(57)【要約】【課題】対象ががん、特に腺がん、さらに特別には甲状腺がんを有するかどうかの判定、および進行がんの検出を高い精度で効率的に行う。【解決手段】ＷＤＲ１部分ペプチドおよび／またはフィブロネクチン１部分ペプチドを用いて対象由来の試料中の抗ＷＤＲ１抗体および／または抗フィブロネクチン抗体の力価を測定することを含む、対象におけるがんの有無の判定方法ならびに進行がんの検出方法、ならびにそのためのキット。【選択図】なし【特許請求の範囲】
【請求項１】
対象におけるがんの有無を判定する方法であって、
（Ｉ）：
ＷＤＲ１−２ペプチド（Ｓｅｒ−Ｐｈｅ−Ａｌａ−Ｇｌｙ−Ｌｙｓ−Ｇｌｙ−Ｈｉｓ−Ｔｈｒ−Ａｓｎ−Ｇｌｎ−Ｖａｌ−Ｓｅｒ）（配列番号：１）またはその変異体、
ＷＤＲ１−９ペプチド（Ｖａｌ−Ａｒｇ−Ｔｙｒ−Ｔｈｒ−Ｓｅｒ−Ｌｅｕ−Ｍｅｔ−Ｌｅｕ−Ａｒｇ−Ａｓｐ−Ｔｙｒ−Ｓｅｒ）（配列番号：２）または変異体、
ＷＤＲ１−１６ペプチド（Ｐｒｏ−Ｌｙｓ−Ｃｙｓ−Ｖａｌ−Ａｌａ−Ｖａｌ−Ｇｌｙ−Ｐｒｏ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｔｙｒ−Ａｌａ）（配列番号：３）またはその変異体、
ＷＤＲ１−２１ペプチド（Ｐｈｅ−Ｓｅｒ−Ｉｌｅ−Ａｓｐ−Ａｓｎ−Ｐｒｏ−Ｇｌｙ−Ｔｙｒ−Ｇｌｕ−Ｐｒｏ−Ｇｌｕ−Ｖａｌ）（配列番号：４）またはその変異体、
ＷＤＲ１−２４ペプチド（Ｇｌｕ−Ｇｌｙ−Ｌｙｓ−Ｌｅｕ−Ｌｅｕ−Ｇｌｕ−Ａｌａ−Ｌｙｓ−Ｇｌｙ−Ｐｒｏ−Ｖａｌ−Ｔｈｒ）（配列番号：５）またはその変異体、
ＷＤＲ１−３３ペプチド（Ｖａｌ−Ｐｈｅ−Ｓｅｒ−Ｖａｌ−Ａｌａ−Ａｓｐ−Ｇｌｙ−Ｔｙｒ−Ｓｅｒ−Ｇｌｕ−Ａｓｎ−Ａｓｎ）（配列番号：６）またはその変異体、および
ＷＤＲ１−３７ペプチド（Ｍｅｔ−Ｍｅｔ−Ｖａｌ−Ｔｙｒ−Ｖａｌ−Ｔｒｐ−Ｔｈｒ−Ｌｅｕ−Ｓｅｒ−Ａｓｐ−Ｐｒｏ−Ｇｌｕ）（配列番号：７）またはその変異体
からなる群より選択される１種または２種のペプチドを用いて対象由来の試料中の抗ＷＤＲ１抗体の力価を測定すること、および／または
（ＩＩ）：
フィブロネクチン１−１９ペプチド（Ａｒｇ−Ｔｈｒ−Ｉｌｅ−Ｌｙｓ−Ｐｒｏ−Ａｓｐ−Ｖａｌ−Ａｒｇ−Ｓｅｒ−Ｔｙｒ−Ｔｈｒ−Ｉｌｅ）（配列番号：８）またはその変異体、
フィブロネクチン１−２０ペプチド（Ｖａｌ−Ａｒｇ−Ｓｅｒ−Ｔｙｒ−Ｔｈｒ−Ｉｌｅ−Ｔｈｒ−Ｇｌｙ−Ｌｅｕ−Ｇｌｎ−Ｐｒｏ−Ｇｌｙ）（配列番号：９）またはその変異体、
フィブロネクチン１−２７ペプチド（Ｓｅｒ−Ａｓｎ−Ｌｅｕ−Ａｒｇ−Ｐｈｅ−Ｌｅｕ−Ａｌａ−Ｔｈｒ−Ｔｈｒ−Ｐｒｏ−Ａｓｎ−Ｓｅｒ）（配列番号：１０）またはその変異体、
フィブロネクチン１−２９ペプチド（Ｌｅｕ−Ｌｅｕ−Ｖａｌ−Ｓｅｒ−Ｔｒｐ−Ｇｌｎ−Ｐｒｏ−Ｐｒｏ−Ａｒｇ−Ａｌａ−Ａｒｇ−Ｉｌｅ）（配列番号：１１）またはその変異体、および
フィブロネクチン１−３０ペプチド（Ｐｒｏ−Ｐｒｏ−Ａｒｇ−Ａｌａ−Ａｒｇ−Ｉｌｅ−Ｔｈｒ−Ｇｌｙ−Ｔｙｒ−Ｉｌｅ−Ｉｌｅ−Ｌｙｓ）（配列番号：１２）またはその変異体
からなる群より選択される１種または２種のペプチドを用いて対象由来の試料中の抗フィブロネクチン１抗体の力価を測定すること
を含む方法。
【請求項２】
がんが分泌腺組織に生じるがんである、請求項１記載の方法。
【請求項３】
がんが甲状腺がんである、請求項２記載の方法。
【請求項４】
がんが進行がんである、請求項１〜３のいずれか１項記載の方法。
【請求項５】
ＷＤＲ１−２ペプチド（Ｓｅｒ−Ｐｈｅ−Ａｌａ−Ｇｌｙ−Ｌｙｓ−Ｇｌｙ−Ｈｉｓ−Ｔｈｒ−Ａｓｎ−Ｇｌｎ−Ｖａｌ−Ｓｅｒ）（配列番号：１）またはその変異体、
ＷＤＲ１−９ペプチド（Ｖａｌ−Ａｒｇ−Ｔｙｒ−Ｔｈｒ−Ｓｅｒ−Ｌｅｕ−Ｍｅｔ−Ｌｅｕ−Ａｒｇ−Ａｓｐ−Ｔｙｒ−Ｓｅｒ）（配列番号：２）または変異体、
ＷＤＲ１−１６ペプチド（Ｐｒｏ−Ｌｙｓ−Ｃｙｓ−Ｖａｌ−Ａｌａ−Ｖａｌ−Ｇｌｙ−Ｐｒｏ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｔｙｒ−Ａｌａ）（配列番号：３）またはその変異体、
ＷＤＲ１−２１ペプチド（Ｐｈｅ−Ｓｅｒ−Ｉｌｅ−Ａｓｐ−Ａｓｎ−Ｐｒｏ−Ｇｌｙ−Ｔｙｒ−Ｇｌｕ−Ｐｒｏ−Ｇｌｕ−Ｖａｌ）（配列番号：４）またはその変異体、
ＷＤＲ１−２４ペプチド（Ｇｌｕ−Ｇｌｙ−Ｌｙｓ−Ｌｅｕ−Ｌｅｕ−Ｇｌｕ−Ａｌａ−Ｌｙｓ−Ｇｌｙ−Ｐｒｏ−Ｖａｌ−Ｔｈｒ）（配列番号：５）またはその変異体、
ＷＤＲ１−３３ペプチド（Ｖａｌ−Ｐｈｅ−Ｓｅｒ−Ｖａｌ−Ａｌａ−Ａｓｐ−Ｇｌｙ−Ｔｙｒ−Ｓｅｒ−Ｇｌｕ−Ａｓｎ−Ａｓｎ）（配列番号：６）またはその変異体、
ＷＤＲ１−３７ペプチド（Ｍｅｔ−Ｍｅｔ−Ｖａｌ−Ｔｙｒ−Ｖａｌ−Ｔｒｐ−Ｔｈｒ−Ｌｅｕ−Ｓｅｒ−Ａｓｐ−Ｐｒｏ−Ｇｌｕ）（配列番号：７）またはその変異体
フィブロネクチン１−１９ペプチド（Ａｒｇ−Ｔｈｒ−Ｉｌｅ−Ｌｙｓ−Ｐｒｏ−Ａｓｐ−Ｖａｌ−Ａｒｇ−Ｓｅｒ−Ｔｙｒ−Ｔｈｒ−Ｉｌｅ）（配列番号：８）またはその変異体、
フィブロネクチン１−２０ペプチド（Ｖａｌ−Ａｒｇ−Ｓｅｒ−Ｔｙｒ−Ｔｈｒ−Ｉｌｅ−Ｔｈｒ−Ｇｌｙ−Ｌｅｕ−Ｇｌｎ−Ｐｒｏ−Ｇｌｙ）（配列番号：９）またはその変異体、
フィブロネクチン１−２７ペプチド（Ｓｅｒ−Ａｓｎ−Ｌｅｕ−Ａｒｇ−Ｐｈｅ−Ｌｅｕ−Ａｌａ−Ｔｈｒ−Ｔｈｒ−Ｐｒｏ−Ａｓｎ−Ｓｅｒ）（配列番号：１０）またはその変異体、
フィブロネクチン１−２９ペプチド（Ｌｅｕ−Ｌｅｕ−Ｖａｌ−Ｓｅｒ−Ｔｒｐ−Ｇｌｎ−Ｐｒｏ−Ｐｒｏ−Ａｒｇ−Ａｌａ−Ａｒｇ−Ｉｌｅ）（配列番号：１１）またはその変異体、および
フィブロネクチン１−３０ペプチド（Ｐｒｏ−Ｐｒｏ−Ａｒｇ−Ａｌａ−Ａｒｇ−Ｉｌｅ−Ｔｈｒ−Ｇｌｙ−Ｔｙｒ−Ｉｌｅ−Ｉｌｅ−Ｌｙｓ）（配列番号：１２）またはその変異体
からなる群より選択される１種または２種のペプチドを含む、対象におけるがんの有無を判定するためのキット。
【請求項６】
がんが分泌腺組織に生じるがんである、請求項５記載のキット。
【請求項７】
がんが甲状腺がんである、請求項６記載のキット。
【請求項８】
がんが進行がんである、請求項５〜７のいずれか１項記載のキット。
【請求項９】
ＷＤＲ１−２ペプチド（Ｓｅｒ−Ｐｈｅ−Ａｌａ−Ｇｌｙ−Ｌｙｓ−Ｇｌｙ−Ｈｉｓ−Ｔｈｒ−Ａｓｎ−Ｇｌｎ−Ｖａｌ−Ｓｅｒ）（配列番号：１）またはその変異体、
ＷＤＲ１−９ペプチド（Ｖａｌ−Ａｒｇ−Ｔｙｒ−Ｔｈｒ−Ｓｅｒ−Ｌｅｕ−Ｍｅｔ−Ｌｅｕ−Ａｒｇ−Ａｓｐ−Ｔｙｒ−Ｓｅｒ）（配列番号：２）または変異体、
ＷＤＲ１−１６ペプチド（Ｐｒｏ−Ｌｙｓ−Ｃｙｓ−Ｖａｌ−Ａｌａ−Ｖａｌ−Ｇｌｙ−Ｐｒｏ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｔｙｒ−Ａｌａ）（配列番号：３）またはその変異体、
ＷＤＲ１−２１ペプチド（Ｐｈｅ−Ｓｅｒ−Ｉｌｅ−Ａｓｐ−Ａｓｎ−Ｐｒｏ−Ｇｌｙ−Ｔｙｒ−Ｇｌｕ−Ｐｒｏ−Ｇｌｕ−Ｖａｌ）（配列番号：４）またはその変異体、
ＷＤＲ１−２４ペプチド（Ｇｌｕ−Ｇｌｙ−Ｌｙｓ−Ｌｅｕ−Ｌｅｕ−Ｇｌｕ−Ａｌａ−Ｌｙｓ−Ｇｌｙ−Ｐｒｏ−Ｖａｌ−Ｔｈｒ）（配列番号：５）またはその変異体、
ＷＤＲ１−３３ペプチド（Ｖａｌ−Ｐｈｅ−Ｓｅｒ−Ｖａｌ−Ａｌａ−Ａｓｐ−Ｇｌｙ−Ｔｙｒ−Ｓｅｒ−Ｇｌｕ−Ａｓｎ−Ａｓｎ）（配列番号：６）またはその変異体、および
ＷＤＲ１−３７ペプチド（Ｍｅｔ−Ｍｅｔ−Ｖａｌ−Ｔｙｒ−Ｖａｌ−Ｔｒｐ−Ｔｈｒ−Ｌｅｕ−Ｓｅｒ−Ａｓｐ−Ｐｒｏ−Ｇｌｕ）（配列番号：７）またはその変異体
からなる群より選択される１種または２種のペプチドを用いることを特徴とする、対象由来の試料中の抗ＷＤＲ１抗体の力価を測定する方法。
【請求項１０】
ＷＤＲ１−２ペプチド（Ｓｅｒ−Ｐｈｅ−Ａｌａ−Ｇｌｙ−Ｌｙｓ−Ｇｌｙ−Ｈｉｓ−Ｔｈｒ−Ａｓｎ−Ｇｌｎ−Ｖａｌ−Ｓｅｒ）（配列番号：１）またはその変異体、
ＷＤＲ１−９ペプチド（Ｖａｌ−Ａｒｇ−Ｔｙｒ−Ｔｈｒ−Ｓｅｒ−Ｌｅｕ−Ｍｅｔ−Ｌｅｕ−Ａｒｇ−Ａｓｐ−Ｔｙｒ−Ｓｅｒ）（配列番号：２）または変異体、
ＷＤＲ１−１６ペプチド（Ｐｒｏ−Ｌｙｓ−Ｃｙｓ−Ｖａｌ−Ａｌａ−Ｖａｌ−Ｇｌｙ−Ｐｒｏ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｔｙｒ−Ａｌａ）（配列番号：３）またはその変異体、
ＷＤＲ１−２１ペプチド（Ｐｈｅ−Ｓｅｒ−Ｉｌｅ−Ａｓｐ−Ａｓｎ−Ｐｒｏ−Ｇｌｙ−Ｔｙｒ−Ｇｌｕ−Ｐｒｏ−Ｇｌｕ−Ｖａｌ）（配列番号：４）またはその変異体、
ＷＤＲ１−２４ペプチド（Ｇｌｕ−Ｇｌｙ−Ｌｙｓ−Ｌｅｕ−Ｌｅｕ−Ｇｌｕ−Ａｌａ−Ｌｙｓ−Ｇｌｙ−Ｐｒｏ−Ｖａｌ−Ｔｈｒ）（配列番号：５）またはその変異体、
ＷＤＲ１−３３ペプチド（Ｖａｌ−Ｐｈｅ−Ｓｅｒ−Ｖａｌ−Ａｌａ−Ａｓｐ−Ｇｌｙ−Ｔｙｒ−Ｓｅｒ−Ｇｌｕ−Ａｓｎ−Ａｓｎ）（配列番号：６）またはその変異体、および
ＷＤＲ１−３７ペプチド（Ｍｅｔ−Ｍｅｔ−Ｖａｌ−Ｔｙｒ−Ｖａｌ−Ｔｒｐ−Ｔｈｒ−Ｌｅｕ−Ｓｅｒ−Ａｓｐ−Ｐｒｏ−Ｇｌｕ）（配列番号：７）またはその変異体
からなる群より選択される１種または２種のペプチドを含む、抗ＷＤＲ１抗体の力価を測定するためのキット。
【請求項１１】
フィブロネクチン１−１９ペプチド（Ａｒｇ−Ｔｈｒ−Ｉｌｅ−Ｌｙｓ−Ｐｒｏ−Ａｓｐ−Ｖａｌ−Ａｒｇ−Ｓｅｒ−Ｔｙｒ−Ｔｈｒ−Ｉｌｅ）（配列番号：８）またはその変異体、
フィブロネクチン１−２０ペプチド（Ｖａｌ−Ａｒｇ−Ｓｅｒ−Ｔｙｒ−Ｔｈｒ−Ｉｌｅ−Ｔｈｒ−Ｇｌｙ−Ｌｅｕ−Ｇｌｎ−Ｐｒｏ−Ｇｌｙ）（配列番号：９）またはその変異体、
フィブロネクチン１−２７ペプチド（Ｓｅｒ−Ａｓｎ−Ｌｅｕ−Ａｒｇ−Ｐｈｅ−Ｌｅｕ−Ａｌａ−Ｔｈｒ−Ｔｈｒ−Ｐｒｏ−Ａｓｎ−Ｓｅｒ）（配列番号：１０）またはその変異体、
フィブロネクチン１−２９ペプチド（Ｌｅｕ−Ｌｅｕ−Ｖａｌ−Ｓｅｒ−Ｔｒｐ−Ｇｌｎ−Ｐｒｏ−Ｐｒｏ−Ａｒｇ−Ａｌａ−Ａｒｇ−Ｉｌｅ）（配列番号：１１）またはその変異体、および
フィブロネクチン１−３０ペプチド（Ｐｒｏ−Ｐｒｏ−Ａｒｇ−Ａｌａ−Ａｒｇ−Ｉｌｅ−Ｔｈｒ−Ｇｌｙ−Ｔｙｒ−Ｉｌｅ−Ｉｌｅ−Ｌｙｓ）（配列番号：１２）またはその変異体
からなる群より選択される１種またはそれ以上のペプチドを用いることを特徴とする、対象由来の試料中の抗フィブロネクチン抗体の力価を測定する方法。
【請求項１２】
フィブロネクチン１−１９ペプチド（Ａｒｇ−Ｔｈｒ−Ｉｌｅ−Ｌｙｓ−Ｐｒｏ−Ａｓｐ−Ｖａｌ−Ａｒｇ−Ｓｅｒ−Ｔｙｒ−Ｔｈｒ−Ｉｌｅ）（配列番号：８）またはその変異体、
フィブロネクチン１−２０ペプチド（Ｖａｌ−Ａｒｇ−Ｓｅｒ−Ｔｙｒ−Ｔｈｒ−Ｉｌｅ−Ｔｈｒ−Ｇｌｙ−Ｌｅｕ−Ｇｌｎ−Ｐｒｏ−Ｇｌｙ）（配列番号：９）またはその変異体、
フィブロネクチン１−２７ペプチド（Ｓｅｒ−Ａｓｎ−Ｌｅｕ−Ａｒｇ−Ｐｈｅ−Ｌｅｕ−Ａｌａ−Ｔｈｒ−Ｔｈｒ−Ｐｒｏ−Ａｓｎ−Ｓｅｒ）（配列番号：１０）またはその変異体、
フィブロネクチン１−２９ペプチド（Ｌｅｕ−Ｌｅｕ−Ｖａｌ−Ｓｅｒ−Ｔｒｐ−Ｇｌｎ−Ｐｒｏ−Ｐｒｏ−Ａｒｇ−Ａｌａ−Ａｒｇ−Ｉｌｅ）（配列番号：１１）またはその変異体、および
フィブロネクチン１−３０ペプチド（Ｐｒｏ−Ｐｒｏ−Ａｒｇ−Ａｌａ−Ａｒｇ−Ｉｌｅ−Ｔｈｒ−Ｇｌｙ−Ｔｙｒ−Ｉｌｅ−Ｉｌｅ−Ｌｙｓ）（配列番号：１２）またはその変異体
からなる群より選択される１種またはそれ以上のペプチドを含む、抗フィブロネクチン抗体の力価を測定するためのキット。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、対象におけるがんの有無の判定および進行がんの検出のための方法ならびにキット等に関する。
【背景技術】
【０００２】
対象におけるがんの有無の判定は重要である。特に、対象における進行がんの検出は治療方針を決めるうえで極めて重要である。がんが進行がんであるか否かによって治療戦略が大きく変わってくるからである。進行がんであれば、早急な手術、抗がん剤治療、放射線治療をはじめ疾患の進行を考慮した様々な治療方法を行う必要がある。一方、非進行がんであれば、原発巣に対する手術治療が中心であるが疾患によっては経過観察だけで済む場合もある。これまで一部の癌では非進行がんであっても進行がんと同等に治療を行った結果、逆に費用対効果や患者のＱＯＬが損なわれることが報告されている。
【０００３】
がんの有無の判定および進行がんの検出には、画像検査や病変からの生検や細胞診などの組織採取が用いられているが、これらには人的負担、専門性が求められる。
【０００４】
がん患者の体内に特定のタンパク質に対する自己抗体が生成することが知られている。がん特異的な自己抗体を利用してがんの診断を行う試みがなされている（非特許文献１参照）。また、がん特異的な自己抗体と結合するポリペプチドをがんの検出手段とすることも行われている（特許文献１〜３参照）。
【０００５】
本発明者らは、甲状腺がん患者における自己抗体について研究し、甲状腺がん患者の試料からＷＤＲ１およびフィブロネクチン１をクローニングした。そして、ＷＤＲ１のＣ末端側の断片を用いて抗ＷＤＲ１抗体力価を測定し、未分化がんおよび乳頭がんの患者の試料において有意に高いことを見出した（非特許文献２参照）。しかし、抗ＷＤＲ１抗体力価をより正確に測定するためにはさらなる改良が必要であった。また進行がんを効率良く検出することは困難であった。
【先行技術文献】
【特許文献】
【０００６】
【特許文献１】特開２０１３−１０１１４７号公報
【特許文献２】特開２０１３−１０１１４８号公報
【特許文献３】特開２０１３−１０１１４９号公報
【非特許文献】
【０００７】
【非特許文献１】Minz PJ et al, PNAS 2015, 112:2515-20
【非特許文献２】Izawa S et al, Clinical Endocrinology 2013, 79:35-42
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００８】
対象ががんを有するかどうかの判定、および進行がんの検出を高い精度で効率的に行うことが望まれていた。
【課題を解決するための手段】
【０００９】
本発明者らは、上記課題を解決するために鋭意研究を重ねた。本発明者らは、甲状腺がん患者において抗ＷＤＲ１抗体および抗フィブロネクチン１抗体の力価が上昇することを見出した。そして抗ＷＤＲ１抗体力価の測定に適したＷＤＲ１部分ペプチド、および抗フィブロネクチン１抗体力価の測定に適したフィブロネクチン１部分ペプチドを見出した。本発明者らは、これらの部分ペプチドを用いて抗ＷＤＲ１抗体および抗フィブロネクチン１抗体の力価を測定することによって、対象中のがんの有無の判定および進行がんの検出を高い精度で効率良く行えることを見出し、本発明を完成させるに至った。
【００１０】
したがって、本発明は以下のものを提供する。
（１）対象におけるがんの有無を判定する方法であって、
（Ｉ）：
ＷＤＲ１−２ペプチド（Ｓｅｒ−Ｐｈｅ−Ａｌａ−Ｇｌｙ−Ｌｙｓ−Ｇｌｙ−Ｈｉｓ−Ｔｈｒ−Ａｓｎ−Ｇｌｎ−Ｖａｌ−Ｓｅｒ）（配列番号：１）またはその変異体、
ＷＤＲ１−９ペプチド（Ｖａｌ−Ａｒｇ−Ｔｙｒ−Ｔｈｒ−Ｓｅｒ−Ｌｅｕ−Ｍｅｔ−Ｌｅｕ−Ａｒｇ−Ａｓｐ−Ｔｙｒ−Ｓｅｒ）（配列番号：２）または変異体、
ＷＤＲ１−１６ペプチド（Ｐｒｏ−Ｌｙｓ−Ｃｙｓ−Ｖａｌ−Ａｌａ−Ｖａｌ−Ｇｌｙ−Ｐｒｏ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｔｙｒ−Ａｌａ）（配列番号：３）またはその変異体、
ＷＤＲ１−２１ペプチド（Ｐｈｅ−Ｓｅｒ−Ｉｌｅ−Ａｓｐ−Ａｓｎ−Ｐｒｏ−Ｇｌｙ−Ｔｙｒ−Ｇｌｕ−Ｐｒｏ−Ｇｌｕ−Ｖａｌ）（配列番号：４）またはその変異体、
ＷＤＲ１−２４ペプチド（Ｇｌｕ−Ｇｌｙ−Ｌｙｓ−Ｌｅｕ−Ｌｅｕ−Ｇｌｕ−Ａｌａ−Ｌｙｓ−Ｇｌｙ−Ｐｒｏ−Ｖａｌ−Ｔｈｒ）（配列番号：５）またはその変異体、
ＷＤＲ１−３３ペプチド（Ｖａｌ−Ｐｈｅ−Ｓｅｒ−Ｖａｌ−Ａｌａ−Ａｓｐ−Ｇｌｙ−Ｔｙｒ−Ｓｅｒ−Ｇｌｕ−Ａｓｎ−Ａｓｎ）（配列番号：６）またはその変異体、および
ＷＤＲ１−３７ペプチド（Ｍｅｔ−Ｍｅｔ−Ｖａｌ−Ｔｙｒ−Ｖａｌ−Ｔｒｐ−Ｔｈｒ−Ｌｅｕ−Ｓｅｒ−Ａｓｐ−Ｐｒｏ−Ｇｌｕ）（配列番号：７）またはその変異体
からなる群より選択される１種または２種のペプチドを用いて対象由来の試料中の抗ＷＤＲ１抗体の力価を測定すること、および／または
（ＩＩ）：
フィブロネクチン１−１９ペプチド（Ａｒｇ−Ｔｈｒ−Ｉｌｅ−Ｌｙｓ−Ｐｒｏ−Ａｓｐ−Ｖａｌ−Ａｒｇ−Ｓｅｒ−Ｔｙｒ−Ｔｈｒ−Ｉｌｅ）（配列番号：８）またはその変異体、
フィブロネクチン１−２０ペプチド（Ｖａｌ−Ａｒｇ−Ｓｅｒ−Ｔｙｒ−Ｔｈｒ−Ｉｌｅ−Ｔｈｒ−Ｇｌｙ−Ｌｅｕ−Ｇｌｎ−Ｐｒｏ−Ｇｌｙ）（配列番号：９）またはその変異体、
フィブロネクチン１−２７ペプチド（Ｓｅｒ−Ａｓｎ−Ｌｅｕ−Ａｒｇ−Ｐｈｅ−Ｌｅｕ−Ａｌａ−Ｔｈｒ−Ｔｈｒ−Ｐｒｏ−Ａｓｎ−Ｓｅｒ）（配列番号：１０）またはその変異体、
フィブロネクチン１−２９ペプチド（Ｌｅｕ−Ｌｅｕ−Ｖａｌ−Ｓｅｒ−Ｔｒｐ−Ｇｌｎ−Ｐｒｏ−Ｐｒｏ−Ａｒｇ−Ａｌａ−Ａｒｇ−Ｉｌｅ）（配列番号：１１）またはその変異体、および
フィブロネクチン１−３０ペプチド（Ｐｒｏ−Ｐｒｏ−Ａｒｇ−Ａｌａ−Ａｒｇ−Ｉｌｅ−Ｔｈｒ−Ｇｌｙ−Ｔｙｒ−Ｉｌｅ−Ｉｌｅ−Ｌｙｓ）（配列番号：１２）またはその変異体
からなる群より選択される１種または２種のペプチドを用いて対象由来の試料中の抗フィブロネクチン１抗体の力価を測定すること
を含む方法。
（２）がんが分泌腺組織に生じるがんである、（１）記載の方法。
（３）がんが甲状腺がんである、（２）記載の方法。
（４）がんが進行がんである、（１）〜（３）のいずれか記載の方法。
（５）ＷＤＲ１−２ペプチド（Ｓｅｒ−Ｐｈｅ−Ａｌａ−Ｇｌｙ−Ｌｙｓ−Ｇｌｙ−Ｈｉｓ−Ｔｈｒ−Ａｓｎ−Ｇｌｎ−Ｖａｌ−Ｓｅｒ）（配列番号：１）またはその変異体、
ＷＤＲ１−９ペプチド（Ｖａｌ−Ａｒｇ−Ｔｙｒ−Ｔｈｒ−Ｓｅｒ−Ｌｅｕ−Ｍｅｔ−Ｌｅｕ−Ａｒｇ−Ａｓｐ−Ｔｙｒ−Ｓｅｒ）（配列番号：２）または変異体、
ＷＤＲ１−１６ペプチド（Ｐｒｏ−Ｌｙｓ−Ｃｙｓ−Ｖａｌ−Ａｌａ−Ｖａｌ−Ｇｌｙ−Ｐｒｏ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｔｙｒ−Ａｌａ）（配列番号：３）またはその変異体、
ＷＤＲ１−２１ペプチド（Ｐｈｅ−Ｓｅｒ−Ｉｌｅ−Ａｓｐ−Ａｓｎ−Ｐｒｏ−Ｇｌｙ−Ｔｙｒ−Ｇｌｕ−Ｐｒｏ−Ｇｌｕ−Ｖａｌ）（配列番号：４）またはその変異体、
ＷＤＲ１−２４ペプチド（Ｇｌｕ−Ｇｌｙ−Ｌｙｓ−Ｌｅｕ−Ｌｅｕ−Ｇｌｕ−Ａｌａ−Ｌｙｓ−Ｇｌｙ−Ｐｒｏ−Ｖａｌ−Ｔｈｒ）（配列番号：５）またはその変異体、
ＷＤＲ１−３３ペプチド（Ｖａｌ−Ｐｈｅ−Ｓｅｒ−Ｖａｌ−Ａｌａ−Ａｓｐ−Ｇｌｙ−Ｔｙｒ−Ｓｅｒ−Ｇｌｕ−Ａｓｎ−Ａｓｎ）（配列番号：６）またはその変異体、
ＷＤＲ１−３７ペプチド（Ｍｅｔ−Ｍｅｔ−Ｖａｌ−Ｔｙｒ−Ｖａｌ−Ｔｒｐ−Ｔｈｒ−Ｌｅｕ−Ｓｅｒ−Ａｓｐ−Ｐｒｏ−Ｇｌｕ）（配列番号：７）またはその変異体
フィブロネクチン１−１９ペプチド（Ａｒｇ−Ｔｈｒ−Ｉｌｅ−Ｌｙｓ−Ｐｒｏ−Ａｓｐ−Ｖａｌ−Ａｒｇ−Ｓｅｒ−Ｔｙｒ−Ｔｈｒ−Ｉｌｅ）（配列番号：８）またはその変異体、
フィブロネクチン１−２０ペプチド（Ｖａｌ−Ａｒｇ−Ｓｅｒ−Ｔｙｒ−Ｔｈｒ−Ｉｌｅ−Ｔｈｒ−Ｇｌｙ−Ｌｅｕ−Ｇｌｎ−Ｐｒｏ−Ｇｌｙ）（配列番号：９）またはその変異体、
フィブロネクチン１−２７ペプチド（Ｓｅｒ−Ａｓｎ−Ｌｅｕ−Ａｒｇ−Ｐｈｅ−Ｌｅｕ−Ａｌａ−Ｔｈｒ−Ｔｈｒ−Ｐｒｏ−Ａｓｎ−Ｓｅｒ）（配列番号：１０）またはその変異体、
フィブロネクチン１−２９ペプチド（Ｌｅｕ−Ｌｅｕ−Ｖａｌ−Ｓｅｒ−Ｔｒｐ−Ｇｌｎ−Ｐｒｏ−Ｐｒｏ−Ａｒｇ−Ａｌａ−Ａｒｇ−Ｉｌｅ）（配列番号：１１）またはその変異体、および
フィブロネクチン１−３０ペプチド（Ｐｒｏ−Ｐｒｏ−Ａｒｇ−Ａｌａ−Ａｒｇ−Ｉｌｅ−Ｔｈｒ−Ｇｌｙ−Ｔｙｒ−Ｉｌｅ−Ｉｌｅ−Ｌｙｓ）（配列番号：１２）またはその変異体
からなる群より選択される１種または２種のペプチドを含む、対象におけるがんの有無を判定するためのキット。
（６）がんが分泌腺組織に生じるがんである、（５）記載のキット。
（７）がんが甲状腺がんである、（６）記載のキット。
（８）がんが進行がんである、（５）〜（７）のいずれか記載のキット。
（９）ＷＤＲ１−２ペプチド（Ｓｅｒ−Ｐｈｅ−Ａｌａ−Ｇｌｙ−Ｌｙｓ−Ｇｌｙ−Ｈｉｓ−Ｔｈｒ−Ａｓｎ−Ｇｌｎ−Ｖａｌ−Ｓｅｒ）（配列番号：１）またはその変異体、
ＷＤＲ１−９ペプチド（Ｖａｌ−Ａｒｇ−Ｔｙｒ−Ｔｈｒ−Ｓｅｒ−Ｌｅｕ−Ｍｅｔ−Ｌｅｕ−Ａｒｇ−Ａｓｐ−Ｔｙｒ−Ｓｅｒ）（配列番号：２）または変異体、
ＷＤＲ１−１６ペプチド（Ｐｒｏ−Ｌｙｓ−Ｃｙｓ−Ｖａｌ−Ａｌａ−Ｖａｌ−Ｇｌｙ−Ｐｒｏ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｔｙｒ−Ａｌａ）（配列番号：３）またはその変異体、
ＷＤＲ１−２１ペプチド（Ｐｈｅ−Ｓｅｒ−Ｉｌｅ−Ａｓｐ−Ａｓｎ−Ｐｒｏ−Ｇｌｙ−Ｔｙｒ−Ｇｌｕ−Ｐｒｏ−Ｇｌｕ−Ｖａｌ）（配列番号：４）またはその変異体、
ＷＤＲ１−２４ペプチド（Ｇｌｕ−Ｇｌｙ−Ｌｙｓ−Ｌｅｕ−Ｌｅｕ−Ｇｌｕ−Ａｌａ−Ｌｙｓ−Ｇｌｙ−Ｐｒｏ−Ｖａｌ−Ｔｈｒ）（配列番号：５）またはその変異体、
ＷＤＲ１−３３ペプチド（Ｖａｌ−Ｐｈｅ−Ｓｅｒ−Ｖａｌ−Ａｌａ−Ａｓｐ−Ｇｌｙ−Ｔｙｒ−Ｓｅｒ−Ｇｌｕ−Ａｓｎ−Ａｓｎ）（配列番号：６）またはその変異体、および
ＷＤＲ１−３７ペプチド（Ｍｅｔ−Ｍｅｔ−Ｖａｌ−Ｔｙｒ−Ｖａｌ−Ｔｒｐ−Ｔｈｒ−Ｌｅｕ−Ｓｅｒ−Ａｓｐ−Ｐｒｏ−Ｇｌｕ）（配列番号：７）またはその変異体
からなる群より選択される１種または２種のペプチドを用いることを特徴とする、対象由来の試料中の抗ＷＤＲ１抗体の力価を測定する方法。
（１０）ＷＤＲ１−２ペプチド（Ｓｅｒ−Ｐｈｅ−Ａｌａ−Ｇｌｙ−Ｌｙｓ−Ｇｌｙ−Ｈｉｓ−Ｔｈｒ−Ａｓｎ−Ｇｌｎ−Ｖａｌ−Ｓｅｒ）（配列番号：１）またはその変異体、
ＷＤＲ１−９ペプチド（Ｖａｌ−Ａｒｇ−Ｔｙｒ−Ｔｈｒ−Ｓｅｒ−Ｌｅｕ−Ｍｅｔ−Ｌｅｕ−Ａｒｇ−Ａｓｐ−Ｔｙｒ−Ｓｅｒ）（配列番号：２）または変異体、
ＷＤＲ１−１６ペプチド（Ｐｒｏ−Ｌｙｓ−Ｃｙｓ−Ｖａｌ−Ａｌａ−Ｖａｌ−Ｇｌｙ−Ｐｒｏ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｔｙｒ−Ａｌａ）（配列番号：３）またはその変異体、
ＷＤＲ１−２１ペプチド（Ｐｈｅ−Ｓｅｒ−Ｉｌｅ−Ａｓｐ−Ａｓｎ−Ｐｒｏ−Ｇｌｙ−Ｔｙｒ−Ｇｌｕ−Ｐｒｏ−Ｇｌｕ−Ｖａｌ）（配列番号：４）またはその変異体、
ＷＤＲ１−２４ペプチド（Ｇｌｕ−Ｇｌｙ−Ｌｙｓ−Ｌｅｕ−Ｌｅｕ−Ｇｌｕ−Ａｌａ−Ｌｙｓ−Ｇｌｙ−Ｐｒｏ−Ｖａｌ−Ｔｈｒ）（配列番号：５）またはその変異体、
ＷＤＲ１−３３ペプチド（Ｖａｌ−Ｐｈｅ−Ｓｅｒ−Ｖａｌ−Ａｌａ−Ａｓｐ−Ｇｌｙ−Ｔｙｒ−Ｓｅｒ−Ｇｌｕ−Ａｓｎ−Ａｓｎ）（配列番号：６）またはその変異体、および
ＷＤＲ１−３７ペプチド（Ｍｅｔ−Ｍｅｔ−Ｖａｌ−Ｔｙｒ−Ｖａｌ−Ｔｒｐ−Ｔｈｒ−Ｌｅｕ−Ｓｅｒ−Ａｓｐ−Ｐｒｏ−Ｇｌｕ）（配列番号：７）またはその変異体
からなる群より選択される１種または２種のペプチドを含む、抗ＷＤＲ１抗体の力価を測定するためのキット。
（１１）フィブロネクチン１−１９ペプチド（Ａｒｇ−Ｔｈｒ−Ｉｌｅ−Ｌｙｓ−Ｐｒｏ−Ａｓｐ−Ｖａｌ−Ａｒｇ−Ｓｅｒ−Ｔｙｒ−Ｔｈｒ−Ｉｌｅ）（配列番号：８）またはその変異体、
フィブロネクチン１−２０ペプチド（Ｖａｌ−Ａｒｇ−Ｓｅｒ−Ｔｙｒ−Ｔｈｒ−Ｉｌｅ−Ｔｈｒ−Ｇｌｙ−Ｌｅｕ−Ｇｌｎ−Ｐｒｏ−Ｇｌｙ）（配列番号：９）またはその変異体、
フィブロネクチン１−２７ペプチド（Ｓｅｒ−Ａｓｎ−Ｌｅｕ−Ａｒｇ−Ｐｈｅ−Ｌｅｕ−Ａｌａ−Ｔｈｒ−Ｔｈｒ−Ｐｒｏ−Ａｓｎ−Ｓｅｒ）（配列番号：１０）またはその変異体、
フィブロネクチン１−２９ペプチド（Ｌｅｕ−Ｌｅｕ−Ｖａｌ−Ｓｅｒ−Ｔｒｐ−Ｇｌｎ−Ｐｒｏ−Ｐｒｏ−Ａｒｇ−Ａｌａ−Ａｒｇ−Ｉｌｅ）（配列番号：１１）またはその変異体、および
フィブロネクチン１−３０ペプチド（Ｐｒｏ−Ｐｒｏ−Ａｒｇ−Ａｌａ−Ａｒｇ−Ｉｌｅ−Ｔｈｒ−Ｇｌｙ−Ｔｙｒ−Ｉｌｅ−Ｉｌｅ−Ｌｙｓ）（配列番号：１２）またはその変異体
からなる群より選択される１種またはそれ以上のペプチドを用いることを特徴とする、対象由来の試料中の抗フィブロネクチン抗体の力価を測定する方法。
（１２）フィブロネクチン１−１９ペプチド（Ａｒｇ−Ｔｈｒ−Ｉｌｅ−Ｌｙｓ−Ｐｒｏ−Ａｓｐ−Ｖａｌ−Ａｒｇ−Ｓｅｒ−Ｔｙｒ−Ｔｈｒ−Ｉｌｅ）（配列番号：８）またはその変異体、
フィブロネクチン１−２０ペプチド（Ｖａｌ−Ａｒｇ−Ｓｅｒ−Ｔｙｒ−Ｔｈｒ−Ｉｌｅ−Ｔｈｒ−Ｇｌｙ−Ｌｅｕ−Ｇｌｎ−Ｐｒｏ−Ｇｌｙ）（配列番号：９）またはその変異体、
フィブロネクチン１−２７ペプチド（Ｓｅｒ−Ａｓｎ−Ｌｅｕ−Ａｒｇ−Ｐｈｅ−Ｌｅｕ−Ａｌａ−Ｔｈｒ−Ｔｈｒ−Ｐｒｏ−Ａｓｎ−Ｓｅｒ）（配列番号：１０）またはその変異体、
フィブロネクチン１−２９ペプチド（Ｌｅｕ−Ｌｅｕ−Ｖａｌ−Ｓｅｒ−Ｔｒｐ−Ｇｌｎ−Ｐｒｏ−Ｐｒｏ−Ａｒｇ−Ａｌａ−Ａｒｇ−Ｉｌｅ）（配列番号：１１）またはその変異体、および
フィブロネクチン１−３０ペプチド（Ｐｒｏ−Ｐｒｏ−Ａｒｇ−Ａｌａ−Ａｒｇ−Ｉｌｅ−Ｔｈｒ−Ｇｌｙ−Ｔｙｒ−Ｉｌｅ−Ｉｌｅ−Ｌｙｓ）（配列番号：１２）またはその変異体
からなる群より選択される１種またはそれ以上のペプチドを含む、抗フィブロネクチン抗体の力価を測定するためのキット。
【発明の効果】
【００１１】
本発明によれば、対象ががん、特に腺がん、さらに特別には甲状腺がんを有するかどうかの判定、および進行がんの検出を高い精度で効率的に行うことができる。本願発明は血清を試料とすることができるので、患者への負担も少なく、特別な技能や施設を用いなくてもよい。したがって、本発明によれば、簡単な試験により適切な治療戦略を決定でき、不要な手術を回避できる。そのため、本発明は患者のＱＯＬの向上に資するものである。
【図面の簡単な説明】
【００１２】
【図１】図１は、ＷＤＲ１−２ペプチドと、進行甲状腺がん患者血清（ｎ＝１６）、非進行甲状腺がん患者血清（ｎ＝８）、良性甲状腺結節患者血清（ｎ＝１４）、自己免疫性甲状腺疾患患者血清（ｎ＝１５）および正常コントロール対象血清（ｎ＝７）との反応をＥＬＩＳＡにて検討した結果を示すグラフである。縦軸は４５０ｎｍにおける吸光度を示し、横軸において、Ａが進行甲状腺がん患者血清、Ｂが非進行甲状腺がん患者血清、Ｃが良性甲状腺結節患者血清、Ｄが自己免疫性甲状腺疾患患者血清、Ｅが正常コントロール対象血清を示す。バーの高さは平均値、カッコ内の数値は標準偏差を示す。
【図２】図２は、ＷＤＲ１−９ペプチドと、進行甲状腺がん患者血清（ｎ＝１６）、非進行甲状腺がん患者血清（ｎ＝８）、良性甲状腺結節患者血清（ｎ＝１４）、自己免疫性甲状腺疾患患者血清（ｎ＝１５）および正常コントロール対象血清（ｎ＝７）との反応をＥＬＩＳＡにて検討した結果を示すグラフである。縦軸は４５０ｎｍにおける吸光度を示し、横軸において、Ａが進行甲状腺がん患者血清、Ｂが非進行甲状腺がん患者血清、Ｃが良性甲状腺結節患者血清、Ｄが自己免疫性甲状腺疾患患者血清、Ｅが正常コントロール対象血清を示す。バーの高さは平均値、カッコ内の数値は標準偏差を示す。
【図３】図３は、ＷＤＲ１−１６ペプチドと、進行甲状腺がん患者血清（ｎ＝１６）、非進行甲状腺がん患者血清（ｎ＝８）、良性甲状腺結節患者血清（ｎ＝１４）、自己免疫性甲状腺疾患患者血清（ｎ＝１５）および正常コントロール対象血清（ｎ＝７）との反応をＥＬＩＳＡにて検討した結果を示すグラフである。縦軸は４５０ｎｍにおける吸光度を示し、横軸において、Ａが進行甲状腺がん患者血清、Ｂが非進行甲状腺がん患者血清、Ｃが良性甲状腺結節患者血清、Ｄが自己免疫性甲状腺疾患患者血清、Ｅが正常コントロール対象血清を示す。バーの高さは平均値、カッコ内の数値は標準偏差を示す。
【図４】図４は、ＷＤＲ１−２１ペプチドと、進行甲状腺がん患者血清（ｎ＝１６）、非進行甲状腺がん患者血清（ｎ＝８）、良性甲状腺結節患者血清（ｎ＝１４）、自己免疫性甲状腺疾患患者血清（ｎ＝１５）および正常コントロール対象血清（ｎ＝７）との反応をＥＬＩＳＡにて検討した結果を示すグラフである。縦軸は４５０ｎｍにおける吸光度を示し、横軸において、Ａが進行甲状腺がん患者血清、Ｂが非進行甲状腺がん患者血清、Ｃが良性甲状腺結節患者血清、Ｄが自己免疫性甲状腺疾患患者血清、Ｅが正常コントロール対象血清を示す。バーの高さは平均値、カッコ内の数値は標準偏差を示す。
【図５】図５は、ＷＤＲ１−２４ペプチドと、進行甲状腺がん患者血清（ｎ＝１６）、非進行甲状腺がん患者血清（ｎ＝８）、良性甲状腺結節患者血清（ｎ＝１４）、自己免疫性甲状腺疾患患者血清（ｎ＝１５）および正常コントロール対象血清（ｎ＝７）との反応をＥＬＩＳＡにて検討した結果を示すグラフである。縦軸は４５０ｎｍにおける吸光度を示し、横軸において、Ａが進行甲状腺がん患者血清、Ｂが非進行甲状腺がん患者血清、Ｃが良性甲状腺結節患者血清、Ｄが自己免疫性甲状腺疾患患者血清、Ｅが正常コントロール対象血清を示す。バーの高さは平均値、カッコ内の数値は標準偏差を示す。
【図６】図６は、ＷＤＲ１−３３ペプチドと、進行甲状腺がん患者血清（ｎ＝１６）、非進行甲状腺がん患者血清（ｎ＝８）、良性甲状腺結節患者血清（ｎ＝１４）、自己免疫性甲状腺疾患患者血清（ｎ＝１５）および正常コントロール対象血清（ｎ＝７）との反応をＥＬＩＳＡにて検討した結果を示すグラフである。縦軸は４５０ｎｍにおける吸光度を示し、横軸において、Ａが進行甲状腺がん患者血清、Ｂが非進行甲状腺がん患者血清、Ｃが良性甲状腺結節患者血清、Ｄが自己免疫性甲状腺疾患患者血清、Ｅが正常コントロール対象血清を示す。バーの高さは平均値、カッコ内の数値は標準偏差を示す。
【図７】図７は、ＷＤＲ１−３７ペプチドと、進行甲状腺がん患者血清（ｎ＝１６）、非進行甲状腺がん患者血清（ｎ＝８）、良性甲状腺結節患者血清（ｎ＝１４）、自己免疫性甲状腺疾患患者血清（ｎ＝１５）および正常コントロール対象血清（ｎ＝７）との反応をＥＬＩＳＡにて検討した結果を示すグラフである。縦軸は４５０ｎｍにおける吸光度を示し、横軸において、Ａが進行甲状腺がん患者血清、Ｂが非進行甲状腺がん患者血清、Ｃが良性甲状腺結節患者血清、Ｄが自己免疫性甲状腺疾患患者血清、Ｅが正常コントロール対象血清を示す。バーの高さは平均値、カッコ内の数値は標準偏差を示す。
【図８】図８は、フィブロネクチン１−１９ペプチドと、進行甲状腺がん患者血清（ｎ＝１６）、非進行甲状腺がん患者血清（ｎ＝８）、良性甲状腺結節患者血清（ｎ＝１４）、自己免疫性甲状腺疾患患者血清（ｎ＝１５）および正常コントロール対象血清（ｎ＝７）との反応をＥＬＩＳＡにて検討した結果を示すグラフである。縦軸は４５０ｎｍにおける吸光度を示し、横軸において、Ａが進行甲状腺がん患者血清、Ｂが非進行甲状腺がん患者血清、Ｃが良性甲状腺結節患者血清、Ｄが自己免疫性甲状腺疾患患者血清、Ｅが正常コントロール対象血清を示す。バーの高さは平均値、カッコ内の数値は標準偏差を示す。
【図９】図９は、フィブロネクチン１−２７ペプチドと、進行甲状腺がん患者血清（ｎ＝１６）、非進行甲状腺がん患者血清（ｎ＝８）、良性甲状腺結節患者血清（ｎ＝１４）、自己免疫性甲状腺疾患患者血清（ｎ＝１５）および正常コントロール対象血清（ｎ＝７）との反応をＥＬＩＳＡにて検討した結果を示すグラフである。縦軸は４５０ｎｍにおける吸光度を示し、横軸において、Ａが進行甲状腺がん患者血清、Ｂが非進行甲状腺がん患者血清、Ｃが良性甲状腺結節患者血清、Ｄが自己免疫性甲状腺疾患患者血清、Ｅが正常コントロール対象血清を示す。バーの高さは平均値、カッコ内の数値は標準偏差を示す。
【図１０】図１０は、フィブロネクチン１−３０ペプチドと、進行甲状腺がん患者血清（ｎ＝１６）、非進行甲状腺がん患者血清（ｎ＝８）、良性甲状腺結節患者血清（ｎ＝１４）、自己免疫性甲状腺疾患患者血清（ｎ＝１５）および正常コントロール対象血清（ｎ＝７）との反応をＥＬＩＳＡにて検討した結果を示すグラフである。縦軸は４５０ｎｍにおける吸光度を示し、横軸において、Ａが進行甲状腺がん患者血清、Ｂが非進行甲状腺がん患者血清、Ｃが良性甲状腺結節患者血清、Ｄが自己免疫性甲状腺疾患患者血清、Ｅが正常コントロール対象血清を示す。バーの高さは平均値、カッコ内の数値は標準偏差を示す。
【図１１】図１１は、フィブロネクチン１−２０ペプチドと、進行甲状腺がん患者血清（ｎ＝７）、非進行甲状腺がん患者血清（ｎ＝４）との反応をＥＬＩＳＡにて検討した結果を示すグラフである。縦軸は４５０ｎｍにおける吸光度を示し、横軸において、Ａが進行甲状腺がん患者血清、Ｂが非進行甲状腺がん患者血清を示す。バーの高さは平均値、カッコ内の数値は標準偏差を示す。
【図１２】図１２は、フィブロネクチン１−２９ペプチドと、進行甲状腺がん患者血清（ｎ＝７）、非進行甲状腺がん患者血清（ｎ＝４）との反応をＥＬＩＳＡにて検討した結果を示すグラフである。縦軸は４５０ｎｍにおける吸光度を示し、横軸において、Ａが進行甲状腺がん患者血清、Ｂが非進行甲状腺がん患者血清を示す。バーの高さは平均値、カッコ内の数値は標準偏差を示す。
【発明を実施するための形態】
【００１３】
本発明者らは、ＷＤＲ１タンパク質の遺伝子をクローニングし、その結果得られたアミノ酸配列に基づいてＷＤＲ１タンパク質の部分ペプチドを多数合成し、抗ＷＤＲ１抗体力価の測定に使用可能なＷＤＲ１部分ペプチドの候補を見出した（ＷＤＲ１−２、ＷＤＲ１−９、ＷＤＲ１−１６、ＷＤＲ１−２１、ＷＤＲ１−２４、ＷＤＲ１−３３、ＷＤＲ１−３７）。これらのＷＤＲ１部分ペプチドのアミノ酸配列を以下に示す。
【００１４】
ＷＤＲ１−２：Ｓｅｒ−Ｐｈｅ−Ａｌａ−Ｇｌｙ−Ｌｙｓ−Ｇｌｙ−Ｈｉｓ−Ｔｈｒ−Ａｓｎ−Ｇｌｎ−Ｖａｌ−Ｓｅｒ（配列番号：１）
ＷＤＲ１−９：Ｖａｌ−Ａｒｇ−Ｔｙｒ−Ｔｈｒ−Ｓｅｒ−Ｌｅｕ−Ｍｅｔ−Ｌｅｕ−Ａｒｇ−Ａｓｐ−Ｔｙｒ−Ｓｅｒ（配列番号：２）
ＷＤＲ１−１６：Ｐｒｏ−Ｌｙｓ−Ｃｙｓ−Ｖａｌ−Ａｌａ−Ｖａｌ−Ｇｌｙ−Ｐｒｏ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｔｙｒ−Ａｌａ（配列番号：３）
ＷＤＲ１−２１：Ｐｈｅ−Ｓｅｒ−Ｉｌｅ−Ａｓｐ−Ａｓｎ−Ｐｒｏ−Ｇｌｙ−Ｔｙｒ−Ｇｌｕ−Ｐｒｏ−Ｇｌｕ−Ｖａｌ（配列番号：４）
ＷＤＲ１−２４：Ｇｌｕ−Ｇｌｙ−Ｌｙｓ−Ｌｅｕ−Ｌｅｕ−Ｇｌｕ−Ａｌａ−Ｌｙｓ−Ｇｌｙ−Ｐｒｏ−Ｖａｌ−Ｔｈｒ（配列番号：５）
ＷＤＲ１−３３：Ｖａｌ−Ｐｈｅ−Ｓｅｒ−Ｖａｌ−Ａｌａ−Ａｓｐ−Ｇｌｙ−Ｔｙｒ−Ｓｅｒ−Ｇｌｕ−Ａｓｎ−Ａｓｎ（配列番号：６）
ＷＤＲ１−３７：Ｍｅｔ−Ｍｅｔ−Ｖａｌ−Ｔｙｒ−Ｖａｌ−Ｔｒｐ−Ｔｈｒ−Ｌｅｕ−Ｓｅｒ−Ａｓｐ−Ｐｒｏ−Ｇｌｕ（配列番号：７）
【００１５】
本発明者らは、フィブロネクチン１タンパク質の遺伝子をクローニングし、その結果得られたアミノ酸配列に基づいてフィブロネクチン１タンパク質の部分ペプチドを多数合成し、抗フィブロネクチン１抗体力価の測定に使用可能なフィブロネクチン１部分ペプチドの候補を見出した（フィブロネクチン１−１９、フィブロネクチン１−２０、フィブロネクチン１−２７、フィブロネクチン１−２９、フィブロネクチン１−３０）。これらのフィブロネクチン１部分ペプチドのアミノ酸配列を以下に示す。
【００１６】
フィブロネクチン１−１９：Ａｒｇ−Ｔｈｒ−Ｉｌｅ−Ｌｙｓ−Ｐｒｏ−Ａｓｐ−Ｖａｌ−Ａｒｇ−Ｓｅｒ−Ｔｙｒ−Ｔｈｒ−Ｉｌｅ（配列番号：８）
フィブロネクチン１−２０：Ｖａｌ−Ａｒｇ−Ｓｅｒ−Ｔｙｒ−Ｔｈｒ−Ｉｌｅ−Ｔｈｒ−Ｇｌｙ−Ｌｅｕ−Ｇｌｎ−Ｐｒｏ−Ｇｌｙ（配列番号：９）
フィブロネクチン１−２７：Ｓｅｒ−Ａｓｎ−Ｌｅｕ−Ａｒｇ−Ｐｈｅ−Ｌｅｕ−Ａｌａ−Ｔｈｒ−Ｔｈｒ−Ｐｒｏ−Ａｓｎ−Ｓｅｒ（配列番号：１０）
フィブロネクチン１−２９：Ｌｅｕ−Ｌｅｕ−Ｖａｌ−Ｓｅｒ−Ｔｒｐ−Ｇｌｎ−Ｐｒｏ−Ｐｒｏ−Ａｒｇ−Ａｌａ−Ａｒｇ−Ｉｌｅ（配列番号：１１）
フィブロネクチン１−３０：Ｐｒｏ−Ｐｒｏ−Ａｒｇ−Ａｌａ−Ａｒｇ−Ｉｌｅ−Ｔｈｒ−Ｇｌｙ−Ｔｙｒ−Ｉｌｅ−Ｉｌｅ−Ｌｙｓ（配列番号：１２）
【００１７】
本発明者らは、上記ＷＤＲ１部分ペプチドまたはその変異体を用いて対象由来の試料中の抗ＷＤＲ１抗体力価を調べることにより、対象におけるがんの存在を高精度で判定できることを見出した。また本発明者らは、上記ＷＤＲ１部分ペプチドまたはその変異体を用いた場合に、進行がんを効率的に検出できることも見出した。
【００１８】
さらに本発明者らは、上記フィブロネクチン１部分ペプチドまたはその変異体を用いて対象由来の試料中の抗フィブロネクチン１抗体力価を調べることにより、対象におけるがんの存在を高精度で判定できることを見出した。また本発明者らは、上記フィブロネクチン１部分ペプチドまたはその変異体を用いた場合に、進行がんを効率的に検出できることも見出した。
【００１９】
したがって、本発明は、１の態様において、
対象におけるがんの有無を判定する方法であって、
（Ｉ）：
ＷＤＲ１−２ペプチド（Ｓｅｒ−Ｐｈｅ−Ａｌａ−Ｇｌｙ−Ｌｙｓ−Ｇｌｙ−Ｈｉｓ−Ｔｈｒ−Ａｓｎ−Ｇｌｎ−Ｖａｌ−Ｓｅｒ）（配列番号：１）またはその変異体、
ＷＤＲ１−９ペプチド（Ｖａｌ−Ａｒｇ−Ｔｙｒ−Ｔｈｒ−Ｓｅｒ−Ｌｅｕ−Ｍｅｔ−Ｌｅｕ−Ａｒｇ−Ａｓｐ−Ｔｙｒ−Ｓｅｒ）（配列番号：２）または変異体、
ＷＤＲ１−１６ペプチド（Ｐｒｏ−Ｌｙｓ−Ｃｙｓ−Ｖａｌ−Ａｌａ−Ｖａｌ−Ｇｌｙ−Ｐｒｏ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｔｙｒ−Ａｌａ）（配列番号：３）またはその変異体、
ＷＤＲ１−２１ペプチド（Ｐｈｅ−Ｓｅｒ−Ｉｌｅ−Ａｓｐ−Ａｓｎ−Ｐｒｏ−Ｇｌｙ−Ｔｙｒ−Ｇｌｕ−Ｐｒｏ−Ｇｌｕ−Ｖａｌ）（配列番号：４）またはその変異体、
ＷＤＲ１−２４ペプチド（Ｇｌｕ−Ｇｌｙ−Ｌｙｓ−Ｌｅｕ−Ｌｅｕ−Ｇｌｕ−Ａｌａ−Ｌｙｓ−Ｇｌｙ−Ｐｒｏ−Ｖａｌ−Ｔｈｒ）（配列番号：５）またはその変異体、
ＷＤＲ１−３３ペプチド（Ｖａｌ−Ｐｈｅ−Ｓｅｒ−Ｖａｌ−Ａｌａ−Ａｓｐ−Ｇｌｙ−Ｔｙｒ−Ｓｅｒ−Ｇｌｕ−Ａｓｎ−Ａｓｎ）（配列番号：６）またはその変異体、および
ＷＤＲ１−３７ペプチド（Ｍｅｔ−Ｍｅｔ−Ｖａｌ−Ｔｙｒ−Ｖａｌ−Ｔｒｐ−Ｔｈｒ−Ｌｅｕ−Ｓｅｒ−Ａｓｐ−Ｐｒｏ−Ｇｌｕ）（配列番号：７）またはその変異体
からなる群より選択される１種または２種のペプチドを用いて対象由来の試料中の抗ＷＤＲ１抗体の力価を測定すること、あるいは
（ＩＩ）：
フィブロネクチン１−１９ペプチド（Ａｒｇ−Ｔｈｒ−Ｉｌｅ−Ｌｙｓ−Ｐｒｏ−Ａｓｐ−Ｖａｌ−Ａｒｇ−Ｓｅｒ−Ｔｙｒ−Ｔｈｒ−Ｉｌｅ）（配列番号：８）またはその変異体、
フィブロネクチン１−２０ペプチド（Ｖａｌ−Ａｒｇ−Ｓｅｒ−Ｔｙｒ−Ｔｈｒ−Ｉｌｅ−Ｔｈｒ−Ｇｌｙ−Ｌｅｕ−Ｇｌｎ−Ｐｒｏ−Ｇｌｙ）（配列番号：９）またはその変異体、
フィブロネクチン１−２７ペプチド（Ｓｅｒ−Ａｓｎ−Ｌｅｕ−Ａｒｇ−Ｐｈｅ−Ｌｅｕ−Ａｌａ−Ｔｈｒ−Ｔｈｒ−Ｐｒｏ−Ａｓｎ−Ｓｅｒ）（配列番号：１０）またはその変異体、
フィブロネクチン１−２９ペプチド（Ｌｅｕ−Ｌｅｕ−Ｖａｌ−Ｓｅｒ−Ｔｒｐ−Ｇｌｎ−Ｐｒｏ−Ｐｒｏ−Ａｒｇ−Ａｌａ−Ａｒｇ−Ｉｌｅ）（配列番号：１１）またはその変異体、および
フィブロネクチン１−３０ペプチド（Ｐｒｏ−Ｐｒｏ−Ａｒｇ−Ａｌａ−Ａｒｇ−Ｉｌｅ−Ｔｈｒ−Ｇｌｙ−Ｔｙｒ−Ｉｌｅ−Ｉｌｅ−Ｌｙｓ）（配列番号：１２）またはその変異体
からなる群より選択される１種または２種のペプチドを用いて対象由来の試料中の抗フィブロネクチン１抗体の力価を測定すること
を含む方法
を提供する。
【００２０】
対象は哺乳動物であり、その種類は特に限定されない。好ましくは、対象はヒトである。
【００２１】
対象由来の試料は、対象のいずれの部位、組織に由来するものであってもよい。対象の血清由来の試料が好ましい。
【００２２】
ＷＤＲ１部分ペプチドは、ＷＤＲ１タンパク質の一部分の連続したアミノ酸残基からなるペプチドである。ＷＤＲ１タンパク質はいずれの生物種に由来するものであってもよいが、好ましくは、試料を採取する対象と同じ生物種由来のものである。ＷＤＲ１タンパク質のアミノ酸配列は公知である。
【００２３】
ＷＤＲ１部分ペプチドは変異体であってもよい。ＷＤＲ１部分ペプチドの変異体は、ＷＤＲ１部分ペプチドを構成する１個ないし数個のアミノ酸残基が他のアミノ酸残基に置換されている、あるいは１個ないし数個のアミノ酸残基が欠失または付加されているペプチドをいう。数個とは１個〜６個であってもよく、好ましくは１個〜３個、より好ましくは１個または２個、さらに好ましくは１個である。アミノ酸残基の置換は、保存的アミノ酸置換が好ましい。保存的アミノ酸置換は公知である。
【００２４】
ＷＤＲ１部分ペプチドの変異体は誘導体であってもよい。誘導体化としてはリン酸化、アミド化、アセチル化、アルキル化、標識化などが例示されるが、これらに限定されない。標識としては放射性標識、蛍光標識、発光標識、ペプチドタグ、酵素、抗体などが例示されるが、これらに限定されない。
【００２５】
ＷＤＲ１部分ペプチド、その変異体または誘導体はチップやその他の担体に固定化されていてもよい。
【００２６】
ＷＤＲ１部分ペプチドの変異体または誘導体は、元のＷＤＲ１部分ペプチドと同等の特性を有するものであり、例えば、元のＷＤＲ１部分ペプチドと同等のＷＤＲ１自己抗体に対する特異性または力価測定精度を有するものであってもよい。
【００２７】
ＷＤＲ１部分ペプチドは公知の方法にて得ることができきる。公知のペプチド合成方法を用いてＷＤＲ１部分ペプチドを得てもよい。ＷＤＲ１部分ペプチドの変異体および誘導体も公知の方法を用いて製造することができる。
【００２８】
フィブロネクチン１部分ペプチドは、フィブロネクチン１タンパク質の一部分の連続したアミノ酸残基からなるペプチドである。フィブロネクチン１タンパク質はいずれの生物種に由来するものであってもよいが、好ましくは、試料を採取する対象と同じ生物種由来のものである。フィブロネクチン１タンパク質のアミノ酸配列は公知である。
【００２９】
フィブロネクチン１部分ペプチドは変異体であってもよい。フィブロネクチン１部分ペプチドの変異体は、フィブロネクチン１部分ペプチドを構成する１個ないし数個のアミノ酸残基が他のアミノ酸残基に置換されている、あるいは１個ないし数個のアミノ酸残基が欠失または付加されているペプチドをいう。数個とは１個〜６個であってもよく、好ましくは１個〜３個、より好ましくは１個または２個、さらに好ましくは１個である。アミノ酸残基の置換は、保存的アミノ酸置換が好ましい。保存的アミノ酸置換は公知である。
【００３０】
フィブロネクチン１部分ペプチドの変異体は誘導体であってもよい。誘導体化としてはリン酸化、アミド化、アセチル化、アルキル化、標識化などが例示されるが、これらに限定されない。標識としては放射性標識、蛍光標識、発光標識、ペプチドタグ、酵素、抗体などが例示されるが、これらに限定されない。
【００３１】
フィブロネクチン１部分ペプチド、その変異体または誘導体はチップやその他の担体に固定化されていてもよい。
【００３２】
フィブロネクチン１部分ペプチドの変異体または誘導体は、元のフィブロネクチン１部分ペプチドと同等の特性を有するものであり、例えば、元のフィブロネクチン１部分ペプチドと同等のフィブロネクチン１自己抗体に対する特異性または力価測定精度を有するものであってもよい。
【００３３】
フィブロネクチン１部分ペプチドは公知の方法にて得ることができきる。公知のペプチド合成方法を用いてフィブロネクチン１部分ペプチドを得てもよい。フィブロネクチン１部分ペプチドの変異体および誘導体も公知の方法を用いて製造することができる。
【００３４】
上記方法において、ＷＤＲ１部分ペプチドおよび／またはフィブロネクチン１部分ペプチドを単独で用いてもよい。これらのペプチドを２種以上組み合わせて用いることにより、がんの有無の判定および進行がんの検出を高い精度で効率的に行うことができる。
【００３５】
上記方法にて有無を判定されるがんはいずれの種類のがんであってもよいが、好ましくは、甲状腺、副甲状腺、副腎、ランゲルハンス島、精巣、卵巣、乳腺、前立腺など（これらに限定されない）の分泌腺組織に生じるがんであり、より好ましくは甲状腺がんである。
【００３６】
本発明のＷＤＲ１部分ペプチドまたはその変異体、およびフィブロネクチン１部分ペプチドまたはその変異体を用いて抗ＷＤＲ１抗体力価および抗フィブロネクチン１抗体力価を測定すると、良性甲状腺結節患者血清、自己免疫性甲状腺疾患患者血清および正常コントロール対象血清と比較して、進行がんおよび非進行がん患者血清におけるこれらの抗体力価が高い。さらに、非進行がん患者血清と比較して、進行がん患者血清におけるこれらの抗体力価が高い。これらより、本発明の部分ペプチドまたはその変異体を用いて、対象におけるがんの有無の判定、および進行癌の検出を高い精度で効率良く行えることがわかる。
【００３７】
試料中の抗ＷＤＲ１抗体の力価が高いほど、対象ががんを有する可能性が高く、しかもがんが進行がんである可能性があると判定することができる。試料中の抗ＷＤＲ１抗体の力価の高低を判定する基準として、がんを有していない対象または良性の腫瘍または疾患を有する対象の試料中の抗ＷＤＲ１抗体力価を用いてもよい。
【００３８】
試料中の抗フィブロネクチン１抗体の力価が高いほど、対象ががんを有する可能性が高く、しかもがんが進行がんである可能性があると判定することができる。試料中の抗フィブロネクチン１抗体の力価の高低を判定する基準として、がんを有していない対象または良性の腫瘍または疾患を有する対象の試料中の抗フィブロネクチン１抗体力価を用いてもよい。
【００３９】
上記方法により進行がんを高い精度で効率よく検出することができる。進行がんを検出する場合、試料中の抗ＷＤＲ１抗体の力価の高低を判定する基準として、非進行がんを有する対象の試料中の抗ＷＤＲ１抗体力価を用いてもよい。進行がんを検出する場合、試料中の抗フィブロネクチン１抗体の力価の高低を判定する基準として、非進行がんを有する対象の試料中の抗フィブロネクチン１抗体力価を用いてもよい。進行癌の検出において、ＷＤＲ１−３３ペプチドを用いることが好ましい。
【００４０】
抗体力価の測定は当業者に公知である。例えばＥＬＩＳＡ法を用いて抗体力価を測定してもよい。
【００４１】
進行がんは、ある程度進行したがんをいう。典型的にはステージＩＩ以上のがんをいう。非進行がんは、進行がんよりも進行していないがんをいう。典型的にはステージＩ以下のがんをいう。進行がんの例として、甲状腺がんの場合には、ステージＩＩ以上の濾胞上皮がん（乳頭がん、濾胞がん）および未分化がんが挙げられるが、これらに限定されない。
【００４２】
本発明は、さらなる態様において、
ＷＤＲ１−２ペプチド（Ｓｅｒ−Ｐｈｅ−Ａｌａ−Ｇｌｙ−Ｌｙｓ−Ｇｌｙ−Ｈｉｓ−Ｔｈｒ−Ａｓｎ−Ｇｌｎ−Ｖａｌ−Ｓｅｒ）（配列番号：１）またはその変異体、
ＷＤＲ１−９ペプチド（Ｖａｌ−Ａｒｇ−Ｔｙｒ−Ｔｈｒ−Ｓｅｒ−Ｌｅｕ−Ｍｅｔ−Ｌｅｕ−Ａｒｇ−Ａｓｐ−Ｔｙｒ−Ｓｅｒ）（配列番号：２）または変異体、
ＷＤＲ１−１６ペプチド（Ｐｒｏ−Ｌｙｓ−Ｃｙｓ−Ｖａｌ−Ａｌａ−Ｖａｌ−Ｇｌｙ−Ｐｒｏ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｔｙｒ−Ａｌａ）（配列番号：３）またはその変異体、
ＷＤＲ１−２１ペプチド（Ｐｈｅ−Ｓｅｒ−Ｉｌｅ−Ａｓｐ−Ａｓｎ−Ｐｒｏ−Ｇｌｙ−Ｔｙｒ−Ｇｌｕ−Ｐｒｏ−Ｇｌｕ−Ｖａｌ）（配列番号：４）またはその変異体、
ＷＤＲ１−２４ペプチド（Ｇｌｕ−Ｇｌｙ−Ｌｙｓ−Ｌｅｕ−Ｌｅｕ−Ｇｌｕ−Ａｌａ−Ｌｙｓ−Ｇｌｙ−Ｐｒｏ−Ｖａｌ−Ｔｈｒ）（配列番号：５）またはその変異体、
ＷＤＲ１−３３ペプチド（Ｖａｌ−Ｐｈｅ−Ｓｅｒ−Ｖａｌ−Ａｌａ−Ａｓｐ−Ｇｌｙ−Ｔｙｒ−Ｓｅｒ−Ｇｌｕ−Ａｓｎ−Ａｓｎ）（配列番号：６）またはその変異体、
ＷＤＲ１−３７ペプチド（Ｍｅｔ−Ｍｅｔ−Ｖａｌ−Ｔｙｒ−Ｖａｌ−Ｔｒｐ−Ｔｈｒ−Ｌｅｕ−Ｓｅｒ−Ａｓｐ−Ｐｒｏ−Ｇｌｕ）（配列番号：７）またはその変異体
フィブロネクチン１−１９ペプチド（Ａｒｇ−Ｔｈｒ−Ｉｌｅ−Ｌｙｓ−Ｐｒｏ−Ａｓｐ−Ｖａｌ−Ａｒｇ−Ｓｅｒ−Ｔｙｒ−Ｔｈｒ−Ｉｌｅ）（配列番号：８）またはその変異体、
フィブロネクチン１−２０ペプチド（Ｖａｌ−Ａｒｇ−Ｓｅｒ−Ｔｙｒ−Ｔｈｒ−Ｉｌｅ−Ｔｈｒ−Ｇｌｙ−Ｌｅｕ−Ｇｌｎ−Ｐｒｏ−Ｇｌｙ）（配列番号：９）またはその変異体、
フィブロネクチン１−２７ペプチド（Ｓｅｒ−Ａｓｎ−Ｌｅｕ−Ａｒｇ−Ｐｈｅ−Ｌｅｕ−Ａｌａ−Ｔｈｒ−Ｔｈｒ−Ｐｒｏ−Ａｓｎ−Ｓｅｒ）（配列番号：１０）またはその変異体、
フィブロネクチン１−２９ペプチド（Ｌｅｕ−Ｌｅｕ−Ｖａｌ−Ｓｅｒ−Ｔｒｐ−Ｇｌｎ−Ｐｒｏ−Ｐｒｏ−Ａｒｇ−Ａｌａ−Ａｒｇ−Ｉｌｅ）（配列番号：１１）またはその変異体、および
フィブロネクチン１−３０ペプチド（Ｐｒｏ−Ｐｒｏ−Ａｒｇ−Ａｌａ−Ａｒｇ−Ｉｌｅ−Ｔｈｒ−Ｇｌｙ−Ｔｙｒ−Ｉｌｅ−Ｉｌｅ−Ｌｙｓ）（配列番号：１２）またはその変異体
からなる群より選択される１種または２種のペプチドを含む、対象におけるがんの有無を判定するためのキット
を提供する。本発明のキットはさらに抗ＷＤＲ１抗体力価および／または抗フィブロネクチン１抗体力価を測定するための手段を含んでいてもよく、例えばＥＬＩＳＡ用試薬や器具を含んでいてもよい。通常は、キットに取扱説明書が添付される。本発明のキットを用いて、がんの有無の判定および進行がんの検出を高い精度で効率的に行うことができる。
【００４３】
本発明は、さらなる態様において、
ＷＤＲ１−２ペプチド（Ｓｅｒ−Ｐｈｅ−Ａｌａ−Ｇｌｙ−Ｌｙｓ−Ｇｌｙ−Ｈｉｓ−Ｔｈｒ−Ａｓｎ−Ｇｌｎ−Ｖａｌ−Ｓｅｒ）（配列番号：１）またはその変異体、
ＷＤＲ１−９ペプチド（Ｖａｌ−Ａｒｇ−Ｔｙｒ−Ｔｈｒ−Ｓｅｒ−Ｌｅｕ−Ｍｅｔ−Ｌｅｕ−Ａｒｇ−Ａｓｐ−Ｔｙｒ−Ｓｅｒ）（配列番号：２）または変異体、
ＷＤＲ１−１６ペプチド（Ｐｒｏ−Ｌｙｓ−Ｃｙｓ−Ｖａｌ−Ａｌａ−Ｖａｌ−Ｇｌｙ−Ｐｒｏ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｔｙｒ−Ａｌａ）（配列番号：３）またはその変異体、
ＷＤＲ１−２１ペプチド（Ｐｈｅ−Ｓｅｒ−Ｉｌｅ−Ａｓｐ−Ａｓｎ−Ｐｒｏ−Ｇｌｙ−Ｔｙｒ−Ｇｌｕ−Ｐｒｏ−Ｇｌｕ−Ｖａｌ）（配列番号：４）またはその変異体、
ＷＤＲ１−２４ペプチド（Ｇｌｕ−Ｇｌｙ−Ｌｙｓ−Ｌｅｕ−Ｌｅｕ−Ｇｌｕ−Ａｌａ−Ｌｙｓ−Ｇｌｙ−Ｐｒｏ−Ｖａｌ−Ｔｈｒ）（配列番号：５）またはその変異体、
ＷＤＲ１−３３ペプチド（Ｖａｌ−Ｐｈｅ−Ｓｅｒ−Ｖａｌ−Ａｌａ−Ａｓｐ−Ｇｌｙ−Ｔｙｒ−Ｓｅｒ−Ｇｌｕ−Ａｓｎ−Ａｓｎ）（配列番号：６）またはその変異体、および
ＷＤＲ１−３７ペプチド（Ｍｅｔ−Ｍｅｔ−Ｖａｌ−Ｔｙｒ−Ｖａｌ−Ｔｒｐ−Ｔｈｒ−Ｌｅｕ−Ｓｅｒ−Ａｓｐ−Ｐｒｏ−Ｇｌｕ）（配列番号：７）またはその変異体
からなる群より選択される１種または２種のペプチドを用いることを特徴とする、対象由来の試料中の抗ＷＤＲ１抗体の力価を測定する方法
を提供する。本発明の方法を用いることにより、抗ＷＤＲ１抗体の力価を高い精度で測定することができる。
【００４４】
本発明は、もう１つの態様において、
１種またはそれ以上の上記ペプチドまたはその変異体を含む、対象由来の試料中の抗ＷＤＲ１抗体の力価を測定するためのキット
を提供する。本発明のキットはさらに抗ＷＤＲ１抗体力価を測定するための手段を含んでいてもよく、例えばＥＬＩＳＡ用試薬や器具を含んでいてもよい。通常は、キットに取扱説明書が添付される。本発明のキットを用いることにより、抗ＷＤＲ１抗体の力価を高い精度で測定することができる。
【００４５】
本発明は、さらなる態様において、
フィブロネクチン１−１９ペプチド（Ａｒｇ−Ｔｈｒ−Ｉｌｅ−Ｌｙｓ−Ｐｒｏ−Ａｓｐ−Ｖａｌ−Ａｒｇ−Ｓｅｒ−Ｔｙｒ−Ｔｈｒ−Ｉｌｅ）（配列番号：８）またはその変異体、
フィブロネクチン１−２０ペプチド（Ｖａｌ−Ａｒｇ−Ｓｅｒ−Ｔｙｒ−Ｔｈｒ−Ｉｌｅ−Ｔｈｒ−Ｇｌｙ−Ｌｅｕ−Ｇｌｎ−Ｐｒｏ−Ｇｌｙ）（配列番号：９）またはその変異体、
フィブロネクチン１−２７ペプチド（Ｓｅｒ−Ａｓｎ−Ｌｅｕ−Ａｒｇ−Ｐｈｅ−Ｌｅｕ−Ａｌａ−Ｔｈｒ−Ｔｈｒ−Ｐｒｏ−Ａｓｎ−Ｓｅｒ）（配列番号：１０）またはその変異体、
フィブロネクチン１−２９ペプチド（Ｌｅｕ−Ｌｅｕ−Ｖａｌ−Ｓｅｒ−Ｔｒｐ−Ｇｌｎ−Ｐｒｏ−Ｐｒｏ−Ａｒｇ−Ａｌａ−Ａｒｇ−Ｉｌｅ）（配列番号：１１）またはその変異体、および
フィブロネクチン１−３０ペプチド（Ｐｒｏ−Ｐｒｏ−Ａｒｇ−Ａｌａ−Ａｒｇ−Ｉｌｅ−Ｔｈｒ−Ｇｌｙ−Ｔｙｒ−Ｉｌｅ−Ｉｌｅ−Ｌｙｓ）（配列番号：１２）またはその変異体
からなる群より選択される１種またはそれ以上のペプチドを用いることを特徴とする、対象由来の試料中の抗フィブロネクチン抗体の力価を測定する方法
を提供する。本発明の方法を用いることにより、抗フィブロネクチン１抗体の力価を高い精度で測定することができる。
【００４６】
本発明は、もう１つの態様において、
１種またはそれ以上の上記ペプチドまたはその変異体を含む、対象由来の試料中の抗フィブロネクチン１抗体の力価を測定するためのキット
を提供する。本発明のキットはさらに抗フィブロネクチン１抗体力価を測定するための手段を含んでいてもよく、例えばＥＬＩＳＡ用試薬や器具を含んでいてもよい。通常は、キットに取扱説明書が添付される。本発明のキットを用いることにより、抗フィブロネクチン１抗体の力価を高い精度で測定することができる。
【００４７】
以下に実施例を示して本発明をより詳細かつ具体的に説明するが、実施例は本発明を限定するものではない。
【実施例１】
【００４８】
実施例１：ＷＤＲ１部分ペプチドを用いる対象中のがんの有無の判定および進行がんの検出
（１）ＷＤＲ１部分ペプチドの選定
本発明者らは、以前、ＧＳＴ結合組み換えＷＤＲ１を用いて抗体力価の測定を行ったが、以下のような課題があった。すなわち、ＷＤＲ１の構造上、疎水性領域に富み、大腸菌、酵母などを用いた発現系にて安定した抗原蛋白の供給が困難であった。また、ＧＳＴ結合タンパクからＧＳＴを切り離すとＷＤＲ１が不安定化するため、コントロールとしてＧＳＴを用いることが必須であった。さらに、ＧＳＴ結合ＷＤＲ１の精製には、封入体の破砕や透析の処理が必要となり、長期保存で断片化が生じるなど、長期保存にも問題があった。
【００４９】
そこで本発明者らは、ＷＤＲ１の立体構造予測に基づいて、ＷＤＲ１抗体との反応性が期待される領域を網羅する合成ペプチドライブラリーを作製した。ペプチドの長さは、ＷＤＲ１に対する選択性および特異性、合成のしやすさ、合成品の純度等を考慮して、試行錯誤の末、約１０〜約１５アミノ酸が好ましいと考えられた。
【００５０】
作製したペプチドライブラリーを、Izawa S et al, Clinical Endocrinology 2013, 79:35-42において陽性コントロールとして用いた血清を含む抗ＷＤＲ１高力価陽性の検体、および良性甲状腺結節の患者血清を含む検体と反応させ、前者が統計学的に有意に高値を示すペプチドを選定した。その結果、以下のＷＤＲ１部分ペプチドを選定した：
ＷＤＲ１−２：Ｓｅｒ−Ｐｈｅ−Ａｌａ−Ｇｌｙ−Ｌｙｓ−Ｇｌｙ−Ｈｉｓ−Ｔｈｒ−Ａｓｎ−Ｇｌｎ−Ｖａｌ−Ｓｅｒ（配列番号：１）
ＷＤＲ１−９：Ｖａｌ−Ａｒｇ−Ｔｙｒ−Ｔｈｒ−Ｓｅｒ−Ｌｅｕ−Ｍｅｔ−Ｌｅｕ−Ａｒｇ−Ａｓｐ−Ｔｙｒ−Ｓｅｒ（配列番号：２）
ＷＤＲ１−１６：Ｐｒｏ−Ｌｙｓ−Ｃｙｓ−Ｖａｌ−Ａｌａ−Ｖａｌ−Ｇｌｙ−Ｐｒｏ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｔｙｒ−Ａｌａ（配列番号：３）
ＷＤＲ１−２１：Ｐｈｅ−Ｓｅｒ−Ｉｌｅ−Ａｓｐ−Ａｓｎ−Ｐｒｏ−Ｇｌｙ−Ｔｙｒ−Ｇｌｕ−Ｐｒｏ−Ｇｌｕ−Ｖａｌ（配列番号：４）
ＷＤＲ１−２４：Ｇｌｕ−Ｇｌｙ−Ｌｙｓ−Ｌｅｕ−Ｌｅｕ−Ｇｌｕ−Ａｌａ−Ｌｙｓ−Ｇｌｙ−Ｐｒｏ−Ｖａｌ−Ｔｈｒ（配列番号：５）
ＷＤＲ１−３３：Ｖａｌ−Ｐｈｅ−Ｓｅｒ−Ｖａｌ−Ａｌａ−Ａｓｐ−Ｇｌｙ−Ｔｙｒ−Ｓｅｒ−Ｇｌｕ−Ａｓｎ−Ａｓｎ（配列番号：６）
ＷＤＲ１−３７：Ｍｅｔ−Ｍｅｔ−Ｖａｌ−Ｔｙｒ−Ｖａｌ−Ｔｒｐ−Ｔｈｒ−Ｌｅｕ−Ｓｅｒ−Ａｓｐ−Ｐｒｏ−Ｇｌｕ（配列番号：７）。
【００５１】
（２）対象血清試料中の抗ＷＤＲ１抗体力価と対象におけるがんの有無および進行がんの存在との関連性
対象血清試料中のＷＤＲ１抗体力価はＥＬＩＳＡ法により測定した。以下にＥＬＩＳＡ法の手順を説明する。
【００５２】
（ｉ）ペプチドプレートの作製
ペプチド濃度が１０μｇ／ｍＬとなるように０．１Ｍカーボネートバッファー（ｐＨ９．６）にて希釈し、プレートへ塗布し、４℃で一晩静置にて反応させた。反応後、０．０１％ Ｔｗｅｅｎ／ＰＢＳにて３回洗浄し、０．５％ヤギ血清、０．２％ゼラチン／ＰＢＳにてブロッキングした（室温、１時間以上反応）。その後０．０１％Ｔｗｅｅｎ／ＰＢＳにて洗浄した。
【００５３】
（ｉｉ）血清試料中のＷＤＲ１抗体力価の測定
血清試料を０．５％ヤギ血清、０．２％ゼラチン／ＰＢＳにて１／５００希釈し、（ｉ）のペプチドプレートで４℃、１時間、静置にて反応させた。反応後、０．０１％ Ｔｗｅｅｎ／ＰＢＳにて３回洗浄した。二次抗体（Ａｎｔｉ−Ｈｕｍａｎ  ＩｇＧ  （Ｈ＋Ｌ），ＨＲＰ  Ｃｏｎｊｕｇａｔｅ／Ｐｒｏｍｅｇａ）を０．５％ヤギ血清、０．２％ゼラチン／ＰＢＳにて１／５０００希釈し、ペプチドプレートで室温、１時間、静置にて反応させた。反応後、０．０１％ Ｔｗｅｅｎ／ＰＢＳにて３回洗浄した。酵素基質液（ＴＭＢ＋／Ｄａｋｏ）と反応させ、室温で１０分静置して発色させた。１Ｎ硫酸にて反応を停止させ、４５０ｎｍの吸光度を測定した。
【００５４】
（３）結果
ＷＤＲ１−２ペプチドと、進行甲状腺がん患者血清（ｎ＝１６）、非進行甲状腺がん患者血清（ｎ＝８）、良性甲状腺結節患者血清（ｎ＝１４）、自己免疫性甲状腺疾患患者血清（ｎ＝１５）および正常コントロール対象血清（ｎ＝７）との反応をＥＬＩＳＡにて検討した。進行甲状腺がんは未分化がん（９例）およびステージＩＩ以上の進行甲状腺乳頭がん（７例）であった（フィブロネクチン１−２０ペプチドおよびフィブロネクチン１−２９ペプチドを用いた実験を除き、以下の実験でも同じ）。非進行甲状腺がんはステージＩの甲状腺乳頭がんであった（以下の実験でも同じ）。自己免疫性甲状腺疾患はバセドウ病（１０例）および慢性甲状腺炎（５例）であった（以下の実験でも同じ）。結果を図１に示す。進行甲状腺がん患者血清のＷＤＲ１抗体力価が最も高く、次に非進行甲状腺がん患者血清のＷＤＲ１抗体力価が高かった。良性甲状腺結節患者血清、自己免疫性甲状腺疾患患者血清および正常コントロール対象血清では、進行甲状腺がん患者血清および非進行甲状腺がん患者血清と比較してＷＤＲ１抗体力価は低値であった。これらの結果から、ＷＤＲ１−２ペプチドは、高い精度で甲状腺がんを検出でき、しかも進行がんを効率的に検出できることがわかった。
【００５５】
ＷＤＲ１−９ペプチドと、進行甲状腺がん患者血清（ｎ＝１６）、非進行甲状腺がん患者血清（ｎ＝８）、良性甲状腺結節患者血清（ｎ＝１４）、自己免疫性甲状腺疾患患者血清（ｎ＝１５）および正常コントロール対象血清（ｎ＝７）との反応をＥＬＩＳＡにて検討した。結果を図２に示す。進行甲状腺がん患者血清のＷＤＲ１抗体力価が最も高く、次に非進行甲状腺がん患者血清のＷＤＲ１抗体力価が高かった。良性甲状腺結節患者血清、自己免疫性甲状腺疾患患者血清および正常コントロール対象血清では、進行甲状腺がん患者血清および非進行甲状腺がん患者血清と比較してＷＤＲ１抗体力価は低値であった。これらの結果から、ＷＤＲ１−９ペプチドは、高い精度で甲状腺がんを検出でき、しかも進行がんを効率的に検出できることがわかった。
【００５６】
ＷＤＲ１−１６ペプチドと、進行甲状腺がん患者血清（ｎ＝１６）、非進行甲状腺がん患者血清（ｎ＝８）、良性甲状腺結節患者血清（ｎ＝１４）、自己免疫性甲状腺疾患患者血清（ｎ＝１５）および正常コントロール対象血清（ｎ＝７）との反応をＥＬＩＳＡにて検討した。結果を図３に示す。進行甲状腺がん患者血清のＷＤＲ１抗体力価が最も高く、次に非進行甲状腺がん患者血清のＷＤＲ１抗体力価が高かった。良性甲状腺結節患者血清、自己免疫性甲状腺疾患患者血清および正常コントロール対象血清では、進行甲状腺がん患者血清および非進行甲状腺がん患者血清と比較してＷＤＲ１抗体力価は低値であった。これらの結果から、ＷＤＲ１−１６ペプチドは、高い精度で甲状腺がんを検出でき、しかも進行がんを効率的に検出できることがわかった。
【００５７】
ＷＤＲ１−２１ペプチドと、進行甲状腺がん患者血清（ｎ＝１６）、非進行甲状腺がん患者血清（ｎ＝８）、良性甲状腺結節患者血清（ｎ＝１４）、自己免疫性甲状腺疾患患者血清（ｎ＝１５）および正常コントロール対象血清（ｎ＝７）との反応をＥＬＩＳＡにて検討した。結果を図４に示す。進行甲状腺がん患者血清のＷＤＲ１抗体力価が最も高く、次に非進行甲状腺がん患者血清のＷＤＲ１抗体力価が高かった。良性甲状腺結節患者血清、自己免疫性甲状腺疾患患者血清および正常コントロール対象血清では、進行甲状腺がん患者血清および非進行甲状腺がん患者血清と比較してＷＤＲ１抗体力価は低値であった。これらの結果から、ＷＤＲ１−２１ペプチドは、高い精度で甲状腺がんを検出でき、しかも進行がんを効率的に検出できることがわかった。
【００５８】
ＷＤＲ１−２４ペプチドと、進行甲状腺がん患者血清（ｎ＝１６）、非進行甲状腺がん患者血清（ｎ＝８）、良性甲状腺結節患者血清（ｎ＝１４）、自己免疫性甲状腺疾患患者血清（ｎ＝１５）および正常コントロール対象血清（ｎ＝７）との反応をＥＬＩＳＡにて検討した。結果を図５に示す。進行甲状腺がん患者血清のＷＤＲ１抗体力価が最も高く、次に非進行甲状腺がん患者血清のＷＤＲ１抗体力価が高かった。良性甲状腺結節患者血清、自己免疫性甲状腺疾患患者血清および正常コントロール対象血清では、進行甲状腺がん患者血清および非進行甲状腺がん患者血清と比較してＷＤＲ１抗体力価は低値であった。これらの結果から、ＷＤＲ１−２４ペプチドは、高い精度で甲状腺がんを検出でき、しかも進行がんを効率的に検出できることがわかった。
【００５９】
ＷＤＲ１−３３ペプチドと、進行甲状腺がん患者血清（ｎ＝１６）、非進行甲状腺がん患者血清（ｎ＝８）、良性甲状腺結節患者血清（ｎ＝１４）、自己免疫性甲状腺疾患患者血清（ｎ＝１５）および正常コントロール対象血清（ｎ＝７）との反応をＥＬＩＳＡにて検討した。結果を図６に示す。進行甲状腺がん患者血清のＷＤＲ１抗体力価が最も高く、非進行甲状腺がん患者血清のＷＤＲ１抗体力価の約２倍であった。良性甲状腺結節患者血清、自己免疫性甲状腺疾患患者血清および正常コントロール対象血清では、進行甲状腺がん患者血清および非進行甲状腺がん患者血清と比較してＷＤＲ１抗体力価は低値であった。これらの結果から、ＷＤＲ１−３３ペプチドは、高い精度で甲状腺がんを検出でき、しかも進行がんの検出に好適であることがわかった。
【００６０】
ＷＤＲ１−３７ペプチドと、進行甲状腺がん患者血清（ｎ＝１６）、非進行甲状腺がん患者血清（ｎ＝８）、良性甲状腺結節患者血清（ｎ＝１４）、自己免疫性甲状腺疾患患者血清（ｎ＝１５）および正常コントロール対象血清（ｎ＝７）との反応をＥＬＩＳＡにて検討した。結果を図７に示す。進行甲状腺がん患者血清のＷＤＲ１抗体力価が最も高く、次に非進行甲状腺がん患者血清のＷＤＲ１抗体力価が高かった。良性甲状腺結節患者血清、自己免疫性甲状腺疾患患者血清および正常コントロール対象血清では、進行甲状腺がん患者血清および非進行甲状腺がん患者血清と比較してＷＤＲ１抗体力価は低値であった。これらの結果から、ＷＤＲ１−３７ペプチドは、高い精度で甲状腺がんを検出でき、しかも進行がんを効率的に検出できることがわかった。
【実施例２】
【００６１】
実施例２：フィブロネクチン１部分ペプチドを用いる対象中のがんの有無の判定および進行がんの検出
（１）フィブロネクチン１部分ペプチドの選定
本発明者らは、以前、組み換えフィブロネクチン１を用いて抗体力価の測定を行ったが、ＷＤＲ１の場合と同様、タンパクの製造上の問題や長期保存性に関する問題があった。
【００６２】
そこで本発明者らは、ＷＤＲ１の場合と同様の手法にて、以下のフィブロネクチン１部分ペプチドを選定した：
フィブロネクチン１−１９：Ａｒｇ−Ｔｈｒ−Ｉｌｅ−Ｌｙｓ−Ｐｒｏ−Ａｓｐ−Ｖａｌ−Ａｒｇ−Ｓｅｒ−Ｔｙｒ−Ｔｈｒ−Ｉｌｅ（配列番号：８）
フィブロネクチン１−２０：Ｖａｌ−Ａｒｇ−Ｓｅｒ−Ｔｙｒ−Ｔｈｒ−Ｉｌｅ−Ｔｈｒ−Ｇｌｙ−Ｌｅｕ−Ｇｌｎ−Ｐｒｏ−Ｇｌｙ（配列番号：９）
フィブロネクチン１−２７：Ｓｅｒ−Ａｓｎ−Ｌｅｕ−Ａｒｇ−Ｐｈｅ−Ｌｅｕ−Ａｌａ−Ｔｈｒ−Ｔｈｒ−Ｐｒｏ−Ａｓｎ−Ｓｅｒ（配列番号：１０）
フィブロネクチン１−２９：Ｌｅｕ−Ｌｅｕ−Ｖａｌ−Ｓｅｒ−Ｔｒｐ−Ｇｌｎ−Ｐｒｏ−Ｐｒｏ−Ａｒｇ−Ａｌａ−Ａｒｇ−Ｉｌｅ（配列番号：１１）
フィブロネクチン１−３０：Ｐｒｏ−Ｐｒｏ−Ａｒｇ−Ａｌａ−Ａｒｇ−Ｉｌｅ−Ｔｈｒ−Ｇｌｙ−Ｔｙｒ−Ｉｌｅ−Ｉｌｅ−Ｌｙｓ（配列番号：１２）。
【００６３】
（２）対象血清試料中の抗フィブロネクチン１抗体力価と対象におけるがんの有無および進行がんの存在との関連性
実施例１にて説明したＥＬＩＳＡ法により、甲状腺患者の血清試料中の抗フィブロネクチン１抗体力価を測定した。
【００６４】
（３）結果
フィブロネクチン１−１９ペプチドと、進行甲状腺がん患者血清（ｎ＝１６）、非進行甲状腺がん患者血清（ｎ＝８）、良性甲状腺結節患者血清（ｎ＝１４）、自己免疫性甲状腺疾患患者血清（ｎ＝１５）および正常コントロール対象血清（ｎ＝７）との反応をＥＬＩＳＡにて検討した。結果を図８に示す。進行甲状腺がん患者血清のフィブロネクチン１抗体力価が最も高く、次に非進行甲状腺がん患者血清のフィブロネクチン１抗体力価が高かった。良性甲状腺結節患者血清、自己免疫性甲状腺疾患患者血清および正常コントロール対象血清では、進行甲状腺がん患者血清および非進行甲状腺がん患者血清と比較してフィブロネクチン１抗体力価は低値であった。これらの結果から、フィブロネクチン１−１９ペプチドは、高い精度で甲状腺がんを検出でき、しかも進行がんを効率的に検出できることがわかった。
【００６５】
フィブロネクチン１−２７ペプチドと、進行甲状腺がん患者血清（ｎ＝１６）、非進行甲状腺がん患者血清（ｎ＝８）、良性甲状腺結節患者血清（ｎ＝１４）、自己免疫性甲状腺疾患患者血清（ｎ＝１５）および正常コントロール対象血清（ｎ＝７）との反応をＥＬＩＳＡにて検討した。結果を図９に示す。進行甲状腺がん患者血清のフィブロネクチン１抗体力価が最も高く、次に非進行甲状腺がん患者血清のフィブロネクチン１抗体力価が高かった。良性甲状腺結節患者血清、自己免疫性甲状腺疾患患者血清および正常コントロール対象血清では、進行甲状腺がん患者血清および非進行甲状腺がん患者血清と比較してフィブロネクチン１抗体力価は低値であった。これらの結果から、フィブロネクチン１−２７ペプチドは、高い精度で甲状腺がんを検出でき、しかも進行がんを効率的に検出できることがわかった。
【００６６】
フィブロネクチン１−３０ペプチドと、進行甲状腺がん患者血清（ｎ＝１６）、非進行甲状腺がん患者血清（ｎ＝８）、良性甲状腺結節患者血清（ｎ＝１４）、自己免疫性甲状腺疾患患者血清（ｎ＝１５）および正常コントロール対象血清（ｎ＝７）との反応をＥＬＩＳＡにて検討した。結果を図１０に示す。進行甲状腺がん患者血清のフィブロネクチン１抗体力価が最も高く、次に非進行甲状腺がん患者血清のフィブロネクチン１抗体力価が高かった。良性甲状腺結節患者血清、自己免疫性甲状腺疾患患者血清および正常コントロール対象血清では、進行甲状腺がん患者血清および非進行甲状腺がん患者血清と比較してフィブロネクチン１抗体力価は低値であった。これらの結果から、フィブロネクチン１−３０ペプチドは、高い精度で甲状腺がんを検出でき、しかも進行がんを効率的に検出できることがわかった。
【００６７】
フィブロネクチン１−２０ペプチドおよびフィブロネクチン１−２９ペプチドについても同様に実験を行い、上記と同様の結果を得た。
【００６８】
フィブロネクチン１−２０ペプチドと、進行甲状腺がん患者血清（ｎ＝７）、非進行甲状腺がん患者血清（ｎ＝４）との反応をＥＬＩＳＡにて検討した。進行甲状腺がんは未分化がん（３例）およびステージＩＩ以上の進行甲状腺乳頭がん（４例）であった。結果を図１１に示す。進行甲状腺がん患者血清のフィブロネクチン１抗体力価は非進行甲状腺がん患者血清のフィブロネクチン１抗体力価より高かった。この結果から、フィブロネクチン１−２０ペプチドは、進行がんを効率的に検出できることがわかった。また、良性甲状腺結節患者血清、自己免疫性甲状腺疾患患者血清および正常コントロール対象血清では、進行甲状腺がん患者血清および非進行甲状腺がん患者血清と比較してフィブロネクチン１抗体力価は低値であったことから（データ示さず）、フィブロネクチン１−２０ペプチドは、甲状腺がんの検出に使用できることがわかった。
【００６９】
フィブロネクチン１−２９ペプチドと、進行甲状腺がん患者血清（ｎ＝７）、非進行甲状腺がん患者血清（ｎ＝４）との反応をＥＬＩＳＡにて検討した。進行甲状腺がんは未分化がん（３例）およびステージＩＩ以上の進行甲状腺乳頭がん（４例）であった。結果を図１２に示す。進行甲状腺がん患者血清のフィブロネクチン１抗体力価は非進行甲状腺がん患者血清のフィブロネクチン１抗体力価より高かった。この結果から、フィブロネクチン１−２９ペプチドは、進行がんを効率的に検出できることがわかった。また、良性甲状腺結節患者血清、自己免疫性甲状腺疾患患者血清および正常コントロール対象血清では、進行甲状腺がん患者血清および非進行甲状腺がん患者血清と比較してフィブロネクチン１抗体力価は低値であったことから（データ示さず）、フィブロネクチン１−２９ペプチドは、甲状腺がんの検出に使用できることがわかった。
【産業上の利用可能性】
【００７０】
本発明は、がんの診断キットの製造、がんの研究などにおいて利用可能である。
【配列表フリーテキスト】
【００７１】
配列番号：１はＷＤＲ１−２ペプチドのアミノ酸配列である。
配列番号：２はＷＤＲ１−９ペプチドのアミノ酸配列である。
配列番号：３はＷＤＲ１−１６ペプチドのアミノ酸配列である。
配列番号：４はＷＤＲ１−２１ペプチドのアミノ酸配列である。
配列番号：５はＷＤＲ１−２４ペプチドのアミノ酸配列である。
配列番号：６はＷＤＲ１−３３ペプチドのアミノ酸配列である。
配列番号：７はＷＤＲ１−３７ペプチドのアミノ酸配列である。
配列番号：８はフィブロネクチン１−１９ペプチドのアミノ酸配列である。
配列番号：９はフィブロネクチン１−２０ペプチドのアミノ酸配列である。
配列番号：１０はフィブロネクチン１−２７ペプチドのアミノ酸配列である。
配列番号：１１はフィブロネクチン１−２９ペプチドのアミノ酸配列である。
配列番号：１２はフィブロネクチン１−３０ペプチドのアミノ酸配列である。
【図１】
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【図２】
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【図３】
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【図４】
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【図５】
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【図６】
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【図７】
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【図８】
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【図９】
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【図１０】
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【図１１】
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【図１２】
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【配列表】
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