(57)【要約】【課題】メタン発酵施設において、オンサイトでリアルタイムに、メタン発酵中のメタン生成菌数を測定することのできるメタン発酵システム及びメタン生成菌のモニタリング方法を提供する。【解決手段】本発明のメタン発酵システムは、メタン生成菌を用いてバイオマスを発酵し、メタンガスを生成するメタン発酵槽と、前記メタン発酵槽に接続され、前記メタン発酵槽内の消化液の一部を引き抜いてから、さらに前記メタン発酵槽に戻す循環導管と、非接触で前記循環導管を通る前記メタン生成菌の量を検出する検出部と、を備える。【選択図】図１
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【特許請求の範囲】
【請求項１】
メタン発酵システムであって、
メタン生成菌を用いてバイオマスを発酵し、メタンガスを生成するメタン発酵槽と、
前記メタン発酵槽に接続され、前記メタン発酵槽内の消化液の一部を引き抜いてから、さらに前記メタン発酵槽に戻す循環導管と、
非接触で前記循環導管を通る前記メタン生成菌の量を検出する検出部と、を備える、メタン発酵システム。
【請求項２】
前記検出部は、前記循環導管に設けられ、前記循環導管の内部の前記消化液を透視する透明窓部と、該透明窓部に光を照射する光源と、前記透明窓部から反射する光を検出する撮影部と、該撮影部で撮影したデータを画像化する画像処理演算部と、を備える、請求項１に記載のメタン発酵システム。
【請求項３】
前記循環導管の途中に設けられた循環用ポンプを、さらに備える、請求項１又は２に記載のメタン発酵システム。
【請求項４】
前記循環導管は、前記透明窓部に対向する領域に、前記消化液の液体分のみを導入するじゃま板をさらに備える、請求項１〜３の何れかに記載のメタン発酵システム。
【請求項５】
前記じゃま板は、その一部又は全体が、メッシュ状に形成され、前記消化液の固形分と前記液体分とを分離させて、前記透明窓部に対向する領域に、前記液体分のみを導入するように構成されている、請求項１〜４の何れかに記載のメタン発酵システム。
【請求項６】
メタン発酵槽中のメタン生成菌のモニタリング方法であって、
前記メタン発酵槽中の消化液を取り出して、前記メタン発酵槽中に戻す循環路を形成する工程と、
前記循環路の表面に、所定の波長範囲の励起光を照射する工程と、
前記メタン生成菌に特有の補酵素Ｆ４２０の蛍光量を検出する工程と、
単位面積当たりの前記蛍光量の総量を算出する工程と、を備える、メタン生成菌のモニタリング方法。
【請求項７】
予め作成したメタン生成菌密度‐蛍光量の検量線から、前記循環路に流れてきた前記消化液中の表面メタン生成菌密度を算出し、さらに断面積で除して元の消化液中のメタン生成菌密度を算出する工程を、さらに備える、請求項６に記載のメタン生成菌のモニタリング方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、メタン発酵システム及びメタン生成菌のモニタリング方法に関する。
【背景技術】
【０００２】
従来より、メタン発酵施設等において、例えば、有機廃棄物等のバイオマス原料から、種々の発酵技術によって、メタンガス等のバイオガスを生成させることが、広く行われている。
【０００３】
例えば、メタン発酵施設において、バイオマス原料からメタンガスを生成させる場合、バイオマス原料を液化、加水分解等によって低分子化、酸生成させることで、低級脂肪酸及びアルコールを生成させる。そして、水素生成、酢酸生成によって、水素＋二酸化炭素、又は酢酸を、細菌（メタン生成菌）を用いて発酵させることで、メタンガスが生成される。このようにして生成されたメタンガス及び熱を、回収するようになっている。
【０００４】
ところで、メタン発酵施設において、施設の立ち上げを円滑に行ったり、メタンガスを計画通りに回収したりするためには、メタン発酵を担うメタン生成菌が、発酵槽の発酵液中に、一定数以上存在することが重要である。そのため、メタン生成菌の効率的なモニタリング方法が求められている。
【０００５】
そこで、メタン発酵におけるメタン生成菌のモニタリングに関する技術として、メタン生成菌に特異的に存在する蛍光性補酵素（８‐ヒドロキシ‐５‐ジアザフラビン誘導体、以下、蛍光物質Ｆ４２０という）の蛍光強度を測定することで、メタン生成菌の活性を測定する技術が、例えば、特開平１‐２５００４１号公報（特許文献１）及び特開平８‐１５４６６２号公報（特許文献２）に開示されている。
【０００６】
特許文献１に記載のメタン生成菌計測装置では、発酵槽と、発酵槽中のメタン生成菌を含有する被検体を流すための導管と、被検体に所定の波長範囲の励起光を照射する光源と、被検体が励起光の照射を受けて発する蛍光のうち所定の波長範囲の蛍光を蛍光画像として取得するビデオカメラと、蛍光画像を画像処理してメタン生成菌以外の物質に基づく蛍光を排除する画像処理回路と、を備える。
【０００７】
係るメタン生成菌計測装置では、蛍光強度の測定において、光源からメタン生成菌に４２０ｎｍの光を照射して、蛍光物質Ｆ４２０を青白く光らせ、ビデオカメラで蛍光強度を測定する。測定された蛍光強度のデータは、画像処理回路に送られる。
【０００８】
この種のメタン生成菌計測装置では、励起光を照射する前の段階において、メタン生成菌を含む被検体を、予め洗浄するためのメンブレンフィルタ及び洗浄制御装置を設けることで、発酵槽中に含まれるメタン生成菌以外の蛍光物質を除去し、蛍光画像のバックグランドを除去することができる、とされている。
【０００９】
また、特許文献２に記載のメタン発酵槽の自動制御システムは、メタン発酵槽と、メタン発酵槽に接続され、メタン生成菌を送り出すサンプリングラインと、サンプリングラインに接続され、メタン生成菌の前処理を行う前処理装置と、前処理装置に接続された蛍光分光光度計と、蛍光分光光度計に接続されたデータ解析装置と、を備える。
【００１０】
特許文献２に記載のメタン発酵槽の自動制御システムでは、メタン発酵槽からサンプリングラインを介して、発酵液をサンプリングし、発酵液を前処理装置に送る。前処理装置では、発酵液の希釈、メタン生成菌中の蛍光物質Ｆ４２０を菌体外に溶出させるためのアルカリ処理、及び加熱処理等が行われる。
【００１１】
そして、前処理後のサンプルを、蛍光分光光度計に送り、蛍光強度を測定する。蛍光強度の測定では、メタン生成菌に４２０ｎｍの光を照射して、蛍光物質Ｆ４２０を青白く光らせ、蛍光分光光度計で蛍光強度を測定する。測定された蛍光強度のデータは、データ解析装置に送られる。データ解析装置は、送られてきたデータを解析し、原料槽から原料投入ラインを介して、メタン生成菌を含む原料液を、メタン発酵槽内に必要時に必要量だけ、投入するようになっている。
【先行技術文献】
【特許文献】
【００１２】
【特許文献１】特開平１‐２５００４１号公報
【特許文献２】特開平８‐１５４６６２号公報
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【００１３】
しかしながら、特許文献１に記載のメタン発酵システムでは、上述のように、メタン生成菌に励起光を照射する前の段階において、被検体を予め洗浄するためのメンブレンフィルタ及び洗浄制御装置を設ける必要があるため、洗浄に使用する大がかりな設備等が別途必要である。また、測定で使用された被験体を、そのまま排出するため、再利用することができない、という問題があった。
【００１４】
また、特許文献２に記載のメタン発酵システムでは、発酵液の希釈、メタン生成菌中の蛍光物質Ｆ４２０を菌体外に溶出させるためのアルカリ処理、及び加熱処理等の前処理、及び前処理を行うための試薬が必要である。
【００１５】
さらに、特許文献１及び特許文献２に記載のメタン発酵システムでは、メタン発酵槽中のメタン生成菌を、ある程度の時間間隔（タイムラグ）で測定することは可能であるが、メタン発酵槽中のメタン生成菌の菌数を、リアルタイムに測定することはできず、メタン生成菌のオンサイトでの正確な測定については、全く考慮されていない、という問題があった。
【００１６】
そこで、発明者等は、メタン生成菌のより効率的なモニタリング方法として、メタン発酵施設において、オンサイトでリアルタイムに、メタン発酵中のメタン生成菌の菌数を測定することを検討した。
【００１７】
本発明は、斯かる実情に鑑み、メタン発酵施設において、オンサイトでリアルタイムに、メタン発酵中のメタン生成菌の菌数を測定することのできるメタン発酵システム及びメタン生成菌のモニタリング方法を提供することを目的とする。
【課題を解決するための手段】
【００１８】
本発明に係るメタン発酵システムは、メタン生成菌を用いてバイオマスを発酵し、メタンガスを生成するメタン発酵槽と、前記メタン発酵槽に接続され、前記メタン発酵槽内の消化液の一部を引き抜いてから、さらに前記メタン発酵槽に戻す循環導管と、非接触で前記循環導管を通る前記メタン生成菌の量を検出する検出部と、を備えることを特徴とする。
【００１９】
上記構成のメタン発酵システムによれば、メタン生成菌を用いてバイオマスを発酵し、メタンガスを生成するメタン発酵槽と、メタン発酵槽に接続され、メタン発酵槽内の消化液の一部を引き抜いてから、さらにメタン発酵槽に戻す循環導管と、非接触で循環導管を通るメタン生成菌の量を検出する検出部と、を備えるため、検出部において、メタン生成菌に直接接触することなく、非接触で循環導管を通るメタン生成菌の量を検出することができる。
【００２０】
また、大がかりな設備等を別途必要とせず、前処理、及び前処理等で使用する試薬が不要である。これにより、メタン発酵槽内において、消化液の性状の変化を伴う処理を行う必要がないため、メタン生成菌の量を検出するために使用された消化液を循環させることができる。その結果、メタン発酵施設において、オンサイトでリアルタイムに、メタン発酵中のメタン生成菌の菌数を測定することができる。
【００２１】
また、メタン生成菌の量を検出するために使用された消化液を循環させるため、排出する必要がなく、消化液の一部を循環させてメタン発酵槽に戻し、メタン発酵に再利用することができる。その結果、消化液が循環導管内を絶えず流れているため、循環導管内に、例えば、消化液中の固形分等による汚れが付着することがない。
【００２２】
さらに、例えば、メタン発酵槽中のメタン生成菌の生育状況を確認するための指標として、ｐＨ値の測定を行う場合がある。そのような場合、循環導管を、ｐＨ値測定用の循環経路と併用することができる。
【００２３】
本発明の一態様として、前記検出部は、前記循環導管に設けられ、前記循環導管の内部の前記消化液を透視する透明窓部と、該透明窓部に光を照射する光源と、前記透明窓部から反射する光を検出する撮影部と、該撮影部で撮影したデータを画像化する画像処理演算部と、を備える、のが好ましい。
【００２４】
上記構成のメタン発酵システムによれば、検出部は、循環導管に設けられ、循環導管の内部の消化液を透視する透明窓部と、該透明窓部に光を照射する光源と、透明窓部から反射する光を検出する撮影部と、該撮影部で撮影したデータを画像化する画像処理演算部と、を備えるため、光源から循環導管の透明窓部に、光が照射され、透明窓部から反射する光は、撮影部によって検出（撮影）され、撮影部で撮影されたデータは、画像処理演算部によって画像化される。
【００２５】
したがって、光源、透明窓部、撮影部及び画像処理演算部といった簡単な構成で、メタン生成菌に直接接触することなく、非接触で循環導管を通るメタン生成菌の量を検出することができる。これにより、メタン発酵施設において、オンサイトでリアルタイムに、メタン発酵中のメタン生成菌の菌数を測定することができる。
【００２６】
本発明の他態様として、前記循環導管の途中に設けられた循環用ポンプを、さらに備える、のが好ましい。
【００２７】
上記構成のメタン発酵システムによれば、循環導管の途中に設けられた循環用ポンプを、さらに備えるため、メタン発酵槽から循環導管に、消化液をより効率的に送り出して、循環導管内に消化液を常に流し続けることで、消化液を効率的に循環させることができる。
【００２８】
本発明の他態様として、前記循環導管は、前記透明窓部に対向する領域に、前記消化液の液体分のみを導入するじゃま板をさらに備える、のが好ましい。
【００２９】
メタン発酵槽中には、バイオマスやメタン生成菌等の固形分、及び発酵液等の液体分が存在している。上記構成のメタン発酵システムによれば、循環導管は、透明窓部に対向する領域に、消化液の液体分のみを導入するじゃま板をさらに備えるため、循環導管を通って透明窓部に対向する領域に、消化液の液体分のみを効率的に導入することができる。
【００３０】
また、じゃま板を備えることで、透明窓部付近の消化液の流路（断面積）を狭くし、検出対称となる消化液（メタン生成菌）の量を低減させることができる。
【００３１】
本発明のメタン生成菌のモニタリング方法は、メタン発酵槽中のメタン生成菌のモニタリング方法であって、前記メタン発酵槽中の消化液を取り出して、前記メタン発酵槽中に戻す循環路を形成する工程と、前記循環路の表面に、所定の波長範囲の励起光を照射する工程と、前記メタン生成菌に特有の補酵素Ｆ４２０の蛍光量を検出する工程と、単位面積当たりの前記蛍光量の総量を算出する工程と、を備える、ことを特徴とする。
【００３２】
上記構成のメタン生成菌のモニタリング方法によれば、メタン発酵槽中のメタン生成菌のモニタリング方法であって、メタン発酵槽中の消化液を取り出して、メタン発酵槽中に戻す循環路を形成する工程と、循環路の表面に、所定の波長範囲の励起光を照射する工程と、メタン生成菌に特有の補酵素Ｆ４２０の蛍光量を検出する工程と、単位面積当たりの前記蛍光量の総量を算出する工程と、を備えるため、メタン生成菌を１個ずつ分離する必要がなく、メタン生成菌に直接接触することなく、非接触で循環導管を通るメタン生成菌の量を検出することができる。
【００３３】
また、大がかりな設備等が不要であり、前処理及び前処理等で使用する試薬が不要である。これにより、メタン発酵槽内において、消化液の性状の変化を伴う処理を行う必要がないため、メタン生成菌の量を検出するために使用された消化液を排出する必要がない。そのため、メタン生成菌の量を検出するために使用された消化液を循環させることができ、消化液の一部を循環させてメタン発酵槽に戻し、メタン発酵に再利用することができる。その結果、消化液が循環導管内を絶えず流れているため、循環導管内に、例えば、消化液中の固形分等による汚れが付着することがない。メタン発酵施設において、オンサイトでリアルタイムにメタン発酵中のメタン生成菌の菌数を測定することができる。
【００３４】
本発明のさらに別の態様として、予め作成したメタン生成菌密度‐蛍光量の検量線から、前記循環路に流れてきた前記消化液中の表面メタン生成菌密度を算出し、さらに断面積で除して元の消化液中のメタン生成菌密度を算出する工程を、さらに備える、のが好ましい。
【００３５】
上記構成のメタン生成菌のモニタリング方法によれば、予め作成したメタン生成菌密度‐蛍光量の検量線から、循環路に流れてきた消化液中の表面メタン生成菌密度を算出し、さらに断面積で除して元の消化液中のメタン生成菌密度を算出する工程を、さらに備えるため、メタン生成菌密度‐蛍光量の検量線を用いて、単位面積当たりの蛍光量の総量から、メタン生成菌密度を容易に求めることができる。これにより、メタン発酵施設において、オンサイトでリアルタイムにメタン発酵中のメタン生成菌数を測定することができる。
【発明の効果】
【００３６】
以上のように、本発明のメタン発酵システム及びメタン生成菌のモニタリング方法によれば、メタン発酵施設において、オンサイトでリアルタイムに、メタン発酵中のメタン生成菌数を測定することができる、といった優れた効果を奏し得る。
【図面の簡単な説明】
【００３７】
【図１】本発明の一実施形態に係るメタン発酵システムの全体構成を示す図である。
【図２】同実施形態に係るメタン発酵システムの検出部の構成を示す拡大図である。
【図３】同実施形態に係るメタン発酵システムの検出部の変形例を示す図である。
【発明を実施するための形態】
【００３８】
以下、本発明の一実施形態に係るメタン発酵システムの概略について、添付図面を参照して説明する。
【００３９】
本実施形態に係るメタン発酵システムは、例えば、メタンガス等のバイオガスを発生させるためのメタン発酵装置を備えた、一般的なメタン発酵施設等に設置されるためのものである。
【００４０】
図１に示すように、本実施形態に係るメタン発酵システム１００は、メタン生成菌を用いてバイオマスを発酵し、メタンガスを生成するメタン発酵槽１０と、メタン発酵槽１０に接続され、メタン発酵槽１０内の消化液の一部を引き抜いてから、さらにメタン発酵槽１０に戻す循環導管１１と、非接触で循環導管１１を通るメタン生成菌の量を検出する検出部１２と、を備える。
【００４１】
本実施形態に係るメタン発酵槽１０として、メタン発酵施設、有機性廃棄物等の処理施設等に設置される一般的なメタン発酵槽が、使用可能である。本実施形態において、メタン発酵槽１０は、底面１０ａと、底面１０ａから立ち上がる側壁部１０ｂと、を備える。
【００４２】
なお、メタン発酵槽１０には、有機性廃棄物等のバイオマス、発酵菌としてのメタン生成菌、消化液、栄養等が供給されている。バイオマスの種類、発酵菌、栄養及び消化液の種類等は、必要に応じて、適宜変更可能である。
【００４３】
メタン発酵に必要なメタン生成菌の個数として、例えば、メタン発酵槽１０中に、１×１０８個程度存在していればよい。後述するメタン生成菌のモニタリング方法によるモニタリングの結果、毎日のメタン発酵槽１０中へのメタン生成菌の投入量を調整するようにする。例えば、メタン発酵が４０日間で行われる場合、メタン生成菌を、毎日１／４０量ずつ投入すればよい。投入材料の量や配合は、栄養で調整することが可能である。
【００４４】
本実施形態において、循環導管１１は、ガラス管、もしくは、側面の一部が、ガラス製であることが好ましい。なお、本実施形態において、循環導管１１として、励起波長４２０ｎｍの光と蛍光波長４７２ｎｍの光とが透過可能な、石英ガラスが望ましいが、ガラスの材質は、特に限定されるものではない。また、循環導管１１は、ガラスに限定されるものではなく、例えば、風化することなく、硬くて透明な材質であればよい。
【００４５】
本実施形態において、循環導管１１は、メタン発酵槽１０の側壁部１０ｂの外側に接続されている。より具体的には、循環導管１１は、メタン発酵槽１０の側壁部１０ｂの外側から水平方向に延びる第一の導管１１ａと、第一の導管１１ａに接続され、第一の導管１１ａから上方向に向けて（垂直方向に）延びる第二の導管１１ｂと、第二の導管１１ｂに接続され、第二の導管１１ｂからメタン発酵槽１０の側壁部に向けて延びる第三の導管１１ｃと、を備える。
【００４６】
図２に示すように、本実施形態において、検出部１２は、循環導管１１に設けられ、循環導管１１の内部の消化液を透視する透明窓部１３と、該透明窓部１３に光を照射する光源１４と、透明窓部１３から反射する光を検出（撮影）する撮影部１５と、該撮影部１５で撮影したデータを画像化する画像処理演算部１６と、を備える。
【００４７】
本実施形態において、透明窓部１３は、略矩形状を呈し、第二の導管１１ｂの外周面に形成されている。
【００４８】
光源１４は、透明窓部１３に対向する領域を通るメタン生成菌に、４２０ｎｍの光を照射し、メタン生成菌に特有の蛍光物質Ｆ４２０を青白く光らせる。光源１４としては、一般的に用いられるものが使用可能である。
【００４９】
撮影部１５は、透明窓部１３から反射する４７０ｎｍの反射光の蛍光強度を検出（撮影）する。本実施形態において、撮影部１５として、ＣＣＤカメラが使用されているが、これに限定されるものではなく、透明窓部１３から反射する４７０ｎｍの反射光の蛍光強度を検出（撮影）可能なものであればよい。
【００５０】
撮影部１５によって検出、撮影された蛍光強度のデータは、画像処理演算部１６に送られる。画像処理演算部１６は、撮影部１５で撮影したデータを画像化し、撮影部１５に接続された画像表示部としてのモニター（図示せず）によって表示するとともに、単位面積当たりの蛍光量の総量を算出する。
【００５１】
図１に示すように、本実施形態において、メタン発酵システム１００は、循環導管１１の途中に設けられた循環用ポンプ１７を、さらに備える。
【００５２】
循環用ポンプ１７としては、特に限定されるものではなく、一般的な導管や配管等の循環用に用いられるものが使用可能である。本実施形態において、循環用ポンプ１７は、第一の導管１１ａの途中に設けられている。
【００５３】
図３に示すように、本実施形態において、循環導管１１は、透明窓部１３に対向する領域に、消化液の液体分Ｌのみを導入するじゃま板１８をさらに備える。
【００５４】
じゃま板１８は、その一部又は全体が、メッシュ状に形成され、消化液の固形分Ｓと液体分Ｌとを分離させて、透明窓部１３に対向する領域に、液体分Ｌのみを導入するように構成されている。
【００５５】
本実施形態において、じゃま板１８は、透明窓部１３と同様の材質で形成されている。本実施形態において、じゃま板１８は、透明窓部１３と同様の材質で形成されているが、これに限定されるものではない。なお、じゃま板１８は、スリット形状を有してもよい。
【００５６】
図３に示すように、じゃま板１８は、断面視において、略三角形状に形成されている。本実施形態において、じゃま板１８は、断面視において、略三角形状に形成されているが、これに限定されるものではなく、任意の形状が可能である。
【００５７】
以上のように、本実施形態に係るメタン発酵システム１００によれば、検出部１２において、メタン生成菌に直接接触することなく、非接触で循環導管１１を通るメタン生成菌の量を検出することができる。
【００５８】
また、大がかりな設備等を別途必要とせず、前処理、及び前処理等で使用する試薬が不要である。これにより、メタン発酵槽１０内において、消化液の性状の変化を伴う処理を行う必要がないため、メタン生成菌の量を検出するために使用された消化液を循環させることができる。その結果、メタン発酵施設において、オンサイトでリアルタイムに、メタン発酵中のメタン生成菌数を測定することができる。
【００５９】
また、メタン生成菌の量を検出するために使用された消化液を循環させるため、排出する必要がなく、消化液の一部を循環させてメタン発酵槽１０に戻し、メタン発酵に再利用することができる。その結果、消化液が循環導管１１内を絶えず流れているため、循環導管１１内に、例えば、消化液中の固形分Ｓ等による汚れが付着することがない。
【００６０】
さらに、メタン生成菌の測定において、例えば、メタン発酵槽１０中のメタン生成菌の生育状況を確認するための指標として、ｐＨ値の測定を行う場合がある。そのような場合、循環導管１１を、ｐＨ値測定用の循環経路と併用することができる。
【００６１】
また、検出部１２において、光源１４から循環導管１１の透明窓部１３に、４２０ｎｍの光が照射され、透明窓部１３から反射する４７２ｎｍの光は、撮影部１５によって検出（撮影）され、撮影部１５で撮影したデータは、画像処理演算部１６によって画像化される。
【００６２】
したがって、検出部１２として、光源１４、透明窓部１３、撮影部１５及び画像処理演算部１６といった簡単な構成で、メタン生成菌に直接接触することなく、非接触で循環導管１１を通るメタン生成菌の量を検出することができる。これにより、メタン発酵施設において、オンサイトでリアルタイムに、メタン発酵槽１０中のメタン生成菌の菌数を測定することができる。
【００６３】
また、循環用ポンプ１７によって、メタン発酵槽１０から循環導管１１に、消化液をより効率的に送り出して、循環導管１１内に消化液を常に流し続けることで、消化液を効率的に循環させることができる。
【００６４】
また、じゃま板１８によって、循環導管１１を通って透明窓部１３に対向する領域に、消化液の液体分Ｌのみを効率的に導入することができる。
【００６５】
また、じゃま板１８を備えることで、透明窓部１３付近の消化液の流路（断面積）を狭くし、検出対称となる消化液（メタン生成菌）の量を低減させることができる。
【００６６】
本実施形態に係るメタン発酵システム１００の構成についての説明は以上の通りであり、次に、本実施形態に係るメタン発酵システム１００を用いて、メタン発酵装置（図示せず）における、メタン発酵槽１０中のメタン生成菌をモニタリングする作業について説明する。
【００６７】
本実施形態に係るメタン発酵槽１０中のメタン生成菌のモニタリング方法は、メタン発酵槽１０中の消化液を取り出して、メタン発酵槽１０中に戻す循環路を形成する工程と、循環路の表面に、所定の波長範囲の励起光を照射する工程と、メタン生成菌に特有の補酵素Ｆ４２０の蛍光量を検出する工程と、単位面積当たりの蛍光量の総量を算出する工程と、を備える。
【００６８】
より具体的には、メタン発酵槽１０中のメタン生成菌のモニタリング方法は、メタン発酵槽１０中の消化液を取り出して、メタン発酵槽１０中に戻す循環路としての循環導管１１を形成する工程と、循環路（循環導管１１）の表面に、光源１４から４２０ｎｍの励起波長の励起光を照射する工程と、撮影部１５によりメタン生成菌に特有の補酵素Ｆ４２０の４７２ｎｍの蛍光量を検出する工程と、画像処理演算部１６により撮影部１５で撮影したデータを画像化し、単位面積当たりの蛍光量の総量を算出する工程と、を備える。
【００６９】
本実施形態において、メタン発酵槽１０中のメタン生成菌のモニタリング方法は、予め作成したメタン生成菌密度‐蛍光量の検量線から、循環路（循環導管１１）に流れてきた消化液中の表面メタン生成菌密度を算出し、さらに断面積で除して元の消化液中のメタン生成菌密度を算出する工程を、さらに備える。
【００７０】
本実施形態に係るメタン生成菌のモニタリング方法を用いて、メタン発酵槽１０中のメタン生成菌の菌数を測定する場合、まず、図１に示すように、メタン発酵槽１０内の消化液の一部を、循環用ポンプ１７によって、第一の導管１１ａに送り出し、第二の導管１１ｂ、第三の導管１１ｃへと、消化液の一部を順に送り出すことで、循環路（循環導管１１）を形成する。なお、図１において、循環路（循環導管１１）内の消化液の流れを、矢印で示している。
【００７１】
なお、この時点で、すぐに次の工程に進むようにしてもよいが、例えば、所定の時間間隔をあけて、消化液中の固形分Ｓが、第二の導管１１ｂの下側（底部）にある程度溜まるのを待ってから、次の工程に進むようにしてもよい。
【００７２】
メタン発酵槽１０内の消化液の一部を、循環用ポンプ１７によって、第一の導管１１ａに送り出した当初、消化液中の固形分Ｓの濃度は、約１０％程度になっている。消化液の一部が、第二の導管１１ｂ、第三の導管１１ｃへと、順に送り出されることで、循環路（循環導管１１）を形成するようになると、消化液中の固形分Ｓの濃度は、約８％程度になっている。
【００７３】
そして、図２に示すように、光源１４から透明窓部１３に向けて、４２０ｎｍの光を照射する。次に、透明窓部１３から反射する４７０ｎｍの反射光の蛍光強度から、メタン生成菌に特有の補酵素Ｆ４２０の蛍光量を、撮影部１５によって、検出（撮影）する。
【００７４】
そして、図１及び図２に示すように、撮影部１５によって撮影されたデータを、画像処理演算部１６に送る。次に、画像処理演算部１６は、撮影部１５で撮影したデータを画像化し、撮影部１５に接続された画像表示部としてのモニター（図示せず）によって表示するとともに、予め作成したメタン生成菌密度‐蛍光量の検量線から、循環路（循環導管１１）に流れてきた消化液中の表面メタン生成菌密度を算出し、さらに断面積で除して元の消化液中のメタン生成菌密度を算出することで、単位面積当たりの蛍光量の総量を算出する。
【００７５】
そして、算出されたメタン生成菌密度に基づいて、メタン発酵に必要なメタン生成菌の個数を、メタン発酵槽１０中へ随時投入する。
【００７６】
以上のように、本実施形態に係るメタン生成菌のモニタリング方法によれば、面全体の発光度合で菌の量（全体の光強度）を推定するため、メタン生成菌を１個ずつ分離する必要がなく、また、メタン生成菌に直接接触することなく、非接触で循環導管を通るメタン生成菌の量を検出することができる。
【００７７】
また、大がかりな設備等が不要であり、前処理及び前処理等で使用する試薬が不要である。これにより、メタン発酵槽１０内において、消化液の性状の変化を伴う処理を行う必要がないため、メタン生成菌の量を検出するために使用された消化液を排出する必要がない。そのため、メタン生成菌の量を検出するために使用された消化液を循環させることができ、消化液の一部を循環させてメタン発酵槽に戻し、メタン発酵に再利用することができる。
【００７８】
その結果、消化液が循環導管１１内を絶えず流れているため、循環導管１１内に、例えば、消化液中の固形分Ｓ等による汚れが付着することがない。これにより、メタン発酵施設において、オンサイトでリアルタイムにメタン発酵中のメタン生成菌数を測定することができる。
【００７９】
上述のように、メタン発酵に必要なメタン生成菌の個数として、例えば、メタン発酵槽１０中に、１×１０８個程度存在していればよい。メタン生成菌のモニタリング方法によるモニタリングの結果、毎日のメタン発酵槽１０中へのメタン生成菌の投入量を調整するようにする。例えば、メタン発酵が４０日間で行われる場合、メタン生成菌を、毎日１／４０量ずつ投入すればよい。投入材料の量や配合は、栄養で調整することが可能である。
【００８０】
尚、本発明のメタン発酵システム及びメタン生成菌のモニタリング方法は、上記実施形態に限定されるものではなく、本発明の要旨を逸脱しない範囲で適宜変更し得ることは勿論のことである。
【００８１】
上記実施形態において、循環導管１１は、メタン発酵槽１０の側壁部の外側から水平方向に延びる第一の導管１１ａと、第一の導管１１ａに接続され、第一の導管１１ａから上方向に向けて（垂直方向に）延びる第二の導管１１ｂと、第二の導管１１ｂに接続され、第二の導管１１ｂからメタン発酵槽１０の側壁部に向けて延びる第三の導管１１ｃと、を備えるが、これに限定されるものではない。例えば、循環導管１１は、チューブや配管等で構成され、メタン発酵槽１０中に直接差し込まれるような構成であってもよい。要は、循環導管１１は、メタン発酵槽１０中の消化液を取り出して、メタン発酵槽１０中に戻す循環路を形成するような構成であればよい。
【００８２】
上記実施形態において、非接触で循環導管１１を通るメタン生成菌の量を検出する検出部１２として、循環導管１１に設けられ、循環導管１１の内部の消化液を透視する透明窓部１３と、該透明窓部１３に光を照射する光源１４と、透明窓部１３から反射する光を検出（撮影）する撮影部１５と、該撮影部１５で撮影したデータを画像化する画像処理演算部１６と、を備えるが、これに限定されるものではない。要は、検出部１２は、非接触で循環導管を通るメタン生成菌の量を検出できるような構成であればよい。
【００８３】
本実施形態において、透明窓部１３は、略矩形状を呈し、第二の導管１１ｂの外周面に形成されているが、これに限定されるものではない。要は、透明窓部１３は、循環導管１１に設けられ、循環導管１１の内部の消化液を透視することができるような構成であればよい。
【００８４】
上記実施形態において、循環用ポンプ１７は、第一の導管１１ａの途中に設けられているが、これに限定されるものではない。要は、循環用ポンプ１７は、循環導管１１に設けられ、メタン発酵槽１０から循環導管１１に、消化液をより効率的に送り出して、循環導管１１内に消化液を常に流し続けることで、消化液を効率的に循環させることができるような構成であればよい。
【００８５】
上記実施形態において、メタン発酵槽１０中の消化液に、固形分Ｓが多く存在している場合、循環導管１１内に、目の粗いフィルタを設けて、固形分Ｓと液体分Ｌとの流路を分け、液体分Ｌ中に拡散しているメタン生成菌のみを、測定対象とするようにしてもよい。
【００８６】
上記実施形態において、メタン生成菌のモニタリング方法は、循環導管１１内の消化液を、所定時間に一度、逆循環させる工程を、さらに備えるようにしてもよい。そうすることで、循環導管１１内に、例えば、バイオマスやメタン生成菌等の固形分Ｓが詰まったり、消化液等の液体分Ｌが、循環導管１１の内壁に付着したりすることを防ぐことができる。
【００８７】
また、検出部１２に対向する領域にじゃま板１８を設ける場合、じゃま板１８のメッシュ形状に、バイオマスやメタン生成菌等の固形分Ｓが目詰まりする等の不具合を改善することができる。
【００８８】
上記実施形態において、検出部１２に、フローサイトメータ等の測定器を組み合わせるようにしてもよい。
【産業上の利用可能性】
【００８９】
本発明のメタン発酵システム及びメタン生成菌のモニタリング方法は、メタンガス等のバイオガスを発生させるためのメタン発酵装置を備えた、一般的なメタン発酵施設等に有効に適用される。
【符号の説明】
【００９０】
１０  メタン発酵槽、１０ａ  底面、１０ｂ  側壁部、１１  循環導管、１１ａ  第一の導管、１１ｂ  第二の導管、１１ｃ  第三の導管、１２  検出部、１３  透明窓部、１４  光源、１５  撮影部、１６  画像処理演算部、１７  循環用ポンプ、１８  じゃま板、１００  メタン発酵システム、Ｓ  固形分、Ｌ  液体分。
【図１】
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【図２】
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【図３】
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