(57)【要約】  本発明は、腫瘍および転移を治療するための製剤の製造における、Ｎ−アセチル−Ｄ−グルコサミンの使用に関する。Ｎ−アセチル−Ｄ−グルコサミンは、細胞膜を調節し、細胞膜の安定な構造成分を構成し、腫瘍細胞の代謝プロセスに関与し、そして腫瘍細胞の死を起こすエネルギー供給をストップし得る。適応療法の製剤として、それは実験室研究、動物テストおよび人での臨床試験で顕著な効果を示した。【特許請求の範囲】
【請求項１】
腫瘍および転移性の疾患を治療するための製剤の製造における、Ｎ−アセチル−Ｄ−グルコサミンの使用。
【請求項２】
製剤が注射用溶液、錠剤またはカプセルの形態である医薬製剤である、請求項１記載の使用。
【請求項３】
製剤が１００〜２０，０００ｍｇ／日のＮ−アセチル−Ｄ−グルコサミンの注射投与量、または１，０００〜１０，０００ｍｇ／日のＮ−アセチル−Ｄ−グルコサミンの経口投与量である、請求項１または２記載の使用。
【請求項４】
Ｎ−アセチル−Ｄ−グルコサミンの製剤中の濃度が重量で０．１％〜１０％である、請求項１または３の使用。
【発明の詳細な説明】
【発明の詳細な説明】
【０００１】
発明の分野
本発明は、抗腫瘍および抗転移のための製剤の製造における、Ｎ−アセチル−Ｄ−グルコサミンおよびその製剤的に許容される塩の使用に関する。
【０００２】
発明の背景
腫瘍は一般的でよく起こる病気であり、悪性の腫瘍は人の健康に有害である最も厳しい病気の１つである。統計によれば、世界中で一年当たり約５百万人が癌で死亡し、中国でも約９０万人が癌で死亡している。中国に置ける、人口の高年齢化の進行、都市人口比率の上昇、環境汚染の悪化に伴って、癌の発生率は日に日に増加している。癌は普通は、環境、栄養および食事、遺伝的要因、ウィルス感染および生活様式の選択のような様々な要因の相互作用によって起こる。
【０００３】
腫瘍は、手術、放射線、抗がん剤、伝統的中国医薬、および免疫治療などのような様々な方法で普通は治療され、手術療法が依然として最も有効な方法である。化学療法は急速に発達し、細胞毒薬剤、代謝拮抗物質薬剤、抗生物質、アルカロイド、ホルモン等のような多くの抗がん剤が現在は使用されている。しかし、現在の抗がん剤は、以下の２つの問題を解決することはできない：（１）１つは治療効果で、化学療法剤は単にあるパーセントで腫瘍細胞を殺すだけであり、例えば１０１２の腫瘍細胞を有する進行した白血病の患者が化学療法剤で処理されて腫瘍細胞の９９．９％が殺されたとしても、残存する１０８の腫瘍細胞が依然として臨床的な逆戻りを招くかもしれない；そして（２）他は、正常細胞、特に成長および増殖段階の正常細胞への抗癌剤の影響であり、様々な副作用がそのような薬剤を投与した後に現れるかもしれず、頻発する副作用には：（ａ）白血球減少症および血小板減少；（ｂ）吐き気、嘔吐、下痢、歯性潰瘍などのような消化管反応；（ｃ）抜け毛；（ｄ）血尿；（ｅ）免疫低下；および（ｆ）合併細菌または真菌感染が含まれる。放射線療法、伝統的中国医薬および免疫療法のような他の治療方法もまた、同様の問題を有している。このように、新しい抗癌剤の開発においては、腫瘍細胞を殺す効果だけでなく、副作用を減少させることも考慮されなければならない。
【０００４】
“バイオウェーブ（bio-waves）”理論の研究において、本発明者は、バクテリアウェーブ成長モデルを構築した。研究を通して、このウェーブは本来備わっている調節メカニズムであること：異常な周期的な遅いウェーブを正常な生理的無秩序な速いウェーブにするために、バイオウェーブプロセスにおいて、いくつかの化学物質が調節に関与することができる事が知られており、そしてそれらの種の物質はウェーブ因子を活性化することが知られている。分離、精製、および同定を通して、それらの因子の１つがＮ−アセチル−Ｄ−グルコサミンであることが決定され、その活性化されたウェーブの作用は、細胞膜タンパクと糖分解の共役振動を調節することであることが示される。人体の多くの生化学的および生理的プロセスは、ウェーブ因子の活性化の関与が必要であり、そしてもし生体でこの種のウェーブ活性化因子が欠けると、異常な状態になってしまうであろう。
【０００５】
Ｎ−アセチル−Ｄ−グルコサミンは、化学試薬である。１９９０年から、歯周炎（ＷＯ９１０２５３０Ａ１）、微生物感染（ＷＯ９７１８７９０Ａ３）、腸炎症（ＷＯ９９５３９２９Ａ１）、角膜疾患（ＪＰ１０２８７５７０Ａ２）、前立腺肥大症（ＵＳ０５１１６６１５）などの治療に継続的に使用されている。また、美容術（ＪＰ５９０１３７０８Ａ２）、シャンプー（ＪＰ２０１１５０５Ａ２）、組織成長調節剤（ＷＯ／Ａ８７０２２４４）などとしても適用されるが、これまで粘膜皮膚膜のミクロ生態的均衡の調節のための製剤の調製使用されてはいない。  
【０００６】
発明の内容
本発明の発明者は、驚くべきことにＮ−アセチル−Ｄ−グルコサミンが細胞膜を調節し、細胞膜の安定な構造成分を構成し、腫瘍細胞の代謝プロセスに関与し、そして腫瘍細胞の死を起こすエネルギー供給をストップし得ることを見出した。適応療法の製剤として、それは実験室研究、動物テストおよび人での臨床試験で顕著な効果を示した。
【０００７】
本発明は、腫瘍および転移性の疾患を治療するための製剤の調製における、Ｎ−アセチル−Ｄ−グルコサミンおよびその製剤的に許容される塩の使用に関する。
さらに、本発明は、腫瘍および転移性の疾患を予防する、または治療する方法であって、それを必要とする患者に有効量のＮ−アセチル−Ｄ−グルコサミンおよびその製剤的に許容される塩を投与することを含む方法に関する。
【０００８】
Ｎ−アセチル−Ｄ−グルコサミンの分子式は、Ｃ８Ｈ１５ＮＯ６であり、その構造は以下に示すものである。
【０００９】
【化１】
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【００１０】
Ｎ−アセチル−Ｄ−グルコサミンは、市販品を購入することも、または公知の方法で調製することもできる。例えば、特許出願ＷＯ９７／３１１２１は、酵素法によるキチンからのＮ−アセチル−Ｄ−グルコサミンの調製方法を開示し、日本特許出願ＪＰ６３２７３４９３はキチンをＮ−アセチル−キトースに部分加水分解され、それから酵素で処理されＮ−アセチル−Ｄ−グルコサミンを得る方法が開示されている。
【００１１】
言及されうるＮ−アセチル−Ｄ−グルコサミンのその製剤的に許容される塩は、製剤的に許容される酸と形成される塩であり、例えば、塩酸塩、臭化水素酸塩、ホウ酸塩、リン酸塩、硫酸塩、硫酸水素塩、およびリン酸水素塩のような無機酸と形成される塩、クエン酸塩、安息香酸塩、アスコルビン酸塩、メチル硫酸塩、ナフタレン−２−硫酸塩、ピクリン酸、フマル酸塩、マレイン酸塩、マロン酸塩、シュウ酸塩、コハク酸塩、酢酸塩、酒石酸塩、メシレート、トシル塩（tosylate）、イセチオン酸塩、α−ケトグルタル酸塩、α−グリセロールリン酸塩、およびグルコース−１−リン酸塩のような有機酸と形成される塩である。
【００１２】
一般的に、本発明の化合物は、経口投与、非経口投与、舌下投与、または経皮投与用に調剤され、好ましくは非経口または経口投与用として調剤される。腫瘍または転移性の疾患が本発明の方法に従い治療される際は、活性成分の量はその疾患の性質や程度、および患者の体重に依存する。大人の患者に関しては、Ｎ−アセチル−Ｄ−グルコサミンの提案される注入量は、１００−２０，０００ｍｇ／日であり、提案されるＮ−アセチル−Ｄ−グルコサミンの経口投与量は１，０００−１０，０００ｍｇ／日である。
【００１３】
本発明が上述の疾患を治療するための、経口、舌下、皮下、筋肉内、静脈内、経皮、または直腸投与での医薬組成物として適用される場合は、活性成分は動物または人へ、凍結乾燥形態または通常の製剤的に許容される担体と形成された混合物のような単位投与の形態で適用されることができる。適当な単位投与には、分散錠剤、カプセル、パウダー、顆粒、および経口投与用の溶液または懸濁液のような経口投与形態、舌下および口腔内投与の投与形態、皮下、筋肉内、または静脈内投与の投与形態、局所投与の投与形態、および直腸投与用の投与形態が含まれ、好ましくは非経口および経口投与用製剤、特に好ましくは注射溶液、錠剤およびカプセルである。
【００１４】
錠剤形態の固体組成物は、ゼラチン、スターチ、ラクトース、ステアリン酸マグネシウム、タルク紛、アラビアガムなどのような製剤添加物とともにおもな活性成分を混合することにより調製される。錠剤は、糖や他の適当な物質でコートすることができ、または持続性を持たせ、作用を遅らせ、活性成分のあらかじめ決められた量を継続的に放出する性質を持たせることができる。
【００１５】
カプセルの形態での製剤は、活性成分と希釈剤を混合し、得られた混合物を柔軟なまたは硬いカプセルに充填することによって得られる。
シロップまたはエリキシル剤の形態での製剤は、活性成分と好ましくはカロリーのない甘味剤、防腐剤としてのメチルｐ−ヒドロキシベンゾエートおよびプロピルｐ−ヒドロキシベンゾエート、芳香剤および適当な着色物質を含むことができる。
【００１６】
水分散粉末および顆粒製剤は、分散剤または湿潤剤、またはポリビニルピロリドンのような懸濁剤と混合された活性成分、および甘味剤または味覚調節剤を含みことができる。
直腸投与のための坐剤は、ココアオイルまたはポリエチレングリコールのような直腸と同じ温度で溶解する粘着剤と調製される。
【００１７】
本発明の化合物の注射可能な無菌水溶液、塩溶液、アルコール性溶液または均一懸濁液は、非経口的投与することができる。
本発明の実施の最良の態様
以下の実施例は、本発明の化合物（式（Ｉ）の化合物）がインビボにおいて動物の腫瘍の成長と発達を阻害する能力を有することを例示するために使用される。
Ｉ．式（Ｉ）の化合物のウェーブ促進試験
１．実験材料および方法：
１．１  サンプル：式（Ｉ）の純粋な化合物
１．２  実験材料
菌種：Ｐｒｏｔｅｕｓ  Ｍｉｒａｂｉｌｉｓ（以下の生物的反応特性を有する：運動性（＋）、ウレアーゼ（＋）、ラクトース（−）、グルコース（＋）、Ｈ２Ｓ（−）、フェニルアラニンデアミナーゼ（＋））。
【００１８】
培養培地：修正ＬＢ培養培地（培地成分：１％トリトン、０．５％酵母エキス、１％塩化ナトリウム、０．１％グルコース、０．００２％ＴＴＣ、およびｐＨ＝７．２〜７．４）。
１．３  実験方法：
Ｐｒｏｔｅｕｓ  ＭｉｒａｂｉｌｉｓをＬＢプレートの中心に植菌し、３７℃で９時間培養し、同心円が出現し、外側に連続的に３時間の間隔で拡張し、そしてこれをコントロールとした；ＬＢプレート上に終濃度０．５％で式（Ｉ）の化合物を添加し、そしてＰｒｏｔｅｕｓ  Ｍｉｒａｂｉｌｉｓを同様の方法で接種し、３７℃で培養した。そしてその結果、３時間間隔で出現した同心円だけでなく、コントロールと比較し、それぞれの円上に多くのきれいなウェーブが見られた。
２．実験結果および評価
実験では、式（Ｉ）の化合物のウェーブ促進作用を検討するために、バイオウェーブモデルを適用した。結果から、式（Ｉ）の化合物は、バクテリア細胞に正常なバイオウェーブ特性を示させ得るだけでなく、ウェーブをより細かい振動にし、短いウェーブサイクルを生じさせることができることが分かり、そしてそれらは式（Ｉ）の化合物がバイオウェーブ作用を促進する作用を有し、そしてウェーブの促進作用はインビボでの細胞内再分配を調節することができること、そして式（Ｉ）の化合物が粘膜皮膚膜のミクロ生態的不均衡を予防するため、および治療するための調節剤として使用されるという基礎を示している。
II．式（Ｉ）の化合物の毒性試験は以下を含む：
１．急性毒性試験：薬剤経口投与、静脈注射、および投与最大限度量試験を含む；
２．エイムス試験；
３．小さなマウスの骨髄細胞の小核試験（micronucleus test）；
４．マウス精子の異常性の試験；
５．マウスの精巣のクロモシンの異常アベランス試験（aberrance test）；
６．慢性致死試験；
７．亜慢性毒性試験（９０日投与）；
８．トラディショナル奇形誘導試験；
それらの試験の結果は、式（Ｉ）の化合物の急性毒性試験では、２ｇ／ｋｇ以上の投与で試験したが（これは人への注入量の３００倍以上である）、急性毒性反応は見られなかった。長期の毒性試験では、最大投与量は１ｇ／ｋｇまで達し、そして４週間の処置と観察の後、いまだ中毒反応はみられていない；そして生殖試験では、マウスに継続的に７ｍｇ／ｋｇの投与量で３世代与えたが、式（Ｉ）の化合物は妊娠、出産、赤ちゃんマウスの世話と成長に何ら影響がないことが示された。従って、式（Ｉ）の化合物は毒性がない物質であると証明された。
III．動物試験
１．  材料と方法
１．１  動物：Ｋｕｎｍｉｎｇマウス、Ｓｃａｄ雄性マウス
１．２  腫瘍細胞：Ｂ１６細胞、ＰＧ細胞およびＢｉｕ細胞（これらは本学の病理学教室（Staff Room of Pathology）および第２関連病院の腫瘍部門からそれぞれ提供された。）。
１．３  方法：  ＫｕｎｍｉｎｇマウスとＢａｌｂｃマウスの足裏にＢ１６細胞懸濁液を注入し、そしてそれらのマウスの腹膜内に、式（Ｉ）の化合物の１０％水溶液を、Ｂ１６細胞注入後０日、４日、７日後に注入した。結果を以下の表に示す。
【００１９】
【表１】
2007506645.tif 000003
【００２０】
表から、腫瘍の成長は、化合物の高濃度が腹膜内に投与されたグループでは阻害された；そして３グループの結果によれば、早期に化合物が投与されればされるほど、よりよい効果が得られた。これは、腫瘍成長を調節する、そして腫瘍の成長と転移をコントロールする基礎であった。同様な結果は、ＰＧ細胞やＢｉｕ細胞を使用した、ｓｃａｄマウスでの早期コントロール試験でも得られた。
ＩＶ．典型的ケース
悪性リンパ種を患い、化学療法期間中に、吐き気、嘔吐、食欲低下およびたびたびの感染のような激しい副作用を示しているＨｕ（７歳）さん（Ｘｉｎａｎ病院の小児部の患者）に、ウェーブ促進Ｎ−アセチル−Ｄ−グルコサミンカプセルを副作用をコントロールするために使用した。化学療法の終わりの後に前記カプセルを継続的に投与することによって、ヘモグラムが改善され、リンパ球骨髄イメージングが明らかに成熟し、血中のＭタンパクレベルが減少し、症状が効果的にコントロールされたことが観察された。
【００２１】
Ｃｈｅｎさん（女性）は、Chuanxinan Mining Area Hospitalの手術部に乳ガンで来院していた。主治医であるＣｈｅｎ  Ｑｉさんは、手術後の高い転移率を考慮して、手術前と手術後の１週間１５ｇ／６０ｋｇ／日の投与量で式（Ｉ）の化合物を注射によりＣｈｅｎさんに投与した。その結果、手術後一年以内には転移が見られなかった。
【００２２】
本発明は、Ｎ−アセチル−Ｄ−グルコサミン新しい医療用途を開発し、Ｎ−アセチル−Ｄ−グルコサミンの使用の範囲を広げ、Ｎ−アセチル−Ｄ−グルコサミンの活用価値を増加させる。
【手続補正書】
【提出日】平成18年6月1日(2006.6.1)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
Ｎ−アセチル−Ｄ−グルコサミンを含む、腫瘍および転移性の疾患を治療するための医薬組成物。
【請求項２】
組成物が注射用溶液、錠剤またはカプセルの形態である、請求項１記載の医薬組成物。
【請求項３】
１００〜２０，０００ｍｇ／日のＮ−アセチル−Ｄ−グルコサミンの注射投与量、または１，０００〜１０，０００ｍｇ／日のＮ−アセチル−Ｄ−グルコサミンの経口投与量である、請求項１または２記載の医薬組成物。
【請求項４】
組成物中のＮ−アセチル−Ｄ−グルコサミンの濃度が重量で０．１％〜１０％である、請求項１または３の医薬組成物。                                    
【国際調査報告】
2007506645.tif 000004
2007506645.tif 000005