(57)【要約】      （修正有）【課題】脂肪肝の予防又は治療の為、血中コレステロール及び肝臓中性脂肪を低下させる新規化合物の提供。【解決手段】式（Ｉ）で示されるリン酸アミド化合物。2019019063.tif 000016［Ｒ１はＣ１〜２４アルキル基又はアルケニル基；Ｒ２はＣ１〜２４アルキル基又はアルケニル基］【選択図】なし【特許請求の範囲】
【請求項１】
下記式
【化１】
2019019063.tif 000014
（式中、Ｒ１は炭素数１〜２４のアルキル基又はアルケニル基を示す。Ｒ２は炭素数１〜２４のアルキル基又はアルケニル基を示す。）で表わされる化合物。
【請求項２】
下記式
【化２】
2019019063.tif 000015
で表わされる、請求項１に記載の化合物。
【請求項３】
請求項１又は２に記載の化合物を含む、脂肪肝の予防又は治療剤。
【請求項４】
請求項１又は２に記載の化合物を含む、血中コレステロール低下剤。
【請求項５】
請求項１又は２に記載の化合物を含む、血中コレステロール低下用食品組成物。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、新規化合物、脂肪肝の予防又は治療剤、血中コレステロール低下剤及び血中コレステロール低下用食品組成物に関するものである。
【背景技術】
【０００２】
シジミは古くから味噌汁や佃煮として食されてきた一般的な和食材であると同時に、「肝臓に良い」、「黄疸によい」などの理由から民間療法として利用されてきた。更に、近年の健康志向の高まりからシジミ抽出物食品が栄養補助食品、健康補助食品やサプリメントとして流通している。
【０００３】
特許文献１は、シジミ抽出物を含む血中コレステロール低下剤を開示している。
【０００４】
非特許文献1は、シジミ抽出物中のコレステロール低下作用を有する分画を記載し、スフィンゴ脂質を含む分画にコレステロール低下作用があることが記載されている。
【先行技術文献】
【特許文献】
【０００５】
【特許文献１】特開2007-210990号公報
【非特許文献】
【０００６】
【非特許文献１】Food Chemistry, 136 (2013) 328-334
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００７】
シジミ抽出物が血中コレステロール低下作用を有することは公知であるが、シジミ抽出物中には数多くの成分が存在し、血中コレステロール低下作用を有する物質は特定されていなかった。
【０００８】
本発明は、血中コレステロール低下作用を有する新規化合物、該化合物を含む脂肪肝の予防又は治療剤、血中コレステロール低下剤及び血中コレステロール低下用食品を提供することを目的とする。
【課題を解決するための手段】
【０００９】
本発明者は、血中コレステロール低下作用に基づいてシジミ抽出物を分画し、血中コレステロール低下作用を有する新規化合物を見出した。該化合物は、血中コレステロール低下作用及び肝臓中性脂肪の低下作用を有し、脂肪肝の予防又は治療剤として有用である。
【００１０】
本発明は、以下の新規化合物、脂肪肝の予防又は治療剤、血中コレステロール低下剤及び血中コレステロール低下用食品組成物を提供するものである。
項１．  下記式
【００１１】
【化１】
2019019063.tif 000002
【００１２】
（式中、Ｒ１は炭素数１〜２４のアルキル基又はアルケニル基を示す。Ｒ２は炭素数１〜２４のアルキル基又はアルケニル基を示す。）で表わされる化合物。
項２．  下記式
【００１３】
【化２】
2019019063.tif 000003
【００１４】
で表わされる、項１に記載の化合物。
項３．  項１又は２に記載の化合物を含む、脂肪肝の予防又は治療剤。
項４．  項１又は２に記載の化合物を含む、血中コレステロール低下剤。
項５．  項１又は２に記載の化合物を含む、血中コレステロール低下用食品組成物。
【発明の効果】
【００１５】
本発明の化合物は、血液、血清、血漿中の総コレステロール、遊離コレステロール、コレステロールエステル、LDL-コレステロール、さらに肝臓中性脂肪を低下させることができる。
【００１６】
本発明によれば、血中コレステロール低下作用及び肝臓中性脂肪低下作用を有する化合物が提供される。この化合物は血中コレステロール低下用食品組成物あるいは脂肪肝の予防又は治療剤として摂取することで、血中コレステロールを低下させ、脂肪肝を予防又は治療することができる。
【図面の簡単な説明】
【００１７】
【図１】シジミ熱水抽出エキスの分画スキームを示す。
【発明を実施するための形態】
【００１８】
本発明は、血中コレステロール低下作用を有する以下の式（I）の化合物を提供するものである。好ましい立体配置を式(IA)に示す。
【００１９】
【化３】
2019019063.tif 000004
【００２０】
（式中、Ｒ１は炭素数１〜２４のアルキル基又はアルケニル基を示す。Ｒ２は炭素数１〜２４のアルキル基又はアルケニル基を示す。）
炭素数１〜２４のアルキル基としては、例えば、メチル、エチル、ｎ−プロピル、イソプロピル、ｎ−ブチル、イソブチル、ｔｅｒｔ−ブチル、ペンチル、ヘキシル、オクチル、２−エチルヘキシル、ノニル、デシル、ウンデシル、ドデシル、トリデシル、テトラデシル、ペンタデシル、ヘキサデシル、ヘプタデシル、ヘプタデシル、ステアリル、イソステアリル、ノナデシル、イコシル、ヘンイコシル、ドコサニル、トリコサニル、テトラコサニルなどの直鎖又は分岐を有する炭素数１〜２４、好ましくは炭素数４〜２２、より好ましくは炭素数８〜２０のアルキル基が挙げられる。
【００２１】
炭素数１〜２４のアルケニル基としては、例えば、ビニル、アリル、ブテニル、イソブテニル、ペンテニル、ヘキセニル、ヘプテニル、オクテニル、ノネニル、デセニル、ウンデセニル、ドデセニル、トリデセニル、テトラデセニル、ペンタデセニル、ヘキサデセニル、ヘプタデセニル、オクタデセニル、イソオクタデセニル、ノナデセニル、イコセニル、ヘンイコセニル、ドコセニル、トリコセニル、テトラコセニルなどの直鎖又は分岐を有する炭素数２〜２４、好ましくは炭素数４〜２２、より好ましくは炭素数８〜２０のアルケニル基が挙げられる。
【００２２】
好ましいＲ１としては、以下のものが挙げられる：
【００２３】
【化４】
2019019063.tif 000005
【００２４】
好ましいＲ２としては、以下のものが挙げられる：
【００２５】
【化５】
2019019063.tif 000006
【００２６】
本発明のさらに好ましい化合物を以下に示す。
【００２７】
【化６】
2019019063.tif 000007
【００２８】
本発明の化合物が１以上の不斉炭素を有する場合、各不斉炭素の立体配置はＲ体、Ｓ体、Ｒ体とＳ体の任意の割合の混合物(ラセミ体を含む)を包含する。したがって、本発明の化合物は、各種エナンチオマー及びジアステレオマーを含む。
【００２９】
本発明の化合物は、例えば以下のスキーム１〜３のようにして合成することができる。スキーム４は、原料である化合物（４）の製造法を示す。
【００３０】
【化７】
2019019063.tif 000008
【００３１】
(式中、Ｒ１、Ｒ２は前記に定義されるとおりである。)
化合物（１）１モルに対し、酸クロライド（２）を１モルから過剰量使用し、必要に応じて塩基の存在下に溶媒中で反応させることにより、式（Ｉ）の化合物を得ることができる。反応温度は０〜１００℃程度であり、反応時間は３０分から１２時間程度である。塩基としては、炭酸カリウム、炭酸ナトリウム、炭酸水素カリウム、炭酸水素ナトリウムなどのアルカリ金属炭酸塩又は炭酸水素塩、トリエチルアミン、ジイソプロピルエチルアミン、ＤＢＵなどが挙げられる。溶媒としては、テトラヒドロフラン、ジエチルエーテル、酢酸エチル、クロロホルム、塩化メチレンなどが挙げられる。
【００３２】
【化８】
2019019063.tif 000009
【００３３】
(式中、Ｒ１、Ｒ２は前記に定義されるとおりである。)
化合物（３）１モルに対し、アンモニアを１モルから過剰量使用し、必要に応じて塩基の存在下に溶媒中で反応させることにより、式（Ｉ）の化合物を得ることができる。反応温度は室温から１００℃程度であり、反応時間は３０分から１２時間程度である。塩基としては、炭酸カリウム、炭酸ナトリウム、炭酸水素カリウム、炭酸水素ナトリウムなどのアルカリ金属炭酸塩又は炭酸水素塩、アンモニア、トリエチルアミン、ジイソプロピルエチルアミン、ＤＢＵなどが挙げられる。溶媒としては、テトラヒドロフラン、ジエチルエーテル、酢酸エチル、クロロホルム、塩化メチレン、ジメチルホルムアミド、ジメチルスルホキシドなどが挙げられる。
【００３４】
【化９】
2019019063.tif 000010
【００３５】
(式中、Ｒ１、Ｒ２は前記に定義されるとおりである。)
化合物（４）１モルに対し、アンモニアを１モルから過剰量使用し、DICのようなカルボジイミド縮合剤を等モルから過剰量使用し、溶媒中で反応させることにより、式（Ｉ）の化合物を得ることができる。反応温度は０℃から１００℃程度であり、反応時間は３０分から１２時間程度である。溶媒としては、テトラヒドロフラン、ジエチルエーテル、酢酸エチル、クロロホルム、塩化メチレン、ジメチルホルムアミド、ジメチルアセトアミド、ジメチルスルホキシド、ピリジンなどが挙げられる。
【００３６】
【化１０】
2019019063.tif 000011
【００３７】
(式中、Ｒ１、Ｒ２は前記に定義されるとおりである。)
化合物（５）１モルに対し、化合物（６）を１モルから過剰量使用し、塩基の存在下に溶媒中で反応させ、さらにｔ−ＢｕＯＯＨと反応させることにより、式（Ｉ）の化合物を得ることができる。反応温度は−７８℃から室温程度であり、反応時間は３０分から１２時間程度である。塩基としては、トリエチルアミン、ジイソプロピルエチルアミン、ＤＢＵ、ＤＩＰＥＡなどが挙げられる。溶媒としては、テトラヒドロフラン、ジエチルエーテル、酢酸エチル、クロロホルム、塩化メチレン、ジメチルホルムアミド、ジメチルスルホキシドなどが挙げられる。
【００３８】
本発明の脂肪肝の予防又は治療剤及び血中コレステロール低下用食品組成物は、製剤の形態が好ましい。製剤としては、具体的には錠剤、カプセル剤(ハードカプセル、ソフトカプセル)、丸剤、チュアブル錠、口腔内崩壊錠、顆粒剤、散剤、液剤、ドリンク剤、懸濁剤、乳濁剤などが挙げられる。
【００３９】
本発明の脂肪肝の予防又は治療剤及びコレステロール低下用食品組成物は、本発明の化合物とともに製剤用の担体を含むことができる。このような担体としては、固形製剤の場合、賦形剤、結合剤、崩壊剤、滑沢剤、着色剤、矯味・矯臭剤などが挙げられ、液状製剤の場合、溶剤、溶解補助剤、懸濁化剤、等張化剤、緩衝剤などが挙げられる。また、必要に応じて防腐剤、抗酸化剤、着色剤、甘味剤、安定化剤等の製剤添加物を用いることもできる。カプセル剤の担体としては、ハードカプセルの場合には、カプセル皮膜としてゼラチンを挙げることができ、ソフトカプセルの場合には、カプセル用皮膜として、ゼラチン、多価アルコール（グリセリン、ソルビトール、マンニトール、マルチトール等）等を挙げることができる。ソフトカプセルはさらに水を含んでいてもよい。賦形剤としては、乳糖、白糖、D-マンニトール、ブドウ糖、デンプン、炭酸カルシウム、カオリン、微結晶セルロース、無水ケイ酸等が挙げられる。
【００４０】
結合剤としては、水、エタノール、1-プロパノール、2-プロパノール、単シロップ、ブドウ糖液、α-デンプン液、ゼラチン液、D-マンニトール、カルボキシメチルセルロース、ヒドロキシプロピルセルロース、ヒドロキシプロピルスターチ、メチルセルロース、エチルセルロース、シェラック、リン酸カルシウム、ポリビニルピロリドン等が挙げられる。
【００４１】
崩壊剤としては、乾燥デンプン、アルギン酸ナトリウム、カンテン末、炭酸水素ナトリウム、炭酸カルシウム、ラウリル硫酸ナトリウム、ステアリン酸モノグリセリド、乳糖等が挙げられる。
【００４２】
滑沢剤としては、精製タルク、ステアリン酸塩ナトリウム、ステアリン酸マグネシウム、ホウ砂、ポリエチレングリコール等が挙げられる。
【００４３】
着色剤としては、酸化チタン、酸化鉄等が挙げられる。
【００４４】
矯味・矯臭剤としては白糖、橙皮、クエン酸、酒石酸等が挙げられる。
【００４５】
緩衝剤としては、クエン酸ナトリウム等が挙げられる。
【００４６】
安定剤としては、トラガント、アラビアゴム、ゼラチン等が挙げられる。
【００４７】
本発明の食品組成物は、サプリメントの形態であってもよい。
【００４８】
本発明において、食品としては、グミ、飲料、ドリンクゼリー、キャンデー、クッキー、ビスケットなどが挙げられる。
【００４９】
本発明の化合物は、健常な成人１日当たり５ｎｇ〜１ｍｇ程度、好ましくは２０ｎｇ〜０．５ｍｇ程度、より好ましくは１００ｎｇ〜０．１ｍｇ程度摂取されることが望ましい。
【実施例】
【００５０】
以下に参考例、実施例及び試験例を挙げて本発明を更に具体的に説明するが、これらは本発明を限定するものではない。
【００５１】
実施例1
特許文献１の実施例１の記載に従い2.5kgのシジミエキス粉末を得た。得られたシジミエキス粉末2.5kgを、図1のプロトコールに従い分画した。
【００５２】
得られた分画のうち、フラクション1-2-7において、以下の構造式の化合物を単離した。
【００５３】
【化１１】
2019019063.tif 000012
【００５４】
上記化合物のマススペクトルの物性値を以下に示す。
C36H73N2O5P
Exact Mass: 644.5
Mol. Wt.: 644.9
(+)HR-FABMS C36H74N2O5P [M+H]+ 645.5339 Δ+0.4mmu
C36H73N2O5PNa [M+Na]+ 667.5165 Δ+1.1mmu
【００５５】
上記化合物を含むフラクション1-2-7及びコントロールについて、非特許文献１の記載に従い、高コレステロール食を与えたラットについて、血清総コレステロールを測定した。コントロールはコレステロール0.5％、コール酸ナトリウム0.25％を含む高コレステロール食を自由摂食させたラットである。フラクション1-2-7は同様の高コレステロール食に0.23％添加した試験食を自由摂食させたラットである。結果を表１に示す。血清総コレステロール、LDL-コレステロール、遊離コレステロール、コレステロールエステル及び肝臓中性脂肪の測定は、常法に従い行った。
【００５６】
【表１】
2019019063.tif 000013
【００５７】
本発明の化合物が、強力な血中コレステロール低下作用及び肝臓中性脂肪の低下作用を有することが明らかになった。
【図１】
2019019063.tif 000017
【手続補正書】
【提出日】平成29年10月6日(2017.10.6)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
下記式
【化１】
2019019063.tif 000018
（式中、
（ｉ）Ｒ1は炭素数１〜２４のアルキル基又はアルケニル基を示し、
Ｒ2は下記式
【化２】
2019019063.tif 000019
で表わされるいずれかの基を示すか、或いは、
（ｉｉ）Ｒ1は下記式
【化３】
2019019063.tif 000020
で表わされるいずれかの基を示し、Ｒ2は炭素数１〜２４のアルキル基又はアルケニル基を示すか、或いは、
（ｉｉｉ）Ｒ1は下記式
【化４】
2019019063.tif 000021
で表わされるいずれかの基を示し、Ｒ2は下記式
【化５】
2019019063.tif 000022
で表わされるいずれかの基を示す。）
で表わされる化合物。
【請求項２】
下記式
【化６】
2019019063.tif 000023
で表わされる、請求項１に記載の化合物。
【請求項３】
請求項１又は２に記載の化合物を含む、脂肪肝の予防又は治療剤。
【請求項４】
請求項１又は２に記載の化合物を含む、血中コレステロール低下剤。
【請求項５】
請求項１又は２に記載の化合物を含む、血中コレステロール低下用食品組成物。