(57)【要約】      （修正有）【課題】ＥＧＦＲタンパク質及びＰＩ３Ｋタンパク質を二重に阻害し、結腸直腸がん等の悪性腫瘍等の治療に有用な、キナゾリン構造又はキノリン構造を有する新規化合物の提供。【解決手段】下記式（Ｉ）で表されるキナゾリン系化合物、又は前記キナゾリン骨格が３−シアノキノリン骨格に置き換わったキノリン系化合物。2019206549.tif 000065（Ｒ１は置換可フェニル基、又は置換可ピリジル基等の置換可５乃至９員の含窒素単環又は縮合複素環基；Ｒ２は置換可フェニル基、置換可ピリジル基等。）【選択図】なし【特許請求の範囲】
【請求項１】
式Ｉ：
【化１】
2019206549.tif 000063
、または式ＩＩ：
【化２】
2019206549.tif 000064
で示される化合物であって、その医薬的に許容される塩、溶媒和物、及び／またはプロドラッグを含み、式中、Ｒ１及びＲ２は独立して、得られる化合物がＥＧＦＲタンパク質及びＰＩ３Ｋタンパク質を阻害することを可能にする任意の化学部分を含む、前記化合物。
【発明の詳細な説明】
【発明の詳細な説明】
【０００１】
［技術分野]
連邦政府資金による研究開発の記載
本発明は、国立衛生研究所によって付与された認可番号Ｒ０１  ＣＡ１５５１９８の下で政府支援を受けてなされた。政府は本発明の所定の権利を有する。
【０００２】
本発明は、医薬品化学の分野に属する。具体的には、本発明は、ＥＧＦＲタンパク質及びＰＩ３Ｋタンパク質の二重阻害剤の役割を果たすキナゾリン構造またはキノリン構造を有する新たなクラスの小分子、ならびにがん及び他の疾患を治療するための治療薬としてのそれらの使用に関する。
【０００３】
［背景技術］
緒言
結腸直腸がんは、米国で３番目に多くみられる悪性腫瘍であり、２００５年におよそ１４５，０００人が新たにそれと診断され、５６，０００人が死亡したと推定されている（例えば、Ｃａｎｃｅｒ  Ｆａｃｔｓ  ａｎｄ  Ｆｉｇｕｒｅｓ  ２００５，Ｓｕｒｖｅｉｌｌａｎｃｅ  Ｒｅｓｅａｒｃｈ（Ｗａｓｈｉｎｇｔｏｎ，Ｄ．Ｃ．：Ａｍｅｒｉｃａｎ
Ｃａｎｃｅｒ  Ｓｏｃｉｅｔｙ，Ｉｎｃ．），２００５参照）。結腸直腸がんの治療は外科手術が中心であるが、再発の頻繁が高い。５−フルオロウラシルとレバミゾールとの組合せを用いて限定された成果が達成されているものの、結腸直腸がんは化学療法に耐性があることが証明されている。外科手術は生存率に大きな効果を与え、一部の限局性疾患の患者では治癒を得る。しかしながら、外科手術では大きな腫瘍が除去され、顕微鏡的遺残病変は残され、これが結局は再発をもたらす。
【０００４】
結腸直腸がんの予防方法及び／または治療方法の改良が必要とされている。
【０００５】
［発明の概要］
本発明の実施形態の開発の過程で実施された実験で、ホスホイノシチド３’ＯＨキナーゼファミリー（ＰＩＫ３）（例えば、ＰＩＫ３Ｃα、ＰＩＫ３δ、ＰＩＫ３β、ＰＩＫ３Ｃγ、ＰＩ３Ｋα）のタンパク質の活性または機能の調節（例えば、阻害）及び上皮成長因子ＥＧＦＲファミリー（例えば、ＥＲＢＢ受容体チロシンキナーゼファミリー（例えば、ＥＲＢＢ１、ＥＲＢＢ２、ＥＲＢＢ４、ＥＲＢＢ１））のタンパク質の活性または機能の調節（例えば、阻害）のためのキナゾリン誘導体ならびにキノリン誘導体を合成した。具体的には、既知のＰＩ３Ｋ及びＥＧＦＲ阻害剤から収集したｘ線結晶構造及び構造活性相関を活用し、かかる実験は、ＰＩ３Ｋに対する高阻害活性を促進するＰＩ３Ｋ阻害剤の「活性コア」の特定、ならびにＥＧＦＲに対する高阻害活性を促進するＥＧＦＲ阻害剤の「活性コア」の特定をそれぞれもたらした（実施例Ｉ参照）。本発明のキナゾリン化合物及びキノリン化合物は、それに応じて、ＰＩ３Ｋに対する「活性コア」及びＥＧＦＲに対する「活性コア」を標的にするように合成され、それによりかかる化合物をＰＩ３Ｋ及びＥＧＦＲに対して「二重効力」を有するようにした。
【０００６】
ＰＩ３Ｋは、ホスファターゼ・テンシン・ホモログ（ＰＴＥＮ）によって負に調節される（例えば、Ｈａｍａｄａ  Ｋ，ｅｔ  ａｌ．，２００５  Ｇｅｎｅｓ  Ｄｅｖ  １９（１７）：２０５４−６５参照）。多くの研究で、全生存の低下につながるＰＩＫ３ＣＡ変異／ＰＴＥＮ欠失とＥＧＦＲ標的耐性の間との関連性が示されている（例えば、Ａｔｒｅｙａ  ＣＥ，Ｓａｎｇａｌｅ  Ｚ，Ｘｕ  Ｎ，ｅｔ  ａｌ．Ｃａｎｃｅｒ  Ｍｅｄ．２０１３；２：４９６−５０６；Ｓａｗａｉ  Ｈ，ｅｔ  ａｌ．，ＢＭＣ  Ｇａｓｔｒｏｅｎｔｅｒｏｌ．２００８；８：５６；Ｂｅｔｈｕｎｅ  Ｇ，ｅｔ  ａｌ．，Ｊ  Ｔｈｏｒａｃ  Ｄｉｓ．２０１０；２：４８−５１；Ｓｐａｎｏ  ＪＰ，ｅｔ  ａｌ．，Ａｎｎ  Ｏｎｃｏｌ．２００５；１６：１８９−１９４；Ｈｅｉｍｂｅｒｇｅｒ  ＡＢ，ｅｔ  ａｌ．，Ｊ  Ｔｒａｎｓｌ  Ｍｅｄ．２００５；３：３８参照）。本発明の実施形態の開発の過程で合成されたキナゾリン化合物及びキノリン化合物は、ＥＧＦＲ陽性かつＰＩＫ３ＣＡ変異またはヌルＰＴＥＮ発現体のいずれかである結腸直腸がんの患者において、ＥＧＦＲ及びＰＩＫ３ＣＡの二重標的化が有効であるという主要仮説に基づいて設計された（例えば、Ｐｓｙｒｒｉ  Ａ，ｅｔ  ａｌ．，Ａｍ  Ｓｏｃ  Ｃｌｉｎ  Ｏｎｃｏｌ  Ｅｄｕｃ  Ｂｏｏｋ．２０１３：２４６−２５５；Ｌｕｉ  ＶＷ，ｅｔ  ａｌ．，Ｃａｎｃｅｒ
Ｄｉｓｃｏｖ．２０１３；３：７６１−７６９；Ｊｉｎ  Ｇ，ｅｔ  ａｌ．，Ｌｕｎｇ
Ｃａｎｃｅｒ．２０１０；６９：２７９−２８３；Ｂｕｃｋ  Ｅ，ｅｔ  ａｌ．，Ｍｏｌ  Ｃａｎｃｅｒ  Ｔｈｅｒ．２００６；５：２６７６−２６８４；Ｆａｎ  ＱＷ，ｅｔ
ａｌ．，Ｃａｎｃｅｒ  Ｒｅｓ．２００７；６７：７９６０−７９６５；Ｇａｄｇｅｅｌ  ＳＭ，ｅｔ  ａｌ．，Ｃｌｉｎ  Ｌｕｎｇ  Ｃａｎｃｅｒ．２０１３；１４：３２２−３３２参照）。
【０００７】
したがって、本発明は、ＥＧＦＲタンパク質及びＰＩ３Ｋタンパク質の二重阻害剤の役割を果たすキナゾリン構造またはキノリン構造を有する新たなクラスの小分子、ならびに異常なＥＧＦＲ及びＰＩ３Ｋ発現によって特徴づけられる疾患（例えば、がん及び他の疾患（例えば、自己免疫疾患、炎症性疾患、心血管疾患、神経変性疾患、アレルギー、喘息、膵炎、多臓器不全、腎疾患、血小板凝集、精子の運動性、移植拒絶反応、移植片拒絶反応、肺損傷、等））の治療のための治療薬としてのそれらの使用に関する。実際、ＥＧＦＲ及びＰＩ３Ｋの両方の標的化により、本発明の化合物は、ＰＩ３Ｋαにおける活性化突然変異を有するか、またはＰＴＥＮヌルであるＥＧＦＲ陽性結腸直腸がんの対象の治療に有用である。
【０００８】
したがって、本発明は、異常なＥＧＦＲタンパク質活性（例えば、ＥＲＢＢ１）及びＰＩ３Ｋタンパク質活性（例えば、ＰＩ３Ｋα）によって特徴づけられる疾患（例えば、がん（例えば、及び／またはがん関連疾患）の動物（例えば、ヒト）を、ＥＧＦＲ及びＰＩ３Ｋの両方の活性を阻害するキナゾリン構造を有する（例えば、キナゾリン構造を有する小分子）、またはキノリン構造を有する（例えば、キノリン構造を有する小分子）薬物（複数可）の治療有効量に曝露することが、異常なＥＧＦＲ及びＰＩ３Ｋタンパク質の発現によって特徴づけられる細胞（例えば、異常なＥＧＦＲ及びＰＩ３Ｋタンパク質の発現を有する結腸直腸がん細胞）の成長を阻害すること、及び／または、かかる細胞を、追加の治療薬（例えば、がん治療薬もしくは放射線療法）の細胞死誘導活性の影響をより受けやすい集団にすることを企図する。本発明は、ＥＧＦＲ及びＰＩ３Ｋの両方の阻害剤が、異常なＥＧＦＲ及びＰＩ３Ｋ活性で特徴づけられる複数の疾患（例えば、がん）の治療に対して、かかる細胞（例えば、がん細胞）における細胞成長阻害、アポトーシス、及び／または細胞周期停止を誘導するために単剤療法として投与される場合、または、追加薬（複数可）、例えば、他の細胞死誘導性もしくは細胞周期破壊性の治療薬（例えば、がん治療薬もしくは放射線療法）（併用療法）との時間的関係で投与し、アポトーシスプログラムを実行しやすい細胞（例えば、がん細胞）または支持細胞の割合を、該治療薬もしくは放射線療法単独のみで処理される動物における対応する細胞の割合と比較して高くする場合のいずれかで、まだ満たされていない需要を満たすことを企図する。
【０００９】
治療される疾患が、異常なＥＧＦＲタンパク質活性（例えば、ＥＲＢＢ１）及びＰＩ３Ｋタンパク質活性（例えば、ＰＩ３Ｋα）で特徴づけられるがん（例えば、結腸直腸がん）である本発明の特定の実施形態では、動物における治療有効量の本発明の化合物及び一連の抗がん剤の併用療法は、かかる動物において、該化合物または抗がん剤／放射線単独で処理された動物と比較して、より大きな腫瘍反応及び臨床的有効性をもたらす。承認されたすべての抗がん剤及び放射線療法に対する用量は既知であるため、本発明では、それらと本発明の化合物との様々な組合せが企図される。
【００１０】
上述のように、本出願者らは、特定のキナゾリン化合物及びキノリン化合物がＥＧＦＲ及びＰＩ３Ｋの両方の阻害剤として機能し、がん及び他の疾患の治療のための治療薬の役割を果たすことを見出した。したがって、本発明は、ＥＧＦＲ及びＰＩ３Ｋの活性を阻害し（例えば、それにより細胞のアポトーシスを促進し）、アポトーシス及び／または細胞周期停止の誘導剤に対する細胞の感受性を向上させるのに有用なキナゾリン化合物及びキノリン化合物に関する。本発明の特定のキナゾリン化合物及びキノリン化合物は、光学異性体を含む立体異性体として存在してもよい。本発明は、すべての立体異性体を、純粋な個々の立体異性体調製物及び各々の濃縮調製物の両方として含み、また、かかる立体異性体のラセミ混合物ならびに当業者に周知の方法に従って分離され得る個々のジアステレオマー及びエナンチオマーの両方を含む。
【００１１】
特定の実施形態において、式Ｉ
【００１２】
【化１】
2019206549.tif 000002
【００１３】
を有するキナゾリン化合物を、その医薬的に許容される塩、溶媒和物、及び／またはプロドラッグを含めて提供する。
【００１４】
特定の実施形態において、式ＩＩ
【００１５】
【化２】
2019206549.tif 000003
【００１６】
を有するキノリン化合物を、その医薬的に許容される塩、溶媒和物、及び／またはプロドラッグを含めて提供する。
【００１７】
式Ｉ及びＩＩは、Ｒ１及びＲ２の特定の化学部分に限定されない。いくつかの実施形態では、Ｒ１及びＲ２の該特定の化学部分は独立して、得られる化合物がＥＧＦＲタンパク質（例えば、ＥＲＢＢ１）及びＰＩ３Ｋタンパク質（例えば、ＰＩ３Ｋα）を阻害することを可能にする任意の化学部分を含む。
【００１８】
いくつかの実施形態において、Ｒ１は置換された、または非置換のアリール部分である。いくつかの実施形態では、Ｒ１は、
【００１９】
【化３】
2019206549.tif 000004
2019206549.tif 000005
2019206549.tif 000006
2019206549.tif 000007
【００２０】
及び
【００２１】
【化４】
2019206549.tif 000008
【００２２】
から選択される。
【００２３】
いくつかの実施形態において、Ｒ２は置換された、または非置換のアリール部分である。いくつかの実施形態では、Ｒ２は、
【００２４】
【化５】
2019206549.tif 000009
【００２５】
及び
【００２６】
【化６】
2019206549.tif 000010
【００２７】
から選択される。
【００２８】
いくつかの実施形態において、以下の化合物が式Ｉ及びＩＩについて企図される。
【００２９】
【表１】
2019206549.tif 000011
2019206549.tif 000012
2019206549.tif 000013
2019206549.tif 000014
2019206549.tif 000015
2019206549.tif 000016
2019206549.tif 000017
2019206549.tif 000018
2019206549.tif 000019
2019206549.tif 000020
2019206549.tif 000021
2019206549.tif 000022
2019206549.tif 000023
2019206549.tif 000024
2019206549.tif 000025
2019206549.tif 000026
2019206549.tif 000027
【００３０】
本発明はさらに、本発明の任意の化合物の調製方法を提供する。
【００３１】
本発明はまた、異常なＥＧＦＲタンパク質活性（例えば、ＥＲＢＢ１）及びＰＩ３Ｋタンパク質活性（例えば、ＰＩ３Ｋα）で特徴づけられる細胞での細胞周期停止及び／またはアポトーシスを誘導するための化合物の使用を提供する。本発明はまた、アポトーシス及び／または細胞周期停止の誘導剤等の追加剤（複数可）に対して細胞を感作させるため、ならびに化学療法剤での処理前の細胞周期停止の誘導による正常細胞の化学防御のための化合物の使用に関する。
【００３２】
本発明の化合物は、アポトーシス細胞死の誘導に反応性の疾患等、例えば、異常なＥＧＦＲタンパク質活性（例えば、ＥＲＢＢ１）及びＰＩ３Ｋタンパク質活性（例えば、ＰＩ３Ｋα）の細胞で特徴づけられるがん（例えば、結腸直腸がん）等の過剰増殖性疾患を含む、アポトーシスの調節不全によって特徴づけられる疾患の治療、改善、または予防に有用である。特定の実施形態では、該化合物は、がん療法に対する耐性によって特徴づけられるタイプ（例えば、化学療法耐性、放射線耐性、ホルモン耐性等のがん細胞）のがん（例えば、結腸直腸がん）の治療、改善、または予防に用いることができる。特定の実施形態では、該がんは、結腸直腸がん、頭頸部がん、神経膠芽腫多形、及び／または非小細胞肺がん（ＮＳＣＬＣ）である。他の実施形態では、該化合物は、ＥＧＦＲ及びＰＩ３Ｋタンパク質の異常発現によって特徴づけられる他（例えば、自己免疫疾患、炎症性疾患、心臓血管疾患、神経変性疾患、アレルギー、喘息、膵炎、多臓器不全、腎疾患、血小板凝集、精子の運動性、移植拒絶反応、移植片拒絶反応、肺損傷等）の治療に用いることができる。
【００３３】
本発明はまた、本発明の化合物を医薬的に許容される担体中に含む医薬組成物を提供する。
【００３４】
本発明はまた、本発明の化合物及び該化合物を動物に投与するための説明書を含むキットを提供する。該キットは、他の治療薬、例えば、抗がん剤またはアポトーシス調節剤を任意に含んでよい。
【００３５】
さらに、本発明は、細胞のＥＧＦＲタンパク質活性及びＰＩ３Ｋタンパク質活性の両方を、かかる細胞を本発明のキナゾリンまたはキノリン化合物の１つ以上に曝露することによって、同時に阻害する方法を提供する。
【００３６】
［図面の簡単な説明］
［図１Ａ］  ＥＧＦＲ阻害剤を示す。
［図１Ｂ］  ＥＧＦＲ阻害剤を示す。
［図１Ｃ］  ＥＧＦＲ阻害剤を示す。
［図２Ａ］  ＰＩ３Ｋ阻害剤を示す。
［図２Ｂ］  ＰＩ３Ｋ阻害剤を示す。
［図２Ｃ］  ＰＩ３Ｋ阻害剤を示す。
［図２Ｄ］  ＰＩ３Ｋ阻害剤を示す。
［図２Ｅ］  ＰＩ３Ｋ阻害剤を示す。
［図３］  ラパチニブ（ＰＤＢコード：１ＸＫＫ）及びＨＫＩ−２７２（ＰＤＢコード：３Ｗ２Ｑ）に対するＥＧＦＲ（プロテインキナーゼのＡＴＰ競合部位）のＸ線結晶キノロン結合様式を示す。
［図４Ａ］  ＧＳＫ２１２６４５８（ＰＤＢコード：３Ｌ０８）のＥＧＦＲ及びＰＩ３ＫとのＸ線結晶結合様式、ＰＦ−０４９７９０６４（ＰＤＢコード：４ＨＶＢ）のＰＩ３ＫとのＸ線結晶結合様式、ならびにラパチニブのＥＧＦＲとのＸ線結晶結合様式を示す。
［図４Ｂ］  ＰＩ３ＫでのＢＥＺ２３５の結合様式を示す。
［図４Ｃ］  ラパチニブ及びＧＳＫ２１２６４５８（ＰＤＢコード：３Ｌ０８）に対するキノリンの脂質対プロテインキナーゼ結合様式の比較を示す。
［図５Ａ］  ＥＧＦＲのリン酸化が、ＭＯＬ−１６２の単回経口投与後２時間でＨＣＴ−１１６腫瘍（１００ｍｇ／ｋｇ）において完全に抑制されることが見出されたことを示す。
［図５Ｂ］  ＭＯＬ−１６０、ＭＯＬ−１６１、ＭＯＬ−１６２、及びＭＯＬ−１６３に対する細胞増殖の測定値を示す。
［図５Ｃ］  様々な化合物に対するＨＣＴ−１１６細胞の生存率を示す。
【００３７】
図５Ｄは、２時間処理したＨＣＴ−１１６細胞でのｐＡＫＴ及びｐＥＧＦＲに対するＭＯＬ−１６２の影響を示す。
［図６］  ＥＧＦＲ及びＰＩＫ３ＣＡに対する様々な化合物のＩＣ５０を示す。
［図７］  １０μＭの化合物について、選択化合物のＮＣＩ−６０比較パネルに対する成長％を示す。
［図８］  図８Ａ、８Ｂ、８Ｃ、８Ｄ、及び８Ｅは、ＨＣＴ−１１６異種移植片、Ａ４３１異種移植片、ＣＯＬ−２０５異種移植片、ＳＫ−ＭＥＬ５異種移植片、及びＭＤＡ−ＭＢ−４６８異種移植片に対するＭＯＬ−２０１のインビボ効力を示す。
【００３８】
［発明を実施するための形態］
定義
本明細書で用いられる「抗がん剤」という用語は、（例えば、哺乳類での、例えば、ヒトでの）がん等の過剰増殖性疾患の治療に用いられる、任意の治療薬（例えば、化学療法化合物及び／または分子治療化合物）、アンチセンス療法、放射線療法、または外科的介入を指す。
【００３９】
本明細書で用いられる「プロドラッグ」という用語は、当該プロドラッグを放出するため、または活性薬物に変換（例えば、酵素的、生理的、機械的、電磁的に）するための、標的の生理系内の生体内変化（例えば、自然または酵素的）を要する、親「薬物」分子の薬理学的に不活性な誘導体を指す。プロドラッグは、安定性、水溶性、毒性、特異性の欠如、または限られた生体利用効率に伴う問題を克服するように設計される。例示的なプロドラッグは、活性薬物分子自体及び化学的マスキング基（例えば、該薬物の活性を可逆的に抑制する基）を含む。いくつかのプロドラッグは、代謝条件下で切断可能な基を有する化合物の変形または誘導体である。プロドラッグは、当技術分野で既知の方法、例えば、Ａ  Ｔｅｘｔｂｏｏｋ  ｏｆ  Ｄｒｕｇ  Ｄｅｓｉｇｎ  ａｎｄ  Ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔ，Ｋｒｏｇｓｇａａｒｄ−Ｌａｒｓｅｎ  ａｎｄ  Ｈ．Ｂｕｎｄｇａａｒｄ（ｅｄｓ．），Ｇｏｒｄｏｎ  ＆  Ｂｒｅａｃｈ，１９９１，特にＣｈａｐｔｅｒ  ５：’’Ｄｅｓｉｇｎ  ａｎｄ  Ａｐｐｌｉｃａｔｉｏｎｓ  ｏｆ  Ｐｒｏｄｒｕｇｓ’’；Ｄｅｓｉｇｎ  ｏｆ  Ｐｒｏｄｒｕｇｓ，Ｈ．Ｂｕｎｄｇａａｒｄ（ｅｄ．），Ｅｌｓｅｖｉｅｒ，１９８５；Ｐｒｏｄｒｕｇｓ：Ｔｏｐｉｃａｌ  ａｎｄ  Ｏｃｕｌａｒ  Ｄｒｕｇ  Ｄｅｌｉｖｅｒｙ，Ｋ．Ｂ．Ｓｌｏａｎ（ｅｄ．），Ｍａｒｃｅｌ  Ｄｅｋｋｅｒ，１９９８；Ｍｅｔｈｏｄｓ  ｉｎ  Ｅｎｚｙｍｏｌｏｇｙ，Ｋ．Ｗｉｄｄｅｒ  ｅｔ  ａｌ．（ｅｄｓ．），Ｖｏｌ．４２，Ａｃａｄｅｍｉｃ  Ｐｒｅｓｓ，１９８５，特にｐｐ．３０９−３９６；Ｂｕｒｇｅｒ’ｓ  Ｍｅｄｉｃｉｎａｌ  Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ  ａｎｄ  Ｄｒｕｇ  Ｄｉｓｃｏｖｅｒｙ，５ｔｈ  Ｅｄ．，Ｍ．Ｗｏｌｆｆ（ｅｄ．），Ｊｏｈｎ  Ｗｉｌｅｙ  ＆  Ｓｏｎｓ，１９９５，特にＶｏｌ．１  ｐｐ．１７２−１７８及びｐｐ．９４９−９８２；Ｐｒｏ−Ｄｒｕｇｓ  ａｓ  Ｎｏｖｅｌ  Ｄｅｌｉｖｅｒｙ  Ｓｙｓｔｅｍｓ，Ｔ．Ｈｉｇｕｃｈｉ  ａｎｄ  Ｖ．Ｓｔｅｌｌａ（ｅｄｓ．），Ａｍ．Ｃｈｅｍ．Ｓｏｃ．，１９７５；ならびにＢｉｏｒｅｖｅｒｓｉｂｌｅ  Ｃａｒｒｉｅｒｓ  ｉｎ
Ｄｒｕｇ  Ｄｅｓｉｇｎ，Ｅ．Ｂ．Ｒｏｃｈｅ（ｅｄ．），Ｅｌｓｅｖｉｅｒ，１９８７に記載の方法を用いて当該親化合物から容易に調製できる。
【００４０】
例示的なプロドラッグは、生理的条件下で加溶媒分解が行われる際、または酵素的分解もしくは他の生化学的変換（例えば、リン酸化、水素化、脱水素化、グリコシル化）が行われる際にインビボまたはインビトロで薬学的に活性になる。プロドラッグは、多くの場合、水溶性、組織適合性、または哺乳類生物での遅延放出の利点をもたらす（例えば、Ｂｕｎｄｇａｒｄ，Ｄｅｓｉｇｎ  ｏｆ  Ｐｒｏｄｒｕｇｓ，ｐｐ．７−９，２１−２４，Ｅｌｓｅｖｉｅｒ，Ａｍｓｔｅｒｄａｍ（１９８５）；及びＳｉｌｖｅｒｍａｎ，Ｔｈｅ
Ｏｒｇａｎｉｃ  Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ  ｏｆ  Ｄｒｕｇ  Ｄｅｓｉｇｎ  ａｎｄ  Ｄｒｕｇ  Ａｃｔｉｏｎ，ｐｐ．３５２−４０１，Ａｃａｄｅｍｉｃ  Ｐｒｅｓｓ，Ｓａｎ  Ｄｉｅｇｏ，ＣＡ（１９９２）参照）。一般的なプロドラッグとしては、酸の誘導体、例えば、親酸と適切なアルコール（例えば、低級アルカノール）との反応で調製されるエステルもしくは親アルコールと適切なカルボン酸（例えば、アミノ酸）との反応で調製されるエステル、当該親酸化合物とアミンとの反応で調製されるアミド、アシル化塩基誘導体（例えば、低級アルキルアミド）を形成するように反応させた塩基性基、またはリン含有誘導体、例えば、環状リン酸、ホスホン酸、及びアミド亜リン酸を含むリン酸、ホスホン酸、及びアミド亜リン酸エステルが挙げられる（例えば、米国特許出願公開第ＵＳ２００７／０２４９５６４Ａ１参照、参照によりその全体が本明細書に組み込まれる）。
【００４１】
本明細書で用いられる「医薬的に許容される塩」という用語は、当該標的動物（例えば、哺乳類）において生理的に許容される本発明の化合物の任意の塩（例えば、酸または塩基との反応で得られる）を指す。本発明の化合物の塩は、無機または有機酸及び塩基から得ることができる。酸の例としては、塩酸、臭化水素酸、硫酸、硝酸、過塩素酸、フマル酸、マレイン酸、リン酸、グリコール酸、乳酸、サリチル酸、コハク酸、トルエン−ｐ−スルホン酸、酒石酸、酢酸、クエン酸、メタンスルホン酸、エタンスルホン酸、ギ酸、安息香酸、マロン酸、スルホン酸、ナフタレン−２−スルホン酸、ベンゼンスルホン酸等が挙げられるがこれらに限定されない。シュウ酸等の他の酸は、それら自体は医薬的に許容されないものの、本発明の化合物及びそれらの医薬的に許容される酸付加塩を得る際の中間体として有用な塩の調製に使用される場合もある。
【００４２】
塩基の例としては、アルカリ金属（例えば、ナトリウム）水酸化物、アルカリ土類金属（例えば、マグネシウム）水酸化物、アンモニア、及び式ＮＷ４＋（式中、ＷはＣ１−４アルキルである）の化合物等が挙げられるがこれらに限定されない。
【００４３】
塩の例としては、酢酸塩、アジピン酸塩、アルギン酸塩、アスパラギン酸塩、安息香酸塩、ベンゼンスルホン酸塩、重硫酸塩、酪酸塩、クエン酸塩、ショウノウ酸塩、カンファースルホン酸塩、シクロペンタンプロピオン酸塩、ジグルコン酸塩、ドデシル硫酸塩、エタンスルホン酸塩、フマル酸塩、フルコヘプタン酸塩（ｆｌｕｃｏｈｅｐｔａｎｏａｔｅ）、グリセロリン酸塩、ヘミ硫酸塩、ヘプタン酸塩、ヘキサン酸塩、塩化物、臭化物、ヨウ化物、２−ヒドロキシエタンスルホン酸塩、乳酸塩、マレイン酸塩、メシル酸塩、メタンスルホン酸塩、２−ナフタレンスルホン酸塩、ニコチン酸塩、シュウ酸塩、パルモエート（ｐａｌｍｏａｔｅ）、ペクチン酸塩、過硫酸塩、フェニルプロピオン酸塩、ピクリン酸塩、ピバル酸塩、プロピオン酸塩、コハク酸塩、酒石酸塩、チオシアン酸塩、トシル酸塩、ウンデカン酸塩等が挙げられるが、これらに限定されない。塩のその他の例としては、Ｎａ＋、ＮＨ４＋、及びＮＷ４＋（式中、ＷはＣ１−４アルキル基である）等の適切なカチオンを有する本発明の化合物のアニオンが挙げられる。治療的使用については、本発明の化合物の塩は、医薬的に許容されることが企図される。しかしながら、医薬的に許容されない酸及び塩基の塩でもまた、例えば、医薬的に許容される化合物の調製または精製において用途が見出され得る。
【００４４】
本明細書で用いられる「溶媒和物」という用語は、本発明の化合物と、有機または無機にかかわらず１つ以上の溶媒分子との物理的会合を指す。この物理的会合は多くの場合水素結合を含む。場合によっては、該溶媒和物は、例えば、１つ以上の溶媒和物分子が当該結晶性固体の結晶格子に組み込まれている場合に単離することが可能である。「溶媒和物」は、溶液相の及び単離可能な溶媒和物の両方を包含する。典型的な溶媒和物としては、水和物、エタノラート、及びメタノラートが挙げられる。
【００４５】
本明細書で用いられる「治療有効量」という用語は、疾患の１つ以上の症状の改善をもたらす、疾患の進行を抑制する、または該疾患の退行を引き起こすのに十分な当該治療薬の量を指す。例えば、がんの治療に関して、１つの実施形態では、治療有効量とは、少なくとも５％、少なくとも１０％、少なくとも１５％、少なくとも２０％、少なくとも２５％、少なくとも３０％、少なくとも３５％、少なくとも４０％、少なくとも４５％、少なくとも５０％、少なくとも５５％、少なくとも６０％、少なくとも６５％、少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％、または少なくとも１００％腫瘍成長速度を低下させる、腫瘍量を減少させる、転移の数を減少させる、腫瘍進行までの時間を延長する、または生存期間を延長する治療薬の量を指す。
【００４６】
本明細書で用いられる「ｓｅｎｓｉｔｉｚｅ（感作させる）」及び「ｓｅｎｓｉｔｉｚｉｎｇ（感作させること）」という用語は、第一の薬剤（例えば、本発明のキナゾリン化合物）の投与によって、第二の薬剤の生物学的効果（例えば、細胞分裂、細胞成長、増殖、浸潤、血管形成、壊死、もしくはアポトーシスが挙げられるがこれらに限定されない細胞機能面の促進または遅延）に対して、動物または動物の細胞の感受性を高める、または反応性を高めることを指す。第一の薬剤が標的細胞に及ぼす感作効果は、該第一の薬剤の投与した場合及び投与しなかった場合の、第二の薬剤の投与時に観察される目的の生物学的効果（例えば、細胞成長、増殖、浸潤、血管形成、もしくはアポトーシスが挙げられるがこれらに限定されない細胞機能面の促進または遅延）の相違として測定することができる。感作させた細胞の反応は、該第一の薬剤の非存在下での反応より少なくとも約１０％、少なくとも約２０％、少なくとも約３０％、少なくとも約４０％、少なくとも約５０％、少なくとも約６０％、少なくとも約７０％、少なくとも約８０％、少なくとも約９０％、少なくとも約１００％、少なくとも約１５０％、少なくとも約２００％、少なくとも約２５０％、少なくとも３００％、少なくとも約３５０％、少なくとも約４００％、少なくとも約４５０％、または少なくとも約５００％増加し得る。
【００４７】
本明細書で用いられる「アポトーシスの調節不全」という用語は、アポトーシスを介して細胞死が生じる細胞の能力（例えば、素因）の任意の異常を指す。アポトーシスの調節不全は、様々な疾患を伴うか、またはそれらによって誘導される。該疾患の非限定的な例としては、自己免疫疾患（例えば、全身性エリテマトーデス、関節リウマチ、移植片対宿主病、重症筋無力症、またはシェーグレン症候群）、慢性炎症性疾患（例えば、乾癬、喘息、またはクローン病）、過剰増殖性疾患（例えば、腫瘍、Ｂ細胞リンパ腫、またはＴ細胞リンパ腫）、ウイルス感染症（例えば、ヘルペス、パピローマ、またはＨＩＶ）、ならびに変形性関節症及びアテローム性動脈硬化症等の他の疾患が挙げられる。
【００４８】
本明細書で用いられる「過剰増殖性疾患」という用語は、動物における限局した増殖細胞集団が正常な成長の通常の制限によって抑制されない任意の疾患を指す。過剰増殖性疾患の例としては、腫瘍、新生物、リンパ腫等が挙げられる。新生物は、浸潤または転移を経ない場合には良性、それらのどちらかを経る場合には悪性であると考えられている。「転移性の」細胞とは、隣接する身体構造に浸潤してそれを破壊し得る細胞を意味する。過形成とは、構造または機能の顕著な変化を伴わない、組織または器官における細胞数の増加を伴う細胞増殖の形態である。化生とは、１つのタイプの完全に分化した細胞が別のタイプの分化細胞と置き換わる、制御された細胞成長の形態である。
【００４９】
活性化されたリンパ系細胞の病的成長は、多くの場合、自己免疫疾患または慢性炎症性疾患をもたらす。本明細書で用いられる「自己免疫疾患」という用語は、生物が、該生物自体の分子、細胞、もしくは組織を認識する抗体または免疫細胞を産生する任意の疾患を指す。自己免疫疾患の非限定的な例としては、自己免疫性溶血性貧血、自己免疫性肝炎、バージャー病もしくはＩｇＡ腎症、セリアック病、慢性疲労症候群、クローン病、皮膚筋炎、線維筋痛症、移植片対宿主病、グレーブス病、橋本甲状腺炎、特発性血小板減少性紫斑病、扁平苔癬、多発性硬化症、重症筋無力症、乾癬、リウマチ熱、関節リウマチ、強皮症、シェーグレン症候群、全身性エリテマトーデス、１型糖尿病、潰瘍性大腸炎、白斑等が挙げられる。
【００５０】
本明細書で用いられる「腫瘍性疾患」という用語は、良性（非がん性）または悪性（がん性）のいずれかである細胞の任意の異常成長を指す。
【００５１】
本明細書で用いられる「正常細胞」という用語は、異常な成長または分裂を経ていない細胞を指す。正常細胞は、非がん性であり、いかなる過剰増殖性疾患または障害の一部でもない。
【００５２】
本明細書で用いられる「抗腫瘍剤」という用語は、標的とされる（例えば、悪性）新生物の増殖、成長、または拡張を遅延させる任意の化合物を指す。
【００５３】
本明細書で用いられる「ｐｒｅｖｅｎｔ（予防する）」、「ｐｒｅｖｅｎｔｉｎｇ（予防すること）」、及び「ｐｒｅｖｅｎｔｉｏｎ（予防）」という用語は、動物における病的細胞（例えば、過剰増殖性または腫瘍性細胞）の発生の低下を指す。予防とは、完全なもの、例えば、対象における病的細胞が皆無であることであり得る。予防はまた、対象における病的細胞の発生が本発明なしで生じた場合よりも少なくなるように部分的ものである場合もある。
【００５４】
「医薬的に許容される担体」または「医薬的に許容される媒体」という用語は、標準的な医薬担体、溶媒、界面活性剤、または媒体のいずれかを包含する。適切な医薬的に許容される媒体としては、水性媒体及び非水性媒体が挙げられる。標準的な医薬担体及びそれらの処方は、Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ’ｓ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｓｃｉｅｎｃｅｓ，Ｍａｃｋ  Ｐｕｂｌｉｓｈｉｎｇ  Ｃｏ．，Ｅａｓｔｏｎ，ＰＡ，１９ｔｈ  ｅｄ．１９９５に記載されている。
【００５５】
［発明を実施するための形態］
ＰＩ３Ｋ／ＡＫＴ経路の活性化がＥＧＦＲ標的薬剤に対する耐性をもたらすことを示す有力な証拠があるにもかかわらず、ごく最近になって研究者らは、ＥＧＦＲ標的薬剤とＰＩ３Ｋ／ＡＫＴ／ＭＴＯＲ経路阻害剤とを前臨床的にかつ臨床的に結びつけようとしている。例えば、Ｂｕｃｋらは、エルロチニブ単独処理に対して耐性があるいくつかの細胞株で、ｍＴＯＲ阻害剤ラパマイシンがＥＧＦＲ阻害剤エルロチニブと相乗作用することを立証した（例えば、Ｒａｔｕｓｈｎｙ  Ｖ，ｅｔ  ａｌ．，Ｃｅｌｌ  Ｓｉｇｎａｌ．２００９；２１：１２５５−１２６８）。しかしながら、ラパマイシンはＡＫＴのリン酸化を誘導して経路の再活性化をもたらすため、この相乗的な組合せの潜在能力は十分に得られない（例えば、Ｒａｔｕｓｈｎｙ  Ｖ，ｅｔ  ａｌ．，Ｃｅｌｌ  Ｓｉｇｎａｌ．２００９；２１：１２５５−１２６８）。他の研究者らはいくつかの細胞株及びがんの組織型でのＥＧＦＲ及びＰＩ３Ｋ／ＡＫＴ経路の二重阻害を研究し、この併用治療法に対するさらなる裏付けを提供した（例えば、Ｅｉｃｈｈｏｒｎ  ＰＪ，ｅｔ  ａｌ．，Ｃａｎｃｅｒ
Ｒｅｓ．２００８；６８：９２２１−９２３０参照）。本発明の化合物は、かかる制限を克服し、ＥＧＦＲタンパク質活性（例えば、ＥＲＢＢ１）及びＰＩ３Ｋタンパク質活性（例えば、ＰＩ３Ｋα）の両方の二重効力阻害剤に相当する。具体的には、既知のＰＩ３Ｋ及びＥＧＦＲ阻害剤から収集したｘ線結晶構造及び構造活性相関を活用し、かかる実験は、ＰＩ３Ｋに対する高阻害活性を促進するＰＩ３Ｋ阻害剤の「活性コア」、ならびにＥＧＦＲに対する高阻害活性を促進するＥＧＦＲ阻害剤の「活性コア」をそれぞれ特定した（実施例Ｉ参照）。本発明のキナゾリン及びキノリン化合物は、それに応じて、ＰＩ３Ｋに対する「活性コア」及びＥＧＦＲに対する「活性コア」を標的とするために合成され、それによりかかる化合物をＥＧＦＲタンパク質活性（例えば、ＥＲＢＢ１）及びＰＩ３Ｋタンパク質活性（例えば、ＰＩ３Ｋα）に対して「二重効力」を有するようにした。
【００５６】
したがって、本発明は、ＥＧＦＲタンパク質活性（例えば、ＥＲＢＢ１）及びＰＩ３Ｋタンパク質活性（例えば、ＰＩ３Ｋα）の阻害剤として機能する化合物に関する。ＥＧＦＲタンパク質活性（例えば、ＥＲＢＢ１）及びＰＩ３Ｋタンパク質活性（例えば、ＰＩ３Ｋα）の活性を阻害することによって、これらの化合物は、アポトーシス及び／または細胞周期停止の誘導剤に対して細胞を感作させ、場合によっては、それら自体がアポトーシス及び／または細胞周期停止を誘導する。したがって、本発明は、アポトーシス及び／または細胞周期停止の誘導剤に対して細胞を感作させる方法、ならびに細胞のアポトーシス及び／または細胞周期停止の誘導方法であって、該細胞と本発明の化合物とを、単独で、または追加薬（複数可）、例えば、アポトーシスの誘導剤もしくは細胞周期かく乱物質と組み合わせて接触させることを含む、方法に関する。
【００５７】
本発明はさらに、異常なＥＧＦＲタンパク質活性（例えば、ＥＲＢＢ１）及びＰＩ３Ｋタンパク質活性（例えば、ＰＩ３Ｋα）を有する細胞で特徴づけられる患者における疾患、例えば、アポトーシスの誘導に反応性の疾患の治療、改善、または予防方法であって、本発明の化合物及び追加薬（複数可）、例えば、アポトーシスの誘導剤を該患者に投与することを含む、方法に関する。かかる疾患としては、アポトーシスの調節不全によって特徴づけられるものならびに異常なＥＧＦＲタンパク質活性（例えば、ＥＲＢＢ１）及びＰＩ３Ｋタンパク質活性（例えば、ＰＩ３Ｋα）を有する細胞の増殖によって特徴づけられるもの（例えば、結腸直腸がん）が挙げられる。実際、ＥＧＦＲ及びＰＩ３Ｋの両方の標的化により、本発明の化合物は、ＰＩ３Ｋαにおける活性化突然変異を有するか、またはＰＴＥＮヌルであるＥＧＦＲ陽性結腸直腸がんの対象の治療に有用である。
【００５８】
特定の実施形態において、式Ｉ
【００５９】
【化７】
2019206549.tif 000028
【００６０】
を有するキナゾリン化合物を、その医薬的に許容される塩、溶媒和物、及び／またはプロドラッグを含めて提供する。
【００６１】
特定の実施形態において、式ＩＩ
【００６２】
【化８】
2019206549.tif 000029
【００６３】
を有するキノリン化合物を、その医薬的に許容される塩、溶媒和物、及び／またはプロドラッグを含めて提供する。
【００６４】
式Ｉ及びＩＩは、Ｒ１及びＲ２の特定の化学部分に限定されない。いくつかの実施形態では、Ｒ１及びＲ２の該特定の化学部分は独立して、得られる化合物がＥＧＦＲタンパク質（例えば、ＥＲＢＢ１）及びＰＩ３Ｋタンパク質（例えば、ＰＩ３Ｋα）を阻害することを可能にする任意の化学部分を含む。
【００６５】
いくつかの実施形態において、Ｒ１は置換された、または非置換のアリール部分である。いくつかの実施形態では、Ｒ１は、
【００６６】
【化９】
2019206549.tif 000030
2019206549.tif 000031
2019206549.tif 000032
2019206549.tif 000033
【００６７】
及び
【００６８】
【化１０】
2019206549.tif 000034
【００６９】
から選択される。
【００７０】
いくつかの実施形態において、Ｒ２は置換された、または非置換のアリール部分である。いくつかの実施形態では、Ｒ２は、
【００７１】
【化１１】
2019206549.tif 000035
【００７２】
及び
【００７３】
【化１２】
2019206549.tif 000036
【００７４】
から選択される。
【００７５】
いくつかの実施形態において、以下の化合物が式Ｉ及びＩＩについて企図される。
【００７６】
【表２】
2019206549.tif 000037
2019206549.tif 000038
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【００７７】
本発明の重要な態様は、本発明の化合物が細胞周期停止及び／またはアポトーシスを誘導し、また細胞周期停止及び／またはアポトーシスの誘導を単独で、または追加のアポトーシス誘導シグナルに応答して高めることである。したがって、これらの化合物は、かかる誘導刺激に対して耐性である細胞を含む細胞を、細胞周期停止及び／またはアポトーシスの誘導に対して感作させることが企図される。本発明のＥＧＦＲ及びＰＩ３Ｋ阻害剤（例えば、キナゾリン化合物）（例えば、キノリン化合物）は、アポトーシスの誘導によって治療、改善、または予防され得る任意の疾患においてアポトーシスを誘導するために使用することができる。
【００７８】
いくつかの実施形態において、本発明の組成物及び方法を用いて、動物（例えば、ヒト及び獣医学的動物が挙げられるがこれらに限定されない哺乳類患者）における病変細胞、組織、器官、または病状及び／または病態を治療する。この点において、様々な疾患及び病変に本発明の方法及び組成物を用いる治療または予防が適している。これら疾患及び状態の非限定的な例のリストには、結腸直腸がん、非小細胞肺がん、頭頸部がん（ｈｅａｄ
ｏｒ  ｎｅｃｋ  ｃａｒｃｉｎｏｍａ）、神経膠芽腫多形がん、膵臓がん、乳がん、前立腺がん（ｐｒｏｓｔａｔｅ  ｃａｎｃｅｒ）、リンパ腫、皮膚がん、結腸がん（ｃｏｌｏｎ  ｃａｎｃｅｒ）、黒色腫、悪性黒色腫、卵巣がん（ｏｖａｒｉａｎ  ｃａｎｃｅｒ）、脳がん、原発性脳腫瘍、頭頸部がん（ｈｅａｄ−ｎｅｃｋ  ｃａｎｃｅｒ）、神経膠腫、神経膠芽腫、肝臓がん、膀胱がん、非小細胞肺がん、乳がん、卵巣がん（ｏｖａｒｉａｎ  ｃａｒｃｉｎｏｍａ）、肺がん、小細胞肺がん、ウィルムス腫瘍、子宮頸がん、精巣がん、膀胱がん、膵臓がん、胃がん、結腸がん（ｃｏｌｏｎ  ｃａｒｃｉｎｏｍａ）、前立腺がん（ｐｒｏｓｔａｔｉｃ  ｃａｒｃｉｎｏｍａ）、泌尿生殖器がん、甲状腺がん、食道がん、骨髄腫、多発性骨髄腫、副腎がん、腎細胞がん、子宮内膜がん、副腎皮質がん、悪性膵臓インスリノーマ、悪性カルチノイドがん、絨毛がん、菌状息肉腫、悪性高カルシウム血症、子宮頸肥大症、白血病、急性リンパ性白血病、慢性リンパ性白血病、急性骨髄性白血病、慢性骨髄性白血病、慢性顆粒球性白血病、急性顆粒球性白血病、ヘアリー細胞白血病、神経芽細胞腫、横紋筋肉腫、カポジ肉腫、真性多血症、本態性血小板血症、ホジキン病、非ホジキンリンパ腫、軟部肉腫、骨肉腫、原発性マクログロブリン血症、ならびに網膜芽細胞腫等、Ｔ及びＢ細胞媒介性自己免疫疾患；炎症性疾患；感染症；過剰増殖性疾患；エイズ；変性状態、血管疾患等が含まれるこれらに限定されない。いくつかの実施形態では、治療されるがん細胞は転移性である。他の実施形態では、治療されるがん細胞は、抗がん剤に耐性がある。
【００７９】
他の実施形態において、該疾患は、異常なＥＧＦＲタンパク質活性（例えば、ＥＲＢＢ１）及びＰＩ３Ｋタンパク質活性（例えば、ＰＩ３Ｋα）を有する細胞を有する任意の疾患（例えば、自己免疫疾患、炎症性疾患、心臓血管疾患、神経変性疾患、アレルギー、喘息、膵炎、多臓器不全、腎疾患、血小板凝集、精子の運動性、移植拒絶反応、移植片拒絶反応、肺損傷等））である。
【００８０】
本発明のいくつかの実施形態は、有効量の本発明の化合物及び少なくとも１つの追加の治療薬（化学療法抗腫瘍剤、アポトーシス調節剤、抗菌剤、抗ウイルス剤、抗真菌剤、及び抗炎症薬が挙げられるがこれらに限定されない）ならびに／または治療技術（例えば、外科的介入及び／または放射線療法）の投与方法を提供する。特定の実施形態では、該追加の治療薬（複数可）は抗がん剤である。
【００８１】
多くの適切な抗がん剤が本発明の方法に企図される。実際、本発明は：アポトーシスを誘導する薬剤；ポリヌクレオチド（例えば、アンチセンス、リボザイム、ｓｉＲＮＡ）；ポリペプチド（例えば、酵素及び抗体）；生物学的模倣剤；アルカロイド；アルキル化剤；抗腫瘍性抗生物質；代謝拮抗物質；ホルモン；白金化合物；モノクローナルもしくはポリクローナル抗体（例えば、抗がん剤、毒素、デフェンシンと結合した抗体）、毒素；放射性核種；生物反応修飾物質（例えば、インターフェロン（例えば、ＩＦＮ−α）及びインターロイキン（例えば、ＩＬ−２））；養子免疫療法剤；造血成長因子；腫瘍細胞の分化を誘導する薬剤（例えば、オールトランス型レチノイン酸）；遺伝子治療試薬（例えば、アンチセンス治療試薬及びヌクレオチド）；腫瘍ワクチン；血管形成阻害剤；プロテアソーム阻害剤：ＮＦ−КＢモジュレーター；抗ＣＤＫ化合物；ＨＤＡＣ阻害剤等の多数の抗がん剤の投与を企図するが、これらに限定されない。開示の化合物との同時投与に適する多数の他の化学療法化合物及び抗がん療法の例は、当業者には既知である。
【００８２】
特定の実施形態において、抗がん剤は、アポトーシスを誘導または刺激する媒介物を含む。アポトーシスを誘導する媒介物としては、放射線（例えば、Ｘ線、ガンマ線、ＵＶ）；腫瘍壊死因子（ＴＮＦ）関連因子（例えば、ＴＮＦファミリー受容体タンパク質、ＴＮＦファミリーリガンド、ＴＲＡＩＬ、ＴＲＡＩＬ−Ｒ１またはＴＲＡＩＬ−Ｒ２に対する抗体）；キナーゼ阻害剤（例えば、上皮成長因子受容体（ＥＧＦＲ）キナーゼ阻害剤、血管増殖因子受容体（ＶＧＦＲ）キナーゼ阻害剤、線維芽細胞増殖因子受容体（ＦＧＦＲ）キナーゼ阻害剤、血小板由来増殖因子受容体（ＰＤＧＦＲ）キナーゼ阻害剤、及びＢｃｒ−Ａｂｌキナーゼ阻害剤（ＧＬＥＥＶＥＣ等））；アンチセンス分子；抗体（例えば、ハーセプチン、リツキサン、ゼバリン、及びアバスチン）；抗エストロゲン（例えば、ラロキシフェン及びタモキシフェン）；抗アンドロゲン（例えば、フルタミド、ビカルタミド、フィナステリド、アミノグルテタミド（ａｍｉｎｏｇｌｕｔｅｔｈａｍｉｄｅ）、ケトコナゾール、及びコルチコステロイド）；シクロオキシゲナーゼ２（ＣＯＸ−２）阻害剤（例えば、セレコキシブ、メロキシカム、ＮＳ−３９８、及び非ステロイド性抗炎症薬（ＮＳＡＩＤ））；抗炎症薬（例えば、ブタゾリジン、デカドロン、デルタゾン、デキサメタゾン、デキサメタゾンインテンソール、デキソン、ヘキサドロール、ヒドロキシクロロキン、メチコルテン、オラデキソン、オラソン、オキシフェンブタゾン、ペディアプレッド（ＰＥＤＩＡＰＲＥＤ）、フェニルブタゾン、プラケニル（ＰＬＡＱＵＥＮＩＬ）、プレドニゾロン、プレドニゾン、プレロン、及びタンデリル）；ならびにがんの化学療法薬（例えば、イリノテカン（ＣＡＭＰＴＯＳＡＲ）、ＣＰＴ−１１、フルダラビン（フルダラ（ＦＬＵＤＡＲＡ））、ダカルバジン（ＤＴＩＣ）、デキサメタゾン、ミトキサントロン、マイロターグ、ＶＰ−１６、シスプラチン、カルボプラチン、オキサリプラチン、５−ＦＵ、ドキソルビシン、ゲムシタビン、ボルテゾミブ、ゲフィチニブ、ベバシズマブ、タキソテールまたはタキソール）；細胞シグナル伝達分子；セラミド及びサイトカイン；スタウロスポリン等が挙げられるがこれらに限定されない。
【００８３】
さらに他の実施形態において、本発明の組成物及び方法は、本発明の化合物ならびにアルキル化剤、代謝拮抗物質、及び天然物（例えば、ハーブ及び他の植物及び／または動物由来の化合物）から選択される少なくとも１つの抗過剰増殖性薬剤または抗腫瘍薬を提供する。
【００８４】
本組成物及び方法での使用に適するアルキル化剤としては：１）ナイトロジェンマスタード（例えば、メクロレタミン、シクロホスファミド、イホスファミド、メルファラン（Ｌ−サルコリシン）；及びクロラムブシル）；２）エチレンイミンならびにメチルメラミン（例えば、ヘキサメチルメラミン及びチオテパ）；３）アルキルスルホネート（例えば、ブスルファン）；４）ニトロソウレア（例えば、カルムスチン（ＢＣＮＵ）；ロムスチン（ＣＣＮＵ）；セムスチン（メチルＣＣＮＵ）；及びストレプトゾシン（ストレプトゾトシン））；ならびに５）トリアゼン（例えば、ダカルバジン（ＤＴＩＣ；ジメチルトリアゼノイミダゾールカルボキサミド）が挙げられるがこれらに限定されない。
【００８５】
いくつかの実施形態において、本組成物及び方法での使用に適する代謝拮抗物質としては：１）葉酸類似体（例えば、メトトレキサート（アメトプテリン））；２）ピリミジン類似体（例えば、フルオロウラシル（５−フルオロウラシル；５−ＦＵ）、フロクスウリジン（フルオロデオキシウリジン；ＦｕｄＲ）、及びシタラビン（シトシンアラビノシド））；ならびに３）プリン類似体（例えば、メルカプトプリン（６−メルカプトプリン；６−ＭＰ）、チオグアニン（６−チオグアニン；ＴＧ）、及びペントスタチン（２’−デオキシコホルマイシン））が挙げられるがこれらに限定されない。
【００８６】
さらに他の実施形態において、本組成物及び方法での使用に適する化学療法剤としては：１）ビンカアルカロイド（例えば、ビンブラスチン（ＶＬＢ）、ビンクリスチン）；２）エピポドフィロトキシン（例えば、エトポシドおよびテニポシド）；３）抗生物質（例えば、ダクチノマイシン（アクチノマイシンＤ）、ダウノルビシン（ダウノマイシン；ルビドマイシン）、ドキソルビシン、ブレオマイシン、プリカマイシン（ミトラマイシン）、及びマイトマイシン（マイトマイシンＣ））；４）酵素（例えば、Ｌ−アスパラギナーゼ）；５）生物反応修飾物質（例えば、インターフェロンアルファ）；６）白金配位錯体（例えば、シスプラチン（ｃｉｓ−ＤＤＰ）及びカルボプラチン）；７）アントラセンジオン（例えば、ミトキサントロン）；８）置換尿素（例えば、ヒドロキシ尿素）；９）メチルヒドラジン誘導体（例えば、プロカルバジン（Ｎ−メチルヒドラジン；ＭＩＨ））；１０）副腎皮質抑制剤（例えば、ミトタン（ｏ，ｐ’−ＤＤＤ）及びアミノグルテチミド）；１１）副腎皮質ステロイド（例えば、プレドニゾン）；１２）プロゲスチン（例えば、カプロン酸ヒドロキシプロゲステロン、酢酸メドロキシプロゲステロン、及び酢酸メゲストロール）；１３）エストロゲン（例えば、ジエチルスチルベストロール及びエチニルエストラジオール）；１４）抗エストロゲン（例えば、タモキシフェン）；１５）アンドロゲン（例えば、プロピオン酸テストステロン及びフルオキシメステロン）；１６）抗アンドロゲン（例えば、フルタミド）：ならびに１７）ゴナドトロピン放出ホルモン類似体（例えば、ロイプロリド）が挙げられるがこれらに限定されない。
【００８７】
がん療法の中で通常用いられる任意の腫瘍崩壊剤では、本発明の組成物及び方法における用途が見出される。例えば、米国食品医薬品局は、米国での使用が認可された腫瘍崩壊剤の処方集を保持する。Ｕ．Ｓ．Ｆ．Ｄ．Ａ．と同等の国際的な機関が同様の処方集を保持する。表１は、米国での使用が認可された例示的な抗腫瘍薬のリストを提供する。当業者は、すべての米国認可化学療法に必要な「製品ラベル」には、当該例示的薬剤に関する、承認された適応症、投薬に関する情報、毒性データ等を記載されていることを理解する。
【００８８】
【表３】
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2019206549.tif 000052
【００８９】
抗がん剤はさらに、抗がん活性を有すると特定された化合物を含む。例としては、３−ＡＰ、１２−Ｏ−テトラデカノイルホルボール−１３−アセテート、１７ＡＡＧ、８５２Ａ、ＡＢＩ−００７、ＡＢＲ−２１７６２０、ＡＢＴ−７５１、ＡＤＩ−ＰＥＧ  ２０、ＡＥ−９４１、ＡＧ−０１３７３６、ＡＧＲＯ１００、アラノシン、ＡＭＧ  ７０６、抗体Ｇ２５０、アンチネオプラストン、ＡＰ２３５７３、アパジコン、ＡＰＣ８０１５、アチプリモド、ＡＴＮ−１６１、アトラセンテン（ａｔｒａｓｅｎｔｅｎ）、アザシチジン、ＢＢ−１０９０１、ＢＣＸ−１７７７、ベバシズマブ、ＢＧ００００１、ビカルタミド、ＢＭＳ  ２４７５５０、ボルテゾミブ、ブリオスタチン−１、ブセレリン、カルシトリオール、ＣＣＩ−７７９、ＣＤＢ−２９１４、セフィキシム、セツキシマブ、ＣＧ００７０、シレンジチド、クロファラビン、コンブレタスタチンＡ４ホスフェート、ＣＰ−６７５，２０６、ＣＰ−７２４，７１４、ＣｐＧ  ７９０９、クルクミン、デシタビン、ＤＥＮＳＰＭ、ドキセルカルシフェロール、Ｅ７０７０、Ｅ７３８９、エクチナサイジン７４３、エファプロキシラル、エフロルニチン、ＥＫＢ−５６９、エンザスタウリン、エルロチニブ、エクシスリンド、フェンレチニド、フラボピリドール、フルダラビン、フルタミド、フォテムスチン、ＦＲ９０１２２８、Ｇ１７ＤＴ、ガリキシマブ、ゲフィチニブ、ゲニステイン、グルフォスファミド、ＧＴＩ−２０４０、ヒストレリン、ＨＫＩ−２７２、ホモハリングトニン、ＨＳＰＰＣ−９６、ｈｕ１４．１８−インターロイキン−２融合タンパク質、ＨｕＭａｘ−ＣＤ４、イロプロスト、イミキモド、インフリキシマブ、インターロイキン−１２、ＩＰＩ−５０４、イロフルベン、イクサベピロン、ラパチニブ、レナリドマイド、レスタウルチニブ、ロイプロリド、ＬＭＢ−９免疫毒素、ロナファルニブ、ルニリキシマブ（ｌｕｎｉｌｉｘｉｍａｂ）、マホスファミド、ＭＢ０７１３３、ＭＤＸ−０１０、ＭＬＮ２７０４、モノクローナル抗体３Ｆ８、モノクローナル抗体Ｊ５９１、モテキサフィン、ＭＳ−２７５、ＭＶＡ−ＭＵＣ１−ＩＬ２、ニルタミド、ニトロカンプトテシン、ノラトレキセド二塩酸塩、ノルバデックス、ＮＳ−９、Ｏ６−ベンジルグアニン、オブリメルセンナトリウム、ＯＮＹＸ−０１５、オレゴボマブ、ＯＳＩ−７７４、パニツムマブ、パラプラチン、ＰＤ−０３２５９０１、ペメトレキセド、ＰＨＹ９０６、ピオグリタゾン、ピルフェニドン、ピクサントロン、ＰＳ−３４１、ＰＳＣ  ８３３、ＰＸＤ１０１、ピラゾロアクリジン、Ｒ１１５７７７、ＲＡＤ００１、ランピルナーゼ、レベッカマイシン類似体、ｒｈｕアンジオスタチン（ｒｈｕＡｎｇｉｏｓｔａｔｉｎ）タンパク質、ｒｈｕＭａｂ  ２Ｃ４、ロシグリタゾン、ルビテカン、Ｓ−１、Ｓ−８１８４、サトラプラチン、ＳＢ−、１５９９２、ＳＧＮ−００１０、ＳＧＮ−４０、ソラフェニブ、ＳＲ３１７４７Ａ、ＳＴ１５７１、ＳＵ０１１２４８、スベロイルアニリドヒドロキサム酸、スラミン、タラボスタット、タランパネル、タリキダル、テムシロリムス、ＴＧＦａ−ＰＥ３８免疫毒素、サリドマイド、チマルファシン、チピファルニブ、チラパザミン、ＴＬＫ２８６、トラベクテジン、グルクロン酸トリメトレキサート、ＴｒｏＶａｘ、ＵＣＮ−１、バルプロ酸、ビンフルニン、ＶＮＰ４０１０１Ｍ、ボロシキシマブ、ボリノスタット、ＶＸ−６８０、ＺＤ１８３９、ＺＤ６４７４、ジロイトン、及びゾスキダル三塩酸塩が挙げられるがこれらに限定されない。
【００９０】
抗がん剤及び他の治療薬のより詳細な説明については、当業者は、Ｐｈｙｓｉｃｉａｎ’ｓ  Ｄｅｓｋ  Ｒｅｆｅｒｅｎｃｅ及びＧｏｏｄｍａｎ  ａｎｄ  Ｇｉｌｍａｎ’ｓ  ’’Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｂａｓｉｓ  ｏｆ  Ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃｓ’’ｔｅｎｔｈ  ｅｄｉｔｉｏｎ，Ｅｄｓ．Ｈａｒｄｍａｎ  ｅｔ  ａｌ．，２００２が挙げられるがこれらに限定されない様々な指示マニュアルを参照のこと。
【００９１】
本発明は、本発明の化合物を放射線療法とともに投与するための方法を提供する。本発明は、動物へ治療量の放射線を送達するために使用されるタイプ、量、または送達及び投与システムによって限定されない。例えば、該動物は、光子放射線療法、粒子線照射療法、他のタイプの放射線療法、及びそれらの組合せを受ける場合がある。いくつかの実施形態では、該放射線は、線形加速器を用いて該動物へ送達される。さらに他の実施形態では、該放射線は、ガンマナイフを用いて送達される。
【００９２】
放射線源は動物に対して外部のものでも内部のものでもよい。外部放射線療法が最も一般的であり、高エネルギー放射線ビームを、例えば、線形加速器を用いて皮膚を介して腫瘍部位に導くことを含む。該放射線ビームは該腫瘍部位に限局されるものの、正常な健常組織の被ばくを避けることは不可能に近い。しかしながら、外部放射線は通常、動物には良好な忍容性を示す。内部放射線療法は、放射線放出源、例えば、ビーズ、ワイヤ、ペレット、カプセル、粒子等を体内の当該腫瘍部位やその付近に埋め込むことを含み、これには、がん細胞を特異的に標的とする送達システムを用いること（例えば、がん細胞結合性リガンドに結合した粒子を用いること）が含まれる。かかる埋没物は、治療後に除去してもよく、または体内に不活性のまま残してもよい。内部放射線療法のタイプとしては、小線源療法、組織内照射、腔内照射、放射免疫療法等が挙げられるがこれらに限定されない。
【００９３】
該動物は任意に放射線増感剤（例えば、メトロニダゾール、ミソニダゾール、動脈内Ｂｕｄｒ、静脈内ヨードデオキシウリジン（ＩｕｄＲ）、ニトロイミダゾール、５−置換−４−ニトロイミダゾール、２Ｈ−イソインドールジオン、［［（２−ブロモエチル）アミノ］メチル］ニトロ−１Ｈ−イミダゾール−１−エタノール、ニトロアニリン誘導体、ＤＮＡ親和性低酸素選択的細胞毒、ハロゲン化ＤＮＡリガンド、１，２，４−ベンゾトリアジンオキシド、２−ニトロイミダゾール誘導体、含フッ素ニトロアゾール誘導体、ベンズアミド、ニコチンアミド、アクリジンインターカレーター、５−チオトレトラゾール（５−ｔｈｉｏｔｒｅｔｒａｚｏｌｅ）誘導体、３−ニトロ−１，２，４−トリアゾール、４，５−ジニトロイミダゾール誘導体、ヒドロキシル化テキサフィリン（ｈｙｄｒｏｘｙｌａｔｅｄ  ｔｅｘａｐｈｒｉｎ）、シスプラチン、マイトマイシン、チリパザミン（ｔｉｒｉｐａｚａｍｉｎｅ）、ニトロソウレア、メルカプトプリン、メトトレキサート、フルオロウラシル、ブレオマイシン、ビンクリスチン、カルボプラチン、エピルビシン、ドキソルビシン、シクロホスファミド、ビンデシン、エトポシド、パクリタキセル、熱（温熱療法）等）、放射線防護剤（例えば、システアミン、アミノアルキルジハイドロジェンホスホロチオエート、アミホスチン（ＷＲ  ２７２１）、ＩＬ−１、ＩＬ−６等）を受けてもよい。放射線増感剤は、腫瘍細胞の破壊を増強する。放射線防護剤は、放射線の有害な影響から健常組織を防護する。
【００９４】
放射線量が当該動物によって許容できない負の副作用なく許容される限り、任意のタイプの放射線を該動物に投与することができる。適切な放射線療法のタイプとしては、例えば、電離（電磁）放射線療法（例えば、Ｘ線もしくはガンマ線）または粒子線照射療法（例えば、高線形エネルギー放射線）が挙げられる。電離放射線は、イオン化をもたらす、すなわち、電子を獲得または喪失するために十分なエネルギーを有する粒子または光子を含む放射線と定義される（例えば、参照よってその全体が本明細書中に組み込まれるＵ．Ｓ．５，７７０，５８１に記載されている）。放射線の影響は、少なくとも部分的に、当該臨床医によって制御され得る。１つの実施形態では、放射線量は、最大標的細胞の曝露及び毒性の低減のために分割される。
【００９５】
１つの実施形態において、動物に投与される総放射線量は、約．０１Ｇｒａｙ（Ｇｙ）〜約１００Ｇｙである。別の実施形態では、約１０Ｇｙ〜約６５Ｇｙ（例えば、約１５Ｇｙ、２０Ｇｙ、２５Ｇｙ、３０Ｇｙ、３５Ｇｙ、４０Ｇｙ、４５Ｇｙ、５０Ｇｙ、５５Ｇｙ、または６０Ｇｙ）が治療期間中に投与される。いくつかの実施形態では、全放射線量を１日のうちに投与することができるものの、該全線量は理想的には分割され、数日にわたって投与される。望ましくは、放射線療法は少なくとも約３日間、例えば少なくとも５、７、１０、１４、１７、２１、２５、２８、３２、３５、３８、４２、４６、５２、または５６日間（約１〜８週間）にわたって投与される。したがって、１日の放射線量は、およそ１〜５Ｇｙ（例えば、約１Ｇｙ、１．５Ｇｙ、１．８Ｇｙ、２Ｇｙ、２．５Ｇｙ、２．８Ｇｙ、３Ｇｙ、３．２Ｇｙ、３．５Ｇｙ、３．８Ｇｙ、４Ｇｙ、４．２Ｇｙ、もしくは４．５Ｇｙ）、または１〜２Ｇｙ（例えば、１．５〜２Ｇｙ）からなる。該１日の放射線量は、当該標的細胞の破壊を誘導するのに十分なものとなるべきである。一定期間延長される場合、１つの実施形態では、放射線を毎日は投与せず、それによって当該動物を休息させかつ該療法の効果を実現させる。例えば、毎週の治療では、放射線を望ましくは５日間連続で投与し、２日間は投与せず、それにより、１週間に２日の休みを設ける。しかしながら、放射線は、当該動物の反応性及び任意の潜在的副作用に応じて、１日／週、２日／週、３日／週、４日／週、５日／週、６日／週、または全７日／週投与することができる。放射線療法は、治療期間の任意の時点で開始することができる。１つの実施形態では、放射線は１週目または２週目に開始し、当該治療期間の残りの期間投与される。例えば、放射線は、例えば、６週間の固形腫瘍治療を含む治療期間の第１〜６週目または２〜６週目に投与される。代替として、放射線は、５週間からなる治療期間の１〜５週目または２〜５週目に投与される。しかし、これらの例示的な放射線療法の投与スケジュールは、本発明を限定することを意図しない。
【００９６】
抗菌治療薬もまた、本発明における治療薬として使用され得る。微生物を殺傷し、阻害し、さもなければその機能を減衰させることができる任意の薬剤、ならびにかかる活性を有することが企図される任意の薬剤が使用され得る。抗菌剤としては、単独または組み合わせて用いられる、天然及び合成抗生物質、抗体、阻害タンパク質（例えば、ディフェンシン）、アンチセンス核酸、膜破壊剤等が挙げられるが、これらに限定されない。実際、抗細菌剤、抗ウイルス剤、抗真菌剤等が挙げられるがこれらに限定されない任意のタイプの抗生物質が使用され得る。
【００９７】
本発明のいくつかの実施形態において、本発明の化合物及び１つ以上の治療薬または抗がん剤は、以下の条件、すなわち、種々の周期性、種々の継続期間、種々の濃度、種々の投与経路等の１つ以上の下で動物に投与される。いくつかの実施形態では、該化合物は、該治療薬または抗がん剤の前に、例えば、該治療薬または抗がん剤の投与の０．５、１、２、３、４、５、１０、１２、もしくは１８時間、１、２、３、４、５、もしくは６日、または１、２、３、もしくは４週間前に投与される。いくつかの実施形態では、該化合物は、該治療薬または抗がん剤の後に、例えば、該抗がん剤の投与の０．５、１、２、３、４、５、１０、１２、もしくは１８時間、１、２、３、４、５、もしくは６日、または１、２、３、もしくは４週間後に投与される。いくつかの実施形態では、該化合物及び該治療薬または抗がん剤は、同時にではあるが、異なるスケジュールで投与され、例えば、該化合物を毎日投与する一方、該治療薬または抗がん剤は１週間に１回、２週間に１回、３週間に１回、または４週間に１回投与される。他の実施形態では、該化合物を週１回投与する一方、該治療薬または抗がん剤は毎日、１週間に１回、２週間に１回、３週間に１回、または４週間に１回投与される。
【００９８】
本発明の範囲内の組成物は、本発明の化合物が、その意図される目的を達成するのに有効な量で含まれるすべての組成物を含む。個々の要求は異なるが、各成分の有効量の最適範囲の決定は、当該分野の技術の範囲内のものである。通常、該化合物は、哺乳類、例えばヒトに、アポトーシスの誘導に反応する疾患が治療される該哺乳類の体重当たり１日につき０．００２５〜５０ｍｇ／ｋｇの用量で経口投与され得るか、または同等の用量のその医薬的に許容される塩が経口投与され得る。１つの実施形態では、約０．０１〜約２５ｍｇ／ｋｇが経口投与され、かかる疾患を治療、改善、または予防する。筋肉内注射については、該用量は一般に該経口用量の約半分である。例えば、適切な筋肉内用量は、約０．００２５〜約２５ｍｇ／ｋｇ、または約０．０１〜約５ｍｇ／ｋｇとなる。
【００９９】
単位経口用量は、約０．０１〜約１０００ｍｇ、例えば、約０．１〜約１００ｍｇの該化合物を含み得る。該単位用量は、各々が約０．１〜約１０ｍｇ、便宜上約０．２５〜５０ｍｇの該化合物またはその溶媒和物を含む１つ以上の錠剤またはカプセル剤として、１日に１回以上投与され得る。
【０１００】
局所製剤には、該化合物は、担体１グラムあたり約０．０１〜１００ｍｇの濃度で存在し得る。１つの実施形態では、該化合物は、約０．０７〜約１．０ｍｇ／ｍｌ、例えば、約０．１〜０．５ｍｇ／ｍｌ、及び、１つの実施形態では、約０．４ｍｇ／ｍｌの濃度で存在する。
【０１０１】
該化合物を未加工の化学物質として投与することに加えて、本発明の化合物は、医薬的に使用することができる製剤への該化合物の加工を容易にする賦形剤及び補助剤を含む、医薬的に許容される適切な担体を含む医薬品の一部として投与され得る。該製剤、特に経口的もしくは局所的に投与することができ、かつ、投与の１つのタイプ、例えば、錠剤、糖衣錠、徐放性ロゼンジ剤及びカプセル剤、マウスリンス及びマウスウォッシュ、ゲル、懸濁液、ヘアリンス、毛髪用ゲル、シャンプーに使用することができる製剤、また、坐剤等の直腸投与することができる製剤、ならびに静脈内注入、注射、局所、もしくは経口投与に適する溶液は、約０．０１〜９９パーセント、１つの実施形態では、約０．２５〜７５パーセントの活性化合物（複数可）を、該賦形剤とともに含む。
【０１０２】
本発明の医薬組成物は、本発明の化合物の有益な効果が認められ得る任意の患者に投与され得る。かかる患者のうちで最初に挙げられるのは、哺乳類、例えばヒトであるが、本発明はそのように限定されることを意図しない。他の患者としては、獣医学的動物（ウシ、ヒツジ、ブタ、ウマ、イヌ、ネコ等）が挙げられる。
【０１０３】
該化合物及びその医薬組成物は、それらの意図する目的を達成する任意の手段で投与され得る。例えば、投与は、非経口、皮下、静脈内、筋肉内、腹腔内、経皮、口腔内、髄腔内、頭蓋内、鼻腔内、または局所経路によるものでよい。代替として、または同時に、投与は経口経路によるものであってもよい。投与される用量は、当該レシピエントの年齢、健康状態、及び体重、（ある場合は）併用療法の種類、治療の頻度、ならびに所望の効果の性質により決定される。
【０１０４】
本発明の医薬品は、既知である方法、例えば、従来の混合、造粒、糖衣錠製造、溶解、または凍結乾燥の過程によって製造される。したがって、経口使用用の医薬品は、該活性化合物を固体賦形剤と混合し、任意に得られた混合物を粉砕して該顆粒混合物を加工し、所望または必要に応じて適切な補助剤の添加後、錠剤や糖衣錠のコアを得ることによって得ることができる。
【０１０５】
適切な賦形剤は、特に、糖類等の充填剤、例えば、ラクトースもしくはスクロース、マンニトールもしくはソルビトール、セルロース調製物及び／またはリン酸カルシウム、例えば、リン酸三カルシウムもしくはリン酸水素カルシウム、ならびに結合剤、例えば、デンプンペースト、例えば、トウモロコシデンプン、小麦デンプン、米デンプン、ジャガイモデンプンを使用するもの、ゼラチン、トラガカント、メチルセルロース、ヒドロキシプロピルメチルセルロース、カルボキシメチルセルロースナトリウム、及び／またはポリビニルピロリドンである。所望の場合、崩壊剤、例えば、上述のデンプンならびにカルボキシメチルデンプン、架橋ポリビニルピロリドン、寒天、またはアルギン酸もしくはその塩、例えばアルギン酸ナトリウムが添加されてもよい。補助剤は、特に、流動調節剤及び滑沢剤、例えば、シリカ、タルク、ステアリン酸もしくはその塩、例えばステアリン酸マグネシウムもしくはステアリン酸カルシウム、及び／またはポリエチレングリコールである。糖衣錠のコアは、所望の場合、耐胃液性の適切なコーティングが施される。このために、濃縮糖溶液を用いてもよく、これは任意にアラビアゴム、タルク、ポリビニルピロリドン、ポリエチレングリコール及び／または二酸化チタン、ラッカー溶液ならびに適切な有機溶媒または溶媒混合物を含んでよい。耐胃液性コーティングを製造するため、アセチルセルロースフタレートまたはヒドロキシプロピルメチルセルロースフタレート等の適切なセルロース調製物溶液が使用される。染料または顔料を、例えば、活性化合物用量の組合せを識別するまたは特徴付けるために、該錠剤または糖衣錠のコーティングに添加してもよい。
【０１０６】
経口的に使用することができる他の医薬品としては、ゼラチン製の押し込み型カプセル剤、ならびにゼラチン及びグリセロールまたはソルビトール等の可塑剤からなる密封軟カプセル剤が挙げられる。該押し込み型カプセル剤は、該活性化合物を、ラクトース等の充填剤、デンプン等の結合剤、及び／またはタルクもしくはステアリン酸マグネシウム等の滑沢剤、また任意に安定剤と混合され得る顆粒状で含むことができる。軟カプセル剤の該活性化合物は、１つの実施形態において、適切な液体、例えば、脂肪油、または流動パラフィンに溶解または懸濁される。さらに、安定剤を添加してもよい。
【０１０７】
直腸に使用することができる想定される医薬品としては、例えば、坐薬が挙げられ、これは該活性化合物の１つ以上と坐剤の基剤との組合せからなる。適切な坐剤の基剤は、例えば、天然もしくは合成トリグリセリド、またはパラフィン炭化水素である。さらに、該活性化合物と基剤との組合せからなるゼラチン直腸カプセル剤の使用も可能である。想定される基剤材料としては、例えば、液体トリグリセリド、ポリエチレングリコール、またはパラフィン炭化水素が挙げられる。
【０１０８】
非経口投与に適する製剤としては、水溶性形態の該活性化合物の水溶液、例えば、水溶性塩及びアルカリ性溶液が挙げられる。さらに、適切な油状注射懸濁液としての該活性化合物の懸濁液を投与してもよい。適切な親油性溶媒または媒体としては、脂肪油、例えば、ゴマ油、または合成脂肪酸エステル、例えば、オレイン酸エチルもしくはトリグリセリドまたはポリエチレングリコール−４００が挙げられる。水性注射懸濁液は、例えば、カルボキシメチルセルロースナトリウム、ソルビトール、及び／またはデキストラン等、該懸濁液の粘度を増加させる物質を含んでもよい。任意に、該懸濁剤はまた安定剤を含有してよい。
【０１０９】
本発明の局所用組成物は、１つの実施形態において、適切な担体の選択によって、油、クリーム、ローション、軟膏等として処方される。適切な担体としては、植物油または鉱油、白色ワセリン（白色軟パラフィン）、分岐鎖脂肪または油、動物性脂肪、及び高分子量アルコール（Ｃ１２超）が挙げられる。該担体は、該活性成分が可溶であるものでよい。所望される場合、乳化剤、安定剤、湿潤剤、及び抗酸化剤、ならびに色または香りを与える薬剤もまた含まれ得る。さらに、経皮浸透促進剤をこれらの局所用組成物に使用することができる。かかる促進剤の例は、各々参照により全体が本明細書に組み込まれる米国特許第３，９８９，８１６号及び同第４，４４４，７６２号に見出すことができる。
【０１１０】
軟膏は該活性成分のアーモンド油等の植物油溶液を温軟パラフィンと混合し、該混合物を冷却することによって製剤化され得る。かかる軟膏の典型的な例は、アーモンド油約３０重量％と白色軟パラフィン約７０重量％を含むものである。ローションは便宜上、該活性成分をプロピレングリコールまたはポリエチレングリコール等の適切な高分子量アルコールに溶解することによって調製され得る。
【０１１１】
当業者であれば、上記が単に本発明の特定の好ましい実施形態の詳細な説明を表すものであることを容易に理解する。上記の組成物及び方法の様々な修正及び変更は、当技術分野で利用可能な専門知識を使用して容易に達成することができ、本発明の範囲内のものである。
【０１１２】
［実施例］
以下の実施例は、本発明の化合物、組成物、及び方法を例示するものであって、限定するものではない。臨床治療において通常みられ、かつ当業者には明らかである様々な条件及びパラメータの他の適切な修正及び適応は、本発明の趣旨及び範囲内のものである。
【０１１３】
実施例１．
化合物のデータベースから収集したｘ線結晶構造及び構造活性相関を活用し、すべての精選された文献のＥＧＦＲ阻害剤（図１Ａ〜Ｃ）及びＰＩ３Ｋ阻害剤（図２Ａ〜Ｅ）の編集されたデータベースを作成した。
【０１１４】
次に、各標的に対する「活性コア」を別々に生成し、かかるコアは両方のキナーゼに対する高活性と比較した。かかるコアを、選択性について照合した。３つの「選択的」コアを特定した。該活性かつ選択的コアのＸ線結晶構造を、結合様式について分析した。
【０１１５】
図３は、ラパチニブ（ＰＤＢコード：１ＸＫＫ）及びＨＫＩ−２７２（ＰＤＢコード：３Ｗ２Ｑ）に対するＥＧＦＲ（プロテインキナーゼのＡＴＰ競合部位）のＸ線結晶キノロン結合様式を示す。ラパチニブについては、キノリン窒素がヒンジ骨格のＭＥＴ７９３と水素結合を形成する。キナゾリン環系の６位は、溶媒に向かって外に出ており、これはキノリンのＰＩ３Ｋ結合様式に対して反転される。ＨＫＩ−２７２（３−ニトリルを備えたキノリン）については、キナゾリンコアと同様の結合様式が保持されるが、ＰＩ３Ｋ結合様式と比較した場合は反転される。これら２つの系の間のＳＡＲは、収束性であると予測される。
【０１１６】
図４Ａは、ＧＳＫ２１２６４５８（ＰＤＢコード：３Ｌ０８）のＥＧＦＲとＰＩ３ＫとのＸ線結晶結合様式、ＰＦ−０４９７９０６４（ＰＤＢコード：４ＨＶＢ）とＰＩ３ＫとのＸ線結晶結合様式、及びラパチニブとＥＧＦＲとのＸ線結晶結合様式を示す。図示のように、ＰＩ３Ｋに結合するＧＳＫ２１２６４５８（３Ｌ０８）のＸ線結晶構造のキノリン窒素は、ヒンジ骨格のバリンと水素結合を形成する。６位から離れたピリジルは、ＰＩ３Ｋの特異性ポケット内に位置する。スルホンアミドはＬＹＳ８３３と相互作用し、芳香族基はリン酸結合ポケット内に位置する。
【０１１７】
図４Ｂは、ＰＩ３ＫでのＢＥＺ２３５の結合様式を示す。ＰＩ３Ｋ内で結合するＢＥＺ２３５のモデルのキノリン窒素は、ヒンジ骨格バリンと水素結合を形成する。６位から離れた第二のキノリンは、ＰＩ３Ｋの特異性ポケット内に位置する。ニトリルはＬＹＳ８３３と相互作用し、芳香族基はリボース結合ポケットとリン酸結合ポケット間の架橋である。
【０１１８】
図４Ｃは、ラパチニブ及びＧＳＫ２１２６４５８（ＰＤＢコード：３Ｌ０８）に対するキノリンの脂質対プロテインキナーゼ結合様式の比較を示す。図示のように、キノリン（キナゾリン）コアの結合様式はＥＧＦＲに対するＰＩ３Ｋで反転する。
【０１１９】
かかる結合情報に基づいて、ＰＩ３Ｋ及びＥＧＦＲに対する二重効力のために新たな化合物を合成した。共通のコア（例えば、
【０１２０】
【化１３】
2019206549.tif 000053
【０１２１】
（ＢＥＺ２３５））（例えば、
【０１２２】
【化１４】
2019206549.tif 000054
【０１２３】
（エルロチニブ））（例えば、
【０１２４】
【化１５】
2019206549.tif 000055
【０１２５】
（ペリチニブ））を選択し、リガンドをＥＧＦＲ及びＰＩＫ３ＣＡに対する効力に対して設計した。これらの分子のそれぞれのコア部分は、ＰＩＫ３ＣＡまたはＥＧＦＲに対する活性を有する共通コア構造の構造モチーフを示す。これらの共通コアは、ＥＧＦＲ及びＰＩ３Ｋの両方に対する潜在的活性を備えた新たな分子の設計の基礎としての役割を果たした。かかるコアは、既知の結合様式の分子とともに、それらのＥＧＦＲ及びＰＩ３Ｋのそれぞれの活性部位で活用し、その結果、両方に対する活性を備えた新規なリガンドが設計された（図４Ｃ参照）。
【０１２６】
多数のヒットはＥＧＦＲ及びＰＩＫ３ＣＡに対するナノモル効力で示された。予想外に、該分子を多種多様なチロシン、セリン／スレオニン及び脂質キナーゼを含む３９キナーゼの広範なパネルに対してプロファイリングした場合、ＥＲＢＢ（ＥＲＢＢ１、ＥＲＢＢ２、及びＥＲＢＢ４）ならびにＰＩ３Ｋ（ＰＩＫ３アルファ、Ｐ１１０ガンマ、Ｐ１１０デルタ、ＭＴＯＲ、及びＤＮＡ−ＰＫ）ファミリーのみが一様に１０μＭで＞５０％阻害された。ＭＯＬ−１６２に対する代表的なデータは、精製ＥＧＦＲ及びＰＩＫ３ＣＡの強力な二重阻害が、両径路の細胞調節及びＫＲＡＳ変異ＨＣＴ−１１６細胞に対する細胞毒性を伴うことを示した。構造活性相関が、これら生化学的標的の両方に対するこれらの薬剤について示された。さらに、選択性は、他のＨＥＲファミリーメンバー及びＭＴＯＲに対して示された。ＰＩ３Ｋファミリーメンバーに対するかかる結果に基づいて、かかる化合物はＰＩＫ３ＣＡを越えてＰＩ３Ｋの他のイソ型に対して等しく効力があり、それ故、結腸直腸がんを越えて治療的有用性が広がることが予測される。
【０１２７】
ＭＯＬ−１５３のクリーンなキナーゼプロファイルによって、皮下ＨＣＴ−１１６腫瘍に対するインビボ薬力学的活性についてこの化合物が評価された。この化合物１００ｍｇ／ｋｇの腹腔内投与でｐＡＫＴの阻害が生じたが、恐らくはＥＧＦＲ（３４９ｎＭ）に対する効力が不十分であるため、ｐＥＧＦＲの阻害は検出されなかった。両主要標的に対する改善された二重効力を有し、かつ経口活性も示すことになる近縁類似体を次に合成した。ＭＯＬ−１５３より溶解性が顕著に高いＭＯＬ−１６２は、これらの取り組みから生じた。図５Ａに示すように、ＥＧＦＲのリン酸化は、ＭＯＬ−１６２の単回経口投与後２時間で、ＨＣＴ−１１６腫瘍において完全に抑制されることが分かった（１００ｍｇ／ｋｇ）。ＡＫＴのリン酸化は、それほど強くは阻害されなかった。しかしながら、毎日の１回及び反復投与後に、両標的の標的化阻害の最大次数を測定するための完全な薬力学的経時試験を行うため、ＭＯＬ−１６２の追加合成が必要である。
【０１２８】
図５Ｂは、ＭＯＬ−１６０、ＭＯＬ−１６１、ＭＯＬ−１６２、及びＭＯＬ−１６３に対する細胞増殖の測定値を示す。細胞増殖は、Ｃｅｌｌ  Ｔｉｔｅｒ  Ｇｌｏアッセイ（Ｐｒｏｍｅｇａ，Ｍａｄｉｓｏｎ，ＷＩ）を用いて測定した。細胞株を９６ウェルプレートに１ウェル当たり２，０００〜５，０００細胞の密度で播種した。播種の２４時間後、細胞に異なる濃度の薬物を単剤または組合せのいずれかで投与した。Ｃｅｌｌ  Ｔｉｔｅｒ  Ｇｌｏの信号は、投与の７２または９６時間後に測定した。
【０１２９】
図５Ｃは、様々な化合物に対するＨＣＴ−１１６細胞の生存率を示す。
【０１３０】
図５Ｄは、２時間処理した後ＨＣＴ−１１６細胞でのｐＡＫＴ及びｐＥＧＦＲに対するＭＯＬ−１６２の影響を示す。
【０１３１】
図６は、ＥＧＦＲ及びＰＩＫ３ＣＡに対する様々な化合物のＩＣ５０を示す。様々な化合物は、それらのＥＧＦＲ及びＰＩＫ３ＣＡを阻害する能力について試験した。阻害を測定するアッセイは、実施例２のアッセイ−Ｚ´−ＬＹＴＥ（登録商標）及びＡＤＡＰＴＡに記載されている。
【０１３２】
図７は、１０μＭの化合物について、ＮＣＩ−６０比較パネルに対する選択された化合物の成長％を示す。二重ＥＧＦＲ及びＰＩＫ３ＣＡ阻害剤は、ＮＣＩ−６０細胞パネルの腫瘍成長をインビトロで抑制した。ＭＯＬ−２０１は、このパネル内で広範な細胞死（１０ｕＭで負の成長）を示した。本方法は、実施例２−ＮＣＩ比較パネルに概説されている。
【０１３３】
図８Ａ、８Ｂ、８Ｃ、８Ｄ、及び８Ｅは、ＨＣＴ−１１６、Ａ４３１、ＣＯＬ−２０５、ＳＫ−ＭＥＬ５、及びＭＤＡ−ＭＢ−４６８異種移植片に対するＭＯＬ−２０１のインビボ効力を示す。２０及び１００ｍｇ／ｋｇで１０日間毎日処理されたマウスは、毒性が臨床的に観察されず、ＭＯＬ−２０１に対する忍容性が良好であった。Ｔ／Ｃ及びＴ−Ｃ値で示されるように、ＨＣＴ−１１６、Ａ４３１、ＳＫ−ＭＥＬ５、及びＣＯＬ−２０５異種移植片では、より高用量で抗腫瘍活性が認められた。ＭＯＬ−２０１は、２０ｍｇ／ｋｇの低用量で抗腫瘍活性を誘発した。本方法は、実施例２−異種移植片試験に概説されている。
【０１３４】
実施例２．
実施例１の材料及び方法を説明する。
【０１３５】
アッセイ：Ｚ´−ＬＹＴＥ（登録商標）生化学アッセイは、蛍光ベースの共役酵素型を採用し、リン酸化及び非リン酸化ペプチドのタンパク質分解的切断に対する感受性差に基づいている（図６）。このペプチド基質は、ＦＲＥＴ対を構成する、各端に１つある２つのフルオロフォアで標識される。第一の反応で、キナーゼはＡＴＰのガンマ−リン酸を、合成ＦＲＥＴ−ペプチドの単一のチロシン、セリン、またはスレオニン残基に転移させる。第二の反応で、部位特異的プロテアーゼが非リン酸化ＦＲＥＴ−ペプチドを認識して切断する。ＦＲＥＴ−ペプチドのリン酸化によりこの開発試薬による切断が抑制される。切断により、ＦＲＥＴ−ペプチド上の供与体（すなわち、クマリン）と受容体（すなわち、フルオレセイン）フルオロフォアとの間でＦＲＥＴが分断される一方、未切断のリン酸化ＦＲＥＴ−ペプチドはＦＲＥＴを維持する。４００ｎｍで供与体フルオロフォアを励起後の受容体発光に対する供与体発光の比（発光比）を計算するレシオメトリック法を用いて、反応の進行を定量化する。
【０１３６】
反応の進行を定量化するこのレシオメトリック法の重要な利点は、ＦＲＥＴ−ペプチド濃度及び信号強度のウェル間の変動の排除である。結果としてこのアッセイにより極めて高いＺ´−ファクター値（＞０．７）が低リン酸化パーセントで得られる。
【０１３７】
切断及び未切断のＦＲＥＴ−ペプチドはともにこの蛍光信号ひいては発光比に寄与する。ＦＲＥＴ−ペプチドのリン酸化の程度は、発光比から計算できる。発光比は、ＦＲＥＴ−ペプチドがリン酸化される（すなわち、キナーゼ阻害がない）場合は低いままであり、ＦＲＥＴ−ペプチドがリン酸化されない（すなわち、キナーゼ阻害）場合は高くなる。
【０１３８】
酵素：ＡＤＡＰＴＡユニバーサルキナーゼアッセイは、ＡＤＰ検出用の均質な蛍光ベースのイムノアッセイである。ＡＴＰ枯渇アッセイとは対照的に、ＡＤＡＰＴＡアッセイは、ＡＤＰ生成に極めて感受性があり、このため、信号変化の大部分がＡＴＰからＡＤＰへの最初の１０〜２０％の変換で生じる。これは、ＡＤＡＰＴＡユニバーサルキナーゼアッセイを低活性のキナーゼでの使用に理想的に適したものにする。
【０１３９】
ＡＤＡＰＴＡユニバーサルキナーゼアッセイの原理を以下に概説する。このアッセイはそれ自体２段階、すなわちキナーゼ反応段階及びＡＤＰ検出段階に分けることができる。キナーゼ反応段階では、キナーゼ反応に必要なすべての成分をウェルに添加し、この反応物を６０分間インキュベートする。反応後、ユーロピウム標識抗ＡＤＰ抗体、Ａｌｅｘａ
Ｆｌｕｏｒ（登録商標）６４７標識ＡＤＰトレーサ、及びＥＤＴＡ（キナーゼ反応停止用）からなる検出液をアッセイウェルに添加する。キナーゼ反応（阻害剤の非存在下）によって生じるＡＤＰは、抗体からＡｌｅｘａ  Ｆｌｕｏｒ（登録商標）６４７標識ＡＤＰトレーサを外し、その結果ＴＲ−ＦＲＥＴ信号が低下する。阻害剤の存在下では、キナーゼ反応によって生じるＡＤＰ量は減少し、得られる無傷の抗体−トレーサ相互作用が高いＴＲ−ＦＲＥＴ信号をもたらす。
【０１４０】
Ｚ´−ＬＹＴＥ（登録商標）アッセイ条件：
試験化合物 試験化合物は、ウェル内の１％ＤＭＳＯ（最終）中でスクリーニングする。１０点滴定については、顧客が選択する開始濃度から３倍連続希釈を行う。
【０１４１】
ペプチド／キナーゼ混合物  すべてのペプチド／キナーゼ混合物は、適切なキナーゼ緩衝液で２倍の作用濃度に希釈する。
【０１４２】
ＡＴＰ溶液  すべてのＡＴＰ溶液は、キナーゼ緩衝液（５０ｍＭ  ＨＥＰＥＳ  ｐＨ  ７．５、０．０１％  ＢＲＩＪ−３５、１０ｍＭ  ＭｇＣｌ２、１ｍＭ  ＥＧＴＡ）で４倍の作用濃度に希釈する。ＡＴＰの見かけのＫｍは、Ｚ´−ＬＹＴＥ（登録商標）アッセイを用いてあらかじめ測定される。
【０１４３】
開発試薬溶液  開発試薬は開発緩衝液で希釈する。
【０１４４】
１０Ｘ新規ＰＫＣ脂質混合物：２ｍｇ／ｍｌホスファチジルセリン、０．２ｍｇ／ｍｌ
ＤＡＧの２０ｍＭ  ＨＥＰＥＳ、ｐＨ７．４溶液、０．３％ＣＨＡＰＳ。５ｍＬの１０Ｘ新規ＰＫＣ脂質混合物用：１．ホスファチジルセリン（Ａｖａｎｔｉ  Ｐｏｌａｒ  Ｌｉｐｉｄｓ  Ｐａｒｔ＃  ８４０００３２Ｃまたは８４００３９Ｃ）１０ｍｇ及びＤＡＧ（Ａｖａｎｔｉ  Ｐｏｌａｒ  Ｌｉｐｉｄｓ  Ｐａｒｔ＃  ８００８１１Ｃ）１ｍｇをガラス管に添加する。２．窒素流下、透明な薄膜に蒸着することによって脂質混合物からクロロホルムを除去する。脂質溶液の最大表面積を確保する角度で管を連続回転させることにより、最も薄い膜が形成されるよう促進されることになる。３．  ５ｍＬの再懸濁用緩衝液、すなわち２０ｍＭ  ＨＥＰＥＳ、０．３％ＣＨＡＰＳ、ｐＨ７．４をこの乾燥脂質混合物に添加する。４．  ５０〜６０℃まで１〜２分間緩徐に加熱し、脂質が溶解して透明またはわずかに濁った溶液になるまで短い間隔でボルテックスする。脂質は通常２〜３サイクルの加熱／ボルテックス後に溶解する。５．室温まで冷却し、単回使用体積に等分し、−２０℃で保存する。
【０１４５】
アッセイプロトコル：バーコード化コーニング、低容量ＮＢＳ、黒色３８４ウェルプレート（コーニングカタログ番号４５１４）１．  ２．５μＬ−４Ｘ試験化合物または１００ｎＬ  １００Ｘプラス２．４μＬキナーゼ緩衝液。２．  ５μＬ−２Ｘペプチド／キナーゼ混合物。３．  ２．５μＬ−４Ｘ  ＡＴＰ溶液。４．  ３０秒間プレート振とう。５．室温で６０分間のキナーゼ反応インキュベーション。６．  ５μＬ−開発試薬溶液。７．  ３０秒間プレート振とう。８．室温で６０分間開発反応インキュベーション。９．蛍光プレートリーダーでの読み取り及びデータの分析。
【０１４６】
ＡＤＰ生成は、アッセイウェルからの発光比を計算することで測定される。発光比は、下記式で示すように、６１５ｎｍでのＥｕ（供与体）の発光強度でトレーサ（受容体）の発光強度を除算することで計算される。
【０１４７】
ＡＤＡＰＴＡ技術は、ＡＤＰ生成（すなわち、ＡＴＰのＡＤＰへの変換）を測定するため、キナーゼの内因性ＡＴＰアーゼ活性を含む任意のタイプのＡＴＰ加水分解の測定に使用することができる。この場合、基質は水であり、脂質またはペプチドではない。ＳｅｌｅｃｔＳｃｒｅｅｎ（登録商標）サービスは、ＣＨＵＫをこの方法でスクリーニングするため、このキナーゼ反応には基質は含まれない。内因性ＡＴＰアーゼ活性を用いてキナーゼ阻害剤をスクリーニングするための参照を以下に示す。
【０１４８】
Ａｄａｐｔａ（登録商標）アッセイ条件
試験化合物：試験化合物は、ウェル内の１％ＤＭＳＯ（最終）中でスクリーニングする。１０点滴定については、顧客が選択する開始濃度から３倍連続希釈を行う。
【０１４９】
基質／キナーゼ混合物：すべての基質／キナーゼ混合物は、適切なキナーゼ緩衝液で２倍の作用濃度に希釈する（完全な説明については、キナーゼ特異的アッセイ条件の節を参照のこと）。
【０１５０】
ＡＴＰ溶液 すべてのＡＴＰ溶液は、水で４倍の作用濃度に希釈する。ＡＴＰの見かけのＫｍは、基質が利用できずＡｄａｐｔａ（登録商標）アッセイが行われる場合を除いて、放射測定アッセイを用いてあらかじめ測定される。
【０１５１】
検出混合物：検出混合物はＴＲ−ＦＲＥＴ希釈緩衝液中で調製する。この検出混合物は、ＥＤＴＡ（３０ｍＭ）、Ｅｕ−抗ＡＤＰ抗体（６ｎＭ）、及びＡＤＰトレーサからなる。この検出混合物は、５〜１５０μＭのＡＴＰに対してＥＣ６０濃度のトレーサを含む。
【０１５２】
アッセイプロトコル：バーコード化コーニング、低容量、白色３８４ウェルプレート（コーニングカタログ番号４５１２）１．  ２．５μＬ−４Ｘ試験化合物の３０ｍＭ  ＨＥＰＥＳ溶液または１００ｎＬ  １００Ｘの１００％ＤＭＳＯ溶液プラス２．４μＬの３０ｍＭ  ＨＥＰＥＳ．２．  ２．５μＬ−４Ｘ  ＡＴＰ溶液。３．  ５μＬ−２Ｘ基質／キナーゼ混合物。４．  ３０秒間プレート振とう。５．  １０００×ｇで１分間遠心分離。６．室温で６０分間のキナーゼ反応インキュベーション。７．  ５μＬ−検出混合物。８．  ３０秒間プレート振とう。９．  １０００×ｇで１分間遠心分離。１０．室温で６０分間検出混合物の平衡化。１１．蛍光プレートリーダーでの読み取り及びデータの分析。
【０１５３】
タンパク質溶解物の調製及びウェスタンブロッティング［５０ｍｍｏｌ／Ｌ  Ｔｒｉｓ−ＨＣｌ（ｐＨ８．０）、１５０ｍｍｏｌ／Ｌ  ＮａＣｌ、１％  ＮＰ４０、０．５％デオキシコール酸Ｎａ、０．１％ＳＤＳ、プロテアーゼ（Ｐ８３４０、Ｓｉｇｍａ、Ｓｔ．Ｌｏｕｉｓ、ＭＯ）及びホスファターゼ（Ｐ５７２６、Ｓｉｇｍａ）阻害剤のカクテル含有］。可溶性タンパク質の濃度は、マイクロウシ血清アルブミンアッセイ（Ｐｉｅｒｃｅ、Ｒｏｃｋｆｏｒｄ、ＩＬ）で測定した。タンパク質の免疫検出は、ＳＤＳ−ＰＡＧＥで分離されたタンパク質のニトロセルロースへの電気泳動転写、抗体とのインキュベーション、及び化学発光による第二段階の検出（ＰｉｃｏＷｅｓｔ、Ｐｉｅｒｃｅ）によって行った。抗体はＥＧＦＲ、リン酸化ＥＧＦＲ（Ｙ１０６８）、リン酸化ｐ４２／ｐ４４、リン酸化Ａｋｔ（４７３）、リン酸化Ａｋｔ（３０８）、全Ａｋｔ、リン酸化Ｓ６（２３５／２３６）、及び全Ｓ６を含んでいた。すべての抗体は、Ｃｅｌｌ  Ｓｉｇｎａｌｉｎｇ
Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ（Ｄａｎｖｅｒｓ、ＭＡ）から入手した。
【０１５４】
治療試験  下流のシグナル伝達タンパク質のリン酸化に対する本明細書に開示の分子の影響の分析のため、細胞株を７０％コンフルエンスまで成長させ、この時点でＭＯＬ−１６２及び／または同様の化合物を指示濃度で添加し、細胞を３７℃で１または２時間インキュベートした。指示された場合、１０ｎｇ／ｍＬのＥＧＦリガンドを５分間添加した。培地を除去し、細胞をＰＢＳで２回洗浄し、先に記載の通り細胞を溶解した。
【０１５５】
ウェスタンブロッティング  細胞抽出物は界面活性剤による溶解で調製し［２５ｍｍｏｌ／Ｌ  Ｔｒｉｓ−ＨＣｌ（ｐＨ７．６）、１５０ｍｍｏｌ／Ｌ  ＮａＣｌ、１％Ｎｏｎｉｄｅｔ  Ｐ−４０、１０％グリセロール、１ｍＭ  ＥＤＴＡ、１ｍｍｏｌ／Ｌジチオスレイトール（ＤＴＴ）、ならびにプロテアーゼ及びホスファターゼ阻害剤、４℃で３０分間揺動させ、４℃で２０分間１４，０００ｒｐｍで遠心分離した。タンパク質濃度はＢｉｏＲａｄのタンパク質アッセイで測定し、続いて溶解物に対してＳＤＳゲル電気泳動を行った。タンパク質をポリフッ化ビニリデン（ＰＶＤＦ）膜に転写し、ＥＧＦＲ、リン酸化ＥＧＦＲ（Ｙ１０６８）、リン酸化ｐ４２／ｐ４４、リン酸化Ａｋｔ（４７３）、リン酸化Ａｋｔ（３０８）、全Ａｋｔ、及びＧＡＰＤＨ（Ａｂｃａｍ）を認識する一次抗体でプローブした。抗ウサギＨＲＰまたは抗マウスＨＲＰを連結した二次抗体（Ｊａｃｋｓｏｎ
ＩｍｍｕｎｏＲｅｓｅａｒｃｈ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓ，Ｉｎｃ．）のいずれかとのインキュベーション後、タンパク質を、化学発光（ＧＥ  Ｈｅａｌｔｈｃａｒｅ）を用いて検出した。
【０１５６】
ＮＣＩ比較パネル。がんスクリーニングパネルのヒト腫瘍細胞株は、５％ウシ胎児血清及び２ｍＭのＬ−グルタミンを含むＲＰＭＩ  １６４０培地で成長させる。通常のスクリーニング実験では、細胞を９６ウェルのマイクロタイタープレートに、１００μＬ中、個々の細胞株の倍加時間に応じて５，０００〜４０，０００細胞／ウェルの播種密度で接種する。細胞接種後、実験薬物を添加する前に、これらマイクロタイタープレートを３７℃、５％のＣＯ２、９５％の空気、及び１００％の相対湿度で２４時間インキュベートする。
【０１５７】
２４時間後、薬物添加時（Ｔｚ）の各細胞株についての細胞集団の測定値を表すため、各細胞株の２枚のプレートをインサイチュでＴＣＡによって固定する。実験薬物は、所望の最終最大試験濃度の４００倍でジメチルスルホキシドに溶解し、使用まで凍結保存する。薬物添加時、凍結濃縮物の分割量を解凍し、５０μｇ／ｍｌのゲンタマイシンを含む完全培地で所望の最終最大試験濃度の２倍に希釈する。さらなる４、１０倍、または１／２ログの連続希釈を行い、計５つの薬物濃度及び対照を得る。これら異なる薬物希釈物の１００μｌの分割量を１００μｌの培地がすでに入った適切なマイクロタイターウェルに添加し、所要の最終薬物濃度を得る。
【０１５８】
薬物添加後、これらプレートを３７℃、５％のＣＯ２、９５％、の空気、及び１００％の相対湿度でさらに４８時間インキュベートする。接着細胞については、このアッセイを冷ＴＣＡの添加で終了する。細胞は５０μｌの冷５０％（ｗ／ｖ）ＴＣＡ（最終濃度、１０％ＴＣＡ）を緩徐に添加することによってインサイチュで固定し、４℃で６０分間インキュベートする。この上清を廃棄し、これらのプレートを水道水で５回洗浄し、空気乾燥させる。０．４％（ｗ／ｖ）のスルホローダミンＢ（ＳＲＢ）の１％酢酸溶液（１００μｌ）を各ウェルに添加し、プレートを室温で１０分間インキュベートする。染色後、未結合の染料を１％酢酸で５回洗浄して除去し、これらのプレートを空気乾燥する。その後、結合した染色剤を１０ｍＭのトリズマ塩基で可溶化し、波長５１５ｎｍでの吸光度を自動プレートリーダーにて読み取る。懸濁細胞については、方法は、ウェルの底に沈んだ細胞を５０μｌの８０％ＴＣＡ（最終濃度、１６％ＴＣＡ）を緩徐に添加することで固定してアッセイを終了すること以外は同じである。７つの吸光度測定［ゼロ時間、（Ｔｚ）、対照の成長、（Ｃ）、及び５つの濃度レベルの薬物の存在下での試験成長（Ｔｉ）］を用い、成長パーセントを各々の薬物濃度レベルで計算する。成長阻害パーセントは、以下のように計算される：
Ｔｉ＞／＝Ｔｚの濃度に対して［（Ｔｉ−Ｔｚ）／（Ｃ−Ｔｚ）］ｘ１００
Ｔｉ＜Ｔｚの濃度に対して［（Ｔｉ−Ｔｚ）／Ｔｚ］ｘ１００。
【０１５９】
単回投与アッセイ用に示されるこの数は、無薬物対照に対する、及びゼロ時間の細胞数に対する成長である。これは、成長阻害（０〜１００の値）及び致死率（０未満の値）の両方の検出を可能にする。例えば、１００の値は、成長阻害がないことを意味する。４０の値は、６０％の成長阻害を意味する。０の値は、実験の間に正味の成長がないことを意味する。−４０の値は、４０％の致死率を意味する。−１００の値は、すべての細胞の死を意味する。この単回投与平均グラフの情報は、比較分析に利用可能である。このヒートマップは、緑（成長％＜０％、成長％＞０％であるが５０％未満、成長％＞５０％について詳述する。
【０１６０】
異種移植片試験。雌の６〜７週齢ＮＣＲヌードマウス（ＣｒＴａｃ：ＮＣｒ−Ｆｏｘｎｌｎｕ、Ｔａｃｏｎｉｃ）、６〜７週齢に対して、１：１無血清培地／Ｍａｔｒｉｇｅｌ（登録商標）混合物中で１×１０６〜１×１０７細胞を右腋窩領域に皮下移植した。マウスを処理群に無作為化し、腫瘍が１００〜２００ｍｇに達したときに処理を開始した。ＭＴＸ−２０１を５％ＤＭＳＯ／９５％ＰＥＧ３００の透明黄色溶液として、個々の動物の体重に基づいて（０．２ｍｌ／２０ｇ）１０日間毎日、強制経口投与した。皮下腫瘍体積及び体重を週２〜３回測定した。腫瘍体積は、２つの直交する直径をノギスで測定し、かつ式：腫瘍体積＝（長さ×幅２）／２を使用することにより算出した。処理の停止後、腫瘍量が約１０００ｍｇに達して腫瘍成長遅延の計算を可能になるまでマウスを保持した。処理／対照パーセント（％Ｔ／Ｃ）は、処理の最終日、平均処理腫瘍重量を平均対照腫瘍重量で除算し、１００で乗算して算出した。腫瘍成長遅延（Ｔ−Ｃ）は、処理群が評価サイズ（７５０ｍｇ）に達する平均時間を対照群の評価サイズへの平均時間を減算して算出した。部分退縮（ＰＲ）は、ベースライン腫瘍体積の＜＝５０％に退縮した腫瘍として定義される。完全緩解（ＣＲ）は、触診限界未満（＜４０ｍｇ）の腫瘍として定義される。
【０１６１】
実施例３．
本実施例は、ミシガン大学キナゾリンライブラリー３−実験（ＭＯＬ−１６０〜１６３及びＭＯＬ−１６５の合成）を示す。
【０１６２】
【化１６】
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【０１６３】
反応条件：（ｉ）ｉＰｒＯＨ、８０℃、一夜；（ｉｉ）ＳｉｌｉａＣａｔＤｐｐ−Ｐｄ
５ｍｏｌ％、１０％Ｋ２ＣＯ３、ＥｔＯＨ、１２５℃、５〜６０分、ｕＷ
２Ａ−  ３−クロロ−４−フルオロアニリン
２Ｂ−  ３−クロロアニリン
２Ｃ−  ３−アミノ−５−クロロピリジン
２Ｄ−  ３−ブロモアニリン
２Ｅ−  ３−（（トリメチルシリル）エチニル）アニリン
Ｎ−（５−（４−（（３−クロロ−４−フルオロフェニル）アミノ）キナゾリン−６−イル）ピリジン−３−イル）メタンスルホンアミド、ＭＯＬ−１６０．
６−ブロモ−４−クロロキナゾリン（０．３ｇ、１．３０ｍｍｏｌ）の２−プロパノール（３０ｍＬ）からなる溶液に、３−クロロ−４−フルオロアニリン（０．１８９ｇ、１．３０ｍｍｏｌ）を添加した。この反応混合物を加熱し（８０℃）、Ｎ２流下で一夜攪拌した。この反応混合物を室温まで冷却し、その後この反応混合物をフリット漏斗で濾過した。濾過した固体を過剰の２−プロパノールですすぎ、高真空下で乾燥させ、６−ブロモ−Ｎ−（３−クロロ−４−フルオロフェニル）キナゾリン−４−アミン（３Ａ）をオフホワイトの固体として得た（３５０ｍｇ、収率８５％）。ＭＳ：  （ＥＳＩ  ＋  ｍ／ｚ  ３５３．９，  ＥＳＩ  −  ｍ／ｚ  ３５１．９）。６−ブロモ−Ｎ−（３−クロロ−４−フルオロフェニル）キナゾリン−４−アミン（０．１８５ｇ、０．５２６ｍｍｏｌ）の無水エタノール（３ｍＬ）からなる溶液を、攪拌棒を備えた５ｍＬのマイクロ波反応バイアルに入れた。次に、５−（メチルスルホンアミド）ピリジン−３−イルボロン酸ピナコールエステル（４、０．１６４ｇ、０．５５３ｍｍｏｌ）、続いてＳｉｌｉＣａｔ  ＤＰＰ−Ｐｄ（５ｍｏｌ％、０．２６ｍｍｏｌ／ｇ充填、０．１０１ｇ）及び１０％炭酸カリウム水溶液（２当量、０．７６ｍＬ、１．０５ｍｍｏｌ）を添加した。この反応混合物をＮ２雰囲気下に置き、蓋をして、その後Ｂｉｏｔａｇｅ  Ｅｍｒｙｓ  Ｏｐｔｉｍｉｚｅｒのマイクロ波にて１２５℃で１時間加熱した。この反応混合物を室温まで冷却し、その後フリット漏斗で濾過してＳｉｌｉＣａｔ  ＤＰＰ−Ｐｄを集めた。濾過した固体を過剰のエタノールですすぎ、この濾液を減圧下で濃縮して粗生成物を得た。４〜１００％の酢酸エチルを含むヘプタンの勾配に続いて０〜１０％のメタノールを含むジクロロメタンの勾配を用いたＢｉｏｔａｇｅ  Ｉｓｏｌｅｒａフラッシュクロマトグラフィーによるこの粗生成物の精製により、Ｎ−（５−（４−（（３−クロロ−４−フルオロフェニル）アミノ）キナゾリン−６−イル）ピリジン−３−イル）メタンスルホンアミド（５Ａ、ＭＯＬ−１６０、９６ｍｇ、収率４１％、純度９６％）を白色固体として得た。１Ｈ  ＮＭＲ  （４００ＭＨｚ，  ＤＭＳＯ−ｄ６）  δ  １０．１７  （ｂｒ．  ｓ，  １Ｈ），  １０．０３  （ｓ，  １Ｈ），  ８．８３−８．８７  （ｍ，  ２Ｈ），  ８．６６  （ｓ，  １Ｈ），  ８．４９  （ｄ，  Ｊ＝２．３８Ｈｚ，  １Ｈ），  ８．１３−８．２０
（ｍ，  ２Ｈ），  ７．９０−７．９８  （ｍ，  ２Ｈ），  ７．８３  （ｄｄｄ，  Ｊ＝２．６５，  ４．２５，  ９．０１  Ｈｚ，  １Ｈ），  ７．４７  （ｔ，  Ｊ＝９．１５  Ｈｚ，  １Ｈ），  ３．１４  （ｓ，  ３Ｈ）；  ＭＳ：  （ＥＳＩ  ＋  ｍ／ｚ  ４４４．１，  ＥＳＩ  −  ｍ／ｚ  ４４２．０）；  ＴＬＣ：  （９０：１０：０．５，  ＤＣＭ：ＭｅＯＨ：ＮＨ４ＯＨ）  Ｒｆ  ＝  ０．３２。
【０１６４】
Ｎ−（５−（４−（（３−クロロフェニル）アミノ）キナゾリン−６−イル）ピリジン−３−イル）メタンスルホンアミド、ＭＯＬ−１６２
６−ブロモ−４−クロロキナゾリン（０．４４８ｇ、１．８４ｍｍｏｌ）の２−プロパノール（１０ｍＬ）からなる溶液に、３−クロロアニリン（０．２４６ｇ、１．９３ｍｍｏｌ）を添加した。この反応混合物を加熱し（８０℃）、Ｎ２流下で一夜攪拌した。この反応混合物を室温まで冷却し、その後この反応混合物をフリット漏斗で濾過した。濾過した固体を過剰の２−プロパノールですすぎ、高真空下で乾燥させ、６−ブロモ−Ｎ−（３−クロロフェニル）キナゾリン−４−アミン（３Ｂ）をオフホワイトの固体として得た（４９０ｍｇ、収率７９％、純度９８％）。ＭＳ  （ＥＳＩ  ＋  ｍ／ｚ  ３３５．９，  ＥＳＩ  −  ｍ／ｚ  ３３３．９）。６−ブロモ−Ｎ−（３−クロロフェニル）キナゾリン−４−アミン（０．２００ｇ、０．５９７ｍｍｏｌ）の無水エタノール（３ｍＬ）からなる溶液を、攪拌棒を備えた５ｍＬのマイクロ波反応バイアルに入れた。次に、５−（メチルスルホンアミド）ピリジン−３−イルボロン酸ピナコールエステル（４、０．１８７ｇ、０．６２７ｍｍｏｌ）、続いてＳｉｌｉＣａｔ  ＤＰＰ−Ｐｄ（５ｍｏｌ％、０．２６ｍｍｏｌ／ｇ充填、０．１１５ｇ）及び１０％炭酸カリウム水溶液（２当量、０．８７ｍＬ、１．２０ｍｍｏｌ）を添加した。この反応混合物をＮ２雰囲気下に置き、蓋をし、その後Ｂｉｏｔａｇｅ  Ｅｍｒｙｓ  Ｏｐｔｉｍｉｚｅｒのマイクロ波にて１００℃で３０分間加熱した。この反応混合物を室温まで冷却し、その後フリット漏斗で濾過してＳｉｌｉＣａｔ  ＤＰＰ−Ｐｄを集めた。濾過した固体を過剰のエタノールですすぎ、この濾液を減圧下濃縮して粗生成物を得た。４〜１００％の酢酸エチルを含むヘプタンの勾配に続いて０〜１０％のメタノールを含むジクロロメタンの勾配を用いたＢｉｏｔａｇｅ  Ｉｓｏｌｅｒａフラッシュクロマトグラフィーによるこの粗生成物の精製で、Ｎ−（５−（４−（（３−クロロフェニル）アミノ）キナゾリン−６−イル）ピリジン−３−イル）メタンスルホンアミド（５Ｂ、ＭＯＬ−１６２、７８ｍｇ、収率３１％、純度９７％）を白色固体として得た。１Ｈ  ＮＭＲ  （４００ＭＨｚ，  ＤＭＳＯ−ｄ６）  δ  １０．２０  （ｂｒ．  ｓ．，  １Ｈ），  １０．０４  （ｓ，  １Ｈ），  ８．８９  （ｄｄ，
Ｊ−１．７４，  １３．４５  Ｈｚ，  １Ｈ），  ８．７０  （ｓ，  １Ｈ），  ８．５０  （ｄ，  Ｊ＝２．３８Ｈｚ，  １Ｈ），  ８．１９  （ｄｄ，  Ｊ＝１．６５，  ８．６０  Ｈｚ，  １Ｈ），  ８．１１  （ｔ，  Ｊ＝２．０１  Ｈｚ，  １Ｈ），  ７．９１−８．０４  （ｍ，  １Ｈ），  ７．６７−７．９１  （ｍ，  １Ｈ），  ７．４５  （ｔ，  Ｊ＝８．１４  Ｈｚ，  １Ｈ），  ７．２２  （ｍ，  １Ｈ），  ３．１６
（ｓ，  ３Ｈ）；  ＭＳ：  （ＥＳＩ  ＋  ｍ／ｚ  ４２６．１，  ＥＳＩ  −  ｍ／ｚ  ４２４．０）；  ＴＬＣ：  （９０：１０：０．５，  ＤＣＭ：ＭｅＯＨ：ＮＨ４ＯＨ）  Ｒｆ  ＝  ０．４９．
Ｎ−（５−（４−（（５−クロロピリジン−３−イル）アミノ）キナゾリン−６−イル）ピリジン−３−イル）メタンスルホンアミド、ＭＯＬ−１６３
２−プロパノール（１０ｍＬ）中、６−ブロモ−４−クロロキナゾリン（０．４４８ｇ、１．８４ｍｍｏｌ）からなる溶液に、３−アミノ−５−クロロピリジン（０．２４８ｇ、１．９３ｍｍｏｌ）を添加した。この反応混合物を加熱し（８０℃）、Ｎ２流下で一夜攪拌した。この反応混合物を室温まで冷却し、その後この反応混合物をフリット漏斗で濾過した。濾過した固体を過剰の２−プロパノールですすぎ、高真空下で乾燥させ、６−ブロモ−Ｎ−（５−クロロピリジン−３−イル）キナゾリン−４−アミン（３Ｃ）をオフホワイトの固体として得た（５７５ｍｇ、収率９３％、純度９３％）。ＭＳ  （ＥＳＩ  ＋
ｍ／ｚ  ３３６．９，  ＥＳＩ  −  ｍ／ｚ  ３３４．９）．無水エタノール（３ｍＬ）中、６−ブロモ−Ｎ−（５−クロロピリジン−３−イル）キナゾリン−４−アミン（０．１３６ｇ、０．４０５ｍｍｏｌ）からなる溶液を、攪拌棒を備えた５ｍＬのマイクロ波反応バイアルに入れた。次に、５−（メチルスルホンアミド）ピリジン−３−イルボロン酸ピナコールエステル（４、０．１２７ｇ、０．４２５ｍｍｏｌ）、続いてＳｉｌｉＣａｔ  ＤＰＰ−Ｐｄ（５ｍｏｌ％、０．２６ｍｍｏｌ／ｇ充填、０．０８２ｇ）及び１０％炭酸カリウム水溶液（２当量、０．５９ｍＬ、０．８１ｍｍｏｌ）を添加した。この反応混合物をＮ２雰囲気下に置き、蓋をして、その後Ｂｉｏｔａｇｅ  Ｅｍｒｙｓ  Ｏｐｔｉｍｉｚｅｒのマイクロ波にて１００℃で３０分間加熱した。この反応混合物を室温まで冷却し、その後フリット漏斗で濾過してＳｉｌｉＣａｔ  ＤＰＰ−Ｐｄを集めた。濾過した固体を過剰のエタノールですすぎ、この濾液を減圧下で濃縮して粗生成物を得た。４〜１００％の酢酸エチルを含むヘプタンの勾配に続いて、０〜１０％のメタノールを含むジクロロメタンの勾配を用いたＢｉｏｔａｇｅ  Ｉｓｏｌｅｒａフラッシュクロマトグラフィーによるこの粗生成物の精製により、Ｎ−（５−（４−（（５−クロロピリジン−３−イル）アミノ）キナゾリン−６−イル）ピリジン−３−イル）メタンスルホンアミド（５Ｃ、ＭＯＬ−１６３、７０ｍｇ、収率４０％、純度９８％）を白色固体として得た。１Ｈ  ＮＭＲ  （４００ＭＨｚ，  ＤＭＳＯ−ｄ６）  δ  １０．２１  （ｂｒ．  ｓ．，  ２Ｈ），  ８．９４−９．０３  （ｍ，  １Ｈ），  ８．８６−８．８８  （ｄ，  Ｊ＝４．６５  Ｈｚ，  ２Ｈ），  ８．７３  （ｓ，  １Ｈ），  ８．５９  （ｓ，  １Ｈ），
８．５０  （ｄ，  Ｊ＝２．０１  Ｈｚ，  １Ｈ），  ８．３２−８．４４  （ｍ，  １Ｈ），  ８．２０  （ｄ，  Ｊ＝８．９７  Ｈｚ，  １Ｈ），  ７．９０−８．０４  （ｍ，  ２Ｈ），  ３．１５  （ｓ，  ３Ｈ）；  ＭＳ：  （ＥＳＩ  ＋  ｍ／ｚ  ４２７．０，  ＥＳＩ  −  ｍ／ｚ  ４２５．０）；  ＴＬＣ：  （９０：１０：０．５，  ＤＣＭ：ＭｅＯＨ：ＮＨ４ＯＨ）  Ｒｆ  ＝  ０．４７。
【０１６５】
Ｎ−（５−（４−（（５−ブロモピリジン−３−イル）アミノ）キナゾリン−６−イル）ピリジン−３−イル）メタンスルホンアミド、ＭＯＬ−１６５
６−ブロモ−４−クロロキナゾリン（０．４４８ｇ、１．８４ｍｍｏｌ）の２−プロパノール（１０ｍＬ）からなる溶液に、３−ブロモアニリン（０．３３２ｇ、１．９３ｍｍｏｌ）を添加した。この反応混合物を加熱し（８０℃）、Ｎ２流下で一夜攪拌した。この反応混合物を室温まで冷却し、その後この反応混合物をフリット漏斗で濾過した。濾過した固体を過剰の２−プロパノールですすぎ、高真空下で乾燥させ、６−ブロモ−Ｎ−（５−ブロモピリジン−３−イル）キナゾリン−４−アミン（３Ｄ）をオフホワイトの固体として得た（６０５ｍｇ、収率８７％、純度９８％）。ＭＳ  （ＥＳＩ  ＋  ｍ／ｚ  ３７９．９，  ＥＳＩ  −  ｍ／ｚ  ３７７．８）。６−ブロモ−Ｎ−（５−ブロモピリジン−３−イル）キナゾリン−４−アミン（０．１５０ｇ、０．３９５ｍｍｏｌ）の無水エタノール（４ｍＬ）からなる溶液を、攪拌棒を備えた５ｍＬのマイクロ波反応バイアルに入れた。次に、５−（メチルスルホンアミド）ピリジン−３−イルボロン酸ピナコールエステル（４、０．１２０ｇ、０．４００ｍｍｏｌ）、続いてＳｉｌｉＣａｔ  ＤＰＰ−Ｐｄ（５ｍｏｌ％、０．２６ｍｍｏｌ／ｇ充填、０．０８０ｇ）及び１０％炭酸カリウム水溶液（２当量、０．６０ｍＬ、０．７９ｍｍｏｌ）を添加した。この反応混合物をＮ２雰囲気下に置き、蓋をして、その後Ｂｉｏｔａｇｅ  Ｅｍｒｙｓ  Ｏｐｔｉｍｉｚｅｒのマイクロ波にて１００℃で３０分間加熱した。この反応混合物を室温まで冷却し、その後フリット漏斗で濾過してＳｉｌｉＣａｔ  ＤＰＰ−Ｐｄを集めた。濾過した固体を過剰のエタノールですすぎ、この濾液を減圧下で濃縮して粗生成物を得た。４〜１００％の酢酸エチルを含むヘプタンの勾配に続いて０〜１０％のメタノールを含むジクロロメタンの勾配を用いたＢｉｏｔａｇｅ  Ｉｓｏｌｅｒａフラッシュクロマトグラフィーによるこの粗生成物の精製により、Ｎ−（５−（４−（（５−ブロモピリジン−３−イル）アミノ）キナゾリン−６−イル）ピリジン−３−イル）メタンスルホンアミド（５Ｄ、ＭＯＬ−１６５、３９ｍｇ、収率２１％、純度８５％）を白色固体として得た。この生成物は、８５：１５の５Ｄ：５Ｄ−Ｂの混合物であり、５Ｄ−Ｂは、鈴木カップリング反応の副産物として生じるＮ−（５’−（（６−ブロモキナゾリン−４−イル）アミノ）−［３，３’−ビピリジン］−５−イル）メタンスルホンアミドである。１Ｈ  ＮＭＲ  （４００ＭＨｚ，  ＤＭＳＯ−ｄ６）  δ  １０．１７  （ｂｒ．  ｓ．，  １Ｈ），  １０．００  （ｓ，  １Ｈ），  ８．８４−８．９４  （ｍ，  ２Ｈ），  ８．７０  （ｓ，  １Ｈ），  ８．５１  （ｄ，  Ｊ＝２．３８  Ｈｚ，  １Ｈ），  ８．１５−８．２５  （ｍ，  ２Ｈ），  ７．８９−８．０３  （ｍ，  ２Ｈ），  ７．３３−７．４１  （ｍ，  ２Ｈ），  ３．１６  （ｓ，  ３Ｈ）；  ＭＳ：  （ＥＳＩ  ＋  ｍ／ｚ  ４７０，  ４７２）；  ＴＬＣ：  （９０：１０：０．５，  ＤＣＭ：ＭｅＯＨ：ＮＨ４ＯＨ）  Ｒｆ  ＝  ０．６２。
【０１６６】
Ｎ−（５−（４−（（３−エチニルフェニル）アミノ）キナゾリン−６−イル）ピリジン−３−イル）メタンスルホンアミド、ＭＯＬ−１６１
６−ブロモ−４−クロロキナゾリン（１．２ｇ、４．９ｍｍｏｌ）及び３−（（トリメチルシリル）エチニル）アニリン（１．１ｇ、５．９ｍｍｏｌ、Ｕｔｅ  Ｆ．Ｒｏｈｒｉｇ，ＪＭＣ，２０１２，５５（１１），５２７０−５２９０に記載の通りに調製）の３０ｍＬの１，４−ジオキサンからなる溶液を９０℃で３時間加熱した。この反応混合物を室温まで冷却し、ジエチルエーテルで希釈し、フリットガラスを介して濾過した。この固体を２０ｍＬのイソプロピルアルコール下で粉砕し、濾過し、乾燥させて６−ブロモ−Ｎ−（３−（（トリメチルシリル）エチニル）フェニル）キナゾリン−４−アミン（３Ｅ）を固体として得た（９４０ｍｇ、４８％）。１Ｈ  ＮＭＲ  （４００ＭＨｚ，  ＤＭＳＯ−ｄ６）  δ  １１．８  （ｂｒ  ｓ，  １Ｈ），  ９．２９  （ｄ，  Ｊ＝１．７  Ｈｚ，  １Ｈ），  ９．００  （ｓ，  １Ｈ），  ８．２６  （ｄｄ，  Ｊ＝１．７，  ８．８  Ｈｚ，  １Ｈ），  ７．９５  （ｄ，  Ｊ＝８．９  Ｈｚ，  １Ｈ），  ７．８９  （ｓ，  １Ｈ），  ７．８１  （ｄ，  Ｊ＝８．１  Ｈｚ，１Ｈ），  ７．５１  （ｔ，
Ｊ＝７．９  Ｈｚ，  １Ｈ），  ７．４１  （ｄ，  Ｊ＝７．７  Ｈｚ，  １Ｈ），  ０．２５  （ｓ，  ９Ｈ）。６−ブロモ−Ｎ−（３−（（トリメチルシリル）エチニル）フェニル）キナゾリン−４−アミン（０．２５０ｇ、０．６３１ｍｍｏｌ）の無水エタノール（４ｍＬ）からなる溶液を、攪拌棒を備えた５ｍＬのマイクロ波反応バイアルに入れた。次に、５−（メチルスルホンアミド）ピリジン−３−イルボロン酸ピナコールエステル（４、０．２００ｇ、０．６６２ｍｍｏｌ）、続いてＳｉｌｉＣａｔ  ＤＰＰ−Ｐｄ（５ｍｏｌ％、０．２６ｍｍｏｌ／ｇ充填、０．１２６ｇ）及び１０％炭酸カリウム水溶液（２当量、０．９１ｍＬ、１．２６ｍｍｏｌ）を添加した。この反応混合物をＮ２雰囲気下に置き、蓋をして、その後Ｂｉｏｔａｇｅ  Ｅｍｒｙｓ  Ｏｐｔｉｍｉｚｅｒのマイクロ波にて１００℃で５分間加熱した。この反応混合物を室温まで冷却し、その後フリット漏斗で濾過してＳｉｌｉＣａｔ  ＤＰＰ−Ｐｄを集めた。濾過した固体を過剰のエタノールですすぎ、この濾液を減圧下で濃縮して粗生成物を得た。５〜６５％の酢酸エチルを含むヘプタンの勾配に続いて０〜１０％のメタノールを含むジクロロメタンの勾配を用いたＢｉｏｔａｇｅ  Ｉｓｏｌｅｒａフラッシュクロマトグラフィーによるこの粗生成物の精製で、５ＥとＴＭＳ保護５Ｅの混合物を得た。この混合物をメタノールに溶解し、その後過剰の１０％炭酸カリウム（１ｍＬ）で処理した。この溶液を３５℃まで加熱し、ＴＭＳを除去した後、ＴＬＣ（９０：１０：０．５、ＤＣＭ：ＭｅＯＨ：ＮＨ４ＯＨ）を除去した。反応終了後、この溶液をｐＨ約５に酸性化し（１Ｎ  ＨＣｌ）、その後ＤＣＭ：ＭｅＯＨ（９０：１０混合物、７５ｍＬ）で３回抽出した。この有機層を減圧下で濃縮し、粗生成物を得た。１〜１３％のメタノールを含むジクロロメタンの勾配を用いたＢｉｏｔａｇｅ  Ｉｓｏｌｅｒａフラッシュクロマトグラフィーによるこの脱保護粗生成物の精製で、Ｎ−（５−（４−（（３−エチニルフェニル）アミノ）キナゾリン−６−イル）ピリジン−３−イル）メタンスルホンアミド（５Ｅ、ＭＯＬ−１６１、６８ｍｇ、収率２６％、純度９７．５％）を黄色固体として得た。１Ｈ  ＮＭＲ  （４００ＭＨｚ，  ＤＭＳＯ−ｄ６）  δ  １０．１６  （ｂｒ．  ｓ．，  １Ｈ），  ９．９７  （ｓ，  １Ｈ），  ８．７５−８．９４  （ｍ，  ２Ｈ），  ８．６６  （ｓ，  １Ｈ），  ８．４８  （ｄ，  Ｊ＝２．３８Ｈｚ，  １Ｈ），  ８．１６  （ｄｄ，  Ｊ＝１．６５，  ８．６０  Ｈｚ，  １Ｈ），  ８．０４  （ｓ，  １Ｈ），  ７．８５−７．９８  （ｍ，  ４Ｈ），  ７．４２  （ｔ，  Ｊ＝７．８７  Ｈｚ，  １Ｈ），  ７．４２  （ｄ，  Ｊ＝７．６９  Ｈｚ，  １Ｈ），  ４．２１  （ｓ，  １Ｈ），  ３．１３  （ｓ，  ３Ｈ）；  ＭＳ：  （ＥＳＩ  ＋  ｍ／ｚ  ４１６．１，  ＥＳＩ  −  ｍ／ｚ  ４１４．０）；  ＴＬＣ：  （９０：１０：０．５，  ＤＣＭ：ＭｅＯＨ：ＮＨ４ＯＨ）  Ｒｆ  ＝  ０．６。
【０１６７】
実施例４．
本実施例は、ミシガン大学キナゾリン実験（ＭＯＬ−１６６〜１６７及びＭＯＬ−１５３の合成）を示す。
【０１６８】
【化１７】
2019206549.tif 000057
【０１６９】
反応条件：（ｉ）ｉＰｒＯＨ、８０℃、一夜；（ｉｉ）ＳｉｌｉａＣａｔＤｐｐ−Ｐｄ
５ｍｏｌ％、１０％Ｋ２ＣＯ３、ＥｔＯＨ、１２５℃、５〜６０分、ｕＷ；（ｉｉｉ）（７Ｆ−Ｈ）、ピリジン、メタンスルホニルクロリド、室温、１５分
２Ｆ−  ４−（ピリジン−４−イルオキシ）アニリン
２Ｇ−  ベンジルアミン
２Ｈ−  ３−クロロ−４−メトキシアニリン
Ｎ−（５−（４−（（４−（ピリジン−４−イルオキシ）フェニル）アミノ）キナゾリン−６−イル）ピリジン−３−イル）メタンスルホンアミド、ＭＯＬ−１６６
６−ブロモ−４−クロロキナゾリン（０．４４８ｇ、１．８４ｍｍｏｌ）の２−プロパノール（１０ｍＬ）からなる溶液に、４−（ピリジン−４−イルオキシ）アニリン（０．３６０ｇ、１．９３ｍｍｏｌ）を添加した。この反応混合物を加熱し（８０℃）、Ｎ２流下で一夜攪拌した。この反応混合物を室温まで冷却し、その後この反応混合物をフリット漏斗で濾過した。濾過した固体を過剰の２−プロパノールですすぎ、高真空下で乾燥させて６−ブロモ−Ｎ−（４−（ピリジン−４−イルオキシ）フェニル）キナゾリン−４−アミン（３Ｆ）をオフホワイトの固体として得た（３１３ｍｇ、４３収率％、純度９７％）。ＭＳ  （ＥＳＩ  ＋  ｍ／ｚ  ３９４．０，  ＥＳＩ  −  ｍ／ｚ  ３９２．０）。次に、６−ブロモ−Ｎ−（４−（ピリジン−４−イルオキシ）フェニル）キナゾリン−４−アミン（０．３０６ｇ、０．７７ｍｍｏｌ）の無水エタノール（１０ｍＬ）からなる溶液を、攪拌棒を備えた２０ｍＬのマイクロ波反応バイアルに入れた。次に、３−アミノピリジン−５−ボロン酸ピナコールエステル（６、０．１７６ｇ、０．８０ｍｍｏｌ）、続いてＳｉｌｉＣａｔ  ＤＰＰ−Ｐｄ（５ｍｏｌ％、０．２６ｍｍｏｌ／ｇ充填、０．１５０ｇ）及び１０％炭酸カリウム水溶液（２当量、１．１５ｍＬ、１．６ｍｍｏｌ）を添加した。この反応混合物をＮ２雰囲気下に置き、蓋をして、その後Ｂｉｏｔａｇｅ  Ｅｍｒｙｓ  Ｏｐｔｉｍｉｚｅｒのマイクロ波にて１２５℃で１時間加熱した。この反応混合物を室温まで冷却し、その後フリット漏斗で濾過してＳｉｌｉＣａｔ  ＤＰＰ−Ｐｄを集めた。濾過した固体を過剰のエタノールですすぎ、この濾液を減圧下で濃縮して粗生成物を得た。４〜１００％の酢酸エチルを含むヘプタンの勾配に続いて０〜１０％のメタノールを含むジクロロメタンの勾配を用いたＢｉｏｔａｇｅ  Ｉｓｏｌｅｒａフラッシュクロマトグラフィーによるこの粗生成物の精製により、７Ｆの６−（５−アミノピリジン−３−イル）−Ｎ−（４−（ピリジン−４−イルオキシ）フェニル）キナゾリン−４−アミン（５０ｍｇ、収率１５％、純度９２％）をオフホワイトの固体として得た。ＭＳ  （ＥＳＩ  ＋  ｍ／ｚ  ４０７．１，  ＥＳＩ  −  ｍ／ｚ  ４０５．１）。６−（５−アミノピリジン−３−イル）−Ｎ−（４−（ピリジン−４−イルオキシ）フェニル）キナゾリン−４−アミン（５０ｍｇ、０．１２ｍｍｏｌ）のピリジン（３ｍＬ）の室温溶液に、メタンスルホニルクロリド（５６ｍｇ、０．５ｍｍｏｌ）を添加した。この反応混合物は暗赤色になり、この状態が持続した。これを１５分間攪拌した。この反応混合物を飽和重炭酸ナトリウム溶液に注ぎ、有機物質を酢酸エチルで抽出した。この有機相を水及びブラインで洗浄し、硫酸マグネシウムで乾燥させ、濾過し、真空下濃縮した。この粗固体をメタノールに溶解し、１／９〜３／７メタノール／酢酸エチル勾配で溶出するシリカカラムに「乾燥充填」し、Ｎ−（５−（４−（（４−（ピリジン−４−イルオキシ）フェニル）アミノ）キナゾリン−６−イル）ピリジン−３−イル）メタンスルホンアミド（５Ｆ、ＭＯＬ−１６６、２０ｍｇ、収率３３％、純度９６％）を固体として得た。１Ｈ  ＮＭＲ  （４００ＭＨｚ，  ＤＭＳＯ−ｄ６）  ��  １０．０７  （ｓ，  １Ｈ），  ８．９１  （ｓ，  １Ｈ），  ８．７９  （ｄ，  Ｊ＝１．９  Ｈｚ，  １Ｈ），  ８．６２  （ｓ，  １Ｈ），  ８．４−８．５  （ｍ，  ３Ｈ），  ８．１５  （ｄｄ，  Ｊ＝１．７，  ８．６
Ｈｚ，  １Ｈ），  ７．８５−８．０  （ｍ，  ４Ｈ），  ７．２４  （ｄ，  Ｊ＝８．９  Ｈｚ，  ２Ｈ），  ６．９４  （ｄ，  Ｊ＝４．７  Ｈｚ，  ２Ｈ），  ３．０８
（ｓ，  ３Ｈ）；  ＭＳ：  （ＥＳＩ  ＋  ｍ／ｚ  ４８５．１，  ＥＳＩ−  ｍ／ｚ
４８３．０）。
【０１７０】
５Ｇ、Ｎ−（５−（４−（ベンジルアミノ）キナゾリン−６−イル）ピリジン−３−イル）メタンスルホンアミド、ＭＯＬ−１６７
６−ブロモ−４−クロロキナゾリン（１．２ｇ、４．９ｍｍｏｌ）とベンジルアミン（６３３ｍｇ、５．９ｍｍｏｌ）との混合物を含む３０ｍＬの１，４−ジオキサンを４５℃で２時間、その後９０℃で１時間加熱した。ベンジルアミンの追加量（５００ｍｇ、４．７ｍｍｏｌ）を添加し、この反応混合物を９０℃でさらに２時間加熱した。この反応混合物を室温まで冷却し、ジエチルエーテルで希釈し、フリットガラスを介して濾過した。この濾液を真空下で濃縮し、この粗固体をイソプロピルアルコール下で粉砕し、濾過し、乾燥させてＮ−ベンジル−６−ブロモキナゾリン−４−アミン（３Ｇ）を固体として得た（９５０ｍｇ、収率６２％）。１Ｈ  ＮＭＲ  （４００ＭＨｚ，  ＤＭＳＯ−ｄ６）  δ  ８．９１  （ｔ，  Ｊ＝５．９  Ｈｚ，  １Ｈ），  ８．６０  （ｄ，  Ｊ＝２．２  Ｈｚ，  １Ｈ），  ８．４６  （ｓ，  １Ｈ），  ７．８８  （ｄｄ，  Ｊ＝２．２，  ８．９  Ｈｚ，  １Ｈ），  ７．６２  （ｄ，  Ｊ＝８．９  Ｈｚ，１Ｈ），  ７．２５−７．４０  （ｍ，  ４Ｈ），  ７．２３  （ｔ，  Ｊ＝９  Ｈｚ，  １Ｈ），  ４．７５
（ｄ，  Ｊ＝５．８  Ｈｚ，  ２Ｈ）。次に、Ｎ−ベンジル−６−ブロモキナゾリン−４−アミン（０．３１４ｇ、１．０ｍｍｏｌ）の無水エタノール（１０ｍＬ）からなる溶液を、攪拌棒を備えた２０ｍＬのマイクロ波反応バイアルに入れた。次に、３−アミノピリジン−５−ボロン酸ピナコールエステル（６、０．２３１ｇ、１．０５ｍｍｏｌ）、続いてＳｉｌｉＣａｔ  ＤＰＰ−Ｐｄ（５ｍｏｌ％、０．２６ｍｍｏｌ／ｇ充填、０．２００ｇ）及び１０％炭酸カリウム水溶液（２当量、１．５ｍＬ、１．２６ｍｍｏｌ）を添加した。この反応混合物をＮ２雰囲気下に置き、蓋をし、その後Ｂｉｏｔａｇｅ  Ｅｍｒｙｓ  Ｏｐｔｉｍｉｚｅｒのマイクロ波にて１００℃で５分間加熱した。この反応混合物を室温まで冷却し、その後フリット漏斗で濾過してＳｉｌｉＣａｔ  ＤＰＰ−Ｐｄを集めた。濾過した固体を過剰のエタノールですすぎ、この濾液を減圧下で濃縮して粗生成物を得た。４〜１００％の酢酸エチルを含むヘプタンの勾配に続いて０〜１０％のメタノールを含むジクロロメタンの勾配を用いたＢｉｏｔａｇｅ  Ｉｓｏｌｅｒａフラッシュクロマトグラフィーによるこの粗生成物の精製により、６−（５−アミノピリジン−３−イル）−Ｎ−ベンジルキナゾリン−４−アミン（７Ｇ）を白色固体として得た（５９ｍｇ、収率１８％、純度８５％）。ＭＳ：  （ＥＳＩ  ＋  ｍ／ｚ  ３２８．１，  ＥＳＩ  −  ｍ／ｚ  ３２６．１）。６−（５−アミノピリジン−３−イル）−Ｎ−ベンジルキナゾリン−４−アミン（５９ｍｇ，０．１８ｍｍｏｌ）のピリジン（４ｍＬ）の室温溶液に、メタンスルホニルクロリド（８３ｍｇ、０．７２ｍｍｏｌ）を添加した。この反応混合物は暗赤色になり、これが持続した。これを１時間攪拌した。この反応混合物を飽和重炭酸ナトリウム溶液に注ぎ、有機物質を酢酸エチルで抽出した。この有機相を水及びブラインで洗浄し、硫酸マグネシウムで乾燥させ、濾過し、真空下で濃縮した。この粗固体をメタノールに溶解し、１／９〜３／７メタノール／酢酸エチル勾配で溶出するシリカカラムに「乾燥充填」し、部分的に精製された淡黄色固体を得た。この粗固体を２−プロパノール／ジクロロメタン／酢酸エチル溶液下で粉砕し、濾過し、乾燥させて、Ｎ−（５−（４−（ベンジルアミノ）キナゾリン−６−イル）ピリジン−３−イル）メタンスルホンアミド（５Ｇ、ＭＯＬ−１６７、６ｍｇ、収率８％、純度９６％）を白色粉体として得た。ＭＳ：  （ＥＳＩ  ＋  ｍ／ｚ  ４０６．１，  ＥＳＩ  −  ｍ／ｚ  ４０４．１）。
【０１７１】
５Ｈ、Ｎ−（５−（４−（（３−クロロ−４−メトキシフェニル）アミノ）キナゾリン−６−イル）ピリジン−３−イル）メタンスルホンアミド、ＭＯＬ−１５３
６−ブロモ−４−クロロキナゾリン（１．６５ｇ、６．５ｍｍｏｌ）と３−クロロ−４−メトキシアニリン（１．２ｇ、７．８ｍｍｏｌ）との混合物を含む４０ｍＬの１，４−ジオキサンを９０℃で３時間加熱した。この反応混合物を室温まで冷却し、ジエチルエーテルで希釈し、フリットガラスを介して濾過した。この固体をジエチルエーテルで洗浄し、乾燥させて６−ブロモ−Ｎ−（３−クロロ−４−メトキシフェニル）キナゾリン−４−アミン（３Ｈ）を黄色−金色固体として得た（２．１ｇ、８９％）。１Ｈ  ＮＭＲ  （４００ＭＨｚ，  ＤＭＳＯ−ｄ６）  δ  １１．５  （ｂｒ  ｓ，  １Ｈ），  ９．１５  （ｓ，  １Ｈ），  ８．９２  （ｓ，  １Ｈ），  ８．２１  （ｄ，  Ｊ＝９  Ｈｚ，  １Ｈ），  ７．８−８．０  （ｍ，  ２Ｈ），  ７．６６  （ｄｄ，  Ｊ＝８．９，  ２．３  Ｈｚ，  １Ｈ），  ７．２５  （ｄ，  Ｊ＝８．９  Ｈｚ，  １Ｈ），  ３．９５
（ｓ，  ３Ｈ）；  ＭＳ：  （ＥＳＩ  ＋  ｍ／ｚ  ３６４．０，  ３６６．０  （Ｂｒ同位体），  ＥＳＩ  −  ｍ／ｚ  ３６２．０，  ３６４．０  （Ｂｒ同位体））。６−ブロ−Ｎ−（３−クロロ−４−メトキシフェニル）キナゾリン−４−アミン（１．８５ｇ、５．０８ｍｍｏｌ）及び３−アミノピリジン−５−ボロン酸ピナコールエステル（６、９３２ｍｇ、４．２３ｍｍｏｌ）の１，４−ジオキサン（９０ｍＬ）及び水（７．６ｍＬ）溶液を脱気した。この溶液に炭酸セシウム（６．９ｇ、２１．１ｍｍｏｌ）及び［１，１’−ビス（ジフェニルホスフィノフェロセン］ジクロロパラジウム（ＩＩ）（３６６ｍｇ）を添加した。この反応混合物をＮ２下にて９０℃〜９５℃で４時間加熱した。この反応混合物を酢酸エチル、ジクロロメタン、及びメタノールで希釈し、飽和重炭酸ナトリウム、水、及びブラインで洗浄し、硫酸マグネシウムで乾燥させ、濾過し、真空下で濃縮した。この原料を２／９８〜２５／７５メタノール／酢酸エチルの勾配で溶出するシリカゲルカラムクロマトグラフィーによって精製し、６−（５−アミノピリジン−３−イル）−Ｎ−（３−クロロ−４−メトキシフェニル）キナゾリン−４−アミン（７Ｈ）を白色固体として得た（５２４ｍｇ、収率３３％）。６−（５−アミノピリジン−３−イル）−Ｎ−（３−クロロ−４−メトキシフェニル）キナゾリン−４−アミン（２５０ｍｇ、０．６６ｍｍｏｌ）のピリジン（１５ｍＬ）の室温溶液に、メタンスルホニルクロリド（３０３ｍｇ、２．６５ｍｍｏｌ）を添加した。この反応混合物は暗赤色になり、これが持続した。これを１時間攪拌した。この反応混合物を飽和重炭酸ナトリウム溶液に注ぎ、有機物質を酢酸エチルで抽出した。この有機相を水及びブラインで洗浄し、硫酸マグネシウムで乾燥させ、濾過し、真空下で濃縮した。この黄色の粗固体をメタノールに溶解した。酢酸エチル及びジエチルエーテルを濁りが認められるまで添加した。この混合物を１時間攪拌し、得られた固体を濾過し、酢酸エチルで洗浄し、乾燥させてＮ−（５−（４−（（３−クロロ−４−メトキシフェニル）アミノ）キナゾリン−６−イル）ピリジン−３−イル）メタンスルホンアミド（５Ｈ、ＭＯＬ−１５３、１２０ｍｇ、収率４０％、純度９４％）を鮮黄色粉体として得た。１Ｈ  ＮＭＲ  （４００ＭＨｚ，  ＤＭＳＯ−ｄ６）  δ  １１．６  （ｂｒ  ｓ，  １Ｈ），  １０．３  （ｂｒ  ｓ，  １Ｈ），  ９．１７  （ｓ，
１Ｈ），  ８．９５  （ｓ，  １Ｈ），  ８．８８  （ｂｒ  ｓ，  １Ｈ），  ８．５２  （ｂｒ  ｓ，  １Ｈ），  ８．４０  （ｄｄ，  Ｊ＝１．３，  ８．６  Ｈｚ，１Ｈ），  ８．０−８．１  （ｍ，  １Ｈ），  ７．８９  （ｄ，  Ｊ＝２．６  Ｈｚ，  １Ｈ），  ７．６６  （ｄｄ，  Ｊ＝２．６，  ８．９  Ｈｚ，  １Ｈ），  ７．２８  （ｄ，  Ｊ＝９．０  Ｈｚ，  １Ｈ），  ３．９０  （ｓ，  ３Ｈ），  ３．１６  （ｓ，
３Ｈ）；  ＭＳ：  （ＥＳＩ  ＋  ｍ／ｚ  ４５６）。
【０１７２】
実施例５．
本実施例は、ミシガン大学キナゾリン実験（ＭＯＬ−１５４の合成）を示す。
【０１７３】
【化１８】
2019206549.tif 000058
【０１７４】
反応条件：（ｉ）ピリジン、３−フルオロベンゼンスルホニルクロリド、室温、１時間
８、（Ｎ−（５−（４−（（３−クロロ−４−メトキシフェニル）アミノ）キナゾリン−６−イル）ピリジン−３−イル）−３−フルオロベンゼンスルホンアミド、ＭＯＬ−１５４）
６−（５−アミノピリジン−３−イル）−Ｎ−（３−クロロ−４−メトキシフェニル）キナゾリン−４−アミン（７Ｈ、２５０ｍｇ、０．６６ｍｍｏｌ）のピリジン（１５ｍＬ）の室温溶液に、３−フルオロベンゼンスルホニルクロリド（５１６ｍｇ、２．６５ｍｍｏｌ）を添加した。この反応混合物は暗赤色になり、これが持続した。これを１時間攪拌した。この反応混合物を飽和重炭酸ナトリウム溶液に注ぎ、有機物質を酢酸エチルで抽出した。この有機相を水及びブラインで洗浄し、硫酸マグネシウムで乾燥させ、濾過し、真空下で濃縮した。ヘプタンでの回転蒸発で黄色の粗固体を得、これをメタノールと酢酸エチルとジエチルエーテルとの混合物の下で１時間粉砕し、得られた固体を濾過し、乾燥させてＮ−（５−（４−（（３−クロロ−４−メトキシフェニル）アミノ）キナゾリン−６−イル）ピリジン−３−イル）−３−フルオロベンゼンスルホンアミド（８、ＭＯＬ−１５４、１２０ｍｇ、収率３４％、純度１００％）を黄色粉体として得た。１Ｈ  ＮＭＲ  （４００ＭＨｚ，  ＤＭＳＯ−ｄ６）  δ  １０．８  （ｂｒ  ｓ，  １Ｈ），  １０．０  （ｂｒ  ｓ，  １Ｈ），  ８．８２  （ｓ，  ２Ｈ），  ８．６２  （ｓ，  １Ｈ），  ８．２９  （ｄ，  Ｊ＝２．２  Ｈｚ，  １Ｈ），  ８．０７  （ｄ，  Ｊ＝７．５
Ｈｚ，  １Ｈ），  ７．９６  （ｄ，  Ｊ＝２．３  Ｈｚ，  １Ｈ），  ７．９３  （ｄ，  Ｊ＝１．９  Ｈｚ，  １Ｈ），  ７．８７  （ｄ，  Ｊ＝８．９  Ｈｚ，  １Ｈ），  ７．７２  （ｄｄ，  Ｊ＝２．４，  ８．９  Ｈｚ，１Ｈ），  ７．６−７．７  （ｍ，  ２Ｈ），  ７．４５−７．５５  （ｍ，  １Ｈ），  ７．２８  （ｄ，  Ｊ＝９．０  Ｈｚ，  １Ｈ），  ３．８８  （ｓ，  ３Ｈ）；  ＭＳ：  （ＥＳＩ  ＋  ｍ／ｚ  ５３６）。
【０１７５】
実施例６．
本実施例は、ミシガン大学キナゾリンライブラリー４−実験（ＭＯＬ−１７１〜１７７、ＭＯＬ−１８１〜１８６、及びＭＯＬ−１９１〜１９６の合成）を示す。
【０１７６】
【化１９】
2019206549.tif 000059
【０１７７】
反応条件：（ｉ）ＳｉｌｉａＣａｔＤｐｐ−Ｐｄ  ５ｍｏｌ％、１０％Ｋ２ＣＯ３、ＥｔＯＨ、１００℃、１２〜３０分、ｕＷ
３Ａ−  ６−ブロモ−Ｎ−（３−クロロ−４−フルオロフェニル）キナゾリン−４−アミン
３Ｂ−  ６−ブロモ−Ｎ−（３−クロロフェニル）キナゾリン−４−アミン
３Ｃ−  ６−ブロモ−Ｎ−（５−クロロピリジン−３−イル）キナゾリン−４−アミン
９Ａ−  （２−アミノピリミジン−５−イル）ボロン酸
９Ｂ−  ５−（４，４，５，５−テトラメチル−１，３，２−ジオキサボロラン−２−イル）−１Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピリジン
９Ｃ−  １−メチル−３−（４−（４，４，５，５−テトラメチル−１，３，２−ジオキサボロラン−２−イル）フェニル）ウレア
９Ｄ−  Ｎ−（３−（４，４，５，５−テトラメチル−１，３，２−ジオキサボロラン−２−イル）フェニル）メタンスルホンアミド
９Ｅ−  （３−（２Ｈ−テトラゾール−５−イル）フェニル）ボロン酸
９Ｆ−  （１Ｈ−ピラゾール−４−イル）ボロン酸
１０Ａ、６−（２−アミノピリミジン−５−イル）−Ｎ−（３−クロロフェニル）キナゾリン−４−アミン、ＭＯＬ−１７１
６−ブロモ−Ｎ−（３−クロロフェニル）キナゾリン−４−アミン（３Ｂ、０．１１５ｇ、０．３４３ｍｍｏｌ）の無水エタノールからなる溶液を（４ｍＬ）、攪拌棒を備えた５ｍＬのマイクロ波反応バイアルに入れた。次に、（２−アミノピリミジン−５−イル）ボロン酸（９Ａ、０．５０ｇ、０．３６１ｍｍｏｌ）、続いてＳｉｌｉＣａｔ  ＤＰＰ−Ｐｄ（５ｍｏｌ％、０．２６ｍｍｏｌ／ｇ充填、０．０６８ｇ）及び１０％炭酸カリウム水溶液（２当量、０．５０ｍＬ、０．６８ｍｍｏｌ）を添加した。この反応混合物をＮ２雰囲気下に置き、蓋をして、その後Ｂｉｏｔａｇｅ  Ｅｍｒｙｓ  Ｏｐｔｉｍｉｚｅｒのマイクロ波にて１００℃で１５分間加熱した。この反応混合物を室温まで冷却し、その後フリット漏斗で濾過してＳｉｌｉＣａｔ  ＤＰＰ−Ｐｄを集めた。濾過した固体を過剰のエタノールですすぎ、この濾液を減圧下で濃縮して粗生成物を得た。４〜１００％の酢酸エチルを含むヘプタンの勾配に続いて０〜１０％のメタノールを含むジクロロメタンの勾配を用いたＢｉｏｔａｇｅ  Ｉｓｏｌｅｒａフラッシュクロマトグラフィーによるこの粗生成物の精製により、６−（２−アミノピリミジン−５−イル）−Ｎ−（３−クロロフェニル）キナゾリン−４−アミン（１０Ａ、ＭＯＬ−１７１、２６．４ｍｇ、収率２２％、純度９５％）を白色固体として得た。１Ｈ  ＮＭＲ  （４００ＭＨｚ，  ＤＭＳＯ−ｄ６）  δ  ９．８８  （ｓ，  １Ｈ），  ８．８３  （ｓ，  １Ｈ），  ８．７６  （ｍ，
１Ｈ），  ８．６５  （ｓ，  １Ｈ），  ８．２０  （ｄｄ，  Ｊ  ＝  １．６５，  ８．６０Ｈｚ，  １Ｈ），  ８．１０  （ｔ，  Ｊ＝１．９２  Ｈｚ，  １Ｈ），  ７．７３−７．９９  （ｍ，  ２Ｈ），  ７．４５  （ｔ，  Ｊ＝８．１４  Ｈｚ，  １Ｈ），  ７．０７−７．３１  （ｍ，  １Ｈ），  ６．９５  （ｓ，  ２Ｈ）；  ＭＳ：  （ＥＳＩ  ＋  ｍ／ｚ  ３４８．８，  ＥＳＩ  −  ｍ／ｚ  ３４６．８）；  ＴＬＣ：  （９０：１０：０．５，  ＤＣＭ：ＭｅＯＨ：ＮＨ４ＯＨ）  Ｒｆ  ＝  ０．５２。
以下の各々（１０Ｂ〜１０Ｆ）は、別途示されない限り、１０Ａについて記載した方法で調製した。
【０１７８】
１０Ｂ、Ｎ−（３−クロロフェニル）−６−（１Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピリジン−５−イル）キナゾリン−４−アミン、ＭＯＬ−１７２
９Ａの代わりに５−（４，４，５，５−テトラメチル−１，３，２−ジオキサボロラン−２−イル）−１Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピリジン９Ｂを使用して表題化合物をオフホワイトの固体として得た（０．０２２ｇ、収率２０％、純度９７％）。１Ｈ  ＮＭＲ  （４００ＭＨｚ，  ＤＭＳＯ−ｄ６）  δ  １１．８１  （ｂｒ．  ｓ．，  １Ｈ），  １０．０６  （ｂｒ．  ｓ．，  １Ｈ），  ８．８６  （ｓ，  １Ｈ），  ８．７５  （ｄ，  Ｊ＝１．８３  Ｈｚ，  １Ｈ），  ８．５６  （ｂｒ．  ｓ．，  １Ｈ），  ８．４２  （ｄ，  Ｊ  ＝２．０１  Ｈｚ，  １Ｈ），  ８．２２  （ｄ，  Ｊ＝８．０５  Ｈｚ，  １Ｈ），  ８．０５  （ｂｒ．  ｓ．，  １Ｈ），  ７．６８−７．９３  （ｍ，
２Ｈ），  ７．５６  （ｄ，  Ｊ＝３．２９  Ｈｚ，  １Ｈ），  ７．４０  （ｔ，  Ｊ＝８．１４  Ｈｚ，  １Ｈ），  ７．１２  （ｄ，  Ｊ＝７．１４  Ｈｚ，  １Ｈ），
６．５６  （ｄ，  Ｊ＝５．５１  Ｈｚ，  １Ｈ）；  ＭＳ：  （ＥＳＩ  ＋  ｍ／ｚ
３７１．８，  ＥＳＩ  −  ｍ／ｚ  ３６９．８）；  ＴＬＣ：  （９０：１０：０．５，  ＤＣＭ：ＭｅＯＨ：ＮＨ４ＯＨ）  Ｒｆ  ＝  ０．５４。
【０１７９】
１０Ｃ、１−（４−（４−（（３−クロロフェニル）アミノ）キナゾリン−６−イル）フェニル）−３−メチルウレア、ＭＯＬ−１７３
９Ａの代わりに１−メチル−３−（４−（４，４，５，５−テトラメチル−１，３，２−ジオキサボロラン−２−イル）フェニル）ウレア９Ｃを使用して表題化合物をオフホワイトの固体として得た（０．０３７ｇ、収率２８％、純度９６％）。１Ｈ  ＮＭＲ  （４００ＭＨｚ，  ＤＭＳＯ−ｄ６）  δ  ９．９６  （ｓ，  １Ｈ），  ８．７７  （ｄ，
Ｊ＝１．８３  Ｈｚ，  １Ｈ），  ８．７１  （ｓ，  １Ｈ），  ８．６４  （ｓ，  １Ｈ），  ８．１４−８．４１  （ｍ，  １Ｈ），  ８．０１−８．１４  （ｍ，  １Ｈ），  ７．６９−７．９６  （ｍ，  ２Ｈ），  ７．５９  （ｄ，  Ｊ＝８．６０  Ｈｚ，  １Ｈ），  ７．４５  （ｔ，  Ｊ＝８．１４  Ｈｚ，  １Ｈ），  ７．０６−７．３１  （ｍ，  １Ｈ），  ６．０７  （ｄ，  Ｊ＝４．５７  Ｈｚ，  １Ｈ），  ３．３３
（ｓ，  ３Ｈ）；  ＭＳ：  （ＥＳＩ  ＋  ｍ／ｚ  ４０３．８，  ＥＳＩ  −  ｍ／ｚ  ４０１．８）；  ＴＬＣ：  （９０：１０：０．５，  ＤＣＭ：ＭｅＯＨ：ＮＨ４ＯＨ）  Ｒｆ  ＝  ０．５４。
【０１８０】
１０Ｄ、Ｎ−（３−（４−（（３−クロロフェニル）アミノ）キナゾリン−６−イル）フェニル）メタンスルホンアミド、ＭＯＬ−１７４
９Ａの代わりにＮ−（３−（４，４，５，５−テトラメチル−１，３，２−ジオキサボロラン−２−イル）フェニル）メタンスルホンアミドウレア９Ｄを使用して表題化合物をオフホワイトの固体として得た（０．０４９ｇ、収率３９％、純度９６％）。１Ｈ  ＮＭＲ  （４００ＭＨｚ，  ＤＭＳＯ−ｄ６）  δ  １０．０４  （ｓ，  １Ｈ），  ９．９１  （ｓ，  １Ｈ），  ８．８１  （ｄ，  Ｊ＝１．８３  Ｈｚ，  １Ｈ），  ８．６８
（ｓ，  １Ｈ），  ８．０２−８．２２  （ｍ，  ２Ｈ），  ７．７５−８．０１  （ｍ，  ２Ｈ），  ７．５９−７．６７  （ｍ，  １Ｈ），  ７．５０−７．５９  （ｍ，
１Ｈ），  ７．４５  （ｔ，  Ｊ＝８．１４  Ｈｚ，  １Ｈ），  ７．３１  （ｄ，  Ｊ＝８．６０  Ｈｚ，  １Ｈ），  ７．２０  （ｄｄ，  Ｊ＝１．７４，  ７．７８  Ｈｚ，  １Ｈ）  ３．０７  （ｓ，  ３Ｈ）；  ＭＳ：  （ＥＳＩ  ＋  ｍ／ｚ  ４２５．８，  ＥＳＩ  −  ｍ／ｚ  ４２３．７）；  ＴＬＣ：  （９０：１０：０．５，  ＤＣＭ：ＭｅＯＨ：ＮＨ４ＯＨ）  Ｒｆ  ＝  ０．６２。
【０１８１】
１０Ｅ、６−（３−（１Ｈ−テトラゾール−５−イル）フェニル）−Ｎ−（３−クロロフェニル）キナゾリン−４−アミン、ＭＯＬ−１７５
９Ａの代わりに（３−（２Ｈ−テトラゾール−５−イル）フェニル）ボロン酸９Ｅを使用して表題化合物をオフホワイトの固体として得た（０．０４９ｇ、収率２１％、純度９８％）。１Ｈ  ＮＭＲ  （４００ＭＨｚ，  ＤＭＳＯ−ｄ６）  δ  １０．１０  （ｂｒ．  ｓ．，  １Ｈ），  ８．９４  （ｓ，  １Ｈ），  ８．５４  （ｓ，  １Ｈ），  ８．２９  （ｄ，  Ｊ＝８．７８  Ｈｚ，  １Ｈ），  ８．０３−８．１９  （ｍ，  ２Ｈ），  ７．９６  （ｄ，  Ｊ＝８．６０  Ｈｚ，  １Ｈ），  ７．６４−７．９２  （ｍ，  ２Ｈ），  ７．４６  （ｔ，  Ｊ＝８．０５  Ｈｚ，  １Ｈ），  ７．２２  （ｄｄ，  Ｊ＝１．３０，  ７．９０  Ｈｚ，  １Ｈ）；  ＭＳ：  （ＥＳＩ  ＋  ｍ／ｚ  ４００．０，  ＥＳＩ  −  ｍ／ｚ  ３９８．１）；  ＴＬＣ：  （９０：１０：０．５，
ＤＣＭ：ＭｅＯＨ：ＮＨ４ＯＨ）  Ｒｆ  ＝  ０．５６。
【０１８２】
１０Ｆ、Ｎ−（３−クロロフェニル）−６−（１Ｈ−ピラゾール−４−イル）キナゾリン−４−アミン、ＭＯＬ−１７６
９Ａの代わりに（１Ｈ−ピラゾール−４−イル）ボロン酸９Ｆを使用して表題化合物を白色固体として得た（０．０１０ｇ、収率９％、純度９８％）。１Ｈ  ＮＭＲ  （４００ＭＨｚ，  ＤＭＳＯ−ｄ６）  δ  １３．１１  （ｂｒ．  ｓ．，  １Ｈ），  ９．８０
（ｓ，  １Ｈ），  ８．７２  （ｓ，  １Ｈ），  ８．６２  （ｓ，  １Ｈ），  ８．３５  （ｂｒ．  ｓ．，  １Ｈ）  ８．０９−８．２１  （ｍ，  ２Ｈ），  ７．８８  （ｄｄ，  Ｊ＝  １．８０，  ８．００  Ｈｚ，  １Ｈ），  ７．８０  （ｄ，  Ｊ＝８．７８  Ｈｚ，  １Ｈ），  ７．４６  （ｔ，  Ｊ＝８．１４  Ｈｚ，  １Ｈ），  ７．２０  （ｄｄ，  Ｊ＝１．８０，  ８．３４  Ｈｚ，  １Ｈ）；  ＭＳ：  （ＥＳＩ  ＋
ｍ／ｚ  ３２２．０，  ＥＳＩ  −  ｍ／ｚ  ３２０．０）；  ＴＬＣ：  （９０：１０：０．５，  ＤＣＭ：ＭｅＯＨ：ＮＨ４ＯＨ）  Ｒｆ  ＝  ０．５４。
【０１８３】
Ｎ−（３−クロロフェニル）−６−（１Ｈ−ピラゾロ［３，４−ｂ］ピリジン−５−イル）キナゾリン−４−アミン、ＭＯＬ−１７７
攪拌棒を備えた２ｍＬのマイクロ波反応バイアル中、６−ブロモ−Ｎ−（３−クロロフェニル）キナゾリン−４−アミン（０．１３３ｇ、０．３６ｍｍｏｌ）及び１Ｈ−ピラゾロ［３，４−ｂ］ピリジン−５−ボロン酸ピナコールエステル（０．１３３ｇ、０．５４ｍｍｏｌ）の１，４−ジオキサン（２ｍＬ）からなる溶液に２ＭのＫ２ＣＯ３（０．７２ｍＬ、１．４４ｍｍｏｌ）を添加した。この混合物を脱気した（真空／窒素、３回）後にＳｉｌｉＣａｔ  ＤＰＰ−Ｐｄ（０．１０ｇ、０．２６ｍｍｏｌ／ｇ充填）を添加し、その後、Ｂｉｏｔａｇｅ  Ｅｍｒｙｓ  Ｏｐｔｉｍｉｚｅｒのマイクロ波にて１４０℃で２０分間３回加熱した。この反応混合物を室温まで冷却し、使い捨てピペットでこの水層を除去し、残りの有機相をフリット漏斗で濾過してＳｉｌｉＣａｔ  ＤＰＰ−Ｐｄを集めた。濾過した固体を室温のメタノールですすぎ、この濾液を確保した。その後、濾過した固体を熱メタノールで十分に洗浄し、この濾液を減圧下で濃縮して表題化合物を淡黄色固体として得た（４３ｍｇ、３２％、純度９４．９％）。ＴＬＣ  Ｒｆ  ０．１０  （溶媒系：  ７：３  ｖ／ｖ酢酸エチル−ヘプタン）；  ＭＳ  （ＥＳ−ＡＰＩ＋）  ｍ／ｚ  ３７３．０  （Ｍ＋１），  ３７５．０  （Ｃｌ同位体），  （ＥＳ−ＡＰＩ−）  ｍ／ｚ
３７１．０  （Ｍ−１），  ３７３．０  （Ｃｌ同位体）；  １Ｈ  ＮＭＲ  （４００
ＭＨｚ，  ＤＭＳＯ−  ｄ６）  δ  ９．０１  （ｄ，  Ｊ＝１．２８  Ｈｚ，  １Ｈ），  ８．８６  （ｓ，  １Ｈ），  ８．６２  （ｓ，  １Ｈ），  ８．５３  （ｓ，  １Ｈ），  ８．１８−８．２５  （ｍ，  ２Ｈ），  ８．０１  （ｓ，  １Ｈ），  ７．８０  （ｄ，  Ｊ＝８．６９  Ｈｚ，  １Ｈ），  ７．７５  （ｂｒ  ｄ，  Ｊ＝８．２３  Ｈｚ，  １Ｈ），  ７．３７  （ｔ，  Ｊ＝７．９６  Ｈｚ，  １Ｈ），  ７．０９
（ｂｒ  ｄ，  Ｊ＝７．８７  Ｈｚ，  １Ｈ）。
【０１８４】
１１Ａ、６−（２−アミノピリミジン−５−イル）−Ｎ−（３−クロロ−４−フルオロフェニル）キナゾリン−４−アミン、ＭＯＬ−１８１
攪拌棒を備えた５ｍＬのマイクロ波反応バイアル中に、６−ブロモ−Ｎ−（３−クロロ−４−フルオロフェニル）キナゾリン−４−アミン（３Ａ、０．１５０ｇ、０．４２５ｍｍｏｌ）の無水エタノール（４ｍＬ）からなる溶液を入れた。次に、（２−アミノピリミジン−５−イル）ボロン酸（９Ａ、０．６２ｇ、０．４４７ｍｍｏｌ）に続いてＳｉｌｉＣａｔ  ＤＰＰ−Ｐｄ（５ｍｏｌ％、０．２６ｍｍｏｌ／ｇ充填、０．０８５ｇ）及び１０％炭酸カリウム水溶液（２当量、０．６２ｍＬ、０．８５ｍｍｏｌ）を添加した。この反応混合物をＮ２雰囲気下に置き、蓋をして、その後Ｂｉｏｔａｇｅ  Ｅｍｒｙｓ  Ｏｐｔｉｍｉｚｅｒのマイクロ波にて１００℃で１５分間加熱した。この反応混合物を室温まで冷却し、その後フリット漏斗で濾過してＳｉｌｉＣａｔ  ＤＰＰ−Ｐｄを集めた。濾過した固体を過剰のエタノールですすぎ、この濾液を減圧下で濃縮して粗生成物を得た。４〜１００％の酢酸エチルを含むヘプタンの勾配に続いて０〜１０％メタノールを含むジクロロメタンの勾配を用いたＢｉｏｔａｇｅ  Ｉｓｏｌｅｒａフラッシュクロマトグラフィーによるこの粗生成物の精製により、６−（２−アミノピリミジン−５−イル）−Ｎ−（３−クロロ−４−フルオロフェニル）キナゾリン−４−アミン（１１Ａ、ＭＯＬ−１８１、７５ｍｇ、収率４８％、純度９５％）を白色固体として得た。１Ｈ  ＮＭＲ  （４００ＭＨｚ，  ＤＭＳＯ−ｄ６）  δ  ９．９１  （ｓ，  １Ｈ），  ８．８２  （ｓ，  １Ｈ），  ８．６９−８．７８  （ｍ，  １Ｈ），  ８．６３  （ｓ，  １Ｈ），  ８．０４−８．２９  （ｍ，  １Ｈ），  ７．７８−７．９２  （ｍ，  １Ｈ），  ７．４９  （ｔ，  Ｊ＝９．０６  Ｈｚ，  １Ｈ），  ６．９６  （ｓ，  ２Ｈ）；  ＭＳ：  （ＥＳＩ  ＋  ｍ／ｚ  ３６７．０，  ＥＳＩ  −  ｍ／ｚ  ３６５．０）；  ＴＬＣ：  （９０：１０：０．５，  ＤＣＭ：ＭｅＯＨ：ＮＨ４ＯＨ）  Ｒｆ  ＝  ０．５８。
【０１８５】
以下の各々（１１Ｂ〜１１Ｆ）は、別途示されない限り、１１Ａについて記載した方法で調製した。
【０１８６】
１１Ｂ、Ｎ−（３−クロロ−４−フルオロフェニル）−６−（１Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピリジン−５−イル）キナゾリン−４−アミン、ＭＯＬ−１８２
９Ａの代わりに５−（４，４，５，５−テトラメチル−１，３，２−ジオキサボロラン−２−イル）−１Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピリジン９Ｂを使用して表題化合物をオフホワイトの固体として得た（０．０６７ｇ、収率４１％、純度９８％）。１Ｈ  ＮＭＲ  （４００ＭＨｚ，  ＤＭＳＯ−ｄ６）  δ  １１．８４  （ｂｒ．  ｓ．，  １Ｈ），  １０．０１  （ｓ，  １Ｈ），  ８．８３−８．９９  （ｍ，  １Ｈ），  ８．７８  （ｄ，  Ｊ＝２．０１  Ｈｚ，  １Ｈ），  ８．６５  （ｓ，  １Ｈ），  ８．４４  （ｄ，
Ｊ  ＝２．０１  Ｈｚ，  １Ｈ），  ８．１７−８．３７  （ｍ，  ２Ｈ），  ７．８３−７．９５  （ｍ，  １Ｈ），  ７．５７  （ｔ，  Ｊ＝２．９３  Ｈｚ，  １Ｈ），
７．４９  （ｔ，  Ｊ＝９．１５  Ｈｚ，  １Ｈ），  ６．４１−６．６７  （ｍ，  １Ｈ）；  ＭＳ：  （ＥＳＩ  ＋  ｍ／ｚ  ３９０．１，  ＥＳＩ  −  ｍ／ｚ  ３８８．１）；  ＴＬＣ：  （９０：１０：０．５，  ＤＣＭ：ＭｅＯＨ：ＮＨ４ＯＨ）  Ｒｆ
＝  ０．６３。
【０１８７】
１１Ｃ、１−（４−（４−（（３−クロロ−４−フルオロフェニル）アミノ）キナゾリン−６−イル）フェニル）−３−メチルウレア、ＭＯＬ−１８３
９Ａの代わりに１−メチル−３−（４−（４，４，５，５−テトラメチル−１，３，２−ジオキサボロラン−２−イル）フェニル）ウレア９Ｃを使用して表題化合物をオフホワイトの固体として得た（０．０２２ｇ、収率１３％、純度１００％）。１Ｈ  ＮＭＲ  （４００ＭＨｚ，  ＤＭＳＯ−ｄ６）  δ  ９．９８  （ｓ，  １Ｈ），  ８．７５  （ｄ，  Ｊ＝１．４０  Ｈｚ，  １Ｈ），  ８．７１  （ｓ，  １Ｈ），  ８．６３  （ｓ，
１Ｈ），  ８．０６−８．２７  （ｍ，  １Ｈ），  ７．７０−７．９１  （ｍ，  ２Ｈ），  ７．５９  （ｄ，  Ｊ＝８．６０  Ｈｚ，  １Ｈ），  ７．４９  （ｔ，  Ｊ＝９．０６  Ｈｚ，  １Ｈ），  ６．０８  （ｄ，  Ｊ＝４．７６  Ｈｚ，  １Ｈ），  ３．３３  （ｓ，  ３Ｈ），  ２．６７  （ｄ，  Ｊ＝４．５７    Ｈｚ，  ２Ｈ）；  ＭＳ：  （ＥＳＩ  ＋  ｍ／ｚ  ４２２．１，  ＥＳＩ  −  ｍ／ｚ  ４２０．１）；  ＴＬＣ：  （９０：１０：０．５，  ＤＣＭ：ＭｅＯＨ：ＮＨ４ＯＨ）  Ｒｆ  ＝  ０．５８。
【０１８８】
１１Ｄ、Ｎ−（３−（４−（（３−クロロ−４−フルオロフェニル）アミノ）キナゾリン−６−イル）フェニル）メタンスルホンアミド、ＭＯＬ−１８４
９Ａの代わりにＮ−（３−（４，４，５，５−テトラメチル−１，３，２−ジオキサボロラン−２−イル）フェニル）メタンスルホンアミドウレア９Ｄを使用して表題化合物をオフホワイトの固体として得た（０．０５６ｇ、収率３０％、純度９６％）。１Ｈ  ＮＭＲ  （４００ＭＨｚ，  ＤＭＳＯ−ｄ６）  δ  １０．０６  （ｓ，  １Ｈ），  ９．９１  （ｓ，  １Ｈ），  ８．７７  （ｓ，  １Ｈ），  ８．６６  （ｓ，  １Ｈ），  ８．１９  （ｄｄ，  Ｊ＝２．４７，  ６．８６  Ｈｚ，  １Ｈ），  ８．１１  （ｄｄ，
Ｊ＝１．３７，  ８．６９  Ｈｚ，  １Ｈ），  ７．７２−７．９９  （ｍ，  ２Ｈ），  ７．４１−７．６５  （ｍ，  ３Ｈ），  ７．３０  （ｄ，  Ｊ＝７．８７  Ｈｚ，
１Ｈ），  ３．０７  （ｓ，  ３Ｈ）；  ＭＳ：  （ＥＳＩ  ＋  ｍ／ｚ  ４４３．１，  ＥＳＩ  −  ｍ／ｚ  ４４１．１）；  ＴＬＣ：  （９０：１０：０．５，  ＤＣＭ：ＭｅＯＨ：ＮＨ４ＯＨ）  Ｒｆ  ＝  ０．６６。
【０１８９】
１１Ｅ、６−（３−（１Ｈ−テトラゾール−５−イル）フェニル）−Ｎ−（３−クロロ−４−フルオロフェニル）キナゾリン−４−アミン、ＭＯＬ−１８５
９Ａの代わりに（３−（２Ｈ−テトラゾール−５−イル）フェニル）ボロン酸９Ｅを使用して表題化合物をオフホワイトの固体として得た（０．００７ｇ、収率４％、純度８３％）。１Ｈ  ＮＭＲ  （４００ＭＨｚ，  ＤＭＳＯ−ｄ６）  δ  １０．２４  （ｂｒ．
ｓ．，  １Ｈ），  ９．０３  （ｓ，  １Ｈ），  ８．６６  （ｍ，  ２Ｈ），  ８．２８  （ｍ，  ２Ｈ），  ８．１０  （ｄ，  Ｊ＝７．３２  Ｈｚ，  １Ｈ），  ７．８１−８．０３  （ｍ，  ２Ｈ），  ７．６８  （ｔ，  Ｊ＝７．３２Ｈｚ，  １Ｈ），  ７．４８  （ｔ，  Ｊ＝９．００  Ｈｚ，  １Ｈ）；  ＭＳ：  （ＥＳＩ  ＋  ｍ／ｚ  ４１８．０，  ＥＳＩ  −  ｍ／ｚ  ４１６．０）；  ＴＬＣ：  （９０：１０：０．５，  ＤＣＭ：ＭｅＯＨ：ＮＨ４ＯＨ）  Ｒｆ  ＝  ０．２２。
【０１９０】
１１Ｆ、Ｎ−（３−クロロ−４−フルオロフェニル）−６−（１Ｈ−ピラゾール−４−イル）キナゾリン−４−アミン、ＭＯＬ−１８６
９Ａの代わりに（１Ｈ−ピラゾール−４−イル）ボロン酸９Ｆを使用して表題化合物を白色固体として得た（０．０２２ｇ、収率１５％、純度９７％）。１Ｈ  ＮＭＲ  （４００ＭＨｚ，  ＤＭＳＯ−ｄ６）  δ  １３．１１  （ｂｒ．  ｓ．，  １Ｈ），  ９．８０  （ｓ，  １Ｈ），  ８．６９  （ｓ，  １Ｈ），  ８．５９  （ｓ，  １Ｈ），  ８．３５  （ｂｒ．  ｓ．，  １Ｈ）  ８．０２−８．２８  （ｍ，  ２Ｈ），  ７．８０−７．９２  （ｍ，  １Ｈ），  ７．７９  （ｄ，  Ｊ＝８．７８  Ｈｚ，  １Ｈ），  ７．４９  （ｔ，  Ｊ＝９．１４  Ｈｚ，  １Ｈ），  ７．２０  （ｄｄ，  Ｊ＝１．８０，  ８．３４  Ｈｚ，  １Ｈ）；  ＭＳ：  （ＥＳＩ  ＋  ｍ／ｚ  ３４０．０，  ＥＳＩ  −  ｍ／ｚ  ３３８．０）；  ＴＬＣ：  （９０：１０：０．５，  ＤＣＭ：ＭｅＯＨ：ＮＨ４ＯＨ）  Ｒｆ  ＝  ０．５４。
【０１９１】
３−（４−（（３−クロロ−４−フルオロフェニル）アミノ）キナゾリン−６−イル）−Ｎ−シクロプロピルベンゼンスルホンアミド、ＭＯＬ−２１４
６−ブロモ−Ｎ−（３−クロロフェニル）キナゾリン−４−アミン−ＨＣｌ（１００ｍｇ、０．２６ｍｍｏｌ）、（３−（Ｎ−シクロプロピルスルファモイル）フェニル）ボロン酸（９４ｍｇ、０．３９ｍｍｏｌ）、及び１．４ＭのＫ２ＣＯ３（１．１ｍＬ）からなる混合物を含む３ｍＬの１，４−ジオキサンを脱気した（真空／窒素、３回）。この反応混合物にＳｉｌｉＣａｔ  ＤＰＰ−Ｐｄ（５０ｍｇ、０．２６ｍｍｏｌ／ｇ充填）を添加した。この反応混合物を密閉し、Ｂｉｏｔａｇｅ  Ｅｍｒｙｓ  Ｏｐｔｉｍｉｚｅｒのマイクロ波にて１００℃で１２分間加熱した。この反応混合物に、追加の２−クロロ−５−（４，４，５，５−テトラメチル−１，３，２−ジオキサボロラン−２−イル）アニリン（４０ｍｇ、０．１６ｍｍｏｌ）及びＳｉｌｉＣａｔ  ＤＰＰ−Ｐｄ（３０ｍｇ）を添加した。この反応混合物を再度１２０℃で１５分間加熱し、冷却した。この水相を除去し、残りの有機相を、ガラスフリットを介して濾過した。この固体をメタノールで洗浄した。この濾液を減圧下で濃縮した。この白色固体残渣を、乾燥充填法を用いて４０ｇのシリカカラムに加え、４：６酢酸エチル−ヘプタン〜１００％酢酸エチルの勾配で溶出し、２０ｍｇ（１６％、純度９６％）の表題化合物を淡黄色固体として得た。ＭＳ  （ＥＳ−ＡＰＩ＋）  ｍ／ｚ  ４６９．０  （Ｍ＋１），  ４７１．０  （Ｃｌ同位体）；  １Ｈ  ＮＭＲ  （４００  ＭＨｚ，  ＤＭＳＯ−  ｄ６）  δ  １０．１３  （ｓ，  １Ｈ），  ８．８７  （ｓ，  １Ｈ），  ８．６７  （ｓ，  １Ｈ），  ８．１４−８．２７  （ｍ，  ４Ｈ），  ８．０１  （ｄ，  Ｊ＝２．６５  Ｈｚ，  １Ｈ），  ７．９５  （ｄ，
Ｊ＝８．６９  Ｈｚ，  １Ｈ），  ７．８７−７．９２  （ｍ，  １Ｈ），  ７．７９−７．８７  （ｍ，  ２Ｈ），  ７．４９  （ｔ，  Ｊ＝９．０６  Ｈｚ，  １Ｈ），  ２．１７  （ｄｔ，Ｊ＝３．３４，  ６．７５  Ｈｚ，  １Ｈ），  ０．３７−０．５４
（ｍ，  ４Ｈ）。
【０１９２】
１３  Ｎ−（３−クロロ−４−フルオロフェニル）−６−（６−メトキシピリジン−３−イル）キナゾリン−４−アミン、ＭＯＬ−１５１
６−ブロモ−Ｎ−（３−クロロ−４−フルオロフェニル）キナゾリン−４−アミン（３Ａ、２７５ｍｇ、０．７８ｍｍｏｌ）及び（６−メトキシピリジン−３−イル）ボロン酸（９Ｇ、１１９ｍｇ、０．７８ｍｍｏｌ）の１，４−ジオキサン（１５ｍＬ）及び水（１．４ｍＬ）の溶液を脱気した。この溶液に炭酸セシウム（１．０ｇ、３．１ｍｍｏｌ）及び［１，１’−ビス（ジフェニルホスフィノ）フェロセン］ジクロロパラジウム（ＩＩ）（４４ｍｇ）を添加した。この反応混合物をＮ２下にて８０℃で２時間加熱した。この反応混合物をトルエンで希釈し、揮発性物質を真空下で除去し、この原料をシリカゲルカラムクロマトグラフィーにより３／７〜６／４の酢酸エチル／ヘプタン勾配で溶出して精製して、Ｎ−（３−クロロ−４−フルオロフェニル）−６−（６−メトキシピリジン−３−イル）キナゾリン−４−アミン（１３、ＭＯＬ−１５１，４０ｍｇ、１３％、ＨＰＬＣによる純度９５％）を黄色固体として得た。１Ｈ  ＮＭＲ  （４００ＭＨｚ，  ＤＭＳＯ−ｄ６）  δ  ９．９３  （ｓ，  １Ｈ），  ８．７７  （ｄ，  Ｊ＝１．５  Ｈｚ，  １Ｈ），  ８．６９  （ｄ，  Ｊ＝２．６  Ｈｚ，  １Ｈ），  ８．６３  （ｓ，  １Ｈ），  ８．１−８．２４  （ｍ，  ３Ｈ），  ７．７８−７．９２  （ｍ，  ２Ｈ），  ７．４６  （ｔ，  Ｊ＝９．１５  Ｈｚ，  １Ｈ），  ７．００  （ｄ，  Ｊ＝８．８  Ｈｚ，  １Ｈ），  ３．９２  （ｓ，  ３Ｈ）；  ＭＳ：  （ＥＳＩ  ＋  ｍ／ｚ  ３８１．１，  ＥＳＩ  −  ｍ／ｚ  ３７９．１）。
【０１９３】
１２Ａ、６−（２−アミノピリミジン−５−イル）−Ｎ−（５−クロロピリジン−３−イル）キナゾリン−４−アミン、ＭＯＬ−１９１
６−ブロモ−Ｎ−（５−クロロピリジン−３−イル）キナゾリン−４−アミン（３Ｃ、０．１５０ｇ、０．４４７ｍｍｏｌ）の無水エタノール（４ｍＬ）からなる溶液を、攪拌棒を備えた５ｍＬのマイクロ波反応バイアルに入れた。次に、（２−アミノピリミジン−５−イル）ボロン酸（９Ａ、０．６５ｇ、０．４６９ｍｍｏｌ）、続いてＳｉｌｉＣａｔ
ＤＰＰ−Ｐｄ（５ｍｏｌ％、０．２６ｍｍｏｌ／ｇ充填、０．０９０ｇ）及び１０％炭酸カリウム水溶液（２当量、０．６５ｍＬ、０．８９ｍｍｏｌ）を添加した。この反応混合物をＮ２雰囲気下に置き、蓋をし、その後Ｂｉｏｔａｇｅ  Ｅｍｒｙｓ  Ｏｐｔｉｍｉｚｅｒのマイクロ波にて１００℃で１５分間加熱した。この反応混合物を室温まで冷却し、その後フリット漏斗で濾過してＳｉｌｉＣａｔ  ＤＰＰ−Ｐｄを集めた。濾過した固体を過剰のエタノールですすぎ、この濾液を減圧下で濃縮して粗生成物を得た。４〜１００％の酢酸エチルを含むヘプタンの勾配に続いて０〜１０％のメタノールを含むジクロロメタンの勾配を用いたＢｉｏｔａｇｅ  Ｉｓｏｌｅｒａフラッシュクロマトグラフィーによるこの粗生成物の精製により、６−（２−アミノピリミジン−５−イル）−Ｎ−（５−クロロピリジン−３−イル）キナゾリン−４−アミン（１２Ａ、ＭＯＬ−１９１、４４ｍｇ、収率２８％、純度９５％）を白色固体として得た。１Ｈ  ＮＭＲ  （４００ＭＨｚ，  ＤＭＳＯ−ｄ６）  δ  １０．０６  （ｓ，  １Ｈ），  ９．０１  （ｓ，  １Ｈ），  ８．８３  （ｓ，  １Ｈ），  ８．７０  （ｓ，  １Ｈ），  ８．６２  （ｂｒ．  ｓ．，  １Ｈ），  ８．３９  （ｄ，  Ｊ＝１．５０  Ｈｚ，  １Ｈ），  ８．２３  （ｄ，
Ｊ＝８．２３  Ｈｚ  １Ｈ），  ７．  ８９（ｄ，  Ｊ＝８．６０  Ｈｚ，  １Ｈ），
６．９７  （ｓ，  ２Ｈ）；  ＭＳ：  （ＥＳＩ  ＋  ｍ／ｚ  ３５０．０，  ＥＳＩ
−  ｍ／ｚ  ３４８．０）；  ＴＬＣ：  （９０：１０：０．５，  ＤＣＭ：ＭｅＯＨ：ＮＨ４ＯＨ）  Ｒｆ  ＝  ０．４０。
【０１９４】
以下の各々（１２Ｂ〜１２Ｆ）は、別途示されない限り、１２Ａについて記載した方法で調製した。
【０１９５】
１２Ｂ、Ｎ−（５−クロロピリジン−３−イル）−６−（１Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピリジン−５−イル）キナゾリン−４−アミン、ＭＯＬ−１９２
９Ａの代わりに５−（４，４，５，５−テトラメチル−１，３，２−ジオキサボロラン−２−イル）−１Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピリジン９Ｂを使用して表題化合物をオフホワイトの固体として得た（０．０５２ｇ、収率３１％、純度９８％）。１Ｈ  ＮＭＲ  （４００ＭＨｚ，  ＤＭＳＯ−ｄ６）  δ  １１．８４  （ｂｒ．  ｓ．，  １Ｈ），  １０．１６  （ｓ，  １Ｈ），  ９．０３  （ｄ，  Ｊ＝２．０１  Ｈｚ，  １Ｈ），  ８．８９  （ｍ，  １Ｈ），  ８．７８  （ｄ，  Ｊ＝２．０１  Ｈｚ，  １Ｈ），  ８．７１  （ｓ，  １Ｈ），  ８．６３  （ｔ，  Ｊ  ＝２．０１  Ｈｚ，  １Ｈ），  ８．４４  （ｄ，  Ｊ  ＝２．０１  Ｈｚ，  １Ｈ），  ８．１４−８．４１  （ｍ，  ２Ｈ），  ７．９３  （ｄ，  Ｊ  ＝８．６０  Ｈｚ，  １Ｈ），  ７．５７  （ｔ，  Ｊ＝２．９３  Ｈｚ，  １Ｈ），  ６．５７  （ｄｄ，  Ｊ＝１．８３，  ３．４８  Ｈｚ，
１Ｈ）；  ＭＳ：  （ＥＳＩ  ＋  ｍ／ｚ  ３７３．１，  ＥＳＩ  −  ｍ／ｚ  ３７１．１）；  ＴＬＣ：  （９０：１０：０．５，  ＤＣＭ：ＭｅＯＨ：ＮＨ４ＯＨ）  Ｒｆ  ＝  ０．５０。
【０１９６】
１２Ｃ、１−（４−（４−（（５−クロロピリジン−３−イル）アミノ）キナゾリン−６−イル）フェニル）−３−メチルウレア、ＭＯＬ−１９３
９Ａの代わりに１−メチル−３−（４−（４，４，５，５−テトラメチル−１，３，２−ジオキサボロラン−２−イル）フェニル）ウレア９Ｃを使用して表題化合物を白色固体として得た（０．０１６ｇ、収率９％、純度９８％）。１Ｈ  ＮＭＲ  （４００ＭＨｚ，
ＤＭＳＯ−ｄ６）  δ  １０．１４  （ｂｒ．  ｓ．，  １Ｈ），  ９．０２  （ｂｒ．  ｓ．，  １Ｈ），  ８．６５−８．８８  （ｍ，  ２Ｈ），  ８．６２  （ｂｒ．  ｓ．，  １Ｈ），  ８．３８  （ｂｒ．  ｓ．，  １Ｈ），  ８．２１  （ｄ，  Ｊ＝８．７８  Ｈｚ，  １Ｈ），  ７．８８  （ｄ，  Ｊ＝８．４２  Ｈｚ，  １Ｈ），  ７．７９（ｄ，  Ｊ＝８．４２  Ｈｚ，  １Ｈ），  ７．５９  （ｄ，  Ｊ＝８．４２  Ｈｚ，  １Ｈ），  ６．０８  （ｄ，  Ｊ＝４．７６  Ｈｚ，  １Ｈ），  ３．３３  （ｓ，
３Ｈ），  ２．６７  （ｄ，  Ｊ＝４．２１  Ｈｚ，  ２Ｈ）；  ＭＳ：  （ＥＳＩ  ＋  ｍ／ｚ  ４０５．１，  ＥＳＩ  −  ｍ／ｚ  ４０３．１）；  ＴＬＣ：  （９０：１０：０．５，  ＤＣＭ：ＭｅＯＨ：ＮＨ４ＯＨ）  Ｒｆ  ＝  ０．４９。
【０１９７】
１２Ｄ、Ｎ−（３−（４−（（５−クロロピリジン−３−イル）アミノ）キナゾリン−６−イル）フェニル）メタンスルホンアミド、ＭＯＬ−１９４
９Ａの代わりにＮ−（３−（４，４，５，５−テトラメチル−１，３，２−ジオキサボロラン−２−イル）フェニル）メタンスルホンアミドウレア９Ｄを使用して表題化合物を白色固体として得た（０．０４９ｇ、収率２６％、純度９７％）。１Ｈ  ＮＭＲ  （４００ＭＨｚ，  ＤＭＳＯ−ｄ６）  δ  １０．２３  （ｓ，  １Ｈ），  ９．９３  （ｓ，
１Ｈ），  ９．００  （ｓ，  １Ｈ），  ８．８０  （ｓ，  １Ｈ），  ８．７３  （ｓ，  １Ｈ），  ８．６１  （ｂｒ．  ｓ．，  １Ｈ），  ８．３９  （ｄ，  Ｊ＝２．０１  Ｈｚ，  １Ｈ），  ８．１４  （ｄｄ，  Ｊ＝１．３７，  ８．６９  Ｈｚ，  １Ｈ），  ７．９５  （ｄ，  Ｊ＝８．７８  Ｈｚ，  １Ｈ），  ７．４３−７．６５  （ｍ，  ２Ｈ），  ７．３２  （ｄ，  Ｊ＝７．８７  Ｈｚ，  １Ｈ），  ３．０８  （ｓ，  ３Ｈ）；  ＭＳ：  （ＥＳＩ  ＋  ｍ／ｚ  ４２６．０，  ＥＳＩ  −  ｍ／ｚ  ４２４．０）；  ＴＬＣ：  （９０：１０：０．５，  ＤＣＭ：ＭｅＯＨ：ＮＨ４ＯＨ）  Ｒｆ  ＝  ０．５１。
【０１９８】
１２Ｅ、６−（３−（１Ｈ−テトラゾール−５−イル）フェニル）−Ｎ−（５−クロロピリジン−３−イル）キナゾリン−４−アミン、ＭＯＬ−１９５
９Ａの代わりに（３−（２Ｈ−テトラゾール−５−イル）フェニル）ボロン酸９Ｅを使用して表題化合物をオフホワイトの固体として得た（０．０３０ｇ、収率１７％、純度９５％）。１Ｈ  ＮＭＲ  （４００ＭＨｚ，  ＤＭＳＯ−ｄ６）  δ  １０．２８  （ｓ，
１Ｈ），  ９．０１  （ｄ，  Ｊ＝１．８３  Ｈｚ，  １Ｈ），  ８．９３  （ｓ，  １Ｈ），  ８．７４  （ｓ，  １Ｈ），  ８．６１  （ｔ，  Ｊ＝１．８３  Ｈｚ，  ２Ｈ），  ８．５４  （ｓ，  １Ｈ），  ８．４０  （ｄ，  Ｊ＝２．０１  Ｈｚ，  １Ｈ），  ８．３２  （ｄｄ，  Ｊ＝１．４６，  ８．７８  Ｈｚ，  １Ｈ），  ８．１０  （ｄｄ，  Ｊ＝８．０５，  １３．９１  Ｈｚ，  ２Ｈ），  ７．９９  （ｔ，  Ｊ＝８．６０Ｈｚ，  １Ｈ），  ７．８１  （ｔ，  Ｊ＝７．７８  Ｈｚ，  １Ｈ）；  ＭＳ：
（ＥＳＩ  ＋  ｍ／ｚ  ４０１．０，  ＥＳＩ  −  ｍ／ｚ  ３９９．１）；  ＴＬＣ：  （９０：１０：０．５，  ＤＣＭ：ＭｅＯＨ：ＮＨ４ＯＨ）  Ｒｆ  ＝  ０．０８。
【０１９９】
１２Ｆ、Ｎ−（５−クロロピリジン−３−イル）−６−（１Ｈ−ピラゾール−４−イル）キナゾリン−４−アミン、ＭＯＬ−１９６
９Ａの代わりに（１Ｈ−ピラゾール−４−イル）ボロン酸９Ｆを使用して表題化合物を白色固体として得た（０．０１０ｇ、収率７％、純度９９％）。１Ｈ  ＮＭＲ  （４００ＭＨｚ，  ＤＭＳＯ−ｄ６）  δ  １３．１２  （ｂｒ．  ｓ．，  １Ｈ），  ９．９８
（ｓ，  １Ｈ），  ９．０１  （ｂｒ．  ｓ．，  １Ｈ），  ８．６０−８．７２  （ｍ，  ３Ｈ），  ８．３８  （ｄ，  Ｊ＝２．０１  Ｈｚ，  １Ｈ），  ８．１８  （ｄ，  Ｊ＝８．４２  Ｈｚ，  ２Ｈ），  ７．８３  （ｄ，  Ｊ＝８．２３  Ｈｚ，  １Ｈ），  ７．６８  （ｓ，  １Ｈ）；  ＭＳ：  （ＥＳＩ  ＋  ｍ／ｚ  ３２３．０，  ＥＳＩ  −  ｍ／ｚ  ３２１．０）；  ＴＬＣ：  （９０：１０：０．５，  ＤＣＭ：ＭｅＯＨ：ＮＨ４ＯＨ）  Ｒｆ  ＝  ０．３７。
【０２００】
実施例７．
本実施例は、ＥＭＤキナゾリン実験（ＥＭＤ−１５１の合成）を示す。
【０２０１】
【化２０】
2019206549.tif 000060
【０２０２】
反応条件：（ｉ）ジオキサン、Ｃｓ２ＣＯ３、ＰｄＣｌ２（ｄｐｐｆ）、８０℃、２時間
１３  Ｎ−（３−クロロ−４−フルオロフェニル）−６−（６−メトキシピリジン−３−イル）キナゾリン−４−アミン、ＥＭＤ−１５１
６−ブロモ−Ｎ−（３−クロロ−４−フルオロフェニル）キナゾリン−４−アミン（３Ａ、２７５ｍｇ、０．７８ｍｍｏｌ）及び（６−メトキシピリジン−３−イル）ボロン酸（９Ｇ、１１９ｍｇ、０．７８ｍｍｏｌ）の１，４−ジオキサン（１５ｍＬ）及び水（１．４ｍＬ）の溶液を脱気した。この溶液に炭酸セシウム（１．０ｇ、３．１ｍｍｏｌ）及び［１，１’−ビス（ジフェニルホスフィノ）フェロセン］ジクロロパラジウム（ＩＩ）（４４ｍｇ）を添加した。この反応混合物をＮ２下にて８０℃で２時間加熱した。この反応混合物をトルエンで希釈し、揮発性物質を真空下で除去し、この原料をシリカゲルカラムクロマトグラフィーにより３／７〜６／４の酢酸エチル／ヘプタン勾配で溶出して精製し、Ｎ−（３−クロロ−４−フルオロフェニル）−６−（６−メトキシピリジン−３−イル）キナゾリン−４−アミン（１３、ＥＭＤ−１５１、４０ｍｇ、１３％、ＨＰＬＣによる純度９５％）を黄色固体として得た。１Ｈ  ＮＭＲ  （４００ＭＨｚ，  ＤＭＳＯ−ｄ６）  δ  ９．９３  （ｓ，  １Ｈ），  ８．７７  （ｄ，  Ｊ＝１．５  Ｈｚ，  １Ｈ），  ８．６９  （ｄ，  Ｊ＝２．６  Ｈｚ，  １Ｈ），  ８．６３  （ｓ，  １Ｈ），
８．１−８．２４  （ｍ，  ３Ｈ），  ７．７８−７．９２  （ｍ，  ２Ｈ），  ７．４６  （ｔ，  Ｊ＝９．１５  Ｈｚ，  １Ｈ），  ７．００  （ｄ，  Ｊ＝８．８  Ｈｚ，  １Ｈ），  ３．９２  （ｓ，  ３Ｈ）；  ＭＳ：  （ＥＳＩ  ＋  ｍ／ｚ  ３８１．１，  ＥＳＩ  −  ｍ／ｚ  ３７９．１）。
【０２０３】
実施例８．
本実施例は、本発明のさらなるキナゾリン系化合物の合成を記載する。
【０２０４】
【化２１】
2019206549.tif 000061
【０２０５】
反応条件：（ｉ）ＳｉｌｉａＣａｔＤｐｐ−Ｐｄ  ５ｍｏｌ％、１０％Ｋ２ＣＯ３、ＥｔＯＨ、１００℃、１２〜３０分、ｕＷ、（ｉｉ）ピリジン、室温、一夜
３Ａ−  ６−ブロモ−Ｎ−（３−クロロ−４−フルオロフェニル）キナゾリン−４−アミン
３Ｂ−  ６−ブロモ−Ｎ−（３−クロロフェニル）キナゾリン−４−アミン
９Ｈ−  ２−クロロ−５−（４，４，５，５−テトラメチル−１，３，２−ジオキサボロラン−２−イル）ピリジン−３−アミン
９Ｉ−  ２−メトキシ−５−（４，４，５，５−テトラメチル−１，３，２−ジオキサボロラン−２−イル）ピリジン−３−アミン
９Ｊ−  ２−クロロ−５−（４，４，５，５−テトラメチル−１，３，２−ジオキサボロラン−２−イル）アニリン
１０Ｈ−  ６−（５−アミノ−６−クロロピリジン−３−イル）−Ｎ−（３−クロロフェニル）キナゾリン−４−アミン
１０Ｉ−  ６−（５−アミノ−６−メトキシピリジン−３−イル）−Ｎ−（３−クロロ−４−フルオロフェニル）キナゾリン−４−アミン
１１Ｈ−  ６−（５−アミノ−６−クロロピリジン−３−イル）−Ｎ−（３−クロロ−４−フルオロフェニル）キナゾリン−４−アミン
１１Ｊ−  ６−（３−アミノ−４−クロロフェニル）−Ｎ−（３−クロロ−４−フルオロフェニル）キナゾリン−４−アミン
６−（５−アミノ−６−クロロピリジン−３−イル）−Ｎ−（３−クロロフェニル）キナゾリン−４−アミン（３Ｂ）、ＭＯＬ−２００
６−ブロモ−Ｎ−（３−クロロフェニル）キナゾリン−４−アミン（１０．０ｇ、２６．９ｍｍｏｌ）及び２−クロロ−５−（４，４，５，５−テトラメチル−１，３，２−ジオキサボロラン−２−イル）ピリジン−３−アミン（９Ｈ）（６．８ｇ、２６．９ｍｍｏｌ）の１，４−ジオキサン（２５０ｍＬ）からなる溶液に、１．４ＭのＫ２ＣＯ３（５８ｍＬ、８１ｍｍｏｌ）を添加した。この混合物を脱気した（真空／窒素、３回）後、ＳｉｌｉＣａｔ  ＤＰＰ−Ｐｄ（３．５ｇ、０．２６ｍｍｏｌ／ｇ充填）を添加し、その後、９５℃で攪拌しながら一夜加熱した。この反応混合物を室温まで冷却し、酢酸エチル、メタノール、及びジクロロメタンで希釈した。この混合物を水で２回洗浄し、その後ブラインで洗浄した。この有機相を硫酸マグネシウムで乾燥させ、濾過し、減圧下で濃縮した。この残渣を、酢酸エチル５０ｍＬ、ジクロロメタン４０ｍＬ、メタノール１０ｍＬ、水酸化アンモニウム０．２５ｍＬの混合溶媒下で１時間粉砕して濾過した。この固体を酢酸エチルで洗浄し、高真空中で乾燥させて表題化合物を得た（５．９２ｇ、５７％）。この濾液を２：３５：６３のメタノール−酢酸エチル−ジクロロメタンで溶出するシリカカラムに加え、別のロットの表題化合物を白色固体として得た（０．２ｇ、純度１００％）。ＴＬＣ  Ｒｆ  ０．１６  （溶媒系：  ６５：３５  ｖ／ｖ  酢酸エチル−ヘプタン）；  ＭＳ  （ＥＳ−ＡＰＩ＋）  ｍ／ｚ  ３８２．１  （Ｍ＋１），  ３８４．１  （Ｃｌ同位体），  （ＥＳ−ＡＰＩ−）  ｍ／ｚ  ３８０．０  （Ｍ−１），  ３８２．０  （Ｃｌ同位体）；  １Ｈ  ＮＭＲ  （４００  ＭＨｚ，  ＤＭＳＯ−  ｄ６）  δ  １０．００  （ｓ，  １Ｈ），  ８．８２  （ｄ，  Ｊ＝１．７４  Ｈｚ，  １Ｈ），８．６７  （ｓ，  １Ｈ），  ８．０５−８．１５  （ｍ，  ３Ｈ），  ７．８９  （ｄ，  Ｊ＝８．６０  Ｈｚ，  １Ｈ），  ７．８２−７．８７  （ｍ，  １Ｈ），  ７．５１  （ｄ，
Ｊ＝２．２０  Ｈｚ，  １Ｈ），  ７．４３  （ｔ，  Ｊ＝８．１４  Ｈｚ，  １Ｈ），  ７．１５−７．２２  （ｍ，  １Ｈ），  ５．７４  （ｓ，  ２Ｈ）。
【０２０６】
Ｎ−（２−クロロ−５−（４−（（３−クロロフェニル）アミノ）キナゾリン−６−イル）ピリジン−３−イル）メタンスルホンアミド、ＭＯＬ−２０１
６−（５−アミノ−６−クロロピリジン−３−イル）−Ｎ−（３−クロロフェニル）キナゾリン−４−アミン（１．９９ｇ、５．２ｍｍｏｌ）のピリジン（２５ｍＬ）からなる混合物に、メタンスルホニルクロリド（０．３５ｇ、３．０ｍｍｏｌ）、続いて３時間後にさらなる追加のメタンスルホニルクロリド（０．３５ｇ、３．０ｍｍｏｌ）、及び３０分後にさらに（０．４６ｍｇ、４．０ｍｍｏｌ）を添加した。この反応混合物を室温で一夜攪拌した。この氷冷反応混合物に、２ＮのＮａＯＨ（５ｍＬ、１０ｍｍｏｌ）を添加し、室温まで加温し、３時間後に０℃でさらに添加（５ｍＬ、１０ｍｍｏｌ）した。この混合物を室温まで加温しながら１時間攪拌し、１ＮのＨＣｌ（３ｍＬ、３ｍｍｏｌ）及びブラインを添加した。有機物質を酢酸エチル−メタノール（８：２）で２回抽出した。合わせた有機相をブラインで洗浄し、硫酸マグネシウムで乾燥させ、濾過し、減圧下で濃縮した。この残渣をトルエンに懸濁し、濃縮し、続いて酢酸エチルに懸濁して濃縮し、ほぼ白色の固体を得た。この固体を２０ｍＬ／３０ｍＬのメタノール／酢酸エチル下で一夜粉砕し、濾過して表題化合物をオフホワイトの固体として得た（１．５５ｇ、６５％、純度９９．６％）。ＭＳ  （ＥＳ−ＡＰＩ＋）  ｍ／ｚ  ４６０．０  （Ｍ＋１），  ４６２．０  （Ｃｌ同位体），  （ＥＳ−ＡＰＩ−）  ｍ／ｚ  ４５７．９  （Ｍ−１），  ４５９．９  （Ｃｌ同位体）；  １Ｈ  ＮＭＲ  （４００  ＭＨｚ，  ＤＭＳＯ−  ｄ６）  δ  １０．０４  （ｓ，  １Ｈ），  ９．９３  （ｂｒ  ｓ，  １Ｈ），  ８．８８  （ｓ，  １Ｈ），  ８．６７  （ｓ，  １Ｈ），  ８．６０  （ｓ，  １Ｈ），  ８．１４−８．２３  （ｍ，  ２Ｈ），  ８．０９  （ｔ，  Ｊ＝１．９２  Ｈｚ，  １Ｈ），  ７．９１  （ｄ，  Ｊ＝８．６９  Ｈｚ，  １Ｈ），  ７．８３  （ｄｄ，  Ｊ＝１．０１，  ８．３３  Ｈｚ，  １Ｈ），  ７．４３  （ｔ，  Ｊ＝８．１０  Ｈｚ，  １Ｈ），  ７．１９  （ｄ，  Ｊ＝８．１４  Ｈｚ，  １Ｈ），  ３．０７  （ｓ，  ３Ｈ）。
【０２０７】
Ｎ−（２−クロロ−５−（４−（（３−クロロフェニル）アミノ）キナゾリン−６−イル）ピリジン−３−イル）−Ｎ−（メチルスルホニル）メタンスルホンアミド、ＭＯＬ−２０１Ｂ
６−（５−アミノ−６−クロロピリジン−３−イル）−Ｎ−（３−クロロフェニル）キナゾリン−４−アミン（２５５ｍｇ、０．６７ｍｍｏｌ）のピリジン（１．２ｍＬ）からなる混合物に、メタンスルホニルクロリド（４５８ｍＬ、４．０ｍｍｏｌ）を少量ずつ添加した。この反応混合物を室温で５時間攪拌し、その後３℃で一夜保存した。この結晶性物質を濾過し、２ｍＬのメタノールで洗浄し、５ｍＬのメタノール下で３時間粉砕した。この固体を濾過し、高真空中で乾燥させて表題化合物を得た（１２５ｍｇ、２３％、純度８８％）。ＭＳ  （ＥＳ−ＡＰＩ＋）  ｍ／ｚ  ５３８  （Ｍ＋１），  ５４１  （Ｃｌ同位体），  （ＥＳ−ＡＰＩ−）  ｍ／ｚ  ５３５．９  （Ｍ−１），  ５３７．９  （Ｃｌ同位体）；  １Ｈ  ＮＭＲ  （４００  ＭＨｚ，  ＤＭＳＯ−  ｄ６）  δ  １１．４７  （ｂｒ  ｓ，  １Ｈ），  ９．５７  （ｓ，  １Ｈ），  ９．２０  （ｄ，  Ｊ＝２．２９  Ｈｚ，  １Ｈ），  ８．９７  （ｄ，  Ｊ＝２．２９  Ｈｚ，  １Ｈ），  ８．８７  （ｓ，  １Ｈ），  ８．５２  （ｄｄ，  Ｊ＝１．６０，  ８．７４  Ｈｚ，  １Ｈ），  ８．１４  （ｔ，  Ｊ＝１．８８  Ｈｚ，  １Ｈ），  ８．０２  （ｄ，  Ｊ＝８．７８  Ｈｚ，  １Ｈ），  ７．９３  （ｄ，  Ｊ＝７．６４  Ｈｚ，  １Ｈ），  ７．４９  （ｔ，  Ｊ＝８．１０  Ｈｚ，  １Ｈ），  ７．３０  （ｄ，  Ｊ＝７．５７
Ｈｚ，  １Ｈ），  ３．７６  （ｓ，  ６Ｈ）。
【０２０８】
６−（５−アミノ−６−メトキシピリジン−３−イル）−Ｎ−（３−クロロフェニル）キナゾリン−４−アミン（１０Ｉ）、ＭＯＬ２０２Ａ
６−ブロモ−Ｎ−（３−クロロフェニル）キナゾリン−４−アミン−ＨＣｌ（８００ｍｇ、２．１５ｍｍｏｌ）、２−メトキシ−５−（４，４，５，５−テトラメチル−１，３，２−ジオキサボロラン−２−イル）ピリジン−３−アミン（５５０ｍｇ、２．２０ｍｍｏｌ）、及び１．４ＭのＫ２ＣＯ３（６．１ｍＬ）の１０ｍＬの１，４−ジオキサンからなる混合物を脱気した（真空／窒素、３回）。この反応混合物にＳｉｌｉＣａｔ  ＤＰＰ−Ｐｄ（２５０ｍｇ、０．２６ｍｍｏｌ／ｇ充填）を添加した。この反応混合物を密閉し、Ｂｉｏｔａｇｅ  Ｅｍｒｙｓ  Ｏｐｔｉｍｉｚｅｒのマイクロ波にて１００℃で８分間加熱した。この反応混合物を冷却し、水相を除去し、残りの有機相を、ガラスフリットを介して濾過した。この固体をメタノールで洗浄した。この反応手順を９回繰り返した。合わせた濾液を減圧下で濃縮した。この残渣を、酢酸エチル、メタノール、ジクロロメタン、及びヘプタンの混合物下で一夜粉砕した。この懸濁液を濾過し、高真空下で乾燥させた後、２．４６ｇの表題化合物を灰褐色の固体として得た。この濾液を１２０ｇのシリカカラムに加え、それを１：１酢酸エチル−ヘプタン〜１００％酢酸エチルの勾配で溶出し、１．２０ｇの表題化合物を暗黄色固体として得た。総量：３．６６ｇ（４５％）。ＭＳ  （ＥＳ−ＡＰＩ＋）  ｍ／ｚ  ３７８．１  （Ｍ＋１），  ３８０．１  （Ｃｌ同位体）；  １Ｈ  ＮＭＲ  （４００  ＭＨｚ，  ＤＭＳＯ−  ｄ６）  δ  ９．９７  （ｓ，  １Ｈ），  ８．７４  （ｄ，  Ｊ＝１．５５  Ｈｚ，  １Ｈ），  ８．６４  （ｓ，  １Ｈ），  ８．１０  （ｔ，  Ｊ＝１．９２  Ｈｚ，  １Ｈ），  ８．０５  （ｄ，  Ｊ＝８．６９  Ｈｚ，  １Ｈ），  ７．８１−７．９０  （ｍ，  ３Ｈ），  ７．４２  （ｔ，  Ｊ＝８．１４  Ｈｚ，  １Ｈ），  ７．３０  （ｄ，  Ｊ＝２．２０  Ｈｚ，  １Ｈ），  ７．１７  （ｄ，  Ｊ＝７．６７  Ｈｚ，  １Ｈ），  ５．１３  （ｓ，  ２Ｈ），  ３．９２  （ｓ，  ３Ｈ）。
【０２０９】
Ｎ−（５−（４−（（３−クロロフェニル）アミノ）キナゾリン−６−イル）−２−メトキシピリジン−３−イル）メタンスルホンアミド、ＭＯＬ−２０２
６−（５−アミノ−６−メトキシピリジン−３−イル）−Ｎ−（３−クロロフェニル）キナゾリン−４−アミン（３００ｍｇ、０．７９ｍｍｏｌ）のピリジン（２ｍＬ）からなる混合物に、メタンスルホニルクロリド（１２１ｍｇ、１．０６ｍｍｏｌ）を添加した。この反応混合物を室温で２．７５時間攪拌した。この反応混合物を濾過し、この固体を酢酸エチルで洗浄し、２−プロパノール下で３時間粉砕した。この混合物を濾過し、高真空下で乾燥させ、表題化合物（２６７ｍｇ、７４％）を淡オフホワイトの固体として得た。ＴＬＣ  Ｒｆ  ０．２５  （溶媒系：  １：１  ｖ／ｖ  酢酸エチル−ヘプタン）；  ＭＳ  （ＥＳ−ＡＰＩ＋）  ｍ／ｚ  ４５６  （Ｍ＋１），  ４５８  （Ｃｌ同位体），  （ＥＳ−ＡＰＩ−）  ｍ／ｚ  ４５３．９  （Ｍ−１），  ４５６．０  （Ｃｌ同位体）；  １Ｈ  ＮＭＲ  （４００  ＭＨｚ，  ＤＭＳＯ−  ｄ６）  δ  １２．３５  （ｂｒ
ｓ，  １Ｈ），  ９．６２  （ｂｒ  ｓ，  １Ｈ），  ９．４０  （ｓ，１Ｈ），  ８．８９  （ｓ，  １Ｈ），  ８．７２  （ｄ，  Ｊ＝２．２９  Ｈｚ，  １Ｈ），  ８．３９  （ｂｒ  ｄ，  Ｊ＝８．８７  Ｈｚ，  １Ｈ），  ８．１７  （ｄ，  Ｊ＝２．１０  Ｈｚ，  １Ｈ），  ８．１２  （ｄ，  Ｊ＝８．６０  Ｈｚ，  １Ｈ），  ８．０３
（ｓ，  １Ｈ），  ７．８６  （ｂｒ  ｄ，  Ｊ＝８．３３  Ｈｚ，  １Ｈ），  ７．４８  （ｔ，  Ｊ＝８．１４  Ｈｚ，  １Ｈ），  ７．３４  （ｂｒ  ｄ，  Ｊ＝８．４２  Ｈｚ，  １Ｈ），  ３．９８  （ｓ，  ３Ｈ），  ３．１７  （ｓ，  ３Ｈ）。
【０２１０】
Ｎ−（５−（４−（（３−クロロフェニル）アミノ）キナゾリン−６−イル）−２−メトキシピリジン−３−イル）−Ｎ−（メチルスルホニル）メタンスルホンアミド、ＭＯＬ−２０２Ｂ
Ｎ−（５−（４−（（３−クロロフェニル）アミノ）キナゾリン−６−イル）−２−メトキシピリジン−３−イル）メタンスルホンアミド（１５０ｍｇ、０．３３ｍｍｏｌ）のピリジン（０．５ｍＬ）からなる混合物に、メタンスルホニルクロリド（２２７ｍｇ、１．９８ｍｍｏｌ）を添加した。この反応混合物を室温で２時間、その後４０℃で４時間攪拌した。この反応混合物を０℃で一夜保存し、ジクロロメタン１ｍＬ及びモルホリン３滴で希釈し（モルホリンの添加で均質溶液が得られた）、精製用の２５ｇのシリカゲルカラムに直接加えた。このカラムを４：６〜８：２ｖ／ｖの酢酸エチル−ヘプタンの勾配で溶出し、表題化合物（１８ｍｇ、１０％）を淡褐色固体として単離した。ＴＬＣ  Ｒｆ  ０．３６  （溶媒系：  １：１  ｖ／ｖ  酢酸エチル−ヘプタン）；  ＭＳ  （ＥＳ−ＡＰＩ＋）  ｍ／ｚ  ５３４  （Ｍ＋１），  ５３６  （Ｃｌ同位体），  （ＥＳ−ＡＰＩ−）  ｍ／ｚ  ５３２  （Ｍ−１），５３４  （Ｃｌ同位体）。
【０２１１】
Ｎ−（５−（４−（（３−クロロフェニル）アミノ）キナゾリン−６−イル）−２−メトキシピリジン−３−イル）シクロプロパンスルホンアミド、ＭＯＬ−２０４
６−（５−アミノ−６−メトキシピリジン−３−イル）−Ｎ−（３−クロロフェニル）キナゾリン−４−アミン（２００ｍｇ、０．５３ｍｍｏｌ）のピリジン（０．８ｍＬ）からなる混合物に、シクロプロパンスルホニルクロリド（２７８ｍｇ、１．９８ｍｍｏｌ）を均等に２回に分けて１時間空けて添加した。この反応混合物を室温でさらに２．２５時間攪拌した。この反応混合物に、メタノール（１８５ｍｇ、５．３ｍｍｏｌ）の１ｍＬジクロロメタン溶液及びモルホリン３滴を添加し（モルホリンの添加で均質溶液が得られた）、この混合物を精製用の４０ｇのシリカゲルカラムに直接加えた。このカラムを０：１００〜１０：９０ｖ／ｖのメタノール−酢酸エチルの勾配で溶出し、表題化合物（４５ｍｇ、１８％）を固体として単離した。ＴＬＣ  Ｒｆ  ０．２５  （溶媒系：  １：１  ｖ／ｖ  酢酸エチル−ヘプタン）；  ＭＳ  （ＥＳ−ＡＰＩ＋）  ｍ／ｚ  ４８２  （Ｍ＋１），  ４８４  （Ｃｌ同位体），  （ＥＳ−ＡＰＩ−）  ｍ／ｚ  ４８０  （Ｍ−１），  ４８２  （Ｃｌ同位体）；  １Ｈ  ＮＭＲ  （４００  ＭＨｚ，  ＤＭＳＯ−  ｄ６）  δ  ９．９７  （ｓ，  １Ｈ），  ９．４４  （ｓ，  １Ｈ），  ８．８０  （ｓ，
１Ｈ），  ８．６５  （ｓ，  １Ｈ），  ８．５３  （ｄ，  Ｊ＝２．１０  Ｈｚ，  １Ｈ），  ８．１７  （ｄｄ，  Ｊ＝１．３３，  ８．７４  Ｈｚ，  １Ｈ），  ８．０５−８．１１  （ｍ，  ２Ｈ），  ７．８８  （ｄ，  Ｊ＝８．６９  Ｈｚ，  １Ｈ），
７．８０−７．８６  （ｍ，  １Ｈ），  ７．４３  （ｔ，  Ｊ＝８．１０  Ｈｚ，  １Ｈ），  ７．１５−７．２１  （ｍ，  １Ｈ），  ３．９９  （ｓ，  ３Ｈ），  ２．６９−２．７９  （ｍ，  １Ｈ），  １．９６  （ｓ，  １Ｈ），  ０．８３−０．９８
（ｍ，  ４Ｈ）。
【０２１２】
Ｎ−（５−（４−（（３−クロロフェニル）アミノ）キナゾリン−６−イル）−２−メトキシピリジン−３−イル）−２−モルホリノエタン−１−スルホンアミド、ＭＯＬ−２０５
２つの反応容器内：６−（５−アミノ−６−メトキシピリジン−３−イル）−Ｎ−（３−クロロフェニル）キナゾリン−４−アミン（３００ｍｇ、０．７９ｍｍｏｌ）及びＮ−メチルモルホリン（２３９ｍｇ、２．３７ｍｍｏｌ）のジクロロメタン（２０ｍＬ）懸濁液を含む２つの反応容器の各々に、２−クロロエタンスルホニルクロリド（２５８ｍｇ、１．５８ｍｍｏｌ）を緩徐に添加した。室温で４時間攪拌した後、２−クロロエタンスルホニルクロリド（２８０ｍｇ、１．７ｍｍｏｌ）及びＮ−メチルモルホリン（２７６ｍｇ、２．７ｍｍｏｌ）を添加した。約３時間後、両方の反応混合物にモルホリン（２４１ｍｇ、２．８ｍｍｏｌ）を添加し、この反応物を室温で一夜攪拌した。この反応混合物を合わせ、酢酸エチル−ヘプタン（８：２ｖ／ｖ）で平衡化された１２０ｇのシリカカラムに直接充填し、この原料を溶液中に維持するのを助けとなる十分なジクロロメタンを用いた。このシリカカラムをメタノール−酢酸エチル（０：１００ｖ／ｖ〜１０：９０ｖ／ｖ）の勾配で溶出した。適切な画分の部分濃縮で得られた沈殿物を濾過し、表題化合物をほぼ白色の固体として得た（１２５ｍｇ、２８％）。ＴＬＣ  Ｒｆ  ０．１３  （溶媒系：酢酸エチル）；  ＭＳ  （ＥＳ−ＡＰＩ＋）  ｍ／ｚ  ５５５  （Ｍ＋１），  ５５７  （Ｃｌ同位体），  （ＥＳ−ＡＰＩ−）  ｍ／ｚ  ５５３  （Ｍ−１），  ５５５  （Ｃｌ同位体）；  １Ｈ  ＮＭＲ  （４００  ＭＨｚ，  ＤＭＳＯ−  ｄ６）  δ  ９．９７  （ｓ，  １Ｈ），  ９．４７  （ｂｒ  ｓ，  １Ｈ），  ８．７９  （ｓ，  １Ｈ），  ８．６５  （ｓ，  １Ｈ），  ８．５１  （ｄ，  Ｊ＝２．０１  Ｈｚ，  １Ｈ），  ８．１５  （ｄｄ，  Ｊ＝１．４６，  ８．６９  Ｈｚ，  １Ｈ），  ８．０５−８．１２
（ｍ，  ２Ｈ），  ７．８８  （ｄ，  Ｊ＝８．６９  Ｈｚ，  １Ｈ），  ７．８０−７．８６  （ｍ，  １Ｈ），  ７．８４  （ｄｄ，  Ｊ＝１．８８，  ８．１９  Ｈｚ，
１Ｈ），  ７．４３  （ｔ，  Ｊ＝８．１４  Ｈｚ，  １Ｈ），  ７．１８  （ｄｄ，
Ｊ＝２．０１，  ７．９６  Ｈｚ，  １Ｈ），  ３．９９  （ｓ，  ３Ｈ），  ３．４９  （ｔ，  Ｊ＝４．４８  Ｈｚ，  ４Ｈ），  ３．３４−３．４２  （ｍ，  ２Ｈ），
２．７６  （ｂｒ  ｔ，  Ｊ＝７．１８  Ｈｚ，  ２Ｈ），  ２．３７  （ｍ，  ４Ｈ）。
【０２１３】
Ｎ−（５−（４−（（３−クロロフェニル）アミノ）キナゾリン−６−イル）−２−メトキシピリジン−３−イル）−４−メチルピペラジン−１−スルホンアミド、ＭＯＬ−２０７
６−（５−アミノ−６−メトキシピリジン−３−イル）−Ｎ−（３−クロロフェニル）キナゾリン−４−アミン（２５ｍｇ、０．０７ｍｍｏｌ）からなる混合物を含むピリジン（０．５ｍＬ）に、４−メチルピペラジン−１−スルホニルクロリド（４０ｍｇ、０．２０ｍｍｏｌ）を添加した。この反応混合物を４０℃で一夜攪拌し、室温まで冷却し、４４日間置いた。この混合物を濾過し、メタノール２ｍＬで洗浄し、室温で高真空下にて乾燥させ、表題化合物（１３ｍｇ、３４％）を固体として得た。ＭＳ  （ＥＳ−ＡＰＩ＋）  ｍ／ｚ  ５４０．１  （Ｍ＋１），  ５４２．１  （Ｃｌ同位体），  （ＥＳ−ＡＰＩ−）  ｍ／ｚ  ５３８．０  （Ｍ−１），  ５４０．０  （Ｃｌ同位体）；  １Ｈ  ＮＭＲ
（４００  ＭＨｚ，  ＤＭＳＯ−ｄ６及びＤ２Ｏ）  δ  ８．８０  （ｓ，  １Ｈ），
８．６４  （ｓ，  １Ｈ），  ８．５３  （ｄ，  Ｊ＝１．９５  Ｈｚ，  １Ｈ），  ８．１２−８．２０  （ｍ，  １Ｈ），  ８．１０  （ｄ，  Ｊ＝１．９５  Ｈｚ，  １Ｈ），  ８．０３  （ｓ，  １Ｈ），  ７．９０  （ｄ，  Ｊ＝８．９９  Ｈｚ，  １Ｈ），  ７．８０  （ｂｒ  ｄ，  Ｊ＝７．８２  Ｈｚ，  １Ｈ），  ７．４３  （ｔ，  Ｊ＝８．０１  Ｈｚ，  １Ｈ），  ７．１９  （ｂｒ  ｄ，  Ｊ＝８．２１  Ｈｚ，  １Ｈ），  ３．３１−３．５０  （ｍ，  ４Ｈ），  ３．００  （ｂｒ  ｔ，  Ｊ＝１１．１４  Ｈｚ，  ２Ｈ），  ２．７５  （ｓ，  ３Ｈ），  ２．６７  （ｂｒ  ｔ，  Ｊ＝１２．５１  Ｈｚ，  ２Ｈ）。
【０２１４】
６−（５−アミノ−６−クロロピリジン−３−イル）−Ｎ−（３−クロロ−４−フルオロフェニル）キナゾリン−４−アミン（１１Ｈ）、ＭＯＬ−２１０
６−ブロモ−Ｎ−（３−クロロフェニル）キナゾリン−４−アミン−ＨＣｌ（７００ｍｇ、１．８０ｍｍｏｌ）、２−メトキシ−５−（４，４，５，５−テトラメチル−１，３，２−ジオキサボロラン−２−イル）ピリジン−３−アミン（４６７ｍｇ、１．８０ｍｍｏｌ）、及び１．４ＭのＫ２ＣＯ３（５．１ｍＬ）からなる混合物を含む１５ｍＬの１，４−ジオキサンを脱気した（真空／窒素、３回）。この反応混合物にＳｉｌｉＣａｔ  ＤＰＰ−Ｐｄ（３００ｍｇ、０．２６ｍｍｏｌ／ｇ充填）を添加した。この反応混合物を密閉し、Ｂｉｏｔａｇｅ  Ｅｍｒｙｓ  Ｏｐｔｉｍｉｚｅｒのマイクロ波にて１００℃で１０分間加熱した。この反応混合物を冷却し、水相を除去し、残りの有機相を、ガラスフリットを介して濾過した。この固体をメタノールで洗浄した。この濾液を減圧下で濃縮した。この残渣を、酢酸エチル、メタノール、ジクロロメタン、及びヘプタンの混合物に溶解し、１２０ｇのシリカカラムに加え、それを３５：６５〜７５：２５の酢酸エチル−ヘプタンの勾配で溶出し、３９９ｍｇ（５５％）の表題化合物を固体として得た。ＭＳ  （ＥＳ−ＡＰＩ＋）  ｍ／ｚ  ４００．０  （Ｍ＋１），  ４０２．０  （Ｃｌ同位体），  （ＥＳ−ＡＰＩ−）  ｍ／ｚ  ３９７．９  （Ｍ−１），  ４００．０  （Ｃｌ同位体）；  １Ｈ  ＮＭＲ  （４００  ＭＨｚ，  ＤＭＳＯ−  ｄ６）  δ  １０．０２  （ｓ，
１Ｈ），  ８．７８  （ｓ，  １Ｈ），  ８．６４  （ｓ，  １Ｈ），  ８．１８  （ｄｄ，  Ｊ＝２．６１，  ６．９１  Ｈｚ，  １Ｈ），  ８．０４−８．１２  （ｍ，  ２Ｈ），  ７．８８  （ｄ，  Ｊ＝８．６９  Ｈｚ，  １Ｈ），７．８０−７．８６  （ｍ，  １Ｈ），  ７．５０  （ｄ，  Ｊ＝２．２０  Ｈｚ，  １Ｈ），  ７．４１−７．４８  （ｔ，  １Ｈ），  ５．７４  （ｓ，  ２Ｈ）。
【０２１５】
Ｎ−（２−クロロ−５−（４−（（３−クロロ−４−フルオロフェニル）アミノ）キナゾリン−６−イル）ピリジン−３−イル）メタンスルホンアミド、ＭＯＬ−２１１
６−（５−アミノ−６−クロロピリジン−３−イル）−Ｎ−（３−クロロ−４−フルオロフェニル）キナゾリン−４−アミン（３００ｍｇ、０．７５ｍｍｏｌ）の３ｍＬのピリジンからなる室温攪拌混合物に、メタンスルホニルクロリド（９２ｍｇ、０．６ｍｍｏｌ（２×））を２回に分けて４時間開けて添加した。この反応混合物をその後一夜攪拌した。この反応混合物に２ＮのＮａＯＨ（１．０ｍＬ、２ｍｍｏｌ）を添加し、それを３０分間攪拌した。この反応混合物を飽和塩化アンモニウム溶液及び１ｍＬの１Ｎ  ＨＣｌで希釈した（ｐＨ＝９）。この混合物を酢酸エチルで抽出した。この有機相を飽和塩化アンモニウム溶液、続いてブラインで洗浄し、硫酸マグネシウムで乾燥させ、濾過し、濃縮した。この固体残渣に対して、７：３の酢酸エチル−ヘプタン〜１００％酢酸エチルの勾配で溶出する８０ｇのシリカカラムのクロマトグラフィーを行った。適切な画分から得られた固体物質を酢酸エチル（４ｍＬ）及びメタノール（２ｍＬ）下で粉砕し、濾過し、高真空中で乾燥させ、１６７ｍｇ（４６％、純度９５％）の表題化合物を得た。ＭＳ  （ＥＳ−ＡＰＩ＋）  ｍ／ｚ  ４７８．０  （Ｍ＋１），  ４８０．０  （Ｃｌ同位体），  （ＥＳ−ＡＰＩ−）  ｍ／ｚ  ４７６．０  （Ｍ−１），  ４７８．０  （Ｃｌ同位体）；  １Ｈ  ＮＭＲ  （４００  ＭＨｚ，  ＤＭＳＯ−  ｄ６）  δ  １０．０５  （ｂｒ  ｓ，  １Ｈ），  ９．９６  （ｂｒ  ｓ，  １Ｈ），  ８．８８  （ｓ，  １Ｈ），  ８．８０  （ｄ，  Ｊ＝２．１０  Ｈｚ，  １Ｈ），  ８．６７  （ｓ，  １Ｈ），  ８．２８  （ｄ，  Ｊ＝２．１０  Ｈｚ，  １Ｈ），８．２２−８．２７  （ｍ，  １Ｈ），  ８．１８  （ｄｄ，  Ｊ＝２．３８，  ６．８６  Ｈｚ，  １Ｈ），  ７．９３  （ｄ，
Ｊ＝８．６９  Ｈｚ，  １Ｈ），  ７．７７−７．８９  （ｍ，  １Ｈ），  ７．４９
（ｔ，  Ｊ＝９．０６  Ｈｚ，  １Ｈ），  ３．１９  （ｓ，  ３Ｈ）。
【０２１６】
６−（３−アミノ−４−クロロフェニル）−Ｎ−（３−クロロ−４−フルオロフェニル）キナゾリン−４−アミン（１１Ｊ）、ＭＯＬ−２１２
６−ブロモ−Ｎ−（３−クロロフェニル）キナゾリン−４−アミン−ＨＣｌ（３５０ｍｇ、０．９０ｍｍｏｌ）、２−クロロ−５−（４，４，５，５−テトラメチル−１，３，２−ジオキサボロラン−２−イル）アニリン（２５１ｍｇ、０．９９ｍｍｏｌ）、及び１．４ＭのＫ２ＣＯ３（２．８ｍＬ）からなる混合物を含む１０ｍＬの１，４−ジオキサンを脱気した（真空／窒素、３回）。この反応混合物にＳｉｌｉＣａｔ  ＤＰＰ−Ｐｄ（１５０ｍｇ、０．２６ｍｍｏｌ／ｇ充填）を添加した。この反応混合物を密閉し、Ｂｉｏｔａｇｅ  Ｅｍｒｙｓ  Ｏｐｔｉｍｉｚｅｒのマイクロ波にて１００℃で１２分間加熱した。この反応混合物に追加の２−クロロ−５−（４，４，５，５−テトラメチル−１，３，２−ジオキサボロラン−２−イル）アニリン（４０ｍｇ、０．１６ｍｍｏｌ）及びＳｉｌｉＣａｔ  ＤＰＰ−Ｐｄ（３０ｍｇ）を添加した。この反応混合物を再度１００℃で６分間加熱し、冷却した。この水相を除去し、残りの有機相を、ガラスフリットを介して濾過した。この固体をメタノールで洗浄した。この濾液を減圧下で濃縮した。この残渣を、１２０ｇのシリカカラムに加え、３５：６５〜７５：２５の酢酸エチル−ヘプタンの勾配で溶出し、１２６ｍｇ（３５％）の表題化合物を無色固体として得た。ＭＳ  （ＥＳ−ＡＰＩ＋）  ｍ／ｚ  ３９９．０  （Ｍ＋１），  ４０１．０  （Ｃｌ同位体），  （ＥＳ−ＡＰＩ−）  ｍ／ｚ  ３９７．０  （Ｍ−１），  ３９９．０  （Ｃｌ同位体）；  １Ｈ
ＮＭＲ  （４００  ＭＨｚ，  ＤＭＳＯ−  ｄ６）  δ  １０．０４  （ｓ，  １Ｈ），  ８．７３  （ｄ，  Ｊ＝１．７４  Ｈｚ，  １Ｈ），  ８．６４  （ｓ，  １Ｈ），
８．２０  （ｄｄ，  Ｊ＝２．６５，  ６．８６  Ｈｚ，  １Ｈ），  ８．０６  （ｄｄ，  Ｊ＝１．８３，  ８．６９  Ｈｚ，  １Ｈ），  ７．８３−７．９０  （ｍ，  ２Ｈ），  ７．４７  （ｔ，  Ｊ＝９．１０  Ｈｚ，  １Ｈ），  ７．３７  （ｄ，  Ｊ＝８．２３  Ｈｚ，  １Ｈ），  ７．２３  （ｄ，  Ｊ＝２．２０  Ｈｚ，  １Ｈ），  ７．０３  （ｄｄ，  Ｊ＝２．２０，  ８．２３  Ｈｚ，  １Ｈ），  ５．５１  （ｓ，  ２Ｈ）。
【０２１７】
Ｎ−（２−クロロ−５−（４−（（３−クロロ−４−フルオロフェニル）アミノ）キナゾリン−６−イル）フェニル）メタンスルホンアミド、ＭＯＬ−２１３
６−（３−アミノ−４−クロロフェニル）−Ｎ−（３−クロロ−４−フルオロフェニル）キナゾリン−４−アミン（１２６ｍｇ、０．３２ｍｍｏｌ）の１．５ｍＬのピリジンからなる室温攪拌混合物に、メタンスルホニルクロリド（４５ｍｇ、０．３９ｍｍｏｌ）を添加した。この反応混合物をその後一夜攪拌した。この反応混合物に２ＮのＮａＯＨ（１．０ｍＬ、２ｍｍｏｌ）を添加し、それを１０分間攪拌した。この反応混合物を飽和塩化アンモニウム溶液及び０．５ｍＬの１Ｎ  ＨＣｌで希釈した。この混合物を酢酸エチルで抽出した。この有機相を飽和塩化アンモニウム溶液、次にブラインで洗浄し、硫酸マグネシウムで乾燥させ、濾過し、濃縮した。この固体残渣を酢酸エチル（４ｍＬ）及びメタノール（２ｍＬ）下で２０時間粉砕し、濾過し、高真空中で乾燥させて８３ｍｇ（５４％、純度９７％）の表題化合物を得た。ＭＳ  （ＥＳ−ＡＰＩ＋）  ｍ／ｚ  ４７７．０  （Ｍ＋１），  ４７９．０  （Ｃｌ同位体），  （ＥＳ−ＡＰＩ−）  ｍ／ｚ  ４７４．９
（Ｍ−１），  ４７７．０  （Ｃｌ同位体）；  １Ｈ  ＮＭＲ  （４００  ＭＨｚ，  ＤＭＳＯ−  ｄ６）  δ  １０．０５  （ｓ，  １Ｈ），  ９．６７  （ｓ，  １Ｈ），
８．７９  （ｄ，  Ｊ＝１．５６  Ｈｚ，  １Ｈ），  ８．６４  （ｓ，  １Ｈ），  ８．１２−８．１９  （ｍ，  ２Ｈ），  ７．８４−７．９２  （ｍ，  ２Ｈ），  ７．８１  （ｄｄｄ，  Ｊ＝２．７４，  ４．３０，  ９．０６  Ｈｚ，  １Ｈ），  ７．７３−７．７８  （ｍ，  １Ｈ），  ７．６８−７．７３  （ｍ，  １Ｈ），  ７．４６  （ｔ，  Ｊ＝９．１０  Ｈｚ，  １Ｈ），  ３．１０  （ｓ，  ３Ｈ）。
【０２１８】
６−ブロモ−Ｎ−（３−クロロ−４−（ピリジン−２−イルメトキシ）フェニル）キナゾリン−４−アミン塩酸塩
６−ブロモ−４−クロロキナゾリン（１．０ｇ、４．１ｍｍｏｌ）及び３−クロロ−４−（ピリジン−２−イルメトキシ）アニリン（１．１５ｇ、４．９ｍｍｏｌ）からなる混合物を含む４０ｍＬの１，４−ジオキサンを８０℃で一夜加熱した。この反応混合物を室温まで冷却し、２０ｍＬのジエチルエーテルで希釈し、濾過した。この固体を高真空中で乾燥させて１．９８ｇ（１００％、純度９０％）の表題化合物を得た。ＭＳ  （ＥＳ−ＡＰＩ＋）  ｍ／ｚ  ４４１．０  （Ｍ＋１）  ４４３．０  （Ｃｌ／Ｂｒ同位体），  （ＥＳ−ＡＰＩ−）  ｍ／ｚ  ４３９．０  （Ｍ−１）  ４４１．０  （Ｃｌ／Ｂｒ同位体）；  １Ｈ  ＮＭＲ  （４００  ＭＨｚ，  ＤＭＳＯ−  ｄ６）  δ  １１．４９  （ｂｒ  ｓ，  １Ｈ），  ９．１５  （ｄ，  Ｊ＝１．９２  Ｈｚ，  １Ｈ），  ８．９１  （ｓ，  １Ｈ），  ８．６１  （ｄ，  Ｊ＝５．０３  Ｈｚ，  １Ｈ），  ８．２０  （ｄｄ，  Ｊ＝２．０１，  ８．８７  Ｈｚ，  １Ｈ），  ７．９０−７．９６  （ｍ，  ２Ｈ），  ７．８７  （ｄ，  Ｊ＝８．９７  Ｈｚ，  １Ｈ），  ７．５９−７．６９  （ｍ，  ２Ｈ），  ７．４１  （ｄｄ，  Ｊ＝４．９９，  ６．５４  Ｈｚ，  １Ｈ），
７．３４  （ｄ，  Ｊ＝９．０６  Ｈｚ，  １Ｈ），  ５．３４  （ｓ，  ２Ｈ）。
【０２１９】
６−（５−アミノ−６−クロロピリジン−３−イル）−Ｎ−（３−クロロ−４−（ピリジン−２−イルメトキシ）フェニル）キナゾリン−４−アミン
６−ブロモ−Ｎ−（３−クロロ−４−（ピリジン−２−イルメトキシ）フェニル）キナゾリン−４−アミン−ＨＣｌ（９００ｍｇ、１．８８ｍｍｏｌ）、２−メトキシ−５−（４，４，５，５−テトラメチル−１，３，２−ジオキサボロラン−２−イル）ピリジン−３−アミン（８３２ｍｇ、４．３ｍｍｏｌ）、及び２．０ＭのＫ２ＣＯ３（４．４ｍＬ）からなる混合物を含む１５ｍＬの１，４−ジオキサンを脱気した（真空／窒素、３回）。この反応混合物にＳｉｌｉＣａｔ  ＤＰＰ−Ｐｄ（４５０ｍｇ、０．２６ｍｍｏｌ／ｇ充填）を添加した。この反応混合物を密閉し、Ｂｉｏｔａｇｅ  Ｅｍｒｙｓ  Ｏｐｔｉｍｉｚｅｒのマイクロ波にて１００℃で２０分間加熱した。この反応混合物を冷却し、水相を除去し、この混合物を、ガラスフリットを介して濾過した。この固体をメタノール、次に熱メタノールで洗浄した。この濾液を減圧下で濃縮した。この残渣を、メタノール及び酢酸エチルで希釈し、減圧下で濃縮して固体を得た。この固体を２０ｍＬの酢酸エチルに懸濁した。２ｍＬのメタノールの添加によって均質溶液が得られた。１５ｍＬのヘプタンを緩徐に添加することで固体が析出し、この懸濁液を３０分間攪拌し、濾過し、乾燥させて５３０ｍｇの表題化合物を薄緑／褐色固体として得た。この母液を一夜置いて沈殿物を生成させ、これを濾過して３００ｍｇの追加の淡緑色固体を得た。合計：８８０ｍｇ（９６％、純度９０％）。ＭＳ  （ＥＳ−ＡＰＩ＋）  ｍ／ｚ  ４８９．１  （Ｍ＋１），  ４９１．０  （Ｃｌ同位体），  （ＥＳ−ＡＰＩ−）  ｍ／ｚ  ４８７．０  （Ｍ−１），
４８９．０  （Ｃｌ同位体）；  １Ｈ  ＮＭＲ  （４００  ＭＨｚ，  ＤＭＳＯ−ｄ６）  ９．８４−１０．２０  （ｂｒ  ｓ，  １Ｈ），  ８．７９  （ｂｒ  ｓ，  １Ｈ），  ８．５８  （ｂｒ  ｄ，  Ｊ＝４．３９  Ｈｚ，  １Ｈ），  ８．５０  （ｂｒ  ｓ，  １Ｈ），  ８．０７  （ｂｒ  ｄ，  Ｊ＝１．６５  Ｈｚ，  １Ｈ），  ７．９５−８．０４  （ｍ，  ２Ｈ），  ７．８２−７．９０  （ｍ，  １Ｈ），  ７．７８  （ｂｒ  ｄ，  Ｊ＝８．８８  Ｈｚ，  １Ｈ），  ７．６９  （ｂｒ  ｄ，  Ｊ＝７．６９  Ｈｚ，  １Ｈ），  ７．５３−７．６０  （ｍ，  ２Ｈ），  ７．３０−７．３８  （ｍ，  １Ｈ），  ７．２４  （ｂｒ  ｄ，  Ｊ＝８．７８  Ｈｚ，  １Ｈ），  ５．７３  （ｓ，  ２Ｈ），  ５．２７  （ｓ，  ２Ｈ）。
【０２２０】
Ｎ−（２−クロロ−５−（４−（（３−クロロ−４−（ピリジン−２−イルメトキシ）フェニル）アミノ）キナゾリン−６−イル）ピリジン−３−イル）メタンスルホンアミド、ＭＯＬ−２１５
６−（５−アミノ−６−クロロピリジン−３−イル）−Ｎ−（３−クロロ−４−（ピリジン−２−イルメトキシ）フェニル）キナゾリン−４−アミン（３００ｍｇ、０．６１ｍｍｏｌ）の３．５ｍＬのピリジンからなる室温攪拌混合物に、メタンスルホニルクロリド（１４０ｍｇ、２．４５ｍｍｏｌ（２×））を２時間空けて２回に分けて添加した。この反応混合物を一夜攪拌した。この反応混合物に２ＮのＮａＯＨ（１．５ｍＬ、３ｍｍｏｌ）を添加した。０．５時間で２ＮのＮａＯＨの追加量（０．５ｍＬ、１ｍｍｏｌ）を添加し、攪拌をさらに０．５時間継続した。この反応物に２ＮのＮａＯＨ（２．０ｍＬ、４ｍｍｏｌ）を添加し、３０分後、ＴＬＣによってこの反応（加水分解）が完了したことが考えられた。この反応混合物を飽和重炭酸ナトリウム溶液及び酢酸エチルで希釈し、分液漏斗で振盪した。この混合物に、水、ブライン、メタノール、イソプロパノール（２５ｍＬ）を添加し、エマルションを破壊した。この混合物を酢酸エチルで２回抽出した。合わせた有機相をブラインで洗浄し、硫酸マグネシウムで乾燥させ、濾過し、減圧下で濃縮した。この残渣をトルエンに取り、濃縮した。この固体をメタノール／酢酸エチルに取り、濾過し、濾液を９：１の酢酸エチル−ヘプタン〜１００％酢酸エチル−１：９メタノール−酢酸エチルで溶出する１２０ｇのシリカカラムに加え、１４０ｍｇ（４０％、純度９７％）の表題化合物を黄色固体として得た。ＭＳ  （ＥＳ−ＡＰＩ＋）  ｍ／ｚ  ５６７．０
（Ｍ＋１），  ５６９．１  （Ｃｌ同位体），  （ＥＳ−ＡＰＩ−）  ｍ／ｚ  ５６５．０  （Ｍ−１），  ５６７．０  （Ｃｌ同位体）；  １Ｈ  ＮＭＲ  （４００  ＭＨｚ，  ＤＭＳＯ−  ｄ６）  δ  ９．９６  （ｂｒ  ｓ，  ２Ｈ），  ８．８８  （ｓ，  １Ｈ），  ８．８１  （ｄ，  Ｊ＝２．１０  Ｈｚ，  １Ｈ），  ８．６２  （ｓ，  １Ｈ），  ８．６０  （ｂｒ  ｄ，  Ｊ＝４．３９  Ｈｚ，  １Ｈ），  ８．２９  （ｄ，
Ｊ＝２．０１  Ｈｚ，  １Ｈ），  ８．２４  （ｂｒ  ｄ，  Ｊ＝８．７８  Ｈｚ，  １Ｈ），  ８．０２  （ｄ，  Ｊ＝２．４７  Ｈｚ，  １Ｈ），  ７．８６−７．９３  （ｍ，  ２Ｈ），  ７．７２  （ｄｄ，  Ｊ＝２．３８，  ８．８７  Ｈｚ，  １Ｈ），
７．５９  （ｄ，  Ｊ＝７．８７  Ｈｚ，  １Ｈ），  ７．３４−７．４１  （ｍ，  １Ｈ），  ７．３１  （ｄ，  Ｊ＝９．０６  Ｈｚ，  １Ｈ），  ５．３１  （ｓ，  ２Ｈ），  ３．２０  （ｓ，  ３Ｈ）。
【０２２１】
６−（５−アミノピリジン−３−イル）−Ｎ−（３−クロロフェニル）キナゾリン−４−アミン、ＭＯＬ−３１０
６−ブロモ−Ｎ−（３−クロロフェニル）キナゾリン−４−アミン−ＨＣｌ（５００ｍｇ、１．４９ｍｍｏｌ）、５−（４，４，５，５−テトラメチル−１，３，２−ジオキサボロラン−２−イル）ピリジン−３−アミン（２７４ｍｇ、１．２４ｍｍｏｌ）、及び２．０ＭのＫ２ＣＯ３（３．１ｍＬ）からなる混合物を含む１５ｍＬの１，４−ジオキサンを脱気した（真空／窒素、３回）。この反応混合物にＳｉｌｉＣａｔ  ＤＰＰ−Ｐｄ（６０ｍｇ、０．２６ｍｍｏｌ／ｇ充填）を添加した。この反応混合物を密閉し、９５℃で１．２５時間加熱した。この反応に、５−（４，４，５，５−テトラメチル−１，３，２−ジオキサボロラン−２−イル）ピリジン−３−アミン（９０ｍｇ、０．４１ｍｍｏｌ）を添加し、再度９５℃で一夜加熱した。この反応混合物を冷却し、ガラスフリットを介して濾過した。この固体をエタノールで洗浄した。この濾液を減圧下濃縮した。この残渣に対して、乾燥充填法を用いて４０ｇのシリカカラムのクロマトグラフィーを行い、１：９９〜１５：８５のメタノール−酢酸エチルの勾配で溶出し、１２６ｍｇ（２４％、純度９７．４％）の表題化合物を得た。ＭＳ  （ＥＳ−ＡＰＩ＋）  ｍ／ｚ  ３４８．０  （Ｍ＋１），  ３５０．０  （Ｃｌ同位体），  （ＥＳ−ＡＰＩ−）  ｍ／ｚ  ３４６．０  （Ｍ−１），  ３４８．０  （Ｃｌ同位体）；  １Ｈ  ＮＭＲ  （４００  ＭＨｚ，  ＤＭＳＯ−  ｄ６）  δ  ９．９９  （ｓ，  １Ｈ），  ８．８１  （ｄ，  Ｊ＝１．６５  Ｈｚ，  １Ｈ），  ８．６６  （ｓ，  １Ｈ），  ８．２４  （ｄ，  Ｊ＝１．９２  Ｈｚ，  １Ｈ），  ８．０５−８．１４  （ｍ，  ２Ｈ），  ７．９９  （ｄ，  Ｊ＝２．４７  Ｈｚ，  １Ｈ），  ７．８１−７．９３  （ｍ，  ２Ｈ），  ７．４２  （ｔ，  Ｊ＝８．１０  Ｈｚ，  １Ｈ），  ７．２９  （ｔ，  Ｊ＝２．２９  Ｈｚ，  １Ｈ），
７．１８  （ｄ，  Ｊ＝８．１８  Ｈｚ，  １Ｈ），  ５．４８  （ｓ，  ２Ｈ）。
【０２２２】
６−（５−（１Ｈ−テトラゾール−１−イル）ピリジン−３−イル）−Ｎ−（３−クロロフェニル）キナゾリン−４−アミン、ＭＯＬ−３１１
６−（５−アミノピリジン−３−イル）−Ｎ−（３−クロロフェニル）キナゾリン−４−アミン（１００ｍｇ、０．２９ｍｍｏｌ）からなる混合物を含む２ｍＬの酢酸に、オルトギ酸トリメチル（９２ｍｇ、０．８６ｍｍｏｌ）及びアジ化ナトリウム（５６ｍｇ、０．８６ｍｍｏｌ）を添加した。この反応混合物を８０℃で４時間加熱した。この反応物を飽和重炭酸ナトリウム溶液でクエンチし、酢酸エチル抽出した。この有機相を硫酸マグネシウムで乾燥させ、濾過し、黄色固体まで減圧下で濃縮した。この固体を、４：１ジクロロメタン（ｄｉｃｈｌｏｒｏｍｅｔｈａｎ）−酢酸エチル下で粉砕し、続いてジクロロメタン−酢酸エチル−テトラヒドロフラン下で粉砕し、濾過して４０ｍｇ（３４、純度９１％）の表題化合物を得た。ＭＳ  （ＥＳ−ＡＰＩ＋）  ｍ／ｚ  ４０１．１  （Ｍ＋１），  ４０３．０  （Ｃｌ同位体），  （ＥＳ−ＡＰＩ−）  ｍ／ｚ  ３９９．０  （Ｍ−１），  ４０１．０  （Ｃｌ同位体）；  １Ｈ  ＮＭＲ  （４００  ＭＨｚ，  ＤＭＳＯ−  ｄ６）  δ  １０．２６  （ｓ，  １Ｈ），  １０．００  （ｓ，  １Ｈ），  ９．３３  （ｓ，  １Ｈ），  ９．１９  （ｄ，  Ｊ＝２．１０  Ｈｚ，  １Ｈ），  ９．０１  （ｓ，  １Ｈ），  ８．７６−８．８８  （ｍ，  １Ｈ），  ８．６９  （ｓ，  １Ｈ），  ８．３８  （ｄ，  Ｊ＝８．６０  Ｈｚ，  １Ｈ），  ８．０８  （ｓ，  １Ｈ），  ７．９５  （ｄ，  Ｊ＝８．６０  Ｈｚ，  １Ｈ），  ７．８４  （ｂｒ  ｄ，  Ｊ＝８．２３  Ｈｚ，  １Ｈ），  ７．４４  （ｔ，  Ｊ＝８．１０  Ｈｚ，  １Ｈ），
７．２０  （ｄ，  Ｊ＝７．９６  Ｈｚ，  １Ｈ）。
【０２２３】
５−（４−（（３−クロロフェニル）アミノ）キナゾリン−６−イル）ニコチノニトリル、ＭＯＬ−３１２
６−ブロモ−Ｎ−（３−クロロフェニル）キナゾリン−４−アミン−ＨＣｌ（５００ｍｇ、１．４９ｍｍｏｌ）、５−（４，４，５，５−テトラメチル−１，３，２−ジオキサボロラン−２−イル）ニコチノニトリル（２８６ｍｇ、１．２４ｍｍｏｌ）、及び２ＭのＫ２ＣＯ３（３．１ｍＬ）からなる混合物を含む１５ｍＬの１，４−ジオキサンを脱気した（真空／窒素、３回）。この反応混合物にＳｉｌｉＣａｔ  ＤＰＰ−Ｐｄ（７０ｍｇ、０．２６ｍｍｏｌ／ｇ充填）を添加した。この反応混合物を密閉し、９５℃で４時間加熱した。この反応混合物を冷却し、ガラスフリットを介して濾過した。この固体をエタノールで洗浄した。濾液を減圧下で濃縮した。トルエンをこの残渣に添加し、減圧下で濃縮した。この残渣に対して、乾燥充填法を用いて４０ｇのシリカカラムのクロマトグラフィーを行い、２５：７５〜９５：５の酢酸エチル−ジクロロメタンの勾配で溶出させ、続いてこの９５：５の酢酸エチル−ジクロロメタン系に５％メタノール〜９％メタノールを添加して、１４７ｍｇ（３３％）の表題化合物を淡黄色固体として得た。ＭＳ  （ＥＳ−ＡＰＩ＋）  ｍ／ｚ  ３５８．０  （Ｍ＋１），  ３６０．０  （Ｃｌ同位体），  （ＥＳ−ＡＰＩ−）  ｍ／ｚ  ３５６．０  （Ｍ−１），  ３５８．０  （Ｃｌ同位体）；  １Ｈ
ＮＭＲ  （４００  ＭＨｚ，  ＤＭＳＯ−  ｄ６）  δ  ９．９５  （ｓ，  １Ｈ），
９．４１  （ｄ，  Ｊ＝２．２０  Ｈｚ，  １Ｈ），  ９．０８  （ｄ，  Ｊ＝１．８３  Ｈｚ，  １Ｈ），  ８．９４  （ｄ，  Ｊ＝１．７４  Ｈｚ，  １Ｈ），  ８．８２
（ｔ，  Ｊ＝２．１０  Ｈｚ，  １Ｈ），  ８．６９  （ｓ，  １Ｈ），  ８．３４  （ｄｄ，  Ｊ＝１．８３，  ８．６９  Ｈｚ，  １Ｈ），  ８．０７  （ｔ，  Ｊ＝１．９７  Ｈｚ，  １Ｈ），  ７．９２  （ｄ，  Ｊ＝８．６９  Ｈｚ，  １Ｈ），  ７．８４  （ｄｄ，  Ｊ＝１．１９，  ８．２３  Ｈｚ，  １Ｈ），  ７．４４  （ｔ，  Ｊ＝８．１４  Ｈｚ，  １Ｈ），  ７．２０  （ｄｄ，  Ｊ＝１．３３，  ７．９１  Ｈｚ，
１Ｈ）。
【０２２４】
６−（５−（１Ｈ−テトラゾール−５−イル）ピリジン−３−イル）−Ｎ−（３−クロロフェニル）キナゾリン−４−アミン、ＭＯＬ−３１３
５−（４−（（３−クロロフェニル）アミノ）キナゾリン−６−イル）ニコチノニトリル（５０ｍｇ、０．１４ｍｍｏｌ）、アジ化ナトリウム（１８ｍｇ、０．２８ｍｍｏｌ）、塩化アンモニウム（１５ｍｇ、０．２８ｍｍｏｌ）、及び塩化リチウム（１．２ｍｇ）からなる混合物を１００℃で一夜加熱した。この反応物を冷却し、トルエンを添加し、この混合物を減圧下で１ｍＬ未満まで濃縮した。この残渣に、０．５：５：９５の酢酸−メタノール−ジクロロメタン混合物を添加し、この混合物を濾過した。濾液を２５ｇのシリカカラムに加え、これを０．５：１０：９０〜０．５：４０：６０の酢酸−メタノール−ジクロロメタン勾配で溶出して３４ｍｇ（６０％、純度９６％）の表題化合物を固体として得た。ＭＳ  （ＥＳ−ＡＰＩ＋）  ｍ／ｚ  ４０１．０  （Ｍ＋１），  ４０３．１  （Ｃｌ同位体）；  １Ｈ  ＮＭＲ  （４００  ＭＨｚ，  ＤＭＳＯ−  ｄ６）  δ  １０．２５  （ｂｒ  ｓ，  １Ｈ），  ９．１８  （ｓ，  １Ｈ），  ９．０３  （ｓ，  １Ｈ），  ９．０１  （ｓ，  １Ｈ），  ８．７１  （ｓ，  １Ｈ），  ８．６７  （ｓ，
１Ｈ），  ８．２９  （ｄ，  Ｊ＝８．６９  Ｈｚ，  １Ｈ），  ８．１３  （ｓ，  １Ｈ），  ７．９２  （ｄ，  Ｊ＝８．６９  Ｈｚ，  １Ｈ），  ７．８８  （ｂｒ  ｄ，  Ｊ＝８．４２  Ｈｚ，  １Ｈ），  ７．４２  （ｔ，  Ｊ＝８．１０  Ｈｚ，  １Ｈ），  ７．１８  （ｄ，  Ｊ＝７．９６  Ｈｚ，  １Ｈ）。
【０２２５】
実施例９．
本実施例は、本発明のさらなるキノリン系化合物の合成手順を示す。
【０２２６】
【化２２】
2019206549.tif 000062
【０２２７】
反応条件：（ｉ）２Ａ、ジオキサン、９０℃、２時間。（ｉｉ）９Ｇ、ジオキサン、Ｃｓ２ＣＯ３、ＰｄＣｌ２（ｄｐｐｆ）、８０℃、２時間
４−（（３−クロロ−４−フルオロフェニル）アミノ）−６−（６−メトキシピリジン−３−イル）キノリン−３−カルボニトリル、ＭＯＬ−１５０
６−ブロモ−４−クロロキノリン−３−カルボニトリル（１４、２００ｍｇ、０．７５ｍｍｏｌ）及び３−クロロ−４−フルオロアニリン（２Ａ、１３０ｍｇ、０．９０ｍｍｏｌ）の混合物を含む４ｍＬの１，４−ジオキサンを９０℃で２時間加熱した。この反応混合物を室温まで冷却し、ジエチルエーテルで希釈し、０℃まで冷却し、フリットガラスを介して濾過した。この固体をジエチルエーテルで洗浄し、乾燥させて６−ブロモ−４−（（３−クロロ−４−フルオロフェニル）アミノ）キノリン−３−カルボニトリル（１５、２８０ｍｇ、１００％）を暗黄色固体として得た。６−ブロモ−４−（（３−クロロ−４−フルオロフェニル）アミノ）キノリン−３−カルボニトリル（２７８ｍｇ、０．７７ｍｍｏｌ）及び（６−メトキシピリジン−３−イル）ボロン酸（９Ｇ、１１８ｍｇ、０．７７ｍｍｏｌ）の１，４−ジオキサン（１５ｍＬ）及び水（１．４ｍＬ）の溶液を脱気した。この溶液に、炭酸セシウム（１．０ｇ、３．１ｍｍｏｌ）及び［１，１’−ビス（ジフェニルホスフィノ）フェロセン］ジクロロパラジウム（ＩＩ）（４４ｍｇ）を添加した。この反応混合物をＮ２下にて８０℃で２時間加熱した。この反応混合物をトルエンで希釈し、この揮発性物質を真空下で除去し、この原料を３／７〜７／３の酢酸エチル／ヘプタンの勾配で溶出するシリカゲルカラムクロマトグラフィーで精製した。この黄色固体をジクロロメタン／ジエチルエーテル下で粉砕し、濾過し、乾燥させて４−（（３−クロロ−４−フルオロフェニル）アミノ）−６−（６−メトキシピリジン−３−イル）キノリン−３−カルボニトリル（１６、ＭＯＬ−１５０，４４ｍｇ、１４％、純度１００％）を白色固体として得た。１Ｈ  ＮＭＲ  （４００ＭＨｚ，  ＤＭＳＯ−ｄ６）  δ  ９．９５  （ｓ，  １Ｈ），  ８．７５  （ｄ，  Ｊ＝１．９  Ｈｚ，  １Ｈ），  ８．７０  （ｄ，  Ｊ＝１．９  Ｈｚ，  １Ｈ），  ８．５８  （ｓ，  １Ｈ），  ８．２１  （ｔ，  Ｊ＝６．２  Ｈｚ，  ２Ｈ），  ７．９９  （ｄ，  Ｊ＝８．４  Ｈｚ，  １Ｈ），  ７．６４  （ｄ，  Ｊ＝６．６  Ｈｚ，  １Ｈ），  ７．４８  （ｔ，  Ｊ＝８．８  Ｈｚ，  １Ｈ），  ７．３−７．４  （ｍ，  １Ｈ），  ６．９９  （ｄ，  Ｊ＝８．５  Ｈｚ，  １Ｈ），  ３．９１  （ｓ，  ３Ｈ）；  ＭＳ：  （ＥＳＩ  ＋  ｍ／ｚ  ４０５．１，  ＥＳＩ  −  ｍ／ｚ  ４０３．１）。
【０２２８】
６−ブロモ−４−（（４−（ピリジン−４−イルオキシ）フェニル）アミノ）キノリン−３−カルボニトリル塩酸塩、ＭＯＬ−４００
６−ブロモ−４−クロロキノリン−３−カルボニトリル（４４０ｍｇ、１．６４ｍｍｏｌ）及び４−（ピリジン−４−イルオキシ）アニリン（２９１ｍｇ、１．５６ｍｍｏｌ）からなる混合物を含む３ｍＬのエトキシエタノールを、密封容器内にて１２５℃で２時間加熱した。この反応混合物を室温まで冷却し、濾過して１９３ｍｇの表題化合物を淡褐色固体として得た。この濾液を酢酸エチルで希釈し、飽和重炭酸ナトリウム溶液で洗浄した。この水相を酢酸エチルで２回抽出した。合わせた有機相をブラインで洗浄し、硫酸マグネシウムで乾燥させ、濾過し、減圧下で濃縮した。この残渣に対して、４５：５５の酢酸エチル−ヘプタン〜１００％酢酸エチル〜２：９８メタノール−酢酸エチルの勾配で溶出する２５ｇのシリカのクロマトグラフィーを行い、１６０ｍｇの表題化合物を淡褐色固体として得た。合計：３５３ｍｇ（５４％）。この淡褐色固体の試料を、大部分２：８のメタノール−ジクロロメタン５ｍＬに溶解し、ジエチルエーテル１５ｍＬ及びヘプタン５ｍＬを攪拌しながら添加した。この懸濁液を一夜攪拌し、濾過した。濾液を室温で固化させ、生成した結晶性物質を濾過してほぼ白色の固体を得た（純度９９．９％）。ＭＳ  （ＥＳ−ＡＰＩ＋）  ｍ／ｚ  ４１７．０  （Ｍ＋１）  ４１９．０  （Ｂｒ同位体），  （ＥＳ−ＡＰＩ−）  ｍ／ｚ  ４１４．９  （Ｍ−１）  ４１７．０  （Ｂｒ同位体）；  １Ｈ  ＮＭＲ  （４００  ＭＨｚ，  ＤＭＳＯ−  ｄ６）  δ  １０．０３  （ｂｒ  ｓ，  １Ｈ），  ８．７８  （ｄ，  Ｊ＝１．９２  Ｈｚ，  １Ｈ），  ８．５７  （ｓ，
１Ｈ），  ８．４４−８．５１  （ｍ，  ２Ｈ），  ７．９７  （ｄｄ，  Ｊ＝２．１０，  ８．８７  Ｈｚ，  １Ｈ），  ７．８５  （ｄ，  Ｊ＝８．８７  Ｈｚ，  １Ｈ），  ７．４５  （ｄ，  Ｊ＝８．６９  Ｈｚ，  ２Ｈ），  ７．２１−７．３０  （ｍ，
２Ｈ），  ６．９７−７．０３  （ｍ，  ２Ｈ）。
【０２２９】
６−（３−（ヒドロキシメチル）フェニル）−４−（（４−（ピリジン−４−イルオキシ）フェニル）アミノ）キノリン−３−カルボニトリル、ＭＯＬ−４０２
６−ブロモ−４−（（４−（ピリジン−４−イルオキシ）フェニル）アミノ）キノリン−３−カルボニトリル塩酸塩（４０ｍｇ、０．０９６ｍｍｏｌ）、（３−（ヒドロキシメチル）フェニル）ボロン酸（１９ｍｇ、０．１２５ｍｍｏｌ）、及び２．０ＭのＫ２ＣＯ３（０．２４ｍＬ）を含む２ｍＬの１，４−ジオキサン及び１ｍＬのエタノールからなる混合物を脱気した（真空／窒素、３回）。この反応混合物にＳｉｌｉＣａｔ  ＤＰＰ−Ｐｄ（２５ｍｇ、０．２６ｍｍｏｌ／ｇ充填）を添加した。この反応混合物を密閉し、９５℃で２時間加熱した。この反応混合物を冷却し、ガラスフリットを介して濾過した。この固体をエタノールで洗浄した。この濾液を減圧下で濃縮した。この残渣を１．５ｍＬのメタノール下で粉砕し、濾過して２５ｍｇ（５８％、純度９８．４％）の表題化合物を固体として得た。ＭＳ  （ＥＳ−ＡＰＩ＋）  ｍ／ｚ  ４４５．２  （Ｍ＋１），  （ＥＳ−ＡＰＩ−）  ｍ／ｚ  ４４３．２  （Ｍ−１）；  １Ｈ  ＮＭＲ  （４００  ＭＨｚ，  ＤＭＳＯ−ｄ６）  δ  １０．１１  （ｂｒ  ｓ，  １Ｈ），  ８．７５−８．８８  （ｍ，  １Ｈ），  ８．５４  （ｓ，  １Ｈ），  ８．４４  （ｄ，  Ｊ＝５．３７  Ｈｚ，  ２Ｈ），  ８．１７  （ｄｄ，  Ｊ＝１．６９，  ８．６５  Ｈｚ，  １Ｈ），  ７．９９  （ｄ，  Ｊ＝８．６０  Ｈｚ，  １Ｈ），  ７．８３  （ｓ，  １Ｈ），  ７．７６  （ｂｒ  ｄ，  Ｊ＝７．９６  Ｈｚ，  １Ｈ），  ７．４３−７．５４  （ｍ，  ３Ｈ），  ７．３８  （ｄ，  Ｊ＝７．５０  Ｈｚ，  １Ｈ），  ７．２６  （ｄ，  Ｊ＝８．７８  Ｈｚ，  ２Ｈ），  ６．９３−７．０２  （ｍ，  ２Ｈ），  ５．２８  （ｔ，  Ｊ＝５．６７  Ｈｚ，  １Ｈ），  ４．６０  （ｄ，  Ｊ＝５．５８  Ｈｚ，  ２Ｈ）。
【０２３０】
Ｎ−（５−（３−シアノ−４−（（４−（ピリジン−４−イルオキシ）フェニル）アミノ）キノリン−６−イル）ピリジン−３−イル）メタンスルホンアミド、ＭＯＬ−４０１
６−ブロモ−４−（（４−（ピリジン−４−イルオキシ）フェニル）アミノ）キノリン−３−カルボニトリル塩酸塩（８０ｍｇ、０．１９ｍｍｏｌ）、Ｎ−（５−（４，４，５，５−テトラメチル−１，３，２−ジオキサボロラン−２−イル）ピリジン−３−イル）メタンスルホンアミド（７４ｍｇ、０．２５ｍｍｏｌ）、及び２．０ＭのＫ２ＣＯ３（０．４７ｍＬ）からなる混合物を含む４ｍＬの１，４−ジオキサン及び２ｍＬのエタノールを脱気した（真空／窒素、３回）。この反応混合物にＳｉｌｉＣａｔ  ＤＰＰ−Ｐｄ（５０ｍｇ、０．２６ｍｍｏｌ／ｇ充填）を添加した。この反応混合物を密閉し、９５℃で２時間加熱した。この反応混合物を冷却し、ガラスフリットを介して濾過した。この固体をエタノールで洗浄した。この濾液を減圧下で濃縮した。この残渣に対して、１００％酢酸エチル〜２５：７５のメタノール／酢酸エチルの勾配で溶出する１２ｇのシリカカラムのクロマトグラフィーを行い、６５ｍｇの黄色固体を得た。この固体をメタノール−酢酸エチル−ジクロロメタンの混合物下で粉砕し、濾過して３２ｍｇの表題化合物を黄色固体として得た（３３％、純度９１％）。ＭＳ  （ＥＳ−ＡＰＩ＋）  ｍ／ｚ  ５０９．１  （Ｍ＋１），  （ＥＳ−ＡＰＩ−）  ｍ／ｚ  ５０７．０  （Ｍ−１）；  １Ｈ  ＮＭＲ  （４００  ＭＨｚ，  ＤＭＳＯ−ｄ６）  δ  １０．１４  （ｓ，  ２Ｈ），  ８．８６
（ｓ，  ２Ｈ），  ８．５８  （ｓ，  １Ｈ），  ８．４４−８．５１  （ｍ，  ３Ｈ），  ８．１３−８．２２  （ｍ，  １Ｈ），  ８．１３−８．２２  （ｍ，  １Ｈ），
８．０５  （ｂｒ  ｄ，  Ｊ＝８．６０  Ｈｚ，  １Ｈ），  ８．００  （ｔ，  Ｊ＝２．１０  Ｈｚ，  １Ｈ），  ７．４９  （ｂｒ  ｄ，  Ｊ＝８．３３  Ｈｚ，  ２Ｈ），  ７．２７  （ｄ，  Ｊ＝８．６９  Ｈｚ，  ２Ｈ），  ６．９８  （ｄ，  Ｊ＝５．３７  Ｈｚ，  ２Ｈ），  ３．１３  （ｓ，  ３Ｈ）。
【０２３１】
６−（３−ヒドロキシフェニル）−４−（（４−（ピリジン−４−イルオキシ）フェニル）アミノ）キノリン−３−カルボニトリル、ＭＯＬ−４０３
６−ブロモ−４−（（４−（ピリジン−４−イルオキシ）フェニル）アミノ）キノリン−３−カルボニトリル塩酸塩（８０ｍｇ、０．１９ｍｍｏｌ）、（３−ヒドロキシフェニル）ボロン酸（３４ｍｇ、０．２５ｍｍｏｌ）、及び２．０ＭのＫ２ＣＯ３（０．４７ｍＬ）からなる混合物を含む４ｍＬの１，４−ジオキサン及び２ｍＬのエタノールを脱気した（真空／窒素、３回）。この反応混合物にＳｉｌｉＣａｔ  ＤＰＰ−Ｐｄ（５０ｍｇ、０．２６ｍｍｏｌ／ｇ充填）を添加した。この反応混合物を密閉し、９５℃で２時間加熱した。この反応混合物を冷却し、ガラスフリットを介して濾過した。この固体をエタノールで洗浄した。この濾液をトルエンで希釈し、減圧下で濃縮した。この残渣に対して、８：２の酢酸エチル−ジクロロメタン〜１００％酢酸エチル〜１：９のメタノール−酢酸エチルの勾配で溶出する１２ｇのシリカカラムのクロマトグラフィーを行い、１５ｍｇ（１８％、純度９５．９％）の表題化合物を得た。ＭＳ  （ＥＳ−ＡＰＩ＋）  ｍ／ｚ  ４３１．１  （Ｍ＋１），  （ＥＳ−ＡＰＩ−）  ｍ／ｚ  ４２９．１  （Ｍ−１）；  １Ｈ
ＮＭＲ  （４００  ＭＨｚ，  ＤＭＳＯ−ｄ６）  δ  ９．９１−１０．４８  （ｂｒ
ｓ，  １Ｈ），  ９．４７−９．９１  （ｂｒ  ｓ，  １Ｈ），  ８．７５  （ｓ，  １Ｈ），  ８．３８−８．５２  （ｍ，  ３Ｈ），  ８．０７  （ｂｒ  ｄ，  Ｊ＝７．９６  Ｈｚ，  １Ｈ），  ７．９２  （ｂｒ  ｄ，  Ｊ＝８．６９  Ｈｚ，  １Ｈ），  ７．４１  （ｂｒ  ｄ，  Ｊ＝８．０５  Ｈｚ，  ２Ｈ），  ７．２５−７．３６  （ｍ，  ３Ｈ），  ７．２２  （ｂｒ  ｄ，  Ｊ＝８．６０  Ｈｚ，  ２Ｈ），  ６．９６  （ｄ，  Ｊ＝６．１３  Ｈｚ，  ２Ｈ），  ６．８２  （ｂｒ  ｄ，  Ｊ＝７．２３  Ｈｚ，  １Ｈ）。
【０２３２】
６−ブロモ−４−（（３−クロロ−４−フルオロフェニル）アミノ）キノリン−３−カルボニトリル塩酸塩
６−ブロモ−４−クロロキノリン−３−カルボニトリル（１．０ｇ、３．７ｍｍｏｌ）及び３−クロロ−４−フルオロアニリン（６５３ｍｇ、４．５ｍｍｏｌ）からなる混合物を含む４０ｍＬの１，４−ジオキサンを８０℃で一夜加熱した。この反応混合物を室温まで冷却し、２０ｍＬのジエチルエーテルで希釈し、濾過した。この固体を高真空中で乾燥させて１．３６ｇ（８９％）の表題化合物を得た。ＭＳ  （ＥＳ−ＡＰＩ＋）  ｍ／ｚ  ３７６．０  （Ｍ＋１）  ３７８．０  （Ｃｌ／Ｂｒ同位体），  （ＥＳ−ＡＰＩ−）  ｍ／ｚ  ３７３．９  （Ｍ−１）  ３７５．９  （Ｃｌ／Ｂｒ同位体）；  １Ｈ  ＮＭＲ
（４００  ＭＨｚ，  ＤＭＳＯ−ｄ６）  ９．０７  （ｄ，  Ｊ＝１．８３  Ｈｚ，  １Ｈ），  ８．９９  （ｓ，  １Ｈ），８．１６  （ｄｄ，  Ｊ＝１．９２，  ８．９７
Ｈｚ，  １Ｈ），  ８．００  （ｄ，  Ｊ＝８．８８  Ｈｚ，  １Ｈ），  ７．７５  （ｄｄ，  Ｊ＝２．５２，  ６．６３  Ｈｚ，  １Ｈ），  ７．５０−７．５９  （ｍ，
１Ｈ），  ７．４３−７．５０  （ｍ，  １Ｈ）。
【０２３３】
６−（５−アミノ−６−クロロピリジン−３−イル）−４−（（３−クロロ−４−フルオロフェニル）アミノ）キノリン−３−カルボニトリル
６−ブロモ−４−（（３−クロロ−４−フルオロフェニル）アミノ）キノリン−３−カルボニトリル−ＨＣｌ（１．２ｇ、２．９ｍｍｏｌ）、２−メトキシ−５−（４，４，５，５−テトラメチル−１，３，２−ジオキサボロラン−２−イル）ピリジン−３−アミン（１．１ｇ、４．３ｍｍｏｌ）、及び２．０ＭのＫ２ＣＯ３（５．８ｍＬ）からなる混合物を含む１５ｍＬの１，４−ジオキサンを脱気した（真空／窒素、３回）。この反応混合物にＳｉｌｉＣａｔ  ＤＰＰ−Ｐｄ（６５０ｍｇ、０．２６ｍｍｏｌ／ｇ充填）を添加した。この反応混合物を密閉し、Ｂｉｏｔａｇｅ  Ｅｍｒｙｓ  Ｏｐｔｉｍｉｚｅｒのマイクロ波にて１００℃で２０分間加熱した。この反応混合物を冷却し、ガラスフリットを介して濾過した。この固体をメタノールで、その後熱メタノールで洗浄した。この濾液を減圧下で濃縮した。この残渣をトルエンで希釈し、減圧下で濃縮し、その後酢酸エチル下で１時間粉砕した。この固体を濾過し、乾燥させて２．９８ｇの表題化合物を固体として得た。ＭＳ  （ＥＳ−ＡＰＩ＋）  ｍ／ｚ  ４２４．０  （Ｍ＋１），  ４２６．０  （Ｃｌ同位体），  （ＥＳ−ＡＰＩ−）  ｍ／ｚ  ４２２．０  （Ｍ−１），  ４２３．９  （Ｃｌ同位体）；  １Ｈ  ＮＭＲ  （４００  ＭＨｚ，  ＤＭＳＯ−ｄ６）  ８．５２  （ｓ，  １Ｈ），  ７．８８  （ｄ，  Ｊ＝２．０１  Ｈｚ，  １Ｈ），  ７．７８  （ｓ，  １Ｈ），  ７．６２−７．６８  （ｍ，  １Ｈ），  ７．３８−７．５０  （ｍ，
２Ｈ），  ７．０８  （ｔ，  Ｊ＝９．２４  Ｈｚ，  １Ｈ），  ６．７７  （ｂｒ  ｄ，  Ｊ＝６．６８  Ｈｚ，  １Ｈ），  ６．６０−６．６９  （ｍ，  １Ｈ），  ５．６１  （ｓ，  ２Ｈ）。
【０２３４】
Ｎ−（２−クロロ−５−（４−（（３−クロロ−４−フルオロフェニル）アミノ）−３−シアノキノリン−６−イル）ピリジン−３−イル）メタンスルホンアミド、ＭＯＬ−２１６
６−（５−アミノ−６−クロロピリジン−３−イル）−４−（（３−クロロ−４−フルオロフェニル）アミノ）キノリン−３−カルボニトリル（１．００ｇ、２．３５ｍｍｏｌ）の１２ｍＬのピリジンからなる室温攪拌混合物に、２つに分けたメタンスルホニルクロリド（０．５４ｇ、９．４ｍｍｏｌ（２×））を２時間空けて２回に分けて添加した。この反応混合物を合計５時間攪拌した。この反応混合物に２ＮのＮａＯＨ（５．０ｍＬ、１０ｍｍｏｌ）を添加した。１．５時間で２ＮのＮａＯＨの追加量（３ｍＬ、６ｍｍｏｌ）を添加し、さらに０．５時間攪拌を継続した。この濃いオレンジ／赤色反応混合物に６ＮのＨＣｌ（１ｍＬ、６ｍｍｏｌ）を滴下した。この赤／褐色反応混合物を飽和塩化ナトリウム溶液で希釈し、この混合物を酢酸エチルで２回抽出した。合わせた有機相をブラインで洗浄し、硫酸マグネシウムで乾燥させ、濾過し、濃縮した。この固体残渣をメタノールと酢酸エチルの混合物下で粉砕し、濾過した。この母液を６５：３５の酢酸エチル−ヘプタン〜１００％酢酸エチル〜１５：８５のメタノール−酢酸エチルの勾配で溶出する１２０ｇのシリカカラムに加えた。生成物を含む清浄画分を合わせ、淡黄色固体を析出させた。これを濾過し、乾燥させて３０ｍｇ（２．５％）の表題化合物を得た。上記からの濾過した固体を熱メタノール−酢酸エチル（９：１、２５０ｍＬ）に溶解した。この溶液に、シリカ２５ｇを添加し、この混合物を用いて、この試料を６５：３５の酢酸エチル−ヘプタン〜１００％酢酸エチル〜１：９のメタノール−酢酸エチルの勾配で溶出する２２０ｇのシリカカラムに乾燥充填した。清浄な生成物を含むこれらの画分を減圧下で濃縮し、５２ｍｇ（４．２％）の表題化合物をオフホワイトの固体として得た。ＭＳ  （ＥＳ−ＡＰＩ＋）  ｍ／ｚ  ５０２．０  （Ｍ＋１），  ５０４．０  （Ｃｌ同位体），  （ＥＳ−ＡＰＩ−）  ｍ／ｚ  ５００．０  （Ｍ−１），  ５０１．９  （Ｃｌ同位体）；  １Ｈ
ＮＭＲ  （４００  ＭＨｚ，  ＤＭＳＯ−ｄ６）  １０．０６  （ｓ，  １Ｈ），  ９．９３  （ｂｒ  ｓ，  １Ｈ），  ８．８４  （ｓ，  １Ｈ），  ８．８０  （ｓ，  １Ｈ），  ８．６２  （ｓ，  １Ｈ），  ８．２８  （ｓ，  １Ｈ），  ８．２４  （ｂｒ
ｄ，  Ｊ＝９．１５  Ｈｚ，  １Ｈ），  ８．０５  （ｂｒ  ｄ，  Ｊ＝８．５１  Ｈｚ，  １Ｈ），  ７．６７  （ｂｒ  ｄ，  Ｊ＝４．６７  Ｈｚ，  １Ｈ），  ７．４５−７．５４  （ｍ，  １Ｈ），  ７．４２  （ｂｒ  ｓ，  １Ｈ），  ３．１６  （ｓ，
３Ｈ）。
【０２３５】
本発明を十分に説明したため、当業者には、本発明の範囲またはその任意の実施形態に影響を与えることなく、条件、処方、及び他のパラメータの広範かつ同等の範囲内で本発明を実施することができることが理解されよう。本明細書に引用される全ての特許、特許出願、及び刊行物は、参照によりそれらの全体が完全に本明細書に組み込まれる。
【０２３６】
文献の援用
本明細書に言及する各特許文献及び科学論文の全体の開示は、あらゆる目的のため、参照によって組み込まれる。
【０２３７】
同等物
本発明は、その趣旨または本質的特質から逸脱することなく他の特定の形態で具体化され得る。上記実施形態は、したがって、あらゆる点で、本明細書に記載の本発明を限定するものではなく例示的なものであると見なされる。本発明の範囲は、したがって、上記の説明によってではなく、添付の特許請求の範囲によって示され、また、該特許請求の範囲の同等の意味及び範囲内のすべての変更は、その中に含まれることが意図される。
【図面の簡単な説明】
【０２３８】
【図１Ａ】ＥＧＦＲ阻害剤を示す。
【図１Ｂ】ＥＧＦＲ阻害剤を示す。
【図１Ｃ】ＥＧＦＲ阻害剤を示す。
【図２Ａ】ＰＩ３Ｋ阻害剤を示す。
【図２Ｂ】ＰＩ３Ｋ阻害剤を示す。
【図２Ｃ】ＰＩ３Ｋ阻害剤を示す。
【図２Ｄ】ＰＩ３Ｋ阻害剤を示す。
【図２Ｅ】ＰＩ３Ｋ阻害剤を示す。
【図３】ラパチニブ（ＰＤＢコード：１ＸＫＫ）及びＨＫＩ−２７２（ＰＤＢコード：３Ｗ２Ｑ）に対するＥＧＦＲ（プロテインキナーゼのＡＴＰ競合部位）のＸ線結晶キノロン結合様式を示す。
【図４Ａ】ＧＳＫ２１２６４５８（ＰＤＢコード：３Ｌ０８）のＥＧＦＲ及びＰＩ３ＫとのＸ線結晶結合様式、ＰＦ−０４９７９０６４（ＰＤＢコード：４ＨＶＢ）のＰＩ３ＫとのＸ線結晶結合様式、ならびにラパチニブのＥＧＦＲとのＸ線結晶結合様式を示す。
【図４Ｂ】ＰＩ３ＫでのＢＥＺ２３５の結合様式を示す。
【図４Ｃ】ラパチニブ及びＧＳＫ２１２６４５８（ＰＤＢコード：３Ｌ０８）に対するキノリンの脂質対プロテインキナーゼ結合様式の比較を示す。
【図５Ａ】ＥＧＦＲのリン酸化が、ＭＯＬ−１６２の単回経口投与後２時間でＨＣＴ−１１６腫瘍（１００ｍｇ／ｋｇ）において完全に抑制されることが見出されたことを示す。
【図５Ｂ】ＭＯＬ−１６０、ＭＯＬ−１６１、ＭＯＬ−１６２、及びＭＯＬ−１６３に対する細胞増殖の測定値を示す。
【図５Ｃ】様々な化合物に対するＨＣＴ−１１６細胞の生存率を示す。
【図５Ｄ】２時間処理したＨＣＴ−１１６細胞でのｐＡＫＴ及びｐＥＧＦＲに対するＭＯＬ−１６２の影響を示す。
【図６】ＥＧＦＲ及びＰＩＫ３ＣＡに対する様々な化合物のＩＣ５０を示す。
【図７】１０μＭの化合物について、選択化合物のＮＣＩ−６０比較パネルに対する成長％を示す。
【図８Ａ】図８Ａ、８Ｂ、８Ｃ、８Ｄ、及び８Ｅは、ＨＣＴ−１１６異種移植片、Ａ４３１異種移植片、ＣＯＬ−２０５異種移植片、ＳＫ−ＭＥＬ５異種移植片、及びＭＤＡ−ＭＢ−４６８異種移植片に対するＭＯＬ−２０１のインビボ効力を示す。
【図８Ｂ】図８Ａ、８Ｂ、８Ｃ、８Ｄ、及び８Ｅは、ＨＣＴ−１１６異種移植片、Ａ４３１異種移植片、ＣＯＬ−２０５異種移植片、ＳＫ−ＭＥＬ５異種移植片、及びＭＤＡ−ＭＢ−４６８異種移植片に対するＭＯＬ−２０１のインビボ効力を示す。
【図８Ｃ】図８Ａ、８Ｂ、８Ｃ、８Ｄ、及び８Ｅは、ＨＣＴ−１１６異種移植片、Ａ４３１異種移植片、ＣＯＬ−２０５異種移植片、ＳＫ−ＭＥＬ５異種移植片、及びＭＤＡ−ＭＢ−４６８異種移植片に対するＭＯＬ−２０１のインビボ効力を示す。
【図８Ｄ】図８Ａ、８Ｂ、８Ｃ、８Ｄ、及び８Ｅは、ＨＣＴ−１１６異種移植片、Ａ４３１異種移植片、ＣＯＬ−２０５異種移植片、ＳＫ−ＭＥＬ５異種移植片、及びＭＤＡ−ＭＢ−４６８異種移植片に対するＭＯＬ−２０１のインビボ効力を示す。
【図８Ｅ】図８Ａ、８Ｂ、８Ｃ、８Ｄ、及び８Ｅは、ＨＣＴ−１１６異種移植片、Ａ４３１異種移植片、ＣＯＬ−２０５異種移植片、ＳＫ−ＭＥＬ５異種移植片、及びＭＤＡ−ＭＢ−４６８異種移植片に対するＭＯＬ−２０１のインビボ効力を示す。
【図１Ａ】
2019206549.tif 000066
【図１Ｂ】
2019206549.tif 000067
【図１Ｃ】
2019206549.tif 000068
【図２Ａ】
2019206549.tif 000069
【図２Ｂ】
2019206549.tif 000070
【図２Ｃ】
2019206549.tif 000071
【図２Ｄ】
2019206549.tif 000072
【図２Ｅ】
2019206549.tif 000073
【図３】
2019206549.tif 000074
【図４Ａ】
2019206549.tif 000075
【図４Ｂ】
2019206549.tif 000076
【図４Ｃ】
2019206549.tif 000077
【図５Ａ】
2019206549.tif 000078
【図５Ｂ】
2019206549.tif 000079
【図５Ｃ】
2019206549.tif 000080
【図５Ｄ】
2019206549.tif 000081
【図６】
2019206549.tif 000082
【図７】
2019206549.tif 000083
【図８Ａ】
2019206549.tif 000084
【図８Ｂ】
2019206549.tif 000085
【図８Ｃ】
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【図８Ｄ】
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【図８Ｅ】
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