(57)【要約】【課題】本発明は、ヒトを含む動物において免疫を増強する、アレルギー症状を改善又は予防する、或いは、ウイルス性下痢症状を改善又は予防するために有効な手段を提供する。【解決手段】本発明は、シュウドモナス属細菌等の土壌菌に属し免疫を増強する能力を有する微生物、前記微生物の培養物、或いは、前記微生物又は前記培養物の処理物を含む、免疫増強剤に関する。本発明はまた、土壌菌に属し花粉症等のアレルギー症状を改善又は予防する能力を有する微生物、前記微生物の培養物、或いは、前記微生物又は前記培養物の処理物を含む、アレルギー症状の改善又は予防剤に関する。本発明はまた、土壌菌に属しウイルス性下痢症状を改善又は予防する能力を有する微生物、前記微生物の培養物、或いは、前記微生物又は前記培養物の処理物を含む、ウイルス性下痢症状の改善又は予防剤に関する。【選択図】なし【特許請求の範囲】
【請求項１】
土壌菌に属し免疫を増強する能力を有する微生物、前記微生物の培養物、或いは、前記微生物又は前記培養物の処理物を含む、免疫増強剤。
【請求項２】
前記土壌菌がシュウドモナス属細菌である、請求項１に記載の免疫増強剤。
【請求項３】
前記微生物が、シュウドモナス・フォンス（Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ  ｆｏｎｓ）ＭＳ−１株（受託番号ＦＥＲＭ  Ｐ−２１６７３）、又は、シュウドモナス・フォンスＭＳ−１株の、免疫を増強する能力を有する変異株である、請求項２に記載の免疫増強剤。
【請求項４】
非ヒト動物における免疫を増強するための、請求項１〜３のいずれか１項に記載の免疫増強剤。
【請求項５】
土壌菌に属しアレルギー症状を改善又は予防する能力を有する微生物、前記微生物の培養物、或いは、前記微生物又は前記培養物の処理物を含む、アレルギー症状の改善又は予防剤。
【請求項６】
前記土壌菌がシュウドモナス属細菌である、請求項５に記載のアレルギー症状の改善又は予防剤。
【請求項７】
前記微生物が、シュウドモナス・フォンスＭＳ−１株（受託番号ＦＥＲＭ  Ｐ−２１６７３）、又は、シュウドモナス・フォンスＭＳ−１株の、アレルギー症状を改善又は予防する能力を有する変異株である、請求項６に記載のアレルギー症状の改善又は予防剤。
【請求項８】
前記アレルギー症状が花粉症である、請求項５〜７のいずれか１項に記載のアレルギー症状の改善又は予防剤。
【請求項９】
前記アレルギー症状が鼻汁産出である、請求項５〜８のいずれか１項に記載のアレルギー症状の改善又は予防剤。
【請求項１０】
土壌菌に属しウイルス性下痢症状を改善又は予防する能力を有する微生物、前記微生物の培養物、或いは、前記微生物又は前記培養物の処理物を含む、ウイルス性下痢症状の改善又は予防剤。
【請求項１１】
前記土壌菌がシュウドモナス属細菌である、請求項１０に記載のウイルス性下痢症状の改善又は予防剤。
【請求項１２】
前記微生物が、シュウドモナス・フォンスＭＳ−１株（受託番号ＦＥＲＭ  Ｐ−２１６７３）、又は、シュウドモナス・フォンスＭＳ−１株の、ウイルス性下痢症状を改善又は予防する能力を有する変異株である、請求項１１に記載のウイルス性下痢症状の改善又は予防剤。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明はシュウドモナス属細菌等の土壌菌微生物を有効成分として含む、免疫増強剤、アレルギー症状の改善又は予防剤、及び、ウイルス性下痢症状の改善又は予防剤に関する。
【背景技術】
【０００２】
これまでに、乳酸菌、ビフィズス菌、納豆菌などの特定の細菌を摂取することで、免疫などの代謝の増進することが報告されている。
【０００３】
しかし、このような乳酸菌等の免疫活性増進効果はそれほど大きくはなく、当該学界においても、乳酸菌、ビフィズス菌の免疫向上を含めたＱＯＬ（クオリティーオブライフ、生活の質）への貢献度は低いとされている。一方、土壌菌は腸内細菌群において多数を占めるとされているが（国澤ら、細胞工学、３０巻：４０９−４１２頁、２０１１年）、ＱＯＬへの貢献度については明らかにされていない。
【０００４】
一方、アレルギー症疾病のなかで大きな被害が生じている花粉症は、日本では２月から５月にかけて全国的に多発し、その患者数は２千万人以上に達する。スギ、ヒノキ花粉が主原因であるが、過敏な患者では牧草や秋期のセイタカアワダチソウ等の花粉に反応し疾病をおこす場合があり、その発症は初春から秋にまでに及ぶ。
【０００５】
この花粉症への対策としては、抗ヒスタミン薬、ステロイド薬等のいくつかの薬剤、漢方薬、あるいは乳酸菌に効果があると報告されている。また、ワクチンを舌下に投与する方法においても一定呈度の効果が得られているが、患者の根治感を得るまでには至らず、また喉、鼻の内皮損傷部位でのウイルス等病原菌感染への対処も充分ではない。
【０００６】
さらに、近年のウイルスに起因する下痢疾病は、子供、成人の広範囲にわたって多発している。抗生物質などの薬剤に効果がみられないことから、多くの患者が１０日以上の腹痛、嘔吐、下痢症状を呈し、子供では生命の危機に瀕す場合もある。
【０００７】
一方、特許文献１には、シュウドモナス・フォンスＭＳ−１株（受託番号ＦＥＲＭ  Ｐ−２１６７３）が病原性の細菌、真菌、ウイルスの感染および増殖を抑制する能力を有すること、及び、本微生物を用いて蜜蜂、動物また植物の疾病を防除することが記載されている。
【先行技術文献】
【特許文献】
【０００８】
【特許文献１】特許第４９１３１１７号明細書
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００９】
本発明が解決しようとする課題は、ヒトを含む動物において免疫を増強する、アレルギー症状を改善又は予防する、或いは、ウイルス性下痢症状を改善又は予防するために有効な手段を提供することである。
【課題を解決するための手段】
【００１０】
本発明者は驚くべきことに、シュウドモナス属等の土壌菌に属する微生物、その培養物、或いは、前記微生物又は培養物の処理物が、ヒトを含む動物における免疫の増強、花粉症等のアレルギー症状の改善又は予防、或いは、ウイルス性下痢症状の改善又は予防の用途に有効であることを見出し本発明を完成するに至った。本発明は以下の発明を包含する。
（１）
土壌菌に属し免疫を増強する能力を有する微生物、前記微生物の培養物、或いは、前記微生物又は前記培養物の処理物を含む、免疫増強剤。
（２）
前記土壌菌がシュウドモナス属細菌である、（１）に記載の免疫増強剤。
（３）
前記微生物が、シュウドモナス・フォンスＭＳ−１株（受託番号ＦＥＲＭ  Ｐ−２１６７３）、又は、シュウドモナス・フォンスＭＳ−１株の、免疫を増強する能力を有する変異株である、（２）に記載の免疫増強剤。
（４）
非ヒト動物における免疫を増強するための、（１）〜（３）のいずれかに記載の免疫増強剤。
（５）
土壌菌に属しアレルギー症状を改善又は予防する能力を有する微生物、前記微生物の培養物、或いは、前記微生物又は前記培養物の処理物を含む、アレルギー症状の改善又は予防剤。
（６）
前記土壌菌がシュウドモナス属細菌である、（５）に記載のアレルギー症状の改善又は予防剤。
（７）
前記微生物が、シュウドモナス・フォンスＭＳ−１株（受託番号ＦＥＲＭ  Ｐ−２１６７３）、又は、シュウドモナス・フォンスＭＳ−１株の、アレルギー症状を改善又は予防する能力を有する変異株である、（６）に記載のアレルギー症状の改善又は予防剤。
（８）
前記アレルギー症状が花粉症である、（５）〜（７）のいずれかに記載のアレルギー症状の改善又は予防剤。
（９）
前記アレルギー症状が鼻汁産出である、（５）〜（８）のいずれかに記載のアレルギー症状の改善又は予防剤。
（１０）
土壌菌に属しウイルス性下痢症状を改善又は予防する能力を有する微生物、前記微生物の培養物、或いは、前記微生物又は前記培養物の処理物を含む、ウイルス性下痢症状の改善又は予防剤。
（１１）
前記土壌菌がシュウドモナス属細菌である、（１０）に記載のウイルス性下痢症状の改善又は予防剤。
（１２）
前記微生物が、シュウドモナス・フォンスＭＳ−１株（受託番号ＦＥＲＭ  Ｐ−２１６７３）、又は、シュウドモナス・フォンスＭＳ−１株の、ウイルス性下痢症状を改善又は予防する能力を有する変異株である、（１１）に記載のウイルス性下痢症状の改善又は予防剤。
【発明の効果】
【００１１】
本発明の土壌菌の使用により、テラピア、マダイ等の魚の免疫物質である好中球数やリゾチーム活性が増加、増進した。そして、その増加・増進の割合は乳酸菌の代表的種であるＬａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓ  ｂｒｅｖｉｓを大幅に上回った。
【００１２】
また、本発明の土壌菌を、凍結乾燥により生きたまま粉末として花粉症状を呈する人間に給与したところ、１日にして症状が軽減した。すなわち、花粉症の代表的症状である鼻かみ回数が１日で１／１０以下に減少し、３日目には症状がほとんど見られないまでになる。
【００１３】
そして、本発明の土壌菌を凍結乾燥により生きたまま粉末として、ウイルス性下痢症状を呈する患者に給与したところ、短日数において腹痛、ウイルス性下痢症状が改善した。
【発明を実施するための最良の形態】
【００１４】
以下に、本発明をより詳細に説明する。
１．微生物
本発明の免疫増強促進剤は、シュウドモナス属細菌等の土壌菌に属し免疫を増強する能力を有する微生物、前記微生物の培養物、或いは、前記微生物又は前記培養物の処理物を有効成分として含む。
本発明のアレルギー症状の改善又は予防剤は、シュウドモナス属細菌等の土壌菌に属しアレルギー症状を改善又は予防する能力を有する微生物、前記微生物の培養物、或いは、前記微生物又は前記培養物の処理物を有効成分として含む。
本発明のウイルス性下痢症状の改善又は予防剤は、シュウドモナス属細菌等の土壌菌に属しウイルス性下痢症状を改善又は予防する能力を有する微生物、前記微生物の培養物、或いは、前記微生物又は前記培養物の処理物を有効成分として含む。
【００１５】
本発明の各態様で用いる微生物としては、シュウドモナス・フォンス（Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ  ｆｏｎｓ）ＭＳ−１株（受託番号ＦＥＲＭ  Ｐ−２１６７３）が最も好ましいが、これには限定されずシュウドモナス属に属する細菌や他の土壌菌に分類される細菌が使用できる。
本菌の菌学的性質
形状
桿菌、長さ：１〜３ミクロン、運動性：有り、胞子形成：無し、グラム染色：陰性、ＯＦテスト：−
生育程度
１〜２日程度培養で数ｍｍのコロニーを形成する、色：薄茶色、光沢：特に無し、表面、円滑、拡散色素：無し、ｐＨ：４〜１０程度で生育、温度：中温性７〜４５℃、ＮａＣｌ：０〜４％。その他、詳細は特許文献１書に記載のとおりである。
シュウドモナス・フォンスＭＳ−１株の性状は、特許文献１（特許第４９１３１１７号明細書）に記載されている。特許文献１では、本微生物が病原性の細菌、真菌、ウイルスの感染および増殖を抑制する能力を有すること、及び、本微生物を用いて蜜蜂、動物また植物の疾病を防除することが記載されている。
【００１６】
シュウドモナス・フォンスＭＳ−１株の変異株は、ヒト又は非ヒト動物において、免疫を増強する能力、アレルギー症状を改善又は予防する能力、及び、ウイルス性下痢症状を改善又は予防する能力のうち少なくとも１つの能力を有するものであれば、本発明に好適に使用できる。
ここで、変異体とはシュウドモナス・フォンスＭＳ−１株が変異誘発処理された変異株である。変異誘発処理は任意の適当な変異原を用いて行なわれ得る。ここで、「変異原」なる語は、その広義において、例えば変異原効果を有する薬剤のみならずＵＶ照射のごとき変異原効果を有する処理をも含むものと理解すべきである。適当な変異原の例としてエチルメタスルホネート、ＵＶ照射、Ｎ−メチル−Ｎ−ニトロ−Ｎ−ニトロソグアニジン、ブロモウラシルのようなヌクレオチド塩基類似体及びアクリジン類が挙げられるが、他の任意の効果的な変異原もまた使用され得る。
【００１７】
本発明のシュウドモナス・フォンスＭＳ−１株の培養には、固体培養基（モルトエキス５０ｇ、酵母エキス３０ｇ、ビートオリゴ糖１００ｇ、フィルタ濾過水１，０００ｍｌ）や、他の一般的な細菌用の培地を使用することができ、特に組成を限定するものではない。例えば、ソイトン（大豆抽出物）なども培地として使用できる。培地のｐＨは７．２〜７．４が適当であり、１２１℃、１５分間の過熱滅菌を行って使用することができる。
【００１８】
また、シュウドモナス・フォンスＭＳ−１株を生きたまま粉末にするために、凍結乾燥法を使用することができる。凍結乾燥法の一例としては次の方法が挙げられる。まず、シュウドモナス・フォンスＭＳ−１株の培養液に保護剤としてグルコース、オリゴ糖やスキムミルクを１０％濃度になるように添加する。次に、その２００ｍｌを丸型フラスコに分注し、その数本を凍結乾燥機に装着し、２４時間、−６０℃での真空操作によって乾燥粉体を得る。この乾燥粉末とした生菌は、乾燥剤とともに室温で保存が可能である。
【００１９】
前記微生物を本発明の各用途に使用する場合、その形態は特に限定されず、前記微生物そのもの（菌体）であってもよいし、前記微生物の培養物であてもよいし、前記微生物又は前記培養物の処理物であってもよい。前記微生物は、生きた状態の微生物（生菌）であってもよいし、死滅した状態の微生物であってもよい。「培養物」とは液体又は固体培地中で前記微生物を培養して生じる、前記微生物と培地との分離を行っていない培養混合物であり、液状であってもよいし、固体状であってもよい。前記微生物の「処理物」とは、前記微生物を処理したもの全てを包含し、例えば、前記微生物の乾燥物、凍結物、破砕物等を包含する。また、前記培養物の「処理物」とは、前記培養物を処理したもの全てを包含し、例えば、前記培養物の希釈物、濃縮物、乾燥物、凍結物、前記培養物から前記微生物を除去した培養組成物、前記培養組成物の希釈物、濃縮物、乾燥物、凍結物等を包含する。
【００２０】
本発明の目的には、前記微生物の培養物を、前記微生物を含むそのままの状態で、或いは、上記凍結乾燥法によって粉体にした形態で使用することや、前記培養物から前記微生物を除いた培養組成物の形態で使用することが特に好ましい。前記微生物は、他の雑菌の混入がなければ保存温度５℃で約２〜３週間程度の期間有効に保管できるため、低温輸送、冷蔵保管することによって供給することができ、また、生菌粉末の場合には、常温で１２ヶ月間は保存できる。そして、培養物はグルコースやグリセロールを添加して−３０〜−８０℃で凍結して保管することも長期保存の観点から有効である。
【００２１】
２．免疫増強のための用途
シュウドモナス・フォンスＭＳ−１株、その変異株等の、土壌菌に属し免疫を増強する能力を有する微生物、前記微生物の培養物、或いは、前記微生物又は前記培養物の処理物は、ヒト又は非ヒト動物における免疫増強に有効である。本発明者は、実施例において、シュウドモナス・フォンスＭＳ−１株を魚類テラピアとマダイに投与したところ、免疫細胞の生産量が大幅に増加した。この用途には、前記微生物の培養液又は生菌粉末を使用することが好ましい。
免疫増強の対象となる動物としてはヒト又は非ヒト動物が挙げられ、非ヒト動物としては特に魚類や家畜が好ましい。
【００２２】
３．花粉症などのアレルギー症状への用途
シュウドモナス・フォンスＭＳ−１株、その変異株等の、土壌菌に属しアレルギー症状を改善又は予防する能力を有する微生物、前記微生物の培養物、或いは、前記微生物又は前記培養物の処理物は、ヒト又は非ヒト動物におけるアレルギー症状の改善又は予防に有効である。この用途には、前記微生物を、必要に応じて水（湯を含む）ともに摂取又は投与することが好ましい。或いは、前記微生物を含む液体組成物、前記微生物を含む培養物から前記生物を除去した培養組成物（例えば培養液上澄）、前記微生物の乾燥粉末を経口的に摂取又は投与することが好ましい。
アレルギー症状の改善又は予防の対象となる動物としてはヒト又は非ヒト動物が挙げられ、ヒトが特に好ましい。
アレルギー症状としては花粉症が代表的であるが、これには限定されない。本発明によって、花粉症患者における鼻水の漏出、のどの痛み、目のかゆみ、目の痛みなどの症状を抑制することができる。
アレルギー症状は、他の一実施形態では、鼻汁産出である。本発明によれば、アレルギーによる鼻汁産出を抑制することができる。
【００２３】
４．ウイルス性下痢症状への用途
シュウドモナス・フォンスＭＳ−１株、その変異株等の、土壌菌に属しウイルス性下痢症状を改善又は予防する能力を有する微生物、前記微生物の培養物、或いは、前記微生物又は前記培養物の処理物は、ヒト又は非ヒト動物におけるウイルス性下痢症状の改善又は予防に有効である。この用途には、前記微生物を、必要に応じて水（湯を含む）ともに摂取又は投与することが好ましい。或いは、前記微生物を含む液体組成物、前記微生物を含む培養物から前記生物を除去した培養組成物（例えば培養液上澄）、前記微生物の乾燥粉末（特に生菌粉末）を経口的に摂取又は投与することが好ましい。
ウイルス性下痢症状の改善又は予防の対象となる動物としてはヒト又は非ヒト動物が挙げられ、ヒトが特に好ましい。
ウイルス性下痢症状は、一実施形態では、ノロウイルス等に起因する。ウイルス性下痢症状は、腹痛、腹部膨満、下痢等を含み、その治癒までには数日以上を要することも稀ではない。ウイルス性下痢症状には抗生物質が使用できず、患者は水分補給のうえ安静にするだけの状況に陥る。本発明によれば、このように治癒が困難であったウイルス性下痢症を効果的に改善又は予防することができる。
【００２４】
〔実施例１〕
シュウドモナス・フォンスＭＳ−１株の単離および同定
本発明のシュウドモナス・フォンスＭＳ−１株は、多くの病原細菌、病原真菌、病原ウイルスの増殖を抑制するが、その細菌学的性状は、特許文献１において詳細に記載されている。また、その分類学的位置は、１６ＳｒＲＮＡの解析によって決定され、その塩基配列も特許文献１に記載されたとおりである。
【００２５】
当該菌株は、シュウドモナス・フォンスＭＳ−１株と命名され、平成２０年９月１８日に特許生物寄託センター（ＩＰＯＤ）に受託番号ＦＥＲＭ  Ｐ−２１６７３として寄託されている。
【００２６】
〔実施例２〕
シュウドモナス・フォンスＭＳ−１株における動物の免疫増強性能
上記シュウドモナス・フォンスＭＳ−１株およびその培養上澄液が動物の免疫物質好中球およびリゾチームの生産を増進する能力を有することを以下のように確認した。
【００２７】
免疫物質好中球の測定結果について以下に述べる。魚類テラピアに対して大豆を約０．５ｍｍの大きさに粉砕し、テラピアに毎日魚体重総量の５％を給与した。実験区の大豆餌にはシュウドモナス・フォンスＭＳ−１株の培養液（約１０９ｃｅｌｌｓ／ｍｌ）を１０％（菌量／大豆重量）加え、対照区の実験区では、菌を加えずに大豆粒のみとした。乳酸菌（Ｌａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓ  ｂｒｅｖｉｓ）についても同様の試験区を設定した。魚類の飼育は３５日間行った。好中球の採取法はＥｎｄｏ  ｅｔ  ａｌ．（Ｆｉｓｈｅｒｉｅｓ  Ｓｃｉｅｎｃｅ，６３巻、６４４−６４５頁、１９９７年）の方法を用いた。まず滅菌したカゼイン溶液５ｍｌをテラピアの浮き袋に２７Ｇ注射針で注射した。４８時間放置した後カゼインを標的として好中球が浮き袋に集まってくる。そこで生理食塩水５ｍｌを浮き袋に注射し、その生理食塩水に浮遊した好中球を注射器で吸い出して採取した。好中球数の計算にはトーマ計数板を用いた。この結果、乳酸菌の免疫細胞生産増進効果は対照区の約１．７倍となったが、シュウドモナス・フォンスＭＳ−１株においては、その増加の割合は対照区の値の約３．１倍となった（表１）。
同様の実験を、ここでは配合飼料を用いて実施したが、マダイにおいて実施し上記テラピアと同様の結果となった。すなわちシュウドモナス・フォンスＭＳ−１株を投与したマダイでは好中球の数は対照区と比較して約３．２倍に増加した（表２）。
【００２８】
代表的な免疫物質の一つにリゾチームがある。リゾチームは酵素反応により外部侵入物（外敵）を分解する作用をあらわす。ここで測定は楠田等の方法（日本水産学会誌、５３巻、２１１−２１４頁、１９８７年）に準じ、外敵としては細菌Ｍｉｃｒｏｃｏｃｃｕｓ  ｌｙｓｏｄｅｉｋｔｉｃｕｓを用いた。まず魚類テラピアに対して大豆を約０．５ｍｍの大きさに粉砕し、毎日魚体重総量の５％を給与した。実験区の大豆餌にはシュウドモナス・フォンスＭＳ−１株の培養液（約１０９ｃｅｌｌｓ／ｍｌ）を１０％（菌量／大豆重量）加え、対照区の実験区では、菌を加えずに大豆粒のみとした。乳酸菌（Ｌａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓ  ｂｒｅｖｉｓ）についても同様の試験区を設定した。このようにして３０日間飼育したテラピアについて、その腎臓０．０５ｇを計量し、生理食塩水中で粉砕し、４℃、１００００ｒｐｍで２０分間遠心分離した上澄液をリゾチーム試料とした。そしてグラム陽性細菌であるＭｉｃｒｏｃｏｃｃｕｓ  ｌｙｓｏｄｅｉｋｔｉｃｕｓを緩衝液とともに上澄液に加えた。この反応液を３５℃で３０分間反応させ、Ｍｉｃｒｏｃｏｃｃｕｓ  ｌｙｓｏｄｅｉｋｔｉｃｕｓの分解に起因する波長５３０ｎｍの吸光度の減少をリゾチームの活性とした。活性の数値化は、その吸光度の減少を卵白リゾチームの標品を用いて作成した標準曲線をもとにして算出した。この結果、シュウドモナス・フォンスＭＳ−１株を給与したテラピアの腎臓における活性は、乳酸菌よりも３１％高かった。また。ＭＳ−１株の菌体成分を除いた培養液上澄においても、高い活性値が得られた（表３）。
【００２９】
リゾチーム活性につて、同様の試験をテラピアの体表粘膜部位においても行った。すなわち体表部位０．０５ｇを生理食塩水中で粉砕し、その上澄液について同様の測定を行ったところ、シュウドモナス・フォンスＭＳ−１株給与区のリゾチーム活性は、乳酸菌給与区と比較して１８％高かった。ＭＳ−１株の菌体成分を除いた培養液上澄においても高い活性値が得られた（表４）。
【００３０】
〔実施例３〕
シュウドモナス・フォンスＭＳ−１株による花粉症状鼻水産出の抑制性能
花粉症状において鼻水処理のための鼻かみ回数をスコアとして数値化し、シュウドモナス・フォンスＭＳ−１株の投与におけるその数値の大幅な改善を確認した。なお、スコアによる疾病症状の数値化は、アレルギー全般の診断において広く採用される方法である（日皮会誌、１１８巻、３２５−３４２頁、２００８年）。
【００３１】
すなわち杉花粉飛散時期の２〜３月にかけて、鼻水を産出する被験者に対してシュウドモナス・フォンスＭＳ−１株の生菌粉末の約１ｇを１日３回給与した。そして、鼻かみの回数をスコアとして、２０回以上／日を４、２０〜１０回／日を３、１０〜５回／日を２、５回以下／日を１、鼻水産出の止まった被験者はスコア０とした。この２１名の被験者において、１日で７名の鼻かみスコアが４から２に減少し、３日目には１以下となった。既存の乳酸菌における報告（勘里裕樹、Ｍｅｄｉｃａｌ  Ｓｃｉｅｎｃｅ  Ｄｉｇｅｓｔ，  ３５巻、２７−３０頁、２００９年）では、同等の効果を得るまでには５週間以上を要する。このように、シュウドモナス・フォンスＭＳ−１株の花粉症状の改善効果は著しいことが明らかになった（表５）。なお、シュウドモナス・フォンスＭＳ−１株は、病原菌を抑制、殺滅することが特許第４９１３１１７号明細書において明らかにされている。特許第４９１３１１７号では花粉症に対する記述はないが、ＭＳ−１株によって花粉症において２次感染症状を起こすウイルスが抑制されることも、この効果に資するものと思われる。さらに、本菌の免疫増進機能も花粉症状改善に資すると考える。
【００３２】
また、花粉症の被験者の鼻水には、免疫グロブリンＥ（ＩｇＥ）がより多く含まれることが報告されている。そして、このＩｇＥ量はアレルウォッチ涙液ＩｇＥキット（日立化成株式会社）を使用し測定することができる。この測定は、福島等（日耳鼻誌、１１４巻、７７４−７７９頁、２０１１年）の方法に準じて行った。すなわち、棒状キットの綿部分に少量の鼻水を浸漬することによりＩｇＥ含量が数値化される。反応機序は以下のとおりである。上記アレルウォッチ表面において、綿部分に浸した検体中（鼻水中）のＩｇＥと金コロイド標識ヤギ抗ヒトＩｇＥ抗体とが反応し、金コロイド標識ヤギ抗ヒトＩｇＥ抗体−ＩｇＥの複合体を形成させる。毛細管現象によりアレルウォッチの膜上を移動した複合体は、膜上に設けられたテストライン上のマウス抗ヒトＩｇＥ抗体と反応して、マウス抗ヒトＩｇＥ抗体−ＩｇＥ−金コロイド標識ヤギ抗ヒトＩｇＥ抗体の新たな複合体を形成する。その結果、目視で判定できる赤色ラインが形成されるので、これを検体ラインとする。一方、検体中のＩｇＥの有無に関わらず、毛細管現象で移動した金コロイド標識ヤギ抗ヒトＩｇＥ抗体はコントロールライン上で反応し、目視で判定できる赤色ラインを形成する。これをコントロールラインとする。測定結果の判定においては、検体ラインの発色強度がコントロールラインと比較して同等以上の場合を陽性（数値２）とし、コントロールラインより薄い色のラインの場合には弱陽性（数値１）、検体ラインが無い場合は陰性（数値０）とする。また、コントロールラインが現れない場合は試験不成立となる。このキットを用いた測定において本試験を行った被験者のＩｇＥ量は有為に高く、すなわち鼻水の産出が花粉症によるＩｇＥ増大を伴うことが明らかになった（表６）。
【００３３】
〔実施例４〕
シュウドモナス・フォンスＭＳ−１株によるウイルス性下痢症状の改善
おもにエンテロウイルスによるウイルス性下痢においては、腹部膨満、腹痛、吐き気、嘔吐、そして1日数回から数１０回の下痢をともなう。便の性状は黄褐色の水様便で、粘液や血液が混じることはないが、腐肉様の悪臭がある。ウイルス性下痢と判断されたこのような症状を呈する人に対してシュウドモナス・フォンスＭＳ−１株を投与した場合の下痢症状の改善を試験した。
【００３４】
下痢症状につては、スコアを以下のように設定した。すなわち、下痢が連続する劇症を５、１日３〜４回の下痢は中程度４、少々の下痢３、軽微の軟便２、腹部違和感のみ１、下痢無を０とした。下痢症状の５名の被験者に対して、シュウドモナス・フォンスＭＳ−１株の生菌粉末１ｇを、１日目は５回、２日目からは３回給与した。この結果、投与１２時間後には下痢の前駆症状と考えられる腹部膨満が改善、また下痢の回数が減少した。そして、２日後には液状便が軟便に変化し、３日目においては通常の固形便に回復した。この間、腹部の痛みは、１日目で大幅に改善し、２日目においては軽微の痛みを感じるほどで、３日目で痛みは無くなった。また、ＭＳ−１株の菌体成分を除いた培養液上澄においても同様の治癒効果を得た（表７）。本菌は、様々なウイルスを物理的に構造分解することが判明しており、この非特異的ウイルス抑制機能が下痢症状改善効果に資するものと思われる。
【００３５】
【表１】
2019127445.tif 000002
【００３６】
【表２】
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【００３７】
【表３】
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【００３８】
【表４】
2019127445.tif 000005
【００３９】
【表５】
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【００４０】
【表６】
2019127445.tif 000007
【００４１】
【表７】
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