(57)【要約】      （修正有）【課題】効率よくコラーゲン産生を促進することができるコラーゲン産生促進剤を提供することを目的とする。【解決手段】一般式（１）で表される３−ヒドロキシピリジニウム誘導体を有効成分として含有するコラーゲン産生促進剤。2019019129.tif 000021【選択図】なし【特許請求の範囲】
【請求項１】
下記一般式（１）で表される３−ヒドロキシピリジニウム誘導体を有効成分として含有するコラーゲン産生促進剤。
【化１】
2019019129.tif 000017
（式（１）中、Ａ１はそれぞれ独立して水酸基、炭素原子数１〜１０のアルコキシ基、Ｎ末端で結合するアミノ酸数１〜１００のペプチド構造、水素原子、アミノ基（−ＮＲ４２）、又は炭素原子数１〜１０の炭化水素基を、Ａ２はそれぞれ独立して水素原子、炭素原子数１〜１０の炭化水素基、アシル基（−ＣＯＲ５）、又はＣ末端で結合するアミノ酸数１〜１００のペプチド構造を、Ｒはそれぞれ独立して水素原子、又は炭素原子数１〜１０の炭化水素基を、Ｒ１はそれぞれ独立して単結合、又は水酸基、アミノ基（−ＮＲ４２）及びオキサ基（−Ｏ−）からなる群より選択される少なくとも１種の官能基を有していてもよい炭素原子数１〜１０の２価の炭化水素基を、Ｒ２はそれぞれ独立して水酸基、カルボキシル基及びアミノ基（−ＮＲ４２）からなる群より選択される少なくとも１種の官能基を有していてもよい炭素原子数１〜１０の炭化水素基を、Ｒ３は水素原子、下記式（２）で表される構造、又は水酸基、カルボキシル基及びアミノ基（−ＮＲ４２）からなる群より選択される少なくとも１種の官能基を有していてもよい炭素原子数１〜１０の炭化水素基を、Ｒ４はそれぞれ独立して水素原子又は炭素原子数１〜１０の炭化水素基を、Ｒ５は炭素原子数１〜１０の炭化水素基を、ｍ及びｎはそれぞれ独立して０〜４の整数を表す。但し、ｍ及びｎは、ｍ＋ｎが０〜４の整数となる数値である。）
【化２】
2019019129.tif 000018
（式（２）中、Ａ１は式（１）中のＡ１に独立して水酸基、炭素原子数１〜１０のアルコキシ基、Ｎ末端で結合するアミノ酸数１〜１００のペプチド構造、水素原子、アミノ基（−ＮＲ４２）、又は炭素原子数１〜１０の炭化水素基を、Ａ２は式（１）中のＡ２に独立して水素原子、炭素原子数１〜１０の炭化水素基、アシル基（−ＣＯＲ５）、又はＣ末端で結合するアミノ酸数１〜１００のペプチド構造を、Ｒは式（１）中のＲに独立して水素原子、又は炭素原子数１〜１０の炭化水素基を、Ｒ４は式（１）中のＲ４に独立してそれぞれ独立して水素原子又は炭素原子数１〜１０の炭化水素基を、Ｒ５は式（１）中のＲ５に独立して炭素原子数１〜１０の炭化水素基を、Ｒ６は単結合、又は水酸基及びアミノ基（−ＮＲ４２）からなる群より選択される少なくとも１種の官能基を有していてもよい炭素原子数１〜１０の２価の炭化水素基を表す。）
【請求項２】
前記３−ヒドロキシピリジニウム誘導体を、有効成分として０．００００１重量％以上含有することを特徴とする請求項１に記載のコラーゲン産生促進剤。
【請求項３】
前記３−ヒドロキシピリジニウム誘導体が、天然物由来であることを特徴とする請求項１または請求項２に記載のコラーゲン産生促進剤。
【請求項４】
請求項１〜３のいずれか一項に記載のコラーゲン産生促進剤を含有してなる化粧料組成物。
【請求項５】
請求項１〜３のいずれか一項に記載のコラーゲン産生促進剤を含有してなる飲食品組成物。
【請求項６】
請求項１〜３のいずれか一項に記載のコラーゲン産生促進剤を含有してなる細胞培養用組成物。
【請求項７】
請求項１〜３のいずれか一項に記載のコラーゲン産生促進剤を含有してなる創傷治癒用医薬組成物。
【請求項８】
請求項１〜３のいずれか一項に記載のコラーゲン産生促進剤を含有してなる骨形成促進用組成物。
【請求項９】
下記一般式（３）で表される３−ヒドロキシピリジニウム部分構造を、０．０１５重量％以上含有することを特徴とするコラーゲン分解物。
【化３】
2019019129.tif 000019
【請求項１０】
下記一般式（４）で表される３−ヒドロキシピリジノリンを、０．０７重量％以上含有することを特徴とするコラーゲン分解物。
【化４】
2019019129.tif 000020
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、コラーゲン産生促進剤、並びに当該コラーゲン産生促進剤を含有する化粧用組成物、飲食品組成物、細胞培養用組成物、創傷治癒用医薬組成物、骨形成促進用組成物に関する。
【背景技術】
【０００２】
コラーゲンはすべての多細胞動物に存在し、脊椎動物ではもっとも多いタンパクとして、細胞外に存在している。そして、コラーゲンは、骨、歯、軟骨、腱、靱帯、皮膚や血管の繊維構造など結合組織において、張力に対し非常に強い不溶性繊維を形成しているため、ひずみ力に抵抗する主成分として働くことが知られている。
【０００３】
さらに、コラーゲンは３本のポリペプチド鎖からなり、各ペプチド鎖が３−ヒドロキシピリジニウム構造を有する化合物で架橋されていることも知られているが、その分解物である３−ヒドロキシピリジニウム誘導体が、受容体を介して生理作用を示すといったような報告は全くなされていない。
【０００４】
また、コラーゲンは皮膚の弾力性、保湿機能などに重要な成分であり、コラーゲン量の減少は皮膚の張りや弾力性の低下、および肌荒れや、皺などの老化様症状の顕現をひきおこすことが知られている。このため、皮膚の健康維持あるいは皮膚の老化抑制等を目的として、皮膚のコラーゲン量を増大させる食品素材や化粧品素材、あるいは医薬用組成物の研究がなされてきた。
【０００５】
一方、骨は通常古い骨を分解する破骨細胞と、新しい骨を作る骨芽細胞の働きのバランスによって代謝が保たれており、骨芽細胞が分泌したＩ型コラーゲン線維のまわりにリン酸カルシウムが沈着しヒドロキシアパタイトとなり骨が形成されることが知られている。
【０００６】
近年高齢化、あるいは糖尿病等の基礎的疾患の増加に伴い、骨折・骨粗鬆症など骨量・骨質の低下に起因する各種骨疾患患者が増加する傾向にある。骨量および骨質は、上記したように健常時には骨吸収（骨分解）と骨形成のバランスによって維持されているが、加齢や閉経などによるホルモン分泌量低下などに起因して骨吸収が優勢となることにより、骨が脆くなることが知られている。これに対して、経口用カルシウム製剤、ビタミンＤ3製剤、副甲状腺ホルモン製剤などを投与し、破骨細胞の働きを抑制させる等の治療法が一般的に実施されている。
【０００７】
コラーゲン産生促進剤について、例えば、特許文献１には、１−アセトキシ−１−（２，４−ジアセトキシフェニル）−２−プロペンに代表される化合物が記載されている。特許文献２には、アミノ酸が３個から８個で構成される合成ペプチド又はその誘導体と、分子量が５００から５０００の範囲にある加水分解コラーゲン又はその誘導体とを含有することを特徴とする抗老化用皮膚外用剤が記載されている。
また、本願化合物の代表であるピリジノリンは、非特許文献１に記載されているように、公知のコラーゲン分解成分であり、特許文献３、４に記載されているように、骨粗鬆症の診断薬として用いられている。
【先行技術文献】
【特許文献】
【０００８】
【特許文献１】特開２００９−７９００４号公報
【特許文献２】特開２０１１−０４２６１３号公報
【特許文献３】特表平０５−５０２９４２号公報
【特許文献４】特開平０５−２０９８７０号公報
【非特許文献】
【０００９】
【非特許文献１】Daisaburo Fujimoto, Takahiko Moriguchi, Torao Ishida, and Hiroshi Hayashi:‘The structure of pyridinoline, a collagen crosslink.’Biochem. Biophysics. Res. Commun. 84, 52-57 (1978).
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【００１０】
骨折・骨粗鬆症などの骨疾患の治療法として、一般的に行われている経口用カルシウム製剤、ビタミンＤ3製剤、副甲状腺ホルモン製剤等の投与治療法は、食欲不振や全身倦怠感、顎骨壊死等の副作用の問題等が存在しており、骨疾患の治療法として骨芽細胞に直接作用してコラーゲン合成を増大させ、骨形成を促進させる治療法が求められていた。また、一般に販売されているコラーゲンペプチドを摂取する場合も、その効果を実感するためには、大量に摂取する必要があり、効率的にコラーゲン産生を促進できる成分が求められていた。
【００１１】
本発明は、効率的にコラーゲン産生を促進できる新規コラーゲン産生促進剤を提供することを目的としている。さらに当該コラーゲン産生促進剤を含有する化粧用組成物、飲食品組成物、細胞培養用組成物、創傷治癒用医薬組成物、骨形成促進用組成物を提供することを主な目的としている。
【課題を解決するための手段】
【００１２】
本発明者らは、上記課題を解決するために鋭意検討した結果、３−ヒドロキシピリジニウム誘導体が、コラーゲン産生促進能を有することを見いだし、本発明を完成した。
すなわち本発明は、以下のコラーゲン産生促進剤、当該コラーゲン産生促進剤を含有する化粧用組成物、飲食品組成物、細胞培養用組成物、創傷治癒用医薬組成物、骨形成促進用組成物、及び、コラーゲン分解物である。
【００１３】
上記課題を解決するための、本発明のコラーゲン産生促進剤は、下記一般式（１）で表される３−ヒドロキシピリジニウム誘導体を有効成分として含有することを特徴としている。
【化１】
2019019129.tif 000002
（式（１）中、Ａ１はそれぞれ独立して水酸基、炭素原子数１〜１０のアルコキシ基、Ｎ末端で結合するアミノ酸数１〜１００のペプチド構造、水素原子、アミノ基（−ＮＲ４２）、又は炭素原子数１〜１０の炭化水素基を、Ａ２はそれぞれ独立して水素原子、炭素原子数１〜１０の炭化水素基、アシル基（−ＣＯＲ５）、又はＣ末端で結合するアミノ酸数１〜１００のペプチド構造を、Ｒはそれぞれ独立して水素原子、又は炭素原子数１〜１０の炭化水素基を、Ｒ１はそれぞれ独立して単結合、又は水酸基、アミノ基（−ＮＲ４２）及びオキサ基（−Ｏ−）からなる群より選択される少なくとも１種の官能基を有していてもよい炭素原子数１〜１０の２価の炭化水素基を、Ｒ２はそれぞれ独立して水酸基、カルボキシル基及びアミノ基（−ＮＲ４２）からなる群より選択される少なくとも１種の官能基を有していてもよい炭素原子数１〜１０の炭化水素基を、Ｒ３は水素原子、下記式（２）で表される構造、又は水酸基、カルボキシル基及びアミノ基（−ＮＲ４２）からなる群より選択される少なくとも１種の官能基を有していてもよい炭素原子数１〜１０の炭化水素基を、Ｒ４はそれぞれ独立して水素原子又は炭素原子数１〜１０の炭化水素基を、Ｒ５は炭素原子数１〜１０の炭化水素基を、ｍ及びｎはそれぞれ独立して０〜４の整数を表す。但し、ｍ及びｎは、ｍ＋ｎが０〜４の整数となる数値である。）
【化２】
2019019129.tif 000003
（式（２）中、Ａ１は式（１）中のＡ１に独立して水酸基、炭素原子数１〜１０のアルコキシ基、Ｎ末端で結合するアミノ酸数１〜１００のペプチド構造、水素原子、アミノ基（−ＮＲ４２）、又は炭素原子数１〜１０の炭化水素基を、Ａ２は式（１）中のＡ２に独立して水素原子、炭素原子数１〜１０の炭化水素基、アシル基（−ＣＯＲ５）、又はＣ末端で結合するアミノ酸数１〜１００のペプチド構造を、Ｒは式（１）中のＲに独立して水素原子、又は炭素原子数１〜１０の炭化水素基を、Ｒ４は式（１）中のＲ４に独立してそれぞれ独立して水素原子又は炭素原子数１〜１０の炭化水素基を、Ｒ５は式（１）中のＲ５に独立して炭素原子数１〜１０の炭化水素基を、Ｒ６は単結合、又は水酸基及びアミノ基（−ＮＲ４２）からなる群より選択される少なくとも１種の官能基を有していてもよい炭素原子数１〜１０の２価の炭化水素基を表す。）
この特徴によれば、簡便、簡単にコラーゲン産生を促進することができる。
【００１４】
更に、本発明のコラーゲン産生促進剤の一実施態様によれば、３−ヒドロキシピリジニウム誘導体の含有量は、０．００００１重量％以上含有することを特徴とするものである。
この特徴によれば、効率的にコラーゲン産生を促すことができるという効果を発揮することができる。
【００１５】
更に、本発明のコラーゲン産生促進剤は天然物由来の３−ヒドロキシピリジニウム誘導体を含有することを特徴とするものである。
この特徴によれば、天然物から３−ヒドロキシピリジニウム誘導体を得ることができるため、触媒等の不純物除去の必要が無く、純粋な材料を簡便に得ることができるという効果を発揮することができる。
【００１６】
更に、本発明のコラーゲン産生促進剤の一実施態様によれば、化粧料用組成物であることを特徴とする。
この特徴によれば、コラーゲン量の減少により皮膚の張りや弾力性が低下した皮膚等のコラーゲン産生を促進することができ、皮膚の健康維持あるいは皮膚の老化抑制等に寄与することができるという本発明の効果をより発揮することができる。
【００１７】
更に、本発明のコラーゲン産生促進剤の一実施態様によれば、飲食品組成物であることを特徴とする
この特徴によれば、経口投与により簡便にコラーゲン産生を促進することができ、皮膚の健康維持あるいは皮膚の老化抑制、骨粗鬆症予防等に寄与することができ、また、ペット等動物の寿命向上に寄与できるという本発明の効果をより発揮することができる。
【００１８】
更に、本発明のコラーゲン産生促進剤の一実施態様によれば、細胞培養用組成物であることを特徴とする。
この特徴によれば、再生医療等において、簡便にコラーゲン産生を促進することができ、また、動物実験等の代替試験に寄与することができるという本発明の効果をより発揮することができる。
【００１９】
更に、本発明のコラーゲン産生促進剤の一実施態様によれば、創傷治癒用医薬組成物であることを特徴とする。
この特徴によれば、再生医療等において、簡便にコラーゲン産生を促進することができ、裂傷や火傷治療等の皮膚再生に寄与することができるという本発明の効果をより発揮することができる。
【００２０】
更に、本発明のコラーゲン産生促進剤の一実施態様によれば、骨形成促進用組成物であることを特徴とする。
この特徴によれば、骨粗鬆症等の治療において、簡便にコラーゲン産生を促進することができ、骨形成の促進に寄与することができるという本発明の効果をより発揮することができる。
【００２１】
また、本発明は下記一般式（３）で表される３−ヒドロキシピリジニウム部分構造を、０．０１５重量％以上含有することを特徴とするコラーゲン分解物である。
【化３】
2019019129.tif 000004
この特徴によれば、効率的にコラーゲン産生を促すことができるという効果を発揮することができる。
【００２２】
更に、本発明は下記一般式（４）で表される３−ヒドロキシピリジノリンを、０．０７重量％以上含有することを特徴とするコラーゲン分解物である。
【化４】
2019019129.tif 000005
この特徴によれば、効率的にコラーゲン産生を促すことができるという効果を発揮することができる。
【発明の効果】
【００２３】
本発明によれば、簡便、簡単に効率良くコラーゲン産生を促進することができ、皮膚の健康維持あるいは皮膚の老化抑制や、骨粗鬆症等の治療に用いることができる。
【図面の簡単な説明】
【００２４】
【図１】逆相ＨＰＬＣによる精製ＰＹＲの純度検定
【図２】マススペクトル解析によるＰＹＲの構造特定
【図３】ヒト尿細管上皮細胞のI型コラーゲンタイプＡのＲＮＡ発現量解析結果
【図４】ＴＧＦβ1のI型コラーゲンタイプＡのＲＮＡ発現量解析結果
【図５】ＣＨＨＰによる骨芽細胞分化促進作用を示すデータ
【図６】ＣＨＨＰによる骨芽細胞コラーゲン産生促進作用ＲＴ−ＰＣＲデータ
【発明を実施するための形態】
【００２５】
本発明の詳細を説明するに当たり、具体例を挙げて説明するが、本発明の趣旨を逸脱しない限り以下の内容に限定されるものではなく、適宜変更して実施することができる。
【００２６】
［コラーゲン産生促進剤］
本発明のコラーゲン産生促進剤は、下記一般式（１）で表される３−ヒドロキシピリジニウム誘導体を有効成分として含有することを特徴としている。
【化５】
2019019129.tif 000006
（式（１）中、Ａ１はそれぞれ独立して水酸基、炭素原子数１〜１０のアルコキシ基、Ｎ末端で結合するアミノ酸数１〜１００のペプチド構造、水素原子、アミノ基（−ＮＲ４２）、又は炭素原子数１〜１０の炭化水素基を、Ａ２はそれぞれ独立して水素原子、炭素原子数１〜１０の炭化水素基、アシル基（−ＣＯＲ５）、又はＣ末端で結合するアミノ酸数１〜１００のペプチド構造を、Ｒはそれぞれ独立して水素原子、又は炭素原子数１〜１０の炭化水素基を、Ｒ１はそれぞれ独立して単結合、又は水酸基、アミノ基（−ＮＲ４２）及びオキサ基（−Ｏ−）からなる群より選択される少なくとも１種の官能基を有していてもよい炭素原子数１〜１０の２価の炭化水素基を、Ｒ２はそれぞれ独立して水酸基、カルボキシル基及びアミノ基（−ＮＲ４２）からなる群より選択される少なくとも１種の官能基を有していてもよい炭素原子数１〜１０の炭化水素基を、Ｒ３は水素原子、下記式（２）で表される構造、又は水酸基、カルボキシル基及びアミノ基（−ＮＲ４２）からなる群より選択される少なくとも１種の官能基を有していてもよい炭素原子数１〜１０の炭化水素基を、Ｒ４はそれぞれ独立して水素原子又は炭素原子数１〜１０の炭化水素基を、Ｒ５は炭素原子数１〜１０の炭化水素基を、ｍ及びｎはそれぞれ独立して０〜４の整数を表す。但し、ｍ及びｎは、ｍ＋ｎが０〜４の整数となる数値である。）
【化６】
2019019129.tif 000007
（式（２）中、Ａ１は式（１）中のＡ１に独立して水酸基、炭素原子数１〜１０のアルコキシ基、Ｎ末端で結合するアミノ酸数１〜１００のペプチド構造、水素原子、アミノ基（−ＮＲ４２）、又は炭素原子数１〜１０の炭化水素基を、Ａ２は式（１）中のＡ２に独立して水素原子、炭素原子数１〜１０の炭化水素基、アシル基（−ＣＯＲ５）、又はＣ末端で結合するアミノ酸数１〜１００のペプチド構造を、Ｒは式（１）中のＲに独立して水素原子、又は炭素原子数１〜１０の炭化水素基を、Ｒ４は式（１）中のＲ４に独立してそれぞれ独立して水素原子又は炭素原子数１〜１０の炭化水素基を、Ｒ５は式（１）中のＲ５に独立して炭素原子数１〜１０の炭化水素基を、Ｒ６は単結合、又は水酸基及びアミノ基（−ＮＲ４２）からなる群より選択される少なくとも１種の官能基を有していてもよい炭素原子数１〜１０の２価の炭化水素基を表す。）
このコラーゲン産生促進剤によれば、簡便、簡単に効率良くコラーゲン産生を促進することができる。
【００２７】
［コラーゲン産生メカニズム］
本発明のコラーゲン産生のメカニズムは具体的に解明されていないが、終末糖化産物受容体(Ｒｅｃｅｐｔｏｒ  ｆｏｒ  Ａｄｖａｎｔａｇｅ  Ｇｌｙｃａｔｉｏｎ  Ｅｎｄ  Ｐｒｏｄｕｃｔ：ＲＡＧＥ)に、本発明の３−ヒドロキシピリジニウム誘導体が認識されることで、コラーゲン産生が促進されるものと考えられる。
【００２８】
終末糖化産物受容体（ＲＡＧＥ）は、平滑筋細胞、肝細胞、神経細胞、血管内皮細胞、単球など幅広い細胞に発現しているタンパク質である。
Ｆｉｓｃｈｅｒの鍵と鍵穴モデルに代表されるように、タンパクのリガンド結合部位はリガンドに対して確固たる相補的構造を持つと考えられ、リガンドとして３−ヒドロキシピリジニウム部分構造を有するものであれば、その置換基等の立体障害に影響されず、終末糖化産物受容体（ＲＡＧＥ）に選択的に認識されるものであると考えられる。
【００２９】
［３−ヒドロキシピリジニウム誘導体］
本発明で使用される３−ヒドロキシピリジニウム誘導体は下記式（１）で表されるものである。
【化７】
2019019129.tif 000008
（式（１）中、Ａ１はそれぞれ独立して水酸基、炭素原子数１〜１０のアルコキシ基、Ｎ末端で結合するアミノ酸数１〜１００のペプチド構造、水素原子、アミノ基（−ＮＲ４２）、又は炭素原子数１〜１０の炭化水素基を、Ａ２はそれぞれ独立して水素原子、炭素原子数１〜１０の炭化水素基、アシル基（−ＣＯＲ５）、又はＣ末端で結合するアミノ酸数１〜１００のペプチド構造を、Ｒはそれぞれ独立して水素原子、又は炭素原子数１〜１０の炭化水素基を、Ｒ１はそれぞれ独立して単結合、又は水酸基、アミノ基（−ＮＲ４２）及びオキサ基（−Ｏ−）からなる群より選択される少なくとも１種の官能基を有していてもよい炭素原子数１〜１０の２価の炭化水素基を、Ｒ２はそれぞれ独立して水酸基、カルボキシル基及びアミノ基（−ＮＲ４２）からなる群より選択される少なくとも１種の官能基を有していてもよい炭素原子数１〜１０の炭化水素基を、Ｒ３は水素原子、下記式（２）で表される構造、又は水酸基、カルボキシル基及びアミノ基（−ＮＲ４２）からなる群より選択される少なくとも１種の官能基を有していてもよい炭素原子数１〜１０の炭化水素基を、Ｒ４はそれぞれ独立して水素原子又は炭素原子数１〜１０の炭化水素基を、Ｒ５は炭素原子数１〜１０の炭化水素基を、ｍ及びｎはそれぞれ独立して０〜４の整数を表す。但し、ｍ及びｎは、ｍ＋ｎが０〜４の整数となる数値である。）
【化８】
2019019129.tif 000009
（式（２）中、Ａ１は式（１）中のＡ１に独立して水酸基、炭素原子数１〜１０のアルコキシ基、Ｎ末端で結合するアミノ酸数１〜１００のペプチド構造、水素原子、アミノ基（−ＮＲ４２）、又は炭素原子数１〜１０の炭化水素基を、Ａ２は式（１）中のＡ２に独立して水素原子、炭素原子数１〜１０の炭化水素基、アシル基（−ＣＯＲ５）、又はＣ末端で結合するアミノ酸数１〜１００のペプチド構造を、Ｒは式（１）中のＲに独立して水素原子、又は炭素原子数１〜１０の炭化水素基を、Ｒ４は式（１）中のＲ４に独立してそれぞれ独立して水素原子又は炭素原子数１〜１０の炭化水素基を、Ｒ５は式（１）中のＲ５に独立して炭素原子数１〜１０の炭化水素基を、Ｒ６は単結合、又は水酸基及びアミノ基（−ＮＲ４２）からなる群より選択される少なくとも１種の官能基を有していてもよい炭素原子数１〜１０の２価の炭化水素基を表す。）
【００３０】
本発明において、一般式（１）で表される３−ヒドロキシピリジニウム誘導体は、その化合物自体のみならず、その異性体、その混合物、その薬学的に許容可能な塩、溶媒和物、プロドラッグも包含されうることは技術常識の範囲である。ここでプロドラッグとしては、例えば特表２０１６−５１９６５９号に記載されているものが挙げられる。水酸基に関するプロドラッグ構造は、特に限定されないが、アシルオキシアルキル（例えば、アシルオキシメチル、アシルオキシエチル）エステル、アルコキシカルボニルオキシアルキルエステル、アルキルエステル、アリールエステル、リン酸エステル、スルホン酸エステル、硫酸エステル、及びエステルを含むジスルフィドなどのエステル、エーテル（例えばアルキルエーテル）、アミド、カルバマート、ヘミスクシナート、ジメチルアミノアセタート、及びホスホリルメチルカルボニルを含む。
【００３１】
式（１）及び式（２）の中のＡ１の「炭素原子数１〜１０のアルコキシ基」は、アルコキシ基中の炭化水素基が分岐構造、環状構造、及び炭素−炭素不飽和結合（炭素−炭素二重結合、炭素−炭素三重結合）のそれぞれを有していてもよく、飽和炭化水素基、不飽和炭化水素基、芳香族炭化水素基等の何れであってもよいことを意味する。アルコキシ基の炭素原子数は、アルコキシ基の炭化水素基が芳香族炭化水素基である場合、通常６以上である。一方、アルコキシ基の炭化水素基が芳香族炭化水素基以外である場合、好ましくは８以下、より好ましくは６以下、また３以下であってもよい。
「炭素原子数１〜１０のアルコキシ基」の具体例としては、メトキシ基、エトキシ基、ｎ−プロポキシ基、ｉ−プロポキシ基、ｎ−ブトキシ基、ｉ−ブトキシ基、ｓ−ブトキシ基、ｔ−ブトキシ基、ｎ−ペンチルオキシ基、２，２−ジメチルプロポキシ基、シクロペンチルオキシ基、ｎ−ヘキシルオキシ基、シクロヘキシルオキシ基、ｎ−ヘプチルオキシ基、２−メチルペンチルオキシ基、ｎ−オクチルオキシ基、２−エチルヘキシルオキシ基、ｎ−ノニルオキシ基、ｎ−デシルオキシ基、フェニルオキシ基、ビニルオキシ基等が挙げられる。
【００３２】
式（１）及び式（２）の中のＡ１、Ａ２、Ｒ、Ｒ４、Ｒ５の「炭素数１〜１０の炭化水素基」は、分岐構造、環状構造、及び炭素−炭素不飽和結合（炭素−炭素二重結合、炭素−炭素三重結合）のそれぞれを有していてもよく、飽和炭化水素基、不飽和炭化水素基、芳香族炭化水素基等の何れであってもよいことを意味する。炭化水素基の炭素原子数は、炭化水素基が芳香族炭化水素基である場合、通常６以上である。一方、炭化水素基が芳香族炭化水素基以外である場合、好ましくは８以下、より好ましくは６以下、また３以下であってもよい。
「炭素数１〜１０の炭化水素基」の具体例としては、メチル基、エチル基、ｎ−プロピル基、ｉ−プロピル基、シクロプロピル基、ｎ−ブチル基、ｉ−ブチル基、ｓ−ブチル基、ｔ−ブチル基、２，２−ジメチル−１−プロピル基、シクロペンチル基、ｎ−ヘキシル基、シクロヘキシル基、ｎ−ヘプチル基、２−メチルペンチル基、ｎ−オクチル基、２−エチルヘキシル基、ｎ−ノニル基、ｎ−デシル基、フェニル基、ビニル基等が挙げられる。
【００３３】
式（１）中のＲ１の「水酸基、アミノ基（−ＮＲ４２）及びオキサ基（−Ｏ−）からなる群より選択される少なくとも１種の官能基を有していてもよい炭素原子数１〜１０の２価の炭化水素基」の「２価の炭化水素基」とは、２つの結合部位を有する炭化水素基であることを意味する。また、「水酸基、アミノ基（−ＮＲ４２）及びオキサ基（−Ｏ−）からなる群より選択される少なくとも１種の官能基を有していてもよい」とは、炭化水素基の水素原子が水酸基やアミノ基で置換されていてもよいこと、さらに炭化水素基の炭素骨格内部にオキサ基が導入されていてもよいことを意味する。炭化水素は、好ましくは８以下、より好ましくは６以下、また３以下であってもよい
「水酸基、アミノ基及びオキサ基（−Ｏ−）からなる群より選択される少なくとも１種の官能基を有していてもよい炭素原子数１〜１０の２価の炭化水素基」の具体例としては、メチレン基、オキシメチレン基、エチレン基、ジメチルエーテル基、プロピレン基、ブチレン基、ヒドロキシメチレン基、ヒドロキシエチレン基、１−ヒドロキシプロパニレン基、２−ヒドロキシプロパニレン基、ヒドロキシブレン基、アミノメチレン基、アミノエチレン基、１−アミノプロパニル基、２−アミノプロパニル基、アミノブチレン基、ビニレン基等が挙げられる。
【００３４】
式（２）の中のＲ６の「水酸基及びアミノ基（−ＮＲ４２）からなる群より選択される少なくとも１種の官能基を有していてもよい炭素原子数１〜１０の２価の炭化水素基」の「水酸基及びアミノ基からなる群より選択される少なくとも１種の官能基を有していてもよい」と「炭素原子数１〜１０の２価の炭化水素基」は、前述のものと同義である。
「水酸基及びアミノ基からなる群より選択される少なくとも１種の官能基を有していてもよい炭素原子数１〜１０の２価の炭化水素基」の具体例としては、メチレン基、エチレン基、プロピレン基、ブチレン基、ヒドロキシメチレン基、ヒドロキシエチレン基、１−ヒドロキシプロパニレン基、２−ヒドロキシプロパニレン基、ヒドロキシブレン基、アミノメチレン基、アミノエチレン基、１−アミノプロパニル基、２−アミノプロパニル基、アミノブチレン基、ビニレン基等が挙げられる。
【００３５】
式（１）及び式（２）の中のＡ１の「Ｎ末端で結合するアミノ酸数１〜１００のペプチド構造」は、２以上のアミノ酸から構成されるペプチド構造のみならず、１つのアミノ酸からなるアミノ酸構造も含まれることを意味する。また、「Ｎ末端で結合する」とは、Ａ１が結合するカルボニル基（＞Ｃ＝Ｏ）に対して、ペプチド構造のＮ末端又はアミノ酸構造のアミノ基で結合していることを意味する。
１つのアミノ酸構造の具体例としては、グリシン構造、アラニン構造、バリン構造、ロイシン構造、イソロイシン構造、メチオニン構造、プロリン構造、フェニルアラニン構造、トリプトファン構造、セリン構造、トレオニン構造、アスパラギン構造、グルタミン構造、チロシン構造、システイン構造、リジン構造、アルギニン構造、ヒスチジン構造、アスパラギン酸構造、グルタミン酸構造等の必須アミノ酸構造、ヒドロキシリジン構造、アリシン構造、ヒドロキシアリシン構造、ヒドロキシプロリン構造等の変性されたアミノ酸構造、コラーゲンの構造に含まれるアミノ酸構造が挙げられ、特に好ましくは、グリシン構造、プロリン構造、ヒドロキシプロリン構造、リジン、ヒドロキシリジン構造、アリシン構造、ヒドロキシアリシン構造である。
「Ｎ末端で結合するアミノ酸数１〜１００のペプチド構造」が２以上のアミノ酸から構成されるペプチド構造である場合のアミノ酸数は、好ましくは５０以下、より好ましくは２０以下、さらに好ましくは１０以下、最も好ましくは３以下である。
２以上のアミノ酸から構成されるペプチド構造のアミノ酸の種類としては、同様にグリシン、アラニン、バリン、ロイシン、イソロイシン、メチオニン、プロリン、フェニルアラニン、トリプトファン、セリン、トレオニン、アスパラギン、グルタミン、チロシン、システイン、リジン、アルギニン、ヒスチジン、アスパラギン酸、グルタミン酸等の必須アミノ酸、ヒドロキシリジン、アリシン、ヒドロキシアリシン、ヒドロキシプロリン等の変性されたアミノ酸、コラーゲンの構造に含まれるアミノ酸等が挙げられる。
【００３６】
式（１）及び式（２）の中のＡ２の「Ｃ末端で結合するアミノ酸数１〜１００のペプチド構造」は、２以上のアミノ酸から構成されるペプチド構造のみならず、１つのアミノ酸からなるアミノ酸構造も含まれることを意味する。また、「Ｃ末端で結合する」とは、Ａ２が結合するアミノ基（＞ＮＲ）に対して、ペプチド構造のＣ末端又はアミノ酸構造のカルボニル基で結合していることを意味する。
１つのアミノ酸構造の具体例としては、グリシン構造、アラニン構造、バリン構造、ロイシン構造、イソロイシン構造、メチオニン構造、プロリン構造、フェニルアラニン構造、トリプトファン構造、セリン構造、トレオニン構造、アスパラギン構造、グルタミン構造、チロシン構造、システイン構造、リジン構造、アルギニン構造、ヒスチジン構造、アスパラギン酸構造、グルタミン酸構造等の必須アミノ酸構造、ヒドロキシリジン構造、アリシン構造、ヒドロキシアリシン構造、ヒドロキシプロリン構造等の変性されたアミノ酸構造、コラーゲンの構造に含まれるアミノ酸構造が挙げられ、特に好ましくは、グリシン構造、プロリン構造、ヒドロキシプロリン構造、リジン、ヒドロキシリジン構造、アリシン構造、ヒドロキシアリシン構造である。
「Ｎ末端で結合するアミノ酸数１〜１００のペプチド構造」が２以上のアミノ酸から構成されるペプチド構造である場合のアミノ酸数は、好ましくは５０以下、より好ましくは２０以下、さらに好ましくは１０以下、最も好ましくは３以下である。
２以上のアミノ酸から構成されるペプチド構造のアミノ酸の種類としては、同様にグリシン、アラニン、バリン、ロイシン、イソロイシン、メチオニン、プロリン、フェニルアラニン、トリプトファン、セリン、トレオニン、アスパラギン、グルタミン、チロシン、システイン、リジン、アルギニン、ヒスチジン、アスパラギン酸、グルタミン酸等の必須アミノ酸、ヒドロキシリジン、アリシン、ヒドロキシアリシン、ヒドロキシプロリン等の変性されたアミノ酸、コラーゲンの構造に含まれるアミノ酸等が挙げられる。
【００３７】
式（１）中のＲ２及びＲ３の「水酸基、カルボキシル基及びアミノ基（−ＮＲ４２）からなる群より選択される少なくとも１種の官能基を有していてもよい炭素原子数１〜１０の炭化水素基」の「水酸基、カルボキシル基及びアミノ基（−ＮＲ４２）からなる群より選択される少なくとも１種の官能基を有していてもよい」と「炭化水素基」は、前述のものと同義である。
炭化水素基の炭素原子数は、炭化水素基が芳香族炭化水素基である場合、通常６以上である。一方、炭化水素基が芳香族炭化水素基以外である場合、好ましくは８以下、より好ましくは６以下、また３以下であってもよい。
「水酸基、カルボキシル基及びアミノ基（−ＮＲ４２）からなる群より選択される少なくとも１種の官能基を有していてもよい炭素原子数１〜１０の炭化水素基」の具体例としては、メチル基、エチル基、ｎ−プロピル基、ｉ−プロピル基、シクロプロピル基、ｎ−ブチル基、ｉ−ブチル基、ｓ−ブチル基、ｔ−ブチル基、２，２−ジメチル−１−プロピル基、シクロペンチル基、ｎ−ヘキシル基、シクロヘキシル基、ｎ−ヘプチル基、２−メチルペンチル基、ｎ−オクチル基、２−エチルヘキシル基、ｎ−ノニル基、ｎ−デシル基、フェニル基、ビニル基、２−ヒドロキシエチル基、３−ヒドロキシプロピル基、２−カルボキシルエチル基、４−カルボキシルブチル基、５−カルボキシペンチル基、２−ヒドロキシ−４−アミノ−５−カルボキシペンチル基、２−アミノ−２−カルボキシエチル基、３−アミノ−３−カルボキシプロピル基等が挙げられ、好ましくは、２−ヒドロキシエチル基、３−ヒドロキシプロピル基、２−カルボキシルエチル基、４−カルボキシルブチル基、５−カルボキシペンチル基、２−ヒドロキシ−４−アミノ−５−カルボキシペンチル基、２−アミノ−２−カルボキシエチル基、３−アミノ−３−カルボキシプロピル基が挙げられる。
【００３８】
さらに、式（１）で表される３−ヒドロキシピリジニウム誘導体は対アニオンを有する。対アニオンとして、例えば、塩化物イオン、臭化物イオン等のハロゲンイオン、酢酸イオン、トリフルオロ酢酸イオン等が挙げられる。
【００３９】
前記式（１）で表される３−ヒドロキシピリジニウム誘導体の分子量は１００００以下であり、５０００以下であってもよく、さらに１０００以下であってもよく、特に７００以下であってもよく、５００以下であってもよく、さらに５００未満、４８０以下、４５０以下であってもよい。
【００４０】
前記式（１）で表される３−ヒドロキシピリジニウム誘導体の具体例としては、下記式（１ａ）〜（１ｅ）で表される構造を有する化合物が挙げられる。
【００４１】
【化９】
2019019129.tif 000010
式中ｉはそれぞれ独立に１〜１０の整数であり、好ましくは１〜５の整数を示す。さらに、ｊはそれぞれ１〜１０の整数であり、好ましくは１〜５の整数を示す。
【００４２】
本発明のコラーゲン産生促進剤は、前記式（１）で表される３−ヒドロキシピリジニウム誘導体に該当する１種類の化合物のみからなるものでもあっても、前記式（１）で表される３−ヒドロキシピリジニウム誘導体に該当する２種類以上の化合物を含有するものであってもよい。前記式（１）で表される３−ヒドロキシピリジニウム誘導体を有効成分として０．００００１重量％以上含有することを特徴とし（前記式（１）で表される３−ヒドロキシピリジニウム誘導体に該当する２種類以上の化合物を含有する場合は、化合物の層含有量として）、好ましくは０．０００１重量％以上、さらに好ましくは０．００１重量％、特に好ましくは０．０１重量％以上、最も好ましくは０．１重量％以上である。さらに好ましくは１重量％以上であり、より好ましくは５重量％以上である。コラーゲン産生促進剤の含有量について上限は特に限定されないが、好ましくは５０重量％以下であり、より好ましくは８０重量％以下であり、最も好ましくは１００重量％である。コラーゲン産生促進能については、３−ヒドロキシピリジニウム部分構造を有する誘導体であれば発揮されるが、３−ヒドロキシピリジニウム部分構造の含有量が多くなることでＲＡＧＥに認識される分子の数が増加し、コラーゲン産生効果をより効果的に発揮することができる。
【００４３】
３−ヒドロキシピリジニウム部分構造とは、下記式（３）で表される構造で示される。
【化１０】
2019019129.tif 000011
【００４４】
本発明のコラーゲン産生促進剤は、他の成分を含んでいても良いが、前記式（１）で表される３−ヒドロキシピリジニウム誘導体が、コラーゲン産生促進剤に含まれる全ての成分のうち０．０５重量％以上含まれるのが好ましい。さらに、好ましくは０．０１重量％以上、特に好ましくは０．１重量％以上、さらに好ましくは1重量％以上、特に好ましくは１０重量％以上である。
【００４５】
コラーゲン促進剤に含まれる他の成分としては、アミノ酸、タンパク質、３−ヒドロキシピリジニウム誘導体を含まないコラーゲン由来の成分、ビタミンC等が挙げられる。
【００４６】
コラーゲン産生促進剤の形態は特に限定されず、適用される製剤、製品の剤型、形態、用途等に応じて設定することができる。例えば、水溶液、ブドウ糖溶液、緩衝液含有溶液、生体適合液、液状、乳液状、クリーム状、粉末状、顆粒、丸剤、軟膏等に調製することができる。
【００４７】
対象となる細胞は、本発明の効果が奏される範囲であれば限定されないが、ヒト近位尿細管上皮細胞、骨芽細胞、表皮の上皮細胞、及び、線維芽細胞に作用してコラーゲン産生を顕著に促進することができる。
【００４８】
[３−ヒドロキシピリジニウム誘導体を製造する方法]
本発明における、３−ヒドロキシピリジニウム誘導体は、有機合成によって製造してもよく、又は、天然物を精製して製造することもできる。天然物を精製して製造する方法としては、例えば、コラーゲンを分解することで得ることができる。
【００４９】
（有機合成によって製造する方法）
有機合成によって製造する方法としては、例えば、グリセルアルデヒド及び６−アミノヘキサン酸を反応させる方法、特開平１０―１９５０５２号公報に記載されているような、Ｎα保護−Ｏ保護−リシンと、５，６−エポキシ−２−Ｎ保護−Ｏ保護−（２Ｓ）−２−アミノヘキサン酸エステルを反応させる方法が挙げられる。
また、市販の３−ヒドロキシピリジン誘導体に対して、各種置換基を付加させる方法等によっても得ることが可能であり、例えば、３−ヒドロキシピリジンに対して６−ブロモヘキサン酸を反応させることで、３−ヒドロキシピリジニウム誘導体を簡単に得ることができる。
【００５０】
（コラーゲン分解によって製造する方法）
コラーゲンを分解する方法としては、酸、アルカリ、酵素等で処理することによって分解することができる。
【００５１】
前記コラーゲンとしては、特に限定されず、例えば、牛や豚などの哺乳類由来のコラーゲン、サメなどの魚類由来のコラーゲン、鶏やダチョウなどの鳥類由来のコラーゲンなどが挙げられる。コラーゲンは、前記哺乳類、魚類、鳥類などの骨、皮、鱗などに多く含まれており、これらの各種材料に対して、脱脂・脱灰処理、抽出処理等の従来公知の処理を施すことによって得ることができる。
【００５２】
・加水分解条件
加水分解反応の条件としては、特に限定されないが、例えば、ｐＨ２．５〜８．０であることが好ましい。より好ましくはｐＨ２．５〜５．５である。
分解温度については、特に限定されないが、例えば、１０℃〜１００℃であり、好ましくは、２０℃〜５０℃であり、特に好ましくは２５℃〜３０℃である。
加水分解反応の時間として、特に限定されないが、例えば、１分〜２００時間とすることができ、好ましくは６０分〜１００時間であり、特に好ましくは１２０分〜２４時間である。
【００５３】
・酵素による分解
トリプシンによる酵素消化条件
トリプシンによる酵素消化温度は、特に限定されないが、例えば、１０℃〜１００℃で行うのが通常である。更に、３０℃〜７０℃であれば、コラーゲンが良好に分解されるためより好ましい。
【００５４】
加水分解処理後、通常行われるように、酵素を失活させる必要がある。具体的には、特に限定されないが、例えば、７０〜１００℃で１秒〜３時間加熱することにより、酵素を失活させることができる
【００５５】
・分解物の精製
加水分解して得られた分解物は、カラムクロマトグラフィー、陽イオン交換クロマトグラフィー、固相抽出、逆相ＨＰＬＣ等の精製操作を経由して精製することができる。
【００５６】
・精製物の同定
得られた精製物は、蛍光スペクトル、ＮＭＲ、ＧＰＣ、及び質量分析装置等により同定される。
【００５７】
［コラーゲン分解物］
本発明は、前記式（３）で表される３−ヒドロキシピリジニウム部分構造を０．０１５重量％以上含有するコラーゲン分解物である。また、本発明のコラーゲン分解物は、３−ヒドロキシピリジニウム部分構造を０．０２重量％以上含有してもよく、さらに０．０３重量％以上含有してもよく、０．０５重量％以上含有してもよく、さらに０．１重量％以上含有してもよく、さらに０．２重量％以上含有してもよく、さらに０．５重量％以上含有してもよい。
本発明のコラーゲン分解物は、一般的なコラーゲン分解物に比べて、高濃度の３−ヒドロキシピリジニウム部分構造を含有するものである。
【００５８】
本発明の３−ヒドロキシピリジニウム部分構造を０．０１５重量％以上含有するコラーゲン分解物は、コラーゲンを分解することで製造することができ、コラーゲンの架橋部分として存在する３−ヒドロキシピリジニウム誘導体を分取、分画して得られるものである。
【００５９】
分取、分画の方法については限定されないが、例えば、カラムクロマトグラフィー、イオン交換クロマトグラフィー、ゲル濾過クロマトグラフィー、ＨＰＬＣ、電気泳動、遠心分離、固液抽出、分液、濾過、電気透析、ＧＰＣ、蒸留、再結晶、再沈殿、蒸留等の操作を行うことで３−ヒドロキシピリジニウム部分構造を０．０１５重量％以上含有するコラーゲン分解物を得ることができる。
【００６０】
更に、本発明は、前記式（４）で表される３−ヒドロキシピリジノリンを０．０７重量％以上含有するコラーゲン分解物である。また、本発明のコラーゲン分解物は、３−ヒドロキシピリジノリンを０．０８重量％以上含有してもよく、さらに０．１重量％以上含有してもよく、０．３重量％以上含有してもよく、さらに０．５重量％以上含有してもよく、さらに１．０重量％以上含有してもよく、さらに２．０重量％以上含有してもよい。
本発明のコラーゲン分解物は、一般的なコラーゲン分解物に比べて、高濃度の３−ヒドロキシピリジノリンを含有するものである。
【００６１】
本発明の３−ヒドロキシピリジノリンを０．０７重量％以上含有するコラーゲン分解物は、コラーゲンを分解することで製造することができ、コラーゲンの架橋部分として存在する３−ヒドロキシピリジノリンを分取、分画して得られるものである。
【００６２】
分取、分画の方法については限定されないが、例えば、カラムクロマトグラフィー、イオン交換クロマトグラフィー、ゲル濾過クロマトグラフィー、ＨＰＬＣ、電気泳動、遠心分離、固液抽出、分液、濾過、電気透析、ＧＰＣ、蒸留、再結晶、再沈殿、蒸留等の操作を行うことで３−ヒドロキシピリジノリンを０．０７重量％以上含有するコラーゲン分解物を得ることができる。
【００６３】
［コラーゲン分解物の分析方法］
コラーゲン分解物中の３−ヒドロキシピリジニウム部分構造、及び、３−ヒドロキシピリジノリンの濃度を測定する方法としては、例えば、コラーゲン、または、コラーゲン分解物を、架橋成分である３-ヒドロキシピリジノリンが単離できる程度まで分解または再分解させる。
分解または再分解の方法は、コラーゲンまたはコラーゲン分解物に対して、６Ｍ 塩酸を加え、窒素置換下１１０℃で２４時間加水分解を行うことで、３-ヒドロキシピリジノリンが単離できる程度に分解することができる。
そして、３−ヒドロキシピリジノリンの特異的吸収波長２９５ｎｍに対する吸光度を有する画分の面積を測定することで、３−ヒドロキシピリジノリンの濃度を測定することができる。
さらに、３−ヒドロキシピリジノリンの濃度を求めた後に、３−ヒドロキシピリジニウム部分構造の分子量と３−ヒドロキシピリジノリンの分子量との比を計算することでコラーゲン分解物中の３−ヒドロキシピリジニウム部分構造の濃度を算出することができる。
例えば、３−ヒドロキシピリジノリン（ＰＹＲ）がコラーゲン分解物１００重量部中１重量部含まれているとするなら、３−ヒドロキシピリジニウム部分構造は０．２１２重量部含まれていることがわかる。
３−ヒドロキシピリジニウム部分構造の分子量（９１ｇ／ｍｏｌ）
３−ヒドロキシピリジノリン（ＰＹＲ）の分子量（４２９ｇ／ｍｏｌ）
【００６４】
［一般的なコラーゲン分解物］
一般的なコラーゲン分解物において、３−ヒドロキシピリジノリンの含有量は０．０７重量％未満である。また、３−ヒドロキシピリジニウム部分構造の含有量は０．０１４８重量％未満である。
なぜなら、コラーゲン１本あたり、３−ヒドロキシピリジノリンが０．１６個含まれることが知られており、それらを踏まえて計算することにより導き出すことができる。
例えば、コラーゲン１本あたりの分子量（約１０万）、３−ヒドロキシピリジノリンの分子量（２２９ｇ／ｍｏｌ）、３−ヒドロキシピリジノリウム部分構造の分子量（９１ｇ／ｍｏｌ）から算出することができる（Fujimoto et al J. Biochem. 83, 863-867 (1978)を参照）。
【００６５】
［コラーゲン促進剤の用途］
コラーゲン促進剤の適用用途も、特に限定されず、目的に応じて設定することができる。例えば、化粧料組成物や食品組成物として使用可能である。さらに、生体に適用して、皮膚状態の改善や創傷治癒の促進のために用いることができる。また、培地や培養液に添加して、人工組織や足場材料等のコラーゲン含有組織や骨組織の形成促進のために用いることができる。
【００６６】
産生促進可能なコラーゲンとしては、特に限定されず、Ｉ型コラーゲン、ＩＩ型コラーゲン等のコラーゲン類が挙げられるが、特に、骨や皮膚に多く存在するＩ型コラーゲンの産生に用いることができる。
【００６７】
・Ｉ型コラーゲン
Ｉ型コラーゲンは、２本のａ１鎖と１本のａ２鎖からなり、上記したように骨や皮膚に多く存在することが知られている。
【００６８】
そして、Ｉ型コラーゲンａ１鎖をコードする遺伝子（Ｃｏｌ１ａ１）の発現を増大させることで、コラーゲンの産生を促進させることが可能であり、Ｉ型コラーゲンの産生を促進させてＩ型コラーゲン量を維持することが、しわ・たるみの予防・改善に有効であることが知られている。さらにＩ型コラーゲンの産生促進は皮膚の創傷治癒の改善にも有効である。
また、骨では有機質の８０％がＩ型コラーゲンからできており、骨芽細胞が分泌したＩ型コラーゲン線維のまわりに、リン酸カルシウムが沈着しヒドロキシアパタイトとなり骨が形成されることが知られている。
このことから、Ｉ型コラーゲンの産生を促進させることで、骨が再生され、骨粗鬆症の治療等に応用することが可能である。
【００６９】
（化粧料組成物)
本発明の化粧料組成物は、上記コラーゲン産生促進剤を含有することを特徴とする。
本発明の化粧料組成物は、皮膚の表皮や真皮のコラーゲンの産生を促進することができ皮膚の健康維持あるいは皮膚の老化抑制等に寄与することができる。
【００７０】
本発明の化粧料組成物は、上記コラーゲン産生促進剤を、適当な媒体又は担体と共に調製することにより、作製することができる。
コラーゲン産生促進剤の配合量は限定されないが、化合物の構造や適用部位、適用対象の年齢や特性、化粧料組成物の形態等によって異なるため、厳格に定義することはできないが、コラーゲン産生促進剤の配合量は特に限定されるものではなく、例えば、組成物中０．００１重量％以上含有することが好ましく、さらに好ましくは、０．０１重量％以上、特に好ましくは０．１重量％以上であり、最も好ましくは１重量％以上であり、より好ましくは３重量％以上である。
本発明の化粧料組成物は、他のコラーゲン由来の成分（特にペプチド）を含んでいても良いが、本願発明の化粧料組成物に含まれる全てのコラーゲン由来の成分（特にペプチド）のうち、１０重量％以上、好ましくは２０重量％以上、特に好ましくは５０重量％以上、本願式（１）で表される化合物及びその誘導体が占めることが好ましい。
【００７１】
本発明の化粧料組成物には、本発明の効果を損なわない範囲で、他の成分を配合することができる。他の成分として、例えば、美白剤、肌荒れ防止剤、保湿剤、老化防止剤、育毛剤、皮脂ケア・にきびケア剤、殺菌・抗菌剤、収斂剤、紫外線吸収剤等が挙げられる。また、ビタミンＣなどのコラーゲン産生能を向上させ得る化合物を配合することもできる。
また、本発明の化粧料組成物は、所望に応じて、適当な形態、例えば、液状、乳液状、クリーム状、粉末状、顆粒状、マイクロカプセル化等に適宜調製することができる。
また、本発明の化粧料組成物を用いて、洗顔、石鹸、クレンジング、美容液、ファンデーション、オールインワンジェル、日焼け止め、ボディソープ、制汗剤、化粧水、ローション、トニック、クリーム、乳液、軟膏、パック、マスク、口紅、入浴剤、整髪料等の各種化粧品や化粧料を、常法に従って製造することもできる。
【００７２】
化粧料組成物の適用部位も、本発明の効果が奏される範囲内であれば特に限定されず、顔面用、ボディ用、頭髪用等、種々の部位に利用できる。また、頭皮毛包幹細胞のコラーゲン生成と毛髪の関係が知られるようになったことから、頭皮に適用することで、薄毛予防にも効果が期待できる。
本発明の化粧用組成物は、皮膚の線維芽細胞におけるコラーゲン産生を顕著に促進させる作用を有し、皮膚の健康維持用あるいは皮膚の老化抑制用等に利用可能である。
【００７３】
（飲食品組成物）
本発明の飲食用組成物は、上記コラーゲン産生促進剤を含有することを特徴とする。
本発明の飲食用組成物は、経口投与により簡便にコラーゲン産生を促進することができ、皮膚の健康維持あるいは皮膚の老化抑制、骨粗鬆症予防、ペットの病気予防等に効果的である。
本発明における飲食用組成物とは、食料品、飲料品、嗜好品、サプリメント、ペットフード等、経口で摂取するものを指す。これらに、本発明のコラーゲン産生促進剤を含有させることができるが、その形態は特に限定されるものではなく、パン類、麺類等主菜となりうるもの、チーズ、ウインナー、ハム、魚介加工品等副菜となりうるもの、果汁飲料、乳飲料、炭酸飲料等の飲料、ケーキ、クッキー、ゼリー、キャンディー、プリン、ヨーグルト等の嗜好品等とすることができる。また、サプリメントとしての形態も特に限定されるものではなく、錠剤、カプセル、ソフトカプセル、栄養ドリンク状の形態をとることもできる。
【００７４】
飲食品組成物における、コラーゲン産生促進剤の配合量は特に限定されるものではなく、例えば、組成物中０．００１重量％以上含有することが好ましく、さらに好ましくは、０．０１重量％以上、特に好ましくは０．１重量％以上であり、最も好ましくは１重量％以上であり、より好ましくは３重量％以上である。
【００７５】
（細胞培養用組成物）
本発明の細胞培養用組成物は、上記コラーゲン産生促進剤を含有することを特徴とする。
本発明の細胞培養用組成物は、簡便にコラーゲン膜を生成することができ、再生医療や動物実験代替などに寄与することができる
細胞培養用組成物の作製方法は、特に限定されないが、例えば、一般的な培養液等に、上記コラーゲン産生促進剤を添加することで製造することができる。また、上記コラーゲン産生促進剤を、培地又は培養液の組成成分として調製することにより作製することができる。
【００７６】
細胞培養用組成物におけるコラーゲン産生促進剤の割合は、細胞や培地、培養液の種類等によって異なり一律に特定することはできないが、例えば、組成物中０．００１重量％以上含有することが好ましく、さらに好ましくは０．０１重量％以上、特に好ましくは０．１重量％以上であり、最も好ましくは１重量％以上であり、より好ましくは３重量％以上である。
本願発明の細胞培養組成物は、他のコラーゲン由来の成分（特にペプチド）を含んでいても良いが、本願発明の細胞培養組成物に含まれる全てのコラーゲン由来の成分（特にペプチド）のうち、１０重量％以上、好ましくは２０重量％以上、特に好ましくは５０重量％以上、本願式（１）で表される化合物及びその誘導体が占めることが好ましい。
【００７７】
本発明の細胞培養用組成物には、本発明の効果を損なわない範囲で、他の成分を配合することができる。他の成分としては、例えば、無機塩類、炭素源、各種ビタミン、緩衝剤、細胞増殖因子、アミノ酸、血清を挙げることができる。また、ＤＴＰＡ、ＴＰＥＮ、又はＡＣＡなどのコラーゲン産生能を向上させ得る化合物、或いはビタミンＣ又はその誘導体などのコラーゲン産生を増強させる化合物などを配合することもできる。
【００７８】
本発明の細胞培養用組成物は、培養細胞のコラーゲン産生を顕著に促進させる作用を有し、例えば、人工皮膚の培養用として用いて、人工組織の形成促進等のために利用することができる。また、再生医療用の足場材料の調製用として用いて、コラーゲン含有組織の形成促進等のために利用することができる。
【００７９】
（創傷治癒用医薬組成物）
本発明の創傷治癒用医薬組成物は、上記コラーゲン産生促進剤を含有することを特徴とする。本発明の創傷治癒用医薬組成物は、裂傷や火傷治療等の皮膚再生等、創傷の治癒を促進するために利用される。
【００８０】
本発明の創傷治癒用医薬組成物は、常法に従って、作製することができる。例えば、上記コラーゲン産生促進剤を、薬学的に許容できる担体と共に調製することにより、作製することができる。
本発明の創傷治癒用医薬組成物には、本発明の効果を奏する範囲であれば、薬学的に許容可能な担体や、公知の添加剤、或いは他の薬学的活性成分などを含有することもできる。また、ビタミンＣ又はその誘導体などのコラーゲン産生を増強させる化合物などを配合することもできる。
【００８１】
本発明の創傷治癒用医薬組成物における、コラーゲン産生促進剤配合割合は、適用部位、適用対象の年齢、医薬組成物の形態等によって異なり、一律に特定することはできないが、例えば、組成物中０．００１重量％以上含有することが好ましく、さらに好ましくは０．０１重量％以上、特に好ましくは０．１重量％以上であり、最も好ましくは１重量％以上であり、より好ましくは３重量％以上である。
本発明の創傷治癒用医薬組成物は、他のコラーゲン由来の成分（特にペプチド）を含んでいても良いが、本願発明の創傷治癒用医薬組成物に含まれる全てのコラーゲン由来の成分（特にペプチド）のうち、１０重量％以上、好ましくは２０重量％以上、特に好ましくは５０重量％以上、本願式（１）で表される化合物及びその誘導体が占めることが好ましい。
【００８２】
本発明の創傷治癒用医薬組成物は、所望に応じて、適当な形態に設定することができる。例えば、乾燥粉末、ゲル、クリーム、軟膏、懸濁液、溶液又は生体適合性がある合成もしくは天然の固体マトリックスの形態とすることができる。
さらにフィルム等の基材上に塗布して、皮膚等に付着させて使用することも可能である。
【００８３】
（骨形成促進用組成物）
本発明の骨形成促進用組成物は、上記コラーゲン産生促進剤を含有することを特徴とする。本発明の骨形成促進用組成物は、骨粗鬆症の予防及び治療に用いることができる。
本発明の骨形成促進用組成物は、サプリメントとして経口投与可能な製剤とすることや、直接幹部に注入して使用することも可能である。このような製剤としては例えば、口腔内崩壊錠、チュアブル錠、分散錠等の錠剤や、カプセル剤、顆粒剤、散剤、経口液剤、シロップ剤、または経口ゼリー剤、水溶液、ブドウ糖液等を挙げることができる。
【００８４】
本発明の骨形成促進用組成物では、製剤化、薬剤化に際して、薬学的に許容される賦形剤、結合剤、滑沢剤、等張剤、安定剤、保存剤、矯味剤、溶解補助剤、または乳化剤等をさらに加えることができる。
本発明の骨形成促進用組成物は、従来公知の方法にて製造することができる。例えば錠剤の場合、次のような工程で製剤化できる。すなわち、秤量、一次混合（有効成分、賦形剤、結合剤、崩壊剤等を均一に混合）、造粒、篩過、二次混合（滑沢剤等を混合）、コーティング（必要に応じ）、包装等の工程を経る製造方法である。
【００８５】
本発明の骨形成促進用組成物は、骨芽細胞を活性化することから、患者の骨欠損に局所送達することにより骨を修復し又は骨密度を増加させることができる。その際に用いる、薬物担体混合物は、例えばリン酸カルシウムセメント粉末などと混合することにより調製される。詳細な実施形態に応じて、薬物担体混合物を好適な骨基質材料と組み合わせることにより、本発明の骨組成物を形成し得る。或いは、骨修復組成物はコラーゲンスポンジを含んでもよい。次に骨組成物が治療部位に、例えば骨欠損部位に植え込むか又は注入によるなどして適用され得る。また、インプラントにも適用し得る。
【００８６】
本発明の骨形成促進用組成物のコラーゲン産生促進剤含量は特に限定されないが、例えば、組成物中０．００１重量％以上含有することが好ましく、さらに好ましくは、０．０１重量％以上、特に好ましくは０．１重量％以上であり、最も好ましくは１重量％以上であり、より好ましくは３重量％以上である。
本発明の骨形成促進用組成物は、他のコラーゲン由来の成分（特にペプチド）を含んでいても良いが、本願発明の骨形成促進用組成物に含まれる全てのコラーゲン由来の成分（特にペプチド）のうち、１０重量％以上、好ましくは２０重量％以上、特に好ましくは５０重量％以上、本願式（１）で表される化合物及びその誘導体が占めることが好ましい。
【００８７】
以下、実施例を挙げて本発明を説明するが、本発明はこれらに限定されるものではない。
＜実施例１＞
（１）３−ヒドロキシピリジノリン（ＰＹＲ）の調製
【化１１】
2019019129.tif 000012
ＰＹＲを以下に示す方法に従って調製した。
ウシアキレス腱コラーゲン１ｇ（Ｓｉｇｍａ）に６Ｍ 塩酸（アミノ酸自動分析用）を１０ｍｌ加え、加水分解装置（Ｗａｔｅｒｓ，Ｐｉｃｏ・Ｔａｇ）を用いて窒素置換下、１１０℃で２４時間加水分解を行った。加水分解物を孔径０．２μmのフィルター（ＡＤＶＡＮＴＥＣ，ＤＩＳＭＩＣ−２５ＣＳ）で濾過したのち、ロータリーエバポレーター（ＥＹＥＬＡ，Ｎ−１１００，ＳＢ―１１００，Ａ１０００Ｓ）により塩酸を除去・乾燥させることによりコラーゲン加水分解物を得た。コラーゲン加水分解物を１０ｍＭ酢酸ナトリウムバッファーに溶解したのち、１０Ｍ水酸化ナトリウム水溶液を加えｐＨ４．０に調整した。これを陽イオン交換クロマトグラフィー（ＦＰＣ３５００）に供し、０．５Ｍ ＮａＣｌを含有する１０ｍＭ 酢酸ナトリウムバッファーにより目的の画分を溶出させた。溶出画分をロータリーエバポレーターにより濃縮したのち、０．１％ＨＦＢＡに溶解し、Ｓｅｐ−ＰａｋＣ１８・３５ｃｃ Ｖａｃ Ｃａｒｔｒｉｄｇｅ（Ｗａｔｅｒｓ，ＷＡＴ０４３３４５）を用いた固相抽出に供した。０．１％ＨＦＢＡにより非吸着画分および塩を溶出させたのち、２０％アセトニトリルにより目的画分を溶出させた。溶出画分をロータリーエバポレーターにより濃縮したのち、少量の０．１％ＨＦＢＡに溶解させた。これを孔径０．４５μmのフィルター（ＡＤＶＡＮＴＥＣ，ＤＩＳＭＩＣ−０３ＣＰ）を用いて濾過した後、逆相ＨＰＬＣ（Ｉｎｅｒｔｓｉｌ ＯＤＳ−４、ＧＬ Ｓｃｉｅｎｃｅ）に供し、０．１％ＨＦＢＡを含有する５０％アセトニトリルにより分離した。ＰＹＲの特異的吸収波長２９５ｎｍに対する吸光度を有する画分を単離し、さらにこれを逆相ＨＰＬＣ（Ｉｎｅｒｔｓｉｌ ＯＤＳ−３、ＧＬ Ｓｃｉｅｎｃｅ）に供して０．１％ＨＦＢＡを含有する５０％アセトニトリルにより分離することにより精製し、ＰＹＲ（上記一般式（４））を得た。
得られた化合物の蛍光スペクトルを図１に示す。またマススペクトル結果を図２に示す。
特異的蛍光及びマススペクトル解析から、得られた化合物はＰＹＲであることを確認できる。
【００８８】
（２）コラーゲン産生促進作用の評価
以下の手法で、化合物のコラーゲン産生促進作用を評価した。
（２−１）試料の作製
ヒト近位尿細管上皮細胞株（ＨＫ−２、理研細胞バンク）を、細胞数が１×１０６個となるよう細胞培養ディッシュに播種し、１０％ＦＢＳを含有するＤＭＥＭ培地で７２時間培養した。培養細胞に被験化合物としてＰＹＲを添加し、２４時間培養した。また比較例として、ＰＹＲを添加しない系についても試料を作成した。
【００８９】
サンプル群
サンプル１）コントロール（ＰＹＲ無添加）
サンプル２）ＰＹＲ  １０μＭ  添加
サンプル３）ＰＹＲ  ５０μＭ  添加
【００９０】
（２−２）コラーゲン産生量の測定
上記（２−１）で調製したサンプル群について、次の手順により、コラーゲンの産生量をＲＴ（逆転写）−ＰＣＲ法により解析した。
培養ディッシュから培地を除去し、ＰＢＳ溶液で５分間、２回洗浄した後、１ｍｌのＴＲＩｚｏｌ（ａｍｂｉｏｎ）を加えて細胞を溶解してマイクロチューブ（ＷＡＴＳＯＮ）に回収した。これにクロロホルムを４００&micro;ｌ加えて撹拌したのち、遠心分離により水層を得た。得られた水層画分に５００&micro;ｌのイソプロパノールを加え、ＲＮＡを沈澱させた。遠心分離により上清を除去し、得られたＲＮＡを７５％エタノールで洗浄したのちに水に溶解させた。２&micro;ｇのＲＮＡを鋳型とし、（ｄＴ）１８プライマー、ＡＭＶ Ｒｅｖｅｒｓｅ ｔｒａｎｓｃｒｉｐｔａｓｅ（宝酒造）を用いた逆転写反応によってｃＤＮＡを合成した。各サンプル群から得たｃＤＮＡを鋳型とし、Ｉ型コラーゲンａ１（Ｃｏｌ１ａ１）に特異的なプライマー、Ｈｙｂｒｉｐｏｌ ＤＮＡ Ｐｏｌｙｍｅｒａｓｅを用いてＰＣＲ測定を行った。反応後の増幅産物をアガロース電気泳動に供し、バンド強度を測定、評価した。恒常的に発現が見られるＧＡＰＤＨの発現強度を対照とし、数値を補正した。
【００９１】
ＰＹＲ（サンプル２及びサンプル３）について、得られたヒト尿細管上皮細胞のＩ型コラーゲンタイプＡのｍＲＮＡ発現量解析結果を図３に示す。図中の強度の値は、コントロールを１００としたときに各サンプルの発現強度の割合として表したものである。また、染色強度の解析結果を表１に示す。表中の強度の値は、コントロールを１００としたときの各サンプルの染色強度の割合として表したものである。
【００９２】
Ｉ型コラーゲンａ１（Ｃｏｌ１ａ１）の発現量（平均値）
【表１】
2019019129.tif 000013
【００９３】
図３及び表１より、ＰＹＲ（サンプル２及び３）はコントロール（サンプル１）と比較するとコラーゲンの産生量が顕著に向上していることが確認され、コラーゲン産生能亢進作用活性を有することが示唆された。
【００９４】
（３）コラーゲン産生に関わるTGFβ発現促進作用の評価
以下の手法で、化合物のTGFβ発現促進作用を評価した。
（３−１）試料の作製
ラット近位尿細管上皮細胞株（ＮＲＫ５２Ｅ、理研細胞バンク）を、細胞数が１×１０６個となるよう細胞培養ディッシュに播種し、１０％ＦＢＳを含むＤＭＥＭ培地で７２時間培養した。培養細胞に被験化合物としてＰＹＲを添加し、２４時間培養した。また比較例として、ＰＹＲを添加しない系についても試料を作成した。
【００９５】
サンプル群
サンプル４）コントロール（ＰＹＲ無添加）
サンプル５）ＰＹＲ  １０μＭ  添加
サンプル６）ＰＹＲ  ５０μＭ  添加
【００９６】
（３−２）コラーゲン産生量の測定
上記（３−１）で調製したサンプル群について、次の手順により、コラーゲンの産生量をＲＴ（逆転写）−ＰＣＲ法により解析した。
培養ディッシュから培地を除去し、ＰＢＳ溶液で５分間、２回洗浄した後、１ｍｌのＴＲＩｚｏｌ（ａｍｂｉｏｎ）を加えて細胞を溶解してマイクロチューブ（ＷＡＴＳＯＮ）に回収した。これにクロロホルムを４００&micro;ｌ加えて撹拌したのち、遠心分離により水層を得た。得られた水層画分に５００&micro;ｌのイソプロパノールを加え、ＲＮＡを沈澱させた。遠心分離により上清を除去し、得られたＲＮＡを７５％エタノールで洗浄したのちに水に溶解させた。２&micro;ｇのＲＮＡを鋳型とし、（ｄＴ）１８プライマー、ＡＭＶ Ｒｅｖｅｒｓｅ ｔｒａｎｓｃｒｉｐｔａｓｅ（宝酒造）を用いた逆転写反応によってｃＤＮＡを合成した。各サンプル群から得たｃＤＮＡを鋳型とし、ＴＧＦβ1に特異的なプライマー、Ｈｙｂｒｉｐｏｌ ＤＮＡ Ｐｏｌｙｍｅｒａｓｅを用いてＰＣＲ測定を行った。反応後の増幅産物をアガロース電気泳動に供し、バンド強度を測定、評価した。恒常的に発現が見られるＧＡＰＤＨの発現強度を対照とし、数値を補正した。
【００９７】
ＰＹＲ（サンプル５及びサンプル６）について、得られたラット尿細管上皮細胞のＴＧＦβ1のｍＲＮＡ発現量解析結果を図４に示す。図中の強度の値は、コントロールを１００としたときに各サンプルの発現強度の割合として表したものである。また、染色強度の解析結果を表１に示す。表中の強度の値は、コントロールを１００としたときの各サンプルの染色強度の割合として表したものである。
【００９８】
ＴＧＦβ1の発現量（平均値）
【表２】
2019019129.tif 000014
【００９９】
図４及び表２より、ＰＹＲ（サンプル５及び６）はコントロール（サンプル４）と比較するとＴＧＦβ1の発現量が顕著に向上していることが確認され、コラーゲン産生能亢進作用活性を有しているから、化粧料組成物、飲食用組成物として有用であることがわかる。
非特許文献（Ｊｅｏｎ  ｅｔ  ａｌ．  Ｊ．  Ｐｈｙｓ．  Ｔｈｅｒ．  Ｓｃｉ．  ２７，  １４８５−１４９０  ２０１５）に記載されているとおり、ＴＧＦ−β発現の増大、およびＩ型コラーゲン産生の増大は、創傷治癒に効果的であることは公知の事実である。ＴＧＦ−βの発現を増大させ、Ｉ型コラーゲン発現を増大させる本発明のコラーゲン促進剤は創傷治癒用医薬組成物として有用である。
【０１００】
＜実施例２＞
（１）１−（５−カルボキシペンチル）−３−ヒドロキシ−５−ヒドロキシメチルピリジニウム（ＣＨＨＰ）の調製
【化１２】
2019019129.tif 000015
【０１０１】
２Ｍグリセルアルデヒドおよび０．１Ｍ ６−アミノヘキサン酸を０．２Ｍ リン酸緩衝液（ｐＨ７．４）中、５０℃で７２時間反応させた。反応溶液をＳｅｐ−ＰａｋＣ１８ ３５ｃｃ Ｖａｃ Ｃａｒｔｒｉｄｇｅ（Ｗａｔｅｒｓ， ＷＡＴ０４３３４５）を用いた固相抽出に供した。水によって溶出される非吸着画分を得て、これをロータリーエバポレーターにより濃縮したのち、少量の水に溶解させ、さらにトリフルオロ酢酸（ＴＦＡ）を加えてｐＨを２．０に調整した。この溶液を再度Ｓｅｐ−Ｐａｋ Ｃ１８ ３５ｃｃ Ｖａｃ Ｃａｒｔｒｉｄｇｅに供し、２０％アセトニトリル水溶液にて溶出させた画分を濃縮した。濃縮後の溶液を逆相ＨＰＬＣ（Ｉｎｅｒｔｓｉｌ ＯＤＳ−３、ＧＬ Ｓｃｉｅｎｃｅ）に供し、０．０５％ＴＦＡを含有する５０％アセトニトリルにより分離した。ＣＨＨＰの特異的吸収波長２９１ｎｍに対する吸光度を有する画分を単離することにより、精製ＣＨＨＰ（上記一般式（５）を得た。
【０１０２】
（２）骨形成促進作用の評価
（２−１）マウス頭蓋骨由来細胞株（ＭＣ３Ｔ３−Ｅ１、理研バイオリソースセンター）を、細胞数が１×１０６個となるよう細胞培養ディッシュ（ＮＵＮＣ）に播種し、１０％ＦＢＳ、２５&micro;ｇ／ｍｌアスコルビン酸、５ｍＭβグリセロリン酸を含有するαＭＥＭ培地で培養し、骨芽細胞様に分化させた。これに被験化合物としＣＨＨＰを添加し、２４時間培養した。
骨形成促進作用は骨芽細胞の分化促進作用、あるいは骨基質コラーゲンの産生促進作用により評価した。
骨芽細胞の分化をアルカリフォスファターゼの発現度を酵素活性によって評価した。ＭＣ３Ｔ３−Ｅ１細胞を分化培地で１４日間培養した後、ＣＨＨＰを加えた分化培地でさらに７日間培養した。培養後に培地を除去し、ディッシュを洗浄した後、界面活性剤（０．１％ ＮＰ−４０）およびプロテアーゼ阻害剤を含有するバッファー（２０ｍＭ Ｔｒｉｓ、ｐＨ７．５）により細胞を回収し、超音波処理によって細胞を破砕し、細胞抽出液を得た。アルカリフォスファターゼの基質を含有するバッファー（ｐＨ１０．０）に細胞抽出液を加え、３７℃で１時間反応させた。反応後に基質より生じた生成物（ｐ−ニトロフェノール）を４０５ｎｍの吸光度増大により評価した。
ＣＨＨＰによるアルカリフォスファターゼの活性増大作用、すなわち骨芽細胞分化促進作用を示すデータ（無添加のコントロールに対する相対値）を図４に示した。
【０１０３】
（２−２）さらに、ヒト尿細管上皮細胞と同様に、ＣＨＨＰによる骨芽細胞コラーゲン産生促進作用をＲＴ−ＰＣＲにより評価し、その結果を図５に示した。
【０１０４】
サンプル群
サンプル７）コントロール（ＣＨＨＰ無添加）
サンプル８）ＣＨＨＰ    １μＭ  添加
サンプル９）ＣＨＨＰ  １０μＭ  添加
【０１０５】
Ｉ型コラーゲンａ１（Ｃｏｌ１ａ１）の発現量（平均値）
【表３】
2019019129.tif 000016
【０１０６】
図５、図６及び表３より、ＣＨＨＰ（サンプル８及び９）はコントロール（サンプル７）と比較するとコラーゲンの産生量が顕著に向上していることが確認され、骨芽細胞分化促進作用を有することも示唆された。
【０１０７】
非特許文献（孔令群、出山義昭、工藤智也、吉村善隆、鈴木邦明：「骨芽細胞様ＭＣ３Ｔ３−Ｅ１細胞の各種ＡＴＰａｓｅに対するエストロゲンの作用」  北海道歯学雑誌  ３３，  １７５−１８４  （２０１３）（http://hdl.handle.net/2115/52456））に記載されているように、骨は骨芽細胞が産生するコラーゲン基質にリン酸カルシウムなどが蓄積される過程を経て形成される。したがって骨芽細胞のコラーゲン産生や分化を促進する化合物は骨量を増大させ、骨粗鬆症の治療薬および予防薬となりえることは周知の事実である。また同非特許文献に述べられているように、骨芽細胞においては、その分化にともなってアルカリホスファターゼ（ＡＬＰ）の発現が増大する。このことからＡＬＰ活性を増大させる化合物は骨芽細胞分化促進作用を有し、したがって骨粗鬆症の治療薬および予防薬となりえることも周知の事実である。
同非特許文献に述べられているように、マウスＭＣ３Ｔ３−Ｅ１細胞はヒト骨芽細胞に近い特徴を有しており、骨芽細胞の機能解析に汎用される細胞株である。したがってＭＣ３Ｔ３−Ｅ１細胞のコラーゲン産生促進やＡＬＰ発現増大は、骨形成促進の指標となりうるといえる。
【０１０８】
・終末糖化産物受容体（ＲＡＧＥ）と３−ヒドロキシピリジニウム誘導体との相互作用の検討
（１）Ｂｉａｃｏｒｅシステムを用いたＲＡＧＥリガンドの解析
大腸菌により可溶型ＲＡＧＥを組換えタンパク質として発現させ、アフィニティーカラムクロマトグラフィーを用いて精製した。精製した組換えＲＡＧＥタンパク質をセンサーチップに固定化し、ピリジノリン、ＣＨＨＰをアナライトとして添加したところ、濃度依存的な結合レスポンスが検出された。Ｋｉｎｅｔｉｃｓ解析を行ったところ、解離定数ＫＤは１７９μＭ（ＰＹＲ）、３９３μＭ（ＣＨＨＰ）であった。さらにペプチド構造を有するピリジノリンペプチドについても解析を行ったところ、特異的な相互作用が確認された。
これらの結果から、３−ヒドロキシピリジニウム誘導体が終末糖化産物受容体（ＲＡＧＥ）に対して特異的に親和性を示すことが実証された。
【０１０９】
これらの結果より、本発明の３−ヒドロキシピリジニウム誘導体が、終末糖化産物受容体（ＲＡＧＥ）に特異的に認識されることが確認され、コラーゲン産生が促進されることが示唆された。
【０１１０】
（３−ヒドロキシピリジノリン（ＰＹＲ）含有コラーゲン分解物の調製）
フィッシュコラーゲン１ｋｇに６Ｍ 塩酸を１０Ｌ加え、１１０℃で２４時間加水分解を行った。加水分解物を孔径０．２μmのフィルター（ＡＤＶＡＮＴＥＣ社製）で濾過したのち、１０Ｍ水酸化ナトリウム水溶液で中和した。次いで、これを乾燥し、コラーゲン加水分解物を得た。
コラーゲン加水分解物を１０ｍＭ酢酸ナトリウムバッファーに溶解したのち、１０Ｍ水酸化ナトリウム水溶液を加えｐＨ４．０に調整した。これを陽イオン交換クロマトグラフィーに供し、０．５Ｍ ＮａＣｌを含有する１０ｍＭ 酢酸ナトリウムバッファーにより目的の画分を溶出させた。溶出画分を乾燥し、ＰＹＲ含有コラーゲン分解物を得た。
【０１１１】
［処方例］
次に、本発明のＰＹＲ含有コラーゲン分解物を、洗浄料、スキンケア化粧品、メークアップ化粧品、ヘアケア化粧品、日焼け止め・ＵＶケア化粧品、食品、飲料に適用した配合処方の例を示す。但し、これらの処方例により本発明の技術範囲が限定されるものではない。
【０１１２】
（処方例１）
下記処方でセッケンを調製した。
成分名                                        配合量（質量％）
ＰＹＲ含有コラーゲン分解物                        １．００
ヤシ脂肪酸                                      ２０．００
パーム油脂肪酸                                  ２０．００
グリセリン                                        ６．００
水酸化Ｎａ（８５％）                            １５．７５
ＥＤＴＡ−２Ｎａ                                  ０．２０
クエン酸Ｎａ                                      ０．５０
水                                                残部
【０１１３】
（処方例２）
下記処方でボディソープ（透明タイプ）を調製した。
成分名                                        配合量（質量％）
ＰＹＲ含有コラーゲン分解物                      １０．００
ヤシ脂肪酸                                        ５．００
クエン酸                                          １．００
グリセリン                                        ３．００
水酸化Ｋ                                          ５．６８
ＥＤＴＡ−４Ｎａ                                  ０．２０
グルコン酸Ｎａ                                    １．００
ジオレイン酸ＰＥＧ−１２０メチルグルコース        ２．００
水                                                残部
【０１１４】
（処方例３）
下記処方でボディソープ（パールタイプ）を調製した。
成分名                                        配合量（質量％）
ＰＹＲ含有コラーゲン分解物                      １０．００
ココイルメチルタウリンＮａ、水                  １０．００
（ＮＩＫＫＯＬ  ＣＭＴ−３０）
ラウレス硫酸Ｎａ、水（２７％水溶液）            ２２．２０
ジステアリン酸ＰＥＧ−１５０                      ３．００
（ＮＩＫＫＯＬ  ＣＤＳ−６０００Ｐ）
ラウレス−５カルボン酸Ｎａ、水                  ２０．００
（ＮＩＫＫＯＬ  ＡＫＹＰＯ  ＲＬＭ  ４５ＮＶ）
ラウリルベタイン、水                            １０．００
（ＮＩＫＫＯＬ  ＡＭ−３０１）
ＢＧ                                              ５．００
ジステアリン酸グリコール                          ２．００
（ＮＩＫＫＯＬ  エステパール１５Ｖ）
クエン酸                                          適量
ＥＤＴＡ−２Ｎａ                                  ０．１０
防腐剤                                            適量
水                                                残部
【０１１５】
（処方例４）
下記処方でボディソープ（アミノ酸界面活性剤を使用した低刺激性のボディソープ）を調製した。
成分名                                        配合量（質量％）
ＰＹＲ含有コラーゲン分解物                      １０．００
ココイルグルタミンサンＴＥＡ、水（３０％水溶液  ３０．００
トリデセス−４カルボン酸ナトリウム                ５．００
（ＮＩＫＫＯＬ  ＥＣＴＤ−３ＮＥＸ）
ココアンホ酢酸Ｎａ、水（）                      １０．００
（ＮＩＫＫＯＬ  ＡＭ−１０１）
ＰＥＧ−５０水添ヒマシ油                          ０．５０
（ＮＩＫＫＯＬ  ＨＣＯ−５０）
ＢＧ                                              ５．００
ＥＤＴＡ−２Ｎａ                                  ０．１０
防腐剤                                            適量
水                                                残部
【０１１６】
（処方例５）
下記処方でボディソープ（セッケンとアニオン界面活性剤を併用したボディソープ）を調製した。
成分名                                        配合量（質量％）
ＰＹＲ含有コラーゲン分解物                      １０．００
ヤシ油脂肪酸Ｋ・ミリスチン酸Ｋ配合液            ４０．００
ラウロイルメチルアラニンＮａ、水                ２０．００
（ＮＩＫＫＯＬ  アラニネートＬＮ３０）
ヤシ油脂肪酸ＰＥＧ−７グリセリル                  ５．００
（ＮＩＫＫＯＬ  ＴＭＧＣＯ−７）
コカミドＤＥＡ                                    ３．００
グリセリン                                      １５．００
ＢＧ                                              ５．００
ＥＤＴＡ−３Ｎａ                                  ０．０５
防腐剤                                            適量
水                                                残部
【０１１７】
（処方例６）
下記処方で洗顔フォームを調製した。
成分名                                        配合量（質量％）
ＰＹＲ含有コラーゲン分解物                        １．００
ラウリン酸                                      １０．００
パルミチン酸                                    １２．００
ステアリン酸                                    １０．００
ラウリロイルメチルタウリンＮａ                    ５．００
（ＮＩＫＫＯＬ  ＬＭＴ）          
ステアリン酸グリセリル（ＳＥ）                    ２．００
（ＮＩＫＫＯＬ  ＭＧＳ−ＢＳＥＶ）
ＰＥＧ−６、ＰＥＧ３２                          １０．００
グリセリン                                      １０．００
ソルビトール（７０％水溶液）                      ５．００
オリーブ果実油                                    １．００
（ＮＩＫＫＯＬ  オリーブ油）
防腐剤                                            適量
水酸化Ｋ                                          ７．００
水                                                残部
【０１１８】
（処方例７）
下記処方で洗顔フォーム（アミノ酸系界面活性剤配合）を調製した。
成分名                                        配合量（質量％）
ＰＹＲ含有コラーゲン分解物                        １．００
クエン酸                                          ０．１５
ＥＤＴＡ−２Ｎａ                                  ０．０５
ＢＧ                                            １５．００
グリセリン                                      １０．００
コカミドＤＥＡ                                    ３．００
ココイルメチルタウリンＮａ、水                    ４．００
（ＮＩＫＫＯＬ  ＣＭＴ−３０）
ラウロイルメチルアラニンＮａ、水                  ８．００
（ＮＩＫＫＯＬ  アラニネート  ＬＮ−３０）
コカミドプロピルベタイン、水                      ８．００
（ＮＩＫＫＯＬ  ＡＭ−３１３０Ｎ）
防腐剤                                            適量
エタノール                                        ３．００
水                                                残部
【０１１９】
（処方例８）
下記処方で洗顔フォーム（リン酸界面活性剤配合）を調製した。
成分名                                        配合量（質量％）
ＰＹＲ含有コラーゲン分解物                        １．００
ラウレス−１リン酸、水                            ７．５０
（ＮＩＫＫＯＬ  ホステン  ＨＬＰ−１）
アルギニン                                        ４．４０
ＤＰＧ                                            ４．００
防腐剤                                            適量
ココイルメチルタウリンＮａ、水                    ５．００
（ＮＩＫＫＯＬ  ＣＭＴ−３０）
トリイソステアリン酸ＰＥＧ−２０グリセリル        ４．００
（ＮＩＫＫＯＬ  ＴＧＩ−２０）
ペンチレングリコール                              ２．００
カプリル酸グリセリル                              １．００
グリセリン                                        １．００
キレート剤                                        適量
クエン酸                                          ０．２５
水                                                残部
【０１２０】
（処方例９）
下記処方でクレンジングオイル（バイコンティニュアス型）を調製した。
成分名                                        配合量（質量％）
油性成分：
ペンタイソステアリン酸ポリグリセリル−１０        ６．３０
（ＮＩＫＫＯＬ  Ｄｅｃａｇｌｙｎ  ５−ＩＳＶ）
ラウリン酸ポリグリセリル−６                    １１．７０
（ＮＩＫＫＯＬ  Ｈｅｘａｇｌｙｎ  １−Ｌ）
ジイソステアリン酸ポリグリセリル−１０            ２．００
（ＮＩＫＫＯＬ  Ｄｅｃａｇｌｙｎ  ２−ＩＳＶ）
ラウリン酸メチルヘプチル                        ５８．３０
（ＮＩＫＫＯＬ  ＧＳ−ＭＨＬ）
ミリスチン酸                                      ０．８０
混合植物油                                        ３．００
（ＮＩＫＫＯＬ  ＮＡＴＵＲＡＬ  ＯＩＬＳ−１）
シクロペンタシロキサン                          １０．００
水性成分：
ＰＹＲ含有コラーゲン分解物                        １．００
エタノール                                        １．５０
防腐剤                                            適量
水                                                残部
【０１２１】
（処方例１０）
下記処方でクレンジングクリーム（Ｏ／Ｗ型、洗い流しおよびふき取り両用タイプ）を調製した。
成分名                                        配合量（質量％）
油性成分：
ステアリン酸ＰＥＧ−６ソルビタン                  ２．００
（ＮＩＫＫＯＬ  ＴＳ−１０６Ｖ）
ポリソルベート  ６０                              ０．８０
（ＮＩＫＫＯＬ  ＴＳ−１０Ｖ）
ステアリン酸グリセリル                            １．２０
（ＮＩＫＫＯＬ  ＭＧＳ―ＢＶ２）
セテアリルアルコール                              ３．５０
スクワラン                                      ４５．００
（ＮＩＫＫＯＬ  シュガースクワラン）
ラウリン酸メチルヘプチル                          ５．００
（ＮＩＫＫＯＬ  ＧＳ−ＭＨＬ）
ジメチコン（３５０ｍＰａ・ｓ）                    ０．２０
水性成分：
ＰＹＲ含有コラーゲン分解物                        １．００
ＢＧ                                            １０．００
グリセリン                                        ２．００
カルボキシビニルポリマー（２％水溶液）            ５．００
（ＮＴＣ−ＣＡＲＢＯＭＥＲ  ３８０）
防腐剤                                            適量
ステアリルメチルタウリンＮａ                      ０．３０
（ＮＩＫＫＯＬ  ＳＭＴ）
水酸化Ｋ                                          ０．０３５
水                                                残部
【０１２２】
（処方例１１）
下記処方でクレンジングミルク（Ｏ／Ｗ型、洗い流しおよびふき取り両用タイプ）を調製した。
成分名                                        配合量（質量％）
油性成分：
シクロペンタシロキサン                            ５．００
ジフェニルシロキシフェニルトリメチコン            ５．００
ラウリン酸メチルヘプチル                          ５．００
（ＮＩＫＫＯＬ  ＧＳ−ＭＨＬ）
スクワラン                                        ３．００
（ＮＩＫＫＯＬ  シュガースクワラン）
ヤシ油脂肪酸ＰＥＧ−７グリセリル                １０．００
（ＮＩＫＫＯＬ  ＴＭＧＣＯ−７）
トリ（ベヘン酸／イソステアリン酸／エイコサン二酸）グリセリルセテアリルアルコール
０．５０
イソステアリン酸ソルビタン                        １．００
（ＮＩＫＫＯＬ  ＳＩ−１０ＲＶ）
テトラオレイン酸ソルベス−３０                    １．００
（ＮＩＫＫＯＬ  ＧＯ−４３０  ＮＶ）
ポリソルベート６０                                １．００
（ＮＩＫＫＯＬ  ＴＳ−１０Ｖ）
水性成分：
ＰＹＲ含有コラーゲン分解物                        １．００
グリセリン                                      １０．００
ＢＧ                                              ３．００
カルボキシビニルポリマー（２％水溶液）          １０．００
（ＮＴＣ−ＣＡＲＢＯＭＥＲ  ３８１）
（アクリレーツ／アクリル酸アルキル（Ｃ１０−３０）クロスポリマー（高粘度用）（２％水溶液））                                      ５．００
ＥＤＴＡ−２Ｎａ                                  ０．０５
防腐剤                                            適量
水酸化Ｋ                                          ０．０７
水                                                残部
【０１２３】
（処方例１２）
下記処方でクレンジングジェル（油性タイプ）を調製した。
成分名                                        配合量（質量％）
油性成分：
ＰＰＧ−６デシルテトラデセス−３０              １２．００
（ＮＩＫＫＯＬ  ＰＥＮ−４６３０）
オクチルドデセス−２５                            ４．００
スクワラン                                        ２．００
（ＮＩＫＫＯＬ  シュガースクワラン）
エチルヘキサン酸セチル                            ６．４０
（ＮＩＫＫＯＬ  ＣＩＯ）
トリエチルヘキサノイン                          ４０．００
（ＮＩＫＫＯＬ  Ｔｒｉｆａｔ  Ｓ−３０８）
グリセリン                                      １２．００
メチルグルセス−１０                              ３．００
（ＮＩＫＫＯＬ  ＢＭＧ−１０）
水性成分：
ＰＹＲ含有コラーゲン分解物                        １．００
ソルビトール（７０％水溶液）                      ８．００
ＤＰＧ                                            ４．００
水                                                残部
【０１２４】
（処方例１３）
下記処方でクレンジングジェル（液晶タイプ）を調製した。
成分名                                        配合量（質量％）
ＰＹＲ含有コラーゲン分解物                        １．００
ＰＥＧ−４０水添ヒマシ油                          ８．００
（ＮＩＫＫＯＬ  ＨＣＯ−４０）
ＰＥＧ−５０水添ヒマシ油                          ８．００
（ＮＩＫＫＯＬ  ＨＣＯ−５０）
トリエチルヘキサノイン                          ６０．００
（ＮＩＫＫＯＬ  Ｔｒｉｆａｔ  Ｓ−３０８）
グリセリン                                      １６．８０
水                                                残部
【０１２５】
（処方例１４）
下記処方でクレンジングジェル（Ｏ／Ｗ型  洗い流しタイプ）を調製した。
成分名                                        配合量（質量％）
油性成分：
イソドデカン                                    ２０．００
エチルヘキサン酸セチル                          １０．００
（ＮＩＫＫＯＬ  ＣＩＯ）
シクロペンタシロキサン                          １０．００
水性成分：
ＰＹＲ含有コラーゲン分解物                        １．００
複合乳化剤                                        ４．５０
（ＮＩＫＫＯＬ  ニコムルス  ＳＥ  Ｗ）
ＢＧ                                              ５．００
防腐剤                                            適量
水酸化Ｋ                                          ０．０５
水                                              残部
【０１２６】
（処方例１５）
下記処方でクレンジングジェル（水性タイプ）を調製した。
成分名                                        配合量（質量％）
油性成分：
ヤシ油脂肪酸ＰＥＧ−７グリセリル                １０．００
（ＮＩＫＫＯＬ  ＴＭＧＣＯ−７）
トリイソステアリン酸ＰＥＧ−２０グリセリル        ４．５０
（ＮＩＫＫＯＬ  ＴＧＩ−２０）
イソステアリン酸ＰＥＧ−２０ソルビタン            ３．５０
（ＮＩＫＫＯＬ  ＴＩ−１０Ｖ）
ステアリン酸ＰＥＧ−４５                          ２．００
（ＮＩＫＫＯＬ  ＭＹＳ−４５Ｖ）
ＤＰＧ                                          ２０．００
防腐剤                                            適量
水性成分：
ＰＹＲ含有コラーゲン分解物                        １．００
メチルグルセス−１０                              ５．００
（ＮＩＫＫＯＬ  ＢＭＧ−１０）
カルボキシビニルポリマー                          ０．４０
（ＮＴＣ−ＣＡＲＢＯＭＥＲ  ３８０）
水酸化Ｋ                                          ０．１４
ＥＤＴＡ−２Ｎａ                                  ０．１０
水                                                残部
【０１２７】
（処方例１６）
下記処方でクレンジングローション（拭き取りタイプ）を調製した。
成分名                                        配合量（質量％）
油性成分：
ヤシ油脂肪酸ＰＥＧ−７グリセリル                  ４．００
（ＮＩＫＫＯＬ  ＴＭＧＣＯ−７）
ラウリン酸ＰＥＧ−１０                            ４．００
（ＮＩＫＫＯＬ  ＭＹＬ−１０）
ＰＥＧ−５０水添ヒマシ油                          ２．００
（ＮＩＫＫＯＬ  ＨＣＯ−５０）
防腐剤                                            適量
水酸化レシチン、グリセリン                        ０．５０
（ＮＩＫＫＯＬ  レシチノールＳＨ５０）
水性成分：
ＰＹＲ含有コラーゲン分解物                        １．００
ココイルアルギニンエチルＰＣＡ                    ０．１０
クエン酸                                          ０．００５
クエン酸Ｎａ                                      ０．０３
ＥＤＴＡ−２Ｎａ                                  ０．０３
水                                                残部
【０１２８】
（処方例１７）
下記処方でメークアップリムーバー（２層式）を調製した。
成分名                                        配合量（質量％）
油性成分：
シクロペンタシロキサン                          ２０．００
ラウリン酸メチルヘプチル                        ２０．００
（ＮＩＫＫＯＬ  ＧＳ−ＭＨＬ）
水性成分：
ＰＹＲ含有コラーゲン分解物                        １．００
エタノール                                        ３．００
ヤシ油脂肪酸ＰＥＧ−７グリセリル                  ０．２０
（ＮＩＫＫＯＬ  ＴＭＧＣＯ−７）
ＰＰＧ−４セテス−１０                            ０．１０
（ＮＩＫＫＯＬ  ＰＢＣ−３３）
ＰＥＧ−４００                                    ０．０５
塩化Ｎａ                                          ０．５０
ＥＤＴＡ−３Ｎａ                                  ０．０２
ココイルアルギニンエチルＰＣＡ                    ０．０５
水                                                残部
【０１２９】
（処方例１８）
下記処方でバニシングクリーム（石油系界面活性剤フリー）を調製した。
成分名                                        配合量（質量％）
油性成分：
ステアリン酸                                    １５．００
パルミチン酸イソプロピル                          ２．００
（ＮＩＫＫＯＬ  ＩＰＰ）
ラノリン                                          １．００
水性成分：
ＰＹＲ含有コラーゲン分解物                        １．００
ソルビトール（７０％水溶液）                      ８．００
水酸化Ｋ                                          １．００
防腐剤                                            適量
水                                                残部
【０１３０】
（処方例１９）
下記処方でバニシングクリームを調製した。
成分名                                        配合量（質量％）
油性成分：
ポリソルベート６０                                ２．００
（ＮＩＫＫＯＬ  ＴＳ−１０Ｖ）
テトラオレイン酸ソルベス−３０                    ０．５０
（ＮＩＫＫＯＬ  ＧＯ−４３０ＮＶ）
ステアリン酸グリセリル、ステアリン酸グリセリル（ＳＥ）、ステアリン酸ＰＥＧ−１０
０．５０
（ＮＩＫＫＯＬ  ＭＧＳ―ＤＥＸＶ）
ステアリン酸                                      ７．００
セタノール                                        ３．００
パルミチン酸セチル                                ３．００
（ＮＩＫＫＯＬ  Ｎ−ＳＰＶ）
パラフィン（１３５°Ｆ）                          ３．００
ホホバ種子油                                      ７．００
（ＮＩＫＫＯＬ  ホホバ油Ｓ）  
水性成分：
ＰＹＲ含有コラーゲン分解物                        １．００
ＢＧ                                              ７．００
防腐剤                                            適量
水                                                残部
【０１３１】
（処方例２０）
下記処方でエモリエントクリームを調製した。
成分名                                        配合量（質量％）
油性成分：
ステアリン酸ＰＥＧ−４０                          ２．００
（ＮＩＫＫＯＬ  ＭＹＳ−４０Ｖ）
ステアリン酸グリセリル、ステアリン酸グリセリル（ＳＥ）、ステアリン酸ＰＥＧ−１０
５．００
（ＮＩＫＫＯＬ  ＭＧＳ―ＤＥＸＶ）
ステアリン酸                                      ２．００
セタノール                                        ２．００
スクワラン                                      １２．００
（ＮＩＫＫＯＬ  シュガースクワラン）
マカデミア種子油                                  ４．００
（ＮＩＫＫＯＬ  マカデミアナッツ油）
ジメチコン（３００ｍＰａ・ｓ）                    ０．２０
水性成分：
ＰＹＲ含有コラーゲン分解物                        １．００
ＢＧ                                              ７．００
防腐剤                                            適量
水                                                残部
【０１３２】
（処方例２１）
下記処方でモイスチュアクリームを調製した。
成分名                                        配合量（質量％）
油性成分：
機能性脂質複合体                                  ３．００
（ＮＩＫＫＯＬ  ニコリピッド８１Ｓ）
セタノール                                        ２．００
トリ（カプリル酸／カプリン酸）グリセリル          ４．００
（ＮＩＫＫＯＬ  トリエスターＦ−８１０）
低融点ワックス                                    ４．００
（ＮＩＫＫＯＬ  ニコワックスＬＭ）
トリヘキシルデカン酸ピリドキシン                  １．００
（ＮＩＫＫＯＬ  ＶＢ６−ＩＰ）
エチルヘキシルグリセリン、カプリン酸グリセリル    ０．４０
（ＮＩＫＫＯＬ  ニコガード８８）
ジメチコン（高重合）                              １．００
ジフェニルシキシフェニルトリメチコン              ２．００
水性成分：
ＰＹＲ含有コラーゲン分解物                        １．００
ＢＧ                                              ５．００
グリセリン                                        ５．００
ヒドロキシプロピルメチルセルロース                ０．２０
カルボマー                                        ０．３０
（ＮＴＣ−ＣＡＲＢＯＭＥＲ  ３８０）
ベタイン                                          ２．００
アルギニン                                        ０．３０
水                                                残部
【０１３３】
（処方例２２）
下記処方でモイスチュアクリーム（レシチン乳化）を調製した。
成分名                                        配合量（質量％）
油性成分：
水添レシチン                                      ２．００
（ＮＩＫＫＯＬ  レシノールＳ−１０）
ミリスチルアルコール                              ２．００
ベヘニルアルコール                                ３．００
（ＮＩＫＫＯＬ  ベヘニルアルコール８０）
パルミチン酸セチル                                ２．００
（ＮＩＫＫＯＬ  Ｎ−ＳＰＶ）
トリエチルヘキサノイン                          １０．００
（ＮＩＫＫＯＬ  Ｔｒｉｆａｔ  Ｓ−３０８）
スクワラン                                        ８．００
（ＮＩＫＫＯＬ  シュガースクワラン）
ホホバ種子油                                      １．００
（ＮＩＫＫＯＬ  ホホバ油Ｓ）
ジメチコン（３５０ｍＰａ・ｓ）                    １．００
水性成分：
ＰＹＲ含有コラーゲン分解物                        １．００
ＢＧ                                              ５．００
グリセリン                                        ８．００
キサンタンガム                                    ０．１０
水                                                残部
【０１３４】
（処方例２３）
下記処方でアンチエイジングクリーム（液晶タイプ）を調製した。
成分名                                        配合量（質量％）
油性成分：
複合乳化剤                                        ５．００
（ＮＩＫＫＯＬ  ニコムルスＬＣ）
セテアリルアルコール                              ３．００
低融点ワックス                                    ０．２０
（ＮＩＫＫＯＬ  ニコワックスＬＭ）
スクワラン                                        ５．００
（ＮＩＫＫＯＬ  シュガースクワラン）
トリエチルヘキサノイン                            ５．００
（ＮＩＫＫＯＬ  Ｔｒｉｆａｔ  Ｓ−３０８）
テトラエチルヘキサン酸ペンタエリスリチル          ５．００
シクロペンタシロキサン                            ３．００
ジメチコン（３５０ｍＰａ・ｓ）                    ０．２０
水性成分：
ＰＹＲ含有コラーゲン分解物                        １．００
グリセリン                                      １０．００
ペンチレングリコール                              ２．００
ＢＧ                                              ８．００
カルボマー                                        ０．２０
（ＮＴＣ−ＣＡＲＢＯＭＥＲ  ３８０）
キサンタンガム                                    ０．１０
防腐剤                                            適量
水酸化Ｋ                                          ０．０５
ヒアルロン酸Ｎａ（１％水溶液）                    １．００
多糖体水溶液                                      ５．００
（ＦＵＣＯＧＥＬ１．５Ｐ）  
水                                                残部
【０１３５】
（処方例２４）
下記処方でライトクリーム（レシチン、高分子乳化）を調製した。
成分名                                        配合量（質量％）
油性成分：
バチルアルコール                                  ０．２０
（ＮＩＫＫＯＬ  バチルアルコールＥＸ）
水添レシチン                                      ０．３０
（ＮＩＫＫＯＬ  レシノールＳ−１０）
ステアリン酸グリセリル                            １．５０
（ＮＩＫＫＯＬ  ＭＧＳ−ＢＶ２）
エチルヘキサン酸セチル                            １．００
（ＮＩＫＫＯＬ  ＣＩＯ）
ジフェニルジメチコン                              ３．００
ジメチコン（６ｍＰａ・ｓ）                        ４．００
ジメチコン（３５０ｍＰａ・ｓ）                    １．００
水性成分：
ＰＹＲ含有コラーゲン分解物                        １．００
複合乳化剤                                        ５．００
（ＮＩＫＫＯＬ  ニコムルスＬＨ）
ペンチレングリコール                              ２．００
ＢＧ                                              ４．００
グリセリン                                        ５．００
グリチルリチン酸２Ｋ                              ０．１０
防腐剤                                            適量
水                                                残部
【０１３６】
（処方例２５）
下記処方でアンチアクネクリームを調製した。
成分名                                        配合量（質量％）
油性成分：
テトラヘキシルデカン酸アスコルビル              １０．００
（ＮＩＫＫＯＬ  ＶＣ−ＩＰ）
水添レシチン                                      ０．１０
（ＮＩＫＫＯＬ  レシノールＳ−１０）
バチルアルコール                                    １．００
（ＮＩＫＫＯＬ  バチルアルコールＥＸ）
ベヘニルアルコール                                ２．００
（ＮＩＫＫＯＬ  ベヘニルアルコール６５）
ステアリン酸グリセリル、ステアリン酸ＰＥＧ−６０グリセリル  ２．００
（ＮＩＫＫＯＬ  ＭＧＳ−１５０Ｖ）
パルミチン酸セチル                                ３．００
（ＮＩＫＫＯＬ  Ｎ−ＳＰＶ）
ジメチコン（１００ｍＰａ・ｓ）                    ０．２０
水添パーム油、パーム核油、パーム油                ４．００
（ＮＩＫＫＯＬ  Ｔｒｉｆａｔ  ＰＳ−４５Ｈ）
オレフィンオリゴマー                              ４．００
（ＮＩＫＫＯＬ  シンセラン４ＳＰ）
トコフェロール                                    ０．１０
水性成分：
ＰＹＲ含有コラーゲン分解物                        １．００
ＢＧ                                              ５．００
グリセリン                                        ３．００
キサンタンガム                                    ０．０４
ヒドロキシエチルセルロース                        ０．０４
クエン酸                                          ０．０２
クエン酸Ｎａ                                      ０．０３
防腐剤                                            適量
水                                                残部
【０１３７】
（処方例２６）
下記処方で目元用クリームを調製した。
成分名                                        配合量（質量％）
油性成分：
トリ（カプリル酸／カプリン酸）グリセリル、レチノイン酸トコフェリル  ２．００
（ＮＩＫＫＯＬ  トコレチノエート−１０）
水添レシチン                                      ０．５０
（ＮＩＫＫＯＬ  レシノールＳ−１０）
ミリスチン酸ポリグリセリル−１０                  ３．００
（ＮＩＫＫＯＬ  Ｄｅｃａｇｌｙｎ  １−Ｍ）
オレイルグリセリル                                ２．００
（ＮＩＫＫＯＬ  セラキルアルコール）
パルミチン酸セチル                                ４．００
（ＮＩＫＫＯＬ  Ｎ−ＳＰＶ）
スクワラン                                      １０．００
（ＮＩＫＫＯＬ  シュガースクワラン）
トリエチルヘキサノイン                            ８．００
（ＮＩＫＫＯＬ  Ｔｒｉｆａｔ  Ｓ−３０８）
セタノール                                        ６．００
水性成分：
ＰＹＲ含有コラーゲン分解物                        １．００
グリセリン                                        ３．００
キサンタンガム                                    ０．２０
防腐剤                                            適量
水                                                残部
【０１３８】
（処方例２７）
下記処方でマッサージクリームを調製した。
成分名                                        配合量（質量％）
油性成分：
セテス−２０                                      ２．００
（ＮＩＫＫＯＬ  ＢＣ−２０）
ステアリン酸グリセリル                            ４．００
（ＮＩＫＫＯＬ  ＭＧＳ―ＢＶ２）
セタノール                                        ２．００
パルミチン酸セチル                                ２．００
（ＮＩＫＫＯＬ  Ｎ−ＳＰＶ）
ワセリン                                          ６．００
スクワラン                                      ３０．００
（ＮＩＫＫＯＬ  シュガースクワラン）
トリエチルヘキサノイン                            ５．００
（ＮＩＫＫＯＬ  Ｔｒｉｆａｔ  Ｓ−３０８）
メドウフォーム油                                  ３．００
（ＮＩＫＫＯＬ  メドウフォーム油）
ジメチコン（３００ｍＰａ・ｓ）                    ０．２０
水性成分：
ＰＹＲ含有コラーゲン分解物                        １．００
カルボマー                                        ０．２０
（ＮＴＣ−ＣＡＲＢＯＭＥＲ３８０）
グリセリン                                      １５．００
防腐剤                                            適量
ＴＥＡ                                            ０．１０
水                                                残部
【０１３９】
（処方例２８）
下記処方でマッサージクリーム（ミツロウ・ホウ砂による乳化）を調製した。
成分名                                        配合量（質量％）
油性成分：
ＰＥＧ−２０  ソルビタンココエート                ３．００
（ＮＩＫＫＯＬ  ＴＬ−１０）
ステアリン酸グリセリル（ＳＥ）                    ２．７０
（ＮＩＫＫＯＬ  ＭＧＳ−ＡＳＥＶ）
ミネラルオイル（＃７０）                        ２５．００
パルミチン酸エチルヘキシル                      ２２．００
（ＮＩＫＫＯＬ  ＩＯＰ）
ミツロウ                                          ３．００
ステアリン酸                                      １．３０
セタノール                                        １．００
ジメチコン（３５０ｍＰａ・ｓ）                    ０．１０
水性成分：
ＰＹＲ含有コラーゲン分解物                        １．００
カルボマー                                        ０．２０
（ＮＴＣ−ＣＡＲＢＯＭＥＲ３８１）
ＢＧ                                              ５．００
防腐剤                                            適量
ＴＥＡ                                            ０．５０
ホウ酸Ｎａ                                        ０．５０
水                                                残部
【０１４０】
（処方例２９）
下記処方でハンドクリーム（Ｗ／Ｏ型）を調製した。
成分名                                        配合量（質量％）
油性成分：
イソステアリン酸ポリグリセリル−２                ２．５０
（ＮＩＫＫＯＬ  ＤＧＭＩＳ）
ポリリシノレイン酸ポリグリセリル                  １．５０
（ＮＩＫＫＯＬ  Ｈｅｘａｇｌｙｎ  ＰＲ−１５）
スクワラン                                        ４．００
（ＮＩＫＫＯＬ  シュガースクワラン）
ジフェニルシロキシフェノキシトリメチコン          ５．００
グリセリン                                      １０．００
酢酸トコフェロール                                ０．１０
水性成分：
ＰＹＲ含有コラーゲン分解物                        １．００
アルギン酸Ｎａ                                    ０．１０
ＢＧ                                              ５．００
硫酸Ｍｇ                                          ０．１０
防腐剤                                            適量
水                                                残部
【０１４１】
（処方例３０）
下記処方でエモリエントクリーム（アミノ酸ゲル乳化、Ｗ／Ｏ型）を調製した。
成分名                                        配合量（質量％）
油性成分：
ポリリシノレイン酸ポリグリセリル−６              １．５０
（ＮＩＫＫＯＬ  Ｈｅｘａｇｌｙｎ  ＰＲ−１５）
オレイン酸ポリグリセリル−２                      ０．５０
（ＮＩＫＫＯＬ  ＤＧＭＯ−ＣＶ）
ミネラルオイル（＃７０）                          ８．００
トリエチルヘキサノイン                            ５．００
（ＮＩＫＫＯＬ  Ｔｒｉｆａｔ  Ｓ−３０８）
水性成分：
ＰＹＲ含有コラーゲン分解物                        １．００
グルタミン酸Ｎａ                                  １．００
グリセリン                                        ５．００
塩化Ｎａ                                          ２．００
防腐剤                                            適量
水                                                残部
【０１４２】
（処方例３１）
下記処方でエモリエントクリーム（有機変性粘土鉱物ゲル乳化、Ｗ／Ｓｉ型）を調製した。
成分名                                        配合量（質量％）
油性成分：
Ｗ／Ｏ複合乳化剤                                  ４．００
（ＮＩＫＫＯＬ  ニコムルス  ＷＯ）
シクロペンタシロキサン                            ７．００
シリコーン配合品                                  ５．００
（ＮＩＫＫＯＬ  ＳＩＬＢＬＥＮＤ−９１）
水性成分：
ＰＹＲ含有コラーゲン分解物                        １．００
ＢＧ                                              ５．００
グリセリン                                      ２５．００
防腐剤                                            適量
ヒアルロン酸Ｎａ（１％水溶液）                    １．００
多糖体水溶液（ＦＵＣＯＧＥＬ１．５Ｐ）            １．００
アセチルヒドロキシプロリン（ＡＨＹＰ）            ０．１０
塩化Ｎａ                                          ０．５０
ＥＤＴＡ−２Ｎａ                                  ０．１０
水                                                残部
【０１４３】
（処方例３２）
下記処方でハンドクリームを調製した。
成分名                                        配合量（質量％）
油性成分：
ミリスチン酸ポリグリセリル−１０                  １．２０
（ＮＩＫＫＯＬ  Ｄｅｃａｇｌｙｎ  １−Ｍ）
水添レシチン                                      ０．５０
（ＮＩＫＫＯＬ  レシノールＳ−１０）
ステアリン酸グリセリル、ステアリン酸グリセリル（ＳＥ）、ステアリン酸ＰＥＧ−１０
１．００
（ＮＩＫＫＯＬ  ＭＧＳ―ＤＥＸＶ）
ステアリン酸                                      ４．００
セタノール                                        ４．００
パルミチン酸セチル                                ２．００
（ＮＩＫＫＯＬ  Ｎ−ＳＰＶ）
スクワラン                                        ４．００
（ＮＩＫＫＯＬ  シュガースクワラン）
イソステアリン酸ヘキシルデシル                    ２．００
（ＮＩＫＫＯＬ  ＩＣＩＳ）
ミリスチン酸オクチルドデシル                      ４．００
（ＮＩＫＫＯＬ  ＯＤＭ−１００）
ジメチコン（３００ｍＰａ・ｓ）                    ０．２０
水性成分：
ＰＹＲ含有コラーゲン分解物                        １．００
ＤＰＧ                                            ５．００
防腐剤                                            適量
ＦＯＭＢＬＩＮ（フッ素油）配合エマルションベース  ３．００
（ＮＩＫＫＯＬ  ＮＥＴ−ＨＣ−Ｒ）
シリコーン配合エマルションベース                  ３．００
（ＮＩＫＫＯＬ  ＮＥＴ−ＳＧ−６０  Ａ）
水                                                残部
【０１４４】
（処方例３３）
下記処方でハンドクリーム（ナチュラルハンドクリーム）を調製した。
成分名                                        配合量（質量％）
油性成分：
ステアリン酸ポリグリセリル−１０                  ２．２０
（ＮＩＫＫＯＬ  Ｄｅｃａｇｌｙｎ  １−ＳＶ）
水添ナタネ油アルコール                            ３．００
マカデミア種子油                                  ２．００
（ＮＩＫＫＯＬ  マカデミアナッツ油）
トリ（カプリル酸／カプリン酸）グリセリル          ５．００
（ＮＩＫＫＯＬ  トリエスターＦ−８１０）
シア脂（Ｓｔａｒ  Ｓｈｅａ  Ｂｕｔｔｅｒ  Ｒｅｆｉｎｅｄ）
１５．００
水性成分：
ＰＹＲ含有コラーゲン分解物                        １．００
キサンタンガム                                    ０．１０
グリセリン                                      １０．００
ＢＧ                                            １０．００
防腐剤                                            適量
エタノール                                        ３．００
水                                                残部
【０１４５】
（処方例３４）
下記処方で保湿乳液（レシチン乳化）を調製した。
成分名                                        配合量（質量％）
油性成分：
水添レシチン                                      ０．８０
（ＮＩＫＫＯＬ  レシノールＳ−１０）
フィトステローズ                                  ０．２０
ステアリルアルコール                              ０．４０
ベヘニルアルコール                                ０．４０
（ＮＩＫＫＯＬ  ベヘニルアルコール８０）  
パルミチン酸セチル                                ０．８０
（ＮＩＫＫＯＬ  Ｎ−ＳＰＶ）
トリエチルヘキサノイン                            ４．００
（ＮＩＫＫＯＬ  Ｔｒｉｆａｔ  Ｓ−３０８）
スクワラン                                        ３．２０
（ＮＩＫＫＯＬ  シュガースクワラン）
ホホバ種子油                                      ０．４０
（ＮＩＫＫＯＬ  ホホバ油Ｓ）
ジメチコン（３５０ｍＰａ・ｓ）                    ０．４０
水性成分：
ＰＹＲ含有コラーゲン分解物                        １．００
キサンタンガム                                    ０．１０
グリセリン                                        ３．２０
ＢＧ                                              ５．００
カルボマー                                        ０．０６
（ＮＴＣ−ＣＡＲＢＯＭＥＲ３８１）
防腐剤                                            適量
アルギニン                                        ０．０７
水                                                残部
【０１４６】
（処方例３５）
下記処方で乳液（液晶タイプ）を調製した。
成分名                                        配合量（質量％）
油性成分：
複合乳化剤                                        ４．００
（ＮＩＫＫＯＬ  ニコムルス  ＬＣ）
セテアリルアルコール                              １．００
オレフィンオリゴマー                              ４．００
（ＮＩＫＫＯＬ  シンセラン４ＳＰ）
メドウフォーム油                                  １．００
（ＮＩＫＫＯＬ  メドウフォーム油）
ジメチコン（３５０ｍＰａ・ｓ）                    ０．５０
エチルヘキシルグリセリン、カプリン酸グリセリル    ０．５０
（ＮＩＫＫＯＬ  ニコガード８８）
水性成分：
ＰＹＲ含有コラーゲン分解物                        １．００
ＢＧ                                              ４．００
グリセリン                                        １．００
ＰＥＧ−６、ＰＥＧ−３２                          １．００
レシチン、リゾフォスファチジン酸、リゾレシチン    ０．１０
カルボマー                                        ０．１５
（ＮＴＣ−ＣＡＲＢＯＭＥＲ３８１）
アルギニン                                        ０．１１
ＥＤＴＡ−２Ｎａ                                  ０．１０
エタノール                                        ５．００
スイカ果実エキス、リンゴ果実エキス、ヒラマメ果実エキス（Ａｑｕａ−Ｓｐｅｅｄ）
３．００
水                                                残部
【０１４７】
（処方例３６）
下記処方で保湿乳液（天然物由来原料のみ）を調製した。
成分名                                        配合量（質量％）
油性成分：
ステアリン酸ポリグリセリル−１０                  ２．００
（ＮＩＫＫＯＬ  Ｄｅｃａｇｌｙｎ  １−ＳＶ）
セスキステアリン酸ソルビタン                      １．００
（ＮＩＫＫＯＬ  ＳＳ−１５Ｖ）  
水添ナタネ油アルコール                            １．８０
シア脂（Ｓｔａｒ  Ｓｈｅａ  Ｂｕｔｔｅｒ  Ｒｅｆｉｎｅｄ）
２．００
イソステアリン酸メチルヘプチル                    ３．００
（ＮＩＫＫＯＬ  ＧＳ−ＭＨＩＳ）
ラウリン酸メチルヘプチル                          ３．００
（ＮＩＫＫＯＬ  ＧＳ−ＭＨＬ）
スクワラン                                        ５．００
（ＮＩＫＫＯＬ  シュガースクワラン）
混合植物油                                        １．００
（ＮＩＫＫＯＬ  ＮＡＴＵＲＡＬ  ＯＩＬＳ−１）
ラベンダー油                                      ０．２０
水性成分：
ＰＹＲ含有コラーゲン分解物                        １．００
キサンタンガム                                    ０．１０
ＢＧ                                              １．００
グリセリン                                        ５．００
防腐剤                                            適量
多糖体水溶液（ＦＵＣＯＧＥＬ１．５Ｐ）            １．００
水                                                残部
【０１４８】
（処方例３７）
下記処方で美白乳液を調製した。
成分名                                        配合量（質量％）
油性成分：
ペンタステアリン酸ポリグリセリル−１０            １．００
（ＮＩＫＫＯＬ  Ｄｅｃａｇｌｙｎ  ５−ＳＶ）
ステアリン酸ＰＥＧ−４０                          １．００
（ＮＩＫＫＯＬ  ＭＹＳ−４０Ｖ）
ベヘニルアルコール                                １．７０
（ＮＩＫＫＯＬ  ベヘニルアルコール６５）
ステアリン酸グリセリル                            １．００
（ＮＩＫＫＯＬ  ＭＧＳ−ＢＶ２）
トリエチルヘキサノイン                            ５．５０
（ＮＩＫＫＯＬ  Ｔｒｉｆａｔ  Ｓ−３０８）
スクワラン                                        ３．５０
（ＮＩＫＫＯＬ  シュガースクワラン）
ホホバ種子油                                      １．００
（ＮＩＫＫＯＬ  ホホバ油Ｓ）
シクロペンタシロキサン                            ５．００
ジフェニルジメチコン                              ３．５０
水性成分：
ＰＹＲ含有コラーゲン分解物                        １．００
キサンタンガム                                    ０．３０
ステアロイルメチルタウリンＮａ                    ０．６０
（ＮＩＫＫＯＬ  ＳＭＴ）
ＤＰＧ                                            ２．００
ＢＧ                                              ３．００
防腐剤                                            適量
リン酸アスコルビンＭｇ                                ３．００
（ＮＩＫＫＯＬ  ＶＣ−ＰＭＧ）
多糖体水溶液（ＦＵＣＯＧＥＬ１．５Ｐ）            ０．５０
ヒアルロン酸Ｎａ（１％水溶液）                    ０．５０
グルタミン酸Ｎａ                                  ０．５０
ＥＤＴＡ−４Ｎａ                                  ０．１０
ピロ亜硫酸Ｎａ                                    ０．２０
水                                                残部
【０１４９】
（処方例３８）
下記処方で乳液（αゲル乳液）を調製した。
成分名                                        配合量（質量％）
油性成分：
リン酸セチル                                      ０．７０
（ＮＩＫＫＯＬ  ピュアフォスα）
バチルアルコール                                  ０．５０
（ＮＩＫＫＯＬ  バチルアルコールＥＸ）
セタノール                                        １．５０
スクワラン                                        ２．００
（ＮＩＫＫＯＬ  シュガースクワラン）
ジメチコン（６ｍＰａ・ｓ）                        ３．００
水性成分：
ＰＹＲ含有コラーゲン分解物                        １．００
アルギニン                                        ０．５０
グリセリン                                      １０．００
ＢＧ                                              ５．００
ベタイン                                          ０．５０
ヒアルロン酸Ｎａ（１％水溶液）                    １．００
カルボマー                                        ０．１５
（ＮＴＣ−ＣＡＲＢＯＭＥＲ３８１）
防腐剤                                            適量
スイカ果実エキス、リンゴ果実エキス、ヒラマメ果実エキス（Ａｑｕａ−Ｓｐｅｅｄ）
１．００
水                                                残部
【０１５０】
（処方例３９）
下記処方でボディミルクを調製した。
成分名                                        配合量（質量％）
油性成分：
ミリスチン酸ポリグリセリル−１０                  ２．１０
（ＮＩＫＫＯＬ  Ｄｅｃａｇｌｙｎ１−Ｍ）
水添レシチン                                      ０．６０
（ＮＩＫＫＯＬ  レシノールＳ−１０）
ステアリン酸                                      ０．５０
ベヘニルアルコール                                １．６０
（ＮＩＫＫＯＬ  ベヘニルアルコール６５）
パルミチン酸セチル                                ０．６０
（ＮＩＫＫＯＬ  Ｎ−ＳＰＶ）
水添ポリデセン                                    ６．００
エチルヘキサン酸セチル                            ６．００
（ＮＩＫＫＯＬ  ＣＩＯ）
トリエチルヘキサノイン                            ６．００
（ＮＩＫＫＯＬ  Ｔｒｉｆａｔ  Ｓ−３０８）
水性成分：
ＰＹＲ含有コラーゲン分解物                        １．００
カルボマー                                        ０．１０
（ＮＴＣ−ＣＡＲＢＯＭＥＲ３８０）
グリセリン                                        ５．００
防腐剤                                            適量
水                                                残部
【０１５１】
（処方例４０）
下記処方で柔軟化粧水を調製した。
成分名                                        配合量（質量％）
ＰＹＲ含有コラーゲン分解物                        １．００
グリセリン                                        ５．００
ＤＰＧ                                            ４．００
ＰＥＧ−２０                                      ０．５０
キサンタンガム                                    ０．０５
クエン酸                                          ０．０２
クエン酸Ｎａ                                      ０．１０
ＥＤＴＡ−２Ｎａ                                  ０．０５
ＢＧ                                              ４．００
ＰＥＧ−６０水添ヒマシ油                          ０．５０
（ＮＩＫＫＯＬ  ＨＣＯ−６０）  
防腐剤                                            適量
多糖体水溶液（ＦＵＣＯＧＥＬ  １．５Ｐ）          ２．００
スイカ果実エキス、リンゴ果実エキス、ヒラマメ果実エキス（Ａｑｕａ−Ｓｐｅｅｄ）
３．００
水                                                残部
【０１５２】
（処方例４１）
下記処方でモイスチュアローションを調製した。
成分名                                        配合量（質量％）
ＰＹＲ含有コラーゲン分解物                        １．００
グリセリン                                        ３．００
ソルビトール（７０％水溶液）                      ２．００
ＤＰＧ                                            ４．００
キサンタンガム                                    ０．０５
ヒドロキシエチルセルロース                        ０．０５
アセチルヒドロキシプロリン                        ５．００
アルギニン                                        ５．００
ヒアルロン酸Ｎａ（１％水溶液）                    １．００
クエン酸                                          ０．０５
クエン酸Ｎａ                                      ０．０１
ＰＣＡ−Ｎａ（５０％水溶液）                      １．００
ＢＧ                                              ５．００
防腐剤                                            適量
水                                                残部
【０１５３】
（処方例４２）
下記処方で収れん化粧水を調製した。
成分名                                        配合量（質量％）
ＰＹＲ含有コラーゲン分解物                        １．００
ＰＥＧ−６０水添ヒマシ油                          １．００
（ＮＩＫＫＯＬ  ＨＣＯ−６０）  
エタノール                                      １５．００
防腐剤                                            適量
ＰＥＧ−８                                        １．００
ＢＧ                                              ５．００
パラフェノールスルホン酸亜鉛                      ０．２０
クエン酸                                          ０．１０
ｐＨ緩衝剤                                        適量
香料                                              適量
色素                                              適量
水                                                残部
【０１５４】
（処方例４３）
下記処方でクレンジングローションを調製した。
成分名                                        配合量（質量％）
ＰＹＲ含有コラーゲン分解物                        １．００
ヤシ油脂肪酸ＰＥＧ−７グリセリル                  ４．００
（ＮＩＫＫＯＬ  ＴＭＧＣＯ−７）
ラウリン酸ＰＥＧ−１０                            ４．００
（ＮＩＫＫＯＬ  ＭＹＬ−１０）
ＰＥＧ−５０水添ヒマシ油                          ２．００
（ＮＩＫＫＯＬ  ＨＣＯ−５０）
防腐剤                                            適量
水酸化レシチン、グリセリン                        ０．５０
（ＮＩＫＫＯＬ  レシノールＳＨ−５０）
ココイルアルギニンエチルＰＣＡ                    ０．１０
クエン酸                                          ０．００５
クエン酸Ｎａ                                      ０．０３
ＥＤＴＡ−２Ｎａ                                  ０．０３
水                                                残部
【０１５５】
（処方例４４）
下記処方でカーマインローションを調製した。
成分名                                        配合量（質量％）
ＰＹＲ含有コラーゲン分解物                        １．００
グリチルリチン酸２Ｋ                              ０．１０
ＰＣＡ−Ｎａ                                      ２．５０
ＥＤＴＡ−２Ｎａ                                  ０．１０
ＢＧ                                              ６．００
防腐剤                                            適量
セイヨウオトギリソウエキス、ゴボウ根エキス、サボンソウ葉エキス、セージ葉エキス、トウキンセンカ花エキス、ホップ球果エキス、レモン果実エキス，ＢＧ、水
４．００
（フィテレンＥＧＸ―２５２（ＢＧ））
酸化鉄                                            ０．１５
酸化亜鉛                                          ０．５０
カオリン                                          １．００
水                                                残部
【０１５６】
（処方例４５）
下記処方で化粧水（ナノエマルションタイプ）を調製した。
成分名                                        配合量（質量％）
ＰＹＲ含有コラーゲン分解物                        １．００
ヒドロキシプロリン（Ｌ−ヒドロキシプロリン）      ０．１０
ＢＧ                                              １．００
ＤＰＧ                                            １．００
ＰＥＧ−３２                                      ０．３０
ＰＥＧ−１５０                                    ０．２０
ペンチレングリコール                              ２．５０
クエン酸                                          ０．０３
クエン酸Ｎａ                                      ０．０４
ＥＤＴＡ−２Ｎａ                                  ０．１０
防腐剤                                            適量
脂溶性ビタミンＣ誘導体含有ナノエマルションベース  ５．００
（ＮＩＫＫＯＬ  ソルブル  ＶＣＩＰ）
水                                                残部
【０１５７】
（処方例４６）
下記処方でモイスチュアジェル（レシチン乳化）を調製した。
成分名                                        配合量（質量％）
ＰＹＲ含有コラーゲン分解物                        １．００
水添レシチン                                      １．００
（ＮＩＫＫＯＬ  レシノールＳ−１０ＰＬＵＳ）
グリセリン                                      １５．００
ＢＧ                                              ６．００
ＰＥＧ−３２                                      ２．００
キサンタンガム                                    ０．０８
（アクリレーツ／アクリル酸アルキル（Ｃ１０−３０））クロスポリマー（高粘度用）
０．３０
ヒドロキシエチルセルロース                        ０．０８
ジメチロールプロピオン酸ヘキシル                  ０．５０
（ＮＩＫＫＯＬ  ニコガード６）
ジフェニルジメチコン                              １．００
シクロペンタシロキサン                            ４．００
アルギニン                                        ０．３０
ヒアルロン酸Ｎａ（１％水溶液）                    １．００
多糖体水溶液（ＦＵＣＯＧＥＬ１．５Ｐ）            ３．００
シソ葉エキス、エタノール                          ０．３０
（シソエキスＮＡ  ＦＲＥＥ）
水                                                残部
【０１５８】
（処方例４７）
下記処方でオールインワンジェルを調製した。
成分名                                        配合量（質量％）
ＰＹＲ含有コラーゲン分解物                        １．００
ポリリシノレイン酸ポリグリセリル−６              ０．５０
（ＮＩＫＫＯＬ  Ｈｅｘａｇｌｙｎ  ＰＲ−１５）
ジメチコン（１０ｍＰａ・ｓ）                      １．４０
ジメチコン（３５０ｍＰａ・ｓ）                    ０．６０
シクロペンタシロキサン                            ０．２０
カルボマー                                        ０．２０
（ＮＴＣ−ＣＡＲＢＯＭＥＲ３８０）
（アクリレーツ／アクリル酸アルキル（Ｃ１０−３０））クロスポリマー（高粘度用）
０．１０
ヒドロキシプロピルメチルセルロース                ０．２０
グリセリン                                      １５．００
ＢＧ                                              ６．００
ソルビトール（７０％水溶液）                      ３．００
エタノール                                        ３．００
ジメチロールプロピオン酸ヘキシル                  ０．７０
（ＮＩＫＫＯＬ  ニコガード６）
水酸化Ｋ                                          ０．１０
ビタミン類などを含有するナノエマルションベース    １．００
（ＮＩＫＫＯＬ  ニコソーム  ビタミンＡＢＣＥ）
プセウドジマツクバエンシス／（オリーブ油／グリセリン／ダイズタンパク）発酵物などを含有するナノエマルションベース                  ５．００
（ＮＩＫＫＯＬ  ニコソーム  ＳＭＬ）
【０１５９】
（処方例４８）
下記処方でアンチエイジング美容液を調製した。
成分名                                        配合量（質量％）
ＰＹＲ含有コラーゲン分解物                        １．００
ＢＧ                                              ２．００
ＤＰＧ                                            ３．００
ペンチレングリコール                              ４．００
グリセリン                                        ７．００
キサンタンガム                                    ０．０２
（アクリレーツ／アクリル酸アルキル（Ｃ１０−３０））クロスポリマー（高粘度用）
０．１０
（アクリレーツ／アクリル酸アルキル（Ｃ１０−３０））クロスポリマー（低粘度用）
０．２０
防腐剤                                            適量
アルギニン                                        ０．１０
テトラヘキシルデカン酸アスコルビン                １．００
（ＮＩＫＫＯＬ  ＶＣ−ＩＰ）  
ジフェニルジメチコン                              ３．００
シクロペンタシロキサン                            ７．００
トコフェロール                                    ０．１０
ＥＤＴＡ−２Ｎａ                                  ０．１０
水                                                残部
【０１６０】
（処方例４９）
下記処方でアンチエイジング美容液（リポソーム配合）を調製した。
成分名                                        配合量（質量％）
ＰＹＲ含有コラーゲン分解物                        １．００
カルボマー                                        ０．５４
（ＮＴＣ−ＣＡＲＢＯＭＥＲ３８０）
ＢＧ                                              ４．００
ジグリセリン                                      ４．００
ＰＥＧ−２０                                      １．００
マルチトール（７５％水溶液）                      １．００
水酸化Ｋ                                          ０．１８
ヒドロキシプロリン（Ｌ−ヒドロキシプロリン）      ０．５０
シリコーン配合エマルションベース                  １．００
（ＮＩＫＫＯＬ  ＮＥＴ−８１３−１）
多価アルコール配合リポソーム                      １．００
（ＮＩＫＫＯＬ  アクアソームＢＨ）
多糖体水溶液（ＦＵＣＯＧＥＬ１．５Ｐ）            ３．００
ヒアルロン酸Ｎａ（１％水溶液）                        ３．００
エタノール                                        ３．００
防腐剤                                            適量
水                                                残部
【０１６１】
（処方例５０）
下記処方で美白美容液（透明タイプ）を調製した。
成分名                                        配合量（質量％）
ＰＹＲ含有コラーゲン分解物                        １．００
キサンタンガム                                    ０．４０
ヒドロキシエチルセルロース                        ０．４０
ＢＧ                                              ３．００
グリセリン                                        ３．００
ヒアルロン酸（１％水溶液）                        ５．００
防腐剤                                            適量
リン酸アスコルビン酸Ｍｇ                          ３．００
（ＮＩＫＫＯＬ  ＶＣ−ＰＭＧ）
クエン酸Ｎａ                                      ０．５０
ＥＤＴＡ−４Ｎａ                                  ０．１０
水                                                残部
【０１６２】
（処方例５１）
下記処方で保湿美容液（半透明タイプ）を調製した。
成分名                                        配合量（質量％）
ＰＹＲ含有コラーゲン分解物                        １．００
水添レシチン                                      ０．６０
（ＮＩＫＫＯＬ  レシノールＳ−１０）
ＢＧ                                              ６．００
ＰＥＧ−３２                                      １．００
グリセリン                                      １５．００
ヒドロキシエチルセルロース                        ０．０８
（アクリレーツ／アクリル酸アルキル（Ｃ１０−３０））クロスポリマー（高粘度用）
０．２０
防腐剤                                            適量
アルギニン                                        ０．２０
ＥＤＴＡ−２Ｎａ                                  ０．１０
トリヘキシルデカン酸ピリドキシン                  １．００
（ＮＩＫＫＯＬ  ＶＢ６−ＩＰ）
シクロペンタシロキサン                            ５．００
バチルアルコール                                  ０．１０
（ＮＩＫＫＯＬ  バチルアルコールＥＸ）
トコフェロール                                    ０．１０
水                                                残部
【０１６３】
（処方例５２）
下記処方でピールオフパック（ジェルタイプ）を調製した。
成分名                                        配合量（質量％）
ＰＹＲ含有コラーゲン分解物                        １．００
ポリビニルアルコール                            １５．００
カルボキシメチルセルロース                        ５．００
ＢＧ                                              ５．００
緩衝剤                                            適量
エタノール                                      １２．００
オレス−２０                                      ０．５０
（ＮＩＫＫＯＬ  ＢＯ−２０Ｖ）                  
香料                                              適量
防腐剤                                            適量
水                                                残部
【０１６４】
（処方例５３）
下記処方でクレイパックを調製した。
成分名                                        配合量（質量％）
ＰＹＲ含有コラーゲン分解物                      ２５．００
ベントナイト                                    １２．００
カオリン                                        １３．００
酸化チタン                                        ２．００
セテス−２０                                      １．００
（ＮＩＫＫＯＬ  ＢＣ−２０Ｖ）                  
ＢＧ                                            １０．００
グリセリン                                      １０．００
防腐剤                                            適量
ポリビニルアルコール                              １．００
水                                                残部
【０１６５】
（処方例５４）
下記処方でクリームパックを調製した。
成分名                                        配合量（質量％）
ＰＹＲ含有コラーゲン分解物                      ２５．００
スクワラン                                      １０．００
（ＮＩＫＫＯＬ  シュガースクワラン）
トリ（カプリル酸／カプリン酸）グリセリル          ５．００
（ＮＩＫＫＯＬ  トリエスターＦ−８１０）
テトラヘキシルデカン酸アスコルビル                ２．００
（ＮＩＫＫＯＬ  ＶＣ−ＩＰ）
ワセリン                                          ３．００
ステアリルアルコール                              ３．００
ステアリン酸ＰＥＧ−５５                          ０．８０
（ＮＩＫＫＯＬ  ＭＹＳ−５５Ｖ）              
ステアリン酸グリセリル                            ２．２０
（ＮＩＫＫＯＬ  ＭＧＳ―ＢＶ２）
パルミチン酸セチル                                ２．００
（ＮＩＫＫＯＬ  Ｎ−ＳＰＶ）
ジメチコン（３５０ｍＰａ・ｓ）                    ０．５０
トコフェロール                                    ０．１０
ヒドロキシエチルセルロース                        ０．１０
ＢＧ                                              ５．００
グリセリン                                        ７．００
防腐剤                                            適量
酸化チタン、水酸化Ａｌ                            ２．００
ステアロイルメチルタウリンＮａ                    ０．０５
（ＮＩＫＫＯＬ  ＳＭＴ）
クエン酸                                          ０．０１
ＥＤＴＡ−２Ｎａ                                  ０．０５
エチルゴチオネイン、水（ＴＨＩＯＴＡＩＮＥ）      １．００
水                                                残部
【０１６６】
（処方例５５）
下記処方で化粧下地を調製した。
成分名                                        配合量（質量％）
ＰＹＲ含有コラーゲン分解物                        １．００
複合乳化剤                                    ４．００
（ＮＩＫＫＯＬ  ニコムルス  ＬＣ）
セテアリルアルコール                              １．００
スクワラン                                        ５．００
（ＮＩＫＫＯＬ  シュガースクワラン）
フェニルトリメチコン                              ５．００
ポリプロピルシルセスキオキサン（アクリル酸アルキル／ジメチコ）コポリマー、シクロペンタシロキサン                                  １．００
カルボマー                                        ０．１５
（ＮＴＣ−ＣＡＲＢＯＭＥＲ３８１）
アクリル酸ヒドロキシエチル／アクリロイルジメチルタウリンＮａ）コポリマー
０．３０
ＥＤＴＡ−２Ｎａ                                  ０．１０
防腐剤                                            適量
アルギニン                                        ０．０５
ＢＧ                                              ４．００
グリセリン                                        １．００
顔料級酸化チタン                                  適量
赤酸化鉄                                          適量
（ＨＤＩ／トリメチロールヘキシルラクトン）クロスポリマー、シリカ、ポリメタクリル酸メチル、マイカ、酸化チタン                      ３．００
スイカ果実エキス、リンゴ果実エキス、ヒラマメ果実エキス（Ａｑｕａ−Ｓｐｅｅｄ）
３．００
エタノール                                        ５．００
水                                                残部
【０１６７】
（処方例５６）
下記処方で油性ファンデーションを調製した。
成分名                                        配合量（質量％）
ＰＹＲ含有コラーゲン分解物                        １．００
タルク                                            残部
カオリン                                        １５．００
顔料級酸化チタン                                １５．００
ベンガラ                                          適量
黄酸化鉄                                          適量
黒酸化鉄                                          適量
固形パラフィン                                    ３．００
マイクロクリスタリンワックス                      ６．００
ミツロウ                                          ２．００
ワセリン                                        １２．００
酢酸ラノリン                                      １．００
スクワラン                                        ６．００
（ＮＩＫＫＯＬ  シュガースクワラン）
パルミチン酸イソプロピル                        １８．００
（ＮＩＫＫＯＬ  ＩＰＰ）
防腐剤                                            適量
【０１６８】
（処方例５７）
下記処方でファンデーション（Ｏ／Ｗ型）を調製した。
成分名                                        配合量（質量％）
ＰＹＲ含有コラーゲン分解物                        １．００
複合乳化剤                                        ２．５０
（ＮＩＫＫＯＬ  ニコムルス４１）
ステアリン酸グリセリル                            １．００
（ＮＩＫＫＯＬ  ＭＧＳ−ＢＶ２）
バチルアルコール                                    ０．３０
（ＮＩＫＫＯＬ  バチルアルコール１００）
セテアリルアルコール                              １．００
ジエチルアミノヒドロキシベンゾイル安息香酸ヘキシル２．００
メトキシケイヒ酸エチルヘキシル                  １０．００
イソノナン酸イソノニル                            ２．００
シクロペンタシロキサン                            ７．００
ジメチコン（１０ｍＰａ・ｓ）                      ３．００
顔料級酸化チタン                                  ６．００
ベンガラ                                          適量
黄酸化鉄                                          適量
黒酸化鉄                                          適量
グリセリン                                        ５．００
ジプロピレングリコール                            ５．００
ケイ酸（Ａｌ／Ｍｇ）                              ０．５０
ステアロイルメチルタウリンＮａ                    ０．５０
（ＮＩＫＫＯＬ  ＳＭＴ）
ＥＤＴＡ−２Ｎａ                                  ０．０５
防腐剤                                            適量
キサンタンガム                                    ０．３０
水                                                残部
【０１６９】
（処方例５８）
下記処方でファンデーション（Ｗ／Ｏ型）を調製した。
成分名                                        配合量（質量％）
ＰＹＲ含有コラーゲン分解物                        １．００
複合乳化剤                                        ５．００
（ＮＩＫＫＯＬ  ニコムルスＷＯ）
シリコーン配合品                                  ２．５０
（ＮＩＫＫＯＬ  ＳＩＬＢＬＥＮＤ−９１）
シクロペンタシロキサン、（ジメチコン／ビニルジメチコン）クロスポリマー  ２．００
シクロペンタシロキサン                          ２０．００
ジメチコン（６ｍＰａ・ｓ）                        ２．５０
ジフェニルシロキシフェニルトリメチコン            ２．５０
（アクリル酸アルキル／ジメチコン）コポリマー、シクロペンタシロキサン  １．００
テトラエチルヘキサン酸ペンタエリスリチル          ２．００
リンゴ酸ジイソステアリル                          １．００
（ＮＩＫＫＯＬ  ＤＩＳＭ）
（ＨＤＩ／トリメチロールヘキシルラクトン）クロスポリマー、シリカ、  ３．００
シリコーン処理顔料級酸化チタン                    ７．００
シリコーン処理ベンガラ                            適量
シリコーン処理黄酸化鉄                            適量
シリコーン処理黒酸化鉄                            適量
グリセリン                                        ８．００
ＢＧ                                              ３．００
塩化Ｎａ                                          ０．５０
ＥＤＴＡ−２Ｎａ                                  ０．０５
エタノール                                        ３．００
防腐剤                                            適量
水                                                残部
【０１７０】
（処方例５９）
下記処方で両用ファンデーションを調製した。
成分名                                        配合量（質量％）
ＰＹＲ含有コラーゲン分解物                        １．００
シリコーン処理タルク                              残部
シリコーン処理マイカ                            ４０．００
シリコーン処理微粒子酸化チタン                    ５．００
シリコーン処理顔料級酸化チタン                  １５．００
シリコーン処理ベンガラ                            適量
シリコーン処理黄酸化鉄                            適量
シリコーン処理黒酸化鉄                            適量
ステアリン酸亜鉛                                  ０．１０
ナイロンパウダー                                  ０．２０
スクワラン                                        ４．００
（ＮＩＫＫＯＬ  シュガースクワラン）
固形パラフィン                                    ０．５０
ジメチコン（１０ｍＰａ・ｓ）                      ４．００
トリエチルヘキサノイン                            ５．００
（ＮＩＫＫＯＬ  Ｔｒｉｆａｔ  Ｓ−３０８）
メトキシケイヒ酸エチルヘキシル                    １．００
防腐剤                                            適量
【０１７１】
（処方例６０）
下記処方でパウダーファンデーションを調製した。
成分名                                        配合量（質量％）
ＰＹＲ含有コラーゲン分解物                        １．００
セリサイト                                        残部
タルク                                            ５．００
マイカ                                          １０．００
微粒子酸化チタン                                  ５．００
顔料級酸化チタン                                １０．００
ベンガラ                                          適量
黄酸化鉄                                          適量
黒酸化鉄                                          適量
スクワラン                                        １．５０
（ＮＩＫＫＯＬ  シュガースクワラン）
トリエチルヘキサノイン                            ５．００
（ＮＩＫＫＯＬ  Ｔｒｉｆａｔ  Ｓ−３０８）
エチルヘキシルグリセリン、カプリン酸グリセリル    ０．４０
（ＮＩＫＫＯＬ  ニコガード８８）
【０１７２】
（処方例６１）
下記処方で口紅を調製した。
成分名                                        配合量（質量％）
ＰＹＲ含有コラーゲン分解物                        １．００
着色剤                                            適量
リンゴ酸ジイソステアリル                          残部
ポリエチレン                                      ５．００
セレシン                                          ６．００
マイクロクリスタリンワックス                      ３．００
トリエチルヘキサノイン                          ２０．００
（ＮＩＫＫＯＬ  Ｔｒｉｆａｔ  Ｓ−３０８）
エチルヘキサン酸セチル                            ７．００
（ＮＩＫＫＯＬ  ＣＩＯ）
水添ポリイソブテン                                ２．００
酸化防止剤                                        適量
【０１７３】
（処方例６２）
下記処方で透明リップグロスを調製した。
成分名                                        配合量（質量％）
ＰＹＲ含有コラーゲン分解物                        １．００
パルミチン酸デキストリン                          ４．５０
ミネラルオイル                                  ２５．００
リンゴ酸ジイソステアリル                          残部
（ＮＩＫＫＯＬ  ＤＩＳＭ）
トリイソステアリン酸ポリグリセリル−２            ５．５０
（ＮＩＫＫＯＬ  ＤＧＴＩＳ）
酸化防止剤                                        適量
水添ポリイソブテン                              ４０．００
【０１７４】
（処方例６３）
下記処方でネイルエナメルを調製した。
成分名                                        配合量（質量％）
ＰＹＲ含有コラーゲン分解物                        １．００
ニトロセルロース                                １４．００
（無水フタル酸／無水トリメリット酸／グリコールズ）コポリマー  １６．００
クエン酸アセチルトリブチル                        ５．００
酢酸エチル                                      ２０．００
酢酸ブチル                                        残部
エタノール                                        適量
イソプロパノール                                  適量
顔料                                              適量
ステアラルコニウムヘクトライト                    適量
【０１７５】
（処方例６４）
下記処方でシャンプーを調製した。
成分名                                        配合量（質量％）
ＰＹＲ含有コラーゲン分解物                        １．００
コカドプロピルベタイン                          １０．００
（ＮＩＫＫＯＬ  ＡＭ−３１３０  Ｎ）
ラウレス硫酸Ｎａ、水                            ２０．００
ラウレス硫酸ＴＥＡ、水                          １０．００
コカミドＤＥＡ                                    ３．００
ジステアリン酸グリコール                          ２．００
（ＮＩＫＫＯＬ  エステパール  １０Ｖ）
ポリクオタニウム１０、塩化Ｎａ（１．５％水溶液）１０．００
ＢＧ                                              ３．００
クエン酸（１０％水溶液）                          １．５０
ＥＤＴＡ−２Ｎａ                                  ０．１０
防腐剤                                            適量
水                                                残部
【０１７６】
（処方例６５）
下記処方で低刺激性シャンプーを調製した。
成分名                                        配合量（質量％）
ＰＹＲ含有コラーゲン分解物                        １．００
ココイルメチルタウリンＮａ、水                  ２５．００
（ＮＩＫＫＯＬ  ＣＭＴ−３０）
ラウロイルメチルアラニンＮａ、水                １５．００
（ＮＩＫＫＯＬ  アラニネート  ＬＮ−３０）
ラウリルベタイン、水                            ２０．００
（ＮＩＫＫＯＬ  ＡＭ−３０１）
ラウラミドＤＥＡ                                  ５．００
ＰＥＧ−６０水添ヒマシ油                          １．００
（ＮＩＫＫＯＬ  ＨＣＯ−６０）
ジステアリン酸グリコール                          ２．００
（ＮＩＫＫＯＬ  エステパール１５Ｖ）
ポリクオタニウム１０、塩化Ｎａ（１．５％水溶液）１０．００
ＢＧ                                              ３．００
クエン酸（１０％水溶液）                          ０．４０
ＥＤＴＡ−２Ｎａ                                  ０．１０
防腐剤                                            適量
水                                                残部
【０１７７】
（処方例６６）
下記処方でノンシリコンシャンプーを調製した。
成分名                                        配合量（質量％）
ＰＹＲ含有コラーゲン分解物                        １．００
ＢＧ                                              ４．００
ソルビトール、水                                  ２．００
ポリクオタニウム１０                              ０．５０
クエン酸（１０％水溶液）                          ０．６５
ＥＤＴＡ−２Ｎａ                                  ０．１０
防腐剤                                            適量
ココイルメチルタウリンＮａ、水                  ２０．００
（ＮＩＫＫＯＬ  ＣＭＴ−３０）
ラウロイルメチルアラニンＮａ、水                １５．００
（ＮＩＫＫＯＬ  アラニネート  ＬＮ−３０）
コカミドプロピルベタイン、水                    １５．００
（ＮＩＫＫＯＬ  ＡＭ−３１３０Ｎ）
コカミドＤＥＡ                                    ２．００
ラウレス−２                                      １．００
（ＮＩＫＫＯＬ  ＢＬ−２）
デシルグルコシド、水                            １０．００
ヤシ油脂肪酸ＰＥＧ−７グリセリル                  １．００
（ＮＩＫＫＯＬ  ＴＭＧＣＯ−７）
ステアラミドプロピルジメチルアミン                ０．５０
（ＮＩＫＫＯＬ  アミドアミン  ＭＰＳ）
シソ葉エキス、エタノール、水                      ０．３０
（シソエキスＮＡ  ＦＲＥＥ）
植物エキス混合物                                  ０．１０
（フィテレンＥＧＸ―２３２（ＢＧ））
水                                                残部
【０１７８】
（処方例６７）
下記処方でドライシャンプーを調製した。
成分名                                        配合量（質量％）
ＰＹＲ含有コラーゲン分解物                        １．００
機能性配合原料                                    ２．００
（ＮＩＫＫＯＬ  ＡＰＰ−ＣＬＥＶ）
グリセリン脂肪酸エステル混合物                    ０．５０
（ＮＩＫＫＯＬ  ニコガード  ＤＬ）
エタノール                                      ３０．００
水                                                残部
【０１７９】
（処方例６８）
下記処方でスカルプオイルシャンプーを調製した。
成分名                                        配合量（質量％）
ＰＹＲ含有コラーゲン分解物                        １．００
（カプリリル／カプリル）グルコシド、水          １０．００
（ＧｒｅｅｎＡＰＧ  ＰＣ  ０８１０）
ＢＧ                                              ４．００
ソルビトール、水                                  ２．００
グアーヒドロキシプロピルトリモニウムクロリド      １．００
防腐剤                                            適量
クエン酸                                          ０．６５
ＥＤＴＡ−２Ｎａ                                  ０．１０
ココイルメチルタウリンＮａ、水                  ２０．００
（ＮＩＫＫＯＬ  ＣＭＴ−３０）
ラウロイルメチルアラニンＮａ、水                １５．００
（ＮＩＫＫＯＬ  アラニネート  ＬＮ−３０）
コカミドプロピルベタイン、水                    １５．００
（ＮＩＫＫＯＬ  ＡＭ−３１３０Ｎ）
ラウリン酸ＰＧ                                    ２．００
ラウリン酸ポリグリセリル−１０                    ３．００
（ＮＩＫＫＯＬ  Ｄｅｃａｇｌｙｎ  １−Ｌ）
スクワラン                                        ０．３０
（ＮＩＫＫＯＬ  シュガースクワラン）
ラウリン酸メチルヘプチル                          ０．３０
（ＮＩＫＫＯＬ  ＧＳ−ＭＨＬ）
アルガニアスピノサ核油（アルガンオイル）          ０．３０
植物・海藻エキス混合物                            １．００
（フィテレン  ＥＧＸ−７７１ＢＧ）
【０１８０】
（処方例６９）
下記処方でコンディショナーを調製した。
成分名                                        配合量（質量％）
ＰＹＲ含有コラーゲン分解物                        １．００
ベヘントリモニウムクロリド、エタノール            ２．４０
（ＮＩＫＫＯＬ  ＣＡ−２５８０）
ジステアリルジモニウムクロリド、イソプロパノール、水
０．８０
（ＮＩＫＫＯＬ  ＣＡ−３４７５Ｖ）
セタノール                                        ５．００
オレイルアルコール                                １．００
ステアリン酸グリセリル                            １．００
（ＮＩＫＫＯＬ  ＭＧＳ−ＢＶ２）
低融点ワックス                                    １．００
（ＮＩＫＫＯＬ  ニコワックスＬＭ）
オリーブ果実油                                    ２．００
（ＮＩＫＫＯＬ  オリーブ油）
ワセリン                                          ８．００
ジメチコン（１００ｍＰａ・ｓ）                    １．００
ジメチコン（１０００ｍＰａ・ｓ）                  ０．５０
トコフェロール                                    ０．０５
グリセリン                                        ６．００
防腐剤                                            適量
水                                                残部
【０１８１】
（処方例７０）
下記処方でノンシリコーントリートメントを調製した。
成分名                                        配合量（質量％）
ＰＹＲ含有コラーゲン分解物                        １．００
ステアラミドプロピルジメチルアミン                ３．２５
（ＮＩＫＫＯＬ  アミドアミン  ＭＰＳ）
ステアリン酸グリセリル                            ０．５０
（ＮＩＫＫＯＬ  ＭＧＳ−ＢＶ２）
ステアリルアルコール                              ７．００
ビャクダンエキス、キハダ樹皮エキス、オオムギエキス１．００
（ＢＯＩＳ  ＩＩ）
ラウリン酸メチルヘプチル                          ２．００
（ＮＩＫＫＯＬ  ＧＳ−ＭＨＬ）
イソステアリン酸フィトステアリル                  ３．００
オクチルドデカノール                              ３．００
ワセリン                                          ４．００
ＰＧ                                              ５．００
グルタミン酸                                      １．０５
ポリオクタニウム−４７、水                        ２．４０
防腐剤                                            適量
シソ葉エキス、エタノール、水                      ０．３０
（シソエキスＮＡ  ＦＲＥＥ）
植物エキス混合物                                  ０．１０
（フィテレンＥＧＸ―２３２（ＢＧ））
多糖体水溶液（ＦＵＣＯＧＥＬ１．５Ｐ）            ３．００
水                                                残部
【０１８２】
（処方例７１）
下記処方でヘアワックスを調製した。
成分名                                        配合量（質量％）
ＰＹＲ含有コラーゲン分解物                        １．００
複合乳化剤                                        ７．００
（ＮＩＫＫＯＬ  ニコムルス  ＬＣ）
セテアリルアルコール                              ５．００
ベヘニルアルコール                                ２．００
（ＮＩＫＫＯＬ  ベヘニルアルコール６５）
低融点ワックス                                    １．００
（ＮＩＫＫＯＬ  ニコワックスＬＭ）
ミツロウ                                        １０．００
スクワラン                                        １．００
（ＮＩＫＫＯＬ  シュガースクワラン）
オレフィンオリゴマー                              ５．００
（ＮＩＫＫＯＬ  シンセラン４ＳＰ）
トリエチルヘキサノイン                            ５．００
（ＮＩＫＫＯＬ  Ｔｒｉｆａｔ  Ｓ−３０８）
ワセリン                                          ５．００
シクロペンタシロキサン                            ２．００
ジメチコン（６ｍＰａ・ｓ）                        ２．００
防腐剤                                            適量
ＢＧ                                              ５．００
グリセリン                                        ３．００
ＥＤＴＡ−２Ｎａ                                  ０．１０
ＰＥＧ−１１５Ｍ                                  ０．１０
カルボマー                                      １０．００
（ＮＴＣ−ＣＡＲＢＯＭＥＲ  ３８０）
アルギニン                                        ０．２０
（ＶＰ／ＶＡ）コポリマー、エタノールポリクタニウム−１１、水  １．００
水                                                残部
【０１８３】
（処方例７２）
下記処方でヘアジェルクリームを調製した。
成分名                                        配合量（質量％）
ＰＹＲ含有コラーゲン分解物                        １．００
複合乳化剤                                        ４．５０
（ＮＩＫＫＯＬ  ニコムルス  ＳＥ  Ｗ）
ＢＧ                                              ８．００
防腐剤                                            適量
水酸化Ｋ                                          ０．０５
ＥＤＴＡ−２Ｎａ                                  ０．０３
グリセリン                                        ５．００
スクワラン                                        ２．５０
（ＮＩＫＫＯＬ  シュガースクワラン）
シクロペンタシロキサン                            ８．００
ジメチコン（１０ｍＰａ・ｓ）                      １．５０
アモジメチコン                                    １．００
シクロペンタシロキサン、ジメチコノール            １．００
ＰＥＧ／ＰＰＧ−１９／１９ジメチコン、シクロペンタシロキサン
１．００
ジエチルアミノヒドロキシベンゾイル安息香酸ヘキシル、
メトキシケイヒ酸エチルヘキシル                        １．５０
トコフェロール                                    ０．１０
水                                                残部
【０１８４】
（処方例７３）
下記処方でサンスクリーンミルク（ノンケミカル、Ｗ／Ｏ型）を調製した。
成分名                                        配合量（質量％）
油性成分：
微粒子酸化チタン分散物                          ３０．００
（ＣＭ３Ｋ４０ＶＭＪ）
微粒子酸化亜鉛分散物                            ３５．００
（ＣＭ３Ｋ５０ＸＺ４Ｊ）
イソドデカン                                    １１．５０
トリメチルシロキシケイ酸，シクロペンタシロキサン  ３．００
（ＨＤＩ／トリメチロールヘキシルラクトン）クロスポリマー、シリカ  ３．００
パルミチン酸エチルヘキシル                        ０．５０
（ＮＩＫＫＯＬ  ＩＯＰ）
（ビニルジメチコン／メチコンシルセスキオキサン）クロスポリマー  ２．００
ＰＥＧ−９ポリジメチルシロキシエチルジメチコン    １．００
水性成分：
ＰＹＲ含有コラーゲン分解物                        ５．００
グリセリン                                        ５．００
防腐剤                                            適量
クエン酸Ｎａ                                      ０．２０
ＥＤＴＡ−３Ｎａ                                  ０．０５
水                                                残部
【０１８５】
（処方例７４）
下記処方でサンスクリーンクリーム（ノンケミカル、Ｗ／Ｏ型）を調製した。
成分名                                        配合量（質量％）
油性成分：
微粒子酸化チタン分散物                          ３５．００
（ＣＭ３Ｋ４０Ｔ４Ｊ）
微粒子酸化亜鉛分散物                            ３４．００
（ＣＭ３ＫＧ６０ＸＺ４）
シクロペンタシロキサン                            ９．５５
トリメチルシロキシケイ酸，シクロペンタシロキサン  ３．００
（ＨＤＩ／トリメチロールヘキシルラクトン）クロスポリマー、シリカ  ３．００
パルミチン酸エチルヘキシル                        ０．５０
（ＮＩＫＫＯＬ  ＩＯＰ）
（ビニルジメチコン／メチコンシルセスキオキサン）クロスポリマー  ２．００
ＰＥＧ−９ポリジメチルシロキシエチルジメチコン    １．００
水性成分：
ＰＹＲ含有コラーゲン分解物                        ５．００
ＢＧ                                              ３．００
防腐剤                                            適量
クエン酸Ｎａ                                      ０．２０
ＥＤＴＡ−３Ｎａ                                  ０．０５
水                                                残部
【０１８６】
（処方例７５）
下記処方でサンスクリーンクリーム（Ｏ／Ｗ型）を調製した。
成分名                                        配合量（質量％）
油性成分：
微粒子酸化チタン分散物                          １５．００
（ＣＭＩＰ４０ＶＭＪ）
微粒子酸化亜鉛分散物                            １５．００
（ＣＭＩＰ５０ＸＺ４Ｊ）
ステアリン酸ソルビタン                            ２．００
（ＮＩＫＫＯＬ  ＳＳ−１０Ｖ）
ミリスチン酸ポリグリセリル−１０                  ０．５０
（ＮＩＫＫＯＬ  Ｄｅｃａｇｌｙｎ１−Ｍ）
トコフェロール                                    ０．１０
メトキシケイヒ酸エチルヘキシル                  １０．００
ジメチルアミノヒドロキシベンゾイル安息香酸ヘキシル３．００
水性成分：
ＰＹＲ含有コラーゲン分解物                        ５．００
ＢＧ                                              ７．００
ステアロイルメチルタウリンＮａ                    ０．５０
（ＮＩＫＫＯＬ  ＳＭＴ）
（ＨＤＩ／トリメチロールヘキシルラクトン）クロスポリマー、シリカ  ２．００
キサンタンガム（２％水溶液）                      ５．００
ヒアルロン酸Ｎａ（１％水溶液）                    ５．００
多糖体水溶液（ＦＵＣＯＧＥＬ１．５Ｐ）            １．００
防腐剤                                            適量
複合乳化剤                                        ３．００
（ＮＩＫＫＯＬ  ニコムルスＬＨ）
エタノール                                        ５．００
水                                                残部
【０１８７】
（処方例７６）
下記処方でサンスクリーンジェルクリーム（Ｏ／Ｗ型）を調製した。
成分名                                        配合量（質量％）
油性成分：
微粒子酸化チタン分散物                          ２２．５０
（ＭＣＰ５５ＺＳＪ）
ジエチルアミノヒドロキシベンゾイル安息香酸ヘキシル２．８０
オクトクリレン                                    １．００
オレイン酸ソルビタン                              ０．２５
（ＮＩＫＫＯＬ  ＳＯ−１０Ｖ）
ジイソステアリン酸ポリグリセリル−１０            ０．７５
（ＮＩＫＫＯＬ  Ｄｅｃａｇｌｙｎ２−ＩＳＶ）
（アクリル酸Ｎａ／アクリロイルジメチルタウリンＮａ）コポリマー、イソヘキサデカン，ポリソルベート８０，オレイン酸ソルビタン，水    ２．００
混合植物油                                        ２．５０
（ＮＩＫＫＯＬ  ＮＡＴＵＲＡＬ  ＯＩＬＳ−１）
トリメチルシロキシケイ酸，ジメチコン              ３．００
水性成分：
ＰＹＲ含有コラーゲン分解物                        ５．００
グリセリン                                        １．００
ＢＧ                                              １．００
メタクリル酸メチルクロスポリマー                  ２．００
キサンタンガム（２％水溶液）                      ５．００
ヒアルロン酸Ｎａ（１％水溶液）                    ５．００
エタノール                                        ５．００
水                                                残部
【０１８８】
（処方例７７）
下記処方でＢＢクリーム（ノンケミカル，Ｗ／Ｏ型）を調製した。
成分名                                        配合量（質量％）
油性成分：
微粒子酸化チタン分散物                          １０．００
（ＣＭ３Ｋ４０Ｔ４Ｊ）
微粒子酸化亜鉛分散物                            ２５．００
（ＣＭ３Ｋ５０ＸＺ４Ｊ）
シクロペンタシロキサン                          １２．５０
ＰＥＧ−９ポリジメチルシロキシエチルジメチコン    １．００
シクロペンタシロキサン，（ジメチコン／ビニルジメチコン）クロスポリマー  
２．００
（ビニルジメチコン／メチコンシルセスキオキサン）クロスポリマー  ３．００
トリメチルシロキシケイ酸，シクロペンタシロキサン  ３．００
（ＨＤＩ／トリメチロールヘキシルラクトン）クロスポリマー、シリカ  ４．００
酸化鉄のシリコーン分散物                        １５．００
（ＮＩＫＫＯＬ  フレッシュカラーベース）
水性成分：
ＰＹＲ含有コラーゲン分解物                        ８．００
グリセリン                                        ５．００
ＢＧ                                              ２．００
防腐剤                                            適量
ＥＤＴＡ−２Ｎａ                                  ０．０５
Ｌ−ヒドロキシプロリン                            ０．１０
ヒアルロン酸Ｎａ（１％水溶液）                    １．００
塩化Ｎａ                                          １．００
水                                                残部
【０１８９】
（処方例７８）
下記処方でＣＣクリーム（ノンケミカル，Ｏ／Ｗ型）を調製した。
成分名                                        配合量（質量％）
油性成分：
微粒子酸化チタン分散物                          ２７．５０
（ＩＯＰＰ４０ＶＭＪ）
ステアリン酸ソルビタン                            ２．００
（ＮＩＫＫＯＬ  ＳＳ−１０Ｖ）
トリエチルヘキサノイン                            ２．００
（ＮＩＫＫＯＬ  Ｔｒｉｆａｔ  Ｓ−３０８）
セテアリルアルコール                              ０．５０
ＰＥＧ−６０水添ヒマシ油                          ０．５０
（ＮＩＫＫＯＬ  ＨＣＯ−６０）
ポリソルベート８０                                ０．２０
（ＮＩＫＫＯＬ  ＴＯ−１０Ｖ）
トコフェロール                                    ０．２０
水性成分：
ＰＹＲ含有コラーゲン分解物                        ８．００
ＢＧ                                              ４．００
ペンチレングリコール                              ３．００
メタクリル酸メチルクリスポリマー                  ２．００
グリセリン                                        １．００
ステアロイルメチルタウリンＮａ                    ０．５０
（ＮＩＫＫＯＬ  ＳＭＴ）
ステアロキシヒドロキシプロピルメチルセルロース    ０．１０
キサンタンガム（２％水溶液）                      ５．００
ヒアルロン酸Ｎａ（１％水溶液）                    ２．００
防腐剤                                            適量
グリチルリチン酸２Ｋ                              ０．５０
クエン酸                                          ０．２０
クエン酸Ｎａ                                      ０．０３
酸化鉄のシリコーン分散物                        １０．００
（ＮＩＫＫＯＬ  フレッシュカラーベース  ＡＱＵＡ）
水                                                残部
【０１９０】
（処方例７９）錠剤
公知の流動層造粒機を用いて、上記のＰＹＲ含有コラーゲン分解物を１質量％澱粉水溶液で造粒コーティングし、ＰＹＲ含有コラーゲン分解物顆粒を得た。得られたＰＹＲ含有コラーゲン分解物顆粒を、以下の配合にて他の粉末と混合したのち、打錠機を用いて錠剤（１０ｍｍφ、３００ｍｇ）を作製した。
成分名                                          配合量（質量％）
ＰＹＲ含有コラーゲン分解物顆粒                    ５０．０
乳糖                                              １０．０
澱粉（造粒用）                                      ０．５
澱粉（粉末混合用）                                １２．０
マルチトール                                      １０．０
微結晶セルロース                                  １５．０
二酸化ケイ素                                        ０．５
ステアリン酸マグネシウム                            ２．０
ＰＹＲ含有コラーゲン分解物を澱粉で造粒コーティングすることにより、スティッキングなどの打錠障害を抑制することができた。
【０１９１】
（処方例８０）顆粒スティック
上記のＰＹＲ含有コラーゲン分解物を、以下の配合にて混合したのち、公知の流動層造粒機を用いて造粒した。なお、造粒用のデキストリンは、１質量％デキストリン水溶液を用いた。得られた造粒物をスティックに充填し、顆粒スティックを得た（１．２ｇ／包）。
成分名                                          配合量（質量％）
ＰＹＲ含有コラーゲン分解物                        ９０．０
デキストリン（造粒用）                              １．０
ビタミンＢ１                                        ０．０９
ビタミンＢ２                                        ０．１
ビタミンＢ６                                        ０．１３
ビタミンＢ１２                                      ０．０００２
ナイアシン                                          １．４
パントテン酸                                        ０．４２
葉酸                                                ０．０１７
油脂被覆ビタミンＣ（ＶＣ８０％）                    ４．０
パイン粉末香料                                      ０．１
ショ糖                                              ２．７３２８
ステビア                                            ０．０１
油脂被覆ビタミンＣ（日油(株)製）を使用することにより、酸味が抑制され、食べやすい顆粒を得ることができた。また、ビタミンＣとＰＹＲ含有コラーゲン分解物の接触が防止され、長期保存における褐変を防止することができた。さらに、ビタミンＢ２を配合することにより、黄色に着色されるため、長期保存における変色の差が小さくなるという効果がある。
【０１９２】
（処方例８１）飲料
成分名                                          配合量
ＰＹＲ含有コラーゲン分解物                    ５０００ｍｇ
ヒアルロン酸                                      １０ｍｇ
プラセンタ                                        １０ｍｇ
セラミド                                        ２００μｇ
コエンザイムＱ１０                                  １ｍｇ
ビタミンＣ                                      １００ｍｇ
甘味料（スクラロース、アセスルファムＫ）            適量
酸味料（クエン酸）                                  適量
水                                                ５０ｍＬ
【産業上の利用可能性】
【０１９３】
本発明のコラーゲン産生促進剤は、簡便、簡単に効率良くコラーゲン産生を促進することができ、皮膚の健康維持あるいは皮膚の老化抑制や、骨粗鬆症等の治療に有用である
【図１】
2019019129.tif 000022
【図２】
2019019129.tif 000023
【図３】
2019019129.tif 000024
【図４】
2019019129.tif 000025
【図５】
2019019129.tif 000026
【図６】
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