(57)【要約】  本発明は、リポソーム送達システム中のMahonia aquifolium抽出物を含む皮膚治療組成物を提供する。Mahonia aquifolium抽出物は、皮膚治療組成物中で、合計組成物の５重量％〜２０重量％の範囲で存在する。該皮膚治療組成物は、乾癬、湿疹および他の乾燥皮膚疾患の治療に特に有効である。さらに、本発明は、Mahonia aquifoliumの抽出物を得る方法を提供する。【特許請求の範囲】
【請求項１】
リポソーム送達システム中にMahonia aquifoliumの抽出物を含む皮膚治療組成物。
【請求項２】
Mahonia aquifoliumの該抽出物が、合計組成物の５重量％〜２０重量％の濃度で存在する請求項１記載の皮膚治療組成物。
【請求項３】
Mahonia aquifoliumの該抽出物が、合計組成物の１０重量％の濃度で存在する請求項１記載の皮膚治療組成物。
【請求項４】
（ａ）水、アルコールおよび粗製の乾燥Mahonia aquifoliumの混合物に熱および圧力を適用し；
（ｂ）混合物を撹拌し；
（ｃ）約３時間、約３０００ｒｐｍの速度で混合物を処理し；
（ｄ）該混合物を圧力下で少なくとも２４時間冷却させ；
（ｅ）少なくとも２回を超えてその最終の２工程を繰り返し；
（ｆ）圧力を放出し；
（ｇ）該混合物を加熱および混合しつつ真空下に置いて、アルコールおよび水を低減ならびに除去し、約６容量％の混合物を得；次いで
（ｈ）得られた混合物を濾過して、Mahonia aquifoliumの抽出物を得る
工程を含むMahonia aquifoliumの抽出物を得る方法。
【請求項５】
工程（ａ）において、該混合物が５０℃以下の温度に加熱される請求項４記載の方法。
【請求項６】
工程（ａ）において、該混合物が４０℃の温度に加熱される請求項４記載の方法。
【請求項７】
該圧力が、約３〜６ｐｓｉの範囲にある請求項４記載の方法。
【請求項８】
請求項４記載の方法により得られたMahonia aquifoliumの抽出物。
【請求項９】
請求項１の皮膚治療組成物を適用することにより乾癬、湿疹および他の乾燥皮膚疾患を治療するための方法。
【発明の詳細な説明】
【発明の詳細な説明】
【０００１】
技術分野
本発明は、Mahonia aquifolium抽出物、新しい抽出方法を用いた該抽出物の濃縮形態を得る方法、および該抽出物を含む医薬組成物に指向される。該医薬組成物は、乾癬、湿疹、皮膚炎および他の乾燥皮膚疾患に特に有効な治療剤である。
【０００２】
背景技術
乾癬は、皮膚のスケーリングおよび炎症により特徴づけられる慢性皮膚疾患である。皮膚の外層中の細胞が通常よりも速く再生し、皮膚表面に集積する場合に、スケーリングが発生する。乾癬は、北アメリカの集団の約１.５％〜２％に発症する。それは全年齢集団に発生し、男性および女性に同等に発生する。乾癬に罹患した人々は、不快感、関節運動の制限および情緒的困難に苦しむ。乾癬に苦しむ人々の約１０％は、関節炎に類似する症状を生成する関節炎症を有する。
【０００３】
乾癬が発生すると、皮膚のパッチは厚くなり、赤くなり、銀色の鱗屑で覆われるようになる。これらのパッチは一般にプラークと呼ばれる。プラークは通常そう痒で、燃え得る。乾癬は、最もしばしば、肘、膝、頭皮、腰、顔、手掌および足底に発生する。
【０００４】
コルチコステロイド、カルシポトリエン、コールタール等の局所適用を含めた種々の処置および方法が、何年もにわたり用いられてきた。入浴用溶液および一般的な保湿剤がいくらかの患者により利用されている。また、日光および紫外線の処置が用いられている。いくつかの例において、処方医薬を用いた全身治療が内服的に必要とされている。内服用の薬物には、レチノイド、メトトレキセート、ヒドロキシ尿素および抗生物質が含まれる。
【０００５】
これらの各処置はその利点および欠点を有する。多数の例において、患者は、その処置に対する耐性を生じ、その処置はなおさら有効でなくなる。発明者らは、前記の欠点を克服する、種々の患者に適した処置を追求した。
【０００６】
Mahonia aquifoliumは太平洋の北西部および英国Columbiaで元来発見され、それが多数の世紀の間、在来の北アメリカ人により乾癬および湿疹の治療に用いられてきている。それはメギ科ファミリーに属する常緑の低木である。
【０００７】
Mahonia aquifolium植物の根および樹皮は、ベルベリン、パルマチン（palmatine）、ベルバミン、オキシアカンチン、ジャトロリジン（jatrorrhizine）、ベルブルシン（bervulcine）、マグノフロリン（magnoflorine）およびコロンバミン（columbamine）を含むイソキノリンアルカロイドを含むことが知られている。これらのアルカロイドは、それらの多数が、ｉｎ ｖｉｔｒｏにて強力な抗微生物および抗真菌の活性が示されているので、植物の有効成分であると考えられている。
【０００８】
Mahonia aquifoliumは、乾癬および他の炎症性疾患の治療および管理においていくつかの作用機構を有し得る。前記のベルベリンおよび関連アルカロイドは、ＤＮＡにおいて複製および転写の妨害を可逆的に挿入する。上記に概説されるように、Mahonia抽出物はイソキノリンアルカロイドを含む。イソキノリンは、顆粒層の付随する産生と共に、マウス尾部表皮中の不全角化（parakeratotic）角質層の濾胞間部位を正角化（orthokeratotic）するコールタールの成分であると同定された。この点で、イソキノリンはコールタールに類似して作用し、イソキノリンは、コールタールの抗乾癬活性に寄与し得る。該抽出物から分離されたアルカロイドは、ケラチン細胞に関して抗増殖活性を示す。ケラチン細胞の過度の増殖は、乾癬の主症状であり、したがって、この活性の制御は乾癬の治療を助けるであろう。リポキシゲナーゼ阻害は、恐らく脂質ヒドロペルオキシド基質蓄積の低下により、プロトベルベリン（protoberberine）アルカロイドの脂質抗酸化効果と強力に関連している。Mahoniaは、ＬＴＢ-４（炎症を媒介すると考えられているロイコトリエン）および５−ヒドロキシ−エイコサテトラエン酸（５−ＨＥＴＥ）の中程度の阻害物質であり、アントラリンと同一オーダーの大きさのＩＣ−５０を有する。ＩＣ−５０は、５０％阻害が発生する濃度をいう。
【０００９】
また、Mahonia aquifolium抽出物は、脂質過酸化の非常に強力な阻害物質である。該抽出物から単離された個々のアルカロイドは、リポキシゲナーゼの作用を阻害することにより抗炎症活性を示す。リポキシゲナーゼの作用に起因する酸化生成物は、他の生物系での炎症の媒介物質であることが知られている。脂質過酸化に対するMahonia aquifoliumの阻害作用は、わずかに脂質過酸化を刺激するアントラリンと対比される。この差は、Mahonia aquifolium抽出物が刺激を低下させる理由を説明し得る。
【００１０】
発明の開示
本発明のMahonia aquifolium抽出物は、後記のごとき抽出方法を用いて、高度に濃縮された形態で得られる。その抽出方法に用いた試薬は、水、アルコールおよび粗製の乾燥Mahonia aquifoliumである。
【００１１】
粗製の乾燥Mahonia aquifoliumは、Mahonia aquifolium（メギ科）ファミリーからの植物の乾燥した樹皮および小枝から得られる。かかる植物は、メギ科の植物、例えば、Oregon hollygrapeを含む。
【００１２】
試薬は、ステンレス鋼反応器に負荷される。その反応器は、固定して閉じられる。３〜６ｐｓｉの圧力（容量依存的）を反応器に適用し、内部相互回転撹拌ミキサー（internal counter-rotating agitating mixer）で内容物を混合しつつ、反応混合物を５０℃以下、好ましくは４０℃の温度に加熱する。その混合物が４０℃に達した場合に、内部細砕ミキサー（internal grinding mixer）を連動させ、混合物を内部相互回転撹拌ミキサーと組み合わせて約３０００ｒｐｍ（毎分回転数）の速度で３時間処理する。混合物を反応器中で３〜６ｐｓｉ圧力下に置き、２４時間以上冷却させる。
【００１３】
２４時間が経過した後、内部細砕ミキサーを再度連動させ、混合物を内部相互回転撹拌ミキサーと組み合わせて約３０００ｒｐｍの速度で３時間処理する。混合物を反応器中で約３〜６ｐｓｉ圧力下に２４時間以上置く。
【００１４】
第２の２４時間後、内部細砕ミキサーを再度連動させ、混合物を内部相互回転撹拌ミキサーと組み合わせて約３０００ｒｐｍの速度で３時間処理する。次いで、混合物を反応器中で約３〜６ｐｓｉ圧力下に最低２４時間置く。
【００１５】
第３の２４時間後、反応器中の圧力を放出し、試薬混合物を、粗目フィルター、次いで、５ミクロンのフィルターを通して濾過する。次いで、その混合物を真空下に置き、混合物がその元来の容積の約６％となるまで、混合しつつ、最小４０℃で、しかし５０℃以下に加熱して、溶媒を低下および除去する。得られた生成物は、１ミクロンのフィルターを通して再濾過する。
【００１６】
この抽出方法は、約１.５ｍｇ／ｍｌのベルベリンアルカロイド濃度を持つ完成したMahonia aquifolium抽出物を与える。典型的なアルコールベースの抽出方法は、約０.０９ｍｇ／ｍｌのベルベリンアルカロイドの濃度を持つ完成抽出物を与えるであろう。
【００１７】
次いで、この抽出方法から得られた生成物を利用して、乾癬ならびに他の皮膚の病気および疾患の治療に使用するのに適した医薬組成物を調製する。
【００１８】
医薬組成物は、リポソーム送達システムにMahonia aquifolium抽出物を組み合わせることによる使用のために調製される。
【００１９】
リポソームは、リン脂質が水和される場合に形成する微視的な球状ビヒクルである。最近、リポソームは、薬物、ビタミンおよび化粧品原料のための送達システムとして利用され評価されている。それらは、脂質含量、サイズ、表面電荷および調製方法を変化させることにより、ほとんどいずれの用途についてもカスタム設計できる。リポソーム壁が非常に生理学上細胞膜の物質に類似するので、それらは、皮膚への適用のための生成物の送達に特に適している。リポソームを含む医薬または化粧品が皮膚に適用される場合、そのリポソームは皮膚上に堆積し、細胞膜と融合し始める。リポソームは細胞に活性物質を放出し、その結果、活性物質の送達は非常に特殊である。そのリポソーム送達システムは、種々の条件、例えば、遅放出、速放出、二層組成、温度依存性放出、ｐＨ依存性放出等の下、活性物質を放出するように設計できる。
【００２０】
本発明の医薬組成物に用いる好ましいリポソーム送達システムは、NovasomeR技術である。Novasome脂質ビヒクルは、親水性および疎水性の双方を所有する分子（すなわち、両親媒性物質）よりなる。Novasomeビヒクルは、より大きなコアを囲む１以上の脂質膜または二重層（一般に５〜７）よりなる。各膜は、各々、二重層配列における両親媒性物質よりなる。
【００２１】
そのコアは、大部分のビヒクル体積を占め、水溶性および水不混和性の物質に高度の運搬能を供する。そのNovasome二重層は、完全な配列にはなく、カプセル化成分が移動できる隙間（チャネル）を含む。カプセル化成分は、その二重層内の隙間の側方運動を生じる一連のランダムジャンプを介して各二重層内または各二重層間を移動する。
【００２２】
有効成分は、コアに含まれ、コアから二重層を通って通過できる。有効成分の連続的でかつ制御された放出を達成できるように、徐放機構がNovasomeビヒクルの構造により提供される。有効成分が使用に先立ちより保護された方法でコア内に捕捉されるように、有効成分の貯蔵安定性および安定性が改善される。これは、有効成分のより効率的でかつより有効な送達を供する。
【００２３】
医薬組成物は、リポソーム送達システムにおける合計組成物の約５重量％〜２０重量％の濃度でMahonia aquifolium抽出物を組み合わせることにより調製される。直前に詳述したそのリポソーム送達システムは、１つの好ましい送達システムである。好ましい組成物は、合計組成物の５重量％〜１０重量％の間のMahonia aquifolium濃度を有する。これは、最小０.７１２％のベルベリンを含む組成物を提供するであろう。
【００２４】
組成物の残りは、典型的な医薬上許容される成分、例えば、希釈剤、賦形剤等を含む。
【００２５】
組成物は、局所適用形態で利用され、罹患した領域に直接的に適用される。その組成物は、ローション剤またはクリーム剤の形態とすることができる。典型的な３種の製剤を以下に詳述する。各成分につき記載された重量パーセントは、その合計組成物の重量パーセントである。そのMahonia aquifolium抽出物は、リポソーム送達システム中に存在する。
【００２６】
ローション剤  
成分                                      重量パーセント
ＤＩ水                                          ５１.０４
Mahonia抽出物                                   １０.００
トランスクトール（transcutol）                  ８.００
ジラウリン酸グリセリル                          ８.００
モノステアリン酸グリセリル                      ４.５０ 
９６％グリセリン                                ３.４１
アジピン酸ジイソプロピル                        ３.００
シクロメチコン                                  ２.５０
ジメチコーン                                    ２.００
パルミチン酸オクチル                            １.４０
Ｃ１２-１５乳酸アルコール                       １.００
カミツレ抽出物                                  １.００
ステアロキシジメチコン                          ０.７０
コレステロール                                  ０.５０
ポリソルベート８０ＴＭ                          ０.５０
セテアリルグルコシド                            ０.５０
セチルアルコール                                ０.５０
緑茶抽出物                                      ０.５０
フェノキシエタノール                            ０.４０
メチルパラベン                                  ０.２０ 
キサンタンガム                                  ０.１５
ＥＤＴＡ二ナトリウム                            ０.１０
酢酸ビタミンＥ                                  ０.１０
【００２７】
クリーム剤
成分                                      重量パーセント
ＤＩ水                                          ４４.９５
Mahonia抽出物                                   １０.００
トランスクトール                                １０.００
ジラウリン酸グリセリル                          ８.００
モノステアリン酸グリセリル                      ４.５０
９６％グリセリン                                ３.４１
シクロメチコン                                  ３.００
ジメチコーン                                    ２.５０
セテアリルグルコシド                            １.５０ 
ＰＥＧ−１５０モノステアリン酸塩                １.５０
アジピン酸ジイソプロピル                        １.５０
ステアロキシジメチコン                          １.００
Ｃ１２-１５乳酸アルコール                       １.００
オレイン酸エチル                                １.００
セバシン酸ジイソプロピル                        １.００
セチルアルコール                                １.００
カミツレ抽出物                                  １.００
セピゲル（Sepigel）３０５ＴＭ                   １.００
緑茶抽出物                                      ０.５０
コレステロール                                  ０.５０
フェノキシエタノール                            ０.４０
キサンタンガム                                  ０.３０
メチルパラベン                                  ０.２０
ＥＤＴＡ二ナトリウム                            ０.１０
アルファ酢酸トコフェロール                      ０.１０
クエン酸                                        ０.０４
【００２８】
頭皮治療組成物
成分                                      重量パーセント
ＤＩ水                                          ６７.３４
Mahonia抽出物                                   １０.００
モノステアリン酸グリセリル                      ４.５０
カミツレ抽出物                                  ３.００
プロピレングリコール                            ２.５０
鹸化可能でないアボカド                          ２.００
クアテリアム（Quaterium）２２ＴＭ               ２.００
シクロメチコン                                  １.４０
ベヘントリモニウムメトサルフェート              １.００
セテアリルアルコール                            １.００
アロエベラ（aloe ver）パウダー                  １.００
緑茶抽出物                                      １.００
小麦胚芽油                                      １.００
ステアリルアルコール                            ０.７０
トリエタノールアミン                            ０.６６
クアテリアム２６ＴＭ                            ０.５０
メチルパラベン                                  ０.２０
ＤＭＤＭヒダントイン                            ０.２０
【００２９】
臨床的研究および試験における、後記のごとき本発明の組成物の有利な効果を記載する。
【００３０】
１つの試験において、軽度〜中程度を有する乾癬の患者に、罹患した領域の半分に本発明組成物を適用した。その罹患した領域の他側に、患者は無修飾ビヒクルクリーム（本発明の組成物を調製するために利用したクリーム）を適用された。その組成物を１日２回、４週間適用した。１１名の患者全員が適合し、４週間の試験を終了した。９名の患者が改善し、１名が治療の全体にわたって同一のままであったが、掻痒性が低く、１名は、無修飾ビヒクルクリーム側のみで改善した。改善した９名の患者のうち、１名の患者が両側できれいになり、１名の患者が両側で同等に改善され、１名の患者が本発明の組成物を利用する側でわずかに改善し、６名の患者が、本発明の組成物を利用する側で明確に改善した。
【００３１】
もう一つの試験において、クリーム基剤中の低濃度のMahonia aquifolium抽出物が、乾癬のプラークに適用された場合にその調製物が安全でかつ忍容性が良好であることを示した。第２の試験は、種々のタイプの乾癬を持つ３３名の患者および湿疹を持つ８名の患者において、より高濃度のMahonia aquifolium抽出物の安全性、認容性および有効性を検討するために開始された。その試験は観察試験であった。
【００３２】
患者集団には、広範囲の年齢集団が含まれ、両性別が含まれた。Mahonia aquifolium抽出物の適用の開始に先立つ治療は、無治療から、外用副腎皮質ホルモン剤、ドボネックス（Dovonex）TM、紫外線およびメトトレキセートに及んだ。
【００３３】
Mahonia抽出物およびビヒクルで治療された病変は、治療に先立ち、および試験の全体にわたって撮影された。標的病変は、スケーリング、厚さおよび発赤につきスコアされた。ほぼ全ての場合において、スケーリングは改善すべき第１の症状であった。多くの場合に、治療の第１週後に改善が記録された。そのプラークの厚さは、２〜４週間にわたり一般的に実質的に低下した。発赤は最も徐々に改善した。これは大部分の乾癬治療に共通する。
【００３４】
いくらかの場合において、Mahonia抽出物の適用を開始した場合、メトトレキセートおよび／または紫外線治療を継続した。そのMahonia抽出物は、これらの治療とのいずれの有害な相互作用も生じなく、感光性または光毒性の証拠はなかった。Mahoniaクリームは補足的な治療で有り得る。試験されるべきクリーム剤が紫外線をブロックするか、または紫外線と干渉するという臨床的な証拠はなかった。
【００３５】
Mahoniaクリームは、全ての患者により積極的に受け入れられ、試験プロトコールのコンプライアンスおよび順守は良好であった。乾癬および湿疹の双方の全症例において、Mahoniaクリームで処置された側はビヒクルクリーム単独で処置した側と同様であったか、あるいはビヒクルクリーム単独で処置した側よりも良好であった。
【００３６】
産業上の利用性
本発明の方法により得られたMahonia aquifolium抽出物は、乾癬、湿疹、皮膚炎および他の乾燥皮膚疾患に有効な治療として用いることができる医薬組成物中での使用に適当である。
【国際調査報告】
2007506685.tif 000002
2007506685.tif 000003
2007506685.tif 000004