(57)【要約】      （修正有）【課題】治療を必要とする個体におけるＣＹＲ６１媒介性の状態を治療する方法の提供。【解決手段】増殖性糖尿病性網膜症を有する個体におけるＣＹＲ６１遺伝子の発現を減少させるための剤であって、アントラサイクリン（ドキソルビシン、ダウノルビシン又はイダルビシン）、もしくは、スタチン（シンバスタチン又はロバスタチン）を有効成分として含有する剤。【選択図】なし【特許請求の範囲】
【請求項１】
そのような治療を必要とする個体におけるＣＹＲ６１媒介性の状態を治療する方法であって、
有効量の少なくとも１種のＣＹＲ６１ダウンレギュレーター（ＣＹＲ６１ＤＲ）を前記個体に投与するステップ
を含み、
前記有効量は、前記個体におけるＣＹＲ６１遺伝子の発現を減少させるのに十分な量である、
方法。
【請求項２】
前記ＣＹＲ６１媒介性の状態は、血管新生を伴う状態及び炎症を伴う状態からなる群から選択される、請求項１に記載の方法。
【請求項３】
前記ＣＹＲ６１媒介性の状態は、増殖性糖尿病性網膜症、血管新生緑内障、黄斑変性、炎症性血管新生、クローン病、潰瘍性大腸炎、網膜血管新生、網膜血管障害、腫瘍血管新生、癌血管新生、転移、関節リウマチ、及び線維症からなる群から選択される、請求項１に記載の方法。
【請求項４】
前記少なくとも１種のＣＹＲ６１ＤＲはアントラサイクリン及びスタチンからなる群から選択される、請求項１に記載の方法。
【請求項５】
前記少なくとも１種のＣＹＲ６１ＤＲは、ドキソルビシン、ダウノルビシン、エピルビシン、イダルビシン、バルルビシン、及びミトキサントロンからなる群から選択される少なくとも１種のアントラサイクリンを含む、請求項４に記載の方法。
【請求項６】
前記少なくとも１種のＣＹＲ６１ＤＲは、シンバスタチン、プラバスタチン、フルバスタチン、アトルバスタチン、セリバスタチン、ロバスタチン、メバスタチン、ピタバスタチン、及びロスバスタチンからなる群から選択される少なくとも１種のスタチンを含む、請求項４に記載の方法。
【請求項７】
投与が硝子体内投与を含む、請求項１に記載の方法。
【請求項８】
投与が経口投与を含む、請求項１に記載の方法。
【請求項９】
投与が静脈内投与を含む、請求項１に記載の方法。
【請求項１０】
そのような治療を必要とする個体におけるＶＥＧＦ媒介性の状態を治療する方法であって、
有効量の少なくとも１種のＣＹＲ６１ダウンレギュレーター（ＣＹＲ６１ＤＲ）を前記個体に投与するステップ
を含み、
前記有効量は、前記個体におけるＣＹＲ６１遺伝子及びＶＥＧＦ遺伝子の両方の発現を減少させるのに十分な量である、
方法。
【請求項１１】
前記少なくとも１種のＣＹＲ６１ＤＲはアントラサイクリン及びスタチンからなる群から選択される、請求項１０に記載の方法。
【請求項１２】
前記少なくとも１種のＣＹＲ６１ＤＲは、ドキソルビシン、ダウノルビシン、エピルビシン、イダルビシン、バルルビシン、及びミトキサントロンからなる群から選択される少なくとも１種のアントラサイクリンを含む、請求項１１に記載の方法。
【請求項１３】
前記少なくとも１種のＣＹＲ６１ＤＲは、シンバスタチン、プラバスタチン、フルバスタチン、アトルバスタチン、セリバスタチン、ロバスタチン、メバスタチン、ピタバスタチン、及びロスバスタチンからなる群から選択される少なくとも１種のスタチンを含む、請求項１１に記載の方法。
【請求項１４】
投与が硝子体内投与を含む、請求項１０に記載の方法。
【請求項１５】
投与が経口投与を含む、請求項１０に記載の方法。
【請求項１６】
そのような治療を必要とする個体におけるＶＥＧＦ媒介性の状態を治療する方法であって、
有効量の少なくとも１種のＣＹＲ６１ダウンレギュレーター（ＣＹＲ６１ＤＲ）を前記個体に投与するステップ
を含み、
前記有効量は、前記個体におけるＣＹＲ６１遺伝子及びＶＥＧＦ遺伝子の発現を減少させるのに十分な量である、
方法。
【発明の詳細な説明】
【関連出願の相互参照】
【０００１】
本出願は、同時係属の米国仮特許出願第６１／８７４９６６号（２０１３年９月６日出願）（本明細書に組み入れられている。）の利益を主張するものである。
【背景】
【０００２】
遺伝子ｃｙｓｔｅｉｎｅ−ｒｉｃｈ，ａｎｇｉｏｇｅｎｉｃ  ｉｎｄｕｃｅｒ，６１（ＣＹＲ６１）はＣＣＮ遺伝子ファミリーのメンバーであり、分化及び細胞増殖に関与するシステインリッチな分泌型タンパク質をコードする。ＣＹＲ６１は、とりわけ、細胞接着を媒介し、血管新生を亢進させることが知られている。増殖性糖尿病性網膜症（ＰＤＲ）を有する個体は、ＣＹＲ６１発現を誘導するＴＧＢ−βのレベルが上昇していることが示されている。
【０００３】
Ｙｏｕらは、内皮細胞走化性及び管形成を誘導するＣＹＲ６１タンパク質の能力並びにＣＹＲ６１発現と血管内皮増殖因子（ＶＥＧＦ）発現との間の共同効果を示している。より具体的には、Ｙｏｕらは、抗ＣＹＲ６１抗体が導入されるとＣＹＲ６１及びＶＥＧＦ誘導性の走化性及び管形成の両方が顕著に減少することを観察した。
【概要】
【０００４】
一実施形態では、本発明は、そのような治療を必要とする個体におけるＣＹＲ６１媒介性の状態を治療する方法であって、有効量の少なくとも１種のＣＹＲ６１ダウンレギュレーター（ＣＹＲ６１ＤＲ）を個体に投与するステップを含み、有効量は、個体におけるＣＹＲ６１遺伝子の発現を減少させるのに十分な量であり、特に、必ずではないが、そのようなＣＹＲ６１ＤＲは転写を少なくとも約１．５倍（約１．５分の１に）減少させる、方法を提供する。
【０００５】
他の実施形態では、本発明は、そのような治療を必要とする個体におけるＶＥＧＦ媒介性の状態を治療する方法であって、有効量の少なくとも１種のＣＹＲ６１ダウンレギュレーター（ＣＹＲ６１ＤＲ）を個体に投与するステップを含み、有効量は、個体におけるＣＹＲ６１遺伝子及びＶＥＧＦ遺伝子の両方の発現を減少させるのに十分な量であり、特に、必ずではないが、そのようなＣＹＲ６１ＤＲは転写を少なくとも約２倍（約２分の１に）減少させる、方法を提供する。
【詳細な説明】
【０００６】
出願人は、既知の２つのクラスの化合物、アントラサイクリン及びスタチンのメンバーがＣＹＲ６１遺伝子の発現をダウンレギュレートすることができ、それによりそれらの化合物がＣＹＲ６１媒介性の状態の治療に有用となることを意外にも発見した。さらに、ＣＹＲ６１発現及びＶＥＧＦ発現の共同効果によって、これらの化合物はＶＥＧＦ媒介性の状態の治療においても同様に有用となる。
【０００７】
典型的には、本発明の実施において、ＣＹＲ６１遺伝子発現は、少なくとも約１．５倍（約１．５分の１に）、例えば２倍（２分の１に）ダウンレギュレートされる。すなわち、ＣＹＲ６１  ｍＲＮＡの量は、処理された細胞において未処理細胞より少なくとも約１．５倍少ない（例えば２倍少ない（未処理細胞の２分の１である））。
【０００８】
本発明の実施形態に至る研究において、ヒト網膜色素上皮細胞株（ＡＲＰＥ−１９／ＨＰＶ１６）を、アントラサイクリン（ドキソルビシン又はダウノルビシン）、スタチン（シンバスタチン又はロバスタチン）、又はビヒクルで２４時間別々に処理し、１２４９０種の遺伝子をカバーする２２２３８個のプローブセットの遺伝子発現を、Ａｆｆｙｍｅｔｒｉｘ社製機器を用いて生じさせた。ＣＹＲ６１の発現に対するこれらの化合物の効果を下記表１に示す。
【０００９】
表１（ＣＹＲ６１ダウンレギュレーション）：
【表１】
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【００１０】
表１から分かるように、アントラサイクリン及びスタチンはＣＹＲ６１を顕著にダウンレギュレートすることができる。これらの結果では、アントラサイクリンによるダウンレギュレーションは、スタチンによるダウンレギュレーションよりおよそ１桁又はそれ以上大きい。しかし、一部の状況では、潜在的な副作用及び薬物相互作用の相違、並びに所望されるＣＹＲ６１ダウンレギュレーションの程度によって、いずれか又は両方のクラスの化合物が望ましいものとなる。
【００１１】
本発明の実施形態による使用に適したアントラサイクリンは、例えば、ドキソルビシン、ダウノルビシン、エピルビシン、イダルビシン、バルルビシン、及びミトキサントロンを含む。本発明の実施形態による使用に適したスタチンは、例えば、シンバスタチン、プラバスタチン、フルバスタチン、アトルバスタチン、セリバスタチン、ロバスタチン、メバスタチン、ピタバスタチン、及びロスバスタチンを含む。
【００１２】
本発明のいくつかの実施形態によれば、１種若しくは複数種のアントラサイクリン及び／又は１種若しくは複数種のスタチンは、ＣＹＲ６１及び／又はＶＥＧＦのダウンレギュレーションに影響を及ぼすのに十分な量で個体に投与され得る。例えば、一実施形態では、個体にはドキソルビシン、ダウノルビシン、又は両方が投与され得る。他の実施形態では、個体にはドキソルビシン、スタチン、又は両方が投与され得る。
【００１３】
１種又は複数種のＣＹＲ６１ＤＲで治療され得る状態は、血管新生及び／又は炎症を伴う状態、例えば、増殖性糖尿病性網膜症、血管新生緑内障、黄斑変性、炎症性血管新生、クローン病、潰瘍性大腸炎、網膜血管新生、網膜血管障害、腫瘍血管新生、癌血管新生、転移、関節リウマチ、及び線維症を含む。
【００１４】
ＣＹＲ６１ＤＲは、治療される個体に医薬組成物の形態で投与され得る。本発明の種々の実施形態に従って使用される医薬組成物は、治療有効量のＣＹＲ６１ＤＲ若しくはＣＹＲ６１ＤＲの活性代謝物又はその薬学的に許容可能な塩若しくは他の形態（例えば溶媒和物）を、１種又は複数種の薬学的に許容可能な賦形剤又は担体とともに含む。「医薬組成物」という語は、医学的用途における投与に適した組成物を指す。特定の患者のための適切な剤形、用量、及び投与経路の決定は、薬学及び医学の技術分野における通常の技能のレベルの範囲内にあることが理解されるべきである。
【００１５】
投与は経口であり得るが、他の投与経路、例えば、硝子体内、非経口、経鼻、頬側、経皮、舌下、筋肉内、静脈内、直腸内、膣内なども採用され得る。経口投与用の固体剤形は、カプセル剤、錠剤、丸剤、散剤、及び顆粒剤を含む。そのような固体剤形において、化合物は少なくとも１種の不活性な薬学的に許容可能な賦形剤と混合されている。そのような賦形剤は、例えば、（ａ）充填剤又は増量剤、例えば、デンプン、ラクトース、スクロース、グルコース、マンニトール、及びケイ酸、（ｂ）結合剤、例えば、カルボキシメチルセルロース、アルギン酸塩、ゼラチン、ポリビニルピロリドン、スクロース、及びアカシア、（ｃ）保湿剤、例えばグリセロール、（ｄ）崩壊剤、例えば、寒天、炭酸カルシウム、馬鈴薯若しくはタピオカ澱粉、アルギン酸、一部の複合ケイ酸塩、及び炭酸ナトリウム、（ｅ）溶解遅延剤、例えばパラフィン、（ｆ）吸収促進剤、例えば第４級アンモニウム化合物、（ｇ）湿潤剤、例えば、セチルアルコール及びモノステアリン酸グリセロール、（ｈ）吸着剤、例えば、カオリン及びベントナイト、及び（ｉ）滑沢剤、例えば、タルク、ステアリン酸カルシウム、ステアリン酸マグネシウム、固体ポリエチレングリコール、ラウリル硫酸ナトリウム、或いはそれらの混合物である。カプセル剤、錠剤、及び丸剤の場合、剤形は緩衝剤を含んでもよい。錠剤、糖衣錠、カプセル剤、丸剤、及び顆粒剤などの固体剤形は、コーティング及びシェル（例えば、腸溶性コーティング及び当技術分野で周知の他のもの）を用いて調製することもできる。固体剤形は乳白剤を含有してもよく、また、１種又は複数種の活性化合物を腸管のある特定の部分で遅延した様式で放出するような組成物でもあり得る。使用可能な包埋組成物の例はポリマー物質及びロウである。活性化合物はまた、上記賦形剤の１種又は複数種を適宜含むマイクロカプセル化形態のものであり得る。そのような固体剤形は、概して１％〜９５％（ｗ／ｗ）の活性化合物を含有し得る。ある実施形態では、活性化合物は５％〜７０％（ｗ／ｗ）の範囲である。
【００１６】
経口投与用の固体組成物は、各用量が約１ｍｇ〜約５００ｍｇの活性成分を含有する単位剤形に製剤化することができる。「単位剤形」という語は、ヒト対象及び他の哺乳動物のための単位用量として適した物理的に離散した単位を指し、ここで、各単位は、治療期間にわたって所望の効果を生じるように計算された所定量の活性成分を所要の医薬担体とともに含有する。ＣＹＲ６１ＤＲは、例えば、賦形剤に加えて１〜５００ｍｇの活性成分を有するカプセルである単位剤形に製剤化することができる。
【００１７】
経口投与用の液体剤形は、薬学的に許容可能な乳濁液、溶液、懸濁液、シロップ、及びエリキシルを含む。化合物又は組成物に加えて、液体剤形は、当技術分野で一般的に使用される不活性希釈剤を含有し得る。そのような不活性希釈剤は、例えば、水若しくは他の溶媒、可溶化剤及び乳化剤、例えば、エチルアルコール、イソプロピルアルコール、炭酸エチル、酢酸エチル、ベンジルアルコール、安息香酸ベンジル、プロピレングリコール、１，３−ブチレングリコール、ジメチルホルムアミド、油（特に、綿実油、落花生油、トウモロコシ胚芽油、オリーブ油、ひまし油、及びごま油）、グリセロール、テトラヒドロフルフリルアルコール、ポリエチレングリコール、及びソルビタンの脂肪酸エステル、又はこれらの物質の混合物である。そのような不活性希釈剤に加えて、組成物はまた、湿潤剤、乳化剤、懸濁化剤、甘味料、香味料、及び芳香剤などの補助剤を含み得る。
【００１８】
本発明のいくつかの実施形態では、ＣＹＲ６１ＤＲは液体形態で提供され、個体に硝子体内投与される。
【００１９】
上で概略が記載された特定の実施形態と併せて本発明を説明したが、多くの代替形態、修正形態及び変更形態が当業者に明らかであり、又はそうでなければそれらが包含されることが意図されていることは明白である。すなわち、上述の本発明の実施形態は説明を意図したものであり、限定を意図したものではない。特許請求の範囲に規定された本発明の精神及び範囲から逸脱することなく種々の変更がなされ得る。本明細書に引用されたすべての特許、特許出願、科学論文及び他の公開された文献は、その開示の内容についてそれらの全体がここに組み入れられている。
【手続補正書】
【提出日】令和1年7月25日(2019.7.25)
【手続補正１】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００１９
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００１９】
上で概略が記載された特定の実施形態と併せて本発明を説明したが、多くの代替形態、修正形態及び変更形態が当業者に明らかであり、又はそうでなければそれらが包含されることが意図されていることは明白である。すなわち、上述の本発明の実施形態は説明を意図したものであり、限定を意図したものではない。特許請求の範囲に規定された本発明の精神及び範囲から逸脱することなく種々の変更がなされ得る。本明細書に引用されたすべての特許、特許出願、科学論文及び他の公開された文献は、その開示の内容についてそれらの全体がここに組み入れられている。
本発明の実施形態は例えば下記実施形態１〜１６を含む。
実施形態１：
そのような治療を必要とする個体におけるＣＹＲ６１媒介性の状態を治療する方法であって、
有効量の少なくとも１種のＣＹＲ６１ダウンレギュレーター（ＣＹＲ６１ＤＲ）を前記個体に投与するステップを含み、
前記有効量は、前記個体におけるＣＹＲ６１遺伝子の発現を減少させるのに十分な量である、
方法。
実施形態２：
前記ＣＹＲ６１媒介性の状態は、血管新生を伴う状態及び炎症を伴う状態からなる群から選択される、実施形態１に記載の方法。
実施形態３：
前記ＣＹＲ６１媒介性の状態は、増殖性糖尿病性網膜症、血管新生緑内障、黄斑変性、炎症性血管新生、クローン病、潰瘍性大腸炎、網膜血管新生、網膜血管障害、腫瘍血管新生、癌血管新生、転移、関節リウマチ、及び線維症からなる群から選択される、実施形態１に記載の方法。
実施形態４：
前記少なくとも１種のＣＹＲ６１ＤＲはアントラサイクリン及びスタチンからなる群から選択される、実施形態１に記載の方法。
実施形態５：
前記少なくとも１種のＣＹＲ６１ＤＲは、ドキソルビシン、ダウノルビシン、エピルビシン、イダルビシン、バルルビシン、及びミトキサントロンからなる群から選択される少なくとも１種のアントラサイクリンを含む、実施形態４に記載の方法。
実施形態６：
前記少なくとも１種のＣＹＲ６１ＤＲは、シンバスタチン、プラバスタチン、フルバスタチン、アトルバスタチン、セリバスタチン、ロバスタチン、メバスタチン、ピタバスタチン、及びロスバスタチンからなる群から選択される少なくとも１種のスタチンを含む、実施形態４に記載の方法。
実施形態７：
投与が硝子体内投与を含む、実施形態１に記載の方法。
実施形態８：
投与が経口投与を含む、実施形態１に記載の方法。
実施形態９：
投与が静脈内投与を含む、実施形態１に記載の方法。
実施形態１０：
そのような治療を必要とする個体におけるＶＥＧＦ媒介性の状態を治療する方法であって、
有効量の少なくとも１種のＣＹＲ６１ダウンレギュレーター（ＣＹＲ６１ＤＲ）を前記個体に投与するステップを含み、
前記有効量は、前記個体におけるＣＹＲ６１遺伝子及びＶＥＧＦ遺伝子の両方の発現を減少させるのに十分な量である、
方法。
実施形態１１：
前記少なくとも１種のＣＹＲ６１ＤＲはアントラサイクリン及びスタチンからなる群から選択される、実施形態１０に記載の方法。
実施形態１２：
前記少なくとも１種のＣＹＲ６１ＤＲは、ドキソルビシン、ダウノルビシン、エピルビシン、イダルビシン、バルルビシン、及びミトキサントロンからなる群から選択される少なくとも１種のアントラサイクリンを含む、実施形態１１に記載の方法。
実施形態１３：
前記少なくとも１種のＣＹＲ６１ＤＲは、シンバスタチン、プラバスタチン、フルバスタチン、アトルバスタチン、セリバスタチン、ロバスタチン、メバスタチン、ピタバスタチン、及びロスバスタチンからなる群から選択される少なくとも１種のスタチンを含む、実施形態１１に記載の方法。
実施形態１４：
投与が硝子体内投与を含む、実施形態１０に記載の方法。
実施形態１５：
投与が経口投与を含む、実施形態１０に記載の方法。
実施形態１６：
そのような治療を必要とする個体におけるＶＥＧＦ媒介性の状態を治療する方法であって、
有効量の少なくとも１種のＣＹＲ６１ダウンレギュレーター（ＣＹＲ６１ＤＲ）を前記個体に投与するステップを含み、
前記有効量は、前記個体におけるＣＹＲ６１遺伝子及びＶＥＧＦ遺伝子の発現を減少させるのに十分な量である、
方法。
【手続補正２】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
増殖性糖尿病性網膜症（ＰＤＲ）を有する個体におけるＣＹＲ６１遺伝子の発現を少なくとも約２分の１に減少させるための剤であって、少なくとも１種のアントラサイクリンを有効成分として含有し、有効量の少なくとも１種のアントラサイクリンが前記個体に投与されるように用いられ、少なくとも１種のアントラサイクリンは、ドキソルビシン、ダウノルビシン、イダルビシン、及びそれらの薬学的に許容可能な塩からなる群から選択される、剤。
【請求項２】
増殖性糖尿病性網膜症（ＰＤＲ）を有する個体におけるＣＹＲ６１遺伝子の発現を少なくとも約２分の１に減少させるための剤であって、少なくとも１種のスタチンを有効成分として含有し、有効量の少なくとも１種のスタチンが前記個体に投与されるように用いられ、少なくとも１種のスタチンは、シンバスタチン及びロバスタチンからなる群から選択される、剤。
【外国語明細書】
2019206530000001.pdf