(57)【要約】      （修正有）【課題】（３Ｒ，４Ｓ）−１−（（４−アミノ−５Ｈ−ピロロ［３，２−ｄ］ピリミジン−７−イル）メチル）−４−（メチルチオメチル）ピロリジン−３−オール（Ｉａ）及びその中間体の製造方法の提供。【解決手段】（ＸＩＩ）を、水／エタノール中で式（ＶＩＩ）及びホルムアルデヒドとカップリングして化合物（Ｉａ）を得るステップを含む方法。2019206525.tif 0000452019206525.tif 000046【選択図】なし【特許請求の範囲】
【請求項１】
（３Ｒ，４Ｓ）−１−（（４−アミノ−５Ｈ−ピロロ［３，２−ｄ］ピリミジン−７−イル）メチル）−４−（メチルチオメチル）ピロリジン−３−オールリン酸塩、（３Ｒ，４Ｓ）−１−（（４−アミノ−５Ｈ−ピロロ［３，２−ｄ］ピリミジン−７−イル）メチル）−４−（メチルチオメチル）ピロリジン−３−オールギ酸塩、（３Ｒ，４Ｓ）−１−（（４−アミノ−５Ｈ−ピロロ［３，２−ｄ］ピリミジン−７−イル）メチル）−４−（メチルチオメチル）ピロリジン−３−オールシュウ酸塩、及び（３Ｒ，４Ｓ）−１−（（４−アミノ−５Ｈ−ピロロ［３，２−ｄ］ピリミジン−７−イル）メチル）−４−（メチルチオメチル）ピロリジン−３−オール硫酸塩からなる群から選択される、（３Ｒ，４Ｓ）−１−（（４−アミノ−５Ｈ−ピロロ［３，２−ｄ］ピリミジン−７−イル）メチル）−４−（メチルチオメチル）ピロリジン−３−オールの塩形態。
【請求項２】
結晶性である、請求項１に記載の（３Ｒ，４Ｓ）−１−（（４−アミノ−５Ｈ−ピロロ［３，２−ｄ］ピリミジン−７−イル）メチル）−４−（メチルチオメチル）ピロリジン−３−オールの塩形態。
【請求項３】
（３Ｒ，４Ｓ）−１−（（４−アミノ−５Ｈ−ピロロ［３，２−ｄ］ピリミジン−７−イル）メチル）−４−（メチルチオメチル）ピロリジン−３−オールリン酸塩、すなわち式（Ｉａ）：
【化１】
2019206525.tif 000039
の化合物である、請求項１又は２に記載の塩形態。
【請求項４】
以下の面間隔ｄ：約１９．１、１４．４、１１．４９、９．４４、７．８７、７．１８、６．５０、５．８５、５．７４、５．１６、４．７９、４．５３、３．９７７、３．８２３、３．７２５、３．５７９及び３．４５９Åにそれぞれ対応する、以下の２θ角度：約５．３８、７．１０、８．９３、１０．８７、１３．０６、１４．３１、１５．８１、１７．５９、１７．９２、１９．９７、２１．５３、２２．７６、２６．００、２７．０６、２７．７９、２８．９５及び２９．９７°２θ±０．０５°２θでの粉末Ｘ線回折ピークにより特徴付けられる、Ｄ形の結晶性（３Ｒ，４Ｓ）−１−（（４−アミノ−５Ｈ−ピロロ［３，２−ｄ］ピリミジン−７−イル）メチル）−４−（メチルチオメチル）ピロリジン−３−オールリン酸塩である、請求項１又は２に記載の塩形態。
【請求項５】
以下の面間隔ｄ：約７．０５、６．７１、６．２３、５．４０、５．１１、４．９６、４．７３、４．６４、４．４６、４．１５９、４．０１４、３．９３１、３．６７９、３．６２５、３．５３１、３．４０１、３．３５７、３．３１１、３．１８３、３．２３６、３．０４５、３．１１９Åにそれぞれ対応する、以下の２θ角度：約１４．５７、１５．３２、１６．５０、１９．０７、２０．１７、２０．７７、２１．７８、２２．２２、２３．１２、２４．８４、２５．７５、２６．３１、２８．１４、２８．５７、２９．３５、３０．５０、３０．９１、３１．３５、３２．６４、３２．０９、３４．１７、３３．３３°２θ±０．０５°２θでの１つ又は複数の追加の粉末Ｘ線回折ピークによりさらに特徴付けられる、請求項４に記載の塩形態。
【請求項６】
以下の面間隔ｄ：約１９．５、１４．６、１１．８１、９．７０、６．４５、５．９６、５．８６、４．８５、４．７７、４．５４、４．０３１、３．８４９、３．５８９、３．４５７及び３．３７４Åにそれぞれ対応する、以下の２θ角度：約５．２６、７．０１、８．６９、１０．５８、１５．９５、１７．２６、１７．５７、２１．２７、２１．６０、２２．７５、２５．６４、２６．８８、２８．８６、２９．９９及び３０．７５°２θ±０．０５°２θでの粉末Ｘ線回折ピークにより特徴付けられる、Ｅ形の結晶性（３Ｒ，４Ｓ）−１−（（４−アミノ−５Ｈ−ピロロ［３，２−ｄ］ピリミジン−７−イル）メチル）−４−（メチルチオメチル）ピロリジン−３−オールリン酸塩である、請求項１又は２に記載の塩形態。
【請求項７】
以下の面間隔ｄ：約１１．５２、８．１８、６．１４、５．７７、５．３２、５．１２、４．９４、４．６７、４．５８、４．４８、４．２７８、３．９８４、３．９５２、３．８８４、３．７３４、３．５３１、３．４３１、３．３３６、３．２８８、３．２０８、３．１４６、３．１１５、３．０６６Åにそれぞれ対応する、以下の２θ角度：約８．９１、１２．５６、１６．７６、１７．８４、１９．３６、２０．１４、２０．８６、２２．０９、２２．５３、２３．０３、２４．１４、２５．９５、２６．１６、２６．６３、２７．７２、２９．３５、３０．２２、３１．１１、３１．５７、３２．３８、３３．０４、３３．３８、３３．９３°２θ±０．０５°２θでの１つ又は複数の追加の粉末Ｘ線回折ピークによりさらに特徴付けられる、請求項６に記載の塩形態。
【請求項８】
以下の面間隔ｄ：約１９．５、１４．７、１１．７６、９．６２、６．５０、６．４１、５．８７、５．８０、５．１２、４．９７、４．８３、４．７５、４．５３、４．０２２、３．９６２、３．６２７、３．５０６、３．３９８、３．３０３及び３．２０４Åにそれぞれ対応する、以下の２θ角度：約５．２５、７．００、８．７３、１０．６７、１５．８２、１６．０４、１７．５２、１７．７５、２０．１３、２０．７７、２１．３６、２１．７２、２２．７９、２５．７０、２６．１０、２８．５５、２９．５６、３０．５２、３１．４３及び３２．４２°２θ±０．０５°２θでの粉末Ｘ線回折ピークにより特徴付けられる、Ｆ形の結晶性（３Ｒ，４Ｓ）−１−（（４−アミノ−５Ｈ−ピロロ［３，２−ｄ］ピリミジン−７−イル）メチル）−４−（メチルチオメチル）ピロリジン−３−オールリン酸塩である、請求項１又は２に記載の塩形態。
【請求項９】
以下の面間隔ｄ：約１１．５０、８．０９、７．２５、６．７９、６．１７、５．３６、４．６７、４．３７４、４．２４１、４．１６５、３．８５９、３．８３２、３．７２２、３．５７１、３．４６９、３．２３３、３．１５４、３．０８８、３．０５２、２．９６８、２．９０７、２．８５０、２．７９５、２．６６８、２．５９２、２．５６７、２．５０５、２．４６４、２．４０８、２．３６２、２．２８３、２．２６５、２．２４３、２．１８９、２．１５６、２．１３５Åにそれぞれ対応する、以下の２θ角度：約８．９２、１２．６９、１４．１９、１５．１４、１６．６８、１９．２１、２２．０９、２３．６０、２４．３５、２４．８０、２６．８１、２７．００、２７．８１、２９．０１、２９．８８、３２．１２、３２．９５、３３．６８、３４．０８、３５．０８、３５．８４、３６．５８、３７．３２、３９．１８、４０．３７、４０．７９、４１．８４、４２．５６、４３．６２、４４．５１、４６．１４、４６．５２、４７．００、４８．２４、４９．０２、４９．５４°２θ±０．０５°２θでの１つ又は複数の追加の粉末Ｘ線回折ピークによりさらに特徴付けられる、請求項８に記載の塩形態。
【請求項１０】
以下の面間隔ｄ：約１６．５、８．３２、７．５９、５．６５、５．０３、４．７０、４．２６３及び３．５２０Åにそれぞれ対応する、以下の２θ角度：約６．２２、１２．３５、１３．５４、１８．２３、２０．４７、２１．９４、２４．２２及び２９．４４°２θ±０．０５°２θでの粉末Ｘ線回折ピークにより特徴付けられる、結晶性（３Ｒ，４Ｓ）−１−（（４−アミノ−５Ｈ−ピロロ［３，２−ｄ］ピリミジン−７−イル）メチル）−４−（メチルチオメチル）ピロリジン−３−オールシュウ酸塩である、請求項１又は２に記載の塩形態。
【請求項１１】
以下の面間隔ｄ：約６．８８、６．５４、５．３９、４．５８、３．４４８、３．３３６、３．２３９、３．１７７、３．０６８Åにそれぞれ対応する、以下の２θ角度：約１４．９４、１５．７２、１９．１１、２２．５４、３０．０７、３１．１１、３２．０６、３２．７１、３３．９０°２θ±０．０５°２θでの１つ又は複数の追加の粉末Ｘ線回折ピークによりさらに特徴付けられる、請求項１０に記載の塩形態。
【請求項１２】
以下の面間隔ｄ：約１２．６５、６．３１、４．９８、４．１５７、４．０２２、３．９７２、３．６９８、３．２２３及び３．１４７Åにそれぞれ対応する、以下の２θ角度：約８．１１、１６．３０、２０．６８、２４．８５、２５．７０、２６．０３、２８．００、３２．２３及び３３．０２°２θ±０．０５°２θでの粉末Ｘ線回折ピークにより特徴付けられる、結晶性（３Ｒ，４Ｓ）−１−（（４−アミノ−５Ｈ−ピロロ［３，２−ｄ］ピリミジン−７−イル）メチル）−４−（メチルチオメチル）ピロリジン−３−オールギ酸塩である、請求項１又は２に記載の塩形態。
【請求項１３】
以下の面間隔ｄ：約９．９３、７．５２、５．８７、５．７４、５．４７、４．８４、４．７５、４．４５、４．１９４、３．８１４、３．７５４、３．６３２、３．６００、３．４２０、３．３４２、３．３２２、３．１０８、３．０３９、３．０１４、２．９２９、２．８９６、２．８４５、２．８２５、２．７３７、２．６８６、２．６１９、２．５８６、２．５２８、２．４８６、２．４５４、２．３６９、２．３３０、２．２７７、２．２６６、２．２２７、２．１７８、２．１４９、２．１１２Åにそれぞれ対応する、以下の２θ角度：約１０．３４、１３．６６、１７．５４、１７．９５、１８．８３、２１．３２、２１．７１、２３．１７、２４．６３、２７．１３、２７．５７、２８．５１、２８．７７、３０．３３、３１．０５、３１．２４、３３．４５、３４．２４、３４．５２、３５．５７、３５．９９、３６．６６、３６．９３、３８．１５、３８．９１、３９．９４、４０．４７、４１．４５、４２．１７、４２．７５、４４．３６、４５．１５、４６．２７、４６．５０、４７．３６、４８．４９、４９．２０、５０．１２°２θ±０．０５°２θでの１つ又は複数の追加の粉末Ｘ線回折ピークによりさらに特徴付けられる、請求項１２に記載の塩形態。
【請求項１４】
以下の面間隔ｄ：約１７．８、９．９４、７．８２、６．６７、６．４７、５．８４、５．６２、４．８１、４．２５、３．９５４、３．８６６、３．７４１、３．４２５、３．３５、３．２９３及び３．２１９Åにそれぞれ対応する、以下の２θ角度：約５．７５、１０．３３、１３．１４、１５．４１、１５．９０、１７．６１、１８．３２、２１．４３、２４．３０、２６．１５、２６．７６、２７．６７、３０．２８、３０．９７、３１．５２及び３２．２７°２θ±０．０５°２θでの粉末Ｘ線回折ピークにより特徴付けられる、結晶性（３Ｒ，４Ｓ）−１−（（４−アミノ−５Ｈ−ピロロ［３，２−ｄ］ピリミジン−７−イル）メチル）−４−（メチルチオメチル）ピロリジン−３−オール硫酸塩である、請求項１又は２に記載の塩形態。
【請求項１５】
以下の面間隔ｄ：約５．３８、５．０８、４．９４、４．６３、４．１９２、３．５２９、３．１２７Åにそれぞれ対応する、以下の２θ角度：約１９．１４、２０．２８、２０．８７、２２．２６、２４．６４、２９．３７、３３．２４°２θ±０．０５°２θでの１つ又は複数の追加の粉末Ｘ線回折ピークによりさらに特徴付けられる、請求項１４に記載の塩形態。
【請求項１６】
示差走査熱量測定で測定した場合に約１６５℃〜約１８５℃の範囲で吸熱を示す（３Ｒ，４Ｓ）−１−（（４−アミノ−５Ｈ−ピロロ［３，２−ｄ］ピリミジン−７−イル）メチル）−４−（メチルチオメチル）ピロリジン−３−オールリン酸塩である、請求項１又は２に記載の塩形態。
【請求項１７】
示差走査熱量測定で測定した場合に約１３７．０４℃で吸熱を示す（３Ｒ，４Ｓ）−１−（（４−アミノ−５Ｈ−ピロロ［３，２−ｄ］ピリミジン−７−イル）メチル）−４−（メチルチオメチル）ピロリジン−３−オールシュウ酸塩である、請求項１又は２に記載の塩形態。
【請求項１８】
示差走査熱量測定で測定した場合に約１７９．５４℃で吸熱を示す（３Ｒ，４Ｓ）−１−（（４−アミノ−５Ｈ−ピロロ［３，２−ｄ］ピリミジン−７−イル）メチル）−４−（メチルチオメチル）ピロリジン−３−オールギ酸塩である、請求項１又は２に記載の塩形態。
【請求項１９】
請求項１〜１８のいずれか一項に記載の塩形態と少なくとも１種の薬学的に許容される賦形剤とを含む医薬組成物。
【請求項２０】
前記塩形態は（３Ｒ，４Ｓ）−１−（（４−アミノ−５Ｈ−ピロロ［３，２−ｄ］ピリミジン−７−イル）メチル）−４−（メチルチオメチル）ピロリジン−３−オールリン酸塩である、請求項１９に記載の医薬組成物。
【請求項２１】
ＭＴＡＰを阻害することが望ましい疾患又は障害を処置する方法であって、請求項１〜１８のいずれか一項に記載の塩形態の有効量を、それを必要とする患者に投与することを含む方法。
【請求項２２】
結晶性（３Ｒ，４Ｓ）−１−（（４−アミノ−５Ｈ−ピロロ［３，２−ｄ］ピリミジン−７−イル）メチル）−４−（メチルチオメチル）ピロリジン−３−オールリン酸塩の調製のための方法であって、
（ａ）（３Ｒ，４Ｓ）−１−（（４−アミノ−５Ｈ−ピロロ［３，２−ｄ］ピリミジン−７−イル）メチル）−４−（メチルチオメチル）ピロリジン−３−オールリン酸塩の水溶液を調製するステップと、
（ｂ）アルコール、メチルエチルケトン、テトラヒドロフラン又はアセトンを溶液に添加して、（３Ｒ，４Ｓ）−１−（（４−アミノ−５Ｈ−ピロロ［３，２−ｄ］ピリミジン−７−イル）メチル）−４−（メチルチオメチル）ピロリジン−３−オールリン酸塩の結晶を形成するステップと、
（ｃ）（３Ｒ，４Ｓ）−１−（（４−アミノ−５Ｈ−ピロロ［３，２−ｄ］ピリミジン−７−イル）メチル）−４−（メチルチオメチル）ピロリジン−３−オールリン酸塩の結晶を単離するステップと、
を含む方法。
【請求項２３】
式（Ｖ）：
【化２】
2019206525.tif 000040
の化合物を調製するための方法であって、
（ｄ）式（ＩＩＩ）の化合物をクロロギ酸メチルと反応させて式（ＩＶ）の化合物を生成するステップと、
【化３】
2019206525.tif 000041
（ｅ）塩基性条件下で式（ＩＶ）の化合物を環化して式（Ｖ）の化合物を得るステップと、
を含み、ステップ（ｄ）における溶媒として酢酸エチルが使用される方法。
【請求項２４】
式（ＸＩＩ）：
【化４】
2019206525.tif 000042
の化合物を調製するための方法であって、
（ｆ）式（ＩＸ）の化合物をメタンスルホニルクロリド及び２，６−ルチジン、続いてナトリウムチオメトキシドと接触させて式（Ｘ）の化合物を得るステップと、
【化５】
2019206525.tif 000043
（ｇ）式（Ｘ）の化合物を脱保護し、続いて式（ＸＩ）の化合物に変換するステップと、
【化６】
2019206525.tif 000044
（ｈ）式（ＸＩ）の化合物を式（ＸＩＩ）の化合物に変換するステップと、
を含み、ステップ（ｆ）における溶媒としてアセトンが使用される方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、（３Ｒ，４Ｓ）−１−（（４−アミノ−５Ｈ−ピロロ［３，２−ｄ］ピリミジン−７−イル）メチル）−４−（メチルチオメチル）ピロリジン−３−オールすなわち下記化合物（Ｉ）（ＭＴＤＩＡ）の塩形態及び該塩の多形形態に関する。本発明はさらに、塩形態を調製するための方法、並びに５’−メチルチオアデノシンホスホリラーゼ（ＭＴＡＰ）を阻害することが望ましい疾患及び障害（例えば癌）の処置における塩形態の使用に関する。
【化１】
2019206525.tif 000002
【背景】
【０００２】
５’−メチルチオアデノシンホスホリラーゼ（ＭＴＡＰ）は、ポリアミン生合成経路において、また哺乳動物のプリンサルベージにおいて機能する。ＭＴＡＰは、５’−メチルチオアデノシン（ＭＴＡ）からアデニン及び５−メチルチオ−α−Ｄ−リボース−１−リン酸塩（ＭＴＲ−１Ｐ）への可逆的な加リン酸分解を触媒する。形成されるアデニンは、その後再利用され、ヌクレオチドに変換される。本質的に、ヒト細胞中の遊離アデニンの唯一の供給源は、これらの酵素の作用の結果である。ＭＴＲ−１Ｐはその後、一連の酵素作用によってメチオニンに変換される。
【０００３】
ＭＴＡは、スペルミジン及びスペルミン形成中の脱カルボキシル化されたＳ−アデノシルメチオニンからプトレシンへのアミノプロピル基の転移に関与する反応の副生成物である。反応は、スペルミジン合成酵素及びスペルミン合成酵素により触媒される。合成酵素は、ＭＴＡ蓄積による生成物阻害に対し非常に感受性が高い。したがって、ＭＴＡＰを阻害すると、細胞においてポリアミン生合成及びアデニンのサルベージ経路が大幅に制限される。
【０００４】
多くの悪性腫瘍で、遺伝子欠失によるＭＴＡＰの欠損が報告されている。悪性腫瘍細胞中でＭＴＡＰ酵素機能が失われているのは、第９染色体における近接して連鎖するＭＴＡＰ及びｐ１６／ＭＴＳ１腫瘍抑制遺伝子のホモ接合性欠失によるものであることが知られている。ｐ１６／ＭＴＳ１が存在しないことがおそらく腫瘍の原因であることから、ＭＴＡＰ活性の欠如は遺伝子欠失の結果であり、癌の原因ではない。しかし、ＭＴＡＰが存在しないと、悪性腫瘍細胞においてプリン代謝が変化することから、細胞はプリンの供給を主として新生経路に依存することになる。そのため、悪性腫瘍細胞は、新生経路を遮断するメトトレキセート及びアザセリンのような阻害剤に対して非常に高い感受性を有するようになる。したがって、メトトレキセート又はアザセリンとＭＴＡＰ阻害剤との組合せ治療は非常に高い抗腫瘍特性を有すると予想される。
【０００５】
国際公開第２００４／０１８４９６号には、ヌクレオシドプロセシング酵素の阻害剤である、ＭＴＤＩＡを含む化合物が記載されている。米国特許出願公開第２０１０／０２２２３７０号には、ＭＴＤＩＡが前立腺及び頭頸部癌の処置に有用であることが記載されている。
【０００６】
本発明の目的は、（３Ｒ，４Ｓ）−１−（（４−アミノ−５Ｈ−ピロロ［３，２−ｄ］ピリミジン−７−イル）メチル）−４−（メチルチオメチル）ピロリジン−３−オールの塩形態を提供すること、又は有用な代替物を少なくとも提供することである。
【発明の開示】
【０００７】
第１の態様において、本発明は、（３Ｒ，４Ｓ）−１−（（４−アミノ−５Ｈ−ピロロ［３，２−ｄ］ピリミジン−７−イル）メチル）−４−（メチルチオメチル）ピロリジン−３−オールリン酸塩、（３Ｒ，４Ｓ）−１−（（４−アミノ−５Ｈ−ピロロ［３，２−ｄ］ピリミジン−７−イル）メチル）−４−（メチルチオメチル）ピロリジン−３−オールギ酸塩、（３Ｒ，４Ｓ）−１−（（４−アミノ−５Ｈ−ピロロ［３，２−ｄ］ピリミジン−７−イル）メチル）−４−（メチルチオメチル）ピロリジン−３−オールシュウ酸塩、及び（３Ｒ，４Ｓ）−１−（（４−アミノ−５Ｈ−ピロロ［３，２−ｄ］ピリミジン−７−イル）メチル）−４−（メチルチオメチル）ピロリジン−３−オール硫酸塩からなる群から選択される、（３Ｒ，４Ｓ）−１−（（４−アミノ−５Ｈ−ピロロ［３，２−ｄ］ピリミジン−７−イル）メチル）−４−（メチルチオメチル）ピロリジン−３−オールの塩形態を提供する。
【０００８】
別の態様において、本発明は、（３Ｒ，４Ｓ）−１−（（４−アミノ−５Ｈ−ピロロ［３，２−ｄ］ピリミジン−７−イル）メチル）−４−（メチルチオメチル）ピロリジン−３−オールリン酸塩、（３Ｒ，４Ｓ）−１−（（４−アミノ−５Ｈ−ピロロ［３，２−ｄ］ピリミジン−７−イル）メチル）−４−（メチルチオメチル）ピロリジン−３−オールギ酸塩、（３Ｒ，４Ｓ）−１−（（４−アミノ−５Ｈ−ピロロ［３，２−ｄ］ピリミジン−７−イル）メチル）−４−（メチルチオメチル）ピロリジン−３−オールシュウ酸塩、及び（３Ｒ，４Ｓ）−１−（（４−アミノ−５Ｈ−ピロロ［３，２−ｄ］ピリミジン−７−イル）メチル）−４−（メチルチオメチル）ピロリジン−３−オール硫酸塩からなる群から選択される、（３Ｒ，４Ｓ）−１−（（４−アミノ−５Ｈ−ピロロ［３，２−ｄ］ピリミジン−７−イル）メチル）−４−（メチルチオメチル）ピロリジン−３−オールの結晶性塩形態を提供する。
【０００９】
別の態様において、本発明は、（３Ｒ，４Ｓ）−１−（（４−アミノ−５Ｈ−ピロロ［３，２−ｄ］ピリミジン−７−イル）メチル）−４−（メチルチオメチル）ピロリジン−３−オールリン酸塩、すなわち式（Ｉａ）：
【化２】
2019206525.tif 000003
の化合物を提供する。
【００１０】
別の態様において、本発明は、結晶性（３Ｒ，４Ｓ）−１−（（４−アミノ−５Ｈ−ピロロ［３，２−ｄ］ピリミジン−７−イル）メチル）−４−（メチルチオメチル）ピロリジン−３−オールリン酸塩を提供する。
【００１１】
さらに別の態様において、本発明は、以下の面間隔ｄ：約１９．１、１４．４、１１．４９、９．４４、７．８７、７．１８、６．５０、５．８５、５．７４、５．１６、４．７９、４．５３、３．９７７、３．８２３、３．７２５、３．５７９及び３．４５９Åにそれぞれ対応する、以下の２θ角度：約５．３８、７．１０、８．９３、１０．８７、１３．０６、１４．３１、１５．８１、１７．５９、１７．９２、１９．９７、２１．５３、２２．７６、２６．００、２７．０６、２７．７９、２８．９５及び２９．９７°２θ±０．０５°２θでの粉末Ｘ線回折ピークにより特徴付けられる、Ｄ形の結晶性（３Ｒ，４Ｓ）−１−（（４−アミノ−５Ｈ−ピロロ［３，２−ｄ］ピリミジン−７−イル）メチル）−４−（メチルチオメチル）ピロリジン−３−オールリン酸塩を提供する。
【００１２】
好ましくは、Ｄ形の結晶性（３Ｒ，４Ｓ）−１−（（４−アミノ−５Ｈ−ピロロ［３，２−ｄ］ピリミジン−７−イル）メチル）−４−（メチルチオメチル）ピロリジン−３−オールリン酸塩は、以下の面間隔ｄ：約７．０５、６．７１、６．２３、５．４０、５．１１、４．９６、４．７３、４．６４、４．４６、４．１５９、４．０１４、３．９３１、３．６７９、３．６２５、３．５３１、３．４０１、３．３５７、３．３１１、３．１８３、３．２３６、３．０４５、３．１１９Åにそれぞれ対応する、以下の２θ角度：約１４．５７、１５．３２、１６．５０、１９．０７、２０．１７、２０．７７、２１．７８、２２．２２、２３．１２、２４．８４、２５．７５、２６．３１、２８．１４、２８．５７、２９．３５、３０．５０、３０．９１、３１．３５、３２．６４、３２．０９、３４．１７、３３．３３°２θ±０．０５°２θでの１つ又は複数の追加の粉末Ｘ線回折ピークによりさらに特徴付けられる。
【００１３】
さらなる態様において、本発明は、実質的に図３ａに示される粉末Ｘ線回折パターンを有する結晶性（３Ｒ，４Ｓ）−１−（（４−アミノ−５Ｈ−ピロロ［３，２−ｄ］ピリミジン−７−イル）メチル）−４−（メチルチオメチル）ピロリジン−３−オールリン酸塩  Ｄ形を提供する。
【００１４】
さらに別の態様において、本発明は、以下の面間隔ｄ：約１９．５、１４．６、１１．８１、９．７０、６．４５、５．９６、５．８６、４．８５、４．７７、４．５４、４．０３１、３．８４９、３．５８９、３．４５７及び３．３７４Åにそれぞれ対応する、以下の２θ角度：約５．２６、７．０１、８．６９、１０．５８、１５．９５、１７．２６、１７．５７、２１．２７、２１．６０、２２．７５、２５．６４、２６．８８、２８．８６、２９．９９及び３０．７５°２θ±０．０５°２θでの粉末Ｘ線回折ピークにより特徴付けられる、Ｅ形の結晶性（３Ｒ，４Ｓ）−１−（（４−アミノ−５Ｈ−ピロロ［３，２−ｄ］ピリミジン−７−イル）メチル）−４−（メチルチオメチル）ピロリジン−３−オールリン酸塩を提供する。
【００１５】
好ましくは、Ｅ形の結晶性（３Ｒ，４Ｓ）−１−（（４−アミノ−５Ｈ−ピロロ［３，２−ｄ］ピリミジン−７−イル）メチル）−４−（メチルチオメチル）ピロリジン−３−オールリン酸塩は、以下の面間隔ｄ：約１１．５２、８．１８、６．１４、５．７７、５．３２、５．１２、４．９４、４．６７、４．５８、４．４８、４．２７８、３．９８４、３．９５２、３．８８４、３．７３４、３．５３１、３．４３１、３．３３６、３．２８８、３．２０８、３．１４６、３．１１５、３．０６６Åにそれぞれ対応する、以下の２θ角度：約８．９１、１２．５６、１６．７６、１７．８４、１９．３６、２０．１４、２０．８６、２２．０９、２２．５３、２３．０３、２４．１４、２５．９５、２６．１６、２６．６３、２７．７２、２９．３５、３０．２２、３１．１１、３１．５７、３２．３８、３３．０４、３３．３８、３３．９３°２θ±０．０５°２θでの１つ又は複数の追加の粉末Ｘ線回折ピークによりさらに特徴付けられる。
【００１６】
さらなる態様において、本発明は、実質的に図４ａに示される粉末Ｘ線回折パターンを有する結晶性（３Ｒ，４Ｓ）−１−（（４−アミノ−５Ｈ−ピロロ［３，２−ｄ］ピリミジン−７−イル）メチル）−４−（メチルチオメチル）ピロリジン−３−オールリン酸塩  Ｅ形を提供する。
【００１７】
さらに別の態様において、本発明は、以下の面間隔ｄ：約１９．５、１４．７、１１．７６、９．６２、６．５０、６．４１、５．８７、５．８０、５．１２、４．９７、４．８３、４．７５、４．５３、４．０２２、３．９６２、３．６２７、３．５０６、３．３９８、３．３０３及び３．２０４Åにそれぞれ対応する、以下の２θ角度：約５．２５、７．００、８．７３、１０．６７、１５．８２、１６．０４、１７．５２、１７．７５、２０．１３、２０．７７、２１．３６、２１．７２、２２．７９、２５．７０、２６．１０、２８．５５、２９．５６、３０．５２、３１．４３及び３２．４２°２θ±０．０５°２θでの粉末Ｘ線回折ピークにより特徴付けられる、Ｆ形の結晶性（３Ｒ，４Ｓ）−１−（（４−アミノ−５Ｈ−ピロロ［３，２−ｄ］ピリミジン−７−イル）メチル）−４−（メチルチオメチル）ピロリジン−３−オールリン酸塩を提供する。
【００１８】
好ましくは、Ｆ形の結晶性（３Ｒ，４Ｓ）−１−（（４−アミノ−５Ｈ−ピロロ［３，２−ｄ］ピリミジン−７−イル）メチル）−４−（メチルチオメチル）ピロリジン−３−オールリン酸塩は、以下の面間隔ｄ：約１１．５０、８．０９、７．２５、６．７９、６．１７、５．３６、４．６７、４．３７４、４．２４１、４．１６５、３．８５９、３．８３２、３．７２２、３．５７１、３．４６９、３．２３３、３．１５４、３．０８８、３．０５２、２．９６８、２．９０７、２．８５０、２．７９５、２．６６８、２．５９２、２．５６７、２．５０５、２．４６４、２．４０８、２．３６２、２．２８３、２．２６５、２．２４３、２．１８９、２．１５６、２．１３５Åにそれぞれ対応する、以下の２θ角度：約８．９２、１２．６９、１４．１９、１５．１４、１６．６８、１９．２１、２２．０９、２３．６０、２４．３５、２４．８０、２６．８１、２７．００、２７．８１、２９．０１、２９．８８、３２．１２、３２．９５、３３．６８、３４．０８、３５．０８、３５．８４、３６．５８、３７．３２、３９．１８、４０．３７、４０．７９、４１．８４、４２．５６、４３．６２、４４．５１、４６．１４、４６．５２、４７．００、４８．２４、４９．０２、４９．５４°２θ±０．０５°２θでの１つ又は複数の追加の粉末Ｘ線回折ピークによりさらに特徴付けられる。
【００１９】
さらなる態様において、本発明は、実質的に図５ａに示される粉末Ｘ線回折パターンを有する結晶性（３Ｒ，４Ｓ）−１−（（４−アミノ−５Ｈ−ピロロ［３，２−ｄ］ピリミジン−７−イル）メチル）−４−（メチルチオメチル）ピロリジン−３−オールリン酸塩  Ｆ形を提供する。
【００２０】
さらに別の態様において、本発明は、以下の面間隔ｄ：約１６．５、８．３２、７．５９、５．６５、５．０３、４．７０、４．２６３及び３．５２０Åにそれぞれ対応する、以下の２θ角度：約６．２２、１２．３５、１３．５４、１８．２３、２０．４７、２１．９４、２４．２２及び２９．４４°２θ±０．０５°２θでの粉末Ｘ線回折ピークにより特徴付けられる、結晶性（３Ｒ，４Ｓ）−１−（（４−アミノ−５Ｈ−ピロロ［３，２−ｄ］ピリミジン−７−イル）メチル）−４−（メチルチオメチル）ピロリジン−３−オールシュウ酸塩を提供する。
【００２１】
好ましくは、結晶性（３Ｒ，４Ｓ）−１−（（４−アミノ−５Ｈ−ピロロ［３，２−ｄ］ピリミジン−７−イル）メチル）−４−（メチルチオメチル）ピロリジン−３−オールシュウ酸塩は、以下の面間隔ｄ：約６．８８、６．５４、５．３９、４．５８、３．４４８、３．３３６、３．２３９、３．１７７、３．０６８Åにそれぞれ対応する、以下の２θ角度：約１４．９４、１５．７２、１９．１１、２２．５４、３０．０７、３１．１１、３２．０６、３２．７１、３３．９０°２θ±０．０５°２θでの１つ又は複数の追加の粉末Ｘ線回折ピークによりさらに特徴付けられる。
【００２２】
さらなる態様において、本発明は、実質的に図１ａに示される粉末Ｘ線回折パターンを有する結晶性（３Ｒ，４Ｓ）−１−（（４−アミノ−５Ｈ−ピロロ［３，２−ｄ］ピリミジン−７−イル）メチル）−４−（メチルチオメチル）ピロリジン−３−オールシュウ酸塩を提供する。
【００２３】
さらに別の態様において、本発明は、以下の面間隔ｄ：約１２．６５、６．３１、４．９８、４．１５７、４．０２２、３．９７２、３．６９８、３．２２３及び３．１４７Åにそれぞれ対応する、以下の２θ角度：約８．１１、１６．３０、２０．６８、２４．８５、２５．７０、２６．０３、２８．００、３２．２３及び３３．０２°２θ±０．０５°２θでの粉末Ｘ線回折ピークにより特徴付けられる、結晶性（３Ｒ，４Ｓ）−１−（（４−アミノ−５Ｈ−ピロロ［３，２−ｄ］ピリミジン−７−イル）メチル）−４−（メチルチオメチル）ピロリジン−３−オールギ酸塩を提供する。
【００２４】
好ましくは、結晶性（３Ｒ，４Ｓ）−１−（（４−アミノ−５Ｈ−ピロロ［３，２−ｄ］ピリミジン−７−イル）メチル）−４−（メチルチオメチル）ピロリジン−３−オールギ酸塩は、以下の面間隔ｄ：約９．９３、７．５２、５．８７、５．７４、５．４７、４．８４、４．７５、４．４５、４．１９４、３．８１４、３．７５４、３．６３２、３．６００、３．４２０、３．３４２、３．３２２、３．１０８、３．０３９、３．０１４、２．９２９、２．８９６、２．８４５、２．８２５、２．７３７、２．６８６、２．６１９、２．５８６、２．５２８、２．４８６、２．４５４、２．３６９、２．３３０、２．２７７、２．２６６、２．２２７、２．１７８、２．１４９、２．１１２Åにそれぞれ対応する、以下の２θ角度：約１０．３４、１３．６６、１７．５４、１７．９５、１８．８３、２１．３２、２１．７１、２３．１７、２４．６３、２７．１３、２７．５７、２８．５１、２８．７７、３０．３３、３１．０５、３１．２４、３３．４５、３４．２４、３４．５２、３５．５７、３５．９９、３６．６６、３６．９３、３８．１５、３８．９１、３９．９４、４０．４７、４１．４５、４２．１７、４２．７５、４４．３６、４５．１５、４６．２７、４６．５０、４７．３６、４８．４９、４９．２０、５０．１２°２θ±０．０５°２θでの１つ又は複数の追加の粉末Ｘ線回折ピークによりさらに特徴付けられる。
【００２５】
さらなる態様において、本発明は、実質的に図６ａに示される粉末Ｘ線回折パターンを有する結晶性（３Ｒ，４Ｓ）−１−（（４−アミノ−５Ｈ−ピロロ［３，２−ｄ］ピリミジン−７−イル）メチル）−４−（メチルチオメチル）ピロリジン−３−オールギ酸塩を提供する。
【００２６】
さらに別の態様において、本発明は、以下の面間隔ｄ：約１７．８、９．９４、７．８２、６．６７、６．４７、５．８４、５．６２、４．８１、４．２５、３．９５４、３．８６６、３．７４１、３．４２５、３．３５、３．２９３及び３．２１９Åにそれぞれ対応する、以下の２θ角度：約５．７５、１０．３３、１３．１４、１５．４１、１５．９０、１７．６１、１８．３２、２１．４３、２４．３０、２６．１５、２６．７６、２７．６７、３０．２８、３０．９７、３１．５２及び３２．２７°２θ±０．０５°２θでの粉末Ｘ線回折ピークにより特徴付けられる、結晶性（３Ｒ，４Ｓ）−１−（（４−アミノ−５Ｈ−ピロロ［３，２−ｄ］ピリミジン−７−イル）メチル）−４−（メチルチオメチル）ピロリジン−３−オール硫酸塩を提供する。
【００２７】
好ましくは、結晶性（３Ｒ，４Ｓ）−１−（（４−アミノ−５Ｈ−ピロロ［３，２−ｄ］ピリミジン−７−イル）メチル）−４−（メチルチオメチル）ピロリジン−３−オール硫酸塩は、以下の面間隔ｄ：約５．３８、５．０８、４．９４、４．６３、４．１９２、３．５２９、３．１２７Åにそれぞれ対応する、以下の２θ角度：約１９．１４、２０．２８、２０．８７、２２．２６、２４．６４、２９．３７、３３．２４°２θ±０．０５°２θでの１つ又は複数の追加の粉末Ｘ線回折ピークによりさらに特徴付けられる。
【００２８】
さらなる態様において、本発明は、実質的に図２ａに示される粉末Ｘ線回折パターンを有する結晶性（３Ｒ，４Ｓ）−１−（（４−アミノ−５Ｈ−ピロロ［３，２−ｄ］ピリミジン−７−イル）メチル）−４−（メチルチオメチル）ピロリジン−３−オール硫酸塩を提供する。
【００２９】
さらに別の態様において、本発明は、示差走査熱量測定で測定した場合に約１６５℃〜約１８５℃の範囲で吸熱を示す（３Ｒ，４Ｓ）−１−（（４−アミノ−５Ｈ−ピロロ［３，２−ｄ］ピリミジン−７−イル）メチル）−４−（メチルチオメチル）ピロリジン−３−オールリン酸塩を提供する。
【００３０】
さらに別の態様において、本発明は、実質的に図３ｃに示される示差走査熱量測定サーモグラムを有するＤ形の（３Ｒ，４Ｓ）−１−（（４−アミノ−５Ｈ−ピロロ［３，２−ｄ］ピリミジン−７−イル）メチル）−４−（メチルチオメチル）ピロリジン−３−オールリン酸塩を提供する。
【００３１】
さらに別の態様において、本発明は、実質的に図４ｃに示される示差走査熱量測定サーモグラムを有するＥ形の（３Ｒ，４Ｓ）−１−（（４−アミノ−５Ｈ−ピロロ［３，２−ｄ］ピリミジン−７−イル）メチル）−４−（メチルチオメチル）ピロリジン−３−オールリン酸塩を提供する。
【００３２】
さらに別の態様において、本発明は、実質的に図５ｃに示される示差走査熱量測定サーモグラムを有するＦ形の（３Ｒ，４Ｓ）−１−（（４−アミノ−５Ｈ−ピロロ［３，２−ｄ］ピリミジン−７−イル）メチル）−４−（メチルチオメチル）ピロリジン−３−オールリン酸塩を提供する。
【００３３】
さらに別の態様において、本発明は、示差走査熱量測定で測定した場合に約１３７．０４℃で吸熱を示す（３Ｒ，４Ｓ）−１−（（４−アミノ−５Ｈ−ピロロ［３，２−ｄ］ピリミジン−７−イル）メチル）−４−（メチルチオメチル）ピロリジン−３−オールシュウ酸塩を提供する。
【００３４】
さらに別の態様において、本発明は、実質的に図１ｂに示される示差走査熱量測定サーモグラムを有する（３Ｒ，４Ｓ）−１−（（４−アミノ−５Ｈ−ピロロ［３，２−ｄ］ピリミジン−７−イル）メチル）−４−（メチルチオメチル）ピロリジン−３−オールシュウ酸塩を提供する。
【００３５】
さらに別の態様において、本発明は、示差走査熱量測定で測定した場合に約１７９．５４℃で吸熱を示す（３Ｒ，４Ｓ）−１−（（４−アミノ−５Ｈ−ピロロ［３，２−ｄ］ピリミジン−７−イル）メチル）−４−（メチルチオメチル）ピロリジン−３−オールギ酸塩を提供する。
【００３６】
さらに別の態様において、本発明は、実質的に図６ｃに示される示差走査熱量測定サーモグラムを有する（３Ｒ，４Ｓ）−１−（（４−アミノ−５Ｈ−ピロロ［３，２−ｄ］ピリミジン−７−イル）メチル）−４−（メチルチオメチル）ピロリジン−３−オールギ酸塩を提供する。
【００３７】
好ましくは、（３Ｒ，４Ｓ）−１−（（４−アミノ−５Ｈ−ピロロ［３，２−ｄ］ピリミジン−７−イル）メチル）−４−（メチルチオメチル）ピロリジン−３−オールリン酸塩、（３Ｒ，４Ｓ）−１−（（４−アミノ−５Ｈ−ピロロ［３，２−ｄ］ピリミジン−７−イル）メチル）−４−（メチルチオメチル）ピロリジン−３−オールギ酸塩、（３Ｒ，４Ｓ）−１−（（４−アミノ−５Ｈ−ピロロ［３，２−ｄ］ピリミジン−７−イル）メチル）−４−（メチルチオメチル）ピロリジン−３−オールシュウ酸塩、又は（３Ｒ，４Ｓ）−１−（（４−アミノ−５Ｈ−ピロロ［３，２−ｄ］ピリミジン−７−イル）メチル）−４−（メチルチオメチル）ピロリジン−３−オール硫酸塩は結晶性である。
【００３８】
さらなる態様において、本発明は、（３Ｒ，４Ｓ）−１−（（４−アミノ−５Ｈ−ピロロ［３，２−ｄ］ピリミジン−７−イル）メチル）−４−（メチルチオメチル）ピロリジン−３−オールリン酸塩、（３Ｒ，４Ｓ）−１−（（４−アミノ−５Ｈ−ピロロ［３，２−ｄ］ピリミジン−７−イル）メチル）−４−（メチルチオメチル）ピロリジン−３−オールギ酸塩、（３Ｒ，４Ｓ）−１−（（４−アミノ−５Ｈ−ピロロ［３，２−ｄ］ピリミジン−７−イル）メチル）−４−（メチルチオメチル）ピロリジン−３−オールシュウ酸塩又は（３Ｒ，４Ｓ）−１−（（４−アミノ−５Ｈ−ピロロ［３，２−ｄ］ピリミジン−７−イル）メチル）−４−（メチルチオメチル）ピロリジン−３−オール硫酸塩、好ましくは（３Ｒ，４Ｓ）−１−（（４−アミノ−５Ｈ−ピロロ［３，２−ｄ］ピリミジン−７−イル）メチル）−４−（メチルチオメチル）ピロリジン−３−オールリン酸塩、より好ましくは結晶性（３Ｒ，４Ｓ）−１−（（４−アミノ−５Ｈ−ピロロ［３，２−ｄ］ピリミジン−７−イル）メチル）−４−（メチルチオメチル）ピロリジン−３−オールリン酸塩と、少なくとも１種の薬学的に許容される賦形剤と、を含む医薬組成物を提供する。
【００３９】
好ましくは、結晶性（３Ｒ，４Ｓ）−１−（（４−アミノ−５Ｈ−ピロロ［３，２−ｄ］ピリミジン−７−イル）メチル）−４−（メチルチオメチル）ピロリジン−３−オールリン酸塩は、以下の面間隔ｄ：約１９．１、１４．４、１１．４９、９．４４、７．８７、７．１８、６．５０、５．８５、５．７４、５．１６、４．７９、４．５３、３．９７７、３．８２３、３．７２５、３．５７９及び３．４５９Åにそれぞれ対応する、以下の２θ角度：約５．３８、７．１０、８．９３、１０．８７、１３．０６、１４．３１、１５．８１、１７．５９、１７．９２、１９．９７、２１．５３、２２．７６、２６．００、２７．０６、２７．７９、２８．９５及び２９．９７°２θ±０．０５°２θでの粉末Ｘ線回折ピークにより特徴付けられる。より好ましくは、結晶性（３Ｒ，４Ｓ）−１−（（４−アミノ−５Ｈ−ピロロ［３，２−ｄ］ピリミジン−７−イル）メチル）−４−（メチルチオメチル）ピロリジン−３−オールリン酸塩は、以下の面間隔ｄ：約７．０５、６．７１、６．２３、５．４０、５．１１、４．９６、４．７３、４．６４、４．４６、４．１５９、４．０１４、３．９３１、３．６７９、３．６２５、３．５３１、３．４０１、３．３５７、３．３１１、３．１８３、３．２３６、３．０４５、３．１１９Åにそれぞれ対応する、以下の２θ角度：約１４．５７、１５．３２、１６．５０、１９．０７、２０．１７、２０．７７、２１．７８、２２．２２、２３．１２、２４．８４、２５．７５、２６．３１、２８．１４、２８．５７、２９．３５、３０．５０、３０．９１、３１．３５、３２．６４、３２．０９、３４．１７、３３．３３°２θ±０．０５°２θでの１つ又は複数の追加の粉末Ｘ線回折ピークによりさらに特徴付けられる。
【００４０】
あるいは、好ましくは、結晶性（３Ｒ，４Ｓ）−１−（（４−アミノ−５Ｈ−ピロロ［３，２−ｄ］ピリミジン−７−イル）メチル）−４−（メチルチオメチル）ピロリジン−３−オールリン酸塩は、以下の面間隔ｄ：約１９．５、１４．６、１１．８１、９．７０、６．４５、５．９６、５．８６、４．８５、４．７７、４．５４、４．０３１、３．８４９、３．５８９、３．４５７及び３．３７４Åにそれぞれ対応する、以下の２θ角度：約５．２６、７．０１、８．６９、１０．５８、１５．９５、１７．２６、１７．５７、２１．２７、２１．６０、２２．７５、２５．６４、２６．８８、２８．８６、２９．９９及び３０．７５°２θ±０．０５°２θでの粉末Ｘ線回折ピークにより特徴付けられる。より好ましくは、結晶性（３Ｒ，４Ｓ）−１−（（４−アミノ−５Ｈ−ピロロ［３，２−ｄ］ピリミジン−７−イル）メチル）−４−（メチルチオメチル）ピロリジン−３−オールリン酸塩は、以下の面間隔ｄ：約１１．５２、８．１８、６．１４、５．７７、５．３２、５．１２、４．９４、４．６７、４．５８、４．４８、４．２７８、３．９８４、３．９５２、３．８８４、３．７３４、３．５３１、３．４３１、３．３３６、３．２８８、３．２０８、３．１４６、３．１１５、３．０６６Åにそれぞれ対応する、以下の２θ角度：約８．９１、１２．５６、１６．７６、１７．８４、１９．３６、２０．１４、２０．８６、２２．０９、２２．５３、２３．０３、２４．１４、２５．９５、２６．１６、２６．６３、２７．７２、２９．３５、３０．２２、３１．１１、３１．５７、３２．３８、３３．０４、３３．３８、３３．９３°２θ±０．０５°２θでの１つ又は複数の追加の粉末Ｘ線回折ピークによりさらに特徴付けられる。
【００４１】
あるいは、好ましくは、結晶性（３Ｒ，４Ｓ）−１−（（４−アミノ−５Ｈ−ピロロ［３，２−ｄ］ピリミジン−７−イル）メチル）−４−（メチルチオメチル）ピロリジン−３−オールリン酸塩は、以下の面間隔ｄ：約１９．５、１４．７、１１．７６、９．６２、６．５０、６．４１、５．８７、５．８０、５．１２、４．９７、４．８３、４．７５、４．５３、４．０２２、３．９６２、３．６２７、３．５０６、３．３９８、３．３０３及び３．２０４Åにそれぞれ対応する、以下の２θ角度：約５．２５、７．００、８．７３、１０．６７、１５．８２、１６．０４、１７．５２、１７．７５、２０．１３、２０．７７、２１．３６、２１．７２、２２．７９、２５．７０、２６．１０、２８．５５、２９．５６、３０．５２、３１．４３及び３２．４２°２θ±０．０５°２θでの粉末Ｘ線回折ピークにより特徴付けられる。より好ましくは、結晶性（３Ｒ，４Ｓ）−１−（（４−アミノ−５Ｈ−ピロロ［３，２−ｄ］ピリミジン−７−イル）メチル）−４−（メチルチオメチル）ピロリジン−３−オールリン酸塩は、以下の面間隔ｄ：約１１．５０、８．０９、７．２５、６．７９、６．１７、５．３６、４．６７、４．３７４、４．２４１、４．１６５、３．８５９、３．８３２、３．７２２、３．５７１、３．４６９、３．２３３、３．１５４、３．０８８、３．０５２、２．９６８、２．９０７、２．８５０、２．７９５、２．６６８、２．５９２、２．５６７、２．５０５、２．４６４、２．４０８、２．３６２、２．２８３、２．２６５、２．２４３、２．１８９、２．１５６、２．１３５Åにそれぞれ対応する、以下の２θ角度：約８．９２、１２．６９、１４．１９、１５．１４、１６．６８、１９．２１、２２．０９、２３．６０、２４．３５、２４．８０、２６．８１、２７．００、２７．８１、２９．０１、２９．８８、３２．１２、３２．９５、３３．６８、３４．０８、３５．０８、３５．８４、３６．５８、３７．３２、３９．１８、４０．３７、４０．７９、４１．８４、４２．５６、４３．６２、４４．５１、４６．１４、４６．５２、４７．００、４８．２４、４９．０２、４９．５４°２θ±０．０５°２θでの１つ又は複数の追加の粉末Ｘ線回折ピークによりさらに特徴付けられる。
【００４２】
さらに別の態様において、本発明は、ＭＴＡＰを阻害することが望ましい疾患又は障害を処置する方法であって、（３Ｒ，４Ｓ）−１−（（４−アミノ−５Ｈ−ピロロ［３，２−ｄ］ピリミジン−７−イル）メチル）−４−（メチルチオメチル）ピロリジン−３−オールリン酸塩又は（３Ｒ，４Ｓ）−１−（（４−アミノ−５Ｈ−ピロロ［３，２−ｄ］ピリミジン−７−イル）メチル）−４−（メチルチオメチル）ピロリジン−３−オールギ酸塩又は（３Ｒ，４Ｓ）−１−（（４−アミノ−５Ｈ−ピロロ［３，２−ｄ］ピリミジン−７−イル）メチル）−４−（メチルチオメチル）ピロリジン−３−オールシュウ酸塩又は（３Ｒ，４Ｓ）−１−（（４−アミノ−５Ｈ−ピロロ［３，２−ｄ］ピリミジン−７−イル）メチル）−４−（メチルチオメチル）ピロリジン−３−オール硫酸塩、好ましくは（３Ｒ，４Ｓ）−１−（（４−アミノ−５Ｈ−ピロロ［３，２−ｄ］ピリミジン−７−イル）メチル）−４−（メチルチオメチル）ピロリジン−３−オールリン酸塩の有効量を、それを必要とする患者に投与することを含む方法を提供する。
【００４３】
さらに別の態様において、本発明は、（３Ｒ，４Ｓ）−１−（（４−アミノ−５Ｈ−ピロロ［３，２−ｄ］ピリミジン−７−イル）メチル）−４−（メチルチオメチル）ピロリジン−３−オールリン酸塩又は（３Ｒ，４Ｓ）−１−（（４−アミノ−５Ｈ−ピロロ［３，２−ｄ］ピリミジン−７−イル）メチル）−４−（メチルチオメチル）ピロリジン−３−オールギ酸塩又は（３Ｒ，４Ｓ）−１−（（４−アミノ−５Ｈ−ピロロ［３，２−ｄ］ピリミジン−７−イル）メチル）−４−（メチルチオメチル）ピロリジン−３−オールシュウ酸塩又は（３Ｒ，４Ｓ）−１−（（４−アミノ−５Ｈ−ピロロ［３，２−ｄ］ピリミジン−７−イル）メチル）−４−（メチルチオメチル）ピロリジン−３−オール硫酸塩、好ましくは（３Ｒ，４Ｓ）−１−（（４−アミノ−５Ｈ−ピロロ［３，２−ｄ］ピリミジン−７−イル）メチル）−４−（メチルチオメチル）ピロリジン−３−オールリン酸塩の、薬剤としての使用を提供する。
【００４４】
さらに別の態様において、本発明は、薬剤の製造における、（３Ｒ，４Ｓ）−１−（（４−アミノ−５Ｈ−ピロロ［３，２−ｄ］ピリミジン−７−イル）メチル）−４−（メチルチオメチル）ピロリジン−３−オールリン酸塩又は（３Ｒ，４Ｓ）−１−（（４−アミノ−５Ｈ−ピロロ［３，２−ｄ］ピリミジン−７−イル）メチル）−４−（メチルチオメチル）ピロリジン−３−オールギ酸塩又は（３Ｒ，４Ｓ）−１−（（４−アミノ−５Ｈ−ピロロ［３，２−ｄ］ピリミジン−７−イル）メチル）−４−（メチルチオメチル）ピロリジン−３−オールシュウ酸塩又は（３Ｒ，４Ｓ）−１−（（４−アミノ−５Ｈ−ピロロ［３，２−ｄ］ピリミジン−７−イル）メチル）−４−（メチルチオメチル）ピロリジン−３−オール硫酸塩、好ましくは（３Ｒ，４Ｓ）−１−（（４−アミノ−５Ｈ−ピロロ［３，２−ｄ］ピリミジン−７−イル）メチル）−４−（メチルチオメチル）ピロリジン−３−オールリン酸塩の使用を提供する。
【００４５】
さらに別の態様において、本発明は、ＭＴＡＰを阻害することが望ましい疾患又は障害を処置するための薬剤の製造における、（３Ｒ，４Ｓ）−１−（（４−アミノ−５Ｈ−ピロロ［３，２−ｄ］ピリミジン−７−イル）メチル）−４−（メチルチオメチル）ピロリジン−３−オールリン酸塩又は（３Ｒ，４Ｓ）−１−（（４−アミノ−５Ｈ−ピロロ［３，２−ｄ］ピリミジン−７−イル）メチル）−４−（メチルチオメチル）ピロリジン−３−オールギ酸塩又は（３Ｒ，４Ｓ）−１−（（４−アミノ−５Ｈ−ピロロ［３，２−ｄ］ピリミジン−７−イル）メチル）−４−（メチルチオメチル）ピロリジン−３−オールシュウ酸塩又は（３Ｒ，４Ｓ）−１−（（４−アミノ−５Ｈ−ピロロ［３，２−ｄ］ピリミジン−７−イル）メチル）−４−（メチルチオメチル）ピロリジン−３−オール硫酸塩、好ましくは（３Ｒ，４Ｓ）−１−（（４−アミノ−５Ｈ−ピロロ［３，２−ｄ］ピリミジン−７−イル）メチル）−４−（メチルチオメチル）ピロリジン−３−オールリン酸塩の使用を提供する。
【００４６】
さらに別の態様において、本発明は、ＭＴＡＰを阻害することが望ましい疾患又は障害の処置における使用のための医薬組成物であって、（３Ｒ，４Ｓ）−１−（（４−アミノ−５Ｈ−ピロロ［３，２−ｄ］ピリミジン−７−イル）メチル）−４−（メチルチオメチル）ピロリジン−３−オールリン酸塩又は（３Ｒ，４Ｓ）−１−（（４−アミノ−５Ｈ−ピロロ［３，２−ｄ］ピリミジン−７−イル）メチル）−４−（メチルチオメチル）ピロリジン−３−オールギ酸塩又は（３Ｒ，４Ｓ）−１−（（４−アミノ−５Ｈ−ピロロ［３，２−ｄ］ピリミジン−７−イル）メチル）−４−（メチルチオメチル）ピロリジン−３−オールシュウ酸塩又は（３Ｒ，４Ｓ）−１−（（４−アミノ−５Ｈ−ピロロ［３，２−ｄ］ピリミジン−７−イル）メチル）−４−（メチルチオメチル）ピロリジン−３−オール硫酸塩、好ましくは（３Ｒ，４Ｓ）−１−（（４−アミノ−５Ｈ−ピロロ［３，２−ｄ］ピリミジン−７−イル）メチル）−４−（メチルチオメチル）ピロリジン−３−オールリン酸塩を含む組成物を提供する。
【００４７】
好ましくは、（３Ｒ，４Ｓ）−１−（（４−アミノ−５Ｈ−ピロロ［３，２−ｄ］ピリミジン−７−イル）メチル）−４−（メチルチオメチル）ピロリジン−３−オールリン酸塩は、結晶性（３Ｒ，４Ｓ）−１−（（４−アミノ−５Ｈ−ピロロ［３，２−ｄ］ピリミジン−７−イル）メチル）−４−（メチルチオメチル）ピロリジン−３−オールリン酸塩である。
【００４８】
好ましくは、結晶性（３Ｒ，４Ｓ）−１−（（４−アミノ−５Ｈ−ピロロ［３，２−ｄ］ピリミジン−７−イル）メチル）−４−（メチルチオメチル）ピロリジン−３−オールリン酸塩は、以下の面間隔ｄ：約１９．１、１４．４、１１．４９、９．４４、７．８７、７．１８、６．５０、５．８５、５．７４、５．１６、４．７９、４．５３、３．９７７、３．８２３、３．７２５、３．５７９及び３．４５９Åにそれぞれ対応する、以下の２θ角度：約５．３８、７．１０、８．９３、１０．８７、１３．０６、１４．３１、１５．８１、１７．５９、１７．９２、１９．９７、２１．５３、２２．７６、２６．００、２７．０６、２７．７９、２８．９５及び２９．９７°２θ±０．０５°２θでの粉末Ｘ線回折ピークにより特徴付けられる。より好ましくは、結晶性（３Ｒ，４Ｓ）−１−（（４−アミノ−５Ｈ−ピロロ［３，２−ｄ］ピリミジン−７−イル）メチル）−４−（メチルチオメチル）ピロリジン−３−オールリン酸塩は、以下の面間隔ｄ：約７．０５、６．７１、６．２３、５．４０、５．１１、４．９６、４．７３、４．６４、４．４６、４．１５９、４．０１４、３．９３１、３．６７９、３．６２５、３．５３１、３．４０１、３．３５７、３．３１１、３．１８３、３．２３６、３．０４５、３．１１９Åにそれぞれ対応する、以下の２θ角度：約１４．５７、１５．３２、１６．５０、１９．０７、２０．１７、２０．７７、２１．７８、２２．２２、２３．１２、２４．８４、２５．７５、２６．３１、２８．１４、２８．５７、２９．３５、３０．５０、３０．９１、３１．３５、３２．６４、３２．０９、３４．１７、３３．３３°２θ±０．０５°２θでの１つ又は複数の追加の粉末Ｘ線回折ピークによりさらに特徴付けられる。
【００４９】
あるいは、好ましくは、結晶性（３Ｒ，４Ｓ）−１−（（４−アミノ−５Ｈ−ピロロ［３，２−ｄ］ピリミジン−７−イル）メチル）−４−（メチルチオメチル）ピロリジン−３−オールリン酸塩は、以下の面間隔ｄ：約１９．５、１４．６、１１．８１、９．７０、６．４５、５．９６、５．８６、４．８５、４．７７、４．５４、４．０３１、３．８４９、３．５８９、３．４５７及び３．３７４Åにそれぞれ対応する、以下の２θ角度：約５．２６、７．０１、８．６９、１０．５８、１５．９５、１７．２６、１７．５７、２１．２７、２１．６０、２２．７５、２５．６４、２６．８８、２８．８６、２９．９９及び３０．７５°２θ±０．０５°２θでの粉末Ｘ線回折ピークにより特徴付けられる。より好ましくは、結晶性（３Ｒ，４Ｓ）−１−（（４−アミノ−５Ｈ−ピロロ［３，２−ｄ］ピリミジン−７−イル）メチル）−４−（メチルチオメチル）ピロリジン−３−オールリン酸塩は、以下の面間隔ｄ：約１１．５２、８．１８、６．１４、５．７７、５．３２、５．１２、４．９４、４．６７、４．５８、４．４８、４．２７８、３．９８４、３．９５２、３．８８４、３．７３４、３．５３１、３．４３１、３．３３６、３．２８８、３．２０８、３．１４６、３．１１５、３．０６６Åにそれぞれ対応する、以下の２θ角度：約８．９１、１２．５６、１６．７６、１７．８４、１９．３６、２０．１４、２０．８６、２２．０９、２２．５３、２３．０３、２４．１４、２５．９５、２６．１６、２６．６３、２７．７２、２９．３５、３０．２２、３１．１１、３１．５７、３２．３８、３３．０４、３３．３８、３３．９３°２θ±０．０５°２θでの１つ又は複数の追加の粉末Ｘ線回折ピークによりさらに特徴付けられる。
【００５０】
あるいは、好ましくは、結晶性（３Ｒ，４Ｓ）−１−（（４−アミノ−５Ｈ−ピロロ［３，２−ｄ］ピリミジン−７−イル）メチル）−４−（メチルチオメチル）ピロリジン−３−オールリン酸塩は、以下の面間隔ｄ：約１９．５、１４．７、１１．７６、９．６２、６．５０、６．４１、５．８７、５．８０、５．１２、４．９７、４．８３、４．７５、４．５３、４．０２２、３．９６２、３．６２７、３．５０６、３．３９８、３．３０３及び３．２０４Åにそれぞれ対応する、以下の２θ角度：約５．２５、７．００、８．７３、１０．６７、１５．８２、１６．０４、１７．５２、１７．７５、２０．１３、２０．７７、２１．３６、２１．７２、２２．７９、２５．７０、２６．１０、２８．５５、２９．５６、３０．５２、３１．４３及び３２．４２°２θ±０．０５°２θでの粉末Ｘ線回折ピークにより特徴付けられる。より好ましくは、結晶性（３Ｒ，４Ｓ）−１−（（４−アミノ−５Ｈ−ピロロ［３，２−ｄ］ピリミジン−７−イル）メチル）−４−（メチルチオメチル）ピロリジン−３−オールリン酸塩は、以下の面間隔ｄ：約１１．５０、８．０９、７．２５、６．７９、６．１７、５．３６、４．６７、４．３７４、４．２４１、４．１６５、３．８５９、３．８３２、３．７２２、３．５７１、３．４６９、３．２３３、３．１５４、３．０８８、３．０５２、２．９６８、２．９０７、２．８５０、２．７９５、２．６６８、２．５９２、２．５６７、２．５０５、２．４６４、２．４０８、２．３６２、２．２８３、２．２６５、２．２４３、２．１８９、２．１５６、２．１３５Åにそれぞれ対応する、以下の２θ角度：約８．９２、１２．６９、１４．１９、１５．１４、１６．６８、１９．２１、２２．０９、２３．６０、２４．３５、２４．８０、２６．８１、２７．００、２７．８１、２９．０１、２９．８８、３２．１２、３２．９５、３３．６８、３４．０８、３５．０８、３５．８４、３６．５８、３７．３２、３９．１８、４０．３７、４０．７９、４１．８４、４２．５６、４３．６２、４４．５１、４６．１４、４６．５２、４７．００、４８．２４、４９．０２、４９．５４°２θ±０．０５°２θでの１つ又は複数の追加の粉末Ｘ線回折ピークによりさらに特徴付けられる。
【００５１】
好ましくは、疾患又は障害は、癌、例えば、頭頸部癌、肺癌、乳癌、結腸癌、子宮頚癌又は前立腺癌である。
【００５２】
（３Ｒ，４Ｓ）−１−（（４−アミノ−５Ｈ−ピロロ［３，２−ｄ］ピリミジン−７−イル）メチル）−４−（メチルチオメチル）ピロリジン−３−オールリン酸塩又は（３Ｒ，４Ｓ）−１−（（４−アミノ−５Ｈ−ピロロ［３，２−ｄ］ピリミジン−７−イル）メチル）−４−（メチルチオメチル）ピロリジン−３−オールギ酸塩又は（３Ｒ，４Ｓ）−１−（（４−アミノ−５Ｈ−ピロロ［３，２−ｄ］ピリミジン−７−イル）メチル）−４−（メチルチオメチル）ピロリジン−３−オールシュウ酸塩又は（３Ｒ，４Ｓ）−１−（（４−アミノ−５Ｈ−ピロロ［３，２−ｄ］ピリミジン−７−イル）メチル）−４−（メチルチオメチル）ピロリジン−３−オール硫酸塩は、第２の化合物、例えばメチルチオアデノシンと共に投与され得る。化合物は、別々に、連続的に又は一緒に投与され得る。
【００５３】
別の態様において、本発明は、
結晶性（３Ｒ，４Ｓ）−１−（（４−アミノ−５Ｈ−ピロロ［３，２−ｄ］ピリミジン−７−イル）メチル）−４−（メチルチオメチル）ピロリジン−３−オールリン酸塩の調製のための方法であって、
（ａ）（３Ｒ，４Ｓ）−１−（（４−アミノ−５Ｈ−ピロロ［３，２−ｄ］ピリミジン−７−イル）メチル）−４−（メチルチオメチル）ピロリジン−３−オールリン酸塩の水溶液を調製するステップと、
（ｂ）アルコール、メチルエチルケトン、テトラヒドロフラン又はアセトンを溶液に添加して、（３Ｒ，４Ｓ）−１−（（４−アミノ−５Ｈ−ピロロ［３，２−ｄ］ピリミジン−７−イル）メチル）−４−（メチルチオメチル）ピロリジン−３−オールリン酸塩の結晶を形成するステップと、
（ｃ）（３Ｒ，４Ｓ）−１−（（４−アミノ−５Ｈ−ピロロ［３，２−ｄ］ピリミジン−７−イル）メチル）−４−（メチルチオメチル）ピロリジン−３−オールリン酸塩の結晶を単離するステップと、
を含む方法を提供する。
【００５４】
好ましくは、アルコールはステップ（ｂ）で添加され、より好ましくは、アルコールはＣ１〜Ｃ６アルコールであり、さらに好ましくは、アルコールはメタノール、エタノール、ｎ−プロパノール又はイソプロパノールであり、さらに好ましくは、アルコールはメタノール又はエタノールである。ステップ（ｂ）におけるエタノールと水との比は、少なくとも約５０％のエタノール、例えば約５５：４５のエタノール：水、例えば６０：４０のエタノール：水であることがさらに好ましい。
【００５５】
あるいは、ステップ（ｂ）におけるエタノールと水との比は、約５０％未満のエタノール、例えば約４５：５５のエタノール：水、例えば約４０：６０のエタノール：水であることが好ましい。
【００５６】
別の態様において、本発明は、
式（Ｖ）：
【化３】
2019206525.tif 000004
の化合物を調製するための方法であって、
（ｄ）式（ＩＩＩ）の化合物をクロロギ酸メチルと反応させて式（ＩＶ）の化合物を生成するステップと、
【化４】
2019206525.tif 000005
（ｅ）塩基性条件下で式（ＩＶ）の化合物を環化して式（Ｖ）の化合物を得るステップと、
を含み、ステップ（ｄ）における溶媒として酢酸エチルが使用される方法を提供する。
【００５７】
好ましくは、ＤＢＵが環化ステップ（ｅ）における塩基として使用される。より好ましくは、ＤＢＵ及びジクロロメタンがそれぞれ環化ステップ（ｅ）における塩基及び溶媒として使用される。ステップ（ｅ）において、約１５分未満（例えば約１０分）の反応時間が使用されることがさらに好ましい。また、ステップ（ｅ）における約１５分未満の反応時間の後に、メタノール、続いて酢酸アンモニウムが反応に添加されることが好ましい。
【００５８】
さらに別の態様において、本発明は、
式（ＸＩＩ）：
【化５】
2019206525.tif 000006
の化合物を調製するための方法であって、
（ｆ）式（ＩＸ）の化合物をメタンスルホニルクロリド及び２，６−ルチジン、続いてナトリウムチオメトキシドと接触させて式（Ｘ）の化合物を得るステップと、
【化６】
2019206525.tif 000007
（ｇ）式（Ｘ）の化合物を脱保護し、続いて式（ＸＩ）の化合物に変換するステップと、
【化７】
2019206525.tif 000008
（ｈ）式（ＸＩ）の化合物を式（ＸＩＩ）の化合物に変換するステップと、
を含み、ステップ（ｆ）における溶媒としてアセトンが使用される方法を提供する。
【００５９】
好ましくは、ステップ（ｇ）における式（Ｘ）の化合物の脱保護は、式（Ｘ）の化合物をトリフルオロ酢酸と接触させることによって行われる。ステップ（ｇ）における化合物（ＸＩ）への変換は、式（Ｘ）の脱保護化合物を食品グレードの強塩基陰イオン交換樹脂などの樹脂と接触させることによって行われることがさらに好ましい。また、ステップ（ｈ）における式（ＸＩ）の化合物の化合物（ＸＩＩ）への変換は、式（ＸＩ）の化合物を食品グレードの強塩基陰イオン交換樹脂などの樹脂と接触させることによって行われることが好ましい。
【００６０】
さらに別の態様において、本発明は、
（３Ｒ，４Ｓ）−１−（（４−アミノ−５Ｈ−ピロロ［３，２−ｄ］ピリミジン−７−イル）メチル）−４−（メチルチオメチル）ピロリジン−３−オールリン酸塩を調製するための方法であって、
（ａ）式（ＸＩＩ）の化合物を水／エタノール溶媒中の９−デアザアデニン及びホルムアルデヒドと接触させて、（３Ｒ，４Ｓ）−１−（（４−アミノ−５Ｈ−ピロロ［３，２−ｄ］ピリミジン−７−イル）メチル）−４−（メチルチオメチル）ピロリジン−３−オールを生成するステップと、
【化８】
2019206525.tif 000009
（ｂ）ステップ（ａ）で生成された（３Ｒ，４Ｓ）−１−（（４−アミノ−５Ｈ−ピロロ［３，２−ｄ］ピリミジン−７−イル）メチル）−４−（メチルチオメチル）ピロリジン−３−オールを、
（ｉ）（３Ｒ，４Ｓ）−１−（（４−アミノ−５Ｈ−ピロロ［３，２−ｄ］ピリミジン−７−イル）メチル）−４−（メチルチオメチル）ピロリジン−３−オールリン酸塩を含有する溶液を生成するためのリン酸水溶液、
（ｉｉ）（３Ｒ，４Ｓ）−１−（（４−アミノ−５Ｈ−ピロロ［３，２−ｄ］ピリミジン−７−イル）メチル）−４−（メチルチオメチル）ピロリジン−３−オールリン酸塩の種結晶、及び任意選択で
（ｉｉｉ）エタノール
と接触させて、結晶性（３Ｒ，４Ｓ）−１−（（４−アミノ−５Ｈ−ピロロ［３，２−ｄ］ピリミジン−７−イル）メチル）−４−（メチルチオメチル）ピロリジン−３−オールリン酸塩を生成するステップと、
（ｃ）結晶性（３Ｒ，４Ｓ）−１−（（４−アミノ−５Ｈ−ピロロ［３，２−ｄ］ピリミジン−７−イル）メチル）−４−（メチルチオメチル）ピロリジン−３−オールリン酸塩を単離するステップと、
を含む方法を提供する。
【００６１】
好ましくは、ステップ（ａ）における水対エタノールの比は約４：１である。ステップ（ａ）の反応混合物は周囲温度で約２日間撹拌されることがさらに好ましい。
【００６２】
好ましくは、ステップ（ｂ）においてエタノールは段階的に少しずつ添加される。エタノールは約２時間の時間にわたって添加されることがさらに好ましい。
【詳細な説明】
【００６３】
（３Ｒ，４Ｓ）−１−（（４−アミノ−５Ｈ−ピロロ［３，２−ｄ］ピリミジン−７−イル）メチル）−４−（メチルチオメチル）ピロリジン−３−オールの塩形態、例えば、（３Ｒ，４Ｓ）−１−（（４−アミノ−５Ｈ−ピロロ［３，２−ｄ］ピリミジン−７−イル）メチル）−４−（メチルチオメチル）ピロリジン−３−オールリン酸塩（下記化合物（Ｉａ））又は（３Ｒ，４Ｓ）−１−（（４−アミノ−５Ｈ−ピロロ［３，２−ｄ］ピリミジン−７−イル）メチル）−４−（メチルチオメチル）ピロリジン−３−オールギ酸塩又は（３Ｒ，４Ｓ）−１−（（４−アミノ−５Ｈ−ピロロ［３，２−ｄ］ピリミジン−７−イル）メチル）−４−（メチルチオメチル）ピロリジン−３−オールシュウ酸塩又は（３Ｒ，４Ｓ）−１−（（４−アミノ−５Ｈ−ピロロ［３，２−ｄ］ピリミジン−７−イル）メチル）−４−（メチルチオメチル）ピロリジン−３−オール硫酸塩は、例えば、ＭＴＡＰを阻害することが望ましい疾患又は障害、例えば癌（例えば、頭頸部癌、肺癌、乳癌、結腸癌、子宮頚癌、又は前立腺癌）を処置するための医薬品として有用である。
【化９】
2019206525.tif 000010
【００６４】
例えば、図８は、より大きな腫瘍（１５０ｍｍ３）に対する（３Ｒ，４Ｓ）−１−（（４−アミノ−５Ｈ−ピロロ［３，２−ｄ］ピリミジン−７−イル）メチル）−４−（メチルチオメチル）ピロリジン−３−オールリン酸塩の効果についての研究を示している。研究では、マウス異種移植モデルにおいて３５日間同所的に成長させたＭＤＡ−ＭＢ−４６８腫瘍を使用する。処置は、数日以内に１５０ｍｍ３の腫瘍を半分に縮小し、その後の３０日間成長を抑制する。用量２４〜３０．５ｍｇ／ｋｇの（３Ｒ，４Ｓ）−１−（（４−アミノ−５Ｈ−ピロロ［３，２−ｄ］ピリミジン−７−イル）メチル）−４−（メチルチオメチル）ピロリジン−３−オールリン酸塩は、癌の成長を止めるのに等しく有効である。薬物放出時に、腫瘍サイズは無処置の腫瘍に比べて緩徐に大きくなる。対照腫瘍は、３５日にわたって１５０から４００ｍｍ３に成長する。７１日目に、大きな腫瘍は、（３Ｒ，４Ｓ）−１−（（４−アミノ−５Ｈ−ピロロ［３，２−ｄ］ピリミジン−７−イル）メチル）−４−（メチルチオメチル）ピロリジン−３−オールリン酸塩３０ｍｇ／ｋｇ  ｉ．ｐ．で処置される。２週間にわたってほとんどの腫瘍が分解する腫瘍溶解の結果として、腫瘍のサイズは急速に減少する。
【００６５】
（３Ｒ，４Ｓ）−１−（（４−アミノ−５Ｈ−ピロロ［３，２−ｄ］ピリミジン−７−イル）メチル）−４−（メチルチオメチル）ピロリジン−３−オールの塩形態、例えば、（３Ｒ，４Ｓ）−１−（（４−アミノ−５Ｈ−ピロロ［３，２−ｄ］ピリミジン−７−イル）メチル）−４−（メチルチオメチル）ピロリジン−３−オールリン酸塩又は（３Ｒ，４Ｓ）−１−（（４−アミノ−５Ｈ−ピロロ［３，２−ｄ］ピリミジン−７−イル）メチル）−４−（メチルチオメチル）ピロリジン−３−オールギ酸塩又は（３Ｒ，４Ｓ）−１−（（４−アミノ−５Ｈ−ピロロ［３，２−ｄ］ピリミジン−７−イル）メチル）−４−（メチルチオメチル）ピロリジン−３−オール硫酸塩は溶媒和物として存在することができることを当業者は理解するであろう。例えば、（３Ｒ，４Ｓ）−１−（（４−アミノ−５Ｈ−ピロロ［３，２−ｄ］ピリミジン−７−イル）メチル）−４−（メチルチオメチル）ピロリジン−３−オールリン酸塩及び（３Ｒ，４Ｓ）−１−（（４−アミノ−５Ｈ−ピロロ［３，２−ｄ］ピリミジン−７−イル）メチル）−４−（メチルチオメチル）ピロリジン−３−オール硫酸塩の結晶形態は結晶水を含有し得る。
【００６６】
有利なことに、本発明の（３Ｒ，４Ｓ）−１−（（４−アミノ−５Ｈ−ピロロ［３，２−ｄ］ピリミジン−７−イル）メチル）−４−（メチルチオメチル）ピロリジン−３−オールのリン酸塩は、改善された安定性及び溶解性を提供する。（３Ｒ，４Ｓ）−１−（（４−アミノ−５Ｈ−ピロロ［３，２−ｄ］ピリミジン−７−イル）メチル）−４−（メチルチオメチル）ピロリジン−３−オールのリン酸塩は、高純度の生成物をもたらす反応混合物から直接結晶化することができる。これは、遊離塩基形態又は塩酸塩形態では達成可能でない。従来は、（３Ｒ，４Ｓ）−１−（（４−アミノ−５Ｈ−ピロロ［３，２−ｄ］ピリミジン−７−イル）メチル）−４−（メチルチオメチル）ピロリジン−３−オールを精製する唯一の方法はクロマトグラフィーによるものであったのに対して、（３Ｒ，４Ｓ）−１−（（４−アミノ−５Ｈ−ピロロ［３，２−ｄ］ピリミジン−７−イル）メチル）−４−（メチルチオメチル）ピロリジン−３−オールのリン酸塩は、特に再結晶により精製できることから大規模生産に適している。
【００６７】
本発明は以下を提供する。
１．  （３Ｒ，４Ｓ）−１−（（４−アミノ−５Ｈ−ピロロ［３，２−ｄ］ピリミジン−７−イル）メチル）−４−（メチルチオメチル）ピロリジン−３−オールリン酸塩、（３Ｒ，４Ｓ）−１−（（４−アミノ−５Ｈ−ピロロ［３，２−ｄ］ピリミジン−７−イル）メチル）−４−（メチルチオメチル）ピロリジン−３−オールギ酸塩、（３Ｒ，４Ｓ）−１−（（４−アミノ−５Ｈ−ピロロ［３，２−ｄ］ピリミジン−７−イル）メチル）−４−（メチルチオメチル）ピロリジン−３−オールシュウ酸塩、及び（３Ｒ，４Ｓ）−１−（（４−アミノ−５Ｈ−ピロロ［３，２−ｄ］ピリミジン−７−イル）メチル）−４−（メチルチオメチル）ピロリジン−３−オール硫酸塩からなる群から選択される、（３Ｒ，４Ｓ）−１−（（４−アミノ−５Ｈ−ピロロ［３，２−ｄ］ピリミジン−７−イル）メチル）−４−（メチルチオメチル）ピロリジン−３−オールの塩形態。
２．  結晶性である、上記項１に記載の（３Ｒ，４Ｓ）−１−（（４−アミノ−５Ｈ−ピロロ［３，２−ｄ］ピリミジン−７−イル）メチル）−４−（メチルチオメチル）ピロリジン−３−オールの塩形態。
３．  （３Ｒ，４Ｓ）−１−（（４−アミノ−５Ｈ−ピロロ［３，２−ｄ］ピリミジン−７−イル）メチル）−４−（メチルチオメチル）ピロリジン−３−オールリン酸塩、すなわち式（Ｉａ）：
【化１０】
2019206525.tif 000011
の化合物である、上記項１又は２に記載の塩形態。
４．  以下の面間隔ｄ：約１９．１、１４．４、１１．４９、９．４４、７．８７、７．１８、６．５０、５．８５、５．７４、５．１６、４．７９、４．５３、３．９７７、３．８２３、３．７２５、３．５７９及び３．４５９Åにそれぞれ対応する、以下の２θ角度：約５．３８、７．１０、８．９３、１０．８７、１３．０６、１４．３１、１５．８１、１７．５９、１７．９２、１９．９７、２１．５３、２２．７６、２６．００、２７．０６、２７．７９、２８．９５及び２９．９７°２θ±０．０５°２θでの粉末Ｘ線回折ピークにより特徴付けられる、Ｄ形の結晶性（３Ｒ，４Ｓ）−１−（（４−アミノ−５Ｈ−ピロロ［３，２−ｄ］ピリミジン−７−イル）メチル）−４−（メチルチオメチル）ピロリジン−３−オールリン酸塩である、上記項１又は２に記載の塩形態。
５．  以下の面間隔ｄ：約７．０５、６．７１、６．２３、５．４０、５．１１、４．９６、４．７３、４．６４、４．４６、４．１５９、４．０１４、３．９３１、３．６７９、３．６２５、３．５３１、３．４０１、３．３５７、３．３１１、３．１８３、３．２３６、３．０４５、３．１１９Åにそれぞれ対応する、以下の２θ角度：約１４．５７、１５．３２、１６．５０、１９．０７、２０．１７、２０．７７、２１．７８、２２．２２、２３．１２、２４．８４、２５．７５、２６．３１、２８．１４、２８．５７、２９．３５、３０．５０、３０．９１、３１．３５、３２．６４、３２．０９、３４．１７、３３．３３°２θ±０．０５°２θでの１つ又は複数の追加の粉末Ｘ線回折ピークによりさらに特徴付けられる、上記項４に記載の塩形態。
６．  実質的に図３ａに示される粉末Ｘ線回折パターンを有する結晶性（３Ｒ，４Ｓ）−１−（（４−アミノ−５Ｈ−ピロロ［３，２−ｄ］ピリミジン−７−イル）メチル）−４−（メチルチオメチル）ピロリジン−３−オールリン酸塩  Ｄ形である、上記項１又は２に記載の塩形態。
７．  以下の面間隔ｄ：約１９．５、１４．６、１１．８１、９．７０、６．４５、５．９６、５．８６、４．８５、４．７７、４．５４、４．０３１、３．８４９、３．５８９、３．４５７及び３．３７４Åにそれぞれ対応する、以下の２θ角度：約５．２６、７．０１、８．６９、１０．５８、１５．９５、１７．２６、１７．５７、２１．２７、２１．６０、２２．７５、２５．６４、２６．８８、２８．８６、２９．９９及び３０．７５°２θ±０．０５°２θでの粉末Ｘ線回折ピークにより特徴付けられる、Ｅ形の結晶性（３Ｒ，４Ｓ）−１−（（４−アミノ−５Ｈ−ピロロ［３，２−ｄ］ピリミジン−７−イル）メチル）−４−（メチルチオメチル）ピロリジン−３−オールリン酸塩である、上記項１又は２に記載の塩形態。
８．  以下の面間隔ｄ：約１１．５２、８．１８、６．１４、５．７７、５．３２、５．１２、４．９４、４．６７、４．５８、４．４８、４．２７８、３．９８４、３．９５２、３．８８４、３．７３４、３．５３１、３．４３１、３．３３６、３．２８８、３．２０８、３．１４６、３．１１５、３．０６６Åにそれぞれ対応する、以下の２θ角度：約８．９１、１２．５６、１６．７６、１７．８４、１９．３６、２０．１４、２０．８６、２２．０９、２２．５３、２３．０３、２４．１４、２５．９５、２６．１６、２６．６３、２７．７２、２９．３５、３０．２２、３１．１１、３１．５７、３２．３８、３３．０４、３３．３８、３３．９３°２θ±０．０５°２θでの１つ又は複数の追加の粉末Ｘ線回折ピークによりさらに特徴付けられる、上記項７に記載の塩形態。
９．  実質的に図４ａに示される粉末Ｘ線回折パターンを有する結晶性（３Ｒ，４Ｓ）−１−（（４−アミノ−５Ｈ−ピロロ［３，２−ｄ］ピリミジン−７−イル）メチル）−４−（メチルチオメチル）ピロリジン−３−オールリン酸塩  Ｅ形である、上記項１又は２に記載の塩形態。
１０．  以下の面間隔ｄ：約１９．５、１４．７、１１．７６、９．６２、６．５０、６．４１、５．８７、５．８０、５．１２、４．９７、４．８３、４．７５、４．５３、４．０２２、３．９６２、３．６２７、３．５０６、３．３９８、３．３０３及び３．２０４Åにそれぞれ対応する、以下の２θ角度：約５．２５、７．００、８．７３、１０．６７、１５．８２、１６．０４、１７．５２、１７．７５、２０．１３、２０．７７、２１．３６、２１．７２、２２．７９、２５．７０、２６．１０、２８．５５、２９．５６、３０．５２、３１．４３及び３２．４２°２θ±０．０５°２θでの粉末Ｘ線回折ピークにより特徴付けられる、Ｆ形の結晶性（３Ｒ，４Ｓ）−１−（（４−アミノ−５Ｈ−ピロロ［３，２−ｄ］ピリミジン−７−イル）メチル）−４−（メチルチオメチル）ピロリジン−３−オールリン酸塩である、上記項１又は２に記載の塩形態。
１１．  以下の面間隔ｄ：約１１．５０、８．０９、７．２５、６．７９、６．１７、５．３６、４．６７、４．３７４、４．２４１、４．１６５、３．８５９、３．８３２、３．７２２、３．５７１、３．４６９、３．２３３、３．１５４、３．０８８、３．０５２、２．９６８、２．９０７、２．８５０、２．７９５、２．６６８、２．５９２、２．５６７、２．５０５、２．４６４、２．４０８、２．３６２、２．２８３、２．２６５、２．２４３、２．１８９、２．１５６、２．１３５Åにそれぞれ対応する、以下の２θ角度：約８．９２、１２．６９、１４．１９、１５．１４、１６．６８、１９．２１、２２．０９、２３．６０、２４．３５、２４．８０、２６．８１、２７．００、２７．８１、２９．０１、２９．８８、３２．１２、３２．９５、３３．６８、３４．０８、３５．０８、３５．８４、３６．５８、３７．３２、３９．１８、４０．３７、４０．７９、４１．８４、４２．５６、４３．６２、４４．５１、４６．１４、４６．５２、４７．００、４８．２４、４９．０２、４９．５４°２θ±０．０５°２θでの１つ又は複数の追加の粉末Ｘ線回折ピークによりさらに特徴付けられる、上記項１０に記載の塩形態。
１２．  実質的に図５ａに示される粉末Ｘ線回折パターンを有する結晶性（３Ｒ，４Ｓ）−１−（（４−アミノ−５Ｈ−ピロロ［３，２−ｄ］ピリミジン−７−イル）メチル）−４−（メチルチオメチル）ピロリジン−３−オールリン酸塩  Ｆ形である、上記項１又は２に記載の塩形態。
１３．  以下の面間隔ｄ：約１６．５、８．３２、７．５９、５．６５、５．０３、４．７０、４．２６３及び３．５２０Åにそれぞれ対応する、以下の２θ角度：約６．２２、１２．３５、１３．５４、１８．２３、２０．４７、２１．９４、２４．２２及び２９．４４°２θ±０．０５°２θでの粉末Ｘ線回折ピークにより特徴付けられる、結晶性（３Ｒ，４Ｓ）−１−（（４−アミノ−５Ｈ−ピロロ［３，２−ｄ］ピリミジン−７−イル）メチル）−４−（メチルチオメチル）ピロリジン−３−オールシュウ酸塩である、上記項１又は２に記載の塩形態。
１４．  以下の面間隔ｄ：約６．８８、６．５４、５．３９、４．５８、３．４４８、３．３３６、３．２３９、３．１７７、３．０６８Åにそれぞれ対応する、以下の２θ角度：約１４．９４、１５．７２、１９．１１、２２．５４、３０．０７、３１．１１、３２．０６、３２．７１、３３．９０°２θ±０．０５°２θでの１つ又は複数の追加の粉末Ｘ線回折ピークによりさらに特徴付けられる、上記項１３に記載の塩形態。
１５．  実質的に図１ａに示される粉末Ｘ線回折パターンを有する結晶性（３Ｒ，４Ｓ）−１−（（４−アミノ−５Ｈ−ピロロ［３，２−ｄ］ピリミジン−７−イル）メチル）−４−（メチルチオメチル）ピロリジン−３−オールシュウ酸塩である、上記項１又は２に記載の塩形態。
１６．  以下の面間隔ｄ：約１２．６５、６．３１、４．９８、４．１５７、４．０２２、３．９７２、３．６９８、３．２２３及び３．１４７Åにそれぞれ対応する、以下の２θ角度：約８．１１、１６．３０、２０．６８、２４．８５、２５．７０、２６．０３、２８．００、３２．２３及び３３．０２°２θ±０．０５°２θでの粉末Ｘ線回折ピークにより特徴付けられる、結晶性（３Ｒ，４Ｓ）−１−（（４−アミノ−５Ｈ−ピロロ［３，２−ｄ］ピリミジン−７−イル）メチル）−４−（メチルチオメチル）ピロリジン−３−オールギ酸塩である、上記項１又は２に記載の塩形態。
１７．  以下の面間隔ｄ：約９．９３、７．５２、５．８７、５．７４、５．４７、４．８４、４．７５、４．４５、４．１９４、３．８１４、３．７５４、３．６３２、３．６００、３．４２０、３．３４２、３．３２２、３．１０８、３．０３９、３．０１４、２．９２９、２．８９６、２．８４５、２．８２５、２．７３７、２．６８６、２．６１９、２．５８６、２．５２８、２．４８６、２．４５４、２．３６９、２．３３０、２．２７７、２．２６６、２．２２７、２．１７８、２．１４９、２．１１２Åにそれぞれ対応する、以下の２θ角度：約１０．３４、１３．６６、１７．５４、１７．９５、１８．８３、２１．３２、２１．７１、２３．１７、２４．６３、２７．１３、２７．５７、２８．５１、２８．７７、３０．３３、３１．０５、３１．２４、３３．４５、３４．２４、３４．５２、３５．５７、３５．９９、３６．６６、３６．９３、３８．１５、３８．９１、３９．９４、４０．４７、４１．４５、４２．１７、４２．７５、４４．３６、４５．１５、４６．２７、４６．５０、４７．３６、４８．４９、４９．２０、５０．１２°２θ±０．０５°２θでの１つ又は複数の追加の粉末Ｘ線回折ピークによりさらに特徴付けられる、上記項１６に記載の塩形態。
１８．  実質的に図６ａに示される粉末Ｘ線回折パターンを有する結晶性（３Ｒ，４Ｓ）−１−（（４−アミノ−５Ｈ−ピロロ［３，２−ｄ］ピリミジン−７−イル）メチル）−４−（メチルチオメチル）ピロリジン−３−オールギ酸塩である、上記項１又は２に記載の塩形態。
１９．  以下の面間隔ｄ：約１７．８、９．９４、７．８２、６．６７、６．４７、５．８４、５．６２、４．８１、４．２５、３．９５４、３．８６６、３．７４１、３．４２５、３．３５、３．２９３及び３．２１９Åにそれぞれ対応する、以下の２θ角度：約５．７５、１０．３３、１３．１４、１５．４１、１５．９０、１７．６１、１８．３２、２１．４３、２４．３０、２６．１５、２６．７６、２７．６７、３０．２８、３０．９７、３１．５２及び３２．２７°２θ±０．０５°２θでの粉末Ｘ線回折ピークにより特徴付けられる、結晶性（３Ｒ，４Ｓ）−１−（（４−アミノ−５Ｈ−ピロロ［３，２−ｄ］ピリミジン−７−イル）メチル）−４−（メチルチオメチル）ピロリジン−３−オール硫酸塩である、上記項１又は２に記載の塩形態。
２０．  以下の面間隔ｄ：約５．３８、５．０８、４．９４、４．６３、４．１９２、３．５２９、３．１２７Åにそれぞれ対応する、以下の２θ角度：約１９．１４、２０．２８、２０．８７、２２．２６、２４．６４、２９．３７、３３．２４°２θ±０．０５°２θでの１つ又は複数の追加の粉末Ｘ線回折ピークによりさらに特徴付けられる、上記項１９に記載の塩形態。
２１．  実質的に図２ａに示される粉末Ｘ線回折パターンを有する結晶性（３Ｒ，４Ｓ）−１−（（４−アミノ−５Ｈ−ピロロ［３，２−ｄ］ピリミジン−７−イル）メチル）−４−（メチルチオメチル）ピロリジン−３−オール硫酸塩である、上記項１又は２に記載の塩形態。
２２．  示差走査熱量測定で測定した場合に約１６５℃〜約１８５℃の範囲で吸熱を示す（３Ｒ，４Ｓ）−１−（（４−アミノ−５Ｈ−ピロロ［３，２−ｄ］ピリミジン−７−イル）メチル）−４−（メチルチオメチル）ピロリジン−３−オールリン酸塩である、上記項１又は２に記載の塩形態。
２３．  実質的に図３ｃに示される示差走査熱量測定サーモグラムを有するＤ形の（３Ｒ，４Ｓ）−１−（（４−アミノ−５Ｈ−ピロロ［３，２−ｄ］ピリミジン−７−イル）メチル）−４−（メチルチオメチル）ピロリジン−３−オールリン酸塩である、上記項１又は２に記載の塩形態。
２４．  実質的に図４ｃに示される示差走査熱量測定サーモグラムを有するＥ形の（３Ｒ，４Ｓ）−１−（（４−アミノ−５Ｈ−ピロロ［３，２−ｄ］ピリミジン−７−イル）メチル）−４−（メチルチオメチル）ピロリジン−３−オールリン酸塩である、上記項１又は２に記載の塩形態。
２５．  実質的に図５ｃに示される示差走査熱量測定サーモグラムを有するＦ形の（３Ｒ，４Ｓ）−１−（（４−アミノ−５Ｈ−ピロロ［３，２−ｄ］ピリミジン−７−イル）メチル）−４−（メチルチオメチル）ピロリジン−３−オールリン酸塩である、上記項１又は２に記載の塩形態。
２６．  示差走査熱量測定で測定した場合に約１３７．０４℃で吸熱を示す（３Ｒ，４Ｓ）−１−（（４−アミノ−５Ｈ−ピロロ［３，２−ｄ］ピリミジン−７−イル）メチル）−４−（メチルチオメチル）ピロリジン−３−オールシュウ酸塩である、上記項１又は２に記載の塩形態。
２７．  実質的に図１ｂに示される示差走査熱量測定サーモグラムを有する（３Ｒ，４Ｓ）−１−（（４−アミノ−５Ｈ−ピロロ［３，２−ｄ］ピリミジン−７−イル）メチル）−４−（メチルチオメチル）ピロリジン−３−オールシュウ酸塩である、上記項１又は２に記載の塩形態。
２８．  示差走査熱量測定で測定した場合に約１７９．５４℃で吸熱を示す（３Ｒ，４Ｓ）−１−（（４−アミノ−５Ｈ−ピロロ［３，２−ｄ］ピリミジン−７−イル）メチル）−４−（メチルチオメチル）ピロリジン−３−オールギ酸塩である、上記項１又は２に記載の塩形態。
２９．  実質的に図６ｃに示される示差走査熱量測定サーモグラムを有する（３Ｒ，４Ｓ）−１−（（４−アミノ−５Ｈ−ピロロ［３，２−ｄ］ピリミジン−７−イル）メチル）−４−（メチルチオメチル）ピロリジン−３−オールギ酸塩である、上記項１又は２に記載の塩形態。
３０．  上記項１〜２９のいずれか一項に記載の塩形態と少なくとも１種の薬学的に許容される賦形剤とを含む医薬組成物。
３１．  塩形態が（３Ｒ，４Ｓ）−１−（（４−アミノ−５Ｈ−ピロロ［３，２−ｄ］ピリミジン−７−イル）メチル）−４−（メチルチオメチル）ピロリジン−３−オールリン酸塩である、上記項３０に記載の医薬組成物。
３２．  ＭＴＡＰを阻害することが望ましい疾患又は障害を処置する方法であって、上記項１〜２９のいずれか一項に記載の塩形態の有効量を、それを必要とする患者に投与することを含む方法。
３３．  塩形態が、（３Ｒ，４Ｓ）−１−（（４−アミノ−５Ｈ−ピロロ［３，２−ｄ］ピリミジン−７−イル）メチル）−４−（メチルチオメチル）ピロリジン−３−オールリン酸塩である、上記項３２に記載の方法。
３４．  疾患又は障害が癌である、上記項３２又は３３に記載の方法。
３５．  結晶性（３Ｒ，４Ｓ）−１−（（４−アミノ−５Ｈ−ピロロ［３，２−ｄ］ピリミジン−７−イル）メチル）−４−（メチルチオメチル）ピロリジン−３−オールリン酸塩の調製のための方法であって、
（ａ）（３Ｒ，４Ｓ）−１−（（４−アミノ−５Ｈ−ピロロ［３，２−ｄ］ピリミジン−７−イル）メチル）−４−（メチルチオメチル）ピロリジン−３−オールリン酸塩の水溶液を調製するステップと、
（ｂ）アルコール、メチルエチルケトン、テトラヒドロフラン又はアセトンを溶液に添加して、（３Ｒ，４Ｓ）−１−（（４−アミノ−５Ｈ−ピロロ［３，２−ｄ］ピリミジン−７−イル）メチル）−４−（メチルチオメチル）ピロリジン−３−オールリン酸塩の結晶を形成するステップと、
（ｃ）（３Ｒ，４Ｓ）−１−（（４−アミノ−５Ｈ−ピロロ［３，２−ｄ］ピリミジン−７−イル）メチル）−４−（メチルチオメチル）ピロリジン−３−オールリン酸塩の結晶を単離するステップと、
を含む方法。
３６．  エタノールがステップ（ｂ）で添加される、上記項３５に記載の方法。
３７．  式（Ｖ）：
【化１１】
2019206525.tif 000012
の化合物を調製するための方法であって、
（ｄ）式（ＩＩＩ）の化合物をクロロギ酸メチルと反応させて式（ＩＶ）の化合物を生成するステップと、
【化１２】
2019206525.tif 000013
（ｅ）塩基性条件下で式（ＩＶ）の化合物を環化して式（Ｖ）の化合物を得るステップと、
を含み、ステップ（ｄ）における溶媒として酢酸エチルが使用される方法。
３８．  式（ＸＩＩ）：
【化１３】
2019206525.tif 000014
の化合物を調製するための方法であって、
（ｆ）式（ＩＸ）の化合物をメタンスルホニルクロリド及び２，６−ルチジン、続いてナトリウムチオメトキシドと接触させて式（Ｘ）の化合物を得るステップと、
【化１４】
2019206525.tif 000015
（ｇ）式（Ｘ）の化合物を脱保護し、続いて式（ＸＩ）の化合物に変換するステップと、
【化１５】
2019206525.tif 000016
（ｈ）式（ＸＩ）の化合物を式（ＸＩＩ）の化合物に変換するステップと、
を含み、ステップ（ｆ）における溶媒としてアセトンが使用される方法。
３９．  （３Ｒ，４Ｓ）−１−（（４−アミノ−５Ｈ−ピロロ［３，２−ｄ］ピリミジン−７−イル）メチル）−４−（メチルチオメチル）ピロリジン−３−オールリン酸塩を調製するための方法であって、
（ａ）式（ＸＩＩ）の化合物を水／エタノール溶媒中の９−デアザアデニン及びホルムアルデヒドと接触させて、（３Ｒ，４Ｓ）−１−（（４−アミノ−５Ｈ−ピロロ［３，２−ｄ］ピリミジン−７−イル）メチル）−４−（メチルチオメチル）ピロリジン−３−オールを生成するステップと、
【化１６】
2019206525.tif 000017
（ｂ）ステップ（ａ）で生成された（３Ｒ，４Ｓ）−１−（（４−アミノ−５Ｈ−ピロロ［３，２−ｄ］ピリミジン−７−イル）メチル）−４−（メチルチオメチル）ピロリジン−３−オールを、
（ｉ）（３Ｒ，４Ｓ）−１−（（４−アミノ−５Ｈ−ピロロ［３，２−ｄ］ピリミジン−７−イル）メチル）−４−（メチルチオメチル）ピロリジン−３−オールリン酸塩を含有する溶液を生成するためのリン酸水溶液、
（ｉｉ）（３Ｒ，４Ｓ）−１−（（４−アミノ−５Ｈ−ピロロ［３，２−ｄ］ピリミジン−７−イル）メチル）−４−（メチルチオメチル）ピロリジン−３−オールリン酸塩の種結晶、及び任意選択で
（ｉｉｉ）エタノール
と接触させて、結晶性（３Ｒ，４Ｓ）−１−（（４−アミノ−５Ｈ−ピロロ［３，２−ｄ］ピリミジン−７−イル）メチル）−４−（メチルチオメチル）ピロリジン−３−オールリン酸塩を生成するステップと、
（ｃ）結晶性（３Ｒ，４Ｓ）−１−（（４−アミノ−５Ｈ−ピロロ［３，２−ｄ］ピリミジン−７−イル）メチル）−４−（メチルチオメチル）ピロリジン−３−オールリン酸塩を単離するステップと、
を含む方法。
【００６８】
定義：
「患者」という用語はヒト及び非ヒト動物を含む。
【００６９】
「処置」、「処置する」などの用語は、１つ若しくは複数の症状の軽減、又は疾患若しくは障害に関連する状態の改善、例えば、癌の場合、腫瘍サイズの減少若しくは腫瘍の成長の抑制を含む。
【００７０】
化合物（Ｉ）の合成：
（３Ｒ，４Ｓ）−１−（（４−アミノ−５Ｈ−ピロロ［３，２−ｄ］ピリミジン−７−イル）メチル）−４−（メチルチオメチル）ピロリジン−３−オール（化合物（Ｉ））、及びそのリン酸塩、（３Ｒ，４Ｓ）−１−（（４−アミノ−５Ｈ−ピロロ［３，２−ｄ］ピリミジン−７−イル）メチル）−４−（メチルチオメチル）ピロリジン−３−オールリン酸塩（化合物（Ｉａ））は、２つの反応経路の収束によって合成される。
【００７１】
第１の経路は、スキーム１に示される９−デアザアデニン（ＶＩＩ）を得る５段階プロセスである。
【００７２】
スキーム１（９−デアザアデニン（ＶＩＩ）の合成）：
【化１７】
2019206525.tif 000018
【００７３】
化合物（ＩＩＩ）は、メタノール中のトリエチルアミンの存在下で、化合物（ＩＩ）と重硫酸アミノアセトニトリルのオレフィン付加脱離反応から形成される。添加の順序は、関連する発熱（１０ｇの規模の５分間にわたる添加で４．６℃の温度上昇）を管理するために慎重に制御される。化合物（ＩＩＩ）は、クロロギ酸メチル（ＭＣＦ）とさらに反応させる。有利には、本発明の方法は、このステップにおいて酢酸エチルを使用し、毒性溶媒の使用を最小限にする。乾燥酢酸エチルが使用されることが好ましい。化合物（ＩＶ）の形成は約１０分で完了する。
【００７４】
本発明者らは、温度及びオレフィン濃度の変化は収率に強く影響し、環化生成物が不安定になり得ることを見出した。本発明の方法は、環化生成物（Ｖ）の劣化を最小限にするために、適度に短い反応時間を使用する。遊離ピロール（化合物（Ｖ））は種々の溶媒から容易に沈殿し、精製並びに改善された収率及び純度のための簡便で規模に適した方法をもたらす。
【００７５】
驚くべきことに、エタノール／水からの化合物（Ｖ）の沈殿は、環化の間に形成される不純物の多く及び反応からの任意の残留色を除去することが見出された。しかし、２種の不純物が残ることから、それらの除去が後の段階で必要とされる。反応の規模を大きくすると、７２％の収率及び８２．８％の純度で単離された化合物（Ｖ）と一致する結果をもたらす。したがって、有利には、化合物（Ｖ）は高純度の固体形態で生成される。
【００７６】
化合物（ＶＩ）の合成は、生成物の単離及びその後の反応の再開を含む。このようにすれば、驚くべきことにほぼ完全な変換を達成することが可能である。
【００７７】
化合物（ＶＩ）を鹸化し、続いて脱炭酸反応がエステル基を除去する。反応が完了に近づくと、一般的には約９９．７４％の高純度をもたらす生成物の結晶が観察される。これは、精製が結晶化の際に起こること（これは、拡大された規模の手順に有利である。）を示す。
【００７８】
第２の経路は、スキーム２に示されるピロリジン（ＸＩＩ）を得る４段階プロセスである。
【００７９】
スキーム２（ピロリジン（ＸＩＩ）の合成）：
【化１８】
2019206525.tif 000019
【００８０】
（ＶＩＩＩ）からのベンジル保護基の除去は、エタノール中の水素のバルーン圧下で、パールマン触媒（（ＶＩＩＩ）に対して１０重量％投入）を用いて水素化分解することによって達成される。水素化分解が失速した場合、触媒の第２の投入を用いて変換を達成することができる。触媒は濾過を介して除去され、得られた溶液は二炭酸ジ−ｔ−ブチルで処理される。ガス発生が停止すると、さらに精製することなく使用される定量的収率の化合物（ＩＸ）を得るために混合物を蒸発させる。
【００８１】
反応に窒素が関与することにより、化合物（ＩＸ）の６位でのメシル化が困難になる場合があることがこれまでに見出されている（Ｔｅｔ．Ａｓｙｍｍ．，９，  １９９８，  １０５１−１０５７）。３−メシル、６−メシル及びビス−メシル保護された化合物の混合物をもたらす唯一の適度な保護基の選択が観察される。これは、所望の生成物の化合物（Ｘ）の収率を低くする可能性がある。しかし、本発明者らは、アセトン／ルチジン系における化合物（ＩＸ）とメタンスルホニルクロリドの反応、続くチオメトキシド置換は、クロマトグラフィー後、良好な収率及び純度で化合物（Ｘ）をもたらすことを見出した。
【００８２】
化合物（Ｘ）の脱保護は、伝統的に、水性のＨＣｌ／メタノール混合物を使用し、乾燥するまで蒸発させて達成される。本発明の方法は、イソプロピルアルコール中でトリフルオロ酢酸並びにＡｍｂｅｒｌｉｔｅ  ＦＰＡ９１及びＦＰＡ９８などの食品グレードの強塩基イオン交換樹脂を用いた規模に適したアプローチを含む。
【００８３】
完全に塩基性化するためには、基板と樹脂を十分な時間接触させることが重要である。これは、ＩＰＡ溶液中の化合物を樹脂と共に２０分間スラリー化し、続いて、スラリーを、より多くの樹脂を含有するカラムにロードし、重力下で溶出することによって達成される。完全な脱保護のために、化合物（Ｘ）に対して約１０倍の重量の樹脂が必要とされる。イオン交換樹脂の使用は、遊離塩基形態のクルード（ＸＩＩ）を生成するための信頼できる方法をもたらす。有利には、結晶性塩形態は、拡大された規模での処理のために提供される。エタノールからのシュウ酸塩の結晶化は、シュウ酸塩（ＸＩ）などのピロリジンの濾過可能な結晶性スラリーを高純度、８０％の収率でもたらす。
【００８４】
スキーム３（化合物（Ｉａ）を形成するための合成経路の収束）：
【化１９】
2019206525.tif 000020
【００８５】
化合物（Ｉａ）の調製の最終段階をスキーム３に示す。まず、シュウ酸塩（化合物（ＸＩ））を、水中のＡｍｂｅｒｌｉｔｅ  ＦＰＡ９１イオン交換樹脂を用いて遊離塩基（ＸＩＩ）に変換することによって（ＸＩＩ）を得、その後、水／エタノール中で（ＶＩＩ）及びホルムアルデヒドとカップリングすることによって化合物（Ｉａ）を得る。カップリングに続いて、リン酸が貧溶媒としてのエタノールと一緒に投入されて、溶液から化合物（Ｉａ）を結晶化させる。貧溶媒としてのエタノールを徐々に添加することを介した制御された（Ｉａ）の結晶化を容易にするために、約４５：５５〜約１５：８５、例えば約４０：６０の水／エタノール比が選択される。化合物（Ｉａ）は、水／エタノール又は水／メタノールから再結晶され得る。
【００８６】
多くの対イオンでの化合物（Ｉ）の結晶化スクリーンは、シュウ酸塩、硫酸塩、ギ酸塩及びリン酸塩が結晶性であることを示している。解釈された化学量論を用いたリン酸塩、ギ酸塩及び硫酸塩の微量分析を以下に示す（表１）。
【００８７】
表１（化合物（Ｉ）の塩形態の微量分析）：
【表１】
2019206525.tif 000021
【００８８】
粉末Ｘ線回折（ＸＲＰＤ）、示差走査熱量測定（ＤＳＣ）及び熱重量分析（ＴＧＡ）は、化合物（Ｉａ）である（３Ｒ，４Ｓ）−１−（（４−アミノ−５Ｈ−ピロロ［３，２−ｄ］ピリミジン−７−イル）メチル）−４−（メチルチオメチル）ピロリジン−３−オールリン酸塩が多形形態として存在することを示す。すべての形態はＤＳＣ分析において類似性を示す。
【００８９】
表２（化合物（Ｉａ）の多形体）：
【表２】
2019206525.tif 000022
【００９０】
上記表２に示されるように、化合物（Ｉａ）である（３Ｒ，４Ｓ）−１−（（４−アミノ−５Ｈ−ピロロ［３，２−ｄ］ピリミジン−７−イル）メチル）−４−（メチルチオメチル）ピロリジン−３−オールリン酸塩は、エタノールから単離された２つの多形形態、Ｄ及びＥ、並びにメタノールから単離された１つの多形形態Ｆとして存在する。
【００９１】
結晶形Ｄ及びＥの再結晶は純度を高める手段として利用でき、これは、約３８℃に加温しながら水に溶解し、エタノールを添加した後に３０℃まで冷却することによってなされる。種結晶を添加し、続いて１時間にわたって２０℃までさらに冷却する。エタノールを緩徐に添加し、スラリーを１時間熟成させる。エタノールの第２の部分を添加し、スラリーを１時間熟成させる。エタノールの第３の部分を添加し、スラリーを１時間熟成させる。結晶を濾紙上に厚め、エタノールで洗浄し、真空下で乾燥させる（図９）。（１Ｈ  ＮＭＲによる）残留エタノールのレベルは約０．５重量％であり、これは、経口医薬品有効成分のためのＩＣＨガイダンスに対応する。
【００９２】
結晶形Ｆの再結晶はまた、エタノールをメタノールと置き換えて、上記と同じ手順によって純度を高める手段として利用できる。
【００９３】
さらなる態様：
化合物（Ｉ）の塩形態、例えば化合物（Ｉａ）（（３Ｒ，４Ｓ）−１−（（４−アミノ−５Ｈ−ピロロ［３，２−ｄ］ピリミジン−７−イル）メチル）−４−（メチルチオメチル）ピロリジン−３−オールリン酸塩）は、種々の経路で患者に投与することができ、投与経路は限定されない。このような投与経路としては、経口、非経口、局所、直腸、経鼻、頬、吸入スプレーによる又は移植リザーバーを介するものが挙げられる。投与すべき化合物の量は、患者の性質並びに処置される障害の性質及び程度に応じて大きく異なり得る。典型的には、成人ヒト用の用量は、１〜１０００ミリグラム未満、好ましくは０．１〜１００ミリグラムの範囲となる。化合物は、種々の投与計画、例えば、１日に１回又は１日に２回の投薬を用いて投与することができる。当業者は、投与計画は、患者の性質並びに処置される障害の性質及び程度に応じて異なることを理解するであろう。
【００９４】
化合物（Ｉ）の塩形態（例えば化合物（Ｉａ））は医薬組成物として提供することができる。化合物（Ｉ）の塩形態（例えば化合物（Ｉａ））は、錠剤、カプセル剤、坐剤、散剤、溶液、懸濁液及び分散液などの固体又は液体製剤に処方することができる。いくつかの実施形態において、化合物（Ｉ）の塩形態（例えば化合物（Ｉａ））は、固体又は液体製剤、例えば、錠剤、カプセル剤、散剤、溶液、懸濁液及び分散剤として経口投与のために処方される。このような製剤は当該技術分野において周知である。錠剤形態では、化合物（Ｉ）の塩形態（例えば化合物（Ｉａ））は、結合剤、例えば、コーンスターチ又はゼラチン；カルボキシメチルセルロース、ポリビニルピロリジノン、ジャガイモデンプン、アルギン酸及びゼラチンなどの崩壊剤；並びにステアリン酸マグネシウム又はタルクなどの潤滑剤と共に、グルコース、ラクトース、スクロース、マンニトール及びコーンスターチなどの従来の錠剤基剤を用いて錠剤にすることができる。カプセル形態での経口投与のために、ラクトース及び乾燥コーンスターチなどの希釈剤が使用され得る。着色剤、甘味剤又は香味剤などの他の成分が添加され得る。
【００９５】
経口使用に水性懸濁液が必要とされる場合、化合物（Ｉ）の塩形態（例えば化合物（Ｉａ））は、水及びエタノールなどの担体と組み合わせられ得、乳化剤、懸濁化剤及び／又は界面活性剤が使用され得る。また、着色剤、甘味剤、香味剤又はｐＨ調整剤が添加されてもよい。
【００９６】
化合物（Ｉ）の塩形態（例えば化合物（Ｉａ））はさらに、持続放出システムを用いて投与され得る。例えば、それらを緩徐に溶解する錠剤又はカプセル剤に組み込まれ得る。
【００９７】
液体形態は、薬学的に許容される界面活性剤又は懸濁化剤などの他の物質と共に又はそのような物質なしで、水及びエタノールなどの担体を含む。
【００９８】
化合物（Ｉ）の塩形態（例えば化合物（Ｉａ））は、水又は生理食塩水などの生理学的に許容される希釈剤中で注射によって投与されてもよい。希釈剤は、エタノール、プロピレングリコール、油又は薬学的に許容される界面活性剤などの１種又は複数種の他の成分を含み得る。
【００９９】
化合物（Ｉ）の塩形態（例えば化合物（Ｉａ））は、皮膚又は粘膜への局所投与のためのクリーム中の成分として存在し得る。好ましくは、クリームは、皮膚又は粘膜の通過を支援する薬学的に許容される溶媒を含む。適切なクリームは当業者にとって周知である。
【図面の簡単な説明】
【０１００】
【図１ａ】図１ａ（Ｆｉｇｕｒｅ  １（ａ））は、（３Ｒ，４Ｓ）−１−（（４−アミノ−５Ｈ−ピロロ［３，２−ｄ］ピリミジン−７−イル）メチル）−４−（メチルチオメチル）ピロリジン−３−オールシュウ酸塩に関する粉末Ｘ線回折（Ｂｒｕｋｅｒ  Ｄ８  Ａｄｖａｎｃｅ回折計を用いて測定）を示す。
【図１ｂ】図１ｂ（Ｆｉｇｕｒｅ  １（ｂ））は、（３Ｒ，４Ｓ）−１−（（４−アミノ−５Ｈ−ピロロ［３，２−ｄ］ピリミジン−７−イル）メチル）−４−（メチルチオメチル）ピロリジン−３−オールシュウ酸塩に関するＤＳＣトレース（Ｍｅｔｔｌｅｒ−Ｔｏｌｅｄｏ  ＤＳＣ１  Ｓｔａｒ−ｅシステムを用いて測定）を示す。１３７．０４℃での融解吸熱開始（走査範囲：２５℃〜３００℃；走査速度：１０℃／分）。
【図２ａ】図２ａ（Ｆｉｇｕｒｅ  ２（ａ））は、（３Ｒ，４Ｓ）−１−（（４−アミノ−５Ｈ−ピロロ［３，２−ｄ］ピリミジン−７−イル）メチル）−４−（メチルチオメチル）ピロリジン−３−オール硫酸塩に関する粉末Ｘ線回折（Ｂｒｕｋｅｒ  Ｄ８  Ａｄｖａｎｃｅ回折計を用いて測定）を示す。
【図２ｂ】図２ｂ（Ｆｉｇｕｒｅ  ２（ｂ））は、（３Ｒ，４Ｓ）−１−（（４−アミノ−５Ｈ−ピロロ［３，２−ｄ］ピリミジン−７−イル）メチル）−４−（メチルチオメチル）ピロリジン−３−オール硫酸塩に関するＤＳＣトレース（Ｍｅｔｔｌｅｒ−Ｔｏｌｅｄｏ  ＤＳＣ１  Ｓｔａｒ−ｅシステムを用いて測定）を示す。明らかな融解転移なし（走査範囲：２５℃〜３００℃；走査速度：１０℃／分）。
【図３ａ】図３ａ（Ｆｉｇｕｒｅ  ３（ａ））は、６０／４０  水／エタノールから単離された（３Ｒ，４Ｓ）−１−（（４−アミノ−５Ｈ−ピロロ［３，２−ｄ］ピリミジン−７−イル）メチル）−４−（メチルチオメチル）ピロリジン−３−オールリン酸塩  Ｄ形に関する粉末Ｘ線回折（Ｐｈｉｌｌｉｐｓ  ＰＷ１７００回折計を用いて測定）を示す。
【図３ｂ】図３ｂ（Ｆｉｇｕｒｅ  ３（ｂ））は、６０／４０  水／エタノールから単離された（３Ｒ，４Ｓ）−１−（（４−アミノ−５Ｈ−ピロロ［３，２−ｄ］ピリミジン−７−イル）メチル）−４−（メチルチオメチル）ピロリジン−３−オールリン酸塩  Ｄ形に関するＴＧＡを示す。４．６％の初期重量損失（走査範囲：周囲温度〜３００℃；走査速度：１０℃／分）。
【図３ｃ】図３ｃ（Ｆｉｇｕｒｅ  ３（ｃ））は、６０／４０  水／エタノールから単離された（３Ｒ，４Ｓ）−１−（（４−アミノ−５Ｈ−ピロロ［３，２−ｄ］ピリミジン−７−イル）メチル）−４−（メチルチオメチル）ピロリジン−３−オールリン酸塩  Ｄ形に関するＤＳＣトレース（Ａｌｐｈａｔｅｃ  ＳＤＴ  Ｑ６００機器を用いて測定）を示す。１６３．３０℃での融解吸熱開始（走査範囲：２５℃〜３００℃；走査速度：１０℃／分）。
【図３ｄ】図３ｄ（Ｆｉｇｕｒｅ  ３（ｄ））は、６０／４０  水／エタノールから単離された（３Ｒ，４Ｓ）−１−（（４−アミノ−５Ｈ−ピロロ［３，２−ｄ］ピリミジン−７−イル）メチル）−４−（メチルチオメチル）ピロリジン−３−オールリン酸塩  Ｄ形に関する微分ＴＧＡを示す。
【図４ａ】図４ａ（Ｆｉｇｕｒｅ  ４（ａ））は、３．６／６．４  水／エタノールから単離された（３Ｒ，４Ｓ）−１−（（４−アミノ−５Ｈ−ピロロ［３，２−ｄ］ピリミジン−７−イル）メチル）−４−（メチルチオメチル）ピロリジン−３−オールリン酸塩  Ｅ形に関する粉末Ｘ線回折（Ｐｈｉｌｌｉｐｓ  ＰＷ１７００回折計を用いて測定）を示す。
【図４ｂ】図４ｂ（Ｆｉｇｕｒｅ  ４（ｂ））は、３．６／６．４  水／エタノールから単離された（３Ｒ，４Ｓ）−１−（（４−アミノ−５Ｈ−ピロロ［３，２−ｄ］ピリミジン−７−イル）メチル）−４−（メチルチオメチル）ピロリジン−３−オールリン酸塩  Ｅ形に関するＴＧＡを示す。５．７％の初期重量損失（走査範囲：周囲温度〜３００℃；走査速度：１０℃／分）。
【図４ｃ】図４ｃ（Ｆｉｇｕｒｅ  ４（ｃ））は、３．６／６．４  水／エタノールから単離された（３Ｒ，４Ｓ）−１−（（４−アミノ−５Ｈ−ピロロ［３，２−ｄ］ピリミジン−７−イル）メチル）−４−（メチルチオメチル）ピロリジン−３−オールリン酸塩  Ｅ形に関するＤＳＣトレース（Ａｌｐｈａｔｅｃ  ＳＤＴ  Ｑ６００機器を用いて測定）を示す。１７３．５３℃での融解吸熱開始（走査範囲：２５℃〜３００℃；走査速度：１０℃／分）。
【図４ｄ】図４ｄ（Ｆｉｇｕｒｅ  ４（ｄ））は、３．６／６．４  水／エタノールから単離された（３Ｒ，４Ｓ）−１−（（４−アミノ−５Ｈ−ピロロ［３，２−ｄ］ピリミジン−７−イル）メチル）−４−（メチルチオメチル）ピロリジン−３−オールリン酸塩  Ｅ形に関する微分ＴＧＡを示す。
【図５ａ】図５ａ（Ｆｉｇｕｒｅ  ５（ａ））は、メタノールから単離された（３Ｒ，４Ｓ）−１−（（４−アミノ−５Ｈ−ピロロ［３，２−ｄ］ピリミジン−７−イル）メチル）−４−（メチルチオメチル）ピロリジン−３−オールリン酸塩  Ｆ形に関する粉末Ｘ線回折（Ｐｈｉｌｌｉｐｓ  ＰＷ１７００回折計を用いて測定）を示す。
【図５ｂ】図５ｂ（Ｆｉｇｕｒｅ  ５（ｂ））は、メタノールから単離された（３Ｒ，４Ｓ）−１−（（４−アミノ−５Ｈ−ピロロ［３，２−ｄ］ピリミジン−７−イル）メチル）−４−（メチルチオメチル）ピロリジン−３−オールリン酸塩  Ｆ形に関するＴＧＡを示す。３．９％の初期重量損失（走査範囲：周囲温度〜２７５℃；走査速度：１０℃／分）。
【図５ｃ】図５ｃ（Ｆｉｇｕｒｅ  ５（ｃ））は、メタノールから単離された（３Ｒ，４Ｓ）−１−（（４−アミノ−５Ｈ−ピロロ［３，２−ｄ］ピリミジン−７−イル）メチル）−４−（メチルチオメチル）ピロリジン−３−オールリン酸塩  Ｆ形に関するＤＳＣトレース（Ａｌｐｈａｔｅｃ  ＳＤＴ  Ｑ６００機器を用いて測定）を示す。１７７．０６℃での融解吸熱開始（走査範囲：２５℃〜３００℃；走査速度：１０℃／分）。
【図５ｄ】図５ｄ（Ｆｉｇｕｒｅ  ５（ｄ））は、メタノールから単離された（３Ｒ，４Ｓ）−１−（（４−アミノ−５Ｈ−ピロロ［３，２−ｄ］ピリミジン−７−イル）メチル）−４−（メチルチオメチル）ピロリジン−３−オールリン酸塩  Ｆ形に関する微分ＴＧＡを示す。
【図６ａ】図６ａ（Ｆｉｇｕｒｅ  ６（ａ））は、水／アセトンから単離された（３Ｒ，４Ｓ）−１−（（４−アミノ−５Ｈ−ピロロ［３，２−ｄ］ピリミジン−７−イル）メチル）−４−（メチルチオメチル）ピロリジン−３−オールギ酸塩に関する粉末Ｘ線回折（Ｂｒｕｋｅｒ  Ｄ８  Ａｄｖａｎｃｅ回折計を用いて測定）を示す。
【図６ｂ】図６ｂ（Ｆｉｇｕｒｅ  ６（ｂ））は、水／アセトンから単離された（３Ｒ，４Ｓ）−１−（（４−アミノ−５Ｈ−ピロロ［３，２−ｄ］ピリミジン−７−イル）メチル）−４−（メチルチオメチル）ピロリジン−３−オールギ酸塩に関するＴＧＡを示す。初期重量損失なし（走査範囲：周囲温度〜２７５℃；走査速度：１０℃／分）。
【図６ｃ】図６ｃ（Ｆｉｇｕｒｅ  ６（ｃ））は、水／アセトンから単離された（３Ｒ，４Ｓ）−１−（（４−アミノ−５Ｈ−ピロロ［３，２−ｄ］ピリミジン−７−イル）メチル）−４−（メチルチオメチル）ピロリジン−３−オールギ酸塩に関するＤＳＣトレース（Ａｌｐｈａｔｅｃ  ＳＤＴ  Ｑ６００機器を用いて測定）を示す。１７９．５４℃での融解吸熱開始（走査範囲：２５℃〜３００℃；走査速度：１０℃／分）。
【図６ｄ】図６ｄ（Ｆｉｇｕｒｅ  ６（ｄ））は、水／アセトンから単離された（３Ｒ，４Ｓ）−１−（（４−アミノ−５Ｈ−ピロロ［３，２−ｄ］ピリミジン−７−イル）メチル）−４−（メチルチオメチル）ピロリジン−３−オールギ酸塩に関する微分ＴＧＡを示す。
【図７ａ】図７ａ（Ｆｉｇｕｒｅ  ７（ａ））は、（３Ｒ，４Ｓ）−１−（（４−アミノ−５Ｈ−ピロロ［３，２−ｄ］ピリミジン−７−イル）メチル）−４−（メチルチオメチル）ピロリジン−３−オールに関するＸＲＰＤ（Ｂｒｕｋｅｒ  Ｄ８  Ａｄｖａｎｃｅ回折計を用いて測定）を示す。
【図７ｂ】図７ｂ（Ｆｉｇｕｒｅ  ７（ｂ））は、（３Ｒ，４Ｓ）−１−（（４−アミノ−５Ｈ−ピロロ［３，２−ｄ］ピリミジン−７−イル）メチル）−４−（メチルチオメチル）ピロリジン−３−オールに関するＤＳＣトレース（Ｍｅｔｔｌｅｒ−Ｔｏｌｅｄｏ  ＤＳＣ１  Ｓｔａｒ−ｅシステムを用いて測定）を示す。１８４．８２℃での融解吸熱開始（走査範囲：２５℃〜３００℃；走査速度：１０℃／分）。
【図８】図８（Ｆｉｇｕｒｅ  ８）は、より大きな腫瘍（１５０ｍｍ３）に対する（３Ｒ，４Ｓ）−１−（（４−アミノ−５Ｈ−ピロロ［３，２−ｄ］ピリミジン−７−イル）メチル）−４−（メチルチオメチル）ピロリジン−３−オールリン酸塩の効果についての研究を示す。
【図９ａ】図９ａ（Ｆｉｇｕｒｅ  ９（ａ））は、２０倍の倍率での（３Ｒ，４Ｓ）−１−（（４−アミノ−５Ｈ−ピロロ［３，２−ｄ］ピリミジン−７−イル）メチル）−４−（メチルチオメチル）ピロリジン−３−オールリン酸塩  Ｅ形の結晶の画像を示す。
【図９ｂ】図９ｂ（Ｆｉｇｕｒｅ  ９（ｂ））は、５０倍の倍率での（３Ｒ，４Ｓ）−１−（（４−アミノ−５Ｈ−ピロロ［３，２−ｄ］ピリミジン−７−イル）メチル）−４−（メチルチオメチル）ピロリジン−３−オールリン酸塩  Ｅ形の結晶の画像を示す。
【略語】
【０１０１】
ＤＢＵ：  １，８−ジアザビシクロウンデカ−７−エン
ＤＣＭ：  ジクロロメタン
ＤＳＣ：  示差走査熱量測定
ＸＲＰＤ：  粉末Ｘ線回折
ＴＬＣ：  薄層クロマトグラフィー
ＴＦＡ：  トリフルオロ酢酸
ＴＧＡ：  熱重量分析
ＤＭＡＰ：  ４−ジメチルアミノピリジン
ＭＴＢＥ：  メチルｔ−ブチルエーテル
ＩＰＡ：  イソプロピルアルコール
ＨＰＬＣ：  高性能液体クロマトグラフィー
ＤＳＣ：  示差走査熱量測定
ＧＣ：  ガスクロマトグラフィー
【実施例】
【０１０２】
概要：
粉末Ｘ線回折パターンは、Ｂｒｕｋｅｒ  Ｄ８  Ａｄｖａｎｃｅ回折計（（３Ｒ，４Ｓ）−１−（（４−アミノ−５Ｈ−ピロロ［３，２−ｄ］ピリミジン−７−イル）メチル）−４−（メチルチオメチル）ピロリジン−３−オール、並びに（３Ｒ，４Ｓ）−１−（（４−アミノ−５Ｈ−ピロロ［３，２−ｄ］ピリミジン−７−イル）メチル）−４−（メチルチオメチル）ピロリジン−３−オール硫酸塩、シュウ酸塩及びギ酸塩）又はＰｈｉｌｌｉｐｓ  ＰＷ１７００回折計（（３Ｒ，４Ｓ）−１−（（４−アミノ−５Ｈ−ピロロ［３，２−ｄ］ピリミジン−７−イル）メチル）−４−（メチルチオメチル）ピロリジン−３−オールリン酸塩形態）を用い、Ｃｏ  Ｋα放射線を用い、平行ビーム粉末Ｘ線回折法を用いて得る。Ｂｒｕｋｅｒ  Ｄ８  Ａｄｖａｎｃｅには、３００ｍｍのゴニオメータ半径、入射ビームゲーベルミラー及び０．２３°平行平板回折ビームコリメータを装備する。検出器はＮａＩ（Ｔｌ）シンチレーションカウンターである。Ｐｈｉｌｌｉｐｓ  ＰＷ１７００シリーズＢｒａｇｇ−Ｂｒｅｎｔａｎｏ回折計には、１７３ｍｍのゴニオメータ半径、自動発散及び１°固定散乱防止スリット、０．２ｍｍの受光スリット並びにグラファイト回折ビームモノクロメータを装備する。検出器はキセノン充填型比例計数管である。
【０１０３】
示差走査熱量測定は、Ｍｅｔｔｌｅｒ−Ｔｏｌｅｄｏ  ＤＳＣ１  Ｓｔａｒ−ｅシステム又はＡｌｐｈａｔｅｃ  ＳＤＴ  Ｑ６００機器で行う。走査範囲：２５℃〜３００℃；走査速度：１０℃／分。
【０１０４】
熱重量分析は、Ａｌｐｈａｔｅｃ  ＳＤＴ  Ｑ６００機器で行う。走査範囲：周囲温度〜３００℃又は２７５℃；走査速度：１０℃／分。
【０１０５】
実施例１（化合物（１ａ）（（３Ｒ，４Ｓ）−１−（（４−アミノ−５Ｈ−ピロロ［３，２−ｄ］ピリミジン−７−イル）メチル）−４−（メチルチオメチル）ピロリジン−３−オールリン酸塩）の合成）：
化合物（ＩＩＩ）（（Ｅ）−エチル２−シアノ−３−（シアノメチルアミノ）アクリレート）：
【化２０】
2019206525.tif 000023
【０１０６】
メタノール（０．５Ｌ，ＡＲグレード）中の重硫酸アミノアセトニトリル（２２．８ｇ，０．１４８ｍｏｌ）を十分な時間撹拌して、存在する物質の塊を破壊して溶解させる。アクリレート（２５ｇ，０．１４８ｍｏｌ）を混合物に投入し、温度を５〜１０℃まで冷却する。２０℃未満の内部温度を維持するために、トリエチルアミン（４５．３ｍｌ，０．３３ｍｏｌ）を徐々に添加する。混合物を２時間撹拌して、出発物質の消費についてＴＬＣで分析する。溶媒を真空中で除去し、残留物を酢酸エチル（０．３Ｌ）に溶解し、次いで飽和重炭酸ナトリウム水溶液（０．２Ｌ）及びブライン（０．０８Ｌ，３０％）で洗浄する。酢酸エチル溶液を濃縮して定量的収率で生成物を得、その後、次の段階で使用するために等体積の新しい酢酸エチル（ＡＲグレード）と溶解させる（６０：４０異性体混合物として特徴付けられる。Ｈ’＝微量の異性体プロトン）。δＨ（５００ＭＨｚ，ｄ６−ＤＭＳＯ）  １．２１（３Ｈ，ｔ，Ｊ  ７．１），１．２３（３Ｈ’，ｔ，Ｊ  ７．２），４．１４（２Ｈ，ｑ，Ｊ  ７．１），４．１７（２Ｈ’，ｑ，Ｊ  ７．２），４．４４（２Ｈ’，ｓ），４．５３（２Ｈ，ｓ），７．８６（１Ｈ’，ｂｄ，Ｊ  １１．３），８．１６（１Ｈ，ｓ），９．００（１Ｈ，ｂｓ），９．２７（１Ｈ’，ｂｓ）；  δＣ（１２５ＭＨｚ，ｄ６−ＤＭＳＯ）  １４．０，  １４．３，  ３６．１，  ３６．８，  ６０．１，  ７１．９，  ７２．７，  １１５．７，  １１６．９，  １１６．９，  １１８．２，  １５９．９，  １６０．１，  １６４．３，  １６５．７；  ｍ．ｐ．  ９５℃；  ＨＲＭＳ  Ｃ８Ｈ９Ｎ３Ｏ２Ｎａの計算値  ｍ／ｚ  ２０２．０５９２，  測定値  ２０２．０５９０．
【０１０７】
化合物（ＩＶ）（（Ｅ）−エチル２−シアノ−３−（（シアノメチル）（メトキシカルボニル）アミノ）アクリレート）：
【化２１】
2019206525.tif 000024
【０１０８】
酢酸エチル中の化合物（ＩＩＩ）（０．１４８ｍｏｌ）を５〜１０℃まで冷却する。クロロギ酸メチル（１２．６ｍｌ，０．１６３ｍｏｌ）を添加し、続いて、２５℃未満の内部温度を維持するためにトリエチルアミン（２２．７ｍｌ，０．１６３ｍｏｌ）を徐々に添加する。添加完了後に、反応混合物を１０分間撹拌し、次いで２０℃に加温する。反応混合物を脱イオン水（０．１５Ｌ）、飽和重炭酸ナトリウム水溶液（０．１５Ｌ）、及びブライン（０．０５Ｌ，３０％）で洗浄する。溶媒を真空中で除去し、定量的収率でオレンジ色の油状物として生成物を得る。δＨ（５００ＭＨｚ，ｄ６−ＤＭＳＯ）  １．２７（３Ｈ，ｔ，Ｊ  ７．１），３．９４（３Ｈ，ｓ），４．２７（２Ｈ，ｑ，Ｊ  ７．１），５．０７（２Ｈ，ｓ），８．４４（１Ｈ，ｓ）；  δＣ（１２５ＭＨｚ，ｄ６−ＤＭＳＯ）  １４．０，  ３４．２，  ５６．０，  ６２．１，  ８３．６，  １１４．０，  １１５．３，  １４９．４，  １５１．９，  １６２．６；  ＨＲＭＳ  Ｃ１０Ｈ１１Ｎ３Ｏ４Ｎａの計算値  ｍ／ｚ  ２６０．０６４７，  測定値  ２６０．０６５２．
【０１０９】
化合物（Ｖ）（エチル４−アミノ−５−シアノ−１Ｈ−ピロール−３−カルボキシレート）：
【化２２】
2019206525.tif 000025
【０１１０】
化合物（ＩＶ）（３５．１ｇ，０．１４８ｍｏｌ）をジクロロメタン（０．３９Ｌ）に溶解し、温度を２７℃に調整する。ＤＢＵ（１２．５ｍｌ，０．０８３ｍｏｌ）をジクロロメタン中の溶液（１２．５ｍｌ）として、激しく撹拌しながら約１分にわたって化合物（ＩＶ）の溶液に添加する。添加が完了したら、混合物を１０分間撹拌し、ジャケットを２０℃に設定する。メタノール（３９ｍｌ，ＡＲグレード）を添加して、混合物を１５分間撹拌し、続いてメタノール中の溶液（６０ｍｌ）として酢酸アンモニウム（７．９８ｇ，０．１０４ｍｏｌ）を添加する。溶媒を真空中で除去し、残留物を無水エタノール（７０ｍｌ）中でスラリー化する。水（２８０ｍｌ）を撹拌しながらスラリーに徐々に添加し、少なくとも２時間撹拌を続ける。次いで、混合物を濾過し、水（８０ｍｌ）で洗浄し、真空下で乾燥させて、８０％（ＩＰＣにより決定）の純度の固体（７２％）１９ｇを得る。ＩＰＣは、流速０．３ｍｌ／分、試料濃度０．５ｍｇ／ｍｌ、波長２５５ｎｍ、４０℃で、Ｋｉｎｅｔｉｘ  Ｃ１８  ２．６μ  １００×３．０ｍｍカラムを用いて行う。溶媒Ａは水＋０．１％ＴＦＡ、溶媒Ｂはアセトニトリル＋０．１％ＴＦＡであり、グラジエント条件は、０〜２０分，Ａ：Ｂ，９：１；  ２０〜２２分，Ａ：Ｂ，１：１；  ２２〜２７分，Ａ：Ｂ，９：１である。δＨ（５００ＭＨｚ，ｄ６−ＤＭＳＯ）  １．２６（３Ｈ，ｔ，Ｊ  ７．１），４．２０（２Ｈ，ｑ，Ｊ  ７．１），５．６５（２Ｈ，ｓ），７．３５（１Ｈ，ｓ），１１．８（１Ｈ，ｂｓ）；  δＣ（１２５ＭＨｚ，ｄ６−ＤＭＳＯ）  １４．３，  ５９．１，  ８４．４，  １０２．３，  １１４．８，  １２７．４，  １４６．０，  １６４．０；  ｍ．ｐ．  ２０５℃；  ＨＲＭＳ  Ｃ８Ｈ９Ｎ３Ｏ２Ｎａの計算値  ｍ／ｚ  ２０２．０５９２，  測定値  ２０２．０５９１．
【０１１１】
化合物（ＶＩ）（エチル４−アミノ−５Ｈ−ピロロ［３，２−ｄ］ピリミジン−７−カルボキシレート）：
【化２３】
2019206525.tif 000026
【０１１２】
化合物（Ｖ）（１９．１ｇ，０．１０７ｍｏｌ）、ホルムアミジンアセテート（１６．７ｇ，０．１６ｍｏｌ）及びホルムアミド（０．２Ｌ，ＡＲグレード）を容器に投入し、９０℃で２０時間加熱する。混合物を５０℃未満まで冷却し、水（０．３Ｌ）を撹拌懸濁液に添加し、温度を１０〜２０℃に調整する。２時間平衡した後、混合物を濾過し、固体を水（５０ｍｌ）で洗浄し、簡単に風乾する。１６〜１８ｇの乾燥固体を得る（出発物質を８０％の純度に調整した場合、９０〜１００％の収率）。生成物は出発物質よりも溶解性が低く、純度はＩＰＣ分析及び出発物質の減少を計算することによって決定される。ＩＰＣは、流速０．２５ｍｌ／分、試料濃度０．５ｍｇ／ｍｌ、波長２０５ｎｍ、４０℃で、Ｋｉｎｅｔｉｘ  Ｃ１８  ２．６μ  １００×３．０ｍｍカラムを用いて行う。溶媒Ａは水＋０．１％ＴＦＡ、溶媒Ｂはアセトニトリル＋０．１％ＴＦＡであり、グラジエント条件は、０〜２５分，Ａ：Ｂ，９：１；  ２５〜２６分，Ａ：Ｂ，４：６；  ２６〜３１分，Ａ：Ｂ，９：１である。δＨ（５００ＭＨｚ，ｄ６−ＤＭＳＯ）  １．２９（３Ｈ，ｔ，Ｊ  ７．１），４．２５（２Ｈ，ｑ，Ｊ  ７．１），６．８５（２Ｈ，ｂｓ），８．１６（１Ｈ，ｓ），８．２０（１Ｈ，ｓ），１１．６（１Ｈ，ｂｓ）．
【０１１３】
化合物（ＶＩＩ）（５Ｈ−ピロロ［３，２−ｄ］ピリミジン−４−アミン）：
【化２４】
2019206525.tif 000027
【０１１４】
水中懸濁液（２１５ｍｌ）として湿った化合物（ＶＩ）（想定乾燥重量１７．６ｇ，０．０８５ｍｏｌ）を水酸化カリウム（１２．０ｇ，０．２１ｍｏｌ）で処理する。混合物を１２０℃で穏やかに還流する。６時間後、混合物をＩＰＣで完了について分析する。加熱し、出発物質が消費されるまでＩＰＣ分析を続ける。混合物を２〜８℃まで冷却し、２時間撹拌する。混合物を濾過し、固体を収集して水（４０ｍｌ）で洗浄する。湿気のある固体を真空下にて２０〜４０℃で乾燥させて、ベージュ色の固体を９〜１０ｇ（ＩＰＣにより決定された８０〜９０％の純度）得る。ＩＰＣは、流速１．０ｍｌ／分、試料濃度０．５ｍｇ／ｍｌ、波長２７３ｎｍ、２０℃で、Ａｔｌａｎｔｉｓ  Ｔ３  ３μ  １５０×４．６ｍｍカラムを用いて行う。溶媒Ａは水＋０．１％ＴＦＡ、溶媒Ｂはアセトニトリル＋０．１％ＴＦＡであり、グラジエント条件は、０〜１５分，Ａ：Ｂ，１０：０；  １５〜１６分，Ａ：Ｂ，８：２；  １６〜２１分，Ａ：Ｂ，１０：０である。δＨ（５００ＭＨｚ，ｄ６−ＤＭＳＯ）  ６．３４（１Ｈ，ｓ），６．６６（２Ｈ，ｂｓ），７．５０（１Ｈ，ｓ），８．１０（１Ｈ，ｓ），１０．９１（１Ｈ，ｂｓ）．
【０１１５】
化合物（ＩＸ）（（３Ｒ，４Ｒ）−ｔｅｒｔ−ブチル３−ヒドロキシ−４−（ヒドロキシメチル）ピロリジン−１−カルボキシレート）：
【化２５】
2019206525.tif 000028
【０１１６】
エタノール（１０ｍｌ）中の化合物（ＶＩＩＩ）（国際公開第２００５／１１８５３２号に記載のように調製することができる。）（１ｇ，４．８２ｍｍｏｌ）を脱気し、次いでパールマン触媒（０．１ｇ）で処理する。混合物を低圧の水素下で撹拌し、反応進行をＴＬＣで監視し、反応が失速した場合、触媒（０．１ｇ）をさらに添加する。出発物質Ｎ−ベンジルが消費され、混合物を濾過助剤のパッドを通じて濾過し、二炭酸ジ−ｔ−ブチル（合計１．２６ｇ，５．７９ｍｍｏｌ）を濾液に添加したら、ガスの発生及び穏やかな発熱が観察される。オフガスが治まったら、ＤＭＡＰ（１３ｍｇ）を添加し、さらなるオフガスを発生させる。ガス発生が停止したら、溶媒を真空中で除去して１ｇの無色の油状物を得る。δＨ（５００ＭＨｚ，ＣＤ３ＯＤ）  １．４５（９Ｈ，ｓ），２．２３（１Ｈ，ｍ），３．２１（２Ｈ，ｍ），３．４５（１Ｈ，ｍ），３．５４（３Ｈ，ｍ），４．１３（１Ｈ，ｍ）．
【０１１７】
化合物（Ｘ）（（３Ｒ，４Ｓ）−ｔｅｒｔ−ブチル３−ヒドロキシ−４−（メチルチオメチル）ピロリジン−１−カルボキシレート）：
【化２６】
2019206525.tif 000029
【０１１８】
化合物（ＩＸ）（２０．６ｇ，０．０９３ｍｏｌ）を真空中でアセトン溶液（０．１０Ｌ）濃縮から単離する。残留物をアセトン（０．２０Ｌ）に再溶解し、２，６−ルチジン（２２．１ｍｌ，０．１９ｍｏｌ）、続いてメタンスルホニルクロリド（８．０ｍｌ，０．１０ｍｏｌ）で処理する。溶液を１５〜２０℃で２日間撹拌し、ＩＰＣで完了について分析する。混合物を濾過し、固体を少量のアセトンで洗浄する。合わせた濾液を反応容器に移し、ナトリウムチオメトキシド（８．６ｇ，０．１２ｍｏｌ）で処理する。混合物を５０℃で２時間加熱し、ＩＰＣで監視する。完了したら、反応物を濃縮し、残留物をＭＴＢＥ（０．２Ｌ）と水酸化ナトリウム水溶液（１Ｍ，０．２Ｌ）に分配する。水相をＭＴＢＥ（０．２Ｌ）で再度抽出し、合わせたＭＴＢＥ相を塩酸（１Ｍ，０．２Ｌ）及び水（０．２Ｌ）で連続的に洗浄する。ＭＴＢＥを蒸留及びトルエン共沸混合物（０．２Ｌ）で除去する。残留物をジクロロメタン／酢酸エチル（９０：１０，  ０．１１Ｌ）中に取り、Ｂｉｏｔａｇｅ７５Ｓカートリッジ（２００ｇシリカ）に適用する。カラムを９０：１０  ジクロロメタン／酢酸エチル、次いで６６／３３  ジクロロメタン／酢酸エチルで溶出する。画分をＴＬＣによりアッセイし、生成物含有画分を濃縮して、１４．８ｇ（６３％）の化合物（Ｘ）を淡黄色から無色の油状物として得る。ＩＰＣ分析は、流速０．２５ｍｌ／分、試料濃度０．５ｍｇ／ｍｌ、２０５ｎｍ、４０℃で、Ｋｉｎｅｔｉｘ  Ｃ１８  ２．６μ  １００×３．０ｍｍカラムを用いて行う。溶媒Ａは水、溶媒Ｂはアセトニトリルであり、グラジエント条件は、０〜２５分，Ａ：Ｂ，９：１；  ２５〜２６分，Ａ：Ｂ，４：６；  ２６〜３１分，Ａ：Ｂ，９：１である。δＨ（５００ＭＨｚ，ＣＤ３ＯＤ）  １．４６（９Ｈ，ｓ），２．１１（３Ｈ，ｓ），２．２８（１Ｈ，ｍ），２．４９（１Ｈ，ｍ），２．６３（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ  １３．１，  ６．０），３．２０（２Ｈ，ｍ），３．５６（１Ｈ，ｍ），３．６０（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ  １１．１，  ７．２），４．１０（１Ｈ，ｍ）．
【０１１９】
化合物（ＸＩ）（（３Ｒ，４Ｓ）−４−（メチルチオメチル）ピロリジン−３−オールシュウ酸塩）：
【化２７】
2019206525.tif 000030
【０１２０】
化合物（Ｘ）（７．２４ｇ，２９．３ｍｍｏｌ）をトルエン（５０ｍｌ）に溶解し、濃縮する。残留物をトルエン（５０ｍｌ，ＡＲグレード）に再溶解し、溶液を０℃まで冷却する。ＴＦＡ（２５ｍｌ）を撹拌しながら添加し、安定したガスの発生をもたらす。２０分後、温度を２０℃に上昇させ、混合物は二相になり得る。約４０分後にオフガスが停止したら、溶媒を真空中で除去し、任意の残留溶媒をＩＰＡ（４０ｍｌ）で共沸させる。残留物をＩＰＡ（７５ｍｌ，ＡＲグレード）中に再溶解し、Ａｍｂｅｒｌｉｔｅ  ＦＰＡ９１塩基性樹脂（６０ｇ湿重量）と共に３０分間スラリー化する。溶液のｐＨが≧７であると検証する。スラリーをＦＰＡ９１樹脂（２０ｇ）のカラムに適用し、重力下にてＩＰＡ（３５０ｍｌ）で溶出する。ＩＰＡを蒸発させて、５ｇの遊離塩基を褐色の油状物として得る。油状物をエタノール（５０ｍｌ）に溶解し、シュウ酸（４．０６ｇ，３２．１ｍｍｏｌ）の無水エタノール（５０ｍｌ）溶液に、撹拌しながら緩徐に添加する。添加完了後に、結晶スラリーを少なくとも２時間熟成させ、結晶を濾過によって収集する。結晶をエタノール（２０ｍｌ）で洗浄し、乾燥させて、白色からオフホワイトの固体５．５ｇ（７９％）を得る。δＨ（５００ＭＨｚ，ｄ６−ＤＭＳＯ）  ２．０７（３Ｈ，ｓ），２．３２（１Ｈ，ｍ），２．４１（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ  １３．２，  ９．０），２．６０（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ  １３．２，  ６．４），３．０１（２Ｈ，ｍ），３．３１（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ  １２．２，  ５．１），３．４０（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ  １１．８，  ７．３），４．１３（１Ｈ，ｍ）．
【０１２１】
化合物（ＸＩＩ）（（３Ｒ，４Ｓ）−４−（メチルチオメチル）ピロリジン−３−オール）：
【化２８】
2019206525.tif 000031
【０１２２】
水（８０ｍｌ）中の化合物（ＸＩ）（４．０ｇ，１６．９ｍｍｏｌ）をＡｍｂｅｒｌｉｔｅ  ＦＰＡ９１樹脂（１５ｇ）と共に３０分間スラリー化する。生成物を得るために必要に応じて、スラリーをＦＰＡ９１樹脂（１５ｇ）のカラムに適用し、重力下にて水（２００ｍｌ）で溶出する。４０℃で水を除去することにより、２．６８ｇのオレンジ色の油状物を得て、これを−２０℃で保存して固化する。ＧＣは、１００℃、次いで８℃／分のグラジエントで２０分間、流速２．６ｍｌ／分でＲｔｘ−５アミンキャピラリーカラム１μ、３０ｍ×０．３２ｍｍを用いて行う。δＨ（５００ＭＨｚ，ＣＤ３ＯＤ）  ２．１１（３Ｈ，ｓ），２．１９（１Ｈ，ｍ），２．４３（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ  １３．０，  ８．７），２．６４（２Ｈ，ｍ），２．７８（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ  １２．１，  ３．５），３．０１（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ  １２．１，  ５．５），３．２３（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ  １１．６，  ７．６），４．０５（１Ｈ，ｍ）．
【０１２３】
化合物（Ｉａ）（（３Ｒ，４Ｓ）−１−（（４−アミノ−５Ｈ−ピロロ［３，２−ｄ］ピリミジン−７−イル）メチル）−４−（メチルチオメチル）ピロリジン−３−オールリン酸塩）：
【化２９】
2019206525.tif 000032
【０１２４】
水／エタノール中の溶液（４：１，  ３７５ｍｌ）としての化合物（ＸＩＩ）（１５．６ｇ，１０６ｍｍｏｌ）を化合物（ＶＩＩ）（１２．８ｇ，９５．４ｍｍｏｌ）及びホルムアルデヒド溶液（８．６６ｍｌ，３５％）で処理する。混合物を約２０℃で２４時間撹拌し、出発物質が消費されるまでＩＰＣで監視する。リン酸（９．３５ｍｌ，１３８ｍｍｏｌ）を撹拌しながら添加する。沈殿物が形成し始める。３０分後、エタノール（２００ｍｌ）を容器に緩徐に添加し、混合物を１時間熟成させ、さらにエタノール（３００ｍｌ）を添加し、混合物を１時間熟成させる。次いで、エタノール（３００ｍｌ）をさらに添加し、混合物を一晩放置する。結晶を濾過により収集し、エタノール／水（４／６，  ２００ｍｌ）、次いでエタノール（２×２００ｍｌ）で洗浄し、真空下で乾燥させて、３６．４ｇ（９７％）の生成物を白色からオフホワイトの固体として得る。ＩＰＣは、流速０．８ｍｌ／分、試料濃度０．５ｍｇ／ｍｌ、波長２７３ｎｍ、３５℃で、Ｗａｔｅｒｓ  Ｔ３  ３μ  １５０×４．６ｍｍを用いて行う。溶媒Ａは水＋０．１％ＴＦＡ、溶媒Ｂはアセトニトリル＋０．１％ＴＦＡであり、グラジエント条件は、０〜２５分，Ａ：Ｂ，９．５：０．５；  ２０〜２１分，Ａ：Ｂ，７．８：２．２；  ２１〜２６分，Ａ：Ｂ，９．５：０．５である。この物質を熱水（１５０ｍｌ）に溶解し、溶液を沸点に保ちながら、メタノール（５００ｍｌ）を緩徐に添加し、次いで冷却する。生成物を濾過により収集し、メタノールで洗浄して、３３．０ｇ（８８％）を得る。元素分析  Ｃ１３Ｈ１９Ｎ５ＯＳ・１．４Ｈ３ＰＯ４・Ｈ２Ｏの計算値：  Ｃ，３４．８；  Ｈ，５．７；  Ｎ，１５．６；  Ｐ，９．７．  測定値：  Ｃ，３４．５；  Ｈ，５．６；  Ｎ，１５．５；  Ｐ，９．９．  δ１３Ｃ  ＮＭＲ（Ｄ２Ｏ）  １５０．１，  １４６．６，  １４０．４，  １３３．７，  １１３．０，  １０２．５，  ７２．８，  ５８．５，  ５５．５，  ４７．６，  ４４．９，  ３４．０，  １４．４．
【０１２５】
（３Ｒ，４Ｓ）−１−（（４−アミノ−５Ｈ−ピロロ［３，２−ｄ］ピリミジン−７−イル）メチル）−４−（メチルチオメチル）ピロリジン−３−オールリン酸塩  Ｄ形：
化合物（ＸＩＩ）（２．４８ｇ，１６．９ｍｍｏｌ）を水／エタノール（４：１，  ８０ｍｌ）中で撹拌し、９−デアザアデニン（２．０６ｇ，１５．３ｍｍｏｌ）及びホルムアルデヒド溶液（１．１１ｍｌ，３８％）で処理する。混合物を周囲温度で２日間撹拌する。リン酸（２．２５ｇ，２３．０ｍｍｏｌ）の水溶液（水１０ｍｌ）を調製する。この溶液の一部（６ｍｌ）を、撹拌しながら混合物に緩徐に添加する。種結晶（７６ｍｇ）を添加し、混合物を１時間熟成させる。残りの酸性溶液を撹拌しながら緩徐に投入し、混合物を１時間熟成させる。エタノール（３５ｍｌ）を容器に緩徐に投入し、混合物を１時間熟成させる。さらに、エタノール（６０ｍｌ）を容器に緩徐に投入し、混合物を１時間熟成させる。混合物を濾過し、結晶をエタノール／水（４０／６０，  ２５ｍｌ）、次いでエタノール（２×２５ｍｌ）で洗浄する。結晶を真空下で乾燥させて、白色からオフホワイトの固体として生成物４．７ｇ（７０％）を得る。
【０１２６】
（３Ｒ，４Ｓ）−１−（（４−アミノ−５Ｈ−ピロロ［３，２−ｄ］ピリミジン−７−イル）メチル）−４−（メチルチオメチル）ピロリジン−３−オールリン酸塩  Ｅ形：
（３Ｒ，４Ｓ）−１−（（４−アミノ−５Ｈ−ピロロ［３，２−ｄ］ピリミジン−７−イル）メチル）−４−（メチルチオメチル）ピロリジン−３−オールリン酸塩（１ｇ）を水（１８ｍｌ）中で撹拌し、４０℃に加熱して溶解する。エタノール（２ｍｌ）を（３Ｒ，４Ｓ）−１−（（４−アミノ−５Ｈ−ピロロ［３，２−ｄ］ピリミジン−７−イル）メチル）−４−（メチルチオメチル）ピロリジン−３−オールリン酸塩の結晶（２５ｍｇ）と一緒に添加する。得られた混合物を約１５℃まで冷却する。１時間後、エタノール（５ｍｌ）を撹拌溶液に添加する。さらに１時間後、エタノール（１０ｍｌ）を撹拌溶液に添加する。さらに１時間後、エタノール（１５ｍｌ）を添加し、スラリーを一晩撹拌する。混合物を濾紙上で濾過し、結晶をエタノール（約１０ｍｌ）で洗浄する。結晶を真空下で乾燥させて、７７５ｍｇの白色固体を得る。
【０１２７】
（３Ｒ，４Ｓ）−１−（（４−アミノ−５Ｈ−ピロロ［３，２−ｄ］ピリミジン−７−イル）メチル）−４−（メチルチオメチル）ピロリジン−３−オールリン酸塩  Ｆ形：
（３Ｒ，４Ｓ）−１−（（４−アミノ−５Ｈ−ピロロ［３，２−ｄ］ピリミジン−７−イル）メチル）−４−（メチルチオメチル）ピロリジン−３−オールリン酸塩（３６．３ｇ）を沸騰水（１５０ｍｌ）に溶解し、溶液を還流させながらメタノール（５００ｍｌ）を緩徐に添加する。得られた混合物を１５℃まで冷却し、１８時間撹拌する。得られた結晶を濾過し、メタノール（約５０ｍｌ）で洗浄し乾燥させて、白色固体３３．０ｇ（９１％）を得る。
【０１２８】
実施例２（化合物（Ｉ）の硫酸塩、シュウ酸塩及びギ酸塩）：
（３Ｒ，４Ｓ）−１−（（４−アミノ−５Ｈ−ピロロ［３，２−ｄ］ピリミジン−７−イル）メチル）−４−（メチルチオメチル）ピロリジン−３−オール：
化合物（ＸＩＩ）（４５７ｍｇ，３．１０ｍｍｏｌ）を水／エタノール（４：１，  ２２．５ｍｌ）中で撹拌し、９−デアザアデニン（３７８ｍｇ，２．８２ｍｍｏｌ）及びホルムアルデヒド溶液（０．２１ｍｌ，３８％）で処理する。混合物を周囲温度で３日間撹拌する。硫酸溶液（２．８ｍｌ，１Ｍ）を添加する。エタノール（５ｍｌ）を添加する。混合物を０℃まで冷却し、１５分間撹拌する。得られたスラリーを濾過し、結晶を乾燥させて、５４８ｍｇの黄褐色の固体を得る。この固体の一部（３００ｍｇ）をＡｍｂｅｒｌｉｔｅ  ＦＰＡ９１−ＯＨ樹脂（約２ｇ）を含む水（約１０ｍｌ）中で３０分間撹拌する。樹脂を濾過し、溶液を蒸発させて、１４３ｍｇの白色固体（次のステップで使用される（３Ｒ，４Ｓ）−１−（（４−アミノ−５Ｈ−ピロロ［３，２−ｄ］ピリミジン−７−イル）メチル）−４−（メチルチオメチル）ピロリジン−３−オール）を得る。
【０１２９】
（３Ｒ，４Ｓ）−１−（（４−アミノ−５Ｈ−ピロロ［３，２−ｄ］ピリミジン−７−イル）メチル）−４−（メチルチオメチル）ピロリジン−３−オール硫酸塩：
（３Ｒ，４Ｓ）−１−（（４−アミノ−５Ｈ−ピロロ［３，２−ｄ］ピリミジン−７−イル）メチル）−４−（メチルチオメチル）ピロリジン−３−オール（５０ｍｇ，０．１７ｍｍｏｌ）を水（１．０ｍｌ）に溶解し、硫酸（０．１７ｍｌ，１Ｍ，１．０当量）で処理する。ＩＰＡ（０．４ｍｌ）を添加し、得られた溶液を４℃で保存し、油相の形成をもたらす。混合物を加温し、溶液を得て、エタノール（約０．２ｍｌ）で処理し、４℃で一晩保存し、溶液から固体の沈殿をもたらす。固体を濾紙上で濾過し、真空下で乾燥させる。
【０１３０】
（３Ｒ，４Ｓ）−１−（（４−アミノ−５Ｈ−ピロロ［３，２−ｄ］ピリミジン−７−イル）メチル）−４−（メチルチオメチル）ピロリジン−３−オールシュウ酸塩：
（３Ｒ，４Ｓ）−１−（（４−アミノ−５Ｈ−ピロロ［３，２−ｄ］ピリミジン−７−イル）メチル）−４−（メチルチオメチル）ピロリジン−３−オール（５０ｍｇ，０．１７ｍｍｏｌ）を水（１．０ｍｌ）に溶解し、シュウ酸二水和物（２２ｍｇ，０．１７ｍｍｏｌ）で処理する。ＩＰＡ（０．４ｍｌ）を添加し、得られた溶液を４℃で保存し、固体の形成をもたらす。固体を濾紙上で濾過し、真空下で乾燥させる。
【０１３１】
（３Ｒ，４Ｓ）−１−（（４−アミノ−５Ｈ−ピロロ［３，２−ｄ］ピリミジン−７−イル）メチル）−４−（メチルチオメチル）ピロリジン−３−オールギ酸塩：
（３Ｒ，４Ｓ）−１−（（４−アミノ−５Ｈ−ピロロ［３，２−ｄ］ピリミジン−７−イル）メチル）−４−（メチルチオメチル）ピロリジン−３−オール（０．９８３ｇ，３．３５ｍｍｏｌ）を水（３ｍｌ）に懸濁し、ギ酸（０．２５ｍｌ，６．７０ｍｍｏｌ）を添加する。混合物を約４０℃に加温し、溶解する。エタノール（約１０ｍｌ）を添加する。混合物を乾燥するまで蒸発させ、水（２ｍｌ）に再懸濁し、アセトンを添加し（約３０ｍｌ）、淡黄色の結晶（０．７１ｇ）の形成をもたらす。この物質の一部（０．６５ｇ）を水（２．５ｍｌ）に溶解し、アセトン（３０ｍｌ）で希釈する。得られた結晶を濾過し、乾燥させて、０．５５ｇ（遊離塩基から５２％の収率）のクリーム色の固体を得る。
【０１３２】
実施例３（本発明の化合物の粉末Ｘ線回折データ）：
（３Ｒ，４Ｓ）−１−（（４−アミノ−５Ｈ−ピロロ［３，２−ｄ］ピリミジン−７−イル）メチル）−４−（メチルチオメチル）ピロリジン−３−オールリン酸塩  Ｄ形：
【表Ａ】
2019206525.tif 000033
【０１３３】
（３Ｒ，４Ｓ）−１−（（４−アミノ−５Ｈ−ピロロ［３，２−ｄ］ピリミジン−７−イル）メチル）−４−（メチルチオメチル）ピロリジン−３−オールリン酸塩  Ｅ形：
【表Ｂ】
2019206525.tif 000034
【０１３４】
（３Ｒ，４Ｓ）−１−（（４−アミノ−５Ｈ−ピロロ［３，２−ｄ］ピリミジン−７−イル）メチル）−４−（メチルチオメチル）ピロリジン−３−オールリン酸塩  Ｆ形：
【表Ｃ】
2019206525.tif 000035
【０１３５】
（３Ｒ，４Ｓ）−１−（（４−アミノ−５Ｈ−ピロロ［３，２−ｄ］ピリミジン−７−イル）メチル）−４−（メチルチオメチル）ピロリジン−３−オールシュウ酸塩：
【表Ｄ】
2019206525.tif 000036
【０１３６】
（３Ｒ，４Ｓ）−１−（（４−アミノ−５Ｈ−ピロロ［３，２−ｄ］ピリミジン−７−イル）メチル）−４−（メチルチオメチル）ピロリジン−３−オールギ酸塩：
【表Ｅ】
2019206525.tif 000037
【０１３７】
（３Ｒ，４Ｓ）−１−（（４−アミノ−５Ｈ−ピロロ［３，２−ｄ］ピリミジン−７−イル）メチル）−４−（メチルチオメチル）ピロリジン−３−オール硫酸塩：
【表Ｆ】
2019206525.tif 000038
【０１３８】
実施例４（頭頸部癌、肺癌、乳癌、結腸癌、子宮頚癌又は前立腺癌に対する（３Ｒ，４Ｓ）−１−（（４−アミノ−５Ｈ−ピロロ［３，２−ｄ］ピリミジン−７−イル）メチル）−４−（メチルチオメチル）ピロリジン−３−オールリン酸塩の活性）：
雌のＮｃｒ−Ｎｕマウス（６〜８週齢）をＮＣＩ、ＮＩＨから得る。動物実験は、Ａｎｉｍａｌ  Ｃｏｍｍｉｔｔｅｅ  ｏｆ  ｔｈｅ  Ａｌｂｅｒｔ  Ｅｉｎｓｔｅｉｎ  Ｃｏｌｌｅｇｅ  ｏｆ  Ｍｅｄｉｃｉｎｅの承認されたプロトコルのガイドラインに従って行う。同所性乳房脂肪パッド注射は、２．５×１０６ＭＤＡ−ＭＢ−４６８生存細胞を７５ｍｌのＰＢＳ中に再懸濁し、部位あたり２５ｍｌのラット尾のＩ型コラーゲン（ＢＤ）と混合することにより、各マウスの２つの向かいあった鼠径部脂肪パッドで行う。３６日目に、確立された腫瘍（約１５０ｍｍ３）を有するマウスを各々５匹の動物の処置群又は対照群にランダムに割り当て、続いて、飲料水中の３０．５ｍｇ／ｋｇ体重の（３Ｒ，４Ｓ）−１−（（４−アミノ−５Ｈ−ピロロ［３，２−ｄ］ピリミジン−７−イル）メチル）−４−（メチルチオメチル）ピロリジン−３−オールリン酸塩での処置、又は１３ｍｇ／ｋｇのメチルチオアデノシンあり若しくはなしでの２４ｍｇ／ｋｇ体重の毎日の腹腔内（ｉ．ｐ．）注射を行う。腫瘍体積（Ｖ）は次のように決定される：Ｖ＝（４／３）×（２２／７）×１／８（長さ×幅×高さ）。処置コホート間の差は、スチューデントのｔ検定を用いて決定する。マウスは、脱毛、食欲不振、嘔吐及び下痢について監視して、４〜５日毎に秤量する。無処置の対照腫瘍は、３５日間にわたって１５０〜４００ｍｍ３に成長する。用量２４〜３０．５ｍｇ／ｋｇの（３Ｒ，４Ｓ）−１−（（４−アミノ−５Ｈ−ピロロ［３，２−ｄ］ピリミジン−７−イル）メチル）−４−（メチルチオメチル）ピロリジン−３−オールリン酸塩は、癌の成長を止めるのに等しく有効である。７１日目に、処置されている動物を治療から解放して、再成長が無処置腫瘍の成長に等しいかどうかを確認する。逆に、大きい対照腫瘍を有する動物は、（３Ｒ，４Ｓ）−１−（（４−アミノ−５Ｈ−ピロロ［３，２−ｄ］ピリミジン−７−イル）メチル）−４−（メチルチオメチル）ピロリジン−３−オールリン酸塩３０ｍｇ／ｋｇ  ｉ．ｐ．で処置される。処置の間、（３Ｒ，４Ｓ）−１−（（４−アミノ−５Ｈ−ピロロ［３，２−ｄ］ピリミジン−７−イル）メチル）−４−（メチルチオメチル）ピロリジン−３−オールリン酸塩は、１５０ｍｍ３の腫瘍における腫瘍の成長を完全に抑制する。薬物放出時に、腫瘍サイズは無処置の腫瘍の成長に比べて緩徐に大きくなる。大きい腫瘍は、腫瘍溶解の結果としてサイズが急速に減少する。腫瘍の大部分は２週間の処置期間にわたって消散する。
【０１３９】
本発明を特定の好ましい実施形態に関して説明してきたが、特許請求される発明はそのような特定の実施形態に不当に限定されるべきでないことが理解されるべきである。
【０１４０】
本発明の趣旨及び範囲から逸脱することなくさらなる修正が本明細書に記載の発明に対してなされ得ることが理解される。
【図１ａ】
2019206525.tif 000047
【図１ｂ】
2019206525.tif 000048
【図２ａ】
2019206525.tif 000049
【図２ｂ】
2019206525.tif 000050
【図３ａ】
2019206525.tif 000051
【図３ｂ】
2019206525.tif 000052
【図３ｃ】
2019206525.tif 000053
【図３ｄ】
2019206525.tif 000054
【図４ａ】
2019206525.tif 000055
【図４ｂ】
2019206525.tif 000056
【図４ｃ】
2019206525.tif 000057
【図４ｄ】
2019206525.tif 000058
【図５ａ】
2019206525.tif 000059
【図５ｂ】
2019206525.tif 000060
【図５ｃ】
2019206525.tif 000061
【図５ｄ】
2019206525.tif 000062
【図６ａ】
2019206525.tif 000063
【図６ｂ】
2019206525.tif 000064
【図６ｃ】
2019206525.tif 000065
【図６ｄ】
2019206525.tif 000066
【図７ａ】
2019206525.tif 000067
【図７ｂ】
2019206525.tif 000068
【図８】
2019206525.tif 000069
【図９ａ】
2019206525.tif 000070
【図９ｂ】
2019206525.tif 000071
【手続補正書】
【提出日】令和1年7月9日(2019.7.9)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
式（Ｖ）：
【化１】
2019206525.tif 000072
の化合物を調製するための方法であって、
（ｄ）式（ＩＩＩ）の化合物をクロロギ酸メチルと反応させて式（ＩＶ）の化合物を生成するステップと、
【化２】
2019206525.tif 000073
（ｅ）塩基性条件下で式（ＩＶ）の化合物を環化して式（Ｖ）の化合物を得るステップと、
を含み、ステップ（ｄ）における溶媒として酢酸エチルが使用される方法。
【請求項２】
ステップ（ｅ）における塩基としてＤＢＵが使用される、請求項１に記載の方法。
【請求項３】
ステップ（ｅ）における溶媒としてジクロロメタンが使用される、請求項２に記載の方法。
【請求項４】
ステップ（ｅ）において１５分未満の反応時間が使用される、請求項１〜３のいずれか一項に記載の方法。
【請求項５】
１５分未満の反応時間の後に、メタノール、続いて酢酸アンモニウムが反応に添加される、請求項４に記載の方法。
【請求項６】
式（ＸＩＩ）：
【化３】
2019206525.tif 000074
の化合物を調製するための方法であって、
（ｆ）式（ＩＸ）の化合物をメタンスルホニルクロリド及び２，６−ルチジン、続いてナトリウムチオメトキシドと接触させて式（Ｘ）の化合物を得るステップと、
【化４】
2019206525.tif 000075
（ｇ）式（Ｘ）の化合物を脱保護し、続いて式（ＸＩ）の化合物に変換するステップと、
【化５】
2019206525.tif 000076
（ｈ）式（ＸＩ）の化合物を式（ＸＩＩ）の化合物に変換するステップと、
を含み、ステップ（ｆ）における溶媒としてアセトンが使用される方法。
【請求項７】
ステップ（ｇ）における式（Ｘ）の化合物の脱保護は、式（Ｘ）の化合物をトリフルオロ酢酸と接触させることによって行われる、請求項６に記載の方法。
【請求項８】
ステップ（ｇ）における化合物（ＸＩ）への変換は、式（Ｘ）の脱保護化合物を樹脂と接触させることによって行われる、請求項６又は７に記載の方法。
【請求項９】
ステップ（ｈ）における式（ＸＩ）の化合物の化合物（ＸＩＩ）への変換は、式（ＸＩ）の化合物を樹脂と接触させることによって行われる、請求項６〜８のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１０】
化合物（Ｉａ）：
【化６】
2019206525.tif 000077
を調製するための方法であって、
（ｉ）請求項１〜５のいずれか一項に記載の方法によって式（Ｖ）の化合物を調製するステップと、
（ｉｉ）式（Ｖ）の化合物を
【化７】
2019206525.tif 000078
及びホルムアミドと反応させて式（ＶＩ）：
【化８】
2019206525.tif 000079
の化合物を形成するステップと、
（ｉｉｉ）式（ＶＩ）の化合物をＫＯＨ及び水と共に還流させて式（ＶＩＩ）：
【化９】
2019206525.tif 000080
の化合物を形成するステップと、
（ｉｖ）請求項６〜９のいずれか一項に記載の方法によって式（ＸＩＩ）の化合物を調製するステップと、
（ｖ）式（ＸＩＩ）の化合物を水／エタノール中で式（ＶＩＩ）の化合物及びホルムアルデヒドとカップリングして化合物（Ｉａ）を得るステップと、
（ｖｉ）リン酸及び貧溶媒としてのエタノールを投入して溶液から化合物（Ｉａ）を結晶化させるステップと、
を含む方法。
【請求項１１】
ステップ（ｖ）における水／エタノール比は４５：５５〜１５：８５である、請求項１０に記載の方法。
【請求項１２】
化合物（Ｉａ）を水／エタノール又は水／メタノールから再結晶するステップをさらに含む、請求項１０又は１１に記載の方法。
【外国語明細書】
2019206525000001.pdf