(57)【要約】  本発明は、好ましくは、例えば噴霧乾燥粉末又は凍結乾燥粉末などの粉末状組成物であって、抗体又は抗体誘導体と、1,4 O-結合型D-gal-サッカロース（ラクトスクロース）、1,4 O-結合型D-glu-サッカロース（グルコシルスクロース）又は1,4 O-結合型glu-glu-サッカロース（マルトシルスクロース）から選択される1,4 O-結合型サッカロース誘導体１種以上とを含む組成物に関する。好ましくは、ラクトスクロース又はグルコシルスクロースとマルトシルスクロースとの混合物を含む組成物である。【特許請求の範囲】
【請求項１】
少なくとも１種の抗体又は１種の抗体誘導体と、1,4 O-結合型D-gal-サッカロース（ラクトスクロース）、1,4 O-結合型D-glu-サッカロース（グルコシルスクロース）又は1,4 O-結合型glu-glu-サッカロース（マルトシルスクロース）から選択される1,4 O-結合型サッカロース誘導体の１種以上とを含む組成物。
【請求項２】
前記組成物が、1,4 O-結合型サッカロース誘導体としてラクトスクロースを含むことを特徴とする請求項１記載の組成物。
【請求項３】
前記組成物が、さらに単糖類、ニ糖類及び／又は多糖類の１種以上を含むことを特徴とする請求項２記載の組成物。
【請求項４】
前記組成物が、さらにラクトース及びサッカロースを含むことを特徴とする請求項３記載の組成物。
【請求項５】
前記ラクトスクロース分が、前記組成物に含まれる糖分に対して少なくとも55質量％になることを特徴とする請求項２〜４のいずれか１項記載の組成物。
【請求項６】
前記組成物が、グルコシルスクロースとマルトシルスクロースとの混合物を含むことを特徴とする請求項１記載の組成物。
【請求項７】
前記組成物が、さらに単糖類、ニ糖類及び／又は多糖類１種以上を含むことを特徴とする請求項６記載の組成物。
【請求項８】
前記組成物が、さらにフルクトース、グルコース及び／又はサッカロースを含むことを特徴とする請求項７記載の組成物。
【請求項９】
グルコシルスクロース及びマルトシルスクロースの合計が、前記組成物に含まれる糖分に対して少なくとも25質量％になることを特徴とする請求項６〜８のいずれか１項記載の組成物。
【請求項１０】
グルコシルスクロース及びマルトシルスクロースそれぞれが、前記組成物に含まれる糖分に対して少なくとも18質量％になることを特徴とする請求項９記載の組成物。
【請求項１１】
少なくとも１種の1,4 O-結合型サッカロース誘導体を含む前記糖分が、前記組成物の乾燥質量の25〜99.99質量％になることを特徴とする請求項１〜１０のいずれか１項記載の組成物。
【請求項１２】
前記抗体又は抗体誘導体分が、前記組成物の乾燥質量の0.01〜75質量％となり、かつ、質量パーセントの合計が最大100質量％となることを特徴とする請求項１〜１１のいずれか１項記載の組成物。
【請求項１３】
前記組成物が、乾燥質量基準で60〜90質量％の糖分と40質量％までの抗体又は抗体誘導体とを含み、それによってラクトスクロース、マルトシルスクロース及び／又はグルコシルスクロース分が前記組成物の乾燥質量に対して少なくとも20質量％となり、かつ、質量パーセントの合計が最大100質量％となることを特徴とする請求項１〜１２のいずれか１項記載の組成物。
【請求項１４】
前記組成物が、医薬的に適合するアジュバント１種以上及び／又は塩１種以上を含むことを特徴とする請求項１〜１３のいずれか１項記載の組成物。
【請求項１５】
前記アジュバントがアミノ酸又はペプチドであることを特徴とする請求項１４記載の組成物。
【請求項１６】
前記アミノ酸が、イソロイシンであることを特徴とする請求項１５記載の組成物。
【請求項１７】
前記ペプチドが、ジペプチド又はトリペプチドであることを特徴とする請求項１５記載の組成物。
【請求項１８】
前記ペプチドが、イソロイシン含有ペプチドであることを特徴とする請求項１５記載の組成物。
【請求項１９】
前記ペプチドが、ジイソロイシン又はトリイソロイシンであることを特徴とする請求項１７又は１８記載の組成物。
【請求項２０】
前記組成物が、乾燥質量基準で60〜99質量％の少なくとも１種の1,4 O-結合型サッカロース誘導体又は少なくとも１種の1,4 O-結合型サッカロース誘導体を含む糖混合物と、１〜40質量％のイソロイシンとを含有することを特徴とする請求項１６記載の組成物。
【請求項２１】
前記組成物が、乾燥質量基準で60〜99質量％の少なくとも１種の1,4 O-結合型サッカロース誘導体又は少なくとも１種の1,4 O-結合型サッカロース誘導体を含む糖混合物と、１〜40質量％のペプチドを含有することを特徴とする請求項１７〜２０のいずれか１項記載の組成物。
【請求項２２】
前記組成物が、水溶液、半固体製剤又は粉末であることを特徴とする請求項１〜２１のいずれか１項記載の組成物。
【請求項２３】
前記粉末中の粒子のＭＭＤが、１〜10μｍであることを特徴とする請求項２２記載の粉末。
【請求項２４】
前記粉末中の粒子のＭＭＡＤが１〜５μｍであることを特徴とする請求項２２又は２３記載の粉末。
【請求項２５】
請求項２２〜２４のいずれか１項記載の粉末の製造方法であって、
ａ）抗体又は抗体誘導体を水溶液／懸濁液に溶解／懸濁し、
ｂ）ラクトスクロース、グルコシルスクロース又はマルトシルスクロースから選択される1,4 O-結合型サッカロース誘導体の１種以上、あるいは、これらの1,4 O-結合型サッカロース誘導体の少なくとも１種を含有する糖混合物を水溶液／懸濁液に溶解／懸濁し、
ｃ）抗体又は抗体誘導体と、1,4 O-結合型サッカロース誘導体又は少なくとも１種の1,4 O-結合型サッカロース誘導体を含む糖混合物とが異なる溶液／懸濁液に溶解／懸濁している場合は、それらを混合し、
ｄ）抗体又は抗体誘導体と1,4 O-結合型サッカロース誘導体の１種以上とを含む溶液／懸濁液を乾燥させることを特徴とする、粉末の製造方法。
【請求項２６】
前記乾燥工程が凍結乾燥又は噴霧乾燥であることを特徴とする請求項２５記載の方法。
【請求項２７】
前記1,4 O-結合型サッカロース誘導体がラクトスクロースであることを特徴とする請求項２５又は２６記載の方法。
【請求項２８】
前記溶液又は懸濁液が、さらに単糖類、ニ糖類又は多糖類の１種以上を含むことを特徴とする請求項２７記載の方法。
【請求項２９】
前記乾燥用溶液が、さらにラクトース及びサッカロースを含むことを特徴とする請求項２８記載の方法。
【請求項３０】
ラクトスクロース分が、前記乾燥用溶液中に存在する糖分の少なくとも55質量％になることを特徴とする請求項２７〜２９のいずれか１項記載の方法。
【請求項３１】
前記1,4 O-結合型サッカロース誘導体が、グルコシルスクロースとマルトシルスクロースとの混合物であることを特徴とする請求項２５又は２６記載の方法。
【請求項３２】
前記乾燥用溶液が、さらに単糖類、ニ糖類又は多糖類の１種以上を含むことを特徴とする請求項３１記載の方法。
【請求項３３】
前記乾燥用溶液が、フルクトース、サッカロース及び／又はグルコースを含むことを特徴とする請求項３１又は３２記載の方法。
【請求項３４】
グルコシルスクロース及びマルトシルスクロースの合計が、前記乾燥用溶液中に存在する糖分の少なくとも25質量％になることを特徴とする請求項３１〜３３のいずれか１項記載の方法。
【請求項３５】
グリコシルスクロース及びマルトシルスクロースそれぞれが、前記乾燥用溶液中に存在する糖分の少なくとも18質量％になることを特徴とする請求項３４記載の方法。
【請求項３６】
少なくとも１種の1,4 O-結合型サッカロース誘導体を含む糖分が、前記乾燥用溶液の乾燥質量基準で25〜99.99質量％になることを特徴とする請求項２６〜３５のいずれか１項記載の方法。
【請求項３７】
前記抗体又は抗体誘導体分が、前記乾燥用溶液の乾燥質量基準で0.01〜75質量％になり、それによって、質量パーセントの合計が最大100質量％となることを特徴とする請求項２６〜３６のいずれか１項記載の方法。
【請求項３８】
前記乾燥用溶液が、医薬的に適合可能なアジュバントの１種以上及び／又は塩の１種以上を含むことを特徴とする請求項２６〜３７のいずれか１項記載の方法。
【請求項３９】
前記アジュバントがアミノ酸又はペプチドであることを特徴とする請求項３６記載の方法。
【請求項４０】
前記アミノ酸がイソロイシンであることを特徴とする請求項３９記載の方法。
【請求項４１】
前記ペプチドがジペプチド又はトリペプチドであることを特徴とする請求項３６記載の方法。
【請求項４２】
前記ペプチドがイソロイシン含有ペプチドであることを特徴とする請求項３９記載の方法。
【請求項４３】
前記ペプチドがトリイソロイシンであることを特徴とする請求項４１又は４２記載の方法。
【請求項４４】
前記乾燥用溶液の乾燥質量が、60〜90質量％の少なくとも１種の1,4 O-結合型サッカロース誘導体又は少なくとも１種の1,4 O-結合型サッカロース誘導体を含む糖混合物と、１〜19.99質量％のアミノ酸とを含み、かつ、質量パーセントの合計が最大100質量％になることを特徴とする請求項３９又は４０記載の方法。
【請求項４５】
前記乾燥用溶液の乾燥質量が、60〜90質量％の少なくとも１種の1,4 O-結合型サッカロース誘導体又は少なくとも１種の1,4 O-結合型サッカロース誘導体を含む糖混合物と、１〜19.99質量％のペプチドとを含むことを特徴とする請求項４０〜４２のいずれか１項記載の方法。
【請求項４６】
医薬品を製造するための、請求項２２〜２４のいずれか１項記載の粉末の使用。
【請求項４７】
吸入医薬品を製造するための請求項２３又は２４記載の噴霧乾燥粉末の使用。
【発明の詳細な説明】
【発明の詳細な説明】
【０００１】
（発明の分野）
本発明は、医薬有効成分として抗体又は抗体誘導体を含む医薬組成物、主に粉末医薬組成物を製造するための、新規なオリゴ糖／オリゴ糖混合物の使用に関する。粉末は、噴霧乾燥又は凍結乾燥による製造が好ましい。とりわけ、本発明は、抗体を含有する前記粉末及びその製造方法に関する。
（背景）
水溶液に処方した活性物質／活性物質調剤は幾分不安定になりやすく、結果、有効性又はバイオアクティビティの低下及び毒性又は不相溶性の上昇を引き起こすことがある。このことは従来からの医薬品だけでなく、ペプチド含有有効成分又はタンパク質含有有効成分にもあてはまる。医薬有効成分の安定化には、それ自体の構造を修飾すること（内的）又は適切なアジュバントの添加（外的）が好影響を及ぼす。
医薬有効成分の従来からの外的安定化方法は、好適なアジュバントを適用することである。有効成分を安定化させるためのアジュバントは、糖及びポリオール、アミノ酸、アミン、塩、ポリマー、界面活性剤類に大別することができる。
【０００２】
糖及びポリオール類は不特定安定化剤として使用することが多い。生物学的活性物質に対する安定化効果は、主に「優先的排除（preferential exclusion）」によるものである（Xie及びTimasheff著（1997）、Biophysical Chemistry、64(1-3)、25-43；Xie及びTimasheff著（1997）、Protein Science、6(1)、211-221；Timasheff著（1998）、Advances in protein chemistry、51、355-432）。糖類を選択する際、生物学的活性物質には還元糖を避けるのが一般的である。非還元糖としてサッカロースやトレハロースの使用が好ましい。好適なアジュバントの例として他には、グルコース、ソルビトール、グリセロール（Boctor及びMehta著（1992）Journal of Pharmacy and Pharmacology、44 (7)、600-3；Timasheff著（1993）Annual review of biophysics and biomolecular structure、22、67-97；Chang等（1993）Pharmaceutical Research、10(10)、1478-83）及びマンニトール（Hermann等（1996）Pharmaceutical Biotechnology、9（Formulation, Characterization, and Stability of Protein Drugs）、303-328；Chang等（1996）Pharmaceutical Research、13(5)、756-761）が挙げられる。さらに、医薬的活性物質、主に、例えば抗体等のようなタンパク質類には、広範なポリマー類が安定化効果を及ぼすことが知られている。過去においてヒト血清アルブミン（ＨＡＳ）が多用されていたのは、実際のところ、安定化特性及び凝集抑制特性が非常に優れているという特徴を有するからであるが、血液によって運ばれる病原体による潜在的な汚染という理由から適していないことがわかってきた。すでに公知のポリマーのなかでは、ヒドロキシプロピル-β-シクロデキストリン（ＨＰ−β−ＣＤ）が特に適している。それは、完全に安全な方法で非経口で使えるからである。この他、高分子量デキストラン（18〜82kD）、ＰＶＰ、ヘパリン、ゼラチンタイプＡ及びＢ、ヒドロキシエチルデンプン（ＨＥＳ）、ヘパリン、硫酸デキストラン、ポリリン酸、ポリ-Ｌ‐グルタミン酸、ポリ-Ｌ‐リジンが挙げられる。
【０００３】
糖及びポリオール類とならび、アミノ酸も単独又は他のアジュバントと共に安定化剤として使用することができる。アミノ酸は主にタンパク質の安定化に使用される。例えば、10mMリン酸ナトリウム緩衝液（ｐＨ7.0）でのrhKGFの凝集は、ヒスチジン、グリシン、アスパラギン酸ナトリウム（Na-Asp）、グルタメート及び塩酸リジン（Lys-HCl）を５％のマンニトールと組合せて抑えることができる（Zhang等（1995）「Biochemistry」34 (27)、 8631-41）。アミノ酸とプロピレングリコールを組合せることにより、例えば、rhCNTFの構造的安定性が向上する（Dix等（1995）「Pharmaceutical Research (Supplement)」12、97頁）。リジンとアルギニンはIL-1Rの熱安定性を向上させる（Tm-増加）が、一方では、グリシンとアラニンは不安定化作用を有する（Remmele等（1998）「Pharmaceutical Research」15(2)、200-208）。
医薬的活性物質の安定性は、さらに、様々な乾燥工程によって向上させることができる。しかしながら、大概、乾燥工程も、活性物質の安定性を維持し乾燥粉体の特性を向上させることを目的としたアジュバントの存在下で進行する。安定化に影響する乾燥工程の決定的要因は、非晶質なマトリックス中で活性物質を固定化することである。非晶質な状態は、粘度を上昇させ、分子運動性を低下させ、反応性を低くする。そのため、有利なアジュバントとは、活性物質を埋め込むマトリックスとして、可能な限り高いガラス転移温度を有する非晶質マトリックスを形成できなければならない。したがって、アジュバントの選択は、特に、その安定化性能により決まる。さらに、アジュバントの医薬的許容性や粒子形成への影響力、分散性及び流動性といった他の要因も重要な役割を果たし、特に噴霧乾燥の場合はなおさらのことである。
【０００４】
ペプチド／タンパク質含有医薬有効成分の化学的及び物理的安定性を向上させるには、噴霧乾燥が特に好適であることがわかっている（(Maa等（1998）「Pharmaceutical Research」15(5)、768-775)。特に、肺疾患の治療分野では、噴霧乾燥の利用が増大している（米国特許第5,626,874号、米国特許第5,972,388号、Broadhead等（1994）「J. Pharm. Pharmacol.」46(6)、458-467）。それは、全身性疾患の治療において吸入器での投与も実行可能な選択肢の１つであることが示されているからである（ＷＯ99/07340）。前提条件となるのは、粉体の平均粒径が１〜10μｍ、好ましくは１〜7.5μｍの範囲にあることで、肺のより奥深い部分に到達し、血流にのることができる。例えばＤＥ-Ａ-1792207には、該当する噴霧乾燥粒子の製造が記載されている。前記粉体の製造については、数多くの方法がある（ＷＯ95/31479、ＷＯ96/09814、ＷＯ96/32096、ＷＯ96/32149、ＷＯ97/41833、ＷＯ97/44013、ＷＯ98/16205、ＷＯ98/31346、ＷＯ99/66903、ＷＯ00/10541、ＷＯ01/13893、Maa等（1998）同上、Vidgren等（1987）「Int. J. Pharmaceutics」35、139-144、Niven等（1994）「Pharmaceutical Research」11(8)、1101-1109）。
糖類及びそのアルコール類もアジュバントとして適しているが（例えば、トレハロース、ラクトース、サッカロース又はマンニトール）、同様に様々なポリマー類も適している（Maa等（1997）「Pharm. Development and Technology」2(3)、213-223；Maa等（1998）同上；論文Adler（1998）エアランゲン大学；Costantino等（1998）「J. Pharm. Sci.」87(11)、1406-1411）。しかしながら、使用されている主なアジュバントにはそれぞれ短所がある。例えば、トレハロースやマンニトールは、添加により噴霧乾燥製剤の流動性を低下させる（C. Bosquillon等（2001）「Journal of Controlled Release」70(3)、329-339）。また、マンニトールは、含有量が20質量％をこえるとさらに再結晶化傾向があり（Costantino等（1998）同上）、安定化効果が急激に減衰する。ラクトースはよく使用されるアジュバントであり、噴霧乾燥製剤の流動性を改善する（C. Bosquillon等（2001）同上）が、とりわけペプチド活性物質含有／タンパク質含有有効成分の処方中に問題が発生する。それは、ラクトースはその還元特性によりペプチド／タンパク質とマイラード反応を起こし不安定化を伴う可能性があるからである。
【０００５】
安定化剤を添加せずに抗体を噴霧乾燥すると、脱水、熱及び剪断により固有の第２の構造が定期的に発現し、その結果としてバイオアクティビティーが劇的に損なわれる。既に内側を向いていた抗体の疎水性部分が逆戻りして外側を向く。これは、噴霧乾燥工程中に生じる水滴と周囲の空気との疎水性界面において進行する。さらに加えて、抗体は水性相内で凝集し二量体又はより高次な凝集体を形成する。こうした凝集は不可逆性であることが多い。さらに、タンパク質を噴霧する際の高温は重大なパラメータとなる。高エネルギーを使うことで、ペプチド結合が不安定化し、抗体が変性する可能性がある。さらに、粉体の保存期間中にも噴霧乾燥抗体は凝集体を形成する。この場合は、粉体中の残留水分がとりわけ悪影響を及ぼす。タンパク質の凝集体は、生物学的活性が減退もしくは喪失し、抗原性が強まるという特徴を有する。
マルトシルスクロース及びグルコシルスクロースならびにラクトスクロースを主成分とするカップリングシュガーと呼ばれる多糖類が、食品分野で利用されている。これらは、アスパルテームのような甘味剤とともに増量剤や分散剤として、またチューインガムのほのかな甘味成分として、トレハロースシロップが結晶化しないように安定化させるために、またはいわゆるＮＤＯ（難消化性オリゴ糖類）として使用されている。アスパラギルペプチドの甘味特性の向上と安定化、又は、バラスト（ballast）と甘味剤とを含む飲料系における甘味／酸味の関係の向上と安定化については公知である（米国特許第2003/0059511、ＥＰ1223175、ＤＥ19953727）。さらに、米国特許第5,489,577号及びＥＰ0630651から、治療用タンパク質と油脂基剤とから調製される懸濁液を安定化させるためのオリゴ糖の使用が公知である。開示には、疎水性の半固体のかたまりと一緒に混合及び混練する際に、前もってオリゴ糖と混合しておかないと、前記タンパク質はその活性を失うおそれがあると記載されている。保存期間にわたり、親水性混合物又は粉体における安定化の潜在能力については何も言及されていない。
【０００６】
本発明の目的は、医薬製剤を製造するための新規なアジュバントを提案することである。該製剤は、特に長期にわたる優れた安定性という特徴を有するはずである。
さらなる本発明の目的は、乾燥医薬製剤製造用の新規なアジュバントを提供することである。該粉末状医薬製剤は、長期安定性に優れていること、さらに可能であれば吸入性という特徴を有するであろう。
さらに別の本発明の目的は、ペプチド含有／タンパク質含有医薬製剤を製造するための新規なアジュバントを提供することであり、とりわけこれらの製剤が噴霧乾燥で製造される場合である。該ペプチド含有／タンパク質含有医薬製剤は長期安定性と、可能であれば吸入性という特徴を有するであろう。
また、本発明のさらに別な目的は、治療用抗体又は抗体誘導体を処方するための新規なアジュバントを提供することであり、特にこれらが噴霧乾燥で製造される場合である。該抗体含有医薬製剤も、長期安定性と、可能であれば吸入性という特徴を有するであろう。
さらに別の本発明の目的は、吸入器による投与用の医薬製剤を提供することで、剤形が、乾燥粉末、噴射剤含有定量エアロゾル、又は、噴射剤を含まない吸入溶液のいずれかである。
本発明の基礎となる前記目的は、以下の記載により、また、特許クレームに示すもの／方法により達成される。
【０００７】
（発明の概要）
本発明は、１種の抗体又は１種の抗体誘導体と、1,4 O-結合型D-gal-サッカロース（ラクトスクロース）、1,4 O-結合型D-glu-サッカロース（グルコシルスクロース）又は1,4 O-結合型glu-glu-サッカロース（マルトシルスクロース）から選択される1,4 O-結合型サッカロース誘導体の１種以上とを含む組成物に関する。グルコシルスクロースとマルトシルスクロースを含む組成物が好ましい組成物である。
ラクトスクロースという用語は下記の構造式を有する分子を意味する。
【０００８】
【化１】
2007536314.tif 000002
【０００９】
また、本発明に関しては、グルコシルスクロースは下記の構造式を有する分子を意味するものと解釈される。
【００１０】
【化２】
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【００１１】
また、マルトシルスクロースという用語は、下記の構造式を有する分子を意味する。
【００１２】
【化３】
2007536314.tif 000004
【００１３】
本発明のさらなる実施形態によると、当該組成物は、抗体又は抗体誘導体と1,4 O-結合型サッカロース誘導体とともに、単糖類、ニ糖類及び／又は多糖類の１種以上をさらに含むもので、単糖類及び／又はニ糖類の添加利用が好ましい。さらに、グリコシルスクロース及びマルトシルスクロースの組成物と、１種の抗体又は抗体誘導体とを一緒にして作製した組成物が本発明に対応することは既に記載したが、好ましくは単糖類、ニ糖類及び／又は多糖類が一緒であると好ましい。
そこで、特に本発明による組成物としては、（ａ）25〜99.99質量％、好ましくは80〜90質量％（組成物の乾燥質量基準）の少なくとも１種の1,4 O-結合型サッカロース誘導体又は少なくとも１種の1,4 O-結合型サッカロース誘導体を含む糖混合物と、（ｂ）１種の抗体又は１種の抗体誘導体を好ましくは0.01〜75質量％（組成物の乾燥質量基準）の濃度で含み、糖／糖混合物と抗体又は抗体誘導体との質量パーセントの合計が最大100質量％となる組成物である。
組成物は水性組成物、固体又は半固体組成物であってもよい。特に好ましいのは固体の組成物で、好ましくは粉末状の組成物である。驚くべきことに、前記の抗体を含有する粉末組成物は、（ｉ）非晶質構造を形成し、（ii）ガラス転移温度が40℃より高く、（iii）再結晶化傾向が低いということがわかった。このことは、噴霧乾燥粉末にとくにあてはまる。
【００１４】
本発明の組成物、とりわけ粉末状組成物は、少なくとも１種の1,4 O-結合型サッカロース誘導体又は少なくとも１種の1,4 O-結合型サッカロース誘導体を含む糖混合物に加えて、例えば、アミノ酸、ペプチド、タンパク質及び他の糖類等といった付加的アジュバントを含有してもよい。少なくとも１種の1,4 O-結合型サッカロース誘導体又は少なくとも１種の1,4 O-結合型サッカロース誘導体を含む糖混合物と、１種の抗体又は抗体誘導体に加え、さらに、少なくとも１種のアミノ酸、少なくとも１種のペプチド、好ましくはジペプチドもしくはトリペプチド及び／又は１種の塩を含む組成物が特に有用である。好ましい実施形態の１つによると、本発明は、好ましくは粉末状組成物、例えば、噴霧乾燥粉末であって、乾燥質量基準で（ａ）25〜90質量％の少なくとも１種の1,4 O-結合型サッカロース誘導体又は少なくとも１種の1,4 O-結合型サッカロース誘導体を含む糖混合物と、（ｂ）付加的アジュバントとして１〜39.99質量％の少なくとも１種のアミノ酸及び／又は少なくとも１種のペプチドと、（ｃ）少なくとも0.01質量％の１種の抗体又は抗体誘導体とを含む粉末状組成物に関する。付加的アジュバントとして好ましいのは、アミノ酸のイソロイシン又はペプチド、好ましくは少なくとも１個のイソロイシン基を有するジペプチドもしくはトリペプチドを指す。具体的な実施形態の１つとして、本発明は、例えば噴霧乾燥粉末等の組成物であって、乾燥質量基準で（ａ）およそ60〜80質量％の少なくとも１種の1,4 O-結合型サッカロース誘導体又は少なくとも１種の1,4 O-結合型サッカロース誘導体を含む糖混合物と、（ｂ）およそ10〜19.99質量％の少なくとも１種のアミノ酸、好ましくはイソロイシンと、（ｃ）およそ0.01〜30質量％の１種の抗体又は抗体誘導体とを含む組成物に関する。また別の実施形態としては、本発明は、組成物、好ましくは、例えば噴霧乾燥粉末等の粉末状組成物であって、乾燥質量基準で（ａ）およそ60〜80質量％の少なくとも１種の1,4 O-結合型サッカロース誘導体又は少なくとも１種の1,4 O-結合型サッカロース誘導体を含む糖混合物と、（ｂ）およそ１〜19.99質量％のペプチド、好ましくはイソロイシン含有ペプチド、特に好ましくはイソロイシン含有ジペプチド又はトリペプチド、さらに好ましくはトリイソロイシンと、（ｃ）およそ0.01〜39質量％の１種の抗体又は抗体誘導体とを含む組成物に関する。この組成の粉末は、イソロイシン又はイソロイシン含有トリペプチドと一緒に混合することにより、とりわけ良好な流動特性を示す。該噴霧乾燥粉末は、さらに吸入可能粒子の割合が非常に高い。さらに、該粉末は加工安定性及び保存安定性において非常に優れている。
【００１５】
別の実施形態によると、本発明は、前記粉末状組成物、好ましくは噴霧乾燥粉末であって、（ａ）1,4 O-結合型サッカロース誘導体の１種もしくは前記記載の組合せ、又は少なくとも１種の1,4 O-結合型サッカロース誘導体を含む糖混合物と、（ｂ）少なくとも１種の抗体又は抗体誘導体とを含有する粉末状組成物であって、これにより、前記粉末のガラス転移温度が40℃より高く、好ましくは45℃より高く、さらに好ましくは50℃より高く、特に好ましくは55℃より高く、きわめて好ましくは60℃より高い粉末状組成物に関する。一般に、本発明の前記粉末の最高ガラス転移温度は約96〜110℃である。個々のケースでは、この値がさらに高くてもよい。粉末において、添加するアジュバント画分、とりわけ1,4 O-結合型サッカロース誘導体画分又は誘導体混合物画分が、前記ガラス転移温度を主として決定する。
別の実施形態によると、本発明は、抗体又は抗体誘導体を含む吸入器による投与用の医薬組成物に関するもので、本発明による本願記載の粉末状組成物の１種を含む医薬組成物ならびに前記記載の粉末状組成物の１種で構成される医薬組成物である。これに関して、本発明の粉末を噴射剤を含む定量エアロゾルとして、又は噴射剤を含まない吸入溶液として含有する医薬組成物が好ましい。前記医薬組成物の製造に使用する本発明の粉末、好ましくは噴霧乾燥によって製造される粉末は、さらに別の実施形態によると、空気動力学的粒径（ＭＭＡＤ）が10μｍ未満、好ましくは0.5〜7.5μｍ、さらに好ましくは0.5〜5.5μｍ、とりわけ好ましくは0.5〜5.0μｍの吸入可能粒子の画分が高いという特徴を有する。
さらに、本発明は、前記記載の本発明による組成物、好ましくは粉末状組成物の製造、例えば、噴霧乾燥粉末の製造方法を提案するもので、（ａ）１種以上の1,4 O-結合型サッカロース誘導体又は少なくとも１種の1,4 O-結合型サッカロース誘導体を含む糖混合物と、（ｂ）少なくとも１種の抗体又は抗体誘導体とを含む水性組成物を調製し、粉末状組成物の場合は、適切な条件下、例えば噴霧することを特徴とする製造方法である。
【００１６】
（発明の詳細な説明）
定義：
本発明の明細書の範囲で使用する用語及び名称は、以下に定義する意味を有する。特に指示のない限り、質量及び質量パーセントのデータは、組成物の乾燥質量又は溶液／懸濁液の固形分にそれぞれ関する。「含んでいる」「含む」という概括的実施形態は、「〜で構成される」というより具体的な実施形態を包含する。「単数」及び「複数」は、なんら限定することなく使用する。
「1,4 O-結合型サッカロース誘導体又は少なくとも１種の1,4 O-結合型サッカロース誘導体を含む糖混合物」という表現は、（ｉ）本願明細書に記載の式の１つを有する1,4 O-結合型サッカロース誘導体、（ii）その混合物で、好ましくはマルトシルスクロースとグルコシルスクロースの混合物、（iii）前記記載の式のいずれか１つを有する少なくとも１種の1,4 O-結合型サッカロース誘導体と、他の糖との混合物で、好ましくは、ラクトスクロースとラクトースとサッカロースとの混合物、あるいは、グルコシル及び／又はマルトシルスクロース、サッカロース、フルクトース及びグルコースとの混合物、（iv）少なくとも55質量％のラクトスクロースと、最大25質量％のラクトースと、最大10質量％のサッカロースとの混合物、（ｖ）少なくとも88質量％のラクトスクロースと、最大10質量％のラクトース及びサッカロースとの混合物、（vi）25質量％のグルコシル及び／又はマルトシルスクロースと、48〜56質量％のサッカロースと、10質量％以下のグルコース及びフルクトースとの混合物、（vii）それぞれ18質量％のグルコシルスクロース及びマルトシルスクロースと、11〜15質量％のサッカロースと、５〜９質量％のグルコースとの混合物、（viii）「乳果オリゴ（登録商標）LS40L」（LS40Lと略記）、「乳果オリゴ（登録商標）LS55L」（LS55Lと略記）、「乳果オリゴ（登録商標）LS55P」（LS55Pと略記）、「乳果オリゴ（登録商標）LS90P」（LS90Pと略記）、「カップリングシュガー（登録商標）」もしくは「カップリングシュガーＳ（登録商標）」（株式会社林原商事、日本）と呼ばれる糖混合物である。
【００１７】
「組成物」は、少なくとも２種の出発物質を含む液体、半固体又は固体の混合物を意味する。
「医薬的に許容されるアジュバント」という用語は、本発明の範囲における調剤中で任意に含有させることができるアジュバントを指す。例えば、アジュバントは、対象者又は対象者の肺に後から著しい毒性副作用を及ぼすことなく肺への投与が可能なものである。
「医薬的に許容される塩」とは、例えば以下の塩が含まれるが、これらに限定されるものではない。無機酸の塩、例えば、塩酸塩、硫酸塩、リン酸塩、ニリン酸塩、臭化物及び硝酸塩。さらに、有機酸の塩として、リンゴ酸塩、マレイン酸塩、フマル酸塩、酒石酸塩、コハク酸塩、エチルコハク酸塩、クエン酸塩、酢酸塩、乳酸塩、メタンスルホン酸塩、安息香酸塩、アスコルビン酸塩、パラトルエンスルホン酸塩、パモ酸塩（palmoate）、サリチル酸塩及びステアリン酸塩、ならびにエストレート、グルセプテート及びラクトビオネート塩が挙げられる。
「医薬的に許容されるカチオン」という用語は例えば、リチウム、ナトリウム、カリウム、カルシウム、アルミニウム及びアンモニウム（置換アンモニウムを含む）などが例示できるが、これらに限定されるものではない。
【００１８】
「アミノ酸」という用語は、少なくとも１個のアミノ基と少なくとも１個のカルボキシル基とを含む化合物を意味する。通常、カルボキシル基に対してアミノ基はα‐位置にあるが、分子中の構成が他のものも考えられる。また、アミノ酸は、例えば、アミノ基、カルボキサミド基、カルボキシル基、イミダゾール基、チオ基等の他の官能基を含有していてもよい。天然アミノ酸、合成アミノ酸で、ラセミ体又は立体異性の関係が様々な光学活性を有するもの（Ｄ体もしくはＬ体）が使用される。例えば、イソロイシンならびにＤ−イソロイシン、Ｌ−イソロイシン、ラセミ体のイソロイシン及び２つの鏡像異性体の比率の異なるものが含まれる。
「生物学的高分子」という用語は、ペプチド、タンパク質、脂肪、脂肪酸又は核酸を意味する。
「ペプチド」又は「ポリペプチド」という用語の定義は、２〜100個のアミノ酸基で構成されるアミノ酸高分子である。「ペプチド」又は「ポリペプチド」という用語は、匿名として用いられることもあり、ホモペプチドとヘテロペプチドの両方を含む。即ち、同一のアミノ酸基又は異なるアミノ酸基で構成されるアミノ酸高分子が含まれる。したがって、「ジペプチド」はペプチド結合による２個のアミノ酸で構成されており、「トリペプチド」はペプチド結合による３個のアミノ酸で構成される。本願明細書で使用する「タンパク質」という用語は、100個を超えるアミノ酸基を有するアミノ酸高分子である。
「類似物」という用語は、ペプチド／タンパク質において、１個又は多数のアミノ酸が置換されたもの、削除されたもの（例えば、断片）、付け足されたもの（例えば、Ｃ−又はＮ−末端を延長した誘導体）、さもなければ、固有の（生来の）シーケンスに対して変性されたものを意味する。また、例えば、糖類、ポリエチレングリコール等を用いて、固有のタンパク質から誘導体を調製することも可能である。類似物は、固有の合成していないタンパク質のバイオアクティビティーの少なくとも10、20、30又は40％、好ましくは少なくとも50、60又は70％、とりわけ好ましくは少なくとも80、90、95、100％、あるいは100％を超えることが好ましい。
【００１９】
「オリゴ糖」又は「多糖」という用語は、少なくとも３個の単量体糖分子で構成される多糖を意味する。
「タンパク質のみの調剤」という用語は、１種以上の抗体又は抗体誘導体からなる粉末であって、さらに任意で好適な緩衝剤（通常、乾燥粉末の質量に対して０〜15質量％）を含んでもよい粉末を意味する。粉末は本質的には他のアジュバントを含有しない。即ち、含有させることができる他のアジュバントの含有量は乾燥粉末の質量に対して１質量％未満である。
「噴霧乾燥粉末調剤」又は「乾燥粉末調剤」という表記は、通常、残留水分が約10質量％未満、好ましくは７質量％未満、さらに好ましくは５質量％未満、特に好ましくは３質量％未満の粉末調剤を意味する。残留水分は、噴霧乾燥、真空乾燥又は凍結乾燥の条件が一定、かつアジュバントが同一であれば、その粉末調剤中の医薬有効成分の種類と含有量によってほぼ決まる。
「非晶質」という用語は、結晶部位が10％未満、好ましくは７％未満、さらに好ましくは５％未満、特に好ましくは４、３、２又は１％未満である粉末調剤を意味する。
「吸入可能な」という用語は、粉末が肺への投与に適していることを意味する。吸入可能粉末は吸入器を用いて分散、吸入させることができ、吸入によって粒子が肺に到達し、必要に応じて肺胞を介して全身に作用を発現させる。吸入可能な粒子は、例えば平均粒径（ＭＭＤ＝体積中央径）が0.4〜10μｍ、通常0.5〜5.0μｍ、好ましくは１〜３μｍ、及び／又は、空気動力学的粒径（ＭＭＡＤ）が0.5〜10μｍ、好ましくは0.5〜7.5μｍ、さらに好ましくは0.5〜5.5μｍ、より好ましくは１〜５μｍ、とりわけ好ましくは１〜4.5μｍである。
【００２０】
「体積中央径」又は「ＭＭＤ」が平均粒径分布を特徴づける単位であるのは、本発明の粉末が通常、多分散系だからである。この結果は、総処理量の全体積分布の50％における粒径として表される。ＭＭＤ値は、例えば、レーザー回折法（これについては「実施例」のセクションの「方法」を参照）によって求めることができるが、従来からの他の方法も使用できる（例えば、電子顕微鏡検査法、遠心沈降法等）。
「空気動力学的粒径（＝ＭＭＡＤ）」という用語は、空気動力学的粒径が通常小さい粉体粒子の50％の空気動力学的粒径を指す。不明確な場合は、本願記載の方法（これについては「実施例」のセクションの「方法」を参照）が、ＭＭＡＤを求めるための参考の方法となる。
「細粒分」（ＦＰＦ）という用語は、ＭＭＡＤが５μｍ以下の粒径を有する粒子からなる吸入可能な粉末部分を指す。分散が良好な粉末において、ＦＰＦは20％より多く、好ましくは30％より多く、特に好ましくは40％より多く、さらに好ましくは50％より多く、格別に好ましくは55％より多い。明細書中に使用の「カットオフ粒径」という用語は、ＦＰＦを求める際に考慮する径を指す。カットオフ粒径が５μｍでＦＰＦが30％（ＦＰＦ5）という場合、粉末中の全粒子の少なくとも30％が体積平均空気動力学的粒径５μｍ未満の粒子であることを意味する。
「噴霧溶液」という用語は、医薬有効成分を少なくとも１種のアジュバントと共に溶解／懸濁した水溶液又は懸濁液を意味する。
「飛行時間」という用語は標準的測定方法に使用される名称で、「実施例」の項でより詳細に説明する。飛行時間の測定時に、ＭＭＡＤ及びＦＰＦは同時に測定される（これについては「実施例」の項の「方法」を参照）。
「界面活性」物質は、その物質が溶解されている溶液の表面張力を減少させることができる。表面活性は、例えば、Lecomte du Nouy（Bauer、Fromming、Fuhrer、第６版）で提案されているテンシオメーター法を用いて測定される。
【００２１】
本発明の組成物：
本発明は、ａ）医薬有効成分としての１種の抗体又は抗体誘導体と、ｂ）1,4 O-結合型D-gal-サッカロース（ラクトスクロース）、1,4 O-結合型D-glu-サッカロース（グルコシルスクロース）又は1,4 O-結合型gul-gul-サッカロース（マルトシルスクロース）から選択される1,4 O-結合型サッカロース誘導体の１種以上を含む組成物、好ましくは、例えば噴霧乾燥粉末のような粉末組成物に関する。
本発明のさらなる実施形態によると、前記組成物は、抗体又は抗体誘導体及び1,4 O-結合型サッカロース誘導体とともに、さらに１種以上の単糖類、ニ糖類及び／又は多糖類を含むが、粉末製造工程において単糖類及び／又はニ糖類の添加利用が特に好ましい。したがって、ラクトスクロースとラクトースとサッカロースとを含む組成物、好ましくは噴霧乾燥粉末のような粉末状組成物も本発明に含まれるが、組成物中の糖分全体に対してラクトスクロース分が40質量％以上、好ましくは55質量％以上、さらに88質量％以上が好ましい。好適な実施形態の１つによると、本発明の組成物は、医薬有効成分としての１種の抗体又は抗体誘導体とともに、株式会社林原商事（日本）の「乳果オリゴ（登録商標）LS55P」（LS55Pと略記）と呼ばれる、少なくとも55％のラクトスクロースと、最大で25質量％のラクトースと最大で10質量％のサッカロースとを含む糖混合物を含有する。別の好ましい実施形態によると、本発明の組成物は、医薬有効成分とともに、株式会社林原商事（日本）の「乳果オリゴ（登録商標）LS90P」（LS90Pと略記）と呼ばれる、少なくとも88％のラクトスクロースと、最大で10質量％のラクトースとサッカロースとを含む糖混合物を含有する。
【００２２】
抗体又は抗体誘導体とグルコシル及びマルトシルスクロースとの組合せで構成される組成物、好ましくは例えば噴霧乾燥粉末のような粉末状組成物が本発明に合致することは既に示したが、これもまた、別の単糖類、ニ糖類及び／又は多糖類を一緒に含むとよい。したがって、本発明には、抗体又は抗体誘導体とともに、グルコシル及びマルトシルスクロース、サッカロース、グルコース及び／又はフルクトースとの混合物を含有する前記組成物、好ましくは例えば噴霧乾燥粉末のような粉末状組成物が包含され、この場合、組成物中の糖分全体に対してグルコシル及びマルトシルスクロース分が25質量％以上であると好ましい。さらに別の実施形態によると、グルコシルスクロースとマルトシルスクロースのそれぞれの比率は、組成物中の糖分全体に対して少なくとも18質量％である。別の好適な実施形態によると、本発明の組成物、好ましくは粉末状組成物は、医薬有効成分としての抗体又は抗体誘導体のほかに、株式会社林原商事（日本）の「カップリングシュガー（登録商標）」と呼ばれる糖混合物で、グルコシルスクロース及びマルトシルスクロースをそれぞれ少なくとも18質量％、サッカロースを11〜15質量％、グルコース及びフルクトースをそれぞれ５〜９質量％含有する糖混合物を含む。さらにまた本発明は、医薬有効成分としての抗体又は抗体誘導体に加えて、株式会社林原商事（日本）の「カップリングシュガーＳ（登録商標）」と呼ばれる糖混合物で、グルコシル及びマルトシルスクロースを少なくとも25質量％、サッカロースを48〜56質量％、グルコース及びフルクトースを10質量％以下含む組成物、好ましくは粉末状組成物に関する。
【００２３】
組成物の乾燥質量に対する1,4 O-結合型サッカロース誘導体分又は少なくとも１種の1,4 O-結合型サッカロース誘導体を含む糖混合物分が25〜99.99質量％、好ましくは40〜99質量％、より好ましくは60〜99質量％、さらに好ましくは60〜90質量％で、例えば、25、25.1、25.2、25.3、---25.7、25.8、25.9等；26、27、28、29、30等；31、32、33、---38、39、40等；41、42、43、---48、49、50等；51、52、53、---58、59、60等；61、62、63、---68、69、70等；71、72、73、---78、79、80等；81、82、83、---88、89、90等；91、92、93、---98等、99、99.1、99.2、99.3、---99.8、99.9等；99.91、99.92、99.93、---99.98、99.99質量％となる組成物、好ましくは噴霧乾燥粉末のような粉末状組成物が特に有用であることがわかった。LS55P又はLS90Pの使用に関しては、60〜90質量％が特に有利であることがわかった。組成物が例えば噴霧乾燥粉末のような粉末状組成物に言及する場合、1,4 O-結合型サッカロース誘導体の割合又は少なくとも１種の1,4 O-結合型サッカロース誘導体を含む糖混合物の割合は、粉末状組成物が少なくとも部分的に非晶質状態、好ましくは完全な非晶質状態になるように選択するとよい。1,4 O-結合型サッカロース誘導体の割合又は少なくとも１種の1,4 O-結合型サッカロース誘導体を含む糖混合物の割合は、60質量％より少なくすることもできる。この場合は、粉末を適量の別の安定化効果を有するアジュバントと混合するとよい。この安定化効果を有するアジュバントの例については本願明細書中別のところに記載する。
【００２４】
本発明の組成物の乾燥質量における抗体又は抗体誘導体の割合は、一般に、0.01〜75質量％、好ましくは0.01〜50質量％、さらに好ましくは0.33〜50質量％、特に好ましくは0.33〜40質量％である。また別の好ましい実施形態によると、本発明の組成物の固形分における抗体又は抗体誘導体の割合は0.33〜35質量％、好ましくは0.33〜30質量％である。したがって、その割合は例えば、0.01、0.02、0.03、---0.08、0.09等；0.1、0.2、0.3、---0.8、0.9等；１、２、３、---８、９、10等；21、22、23、---28、29、30等；31、32、33、---38、39、40等；41、42、43、---48、49、50等；51、52、53、---58、59、60等；61、62、63、---68、69、70等；71、72、73、74、74.1、74.2、74.3、---74.8、74.9等；74.91、74.92、74.93、---74.98、74.99、75質量％である。
そのため、本発明の組成物は、1,4 O-結合型サッカロース誘導体又は少なくとも１種の1,4 O-結合型サッカロース誘導体を含む糖混合物の医薬有効成分（抗体又は抗体誘導体）に対する比率が、例えば、25/75、26/74、27/73、28/72、29/71、30/70、31/69、32/68、33/67、34/66、35/65、36/64、37/63、38/62、39/61、40/60、41/59、42/58、43/57、44/56、45/55、46/54、47/53、48/52、49/51、50/50、51/49、52/48、53/47、54/46、55/45、56/44、57/43、58/42、59/41、60/40、61/39、62/38、63/37、64/36、65/35、66/34、67/33、68/32、69/31、70/30、71/29、72/28、73/27、74/26、75/25、76/24、77/23、78/22、79/21、80/20、81/19、82/18、83/17、84/16、85/15、86/14、87/13、88/12、89/11、90/10、91/9、92/8、93/7、94/6、95/5、96/4、97/3、98/2、99/1、99.1/0.9、99.2/0.8、99.3/0.7、99.4/0.6、99.5/0.5、99.6/0.4、99.66/0.33、99.7/0.3、99.8/0.2、99.9/0.1、99.99/0.01質量％の組成物、好ましくは、例えば噴霧乾燥粉末のような粉末状組成物である。前記組成物が１種以上の付加的アジュバントを含む場合は、ａ）1,4 O-結合型サッカロース誘導体分もしくは少なくとも１種の1,4 O-結合型サッカロース誘導体を含む糖混合物分、ｂ）抗体又は抗体誘導体分、又はｃ）その両方を相応に減らし、それによって、本発明の組成物の乾燥質量に対して、1,4 O-結合型サッカロース誘導体又は少なくとも１種の1,4 O-結合型サッカロース誘導体を含む糖混合物分が、60質量％から90質量％の範囲内のいずれかの値をとると好ましい。
【００２５】
本発明における医薬有効成分は抗体又は抗体誘導体である。その例としては、モノクローナル抗体、ポリクローナル抗体、多特異性抗体及び単鎖抗体とならび、その断片で、例えばFab、Fab'、F(ab')2、Fc及びFc'断片、抗体の軽いL鎖と重いH鎖、それらによる定常領域、可変領域又は超可変領域、ならびにFd及びFv断片、少なくとも抗体断片又は少なくとも二重鎖抗体もしくは単鎖抗体の断片を含む融合タンパク質（Chamov等（1999）「Antibody Fusion Proteins」Wiley-Liss社）が挙げられる。抗体はヒト抗体又はヒト以外の抗体でもよい。ヒト抗体において公知である以下のクラス、IgA、IgD、IgE、IgG及びIgMは、さらにそれぞれサブクラス、例えば、IgA1、IgA2、IgG1、IgG2、IgG3、IgG4等を有する。また、ヒト化抗体やキメラ抗体も含まれる。なかでも、CD4、CD20又はCD44等の様々な表面抗原、あるいは、例えば、IL2、IL4又はIL5等の様々なサイトカイニン等に対抗する抗体を含む組成物、好ましくは、例えば噴霧乾燥粉末などの粉末状組成物が特に治療上重要であり、そのため本発明の主題となる。他の例としては、特異抗体クラスに対抗する抗体（例えば、抗IgE抗体）又はウイルスタンパク質に対抗する抗体（例えば、抗-RSV抗体、抗-CMV抗体等）が挙げられる。
抗原結合フラグメント又はFab断片は、両方の鎖の可変領域を有し、この可変領域は隣接する定常領域によって保持されている。別の抗体断片がF(ab')2断片で、これはペプシンによるタンパク分解により産生させることができる。遺伝子クローン化を用いて、重いＨ鎖の可変領域（VH）と軽いＬ鎖の可変領域（VL）のみから構成される短い抗体断片を産生させることもできる。これはFv断片（＝可変領域断片）と呼ばれている。この抗体断片は、単鎖Fv断片（scFv）とも言われる。scFv断片の例は公知であり記述もある（例えば、Huston等（1988）Proc. Natl. Acad. Sci. USA、16、5879ff参照）。
【００２６】
過去、多重結合のscFv誘導体、例えば二重特異性抗体（diabody）、三重特異性抗体（tribody）、五重特異性抗体（pentabody）等を産生させるために様々な方法が開発されてきた。２価の同質ニ量体scFv誘導体を当業者は「二重特異性抗体」と呼んでいる。scFv分子中のペプチドリンカーを５〜10個のアミノ酸に短くすると、VH及びVL鎖が重なり合って同質ニ量体を形成する。さらに、ジスルフィド結合を導入することにより二重特異性抗体を安定化させることができる。二重特異性抗体の例については、文献、例えばPerisic等（1994）Structure、2、1217ffに見ることができる。２価の同質ニ量体scFv誘導体は、この分野の当業者により、「ミニ抗体（minibody）」とも言われている。これは、二量体化領域として、抗体なかでも好ましくはIgG、とりわけIgG1のCH3領域を有する融合タンパク質で構成される。これもまたIgGのヒンジ領域及びリンカー領域を介してscFv断片を結合する。このような「ミニ抗体」の例については、Hu等（1996）「Cancer Res.」56、3055ffに記載されている。３価の同質三量体scFv誘導体は、当業者により「三重特異性抗体」と呼ばれている（Kortt等（1997）「Protein Engineering」10、423ff）。リンカーシーケンスを用いずにVH-VLを直接融合させることで、三量体が形成される。
【００２７】
当業者が「ミニ抗体」と呼ぶ、２価、３価又は５価の構造を有する断片は、scFv断片の誘導体でもある。この場合、ニ量体、三量体又は五量体コイルドコイル構造を用いて多量体化を行う（Pack, P.等（1993）「Biotechnology」11、1271ff；Lovejoy, B.等（1993）「Science」259、1288ff；Pack, P.等（1995）「J. Mol. Biol.」246、28ff）。
本発明の特に好ましい実施形態は、抗体クラスのタンパク質、より具体的には、抗体Gタイプ１に関する。これは、95％のヒト抗体と５％のネズミ抗体を有するヒト化モノクローナル抗体である。この抗体の分子量は約148キロダルトン（kDa）であり、２本の軽い鎖と２本の重い鎖からなり、合計で４本のジスルフィド結合を有する。
さらに別の実施形態によると、本発明は、組成物、好ましくは例えば噴霧乾燥粉末のような粉末状組成物であって、組成物の乾燥質量中、少なくとも50質量％、好ましくは50〜99.99質量％、特に好ましくは60〜90質量％の糖と、40質量％までの医薬有効成分としての抗体又は抗体誘導体を含むことを特徴とし、それによって、ラクトスクロース、マルトシルスクロース及び／又はグルコシルスクロース分が、本発明の組成物の乾燥質量に対して少なくとも20質量％になり、かつ、質量パーセンテージの合計が最大で100質量％となる組成物に関する。この分野の当業者であれば、該当する組成物、好ましくは例えば噴霧乾燥粉末のような粉末状組成物を製造することは可能である。即ち、1,4 O-結合型サッカロース誘導体又は少なくとも１種の1,4 O-結合型サッカロース誘導体を含む糖混合物分が90質量％となる場合は、当業者は、本発明の組成物の総固形分に対して最大10質量％の抗体又は抗体誘導体を混合できることがわかっているということである。
【００２８】
さらに、本発明の組成物、とりわけ、噴霧乾燥粉末のような粉末状組成物は、他のアジュバントである、例えばアミノ酸、ペプチド、非生物学的ポリマーもしくは生物学的ポリマー及び／又は１種以上の糖を含んでもよい。他の従来からのアジュバントとしては、例えば、脂質、脂肪酸、脂肪酸エステル、ステロイド（例：コレステロール）又はキレート剤（例：EDTA）ならびに様々なカチオン（上記参照）が挙げられる。噴霧乾燥粉末のような粉末状組成物を製造する際に特に好ましいのは、ガラス転移温度が高いアジュバントで、例えば、ガラス転移温度が40℃を超えるもの、好ましくは45℃を超えるもの、より好ましくは50℃を超えるもの、あるいは55℃を超えるものが好ましい。好適なアジュバントの一覧は、例えば、Kippe (Eds.)「Handbook of Pharmaceutical Excipients」３版（2000）に記載されている。
タンパク質含有アジュバントの好適なものとしては、例えば、アルブミン（ヒト由来又は組換え型）、ゼラチン、カゼイン、ヘモグロビン等が挙げられる。糖は、好ましくは単糖、ニ糖、オリゴ糖又は多糖類、あるいはそれらの組合せであることが好ましい。単糖類の例としては、フルクトース、マルトース、ガラクトース、グルコース、D-マンノース、ソルボース等がある。本発明での好適なニ糖類には、例えば、ラクトース、サッカロース、トレハロース、セロビオース等がある。ラフィノース、メレチトース、デキストリン、デンプン等がオリゴ糖や多糖類として特に好適である。糖アルコールのなかでも、マンニトール、キシリトール、マルチトール、ガラクチトール、アラビニトール、アドニトール、ラクチトール、ソルビトール（グルシトール）、ピラノシルソルビトール、イノシトール、ミオイノシトール等が好適なアジュバントとして考察される。好ましいアミノ酸としては、例えば、アラニン、グリシン、アルギニン、ヒスチジン、グルタメート、アスパラギン、システイン、ロイシン、リジン、イソロイシン、バリン、トリプトファン、メチオニン、フェニルアラニン、チロシン、シトルリン、L-アスパルチル-L-フェニルアラニンメチルエステル（＝アスパルテーム）、トリメチルアンモニウムアセテート（＝ベタイン）等が挙げられる。緩衝剤として作用するアミノ酸（例えばグリシン又はヒスチジン）及び／又は分散剤として作用するアミノ酸の使用が好ましい。後者のグループには、特に、実質的に疎水性であるアミノ酸、例えばロイシン、バリン、イソロイシン、トリプトファン、アラニン、メチオニン、フェニルアラニン、チロシン、ヒスチジン又はプロリン等が挙げられる。
【００２９】
本発明の範囲において、1,4 O-結合型サッカロース誘導体又は少なくとも１種の1,4 O-結合型サッカロース誘導体を含む糖混合物と共に、アミノ酸を使用すること、とりわけイソロイシン又はシトルリン、特に好ましくはイソロイシンを使用することが有利であることがわかったが、その濃度は、好ましくは１〜19.99質量％、特に好ましくは５〜19.99質量％、さらに10〜19.99質量％、より好ましくは12〜19.99質量％である。しかしながら、この比率は、1,4 O-結合型サッカロース誘導体又は少なくとも１種の1,4 O-結合型サッカロース誘導体を含む糖混合物分、あるいは抗体又は抗体誘導体分を相応に下げるならば、40質量％まで増やすことができるが、粉末の固形分は100質量％を超えないようにする。
他のアジュバントとして、実質的に疎水性であるアミノ酸基を１つ以上含むジペプチド、トリペプチド、オリゴペプチド又はポリペプチドを用いることも特に有用である。なかでも、20個までのアミノ酸を有するペプチドが好ましく、さらには15個までのアミノ酸を有するペプチド、またさらには、12個までのアミノ酸を有するペプチド、さらに11個までのもの、さらには10個までのもの、また、９個までのアミノ酸を有するペプチド、８個までのもの、さらには、７個までのもの、また７個、６個、５個、４個又は３個までのアミノ酸を有するペプチドが好ましい。この場合、安定化のために使用するペプチドは、医薬有効成分と同時に一致することはない。
【００３０】
トリペプチドの好適な例として、例えば下記のトリペプチドの１種以上が挙げられる。Leu-Leu-Gly、Leu-Leu-Ala、Leu-Leu-Val、Leu-Leu-Leu、Leu-Leu-Met、Leu-Leu-Pro、Leu-Leu-Phe、Leu-Leu-Trp、Leu-Leu-Ser、Leu-Leu-Thr、Leu-Leu-Cys、Leu-Leu-Tyr、Leu-Leu-Asp、Leu-Leu-Glu、Leu-Leu-Lys、Leu-Leu-Arg、Leu-Leu-His、Leu-Gly-Leu、Leu-Ala-Leu、Leu-Val-Leu、Leu-Met-Leu、Leu-Pro-Leu、Leu-Phe-Leu、Leu-Trp-Leu、Leu-Ser-Leu、Leu-Thr-Leu、Leu-Cys-Leu、Leu-Try-Leu、Leu-Asp-Leu、Leu-Glu-Leu、Leu-Lys-Leu、Leu-Arg-Leu及びLeu-His-Leu。一般式Ile-X-X；X-Ile-X；X-X-Ileで表されるトリペプチドの使用は特に有利であることがわかった（式中、Ｘは以下のアミノ酸の１つであればよい：アラニン、グリシン、アルギニン、ヒスチジン、グルタミン酸、グルタミン、アスパラギン、アスパラギン酸、システイン、ロイシン、リジン、イソロイシン（Ile）、バリン、トリプトファン、メチオニン、フェニルアラニン、プロリン、セリン、トレオニン、チロシン、L-アスパルチル-L-フェニルアラニン-メチルエステル（＝アスパルテーム）、トリメチルアンモニウムアセテート。式（Ile）2-X、例えば、Ile-Ile-X、Ile-X-IIe又はX-IIe-Ileで表される対応のトリペプチドが特に好ましい（式中、Ｘはここでも前記列挙したアミノ酸のいずれか１つであればよい）。例えば、下記のペプチドがここでは挙げられる： Ile-Ile-Gly、Ile-Ile-Ala、Ile-Ile-Val、Ile-Ile-Ile、Ile-Ile-Met、Ile-Ile-Pro、Ile-Ile-Phe、Ile-Ile-Trp、Ile-Ile-Ser、Ile-Ile-Thr、Ile-Ile-Cys、Ile-Ile-Tyr、Ile-Ile-Asp、Ile-Ile-Glu、Ile-Ile-Lys、Ile-Ile-Arg、Ile-Ile-His、Ile-Gly-Ile、Ile-Ala-Ile、Ile-Val-Ile、Ile-Met-Ile、Ile-Pro-Ile、Ile-Phe-Ile、Ile-Trp-Ile、Ile-Ser-Ile、Ile-Thr-Ile、Ile-Cys-Ile、Ile-Try-Ile、Ile-Asp-Ile、Ile-Glu-Ile、Ile-Lys-Ile、Ile-Arg-Ile、Ile-His-Ile。なかでも有利なのは、Ile-Ile-Ileの使用である。
【００３１】
好適なポリマーとしては、例えば、既にアジュバントとして記載したポリマー、ポリビニルピロリドン、セルロース誘導体（例として、ヒドロキシメチル、ヒドロキシエチル又はヒドロキシプロピルエチルセルロース等）、高分子の糖類（例として、フィコール（ficoll））、デンプン類（例として、ヒドロキシエチルデンプン又はヒドロキシプロピルデンプン等）、例えばシクロデキストリン等のデキストリン類（例として、2-ヒドロキシプロピル-β-シクロデキストリン、スルホブチルエーテル-β-シクロデキストリン）、ポリエチレン、グリコール類及び／又はペクチン類が挙げられる。
塩の場合は、例えば、塩化物、硫酸塩、リン酸塩、ニリン酸塩、臭化水素酸塩及び／又は硝酸塩等の無機塩が挙げられる。さらに、本発明の粉末は、リンゴ酸塩、マレイン酸塩、フマル酸塩、酒石酸塩、コハク酸塩、エチルコハク酸塩、クエン酸塩、酢酸塩、乳酸塩、メタンスルホン酸塩、安息香酸塩、アスコルビン酸塩、パラトルエンスルホン酸塩、パモ酸塩（palmoate）、サリチル酸塩、ステアリン酸塩、エストレート、グルセプテート及びラクトビオネート塩等の有機塩を含有してもよい。前記塩は医薬的に許容できるカチオン、例えば、ナトリウム、カリウム、カルシウム、アルミニウム、リチウム又はアンモニウム等を同時に含んでいてもよい。抗体又は抗体誘導体を安定化する際、前記カチオンを使用することが特に好ましいことがわかった。
そのため、さらに別の実施形態の１つによると、本発明は、好ましくは、例えば噴霧乾燥粉末のような粉末状組成物である組成物であって、1,4 O-結合型サッカロース誘導体又は少なくとも１種の1,4 O-結合型サッカロース誘導体を含む糖混合物及び医薬有効成分としての１種の抗体又は抗体誘導体と共に、医薬的に適応可能なアジュバント１種以上及び／又は塩１種以上を含む組成物に関する。アジュバントとしては、例えば、アミノ酸、ペプチド及びその塩、糖類、ポリオール類、有機酸の塩及び／又は前記記載のポリマーなどがよい。
【００３２】
本発明の別の実施形態は、1,4 O-結合型サッカロース誘導体又は少なくとも１種の1,4 O-結合型サッカロース誘導体を含む糖混合物及び医薬有効成分としての１種の抗体又は抗体誘導体と共に、付加的アジュバントとして１種以上のアミノ酸、好ましくは１種のアミノ酸を含む組成物、好ましくは、噴霧乾燥粉末のような粉末状組成物に関する。これに関して、本発明は、その乾燥質量に対してａ）少なくとも25質量％、好ましくは50〜90質量％、特に好ましくは60〜90質量％の1,4 O-結合型サッカロース誘導体１種又は少なくとも１種の1,4 O-結合型サッカロース誘導体を含む糖混合物と、（ｂ）１〜19.99質量％のアミノ酸と、（ｃ）0.01〜74質量％の医薬有効成分としての抗体又は抗体誘導体とを含み、その質量比の合計が100質量％となる組成物、好ましくは、噴霧乾燥粉末のような粉末状組成物に関する。好ましい実施形態では、前記組成物の乾燥質量に対して、1,4 O-結合型サッカロース誘導体又は少なくとも１種の1,4 O-結合型サッカロース誘導体を含む糖混合物分が少なくとも60質量％、好ましくは70〜90質量％である。該当する調剤の１つとしては、アミノ酸分が好ましくは１〜19.99質量％で、抗体又は抗体誘導体分が0.01〜39質量％であると好ましい。
【００３３】
そこで、別の実施形態によると、本発明は、例えば、80％の1,4 O-結合型サッカロース誘導体もしくは少なくとも１種の1,4 O-結合型サッカロース誘導体を含む糖混合物／19質量％のアミノ酸と／１質量％の抗体又は抗体誘導体を含有する、比率（80/19/1）の組成物、好ましくは、噴霧乾燥粉末のような粉末状組成物、あるいは、(80/18/2)、(80/17/13)、(80/16/4)、(80/15/5)、(80/14/6)、(80/13/7)、(80/12/8)、(80/11/9)、(80/10/10)、(70/20/10)、(70/19/11)、(70/18/12)、(70/17/13)、(70/16/14)、(70/15/15)、(70/14/16)、(70/13/17)、(70/12/18)、(70/11/19)、(70/10/20)、(60/20/20)、(60/19/21)、(60/18/22)、(60/17/23)、(60/16/24)、(60/15/25)、(60/14/26)、(60/13/27)、(60/12/28)又は(60/11/29)で含む組成物、あるいは、これらで構成される組成物に関する。アミノ酸分は一定で、抗体又は抗体誘導体分を20質量％から0.01質量％まで減らすのであれば、例えば、9.99、---9.9、9.8、9.7、---9.3、9.2、9.1、---9、8、7、6、5、4、3、2、1、---0.9、0.8、0.7、---0.66、---0.6、0.5、0.4、0.3、0.2、0.1、0.09、0.08、0.07、0.06、0.05、0.04、0.03、0.02、0.01質量％に減らすのであれば、それに応じて1,4 O-結合型サッカロース誘導体又は少なくとも１種の1,4 O-結合型サッカロース誘導体を含む糖混合物分を、例えば、80.01、---80.1、80.2、80.3、---80.8、80.9、81、82、83、84、85、86、87、88、89、---89.1、89.2、89.3、---89.33、---89.4、89.5、89.6、89.7、89.8、89.9、---89.91、89.92、89.93、---89.97、89.98、89.99質量％にまで増やすことができ、組成物の乾燥質量に対してそれぞれの成分の質量比の合計を00質量％とする。付加的アジュバント又は塩をさらに添加することにより、1,4 O-結合型サッカロース誘導体又は少なくとも１種の1,4 O-結合型サッカロース誘導体を含む糖混合物と、アミノ酸／ペプチド及び／又は抗体又は抗体誘導体医薬有効成分の比率を相応に調整／減少させ、それぞれの成分の質量比が全体で100質量％になるようにする。
【００３４】
添加するアミノ酸がイソロイシンの場合、別の実施形態によると、（ａ）1,4 O-結合型サッカロース誘導体又は少なくとも１種の1,4 O-結合型サッカロース誘導体を含む糖混合物の比率が少なくとも25質量％、好ましくは50〜90質量％、特に好ましくは60〜90質量％、（ｂ）イソロイシン分が１〜19.99質量％、（ｃ）医薬有効成分としての抗体又は抗体誘導体分、好ましくはペプチド／タンパク質が少なくとも0.01質量％、好ましくは0.01から最大で74質量％の組成物、好ましくは、例えば噴霧乾燥粉末のような粉末状組成物が、本発明に対応する。好ましくは、イソロイシン分が、本発明の組成物の全固形分中、５〜19.99質量％、さらに好ましくは10〜19.99質量％となる。これも、それぞれの成分の質量パーセントの合計が最大100質量％となる。また、本発明によると、以下の組成を有する組成物、好ましくは、例えば噴霧乾燥粉末のような粉末状組成物も本発明に合致する。80質量％の1,4 O-結合型サッカロース誘導体又は少なくとも１種の1,4 O-結合型サッカロース誘導体を含む糖混合／10質量％のアミノ酸又はペプチド／10質量％の抗体又は抗体誘導体、即ち、(80/10/10)、あるいは、(79/11/10)、(78/12/10)、(77/13/10)、(76/14/10)、(75/15/10)、(74/16/10)、(73/17/10)、(72/18/10)、(71/19/10)、(70/20/10)の組成であり、抗体又は抗体誘導体分を10質量％から0.01質量％に減らすこともでき、例えば、9.99、---9.9、9.8、9.7、---9.3、9.2、9.1、---9、8、7、6、5、4、3、2、1、---0.9、0.8、0.7、---0.66、---0.6、0.5、0.4、0.3、0.2、0.1、0.09、0.08、0.07、0.06、0.05、0.04、0.03、0.02、0.01質量％に減らし、それに応じて1,4 O-結合型サッカロース誘導体又は少なくとも１種の1,4 O-結合型サッカロース誘導体を含む糖混合物分を、例えば、80.01、---80.1、80.2、80.3、---80.8、80.9、81、82、83、84、85、86、87、88、89、---89.1、89.2、89.3、---89.33、89.4、89.5、89.6、89.7、89.8、89.9、---89.91、89.92、89.93、---89.97、89.98、89.99質量％に増やすことができ、組成物の乾燥質量に対する各成分の質量分合計を最大100質量％とする。そのため、以下の組成を有する組成物、好ましくは、例えば噴霧乾燥粉末のような粉末状組成物も本発明に合致する。80質量％の1,4 O-結合型サッカロース誘導体又は少なくとも１種の1,4 O-結合型サッカロース誘導体を含む糖混合物／19質量％のイソロイシン／１質量％の抗体又は抗体誘導体、即ち、(80/19/1)、あるいは、(80/18/2)、(80/17/3)、(80/16/4)、(80/15/5)、(80/14/6)、(80/13/7)、(80/12/8)、(80/11/9)、(80/10/10)、(70/19/11)、(70/18/12)、(70/17/13)、(70/16/14)、(70/15/15)、(70/14/16)、(70/13/17)、(70/12/18)、(70/11/19)、(70/10/20)、(60/19/21)、(60/18/22)、(60/17/23)、(60/16/24)、(60/15/25)、(60/14/26)、(60/13/27)、(60/12/28)、(60/11/29)、(60/10/30)。付加的アジュバント又は塩をさらに添加する場合、1,4 O-結合型サッカロース誘導体又は少なくとも１種の1,4 O-結合型サッカロース誘導体を含む糖混合物、イソロイシン及び／又は抗体もしくは抗体誘導体分を相応に調整し、各成分の質量を全体で100質量％とする。
【００３５】
本発明の別の実施形態は、医薬有効成分としての抗体又は抗体誘導体を、ペプチド、タンパク質又はそれらの混合物として含む組成物、好ましくは、例えば噴霧乾燥粉末のような粉末状組成物を安定化させるための、少なくとも１種の1,4 O-結合型サッカロース誘導体又は少なくとも１種の1,4 O-結合型サッカロース誘導体を含む糖混合物及びペプチド、好ましくはジペプチド又はトリペプチドの使用に関する。本願明細書では、本発明の組成物、好ましくは、例えば噴霧乾燥粉末のような粉末状組成物を製造するの際に、1,4 O-結合型サッカロース誘導体又は少なくとも１種の1,4 O-結合型サッカロース誘導体を含む糖混合物と一緒に使用することができる数多くのトリペプチドが記載されている。特別の実施形態としては、ペプチド、好ましくはジペプチド又はトリペプチドが、少なくとも１個、好ましくは２個のイソロイシン基を含むもので、特に有用な実施形態では、３個のイソロイシンからなるトリペプチドである。
【００３６】
これに関連して、（ａ）少なくとも１種の1,4 O-結合型サッカロース誘導体又は少なくとも１種の1,4 O-結合型サッカロース誘導体を含む糖混合物分が少なくとも25質量％、好ましくは60〜99質量％、特に好ましくは60〜90質量％、（ｂ）ペプチド、好ましくはジペプチド又はトリペプチド、特に好ましくはイソロイシン含有ペプチド分が１〜19.99質量％、（ｃ）抗体又は抗体誘導体分が0.01質量％から最大で74質量％を有する組成物、好ましくは、例えば噴霧乾燥粉末のような粉末状組成物が本発明に合致するとみなされる。この場合も、個々の固形分の合計が100質量％を超えてはいけない。組成物、好ましくは、例えば噴霧乾燥粉末のような粉末状組成物で、以下の組成を有するものが本発明に合致する。89質量％の少なくとも１種の1,4 O-結合型サッカロース誘導体又は少なくとも１種の1,4 O-結合型サッカロース誘導体を含む糖混合物／１質量％のペプチド、好ましくはジペプチド又はトリペプチド、さらに好ましくはイソロイシン含有トリペプチド、特に好ましくはトリイソロイシン／10質量％の抗体又は抗体誘導体、即ち、(89/1/10)、あるいは、(88/2/10)、(87/3/10)、(86/4/10)、(85/5/10)、(84/6/10)、(83/7/10)、(82/8/10)、(81/9/10)、(80/10/10)、(79/11/10)、(78/12/10)、(77/13/10)、(76/14/10)、(75/15/10)、(74/16/10)、(73/17/10)、(72/18/10)又は(71/19/10)で、抗体又は抗体誘導体分を10質量％から0.01質量％まで減らすことができ、例えば、9.99、---9.9、9.8、9.7、---9.3、9.2、9.1、---9、8、7、6、5、4、3、2、1、---0.9、0.8、0.7、---0.66、---0.6、0.5、0.4、0.3、0.2、0.1、0.09、0.08、0.07、0.06、0.05、0.04、0.03、0.02、0.01質量％に減らし、それに応じて1,4 O-結合型サッカロース誘導体又は少なくとも１種の1,4 O-結合型サッカロース誘導体を含む糖混合物分を、例えば、80.01、---80.1、80.2、80.3、---80.8、80.9、81、82、83、84、85、86、87、88、89、---89.1、89.2、89.3、---89.33、89.4、89.5、89.6、89.7、89.8、89.9、---89.91、89.92、89.93、---89.97、89.98、89.99質量％に増やすことができ、組成物の乾燥質量に対する各成分の質量合計が最大100質量％になるようにする。そこで、以下の組成を有する組成物、好ましくは、例えば噴霧乾燥粉末のような粉末状組成物も本発明に合致する。80質量％の少なくとも１種の1,4 O-結合型サッカロース誘導体又は少なくとも１種の1,4 O-結合型サッカロース誘導体を含む糖混合物／19質量％のペプチド、好ましくはジペプチド又はトリペプチド、特に好ましくはイソロイシン含有ペプチド、さらに好ましくはトリイソロイシン／１質量％の抗体又は抗体誘導体、即ち、(80/19/1)、あるいは、(80/18/2)、(80/17/3)、(80/16/4)、(80/15/5)、(80/14/6)、(80/13/7)、(80/12/8)、(80/11/9)、(80/10/10)、(70/19/11)、(70/18/12)、(70/17/13)、(70/16/14)、(70/15/15)、(70/14/16)、(70/13/7)、(70/12/18)、(70/11/19)、(70/10/20)、(60/19/21)、(60/18/22)、(60/17/23)、(60/16/24)、(60/15/25)、(60/14/26)、(60/13/27)、(60/12/28)、(60/11/29)、(60/10/30)で、ペプチド（ジペプチド、トリペプチド、イソロイシン含有ペプチド、トリペプチド、ジペプチド又はトリイソロイシン）分も10質量％から１質量％に減らすこともでき、例えば、9.99、---9.9、9.8、9.7、---9.3、9.2、9.1、---9、8、7、6、5、4、3、2、1.9、1.8、1.7、---1.66、---1.6、1.5、1.4、1.3、1.2、1.1、１質量％まで減らすことができ、それに応じて抗体又は抗体誘導体分を、例えば、30.1、30.2、30.3、---30.8、30.9、31、32、33、34、35、36、37、38、38.1、38.2、38.3、---38.33、---38.4、38.5、38.6、38.7、38.8、38.9、---39質量％まで増やすことができ、組成物の乾燥質量に対する各成分の質量比合計を最大100質量％とする。ペプチド（ジペプチド、トリペプチド、イソロイシン含有ペプチド、トリペプチド、ジペプチド又はトリイソロイシン）分を本願明細書に示したように10質量％から１質量％に下げると、粉末における1,4 O-結合型サッカロース誘導体又は少なくとも１種の1,4 O-結合型サッカロース誘導体を含む糖混合物分を上げることもできる。例えば、有効成分の抗体又は抗体誘導体を10質量％で一定にして、1,4 O-結合型サッカロース誘導体又は少なくとも１種の1,4 O-結合型サッカロース誘導体を含む糖混合物分が80.1、80.2、80.3、---80.8、80.9、81、82、83、84、85、86、87、88、88.1、88.2、88.3、---88.33、---88.4、88.5、88.6、88.7、88.8、88.9又は89質量％の組成物を製造することができる。
【００３７】
とりわけ好ましい組成物としては、ａ）少なくとも１種の1,4 O-結合型サッカロース誘導体又は少なくとも１種の1,4 O-結合型サッカロース誘導体を含む糖混合物分が60〜80質量％、（ｂ）ペプチド、好ましくはジペプチド又はトリペプチド、特に好ましくはイソロイシン含有ペプチド、さらに好ましくはトリペプチド、さらにはトリイソロイシン分が10〜19.99質量％、ｃ）抗体又は抗体誘導体が0.01〜最大30質量％の組成物、好ましくは、例えば噴霧乾燥粉末のような粉末状組成物であることがわかった。
さらに、本発明の別の実施形態によると、組成物、好ましくは、例えば噴霧乾燥粉末のような粉末状組成物は、さらに、Tween 20、40、60、80、Brij35、Pluronic F88及びPluronic F127等のような界面活性物質が含んでいてもよい。これらの物質は、0.01〜0.1質量％濃度で使用することが好ましい。少なくとも１種の1,4 O-結合型サッカロース誘導体又は少なくとも１種の1,4 O-結合型サッカロース誘導体を含む糖混合物をアジュバントとして含有し、さらにTween 20を界面活性物質として濃度0.01〜0.1質量％で含む組成物、好ましくは、例えば噴霧乾燥粉末のような粉末状組成物が特に好ましい。
更なる実施形態によると、本発明の粉末状組成物の粒子は、ＭＭＤが１〜10μｍ、好ましくは１〜５μｍである。
別の実施形態では、本発明は、ａ）少なくとも１種の1,4 O-結合型サッカロース誘導体又は少なくとも１種の1,4 O-結合型サッカロース誘導体を含む糖混合物分と、ｂ）１種の抗体又は抗体誘導体とを含む組成物、好ましくは、例えば噴霧乾燥粉末のような粉末状組成物であって、前記粉末状組成物のガラス転移温度が40℃より高いことを特徴とする組成物に関する。通常、本発明の粉末の最高ガラス転移温度は、およそ96〜110℃である。しかしながら、個々のケースに応じて、この値はさらに高くてもよい。
さらに、本発明は、本願明細書に記載の組成物の少なくとも１種を含む医薬組成物に関する。
【００３８】
本発明の組成物の製造：
本発明の組成物は、ａ）少なくとも１種の1,4 O-結合型サッカロース誘導体又は少なくとも１種の1,4 O-結合型サッカロース誘導体を含む糖混合物分と、ｂ）１種の抗体又は抗体誘導体とを含む、液体、半固体又は固体の組成物である。特に好ましいのは固体の粉末状組成物で、例えば、水溶液又は懸濁液を凍結乾燥又は噴霧乾燥により作製した固体の粉末状組成物である。水溶液又は懸濁液は、該当する成分（例えば、1,4 O-結合型サッカロース誘導体と抗体等）を好適な溶媒中に混合又は懸濁させて得ることができる。それぞれの物質は乾燥状態で溶媒に添加して、溶解、懸濁させることもできる。半固体状製剤も好適である。半固体製剤は、単一又は複合基剤で構成され、その中に、本発明によるａ）少なくとも１種の1,4 O-結合型サッカロース誘導体又は少なくとも１種の1,4 O-結合型サッカロース誘導体を含む糖混合物分と、ｂ）抗体又は抗体誘導体とが溶解又は分散されている。1,4 O-結合型サッカロース誘導体又は少なくとも１種の1,4 O-結合型サッカロース誘導体を含む糖混合物分と、抗体又は抗体誘導体とは、個々に基剤に添加することができる。あるいは、前記記載のように、記載した好適な方法で作製した粉末中に添加することもできる。製剤は、さらに、防腐剤、酸化防止剤、安定化剤、乳化剤、増粘剤、浸透促進剤等の適したアジュバント又は他のアジュバントを含有してもよい。好適な半固体状基剤としては、疎水性軟膏、水吸収性軟膏、親水性軟膏、親油性クリーム、親水性クリーム、親油性ゲル、親水性ゲル、ペースト及びコーティング用ペーストが挙げられるが、これらに限定されるものではない。
【００３９】
例えば、先の水溶液又は懸濁液を乾燥させて作製する固体状粉末組成物もとりわけ好ましい。公知の乾燥方法としては、とりわけ凍結乾燥、噴霧乾燥、真空乾燥、赤外線乾燥又はマイクロ波乾燥が挙げられる。好適な方法の説明の１つとして、例えば、Willmannの発表（論文、2000、Dr. Hut Verlag、ドイツ、ミュンヘン  ISBN 3-89963-027-0）に記載があり、この内容を引用により本願明細書の記載に含むものとする。ａ）少なくとも１種の1,4 O-結合型サッカロース誘導体又は少なくとも１種の1,4 O-結合型サッカロース誘導体を含む糖混合物分と、ｂ）１種の抗体又は抗体誘導体とで構成される粉末状組成物は、噴霧乾燥又は凍結乾燥によって製造したものがとりわけ安定していることがわかった。
本発明の乾燥粉末の製造：
また、本発明は、上記で詳細に説明した乾燥粉末、好ましくは噴霧乾燥粉末の製造方法を提供する。噴霧乾燥方法は、ａ）医薬有効成分としての抗体又は抗体誘導体と、ｂ）少なくとも１種の1,4 O-結合型サッカロース誘導体又は少なくとも１種の1,4 O-結合型サッカロース誘導体を含む糖混合物とを含む噴霧用溶液／懸濁液を、温度200℃未満／120℃未満（入口温度／出口温度）で、好ましくは温度186℃未満／96℃未満で、また、好ましくは温度186℃／96℃〜60℃／40℃で、例えば、180〜150℃／95〜80℃で噴霧することを特徴とする。本発明の方法は、「実施例」のセクションで多数の実施例を基に、より詳細に説明する。
基本的には、本発明の粉末は、抗体又は抗体誘導体を、それらの溶解条件に応じて水溶液に溶解することによって製造することができる。通常、ｐＨ３〜11、好ましくはｐＨ3.5〜９の緩衝液が用いられる。吸入可能な粉末を調製するには、ｐＨ４〜7.8の水溶液が特に有利である。十分な溶解度を確保するには、溶液のｐＨ値を抗体又は抗体誘導体のｐＨ値より低くするとよい。水溶液にはさらに、例えばアセトン、アルコール等のような水溶性有機溶媒を付加的に含有させてもよい。メタノール、エタノール又はプロパノール（ｎ-プロパノールもしくはイソプロパノール）等の低級アルコール類が特に好適である。このような混合溶媒系は、通常、水溶性有機溶媒を10〜20容量％含む。乾燥用溶液中の固形分は、通常、0.01〜20質量％、好ましくは0.05〜10質量％、特に好ましくは0.1〜５質量％となる。本発明の範囲では、噴霧乾燥粉末は、固形分10質量％、3.33質量％又は2.00質量％の水溶液を基に、ならびに、凍結乾燥粉末は、固形分10質量％の水溶液を基に作製した。
【００４０】
例えば上記記載したようなアジュバント又は好適なアジュバントの混合物は、通常、第２の容器中で、非常に純度の高い水又はｐＨ３〜11、好ましくはｐＨ3.5〜９、特に好ましくはｐＨ4.0〜7.8の適当な緩衝液を用いて溶解し、第２工程で抗体又は抗体誘導体を含む有効成分溶液と一緒に混合する。その後、この溶液／懸濁液を、極めて純度の高い水又はｐＨ３〜11、好ましくはｐＨ3.5〜９、特に好ましくはｐＨ4.0〜7.8の好適な緩衝液を用いて、必要とされる固形分になるよう調整する。
そこで、本発明は、粉末の製造方法であって、
ａ）抗体又は抗体誘導体を水溶液／懸濁液に溶解し、
ｂ）化合物ラクトスクロース、グルコシルスクロースもしくはマルトシルスクロースから選択される1,4 O-結合型サッカロース誘導体１種以上、又は、これらの1,4 O-結合型サッカロース誘導体の少なくとも１種を含有する糖混合物を水溶液／懸濁液に溶解／懸濁し、
ｃ）抗体又は抗体誘導体と、1,4 O-結合型サッカロース誘導体又は少なくとも１種の1,4 O-結合型サッカロース誘導体を含む糖混合物とが異なる溶液／懸濁液に溶解／懸濁している場合は、それらを混合し、
ｄ）1,4 O-結合型サッカロース誘導体１種以上と抗体又は抗体誘導体とを含む溶液／懸濁液を乾燥させることを特徴とする製造方法に関する。
乾燥工程が噴霧乾燥の場合、ｄ）の乾燥が、温度200℃未満／120℃未満（入口温度／出口温度）、好ましくは温度60℃／40℃から温度186℃／96℃の範囲で前記溶液／懸濁液を噴霧して行うことを特徴とする。
【００４１】
1,4 O-結合型サッカロース誘導体は、少なくとも１種の1,4 O-結合型サッカロース誘導体を含む糖混合物の一部を形成していてもよい。好適な糖混合物の例については、「定義」のセクションでより詳細に記載されている。この場合、糖混合物は、1,4 O-結合型サッカロース誘導体とともに、１種以上の単糖類、ニ糖類及び／又は多糖類を含むことができるが、粉末製造上から単糖類及び／又はニ糖類を添加して使うことが好ましい。本発明の範囲では、例えば、ラクトスクロース、ラクトース及びサッカロースの糖混合物の使用が可能であり、組成物の糖分全体に対するラクトスクロース分が40質量％以上、好ましくは55質量％以上、特には88質量％以上が好ましい。好ましい糖混合物としては、株式会社林原商事（日本）の「乳果オリゴ（登録商標）LS55P」（LS55Pと略記）と呼ばれ、少なくとも55％のラクトスクロースと、最大で25質量％のラクトースと最大で10質量％のサッカロースとを含む糖混合物である。別の好ましい実施形態によると、株式会社林原商事（日本）の「乳果オリゴ（登録商標）LS90P」（LS90Pと略記）と呼ばれ、少なくとも88％のラクトスクロースと、最大で10質量％のラクトース及びサッカロースとを含む糖混合物である。グルコシルスクロース及びマルトシルスクロースの組成物で構成される糖混合物も、好ましくは、他の単糖類、ニ糖類及び／又は多糖類と一緒に使用するとよい。また、本発明で好適な糖分子とは、結局、グルコシルスクロースとマルトシルスクロース、サッカロース、グルコース及び／又はフルクトースで構成される糖分子で、組成物中の糖分全体に対してグルコシルスクロースとマルトシルスクロースが25質量％以上であることが好ましい。さらに好ましい実施形態によると、グルコシルスクロースとマルトシルスクロースそれぞれの含有量は、糖分全体に対して少なくとも18質量％である。また別の好ましい実施形態では、使用する糖混合物が、グルコシル及びマルトシルスクロースをそれぞれ少なくとも18質量％、サッカロースを11〜15質量％、グルコースとフルクトースをそれぞれ５〜９質量％含む、株式会社林原商事（日本）の「カップリングシュガー（登録商標）」である。また、本発明では、グルコシル及び／又はマルトシルスクロースを少なくとも25質量％、サッカロースを48〜56質量％、グルコース及びフルクトースを10質量％以下含む、「カップリングシュガーＳ（登録商標）」（株式会社林原商事、日本）と呼ばれる糖混合物も好適である。
【００４２】
乾燥させる溶液／懸濁液中の1,4 O-結合型サッカロース誘導体又は少なくとも１種の1,4 O-結合型サッカロース誘導体を含む糖混合物のアジュバント含有量は、乾燥させる溶液又は懸濁液の固形分に対して25〜99.99質量％、好ましくは60〜99質量％、さらに好ましくは60〜90質量％である。抗体又は抗体誘導体という医薬有効成分濃度は、乾燥させる溶液又は懸濁液の固形分に対して通常0.01〜75質量％、好ましくは0.01〜40質量％、特に好ましくは0.01〜30質量％である。この分野の当業者であれば、前記記載の本発明の粉末組成を基に、乾燥用溶液／懸濁液を作製することは可能であり、乾燥後、とりわけ噴霧後、当該粉末組成物となる。
また本発明は、前記記載の乾燥粉末の製造方法であって、乾燥用溶液／懸濁液の固形分が、25〜99.99質量％、好ましくは60〜99質量％の少なくとも１種の1,4 O-結合型サッカロース誘導体又は少なくとも１種の1,4 O-結合型サッカロース誘導体を含む糖混合物を含有することを特徴とする製造方法に関する。別の推奨実施形態によると、本発明は前記製造方法であって、乾燥用溶液／懸濁液の固形分中に0.01〜75質量％、好ましくは0.01〜30質量％、特に好ましくは0.33〜30質量％の医薬有効成分としての抗体又は抗体誘導体を含むことを特徴とする方法に関する。
本発明のさらなる実施形態によると、固形分の、（ａ）少なくとも25質量％、例えば、25〜99.99質量％が少なくとも１種の1,4 O-結合型サッカロース誘導体又は少なくとも１種の1,4 O-結合型サッカロース誘導体を含む糖混合物であり、（ｂ）少なくとも0.01質量％、好ましくは0.01〜75質量％が医薬有効成分としての抗体又は抗体誘導体である、乾燥用溶液／懸濁液を製造し、乾燥、とりわけ噴霧するものであって、質量パーセントの合計が最大100質量％となる。好ましい実施形態の１つによると、固形分の、（ａ）少なくとも60質量％、好ましくは60〜90質量％が少なくとも１種の1,4 O-結合型サッカロース誘導体又は少なくとも１種の1,4 O-結合型サッカロース誘導体を含む糖混合物であり、（ｂ）0.01〜40質量％が抗体又は抗体誘導体である乾燥用溶液／懸濁液を製造、乾燥、好ましくは噴霧するものであって、溶液又は懸濁液の質量パーセントの合計が噴霧溶液／噴霧懸濁液の固形分に対して最大で100質量％となる。
【００４３】
さらに、前記記載の本発明の粉末によっては、別の実施形態では、本発明の乾燥用溶液／懸濁液がさらに医薬的に適用可能なアジュバント１種以上の及び／又は塩１種以上を含む。アジュバントは、主に、アミノ酸、ペプチドもしくはその塩、糖類、ポリオール、有機酸の塩及び／又はポリマーである。
乾燥させる溶液／懸濁液が、ａ）医薬有効成分としての１種の抗体又は抗体誘導体と、ｂ）少なくとも１種の1,4 O-結合型サッカロース誘導体又は少なくとも１種の1,4 O-結合型サッカロース誘導体を含む糖混合物と共に、好ましくは、ｃ）他のアジュバントとしての１種以上のアミノ酸及び／又はペプチド又はタンパク質を含むのが好ましい。そこで、本発明は、乾燥粉末、好ましくは噴霧乾燥粉末の製造方法であって、乾燥用溶液／懸濁液が、その固形分を基準に、ａ）少なくとも25質量％、好ましくは少なくとも60〜90質量％の少なくとも１種の1,4 O-結合型サッカロース誘導体又は少なくとも１種の1,4 O-結合型サッカロース誘導体を含む糖混合物と、ｂ）１〜19.99質量％の少なくとも１種のアミノ酸及び／又は少なくとも１種のペプチドと、ｃ）0.01〜74質量％の抗体又は抗体誘導体とを含むことを特徴とする製造方法に関する。医薬的に適用可能な塩、ペプチド及びアミノ酸をはじめとする好適なアジュバントの例は、本願明細書の「本発明の粉末」のセクションに記載されている。この分野の当業者であれば、前記粉末を製造し、固形分の合計が最大100質量％となるように質量分を調整することは可能であろう。抗体又は抗体誘導体分（全固形分に対して）が例えば10質量％で、かつ、少なくとも１種の1,4 O-結合型サッカロース誘導体又は少なくとも１種の1,4 O-結合型サッカロース誘導体を含む糖混合物分が80質量％である場合、当業者であれば、最大で10質量％のアミノ酸を乾燥用溶液／懸濁液に添加できることがわかる。
【００４４】
さらに好ましい実施形態によると、乾燥用溶液／懸濁液は、少なくとも１種の1,4 O-結合型サッカロース誘導体又は少なくとも１種の1,4 O-結合型サッカロース誘導体を含む糖混合物とともに、付加的アジュバントとしてイソロイシンをさらに含む。乾燥用溶液／懸濁液の固形分を基準に、ａ）少なくとも25質量％、好ましくは60〜90質量％の少なくとも１種の1,4 O-結合型サッカロース誘導体又は少なくとも１種の1,4 O-結合型サッカロース誘導体を含む糖混合物、ｂ）１〜19.99質量％のイソロイシン、及びｃ）少なくとも0.01質量％の医薬有効成分としての抗体又は抗体誘導体を含む乾燥用溶液／懸濁液が有利であると考えられる。この場合、抗体又は抗体誘導体分は、0.01質量％から最大で74質量％が好ましく、これによって固形分の合計を最大100％とする。この分野の当業者であれば、該当する粉末を好ましくは噴霧乾燥によって製造し、固形分の合計が最大100質量％になるように質量分を調整することは可能であろう。抗体又は抗体誘導体分が（全固形分に対して）例えば10質量％で、かつ、少なくとも１種の1,4 O-結合型サッカロース誘導体又は少なくとも１種の1,4 O-結合型サッカロース誘導体を含む糖混合物分が80質量％になる場合、当業者であれば、乾燥用溶液／懸濁液にイソロイシンを最大で10質量％添加できることがわかる。
【００４５】
別の実施形態によると、乾燥用溶液／懸濁液は、少なくとも１種の1,4 O-結合型サッカロース誘導体又は少なくとも１種の1,4 O-結合型サッカロース誘導体を含む糖混合物とともに、１種以上のトリペプチド、特に好ましくはトリイソロイシンを含む。溶液／懸濁液の固形分を基準に、ａ）少なくとも25質量％、好ましくは60〜98.99質量％、特に好ましくは60〜90質量％の少なくとも１種の1,4 O-結合型サッカロース誘導体又は少なくとも１種の1,4 O-結合型サッカロース誘導体を含む糖混合物、ｂ）１〜19.99質量％のペプチド、好ましくはジペプチド又はトリペプチド、特に好ましくはイソロイシン含有ペプチド、さらに好ましくはトリイソロイシン、ｃ）少なくとも0.01質量％の医薬有効成分としての抗体又は抗体誘導体を含み、それによって、固形分の合計が最大で100質量％となる溶液／懸濁液が有利だと考えられる。この場合、抗体又は抗体誘導体分が0.01質量％から最大で74質量％が好ましい。この分野の当業者であれば、該当する粉末を製造し、その固形分の合計が最大で100質量％となるように質量比率を調整することができよう。抗体又は抗体誘導体の比率が（全固形分に対して）10質量％で、かつ、少なくとも１種の1,4 O-結合型サッカロース誘導体又は少なくとも１種の1,4 O-結合型サッカロース誘導体を含む糖混合物の比率が80質量％となる場合、当業者であれば、ペプチド、好ましくはジペプチド又はトリペプチド、特に好ましくはイソロイシン含有ペプチド、とりわけトリイソロイシンを、最大で10質量％乾燥用溶液又は懸濁液に添加可能であることがわかる。
既に記したように、乾燥、好ましくは噴霧に供する溶液をｐＨ３〜11、好ましくは3.5〜９、特に好ましくは4.0〜7.8で製造及び噴霧すると有利である。好適な緩衝剤系は当業者には公知である。一般に、無機塩又は有機塩を緩衝剤系として利用することが、とりわけ有利であることがわかっている。
【００４６】
通常、抗体又は抗体誘導体に対する最適なアジュバント及びタンパク質含量は、実験的に求める。本発明の好ましい調剤には、分散性や流動性といった粉末特性を改善し、凝集体の抑制を維持するために、付加的アジュバントが含有されるとよい。
噴霧乾燥
噴霧乾燥は、従来の噴霧乾燥器、例えば、ニロ社（ソーボー（Soeborg）、デンマーク）、Buchi Labortechnik社（フラウィル、スイス）等が製造した装置で行われる。噴霧乾燥の最適条件はそれぞれ処方によって異なるので、実験的に求めればよい。通常、使用するガスは空気であるが、窒素又はアルゴン等のような不活性ガスも好適である。さらに、噴霧乾燥温度、即ち、入口温度及び出口温度を意味するが、これらの温度は使用する有効成分の温度に対する反応性にしたがって、また、それぞれのケースで使用する安定化剤に応じて決められる。入口温度は通常50〜200℃、一方、出口温度は通常30〜150℃である。本発明の範囲においては、入口温度は約170〜185℃、出口温度は80〜100℃で操作を行った。しかしながら、安定化剤含有量に応じて、入口温度は200℃まで、好ましくは60〜185℃、出口温度は120℃まで、好ましくは40〜105℃にすることができる。噴霧は、通常、およそ20〜150psi、好ましくは約30〜又は40〜100psi、例えば、約30、40、50、60、70、80、90又は100psiの圧力で行う。
【００４７】
噴霧乾燥器ビュッヒB290（Buchi B290）の場合、液体供給量は通常0.1〜100ml／分、好ましくは0.1〜30ml／分で、例えば約３ml／分である。これに関連して、アスピレータ流量は20〜40m3／時、好ましくは30〜40m3／時、例えば38.3m3／時であり、霧化速度は0.3〜2.5m3／時、好ましくは約0.67m3／時、1.05m3／時、1.74m3／時が特に適切であることがわかった。
噴霧乾燥した抗体又は抗体誘導体製剤に、任意であるが第２のゆるやかな乾燥（後乾燥）を施してもよい。その目的は調剤を規定の残留含水量にすることで、好ましくは２質量％未満にすることで、これにより、有効成分の安定性とともに粉末特性であるガラス転移温度、流動性及び分散性等を改善する。後乾燥工程の条件は、抗体又は抗体誘導体の凝集が著しく増加しないように決めなければならない。噴霧乾燥有効成分製剤は、好ましくは乾燥条件下（低い相対湿度のもと）で製造、さらに加工及び保存されることが好ましい。噴霧乾燥後の初期残留含水量が比較的高くても、後乾燥工程によって粉末中の水分を一層減少させることが可能である。驚くべきことに、製造及び保存条件が最適でないとしても、好適な調剤においては、本発明の対象であるアジュバントによってタンパク質が非常に良好に安定化する。
【００４８】
凍結乾燥
水溶液の凍結乾燥は、Essig及びOschmannの「Lyophilisation」（学会発表、シュトゥットガルト、1993）に記載の説明に沿って行うことができる。治療用有効成分及び抗体又は抗体誘導体は、通常、水溶液又は懸濁液状態で凍結乾燥を行う。好適な濃度やｐＨ値に考慮しなければならない。好ましい製剤においては、最初に抗体又は抗体誘導体を好適な緩衝系水溶液に溶解する。タンパク質含有溶液のｐＨ値は通常３〜11、好ましくは3.5〜９、特に好ましくは4.0〜８である。溶液のｐＨ値は、抗体／抗体誘導体の等電点より低いか高い値に設定しなければならない。第２の容器では、アジュバント又は好適なアジュバントの混合物を、非常に純度の高い水又はｐＨ３〜11、好ましくはｐＨ3.5〜９、特に好ましくはｐＨ4.0〜8.5の適当な緩衝液に溶解し、第２の工程でタンパク質溶液と一緒に混合する。最後に、極めて純度の高い水又はｐＨ３〜11、好ましくはｐＨ3.5〜９、特に好ましくはｐＨ4.0〜8.5の好適な緩衝液を用いて、溶液が必要とされる固形分になるよう調整する。総固形分が0.1〜30質量％であることが適当であり、好ましくは0.5〜20質量％、特に好ましくは0.75〜15.0質量％である。
その後、従来からの市販の凍結乾燥器、例えば、Martin Christ Gefriertrocknungsanlagen社の凍結乾燥器Christ LPC-16/NT Epsilon 2-12 D型等で溶液の凍結乾燥を行う。生成物は、タンパク質含有粉末又はケークで、さらなる処理の前に、適当な工程でサイズを小さくして、多分散系粉末にする。
【００４９】
凍結乾燥器内の温度は実験的に最適化するが、通常は-70〜+100℃、好ましくは-50〜+40℃の範囲である。凍結乾燥器内の圧力パラメータは、10*e-5〜1013mbarが好ましい。凍結乾燥したタンパク質製剤は、その粒度の低減後、第２の穏やかな乾燥（後乾燥）を施すことが好ましい。その目的は製剤中の残留含水量を２質量％未満に均一に保つことで、それによって抗体の安定性とともに粉末特性であるガラス転移温度、流動性及び分散性等を改善するためである。後乾燥工程の条件は、タンパク質の凝集が著しく増加しないように決めなければならない。
噴霧乾燥した乾燥粉末調剤の特性
本発明の範囲で製造した乾燥タンパク質粉末調剤の残留含水量は15質量％未満、通常は10質量％未満、好ましくは６質量％未満である。特に好ましくは、噴霧乾燥による乾燥タンパク質粉末調剤の残留含水量は５質量％未満で、特に好ましくは３質量％未満、0.2〜2.0質量％の残留含水量が最も好ましい。残留含水量が低いほど、充填及び保存期間中の調剤の安定性は向上する。さらに、本発明の乾燥タンパク質粉末調剤はとりわけ吸湿性を示す。即ち、この調剤は周囲の水分を吸収する傾向を有する。これを防ぐために、通常、粉末は、大気中の水分を中に入れないブリスターパックのような容器で保存する。驚いたことに、本発明の粉末の調剤のうち選ばれたいくつかでは、相対湿度43％で１ヶ月間開放状態で保存しても、タンパク質の安定性と吸入性の両方の面で安定した状態を保っていることがわかった。
【００５０】
本願明細書で記載したアジュバントによる安定化効果で、噴霧乾燥中及び保存中のタンパク質を過度の負荷から保護することができる。アジュバントなしで噴霧乾燥したタンパク質のみの調剤は、かなりの凝集体を形成する。熱、剪断応力及び空気と水との界面での変性といったプロセス依存の要因により、凝集は噴霧乾燥時（凝集体：約6.6％まで）及びその後の後乾燥時（凝集体：約5.8％まで）に起こる。保存中は、タンパク質を安定化させるための水和物の殻がないため、大量の凝集をひきおこす（凝集体：約11.8〜約18.9％）。
タンパク質のみの調剤と比較して、本発明の好適な噴霧乾燥調剤は、噴霧乾燥後の凝集体の形成を抑えるとともに、様々な保存条件のもとでも凝集体の形成を非常に低いレベルに保つことができる。噴霧乾燥及びそれに続く真空乾燥で、好ましい調剤での凝集体の形成は約0.5〜約1.8％にとどまるが、それに対して、タンパク質のみの調剤の場合は約4.0％の凝集体含有率である。とりわけ厳しい保存条件下（40℃、相対温度75％）の強制的保存安定性の場合、タンパク質のみの調剤（凝集体：約18.2〜18.9％）やアジュバントとしてトレハロースを用いた類似の参照用調剤に対して、本発明の好適な調剤は、凝集体含有率約1.0〜約13.1％という優位性を明示する。この優位性は実施例４に示す調剤との比較で特に顕著となる。噴霧溶液にトリイソロイシンを添加することにより、粉末の空気力学特性が著しく向上する。驚くべきことに、少なくとも１種の1,4 O-結合型サッカロース誘導体、好ましくはラクトスクロースとトリイソロイシン、とりわけLS55PとトリイソロイシンやLS90Pとトリイソロイシンを含む組合せの場合のみ、タンパク質を凝集体形成から保護することができる（凝集体：0.7〜4.4％のみ）。ＷＯ01/32144記載のトリイソロイシンとラフィノースとの組合せ（凝集体：12.6％）又はヒドロキシエチルデンプンとの組合せ（凝集体：約18.6％）だけでなく、従来技術で優れた安定化剤として記載されているトレハロースの場合も、トリイソロイシンとの組合せでは特に厳しい条件下ではタンパク質凝集体形成を防ぐことができない。LS55P-トリイソロイシン調剤及びLS90P-トリイソロイシン調剤も、サッカロース-トリイソロイシン調剤（凝集体：5.6％）やサッカロース-ラクトース-トリイソロイシン調剤（凝集体：8.8％）と比べると明らかに優れている。さらに驚くべきことは、LS55Pにはサッカロースとともにラクトースも25％まで含有されているということである。還元糖であるラクトースがタンパク質の安定性に及ぼすマイナスの影響が、LS55Pの場合、1,4 O-結合型サッカロース誘導体のラクトスクロースにより過分に補われているケースであることが明らかである。調剤の糖分においてラクトスクロースの割合が高いほど、タンパク質安定性にとって非常に有利になる（LS90P調剤参照）。
【００５１】
調剤を、著しく不安定化させる条件下で比較的短い期間（１週間、40℃、相対湿度75％）保存した際に、混合されているタンパク質に対して既に顕著な安定化効果を及ぼしているのであれば、かなり穏やかな標準的保存条件のもとで長期間（１年間、乾燥状態、約25℃）にわたる保存であっても、タンパク質は安定化される。
平衡化（equilibration）の後、乾燥状態、40℃で４週間保存（平衡化保存安定性）すると、LS55Pやカップリングシュガーを含む粉末調剤は、凝集体含有率が低い（約1.4〜3.2％）という特徴を示すが、これはタンパク質だけの粉末（凝集体含有率：約11.8％）と比較すると顕著である。
真空乾燥の後、乾燥状態、40℃で４週間保存（真空乾燥保存安定性）すると、LS55Pやカップリングシュガーを含む粉末調剤は、凝集体含有率が低い（約1.1〜2.1％）という特徴を示すが、これはタンパク質だけの粉末（凝集体含有率：約13.2％）と比較すると顕著である。
細粒分が約35％の、LS55P（80％）とイソロイシン（10％）とIgG1（10％）とによる調剤の場合、真空乾燥を行った後に窒素雰囲気下で充填し、乾燥状態で２〜８℃、25℃、40℃で３ヶ月間保存すると、凝集体含有率は1.9％未満である。
【００５２】
LS55P（80％）とトリイソロイシン（10％）とIgG1（10％）の調剤で、噴霧乾燥後のＭＭＡＤが約3.9μｍで細粒分が約58.3％の調剤は、真空乾燥を行った後に窒素雰囲気下で充填し、乾燥状態で２〜８℃、25℃で３ヶ月間保存すると、凝集体含有率は1.9％未満で、また、乾燥状態、40℃で保存すると（３ヶ月安定性）、凝集体含有率2.6％未満を示す。
【００５３】
さらに、前記のLS55P（80％）とトリイソロイシン（10％）とIgG1（10％）との調剤は、相対湿度が約43％で温度25℃での１ヶ月間の開放状態の保存（１ヶ月開放状態安定性）後も、ＭＭＡＤがほぼ同じくらい低く（約3.8μｍ）、同じように細粒分が高い（約59.6％）状態で、凝集体含有率は低いままだった（約1.3％）。
LS90P（90％）とIgG1（10％）との調剤で、噴霧乾燥後のＭＭＡＤが約3.8μｍ、ＭＭＤが約2.8μｍで、細粒分が約24％の調剤は、真空乾燥を行った後に窒素雰囲気下で充填し、乾燥状態で２〜８℃、25℃、40℃で１ヶ月及び３ヶ月間保存すると（１ヶ月安定性及び３ヶ月安定性）、それぞれ凝集体含有率は1.2％未満及び2.2％未満を示す。
LS90P（80％）とイソロイシン（10％）とIgG1（10％）との調剤で、噴霧乾燥後の細粒分が約28％の調剤は、真空乾燥を行った後に窒素雰囲気下で充填し、乾燥状態で２〜８℃、25℃、40℃で１ヶ月及び３ヶ月間保存すると（１ヶ月安定性及び３ヶ月安定性）、それぞれ凝集体含有率は0.9％未満及び1.1％未満を示す。
LS90P（80％）とトリイソロイシン（10％）とIgG1（10％）との調剤で、噴霧乾燥後のＭＭＡＤが約4.8μｍ、細粒分が約53.2％の調剤は、真空乾燥を行った後に窒素雰囲気下で充填し、乾燥状態で２〜８℃、25℃、40℃で１ヶ月及び３ヶ月間保存すると（１ヶ月安定性及び３ヶ月安定性）、それぞれ凝集体含有率は1.0％未満及び2.3％未満を示す。
【００５４】
さらに、前記記載のLS90P（80％）とトリイソロイシン（10％）とIgG1（10％）との調剤の様々な種類においては、相対湿度約43％、温度25℃で１ヶ月及び３ヶ月間開放状態で保存すると（１ヶ月及び３ヶ月開放状態安定性）、約0.5％未満と約0.8％未満の低い凝集体含有率を示す。噴霧乾燥後、ＭＭＡＤは3.9〜3.3μｍ、細粒分は約55.6〜58.9％である。相対湿度43％、温度25℃での１ヶ月開放保存後、前記調剤のＭＭＡＤは低く（約4.1〜3.5μｍ）、細粒分は高い（約62.3〜67.3％）。
噴霧乾燥条件を変えることで、平均粒径（ＭＭＤ）が好ましくは20μｍ未満、さらに好ましくは10μｍ未満の粉末を製造することができる。特に好ましい実施形態によると、本発明の粒子の平均粒径は7.5μｍ未満、好ましくは５μｍ未満である。平均粒径が４μｍ未満の粒子が特に好ましく、さらに、3.5μｍ未満は一層好ましい。平均粒径が0.1〜５μｍ、好ましくは0.2〜４μｍの粒子を製造することもできる。別の実施形態では、前記粒子をラクトースのような粒径が少なくとも40μｍの非呼吸用粒子と混合する。この割合は、好ましくは少なくとも15％が好ましく、より好ましくは少なくとも20％、さらに好ましくは少なくとも30％、さらにより好ましくは少なくとも40％、特に好ましくは少なくとも50％又は60％である。
【００５５】
平均粒径（ＭＭＤ＝体積中央径）とともに、空気動力学的粒径（ＭＭＡＤ）によって吸入性はおおかた決まる。好ましくは、本発明の粒子のＭＭＡＤは10μｍ未満で、より好ましくは7.5μｍ未満である。ＭＭＡＤが5.5μｍ未満、好ましくは５μｍ未満、さらに好ましくは4.5μｍ未満の粒子からなる粉末が特に有利である。実施例に記載の粉末は、噴霧乾燥条件を最適化することと、本発明のアジュバントの選択と濃度を適切にすることを組み合わせて、前記粒径を有する粉末に製造することができる。特に、アミノ酸及び／又はトリペプチドを添加すると粒子特性が改善され、ＭＭＡＤが7.5μｍ未満、好ましくは5.5μｍ未満の吸入可能粒子の割合を増やすことになる。イソロイシンやトリイソロイシンの添加により、ＦＰＦが28％を超える、好ましくは40％を超える、さらに好ましくは50％を超える、より一層好ましくは55％を超える吸入可能粉末を製造することができる（実施例参照）。
さらに、本発明の粉末は、ガラス転移温度が少なくとも40℃、好ましくは少なくとも50℃、さらに好ましくは少なくとも55℃、より一層好ましくは少なくとも60℃という特徴を有する。特に好ましい粉末のガラス転移温度は少なくとも65℃である。通常、本発明の粉末のガラス転移温度は40〜110℃になる。したがって、本発明は、医薬有効成分と、LS90P、LS55P、カップリングシュガー又はカップリングシュガーＳとを含む粉末、好ましくは噴霧乾燥粉末であって、それによってガラス転移温度が40℃以上、好ましくは45〜60℃以上になる粉末に関する。さらに好ましい実施形態によると、ガラス転移温度は55℃以上、好ましくは55〜60℃以上である。
【００５６】
噴霧乾燥粉末の使用
本発明の粉末は医薬品の製造に適しており、好ましくは、吸入性医薬品の製造に適している。
凍結乾燥粉末：
別の方法として、凍結乾燥とその後の微粉砕によって粉末を製造することもできる（実施例参照）。本願明細書に記載の実施例においては、微粉砕は、凍結乾燥用バイアル中でスパチュラを使い、可能な限り簡単な方法で行った。自明であるが、アトリションミル、ボールミル、ロッドミル、モルタルミル、エアジェットミル等の適したミル又は他の好適な方法によっても凍結乾燥物を微粉砕することができる（Bauer、Fromming, Fuhrer、６版参照）。
凍結乾燥、微粉砕した乾燥粉末調剤の特性：
本発明の範囲内で作製される乾燥タンパク質粉末調剤の残留含水量は、15質量％未満、通常は10質量％未満、好ましくは５質量％未満である。凍結乾燥によるタンパク質粉末調剤の残留含水量も３質量％未満であると好ましく、２質量％未満であると特に好ましく、0.2〜1.5質量％の残留含水量が最も好ましい。残留含水量が低いほど、充填及び保存期間中の調剤の安定性が向上する。さらに、本発明の乾燥タンパク質粉末調剤は、とりわけ吸湿性を示す。即ち、この調剤は周囲の水分を吸収する傾向を有する。これを防ぐために、通常、大気中の水分を中に入れない容器、例えばブリスターパックなどで粉末を保存する。
【００５７】
本願明細書で記載したアジュバントの安定化効果により、凍結乾燥中及び保存期間中の過酷なストレスからタンパク質を保護することができる。アジュバントなしで凍結乾燥させたタンパク質のみの調剤は、かなりの凝集体を形成する。熱、剪断応力及び空気と水との界面での変性といったプロセス依存の要因により、凍結乾燥中に凝集が起こる（凝集体：約2.1％まで）。保存期間中、タンパク質を安定化させるための水和物の殻がないため、大量の凝集体が形成される（凝集体：20.5％）。
タンパク質のみの調剤と比べると、本発明の好適な凍結乾燥調剤では、凍結乾燥後の凝集体の形成を抑え、かつ、保存条件が様々であっても凝集体含有率を非常に低いレベルに保つことができる。凍結乾燥、微粉砕を施した凍結乾燥物は、とりわけ厳しい保存条件（40℃、相対温度75％）の「強制的保存安定性」において、タンパク質のみの調剤（凝集体含有率：約14.5％）やアジュバントとしてマンニトールを含む類似の参照用調剤（凝集体含有率：約34.0％）に比べて、凝集体含有率が約1.2〜約1.5％という明瞭な優位性を示す。
特に不安定化させる条件のもとで比較的短い保存期間中（１週間、40℃、相対湿度75％）に、混合されているタンパク質に対して顕著な安定化効果が既にみられる調剤であれば、かなり穏やかな標準的保存条件のもとであれば、長期間（例えば１年間、乾燥状態、約25℃）にわたりタンパク質を安定化させる。
【００５８】
凍結乾燥、微粉砕、平衡化（equilibration）を行い、40℃かつ乾燥状態で４週間保存（平衡化保存安定性）すると、LS55Pやカップリングシュガーを含む粉末調剤は凝集体含有率が低い（約2.6％及び約4.6％）という特徴を示すが、これは、タンパク質のみの粉末（凝集体含有率：約15.3％）やマンニトールをアジュバントとして含む類似の参照用調剤（凝集体含有率：約11.6％）と比較すると顕著である。
凍結乾燥、微粉砕後、真空乾燥を行い、40℃かつ乾燥状態で４週間保存（真空乾燥保存安定性）すると、LS55Pやカップリングシュガーを含む粉末調剤は凝集体含有率が低い（約1.2％及び約1.5％）という特徴を示すが、これは、タンパク質のみの粉末（凝集体含有率：約14.5％）やマンニトールをアジュバントとして含む類似の参照用調剤（凝集体含有率：約6.2％）と比較すると顕著である。
本発明の粉末はさらに、ガラス転移温度が少なくとも40℃、好ましくは少なくとも50℃、より好ましくは少なくとも55℃という特徴を有する。本発明の粉末のガラス転移温度は通常40〜110℃であるが、個々のケースにおいてこの値を超えてもよい。したがって、本発明は、医薬有効成分と、LS90P、LS55P、カップリングシュガー又はカップリングシュガーＳとを含む粉末、好ましくは凍結乾燥微粉砕粉末であって、そのガラス転移温度が40℃以上、好ましくは45〜60℃以上になる粉末に関する。さらに好ましい実施形態によると、ガラス転移温度は55℃以上、好ましくは55〜60℃以上、又は110℃までである。
【００５９】
乾燥粉末の使用
本発明の粉末は医薬品の製造に適しており、好ましくは、吸入性医薬品の製造に適している。
本発明の粉末の送達：
本発明の噴霧乾燥粉末製剤は、基本的には、いわゆる乾燥粉末吸入器等を用いて乾燥粉末のまま直接投与するか、あるいは、エアロゾル状態に再構成してからいわゆる噴霧器を用いて投与することができる。この場合、本発明の吸入粉末は、従来技術から公知の吸入器を用いて投与できる。
本発明による吸入粉末は、例えば、ＵＳ4,570,630Ａに記載されているような計量チャンバーによって保存容器から一回分の投与量を放出する吸入器を用いて、あるいは、ＤＥ3625685Ａに記載されているような他の装置を使って投与することができる。本発明の吸入粉末は、例えばＷＯ94/28958に記載されているような吸入器で使用されるカプセルに充填すること（いわゆるインハレット(inhalettes)の形成)が好ましい。
この他の好適な吸入器の例は、例えば、米国特許第5,458,135号、米国特許第5,785,049号又はＷＯ01/00263に記載されている。好適な吸入器は、ＷＯ97/41031、米国特許第3,906,950号及び米国特許第4,013,075号からも公知である。乾燥粉末調剤用の分散式吸入器は、他にも、ＥＰ129985、ＥＰ472598、ＥＰ467172及び米国特許第5,522,385号に記載されている。
本発明の吸入粉末は、例えば、公知の「タービュヘイラー（Turbuhaler）（登録商標）」（アストラゼネカＬＰ製）という手段で、あるいは、例えばＥＰ237507Ａに開示されているような吸入器を用いて投与することができる。この他の好適な吸入器としては、「ロタヘイラー（Rotahaler）（登録商標）」又は「ディスカス（Discus）（登録商標）」（ともにグラクソスミスクライン社製）、「スピロス（Spiros）(商標）インヘイラー」（Dura Pharmaceuticals社製）及び「スピンヘイラー（Spinhaler）（登録商標）」（フィスコン社製）が挙げられる。
【００６０】
図２４に、インハレット状態の本発明の医薬品組成物を投与するための特に好ましい吸入器を示す。カプセルから粉末状医薬品を吸入するためのこの吸入器（「ハンディヘラー」）は、２個の窓２を含むハウジング１と、空気導入口が設けられ、スクリーンハウジング４で固定されたスクリーン５を備えたデッキ３と、デッキ３に連結し、２本のとがったピン７を備え、バネ８に対して可動するトリガー９を有する吸入チャンバー６と、軸１０を介してハウジング１、デッキ３及びキャップ１１と蝶番式に取り付けられているマウスピース１２と、流動抵抗を調整するための空気孔１３とによって特徴づけられる。
前記記載の好ましい投与として、本発明の吸入粉末をカプセルに充填する場合（インハレット）、充填量はカプセル１個につき１〜30mgが適当である。
また、本発明の吸入粉末は、噴射剤を含有する又は含有しない吸入用エアロゾルとして投与することもできる。このためには、加圧で融解可能な溶媒又は溶媒混合物に本発明の粉末を懸濁させるか、あるいは、水溶液に溶かす。好適な懸濁液又は溶液はこの分野で公知である。例えば、ｐＨ３〜11、好ましくはｐＨ４〜９の生理溶液に溶かして再構成するのが有利である。ｐＨ5.5〜7.8の水溶液に溶かすことが特に有利である。本発明の粉末を溶かすための噴射剤を含む懸濁液又は溶液は、さらに、安定剤、乳化剤、界面活性物質又は水溶性有機溶媒という状態の他のアジュバントをさらに含んでもよい。適切な物質は当業者には既知であり、例えば、Bauer、Textbook of Pharmaceutical Technology、Wissenschaft、Verlagsgesellschaft GmbH、シュトットガルト、178-184；Adler、1998「Journal of Pharmaceutical Sciences」88(2)、199-208に記載されている。本発明の粉末を懸濁又は溶かして調製した前記吸入用エアロゾルも本発明の目的である。
【００６１】
本発明の吸入エアロゾルの調製に使用する噴射剤は、この分野で公知である。ｎ−プロパン、ｎ−ブタン又はイソブタン等の炭化水素化合物、及び、メタン、エタン、プロパン、ブタン、シクロプロパン又はシクロブタンの好ましくは塩素化誘導体及びフッ素化誘導体等のハロゲン化炭化水素化合物を含む群から、適当な噴射剤を選択する。上記噴射剤は単独で、又はその混合物として使用できる。特に好ましい噴射剤は、ＴＧ１１、ＴＧ１２、ＴＧ１３４ａ（1,1,1,2-テトラフルオロエタン）、ＴＧ２２７（1,1,1,2,3,3,3-ヘプタフルオロプロパン）及びこれらの混合物から選択されるハロゲン化アルカン誘導体であり、この中でもＴＧ１３４ａ、ＴＧ２２７及びその混合物の噴射剤が好ましい。
本発明による噴射剤含有吸入エアロゾルは、有効成分を５質量％まで含んでいるとよい。本発明のエアロゾルは医薬有効成分を、例えば、0.002〜５質量％、0.01〜３質量％、0.015〜２質量％、0.1〜２質量％、0.5〜２質量％又は0.5〜１質量％含有する。本発明の粉末を対象として溶かすことにより適切な量の溶媒で、該当する有効成分濃度を有する吸入用エアロゾルを調製することができる。
【００６２】
前述の本発明による噴射剤含有吸入用エアロゾルは、従来の技術において公知である吸入器(定量噴霧吸入器（ＭＤＩ））を用いて投与することもできる。吸入器「ベントリン（登録商標）」（ベントリンファーマシー社）、あるいは米国特許5,32,094号又は米国特許第5,672,581号記載の吸入器を参照できる。従って、本発明の別の態様としては、噴射剤含有エアロゾルを投与するのに適した１種以上の吸入器と組み合わせた、前記記載の噴射剤含有エアロゾル状態の医薬品に関する。更に、本発明は、本発明による前記の噴射剤含有エアロゾルを収容することを特徴とする吸入器に関するものである。
さらに、本発明は、好適な吸入器で使用するための適切なバルブが設けられていることによって使用でき、かつ、本発明による上記噴射剤含有吸入エアロゾルを収容する、カートリッジに関する。好適なカートリッジ、さらには本発明による噴射剤含有吸入エアロゾルをカートリッジに充填する方法については、従来技術から公知である。
【００６３】
また、本発明の粉末は、噴射剤を含有しない吸入溶液又は懸濁液に再構成することもできる。該噴射剤を含有しない吸入溶液は、例えば水性溶媒又はアルコール系溶媒、好ましくはエタノール性溶媒を含有するが、必要に応じてエタノール性溶媒と水性溶媒とを混合してもよい。水性溶媒／エタノール性溶媒との混合物の場合、水に対するエタノールの相対的割合は限定されないが、上限はエタノール70容量％までが好ましく、特に60容量％までが好ましい。残りの容量％を水にする。本発明による噴射剤を含有しない吸入溶液は、補助溶剤及び／又は前記記載のような他のアジュバントと混合してもよい。例えば、ヒドロキシル基又は他の極性基を含む補助溶剤で、例えばアルコール類、特にイソプロピルアルコール、グリコール類、特にプロピレングリコール、ポリエチレングリコール、ポリプロピレングリコール、グリコールエーテル、グリセロール、ポリオキシエチレンアルコール類及びポリオキシエチレン脂肪酸類等を使うことができる。本件では、アジュバント及び添加剤は、それ自体は活性物質ではないが、薬理学的に好適な溶媒中で１種以上の活性物質と共に処方することができ、活性物質を含む調剤の特性を改善することができる、薬理学的に許容される任意の物質を意味すると解される。これらの物質は、一般に、又は、求める治療において、顕著な薬理的作用を持たないか、少なくとも望ましくない薬理作用を有していないことが好ましい。アジュバント及び添加剤としては、例えば、大豆レシチン、オレイン酸、ポリソルベート等のソルビタンエステル類、ポリビニルピロリドンなどの界面活性剤、他の安定剤、錯化剤、医薬製剤最終製品の使用可能期間を保証又は延長する酸化防止剤及び／又は防腐剤とともに、香味付与剤、ビタミン類及び／又は公知の他の添加剤が挙げられる。また、添加剤には、例えば塩化ナトリウム等の薬理学的に無害な塩が等張剤として含まれる。好ましいアジュバントとしては、例えば、ｐＨ値の調整に使用していなければアスコルビン酸、さらにはビタミンＡ、ビタミンＥ、トコフェロール及び類似のビタミン類又は人体組織内で産生するプロビタミン類等の酸化防止剤が挙げられる。防腐剤を使用して細菌による汚染から該処方物を保護することができる。この分野で公知の防腐剤が適しており、特に従来技術において公知の濃度の塩化セチルピリジニウム、塩化ベンザルコニウム又は安息香酸もしくは安息香酸ナトリウム等の安息香酸塩である。上記防腐剤は、好ましくは50mg/100mlまで、特に好ましくは５〜20mg/100mlの範囲の濃度で含有されることが好ましい。従って、本発明は、本発明による粉末を再構成することにより調製した噴射剤を含有しない吸入エアロゾルに関する。
【００６４】
本発明の噴射剤を含有しない吸入溶液の投与には、特に、治療に必要な投与量の液体調剤少量を数秒間以内で霧状にして吸入器での使用に適した治療用エアロゾルを生成することができるタイプの吸入器がとりわけ好適である。本発明の範囲においては、100μL未満、好ましくは50μL未満、より好ましくは10〜30μLの量の有効成分溶液を、１回のストロークで霧化し、平均粒径が20μm未満、好ましくは10μm未満のエアロゾルを形成することができ、エアロゾルの吸入可能な部分が治療上の有効量に相当するように形成することのできる噴霧器が好ましい。
吸入器での投与用の液状医薬品の定量を噴射剤無しで投与するタイプの装置については、例えば国際特許出願ＷＯ91/14468及びＷＯ97/12687（特に図６ａ及び図６ｂ参照）に詳しく記載されている。
本発明の範囲において、ＷＯ97/12687の該当する図６ａ及び図６ｂならびに明細書中の関連箇所を含み、本発明に特別に引用するものである。また、本出願に記載の噴霧器（装置）は、「Respimat（登録商標）」（ベーリンガーインゲルハイムファーマ社）という名称でも知られている。この装置は円筒形に近い形状で、長さ９cm未満〜15cm及び幅２〜４cmの取り扱い易いサイズであることから、患者は常に携行することができる。噴霧器は、高圧下で小さなノズルから所定量の医薬品調剤を噴霧して吸入可能なエアロゾルを生成するものである。
好ましい噴霧器は、上部ハウジング部と、ポンプハウジングと、ノズルと、ブロック引張り機構と、バネハウジングと、バネと、保存容器から基本的に構成され、
【００６５】
−  上部ハウジング部の所定の位置に固定され、その一端にはノズル又はノズル装置を備えたノズル本体を搭載するポンプハウジング、
−  バルブ本体を備えた中空ピストン、
−  内部で中空ピストンが所定位置に固定され、上部ハウジング部に配置された動力取り出しフランジ、
−  上部ハウジング部に配置されたブロック引張り機構、
−  内部にバネを収容し、ピボット軸受けによって上部ハウジング部に回動可能に取り付けられているバネハウジング、
−  バネハウジング上に軸方向に挿入されている下部ハウジング部、とによって特徴づけられる。
バルブ本体を備えた中空ピストンは、ＷＯ97/12687に開示の装置に対応する。中空ピストンは、ポンプハウジングのシリンダ内に一部が突き出ており、シリンダ内を軸方向に移動可能である。本発明の範囲において、図１乃至図４、特に図３及び明細書の関連部分を引用する。バルブ本体を備えた中空ピストンは、バネの作動時に高圧がかかる端部において５〜60Mpa（約50〜600bar）、好ましくは10〜60Mpa（約100〜600bar）の圧力を流体、即ち定量の有効成分溶液に対してかける。10〜50μLの量が好ましい。一ストロークにつき、特に好ましくは10〜20μLで、15μLがとりわけ好ましい。
【００６６】
バルブ本体は、好ましくは中空ピストン端部に配置され、ノズル本体の方に向く。
ノズル本体内のノズルは微細構造を有することが好ましく、即ち、マイクロテクノロジーによって作製されたものであることが好ましい。微細構造を有するノズル本体については、例えばＷＯ94/07607に開示されており、そこの開示されている内容、特に図１及びその関連説明について本願明細書に引用する。ノズル本体は、例えば、互いに強固に結合した２枚のガラス製及び／又はシリコン製シートからなり、２枚のうちの少なくとも１枚には、１本以上の微細構造により作製された溝があり、この溝によってノズル入口側がノズル出口側と連結している。ノズル出口側には、深さ２〜10μmで幅５〜15μm、好ましくは深さが4.5〜6.5μmで、長さが７〜９μmの少なくとも１個の円形および非円形開口部がある。ノズル開口部が複数個、好ましくは２個ある場合、ノズル本体内におけるノズルの噴射方向は互いに平行に延びてもよいし、あるいはノズル開口方向に互いに対して傾斜している。出口側に少なくとも２つのノズル開口部を有するノズル本体において、噴射方向は、20〜160°の角度で互いに対して傾いていてもよい。角度は、好ましくは60〜150°が好ましく、特に好ましくは80〜100°の角度である。ノズル開口部は、好ましくは10〜200μm、より好ましくは10〜100μm、特に好ましくは30〜70μmの間隔をおいて配置される。50μmの間隔が最も好ましい。
したがって、噴射方向はノズル開口部近傍で収束する。
【００６７】
液状医薬品調剤は、入口圧力600barまで、好ましくは200〜300barでノズル本体に突き当たり、ノズル開口部を通って霧化され吸入可能なエアロゾルになる。エアロゾルの好ましい粒径または液滴径は20μmまで、好ましくは３〜10μmである。
ブロック引張り機構は、力学的エネルギーを保存するためのバネ、好ましくは円筒状のネジ型圧縮バネを備える。このバネは弾性部材として動力取り出しフランジに作用するが、フランジの移動はブロック部材の位置によって決まる。この動力取り出しフランジの移動は、上端止め及び下端止め（stop）によって正確に定められている。上部ハウジング部が下部ハウジング部内のバネハウジングと反対に回転する際に発生する外部トルクによって、力を伝達する装置、例えば螺旋状スラストギア等を用いてバネが引っ張られるのが好ましい。この場合、上部ハウジング部及び動力取り出しフランジは、一条又は多条Ｖギアと組み込む。
絡まりのあるブロック表面を有するブロック部材は、動力取り出しフランジの回りにリング状に配置されている。ブロック部材は、例えば、固有の径方向に弾性変形するプラスチック製又は金属製のリングで構成される。このリングは、噴霧器の軸に対して直角をなす面に配置される。バネが引っ張られた後、ブロック部材のブロック面は動力取り出しフランジ通路内に滑動し、バネが緩まないようにする。ブロック部材はボタンによって作動する。この作動ボタンはブロック部材に接続又は連結している。ブロック引張り機構を作動させるには、作動ボタンをリング平面に対して平行に、好ましくは噴霧器内に移動させ、変形性リングをリング面において変形させる。ブロック引張り機構の設計詳細はＷＯ97/20590に記載されている。
【００６８】
下部ハウジングは、軸方向にバネハウジング上に滑り動かされ、軸受、スピンドル駆動装置及び流体貯蔵容器を収容する。
噴霧器を作動させている間、上部ハウジング部が下部ハウジング部と反対に回転し、それによって下部ハウジング部がバネハウジングを一緒に回転させる。結果として、バネは螺旋状スラストギアによって圧縮、引っ張られ、ブロック機構が自動的に嵌合する。回転角は360度分の整数度、例えば180度が好ましい。バネに張力がかかると同時に、上部ハウジング部における動力取り出し部が所定の距離だけ移動し、中空ピストンがポンプハウジング内のシリンダ内部に引き戻され、それによって、流体の一部が貯蔵容器から吸い出され、ノズル前方の高圧スペースに送りこまれる。
必要に応じて、噴霧する流体を収容する取替え可能な複数個の貯蔵容器を噴霧器に連続的に挿入して使用してもよい。貯蔵容器には本発明の水性エアロゾル調剤が収容される。
噴霧工程は作動ボタンを軽く押すことにより開始される。この場合、ブロック機構により駆動部用の通路が開けられる。バネに張力が負荷され、ポンプハウジングのシリンダ内にピストンが滑動する。流体は噴霧器のノズルから霧状態で放出される。
設計上の更なる詳細については、ＰＣＴ出願ＷＯ97/12683及びＷＯ97/20590に公開されており、これらの内容を本願明細書に引用する。
【００６９】
噴霧器の構成部品は、その機能に適合する材料で作製される。噴霧器のハウジング、さらには機能上許されるならば他の部品も同様にプラスチック製が好ましく、例えば射出成型によって製造される。医療用途であるため、生理学的に安全な材料が用いられる。
ＷＯ97/12687の図６ａ／図６ｂは、その関連説明とともに再度本願明細書に引用されるもので、対応の噴霧器（「Respimat（登録商標）」）を示す。この噴霧器は、本発明による噴射剤を含まない吸入エアロゾルの投与にとりわけ適している。
ＷＯ97/12687の図６ａは、バネが引っ張られた状態の噴霧器の長手方向断面図であり、一方、ＷＯ97/12687の図６ｂは、バネが緩んだ状態の噴霧器の長手方向断面図である。上部ハウジング部（５１）はポンプハウジング（５２）を収容し、その端部には噴霧器ノズル用のホルダ（５３）が取付けられている。このホルダにはノズル本体（５４）及びフィルタ（５５）が配置されている。ブロック引張り機構の動力取り出しフランジ（５６）内に固定された中空ピストン（５７）は、ポンプハウジングのシリンダ内にその一部が突き出ている。中空ピストンは、その端部においてバルブ本体（５８）を担持する。中空ピストンは、シール（５９）によって封止されている。バネが緩んだときに、動力取り出しフランジを保持する止め（６０）が上部ハウジング部の中に設けられる。バネが引っ張られたときに、動力取り出しフランジを保持する止め（６１）が駆動フランジ上に設けられる。バネが引っ張られた後、ブロック部材（６２）は、上部ハウジング部内で止め（６１）と支持体（６３）との間を滑動する。作動ボタン（６４）はブロック部材に連結している。上部ハウジング部は、マウスピース（６５）で終端しており、マウスピースは差込み可能な保護キャップ（６６）により閉じられている。圧縮バネ（６８）を備えたバネハウジング（６７）は、バネ式の爪（６９）及びピボット軸受けによって上部ハウジング部に回動自在に取付けられている。下部ハウジング部（７０）は摺動してバネハウジングの上にかぶせられる。バネハウジング内部には、噴霧する流体（７２）用の取替え可能な貯蔵容器（７１）が配置される。貯蔵容器はストッパ（７３）で封止され、このストッパを通過して中空ピストンは貯蔵容器内に突き出し、その端部が流体中に浸漬される（有効成分溶液の供給）。機械的カウンタ用のスピンドル（７４）は、バネハウジングの外側に取付けられている。上部ハウジング部に面したスピンドルの端部には、駆動ピニオン（７５）が存在する。スライダ（７６）がスピンドル上に配置されている。
【００７０】
本発明の調剤を、前記記載の方法（「Respimat（登録商標）」）を用いて噴霧する場合、吸入器の全作動（ストローク）の少なくとも97％、好ましくは少なくとも98％の段階で送達される質量が、許容範囲最大25％、好ましくは20％を有する規定量に相当するとよい。ストローク１回あたり、規定質量として調剤５〜30mg、特に好ましくは５〜20mgが放出されることが好ましい。
上記以外の吸入器、例えば、ジェット流吸入器又は他の据え置き型噴霧器等を使って、本発明の調剤を噴霧化してもよい。
したがって、本発明の更なる態様は、上記のような噴射剤を含有しない吸入溶液又は懸濁液状態の医薬品であって、この調剤の投与に適した装置、好ましくは「Respimat（登録商標）」と組み合わせた、噴射剤を含有しない吸入溶液又は懸濁液状態の医薬品に関する。好ましくは、本発明は、本発明の粉末の１種を含有する、噴射剤を含有しない吸入溶液又は懸濁液であって、「Respimat（登録商標）」という名称で公知の装置と組み合わせた吸入溶液又は懸濁液に関する。さらに本発明は、前記吸入用の装置、好ましくは「Respimat（登録商標）」であって、前記記載の噴射剤を含有しない吸入溶液又は懸濁液を収容していることを特徴とする、前記吸入用装置に関する。
本願明細書で前記記載の本発明による粉末１種を含有するの吸入溶液を、特有の市販可能な形態にしているものが、好ましいことに本発明と合致する。
【００７１】
本発明による噴射剤を含有しない吸入溶液又は懸濁液は、「Respimat（登録商標）」で投与するために上記記載のごとく想定した溶液及び懸濁液とともに、濃縮物又は直ぐに使用できる無菌吸入溶液又は懸濁液として使用することもできる。直ぐに使用可能な調剤は、例えば等張性の調理用食塩水を添加することによって濃縮物から調製できる。無菌の直ぐに使用できる製剤は、ベンチュリの原理又は他の原理にしたがって超音波又は圧縮空気を用いて吸入性エアロゾルを生成する動力駆動型の据付タイプ又は持運び可能な噴霧器を使用して投与することができる。
したがって、本発明の別の態様は、前記記載のような噴射剤を含有しない吸入溶液又は懸濁液状態の医薬品であって、これを投与するのに適した装置と組み合わせて濃縮物又は直ぐに使用可能な無菌調剤として使用される医薬品であって、該装置が、ベンチュリの原理又は他の原理にしたがって超音波又は圧縮空気を用いて吸入性エアロゾルを生成する、動力駆動式の据付型又は持運び可能な噴霧器を指すことを特徴とする。
吸入器内の再構成したエアロゾルを投与するのに適した噴霧器として、他には「AERx（商標）」（Aradigm社）、「Ultravent（登録商標）」（Mallinkrodt社）及び「Aconll（登録商標）」（Maquest Medical Products社）が挙げられる。
【００７２】
（実施形態例）
（材料と方法）
材料
IgG1として、ベーリンガーインゲルハイム社（ドイツ）の分子量約148kDaのヒト化単クローン抗体を使用した。この抗体はマウス抗体由来であり、マウス抗体の相補性決定領域をヒト抗体構造に移したものである。ヒト抗体分95％とマウス抗体分５％のキメラ抗体が産生された。この抗体はマウスの骨髄腫細胞株で発現した。十字流精密濾過（tangential flow microfiltration）で細胞を取り除き、細胞が除かれた溶液をクロマトグラフィーの様々な方法で精製する。さらに、ヌクレアーゼ処理、低ｐＨ値での処理及びナノ濾過の工程を行う。抗体含有バルク溶液は、緩衝剤として25mMヒスチジンと1.6mMグリシンを含み、この溶液を、ダイアフィルトレーションにより約100mg/mlまで濃縮して噴霧乾燥用溶液を調製した。噴霧溶液を調製するためのバルクには、凝集体が0.4〜0.8％含まれていた。最終製品としての薬剤は２〜８℃で少なくとも２年間は保存することができる。「乳果オリゴ（登録商標）LS55P」、「乳果オリゴ（登録商標）LS90P」、「カップリングシュガー（登録商標）」及び「カップリングシュガーＳ（登録商標）」は株式会社林原商事（日本）から入手した。サッカロース、ラクトース、マンニトール、ラフィノース、ヒドロキシエチルデンプン及びＬ−イソロイシンは、シグマアルドリッチケミカル社（ドイツ）から入手した。トレハロースはゲオルグ・ブロイヤー社（ドイツ）から調達した。トリイソロイシンはIris Biotech社（ドイツ）から入手した。卵白リゾチーム（135500U/mg）は、SERVA Electrophoresis社（ドイツ）から入手した。合成の鮭カルシトニン（カルシトニン）はBiotrend Chemikalien社（ドイツ）から入手した。
【００７３】
ビュッヒＢ−２９０による噴霧乾燥
ビュッヒラボテクニック社製のビュッヒミニスプレードライヤーB-290を用いて噴霧乾燥を行った。基本的には、「Spray Drying Handbook」（５版）、K. Masters、John Wiley and Sons社、NY、NY（1991）に記載の説明にしたがって調剤の噴霧乾燥を行った。
このスプレードライヤーは、加熱系、フィルター、アスピレータ、乾燥系、サイクロン、入口温度及び出口温度を測定する温度センサー及び回収容器で構成されている。蠕動ポンプを用いて噴霧用溶液を２流体ノズル（two-substance nozzle）にくみ上げる。ノズルでは、圧縮空気を用いて溶液を霧化して小滴とする。温めた空気を使って噴霧塔で乾燥を行うが、この温めた空気はアスピレータを使って連続的な流入法で噴霧塔に吸引する。サイクロンを通過させた後、生成物を回収容器に回収する。
２種の異なるサイクロンを使用した。
−  サイクロンＩ：ビュッヒサイクロン（シリアルナンバー4189）
−  サイクロンII：ビュッヒ高性能サイクロン（シリアルナンバー46369）
噴霧した溶液の固形分は、50〜600ml中10％（質量／容積）、3.33％、2.00％であった。入口温度はおよそ170〜185℃、液体供給速度は約３〜3.33ml／分、アスピレータ流量は約36.8〜38.3m3／時、噴霧空気流量は約0.67m3／時、1.05m3／時及び1.74m3／時で、その結果、出口温度は約80〜95℃になった。
【００７４】
凍結乾燥
凍結乾燥は、Martin Christ Gefriertrocknungsanlagen社製の凍結乾燥機Christ LPC-16/NT Epsilon 2-12 D型を使って行った。この凍結乾燥機は、乾燥室、昇華した溶媒を分離する凝縮器、真空形成用ポンプ及び電気系統で構成されている。コントロール表面温度と乾燥室の真空を介して、乾燥の調整を行う。
凍結乾燥用溶液の固形分は５％（質量／容積）であった。溶液を２Ｒバイアルに0.5mlずつ小分けにして、ねじ式凍結乾燥ストッパー（threaded freeze drying stoppers）で凍結乾燥器に入れた。最初は、-40℃ｘ30分で溶液を凍結させた。引き続き、0.11mbarで乾燥の主工程を３段階にわけて行った。第１段階が-40℃ｘ30時間、その次が-30℃ｘ８時間、最後が-16℃ｘ８時間である。その次の工程は後乾燥で、これは20℃ｘ20時間で0.001mbarで行った。最終工程として、最初に挿入しておいただけの凍結乾燥ストッパーでバイアルを自動的に封止した。こうして得られた凍結乾燥物は、バイアルの中にあるスパチュラで微粉化された。
【００７５】
Ｘ線回折法（広角Ｘ線回折（ＷＡＸＳ））
乾燥後の試料の結晶化度を求めるために、Ｘ線回折計XRD3000TT（ザイフェルト社製（アヒレンスバーグ、ドイツ））を用いて、温度22℃に調整したチャンバー内で試料を調べた。Ｘ線管Ｃｕアノード、波長λ＝0.15418mmのCu-Kα線（ニッケル一次フィルタ）を、アノード電圧40kV及び電流強さ30mAにして操作した。試料皿を装置内に置いた後、試料を５〜40°の範囲にわたり各角度の測定時間を２秒にして走査速度２θ＝0.05°で測定した。
SC1000VデテクタにScanX-Rayflexアプリケーション、バージョン3.07デバイスXRD3000（Scan）とRayflexバージョン2.1、1996（analysis）を用いて、粉末ディフラクトグラムを記録した。
サイズ排除クロマトグラフィー（ＳＥＣ−ＨＰＬＣ）
ａ）IgG1タンパク質凝集体
再構成した粉末中のIgG1タンパク質凝集体を定量化するために、SEC-HPLCを行った。SEC-HPLCはアジレント社のHP1090で行った。トーソー・バイオセップ（トーソー・バイオサイエンス、シュトットガルト、ドイツ）のTSK3000SWXLカラム（300 x 7.8mm）を分離用として用いた。流体として、0.1Mリン酸水素ニナトリウムニ水和物と0.1M硫酸ナトリウムで構成される緩衝液を脱水し、85％オルトリン酸でｐＨ6.8に調整した。投入した試料の量は、タンパク質濃度２〜10mg/mlで25μｌであった。アジレント社製ダイオードアレイ検知器を用いて、280nmでタンパク質を検出した。アジレント社製のソフトウェアＨＰケムステーション（Chemstation）を用いてクロマトグラムの評価を行った。
【００７６】
ｂ）カルシトニンタンパク質凝集体
再構成した粉末中のカルシトニンタンパク質凝集体を定量化するために、SEC-HPLCを行った。SEC-HPLCはアジレント社のHP1100で行った。トーソー・バイオセップ（トーソー・バイオサイエンス、シュトットガルト、ドイツ）のTSK2000SWXLカラム（300 x 7.8mm）を分離用として用いた。流体として、0.25硫酸ナトリウムで構成される、ｐＨ値がおよそ６の緩衝液を用いた（Windisch等、1997）。あるいは、0.1Mリン酸水素ニナトリウムニ水和物と0.1M硫酸ナトリウムで構成される脱水した緩衝液で、85％オルトリン酸でｐＨ6.8に調整したものを使うこともできる。投入した試料の量は、タンパク質濃度0.5〜２mg/mlで20μｌであった。アジレント社製ＵＶ検知器を用いて、210nmでタンパク質を検出した。アジレント社製のソフトウェアＨＰケムステーションを用いてクロマトグラムを評価した。
ｃ）リゾチーム残留モノマー含有量
再構成したリゾチーム調剤中のリゾチーム残留モノマー含有量を定量化するために、改造したSEC-HPLC（van de Weert、2000）を行った。トーソー・バイオセップ（トーソー・バイオサイエンス、シュトットガルト、ドイツ）のTSK2000SWXLカラム（300 x 7.8mm）を分離用として用いた。流体として、0.1Mリン酸水素ニナトリウムニ水和物と0.2M塩化ナトリウムで構成される緩衝液を、85％オルトリン酸でｐＨ7.0に調整した。投入した試料の量は、タンパク質濃度２〜10mg/mlで25μｌであった。アジレント社製ダイオードアレイ検知器を用いて、280nmでタンパク質を検出した。アジレント社製のソフトウェアＨＰケムステーションを用いてクロマトグラムの評価を行った。
【００７７】
調剤の評価として、残留可溶性モノマーを下記の方法で定量化した。濃度2.5mg/ml、5.0mg/ml及び10mg/mlのリゾチーム標準溶液を使って、最初に検量線を得た。その後、評価した標準溶液の相当するリゾチーム濃度との相関からモノマーピークのＡＵＣを考察した。
評価した様々なリゾチーム調剤における残留モノマー含有量は、検量線を基にして算出した。調剤の残留モノマー含有量が高くなるほどタンパク質安定性は向上する。
粒径の測定（ＭＭＤ）
体積平均径（ＭＭＤ）又は平均粒径は、Sympatech社製（クラウスタール-ツェラーフェルト、ドイツ）のSympatech Helosを用いて測定した。測定原理は、ヘリウムネオンレーザーを用いたレーザー回折に基づく。１〜３mgの粉末を空気圧２barで分散させ、フーリエレンズ（50mm）の手前でレーザー平行光を通過させた。フラウンホーファーモデルを用いて粒径分布を評価した。１種の粉末について２回の測定を行った。
【００７８】
空気動力学的粒径（ＭＭＡＤ）及び細粒分（ＦＰＦ）
12〜18mgの粉末をハードゼラチンカプセル（サイズ３号）にそれぞれ充填し、ハンディヘラー（ベーリンガーインゲルハイム社の粉末吸入器）に導入したものを測定に使用した。アダプターを使ってハンディヘラーをＵＳＰ／ＥＰインパクターインレットののど部に接続した。流速39.0リットル/分、吸入時間6.15秒で粉末を導入した。空気処理量は外部コントロールパネルで調整した。それぞれの粉末について、少なくとも３個のカプセルを測定した。
インパクターインレット3306と組み合わせてTSI社（米国、ミネソタ州）のAPS3321を同時に使い、粒子の飛行時間を求めることにより空気動力学的粒径（体積平均空気動力学的粒径、ＭＭＡＤ）を、また、シングルステージインパクター（流速39リットル／分で有効カットオフ粒径5.0μｍ）により細粒分（ＦＰＦ）を求めた。粉末は、ＥＰ／ＵＳＰ準拠ののど部又は試料誘導ポートをとおり細い毛管へ移動するが、ここで、等速サンプリングできる条件で、飛行時間の測定をするために粉末量の0.2％を採取する。飛行時間は、毛管２本のレーザー光線を通り抜けることで測定するが、このレーザー光線は光の壁として特定の距離の飛行時間を検出する。得られた結果は数値的分布であり、これをさらに体積分布に変換し、体積平均空気動力学的粒径（ＭＭＡＤ）に変換する。
毛管を通った粉末母集団のうちの99.8％がシングルステージインパクターで分離される。5.0μｍよりも大きい画分が、体積慣性（mass inertia）の結果としてインパクター内の衝突面上で分離する。細粒分（ＦＰＦ）は空気の流れに従い、最終的にはデプスフィルター中で分離する。細粒分は重量測定で求める。使用した粉末の総量、即ち、カプセル１個あたりの秤量した粉末に対するフィルター中で分取した粉末画分から細粒分を算出する。
【００７９】
残留水分量
乾燥後の製品の残留含水量を、電量滴定で求めた（703滴定レベルのメトローム737KF電量計（メトローム社、ドイツ））。残留含水量を求めるのに、粉末をメタノール（ハイドラナール−乾燥メタノール、VWR/Merck Eurolab社製）に溶解又は分散させた。メトローム電量計の測定溶液（ハイドラナール−クーロマット液、VWR/Merck Eurolab社）を、測定開始時に調整した。即ち、測定溶液を滴定して含水量ゼロにした。試料を滴定セルに注入して測定した。
安定性の測定
粉末又は粉末に含まれるタンパク質の噴霧乾燥後の様々な安定性を調べた。製剤の安定性を測定するために、タンパク質凝集体のパーセンテージを測定単位で定めた。タンパク質だけの製剤、類似のトレハロース製剤、類似のラフィノース製剤、類似のサッカロース製剤、類似のサッカロース−ラクトース製剤又は類似のヒドロキシエチルデンプン製剤を参照用として、本発明に記載の革新的なアジュバンドと部分的に比較した。凝集体は、ＵＶ検出（ＤＡＤ）を用いて有効なサイズ排除クロマトグラフィー（ＳＥＣ−ＨＰＬＣ）で分析した。このため、前処理をした粉末を、まず最初に純水（ｐＨ６〜８）に溶かした。
−  強制的保存安定性：選択した製剤について、温度約40℃、相対湿度約75％において（40℃、75％ＲＨ）開放したガラスバイアルに入れ、開放状態で１週間保存した後の安定性を調べた。
【００８０】
−  平衡化（equilibrated）保存安定性：噴霧乾燥後の製剤を選択し、温度約22℃、相対湿度50〜55％において開放したガラスバイアルに入れて１日保存した（平衡化）。その後、ガラスバイアルを前記規定の条件下で封止、ビード処理を行い、約40℃の乾燥状態で４週間保存した後に安定性を調べた。
−  真空乾燥保存安定性：噴霧乾燥後の製剤を選択し、温度約30℃、約0.15mbarでMemmert社製（ドイツ）の真空乾燥キャビネット内で開放したガラスバイアルに入れて１日保存した（真空乾燥）。その後、ガラスバイアルを真空乾燥キャビネットから取り出し、封止、ビード処理を行い、約40℃の乾燥状態で４週間保存した後の安定性を調べた。
−  ３ヶ月安定性：噴霧乾燥後の製剤を選択し、開放したガラスバイアルにいれて真空乾燥させた（上記参照）。窒素雰囲気下でガラスバイアルを封止、ビード処理し、３つの異なる温度、２〜８℃、25℃、40℃で保存した。１ヵ月後の粉末の安定性を調べた。
−  ３ヶ月開放状態安定性：噴霧乾燥後の製剤を選択し、開放したガラスバイアルに入れて温度25℃、相対湿度約29％及び／又は43％でそれぞれ保存した。１ヶ月及び３ヵ月後の粉末の安定性を調べた。このうち幾つかの製剤については、粒子の飛行時間の測定により粉末の空気動力学的性能を求めた（前記参照）。
【００８１】
実施例１
10％(w/v)IgG1製剤の噴霧乾燥
ｐＨ６のグリシン−ヒスチジン緩衝液に処方した濃度約109mg/mlの純粋なIgG1（「材料」の項参照）を脱塩水（ｐＨ約7.5）で100mg/mlまで希釈し、他のアジュバントを入れずに、サイクロンＩを使って噴霧空気量を約0.67m3/時間で前記記載のようにして噴霧乾燥を行った。溶液の量は50mlであった。凝集体含有率は前記記載の方法で調べた。
−  相対湿度75％、温度40℃の開放状態で１週間保存したところ（強制的保存安定性）、粉末を溶かして調製した溶液の凝集体含有率はそれぞれ約18.9％と18.2％であった。
−  １日平衡にした後、40℃、乾燥状態で４週間保存したところ、粉末を溶かして調製した溶液の凝集体含有率は約11.8％であった。
−  １日真空乾燥を行った後、40℃、乾燥状態で４週間保存したところ、粉末を溶かして調製した溶液の凝集体含有率は約13.2％であった。
【００８２】
3.33％(w/v)IgG1製剤の噴霧乾燥
ｐＨ６のグリシン−ヒスチジン緩衝液に処方した濃度約102.8mg/mlの純粋なIgG1（「材料」の項参照）を脱塩水（ｐＨ約7.5）で33mg/mlまで希釈し、他のアジュバントを入れずに、サイクロンＩを使って噴霧空気量を約0.67m3/時間で前記記載のようにして噴霧乾燥を行った。溶液の量は150mlであった。凝集体含有率は前記記載の方法で調べた。
−  相対湿度75％、温度40℃の開放状態で１週間保存したところ（強制的保存安定性）、粉末を溶かして調製した溶液の凝集体含有率は約16.3％であった。
−  ２〜８℃で１ヶ月及び３ヶ月保存したところ（３ヶ月安定性）、粉末を溶かして調製した溶液の凝集体含有率はそれぞれ約4.5％と約4.4％であった。
−  25℃で１ヶ月及び３ヶ月保存したところ（３ヶ月安定性）、粉末を溶かして調製した溶液の凝集体含有率はそれぞれ約7.4％と約7.1％であった。
−  40℃で１ヶ月及び３ヶ月保存したところ（３ヶ月安定性）、粉末を溶かして調製した溶液の凝集体含有率はそれぞれ約13.3％と約18.1％であった。
−  相対湿度約29％、温度25℃で１ヶ月及び３ヶ月保存したところ、粉末を溶かして調製した溶液の凝集体含有率はそれぞれ約5.5％と約6.6％であった。
−  相対湿度約43％、温度25℃で１ヶ月及び３ヶ月保存したところ、粉末を溶かして調製した溶液の凝集体含有率はそれぞれ約5.6％と約7.0％であった。
【００８３】
９％(w/v)トレハロース及び１％(w/v)IgG1含有製剤の噴霧乾燥
4.5gのトレハロースを約40mlの脱塩水（ｐＨ約7.5）に溶解した。次に、ｐＨ６のグリシン−ヒスチジン緩衝液に処方した濃度約109mg/mlの約4.6mlの純粋なIgG1（「材料」の項参照）を添加し、脱塩水（ｐＨ約7.5）で希釈し50mlにした。こうして得られた溶液には約９％(w/v)のアジュバント又はマトリックスと１％(w/v)のタンパク質が含まれており、サイクロンＩを使って噴霧空気量を約0.67m3/時間で前記記載のようにして噴霧乾燥させた。凝集体含有率は前記記載の方法で調べた。
下記の凝集体含有率は、保存安定性として求めた。
−  相対湿度75％、温度40℃の開放状態で１週間保存したところ（強制的保存安定性）、粉末を溶かして調製した溶液の凝集体含有率は約12.6％であった。
【００８４】
3.00％(w/v)LS90P及び0.33％(w/v)IgG1含有製剤の噴霧乾燥
4.5gのLS90Pを約140mlの脱塩水（ｐＨ約7.5）に溶解した。次に、ｐＨ６のグリシン−ヒスチジン緩衝液に処方した濃度約102.8mg/mlの約4.864mlの純粋なIgG1（「材料」の項参照）を添加し、脱塩水（ｐＨ約7.5）で希釈し150mlにした。こうして得られた溶液には約3.00％(w/v)のアジュバント又はマトリックスと0.33％(w/v)のタンパク質が含まれており、サイクロンＩを使って噴霧空気量を約0.67m3/時間で前記記載のようにして噴霧乾燥させた。凝集体含有率は前記記載の方法で調べた。
下記の凝集体含有率は、保存安定性として求めた。
−  相対湿度75％、温度40℃の開放状態で１週間保存したところ（強制的保存安定性）、粉末を溶かして調製した溶液の凝集体含有率は約1.0％であった。
−  ２〜８℃で１ヶ月及び３ヶ月保存したところ（３ヶ月安定性）、粉末を溶かして調製した溶液の凝集体含有率はそれぞれ約0.6％と約0.9％であった。
−  25℃で１ヶ月及び３ヶ月保存したところ（３ヶ月安定性）、粉末を溶かして調製した溶液の凝集体含有率はそれぞれ約0.8％と約1.3％であった。
−  40℃で１ヶ月及び３ヶ月保存したところ（３ヶ月安定性）、粉末を溶かして調製した溶液の凝集体含有率はそれぞれ約1.1％と約2.2％であった。
粉末のＭＭＤを前記記載のようにして求めた。
−  噴霧乾燥後の粉末のＭＭＤは2.8μｍであった。
粉末のＭＭＡＤ及びＦＰＦを前記記載のようにして求めた。
−  噴霧乾燥後の粉末のＭＭＡＤは3.8μｍ、ＦＰＦは粉末カプセル質量に対して23.6％であった。
【００８５】
9.9％(w/v)LS55P及び0.1％(w/v)IgG1含有製剤の噴霧乾燥
4.950gのLS55Pを約40mlの脱塩水（ｐＨ約7.5）に溶解した。次に、ｐＨ６のグリシン−ヒスチジン緩衝液に処方した濃度約96.55mg/mlの約0.518mlの純粋なIgG1（「材料」の項参照）を添加し、脱塩水（ｐＨ約7.5）で希釈し50mlにした。こうして得られた溶液には約9.9％(w/v)のアジュバント又はマトリックスと0.1％(w/v)のタンパク質が含まれており、サイクロンＩを使って噴霧空気量を約0.67m3/時間で前記記載のようにして噴霧乾燥させた。凝集体含有率は前記記載の方法で調べた。
下記の凝集体含有率は、保存安定性として求めた。
−  相対湿度75％、温度40℃の開放状態で１週間保存したところ（強制的保存安定性）、粉末を溶かして調製した溶液の凝集体含有率は約5.7％であった。
−  １日真空乾燥を行った後、40℃、乾燥状態で４週間保存したところ、粉末を溶かして調製した溶液の凝集体含有率は約4.7％であった。
【００８６】
９％(w/v)LS55P及び１％(w/v)IgG1含有製剤の噴霧乾燥
4.5gのLS55Pを約40mlの脱塩水（ｐＨ約7.5）に溶解した。次に、ｐＨ６のグリシン−ヒスチジン緩衝液に処方した濃度約109mg/mlの約4.6mlの純粋なIgG1（「材料」の項参照）を添加し、脱塩水（ｐＨ約7.5）で希釈し50mlにした。こうして得られた溶液には約９％(w/v)のアジュバント又はマトリックスと１％(w/v)のタンパク質が含まれており、サイクロンＩを使って噴霧空気量を約0.67m3/時間で前記記載のようにして噴霧乾燥させた。凝集体含有率は前記記載の方法で調べた。
下記の凝集体含有率は、保存安定性として求めた。
−  相対湿度75％、温度40℃の開放状態で１週間保存したところ（強制的保存安定性）、粉末を溶かして調製した溶液の凝集体含有率は約2.3％であった。
−  １日平衡にした後、40℃、乾燥状態で４週間保存したところ、粉末を溶かして調製した溶液の凝集体含有率は約1.8％であった。
−  １日真空乾燥を行った後、40℃、乾燥状態で４週間保存したところ、粉末を溶かして調製した溶液の凝集体含有率は約1.4％であった。
【００８７】
６％(w/v)LS55P及び４％(w/v)IgG1含有製剤の噴霧乾燥
3.0gのLS55Pを約15mlの脱塩水（ｐＨ約7.5）に溶解した。次に、ｐＨ６のグリシン−ヒスチジン緩衝液に処方した濃度約102.8mg/mlの約19.45mlの純粋なIgG1（「材料」の項参照）を添加し、脱塩水（ｐＨ約7.5）で希釈し50mlにした。こうして得られた溶液には約６％(w/v)のアジュバント又はマトリックスと４％(w/v)のタンパク質が含まれており、サイクロンＩを使って噴霧空気量を約0.67m3/時間で前記記載のようにして噴霧乾燥させた。凝集体含有率は前記記載の方法で調べた。
下記の凝集体含有率は、保存安定性として求めた。
−  相対湿度75％、温度40℃の開放状態で１週間保存したところ（強制的保存安定性）、粉末を溶かして調製した溶液の凝集体含有率は約4.0％であった。
【００８８】
４％(w/v)LS55P及び６％(w/v)IgG1含有製剤の噴霧乾燥
2.0gのLS55Pを約15mlの脱塩水（ｐＨ約7.5）に溶解した。次に、ｐＨ６のグリシン−ヒスチジン緩衝液に処方した濃度約102.8mg/mlの約29.18mlの純粋なIgG1（「材料」の項参照）を添加し、脱塩水（ｐＨ約7.5）で希釈し50mlにした。こうして得られた溶液には約４％(w/v)のアジュバント又はマトリックスと６％(w/v)のタンパク質が含まれており、サイクロンＩを使って噴霧空気量を約0.67m3/時間で前記記載のようにして噴霧乾燥させた。凝集体含有率は前記記載の方法で調べた。
下記の凝集体含有率は、保存安定性として求めた。
−  相対湿度75％、温度40℃の開放状態で１週間保存したところ（強制的保存安定性）、粉末を溶かして調製した溶液の凝集体含有率は約6.9％であった。
【００８９】
2.5％(w/v)LS55P及び7.5％(w/v)IgG1含有製剤の噴霧乾燥
1.25gのLS55Pを約10mlの脱塩水（ｐＨ約7.5）に溶解した。次に、ｐＨ６のグリシン−ヒスチジン緩衝液に処方した濃度約96.55mg/mlの約38.84mlの純粋なIgG1（「材料」の項参照）を添加し、脱塩水（ｐＨ約7.5）で希釈し50mlにした。こうして得られた溶液には約2.5％(w/v)のアジュバント又はマトリックスと7.5％(w/v)のタンパク質が含まれており、サイクロンＩを使って噴霧空気量を約0.67m3/時間で前記記載のようにして噴霧乾燥させた。凝集体含有率は前記記載の方法で調べた。
下記の凝集体含有率は、保存安定性として求めた。
−  相対湿度75％、温度40℃の開放状態で１週間保存したところ（強制的保存安定性）、粉末を溶かして調製した溶液の凝集体含有率は約5.9％であった。
−  １日真空乾燥を行った後、40℃、乾燥状態で４週間保存したところ、粉末を溶かして調製した溶液の凝集体含有率は約6.1％であった。
【００９０】
1.0％(w/v)LS55P及び9.0％(w/v)IgG1含有製剤の噴霧乾燥
0.50gのLS55Pを約５mlの脱塩水（ｐＨ約7.5）に溶解した。次に、ｐＨ６のグリシン−ヒスチジン緩衝液に処方した濃度約96.55mg/mlの約41.43mlの純粋なIgG1（「材料」の項参照）を添加し、脱塩水（ｐＨ約7.5）で希釈し50mlにした。こうして得られた溶液には約1.0％(w/v)のアジュバント又はマトリックスと9.0％(w/v)のタンパク質が含まれており、サイクロンＩを使って噴霧空気量を約0.67m3/時間で前記記載のようにして噴霧乾燥させた。凝集体含有率は前記記載の方法で調べた。
下記の凝集体含有率は、保存安定性として求めた。
−  相対湿度75％、温度40℃の開放状態で１週間保存したところ（強制的保存安定性）、粉末を溶かして調製した溶液の凝集体含有率は約10.8％であった。
−  １日真空乾燥を行った後、40℃、乾燥状態で４週間保存したところ、粉末を溶かして調製した溶液の凝集体含有率は約8.0％であった。
【００９１】
0.5％(w/v)LS55P及び9.5％(w/v)IgG1含有製剤の噴霧乾燥
0.25gのLS55Pを約2.5mlの脱塩水（ｐＨ約7.5）に溶解した。次に、ｐＨ６のグリシン−ヒスチジン緩衝液に処方した濃度約102.8mg/mlの約46.21mlの純粋なIgG1（「材料」の項参照）を添加し、脱塩水（ｐＨ約7.5）で希釈し50mlにした。こうして得られた溶液には約0.5％(w/v)のアジュバント又はマトリックスと9.5％(w/v)のタンパク質が含まれており、サイクロンＩを使って噴霧空気量を約0.67m3/時間で前記記載のようにして噴霧乾燥させた。凝集体含有率は前記記載の方法で調べた。
下記の凝集体含有率は、保存安定性として求めた。
−  相対湿度75％、温度40℃の開放状態で１週間保存したところ（強制的保存安定性）、粉末を溶かして調製した溶液の凝集体含有率は約13.7％であった。
【００９２】
3.00％(w/v)LS55P及び0.33％(w/v)IgG1含有製剤の噴霧乾燥
9.0gのLS55Pを約280mlの脱塩水（ｐＨ約7.5）に溶解した。次に、ｐＨ６のグリシン−ヒスチジン緩衝液に処方した濃度約102.8mg/mlの約9.73mlの純粋なIgG1（「材料」の項参照）を添加し、脱塩水（ｐＨ約7.5）で希釈し300mlにした。こうして得られた溶液には約3.0％(w/v)のアジュバント又はマトリックスと0.33％(w/v)のタンパク質が含まれており、サイクロンIIを使って噴霧空気量を約0.67m3/時間で前記記載のようにして噴霧乾燥させた。凝集体含有率は前記記載の方法で調べた。
下記の凝集体含有率は、保存安定性として求めた。
−  相対湿度75％、温度40℃の開放状態で１週間保存したところ（強制的保存安定性）、粉末を溶かして調製した溶液の凝集体含有率は約5.0％であった。
粉末のＭＭＤを前記記載のようにして求めた。
−  噴霧乾燥後の粉末のＭＭＤは2.9μｍであった。
粉末のＭＭＡＤ及びＦＰＦを前記記載のようにして求めた。
−  噴霧乾燥後の粉末のＭＭＡＤは4.3μｍ、ＦＰＦは粉末カプセル質量に対して15.9％であった。
【００９３】
9.9％(w/v)カップリングシュガー及び0.1％(w/v)IgG1含有製剤の噴霧乾燥
6.290gのカップリングシュガー含有シロップ（カップリングシュガー4.950gに相当）を約40mlの脱塩水（ｐＨ約7.5）に溶解した。次に、ｐＨ６のグリシン−ヒスチジン緩衝液に処方した濃度約96.55mg/mlの約0.518mlの純粋なIgG1（「材料」の項参照）を添加し、脱塩水（ｐＨ約7.5）で希釈し50mlにした。こうして得られた溶液には約9.9％(w/v)のアジュバント又はマトリックスと0.1％(w/v)のタンパク質が含まれており、サイクロンＩを使って噴霧空気量を約0.67m3/時間で前記記載のようにして噴霧乾燥させた。凝集体含有率は前記記載の方法で調べた。
下記の凝集体含有率は、保存安定性として求めた。
−  相対湿度75％、温度40℃の開放状態で１週間保存したところ（強制的保存安定性）、粉末を溶かして調製した溶液の凝集体含有率は約14.9％であった。
【００９４】
９％(w/v)カップリングシュガー及び１％(w/v)IgG1含有製剤の噴霧乾燥
5.71gのカップリングシュガー含有シロップ（カップリングシュガー4.5gに相当）を約40mlの脱塩水（ｐＨ約7.5）に溶解した。次に、ｐＨ６のグリシン−ヒスチジン緩衝液に処方した濃度約109mg/mlの約4.6mlの純粋なIgG1（「材料」の項参照）を添加し、脱塩水（ｐＨ約7.5）で希釈し50mlにした。こうして得られた溶液には約９％(w/v)のアジュバント又はマトリックスと１％(w/v)のタンパク質が含まれており、サイクロンＩを使って噴霧空気量を約0.67m3/時間で前記記載のようにして噴霧乾燥させた。凝集体含有率は前記記載の方法で調べた。
下記の凝集体含有率は、保存安定性として求めた。
−  相対湿度75％、温度40℃の開放状態で１週間保存したところ（強制的保存安定性）、粉末を溶かして調製した溶液の凝集体含有率は約4.9％であった。
−  １日平衡にした後、40℃、乾燥状態で４週間保存したところ、粉末を溶かして調製した溶液の凝集体含有率は約3.2％であった。
−  １日真空乾燥を行った後、40℃、乾燥状態で４週間保存したところ、粉末を溶かして調製した溶液の凝集体含有率は約2.1％であった。
【００９５】
６％(w/v)カップリングシュガー及び４％(w/v)IgG1含有製剤の噴霧乾燥
3.81gのカップリングシュガー含有シロップ（カップリングシュガー3.0gに相当）を約25mlの脱塩水（ｐＨ約7.5）に溶解した。次に、ｐＨ６のグリシン−ヒスチジン緩衝液に処方した濃度約102.8mg/mlの約19.45mlの純粋なIgG1（「材料」の項参照）を添加し、脱塩水（ｐＨ約7.5）で希釈し50mlにした。こうして得られた溶液には約６％(w/v)のアジュバント又はマトリックスと４％(w/v)のタンパク質が含まれており、サイクロンＩを使って噴霧空気量を約0.67m3/時間で前記記載のようにして噴霧乾燥させた。凝集体含有率は前記記載の方法で調べた。
下記の凝集体含有率は、保存安定性として求めた。
−  相対湿度75％、温度40℃の開放状態で１週間保存したところ（強制的保存安定性）、粉末を溶かして調製した溶液の凝集体含有率は約5.0％であった。
【００９６】
４％(w/v)カップリングシュガー及び６％(w/v)IgG1含有製剤の噴霧乾燥
2.54gのカップリングシュガー含有シロップ（カップリングシュガー2.0gに相当）を約15mlの脱塩水（ｐＨ約7.5）に溶解した。次に、ｐＨ６のグリシン−ヒスチジン緩衝液に処方した濃度約xmg/mlの約29.18mlの純粋なIgG1（「材料」の項参照）を添加し、脱塩水（ｐＨ約7.5）で希釈し50mlにした。こうして得られた溶液には約４％(w/v)のアジュバント又はマトリックスと６％(w/v)のタンパク質が含まれており、サイクロンＩを使って噴霧空気量約0.67m3/時間で前記記載のようにして噴霧乾燥させた。凝集体含有率は前記記載の方法で調べた。
下記の凝集体含有率は、保存安定性として求めた。
−  相対湿度75％、温度40℃の開放状態で１週間保存したところ（強制的保存安定性）、粉末を溶かして調製した溶液の凝集体含有率は約9.9％であった。
【００９７】
2.5％(w/v)カップリングシュガー及び7.5％(w/v)IgG1含有製剤の噴霧乾燥
1.59gのカップリングシュガー含有シロップ（カップリングシュガー1.250gに相当）を約８mlの脱塩水（ｐＨ約7.5）に溶解した。次に、ｐＨ６のグリシン−ヒスチジン緩衝液に処方した濃度約96.56mg/mlの約38.84mlの純粋なIgG1（「材料」の項参照）を添加し、脱塩水（ｐＨ約7.5）で希釈し50mlにした。こうして得られた溶液には約2.5％(w/v)のアジュバント又はマトリックスと7.5％(w/v)のタンパク質が含まれており、サイクロンＩを使って噴霧空気量約0.67m3/時間で前記記載のようにして噴霧乾燥させた。凝集体含有率は前記記載の方法で調べた。
下記の凝集体含有率は、保存安定性として求めた。
−  相対湿度75％、温度40℃の開放状態で１週間保存したところ（強制的保存安定性）、粉末を溶かして調製した溶液の凝集体含有率は約10.8％であった。
【００９８】
1.0％(w/v)カップリングシュガー及び9.0％(w/v)IgG1含有製剤の噴霧乾燥
0.653gのカップリングシュガー含有シロップ（カップリングシュガー0.50gに相当）を約５mlの脱塩水（ｐＨ約7.5）に溶解した。次に、ｐＨ６のグリシン−ヒスチジン緩衝液に処方した濃度約96.56mg/mlの約41.43mlの純粋なIgG1（「材料」の項参照）を添加し、脱塩水（ｐＨ約7.5）で希釈し50mlにした。こうして得られた溶液には約1.0％(w/v)のアジュバント又はマトリックスと9.0％(w/v)のタンパク質が含まれており、サイクロンＩを使って噴霧空気量約0.67m3/時間で前記記載のようにして噴霧乾燥させた。凝集体含有率は前記記載の方法で調べた。
下記の凝集体含有率は、保存安定性として求めた。
−  相対湿度75％、温度40℃の開放状態で１週間保存したところ（強制的保存安定性）、粉末を溶かして調製した溶液の凝集体含有率は約13.1％であった。
【００９９】
９％(w/v)カップリングシュガーＳ及び１％(w/v)IgG1含有製剤の噴霧乾燥
5.86gのカップリングシュガーＳ含有シロップ（カップリングシュガーＳ4.5gに相当）を約40mlの脱塩水（ｐＨ約7.5）に溶解した。次に、ｐＨ６のグリシン−ヒスチジン緩衝液に処方した濃度約109mg/mlの約4.6mlの純粋なIgG1（「材料」の項参照）を添加し、脱塩水（ｐＨ約7.5）で希釈し50mlにした。こうして得られた溶液には約９％(w/v)のアジュバント又はマトリックスと１％(w/v)のタンパク質が含まれており、サイクロンＩを使って噴霧空気量約0.67m3/時間で前記記載のようにして噴霧乾燥させた。凝集体含有率は前記記載の方法で調べた。
下記の凝集体含有率は、保存安定性として求めた。
−  相対湿度75％、温度40℃の開放状態で１週間保存したところ（強制的保存安定性）、粉末を溶かして調製した溶液の凝集体含有率は約5.4％であった。
【０１００】
実施例２
８％(w/v)トレハロース、１％(w/v)Ｌ−イソロイシン及び１％(w/v)IgG1含有製剤の噴霧乾燥
4.0gのトレハロース及び0.5gのＬ−イソロイシンを、超音波浴中、約40mlの脱塩水（ｐＨ約7.5）に溶解した。次に、ｐＨ６のグリシン−ヒスチジン緩衝液に処方した濃度約109mg/mlの約4.6mlの純粋なIgG1（「材料」の項参照）を添加し、脱塩水（ｐＨ約7.5）で希釈し50mlにした。こうして得られた溶液には約９％(w/v)のアジュバント又はマトリックスと１％(w/v)のタンパク質が含まれており、サイクロンＩを使って噴霧空気量約0.67m3/時間で前記記載のようにして噴霧乾燥させた。凝集体含有率は前記記載の方法で調べた。
−  相対湿度75％、温度40℃の開放状態で１週間保存したところ（強制的保存安定性）、粉末を溶かして調製した溶液の凝集体含有率は約22.2％であった。
【０１０１】
2.66％(w/v)LS90P、0.33％(w/v)Ｌ−イソロイシン及び0.33％(w/v)IgG1含有製剤の噴霧乾燥
4.0gのLS90P及び0.50gのＬ−イソロイシンを、超音波浴中、約140mlの脱塩水（ｐＨ約7.5）に溶解した。次に、ｐＨ６のグリシン−ヒスチジン緩衝液に処方した濃度約102.8mg/mlの約4.864mlの純粋なIgG1（「材料」の項参照）を添加し、脱塩水（ｐＨ約7.5）で希釈し150mlにした。こうして得られた溶液には約3.00％(w/v)のアジュバント又はマトリックスと0.33％(w/v)のタンパク質が含まれており、サイクロンIIを使って噴霧空気量約0.67m3/時間で前記記載のようにして噴霧乾燥させた。凝集体含有率は前記記載の方法で調べた。
下記の凝集体含有率は、保存安定性として求めた。
−  相対湿度75％、温度40℃の開放状態で１週間保存したところ（強制的保存安定性）、粉末を溶かして調製した溶液の凝集体含有率は約0.7％であった。
−  ２〜８℃で１ヶ月及び３ヶ月保存したところ（３ヶ月安定性）、粉末を溶かして調製した溶液の凝集体含有率はそれぞれ約0.7％と約1.0％であった。
−  25℃で１ヶ月及び３ヶ月保存したところ（３ヶ月安定性）、粉末を溶かして調製した溶液の凝集体含有率はそれぞれ約0.8％と約1.1％であった。
−  40℃で１ヶ月及び３ヶ月保存したところ（３ヶ月安定性）、粉末を溶かして調製した溶液の凝集体含有率はそれぞれ約0.6％と約1.1％であった。
粉末のＭＭＡＤ及びＦＰＦを前記記載のようにして求めた。
−  噴霧乾燥後の粉末のＭＭＡＤは7.3μｍ、ＦＰＦは粉末カプセル質量に対して28.1％であった。
【０１０２】
８％(w/v)LS55P、１％(w/v)Ｌ−イソロイシン及び１％(w/v)IgG1含有製剤の噴霧乾燥
4.00gのLS55P及び0.50gのＬ−イソロイシンを、超音波浴中、約40mlの脱塩水（ｐＨ約7.5）に溶解した。次に、ｐＨ６のグリシン−ヒスチジン緩衝液に処方した濃度約109mg/mlの約4.60mlの純粋なIgG1（「材料」の項参照）を添加し、脱塩水（ｐＨ約7.5）で希釈し50mlにした。こうして得られた溶液には約９％(w/v)のアジュバント又はマトリックスと１％(w/v)のタンパク質が含まれており、サイクロンＩを使って噴霧空気量約0.67m3/時間で前記記載のようにして噴霧乾燥させた。凝集体含有率は前記記載の方法で調べた。
−  相対湿度75％、温度40℃の開放状態で１週間保存したところ（強制的保存安定性）、粉末を溶かして調製した溶液の凝集体含有率は約5.5％であった。
−  １日平衡にした後、40℃、乾燥状態で４週間保存したところ、粉末を溶かして調製した溶液の凝集体含有率は約1.8％であった。
−  １日真空乾燥を行った後、40℃、乾燥状態で４週間保存したところ、粉末を溶かして調製した溶液の凝集体含有率は約1.8％であった。
【０１０３】
2.66％(w/v)LS55P、0.33％(w/v)Ｌ−イソロイシン及び0.33％(w/v)IgG1含有製剤の噴霧乾燥
8.0gのLS55P及び１gのＬ−イソロイシンを、超音波浴中、約280mlの脱塩水（ｐＨ約7.5）に溶解した。次に、ｐＨ６のグリシン−ヒスチジン緩衝液に処方した濃度約102.8mg/mlの約9.7mlの純粋なIgG1（「材料」の項参照）を添加し、脱塩水（ｐＨ約7.5）で希釈し300mlにした。こうして得られた溶液には約３％(w/v)のアジュバント又はマトリックスと0.33％(w/v)のタンパク質が含まれており、サイクロンIIを使って噴霧空気量約0.67m3/時間で前記記載のようにして噴霧乾燥させた。凝集体含有率は前記記載の方法で調べた。
−  相対湿度75％、温度40℃の開放状態で１週間保存したところ（強制的保存安定性）、粉末を溶かして調製した溶液の凝集体含有率は約5.9％であった。
−  ２〜８℃で１ヶ月及び３ヶ月保存したところ（３ヶ月安定性）、粉末を溶かして調製した溶液の凝集体含有率はそれぞれ約1.6％であった。
−  25℃で１ヶ月及び３ヶ月保存したところ（３ヶ月安定性）、粉末を溶かして調製した溶液の凝集体含有率はそれぞれ約1.6％と約1.8％であった。
−  40℃で１ヶ月及び３ヶ月保存したところ（３ヶ月安定性）、粉末を溶かして調製した溶液の凝集体含有率はそれぞれ約1.6％と約1.8％であった。
粉末のＭＭＡＤ及びＦＰＦを前記記載のようにして求めた。
−  噴霧乾燥後の粉末のＭＭＡＤは4.9μｍ、ＦＰＦは粉末カプセル質量に対して34.7％であった。
【０１０４】
８％(w/v)カップリングシュガー、１％(w/v)Ｌ−イソロイシン及び１％(w/v)IgG1含有製剤の噴霧乾燥
5.08gのカップリングシュガー含有シロップ（カップリングシュガー4.0gに相当）及び0.50gのＬ−イソロイシンを、超音波浴中、約40mlの脱塩水（ｐＨ約7.5）に溶解した。次に、ｐＨ６のグリシン−ヒスチジン緩衝液に処方した濃度約109mg/mlの約4.60mlの純粋なIgG1（「材料」の項参照）を添加し、脱塩水（ｐＨ約7.5）で希釈し50mlにした。こうして得られた溶液には約９％(w/v)のアジュバント又はマトリックスと１％(w/v)のタンパク質が含まれており、サイクロンＩを使って噴霧空気量約0.67m3/時間で前記記載のようにして噴霧乾燥させた。凝集体含有率は前記記載の方法で調べた。
−  相対湿度75％、温度40℃の開放状態で１週間保存したところ（強制的保存安定性）、粉末を溶かして調製した溶液の凝集体含有率は約7.1％であった。
−  １日平衡にした後、40℃、乾燥状態で４週間保存したところ、粉末を溶かして調製した溶液の凝集体含有率は約2.5％であった。
−  １日真空乾燥を行った後、40℃、乾燥状態で４週間保存したところ、粉末を溶かして調製した溶液の凝集体含有率は約1.1％であった。
【０１０５】
８％(w/v)カップリングシュガーＳ、１％(w/v)Ｌ−イソロイシン及び１％(w/v)IgG1含有製剤の噴霧乾燥
5.21gのカップリングシュガーＳ含有シロップ（カップリングシュガーＳ4.0gに相当）及び0.50gのＬ−イソロイシンを、超音波浴中、約40mlの脱塩水（ｐＨ約7.5）に溶解した。次に、ｐＨ６のグリシン−ヒスチジン緩衝液に処方した濃度約109mg/mlの約4.60mlの純粋なIgG1（「材料」の項参照）を添加し、脱塩水（ｐＨ約7.5）で希釈し50mlにした。こうして得られた溶液には約９％(w/v)のアジュバント又はマトリックスと１％(w/v)のタンパク質が含まれており、サイクロンＩを使って噴霧空気量約0.67m3/時間で前記記載のようにして噴霧乾燥させた。凝集体含有率は前記記載の方法で調べた。
−  相対湿度75％、温度40℃の開放状態で１週間保存したところ（強制的保存安定性）、粉末を溶かして調製した溶液の凝集体含有率は約6.8％であった。
【０１０６】
実施例３
３％(w/v)トレハロース、６％(w/v)Ｌ−シトルリン及び１％(w/v)IgG1含有製剤の噴霧乾燥
1.50gのトレハロース及び3.00gのＬ−シトルリンを、超音波浴中、約40mlの脱塩水（ｐＨ約7.5）に溶解した。次に、ｐＨ６のグリシン−ヒスチジン緩衝液に処方した濃度約109mg/mlの約4.6mlの純粋なIgG1（「材料」の項参照）を添加し、脱塩水（ｐＨ約7.5）で希釈し50mlにした。こうして得られた溶液には約９％(w/v)のアジュバント又はマトリックスと１％(w/v)のタンパク質が含まれており、サイクロンＩを使って噴霧空気量約0.67m3/時間で前記記載のようにして噴霧乾燥させた。凝集体含有率は前記記載の方法で調べた。
−  相対湿度75％、温度40℃の開放状態で１週間保存したところ（強制的保存安定性）、粉末を溶かして調製した溶液の凝集体含有率は約5.9％であった。
【０１０７】
３％(w/v)LS55P、６％(w/v)Ｌ−シトルリン及び１％(w/v)IgG1含有製剤の噴霧乾燥
1.50gのLS55P及び3.00gのＬ−シトルリンを、超音波浴中、約40mlの脱塩水（ｐＨ約7.5）に溶解した。次に、ｐＨ６のグリシン−ヒスチジン緩衝液に処方した濃度約109mg/mlの約4.60mlの純粋なIgG1（「材料」の項参照）を添加し、脱塩水（ｐＨ約7.5）で希釈し50mlにした。こうして得られた溶液には約９％(w/v)のアジュバント又はマトリックスと１％(w/v)のタンパク質が含まれており、サイクロンＩを使って噴霧空気量約0.67m3/時間で前記記載のようにして噴霧乾燥させた。凝集体含有率は前記記載の方法で調べた。
−  相対湿度75％、温度40℃の開放状態で１週間保存したところ（強制的保存安定性）、粉末を溶かして調製した溶液の凝集体含有率は約2.9％であった。
−  １日平衡にした後、40℃、乾燥状態で４週間保存したところ、粉末を溶かして調製した溶液の凝集体含有率は約1.8％であった。
−  １日真空乾燥を行った後、40℃、乾燥状態で４週間保存したところ、粉末を溶かして調製した溶液の凝集体含有率は約1.3％であった。
【０１０８】
３％(w/v)カップリングシュガー、６％(w/v)Ｌ−シトルリン及び１％(w/v)IgG1含有製剤の噴霧乾燥
1.91gのカップリングシュガー含有シロップ（カップリングシュガー1.5gに相当）及び3.00gのＬ−シトルリンを、超音波浴中、約40mlの脱塩水（ｐＨ約7.5）に溶解した。次に、ｐＨ６のグリシン−ヒスチジン緩衝液に処方した濃度約109mg/mlの約4.60mlの純粋なIgG1（「材料」の項参照）を添加し、脱塩水（ｐＨ約7.5）で希釈し50mlにした。こうして得られた溶液には約９％(w/v)のアジュバント又はマトリックスと１％(w/v)のタンパク質が含まれており、サイクロンＩを使って噴霧空気量約0.67m3/時間で前記記載のようにして噴霧乾燥させた。凝集体含有率は前記記載の方法で調べた。
−  相対湿度75％、温度40℃の開放状態で１週間保存したところ（強制的保存安定性）、粉末を溶かして調製した溶液の凝集体含有率は約3.9％であった。
−  １日平衡にした後、40℃、乾燥状態で４週間保存したところ、粉末を溶かして調製した溶液の凝集体含有率は約1.4％であった。
−  １日真空乾燥を行った後、40℃、乾燥状態で４週間保存したところ、粉末を溶かして調製した溶液の凝集体含有率は約1.3％であった。
【０１０９】
３％(w/v)カップリングシュガーＳ、６％(w/v)Ｌ−シトルリン及び１％(w/v)IgG1含有製剤の噴霧乾燥
1.95gのカップリングシュガーＳ含有シロップ（カップリングシュガーＳ1.5gに相当）及び3.00gのＬ−シトルリンを、超音波浴中、約40mlの脱塩水（ｐＨ約7.5）に溶解した。次に、ｐＨ６のグリシン−ヒスチジン緩衝液に処方した濃度約109mg/mlの約4.60mlの純粋なIgG1（「材料」の項参照）を添加し、脱塩水（ｐＨ約7.5）で希釈し50mlにした。こうして得られた溶液には約９％(w/v)のアジュバント又はマトリックスと１％(w/v)のタンパク質が含まれており、サイクロンＩを使って噴霧空気量約0.67m3/時間で前記記載のようにして噴霧乾燥させた。凝集体含有率は前記記載の方法で調べた。
−  相対湿度75％、温度40℃の開放状態で１週間保存したところ（強制的保存安定性）、粉末を溶かして調製した溶液の凝集体含有率は約3.1％であった。
【０１１０】
実施例４
2.66％(w/v)トレハロース、0.33％(w/v)トリイソロイシン及び0.33％(w/v)IgG1含有製剤の噴霧乾燥
8.0gのトレハロース及び１gのトリイソロイシンを、超音波浴中、約280mlの脱塩水（ｐＨ約7.5）に溶解した。次に、ｐＨ６のグリシン−ヒスチジン緩衝液に処方した濃度約96.55mg/mlの約12.30mlの純粋なIgG1（「材料」の項参照）を添加し、脱塩水（ｐＨ約7.5）で希釈して300mlにした。こうして得られた溶液には約３％(w/v)のアジュバント又はマトリックスと0.33％(w/v)のタンパク質が含まれており、サイクロンIIを使って噴霧空気量約0.67m3/時間で前記記載のようにして噴霧乾燥させた。凝集体含有率は前記記載の方法で調べた。
−  相対湿度75％、温度40℃の開放状態で１週間保存したところ（強制的保存安定性）、粉末を溶かして調製した溶液の凝集体含有率は約26.7％であった。
【０１１１】
2.66％(w/v)ラフィノース、0.33％(w/v)トリイソロイシン及び0.33％(w/v)IgG1含有製剤の噴霧乾燥
8.0gのラフィノース及び１gのトリイソロイシンを、超音波浴中、約140mlの脱塩水（ｐＨ約7.5）に溶解した。次に、ｐＨ６のグリシン−ヒスチジン緩衝液に処方した濃度約102.8mg/mlの約4.87mlの純粋なIgG1（「材料」の項参照）を添加し、脱塩水（ｐＨ約7.5）で希釈し300mlにした。こうして得られた溶液には約３％(w/v)のアジュバント又はマトリックスと0.33％(w/v)のタンパク質が含まれており、サイクロンIIを使って噴霧空気量約0.67m3/時間で前記記載のようにして噴霧乾燥させた。凝集体含有率は前記記載の方法で調べた。
−  相対湿度75％、温度40℃の開放状態で１週間保存したところ（強制的保存安定性）、粉末を溶かして調製した溶液の凝集体含有率は約12.6％であった。
【０１１２】
2.66％(w/v)ヒドロキシエチルデンプン（HES）、0.33％(w/v)トリイソロイシン及び0.33％(w/v)IgG1含有製剤の噴霧乾燥
8.0gのＨＥＳ及び１gのトリイソロイシンを、超音波浴中、約80℃で攪拌しながら約140mlの脱塩水（ｐＨ約7.5）に溶解した。次に、ｐＨ６のグリシン−ヒスチジン緩衝液に処方した濃度約102.8mg/mlの約4.87mlの純粋なIgG1（「材料」の項参照）を先に冷却しておいた濁った溶液に添加し、脱塩水（ｐＨ約7.5）で希釈し150mlにした。こうして得られた溶液には約３％(w/v)のアジュバント又はマトリックスと0.33％(w/v)のタンパク質が含まれており、サイクロンIIを使って噴霧空気量約0.67m3/時間で前記記載のようにして噴霧乾燥させた。凝集体含有率は前記記載の方法で調べた。
−  相対湿度75％、温度40℃の開放状態で１週間保存したところ（強制的保存安定性）、粉末を溶かして調製した溶液の凝集体含有率は約18.6％であった。
−  相対湿度約43％、温度25℃の開放状態で１ヶ月及び３ヶ月保存したところ（３ヶ月開放状態安定性）、粉末を溶かして調製した溶液の凝集体含有率はそれぞれ約11.9％と約15.4％であった。
【０１１３】
2.00％(w/v)サッカロース、0.66％(w/v)ラクトース、0.33％(w/v)トリイソロイシン及び0.33％(w/v)IgG1含有製剤の噴霧乾燥
6.0gのサッカロース、2.0gのラクトース及び１gのトリイソロイシンを、超音波浴中、約280mlの脱塩水（ｐＨ約7.5）に溶解した。次に、ｐＨ６のグリシン−ヒスチジン緩衝液に処方した濃度約102.8mg/mlの約9.73mlの純粋なIgG1（「材料」の項参照）を添加し、脱塩水（ｐＨ約7.5）で希釈し300mlにした。こうして得られた溶液には約３％(w/v)のアジュバント又はマトリックスと0.33％(w/v)のタンパク質が含まれており、サイクロンIIを使って噴霧空気量約0.67m3/時間で前記記載のようにして噴霧乾燥させた。凝集体含有率は前記記載の方法で調べた。
−  相対湿度75％、温度40℃の開放状態で１週間保存したところ（強制的保存安定性）、粉末を溶かして調製した溶液の凝集体含有率は約8.8％であった。
【０１１４】
2.66％(w/v)サッカロース、0.33％(w/v)トリイソロイシン及び0.33％(w/v)IgG1含有製剤の噴霧乾燥
8.0gのサッカロース及び１gのトリイソロイシンを、超音波浴中、約280mlの脱塩水（ｐＨ約7.5）に溶解した。次に、ｐＨ６のグリシン−ヒスチジン緩衝液に処方した濃度約102.8mg/mlの約9.73mlの純粋なIgG1（「材料」の項参照）を添加し、脱塩水（ｐＨ約7.5）で希釈し300mlにした。こうして得られた溶液には約３％(w/v)のアジュバント又はマトリックスと0.33％(w/v)のタンパク質が含まれており、サイクロンIIを使って噴霧空気量約0.67m3/時間で前記記載のようにして噴霧乾燥させた。凝集体含有率は前記記載の方法で調べた。
−  相対湿度75％、温度40℃の開放状態で１週間保存したところ（強制的保存安定性）、粉末を溶かして調製した溶液の凝集体含有率は約5.6％であった。
【０１１５】
2.66％(w/v)LS90P、0.33％(w/v)トリイソロイシン及び0.33％(w/v)IgG1含有製剤の噴霧乾燥
4.0gのLS90P及び0.50gのトリイソロイシンを、約140mlの脱塩水（ｐＨ約7.5）に溶解した。次に、ｐＨ６のグリシン−ヒスチジン緩衝液に処方した濃度約102.8mg/mlの約4.864mlの純粋なIgG1（「材料」の項参照）を添加し、脱塩水（ｐＨ約7.5）で希釈し150mlにした。こうして得られた溶液には約3.00％(w/v)のアジュバント又はマトリックスと0.33％(w/v)のタンパク質が含まれており、サイクロンIIを使って噴霧空気量約0.67m3/時間で前記記載のようにして噴霧乾燥させた。凝集体含有率は前記記載の方法で調べた。
下記の凝集体含有率は、保存安定性として求めた。
−  相対湿度75％、温度40℃の開放状態で１週間保存したところ（強制的保存安定性）、粉末を溶かして調製した溶液の凝集体含有率は約2.3％であった。
−  ２〜８℃で１ヶ月及び３ヶ月保存したところ（３ヶ月安定性）、粉末を溶かして調製した溶液の凝集体含有率はそれぞれ約0.7％と約1.0％であった。
−  25℃で１ヶ月及び３ヶ月保存したところ（３ヶ月安定性）、粉末を溶かして調製した溶液の凝集体含有率はそれぞれ約0.8％と約1.4％であった。
−  40℃で１ヶ月及び３ヶ月保存したところ（３ヶ月安定性）、粉末を溶かして調製した溶液の凝集体含有率はそれぞれ約0.9％と約2.2％であった。
−  相対湿度約29％、温度25℃の開放状態で１ヶ月及び３ヶ月保存したところ、粉末を溶かして調製した溶液の凝集体含有率はそれぞれ約0.4％と約0.7％であった。
−  相対湿度約43％、温度25℃の開放状態で１ヶ月及び３ヶ月保存したところ、粉末を溶かして調製した溶液の凝集体含有率はそれぞれ約0.5％と約0.6％であった。
粉末のＭＭＤを前記記載のようにして求めた。
−  噴霧乾燥後の粉末のＭＭＤは4.7μｍであった。
粉末のＭＭＡＤ及びＦＰＦを前記記載のようにして求めた。
−  噴霧乾燥後の粉末のＭＭＡＤは4.8μｍ、ＦＰＦは粉末カプセル質量に対して53.2％であった。
【０１１６】
2.66％(w/v)LS90P、0.33％(w/v)トリイソロイシン及び0.33％(w/v)IgG1含有製剤の噴霧乾燥
4.0gのLS90P及び0.50gのトリイソロイシンを、約140mlの脱塩水（ｐＨ約7.5）に溶解した。次に、ｐＨ６のグリシン−ヒスチジン緩衝液に処方した濃度約102.8mg/mlの約4.864mlの純粋なIgG1（「材料」の項参照）を添加し、脱塩水（ｐＨ約7.5）で希釈し150mlにした。こうして得られた溶液には約3.00％(w/v)のアジュバント又はマトリックスと0.33％(w/v)のタンパク質が含まれており、サイクロンIIを使って噴霧空気量約1.05m3/時間で前記記載のようにして噴霧乾燥させた。凝集体含有率は前記記載の方法で調べた。
下記の凝集体含有率は、保存安定性として求めた。
−  相対湿度75％、温度40℃の開放状態で１週間保存したところ（強制的保存安定性）、粉末を溶かして調製した溶液の凝集体含有率は約2.2％であった。
−  相対湿度約29％、温度25℃で１ヶ月及び３ヶ月保存したところ（３ヶ月開放状態安定性）、粉末を溶かして調製した溶液の凝集体含有率はそれぞれ約0.5％と約0.6％だった。
−  相対湿度約43％、温度25℃で１ヶ月及び３ヶ月保存したところ（３ヶ月開放状態安定性）、粉末を溶かして調製した溶液の凝集体含有率はそれぞれ約0.5％と約0.7％だった。
粉末のＭＭＤを前記記載のようにして求めた。
−  噴霧乾燥後の粉末のＭＭＤは2.7μｍであった。
粉末のＭＭＡＤ及びＦＰＦを前記記載のようにして求めた。
−  噴霧乾燥後の粉末のＭＭＡＤは3.6μｍ、ＦＰＦは粉末カプセル質量に対して58.0％であった。
【０１１７】
2.66％(w/v)LS90P、0.33％(w/v)トリイソロイシン及び0.33％(w/v)IgG1含有製剤の噴霧乾燥
4.0gのLS90P及び0.50gのトリイソロイシンを、約140mlの脱塩水（ｐＨ約7.5）に溶解した。次に、ｐＨ６のグリシン−ヒスチジン緩衝液に処方した濃度約102.8mg/mlの約4.864mlの純粋なIgG1（「材料」の項参照）を添加し、脱塩水（ｐＨ約7.5）で希釈し150mlにした。こうして得られた溶液には約3.00％(w/v)のアジュバント又はマトリックスと0.33％(w/v)のタンパク質が含まれており、サイクロンIIを使って噴霧空気量約1.74m3/時間で前記記載のようにして噴霧乾燥させた。凝集体含有率は前記記載の方法で調べた。
下記の凝集体含有率は、保存安定性として求めた。
−  相対湿度75％、温度40℃の開放状態で１週間保存したところ（強制的保存安定性）、粉末を溶かして調製した溶液の凝集体含有率は約％であった。
−  相対湿度約29％、温度25℃で１ヶ月及び３ヶ月保存したところ（３ヶ月開放状態安定性）、粉末を溶かして調製した溶液の凝集体含有率はそれぞれ約0.5％と約0.6％だった。
−  相対湿度約43％、温度25℃で１ヶ月及び３ヶ月保存したところ（３ヶ月開放状態安定性）、粉末を溶かして調製した溶液の凝集体含有率はそれぞれ約0.5％と約0.8％だった。
粉末のＭＭＤを前記記載のようにして求めた。
−  噴霧乾燥後の粉末のＭＭＤは2.6μｍであった。
粉末のＭＭＡＤ及びＦＰＦを前記記載のようにして求めた。
−  噴霧乾燥後の粉末のＭＭＡＤは3.3μｍ、ＦＰＦは粉末カプセル質量に対して58.9％であった。
【０１１８】
1.60％(w/v)LS90P、0.20％(w/v)トリイソロイシン及び0.20％(w/v)IgG1含有製剤の噴霧乾燥
4.0gのLS90P及び0.50gのトリイソロイシンを、約220mlの脱塩水（ｐＨ約7.5）に溶解した。次に、ｐＨ６のグリシン−ヒスチジン緩衝液に処方した濃度約102.8mg/mlの約4.864mlの純粋なIgG1（「材料」の項参照）を添加し、脱塩水（ｐＨ約7.5）で希釈し250mlにした。こうして得られた溶液には約1.80％(w/v)のアジュバント又はマトリックスと0.20％(w/v)のタンパク質が含まれており、サイクロンIIを使って噴霧空気量約0.67m3/時間で前記記載のようにして噴霧乾燥させた。凝集体含有率は前記記載の方法で調べた。
下記の凝集体含有率は、保存安定性として求めた。
−  相対湿度75％、温度40℃の開放状態で１週間保存したところ（強制的保存安定性）、粉末を溶かして調製した溶液の凝集体含有率は約2.2％であった。
−  相対湿度約29％、温度25℃で１ヶ月及び３ヶ月保存したところ（３ヶ月開放状態安定性）、粉末を溶かして調製した溶液の凝集体含有率はそれぞれ約0.5％と約0.5％だった。
−  相対湿度約43％、温度25℃で１ヶ月及び３ヶ月保存したところ（３ヶ月開放状態安定性）、粉末を溶かして調製した溶液の凝集体含有率はそれぞれ約0.7％と約0.7％だった。
粉末のＭＭＤを前記記載のようにして求めた。
−  噴霧乾燥後の粉末のＭＭＤは3.2μｍであった。
粉末のＭＭＡＤ及びＦＰＦを前記記載のようにして求めた。
−  噴霧乾燥後の粉末のＭＭＡＤは3.9μｍ、ＦＰＦは粉末カプセル質量に対して55.6％であった。
【０１１９】
2.833％(w/v)LS90P、0.166％(w/v)トリイソロイシン及び0.33％(w/v)IgG1含有製剤の噴霧乾燥
4.25gのLS90P及び0.25gのトリイソロイシンを、約140mlの脱塩水（ｐＨ約7.5）に溶解した。次に、ｐＨ６のグリシン−ヒスチジン緩衝液に処方した濃度約102.8mg/mlの約4.864mlの純粋なIgG1（「材料」の項参照）を添加し、脱塩水（ｐＨ約7.5）で希釈し150mlにした。こうして得られた溶液には約3.00％(w/v)のアジュバント又はマトリックスと0.33％(w/v)のタンパク質が含まれており、サイクロンIIを使って噴霧空気量約0.67m3/時間で前記記載のようにして噴霧乾燥させた。凝集体含有率は前記記載の方法で調べた。
下記の凝集体含有率は、保存安定性として求めた。
−  相対湿度75％、温度40℃の開放状態で１週間保存したところ（強制的保存安定性）、粉末を溶かして調製した溶液の凝集体含有率は約1.5％であった。
−  相対湿度約29％、温度25℃で１ヶ月及び３ヶ月保存したところ（３ヶ月開放状態安定性）、粉末を溶かして調製した溶液の凝集体含有率はそれぞれ約0.5％と約0.5％だった。
−  相対湿度約43％、温度25℃で１ヶ月及び３ヶ月保存したところ（３ヶ月開放状態安定性）、粉末を溶かして調製した溶液の凝集体含有率はそれぞれ約0.5％と約0.6％だった。
粉末のＭＭＤを前記記載のようにして求めた。
−  噴霧乾燥後の粉末のＭＭＤは4.8μｍであった。
粉末のＭＭＡＤ及びＦＰＦを前記記載のようにして求めた。
−  噴霧乾燥後の粉末のＭＭＡＤは5.2μｍ、ＦＰＦは粉末カプセル質量に対して45.7％であった。
【０１２０】
2.9166％(w/v)LS90P、0.0833％(w/v)トリイソロイシン及び0.33％(w/v)IgG1含有製剤の噴霧乾燥
4.375gのLS90P及び0.125gのトリイソロイシンを、約140mlの脱塩水（ｐＨ約7.5）に溶解した。次に、ｐＨ６のグリシン−ヒスチジン緩衝液に処方した濃度約102.8mg/mlの約4.864mlの純粋なIgG1（「材料」の項参照）を添加し、脱塩水（ｐＨ約7.5）で希釈し150mlにした。こうして得られた溶液には約3.00％(w/v)のアジュバント又はマトリックスと0.33％(w/v)のタンパク質が含まれており、サイクロンIIを使って噴霧空気量約0.67m3/時間で前記記載のようにして噴霧乾燥させた。凝集体含有率は前記記載の方法で調べた。
下記の凝集体含有率は、保存安定性として求めた。
−  相対湿度75％、温度40℃の開放状態で１週間保存したところ（強制的保存安定性）、粉末を溶かして調製した溶液の凝集体含有率は約1.2％であった。
−  相対湿度約29％、温度25℃で１ヶ月及び３ヶ月保存したところ（３ヶ月開放状態安定性）、粉末を溶かして調製した溶液の凝集体含有率はそれぞれ約0.4％と約0.5％だった。
−  相対湿度約43％、温度25℃で１ヶ月及び３ヶ月保存したところ（３ヶ月開放状態安定性）、粉末を溶かして調製した溶液の凝集体含有率はそれぞれ約0.5％と約0.6％だった。
粉末のＭＭＤを前記記載のようにして求めた。
−  噴霧乾燥後の粉末のＭＭＤは4.2μｍであった。
粉末のＭＭＡＤ及びＦＰＦを前記記載のようにして求めた。
−  噴霧乾燥後の粉末のＭＭＡＤは6.1μｍ、ＦＰＦは粉末カプセル質量に対して39.6％であった。
【０１２１】
2.66％(w/v)LS55P、0.33％(w/v)トリイソロイシン及び0.33％(w/v)IgG1含有製剤の噴霧乾燥
8.0gのLS55P及び１gのトリイソロイシンを、超音波浴中、約280mlの脱塩水（ｐＨ約7.5）に溶解した。次に、ｐＨ６のグリシン−ヒスチジン緩衝液に処方した濃度約102.8mg/mlの約9.73mlの純粋なIgG1（「材料」の項参照）を添加し、脱塩水（ｐＨ約7.5）で希釈し300mlにした。こうして得られた溶液には約３％(w/v)のアジュバント又はマトリックスと0.33％(w/v)のタンパク質が含まれており、サイクロンIIを使って噴霧空気量約0.67m3/時間で前記記載のようにして噴霧乾燥させた。凝集体含有率は前記記載の方法で調べた。
−  相対湿度75％、温度40℃の開放状態で１週間保存したところ（強制的保存安定性）、粉末を溶かして調製した溶液の凝集体含有率は約2.1％であった。
−  ２〜８℃で１ヶ月及び３ヶ月保存したところ（３ヶ月安定性）、粉末を溶かして調製した溶液の凝集体含有率はそれぞれ約0.8％と約1.5％であった。
−  25℃で１ヶ月及び３ヶ月保存したところ（３ヶ月安定性）、粉末を溶かして調製した溶液の凝集体含有率はそれぞれ約0.9％と約1.5％であった。
−  40℃で１ヶ月及び３ヶ月保存したところ（３ヶ月安定性）、粉末を溶かして調製した溶液の凝集体含有率はそれぞれ約1.3％と約2.6％であった。
−  相対湿度約43％、温度25℃で１ヶ月及び３ヶ月保存したところ（３ヶ月開放状態安定性）、粉末を溶かして調製した溶液の凝集体含有率はそれぞれ約1.0％と約1.0％だった。
粉末のＭＭＤを前記記載のようにして求めた。
−  噴霧乾燥後の粉末のＭＭＤは3.4μｍであった。
粉末のＭＭＡＤ及びＦＰＦを前記記載のようにして求めた。
−  噴霧乾燥後の粉末のＭＭＡＤは3.9μｍ、ＦＰＦは粉末カプセル質量に対して58.3％であった。
−  相対湿度約43％、温度25℃で１ヶ月保存したところ（３ヶ月開放状態安定性）、ＭＭＡＤは3.8μｍ、ＦＰＦは粉末カプセル質量に対して59.6％であった。
【０１２２】
2.833％(w/v)LS55P、0.166％(w/v)トリイソロイシン及び0.33％(w/v)IgG1含有製剤の噴霧乾燥
8.5gのLS55P及び0.5gのトリイソロイシンを、超音波浴中、約280mlの脱塩水（ｐＨ約7.5）に溶解した。次に、ｐＨ６のグリシン−ヒスチジン緩衝液に処方した濃度約102.8mg/mlの約9.73mlの純粋なIgG1（「材料」の項参照）を添加し、脱塩水（ｐＨ約7.5）で希釈し300mlにした。こうして得られた溶液には約３％(w/v)のアジュバント又はマトリックスと0.33％(w/v)のタンパク質が含まれており、サイクロンIIを使って噴霧空気量約0.67m3/時間で前記記載のようにして噴霧乾燥させた。凝集体含有率は前記記載の方法で調べた。
−  相対湿度75％、温度40℃の開放状態で１週間保存したところ（強制的保存安定性）、粉末を溶かして調製した溶液の凝集体含有率は約3.4％であった。
−  相対湿度約43％、温度25℃で１ヶ月及び３ヶ月保存したところ（３ヶ月開放状態安定性）、粉末を溶かして調製した溶液の凝集体含有率はそれぞれ約1.3％と約1.5％だった。
粉末のＭＭＤを前記記載のようにして求めた。
−  噴霧乾燥後の粉末のＭＭＤは2.9μｍであった。
粉末のＭＭＡＤ及びＦＰＦを前記記載のようにして求めた。
−  噴霧乾燥後の粉末のＭＭＡＤは4.4μｍ、ＦＰＦは粉末カプセル質量に対して58.6％であった。
【０１２３】
2.9166％(w/v)LS55P、0.0833％(w/v)トリイソロイシン及び0.33％(w/v)IgG1含有製剤の噴霧乾燥
8.75gのLS55P及び0.25gのトリイソロイシンを、約280mlの脱塩水（ｐＨ約7.5）に溶解した。次に、ｐＨ６のグリシン−ヒスチジン緩衝液に処方した濃度約102.8mg/mlの約9.73mlの純粋なIgG1（「材料」の項参照）を添加し、脱塩水（ｐＨ約7.5）で希釈し300mlにした。こうして得られた溶液には約３％(w/v)のアジュバント又はマトリックスと0.33％(w/v)のタンパク質が含まれており、サイクロンIIを使って噴霧空気量約0.67m3/時間で前記記載のようにして噴霧乾燥させた。凝集体含有率は前記記載の方法で調べた。
−  相対湿度75％、温度40℃の開放状態で１週間保存したところ（強制的保存安定性）、粉末を溶かして調製した溶液の凝集体含有率は約4.4％であった。
−  相対湿度約43％、温度25℃で１ヶ月及び３ヶ月保存したところ（３ヶ月開放状態安定性）、粉末を溶かして調製した溶液の凝集体含有率はそれぞれ約0.7％と約0.8％だった。
粉末のＭＭＤを前記記載のようにして求めた。
−  噴霧乾燥後の粉末のＭＭＤは2.9μｍであった。
粉末のＭＭＡＤ及びＦＰＦを前記記載のようにして求めた。
−  噴霧乾燥後の粉末のＭＭＡＤは4.4μｍ、ＦＰＦは粉末カプセル質量に対して58.6％であった。
【０１２４】
実施例５
本発明による別の粉末の製造
3.33％(w/v)リゾチーム含有製剤の噴霧乾燥
５gのリゾチームを約140mlの脱塩水（ｐＨ約7.5）に溶解し、脱塩水（ｐＨ約7.5）で希釈して150mlにした。こうして得られた溶液を、サイクロンIIを使って前記記載のようにして噴霧乾燥させた。
残留モノマー含有率を前記記載の方法で求めた。強制的保存の後、粉末を溶かして調製した溶液の残留モノマー含有率は約35.3％であった。粉末のＭＭＤを前記記載のようにして求めた。粉末のＭＭＤは3.2μｍであった。粉末のＭＭＡＤ及びＦＰＦを前記記載のようにして求めた。ＭＭＡＤは4.0μｍ、ＦＰＦは粉末カプセル質量に対して70.4％であった。
【０１２５】
3.00％(w/v)LS90P及び0.33％(w/v)リゾチーム含有製剤の噴霧乾燥
9.0gのLS90Pを、超音波浴中、約280mlの脱塩水（ｐＨ約7.5）に溶解した。次に、１ｇのリゾチームを添加し、脱塩水（ｐＨ約7.5）で希釈し300mlにした。こうして得られた溶液を、サイクロンIIを使って前記記載のようにして噴霧乾燥させた。
残留モノマー含有率を前記記載の方法で求めた。強制的保存の後、粉末を溶かして調製した溶液の残留モノマー含有率は約62.1％であった。粉末のＭＭＤを前記記載のようにして求めた。粉末のＭＭＤは4.0μｍであった。粉末のＭＭＡＤ及びＦＰＦを前記記載のようにして求めた。ＭＭＡＤは3.7μｍ、ＦＰＦは粉末カプセル質量に対して24.7％であった。
【０１２６】
2.66％(w/v)LS90P、0.33％(w/v)イソロイシン及び0.33％(w/v)リゾチーム含有製剤の噴霧乾燥
8.0gのLS90Pと１gのイソロイシンとを、超音波浴中約280mlの脱塩水（ｐＨ約7.5）に溶解した。次に、１ｇのリゾチームを添加し、脱塩水（ｐＨ約7.5）で希釈して300mlにした。こうして得られた溶液をサイクロンIIを使って前記記載のようにして噴霧乾燥させた。
残留モノマー含有率は前記記載の方法で求めた。強制的保存の後、粉末を溶かして調製した溶液の残留モノマー含有率は約47.9％であった。粉末のＭＭＤを前記記載のようにして求めた。粉末のＭＭＤは3.9μｍであった。粉末のＭＭＡＤ及びＦＰＦを前記記載のようにして求めた。ＭＭＡＤは4.1μｍ、ＦＰＦは粉末カプセル質量に対して29.0％であった。
【０１２７】
2.66％(w/v)LS90P、0.33％(w/v)トリイソロイシン及び0.33％(w/v)リゾチーム含有製剤の噴霧乾燥
8.0gのLS90Pと１gのトリイソロイシンとを、超音波浴中約280mlの脱塩水（ｐＨ約7.5）に溶解した。次に、１ｇのリゾチームを添加し、脱塩水（ｐＨ約7.5）で希釈して300mlにした。こうして得られた溶液を、サイクロンIIを使って前記記載のようにして噴霧乾燥させた。
残留モノマー含有率を前記記載の方法で求めた。強制的保存の後、粉末を溶かして調製した溶液の残留モノマー含有率は約47.9％であった。粉末のＭＭＤを前記記載のようにして求めた。粉末のＭＭＤは2.7μｍであった。粉末のＭＭＡＤ及びＦＰＦを前記記載のようにして求めた。ＭＭＡＤは3.6μｍ、ＦＰＦは粉末カプセル質量に対して58.6％であった。
【０１２８】
3.33％(w/v)カルシトニン含有製剤の噴霧乾燥
１gのカルシトニンを約25mlの脱塩水（ｐＨ約7.5）に溶解し、脱塩水（ｐＨ約7.5）で希釈し30mlにした。こうして得られた溶液を、サイクロンIIを使って前記記載のようにして噴霧乾燥させた。
凝集体含有率を前記記載の方法で求めた。
−  ２〜８℃で３ヶ月保存したところ（３ヶ月安定性）、粉末を溶かして調製した溶液の凝集体含有率は約4.1％であった。
−  25℃で３ヶ月保存したところ（３ヶ月安定性）、粉末を溶かして調製した溶液の凝集体含有率は約4.9％であった。
−  40℃で３ヶ月保存したところ（３ヶ月安定性）、粉末を溶かして調製した溶液の凝集体含有率は約7.4％であった。
粉末のＭＭＡＤ及びＦＰＦを前記記載のようにして求めた。ＭＭＡＤは3.9μｍ、ＦＰＦは粉末カプセル質量に対して59.0％であった。
【０１２９】
3.166％(w/v)LS90P及び0.166％(w/v)カルシトニン含有製剤の噴霧乾燥
4.750gのLS90Pを約140mlの脱塩水（ｐＨ約7.5）に溶解した。次に、0.250gのカルシトニンを添加し脱塩水（ｐＨ約7.5）で希釈して150mlにした。こうして得られた溶液を、サイクロンIIを使って前記記載のようにして噴霧乾燥させた。
凝集体含有率を前記記載の方法で求めた。
−  ２〜８℃で３ヶ月保存したところ（３ヶ月安定性）、粉末を溶かして調製した溶液の凝集体含有率は約3.6％であった。
−  25℃で３ヶ月保存したところ（３ヶ月安定性）、粉末を溶かして調製した溶液の凝集体含有率は約3.9％であった。
−  40℃で３ヶ月保存したところ（３ヶ月安定性）、粉末を溶かして調製した溶液の凝集体含有率は約4.6％であった。
粉末のＭＭＤを前記記載のようにして求めた。粉末のＭＭＤは2.6μｍであった。粉末のＭＭＡＤ及びＦＰＦを前記記載のようにして求めた。ＭＭＡＤは4.3μｍ、ＦＰＦは粉末カプセル質量に対して47.3％であった。
【０１３０】
2.833％(w/v)LS90P、0.33％(w/v)イソロイシン及び0.166％(w/v)カルシトニン含有製剤の噴霧乾燥
4.250gのLS90P及び0.50gのイソロイシンを、超音波浴中で約140mlの脱塩水（ｐＨ約7.5）に溶解した。次に、0.250gのカルシトニンを添加し脱塩水（ｐＨ約7.5）で希釈して150mlにした。こうして得られた溶液を、サイクロンIIを使って前記記載のようにして噴霧乾燥させた。
凝集体含有率を前記記載の方法で求めた。
−  ２〜８℃で３ヶ月保存したところ（３ヶ月安定性）、粉末を溶かして調製した溶液の凝集体含有率は約3.3％であった。
−  25℃で３ヶ月保存したところ（３ヶ月安定性）、粉末を溶かして調製した溶液の凝集体含有率は約3.6％であった。
−  40℃で３ヶ月保存したところ（３ヶ月安定性）、粉末を溶かして調製した溶液の凝集体含有率は約3.6％であった。
粉末のＭＭＤを前記記載のようにして求めた。粉末のＭＭＤは2.8μｍであった。粉末のＭＭＡＤ及びＦＰＦを前記記載のようにして求めた。ＭＭＡＤは4.4μｍ、ＦＰＦは粉末カプセル質量に対して49.2％であった。
【０１３１】
2.866％(w/v)LS90P、0.33％(w/v)トリイソロイシン及び0.166％(w/v)カルシトニン含有製剤の噴霧乾燥
4.250gのLS90P及び0.50gのトリイソロイシンを、超音波浴中で約140mlの脱塩水（ｐＨ約7.5）に溶解した。次に、0.250gのカルシトニンを添加し脱塩水（ｐＨ約7.5）で希釈し150mlにした。こうして得られた溶液を、サイクロンIIを使って前記記載のようにして噴霧乾燥させた。
凝集体含有率を前記記載の方法で求めた。
−  ２〜８℃で３ヶ月保存したところ（３ヶ月安定性）、粉末を溶かして調製した溶液の凝集体含有率は約3.3％であった。
−  25℃で３ヶ月保存したところ（３ヶ月安定性）、粉末を溶かして調製した溶液の凝集体含有率は約3.6％であった。
−  40℃で３ヶ月保存したところ（３ヶ月安定性）、粉末を溶かして調製した溶液の凝集体含有率は約3.9％であった。
粉末のＭＭＤを前記記載のようにして求めた。粉末のＭＭＤは2.5μｍであった。粉末のＭＭＡＤ及びＦＰＦを前記記載のようにして求めた。ＭＭＡＤは3.5μｍ、ＦＰＦは粉末カプセル質量に対して60.4％であった。
【０１３２】
実施例６
５％(w/v)IgG1調剤の凍結乾燥
ｐＨ６のグリシン−ヒスチジン緩衝液に処方した濃度約109mg/mlの純粋なIgG1（「材料」の項参照）を、脱塩水（ｐＨ約7.5）で50mg/mlまで希釈し、他のアジュバントを加えずに凍結乾燥させた。凍結乾燥前の溶液の量は50mlで市販の２Ｒバイアルに分けておいた。前記記載のように、２Ｒバイアル中で凍結乾燥させ、スパチュラを使ってさらに処理を行った。
凝集体含有率は前記記載の方法で調べた。
−  相対湿度75％、温度40℃の開放状態で１週間保存したところ（強制的保存安定性）、粉末を溶かして調製した溶液の凝集体含有率は約20.5％であった。
−  １日平衡にした後、40℃、乾燥状態で４週間保存したところ、粉末を溶かして調製した溶液の凝集体含有率は約15.3％であった。
−  １日真空乾燥を行った後、40℃、乾燥状態で４週間保存したところ、粉末を溶かして調製した溶液の凝集体含有率は約12.6％であった。
【０１３３】
4.5％(w/v)マンニトール及び0.5％(w/v)IgG1含有製剤の凍結乾燥
2.25gのマンニトールを約40mlの脱塩水（ｐＨ約7.5）に溶解した。次に、ｐＨ６のグリシン−ヒスチジン緩衝液に処方した濃度約109mg/mlの2.3mlの純粋なIgG1（「材料」の項参照）を、脱塩水（ｐＨ約7.5）で希釈して50mg/mlにした。こうして得られた溶液には約4.5％(w/v)のアジュバント又はマトリックスと0.5％(w/v)のタンパク質が含まれており、市販の２Ｒバイアルに分け、前記記載のようにして凍結乾燥させた。前記記載のように、２Ｒバイアル中で凍結乾燥させ、スパチュラを使ってさらに処理を行った。凝集体含有率は前記記載の方法で調べた。
下記の凝集体含有率は、保存安定性として求めた。
−  相対湿度75％、温度40℃の開放状態で１週間保存したところ（強制的保存安定性）、粉末を溶かして調製した溶液の凝集体含有率は約34.0％であった。
−  １日平衡にした後、40℃、乾燥状態で４週間保存したところ、粉末を溶かして調製した溶液の凝集体含有率は約11.6％であった。
−  １日真空乾燥を行った後、40℃、乾燥状態で４週間保存したところ、粉末を溶かして調製した溶液の凝集体含有率は約6.2％であった。
【０１３４】
4.5％(w/v)LS55P及び0.5％(w/v)IgG1含有製剤の凍結乾燥
2.25gのLS55Pを約40mlの脱塩水（ｐＨ約7.5）に溶解した。次に、ｐＨ６のグリシン−ヒスチジン緩衝液に処方した濃度約109mg/mlの2.3mlの純粋なIgG1（「材料」の項参照）を、脱塩水（ｐＨ約7.5）で希釈して50mg/mlにした。こうして得られた溶液には約4.5％(w/v)のアジュバント又はマトリックスと0.5％(w/v)のタンパク質が含まれており、市販の２Ｒバイアルに分け、前記記載のようにして凍結乾燥させた。前記記載のように、２Ｒバイアル中で凍結乾燥させ、スパチュラを使ってさらに処理を行った。凝集体含有率は前記記載の方法で調べた。
下記の凝集体含有率は、保存安定性として求めた。
−  相対湿度75％、温度40℃の開放状態で１週間保存したところ（強制的保存安定性）、粉末を溶かして調製した溶液の凝集体含有率は約2.5％であった。
−  １日平衡にした後、40℃、乾燥状態で４週間保存したところ、粉末を溶かして調製した溶液の凝集体含有率は約2.6％であった。
−  １日真空乾燥を行った後、40℃、乾燥状態で４週間保存したところ、粉末を溶かして調製した溶液の凝集体含有率は約1.2％であった。
【０１３５】
4.5％(w/v)カップリングシュガー及び0.5％(w/v)IgG1含有製剤の凍結乾燥
2.25gのカップリングシュガーを約40mlの脱塩水（ｐＨ約7.5）に溶解した。次に、ｐＨ６のグリシン−ヒスチジン緩衝液に処方した濃度約109mg/mlの2.3mlの純粋なIgG1（「材料」の項参照）を、脱塩水（ｐＨ約7.5）で希釈して50mg/mlにした。こうして得られた溶液には約4.5％(w/v)のアジュバント又はマトリックスと0.5％(w/v)のタンパク質が含まれており、市販の２Ｒバイアルに分け、前記記載のようにして凍結乾燥させた。前記記載のように、２Ｒバイアル中で凍結乾燥させ、スパチュラを使ってさらに処理を行った。凝集体含有率は前記記載の方法で調べた。
下記の凝集体含有率は、保存安定性として求めた。
−  相対湿度75％、温度40℃の開放状態で１週間保存したところ（強制的保存安定性）、粉末を溶かして調製した溶液の凝集体含有率は約5.5％であった。
−  １日平衡にした後、40℃、乾燥状態で４週間保存したところ、粉末を溶かして調製した溶液の凝集体含有率は約4.6％であった。
−  １日真空乾燥を行った後、40℃、乾燥状態で４週間保存したところ、粉末を溶かして調製した溶液の凝集体含有率は約1.5％であった。
【０１３６】
明細書中に記載のパーセントのデータはすべて溶液中の固形分濃度（質量／質量）を指す。下記記載の図面の説明文は、すべて噴霧乾燥や微粉化を伴う凍結乾燥によって得られる粉末の組成比（質量／質量）を指している。さらに、図面説明文によると、溶液中の総固形分濃度（総固形分＝ＴＳ）がパーセント（質量／質量）で規定されている。図８の説明では、カップリングシュガーをＣＳと略記している。図１８、図１９、図２０及び図２１の説明では、トリイソロイシンをIle3と略記している。さらに、図１５、図１６、図１７、図１８、図１９、図２０及び図２１では、ビュッヒ社（Buchi）のB-290に設定した噴霧乾燥工程中の霧化速度（ＡＡＦ＝噴霧空気流量）が指定されている。その数値４０は、実際の流量約0.67m3/時間に相当し、数値５０は、実際の流量約1.05m3/時間に相当し、数値６０は、実際の流量約1.74m3/時間に相当する。他のすべての図面では、霧化速度４０が実際の流量約0.67m3/時間に対応している。
【図面の簡単な説明】
【０１３７】
【図１】凍結乾燥を行い、微粉化後に相対湿度75％及び温度40℃の開放状態で１週間保存し（強制的保存安定性）、再構成した後の凝集体含有率を示す。ａ）4.5％のLS55P分及び0.5％のIgG分、ｂ）4.5％のカップリングシュガー分及び0.5％のIgG分、ｃ）5.0％のIgG分、ｄ）4.5％のマンニトール分及び0.5％のIgG分をそれぞれ含む水溶液を凍結乾燥した。LS55Pを含む粉末とカップリングシュガーを含む粉末は、凝集分が低いことを特徴とする。
【０１３８】
【図２】凍結乾燥を行い、微粉化、平衡化（equilibration）後、温度40℃の乾燥状態で４週間保存し（平衡化（equilibrated）保存安定性）、再構成した後の凝集体含有率を示す。ａ）4.5％のLS55P分及び0.5％のIgG分、ｂ）4.5％のカップリングシュガー分及び0.5％のIgG分、ｃ）5.0％のIgG分、ｄ）4.5％のマンニトール分及び0.5％のIgG分をそれぞれ含む水溶液を凍結乾燥した。LS55Pを含む粉末とカップリングシュガーを含む粉末は、凝集分が低いことを特徴とする。
【０１３９】
【図３】凍結乾燥を行い、微粉化、真空乾燥後、温度40℃の乾燥状態で４週間保存し（真空乾燥保存安定性）、再構成後の凝集体含有率を示す。ａ）4.5％のLS55P分及び0.5％のIgG分、ｂ）4.5％のカップリングシュガー分及び0.5％のIgG分、ｃ）5.0％のIgG分、ｄ）4.5％のマンニトール分及び0.5％のIgG分をそれぞれ含む水溶液を凍結乾燥した。LS55Pを含む粉末とカップリングシュガーを含む粉末は、凝集分が低いことを特徴とする。
【０１４０】
【図４】噴霧乾燥を行い、相対湿度75％及び温度40℃の開放状態で１週間保存し（強制的保存安定性）、再構成後の凝集体含有率を示す。ａ）９％のLS55P分及び１％のIgG分、ｂ）９％のカップリングシュガー分及び１％のIgG分、ｃ）９％のカップリングシュガーＳ分及び１％のIgG分、ｄ）９％のトレハロース分及び１％のIgG分、ｅ）10％のIgG分をそれぞれ含む水溶液を噴霧乾燥した。LS55Pを含む粉末、ならびにカップリングシュガーを含む粉末とカップリングシュガーＳを含む粉末は、凝集分が低いことを特徴とする。
【０１４１】
【図５】噴霧乾燥を行い、相対湿度75％及び温度40℃の開放状態で１週間保存し（強制的保存安定性）、再構成後の凝集体含有率を示す。ａ）８％のLS55P分、１％のイソロイシン分及び１％のIgG分、ｂ）８％のカップリングシュガー分、１％のイソロイシン分及び１％のIgG分、ｃ）８％のカップリングシュガーＳ分、１％のイソロイシン分及び１％のIgG分、ｄ）８％のトレハロース分、１％のイソロイシン分及び１％のIgG分、ｅ）10％のIgG分をそれぞれ含む水溶液を噴霧乾燥した。LS55Pを含む粉末、ならびにカップリングシュガーを含む粉末とカップリングシュガーＳを含む粉末は、凝集分が低いことを特徴とする。
【０１４２】
【図６】噴霧乾燥を行い、相対湿度75％及び温度40℃の開放状態で１週間保存し（強制的保存安定性）、再構成後の凝集体含有率を示す。ａ）３％のLS55P分、６％のシトルリン分及び１％のIgG分、ｂ）３％のカップリングシュガー分、６％のシトルリン分及び１％のIgG分、ｃ）３％のカップリングシュガーＳ分、16％のシトルリン分及び１％のIgG分、ｄ）３％のトレハロース分、６％のシトルリン分及び１％のIgG分、ｅ）10％のIgG分をそれぞれ含む水溶液を噴霧乾燥した。LS55Pを含む粉末、ならびにカップリングシュガーを含む粉末とカップリングシュガーＳを含む粉末は、凝集分が低いことを特徴とする。
【０１４３】
【図７】噴霧乾燥を行い、相対湿度75％及び温度40℃の開放状態で１週間保存し（強制的保存安定性）、再構成後の凝集体含有率を示す。ａ）9.9％のLS55P分及び0.1％のIgG分、ｂ）９％のLS55P分及び１％のIgG分、ｃ）６％のLS55P分及び４％のIgG分、ｄ）４％のLS55P分及び６％のIgG分、ｅ）2.5％のLS55P分及び7.5％のIgG分、ｆ）９％のLS55P分及び１％のIgG分、ｇ）0.5％のLS55P分及び9.5％のIgG分、ｈ）10％のIgG分をそれぞれ含む水溶液を噴霧乾燥した。LS55Pを含む粉末は凝集分が低いことを特徴とする。
【０１４４】
【図８】噴霧乾燥を行い、相対湿度75％及び温度40℃の開放状態で１週間保存し（強制的保存安定性）、再構成後の凝集体含有率を示す。ａ）9.9％のカップリングシュガー分及び0.1％のIgG分、ｂ）９％のカップリングシュガー分及び１％のIgG分、ｃ）６％のカップリングシュガー分及び４％のIgG分、ｄ）４％のカップリングシュガー分及び６％のIgG分、ｅ）2.5％のカップリングシュガー分及び7.5％のIgG分、ｆ）１％のカップリングシュガー分及び９％のIgG分、ｇ）10％のIgG分をそれぞれ含む水溶液を噴霧乾燥した。LS55Pを含む粉末は凝集分が低いことを特徴とする。
【０１４５】
【図９】噴霧乾燥を行い、相対湿度75％及び温度40℃の開放状態で１週間保存し（強制的保存安定性）、再構成後の凝集体含有率を示す。ａ）3.00％のLS55P分及び0.33％のIgG分、ｂ）2.9166％のLS55P分、0.0833％のトリイソロイシン分及び0.33％のIgG分、ｃ）2.833％のLS55P分、0.166％のトリイソロイシン分及び0.33％のIgG分、ｄ）2.66％のLS55P分、0.33％のトリイソロイシン分及び0.33％のIgG分をそれぞれ含む水溶液を噴霧乾燥した。LS55Pを含む粉末は凝集分が低いことを特徴とする。LS55Pを含む粉末の総固形分に対して、トリイソロイシン分が０％から10％に増えると、タンパク質凝集体は著しく減少する。
【０１４６】
【図１０】噴霧乾燥を行い、相対湿度75％及び温度40℃の開放状態で１週間保存し（強制的保存安定性）、再構成後の凝集体含有率を示す。ａ）3.00％のLS90P分及び0.33％のIgG分、ｂ）2.9166％のLS90P分、0.0833％のトリイソロイシン分及び0.33％のIgG分、ｃ）2.833％のLS90P分、0.166％のトリイソロイシン分及び0.33％のIgG分、ｄ）2.66％のLS90P分、0.33％のトリイソロイシン分及び0.33％のIgG分をそれぞれ含む水溶液を噴霧乾燥した。LS90P含有粉末は凝集分が低いことを特徴とする。
【０１４７】
【図１１】噴霧乾燥を行い、相対湿度75％及び温度40℃の開放状態で１週間保存し（強制的保存安定性）、再構成後の凝集体含有率を示す。ａ）2.66％のLS90P分、0.33％のトリイソロイシン分及び0.33％のIgG分、ｂ）2.66％のLS55P分、0.33％のトリイソロイシン分及び0.33％のIgG分、ｃ）2.66％のサッカロース分、0.33％のトリイソロイシン分及び0.33％のIgG分、ｄ）2.00％のサッカロース分、0.66％のラクトース分、0.33％のトリイソロイシン分及び0.33％のIgG分、ｅ）2.66％のラフィノース分、0.33％のトリイソロイシン分及び0.33％のIgG分、ｆ）2.66％のヒドロキシエチルデンプン（HES）分、0.33％のトリイソロイシン分及び0.33％のIgG分、ｇ）2.66％のトレハロース分、0.33％のトリイソロイシン分及び0.33％のIgG分をそれぞれ含む水溶液を噴霧乾燥した。LS90P含有粉末及びLS55P含有粉末は、特に現状技術としてのラフィノースやヒドロキシエチルデンプン（HES）と比較すると凝集分が著しく低い。
【０１４８】
【図１２】噴霧乾燥を行い、真空乾燥後に温度40℃の乾燥状態で４週間保存し（真空乾燥保存安定性）、再構成した後の凝集体含有率を示す。ａ）９％のカップリングシュガー分及び１％のIgG分、ｂ）８％のカップリングシュガー分、１％のイソロイシン分及び１％のIgG分、ｃ）３％のカップリングシュガー分、６％のシトルリン及び１％のIgG分、ｄ）10％のIgG分をそれぞれ含む水溶液を噴霧乾燥した。カップリングシュガーを含む粉末は、凝集分が低いことを特徴とする。
【０１４９】
【図１３】噴霧乾燥を行い、真空乾燥後に温度40℃の乾燥状態で４週間保存し（真空乾燥保存安定性）、再構成した後の凝集体含有率を示す。ａ）9.9％のLS55P分及び0.1％のIgG分、ｂ）９％のLS55P分及び１％のIgG分、ｃ）2.5％のLS55P分及び7.5％のIgG分、ｄ）１％のLS55P分及び９％のIgG分、ｅ）10％のIgG分、ｆ）８％のLS55P分、１％のイソロイシン分及び１％のIgG分、ｇ）３％のLS55P分、６％のシトルリン分及び１％のIgG分をそれぞれ含む水溶液を噴霧乾燥した。LS55Pを含む粉末は凝集分が低いことを特徴とする。
【０１５０】
【図１４ａ】噴霧乾燥を行い、真空乾燥後に温度２〜８℃、25℃、40℃の乾燥状態で１ヶ月又は３ヶ月保存し（１ヶ月又は３ヶ月安定性）、再構成した後の凝集体含有率を示す。ａ）3.00％のLS90P分及び0.33％のIgG分、ｂ）2.66％のLS55P分、0.33％のイソロイシン分及び0.33％のIgG分、ｃ）2.66％のLS90P分、0.33％のイソロイシン分及び0.33％のIgG分、ｄ）2.66％のLS55P分、0.33％のトリイソロイシン分及び0.33％のIgG分、ｅ）2.66％のLS90P分、0.33％のトリイソロイシン分及び0.33％のIgG分、ｆ）3.33％のIgG分をそれぞれ含む水溶液を噴霧乾燥した。３ヶ月の保存後、LS90Pを含む粉末及びLS55Pを含む粉末は凝集分がとりわけ低いことを特徴とする。
【０１５１】
【図１４ｂ】噴霧乾燥を行い、真空乾燥後に温度２〜８℃、25℃、40℃の乾燥状態で１ヶ月又は３ヶ月保存し（１ヶ月又は３ヶ月安定性）、再構成した後の凝集体含有率を示す。ａ）3.00％のLS90P分及び0.33％のIgG分、ｂ）2.66％のLS55P分、0.33％のイソロイシン分及び0.33％のIgG分、ｃ）2.66％のLS90P分、0.33％のイソロイシン分及び0.33％のIgG分、ｄ）2.66％のLS55P分、0.33％のトリイソロイシン分及び0.33％のIgG分、ｅ）2.66％のLS90P分、0.33％のトリイソロイシン分及び0.33％のIgG分、ｆ）3.33％のIgG分をそれぞれ含む水溶液を噴霧乾燥した。３ヶ月の保存後、LS90Pを含む粉末及びLS55Pを含む粉末は凝集分がとりわけ低いことを特徴とする。
【０１５２】
【図１５ａ】噴霧乾燥を行い、真空乾燥後に温度25℃で相対湿度29％と43％の開放状態でそれぞれ１ヶ月又は３ヶ月乾燥状態で保存し（開放状態の１ヶ月又は３ヶ月安定性）、再構成した後の凝集体含有率を示す。ａ）2.9166％のLS90P分、0.0833％のトリイソロイシン分及び0.33％のIgG分（ＡＡＦ値４０）、ｂ）2.833％のLS90P分、0.166％のトリイソロイシン分及び0.33％のIgG分（ＡＡＦ値４０）、ｃ）2.66％のLS90P分、0.33％のトリイソロイシン分及び0.33％のIgG分（ＡＡＦ値４０）、ｄ）1.60％のLS90P分、0.20％のトリイソロイシン分及び0.33％のIgG分（ＡＡＦ値４０）、ｅ）2.66％のLS90P分、0.33％のトリイソロイシン分及び0.33％のIgG分（ＡＡＦ値５０）、ｆ）2.66％のLS90P分、0.33％のトリイソロイシン分及び0.33％のIgG分（ＡＡＦ値６０）、ｇ）3.33％のIgG分（ＡＡＦ値４０）をそれぞれ含む水溶液を噴霧乾燥した。３ヶ月の保存後、LS90Pを含む粉末は凝集分がとりわけ低いことを特徴とする。
【０１５３】
【図１５ｂ】噴霧乾燥を行い、真空乾燥後に温度25℃で相対湿度29％と43％の開放状態でそれぞれ１ヶ月又は３ヶ月乾燥状態で保存し（開放状態の１ヶ月又は３ヶ月安定性）、再構成した後の凝集体含有率を示す。ａ）2.9166％のLS90P分、0.0833％のトリイソロイシン分及び0.33％のIgG分（ＡＡＦ値４０）、ｂ）2.833％のLS90P分、0.166％のトリイソロイシン分及び0.33％のIgG分（ＡＡＦ値４０）、ｃ）2.66％のLS90P分、0.33％のトリイソロイシン分及び0.33％のIgG分（ＡＡＦ値４０）、ｄ）1.60％のLS90P分、0.20％のトリイソロイシン分及び0.33％のIgG分（ＡＡＦ値４０）、ｅ）2.66％のLS90P分、0.33％のトリイソロイシン分及び0.33％のIgG分（ＡＡＦ値５０）、ｆ）2.66％のLS90P分、0.33％のトリイソロイシン分及び0.33％のIgG分（ＡＡＦ値６０）、ｇ）3.33％のIgG分（ＡＡＦ値４０）をそれぞれ含む水溶液を噴霧乾燥した。３ヶ月の保存後、LS90Pを含む粉末は凝集分がとりわけ低いことを特徴とする。
【０１５４】
【図１６】種々の粉末に関し、粒径５μｍ未満の粒子を除いた細かい粒子の分画（ＦＰＦ）を示す。LS55PとIgG1とを含んだ水溶液又はLS55PとイソロイシンとIgG1とを含んだ水溶液を噴霧乾燥させて、粉末を製造した。溶液の調製及び噴霧については、実施例の項で記載のようにして行った。イソロイシン含有粉末のＦＰＦは約35％であるが、イソロイシンを含まない粉末のＦＰＦは約16％にとどまっている。
【０１５５】
【図１７】種々の粉末に関し、粒径５μｍ未満の粒子を除いた細かい粒子の分画（ＦＰＦ）を示す。LS90PとIgG1とを含んだ水溶液又はLS90PとイソロイシンとIgG1とを含んだ水溶液を噴霧乾燥させて、粉末を製造した。溶液の調製及び噴霧については、実施例の項で記載のようにして行った。イソロイシン含有粉末のＦＰＦは約28％であるが、イソロイシンを含まない粉末のＦＰＦは約23％にとどまっている。
【０１５６】
【図１８】様々な粉末におけるカットオフ粒径５μｍ未満の細粒分（ＦＰＦ）を示す。LS55PとIgG1とを含んだ水溶液又はLS55PとトリイソロイシンとIgG1とを含んだ水溶液を噴霧乾燥させて、粉末を製造した。溶液の調製及び噴霧については、実施例の項で記載のようにして行った。トリイソロイシン含有粉末のＦＰＦは50又は58％を超えるが、トリイソロイシンを含まない粉末のＦＰＦは約16％にとどまっている。
【０１５７】
【図１９】様々な粉末における空気動力学的粒径（ＭＭＡＤ）及び体積中央径（ＭＭＤ）を示す。LS55PとIgG1とを含んだ水溶液又はLS55PとトリイソロイシンとIgG1とを含んだ水溶液を噴霧乾燥させて、粉末を製造した。溶液の調製及び噴霧については、実施例の項で記載のようにして行った。いずれの粉末のＭＭＡＤも、５μｍ未満であり、ＭＭＤは3.5μｍ未満である。総固形分濃度及び噴霧パラメータが一定の場合の、トリイソロイシンのＭＭＡＤ及びＭＭＤへの影響が図からわかる。調剤中の総固形分に対してトリイソロイシン分が10％であると、ＭＭＡＤを著しく減少する。
【０１５８】
【図２０】様々な粉末におけるカットオフ粒径５μｍ未満の細粒分（ＦＰＦ）を示す。LS90PとIgG1とを含んだ水溶液又はLS90PとトリイソロイシンとIgG1とを含んだ水溶液を噴霧乾燥させて、粉末を製造した。溶液の調製及び噴霧については、実施例の項で記載のようにして行った。トリイソロイシン含有粉末のＦＰＦは約40〜約59％であるが、トリイソロイシンを含まない粉末のＦＰＦは約24％にとどまっている。
【０１５９】
【図２１】様々な粉末における体積中央径（ＭＭＤ）及び空気動力学的粒径（ＭＭＡＤ）を示す。LS90PとIgG1とを含んだ水溶液又はLS90PとトリイソロイシンとIgG1とを含んだ水溶液を噴霧乾燥させて、粉末を製造した。溶液の調製及び噴霧については、実施例の項で記載のようにして行った。いずれの粉末のＭＭＡＤも、6.5μｍ未満であり、ＭＭＤは５μｍ未満である。総固形分濃度及び噴霧パラメータが一定の場合の、トリイソロイシン分のＭＭＡＤ及びＭＭＤに対する影響が図からわかる。調剤中の総固形分に対してトリイソロイシン分が10％であると、ＭＭＡＤを著しく減少する。固形分が減少し（例えば、ＴＳ２％）かつ噴霧圧力が上昇（ＡＡＦ値、50又は60）すると、ＭＭＤが著しく低下する。
【０１６０】
【図２２】噴霧乾燥を行い、強制的保存後に再構成したものの残留モノマー含有率を示す。ａ）リゾチーム3.33質量％、ｂ）リゾチーム0.33質量％及びLS90P 3.0質量％、ｃ）リゾチーム0.33質量％、イソロイシン0.33質量％及びLS90P 2.66質量％、ｄ）リゾチーム0.33質量％、トリイソロイシン0.33質量％及びLS90P 2.66質量％をそれぞれ含む水溶液を噴霧した。LS90P含有粉末は残留モノマー含有率が高いことが顕著である。
【０１６１】
【図２３】噴霧乾燥を行い、真空乾燥後に乾燥状態かつ温度２〜８℃、25℃、40℃で３ヶ月保存し（３ヶ月安定性）、再構成した後の凝集体含有率を示す。ａ）3.33質量％のカルシトニン、ｂ）0.166質量％のカルシトニン及び3.166質量％のLS90P分、ｃ）0.166質量％のカルシトニン、0.33質量％のイソロイシン分及び2.833質量％のLS90P分、ｄ）0.166質量％のカルシトニン、0.33質量％のトリイソロイシン分及び2.833質量％のLS90P分をそれぞれ含む水溶液を噴霧した。LS90Pを含む粉末は凝集分がとりわけ低いことを特徴とする。
【０１６２】
【図２４】乾燥粉末調剤の投与用吸入器を示す。
【図１】
2007536314.tif 000005
【図２】
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【図３】
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【図４】
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【図５】
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【図６】
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【図７】
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【図８】
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【図９】
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【図１０】
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【図１１】
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【図１２】
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【図１３】
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【図１６】
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【図１７】
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【図１８】
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【図１９】
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【図２０】
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【図２１】
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【図２２】
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【図２４】
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【図１４ａ】
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【図１４ｂ】
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【図１５ａ】
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【図１５ｂ】
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【図２３】
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【手続補正書】
【提出日】平成19年7月25日(2007.7.25)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
少なくとも１種の抗体又は１種の抗体誘導体と、1,4 O-結合型D-Gal-サッカロース、1,4 O-結合型D-glu-サッカロース及び1,4 O-結合型glu-glu-サッカロースからなる群から選択される1,4 O-結合型サッカロース誘導体の１種以上とを含む医薬組成物。
【請求項２】
前記医薬組成物が、さらにラクトース及びサッカロースを含むことを特徴とする請求項１記載の医薬組成物。
【請求項３】
前記1,4 O-結合型D-Gal-サッカロース分が、前記医薬組成物に含まれる糖分に対して少なくとも55質量％になることを特徴とする請求項１又は２記載の医薬組成物。
【請求項４】
前記医薬組成物が、さらに単糖類、二糖類及び／又は多糖類の１種以上を含むことを特徴とする請求項１〜３のいずれか１項記載の医薬組成物。
【請求項５】
少なくとも１種の1,4 O-結合型-サッカロース誘導体を含む前記糖分が、前記医薬組成物の乾燥質量の25〜99.99質量％になることを特徴とする請求項１〜４のいずれか１項記載の医薬組成物。
【請求項６】
前記抗体又は抗体誘導体分が、前記医薬組成物の乾燥質量の0.01〜75質量％となり、かつ、質量パーセントの合計が最大100質量％となることを特徴とする請求項１〜５のいずれか１項記載の医薬組成物。
【請求項７】
前記医薬組成物が、乾燥質量基準で60〜90質量％の糖分と40質量％までの抗体又は抗体誘導体とを含み、それによって1,4 O-結合型D-Gal-サッカロース、1,4 O-結合型D-glu-サッカロース及び／又は1,4 O-結合型glu-glu-サッカロース分が前記医薬組成物の乾燥質量に対して少なくとも20質量％となり、かつ、質量パーセントの合計が最大100質量％となることを特徴とする請求項１〜６のいずれか１項記載の医薬組成物。
【請求項８】
前記医薬組成物が、医薬的に適合するアジュバント１種以上及び／又は塩１種以上を含むことを特徴とする請求項１〜７のいずれか１項記載の医薬組成物。
【請求項９】
前記アジュバントがアミノ酸又はペプチドであることを特徴とする請求項８記載の医薬組成物。
【請求項１０】
前記アミノ酸が、イソロイシンであることを特徴とする請求項９記載の医薬組成物。
【請求項１１】
前記ペプチドが、ジペプチド又はトリペプチドであることを特徴とする請求項９記載の医薬組成物。
【請求項１２】
前記ペプチドが、イソロイシン含有ペプチドであることを特徴とする請求項９記載の医薬組成物。
【請求項１３】
前記ペプチドが、ジイソロイシン又はトリイソロイシンであることを特徴とする請求項１１又は１２記載の医薬組成物。
【請求項１４】
前記医薬組成物が、乾燥質量基準で60〜99質量％の少なくとも１種の1,4 O-結合型サッカロース誘導体又は少なくとも１種の1,4 O-結合型サッカロース誘導体を含む糖混合物と、１〜40質量％のイソロイシンとを含有することを特徴とする請求項１０記載の医薬組成物。
【請求項１５】
前記医薬組成物が、乾燥質量基準で60〜99質量％の少なくとも１種の1,4 O-結合型サッカロース誘導体又は少なくとも１種の1,4 O-結合型サッカロース誘導体を含む糖混合物と、１〜40質量％のペプチドを含有することを特徴とする請求項１１〜１４のいずれか１項記載の医薬組成物。
【請求項１６】
前記医薬組成物が、水溶液又は半固体製剤の形態であることを特徴とする請求項１〜１５のいずれか１項記載の医薬組成物。
【請求項１７】
前記医薬組成物が、粉末の形態であることを特徴とする請求項１〜１５のいずれか１項記載の医薬組成物。
【請求項１８】
前記粉末中の粒子の空気動力学的粒径（ＭＭＡＤ）が１〜５μｍであることを特徴とする請求項１７記載の粉末。
【請求項１９】
請求項１７又は１８記載の粉末の製造方法であって、
ａ）抗体又は抗体誘導体を水溶液又は懸濁液に溶解又は懸濁し、
ｂ）1,4 O-結合型D-Gal-サッカロース、1,4 O-結合型D-glu-サッカロース及び1,4 O-結合型glu-glu-サッカロースからなる群から選択される1,4 O-結合型サッカロース誘導体の１種以上、あるいは、これらの1,4 O-結合型サッカロース誘導体の少なくとも１種を含有する糖混合物を水溶液又は懸濁液に溶解又は懸濁し、
ｃ）抗体又は抗体誘導体と、1,4 O-結合型サッカロース誘導体又は少なくとも１種の1,4 O-結合型サッカロース誘導体を含む糖混合物とが異なる溶液又は懸濁液に溶解又は懸濁している場合は、それらを混合し、
ｄ）抗体又は抗体誘導体と1,4 O-結合型サッカロース誘導体とを含む溶液又は懸濁液を乾燥させることを特徴とする、粉末の製造方法。
【請求項２０】
前記乾燥工程が凍結乾燥又は噴霧乾燥であることを特徴とする請求項１９記載の方法。
【請求項２１】
1,4 O-結合型D-Gal-サッカロース分が、前記乾燥用溶液中に存在する糖分の少なくとも55質量％になることを特徴とする請求項１９又は２０記載の方法。
【請求項２２】
前記乾燥用溶液が、医薬的に適合可能なアジュバントの１種以上及び／又は塩の１種以上を含むことを特徴とする請求項１９〜２１のいずれか１項記載の方法。
【請求項２３】
前記アジュバントがアミノ酸又はペプチドであることを特徴とする請求項２２記載の方法。
【請求項２４】
前記アミノ酸がイソロイシンであることを特徴とする請求項２３記載の方法。
【請求項２５】
前記ペプチドがジペプチド又はトリペプチドであることを特徴とする請求項２３記載の方法。
【請求項２６】
前記ペプチドがイソロイシン含有ペプチドであることを特徴とする請求項２３記載の方法。
【請求項２７】
前記ペプチドがトリイソロイシンであることを特徴とする請求項２３、２５又は２６記載の方法。
【請求項２８】
前記乾燥用溶液の乾燥質量が、60〜90質量％の少なくとも１種の1,4 O-結合型サッカロース誘導体又は少なくとも１種の1,4 O-結合型サッカロース誘導体を含む糖混合物と、１〜19.99質量％のアミノ酸とを含み、かつ、質量パーセントの合計が最大100質量％になることを特徴とする請求項２３又は２４記載の方法。
【請求項２９】
前記乾燥用溶液の乾燥質量が、60〜90質量％の少なくとも１種の1,4 O-結合型サッカロース誘導体又は少なくとも１種の1,4 O-結合型サッカロース誘導体を含む糖混合物と、１〜19.99質量％のペプチドとを含むことを特徴とする請求項２３、２５、２６又は２７記載の方法。
【請求項３０】
医薬品を製造するための、請求項１６〜１８のいずれか１項記載の粉末の使用。
【請求項３１】
吸入医薬品を製造するための請求項１８記載の粉末の使用。
【国際調査報告】
2007536314.tif 000031
2007536314.tif 000032
2007536314.tif 000033
2007536314.tif 000034
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2007536314.tif 000039
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