腫瘍が挙げられる。他には、ニューロン、グリア、星状細胞、視床下部、腺性、マクロファージ、上皮、ストロマ、胞胚腔、炎症性、血管新生、及び自己免疫を含む免疫性の障害が挙げられる。
【０２５３】
一般に、処置される疾患又は障害は、癌などの過剰増殖性疾患である。本明細書で処置される癌の例としては、癌腫、リンパ腫、芽細胞腫、肉腫及び白血病又はリンパ系悪性腫瘍が挙げられるが、これに限定されない。このような癌のより詳細な例としては、扁平細胞癌（例えば上皮扁平細胞癌）、小細胞肺癌、非小細胞肺癌、肺の腺癌及び肺の扁平癌腫を含む肺癌、腹膜の癌、肝細胞癌、消化管癌を含む胃性癌又は胃癌、膵臓癌、神経膠芽腫、子宮頸癌、卵巣癌、肝臓癌、膀胱癌、肝細胞腫、乳癌、結腸癌、直腸癌、直腸結腸癌、子宮内膜癌腫又は子宮癌腫、唾液腺癌腫、腎臓癌又は腎性癌、前立腺癌、外陰癌、甲状腺癌、肝臓癌腫、肛門癌腫、陰茎癌腫並びに頭頸部癌が挙げられる。
【０２５４】
ＡＤＣ化合物が処置に使用され得る自己免疫疾患としては、リウマチ障害（例えば関節リウマチ、シェーグレン症候群、強皮症、ＳＬＥ及びループス腎炎などのループス、多発性筋炎／皮膚筋炎、クリオグロブリン血症、抗リン脂質抗体症候群及び乾癬性関節炎など）、骨関節炎、自己免疫性の胃腸及び肝臓障害（例えば、炎症性腸疾患（例えば潰瘍性大腸炎及びクローン病）、自己免疫性の胃炎及び悪性貧血、自己免疫性肝炎、原発性胆汁性肝硬変、原発性硬化性胆管炎及びセリアック病など）、血管炎（例えばチャーグストラウス血管炎を含むＡＮＣＡ関連血管炎、ウェゲナー肉芽腫症及び多発動脈炎など）、自己免疫性神経障害（例えば多発性硬化症、眼球クローヌスミオクローヌス症候群、重症筋無力症、視神経脊髄炎、パーキンソン病、アルツハイマー病及び自己免疫性多発ニューロパチーなど）、腎臓障害（例えば糸球体腎炎、グッドパスチャー症候群及びベルジェ病など）、自己免疫性皮膚障害（例えば乾癬、蕁麻疹、発疹、尋常性天疱瘡、水疱性類天疱瘡及び皮膚エリテマトーデス）、血液障害（例えば血小板減少性紫斑病、血栓性血小板減少性紫斑病、輸血後紫斑病及び自己免疫性溶血性貧血など）、アテローム性動脈硬化、ぶどう膜炎、自己免疫性聴覚疾患（例えば内耳疾患及び難聴など）、ベーチェット病、レイノー症候群、臓器移植並びに自己免疫性内分泌障害（例えばインスリン依存性真性糖尿病（ＩＤＤＭ）などの糖尿病関連自己免疫疾患、アジソン病及び自己免疫性甲状腺疾患（例えばグレーブス病及び甲状腺炎）など）が挙げられる。より好ましいこのような疾患としては、例えば関節リウマチ、潰瘍性大腸炎、ＡＮＣＡ関連血管炎、ループス、多発性硬化症、シェーグレン症候群、グレーブス病、ＩＤＤＭ、悪性貧血、甲状腺炎、及び糸球体腎炎が挙げられる。
【０２５５】
処置方法
本発明のコンジュゲートは、治療方法で使用してよい。処置の必要がある対象に本発明のコンジュゲート化合物の治療的有効量を投与することを含む、処置方法も提供される。「治療的有効量」という用語は、患者に対する利益を示すのに十分な量である。このような利益は、少なくとも１つの症状の少なくとも寛解であり得る。投与される実際の量並びに投与の速度及び時間経過は、処置されているものの性質及び重症度に依存する。処置の処方、例えば投薬量の決定は、一般の開業医及び他の医師の責任の範囲内である。
【０２５６】
本発明の化合物は、単独で又は他の処置と組み合わせて、処置される状態に応じて同時又は順次のどちらかで投与してよい。処置及び療法（治療）の例としては、化学療法（化学療法薬などの例えば薬剤を含む、活性剤の投与）、外科手術及び放射線療法が挙げられるが、これに限定されない。
【０２５７】
「化学療法剤」は、作用機序に関わらず、癌の処置に有用な化学化合物である。化学療法剤のクラスとしては、アルキル化剤、代謝拮抗剤、紡錘体毒植物アルカロイド、細胞毒性／抗腫瘍性抗生物質、トポイソメラーゼ阻害剤、抗体、光増感剤及びキナーゼ阻害剤が挙げられるが、これに限定されない。化学療法剤としては、「標的療法」及び従来の化学療法に使用される化合物が挙げられる。
【０２５８】
化学療法剤の例としては、エルロチニブ（タルセバ（登録商標）、ジェネンテック／ＯＳＩファーム）、ドセタキセル（タキソテール（登録商標）、サノフィ−アベンティス）、５−ＦＵ（フルオロウラシル、５−フルオロウラシル、ＣＡＳ番号５１−２１−８）、ゲムシタビン（ジェムザール（登録商標）、リリー）、ＰＤ−０３２５９０１（ＣＡＳ番号３９１２１０−１０−９、ファイザー）、シスプラチン（シス−ジアミン、ジクロロ白金（ＩＩ）、ＣＡＳ番号１５６６３−２７−１）、カルボプラチン（ＣＡＳ番号４１５７５−９４−４）、パクリタキセル（タキソール（登録商標）、ブリストル−マイヤーズスクイブ・オンコロジー、ニュージャージー州プリンストン）、トラスツズマブ（ハーセプチン（登録商標）、ジェネンテック）、テモゾロマイド（４−メチル−５−オキソ−２，３，４，６，８−ペンタアザビシクロ［４．３．０］ノナ−２，７，９−トリエン−９−カルボキサミド、ＣＡＳ番号８５６２２−９３−１、テモダール（ＴＥＭＯＤＡＲ）（登録商標）、テモダール（ＴＥＭＯＤＡＬ）（登録商標）、シェリング・プラウ）、タモキシフェン（（Ｚ）−２−［４−（１，２−ジフェニルブタ−１−エニル）フェノキシ］−Ｎ，Ｎ−ジメチルエタンアミン、ノルバデックス（登録商標）、イスツバル（登録商標）、バロデックス（登録商標））、及びドキソルビシン（アドリアマイシン（登録商標））、Ａｋｔｉ−１／２、ＨＰＰＤ及びラパマイシンが挙げられる。
【０２５９】
化学療法剤の更なる例としては、オキサリプラチン（エロキサチン（登録商標）、サノフィ）、ボルテゾミブ（ＶＥＬＣＡＤＥ（登録商標）、ミレニアムファーム）、スーテント（スニチニブ（登録商標）、ＳＵ１１２４８、ファイザー）、レトロゾール（フェマーラ（登録商標）、ノバルティス）、イマチニブメシレート（グリーベック（登録商標）、ノバルティス）、ＸＬ−５１８（Ｍｅｋ阻害剤、エクセリクシス、ＷＯ２００７／０４４５１５）、ＡＲＲＹ−８８６（Ｍｅｋ阻害剤、ＡＺＤ６２４４、アレイバイファーマ、アストラゼネカ）、ＳＦ−１１２６（ＰＩ３Ｋ阻害剤、セマフォー・ファーマシューティカルズ）、ＢＥＺ−２３５（ＰＩ３Ｋ阻害剤、ノバルティス）、ＸＬ−１４７（ＰＩ３Ｋ阻害剤、エクセリクシス）、ＰＴＫ７８７／ＺＫ  ２２２５８４（ノバルティス）、フルベストラント（ファスロデックス（登録商標）、アストラゼネカ）、ロイコボリン（フォリン酸）、ラパマイシン（シロリムス、ラパミューン（登録商標）、ワイス）、ラパチニブ（タイケルブ（登録商標）、ＧＳＫ５７２０１６、グラクソ・スミス・クライン）、ロナファルニブ（ＳＡＲＡＳＡＲ（商標）、ＳＣＨ  ６６３３６、シェリング・プラウ）、ソラフェニブ（ネクサバール（登録商標）、ＢＡＹ４３−９００６、バイエルＬａｂｓ）、ゲフィチニブ（イレッサ（登録商標）、アストラゼネカ）、イリノテカン（カンプトサール（登録商標）、ＣＰＴ−１１、ファイザー）、チピファルニブ（ザルネストラ（商標）、ジョンソン＆ジョンソン）、アブラキサン（商標）（クレモホールフリー）、パクリタキセルのアルブミン操作ナノ粒子処方物（アメリカン・ファーマシューティカル・パートナーズ、イリノイ州シャンバーグ）、バンデタニブ（ｒＩＮＮ、ＺＤ６４７４、ＺＡＣＴＩＭＡ（登録商標）、アストラゼネカ）、クロラムブシル、ＡＧ１４７８、ＡＧ１５７１（ＳＵ  ５２７１；スージェン）、テムシロリムス（トーリセル（登録商標）、ワイス）、パゾパニブ（グラクソ・スミス・クライン）、カンフォスファミド（テルシタ（登録商標）、テリック）、チオテパ及びシクロホスファミド（ｃｙｃｌｏｓｐｈｏｓｐｈａｍｉｄｅ）（シトキサン（登録商標）、ネオサール（登録商標））；ブスルファン、インプロスルファン及びピポスルファンなどのアルキルスルホネート；ベンゾドーパ、カルボコン、メツレドパ及びウレドパなどのアジリジン；アルトレタミン、トリエチレンメラミン、トリエチレンホスホラミド、トリエチレンチオホスホラミド及びトリメチロメラミンを含む、エチレンイミン及びメチルアメラミン；アセトゲニン（特にブラタシン及びブラタシノン）；カンプトテシン（合成類似体トポテカンを含む）；ブリオスタチン；カリスタチン；ＣＣ−１０６５（そのアドゼレシン、カルゼルシン及びビゼレシン合成類似体を含む）；クリプトフィシン（特にクリプトフィシン１及びクリプトフィシン８）；ドラスタチン；デュオカルマイシン（合成類似体、ＫＷ−２１８９及びＣＢ１−ＴＭ１を含む）；エリュテロビン；パンクラチスタチン；サルコジクチン；スポンギスタチン；ナイトロジェンマスタード、例えばクロランブシル、クロルナファジン、クロロホスファミド、エストラムスチン、イホスファミド、メクロレタミン、メクロレタミンオキシドヒドロクロライド、メルファラン、ノブエンビキン、フェネステリン、プレドニムスチン、トロホスファミド、ウラシルマスタード；ニトロソ尿素、例えばカルムスチン、クロロゾトシン、ホテムスチン、ロリムスチン、ニムスチン及びラニムスチン（ｒａｎｉｍｎｕｓｔｉｎｅ）；抗生物質、例えばエンジイン抗生物質（例えばカリケアマイシン、カリケアマイシンガンマ１Ｉ、カリケアマイシンオメガＩ１（Ａｎｇｅｗ  Ｃｈｅｍ．Ｉｎｔｌ．Ｅｄ．Ｅｎｇｌ．（１９９４）３３：１８３−１８６）；ジネミシン、ジネミシンＡ；ビスフォスフォネート、例えばクロドロネート；エスペラマイシン；並びにネオカルチノスタチン発色団及び関連する色素タンパク質エンジイン抗生物質発色団）、アクラシノマイシン（ａｃｌａｃｉｎｏｍｙｓｉｎｓ）、アクチノマイシン、アントラマイシン（ａｕｔｈｒａｍｙｃｉｎ）、アザセリン、ブレオマイシン、カクチノマイシン、カラビシン、カルミノマイシン、カルジノフィリン、クロモマイシン（ｃｈｒｏｍｏｍｙｃｉｎｉｓ）、ダクチノマイシン、ダウノルビシン、デトルビシン、６−ジアゾ−５−オキソ−Ｌ−ノルロイシン、モルホリノ−ドキソルビシン、シアノモルホリノ−ドキソルビシン、２−ピロリノ−ドキソルビシン及びデオキシドキソルビシン）、エピルビシン、エソルビシン、イダルビシン、ネモルビシン、マルセロマイシン、マイトマイシンＣなどのマイトマイシン、ミコフェノール酸、ノガラマイシン、オリボマイシン、ペプロマイシン、ポルフィロマイシン、ピューロマイシン、クエラマイシン、ロドルビシン、ストレプトニグリン、ストレプトゾシン、ツベルシジン、ウベニメクス、ジノスタチン、ゾルビシン；代謝拮抗物質、例えばメトトレキセート及び５−フルオロウラシル（５−ＦＵ）；葉酸類似体、例えばデノプテリン、メトトレキセート、プテロプテリン、トリメトレキセート；プリン類似体、例えばフルダラビン、６−メルカプトプリン、チアミプリン、チオグアニン；ピリミジン類似体、例えばアンシタビン、アザシチジン、６−アザウリジン、カルモフール、シタラビン、ジデオキシウリジン、ドキシフルリジン、エノシタビン、フロクシウリジン；アンドロゲン、例えばカルステロン、プロピオン酸ドロモスタノロン、エピチオスタノール、メピチオスタン、テストラクトン；抗副腎剤、例えばアミノグルテチミド、ミトタン、トリロスタン；葉酸補充剤、例えばフロリン酸；アセグラトン；アルドホスファミドグリコシド；アミノレブリン酸；エニルウラシル；アムサクリン；ベストラブシル；ビスアントレン；エダトレキセート（ｅｄａｔｒａｘａｔｅ）；デフォファミン；デメコルシン；ジアジクォン；エフロルニチン（ｅｌｆｏｒｎｉｔｈｉｎｅ）；酢酸エリプチニウム；エポチロン；エトグルシド；硝酸ガリウム；ヒドロキシ尿素；レンチナン；ロニダミン（ｌｏｎｉｄａｉｎｉｎｅ）；メイタンシノイド、例えばメイタンシン及びアンサマイトシン；ミトグアゾン；ミトキサントロン；モピダンモール（ｍｏｐｉｄａｎｍｏｌ）；ニトラミン（ｎｉｔｒａｅｒｉｎｅ）；ペントスタチン；フェナメット；ピラルビシン；ロソキサントロン；ポドフィリン酸；２−エチ���ヒドラジド；プロカルバジン；ＰＳＫ（登録商標）多糖類複合体（ＪＨＳナチュラルプロダクツ、オレゴン州ユージーン）；ラゾキサン；リゾキシン；シゾフィラン；スピロゲルマニウム；テヌアゾン酸；トリアジクオン；２，２’，２”−トリクロロトリエチルアミン；トリコテセン（特にＴ−２トキシン、ベラキュリン（ｖｅｒｒａｃｕｒｉｎ）Ａ、ロリジンＡ及びアングイジン）；ウレタン；ビンデシン；ダカルバジン；マンノムスチン；ミトブロニトール；ミトラクトール；ピポブロマン；ガシトシン（ｇａｃｙｔｏｓｉｎｅ）；アラビノシド（「Ａｒａ−Ｃ」）；シクロホスファミド；チオテパ；６−チオグアニン；メルカプトプリン；メトトレキセート；白金類似体、例えばシスプラチン及びカルボプラチン；ビンブラスチン；エトポシド（ＶＰ−１６）；イホスファミド；ミトキサントロン；ビンクリスチン；ビノレルビン（ナベルビン（登録商標））；ノバントロン；テニポシド；エダトレキセート；ダウノマイシン；アミノプテリン；カペシタビン（ゼローダ（登録商標）、ロシュ）；イバンドロネート；ＣＰＴ−１１；トポイソメラーゼ阻害剤ＲＦＳ  ２０００；ジフロロメチルオルニチン（ＤＭＦＯ）；レチノイン酸などのレチノイド；並びに上記のいずれかの医薬的に許容される塩、酸及び誘導体が挙げられる。
【０２６０】
また「化学療法剤」の定義に含まれるのは、（ｉ）腫瘍に対するホルモン作用を調節又は阻害するように作用する抗ホルモン剤、例えばタモキシフェン（ノルバデックス（登録商標）；クエン酸タモキシフェンを含む）、ラロキシフェン、ドロロキシフェン、４−ヒドロキシタモキシフェン、トリオキシフェン、ケオキシフェン、ＬＹ１１７０１８、オナプリストン、及びファレストン（ＦＡＲＥＳＴＯＮ）（登録商標）（クエン酸トレミフェン）を含む、抗エストロゲン及び選択的エストロゲン受容体モジュレーター（ＳＥＲＭ）、（ｉｉ）副腎におけるエストロゲン産生を調節する酵素アロマターゼを阻害するアロマターゼ阻害剤、例えば４（５）−イミダゾール、アミノグルテチミド、メガス（ＭＥＧＡＳＥ）（登録商標）（酢酸メゲストロール）、アロマシン（登録商標）（エキセメスタン；ファイザー）、ホルメスタン（ｆｏｒｍｅｓｔａｎｉｅ）、ファドロゾール、リビゾール（ＲＩＶＩＳＯＲ）（登録商標）（ボロゾール）、フェマーラ（登録商標）（レトロゾール；ノバルティス）及びアリミデックス（登録商標）（アナストロゾール；アストラゼネカ）、（ｉｉｉ）抗アンドロゲン、例えばフルタミド、ニルタミド、ビカルタミド、ロイプロリド及びゴセレリン；並びにトロキサシタビン（１，３−ジオキソランヌクレオシドシトシン類似体）、（ｉｖ）タンパク質キナーゼ阻害剤、例えばＭＥＫ阻害剤（国際公開第２００７／０４４５１５号）、（ｖ）脂質キナーゼ阻害剤、（ｖｉ）アンチセンスオリゴヌクレオチド、特に異所性細胞増殖に関与シグナル伝達経路における遺伝子の発現を阻害するもの、例えばＰＫＣ−アルファ、Ｒａｆ及びＨ−Ｒａｓ、例えばオブリメルセン（ジェナセンス（登録商標）、ジェンタＩｎｃ．）、（ｖｉｉ）リボザイム、例えばＶＥＧＦ発現阻害剤（例えばアンギオザイム（登録商標））及びＨＥＲ２発現阻害剤、（ｖｉｉｉ）遺伝子治療ワクチンなどのワクチン、例えばアロベクチン（登録商標）、ロイべクチン（登録商標）及びバキシド（ＶＡＸＩＤ）（登録商標）；プロロイキン（登録商標）ｒＩＬ−２；トポイソメラーゼ１阻害剤、例えばラルトテカン（登録商標）などの；アバレリクス（登録商標）ｒｍＲＨ、（ｉｘ）血管新生抑制物質、例えばベバシズマブ（アバスチン（登録商標）、ジェネンテック）；並びに上記のいずれかの医薬的に許容される塩、酸及び誘導体である。
【０２６１】
また「化学療法剤」の定義に含まれるのは、治療用抗体、例えばアレムツズマブ（キャンパス）、ベバシズマブ（アバスチン（登録商標）、ジェネンテック）；セツキシマブ（アービタックス（登録商標）、イムクローン）；パニツムマブ（ベクティビックス（登録商標）、アムジェン）、リツキシマブ（リツキサン（登録商標）、ジェネンテック／バイオジェン・アイデック）、ペルツズマブ（オムニターグ（商標）、２Ｃ４、ジェネンテック）、トラスツズマブ（ハーセプチン（登録商標）、ジェネンテック）、トシツモマブ（ベキサール、コリキサ）及び抗体薬物コンジュゲート、ゲムツズマブオゾガマイシン（マイロターグ（登録商標）、ワイス）である。
【０２６２】
本発明のコンジュゲートと組み合わせた化学療法剤として治療的可能性を有するヒト化モノクローナル抗体としては、アレムツズマブ、アポリズマブ、アセリズマブ、アトリズマブ、バピネオズマブ、ベバシズマブ、ビバツズマブメルタンシン、カンツズマブメルタンシン、セデリズマブ、セルトリズマブペゴール、シドフシツズマブ、シドツズマブ、ダクリズマブ、エクリズマブ、エファリズマブ、エピラツズマブ、エルリズマブ、フェルビズマブ、フォントリズマブ、ゲムツズマブオゾガマイシン、イノツズマブオゾガマイシン、イピリムマブ、ラベツズマブ、リンツズマブ、マツズマブ、メポリズマブ、モタビズマブ、モトビズマブ、ナタリズマブ、ニモツズマブ、ノロビズマブ、ヌマビズマブ、オクレリズマブ、オマリズマブ、パリビズマブ、パスコリズマブ、ペクフシツズマブ、ペルツズマブ、ペルツズマブ、パキセリズマブ、ラリビズマブ、ラニビズマブ、レスリビズマブ、レスリズマブ、レシビズマブ、ロベリズマブ、ルプリズマブ、シブロツズマブ、シプリズマブ、ソンツズマブ、タカツズマブテトラキセタン、タドシズマブ、タリズマブ、テフィバズマブ、トシリズマブ、トラリズマブ、トラスツズマブ、ツコツズマブセルモロイキン、ツクシツズマブ、ウマビズマブ、ウルトキサズマブ及びビシリズマブが挙げられる。
【０２６３】
本発明による、及び本発明に従う使用のための医薬組成物は、該活性成分、すなわちコンジュゲート化合物に加えて、医薬的に許容される賦形剤、担体、緩衝剤、安定剤又は当業者に周知の他の材料を含んでよい。このような材料は非毒性であるべきであり、活性成分の効能を妨げるべきではない。担体又は他の材料の正確な性質は、投与経路に依存し、投与経路は経口であるか、又は例えば経皮、皮下若しくは静脈内注射によってよい。
【０２６４】
経口投与用の医薬組成物は、錠剤、カプセル、粉末又は液体の形態であってよい。錠剤は、固形担体又はアジュバントを含んでよい。液体医薬組成物は、一般に水、石油、動物性油又は植物性油、鉱油又は合成油などの液体担体を含む。生理的食塩水溶液、デキストロース若しくは他の多糖類溶液、又はエチレングリコール、プロピレングリコール若しくはポリエチレングリコールなどのグリコールが含まれてよい。カプセルは、ゼラチンなどの固形担体を含んでよい。
【０２６５】
静脈内、経皮若しくは皮下注射、又は罹患部位での注射では、該活性成分は、発熱物質を含まず、好適なｐＨ、等張性及び安定性を有する非経口的に許容される水溶液の形態となる。当業者は、例えば塩化ナトリウム注入液、リンゲル注入液、乳酸リンゲル注入液などの等張ビヒクルを使用して好適な溶液を調製することが十分にできる。保存料、安定剤、緩衝剤、抗酸化剤及び／又は他の添加剤は、必要ならば含まれてよい。
【０２６６】
処方物
コンジュゲート化合物を単独で使用する（例えば投与する）ことが可能である場合、該化合物を組成物又は処方物として提供することが多くは好ましい。
一実施形態において、組成物は、本明細書に記載するコンジュゲート化合物及び医薬的に許容される担体、希釈剤又は賦形剤を含む医薬組成物（例えば処方物、調製物、医薬品）である。
【０２６７】
一実施形態において、組成物は、本明細書に記載する少なくとも１種類のコンジュゲート化合物を、医薬的に許容される担体、希釈剤、賦形剤、アジュバント、充填剤、緩衝剤、保存料、酸化防止剤、潤滑剤、安定剤、可溶化剤、界面活性剤（例えば湿潤剤）、マスキング剤、着色剤、香味剤及び甘味剤を含むが、これに限定されない、当業者に周知の１種類以上の他の医薬的に許容される成分と共に含む医薬組成物である。
一実施形態において、組成物は、他の活性剤、例えば他の治療剤又は予防剤を更に含む。
【０２６８】
好適な担体、希釈剤、賦形剤などは標準医薬文書に見出すことができる。例えばＨａｎｄｂｏｏｋ  ｏｆ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ａｄｄｉｔｉｖｅｓ，２ｎｄ  Ｅｄｉｔｉｏｎ（ｅｄｓ．Ｍ．Ａｓｈ  ａｎｄ  Ｉ．Ａｓｈ），２００１（Ｓｙｎａｐｓｅ  Ｉｎｆｏｒｍａｔｉｏｎ  Ｒｅｓｏｕｒｃｅｓ，Ｉｎｃ．，Ｅｎｄｉｃｏｔｔ、Ｎｅｗ  Ｙｏｒｋ，ＵＳＡ），Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ’ｓ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｓｃｉｅｎｃｅｓ，２０ｔｈ  ｅｄｉｔｉｏｎ，ｐｕｂ．Ｌｉｐｐｉｎｃｏｔｔ，Ｗｉｌｌｉａｍｓ＆Ｗｉｌｋｉｎｓ，２０００；及びＨａｎｄｂｏｏｋ  ｏｆ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｅｘｃｉｐｉｅｎｔｓ，２ｎｄ  ｅｄｉｔｉｏｎ，１９９４を参照のこと。
【０２６９】
本発明の別の態様は、本明細書で定義する通りの、少なくとも１種類の［11Ｃ］放射標識コンジュゲート又はコンジュゲート様化合物を、当業者に周知の１種類以上の他の医薬的に許容される成分、例えば担体、希釈剤、賦形剤などと共に混和することを含む、医薬組成物を製造する方法に関する。個別の単位（例えば錠剤など）として処方される場合、各単位は、該活性化合物の所定量（投薬量）を含有する。
【０２７０】
「医薬的（製薬的、製剤的）に許容される」という用語は、本発明で使用する場合、正常な医学的判断の範囲内において、過剰な毒性、刺激、アレルギー応答又は他の問題若しくは合併症を伴わずに、当該の対象（例えば、ヒト）の組織と接触して使用するのに好適であり、合理的な利益／リスク比に相応する、化合物、成分、材料、組成物、投薬形態などに関する。各担体、希釈剤、賦形剤なども、処方物の他方の成分と相容性であるという意味において、「許容され」なければならない。
【０２７１】
該処方物は、製薬の技術分野において周知のいずれの方法によっても調製してよい。このような方法は、該活性化合物を１種類以上の副成分を構成する担体と会合させるステップを含む。一般に、該処方物は、該活性化合物を担体（例えば液体担体、微粉化固形担体など）と均質及び密接に会合させて、次いで必要な場合は、該生成物を成形することによって調製される。
処方物は、急速放出若しくは緩徐放出；即時放出、遅延放出若しくは持続放出；又はその組合せを提供するように調製してよい。
【０２７２】
非経口投与（例えば注射による）に好適な処方物としては、水性又は非水性の等張の発熱物質を含まない無菌液体（例えば溶液、懸濁液）が挙げられ、この中に活性成分が溶解、懸濁又はそれ以外の様式で（例えばリポソーム又は他の微粒子で）提供されている。このような液体は、他の医薬的に許容される成分、例えば酸化防止剤、緩衝剤、保存料、安定剤、静菌薬、懸濁化剤、増粘剤、及び対象とするレシピエントの血液（又は他の関連する体液）と処方物を等張にする溶質を更に含有してよい。賦形剤の例としては、例えば水、アルコール、ポリオール、グリセロール及び植物油などが挙げられる。このような処方物で使用するための好適な等張性担体の例としては、塩化ナトリウム注射用液、リンゲル液又は乳酸リンゲル注射用液が挙げられる。通常、該液体における活性成分の濃度は、約１ｎｇ／ｍｌから約１０μｇ／ｍｌ、例えば約１０ｎｇ／ｍｌから約１μｇ／ｍｌである。処方物は、単位用量又は複数回用量の密閉容器、例えばアンプル及びバイアル中に提供することができ、使用直前に注射の滅菌液体担体、例えば水の添加だけを必要とするフリーズドライ（凍結乾燥）状態で保管されてよい。即時注射溶液及び懸濁液は、滅菌粉末、顆粒及び錠剤から調製してよい。
【０２７３】
投薬量
コンジュゲート化合物及びコンジュゲート化合物を含む組成物の適切な投薬量が患者によって変動し得ることは、当業者によって理解されるであろう。最適な投薬量の決定には、一般に何らかのリスク又は有害な副作用に対する治療的利益のレベルのバランスをとることを伴う。選択された投薬量は、特定の化合物の活性、投与経路、投与時間、化合物の排出速度、処置の持続期間、組み合わせて使用される他の薬物、化合物及び／又は材料、状態の重症度並びに患者の種、性別、年齢、重量、状態、全般的な健康及び前病歴を含むが、これに限定されない、様々な因子に依存するであろう。
一般に投薬量は、実質的に危険又は有害な副作用を引き起こさずに所望の効果を達成する局所濃度を作用部位にて達成するように選択されるが、化合物の量及び投与経路は、最終的に、医師、獣医又は臨床医の裁量による。
【０２７４】
投与は、処置の過程を通じて、１回の用量で、連続的に又は断続的に（例えば分割用量にて適切な間隔で）行うことができる。投与の最も有効な手段及び投薬量を決定する方法は当業者に周知であり、療法（治療）に使用される処方物、療法（治療）の目的、処置される（複数の）標的細胞及び処置される対象によって変動する。単回又は複数回の投与は、処置を行う医師、獣医又は臨床医によって選択される用量レベル及びパターンで実施することができる。
【０２７５】
一般に、活性化合物の好適な用量は、１日に付き、対象の体重１キログラム当たり約１００ｎｇから約２５ｍｇ（より通例には約１μｇから約１０ｍｇ）の範囲である。活性化合物が塩、エステル、アミド又はプロドラッグなどである場合、投与される量は親化合物に基づいて算出されるため、使用される実際の重量が比例して増加する。
【０２７６】
一実施形態において、活性化合物は、以下の投薬計画：約１００ｍｇ、１日３回に従って、ヒト患者に投与される。
一実施形態において、活性化合物は、以下の投薬計画：約１５０ｍｇ、１日２回に従って、ヒト患者に投与される。
一実施形態において、活性化合物は、以下の投薬計画：約２００ｍｇ、１日２回に従って、ヒト患者に投与される。
しかし、一実施形態において、コンジュゲート化合物は、以下の投薬計画：約５０又は約７５ｍｇ、１日３又は４回に従って、ヒト患者に投与される。
一実施形態において、コンジュゲート化合物は、以下の投薬計画：約１００又は約１２５ｍｇ、１日２回に従って、ヒト患者に投与される。
【０２７７】
上に記載した投薬量は、コンジュゲート（抗体へのＰＢＤ部分及びリンカーを含む）又は提供されるＰＢＤ化合物の有効量、例えばリンカーの切断後に放出可能な化合物の量に適用してよい。
【０２７８】
疾患の予防又は処置（治療）に関し、本発明のＡＤＣの適切な投薬量は、上記で定義されている通りの処置される疾患の型、疾患の重症度及び過程、該分子が予防的目的のために投与されるのか又は治療的目的のために投与されるのか、以前の治療法、患者の臨床歴及び抗体に対する応答、並びに主治医の裁量に依存する。分子は、１回で又は一連の処置にわたって患者に好適に投与される。疾患の種類及び重症度に応じて、約１μｇ／ｋｇから１５ｍｇ／ｋｇ（例えば０．１〜２０ｍｇ／ｋｇ）の分子が、例えば１回以上の別個の投与によるか、又は持続注入によるかに関わらず、患者への投与のための初期候補投薬量である。代表的な１日投薬量は、上述した因子に応じて約１μｇ／ｋｇから１００ｍｇ／ｋｇ以上の範囲に及ぶことがある。患者に投与されるＡＤＣの例示的な投薬量は、患者の体重に基づいて約０．１ｍｇ／ｋｇから約１０ｍｇ／ｋｇの範囲である。数日以上にわたる反復投与には、状態に応じて、疾患症状の所望の抑制が生じるまで処置が持続される。例示的な投薬計画は、ＡＤＣの約４ｍｇ／ｋｇの初期負荷用量、続いて追加の用量を毎週、二週間毎又は三週間毎に投与する過程を含む。他の投薬計画も有用であり得る。療法の進捗は、従来技術及びアッセイによって容易にモニタリングされる。
【０２７９】
処置
「処置」という用語は、本発明で使用する場合、状態を処置するという文脈において、一般に、ヒト又は動物（例えば、獣医学用途で）に関わらず、いくつかの所望の治療的効果、例えば状態の進行の阻害が達成される処置及び療法（治療）に関し、進行の速度の低減、進行の速度の停止、状態の後退、状態の寛解及び状態の治癒を含む。予防的措置（すなわち予防、防止）としての処置も含まれる。
【０２８０】
「治療的有効量」という用語は、本明細書で使用する場合、所望の処置計画に従って投与される場合に、合理的な利益／リスク比に相応する、いくつかの所望の治療的効果を生み出すのに有効である、活性化合物又は活性化合物を含む材料、組成物若しくは投薬形態（ｄｏｓａｇｅ  ｆｒｏｍ）のその量に関する。
同様に、「予防的有効量」という用語は、本明細書で使用する場合、所望の処置計画に従って投与される場合に合理的な利益／リスク比に相応する、いくつかの所望の予防的効果を生み出すのに有効である、活性化合物又は活性化合物を含む材料、組成物若しくは投薬形態（ｄｏｓａｇｅ  ｆｒｏｍ）のその量に関する。
【０２８１】
抗体−薬剤コンジュゲートの調製
抗体−薬剤コンジュゲートは、当業者に公知の有機化学反応、条件及び試薬を用いて、（１）共有結合を介して抗体−リンカー中間体Ａｂ−Ｌを形成するための抗体の求核基又は求電子基と二価のリンカー試薬との反応、続いて活性化薬剤部分試薬との反応、及び（２）共有結合を介して薬剤−リンカー試薬Ｄ−Ｌを形成するための薬剤部分試薬とリンカー試薬との反応、続いて抗体の求核基又は求電子基との反応を含む、複数の経路によって調製することができる。コンジュゲーション方法（１）及び（２）を様々な抗体及びリンカーと共に用いることで、本発明の抗体−薬剤コンジュゲートを調製してよい。
【０２８２】
抗体上の求核性基としては、側鎖チオール基、例えばシステインが挙げられるが、これに限定されない。チオール基は、求核性であり、反応して、本発明のリンカー部分などのリンカー部分上に求電子性基との共有結合を形成することができる。ある抗体は、還元性鎖間ジスルフィド、すなわちシステイン架橋を有する。抗体は、還元剤、例えばＤＴＴ（クリーランド試薬、ジチオスレイトール）又はＴＣＥＰ（トリス（２−カルボキシエチル）ホスフィンヒドロクロリド；Ｇｅｔｚ  ｅｔ  ａｌ（１９９９）Ａｎａｌ．Ｂｉｏｃｈｅｍ．Ｖｏｌ  ２７３：７３−８０；ソルテックベンチャーズ、マサチューセッツ州ビバリー）を用いた処理によって、リンカー試薬とコンジュゲートするために反応性にされてよい。各システインジスルフィド架橋はこのため、理論的に２種類の反応性チオール求核試薬を形成する。追加の求核性基を、リジンと２−イミノチオラン（トラウト試薬）との反応を通じて抗体に導入して、アミンのチオールへの変換を生じることができる。
【０２８３】
対象／患者
対象／患者は、動物、哺乳動物、胎盤哺乳動物、有袋類（例えばカンガルー、ウォンバット）、単孔類（例えばカモノハシ）、げっ歯類（例えばモルモット、ハムスター、ラット、マウス）、ネズミ類（例えばマウス）、ウサギ類（例えばウサギ）、トリ類（例えばトリ）、イヌ類（例えばイヌ）、ネコ類（例えばネコ）、ウマ類（例えばウマ）、ブタ類（例えばブタ）、ヒツジ類（例えばヒツジ）、ウシ類（例えば雌ウシ）、霊長類、サル類（例えばサル又は類人猿）、サル（例えばマーモセット、ヒヒ）、類人猿（例えばゴリラ、チンパンジー、オランウータン、テナガザル）又はヒトであってよい。
さらに、対象／患者は、その発生形態のいずれか、例えば胎児であってよい。好ましい一実施形態において、対象／患者はヒトである。
一実施形態において、患者は、各患者が細胞の表面上にαvβ6インテグリンを有する腫瘍を有する集団である。
【０２８４】
合成
式ＩＶのダイマー中間体への１つの考えられる経路を以下に示す：
【化３１】
2019069947.tif 000040
【０２８５】
中間体ＩＶを使用して、中間体ＶＩＩを生成できる。
【化３２−１】
2019069947.tif 000041
【化３２−２】
2019069947.tif 000042
【０２８６】
中間体ＩＶを使用して、中間体ＩＸを生成できる：
【化３３】
2019069947.tif 000043
【０２８７】
又は，中間体ＩＶを中間体Ｘと結合させて、中間体ＩＸを生成できる：
【化３４−１】
2019069947.tif 000044
【化３４−２】
2019069947.tif 000045
【０２８８】
中間体ＩＶを使用して、中間体ＸＶＩを生成できる。
【化３５】
2019069947.tif 000046
【０２８９】
中間体ＩＶを使用して、中間体ＸＩＸを生成できる。
【化３６】
2019069947.tif 000047
【０２９０】
式ＸＩＶのダイマー中間体への１つの考えられる経路を以下に示す：
【化３７】
2019069947.tif 000048
【０２９１】
中間体ＸＸＩを使用して、中間体ＸＸＶＩＩを生成できる：
【化３８−１】
2019069947.tif 000049
【化３８−２】
2019069947.tif 000050
【０２９２】
上のスキームにおいて、ＲN、ＲN’及びＲN”はそれぞれ独立して、窒素保護基を表す。ＲC及びＲC’はそれぞれ独立して、ＯＨ又はＯＰｒｏｔOを表し、式中、ＰｒｏｔOはヒドロキシ保護基である。保護基は当分野で周知である。ＲN、ＲN’及びＲN”は、例えばＢＯＣであってよい。ＰｒｏｔOはＴＨＰであってよい。用いた化学作用に応じて、Ｎ１０−Ｃ１１イミン結合の保護は、合成方法の、上で示したのと異なる段階で除去されることがある。
【０２９３】
一般に、化合物及びコンジュゲートは、最初に２個のＰＢＤモノマーをフェニレン又はピリジレンダイマー架橋によって連結して中間体ＩＶ又はＸＸＩを生成することによって、調製できる。中間体ＩＶのダイマー架橋におけるアリール環上のハロゲン基が次に使用されて、つなぎ部分（ｔｅｔｈｅｒ）（リンカー基Ｇ又はＬを含む）が形成されて、ＰＢＤダイマーを細胞結合因子に結合することがある。
より詳細には、各ＰＢＤモノマーのＣ８位にＸＨ基及び−Ｘ’Ｈ基を有する２個のＰＢＤモノマー（それぞれ中間体Ｉ及びＩＩ）は、中間体ＩＩＩ又は中間体ＸＸの−Ｔ−Ｈａｌ基及び−Ｔ’−Ｈａｌ基と反応してよい。このような合成方法によって、ＰＢＤモノマーは異なるようになるため、得られたＰＢＤダイマーは非対称である。同程度に、ＰＢＤモノマーは同じ場合がある。
ＰＢＤダイマー中間体ＩＶを使用して、架橋中のアリールハロゲン基を２、３の方法で反応させることによって、本発明の化合物及びコンジュゲートを提供してもよい。
【０２９４】
最初に、中間体ＩＶを薗頭クロスカップリング反応で使用して、ダイマー架橋のアリール基上にアセチレン基を提供できる。薗頭クロスカップリング反応は、パラジウム触媒、例えばＰｄ（Ｐｈ3）4、銅触媒、例えばＣｕＩ及び塩基、例えばジエチルアミンの存在下で末端アルキンをアリールハライドとカップリングするために、当分野で周知である。
アセチレンが末端アセチレンとして使用される場合、ＰＢＤダイマーの架橋を防止するために、アセチレン分子の片側は、例えばＴＭＳによって通例保護される。薗頭反応が完了すると、ＴＭＳ基が切断されてアルキン中間体Ｖを提供することができる。
アジド−アルキンヒュスゲン環化付加において、中間体Ｖをアジド化合物と反応させてトリアゾール誘導体を形成することができる。このような反応は、銅触媒によって触媒されてよい。本発明の化合物及びコンジュゲートを形成するために、アジドはエチレン基及び可変数のＰＥＧ基に結合される。アジドは、アミン基によって終端されて更に反応することがある。中間体Ｖとアミノ−アジド化合物との反応によって、中間体ＶＩが提供される。
【０２９５】
中間体ＶＩの遊離アミン基は次に、細胞結合単位へ結合するためにリンカー基のカルボン酸基と反応して、ＰＢＤダイマーをリンカー基Ｇ又はＬに連結するアミド基を形成し、化合物ＶＩＩを提供することができる。
中間体ＶＩＩのリンカー／反応性基Ｇは、細胞結合因子にコンジュゲートされて、本発明のコンジュゲートを提供することができる。
代わりの薗頭反応として、中間体ＩＶを、パラジウム触媒及び銅触媒並びに塩基の存在下でアセチルアミン、例えばプロパルギルアミンにカップリングさせることができる。このような反応は、アクリン基が保存され、遊離末端アミンが更なる反応に利用できる、ＰＢＤダイマー架橋に結合するつなぎ部（ｔｅｔｈｅｒ）の一部を提供する。例えば、中間体ＩＶとプロパルギルアミンとの反応によって、中間体ＶＩＩＩが提供される。
【０２９６】
中間体ＶＩＩＩの末端アミンは、（細胞結合因子への結合のために）リンカー／反応性基Ｇに結合された例えばカルボン酸基と反応して、中間体ＩＸを提供することができる。
中間体ＩＸの代わりの合成として、中間体ＸＩのカルボン酸基をプロパルギルアミンと反応させて、中間体ＸＩＩを形成することができる。薗頭反応における中間体ＩＶと中間体ＸＩＩとの反応によって、中間体ＸＩＩＩが生じる。
可変ＰＥＧ鎖によって終端された保護アミン基は、リンカー／反応性基ＧをＰＢＤダイマー上へカップリングして中間体ＸＩＶを生成するために、脱保護されて中間体ＸＩＶのカルボン酸基と反応させることができる。
【０２９７】
中間体ＩＶは、クロスカップリングアミノ化反応、例えばブッフバルト−ハートウィッグアミノ化でも使用してよい。炭素−窒素結合は、アミンのアリールハライドとのパラジウム触媒クロスカップリングによって形成される。このようなクロスカップリング反応で使用するための２、３のパラジウム触媒、例えばＰｄ（Ｐｈ3）4又はＲｕＰｈｏｓ／ＲｕＰｈｏｓＰｄが公知である。
中間体ＩＶは、保護プロパン−１−アミンによって官能化されたピペリジンとの反応によって中間体ＸＶが提供される。中間体ＸＶの保護アミンは、細胞結合因子への結合のために、リンカー／反応性基Ｇに結合された例えばカルボン酸基と更に反応して、中間体ＸＶＩを提供することができる。
中間体ＩＶの部分保護ピペラジンによるクロスカップリングアミノ化反応、例えばブッフバルト−ハートウィッグアミノ化、続いての（例えばトリフルオロ酢酸による）脱保護によって、中間体ＸＶＩＩが提供される。
【０２９８】
中間体ＸＶＩＩの脱保護されたピペラジンアミン基は、中間体ＸＶＩＩＩ中のカルボン酸基と反応して、中間体ＸＩＸを提供することができる。
中間体ＸＸＩを使用して、オキシム中間体ＸＸＩＶを形成することができる。例えば部分保護ＰＥＧ−ジアミンである中間体ＸＸＩＩを、中間体ＸＩＶのカルボン酸基と反応させてよい。脱保護によって、中間体ＸＩＩＩが生じる。
中間体ＸＸＩ及びＸＸＩＩＩの反応によって、オキシム中間体ＸＸＩＶが生じる。ｓｙｎオキシム及びａｎｔｉオキシムは、分取ＨＰＬＣを使用して分割することができる。
中間体ＸＸＩを使用してもクリルアミド中間体ＸＸＶＩＩを形成することができる。例えば、アルデヒド中間体ＸＸＩをクネーフェナーゲル縮合においてマロン酸と反応させて、アクリル酸及び中間体ＸＸＶを生じることができる。これを部分保護ＰＥＧ−ジアミンと反応させて、中間体ＸＸＶＩを生じることができる。脱保護及び中間体ＸＩＶによるカップリングによって、アクリルアミド中間体ＸＸＶＩＩが生じる。
【０２９９】
２個のイミン部分を含有するＰＢＤ化合物の合成は、参照により本明細書に組み入れられている、以下の参考文献で広範に論じられている：
ａ）国際公開第００／１２５０８号（１４から３０頁）；
ｂ）国際公開第２００５／０２３８１４号（３から１０頁）；及び
ｃ）国際公開第２００５／０８５２５９号（３１から３９頁）。
【実施例】
【０３００】
一般実験方法
旋光度はＡＤＰ２２０偏光計（ベーリンハム・スタンレイＬｔｄ．）で測定し、濃度（ｃ）はｇ／１００ｍＬで示す。融点は、デジタル融点装置（エレクトロサーマル）を使用して測定した。ＩＲスペクトルは、パーキン−エルマースペクトル１０００ＦＴ  ＩＲ分光計で記録した。1Ｈ及び13Ｃ  ＮＭＲスペクトルは、３００ＫでブルーカーＡｖａｎｃｅ  ＮＭＲ分光計を使用して、それぞれ４００及び１００ＭＨｚにて得た。化学シフトは、ＴＭＳ（δ＝０．０ｐｐｍ）に対して記録し、シグナルはｓ（シングレット）、Ｄ（ダブレット）、ｔ（トリプレット）、Ｄｔ（ダブルトリプレット）、Ｄｄ（ダブレットのダブレット）、Ｄｄｄ（ダブレットのダブルダブレット）又はｍ（マルチプレット）と呼び、カップリング定数をヘルツ（Ｈｚ）で示す。質量分析（ＭＳ）データは、ウォーターズ２９９６  ＰＤＡを備えたウォーターズウォーターズ２６９５  ＨＰＬＣに連結された、ウォーターズマイクロマスＺＱ装置を使用して収集した。使用したウォーターズマイクロマスＺＱパラメータは：キャピラリー（ｋＶ）、３．３８；コーン（Ｖ）、３５；エクストラクタ（Ｖ）、３．０；ソース温度（℃）、１００；脱溶媒和温度（℃）、２００；コーン流量（Ｌ／ｈ）、５０；脱溶媒和流量（Ｌ／ｈ）、２５０であった。高分解能質量分析（ＨＲＭＳ）データは、ウォーターズマイクロマスＱＴＯＦグローバルのポジティブＷモードで、サンプルを装置内に導入するために金属コーティングされたホウケイ酸ガラスチップを使用して記録した。薄層クロマトグラフィー（ＴＬＣ）はシリカゲルアルミニウムプレート（メルク６０、Ｆ254）上で行い、フラッシュクロマトグラフィーはシリカゲル（メルク６０、２３０−４００メッシュＡＳＴＭ）を使用した。全ての化学物質及び溶媒はシグマ−アルドリッチより購入し、更に精製せずに供給した。
【０３０１】
一般ＬＣ／ＭＳ条件：ＨＰＬＣ（ウォーターズアライアンス２６９５）は、水（Ａ）（ギ酸０．１％）及びアセトニトリル（Ｂ）（ギ酸０．１％）の移動相を使用して実行した。勾配：初期組成：５％Ｂで１．０分間保持して、次に３分間以内に５％Ｂから９５％Ｂ。組成を９５％Ｂで０．５分間保持して、次に０．３分間で５％Ｂまで戻す。全勾配運転時間は５分であった。流量３．０ｍＬ／分で、４００μＬを質量分析計内へ通過するゼロデッド体積のＴ字片を介して分割した。波長検出範囲：２２０から４００ｎｍ。関数型：ダイオードアレイ（５３５スキャン）。カラム：フェノメネクス（登録商標）オニキスモノリシックＣ１８  ５０×４．６０ｍｍ。
【０３０２】
実施例５から１１の分析ＬＣ／ＭＳ条件は、以下の通りであった：島津ネクセラ（登録商標）／プロミネンス（登録商標）ＬＣＭＳ−２０２０を使用して、ポジティブ・モード・エレクトロスプレー質量分析を行った。使用した移動相は、溶媒Ａ（０．１％ギ酸を含むＨ2Ｏ）及び溶媒Ｂ（０．１％ギ酸を含むＣＨ3ＣＮ）であった。勾配：初期組成：０．２５分間にわたって５％Ｂ、次に２分の期間にわたって５％Ｂから１００％Ｂまで上昇させた。組成を１００％Ｂで０．５０分間保持して、次に０．０５分間で５％Ｂに戻し、５％で０．０５分間保持した。全勾配運転期間は３．０分であった。流量は０．８ｍＬ／分であった。２１４ｎｍ及び２５４ｎｍにて検出を行った。カラム：ウォーターズアクイティＵＰＬＣ（登録商標）ＢＥＨシールドＲＰ１８  １．７μｍ  ２．１×５０ｍｍ、５０℃にて。
【０３０３】
実施例５から１１の分取ＨＰＬＣ条件は、以下の通りであった：逆相超高速液体クロマトグラフィー（ＵＦＬＣ）は、島津プロミネンス登録商標）装置で、以下の寸法のフェノメネックス（登録商標）ジェミニＮＸ  ５μ  Ｃ１８カラム（５０℃にて）：分析用１５０×４．６ｍｍ及び分取作業用１５０×２１．２ｍｍを使用して行った。使用した溶離液は、溶媒Ａ（０．１％ギ酸を含むＨ2Ｏ）及び溶媒Ｂ（０．１％ギ酸を含むＣＨ3ＣＮ）であった。全てのＵＦＬＣ実験は、勾配条件を用いて行った：０から３０分まで、Ｂの組成を０から１００％まで上昇させ、更に２分間１００％Ｂで保持した。３２．０分から３２．１分まで、Ｂの組成を１００％から０％まで低下させて、３５．０分まで０％Ｂで保持した。全勾配運転時間は３５．０分であった。使用した流量は、分析では１．０ｍＬ／分、分取ＨＰＬＣでは２０．０ｍＬ／分であった。２５４ｎｍ及び２８０ｎｍにて検出を行った。
【０３０４】
［実施例１］
（ａ）（１１Ｓ，１１ａＳ，１１’Ｓ，１１ａ’Ｓ）−ジ−ｔｅｒｔ−ブチル８，８’−（（（５−ハロ−１，３−フェニレン）ビス（メチレン））ビス（オキシ））ビス（７−メトキシ−２−メチレン−５−オキソ−１１−（（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−イル）オキシ）−２，３，１１，１１ａ−テトラヒドロ−１Ｈーピロロ［２，１−ｃ］［１，４］ベンゾジアゼピン−１０（５Ｈ）−カルボキシレート）（２ａ、２ｂ、２ｃ）
【化３９】
2019069947.tif 000051
【０３０５】
（ｉ）（１１Ｓ，１１ａＳ，１１’Ｓ，１１ａ’Ｓ）−ジ−ｔｅｒｔ−ブチル８，８’−（（（５−ヨード−１，３−フェニレン）ビス（メチレン））ビス（オキシ））ビス（７−メトキシ−２−メチレン−５−オキソ−１１−（（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−イル）オキシ）−２，３，１１，１１ａ−テトラヒドロ−１Ｈ−ピロロ［２，１−ｃ］［１，４］ベンゾジアゼピン−１０（５Ｈ）−カルボキシレート）（２ａ）。
１，３−ビス（ブロモメチル）−５−ヨードベンゼン（２．００ｇ、５．２０ｍｍｏｌ）を、無水ＤＭＦ（６０ｍＬ）中のＢｏｃ／ＴＨＰ保護ＰＢＤキャッピング単位１（４．７５ｇ、１０．３ｍｍｏｌ）、ＴＢＡＩ（１９０ｍｇ、０．５２ｍｍｏｌ）及びＫ2ＣＯ3（１．４２ｇ、１０．３ｍｍｏｌ）の撹拌溶液に添加した。反応混合物を６０℃まで加熱して、アルゴン雰囲気下で３時間撹拌し、この時点でのＬＣ／ＭＳ分析によって、保持時間４．１５分（ＥＳ＋）ｍ／ｚ  １１７１（［Ｍ＋Ｎａ］+、約１０％相対強度）での実質的な生成物の形成が明らかになった。反応混合物を室温まで放冷して、ＤＭＦを真空中での蒸発によって除去した。得られた残留物を水（５０ｍＬ）とＥｔＯＡｃ（５０ｍＬ）とで分配して、水相をＥｔＯＡｃ（３×２０ｍＬ）で抽出した。合わせた有機層を水（２×２０ｍＬ）、塩水（５０ｍＬ）で洗浄し、脱水して（ＭｇＳＯ4）、濾過して、真空中で蒸発させて、粗生成物を得た。フラッシュクロマトグラフィーによる精製（勾配溶離：５０：５０体積／体積  ＥｔＯＡｃ／ヘキサンから８０：２０体積／体積  ＥｔＯＡｃ／ヘキサン）によって、ビス−エーテル２ａを白色泡（５．４２ｇ、９１％収率）として得た：
【０３０６】
（ｉｉ）（１１Ｓ，１１ａＳ，１１’Ｓ，１１ａ’Ｓ）−ジ−ｔｅｒｔ−ブチル８，８’−（（（５−ブロモ−１，３−フェニレン）ビス（メチレン））ビス（オキシ））ビス（７−メトキシ−２−メチレン−５−オキソ−１１−（（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−イル）オキシ）−２，３，１１，１１ａ−テトラヒドロ−１Ｈ−ピロロ［２，１−ｃ］［１，４］ベンゾジアゼピン−１０（５Ｈ）−カルボキシレート）（２ｂ）。
１−ブロモ−３，５−ビス（ブロモメチル）ベンゼン（１．５４ｇ、４．５３ｍｍｏｌ）を、無水ＤＭＦ（５２ｍＬ）中のＢｏｃ／ＴＨＰ保護ＰＢＤキャッピング単位１（４．２０ｇ、９．０６ｍｍｏｌ）、ＴＢＡＩ（１６７ｍｇ、０．４５ｍｍｏｌ）及びＫ2ＣＯ3（１．２５ｇ、９．０６ｍｍｏｌ）の撹拌溶液に添加した。反応混合物を６０℃まで加熱して、アルゴン雰囲気下で５時間撹拌し、この時点でのＬＣ／ＭＳ分析によって、保持時間４．１０分（ＥＳ＋）ｍ／ｚ  １１０１（［Ｍ＋Ｈ］+、約７０％相対強度）での実質的な生成物の形成が明らかとなった。反応混合物を室温まで放冷して、ＤＭＦを真空中での蒸発によって除去した。得られた残留物を水（６０ｍＬ）とＥｔＯＡｃ（６０ｍＬ）とで分配して、水相をＥｔＯＡｃ（３×２５ｍＬ）で抽出した。合わせた有機層を水（３０ｍＬ）、塩水（５０ｍＬ）で洗浄し、脱水して（ＭｇＳＯ4）、濾過して、真空中で蒸発させて、粗生成物を得た。フラッシュクロマトグラフィーによる精製（勾配溶離：５０：５０体積／体積  ＥｔＯＡｃ／ヘキサンから１００％ＥｔＯＡｃ）によって、ビス−エーテル２ｂを白色泡（３．３７ｇ、６８％収率）として得た：
【０３０７】
（ｉｉｉ）（１１Ｓ，１１ａＳ，１１’Ｓ，１１ａ’Ｓ）−ジ−ｔｅｒｔ−ブチル８，８’−（（（５−クロロ−１，３−フェニレン）ビス（メチレン））ビス（オキシ））ビス（７−メトキシ−２−メチレン−５−オキソ−１１−（（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−イル）オキシ）−２，３，１１，１１ａ−テトラヒドロ−１Ｈ−ピロロ［２，１−ｃ］［１，４］ベンゾジアゼピン−１０（５Ｈ）−カルボキシレート）（２ｃ）
１，３−ビス（ブロモメチル）−５−クロロベンゼン（１．４２ｇ、４．８０ｍｍｏｌ）を、無水ＤＭＦ（５５ｍＬ）中のＢｏｃ／ＴＨＰ保護ＰＢＤキャッピング単位１（４．４２ｇ、９．６０ｍｍｏｌ）、ＴＢＡＩ（１７７ｍｇ、０．４８ｍｍｏｌ）及びＫ2ＣＯ3（１．３３ｇ、９．６０ｍｍｏｌ）の撹拌溶液に添加した。反応混合物を６０℃まで加熱して、アルゴン雰囲気下で１．５時間撹拌し、この時点でのＬＣ／ＭＳ分析によって、保持時間４．０８分（ＥＳ＋）ｍ／ｚ  １０５７（［Ｍ＋Ｈ］+、約３０％相対強度）での実質的な生成物の形成が明らかとなった。反応混合物を室温まで放冷して、ＤＭＦを真空中での蒸発によって除去した。得られた残留物を水（６０ｍＬ）とＥｔＯＡｃ（６０ｍＬ）とで分配して、水相をＥｔＯＡｃ（３×２０ｍＬ）で抽出した。合わせた有機層を水（２０ｍＬ）、塩水（４０ｍＬ）で洗浄し、脱水して（ＭｇＳＯ4）、濾過して、真空中で蒸発させて、粗生成物を得た。フラッシュクロマトグラフィーによる精製（勾配溶離：５０：５０体積／体積  ＥｔＯＡｃ／ヘキサンから８０：２０体積／体積  ＥｔＯＡｃ／ヘキサン）によって、ビス−エーテル２ｃを白色泡（５．１０ｇ、９９％収率）として得た。
【０３０８】
（ｂ）（１１Ｓ，１１ａＳ，１１’Ｓ，１１ａ’Ｓ）−ジ−ｔｅｒｔ−ブチル８，８’−（（（５−エチニル−１，３−フェニレン）ビス（メチレン））ビス（オキシ））ビス（７−メトキシ−２−メチレン−５−オキソ−１１−（（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−イル）オキシ）−２，３，１１，１１ａ−テトラヒドロ−１Ｈ−ピロロ［２，１−ｃ］［１，４］ベンゾジアゼピン−１０（５Ｈ）−カルボキシレート）（４）
【化４０】
2019069947.tif 000052
【０３０９】
（ｉ）（１１Ｓ，１１ａＳ，１１’Ｓ，１１ａ’Ｓ）−ジ−ｔｅｒｔ−ブチル８，８’−（（（５−（（トリメチルシリル）エチニル）−１，３−フェニレン）ビス（メチレン））ビス（オキシ））ビス（７−メトキシ−２−メチレン−５−オキソ−１１−（（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−イル）オキシ）−２，３，１１，１１ａ−テトラヒドロ−１Ｈ−ピロロ［２，１−ｃ］［１，４］ベンゾジアゼピン−１０（５Ｈ）−カルボキシレート）（３）
触媒量のＰｄ（ＰＰｈ3）4（１５．０ｍｇ、１３．１μｍｏｌ）を、オーブンで乾燥させた密閉式容器内の無水ＤＭＦ（５．６ｍＬ）中のビス−エーテル２ａ（７５０ｍｇ、０．６５ｍｍｏｌ）、ＴＭＳ−アセチレン（２７８μＬ、１９１ｍｇ、１．９６ｍｍｏｌ）、ＣｕＩ（５．０ｍｇ、２６．１μｍｏｌ）、ジエチルアミン（１．３５ｍＬ、９５６ｍｇ、１３．１ｍｍｏｌ）及びオーブンで乾燥させた４Åモレキュラーシーブペレットの混合物に添加した。混合物を脱気して、アルゴンを３回流し、次に１００℃の電子レンジで３０分間加熱し、この時点でのＬＣ／ＭＳ分析（方法Ａ）によって、保持時間４．３７分（ＥＳ＋）ｍ／ｚ  １１４２（［Ｍ＋Ｎａ］+、約４０％相対強度）における、出発材料の完全な消費と実質的な生成物の形成が明らかとなった。ＬＣ／ＭＳ条件下でのＴＭＳ切断に相当する、保持時間３．９７分（ＥＳ＋）ｍ／ｚ  １０６９（［Ｍ＋Ｎａ］+、約６０％相対強度）におけるピークが確認された。反応混合物を室温まで放冷して、次に焼結物で濾過して、シーブ（ＤＭＦで洗浄）を除去した。濾液を真空中で蒸発させ、得られた残留物をフラッシュクロマトグラフィー（勾配溶離：５０：５０体積／体積  ＥｔＯＡｃ／ヘキサンから８０：２０体積／体積  ＥｔＯＡｃ／ヘキサン）にかけて、ＴＭＳ−アセチレン３を黄色泡（６９１ｍｇ、９５％収率）として得た。
【０３１０】
（ｉｉ）（１１Ｓ，１１ａＳ，１１’Ｓ，１１ａ’Ｓ）−ジ−ｔｅｒｔ−ブチル８，８’−（（（５−エチニル−１，３−フェニレン）ビス（メチレン））ビス（オキシ））ビス（７−メトキシ−２−メチレン−５−オキソ−１１−（（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−イル）オキシ）−２，３，１１，１１ａ−テトラヒドロ−１Ｈ−ピロロ［２，１−ｃ］［１，４］ベンゾジアゼピン−１０（５Ｈ）−カルボキシレート）（４）
固体Ｋ2ＣＯ3（３８３ｍｇ、２．７７ｍｍｏｌ）を、ＭｅＯＨ（２０ｍＬ）中のＴＭＳ保護化合物３（１．５５ｇ、１．３９ｍｍｏｌ）の撹拌溶液に添加した。室温で３時間撹拌した後、ＬＣ／ＭＳで判定した通りに、反応が完了したと見なした［保持時間４．００分（ＥＳ＋）ｍ／ｚ  １０４７（［Ｍ＋Ｈ］+、約３０％相対強度）での所望の生成物ピーク］。ＭｅＯＨを真空中での蒸発によって除去し、得られた残留物を水（６０ｍＬ）とＥｔＯＡｃ（６０ｍＬ）とで分配した。相を分離して、水相をＥｔＯＡｃ（３×２０ｍＬ）で抽出した。合わせた有機層を水（３０ｍＬ）、塩水（３０ｍＬ）で洗浄し、脱水して（ＭｇＳＯ4）、濾過して、真空中で蒸発させて、粗生成物を得た。フラッシュクロマトグラフィーによる精製（勾配溶離：５０：５０体積／体積  ＥｔＯＡｃ／ヘキサンから８０：２０体積／体積  ＥｔＯＡｃ／ヘキサン）によって、アセチレン４をオレンジ色泡として得た（１．１３ｇ、７８％収率）。
【０３１１】
（ｃ）（１１Ｓ，１１ａＳ，１１’Ｓ，１１ａ’Ｓ）−ジ−ｔｅｒｔ−ブチル８，８’−（（（５−（１−（２−（２−（２−（２−アミノエトキシ）エトキシ）エトキシ）エチル）−１Ｈ−１，２，３−トリアゾール−４−イル）−１，３−フェニレン）ビス（メチレン））ビス（オキシ））ビス（７−メトキシ−２−メチレン−５−オキソ−１１−（（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−イル）オキシ）−２，３，１１，１１ａ−テトラヒドロ−１Ｈ−ピロロ［２，１−ｃ］［１，４］ベンゾジアゼピン−１０（５Ｈ）−カルボキシレート）（５）
【化４１】
2019069947.tif 000053
【０３１２】
固体ＣｕＳＯ4・５Ｈ2Ｏ（１３．０ｍｇ、５２．０μｍｏｌ）及び（＋）−Ｌ−アスコルビン酸ナトリウム（４１．０ｍｇ、０．２１ｍｍｏｌ）をｔｅｒｔ−ＢｕＯＨ（６ｍＬ）及びＨ2Ｏ（６ｍＬ）中の１１−アジド−３，６，９−トリオキサウンデカン−１−アミン（２２７ｍｇ、２０７μＬ、１．０４ｍｍｏｌ）及びアルキン４（１．０９ｇ、１．０４ｍｍｏｌ）の撹拌溶液に室温で添加した。反応が進行するにつれて、黄色から緑色への色の変化が確認された。１６時間撹拌した後、ＬＣ／ＭＳによる分析によって、保持時間３．１２分（ＥＳ＋）ｍ／ｚ  １２６５（［Ｍ＋Ｈ］+、約１００％相対強度）におけるピークに相当する実質的な量の所望の生成物が形成されたことが明らかになった［注記：いくつかの場合で反応の進行が失速したが、更なるＣｕＳＯ4・５Ｈ2Ｏ（０．０５当量）及び（＋）−Ｌ−アスコルビン酸ナトリウム（０．２当量）の添加時に、反応は完了まで推進された］。反応混合物を（分離漏斗を振とうせずに）水（５０ｍＬ）とＥｔＯＡｃ（５０ｍＬ）とで分配した。水相をＥｔＯＡｃ（３×１５ｍＬ）で抽出し、合わせた有機層を水（３０ｍＬ）、塩水（５０ｍＬ）で洗浄し、脱水し（ＭｇＳＯ4）、濾過して、真空中で蒸発させ、粗生成物５を緑色泡として得た（１．３２ｇ、１００％粗収率）。粗生成物を更に精製せずに、次の工程へ移行させた。
【０３１３】
（ｄ）（１１Ｓ，１１ａＳ，１１’Ｓ，１１ａ’Ｓ）−ジ−ｔｅｒｔ−ブチル８，８’−（（（５−（１−（１８−（２，５−ジオキソ−２，５−ジヒドロ−１Ｈ−ピロール−１−イル）−１３−オキソ−３，６，９−トリオキサ−１２−アザオクタデシル）−１Ｈ−１，２，３−トリアゾール−４−イル）−１，３−フェニレン）ビス（メチレン））ビス（オキシ））ビス（７−メトキシ−２−メチレン−５−オキソ−１１−（（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−イル）オキシ）−２，３，１１，１１ａ−テトラヒドロ−１Ｈ−ピロロ［２，１−ｃ］［１，４］ベンゾジアゼピン−１０（５Ｈ）−カルボキシレート）（６）
【化４２】
2019069947.tif 000054
【０３１４】
固体６−マレイミドヘキサン酸Ｎ−ヒドロキシスクシンイミドエステル（３２７ｍｇ、１．０６ｍｍｏｌ）を無水ＤＣＭ（３０ｍＬ）中の第１級アミン５（１．２８ｇ、１．０１ｍｍｏｌ）の撹拌溶液に室温にて添加した。進行をＬＣ／ＭＳによって監視し、３日間の撹拌の後、反応は更に進行せず、実質的な量の所望の生成物が保持時間３．６５分（ＥＳ＋）ｍ／ｚ  １４５８（［Ｍ＋Ｈ］+、約１００％相対強度）にて観察され、保持時間３．１５分における未反応出発材料を伴っていた。反応混合物をシリカゲルで処理して、溶媒を真空中での蒸発により除去した。得られた残留物をフラッシュクロマトグラフィー（勾配溶離：１００％  ＤＣＭから９７：３体積／体積  ＤＣＭ／ＭｅＯＨ）にかけて、マレイミド６を泡として得た（６５８ｍｇ、４５％収率）。
【０３１５】
（ｅ）Ｎ−（２−（２−（２−（２−（４−（３，５−ビス（（（（Ｓ）−７−メトキシ−２−メチレン−５−オキソ−２，３，５，１１ａ−テトラヒドロ−１Ｈ−ピロロ［２，１−ｃ］［１，４］ベンゾジアゼピン−８−イル）オキシ）メチル）フェニル）−１Ｈ−１，２，３−トリアゾール−１−イル）エトキシ）エトキシ）エトキシ）エチル）−６−（２，５−ジオキソ−２，５−ジヒドロ−１Ｈ−ピロール−１−イル）ヘキサンアミド（７）。
【化４３】
2019069947.tif 000055
【０３１６】
９５：５体積／体積  ＴＦＡ／Ｈ2Ｏ（５ｍＬ）の溶液を、Ｂｏｃ／ＴＨＰ保護化合物６のサンプル（４２８ｍｇ、０．２９ｍｍｏｌ）に０℃（氷／アセトン）にて添加した。０℃にて１時間撹拌した後、ＬＣ／ＭＳで判定した通りに、反応が完了したと見なし、保持時間２．７２分（ＥＳ＋）ｍ／ｚ  １０５４（［Ｍ＋Ｈ］+、約７０％相対強度）における所望の生成物のピーク。反応混合物は、低温のまま保持して、ＮａＨＣＯ3（１００ｍＬ）の冷却飽和水溶液に滴下添加した。混合物をＤＣＭ（３×３０ｍＬ）で抽出して、合わせた有機層をＨ2Ｏ（２０ｍＬ）、塩水（４０ｍＬ）で洗浄し、脱水して（ＭｇＳＯ4）、濾過して、真空中で蒸発させて粗生成物を得た。フラッシュクロマトグラフィーによる精製（勾配溶離：１００％ＣＨＣｌ3から９６：４体積／体積  ＣＨＣｌ3／ＭｅＯＨ）によって、７をオレンジ色泡として得た（１６３ｍｇ、５３％収率）。
【０３１７】
［実施例２］
（ａ）（１１Ｓ，１１ａＳ，１１’Ｓ，１１ａ’Ｓ）−ジ−ｔｅｒｔ−ブチル８，８’−（（（５−（３−アミノプロパ−１−イン−１−イル）−１，３−フェニレン）ビス（メチレン））ビス（オキシ））ビス（７−メトキシ−２−メチレン−５−オキソ−１１−（（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−イル）オキシ）−２，３，１１，１１ａ−テトラヒドロ−１Ｈ−ピロロ［２，１−ｃ］［１，４］ベンゾジアゼピン−１０（５Ｈ）−カルボキシレート）（８）
【化４４】
2019069947.tif 000056
【０３１８】
触媒量のＰｄ（ＰＰｈ3）4（５．０ｍｇ、４．２μｍｏｌ）を、オーブンで乾燥させた密閉式容器内の無水ＤＭＦ（１．８ｍＬ）中のビス−エーテル２ａ（２４２ｍｇ、０．２１ｍｍｏｌ）、プロパルギルアミン（４１μＬ、３５ｍｇ、０．６３ｍｍｏｌ）、ＣｕＩ（１．６ｍｇ、８．４μｍｏｌ）、ジエチルアミン（０．４２ｍＬ、３０９ｍｇ、４．２２ｍｍｏｌ）及びオーブンで乾燥させた４Åモレキュラーシーブペレットの混合物に添加した。混合物を脱気して、アルゴンを３回流し、次に１００℃の電子レンジで３分間加熱し、この時点でのＬＣ／ＭＳ分析によって、保持時間３．１８分（ＥＳ＋）ｍ／ｚ  １０７６（［Ｍ＋Ｈ］+、約６０％相対強度）における、出発材料の完全な消費と実質的な生成物の形成が明らかとなった。反応混合物を室温まで放冷して、次に焼結物で濾過して、シーブ（ＤＭＦで洗浄）を除去した。濾液を真空中で蒸発させて、不安定な粗生成物８を得て、これを精製又は分析せずにただちに次の工程で使用した。
【０３１９】
（ｂ）（１１Ｓ，１１ａＳ，１１’Ｓ，１１ａ’Ｓ）−ジ−ｔｅｒｔ−ブチル８，８’−（（（５−（１−（２，５−ジオキソ−２，５−ジヒドロ−１Ｈ−ピロール−１−イル）−３，１９−ジオキソ−７，１０，１３，１６−テトラオキサ−４，２０−ジアザトリコス−２２−イン−２３−イル）−１，３−フェニレン）ビス（メチレン））ビス（オキシ））ビス（７−メトキシ−２−メチレン−５−オキソ−１１−（（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−イル）オキシ）−２，３，１１，１１ａ−テトラヒドロ−１Ｈ−ピロロ［２，１−ｃ］［１，４］ベンゾジアゼピン−１０（５Ｈ）−カルボキシレート）（９）
【化４５】
2019069947.tif 000057
【０３２０】
ＭＡＬ−ｄＰＥＧ（登録商標）４−酸（８８ｍｇ、０．２１ｍｍｏｌ）を、無水ＤＣＭ（４ｍＬ）中のＥＤＣＩ（４１ｍｇ、０．２１ｍｍｏｌ）及び粗第１級アミン８の撹拌溶液に室温にて添加した。反応混合物をアルゴン雰囲気下で３時間撹拌して、この時点でのＬＣ／ＭＳによる分析によって、保持時間３．５８分（ＥＳ＋）ｍ／ｚ  １４７５（［Ｍ＋Ｈ］+、約１０％相対強度）、１４９８（［Ｍ＋Ｎａ］+、約５％相対強度）にて、実質的な量の所望の生成物が示され、保持時間３．８５分における副生成物を伴っていた。反応混合物をＤＣＭ（３０ｍＬ）で希釈して、Ｈ2Ｏ（３×１０ｍＬ）、塩水（２０ｍＬ）で洗浄し、脱水して（ＭｇＳＯ4）、濾過して、真空中で蒸発させて粗生成物を得た。フラッシュクロマトグラフィーによる精製（勾配溶離：１００％ＤＣＭから９６：４体積／体積  ＤＣＭ／ＭｅＯＨ）によって、マレイミド９を泡として得た（６７ｍｇ、２工程で２２％収率）。
【０３２１】
（ｃ）Ｎ−（３−（３，５−ビス（（（（Ｓ）−７−メトキシ−２−メチレン−５−オキソ−２，３，５，１１ａ−テトラヒドロ−１Ｈ−ピロロ［２，１−ｃ］［１，４］ベンゾジアゼピン−８−イル）オキシ）メチル）フェニル）プロパ−２−イン−１−イル）−１−（３−（２，５−ジオキソ−２，５−ジヒドロ−１Ｈ−ピロール−１−イル）プロパンアミド）−３，６，９，１２−テトラオキサペンタデカン−１５−アミド（１０）
【化４６】
2019069947.tif 000058
【０３２２】
９５：５体積／体積  ＴＦＡ／Ｈ2Ｏ（１ｍＬ）の溶液を、Ｂｏｃ／ＴＨＰ保護化合物９のサンプル（６７ｍｇ、４５．５μｍｏｌ）に０℃（氷／アセトン）にて添加した。０℃にて１．５時間撹拌した後、ＬＣ／ＭＳで判定した通りに、反応が完了したと見なし、保持時間２．６７分（ＥＳ＋）ｍ／ｚ  １０７０（［Ｍ＋Ｈ］+、約５％相対強度）における所望の生成物のピーク。反応混合物は、低温のまま保持して、ＮａＨＣＯ3（５０ｍＬ）の冷却飽和水溶液に滴下添加した。混合物をＤＣＭ（３×１５ｍＬ）で抽出して、合わせた有機層を塩水（４０ｍＬ）で洗浄し、脱水して（ＭｇＳＯ4）、濾過して、真空中で蒸発させて粗生成物を得た。フラッシュクロマトグラフィーによる精製（勾配溶離：１００％ＣＨＣｌ3から９６：４体積／体積  ＣＨＣｌ3／ＭｅＯＨ）によって、１０をオレンジ色泡として得た（１２ｍｇ、２４％収率）。
【０３２３】
［実施例３］
（ａ）（１１Ｓ，１１ａＳ，１１’Ｓ，１１ａ’Ｓ）−ジ−ｔｅｒｔ−ブチル８，８’−（（（５−（４−（３−（（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ）プロピル）ピペラジン−１−イル）−１，３−フェニレン）ビス（メチレン））ビス（オキシ））ビス（７−メトキシ−２−メチレン−５−オキソ−１１−（（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−イル）オキシ）−２，３，１１，１１ａ−テトラヒドロ−１Ｈ−ピロロ［２，１−ｃ］［１，４］ベンゾジアゼピン−１０（５Ｈ）−カルボキシレート）（１１）
【化４７】
2019069947.tif 000059
【０３２４】
ビスエーテル２ｃのサンプル（２５０ｍｇ、０．２４ｍｍｏｌ）、ＮａＯtＢｕ（５７ｍｇ、０．５９ｍｍｏｌ）、ＲｕＰｈｏｓ（１１ｍｇ、２３．７μｍｏｌ）及びＲｕＰｈｏｓＰｄ（１９ｍｇ、２３．７μｍｏｌ）を（乾燥器（ｄｅｓｉｃａｔｏｒ）内で放冷した）オーブンで乾燥させた密閉式管に添加した。混合物を脱気して、アルゴンを３回流してから、無水ＴＨＦ（５ｍＬ）を添加し、次に不活性雰囲気下で約１０分間、赤色が退色するまで撹拌した。無水ＴＨＦ（１ｍＬ）中の３−（ピペラジン−１−イル）プロパン−１−アミン（５８ｍｇ、０．２６ｍｍｏｌ）の溶液を添加して、混合物を再度脱気して、アルゴンを３回流した。反応混合物を予熱した油浴中８０℃で２．５時間加熱し、この時点でのＬＣ／ＭＳ分析によって、保持時間３．３５分（ＥＳ＋）ｍ／ｚ  １２６４（［Ｍ＋Ｈ］+、約６０％相対強度）での３成分混合物：所望の生成物、保持時間３．９５分での主副生成物（２ｃの脱塩素化類似体）及び４．１３分のショルダー（微量出発物質）が明らかとなった。室温まで放冷した後、反応混合物を水（２０ｍＬ）とＥｔＯＡｃ（２０ｍＬ）とで分配した。水相をＥｔＯＡｃ（３×１５ｍＬ）で抽出し、合わせた有機層を水（３０ｍＬ）、塩水（５０ｍＬ）で洗浄し、脱水し（ＭｇＳＯ4）、濾過して、真空中で蒸発させ、粗生成物を得た。フラッシュクロマトグラフィーによる精製（勾配溶離：１００％ＤＣＭから９５：５体積／体積  ＤＣＭ／ＭｅＯＨ）によって、ピペラジン１１を泡として得た（１５２ｍｇ、２５％収率）。
【０３２５】
（ｂ）（１１ａＳ，１１ａ’Ｓ）−８，８’−（（（５−（４−（３−アミノプロピル）ピペラジン−１−イル）−１，３−フェニレン）ビス（メチレン））ビス（オキシ））ビス（７−メトキシ−２−メチレン−２，３−ジヒドロ−１Ｈ−ピロロ［２，１−ｃ］［１，４］ベンゾジアゼピン−５（１１ａＨ）−オン）（１２）
【化４８】
2019069947.tif 000060
【０３２６】
９５：５体積／体積  ＴＦＡ／Ｈ2Ｏ（２ｍＬ）の溶液を、Ｂｏｃ／ＴＨＰ保護化合物１１のサンプル（１４２ｍｇ、０．１１ｍｍｏｌ）に０℃（氷／アセトン）にて添加した。０℃にて１時間撹拌した後、ＬＣ／ＭＳで判定した通りに、反応が完了したと見なし、保持時間２．２３分（ＥＳ＋）ｍ／ｚ  ７７８（［Ｍ＋Ｈ2Ｏ］+、約５％相対強度）における所望の生成物のピーク。反応混合物は、低温のまま保持して、ＮａＨＣＯ3（５０ｍＬ）の冷却飽和水溶液に滴下添加した。混合物をＤＣＭ（３×２０ｍＬ）で抽出して、合わせた有機層を塩水（１５ｍＬ）で洗浄し、脱水して（ＭｇＳＯ4）、濾過して、真空中で蒸発させて粗生成物１２をろう状固形物（２２．６ｍｇ）として得た。ＮａＨＣＯ3中和工程の間に、所望の生成物が、ＤＣＭに一部のみ溶解性であるろう状固形物として溶液から沈降したことに留意されたい。ＤＣＭ不溶性固形物をＤＭＦに溶解させて、続いて真空中で蒸発させて、追加の生成物を得た。得られた油状残留物をジエチルエーテルで粉砕して固形物を得て、これを真空中で乾燥させて、追加の粗生成物１２（５４．４ｍｇ、全量＝７７ｍｇ、８５％収率）を得て、さらに精製又は分析せずに、次の工程へ移行させた。
【０３２７】
（ｃ）Ｎ−（３−（４−（３，５−ビス（（（（Ｓ）−７−メトキシ−２−メチレン−５−オキソ−２，３，５，１１ａ−テトラヒドロ−１Ｈ−ピロロ［２，１−ｃ］［１，４］ベンゾジアゼピン−８−イル）オキシ）メチル）フェニル）ピペラジン−１−イル）プロピル）−１−（３−（２，５−ジオキソ−２，５−ジヒドロ−１Ｈ−ピロール−１−イル）プロパンアミド）−３，６，９，１２−テトラオキサペンタデカン−１５−アミド（１３）。
【化４９】
2019069947.tif 000061
【０３２８】
ＭＡＬ−ｄＰＥＧ（登録商標）４−酸（４２ｍｇ、０．１０ｍｍｏｌ）を、無水ＤＣＭ（４ｍＬ）中のＥＤＣＩ（２０ｍｇ、０．１０ｍｍｏｌ）及び粗第１級アミン１２（７７ｍｇ、０．１０ｍｍｏｌ）の撹拌溶液に室温にて添加した。反応混合物をアルゴン雰囲気下で３時間撹拌して、この時点でのＬＣ／ＭＳによる分析によって、出発材料の完全な消費、保持時間２．４２分（ＥＳ＋）ｍ／ｚ  １１７６（［Ｍ＋Ｈ2Ｏ］+、約５％相対強度）における実質的な量の所望の生成物、及び保持時間２．０５分（ダイオードアレイでは弱いが、しかしＥＳ＋／ＥＳ−では検出可能な信号）における過剰なＭＡＬ−ｄＰＥＧ（登録商標）４−酸が示された。反応混合物をＤＣＭ（３０ｍＬ）で希釈して、Ｈ2Ｏ（１５ｍＬ）、塩水（２０ｍＬ）で洗浄し、脱水して（ＭｇＳＯ4）、濾過して、真空中で蒸発させて粗生成物を得た。フラッシュクロマトグラフィーによる精製（勾配溶離：１００％ＣＨＣｌ3から９３：７体積／体積  ＣＨＣｌ3／ＭｅＯＨ）によって、マレイミド１３を泡として得た（４６ｍｇ、５５％収率）。微量の過剰なＭＡＬ−ｄＰＥＧ（登録商標）４−酸をフラッシュクロマトグラフィーによって除去できなかったことに留意されたい。
【０３２９】
［実施例４］
（ａ）（１１Ｓ，１１ａＳ，１１’Ｓ，１１ａ’Ｓ）−ジ−ｔｅｒｔ−ブチル８，８’−（（（５−（４−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）ピペラジン−１−イル）−１，３−フェニレン）ビス（メチレン））ビス（オキシ））ビス（７−メトキシ−２−メチレン−５−オキソ−１１−（（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−イル）オキシ）−２，３，１１，１１ａ−テトラヒドロ−１Ｈ−ピロロ［２，１−ｃ］［１，４］ベンゾジアゼピン−１０（５Ｈ）−カルボキシレート）（１４）
【化５０】
2019069947.tif 000062
２−ジクロロヘキシルホスフィノ−２’，６’−ジイソプロポキシビフェニル（１８ｍｇ、３８μｍｏｌ、０．２当量）、クロロ（２−ジクロロヘキシルホスフィノ−２’，６’−ジイソプロポキシ−１，１’−ビフェニル）［２−（２′−アミノ−１，１’−ビフェニル）］パラジウム（ＩＩ）（１８ｍｇ、２２μｍｏｌ、０．１２当量）、炭酸セシウム（０．３６ｇ、１．１ｍｍｏｌ、５．０当量）及びヨウ素誘導体（２ａ）（０．３０７ｇ、０．２７ｍｍｏｌ、１．０当量）を、真空にして、アルゴンを流した（３回）マイクロ波バイアルに入れた。無水ＴＨＦ（５ｍＬ）、続いてｔｅｒｔ−ブチルピペラジン−１−カルボキシレート（７０ｍｇ、０．３７ｍｍｏｌ、１．１当量）を添加して、得られた混合物を８５℃で４時間、次に室温で一晩加熱した。反応混合物を飽和炭酸水素ナトリウムで希釈し、酢酸エチル（３×１００ｍＬ）で抽出した。合わせた酢酸エチル抽出物を塩水（１００ｍＬ）で洗浄し、脱水して（ＭｇＳＯ4）、減圧下で蒸発させた。生成物１４をフラッシュクロマトグラフィー［ＣＨＣｌ3／ＭｅＯＨ０％から１．５％、０．５％刻み］で精製した（０．１１１ｇ、５１％）。
分析データ：室温４．１２分；ＭＳ（ＥＳ+）ｍ／ｚ（相対強度）１２０７（［Ｍ＋１］+、３０）。
【０３３０】
（ｂ）（１１ａＳ，１１ａ’Ｓ）−８，８’−（（（５−（ピペラジン−１−イル）−１，３−フェニレン）ビス（メチレン））ビス（オキシ））ビス（７−メトキシ−２−メチレン−２，３−ジヒドロ−１Ｈ−ピロロ［２，１−ｃ］［１，４］ベンゾジアゼピン−５（１１ａＨ）−オン）（１５）
【化５１】
2019069947.tif 000063
【０３３１】
９５％トリフルオロ酢酸（４ｍＬ）の冷（氷浴）溶液を、氷浴で冷却した化合物（１４）（０．２ｇ、０．１６５ｍｍｏｌ、１当量）に添加した。溶液を０℃にて３０分間撹拌すると、ＬＣＭＳによって反応が完了していることが示された。反応混合物を氷及び飽和炭酸水素ナトリウム溶液の混合物に滴下添加して、トリフルオロ酢酸を中和した。混合物をＤＣＭ（４×７５ｍＬ）で抽出して、合わせた抽出物を水（１００ｍＬ）、飽和塩水（１００ｍＬ）で洗浄し、脱水して（ＭｇＳＯ4）、減圧下で蒸発させて、生成物１５を黄色固形物として得て、これを更に精製せずに使用した（０．１１６ｇ、１００％）。
分析データ：室温２．３３分；ＭＳ（ＥＳ+）ｍ／ｚ（相対強度）７０３（［Ｍ＋１］+，１００）。
【０３３２】
（ｃ）Ｎ−（１５−（４−（３，５−ビス（（（（Ｓ）−７−メトキシ−２−メチレン−５−オキソ−２，３，５，１１ａ−テトラヒドロ−１Ｈ−ピロロ［２，１−ｃ］［１，４］ベンゾジアゼピン−８−イル）オキシ）メチル）フェニル）ピペラジン−１−イル）−１５−オキソ−３，６，９，１２−テトラオキサペンタデシル）−３−（２，５−ジオキソ−２，５−ジヒドロ−１Ｈ−ピロール−１−イル）プロパンアミド（１７）
【化５２】
2019069947.tif 000064
【０３３３】
Ｎ−（３−ジメチルアミノプロピル）−Ｎ’−エチルカルボジイミドヒドロクロリド（３５ｍｇ、０．１８ｍｍｏｌ、１．１当量）を、アルゴン下の無水ＤＣＭ（５ｍＬ）中の化合物（１５）（１１６ｍｇ、０．１６５ｍｍｏｌ、１．０当量）及び１−（２，５−ジオキソ−２，５−ジヒドロ−１Ｈ−ピロール−１−イル）−３−オキソ−７，１０，１３，１６−テトラオキサ−４−アザノナデカン−１９−酸（１６）（６９ｍｇ、０．１６５ｍｍｏｌ、１．０当量）の溶液に添加した。得られた溶液を室温で２時間撹拌した。反応混合物をＤＣＭ（５０ｍＬ）で希釈し、水（１００ｍＬ）、飽和炭酸水素ナトリウム溶液（１００ｍＬ）、水（１００ｍＬ）、塩水（１００ｍＬ）で洗浄し、脱水して（ＭｇＳＯ4）、減圧下で蒸発させた．フラッシュカラムクロマトグラフィーによる精製［ＣＨＣｌ3／ＭｅＯＨ  ０％から５％、１％刻み］によって、生成物１７を黄色ガラスとして得た（０．０５８ｇ、３２％）。
分析データ：［α］18D＝［＋６２８°］（ｃ＝０．２５，ＣＨＣｌ3）；室温２．６５分；ＭＳ（ＥＳ+）ｍ／ｚ（相対強度）１１０１（［Ｍ＋１］+，４０）
【０３３４】
［実施例５］
（ａ）ｔｅｒｔ−ブチル（４２−（２，５−ジオキソ−２，５−ジヒドロ−１Ｈ−ピロール−１−イル）−３７−オキソ−３，６，９，１２，１５，１８，２１，２４，２７，３０，３３−ウンデカオキサ−３６−アザドテトラコンチル）オキシカルバメート（１９）
【化５３】
2019069947.tif 000065
【０３３５】
６−マレイミドヘキサン酸（６４ｍｇ、０．３０ｍｍｏｌ）を、無水ＤＣＭ（６ｍＬ）中のＥＤＣＩ（６４ｍｇ、０．３３ｍｍｏｌ）及び第１級アミン１８（２００ｍｇ、０．３０ｍｍｏｌ）の撹拌溶液に室温にて添加した。反応混合物をアルゴン雰囲気下で１６時間撹拌して、この時点でのＬＣ／ＭＳによる分析によって、保持時間１．３８分｛（ＥＳ+）ｍ／ｚ  ８５４（［Ｍ＋Ｈ］+、約３０％相対強度）、８７７（［Ｍ＋Ｎａ］+、約１００％相対強度）｝にて、実質的な量の所望の生成物が示され、保持時間１．０７分にて未反応１８を伴っていた。出発材料及び生成物の両方が弱いＵＶ吸収（２１４及び２５４ｎｍ）を有し、ＥＳ+ＴＩＣで最も良好に検出されたことに留意されたい。追加の６−マレイミドヘキサン酸（３２ｍｇ、０．１５ｍｍｏｌ）及びＥＤＣＩ（３２ｍｇ、０．１７ｍｍｏｌ）を、出発材料が完全に消費されるまで（ＬＣ／ＭＳによって判定）、撹拌混合物に添加した。反応混合物をＤＣＭ（１００ｍＬ）で希釈して、Ｈ2Ｏ（３×３０ｍＬ）、塩水（４０ｍＬ）で洗浄し、脱水して（ＭｇＳＯ4）、濾過して、真空中で蒸発させて粗生成物を得た。フラッシュクロマトグラフィーによる精製（１％刻みの勾配溶離：１００％ＤＣＭから９６：４体積／体積  ＤＣＭ／ＭｅＯＨ）によって、アミド１９を油として得た（２１４ｍｇ、８３％収率）。
【０３３６】
（ｂ）Ｎ−（３５−（アミノオキシ）−３，６，９，１２，１５，１８，２１，２４，２７，３０，３３−ウンデカオキサペンタトリアコンチル）−６−（２，５−ジオキソ−２，５−ジヒドロ−１Ｈ−ピロール−１−イル）ヘキサンアミド（２０）
【化５４】
2019069947.tif 000066
【０３３７】
９５：５体積／体積  ＴＦＡ／Ｈ2Ｏ（２ｍＬ）の溶液を、Ｂｏｃ／ＴＨＰ保護化合物１９のサンプル（２１４ｍｇ、０．２５ｍｍｏｌ）に０℃（氷／アセトン）にて添加した。０℃で１時間撹拌した後、ＬＣ／ＭＳで判定した通りに、反応が完了したと見なし、保持時間１．０６分｛（ＥＳ+）ｍ／ｚ  ７５４（［Ｍ＋Ｈ］+、約１００％相対強度）｝における所望の生成物のピーク。出発材料及び生成物の両方が弱いＵＶ吸収（２１４及び２５４ｎｍ）を有し、ＥＳ+ＴＩＣで最も良好に検出されたことに留意されたい。反応混合物は、低温のまま保持して、ＮａＨＣＯ3（１００ｍＬ）の冷却飽和水溶液に滴下添加した。混合物をＤＣＭ（３×３０ｍＬ）で抽出して、合わせた有機層を塩水（５０ｍＬ）で洗浄し、脱水して（ＭｇＳＯ4）、濾過して、真空中で蒸発させて、オキシアミン２０を油として得て（１６１ｍｇ、８５％収率）、これをさらに精製せずに次の工程へ移行させた。
【０３３８】
（ｃ）（１１Ｓ，１１ａＳ，１１’Ｓ，１１ａ’Ｓ）−ジ−ｔｅｒｔ−ブチル８，８’−（（（５−ホルミル−１，３−フェニレン）ビス（メチレン））ビス（オキシ））ビス（７−メトキシ−２−メチレン−５−オキソ−１１−（（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−イル）オキシ）−２，３，１１，１１ａ−テトラヒドロ−１Ｈ−ピロロ［２，１−ｃ］［１，４］ベンゾジアゼピン−１０（５Ｈ）−カルボキシレート）（２１）
【化５５】
2019069947.tif 000067
【０３３９】
３，５−ビス（ブロモメチル）ベンズアルデヒド（２６０ｍｇ、０．９０ｍｍｏｌ）［Ｅｎｒｉｑｕｅ  Ｄｉ’ｅｚ−Ｂａｒｒａ  ｅｔ  ａｌ  Ｊ．Ｏｒｇ．Ｃｈｅｍ．２００１，６６，５６６４−５６７０］を、無水ＤＭＦ（１２ｍＬ）中のＢｏｃ／ＴＨＰ保護ＰＢＤキャッピング単位７（８２６ｍｇ、１．７９ｍｍｏｌ）、ＴＢＡＩ（３３ｍｇ、８９．７μｍｏｌ）及びＫ2ＣＯ3（２４７ｍｇ、１．７９ｍｍｏｌ）の撹拌溶液に添加した。反応混合物を６０℃まで加熱して、アルゴン雰囲気下で２．５時間撹拌し、この時点でのＬＣ／ＭＳ分析によって、保持時間１．９２分｛（ＥＳ＋）ｍ／ｚ  １０５１（［Ｍ＋Ｈ］+、約６５％相対強度）１０７３（［Ｍ＋Ｎａ］+、約２５％相対強度）｝での実質的な生成物の形成が明らかとなった。反応混合物を室温まで放冷して、ＤＭＦを真空中での蒸発によって除去した。得られた残留物を水（５０ｍＬ）とＥｔＯＡｃ（５０ｍＬ）とで分配して、水相をＥｔＯＡｃ（３×１５ｍＬ）で抽出した。合わせた有機層を水（２×２０ｍＬ）、塩水（３０ｍＬ）で洗浄し、脱水して（ＭｇＳＯ4）、濾過して、真空中で蒸発させて、粗生成物を得た。フラッシュクロマトグラフィーによる精製（１０％刻みの勾配溶離：５０：５０体積／体積  ＥｔＯＡｃ／ヘキサンから８０：２０体積／体積  ＥｔＯＡｃ／ヘキサン）によって、ビス−エーテル２１を白色泡（７１７ｍｇ、７６％収率）として得た。２１がＴＨＰ保護基から生じるジアステレオ異性体の混合物として単離されたことに留意されたい。
【０３４０】
（ｄ）（１１Ｓ，１１ａＳ，１１’Ｓ，１１ａ’Ｓ）−ジ−ｔｅｒｔ−ブチル８，８’−（（（５−（（ｓｙｎ／ａｎｔｉ）−４５−（２，５−ジオキソ−２，５−ジヒドロ−１Ｈ−ピロール−１−イル）−４０−オキソ−３，６，９，１２，１５，１８，２１，２４，２７，３０，３３，３６−ドデカオキサ−２，３９−ジアザペンタテトラコンタ−１−エン−１−イル）−１，３−フェニレン）ビス（メチレン））ビス（オキシ））ビス（７−メトキシ−２−メチレン−５−オキソ−１１−（（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−イル）オキシ）−２，３，１１，１１ａ−テトラヒドロ−１Ｈ−ピロロ［２，１−ｃ］［１，４］ベンゾジアゼピン−１０（５Ｈ）−カルボキシレート（２２）
【化５６】
2019069947.tif 000068
【０３４１】
ＰＴＳＡ（４．１ｍｇ、２１．４μｍｏｌ）を、無水ＤＣＭ（３ｍＬ）中のアルデヒド２１（２２４ｍｇ、０．２１ｍｍｏｌ）及びオキシアミン２０（１６１ｍｇ、０．２１ｍｍｏｌ）の撹拌溶液に０℃（氷／アセトン）で添加した。反応混合物を０℃、アルゴン雰囲気下で撹拌し、３時間撹拌して、ＬＣ／ＭＳによる分析によって、オキシアミン２０の完全な消費（保持時間１．０６分）、所望の生成物｛保持時間１．８５分（ＥＳ+）ｍ／ｚ  １７８７（［Ｍ＋Ｈ］+、約２５％相対強度）１８１０（［Ｍ＋Ｎａ］+、約９０％相対強度）｝及び未反応アルデヒド２１（保持時間１．９１分）の存在が明らかになった。（以前の試験反応で確認された）望ましくないＴＨＰ切断を避けるために、反応をこの時点で停止させたが、アルデヒドは完全に消費されていなかった。混合物をＤＣＭ（５０ｍＬ）で希釈して、ＮａＨＣＯ3（３×１５ｍＬ）、塩水（３０ｍＬ）で洗浄し、脱水して（ＭｇＳＯ4）、濾過して、真空中で蒸発させて、粗生成物を得た。フラッシュクロマトグラフィーによる精製（１％刻みの勾配溶離：１００％ＤＣＭから９６：４体積／体積  ＤＣＭ／ＭｅＯＨ）によって、ｓｙｎ／ａｎｔｉオキシム２２を白色泡として得た（２１５ｍｇ、５６％収率）。未反応アルデヒド２１（８３ｍｇ）をフラッシュクロマトグラフィーの間に回収した。２２がＴＨＰ保護基から生じるジアステレオ異性体の混合物として単離されたことに留意されたい。
【０３４２】
（ｅ）Ｎ−（（ｓｙｎ／ａｎｔｉ）−１−（３，５−ビス（（（（Ｓ）−７−メトキシ−２−メチレン−５−オキソ−２，３，５，１１ａ−テトラヒドロ−１Ｈ−ピロロ［２，１−ｃ］［１，４］ベンゾジアゼピン−８−イル）オキシ）メチル）フェニル）−３，６，９，１２，１５，１８，２１，２４，２７，３０，３３，３６−ドデカオキサ−２−アザオクタトリアコンタ−１−エン−３８−イル）−６−（２，５−ジオキソ−２，５−ジヒドロ−１Ｈ−ピロール−１−イル）ヘキサンアミド（２３）
【化５７】
2019069947.tif 000069
【０３４３】
９５：５体積／体積  ＴＦＡ／Ｈ2Ｏ（１ｍＬ）の溶液を、Ｂｏｃ／ＴＨＰ保護化合物２２のサンプル（２０４ｍｇ、０．１１ｍｍｏｌ）に０℃（氷／アセトン）にて添加した。０℃にて３０分間撹拌した後、ＬＣ／ＭＳで判定した通りに、反応が完了したと見なし、保持時間１．４２分（ＥＳ＋）ｍ／ｚ  １３８３（［Ｍ＋Ｈ］+、５％未満の相対強度）における所望の生成物のピーク。反応混合物は、低温のまま保持して、ＮａＨＣＯ3（５０ｍＬ）の冷却飽和水溶液に滴下添加した。混合物をＤＣＭ（３×１５ｍＬ）で抽出して、合わせた有機層を塩水（３０ｍＬ）で洗浄し、脱水して（ＭｇＳＯ4）、濾過して、真空中で蒸発させて粗生成物を得た。フラッシュクロマトグラフィーによる精製（１％刻みの勾配溶離：１００％ＣＨＣｌ3から９６：４体積／体積  ＣＨＣｌ3／ＭｅＯＨ）によって、脱保護ｓｙｎ／ａｎｔｉオキシム２３を黄色薄膜として得た（８５ｍｇ、５４％収率）。逆相超高速液体クロマトグラフィーによる分析（条件については、一般条件節を参照のこと）によって、１６．１５分（ｓｙｎ異性体、副構成成分）及び１６．４２分（ａｎｔｉ異性体、主要構成成分）における主な２つのピークが明らかになった。
【０３４４】
（ｆ）Ｎ−（（ａｎｔｉ）−１−（３，５−ビス（（（（Ｓ）−７−メトキシ−２−メチレン−５−オキソ−２，３，５，１１ａ−テトラヒドロ−１Ｈ−ピロロ［２，１−ｃ］［１，４］ベンゾジアゼピン−８−イル）オキシ）メチル）フェニル）−３，６，９，１２，１５，１８，２１，２４，２７，３０，３３，３６−ドデカオキサ−２−アザオクタトリアコント−１−エン−３８−イル）−６−（２，５−ジオキソ−２，５−ジヒドロ−１Ｈ−ピロール−１−イル）ヘキサンアミド（２４）
【化５８】
2019069947.tif 000070
【０３４５】
化合物２３に分取ＨＰＬＣによる精製を行った（条件については、一般条件節を参照のこと）。１６．４２分の保持時間にて溶離するピークを単離し、凍結乾燥させて、ａｎｔｉ−オキシム２４（９．９ｍｇ）を得た：1Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ3）δ  ８．１２（ｓ，１Ｈ），７．６６（ｄ，２Ｈ，Ｊ＝４．４Ｈｚ），７．６２−７．５９（ｍ，２Ｈ），７．５３−７．５１（ｍ，３Ｈ），６．８２（ｓ，２Ｈ），６．６８（ｓ，２Ｈ），６．１６（ｂｒ  ｓ，２Ｈ），５．２５−５．１４（ｍ，８Ｈ），４．３３（ｔ，２Ｈ，Ｊ＝４．８Ｈｚ），４．２８（ｂｒ  ｓ，４Ｈ），３．９６（ｓ，６Ｈ），３．９０−３．８４（ｍ，２Ｈ），３．８２−３．７８（ｍ，２Ｈ），３．６７−３．４９（ｍ，４３Ｈ），３．４６−３．４２（ｍ，２Ｈ），３．１５−３．０８（ｍ，２Ｈ），２．９８−２．９０（ｍ，２Ｈ），２．１６（ｔ，２Ｈ，Ｊ＝７．６Ｈｚ），１．７０−１．５４（ｍ，４Ｈ），１．３６−１．２４（ｍ，２Ｈ）．
【０３４６】
（ｇ）Ｎ−（（ｓｙｎ）−１−（３，５−ビス（（（（Ｓ）−７−メトキシ−２−メチレン−５−オキソ−２，３，５，１１ａ−テトラヒドロ−１Ｈ−ピロロ［２，１−ｃ］［１，４］ベンゾジアゼピン−８−イル）オキシ）メチル）フェニル）−３，６，９，１２，１５，１８，２１，２４，２７，３０，３３，３６−ドデカオキサ−２−アザオクタトリアコント−１−エン−３８−イル）−６−（２，５−ジオキソ−２，５−ジヒドロ−１Ｈ−ピロール−１−イル）ヘキサンアミド（２５）
【化５９】
2019069947.tif 000071
【０３４７】
化合物２３に分取ＨＰＬＣによる精製を行った（条件については、一般条件節を参照のこと）。保持時間１６．１５分の保持時間にて溶離するピークを単離し、凍結乾燥させて、ｓｙｎ−オキシム２５を得た（５．２ｍｇ）：1Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ3）δ  ７．９３−７．９１（ｍ，２Ｈ），７．６６（ｄ，２Ｈ，Ｊ＝４．４Ｈｚ），７．５７−７．５５（ｍ，１Ｈ），７．５２（ｓ，２Ｈ），７．３２（ｓ，１Ｈ），６．８２（ｓ，２Ｈ），６．６８（ｓ，２Ｈ），６．１８（ｂｒ  ｓ，２Ｈ），５．２６−５．１４（ｍ，８Ｈ），４．３５（ｔ，２Ｈ，Ｊ＝５．１Ｈｚ），４．２８（ｂｒ  ｓ，４Ｈ），３．９６（ｓ，６Ｈ），３．９０−３．８４（ｍ，２Ｈ），３．８１（ｔ，２Ｈ，Ｊ＝５．１Ｈｚ），３．６８−３．４８（ｍ，４３Ｈ），３．４６−３．４２（ｍ，２Ｈ），３．１５−３．０７（ｍ，２Ｈ），２．９７−２．９０（ｍ，２Ｈ），２．１６（ｔ，２Ｈ，Ｊ＝７．６Ｈｚ），１．７０−１．５４（ｍ，４Ｈ），１．３６−１．２４（ｍ，２Ｈ）．
【０３４８】
［実施例６］
（ａ）ジ−ｔｅｒｔ−ブチル８，８’−（（（５−（１−アミノ−１５−オキソ−３，６，９，１２−テトラオキサ−１６−アザノナデカ−１８−イン−１９−イル）−１，３−フェニレン）ビス（メチレン））ビス（オキシ））（１１Ｓ，１１ａＳ，１１’Ｓ，１１ａ’Ｓ）−ビス（７−メトキシ−２−メチレン−５−オキソ−１１−（（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−イル）オキシ）−２，３，１１，１１ａ−テトラヒドロ−１Ｈ−ピロロ［２，１−ｃ］［１，４］ベンゾジアゼピン−１０（５Ｈ）−カルボキシレート）（２９）
【化６０】
2019069947.tif 000072
【０３４９】
（ｉ）ｔｅｒｔ−ブチル（１５−オキソ−３，６，９，１２−テトラオキサ−１６−アザノナデカ−１８−イン−１−イル）カルバメート（２７）
ＥＤＣＩ（２６３ｍｇ、１．３７ｍｍｏｌ）を、無水ＤＣＭ（１０ｍＬ）中のｔ−ｂｏｃ−Ｎ−アミド−ｄＰＥＧ（登録商標）4−酸（２６）（５００ｍｇ、１．３７ｍｍｏｌ、ストラテック・サイエンティフィック・リミテッド）及びプロパルギルアミン（８８μＬ、７６ｍｇ、１．３７ｍｍｏｌ）の撹拌溶液に室温で添加した。反応混合物をアルゴン雰囲気下で１６時間撹拌して、この時点でのＬＣ／ＭＳによる分析によって、保持時間１．２６分（ＥＳ＋）ｍ／ｚ  ４０３（［Ｍ＋Ｈ］+、約５０％相対強度）、４２５（［Ｍ＋Ｎａ］+、約１００％相対強度）にて、実質的な量の所望の生成物が示され、出発材料及び生成物の両方が弱いＵＶ吸収（２１４及び２５４ｎｍ）を有し、ＥＳ＋ＴＩＣで最も良好に検出されたことに留意されたい。反応混合物をＤＣＭ（１００ｍＬ）で希釈して、Ｈ2Ｏ（３０ｍＬ）、塩水（４０ｍＬ）で洗浄し、脱水して（ＭｇＳＯ4）、濾過して、真空中で蒸発させて粗生成物を得た。フラッシュクロマトグラフィーによる精製（１％刻みの勾配溶離：１００％ＤＣＭから９８：２体積／体積  ＤＣＭ／ＭｅＯＨ）によって、アミド２７を油として得た（３９２ｍｇ、７１％収率）。
【０３５０】
（ｉｉ）ジ−ｔｅｒｔ−ブチル８，８’−（（（５−（２，２−ジメチル−４，２０−ジオキソ−３，８，１１，１４，１７−ペンタオキサ−５，２１−ジアザテトラコス−２３−イン−２４−イル）−１，３−フェニレン）ビス（メチレン））ビス（オキシ））（１１Ｓ，１１ａＳ，１１’Ｓ，１１ａ’Ｓ）−ビス（７−メトキシ−２−メチレン−５−オキソ−１１−（（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−イル）オキシ）−２，３，１１，１１ａ−テトラヒドロ−１Ｈ−ピロロ［２，１−ｃ］［１，４］ベンゾジアゼピン−１０（５Ｈ）−カルボキシレート）（２８）
触媒量のＰｄ（ＰＰｈ3）4（２３．０ｍｇ、１９．５μｍｏｌ）を、オーブンで乾燥させた密閉式容器内の無水ＤＭＦ（９ｍＬ）中のヨードアリール化合物２ａ（１．０２ｇ、０．８９ｍｍｏｌ）、Ｂｏｃ−アセチレン２７（３９３ｍｇ、０．９８ｍｍｏｌ）、ＣｕＩ（７．４ｍｇ、３９．１μｍｏｌ）、ジエチルアミン（２．０２ｍＬ、１．４３ｇ、１９．５ｍｍｏｌ）及びオーブンで乾燥させた４Åモレキュラーシーブペレットの混合物に添加した。混合物を脱気して、アルゴンを３回流し、次に１００℃の電子レンジで２６分間加熱し、この時点でのＬＣ／ＭＳ分析によって、保持時間１．８９分（ＥＳ＋）ｍ／ｚ  １４４６（［Ｍ＋Ｎａ］+、約１００％相対強度）、１４２４（［Ｍ＋Ｈ］+、約１５％相対強度）における、実質的な生成物の形成が明らかとなった。反応混合物を室温まで放冷して、次に焼結物で濾過して、シーブ（ＤＭＦで洗浄）を除去した。濾液を真空中で蒸発させて、得られた残留物をＤＣＭ（１００ｍＬ）に溶解させて、Ｈ2Ｏ（２０ｍＬ）、塩水（３０ｍＬ）で洗浄し、脱水して（ＭｇＳＯ4）、濾過して、真空中で蒸発させて、粗生成物を得た。フラッシュクロマトグラフィーによる精製（１％刻みの勾配溶離：１００％ＤＣＭから９７：３体積／体積  ＤＣＭ／ＭｅＯＨ）によって、アルキン２８を黄色泡として得た（８８２ｍｇ、７０％収率）。
【０３５１】
（ｉｉｉ）ジ−ｔｅｒｔ−ブチル８，８’−（（（５−（１−アミノ−１５−オキソ−３，６，９，１２−テトラオキサ−１６−アザノナデカ−１８−イン−１９−イル）−１，３−フェニレン）ビス（メチレン））ビス（オキシ））（１１Ｓ，１１ａＳ，１１’Ｓ，１１ａ’Ｓ）−ビス（７−メトキシ−２−メチレン−５−オキソ−１１−（（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−イル）オキシ）−２，３，１１，１１ａ−テトラヒドロ−１Ｈ−ピロロ［２，１−ｃ］［１，４］ベンゾジアゼピン−１０（５Ｈ）−カルボキシレート）（２９）
ＴＢＤＭＳＯＴｆ（１．４２ｍＬ、１．６４ｇ、６．２ｍｍｏｌ）を、無水ＤＣＭ（１５ｍＬ）中のトリ−Ｂｏｃ保護化合物２８（８８２ｍｇ、０．６２ｍｍｏｌ）及び２，６−ルチジン（０．９６ｍＬ、８８３ｍｇ、８．２５ｍｍｏｌ）の撹拌溶液に室温で添加した。反応混合物をアルゴン雰囲気下で１６時間撹拌し、このときＬＣ／ＭＳによる分析によって、保持時間２．０９分（ＥＳ＋）ｍ／ｚ  １５０４（［Ｍ＋Ｎａ］+、約１００％相対強度）におけるＴＢＳカルバメートの形成が明らかになった。反応混合物をＤＣＭ（６０ｍＬ）で希釈して、飽和ＮＨ4Ｃｌ（２×２０ｍＬ）、Ｈ2Ｏ（２０ｍＬ）、塩水（３０ｍＬ）で洗浄し、脱水して（ＭｇＳＯ4）、濾過して、真空中で蒸発させて粗ＴＢＳカルバメートを得た。生成物をＴＨＦ（１５ｍＬ）に再溶解させて、ＴＢＡＦの溶液（ＴＨＦ中１．０Ｍ溶液の７４４μＬ、０．７４４ｍｍｏｌ）によって室温で処理した。反応混合物を室温にて１時間撹拌して、この時点でのＬＣ／ＭＳによる分析によって、保持時間１．４５分（ＥＳ＋）ｍ／ｚ  １３２４（［Ｍ＋Ｈ］+、約６０％相対強度）における実質的な生成物の形成が、保持時間１．２９分（ＥＳ＋）ｍ／ｚ  １１２１（［Ｍ＋Ｈ］+、約１０％相対強度）、１１３８（［Ｍ＋Ｈ2Ｏ］+、約２０％相対強度）において切断された１  Ｎ１０Ｂｏｃ／１  ＴＨＰに相当する生成物及び保持時間１．１２分（ＥＳ＋）ｍ／ｚ  ９１９（［Ｍ＋Ｈ］+、約２．５％相対強度）、９３７（［Ｍ＋Ｈ2Ｏ］+、約３％相対強度）、９５５（［Ｍ＋２Ｈ2Ｏ］+、約５％相対強度）において切断された２  Ｎ１０  Ｂｏｃ／２  ＴＨＰに相当する生成物と共に明らかになった。ＴＨＦを真空中での蒸発によって除去して、得られた残留物をＤＣＭ（６０ｍＬ）に再溶解させて、飽和ＮＨ4Ｃｌ（２×２０ｍＬ）、Ｈ2Ｏ（２０ｍＬ）、塩水（３０ｍＬ）によって洗浄し、脱水して（ＭｇＳＯ4）、濾過して、真空中で蒸発させて、主要アミン２９をピンク色がかった泡として得た。
【０３５２】
（ｂ）（Ｒ）−２−（ピリジン−２−イルジスルファニル）プロピル（１９−（３，５−ビス（（（（Ｓ）−７−メトキシ−２−メチレン−５−オキソ−２，３，５，１１ａ−テトラヒドロ−１Ｈ−ピロロ［２，１−ｃ］［１，４］ベンゾジアゼピン−８−イル）オキシ）メチル）フェニル）−１５−オキソ−３，６，９，１２−テトラオキサ−１６−アザノナデカ−１８−イン−１−イル）カルバメート（３３）
【化６１】
2019069947.tif 000073
【０３５３】
（ｉ）（Ｒ）−２−（ピリジン−２−イルジスルファニル）プロピルカルボノクロリデート（３１）
トリホスゲン（９．３６ｍｇ、３１．５μｍｏｌ）を無水ＤＣＭ（１ｍＬ）中の（Ｒ）−２−（ピリジン−２−イルジスルファニル）プロパン−１−オール（３０）（１８ｍｇ、０．０９ｍｍｏｌ）及びピリジン（６．７μＬ、６．６ｍｇ、０．０８ｍｍｏｌ）の撹拌溶液に添加した。反応混合物をアルゴン雰囲気下で３０分間撹拌して、この後に溶媒を真空中での蒸発によって除去して、粗クロロホルメート３１を白色泡として得た。注記：生成物は、精製又は分析せずに次の工程へ移行させた。
【０３５４】
（ｉｉ）ジ−ｔｅｒｔ−ブチル８，８’−（（（５−（（Ｒ）−５，２１−ジオキソ−２−（ピリジン−２−イルジスルファニル）−４，９，１２，１５，１８−ペンタオキサ−６，２２−ジアザペンタコス−２４−イン−２５−イル）−１，３−フェニレン）ビス（メチレン））ビス（オキシ））（１１Ｓ，１１ａＳ，１１’Ｓ，１１ａ’Ｓ）−ビス（７−メトキシ−２−メチレン−５−オキソ−１１−（（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−イル）オキシ）−２，３，１１，１１ａ−テトラヒドロ−１Ｈ−ピロロ［２，１−ｃ］［１，４］ベンゾジアゼピン−１０（５Ｈ）−カルボキシレート）（３２）
無水ＤＣＭ（１ｍＬ）中の３１の溶液（約２３ｍｇ、約０．０９ｍｍｏｌ）を、無水ＤＣＭ（１ｍＬ）中のアミン２９（約１１６ｍｇ、約０．０９ｍｍｏｌ）及びピリジン（７．８μＬ、７．７ｍｇ、０．１ｍｍｏｌ）の撹拌溶液に室温で滴下添加した。反応混合物をアルゴン雰囲気下で３時間撹拌し、この時点でのＬＣ／ＭＳによる分析（キネテクス（登録商標）カラム）によって、保持時間２．０２分（ＥＳ＋）ｍ／ｚ  １５５０（［Ｍ＋Ｈ］+、約２０％相対強度）における実質的な生成物の形成が、保持時間１．５１分における未反応出発材料２９の持続と共に明らかになった。溶媒を真空中での蒸発によって除去して、粗カルバメート３２を得て、これをさらに精製又は分析せずに、次の工程へ移行させた。
【０３５５】
（ｉｉｉ）（Ｒ）−２−（ピリジン−２−イルジスルファニル）プロピル（１９−（３，５−ビス（（（（Ｓ）−７−メトキシ−２−メチレン−５−オキソ−２，３，５，１１ａ−テトラヒドロ−１Ｈ−ピロロ［２，１−ｃ］［１，４］ベンゾジアゼピン−８−イル）オキシ）メチル）フェニル）−１５−オキソ−３，６，９，１２−テトラオキサ−１６−アザノナデカ−１８−イン−１−イル）カルバメート（３３）
９５：５体積／体積  ＴＦＡ／Ｈ2Ｏ（１ｍＬ）の溶液を、Ｂｏｃ／ＴＨＰ保護化合物３２のサンプル（約１３６ｍｇ、８８μｍｏｌ）に０℃（氷／アセトン）にて添加した。０℃にて１時間撹拌した後、ＬＣ／ＭＳで判定した通りに、反応が完了したと見なし、保持時間１．４２分（ＥＳ＋）ｍ／ｚ  １１４６（［Ｍ＋Ｈ］+、約９０％相対強度）における所望の生成物のピーク。反応混合物は、低温のまま保持して、ＮａＨＣＯ3（５０ｍＬ）の冷却飽和水溶液に滴下添加した。混合物をＤＣＭ（３×１５ｍＬ）で抽出して、合わせた有機層を塩水（２０ｍＬ）で洗浄し、脱水して（ＭｇＳＯ4）、濾過して、真空中で蒸発させて粗生成物を得た。フラッシュクロマトグラフィーによる精製（勾配溶離：１００％ＣＨＣｌ3から９５：５体積／体積  ＣＨＣｌ3／ＭｅＯＨ）によって、３３を膜として得た（１０ｍｇ、７％収率）。ＬＣ／ＭＳ（１５分間の運転）、保持時間５．７９分（ＥＳ＋）ｍ／ｚ  １１４６（［Ｍ＋Ｈ］+、約８％相対強度）；1Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ3）δ  ８．４４（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝４．８Ｈｚ），７．７５−７．５８（ｍ，２Ｈ），７．６６（ｄ，２Ｈ，Ｊ＝４．４Ｈｚ），７．５２（ｓ，２Ｈ），７．４５−７．４０（ｍ，３Ｈ），７．０８−７．０５（ｍ，１Ｈ），６．９５−６．８５（ｍ，１Ｈ），６．７９（ｓ，２Ｈ），５．４３−５．４１（ｍ，１Ｈ），５．２３−５．０９（ｍ，８Ｈ），４．３０−４．２３（ｍ，６Ｈ），４．１９−４．１０（ｍ，４Ｈ），３．９７−３．９４（ｍ，２Ｈ），３．９６（ｓ，６Ｈ），３．９１−３．８５（ｍ，２Ｈ），３．７５（ｔ，２Ｈ，Ｊ＝５．８Ｈｚ），３．６６−３．５８（ｍ，８Ｈ），３．５２（ｔ，２Ｈ，Ｊ＝５．１Ｈｚ），３．３４−３．３０（ｍ，２Ｈ），３．２３−３．０８（ｍ，３Ｈ），２．９６−２．９０（ｍ，２Ｈ），２．５２（ｔ，２Ｈ，Ｊ＝５．７Ｈｚ），１．３１（ｄ，３Ｈ，Ｊ＝７．０Ｈｚ）．
【０３５６】
［実施例７］
【化６２】
2019069947.tif 000074
【０３５７】
（ａ）（±）−４−（ピリジン−２−イルジスルファニル）ペンタン酸（３５）
アルドリチオール（商標）−２（１７６ｍｇ、０．８６ｍｍｏｌ）を、ＥｔＯＨ（２ｍＬ）中の（±）−４−メルカプトペンタン酸３４（１０７ｍｇ、０．８０ｍｍｏｌ、Ａｕｒｏｒａ  Ｆｉｎｅ  Ｃｈｅｍｉｃａｌｓ  ＬＬＣ）の撹拌溶液に室温で添加した。反応混合物をアルゴン雰囲気下で１６時間撹拌し、この時点でのＬＣ／ＭＳ分析によって、保持時間１．３２分（ＥＳ＋）ｍ／ｚ  ２４４（［Ｍ＋Ｈ］+、約９５％相対強度）での実質的な生成物の形成が明らかとなった。溶媒を真空中での蒸発によって除去して、得られた残留物をフラッシュクロマトグラフィー（勾配溶離：９０：１０体積／体積  ヘキサン／ＥｔＯＡｃから８０：２０体積／体積  ヘキサン／ＥｔＯＡｃ）によって除去して、３５を白色固体として得た（９２ｍｇ、４７％収率）。
【０３５８】
（ｂ）（±）−ジ−ｔｅｒｔ−ブチル８，８’−（（（５−（５，２１−ジオキソ−２４−（ピリジン−２−イルジスルファニル）−８，１１，１４，１７−テトラオキサ−４，２０−ジアザペンタコス−１−イン−１−イル）−１，３−フェニレン）ビス（メチレン））ビス（オキシ））（１１Ｓ，１１ａＳ，１１’Ｓ，１１ａ’Ｓ）−ビス（７−メトキシ−２−メチレン−５−オキソ−１１−（（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−イル）オキシ）−２，３，１１，１１ａ−テトラヒドロ−１Ｈ−ピロロ［２，１−ｃ］［１，４］ベンゾジアゼピン−１０（５Ｈ）−カルボキシレート）（３６）
ＥＤＣＩ（２２ｍｇ、０．１２ｍｍｏｌ）を、無水ＤＣＭ（２ｍＬ）中の（±）−４−（ピリジン−２−イルジスルファニル）ペンタン酸（３５）（２６ｍｇ、０．１０ｍｍｏｌ）及びアミン２９（約１３９ｍｇ、０．１ｍｍｏｌ）の撹拌溶液に室温で添加した。反応混合物をアルゴン雰囲気下で２０時間撹拌して、この時点でのＬＣ／ＭＳによる分析によって、保持時間１．８８分（ＥＳ＋）ｍ／ｚ  １５４８（［Ｍ＋Ｈ］+、約４０％相対強度）における実質的な量の所望の生成物（分割ピーク）が、保持時間１．６７分（ＥＳ＋）ｍ／ｚ  １３４６（［Ｍ＋Ｈ］+、約２０％相対強度）、１１３８（［Ｍ＋Ｈ2Ｏ］+、約２０％相対強度）において切断された１  Ｎ１０Ｂｏｃ／１  ＴＨＰ  に相当する生成物及び保持時間１．４３分（ＥＳ＋Ｍ＋は確認されず）において切断された２  Ｎ１０  Ｂｏｃ／２  ＴＨＰに相当する生成物と共に明らかになった。反応混合物をＤＣＭ（３０ｍＬ）で希釈して、Ｈ2Ｏ（１５ｍＬ）、塩水（２０ｍＬ）で洗浄し、脱水して（ＭｇＳＯ4）、濾過して、真空中で蒸発させて粗生成物３６を泡として得た。
【０３５９】
（ｃ）（±）−Ｎ−（３−（３，５−ビス（（（（Ｓ）−７−メトキシ−２−メチレン−５−オキソ−２，３，５，１１ａ−テトラヒドロ−１Ｈ−ピロロ［２，１−ｃ］［１，４］ベンゾジアゼピン−８−イル）オキシ）メチル）フェニル）プロパ−２−イン−１−イル）−１−（４−（ピリジン−２−イルジスルファニル）ペンタンアミド）−３，６，９，１２−テトラオキサペンタデカン−１５−アミド（３７）
９５：５体積／体積  ＴＦＡ／Ｈ2Ｏ（１ｍＬ）の溶液を、Ｂｏｃ／ＴＨＰ保護化合物３６のサンプル（約１６３ｍｇ、０．１０ｍｍｏｌ）に０℃（氷／アセトン）にて添加した。０℃にて１時間撹拌した後、ＬＣ／ＭＳで判定した通りに、反応が完了したと見なし、保持時間１．４４分（ＥＳ＋）ｍ／ｚ  １１４４（［Ｍ＋Ｈ］+、約３％相対強度）における所望の生成物のピーク。反応混合物は、低温のまま保持して、ＮａＨＣＯ3（６０ｍＬ）の冷却飽和水溶液に滴下添加した。混合物をＤＣＭ（３×３０ｍＬ）で抽出して、合わせた有機層を塩水（３０ｍＬ）で洗浄し、脱水して（ＭｇＳＯ4）、濾過して、真空中で蒸発させて粗生成物を得た。フラッシュクロマトグラフィーによる精製（勾配溶離：１００％ＣＨＣｌ3から９６：４体積／体積  ＣＨＣｌ3／ＭｅＯＨ）によって、３７をオレンジ色固形物として得た（６９ｍｇ、５７％収率）。ＬＣ／ＭＳ（１５分間の運転）、保持時間５．７２分（ＥＳ＋）ｍ／ｚ  １１４４（［Ｍ＋Ｈ］+、約３％相対強度）；1Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ3）δ  ８．４２（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝４．３Ｈｚ），７．７２−７．５９（ｍ，２Ｈ），７．６６（ｄ，２Ｈ，Ｊ＝４．３Ｈｚ），７．５２（ｓ，２Ｈ），７．４５−７．４０（ｍ，３Ｈ），７．０９−７．０４（ｍ，１Ｈ），６．９８−６．９４（ｍ，１Ｈ），６．８０（ｓ，２Ｈ），６．４０−６．３５（ｍ，１Ｈ），５．２３−５．０９（ｍ，８Ｈ），４．３０−４．２３（ｍ，６Ｈ），４．１９−４．１０（ｍ，４Ｈ），３．９６（ｓ，６Ｈ），３．９１−３．８５（ｍ，２Ｈ），３．７５（ｔ，２Ｈ，Ｊ＝５．７Ｈｚ），３．６６−３．５８（ｍ，８Ｈ），３．５１（ｔ，２Ｈ，Ｊ＝５．０Ｈｚ），３．４２−３．３９（ｍ，２Ｈ），３．２３−３．０８（ｍ，２Ｈ），２．９６−２．９０（ｍ，３Ｈ），２．５２（ｔ，２Ｈ，Ｊ＝５．６Ｈｚ），２．３４（ｔ，２Ｈ，Ｊ＝７．４Ｈｚ），１．９４（ｑ，２Ｈ，Ｊ＝７．４Ｈｚ），１．３０（ｄ，３Ｈ，Ｊ＝６．７Ｈｚ）．
【０３６０】
［実施例８］
【化６３】
2019069947.tif 000075
【０３６１】
（ａ）３−（（（プロパ−２−イン−１−イルオキシ）カルボニル）アミノ）プロパン酸（３９）
トルエン（２ｍＬ）中のプロパルギルクロロホルメート（３１５μＬ、３８３ｍｇ、３．２３ｍｍｏｌ）の溶液を、Ｈ2Ｏ（７ｍＬ）中のβ−アラニン（３８）（２５０ｍｇ、２．８１ｍｍｏｌ）及びＮａＨＣＯ3（６７８ｍｇ、８．１ｍｍｏｌ）の撹拌混合物に室温で滴下添加した。反応混合物を１６時間激しく撹拌して、その後、これを分配した。水層をＨ2Ｏ（２０ｍＬ）で希釈し、Ｅｔ2Ｏ（４×１０ｍＬ）で洗浄して、０−５℃（氷／アセトン）まで冷却して、濃ＨＣｌによってｐＨ２まで酸性化した。酸性溶液をＥｔＯＡｃ（３×２０ｍＬ）で抽出して、合わせた有機層をＨ2Ｏ（１０ｍＬ）、塩水（２０ｍＬ）で洗浄して、脱水し（ＭｇＳＯ4）、濾過して、真空中で蒸発させて、粗生成物３９を油として得て、これをさらに精製せずに次の工程へ移行させた。
【０３６２】
（ｂ）ジ−ｔｅｒｔ−ブチル８，８’−（（（５−（５，９，２５−トリオキソ−４，１３，１６，１９，２２−ペンタオキサ−６，１０，２６−トリアザノナコサ−１，２８−ジイン−２９−イル）−１，３−フェニレン）ビス（メチレン））ビス（オキシ））（１１Ｓ，１１ａＳ，１１’Ｓ，１１ａ’Ｓ）−ビス（７−メトキシ−２−メチレン−５−オキソ−１１−（（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−イル）オキシ）−２，３，１１，１１ａ−テトラヒドロ−１Ｈ−ピロロ［２，１−ｃ］［１，４］ベンゾジアゼピン−１０（５Ｈ）−カルボキシレート）（４０）
ＥＤＣＩ（２４ｍｇ、０．１３ｍｍｏｌ）を、無水ＤＣＭ（３ｍＬ）中の３−（（（プロパ−２−イン−１−イルオキシ）カルボニル）アミノ）プロパン酸（３９）（１８ｍｇ、０．１０ｍｍｏｌ）及びアミン２９（約１３９ｍｇ、０．１０ｍｍｏｌ）の撹拌溶液に室温で添加した。反応混合物をアルゴン雰囲気下で１．５時間撹拌して、この時点でのＬＣ／ＭＳによる分析によって、保持時間１．８４分（ＥＳ＋）ｍ／ｚ  １４７７（［Ｍ＋Ｈ］+、約２０％相対強度）、１４９９（［Ｍ＋Ｎａ］+、約２２％相対強度）における実質的な量の所望の生成物が、保持時間１．６０分（ＥＳ＋）ｍ／ｚ  １２７４（［Ｍ＋Ｈ］+、約１０％相対強度）において切断された１  Ｎ１０Ｂｏｃ／１  ＴＨＰに相当する生成物及び保持時間１．４７分（ＥＳ＋）ｍ／ｚ  １３２４（［Ｍ＋Ｈ］+、約５％相対強度）における未反応５と共に明らかになった。反応混合物をＤＣＭ（２０ｍＬ）で希釈して、Ｈ2Ｏ（２×１０ｍＬ）、塩水（２０ｍＬ）で洗浄し、脱水して（ＭｇＳＯ4）、濾過して、真空中で蒸発させて粗生成物４０を得た。
【０３６３】
（ｃ）プロパ−２−イン−１−イル（２３−（３，５−ビス（（（（Ｓ）−７−メトキシ−２−メチレン−５−オキソ−２，３，５，１１ａ−テトラヒドロ−１Ｈ−ピロロ［２，１−ｃ］［１，４］ベンゾジアゼピン−８−イル）オキシ）メチル）フェニル）−３，１９−ジオキソ−７，１０，１３，１６−テトラオキサ−４，２０−ジアザトリコス−２２−イン−１−イル）カルバメート（４１）
９５：５体積／体積  ＴＦＡ／Ｈ2Ｏ（２ｍＬ）の溶液を、Ｂｏｃ／ＴＨＰ保護化合物４０の粗サンプル（約１５５ｍｇ、０．１０ｍｍｏｌ）に０℃（氷／アセトン）にて添加した。０℃にて１．５時間撹拌した後、ＬＣ／ＭＳで判定した通りに、反応が完了したと見なし、保持時間１．４１分（ＥＳ＋）ｍ／ｚ  １０７３（［Ｍ＋Ｈ］+、約３０％相対強度）における所望の生成物のピーク。反応混合物は、低温のまま保持して、ＮａＨＣＯ3（６０ｍＬ）の冷却飽和水溶液に滴下添加した。混合物をＤＣＭ（３×２０ｍＬ）で抽出して、合わせた有機層を塩水（２５ｍＬ）で洗浄し、脱水して（ＭｇＳＯ4）、濾過して、真空中で蒸発させて粗生成物を得た。フラッシュクロマトグラフィーによる精製（勾配溶離：１００％ＣＨＣｌ3から９５：５体積／体積  ＣＨＣｌ3／ＭｅＯＨ）によって、４１を黄色泡として得た（５１ｍｇ、４５％収率）。ＬＣ／ＭＳ（１５分間の運転）、保持時間５．７１分（ＥＳ＋）ｍ／ｚ  １０７３（［Ｍ＋Ｈ］+、約３０％相対強度）；1Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ3）δ  ７．６７（ｄ，２Ｈ，Ｊ＝４．５Ｈｚ），７．５２（ｓ，２Ｈ），７．４６−７．４３（ｍ，３Ｈ），７．０７−７．０２（ｍ，１Ｈ），６．８０（ｓ，２Ｈ），６．６４−６．５７（ｍ，１Ｈ），５．７８−５．７２（ｍ，１Ｈ），５．２１−５．０９（ｍ，８Ｈ），４．６４（ｄ，２Ｈ，Ｊ＝２．２Ｈｚ），４．２９−４．２５（ｍ，６Ｈ），３．９６（ｓ，６Ｈ），３．９０−３．８５（ｍ，２Ｈ），３．７６（ｔ，２Ｈ，Ｊ＝５．９Ｈｚ），３．６５−３．３５（ｍ，１８Ｈ），３．１６−３．０７（ｍ，２Ｈ），２．９３（ｄ，２Ｈ，Ｊ＝１６Ｈｚ），２．５２（ｔ，２Ｈ，Ｊ＝５．９Ｈｚ），２．４８−２．４５（ｍ，１Ｈ），２．４０（ｔ，２Ｈ，Ｊ＝５．９Ｈｚ）．
【０３６４】
［実施例９］
【化６４】
2019069947.tif 000076
【０３６５】
（ａ）ジ−ｔｅｒｔ−ブチル８，８’−（（（５−（１−（４−（（Ｓ）−２−（（Ｓ）−２−（６−（２，５−ジオキソ−２，５−ジヒドロ−１Ｈ−ピロール−１−イル）ヘキサンアミド）−３−メチルブタンアミド）−５−ウレイドペンタンアミド）フェニル）−３，１９−ジオキソ−２，７，１０，１３，１６−ペンタオキサ−４，２０−ジアザトリコス−２２−イン−２３−イル）−１，３−フェニレン）ビス（メチレン））ビス（オキシ））（１１Ｓ，１１ａＳ，１１’Ｓ，１１ａ’Ｓ）−ビス（７−メトキシ−２−メチレン−５−オキソ−１１−（（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−イル）オキシ）−２，３，１１，１１ａ−テトラヒドロ−１Ｈ−ピロロ［２，１−ｃ］［１，４］ベンゾジアゼピンｅ−１０（５Ｈ）−カルボキシレート）（４３）
ＤＩＰＥＡ（４４μＬ、３２ｍｇ、０．２５ｍｍｏｌ）を、無水ＤＭＦ（３ｍＬ）中の主要なアミン２９（約１５５ｍｇ、０．１１ｍｍｏｌ）及びニトロフェニルカーボネート４２（８４ｍｇ、０．１１ｍｍｏｌ）の撹拌溶液に室温で添加した。反応混合物をアルゴン雰囲気下で３日間撹拌して、このときのＬＣ／ＭＳによる分析によって、保持時間１．８０分（ＥＳ＋）ｍ／ｚ  １９２２（［Ｍ＋Ｈ］+、約４０％相対強度）、１９４４（［Ｍ＋Ｎａ］+、約２０％相対強度）で確認された所望の生成物と共に、保持時間１．６１分（ＥＳ＋）ｍ／ｚ  １７２０（［Ｍ＋Ｈ］+、約２０％相対強度）において切断された１  Ｎ１０Ｂｏｃ／１  ＴＨＰに相当する生成物が明らかになった。ＤＭＦを真空中での蒸発によって除去して、得られた生成物４３をさらに精製又は分析せずに、次の工程へ移行させた。
【０３６６】
（ｂ）４−（（Ｓ）−２−（（Ｓ）−２−（６−（２，５−ジオキソ−２，５−ジヒドロ−１Ｈ−ピロール−１−イル）ヘキサンアミド）−３−メチルブタンアミド）−５−ウレイドペンタンアミド）ベンジル（１９−（３，５−ビス（（（（Ｓ）−７−メトキシ−２−メチレン−５−オキソ−２，３，５，１１ａ−テトラヒドロ−１Ｈ−ピロロ［２，１−ｃ］［１，４］ベンゾジアゼピン−８−イル）オキシ）メチル）フェニル）−１５−オキソ−３，６，９，１２−テトラオキサ−１６−アザノナデカ−１８−イン−１−イル）カルバメート（４４）
９５：５体積／体積  ＴＦＡ／Ｈ2Ｏ（３ｍＬ）の溶液を、Ｂｏｃ／ＴＨＰ保護化合物４３の粗サンプル（約１７３ｍｇ、０．１１ｍｍｏｌ）に０℃（氷／アセトン）にて添加した。０℃にて１．５時間撹拌した後、ＬＣ／ＭＳで判定した通りに、反応が完了したと見なし、保持時間１．４２分（ＥＳ＋）ｍ／ｚ  １５１８（［Ｍ＋Ｈ］+、約４０％相対強度）における所望の生成物のピーク。反応混合物は、低温のまま保持して、ＮａＨＣＯ3（１００ｍＬ）の冷却飽和水溶液に滴下添加した。混合物をＤＣＭ（３×３０ｍＬ）で抽出して、合わせた有機層を塩水（２０ｍＬ）で洗浄し、脱水して（ＭｇＳＯ4）、濾過して、真空中で蒸発させて粗生成物を得た。フラッシュクロマトグラフィーによる精製（勾配溶離：１００％ＣＨＣｌ3から８０：２０体積／体積  ＣＨＣｌ3／ＭｅＯＨ）によって、粗生成物を黄色泡として得た（７２ｍｇ、４２％粗収率）。材料を分取ＨＰＬＣによってさらに精製して、純４４を薄膜として得た（４．５ｍｇ、３％収率）：ＬＣ／ＭＳ（１５分間の運転）、保持時間５．４４分（ＥＳ＋）ｍ／ｚ  １５１８（［Ｍ＋Ｈ］+、約３０％相対強度）。
【０３６７】
［実施例１０］
（ａ）１−（３−アミノプロパンアミド）−Ｎ−（３−（３，５−ビス（（（（Ｓ）−７−メトキシ−２−メチレン−５−オキソ−２，３，５，１１ａ−テトラヒドロ−１Ｈ−ピロロ［２，１−ｃ］［１，４］ベンゾジアゼピン−８−イル）オキシ）メチル）フェニル）プロパ−２−イン−１−イル）−３，６，９，１２−テトラオキサペンタデカン−１５−アミド（４７）
【化６５】
2019069947.tif 000077
【０３６８】
（ｉ）ジ−ｔｅｒｔ−ブチル８，８’−（（（５−（１−（９Ｈ−フルオレン−９−イル）−３，７，２３−トリオキソ−２，１１，１４，１７，２０−ペンタオキサ−４，８，２４−トリアザヘプタコス−２６−イン−２７−イル）−１，３−フェニレン）ビス（メチレン））ビス（オキシ））（１１Ｓ，１１ａＳ，１１’Ｓ，１１ａ’Ｓ）−ビス（７−メトキシ−２−メチレン−５−オキソ−１１−（（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−イル）オキシ）−２，３，１１，１１ａ−テトラヒドロ−１Ｈ−ピロロ［２，１−ｃ］［１，４］ベンゾジアゼピン−１０（５Ｈ）−カルボキシレート）（４５）
ＥＤＣＩ（４９ｍｇ、０．２５ｍｍｏｌ）を、無水ＤＣＭ（５ｍＬ）中のＦｍｏｃ−β−アラニン（６６ｍｇ、０．２１ｍｍｏｌ）及びアミン２９（約２７９ｍｇ、０．２１ｍｍｏｌ）の撹拌溶液に室温で添加した。反応混合物をアルゴン雰囲気下で３時間撹拌して、この時点でのＬＣ／ＭＳによる分析によって、保持時間１．７６分（ＥＳ＋）ｍ／ｚ  １６１７（［Ｍ＋Ｈ］+、約１０％相対強度）、１６３９（［Ｍ＋Ｎａ］+、約８０％相対強度）における実質的な量の所望の生成物と共に、保持時間１．５６分（ＥＳ＋）ｍ／ｚ  １４１５（［Ｍ＋Ｈ］+、約１０％相対強度）において切断された１  Ｎ１０Ｂｏｃ／１  ＴＨＰに相当する生成物が明らかになった。反応混合物をＤＣＭ（３０ｍＬ）で希釈して、Ｈ2Ｏ（２０ｍＬ）、塩水（２０ｍＬ）で洗浄し、脱水して（ＭｇＳＯ4）、濾過して、真空中で蒸発させて粗生成物４５を得た。
【０３６９】
（ｉｉ）（９Ｈ−フルオレン−９−イル）メチル（２３−（３，５−ビス（（（（Ｓ）−７−メトキシ−２−メチレン−５−オキソ−２，３，５，１１ａ−テトラヒドロ−１Ｈ−ピロロ［２，１−ｃ］［１，４］ベンゾジアゼピン−８−イル）オキシ）メチル）フェニル）−３，１９−ジオキソ−７，１０，１３，１６−テトラオキサ−４，２０−ジアザトリコス−２２−イン−１−イル）カルバメート（４６）
９５：５体積／体積  ＴＦＡ／Ｈ2Ｏ（４ｍＬ）の溶液を、Ｂｏｃ／ＴＨＰ保護化合物４５のサンプル（約３４１ｍｇ、０．２１ｍｍｏｌ）に０℃（氷／アセトン）にて添加した。０℃にて１時間撹拌した後、ＬＣ／ＭＳ（方法Ｃ）で判定した通りに、反応が完了したと見なし、保持時間１．４４分（ＥＳ＋）ｍ／ｚ  １２１２（［Ｍ＋Ｈ］+、約３０％相対強度）における所望の生成物のピーク。反応混合物は、低温のまま保持して、ＮａＨＣＯ3（８０ｍＬ）の冷却飽和水溶液に滴下添加した。混合物をＤＣＭ（３×２０ｍＬ）で抽出して、合わせた有機層をＮａＨＣＯ3（２×２０ｍＬ）、塩水（２０ｍＬ）で洗浄し、脱水して（ＭｇＳＯ4）、濾過して、真空中で蒸発させて粗生成物を得た。フラッシュクロマトグラフィーによる精製（勾配溶離：１００％ＣＨＣｌ3から９５：５体積／体積  ＣＨＣｌ3／ＭｅＯＨ）によって、粗生成物４６を黄色泡として得た（１７９ｍｇ、７０％収率）。
【０３７０】
（ｉｉｉ）１−（３−アミノプロパンアミド）−Ｎ−（３−（３，５−ビス（（（（Ｓ）−７−メトキシ−２−メチレン−５−オキソ−２，３，５，１１ａ−テトラヒドロ−１Ｈ−ピロロ［２，１−ｃ］［１，４］ベンゾジアゼピン−８−イル）オキシ）メチル）フェニル）プロパ−２−イン−１−イル）−３，６，９，１２−テトラオキサペンタデカン−１５−アミド（４７）
ジメチルアミン（ＴＨＦ中２．０Ｍ溶液の７３５μＬ、１．４７ｍｍｏｌ）をＴＨＦ（３ｍＬ）中のＦｍｏｃ保護化合物４６（８９ｍｇ、７３．５μｍｏｌ）の撹拌溶液に室温で添加した。室温で３時間撹拌した後、ＬＣ／ＭＳによる分析によって、保持時間１．１４分（ＥＳ＋）ｍ／ｚ  ９９０（［Ｍ＋Ｈ］+、約８％相対強度）、１００８（［Ｍ＋Ｈ2Ｏ］+、約１０％相対強度）、１０２６（［Ｍ＋２Ｈ2Ｏ］+、約１５％相対強度）における所望の生成物による反応完了が、保持時間１．８８分におけるＦｍｏｃ切断副生成物と共に明らかになった。混合物を真空中で蒸発させ、粗生成物４７をさらに精製又は分析せずに次の工程へ移行した。
【０３７１】
（ｂ）Ｎ−（３−（３，５−ビス（（（（Ｓ）−７−メトキシ−２−メチレン−５−オキソ−２，３，５，１１ａ−テトラヒドロ−１Ｈ−ピロロ［２，１−ｃ］［１，４］ベンゾジアゼピン−８−イル）オキシ）メチル）フェニル）プロパ−２−イン−１−イル）−１−（３−（２−ブロモアセトアミド）プロパンアミド）−３，６，９，１２−テトラオキサペンタデカン−１５−アミド（４８）
【化６６】
2019069947.tif 000078
【０３７２】
無水ブロモ酢酸（２３ｍｇ、８８．２μｍｏｌ）を、ＤＣＭ（３ｍＬ）中の粗アミン４７（約７３ｍｇ、７３．５μｍｏｌ）の撹拌溶液に添加した。反応混合物をアルゴン雰囲気下で室温で３時間撹拌し、この時点でのＬＣ／ＭＳによる分析によって、保持時間１．３４分（ＥＳ＋）ｍ／ｚ  １１１２（［Ｍ＋Ｈ］+、約３０％相対強度）において確認された所望の組成物による反応の完了が明らかになった。溶媒を真空中での蒸発によって除去して、粗生成物を得た。フラッシュクロマトグラフィーによる精製（勾配溶離：１００％ＣＨＣｌ3から９３：７体積／体積  ＣＨＣｌ3／ＭｅＯＨ）によって、生成物を黄色泡として得た（３８ｍｇ、４６％収率）。材料を分取ＨＰＬＣによってさらに精製して、純４８を薄膜として得た（５ｍｇ、６％収率）：ＬＣ／ＭＳ（１５分間の運転）、保持時間４．９６分（ＥＳ＋）ｍ／ｚ  １１１２（［Ｍ＋Ｈ］+、約１０％相対強度）；1Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ3）δ  ７．６７（ｄ，２Ｈ，Ｊ＝４．４Ｈｚ），７．５２（ｓ，２Ｈ），７．４６−７．４３（ｍ，４Ｈ），７．１０−７．０７（ｍ，１Ｈ），６．８０（ｓ，２Ｈ），５．２１−５．０９（ｍ，８Ｈ），４．２９−４．２５（ｍ，６Ｈ），３．９６（ｓ，６Ｈ），３．９０−３．８５（ｍ，２Ｈ），３．８２（ｓ，２Ｈ），３．７７（ｔ，２Ｈ，Ｊ＝５．９Ｈｚ），３．６５−３．４０（ｍ，１８Ｈ），３．１６−３．０７（ｍ，２Ｈ），２．９４（ｄ，２Ｈ，Ｊ＝１６Ｈｚ），２．５３（ｔ，２Ｈ，Ｊ＝５．９Ｈｚ），２．４３（ｔ，２Ｈ，Ｊ＝５．９Ｈｚ）．
【０３７３】
［実施例１１］１０の別の合成
【化６７】
2019069947.tif 000079
【０３７４】
（ａ）ジ−ｔｅｒｔ−ブチル８，８’−（（（５−（１−（２，５−ジオキソ−２，５−ジヒドロ−１Ｈ−ピロール−１−イル）−３，１９−ジオキソ−７，１０，１３，１６−テトラオキサ−４，２０−ジアザトリコス−２２−イン−２３−イル）−１，３−フェニレン）ビス（メチレン））ビス（オキシ））（１１Ｓ，１１ａＳ，１１’Ｓ，１１ａ’Ｓ）−ビス（７−メトキシ−２−メチレン−５−オキソ−１１−（（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−イル）オキシ）−２，３，１１，１１ａ−テトラヒドロ−１Ｈ−ピロロ［２，１−ｃ］［１，４］ベンゾジアゼピン−１０（５Ｈ）−カルボキシレート（９）
ＥＤＣＩ（６１ｍｇ、０．３２ｍｍｏｌ）を、無水ＤＣＭ（６ｍＬ）中のＮ−マレオイル−β−アラニン（５３ｍｇ、０．３２ｍｍｏｌ）及びアミン２９（約４１８ｍｇ、０．３２ｍｍｏｌ）の撹拌溶液に室温で添加した。反応混合物をアルゴン雰囲気下で３時間撹拌して、この時点でのＬＣ／ＭＳによる分析によって、保持時間１．８０分（ＥＳ＋）ｍ／ｚ  １４７４（［Ｍ＋Ｈ］+、約１５％相対強度）、１４９７（［Ｍ＋Ｎａ］+、約１００％相対強度）における実質的な量の所望の生成物と共に、保持時間１．５６分  １２７２（［Ｍ＋Ｈ］+、約８０％相対強度）１２９５（［Ｍ＋Ｎａ］+、約４５％相対強度）において切断された１  Ｎ１０Ｂｏｃ／１  ＴＨＰに相当する生成物及び保持時間１．３１分（ＥＳ＋Ｍ＋は確認されず）において切断された２  Ｎ１０  Ｂｏｃ／２  ＴＨＰに相当する生成物が示された。反応混合物をＤＣＭ（３０ｍＬ）で希釈して、Ｈ2Ｏ（１５ｍＬ）、塩水（２０ｍＬ）で洗浄し、脱水して（ＭｇＳＯ4）、濾過して、真空中で蒸発させて粗生成物９を泡として得た。
【０３７５】
（ｂ）Ｎ−（３−（３，５−ビス（（（（Ｓ）−７−メトキシ−２−メチレン−５−オキソ−２，３，５，１１ａ−テトラヒドロ−１Ｈ−ピロロ［２，１−ｃ］［１，４］ベンゾジアゼピン−８−イル）オキシ）メチル）フェニル）プロパ−２−イン−１−イル）−１−（３−（２，５−ジオキソ−２，５−ジヒドロ−１Ｈ−ピロール−１−イル）プロパンアミド）−３，６，９，１２−テトラオキサペンタデカン−１５−アミド（１０）
９５：５体積／体積  ＴＦＡ／Ｈ2Ｏ（５ｍＬ）の溶液を、Ｂｏｃ／ＴＨＰ保護化合物９のサンプル（約４６６ｍｇ、０．３２ｍｍｏｌ）に０℃（氷／アセトン）にて添加した。０℃にて１時間撹拌した後、ＬＣ／ＭＳで判定した通りに、反応が完了したと見なし、保持時間１．３２分（ＥＳ＋）ｍ／ｚ  １０７０（［Ｍ＋Ｈ］+、約１００％相対強度）における所望の生成物のピーク。反応混合物は、低温のまま保持して、ＮａＨＣＯ3（１２０ｍＬ）の冷却飽和水溶液に滴下添加した。混合物をＤＣＭ（３×４０ｍＬ）で抽出して、合わせた有機層を塩水（５０ｍＬ）で洗浄し、脱水して（ＭｇＳＯ4）、濾過して、真空中で蒸発させて粗生成物を得た。フラッシュクロマトグラフィーによる精製（勾配溶離：１００％ＣＨＣｌ3から９６：４体積／体積  ＣＨＣｌ3／ＭｅＯＨ）によって、１０をオレンジ色泡として得た（２０２ｍｇ、６０％収率）：［α］21D＝＋３５１°（ｃ＝０．４７、ＣＨＣｌ3）；ＬＣ／ＭＳ（１５分間の運転）、保持時間４．８８分（ＥＳ＋）ｍ／ｚ  １０７０（［Ｍ＋Ｈ］+、約１００％相対強度）；1Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ3）δ  ７．６６（ｄ，２Ｈ，Ｊ＝４．４Ｈｚ），７．５２（ｓ，２Ｈ），７．４５−７．４０（ｍ，３Ｈ），６．９８−６．９４（ｍ，１Ｈ），６．８０（ｓ，２Ｈ），６．６６（ｓ，２Ｈ），６．５５−６．５０（ｍ，１Ｈ），５．２２−５．０７（ｍ，８Ｈ），４．３０−４．２２（ｍ，６Ｈ），３．９６（ｓ，６Ｈ），３．９１−３．８５（ｍ，２Ｈ），３．８２（ｔ，２Ｈ，Ｊ＝７．２Ｈｚ），３．７６（ｔ，２Ｈ，Ｊ＝５．８Ｈｚ），３．６５−３．４３（ｍ，１６Ｈ），３．１６−３．０８（ｍ，２Ｈ），２．９４（ｄ，２Ｈ，Ｊ＝１５．７Ｈｚ），２．５４−２．４４（ｍ，４Ｈ）．
【０３７６】
コンジュゲーションのためのＴｈｉｏＭａｂの還元／酸化
ＣＨＯ細胞中で発現された全長システイン改変モノクローナル抗体（ＴｈｉｏＭａｂｓ−Ｊｕｎｕｔｕｌａ，ｅｔ  ａｌ．，２００８ｂ  Ｎａｔｕｒｅ  Ｂｉｏｔｅｃｈ．，２６（８）：９２５−９３２；Ｄｏｒｎａｎ  ｅｔ  ａｌ（２００９）Ｂｌｏｏｄ  １１４（１３）：２７２１−２７２９；米国特許第７５２１５４１号；米国特許第７７２３４８５号；国際公開第２００９／０５２２４９号、Ｓｈｅｎ  ｅｔ  ａｌ（２０１２）Ｎａｔｕｒｅ  Ｂｉｏｔｅｃｈ．，３０（２）：１８４−１９１；Ｊｕｎｕｔｕｌａ  ｅｔ  ａｌ（２００８）Ｊｏｕｒ  ｏｆ  Ｉｍｍｕｎ．Ｍｅｔｈｏｄｓ  ３３２：４１−５２）を、約２０〜４０倍過剰のＴＣＥＰ（トリス（２−カルボキシエチル）ホスフィンヒドロクロリド又はＤＴＴ（ジチオトレイトール）によって、２ｍＭ  ＥＤＴＡを含む５０ｍＭトリスｐＨ７．５中で、３７℃で３時間又は室温で一晩還元した（Ｇｅｔｚ  ｅｔ  ａｌ（１９９９）Ａｎａｌ．Ｂｉｏｃｈｅｍ．Ｖｏｌ  ２７３：７３−８０；Ｓｏｌｔｅｃ，Ｂｅｖｅｒｌｙ，ＭＡ）。還元したＴｈｉｏＭａｂを希釈して、１０ｍＭ酢酸ナトリウム、ｐＨ５中のＨｉＴｒａｐ  Ｓカラムに添加して、０．３Ｍ塩化ナトリウムを含有するＰＢＳで溶離させた。又は、抗体を１０ｍＭサクシネート、ｐＨ５で希釈した１／２０の体積の１０％酢酸を添加して酸性化し、カラムに添加して、次に１０カラム体積分のサクシネート緩衝液で洗浄した。カラムを５０ｍＭトリスｐＨ７．５、２ｍＭ  ＥＤＴＡで溶離させた。
溶離した還元ＴｈｉｏＭａｂを１５倍モル過剰のＤＨＡＡ（デヒドロアスコルビン酸）又は２００ｎＭ硫酸銅水溶液（ＣｕＳＯ4）で処理した。鎖間ジスルフィド結合の酸化は、約３時間以上で完了した。周囲空気による酸化も有効であった。再酸化した抗体を２０ｍＭコハク酸ナトリウムｐＨ５、１５０ｍＭ  ＮａＣｌ、２ｍＭ  ＥＤＴＡ中へ透析して、−２０℃で凍結保存した。
【０３７７】
抗体−薬剤コンジュゲートを調製するための、Ｔｈｉｏ−Ｍａｂと化合物とのコンジュゲーション
脱封鎖され、再酸化されたチオ抗体（ＴｈｉｏＭａｂ）を６〜８倍モル過剰の（濃度２０ｍＭのＤＭＳＯストックからの）化合物７、１０、１３、１７、２４、２５、３３、３７、４４、４８と５０ｍＭトリス、ｐＨ８中で、反応混合物のＬＣ−ＭＳ分析によって判定されるように、反応が完了するまで（１６〜２４時間）反応させた。
次に、粗抗体−薬剤コンジュゲート（ＡＤＣ）を、２０ｍＭコハク酸ナトリウム、ｐＨ５で希釈した後に、カチオン交換カラムに加えた。カラムを少なくとも１０カラム体積分の２０ｍＭコハク酸ナトリウム、ｐＨ５で洗浄して、抗体をＰＢＳで溶離させた。抗体ー薬剤コンジュゲートを２４０ｍＭスクロースを含む２０ｍＭ  Ｈｉｓ／アセテート、ｐＨ５中に、ゲル濾過カラムを使用して配合した。抗体−薬剤コンジュゲートを、リジンＣエンドペプチダーゼによる処理の前後に、タンパク質濃度を決定するためのＵＶ分光法、凝集分析のための分析ＳＥＣ（サイズ排除クロマトグラフィー）及びＬＣ−ＭＳによってキャラクタリゼーションした。
サイズ排除クロマトグラフィーは、０．２５ｍＭ塩化カリウム及び１５％ＩＰＡを含む０．２Ｍリン酸カリウムｐＨ６．２中のショウデックスＫＷ８０２．５カラムを使用して、０．７５ｍｌ／分の流量で行った。コンジュゲートの凝集状態は、２８０ｎｍにおける溶離ピーク面積吸収の積分によって決定した。
ＬＣ−ＭＳ分析は、アジレントＱＴＯＦ  ６５２０  ＥＳＩ装置を使用して行った。一例として、この化学作用を使用して生成された抗体−薬剤コンジュゲートを、トリス、ｐＨ７．５中の１：５００重量／重量エンドプロテイナーゼＬｙｓ  Ｃ（プロメガ）によって、３７℃で３０分間処理した。得られた切断断片を８０℃まで加熱した１０００Ａ、８ｕｍ  ＰＬＲＰ−Ｓカラムに添加して、３０％Ｂから４０％Ｂの勾配によって５分間溶離した。移動相Ａは０．０５％ＴＦＡを含むＨ2Ｏであり、移動相Ｂは０．０４％ＴＦＡを含むアセトニトリルであった。流量は０．５ｍｌ／分であった。エレクトロスプレーイオン化及びＭＳ分析の前に、タンパク質溶離を２８０ｎｍにおけるＵＶ吸収検出によって監視した。未コンジュゲートＦｃ断片、残留未コンジュゲートＦａｂ及び薬剤結合Ｆａｂのクロマトグラフ分離が通常行われる。得られたｍ／ｚスペクトルをＭａｓｓ  Ｈｕｎｔｅｒ（商標）ソフトウェア（アジレントテクノロジーズ）を使用してデコンボリューションして、抗体断片の質量を算出した。
【０３７８】
【表７】
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【０３７９】
【表８】
2019069947.tif 000081
【０３８０】
【表９】
2019069947.tif 000082
【０３８１】
【表１０】
2019069947.tif 000083
【０３８２】
【表１１】
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【０３８３】
【表１２】
2019069947.tif 000085
【０３８４】
【表１３】
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【０３８５】
【表１４】
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【０３８６】
【表１５】
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【０３８７】
【表１６】
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【０３８８】
以下のインビトロ及びインビボアッセイは、Ｐｈｉｌｌｉｐｓ  ｅｔ  ａｌ（２００８）Ｃａｎｃｅｒ  Ｒｅｓ．６８（２２）：９２８０−９２９０にも記載されている。
【０３８９】
インビトロ細胞増殖アッセイ
ＡＤＣの効能を、細胞増殖アッセイによって、以下のプロトコルを用いて測定した（ＣｅｌｌＴｉｔｅｒ  Ｇｌｏ  Ｌｕｍｉｎｅｓｃｅｎｔ  Ｃｅｌｌ  Ｖｉａｂｉｌｉｔｙ  Ａｓｓａｙ，Ｐｒｏｍｅｇａ  Ｃｏｒｐ．Ｔｅｃｈｎｉｃａｌ  Ｂｕｌｌｅｔｉｎ  ＴＢ２８８；Ｍｅｎｄｏｚａ  ｅｔ  ａｌ（２００２）Ｃａｎｃｅｒ  Ｒｅｓ．６２：５４８５−５４８８）。全ての細胞株は、Ａｍｅｒｉｃａｎ  Ｔｙｐｅ  Ｃｕｌｔｕｒｅ  Ｃｏｌｌｅｃｔｉｏｎより入手した：
【０３９０】
１．  培地中約１０4細胞（例えばＫＰＬ−４、ヒト乳癌細胞株、Ｋｕｒｅｂａｙａｓｈｉ  ｅｔ  ａｌ（１９９９）Ｂｒｉｔ．Ｊｏｕｒ．Ｃａｎｃｅｒ  ７９（５−６）：７０７−７１７）又はＳＫＢＲ−３）を含有する細胞培養物１００μｌの一定分量を、９６ウェルの不透明壁プレートの各ウェルに静置した。
２．  培地を含有して、細胞を含まない対照ウェルを調製した。
３．  ＡＤＣを実験ウェルに添加して、３から５日間インキュベートした。
４．  およそ３０分間にわたって、プレートを室温まで平衡にした。
５．  各ウェル中に存在する細胞培地の量に等しいＣｅｌｌＴｉｔｅｒ−Ｇｌｏ試薬の量を添加した。
６．  オービタルシェーカー上で内容物を２分間混合して、細胞溶解を行った。
７．  Ｔｈプレートを室温で１０分間インキュベートして、発光シグナルを安定化させた。
８．  発光を記録して、ＲＬＵ＝相対発光単位としてグラフに示した。
【０３９１】
ある細胞は、１０００−２０００／ウェル又は２０００−３０００／ウェルで９６ウェルプレート、５０  ｕＬ／ウェルに播種する。１又は２日後、ＡＤＣを５０μＬの量で９０００、３０００、１０００、３３３、１１１、３７、１２．４、４．１又は１．４ｎｇ／ｍＬの最終濃度まで添加して、「ＡＤＣなし」対照ウェルには培地のみ加える。条件は２通り又は３通りである  ３〜５日後、１００μＬ／ウェルのＣｅｌｌ  ＴｉｔｅｒＧｌｏ  ＩＩを添加し（ルシフェラーゼベースアッセイ；ＡＴＰレベルによって増殖を測定）、照度計を使用して細胞数を決定する。各複製セットの平均発光として、標準偏差エラーバーと共にプロットする。プロトコルは、ＣｅｌｌＴｉｔｅｒ  Ｇｌｏ  Ｌｕｍｉｎｅｓｃｅｎｔ  Ｃｅｌｌ  Ｖｉａｂｉｌｉｔｙアッセイ（プロメガ）を変更したものである：
【０３９２】
１．  ５０μＬ／ウェルのＦＢＳ／グルタミン培地で１０００細胞／ウェルを平板培養する。細胞を一晩付着させる。
２．  １８μｇ／ｍｌの作用濃度から開始して、ＡＤＣを培地によって１：３で連続希釈する（これにより９μｇ／ｍｌの最終濃度が生じる）。５０μｌの希釈ＡＤＣを、すでにウェル内にある５０μＬの細胞及び培地に添加する。
３．  ７２〜９６時間インキュベートする（標準は７２時間でああるが、細胞が８５−９５％コンフルエントのときにアッセイを停止するために、０ｕｇ／ｍＬ濃度を監視する）。
４．  １００μＬ／ウェルのプロメガＣｅｌｌ  Ｔｉｔｅｒ  Ｇｌｏ試薬を添加して、３分間振とうして、照度計を読み取る。
【０３９３】
結果
抗体−薬剤コンジュゲートのトラスツズマブ−７（１１０）トラスツズマブ−１０（１２０）及びトラスツズマブ−１７（１３０）をＳＫ−ＢＲ−３、ＫＰＬ−４及びＭＣＦ−７（Ｌｅｖｅｎｓｏｎ  ｅｔ  ａｌ（１９９７）Ｃａｎｃｅｒ  Ｒｅｓ．５７（１５）：３０７１−３０７８）細胞に対して試験して、５日間の研究での細胞生存能を測定した。ＳＫ−ＢＲ−３に対する１１０のＩＣ50値（ｎｇ／ｍＬ）は、２２．９０であった。ＳＫ−ＢＲ−３に対する１２０のＩＣ50値は、１１．１４であった。ＳＫ−ＢＲ−３に対する１３０のＩＣ50値は、１６．８であった。ＳＫ−ＢＲ−３細胞は、ＨＥＲ２＋発現性で、トラスツズマブ感受性である。１１０、１２０及び１３０は、ＨＥＲ２非発現性ヒト乳腺癌細胞株である、ＭＣＦ−７に対して効果的に不活性であった。このため、コンジュゲート１１０、１２０及び１３０は、標的化細胞死滅効力を示す。
【０３９４】
高発現性ＨＥＲ２トランスジェニック外植マウスにおける腫瘍成長阻害、インビボ効能
トランスジェニック実験に好適な動物は、Ｔａｃｏｎｉｃ（ジャーマンタウン、ニューヨーク州）などの標準的な発売元から入手できる。多くの系統が好適であるが、ＦＶＢメスマウスが好ましいのは、腫瘍形成に対してその罹患性がより高いためである。ＦＶＢオスを交配に使用して、精管切除ＣＤ．１種オスを使用して偽妊娠をシミュレートした。精管切除マウスは、いずれの販売供給者からも入手できる。ファウンダーをＦＶＢマウス又は１２９／ＢＬ６×ＦＶＢ  ｐ５３ヘテロ接合マウスのどちらかと交配させた。ｐ５３対立遺伝子にヘテロ接合性を有するマウスを使用して、潜在的に腫瘍形成を上昇させた。しかし、このことは不要であることが判明している。したがって、いくつかのＦ１腫瘍は、混合系統の腫瘍である。ファウンダーの腫瘍はＦＶＢのみである。６匹のファウンダーが得られ、一部は腫瘍を発症していて、同腹仔はなかった。
【０３９５】
腫瘍（Ｆｏ５  ｍｍｔｖトランスジェニックマウスから繁殖させた同種移植片）を有する動物を、ＡＤＣの静脈内注射による単回又は複数回用量によって処置した。注射後の各種時点に、腫瘍の体積を評価した。
ＨＥＲ２のラットホモログであるｎｅｕの突然変異活性化形態を発現するトランスジェニックマウスにおいて、腫瘍がただちに発生するが、ヒト乳癌で過剰発現されるＨＥＲ２は突然変異せず、非突然変異ＨＥＲ２を過剰発現するトランスジェニックマウスでは、腫瘍形成はそれほど強くない（Ｗｅｂｓｔｅｒ  ｅｔ  ａｌ（１９９４）Ｓｅｍｉｎ．Ｃａｎｃｅｒ  Ｂｉｏｌ．５：６９−７６）。
【０３９６】
非突然変異ＨＥＲ２による腫瘍形成を改善するために、欠失させなければ下流のＨＥＲ２の真正開始コドンからの翻訳開始の頻度を低下させる、このような上流ＡＴＧコドンでの翻訳開始を防止する目的で、上流ＡＴＧが欠失したＨＥＲ２  ｃＤＮＡプラスミドを使用して、トランスジェニックマウスを産生した（例えばＣｈｉｌｄ  ｅｔ  ａｌ（１９９９）Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．２７４：２４３３５−２４３４１を参照のこと）。加えて、キメライントロンを５’末端に付加したが、このことも、以前報告されているように、発現レベルを向上させるはずである（Ｎｅｕｂｅｒｇｅｒ  ａｎｄ  Ｗｉｌｌｉａｍｓ（１９８８）Ｎｕｃｌｅｉｃ  Ａｃｉｄｓ  Ｒｅｓ．１６：６７１３；Ｂｕｃｈｍａｎ  ａｎｄ  Ｂｅｒｇ（１９８８）Ｍｏｌ．Ｃｅｌｌ．Ｂｉｏｌ．８：４３９５；Ｂｒｉｎｓｔｅｒ  ｅｔ  ａｌ（１９８８）Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ  ８５：８３６）。キメライントロンは、プロメガベクターのＰｃｉ−ｎｅｏ哺乳動物発現ベクター（ｂｐ  ８９０−１０２２）から誘導した。ｃＤＮＡ  ３’末端には、ヒト成長ホルモンエクソン４及び５並びにポリアデニル化配列が隣接している。さらに、ＦＶＢマウスを使用したのは、この系統が腫瘍発症に対して罹患性がより高いためである。ＭＭＴＶ−ＬＴＲからのプロモータを使用して、乳腺での組織特異的ＨＥＲ２を確実に発現させた。腫瘍形成に対する罹患性を向上させるために、動物にはＡＩＮ  ７６Ａ食を与えた（Ｒａｏ  ｅｔ  ａｌ（１９９７）Ｂｒｅａｓｔ  Ｃａｎｃｅｒ  Ｒｅｓ．ａｎｄ  Ｔｒｅａｔｍｅｎｔ  ４５：１４９−１５８）。
【０３９７】
Ｆｏ５マウス乳腺腫瘍モデル
Ｆｏ５モデルは、マウス乳腺腫瘍ウイルスプロモータ（ＭＭＴＶ−ＨＥＲ２）の転写制御下でヒトＨＥＲ２遺伝子が乳腺上皮にて過剰発現する、トランスジェニックマウスモデルである。過剰発現によって、ヒトＨＥＲ２受容体を過剰発現する乳腺腫瘍の自発的発症が引き起こされる。ファウンダー動物の１匹（ファウンダー＃５［Ｆｏ５］）の乳腺腫瘍は、腫瘍断片の累代移植によって、次世代のＦＶＢマウスで増殖されてきた。生体内効能研究に使用する前に、ＭＭＴＶ−ＨＥＲ２  Ｆｏ５トランスジェニック乳腺腫瘍をｎｕ／ｎｕマウスのｎｏ．２／３乳腺脂肪体（チャールズ・リバー・ラボラトリーズ製）に、およそ２×２ｍｍの寸法の断片として外科的に移植した。腫瘍が所望の体積に達したときに、腫瘍保持マウスをランダム化して、ＡＤＣの静脈内注射の単回用量を投与した。
【０３９８】
結果
図１は、ＣＲＬ  ｎｕ／ｎｕマウスに接種した乳癌モデルＭＭＴＶ−ＨＥＲ２  Ｆｏ５乳腺同種移植腫瘍の、第０日に単回静脈内投薬した後の、生体内平均腫瘍体積の変化の時間に対するプロットを示す：（１）ビヒクルの２０ｍＭヒスチジンアセテート、ｐＨ５．５、２４０ｍＭスクロース、（２）６ｍｇ／ｋｇのｘＣＤ２２−７（１１５）、（３）１ｍｇ／ｋｇのトラスツズマブ−７（１１０）、（４）３ｍｇ／ｋｇのトラスツズマブ−７（１１０）及び（５）６ｍｇ／ｋｇのトラスツズマブ−７（１１０）。図の線は、以下の記号によって示す：
2019069947.tif 000090
【０３９９】
図２は、ＣＲＬ  ｎｕ／ｎｕマウスに接種した乳癌モデルＭＭＴＶ−ＨＥＲ２  Ｆｏ５乳腺同種移植腫瘍の、第０日に単回静脈内投薬した後の、生体内平均腫瘍体積の変化の時間に対するプロットを示す：（１）ビヒクルの２０ｍＭヒスチジンアセテート、ｐＨ５．５、２４０ｍＭスクロース、（２）３ｍｇ／ｋｇのｘＣＤ２２−１０（１２５）、（３）０．３ｍｇ／ｋｇのトラスツズマブ−１０（１２０）、（４）１ｍｇ／ｋｇのトラスツズマブ−１０（１２０）及び（５）３ｍｇ／ｋｇのトラスツズマブ−１０（１２０）。図の線は、以下の記号によって示す：
2019069947.tif 000091
【０４００】
図３は、ＣＲＬ  ｎｕ／ｎｕマウスに接種した乳癌モデルＭＭＴＶ−ＨＥＲ２  Ｆｏ５乳腺同種移植腫瘍の、第０日に単回静脈内投薬した後の、生体内平均腫瘍体積の変化の時間に対するプロットを示す：（１）ビヒクルの２０ｍＭヒスチジンアセテート、ｐＨ５．５、２４０ｍＭスクロース、（２）３ｍｇ／ｋｇのｘＣＤ２２−１７（１３５）、（３）０．３ｍｇ／ｋｇのトラスツズマブ−１７（１３０）、（４）１ｍｇ／ｋｇのトラスツズマブ−１７（１３０）及び（５）３ｍｇ／ｋｇのトラスツズマブ−１７（１３０）。図の線は、以下の記号によって示す：
2019069947.tif 000092
【０４０１】
省略形
Ａｃ  アセチル
Ａｃｍ  アセトアミドメチル
Ａｌｌｏｃ  アリルオキシカルボニル
Ｂｏｃ  ジ−ｔｅｒｔ−ブチルジカーボネート
ｔ−Ｂｕ  ｔｅｒｔ−ブチル
Ｂｚｌ  ベンジル、ここでＢｚｌ−ＯＭｅはメトキシベンジルであり、Ｂｚｌ−Ｍｅはメチルベンゼンである
Ｃｂｚ又はＺ  ベンジルオキシ−カルボニル、ここでＺ−Ｃｌ及びＺ−Ｂｒはそれぞれ、クロロベンジルオキシカルボニル及びブロモベンジルオキシカルボニルである
ＤＭＦ  Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド
Ｄｎｐ  ジニトロフェニル
ＤＴＴ  ジチオスレイトール
Ｆｍｏｃ  ９Ｈ−フルオレン−９−イルメトキシカルボニル
ｉｍｐ  Ｎ−１０イミン保護基：３−（２−メトキシエトキシ）プロパノエート−Ｖａｌ−Ａｌａ−ＰＡＢ
ＭＣ−ＯＳｕ  マレイミドカプロイル−Ｏ−Ｎ−スクシンイミド
Ｍｏｃ  メトキシカルボニル
ＭＰ  マレイミドプロパンアミド
Ｍｔｒ  ４−メトキシ−２，３，６−トリメチルベンゼンスルホニル
ＰＡＢ  パラ−アミノベンジルオキシカルボニル
ＰＥＧ  エチレンオキシ
ＰＮＺ  ｐ−ニトロベンジルカルバメート
Ｐｓｅｃ  ２−（フェニルスルホニル）エトキシカルボニル
ＴＢＤＭＳ  ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリル
ＴＢＤＰＳ  ｔｅｒｔ−ブチルジフェニルシリル
Ｔｅｏｃ  ２−（トリメチルシリル）エトキシカルボニル
Ｔｏｓ  トシル
Ｔｒｏｃ  ２，２，２−トリクロルエトキシカルボニルクロリド
Ｔｒｔ  トリチル
Ｘａｎ  キサンチル
【０４０２】
参考文献
以下の参考文献は、その全体が参照により組み入れられている：
ＥＰ０５２２８６８
ＥＰ０８７５５６９
ＥＰ１２９５９４４
ＥＰ１３４７０４６
ＥＰ１３９４２７４
ＥＰ１３９４２７４
ＥＰ１４３９３９３
ＪＰ０５００３７９０
ＪＰ２００４１１３１５１
ＪＰ５８１８０４８７
ＵＳ２００１／０５５７５１
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ＵＳ２００２／０４２３６６
ＵＳ２００２／１５０５７３
ＵＳ２００２／１９３５６７
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ＵＳ２００３／０６０６１２
ＵＳ２００３／０６４３９７
ＵＳ２００３／０６５１４３
ＵＳ２００３／０９１５８０
ＵＳ２００３／０９６９６１
ＵＳ２００３／１０５２９２
ＵＳ２００３／１０９６７６
ＵＳ２００３／１１８５９２
ＵＳ２００３／１１９１２１
ＵＳ２００３／１１９１２２
ＵＳ２００３／１１９１２５
ＵＳ２００３／１１９１２６
ＵＳ２００３／１１９１２８
ＵＳ２００３／１１９１２９
ＵＳ２００３／１１９１３０
ＵＳ２００３／１１９１３１
ＵＳ２００３／１２４１４０
ＵＳ２００３／１２４５７９
ＵＳ２００３／１２９１９２
ＵＳ２００３／１３４７９０−Ａ１
ＵＳ２００３／１４３５５７
ＵＳ２００３／１５７０８９
ＵＳ２００３／１６５５０４
ＵＳ２００３／１８５８３０
ＵＳ２００３／１８６３７２
ＵＳ２００３／１８６３７３
ＵＳ２００３／１９４７０４
ＵＳ２００３／２０６９１８
ＵＳ２００３／２１９８０６
ＵＳ２００３／２２４４１１
ＵＳ２００３／２２４４５４
ＵＳ２００３／２３２０５６
ＵＳ２００３／２３２３５０
ＵＳ２００３００９６７４３
ＵＳ２００３０１３０１８９
ＵＳ２００３０９６７４３
ＵＳ２００３１３０１８９
ＵＳ２００４／０００１８２７
ＵＳ２００４／００５３２０
ＵＳ２００４／００５５３８
ＵＳ２００４／００５５６３
ＵＳ２００４／００５５９８
ＵＳ２００４／０１０１８９９
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ＵＳ２００４／０２２７２７
ＵＳ２００４／０４４１７９
ＵＳ２００４／０４４１８０
ＵＳ２００４／１０１８７４
ＵＳ２００４／１９７３２５
ＵＳ２００４／２４９１３０
ＵＳ２００４００１８１９４
ＵＳ２００４００５２７９３
ＵＳ２００４００５２７９３
ＵＳ２００４０１２１９４０
ＵＳ２００５／２７１６１５
ＵＳ２００６／１１６４２２
ＵＳ４８１６５６７
ＵＳ５３６２８５２
ＵＳ５４４００２１
ＵＳ５５８３０２４
ＵＳ５６２１００２
ＵＳ５６４４０３３
ＵＳ５６７４７１３
ＵＳ５７００６７０
ＵＳ５７７３２２３
ＵＳ５７９２６１６
ＵＳ５８５４３９９
ＵＳ５８６９４４５
ＵＳ５９７６５５１
ＵＳ６０１１１４６
ＵＳ６１５３４０８
ＵＳ６２１４３４５
ＵＳ６２１８５１９
ＵＳ６２６８４８８
ＵＳ６５１８４０４
ＵＳ６５３４４８２
ＵＳ６５５５３３９
ＵＳ６６０２６７７
ＵＳ６６７７４３５
ＵＳ６７５９５０９
ＵＳ６８３５８０７
ＵＳ７２２３８３７
ＵＳ７３７５０７８
ＵＳ７５２１５４１
ＵＳ７７２３４８５
ＷＯ００／０１２５０８
ＷＯ００／１２５０７
ＷＯ００／１２５０８
ＷＯ０１／１６３１８
ＷＯ０１／４５７４６
ＷＯ０２／０８８１７２
ＷＯ０３／０２６５７７
ＷＯ０３／０４３５８３
ＷＯ０４／０３２８２８
ＷＯ２０００／１２１３０
ＷＯ２０００／１４２２８
ＷＯ２０００／２０５７９
ＷＯ２０００／２２１２９
ＷＯ２０００／３２７５２
ＷＯ２０００／３６１０７
ＷＯ２０００／４０６１４
ＷＯ２０００／４４８９９
ＷＯ２０００／５５３５１
ＷＯ２０００／７５６５５
ＷＯ２０００５３２１６
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ＷＯ２００１／３８４９０
ＷＯ２００１／４０２６９
ＷＯ２００１／４０３０９
ＷＯ２００１／４１７８７
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ＷＯ２００１／４６２６１
ＷＯ２００１／４８２０４
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ＷＯ２００１／５７１８８
ＷＯ２００１／６２７９４
ＷＯ２００１／６６６８９
ＷＯ２００１／７２８３０
ＷＯ２００１／７２９６２
ＷＯ２００１／７５１７７
ＷＯ２００１／７７１７２
ＷＯ２００１／８８１３３
ＷＯ２００１／９０３０４
ＷＯ２００１／９４６４１
ＷＯ２００１／９８３５１
ＷＯ２００２／０２５８７
ＷＯ２００２／０２６２４
ＷＯ２００２／０６３１７
ＷＯ２００２／０６３３９
ＷＯ２００２／１０１０７５
ＷＯ２００２／１０１８７
ＷＯ２００２／１０２２３５
ＷＯ２００２／１０３８２
ＷＯ２００２／１２３４１
ＷＯ２００２／１３８４７
ＷＯ２００２／１４５０３
ＷＯ２００２／１６４１３
ＷＯ２００２／１６４２９
ＷＯ２００２／２２１５３
ＷＯ２００２／２２６３６
ＷＯ２００２／２２６６０
ＷＯ２００２／２２８０８
ＷＯ２００２／２４９０９
ＷＯ２００２／２６８２２
ＷＯ２００２／３０２６８
ＷＯ２００２／３８７６６
ＷＯ２００２／５４９４０
ＷＯ２００２／５９３７７
ＷＯ２００２／６０３１７
ＷＯ２００２／６１０８７；
ＷＯ２００２／６４７９８
ＷＯ２００２／７１９２８
ＷＯ２００２／７２５９６
ＷＯ２００２／７８５２４
ＷＯ２００２／８１６４６
ＷＯ２００２／８３８６６
ＷＯ２００２／８６４４３
ＷＯ２００２／８８１７０
ＷＯ２００２／８９７４７
ＷＯ２００２／９２８３６
ＷＯ２００２／９４８５２
ＷＯ２００２／９８３５８
ＷＯ２００２／９９０７４
ＷＯ２００２／９９１２２
ＷＯ２００３／０００８４２
ＷＯ２００３／００２７１７
ＷＯ２００３／００３９０６
ＷＯ２００３／００３９８４
ＷＯ２００３／００４９８９
ＷＯ２００３／００８５３７
ＷＯ２００３／００９８１４
ＷＯ２００３／０１４２９４
ＷＯ２００３／０１６４７５
ＷＯ２００３／０１６４９４
ＷＯ２００３／０１８６２１
ＷＯ２００３／０２２９９５
ＷＯ２００３／０２３０１３
ＷＯ２００３／０２４３９２
ＷＯ２００３／０２５１３８
ＷＯ２００３／０２５１４８
ＷＯ２００３／０２５２２８
ＷＯ２００３／０２６４９３
ＷＯ２００３／０２９２６２
ＷＯ２００３／０２９２７７
ＷＯ２００３／０２９４２１
ＷＯ２００３／０３４９８４
ＷＯ２００３／０３５８４６
ＷＯ２００３／０４２６６１
ＷＯ２００３／０４５４２２
ＷＯ２００３／０４８２０２
ＷＯ２００３／０５４１５２
ＷＯ２００３／０５５４３９
ＷＯ２００３／０５５４４３
ＷＯ２００３／０６２４０１
ＷＯ２００３／０６２４０１
ＷＯ２００３／０７２０３５
ＷＯ２００３／０７２０３６
ＷＯ２００３／０７７８３６
ＷＯ２００３／０８１２１０
ＷＯ２００３／０８３０４１
ＷＯ２００３／０８３０４７
ＷＯ２００３／０８３０７４
ＷＯ２００３／０８７３０６
ＷＯ２００３／０８７７６８
ＷＯ２００３／０８８８０８
ＷＯ２００３／０８９６２４
ＷＯ２００３／０８９９０４
ＷＯ２００３／０９３４４４
ＷＯ２００３／０９７８０３
ＷＯ２００３／１０１２８３
ＷＯ２００３／１０１４００
ＷＯ２００３／１０４２７０
ＷＯ２００３／１０４２７５
ＷＯ２００３／１０５７５８
ＷＯ２００３００４５２９
ＷＯ２００３０４２６６１
ＷＯ２００３１０４３９９
ＷＯ２００４／０００９９７
ＷＯ２００４／００１００４
ＷＯ２００４／００９６２２
ＷＯ２００４／０１１６１１
ＷＯ２００４／０１５４２６
ＷＯ２００４／０１６２２５
ＷＯ２００４／０２０５９５
ＷＯ２００４／０２２７０９
ＷＯ２００４／０２２７７８
ＷＯ２００４／０２７０４９
ＷＯ２００４／０３１２３８
ＷＯ２００４／０３２８２８
ＷＯ２００４／０３２８４２
ＷＯ２００４／０４００００
ＷＯ２００４／０４３３６１
ＷＯ２００４／０４３９６３
ＷＯ２００４／０４４１７８
ＷＯ２００４／０４５５１６
ＷＯ２００４／０４５５２０
ＷＯ２００４／０４５５５３
ＷＯ２００４／０４６３４２
ＷＯ２００４／０４７７４９
ＷＯ２００４／０４８９３８
ＷＯ２００４／０５３０７９
ＷＯ２００４／０６３３５５
ＷＯ２００４／０６３３６２
ＷＯ２００４／０６３７０９
ＷＯ２００４／０６５５７７
ＷＯ２００４／０７４３２０
ＷＯ２００４０００２２１
ＷＯ２００４０２０５８３
ＷＯ２００４０４２３４６
ＷＯ２００４０６５５７６
ＷＯ２００５／０２３８１４
ＷＯ２００５／０８２０２３
ＷＯ２００５／０８５２５１
ＷＯ２００６／１１１７５９
ＷＯ２００７／０４４５１５
ＷＯ２００７／０８５９３０
ＷＯ２００９／０５２２４９
ＷＯ２０１０／０９１１５０
ＷＯ９１／０２５３６
ＷＯ９２／０７５７４
ＷＯ９２／１７４９７
ＷＯ９４／１０３１２
ＷＯ９４／２８９３１
ＷＯ９６３０５１４
ＷＯ９７／０７１９８
ＷＯ９７／４４４５２
ＷＯ９８／１３０５９
ＷＯ９８／３７１９３
ＷＯ９８／４０４０３
ＷＯ９８／５１８０５
ＷＯ９８／５１８２４
ＷＯ９９／２８４６８
ＷＯ９９／４６２８４
ＷＯ９９／５８６５８
【０４０３】
Ａｍ．Ｊ．Ｈｕｍ．Ｇｅｎｅｔ．４９  （３）：５５５−５６５（１９９１）
Ａｍｉｅｌ  Ｊ．，ｅｔ  ａｌ  Ｈｕｍ．Ｍｏｌ．Ｇｅｎｅｔ．５，３５５−３５７，１９９６
Ａｍｉｒ  ｅｔ  ａｌ  （２００３）Ａｎｇｅｗ．Ｃｈｅｍ．Ｉｎｔ．Ｅｄ．４２：４４９４−４４９９
Ａｍｓｂｅｒｒｙ，ｅｔ  ａｌ（１９９０）Ｊ．Ｏｒｇ．Ｃｈｅｍ．５５：５８６７
Ａｎｇｅｗ  Ｃｈｅｍ．Ｉｎｔｌ．Ｅｄ．Ｅｎｇｌ．（１９９４）３３：１８３−１８６
Ａｎｎｕ．Ｒｅｖ．Ｎｅｕｒｏｓｃｉ．２１：３０９−３４５（１９９８）
Ａｒａｉ  Ｈ．，ｅｔ  ａｌ  Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．２６８，３４６３−３４７０，１９９３
Ａｒａｉ  Ｈ．，ｅｔ  ａｌ  Ｊｐｎ．Ｃｉｒｃ．Ｊ．５６，１３０３−１３０７，１９９２
Ａｒｉｍａ，ｅｔ  ａｌ．，Ｊ．Ａｎｔｉｂｉｏｔｉｃｓ，２５，４３７−４４４（１９７２）
Ａｔｔｉｅ  Ｔ．，ｅｔ  ａｌ，Ｈｕｍ．Ｍｏｌ．Ｇｅｎｅｔ．４，２４０７−２４０９，１９９５
Ａｕｒｉｃｃｈｉｏ  Ａ．，ｅｔ  ａｌ  Ｈｕｍ．Ｍｏｌ．Ｇｅｎｅｔ．５：３５１−３５４，１９９６
Ｂａｒｅｌ  Ｍ．，ｅｔ  ａｌ  Ｍｏｌ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．３５，１０２５−１０３１，１９９８
Ｂａｒｅｌｌａ  ｅｔ  ａｌ（１９９５）Ｂｉｏｃｈｅｍ．Ｊ．３０９：７７３−７７９
Ｂａｒｎｅｔｔ  Ｔ．，ｅｔ  ａｌ  Ｇｅｎｏｍｉｃｓ  ３，５９−６６，１９８８
Ｂｅｃｋ  ｅｔ  ａｌ（１９９２）Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．２２８：４３３−４４１
Ｂｅｃｋ  ｅｔ  ａｌ（１９９６）Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．２５５：１−１３
Ｂｅｒｇｅ，ｅｔ  ａｌ．，Ｊ．Ｐｈａｒｍ．Ｓｃｉ．，６６，１−１９（１９７７）
Ｂｉｏｃｈｅｍ．Ｂｉｏｐｈｙｓ．Ｒｅｓ．Ｃｏｍｍｕｎ．（２０００）２７５（３）：７８３−７８８
Ｂｉｏｃｈｅｍ．Ｂｉｏｐｈｙｓ．Ｒｅｓ．Ｃｏｍｍｕｎ．２５５（２），２８３−２８８（１９９９）
Ｂｌｏｏｄ  （２００２）１００（９）：３０６８−３０７６
Ｂｌｏｏｄ  ９９（８）：２６６２−２６６９  （２００２）
Ｂｌｕｍｂｅｒｇ  Ｈ．，ｅｔ  ａｌ  Ｃｅｌｌ  １０４，９−１９，２００１
Ｂｏｓｅ，ｅｔ  ａｌ．，Ｔｅｔｒａｈｅｄｒｏｎ，４８，７５１−７５８（１９９２）
Ｂｏｕｒｇｅｏｉｓ  Ｃ．，ｅｔ  ａｌ  Ｊ．Ｃｌｉｎ．Ｅｎｄｏｃｒｉｎｏｌ．Ｍｅｔａｂ．８２，３１１６−３１２３，１９９７
Ｂｒｉｎｓｔｅｒ  ｅｔ  ａｌ（１９８８）Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ  ８５：８３６
Ｂｕｃｈｍａｎ  ａｎｄ  Ｂｅｒｇ（１９８８）Ｍｏｌ．Ｃｅｌｌ．Ｂｉｏｌ．８：４３９５
Ｃａｎｃｅｒ  Ｒｅｓ．６１（１５），５８５７−５８６０（２００１）
Ｃａｒｌ  ｅｔ  ａｌ（１９８１）Ｊ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．２４：４７９−４８０
Ｃａｒｌｓｓｏｎ  ｅｔ  ａｌ（１９７８）Ｂｉｏｃｈｅｍ．Ｊ．１７３：７２３−７３７
Ｃａｒｔｅｒ，Ｐ．（２００６）Ｎａｔｕｒｅ  Ｒｅｖｉｅｗｓ  Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｙ  ６：３４３−３５７
Ｃｅｌｌ  １０９  （３）：３９７−４０７（２００２）
ＣｅｌｌＴｉｔｅｒ  Ｇｌｏ  Ｌｕｍｉｎｅｓｃｅｎｔ  Ｃｅｌｌ  Ｖｉａｂｉｌｉｔｙ  Ａｓｓａｙ，Ｐｒｏｍｅｇａ  Ｃｏｒｐ．Ｔｅｃｈｎｉｃａｌ  Ｂｕｌｌｅｔｉｎ  ＴＢ２８８
Ｃｈａｋｒａｖａｒｔｙ  ｅｔ  ａｌ（１９８３）Ｊ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．２６：６３８−６４４
Ｃｈａｎ，Ｊ．ａｎｄ  Ｗａｔｔ，Ｖ．Ｍ．，Ｏｎｃｏｇｅｎｅ  ６（６），１０５７−１０６１（１９９１）
Ｃｈｉｌｄ  ｅｔ  ａｌ（１９９９）Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．２７４：２４３３５−２４３４１
Ｃｈｏ  Ｈ．−Ｓ．，ｅｔ  ａｌ  Ｎａｔｕｒｅ  ４２１，７５６−７６０，２００３
Ｃｉｃｃｏｄｉｃｏｌａ，Ａ．，ｅｔ  ａｌ  ＥＭＢＯ  Ｊ．８（７）：１９８７−１９９１（１９８９）
Ｃｌａｃｋｓｏｎ  ｅｔ  ａｌ（１９９１）Ｎａｔｕｒｅ，３５２：６２４−６２８
Ｃｌａｒｋ  Ｈ．Ｆ．，ｅｔ  ａｌ  Ｇｅｎｏｍｅ  Ｒｅｓ．１３，２２６５−２２７０，２００３
Ｃｏｒｅｙ  Ｅ，Ｑｕｉｎｎ  ＪＥ，Ｂｕｈｌｅｒ  ＫＲ，ｅｔ  ａｌ．ＬｕＣａｐ３５：ａ  ｎｅｗ  ｍｏｄｅｌ  ｏｆ  ｐｒｏｓｔａｔｅ  ｃａｎｃｅｒ  ｐｒｏｇｒｅｓｓｉｏｎ  ｔｏ  ａｎｄｒｏｇｅｎ  ｉｎｄｅｐｅｎｄｅｎｃｅ．Ｔｈｅ  Ｐｒｏｓｔａｔｅ  ２００３；５５：２３９−４６
Ｃｏｕｓｓｅｎｓ  Ｌ．，ｅｔ  ａｌ  Ｓｃｉｅｎｃｅ（１９８５）２３０（４７３０）：１１３２−１１３９
Ｃｒｅｅ  ｅｔ  ａｌ（１９９５）ＡｎｔｉＣａｎｃｅｒ  Ｄｒｕｇｓ  ６：３９８−４０４
Ｃｒｏｕｃｈ  ｅｔ  ａｌ（１９９３）Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．Ｍｅｔｈ．１６０：８１−８８
Ｄａｖｉｓ  ｅｔ  ａｌ（２００１）Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ  ＵＳＡ  ９８（１７）：９７７２−９７７７
ｄｅ  Ｇｒｏｏｔ  ｅｔ  ａｌ（２００１）Ｊ．Ｏｒｇ．Ｃｈｅｍ．６６：８８１５−８８３０
ｄｅ  Ｇｒｏｏｔ  ｅｔ  ａｌ（２００３）Ａｎｇｅｗ．Ｃｈｅｍ．Ｉｎｔ．Ｅｄ．４２：４４９０−４４９４
Ｄｅｎｎｉｓ  ｅｔ  ａｌ．（２００２）「Ａｌｂｕｍｉｎ  Ｂｉｎｄｉｎｇ  Ａｓ  Ａ  Ｇｅｎｅｒａｌ  Ｓｔｒａｔｅｇｙ  Ｆｏｒ  Ｉｍｐｒｏｖｉｎｇ  Ｔｈｅ  Ｐｈａｒｍａｃｏｋｉｎｅｔｉｃｓ  Ｏｆ  Ｐｒｏｔｅｉｎｓ」Ｊ  Ｂｉｏｌ  Ｃｈｅｍ．２７７：３５０３５−３５０４３
Ｄｏｂｎｅｒ  ｅｔ  ａｌ（１９９２）Ｅｕｒ．Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．２２：２７９５−２７９９
Ｄｏｒｎａｎ  ｅｔ  ａｌ（２００９）Ｂｌｏｏｄ  １１４（１３）：２７２１−２７２９
Ｄｏｒｏｎｉｎａ  ｅｔ  ａｌ（２００６）Ｂｉｏｃｏｎｊ．Ｃｈｅｍ．１７：１１４−１２４
Ｄｕｂｏｗｃｈｉｋ  ｅｔ  ａｌ．Ｂｉｏｃｏｎｊｕｇａｔｅ  Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ，２００２，１３，８５５−８６９
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Ｆｕｃｈｓ  Ｓ．，ｅｔ  ａｌ  Ｍｏｌ．Ｍｅｄ．７，１１５−１２４，２００１
Ｆｕｊｉｓａｋｕ  ｅｔ  ａｌ（１９８９）Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．２６４  （４）：２１１８−２１２５）
Ｇａｒｙ  Ｓ．Ｃ．，ｅｔ  ａｌ  Ｇｅｎｅ  ２５６，１３９−１４７，２０００
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Ｍｏｏｒｅ  Ｍ．，ｅｔ  ａｌ  Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．Ｕ．Ｓ．Ａ．８４，９１９４−９１９８，１９８７
Ｍｏｒｒｉｓｏｎ  ｅｔ  ａｌ（１９８４）Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ，８１：６８５１−６８５５
Ｍｕｌｌｅｒ  ｅｔ  ａｌ（１９９２）Ｅｕｒ．Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．２２  （６）：１６２１−１６２５
Ｍｕｎｇａｌｌ  Ａ．Ｊ．，ｅｔ  ａｌ  Ｎａｔｕｒｅ  ４２５，８０５−８１１，２００３
Ｎａｇａｓｅ  Ｔ．，ｅｔ  ａｌ（２０００）ＤＮＡ  Ｒｅｓ．７（２）：１４３−１５０）
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Ｎｏｖａｂｉｏｃｈｅｍ  Ｃａｔａｌｏｇ  ２００６／２００７
Ｏｇａｗａ  Ｙ．，ｅｔ  ａｌ  Ｂｉｏｃｈｅｍ．Ｂｉｏｐｈｙｓ．Ｒｅｓ．Ｃｏｍｍｕｎ．１７８，２４８−２５５，１９９１
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Ｓｈｅｉｋｈ  Ｆ．，ｅｔ  ａｌ（２００４）Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．１７２，２００６−２０１０
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Ｓｖｅｎｓｓｏｎ  Ｐ．Ｊ．，ｅｔ  ａｌ  Ｈｕｍ．Ｇｅｎｅｔ．１０３，１４５−１４８，１９９８
Ｓｗｉｅｒｃｚ  Ｊ．Ｍ．，ｅｔ  ａｌ  Ｊ．Ｃｅｌｌ  Ｂｉｏｌ．１６５，８６９−８８０，２００４
Ｓｙｒｉｇｏｓ  ａｎｄ  Ｅｐｅｎｅｔｏｓ（１９９９）Ａｎｔｉｃａｎｃｅｒ  Ｒｅｓｅａｒｃｈ  １９：６０５−６１４
Ｔａｋｅｕｃｈｉ，ｅｔ  ａｌ．，Ｊ．Ａｎｔｉｂｉｏｔｉｃｓ，２９，９３−９６（１９７６）
Ｔａｗａｒａｇｉ  Ｙ．，ｅｔ  ａｌ  Ｂｉｏｃｈｅｍ．Ｂｉｏｐｈｙｓ．Ｒｅｓ．Ｃｏｍｍｕｎ．１５０，８９−９６，１９８８
ｔｅｎ  Ｄｉｊｋｅ，Ｐ．，ｅｔ  ａｌ  Ｓｃｉｅｎｃｅ  ２６４（５１５５）：１０１−１０４（１９９４）
Ｔｈｏｍｐｓｏｎ，Ｊ．Ｓ．，ｅｔ  ａｌ  Ｓｃｉｅｎｃｅ  ２９３（５５３７），２１０８−２１１１（２００１）ＷＯ２００４／０５８３０９
Ｔｈｕｒｓｔｏｎ，ｅｔ  ａｌ．，Ｃｈｅｍ．Ｂｒｉｔ．，２６，７６７−７７２（１９９０）
Ｔｈｕｒｓｔｏｎ，ｅｔ  ａｌ．，Ｃｈｅｍ．Ｒｅｖ．１９９４，４３３−４６５（１９９４）
Ｔｏｋｉ  ｅｔ  ａｌ（２００２）Ｊ．Ｏｒｇ．Ｃｈｅｍ．６７：１８６６−１８７２
Ｔｏｎｎｅｌｌｅ  ｅｔ  ａｌ（１９８５）ＥＭＢＯ  Ｊ．４（１１）：２８３９−２８４７
Ｔｏｕｃｈｍａｎ  ｅｔ  ａｌ（２０００）Ｇｅｎｏｍｅ  Ｒｅｓ．１０：１６５−１７３
Ｔｒａｉｌ  ｅｔ  ａｌ（２００３）Ｃａｎｃｅｒ  Ｉｍｍｕｎｏｌ．Ｉｍｍｕｎｏｔｈｅｒ．５２：３２８−３３７
Ｔｓｕｎａｋａｗａ，ｅｔ  ａｌ．，Ｊ．Ａｎｔｉｂｉｏｔｉｃｓ，４１，１３６６−１３７３（１９８８）
Ｔｓｕｔｓｕｍｉ  Ｍ．，ｅｔ  ａｌ  Ｇｅｎｅ  ２２８，４３−４９，１９９９
Ｕｃｈｉｄａ  ｅｔ  ａｌ（１９９９）Ｂｉｏｃｈｅｍ．Ｂｉｏｐｈｙｓ．Ｒｅｓ．Ｃｏｍｍｕｎ．２６６：５９３−６０２
Ｖｅｒｈｅｉｊ  Ｊ．Ｂ．，ｅｔ  ａｌ  Ａｍ．Ｊ．Ｍｅｄ．Ｇｅｎｅｔ．１０８，２２３−２２５，２００２
Ｖｏｎ  Ｈｏｅｇｅｎ  ｅｔ  ａｌ（１９９０）Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．１４４（１２）：４８７０−４８７７
Ｗｅｂｓｔｅｒ  ｅｔ  ａｌ（１９９４）Ｓｅｍｉｎ．Ｃａｎｃｅｒ  Ｂｉｏｌ．５：６９−７６
Ｗｅｉｓ  Ｊ．Ｊ．，ｅｔ  ａｌ  Ｊ．Ｅｘｐ．Ｍｅｄ．１６７，１０４７−１０６６，１９８８
Ｗｅｉｓ  Ｊ．Ｊ．，ｅｔ  ａｌ  Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．Ｕ．Ｓ．Ａ．８３，５６３９−５６４３，１９８６
Ｗｉｌｓｏｎ  ｅｔ  ａｌ（１９９１）Ｊ．Ｅｘｐ．Ｍｅｄ．１７３：１３７−１４６
Ｗｕ  ｅｔ  ａｌ（２００５）Ｎａｔｕｒｅ  Ｂｉｏｔｅｃｈ．２３（９）：１１３７−１１４５
Ｘｉｅ  ｅｔ  ａｌ（２００６）Ｅｘｐｅｒｔ．Ｏｐｉｎ．Ｂｉｏｌ．Ｔｈｅｒ．６（３）：２８１−２９１
Ｘｕ，Ｍ．Ｊ．，ｅｔ  ａｌ（２００１）Ｂｉｏｃｈｅｍ．Ｂｉｏｐｈｙｓ．Ｒｅｓ．Ｃｏｍｍｕｎ．２８０（３）：７６８−７７５  ＷＯ２００４／０１６２２５
Ｘｕ，Ｘ．Ｚ．，ｅｔ  ａｌ  Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．Ｕ．Ｓ．Ａ．９８（１９）：１０６９２−１０６９７（２００１）
Ｙａｍａｇｕｃｈｉ，Ｎ．，ｅｔ  ａｌ  Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．２６９  （２），８０５−８０８（１９９４）
Ｙａｍａｍｏｔｏ  Ｔ．，ｅｔ  ａｌ  Ｎａｔｕｒｅ  ３１９，２３０−２３４，１９８６
Ｙｕ  ｅｔ  ａｌ（１９９２）Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．１４８（２）６３３−６３７
【図１】
2019069947.tif 000109
【図２】
2019069947.tif 000110
【図３】
2019069947.tif 000111
【配列表】
2019069947000001.app
【手続補正書】
【提出日】平成30年12月10日(2018.12.10)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
次の式（Ａ）のコンジュゲート：
【化１】
2019069947.tif 000112
（式中、Ｒ2は
【化２】
2019069947.tif 000113
であり、
式中、Ｒ36a及びＲ36bは、それぞれ独立に、Ｈ、Ｆ、Ｃ1-4飽和アルキル、Ｃ2-3アルケニルから選択され、アルキル基及びアルケニル基は、Ｃ1-4アルキルアミド及びＣ1-4アルキルエステルから選択される基によって任意に置換され；又は
Ｒ36a及びＲ36bの一方がＨである場合、他方は、ニトリル及びＣ1-4アルキルエステルから選択され；
Ｒ6及びＲ9は、それぞれ独立して、Ｈ、Ｒ、ＯＨ、ＯＲ、ＳＨ、ＳＲ、ＮＨ2、ＮＨＲ、ＮＲＲ’、ＮＯ2、Ｍｅ3Ｓｎ及びハロから選択され；
Ｒ7は、独立して、Ｈ、Ｒ、ＯＨ、ＯＲ、ＳＨ、ＳＲ、ＮＨ2、ＮＨＲ、ＮＲＲ’、ＮＯ2、Ｍｅ3Ｓｎ及びハロから選択され；
Ｙは、式Ａ２、Ａ３、Ａ４、Ａ５及びＡ６から選択され：
【化３】
2019069947.tif 000114
Ｌは、細胞結合因子に結合されたリンカーであり；
ＣＢＡは、細胞結合因子であり；
ｎは、０から４８の範囲で選択される整数であり；
ＲA4はＣ1-6アルキレン基であり；
さらに以下のいずれかであり：
（ａ）Ｒ10はＨであり、Ｒ11はＯＨ、ＯＲAであり、式中、ＲAはＣ1-4アルキルである；又は
（ｂ）Ｒ10及びＲ11は、それらが結合されている窒素原子と炭素原子との間に窒素−炭素二重結合を形成する；又は
（ｃ）Ｒ10がＨであり、Ｒ11がＯＳＯzＭであり、式中、ｚは２又は３であり、Ｍは１価の医薬的に許容されるカチオンである；
Ｒ及びＲ’は、それぞれ独立して、任意に置換されたＣ1-12アルキル基、Ｃ3-20ヘテロシクリル基及びＣ5-20アリール基より選択され、任意に基ＮＲＲ’に関し、Ｒ及びＲ’は、それらが結合している窒素原子と共に、任意に置換された４員、５員、６員又は７員複素環を形成し；
Ｒ16、Ｒ17、Ｒ19、Ｒ20、Ｒ21及びＲ22は、Ｒ6、Ｒ7、Ｒ9、Ｒ10、Ｒ11及びＲ2についてそれぞれ定義した通りであり；
Ｚは、ＣＨ又はＮであり；
Ｔ及びＴ’は、それぞれ独立して、単結合又はＣ1-9アルキレンから選択され、該アルキレン鎖は、１個以上のヘテロ原子、例えばＯ、Ｓ、Ｎ（Ｈ）、ＮＭｅによって割り込まれてよく、ただし、ＸとＸ’との間の最も短い原子鎖中の原子の数が３〜１２個原子であり；
Ｘ及びＸ’は、それぞれ独立して、Ｏ、Ｓ及びＮ（Ｈ）から選択される。）。
【請求項２】
Ｒ9がＨである、請求項１に記載のコンジュゲート。
【請求項３】
Ｒ6がＨである、請求項１又は請求項２に記載のコンジュゲート。
【請求項４】
Ｒ7がＯＲ7Aであり、Ｒ7Aが任意に置換されたＣ1-4アルキルである、請求項１から３のいずれか一項に記載のコンジュゲート。
【請求項５】
Ｒ7AがＭｅである、請求項４に記載のコンジュゲート。
【請求項６】
ＸがＯである、請求項１から５のいずれか一項に記載のコンジュゲート。
【請求項７】
Ｔが単結合、Ｃ1及びＣ2アルキレン基から選択される、請求項１から６のいずれか一項に記載のコンジュゲート。
【請求項８】
ＴがＣ1アルキレン基である、請求項７に記載のコンジュゲート。
【請求項９】
Ｒ36a及びＲ36bがどちらもＨである、請求項１から８のいずれか一項に記載のコンジュゲート。
【請求項１０】
Ｒ36a及びＲ36bがどちらもメチルである、請求項１から８のいずれか一項に記載のコンジュゲート。
【請求項１１】
Ｒ36a及びＲ36bの一方がＨであり、他方がＣ1-4飽和アルキル、Ｃ2-3アルケニルから選択され、前記アルキル基及びアルケニル基が任意に置換されている、請求項１から８のいずれか一項に記載のコンジュゲート。
【請求項１２】
Ｈではない前記Ｒ36a及びＲ36bの基がメチル及びエチルから選択される、請求項１１に記載のコンジュゲート。
【請求項１３】
Ｒ10がＨであり、Ｒ11がＯＨである、請求項１から１２のいずれか一項に記載のコンジュゲート。
【請求項１４】
Ｒ10及びＲ11が、それらが結合されている窒素原子と炭素原子との間に窒素−炭素二重結合を形成する、請求項１から１２のいずれか一項に記載のコンジュゲート。
【請求項１５】
Ｒ16、Ｒ17、Ｒ19、Ｒ20、Ｒ21、Ｒ22、Ｘ’及びＴ’が、Ｒ6、Ｒ7、Ｒ9、Ｒ10、Ｒ11、Ｒ2、Ｘ及びＴとそれぞれ同じである、請求項１から１４のいずれか一項に記載のコンジュゲート。
【請求項１６】
前記基Ｌが、以下から選択される求電子性官能基に由来する部分を含有する、請求項１から１５のいずれか一項に記載のコンジュゲート：（ｉ）マレイミド基、（ｉｉ）活性化ジスルフィド、（ｉｉｉ）活性エステル、例えばＮＨＳ（Ｎ−ヒドロキシスクシンイミド）エステル、ＨＯＢｔ（Ｎ−ヒドロキシベンゾトリアゾール）エステル、ハロホルメート及び酸ハライド；（ｉｖ）アルキル及びベンジルハライド、例えばハロアセトアミド；並びに（ｖ）アルデヒド、ケトン、カルボキシル。
【請求項１７】
Ｌが次の式である、請求項１から１５いずれか一項に記載のコンジュゲート：
−ＬA−（ＣＨ2）m−  （Ｌ１）
式中、ｍが０から６であり；
ＬAが以下から選択され：
【化４】
2019069947.tif 000115
式中、ＡｒがＣ5-6アリーレン基を表す。
【請求項１８】
ＬAがＬA1-1及びＬA3-2から選択される、請求項１７に記載のコンジュゲート。
【請求項１９】
ｍが２、３又は５である、請求項１７又は請求項１８に記載のコンジュゲート。
【請求項２０】
Ｌが次の式である、請求項１から１５のいずれか一項に記載のコンジュゲート：
−ＬA−（ＣＨ2）m−Ｏ−  （Ｌ２）
式中、ｍが０から６であり；
ＬAが請求項１７で定義した基から選択される。
【請求項２１】
ＬAがＬA3-2である、請求項２０に記載のコンジュゲート。
【請求項２２】
ｍが１である、請求項２０又は２１に記載のコンジュゲート。
【請求項２３】
Ｌが次の式である、請求項１から１５のいずれか一項に記載のコンジュゲート：
−ＬA−（ＣＨ2）q−Ｏ−Ｃ（＝Ｏ）−ＮＨ−（ＣＨ2）p−  （Ｌ３）
式中、ｑが１から３であり、ｐが１から３であり；
ＬAが請求項１７で定義した基から選択される。
【請求項２４】
ＬAが、ＬA7、ＬA8-1及びＬA8-2から選択される、請求項２３に記載のコンジュゲート。
【請求項２５】
ｑが１である、請求項２３又は請求項２４に記載のコンジュゲート。
【請求項２６】
ｐが２である、請求項２３から２５のいずれか一項に記載のコンジュゲート。
【請求項２７】
Ｌが次の式である、請求項１から１５のいずれか一項に記載のコンジュゲート：
【化５】
2019069947.tif 000116
式中、ｍが０から６であり；
Ｘ1及びＸ2が、修飾されていてもよい、天然アミノ酸から選択されるアミノ酸基であり；
ＬAが、請求項１７で定義した基から選択される。
【請求項２８】
前記基−Ｘ1−Ｘ2−が以下から選択される、請求項２７に記載のコンジュゲート：
−Ｐｈｅ−Ｌｙｓ−、
−Ｖａｌ−Ａｌａ−、
−Ｖａｌ−Ｌｙｓ−、
−Ａｌａ−Ｌｙｓ−、
−Ｖａｌ−Ｃｉｔ−。
【請求項２９】
ｍが５である、請求項２７又は請求項２８に記載のコンジュゲート。
【請求項３０】
ｎが０から１６の間の整数である、請求項１から２９のいずれか一項に記載のコンジュゲート。
【請求項３１】
ｎが０から８の間の整数である、請求項１から３０のいずれか一項に記載のコンジュゲート。
【請求項３２】
ｎが３又は４である、請求項１から３１のいずれか一項に記載のコンジュゲート。
【請求項３３】
前記細胞結合因子が抗体又はその活性断片である、請求項１から３２のいずれか一項に記載のコンジュゲート。
【請求項３４】
前記抗体又は抗体断片が、腫瘍関連抗原に対する抗体又は抗体断片である、請求項３３に記載のコンジュゲート。
【請求項３５】
前記抗体又は抗体断片が、（１）−（３８）から選択される１つ以上の腫瘍関連抗原又は細胞表面受容体に結合する、抗体又は抗体断片である、請求項３４に記載のコンジュゲート：
（１）ＢＭＰＲ１Ｂ（骨形成タンパク質受容体ＩＢ型）；
（２）Ｅ１６（ＬＡＴ１、ＳＬＣ７Ａ５）；
（３）ＳＴＥＡＰ１（前立腺の６回膜貫通上皮抗原）；
（４）０７７２Ｐ（ＣＡ１２５、ＭＵＣ１６）；
（５）ＭＰＦ（ＭＰＦ、ＭＳＬＮ、ＳＭＲ、巨核球増強因子、メソテリン）；
（６）Ｎａｐｉ３ｂ（ＮＡＰＩ−３Ｂ、ＮａＰｉ２Ｂ、ＮＰＴＩＩｂ、ＳＬＣ３４Ａ２、溶質担体ファミリー３４（リン酸ナトリウム）、メンバー２、ＩＩ型ナトリウム依存性リン酸トランスポータ３ｂ）；
（７）Ｓｅｍａ  ５ｂ（ＦＬＪ１０３７２、ＫＩＡＡ１４４５，Ｍｍ．４２０１５、ＳＥＭＡ５Ｂ、ＳＥＭＡＧ、セマフォリン５ｂ  Ｈｌｏｇ、セマドメイン、７トロンボスポンジンリピート（１型及び１型様）、膜貫通ドメイン（ＴＭ）及び短細胞質ドメイン、（セマフォリン）５Ｂ）；
（８）ＰＳＣＡ  ｈｌｇ（２７０００５０Ｃ１２Ｒｉｋ、Ｃ５３０００８Ｏ１６Ｒｉｋ、ＲＩＫＥＮ  ｃＤＮＡ  ２７０００５０Ｃ１２、ＲＩＫＥＮ  ｃＤＮＡ  ２７０００５０Ｃ１２遺伝子）；
（９）ＥＴＢＲ（エンドセリンＢ型受容体）；
（１０）ＭＳＧ７８３（ＲＮＦ１２４、仮想タンパク質ＦＬＪ２０３１５）；
（１１）ＳＴＥＡＰ２（ＨＧＮＣ＿８６３９、ＩＰＣＡ−１、ＰＣＡＮＡＰ１、ＳＴＡＭＰ１、ＳＴＥＡＰ２、ＳＴＭＰ、前立腺癌関連遺伝子１、前立腺癌関連タンパク質１、前立腺２の６回膜貫通上皮抗原、６回膜貫通前立腺タンパク質）；
（１２）ＴｒｐＭ４（ＢＲ２２４５０、ＦＬＪ２００４１、ＴＲＰＭ４、ＴＲＰＭ４Ｂ、一過性受容体ポテンシャルカチオンチャネル、サブファミリーＭ、メンバー４）；
（１３）ＣＲＩＰＴＯ（ＣＲ、ＣＲ１、ＣＲＧＦ、ＣＲＩＰＴＯ、ＴＤＧＦ１、奇形癌腫由来成長因子）；
（１４）ＣＤ２１（ＣＲ２（補体受容体２）又はＣ３ＤＲ（Ｃ３ｄ／エプスタインバーウイルス受容体）又はＨｓ７３７９２）；
（１５）ＣＤ７９ｂ（ＣＤ７９Ｂ、ＣＤ７９β、ＩＧｂ（免疫グロブリン関連ベータ）、Ｂ２９）；
（１６）ＦｃＲＨ２（ＩＦＧＰ４、ＩＲＴＡ４、ＳＰＡＰ１Ａ（ＳＨ２ドメイン含有ホスファターゼアンカータンパク質１ａ）、ＳＰＡＰ１Ｂ、ＳＰＡＰ１Ｃ）；
（１７）ＨＥＲ２；
（１８）ＮＣＡ；
（１９）ＭＤＰ；
（２０）ＩＬ２０Ｒα；
（２１）ブレビカン；
（２２）ＥｐｈＢ２Ｒ；
（２３）ＡＳＬＧ６５９；
（２４）ＰＳＣＡ；
（２５）ＧＥＤＡ；
（２６）ＢＡＦＦ−Ｒ（Ｂ細胞活性化因子受容体、ＢＬｙＳ受容体３、ＢＲ３）；
（２７）ＣＤ２２（Ｂ細胞受容体ＣＤ２２−Ｂアイソフォーム）；
（２８）ＣＤ７９ａ（ＣＤ７９Ａ、ＣＤ７９α、免疫グロブリン関連アルファ）；
（２９）ＣＸＣＲ５（バーキットリンパ腫受容体１）；
（３０）ＨＬＡ−ＤＯＢ（ＭＨＣクラスＩＩ分子（Ｉａ抗原）のベータサブユニット）；
（３１）Ｐ２Ｘ５（プリン受容体Ｐ２Ｘリガンド開口型イオンチャネル５）；
（３２）ＣＤ７２（Ｂ細胞分化抗原ＣＤ７２、Ｌｙｂ−２）；
（３３）ＬＹ６４（リンパ球抗原６４（ＲＰ１０５）、ロイシンリッチリピート（ＬＲＲ）ファミリーのＩ型膜タンパク質）；
（３４）ＦｃＲＨ１（Ｆｃ受容体様タンパク質１）；
（３５）ＩＲＴＡ２（免疫グロブリンスーパーファミリー受容体転座関連２）；
（３６）ＴＥＮＢ２（推定膜貫通プロテオグリカン）；
（３７）ＣＤ３３（ＣＤ３３分子、ＳＩＧＬＥＣ−３、ＳＩＧＬＥＣ３、ｐ６７；ＣＤ３３抗原（ｇｐ６７）；ｇｐ６７；骨髄細胞表面抗原ＣＤ３３；シアル酸結合Ｉｇ様レクチン３；シアル酸結合Ｉｇ様レクチン）；及び
（３８）ＬＧＲ５／ＧＰＲ４９。
【請求項３６】
前記抗体又は抗体断片がシステイン操作抗体である、請求項３３に記載のコンジュゲート。
【請求項３７】
前記抗体又は抗体断片がＥｒｂＢ受容体に結合する抗体である、請求項３３又は請求項３６に記載のコンジュゲート。
【請求項３８】
前記抗体がトラスツズマブである、請求項３７に記載のコンジュゲート。
【請求項３９】
Ａｂが抗ＨＥＲ２、抗Ｓｔｅａｐ１又は抗ＣＤ２２抗体である、請求項３３又は請求項３６に記載のコンジュゲート
【請求項４０】
抗体（Ａｂ）に対する薬剤（Ｄ）の薬剤負荷（ｐ）が１から約８の整数である、請求項３３に記載のコンジュゲート。
【請求項４１】
ｐが１、２、３又は４である、請求項４０に記載のコンジュゲート。
【請求項４２】
前記抗体−薬剤コンジュゲート化合物の混合物を含む、請求項４１に記載のコンジュゲートであって、前記抗体−薬剤コンジュゲート化合物の混合物中の抗体当たりの平均薬剤負荷が約２から約５である。
【請求項４３】
療法で使用するための、請求項１から４２のいずれか一項に記載のコンジュゲート。
【請求項４４】
請求項１から４２のいずれか一項に記載のコンジュゲート、医薬的に許容される希釈剤、担体又は賦形剤を含む、医薬組成物。
【請求項４５】
対象の増殖性疾患の処置で使用するための、請求項１から４２のいずれか一項に記載のコンジュゲート又は請求項４４に記載の医薬組成物。
【請求項４６】
前記疾患が癌である、請求項４５に記載のコンジュゲート。
【請求項４７】
医療処置方法における、請求項１から４２のいずれか一項に記載のコンジュゲート又は請求項４５又は請求項４６に記載の医薬の使用。
【請求項４８】
請求項４５又は請求項４６に記載の医薬組成物を患者へ投与することを含む、医療処置方法。
【請求項４９】
前記医療処置方法が癌を処置するためである、請求項４８に記載の方法。
【請求項５０】
前記コンジュゲートと組み合わせて化学療法剤が患者へ投与される、請求項４９に記載の方法。
【請求項５１】
増殖性疾患の処置のための医薬の製造方法における、請求項１から４２のいずれか一項に記載の化合物の使用。
【請求項５２】
請求項１から４２のいずれか一項に記載の化合物又は請求項４５又は請求項４６に記載の医薬組成物の有効量を投与することを含む、増殖性疾患を有する哺乳動物を処置する方法。
【請求項５３】
次の式（Ｂ）の化合物：
【化６】
2019069947.tif 000117
（式中、Ｒ2、Ｒ6、Ｒ7、Ｒ9、Ｒ10、Ｒ11、Ｒ22、Ｒ16、Ｒ17、Ｒ19、Ｒ20、Ｒ21、Ｚ、Ｔ、Ｔ’、Ｘ及びＸ’は、請求項１から１５のいずれか一項で定義した通りであり；
ＹLは、式Ｂ２、Ｂ３、Ｂ４、Ｂ５及びＢ６の群から選択され：
【化７】
2019069947.tif 000118
Ｇは、細胞結合因子に結合される反応性基であり、
ｎ及びＲA4は、請求項１から３２のいずれか一項で定義した通りである）。
【請求項５４】
前記基Ｇが以下から選択される求電子性基を含有する、請求項５３に記載の化合物：  （ｉ）マレイミド基、（ｉｉ）活性化ジスルフィド、（ｉｉｉ）活性エステル、例えばＮＨＳ（Ｎ−ヒドロキシスクシンイミド）エステル、ＨＯＢｔ（Ｎ−ヒドロキシベンゾトリアゾール）エステル、ハロホルメート及び酸ハライド；（ｉｖ）アルキル及びベンジルハライド、例えばハロアセトアミド；並びに（ｖ）アルデヒド、ケトン、カルボキシル。
【請求項５５】
Ｇが次の式である、請求項５３又は請求項５４に記載の化合物：
ＧA−（ＣＨ2）m−  （Ｇ１）
式中、ｍは０から６であり；
ＧAが以下から選択され：
【化８】
2019069947.tif 000119
式中、ＡｒがＣ5-6アリーレン基を表す。
【請求項５６】
ＧAがＧA1-1及びＧA3-3から選択される、請求項４５に記載の化合物。
【請求項５７】
ｍが２、３又は５である、請求項５５又は請求項５６に記載の化合物。
【請求項５８】
Ｇが次の式である、請求項５３又は請求項５４に記載の化合物：
ＧA−（ＣＨ2）m−Ｏ−  （Ｇ２）
式中、ｍが０から６であり；
ＧAが請求項５５で定義した通りである。
【請求項５９】
ＧAがＧA3-2である、請求項５８に記載の化合物。
【請求項６０】
ｍが１である、請求項５８又は請求項５９に記載の化合物。
【請求項６１】
Ｇが次の式である、請求項５３又は請求項５４に記載の化合物：
ＧA−（ＣＨ2）q−Ｏ−Ｃ（＝Ｏ）−ＮＨ−（ＣＨ2）p−  （Ｇ３）
式中、ｑが１から３であり、ｐが１から３であり；
ＧAが請求項５５で定義した通りである。
【請求項６２】
ＧAがＧA7及びＧA8から選択される、請求項６１に記載の化合物。
【請求項６３】
ｑが１である、請求項６１又は請求項６２に記載の化合物。
【請求項６４】
ｐが２である、請求項６１から６３のいずれか一項に記載の化合物。
【請求項６５】
Ｇが次の式である、請求項５３又は請求項５４に記載の化合物：
【化９】
2019069947.tif 000120
式中、ｍが０から６であり；
Ｘ1及びＸ2が、修飾されてよい、天然アミノ酸から選択されるアミノ酸基であり；
ＧAが請求項５５で定義した通りである。
【請求項６６】
ｍが５である、請求項６５に記載の化合物。
【請求項６７】
次の式（Ｃ）の化合物：
【化１０】
2019069947.tif 000121
（式中、Ｒ2、Ｒ6、Ｒ7、Ｒ9、Ｒ22、Ｒ16、Ｒ17、Ｒ19、Ｚ、Ｔ、Ｔ’、Ｘ及びＸ’は、請求項１から１５のいずれか一項で定義した通りであり；
ＹCは、式Ｃ２、Ｃ３、Ｃ４、Ｃ５及びＣ６の群から選択され：
【化１１】
2019069947.tif 000122
式中、ｎ及びＲA4は、請求項１から３２のいずれか一項で定義した通りであり；
さらに以下のいずれかであり：
（ａ）Ｒ30はＨであり、Ｒ31はＯＨ、ＯＲA、であり、式中、ＲAはＣ1-4アルキルである；又は
（ｂ）Ｒ30及びＲ31は、それらが結合されている窒素原子と炭素原子との間に窒素−炭素二重結合を形成する；又は
（ｃ）Ｒ30はＨであり、Ｒ31はＯＳＯzＭであり、式中、ｚは２若しく３であり、Ｍは１価の医薬的に許容されるカチオンである；又は
（ｄ）Ｒ30は、窒素保護基であり、Ｒ31はＯＰｒｏｔOであり、式中、ＰｒｏｔOはヒドロキシ保護基である；
Ｒ40及びＲ41は、Ｒ30及びＲ31についてそれぞれ定義した通りである。）。
【請求項６８】
Ｒ30がＨであり、Ｒ31がＯＨである、請求項６７に記載の化合物。
【請求項６９】
Ｒ30及びＲ41が、それらが結合されている窒素原子と炭素原子との間に窒素−炭素二重結合を形成する、請求項６７に記載の化合物。
【請求項７０】
Ｒ30が窒素保護基であり、Ｒ31がＯＰｒｏｔOであり、式中、ＰｒｏｔOがヒドロキシル保護基である、請求項６７に記載の化合物。
【請求項７１】
前記窒素保護基がＢｏｃである、請求項７０に記載の化合物。
【請求項７２】
前記ヒドロキシル保護基がＴＨＰである、請求項７０又は請求項７１に記載の化合物。
【請求項７３】
式（Ｄ）の化合物：
【化１２】
2019069947.tif 000123
（式中、Ｒ2、Ｒ6、Ｒ7、Ｒ9、Ｒ22、Ｒ16、Ｒ17、Ｒ19、Ｚ、Ｔ、Ｔ’、Ｘ及びＸ’は、請求項１から１５のいずれか一項で定義した通りであり；
Ｒ30、Ｒ31、Ｒ40及びＲ41は、請求項４７から５２のいずれか一項で定義した通りであり；
ＹDは、式Ｄ２、Ｄ３、Ｄ４及びＤ６の群から選択され：
【化１３】
2019069947.tif 000124
式中、ＲA4は、請求項１から３２のいずれか一項で定義した通りである。）。
【請求項７４】
式（Ｅ）の化合物：
【化１４】
2019069947.tif 000125
（式中、Ｒ2、Ｒ6、Ｒ7、Ｒ9、Ｒ22、Ｒ16、Ｒ17、Ｒ19、Ｚ、Ｔ、Ｔ’、Ｘ及びＸ’は、請求項１から１５のいずれか一項で定義した通りであり；
Ｒ30、Ｒ31、Ｒ40及びＲ41は、請求項６７から７２のいずれか一項で定義した通りであり；
ＹEは、式Ｅ５のものであり：
【化１５】
2019069947.tif 000126
式中、ＲE1は、Ｈ及びＴＭＳから選択され；
ＲE2は、Ｂｒ、Ｃｌ及びＩから選択される。）。
【請求項７５】
請求項５３から６６のいずれか一項に記載の薬剤−リンカーを細胞結合因子にコンジュゲートする工程を含む、請求項１から５２のいずれか一項に記載の化合物を合成する方法。
【外国語明細書】
2019069947000001.pdf