(57)【要約】      （修正有）【課題】患者の選択方法及びキットを提供する。【解決手段】少なくとも１つの（置換フェニル）−プロペナール部分を有する化合物に反応し得る患者の選択方法を提供し、この方法は、化合物を患者由来の試料と接触させること、及び試料中で化合物がＡＲ、ｃ−ＭＹＣ、オーロラＡ、突然変異型ｐ５３、ＣＤＫ４、又はＨｅｒ２から選択されるタンパク質の量を減少させるかどうか又は化合物が試料中の活性酸素種の量を増加させるかどうかを決定することを含み、ここでタンパク質の減少又は活性酸素種の増加は、患者がその化合物に反応し得ることを示す。また、キット、アンドロゲン受容体関連病態を治療し得る候補化合物の同定方法、及び上述のとおりの方法によって同定される候補化合物も提供する工程を含む。【選択図】なし【特許請求の範囲】
【請求項１】
式Ｉ、ＩＩａ、ＩＩｂ、ＩＩｃ、ＩＩＩ、ＩＶ、Ｖ、ＶＩ、ＶＩＩ又はＶＩＩＩに係る化合物に反応し得る患者の選択方法であって、
ここで、前記化合物を、前記患者由来の試料と接触させること、及び前記試料中で、前記化合物が、ＡＲ、ｃ−ＭＹＣ、オーロラＡ、突然変異型ｐ５３、ＣＤＫ４、又はＨｅｒ２から選択されるタンパク質の量を減少させるかどうか又は、前記化合物が、活性酸素種の量を増加させるかどうかを決定することを含み、
ここで、前記タンパク質の減少又は前記活性酸素種の増加は、前記患者が前記化合物に反応し得ることを示す；
【化１】
2019194561.tif 000029
式Ｉにおいて、式中：
Ｒ３１及びＲ４１は、各々独立に、アルコキシ、ヒドロキシ、及び水素からなる群から選択され；及び
Ｘ１は、ヒドロキシ、アルコキシ、プロピオン酸エチル、炭酸エチルメチル、及びカルボニルアルキルからなる群から選択される；
【化２】
2019194561.tif 000030
式ＩＩａ及び式ＩＩｂにおいて、式中：
Ｒ３２、Ｒ４２、Ｒ３２’、及びＲ４２’は、独立に、−Ｈ、−ＯＨ、及び−ＯＣＨ３からなる群から選択され；
Ｌ２は、Ｃ０〜Ｃ８アルキレンであるか；又はＬ２は、Ｚ２がないとき、不飽和アルケニレン又はアルキニル（ａｌｋｙｎｌ）であり；
Ｚ２は、−Ｈ、−ＯＨ、芳香環、シクロアルキル、−ＣＯＲ１２、−ＣＯ２Ｒ１２、−ＣＯＮＲ１２Ｒ２２、−ＮＲ１２Ｒ２２、−Ｃ（Ｘ２）３からなる群から選択され、
式中、Ｒ１２及びＲ２２は、独立に、−Ｈ、−ＣＨ３、及び−Ｃ２Ｈ５からなる群から選択され；及び
Ｘ２は、−Ｆ、−Ｃｌ、及び−Ｂｒからなる群から選択されるハロゲン原子である；
【化３】
2019194561.tif 000031
式ＩＩｃにおいて、式中：
Ｒ７２、Ｒ８２、Ｒ７２’、及びＲ８２’は、独立に、−Ｈ、−ＯＨ、及び−ＯＣＨ３からなる群から選択され；及び
Ｒ５２、及びＲ６２は、独立に、−Ｈ、−ＣＨ３、−Ｃ２Ｈ５、置換アリール及び置換ベンジル基からなる群から選択される；
【化４】
2019194561.tif 000032
式ＩＩＩにおいて、式中：
Ｒ３３、Ｒ４３、Ｒ３３’、Ｒ４３’、Ｒ３３’’、及びＲ４３’’は、各々独立に、アルコキシ、ヒドロキシ、及び水素からなる群から選択される；
【化５】
2019194561.tif 000033
式ＩＶにおいて式中：
Ｒ３４、Ｒ４４、Ｒ３４’、Ｒ４４’、Ｒ３４’’、Ｒ４４’’、Ｒ３４’’’、及びＲ４４’’’は、各々独立に、アルコキシ、ヒドロキシ、及び水素からなる群から選択される；
【化６】
2019194561.tif 000034
式Ｖにおいて、式中：
各「ｎ５」は、独立に、１、２、又は３であり；
Ｒ３５、Ｒ４５、Ｒ３５’、及びＲ４５’は、独立に、−Ｈ、−ＯＨ、及び−ＯＣＨ３からなる群から選択され；
Ｌ５−Ｚ５は存在しないか；又は
Ｌ５−Ｚ５は存在し、及びＬ５は、Ｚ５が存在しない場合、Ｃ０〜Ｃ８アルキレン、不飽和アルケニレン、及びアルキニル（ａｌｋｙｎｌ）からなる群から選択され；
Ｚ５は、−Ｈ、−ＯＨ、芳香環、シクロアルキル、−ＣＯＲ１５、−ＣＯ２Ｒ１５、−ＣＯＮＲ１５Ｒ２５、−ＮＲ１５Ｒ２５、−Ｃ（Ｘ５）３からなる群から選択され；
Ｒ１５及びＲ２５は、独立に、−Ｈ、−ＣＨ３、及び−Ｃ２Ｈ５からなる群から選択され；及び
Ｘ５は、−Ｆ、−Ｃｌ、及び−Ｂｒからなる群から選択されるハロゲン原子である；
【化７】
2019194561.tif 000035
式ＶＩ及び式ＶＩＩにおいて、式中：
Ｒ１６、Ｒ１７、Ｒ２６及びＲ２７は一置換又は二置換基であり、独立に、メトキシ基、ヒドロキシル基、アルキルスルホニル基からなる群から選択され；
Ｌ６及びＬ７は、Ｚ６及びＺ７が存在しない場合、各々、カルボニル、アルキレン、アルケニレン、及びアルキニル（ａｌｋｙｎｌ）からなる群から選択され；
Ｚ６及びＺ７は、各々、−Ｈ、−ＯＨ、置換スチレニル、芳香環、シクロアルキル、−ＣＯＲ３６、−ＣＯＮＲ３６Ｒ４６、及び−Ｃ（Ｘ６）３からなる群から選択され、式中、Ｒ３６及びＲ４６は、各々、−Ｈ、−ＣＨ３、又は−Ｃｎ６Ｈ２ｎ６＋１、複素環式化合物、及びヘテロアリール部分からなる群から選択されるか；又はＲ３６及びＲ４６は一緒になって複素環式環を形成し；又は
Ｚ６及びＺ７は、各々、ＣＯＯＲ６であり；式中、Ｒ６は、−Ｈ、−ＣＨ３、及び−Ｃｎ７Ｈ２ｎ７＋１からなる群から選択され；又は
Ｚ６及びＺ７は、Ｙ７がＨでない場合、各々、シクロアルキルであり；
ｎ６及びｎ７は、独立に、２〜４の整数であり；
Ｘ６は、−Ｆ、−Ｃｌ、及び−Ｂｒからなる群から選択され；
Ｙ６及びＹ７は、Ｌがアルキレンであり、且つＺ６及びＺ７が−ＣＯＮＲ３７Ｒ４７（Ｒ３７及びＲ４７は、各々、−Ｈ、複素環式化合物（ｈｅｔｅｒｃｙｃｌｉｃ）、ヘテロアリール、及びシクロアルキルからなる群から選択される）である場合、各々、Ｈであるか；又は
Ｙ６及びＹ７は、各々、Ｃ１〜Ｃ３アルキル、−Ｆ、Ｃｌ、及びＢｒからなる群から選択される；及び
【化８】
2019194561.tif 000036
Ｒ１８及びＲ２８は一置換又は二置換基であり、独立に、メトキシ基、ヒドロキシル基、及びアルキルスルホニル基からなる群から選択され；
Ｒ３８は、
【化９】
2019194561.tif 000037
からなる群から選択され；及び
Ｒ４８は、ＣＨ３、Ｈ、Ｆ及びＣｌからなる群から選択され；及び
ｎ８は１又は２である、方法。
【請求項２】
前記患者がアンドロゲン受容体関連病態に罹患している、請求項１に記載の方法。
【請求項３】
前記アンドロゲン受容体関連病態が、炎症、ざ瘡、脱毛症、多毛症、創傷、球脊髄性筋萎縮症（ＳＢＭＡ、ケネディ病）、望ましくない免疫応答、免疫障害、又は癌から選択される、請求項２に記載の方法。
【請求項４】
前記癌が、前立腺癌、肝癌、膀胱癌、子宮頸癌、肺癌及び乳癌、皮膚癌、小細胞肺癌、精巣癌、リンパ腫、白血病、食道癌、胃癌、結腸癌、子宮内膜癌、卵巣癌、中枢神経系癌などから選択される、請求項３に記載の方法。
【請求項５】
前記化合物が前記タンパク質の分解を亢進させるかどうかを決定することを含む、請求項１に記載の方法。
【請求項６】
前記試料が前記癌の生検に由来する、請求項４に記載の方法。
【請求項７】
前記化合物が式ＶＩＩＩであり、及びＲ１８が３’４’−ＯＣＨ３であり；Ｒ２８が３’４’−ＯＣＨ３であり；Ｒ３８が
【化１０】
2019194561.tif 000038
であり；Ｒ４８がＦであり；及びｎ８が１である、請求項１に記載の方法。
【請求項８】
式Ｉ、ＩＩａ、ＩＩｂ、ＩＩｃ、ＩＩＩ、ＩＶ、Ｖ、ＶＩ、ＶＩＩ又はＶＩＩＩに係る化合物と、ＡＲ、ｃ−ＭＹＣ、オーロラＡ、突然変異型ｐ５３、ＣＤＫ４、又はＨｅｒ２から選択されるタンパク質の量を検出するための検出用分子、又は活性酸素種の量を検出するための検出用分子とを含むキット。
【請求項９】
前記検出用分子が、ＡＲ、ｃ−ＭＹＣ、オーロラＡ、突然変異型ｐ５３、ＣＤＫ４、若しくはＨｅｒ２又は活性酸素種に特異的な抗体である、請求項８に記載のキット。
【請求項１０】
前記化合物が式ＶＩＩＩであり、及びＲ１８が３’４’−ＯＣＨ３であり；Ｒ２８が３’４’−ＯＣＨ３であり；Ｒ３８が
【化１１】
2019194561.tif 000039
であり；Ｒ４８がＦであり；及びｎ８が１である、請求項８に記載のキット。
【請求項１１】
アンドロゲン受容体関連病態を治療し得る候補化合物の同定方法であって、
前記アンドロゲン受容体関連病態に罹患している患者由来の試料に前記候補化合物を接触させること及び、前記試料中で、前記候補化合物がＡＲ、ｃ−ＭＹＣ、オーロラＡ、突然変異型ｐ５３、ＣＤＫ４、又はＨｅｒ２から選択されるタンパク質の量を減少させるかどうかを決定すること又は、前記化合物が前記試料中の活性酸素種の量を増加させるかどうかを決定することを含み、ここで前記タンパク質の減少又は前記活性酸素種の増加は、前記候補化合物が前記アンドロゲン受容体関連病態を治療し得ることを示す、方法。
【請求項１２】
前記アンドロゲン受容体関連病態が、炎症、ざ瘡、脱毛症、多毛症、創傷、球脊髄性筋萎縮症（ＳＢＭＡ、ケネディ病）、望ましくない免疫応答、免疫障害、又は癌から選択される、請求項１１に記載の方法。
【請求項１３】
前記癌が、前立腺癌、肝癌、膀胱癌、子宮頸癌、肺癌及び乳癌、皮膚癌、小細胞肺癌、精巣癌、リンパ腫、白血病、食道癌、胃癌、結腸癌、子宮内膜癌、卵巣癌、中枢神経系癌などから選択される、請求項１２に記載の方法。
【請求項１４】
前記化合物が前記タンパク質の分解を亢進させるかどうかを決定することを含む、請求項１１に記載の方法。
【請求項１５】
前記試料が前記癌の生検に由来する、請求項１１に記載の方法。
【請求項１６】
アンドロゲン受容体関連病態に罹患している患者由来の試料と、ＡＲ、ｃ−ＭＹＣ、オーロラＡ、突然変異型ｐ５３、ＣＤＫ４、又はＨｅｒ２から選択されるタンパク質の量を検出するための検出用分子、又は活性酸素種の量を検出するための検出用分子とを含むキット。
【請求項１７】
前記アンドロゲン受容体関連病態が、炎症、ざ瘡、脱毛症、多毛症、創傷、球脊髄性筋萎縮症（ＳＢＭＡ、ケネディ病）、望ましくない免疫応答、免疫障害、又は癌から選択される、請求項１６に記載のキット。
【請求項１８】
前記癌が、前立腺癌、肝癌、膀胱癌、子宮頸癌、肺癌及び乳癌、皮膚癌、小細胞肺癌、精巣癌、リンパ腫、白血病、食道癌、胃癌、結腸癌、子宮内膜癌、卵巣癌、中枢神経系癌などから選択される、請求項１７に記載のキット。
【請求項１９】
前記試料が前記癌の生検に由来する、請求項１６に記載のキット。
【請求項２０】
前記検出用分子が、ＡＲ、ｃ−ＭＹＣ、オーロラＡ、突然変異型ｐ５３、ＣＤＫ４、若しくはＨｅｒ２又は活性酸素種に特異的な抗体である、請求項１６に記載のキット。
【請求項２１】
請求項１１〜１５のいずれか一項に記載の方法によって同定される候補化合物。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は検出技法に関する。より具体的には、本発明は、少なくとも１つの（置換フェニル）−プロペナール部分を有する化合物に反応し得る患者の選択方法に関する。
【背景技術】
【０００２】
最近では、疾患治療の研究手法はターゲット療法が主流である。国立衛生研究所によれば、ターゲット療法は精密医療の基礎である。
これは、癌細胞の成長、分裂、及び転移を助ける癌細胞の変化を標的とする癌治療の一種である。
研究者は、癌をドライブする細胞変化について理解を深めるにつれ、そうした変化を標的とし、又はその効果を遮断する有望な療法をよりうまく設計できるようになる。
【０００３】
化学療法が通常重度の副作用を引き起こすことは周知である。
更に、化学療法の費用は極めて高価であり得る。しかしながら、化学療法の効果は十分でない。（非特許文献１）に発表されたとおり、成人における５年生存率に対する治癒的及び補助的細胞傷害性化学療法の全体的な寄与は、オーストラリアで２．３％及び米国で２．１％と推定された。従って、特定の薬物に反応し得る患者を選択するためのスクリーニング方法が、治療それ自体と同様に重要であると考えられる。
【先行技術文献】
【非特許文献】
【０００４】
【非特許文献１】２００４年のＪｏｕｒｎａｌ  ｏｆ  Ｃｌｉｎｉｃａｌ  Ｏｎｃｏｌｏｇｙ（Ｔｈｅ  Ｃｏｎｔｒｉｂｕｔｉｏｎ  ｏｆ  Ｃｙｔｏｔｏｘｉｃ  Ｃｈｅｍｏｔｈｅｒａｐｙ  ｔｏ  ５−ｙｅａｒ  Ｓｕｒｖｉｖａｌ  ｉｎ  Ａｄｕｌｔ  Ｍａｌｉｇｎａｎｃｉｅｓ．Ｃｌｉｎ  Ｏｎｃｏｌ（Ｒ  Ｃｏｌｌ  Ｒａｄｉｏｌ）．２００４  Ｄｅｃ；１６（８）：５４９−５６０）
【非特許文献２】Ｋａｔｓｕｎｏ  ｅｔ  ａｌ．，２００４
【非特許文献３】Ｂｕｌｕｎ  ａｎｄ  Ａｄａｓｈｉ，２００３
【非特許文献４】Ｌｅｅ  ｅｔ  ａｌ．，２００４
【非特許文献５】Ｐｅｏｈｌｍａｎ  ｅｔ  ａｌ．，１９９５
【非特許文献６】Ｅｖａｎｓ  ｅｔ  ａｌ．，１９８３
【非特許文献７】Ｈａｄｉｇａｎ  ｅｔ  ａｌ．，２０００
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００５】
本発明は、化学療法の有効率を上昇させて医療費を最適化するため、薬物に反応し得る患者の選択方法を提供するものである。
【課題を解決するための手段】
【０００６】
本発明は、式Ｉ、ＩＩａ、ＩＩｂ、ＩＩｃ、ＩＩＩ、ＩＶ、Ｖ、ＶＩ、ＶＩＩ又はＶＩＩＩに係る化合物に反応し得る患者の選択方法を提供し、この方法は、上記化合物を患者由来の試料と接触させること、及び試料中で、上記化合物がＡＲ、ｃ−ＭＹＣ、オーロラＡ、突然変異型ｐ５３、ＣＤＫ４、又はＨｅｒ２から選択されるタンパク質の量を減少させるかどうか、又は、化合物が活性酸素種の量を増加させるかどうかを決定することを含み、ここでタンパク質の減少又は活性酸素種の増加は、患者がその化合物に反応し得ることを示す；
【化１】
2019194561.tif 000002
式Ｉにおいて式中：
Ｒ３１及びＲ４１は、各々独立に、アルコキシ、ヒドロキシ、及び水素からなる群から選択され；及び
Ｘ１は、ヒドロキシ、アルコキシ、プロピオン酸エチル、メチル炭酸エチル、及びカルボニルアルキルからなる群から選択される；
【化２】
2019194561.tif 000003
式ＩＩａ及び式ＩＩｂにおいて、式中：
Ｒ３２、Ｒ４２、Ｒ３２’、及びＲ４２’は、独立に、−Ｈ、−ＯＨ、及び−ＯＣＨ３からなる群から選択され；
Ｌ２は、Ｃ０〜Ｃ８アルキレンであるか；又はＬ２は、Ｚ２がないとき、不飽和アルケニレン又はアルキニル（ａｌｋｙｎｌ）であり；
Ｚ２は、−Ｈ、−ＯＨ、芳香環、シクロアルキル、−ＣＯＲ１２、−ＣＯ２Ｒ１２、−ＣＯＮＲ１２Ｒ２２、−ＮＲ１２Ｒ２２、−Ｃ（Ｘ２）３からなる群から選択され、式中、Ｒ１２及びＲ２２は、独立に、−Ｈ、−ＣＨ３、及び−Ｃ２Ｈ５からなる群から選択され；及び
Ｘ２は、−Ｆ、−Ｃｌ、及び−Ｂｒからなる群から選択されるハロゲン原子である；
【化３】
2019194561.tif 000004
式ＩＩｃにおいて、式中：
Ｒ７２、Ｒ８２、Ｒ７２’、及びＲ８２’は、独立に、−Ｈ、−ＯＨ、及び−ＯＣＨ３からなる群から選択され；及び
Ｒ５２、及びＲ６２は、独立に、−Ｈ、−ＣＨ３、−Ｃ２Ｈ５、置換アリール及び置換ベンジル基からなる群から選択される；
【化４】
2019194561.tif 000005
式ＩＩＩにおいて、式中：
Ｒ３３、Ｒ４３、Ｒ３３’、Ｒ４３’、Ｒ３３’’、及びＲ４３’’は、各々独立に、アルコキシ、ヒドロキシ、及び水素からなる群から選択される；
【化５】
2019194561.tif 000006
式ＩＶにおいて、式中：
Ｒ３４、Ｒ４４、Ｒ３４’、Ｒ４４’、Ｒ３４’’、Ｒ４４’’、Ｒ３４’’’、及びＲ４４’’’は、各々独立に、アルコキシ、ヒドロキシ、及び水素からなる群から選択される；
【化６】
2019194561.tif 000007
式Ｖにおいて、式中：
各「ｎ５」は、独立に、１、２、又は３であり；
Ｒ３５、Ｒ４５、Ｒ３５’、及びＲ４５’は、独立に、−Ｈ、−ＯＨ、及び−ＯＣＨ３からなる群から選択され；
Ｌ５−Ｚ５は存在しないか；又は
Ｌ５−Ｚ５は存在し、及びＬ５は、Ｚ５が存在しない場合、Ｃ０〜Ｃ８アルキレン、不飽和アルケニレン、及びアルキニル（ａｌｋｙｎｌ）からなる群から選択され；
Ｚ５は、−Ｈ、−ＯＨ、芳香環、シクロアルキル、−ＣＯＲ１５、−ＣＯ２Ｒ１５、−ＣＯＮＲ１５Ｒ２５、−ＮＲ１５Ｒ２５、−Ｃ（Ｘ５）３からなる群から選択され；
Ｒ１５及びＲ２５は、独立に、−Ｈ、−ＣＨ３、及び−Ｃ２Ｈ５からなる群から選択され；及び
Ｘ５は、−Ｆ、−Ｃｌ、及び−Ｂｒからなる群から選択されるハロゲン原子である；
【化７】
2019194561.tif 000008
式ＶＩ及び式ＶＩＩにおいて、式中：
Ｒ１６、Ｒ１７、Ｒ２６及びＲ２７は、一置換又は二置換基であり、独立に、メトキシ基、ヒドロキシル基、アルキルスルホニル基からなる群から選択され；
Ｌ６及びＬ７は、Ｚ６及びＺ７が存在しない場合、各々、カルボニル、アルキレン、アルケニレン、及びアルキニル（ａｌｋｙｎｌ）からなる群から選択され；
Ｚ６及びＺ７は、各々、−Ｈ、−ＯＨ、置換スチレニル、芳香環、シクロアルキル、−ＣＯＲ３６、−ＣＯＮＲ３６Ｒ４６、及び−Ｃ（Ｘ６）３からなる群から選択され、
式中、Ｒ３６及びＲ４６は、各々、−Ｈ、−ＣＨ３、又は−Ｃｎ６Ｈ２ｎ６＋１、複素環式化合物、及びヘテロアリール部分からなる群から選択されるか；又はＲ３６及びＲ４６は一緒になって複素環式環を形成し；又は、
Ｚ６及びＺ７は、各々、ＣＯＯＲ６であり；式中、Ｒ６は、−Ｈ、−ＣＨ３、及び−Ｃｎ７Ｈ２ｎ７＋１からなる群から選択され；又は、
Ｚ６及びＺ７は、Ｙ７がＨでない場合、各々、シクロアルキルであり；
ｎ６及びｎ７は、独立に、２〜４の整数であり；
Ｘ６は、−Ｆ、−Ｃｌ、及び−Ｂｒからなる群から選択され；
Ｙ６及びＹ７は、Ｌがアルキレンであり、且つＺ６及びＺ７が−ＣＯＮＲ３７Ｒ４７（Ｒ３７及びＲ４７は、各々、−Ｈ、複素環式化合物（ｈｅｔｅｒｃｙｃｌｉｃ）、ヘテロアリール、及びシクロアルキルからなる群から選択される）である場合、各々、Ｈであるか；又は
Ｙ６及びＹ７は、各々、Ｃ１〜Ｃ３アルキル、−Ｆ、Ｃｌ、及びＢｒからなる群から選択される；及び
【化８】
2019194561.tif 000009
Ｒ１８及びＲ２８は一置換又は二置換基であり、独立に、メトキシ基、ヒドロキシル基、及びアルキルスルホニル基からなる群から選択され；
Ｒ３８は、
【化９】
2019194561.tif 000010
からなる群から選択され；及び
Ｒ４８は、ＣＨ３、Ｈ、Ｆ及びＣｌからなる群から選択され；及び
ｎ８は１又は２である。
【０００７】
本発明はまた、式Ｉ、ＩＩａ、ＩＩｂ、ＩＩｃ、ＩＩＩ、ＩＶ、Ｖ、ＶＩ、ＶＩＩ又はＶＩＩＩに係る化合物と、ＡＲ、ｃ−ＭＹＣ、オーロラＡ、突然変異型ｐ５３、ＣＤＫ４、又はＨｅｒ２から選択されるタンパク質の量を検出するための検出用分子、又は活性酸素種の量を検出するための検出用分子とを含むキットも提供する。
【０００８】
本発明はまた、アンドロゲン受容体関連病態を治療し得る候補化合物の同定方法も提供し、この方法は、アンドロゲン受容体関連病態に罹患している患者由来の試料に候補化合物を接触させること、及び試料中で候補化合物が、ＡＲ、ｃ−ＭＹＣ、オーロラ−Ａ、突然変異型ｐ５３、ＣＤＫ４、又はＨｅｒ２から選択されるタンパク質の量を減少させるかどうかを決定すること又は、化合物が、活性酸素種の量を増加させるかどうかを決定することを含み、ここで、タンパク質の減少又は活性酸素種の増加は、その候補化合物がアンドロゲン受容体関連病態を治療し得ることを示す。
【０００９】
本発明はまた、アンドロゲン受容体関連病態に罹患している患者由来の試料と、ＡＲ、ｃ−ＭＹＣ、オーロラＡ、突然変異型ｐ５３、ＣＤＫ４、又はＨｅｒ２から選択されるタンパク質の量を検出するための検出用分子又は活性酸素種の量を検出するための検出用分子とを含むキットも提供する。
【００１０】
本発明はまた、上述のとおりの方法によって同定される候補化合物も提供する。
【００１１】
以下の節に本発明を詳細に説明する。本発明の他の特徴、目的及び利点は、この詳細な説明及び特許請求の範囲に見出すことができる。
【図面の簡単な説明】
【００１２】
【図１】ＪＭ１７は、前立腺癌細胞株ＣＷＲ２２ＲＶ１において、ＡＲ及びｃ−Ｍｙｃタンパク質の低減を示した。ＡＲ、ＡＲ−Ｖ７、ｃ−ＭＹＣ及びＬＣ３のタンパク質発現は、ウエスタンブロッティングによって６時間（左）及び２４時間（右）についてＪＭ１７の用量系列（ｓｅｒｉａｌ  ｄｏｓｅｓ）で分析した。
【図２】ＪＭ１７は、ＡＲタンパク質分解を亢進させた。ＣＷＲ２２ＲＶ１細胞を、５μＭ  ＪＭ１７有り又は無しで、シクロヘキシミド（ＣＨＸ）によって処理し、指示時点で回収してウエスタンブロッティングにかけた。ＧＡＰＤＨに対して正規化したＡＲバンド強度の定量を右側に示す。
【図３】ＪＭ１７は、ｃ−ＭＹＣタンパク質分解を亢進させた。ＣＷＲ２２ＲＶ１細胞を５μＭ  ＪＭ１７有り又は無しでシクロヘキシミド（ＣＨＸ）によって処理し、そして、指示時点で回収して、ウエスタンブロッティングにかけた。ＧＡＰＤＨに対して正規化したｃ−ＭＹＣバンド強度の定量を右側に示す。
【図４】ＪＭ１７は、オーロラＡタンパク質分解を亢進させた。ＣＷＲ２２ＲＶ１細胞を、５μＭ  ＪＭ１７有り又は無しでシクロヘキシミド（ＣＨＸ）によって処理し、そして、指示時点で回収して、オーロラＡのウエスタンブロッティングにかけた。
【図５】ＪＭ１７は前立腺癌細胞においてＲＯＳ媒介性タンパク質分解を惹起した。ＣＷＲ２２ＲＶ１細胞をＤＭＳＯ対照又は１．２５、２．５、及び５μＭの用量のＪＭ１７によって処理した。ＪＭ１７を加えた後１０、３０、又は６０分でＲＯＳレベルを検出した（図５ａ）。ＡＲ、ＡＲ−Ｖ７、ｃ−Ｍｙｃ及びｐ６２の発現レベルを、ウエスタンブロットで検出した（図５ｂ）。
【図６】ＪＭ１７は、Ｈｅｒ２、ＡＲ、ｃ−ＭＹＣ、突然変異体ｐ５３及びＣＤＫ４に関するタンパク質発現の減少と合わせて、ＢＴ−４７４細胞成長を抑制した。ＪＭ１７は、４８時間の処理についてＢＴ−４７４の細胞成長を有意に低減した（図６ａ）。ＪＭ１７は、１μＭの用量で、Ｈｅｒ２、ＡＲ、ｃ−ＭＹＣ、突然変異体ｐ５３及びＣＤＫ４のタンパク質発現を減少させた（図６ｂ）。＊＊、ｐ＜０．０１、対照群との比較。
【図７】ＪＭ１７は、ＣＤＫ４タンパク質分解を亢進させた。ＭＤＡ−ＭＢ−２３１細胞を２．５μＭ  ＪＭ１７有り又は無しで、シクロヘキシミド（ＣＨＸ）によって処理し、そして、指示時点で回収して、ＣＤＫ４タンパク質に関するウエスタンブロッティングにかけた。
【図８】ＪＭ１７は、乳癌細胞株ＢＴ−４７４において、Ｈｅｒ２、ＡＲ、ｃ−Ｍｙｃ、ｐ５３、及びＣＤＫ４タンパク質の低減を示した。指示されるタンパク質の発現を、ＪＭ１７の用量系列で（ｓｅｒｉａｌ  ｄｏｓｅｓ）、ウエスタンブロッティングによって分析した。
【図９】ＪＭ１７は、乳房異種移植モデルの腫瘍成長を阻害した。ＢＴ−４７４腫瘍細胞をマウスに皮下接種した。ＪＭ１７は、５、２５又は４０ｍｇ／ｋｇで、毎日Ｉ．Ｐ．注射によって投与した。毎週、ノギスで腫瘍容積を測定した（左）。毎週、ＪＭ１７注射後に体重の変化をモニタした（右）。
【図１０】ＪＭ１７は、異種移植片のＨｅｒ２、ＡＲ、ｃ−ＭＹＣ、ｐ５３発現を低下させた。マウスの犠牲後、図６に記載されるとおり、指示抗体によるイムノブロッティングによって腫瘍のタンパク質発現を測定した。
【図１１】ＪＭ１７は、マウス異種移植モデルにおけるＭＤＡ−ＭＢ−２３１腫瘍の成長速度を有意に低減した。上のパネルは、ビヒクル（対照として）、５ｍｇ／ｋｇ又は２０ｍｇ／ｋｇのＪＭ１７によって週３回、２８日間治療した後の皮下腫瘍の平均サイズを示す。ＪＭ１７は、２０ｍｇ／ｋｇの用量で腫瘍サイズを有意に低減した。腫瘍は、ビヒクル、５ｍｇ／ｋｇ又は２０ｍｇ／ｋｇのＪＭ１７治療後２８日でタンパク質抽出のため単離した（下のパネル）。
【発明を実施するための形態】
【００１３】
１つ又は複数のバイオマーカーによる癌薬物感受性スクリーニングは、有効な癌治療向けの癌患者を選択するのに有用なツールである。
【００１４】
本発明は、式Ｉ、ＩＩａ、ＩＩｂ、ＩＩｃ、ＩＩＩ、ＩＶ、Ｖ、ＶＩ、ＶＩＩ又はＶＩＩＩに係る少なくとも１つの（置換フェニル）−プロペナール部分を有する化合物に反応し得る患者の選択方法を提供し、この方法は、化合物を患者由来の試料と接触させること、及び試料中で、化合物が、ＡＲ、ｃ−ＭＹＣ、オーロラＡ、突然変異型ｐ５３、ＣＤＫ４、又はＨｅｒ２から選択されるタンパク質の量を減少させるかどうか又は、化合物が、活性酸素種の量を増加させるかどうかを決定することを含み、ここでタンパク質の減少又は活性酸素種の増加は、患者がその化合物に反応し得ることを示す。
【００１５】
用語「（置換フェニル）−プロペナール部分」は、本明細書で使用されるとき、プロペナール部分（ｍが１に等しい場合）及びアルコキシ若しくはヒドロキシ部分、又はアルキル若しくは置換アルキル部分が結合したフェニル基を含む組成物を指す。
置換は、本明細書で使用されるとおり、プロペナール部分に対してメタ位又はパラ位又はオルト位に位置してもよく、そして、一般式
【化１０】
2019194561.tif 000011
（式中、ｑは、１、２、３又は４のいずれかの数であってもよく；及び、ｍは１、２、３、４、又はそれ以上のいずれかの数であってもよい）を指す。
【００１６】
用語「アルキル」は、本明細書で使用されるとき、例えば、メチル、エチル、ｎ−プロピル、１−メチルエチル（イソプロピル）、ｎ−ブチル、ｎ−ペンチル、１，１−ジメチルエチル（ｔ−ブチル）など、炭素及び水素原子のみからなり、不飽和を含まず、１〜１０個の炭素原子を有し、且つ単結合によって分子の残りの部分に結合する直鎖又は分枝状炭化水素鎖基を指す。
【００１７】
用語「アルケニル」は、本明細書で使用されるとき、例えば、エテニル、プロパ−１−エニル、ペンタ−１−エニル、ペンタ−１，４−ジエニルなど、炭素及び水素原子のみからなり、少なくとも１つの二重結合を含み、２〜１０個の炭素原子を有し、且つ単結合又は二重結合によって分子の残りの部分に結合する直鎖又は分枝状炭化水素鎖基を指す。
【００１８】
用語「アルケニレン」は、本明細書で使用されるとき、例えば、エテニレン、プロパ−１−エニレンなど、炭素間二重結合を含み、且つ式ＣｐＨ２ｐ−２（式中、水素は更なる炭素間二重結合又は一価置換基に置き換えられてもよい）によって表される直鎖又は分枝状炭化水素鎖を指す。
【００１９】
用語「アルコキシ」は、本明細書で使用されるとき、式−ＯＲ（式中、Ｒは、アルキル、ハロアルキル又はシクロアルキルである）を有する基を指す。
「置換されていても良いアルコキシ」とは、式−ＯＲ’（式中、Ｒ’は、本明細書に記載されるとおりの置換されていても良いアルキルである）を有する基を指す。
【００２０】
用語「アルキニル（ａｌｋｙｎｌ）」は、本明細書で使用されるとき、例えば、エチニル、プロパ−１−イニル、ブタ−１−イニル、ペンタ−１−イニル、ペンタ−３−イニルなど、炭素及び水素原子のみからなり、少なくとも１つの三重結合を含み、２〜１０個の炭素原子を有し、且つ単結合又は三重結合によって分子の残りの部分に結合する直鎖又は分枝状炭化水素鎖基を指す。
【００２１】
用語「アリール」は、本明細書で使用されるとき、環のうちの少なくとも１つが芳香族である炭素環式環系基を指す。アリールは完全に芳香族であってもよく、又は芳香環を非芳香環との組み合わせで含んでもよい。
「ビアリール系」は、少なくとも２つのアリール基を含む化合物である。
【００２２】
用語「シクロアルキル」は、本明細書で使用されるとき、例えば、シクロプロピル、シクロブチル、シクロペンチル、シクロヘキシルなど、炭素及び水素原子のみからなり、３〜１０個の炭素原子を有し、且つ飽和していて単結合によって分子の残りの部分に結合する安定した一価の単環式又は二環式炭化水素基を指す。
【００２３】
用語「ジケトン架橋」、又は「ケトン−エノール架橋」は、本明細書で使用されるとき、それぞれ、２個のケトンを含むか、又はケトンにごく近接して位置するエノールを含む直鎖又は分枝状炭化水素鎖を指す。
「ジケトン架橋」又は「ケトン−エノール架橋」は、少なくとも２つのアリール部分の間に位置する。
【００２４】
用語「ヒドロキシアルキル」は、本明細書で使用されるとき、例えば、−ＣＨ２ＯＨ、−（ＣＨ２）２ＯＨなど、１〜１０個の炭素原子を有する、直鎖又は分枝状ヒドロキシ置換炭化水素鎖基を指す。
【００２５】
式Ｉの化合物を以下に示す：
【化１１】
2019194561.tif 000012
式Ｉにおいて、式中：
Ｒ３１及びＲ４１は、各々独立に、アルコキシ、ヒドロキシ、及び水素からなる群から選択され；及び
Ｘ１は、ヒドロキシ、アルコキシ、プロピオン酸エチル、炭酸エチルメチル、及びカルボニルアルキルからなる群から選択される。
【００２６】
一部の実施形態において、本化合物は、モノマー１、３、５、６及び７からなる群から選択される式を有する。これらのモノマーを以下に提供する：
【化１２】
2019194561.tif 000013
【００２７】
様々な実施形態において、生物学的活性を有する上記に参照されるモノマーの誘導体もまた提供される。誘導体は、活性、溶解度などの１つ以上の特性を増加させるため、１つ以上の位置に置換を有し得る。
かかる誘導体は、化合物の双極子モーメントを調整し得るとともに、疎水性又は親水性がより高い又はより低い組成物をもたらし得る。
【００２８】
式ＩＩａ及び式ＩＩｂの化合物を以下に示す：
【化１３】
2019194561.tif 000014
式ＩＩａ及び式ＩＩｂにおいて、式中：
Ｒ３２、Ｒ４２、Ｒ３２’、及びＲ４２’は、独立に、−Ｈ、−ＯＨ、及び−ＯＣＨ３からなる群から選択され；
Ｌ２は、Ｃ０〜Ｃ８アルキレンであるか；又はＬ２は、Ｚ２がないとき、不飽和アルケニレン又はアルキニル（ａｌｋｙｎｌ）であり；
Ｚ２は、−Ｈ、−ＯＨ、芳香環、シクロアルキル、−ＣＯＲ１２、−ＣＯ２Ｒ１２、−ＣＯＮＲ１２Ｒ２２、−ＮＲ１２Ｒ２２、−Ｃ（Ｘ２）３からなる群から選択され、
式中、Ｒ１２及びＲ２２は、独立に、−Ｈ、−ＣＨ３、及び−Ｃ２Ｈ５からなる群から選択され；及び
Ｘ２は、−Ｆ、−Ｃｌ、及び−Ｂｒからなる群から選択されるハロゲン原子であり；及び
更に式中、
式ＩＩａ及びＩＩｂは、ジケトンの共通の現象として平衡互変異性体である。
【００２９】
一部の実施形態において、本化合物は、ＩＩ−１、ＩＩ−２、ＩＩ−３、ＩＩ−４及びＩＩ−５からなる群から選択される。
式は以下である：
【化１４】
2019194561.tif 000015
【００３０】
式ＩＩｃの化合物を以下に示す：
【化１５】
2019194561.tif 000016
式ＩＩｃにおいて、式中：
Ｒ７２、Ｒ８２、Ｒ７２’、及びＲ８２’は、独立に、−Ｈ、−ＯＨ、及び−ＯＣＨ３からなる群から選択され；及び
Ｒ５２、及びＲ６２は、独立に、−Ｈ、−ＣＨ３、−Ｃ２Ｈ５、置換アリール及び置換ベンジル基からなる群から選択される。
【００３１】
式ＩＩＩの化合物を以下に示す：
【化１６】
2019194561.tif 000017
式ＩＩＩにおいて、式中：
Ｒ３３、Ｒ４３、Ｒ３３’、Ｒ４３’、Ｒ３３’’、及びＲ４３’’は、各々独立に、アルコキシ、ヒドロキシ、及び水素からなる群から選択される。
【００３２】
一部の実施形態において、本化合物は式ＩＩＩ−１又はＩＩＩ−２を含み、これは以下である：
【化１７】
2019194561.tif 000018
【００３３】
式ＩＶの化合物を以下に示す：
【化１８】
2019194561.tif 000019
式ＩＶにおいて、式中：
Ｒ３４、Ｒ４４、Ｒ３４’、Ｒ４４’、Ｒ３４’’、Ｒ４４’’、Ｒ３４’’’、及びＲ４４’’’は、各々独立に、アルコキシ、ヒドロキシ、及び水素からなる群から選択される。
【００３４】
一部の実施形態において、本化合物は式ＩＶ−１を含む：
【化１９】
2019194561.tif 000020
【００３５】
式Ｖの化合物を以下に示す：
【化２０】
2019194561.tif 000021
式Ｖにおいて、式中：
各「ｎ５」は、独立に、１、２、又は３であり；
Ｒ３５、Ｒ４５、Ｒ３５’、及びＲ４５’は、独立に、−Ｈ、−ＯＨ、及び−ＯＣＨ３からなる群から選択され；
Ｌ５−Ｚ５は存在しないか；又は
Ｌ５−Ｚ５は存在し、及びＬ５は、Ｚ５が存在しない場合、Ｃ０〜Ｃ８アルキレン、不飽和アルケニレン、及びアルキニル（ａｌｋｙｎｌ）からなる群から選択され；
Ｚ５は、−Ｈ、−ＯＨ、芳香環、シクロアルキル、−ＣＯＲ１５、−ＣＯ２Ｒ１５、−ＣＯＮＲ１５Ｒ２５、−ＮＲ１５Ｒ２５、−Ｃ（Ｘ５）３からなる群から選択され；
Ｒ１５及びＲ２５は、独立に、−Ｈ、−ＣＨ３、及び−Ｃ２Ｈ５からなる群から選択され；及び
Ｘ５は、−Ｆ、−Ｃｌ、及び−Ｂｒからなる群から選択されるハロゲン原子である。
【００３６】
一部の実施形態において、式Ｖ−１又はＶ−２に係る化合物が提供される：
【化２１】
2019194561.tif 000022
【００３７】
式ＶＩ及び式ＶＩＩの化合物を以下に示す：
【化２２】
2019194561.tif 000023
式ＶＩ及び式ＶＩＩにおいて、式中：
Ｒ１６、Ｒ１７、Ｒ２６及びＲ２７は一置換又は二置換基であり、独立に、メトキシ基、ヒドロキシル基、アルキルスルホニル基からなる群から選択され；
Ｌ６及びＬ７は、Ｚ６及びＺ７が存在しない場合、各々、カルボニル、アルキレン、アルケニレン、及びアルキニル（ａｌｋｙｎｌ）からなる群から選択され；
Ｚ６及びＺ７は、各々、−Ｈ、−ＯＨ、置換スチレニル、芳香環、シクロアルキル、−ＣＯＲ３６、−ＣＯＮＲ３６Ｒ４６、及び−Ｃ（Ｘ６）３からなる群から選択され、
式中、Ｒ３６及びＲ４６は、各々、−Ｈ、−ＣＨ３、又は−Ｃｎ６Ｈ２ｎ６＋１、複素環式化合物、及びヘテロアリール部分からなる群から選択されるか；又は
Ｒ３６及びＲ４６は一緒になって複素環式環を形成し；又は
Ｚ６及びＺ７は、各々、ＣＯＯＲ６であり；式中、Ｒ６は、−Ｈ、−ＣＨ３、及び−Ｃｎ７Ｈ２ｎ７＋１からなる群から選択され；又は
Ｚ６及びＺ７は、Ｙ７がＨでない場合、各々、シクロアルキルであり；
ｎ６及びｎ７は、独立に、２〜４の整数であり；
Ｘ６は、−Ｆ、−Ｃｌ、及び−Ｂｒからなる群から選択され；
Ｙ６及びＹ７は、Ｌがアルキレンであり、且つＺ６及びＺ７が−ＣＯＮＲ３７Ｒ４７（Ｒ３７及びＲ４７は、各々、−Ｈ、複素環式化合物（ｈｅｔｅｒｃｙｃｌｉｃ）、ヘテロアリール、及びシクロアルキルからなる群から選択される）である場合、各々、Ｈであるか；又は
Ｙ６及びＹ７は、各々、Ｃ１〜Ｃ３アルキル、−Ｆ、Ｃｌ、及びＢｒからなる群から選択される。
【００３８】
式ＶＩＩＩの化合物を以下に示す：
【化２３】
2019194561.tif 000024
Ｒ１８及びＲ２８は一置換又は二置換基であり、そして、独立に、メトキシ基、ヒドロキシル基、及びアルキルスルホニル基からなる群から選択され；
Ｒ３８は、
【化２４】
2019194561.tif 000025
からなる群から選択され；及び
Ｒ４８は、ＣＨ３、Ｈ、Ｆ及びＣｌからなる群から選択され；及び
ｎ８は１又は２である。
【００３９】
本発明の一つの好ましい実施形態において、４，４−二置換１，７−ビス−（３，４−ジメトキシフェニル）−ヘプタ−１，６−ジエン−３，５−ジオン及び６，６−二置換１，１１−ビス（置換フェニル）−ウンデカ−１，３，８，１０−テトラエン−５，７−ジオン足場を含む化合物は、表１に示されるとおりである。
【００４０】
【表１】
2019194561.tif 000026
2019194561.tif 000027
【００４１】
本発明の一つのより好ましい実施形態において、本化合物は、式ＶＩＩＩであり、及びＲ１８は、３’４’−ＯＣＨ３であり；Ｒ２８は３’４’−ＯＣＨ３であり；Ｒ３８は
【化２５】
2019194561.tif 000028
であり；Ｒ４８はＦであり；及びｎ８は１であり、ＪＭ１７と称される。
【００４２】
本発明の一実施形態において、患者はアンドロゲン受容体関連病態に罹患している。
【００４３】
用語「アンドロゲン」は、本明細書で使用されるとき、テストステロン及びジヒドロテストステロン（ＤＨＴ）などのアンドロゲンホルモンを指す。
ＤＨＴは、５−α−レダクターゼ酵素による変換されたテストステロン産物である。
アンドロゲンは、アンドロゲン受容体に結合し、次にはこれがアンドロゲン／ＡＲ制御遺伝子（ＤＮＡ）に結合して、この遺伝子を活性化又は調整することにより、脊椎動物において男性的な特徴の発達及び維持並びに他の生理学的機能を刺激又は制御する。
【００４４】
本明細書で使用されるとおりの用語「アンドロゲン受容体」又は「ＡＲ」は、テストステロン及びＤＨＴを含め、アンドロゲンに特異的に結合する細胞内受容体を指す。ＡＲには、アンドロゲン受容体のあらゆる哺乳類アイソフォーム、スプライス変異体及び多型が含まれる。
【００４５】
本発明の一実施形態において、アンドロゲン受容体関連病態は、炎症、ざ瘡、脱毛症、多毛症、創傷、球脊髄性筋萎縮症（ＳＢＭＡ、ケネディ病）、望ましくない免疫応答、免疫障害、又は癌から選択される。
【００４６】
好ましくは、癌は、前立腺癌、肝癌、膀胱癌、子宮頸癌、肺癌及び乳癌、皮膚癌、小細胞肺癌、精巣癌、リンパ腫、白血病、食道癌、胃癌、結腸癌、子宮内膜癌、卵巣癌、中枢神経系癌などから選択される。
【００４７】
本発明によれば、本化合物に反応し得る選択された患者において、本化合物は腫瘍細胞に対する細胞傷害性を誘導してもよく、又は腫瘍細胞成長を阻害してもよい。
一部の実施形態では、本化合物に反応し得る選択された患者において、本化合物の活性は、任意選択でＤＨＴなどの刺激物質で刺激された、癌細胞成長又は増殖を阻害する。
【００４８】
他の実施形態では、本化合物に反応し得る選択された患者において、本化合物、その誘導体、医薬組成物などを使用して、ケネディ病など、神経障害及び神経筋障害からの症状が予防、治療又は改善される。
球脊髄性筋萎縮症（ＳＢＭＡ）、又はケネディ病は、性別特異的運動ニューロン疾患であり、４０，０００人に１人の男性に発症する（（非特許文献２）によってレビューされている）。
ＳＢＭＡ患者は、伸長したポリグルタミントラクト（ｅｘｐａｎｄｅｄ  ｐｏｌｙｇｌｕｔａｍｉｎｅ  ｔｒａｃｔ）を含む突然変異型のアンドロゲン受容体を有する。
伸長したポリグルタミンアンドロゲン受容体は、細胞機能を妨げる凝集物を形成し、そして、ＳＢＭＡに伴う近位筋萎縮を引き起こす要因である。
本化合物に反応し得る選択された患者において、本化合物は、細胞の天然ハウスキーピング機構によってより容易に管理し得るレベルまで、突然変異体ＡＲの量を減少させることにより、凝集物形成によって引き起こされるストレスを軽減することを含んでもよい。
本化合物に反応し得る選択された患者において、本化合物は、アンドロゲン受容体を選択的に分解することを含んでもよく、そして、ひいてはＳＢＭＡに対する療法薬として使用されてもよい。
本化合物に反応し得る選択された患者において、アンドロゲン受容体分解を亢進させることのできる本化合物は、受容体の定常状態レベルを抑制してもよく、ひいては患者の凝集物形成の重症度を軽減し得る。
【００４９】
本化合物に反応し得る選択された患者において、本化合物は、アンドロゲン関連毛髪障害からの症状を、予防、治療又は改善し得る。例えば、アンドロゲン性脱毛症又は「男性型禿頭症」は、毛嚢及び隣接細胞のアンドロゲン受容体に対するアンドロゲン活性によって引き起こされる脱毛である。別の例として、多毛症は、通常女性では発毛が最小限であるか又はない部位に色の濃い太い毛髪が過剰に成長するものである。
終毛性の体毛のかかる男性型の成長は、通常、顔面、胸部、及び乳輪など、アンドロゲンの刺激を受ける部位に起こる。
【００５０】
本化合物に反応し得る選択された患者において、本化合物は、炎症（例えば関節リウマチ）、ざ瘡、脱毛症を治療してもよく、及び創傷治癒を加速させることができる。
ざ瘡は、皮脂腺のアンドロゲン誘導性ＡＲ活性化によって引き起こされ、従ってＡＲ活性化を防ぐ又は低下させる能力を有する化合物を投与することによって治療し得る。
本発明の化合物は、アンドロゲン受容体の分解を誘導すると考えられ、ひいてはかかる病態に対する有効な治療を提供し得る。アンドロゲン性脱毛症及び他の発毛障害は、毛包のアンドロゲン受容体（ＡＲ）が内因性アンドロゲンによって活性化すると引き起こされることが知られている。ある種の炎症病態及び創傷治癒もまた、アンドロゲンに応答したアンドロゲン受容体に関連すると考えられている。
【００５１】
本化合物に反応し得る選択された患者において、本化合物は内分泌障害の治療に使用されてもよい。アンドロゲン過剰は、女性における最も一般的な内分泌障害の一つである（（非特許文献３）によってレビューされている）。
この病態生理学的状態は、多嚢胞性卵巣症候群（ＰＣＯＳ）、下垂体腺腫誘導性高プロラクチン血症、クッシング症候群、先天性副腎過形成、非古典的副腎過形成、卵巣又は副腎腫瘍、及び医原性アンドロゲン過剰を含め、様々な内分泌障害を有する女性に認めることができる。
これらの障害の中でも、生殖年齢の女性の５〜１０％に発生するＰＣＯＳは、高アンドロゲン症の最も多く同定されている原因である。
最近になって、閉経後女性で循環アンドロゲンの循環エストロゲンに対する比（男性化作用（ａｎｄｒｏｇｅｎｉｃｉｔｙ）と呼ばれる）の相対的な増加が観察されている（非特許文献４）。
男性化作用は、閉経後にアンドロゲン合成と比べてエストラジオール及びエストロン合成が大幅に減少する結果であり、その臨床的意味については活発に研究されているところである。
明らかにされているところによれば、男性化作用を呈する女性は中心性肥満（ｃｅｎｔｒａｌ  ｏｂｅｓｉｔｙ）を伴うことが高頻度に見られる（非特許文献５）。
腹壁への脂肪沈着は代謝的に活性であり、末梢組織のインスリン抵抗性に関連する（非特許文献６）。
上述の内分泌異常以外にも、高アンドロゲン症状はまた、リポジストロフィー症候群を示す、ヒト免疫不全ウイルス（ＨＩＶ）感染女性に認められることもある（非特許文献７）。
後者の患者群に観察される脂質異常（ｌｉｐｉｄ  ａｂｅｒｒａｔｉｏｎｓ）に高アンドロゲン症が関与し得ることが示唆されている。
【００５２】
本発明に係る方法は、化合物を患者由来の試料と接触させることを含む。
試料の例としては、限定はされないが、生検、血液、組織、尿、細胞、排泄物、又は組織液分泌物が挙げられる。好ましくは、試料は癌の生検に由来する。
【００５３】
本方法は、化合物を患者由来の試料と接触させること、及び試料中で化合物がＡＲ、ｃ−ＭＹＣ、オーロラＡ、突然変異型ｐ５３、ＣＤＫ４、又はＨｅｒ２から選択されるタンパク質の量を減少させるかどうか又は、化合物が活性酸素種の量を増加させるかどうかを決定することを含み、ここで、タンパク質の減少又は活性酸素種の増加は、患者がその化合物に反応し得ることを示す。好ましくは、本方法は、化合物がタンパク質の分解を亢進させるかどうかを決定することを含む。
【００５４】
タンパク質又は活性酸素種の量を決定する方法としては、限定はされないが、ウエスタンブロッティング、免疫沈降、又は分光学的手順が挙げられる。好ましくは、方法は抗体−抗原親和性に基づく。
【００５５】
実施例に示されるとおり、ＪＭ１７は、インビトロで前立腺癌細胞におけるＲＯＳ媒介性経路を通じたＡＲ、ｃ−ＭＹＣ及びオーロラＡタンパク質分解を亢進させる（図１〜図５）。ＡＲ、ｃ−ＭＹＣ及びオーロラＡだけでなく、ＣＤＫ４、突然変異体ｐ５３及びＨｅｒ２もまた、インビトロでＢＴ−４７４細胞（トリプルポジティブ乳癌細胞株）においてＪＭ１７処理によって分解された（図６）。
ＪＭ１７によってＣＤＫ４タンパク質の半減期が短くなるかどうかに取り組むため、シクロヘキシミドを適用してタンパク質合成を遮断した。結果は、ＪＭ１７がＭＤＡ−ＭＢ−２３１細胞（トリプルネガティブ乳癌細胞株）においてＣＤＫ４タンパク質の半減期を有意に低減したことを示している（図７）。
【００５６】
乳癌異種移植モデルによれば、ＪＭ１７は、異種移植片におけるＡＲ及びｃ−ＭＹＣのタンパク質発現を低減することに加えて、ＭＤＡ−ＭＢ−２３１細胞（トリプルネガティブ乳癌細胞株（ａ  ｔｒｉｐｌｅ  ｎｅｇａｔｉｖｅ  ｂｒｅａｓｔ  ｃａｎｃｅｒ  ｃｅｌｌ  ｌｉｎｅ））の腫瘍成長を低下させる（図１１）。
【００５７】
本発明はまた、式Ｉ、ＩＩａ、ＩＩｂ、ＩＩｃ、ＩＩＩ、ＩＶ、Ｖ、ＶＩ、ＶＩＩ又はＶＩＩＩに係る化合物と、ＡＲ、ｃ−ＭＹＣ、オーロラＡ、突然変異型ｐ５３、ＣＤＫ４、又はＨｅｒ２から選択されるタンパク質の量を検出するための検出用分子又は活性酸素種の量を検出するための検出用分子とを含むキットも提供する。
【００５８】
好ましくは、検出用分子は、ＡＲ、ｃ−ＭＹＣ、オーロラＡ、突然変異型ｐ５３、ＣＤＫ４、若しくはＨｅｒ２又は活性酸素種に特異的な抗体である。
【００５９】
本発明はまた、アンドロゲン受容体関連病態を治療し得る候補化合物の同定方法も提供し、この方法は、アンドロゲン受容体関連病態に罹患している患者由来の試料に候補化合物を接触させること、及び試料中で、候補化合物がＡＲ、ｃ−ＭＹＣ、オーロラＡ、突然変異型ｐ５３、ＣＤＫ４、又はＨｅｒ２から選択されるタンパク質の量を減少させるかどうかを決定すること又は、化合物が活性酸素種の量を増加させるかどうかを決定することを含み、ここでタンパク質の減少又は活性酸素種の増加は、その候補化合物が癌などのアンドロゲン受容体関連病態を治療し得ることを示す。好ましくは、アンドロゲン受容体は、指示されるタンパク質である。
【００６０】
本発明はまた、アンドロゲン受容体関連病態に罹患している患者由来の試料と、ＡＲ、ｃ−ＭＹＣ、オーロラＡ、突然変異型ｐ５３、ＣＤＫ４、又はＨｅｒ２から選択されるタンパク質の量を検出するための検出用分子、又は活性酸素種の量を検出するための検出用分子とを含むキットも提供する。
【００６１】
本発明はまた、上述のとおりの方法によって同定される候補化合物も提供する。
【００６２】
以下の実施例は、当業者が本発明を実施する助けとなるように提供される。
【実施例】
【００６３】
ＪＭ１７は、ＡＲ及びｃ−ＭＹＣの両方のタンパク質分解を亢進させる。
ＮＣＩ−６０細胞株スクリーニングにより、ＩＣ５０が約５μＭ前後であると決定された。
本発明者らはまた、それぞれ５及び２．５μＭで、６時間処理した選択された前立腺癌細胞株における、ＡＲ及びｃ−ＭＹＣの両方のタンパク質レベルに及ぼすＪＭ１７の効果についても研究した（図１）。
【００６４】
ＪＭ１７処理後のＡＲ及びｃ−ＭＹＣタンパク質の低下が、タンパク質分解に起因するかどうかを証明するために、本発明者らは、タンパク質合成を遮断するシクロヘキシミドを使用して、ＣＷＲ２２ＲＶ１（前立腺癌細胞）で「ターンオーバー」実験を実施した。
ＤＭＳＯのビヒクル対照と比較して、ＪＭ１７は、ＡＲタンパク質の半減期を、１２時間から６時間に（図２）、及びｃ−ＭＹＣタンパク質の半減期を約４５分から約８分に（図３）有意に低減した。
ＡＲ及びｃ−ＭＹＣに加え、本発明者らはまた、ＪＭ１７がオーロラＡタンパク質分解を亢進させたことも実証した（図４）。
【００６５】
ＪＭ１７は、前立腺癌細胞においてＲＯＳ媒介性タンパク質分解を惹起した。
前立腺癌細胞株である、ＣＷＲ２２ＲＶ１細胞を、ＤＭＳＯ対照又は、１．２５、２．５、及び５μＭの用量のＪＭ１７によって処理した。
次に、ＪＭ１７を加えた後、１０、３０、又は６０分で、ＲＯＳレベルを検出した。
結果は図５に示す。ＤＭＳＯ対照と比較して、ＪＭ１７は、ＲＯＳを、６０分以内に誘導した（図５ａ）。
ＮＡＣ（ＲＯＳスカベンジャー、５ｍＭ）の有り又は無しで、ＪＭ１７（５μＭ）によって共処理した後、ＡＲ、ＡＲ−Ｖ７、ｃ−Ｍｙｃ及びｐ６２の発現レベルをウエスタンブロットで検出した。
ＪＭ１７媒介性タンパク質分解は、ＮＡＣによって遮断された（図５ｂ）。
【００６６】
ＪＭ１７は、Ｈｅｒ２、ＡＲ、ｃ−ＭＹＣ、突然変異体ｐ５３及びＣＤＫ４に関するタンパク質発現の減少と合わせて、ＢＴ−４７４細胞成長を抑制した。
図６に示されるとおり、ＪＭ１７は、４８時間処理についてトリプルポジティブ乳癌細胞株ＢＴ−４７４の細胞成長を有意に低減した（図６ａ）。
ＪＭ１７は、１μＭの用量で、Ｈｅｒ２、ＡＲ、ｃ−ＭＹＣ、突然変異体ｐ５３及びＣＤＫ４のタンパク質発現を低下させた（図６ｂ）。
【００６７】
ＪＭ１７は、ＣＤＫ４タンパク質分解を亢進させた。
ＭＤＡ−ＭＢ−２３１細胞を、２．５μＭのＪＭ１７有り又は無しで、シクロヘキシミド（ＣＨＸ）によって処理し、そして、指示時点で回収して、ＣＤＫ４タンパク質についてのウエスタンブロッティングにかけた。
ＧＡＰＤＨに対して正規化した、ＣＤＫ４バンド強度の定量を計算した。
図７に示されるとおり、ＪＭ１７は、１２時間処理時点で、ＣＤＫ４タンパク質分解を有意に亢進させた。
【００６８】
ＪＭ１７は、乳癌異種移植モデルにおいて腫瘍成長を抑制した。
ＪＭ１７の適用を他の癌型に広げるため、ＡＲ発現を有するトリプルポジティブ乳癌細胞株である、乳癌細胞株ＢＴ−４７４で、ＪＭ１７誘導性タンパク質分解を特徴付けた。
ＡＲ及びｃ−ＭＹＣに加え、イムノブロッティング結果は、ＪＭ１７が、Ｈｅｒ２、ｐ５３、及びＣＤＫ４タンパク質発現もまた低減したことを示した（図８）。
【００６９】
抗癌剤としての、ＪＭ１７を更に調べるため、本発明者らは、皮下乳癌異種移植モデルにおいて、ＪＭ１７の抗腫瘍有効性を推定した。
ＢＴ−４７４腫瘍担持マウスのビヒクル対照と比較して、低用量（５ｍｇ／ｋｇ）及び高用量（４０ｍｇ／ｋｇ）の両方のＪＭ１７治療群で、３週時の腫瘍容積が減少した（図９、左）。
一方、両方のＪＭ１７群とも体重の増加を示したが、これは、ＪＭ１７が、５ｍｇ／ｋｇでも４０ｍｇ／ｋｇでも、何ら毒性の重大な問題を有しなかったことを意味する（図９、右）。
【００７０】
マウスの犠牲後、指示抗体によるイムノブロッティングによって、腫瘍のタンパク質発現を測定した（図１０）。
【００７１】
ＪＭ１７が、マウス異種移植モデルにおけるＭＤＡ−ＭＢ−２３１腫瘍の成長速度に及ぼす効果も、また図１１に示す。
上のパネルは、ビヒクル（対照として）、５ｍｇ／ｋｇ又は２０ｍｇ／ｋｇのＪＭ１７によって、週３回、２８日間治療した後の皮下腫瘍の平均サイズを示す。
ＪＭ１７は、２０ｍｇ／ｋｇの用量で、腫瘍サイズを有意に低減した。
腫瘍は、ビヒクル、５ｍｇ／ｋｇ又は２０ｍｇ／ｋｇのＪＭ１７治療後２８日で、タンパク質抽出のため単離した（下のパネル）。
ＪＭ１７は、腫瘍試料中のＡＲ及びｃ−ＭＹＣ発現を減少させた。
【００７２】
本発明は、上記に示す具体的な実施形態と併せて記載されているが、当業者には、多数のその代替例並びにその改良例及び変形例が明らかであろう。
かかる代替例、改良例及び変形例は全て、本発明の範囲内に含まれるものと見なされる。
【図１】
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【図２】
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【図３】
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【図４】
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【図５】
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【図６】
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【図７】
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【図８】
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【図９】
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【図１０】
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【図１１】
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【外国語明細書】
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