(57)【要約】【課題】天然物に由来する成分の中から、優れたＥｎｄｏ１８０産生促進作用を有するものを見出し、それを有効成分とするＥｎｄｏ１８０産生促進剤を提供する。【解決手段】本発明のＥｎｄｏ１８０産生促進剤の有効成分として、タイソウ、藤茶、ゲンチアナ、プルーン、ガイヨウ、スターフルーツ、ローヤルゼリー、緑茶、ワイルドタイム、スギナ、サンショウ、キンモクセイ、キンギンカ、およびセイヨウノコギリソウからなる群より選択される１種または２種以上の天然物からの抽出物を用いる。【選択図】なし【特許請求の範囲】
【請求項１】
タイソウ、藤茶、ゲンチアナ、プルーン、ガイヨウ、スターフルーツ、ローヤルゼリー、緑茶、ワイルドタイム、スギナ、サンショウ、キンモクセイ、キンギンカ、およびセイヨウノコギリソウからなる群より選択される１種または２種以上の天然物からの抽出物を有効成分とすることを特徴とするＥｎｄｏ１８０産生促進剤。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、天然物由来成分を有効成分とするＥｎｄｏ１８０産生促進剤に関するものである。
【背景技術】
【０００２】
紫外線の長期曝露によって引き起こされる光老化では、真皮コラーゲン線維構造の量的、質的変化が確認されており、シワの形成に関与していると考えられている。コラーゲン線維構造は、コラーゲン線維の合成および分解の繰り返しによる代謝バランスによって恒常性が維持されている。このうち分解過程においては、マトリックスメタロプロテアーゼによるコラーゲンの断片化と、断片化されたコラーゲンの線維芽細胞への取り込みおよび分解とが起こっており、断片化コラーゲンの細胞内への取り込みには、膜タンパク質であるコラーゲンレセプター「Ｅｎｄｏ１８０」の関与が知られている（非特許文献１）。
【０００３】
Ｅｎｄｏ１８０は、マンノース受容体Ｃ２（ＭＲＣ２）、ウロキナーゼプラスミノーゲン活性化因子受容体関連タンパク質（ｕＰＡＲＡＰ）およびＣＤ２８０としても知られ、再利用されるエンドサイトーシス受容体であり、コラーゲンなどのリガンドと結合してこれを細胞内に取り込み、エンドソームにおける分解へと誘導する。
【０００４】
Ｅｎｄｏ１８０は、マクロファージマンノース受容体ファミリーであるマンノース受容体、ホスホリパーゼＡ２、ＤＥＣ−２０５／ＭＲ６などと相同性を有する。Ｅｎｄｏ１８０は、細胞膜から、後期エンドソーム／リソソーム区画までではなく、リサイクリングエンドソームまでが標的とされるという点で、マンノース受容体のファミリーの中でも特殊であり、細胞遊走、および細胞内分解のためのコラーゲンの取り込みを促進することによって、細胞運動性や細胞外マトリックスの再構築において機能を果たす。また、ｕＰＡＲＡＰとして、ウロキナーゼ型プラスミン活性化因子（ｕＰＡ）およびウロキナーゼ型プラスミン活性化因子受容体（ｕＰＡＲ）と三重複合体を形成し、プラスミノーゲンからのプラスミンの生成に関与する。Ｅｎｄｏ１８０は、細胞表面上のクラスリンで覆われたピットや、エンドソーム等に局在しており、線維芽細胞、内皮細胞、およびマクロファージにおいて主に発現する。組織としては、肺、血管、骨および皮膚において主に発現している（特許文献１参照）。
【０００５】
一方、皮膚の真皮もコラーゲンに富む組織であるが、真皮中のコラーゲン線維のリモデリングにおけるＥｎｄｏ１８０の関与に関する報告は少ない。これまでに、光老化皮膚では線維芽細胞においてＥｎｄｏ１８０発現が低下し、それに伴い真皮マトリックスにおいて断片化コラーゲンが蓄積されることが知られている（非特許文献２）。また、断片化コラーゲンによって線維芽細胞に酸化ストレスが誘導されることが知られている（非特許文献３）。さらに、紫外線によるＥｎｄｏ１８０発現低下メカニズムにケラチノサイトが産生するＩＬ−１αが関与していることも知られている（非特許文献４）。これらのことから、Ｅｎｄｏ１８０は、紫外線の長期曝露によって引き起こされる光老化皮膚の形成（例えば、シワの形成）に関与しているものと考えられている。そのメカニズムとしては、線維芽細胞においてＥｎｄｏ１８０の発現が低下すると、断片化コラーゲンの取り込みが抑えられることで正常なコラーゲン線維構造の再生が阻害され、また細胞の周辺に断片化コラーゲンが蓄積することにより線維芽細胞の機能障害を誘導するものと考えられる。
【０００６】
そのため、例えば、線維芽細胞においてＥｎｄｏ１８０発現を促進することができれば、正常なコラーゲン線維構造の再生を促し、光老化皮膚やこれによるシワ等の形成を抑えることができると考えられる。
【先行技術文献】
【特許文献】
【０００７】
【特許文献１】特表２０１２−５２１２１７号公報
【非特許文献】
【０００８】
【非特許文献１】J. Cell Sci.，2009年，vol.122，pp.4042-4048
【非特許文献２】J. Dermatol. Sci.，2013年，vol.70，pp.42-48
【非特許文献３】Am. J. Pathol.，2009年，vo.174，pp.101-114
【非特許文献４】第40回日本香粧品学会発表要旨，2015年，p.16
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００９】
本発明は、安全性の高い天然物由来成分の中から、優れたＥｎｄｏ１８０産生促進作用を有するものを見出し、それを有効成分とするＥｎｄｏ１８０産生促進剤を提供することを目的とする。
【課題を解決するための手段】
【００１０】
上記課題を解決するために、本発明のＥｎｄｏ１８０産生促進剤は、タイソウ、藤茶、ゲンチアナ、プルーン、ガイヨウ、スターフルーツ、ローヤルゼリー、緑茶、ワイルドタイム、スギナ、サンショウ、キンモクセイ、キンギンカ、およびセイヨウノコギリソウからなる群より選択される１種または２種以上の天然物からの抽出物を有効成分とすることを特徴とする。
【発明の効果】
【００１１】
本発明によれば、天然物に由来するタイソウ、藤茶、ゲンチアナ、プルーン、ガイヨウ、スターフルーツ、ローヤルゼリー、緑茶、ワイルドタイム、スギナ、サンショウ、キンモクセイ、キンギンカ、およびセイヨウノコギリソウからなる群より選択される１種または２種以上の天然物からの抽出物を有効成分として用いることにより、作用効果に優れ、かつ安全性の高いＥｎｄｏ１８０産生促進剤を提供することができる。
【発明を実施するための形態】
【００１２】
以下、本発明の実施の形態について説明する。
本実施形態のＥｎｄｏ１８０産生促進剤は、タイソウ、藤茶、ゲンチアナ、プルーン、ガイヨウ、スターフルーツ、ローヤルゼリー、緑茶、ワイルドタイム、スギナ、サンショウ、キンモクセイ、キンギンカ、およびセイヨウノコギリソウからなる群より選択される１種または２種以上の天然物からの抽出物を有効成分とするものである。
【００１３】
ここで、本実施形態における「抽出物」には、上記天然物を抽出原料として得られる抽出液、当該抽出液の希釈液若しくは濃縮液、当該抽出液を乾燥して得られる乾燥物、又はこれらの粗精製物若しくは精製物のいずれもが含まれる。
【００１４】
本実施形態において使用する抽出原料は、タイソウ（生薬名）、藤茶（学名：Ampelopsis grossedentata(Hand.-Mazz.)W.T.Wang，またはAmpelopsis cantoniensis(Hook.et Arn.)Panch.）、ゲンチアナ（学名：Gentiana Lutea L）、プルーン（学名：Prunus domestica）、ガイヨウ（生薬名）、スターフルーツ（学名：Averrhoa carambola）、ローヤルゼリー、緑茶、ワイルドタイム（学名：Thymus serphyllum）、スギナ（学名：Equisetum arvens）、サンショウ（学名：Zanthoxylum piperitum De Candolle）、キンモクセイ（学名：Osmanthus fragrans var. aurantiacus）、キンギンカ（学名：Lonicera japonica Thunberg.）、およびセイヨウノコギリソウ（学名：Achillea millefolium）である。
【００１５】
タイソウ（体棗，生薬名）は、クロウメモドキ（Rhamnaceae）科ナツメ（学名：Zizyphus jujuba Miller var.inermis Rehder）の成熟した果実部である。ナツメは、南ヨーロッパ、中国等の東アジアに自生する落葉小高木であり、タイソウは、これらの地域から容易に入手することができる。タイソウは、緩和、強壮、利尿等の効用を有していることが知られており、食欲不振、下痢、動悸等に用いられている。
【００１６】
藤茶（Ampelopsis grossedentata(Hand.-Mazz.)W.T.Wang，またはAmpelopsis cantoniensis(Hook.et Arn.)Panch.）は、ブドウ科に属する多年生のつる性植物である。藤茶は、中国の中部〜南部および台湾にわたる広い地域で自生しており、これらの地域から容易に入手可能である。中国では古来からこの植物の葉部を飲料として利用する地域がある他、根部または全草が黄疸性肝炎、風邪、のどの痛み、急性結膜炎症等の治療のための民間薬として利用されている。抽出原料として使用し得る構成部位としては、藤茶の全草、花部、花穂部、果皮部、果実部、球果部、種子部、種皮部、蕾部、茎部、葉部、枝部、枝葉部、根茎部、根皮部、根部、地上部またはこれらの混合物が挙げられるが、好ましくは枝葉部である。
【００１７】
ゲンチアナ（Gentiana Lutea L）は、リンドウ科リンドウ属に属する多年生草本であり、高さ１ｍ以上にまで達し、山地に生える多年生草本である。ゲンチアナは、ヨーロッパのアルプス山麓に自生しており、これらの地域から容易に入手することができる。抽出原料として使用し得る構成部位としては、例えば、葉部、枝部、茎部、果実部、種子部、花部、根茎部、根部又はこれらの部位の混合物等が挙げられるが、好ましくは根部及び根茎部である。
【００１８】
プルーン（Prunus domestica）は、バラ科の植物であり、ヨーロッパ、アメリカで栽培されておりこれらの地域から容易に入手可能である。抽出原料として使用し得る構成部位としては、例えば、葉部、枝部、茎部、花（蕾）部、果実部、果肉部、樹皮部、根部、塊根部、地上部またはこれらの混合物が挙げられるが、これらの中でも果肉部を酵素処理したものが好ましい。
【００１９】
ガイヨウ（生薬名）は、日本全土に分布しているキク科ヨモギ属に属する多年生草本であるヨモギ（学名：Artemisia priceps Pampanini）の葉部であり、これらの地域から容易に入手することができる。ガイヨウは、従来、婦人科領域の止血、流産防止、寒証の腹痛の予防等に使用されている。
【００２０】
スターフルーツ（Averrhoa carambola，和名：ゴレンシ）は、カタバミ科ゴレンシ属の常緑の木本である。スターフルーツの原産地は熱帯アジアであるが、東南アジア全域の他、中国南部、台湾、ブラジル、ガイアナ、トリニダード・トバゴ、フロリダ、ハワイ等の熱帯から亜熱帯地域で栽培されており、これらの地域から容易に入手可能である。スターフルーツは、甘い実のなる甘味種と、酸味のある実のなる酸味種とがあり、生食の他、ジャムやゼリー、漬物などに利用されている。スターフルーツの葉は、風熱感冒、急性胃腸炎、小便不利、産後浮腫等の予防乃至治療剤として利用されている。抽出原料として使用し得る構成部位としては、例えば、葉部、茎部、幹部、樹皮部、花部、果実部、果皮部、根部またはこれらの混合物などが挙げられるが、好ましくは葉部である。
【００２１】
ローヤルゼリーは、ヨーロッパ、アフリカ等に分布しているミツバチ科ミツバチ属に属するヨーロッパミツバチ（学名：Apis melifera L.，別名：セイヨウミツバチ）又はトウヨウミツバチ（学名：Apis indeca Radoszkowski）のうちの若い働き蜂の咽頭腺からの分泌物であり、女王蜂となる幼虫や成虫となった女王蜂に給餌されるものである。
【００２２】
緑茶は、ツバキ科植物・チャノキ（学名：Thea sinensis）の芽葉を原料として製造した飲み物である茶の一種であり、茶は、製造方法の違いから「発酵茶（紅茶）」、「半発酵茶（ウーロン茶）」、「不発酵茶（緑茶）」の３つに大別される。本実施形態においては、抽出原料として緑茶を用いる。
【００２３】
ワイルドタイム（Thymus serphyllum，別名：ヨウシュイブキジャコウソウ）は、シソ科イブキジャコウソウ属に属する植物であって、ヨーロッパから北西アジアを原産とし、広い地域で生育しており、これらの地域から容易に入手することができる。抽出原料として使用し得る部位としては、例えば、葉、茎、花、地上部又はこれらの混合物等が挙げられるが、好ましくは地上部である。
【００２４】
スギナ（Equisetum arvens）は、トクサ科トクサ属に属する植物であり、北半球の暖帯に広く分布しており、これらの地域から容易に入手することができる。抽出原料として使用し得る部位としては、例えば、地下部、地上部またはこれらの部位の混合物等が挙げられるが、好ましくは地上部である。
【００２５】
サンショウ（Zanthoxylum piperitum De Candolle）は、ミカン科サンショウ属に属する植物であって、日本列島や朝鮮半島に分布しており、これらの地域から容易に入手することができる。抽出原料として使用し得る部位としては、例えば、葉部、茎部、花部、蕾部、果実部、果皮部、果核部、地上部またはこれらの混合物が挙げられるが、好ましくは果皮部である。
【００２６】
キンモクセイ（Osmanthus fragrans var. aurantiacus，別名：桂花）は、モクセイ科モクセイ属に属する常緑小高木であり、中国南部を原産地とし、日本においても広く栽培されており、このような地域から容易に入手することができる。抽出原料として使用し得る構成部位としては、例えば、葉部、枝部、樹皮部、幹部、茎部、果実部、花部等の地上部、根部またはこれらの部位の混合物等が挙げられるが、好ましくは花部である。
【００２７】
なお、「花」とは、一般に、種子植物の有性生殖にかかわる器官の総体をいい、葉の変形である花葉と茎の変形である花軸とから構成され、花葉には、萼、花弁、雄しべ、心皮等の器官が含まれる。本実施形態において抽出原料として使用する「花部」には、種子植物の有性生殖にかかわる器官の総体の他、その一部、例えば、花葉、花被（萼と花冠）、花冠、花弁等も含まれる。
【００２８】
キンギンカ（Lonicera japonica Thunberg.，別名：スイカズラ）は、スイカズラ科スイカズラ属に属する常緑つる性木本であり、日本全国、東アジア一帯等に自生しており、これらの地域から容易に入手することができる。抽出原料として使用し得る部位としては、例えば、葉部、茎部、花部、蕾部、果実部、果皮部、果核部、地上部、全草またはこれらの混合物等が挙げられるが、好ましくは葉部、茎部、花部または蕾部である。
【００２９】
セイヨウノコギリソウ（Achillea millefolium）は、ヨーロッパからインド、シベリア、ヒマラヤ等に分布しているキク科ノコギリソウ属に属する多年草であり、これらの地域から容易に入手することができる。抽出原料として使用し得るセイヨウノコギリソウの構成部位としては、例えば、葉部、幹部、地上部、根部、花部、全草等が挙げられるが、好ましくは全草である。
【００３０】
上記天然物からの抽出物は、抽出原料を乾燥した後、そのまま又は粗砕機を用いて粉砕し、抽出溶媒による抽出に供することにより得ることができる。乾燥は天日で行ってもよいし、通常使用される乾燥機を用いて行ってもよい。また、ヘキサン等の非極性溶媒によって脱脂等の前処理を施してから抽出原料として使用してもよい。脱脂等の前処理を行うことにより、上記抽出原料の極性溶媒による抽出処理を効率よく行うことができる。
【００３１】
抽出溶媒としては、極性溶媒を使用することが好ましく、例えば、水、親水性有機溶媒等が挙げられ、これらを単独で又は２種以上を組み合わせて、室温又は溶媒の沸点以下の温度で使用することが好ましい。
【００３２】
抽出溶媒として使用し得る水としては、純水、水道水、井戸水、鉱泉水、鉱水、温泉水、湧水、淡水等のほか、これらに各種処理を施したものが含まれる。水に施す処理としては、例えば、精製、加熱、殺菌、濾過、イオン交換、浸透圧調整、緩衝化等が含まれる。したがって、本実施形態において抽出溶媒として使用し得る水には、精製水、熱水、イオン交換水、生理食塩水、リン酸緩衝液、リン酸緩衝生理食塩水等も含まれる。
【００３３】
抽出溶媒として使用し得る親水性有機溶媒としては、メタノール、エタノール、プロピルアルコール、イソプロピルアルコール等の炭素数１〜５の低級脂肪族アルコール；アセトン、メチルエチルケトン等の低級脂肪族ケトン；１，３−ブチレングリコール、プロピレングリコール、グリセリン等の炭素数２〜５の多価アルコール等が挙げられる。
【００３４】
２種以上の極性溶媒の混合液を抽出溶媒として使用する場合、その混合比は適宜調整することができる。例えば、水と低級脂肪族アルコールとの混合液を抽出溶媒として使用する場合には、水と低級脂肪族アルコールとの混合比が９：１〜１：９（容量比）であることが好ましく、７：３〜２：８（容量比）であることがさらに好ましい。また、水と低級脂肪族ケトンとの混合液を使用する場合には、水と低級脂肪族ケトンとの混合比が９：１〜２：８（容量比）であることが好ましく、水と多価アルコールとの混合液を使用する場合には、水と多価アルコールとの混合比が８：２〜１：９（容量比）であることが好ましい。
【００３５】
抽出処理は、抽出原料に含まれる可溶性成分を抽出溶媒に溶出させ得る限り特に限定はされず、常法に従って行うことができる。例えば、抽出原料の５〜１５倍量（質量比）の抽出溶媒に、抽出原料を浸漬し、常温又は還流加熱下で可溶性成分を抽出させた後、濾過して抽出残渣を除去することにより抽出液を得ることができる。得られた抽出液から溶媒を留去するとペースト状の濃縮物が得られ、この濃縮物をさらに乾燥すると乾燥物が得られる。
【００３６】
以上のようにして得られる、タイソウ、藤茶、ゲンチアナ、プルーン、ガイヨウ、スターフルーツ、ローヤルゼリー、緑茶、ワイルドタイム、スギナ、サンショウ、キンモクセイ、キンギンカ、およびセイヨウノコギリソウからの抽出物は、優れたＥｎｄｏ１８０産生促進作用を有しているため、Ｅｎｄｏ１８０産生促進剤の有効成分として用いることができる。本実施形態のＥｎｄｏ１８０産生促進剤は、医薬品、医薬部外品、化粧品等、飲食品の幅広い用途に使用することができる。
【００３７】
本実施形態のＥｎｄｏ１８０産生促進剤は、タイソウ、藤茶、ゲンチアナ、プルーン、ガイヨウ、スターフルーツ、ローヤルゼリー、緑茶、ワイルドタイム、スギナ、サンショウ、キンモクセイ、キンギンカ、もしくはセイヨウノコギリソウからの抽出物またはこれらの混合物のみからなるものでもよいし、タイソウ、藤茶、ゲンチアナ、プルーン、ガイヨウ、スターフルーツ、ローヤルゼリー、緑茶、ワイルドタイム、スギナ、サンショウ、キンモクセイ、キンギンカ、もしくはセイヨウノコギリソウからの抽出物またはこれらの混合物を製剤化したものでもよい。
【００３８】
本実施形態のＥｎｄｏ１８０産生促進剤は、デキストリン、シクロデキストリン等の薬学的に許容し得るキャリアーその他任意の助剤を用いて、常法に従い、粉末状、顆粒状、錠剤状、液状等の任意の剤形に製剤化することができる。この際、助剤としては、例えば、賦形剤、結合剤、崩壊剤、滑沢剤、安定剤、矯味・矯臭剤等を用いることができる。Ｅｎｄｏ１８０産生促進剤は、他の組成物（例えば、皮膚化粧料、飲食品等）に配合して使用することができるほか、軟膏剤、外用液剤、貼付剤等として使用することができる。
【００３９】
本実施形態のＥｎｄｏ１８０産生促進剤を製剤化した場合、タイソウ、藤茶、ゲンチアナ、プルーン、ガイヨウ、スターフルーツ、ローヤルゼリー、緑茶、ワイルドタイム、スギナ、サンショウ、キンモクセイ、キンギンカ、もしくはセイヨウノコギリソウからの抽出物またはこれらの混合物の含有量は、特に限定されるものではなく、目的に応じて適宜設定することができる。
【００４０】
なお、本実施形態のＥｎｄｏ１８０産生促進剤は、必要に応じて、Ｅｎｄｏ１８０産生促進作用を有する他の天然抽出物等を、タイソウ、藤茶、ゲンチアナ、プルーン、ガイヨウ、スターフルーツ、ローヤルゼリー、緑茶、ワイルドタイム、スギナ、サンショウ、キンモクセイ、キンギンカ、もしくはセイヨウノコギリソウからの抽出物またはこれらの混合物とともに配合して有効成分として用いることができる。
【００４１】
本実施形態のＥｎｄｏ１８０産生促進剤の患者に対する投与方法としては、経皮投与、経口投与等が挙げられるが、疾患の種類に応じて、その予防・治療等に好適な方法を適宜選択すればよい。また、本実施形態のＥｎｄｏ１８０産生促進剤の投与量も、疾患の種類、重症度、患者の個人差、投与方法、投与期間等によって適宜増減すればよい。
【００４２】
本実施形態のＥｎｄｏ１８０産生促進剤は、有効成分であるタイソウ、藤茶、ゲンチアナ、プルーン、ガイヨウ、スターフルーツ、ローヤルゼリー、緑茶、ワイルドタイム、スギナ、サンショウ、キンモクセイ、キンギンカ、またはセイヨウノコギリソウからの抽出物が有するＥｎｄｏ１８０産生促進作用を通じて、線維芽細胞においてＥｎｄｏ１８０の産生を促進し、これにより、エンドサイトーシスによる断片化コラーゲンの取り込みを促進して正常なコラーゲン線維構造の再生を促し、シワの形成等といった皮膚の光老化症状を予防、治療または改善することができる。また、本実施形態のＥｎｄｏ１８０産生促進剤は、正常なコラーゲン線維構造の再生を促すことにより、慢性関節リウマチ、変形性関節炎、化膿性関節炎、痛風性関節炎、外傷性関節炎、骨関節炎等の関節炎の予防、治療または改善などの用途に用いることができる。ただし、本実施形態のＥｎｄｏ１８０産生促進剤は、これらの用途以外にも上記作用を発揮することに意義のあるすべての用途に用いることができる。
【００４３】
また、本実施形態のＥｎｄｏ１８０産生促進剤は、優れたＥｎｄｏ１８０産生促進作用を有するため、例えば、皮膚外用剤や飲食品に配合するのに好適である。この場合に、タイソウ、藤茶、ゲンチアナ、プルーン、ガイヨウ、スターフルーツ、ローヤルゼリー、緑茶、ワイルドタイム、スギナ、サンショウ、キンモクセイ、キンギンカ、もしくはセイヨウノコギリソウからの抽出物またはこれらの混合物をそのまま配合してもよいし、タイソウ、藤茶、ゲンチアナ、プルーン、ガイヨウ、スターフルーツ、ローヤルゼリー、緑茶、ワイルドタイム、スギナ、サンショウ、キンモクセイ、キンギンカ、もしくはセイヨウノコギリソウからの抽出物またはこれらの混合物から製剤化したＥｎｄｏ１８０産生促進剤を配合してもよい。
【００４４】
ここで、皮膚外用剤としては、その区分に制限はなく、経皮的に使用される皮膚化粧料、医薬部外品、医薬品等を幅広く含むものであり、具体的には、例えば、軟膏、クリーム、乳液、化粧水、美容液、ローション、ジェル、美容オイル、パック、ファンデーション、リップクリーム、入浴剤、ヘアートニック、ヘアーローション、シャンプー、リンス、石鹸、ボディシャンプー等が挙げられる。
【００４５】
飲食品とは、人の健康に危害を加えるおそれが少なく、通常の社会生活において、経口又は消化管投与により摂取されるものをいい、行政区分上の食品、医薬品、医薬部外品等の区分に制限されるものではない。したがって、本実施形態における「飲食品」は、経口的に摂取される一般食品、健康食品（機能性飲食品）、保健機能食品（特定保健用食品，栄養機能食品）、医薬部外品、医薬品等を幅広く含むものである。
【００４６】
また、本実施形態のＥｎｄｏ１８０産生促進剤は、優れたＥｎｄｏ１８０産生促進作用を有するので、これらの作用機構に関する研究のための試薬としても好適に利用することができる。
【００４７】
なお、本実施形態のＥｎｄｏ１８０産生促進剤は、ヒトに対して好適に適用されるものであるが、それぞれの作用効果が奏される限り、ヒト以外の動物（例えば，マウス，ラット，ハムスター，イヌ，ネコ，ウシ，ブタ，サル等）に対して適用することもできる。
【実施例】
【００４８】
以下、試験例を示し、本発明を具体的に説明するが、本発明は下記の各例に何ら制限されるものではない。なお、下記試験例においては、被験試料として、表１に示す製品（試料１〜１４，いずれも凍結乾燥品）を使用した。
【００４９】
【表１】
2019055924.tif 000002
【００５０】
〔試験例１〕Ｅｎｄｏ１８０産生促進作用試験
上記天然物由来成分（試料１〜１４）について、以下のようにしてＥｎｄｏ１８０産生促進作用を試験した。
【００５１】
ヒト正常皮膚線維芽細胞（ＮＢ１ＲＧＢ）を、１０％ＦＢＳ含有ダルベッコＭＥＭを用いて培養した後、トリプシン処理により細胞を回収した。回収した細胞を１．０×１０5 cells/mLの細胞密度になるよう上記培地希釈した後、９６ウェルマイクロプレートに１ウェル当たり１００μＬずつ播種し、二晩培養した。
【００５２】
培養終了後、培地を除去し、ＦＢＳ不含有ダルベッコＭＥＭに溶解した被験試料（試料１〜１４，試料濃度は下記表２を参照）を各ウェルに２００μＬずつ添加し、一日間培養した。なお、コントロールとして、試料無添加のＦＢＳ不含有ダルベッコＭＥＭを用いて同様に培養した。培養終了後、各ウェルの細胞表面に存在するＥｎｄｏ１８０量をＥＬＩＳＡ法により測定した。測定結果から、下記式によりＥｎｄｏ１８０産生促進率（％）を算出した。
【００５３】
Ｅｎｄｏ１８０産生促進率（％）＝Ａ／Ｂ×１００
式中の各項はそれぞれ以下を表す。
Ａ：被験試料添加でのＥｎｄｏ１８０産生量
Ｂ：試料無添加でのＥｎｄｏ１８０産生量
結果を表２に示す。
【００５４】
【表２】
2019055924.tif 000003
【００５５】
表２に示すように、タイソウ抽出物（試料１）、藤茶抽出物（試料２）、ゲンチアナ抽出物（試料３）、プルーン抽出物（試料４）、ガイヨウ抽出物（試料５）、スターフルーツ抽出物（試料６）、ローヤルゼリー抽出物（試料７）、緑茶抽出物（試料８）、ワイルドタイム抽出物（試料９）、スギナ抽出物（試料１０）、サンショウ抽出物（試料１１）、キンモクセイ抽出物（試料１２）、キンギンカ抽出物（試料１３）、およびセイヨウノコギリソウ抽出物（試料１４）は、いずれも優れたＥｎｄｏ１８０産生促進作用を有することが確認された。
【産業上の利用可能性】
【００５６】
本発明のＥｎｄｏ１８０産生促進剤は、シワの形成等といった皮膚の光老化症状の予防、治療または改善；各種関節炎の予防、治療または改善；などに大きく貢献できる。
【手続補正書】
【提出日】平成30年4月5日(2018.4.5)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
藤茶、スターフルーツ、タイソウ、ガイヨウ、緑茶、キンモクセイ、ゲンチアナ、プルーン、ローヤルゼリー、ワイルドタイム、スギナ、サンショウ、キンギンカ、およびセイヨウノコギリソウからなる群より選択される１種または２種以上の天然物からの抽出物を有効成分とすることを特徴とするＥｎｄｏ１８０産生促進剤。
【手続補正書】
【提出日】平成30年6月28日(2018.6.28)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
藤茶からの抽出物を有効成分とすることを特徴とするＥｎｄｏ１８０産生促進剤。