(57)【要約】【課題】反応チャンバー内における気泡の発生が生じ難い、マイクロ流体デバイスを提供する。【解決手段】マイクロ流路チップ１０内に複数のマイクロ流路が設けられている、マイクロ流体デバイス１であって、マイクロ流路チップ１０と、マイクロ流路チップ１０の第１の主面１０ａ側に設けられている、温度調節装置２４と、を備え、上記マイクロ流路が、主流路１２と、主流路１２から分岐している複数の分岐流路１５〜１７とを有し、主流路１２が、主流路１２の両端に設けられている第１及び第２の弁１３，１４と、接続流路２０と、入口側流路２１と、廃液用流路２２とを有し、複数の分岐流路１５〜１７のうち少なくとも１つの分岐流路が、反応チャンバーとされており、入口側流路２１及び反応チャンバーが、マイクロ流路チップ１０の第１の主面１０ａ側に設けられている、マイクロ流体デバイス１。【選択図】図３
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【特許請求の範囲】
【請求項１】
マイクロ流路チップ内に複数のマイクロ流路が設けられている、マイクロ流体デバイスであって、
対向する第１及び第２の主面を有する、前記マイクロ流路チップと、
前記マイクロ流路チップの前記第１の主面側に設けられている、温度調節装置と、
を備え、
前記マイクロ流路が、主流路と、該主流路から分岐している複数の分岐流路とを有し、
前記主流路が、該主流路の両端に設けられている第１及び第２の弁と、該第１の弁に接続される接続流路と、該接続流路に接続されており前記複数の分岐流路の一端と連結されている入口側流路と、該入口側流路と前記第２の弁とを接続している廃液用流路とを有し、
前記複数の分岐流路のうち少なくとも１つの分岐流路が、反応チャンバーとされており、
前記入口側流路及び前記反応チャンバーが、前記マイクロ流路チップの第１の主面側に設けられている、マイクロ流体デバイス。
【請求項２】
前記温度調節装置が、前記マイクロ流路チップの前記第１の主面上に設けられている、請求項１に記載のマイクロ流体デバイス。
【請求項３】
前記接続流路及び前記廃液用流路が、前記マイクロ流路チップの前記第１の主面側に設けられている、請求項１又は２に記載のマイクロ流体デバイス。
【請求項４】
前記マイクロ流路チップが、基板と、前記基板上に設けられているカバー層とを備え、
前記入口側流路及び前記反応チャンバーと、前記温度調節装置とが、前記カバー層を介して隔てられている、請求項１〜３のいずれか１項に記載のマイクロ流体デバイス。
【請求項５】
前記複数の分岐流路のうち全ての分岐流路が、それぞれ、反応チャンバーとされている、請求項１〜４のいずれか１項に記載のマイクロ流体デバイス。
【請求項６】
前記反応チャンバーに、反応液が充填されている、請求項１〜５のいずれか１項に記載のマイクロ流体デバイス。
【請求項７】
前記マイクロ流路が、前記複数の分岐流路の他端と連結されている出口側流路をさらに有し、該出口側流路が、前記マイクロチップの第１の主面側に設けられている、請求項１〜６のいずれか１項に記載のマイクロ流体デバイス。
【請求項８】
請求項１〜７のいずれか１項に記載のマイクロ流体デバイスを備える、反応システム。
【請求項９】
前記反応チャンバーで行われる反応が、遺伝子の増幅反応である、請求項８に記載の反応システム。
【請求項１０】
前記遺伝子の増幅反応を検出する検出器をさらに備える、請求項９に記載の反応システム。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、流体が送液されるマイクロ流路が設けられたマイクロ流体デバイス及び該マイクロ流体デバイスを備える反応システムに関する。
【背景技術】
【０００２】
従来、生化学分析などに、流体が送液されるマイクロ流路が設けられたマイクロ流体デバイスが種々提案されている。例えば、下記の特許文献１には、マイクロ流路が設けられたマイクロ流体デバイスが開示されている。上記マイクロ流路は、主流路と、該主流路から分岐している複数の分岐流路とを有する。上記複数の分岐流路は、分岐流路毎に個別に反応チャンバーに接続されており、反応チャンバー毎に個別に弁が設けられている。特許文献１では、反応チャンバー内で遺伝子増幅反応などが行われている。
【先行技術文献】
【特許文献】
【０００３】
【特許文献１】特表２０１４−５２１３０６号公報
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００４】
特許文献１のように、複数の反応チャンバー毎に個別に弁を設けた場合、部品点数が多くなるという問題がある。
【０００５】
また、本発明者らは、主流路の両端に弁を設け、複数の反応チャンバーをまとめて封止する場合、以下のような課題が生じることを見出した。具体的には、遺伝子増幅反応などのように、反応チャンバー内における反応液の加熱と冷却を必要とする反応を行った場合、反応チャンバー内の反応液の量が減少したり、反応チャンバー内に気泡が生じたりする場合があることを見出した。特に、遺伝子増幅反応などを外部から検出器により検出する場合、気泡が存在すると反応の程度や反応により生じた物質等を正確に検出することができなくなる。
【０００６】
本発明の目的は、反応チャンバー内における気泡の発生が生じ難い、マイクロ流体デバイス及び該マイクロ流体デバイスを備える反応システムを提供することにある。
【課題を解決するための手段】
【０００７】
本発明に係るマイクロ流体デバイスは、マイクロ流路チップ内に複数のマイクロ流路が設けられている、マイクロ流体デバイスであって、対向する第１及び第２の主面を有する、前記マイクロ流路チップと、前記マイクロ流路チップの前記第１の主面側に設けられている、温度調節装置と、を備え、前記マイクロ流路が、主流路と、該主流路から分岐している複数の分岐流路とを有し、前記主流路が、該主流路の両端に設けられている第１及び第２の弁と、該第１の弁に接続される接続流路と、該接続流路に接続されており前記複数の分岐流路の一端と連結されている入口側流路と、該入口側流路と前記第２の弁とを接続している廃液用流路とを有し、前記複数の分岐流路のうち少なくとも１つの分岐流路が、反応チャンバーとされており、前記入口側流路及び前記反応チャンバーが、前記マイクロ流路チップの第１の主面側に設けられている。
【０００８】
本発明に係るマイクロ流体デバイスのある特定の局面では、前記温度調節装置が、前記マイクロ流路チップの前記第１の主面上に設けられている。
【０００９】
本発明に係るマイクロ流体デバイスの他の特定の局面では、前記接続流路及び前記廃液用流路が、前記マイクロ流路チップの前記第１の主面側に設けられている。
【００１０】
本発明に係るマイクロ流体デバイスのさらに他の特定の局面では、前記マイクロ流路チップが、基板と、前記基板上に設けられているカバー層とを備え、前記入口側流路及び前記反応チャンバーと、前記温度調節装置とが、前記カバー層を介して隔てられている。
【００１１】
本発明に係るマイクロ流体デバイスのさらに他の特定の局面では、前記複数の分岐流路のうち全ての分岐流路が、それぞれ、反応チャンバーとされている。
【００１２】
本発明に係るマイクロ流体デバイスのさらに他の特定の局面では、前記反応チャンバーに、反応液が充填されている。
【００１３】
本発明に係るマイクロ流体デバイスのさらに他の特定の局面では、前記マイクロ流路が、前記複数の分岐流路の他端と連結されている出口側流路をさらに有し、該出口側流路が、前記マイクロチップの第１の主面側に設けられている。
【００１４】
本発明に係る反応システムは、本発明に従って構成されるマイクロ流体デバイスを備える。
【００１５】
本発明に係る反応システムのある特定の局面では、前記反応チャンバーで行われる反応が、遺伝子の増幅反応である。
【００１６】
本発明に係る反応システムの他の特定の局面では、前記遺伝子の増幅反応を検出する検出器をさらに備える。
【発明の効果】
【００１７】
本発明によれば、反応チャンバー内における気泡の発生が生じ難い、マイクロ流体デバイスを提供することができる。
【図面の簡単な説明】
【００１８】
【図１】本発明の第１の実施形態に係るマイクロ流体デバイスの外観を示す斜視図である。
【図２】本発明の第１の実施形態に係るマイクロ流体デバイスのマイクロ流路を説明するための模式的平面図である。
【図３】図２中のＡ−Ａ線に沿う部分の模式的断面図である。
【図４】図２中のＢ−Ｂ線に沿う部分の模式的断面図である。
【図５】本発明の第２の実施形態としての反応システムを説明するための模式的断面図である。
【図６】比較例１の反応システムを説明するための模式的断面図である。
【発明を実施するための形態】
【００１９】
以下、図面を参照しつつ、本発明の具体的な実施形態を説明することにより、本発明を明らかにする。
【００２０】
なお、本明細書に記載の各実施形態は、例示的なものであり、異なる実施形態間において、構成の部分的な置換または組み合わせが可能であることを指摘しておく。
【００２１】
図１は、本発明の第１の実施形態に係るマイクロ流体デバイスの外観を示す斜視図である。図２は、本発明の第１の実施形態に係るマイクロ流体デバイスのマイクロ流路を説明するための模式的平面図である。また、図３は、図２中のＡ−Ａ線に沿う部分の模式的断面図であり、図４は、図２中のＢ−Ｂ線に沿う部分の模式的断面図である。
【００２２】
図３に示すように、マイクロ流体デバイス１は、マイクロ流路チップ１０と、温度調節装置２４とを備える。マイクロ流路チップ１０は、対向する第１及び第２の主面１０ａ，１０ｂを有する。マイクロ流路チップ１０の第１の主面１０ａ上に、温度調節装置２４が設けられている。
【００２３】
図１に示すように、マイクロ流路チップ１０は、特に限定されないが、本実施形態では、板状の基板２を有する。板状の基板２は、基板本体３と基板本体３の上面を覆うように設けられた第１のカバー層４と、基板本体３の下面側に積層された第２のカバー層５とを有する。第１のカバー層４は、第２の主面１０ｂ側に設けられている。第２のカバー層５は、第１の主面１０ａ側に設けられている。なお、積層構造は特に限定されない。
【００２４】
板状の基板２内には、図２に平面図で示すマイクロ流路１１が設けられている。マイクロ流路１１とは、流体の搬送に際し、マイクロ効果が生じるような微細な流路をいう。このようなマイクロ流路１１では、流体は、表面張力の影響を強く受け、通常の大寸法の流路を流れる流体とは異なる挙動を示す。
【００２５】
マイクロ流路１１の横断面形状及び大きさは、上記のマイクロ効果が生じる流路であれば特に限定はされない。例えば、マイクロ流路１１に流体を流す際、ポンプや重力を用いる場合には、流路抵抗をより一層低下させる観点から、マイクロ流路１１の横断面形状がおおむね長方形（正方形を含む）の場合には、小さい方の辺の寸法で、２０μｍ以上が好ましく、５０μｍ以上がより好ましく、１００μｍ以上がさらに好ましい。また、マイクロ流体デバイス１をより一層小型化する観点より、５ｍｍ以下が好ましく、１ｍｍ以下がより好ましく、５００μｍ以下がさらに好ましい。
【００２６】
また、マイクロ流路１１の横断面形状がおおむね円形の場合には、直径（楕円の場合には、短径）が、２０μｍ以上が好ましく、５０μｍ以上がより好ましく、１００μｍ以上がさらに好ましい。マイクロ流体デバイス１をより一層小型化する観点からは、直径（楕円の場合には、短径）が、５ｍｍ以下が好ましく、１ｍｍ以下がより好ましく、５００μｍ以下がさらに好ましい。
【００２７】
一方、例えば、マイクロ流路１１に流体を流す際、毛細管現象をより一層有効に活用するときに、マイクロ流路１１の横断面形状がおおむね長方形（正方形を含む）の場合には、小さい方の辺の寸法で、５μｍ以上であることが好ましく、１０μｍ以上であることがより好ましく、２０μｍ以上であることがさらに好ましい。また、小さい方の辺の寸法で、２００μｍ以下であることが好ましく、１００μｍ以下であることがより好ましい。
【００２８】
図２に示すように、マイクロ流路１１は、主流路１２を有する。主流路１２に、複数の分岐部１２ａ〜１２ｃが設けられている。分岐部１２ａ〜１２ｃには、それぞれ、分岐流路１５〜１７が接続されている。分岐流路１５〜１７は、分岐部１２ａ〜１２ｃに連なる分岐流路本体部１５ａ〜１７ａを有する。分岐流路本体部１５ａ〜１７ａの下流側端部に分岐流路狭窄部１５ｂ〜１７ｂが連ねられている。分岐流路狭窄部１５ｂ〜１７ｂの下流側端部に、分岐流路拡大部１５ｃ〜１７ｃが連ねられている。分岐流路拡大部１５ｃ〜１７ｃの下流側端部が出口側流路１８に連結されている。また、主流路１２と、出口側流路１８とを結ぶように、バイパス流路１９が設けられている。
【００２９】
分岐流路１５は、図４に示す反応チャンバー２３を構成している。分岐流路１６，１７も、同様に、それぞれ、図示しない反応チャンバー２３を構成している。なお、本発明においては、複数の分岐流路１５〜１７のうち少なくとも１つの分岐流路が反応チャンバー２３を構成していればよい。反応チャンバー２３内には、それぞれ、反応液が充填されている。１つの反応チャンバー２３内の反応液量は、例えば、１μＬ以上、１００μＬ以下とすることができる。
【００３０】
マイクロ流体デバイス１は、反応チャンバー２３内における遺伝子増幅反応（ＰＣＲ）による反応を検出するのに用いられる。もっとも、マイクロ流体デバイス１の用途は、特に限定されるものではない。
【００３１】
次に、主流路１２の構造を説明する。
【００３２】
図３に示すように、主流路１２は、接続流路２０と、入口側流路２１と、廃液用流路２２とを有する。接続流路２０は、第１の弁１３と、入口側流路２１との間に設けられている流路である。入口側流路２１は、接続流路２０と廃液用流路２２とを接続する流路である。入口側流路２１は、分岐流路１５〜１７に連結されている。また、廃液用流路２２は、入口側流路２１と第２の弁１４との間に設けられている流路である。なお、図３においては、入口側流路２１と、接続流路２０及び廃液用流路２２との境界線をそれぞれ破線で示している。入口側流路２１の幅及び深さは、それぞれ、例えば、０．１ｍｍ以上、１．０ｍｍ以下とすることができる。
【００３３】
本実施形態においては、分岐流路１５〜１７に設けられている反応チャンバー２３内に充填された各反応液をまとめて封止するように、第１及び第２の弁１３，１４が設けられている。第１及び第２の弁１３，１４は、それぞれ、第１及び第２の押圧部材１３ａ，１４ａによって第１のカバー層４を押圧することにより流路を開閉する弁である。従って、本実施形態において、第１のカバー層４は、柔軟性を有する材料からなることが望ましい。柔軟性を有する材料としては、合成樹脂フィルムやエラストマーが挙げられる。なお、本発明においては、第１及び第２の弁１３，１４は、特に限定されず、光学的に開状態と閉状態とを切り替えられる弁構造を有する弁であってもよい。
【００３４】
本実施形態では、上記のような弁構造を有することから、第１及び第２の弁１３，１４が、第１のカバー層４側に設けられている。一方、入口側流路２１は、第２のカバー層５側に設けられている。特に、本実施形態では、入口側流路２１が第２のカバー層５と接するように設けられている。そのため、第１及び第２の弁１３，１４と入口側流路２１とを、それぞれ接続する接続流路２０及び廃液用流路２２は、基板２の厚み方向に延びている。
【００３５】
本実施形態では、ＰＣＲ反応を反応チャンバー２３内で行うため、温度調節装置２４がマイクロ流路チップ１０の第１の主面１０ａ側に配置される。なお、温度調節装置２４は、加熱及び冷却を繰り返し得る適宜の温度調節装置により構成することができる。また、温度調節装置２４は、マイクロ流路チップ１０の第１の主面１０ａに接触されている必要は必ずしもなく、隔てられていてもよい。もっとも、好ましくは、温度調節装置２４は、マイクロ流路チップ１０の第１の主面１０ａに接触されるように設けられる。その場合、後述する気泡の発生をより一層生じ難くすることができる。
【００３６】
マイクロ流体デバイス１を構成する材料は特に限定されない。例えば、基板２を構成している基板本体３、第１のカバー層４及び第２のカバー層５は、合成樹脂の成形体の積層構造であってもよい。また、基板本体３が、射出成形品からなり、第１のカバー層４及び第２のカバー層５が射出成形品の上面または下面に貼り付けられた合成樹脂フィルムであってもよい。
【００３７】
反応チャンバー２３における反応を外部から検出器により光学的に検出する場合、反応チャンバー２３の上部及び／又は下部が透光性であることが望ましい。
【００３８】
図３及び図４に示すように、本実施形態では、第２のカバー層５の上面に入口側流路２１及び反応チャンバー２３が設けられており、第２のカバー層５の下面に温度調節装置２４が設けられている。すなわち、入口側流路２１及び反応チャンバー２３が、第２のカバー層５のみを介して温度調節装置２４と隔てられている。なお、本実施形態では、入口側流路２１及び反応チャンバー２３の全ての部分が、温度調節装置２４側に設けられている。
【００３９】
本実施形態では、入口側流路２１及び反応チャンバー２３が温度調節装置２４側に設けられているので、反応チャンバー２３内における気泡の発生が生じ難い。この点については、以下のように説明することができる。
【００４０】
主流路１２の両端に第１の弁１３及び第２の弁１４を設けて、複数の反応チャンバー２３内にまとめて反応液を封止する場合、複数の反応チャンバー２３を連結する入口側流路２１に空き空間が発生することがある。そのため、遺伝子増幅反応などのように、反応チャンバー２３内における反応液の加熱と冷却を必要とする反応を行った場合、加熱時に反応液が膨張し、冷却時に上記空き空間を有する入口側流路２１の内壁が結露することがある。それによって、反応チャンバー２３内の反応液の量が減少したり、反応チャンバー２３内に気泡が生じたりする場合がある。
【００４１】
しかしながら、本実施形態では、反応チャンバー２３に加えて入口側流路２１が温度調節装置２４側に設けられている。そのため、入口側流路２１も加熱することができるので、加熱時に反応液が膨張しても、冷却時に反応液を反応チャンバー２３に戻すことができる。それによって、冷却時に反応液が上記空き空間を有する入口側流路２１の内壁が結露し難くなり、気泡の発生を抑制することができる。また、反応チャンバー２３にコンタミを生じ難くすることもできる。従って、マイクロ流体デバイス１では、遺伝子増幅反応などを外部から検出器により検出する場合に、検出の精度を高めることができる。
【００４２】
また、本実施形態では、上記のように、主流路１２の両端に第１及び第２の弁１３，１４を設けて、複数の反応チャンバー２３内にまとめて反応液を封止した場合においても、気泡の発生を抑制することができる。そのため、複数の反応チャンバー２３毎に個別に弁を設ける必要がなく、部品点数を少なくすることができる。
【００４３】
なお、本発明においては、入口側流路２１及び反応チャンバー２３が温度調節装置２４側に設けられていればよく、入口側流路２１及び反応チャンバー２３と温度調節装置２４との間には、第２のカバー層５以外の他の層が設けられていてもよい。また、入口側流路２１及び反応チャンバー２３が、第２のカバー層５と接していなくともよい。もっとも、気泡の発生をより一層確実に抑制する観点から、入口側流路２１及び反応チャンバー２３と温度調節装置２４とが、第２のカバー層５のみにより隔てられていることが好ましい。この場合、第２のカバー層５の厚みは、３００μｍ以下であることが好ましい。それによって、気泡の発生をより一層生じ難くすることができる。
【００４４】
本発明においては、出口側流路１８やバイパス流路１９も温度調節装置２４側に設けられていることが好ましい。その場合、気泡の発生をさらに一層確実に抑制することができる。もっとも、出口側流路１８やバイパス流路１９は、温度調節装置２４側に設けられていなくてもよい。
【００４５】
また、本発明においては、接続流路２０及び廃液用流路２２が設けられていなくてもよい。すなわち、第１及び第２の弁１３，１４と入口側流路２１とが、同一平面上において直接接続されていてもよい。その場合においても、入口側流路２１及び反応チャンバー２３が、温度調節装置２４側に設けられていればよい。
【００４６】
また、マイクロ流路１１内における流体の送液は、マイクロ流路チップ１０の内部又は外部に設けられた送液手段により送液することができる。送液手段としては、特に限定されず、例えば、マイクロポンプが挙げられる。具体的には、マイクロポンプを用いて、液体や空気、又は所定のガスをマイクロ流路１１に送り込むことにより、送液する手段が挙げられる。この場合、マイクロポンプは、マイクロ流路チップ１０の内部に設けられていてもよいし、マイクロ流路チップ１０の外部に設けられていてもよい。
【００４７】
また、他の送液手段としては、第１の弁１３より上流側に連結された空間に配置されたガス発生部材が挙げられる。ガス発生部材とは、光や熱等の外力によりガスを発生する部材である。ガス発生部材に所定のタイミングで外力を加えることによりガスを発生させ、マイクロ流路１１内にガスを送り込むことができる。それによって、流体を送液することができる。ガス発生部材としては、例えば、ガス発生テープが挙げられる。
【００４８】
［反応システム］
図５は、マイクロ流体デバイス１を有する第２の実施形態としての反応システムを示す断面図である。反応システム３１は、マイクロ流体デバイス１と温度調節装置２４と、検出器３２とを有する。
【００４９】
検出器３２は、上述した反応チャンバー２３内のＰＣＲ反応を検出するために設けられている。検出器３２は、光学的検出装置など様々な測定原理による検出装置で構成することができる。
【００５０】
検出器３２は、非接触式に反応チャンバー２３内のＰＣＲ反応を測定し得るものが望ましい。従って、本実施形態では、検出器３２は、マイクロ流体デバイス１から隔てられて設けられている。
【００５１】
もっとも、検出器３２は、マイクロ流体デバイス１の第１のカバー層４側の表面や第２のカバー層５側の表面に接触されていてもよい。
【００５２】
なお、マイクロ流体デバイス１及び反応システム３１の用途は、ＰＣＲ反応を利用して核酸などを検出する用途に限定されるものではない。もっとも、ＰＣＲ反応では、反応液を加熱し冷却する工程を繰り返すことにより遺伝子を増幅させる。従って、このような加熱及び冷却の繰り返しにより、反応液中の溶存酸素等が気泡となって生じるおそれがある。よって、このような気泡が生じ易い反応に用いた場合に、本発明は効果的である。
【００５３】
次に、反応システム３１を用いた検出方法の操作を説明する。
【００５４】
まず、マイクロ流体デバイス１内の送液手段として第１の弁１３より上流側に設けられた図示しないマイクロポンプを駆動する。そして、主流路１２の上流側から供給された流体としての反応液を主流路１２から、分岐流路１５〜１７に送液する。この場合、第１及び第２の弁１３，１４は開状態とされている。この場合に、分岐流路１５〜１７がほぼ同じタイミングで、反応液で満たされることになる。この状態で、第１及び第２の弁１３，１４を閉状態とする。それによって、反応チャンバー２３内に反応液が閉じ込められる。好ましくは、この状態において反応液が反応チャンバー２３の容積の９７％を占めるように、第１，第２の弁１３，１４及び反応チャンバー２３の容積が定められていることが望ましい。その場合には、気泡がより一層生じ難い。よって、加熱及び冷却を繰り返したとしても検出精度の低下がより一層生じ難い。
【００５５】
また、好ましくは、送液手段として、反応液を押圧するプッシュ式の送液手段が望ましい。それによって、反応チャンバー２３内において気泡がより一層生じ難くなる。
【００５６】
上記のように、第１，第２の弁１３，１４を閉状態とし、その状態で温度調節装置２４を用いて加熱及び冷却を繰り返し、ＰＣＲ反応を進める。設定温度については特に限定されず、ＰＣＲ反応に必要な高温状態と低温状態とを繰り返せばよい。
【００５７】
次に、検出器３２を用いて各反応チャンバー２３内において増幅された核酸などの濃度を光学的に検出する。この場合、各反応チャンバー２３内において気泡が生じ難いため、核酸やＤＮＡなどを高精度に検出することができる。
【００５８】
以下、本発明の具体的な実施例及び比較例を挙げることにより、本発明を明らかにする。なお、本発明は以下の実施例に限定されるものではない。
【００５９】
（実施例１）
実施例１では、図５に示す反応システム３１を作製した。
【００６０】
具体的には、基板本体３が、射出成形品からなり、第１のカバー層４及び第２のカバー層５が射出成形品の上面または下面に貼り付けられた合成樹脂フィルムからなるマイクロ流路チップ１０を作製し、第２のカバー層５の下面に温度調節装置２４を設けた。また、第１のカバー層４の上側に第１のカバー層４と隔てて検出器３２を配置した。
【００６１】
次に、マイクロ流体デバイス１内の送液手段として第１の弁１３より上流側に設けられた図示しないマイクロポンプを駆動した。そして、主流路１２の上流側から供給された流体としての反応液を主流路１２から、分岐流路１５〜１７に送液した。それによって、分岐流路１５〜１７をほぼ同じタイミングで、反応液で満たした。この状態で、第１及び第２の弁１３，１４を閉状態とした。
【００６２】
第１，第２の弁１３，１４を閉状態とし、その状態で温度調節装置２４を用いて加熱及び冷却を繰り返し、ＰＣＲ反応を行なった。その結果、実施例１では、反応チャンバー２３内にほぼ気泡が生じていなかった。
【００６３】
（比較例１）
比較例１では、図６に示す反応システム１０１を作製した。
【００６４】
具体的には、実施例１では、入口側流路２１及び反応チャンバー２３が温度調節装置２４側に設けられていたのに対し、比較例１では、入口側流路２１の一部が、温度調節装置２４側（第１の主面１０ａ側）ではなく、第２の主面１０ｂ側に設けられている。その他の点は、実施例１と同様にして反応システム１０１を作製し、ＰＣＲ反応を行なった。その結果、比較例１では、反応チャンバー２３内に気泡が数多く生じていた。
【符号の説明】
【００６５】
１…マイクロ流体デバイス
２…基板
３…基板本体
４，５…第１，第２のカバー層
１０…マイクロ流路チップ
１０ａ，１０ｂ…第１，第２の主面
１１…マイクロ流路
１２…主流路
１２ａ〜１２ｃ…分岐部
１３，１４…第１，第２の弁
１３ａ，１４ａ…第１，第２の押圧部材
１５〜１７…分岐流路
１５ａ，１６ａ，１７ａ…分岐流路本体部
１５ｂ，１６ｂ，１７ｂ…分岐流路狭窄部
１５ｃ，１６ｃ，１７ｃ…分岐流路拡大部
１８…出口側流路
１９…バイパス流路
２０…接続流路
２１…入口側流路
２２…廃液用流路
２３…反応チャンバー
２４…温度調節装置
３１…反応システム
３２…検出器
【図１】
2019004839.tif 000003
【図２】
2019004839.tif 000004
【図３】
2019004839.tif 000005
【図４】
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【図５】
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【図６】
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