(57)【要約】  本発明は、緑内障及び患者の眼における眼内圧上昇をもたらす他の症状の治療のための、式（Ｉ）の強力なカリウムチャネルブロッカー化合物又はそれらの処方物の使用に関する。本発明はまた、哺乳動物、特にはヒトの眼に神経保護効果を付与するためのそのような化合物又は医薬適合性の塩、インビボ加水分解性のエステル、鏡像異性体、ジアステレオマー又はそれらの混合物の使用にも関し、式（ＩＩ）は、Ｃ６−１０アリール又はＣ３−１０ヘテロシクリルを表し、該アリール又はヘテロシクリルは、Ｒａから選択される１個から３個の基で場合によっては置換されており；Ｚは、（ＣＨ２）ｎＰＯ（ＯＲ）（ＯＲ＊）を表す。2007504233.tif 000054
2007504233.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
構造式Ｉ：
【化１】
2007504233.tif 000050
の化合物若しくは医薬適合性の塩、インビボ加水分解性のエステル、鏡像異性体、ジアステレオマー又はそれらの混合物：
（式中、
Ｒは、水素又はＣ１−６アルキルを表し；
Ｒｃ及びＲｄは、独立に、水素又はハロを表し；
Ｒｅは、Ｎ又はＯを表し；
Ｘは、−（ＣＨＲ７）ｐ−、−（ＣＨＲ７）ｐＣＯ−を表し；
Ｙは、−ＣＯ（ＣＨ２）ｎ−、ＣＨ２又は−ＣＨ（ＯＲ）−を表し；
Ｑは、ＣＲｙを表し；
Ｒｙは、Ｈ又はＣ１−６アルキルを表し；
Ｒｗは、Ｈ、Ｃ１−６アルキル、−Ｃ（Ｏ）Ｃ１−６アルキル、−Ｃ（Ｏ）ＯＣ１−６アルキル、−ＳＯ２Ｎ（Ｒ）２、−ＳＯ２Ｃ１−６アルキル、−ＳＯ２Ｃ６−１０アリール、ＮＯ２、ＣＮ又は−Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ）２を表し；
Ｒ２は、水素、Ｃ１−１０アルキル、ＯＨ、Ｃ２−６アルケニル、Ｃ１−６アルキルＳＲ、−（ＣＨ２）ｎＯ（ＣＨ２）ｍＯＲ、−（ＣＨ２）ｎＣ１−６アルコキシ、−（ＣＨ２）ｎＣ３−８シクロアルキル、−（ＣＨ２）ｎＣ３−１０ヘテロシクリル、−Ｎ（Ｒ）２、−ＣＯＯＲ又は−（ＣＨ２）ｎＣ６−１０アリールを表し、該アルキル、ヘテロシクリル又はアリールは、Ｒａから選択される１個から３個の基で場合によっては置換されており；
Ｒ３は、水素、Ｃ１−１０アルキル、−（ＣＨ２）ｎＣ３−８シクロアルキル、−（ＣＨ２）ｎＣ３−１０ヘテロシクリル、−（ＣＨ２）ｎＣＯＯＲ、−（ＣＨ２）ｎＣ６−１０アリール、−（ＣＨ２）ｎＮＨＲ８、−（ＣＨ２）ｎＮ（Ｒ）２、−（ＣＨ２）ｎＮ（Ｒ８）２、−（ＣＨ２）ｎＮＨＣＯＯＲ、−（ＣＨ２）ｎＮ（Ｒ８）ＣＯ２Ｒ、−（ＣＨ２）ｎＮ（Ｒ８）ＣＯＲ、−（ＣＨ２）ｎＮＨＣＯＲ、−（ＣＨ２）ｎＣＯＮＨ（Ｒ８）、アリール、−（ＣＨ２）ｎＣ１−６アルコキシ、ＣＦ３、−（ＣＨ２）ｎＳＯ２Ｒ、−（ＣＨ２）ｎＳＯ２Ｎ（Ｒ）２、−（ＣＨ２）ｎＣＯＮ（Ｒ）２、−（ＣＨ２）ｎＣＯＮＨＣ（Ｒ）３、−（ＣＨ２）ｎＣＯＮＨＣ（Ｒ）２ＣＯ２Ｒ、−（ＣＨ２）ｎＣＯＲ８、ニトロ、シアノ又はハロゲンを表し、該アルキル、アルコキシ、ヘテロシクリル又はアリールは、Ｒａの１個から３個の基で場合によっては置換されているか；
又は、Ｒ２及びＲ３は、介在するＱと一緒に、Ｏ、Ｓ、Ｃ（Ｏ）又はＮＲの１個から２個の原子により場合によっては割り込まれ、場合によっては１個から４個の二重結合を有し、Ｒａから選択される１個から３個の基で場合によっては置換されている、３−１０員の炭素環式又は複素環式炭素環を形成しており；
Ｒ４及びＲ５は、独立に、水素、Ｃ１−６アルコキシ、ＯＨ、Ｃ１−６アルキル、ＣＯＯＲ、ＳＯ３Ｈ、−Ｏ（ＣＨ２）ｎＮ（Ｒ）２、−Ｏ（ＣＨ２）ｎＣＯ２Ｒ、−ＯＰＯ（ＯＨ）２、ＣＦ３、ＯＣＦ３、−Ｎ（Ｒ）２、ニトロ、シアノ、Ｃ１−６アルキルアミノ又はハロゲンを表し；
【化２】
2007504233.tif 000051
は、Ｃ６−１０アリール又はＣ３−１０ヘテロシクリルを表し、該アリール又はヘテロシクリルは、Ｒａから選択される１個から３個の基で場合によっては置換されており；
Ｚは、（ＣＨ２）ｎＰＯ（ＯＲ）（ＯＲ＊）を表し；
Ｒ＊は、水素又はＣ１−６アルキルを表し；
Ｒ７は、水素、Ｃ１−６アルキル、−（ＣＨ２）ｎＣＯＯＲ又は−（ＣＨ２）ｎＮ（Ｒ）２を表し、
Ｒ８は、−（ＣＨ２）ｎＣ３−８シクロアルキル、−（ＣＨ２）ｎＣ３−１０ヘテロシクリル、Ｃ１−６アルコキシ又は−（ＣＨ２）ｎＣ５−１０ヘテロアリール、−（ＣＨ２）ｎＣ６−１０アリールを表し、該ヘテロシクリル、アリール又はヘテロアリールは、Ｒａから選択される１個から３個の基で場合によっては置換されており；
Ｒａは、Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ、ＣＦ３、Ｎ（Ｒ）２、ＮＯ２、ＣＮ、−ＣＯＲ８、−ＣＯＮＨＲ８、−ＣＯＮ（Ｒ８）２、−Ｏ（ＣＨ２）ｎＣＯＯＲ、−ＮＨ（ＣＨ２）ｎＯＲ、−ＣＯＯＲ、-ＯＣＦ３、−ＮＨＣＯＲ、−ＳＯ２Ｒ、−ＳＯ２ＮＲ２、−ＳＲ、（Ｃ１−Ｃ６アルキル）Ｏ−、−（ＣＨ２）ｎＯ（ＣＨ２）ｍＯＲ、−（ＣＨ２）ｎＣ１−６アルコキシ、（アリール）Ｏ−、−（ＣＨ２）ｎＯＨ、（Ｃ１−Ｃ６アルキル）Ｓ（Ｏ）ｍ−、Ｈ２Ｎ−Ｃ（ＮＨ）−、（Ｃ１−Ｃ６アルキル）Ｃ（Ｏ）−、（Ｃ１−Ｃ６アルキル）ＯＣ（Ｏ）ＮＨ−、−（Ｃ１−Ｃ６アルキル）ＮＲｗ（ＣＨ２）ｎＣ３−１０ヘテロシクリル−Ｒｗ、−（Ｃ１−Ｃ６アルキル）Ｏ（ＣＨ２）ｎＣ３−１０ヘテロシクリル−Ｒｗ、−（Ｃ１−Ｃ６アルキル）Ｓ（ＣＨ２）ｎＣ３−１０ヘテロシクリル−Ｒｗ、−（Ｃ１−Ｃ６アルキル）−Ｃ３−１０ヘテロシクリル−Ｒｗ、−（ＣＨ２）ｎ−Ｚ１−Ｃ（＝Ｚ２）Ｎ（Ｒ）２、−（Ｃ２−６アルケニル）ＮＲｗ（ＣＨ２）ｎＣ３−１０ヘテロシクリル−Ｒｗ、−（Ｃ２−６アルケニル）Ｏ（ＣＨ２）ｎＣ３−１０ヘテロシクリル−Ｒｗ、−（Ｃ２−６アルケニル）Ｓ（ＣＨ２）ｎＣ３−１０ヘテロシクリル−Ｒｗ、−（Ｃ２−６アルケニル）−Ｃ３−１０ヘテロシクリル−Ｒｗ、−（Ｃ２−６アルケニル）−Ｚ１−Ｃ（＝Ｚ２）Ｎ（Ｒ）２、−（ＣＨ２）ｎＳＯ２Ｒ、−（ＣＨ２）ｎＳＯ３Ｈ、−（ＣＨ２）ｎＰＯ（ＯＲ）２、Ｃ３−１０シクロアルキル、Ｃ６−１０アリール、Ｃ３−１０ヘテロシクリル、Ｃ２−６アルケニル及びＣ１−Ｃ１０アルキルを表し、該アルキル、アルケニル、アルコキシ、ヘテロシクリル及びアリールは、Ｃ１−Ｃ６アルキル、ＣＮ、ＮＯ２、ＯＨ、ＣＯＮ（Ｒ）２及びＣＯＯＲから選択される１個から３個の基で場合によっては置換されており；
Ｚ１及びＺ２は、独立に、ＮＲｗ、Ｏ、ＣＨ２又はＳを表し；
ｇは、０から１であり；
ｍは、０から３であり；
ｎは、０から３であり；
ｐは、０から３である。）。
【請求項２】
Ｙが、−ＣＯ（ＣＨ２）ｎであり、ｐが、１から３であり、Ｘが、−（ＣＨＲ７）ｐ又は−（ＣＨＲ７）ｐＣＯ−である、請求項１に記載の化合物。
【請求項３】
Ｚが、ＰＯ（ＯＲ）（ＯＲ＊）であり、Ｒ２及びＲ３が、独立に、水素、Ｃ１−１０アルキル又はＣ１−６アルキルＯＨであり、Ｙが、−ＣＯ（ＣＨ２）ｎである、請求項２に記載の化合物。
【請求項４】
【化３】
2007504233.tif 000052
が、Ｒａから選択される１個から３個の基で場合によっては置換されている、６員のヘテロアリール又はフェニルである、請求項３に記載の化合物。
【請求項５】
【化４】
2007504233.tif 000053
が、Ｒａから選択される１個から３個の基で場合によっては置換されているピリジルである、請求項４に記載の化合物。
【請求項６】
ジ−ｔｅｒｔ−ブチル４−｛［１−（３，３−ジメチル−２−オキソブチル）−６−メトキシ−１−Ｈ−インダゾール−３−イル］カルボニル｝ベンジルホスフェート；
４−｛［１−（３，３−ジメチル−２−オキシブチル）−６−メトキシ−１−Ｈ−インダゾール−３−イル］カルボニル｝ベンジル  リン酸二水素；
２−［（５−｛［１−（３，３−ジメチル−２−オキソブチル−６−メトキシ−１−Ｈ−インダゾール−３−イル）カルボニル｝ピリジン−２−イル）オキシ］エチル  リン酸二水素；
（５−｛［１−３，３−ジメチル−２−オキソブチル）−６−メトキシ−１Ｈ−インダゾール−３−イル］カルボニル｝ピリジン−２−イル）メチル  リン酸二水素；
２−（５−｛［１−（３，３−ジメチル−２−オキソブチル）−６−メトキシ−１Ｈ−インダゾール−３−イル］カルボニル｝ピリジン−２−イル）−２，２−ジフルオロエチル  リン酸二水素；及び
２−（５−｛［７−ブロモ−１−（３，３−ジメチル−２−オキソブチル）−６−メトキシ−１Ｈ−インダゾール−３−イル］カルボニル｝プリジン−２−イル）−２，２−ジフルオロエチル  リン酸二水素
若しくは医薬適合性の塩、インビボ加水分解性のエステル、鏡像異性体、ジアステレオマー又はそれらの混合物である、化合物。
【請求項７】
一ナトリウム又は二ナトリウム塩の形態の、ジ−ｔｅｒｔ−ブチル４−｛［１−（３，３−ジメチル−２−オキソブチル）−６−メトキシ−１−Ｈ−インダゾール−３−イル］カルボニル｝ベンジルホスフェート；
一ナトリウム又は二ナトリウム塩の形態の、４−｛［１−（３，３−ジメチル−２−オキシブチル）−６−メトキシ−１−Ｈ−インダゾール−３−イル］カルボニル｝ベンジル  リン酸二水素；
一ナトリウム又は二ナトリウム塩の形態の、２−［（５−｛［１−（３，３−ジメチル−２−オキソブチル−６−メトキシ−１−Ｈ−インダゾール−３−イル）カルボニル｝ピリジン−２−イル）オキシ］エチル  リン酸二水素；
一ナトリウム又は二ナトリウム塩の形態の、（５−｛［１−３，３−ジメチル−２−オキソブチル）−６−メトキシ−１Ｈ−インダゾール−３−イル］カルボニル｝ピリジン−２−イル）メチル  リン酸二水素；
一ナトリウム又は二ナトリウム塩の形態の、２−（５−｛［１−（３，３−ジメチル−２−オキソブチル）−６−メトキシ−１Ｈ−インダゾール−３−イル］カルボニル｝ピリジン−２−イル）−２，２−ジフルオロエチル  リン酸二水素；及び
一ナトリウム又は二ナトリウム塩の形態の、２−（５−｛［７−ブロモ−１−（３，３−ジメチル−２−オキソブチル）−６−メトキシ−１Ｈ−インダゾール−３−イル］カルボニル｝ピリジン−２−イル）−２，２−ジフルオロエチル  リン酸二水素である、化合物。
【請求項８】
高眼圧又は緑内障の治療用の薬物の製造のための、請求項１に記載の式Ｉの化合物の使用。
【請求項９】
黄斑浮腫、黄斑変性、網膜及び視神経乳頭血流速度上昇、網膜及び視神経酸素圧上昇の治療及び／又は神経保護効果のための薬物の製造のための、請求項１に記載の式Ｉの化合物の使用。
【請求項１０】
カリウムチャネルを含有する哺乳類細胞の再分極又は過分極の予防用の薬物又はアルツハイマー病、うつ病、認知障害及び／又は不整脈疾患の治療用の薬物の製造のための、請求項１に記載の式Ｉの化合物の使用。
【請求項１１】
糖尿病の治療用の薬物の製造のための、請求項１に記載の式Ｉの化合物の使用。
【請求項１２】
請求項１に記載の式Ｉの化合物及び医薬適合性の担体を含む組成物。
【請求項１３】
前記式Ｉの化合物が、局所製剤として適用され、該局所製剤が、溶液又は懸濁液として投与され、場合によってはキサンタンガム又はジェランガムを含有する、請求項１２に記載の組成物。
【請求項１４】
抗β−アドレナリン作動薬、副交感神経作動薬、交感神経模倣薬、炭酸脱水酵素阻害薬、ＥＰ４アゴニスト、プロスタグランジン若しくはその誘導体、降圧性脂質、神経保護剤及び／又は５−ＨＴ２受容体アゴニストからなる群に属する有効成分の１つ又は複数が場合よっては添加される、請求項１３に記載の組成物。
【請求項１５】
前記抗β−アドレナリン作動薬が、チモロール、ベタキソロール、レボベタキソロール、カルテオロール又はレボブノロールであり；前記副交感神経作動薬が、ピロカルピンであり；前記交感神経模倣薬が、エピネフリン、ブリモニジン、アイオピジン、クロニジン又はパラ−アミノクロニジンであり、前記炭酸脱水酵素阻害薬が、ドルゾラミド、アセタゾラミド、メタゾラミド又はブリンゾラミドであり；前記プロスタグランジンが、ラタノプロスト、トラバプロスト、ウノプロストン、レスキュラ又はＳ１０３３であり、前記降圧性脂質が、ルミガンであり、前記神経保護剤が、エリプロジル、Ｒ−エリプロジル又はメマンチンであり；前期５−ＨＴ２受容体アゴニストが、フマル酸１−（２−アミノプロピル）−３−メチル−１Ｈ−イミダゾール−６−オール又は２−（３−クロロ−６−メトキシ−インダゾール−１−イル）−１−メチル−エチルアミンである、請求項１４に記載の組成物。
【発明の詳細な説明】
【背景技術】
【０００１】
本願は、米国仮出願番号第６０／５００，０９５号（２００３年９月４日出願）の３５Ｕ．Ｓ．Ｃ．１１９（ｅ）に基づく優先権を主張する。
【０００２】
緑内障とは、眼内圧が過度に上昇し眼が正常に機能できなくなる眼の変性疾患である。結果として、視神経乳頭に対する損傷を生じ得、視覚機能の不可逆的な喪失が起こる。治療を行わない場合、緑内障は最終的に盲目につながり得る。現在、大多数の眼科医が、高眼圧、すなわち、視神経乳頭損傷又は特徴的な緑内障視野欠損を伴わずに眼内圧が上昇した状態は、緑内障の発症の単なる最初期相を表すものであると考えている。
【０００３】
緑内障及び眼内圧上昇を治療するための療法がいくつか存在するが、これらの薬剤の効力及び副作用面での特徴は理想的ではない。近年、カリウムチャネルブロッカーが眼内圧を低下させ、したがって、高眼圧及びそれに関連する変性眼状態の治療のためのさらなる方法をもたらすことが分かった。カリウムチャネルを遮断することにより液体分泌を減少させ、ある状況下では、平滑筋収縮を増大させることが可能であり、ＩＯＰを低下させ、眼における神経保護効果を有すると予想される（米国特許第５，５７３，７５８号及び第５，９２５，３４２号；Ｍｏｏｒｅら、Ｉｎｖｅｓｔ．Ｏｐｈｔｈａｌｍｏｌ．Ｖｉｓ．Ｓｃｉ  ３８，１９９７；ＷＯ８９／１０７５７、ＷＯ９４／２８９００及びＷＯ９６／３３７１９を参照）。
【発明の開示】
【０００４】
本発明は、緑内障及び患者の眼における眼内圧上昇に関連する他の症状の治療における強力なカリウムチャネルブロッカー又はそれらの処方物の使用に関する。本発明はまた、哺乳動物種、特にはヒトの眼に神経保護効果を付与するための、そのような化合物の使用にも関する。さらに具体的には、本発明は、構造式Ｉ：
【０００５】
【化５】
2007504233.tif 000003
を有するインダゾール化合物を含有する新規リン酸塩、又は医薬適合性の塩、インビボ加水分解性エステル、鏡像異性体、ジアステレオマー若しくはそれらの混合物を用いた、緑内障及び／又は高眼圧（眼内圧上昇）の治療にも関する（式中、
Ｒは、水素又はＣ１−６アルキルを表し；
Ｒｃ及びＲｄは、独立に、水素又はハロを表し；
Ｒｅは、Ｎ又はＯを表し；
Ｘは、−（ＣＨＲ７）ｐ−、−（ＣＨＲ７）ｐＣＯ−を表し；
Ｙは、−ＣＯ（ＣＨ２）ｎ−、ＣＨ２又は−ＣＨ（ＯＲ）−を表し；
Ｑは、ＣＲｙを表し；
Ｒｙは、Ｈ又はＣ１−６アルキルを表し；
Ｒｗは、Ｈ、Ｃ１−６アルキル、−Ｃ（Ｏ）Ｃ１−６アルキル、−Ｃ（Ｏ）ＯＣ１−６アルキル、−ＳＯ２Ｎ（Ｒ）２、−ＳＯ２Ｃ１−６アルキル、−ＳＯ２Ｃ６−１０アリール、ＮＯ２、ＣＮ又は−Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ）２を表し；
Ｒ２は、水素、Ｃ１−１０アルキル、ＯＨ、Ｃ２−６アルケニル、Ｃ１−６アルキルＳＲ、−（ＣＨ２）ｎＯ（ＣＨ２）ｍＯＲ、−（ＣＨ２）ｎＣ１−６アルコキシ、−（ＣＨ２）ｎＣ３−８シクロアルキル、−（ＣＨ２）ｎＣ３−１０ヘテロシクリル、−Ｎ（Ｒ）２、−ＣＯＯＲ又は−（ＣＨ２）ｎＣ６−１０アリールを表し、該アルキル、ヘテロシクリル又はアリールは、Ｒａから選択される１個から３個の基で場合によっては置換されており；
Ｒ３は、水素、Ｃ１−１０アルキル、−（ＣＨ２）ｎＣ３−８シクロアルキル、−（ＣＨ２）ｎＣ３−１０ヘテロシクリル、−（ＣＨ２）ｎＣＯＯＲ、−（ＣＨ２）ｎＣ６−１０アリール、−（ＣＨ２）ｎＮＨＲ８、−（ＣＨ２）ｎＮ（Ｒ）２、−（ＣＨ２）ｎＮ（Ｒ８）２、−（ＣＨ２）ｎＮＨＣＯＯＲ、−（ＣＨ２）ｎＮ（Ｒ８）ＣＯ２Ｒ、−（ＣＨ２）ｎＮ（Ｒ８）ＣＯＲ、−（ＣＨ２）ｎＮＨＣＯＲ、−（ＣＨ２）ｎＣＯＮＨ（Ｒ８）、アリール、−（ＣＨ２）ｎＣ１−６アルコキシ、ＣＦ３、−（ＣＨ２）ｎＳＯ２Ｒ、−（ＣＨ２）ｎＳＯ２Ｎ（Ｒ）２、−（ＣＨ２）ｎＣＯＮ（Ｒ）２、−（ＣＨ２）ｎＣＯＮＨＣ（Ｒ）３、−（ＣＨ２）ｎＣＯＮＨＣ（Ｒ）２ＣＯ２Ｒ、−（ＣＨ２）ｎＣＯＲ８、ニトロ、シアノ又はハロゲンを表し、該アルキル、アルコキシ、ヘテロシクリル又はアリールは、Ｒａの１個から３個の基で場合によっては置換されているか；
又は、Ｒ２及びＲ３は、介在するＱと一緒に、Ｏ、Ｓ、Ｃ（Ｏ）又はＮＲの１個から２個の原子により場合によっては割り込まれ、場合によっては１個から４個の二重結合を有し、Ｒａから選択される１個から３個の基で場合によっては置換されている、３−１０員の炭素環式又は複素環式炭素環を形成しており；
Ｒ４及びＲ５は、独立に、水素、Ｃ１−６アルコキシ、ＯＨ、Ｃ１−６アルキル、ＣＯＯＲ、ＳＯ３Ｈ、−Ｏ（ＣＨ２）ｎＮ（Ｒ）２、−Ｏ（ＣＨ２）ｎＣＯ２Ｒ、−ＯＰＯ（ＯＨ）２、ＣＦ３、ＯＣＦ３、−Ｎ（Ｒ）２、ニトロ、シアノ、Ｃ１−６アルキルアミノ又はハロゲンを表し；
【０００６】
【化６】
2007504233.tif 000004
は、Ｃ６−１０アリール又はＣ３−１０ヘテロシクリルを表し、該アリール又はヘテロシクリルは、Ｒａから選択される１個から３個の基で場合によっては置換されており；
Ｚは、（ＣＨ２）ｎＰＯ（ＯＲ）（ＯＲ＊）を表し；
Ｒ＊は、水素又はＣ１−６アルキルを表し；
Ｒ７は、水素、Ｃ１−６アルキル、−（ＣＨ２）ｎＣＯＯＲ又は−（ＣＨ２）ｎＮ（Ｒ）２を表し、
Ｒ８は、−（ＣＨ２）ｎＣ３−８シクロアルキル、−（ＣＨ２）ｎＣ３−１０ヘテロシクリル、Ｃ１−６アルコキシ又は−（ＣＨ２）ｎＣ５−１０ヘテロアリール、−（ＣＨ２）ｎＣ６−１０アリールを表し、該ヘテロシクリル、アリール又はヘテロアリールは、Ｒａから選択される１個から３個の基で場合によっては置換されており；
Ｒａは、Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ、ＣＦ３、Ｎ（Ｒ）２、ＮＯ２、ＣＮ、−ＣＯＲ８、−ＣＯＮＨＲ８、−ＣＯＮ（Ｒ８）２、−Ｏ（ＣＨ２）ｎＣＯＯＲ、−ＮＨ（ＣＨ２）ｎＯＲ、−ＣＯＯＲ、-ＯＣＦ３、−ＮＨＣＯＲ、−ＳＯ２Ｒ、−ＳＯ２ＮＲ２、−ＳＲ、（Ｃ１−Ｃ６アルキル）Ｏ−、−（ＣＨ２）ｎＯ（ＣＨ２）ｍＯＲ、−（ＣＨ２）ｎＣ１−６アルコキシ、（アリール）Ｏ−、−（ＣＨ２）ｎＯＨ、（Ｃ１−Ｃ６アルキル）Ｓ（Ｏ）ｍ−、Ｈ２Ｎ−Ｃ（ＮＨ）−、（Ｃ１−Ｃ６アルキル）Ｃ（Ｏ）−、（Ｃ１−Ｃ６アルキル）ＯＣ（Ｏ）ＮＨ−、−（Ｃ１−Ｃ６アルキル）ＮＲｗ（ＣＨ２）ｎＣ３−１０ヘテロシクリル−Ｒｗ、−（Ｃ１−Ｃ６アルキル）Ｏ（ＣＨ２）ｎＣ３−１０ヘテロシクリル−Ｒｗ、−（Ｃ１−Ｃ６アルキル）Ｓ（ＣＨ２）ｎＣ３−１０ヘテロシクリル−Ｒｗ、−（Ｃ１−Ｃ６アルキル）−Ｃ３−１０ヘテロシクリル−Ｒｗ、−（ＣＨ２）ｎ−Ｚ１−Ｃ（＝Ｚ２）Ｎ（Ｒ）２、−（Ｃ２−６アルケニル）ＮＲｗ（ＣＨ２）ｎＣ３−１０ヘテロシクリル−Ｒｗ、−（Ｃ２−６アルケニル）Ｏ（ＣＨ２）ｎＣ３−１０ヘテロシクリル−Ｒｗ、−（Ｃ２−６アルケニル）Ｓ（ＣＨ２）ｎＣ３−１０ヘテロシクリル−Ｒｗ、−（Ｃ２−６アルケニル）−Ｃ３−１０ヘテロシクリル−Ｒｗ、−（Ｃ２−６アルケニル）−Ｚ１−Ｃ（＝Ｚ２）Ｎ（Ｒ）２、−（ＣＨ２）ｎＳＯ２Ｒ、−（ＣＨ２）ｎＳＯ３Ｈ、−（ＣＨ２）ｎＰＯ（ＯＲ）２、Ｃ３−１０シクロアルキル、Ｃ６−１０アリール、Ｃ３−１０ヘテロシクリル、Ｃ２−６アルケニル及びＣ１−Ｃ１０アルキルを表し、該アルキル、アルケニル、アルコキシ、ヘテロシクリル及びアリールは、Ｃ１−Ｃ６アルキル、ＣＮ、ＮＯ２、ＯＨ、ＣＯＮ（Ｒ）２及びＣＯＯＲから選択される１個から３個の基で場合によっては置換されており；
Ｚ１及びＺ２は、独立に、ＮＲｗ、Ｏ、ＣＨ２又はＳを表し；
ｇは、０から１であり；
ｍは、０から３であり；
ｎは、０から３であり；
ｐは、０から３である。）。
【０００７】
本発明のこの態様及び他の態様は、全体として、本発明の検証において実現されるであろう。
【発明を実施するための最良の形態】
【０００８】
本発明は、式Ｉの新規カリウムチャネルブロッカーに関する。本発明はまた、本明細書中で前述した式Ｉのカリウムチャネルブロッカーと医薬適合性の担体とを含有する組成物を投与、好ましくは、局所又は眼房内投与することによる、高眼圧を低下させるための、又は緑内障を治療するための方法にも関する。本発明はまた、高眼圧又は緑内障の治療用の薬物の製造のための式Ｉの化合物の使用にも関する。
【０００９】
本化合物の実施形態において、ｐが、１から３である化合物である。
【００１０】
本発明のある実施形態は、Ｙが、−ＣＯ（ＣＨ２）ｎであり、全ての他の可変要素が本来記載されるとおりである場合に実現される。本発明の下位の実施形態は、ｎが０である場合に実現される。
【００１１】
本発明の別の実施形態は、Ｙが、ＣＨ（ＯＲ）であり、全ての他の可変要素が本来記載されるとおりである場合に実現される。
【００１２】
本発明の別の実施形態は、Ｚが、ＰＯ（ＯＲ）（ＯＲ＊）でありＲ及びＲ＊がＨである場合に実現される。本発明の下位の実施形態は、Ｒ及びＲ＊がＣ１−６アルキルである場合に実現される。
【００１３】
別の実施形態において、Ｒｗは、Ｈ、Ｃ１−６アルキル、−Ｃ（Ｏ）Ｃ１−６アルキル及び−Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ）２から選択され、全ての他の可変要素は本来記載されるとおりである。
【００１４】
別の実施形態において、Ｘは、−（ＣＨＲ７）ｐ−であり、ｐは１から３であり、全ての他の可変要素は、本来記載されるとおりである。
【００１５】
別の実施形態において、Ｘは、−（ＣＨＲ７）ｐＣＯ−であり、ｐは１から３であり、全ての他の可変要素は、本来記載されるとおりである。
【００１６】
別の実施形態において、
【００１７】
【化７】
2007504233.tif 000005
は、Ｒａから選択される１個から３個の基で場合によっては置換されている、６員のヘテロアリール又はフェニルである。本発明の下位の実施形態は、
【００１８】
【化８】
2007504233.tif 000006
が、ピリジルである場合に実現される。
【００１９】
本発明のさらに別の実施形態は、Ｒ７が、水素又はＣ１−６アルキルであり、全ての他の可変要素が本来記載されるとおりである場合に実現される。
【００２０】
本発明のさらに別の実施形態は、ＺがＰＯ３（ＯＲ）（ＯＲ＊）であり、Ｒ２及びＲ３が、独立に、水素、Ｃ１−１０アルキル又はＣ１−６アルキルＯＨであり、Ｙが、−ＣＯ（ＣＨ２）ｎである場合に実現される。
【００２１】
本発明の別の実施形態は、Ｒａが、Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ、ＣＦ３、Ｎ（Ｒ）２、ＮＯ２、ＣＮ、−ＣＯＮＨＲ８、−ＣＯＮ（Ｒ８）２、−Ｏ（ＣＨ２）ｎＣＯＯＲ、−ＮＨ（ＣＨ２）ｎＯＲ、−ＣＯＯＲ、−ＯＣＦ３、−ＮＨＣＯＲ、−ＳＯ２Ｒ−、−ＳＯ２ＮＲ２、−ＳＲ、（Ｃ１−Ｃ６アルキル）Ｏ−、−（ＣＨ２）ｎＯ（ＣＨ２）ｍＯＲ、−（ＣＨ２）ｎＣ１−６アルコキシ、（アリール）Ｏ−、−（ＣＨ２）ｎＯＨ、（Ｃ１−Ｃ６アルキル）Ｓ（Ｏ）ｍ−、Ｈ２Ｎ−Ｃ（ＮＨ）−、（Ｃ１−Ｃ６アルキル）Ｃ（Ｏ）−、−（ＣＨ２）ｎＰＯ（ＯＲ）２、Ｃ２−６アルケニル及びＣ１−Ｃ１０アルキルから選択され、該アルキル及びアルケニルが、Ｃ１−Ｃ６アルキル及びＣＯＯＲから選択される１個から３個の基で場合によっては置換されている場合に実現され；
本発明の式Ｉの化合物の例は、
ジ−ｔｅｒｔ−ブチル４−｛［１−（３，３−ジメチル−２−オキソブチル）−６−メトキシ−１−Ｈ−インダゾール−３−イル］カルボニル｝ベンジルホスフェート；
４−｛［１−（３，３−ジメチル−２−オキシブチル）−６−メトキシ−１−Ｈ−インダゾール−３−イル］カルボニル｝ベンジル  リン酸二水素；
２−［（５−｛［１−（３，３−ジメチル−２−オキソブチル−６−メトキシ−１−Ｈ−インダゾール−３−イル）カルボニル｝ピリジン−２−イル）オキシ］エチル  リン酸二水素；
（５−｛［１−３，３−ジメチル−２−オキソブチル）−６−メトキシ−１Ｈ−インダゾール−３−イル］カルボニル｝ピリジン−２−イル）メチル  リン酸二水素；
２−（５−｛［１−（３，３−ジメチル−２−オキソブチル）−６−メトキシ−１Ｈ−インダゾール−３−イル］カルボニル｝ピリジン−２−イル）−２，２−ジフルオロエチル  リン酸二水素；及び
２−（５−｛［７−ブロモ−１−（３，３−ジメチル−２−オキソブチル）−６−メトキシ−１Ｈ−インダゾール−３−イル］カルボニル｝プリジン−２−イル）−２，２−ジフルオロエチル  リン酸二水素、
若しくは医薬適合性の塩、インビボ加水分解性のエステル、鏡像異性体、ジアステレオマー又はそれらの混合物である。本発明の下位の実施形態は、本化合物が、一ナトリウム又は二ナトリウムの形態である場合に実現される。
【００２２】
本発明は、別段の断りがない限り、下記に定義される用語を用いて本明細書中で詳述する。
【００２３】
本発明の化合物は、不斉中心、キラル軸及びキラル面を有し得、ラセミ化合物、ラセミ混合物として、及び個々のジアステレオマーとして生じ得、光学異性体を含む全てのあり得る異性体が本発明に含まれる（Ｅ．Ｌ．Ｅｌｉｅｌ及びＳ．Ｈ．Ｗｉｌｅｎ  Ｓｔｅｒｅｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ  ｏｆ  Ｃａｒｂｏｎ  Ｃｏｍｐｏｕｎｄｓ（Ｊｏｈｎ  Ｗｉｌｅｙ  ａｎｄ  Ｓｏｎｓ，Ｎｅｗ  Ｙｏｒｋ  １９９４）、特に、１１１９−１１９０頁を参照）。
【００２４】
いかなる可変要素（例えば、アリール、複素環、Ｒ１、Ｒ６など）がいかなる構成において１回を上回って現れる場合も、各々の出現に対するそれらの定義はそれぞれ出現時ごとに独立である。また、置換基／又は可変要素の組合せはそのような組合せが安定な化合物を生じる場合にのみ許容される。
【００２５】
「アルキル」という用語は、他に定義されない限り、１個から１０個の炭素原子を含有する一価アルカン（炭化水素）誘導基を意味する。それは直鎖、分枝鎖又は環状であり得る。好ましいアルキル基には、メチル、エチル、プロピル、イソプロピル、ブチル、ｔ−ブチル、シクロプロピル、シクロペンチル及びシクロヘキシルが含まれる。アルキル基がアルキル基で置換されると言われる場合、それは「分枝アルキル基」と交換可能に用いられる。
【００２６】
シクロアルキルは、他に定義されない限り、交互二重結合又は共鳴二重結合を炭素原子間に持たない、３個から１５個の炭素原子を含有するアルキルの一種である。これは、縮合している１個から４個の環を含み得る。そのようなシクロアルキル要素の例には、これらに限定されるものではないが、シクロプロピル、シクロブチル、シクロペンチル、シクロヘキシル及びシクロヘプチルが含まれる。
【００２７】
アルケニルは、Ｃ２−Ｃ６アルケニルである。
【００２８】
アルコキシは、酸素橋を介して結合する、指示された数の炭素原子のアルキル基を意味し、本明細書中で述べられているように、アルキル基は場合によっては置換されている。これらの基は直鎖又は分枝鎖配置のいずれかにある指示された長さの基であり、長さが２炭素原子以上である場合、これらは二重結合又は三重結合を含み得る。そのようなアルコキシ基の例は、メトキシ、エトキシ、プロポキシ、イソプロポキシ、ブトキシ、イソブトキシ、三級ブトキシ、ペントキシ、イソペントキシ、ヘキソキシ、イソヘキソキシ、アリルオキシ、プロパルギルオキシなどである。
【００２９】
ハロゲン（ハロ）は、塩素、フッ素、ヨウ素又は臭素を意味する。
【００３０】
アリールは、芳香族環、例えば、フェニル、置換フェニルなど、ならびに、縮合環、例えば、ナフチル、フェナントレニルなどを意味する。したがって、アリール基は、少なくとも６原子を有する少なくとも１つの環を含み、２２個以下の原子を含有する５個以下のそのような環が存在し、隣接する炭素原子又は適切なヘテロ原子間に交互（共鳴）二重結合が存在する。アリール基の例は、フェニル、ナフチル、テトラヒドロナフチル、インダニル、ビフェニル、フェナントリル、アントリル又はアセナフチル及びフェナントレニル、好ましくは、フェニル、ナフチル又はフェナントレニルである。アリール基は、同様に、定義されるように置換され得る。好ましい置換アリールにはフェニル及びナフチルが含まれる。
【００３１】
ヘテロシクリル又は複素環式という用語は、本明細書中で用いられる場合、飽和又は不飽和のいずれかであり、炭素原子並びに、Ｎ、Ｏ、及びＳからなる群より選択される１個から４個のヘテロ原子からなり、そして上記で定義される複素環のいずれかがベンゼン環に縮合するあらゆる二環式基を含む、安定な３員から７員単環式又は安定な８員から１１員二環式複素環を表す。この複素環は、安定な構造を生み出すあらゆるヘテロ原子又は炭素原子において結合し得る。縮合複素環系は、炭素環式環を含み得、ただ１つの複素環を含むことが必要である。複素環又は複素環式という用語は、ヘテロアリール部分を含む。このような複素環式要素の例には、これらに限定されるものではないが、アゼピニル、ベンゾイミダゾリル、ベンゾイソキサゾリル、ベンゾフラザニル、ベンゾピラニル、ベンゾチオピラニル、ベンゾフリル、ベンゾチアゾリル、ベンゾチエニル、ベンゾオキサゾリル、クロマニル、シンノリニル、ジヒドロベンゾフリル、ジヒドロベンゾチエニル、ジヒドロベンゾチオピラニル、ジヒドロベンゾチオピラニルスルホン、ジヒドロピロリル、１，３−ジオキソラニル、フリル、イミダゾリジニル、イミダゾリニル、イミダゾリル、インドリニル、インドリル、イソクロマニル、イソインドリニル、イソキノリニル、イソチアゾリジニル、イソチアゾリル、イソチアゾリジニル、モルホリニル、ナフチリジニル、オキサジアゾリル、２−オキソアゼピニル、オキサゾリル、２−オキソピペラジニル、２−オキソピペリジニル、２−オキソピロリジニル、ピペリジル、ピペラジニル、ピリジル、ピラジニル、ピラゾリジニル、ピラゾリル、ピリダジニル、ピリミジニル、ピロリジニル、ピロリル、キナゾリニル、キノリニル、キノキサリニル、テトラヒドロフリル、テトラヒドロイソキノリニル、テトラヒドロキノリニル、チアモルホリニル、チアモルホリニルスルホキシド、チアゾリル、チアゾリニル、チエノフリル、チエノチエニル及びチエニルが含まれる。好ましくは、複素環は、２−アゼピノニル、ベンズイミダゾリル、２−ジアザピノニル、ジヒドロイミダゾリル、ジヒドロピロリル、イミダゾリル、２−イミダゾリジノニル、インドリル、イソキノリニル、モルホリニル、ピペリジル、ピペラジニル、ピリジル、ピロリジニル、２−ピペリジノニル、２−ピリミジノニル、２−ピロリジノニル、キノリニル、テトラヒドロフリル、テトラヒドロイソキノリニル及びチエニルから選択される。
【００３２】
「ヘテロ原子」という用語は、独立の基準で選択されるＯ、Ｓ又はＮを意味する。
【００３３】
「ヘテロアリール」という用語は、少なくとも１個のヘテロ原子、Ｏ、Ｓ又はＮを含有し、炭素又は窒素原子が結合点であり、１個又は２個のさらなる炭素原子が、Ｏ又はＳから選択されるヘテロ原子で場合によっては置換されており、かつ１個から３個のさらなる炭素原子が窒素ヘテロ原子で場合によっては置換されている、５個又は６個の環原子を有する単環式芳香族炭化水素基、又は８から１０原子を有する二環式芳香族基を意味し、該ヘテロアリール基は、本明細書中で述べられているように場合によっては置換されている。そのような複素環式要素の例には、これらに限定されるものではないが、ベンズイミダゾリル、ベンズイソキサゾリル、ベンゾフラザニル、ベンゾピラニル、ベンゾチオピラニル、ベンゾフリル、ベンゾチアゾリル、ベンゾチエニル、ベンズオキサゾリル、クロマニル、シンノリニル、ジヒドロベンゾフリル、ジヒドロベンゾチエニル、ジヒドロベンゾチオピラニル、ジヒドロベンゾチオピラニルスルホン、フリル、イミダゾリル、インドリニル、インドリル、イソクロマニル、イソインドリニル、イソキノリニル、イソチアゾリル、ナフチリジニル、オキサジアゾリル、ピリジル、ピラジニル、ピラゾリル、ピリダジニル、ピリミジニル、ピロリル、キナゾリニル、キノリニル、キノキサリニル、テトラヒドロイソキノリニル、テトラヒドロキノリニル、チアゾリル、チエノフリル、チエノチエニル、チエニル及びトリアゾリルが含まれる。さらなる窒素原子が第１の窒素及び酸素又はイオウと共に存在し、例えば、チアジアゾールをもたらし得る。
【００３４】
本発明は、高眼圧又は緑内障の治療を必要とする患者に、式Ｉの化合物のうちの１つを単独で、又は次の有効成分、すなわち、抗β−アドレナリン作動薬、例えば、チモロール、ベタキソロール、レボベタキソロール、カルテオロール、レボブノロール、副交感神経作動薬、例えば、エピネフリン、アイオピジン、ブリモニジン、クロニジン、パラ−アミノクロニジン、炭酸脱水酵素阻害薬、例えば、ドルゾラミド、アセタゾラミド、メタゾラミド又はブリンゾラミド、ＥＰ４アゴニスト（ＷＯ０２／２４６４７、ＷＯ０２／４２２６８、ＥＰ１１１４８１６、ＷＯ０１／４６１４０、ＰＣＴ出願番号ＣＡ２００４０００４７１及びＷＯ０１／７２２６８で開示されているようなもの。）、プロスタグランジン、例えば、ラタノプロスト、トラバプロスト、ウノプロストン、レスキュラ、Ｓ１０３３（米国特許第５，８８９，０５２号；第５，２９６，５０４号；第５，４２２，３６８号及び第５，１５１，４４４号に記載の化合物）又は降圧性脂質、例えば、ルミガン及び、米国特許第５，３５２，７０８号に記載の化合物など；米国特許第４，６９０，９３１号で開示されている神経保護剤、とりわけ、メマンチンを含む、ＷＯ９４／１３２７５に記載のエリプロジル及びＲ−エリプロジル；ＰＣＴ／ＵＳ００／３１２４７に記載の５−ＨＴ２受容体のアゴニスト、とりわけ、フマル酸１−（２−アミノプロピル）−３−メチル−１Ｈ−イミダゾール−６−オール及び２−（３−クロロ−６−メトキシ−インダゾール−１−イル）−１−メチル−エチルアミン又はそれらの混合物の１又は複数と組合せて投与することによる、高眼圧又は緑内障治療の組成物及び方法にも関する。降圧性脂質（基本プロスタグランジン構造のα鎖連結上のカルボン酸基が電気化学的に中性の置換基で置換されている。）の例は、カルボン酸基がＣ１−６アルコキシ基、例えば、ＯＣＨ３（ＰＧＦ２ａ  １−ＯＣＨ３）又はヒドロキシ基（ＰＧＦ２ａ  １−ＯＨ）で置換されているものである。
【００３５】
好ましいカリウムチャネルブロッカーは、カルシウム活性化カリウムチャネルブロッカーである。より好ましいカリウムチャネルブロッカーは、高コンダクタンスのカルシウム活性化カリウム（Ｍａｘｉ−Ｋ）チャネルブロッカーである。Ｍａｘｉ−Ｋチャネルは、神経、平滑筋及び上皮組織において一般的であり、膜電位及び細胞内Ｃａ２＋によって開閉するイオンチャネルのファミリーである。
【００３６】
本発明は、ｍａｘｉ−Ｋチャネルが、それが遮断された場合に、正味の溶質及びＨ２Ｏ流出を阻害することによって房水産生を阻害し、それ故にＩＯＰを低下させるという知見に基づく。この知見から、ｍａｘｉ−Ｋチャネルブロッカーが他の眼科的機能不全、例えば、黄斑浮腫及び黄斑変性の治療に有用であることが示唆される。ＩＯＰを低下させることにより網膜及び視神経への血流が促進されることは公知である。したがって、本発明の化合物は、黄斑浮腫及び／又は黄斑変性の治療に有用である。本発明はまた、これらの疾患の治療用の薬物の製造のための式Ｉの化合物の使用にも関する。
【００３７】
ＩＯＰを低下させるｍａｘｉ−Ｋチャネルブロッカーは、神経保護効果を与えるために有用であると考えられている。これらはまた、ＩＯＰを低下させることにより、網膜及び視神経乳頭の血流速度を上昇させ、網膜及び視神経の酸素を増加させるために効果的であると考えられており、それらが組み合わされると視神経の健康状態に有益である。その結果、本発明はさらに、網膜及び視神経乳頭の血流速度を上昇させ、網膜及び視神経の酸素圧を上昇させ、ならびに神経保護効果を与えるか、又はそれらを組み合わせた効果を与える方法に関する。本発明はまた、これらの疾患の治療用の薬物の製造のための式Ｉの化合物の使用にも関する。
【００３８】
市販薬物の中にはカリウムチャネルアンタゴニストとして機能するものが多く存在する。これらのうち最も重要なものには、化合物グリブリド、グリピジド及びトルブタミドが含まれる。これらのカリウムチャネルアンタゴニストは、抗糖尿病薬として有用である。糖尿病を治療するために、本発明の化合物をこれらの化合物の１又は複数と組み合わせ得る。本発明はまた、糖尿病の治療用の薬物の製造のための式Ｉの化合物の使用にも関する。
【００３９】
カリウムチャネルアンタゴニストはまた、クラス３の抗不整脈薬としても、及びヒトにおける急性梗塞の治療にも用いられる。アパミン、イベリオトキシン、カリブドトキシン、ノキシウストキシン、カリオトキシン、デンドロトキシン（類）、肥満細胞脱顆粒（ＭＣＤ）ペプチド及びβ−ブンガロトキシン（β−ＢＴＸ）を含む多くの天然毒素がカリウムチャネルを遮断することが知られている。不整脈を治療するために、本発明の化合物をこれらの化合物の１又は複数と組み合わせ得る。本発明はまた、不整脈の治療用の薬物の製造のための、これらの化合物と組み合わせた式Ｉの化合物の使用にも関する。
【００４０】
うつ病は、神経伝達物質放出の減少に関連する。うつ病の現在の治療には、神経伝達物質取り込みのブロッカー、及び神経伝達物質の寿命を延長させるように作用する神経伝達物質分解に関与する酵素の阻害剤が含まれる。
【００４１】
アルツハイマー病も神経伝達物質放出の低下を特徴とする。抗コリンエステラーゼ剤（例えば、フィソスチグミン（エセリン）及びタクリン（テトラヒドロアミノクリジン））などのコリン作動性増強剤；他の部分にあまり影響を与えずに神経細胞の代謝に影響を与えるヌートロピック（例えば、ピラセタム、オクシラセタム；及び、メシル酸エルゴロイド及びニモジピンを含むカルシウムチャネル遮断薬の混合物など、脳の脈管構造に影響を与える薬物といった３種類のクラスの薬物がアルツハイマー病の治療において研究されている。脳ドーパミン及びノルエピネフリンを増加させるモノアミンオキシダーゼＢ阻害剤であるセレジリンは、報告によると、一部のアルツハイマー患者において穏やかな改善をもたらす。アルミニウムキレート剤は、アルツハイマー病がアルミニウム毒性によるものであると考える人々が関心を寄せている。神経安定薬及び抗不安薬を含む行動に影響を与える薬物が使用されている。抗不安薬は、作用の穏やかな精神安定剤であるが、神経安定薬よりも効果が少ない。本発明は、カリウムチャネルアンタゴニストとして有用な新規化合物に関する。本発明はまた、うつ病及びアルツハイマー病の治療用の薬物の製造のための式Ｉの化合物の使用にも関する。
【００４２】
本発明の化合物は、アルツハイマー病の治療において、抗コリンエステラーゼ剤、例えば、フィソスチグミン（エセリン）及びタクリン（テトラヒドロアミノクリジン）、ヌートロピック、例えば、ピラセタム、オキシラセタム、メシル酸エルゴロイド、選択的カルシウムチャネルブロッカー、例えば、ニモジピン、又はモノアミンオキシダーゼＢ阻害剤、例えば、セレギリンと組み合わせることができる。本発明の化合物はまた、不整脈の治療において、アパミン、イベリオトキシン、カリブドトキシン、ノキシウストキシン、カリオトキシン、デンドロトキシン（類）、肥満細胞脱顆粒性（ＭＣＤ）ペプチド、β−ブンガロトキシン（β−ＢＴＸ）又はそれらの組合せと組み合わせることができる。本発明の化合物はさらに、糖尿病を治療するために、グリブリド、グリピジド、トルブタミド又はそれらの組合せと組み合わせることができる。
【００４３】
本明細書における実施例は請求される発明を説明するものであり、それを限定するものではない。請求される各化合物はカリウムチャネルアンタゴニストであり、したがって、神経伝達物質放出を最大にするために細胞を脱分極状態に維持することが望ましい、既述の神経学的障害において有用である。有効なカリウムチャネル遮断を達成するようにヒトを含む哺乳動物に投与することができる組成物を生成させるために、本発明において生成される化合物を、適切かつ公知の医薬適合性の賦形剤と容易に組み合わせる。
【００４４】
医薬において用いるため、式Ｉの化合物の塩は医薬適合性の塩である。しかし、他の塩は、本発明による化合物又はそれらの医薬適合性の塩の調製において有用であり得る。本発明の化合物が酸性である場合、適切な「医薬適合性の塩」は、無機塩基及び有機塩基を含む医薬適合性の非毒性塩基から調製される塩を指す。無機塩基から誘導される塩には、アルミニウム、アンモニウム、カルシウム、銅、第二鉄、第一鉄、リチウム、マグネシウム、マンガン塩、マンガン、カリウム、ナトリウム、亜鉛などが含まれる。特に好ましいものは、アンモニウム、カルシウム、マグネシウム、カリウム及びナトリウム塩である。医薬適合性の有機非毒性塩基から誘導される塩には、一級、二級及び三級アミン、天然置換アミンを含む置換アミン、環状アミン及び塩基性イオン交換樹脂、例えば、アルギニン、ベタイン、カフェイン、コリン、Ｎ，Ｎ１−ジベンジルエチレンジアミン、ジエチルアミン、２−ジエチルアミノエタノール、２−ジメチルアミノエタノール、エタノールアミン、エチレンジアミン、Ｎ−エチルモルホリン、Ｎ−エチルピペリジン、グルカミン、グルコサミン、ヒスチジン、ヒドラバミン、イソプロピルアミン、リジン、メチルグルカミン、モルホリン、ピペラジン、ピペリジン、ポリアミン樹脂、プロカイン、プリン、テオブロミン、トリエチルアミン、トリメチルアミン、トリプロピルアミン、トロメタミンなどの塩が含まれる。好ましい医薬適合性の塩は、ナトリウム塩又はカリウム塩である。しかし、調製中にその塩の単離を促進するために、医薬適合性であるか否かにかかわらず、選択した溶媒中でより溶解性の低い塩が好ましいものであり得る。
【００４５】
本発明の化合物が塩基性である場合、塩は無機及び有機酸を含む医薬適合性の非毒性酸から調製し得る。そのような酸には、酢酸、ベンゼンスルホン酸、安息香酸、カンファスルホン酸、クエン酸、エタンスルホン酸、フマル酸、グルコン酸、グルタミン酸、臭化水素酸、塩酸、イセチオン酸、乳酸、マレイン酸、リンゴ酸、マンデル酸、メタンスルホン酸、粘液酸、硝酸、パモ酸、パントテン酸、リン酸、コハク酸、硫酸、酒石酸、ｐ−トルエンスルホン酸などが含まれる。特に好ましいものは、クエン酸、臭化水素酸、塩酸、マレイン酸、リン酸、硫酸及び酒石酸である。
【００４６】
上述の医薬適合性の塩及び他の典型的な医薬適合性の塩の調製は、Ｂｅｒｇら、“Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｓａｌｔｓ，”Ｊ．Ｐｈａｒｍ．Ｓｃｉ．，１９７７：６６：１−１９によって十分に説明されている。
【００４７】
インビボ加水分解性のエステルは、親化合物を生成させるためにヒトの体内で加水分解される医薬適合性のエステルである。このようなエステルは、例えば、試験動物に試験化合物を静脈内投与し、続いて試験動物の体液を調べることにより同定することができる。
【００４８】
本明細書中で用いられる場合、「組成物」という用語は、特定の成分を特定の量含有する生成物、ならびに、特定の量の特定の成分の組合せから、直接又は間接的に得られるあらゆる生成物を包含することが意図される。
【００４９】
本発明による化合物をヒト被験者に投与する場合、１日投与量は、通常、処方する医師により、一般には個々の患者の年齢、体重、性別及び応答、ならびに、患者の症状の重症度に従って変化する投与量をもって決定される。
【００５０】
用いられるｍａｘｉ−Ｋブロッカーは、治療上有効な量で、静脈内、皮下、局所、経皮、非経口又は当業者に公知の他のあらゆる方法で投与することができる。
【００５１】
眼用医薬組成物が、溶液、懸濁液、軟膏、クリームの形態で、又は固形挿入物として、眼への局所投与に好ましく適応させられる。この化合物の眼用処方には、０．０１ｐｐｍから１％、特には、０．１ｐｐｍから１％の医薬が含有され得る。その用量が眼内圧の低下、緑内障の治療、血流速度上昇又は酸素圧増加において有効であるならば、より高い用量、例えば約１０％、又はより低い用量を用いることができる。１回量では、化合物  ０．１ｎｇから５０００μｇ、好ましくは１ｎｇから５００μｇ、特には１０ｎｇから１００μｇをヒトの眼に適用し得る。
【００５２】
本化合物を含有する医薬調製物は、非毒性医薬有機担体又は非毒性医薬無機担体と都合よく混合し得る。医薬適合性の担体の典型は、例えば、水、水及び水混和性溶媒、例えば、低級アルカノール又はアルアルカノールの混合液、植物油、ポリアルキレングリコール、石油ベースのゼリー、エチルセルロース、オレイン酸エチル、カルボキシメチル−セルロース、ポリビニルピロリドン、ミリスチン酸イソプロピル及び他の従来用いられる許容可能な担体である。医薬調製品はまた、非毒性補助物質、例えば、乳化剤、保存剤、湿潤剤、増粘剤など、例えば、ポリエチレングリコール２００、３００、４００及び６００、カルボワックス１，０００、１，５００、４，０００、６，０００及び１０，０００、抗菌性化合物、例えば、四級アンモニウム化合物、冷滅菌特性を有することが公知であり、かつ使用しても有害ではないフェニル水銀塩、チメロサール、メチル及びプロピルパラベン、ベンジルアルコール、フェニルエタノール、緩衝性成分、例えば、ホウ酸ナトリウム、酢酸ナトリウム、グルコン酸緩衝液及び他の従来の成分、例えば、ソルビタンモノラウレート、トリエタノールアミン、オレイン酸塩、ポリオキシエチレンソルビタンモノパルミチレート、ジオクチルナトリウムスルホスクシネート、モノチオグリセロール、チオソルビトール、エチレンジアミン四酢酸などを含み得る。加えて、適切な眼用ビヒクルをこの目的のための担体媒体として用いることができ、これには従来のリン酸緩衝液ビヒクル系、等張性ホウ酸ビヒクル、等張性塩化ナトリウムビヒクル、等張性ホウ酸ナトリウムビヒクルなどが含まれる。医薬調製品はまた、微粒子処方物の形態でもあり得る。医薬調製品はまた、固体挿入物の形態でもあり得る。例えば、固体水溶性ポリマーを本医薬品の担体として用い得る。挿入物の形成に用いられるポリマーは、あらゆる水溶性の非毒性ポリマー、例えば、セルロース誘導体、例えば、メチルセルロース、ナトリウムカルボキシメチルセルロース、（ヒドロキシ低級アルキルセルロース）、ヒドロキシエチルセルロース、ヒドロキシプロピルセルロース、ヒドロキシプロピルメチルセルロース；アクリレート、例えば、ポリアクリル酸塩、エチルアクリレート、ポリアクチルアミド；天然産物、例えば、ゼラチン、アルギン酸塩、ペクチン、トラガカント、カラヤ、コンドルス（ｃｈｏｎｄｒｕｓ）、寒天、アラビアゴム；デンプン誘導体、例えば、酢酸デンプン、ヒドロキシメチルデンプンエーテル、ヒドロキシプロピルデンプン、ならびに、他の合成誘導体、例えば、ポリビニルアルコール、ポリビニルピロリドン、ポリビニルメチルエーテル、ポリエチレンオキシド、中性化カルボポール及びキサンタンガム、ジェランガム及び該ポリマーの混合物であり得る。
【００５３】
本発明の処方物の投与に適する被検体には、霊長類、ヒト及び他の動物、特には、ヒト及びペット動物や家畜、例えば、ネコ及びイヌが含まれる。
【００５４】
医薬調製品は、非毒性補助物質、例えば、使用しても有害ではない抗菌性化合物、例えば、チメロサール、塩化ベンズアルコニウム、メチル及びプロピルパラベン、臭化ベンジルドデシニウム、ベンジルアルコール又はフェニルエタノール；緩衝性成分、例えば、塩化ナトリウム、ホウ酸ナトリウム、酢酸ナトリウム、クエン酸ナトリウム又はグルコン酸緩衝液；及び他の従来の成分、例えば、ソルビタンモノラウレート、トリエタノールアミン、ポリオキシエチレンソルビタンモノパルミチレート、エチレンジアミン四酢酸などを含み得る。
【００５５】
眼用溶液又は懸濁液は、眼内の許容し得るＩＯＰレベルを維持することが必要となるたびに投与し得る。哺乳動物の眼への投与は１日約１回又は２回であることが意図される。
【００５６】
局所眼投与については、併用療法の場合において、本発明の新規処方物は、単位投与量が、有効成分の治療上有効量、又は、併用療法の場合には、その倍数を含有するように配合された、溶液、ゲル、軟膏、懸濁液又は固体挿入物の形態をとり得る。
【００５７】
実例として与える次に挙げる実施例は、本発明の例証である。
【００５８】
実施例で用いる用語の定義は以下の通りである：
ＳＭ−出発物質、
ＤＭＳＯ−ジメチルスルホキシド、
ＴＬＣ−薄層クロマトグラフィー、
ＳＧＣ−シリカゲルクロマトグラフィー、
ＰｈＭｇＢｒ−フェニル臭化マグネシウム、
ｈ＝ｈｒ＝時間、
ＴＨＦ−テトラヒドロフラン、
ＤＭＦ−ジメチルホルムアミド、
ｍｉｎ−分、
ＬＣ／ＭＳ−液体クロマトグラフィー／マススペクトロメトリー（質量分析）、
ＨＰＬＣ−高速液体クロマトグラフィー、
ＰｙＢＯＰ−ベンゾトリアゾール−１−イルオキシトリス−（ジメチルアミノ）ホスホニウムヘキサフルオロホスフェート、
ｅｑｕｉｖ＝ｅｑ＝等量、
ＮＢＳ−Ｎ−ブロモスクシンアミド及び
ＡＩＢＮ−２，２’−アゾビスイソブチロニトリル。
【００５９】
スキーム１から５に従い、適切な場合には改変を行い、本発明の化合物を調製することができる。
【００６０】
【化９】
2007504233.tif 000007
【００６１】
【化１０】
2007504233.tif 000008
【００６２】
スキーム１及び２において、ニトロアニソールは、ＮＢＳ、ＡＩＢＮ及び過酸化ベンゾイルを用いて臭素化する。シアン化カリウムを用いたブロモニトロアニソールの処理により、シアノニトロアニソールを得た。アミンへのニトロ基の転換は、水素添加により遂行する。次に、そのアミンを亜硝酸ナトリウム及びＨＣｌで処理し、インダゾール環を得る。この反応において、アニリン部分のニトロ化によりジアゾニウムが生成したらすぐに、酸性シアン化ベンジルにより分子内にそれを捕捉する。得られた誘導体の互変異性化により、インダゾール核を得る。ニトリルをグリニャールで処理し、続いて得られたイミノマグネシウム錯体を加水分解し、所望するアルキル／アリールケトンを得る。
【００６３】
【化１１】
2007504233.tif 000009
【００６４】
【化１２】
2007504233.tif 000010
【００６５】
【化１３】
2007504233.tif 000011
【００６６】
（調製実施例１）
【００６７】
【化１４】
2007504233.tif 000012
【００６８】
５００ｍＬのフラスコに、ＮａＨ  ３３６ｍｍｏｌ（１３．４４ｇ；６０％）を入れた。アルゴン下で、ＤＭＳＯ  １５０ｍＬを添加し、続いて５℃でシアン酢酸エチル  ３２ｍＬ（２．２等量；３５２ｍｍｏｌ）を滴下添加した。全て添加した後、その反応系を室温まで１時間にわたり温めた。粉末として出発ニトロベンゼン誘導体  ３０ｇを添加（１６０ｍｍｏｌ）した。その反応混合物を密閉系中で９０℃にて８時間加熱した。酸性化及び標準的処理により、未精製の油状残渣を得て、それをシリカゲルカラムで精製し、所望する結晶性生成物３９ｇを得て、それを脱炭酸し、次のようにベンジルニトリルを得た。上記で得たＳＭ  ３８ｇを１Ｎ  炭酸ナトリウム  ４００ｍＬに溶解した。均一溶液をｒｔにて２日間撹拌した。ＴＬＣ分析により、反応の完了が示された。その反応混合物を酸性化し、酢酸エチルで抽出（１００ｍＬｘ４）した。合わせた有機相を硫酸ナトリウムで乾燥させ、濃縮し、残渣をＳＧＣに供し、所望する生成物を得た。
【００６９】
１Ｈ  ＮＭＲ  ＣＤＣＬ３：７．７２（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝３Ｈｚ）；７．６１（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．５Ｈｚ）；７，２５（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝３及び８．５Ｈｚ）；４．１７（２Ｈ，ｓ）；３．９４（３Ｈ，ｓ）。ＬＣＭＳ［Ｍ＋Ｈ］＝１９３。
【００７０】
（調製実施例２）
【００７１】
【化１５】
2007504233.tif 000013
【００７２】
ベンジルニトリル誘導体  １０ｇをＴＨＦ  ２０ｍＬに溶解し、続いて、メタノール  ５０ｍＬで希釈した。その反応混合物を圧力管に取り、Ｐｄ−Ｃ（１０％  ｗｔ／１０ｍｏｌ  ％）を添加し、その反応混合物に４０ｐｓｉで水素添加した。ＮＯ２基の還元に必要な量の水素を消費した後、その反応を停止させた。ＴＬＣ分析から、スポットからスポットへの転換が示された。その反応混合物をｃｅｌｉｔｅのパッドで濾過し、その濾過液を固体になるまで濃縮し、次の段階で直接使用した。未精製アニリン誘導体（５２ｍｍｏｌを２Ｎ  ＨＣｌ（１５０ｍＬ）中で溶解／懸濁し、５℃に冷却し、続いて水  １０ｍＬ中の亜硝酸ナトリウム  ５．４ｇを添加した。その反応混合物を室温に徐々に温めながら１時間撹拌した。ＴＬＣ分析により、ＳＭが完全に消費され、新しいスポットが形成されたことが示された。その反応混合物を酢酸エチルで抽出し（１００ｍＬｘ４）；有機相を回収し、乾燥させ、濃縮した。その残渣をＳＧＣで精製し、所望する生成物を得た。ＬＣＭＳ［Ｍ＋Ｈ］＝１７４。
【００７３】
（調製実施例３）
【００７４】
【化１６】
2007504233.tif 000014
【００７５】
調製実施例２から得たニトリル（１．５ｇ）をドライＴＨＦ  ２０ｍＬに溶解し、アルゴン下で５℃にてＰｈＭｇＢｒ（ＴＨＦ中１Ｍ）３等量を添加した。その反応混合物を室温にて１時間撹拌した。水及び１Ｎ  ＨＣｌ（１５ｍＬ）を添加することにより、その反応を慎重に不活性化した。不活性化した反応混合物を室温にて１時間撹拌し、次に、酢酸エチルで抽出し（２０ｍＬｘ３）；合わせた有機相を硫酸ナトリウムで乾燥させ、固体残渣になるまで濃縮し、それをトルエンを用いて３回共沸させた。ＬＣＭＳ［Ｍ＋Ｈ］＝２５３。
【００７６】
（調製実施例４）
【００７７】
【化１７】
2007504233.tif 000015
【００７８】
インダゾール  ４．１５ｇを量り取り、２回のトルエン（１００ｍＬ）洗浄で水を共沸させ、ロータリーエバポレーターによりトルエン共沸を遂行した。高真空下で完全に乾燥させ、アルゴンパージを行った。アルゴン下で、４０ｍＬ  ドライＴＨＦ及び９２ｍＬ  ドライエーテル中に溶解した。氷水浴で５℃に冷却した。イソプロピルマグネシウムクロライド  ３等量（ＴＨＦ中の２Ｍ  溶液  ６ｍＬ）を入れ、室温にて０．５時間撹拌した。１Ｎ  ＨＣｌ（２４０ｍＬ）を慎重に加え、１時間撹拌した。ＴＬＣで反応を監視した。ＥｔＯＡｃで抽出し、ロータリーエバポレーターにかけ、所望する生成物を得た。
【００７９】
ＬＣＭＳ［Ｍ＋Ｈ］＝２１９。
【００８０】
（調製実施例５）
【００８１】
【化１８】
2007504233.tif 000016
【００８２】
段階Ａ：
【００８３】
【化１９】
2007504233.tif 000017
【００８４】
酢酸中の二臭化物（２３．２ｇ、実施例１、段階３の副生成物）の溶液に、酢酸ナトリウム（２２．５ｇ）を添加した。その混合物を油浴中に置き、反応が完了するまで数時間還流させた。その混合物を室温に冷却し、次に、氷／水に注ぎ、灰白色の固体として、所望する化合物を得た。その固体を濾過により単離し、窒素雰囲気下で乾燥させた。
【００８５】
１Ｈ  ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）：δ１０．２３（１Ｈ，ｓ）；８．１９（１Ｈ，ｄ）；７．０２（１Ｈ，ｄｄ）；６．９６（１Ｈ，ｄ）；３．９０（３Ｈ，ｓ）。
【００８６】
段階Ｂ：
【００８７】
【化２０】
2007504233.tif 000018
【００８８】
段階Ａからの中間体に、オルトギ酸トリエチル（４０ｍｌ）を添加し、数時間１３０℃に加熱した。得られた混合物を濃縮して乾燥させ、褐色の固体として表題化合物を得た。
【００８９】
１Ｈ  ＮＭＲ（ＤＭＳＯ）：δ１０．０８（１Ｈ，ｓ）；７．９８（１Ｈ，ｄ）；７．２５（１Ｈ，ｄ）；７．０２（１Ｈ，ｄｄ）；６．８１（１Ｈ，ｓ）；３．８２（３Ｈ，ｓ）；３．５２（４Ｈ，ｑ）；１．１１（６Ｈ，ｔ）。
【００９０】
（実施例１）
【００９１】
【化２１】
2007504233.tif 000019
【００９２】
ジ−ｔｅｒｔ−ブチル４−｛［１−（３，３−ジメチル−２−オキソブチル）−６−メトキシ−１−Ｈ−インダゾール−３−イル］カルボニル｝ベンジルホスフェート
段階１
【００９３】
【化２２】
2007504233.tif 000020
【００９４】
エチレングリコール  ４００ｍＬ中のフルオロ−アセトフェノン  １００ｇを室温にてヒドラジン（０．６２４ｍｏｌ、２０ｇ）とともに４時間撹拌し、その後、その反応混合物を１５０℃に４８時間加熱した。ＴＬＣ分析により、反応が完了したことが示された。その反応混合物をジクロロメタンと食塩水とに分配した。有機相を硫酸ナトリウムで乾燥させ、固体になるまで蒸発させた。ヘキサン／ジクロロメタンから再結晶化させ、インダゾールを得た。
【００９５】
１Ｈ  ＮＭＲ（ＣＤＣＬ３）：７．５（１Ｈ，ｄ，７．５Ｈｚ）；６．８（２Ｈ，ｍ）；３．８（３Ｈ，ｓ）；２．５５（３Ｈ，ｓ）ＬＣＭＳ［Ｍ＋Ｈ］＝１６３。
【００９６】
段階２
【００９７】
【化２３】
2007504233.tif 000021
【００９８】
６−メトキシ−３−メチル−１−Ｈ  ｔｅｒｔ−ブチル−６−メトキシ−３−メチル−インダゾール１−インダゾール−カルボキシレート
トリエチルアミン１．１等量を含有するＭｅＣＮ  １Ｌに、インダゾール  ７８ｇを溶解し、ＤＭＡＰ  ０．２等量を−５℃に冷却し；続いて、ＭｅＣＮ  ２００ｍＬ中のＢｏｃ２Ｏ（１．１等量）をゆっくりと添加した。ｒｔでその反応物を２時間撹拌した後、その反応混合物を油状になるまで蒸発させ、それをＥｔＯＡｃと食塩水との間で分配し、硫酸ナトリウムで乾燥させ、蒸発させた。その残渣を短いＳＧＣに添加し、ヘキサン中の１５％  ＥｔＯＡｃで溶出した。蒸発させ、生成物を得た。
【００９９】
１Ｈ  ＮＭＲ（ＣＤＣＬ３）：７．６（１Ｈ，ｂｓ）；７．４２（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝７．５Ｈｚ）；６．８５（１Ｈ，ｄｄ）；３．８（３Ｈ，ｓ）；２．５（３Ｈ，ｓ）；１．７（９Ｈ，ｓ）。
【０１００】
ＬＣＭＳ［Ｍ＋Ｈ］＝２６３。
【０１０１】
段階３
【０１０２】
【化２４】
2007504233.tif 000022
【０１０３】
インダゾール  １００ｇをＣＣｌ４  ６００ｍＬに溶解し、続いて、ＮＢＳ  １．１等量及びＢｚ２Ｏ  ０．２等量を添加した。反応混合物をアルゴンで真空パージし、太陽灯からの光の存在下で５時間還流させた。反応混合物をＳＧのパッドで濾過し、濃縮した。残った油状物質を短いＳＧＣで精製した。純粋な臭化物  ８５ｇを得た。混合した分画から、ジブロモ誘導体を得た。
【０１０４】
一臭化物：１Ｈ  ＮＭＲ（ＣＤＣＬ３）：７．７（１Ｈ，ｄ，７．５Ｈｚ）；７．６（１Ｈ，ｂｓ）；６．９５（１Ｈ，ｄｄ）；４．７（２Ｈ，ｓ）；３．９（３Ｈ，ｓ）；１．７（９Ｈ，ｓ）；
二臭化物：１Ｈ  ＮＭＲ（ＣＤＣＬ３）：８．０５（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝７．５Ｈｚ）；７．６（１Ｈ，ｂｓ）；７．０（１Ｈ，ｄｄ）；６．８５（１Ｈ，ｓ）；３．９（３Ｈ，ｓ）；１．７（９Ｈ，ｓ）；
段階４
【０１０５】
【化２５】
2007504233.tif 000023
【０１０６】
３−（ブロモメチル）−６−メトキシ−ｔ−ブチル−３−ホルミル−６−メトキシ−１−Ｈ−インダゾール  １−Ｈ−インダゾール−１−カルボキシレート
臭化物  ５ｇをＤＭＳＯ  １０ｍＬに溶解し、０℃に冷却し、続いて、ＴＭＡＮＯ（トリメチルアミンＮ−オキシド）２．５等量を添加した。反応物を０．５時間撹拌し、次に、標準的処理及びＳＧパッドの濾過を行い、定量的に所望する生成物を得た。ＬＣＭＳ［Ｍ＋Ｈ］＝２７７。
【０１０７】
１Ｈ  ＮＭＲ（ＣＤＣＬ３）：１０．２（１Ｈ，ｓ）；８．１（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝７．５Ｈｚ）；７．６（１Ｈ，ｂｓ）；７．０（１Ｈ，ｄｄ）；３．９（３Ｈ，ｓ）；１．７（９Ｈ，ｓ）；
段階５
【０１０８】
【化２６】
2007504233.tif 000024
【０１０９】
高真空下でガラス製品を火力乾燥した。そのフラスコ中の純粋なヨード−ベンジルアルコール誘導体（３．６ｇ、１０ｍｍｏｌ）に、イソプロピルＭｇＣｌ（５ｍＬ、２Ｍ溶液）をゆっくりと添加した。ｒｔにて２時間撹拌した後、１５ｍＬ  ＴＨＦ中のインダゾール誘導体（１．１ｇ、４ｍｍｏｌ）を添加した。その反応混合物をｒｔにて２時間撹拌した。ＬＣ−ＭＳにより、反応完了が示された。その反応混合物を３０ｍＬ  ＮＨ４Ｃｌ飽和溶液に注ぎ、続いて、４０ｍＬ  エーテルを添加した。その有機層を分離し、水層をエーテル（４０ｍＬ）により抽出した。合わせた有機層をＫ２ＣＯ３飽和溶液（２ｘ３０ｍＬ）、水（４０ｍＬ）及び食塩水（２０ｍＬ）で洗浄した。溶媒を除去し、その残渣をさらに精製せずに次の段階の反応に使用した。ＬＣＭＳ［Ｍ＋Ｈ］＝４９９。
【０１１０】
段階６及び７
【０１１１】
【化２７】
2007504233.tif 000025
【０１１２】
２０ｍＬ  ジクロロメタン中のインダゾール（未精製、段階５より）の溶液に、５ｇ  ｃｅｌｉｔｅ及びＰＣＣ（ＭＷ  ２１５．５６、〜２等量）４．３ｇを添加した。その反応混合物をｒｔにて２時間撹拌した。ＬＣ−ＭＳにより、反応が完了したことが示された。ＬＣＭＳ［Ｍ＋Ｈ］＝４９７。その反応混合物を濾過した。溶媒を除去し、残渣を１０ｍＬ  ＭｅＯＨに溶解し、２０ｍＬ  ２Ｎ  ＨＣｌを添加した。ｒｔで１時間撹拌した後、ＬＣＭＳ及びＴＬＣ分析により、反応が完了したことが示された。その反応混合物をＥｔＯＡｃで抽出（２ｘ３０ｍＬ）した。溶媒を除去し、残渣をさらに精製せずに次の段階の反応に使用した。ＬＣＭＳ［Ｍ＋Ｈ］＝２８３。
【０１１３】
段階８
【０１１４】
【化２８】
2007504233.tif 000026
【０１１５】
１５ｍＬ  アセトン中のインダゾール（段階７からの３４２ｍｇ  未精製生成物、〜１０ｍｍｏｌ）の溶液に、Ｋ２ＣＯ３  １．５ｇ及び１．５ｍＬ  ブロモピナコロン（Ｍｗ  １７９．０６、ｄ１．３２６、２．０ｇ、１１ｍｍｏｌ）を添加した。その反応混合物を８０℃にて密封試験管中で２時間撹拌した。塩を濾別した後、溶媒を除去し、残渣をＨＰＬＣで精製し、白色の固体生成物を得た。
【０１１６】
１Ｈ  ＮＭＲ（ＣＤＣＬ３）＝８．３（３Ｈ，ｍ）；７．５（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝７．５Ｈｚ）；７．０５（１Ｈ，ｄｄ）；７．６（１Ｈ，ｂｓ）；５．４（２Ｈ，ｓ）；４．８（２Ｈ，ｂｓ）；３．９（３Ｈ，ｓ）；１．３８（９Ｈ，ｓ）。
【０１１７】
ＬＣＭＳ［Ｍ＋Ｈ］＝３８１。
【０１１８】
段階９及び１０
【０１１９】
【化２９】
2007504233.tif 000027
【０１２０】
ジ−ｔ−ブチル−４−｛［１−（３，３−ジメチル−２−オキソブチル）−６−メトキシ−１−Ｈ−インダゾール−３−イル］カルボニル｝ベンジルホスフェート
ＣＨＣｌ３  ２０ｍＬ中のインダゾール−ベンジルアルコール誘導体（１．０２ｇ、２．６８ｍｍｏｌ）の溶液に、ＣＨ３ＣＮ中の０.４５Ｍ  １Ｈ−テトラゾール  １５ｍＬを添加し、続いて、ジ−ｔｅｒｔ−ブチルＮ，Ｎ−ジエチルホスホールアミダイト（ｄｉｅｔｈｙｌｐｈｏｓｐｈｏｒａｍｉｄｉｔｅ）（０．８ｍＬ、ｄ０．８９６、Ｍｗ  ２４９．３４、２．８７ｍｍｏｌ、１．１等量）を添加した。３０分間の撹拌後、その反応混合物を−４０℃に冷却し、５ｍＬ  ＤＣＭ中のＭＣＰＢＡ（８５％、２ｇ、Ｍｗ  １７２．５７、９．８ｍｍｏｌ）の溶液を添加した。その反応混合物をｒｔに温め、１０分間撹拌した。１０ｍＬ  １０％  ＮａＨＳＯ３溶液を添加し、過剰なＭＣＰＢＡを不活性化した。ｒｔにて１５分間撹拌した。その反応混合物をエーテル及び水で処理した。その有機層を分離し、水で洗浄した。溶媒を除去し、生成物（残渣）をさらに精製せずに、次の段階の反応（実施例２）で使用した。
【０１２１】
（実施例２）
【０１２２】
【化３０】
2007504233.tif 000028
【０１２３】
実施例１の段階１０において得られた未精製生成物に、ＥｔＯＡｃ中のＨＣｌ（０℃にて５分間ＥｔＯＡｃに通したＨＣｌ）を添加し、室温にて４時間撹拌した。溶媒を除去した。その残渣を逆相ＨＰＬＣで精製し、白色の固体生成物として所望する化合物を得た。
【０１２４】
１Ｈ  ＮＭＲ（ＣＤ３ＯＤ）：８．２５（２Ｈ，ｄ，Ｊ＝７．５Ｈｚ）；８．１８（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝７．５Ｈｚ）；７．６（２Ｈ，ｄ，Ｊ＝７．５Ｈｚ）；７．０（１Ｈ，ｄｄ）；６．９（１Ｈ，ｂｓ）；５．６５（２Ｈ，ｓ）；５．１（２Ｈ，ｂｓ）；３．９（３Ｈ，ｓ）；１．３５（９Ｈ，ｓ）；
ＬＣＭＳ［Ｍ＋Ｈ］＝４６０。
【０１２５】
（実施例３）
【０１２６】
【化３１】
2007504233.tif 000029
【０１２７】
１−（３−｛［６−（２−ヒドロキシエトキシ）ピリジン−３−イル］カルボニル−６−メトキシ−１−Ｈ−インダゾール−１−イル）−３，３−ジメチルブタン−２−オン
段階Ａ：
【０１２８】
【化３２】
2007504233.tif 000030
【０１２９】
６−クロロピリジン−３−イル）−６−メトキシ−１−Ｈ−インダゾール−３−イル）−メタノン
ＴＨＦ（１０ｍＬ）中の５−ヨード−２−クロロピリジン（２．５６ｇ、１０．７８ｍｍｏｌ）の溶液に、−７８℃にてｉＰｒＭｇＢｒを滴下添加した。その反応物を１時間撹拌し、その後、ＴＨＦ（５ｍＬ）中の溶液として中間体１（１．７１ｇ、６．１０ｍｍｏｌ）を添加した。２時間後、その反応を１Ｎ  ＮａＯＨで不活性化し、ＥｔＯＡｃで抽出した。合わせた有機層を食塩水で洗浄し、ＭｇＳＯ４で乾燥させ、真空で濃縮した。トルエン（５０ｍＬ）中の未精製生成物の溶液に、ＭｎＯ２（２．１７３ｇ、２５．０ｍｍｏｌ）を添加し、その反応混合物を１３０℃に加熱した。１時間後、その反応が完了し、ｃｅｌｉｔｅのパッドを介して濾過し、真空で濃縮した。未精製生成物をＴＨＦ（１０ｍＬ）中に溶解し、１Ｎ  ＨＣｌ  ４ｍＬを滴下添加した。ＴＬＣ分析により完了したことが示されるまでその反応系をＲＴにて撹拌した。その反応混合物を０℃に冷却し、固体沈殿物を回収した。１Ｈ  ＮＭＲ（ＣＤ３ＯＤ）δ：３．９００（３Ｈ，ｓ），７．０１３（１Ｈ，ｄ），７．０６２（１Ｈ，ｓ），７．６２７（１Ｈ，ｄ），８．６７２（１Ｈ，ｄ），９．３０６（１Ｈ，ｓ）。
【０１３０】
段階Ｂ：
【０１３１】
【化３３】
2007504233.tif 000031
【０１３２】
１−｛３−［６−クロロピリジン−３−イル）カルボニル］−６−メトキシ−１−Ｈ−インダゾール−１−イル）−３，３−ジメチルブタン−２−オン
ＤＭＦ（１４ｍＬ）中の段階Ａからの中間体（１．００ｇ、３.４８ｍｍｏｌ）及びＣｓ２ＣＯ３（３．３９６ｇ、１０．４５ｍｍｏｌ）の溶液に、１−クロロピナコロン（０．６８１ｍＬ、５．２２ｍｍｏｌ）を添加した。４０分後、その反応が完了し、Ｈ２Ｏで不活性化した。その反応混合物をＥｔＯＡｃで抽出し、合わせた有機層をＨ２Ｏ、食塩水で洗浄し、ＭｇＳＯ４で乾燥させ、真空中で濃縮し、所望する生成物を得た。１Ｈ  ＮＭＲ（ＣＤ３ＯＤ）δ：１．３４４（９Ｈ，ｓ），３．８８８（３Ｈ，ｓ），６．９４７（１Ｈ，ｓ），７．０４３（１Ｈ，ｄ），７．６２５（１Ｈ，ｄ），８．２２１（１Ｈ，ｄ），８．６２４（１Ｈ，ｄ），９．２５７（１Ｈ，ｄ）。
【０１３３】
段階Ｃ：
【０１３４】
【化３４】
2007504233.tif 000032
【０１３５】
１−｛３−［６−（２−ヒドロキシエトキシ）ピリジン−３−イル）カルボニル］−６−メトキシ−１−Ｈ−インダゾール−１−イル）−３，３−ジメチルブタン−２−オン
ＮａＨ（鉱油中の６０％  分散液）４０．６ｍｇ（１．０３６ｍｍｏｌ）をヘキサンで３回洗浄し、窒素下で乾燥させた。エチレングリコール（１ｍＬ）をドライＮａＨに添加し、その反応物を６０℃にて２０分間撹拌した。その反応混合物に、段階Ｂからの中間体（１００ｍｇ、０．２５９ｍｍｏｌ）をＴＨＦ（１．５ｍＬ）中の溶液として添加した。その反応物を一晩、６０℃にて撹拌し続けた。完了時に、ＴＨＦを真空中で除去し、ＥｔＯＡｃで希釈し、Ｈ２Ｏ、食塩水で洗浄し、ＭｇＳＯ４で乾燥させ、真空中で濃縮した。シリカゲルクロマトグラフィーを介して未精製残渣を精製した。
【０１３６】
１．３７６（９Ｈ，ｓ），３．８８９（３Ｈ，ｓ），４．０２１（２Ｈ，ｍ），４．６０８（２Ｈ，ｍ），５．４２９（２Ｈ，ｓ），６．５４３（１Ｈ，ｓ），６．２２３（１Ｈ，ｄ），７．０５４（１Ｈ，ｄ），８．３３６（１Ｈ，ｄ），８．５４１（１Ｈ，ｄ），９．３１０（１Ｈ，ｓ）。
【０１３７】
（実施例４）
【０１３８】
【化３５】
2007504233.tif 000033
【０１３９】
２−［（５-｛［１−（３，３−ジメチル−２−オキソブチル−６−メトキシ−１−Ｈ−インダゾール−３−イル）カルボニル｝ピリジン−２−イル）オキシ］エチル  リン酸二水素
ＣＨＣｌ３（５ｍＬ）中の実施例３、段階Ｃからの中間体（１６０ｍｇ、０．３８８ｍｍｏｌ）の溶液に、ＲＴにてテトラゾール（１．２９ｍＬ、０．５８２ｍｍｏｌ、０．４５Ｍ／ＣＨ３ＣＮ）及びジ−ｔｅｒｔ−ブチル  ジエチルホスホールアミダイト（ｄｉｅｔｈｙｌｐｈｏｓｐｈｏｒａｍｉｄｉｔｅ）（０．１２９ｍＬ、０.４６５ｍｍｏｌ）を添加した。０．５時間後に、その反応が完了し、０℃にて過酢酸（０．０７２ｍＬ、０．５８２ｍｍｏｌ）を添加した。その反応混合物を重亜硫酸ナトリウム飽和溶液で不活性化し、ＥｔＯＡｃで希釈し、重炭酸ナトリウム飽和溶液、Ｈ２Ｏ及びＮａＣｌ飽和溶液で洗浄し、ＭｇＳＯ４で乾燥させ、真空中で乾燥するまで蒸発させた。未精製の残渣をＳｉＯ２でクロマトグラフィーにかけた。ＥｔＯＡｃ中のリン酸エステルの溶液を０℃に冷却し、飽和するまでその混合物に９９％  ＨＣｌガスを泡立てて通気した。固体の沈殿物を回収し、ＥｔＯＡｃ／エーテルから再結晶化させ、最終生成物を得た。
【０１４０】
１Ｈ  ＮＭＲ（ＣＤ３ＯＤ）δ：１．３５０（９Ｈ，ｓ），３．８８７（３Ｈ，ｓ），４．３５３（２Ｈ，ｍ），４．６５２（２Ｈ，ｍ），５．６９６（２Ｈ，ｓ），６．９２９（１Ｈ，ｓ），７．０２４（１Ｈ，ｄ），７．０７２（１Ｈ，ｄ），８．１９９（１Ｈ，ｄ），８．６３８（１Ｈ，ｄ），９．２１７（１Ｈ，ｓ）。
【０１４１】
（実施例５）
【０１４２】
【化３６】
2007504233.tif 000034
【０１４３】
１−（３−｛［６−（ヒドロキシメチル）ピリジン−３−イル）カルボニル｝−６−メトキシ−１Ｈ−インダゾール−１−イル）−３，３−ジメチルブタン２−オン
段階Ａ：
【０１４４】
【化３７】
2007504233.tif 000035
【０１４５】
（６−メトキシ−１Ｈ−インダゾール−３−イル）６-メチルピリジン−３−イル）メタノン
ＴＨＦ（１５ｍＬ）中の５−ブロモ−２−メチルピリジン（７３６ｍｇ、４．３１ｍｍｏｌ）の溶液に、−７８℃でｎＢｕＬｉ（２．１５６ｍＬ、５．３９ｍｍｏｌ、ヘキサン中２．５Ｍ）を滴下添加した。この反応物を１時間撹拌し、その後、中間体１（１．００ｇ、３．５９ｍｍｏｌ）をＴＨＦ（５ｍＬ）中の溶液として添加した。出発物質を２時間後に消費し、その反応物を１Ｎ  ＮａＯＨで不活性化し、ＥｔＯＡｃで抽出した。合わせた有機層を食塩水で洗浄し、ＭｇＳＯ４で乾燥させ、真空中で濃縮した。トルエン（２０ｍＬ）中の未精製生成物の溶液にＭｎＯ２（０．４１４ｇ、４．７７ｍｍｏｌ）を添加し、その反応混合物を１３０℃に加熱した。１時間後、その反応が完了し、ｃｅｌｉｔｅのパッドを介して濾過し、真空で濃縮した。その未精製生成物をＴＨＦ中で溶解し、１Ｎ  ＨＣｌ  ４ｍＬを滴下添加した。１時間後、反応混合物を０℃に冷却し、固体沈殿物を回収した。１Ｈ  ＮＭＲ（ＤＭＳＯ）δ：２．５５３（３Ｈ，ｓ），３．８３２（３Ｈ，ｓ），７．０００（１Ｈ，ｄ），７．０８９（１Ｈ，ｓ），７．４５１（１Ｈ，ｄ），８．１００（１Ｈ，ｄ），８．４３０（１Ｈ，ｄ），９．２２０（１Ｈ，ｓ）。
【０１４６】
段階Ｂ：
【０１４７】
【化３８】
2007504233.tif 000036
【０１４８】
１−｛６−メトキシ−３−［６−メチルピリジン−３−イル）カルボニル］−１Ｈ−インダゾール−１−イル）−３，３−ジメチルブタン−２−オン
実施例３の段階Ｂで述べたようにしてこの化合物を調製した。
【０１４９】
１Ｈ  ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）δ：１．３８（９Ｈ，ｓ），２．６５（３Ｈ，ｓ），３．８５（３Ｈ，ｓ），５．２２（２Ｈ，ｓ），６．５６（１Ｈ，ｓ），７．０５（１Ｈ，ｄ），７．３２（１Ｈ，ｄ），８．３４（１Ｈ，ｄ），８．４５（１Ｈ，ｄ），９．５０（１Ｈ，ｓ）。
【０１５０】
段階Ｃ：
【０１５１】
【化３９】
2007504233.tif 000037
【０１５２】
１−（３−｛［６−（ヒドロキシメチル）ピリジン−３−イル）カルボニル］−１Ｈ−インダゾール−１−イル）−３，３−ジメチルブタン−２−オン
ＣＨ２Ｃｌ２中の段階Ｂからの中間体（７４ｍｇ、０．２０２ｍｍｏｌ）の撹拌溶液に、０℃にてＭＣＰＢＡ（６７ｍｇ、０．３０３ｍｍｏｌ）を添加した。１．５時間後に、ＴＬＣにより反応が完了したことが示され、その反応混合物を真空中で濃縮した。未精製残渣をＥｔＯＡｃに溶解し、重亜硫酸ナトリウム飽和溶液、Ｈ２Ｏ、食塩水で洗浄し、ＭｇＳＯ４で乾燥させ、真空中で濃縮した。シリカゲルクロマトグラフィーを介して精製した。Ｎ−オキシドをＣＨ２Ｃｌ２に溶解し、０℃にてＴＦＡＡを滴下添加した。２時間後、その反応物を真空中で濃縮し、シリカゲルクロマトグラフィーを介して精製した。
【０１５３】
１Ｈ  ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）δ：１．３７３（９Ｈ，ｓ），３．８９８（３Ｈ，ｓ），４．８８２（２Ｈ，ｓ），５．４２８（２Ｈ，ｓ），６．５６４（１Ｈ，ｓ），７．０６６（１Ｈ，ｄ），７．４２９（１Ｈ，ｄ），８．３５２（１Ｈ，ｄ），８．５８１（１Ｈ，ｄ），９．５４１（１Ｈ，ｓ）。
【０１５４】
（実施例６）
【０１５５】
【化４０】
2007504233.tif 000038
【０１５６】
（５−｛［１−３，３−ジメチル−２−オキソブチル）−６−メトキシ−１Ｈ−インダゾール−３−イル］カルボニル｝ピリジン−２−イル）メチル  リン酸二水素
実施例４で述べたようにしてこの化合物を調製し、生成物をＥｔＯＡｃ及びヘキサンから再結晶化させた。
【０１５７】
１Ｈ  ＮＭＲ（ＣＤ３ＯＤ）δ：１．３４０（９Ｈ，ｓ），３．８８４（３Ｈ，ｓ），５．２３５（２Ｈ，ｄ），５．６８７（２Ｈ，ｓ），６．９３７（１Ｈ，ｓ），７．０３６（１Ｈ，ｄ），７．８４０（１Ｈ，ｄ），８．２１０（１Ｈ，ｄ），８．７９７（１Ｈ，ｄ），９．４３０（１Ｈ，ｓ）。
【０１５８】
（実施例７）
【０１５９】
【化４１】
2007504233.tif 000039
【０１６０】
１−（３−｛［６−（１，１−ジフルオロ−２−ヒドロキシエチル）ピリジン−３−イル］カルボニル｝−６−メトキシ−１−インダゾール−１−イル）−３，３−ジメチルブタン−２−オン
段階Ａ：
【０１６１】
【化４２】
2007504233.tif 000040
【０１６２】
エタノール中の２−ピリジン酢酸、５−ブロモ−α，α−ジフルオロ−、エチルエステル（１３．４ｇ；“Ｅｒｏ，Ｈ．；Ｈａｎｅｋｏ，Ｙ．；Ｓａｋａｍｏｔｏ，Ｔ．Ｃｈｅｍ  Ｐｈａｒｍ．Ｂｕｌｌ．２０００，４８，９８２．”に従い調製。）の溶液に、０℃にて水素化ホウ素ナトリウム（２．３ｇ）を分割添加した。０℃にて１時間撹拌した後、その混合物を水に注ぎ、酢酸エチルで抽出した。その有機層を１Ｎ  ＮａＯＨ水溶液、食塩水で洗浄し、乾燥させ（ＭｇＳＯ４）、減圧下で濃縮し、未精製アルコールを得た。塩化メチレン中のその未精製アルコールに、０℃にてイミダゾール（４．１ｇ）及びＴＢＳ−Ｃｌ（８．３ｇ）を添加した。その混合物を１時間撹拌した。その反応物を０．１Ｎ  ＨＣｌ水溶液に注ぎ、塩化メチレンで抽出した。その有機層を食塩水で洗浄し、乾燥させ（ＭｇＳＯ４）、蒸発させた。その残渣をシリカゲル（１００％  塩化メチレン）で精製し、無色の油状物質として所望する化合物を得た。
【０１６３】
１Ｈ  ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）：δ８．７５（１Ｈ，ｄ）；７．９５（１Ｈ，ｄｄ）；７．５７（１Ｈ，ｄ）；４．２０（２Ｈ，ｔ）；０．８２（９Ｈ，ｓ）；０．０２（６Ｈ，ｓ）。
【０１６４】
段階Ｂ：
【０１６５】
【化４３】
2007504233.tif 000041
【０１６６】
実施例３、段階Ａに対して述べたものと同様の手順により、所望する化合物を調製した。
【０１６７】
１Ｈ  ＮＭＲ（ＤＭＳＯ）：δ９．３５（１Ｈ，ｄ）；８．６５（１Ｈ，ｄｄ）；８．１４（１Ｈ，ｄ）；７．８８（１Ｈ，ｄ）；７．１０（１Ｈ，ｄ）；７．０３（１Ｈ，ｄｄ）；４．０５（２Ｈ，ｔ）；３．８５（３Ｈ，ｓ）。
【０１６８】
ＬＣ−ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＝３３４.２。
【０１６９】
段階Ｃ：
【０１７０】
【化４４】
2007504233.tif 000042
【０１７１】
実施例３、段階Ｂに対して述べたものと同様の手順により、所望する化合物を調製した。この化合物をシリカゲルにより精製（ヘキサン／酢酸エチル＝１／１）し、ヘキサン／酢酸エチルから結晶化させた。
【０１７２】
１Ｈ  ＮＭＲ（ＣＨＣｌ３）：δ９．５３（１Ｈ，ｄ）；８．７１（１Ｈ，ｄｄ）；８．３５（１Ｈ，ｄ）；７．８８（１Ｈ，ｄ）；７．０８（１Ｈ，ｄｄ）；６．５７（１Ｈ，ｄ）；５．４４（２Ｈ，ｓ）；４．３２（２Ｈ，ｔ）；３．９１（３Ｈ，ｓ）；１．３８（９Ｈ，ｓ）。
ＬＣ−ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＝４３２．３。
【０１７３】
（実施例８）
【０１７４】
【化４５】
2007504233.tif 000043
【０１７５】
２−（５−｛［１−（３，３−ジメチル−２−オキソブチル）−６−メトキシ−１Ｈ−インダゾール−３−イル］カルボニル｝ピリジン−２−イル）−２，２−ジフルオロエチル  リン酸二水素
実施例４に述べるようにしてこの化合物を調製した。最終生成物を逆相液体クロマトグラフィー（Ｈ２Ｏ中２０−９０％アセトニトリル）を介して精製した。
【０１７６】
１Ｈ  ＮＭＲ（ＣＤ３ＯＤ）δ：１．３４１（９Ｈ，ｓ），３．８８８（３Ｈ，ｓ），４．５８６（２Ｈ，ｍ），５．７０４（２Ｈ，ｓ），６．９３８（１Ｈ，ｓ），７．０４６（１Ｈ，ｄ），７．８９７（１Ｈ，ｄ），８．２１５（１Ｈ，ｄ），８．７２７（１Ｈ，ｄ），９．４５７（１Ｈ，ｓ）。
【０１７７】
（実施例９）
【０１７８】
【化４６】
2007504233.tif 000044
【０１７９】
２−（５−｛［７−ブロモ−１−（３，３−ジメチル−２−オキソブチル）−６−メトキシ−１Ｈ−インダゾール−３−イル］カルボニル｝ピリジン-２−イル）−２，２−ジフルオロエチル  リン酸二水素
段階Ａ：
【０１８０】
【化４７】
2007504233.tif 000045
【０１８１】
クロロホルム中の実施例７、段階Ｃからの中間体に、０℃にて臭素をゆっくりと添加した。その反応物を０℃にて５分間撹拌し、重亜硫酸ナトリウム溶液に注いだ。その混合物を塩化メチレンで抽出した。有機層をＭｇＳＯ４で乾燥させ、濃縮した。残渣を結晶化（ヘキサン／酢酸エチル）により精製した。
【０１８２】
１Ｈ  ＮＭＲ（ＣＨＣｌ３）：δ９．５１（１Ｈ，ｄ）；８．６９（１Ｈ，ｄｄ）；８．４５（１Ｈ，ｄ）；７．８８（１Ｈ，ｄ）；７．１４（１Ｈ，ｄ）；５．９７（２Ｈ，ｓ）；４．３１（２Ｈ，ｔ）；４．０４（３Ｈ，ｓ）；１．３８（９Ｈ，ｓ）。
【０１８３】
ＬＣ−ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＝５１２．１。
【０１８４】
段階Ｂ：
【０１８５】
【化４８】
2007504233.tif 000046
【０１８６】
実施例４に対して述べたものと同様の手順により、所望する化合物を調製した。この化合物を酢酸エチルから結晶化させた。
【０１８７】
１Ｈ  ＮＭＲ（ＣＤ３ＯＤ）：δ９．４４（１Ｈ，ｄ）；８．７４（１Ｈ，ｄｄ）；８．３９（１Ｈ，ｄ）；７．９２（１Ｈ，ｄ）；７．２８（１Ｈ，ｄ）；６．５７（１Ｈ，ｄ）；６．０８（２Ｈ，ｓ）；４．６１（２Ｈ，ｍ）；４．０１（３Ｈ，ｓ）；１．３３（９Ｈ，ｓ）。
【０１８８】
（実施例１０）
【０１８９】
【化４９】
2007504233.tif 000047
【０１９０】
１−（３−｛［６−（２−ヒドロキシエチル）ピリジン−３−イル］カルボニル｝−６−メトキシ−１Ｈ−インダゾール−１−イル）−３，３−ジメチルブタン−２−オン
段階Ａ：
【０１９１】
【化５０】
2007504233.tif 000048
【０１９２】
トルエン中の２，５−ジブロモピリジン（２．４ｇ）の溶液に、トリブチルアリル  スズ（３．４ｍＬ）及びジクロロビス（トリフェニルホスフィン）パラジウム（０．７ｇ）を窒素雰囲気下で添加した。その混合物を数時間還流させ、減圧下で濃縮した。「ウェットエーテル」で残渣を再溶解し、ＤＢＵ（３ｍＬ）をゆっくりと添加し、混濁した溶液を得た。その混合液をシリカゲルのパッドで濾過し、濃縮した。残渣を塩化メチレン／メタノール＝１／１溶液に溶解し、−７８℃に冷却した。反応混合液が青色になるまで、この溶液にオゾンを泡立てて通気した。その反応物を０℃に温め、水素化ホウ素ナトリウム（０．５ｇ）を分割添加した。０℃にて１時間撹拌した後、その混合物を水に注ぎ、酢酸エチルで抽出した。その有機層を１Ｎ  ＮａＯＨ水溶液、食塩水で洗浄し、乾燥させ（ＭｇＳＯ４）、減圧下で濃縮し、未精製アルコールを得た。このアルコールをシリカゲルにより精製（塩化メチレン／酢酸エチル＝１／１）し、所望するアルコールを得た。塩化メチレン中のアルコールの溶液にイミダゾール（０．４ｇ）及びＴＵＢＳ−Ｃｌ（０．８ｇ）を０℃にて添加した。その混合物を１時間撹拌した。その反応物を０．１Ｎ  ＨＣｌ水溶液に注ぎ、塩化メチレンで抽出した。その有機層を食塩水で洗浄し、乾燥させ（ＭｇＳＯ４）、蒸発させた。残渣をシリカゲルにより精製（１００％塩化メチレン）し、所望する化合物を得た。
【０１９３】
１Ｈ  ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）：δ８．６１（１Ｈ，ｄ）；７．７３（１Ｈ，ｄｄ）；７．１４（１Ｈ，ｄ）；３．９７（２Ｈ，ｔ）；２．９６（２Ｈ，ｔ）；０．８６（９Ｈ，ｓ）；−０．０２（６Ｈ，ｓ）。
【０１９４】
段階Ｂ：
【０１９５】
【化５１】
2007504233.tif 000049
【０１９６】
実施例５、段階Ａ及びＢに対して述べたものと同様の手法により、所望する化合物を調製した。この化合物をシリカゲルにより精製（ヘキサン／酢酸エチル＝１／３）した。
【０１９７】
１Ｈ  ＮＭＲ（ＣＨＣｌ３）：δ９．５３（１Ｈ，ｄ）；８．５４（１Ｈ，ｄｄ）；８．３５（１Ｈ，ｄ）；７．３７（１Ｈ，ｄ）；７．０７（１Ｈ，ｄｄ）；６．５６（１Ｈ，ｄ）；５．４５（２Ｈ，ｓ）；４．１１（２Ｈ，ｔ）；３．９０（３Ｈ，ｓ）；３．１８（２Ｈ，ｔ）；１．３８（９Ｈ，ｓ）。
【０１９８】
ＬＣ−ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＝３９６．２。
【０１９９】
機能的アッセイ
Ａ．Ｍａｘｉ−Ｋチャネル
化合物の活性は以下のアッセイによって定量することもできる。
【０２００】
Ｍａｘｉ−Ｋチャネルの阻害剤の同定は、ＨＥＫ−２９３細胞においてチャネルのα及びβ１サブユニット両方をトランスフェクションした後、及びＨＥＫ−２９３細胞の内在性カリウムコンダクタンスを選択的に排除するカリウムチャネルブロッカーとインキュベーションした後の、発現されたＭａｘｉ−Ｋチャネルの細胞静止電位設定能力に基づく。ｍａｘｉ−Ｋチャネル阻害剤が存在しない状態において、トランスフェクションを行ったＨＥＫ−２９３細胞は、ｍａｘｉ−Ｋチャネルの活動の結果であるＥＫ（−８０ｍＶ）に近い、内部が負である過分極膜電位を示す。ｍａｘｉ−ＫチャネルブロッカーとのインキュベーションによりＭａｘｉ−Ｋチャネルを遮断することにより、細胞の脱分極が起こる。膜電位の変化は、２種類の成分、ドナーであるクマリン（ＣＣ２ＤＭＰＥ）及びアクセプターであるオキサノール（ＤｉＳＢＡＣ２（３））を用いる電圧感受性蛍光共鳴エネルギー移動（ＦＲＥＴ）色素ペアで決定することができる。
【０２０１】
オキサノールは親油性陰イオンであり、膜電位に従って膜全体に分布する。正常条件下で、細胞の内側が外側に対して負である場合、オキサノールは膜の外葉に蓄積し、クマリンの励起によりＦＲＥＴが生じる。膜脱分極を導く条件では、オキサノールは細胞の内部に向かって再分布し、結果として、ＦＲＥＴが減少する。このように、比の変化（ドナー／アクセプター）が膜脱分極の後に増大し、それにより試験化合物がｍａｘｉ−Ｋチャネルを積極的に遮断するか否かが決定される。
【０２０２】
ＨＥＫ−２９３細胞は、Ａｍｅｒｉｃａｎ  Ｔｙｐｅ  Ｃｕｌｔｕｒｅ  Ｃｏｌｌｅｃｔｉｏｎ，１２３０１  Ｐａｒｋｌａｗｎ  Ｄｒｉｖｅ，Ｒｏｃｋｖｉｌｌｅ，Ｍａｒｙｌａｎｄ，２０８５２から、受託番号ＡＴＣＣ  ＣＲＬ−１５７３として得た。この微生物への公共アクセスに関するいかなる制限も、特許の発行時に取消し不能な形で撤廃されるものとする。
【０２０３】
ＨＥＫ−２９３細胞におけるｍａｘｉ−Ｋチャネルのα及びβ１サブユニットのトランスフェクションは以下のように行った：１００ｍｍの組織培養用処理済みシャーレに、シャーレあたり３ｘ１０６細胞の密度でＨＥＫ−２９３細胞をプレーティングし、合計で５枚のシャーレを調製した。１０％ウシ胎仔血清、１ｘＬ−グルタミン、及び１ｘペニシリン／ストレプトマイシンを添加したダルベッコ改変イーグル培地（ＤＭＥＭ）からなる培地中で、３７℃、１０％ＣＯ２にて、細胞を増殖させた。Ｍａｘｉ−Ｋ  ｈα（ｐＣＩｎｅｏ）及びＭａｘｉ−Ｋ  ｈβ１（ｐＩＲＥＳｐｕｒｏ）ＤＮＡをトランスフェクションするために、１５０μｌ  ＦｕＧＥＮＥ６ＴＭを血清非含有／フェノールレッド非含有ＤＭＥＭ  １０ｍＬに滴下添加し、室温で５分間インキュベーションした。次に、そのＦｕＧＥＮＥ６ＴＭ溶液を、各プラスミドＤＮＡ  ２５μｇを含有するＤＮＡ溶液に滴下添加し、室温にて３０分間インキュベーションした。このインキュベーション時間の後、ＦｕＧＥＮＥ６ＴＭ／ＤＮＡ溶液  ２ｍｌを細胞の各プレートに滴下添加し、上記と同じ条件下で２日間、細胞を増殖させた。第２日の最後に、６００μｇ／ｍｌ  Ｇ４１８及び０．７５μｇ／ｍｌピューロマイシンの両者を添加したＤＭＥＭからなる選択培地のもとに細胞を置いた。別々のコロニーが形成されるまで細胞を増殖させた。５個のコロニーを集め、６ウェル組織培養用処理済みシャーレに移した。合計で７５個のコロニーを回収した。コンフルエントの単層が得られるまで細胞を増殖させた。その後、ｍａｘｉ−Ｋチャネルα及びβ１サブユニットが存在するか否かを調べるために、１２５Ｉ−イベリオトキシン−Ｄ１９Ｙ／Ｙ３６Ｆのチャネルへの結合を監視するアッセイを用いて細胞を試験した。次に、ＶＩＰＲ装置で蛍光共鳴エネルギー移動（ＦＲＥＴ）ＡＢＳ技術を用いて、トランスフェクションしたＨＥＫ−２９３細胞の膜電位に対するｍａｘｉ−Ｋチャネルの制御能を監視する機能的アッセイを行い、１２５Ｉ−イベリオトキシン−Ｄ１９Ｙ／Ｙ３６Ｆ結合活性を発現する細胞を評価した。最大のシグナル対ノイズ比を示すコロニーを限界希釈した。このために、約５細胞／ｍｌとなるように細胞を再懸濁し、ウェルあたり約１個の細胞が添加されるように、９６ウェル組織培養用処理済みプレートの個々のウェルに２００μｌを添加した。全部で２枚の９６ウェルプレートを作製した。コンフルエント単層が形成された際に、６ウェル組織培養用処理済みプレートに細胞を移した。全部で６２ウェルを移した。コンフルエント単層が得られた際に、ＦＲＥＴ−機能的アッセイを用いて細胞を試験した。最良のシグナル対ノイズ比を示すトランスフェクション細胞を同定し、次の機能的アッセイで用いた。
【０２０４】
機能的アッセイについて：
次に、トランスフェクション細胞（２Ｅ＋０６細胞／ｍＬ）を９６ウェルのポリ−Ｄ−リジンプレートに約１００，０００細胞／ウェルの密度でプレーティングし、約１６時間から２４時間インキュベーションする。培地を細胞から吸引除去し、細胞をダルベッコリン酸緩衝生理食塩水（Ｄ−ＰＢＳ）  １００μｌで１回洗浄する。１ウェル当たり、Ｄ−ＰＢＳ中の約９μＭクマリン（ＣＣ２ＤＭＰＥ）−０．０２％プルロニック−１２７  １００μＬを添加し、ウェルを暗所で約３０分間インキュベーションする。細胞をダルベッコリン酸緩衝生理食塩水  １００μｌで２回洗浄し、１４０ｍＭ  ＮａＣｌ、０．１ｍＭ  ＫＣｌ、２ｍＭ  ＣａＣｌ２、１ｍＭ  ＭｇＣｌ２、２０ｍＭ  Ｈｅｐｅｓ−ＮａＯＨ、ｐＨ７．４、１０ｍＭ  グルコース中の約４．５μＭ  オキサノール（ＤｉＳＢＡＣ２（３））  １００μＬを添加する。ＨＥＫ−２９３細胞の内在性カリウムコンダクタンスの阻害剤  ３μＭを添加する。ｍａｘｉ−Ｋチャネルブロッカーを添加し（約０．０１μＭから約１０μＭ）、暗所で室温にて約３０分間細胞をインキュベーションする。
【０２０５】
プレートを電圧／イオンプローブリーダー（ＶＩＰＲ）機器にセットし、ＣＣ２ＤＭＰＥ及びＤｉＳＢＡＣ２（３）の両者の蛍光放射を１０秒間記録する。この時点で、高カリウム溶液：１４０ｍＭ  ＫＣｌ、２ｍＭ  ＣａＣｌ２、１ｍＭ  ＭｇＣｌ２、２０ｍＭ  Ｈｅｐｅｓ−ＫＯＨ、ｐＨ７．４、１０ｍＭ  グルコース  １００μｌを添加し、両色素の蛍光放射をさらに１０秒間記録する。ＣＣ２ＤＭＰＥ／ＤｉＳＢＡＣ２（３）比は、高カリウム溶液を添加する前は１に等しい。ｍａｘｉ−Ｋチャネル阻害剤が存在しない状態において、高カリウム溶液を添加した後の比は１．６５−２．０の間で変動する。既知の標準化合物又は試験化合物のいずれかによってＭａｘｉ−Ｋチャネルが完全に阻害される場合、この比は１のままである。したがって、蛍光比の濃度依存性変化を監視することにより、Ｍａｘｉ−Ｋチャネル阻害剤の活性を判定することができる。
【０２０６】
本発明の化合物は、約１ｎＭから約２０μＭ、より好ましくは、約１０ｎＭから約５００ｎＭの範囲のＩＣ５０で蛍光比の濃度依存性阻害を生じることが分かった。
【０２０７】
Ｂ．高コンダクタンスカルシウム活性化カリウムチャネルにおける化合物効果の電気生理学的アッセイ
方法：ｍａｘｉ−Ｋチャネルのα−サブユニットを構成的に発現するＣＨＯ細胞又はα−及びβ−サブユニットの両者を構成的に発現するＨＥＫ２９３細胞より切除した膜パッチから、従来の技術（Ｈａｍｉｌｌら，１９８１，Ｐｆｌｕｇｅｒｓ  Ａｒｃｈｉｖ．３９１，８５−１００）を用いて、室温で、高コンダクタンスカルシウム活性化カリウム（ｍａｘｉ−Ｋ）チャネルを介して流れる電流のパッチクランプ記録を行った。ガラス毛細管（Ｇａｒｎｅｒ＃７０５２又はＤｒｕｍｍｏｎｄカスタム  ホウケイ酸ガラス１−０１４−１３２０）を２段階で引いて、約１〜２ミクロンの先端径を有するマイクロピペットを得た。通常どおり、１５０ｍＭ  ＫＣｌ、１０ｍＭ  Ｈｅｐｅｓ（４−（２−ヒドロキシエチル）−１−ピペラジンメタンスルホン酸）、１ｍＭ  Ｍｇ、０．０１ｍＭ  Ｃａを含有し、ＫＯＨでｐＨ７．２０に調整した溶液をピペットに充填した。原形質膜とそのピペットとの間に高抵抗（＞１０９オーム）シールを形成した後、ピペットを細胞から引き抜き、切り出された裏返しの膜パッチを形成させた。１５０ｍＭ  ＫＣｌ、１０ｍＭ  Ｈｅｐｅｓ、５ｍＭ  ＥＧＴＡ（エチレングリコールビス（β−アミノエチルエーテル）−Ｎ，Ｎ，Ｎ’，Ｎ’−四酢酸）、１μＭから５μＭの遊離Ｃａ濃度を得るのに十分なＣａを含有し、ＫＯＨでｐＨを７．２に調整したバス溶液中に、このパッチを切り入れた。例えば、４．１９３ｍＭ  Ｃａを添加して、２２℃で１μＭの遊離濃度を得た。ＥＰＣ９増幅器（ＨＥＫＡ  Ｅｌｅｋｔｒｏｎｉｃ、Ｌａｍｂｒｅｃｔ、Ｇｅｒｍａｎｙ）を電圧の制御及び膜パッチを横断して流れる電流の測定に用いた。ヘッドステージへの入力をＡｇ／ＡｇＣｌ線でピペット溶液に接続し、増幅器のアースを、０．２Ｍ  ＫＣｌに溶解した寒天を充填したチューブで覆われたＡｇ／ＡｇＣｌ線でバス溶液に接続した。ｍａｘｉ−Ｋ電流であることは、膜電位及び細胞内カルシウム濃度に対するチャネル開口確率の感度により確認した。
【０２０８】
データの取得はＰＵＬＳＥソフトウェア（ＨＥＫＡ  Ｅｌｅｋｔｒｏｉｃ）によって制御し、ＰＵＬＳＥＦＩＴ（ＨＥＫＡ  Ｅｌｅｋｔｒｏｎｉｃ）及びＩｇｏｒ（Ｗａｖｅｍｅｔｒｉｃｓ、Ｏｓｗｅｇｏ、ＯＲ）ソフトウェアを用いる後の解析のためにＭａｃＩｎｔｏｓｈコンピュータ（Ａｐｐｌｅ  Ｃｏｍｐｕｔｅｒｓ）のハードドライブに保存した。
【０２０９】
結果：
ｍａｘｉ−Ｋチャネルにおける本発明の化合物の効果を、切り出した裏返し膜パッチにおいてバス溶液の一定の表面灌流で調べた。膜電位を−８０ｍＶに保持し、ｍａｘｉ−Ｋチャネルを一時的に開口させるために、正の膜電位（通常、＋５０ｍＶ）への短い（１００−２００ｍｓ）電圧段階を１５秒ごとに１回適用した。各実験における陽性対照として、カルシウムを添加せずに、１ｍＭ  ＥＧＴＡを標準バス溶液に添加することにより得た低濃度カルシウム（＜１０ｎＭ）にこのパッチを一時的に曝露した後、パルス電位においてｍａｘｉ−Ｋ電流を排除した。各実験において遮断されたチャネルの割合を、膜パッチの内側に指定された化合物を適用することによって生じるピーク電流の減少から算出した。遮断の定常状態レベルが得られるまで化合物を適用した。各化合物濃度で得られる遮断率をＨｉｌｌ式とフィットさせることにより、チャネル遮断のＫＩ値を算出した。本発明に記載の化合物によるチャネル遮断のＫＩ値は０．０１ｎＭから１０μＭを上回る範囲をとる。
【国際調査報告】
2007504233.tif 000055
2007504233.tif 000056
2007504233.tif 000057