(57)【要約】      （修正有）【課題】サイクリン依存的キナーゼ４／６（ＣＤＫ４／６）複製非依存的癌又は異常細胞増殖の治療を受けている被検体の正常細胞に対する化学療法剤の影響を低減する方法の提供。【解決手段】以下に例示される化合物を用いた、化学療法剤の影響を低減する方法。2019055954.tif 000333【選択図】図６Ｂ
2019055954.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
サイクリン依存的キナーゼ４／６（ＣＤＫ４／６）複製非依存的癌又は異常細胞増殖の治療を受けている被検体の正常細胞に対する化学療法剤の影響を低減する方法であって、
前記正常細胞は、造血幹細胞、造血前駆細胞又は腎臓上皮細胞であり、
前記方法は、式Ｉ、ＩＩ、ＩＩＩ、ＩＶもしくはＶから成る群より選択される化合物、又はその薬理学的に許容される塩の有効量を、被検体に投与することを含み、
【化１】
2019055954.tif 000278
式中、Ｚは、−（ＣＨ２）ｘ−で、ｘは１、２、３、又は４、または−Ｏ−（ＣＨ２）ｚ−であり、ｚは２、３又は４であり、
各Ｘは、独立してＣＨ又はＮであり、
各Ｘ’は、独立してＣＨ又はＮであり、
Ｘ’’は、独立してＣＨ２、Ｓ又はＮＨであり、構成部分が安定５員環となるよう配置され、
Ｒ、Ｒ８及びＲ１１は、独立してＨ、Ｃ１−Ｃ３のアルキル又はハロアルキル、シクロアルキル、又は、Ｎ、ＯもしくはＳから選択される１つ以上のヘテロ原子を含んだシクロアルキル、−（アルキレン）ｍ−  Ｃ３−Ｃ８シクロアルキル、−（アルキレン）ｍ−アリール、−（アルキレン）ｍ−ヘテロシクロ、−（アルキレン）ｍ−ヘテロアリール、−（アルキレン）ｍ−ＮＲ３Ｒ４、−（アルキレン）ｍ−Ｃ（Ｏ）−ＮＲ３Ｒ４、−（アルキレン）ｍ−Ｏ−Ｒ５、−（アルキレン）ｍ−  Ｓ（Ｏ）ｎ−Ｒ５、又は−（アルキレン）ｍ−Ｓ（Ｏ）ｎ−ＮＲ３Ｒ４であって、これらのいずれかは、電子価的に可能な限りにおいて１つ以上のＲ基で任意に独立して置換されてもよく、同じ又は隣接した原子に結合した２つのＲｘ基を任意に組み合せて環を形成してもよく、
各Ｒ１は独立して、アリール、アルキル、シクロアルキル又はハロアルキルであり、前記アルキル、シクロアルキル及びハロアルキル基の各々は、鎖中の炭素の代わりに任意にＯ又はＮヘテロ原子を含み、
隣接した環原子又は同じ環原子の２つのＲ１のものは、環原子と共に、任意に結合される３−８員環を形成し、
ｙは、０、１、２、３又は４であり、
Ｒ２は、−（アルキレン）ｍ−ヘテロシクロ、−（アルキレン）ｍ−ヘテロアリール、−（アルキレン）ｍ−ＮＲ３Ｒ４、−（アルキレン）ｍ−Ｃ（Ｏ）−ＮＲ３Ｒ４、−（アルキレン）ｍ−Ｃ（Ｏ）−Ｏ−アルキル、−（アルキレン）ｍ−Ｏ−Ｒ５、−（アルキレン）ｍ−Ｓ（Ｏ）ｎ−Ｒ５、又は−（アルキレン）ｍ−Ｓ（Ｏ）ｎ−ＮＲ３Ｒ４であり、
これらのいずれかは、電子価的に可能な限りにおいて１つ以上のＲｘ基で任意に独立して置換されてもよく
同じ又は隣接した原子に結合した２つのＲｘ基は任意に組み合わされて環を形成してもよく、
ｍは０又は１、ｎは０、１又は２であり、
Ｒ３及びＲ４はその発生毎に、独立して以下の通りである：
（ｉ）水素又は
（ｉｉ）アルキル、シクロアルキル、ヘテロシクロ、アリール、ヘテロアリール、シクロアルキルアルキル、ヘテロシクロアルキル、アリールアルキル又はヘテロアリールアルキル
これらのいずれかは、電子価的に可能な限りにおいて１つ以上のＲｘ基で任意に独立して置換されてもよく
同じ又は隣接した原子に結合した２つのＲｘ基は任意に組み合わされて環を形成してもよく、又は
Ｒ３及びＲ４は、これらが結合される窒素原子と共に組み合わされて、電子価的に可能な限りにおいて１つ以上のＲｘ基で任意に独立して置換されるヘテロシクロ環を形成してもよく、
同じ又は隣接した原子に結合した２つのＲｘ基は任意に組み合わされて環を形成してもよく、
Ｒ５及びＲ５＊はその発生毎に、独立して以下の通りである：
（ｉ）水素又は
（ｉｉ）アルキル、アルケニル、アルキニル、シクロアルキル、ヘテロシクロ、アリール、ヘテロアリール、シクロアルキルアルキル、ヘテロシクロアルキル、アリールアルキル又はヘテロアリールアルキルであり、これらのいずれかは、電子価的に可能な限りにおいて１つ以上のＲｘ基で任意に独立して置換されてもよく、
Ｒｘは、その発生毎に独立して、ハロ、シアノ、ニトロ、オキソ、アルキル、ハロアルキル、アルケニル、アルキニル、シクロアルキル、シクロアルケニル、ヘテロシクロ、アリール、ヘテロアリール、アリールアルキル、ヘテロアリールアルキル、シクロアルキルアルキル、ヘテロシクロアルキル、−（アルキレン）ｍ−ＯＲ５、−（アルキレン）ｍ−Ｏ−アルキレン−ＯＲ５、−（アルキレン）ｍ−Ｓ（Ｏ）ｎ−Ｒ５、−（アルキレン）ｍ−ＮＲ３Ｒ４、−（アルキレン）ｍ−ＣＮ、−（アルキレン）ｍ−Ｃ（Ｏ）−Ｒ５、−（アルキレン）ｍ−Ｃ（Ｓ）−Ｒ５、−（アルキレン）ｍ−Ｃ（Ｏ）−ＯＲ５、−（アルキレン）ｍ−Ｏ−Ｃ（Ｏ）−Ｒ５、−（アルキレン）ｍ−Ｃ（Ｓ）−ＯＲ５、−（アルキレン）ｍ−Ｃ（Ｏ）−（アルキレン）ｍ−ＮＲ３Ｒ４、−（アルキレン）ｍ−Ｃ（Ｓ）−ＮＲ３Ｒ４、−（アルキレン）ｍ−Ｎ（Ｒ３）−Ｃ（Ｏ）−ＮＲ３Ｒ４、−（アルキレン）ｍ−Ｎ（Ｒ３）−Ｃ（Ｓ）−ＮＲ３Ｒ４、−（アルキレン）ｍ−Ｎ（Ｒ３）−Ｃ（Ｏ）−Ｒ５、−（アルキレン）ｍ−Ｎ（Ｒ３）−Ｃ（Ｓ）−Ｒ５、−（アルキレン）ｍ−Ｏ−Ｃ（Ｏ）−ＮＲ３Ｒ４、−（アルキレン）ｍ−Ｏ−Ｃ（Ｓ）−ＮＲ３Ｒ４、−（アルキレン）ｍ−ＳＯ２−ＮＲ３Ｒ４、−（アルキレン）ｍ−Ｎ（Ｒ３）−ＳＯ２−Ｒ５、−（アルキレン）ｍ−Ｎ（Ｒ３）−ＳＯ２−ＮＲ３Ｒ４、−（アルキレン）ｍ−Ｎ（Ｒ３）−Ｃ（Ｏ）−ＯＲ５、−（アルキレン）ｍ−Ｎ（Ｒ３）−Ｃ（Ｓ）−ＯＲ５、又は−（アルキレン）ｍ−Ｎ（Ｒ３）−ＳＯ２−Ｒ５であり、
ここで、前記アルキル、ハロアルキル、アルケニル、アルキニル、シクロアルキル、シクロアルケニル、ヘテロシクロ、アリール、ヘテロアリール、アリールアルキル、ヘテロアリールアルキル、シクロアルキルアルキル及びヘテロシクロアルキル基は、以下の１つ以上でさらに独立して置換されてもよく：
−（アルキレン）ｍ−ＣＮ、−（アルキレン）ｍ−ＯＲ５＊、−（アルキレン）ｍ−Ｓ（Ｏ）ｎ−Ｒ５＊、−（アルキレン）ｍ−ＮＲ３＊Ｒ４＊、−（アルキレン）ｍ−Ｃ（Ｏ）−Ｒ５＊、−（アルキレン）ｍ−Ｃ（＝Ｓ）Ｒ５＊、−（アルキレン）ｍ−Ｃ（＝Ｏ）ＯＲ５＊、−（アルキレン）ｍ−ＯＣ（＝Ｏ）Ｒ５＊、−（アルキレン）ｍ−Ｃ（Ｓ）−ＯＲ５＊、−（アルキレン）ｍ−Ｃ（Ｏ）−ＮＲ３＊Ｒ４＊、−（アルキレン）ｍ−Ｃ（Ｓ）−ＮＲ３＊Ｒ４＊、−（アルキレン）ｍ−Ｎ（Ｒ３＊）−Ｃ（Ｏ）−ＮＲ３＊Ｒ４＊、−（アルキレン）ｍ−Ｎ（Ｒ３＊）−Ｃ（Ｓ）−ＮＲ３＊Ｒ４＊、−（アルキレン）ｍ−Ｎ（Ｒ３＊）−Ｃ（Ｏ）−Ｒ５＊、−（アルキレン）ｍ−Ｎ（Ｒ３＊）−Ｃ（Ｓ）−Ｒ５＊、−（アルキレン）ｍ−Ｏ−Ｃ（Ｏ）−ＮＲ３＊Ｒ４＊、−（アルキレン）ｍ−Ｏ−Ｃ（Ｓ）−ＮＲ３＊Ｒ４＊、−（アルキレン）ｍ−ＳＯ２−ＮＲ３＊Ｒ４＊、−（アルキレン）ｍ−Ｎ（Ｒ３＊）−ＳＯ２−Ｒ５＊、−（アルキレン）ｍ−Ｎ（Ｒ３＊）−ＳＯ２−ＮＲ３＊Ｒ４＊、−（アルキレン）ｍ−Ｎ（Ｒ３＊）−Ｃ（Ｏ）−ＯＲ５＊、−（アルキレン）ｍ−Ｎ（Ｒ３＊）−Ｃ（Ｓ）−ＯＲ５＊、又は−（アルキレン）ｍ−Ｎ（Ｒ３＊）−ＳＯ２−Ｒ５＊、の１つ以上でさらに独立して置換されてもよく、
ｎは、０、１又は２であり、ｍは０又は１であり、
Ｒ３＊及びＲ４＊は、独立してその発生毎に以下の通りであり：
（ｉ）水素又は
（ｉｉ）アルキル、アルケニル、アルキニル  シクロアルキル、ヘテロシクロ、アリール、ヘテロアリール、シクロアルキルアルキル、ヘテロシクロアルキル、アリールアルキル又はヘテロアリールアルキルであって、
これらのいずれかは、電子価的に可能な限りにおいて１つ以上のＲｘ基で任意に独立して置換されてもよく又は
Ｒ３＊及びＲ４＊は、それらに結合される窒素原子と共に組み合わせて、価電子によって与えられる１つ以上のＲｘ基と任意に独立して置換されるヘテロシクロ環を形成してもよく、
Ｒ６はＨ又は低級アルキル、−（アルキレン）ｍ−ヘテロシクロ、−（アルキレン）ｍ−ヘテロアリール、−（アルキレン）ｍ−ＮＲ３Ｒ４、−（アルキレン）ｍ−Ｃ（Ｏ）−ＮＲ３Ｒ４、−（アルキレン）ｍ−Ｏ−Ｒ５、−（アルキレン）ｍ−Ｓ（Ｏ）ｎ−Ｒ５、又は−（アルキレン）ｍ−Ｓ（Ｏ）ｎ−ＮＲ３Ｒ４であり、これらのいずれかは、電子価的に可能な限りにおいて１つ以上のＲｘ基で任意に独立して置換されてもよく、
同じ又は隣接した原子に結合した２つのＲｘ基は任意に組み合わされて環を形成してもよく、
Ｒ１０は
（ｉ）  ＮＨＲＡであり、
ここで、ＲＡは非置換又は置換Ｃ１−Ｃ８アルキル、シクロアルキルアルキル、又は、−ＴＴ−ＲＲ、Ｃ１−Ｃ８シクロアルキル、又は、Ｎ、Ｏ及びＳから選択されるヘテロ原子を１つ以上含むシクロアルキルであり、ＴＴは、非置換又は置換Ｃ１−Ｃ８アルキル又はＣ３−Ｃ８シクロアルキルリンカーであり、そして、ＲＲはヒドロキシル、非置換又は置換Ｃ１−Ｃ６アルコキシ、アミノ、非置換又は置換Ｃ１−Ｃ６アルキルアミノ、非置換又は置換ジ−Ｃ１−Ｃ６アルキルアミノ、非置換又は置換Ｃ６−Ｃ１０アリール、１又は２個の５員又は６員環及びＮ、Ｏ及びＳから選択される１−４個のヘテロ原子を含む非置換又は置換ヘテロアリール、非置換又は置換Ｃ３−Ｃ１０炭素環、又は、１又は２個の５員又は６員環及びＮ、Ｏ及びＳから選択される１−４個のヘテロ原子を含む非置換又は置換ヘテロ環であり、又は
（ｉｉ）−Ｃ（Ｏ）−Ｒ１２又は−Ｃ（Ｏ）Ｏ−Ｒ１３であり、
ここで、Ｒ１２はＮＨＲＡ又はＲＡであり、Ｒ１３はＲＡである、前記方法。
【請求項２】
Ｒ８が、水素又はＣ１〜Ｃ３アルキルである、請求項１に記載の方法。
【請求項３】
前記化合物が、図２７に示される構造から選択される式を有する、請求項１に記載の方法。
【請求項４】
前記化合物が、図２８に示される構造から選択される式を有する、請求項１に記載の方法。
【請求項５】
前記化合物が、図２９に示される構造から選択される式を有する、請求項１に記載の方法。
【請求項６】
前記化合物が、図３０に示される構造から選択される式を有する、請求項１に記載の方法。
【請求項７】
前記化合物が、図３１に示される構造から選択される式を有する、請求項１に記載の方法。
【請求項８】
前記化合物が、以下の式を有する、請求項１に記載の方法。
【化２】
2019055954.tif 000279
【請求項９】
前記化合物が、以下の式を有する、請求項１に記載の方法。
【化３】
2019055954.tif 000280
【請求項１０】
前記化合物が、以下の式を有する、請求項１に記載の方法。
【化４】
2019055954.tif 000281
【請求項１１】
前記化合物が、以下の式を有する、請求項１に記載の方法。
【化５】
2019055954.tif 000282
【請求項１２】
前記化合物が、以下の式を有する、請求項１に記載の方法。
【化６】
2019055954.tif 000283
【請求項１３】
前記化合物が、以下の式を有する、請求項１に記載の方法。
【化７】
2019055954.tif 000284
【請求項１４】
前記化合物が、以下の式を有する、請求項１に記載の方法。
【化８】
2019055954.tif 000285
【請求項１５】
前記化合物が、以下の式を有する、請求項１に記載の方法。
【化９】
2019055954.tif 000286
【請求項１６】
前記化合物が、以下の式を有する、請求項１に記載の方法。
【化１０】
2019055954.tif 000287
【請求項１７】
前記化合物が、以下の式を有する、請求項１に記載の方法。
【化１１】
2019055954.tif 000288
【請求項１８】
前記化合物が、以下の式を有する、又はその薬理学的に許容される塩である、請求項１に記載の方法。
【化１２】
2019055954.tif 000289
［式中、Ｒは、Ｃ（Ｈ）Ｘ、ＮＸ、Ｃ（Ｈ）Ｙ又はＣ（Ｘ）２であり、
ここで、Ｘは、水素、直鎖、分枝又は環状Ｃ１〜Ｃ５アルキル基であり、メチル、エチル、プロピル、シクロプロピル、イソプロピル、ブチル、ｓｅｃ−ブチル、ｔｅｒｔ−ブチル、イソブチル、シクロブチル、ペンチル、イソペンチル、ネオペンチル、ｔｅｒｔ−ペンチル、ｓｅｃ−ペンチル及びシクロペンチルを含み、Ｙは、ＮＲ１Ｒ２であり、ここでＲ１及びＲ２は独立してＸであり、
又はＲ１及びＲ２はアルキル基であり、これらは一緒に１又は２個のヘテロ原子（Ｎ、Ｏ又はＳ）を含む架橋を形成し、かつ、２個のＸ基は一緒にアルキル架橋又は１又は２個のヘテロ原子（Ｎ、Ｓ又はＯ）を含む架橋を形成して、スピロ化合物を形成することができる。］
【請求項１９】
前記化合物が、以下から成る群より選択される、請求項１に記載の方法。
【化１３】
2019055954.tif 000290
2019055954.tif 000291
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2019055954.tif 000304
2019055954.tif 000305
【請求項２０】
前記化合物が以下の通りである、請求項１９に記載の方法。
【化１４】
2019055954.tif 000306
【請求項２１】
前記化合物が以下の通りである、請求項１９に記載の方法。
【化１５】
2019055954.tif 000307
【請求項２２】
前記化合物が以下の通りである、請求項１９に記載の方法。
【化１６】
2019055954.tif 000308
【請求項２３】
前記化合物が以下の通りである、請求項１９に記載の方法。
【化１７】
2019055954.tif 000309
【請求項２４】
一つのＸは、Ｎであり、一つのＸは、Ｃである、請求項１に記載の方法。
【請求項２５】
前記被検体はヒトである、請求項１〜２４のいずれかに記載の方法。
【請求項２６】
前記細胞毒化合物への曝露の前２４時間以下の時間に、前記化合物が前記被検体に投与される、請求項１〜２４のいずれかに記載の方法。
【請求項２７】
前記被検体が、癌を有する、請求項１〜２６のいずれかに記載の方法。
【請求項２８】
前記被検体が、異常細胞増殖を有する、請求項１〜２６のいずれかに記載の方法。
【請求項２９】
前記癌又は異常細胞増殖が、網膜芽細胞腫腫瘍サプレッサタンパク質（ＲＢ）の損失又は欠如によって特徴付けられる、請求項１〜２８のいずれかに記載の方法。
【請求項３０】
前記癌が、小細胞肺癌、網膜芽細胞腫、トリプルネガティブ乳癌、ヒト乳頭腫ウイルス（ＨＰＶ）ポジティブ頭頚部癌、又はＨＰＶポジティブ子宮頸癌である、請求項１〜２６のいずれかに記載の方法。
【請求項３１】
前記化学療法剤が、アルキル化剤、ＤＮＡインターカレータ、タンパク合成阻害剤、ＤＮＡ又はＲＮＡ合成の阻害剤、ＤＮＡ塩基同族体、トポイソメラーゼ阻害剤、テロメラーゼ阻害剤又はテロメアＤＮＡ結合性化合物からから選択される、請求項１〜３０のいずれかに記載の方法。
【請求項３２】
前記癌が小細胞肺癌であり、前記化学療法剤が、エトポシド、シスプラチン及びカルボプラチン又はこれらの組合せから成る群より選択される、請求項１〜３０のいずれかに記載の方法。
【請求項３３】
ＨＳＰＣｓの少なくとも８０％以上は、前記化合物の最後の投与から３６時間未満で、細胞サイクルにリエントリーする、請求項１〜３２のいずれかに記載の方法。
【請求項３４】
前記正常細胞は、造血幹細胞又は造血前駆細胞である、請求項１〜３３のいずれかに記載の方法。
【請求項３５】
前記正常細胞は、腎臓上皮細胞である、請求項１〜３３のいずれかに記載の方法。
【請求項３６】
併用療法で、被験体におけるＲｂネガティブ癌又は異常細胞増殖を治療する方法であって、
化学療法剤と、式Ｉ、ＩＩ、ＩＩＩ、ＩＶ又はＶから成る群より選択されるサイクリン依存的キナーゼ４／６（ＣＤＫ４／６）化合物、又は、その薬理学的に許容される塩、又は、別の化学療法剤化合物と組み合わせた、組合せの有効量を、被験体に投与することを含み、
【化１８】
2019055954.tif 000310
式中、Ｚは、−（ＣＨ２）ｘ−で、ｘは１、２、３、もしくは４、または−Ｏ−（ＣＨ２）ｚ−で、ｚは２、３又は４であり、
各Ｘは、独立してＣＨ又はＮであり、
各Ｘ’は、独立してＣＨ又はＮであり、
Ｘ’’は、独立してＣＨ２、Ｓ又はＮＨであり、構成部分が安定５員環となるよう配置され、
Ｒ、Ｒ８及びＲ１１は、独立してＨ、Ｃ１−Ｃ３のアルキル又はハロアルキル、シクロアルキル又はＮ、Ｏ又はＳから選択される１つ以上のヘテロ原子を含んだシクロアルキル、−（アルキレン）ｍ−Ｃ３−Ｃ８シクロアルキル、−（アルキレン）ｍ−アリール、−（アルキレン）ｍ−ヘテロシクロ、−（アルキレン）ｍ−ヘテロアリール、−（アルキレン）ｍ−ＮＲ３Ｒ４、−（アルキレン）ｍ−Ｃ（Ｏ）−ＮＲ３Ｒ４、−（アルキレン）ｍ−Ｏ−Ｒ５、−（アルキレン）ｍ−  Ｓ（Ｏ）ｎ−Ｒ５、又は−（アルキレン）ｍ−Ｓ（Ｏ）ｎ−ＮＲ３Ｒ４であり、これらのいずれかは、電子価的に可能な限りにおいて１つ以上のＲ基で任意に独立に置換されてもよく、同じ又は隣接した原子に結合した２つのＲｘ基を任意に組み合せて環を形成してもよく、
各Ｒ１は独立して、アリール、アルキル、シクロアルキル又はハロアルキルであり、前記アルキル、シクロアルキル及びハロアルキル基の各々は、鎖中の炭素の代わりに任意にＯ又はＮヘテロ原子を含み、
隣接した環原子又は同じ環原子の２つのＲ１のものは、環原子と共に、任意に結合される３−８員環を形成し、
ｙは、０、１、２、３又は４であり、
Ｒ２は、−（アルキレン）ｍ−ヘテロシクロ、−（アルキレン）ｍ−ヘテロアリール、−（アルキレン）ｍ−ＮＲ３Ｒ４、−（アルキレン）ｍ−Ｃ（Ｏ）−ＮＲ３Ｒ４、−（アルキレン）ｍ−Ｃ（Ｏ）−Ｏ−アルキル、−（アルキレン）ｍ−Ｏ−Ｒ５、−（アルキレン）ｍ−Ｓ（Ｏ）ｎ−Ｒ５、又は−（アルキレン）ｍ−Ｓ（Ｏ）ｎ−ＮＲ３Ｒ４であり、
これらのいずれかは、電子価的に可能な限りにおいて１つ以上のＲｘ基で任意に独立して置換されてもよく
同じ又は隣接した原子に結合した２つのＲｘ基は、任意に組み合わされて環を形成してもよく、
ｍは０又は１、ｎは０、１又は２であり、
Ｒ３及びＲ４はその発生毎に、独立して以下の通りである：
（ｉ）水素又は
（ｉｉ）アルキル、シクロアルキル、ヘテロシクロ、アリール、ヘテロアリール、シクロアルキルアルキル、ヘテロシクロアルキル、アリールアルキル又はヘテロアリールアルキルであり、
これらのいずれかは、電子価的に可能な限りにおいて１つ以上のＲｘ基で任意に独立して置換されてもよく
同じ又は隣接した原子に結合した２つのＲｘ基は任意に組み合わされて環を形成してもよく、又は
Ｒ３及びＲ４は、これらが結合される窒素原子と共に組み合わされて、電子価的に可能な限りにおいて１つ以上のＲｘ基で任意に独立して置換されるヘテロシクロ環を形成してもよく、
同じ又は隣接した原子に結合した２つのＲｘ基は任意に組み合わされて環を形成してもよく、
Ｒ５及びＲ５＊はその発生毎に、独立して以下の通りである：
（ｉ）水素又は
（ｉｉ）アルキル、アルケニル、アルキニル、シクロアルキル、ヘテロシクロ、アリール、ヘテロアリール、シクロアルキルアルキル、ヘテロシクロアルキル、アリールアルキル又はヘテロアリールアルキルであって、これらのいずれかは、電子価的に可能な限りにおいて１つ以上のＲｘ基で任意に独立して置換されてもよく
Ｒｘは、その発生毎に独立して、ハロ、シアノ、ニトロ、オキソ、アルキル、ハロアルキル、アルケニル、アルキニル、シクロアルキル、シクロアルケニル、ヘテロシクロ、アリール、ヘテロアリール、アリールアルキル、ヘテロアリールアルキル、シクロアルキルアルキル、ヘテロシクロアルキル、−（アルキレン）ｍ−ＯＲ５、−（アルキレン）ｍ−Ｏ−アルキレン−ＯＲ５、−（アルキレン）ｍ−Ｓ（Ｏ）ｎ−Ｒ５、−（アルキレン）ｍ−ＮＲ３Ｒ４、−（アルキレン）ｍ−ＣＮ、−（アルキレン）ｍ−Ｃ（Ｏ）−Ｒ５、−（アルキレン）ｍ−Ｃ（Ｓ）−Ｒ５、−（アルキレン）ｍ−Ｃ（Ｏ）−ＯＲ５、−（アルキレン）ｍ−Ｏ−Ｃ（Ｏ）−Ｒ５、−（アルキレン）ｍ−Ｃ（Ｓ）−ＯＲ５、−（アルキレン）ｍ−Ｃ（Ｏ）−（アルキレン）ｍ−ＮＲ３Ｒ４、−（アルキレン）ｍ−Ｃ（Ｓ）−ＮＲ３Ｒ４、−（アルキレン）ｍ−Ｎ（Ｒ３）−Ｃ（Ｏ）−ＮＲ３Ｒ４、−（アルキレン）ｍ−Ｎ（Ｒ３）−Ｃ（Ｓ）−ＮＲ３Ｒ４、−（アルキレン）ｍ−Ｎ（Ｒ３）−Ｃ（Ｏ）−Ｒ５、−（アルキレン）ｍ−Ｎ（Ｒ３）−Ｃ（Ｓ）−Ｒ５、−（アルキレン）ｍ−Ｏ−Ｃ（Ｏ）−ＮＲ３Ｒ４、−（アルキレン）ｍ−Ｏ−Ｃ（Ｓ）−ＮＲ３Ｒ４、−（アルキレン）ｍ−ＳＯ２−ＮＲ３Ｒ４、−（アルキレン）ｍ−Ｎ（Ｒ３）−ＳＯ２−Ｒ５、−（アルキレン）ｍ−Ｎ（Ｒ３）−ＳＯ２−ＮＲ３Ｒ４、−（アルキレン）ｍ−Ｎ（Ｒ３）−Ｃ（Ｏ）−ＯＲ５、−（アルキレン）ｍ−Ｎ（Ｒ３）−Ｃ（Ｓ）−ＯＲ５、又は−（アルキレン）ｍ−Ｎ（Ｒ３）−ＳＯ２−Ｒ５であり、
ここで、前記アルキル、ハロアルキル、アルケニル、アルキニル、シクロアルキル、シクロアルケニル、ヘテロシクロ、アリール、ヘテロアリール、アリールアルキル、ヘテロアリールアルキル、シクロアルキルアルキル及びヘテロシクロアルキル基は、以下の１つ以上でさらに独立して置換されてもよく：
−（アルキレン）ｍ−ＣＮ、−（アルキレン）ｍ−ＯＲ５＊、−（アルキレン）ｍ−Ｓ（Ｏ）ｎ−Ｒ５＊、−（アルキレン）ｍ−ＮＲ３＊Ｒ４＊、−（アルキレン）ｍ−Ｃ（Ｏ）−Ｒ５＊、−（アルキレン）ｍ−Ｃ（＝Ｓ）Ｒ５＊、−（アルキレン）ｍ−Ｃ（＝Ｏ）ＯＲ５＊、−（アルキレン）ｍ−ＯＣ（＝Ｏ）Ｒ５＊、−（アルキレン）ｍ−Ｃ（Ｓ）−ＯＲ５＊、−（アルキレン）ｍ−Ｃ（Ｏ）−ＮＲ３＊Ｒ４＊、−（アルキレン）ｍ−Ｃ（Ｓ）−ＮＲ３＊Ｒ４＊、−（アルキレン）ｍ−Ｎ（Ｒ３＊）−Ｃ（Ｏ）−ＮＲ３＊Ｒ４＊、−（アルキレン）ｍ−Ｎ（Ｒ３＊）−Ｃ（Ｓ）−ＮＲ３＊Ｒ４＊、−（アルキレン）ｍ−Ｎ（Ｒ３＊）−Ｃ（Ｏ）−Ｒ５＊、−（アルキレン）ｍ−Ｎ（Ｒ３＊）−Ｃ（Ｓ）−Ｒ５＊、−（アルキレン）ｍ−Ｏ−Ｃ（Ｏ）−ＮＲ３＊Ｒ４＊、−（アルキレン）ｍ−Ｏ−Ｃ（Ｓ）−ＮＲ３＊Ｒ４＊、−（アルキレン）ｍ−ＳＯ２−ＮＲ３＊Ｒ４＊、−（アルキレン）ｍ−Ｎ（Ｒ３＊）−ＳＯ２−Ｒ５＊、−（アルキレン）ｍ−Ｎ（Ｒ３＊）−ＳＯ２−ＮＲ３＊Ｒ４＊、−（アルキレン）ｍ−Ｎ（Ｒ３＊）−Ｃ（Ｏ）−ＯＲ５＊、−（アルキレン）ｍ−Ｎ（Ｒ３＊）−Ｃ（Ｓ）−ＯＲ５＊、又は−（アルキレン）ｍ−Ｎ（Ｒ３＊）−ＳＯ２Ｒ５＊、の１つ以上でさらに独立して置換されてもよく、
ｎは、０、１又は２であり、ｍは０又は１であり、
Ｒ３＊及びＲ４＊は、独立してその発生毎に以下の通りであり：
（ｉ）水素又は
（ｉｉ）アルキル、アルケニル、アルキニルシクロアルキル、ヘテロシクロ、アリール、ヘテロアリール、シクロアルキルアルキル、ヘテロシクロアルキル、アリールアルキル又はヘテロアリールアルキルであって、
これらのいずれかは、電子価的に可能な限りにおいて１つ以上のＲｘ基で任意に独立して置換されてもよく又は
Ｒ３＊及びＲ４＊は、それらに結合される窒素原子と共に組合せられて、価電子によって与えられる１つ以上のＲｘ基と任意に独立して置換されるヘテロシクロ環を形成してもよく、
Ｒ６はＨ又は低級アルキル、−（アルキレン）ｍ−ヘテロシクロ、−（アルキレン）ｍ−ヘテロアリール、−（アルキレン）ｍ−ＮＲ３Ｒ４、−（アルキレン）ｍ−Ｃ（Ｏ）−ＮＲ３Ｒ４、−（アルキレン）ｍ−Ｏ−Ｒ５、−（アルキレン）ｍ−Ｓ（Ｏ）ｎ−Ｒ５、又は−（アルキレン）ｍ−Ｓ（Ｏ）ｎ−ＮＲ３Ｒ４であり、これらのいずれかは、電子価的に可能な限りにおいて１つ以上のＲｘ基で任意に独立して置換されてもよく、
同じ又は隣接した原子に結合した２つのＲｘ基は任意に組み合わされて環を形成してもよく、
Ｒ１０は
（ｉ）  ＮＨＲＡであり、
ここで、ＲＡは非置換又は置換Ｃ１−Ｃ８アルキル、シクロアルキルアルキル、又は、−ＴＴ−ＲＲ、Ｃ１−Ｃ８シクロアルキル、又は、Ｎ、Ｏ及びＳから選択されるヘテロ原子を１つ以上含むシクロアルキルであり、ＴＴは、非置換又は置換Ｃ１−Ｃ８アルキル又はＣ３−Ｃ８シクロアルキルリンカーであり、そして、ＲＲはヒドロキシル、非置換又は置換Ｃ１−Ｃ６アルコキシ、アミノ、非置換又は置換Ｃ１−Ｃ６アルキルアミノ、非置換又は置換ジ−Ｃ１−Ｃ６アルキルアミノ、非置換又は置換Ｃ６−Ｃ１０アリール、１又は２個の５員又は６員環及びＮ、Ｏ及びＳから選択される１−４個のヘテロ原子を含む非置換又は置換ヘテロアリール、非置換又は置換Ｃ３−Ｃ１０炭素環式化合物、又は、１又は２個の５員又は６員環及びＮ、Ｏ及びＳから選択される１−４個のヘテロ原子を含む非置換又は置換ヘテロ環であり、又は
（ｉｉ）−Ｃ（Ｏ）−Ｒ１２又は−Ｃ（Ｏ）Ｏ−Ｒ１３であり、
ここで、Ｒ１２は、ＮＨＲＡ又はＲＡであり、Ｒ１３は、ＲＡである、前記方法。
【請求項３７】
前記ＣＤＫ４／６阻害物質が、以下の通りである：
【化１９】
2019055954.tif 000311
［式中、Ｒは、Ｃ（Ｈ）Ｘ、ＮＸ、Ｃ（Ｈ）Ｙ又はＣ（Ｘ）２であり、
ここで、Ｘは、水素、直鎖、分枝又は環状Ｃ１〜Ｃ５アルキル基であり、メチル、エチル、プロピル、シクロプロピル、イソプロピル、ブチル、ｓｅｃ−ブチル、ｔｅｒｔ−ブチル、イソブチル、シクロブチル、ペンチル、イソペンチル、ネオペンチル、ｔｅｒｔ−ペンチル、ｓｅｃ−ペンチル及びシクロペンチルを含み、
Ｙは、ＮＲ１Ｒ２であり、ここでＲ１及びＲ２は独立してＸであり、
又はＲ１及びＲ２はアルキル基であり、これらは一緒に１又は２個のヘテロ原子（Ｎ、Ｏ又はＳ）を含む架橋を形成し、かつ、２個のＸ基は一緒にアルキル架橋又は１又は２個のヘテロ原子（Ｎ、Ｓ又はＯ）を含む架橋を形成して、スピロ化合物を形成することができる］、又は、その薬理学的に許容される塩又はプロドラッグである、請求項３６に記載の方法。
【請求項３８】
前記化合物が、以下から成る群より選択される、請求項３６に記載の方法。
【化２０】
2019055954.tif 000312
2019055954.tif 000313
2019055954.tif 000314
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2019055954.tif 000326
2019055954.tif 000327
【請求項３９】
前記化合物が以下の通りである、請求項３６に記載の方法。
【化２１】
2019055954.tif 000328
【請求項４０】
前記化合物が以下の通りである、請求項３６に記載の方法。
【化２２】
2019055954.tif 000329
【請求項４１】
前記化合物が以下の通りである、請求項３６に記載の方法。
【化２３】
2019055954.tif 000330
【請求項４２】
前記化合物が以下の通りである、請求項３６に記載の方法。
【化２４】
2019055954.tif 000331
【請求項４３】
前記化学療法剤化合物が、ｍＴＯＲ阻害剤、ＰＩ３キナーゼ阻害剤、デュアルｍＴＯＲ−ＰＩ３Ｋ阻害剤、ＭＥＫ阻害剤、ＲＡＳ阻害剤、ＡＬＫ阻害剤、ＡＫＴ阻害剤、ＨＳＰ阻害剤、ＢＣＬ−２阻害剤、アポトーシス誘発化合物、ＰＤ−１阻害剤及びＦＬＴ−３阻害剤、又はこれらの組み合わせを含む化合物から選択される、請求項３６に記載の方法。
【請求項４４】
以下の式の化合物：
【化２５】
2019055954.tif 000332
又はその薬理学的に許容される塩。
【請求項４５】
請求項１の化合物、又はその薬理学的に許容される塩、を含む医薬品組成物であって、
適切な用量形態で、化学療法中に、正常細胞の化学防護を達成する、前記医薬品組成物。
【請求項４６】
サイクリン依存的キナーゼ４／６（ＣＤＫ４／６）複製非依存的癌又は異常細胞増殖のための治療を受けている被験体における、ここに記載されたいずれかの化合物の使用であって、前記正常細胞は、造血幹細胞、造血前駆細胞又は腎臓上皮細胞である、前記使用。
【請求項４７】
化学療法剤と組み合わせた、被験体のＲｂネガティブ癌又は異常細胞増殖の治療に対する、ここに記載されたいずれかの化合物の使用。
【請求項４８】
前記化合物が、請求項１９に記載されたものである、請求項４６に記載の使用。
【請求項４９】
前記化合物が、請求項１９に記載されたものである、請求項４７に記載の使用。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
関連出願
本出願は、２０１３年３月１５日に出願の米国仮特許出願番号第６１／７９８，７７２号、２０１３年８月１日に出願の米国仮特許出願番号第６１／８６１，３７４号、２０１３年１２月３日に出願の仮米国特許出願番号第６１／９１１，３５４号、及び、仮２０１４年３月７日に出願の米国特許出願番号第６１／９４９，７８６号の利益を主張するものである。これらの出願の全部が、全ての目的のために参照事項としてここに包含される。
【０００２】
政府の利益
米国政府は、本発明に対して、アレルギー及び感染症学会により与えられる承認番号５Ｒ４４ＡＩ０８４２８４号の支持に基づく権利を有する。
【０００３】
本発明は、正常細胞を一時的に保護するため、特に、化学療法剤に損害を与えるＤＮＡに関連した損害から、造血幹細胞及び前駆細胞（ＨＳＰＣ）、ならびに腎細胞を保護するための、改善された化合物、組成物及び方法の領域に関する。一つの態様では、増殖異常症の治療のためにＤＮＡ損傷化学療法を受けている被検体に投与される場合に、高選択的かつ短期で一時的作用のサイクリン依存キナーゼ４／６（ＣＤＫ４／６）阻害物質として作用する開示化合物を用いて、正常細胞の保護を向上することが、開示される。
【背景技術】
【０００４】
化学療法は、癌、腫瘍、乾癬、関節炎、自己免疫疾患及び多発性硬化症その他を含む一定の増殖異常症を治療する細胞毒（典型的にはＤＮＡ損傷）薬剤の使用のことをいう。
化学療法化合物は、非特異的な傾向があり、特に高用量では、通常の高速で分裂する細胞に対して、有毒である。これにより、しばしば、化学療法を受けている患者において、様々な副作用が生じる。骨髄抑制、すなわち、骨髄中における血球の生産の深刻な低下が、この副作用に一つである。それは、骨髄抑制（貧血、好中球減少症、無顆粒球症及び血小板減少）及びリンパ球減少の２つにより特徴付けられる。好中球減少症は、循環好中球数の選択的減少及び細菌感染症に対する罹病性の増大により特徴付けられる。貧血、すなわち、赤血球又は赤血球の数、ヘモグロビンの量、又は赤血球濃厚液パックの体積の、低下（ヘマトクリットの定量によって特徴づけられる）は、アメリカ合衆国における化学療法を受けている癌患者の約６７  ％に影響を及ぼしている。ＢｉｏＷｏｒｌｄ  Ｔｏｄａｙ誌、２００２年７月２３日を４ページ、参照のこと。血小板減少は、血小板数の低下のことであり、出血の罹病性が上昇する。リンパ球減少は、循環リンパ球（Ｔ細胞及びＢ細胞とも呼ばれる）の数の低下により特徴づけられる、化学療法に共通の副作用である。リンパ球減少患者は、多数種の感染症にかかりやすい傾向がある。骨髄抑制は、癌化学療法剤の用量規定毒性を高く示し続けるため、疾患の管理及び生残性を損ない得るような化学療法剤用量強度の削減が必要となる潜在的な要求が生じるとともに、死亡率もかなり大きくなる。
【０００５】
将来の及び過去に遡る無作為臨床試験からの多くの証拠は、化学療法剤誘発性骨髄抑制は、長期の疾患の管理及び生残性を損なうことを、明らかに示している（Ｌｙｍａｎ，  Ｇ．Ｈ．，  Ｃｈｅｍｏｔｈｅｒａｐｙ  ｄｏｓｅ  ｉｎｔｅｎｓｉｔｙ  ａｎｄ  ｑｕａｌｉｔｙ  ｃａｎｃｅｒ  ｃａｒｅ  （Ｏｎｃｏｌｏｇｙ  （Ｗｉｌｌｉｓｔｏｎ  Ｐａｒｋ），  ２００６．  ２０（１４  Ｓｕｐｐｌ  ９）：  ｐ．  １６−２５））。
更に、全米総合癌センターネットワークのガイドラインで推奨される例えば肺、胸及び結腸直腸癌の治療計画は、顕著な骨髄抑制にますます関連するようになるが、それでも、初期疾患ならびに進行期又は転移性疾病を治療するために、ますます推奨されている（Ｓｍｉｔｈ，  Ｒ．Ｅ．，  Ｔｒｅｎｄｓ  ｉｎ  ｒｅｃｏｍｍｅｎｄａｔｉｏｎｓ  ｆｏｒ  ｍｙｅｌｏｓｕｐｐｒｅｓｓｉｖｅ  ｃｈｅｍｏｔｈｅｒａｐｙ  ｆｏｒ  ｔｈｅ  ｔｒｅａｔｍｅｎｔ  ｏｆ  ｓｏｌｉｄ  ｔｕｍｏｒｓ．  Ｊ  Ｎａｔｌ  Ｃｏｍｐｒ  Ｃａｎｃ  Ｎｅｔｗ，  ２００６．  ４（７）：  ｐ．  ６４９−５８）。癌患者に対しさらに集中的な治療行うことに対するこの傾向は、相対的な用量強度を最適化しつつ、骨髄抑制及び合併症の危険性を最小にするための改善された手段に対する需要を生み出している。
骨髄抑制に加えて、化学療法剤は、腎臓上皮細胞等その他の正常細胞に悪影響を与え得るとともに、尿細管上皮の死による急性腎臓損傷の発現という潜在的なリスクもある。急性腎臓損傷は、慢性腎疾患、多臓器障害、敗血症及び死につながり得る。
骨髄抑制、腎毒性及び他の化学療法細胞毒性を最小にする１つのメカニズムとしては、化学療法の計画的な用量強度を低減することが挙げられる。しかしながら、投与量の低下又はサイクルの遅れは、効果を減じてしまい、また、最終的に、長期的な疾患の管理及び生残性を損ない得る。
【０００６】
特定の化学療法化合物の副作用のいくつかを低減するために、小分子が用いられてきた。例えば、骨髄細胞及び胃腸粘膜細胞に対してのメトトレキセートの影響を緩和するために、ロイコボリンが用いられてきた。アルキル化又はプラチナを含む化学療法剤を受けている患者において、好中球減少症に関連した発熱及び粘膜炎の発生率を低減するために、アミホスチンが用いられてきた。また、デクスラゾキサンは、アンスラサイクリン抗癌化合物から心臓保護を提供するために用いられてきた。都合の悪いことに、デクスラゾキサン及びアミホスチンといった多くの癌防御物質が、併用される化学療法の有効性を減じてしまうことがあるという懸念がある。
【０００７】
特に化学療法剤に関連した貧血及び好中球減少症に対する付加的な癌防御物質療法は、成長因子が用いられる。造血成長因子は、組換え型タンパクとして市販品を入手可能である。これらのタンパクは、顆粒球コロニー刺激因子（Ｇ−ＣＳＦ）並びに顆粒球−マクロファージコロニー刺激因子（ＧＭ−ＣＳＦ）及び好中球減少症の治療のためのそれらの誘導体と、ＥＰＯ（ＥＰＯ）並びに貧血の治療のためのその誘導体とを含む。しかしながら、これらの組み換え型タンパクは高価である。更に、ＥＰＯは、癌患者において顕著な毒性を有し、いくつかの大規模ランダム化実験では、血栓症、再発及び死を上昇させる。Ｇ−ＣＳＦ及びＧＭ−ＣＳＦは、白血病や脊髄形成異常等の二次骨髄異常症の遅発性（＞治療後２年）の危険が増大し得る。従って、それらの使用は限定的であり、必要とする全ての患者がもはや容易に利用できない。さらに、ある種の血球系統に対して、成長因子がその回復を早めることができるものの、血小板、マクロファージ、Ｔ細胞又はＢ細胞の抑制を治療するための治療法は、存在していない。
【０００８】
Ｒｏｂｅｒｔｓらは、２０１２年に、ファイザー社の化合物ＰＤ−  ０３３２９９１が、ＨＳＰＣｓ等の正常細胞のＣＤＫ４／６依存サブセットにおける一時的な細胞サイクル進行の停止を誘導したことを報告している（Ｒｏｂｅｒｔｓ  ｅｔ  ａｌ．  Ｍｕｌｔｉｐｌｅ  Ｒｏｌｅｓ  ｏｆ  Ｃｙｃｌｉｎ−Ｄｅｐｅｎｄｅｎｔ  Ｋｉｎａｓｅ  ４／６  Ｉｎｈｉｂｉｔｏｒｓ  ｉｎ  Ｃａｎｃｅｒ  Ｔｈｅｒａｐｙ．  ＪＮＣＩ  ２０１２；１０４（６）：４７６−４８７を参照）。この化合物は現在、ファイザー社により、エストロゲン陽性、ＨＥＲ２マイナスの乳癌に対する抗腫瘍薬としての臨床試験が行われている。
造血幹細胞は、前駆細胞を生み出し、これは次いで、図１で示すように血液の全ての分化した成分（例えば、リンパ球、赤血球、血小板、顆粒球、単核細胞）を、生み出す。ＨＳＰＣｓは、増殖のためにＣＤＫ４／６の活性を必要とする（Ｒｏｂｅｒｔｓ  ｅｔ  ａｌ．  Ｍｕｌｔｉｐｌｅ  Ｒｏｌｅｓ  ｏｆ  Ｃｙｃｌｉｎ−Ｄｅｐｅｎｄｅｎｔ  Ｋｉｎａｓｅ  ４／６  Ｉｎｈｉｂｉｔｏｒｓ  ｉｎ  Ｃａｎｃｅｒ  Ｔｈｅｒａｐｙ．  ＪＮＣＩ  ２０１２；１０４（６）：４７６−４８７を参照）。健康な腎臓では、腎臓上皮はまれに、細胞サイクルに入る（上皮細胞の約１％）。しかしながら、腎臓が損傷した後は、上皮増殖が激しく増加する（Ｈｕｍｐｈｒｅｙｓ，  Ｂ．Ｄ．  ｅｔ  ａｌ．  Ｉｎｔｒｉｎｓｉｃ  ｅｐｉｔｈｅｌｉａｌ  ｃｅｌｌｓ  ｒｅｐａｉｒ  ｔｈｅ  ｋｉｄｎｅｙ  ａｆｔｅｒ  ｉｎｊｕｒｙ．  Ｃｅｌｌ  Ｓｔｅｍ  Ｃｅｌｌ  ２，  ２８４−９１  （２００８）参照）。
【０００９】
重要な事は、腎損傷に続いて、生き残っている腎臓上皮細胞が複製して、腎臓管状上皮への損害を修復する（Ｈｕｍｐｈｒｅｙｓ，  Ｂ．Ｄ．  ｅｔ  ａｌ．  Ｒｅｐａｉｒ  ｏｆ  ｉｎｊｕｒｅｄ  ｐｒｏｘｉｍａｌ  ｔｕｂｕｌｅ  ｄｏｅｓ  ｎｏｔ  ｉｎｖｏｌｖｅ  ｓｐｅｃｉａｌｉｚｅｄ  ｐｒｏｇｅｎｉｔｏｒｓ．  Ｐｒｏｃ  Ｎａｔｌ  Ａｃａｄ  Ｓｃｉ  Ｕ  Ｓ  Ａ  １０８，  ９２２６−３１  （２０１１）参照）。
また、Ｓｈａｒｐｌｅｓｓらにより出願された国際出願公報ＷＯ２０１０１３２７２５号を参照。特定のピリド［２，３−ｄ］ピリミジン、２−アニリノピリミジン、ジアリール尿素、ベンゾイル−２、４−ジアミノチアゾール、インドロ［６，７−ａ］ピロロ［３，４−ｃ］カルバゾール、及びオキシインドールを含む多数のＣＤＫ４／６阻害物質が特定された（Ｐ．Ｓ．  Ｓｈａｒｍａ，  Ｒ．  Ｓｈａｒｍａ，  Ｒ．  Ｔｙａｇｉ，  Ｃｕｒｒ．  Ｃａｎｃｅｒ  Ｄｒｕｇ  Ｔａｒｇｅｔｓ  ８  （２００８）  ５３−７５参照）国際出願公報ＷＯ０３／０６２２３６号は、ＣＤＫ４／６に対する選択性を示す、Ｒｂ陽性癌の治療用の一連の２−（ピリジン−２−イルアミノ−ピリド［２，３］ピリミジン−７−オンを特定し、これには、６−アセチル−８−シクロペンチル−５−メチル−２−（５−ピペラジン−１−イル−ピリジン−２−イルアミノ）−８Ｈ−ピリド−［２，３−ｄ］−ピリミジン−７  １（ＰＤ０３３２９９１）が含まれる。臨床試験研究は、ＰＤ０３３２９９１を用いてグレード３／４好中球減少症と白血球減少症の割合を報告し、その報告では、患者の７１  ％が投与の中断を必要とし、３５  ％が投与量の削減を必要とし、１０  ％が中止に至る有害事象が生じている（Ｆｉｎｎ，  Ａｂｓｔｒａｃｔ  Ｓ１−６，  ＳＡＢＣＳ  ２０１２参照）。Ｖａｎｄｅｒ  Ｗｅｌらは、強力かつ選択的ＣＤＫ４阻害物質としてヨウ化含有ピリド［２，３−ｄ］ピリミジン−７−オン（ＣＫＩＡ）を開示する（ＶａｎｄｅｒＷｅｌ  ｅｔ  ａｌ．，  Ｊ．  Ｍｅｄ．  Ｃｈｅｍ．  ４８  （２００５）  ２３７１−２３８７参照）。グラクソグループ社により出願された国際出願公報ＷＯ９９／１５５００号は、プロテインキナーゼ及びセリン／トレオニンキナーゼ阻害物質を記載する。ノバルティスＡＧによって出願された国際出願公報ＷＯ２０１０／０２０６７５号は、ＣＤＫ阻害物質としてピロロピリミジン化合物を記載する。ノバルティス社によって出願された国際出願公報ＷＯ２０１１／１０１４０９号においても、ＣＤＫ４／６阻害力を有するピロロピリミジンを記載する。ノバルティス社によって出願された国際出願公報ＷＯ２００５／０５２１４７号及びジャンセンファルマ社によって出願された国際出願公報ＷＯ２００６／０７４９８５号は、添加ＣＤＫ４阻害物質を開示する。Ｂａｒｖｉａｎらによって出願された米国特許公開公報ＵＳ２００７／０１７９１１８号は、炎症を治療するために、ＣＤＫ４阻害物質の使用を教示する。Ｔａｖａｒｅｓによって出願されＧ１  Ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃｓ社に譲渡された国際出願公報ＷＯ２０１２／０６１１５６号は、ＣＤＫ阻害物質を記載する。Ｔａｖａｒｅｓによって出願されＧ１  Ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃｓ社に譲渡された国際出願公報ＷＯ２０１３／１４８７４８号は、ラクタムキナーゼ阻害物質を記載する。Ｓｈａｒｐｌｅｓｓらの米国特許公開公報ＵＳ２０１１／０２２４２２７号は、特定のＣＤＫ４／６阻害物質、例えばＰＤ０３３２９９１及び２ＢｒＩＣ（Ｚｈｕ，  ｅｔ  ａｌ．，  Ｊ．  Ｍｅｄ．  Ｃｈｅｍ．，  ４６  （１１）  ２０２７−２０３０  （２００３）、ＰＣＴ／ＵＳ２００９／０５９２８１を参照）を使用して、化学療法治療を受け���いる被検体におけるＨＳＰＣｓに関する細胞毒性化合物の影響を低減する又は予防することを記載する。また、米国特許公開公報ＵＳ２０１２／０１００１００号を参照のこと。Ｓｔｏｎｅ，  ｅｔ  ａｌ．，  Ｃａｎｃｅｒ  Ｒｅｓｅａｒｃｈ  ５６，  ３１９９−３２０２  （Ｊｕｌｙ  １，１９９６）は、化学療法からの保護として可逆的なｐ１６媒介細胞サイクル進行の停止を記載する。
【発明の概要】
【００１０】
従って、化学療法を行う間に、患者を治療するための新化合物、組成物及び方法を提供することが、本発明の目的である。
【００１１】
一実施形態では、将来、現在、又は過去に化学療法剤（典型的にはＤＮＡ損傷物質）に曝露される被検体、典型的にはヒト、における、造血幹細胞及び造血前駆細胞（合わせてＨＳＰＣｓと呼ぶ）、及び／又は腎臓上皮細胞等のＣＤＫ４／６複製依存正常細胞に対して、化学療法剤の毒性の影響を最小にする、改良された化合物、方法及び組成物が、提供される。
【００１２】
具体的に、本発明は、本明細書に記載されるような、式Ｉ、ＩＩ、ＩＩＩ、ＩＶ又はＶの選択化合物、その薬理学的に許容される組成物、塩、アイソトープ類似体、又はプロドラッグ、の有効量を投与することを含み、これらは、ＤＮＡ損傷化学療法剤等の化学療法剤の被検体への曝露中又は曝露後において、被験体に、例えばＨＳＰＣｓ及び／又は腎臓上皮細胞等の正常細胞の最適な一時的Ｇ１期停止を提供するものであり、ここで、ＤＮＡ損傷化学療法剤は：
【化１】
2019055954.tif 000003
である。
【００１３】
一つの非限定的な例において、化合物は、下記の表１の化合物、又はそれらの薬理学的に許容される組成物、塩、アイソトープ類似体又はプロドラッグから選択することができる。
【００１４】
一つの非限定的な例において、化合物は、下記の化合物Ｔ、Ｑ、ＧＧ、Ｕ又はＡＡＡＡ、又はそれらの薬理学的に許容される組成物、塩、アイソトープ類似体又はプロドラッグから選択することができる。
【００１５】
上記の化合物は、化学療法剤治療中に、ＣＤＫ−複製依存的正常細胞に対して改良された保護を提供し、その理由の一部としては、これらが、ｉ）短期の一時的Ｇ１期停止影響を示すこと、及び、ｉｉ）化学療法損傷影響の中断に続いて、細胞による細胞サイクルへの迅速な同期的再入が生じること、が挙げられる。これらのＣＤＫ４／６特異的短期一時的Ｇ１期停止化合物を、癌防御物質として使用することにより、例えば、細胞系統修復の促進、複製遅れのための細胞毒性リスクの低減、及び／又は、化学療法剤誘発による細胞死の最小化が、可能になる。２ＢｒＩＣ及びＰＤ０３３２９９１等の既知のＣＤＫ４／６阻害物質を用いれば化学防護を示すという報告にもかかわらず、これらの阻害物質は、薬理学的休止（ＰＱ）ストラテジーで使用するために最も理想的な化合物でなくてもよいことが見出された。例えば、２ＢｒＩＣの使用は、その生体有用性が限定的であるため、生体内に制限されており、そしてＰＤ０３３２９９１がＣＤＫ４／６に対する相対的な選択性を示すにもかかわらず、この化合物の細胞内影響は、比較的長時間作用し（Ｒｏｂｅｒｔｓ  ｅｔ  ａｌ．  Ｍｕｌｔｉｐｌｅ  Ｒｏｌｅｓ  ｏｆ  Ｃｙｃｌｉｎ−Ｄｅｐｅｎｄｅｎｔ  Ｋｉｎａｓｅ  ４／６  Ｉｎｈｉｂｉｔｏｒｓ  ｉｎ  Ｃａｎｃｅｒ  Ｔｈｅｒａｐｙ．  ＪＣＮＩ  ２０１２；１０４（６）：４７６−４８７（図２Ａ）参照）化学療法治療に対する十分な保護のために必要な限度を越えて、Ｇ１期停止の一時性を延ばしてしまう。このような長時間作用する影響により、例えば、化学療法剤に悪影響を受け又は自然の生活環中にこの環外となった血球系統の再構成に必要なＨＳＰＣ細胞系統の増殖が遅れてしまう。ＰＤ０３３２９９１により提供される長時間作用型Ｇ１期停止は、化学療法剤によって悪影響を受けている赤血球、血小板及び骨髄性細胞（単核細胞及び顆粒球）を再構成するためのＨＳＰＣｓによる細胞サイクルへの迅速な復帰、又は骨髄抑制又は血液学的毒性影響を制限するための深刻なＨＳＰＣＧ１期停止、を必要とする化学療法治療計画を有する被検体に対して、潜在的な癌防御物質としての使用が限定され得る。
【００１６】
更に、ＰＤ０３３２９９１は、例えば、数日おきに繰り返される療法等、規則的かつ反復的な間隔で化学療法剤に曝露される被検体に対して、癌防御物質としてその使用が制限され得るのであり、これは、被検体の次の化学療法サイクルに先立ち再びこれらを停止することが必要となる前に、これらの被検体のＨＳＰＣｓが直ちに細胞サイクルに復帰する能力を限定し得るからである。たとえば腎細胞等、影響を受けた他の組織に関して、腎毒性作因のために、増殖のタイムリーな再開は、たとえば腎尿細管性上皮の修復等の組織の修復に重要であり、したがって、あまりに長い期間のＰＱは、好ましくない。
【００１７】
したがって、代替的な実施形態では、本発明は、必要に応じてここに記載される化合物を有効量、ホストに投与することを含み、この化合物は、改良された治療効果を提供する以下の因子の１又はあらゆる組合せを示す（単独で、又は、そのあらゆる組合せのいずれにおいて、各々は具体的に考慮され独立して記載される）。
ｉ）ＣＤＫ４／６−複製依存的正常細胞の相当な部分（例えば少なくとも８０  ％以上）が、ヒトへの活性化合物の最後の投与から２４時間、３０時間又は３６時間未満で、又はたとえば、下記の実施例に記載されるプロトコルを使用して、プレ治療ベースライン細胞サイクル活性に戻る又は接近する（すなわち、細胞−サイクルに復帰する）。
ｉｉ）活性化合物の最後の投与から２４時間、３０時間又は３６時間未満で、正常細胞の相当な部分は、同時に細胞−サイクルに復帰する。
ｉｉｉ）阻害物質の投与から２４時間、３０時間又は３６時間未満で、活性化合物のＣＤＫ４／６禁止効果が消失する。
（ｉｖ）活性化合物は、ＣＤＫ２抑制に対してそのＩＣ５０濃度の１５００倍以上小さいＣＤＫ４及び／又はＣＤＫ６抑制のために、ＩＣ５０を有する
（ｖ）活性化合物のＣＤＫ４／６禁止効果の消失から２４時間、３０時間又は３６時間未満で、正常細胞の相当な部分が、プレ治療ベースライン細胞サイクル活性に戻る又は接近する（すなわち、細胞−サイクルに復帰する）。
（ｖｉ）被検体の血液中のＣＤＫ４／６阻害物質の濃度レベルが治療有効な濃度以下に下がった時点から２４時間、約３０時間又は約３６時間未満以内に、プレ治療ベースライン細胞サイクル活性になる（すなわち、細胞−サイクルに復帰する）。
又は
（ｖｉｉ）化学療法剤の最後の投与から２４時間、３０時間又は３６時間未満で、正常細胞の相当な部分は、同時に細胞−サイクルに復帰する。
【００１８】
化学療法剤による治療の間、ここに記載される化合物は、化学療法剤又はその組合せへの曝露の後、化学療法剤での治療の前に、被検体に投与することができる。
ここに記載される化合物は、たとえば静脈内注射又は舌下、大動脈内又は他の効率的な血流アクセス方法を介して、血流への薬剤アクセスを可能にする方法で、典型的には投与されるが、しかしながら、経口、局所、経皮、鼻腔内、筋肉内、又は、例えば溶液、懸濁液、若しくはエマルジョンによる吸入により、又は他の望ましい投与ルートを用いることができる。
【００１９】
一実施形態では、化学療法剤による治療への前２４時間、２０時間、１６時間、１２時間、８時間、又は４時間、２．５時間、２時間、１時間、１／２時間又はより短い時間未満で、化合物は、被検体に投与される。
典型的には、ここに記載される活性化合物は、化学療法剤での治療の前に被検体に投与されるため、化合物は、化学療法剤で治療前又は治療中に、ピークの血清レベルに達する。
【００２０】
一実施形態では、活性化合物は、化学療法剤曝露に対して、併用、又は、それと密接に、投与される。望む場合、活性化合物は、化学療法剤治療中に、複数回投与して、特に化学療法薬が長期間に投与され又は半減期が長い場合に、抑制を最大にすることができる。ここに記載される活性化合物は、望む場合に、化学療法剤に曝露の後、投与して、化学療法剤曝露に関係した正常細胞障害を緩和することができる。特定の実施形態では、化学療法剤曝露に続いて、多くとも約１／２時間、多くとも約１時間、多くとも約２時間、多くとも約４時間、多くとも約８時間、多くとも約１０時間、多くとも約１２時間、多くとも約１４時間、多くとも約１６時間、または、多くとも約２０時間又はそれ以上、活性化合物が投与される。特定の実施形態では、化学療法剤への曝露に続いて約１２時間〜２０時間、活性化合物は投与される。ここに記載されるＣＤＫ４／６阻害物質は、たとえばＣＤＫ２等他のＣＫＤと比較して、ＣＤＫ４及び／又はＣＤＫ６の阻害に対して、著しい選択性を示す。たとえば、本発明に記載されるＣＤＫ４／６阻害物質は、たとえばＨＳＰＣｓ又は腎臓上皮細胞等被検体のＣＤＫ４／６−複製依存的正常細胞に対する用量依存性Ｇ１期停止効果を提供し、また、ここに提供されいる方法は、化学療法剤曝露の間、たとえばＤＮＡ損傷化学療法剤が、被検体中のＣＤＫ４／６−複製依存的正常細胞に対するＤＮＡ損傷効果を示すことができる期間中、ターゲットＣＤＫ４／６−複製依存的正常細胞に対して化学防護を提供するに十分であり、その一方で、たとえばＰＤ０３３２９９１と比較してここに記載される化合物により提供される時間制限ＣＤＫ４／６禁止効果のために、これらの細胞によって化学療法剤が消費された直後に、同時発生的かつ迅速な細胞サイクルへの復帰が可能になるようになる。
【００２１】
同様に、本発明に有用なＣＤＫ４／６阻害物質は、たとえば偶発的な過量等中毒レベルの化学療法剤に曝露されたＣＤＫ４／６−複製依存的正常細胞に対する用量依存性緩和効果を提供し、たとえばＰＤ０３３２９９１と比較して、化学療法剤曝露に関連したＤＮＡ損傷の修復、及びＣＤＫ４／６禁止効果の消失の後の細胞−サイクルへの同時発生的、迅速な復帰を、可能にする。
【００２２】
一実施形態では、ここに記載したＣＤＫ４／６阻害物質の使用が、ＣＤＫ４／６阻害物質の投与の後に消失する被検体のＣＤＫ４／６−複製依存的正常細胞に対するＧ１期停止効果を生じさせることにより、投与の２４時間、３０時間、３６時間又は４０時間未満以内で、被検体の正常細胞は、それらのプレ投与ベースライン細胞−サイクル活性に戻り又は接近するようになる。
【００２３】
一実施形態では、Ｇ１期停止効果は消失するため、被検体のＣＤｋ４／６−複製依存的正常細胞は、約２４時間、３０時間、３６時間又は４０時間未満以内に、それらのプレ投与ベースライン細胞−サイクル活性へ復帰するようになる。一実施形態では、ここに記載されるＣＤｋ４／６阻害物質の使用により、Ｇ１期停止効果が消失するため、化学療法剤効果の約２４時間、３０時間、３６時間又は４０時間未満以内に、それらのプレ投与ベースライン細胞−サイクル活性に戻る又は接近するようになる。
【００２４】
一実施形態では、Ｇ１期停止効果は消失するため、化学療法剤投与の中断の約２４時間、３０時間、３６時間又は４０時間未満以内に、又は約４８時間以内に、被検体のＣＤＫ４／６−複製依存的細胞は、それらのプレ投与ベースライン細胞−サイクル活性に戻るようになる。
【００２５】
一実施形態では、ＣＤＫ４／６−複製依存的正常細胞は、ＨＳＰＣｓである。
【００２６】
一実施形態では、ＣＤＫ４／６依存的正常細胞は、腎臓上皮細胞である。
【００２７】
一実施形態では、ここに記載されるＣＤＫ４／６阻害物質の使用により、Ｇ１期停止効果が消失するため、被検体の血液中のＣＤＫ４／６阻害物質の濃度レベルが治療有効な濃度未満に下がった時点から約２４時間、３０時間、３６時間、４０時間未満以内に、又は約４８時間未満以内に、被検体のＣＤＫ４／６−複製依存的正常細胞は、それらのプレ投与ベースライン細胞−サイクル活性に戻る又は接近するようになる。
【００２８】
一実施形態では、ここに記載されるＣＤＫ４／６阻害物質を用いて、たとえばＤＮＡ損傷化学療法剤等の化学療法剤への曝露中に腎臓上皮細胞を保護し、化学療法剤効果の中断から、又はＣＤＫ４／６投与から、被検体の血液の中にＣＤＫ４／６阻害物質の濃度レベルが治療有効濃度未満に下がった、時点から、約２４時間、約３０時間、約３６時間、約４０時間、又は約４８時間未満で、化学療法剤が誘発する腎尿細管性上皮損傷に応じて、腎臓上皮細胞がＳ期に進行することから、一時的に予防される。ここに記載された方法に有用なＣＤＫ４／６阻害物質は、それらのオフ効果と同時発生的でもよく、すなわち、Ｇ１期停止効果の消失に際して、ここに記載されるＣＤＫ４／６阻害物質に曝露されたＣＤＫ４／６−複製依存的正常細胞は、同様の時間的経過により細胞−サイクルに復帰する。被検体の血液の中にＣＤＫ４／６阻害物質の濃度レベルが治療有効濃度未満に下がった時点から、約２４時間、３０時間、３６時間、４０時間未満以内に、又は、約４８時間以内に、Ｇ１期及びＳ期の通常細胞の一部が、迅速かつ効率的に復旧されるように、細胞−サイクルに復帰したＣＤＫ４／６−複製依存的正常細胞は振る舞う。これは有利なことに、Ｇ１期停止の消失に際して、ＰＤ０３３２９９１等の非同時性のＣＤＫ４／６阻害物質と比較して、さらに多くの正常細胞が複製を開始する。さらに、ここに記載されるＣＤＫ４／６阻害物質を用いたＧ１期停止後の同時発生的細胞−サイクル復帰により、造血成長因子の投与の時間を定める能力を提供して造血細胞系の復元をアシストすることにより、成長因子効果を最大にすることができる。
【００２９】
このように、一実施形態では、ここに記載される化合物又は方法の使用は、造血成長因子の使用組み合わせられ、ここで、造血成長因子の使用には、顆粒球コロニー刺激因子（Ｇ−ＣＳＦ）、顆粒球−マクロファージコロニー刺激因子（ＧＭ−ＣＳＦ）、トロンボポイエチン、インターロイキン（ＩＬ）−１２、スティール因子、及びエリスロポイエチン（ＥＰＯ）、又はこれらの誘導体を含むが、これらに限定されるものではない。
【００３０】
一実施形態では、ＣＤＫ４／６阻害物質は、造血成長因子の投与前に、投与される。
【００３１】
一実施形態では、ＨＳＰＣｓに対するＣＤＫ４／６阻害物質の効果が消失するように、造血成長因子投与の時間が定められる。
【００３２】
一つの態様では、ここに記載されるＣＤＫ４／６−阻害剤の使用は、多くの抗癌治療に共通の標準的な化学療法剤投与スケジュール又は療法中の使用のための、化学被覆薬に対する療法を可能にする。たとえば、ＣＤＫ４／６−複製依存的正常細胞が化学療法剤に曝露されている間、Ｇ１期が停止されるように、ＣＤＫ４／６−阻害剤を投与することができ、化合物のＧ１期停止効果が迅速に消失するため、顕著な数の正常細胞は、細胞−サイクルに復帰し、化学療法剤曝露のすぐ後、たとえば約２４、３０、４０又は４８時間未満以内に、複製することができるようになり、次の化学療法剤治療を予想して、ＣＤＫ４／６−阻害剤の投与まで複製が継続される。
【００３３】
一実施形態では、ＣＤＫ４／６−阻害剤が投与されることで、Ｇ１期停止と細胞−サイクルへの復帰との間でのＣＤＫ４／６−複製依存的正常細胞のサイクルが可能になり、反復投与化学療法剤治療計画に適合するようになり、たとえば、２１日おきに１〜３日目；２８日おきに１〜３日目；３週おきに１日目；２８日おきに１日目、８日目及び１５日目；２８日おきに１日目及び８日目に；２１日おきに１日目及び８日目に；２１日おきに１〜５日目；６〜８週の間１週につき１日；１日目、２２日目及び４３日目に；毎週１日目及び２日目；１〜４日目及び２２〜２５日目；１〜４日目、２２〜２５日目及び４３〜４６日目；及びこれに類似したタイプの療法で、化学療法剤が投与される治療計画を含むが、これらに限定されるものではなく、ＣＤＫ４／６−複製依存的細胞は化学療法剤曝露の間はＧ１期停止しており、細胞のかなりの部分は、化学療法剤曝露の間に細胞−サイクルに復帰する。
【００３４】
一実施形態では、ＣＤＫ４／６−阻害剤を投与して、日常化学療法剤曝露の間、たとえば連続した複数日の化学療法剤療法の間、被検体のＣＤＫ４／６−複製依存的細胞がＧ１期停止であるようにすることができるが、ＣＤＫ４／６−複製依存的細胞のかなりの部分は細胞−サイクルに復帰し、日常の治療の間に複製がなされる。
【００３５】
一実施形態では、ＣＤＫ４／６−阻害剤を投与して、被検体のＣＤＫ４／６−複製依存的細胞は、たとえば連続する複数日の療法等、化学療法剤曝露されている間にＧ１期停止となるようにすることができるが、正常細胞のかなりの部分は、細胞−サイクルに復帰し、次の化学療法剤曝露の前のオフ期間の間に複製が行われる。
【００３６】
一実施形態では、ＣＤＫ４／６阻害物質を投与することにより、日常の化学療法剤治療計画の間、たとえば連続した複数日の治療計画の間、被検体のＣＤＫ４／６−複製依存的細胞のＧ１期停止が提供され、また、停止細胞は、複数日療法終了の直後に細胞−サイクルに復帰することができる。
【００３７】
一実施形態では、癌は、小細胞肺癌であり、ＣＤＫ４／６阻害物質は、２１日の治療サイクル中の１、２及び３日目に投与され、投与されるＤＮＡ損傷剤は、カルボプラチン、シスプラチン及びエトポシド又はこれらの組合せから成る群より選択される。
【００３８】
本発明に従って治療される被検体は、増殖異常症又は例えば癌等の疾病の治療のために、治療的化学療法を受けていてもよい。癌は、サイクリン依存的キナーゼ１（ＣＤＫ１）活性の上昇、サイクリン依存的キナーゼ２（ＣＤＫ２）活性の上昇、網膜芽細胞腫腫瘍サプレッサタンパク（Ｒｂ）（Ｒｂ−空白）の損失、欠乏、又は欠如、高次のＭＹＣ発現、サイクリンＥ１、Ｅ２の上昇、及びサイクリンＡの上昇のうち、一つ、または、これらの組合せにより、特徴づけられる。癌は、網膜芽細胞腫腫瘍サプレッサタンパクの発現の低下、又は網膜芽細胞腫ファミリーメンバータンパク又はタンパク発現の低下（例えば非限定的な例としては、ｐ１０７及びｐ１３０）により特徴付けられてもよい。
一実施形態では、被検体は、Ｒｂ−空白又はＲｂ−欠損癌の治療のために、化学療法剤治療を受けており、このＲｂ−空白又はＲｂ−欠損癌には、小細胞肺癌、トリプルネガティブ乳癌、ＨＰＶ陽性頭頚部癌、網膜芽細胞腫、Ｒｂマイナス膀胱癌、Ｒｂマイナス前立腺癌、骨肉腫、又は子宮頸癌が含まれるが、これらに限定されない。
【００３９】
一実施形態では、癌は、ＣＤＫ４／６から独立した癌である。阻害剤化合物の投与により、用いられる化学療法剤の用量を高くすることができるようになり、ＣＤＫ４／６阻害物質化合物の投与がない場合に安全に用いられるべき標準投与量以外で疾病を治療することができるようになる。ヒトを含むホスト又は被検体は、非悪性増殖異常症、又は、例えば腫瘍、多発性硬化症、自己免疫疾患又は関節炎等のその他の異常な細胞増殖の化学療法剤治療を受けていてもよい。保護されたＨＳＰＣｓは、たとえば長期造血幹細胞（ＬＴ−ＨＳＣｓ）及び短期造血幹細胞（ＳＴ−ＨＳＣｓ）等の造血幹細胞と、多能性前駆細胞（ＭＰＰ）一般の骨髄性前駆細胞（ＣＭＰ）、一般のリンパ様前駆細胞（ＣＬＰ）、顆粒球−単核細胞前駆細胞（ＧＭＰ）及び巨核球赤血球前駆細胞（ＭＥＰ）等を含む造血前駆細胞と、を含んでいる。阻害剤化合物の投与により、被検体においては、造血幹細胞及び／又は造血前駆細胞の一時的な、過渡的薬理学的休止が生じる。
【００４０】
ここに記載されるＣＤＫ４／６阻害物質の投与により、ＣＤＫ４／６阻害物質の投与がない場合の化学療法剤による治療後、その通常の後、又はこれに関係して典型的に予想される場合と比較して、貧血の低下、リンパ球減少の低下、血小板減少の低下、又は好中球減少症の低下がもたらされ得る。
【００４１】
ここに記載されるＣＤＫ４／６阻害物質の使用により、ＣＤＫ４／６阻害物質の長期の使用に関係した骨髄抑制、例えばＣＤＫ４／６阻害物質の使用の中断に続いた骨髄抑制、貧血、リンパ球減少、血小板減少、又は好中球減少症等、からのより急速な回復がもたらされる。
【００４２】
ある実施形態では、ここに記載されるＣＤＫ４／６阻害物質の使用により、たとえば骨髄抑制、貧血、リンパ球減少、血小板減少又は好中球減少症等、ＣＤＫ４／６阻害物質の長期の使用に関連した骨髄抑制の、低下又は限定がもたらされる。
【００４３】
代替的な態様では、ここに記載されるＣＤＫ４／６阻害物質は、Ｒｂマイナスの癌又は他のＲｂマイナスの異常な増殖を治療する化学療法剤と組み合わせて、その抗癌、抗腫瘍、または、抗増殖効果に対して用いることができる。
【００４４】
一実施形態では、ここに記載されるＣＤＫ４／６阻害物質は、化学療法剤の抗癌又は反増殖活性に対して、付加的効果又は協力効果を提供する。
【００４５】
ここに記載されるＣＤＫ４／６阻害物質と組み合わせて用いることができる化学療法剤は、ＲＢ−ヌル癌又は異常細胞増殖の治療に有効又は有用なあらゆる化学療法剤である。
１つの特定の実施形態では、ここに記載される化合物の使用を、少なくとも１つの他の化学療法剤を用いた治療体制と組み合わせて、増殖抑制作用のための細胞−サイクルを通した増殖又は発達に依存しないものとすることができる。この薬剤は、タモキシフェン、ミダゾラム、レトロゾール、ボルテゾミブ、アナストロゾール、ゴセレリン、ｍＴＯＲ阻害剤、ＰＩ３キナーゼ阻害剤、デュアルｍＴＯＲ−ＰＩ３Ｋ阻害剤、ＭＥＫ阻害剤、ＲＡＳ阻害剤、ＡＬＫ阻害剤、ＨＳＰ阻害剤（たとえば、ＨＳＰ７０及びＨＳＰ９０阻害剤又はその組合せ）、Ｂｃｌ−２阻害剤、アポトーシス誘発化合物、ＡＫＴ阻害剤（ＰＤ−１阻害剤）若しくはＦＬＴ−３阻害剤、又はそれらの組合せを含んでもよいが、これに限定されるものではない。
【００４６】
ｍＴＯＲ阻害剤の非限定的な例としては、ラパマイシン及びその類似体、エベロリムス（アフィニトール）、テムシロリムス、リダフォロリムス、シロリムス及びデフォロリムスが挙げられる。
【００４７】
Ｐ１３キナーゼ阻害剤の非限定的な例としては、ワートマニン、デメトキシビリジン、ペリホシン、イデラリシブ、ＰＸ−８６６、ＩＰＩ−１４５（インフィニティ）、ＢＡＹ  ８０−６９４６、ＢＥＺ２３５、ＲＰ６５０３、ＴＧＲ１２０２（ＲＰ５２６４）、ＭＬＮ１１１７（ＩＮＫ１１１７）、ピクチリシブ、ブパルリシブ、ＳＡＲ２４５４０８（ＸＬ１４７）、ＳＡＲ２４５４０９（ＸＬ７６５）、パロミド５２９、ＺＳＴＫ４７４、ＰＷＴ３３５９７、ＲＰ６５３０、ＣＵＤＣ−９０７及びＡＥＺＳ−１３６が挙げられる。
【００４８】
ＭＥＫ阻害剤の非限定的な例としては、トラメチニブ、セルメチニブ、ＭＥＫ１６２、ＧＤＣ−０９７３（ＸＬ５１８）及びＰＤ０３２５９０１が挙げられる。
【００４９】
ＲＡＳ阻害剤の非限定的な例としては、レオリシン及びｓｉＧ１２Ｄローダーが挙げられる。
【００５０】
ＡＬＫ阻害剤の非限定的な例としては、クリゾチニブ、ＡＰ２６１１３及びＬＤＫ３７８が挙げられる。
【００５１】
ＨＳＰ阻害剤の非限定的な例としては、ゲルダナマイシン又は１７−Ｎ−アリルアミノ−１７−デメトキシゲルダナマイシン（１７ＡＡＧ）及びラジシコールが挙げられる。
化学療法剤と組み合わせるＣＤＫ４／６阻害物質は、上記される式Ｉ、式ＩＩ、式ＩＩＩ、式ＩＶ若しくは式Ｖを含む化合物または組成物、又は薬理学的に許容される組成物、塩、アイソトープ類似体又はそのプロドラッグ、から成る群より選択される。
【００５２】
一実施形態では、化合物は、表１により提供される化合物、又はそれらの薬理学的に許容される組成物、塩、アイソトープ類似体又はプロドラッグから選択される。
【００５３】
一実施形態では、化合物は、化合物Ｔ、Ｑ、ＧＧ、Ｕ又はＡＡＡＡ、又はそれらの薬理学的に許容される組成物、塩、アイソトープ類似体又はプロドラッグから選択される。
特定の実施形態では、ここに記載される化合物は、他の化学療法剤による治療の前の被検体、他の化学療法剤による治療の間の被検体、他の化学療法剤の投与の後の被検体、又はその組合せの被検体に投与される。
【００５４】
一実施形態では、ＣＤＫ４／６阻害物質は、表１に記載される化合物から選択される。
【００５５】
一実施形態では、化合物は、化合物Ｔ、Ｑ、ＧＧ、Ｕ又はＡＡＡＡから選択される。
ある実施形態では、被検体又はホストは、ヒトを含む哺乳類である。
要約すると、本発明は、以下の特徴を含む：
【００５６】
Ａ．化学療法剤曝露の間に、たとえばＨＳＰＣｓ及び／又は腎臓上皮細胞等のＣＤＫ４／６−複製依存的正常細胞の化学防護で使用するための、ここに記載される式Ｉ、ＩＩ、ＩＩＩ、ＩＶ及びＶの化合物、及び、薬理学的に許容される組成物、塩、アイソトープ類似体又はそれらのプロドラッグ。
【００５７】
一実施形態では、化合物は、表１の中に記載される化合物、又はそれらの薬理学的に許容される組成物、塩、アイソトープ類似体又はプロドラッグから選択される。
一実施形態では、化合物は、化合物Ｔ、Ｑ、ＧＧ、Ｕ又はＡＡＡＡ、又はそれらの薬理学的に許容される組成物、塩、アイソトープ類似体又はプロドラッグから選択される。
【００５８】
Ｂ．増殖異常症の治療のための化学療法剤療法の間の、ＣＤＫ４／６−複製依存的正常細胞、たとえばＨＳＰＣｓ及び／又は腎臓上皮細胞の化学防護での使用のための、ここに記載される式Ｉ、ＩＩ、ＩＩＩ、ＩＶ及びＶの化合物、及び薬理学的に許容される組成物、塩、アイソトープ類似体又はそれらのプロドラッグ。
【００５９】
一実施形態では、化合物は、表１に記載される化合物又はそれらの薬理学的に許容される組成物、塩、アイソトープ類似体又はプロドラッグから選択される。
【００６０】
一実施形態では、化合物は、化合物Ｔ、Ｑ、ＧＧ、Ｕ又はＡＡＡＡ、又はそれらの薬理学的に許容される組成物、塩、アイソトープ類似体又はプロドラッグから選択される。
【００６１】
Ｃ．癌の治療のための化学療法剤療法の間における、ＣＤＫ４／６−複製依存的正常細胞、たとえばＨＳＰＣｓ及び／又は腎臓上皮細胞の化学防護での使用のための、式Ｉ、ＩＩ、ＩＩＩ、ＩＶ及びここに記載されるＶの化合物、及び薬理学的に許容される組成物、塩、アイソトープ類似体及びそれらのプロドラッグ。
【００６２】
一実施形態では、化合物は、表１に記載される化合物又はそれらの薬理学的に許容される組成物、塩、アイソトープ類似体又はプロドラッグから選択される。
一実施形態では、化合物は、化合物Ｔ、Ｑ、ＧＧ、Ｕ又はＡＡＡＡ、又はそれらの薬理学的に許容される組成物、塩、アイソトープ類似体又はプロドラッグから選択される。
【００６３】
Ｄ．化学療法剤に曝露されている、又は曝露されていた被検体に対して、造血成長因子と組み合わせて使用するための、ここに記載される式Ｉ、ＩＩ、ＩＩＩ、ＩＶ及びＶの化合物、及び薬理学的に許容される組成物、塩、アイソトープ類似体及びそれらのプロドラッグ。
【００６４】
一実施形態では、化合物は、表１に記載される化合物又はそれらの薬理学的に許容される組成物、塩、アイソトープ類似体又はプロドラッグから選択される。
【００６５】
一実施形態では、化合物は、化合物Ｔ、Ｑ、ＧＧ、Ｕ又はＡＡＡＡ、又はそれらの薬理学的に許容される組成物、塩、アイソトープ類似体又はプロドラッグから選択される。
【００６６】
Ｅ．ＣＤＫ４／６−複製依存的正常細胞、たとえばＨＳＰＣｓ及び／又は腎臓上皮細胞、の化学防護で使用するための、薬剤の製造における、ここに記載される式Ｉ、ＩＩ、ＩＩＩ、ＩＶ及びＶの化合物、及び薬理学的に許容される組成物、塩、アイソトープ類似体及びそれらのプロドラッグの使用。
【００６７】
一実施形態では、化合物は、表１に記載される化合物又はそれらの薬理学的に許容される組成物、塩、アイソトープ類似体又はプロドラッグから選択される。
一実施形態では、化合物は、化合物Ｔ、Ｑ、ＧＧ、Ｕ又はＡＡＡＡ、又はそれらの薬理学的に許容される組成物、塩、アイソトープ類似体又はプロドラッグから選択される。
【００６８】
Ｆ．化学療法剤曝露に曝露された、ＣＤＫ４／６−複製依存的正常細胞、たとえばＨＳＰＣｓ及び／又は腎臓上皮細胞のＤＮＡ損傷の緩和、での使用のための薬剤の製造における、ここに記載される式Ｉ、ＩＩ、ＩＩＩ、ＩＶ及びＶの化合物、及び薬理学的に許容される組成物、塩、アイソトープ類似体及びそれらのプロドラッグの使用。
【００６９】
一実施形態では、化合物は、表１に記載される化合物又はそれらの薬理学的に許容される組成物、塩、アイソトープ類似体又はプロドラッグから選択される。
【００７０】
一実施形態では、化合物は、化合物Ｔ、Ｑ、ＧＧ、Ｕ又はＡＡＡＡ、又はそれらの薬理学的に許容される組成物、塩、アイソトープ類似体又はプロドラッグから選択される。
【００７１】
Ｇ．正常細胞の化学防護で使用するための、被検体治療有効量のここに記載される式Ｉ、ＩＩ、ＩＩＩ、ＩＶ及びＶの化合物、又は薬理学的に許容される組成物、塩及びそれらのプロドラッグを含む薬学的製剤。
【００７２】
一実施形態では、化合物は、表１に記載される化合物又はそれらの薬理学的に許容される組成物、塩、アイソトープ類似体又はプロドラッグから選択される。
【００７３】
一実施形態では、化合物は、化合物Ｔ、Ｑ、ＧＧ、Ｕ又はＡＡＡＡ、又はそれらの薬理学的に許容される組成物、塩、アイソトープ類似体又はプロドラッグから選択される。
【００７４】
Ｈ．有効量のここに記載される式Ｉ、ＩＩ、ＩＩＩ、ＩＶ及びＶの化合物を含む、治療製品の作製のための方法。
【００７５】
一実施形態では、化合物は、表１に記載される化合物又はそれらの薬理学的に許容される組成物、塩、アイソトープ類似体又はプロドラッグから選択される。
【００７６】
一実施形態では、化合物は、化合物Ｔ、Ｑ、ＧＧ、Ｕ又はＡＡＡＡ、又はそれらの薬理学的に許容される組成物、塩、アイソトープ類似体又はプロドラッグから選択される。
【００７７】
Ｉ．ＣＤＫ４／６−複製依存的正常細胞、たとえばＨＳＰＣｓ及び／又は腎臓上皮細胞、の化学防護における治療使用のために意図される、式Ｉ、ＩＩ、ＩＩＩ、ＩＶ及びＶの薬剤の製造のための方法。
【００７８】
一実施形態では、薬剤は、表１に記載される化合物又はそれらの薬理学的に許容される組成物、塩、アイソトープ類似体又はプロドラッグから選択される。
【００７９】
一実施形態では、薬剤は、化合物Ｔ、Ｑ、ＧＧ、Ｕ又はＡＡＡＡ、又はそれらの薬理学的に許容される組成物、塩、アイソトープ類似体又はプロドラッグから選択される。
【００８０】
Ｊ．化学療法剤に曝露されたＣＤＫ４／６−複製依存的正常細胞、たとえばＨＳＰＣｓ及び／又は腎臓上皮細胞、のＤＮＡ損傷の緩和、の治療使用のために意図される、式Ｉ、ＩＩ、ＩＩＩ、ＩＶ及びＶの薬剤を製造する方法。
【００８１】
一実施形態では、薬剤は、表１に記載される化合物又はそれらの薬理学的に許容される組成物、塩、アイソトープ類似体又はプロドラッグから選択される。
【００８２】
一実施形態では、薬剤は、化合物Ｔ、Ｑ、ＧＧ、Ｕ又はＡＡＡＡ、又はそれらの薬理学的に許容される組成物、塩、アイソトープ類似体又はプロドラッグから選択される。
【００８３】
Ｋ．化学療法剤と組み合わせて化学療法剤に対して付加的又は協力的効果を提供する、式Ｉ、ＩＩ、ＩＩＩ、ＩＶ又はＶの化合物、又はそれらの薬理学的に許容される組成物、塩、アイソトープ類似体又はプロドラッグを投与することにより、Ｒｂネガティブ癌の成長又は増殖条件を抑制する方法。
【００８４】
一実施形態では、化合物は、表１に記載される化合物又はそれらの薬理学的に許容される組成物、塩、アイソトープ類似体又はプロドラッグから選択される。
【００８５】
一実施形態では、化合物は、化合物Ｔ、Ｑ、ＧＧ、Ｕ又はＡＡＡＡ、又はそれらの薬理学的に許容される組成物、塩、アイソトープ類似体又はプロドラッグから選択される。
【００８６】
一実施形態では、ＣＤＫ４／６阻害物質は、ＭＥＫ阻害剤、ＰＩ３キナーゼデルタ阻害剤、ＢＣｌ−２阻害剤、ＡＫＴ阻害剤、アポトーシス誘導化合物、ＡＫＴ阻害剤、ＰＤ−１阻害剤、ＦＬＴ−３阻害剤、ＨＳＰ９０阻害剤、若しくはｍＴＯＲ阻害剤又はその組合せから成る群より選択される化学療法剤と組み合わせられる。
【図面の簡単な説明】
【００８７】
【図１】図１は、増殖における分化が増加する健康な造血幹細胞（ＨＳＣ）及び健康な造血前駆細胞の階層的な増殖を示す、造血の略図である。
【図２Ａ】図２Ａは、Ｇ２−Ｍ期（白抜き丸）、Ｓ期（三角形）及びＧ０−Ｇ１期（正方形）におけるそれぞれの細胞のパーセンテージ、＜２Ｎ（菱形）対ｔＨＳ６８細胞中の化合物Ｔの濃度変化（ｎＭ）のグラフである。Ｃｄｋ４／６−依存的細胞系統（ｔＨＳ６８）は、示された濃度の化合物Ｔで２４時間治療された。化合物Ｔでの治療の後、細胞サイクル分布のために細胞を採取し分析した。実施例１５２に記載されるように、ｔＨＳ６８細胞は、Ｓ期における細胞数に対応する減少を伴うクリーンなＧ１期停止を示す。
【図２Ｂ】図２Ｂは、ｔＨＳ６８細胞（ＣＤＫ４／６依存的細胞系統）の数対細胞のＤＮＡ含有率（プロピジウム沃化物によって計測される）のグラフである。細胞をＤＭＳＯで２４時間処理し、細胞サイクル分布のために採取し分析した。
【図２Ｃ】図２Ｃは、ＷＭ２６６４細胞（ＣＤＫ４／６依存的細胞系統）の数対細胞のＤＮＡ含有率（プロピジウム沃化物によって計測される）のグラフである。細胞をＤＭＳＯで２４時間処理し、細胞サイクル分布のために採取し分析した。
【図２Ｄ】図２Ｄは、Ａ２０５８細胞（ＣＤＫ４／６から独立した細胞系統）の数対細胞のＤＮＡ含有率（プロピジウム沃化物によって計測される）のグラフである。細胞をＤＭＳＯで２４時間処理し、細胞サイクル分布のために採取し分析した。
【図２Ｅ】図２Ｅは、化合物Ｔによる処理後の、ｔＨＳ６８細胞（ＣＤＫ４／６依存的細胞系統）の数対細胞のＤＮＡ含有率（プロピジウム沃化物によって計測される）のグラフである。細胞は、化合物Ｔ（３００ｎＭ）で２４時間処理され、細胞サイクル分布のために採取し分析した。実施例１５２に記載されるように、化合物ＴによるｔＨＳ６８細胞の処置は、Ｓ期ピーク（矢印によって示される）の損失を与える。
【図２Ｆ】図２Ｆは、化合物Ｔによる処理後の、ＷＭ２６６４細胞（ＣＤＫ４／６依存的細胞系統）の数対細胞のＤＮＡ含有率（プロピジウム沃化物によって計測される）のグラフである。細胞は、化合物Ｔ（３００ｎＭ）で２４時間処理され、細胞サイクル分布のために採取し分析した。実施例１５２に記載されるように、化合物ＴによるＷＭ２６６４細胞の処置は、Ｓ期ピーク（矢印によって示される）の損失を与える。
【図２Ｇ】図２Ｇは、化合物Ｔによる処理後の、Ａ２０５８細胞（ＣＤＫ４／６から独立した細胞系統）の数対細胞のＤＮＡ含有率（プロピジウム沃化物によって計測される）のグラフである。細胞は、化合物Ｔ（３００ｎＭ）で２４時間処理され、細胞サイクル分布のために採取し分析した。実施例１５２に記載されるように、化合物ＴによるＡ２０５８細胞の処置は、Ｓ期ピーク（矢印によって示される）の損失を与えない。
【図３】図３は、化合物Ｔによる処理後の、Ｓｅｒ８０７／８１１及びＳｅｒ７８０におけるＲｂのリン酸化レベルを示すウェスタンブロットである。Ｃｄｋ４／６−依存的細胞系統（ｔＨＳ６８又はＷＭ２６６４）及びＣｄｋ４／６−非依存的細胞系統（Ａ２０５８）は、示した時間（０、４、８、１６及び２４時間）、化合物Ｔ（３００ｎＭ）で処理された。ＭＡＰＫレベルは、タンパク質レベルに対するコントロールとして示される。処理に続いて、細胞は、ウェスタンブロット解析によるＲｂ−リン酸化のために採取され分析された。実施例１５３に記載されるように、化合物Ｔ処理は，Ｃｄｋ４／６−依存的細胞系統（ｔＨＳ６８及びＷＭ２６６４）中における処理後のＲｂ−リン酸化の減少を招いたが、Ｃｄｋ４／６−非依存的細胞系統（Ａ２０５８）ではそうならなかった。
【図４Ａ】図４Ａは、ＤＭＳＯ（暗いバー）又はＰＤ０３３２９９１（明るいバー）による処理後の、Ｒｂポジティブ細胞系統（ＷＭ２６６４）又はＲｂネガティブ小細胞肺癌細胞系統（Ｈ３４５、Ｈ６９、Ｈ２０９、ＳＨＰ−７７、ＮＣＩ４１７又はＨ８２）におけるＳ期の細胞のパーセンテージのグラフである。細胞は、ＰＤ０３３２９９１（３００ｎＭ）又はＤＭＳＯコントロールで２４時間処理された。細胞増殖は、ＥｄＵ取込み及びフローサイトメトリーによって計測された。データは、細胞処理ごとの１００，０００細胞イベントを示す。実施例１５４に記載されるように、ＰＤ０３３２９９１による処理におけるＳ期の細胞のパーセンテージの変化は認知されなかったため、ＲＢ−ヌルＳＣＬＣ細胞系統は、Ｃｄｋ４／６阻害耐性を示した。
【図４Ｂ】図４Ｂは、ＤＭＳＯ（暗いバー）又は化合物ＧＧ（明るいバー）による処理後の、Ｒｂポジティブな細胞系統（ｔＨＳ６８）又はＲｂネガティブ小細胞肺癌細胞系統（Ｈ３４５、Ｈ６９、ＳＨＰ−７７又はＨ８２）のＳ期の細胞のパーセンテージのグラフである。細胞は、化合物ＧＧ（３００ｎＭ又は１０００ｎＭ）又はＤＭＳＯコントロールで２４時間処理された。細胞増殖は、ＥｄＵ取込み及びフローサイトメトリーによって計測された。データは、細胞処理ごとの１００，０００細胞イベントを示す。実施例１５４に記載されるように、化合物ＧＧでの処理に際してＳ期の細胞のパーセンテージの変化が認知されなかったため、Ｒｂ−ヌルＳＣＬＣ細胞系統は、Ｃｄｋ４／６阻害耐性を示した。
【図４Ｃ】図４Ｃは、ＤＭＳＯ（暗いバー）又は化合物Ｔ（明るいバー）による処理後の、Ｒｂポジティブな細胞系統（ｔＨＳ６８）又はＲｂネガティブ小細胞肺癌細胞系統（Ｈ３４５、Ｈ２０９又はＳＨＰ−７７）のＳ期の細胞のパーセンテージのグラフである。細胞は、化合物Ｔ（３００ｎＭ又は１０００ｎＭ）又はＤＭＳＯコントロールで２４時間処理された。細胞増殖は、ＥｄＵ取込み及びフローサイトメトリーによって計測された。データは、細胞処理ごとの１００，０００細胞イベントを示す。実施例１５４に記載されているように、化合物Ｔによる処理に際してＳ期の細胞のパーセンテージの変化が認知されなかったため、ＲＢ−ヌルＳＣＬＣ細胞系統は、Ｃｄｋ４／６阻害耐性を示した。
【図５】図５は、健康なマウスＨＳＰＣｓ及び健康な脊髄前駆細胞にＰＤ０３３２９９１の投与（時間）の後の、ＥｄＵ取込み対時間のグラフである。Ｒｏｂｅｒｔｓらに報告されるように、ＰＤ０３３２９９１（１５０ｍｇ／ｋｇ）が、経口強制飼養により投与され、骨髄停止に対しての過渡的ＣＤＫ４／６阻害の時間効果を評価した。Ｍｕｌｔｉｐｌｅ  Ｒｏｌｅｓ  ｏｆ  Ｃｙｃｌｉｎ−Ｄｅｐｅｎｄｅｎｔ  Ｋｉｎａｓｅ  ４／６  Ｉｎｈｉｂｉｔｏｒｓ  ｉｎ  Ｃａｎｃｅｒ  Ｔｈｅｒａｐｙ．  ＪＣＮＩ  ２０１２；１０４（６）：４７６−４８７  ）ＦＩＧ．２Ａ）実施例１５６に記載されるように、ＰＤ０３３２９９１の単一経口ドーズにより、３６時間以上、ＨＳＰＣＥｄＵ取込み（円；  ＬＫＳ＋）及び脊髄前駆細胞ＥｄＵ取込み（正方形；  ＬＫＳ−）の低下を維持した。
【図６Ａ】図６Ａは、１２又は２４時間のポスト投与における１５０ｍｇ／ｋｇでの化合物Ｔ、Ｑ又はＧＧの経口強制飼養の後の、ＨＳＰＣｓへのＥｄＵ取込みの比の（非処理のコントロールマウスと比較した）グラフである。
【図６Ｂ】図６Ｂは、１２又は２４時間、化合物Ｔで治療されるマウスに対するＥｄＵポジティブなＨＳＰＣ細胞のパーセンテージのグラフである。マウスは経口強制飼養により、５０ｍｇ／ｋｇ（三角）、１００ｍｇ／ｋｇ（正方形）、又は１５０（逆三角）ｍｇ／ｋｇのドーズがなされた。
【図６Ｃ】図６Ｃは、それぞれ１２、２４、３６及び４８時間において、化合物Ｔ（経口強制飼養による１５０ｍｇ／ｋｇ）で治療されるマウスに対するＥｄＵポジティブなＨＳＰＣ細胞のパーセンテージのグラフである。実施例１５７に記載されるように、化合物Ｔ及びＧＧは、１２時間でのＥｄＵ取込みの低下を実証し、２４時間で細胞分割の正常レベルに戻り始めた。
【図７】図７は、化合物の投与（時間）の後の、ＰＤ０３３２９９１（三角）又は化合物Ｔ（逆三角）のいずれかで処理されたマウスのＥｄＵポジティブなＨＳＰＣ細胞のパーセンテージの時間に対するグラフである。両方の化合物は、経口強制飼養によって１５０ｍｇ／ｋｇで投与され、ＥｄＵポジティブなＨＳＰＣ細胞のパーセンテージは、１２、２４、３６又は４８時間で測定された。実施例１５８に記載されているように、ＰＤ０３３２９９１の単一経口ドーズにより、３６時間を超えて、ＨＳＰＣ増殖の低下が維持された。対照的に、化合物Ｔを単一経口ドーズしたところ、１２時間ではＨＳＰＣ増殖は当初低下したが、化合物Ｔのドーズ後２４時間で、ＨＳＰＣｓの増殖が再開した。
【図８Ａ】図８Ａは、ヒト繊維芽（Ｒｂポジティブな）細胞中の化合物（時間）のウォッシュアウトの後の、細胞サイクルのＧ０−Ｇ１期にある細胞のパーセンテージの対時間グラフである。
【図８Ｂ】図８Ｂは、ヒト繊維芽（Ｒｂポジティブ）細胞中の化合物（時間）のウォッシュアウトの後の、細胞サイクルのＳ期にある細胞のパーセンテージの対時間のグラフである。
【図８Ｃ】図８Ｃは、ヒト腎近位尿細管上皮細胞（Ｒｂポジティブ）中の化合物（時間）のウォッシュアウトの後の、細胞サイクルのＧ０−Ｇ１期の中に細胞のパーセンテージの対時間のグラフである。
【図８Ｄ】図８Ｄは、ヒト腎近位尿細管上皮細胞（Ｒｂポジティブ）中の化合物（時間）のウォッシュアウトの後の、細胞サイクルのＳ期にある細胞のパーセンテージの対時間のグラフである。これらの細胞ウォッシュアウト実験は、本発明の阻害剤化合物が、異なる細胞型に対して、短期の過渡的Ｇ１期停止効果を有することを実証した。化合物のウォッシュアウト後の細胞サイクルに対する効果が、２４、３６、４０及び４８時間に測定された。実施例１５９に記載されるように、ＰＤ０３３２９９１（丸）で処理された細胞は、化合物Ｔ（正方形）、化合物Ｑ（三角）、化合物ＧＧ（Ｘ）、又は化合物Ｕ（十字プラスＸ）で処理した細胞に比べて、細胞分割のベースラインレベルに達するまで、著しく長い時間を要した（ＤＭＳＯ（ダイヤ）のみで処理された細胞を参照）ことを、これら結果が示している。
【図９Ａ】図９Ａは、化合物Ｔの投与（時間）の後の、血漿薬物濃度（ｎｇ／ｍｌ）対時間のグラフである。
【図９Ｂ】図９Ｂは、化合物Ｑの投与（時間）の後の、血漿薬物濃度（ｎｇ／ｍｌ）対時間のグラフである。
【図９Ｃ】図９Ｃは、化合物ＧＧの投与（時間）の後の、血漿薬物濃度（ｎｇ／ｍｌ）対時間のグラフである。
【図９Ｄ】図９Ｄは、化合物Ｕの投与（時間）の後の、血漿薬物濃度（ｎｇ／ｍｌ）対時間のグラフである。化合物は、経口強制飼養（ダイヤ）により３０ｍｇ／ｋｇ、又は静脈内注射（正方形）により１０ｍｇ／ｋｇで、マウスにドーズされた。血液サンプルはドーズ後０、０．２５、０．５、１．０、２．０、４．０および８．０時間でとられ、血しょう中濃度はＨＰＬＣによって決定された。
【図１０】図１０は、ヒト及び動物（猿、犬、ネズミ及びマウス）肝ミクロソーム中における化合物Ｔ及びＰＤ０３３２９９１の半減期（分）を提供する。実施例１５８に記載されるように、ＰＤ０３３２９９１は、テストされる種の各々において、６０分より長い半減期を有する。化合物Ｔは、テストされる種の各々においてＰＤ０３３２９９１より短期の半減期を有していたと測定された。
【図１１Ａ】図１１Ａは、５ｕＭエトポシドで処理された細胞の、指示量の化合物Ｔで処理した場合に対する細胞生残性のグラフである。生残した細胞は、２４時間のポスト処理で決定された。実施例１６２に記載されるように、化合物Ｔは、ｔＨＳ６８細胞を化学療法剤誘発性細胞死から保護する故富樫滅された。
【図１１Ｂ】図１１Ｂは、１００μＭカルボプラチンで処理された細胞の、指示量の化合物Ｔによる処理に対する細胞生残性のグラフである。生残した細胞は、２４時間のポスト処理で決定された。実施例１６２に記載されているように、化合物Ｔは、ｔＨＳ６８細胞を化学療法剤誘発性細胞死から保護する。
【図１２Ａ】図１２Ａは、化合物Ｔ（１００ｎＭ、３００ｎＭ又は１０００ｎＭ）及び化学療法（エトポシド、ドキソルビシン、カルボプラチン、パクリタキセル又はカンプトセシン）で処理されるＨＳ６８細胞中の、相対的なＨ２ＡＸ活性対化合物Ｔ（ｎＭ）の濃度変量のグラフである。Ｃｄｋ４／６−依存的ＨＳ６８細胞を、指示ドーズ量の化合物Ｔ及び化学療法で処理した。Ｈ２ＡＸ病巣形成を計測して、化学療法剤誘発性ＤＮＡ損傷を評価した。実施例１６２に記載されるように、化合物Ｔで処理した細胞及び様々な化学療法剤化合物で処理した細胞は、化学療法によって誘発されるＤＮＡ損傷から保護されていた。
【図１２Ｂ】図１２Ｂは、化合物Ｔ（１００ｎＭ、３００ｎＭ又は１０００ｎＭ）で処理されたＨＳ６８細胞及び化学療法（エトポシド、ドキソルビシン、カルボプラチン、パクリタキセル又はカンプトセシン）で処理されたＨＳ６８細胞における、相対カスパーゼ３／７活性対化合物Ｔ（ｎＭ）の濃度変量のグラフである。Ｃｄｋ４／６−依存的ＨＳ６８細胞は、指示ドーズ量の化合物Ｔ及び化学療法で処理された。カスパーゼ３／７活性を計測して、化学療法剤誘発性アポトーシスを評価した。実施例１６２に記載されるように、化合物Ｔ及び様々な化学療法剤化合物で処理された細胞は、化学療法によって誘導されるカスパーゼ３／７活性化から保護されていた。
【図１３】図１３は、増殖（１２時間後にＥｄＵ取込みによって計測される）対細胞ＤＮＡ含有率（ＤＡＰＩ染色によって計測される）を示す一連の等高線プロットである。代表的な等高線プロットは、処理無しで１２時間後にＥｄＵ取込み、ＥｄＵ処理のみ、又はＥｄＵプラス化合物Ｔ処理のそれぞれで測定したＷＢＭ（全骨髄；上）及びＨＳＰＣｓ（造血幹細胞及び前駆細胞；ＬＳＫ；した）における増殖を示す。実施例１６３に記載されるように、化合物Ｔは、全骨髄及び造血幹細胞及び／又は前駆細胞の増殖を低減する。
【図１４Ａ】図１４Ａは、化合物Ｔ処理（白塗りバー）又は非処理（黒塗りバー）の、全骨髄（ＷＢＭ）及び様々な造血幹細胞及び前駆細胞（Ｌｉｎ−、ＬＳＫ、ＨＳＣ、ＭＰＰ又はＣＤ２８＋ＬＳＫ細胞系統）におけるＥｄＵポジティブな細胞のパーセンテージのグラフである。実施例１６３に記載されるように、化合物Ｔによる処理は、ＷＢＭの増殖及び試験される全てのＨＳＰＣ系統を抑制する。＊Ｐ＜０．０５、＊＊Ｐ＜０．０１。
【図１４Ｂ】図１４Ｂは、化合物Ｔで処理（白塗りバー）又は非処理（黒塗りバー）の全骨髄（ＷＢＭ）及び様々な系統限定前駆細胞（ＭＰ、ＧＭＰ、ＭＥＰ、ＣＭＰ又はＣＬＰ細胞系統）における、ＥｄＵポジティブな細胞のパーセンテージのグラフである。実施例１６３に記載されるように、化合物Ｔによる処理は、ＷＢＭの増殖及び試験された全ての系統限定前駆細胞を抑制した。＊Ｐ＜０．０５、＊＊Ｐ＜０．０１。
【図１５Ａ】図１５Ａは、化合物Ｔで処理（白塗りバー）又は非処理の（黒塗りバー）のＴ細胞集団（合計、ＣＤ４＋、ＣＤ８＋、ＤＰ、ＤＮ、ＤＮ１、ＤＮ２、ＤＮ３又はＤＮ４）中の、ＥｄＵポジティブな細胞のパーセンテージのグラフである。実施例１６４に記載されるように、化合物Ｔによる処理は、ＣＤ４＋、ＣＤ８＋、ＤＰ、ＤＮ、ＤＮ１、ＤＮ２、ＤＮ３又はＤＮ４Ｔ細胞集団の増殖を抑制する。＊Ｐ＜０．０５、＊＊Ｐ＜０．０１。
【図１５Ｂ】図１５Ｂは、化合物Ｔで処理（白塗りバー）又は非処理（黒塗りバー）のＢ細胞集団（Ｂ２２０＋、Ｂ２２０＋  ｓＩｇＭ＋、Ｐｒｅ−ｐｒｏ−Ｂ  ｓＩｇＭ−、Ｐｒｏ−Ｂ、ｐｒｅ−Ｂ）におけるＥｄＵポジティブな細胞のパーセンテージのグラフである。実施例１６４に記載されるように、化合物Ｔによる処理は、様々なＢ細胞集団（Ｂ２２０＋、Ｂ２２０＋  ｓＩｇＭ＋、Ｐｒｅ−ｐｒｏーＢ  ｓＩｇＭ−、Ｐｒｏ−Ｂ及びｐｒｅ−Ｂ）の増殖を抑制する。＊Ｐ＜０．０５、＊＊Ｐ＜０．０１。
【図１５Ｃ】図１５Ｃは、化合物Ｔで処理（白塗りバー）又は非処理（黒塗りバー）の脊髄細胞集団（Ｍａｃ１＋Ｇｒ１＋、Ｔｅｒ１１９＋又はＣＤ４１＋）の中にＥｄＵポジティブな細胞のパーセンテージのグラフである。実施例１６４に記載されるように、化合物Ｔによる処理は、Ｍａｃ１＋Ｇｒ１＋、Ｔｅｒ１１９＋又はＣＤ４１＋骨髄性細胞集団の増殖を抑制する。＊Ｐ＜０．０５、＊＊Ｐ＜０．０１。
【図１６】図１６は、骨髄中の化合物ＧＧの薬力学的評価を示す。化合物ＧＧによる、骨髄中カルボプラチン誘発性細胞毒性に対する、過渡的ＣＤＫ４／６阻害の効果を評価するため、ＦＶＢ／ｎマウス（基当たりｎ＝３）は、９０ｍｇ／ｋｇのカルボプラチンの腹こう内投与、又は１５０ｍｇ／ｋｇの化合物ＧＧの経口強制飼養プラス９０ｍｇ／ｋｇのカルボプラチンの腹こう内投与によるビヒクルコントロールで治療された。処理後２４時間で、骨髄を採取し、そして、前述のように、ＥｄＵ取込みにより、サイクリング骨髄前駆細胞のパーセンテージを計測した。
【図１７Ａ】図１７Ａは、５‐フルオロウラシル（５ＦＵ）、（三角）投与後、５ＦＵプラス化合物Ｔ（正方形）投与後、又は非処理のコントロール（丸）の、全血球数対時間（日）のグラフである。ＦＶＢ野生型マウスは、腹こう内投与による５‐フルオロウラシル（５ＦＵ）１５０ｍｇ／ｋｇの投与の３０分前に、経口強制飼養により、化合物Ｔ（１５０ｍｇ／ｋｇ）で処理され、又はビヒクルのみのコントロールであった。全血球数の計数を６日目に開始し、２日おきに計数した。実施例１６６に記載されるように、化合物Ｔで前処理した場合に、化学療法（５ＦＵ）からの全血球の回収がより迅速になる。
【図１７Ｂ】図１７Ｂは、５‐フルオロウラシル（５ＦＵ）（三角）の投与後、５ＦＵプラス化合物Ｔ（正方形）の投与後、又は非処理のコントロール（丸）での、好中球細胞数（日）対時間のグラフである。実験は、図１７Ａで記載したように実行された。実施例１６６に記載されるように、化合物Ｔで前処理される場合に、化学療法（５ＦＵ）からの好中球の回収がより迅速になる。
【図１７Ｃ】図１７Ｃは、５‐フルオロウラシル（５ＦＵ）（三角）の投与後、５ＦＵプラス化合物Ｔ（正方形）の投与後、又は非処理のコントロール（丸）での、。リンパ球細胞数対時間（日）のグラフである。実験は、図１７Ａで記載したように実行された。実施例１６６に記載されるように、化合物Ｔで前処理される場合に、化学療法（５ＦＵ）からのリンパ球の回収がより迅速になる。
【図１７Ｄ】図１７Ｄは、５‐フルオロウラシル（５ＦＵ）（三角）の投与後、５ＦＵプラス化合物Ｔ（正方形）の投与後、又は非処理のコントロール（丸）での、血小板細胞数対時間（日）のグラフである。実験は、図１７Ａで記載したように実行された。実施例１６６に記載されるように、化合物Ｔで前処理される場合に、化学療法（５ＦＵ）からの血小板の回収がより迅速になる。
【図１７Ｅ】図１７Ｅは、５‐フルオロウラシル（５ＦＵ）（三角）の投与後、５ＦＵプラス化合物Ｔ（正方形）の投与後、又は非処理のコントロール（丸）での、赤血球数対時間（日）のグラフである。実験は、図１７Ａで記載したように実行された。実施例１６６に記載されているように、化合物Ｔで前処理される場合に、化学療法（５ＦＵ）からの赤血球の回収がより迅速になる。
【図１７Ｆ】図１７Ｆは、５‐フルオロウラシル（５ＦＵ）（三角）の投与後、５ＦＵプラス化合物Ｔ（正方形）の投与後、又は非処理のコントロール（丸）での、ヘマトクリット（％）対時間（日）のグラフである。実験は、図１７Ａで記載したように実行された。実施例１６６に記載されているように、化合物Ｔで前処理される場合に、化学療法（５ＦＵ）からのヘマトクリットパーセンテージの回収がより迅速になる。
【図１８Ａ】図１８Ａは、５‐フルオロウラシル（５ＦＵ）の投与後、５ＦＵプラス化合物Ｔの投与後、又は非処理のコントロールでの、１４日間の全血球数のグラフである。ＦＶＢ野生型マウスは、腹こう内投与による５‐フルオロウラシル（５ＦＵ）１５０ｍｇ／ｋｇの投与の３０分前に、経口強制飼養により、化合物Ｔ（１５０ｍｇ／ｋｇ）で処理され、又はビヒクルのみのコントロールであった。全血球数を、１４日目に計測した。ボックスは、５  ％−９５  ％の分布を示し、ウィスカーは、最低限及び最高値を示し、そして、中央のバーは、中央値を示す。スチューデントｔ検定を行い、二者間のＰ値を計算した。実施例１６６に記載されるように、化合物Ｔで前処理した場合に、化学療法（５ＦＵ）からの全血球の回収がより迅速になる。
【図１８Ｂ】図１８Ｂは、５‐フルオロウラシル（５ＦＵ）投与の１４日後、５ＦＵプラス化合物Ｔ投与の１４日後、又は非処理のコントロールでの、好中球細胞数のグラフである。実験は、図１８Ａで記載したように実行された。実施例１６６に記載されるように、化合物Ｔで前処理される場合に、化学療法（５ＦＵ）からの好中球細胞の回収がより迅速になる。
【図１８Ｃ】図１８Ｃは、５‐フルオロウラシル（５ＦＵ）の投与の１４日後、５ＦＵプラス化合物Ｔの投与の１４日後、又は非処理のコントロールでの、リンパ球細胞数のグラフである。実験は、図１８Ａで記載したように実行された。実施例１６６に記載されるように、化合物Ｔで前処理される場合に、化学療法（５ＦＵ）からのリンパ球細胞の回収がより迅速になる。
【図１８Ｄ】図１８Ｄは、５‐フルオロウラシル（５ＦＵ）の投与の１４日後、５ＦＵプラス化合物Ｔの投与の１４日後、又は非処理のコントロールでの、赤血球細胞数のグラフである。実験は、図１８Ａで記載したように実行された。実施例１６６に記載されるように、化合物Ｔで前処理される場合に、化学療法（５ＦＵ）からの赤血球細胞の回収がより迅速になる。
【図１８Ｅ】図１８Ｅは、５‐フルオロウラシル（５ＦＵ）の投与の１４日後、５ＦＵプラス化合物Ｔの投与の１４日後、又は非処理のコントロールでの、血小板細胞数のグラフである。実験は、図１８Ａで記載したように実行された。実施例１６６に記載されるように、化合物Ｔで前処理される場合に、化学療法（５ＦＵ）からの血小板細胞の回収がより迅速になる。
【図１９Ａ】図１９Ａは、非処理のマウス（丸）、５‐フルオロウラシル（５ＦＵ）プラス化合物Ｔ処理マウス（正方形）、又は５−ＦＵ処理マウス（三角）の、サイクル３で１０日目（５２日目）における全血球（１０００の細胞／ｕｌ）のグラフである。ＦＶＢ野生型マウスは、腹こう内投与による５‐フルオロウラシル（５ＦＵ）１５０ｍｇ／ｋｇの投与の３０分前に、経口強制飼養により、化合物Ｔ（１５０ｍｇ／ｋｇ）で処理され、又はビヒクルのみのコントロールであった。マウスは、３サイクルの化合物Ｔを受け、又は２１日サイクルの１日目でビヒクルコントロール＋  ５ＦＵであった。全血球数を、第２のドーズの後１０日目に計測した。（最初のドーズ（サイクル３の１０日目）後５２日）実施例１６７に記載されるように、全血球は、化合物Ｔで数サイクル処理される場合に、化学療法（５ＦＵ）からの回復が向上することが示された。
【図１９Ｂ】図１９Ｂは、非処理のマウス（丸）、５‐フルオロウラシル（５ＦＵ）プラス化合物Ｔ処理マウス（正方形）、又は５−ＦＵ処理マウス（三角）の、サイクル３で１０日目（５２日目）における好中球（１０００の細胞／ｕｌ）のグラフである。実験は、図１９Ａで記載したように実行された。実施例１６７に記載されるように、好中球は、化合物Ｔで数サイクル処理される場合に、化学療法（５ＦＵ）からの回復が向上することが示された。
【図１９Ｃ】図１９Ｃは、非処理のマウス（丸）、５‐フルオロウラシル（５ＦＵ）プラス化合物Ｔ処理マウス（正方形）、又は５−ＦＵ処理マウス（三角）の、サイクル３で１０日目（５２日目）におけるリンパ球（１０００の細胞／ｕｌ）のグラフである。実験は、図１９Ａで記載したように実行された。実施例１６７に記載されるように、リンパ球は、化合物Ｔで数サイクル処理される場合に、化学療法（５ＦＵ）からの回復が向上することが示された。
【図１９Ｄ】図１９Ｄは、非処理のマウス（丸）、５‐フルオロウラシル（５ＦＵ）プラス化合物Ｔ処理マウス（正方形）、又は５−ＦＵ処理マウス（三角）の、サイクル３で１０日目（５２日目）における赤血球（１０００の細胞／ｕｌ）のグラフである。実験は、図１９Ａで記載したように実行された。実施例１６７に記載されるように、赤血球は、化合物Ｔで数サイクル処理される場合に、化学療法（５ＦＵ）からの回復が向上することが示された。
【図１９Ｅ】図１９Ｅは、非処理のマウス（丸）、５‐フルオロウラシル（５ＦＵ）プラス化合物Ｔ処理マウス（正方形）、又は５−ＦＵ処理マウス（三角）の、サイクル３で１０日目（５２日目）における血小板（１０００の細胞／ｕｌ）のグラフである。実験は、図１９Ａで記載したように実行された。実施例１６７に記載されるように、化合物Ｔで数サイクル処理される場合の化学療法（５ＦＵ）からの回復において、血小板レベルは上がることが示された。
【図２０】図２０は、Ｇ２−Ｍ期（Ｘ）、Ｓ期（三角形）及びＧ０−Ｇ１期（正方形）におけるそれぞれの細胞のパーセンテージ、＜２Ｎ（菱形）対ヒト腎近位尿細管細胞中の化合物Ｔの濃度変化（ｎＭ）のグラフである。細胞は、指示濃度の化合物Ｔで２４時間処理された。化合物Ｔでの治療の後、細胞サイクル分布のために細胞を採取し分析した。実施例１６８に記載されるように、ヒト腎近位尿細管細胞は、Ｓ期の細胞数に対応した減少を伴う完全なＧ１期停止を示す。
【図２１】図２１は、Ｇ２−Ｍ期（Ｘ）、Ｓ期（三角形）及びＧ０−Ｇ１期（正方形）におけるそれぞれの細胞のパーセンテージ、＜２Ｎ（菱形）対ＤＭＳＯ、エトポシド又はシスプラチンで処理したヒト腎近位尿細管細胞中の化合物Ｔの濃度変化（ｎＭ）のグラフである。細胞は、指示濃度の化合物Ｔを、ＤＭＳＯ、エトポシド又はシスプラチンと組み合わせて、２４時間処理された。化合物Ｔでの治療の後、細胞サイクル分布のために細胞を採取し分析した。実施例１６９に記載されるように、ヒト腎近位尿細管細胞を化合物Ｔで処理することにより、これらの細胞を、エトポシド及びシスプラチンによる化学療法剤誘発性損害から保護する。
【図２２】図２２は、相対的なγ−Ｈ２ＡＸ活性対化合物Ｔ及び化学療法（シスプラチン）で処理されたヒト腎近位尿細管細胞中の化合物Ｔ（ｎＭ）の濃度変化のグラフである細胞は、指示ドーズ量の化合物Ｔ（１０ｎＭ、３０ｎＭ、１００ｎＭ、３００ｎＭ又は１０００ｎＭ）及び化学療法剤（２５ｕＭシスプラチン）で処理された。γ−Ｈ２ＡＸ病巣形成を計測して、化学療法剤誘発性ＤＮＡ損傷を評価した。実施例１７０に記載されるように、化合物Ｔで処理された細胞は、化学療法剤（シスプラチン）によって誘発されるＤＮＡ損傷から保護されていた。
【図２３】図２３は、化合物Ｔの指示濃度及びＤＭＳＯ又はシスプラチンのいずれか（２５μＭ、５０μＭ又は１００μＭ）で処理された細尿管上皮細胞中のカスパーゼ３／７活性化（比較的軽い単位によって計測される）のグラフである。通常の腎近位尿細管上皮細胞は、米国菌培養収集所（ＡＴＣＣ、バージニア州マナサス）より得られた。細胞は、３７℃のインキュベーター内のＣＯ２が５  ％の加湿空気中、腎臓上皮細胞基本培地（ＡＴＣＣ）内で培養し、３７℃の加湿インキュベーター内の腎臓上皮細胞成長キット（ＡＴＣＣ）で補われた。細胞は、シスプラチンが不存在又は２５、５０μＭ又は１００μＭ存在の下、ＤＭＳＯ又は３０ｎＭ、１００ｎＭ、３００ｎＭ又は１μＭの化合物Ｔで処理された。製造者のインストラクションに従い、カスパーゼ−Ｇｌｏ３／７アッセイシステム（Ｐｒｏｍｅｇａ社、ウィスコンシン州マディソン）を用いて、カスパーゼ３／７活性化を、２４時間後に計測した。実施例１７０に記載されるように、化合物Ｔにより、これらの細胞におけるカスパーゼ３／７活性化のドーズ依存性が低下したことが実証された。
【図２４】図２４は、本発明の化合物のＲ２のいくつかの典型的な実施形態を例示する。
【図２５】図２５は、本発明の化合物のＲ２のいくつかの典型的な実施形態を例示する。
【図２６】図２６は、本発明の化合物のＲ２のいくつかの典型的な実施形態を例示する。
【図２７Ａ】本発明の化合物のコア構造の典型的な実施形態を例示する。
【図２７Ｂ】本発明の化合物のコア構造の典型的な実施形態を例示する。
【図２７Ｃ】本発明の化合物のコア構造の典型的な実施形態を例示する。
【図２８Ａ】本発明の化合物のコア構造の典型的な実施形態を例示する。
【図２８Ｂ】本発明の化合物のコア構造の典型的な実施形態を例示する。
【図２８Ｃ】本発明の化合物のコア構造の典型的な実施形態を例示する。
【図２８Ｄ】本発明の化合物のコア構造の典型的な実施形態を例示する。
【図２９Ａ】本発明の化合物のコア構造の典型的な実施形態を例示する。
【図２９Ｂ】本発明の化合物のコア構造の典型的な実施形態を例示する。
【図２９Ｃ】本発明の化合物のコア構造の典型的な実施形態を例示する。
【図３０Ａ】本発明の化合物のコア構造の典型的な実施形態を例示する。
【図３０Ｂ】本発明の化合物のコア構造の典型的な実施形態を例示する。
【図３１Ａ】本発明の化合物のコア構造の典型的な実施形態を例示する。
【図３１Ｂ】本発明の化合物のコア構造の典型的な実施形態を例示する。
【図３１Ｃ】本発明の化合物のコア構造の典型的な実施形態を例示する。
【図３１Ｄ】本発明の化合物のコア構造の典型的な実施形態を例示する。
【図３１Ｅ】本発明の化合物のコア構造の典型的な実施形態を例示する。
【図３１Ｆ】本発明の化合物のコア構造の典型的な実施形態を例示する。
【発明の具体的説明】
【００８８】
改良された化合物、方法及び組成物は、化学療法剤（典型的にはＤＮＡ損傷剤）に曝露されるだろう、されている、又はされていた被検体、典型的にはヒト、における、ＣＤＫ４／６複製依存的正常細胞、例えば造血幹細胞及び／又は造血前駆細胞（共にＨＳＰＣｓと呼ばれる）、及び／又は腎臓上皮細胞、に対する、化学療法剤毒性の影響を最小にする。
【００８９】
定義
特に明記しない限り、明細書及び特許請求の範囲を含む本出願に用いられる以下の用語は、以下の定義を有する。明細書及び添付の特許請求の範囲にて用いられるように、文脈において明らかに影響しない限り、単数形「ａ」、「ａｎ」及び「ｔｈｅ」は複数の指示物を含む。標準化学物質なる用語の定義は、Ｃａｒｅｙ  ａｎｄ  Ｓｕｎｄｂｅｒｇ  （２００７）  Ａｄｖａｎｃｅｄ  Ｏｒｇａｎｉｃ  ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ  ５ｔｈ  Ｅｄ．  Ｖｏｌｓ．  Ａ  ａｎｄ  Ｂ，  Ｓｐｒｉｎｇｅｒ  Ｓｃｉｅｎｃｅ＋Ｂｕｓｉｎｅｓｓ  Ｍｅｄｉａ  ＬＬＣ，  Ｎｅｗ  Ｙｏｒｋを含む参考図書の中に見出されてもよい。本発明の実施には、特に明記しない限り、有機合成化学、質量分析、クロマトグラフィーの準備及び分析法、タンパク質化学、生化学、組換えＤＮＡ技術及び薬理学といった従来法を用いることにする。有機化学の従来法は、Ｍａｒｃｈ’ｓ  Ａｄｖａｎｃｅｄ  Ｏｒｇａｎｉｃ  Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ：  Ｒｅａｃｔｉｏｎｓ，  Ｍｅｃｈａｎｉｓｍｓ，  ａｎｄ  Ｓｔｒｕｃｔｕｒｅ，  ６ｔｈ  Eｄｉｔｉｏｎ  Ｍ．Ｂ．  Ｓｍｉｔｈ  ａｎｄ  Ｊ．  Ｍａｒｃｈ，  Ｊｏｈｎ  Ｗｉｌｅｙ  ＆  Ｓｏｎｓ，  Ｉｎｃ．，  Ｈｏｂｏｋｅｎ，  ＮＪ，  ２００７に含まれるそれらを含む。「アルキル」という用語は、単独で又は「ハロアルキル」及び「アルキルアミノ」等の他の用語と共に用いられる場合、１〜約１２個の炭素原子を有する直鎖又は分枝のラジカルを含む。「低級アルキル」ラジカルは、１〜約６個の炭素原子を有する。このラジカルの例としては、メチル、エチル、ｎ−プロピル、イソプロピル、ｎ−ブチル、イソブチル、ｓｅｃ−ブチル、ｔｅｒｔ−ブチル、ペンチル、イソアミル、ヘキシル等が挙げられる。用語「アルキレン」は、架橋二価直鎖及び分枝のアルキルラジカルを含む。その例としては、プロピレンで、メチレン、エチレン、プロピレン、イソプロピレン等を含む。用語「アルケニル」は、少なくとも１個の炭素−炭素二重結合を有する炭素数２〜約１２の直鎖又は分枝のラジカルを含む。「低級アルケニル」ラジカルは、２〜約６個の炭素原子を有している。アルケニルラジカルの例としては、エテニル、プロペニル、アリル、プロペニル、ブテニル及び４−メチルブテニルが挙げられる。用語「アルケニル」及び「低級アルケニル」は、「シス」及び「トランス」配向又は代替的には「Ｅ」及び「Ｚ」配向を有するラジカルを含む。用語「アルキニル」は、少なくとも１つの炭素−炭素三重結合を有し、かつ、２〜約１２個の炭素原子を有する直鎖又は分枝のラジカルを意味する。「低級アルキニル」ラジカルは、２〜約６個の炭素原子を有する。このラジカルの例としては、プロパルギル、ブチニル等が挙げられる。アルキル、アルケニル及びアルキニルラジカルは、ハロ、ヒドロキシ、ニトロ、アミノ、シアノ、ハロアルキル、アリール、ヘテロアリール、ヘテロシクロ等。の１つ以上の官能基で任意に置換されてもよい。用語「アルキルアミノ」は、「Ｎ−アルキルアミノ」及び「Ｎ，Ｎ−ジアルキルアミノ」を含み、ここでは、アミノ基は、１つのアルキルラジカル、及び２つのアルキルラジカルで、それぞれ独立して置換される。
「低級アルキルアミノ」ラジカルは、窒素原子に結合される炭素数１〜６の１、２アルキルラジカルを有する。適切なアルキルアミノラジカルとしては、Ｎ−メチルアミノ等のモノ又はジアルキルアミノ、Ｎ−エチルアミノ、Ｎ．Ｎ−ジメチルアミノ、Ｎ，Ｎ−ジエチルアミノ等が挙げられる。
【００９０】
「ハロ」という用語は、フッ素、塩素、臭素またはヨウ素原子のようなハロゲンを意味する。用語「ハロアルキル」は、アルキル炭素原子の任意の１つ以上が、上述のように１つ以上のハロで置換されるラジカルを含む。その例としては、モノハロアルキル、ジハロアルキル）及びパーハロアルキルを含むポリハロアルキルラジカルを含む。モノハロアルキルラジカルは、一例として、ラジカル内にヨウ化、ブロモ、クロル又はフルオロ原子を有していてもよい。ジハロ及びポリハロアルキルラジカルは、同じハロ原子の二つ以上又は異なるハロラジカルの組合せを有していてもよい。「低級ハロアルキル」は、１−６個の炭素原子を有するラジカルを含む。ハロアルキルラジカルの例としては、フルオロメチル、ジフルオロメチル、トリフロロメチル、クロロメチル、ジクロロメチル、トリクロロメチル、ペンタフルオロエチル、ヘプタフルオロプロピル、ジフルオロクロロメチル、ジクロロフルオロメチル、ジフルオロエチル、ジフルオロプロピル、ジクロロエチル及びジクロロプロピルが挙げられる。「パーフルオロアルキル」は、フルオロ原子で置換される全ての水素原子を有するアルキルラジカルを意味する。その例としては、トリフロロメチル及びペンタフルオロエチルが挙げられる。
【００９１】
「アリール」という用語は、単独あるいは併用で、１個又は２個の環を含む炭素環式の芳香族システムを意味し、これら環は、融合により互いに結合されてもよい。用語「アリール」は、フェニル、ナフチル、インデニル、テトラヒドロナフチル及びインダニル等の芳香族ラジカルを含む。さらなる好ましいアリールは、フェニルである。前記「アリール」基は、低級アルキル、ヒドロキシル、ハロ、ハロアルキル、ニトロ、シアノ、アルコキシ、低級アルキルアミノ等の置換基を１つ以上有してもよい。アリール基は、ハロ、ヒドロキシ、ニトロ、アミノ、シアノ、ハロアルキル、アリール、ヘテロアリール、ヘテロシクロ等の官能基１つ以上で任意に置換されてもよい。
【００９２】
「ヘテロシクリル」又は「ヘテロシクロ」という用語は、飽和及び部分飽和異種原子含有環ラジカルを含み、この異種原子は、窒素、硫黄及び酸素から選択されてもよい。ヘテロシクロ環は、単環６〜８員環ならびに５〜１６員二環式環構造を含む（架橋融合及びスピロ融合二環式環構造を含んでもよい）。それは、−Ｏ−Ｏ−．−Ｏ−Ｓ−又は−Ｓ−Ｓ−部分を有する環を含まない。前記「ヘテロシクリル」基は、ヒドロキシル、Ｂｏｃ、ハロ、ハロアルキル、シアノ、低級アルキル、低級アラルキル、オキソ、低級アルコキシ、アミノ、低級アルキルアミノ等の、１〜３個の置換基を有してもよい。飽和ヘテロシクロ基の例としては、１〜４個の窒素原子を含む飽和３−、６−員ヘテロ単環基［例えばピロリジニル、イミダゾリジニル、ピペリジニル、ピロリニル、ピペラジニル］；１〜２個の酸素原子及び１〜３個の窒素原子を含む飽和３〜６員ヘテロ単環基［例えばモルホリニル］；１〜２つの硫黄原子及び１〜３つの窒素原子を含んでいる飽和３〜６会員を有するヘテロ単環基［例えばチアゾリジニル］を挙げることができる。部分飽和ヘテロシクリルラジカルの例としては、ジヒドロチエニル、ジヒドロピラニル、ジヒドロフリル、ジヒドロチアゾリル等が挙げられる。部分的に飽和及び飽和ヘテロシクロ基の特定の例としては、ピロリジニル、イミダゾリジニル、ピペリジニル、ピロリニル、ピラゾリジニル、ピペラジニル、モルホリニル、テトラヒドロピラニル、チアゾリジニル、ジヒドロチエニル、２、３−ジヒドロベンゾ［１、４］ジオキサニル、インドリニル、イソインドリニル、ジヒドロベンゾチエニル、ジヒドロベンゾフリル、イソクロマニル、クロマニル、１、２−ジヒドロキノリル、１，２，３，４−テトラヒドロ−イソキノリル、１，２，３，４−テトラヒドロ−キノリル、２，３，４，４ａ，９，９ａ−ヘキサヒドロ−１Ｈ−３−アザ−フルオレニル、５，６，７−トリヒドロ−1、２、４−−トリアゾロ［３，４−ａ］イソキノリル、３，４−ジヒドロ−２Ｈ−ベンゾ［１、４］オキサゾリル、ベンゾ［１，４］ジオキサニル、２，３−ジヒドロ−１Ｈ−１λ−ベンゾ［ｄ］イソチアゾール−６−イル、ジヒドロピラニル、ジヒドロフリル及びジヒドロチアゾリル等が挙げられる。また、ヘテロシクロ基は、ラジカルを含んでおり、その場合、ヘテロシクロラジカルは、芳香属炭化水素基と融合／縮合され；１〜５個の窒素原子を含む不飽和縮合ヘテロシクロ基、たとえば、インドリル、イソインドリル、インドリジニル、ベンズイミダゾリル、キノリル、イソキノリル、インダゾリル、ベンゾトリアゾリル、テトラゾロピリダジニル［例えば、テトラゾロ［１、５−ｂ］ピリダジニル］；１〜２個の酸素原子及び１〜３個の窒素原子を含む不飽和縮合ヘテロシクロ基［例えばベンゾオキサゾリル（ベンゾキサジアゾリル）］；１〜２個の硫黄原子及び１〜３個の窒素原子を含む不飽和縮合ヘテロシクロ基［例えば、ベンゾチアゾリル、ベンゾチアジアゾリル］；及び１〜２個の酸素又は硫黄原子を含む飽和、部分的不飽和及び不飽和縮合ヘテロシクロ基［例えばベンゾフリル、ベンゾチエニル、ジオキシニル２，３−ジヒドロベンゾ［１，４］及びジヒドロベンゾフリル］が挙げられる。
【００９３】
用語「ヘテロアリール」は、基Ｏ、Ｎ及びＳから選択される１つ以上のヘテロ原子を含むアリール環系を意味し、環の窒素及び硫黄原子は任意に酸化され窒素原子は任意に四級化される。
その例としては、１〜４個の窒素原子を含む不飽和５〜６員ヘテロモノシクリル基、たとえば、ピロリル、イミダゾリル、ピラゾリル、２−ピリジル、３−ピリジル、４−ピリジル、ピリミジル、ピラジニル、ピリダジニル、トリアゾリル［例えば、４Ｈ−１，２，４−トリアゾリル、１Ｈ−１，２，３−トリアゾリル、２Ｈ−１，２，３−トリアゾリル］；酸素原子を含む不飽和５〜６員ヘテロ単環基、たとえば、ピラニル、２−フリル、３−フリル等；硫黄原子を含む不飽和５〜６員ヘテロ単環基、たとえば、２−チエニル、３−チエニル等；１〜２個の酸素原子及び１〜３個の窒素原子を含む不飽和５〜６員ヘテロ単環基、たとえば、オキサゾリル、イソオキサゾリル、オキサジアゾリル［例えば、１，２，４−オキサジアゾリル、１，３，４−オキサジアゾリル、１，２、５−オキサジアゾリル］；１〜２個の硫黄原子及び１〜３個の窒素原子を含む不飽和５〜６員ヘテロ単環基、たとえば、チアゾリル、チアジアゾリル［例えば、１，２，４−チアジアゾリル、１，３，４−チアジアゾリル、１，２，５−チアジアゾリル］を挙げることができる。用語「ヘテロアリールアルキル」は、ヘテロアリール基で置換されるアルキルラジカルのことを意味する。その例としては、ピリジルメチル及びチエニルエチルが挙げられる。
【００９４】
「スルホニル」という用語は、単独で用いられるか、又は、たとえばアルキルスルホニルなど、他の用語に関連づけられるかどうかにかかわらず、それぞれ二価のラジカル−ＳＯ２−を意味する。用語「カルボキシ」又は「カルボキシル」は、単独で用いられるか、又は、たとえば「カルボキシアルキル」など、他の用語に関連づけられるかどうかにかかわらず、−Ｃ（Ｏ）−ＯＨを意味する。「カルボニル」という用語は、単独で用いられるか、又は、たとえば「アミノカルボニル」など、他の用語に関連づけられるかどうかにかかわらず、−Ｃ（Ｏ）−を意味する。用語「アミノカルボニル」は、式−Ｃ（Ｏ）−ＮＨ２のアミド基を意味する。用語「ヘテロシクロアルキル」は、ヘテロシクロ置換アルキルラジカルを含む。その例としては、ピペリジルメチル及びモルホリニルエチルが挙げられる。用語「アリールアルキル」には、アリール置換アルキルラジカルが含まれる。その例としては、ベンジル、ジフェニルメチル及びフェニルエチルが挙げられる。前記アラルキルにおけるアリールは、ハロ、アルキル、アルコキシ、ハロアルキル及びハロアルコキシでさらに置換されてもよい。用語「シクロアルキル」は、炭素数３〜１０の飽和炭素環基を含む。低級シクロアルキル基は、Ｃ３−Ｃ６環を含む。その例としては、シクロペンチル、シクロプロピル及びシクロヘキシルが挙げられる。シクロアルキル基は、たとえばハロ、ヒドロキシ、ニトロ、アミノ、シアノ、ハロアルキル、アリール、ヘテロアリール、ヘテロシクロ等の１つ以上の官能基で任意に置換されてもよい。用語「シクロアルキルアルキル」は、シクロアルキル置換アルキルラジカルを含む。「低級シクロアルキルアルキル」ラジカルは、１〜６つの炭素原子を有するアルキルラジカルに結合されるシクロアルキルラジカルである。その例としては、シクロヘキシルメチルが挙げられる。前記ラジカルにおけるシクロアルキルは、ハロ、アルキル、アルコキシ及びヒドロキシでさらに置換されてもよい。用語「シクロアルケニル」は、「シクロアルキルジエニル」化合物を含む１つ以上の炭素−炭素二重結合を有する炭素環基を含む。その例としては、シクロペンテニル、シクロペンタジエニル、シクロヘキセニル及びシクロヘプタジエニルが挙げられる。
【００９５】
ここで用いられる用語「オキソ」は、二重結合で結合される酸素原子を想定している。ここで用いられる用語「ニトロ」は、−ＮＯ２を想定する。ここで用いられる用語「シアノ」は、−ＣＮを想定する。ここで用いられる例では、「プロドラッグ」という用語は、生体内でホストに投与された際に、ペアレントドラッグに変換される化合物を意味する。ここで用いられる例では、用語「ペアレントドラッグ」は、ここに記載されるいずれかの異常症を治療するために有用な、又は、ホスト、典型的にはヒトにおいて、ここに記載されるあらゆる生理学的又は病理学的異常症に関連して根底にある原因又は症状をコントロールする又は向上させるために有用な、本明細書に記載した化合物のいずれかのことを意味する。
【００９６】
プロドラッグは、ペアレントドラッグの特性を改良する又はペアレントの製薬学上又は薬物動態上の特性を向上させることを含んだ、望ましい効果を達成するために、用いることができる。全てここに含まれるとみなされるペアレントドラッグの、インヴィヴォ生成の条件を調節することに関しての選択を提供するような、プロドラッグストラテジーが存在する。プロドラッグストラテジーの非限定的な例は、除去可能な基又は基の除去可能な部分の共有結合性結合を含み、たとえば、アシル化、リン酸化、ホスホニル化、アミド亜リン酸エステル誘導体、アミド化、低下、酸化処理、エステル化、アルキル化、他のカルボキシ誘導体、スルホキシ又はスルホン誘導体、カルボニル化又は無水物等である。特に明記しない限り、明細書及び特許請求の範囲を通して、所与の化学式又は名前は、全ての光学異性体及び立体異性体、ならびにラセミ混合体を、これらの異性体及び混合物が存在する場合に、包摂するものとする。
【００９７】
ある実施形態では、ＣＤＫ４／６−複製依存的正常細胞は、造血幹前駆細胞である。造血幹細胞及び前駆細胞の非限定的な例としては、長期造血幹細胞（ＬＴ−ＨＳＣｓ）、短期造血幹細胞（ＳＴ−ＨＳＣｓ）、多能性前駆細胞（ＭＰＰ）、共通脊髄前駆細胞（ＣＭＰ）、共通リンパ様前駆細胞（ＣＬＰ）、顆粒球−単核細胞前駆細胞（ＧＭＰ）、及び巨核球赤血球前駆細胞（ＭＥＰ）が挙げられる。
【００９８】
ある実施形態では、ＣＤＫ４／６−複製依存的正常細胞は、非造血組織、例えば非限定的な例としては、肝臓、腎臓、すい臓、脳、肺、副腎、腸、腸、胃、皮膚、聴覚系、骨、膀胱、卵巣、子宮、睾丸、胆嚢、甲状腺、心臓、膵島、血液血管、等の中の細胞であってもよい。ある実施形態では、ＣＤＫ４／６−複製依存的正常細胞は、腎細胞であり、そして特に腎臓上皮細胞、たとえば、腎近位尿細管上皮細胞である。ある実施形態では、ＣＤＫ４／６−複製依存的正常細胞は、造血幹前駆細胞である。ある実施形態では、ＣＤＫ４／６−複製依存的正常細胞は、非造血組織、例えば非限定的な例としては、肝臓、腎臓、すい臓、脳、肺、副腎、腸、腸、胃、皮膚、聴覚系、骨、膀胱、卵巣、子宮、睾丸、胆嚢、甲状腺、心臓、膵島、血液血管、等の中の細胞であってもよい。
【００９９】
ここに記載される化合物との関連で用いられる用語「選択的ＣＤＫ４／６阻害物質」とは、標準リン酸化アッセイにおいて、ＣＤＫ２と同じ程度に活性を抑制するために必要なＩＣ５０モル濃度の少なくとも約５００倍、又は１０００倍、又は１５００倍、又は１８００倍、又は２０００倍、又は５０００倍、又は１０，０００倍未満のＩＣ５０モル濃度で、ＣＤＫ４活性、ＣＤＫ６活性、又はＣＤＫ４及びＣＤＫ６活性の両方を抑制する化合物を含む。
【０１００】
「Ｇ１期停止を誘発する」とは、細胞サイクルのＧ１期にある細胞集団の相当な部分に対して、阻害剤化合物が休止状態を誘導することをいう。「血液欠乏」とは、血液細胞系統計数の低下、又は、血球（すなわち、脊髄形成異常）及び／又はリンパ球（すなわち、リンパ球減少、循環リンパ球数、たとえばＢ細胞及びＴ細胞、の減少）の不十分な生成のことを意味する。たとえば、貧血の形態での骨髄抑制、血小板数の低下（すなわち、血小板減少）、白血球数の低下（すなわち、白血球減少症）、又は顆粒球の低下（例えば、好中球減少症）として、血液欠乏が観察され得る。
【０１０１】
「細胞サイクルへの同時発生的復帰」とは、ＣＤＫ４／６阻害物質化合物の影響によりＧ１期停止にあるＣＤＫ４／６−複製依存的正常細胞、たとえばＨＳＰＣｓが、化合物の影響の消失に対して、相対的に同じ総体的時間枠内に又は相対的に同じ速度で細胞サイクルに復帰することを意味する。これに対して、「細胞サイクルへの非同時性の復帰」とは、ＣＤＫ４／６阻害物質化合物の影響のためにＧ１期停止にある正常細胞、たとえばＨＳＰＣｓが、ＰＤ０３３２９９１等の化合物の影響の消失に対して、比較的異なる総体的な時間枠内に又は比較的異なる速度で復帰することを意味する。「オフサイクル」又は「ドラッグホリデイ」とは、被検体が化学療法剤に投与されない又は露出されない期間のことを意味する。たとえば、被検体が２１日間連続で化学療法剤を投与されそして７日間化学療法剤を投与されないという治療計画において、この計画が何度も繰り返される場合、非投与の期間である７日は、「オフサイクル」又は「ドラッグホリデイ」と考えられる。オフターゲット及びドラッグホリデイとは、たとえば骨髄抑制等の有害な副作用のために、被検体にしばらく化学療法剤を投与しない治療計画中の中断のことを指してもよい。治療される被検体は、典型的にはヒト被検体であるが、ここに記載される方法は、他の動物、例えば哺乳類及び脊椎動物種、に関して有効であることが理解されよう。
【０１０２】
より詳しくは、被検体という用語は、臨床前試験に用いられるそれら等のアッセイに用いられる動物を含むことができ、これには、非限定的に、マウス、ネズミ、猿、犬、ブタ及びウサギを含み、さらに、ならびに家畜化された豚（ピッグ及びホッグ）、反芻類、ウマ、家禽、ネコ、ウシ、ネズミ、イヌ等を含む。
【０１０３】
「相当な部分」又は「かなりの部分」とは、少なくとも８０  ％を意味する。代替的な実施形態では、この部分は、少なくとも８５％、９０％又は９５％又はこれより大きくてもよい。
【０１０４】
ある実施形態では、用語「ＣＤＫ４／６−複製非依存的癌」とは、複製のためにＣＤＫ４／６の活性をさほど必要としない癌のことをいう。このタイプの癌は、しばしば、しかし常にではなく、ＣＤＫ２活性レベルの増加（例えば、これを示す細胞を有する）、又は網膜芽細胞腫腫瘍サプレッサタンパク質の減少発現、又は網膜芽細胞腫ファミリーメンバータンパク質（ｓ）、例えば非限定的な例としてはｐ１０７及びｐ１３０、により特徴づけられる。ＣＤＫ２活性レベルの増加又は網膜芽細胞腫腫瘍サプレッサタンパク質若しくは網膜芽細胞腫ファミリーメンバータンパク質の減少又は欠損発現は、たとえば、正常細胞と比較して、増加又は低減させることができる。
【０１０５】
ある実施形態では、ＣＤＫ２活性のレベルの増加は、ｍｙｃプロトオンコジーン増幅又は過剰発現に関連（例えば、生じ得る又はそれに伴って観察され得る）し得る。ある実施形態では、ＣＤＫ２活性のレベルの増加は、サイクリンＥ１、サイクリンＥ２又はサイクリンＡの過剰発現に関連し得る。ここで用いられる例では、用語「化学療法剤」又は「化学療法用剤」とは、細胞増殖抑制性又は細胞毒性剤（すなわち化合物）により処理をして、好ましくない細胞、たとえば癌細胞等の成長又は増殖を低減する又は排除することをいう。
【０１０６】
したがって、ここで用いられる例では、「化学療法剤」又は「化学療法用剤」は、増殖異常症、たとえば癌を治療するために用いられる細胞毒又は細胞増殖抑制性剤のことをいう。この薬剤の細胞毒効果は、核酸インターカレーション又は結合、ＤＮＡ又はＲＮＡアルキル化、ＲＮＡ又はＤＮＡ合成の阻害、他の核酸関連の活性の阻害（例えば、タンパク質合成）、または、あらゆる他の細胞毒効果、のうち一つ以上の結果となり得るが、そうなることを要求されない。
【０１０７】
したがって、「細胞毒性剤」は、「抗新生物性」剤又は「化学療法剤」としても記載される化合物のいずれか一つ又はあらゆる組合せであってもよい。この化合物は、細胞を殺すことができるＤＮＡ損傷化合物及び他の化学薬品を含むが、これに限定されるものではない。
【０１０８】
「ＤＮＡ損傷化学療法剤」の非限定的な例としては、アルキル化剤、ＤＮＡインターカレータ、タンパク合成阻害剤、ＤＮＡ又はＲＮＡ合成の阻害剤、ＤＮＡ塩基同族体、トポイソメラーゼ阻害剤、及びテロメラーゼ阻害剤又はテロメアＤＮＡ結合性化合物が挙げられる。たとえば、アルキル化剤としては、例えばブスルファン、インプロスルファン及びピポスルファン等のアルキルスルホン酸エステル；例えばベンゾジゼパ、カルボコン、メツレデパ及びウレデパ等のアジリジン；例えばアルトレタミン、トリエチレンメラミン、トリエチレンホスホルアミド、トリエチレンチオホスホルアミド及びトリメチロールメラミン等のエチレンイミン及びメチルメラミン；例えばクロラムブシル、クロルナファジン、シクロホスファミド、エストラムスチン、イホスファミド、メクロレタミン、塩酸メクロレタミン酸化物、メルファラン、ノベンビシン、フェンテルミン、プレドニマスチン、トロホスファミド及びウラシルマスタード等のナイトロジェンマスタード；並びに、例えばカルマスティン、クロロゾトシン、ホテムスチン、ロムスチン、ニムスチン及びラニムスチン等のニトロソ尿素等が挙げられる。癌の治療に用いられる抗生物質としては、ダクチノマイシン、ダウノルビシン、ドキソルビシン、イダルビシン、硫酸ブレオマイシン、マイトマイシン、プリカマイシン及びストレプトゾシンが挙げられる。化学療法剤アンチメタボライとしては、メルカプトプリン、チオグアニン、クラドリビン、リン酸フルダラビン、フルオロウラシル（５−ＦＵ）、フロキシウリジン、シタラビン、ペントスタチン、メトトレキセート、及びアザチオプリン、アシクロビル、アデニンβ−１−Ｄ−アラビノシド、アメトプテリン、アミノプテリン、２−アミノプリン、アフィジコリン、８‐アザグアニン、アザセリン、６−アザウラシル、２’−アジド−２’−デオキシヌクレオシド、５−ブロモデオキシシチジン、シトシンβ−１−Ｄ−アラビノシド、ジアゾオキソノルロイシン、ジデオキシヌクレオシド、５−フルオロデオキシシチジン、５‐フルオロデオキシウリジン及びヒドロキシウレアが挙げられる。化学療法剤タンパク合成阻害剤としては、アブリン、クロラムフェニコール、コリシンＥ３、シクロヘキシミド、ジフテリアトキシン、エデインＡ、エメチン、エリスロマイシン、エチオニン、フッ化物、５−フルオロトリプトフアン、フシジン酸、グアニリルメチレンジホスホン酸及びグアニリルイミド二リン酸、カナマイシン、カスガマイシン、キロマイシン及びＯ−メチルスレオニンが挙げられる。付加的なタンパク合成阻害剤としては、モデッシン、ネオマイシン、ノルバリン、パクタマイシン、パロモマイシン、ピューロマイシン、リシン、志賀毒素、ショードマイシン、スパルソマイシン、スペクチノマイシン、ストレプトマイシン、テトラサイクリン、チオストレプトン及びトリメトプリムが挙げられる。ＤＮＡ合成阻害剤としては、例えばジメチル硫酸、マイトマイシンＣ、窒素及びサルファーマスタード等のアルキル化剤；例えばアクリジン系色素、アクチノマイシン、アドリアマイシン、アントラセン、ベンゾピレン、エチジウムブロマイド、絡合プロピジウム二沃化物等の挿入剤；及び例えばジスタマイ��ン及びネトロプシン等のその他の薬剤が挙げられる。例えばクメルマイシン、ナリジキシン酸、ノボビオシン及びオキソリン酸等のトポイソメラーゼ阻害剤；コルセミド、コルヒチン、ビンブラスチン及びビンクリスチンを含む細胞分割の阻害剤；及びアクチノマイシンＤ、α−アマニチン及び他の菌類のアマトキシン、コルジセピン（３’‐デオキシアデノシン）、ジクロロリボフラノシルベンズイミダゾール、リファンピシン、ストレプトバリシン及びストレプトリジギンを含むＲＮＡ合成阻害剤を、ＤＮＡ損傷化合物として用いることもできる。
【０１０９】
ここに開示する選択的ＣＤＫ４／６阻害物質によってその毒作用が緩和可能な現行の化学療法剤の非限定的な例としては、アドリマイシン、５‐フルオロウラシル（５ＦＵ）、６‐メルカプトプリン、ゲムシタビン、メルファラン、クロラムブシル、マイトマイシン、イリノテカン、ミトキサントロン、エトポシド、カンプトセシン、アクチノマイシンＤ、マイトマイシン、シスプラチン、過酸化水素、カルボプラチン、プロカルバジン、メクロレタミン、シクロホスファミド、イホスファミド、メルファラン、クロラムブシル、ブスルファン、ニトロスレア、ダクチノマイシン、ダウノルビシン、ドキソルビシン、ブレオマイシン、プリコマイシン、タモキシフェン、タキソール、トランスプラチナム、ビンブラスチン、ビンブラスチン、カルマスティン、シタラビン、メクロレタミン、クロラムブシル、ストレプトゾシン、ロムスチン、テモゾロマイド、チオテパ、アルトレタミン、オキサリプラチン、カンプトテシン、及びメトトレキセート等、並びに同様の活性タイプ剤が挙げられる。
【０１１０】
一実施形態では、ＤＮＡ損傷化学療法剤は、シスプラチン、カルボプラチン、カンプトテシン、ドキソルビシン及びエトポシドから成る群より選択される。特定の代替的な実施形態では、ここに記載されるＣＤＫ４／６阻害物質は、化学療法剤と組み合わせて、抗癌又は反増殖効果に用いられることにより、ＣＤＫ４／６複製非依存性、例えばＲｂ−ネガティブ、癌又は増殖異常症、を治療する。
【０１１１】
ここに記載されるＣＤＫ４／６阻害物質は、添加剤又は協力効果を化学療法剤に提供してもよく、これにより、単独で化学療法剤を使った場合に予測されるより大きな抗癌効果が得られる。
【０１１２】
一実施形態では、ここに記載されるＣＤＫ４／６阻害物質は、上記の化学療法剤化合物の１つ以上と混合してもよい。
【０１１３】
一実施形態では、ここに記載されるＣＤＫ４／６阻害物質は、タモキシフェン、ミダゾラム、レトロゾール、ボルテゾミブ、アナストロゾール、ゴセレリン、ｍＴＯＲ阻害剤、ＰＩ３キナーゼ阻害剤、デュアルｍＴＯＲ−ＰＩ３Ｋ阻害剤、ＭＥＫ阻害剤、ＲＡＳ阻害剤、ＡＬＫ阻害剤、ＨＳＰ阻害剤、（たとえば、ＨＳＰ７０及びＨＳＰ９０阻害剤又はその組合せ）、ＢＣｌ−２阻害剤から非限定的に選択される化学療法剤；アポトーシス誘発化合物；ＧＳＫ６９０６９３（ペリホシン）（ＫＲＸ−０４０１）ＧＤＣ−００６８、トリシリビン、ＡＺＤ５３６３、ホオノキオール、ＰＦ−０４６９１５０２及びミルテフォシン、ＭＫ−２２０６、を非限定的に含むＡＫＴ阻害剤；ニボルマブ、ＣＴ−０１１、ＭＫ−３４７５、ＢＭＳ９３６５５８を非限定的に含むＰＤ−１阻害剤；及びＰ４０６、ドビチニブ、クイザルチニブ（ＡＣ２２０）、アムバチニブ（ＭＰ−４７０）、タンデュチニブ（ＭＬＮ５１８）（ＥＮＭＤ−２０７６）及びＫＷ−２４４９、またはこれらの組合せを非限定的に含むＡＭＰ−５１４又はＦＬＴ−３阻害剤、と混合することができる。
【０１１４】
ｍＴＯＲ阻害剤の非限定的な例としては、ラパマイシン及びその類似体、エベロリムス（アフィニトール）、テムシロリムス、リダフォロリムス、シロリムス及びデフォロリムスが挙げられる。Ｐ１３キナーゼ阻害剤の非限定的な例としては、ワートマニン、デメトキシビリジン、ペリホシン、イデラリシブ、ＰＸ−８６６、ＩＰＩ−１４５（インフィニティ）、ＢＡＹ  ８０−６９４６、ＢＥＺ２３５、ＲＰ６５０３、ＴＧＲ１２０２（ＲＰ５２６４）、ＭＬＮ１１１７（ＩＮＫ１１１７）、ピクチリシブ、ブパルリシブ、ＳＡＲ２４５４０８（ＸＬ１４７）、ＳＡＲ２４５４０９（ＸＬ７６５）、パロミド５２９、ＺＳＴＫ４７４、ＰＷＴ３３５９７、ＲＰ６５３０、ＣＵＤＣ−９０７及びＡＥＺＳ−１３６が挙げられる。ＭＥＫ阻害剤の非限定的な例としては、トラメチニブ、セルメチニブ、ＭＥＫ１６２、ＧＤＣ−０９７３（ＸＬ５１８）及びＰＤ０３２５９０１が挙げられる。ＲＡＳ阻害剤の非限定的な例としては、レオリシン及びｓｉＧ１２Ｄローダーが挙げられる。ＡＬＫ阻害剤の非限定的な例としては、クリゾチニブ、ＡＰ２６１１３及びＬＤＫ３７８が挙げられる。ＨＳＰ阻害剤の非限定的な例としては、ゲルダナマイシン又は１７−Ｎ−アリルアミノ−１７−デメトキシゲルダナマイシン（１７ＡＡＧ）及びラジシコールが挙げられる。
【０１１５】
一実施形態では、化学療法剤と組み合わせるＣＤＫ４／６阻害物質は、上記される式Ｉ、式ＩＩ、式ＩＩＩ、式ＩＶ若しくは式Ｖを含む化合物または組成物、又は薬理学的に許容される組成物、塩、アイソトープ類似体又はそのプロドラッグ、から成る群より選択される。
【０１１６】
一実施形態では、化合物は、表１により提供される化合物、又はそれらの薬理学的に許容される組成物、塩、アイソトープ類似体又はプロドラッグから選択される。
【０１１７】
一実施形態では、化合物は、化合物Ｔ、Ｑ、ＧＧ、Ｕ又はＡＡＡＡ、又はそれらの薬理学的に許容される組成物、塩、アイソトープ類似体又はプロドラッグから選択される。
【０１１８】
一実施形態では、ここに記載されるＣＤＫ４／６阻害物質は、非限定的な例としてイマチニブメシレート（Ｇｌｅｅｖａｃ（登録商標））、ダサチニブ（Ｓｐｒｙｃｅｌ（登録商標））、ニロチニブ（Ｔａｓｉｇｎａ（登録商標））、ボスチニブ（Ｂｏｓｕｌｉｆ（登録商標））、トラスツズマブ（Ｈｅｒｃｅｐｔｉｎ（登録商標））、ペルツズマブ（Ｐｅｒｊｅｔａ（登録商標））、ラパチニブ（Ｔｙｋｅｒｂ（登録商標））、ゲフィチニブ（Ｉｒｅｓｓａ（登録商標））、エルロチニブ（Ｔａｒｃｅｖａ（登録商標））、セツキシマブ（Ｅｒｂｉｔｕｘ（登録商標））、パニツムマブ（Ｖａｃｔｉｂｉｘ（登録商標））、バンデタニブ（Ｃａｐｒｅｌｓａ（登録商標））、ベムラフェニブ（Ｚｅｌｂｏｒａｆ（登録商標））、ボリノスタット（Ｚｏｌｉｎｚａ（登録商標））、ロミデプシン（Ｉｓｔｏｄａｘ（登録商標））、ベキサロテン（Ｔａｇｒｅｔｉｎ（登録商標））、アリトレチノイン（Ｐａｎｒｅｔｉｎ（登録商標））、トレチノイン（Ｖｅｓａｎｏｉｄ（登録商標））、カーフィルゾミブ（Ｋｙｐｒｏｌｉｓ（登録商標））、プララトレキサート（Ｆｏｌｏｔｙｎ（登録商標））、ベバシズマブ（Ａｖａｓｔｉｎ（登録商標））、ジフ−アフリバーセプト（Ｚａｌｔｒａｐ（登録商標））、ソラフェニブ（Ｎｅｘａｖａｒ（登録商標））、スニチニブ（Ｓｕｔｅｎｔ（登録商標））、パゾパニブ（Ｖｏｔｒｉｅｎｔ（登録商標））、レゴラフェニブ（Ｓｔｉｖａｒｇａ（登録商標））、及びカボザンチニブ（Ｃｏｍｅｔｒｉｑ（登録商標））から選択される化学療法剤を混合することができる。
【０１１９】
「長期の血液毒性」とは、化学療法剤の投与の後、１週以上、１月以上又は１年以上の間続く期間において、被検体に影響を及ぼす血液毒性のことをいう。長期の血液毒性は、血球（すなわち、脊髄形成異常）及び／又はリンパ球（すなわち、リンパ球減少、循環リンパ球、たとえばＢ細胞及びＴ細胞の数の低下）の効果のない生成を引き起こすことがあり得る骨髄異常症を起こし得る。血液毒性はたとえば、貧血、血小板数の低下（すなわち血小板減少）又は白血球数の低下（すなわち好中球減少症）として、観察され得る。ある場合は、脊髄形成異常は、白血病の発現となって生じうる。化学療法剤に関連した長期の毒性は、血液細胞に加えて、被検体の他の自己複製細胞に損傷を与え得る。したがって、長期の毒性は、老化及び虚弱に至らしめ得る。
【０１２０】
活性化合物
一実施形態では、本発明は、式Ｉ、ＩＩ、ＩＩＩ、ＩＶ又はＶ、又は、その薬理学的に許容される塩、の化合物又はこれらの化合物の使用に関し：
【化２】
2019055954.tif 000004
：
式中、Ｚは、−（ＣＨ２）ｘ−で、ｘは１、２，３、又は４、または−Ｏ−（ＣＨ２）ｚ−で、ｚは２，３又は４であり；
各Ｘは、独立してＣＨ又はＮであり；
各Ｘ’は、独立してＣＨ又はＮであり；
Ｘ’’は、独立してＣＨ２、Ｓ又はＮＨであり、構成部分が安定５員環となるよう配置され；
Ｒ、Ｒ８及びＲ１１は、独立してＨ、Ｃ１−Ｃ３のアルキル又はハロアルキル、シクロアルキル、又は、Ｎ、Ｏ又はＳから選択される１つ以上のヘテロ原子を含んだシクロアルキル；
−（アルキレン）ｍ−Ｃ３−Ｃ８シクロアルキル、−（アルキレン）ｍ−アリール、−（アルキレン）ｍ、−ヘテロシクロ、−（アルキレン）ｍ−ヘテロアリール、−（アルキレン）ｍ−ＮＲ３Ｒ４、−（アルキレン）ｍ−Ｃ（O）−ＮＲ３Ｒ４；
−（アルキレン）ｍ−Ｏ−Ｒ５、−（アルキレン）ｍ−  Ｓ（Ｏ）ｎ−Ｒ５、又は−（アルキレン）ｍ−Ｓ（Ｏ）ｎ−ＮＲ３Ｒ４であり、これらのいずれかは、価電子（原子価：ｖａｌａｎｃｅ）で与えられる１つ以上のＲ基で任意に独立に置換されてもよく、同じ又は隣接した原子に結合した２つのＲｘ基を任意に組み合せて環を形成してもよい；
各Ｒ１は独立して、アリール、アルキル、シクロアルキル又はハロアルキルであり、前記アルキル、シクロアルキル及びハロアルキル基の各々は、鎖中の炭素の代わりに任意にＯ又はＮヘテロ原子を含み、
隣接した環原子又は同じ環原子の２つのＲ１のものは、環原子と共に、任意に結合される３−８員環を形成し；
ｙは、０、１、２，３又は４であり；
Ｒ２は、−（アルキレン）ｍ−ヘテロシクロ、−（アルキレン）ｍ−ヘテロアリール、−（アルキレン）ｍ−ＮＲ３Ｒ４、−（アルキレン）ｍ−Ｃ（Ｏ）−ＮＲ３Ｒ４；−（アルキレン）ｍ−Ｃ（Ｏ）−Ｏ−アルキル；−（アルキレン）ｍ−Ｏ−Ｒ５、−（アルキレン）ｍ−Ｓ（Ｏ）ｎ−Ｒ５、又は−（アルキレン）ｍ−Ｓ（Ｏ）ｎ−ＮＲ３Ｒ４であり、
これらのいずれかは、電子価的に可能な限りにおいて(as allowed by valance)１つ以上のＲｘ基で任意に独立して置換されてもよく
同じ又は隣接した原子に結合した２つのＲｘ基は、任意に組み合わされて環を形成してもよく、
ｍは０又は１、ｎは０、１又は２であり；
Ｒ３及びＲ４はその発生毎に、独立して以下の通りである：
（ｉ）水素又は
（ｉｉ）アルキル、シクロアルキル、ヘテロシクロ、アリール、ヘテロアリール、シクロアルキルアルキル、ヘテロシクロアルキル、アリールアルキル又はヘテロアリールアルキル
これらのいずれかは、電子価的に可能な限りにおいて１つ以上のＲｘ基で任意に独立して置換されてもよく
同じ又は隣接した原子に結合した２つのＲｘ基は、任意に組み合わされて環を形成してもよく、
又は、Ｒ３及びＲ４は、これらが結合される窒素原子と共に組み合わされて、電子価的に可能な限りにおいて１つ以上のＲｘ基で任意に独立して置換されるヘテロシクロ環を形成してもよく、
同じ又は隣接した原子に結合した２つのＲｘ基は、任意に組み合わされて環を形成してもよく、
Ｒ５及びＲ５＊はその発生毎に、独立して以下の通りである：
（ｉ）水素又は
（ｉｉ）アルキル、アルケニル、アルキニル、シクロアルキル、ヘテロシクロ、アリール、ヘテロアリール、シクロアルキルアルキル、ヘテロシクロアルキル、アリールアルキル又はヘテロアリールアルキルであり、これらのいずれかは、電子価的に可能な限りにおいて１つ以上のＲｘ基で任意に独立して置換されてもよく；
Ｒｘは、その発生毎に独立して、ハロ、シアノ、ニトロ、オキソ、アルキル、ハロアルキル、アルケニル、アルキニル、シクロアルキル、シクロアルケニル、ヘテロシクロ、アリール、ヘテロアリール、アリールアルキル、ヘテロアリールアルキル、シクロアルキルアルキル、ヘテロシクロアルキル、−（アルキレン）ｍ−ＯＲ５、−（アルキレン）ｍ−Ｏ−アルキレン−ＯＲ５、−（アルキレン）ｍ−Ｓ（Ｏ）ｎ−Ｒ５、−（アルキレン）ｍ−ＮＲ３Ｒ４、−（アルキレン）ｍ−ＣＮ、−（アルキレン）ｍ−Ｃ（Ｏ）−Ｒ５、−（アルキレン）ｍ−Ｃ（Ｓ）−Ｒ５、−（アルキレン）ｍ−Ｃ（Ｏ）−ＯＲ５、−（アルキレン）ｍ−Ｏ−Ｃ（Ｏ）−Ｒ５、−（アルキレン）ｍ−Ｃ（Ｓ）−ＯＲ５、−（アルキレン）ｍ−Ｃ（Ｏ）−（アルキレン）ｍ−ＮＲ３Ｒ４、−（アルキレン）ｍ−Ｃ（Ｓ）−ＮＲ３Ｒ４、−（アルキレン）ｍ−Ｎ（Ｒ３）−Ｃ（Ｏ）−ＮＲ３Ｒ４、−（アルキレン）ｍ−Ｎ（Ｒ３）−Ｃ（Ｓ）−ＮＲ３Ｒ４、−（アルキレン）ｍ−Ｎ（Ｒ３）−Ｃ（Ｏ）−Ｒ５、−（アルキレン）ｍ−Ｎ（Ｒ３）−Ｃ（Ｓ）−Ｒ５、−（アルキレン）ｍ−Ｏ−Ｃ（Ｏ）−ＮＲ３Ｒ４、−（アルキレン）ｍ−Ｏ−Ｃ−ＮＲ３Ｒ４、−（アルキレン）ｍ−ＳＯ２−ＮＲ３Ｒ４、−（アルキレン）ｍ−Ｎ（Ｒ３）−ＳＯ２−Ｒ５、−（アルキレン）ｍ−Ｎ（Ｒ３）−ＳＯ２−ＮＲ３Ｒ４、−（アルキレン）ｍ−Ｎ（Ｒ３）−Ｃ（Ｏ）−ＯＲ５、−（アルキレン）ｍ−Ｎ（Ｒ３）−Ｃ（Ｓ）−ＯＲ５、又は−（アルキレン）ｍ−Ｎ（Ｒ３）−ＳＯ２−Ｒ５であり；
ここで、前記アルキル、ハロアルキル、アルケニル、アルキニル、シクロアルキル、シクロアルケニル、ヘテロシクロ、アリール、ヘテロアリール、アリールアルキル、ヘテロアリールアルキル、シクロアルキルアルキル及びヘテロシクロアルキル基は、以下の１つ以上でさらに独立して置換されてもよい：
−（アルキレン）ｍ−ＣＮ、−（アルキレン）ｍ−ＯＲ５＊、−（アルキレン）ｍ−Ｓ（Ｏ）ｎ−Ｒ５＊、−（アルキレン）ｍ−ＮＲ３＊Ｒ４＊、−（アルキレン）ｍ−Ｃ（Ｏ）−Ｒ５＊、−（アルキレン）ｍ−Ｃ（＝Ｓ）Ｒ５＊、−（アルキレン）ｍ−Ｃ（＝Ｏ）ＯＲ５＊、−（アルキレン）ｍ−ＯＣ（＝Ｏ）Ｒ５＊、−（アルキレン）ｍ−Ｃ（Ｓ）−ＯＲ５＊、−（アルキレン）ｍ−Ｃ（Ｏ）−ＮＲ３＊Ｒ４＊、−（アルキレン）ｍ−Ｃ（Ｓ）−ＮＲ３＊Ｒ４＊、−（アルキレン）ｍ−Ｎ（Ｒ３＊）−Ｃ（Ｏ）−ＮＲ３＊Ｒ４＊、−（アルキレン）ｍ−Ｎ（Ｒ３＊）−Ｃ（Ｓ）−ＮＲ３＊Ｒ４＊、−（アルキレン）ｍ−Ｎ（Ｒ３＊）−Ｃ（Ｏ）−Ｒ５＊、−（アルキレン）ｍ−Ｎ（Ｒ３＊）−Ｃ（Ｓ）−Ｒ５＊、−（アルキレン）ｍ−Ｏ−Ｃ（Ｏ）−ＮＲ３＊Ｒ４＊、−（アルキレン）ｍ−Ｏ−Ｃ−ＮＲ３＊Ｒ４＊、−（アルキレン）ｍ−ＳＯ２−ＮＲ３＊Ｒ４＊、−（アルキレン）ｍ−Ｎ（Ｒ３＊）−ＳＯ２Ｒ５＊、−（アルキレン）ｍ−Ｎ（Ｒ３＊）−ＳＯ２ＮＲ３＊Ｒ４＊、−（アルキレン）ｍ−Ｎ（Ｒ３＊）−Ｃ（Ｏ）−ＯＲ５＊、−（アルキレン）ｍ−Ｎ（Ｒ３＊）−Ｃ（Ｓ）−ＯＲ５＊、又は−（アルキレン）ｍ−Ｎ（Ｒ３＊）−ＳＯ２Ｒ５＊、の１つ以上でさらに独立して置換されてもよく；
ｎは、０、１又は２であり、ｍは０又は１であり；
Ｒ３＊及びＲ４＊は、独立してその発生毎に以下の通りであり：
（ｉ）水素又は
（ｉｉ）アルキル、アルケニル、アルキニルシクロアルキル、ヘテロシクロ、アリール、ヘテロアリール、シクロアルキルアルキル、ヘテロシクロアルキル、アリールアルキル又はヘテロアリールアルキルであって、
これらのいずれかは、電子価的に可能な限りにおいて１つ以上のＲｘ基で任意に独立して置換されてもよく
又は
Ｒ３＊及びＲ４＊は、それらに結合される窒素原子と共に組合せられて、価電子によって与えられる１つ以上のＲｘ基と任意に独立して置換されるヘテロシクロ環を形成してもよく；
Ｒ６はＨ又は低級アルキル、−（アルキレン）ｍ−ヘテロシクロ、−（アルキレン）ｍ−ヘテロアリール、−（アルキレン）ｍ−ＮＲ３Ｒ４、−（アルキレン）ｍ−Ｃ（Ｏ）−ＮＲ３Ｒ４、−（アルキレン）ｍ−Ｏ−Ｒ５、−（アルキレン）ｍ−Ｓ（Ｏ）ｎ−Ｒ５、又は−（アルキレン）ｍ−Ｓ（Ｏ）ｎ−ＮＲ３Ｒ４であり、これらのいずれかは、電子価的に可能な限りにおいて１つ以上のＲｘ基で任意に独立して置換されてもよく、
同じ又は隣接した原子に結合した２つのＲｘ基は任意に組み合わされて環を形成してもよく、
Ｒ１０は
（ｉ）  ＮＨＲＡであり、
ここで、ＲＡは非置換又は置換Ｃ１−Ｃ８アルキル、シクロアルキルアルキル、又は、−ＴＴ−ＲＲ、Ｃ１−Ｃ８シクロアルキル、又は、Ｎ、Ｏ及びＳから選択されるヘテロ原子を１つ以上含むシクロアルキルであり；
ＴＴは、非置換又は置換Ｃ１−Ｃ８アルキル又はＣ３−Ｃ８シクロアルキルリンカーであり；
そして、ＲＲはヒドロキシル、非置換又は置換Ｃ１−Ｃ６アルコキシ、アミノ、非置換又は置換Ｃ１−Ｃ６アルキルアミノ、非置換又は置換ジＣ１−Ｃ６アルキルアミノ、非置換又は置換Ｃ６−Ｃ１０アリール、１又は２個の５員又は６員環及びＮ、Ｏ及びＳから選択される１−４個のヘテロ原子を含む非置換又は置換ヘテロアリール、非置換又は置換Ｃ３−Ｃ１０炭素環、又は、１又は２個の５員又は６員環及びＮ、Ｏ及びＳから選択される１−４個のヘテロ原子を含む非置換又は置換ヘテロ環であり；
又は
（ｉｉ）−Ｃ（Ｏ）−Ｒ１２又は−Ｃ（Ｏ）Ｏ−Ｒ１３、ここで、Ｒ１２はＮＨＲＡ又はＲＡであり、Ｒ１３はＲＡであり；又はその薬理学的に許容される塩、プロドラッグ又はアイソトープ変種、たとえば、一部又は全部に重水素を導入した形態である。
【０１２１】
ある態様では、化合物は式Ｉ又は式ＩＩであり、Ｒ６は不在である。
ある態様では、化合物は、式ＩＩＩであり：変種は、式ＩおよびＩＩの化合物及びその薬理学的に許容される塩と定義される。
【化３】
2019055954.tif 000005
ある態様では、Ｒｘは、さらに置換されない。
ある態様では、Ｒ２は、−（アルキレン）ｍ−ヘテロシクロ、−（アルキレン）ｍ−ヘテロアリール、−（アルキレン）ｍ−ＮＲ３Ｒ４、−（アルキレン）ｍ−Ｃ（Ｏ）−ＮＲ３Ｒ４であり、；
−（アルキレン）ｍ−Ｏ−Ｒ５−（アルキレン）ｍ−Ｓ（Ｏ）ｎ−Ｒ５又は−（アルキレン）ｍ−Ｓ（Ｏ）ｎ−ＮＲ３Ｒ４のいずれかは、電子価的に可能な限りにおいて１つ以上のＲｘ基で任意に独立して置換されてもよく
同じ又は隣接した原子に結合した２つのＲｘ基は任意に組み合わされて環を形成してもよく、
ｍは０又は１、ｎは０、１又は２である。
ある態様では、Ｒ８は、水素又はＣ１−Ｃ３アルキルである。
ある態様では、Ｒは、水素又はＣ１−Ｃ３アルキルである。
ある態様では、Ｒ２は、−（アルキレン）ｍ−ヘテロシクロ、−（アルキレン）ｍ−ＮＲ３Ｒ４、−（アルキレン）ｍ−Ｃ（Ｏ）−ＮＲ３Ｒ４、−（アルキレン）ｍ−Ｃ（Ｏ）−Ｏ−アルキル又は−（アルキレン）ｍ−ＯＲ５であり、
これらのいずれかは、電子価的に可能な限りにおいて１つ以上のＲｘ基で任意に独立して置換されてもよく
同じ又は隣接した原子に結合した２つのＲｘ基は任意に組み合わされて環を形成してもよく、
ある態様では、Ｒ２は、−（アルキレン）ｍ−ヘテロシクロ、−（アルキレン）ｍ−ＮＲ３Ｒ４、−（アルキレン）ｍ−Ｃ（Ｏ）−ＮＲ３Ｒ４、−（アルキレン）ｍ−Ｃ（Ｏ）−Ｏ−アルキル又は−（アルキレン）ｍ−ＯＲ５であり、さらなる置換はない。
ある態様では、Ｒ２におけるｍは、１である。
更なる態様では、Ｒ２のアルキレンは、メチレン基である。
【０１２２】
ある態様では、Ｒ２は、以下の通りである：
【化４】
2019055954.tif 000006
Ｒ２＊は、結合、アルキレン、−（アルキレン）ｍ−Ｏ−（アルキレン）ｍ−、−（アルキレン）ｍ−Ｃ（Ｏ）−（アルキレン）ｍ−、−（アルキレン）ｍ−Ｓ（Ｏ）２−（アルキレン）ｍ−及び−（アルキレン）ｍ−ＮＨ−（アルキレン）ｍ−であり
ここで、各ｍは、独立して０又は１であり；
Ｐは、４員又は８員の単環又は二環式飽和ヘテロシクリル基であり；
各Ｒｘ１は、独立して、−（アルキレン）ｍ−（Ｃ（Ｏ））ｍ−（アルキレン）ｍ−（Ｎ（ＲＮ））ｍ−（アルキル）ｍ、ここで各ｍは、独立して０又は１であるが、少なくとも一つのｍは１、−（Ｃ（Ｏ））−Ｏ−アルキル、−（アルキレン）ｍ−シクロアルキル、ここでｍは０又は１、−Ｎ（ＲＮ）−シクロアルキル、−Ｃ（Ｏ）−シクロアルキル、−（アルキレン）ｍ−ヘテロシクリル、ここでｍは０又は１、又は、−Ｎ（ＲＮ）−ヘテロシクリル、−Ｃ（Ｏ）−ヘテロシクリル、−Ｓ（Ｏ）２−（アルキレン）ｍ、ここでｍは、１又は２であり、、
ここで、ＲＮは、Ｈ、Ｃ１〜Ｃ４アルキル又はＣ１〜Ｃ６ヘテロアルキルであり、
そして、２個のＲｘ１は、Ｐに結合する原子（これは同じ原子でもよい）と共に、環を形成することができ；ｔは、０、１又は２である。
ある態様では、各Ｒｘ１は、非置換のアルキル、ハロゲン又はヒドロキシによって任意に置換されるのみである。
ある態様では、Ｒｘ１は、水素又は非置換のＣ１〜Ｃ４アルキルである。
ある態様では、少なくとも１つのＲｘ１は、−（アルキレン）ｍ−ヘテロシクリルであり、ここで、ｍは０又は１である。
【０１２３】
ある態様では、Ｒ２は：
【化５】
2019055954.tif 000007
ここで、Ｐ＊は、４員又は８員の単環又は二環式飽和ヘテロシクリル基である。
ある態様では、Ｒ２は：
【化６】
2019055954.tif 000008
ある態様では、Ｒ２は：
【化７】
2019055954.tif 000009
ある態様では、Ｒ２は：
【化８】
2019055954.tif 000010
ここで、
Ｒ２＊は、結合、アルキレン、−（アルキレン）ｍ−Ｏ−（アルキレン）ｍ−、−（アルキレン）ｍ−Ｃ（Ｏ）−（アルキレン）ｍ−、−（アルキレン）ｍ−Ｓ（Ｏ）２−（アルキレン）ｍ−及び−（アルキレン）ｍ−ＮＨ−（アルキレン）ｍ−であり
ここで、各ｍは、独立して０又は１であり；
Ｐは、４員又は８員の単環又は二環式飽和ヘテロシクリル基であり；
Ｐ１は、４員又は６員の単環式飽和ヘテロシクリル基であり；
各Ｒｘ２は、独立して水素又はアルキルであり；
ｓは０、１又は２である。
【０１２４】
ある態様では、Ｒ２は：
【化９】
2019055954.tif 000011
ある態様では、Ｐ１は、少なくとも１つの窒素を含む。
ある態様では、前述の全ての態様におけるＲ２＊のあらゆるアルキレンは、さらに置換されない。
ある態様では、Ｒ２は、図２４−２６に示される構造から選択される。
【０１２５】
ある態様では、Ｒ２は：
【化１０】
2019055954.tif 000012
【０１２６】
ある態様では、化合物は、一般式Ｉを有し、より具体的には図２７〜３１の一般構造の一つを有し、そこでは変数はあらかじめ定義されている通りである。
ある態様では、化合物は、一般式Ｉａを有する：
【化１１】
2019055954.tif 000013
ここで、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ及びｙは、あらかじめ定義されている通りである。
ある実施形態では、化合物は式Ｉａを有し、Ｒはアルキルである。
ある実施形態では、化合物は式Ｉａを有し、ＲはＨである。
ある実施形態では、化合物は、式Ｉａを有し、Ｒ２は：
【化１２】
2019055954.tif 000014
ここで、Ｐ＊は、４員又は８員の単環又は二環式飽和ヘテロシクリル基であり、Ｒ２＊、Ｒｘ１及びｔは、あらかじめ定義されている通りである。
ある実施形態では、化合物は式Ｉａを有し、Ｒ２は：
【化１３】
2019055954.tif 000015
ここで、Ｐ＊は、４員又は８員の単環又は二環式飽和ヘテロシクリル基であり、
Ｒｘ１は、水素又は非置換のＣ１〜Ｃ４アルキルであり、
及び
Ｒ２＊は、あらかじめ定義されている通りである。
【０１２７】
ある実施形態では、化合物は、式Ｉｂを有する：
【化１４】
2019055954.tif 000016
ここで、Ｒ２及びＲは、あらかじめ定義されている通りである。
ある実施形態では、化合物は式Ｉｂを有し、Ｒはアルキルである。
ある実施形態では、化合物は式Ｉｂを有し、ＲはＨである。
ある実施形態では、化合物は、式Ｉｂを有し、Ｒ２は：
【化１５】
2019055954.tif 000017
ここで、Ｐ＊は、４員又は８員の単環又は二環式飽和ヘテロシクリル基であり、Ｒ２＊、Ｒｘ１及びｔは、あらかじめ定義されている通りである。
ある実施形態では、化合物は、式Ｉｂを有し、Ｒ２は：
【化１６】
2019055954.tif 000018
ここで、Ｐ＊は、４員又は８員の単環又は二環式飽和ヘテロシクリル基であり、Ｒｘ１は、水素又はＣ１〜Ｃ４アルキルであり、Ｒ２＊はあらかじめ定義されている通りである。
【０１２８】
ある実施形態では、化合物は、式Ｉｃを有する：
【化１７】
2019055954.tif 000019
ここで、Ｒ２及びＲは、あらかじめ定義されているものである。
ある実施形態では、化合物は式Ｉｃを有し、Ｒはアルキルである。
ある実施形態では、化合物は式Ｉｃを有し、ＲはＨである。
ある実施形態では、化合物は式Ｉｃを有し、Ｒ２は：
【化１８】
2019055954.tif 000020
ここで、Ｐ＊は、４員〜８員の単環又は二環式飽和ヘテロシクリル基であり、Ｒ２＊、Ｒｘ１及びｔは、あらかじめ定義されている通りである。
ある実施形態では、化合物は式Ｉｃを有し、Ｒ２は：
【化１９】
2019055954.tif 000021
ここで、Ｐ＊は、４員〜８員の単環又は二環式飽和ヘテロシクリル基であり、Ｒｘ１は、水素又はＣ１〜Ｃ４アルキルであり、Ｒ２＊はあらかじめ定義されている通りである。
【０１２９】
ある実施形態では、化合物は、式Ｉｄを有する：
【化２０】
2019055954.tif 000022
ここで、Ｒ２及びＲは、あらかじめ定義されている通りである。
ある実施形態では、化合物は式Ｉｄを有し、Ｒはアルキルである。
ある実施形態では、化合物は式Ｉｄを有し、ＲはＨである。
ある実施形態では、化合物は、式Ｉｄを有し、Ｒ２は：
【化２１】
2019055954.tif 000023
ここで、Ｐ＊は、４員〜８員の単環又は二環式飽和ヘテロシクリル基であり、Ｒ２＊、Ｒｘ１及びｔは、あらかじめ定義されている通りである。
ある実施形態では、化合物は、式Ｉｄを有し、Ｒ２は：
【化２２】
2019055954.tif 000024
ここで、Ｐ＊は、４員〜８員の単環又は二環式飽和ヘテロシクリル基であり、Ｒｘ１は、水素又はＣ１〜Ｃ４アルキルであり、Ｒ２＊は、あらかじめ定義されているものである。
【０１３０】
ある実施形態では、化合物は、式Ｉｅを有する：
【化２３】
2019055954.tif 000025
ある実施形態では、化合物は式Ｉｅを有し、Ｒはアルキルである。
ある実施形態では、化合物は式Ｉｅを有し、ＲはＨである。
ある実施形態では、化合物は式Ｉｅを有し、Ｒ２は：
【化２４】
2019055954.tif 000026
ここで、Ｐ＊は、４員〜８員の単環又は二環式飽和ヘテロシクリル基であり、Ｒ２＊、Ｒｘ１及びｔは、あらかじめ定義されている通りである。
ある実施形態では、化合物は式Ｉｅを有し、Ｒ２は：
【化２５】
2019055954.tif 000027
ここで、Ｐ＊は、４員〜８員の単環又は二環式飽和ヘテロシクリル基であり、Ｒｘ１は水素又はＣ１〜Ｃ４アルキルであり、Ｒ２＊はあらかじめ定義されている通りである。
【０１３１】
ある実施形態では、化合物は、式Ｉｆを有する
【化２６】
2019055954.tif 000028
ある実施形態では、化合物は式Ｉｆを有し、Ｒはアルキルである。
ある実施形態では、化合物は式Ｉｆを有し、ＲはＨである。
ある実施形態では、化合物は式Ｉｆを有し、Ｒ２は：
【化２７】
2019055954.tif 000029
ここで、Ｐ＊は、４員〜８員の単環又は二環式飽和ヘテロシクリル基であり、Ｒ２＊、Ｒｘ１及びｔは、あらかじめ定義されている通りである。
ある実施形態では、化合物は式Ｉｆを有し、Ｒ２は：
【化２８】
2019055954.tif 000030
ここで、Ｐ＊は、４員〜８員の単環又は二環式飽和ヘテロシクリル基であり、Ｒｘ１は水素又はＣ１〜Ｃ４アルキルであり、Ｒ２＊はあらかじめ定義されている通りである。
【０１３２】
ある実施形態では、化合物は、式Ｉｇを有する：
【化２９】
2019055954.tif 000031
ある実施形態では、化合物は式Ｉｇを有し、Ｒはアルキルである。
ある実施形態では、化合物は式Ｉｇを有し、ＲはＨである。
ある実施形態では、化合物は式Ｉｇを有し、Ｒ２は：
【化３０】
2019055954.tif 000032
ここで、Ｐ＊は、４員〜８員の単環又は二環式飽和ヘテロシクリル基であり、Ｒ２＊、Ｒｘ１及びｔは、あらかじめ定義されている通りである。
ある実施形態では、化合物は式Ｉｇを有し、Ｒ２は：
【化３１】
2019055954.tif 000033
ここで、Ｐ＊は、４員〜８員の単環又は二環式飽和ヘテロシクリル基であり、Ｒｘ１は水素又はＣ１〜Ｃ４アルキルであり、Ｒ２＊はあらかじめ定義されている通りである。
【０１３３】
ある実施形態では、化合物は、式Ｉｈを有する：
【化３２】
2019055954.tif 000034
ある実施形態では、化合物は式Ｉｈを有し、Ｒはアルキルである。
ある実施形態では、化合物は式Ｉｈを有し、ＲはＨである。
ある実施形態では、化合物は、式Ｉｈを有し、Ｒ２は：
【化３３】
2019055954.tif 000035
ここで、Ｐ＊は、４員〜８員の単環又は二環式飽和ヘテロシクリル基であり、Ｒ２＊、Ｒｘ１及びｔは、あらかじめ定義されている通りである。
ある実施形態では、化合物は、式Ｉｈを有し、Ｒ２は：
【化３４】
2019055954.tif 000036
ここで、Ｐ＊は、４員〜８員の単環又は二環式飽和ヘテロシクリル基であり、Ｒｘ１は水素又はＣ１〜Ｃ４アルキルであり、Ｒ２＊はあらかじめ定義されている通りである。
【０１３４】
ある実施形態では、化合物は、式Ｉｉを有する：
【化３５】
2019055954.tif 000037
ある実施形態では、化合物は式Ｉｉを有し、Ｒはアルキルである。
ある実施形態では、化合物は式Ｉｉを有し、ＲはＨである。
ある実施形態では、化合物は式Ｉｉを有し、Ｒ２は：
【化３６】
2019055954.tif 000038
ここで、Ｐ＊は、４員又は８員の単環又は二環式飽和ヘテロシクリル基であり、Ｒ２＊、Ｒｘ１及びｔは、あらかじめ定義されている通りである。
ある実施形態では、化合物は式Ｉｉを有し、Ｒ２は：
【化３７】
2019055954.tif 000039
ここで、Ｐ＊は、４員〜８員の単環又は二環式飽和ヘテロシクリル基であり、Ｒｘ１は水素又はＣ１〜Ｃ４アルキルであり、Ｒ２＊はあらかじめ定義されている通りである。
【０１３５】
ある実施形態では、化合物は、式Ｉｊを有する：
【化３８】
2019055954.tif 000040
ある実施形態では、化合物は式Ｉｊを有し、Ｒはアルキルである。
ある実施形態では、化合物は式Ｉｊを有し、ＲはＨである。
ある実施形態では、化合物は式Ｉｊを有し、Ｒ２は：
【化３９】
2019055954.tif 000041
ここで、Ｐ＊は、４員〜８員の単環又は二環式飽和ヘテロシクリル基である。
ある実施形態では、化合物は式Ｉｊを有し、Ｒ２は：
【化４０】
2019055954.tif 000042
ここで、Ｐ＊は、４員〜８員の単環又は二環式飽和ヘテロシクリル基であり、Ｒｘ１は、水素又はＣ１〜Ｃ４アルキルである。
ある実施形態では、化合物は式Ｉｊを有し、ＲはＨであり、両方のＸはＮである。
【０１３６】
ある実施形態では、化合物は、次の構造を有する：
【化４１】
2019055954.tif 000043
ある実施形態では、化合物は式Ｉｋを有し、Ｒ２は：
【化４２】
2019055954.tif 000044
ここで、Ｐ＊は、４員〜８員の単環又は二環式飽和ヘテロシクリル基である。
ある実施形態では、化合物は式Ｉｋを有し、Ｒ２は：
【化４３】
2019055954.tif 000045
ここで、Ｐ＊は、４員〜８員の単環又は二環式飽和ヘテロシクリル基であり、Ｒｘ１は、水素又はＣ１〜Ｃ４アルキルである。
【０１３７】
ある実施形態では、化合物は、式Ｉｌを有する：
【化４４】
2019055954.tif 000046
ある実施形態では、化合物は式Ｉｌを有し、Ｒ２は：
【化４５】
2019055954.tif 000047
ここで、Ｐ＊は、４員〜８員の単環又は二環式飽和ヘテロシクリル基である。
ある実施形態では、
化合物は式Ｉｌを有し、Ｒ２は：
【化４６】
2019055954.tif 000048
ここで、Ｐ＊は、４員〜８員の単環又は二環式飽和ヘテロシクリル基であり、Ｒｘ１は、水素又はＣ１〜Ｃ４アルキルである。
【０１３８】
ある実施形態では、化合物は、式Ｉｍを有する：
【化４７】
2019055954.tif 000049
ある実施形態では、化合物は式Ｉｍを有し、Ｒ２は：
【化４８】
2019055954.tif 000050
ここで、Ｐ＊は、４員〜８員の単環又は二環式飽和ヘテロシクリル基である。
ある実施形態では、化合物は式Ｉｍを有し、Ｒ２は：
【化４９】
2019055954.tif 000051
ここで、Ｐ＊は、４員〜８員の単環又は二環式飽和ヘテロシクリル基であり、Ｒｘ１は、水素又はＣ１〜Ｃ４アルキルである。
【０１３９】
ある実施形態では、化合物は、式ＩＩａを有する：
【化５０】
2019055954.tif 000052
ある実施形態では、化合物は、式ＩＩａを有し、Ｒ２は：
【化５１】
2019055954.tif 000053
ここで、Ｐ＊は、４員〜８員の単環又は二環式飽和ヘテロシクリル基である。
ある実施形態では、化合物は、式ＩＩａを有し、Ｒ２は：
【化５２】
2019055954.tif 000054
ここで、Ｐ＊は、４員〜８員の単環又は二環式飽和ヘテロシクリル基であり、Ｒｘ１は、水素又はＣ１〜Ｃ４アルキルである。
【０１４０】
ある実施形態では、化合物は、式ＩＩｂを有する：
【化５３】
2019055954.tif 000055
ある実施形態では、化合物は式Ｉｍを有し、Ｒ２は：
【化５４】
2019055954.tif 000056
ここで、Ｐ＊は、４員〜８員の単環又は二環式飽和ヘテロシクリル基である。
ある実施形態では、化合物は式Ｉｍを有し、Ｒ２は：
【化５５】
2019055954.tif 000057
ここで、Ｐ＊は、４員〜８員の単環又は二環式飽和ヘテロシクリル基であり、Ｒｘ１は、水素又はＣ１〜Ｃ４アルキルである。
【０１４１】
ある態様では、活性化合物は以下の通りである：
【化５６】
2019055954.tif 000058
【０１４２】
特定の実施形態では、化合物は、以下から選択される：
【化５７】
2019055954.tif 000059
2019055954.tif 000060
ここで、Ｒは、Ｃ（Ｈ）Ｘ、ＮＸ、Ｃ（Ｈ）Ｙ又はＣ（Ｘ）２であり、
式中、Ｘは、直鎖、分枝又は環状Ｃ１〜Ｃ５アルキル基であり、メチル、エチル、プロピル、シクロプロピル、イソプロピル、ブチル、ｓｅｃ−ブチル、ｔｅｒｔ−ブチル、イソブチル、シクロブチル、ペンチル、イソペンチル、ネオペンチル、ｔｅｒｔ−ペンチル、ｓｅｃ−ペンチル及びシクロペンチルを含み；
Ｙは、ＮＲ１Ｒ２であり、ここでＲ１及びＲ２が独立してＸであり、
又はＲ１及びＲ２はアルキル基であり、これらは一緒に１又は２個のヘテロ原子（Ｎ、Ｏ又はＳ）を含む架橋を形成し；
かつ、２個のＸ基は一緒にアルキル架橋又は１又は２個のヘテロ原子（Ｎ、Ｏ又はＳ）を含む架橋を形成して、スピロ化合物を形成することができる。
Ｔ式のＩＵＰＡＣ名称は、２’−（（５−（４−メチルピペラジン−１−イル）ピリジン−２−イル）アミノ）−７’，８’−ジヒドロ−６’Ｈ−スピロ［シクロヘキサン−１，９’−ピラジノ［１’，２’：１，５］ピロロ［２，３−ｄ］ピリミジン］−６’−オンであり；
式Ｑについては、２’−（（５−（ピペラジン−１−イル）ピリジン−２−イル）アミノ）−７’，８’−ジヒドロ−６’Ｈ−スピロ［シクロヘキサン−１，９’−ピラジノ［１’、２’：１、５］ピロロ［２，３−ｄ］ピリミジン］−６’−オン；
式ＧＧについては、２’−（（５−（４−イソプロピルピペラジン−１−イル）ピリジン−２−イル）アミノ）−７’，８’−ジヒドロ−６’Ｈ−スピロ［シクロヘキサン−１，９’−ピラジノ［１’、２’：１、５］ピロロ［２，３−ｄ］ピリミジン］−６’−オン；
式Ｕについては、２’−（（５−（４−モルホリノピペリジン−１−イル）ピリジン−２−イル）アミノ）−７’，８’−ジヒドロ−６’Ｈ−スピロ［シクロヘキサン−１，９’−ピラジノ［１’、２’：１、５］ピロロ［２，３−ｄ］ピリミジン］−６’−オンである。
【０１４３】
本発明の範囲内に含まれ、ここに開示された治療及び組成物の方法に使用可能な、更に具体的な化合物は、下記の表１に列挙される構造を含み得る。
【０１４４】
【表１】
2019055954.tif 000061
2019055954.tif 000062
2019055954.tif 000063
2019055954.tif 000064
2019055954.tif 000065
2019055954.tif 000066
2019055954.tif 000067
2019055954.tif 000068
2019055954.tif 000069
2019055954.tif 000070
2019055954.tif 000071
2019055954.tif 000072
2019055954.tif 000073
2019055954.tif 000074
2019055954.tif 000075
2019055954.tif 000076
【０１４５】
同位体置換物
本発明は、同位体の量が自然の存在率より多くなるよう、すなわち富化され、望ましい原子の同位体で置換する、化合物及び化合物の使用を含む。同位元素は、同じ原子番号であるが異なる質量数を有している、すなわち、中性子の数が異なるが陽子の数は同じである原子である。一般例として、及び、限定なしで、水素の同位体、たとえば、重水素（２Ｈ）及び三重水素（３Ｈ）が、ここに記載されたいずれの構造においても、用いられてよい。代替的に又は付加的に、炭素の同位体、例えば、１３Ｃ及び１４Ｃを用いてもよい。好ましい同位体的置換は、水素に対して重水素を分子の１つ以上の位置で用いて、薬剤の性能を向上させることである。重水素は、代謝の間に、結合切断の位置（α−重水素反応速度同位体効果）、又は、結合切断の部位の隣接又はその近傍（β−重水素反応速度同位体効果）に結合することができる。重水素等の同位体による置換は、より大きな代謝安定性から得られた一定の治療利点の余裕を与え、たとえば、インヴィヴォ半減期が伸び、又は必要用量が削減される等である。代謝分解の部位において水素を重水素で置換すれば、その結合での代謝の速度を低減することができ、又は代謝を排除することができる。
水素原子が存在できる化合物のあらゆる位置では、水素原子は、軽水素（１Ｈ）、重水素（２Ｈ）及び三重水素（３Ｈ）を含む水素のあらゆる同位体となり得る。したがって、ここにおける化合物への言及は、文脈がそうでないと明らかに指図しない限り、全ての潜在的な同位体的形態をカバーする。
【０１４６】
用語「同位元素標識化」類似体は、「重水素化類似体」、「１３Ｃ標識化類似体」又は「重水素化／１３Ｃ標識化類似体」の類似体のことをいう。
【０１４７】
用語「重水素化類似体」は、ここに記載した化合物であって、それによってＨ−同位体、すなわち水素／軽水素（１Ｈ）は、Ｈ−同位体、すなわち重水素（２Ｈ）に置換されるものを意味する。
重水素置換は、一部または全体でなされてもよい。一部の重水素置換とは、少なくとも１つの水素が少なくとも１つの重水素によって置換されることを意味する。特定の実施形態では、同位体は、着目するあらゆる位置で、９０、９５又は９９  ％又はそれ以上に同位体中に濃縮される。ある実施形態では、望ましい位置で９０、９５又は９９  ％に濃縮される重水素である。
【０１４８】
ＣＤＫ−複製依存的細胞及びサイクリン依存的キナーゼ阻害剤
組織特異幹細胞及びその他のレジデント増殖細胞のサブセットは自己複製ができ、そのことは、成熟した哺乳類の寿命全体を通じて、管理された複製を通してそれ自身を置換することができることを意味する。さらに、幹細胞は、非対称に分裂して、後に所与の器官の様々な要素を生成する「後代」又は「前駆」細胞を生成することになる。たとえば、細網内皮系では、造血幹細胞は前駆細胞を生み出し、そしてそれは次いで、血液の全ての分化した要素（例えば、白血球、赤血球及び血小板）を生み出す。図１参照。ある特定の増殖細胞（例えばＨＳＰＣｓ）は、増殖キナーゼサイクリン−依存的キナーゼ４（ＣＤＫ４）及び／又は細胞複製のためのサイクリン依存的キナーゼ６（ＣＤＫ６）の酵素活性を必要とする。対照的に、成熟した哺乳類中の大部分の増殖細胞（例えば、骨髄中のさらに分化した造血細胞）は、ＣＤＫ４及び／又はＣＤＫ６（すなわちＣＤＫ４／６）の活性を必要としない。これらの分化した細胞は、ＣＤＫ４／６活性がない場合でも、他の増殖キナーゼ、たとえばサイクリン依存的キナーゼ２（ＣＤＫ２）又はサイクリン依存的キナーゼ１（ＣＤＫ１）を用いて、増殖することができる。投与されるＣＤＫ４／６阻害物質は、化合物又は式Ｉ、式ＩＩ、式ＩＩＩ、式ＩＶ又は式Ｖ又はそれらの組合せを含む組成物から成る群より選択される。一実施形態では、化合物は、表１に記載される化合物から選択される。特定の実施形態では、ＣＤＫ４／６阻害物質は、式Ｉ、ＩＩ、ＩＩＩ、ＩＶ又はＶのＣＤＫ４／６阻害物質、又はその薬理学的に許容される組成物、塩、同位体的類似体又はプロドラッグであり、ここで、化合物によって提供される保護は、自然界では短期及び過渡的であり、細胞のかなりの部分が、化学療法剤の効果の中断後すぐ、たとえば約２４、３０、３６又は４０時間未満内に、同時に細胞−サイクルにリエントリーする。
【０１４９】
一実施形態では、化合物は、表１に記載される化合物又はこれらの薬理学的に許容される組成物、塩、同位体的類似体又はそのプロドラッグから選択される。
【０１５０】
一実施形態では、化合物は化合物Ｔ、Ｑ、ＧＧ、Ｕ又はＡＡＡＡ、または、これらの薬理学的に許容される組成物、塩、同位体的類似体又はプロドラッグから選択される。
細胞サイクルのＧ１期内で休止している細胞は、増殖している細胞に比べて、化学療法剤の損傷効果に対して高い耐性を示す。
【０１５１】
ここに記載された方法に用いられるＣＤＫ４／６抑制性化合物は、ＣＤＫ２阻害力が最小の、選択性の高い強力なＣＤＫ４／６阻害物質である。一実施形態では、ここに記載される方法に用いられるＣＤＫ４／６化合物は、ＣＤＫ４／ＣｙｃＤ１  ＩＣ５０抑制性濃度値を有し、すなわち、ＣＤＫ２／ＣｙｃＥ阻害に対するそれぞれのＩＣ５０濃度値より、＞１５００倍、＞１８００倍、＞２０００倍、＞２２００倍、＞２５００倍、＞２７００倍、＞３０００倍、＞３２００倍以上、低い。一実施形態では、ここに記載される方法に用いられるＣＤＫ４／６阻害物質は、ＣＤＫ４／ＣｙｃＤ１阻害に対するＩＣ５０濃度値を有し、それはすなわち、約＜１．５０ｎＭ、＜１．２５ｎＭ、＜１．０ｎＭ、＜０．９０ｎＭ、＜０．８５ｎＭ、＜０．８０ｎＭ、＜０．７５ｎＭ、＜０．７０ｎＭ、＜０．６５ｎＭ、＜０．６０ｎＭ、＜０．５５ｎＭ以下である。一実施形態では、ここに記載される方法に用いられるＣＤＫ４／６阻害物質は、ＣＤＫ２／ＣｙｃＥ阻害に対するＩＣ５０濃度値を有し、それはすなわち、約＞１．０μＭ、＞１．２５μＭ、＞１．５０μＭ、＞１．７５μＭ、＞２．０μＭ、＞２．２５μＭ、＞２．５０μＭ、＞２．７５μＭ、＞３．０μＭ、＞３．２５μＭ、＞３．５μＭ以上である。一実施形態では、ここに記載される方法に用いられるＣＤＫ４／６阻害物質は、ＣＤＫ２／ＣｙｃＡ  ＩＣ５０に対するＩＣ５０濃度値を有し、それはすなわち、つまり＞０．８０μＭ、＞０．８５μＭ、＞０．９０μＭ、＞０．９５μＭ、＞１．０μＭ、＞１．２５μＭ、＞１．５０μＭ、＞１．７５μＭ、＞２．０μＭ、＞２．２５μＭ、＞２．５０μＭ、＞２．７５μＭ、＞３．０μＭ以上である。一実施形態では、ここに記載される方法に用いられるＣＤＫ４／６阻害物質は、式Ｉ、式ＩＩ、式ＩＩＩ、式ＩＶ又は式Ｖ、又はこれらの薬理学的に許容される組成物、塩又はプロドラッグ、から成る群より選択される。一実施形態では、化合物は、表１の中に記載される化合物、又は、薬理学的に許容される組成物、塩、同位体的類似体又はそのプロドラッグから選択される。一実施形態では、化合物は、化合物Ｔ、Ｑ、ＧＧ、Ｕ又はＡＡＡＡ、又はそれらの薬理学的に許容される組成物、塩、アイソトープ類似体又はプロドラッグから選択される。一実施形態では、ここに記載されるＣＤＫ４／６阻害物質は、ＣＤＫ４／６−複製依存的正常細胞サイクリングストラテジーで用いられ、そこでは、被検体は定期的な反復化学療法剤治療に曝露され、被検体の次の化学療法剤治療の前に化学療法剤に曝露され細胞−サイクルに復帰することが可能な場合に、正常細胞はＧ１期停止している。
このサイクリングは、ＣＤＫ４／６−複製依存的細胞に、定期的な反復治療間、たとえば癌の標準的な化学療法剤治療に関連した治療間で損害を受けた血液細胞系統を再生させて、長期ＣＤＫ４／６阻害に関連したリスクを低減する。Ｇ１期停止の状態と複製の状態との間のこのサイクリングは、ＰＤ０３３２９９１等のより長時間作用するＣＤＫ４／６阻害物質を用いた時間の間隔が限定された反復化学療法剤曝露では、実行可能ではなく、なぜなら、化合物のＧ１期停止が長引く影響が、次の化学療法剤曝露の前に細胞サイクルに相当かつ有意義に復帰することを禁止し、又は、正常細胞が、細胞サイクルに入って治療中断後に損害を受けた組織又は細胞を再構成することを、遅らせてしまうからである。
【０１５２】
化学療法剤で治療される増殖異常症は、ガン及び非癌疾病を含む。典型的な実施形態では、増殖異常症は、ＣＤＫ４／６−複製非依存的異常症である。化合物は、幅広い範囲の腫瘍タイプの化学療法剤治療の間に、たとえばＨＳＰＣｓ等の健康なＣＤＫ４／６−複製依存的細胞の保護に有効であり、この幅広い範囲の腫瘍タイプは、非限定的には、胸、前立腺、卵巣、皮膚、肺、結腸直腸、脳（すなわち神経膠腫）及び、腎臓が挙げられる。好ましくは、選択的ＣＤＫ４／６阻害物質は化学療法剤の効能又は、癌細胞のＧ１期停止を損なってはならない。それらが無差別に増殖キナーゼを用いることが可能である（例えば、ＣＤＫ  １／２／４又は６を使うことができる）ため、又は、ＣＤＫによって不活化される網膜芽細胞腫腫瘍サプレッサタンパク質（Ｒｂ）の機能が欠如するため、多くの癌は、増殖に対して、ＣＤＫ４／６の活性に左右されない。
【０１５３】
腫瘍タイプ及び標準技術を用いた分子遺伝学に基づき、ＣＤＫ４／６阻害に対するある種の腫瘍の潜在的な感応性を導き出すことができる。ＣＤＫ４／６の阻害に典型的に影響を受けない癌は、非限定的だが、ＣＤＫ１又はＣＤＫ２の活性の上昇、網膜芽細胞腫腫瘍サプレッサタンパク質（Ｒｂ）の損失、欠乏又は欠如、ｍｙｃの高次発現、サイクリンＥ（たとえば、Ｅ１又はＥ２）の上昇、及びサイクリンＡの上昇又はＲｂ不活化タンパク質（たとえばＨＰＶコード化Ｅ７）の発現の１つ以上によって、特徴付けることができる。この癌の非限定的な例としては、小細胞肺癌、網膜芽細胞腫、ＨＰＶポジティブ悪性腫瘍様子宮頸癌及び特定の頭頚部癌、バーキットのリンパ腫等のＭＹＣ拡大腫瘍及びトリプルネガティブ乳癌；特定の種類の肉腫、特定の種類の非小細胞肺がん、特定の種類の黒色腫、特定の種類の膵癌、特定の種類の白血病、特定の種類のリンパ腫、特定の種類の脳ガン、特定の種類の大腸癌、特定の種類の前立腺癌、特定の種類の卵巣癌、特定の種類の子宮癌、特定の種類の甲状腺及び他の内分泌組織癌、特定の種類の唾液癌、特定の種類の胸腺癌、特定の種類の腎臓癌、特定の種類の膀胱癌及び特定の種類の精巣癌が挙げられる。
【０１５４】
網膜芽細胞腫（Ｒｂ）腫瘍サプレッサタンパク質（Ｒｂ−ヌル）の損失又は欠如は、ウェスタンブロット、ＥＬＩＳＡ（酵素結合免疫測定法）、ＩＨＣ（免疫組織化学）、及びＦＡＣＳ（蛍光性活性細胞選別）を非限定的に含む、当業者に知られるいずれかの標準アッセイにより、決定することができる。アッセイの選択は、利用される組織、細胞系統又は代わりの組織サンプルに依存し、例えば、ウェスタンブロット及びＥＬＩＳＡは、組織、細胞系統又は代理組織のタイプのいずれかまたは全部に用いることができ、ＩＨＣ法は、本発明の方法で利用される組織を腫瘍生検する際に、より適切である。
【０１５５】
ＦＡＣ分析は、たとえば細胞系統等の単個細胞浮遊液及び孤立した末梢血単核細胞であったサンプルに、最も適用できる。たとえば、米国特許公開公報ＵＳ２００７０２１２７３６号、標題“Ｆｕｎｃｔｉｏｎａｌ  Ｉｍｍｕｎｏｈｉｓｔｏｃｈｅｍｉｃａｌ  Ｃｅｌｌ  Ｃｙｃｌｅ  Ａｎａｌｙｓｉｓ  ａｓ  ａ  Ｐｒｏｇｎｏｓｔｉｃ  Ｉｎｄｉｃａｔｏｒ  ｆｏｒ  Ｃａｎｃｅｒ”を参照。代替的には、分子遺伝子の試験は、網膜芽細胞腫遺伝子の状態の決定に用いられてもよい。網膜芽細胞腫のための分子遺伝子の試験は、Ｌｏｈｍａｎｎ  ａｎｄ  Ｇａｌｌｉｅ，“Ｒｅｔｉｎｏｂｌａｓｔｏｍａ  Ｇｅｎｅ  Ｒｅｖｉｅｗｓ”（２０１０），  ｈｔｔｐ：／／ｗｗｗ．ｎｃｂｉ．ｎｌｍ．ｎｉｈ．ｇｏｖ／ｂｏｏｋｓｈｅｌｆ／ｂｒ．ｆｃｇｉ−ｂｏｏｋ＝ｇｅｎｅ＆ｐａｒｔ＝ｒｅｔｉｎｏｂｌａｓｔｏｍａ，  又は、Ｐａｒｓａｍら、“Ａ  ｃｏｍｐｒｅｈｅｎｓｉｖｅ，  ｓｅｎｓｉｔｉｖｅ  ａｎｄ  ｅｃｏｎｏｍｉｃａｌ  ａｐｐｒｏａｃｈ  ｆｏｒ  ｔｈｅ  ｄｅｔｅｃｔｉｏｎ  ｏｆ  ｍｕｔａｔｉｏｎｓ    ｉｎ  ｔｈｅ  ＲＢ１  ｇｅｎｅ  ｉｎ  ｒｅｔｉｎｏｂｌａｓｔｏｍａ”  Ｊｏｕｒｎａｌ  ｏｆ  Ｇｅｎｅｔｉｃｓ，  ８８（４），  ５１７−５２７  （２００９）  に記載される以下を含む。
【０１５６】
ＣＤＫ１又はＣＤＫ２の活性上昇、ＭＹＣ高次発現、サイクリンＥの上昇及びサイクリンＡの上昇は、ウェスタンブロット、ＥＬＩＳＡ（酵素結合免疫測定法）、ＩＨＣ（免疫組織化学）、及びＦＡＣＳ（蛍光性活性細胞選別）を非限定的に含む、当業者に知られるいずれかの標準アッセイにより、決定することができる。アッセイの選択は、利用される組織、細胞系統又は代理組織サンプルに依存し、例えば、ウェスタンブロット及びＥＬＩＳＡは、組織、細胞系統又は代理組織のタイプのいずれかまたは全部に用いることができ、ＩＨＣ法は、本発明の方法で利用される組織を腫瘍生検する際に、より適切である。ＦＡＣ分析は、たとえば細胞系統等の単個細胞浮遊液及び孤立した末梢血単核細胞であったサンプルに、最も適用できる。
【０１５７】
ある実施形態では、癌は、小細胞肺癌、網膜芽細胞腫、及びトリプルネガティブ（ＥＲ／ＰＲ／Ｈｅｒ２ネガティブ）又は「基底状」乳癌から選択され、そしてそれは大抵、網膜芽細胞腫腫瘍サプレッサタンパク質（Ｒｂ）を不活化し、したがって、増殖にはＣＤＫ４／６活性を必要としない。また、トリプルネガティブ（基底状）乳癌は大抵、遺伝子的又は機能的にＲｂ−ヌルである。
【０１５８】
また、特定のウイルス誘発性癌（例えば頭頚部癌の子宮頸癌及びサブセット）は、ウィルスタンパク質（Ｅ７）を発現し、これはＲｂを不活化して、これらの腫瘍を機能的にＲｂヌルとする。
ある肺癌は、ＨＰＶに起因するとも考えられている。１つの特定の実施形態では、癌は小細胞肺癌であり、そして、患者はエトポシド、カルボプラチン及びシスプラチン又はこれらの組合せから成る群より選択されるＤＮＡ損傷剤で処理される。
【０１５９】
また、ここに記載される選択されたＣＤＫ４／６阻害物質は、非癌増殖疾病における異常組織の化学療法剤治療の間に、健康なＣＤＫ４／６−複製依存的細胞を保護するために用いることができ、この非癌増殖疾病における異常組織の化学療法剤治療としては、非限定的に、乾癬、自己免疫疾患、関節炎（特にリウマチ様関節炎）、乳児の中に血管腫症、多発性硬化症、骨髄変性疾病、神経線維腫症、神経節神経腫症、ケロイド形成、骨のパジェット病、胸の繊維嚢胞性疾病、Ｐｅｙｒｏｎｉｅ及びＤｕｐｕｔｒｅｎの線維症、再狭窄及び硬変症が挙げられる。さらに、選択的にＣＤＫ４／６阻害物質を用いて、偶発的な曝露又は過剰投与（例えば、メトトレキセート過剰投与）の場合に、化学療法剤の効果を改善する。
【０１６０】
本発明に従い、あらゆる化学療法剤治療スケジュールで、かつ、所定の治療過程に一致するあらゆるドーズで、活性化合物を被検体に投与することができる。化学療法剤の投与の前、最中及び後に、選択的ＣＤＫ４／６阻害物質化合物が投与される。一実施形態では、化学療法剤治療の前２４時間から曝露の後２４時間までの範囲の期間、ここに記載されるＣＤＫ４／６阻害物質を、被検体に投与することができる。しかしながら、この期間は、（例えば、適切な血しょう中濃度や化合物のプラズマ半減期を達成するために用いる化学療法剤を服用する時間に基づいて）薬剤への曝露前２４時間より早い時間まで延長することができる。さらに、ＣＤＫ４／６阻害物質の後投与が少なくとも一部防護効果に至る限りにおいて、この期間を、化学療法剤に曝露後２４時間より長く延長することができる。この曝露後治療は、特に偶発的な曝露又は過剰投与の場合に有用となり得る。ある実施形態では、選択的ＣＤＫ４／６阻害物質のプラズマレベルが、化学療法剤の投与の時にピークに達するように、選択的ＣＤＫ４／６阻害物質を、化学療法剤の投与の前の期間に、被検体に投与することができる。便利であるならば、治療計画を単純化するために、選択的ＣＤＫ４／６阻害物質を化学療法剤と同時に投与することができる。ある実施形態では、癌防御物質及び化学療法剤を、単一の配合で提供することができる。ある実施形態では、化学療法剤は、高用量（化学療法剤用量強度の上昇）又は高頻度（化学療法剤ドーズ密度の上昇）のどちらでも投与できるよう、選択的にＣＤＫ４／６阻害物質を被検体に投与することができる。
【０１６１】
高ドーズ密度の化学療法剤は、標準的な化学療法剤治療計画において、薬剤を、治療間の時間を短くして与える化学療法剤治療計画である。化学療法剤用量強度ないしドーズ強度とは、単位時間当たり投与される化学療法剤の単位ドーズを示す。投与されるドーズ、投与の時間的間隔、又はその両方を変えることにより、ドーズ強度を増加又は減少させることができる。
【０１６２】
骨髄抑制は、癌化学療法剤に対して、大きな用量規定毒性を示し続け、化学療法剤ドーズ強度の頻繁な低下とともに、著しい罹患率及び死亡率をもたらし、そしてそれは疾患の管理及び生残性を損ない得る。ここに記載される化合物及びこの使用は、有害事象、例えば非限定的な例として骨髄抑制、を緩和しつつ、化学療法剤ドーズ密度及び／又はドーズ強度を上昇する方法を示す。
望む場合、選択されたＣＤＫ４／６阻害物質化合物の複数のドーズを、被検体に投与することができる。代替的には、被検体には、選択されたＣＤＫ４／６阻害物質の単一ドーズを与えることができる。たとえば、ＣＤＫ４／６−複製依存的正常細胞が、化学療法剤曝露の間はＧ１期停止となるよう、ＣＤＫ４／６−阻害剤を投与することができ、ここで、化合物のＧ１期停止効果の迅速な消失のために、多数の正常細胞は、化学療法剤曝露の直後に、たとえば、約２４−４８時間以下で、細胞−サイクルに復帰し、複製が可能になり、次の化学療法剤治療を見越したＣＤＫ４／６−阻害剤の投与まで、続けて複製することができる。
【０１６３】
一実施形態では、ＣＤＫ４／６−阻害剤が投与されることで、Ｇ１期停止と細胞−サイクルへの復帰との間でのＣＤＫ４／６−複製依存的正常細胞のサイクルが可能になり、反復投与化学療法剤治療計画に適合するようになり、たとえば、２１日おきに１〜３日目；２８日おきに１〜３日目；３週おきに１日目；２８日おきに１日目、８日目及び１５日目；２８日おきに１日目及び８日目に；２１日おきに１日目及び８日目に；２１日おきに１〜５日目；６〜８週の間１週につき１日；１日目、２２日目及び４３日目に；毎週１日目及び２日目；１〜４日目及び２２〜２５日目；１〜４日目、２２〜２５日目及び４３〜４６日目；及びこれに類似したタイプの療法で、化学療法剤が投与される治療計画を含むが、これらに限定されるものではなく、ＣＤＫ４／６−複製依存的細胞は化学療法剤曝露の間はＧ１期停止しており、細胞のかなりの部分は、化学療法剤曝露の間に細胞−サイクルに復帰する。一実施形態では、ここに記載されるＣＤＫ４／６阻害物質は、ＣＤＫ４／６−複製非依存的小細胞肺癌治療プロトコルの間に、化学防護を被検体のＣＤＫ４／６−複製依存的正常細胞に提供するために用いられる。
【０１６４】
一実施形態では、ＣＤＫ４／６阻害物質は、小細胞肺癌治療プロトコルで化学防護を提供するために投与され、この治療プロトコルは、例えば非限定的な例としては：２１日ごとに、１日目にシスプラチン６０ｍｇ／ｍ２経静脈投与、プラス、１〜３日目にエトポシド１２０ｍｇ／ｍ２経静脈投与を、４サイクル；２８日ごとに、１日目にシスプラチン８０ｍｇ／ｍ２経静脈投与、プラス、１〜３日目にエトポシド１００ｍｇ／ｍ２経静脈投与を、４サイクル；２１〜２８日ごとに、１日目のシスプラチン６０−８０ｍｇ／ｍ２経静脈投与、プラス、１〜３日目にエトポシド８０−１２０ｍｇ／ｍ２経静脈投与（最大４サイクル）；２８日ごとに、１日目にカルボプラチンＡＵＣ５−６ＩＶ経静脈投与、プラス、１〜３日目にエトポシド８０−１００ｍｇ／ｍ２経静脈投与（最大４サイクル）；２１〜２８日ごとに、１日目にシスプラチン６０−８０ｍｇ／ｍ２経静脈投与、プラス、１〜３日目にエトポシド８０−１２０ｍｇ／ｍ２経静脈投与；２８日ごとに、１日目にカルボプラチンＡＵＣ５−６経静脈投与、プラス、１〜３日目にエトポシド８０−１００ｍｇ／ｍ２経静脈投与（最大６サイクル）；２８日ごとに、１日目にシスプラチン６０ｍｇ／ｍ２経静脈投与、プラス、１、８及び１５日目にイリノテカン６０ｍｇ／ｍ２経静脈投与（最大６サイクル）；２１日ごとに、１及び８日目にシスプラチン３０ｍｇ／ｍ２経静脈投与又は１日目に８０ｍｇ／ｍ２経静脈投与、プラス、１及び８日目にイリノテカン６５ｍｇ／ｍ２経静脈投与（最大６サイクル）；２８日ごとに、１日目のカルボプラチンＡＵＣ５ＩＶ、プラス、１、８及び１５日目にイリノテカン５０ｍｇ／ｍ２経静脈投与（最大６サイクル）；２１日ごとに、１日目にカルボプラチンＡＵＣ４−５経静脈投与、プラス、１日目にイリノテカン１５０−２００ｍｇ／ｍ２経静脈投与（最大６サイクル）；２１〜２８日ごとに、１日目にシクロホスファミド８００−１０００ｍｇ／ｍ２経静脈投与、プラス、１日目にドキソルビシン４０−５０ｍｇ／ｍ２経静脈投与、プラス、１日目にビンクリスチン１−１．４ｍｇ／ｍ２経静脈投与（最大６サイクル）；４週ごとに、３週間毎日エトポシド５０ｍｇ／ｍ２経口投与；２１日ごとに１〜５日目にトポテカン２．３ｍｇ／ｍ２経口投与；２１日ごとに、１〜５日目にトポテカン１．５ｍｇ／ｍ２経静脈投与；２８日ごとに、１日目のカルボプラチンＡＵＣ５経静脈投与、プラス、１、８及び１５日目にイリノテカン５０ｍｇ／ｍ２経静脈投与；２１日ごとに、１日目にカルボプラチンＡＵＣ４  −  ５経静脈投与、プラス、１日目にイリノテカン１５０−２００ｍｇ／ｍ２経静脈投与；２８日ごとに、１、８及び１５日目にシスプラチン３０ｍｇ／ｍ２経静脈投与、プラス、１、８及び１５日目にイリノテカン６０ｍｇ／ｍ２経静脈投与；２８日ごとに、１日目にシスプラチン６０ｍｇ／ｍ２経静脈投与、プラス、１、８及び１５日目にイリノテカン６０ｍｇ／ｍ２経静脈投与；２１日ごとに、１及び８日目にシスプラチン３０ｍｇ／ｍ２経静脈投与又は１日目に８０ｍｇ／ｍ２経静脈投与、プラス、１及び８日目にイリノテカン６５ｍｇ／ｍ２経静脈投与；８週ごとに、週一回で６週間パクリタキセル８０ｍｇ／ｍ２経��脈投与；３週ごとに、１日目にパクリタキセル１７５ｍｇ／ｍ２経静脈投与；
４週ごとに、毎日３週間エトポシド５０ｍｇ／ｍ２経口投与；２１日ごとに、１〜５日目にトポテカン２．３ｍｇ／ｍ２経口投与；２１日ごとに、１〜５日目にトポテカン１．５ｍｇ／ｍ２経静脈投与；２８日ごとに、１日目にカルボプラチンＡＵＣ５経静脈投与、プラス、１、８及び１５日目にイリノテカン５０ｍｇ／ｍ２経静脈投与；２１日ごとに、１日目にカルボプラチンＡＵＣ４−５経静脈投与、プラス、１日目にイリノテカン１５０−２００ｍｇ／ｍ２経静脈投与；２８日ごとに、１、８及び１５日目にシスプラチン３０ｍｇ／ｍ２経静脈投与、プラス、１、８及び１５日目にイリノテカン６０ｍｇ／ｍ２経静脈投与；２８日ごとに、１日目にシスプラチン６０ｍｇ／ｍ２経静脈投与、プラス、１、８及び１５日目にイリノテカン６０ｍｇ／ｍ２経静脈投与；２１日ごとに、１及び８日目にシスプラチン３０ｍｇ／ｍ２経静脈投与又は１日目に８０ｍｇ／ｍ２の経静脈投与、プラス、１及び８日目にイリノテカン６５ｍｇ／ｍ２経静脈投与；８週ごとに、週一回６週間パクリタキセル８０ｍｇ／ｍ２経静脈投与；及び３週ごとに、１日目にパクリタキセル１７５ｍｇ／ｍ２経静脈投与。
【０１６５】
一実施形態では、ここに記載されるＣＤＫ４／６阻害物質は、治療プロトコルの１、２及び３日目に小細胞肺癌を有する被検体に投与され、ここで、カルボプラチン、エトポシド及びシスプラチン又はそれらの組合せから成る群より選択されるＤＮＡ損傷剤が、２１日ごとの１、２及び３日目に投与される。一実施形態では、ここに記載されるＣＤＫ４／６阻害物質を用いて、ＣＤＫ４／６−複製非依存的頭頚部癌治療プロトコルの間に、化学防護を被検体のＣＤＫ４／６−複製依存的正常細胞に提供する。
【０１６６】
一実施形態では、ＣＤＫ４／６阻害物質は、ＣＤＫ４／６−複製非依存的頭頚部癌治療プロトコルにおいて、化学防護を提供するために投与され、この治療プロトコルの非限定的な例としては：６−７週間の毎週、１、２２及び４３日目にシスプラチン１００ｍｇ／ｍ２経静脈投与、又は４０−５０ｍｇ／ｍ２の経静脈投与；放射線療法開始の１週間前に、セツキシマブ経静脈投与初回負荷量４００ｍｇ／ｍ２、次いで毎週２５０ｍｇ／ｍ２（デキサメタゾン、ジフェンヒドラミン及びラニチジンを前投薬）；多くとも７週間毎週２日目にシスプラチン２０ｍｇ／ｍ２経静脈投与、プラス、多くとも７週間毎週１日目にパクリタキセル３０ｍｇ／ｍ２経静脈投与；１−４及び２２−２５日目にシスプラチン２０ｍｇ／ｍ２／日経静脈投与、プラス、１〜４及び２２〜２５日目に持続点滴静脈内注射により５−ＦＵ１０００ｍｇ／ｍ２／日；放射線の日に与えられる１〜５日目に持続点滴静脈内注射により５−ＦＵ８００ｍｇ／ｍ２、プラス、ヒドロキシウレア１ｇ経口投与ｑ１２ｈ（１サイクルにつき１１ドーズ）；合計１３週の間、一週おきに化学療法剤及び放射；１〜４、２２〜２５及び４３−４６日目にカルボプラチン７０ｍｇ／ｍ２／日経静脈投与、プラス、１−４、２２−２５及び４３−４６日目に持続点滴静脈内注射によって５−ＦＵ６００ｍｇ／ｍ２／日。毎週１日目にカルボプラチンＡＵＣ１．５経静脈投与、プラス、毎週１日目にパクリタキセル４５ｍｇ／ｍ２経静脈投与；１、２２及び４３日にシスプラチン１００ｍｇ／ｍ２経静脈投与、又は、６−７週の間毎週４０−５０ｍｇ／ｍ２の経静脈投与；３週ごとに、１日目にドセタキセル７５ｍｇ／ｍ２経静脈投与、プラス、１日目にシスプラチン１００ｍｇ／ｍ２経静脈投与、プラス、１〜４日目に持続点滴静脈内注射により５−ＦＵ１００ｍｇ／ｍ２／日、を３サイクル行った後、３−８週後、多くとも７週の間毎週、放射線療法中にカルボプラチンＡＵＣ１．５経静脈投与；３週ごとに、１日目にドセタキセル７５ｍｇ／ｍ２経静脈投与、プラス、１日目にシスプラチン７５ｍｇ／ｍ２経静脈投与、プラス、１〜４日目に持続点滴静脈内注射により５−ＦＵ７５０ｍｇ／ｍ２／日、を４サイクル；３週ごとに、１日目にシスプラチン１００ｍｇ／ｍ２経静脈投与を６サイクル、プラス、３週ごと１〜４日目に持続点滴静脈内注射による５−ＦＵ  １０００ｍｇ／ｍ２／日を６サイクル、プラス、１日目に、セツキシマブ初回負荷量４００ｍｇ／ｍ２経静脈投与、その後、疾病進行まで毎週２５０ｍｇ／ｍ２の経静脈投与（デキサメタゾン、ジフェンヒドラミン及びラニチジンで前投薬）；３週ごとに、１日目にカルボプラチンＡＵＣ５経静脈投与を６サイクル、プラス、３週ごとに１〜４日目に持続点滴静脈内注射により５−ＦＵ１０００ｍｇ／ｍ２／日をを６サイクル、プラス、１日目に、セツキシマブ初回負荷量４００ｍｇ／ｍ２経静脈投与、その後、疾病進行まで毎週２５０ｍｇ／ｍ２の経静脈投与（デキサメタゾン、ジフェンヒドラミン及びラニチジンで前投薬）；３週ごとに、１日目にシスプラチン７５ｍｇ／ｍ２経静脈投与、プラス、１日目にドセタキセル７５ｍｇ／ｍ２経静脈投与；３週ごとに、１日目にシスプラチン７５ｍｇ／ｍ２経静脈���与、プラス、１日目にパクリタキセル１７５ｍｇ／ｍ２経静脈投与；３週ごとに、１日目にカルボプラチンＡＵＣ６経静脈投与、プラス、１日目にドセタキセル６５ｍｇ／ｍ２経静脈投与；３週ごとに、１日目にカルボプラチンＡＵＣ６経静脈投与、プラス、１日目にパクリタキセル２００ｍｇ／ｍ２経静脈投与；３−４週ごとに、１日目にシスプラチン７５−１００ｍｇ／ｍ２経静脈投与、プラス、１日目に、セツキシマブ初回負荷量４００ｍｇ／ｍ２経静脈投与、その後毎週２５０ｍｇ／ｍ２経静脈投与（デキサメタゾン、ジフェンヒドラミン及びラニチジンで前投薬）；３週ごとに、１日目にシスプラチン１００ｍｇ／ｍ２経静脈投与、プラス、１〜４日目に持続点滴静脈内注射により５−ＦＵ１０００ｍｇ／ｍ２／日；毎週メトトレキセート４０ｍｇ／ｍ２経静脈投与（３週が１つサイクルに等しい）；３週ごとに、パクリタキセル２００ｍｇ／ｍ２経静脈投与；３週ごとに、ドセタキセル７５ｍｇ／ｍ２経静脈投与；１日目に、セツキシマブ初回負荷量４００ｍｇ／ｍ２経静脈投与、その後、疾病進行まで毎週２５０ｍｇ／ｍ２の経静脈投与（デキサメタゾン、ジフェンヒドラミン及びラニチジンで前投薬）；３週ごとに、１日目にシスプラチン１００ｍｇ／ｍ２経静脈投与を６サイクル、プラス、３週ごとに、１〜４日目に持続点滴静脈内注射により５−ＦＵ１０００ｍｇ／ｍ２／日を６サイクル、プラス、１日目に、セツキシマブ初回負荷量４００ｍｇ／ｍ２経静脈投与、その後、毎週２５０ｍｇ／ｍ２の経静脈投与（デキサメタゾン、ジフェンヒドラミン及びラニチジンで前投薬）；３週ごとに、１日目にカルボプラチンＡＵＣ５経静脈投与を６サイクル、プラス、３週ごとに、１〜４日目に持続点滴静脈内注射による５−ＦＵ  １０００ｍｇ／ｍ２／日を６サイクル、プラス、１日目に、セツキシマブ初回負荷量４００ｍｇ／ｍ２経静脈投与、その後、そして毎週２５０ｍｇ／ｍ２経静脈投与（デキサメタゾン、ジフェンヒドラミン及びラニチジンで前投薬）；３週ごとに、１日目にシスプラチン７５ｍｇ／ｍ２経静脈投与、プラス、１日目にドセタキセル７５ｍｇ／ｍ２経静脈投与；３週ごとに、１日目にシスプラチン７５ｍｇ／ｍ２経静脈投与、プラス、１日目にパクリタキセル１７５ｍｇ／ｍ２経静脈投与；３週ごとに、１日目にカルボプラチンＡＵＣ６経静脈投与、プラス、１日目にドセタキセル６５ｍｇ／ｍ２経静脈投与；３週ごとに、１日目にカルボプラチンＡＵＣ６経静脈投与、プラス、１日目にパクリタキセル２００ｍｇ／ｍ２経静脈投与；３−４週ごとに、１日目にシスプラチン７５−１００ｍｇ／ｍ２経静脈投与、プラス、１日目に、セツキシマブ初回負荷量４００ｍｇ／ｍ２経静脈投与、その後、疾病進行まで、毎週２５０ｍｇ／ｍ２の経静脈投与（デキサメタゾン、ジフェンヒドラミン及びラニチジンで前投薬）；３週ごとに、１日目にシスプラチン１００ｍｇ／ｍ２経静脈投与、プラス、１〜４日目に持続点滴静脈内注射により５−ＦＵ１０００ｍｇ／ｍ２／日；毎週メトトレキセート４０ｍｇ／ｍ２経静脈投与（３週が１サイクルに等しい）；３週ごとに、パクリタキセル２００ｍｇ／ｍ２経静脈投与；３週ごとに、ドセタキセル７５ｍｇ／ｍ２経静脈投与；１日目に、セツキシマ��初回負荷量４００ｍｇ／ｍ２経静脈投与；そして毎週２５０ｍｇ／ｍ２経静脈投与（デキサメタゾン、ジフェンヒドラミン及びラニチジンで前投薬）４週ごとに、１、２２及び４３日目に放射線と共にシスプラチン１００ｍｇ／ｍ２経静脈投与、その後、１日目にシスプラチン８０ｍｇ／ｍ２経静脈投与、プラス、１〜４日目に持続点滴静脈内注射による５−ＦＵ  １０００ｍｇ／ｍ２／日、を３サイクル；３週ごとに、１日目にシスプラチン７５ｍｇ／ｍ２経静脈投与、プラス、１日目にドセタキセル７５ｍｇ／ｍ２経静脈投与；３週ごとに、１日目にシスプラチン７５ｍｇ／ｍ２経静脈投与、プラス、１日目にパクリタキセル１７５ｍｇ／ｍ２経静脈投与；３週ごとに、１日目にカルボプラチンＡＵＣ６経静脈投与、プラス、１日目にドセタキセル６５ｍｇ／ｍ２経静脈投与；３週ごとに、１日目にカルボプラチンＡＵＣ６経静脈投与、プラス、１日目にパクリタキセル２００ｍｇ／ｍ２経静脈投与；３週ごとに、１日目にシスプラチン１００ｍｇ／ｍ２経静脈投与、プラス、１〜４日目に持続点滴静脈内注射による５−ＦＵ１０００ｍｇ／ｍ２／日；４週ごとに、１日目にシスプラチン５０−７０ｍｇ／ｍ２経静脈投与、プラス、１、８及び１５日目にゲムシタビン１０００ｍｇ／ｍ２経静脈投与；４週ごとに、１、８及び１５日目にゲムシタビン１０００ｍｇ／ｍ２経静脈投与、又は、３週ごとに、１及び８日目にゲムシタビン１２５０ｍｇ／ｍ２経静脈投与；毎週メトトレキセート４０ｍｇ／ｍ２経静脈投与（３週イコール１サイクル）；３週ごとに、パクリタキセル２００ｍｇ／ｍ２経静脈投与；３週ごとに、ドセタキセル７５ｍｇ／ｍ２経静脈投与；３週ごとに、１日目にシスプラチン７５ｍｇ／ｍ２経静脈投与、プラス、１日目にドセタキセル７５ｍｇ／ｍ２経静脈投与；３週ごとに、１日目にシスプラチン７５ｍｇ／ｍ２経静脈投与、プラス、１日目にパクリタキセル１７５ｍｇ／ｍ２経静脈投与；３週ごとに、１日目にカルボプラチンＡＵＣ６経静脈投与、プラス、１日目にドセタキセル６５ｍｇ／ｍ２経静脈投与；３週ごとに、１日目にカルボプラチンＡＵＣ６経静脈投与、プラス、１日目にパクリタキセル２００ｍｇ／ｍ２経静脈投与；３週ごとに、１日目にシスプラチン１００ｍｇ／ｍ２経静脈投与、プラス、１〜４日目に持続点滴静脈内注射による５−ＦＵ  １０００ｍｇ／ｍ２／日；４週ごとに、１日目にシスプラチン５０−７０ｍｇ／ｍ２経静脈投与、プラス、１、８及び１５日目にゲムシタビン１０００ｍｇ／ｍ２経静脈投与；４週ごとに、１、８及び１５日目にゲムシタビン１０００ｍｇ／ｍ２経静脈投与、又は、３週ごとに、１及び８日目にゲムシタビン１２５０ｍｇ／ｍ２経静脈投与；毎週メトトレキセート４０ｍｇ／ｍ２経静脈投与（３週イコール１サイクル）；３週ごとに、パクリタキセル２００ｍｇ／ｍ２経静脈投与；及び、
３週ごとに、ドセタキセル７５ｍｇ／ｍ２経静脈投与。
【０１６７】
一実施形態では、ここに記載されるＣＤＫ４／６阻害物質を用いて、ＣＤＫ４／６−複製非依存的トリプルネガティブ乳癌治療プロトコルの間に、化学防護を被検体のＣＤＫ４／６−複製依存的正常細胞に提供する。
【０１６８】
一実施形態では、ＣＤＫ４／６阻害物質を投与して、ＣＤＫ４／６−複製非依存的トリプルネガティブ乳癌治療プロトコルにおいて、化学防護を提供するが、このＣＤＫ４／６−複製非依存的トリプルネガティブ乳癌治療プロトコルは、例えば非限定的な例としては以下が挙げられる：２週ごとに、ドーズ密度の高いドキソルビシン（アドリアマイシン）及びシクロホスファミド（シトキサン）を４サイクル、その後、２週ごとに、ドーズ密度の高いパクリタキセル（タキソール）を４サイクル；３週ごとに、アドリアマイシン／パクリタキセル／シクロホスホミドを合計４サイクル；２週ごとに、アドリアマイシン／パクリタキセル／シクロホスホミドを合計４サイクル；３週ごとに、アドリアマイシン／シクロホスホミド、の後、パクリタキセル（タキソール）をそれぞれ４サイクル；及び２週ごとに、アドリアマイシン／シクロホスホミド、の後、パクリタキセル（タキソール）をそれぞれ４サイクル。
【０１６９】
トリプルネガティブ乳癌（ＴＮＢＣ）は、エストロゲン受容体、プロゲステロンレセプター及びＨＥＲ２／ｎｅｕのための染色の欠如と定義される。ＴＮＢＣは、トラスツズマブ等のＨＥＲ２目的の治療及びタモキシフェン又はアロマターゼ阻害薬等の内分泌療法を含む、乳癌治療が利用できる最も有効な治療法のいくつかに対しては、無感応である。
【０１７０】
高ドーズ密度又はメトロノームのスケジュールで投与される組合せ細胞毒化学療法剤は、初期ＴＮＢＣに対する標準治療に残されている。
【０１７１】
プラチナ剤は近年、パクリタキセル及びアドリアマイシンに添加されるカルボプラチンによるＴＮＢＣの治療、プラス、腫瘍免疫賦活薬の設定におけるシクロホスファミド化学療法のための着目の薬剤として登場してきた。
【０１７２】
ポリ（ＡＤＰリボース）ＲＮＡ依存性ＤＮＡポリメラーゼ（ＰＡＲＰ）阻害剤は、ＴＮＢＣの治療のための有望な治療学として登場した。ＰＡＲＰｓは複数の細胞過程の中に関与する酵素のファミリーであり、ＤＮＡ修復を含む。
【０１７３】
非限定的な例示として、被検体は、１週につき少なくとも５回、１週につき少なくとも４回、１週につき少なくとも３回、１週につき少なくとも２回、１週につき少なくとも１回、１ヵ月につき少なくとも３回、１ヵ月につき少なくとも２回、又は１ヵ月につき少なくとも１回、化学療法剤に曝露され、ここで、被検体のＣＤＫ４／６−複製依存的正常細胞は、治療の間、Ｇ１期停止であり、化学療法剤への曝露と曝露の間、たとえば治療中断の間に、サイクルに入ることができる。一実施形態では、被検体は、１週間に５回の化学療法剤治療を受けており、ここで、被検体のＣＤＫ４／６−複製依存的正常細胞は、化学療法剤曝露の間、Ｇ１期停止であり、２日の中断の間、たとえば週末にかけて細胞−サイクルに復帰することができる。一実施形態では、ここに記載されるＣＤＫ４／６阻害物質を用いて、化学療法剤曝露期間全体の間、たとえば連続した複数日療法の間、被検体のＣＤＫ４／６−複製依存的正常細胞は停止され、連続した複数日コースの完了が必要な期間、細胞は停止され、そして、その後この連続した複数日コースの終わりにサイクルに復帰する。
【０１７４】
一実施形態では、ここに記載されるＣＤＫ４／６阻害物質を用いて、被検体のＣＤＫ４／６−複製依存的正常細胞は、化学療法剤療法の全体の間、たとえば３週間の日常の化学療法剤曝露において停止され、治療療法の完了に続いて迅速に細胞−サイクルに復帰する。一実施形態では、被検体は、化学療法剤に曝露され、ここに記載されるＣＤＫ４／６阻害物質を用いて、そしてたとえばＤＮＡ損傷を緩和するための曝露の後、被検体のＣＤＫ４／６−複製依存的正常細胞はＧ１期停止に置かれる。
【０１７５】
一実施形態では、化学療法剤曝露の、少なくとも１／２時間後、少なくとも１時間後、少なくとも２時間後、少なくとも３時間後、少なくとも４時間後、少なくとも５時間後、少なくとも６時間後、少なくとも７時間後、少なくとも８時間後、少なくとも１０時間後、少なくとも１２時間後、少なくとも１４時間後、少なくとも１６時間後、少なくとも１８時間後、少なくとも２０時間以上後、ＣＤＫ４／６阻害物質が投与される。
【０１７６】
ある実施形態では、本発明は、式Ｉ、式ＩＩ、式ＩＩＩ、式ＩＶ式経静脈投与若しくは式Ｖ、又はそれらの薬理学的に許容される組成物、塩、アイソトープ類似体又はプロドラッグから成る群より選択されるＣＤＫ４／６阻害物質による過渡的（例えば、約４０時間未満、３６時間未満、３０時間未満、２４時間未満又はより短い期間）治療により、ＣＤＫ４／６−複製依存的正常細胞、たとえば造血幹細胞及び前駆細胞（ＨＳＰＣｓ）及び／又は腎臓上皮細胞を、休止している状態に強制することによって、哺乳類、特にヒトを、化学療法剤の急性および慢性毒作用から保護するための方法を提供する。
【０１７７】
一実施形態では、化合物は、表１に記載される化合物又はそれらの薬理学的に許容される組成物、塩、アイソトープ類似体又はプロドラッグから選択される一実施形態では、化合物は、化合物Ｔ、Ｑ、ＧＧ、Ｕ又はＡＡＡＡ、又はそれらの薬理学的に許容される組成物、塩、アイソトープ類似体又はプロドラッグから選択される。ＣＤＫ４／６−複製依存的細胞は、この過渡的休止期間から復帰し、その後、阻害剤による処理を停止した後、正常に機能し、その細胞内効果は消失する。休止の期間の間、ＣＤＫ４／６−複製依存的細胞は、化学療法剤の効果から保護されている。
ある実施形態では、ＣＤＫ４／６−複製依存的正常細胞は、ここに記載されるＣＤＫ４／６阻害物質の複数回の時間を空けた投与により、より長い期間、たとえば数時間、数日、および／または数週にわたって、停止することができる。
【０１７８】
ＣＤＫ４／６阻害物質菌体内効果の消失のため、ＣＤＫ４／６−複製依存的正常細胞、たとえばＨＳＰＣｓによる細胞サイクルに迅速かつ同時発生的に復帰するため、細胞は、より長いＧ１期停止プロファイル、たとえばＰＤ０３３２９９１で。ＣＤＫ４／６阻害物質より迅速に、細胞系統を再構成することができる。選択的ＣＤＫ４／６阻害物質によってもたらされる化学毒性の低下により、医学的に関連した化学療法で、ドーズを増大させる（例えば、固定期間にさらに治療を行うことができる）ことができ、これはより良好な有効性に転換するものである。したがって、ここに開示する方法は、毒性が低く有効性の高い化学療法剤療法をもたらすことができる。
【０１７９】
また、外因性生物学的成長因子による予防治療とは対照的に、ここに記載される選択的ＣＤＫ４／６阻害物質は、経口で利用できる小分子であり、多数の異なるルートを介した投与のために調製することができる。適切な場合、経口、局所、鼻腔内、吸入、静脈、又はあらゆる他の望ましい投与形態のために、小分子を調製することができる。
【０１８０】
ここに記載される方法に有用なＣＤＫ４／６阻害物質は、ＣＤＫ４及びＣＤＫ６の少なくとも一方を選択的に抑制する、又は、その支配的な作用様式がＣＤＫ４及び／又はＣＤＫ６の阻害を通じて発揮される、選択的ＣＤＫ４／６阻害物質化合物である。一実施形態では、選択的ＣＤＫ４／６阻害物質は、ＣＤＫ４／ＣｙｃＤ１  ＩＣ５０リン酸化アッセイで計測されるＣＤＫ４に対するＩＣ５０を有し、これは、ＣＤＫ２／ＣｙｃＥ  ＩＣ５０リン酸化アッセイで計測された場合に、ＣＤＫ２に対する化合物のＩＣ５０に比べて、少なくとも１５００倍、２０００倍、５０００倍又は１０，０００倍以上である。一実施形態では、ＣＤＫ４／６阻害物質は、ＰＤ０３３２９９１よりも、少なくとも約１０倍以上有効である（すなわち、少なくとも１０倍以上低いＣＤＫ４／ＣｙｃＤ１リン酸化アッセイにおける、ＩＣ５０を有する）。
【０１８１】
ここに記載される選択されたＣＤＫ４／６阻害物質の使用は、ＣＤＫ４／６依存的細胞に選択的Ｇ１期停止を誘発することができる（例えば、細胞ベースのインビトロアッセイで測定した場合に）。一実施形態では、ＣＤＫ４／６阻害物質は、Ｇ２／Ｍ期及びＳ期でＣＤＫ４／６依存的細胞のパーセンテージを低減させつつ、Ｇ１期にＣＤＫ４／６依存的細胞のパーセンテージを上昇させることができる。
【０１８２】
一実施形態では、選択的ＣＤＫ４／６阻害物質は、ＣＤＫ４／６依存的細胞の中に実質的に純粋な（すなわち、「完全な」）Ｇ１細胞サイクル進行の停止を誘発する（例えば、ここで、選択的ＣＤＫ４／６阻害物質による治療は、細胞サイクル進行の停止を誘発するため、標準分析法（例えばプロピジウムヨウ化物（ＰＩ）染色又はその他）によって画定するように、大部分の細胞はＧ１に停止され、結合されたＧ２／Ｍ及びＳ期の中に細胞の集団が、全細胞集団の約３０％未満、約２５％未満、約２０％未満、約１５％未満、約１０％未満、約５％未満、約３％未満またはそれ以下になる）。
【０１８３】
細胞の集団の細胞段階を評価する方法は、当該技術分野で知られており（たとえば、米国特許出願公開番号第２００２／０２２４５２２号を参照）、これは、血球計算分析顕微鏡分析、勾配遠心、湿式粉砕、免疫蛍光法を含む蛍光技術及びこれらの組合せを含む。血球計算技術は、ＤＮＡ結合染料等の、標識剤又は染色法に細胞を露出することを含み、例えば、ＰＩ、及びフローサイトメトリーによって細胞ＤＮＡ含有率を分析することが含まれる。免疫蛍光法は、たとえばチミジン類似体（例えば、５−ブロモ−２−デオキシウリジン（ＢｒｄＵ）又はよう化デオキシウリジン）等の特定の細胞サイクル指標を、蛍光抗体で検出することを含む。
【０１８４】
ある実施形態では、ここに記載される選択的ＣＤＫ４／６阻害物質の使用により、特に、ＣＤＫ２等、ＣＤＫ４及び又はＣＤＫ６以外のキナーゼの阻害に関連したオフターゲット効果が低減され又は実質的に無くなるが、それは、ここに記載される選択的ＣＤＫ４／６阻害物質は、ＣＤＫ２に対して弱い阻害剤（例えば＞１μＭＩＣ５０）であるからである。
【０１８５】
さらに、ＣＤＫ４／６に対する高い選択性のため、ここに記載される化合物の使用は、ＣＤＫ４／６−非依存的細胞の細胞サイクル進行の停止を誘発してはならない。さらに、Ｇ１期停止効果の短期の過渡的性質のため、ＣＤＫ４／６−複製依存的細胞は、ＰＤ０３３２９９１の使用が提供する場合に比べて比較的より迅速に細胞サイクルに復帰し、その結果、化学療法剤の治療と治療の間でのＨＳＰＣｓの複製能力のため、一実施形態では、長期治療計画の間の血液毒性発現のリスクが減少する。
【０１８６】
ある実施形態では、ここに記載される選択的ＣＤＫ４／６阻害物質の使用は、非限定的に長期毒性、抗酸化剤効果及び卵胞ホルモン効果を含む好ましくないオフターゲット効果のリスクを低減する。抗酸化剤効果は、当該技術分野で知られている標準アッセイによって決定することができる。たとえば、大きな抗酸化剤効果のない化合物は、酸素ラジカル等のフリーラジカルを著しく除去しない化合物である。化合物の抗酸化剤効果は、ゲニステイン等既知の抗酸化剤活性を有する化合物と比較することができる。したがって、高い抗酸化剤活性を有しない化合物は、ゲニステインに対して約２倍、３倍、５倍、１０倍、３０倍又は、１００倍小さい抗酸化剤活性を有するものとすることができる。また、エストロゲン活性は、既知のアッセイを介して決定することができる。例えば、非エストロゲン化合物は、エストロゲン受容体にあまり結合せずかつこれを活性化させないものである。エストロゲン効果が実質的にない化合物は、エストロゲン活性を有する化合物、例えば、ゲニステインに対して。エストロゲン活性が、約２倍、３倍、５倍、１０倍、２０倍又は、１００倍小さい。
【０１８７】
選択されたＣＤＫ４／６阻害物質の合成
本発明のＣＤＫ４／６阻害物質は、当業者に知られるあらゆる手段で合成することができ、たとえば、下記の１〜９の一般化されたスキームに従った方法を含む。
特定の合成は、例えば、国際特許公開ＷＯ２０１２／０６１１５６号（５−（４−イソプロピルピペラジン−１−イル）ピリジン−２−アミン及び５−（４−モルホリノ−１−ピペリジル）ピリジン−２−アミンのそれぞれ）に見出される。
式Ｉ及び式ＩＩは、対応する置換２−アミノピリミジンを用いたスキーム１、又はＷＯ２０１２／０６１１５６の記載に従って、合成することができる。
【０１８８】
【化５８】
2019055954.tif 000077
スキーム１。
【０１８９】
【化５９】
2019055954.tif 000078
スキーム２。
スキーム２では、Ｒｅｆ−１は、国際特許公開ＷＯ２０１０／０２０６７５Ａ１号であり；Ｒｅｆ−２は、Ｗｈｉｔｅ，Ｊ．Ｄ．；ｅｔ  ａｌ．Ｊ．Ｏｒｇ．Ｃｈｅｍ．１９９５，６０，３６００であり；Ｒｅｆ−３は、Ｐｒｅｓｓｅｒ，Ａ．ａｎｄ  Ｈｕｆｎｅｒ，Ａ．Ｍｏｎａｔｓｈｅｆｔｅｒ  Ｃｈｅｍｉｅ  ２００４，１３５，１０１５である。
【０１９０】
【化６０】
2019055954.tif 000079
スキーム３。
スキーム３では、Ｒｅｆ−１は、国際特許公開ＷＯ２０１０／０２０６７５Ａ１号であり；Ｒｅｆ−４は、国際特許公開ＷＯ２００５／０４０１６６Ａ１号であり；Ｒｅｆ−５は、Ｓｃｈｏｅｎａｕｅｒ，Ｋ  ａｎｄ  Ｚｂｉｒａｌ，Ｅ．Ｔｅｔｒａｈｅｄｒｏｎ  Ｌｅｔｔｅｒｓ  １９８３，２４，５７３である。
【０１９１】
【化６１】
2019055954.tif 000080
スキーム４。
スキーム４では、Ｒｅｆ-１は、国際特許公開ＷＯ２０１０／０２０６７５Ａ１号である。
【０１９２】
【化６２】
2019055954.tif 000081
スキーム５。
【０１９３】
【化６３】
2019055954.tif 000082
スキーム６。
【０１９４】
【化６４】
2019055954.tif 000083
スキーム７。
【０１９５】
【化６５】
2019055954.tif 000084
スキーム８。
【０１９６】
【化６６】
2019055954.tif 000085
スキーム９。
スキーム９では、Ｒｅｆ-１は、国際出願公報ＷＯ２０１０／０２０６７５Ａ１号であり;Ｒｅｆ-２は、国際出願公報ＷＯ２００５／０４０１６６Ａ１号であり;Ｒｅｆ-３は、Ｓｃｈｏｅｎａｕｅｒ，Ｋ ａｎｄ Ｚｂｉｒａｌ，Ｅ．Ｔｅｔｒａｈｅｄｒｏｎ Ｌｅｔｔｅｒｓ １９８３，２４，５７３である。
【０１９７】
【化６７】
2019055954.tif 000086
スキーム１０。
【０１９８】
一実施形態では、中間ラクタムは、ジクロロメタン等の有機溶媒中トリエチルアミン等の有機塩基の存在下で、ＢＯＣ-無水物で処理される。Ｂｏｃ保護されたラクタムは、ニッケル触媒の存在下、二酸化炭素で処理され、カルボン酸を生成する。カルボン酸は、トルエン等の有機溶媒の存在下で塩化チオニルと反応する。得られた酸クロリドは、アミンで処理してアミドを生成し、これはトリフルオロ酢酸等の強酸で脱保護することができ、最終的なターゲット阻害剤化合物を生成する。
【０１９９】
代替的には、ラクタムは、強酸及び脱水剤の存在下で、カルボン酸を保護されたアミンと反応させることにより発生することができ、この強酸及び脱水剤は、強酸無水物として１つの部分で共存する。強力な酸無水物の非限定的な例としては、トリフルオロ酢酸無水物、トリブロモ酢酸無水物、トリクロロ酢酸酸無水物又は混合無水物が挙げられる。脱水剤は、カルボジイミドベースの化合物であってもよく、この非限定的な例としては、ＤＣＣ（Ｎ,Ｎ-ジシクロヘキシルカルボジイミド）、ＥＤＣ（１-エチル-３-（３-ジメチルアミノプロピル）カルボジイミド又はＤＩＣ（Ｎ,Ｎ-ジイソプロピルカルボジイミド）が挙げられる。
【０２００】
Ｎ-保護基を除去するために、付加的なステップが必要となる場合があり、その方法は当業者に知られている。代替的には、ピリミジン環に結合されるハロゲン部分は、あらゆる脱離基で置換することができ、この脱離基は、一次アミンによって置換可能であり、これにより、最終生産物のための中間体、たとえばＢｒ、Ｉ、Ｆ、ＳＭｅ、ＳＯ２Ｍｅ、ＳＯアルキル、ＳＯ２アルキル等を生成する。たとえば、Ｔａｖａｒｅｓの国際特許出願ＰＣＴ／ＵＳ２０１３／０３７８７８号を参照のこと。他のアミン中間体及び最終的なアミン化合物は、当業者により合成することができる。この化学反応は、保護及び脱保護が可能な反応性官能性を含む試薬を用いることができ、本発明の時に当業者に知られていることが、理解されよう。Ｇｒｅｅｎｅ，  Ｔ．Ｗ．  ａｎｄ  Ｗｕｔｓ，  Ｐ．Ｇ．Ｍ．，  Ｇｒｅｅｎｅ’ｓ  Ｐｒｏｔｅｃｔｉｖｅ  Ｇｒｏｕｐｓ  ｉｎ  Ｏｒｇａｎｉｃ  Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ，  ４ｔｈ  ｅｄｉｔｉｏｎ，  Ｊｏｈｎ  Ｗｉｌｅｙ  ａｎｄ  Ｓｏｎｓを参照のこと。
【０２０１】
上記で調製された式Ｔ、Ｑ、ＧＧ及びＵは、以下に示すようにマススペクトル分析及びＮＭＲによって特徴づけられた：
【０２０２】
式Ｔ
7.25 (s, 1 H) 7.63 (br. s., 2 H) 7.94 (br. s., 1 H) 8.10 (br. s., 1 H) 8.39 (br. s., 1 H) 9.08 (br. s., 1 H) 11.59 (br. s., 1 H). LCMS ESI (M + H) 447.
【０２０３】
式Ｑ
1H NMR (600 MHz, DMSO-d6) δ ppm 0.82 (d, J=7.32 Hz, 2 H) 1.08 - 1.37 (m, 3 H) 1.38 - 1.64 (m, 2 H) 1.71 (br. s., 1 H) 1.91 (br. s., 1 H) 2.80 (br. s., 1 H) 3.12 (s, 1 H) 3.41 (br. s., 4 H) 3.65 (br. s., 4 H) 4.09 (br. s., 1 H) 7.26 (s, 1 H) 7.52 - 7.74 (m, 2 H) 7.94 (br. s., 1 H) 8.13 (br. s., 1 H) 8.40 (br. s., 1 H) 9.09 (br. s., 1 H) 9.62 (br. s., 1 H) 11.71 (br. s., 1 H).  LCMS ESI (M + ) 433
【０２０４】
式ＧＧ
1H NMR (600 MHz, DMSO-d6) δ ppm 0.85 (br. s., 1 H) 1.17 - 1.39 (m, 7 H) 1.42 - 1.58 (m, 2 H) 1.67 - 1.84 (m,3 H) 1.88 - 2.02 (m, 1 H) 2.76 - 2.93 (m, 1 H) 3.07 - 3.22 (m, 1 H) 3.29 - 3.39 (m, 1 H) 3.41 - 3.61 (m, 4 H) 3.62 - 3.76 (m, 4 H) 3.78 - 3.88 (m, 1 H) 4.12 (br. s., 1H) 7.28 (s, 1 H) 7.60 - 7.76 (m, 2 H) 7.98 (s, 1 H) 8.13 (br. s., 1 H) 8.41 (s, 1 H) 9.10 (br. s., 1 H) 11.21 (br. s., 1 H) 11.54 (s, 1 H).  LCMS ESI (M + H) 475
【０２０５】
式Ｕ
1H NMR (600 MHz, DMSO-d6) δ ppm 0.84 (t, J=7.61 Hz, 2 H) 1.13 - 1.39 (m, 4 H) 1.46 (d, J=14.05 Hz, 2 H) 1.64 - 1.99 (m, 6 H) 2.21 (br. s., 1 H) 2.66 - 2.89 (m, 2 H) 3.06 (br. s., 1 H) 3.24 - 3.36 (m, 1 H) 3.37 - 3.50 (m, 2 H) 3.56 - 3.72 (m, 2 H) 3.77 - 4.00 (m, 4 H) 4.02 - 4.19 (m, 2 H) 7.25 (s, 1 H) 7.50 - 7.75 (m, 2 H) 7.89 (d, J=2.93 Hz, 1 H) 8.14 (d, J=7.32 Hz, 1 H) 8.38 (br. s., 1 H) 9.06 (s, 1 H) 11.53 (br. s., 1 H).  LCMS ESI (M +H) 517
【０２０６】
活性化合物、塩及び配合
ここで用いられる例では、用語「活性化合物」とは、ここに記載される選択的ＣＤＫ４／６阻害剤化合物又はその薬理学的に許容される塩又は同位体的類似体のことをいう。活性化合物は、あらゆる適切なアプローチを通して被検体に投与することができる。量及び投与される活性化合物のタイミングは、無論、治療されている被検体、被検体が曝露されると予想される化学療法剤の用量、化学療法剤曝露の時間経過、投与の方法、特定の活性化合物の薬物動態特性、及び、処方する医師の判断に、依存する。したがって、被検体の多様性のため、以下の用量はガイドラインであり、そして、医師は、被検体に適切であると考える治療を達成するため、化合物のドーズを漸増することができる。要求される治療の程度の考慮において、医師は、被検体の年齢及び体重、既存の疾病の存在、ならびに他の疾病の存在等、様々な因子のバランスをとることができる。医薬組成物は、経口、静脈又は、後で更に詳しく議論されるエアゾール投与を非限定的に含む、投与のあらゆる望ましいルートに対して調製可能である。ここに記載されるあらゆる活性化合物の治療的に有効な用量は、患者のコンディション、大きさ及び年齢ならびにデリバリーのルートに応じて、医師によって決定される。
【０２０７】
１つの非限定された実施形態では、約０．１〜約２００ｍｇ／ｋｇの用量が、治療有効性を有しており、この全ての重量が、活性化合物の重量に基づいて計算され、それは塩が用いられる場合を含んでいる。ある実施形態では、用量は、約１μＭと、５、１０、２０、３０又は４０μＭとの間までの活性化合物の血清中濃度を提供するために必要な化合物の量とすることができる。ある実施形態では、約１０ｍｇ／ｋｇ〜約５０ｍｇ／ｋｇの用量を、経口薬投与のために用いることができる。典型的には、約０．５ｍｇ／ｋｇ〜５ｍｇ／ｋｇの用量を、筋肉内投与のために用いることができる。ある実施形態では、用量は、約１μｍｏｌ／ｋｇ〜約５０μｍｏｌ／ｋｇとしてもよく、又は任意に、静脈又は経口投与のための化合物につき、約２２μｍｏｌ／ｋｇ〜約３３μｍｏｌ／ｋｇとしてもよい。経口薬用量の形態は、活性材料のあらゆる適切な量を含むことができ、たとえば錠剤当たり５ｍｇから５０、１００、２００又は５００ｍｇまでを含み、又はその他の固体投与形態であってもよい。
【０２０８】
ここに開示する方法に従い、ここに記載される薬学的に活性化合物は、固体として、又は、液体として経口で投与されてもよく、又は筋内に、静注で、又は、溶液、懸濁液又はエマルジョンとして吸入によって投与することができる。また、ある実施形態では、化合物又は塩は、リポソーム型懸濁液として、吸入、静注、又は筋内に投与することができる。吸入で投与する場合は、活性化合物又は塩は、あらゆる望ましい粒子サイズを有する複数の固体粒子又は液滴の形態とすることができ、このサイズはたとえば、約０．０１、０．１または０．５〜約５、１０、２０ミクロン以上としてもよく、任意に約１〜約２ミクロンとしてもよい。
【０２０９】
本発明の中に開示される化合物は、たとえば経口薬又は静脈ルートで投与されるときに、良好な薬物動態及び薬力学特性を実証した。本発明の一実施形態では、これらの改良されたＣＤＫ４／６阻害物質は、血液成長因子剤と協調した療法において投与することができる。このように、一実施形態では、ここに記載される化合物及び方法の使用は、造血成長因子の使用と組み合わせられ、この造血成長因子の非限定的な例としては、顆粒球コロニー刺激因子（Ｇ−ＣＳＦ、たとえば、ニューポジェン（フィルグラスチム）、ニューラスタ（ペグ−フィルグラスチム）又はレノグラスチムとして販売）、顆粒球−マクロファージコロニー刺激因子（ＧＭ−ＣＳＦ（たとえばモルグラモスチム及びサルグラモスチム（ロイキン）として販売））、Ｍ−ＣＳＦ（マクロファージコロニー刺激因子）、トロンボポイエチン（巨核球成長発現因子（ＭＧＤＦ）（たとえばロミプロスチム及びエルトロンボパグとして販売））、インターロイキン（ＩＬ）−１２、インターロイキン−３、インターロイキン−１１（脂肪生成抑制因子又はオプレルベキン）、ＳＣＦ（幹細胞因子、スティール因子、キット−リガンド又はＫＬ）並びに、エリスロポイエチン（ＥＰＯ）、及びこれらの誘導体（たとえば、ダルベポエチン、Ｅｐｉｃｅｐｔ、Ｎａｎｏｋｉｎｅ、Ｅｐｏｆｉｔ、Ｅｐｏｇｉｎ、Ｅｐｒｅｘ及びＰｒｏｃｒｉｔとして販売されるエポエチン−α、ＮｅｏＲｅｃｏｒｍｏｎ、Ｒｅｃｏｒｍｏｎ、及び、Ｍｉｃｅｒａとして販売されるエポエチン−β、エポエチン−デルタ（たとえばＤｙｎｅｐｏとして販売）、エポエチン−オメガ（たとえばＥｐｏｍａｘとして販売）、ならびにたとえばＥｐｏｃｅｐｔ、ＥＰＯＴｒｕｓｔ、Ｅｒｙｐｒｏ  Ｓａｆｅ、Ｒｅｐｏｅｉｔｉｎ、Ｖｉｎｔｏｒ、Ｅｐｏｆｉｔ、Ｅｒｙｋｉｎｅ、Ｗｅｐｏｘ、Ｅｓｐｏｇｅｎ、Ｒｅｌｉｐｏｅｉｔｉｎ、Ｓｈａｎｐｏｉｅｔｉｎ、Ｚｙｒｏｐ及びＥＰＩＡＯ）が挙げられる。
【０２１０】
医薬組成物は、ここに記載される活性化合物又はその薬理学的に許容される塩を、あらゆる薬理学的に許容されるキャリア中に、含むことができる。溶液が要求される場合、水溶性化合物又は塩のために選択すべきキャリアは、水であってもよい。水溶性化合物又は塩に関して、有機ビヒクル、例えばグリセリン、プロピレングリコール、ポリエチレングリコール又はそれらの混合物が、適切となり得る。後者の例では、有機ビヒクルは、相当量の水を含むことができる。溶液のいずれの場合でも、当該技術分野で人々に知られている適切な方法で、その後に殺菌ができ、例示としては、０．２２ミクロンフィルタによる濾過が挙げられる。殺菌に引き続き、溶液を、適切な容器、例えば発熱物質を除去されたガラスバイアルに分配することができる。その分配は、任意に無菌方法によりなされる。殺菌されたクロージャを、その後バイアル上に置くことができ、望ましい場合は、バイアルの内容物を凍結乾燥することができる。
【０２１１】
活性化合物又はそれらの塩に加えて、医薬組成物を、他の添加剤、例えばｐＨ調整剤等を含むことができる。特に、有用なｐＨ調整剤は、例えば塩酸等の酸、塩基、又は、たとえば乳酸ナトリウム、酢酸ナトリウム、リン酸ナトリウム、クエン酸ナトリウム、ホウ酸ナトリウム又はグルコン酸ナトリウム等のバッファを含む。さらに、この配合は、抗菌防腐剤を含むことができる。有用な抗菌防腐剤としては、メチルパラベン、プロピルパラベン及びベンジルアルコールが挙げられる。
【０２１２】
ここに記載される医薬組成物を、当該技術分野で周知の技術を用いて凍結乾燥することができる。経口薬投与に対しては、医薬品組成物は、溶液、懸濁液、錠剤、錠剤、カプセル、粉体等の形態をとることができる。たとえばポリビニルピロリドン、蔗糖、ゼラチン及びアラビアゴム等の結着剤と共に、デンプン（例えば、ジャガイモ又はタピオカ澱粉）等の様々な崩壊剤及び特定の錯ケイ酸塩に加えて、クエン酸ナトリウム、炭酸カルシウム及びリン酸カルシウム等の様々な賦形剤を含んでいる錠剤を用いてもよい。
さらに、ステアリン酸マグネシウム、ラウリル硫酸ナトリウム及びタルカムパウダー等の平滑剤は、目的物を錠剤にするために、しばしば非常に有用である。類似したタイプの固体の組成物は、柔らかい及び堅い充填ゼラチンカプセル内で、フィラーとして用いられてもよい。材料は、ラクトース又はラクトースならびに高分子量ポリエチレングリコールもこの点について含む。水性懸濁液や万能薬が経口薬投与のために望ましい場合は、ここに構成要件を開示する化合物は、様々な甘味料、香料、色素、乳化剤及び／又は沈澱防止剤、ならびに、水、エチルアルコール、プロピレングリコール、グリセリン及びその様々な類似の組合せとしてこの希釈液と混合することができる。
【０２１３】
ここに記載される構成要件のさらに別の実施形態では、ここに記載される活性化合物又はその塩を含んだ注射可能な、安定した、無菌の製剤が、密封容器内の単位用量形態で提供される。この化合物又は塩は、凍結乾燥物の形態で提供され、適切な薬理学的に許容されるキャリアで戻し、被検体への注入のために適切な液状製剤を形成する。化合物又は塩が実質的に水不溶性である場合、生理的に容認可能な十分な量の乳化剤を、水性キャリア中に化合物又は塩を乳化させるに十分な量で用いることができる。特に有用な乳化剤には、ホスファチジルコリン類及びレシチンが含まれる。
【０２１４】
ここに提供されている付加的な実施形態は、ここに開示される活性化合物のリポソーム型製剤を含む。リポソーム型懸濁液を形成するための技術は、当該技術分野に周知である。化合物が従来のリポソーム技術を用いた水可溶性塩である場合、同じものが、脂肪小胞に取り込まれることができる。そのような場合、活性化合物が水溶性であるため、活性化合物は、リポソームの親水性中心部又はコア内に実質的に同伴され得る。用いられる脂質層はあらゆる従来の組成物とすることができ、コレステロールを含んでもよいし、コレステロールを含まなくてもよい。着目の活性化合物が水不溶性で、従来のリポソーム形成技術を再び用いている場合は、リポソームの構造を形成する疎水性脂質二重層内に、塩が実質的に同伴され得る。いずれの場合においても、生成されるリポソームは、標準音波処理及びホモジナイゼーション技術を使用して、サイズを小さくすることができる。
【０２１５】
ここに開示される活性化合物を含むリポソーム型製剤を凍結乾燥して、凍結乾燥物を生成することができ、これは、水等の薬理学的に許容されるキャリアで戻して、リポソーム型懸濁液を再生させることができる。また、投与のために適切な医薬組成物が、吸入によるエアゾールとして提供される。
【０２１６】
これらの製剤は、ここに記載される望ましい化合物又はその塩の溶液又は懸濁液、又は、化合物又は塩の複数の固体粒子を含む。望ましい製剤を小型のチャンバ内に配置して、霧化することができる。噴霧療法は、圧搾空気により又は超音波エネルギーにより、化合物又は塩を含んだ複数の液滴又は固体粒子を形成することにより、実現できる。
液滴又は固体粒子は、たとえば約０．５〜約１０ミクロン、任意に約０．５〜約５ミクロンまでの範囲の粒子サイズを有していてもよい固体粒子は、微粒子化等、当該技術分野で知られるあらゆる適切な方法で、固体物質又はその塩を処理することによって得ることができる。任意に、固体粒子又は液滴のサイズは、約１〜約２ミクロンとしてもよい。この点で、商業的噴霧器は、この目的を達成するために利用できる。化合物は、米国特許第５，６２８，９８４号に記載の方法で、吸入可能な粒子のエアゾール懸濁液を介して投与でき、その開示の全体は、参照事項として本願に包含される。エアゾールとして投与のために適切な薬学的製剤が液体の形態である場合、製剤は、水を含むキャリア中に、水溶性活性化合物を含むことができる。噴霧療法を受ける際に、望まれた粒径範囲の液滴を形成するために十分に製剤の表面張力を下げる、界面活性剤が含まれていてもよい。
【０２１７】
用語「薬理学的に許容される塩」は、ここで用いられる例では、健全な医学判断の範囲内で、被検体（例えば、ヒト被検体）との接触で使用するために適切であり、不当な毒性、刺激、アレルギー応答等がなく、合理的な有益性／危険性の比に相応し、かつそれらの意図された使用に有効であり、並びに、可能ならここに開示された構成要件の化合物の両性イオンを形成する、塩のことをいう。したがって、用語「塩」とは、ここに開示された構成要件の化合物の、比較的非中毒性の、無機及び有機酸付加塩のことをいう。これらの塩は、化合物の最終的な分離及び精製の間、インシチュウに調製することができ、又は精製化合物をその遊離塩基形態で適切な有機又は無機酸と別々に反応させ、そして、塩を分離することによりこのように形成することができる。
【０２１８】
薬理学的に許容される塩基付加塩は、たとえばアルカリ及びアルカリ土類金属水酸化物又は有機アミン等、金属又はアミンで形成されてもよい。カチオンとして用いられる金属の非限定的な例としては、ナトリウム、カリウム、マグネシウム、カルシウム等が挙げられる。適切なアミンの非限定的な例としては、Ｎ，Ｎ’−ジベンジルエチレンジアミン、クロロプロカイン、コリン、ジエタノールアミン、エチレンジアミン、Ｎメチルグルカミン及びプロカインが挙げられる。塩は、無機酸の硫酸塩、ピロ硫酸塩、重硫酸塩、亜硫酸エステル、亜硫酸水素塩、硝酸塩、リン酸塩、モノリン酸水素、リン酸二水素、メタ燐酸塩、ピロ燐酸、クロライド、臭化物、ヨウ化物等、例えば塩化水素、窒素、リン、硫酸の、臭化水素、ヨウ化水素、リン等から調製可能である。代表的な塩としては、臭化水素酸塩（塩酸塩、硫酸塩、重硫酸塩、硝酸塩、酢酸塩、シュウ酸塩、吉草酸塩、オレイン酸塩、パルミチン酸塩、ステアリン酸塩、ラウリン酸塩、ホウ酸塩、安息香酸塩、乳酸塩、リン酸塩、トシル酸塩、クエン酸塩、マレイン酸塩、フマル酸塩、コハク酸塩、酒石酸塩、ナフチル酸塩、メシル酸塩、グルコヘプトン酸塩、ラクトビオン酸塩、ラウリルスルホン酸塩及びイセチオン酸塩等が挙げられる。塩は、脂肪族モノ及びジカルボキシル酸、フェニル置換アルカノン酸、ヒドロキシアルカノン酸、アルカン二酸、芳香族酸、脂肪族及び芳香族スルホン酸等の有機酸から調製することもできる。代表的な塩としては、酢酸塩、プロピオン酸塩、カプリル酸塩、イソ酪酸塩、シュウ酸塩、マロン酸塩、コハク酸塩、スベリン酸塩、セバシン酸塩、フマル酸塩、マレイン酸塩、マンデル酸塩、安息香酸塩、クロロ安息香酸塩、安息香酸メチル、ジニトロベンゾアート、フタル酸塩、ベンゼンスルホン酸塩、トルエンスルホン酸塩、フェニルアセタート、クエン酸塩、乳酸塩、マレイン酸塩、酒石酸塩、メタンスルホン酸塩等が挙げられる。薬理学的に許容される塩は、ナトリウム、リチウム、カリウム、カルシウム、マグネシウム等の、アルカリ及びアルカリ土類金属ベースのカチオンを含むことができるとともに、アンモニウム、テトラメチルアンモニウム、テトラエチルアンモニウム、メチルアミン、ジメチルアミン、トリメチルアミン、トリエチルアミン、エチルアミン、等が非限定的に含まれる無毒のアンモニウム、四級アンモニウム及びアミンカチオンを含むことができる。アルギネート、グルコナート、ガラクツロネート等のアミノ酸の塩も想定される。例えばＢｅｒｇｅ  ｅｔ  ａｌ．，Ｊ．Ｐｈａｒｍ．Ｓｃｉ．，１９７７，６６，１−１９を参照のこと。これは参照事項として本願に包含される。
【実施例】
【０２１９】
中間体Ｂ、Ｅ、Ｋ、Ｌ、１Ａ、１Ｆ及び１ＣＡが、Ｔａｖａｒｅｓ，Ｆ．Ｘ．及びＳｔｒｕｍ，Ｊ．Ｃ．に付与された米国特許第８，５９８，１８６号、発明の名称「ＣＤＫ阻害剤（ＣＤＫ  Ｉｎｈｉｂｉｔｏｒｓ）」に従って、合成された。Ｔａｖａｒｅｓ，Ｆ．Ｘ．の国際特許公開ＷＯ２０１３／１４８７４８号、発明の名称「ラクタムキナーゼ阻害剤（Ｌａｃｔａｍ  Ｋｉｎａｓｅ  Ｉｎｈｉｂｉｔｏｒｓ）」、Ｔａｖａｒｅｓ，Ｆ．Ｘ．の国際特許公開ＷＯ２０１３／１６３２３９号、発明の名称「ラクタムの合成（Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ  ｏｆ  Ｌａｃｔａｍｓ）」及びＴａｖａｒｅｓ，Ｆ．Ｘ．及びＳｔｒｕｍ，Ｊ．Ｃ．に付与された米国特許第８，５９８，１８６号、発明の名称「ＣＤＫ阻害剤（ＣＤＫ  Ｉｎｈｉｂｉｔｏｒｓ）」は、参照事項として本願に包含される。
【０２２０】
実施例１
ｔｅｒｔ−ブチルＮ−［２−［（５−ブロモ２クロロピリミジン−４イル）アミノ］エチル］カルバメートの合成、化合物１
【化６８】
2019055954.tif 000087
５−ブロモ−２、４−ジクロロピリミジン（３．２ｇ、０．０１３５ｍｏｌ）のエチルアルコール（８０ｍｌ）溶液を、ヒューニッヒの塩基（３．０ｍｌ）に添加し、その後、Ｎ−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−１、２−エチレンジアミン（２．５ｇ、０．０１５６モル）のエチルアルコール（２０ｍｌ）溶液を添加した。内容物を２０時間終夜撹拌した。溶媒を真空下で蒸発させた。酢酸エチル（２００ｍｌ）及び水（１００ｍｌ）を添加し、層が分離した。有機層を硫酸マグネシウムで乾燥し、その後、真空下で濃縮した。ヘキサン／酢酸エチル（０〜６０％）を用いたシリカゲル上のカラムクロマトグラフィーにより、ｔｅｒｔ−ブチルＮ−［２−［（５−ブロモ−２−クロロ−ピリミジン−４−イル）アミノ］エチル］カルバメートが提供された。
1HNMR (d6-DMSO) δ ppm 8.21 (s, 1H), 7.62 (brs, 1H), 7.27 (brs, 1H), 3.39 (m, 2H), 3.12 (m, 2H), 1.34 (s, 9H). LCMS (ESI) 351 (M + H).
【０２２１】
実施例２
ｔｅｒｔ−ブチルＮ−［２−［［２−クロロ−５−（３、３−ジエトキシプロプ−１−イニル）ピリミジン−４−イル］アミノ］エチル］カルバメートの合成、化合物２
【化６９】
2019055954.tif 000088
アセタール（０．７７８ｍｌ、５．４３ｍモル）、Ｐｄ（ｄｐｐｆ）ＣＨ２Ｃｌ２（１４８ｍｇ）、及びトリエチルアミン（０．７５７ｍｌ、５．４３ｍモル）を、ＴＨＦ（１０ｍｌ）中のｔｅｒｔ−ブチルＮ−［２−［（５−ブロモ−２−クロロ−ピリミジン−４−イル）アミノ］エチル］カルバメート（１．２６５ｇ、３．６ｍモル）に加えた。内容物を脱ガスし、その後窒素でパージした。その後これに、ＣｕＩ（２９ｍｇ）を添加した。反応混合物を加熱して、４８時間還流させた。冷却の後、内容物をＣＥＬＩＴＥ（登録商標）上で濾過し、濃縮した。ヘキサン／酢酸エチル（０−  ３０  ％）を用いて得られた残基のカラムクロマトグラフィーにより、ｔｅｒｔ−ブチルＮ−［２−［［２−クロロ−５−（３、３−ジエトキシプロプ−１−イニル）ピリミジン−４−イル］アミノ］エチル］カルバメートが提供された。
1HNMR (d6-DMSO) δ ppm 8.18 (s, 1H), 7.63 (brs, 1H), 7.40 (brs, 1H), 5.55 (s, 1H), 3.70 (m, 2H), 3.60 (m, 2H), 3.42 (m, 2H), 3.15 (m, 2H), 1.19 - 1.16 (m, 15H). LCMS (ESI) 399 (M + H).
【０２２２】
実施例３
ｔｅｒｔ−ブチルＮ−［２−［２−クロロ−６−（ジエトキシメチル）ピロロ［２，３−ｄ］ピリミジン−７−イル］エチル］カルバメートの合成、化合物３
【化７０】
2019055954.tif 000089
結合製品（２．１ｇ、０．００５２６モル）のＴＨＦ（３０ｍｌ）溶液に、ＴＢＡＦ固体（７．０ｇ）を添加した。内容物は６５度に加熱し２時間それを維持した。濃縮に続いて、酢酸エチル／ヘキサン（０−５０  ％）を用いたカラムクロマトグラフィーを行い、薄い茶色の液体（１．１ｇ）として、薄い色の茶色の液体（１．１ｇ）としてｔｅｒｔ−ブチルＮ−［２−［２−クロロ−６−（ジエトキシメチル）ピロロ［２，３−ｄ］ピリミジン−７−イル］エチル］カルバメートが提供された。
1HNMR (d6-DMSO) δ ppm 8.88 (s, 1H), 6.95 (brs, 1H), 6.69 (s, 1H), 5.79 (s, 1H), 4.29 (m, 2H), 3.59 (m, 4H), 3.34 (m, 1H), 3.18 (m, 1H), 1.19 (m, 9H), 1.17 (m, 6H).  LCMS (ESI) 399 (M + H).
【０２２３】
実施例４
ｔｅｒｔ−ブチルＮ−［２−（２−クロロ−６−ホルミル−ピロロ［２，３−ｄ］ピリミジン−７−イル）エチル］カルバメートの合成、化合物４
【化７１】
2019055954.tif 000090
前のステップからのアセタール（９００ｍｇ）に、ＡｃＯＨ（８．０ｍｌ）及び水（１．０ｍｌ）を添加した。反応物を、１６時間室温で撹拌した。濃縮の後、酢酸エチル／ヘキサン（０〜  ６０  ％）を用いたシリカゲル上のカラムクロマトグラフィーにより、ｔｅｒｔ−ブチルＮ−［２−（２−クロロ−６−ホルミル−ピロロ［２，３−ｄ］ピリミジン−７−イル）エチル］カルバメートが発泡体（０．５１０ｇ）として提供された。
1HNMR (d6-DMSO) δ ppm 9.98 (s, 1H), 9.18 (s, 1H), 7.66 (s, 1H), 6.80 (brs, 1H), 4.52 (m, 2H), 4.36 (m, 2H), 1.14 (s, 9H). LCMS (ESI) 325 (M + H).
【０２２４】
実施例５
７−［２−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ）エチル］−２−クロロ−ピロロ［２，３−ｄ］ピリミジン−６−カルボン酸の合成、化合物５
【化７２】
2019055954.tif 000091
ＤＭＦ（４ｍｌ）中の前のステップからのアルデヒド（０．９４０ｇ）に、オキソン（１．９５ｇ、１．１ｅｑ）を加えた。内容物を、室温で７時間撹拌した。ヘキサン／酢酸エチル（０〜１００  ％）を用いたシリカゲルカラムクロマトグラフィーにより、７−［２−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ）エチル］−２−クロロ−ピロロ［２，３−ｄ］ピリミジン−６カルボン酸（０．５４５ｇ）が提供された。
1HNMR (d6-DMSO) δ ppm 9.11 (s, 1H), 7.39 (s, 1H), 4.38 (m, 2H), 4.15 (m, 2H), 1.48 (m, 9H). LCMS (ESI) 341(M + H).
【０２２５】
実施例６
メチル７−［２−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ）エチル］−２−クロロ−ピロロ［２，３−ｄ］ピリミジン−６−カルボン酸塩の合成、化合物６
【化７３】
2019055954.tif 000092
前のステップからの２−クロロ−７−プロピル−ピロロ［２，３−ｄ］ピリミジン−６−カルボン酸（０．５４５ｇ、０．００１５６モル）のトルエン（３．５ｍｌ）及びＭｅＯＨ（１ｍｌ）の溶液に、ＴＭＳ−ジアゾメタン（１．２ｍｌ）を加えた。室温で終夜撹拌した後に、ＴＭＳ−ジアゾメタンの過剰分を酢酸（３ｍｌ）でクエンチし、反応物を真空下で濃縮した。残留物を、ヘキサン／酢酸エチル（０〜７０％）のシリカゲルカラムクロマトグラフィーによって精製し、メチル７−［２−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ）エチル］−２−クロロ−ピロロ［２，３−ｄ］ピリミジン−６−カルボン酸塩を、オフホワイトの固体（０．５２ｇ）として提供した。
1HNMR (d6-DMSO) δ ppm 9.10 (s, 1H), 7.45 (s, 1H), 6.81 (brs, 1H) 4.60 (m, 2H), 3.91 (s, 3H), 3.29 (m, 2H), 1.18 (m, 9H) LCMS (ESI) 355 (M + H).
【０２２６】
実施例７
クロロ三環系アミドの合成、化合物７
【化７４】
2019055954.tif 000093
ジクロロメタン（２．０ｍｌ）中の前のステップからのメチル７−［２−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ）エチル］−２−クロロ−ピロロ［２，３−ｄ］ピリミジン−６−カルボン酸塩（０．５０ｇ、０．００１４モル）に、ＴＦＡ（０．８３０ｍｌ）を添加した。内容物を、室温で１時間撹拌した。真空下の濃縮により、トルエン（５ｍｌ）及びヒューニッヒ塩基（０．５ｍｌ）中に、懸濁された粗アミノエステルが提供された。内容物は、加熱され２時間還流された。濃縮の後、ヘキサン／酢酸エチル（０−５０％）を用いたシリカゲルカラムクロマトグラフィーにより、望ましいクロロ三環アミド（０．２６０ｇ）が提供された。
1HNMR (d6-DMSO) δ ppm 9.08 (s, 1H), 8.48 (brs, 1H), 7.21 (s, 1H) 4.33 (m, 2H), 3.64 (m, 2H).  LCMS (ESI) 223 (M + H).
【０２２７】
実施例８
クロロ−Ｎ−メチル三環アミドの合成、化合物８
【化７５】
2019055954.tif 000094
ＤＭＦ（２．０ｍｌ）中のクロロ三環ラクタム、化合物７（１８５ｍｇ、０．０００８３モル）の溶液に、水素化ナトリウム（油中５５％の分散物、５２ｍｇ）を添加した。１５分間撹拌した後、沃化メチル（６２μＬ、１．２ｅｑ）を加えた。内容物を、室温で３０分間撹拌した。メタノール（５ｍｌ）の添加の後に、飽和ＮａＨＣＯ３が加えられ、酢酸エチルが続いて添加された。有機層を分離した後、硫酸マグネシウムで乾燥させ、そして、真空下で濃縮を行い、Ｎ−メチル化アミドが定量収率で提供された。
1HNMR (d6-DMSO) δ ppm 9.05 (s, 1H), 7.17 (s, 1H) 4.38 (m, 2H), 3.80 (m, 2H), 3.05 (s, 3H).  LCMS (ESI) 237 (M + H).
【０２２８】
実施例９
１−メチル−４−（６−ニトロ−３−ピリジル）ピペラジンの合成、化合物９
【化７６】
2019055954.tif 000095
ＤＭＦ（２０ｍｌ）中の５−ブロモ−２−ニトロピリジン（４．９３ｇ、２４．３ｍモル）に、Ｎ−メチルピペラジン（２．９６ｇ、１．１ｅｑ）を加えた後、ＤＩＰＥＡ（４．６５ｍｌ、２６．７ｍモル）を加えた。内容物を、９０度で２４時間加熱した。酢酸エチル（２００ｍｌ）の添加の後、水（１００ｍｌ）を添加し、層が分離した。乾燥の後濃縮して、（０〜１０％）ＤＣＭ／メタノールを用いたシリカゲルカラムクロマトグラフィーにより、精製された粗製品が提供された。
1HNMR (d6-DMSO) δ ppm 8.26 (s, 1H), 8.15 (1H, d, J = 9.3 Hz), 7.49 (1H, d, J = 9.4 Hz), 3.50 (m, 4H), 2.49 (m, 4H), 2.22 (s, 3H).
【０２２９】
実施例１０
５−（４−メチルピペラジン−１−イル）ピリジン−２−アミンの合成、化合物１０
【化７７】
2019055954.tif 000096
酢酸エチル（１００ｍｌ）及びエチルアルコール（１００ｍｌ）中の１−メチル−４−（６−ニトロ−３−ピリジル）ピペラジン（３．４ｇ）に、１０％のＰｄ／Ｃ（４００ｍｇ）を添加し、その後、反応物を、水素（１０ｐｓｉ）の存在下で終夜撹拌した。ＣＥＬＩＴＥ（登録商標）を通しての濾過の後、溶媒を蒸発させ、ＭｅＯＨ（０〜５％）中のＤＣＭ／７Ｎアンモニアを用いたシリカゲルカラムクロマトグラフィーにより、粗製品を精製して、５−（４−メチルピペラジン−１−イル）ピリジン−２−アミン（２．２ｇ）が提供された。
1HNMR (d6-DMSO) δ ppm 7.56 (1H, d, J = 3 Hz), 7.13 (1H, m), 6.36 (1H, d, J = 8.8 Hz), 5.33 (brs, 2H), 2.88 (m, 4H), 2.47 (m, 4H), 2.16 (s, 3H).
【０２３０】
実施例１１
ｔｅｒｔ−ブチル４−（６アミノ３−ピリジル）ピペラジン−１−カルボン酸塩の合成、化合物１１
【化７８】
2019055954.tif 000097
この化合物は、国際特許公開ＷＯ２０１０／０２０６７５Ａ１号に記載されているように調製された。
【０２３１】
実施例１２
ｔｅｒｔ−ブチルＮ−［２−（ベンジルオキシカルボニルアミノ）−３−メチルブチル］カルバメートの合成、化合物１２
【化７９】
2019055954.tif 000098
０℃に冷却されたジオキサン（１００ｍｌ）中のベンジルＮ−［１−（ヒドロキシメチル）−２メチル−プロピル］カルバメート（１１．０ｇ、０．０４６４モル）に、ジフェニルホスホリルアジド（１０．９９ｍｌ、１．１ｅｑ）を添加した後、ＤＢＵ（８．３２ｍｌ、１．２ｅｑ）を添加した。内容物を、室温に加温し、１６時間撹拌した。酢酸エチル（３００ｍｌ）及び水（１００ｍｌ）の添加の後、有機層を飽和ＮａＨＣＯ３（１００ｍｌ）で分離し、洗浄した。その後有機層を真空下で乾燥（硫酸マグネシウム）し、濃縮した。ＤＭＳＯ（１００ｍｌ）中のこの中間体に、アジ化ナトリウム（７．５４ｇ）を加え、その後、内容物を９０度で２時間加熱した。酢酸エチル及び水の添加の後、層は分離された。有機層を硫酸マグネシウムで乾燥し、続いて真空下で濃縮して、油分を提供し、この油分を、ヘキサン／酢酸エチル（０〜７０％）を用いたシリカゲルカラムクロマトグラフィーにより精製して、ベンジルＮ−［１−（アジドメチル）−２メチル−プロピル］カルバメートを無色の油分として６．９ｇ提供した。ＴＨＦ（１００ｍｌ）中のベンジルＮ−［１−（アジドメチル）−２メチル−プロピル］カルバメート（６．９ｇ、０．０２６３モル）に、トリフェニルホスフィン（７．５９ｇ、１．１ｅｑ）を添加した。内容物を、２０時間撹拌した。水（１０ｍｌ）を加えた後、さらに６時間撹拌し、酢酸エチルを添加して層が分離された。硫酸マグネシウムによる乾燥及び真空下での濃縮の後、ＤＣＭ／ＭｅＯＨ（０―１０％）を用いたシリカゲルカラムクロマトグラフィーにより粗製品を精製して、ベンジルＮ−［１−（アミノメチル）−２メチル−プロピル］カルバメートを黄色油として提供した。ＴＨＦ（７０ｍｌ）中のベンジルＮ−［１−（アミノメチル）−２メチル−プロピル］カルバメート（４．６５ｇ、０．０１９モル）に、２ＮのＮａＯＨ（２０ｍｌ）を添加した後、ジｔｅｒｔ−ブチルジカーボネート（５．１５ｇ、１．２ｅｑ）を添加した。１６時間撹拌した後に、酢酸エチルを添加し、層は分離した。硫酸マグネシウムによる乾燥及び真空下での濃縮の後、シリカゲルカラム上でヘキサン／酢酸エチル（０〜４０％）を用いて粗製品を精製し、中間体Ａ、ｔｅｒｔ−ブチルＮ−［２−（ベンジルオキシカルボニルアミノ）−３−メチルブチル］カルバメート）（６．１ｇ）を提供した。
1HNMR (600 MHz, CHLOROFORM-d) δ ppm 0.89 (d, J=6.73 Hz, 3 H) 0.92 (d, J=6.73 Hz, 3 H) 1.38 (s, 9 H) 1.70 - 1.81 (m, 1 H) 3.18 (d, J=5.56 Hz, 2 H) 3.47 - 3.60 (m, 1 H) 4.76 (s, 1 H) 4.89 (d, J=7.90 Hz, 1 H) 5.07 (s, 2 H) 7.25 - 7.36 (m, 5 H). LCMS (ESI) 337 (M + H).
【０２３２】
実施例１３
ｔｅｒｔ−ブチルＮ−［２−（ベンジルオキシカルボニルアミノ）−４−メチル−ペンチル］カルバメートの合成、化合物１３
【化８０】
2019055954.tif 000099
ＤＣＭ（１００ｍｌ）中のベンジルカルバミン酸Ｎ−［１−（ヒドロキシメチル）−３−メチルブチル］（６．３ｇ、０．０２５モル）の溶液に、ジイソプロピルエチルアミン（５．２５ｍｌ、１．２ｅｑ）を添加した後、０度のメタン塩化スルホニル（２．１３ｍｌ、１．１ｅｑ）を添加した。３時間撹拌した後に、水（１００ｍｌ）を添加して、有機層が分離された。硫酸マグネシウムによる乾燥及び真空下での濃縮の後、粗［２−（ベンジルオキシカルボニルアミノ）−４−メチル−ペンチル］メタンスルホン酸塩が得られ、これは直接次のステップに用いられた。ＤＭＦ（５０ｍｌ）中の、上記の反応からの粗［２−（ベンジルオキシカルボニルアミノ）−４−メチル−ペンチル］メタンスルホン酸塩に、アジ化ナトリウム２．４３ｇを添加した。その後、反応物混合物を８５度で３時間加熱した。冷却後、酢酸エチル（３００ｍｌ）及び水を添加した。有機層を分離し、硫酸マグネシウムで乾燥し、その後真空下で濃縮して、粗ベンジルＮ−［１−（アジドメチル）−３−メチルブチル］カルバメートを提供した。この粗中間体にＴＨＦ（１００ｍｌ）を添加した後、トリフェニルホスフィン７．２１ｇを添加し、窒素の存在下で１６時間撹拌した。水（１０ｍｌ）を加えた後、さらに６時間撹拌し、酢酸エチルを添加して層が分離された。硫酸マグネシウムによる乾燥及び真空下での濃縮の後、粗製品を、ＤＣＭ／ＭｅＯＨ（０−１０％）を用いてカラムに通し、ベンジルＮ−［１−（アミノメチル）−３−メチルブチル］カルバメート（４．５ｇ）を提供した。ＴＨＦ（６０ｍｌ）中のベンジルＮ−［１−（アミノメチル）−３−メチルブチル］カルバメート（４．５ｇ、０．０１８モル）に、２ＮのＮａＯＨ（１８ｍｌ）を添加した後、ジｔｅｒｔ−ブチルジカーボネート（４．１９ｇ、１．０７ｅｑ）を添加した。１６時間撹拌した後に、酢酸エチルを添加し、層は分離した。硫酸マグネシウムによる乾燥及び真空下での濃縮の後、粗製品を次のステップのために取った。
1HNMR (600 MHz, CHLOROFORM-d) δ ppm 0.89 (d, J=6.73 Hz, 6 H) 1.25 - 1.34 (m, 1 H) 1.39 (s, 9 H) 1.57 - 1.71 (m, 2 H) 3.04 - 3.26 (m, 2 H) 3.68 - 3.80 (m, 1 H) 4.72 - 4.89 (m, 2 H) 5.06 (s, 2 H) 7.25 - 7.38 (m, 5 H). LCMS (ESI) 351 (M + H).
【０２３３】
実施例１４
ｔｅｒｔ−ブチルＮ−［（２Ｒ）−２−（ベンジルオキシカルボニルアミノ）−３−メチルブチル］カルバメートの合成、化合物１４
【化８１】
2019055954.tif 000100
化合物１３のために記載される合成ステップに類似した合成ステップを用いて、ベンジルＮ−［（１Ｒ）−１−（ヒドロキシメチル）−２メチル−プロピル］カルバメートから化合物１４を合成した。分析データ（ＮＭＲ及び質量分析）は、化合物１２の分析データと一致していた。
【０２３４】
実施例１５
ｔｅｒｔ−ブチルＮ−［（２Ｓ）−２−（ベンジルオキシカルボニルアミノ）−３−メチルブチル］カルバメートの合成、化合物１５
【化８２】
2019055954.tif 000101
化合物１３のために記載される合成ステップに類似した合成ステップを用いて、ベンジルＮ−［（１Ｓ）−１−（ヒドロキシメチル）−２メチル−プロピル］カルバメートから化合物１５を合成した。分析データ（ＮＭＲ及び質量分析）は、化合物１２の分析データと一致していた。
【０２３５】
実施例１６
ｔｅｒｔ−ブチルＮ−［（１Ｓ）−１−（アミノメチル）−２メチル−プロピル］カルバメートの合成、化合物１６
【化８３】
2019055954.tif 000102
ＴＨＦ（１００ｍｌ）中のｔｅｒｔ−ブチルカルバミン酸Ｎ−［（１Ｓ）−１−（ヒドロキシメチル）−２メチル−プロピル］カルバメート（６．３ｇ、０．０２５モル）の溶液に、ジイソプロピルエチルアミン（５．２５ｍｌ、１．２ｅｑ）を添加した後、０度のメタン塩化スルホニル（２．１３ｍｌ、１．１ｅｑ）を添加した。３時間撹拌した後に、水（１００ｍｌ）を添加して、有機層が分離された。硫酸マグネシウムによる乾燥及び真空下での濃縮の後、粗［（２ｓ）−２−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ）−３−メチルブチル］メタンスルホン酸塩が、次のステップのために直接とられた。ＤＭＳＯ（５０ｍｌ）中の、上記の反応からの粗［（２ｓ）−２−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ）−３−メチルブチル］メタンスルホン酸塩に、アジ化ナトリウム（２．４３ｇ）が添加された。その後、反応物混合物を８５度で３時間加熱した。冷却後、酢酸エチル（３００ｍｌ）及び水を添加した。有機層を分離し、硫酸マグネシウムで乾燥し、その後真空下で濃縮して、粗ベンジルＮ−［１−（アジドメチル）−３−メチルブチル］カルバメートを提供した。この粗中間体にＴＨＦ（１００ｍｌ）を添加した後、トリフェニルホスフィン（７．２１ｇ）を添加し、反応物は窒素下で１６時間撹拌した。水（１０ｍｌ）を加えた後、さらに６時間撹拌し、酢酸エチルを添加して層が分離された。硫酸マグネシウムによる乾燥及び真空下での濃縮の後、ＤＣＭ／ＭｅＯＨ（０―１０％）を用いたシリカゲルカラムクロマトグラフィーにより粗製品を精製して、ベンジルＮ−［１−（アミノメチル）−３−メチルブチル］カルバメート（４．５ｇ）を提供した。
LCMS (ESI) 203 (M + H).
【０２３６】
実施例１７
ｔｅｒｔ−ブチルＮ−［（１Ｒ）−１−（アミノメチル）−２メチル−プロピル］カルバメートの合成、化合物１７
【化８４】
2019055954.tif 000103
化合物１６のために記載されたと類似した合成シーケンスを用いて、ｔｅｒｔ−ブチルＮ−［（１Ｒ）−１−（ヒドロキシメチル）−２メチル−プロピル］カルバメートから、化合物１７が合成された。分析データ（ＮＭＲ及び質量分析）は、化合物１６の分析データと一致していた。
【０２３７】
実施例１８
ｔｅｒｔ−ブチルＮ−［（２ｓ）−２−（ベンジルオキシカルボニルアミノ）−４−メチル−ペンチル］カルバメートの合成、化合物１８
【化８５】
2019055954.tif 000104
化合物１３のために記載されたと類似した合成シーケンスを用いて、ベンジルＮ−［（１Ｓ）−１−（ヒドロキシメチル）−３−メチルブチル］カルバミン酸から化合物１８が合成された。分析データ（ＮＭＲ及び質量分析）は、化合物１３の分析データと一致していた。
【０２３８】
実施例１９：
ｔｅｒｔ−ブチルＮ−［（２Ｓ）−２−（ベンジルオキシカルボニルアミノ）−２−フェニルエチル］カルバメートの合成、化合物１９
【化８６】
2019055954.tif 000105
化合物１３のために記載されたと類似した合成シーケンスを用いて、ベンジルＮ−［（１Ｓ）−２−ヒドロキシ−１−フェニルエチル］カルバメートから、化合物１９が合成された。
1HNMR (600 MHz, DMSO-d6) δ ppm 1.20 - 1.33 (m, 9 H) 3.11 (t, J=6.29 Hz, 2 H) 4.59 - 4.68 (m, 1 H) 4.88 - 5.01 (m, 2 H) 6.81 (t, J=5.42 Hz, 1 H) 7.14 - 7.35 (m, 10 H) 7.69 (d, J=8.49 Hz, 1 H).  LCMS (ESI) 371 (M + H).
【０２３９】
実施例２０
ｔｅｒｔ−ブチルＮ−［（２Ｓ）−２−（ベンジルオキシカルボニルアミノ）−３−メチル−ペンチル］カルバメートの合成、化合物２０
【化８７】
2019055954.tif 000106
化合物１３のために記載されたと類似した合成シーケンスを用いて、ベンジルＮ−［（１Ｓ）−１−（ヒドロキシメチル）−２メチル−ブチル］カルバメートから、化合物２０が合成された。
1HNMR (600 MHz, CHLOROFORM-d) δ ppm 0.85 - 0.92 (m, 6 H) 1.05 - 1.15 (m, 1 H) 1.35 - 1.41 (m, 9 H) 1.45 - 1.56 (m, 2 H) 3.14 - 3.24 (m, 2 H) 3.54 - 3.64 (m, 1 H) 4.78 (s, 1 H) 4.96 (d, J=7.91 Hz, 1 H) 5.06 (s, 2 H) 7.27 - 7.37 (m, 5 H). LCMS (ESI) 351 (M + H).
【０２４０】
実施例２１
ｔｅｒｔ−ブチルＮ−［（２Ｓ）−２−（ベンジルオキシカルボニルアミノ）−３、３−ジメチルブチル］カルバメートの合成、化合物２１
【化８８】
2019055954.tif 000107
化合物１３のために記載されたと類似した合成シーケンスを用いて、ベンジルＮ−［（１Ｓ）−１−（ヒドロキシメチル）−２，２−ジメチルプロピル］カルバメートから、化合物２１が合成された。
LCMS (ESI) 351.
【０２４１】
実施例２２
ｔｅｒｔ−ブチルＮ−［［１−（ベンジルオキシカルボニルアミノ）シクロヘキシル］メチル］カルバメートの合成、化合物２２
【化８９】
2019055954.tif 000108
ＴＨＦ（１５０ｍｌ）中のベンジルＮ−［１−（アミノメチル）シクロヘキシル］カルバミン酸（１０．０ｇ、０．０３８１モル）の溶液に、ジｔｅｒｔ−ブチルジカーボネート（９．１５ｇ、１．１ｅｑ）を添加した。そして、内容物を室温で１６時間撹拌した。酢酸エチル及び水を、その後添加した。有機層を分離し、硫酸マグネシウムで乾燥し、その後真空下で濃縮して、ｔｅｒｔ−ブチルＮ−［［１−（ベンジルオキシカルボニルアミノ）シクロヘキシル］メチル］カルバメート（１３．１ｇ）を提供した。
1HNMR (600 MHz, DMSO-d6) δ ppm 0.92 - 1.54 (m, 17 H) 1.76 - 2.06 (m, 2 H) 3.09 (d, J=6.15 Hz, 2 H) 4.92 (s, 2 H) 6.63 (d, J=17.27 Hz, 1 H) 7.16 - 7.49 (m, 6 H). LCMS (ESI) 363 (M + H).
【０２４２】
実施例２３
ｔｅｒｔ−ブチルＮ−［［１−（ベンジルオキシカルボニルアミノ）シクロペンチル］メチル］カルバメートの合成、化合物２３
【化９０】
2019055954.tif 000109
ｔｅｒｔ−ブチルＮ−［［１−（ベンジルオキシカルボニルアミノ）シクロヘキシル］メチル］カルバメートと類似した方法で、ｔｅｒｔ−ブチルＮ−［［１−（ベンジルオキシカルボニルアミノ）シクロペンチル］メチル］カルバミン酸を合成した。
LCMS (ESI) 349 (M + H).
【０２４３】
実施例２４
２−ニトロ−５−［４−（１−ピペリジル）−１−ピペリジル］ピリジンの合成、化合物２４
【化９１】
2019055954.tif 000110
ＤＭＳＯ（４ｍｌ）中の５−ブロモ−２−ニトロピリジン（１．２ｇ、５．９ｍモル）に、１−（４−ピペリジル）ピペリジン（１．０ｇ、５．９ｍモル）及びトリエチルアミン（０．９９ｍｌ、７．１ｍモル）を添加した。内容物は、ＣＥＭ  Ｄｉｓｃｏｖｅｒｙ  マイクロ波システムにより、１２０℃で３時間加熱された。その後、ＤＣＭ／メタノール（０−２０％）を用いて、シリカゲルカラムクロマトグラフィーにより、粗反応物を精製して、２−ニトロ−５−［４−（１−ピペリジル）−１−ピペリジル］ピリジンを、油（４５７ｍｇ）として提供した。
1HNMR (600 MHz, DMSO-d6) δ ppm 1.26 - 1.36 (m, 2 H) 1.43 (m, 6 H) 1.76 (m, 2 H) 2.37 (m, 5 H) 2.94 (t, J=12.74 Hz, 2 H) 4.06 (d, J=13.47 Hz, 2 H) 7.41 (dd, J=9.37, 2.64 Hz, 1 H) 8.08 (d, J=9.37 Hz, 1 H) 8.20 (d, J=2.64 Hz, 1 H)
【０２４４】
実施例２５
５−［４−（１−ピペリジル）−１−ピペリジル］ピリジン−２−アミンの合成、化合物２５
【化９２】
2019055954.tif 000111
５−（４−メチルピペラジン−１−イル）ピリジン−２−アミンの合成に用いられたと同様の方法で、５−［４−（１−ピペリジル）−１−ピペリジル］ピリジン−２−アミンを調製した。
1HNMR (600 MHz, DMSO-d6) δ ppm 1.13 - 1.37 (m, 6 H) 1.40 - 1.63 (m, 6 H) 1.71 (m, 2 H), 2.24 (m, 1H) 2.43 (m, 2 H) 3.33 (d, J=12.30 Hz, 2 H) 5.31 (s, 2 H) 6.33 (d, J=8.78 Hz, 1 H) 7.10 (dd, J=8.78, 2.93 Hz, 1 H) 7.55 (d, J=2.64 Hz, 1 H). LCMS (ESI) 261 (M + H).
【０２４５】
実施例２６
４−［１−（６−ニトロ−３−ピリジル）−４−ピペリジル］モルホリンの合成、化合物２６
【化９３】
2019055954.tif 000112
２−ニトロ−５−［４−（１−ピペリジル）−１−ピペリジル］ピリジンの合成に用いられたと同様の方法で、４−［１−（６−ニトロ−３−ピリジル）−４−ピペリジル］モルホリンが合成された。
1HNMR (600 MHz, DMSO-d6) δ ppm 1.41 (m, 2 H) 1.82 (m, 2 H) 2.42 (m, 5 H) 2.98 (t, J=12.44 Hz, 2 H) 3.52 (s, 4 H) 4.04 (d, J=12.88 Hz, 2 H) 7.42 (d, J=9.37 Hz, 1 H) 8.08 (d, J=9.08 Hz, 1 H) 8.21 (s, 1 H).
【０２４６】
実施例２７
５−（４−モルホリノ−１−ピペリジル）ピリジン−２−アミンの合成、化合物２７
【化９４】
2019055954.tif 000113
５−（４−メチルピペラジン−１−イル）ピリジン−２−アミンの合成に用いられたと同様の方法で、５−（４−モルホリノ−１−ピペリジル）ピリジン−２−アミンが調製された。
1HNMR (600 MHz, DMSO-d6) δ ppm 1.34 - 1.52 (m, 2 H) 1.78 (m, 2 H) 2.14 (m, 1 H) 2.43 (m, 4 H) 3.32 (d, J=12.30 Hz, 4 H) 3.47 - 3.59 (m, 4 H) 5.32 (s, 2 H) 6.34 (d, J=8.78 Hz, 1 H) 7.11 (dd, J=8.93, 2.78 Hz, 1 H) 7.47 - 7.62 (m, 1 H).  LCMS (ESI) 263 (M + H).
【０２４７】
実施例２８
４−［１−（６−ニトロ−３−ピリジル）−４−ピペリジル］チオモルホリンの合成、化合物２８
【化９５】
2019055954.tif 000114
２−ニトロ−５−［４−（１−ピペリジル）−１−ピペリジル］ピリジンの合成に用いられたと同様の方法で、４−［１−（６−ニトロ−３−ピリジル）−４−ピペリジル］チオモルホリンが合成された。
1HNMR (600 MHz, DMSO-d6) δ ppm 1.40 - 1.52 (m, 2 H) 1.71 (m, 2 H) 2.49 - 2.55 (m, 4 H) 2.56 - 2.63 (m, 1 H) 2.68 - 2.75 (m, 4 H) 2.88 - 2.98 (m, 2 H) 4.09 (d, J=13.18 Hz, 2 H) 7.42 (dd, J=9.22, 3.07 Hz, 1 H) 8.08 (d, J=9.37 Hz, 1 H) 8.20 (d, J=3.22 Hz, 1 H)
【０２４８】
実施例２９
５−（４−チオモルホリノ−１−ピペリジル）ピリジン−２−アミンの合成、化合物２９
【化９６】
2019055954.tif 000115
５−（４−メチルピペラジン−１−イル）ピリジン−２−アミンの合成に用いられたと同様の方法で、５−（４−チオモルホリノ−１−ピペリジル）ピリジン−２−アミンが調製された。
1HNMR (600 MHz, DMSO-d6) δ ppm 1.47 - 1.59 (m, 2 H) 1.65 (m, 2 H) 2.22 - 2.38 (m, 1 H) 2.50 - 2.59 (m, 6 H) 2.68 - 2.82 (m, 4 H) 3.33 (d, J=12.00 Hz, 2 H) 5.31 (s, 2 H) 6.33 (d, J=9.08 Hz, 1 H) 7.10 (dd, J=8.78, 2.93 Hz, 1 H) 7.55 (d, J=2.64 Hz, 1 H).  LCMS (ESI) 279 (M + H)
【０２４９】
実施例３０
２−ニトロ−５−（１−ピペリジル）ピリジンの合成、化合物３０
【化９７】
2019055954.tif 000116
２−ニトロ−５−［４−（１−ピペリジル）−１−ピペリジル］ピリジンの合成に用いられたと同様の方法で、２−ニトロ−５−（１−ピペリジル）ピリジンが合成された。
1HNMR (600 MHz, DMSO-d6) δ ppm 1.56 (m, 6 H) 3.49 (d, J=4.39 Hz, 4 H) 7.30 - 7.47 (m, 1 H) 8.02 - 8.12 (m, 1 H) 8.15 - 8.26 (m, 1 H).
【０２５０】
実施例３１
５−（１−ピペリジル）ピリジン−２−アミンの合成、化合物３１
【化９８】
2019055954.tif 000117
５−（４−メチルピペラジン−１−イル）ピリジン−２−アミンの合成に用いられたと同様の方法で、５−（１−ピペリジル）ピリジン−２−アミンを調製した。
1HNMR (600 MHz, DMSO-d6) δ ppm 1.39 - 1.46 (m, 2 H) 1.51 - 1.62 (m, 4 H) 2.75 - 2.92 (m, 4 H) 5.30 (s, 2 H) 6.34 (d, J=8.78 Hz, 1 H) 7.09 (dd, J=8.78, 2.93 Hz, 1 H) 7.54 (d, J=2.93 Hz, 1 H).  LCMS (ESI) 178 (M + H).
【０２５１】
実施例３２
４−（６−ニトロ−３−ピリジル）チオモルホリンの合成、化合物３２
【化９９】
2019055954.tif 000118
２−ニトロ−５−［４−（１−ピペリジル）−１−ピペリジル］ピリジンの合成に用いられたと同様の方法で、４−（６−ニトロ−３−ピリジル）チオモルホリンが合成された。
1HNMR (600 MHz, DMSO-d6) δ ppm 2.56 - 2.69 (m, 4 H) 3.79 - 3.92 (m, 4 H) 7.43 (dd, J=9.22, 3.07 Hz, 1 H) 8.10 (d, J=9.37 Hz, 1 H) 8.20 (d, J=2.93 Hz, 1 H).
【０２５２】
実施例３３
５−チオモルホリノピリジン−２−アミンの合成、化合物３３
【化１００】
2019055954.tif 000119
５−（４−メチルピペラジン−１−イル）ピリジン−２−アミンの合成に用いられたと同様の方法で、５−チオモルホリノピリジン−２−アミンが調製された。
1HNMR (600 MHz, DMSO-d6) δ ppm 2.59 - 2.73 (m, 4 H) 3.04 - 3.20 (m, 4 H) 5.41 (s, 2 H) 6.35 (d, J=8.78 Hz, 1 H) 7.10 (dd, J=8.78, 2.93 Hz, 1 H) 7.57 (d, J=2.64 Hz, 1 H).  LCMS (ESI) 196 (M + H).
【０２５３】
実施例３４
ｔｅｒｔ−ブチル（４Ｒ）−５−（６−ニトロ−３−ピリジル）−２、５−ジアザビシクロ［２．２．１］ヘプタン−２−カルボン酸塩の合成、化合物３４
【化１０１】
2019055954.tif 000120
２−ニトロ−５−［４−（１−ピペリジル）−１−ピペリジル］ピリジンの合成に用いられたと同様の方法で、ｔｅｒｔ−ブチル（４Ｒ）−５−（６−ニトロ−３−ピリジル）−２、５−ジアザビシクロ［２．２．１］ヘプタン−２−カルボン酸塩が合成された。
1HNMR (600 MHz, DMSO-d6) δ ppm 1.33 (d, J=32.21 Hz, 11 H) 1.91 (m, 2 H) 3.15 (d, J=10.25 Hz, 1 H) 3.58 (m, 1 H) 4.46 (m, 1 H) 4.83 (s, 1 H) 7.16 (s, 1 H) 7.94 (s, 1 H) 8.05 - 8.16 (m, 1 H).
【０２５４】
実施例３５
ｔｅｒｔ−ブチル（４Ｒ）−５−（６アミノ３−ピリジル）−２、５−ジアザビシクロ［２．２．１］ヘプタン−２−カルボン酸塩の合成、化合物３５
【化１０２】
2019055954.tif 000121
５−（４−メチルピペラジン−１−イル）ピリジン−２−アミンの合成に用いられたと同様の方法で、ｔｅｒｔ−ブチル（４Ｒ）−５−（６アミノ３−ピリジル）−２、５−ジアザビシクロ［２．２．１］ヘプタン−２−カルボン酸塩が調製された。
1HNMR (600 MHz, DMSO-d6) δ ppm 1.31 (d, J=31.91 Hz, 11 H) 1.83 (m, 2 H) 2.71 - 2.82 (m, 1 H) 3.44 (m,1 H) 4.30 (d, 2H) 5.08 (s, 2 H) 6.35 (d, J=8.78 Hz, 1 H) 6.77 - 6.91 (m, 1 H) 7.33 (s, 1 H).  LCMS (ESI) 291 (M + H).
【０２５５】
実施例３６
Ｎ，Ｎ−ジメチル−１−（６−ニトロ−３−ピリジル）ピペリジン−４−アミンの合成、化合物３６
【化１０３】
2019055954.tif 000122
２−ニトロ−５−［４−（１−ピペリジル）−１−ピペリジル］ピリジンの合成に用いられたと同様の方法で、Ｎ，Ｎ−ジメチル−１−（６−ニトロ−３−ピリジル）ピペリジン−ｐ−アミンが合成された。
1HNMR (600 MHz, DMSO-d6) δ ppm 1.30 - 1.45 (m, 2 H) 1.79 (m, 2 H) 2.14 (s, 6 H) 2.33 (m, 1 H) 2.92 - 3.04 (m, 2 H) 4.03 (d, J=13.76 Hz, 2 H) 7.42 (dd, J=9.22, 3.07 Hz, 1 H) 8.04 - 8.11 (m, 1 H) 8.21 (d, J=2.93 Hz, 1 H).
【０２５６】
実施例３７
５−［４−（ジメチルアミノ）−１−ピペリジル］ピリジン−２−アミンの合成、化合物３７
【化１０４】
2019055954.tif 000123
５−（４−メチルピペラジン−１−イル）ピリジン−２−アミンの合成に用いられたと同様の方法で、５−［４−（ジメチルアミノ）−１−ピペリジル］ピリジン−２−アミンが調製された。
1HNMR (600 MHz, DMSO-d6) δ ppm 1.35 - 1.50 (m, 2 H) 1.69 - 1.81 (m, 2 H) 2.00 - 2.10 (m, 1 H) 2.11 - 2.22 (s, 6 H) 3.17 - 3.36 (m, 4 H) 5.19 - 5.38 (s, 2 H) 6.34 (d, J=8.78 Hz, 1 H) 7.10 (dd, J=8.78, 2.93 Hz, 1 H) 7.55 (d, J=2.63 Hz, 1 H).  LCMS (ESI) 221 (M + H).
【０２５７】
実施例３８
４−（６−ニトロ−３−ピリジル）モルホリンの合成、化合物３８
【化１０５】
2019055954.tif 000124
２−ニトロ−５−［４−（１−ピペリジル）−１−ピペリジル］ピリジンの合成に用いられたと同様の方法で、４−（６−ニトロ−３−ピリジル）モルホリンが合成された。
【０２５８】
実施例３９
５−モルホリノピリジン−２−アミンの合成、化合物３９
【化１０６】
2019055954.tif 000125
５−（４−メチルピペラジン−１−イル）ピリジン−２−アミンの合成に用いられたと同様の方法で、５−モルホリノピリジン−２−アミンが調製された。
1HNMR (600 MHz, CHLOROFORM-d) δ ppm 2.91 - 3.00 (m, 4 H) 3.76 - 3.84 (m, 4 H) 4.19 (br. s., 2 H) 6.45 (d, J=8.78 Hz, 1 H) 7.12 (dd, J=8.78, 2.93 Hz, 1 H) 7.72 (d, J=2.93 Hz, 1 H).
【０２５９】
実施例４０
５−（４−イソブチルピペラジン−１−イル）ピリジン−２−アミンの合成、化合物４０
【化１０７】
2019055954.tif 000126
２−ニトロ−５−［４−（１−ピペリジル）−１−ピペリジル］ピリジンの合成に用いられたと同様の方法で、１−イソブチル−４−（６−ニトロ−３−ピリジル）ピペラジンは合成され、その後、これは、５−（４−メチルピペラジン−１−イル）ピリジン−２−アミンの合成に用いられたと同様の方法で５−（４−イソブチルピペラジン−１−イル）ピリジン−２−アミンに変換された。
1HNMR (600 MHz, CHLOROFORM-d) δ ppm 0.88 (d, J=6.73 Hz, 6 H) 1.71 - 1.84 (m, 1 H) 2.10 (d, J=7.32 Hz, 2 H) 2.46 - 2.58 (m, 4 H) 2.97 - 3.07 (m, 4 H) 4.12 (s, 2 H) 6.45 (d, J=8.78 Hz, 1 H) 7.14 (dd, J=8.78, 2.93 Hz, 1 H) 7.75 (d, J=2.93 Hz, 1 H).  LCMS (ESI) 235 (M + H).
【０２６０】
実施例４１
５−（４−イソプロピルピペラジン−１−イル）ピリジン−２−アミンの合成、化合物４１
【化１０８】
2019055954.tif 000127
２−ニトロ−５−［４−（１−ピペリジル）−１−ピペリジル］ピリジンの合成に用いられたと同様の方法で、１−イソプロピル−４−（６−ニトロ−３−ピリジル）ピペラジンが合成され、その後、これは、５−（４−メチルピペラジン−１−イル）ピリジン−２−アミンの合成に用いられたと同様の方法で、５−（４−イソプロピルピペラジン−１−イル）ピリジン−２−アミンに変換された。
1HNMR (600 MHz, CHLOROFORM-d) δ ppm 1.06 (d, J=6.44 Hz, 6 H) 2.59 - 2.75 (m, 5 H) 2.97 - 3.10 (m, 4 H) 4.13 (s, 2 H) 6.45 (d, J=8.78 Hz, 1 H) 7.15 (dd, J=9.08, 2.93 Hz, 1 H) 7.76 (d, J=2.93 Hz, 1 H).  LCMS (ESI) 221 (M + H).
【０２６１】
実施例４２
５−［（２Ｒ，６Ｓ）−２，６−ジメチルモルホリン−４−イル］ピリジン−２−アミンの合成、化合物４２
【化１０９】
2019055954.tif 000128
２−ニトロ−５−［４−（１−ピペリジル）−１−ピペリジル］ピリジンの合成に用いられたと同様の方法で、（２Ｓ，６Ｒ）−２、６−ジメチル−４−（６−ニトロ−３−ピリジル）モルホリンが合成され、これはその後、５−（４−メチルピペラジン−１−イル）ピリジン−２−アミンの合成に用いられたと同様の方法で、５−［（２Ｒ，６Ｓ）−２、６−ジメチルモルホリン−４−イル］ピリジン−２−アミンに変換された。
1HNMR (600 MHz, CHLOROFORM-d) δ ppm 1.20 (d, J=6.44 Hz, 6 H) 2.27 - 2.39 (m, 2 H) 3.11 - 3.21 (m, 2 H) 3.70 - 3.84 (m, 2 H) 4.15 (s, 2 H) 6.45 (d, J=8.78 Hz, 1 H) 7.12 (dd, J=8.78, 2.93 Hz, 1 H) 7.72 (d, J=2.63 Hz, 1 H).  LCMS (ESI) 208 (M + H).
【０２６２】
実施例４３
５−［（３Ｒ，５Ｓ）−３，５−ジメチルピペラジン−１−イル］ピリジン−２−アミンの合成、化合物４３
【化１１０】
2019055954.tif 000129
２−ニトロ−５−［４−（１−ピペリジル）−１−ピペリジル］ピリジンの合成に用いられたと同様の方法で、（３Ｓ，５Ｒ）−３，５−ジメチル−１−（６−ニトロ−３−ピリジル）ピペラジンが合成され、これはその後、５−（４−メチルピペラジン−１−イル）ピリジン−２−アミンの合成に用いられたと同様の方法で、５−［（３Ｒ，５Ｓ）−３，５−ジメチルピペラジン−１−イル］ピリジン−２−アミンに変換された。
1HNMR (600 MHz, CHLOROFORM-d) δ ppm 1.09 (d, J=6.44 Hz, 6 H) 2.20 (t, J=10.83 Hz, 2 H) 2.95 - 3.08 (m, 2 H) 3.23 (dd, J=11.71, 2.05 Hz, 2 H) 4.13 (s, 2 H) 6.45 (d, J=8.78 Hz, 1 H) 7.14 (dd, J=8.78, 2.93 Hz, 1 H) 7.73 (d, J=2.63 Hz, 1 H).  LCMS (ESI) 207 (M + H).
【０２６３】
実施例４４
化合物４４の合成
【化１１１】
2019055954.tif 000130
【０２６４】
ｔｅｒｔ−ブチルＮ−［２−［（５−ブロモ−２−クロロ−ピリミジン−４−イル）アミノ］−３−メチルブチル］カルバメート
【化１１２】
2019055954.tif 000131
エチルアルコール（１００ｍｌ）中の中間体Ａの溶液を、圧力ボンベ内の１０  ％のＰｄ／Ｃ（０．７ｇ）を使用して３０ｐｓｉの水素の下で７時間水素化した。ＣＥＬＩＴＥ（登録商標）を通した反応物混合物の濾過の後、有機層を真空下で濃縮して、ｔｅｒｔ−ブチルＮ−（２−アミノ−３メチルブチル）カルバメート（３．８ｇ）を提供した。エチルアルコール（１００ｍｌ）中の５−ブロモ２、４−ジクロロピリミジン（７．１１ｇ、０．０３１２モル）の溶液に、ジイソプロピルエチルアミン（５．４５ｍｌ、１．０ｅｑ）及びｔｅｒｔ−ブチルＮ−（２−アミノ−３メチルブチル）カルバメート（６．３１ｇ、０．０３１２モル）を添加した。反応物混合物を、室温で２０時間撹拌した。真空下での濃縮の後、酢酸エチル及び水を添加した。有機層を分離し、硫酸マグネシウムで乾燥し、その後真空下で濃縮した。粗製品を、ヘキサン／酢酸エチル（０〜３０％）を用いたシリカゲルカラムクロマトグラフィーにより精製し、ｔｅｒｔ−ブチルＮ−［２−［（５−ブロモ−２−クロロ−ピリミジン−４−イル）アミノ］−３−メチルブチル］カルバメートを提供した。
1HNMR (600 MHz, DMSO-d6) δ ppm 0.77 - 0.85 (d, J=6.5 Hz, 3 H) 0.87 (d, J=6.73 Hz, 3 H) 1.31 - 1.39 (m, 9 H) 1.82 - 1.93 (m, 1 H) 2.94 (d, J=5.56 Hz, 1 H) 3.08 - 3.22 (m, 2 H) 3.98 (d, J=8.20 Hz, 1 H) 6.96 (d, J=8.78 Hz, 1 H) 8.21 (s, 1 H). LCMS (ESI) 393 (M + H).
【０２６５】
ｔｅｒｔ−ブチルＮ−［２−［２−クロロ−６−（ジエトキシメチル）ピロロ［２，３−ｄ］ピリミジン−７−イル］−３−メチルブチル］カルバメート
【化１１３】
2019055954.tif 000132
ｔｅｒｔ−ブチルＮ−［２−［［２−クロロ−５−（３、３−ジエトキシプロプ−１−イニル）ピリミジン−４−イル］アミノ］エチル］カルバメートについて記載する薗頭の条件で、ｔｅｒｔ−ブチルＮ−［２−［（５−ブロモ−２−クロロ−ピリミジン−４−イル）アミノ］−３−メチルブチル］カルバメートのホスティングにより、ｔｅｒｔ−ブチルＮ−［２−［２−クロロ−６−（ジエトキシメチル）ピロロ［２，３−ｄ］ピリミジン−７−イル］−３−メチルブチル］カルバメートを合成し、その後続いて、ｔｅｒｔ−ブチルＮ−［２−［２−クロロ−６−（ジエトキシメチル）ピロロ［２，３−ｄ］ピリミジン−７−イル］エチル］カルバメートの合成について記載されているように、ＴＢＡＦを処理した。
1HNMR (600 MHz, DMSO-d6) δ ppm 1.11 (d, J=6.44 Hz, 3 H) 1.18 (t, J=7.03 Hz, 6 H) 1.21 - 1.26 (m, 12 H) 2.88 (br. s., 1 H) 3.43 - 3.78 (m, 6 H) 3.97 - 4.08 (m, 1 H) 5.61 (s, 1 H) 6.65 (s, 1 H) 6.71 - 6.78 (m, 1 H) 8.87 (s, 1 H). LCMS (ESI) 441 (M + H).
【０２６６】
７−［１−［（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ）メチル］−２メチル−プロピル］−２−クロロ−ピロロ［２，３−ｄ］ピリミジン−６−カルボン酸
【化１１４】
2019055954.tif 000133
ＴＨＦ中のｔｅｒｔ−ブチルＮ−［２−［［２−クロロ−５−（３、３−ジエトキシプロプ−１−イニル）ピリミジン−４−イル］アミノ］エチル］カルバメートの溶液に、ＴＢＡＦを添加し、内容物を加熱して３時間還流した。酢酸エチル及び水をその後添加し、有機層を分離して、硫酸マグネシウムで乾燥し、真空下でその後濃縮した。この粗反応物に酢酸／水（９：１）を添加し、内容物を、室温で１２時間撹拌した。真空下での濃縮の後、飽和ＮａＨＣＯ３及び酢酸エチルを添加した。
有機層を分離し、乾燥し、その後真空下で濃縮した。このように得られた粗反応生成物を、ＤＭＦ中に溶解し、その後オキソンを添加し、内容物を３時間撹拌した。酢酸エチルの添加の後、ＣＥＬＩＴＥ（登録商標）を通して反応物混合物をろ過し、真空下で濃縮した。粗製品を、ヘキサン／酢酸エチル（０〜１００％）を用いたシリカゲル上のカラムクロマトグラフィーにかけて、７−［１−［（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ）メチル］−２メチル−プロピル］−２−クロロ−ピロロ［２，３−ｄ］ピリミジン−６−カルボン酸を提供した。
1HNMR (600 MHz, DMSO-d6) δ ppm 0.85 (d, J=7.03 Hz, 3 H) 0.97 (d, J=6.73 Hz, 3 H) 1.52 (s, 9 H) 1.99 - 2.23 (m, 1 H) 3.98 (dd, J=14.05, 3.51 Hz, 1 H) 4.47 - 4.71 (m, 2 H) 7.47 (s, 1 H) 9.17 (s, 1 H). LCMS (ESI) 383 (M + H).
【０２６７】
化合物４４
ＤＣＭ（１．５ｍｌ）中の７−［１−［（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ）メチル］−２メチル−プロピル］−２−クロロ−ピロロ［２，３−ｄ］ピリミジン−６カルボン酸（０．０５０ｇ、０．０００１３モル）に、ＤＩＣ（３２．７ｍｇ）及びＤＭＡＰ（１０ｍｇ）を添加した。内容物を、２時間撹拌した。その後、トリフルオロ酢酸（０．４ｍｌ）を添加し、さらに撹拌を３０分間続けた。過剰な酸を中和する飽和ＮａＨＣＯ３の添加の後、酢酸エチルを添加し、有機層を分離して、硫酸マグネシウムを用いて乾燥し、その後真空下で濃縮した。ヘキサン／酢酸エチル（０−１００％）を用いたシリカゲルカラムクロマトグラフィーにより、粗製品を精製し、製品を提供した。
1HNMR (600 MHz, DMSO-d6) δ ppm 0.72 (d, J=6.73 Hz, 3 H) 0.97 (d, J=6.73 Hz, 3 H) 2.09 - 2.22 (m, 1 H) 3.57 (dd, J=13.18, 4.98 Hz, 1 H) 3.72 (dd, J=13.61, 4.25 Hz, 1 H) 4.53 (dd, J=8.05, 3.95 Hz, 1 H) 7.20 (s, 1 H) 8.34 (d, J=4.98 Hz, 1 H) 9.08 (s, 1 H).  LCMS (ESI) 265 (M + H).
【０２６８】
実施例４５
化合物４５の合成
【化１１５】
2019055954.tif 000134
化合物１４を１０％のＰｄ／Ｃで水素化して、中間体、ｔｅｒｔ−ブチルＮ−［（２Ｒ）−２−アミノ−３−メチルブチル］カルバメートを提供し、これは次いで、化合物４４について記載されたと類似の反応条件を用いて、５−ブロモ２、４−ジクロロピリミジンで処理され、化合物４５が提供された。分析データは、ラセミ体（中間体１Ａ）のために報告されたものと一致している。
【０２６９】
実施例４６
化合物４６の合成
【化１１６】
2019055954.tif 000135
化合物１５を、１０％のＰｄ／Ｃで水素化して、中間体のｔｅｒｔ−ブチルＮ−［（２Ｓ）−２−アミノ−３−メチルブチル］カルバメートを提供し、これはその後、化合物４４に対して記載されたと類似の反応条件を用いて５−ブロモ２、４−ジクロロピリミジンで処理され、化合物４６を提供した。分析データ（ＮＭＲ及びＬＣＭ）は、ラセミ体化合物４４のために報告されたものと一致していた。
【０２７０】
実施例４７
化合物４７の合成
【化１１７】
2019055954.tif 000136
ＤＭＦ（３ｍｌ）中の化合物４４（８０ｍｇ、０．０００３０モル）の溶液に、油（４０ｍｇ）中の水素化ナトリウムの６０％の分散物を添加した。１５分間の撹拌の後、沃化メチル（３７μＬ、２ｅｑ）を添加した。内容物を、室温で３０分間撹拌した。その後、飽和ＮａＨＣＯ３を添加し、酢酸エチルがそれに続いた。有機層を硫酸マグネシウムで乾燥し、その後、真空下で濃縮し、製品を提供した。
1HNMR (600 MHz, DMSO-d6) δ ppm 0.74 (d, J=6.73 Hz, 3 H) 0.91 (d, J=6.73 Hz, 3 H) 2.04 - 2.20 (m, 1 H) 3.04 (s, 3 H) 3.69 (dd, J=13.76, 1.17 Hz, 1 H) 3.96 (dd, J=13.76, 4.68 Hz, 1 H) 4.58 (dd, J=7.32, 3.51 Hz, 1 H) 7.16 (s, 1 H) 9.05 (s, 1 H).  LCMS (ESI) 279 (M + H).
【０２７１】
実施例４８
化合物４８の合成
【化１１８】
2019055954.tif 000137
【０２７２】
ｔｅｒｔ−ブチルＮ−［（２Ｓ）−２−［（５−ブロモ−２−クロロ−ピリミジン−４−イル）アミノ］−４−メチル−ペンチル］カルバメート
【化１１９】
2019055954.tif 000138
圧力ボンベ内の５０ｐｓｉの水素で覆い、エチルアルコール中１０％のＰｄ／Ｃで、化合物１８を水素化し、ｔｅｒｔ−ブチルＮ−［（２Ｓ）−２−アミノ−４メチルペンチル］カルバメートを提供し、これは次いで、ｔｅｒｔ−ブチルＮ−［２−［（５−ブロモ−２−クロロ−ピリミジン−４−イル）アミノ］−３−メチルブチル］カルバメートについて記載されたと類似の反応条件を用いて、５−ブロモ２、４−ジクロロピリミジンと反応させて、ｔｅｒｔ−ブチルＮ−［（２Ｓ）−２−［（５−ブロモ−２−クロロ−ピリミジン−４−イル）アミノ］−４−メチル−ペンチル］カルバメートを提供した。
1HNMR (600 MHz, CHLOROFORM-d) δ ppm 0.91 (d, J=6.44 Hz, 3 H) 0.94 (d, J=6.44 Hz, 3 H) 1.32 - 1.51 (m, 11 H) 1.55 - 1.67 (m, 1 H) 3.28 (t, J=5.86 Hz, 2 H) 4.21 - 4.42 (m, 1 H) 4.84 (s, 1 H) 5.84 (d, J=7.32 Hz, 1 H) 8.07 (s, 1 H). LCMS (ESI) 407 (M + H).
【０２７３】
【化１２０】
2019055954.tif 000139
トルエン（３６ｍｌ）及びトリエチルアミン（７．２ｍｌ）中のｔｅｒｔ−ブチルＮ−［（２Ｓ）−２−［（５−ブロモ−２−クロロ−ピリミジン−４−イル）アミノ］−４−メチル−ペンチル］カルバメート（５．０ｇ、１２．３ｍモル）の溶液に、３、３−ジエトキシプロプ−１−イン（２．８ｍｌ、１９．７ｍモル）、Ｐｄ２（ＤＢＡ）３（１．１ｇ、１．２３ｍモル）、及びトリフェニルアルシン（３．８ｇ、１２．３ｍモル）を窒素下で添加した。内容物を、７０度で２４時間加熱した。室温に冷却後、反応物混合物をＣＥＬＩＴＥ（登録商標）でろ過し、その後、真空下で濃縮した。粗製品を、ヘキサン／酢酸エチル（０〜３０％）を用いたシリカゲルカラムクロマトグラフィーにより精製し、（２Ｓ）−Ｎ２−［２−クロロ−５−（３、３−ジエトキシプロプ−１−イニル）ピリミジン−４−イル］−４−メチル−ペンタン−１、２−ジアミンを提供した。
LCMS (ESI) 455 (M + H).
【０２７４】
【化１２１】
2019055954.tif 000140
７−［１−［（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ）メチル］−２メチル−プロピル］−２−クロロ−ピロロ［２，３−ｄ］ピリミジン−６カルボン酸について記載したと類似の合成シーケンスを用いて、７−［（１Ｓ）−１−［（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ）メチル］−３−メチルブチル］−２−クロロ−ピロロ［２，３−ｄ］ピリミジン−６カルボン酸を合成した。
1HNMR (600 MHz, DMSO-d6) δ ppm 0.88 (d, J=6.44 Hz, 3 H) 0.97 (d, J=6.44 Hz, 3 H) 1.47 (s, 9 H) 1.49 - 1.54 (m, 1 H) 1.56 (t, J=7.17 Hz, 2 H) 3.98 (dd, J=13.91, 3.07 Hz, 1 H) 3.76 (dd, J=13.31, 4.13 Hz, 1 H) 4.38 (d, J=14.05 Hz, 1 H) 4.90 (t, J=7.17 Hz, 1 H) 7.41 (s, 1 H) 9.11 (s, 1 H).  LCMS (M + H) 397.
【０２７５】
化合物４４に対して記載されたと類似の合成シーケンスを用いて、化合物４８が合成された。
1HNMR (600 MHz, DMSO-d6) δ ppm 0.82 (d, J=6.73 Hz, 3 H) 0.97 (d, J=6.44 Hz, 3 H) 1.34 - 1.46 (m, 1 H) 1.48 - 1.65 (m, 2 H) 3.40 (dd, J=13.32, 5.42 Hz, 1 H) 3.76 (dd, J=13.47, 4.10 Hz, 1 H) 4.76 - 4.92 (m, 1 H) 7.17 (s, 1 H) 8.34 (d, J=5.27 Hz, 1 H) 9.04 (s, 1 H). LCMS (ESI) 279 (M + H)
【０２７６】
実施例４９
化合物４９の合成
【化１２２】
2019055954.tif 000141
化合物４９は、化合物４７に対して記載されたと類似の方法で合成された。
1HNMR (600 MHz, DMSO-d6) δ ppm 0.82 (d, J=6.44 Hz, 3 H) 0.97 (d, J=6.44 Hz, 3 H) 1.37 - 1.68 (m, 3 H) 3.04 (s, 3 H) 3.56 (d, J=13.47 Hz, 1 H) 4.00 (dd, J=13.32, 4.25 Hz, 1 H) 4.82 - 4.94 (m, 1 H) 7.16 (s, 1 H) 9.03 (s, 1 H). LCMS (ESI) 293 (M + H).
【０２７７】
実施例５０
化合物５０の合成
【化１２３】
2019055954.tif 000142
【０２７８】
ｔｅｒｔ−ブチルＮ−［（２Ｓ）−２−［（５−ブロモ−２−クロロ−ピリミジン−４−イル）アミノ］−３−メチル−ペンチル］カルバメート
【化１２４】
2019055954.tif 000143
圧力容器内で５０ｐｓｉの水素下で、１０％のＰｄ／Ｃを用いて化合物２０を水素化し、ｔｅｒｔ−ブチルＮ−［（２Ｓ）−２−アミノ−３メチルペンチル］カルバメートを提供し、これを、ｔｅｒｔ−ブチルＮ−［２−［（５−ブロモ−２−クロロ−ピリミジン−４−イル）アミノ］−３−メチルブチル］カルバメートについて記載されたと類似の反応条件を用いて、５−ブロモ２、４−ジクロロピリミジンと反応させて、ｔｅｒｔ−ブチルＮ−［（２Ｓ）−２−［（５−ブロモ−２−クロロ−ピリミジン−４−イル）アミノ］−３−メチル−ペンチル］カルバメートを提供した。
1HNMR (600 MHz, CHLOROFORM-d) δ ppm 0.88 - 0.95 (m, 6 H) 1.11 - 1.20 (m, 1 H) 1.34 (s, 9 H) 1.44 - 1.54 (m, 1 H) 1.64 - 1.72 (m, 1 H) 3.17 - 3.27 (m, 1 H) 3.33 - 3.43 (m, 1 H) 4.11 - 4.21 (m, 1 H) 4.81 (s, 1 H) 5.92 (d, J=8.20 Hz, 1 H) 8.05 (s, 1 H). LCMS (ESI) 407.
【０２７９】
ｔｅｒｔ−ブチルＮ−［（２Ｓ）−２−［［２−クロロ−５−（３、３−ジエトキシプロプ−１−イニル）ピリミジン−４−イル］アミノ］−３−メチル−ペンチル］カルバメート
【化１２５】
2019055954.tif 000144
（２Ｓ）−Ｎ２−［２−クロロ−５−（３、３−ジエトキシプロプ−１−イニル）ピリミジン−４−イル］−４−メチル−ペンタン−１、２−ジアミンの合成に用いられたと同様の実験条件を用いて、ｔｅｒｔ−ブチルＮ−［（２Ｓ）−２−［［２−クロロ−５−（３、３−ジエトキシプロプ−１−イニル）ピリミジン−４−イル］アミノ］−３−メチル−ペンチル］カルバメートを合成した。
1HNMR (600 MHz, DMSO-d6) δ ppm 0.76 - 0.89 (m, 6 H) 1.03 (q, J=7.22 Hz, 3 H) 1.10 - 1.17 (m, 3 H) 1.25 - 1.42 (m, 11 H) 1.59 - 1.73 (m, 1 H) 3.35 - 3.47 (m, 4 H) 3.51 - 3.73 (m, 2 H) 3.99 - 4.11 (m, 1 H) 5.52 - 5.56 (m, 1 H) 6.76 - 7.03 (m, 2 H) 8.12 - 8.23 (m, 1 H). LCMS (ESI) 455 (M + H).
【０２８０】
７−［（１Ｓ）−１−［（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ）メチル］−２メチル−ブチル］−２−クロロ−ピロロ［２，３−ｄ］ピリミジン−６カルボン酸
【化１２６】
2019055954.tif 000145
７−［１−［（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ）メチル］−２メチル−プロピル］−２−クロロ−ピロロ［２，３−ｄ］ピリミジン−６カルボン酸について記載したと類似の合成シーケンスを用いて、７−［（１Ｓ）−１−［（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ）メチル］−２メチル−ブチル］−２−クロロ−ピロロ［２，３−ｄ］ピリミジン−６カルボン酸を合成した。
1HNMR (600 MHz, DMSO-d6) δ ppm 0.80 (t, J=7.47 Hz, 3 H) 0.86 (d, J=7.03 Hz, 3 H) 1.06 - 1.30 (m, 2 H) 1.48 (s, 9 H) 1.79 - 1.96 (m, 1 H) 3.95 (dd, J=14.05, 3.22 Hz, 1 H) 4.52 (d, J=14.35 Hz, 1 H) 4.61 - 4.73 (m, 1 H) 7.43 (s, 1 H) 9.13 (s, 1 H). LCMS (ESI) 397 (M + H).
【０２８１】
化合物４４に対して記載されたと類似の合成シーケンスを用いて、化合物５０を合成した。
1HNMR (600 MHz, DMSO-d6) δ ppm 0.74 (t, J=7.32 Hz, 3 H) 0.89 (d, J=6.73 Hz, 3 H) 1.00 - 1.12 (m, 2 H) 1.82 - 1.94 (m, 1 H) 3.55 (dd, J=13.91, 4.83 Hz, 1 H) 3.70 (dd, J=13.61, 4.25 Hz, 1 H) 4.57 (dd, J=7.91, 4.10 Hz, 1 H) 7.17 (s, 1 H) 8.31 (d, J=5.27 Hz, 1 H) 9.05 (s, 1 H).  LCMS (ESI) 279 (M + H).
【０２８２】
実施例５１
化合物５１の合成
【化１２７】
2019055954.tif 000146
化合物４７と同様の方法で、化合物５１を合成した。
1HNMR (600 MHz, DMSO-d6) δ ppm 0.77 (t, J=7.47 Hz, 3 H) 0.84 (d, J=6.73 Hz, 3 H) 1.07 - 1.16 (m, 2 H) 1.82 - 1.95 (m, 1 H) 3.03 (s, 3 H) 3.68 (d, J=13.76 Hz, 1 H) 3.96 (dd, J=13.76, 4.39 Hz, 1 H) 4.59 - 4.70 (m, 1 H) 7.16 (s, 1 H) 9.04 (s, 1 H).  LCMS (ESI) 293 (M + H).
【０２８３】
実施例５２
化合物５２の合成
【化１２８】
2019055954.tif 000147
【０２８４】
ｔｅｒｔ−ブチルＮ−［（２Ｓ）−２−［（５−ブロモ−２−クロロ−ピリミジン−４−イル）アミノ］−３、３−ジメチルブチル］カルバメート
【化１２９】
2019055954.tif 000148
圧力容器内、５０ｐｓｉ、水素下で１０％のＰｄ／Ｃを用いて、化合物２１を水素化して、ｔｅｒｔ−ブチルＮ−［（２Ｓ）−２−アミノ−３、３−ジメチルブチル］カルバメートを提供し、次いでこれを、ｔｅｒｔ−ブチルＮ−［２−［（５−ブロモ−２−クロロ−ピリミジン−４−イル）アミノ］−３−メチルブチル］カルバメートについて記載されたと類似の反応条件を用いて、５−ブロモ２、４−ジクロロピリミジンと反応させて、ｔｅｒｔ−ブチルＮ−［（２Ｓ）−２−［（５−ブロモ−２−クロロ−ピリミジン−４−イル）アミノ］−３、３−ジメチルブチル］カルバメートを提供した。
LCMS (ESI) 407 (M + H).
【０２８５】
ｔｅｒｔ−ブチルＮ−［（２Ｓ）−２−［［２−クロロ−５−（３、３−ジエトキシプロプ−１−イニル）ピリミジン−４−イル］アミノ］−３、３−ジメチルブチル］カルバメート
【化１３０】
2019055954.tif 000149
（２Ｓ）−Ｎ２−［２−クロロ−５−（３、３−ジエトキシプロプ−１−イニル）ピリミジン−４−イル］−４−メチル−ペンタン−１、２−ジアミンの合成に用いられたと同様の実験条件を用いて、ｔｅｒｔ−ブチルＮ−［（２Ｓ）−２−［［２−クロロ−５−（３、３−ジエトキシプロプ−１−イニル）ピリミジン−４−イル］アミノ］−３、３−ジメチルブチル］カルバメートを合成した。
LCMS (ESI) 455 (M + H).
【０２８６】
７−［（１Ｓ）−１−［（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ）メチル］−２、２−ジメチルプロピル］−２−クロロ−ピロロ［２，３−ｄ］ピリミジン−６カルボン酸
【化１３１】
2019055954.tif 000150
７−［１−［（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ）メチル］−２メチル−プロピル］−２−クロロ−ピロロ［２，３−ｄ］ピリミジン−６カルボン酸について記載したと類似の合成シーケンスを用いて、７−［（１Ｓ）−１−［（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ）メチル］−２、２−ジメチルプロピル］−２−クロロ−ピロロ［２，３−ｄ］ピリミジン−６カルボン酸を合成した。
LCMS (ESI) 397 (M + H).
【０２８７】
中間体１Ａについて記載されたと類似の合成シーケンスを用いて、中間体１Ｆを合成した。
LCMS (ESI) 279 (M + H).
【０２８８】
実施例５３
化合物５３の合成
【化１３２】
2019055954.tif 000151
中間体１ＣＡについて記載したと同様の方法で、化合物５３を合成した。
LCMS (ESI) 293 (M + H).
【０２８９】
実施例５４
化合物５４の合成
【化１３３】
2019055954.tif 000152
【０２９０】
ｔｅｒｔ−ブチルＮ−［（２Ｓ）−２−［（５−ブロモ−２−クロロ−ピリミジン−４−イル）アミノ］−２−フェニルエチル］カルバメート
【化１３４】
2019055954.tif 000153
圧力容器内の５０ｐｓｉの水素下で１０  ％のＰｄ／Ｃを用いて、化合物２１を水素化し、ｔｅｒｔ−ブチルＮ−［（２Ｓ）−２−アミノ−２−フェニルエチル］カルバメートを提供し、次いでこれを、ｔｅｒｔ−ブチルＮ−［２−［（５−ブロモ−２−クロロ−ピリミジン−４−イル）アミノ］−３−メチルブチル］カルバメートについて記載されたと類似の反応条件を用いて、５−ブロモ２、４−ジクロロピリミジンと反応させて、ｔｅｒｔ−ブチルＮ−［（２Ｓ）−２−［（５−ブロモ−２−クロロ−ピリミジン−４−イル）アミノ］−２−フェニルエチル］カルバメートを提供した。
1HNMR (600 MHz, DMSO-d6) δ ppm 1.32 (s, 9 H) 3.29 - 3.50 (m, 2 H) 5.12 - 5.24 (m, 1 H) 7.10 (t, J=5.27 Hz, 1 H) 7.21 (t, J=6.88 Hz, 1 H) 7.26 - 7.34 (m, 4 H) 7.89 (d, J=7.32 Hz, 1 H) 8.24 (s, 1 H).  LCMS (ESI) 427 (M + H).
【０２９１】
ｔｅｒｔ−ブチルＮ−［（２Ｓ）−２−［［２−クロロ−５−（３、３−ジエトキシプロプ−１−イニル）ピリミジン−４−イル］アミノ］−２−フェニルエチル］カルバメート
【化１３５】
2019055954.tif 000154
（２Ｓ）−Ｎ２−［２−クロロ−５−（３、３−ジエトキシプロプ−１−イニル）ピリミジン−４−イル］−４−メチル−ペンタン−１、２−ジアミンの合成に用いられたと同様の実験条件を用いて、ｔｅｒｔ−ブチルＮ−［（２Ｓ）−２−［［２−クロロ−５−（３、３−ジエトキシプロプ−１−イニル）ピリミジン−４−イル］アミノ］−２−フェニルエチル］カルバメートを合成した。
1HNMR (600 MHz, DMSO-d6) δ ppm 1.14 (t, J=7.03 Hz, 6 H) 1.32 (s, 9 H) 3.39 (s, 2 H) 3.52 - 3.61 (m, 2 H) 3.64 - 3.73 (m, 2 H) 5.17 - 5.26 (m, 1 H) 5.57 (s, 1 H) 7.07 - 7.14 (m, 1 H) 7.20 - 7.25 (m, 1 H) 7.26 - 7.33 (m, 4 H) 7.90 (d, J=7.61 Hz, 1 H) 8.19 (s, 1 H).  LCMS (ESI) 475 (M + H).
【０２９２】
７−［（１Ｓ）−２−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ）−１−フェニルエチル］−２−クロロ−ピロロ［２，３−ｄ］ピリミジン−６カルボン酸
【化１３６】
2019055954.tif 000155
７−［１−［（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ）メチル］−２メチル−プロピル］−２−クロロ−ピロロ［２，３−ｄ］ピリミジン−６カルボン酸について記載されたと類似の合成シーケンスを用いて、７−［（１Ｓ）−２−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ）−１−フェニルエチル］−２−クロロ−ピロロ［２，３−ｄ］ピリミジン−６カルボン酸を合成した。
LCMS (ESI) 417 (M + H).
【０２９３】
化合物５４
化合物４４について記載されたと類似の合成シーケンスを用いて、化合物５４を合成した。
1HNMR (600 MHz, DMSO-d6) δ ppm 3.58 - 3.69 (m, 1 H) 4.13 (dd, J=13.47, 4.39 Hz, 1 H) 6.07 (d, J=3.81 Hz, 1 H) 6.85 (d, J=7.32 Hz, 2 H) 7.19 - 7.31 (m, 3 H) 7.34 (s, 1 H) 8.27 (d, J=5.27 Hz, 1 H) 9.13 (s, 1 H).  LCMS (ESI) 299 (M + H).
【０２９４】
実施例５５
化合物５５の合成
【化１３７】
2019055954.tif 000156
【０２９５】
ｔｅｒｔ−ブチルＮ−［（１Ｓ）−１−［［（５−ブロモ−２−クロロ−ピリミジン−４−イル）アミノ］メチル］−２メチル−プロピル］カルバメート
【化１３８】
2019055954.tif 000157
ｔｅｒｔ−ブチルＮ−［２−［（５−ブロモ−２−クロロ−ピリミジン−４−イル）アミノ］−３−メチルブチル］カルバメートについて記載されたと類似の反応条件を用い、５−ブロモ２、４−ジクロロピリミジン及び中間体Ｅを使用して、ｔｅｒｔ−ブチルＮ−［（１Ｓ）−１−［［（５−ブロモ−２−クロロ−ピリミジン−４−イル）アミノ］メチル］−２メチル−プロピル］カルバメートを合成した。
1HNMR (600 MHz, CHLOROFORM-d) δ ppm 0.95 - 1.02 (m, 6 H) 1.35 - 1.45 (m, 9 H) 1.75 - 1.90 (m, 1 H) 3.35 - 3.48 (m, 1 H) 3.52 - 3.61 (m, 1 H) 3.64 - 3.76 (m, 1 H) 4.56 (d, J=8.49 Hz, 1 H) 6.47 (s, 1 H) 8.07 (s, 1 H).  LCMS (ESI) 393 (M + H).
【０２９６】
ｔｅｒｔ−ブチルＮ−［（１Ｓ）−１−［［［２−クロロ−５−（３、３−ジエトキシプロプ−１−イニル）ピリミジン−４−イル］アミノ］メチル］−２メチル−プロピル］カルバメート
【化１３９】
2019055954.tif 000158
（２Ｓ）−Ｎ２−［２−クロロ−５−（３、３−ジエトキシプロプ−１−イニル）ピリミジン−４−イル］−４−メチル−ペンタン−１、２−ジアミンの合成に用いられたと同様の実験条件を用いて、ｔｅｒｔ−ブチルＮ−［（１Ｓ）−１−［［［２−クロロ−５−（３、３−ジエトキシプロプ−１−イニル）ピリミジン−４−イル］アミノ］メチル］−２メチル−プロピル］カルバメートを合成した。
1HNMR (600 MHz, CHLOROFORM-d) δ ppm 0.90 - 1.00 (m, 6 H) 1.18 - 1.25 (m, 6 H) 1.34 - 1.36 (m, 9 H) 1.69 - 1.90 (m, 1 H) 3.34 - 3.82 (m, 6 H) 4.53 - 4.77 (m, 1 H) 5.45 - 5.55 (m, 1 H) 6.37 (dd, J=15.37, 6.59 Hz, 1 H) 6.56 (s, 1 H) 8.05 (s, 1 H).  LCMS (ESI) 441 (M + H).
【０２９７】
７−［（２Ｓ）−２−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ）−３−メチルブチル］−２−クロロ−ピロロ［２，３−ｄ］ピリミジン−６カルボン酸
【化１４０】
2019055954.tif 000159
７−［１−［（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ）メチル］−２メチル−プロピル］−２−クロロ−ピロロ［２，３−ｄ］ピリミジン−６カルボン酸に対して記載されたものと類似の合成シーケンスを用いて、７−［（２Ｓ）−２−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ）−３−メチルブチル］−２−クロロ−ピロロ［２，３−ｄ］ピリミジン−６カルボン酸を合成した。
1HNMR (600 MHz, CHLOROFORM-d) δ ppm 0.90 (d, J=6.73 Hz, 3 H) 0.96 (d, J=7.03 Hz, 3 H) 1.55 - 1.66 (m, 10 H) 4.14 (dd, J=13.61, 3.95 Hz, 1 H) 4.52 - 4.63 (m, 1 H) 4.84 (dd, J=13.61, 1.32 Hz, 1 H) 7.37 (s, 1 H) 8.95 (s, 1 H).  LCMS (ESI) 383 (M + H).
【０２９８】
化合物５５
化合物４４について記載されたものと類似の合成シーケンスを用いて、化合物５５を合成した。
LCMS (ESI) 265 (M + H).
【０２９９】
実施例５６
化合物５６の合成
【化１４１】
2019055954.tif 000160
５−ブロモ２、４−ジクロロピリミジン及び化合物１７を用いて、出発原料として化合物５６を合成し、続いて、化合物５５に関しての合成ステップの同様のシーケンスを行った。
分析データは、その鏡像異性体（化合物５５）について記載されたものと一致していた。
1HNMR (600 MHz, DMSO-d6) δ ppm 0.88 (d, J=6.44 Hz, 6 H) 1.73 - 1.86 (m, 1 H) 3.67 - 3.76 (m, 2 H) 4.11 - 4.21 (m, 1 H) 7.13 - 7.19 (m, 1 H) 8.56 (s, 1 H) 9.05 (s, 1 H).  LCMS (ESI) 265 (M + H).
【０３００】
実施例５７
化合物５７の合成
【化１４２】
2019055954.tif 000161
【０３０１】
ｔｅｒｔ−ブチルＮ−［２−［（５−ブロモ−２−クロロ−ピリミジン−４−イル）アミノ］−２メチル−プロピル］カルバメート
【化１４３】
2019055954.tif 000162
ｔｅｒｔ−ブチルＮ−［２−［（５−ブロモ−２−クロロ−ピリミジン−４−イル）アミノ］−３−メチルブチル］カルバメートについて記載されたと類似の反応条件を用い、５−ブロモ２、４−ジクロロピリミジン及びｔｅｒｔ−ブチルカルバミン酸Ｎ−（２−アミノ−２メチル−プロピル）を用いて、ｔｅｒｔ−ブチルＮ−［２−［（５−ブロモ−２−クロロ−ピリミジン−４−イル）アミノ］−２メチル−プロピル］カルバメートを合成した。
LCMS (ESI) 379 (M + H).
【０３０２】
ｔｅｒｔ−ブチルＮ−［２−［［２−クロロ−５−（３、３−ジエトキシプロプ−１−イニル）ピリミジン−４−イル］アミノ］−２メチル−プロピル］カルバメート
【化１４４】
2019055954.tif 000163
（２Ｓ）−Ｎ２−［２−クロロ−５−（３、３−ジエトキシプロプ−１−イニル）ピリミジン−４−イル］−４−メチル−ペンタン−１、２−ジアミンの合成に用いられたものと同様の実験条件を用いて、ｔｅｒｔ−ブチルＮ−［２−［［２−クロロ−５−（３、３−ジエトキシプロプ−１−イニル）ピリミジン−４−イル］アミノ］−２メチル−プロピル］カルバメートを合成した。
1HNMR (600 MHz, DMSO-d6) δ ppm 1.11 - 1.22 (m, 6 H) 1.31 - 1.45 (m, 15 H) 3.10 - 3.24 (m, 2 H) 3.51 - 3.76 (m, 4 H) 5.60 (s, 1 H) 6.94 (s, 1 H) 7.33 (t, J=6.44 Hz, 1 H) 8.18 (s, 1 H). LCMS (ESI) 427 (M + H).
【０３０３】
７−［２−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ）−１，１−ジメチルエチル］−２−クロロ−ピロロ［２，３−ｄ］ピリミジン−６カルボン酸
【化１４５】
2019055954.tif 000164
７−［１−［（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ）メチル］−２メチル−プロピル］−２−クロロ−ピロロ［２，３−ｄ］ピリミジン−６カルボン酸について記載されたものと類似の合成シーケンスを用いて、７−［２−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ）−１，１−ジメチルエチル］−２−クロロ−ピロロ［２，３−ｄ］ピリミジン−６カルボン酸を合成した。
1HNMR (600 MHz, DMSO-d6) δ ppm 1.43 (s, 9H) 1.73 (s, 6 H) 4.06 (s, 2 H) 7.46 (s, 1 H) 9.23 (s, 1H). LCMS (ESI) 369 (M + H).
【０３０４】
化合物５７
化合物４４について記載されたものと類似の合成シーケンスを用いて、化合物５７を合成した。
1HNMR (600 MHz, DMSO-d6) δ ppm 1.73 (s, 6 H) 3.50 (d, J=2.93 Hz, 2 H) 7.25 (s, 1 H) 8.46 - 8.55 (m, 1 H) 9.07 (s, 1 H).  LCMS (ESI) 251 (M + H).
【０３０５】
実施例５８
化合物５８の合成
【化１４６】
2019055954.tif 000165
【０３０６】
ｔｅｒｔ−ブチルＮ−［［１−［（５−ブロモ−２−クロロ−ピリミジン−４−イル）アミノ］シクロヘキシル］メチル］カルバメート
【化１４７】
2019055954.tif 000166
ｔｅｒｔ−ブチルＮ−［２−［（５−ブロモ−２−クロロ−ピリミジン−４−イル）アミノ］−３−メチルブチル］カルバメートについて記載されたと類似の反応条件を用いて、５−ブロモ２、４−ジクロロピリミジン及び中間体Ｋを使用して、ｔｅｒｔ−ブチルＮ−［［１−［（５−ブロモ−２−クロロ−ピリミジン−４−イル）アミノ］シクロヘキシル］メチル］カルバメートを合成した。
1HNMR (600 MHz, DMSO-d6) δ ppm 1.18 - 1.54 (m, 17 H) 2.23 (d, J=14.35 Hz, 2 H) 3.36 (d, J=6.44 Hz, 2 H) 5.82 (s, 1 H) 6.93 (s, 1 H) 8.22 (s, 1 H).  LCMS (ESI) 419 (M + H).
【０３０７】
ｔｅｒｔ−ブチルＮ−［［１−［［２−クロロ−５−（３、３−ジエトキシプロプ−１−イニル）ピリミジン−４−イル］アミノ］シクロヘキシル］メチル］カルバメート
【化１４８】
2019055954.tif 000167
（２Ｓ）−Ｎ２−［２−クロロ−５−（３、３−ジエトキシプロプ−１−イニル）ピリミジン−４−イル］−４−メチル−ペンタン−１、２−ジアミンの合成に用いたものと同様の実験条件を用いて、ｔｅｒｔ−ブチルＮ−［［１−［［２−クロロ−５−（３、３−ジエトキシプロプ−１−イニル）ピリミジン−４−イル］アミノ］シクロヘキシル］メチル］カルバメートを合成した。
1HNMR (600 MHz, DMSO-d6) δ ppm 1.08 - 1.16 (m, 6 H) 1.17 - 1.54 (m, 17 H) 2.13 (br. s., 2 H) 3.36 (d, J=6.73 Hz, 2 H) 3.50 - 3.69 (m, 4 H) 5.72 (s, 1 H) 6.94 (s, 1 H) 5.72 (br. s., 1H) 8.17 (s, 1 H).  LCMS (ESI) 467 (M + H).
【０３０８】
７−［１−［（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ）メチル］シクロヘキシル］−２−クロロ−ピロロ［２，３−ｄ］ピリミジン−６カルボン酸
【化１４９】
2019055954.tif 000168
７−［１−［（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ）メチル］−２メチル−プロピル］−２−クロロ−ピロロ［２，３−ｄ］ピリミジン−６カルボン酸について記載したものと類似の合成シーケンスを用いて、７−［１−［（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ）メチル］シクロヘキシル］−２−クロロ−ピロロ［２，３−ｄ］ピリミジン−６カルボン酸を合成した。
1HNMR (600 MHz, DMSO-d6) δ ppm 1.37 - 1.54 (m, 13 H) 1.75 (br. s., 4 H) 2.74 (br. s., 2 H) 3.78 - 3.84 (m, 2 H) 7.44 - 7.51 (m, 1 H) 8.23 (s, 1 H) 9.11 (s, 1 H).  LCMS (ESI) 409 (M + H).
【０３０９】
化合物５８
化合物４４について記載されたものと類似の合成シーケンスを用いて、化合物５８を合成した。
1HNMR (600 MHz, DMSO-d6) δ ppm 1.28 (br. s., 2 H) 1.42 (br. s., 2 H) 1.70 (br. s., 4 H) 1.85 - 1.95 (m, 2 H) 2.69 (m, 2 H) 7.16 - 7.25 (m, 1 H) 8.41 (br. s., 1 H) 9.04 (s, 1 H).  LCMS 291 (M + H).
【０３１０】
実施例５９
化合物５９の合成
【化１５０】
2019055954.tif 000169
【０３１１】
ｔｅｒｔ−ブチルＮ−［［１−［（５−ブロモ−２−クロロ−ピリミジン−４−イル）アミノ］シクロペンチル］メチル］カルバメート
【化１５１】
2019055954.tif 000170
ｔｅｒｔ−ブチルＮ−［２−［（５−ブロモ−２−クロロ−ピリミジン−４−イル）アミノ］−３−メチルブチル］カルバメートについて記載したと類似の反応条件を用い、５−ブロモ２、４−ジクロロピリミジン及び中間体Ｌを使用して、ｔｅｒｔ−ブチルＮ−［［１−［（５−ブロモ−２−クロロ−ピリミジン−４−イル）アミノ］シクロペンチル］メチル］カルバメートを合成した。
1HNMR (600 MHz, DMSO-d6) δ ppm 1.34 (s, 9 H) 1.50 - 1.58 (m, 2 H) 1.63 - 1.78 (m, 4 H) 1.96 - 2.06 (m, 2 H) 3.25 (d, J=6.15 Hz, 2 H) 6.71 (s, 1 H) 7.18 (t, J=6.29 Hz, 1 H) 8.20 (s, 1 H).  LCMS (ESI) 405 (M + H).
【０３１２】
ｔｅｒｔ−ブチルＮ−［［１−［［２−クロロ−５−（３、３−ジエトキシプロプ−１−イニル）ピリミジン−４−イル］アミノ］シクロペンチル］メチル］カルバメート
【化１５２】
2019055954.tif 000171
（２Ｓ）−Ｎ２−［２−クロロ−５−（３、３−ジエトキシプロプ−１−イニル）ピリミジン−４−イル］−４−メチル−ペンタン−１、２−ジアミンの合成に用いられたものと同様の実験条件を用いて、ｔｅｒｔ−ブチルＮ−［［１−［［２−クロロ−５−（３、３−ジエトキシプロプ−１−イニル）ピリミジン−４−イル］アミノ］シクロペンチル］メチル］カルバメートを合成した。
LCMS (ESI) 453 (M + H).
【０３１３】
７−［１−［（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ）メチル］シクロペンチル］−２−クロロ−ピロロ［２，３−ｄ］ピリミジン−６カルボン酸
【化１５３】
2019055954.tif 000172
７−［１−［（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ）メチル］−２メチル−プロピル］−２−クロロ−ピロロ［２，３−ｄ］ピリミジン−６カルボン酸について記載されたものと類似の合成シーケンスを用いて、７−［１−［（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ）メチル］シクロペンチル］−２−クロロ−ピロロ［２，３−ｄ］ピリミジン−６カルボン酸を合成した。
1HNMR (600 MHz, DMSO-d6) δ ppm 1.47 (s, 9 H) 1.74 (br. s., 2 H) 1.88 (br. s., 2 H) 2.04 (br. s., 2 H) 2.41 - 2.45 (m, 2 H) 4.06 (s, 2 H) 7.45 (s, 1 H) 9.11 (s, 1 H).  LCMS (ESI) 395 (M + H).
【０３１４】
化合物５９
化合物４４について記載されたものと類似の合成シーケンスを用いて、化合物５９を合成した。
1HNMR (600 MHz, DMSO-d6) δ ppm 1.72 (br. s., 2 H) 1.86 - 1.93 (m, 2 H) 1.99 (d, J=3.81 Hz, 2 H) 2.40 (br. s., 2 H) 3.48 (d, J=2.34 Hz, 2 H) 7.22 (s, 1 H) 8.53 (br. s., 1 H) 9.05 (s, 1 H).  LCMS (ESI) 277 (M + H).
【０３１５】
実施例６０
化合物６０の合成
【化１５４】
2019055954.tif 000173
【０３１６】
ｔｅｒｔ−ブチルＮ−［２−［（５−ブロモ−２−クロロ−ピリミジン−４−イル）アミノ］−４−メチル−ペンチル］カルバメート
【化１５５】
2019055954.tif 000174
ｔｅｒｔ−ブチルＮ−［２−［（５−ブロモ−２−クロロ−ピリミジン−４−イル）アミノ］−３−メチルブチル］カルバメートについて記載されたと類似の反応条件を用い、５−ブロモ２、４−ジクロロピリミジン及び中間体Ｂを用いて、ｔｅｒｔ−ブチルＮ−［２−［（５−ブロモ−２−クロロ−ピリミジン−４−イル）アミノ］−４−メチル−ペンチル］カルバメートを合成した。分析データは、Ｌ−エナンチオマーについて記載されたものと一致している。
【０３１７】
ｔｅｒｔ−ブチルＮ−［２−［［２−クロロ−５−（３、３−ジエトキシプロプ−１−イニル）ピリミジン−４−イル］アミノ］−４−メチル−ペンチル］カルバメート
【化１５６】
2019055954.tif 000175
ｔｅｒｔ−ブチルＮ−［２−［［２−クロロ−５−（３、３−ジエトキシプロプ−１−イニル）ピリミジン−４−イル］アミノ］エチル］カルバメートの合成に用いられたものと同様の実験条件を用いて、ｔｅｒｔ−ブチルＮ−［２−［［２−クロロ−５−（３、３−ジエトキシプロプ−１−イニル）ピリミジン−４−イル］アミノ］−４−メチル−ペンチル］カルバメートを合成した。
1HNMR (600 MHz, CHLOROFORM-d) δ ppm 1.21 - 1.31 (m, 12 H) 1.38 - 1.46 (m, 11 H) 1.70 (m, 1H) 3.24 (m, 2 H) 3.65 - 3.82 (m, 4 H) 4.86 (br s., 1H), 5.65 (s, 1 H) 5.85 (br s., 1H) 6.94 (s, 1 H) 8.21 (s, 1 H).  LCMS (ESI) 455 (M + H).
【０３１８】
７−［１−［（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ）メチル］−３−メチルブチル］−２−クロロ−ピロロ［２，３−ｄ］ピリミジン−６カルボン酸
【化１５７】
2019055954.tif 000176
７−［１−［（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ）メチル］−２メチル−プロピル］−２−クロロ−ピロロ［２，３−ｄ］ピリミジン−６カルボン酸について記載されたものと類似の合成シーケンスを用いて、７−［１−［（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ）メチル］−３−メチルブチル］−２−クロロ−ピロロ［２，３−ｄ］ピリミジン−６カルボン酸を合成した。分析データは、Ｌ−異性体について記載されたものと一致していた。
【０３１９】
化合物６０
化合物４４のために記載されたものと類似の合成シーケンスを用いて、化合物６０を合成した。分析データは、Ｌ−異性体について記載されたものと一致していた。
【０３２０】
実施例６１
化合物６１の合成
【化１５８】
2019055954.tif 000177
ＤＭＦ（３．０ｍｌ）中の化合物６０（１００ｍｇ、０．０００２４モル）の溶液に、水素化ナトリウム（油中６０％分散物）（２７．６ｍｇ、３ｅｑ）を添加した。１５分間の撹拌の後、沃化メチル（３０、２ｅｑ）を添加した。内容物を、室温で３０分間撹拌した。
飽和ＮａＨＣＯ３の添加の後、酢酸エチルを添加した。有機層の分離の後、硫酸マグネシウムによる乾燥及び真空下での濃縮により、製品を提供した。分析データは、化合物４９と同様だった。
【０３２１】
実施例６２
化合物６２の合成
【化１５９】
2019055954.tif 000178
【０３２２】
ｔｅｒｔ−ブチルＮ−［（１Ｓ，２Ｓ）−２−［（５−ブロモ−２−クロロ−ピリミジン−４−イル）アミノ］シクロペンチル］カルバメート
【化１６０】
2019055954.tif 000179
ｔｅｒｔ−ブチルＮ−［２−［（５−ブロモ−２−クロロ−ピリミジン−４−イル）アミノ］−３−メチルブチル］カルバメートに対して記載されたと類似の反応条件を用いて、ｔｅｒｔ−ブチルＮ−［（１Ｓ，２Ｓ）−２−アミノシクロペンチル］カルバメートを５−ブロモ２、４−ジクロロピリミジンで処理することにより、ｔｅｒｔ−ブチルＮ−［（１Ｓ，２Ｓ）−２−［（５−ブロモ−２−クロロ−ピリミジン−４−イル）アミノ］シクロペンチル］カルバメートを合成した。
1HNMR (600 MHz, DMSO-d6) δ ppm 1.27 (s, 9 H) 1.42 - 1.54 (m, 2 H) 1.56 - 1.65 (m, 2 H) 1.80 - 1.88 (m, 1 H) 1.96 - 2.01 (m, 1 H) 3.88 - 3.96 (m, 1 H) 4.03 - 4.09 (m, 1 H) 6.91 (d, J=8.20 Hz, 1 H) 7.41 (d, J=7.32 Hz, 1 H) 8.18 (s, 1 H).  LCMS (ESI) 391 (M + H).
【０３２３】
ｔｅｒｔ-ブチルＮ−［（１Ｓ,２Ｓ）-２-［［２-クロロ-５-（３、３-ジエトキシプロプ-１-イニル）ピリミジン-４-イル］アミノ］シクロペンチル］カルバメート
【化１６１】
2019055954.tif 000180
（２Ｓ）-Ｎ２-［２-クロロ-５-（３、３-ジエトキシプロプ-１-イニル）ピリミジン-４-イル］-４-メチル-ペンタン-１、２-ジアミンの合成に用いられたものと同様の実験条件を用いて、ｔｅｒｔ-ブチルＮ−［（１Ｓ,２Ｓ）-２-［［２-クロロ-５-（３、３-ジエトキシプロプ-１-イニル）ピリミジン-４-イル］アミノ］シクロペンチル］カルバメートを合成した。
1HNMR (600 MHz, DMSO-d6) δ ppm 1.13 (t, 6 H) 1.28 (s, 9 H) 1.42 - 1.52 (m, 2 H) 1.58 - 1.65 (m, 2 H) 1.81 - 1.90 (m, 1 H) 1.99 - 2.08 (m, 1 H) 3.49 - 3.60 (m, 2 H) 3.63 - 3.71 (m, 2 H) 3.84 - 3.93 (m, 1 H) 3.96 - 4.04 (m, 1 H) 5.53 (s, 1 H) 6.96 (d, J=7.90 Hz, 1 H) 7.34 (d, J=7.03 Hz, 1 H) 8.14 (s, 1 H).  LCMS (ESI) 439 (M + H).
【０３２４】
７−［（１Ｓ，２Ｓ）−２−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ）シクロペンチル］−２−クロロ−ピロロ［２，３−ｄ］ピリミジン−６カルボン酸
【化１６２】
2019055954.tif 000181
７−［１−［（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ）メチル］−２メチル−プロピル］−２−クロロ−ピロロ［２，３−ｄ］ピリミジン−６カルボン酸に対して記載されたものと類似の合成シーケンスを用いて、７−［（１Ｓ，２Ｓ）−２−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ）シクロペンチル］−２−クロロ−ピロロ［２，３−ｄ］ピリミジン−６カルボン酸を合成した。
1HNMR (600 MHz, DMSO-d6) δ ppm 1.41 - 1.52 (m, 9 H) 1.55 - 1.68 (m, 1 H) 1.88 - 2.00 (m, 2 H) 2.05 - 2.15 (m, 1 H) 2.26 - 2.35 (m, 1 H) 2.71 - 2.89 (m, 1 H) 4.01 - 4.16 (m, 1 H) 4.28 - 4.45 (m, 1 H) 7.41 (s, 1 H) 9.11 (s, 1 H).  LCMS (ESI) 381 (M + H).
【０３２５】
化合物６２
化合物４４に対して記載されたものと類似の合成シーケンスを用いて、化合物６２を合成した。
【０３２６】
1HNMR (600 MHz, DMSO-d6) δ ppm 1.48 - 1.60 (m, 1 H) 1.88 - 1.98 (m, 3 H) 1.99 - 2.08 (m, 1 H) 2.66 - 2.75 (m, 1 H) 3.63 - 3.74 (m, 1 H) 3.99 - 4.12 (m, 1 H) 7.21 (s, 1 H) 8.89 (s, 1 H) 9.04 (s, 1 H).  LCMS (ESI) 263 (M + H).
【０３２７】
実施例６３
化合物６３の合成
【化１６３】
2019055954.tif 000182
窒素下、ジオキサン（２．０ｍｌ）中のクロロ三環系ラクタム（０．０５０ｇ、０．２２５ｍモル）に、５−（４−メチルピペラジン−１−イル）ピリジン−２−アミン（０．０５２ｇ、１．２ｅｑ、０．２７０ｍモル）を添加した後、Ｐｄ２（ＤＢＡ）３（１８．５ｍｇ）、ＢＩＮＡＰ（２５ｍｇ）及びナトリウム−ｔｅｒｔ−ブトキシド（３１ｍｇ、０．３２４ｍモル）を添加した。フラスコの内容物を、１０分間脱ガスし、その後１００度で１２時間加熱した。粗反応物をシリカゲルカラム上に充填し、ＤＣＭ／ＭｅＯＨ（０−１５％）で溶出して、所望の製品（２６ｍｇ）を提供した。ＤＣＭ／ＭｅＯＨ（１０  ％）中に溶解されたこの化合物に、イソプロパノール（２ｅｑ）中の３ＮのＨＣｌを添加し、反応物を終夜撹拌した。真空下での濃縮により、塩酸塩を提供した。
1HNMR (d6-DMSO) δ ppm 11.13 (brs, 1H), 9.07 (s, 1H), 8.42 (s, 1H), 8.03 (br m 1H), 7.99 (s, 1H), 7.67 (brm, 1H), 7.18 (s, 1H), 4.33 (m, 2H), 3.79 (m, 2H), 3.64 (m, 2H), 3.50 (m, 2H), 3.16 (m, 4H), 2.79 (s, 3H).  LCMS (ESI) 379 (M + H).
【０３２８】
実施例６４
化合物６４の合成
【化１６４】
2019055954.tif 000183
窒素下、ジオキサン（３．５ｍｌ）中のクロロ三環系ラクタム（０．０７５ｇ、０．３３８ｍモル）に、ｔｅｒｔ−ブチル４−（６アミノ３−ピリジル）ピペラジン−１−カルボン酸塩（０．０９８ｇ、１．０５ｅｑ）を添加し、続いて、Ｐｄ２（ｄｂａ）３（２７ｍｇ）、ＢＩＮＡＰ（３６ｍｇ）及びｔｅｒｔ−ブトキシドナトリウム（４５ｍｇ）を添加した。内容物を、加熱して１１時間還流した。粗反応物をシリカゲルカラム上に充填し、ＤＣＭ／ＭｅＯＨ（０〜１０％）で溶出して、所望の製品（３２ｍｇ）を提供した。
1HNMR (d6-DMSO) δ ppm 9.48 (s, 1H), 8.84 (s, 1H), 8.29 (s, 1H), 8.18 (s, 1H), 7.99 (s, 1H), 7.42 (m, 1H), 6.98 (s, 1H), 4.23 (m, 2H), 3.59 (m, 2H), 3.45 (m, 4H), 3.50 (m, 2H), 3.05 (m, 4H).  LCMS (ESI) 465 (M + H).
【０３２９】
実施例６５
化合物６５の合成
【化１６５】
2019055954.tif 000184
１０％のＤＣＭ／ＭｅＯＨ中の化合物６４（２３ｍｇ）の溶液に、イソプロパノール中のＨＣｌの３Ｍ溶液１０ｍｌを添加した。
内容物を、１６時間撹拌した。
反応物混合物を濃縮し、塩酸塩を提供した。
1HNMR (d6-DMSO) δ ppm 9.01 (s, 1H), 7.94 (m, 1H), 7.86 (m, 1H), 7.23 (s, 1H), 4.30 (m, 2H), 3.64 (m, 2H), 3.36 (m, 4H), 3.25 (m, 4H).  LCMS (ESI) 465 (M + H).
【０３３０】
実施例６６
化合物６６の合成
【化１６６】
2019055954.tif 000185
窒素の下のジオキサン（３．５ｍｌ）中のクロロＮメチル三環系アミド（０．０８０ｇ、０．３３８ｍモル）に、ｔｅｒｔ−ブチル４−（６アミノ３−ピリジル）ピペラジン−１−カルボキシレート０．１０２ｇ（１．１ｅｑ）を添加し、続いて、Ｐｄ２（ｄｂａ）３（２７ｍｇ）、ＢＩＮＡＰ（３６ｍｇ）及びｔｅｒｔ−ブトキシドナトリウム（４５ｍｇ）を添加した。内容物を、加熱して１１時間還流した。
シリカゲルカラムクロマトグラフィーを用いて、ジクロロメタン／メタノール（０〜５％）の溶出剤で、粗製品を精製し、所望の製品（４４ｍｇ）を提供した。
1HNMR (d6-DMSO) δ ppm 9.49 (s, 1H), 8.85 (s, 1H), 8.32 (m, 1H), 8.02 (s, 1H), 7.44 (m, 1H), 7.00 (s, 1H), 4.33 (m, 2H), 3.80 (m, 2H), 3.48 (m, 4H), 3.07 (m, 4H), 3.05 (s, 3H), 1.42 (s, 9H).  LCMS (ESI) 479 (M + H)
【０３３１】
実施例６７
化合物６７の合成
【化１６７】
2019055954.tif 000186
化合物６６（３２ｍｇ）に、イソプロパノール中の３ＮのＨＣＬ（１０ｍｌ）を添加し、内容物を、終夜室温で１６時間撹拌した。
濃縮により、塩酸塩が提供された。
1HNMR (d6-DMSO) δ ppm 9.13 (m, 2H), 8.11 (m, 1H), 8.10 (s, 1H), 7.62 (m, 1H), 7.21 (s, 1H), 4.43 (m, 2H), 3.85 (m, 2H), 3.41 (m, 4H), 3.28 (m, 4H), 3.08 (s, 3H).  LCMS (ESI) 379 (M + H).
【０３３２】
実施例６８
化合物６８の合成
【化１６８】
2019055954.tif 000187
化合物６４に対して記載されたと同様の実験条件を用いて、化合物６８を合成した。
1HNMR (600 MHz, DMSO-d6) δ ppm 0.79 (d, J=7.03 Hz, 3 H) 1.01 (d, J=6.73 Hz, 3 H) 1.35 - 1.48 (m, 9 H) 2.16 (dd, J=14.64, 6.73 Hz, 1 H) 3.00 - 3.14 (m, 4 H) 3.40 - 3.51 (m, 4 H) 3.51 - 3.60 (m, 1 H) 3.63 - 3.74 (m, 1 H) 4.44 (dd, J=7.90, 3.81 Hz, 1 H) 6.99 (s, 1 H) 7.46 (dd, J=8.93, 2.78 Hz, 1 H) 7.94 - 8.09 (m, 2 H) 8.31 (dd, J=9.08, 1.46 Hz, 1 H) 8.85 (s, 1 H) 9.46 (s, 1 H).  LCMS (ESI) 507 (M + H)
【０３３３】
実施例６９
化合物６９の合成
【化１６９】
2019055954.tif 000188
化合物６３に対して記載されたものと同様の実験条件を用いて、化合物６９を合成し、そしてこれは、ＨＣｌ塩として回収された。
1HNMR (600 MHz, DMSO-d6) δ ppm 0.77 - 0.86 (m, 3 H) 0.96 (d, J=7.03 Hz, 3 H) 2.10 - 2.24 (m, 1 H) 3.07 (s, 3 H) 3.37 - 3.79 (m, 8 H) 4.00 (dd, J=13.61, 4.54 Hz, 2 H) 4.63 - 4.73 (m, 1 H) 7.20 (s, 1 H) 7.58 - 7.71 (m, 1 H) 7.99 (d, J=2.34 Hz, 1 H) 8.12 (d, J=9.37 Hz, 1 H) 9.11 (s, 1 H) 9.41 (br. s., 2 H) 11.76 (br. s., 1 H).  LCMS (ESI) 421 (M + H).
【０３３４】
実施例７０
化合物７０の合成
【化１７０】
2019055954.tif 000189
化合物６４及び６５に対して記載されたものと同様の実験条件を用いて、化合物７０を合成し、そしてこれは、ＨＣｌ塩として回収された。キャラクタリゼーションデータ（ＮＭＲ及びＬＣＭ）は、化合物７１に対して報告されたものと一致していた。
【０３３５】
実施例７１
化合物７１の合成
【化１７１】
2019055954.tif 000190
化合物６４及び６５に対して記載されたものと同様の実験条件を用いて、化合物７１を合成し、そしてこれは、ＨＣｌ塩として回収された。
1HNMR (600 MHz, DMSO-d6) δ ppm 0.79 (d, J=6.73 Hz, 3 H) 1.01 (d, J=6.73 Hz, 3 H) 2.18 (dd, J=14.49, 7.17 Hz, 1 H) 3.18 - 3.84 (m, 10 H) 4.53 - 4.71 (m, 1 H) 7.24 (s, 1 H) 7.65 (d, J=9.37 Hz, 1 H) 8.01 (d, J=2.64 Hz, 1 H) 8.14 (d, J=1.46 Hz, 1 H) 8.35 (d, J=5.27 Hz, 1 H) 9.14 (s, 1 H) 9.46 (s, 2 H) 11.80 (s, 1 H)  LCMS (ESI) 407 (M+H).
【０３３６】
実施例７２
化合物７２（化合物ＵＵＵ）の合成
【化１７２】
2019055954.tif 000191
化合物６４及び６５に対して記載されたものと同様の実験条件を用いて、化合物７２を合成し、そしてこれは、ＨＣｌ塩として回収された。
1HNMR (600 MHz, DMSO-d6) δ ppm 0.77 (d, J=7.03 Hz, 3 H) 0.99 (d, J=6.73 Hz, 3 H) 2.10 - 2.24 (m, 1 H) 3.18 - 3.81 (m, 10 H) 4.54 - 4.69 (m, 1 H) 7.22 (s, 1 H) 7.63 (d, J=9.08 Hz, 1 H) 7.99 (d, J=2.63 Hz, 1 H) 8.11 (s, 1 H) 8.33 (d, J=5.27 Hz, 1 H) 9.12 (s, 1 H) 9.43 (s, 2 H) 11.77 (s, 1 H). LCMS (ESI) 407 (M+H).
【０３３７】
実施例７３
化合物７３の合成
【化１７３】
2019055954.tif 000192
化合物６４及び６５に対して記載されたものと同様の実験条件を用いて、化合物７３を合成し、そしてこれは、ＨＣｌ塩として回収された。
1HNMR (600 MHz, DMSO-d6) δ ppm 0.84 (d, J=6.73 Hz, 3 H) 0.98 (d, J=6.73 Hz, 3 H) 2.12 - 2.26 (m, 1 H) 3.09 (s, 3 H) 3.22 - 3.81 (m, 8 H) 4.01 (dd, J=13.61, 4.25 Hz, 2 H) 4.59 - 4.72 (m, 1 H) 7.19 (s, 1 H) 7.74 (s, 1 H) 7.96 - 8.10 (m, 2 H) 9.08 (s, 1 H) 9.22 (s, 2 H). LCMS (ESI) 421 (M+H).
【０３３８】
実施例７４
化合物７４の合成
【化１７４】
2019055954.tif 000193
化合物６３に対して記載されたものと同様の実験条件を用いて、化合物７４を合成し、そしてこれは、ＨＣｌ塩として回収された。
1HNMR (600 MHz, DMSO-d6) δ ppm 0.85 (d, J=4.98 Hz, 3 H) 0.95 (d, J=4.98 Hz, 3 H) 1.42 - 1.70 (m, 3 H) 2.77 (d, J=2.93 Hz, 3 H) 3.07 - 4.14 (m, 10 H) 4.95 (s, 1 H) 7.20 (s, 1 H) 7.66 (d, J=9.66 Hz, 1 H) 7.94 (s, 1 H) 8.08 - 8.16 (m, 1 H) 8.33 (d, J=4.68 Hz, 1 H) 9.09 (s, 1 H) 11.38 (s, 1 H) 11.71 (s, 1 H). LCMS (ESI) 435 (M+H).
【０３３９】
実施例７５
化合物７５の合成
【化１７５】
2019055954.tif 000194
化合物６４及び６５に対して記載されたものと同様の実験条件を用いて、化合物７５を合成し、そしてこれは、ＨＣｌ塩として回収された。
1HNMR (600 MHz, DMSO-d6) δ ppm 0.87 (d, J=6.15 Hz, 3 H) 0.94 (d, J=6.15 Hz, 3 H) 1.57 (d, J=84.61 Hz, 3 H) 3.05 (s, 3 H) 3.13 - 3.55 (m, 8 H) 3.69 (d, J=78.17 Hz, 2 H) 4.90 (s, 1 H) 7.15 (s, 1 H) 7.63 - 7.85 (m, 1 H) 7.93 (s, 1 H) 8.26 (s, 1 H) 9.03 (s, 1 H) 9.20 (s, 2 H).  LCMS (ESI) 421 (M+H).
【０３４０】
実施例７６
化合物７６の合成
【化１７６】
2019055954.tif 000195
化合物６３に対して記載されたものと同様の実験条件を用いて、化合物７６を合成し、そしてこれは、ＨＣｌ塩として回収された。
1HNMR (600 MHz, DMSO-d6) δ ppm 0.85 (d, J=6.44 Hz, 3 H) 0.95 (d, J=6.44 Hz, 3 H) 1.43 - 1.70 (m, 3 H) 2.78 (d, J=2.93 Hz, 3 H) 3.05 (s, 3 H) 3.24 - 3.84 (m, 8 H) 4.01 (d, J=9.66 Hz, 2 H) 4.89 - 5.01 (m, 1 H) 7.15 (s, 1 H) 7.77 (s, 1 H) 7.91 - 8.05 (m, 2 H) 9.03 (s, 1 H) 10.96 - 11.55 (m, 2 H).  LCMS (ESI) 449 (M+H).
【０３４１】
実施例７７
化合物７７の合成
【化１７７】
2019055954.tif 000196
化合物６４及び６５に対して記載されたものと同様の実験条件を用いて、化合物７７を合成し、そしてこれは、ＨＣｌ塩として回収された。
1HNMR (600 MHz, DMSO-d6) δ ppm 0.83 - 0.88 (d, J=6.15 Hz, 3 H) 0.95 (d, J=6.15 Hz, 3 H) 1.40 - 1.71 (m, 3 H) 3.28 - 3.83 (m, 8 H) 4.00 (d, J=3.22 Hz, 2 H) 4.91 - 5.08 (m, 1 H) 7.17 (s, 1 H) 7.68 (d, J=9.66 Hz, 1 H) 7.93 (s, 1 H) 8.07 (s, 1 H) 9.06 (s, 1 H) 9.40 (s, 2 H) 11.59 (s, 1 H).  LCMS (ESI) 435 (M+H).
【０３４２】
実施例７８
化合物７８の合成
【化１７８】
2019055954.tif 000197
０．０６０ｇ（０．２０５ｍモル）の化合物５０に、５−（４−メチルピペラジン−１−イル）ピリジン−２−アミン（３５．４２ｍｇ、０．９ｅｑ）を添加し、次いで、１，４−ジオキサン（３ｍｌ）を添加した。窒素による脱気の後、Ｐｄ２ｄｂａ３（１２ｍｇ）、ＢＩＮＡＰ（１６ｍｇ）及びｔｅｒｔ−ブトキシドナトリウム（２４ｍｇ）を添加した。その後内容物を、ＣＥＭ  Ｄｉｓｃｏｖｅｒｙ  ｍｉｃｒｏｗａｖｅ内で、９０度で３時間加熱した。その後反応物を、シリカゲルカラム上に充填し、ＤＣＭ／ＭｅＯＨ（０〜１５％）で溶出させて、精製した。
1HNMR (600 MHz, DMSO-d6) δ ppm 0.75 (t, J=7.47 Hz, 3 H) 0.91 (d, J=6.73 Hz, 3 H) 1.04 - 1.20 (m, 2 H) 1.80 - 1.98 (m, 1 H) 2.77 (d, J=3.81 Hz, 3 H) 2.94 - 3.90 (m, 10 H) 4.54 - 4.68 (m, 1 H) 7.06 - 7.23 (m, 2 H) 7.56 - 7.75 (m, 1 H) 7.90 - 8.12 (m, 2 H) 8.29 (s, 1 H) 9.07 (s, 1 H) 10.98 - 11.74 (m, 2 H).  LCMS (ESI) 435 (M + H).
【０３４３】
実施例７９
化合物７９の合成
【化１７９】
2019055954.tif 000198
化合物７８に対して記載したと同様の方法で、化合物７９を合成し、次いで、化合物６５に対して記載されたデブロッキングステップを行い、そしてＨＣｌ塩に変換した。
1HNMR (600 MHz, DMSO-d6) δ ppm 0.75 (t, J=7.32 Hz, 3 H) 0.90 (d, J=6.73 Hz, 3 H) 1.07 - 1.15 (m, 2 H) 1.85 - 1.94 (m, 1 H) 3.17 - 3.75 (m, 10 H) 4.58 - 4.67 (m, 1 H) 7.17 (s, 1 H) 7.71 (s, 1 H) 7.96 (s, 1 H) 7.98 - 8.05 (m, 1 H) 8.28 (d, J=4.10 Hz, 1 H) 9.06 (s, 1 H) 9.39 (s, 2 H).  LCMS (ESI) 421 (M+H).
【０３４４】
実施例８０
化合物８０の合成
【化１８０】
2019055954.tif 000199
化合物７８に対する記載されたものと同様の方法で、化合物８０を合成した。
1HNMR (600 MHz, DMSO-d6) δ ppm 0.78 (t, J=7.32 Hz, 3 H) 0.86 (d, J=6.73 Hz, 3 H) 1.13 - 1.21 (m, 2 H) 1.84 - 1.96 (m, 1 H) 2.77 (d, J=4.39 Hz, 3 H) 3.04 (s, 3 H) 3.11 - 3.84 (m, 8 H) 3.98 (dd, J=13.61, 4.25 Hz, 2 H) 4.66 - 4.74 (m, 1 H) 7.17 (s, 1 H) 7.64 (s, 1 H) 7.96 (d, J=2.34 Hz, 1 H) 8.03 - 8.13 (m, 1 H) 9.08 (s, 1 H) 11.26 (s, 1 H) 11.66 (s, 1 H).  LCMS (ESI) 449 (M+H).
【０３４５】
実施例８１
化合物８１の合成
【化１８１】
2019055954.tif 000200
化合物７８に対して記載されたものと同様の方法で、化合物を合成し、続いて、化合物６５に対して記載されたデブロッキングステップを行い、そしてＨＣｌ塩に変換した。
1HNMR (600 MHz, DMSO-d6) δ ppm 0.78 (t, J=7.32 Hz, 3 H) 0.85 (d, J=6.73 Hz, 3 H) 1.10 - 1.27 (m, 2 H) 1.82 - 1.99 (m, 1 H) 3.04 (s, 3 H) 3.28 - 3.77 (m, 8 H) 3.97 (dd, J=13.91, 4.54 Hz, 2 H) 4.62 - 4.75 (m, 1 H) 7.07 - 7.24 (m, 1 H) 7.62 - 7.75 (m, 1 H) 7.94 (d, J=2.34 Hz, 1 H) 7.97 - 8.08 (m, 1 H) 9.05 (s, 1 H) 9.29 (s, 2 H). LCMS (ESI) 435 (M+H).
【０３４６】
実施例８２
化合物８２の合成
【化１８２】
2019055954.tif 000201
化合物７８に対して記載されたものと同様の方法で、化合物を合成し、続いて、化合物６５に対して記載されたデブロッキングステップを行い、そしてＨＣｌ塩に変換した。
1HNMR (600 MHz, DMSO-d6) δ ppm 0.96 (s, 9 H) 3.15 - 3.87 (m, 10 H) 4.42 - 4.53 (m, 1 H) 6.99 (s, 1 H) 7.24 (s, 1 H) 8.06 (s, 1 H) 8.11 - 8.21 (m, 1 H) 8.79 - 8.98 (m, 2 H) 9.25 (s, 2 H) 9.88 (s, 1 H). LCMS (ESI) 421 (M+H).
【０３４７】
実施例８３
化合物８３の合成
【化１８３】
2019055954.tif 000202
化合物７８に対して記載されたものと同様の方法で化合物８３を合成し、続いて、化合物６５に対して記載されたデブロッキングステップを行い、そしてＨＣｌ塩に変換した。
1HNMR (600 MHz, DMSO-d6) δ ppm 0.95 (s, 9 H) 2.79 (d, J=4.10 Hz, 3 H) 3.06 - 3.86 (m, 10 H) 4.56 - 4.67 (m, 1 H) 7.17 (s, 1 H) 7.70 (s, 1 H) 7.96 (d, J=2.63 Hz, 1 H) 7.99 - 8.08 (m, 1 H) 8.26 (s, 1 H) 9.06 (s, 1 H) 10.80 (s, 1 H). LCMS (ESI) 435 (M+H).
【０３４８】
実施例８４
化合物８４の合成
【化１８４】
2019055954.tif 000203
化合物７８に対して記載されたものと同様の方法で、化合物８４を合成し、そしてＨＣｌ塩に変換した。
1HNMR (600 MHz, DMSO-d6) δ ppm 2.75 - 2.81 (m, 3 H) 3.12 - 3.16 (m, 2 H) 3.46 - 3.54 (m, 4 H) 3.60 - 3.69 (m, 2 H) 3.72 - 3.79 (m, 1 H) 4.07 - 4.18 (m, 2 H) 6.06 - 6.09 (m, 1 H) 6.90 (d, J=7.61 Hz, 2 H) 7.20 - 7.31 (m, 3 H) 7.33 (s, 1 H) 7.49 - 7.55 (m, 1 H) 7.62 - 7.70 (m, 1 H) 7.92 (d, J=2.93 Hz, 1 H) 8.22 (s, 1 H) 9.14 (s, 1 H).  LCMS (ESI) 455 (M + H).
【０３４９】
実施例８５
化合物８５の合成
【化１８５】
2019055954.tif 000204
化合物７８に対して記載されたものと同様の方法で、化合物８５を合成し、続いて、化合物６５に対して記載されたデブロッキングステップを行い、そしてＨＣｌ塩に変換した。
1HNMR (600 MHz, DMSO-d6) δ ppm 3.21 (s, 4 H) 3.35 - 3.67 (m, 5 H) 4.07 - 4.20 (m, 2 H) 6.13 (s, 1 H) 6.90 (d, J=7.32 Hz, 2 H) 7.22 - 7.31 (m, 3 H) 7.36 (s, 1 H) 7.48 (d, J=9.37 Hz, 1 H) 7.93 (d, J=2.34 Hz, 1 H) 8.04 - 8.11 (m, 1 H) 8.25 (d, J=4.98 Hz, 1 H) 9.17 (s, 1 H) 11.77 (br, s., 1H).  LCMS (ESI) 441 (M + H).
【０３５０】
実施例８６
化合物８６の合成
【化１８６】
2019055954.tif 000205
化合物７８に対して記載たものと同様の方法で、化合物８６を合成し、続いて、化合物６５に対して記載されたデブロッキングステップを行い、そしてＨＣｌ塩に変換した。
1HNMR (600 MHz, DMSO-d6) δ ppm 0.90 (d, J=6.15 Hz, 6 H) 1.72 - 1.89 (m, 1 H) 3.15 - 3.92 (m, 9 H) 4.10 - 4.46 (m, 2 H) 7.18 (s, 1 H) 7.59 (d, J=8.78 Hz, 1 H) 8.00 (s, 1 H) 8.13 (d, J=9.37 Hz, 1 H) 8.55 (s, 1 H) 9.09 (s, 1 H) 9.67 (s, 2 H) 11.91 (s, 1 H). LCMS (ESI) 407 (ESI).
【０３５１】
実施例８７
化合物８７の合成
【化１８７】
2019055954.tif 000206
化合物８６と同様の方法で、化合物８７を合成し、そしてＨＣｌ塩に変換した。キャラクタリゼーションデータ（ＮＭＲ及びＬＣＭ）は、鏡像異性体化合物８６に対して得られたものと同様であった。
【０３５２】
実施例８８
化合物８８の合成
【化１８８】
2019055954.tif 000207
化合物７８に対して記載されたものと同様の方法で、化合物８８を合成し、続いて、化合物６５に対して記載されたデブロッキングステップを行い、そしてＨＣｌ塩に変換した。
1HNMR (600 MHz, DMSO-d6) δ ppm 1.78 (s, 6 H) 3.40 - 3.53 (m, 6 H) 3.64 - 3.73 (m, 4 H) 7.27 (s, 1 H) 7.66 (d, J=9.37 Hz, 1 H) 7.98 (d, J=2.34 Hz, 1 H) 8.12 (br. s., 1 H) 8.47 (br. s., 1 H) 9.11 (s, 1 H) 9.45 (br. s., 2 H) 11.62 (br. s., 1 H).  LCMS (ESI) 393 (M + H).
【０３５３】
実施例８９
化合物８９（化合物Ｔとも呼ばれる）の合成
【化１８９】
2019055954.tif 000208
化合物７８に対して記載されたものと同様の方法で、化合物８９を合成し、そして、ＨＣｌ塩に変換した。
1HNMR (600 MHz, DMSO-d6) δ ppm 1.47 (br. s., 6 H) 1.72 (br. s., 2 H) 1.92 (br. s., 2 H) 2.77 (br. s., 3 H) 3.18 (br. s., 2 H) 3.46 (br. s., 2 H) 3.63 (br. s., 2 H) 3.66 (d, J=6.15 Hz, 2 H) 3.80 (br. s., 2 H) 7.25 (s, 1 H) 7.63 (br. s., 2 H) 7.94 (br. s., 1 H) 8.10 (br. s., 1 H) 8.39 (br. s., 1 H) 9.08 (br. s., 1 H) 11.59 (br. s., 1 H).  LCMS (ESI) 447 (M + H).
【０３５４】
実施例９０
化合物９０（化合物Ｑとも呼ばれる）の合成
【化１９０】
2019055954.tif 000209
化合物７８に対して記載たものと同様の方法で、化合物９０を合成し、続いて、化合物６５に対して記載されたデブロッキングステップを行い、そしてＨＣｌ塩に変換した。
1HNMR (600 MHz, DMSO-d6) δ ppm 1.27 - 1.64 (m, 6 H) 1.71 (br. s., 2 H) 1.91 (br. s., 2 H) 2.80 (br. s., 1 H) 3.17 - 3.24 (m, 2 H) 3.41 (br. s., 4 H) 3.65 (br. s., 4 H) 7.26 (br. s., 1 H) 7.63 (br. s., 1 H) 7.94 (br. s., 1 H) 8.13 (br. s., 1 H) 8.40 (br. s., 1 H) 9.09 (br. s., 1 H) 9.62 (br. s., 1 H) 11.71 (br. s., 1 H).  LCMS (ESI) 433 (M + H).
【０３５５】
実施例９１
化合物９１（化合物ＺＺとも呼ばれる）の合成
【化１９１】
2019055954.tif 000210
化合物７８に対して記載されたものと同様のコンディションを使用して化合物９１を合成し、そしてＨＣｌ塩に変換した。
1HNMR (600 MHz, DMSO-d6) δ ppm 1.64 - 1.75 (m, 2 H) 1.83 - 1.92 (m, 2 H) 1.96 - 2.06 (m, 2 H) 2.49 - 2.58 (m, 2 H) 2.79 (d, J=3.81 Hz, 3 H) 3.06 - 3.18 (m, 4 H) 3.59 - 3.69 (m, 2 H) 3.73 - 3.83 (m, 2 H) 4.04 - 4.12 (m, 2 H) 7.17 (br. s., 1 H) 7.60 - 7.70 (m, 2 H) 7.70 - 7.92 (m, 2 H) 7.96 (br. s., 1 H) 8.41 (br. s., 1 H) 8.98 (br. s., 1 H) 10.77 (br. s., 1 H).  LCMS (ESI) 433 (M + H).
【０３５６】
実施例９２
化合物９２の合成
【化１９２】
2019055954.tif 000211
化合物７８に対して記載されたものと同様の方法で、化合物９２を合成し、続いて、化合物６５に対して記載されたデブロッキングステップを行い、そしてＨＣｌ塩に変換した。
1HNMR (600 MHz, DMSO-d6) δ ppm 1.64 - 1.75 (m, 2 H) 1.84 - 1.92 (m, 2 H) 1.96 - 2.05 (m, 2 H) 2.48 - 2.56 (m, 2 H) 3.22 (br. s., 4 H) 3.42 - 3.48 (m, 4 H) 3.60 - 3.69 (m, 2 H) 4.05 - 4.13 (m, 1 H) 7.18 (s, 1 H) 7.65 (d, J=13.47 Hz, 1 H) 7.70 - 7.77 (m, 1 H) 7.94 (d, J=1.76 Hz, 1 H) 8.42 (br. s., 1 H) 9.00 (s, 1 H) 9.15 (br. s., 2 H).  LCMS (ESI) 419 (M + H).
【０３５７】
実施例９３
化合物９３の合成
【化１９３】
2019055954.tif 000212
化合物７８に対して記載されたものと同様の方法で、化合物９３を合成し、続いて、化合物６５に対して記載されたデブロッキングステップを行い、そしてＨＣｌ塩に変換した。
1HNMR (600 MHz, DMSO-d6) δ ppm 1.76 (br. s., 2 H) 1.89 (br. s., 2 H) 2.03 (br. s., 2 H) 2.47 - 2.58 (m, 2 H) 3.04 (s, 3 H) 3.22 (br. s., 4 H) 3.39 (br. s., 4 H) 3.66 (s, 2 H) 7.21 (s, 1 H) 7.67 (d, J=9.37 Hz, 1 H) 7.93 (br. s., 1 H) 7.98 - 8.09 (m, 1 H) 9.04 (s, 1 H) 9.34 (br. s., 2 H) 11.31 (br. s., 1 H).  LCMS (ESI) 433 (M + H).
【０３５８】
実施例９４
化合物９４の合成
【化１９４】
2019055954.tif 000213
化合物７８に対して記載されたものと同様の条件を使用して、化合物９４を合成し、そしてＨＣｌ塩に変換した。
1HNMR (600 MHz, DMSO-d6) δ ppm 1.66 - 1.77 (m, 2 H) 1.84 - 1.94 (m, 2 H) 1.96 - 2.08 (m, 2 H) 2.48 - 2.57 (m, 2 H) 3.36 - 3.52 (m, 4 H) 3.60 - 3.80 (m, 6 H) 7.21 (s, 1 H) 7.53 - 7.74 (m, 2 H) 7.86 (s, 1 H) 8.02 (s, 1 H) 8.45 (s, 1 H) 9.03 (s, 1 H) 11.19 (br. s., 1 H).  LCMS (ESI) 420 (M+H).
【０３５９】
実施例９５
化合物９５の合成
【化１９５】
2019055954.tif 000214
化合物７８に対して記載されたものと同様のコンディションを使用して、化合物９５を合成し、そしてＨＣｌ塩に変換した。
1HNMR (600 MHz, DMSO-d6) δ ppm 1.65 - 1.79 (m, 2 H) 1.85 - 1.95 (m, 2 H) 1.97 - 2.08 (m, 2 H) 2.47 - 2.54 (m, 2 H) 3.40 - 3.58 (m, 5 H) 3.65 (dd, J=21.67, 5.56 Hz, 1 H) 3.69 - 3.78 (m, 4 H) 7.24 (s, 1 H) 7.97 - 8.17 (m, 2 H) 8.48 (s, 1 H) 9.08 (s, 1 H) 11.81 (s, 1 H).  LCMS (ESI) 421 (M+H).
【０３６０】
実施例９６
化合物９６の合成
【化１９６】
2019055954.tif 000215
化合物７８に対して記載されたものと同様のコンディションを使用して、化合物９６を合成し、そしてＨＣｌ塩に変換した。
1HNMR (600 MHz, DMSO-d6) δ ppm 1.55 - 1.74 (m, 2 H) 1.80 - 1.98 (m, 4 H) 2.48 - 2.60 (m, 2 H) 3.40 - 3.50 (m, 4 H) 3.57 - 3.72 (m, 2 H) 3.90 - 4.20 (m, 4 H) 7.08 (s, 1 H) 7.37 - 7.57 (m, 2 H) 7.70 (m, 2 H) 8.32 (s, 1 H) 8.88 (s, 1 H) 9.98 (s, 1 H).  LCMS (ESI) 419 (M+H).
【０３６１】
実施例９７
化合物９７（化合物ＩＩＩとも呼ばれる）の合成
【化１９７】
2019055954.tif 000216
化合物７８に対して記載されたものと同様の条件を使用して、化合物９７を合成し、そしてＨＣｌ塩に変換した。
1HNMR (600 MHz, DMSO-d6) δ ppm 1.30 (d, J=5.27 Hz, 6 H) 1.65 - 1.78 (m, 2 H) 1.83 - 1.95 (m, 2 H) 1.97 - 2.10 (m, 2 H) 2.45 - 2.55 (m, 2H) 3.25 - 3.36 (m, 1 H) 3.39 - 3.48 (m, 4 H) 3.60 - 3.70 (m, 4 H) 3.75 - 4.15 (m, 2 H) 7.24 (s, 1 H) 7.54 - 7.75 (m, 2 H) 7.95 (s, 1 H) 8.10 (s, 1 H) 8.49 (s, 1 H) 9.07 (s, 1 H) 11.25 (s, 1 H) 11.48 (s, 1 H).  LCMS (ESI) 461 (M+H).
【０３６２】
実施例９８
化合物９８の合成
【化１９８】
2019055954.tif 000217
化合物７８に対して記載されたものと同様の条件を用いて、化合物９８を合成し、そしてＨＣｌ塩に変換した。
1HNMR (600 MHz, DMSO-d6) δ ppm 0.99 (d, J=6.15 Hz, 6 H) 1.65 - 1.78 (m, 2 H) 1.90 (m, 2 H) 1.97 - 2.08 (m, 2 H) 2.08 - 2.17 (m, 1 H) 2.45 - 2.55 (m, 2H) 2.88 - 3.02 (m, 2 H) 3.33 - 3.48 (m, 4 H) 3.50 - 3.90 (m, 6 H) 7.24 (s, 1 H) 7.67 (s, 2 H) 7.94 (s, 1 H) 8.12 (s, 1 H) 8.49 (s, 1 H) 9.07 (s, 1 H) 10.77 (s, 1 H) 11.51 (s, 1 H).  LCMS (ESI) 475 (M+H).
【０３６３】
実施例９９
化合物９９の合成
【化１９９】
2019055954.tif 000218
化合物７８に対して記載されたものと同様の条件を用いて、化合物９９を合成し、そしてＨＣｌ塩に変換した。
1HNMR (600 MHz, DMSO-d6) δ ppm 1.13 (d, J=5.86 Hz, 6 H) 1.66 - 1.77 (m, 2 H) 1.84 - 1.94 (m, 2 H) 1.97 - 2.09 (m, 2 H) 2.40 - 2.53 (m, 2 H) 3.37 - 3.49 (m, 2 H) 3.50 - 3.59 (m, 2 H) 3.59 - 3.73 (m, 4 H) 7.23 (s, 1 H) 7.64 (m, 3 H) 7.85 (s, 1 H) 8.11 (s, 1 H) 8.47 (s, 1 H) 9.05 (s, 1 H). 11.35 (br s., 1H).  LCMS (ESI) 448 (M+H).
【０３６４】
実施例１００
化合物１００の合成
【化２００】
2019055954.tif 000219
化合物７８に対して記載されたものと同様の条件を用いて、化合物１００を合成し、そしてＨＣｌ塩に変換した。
1HNMR (600 MHz, DMSO-d6) δ ppm 1.50 - 1.57 (m, 2 H) 1.62 - 1.68 (m, 3 H) 1.68 - 1.75 (m, 2 H) 1.84 - 1.92 (m, 2 H) 1.97 - 2.08 (m, 2 H) 2.48 - 2.53 (m, 2 H) 3.14 - 3.23 (m, 4 H) 3.43 - 3.47 (m, 2 H) 3.58 - 3.70 (m, 2 H) 7.22 (s, 1 H) 7.58 - 7.70 (m, 2 H) 7.85 - 8.00 (m, 1 H) 8.16 (d, 1 H) 8.46 (s, 1 H) 9.04 (s, 1 H) 11.37 (br s., 1H). LCMS (ESI) 418 (M + H).
【０３６５】
実施例１０１
化合物１０１（化合物ＷＷとも呼ばれる）の合成
【化２０１】
2019055954.tif 000220
化合物７８に対して記載されたものと同様の条件を用いて、化合物１０１を合成し、そしてＨＣｌ塩に変換した。
1HNMR (600 MHz, DMSO-d6) δ ppm 1.72 (s, 2 H) 1.90 (s, 4 H) 2.03 (s, 2 H) 2.21 (s, 2 H) 2.48 - 2.54 (m, 2 H) 2.73 (s, 2 H) 3.03 (s, 2 H) 3.25 - 3.35 (m, 1 H) 3.38 - 3.48 (m, 4 H) 3.65 - 3.99 (m, 5 H) 7.23 (s, 1 H) 7.63 (d, J=9.66 Hz, 1 H) 7.90 (s, 1 H) 8.13 (s, 1 H) 8.47 (s, 1 H) 9.06 (s, 1 H) 10.50 (br s., 1H).  LCMS (ESI) 503 (M + H).
【０３６６】
実施例１０２
化合物１０２（化合物ＨＨＨとも呼ばれる）の合成
【化２０２】
2019055954.tif 000221
化合物１０２を合成し、次いで、化合物７８に対して記載されたものと同様の条件を用いて、ＨＣｌ塩に変換した。
1HNMR (600 MHz, DMSO-d6) δ ppm 1.63 - 1.85 (m, 6 H) 1.87 - 1.92 (m, 2 H) 1.99 - 2.06 (m, 2 H) 2.15 - 2.23 (m, 2 H) 2.47 - 2.53 (m, 1 H) 2.69 - 2.79 (m, 2 H) 2.81 - 2.91 (m, 2 H) 2.98 - 3.08 (m, 2 H) 3.32 - 3.48 (m, 4 H) 3.57 - 3.72 (m, 4 H) 3.77 - 3.85 (m, 2 H) 7.22 (s, 1 H) 7.60 - 7.68 (m, 2 H) 7.90 (s, 1 H) 8.07 (s, 1 H) 8.46 (s, 1 H) 9.04 (s, 1 H). 11.41 (br s., 1H).  LCMS (ESI) 501 (M + H).
【０３６７】
実施例１０３
化合物１０３の合成
【化２０３】
2019055954.tif 000222
化合物７８に対して記載されたものと同様の条件を用いて、化合物１０３を合成し、そしてＨＣｌ塩に変換した。
1HNMR (600 MHz, DMSO-d6) δ ppm 1.64 - 1.76 (m, 2 H) 1.87 - 1.93 (m, 2 H) 2.00 - 2.07 (m, 2 H) 2.48 - 2.53 (m, 2 H) 2.67 - 2.72 (m, 4 H) 3.44 - 3.47 (m, 2 H) 3.50 - 3.55 (m, 4 H) 7.24 (s, 1 H) 7.61 (d, J=9.37 Hz, 2 H) 7.86 (d, J=2.63 Hz, 1 H) 8.09 (d, J=12.88 Hz, 1 H) 8.48 (s, 1 H) 9.06 (s, 1 H) 11.41 (br s., 1H).  LCMS (ESI) 436 (M + H).
【０３６８】
実施例１０４
化合物１０４の合成
【化２０４】
2019055954.tif 000223
化合物７８に対して記載されたものと同様の条件を用いて、化合物１０４を合成し、そしてＨＣｌ塩に変換した。
1HNMR (600 MHz, DMSO-d6) δ ppm 1.29 (d, J=6.73 Hz, 6 H) 1.66 - 1.79 (m, 2 H) 1.84 - 1.95 (m, 2 H) 1.98 - 2.09 (m, 2 H) 2.46 - 2.55 (m, 2 H) 3.29 - 3.39 (m, 2H) 3.58 - 3.70 (m, 4H) 3.77 - 3.86 (m, 4H) 7.24 (s, 1 H) 7.66 (d, J=9.37 Hz, 1 H) 7.96 (d, J=2.93 Hz, 1 H) 8.08 (s, 1 H) 8.48 (s, 1 H) 9.06 (s, 1 H) 9.28 (s, 1 H) 9.67 (s, 1 H) 11.36 (s, 1H).  LCMS (ESI) 447 (M + H).
【０３６９】
実施例１０５
化合物１０５の合成
【化２０５】
2019055954.tif 000224
化合物７８に対して記載されたものと同様の条件を用いて、化合物１０５を合成し、そしてＨＣｌ塩に変換した。
1HNMR (600 MHz, DMSO-d6) δ ppm 1.73 (s, 2 H) 1.76 - 1.85 (m, 2 H) 1.85 - 1.94 (m, 2 H) 1.98 - 2.07 (m, 2 H) 2.19 - 2.26 (m, 2 H) 2.48 - 2.52 (m, 1 H) 2.70 - 2.81 (m, 4 H) 3.13 - 3.20 (m, 1 H) 3.30 - 3.48 (m, 3 H) 3.58 - 3.71 (m, 4 H) 3.78 - 3.84 (m, 4 H) 7.24 (s, 1 H) 7.62 (d, J=9.37 Hz, 2 H) 7.89 (d, J=1.17 Hz, 1 H) 8.09 - 8.18 (m, 1 H) 8.48 (s, 1 H) 9.06 (s, 1 H) 11.46 (br s., 1H).  LCMS (ESI) 519 (M + H).
【０３７０】
実施例１０６
化合物１０６の合成
【化２０６】
2019055954.tif 000225
化合物７８に対して記載されたものと同様の条件を用いて、化合物１０６を合成し、続いて、化合物６５に対して記載されたデブロッキングステップを行い、そしてＨＣｌ塩に変換した。
1HNMR (600 MHz, DMSO-d6) δ ppm 1.65 - 1.75 (m, 2 H) 1.85 - 1.93 (m, 2 H) 1.93 - 1.99 (m, 1 H) 2.00 - 2.06 (m, 2 H) 2.08 - 2.14 (m, 1 H) 2.47 - 2.55 (m, 2 H) 3.07 - 3.25 (m, 2 H) 3.25 - 3.69 (m, 5 H) 4.46 (s, 1 H) 4.67 (s, 1 H) 7.22 (s, 1 H) 7.58 - 7.69 (m, 2 H) 8.46 (s, 1 H) 9.02 (s, 1 H) 9.34 (s, 1 H) 9.65 (s, 1 H).  LCMS (ESI) 431 (M + H).
【０３７１】
実施例１０７
化合物１０７（化合物ＹＹとも呼ばれる）の合成
【化２０７】
2019055954.tif 000226
化合物７８に対して記載されたものと同様の条件を用いて、化合物１０７を合成し、そしてＨＣｌ塩に変換した。
1HNMR (600 MHz, DMSO-d6) δ ppm 1.65 - 1.82 (m, 3 H) 1.89 (br. s., 2 H) 1.98 - 2.08 (m, 2 H) 2.13 (br. s., 2 H) 2.47 - 2.55 (m, 2 H) 2.68 (d, J=4.98 Hz, 6 H) 2.71 - 2.80 (m, 2 H) 3.29 - 3.71 (m, 10 H) 7.16 - 7.26 (m, 1 H) 7.67 (d, J=9.66 Hz, 2 H) 7.91 (d, J=2.05 Hz, 1 H) 8.14 (br. s., 1 H) 8.48 (br. s., 1 H) 9.05 (s, 1 H) 11.14 (br. s., 1 H) 11.43 (br. s., 1 H).  LCMS (ESI) 461 (M + H).
【０３７２】
実施例１０８
化合物１０８の合成
【化２０８】
2019055954.tif 000227
化合物６４及び６５に対して記載されたものと同様の方法で、化合物１０８を合成し、そしてこれは、ＨＣｌ塩として回収された。分析データは、鏡像異性体化合物７５に対して記載されたものと一致していた。
【０３７３】
実施例１０９
化合物１０９の合成
【化２０９】
2019055954.tif 000228
化合物６４及び６５に対して記載されたものと同様の方法で、化合物１０９を合成し、そしてこれは、ＨＣｌ塩として回収された。分析データは、鏡像異性体化合物７５に対して記載されたものと一致していた。
【０３７４】
実施例１１０
化合物１１０の合成
【化２１０】
2019055954.tif 000229
化合物７８に対して記載されたものと同様の方法で、化合物１１０を合成し、そして、その後、その塩酸塩に変換した。
1HNMR (600 MHz, DMSO-d6) δ ppm 1.50 - 1.65 (m, 1 H) 1.92 - 2.02 (m, 3 H) 2.06 - 2.15 (m, 1 H) 2.78 (d, J=3.81 Hz, 4 H) 3.10 - 3.20 (m, 4 H) 3.47 - 3.51 (m, 2 H) 3.64 - 3.71 (m, 1 H) 3.76 - 3.83 (m, 2 H) 3.98 - 4.14 (m, 1 H) 7.20 (s, 2 H) 7.77 (s, 1 H) 7.97 (s, 2 H) 8.81 (s, 1 H) 9.03 (s, 1 H) 10.97 (br s., 1H).  LCMS (ESI) 419 (M + H).
【０３７５】
実施例１１１
化合物１１１の合成
【化２１１】
2019055954.tif 000230
化合物７８に対して記載されたものと同様の方法で、化合物１１１を合成し、そして、その後、その塩酸塩に変換した。
1HNMR (600 MHz, DMSO-d6) δ ppm 1.54 - 1.59 (m, 1 H) 1.92 - 2.01 (m, 3 H) 2.06 - 2.15 (m, 1 H) 2.76 - 2.84 (m, 1 H) 3.17 - 3.24 (m, 6 H) 3.64 - 3.71 (m, 2 H) 4.02 - 4.11 (m, 2 H) 7.22 (s, 2 H) 7.64 (s, 1 H) 7.97 (s, 2 H) 8.75 (s, 1 H) 8.97 (s, 1 H) 9.21 (s, 1 H).  LCMS (ESI) 405 (M + H).
【０３７６】
実施例１１２
化合物１１２の合成
【化２１２】
2019055954.tif 000231
化合物６４に対して記載されたものと同様の実験条件を用いて、化合物１１２を合成した。
【０３７７】
実施例１１３
ｔｅｒｔ-ブチルＮ−［２−［（５-ブロモ２クロロピリミジン-４イル）アミノ］エチル］カルバメートの合成、化合物１１３
【化２１３】
2019055954.tif 000232
５−ブロモ−２、４−ジクロロピリミジン（１２．８０ｇ、０．０５４モル）のエチルアルコール（２５０ｍｌ）溶液を、ヒューニッヒの塩基（１２．０ｍｌ）に添加し、その後、Ｎ−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−１、２−エチレンジアミン（１０ｇ、０．０６２４モル）のエチルアルコール（８０ｍｌ）溶液を添加した。内容物を２０時間終夜撹拌した。溶媒を真空下で蒸発させた。酢酸エチル（８００ｍｌ）及び水（３００ｍｌ）を添加し、各層に分離した。有機層を硫酸マグネシウムで乾燥し、その後、真空下で濃縮した。ヘキサン／酢酸エチル（０〜６０％）を用いたシリカゲル上のカラムクロマトグラフィーにより、ｔｅｒｔ−ブチルＮ−［２−［（５−ブロモ−２−クロロ−ピリミジン−４−イル）アミノ］エチル］カルバメートが提供された。
LCMS (ESI) 351 (M + H).
【０３７８】
実施例１１４
ｔｅｒｔ−ブチルＮ−［２−［［２−クロロ−５−（３、３−ジエトキシプロプ−１−イニル）ピリミジン−４イル］アミノ］エチル］カルバメートの合成、化合物１１４
【化２１４】
2019055954.tif 000233
トルエン（４２ｍｌ）中のｔｅｒｔ−ブチルＮ−［２−［（５−ブロモ−２−クロロ−ピリミジン−４−イル）アミノ］エチル］カルバメート（５ｇ、１４．２３ｍモル）及びトリエチルアミン（８．３３ｍｌ）に、窒素下で、トリフェニルアルシン（４．３９ｇ）３、３−ジエトキシプロプ−１−イン（３．２４ｍｌ）及びＰｄｄｂａ（１．２７ｇ）を添加した。
内容物を、７０度で２４時間加熱した。ＣＥＬＩＴＥ（商標）を通して濾過した後、ヘキサン／酢酸エチル（０〜２０％）を用いて、粗反応物をカラムに充填し、所望の製品（３．９ｇ）を提供した。ヘキサン／酢酸エチル（０〜３０％）を用いて、得られた残留物のカラムクロマトグラフィーを行い、ｔｅｒｔ−ブチルＮ−［２−［［２−クロロ−５−（３、３−ジエトキシプロプ−１−イニル）ピリミジン−４−イル］アミノ］エチル］カルバメートを提供した。
LCMS (ESI) 399 (M + H).
【０３７９】
実施例１１５
ｔｅｒｔ−ブチルＮ−［２−［２−クロロ−６−（ジエトキシメチル）ピロロ［２，３−ｄ］ピリミジン−７−イル］エチル］カルバメートの合成、化合物１１５
【化２１５】
2019055954.tif 000234
ＴＨＦ（６０ｍｌ）中の化合物１１４（３．９ｇ、０．００９７６モル）の溶液に、ＴＢＡＦ（６８．３ｍｌ、７ｅｑ）を添加した。内容物を、４５度で２時間加熱した。濃縮に続いて、酢酸エチル／ヘキサン（０〜５０％）を用いたカラムクロマトグラフィーを行い、ｔｅｒｔ−ブチルＮ−［２−［２−クロロ−６−（ジエトキシメチル）ピロロ［２，３−ｄ］ピリミジン−７−イル］エチル］カルバメートを、薄い色の茶色の液体（１．１ｇ）として提供した。
1HNMR (d6-DMSO) δ ppm 8.88 (s, 1H), 6.95 (brs, 1H), 6.69 (s, 1H), 5.79 (s, 1H), 4.29 (m, 2H), 3.59 (m, 4H), 3.34 (m, 1H), 3.18 (m, 1H), 1.19 (m, 9H), 1.17 (m, 6H).  LCMS (ESI) 399 (M+H).
【０３８０】
実施例１１６
ｔｅｒｔ−ブチルＮ−［２−［２−クロロ６−（ジエトキシメチル）−５ヨードピロロ［２，３−ｄ］ピリミジン−７−イル］エチル］カルバメートの合成、化合物１１６
【化２１６】
2019055954.tif 000235
アセトニトリル（２ｍｌ）中のｔｅｒｔ−ブチルＮ−［２−［２−クロロ−６−（ジエトキシメチル）ピロロ［２，３−ｄ］ピリミジン−７−イル］エチル］カルバメート（０．１ｇ、０．０００２５ｍｏｌ）に、１、３−ジヨード−５、５−ジメチルヒダントイン（９５ｍｇ、１ｅｑ）及び固体ＮａＨＣＯ３（６３ｍｇ、３ｅｑ）を添加した。反応物を、１６時間室温で撹拌した。反応物を濾過し、真空で濃縮した。ヘキサン／酢酸エチル（０−５０％）を用いたシリカゲルカラムクロマトグラフィーにより、製品を精製し、ｔｅｒｔ−ブチルＮ−［２−［２−クロロ６−（ジエトキシメチル）−５ヨードピロロ［２，３−ｄ］ピリミジン−７−イル］エチル］カルバメートを、淡黄色の固体（０．０３ｇ）として提供した。
LCMS (ESI) 525 (M + H).
【０３８１】
実施例１１７
ｔｅｒｔ−ブチルＮ−［２−［２-クロロ-６-（ジエトキシメチル）-５-（ｏ-トリル）ピロロ［２，３-ｄ］ピリミジン-７-イル］エチル］カルバメートの合成、化合物１１７
【化２１７】
2019055954.tif 000236
ジオキサン（３ｍｌ）中のｔｅｒｔ−ブチルＮ−［２−［２−クロロ６−（ジエトキシメチル）−５ヨードピロロ［２，３−ｄ］ピリミジン−７−イル］エチル］カルバメート（０．１ｇ、０．１９ｍモル）に、２−メチルフェニルボロン酸（２８ｍｇ）、テトラキス（トリフェニルホスフィン）パラジウム（２５ｍｇ）及び水（０．３ｍｌ）中のリン酸カリウム（２５０ｍｇ）を添加した。反応物を、ＣＥＭ  Ｄｉｓｃｏｖｅｒｙ  ｍｉｃｒｏｗａｖｅ内において、９０℃で３時間加熱した。粗反応物を、シリカゲル上に充填し、ヘキサン／酢酸エチル（０〜３０％）を用いてカラム処理をし、ｔｅｒｔ−ブチルＮ−［２−［２−クロロ−６−（ジエトキシメチル）−５−（ｏ−トリル）ピロロ［２，３−ｄ］ピリミジン−７−イル］エチル］カルバメート（０．０６ｇ）を提供した。
LCMS (ESI) 489 (M + H).
【０３８２】
実施例１１８
７−［２−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ）エチル］−２−クロロ−５−（ｏ−トリル）ピロロ［２，３−ｄ］ピリミジン−６カルボン酸の合成、化合物１１８
【化２１８】
2019055954.tif 000237
ＡｃＯＨ（１０ｍｌ）中のｔｅｒｔ−ブチルＮ−［２−［２−クロロ−６−（ジエトキシメチル）−５−（ｏ−トリル）ピロロ［２，３−ｄ］ピリミジン−７−イル］エチル］カルバメート（０．８５ｇ、１．７４ｍモル）に、水（１．５ｍｌ）を添加した。反応物を、１６時間室温で撹拌した。その後粗反応物を、真空下で濃縮した。酢酸エチル（５０ｍｌ）の添加の後、有機層を飽和ＮａＨＣＯ３で洗浄した。有機層を硫酸マグネシウムで乾燥し、その後、真空下で濃縮し、粗中間体、ｔｅｒｔ−ブチルＮ−［２−［２−クロロ−６−ホルミル−５−（ｏ−トリル）ピロロ［２，３−ｄ］ピリミジン−７−イル］エチル］カルバメートを提供した。ＤＭＦ（５ｍｌ）中のこの粗中間体に、オキソン（１．３ｇ）を添加した。２．５時間の撹拌の後、水（２０ｍｌ）及び酢酸エチル（１００ｍｌ）を添加した。有機層を分離し、乾燥し、その後真空下で濃縮して粗製品を提供し、これを、ヘキサン／酢酸エチル（０〜５０％）を用いてシリカゲル上でカラム処理して、７−［２−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ）エチル］−２−クロロ−５−（ｏ−トリル）ピロロ［２，３−ｄ］ピリミジン−６カルボン酸（０．１１２ｇ）を提供した。
LCMS (ESI) 431 (M + H).
【０３８３】
実施例１１９
化合物１１９の合成
【化２１９】
2019055954.tif 000238
ＤＣＭ（４．１ｍｌ）中の７−［２−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ）エチル］−２−クロロ−５−（ｏ−トリル）ピロロ［２，３−ｄ］ピリミジン−６カルボン酸（０．１ｇ、０．２６１ｍモル）に、ＤＭＡＰ（２０ｍｇ）を添加し、続いて、Ｎ、Ｎ’−ジイソプロピルカルボジイミド（０．０８１ｍｌ、２ｅｑ）を添加した。３時間の撹拌の後、ＴＦＡ（０．７２３ｍｌ）を添加した。その後、さらに３０分、撹拌を続けた。反応物混合物を、飽和ＮａＨＣＯ３で中和した。その後ＤＣＭ（２０ｍｌ）を添加し、有機層を分離し、硫酸マグネシウムで乾燥し、その後真空下で濃縮して、粗製品を提供し、これを、ヘキサン／酢酸エチル（０−１００％）を用いてカラム処理して、クロロ三環系アミド、化合物１１９（０．６５ｇ）を提供した。
LCMS (ESI) 313 (M + H).
【０３８４】
実施例１２０
化合物１２０の合成
【化２２０】
2019055954.tif 000239
窒素の下のジオキサン（２．５ｍｌ）の中にクロロ三環系アミド（０．０４０ｇ、０．１２８ｍモル）（化合物１１９）に、Ｐｄ２（ｄｂａ）３（１２ｍｇ）、ｔｅｒｔ−ブトキシドナトリウム（１６ｍｇ）、ＢＩＮＡＰ（１６ｍｇ）及び４−モルホリノアニリン（２２．７ｍｇ、１ｅｑ）を添加した。反応物混合物を、ＣＥＭ  Ｄｉｓｃｏｖｅｒｙ  ｍｉｃｒｏｗａｖｅ内において、９０℃で３．０時間加熱した。粗反応物をシリカゲルカラム上に充填し、その後内容物をＤＣＭ／ＭｅＯＨ（０−６％）で溶出させ、製品（１０ｍｇ）を提供した。
LCMS (ESI) 455 (M + H).  1HNMR (600 MHz, DMSO-d6) δ ppm 2.14 (s, 3 H) 3.23 - 3.50 (m, 2 H) 3.57 - 3.73 (m, 2 H), 3.81 - 3.92 (m, 8H), 7.11 - 7.31 (m, 4 H) 7.31 - 7.48 (m, 1 H) 7.58 - 7.73 (m, 1 H) 7.77 - 7.95 (m, 2 H) 8.05 - 8.21 (m, 1 H) 8.44 (s, 1 H) 9.85 - 10.01 (m, 1 H).
【０３８５】
実施例１２１
化合物１２１の合成
【化２２１】
2019055954.tif 000240
Ｎメチル−２‐ピロリドン（ＮＭＰ）（１．５ｍｌ）中のクロロ三環系アミド（０．０２４ｇ）（化合物１１９）に、トランス−４−アミノシクロヘキサノール（０．０７６８ｍモル、２６．５４ｍｇ、３ｅｑ）及びヒューニッヒの塩基（０．４ｍｌ）を添加した。反応物を、ＣＥＭ  Ｄｉｓｃｏｖｅｒｙ  ｍｉｃｒｏｗａｖｅ容器内で、１５０℃で１．２時間加熱した。粗反応物を、シリカゲルカラム上に充填し、内容物をＤＣＭ／ＭｅＯＨ（０−１０  ％）で溶出させて、製品（２１ｍｇ）を提供した。
LCMS (ESI) 455 (M + H).  1HNMR (600 MHz, DMSO-d6) δ ppm 2.14 (s, 3 H) 3.23 - 3.50 (m, 2 H) 3.57 - 3.73 (m, 2 H), 3.81 - 3.92 (m, 8H), 7.11 - 7.31 (m, 4 H) 7.31 - 7.48 (m, 1 H) 7.58 - 7.73 (m, 1 H) 7.77 - 7.95 (m, 2 H) 8.05 - 8.21 (m, 1 H) 8.44 (s, 1 H) 9.85 - 10.01 (m, 1 H).
【０３８６】
実施例１２２
７−［２−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ）エチル］−２−クロロ−ピロロ［２，３−ｄ］ピリミジン−６カルボン酸の合成、化合物１２２
【化２２２】
2019055954.tif 000241
７−［２−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ）エチル］−２−クロロ−５−（ｏ−トリル）ピロロ［２，３−ｄ］ピリミジン−６カルボン酸の合成に対して記載されたものと同様の実験手順を用いて、７−［２−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ）エチル］−２−クロロ−ピロロ［２，３−ｄ］ピリミジン−６カルボン酸を合成した。
LCMS (ESI) 341 (M + H).
【０３８７】
実施例１２３
化合物１２３の合成
【化２２３】
2019055954.tif 000242
クロロ三環系アミド（化合物１１９）の合成に対して記載されたものと同様の実験手順を用いて、クロロ三環系アミド（化合物１２３）を合成した。
LCMS (ESI) 223 (M + H).
【０３８８】
実施例１２４
化合物１２４の合成
【化２２４】
2019055954.tif 000243
クロロ三環系アミド（ＮＭＰ（１．５ｍｌ）中の化合物１２３（０．０３５ｇ、０．００１５７モル））に、ヒューニッヒの塩基（０．３ｍｌ）を添加し、続いて、トランス−４−アミノシクロヘキサノール（５４．２ｍｇをの添加した。反応物混合物を、１５０℃で１．５時間加熱した。粗反応物をシリカゲルカラム上に充填し、カラムをＤＣＭ／ＭｅＯＨ（０〜１０％）で溶出させて、製品（５ｍｇ）を提供した。
LCMS (ESI) 302 (M + H).
【０３８９】
実施例１２５
ｔｅｒｔ−ブチルＮ−［２−［（５−ブロモ−２−クロロ−ピリミジン−４−イル）アミノ］−２メチル−プロピル］カルバメートの合成、化合物１２５
【化２２５】
2019055954.tif 000244
ｔｅｒｔ−ブチルＮ−［２−［（５−ブロモ−２−クロロ−ピリミジン−４−イル）アミノ］エチル］カルバメートの合成に対して記載されたと同様の実験条件を用いて、５−ブロモ−２、４−−ジクロロピリミジンをｔｅｒｔ−ブチルカルバミン酸Ｎ−（２−アミノ−２メチル−プロピル）で処理することにより、ｔｅｒｔ−ブチルＮ−［２−［（５−ブロモ−２−クロロ−ピリミジン−４−イル）アミノ］−２メチル−プロピル］カルバメートを合成した。
LCMS (ESI) (M+H) 379.
【０３９０】
実施例１２６
ｔｅｒｔ−ブチルＮ−［２−［［２−クロロ−５−（３、３−ジエトキシプロプ−１−イニル）ピリミジン−４−イル］アミノ］−２メチル−プロピル］カルバメートの合成、化合物１２６
【化２２６】
2019055954.tif 000245
ｔｅｒｔ−ブチルＮ−［２−［［２−クロロ−５−（３、３−ジエトキシプロプ−１−イニル）ピリミジン−４イル］アミノ］エチル］カルバメートの合成に対して記載されたと同様の実験条件を用いて、ｔｅｒｔ−ブチルＮ−［２−［（５−ブロモ−２−クロロ−ピリミジン−４−イル）アミノ］−２メチル−プロピル］カルバメートを３、３−ジエトキシプロプ−１−インでＰｄｄｂａ等の触媒の存在下で処理することによって、ｔｅｒｔ−ブチルＮ−［２−［［２−クロロ−５−（３、３−ジエトキシプロプ−１−イニル）ピリミジン−４−イル］アミノ］−２メチル−プロピル］カルバメートを合成した。
LCMS (ESI) (M+H) 427.
【０３９１】
実施例１２７
ｔｅｒｔ−ブチルＮ−［２−［２−クロロ−６−（ジエトキシメチル）ピロロ［２，３−ｄ］ピリミジン−７−イル］−２メチル−プロピル］カルバメートの合成、化合物１２７
【化２２７】
2019055954.tif 000246
合成ｔｅｒｔ−ブチルＮ−［２−［２−クロロ−６−（ジエトキシメチル）ピロロ［２，３−ｄ］ピリミジン−７−イル］エチル］カルバメートに対して記載されたと同様の実験条件を用いて、ｔｅｒｔ−ブチルＮ−［２−［［２−クロロ−５−（３、３−ジエトキシプロプ−１−イニル）ピリミジン−４−イル］アミノ］−２メチル−プロピル］カルバメートをＴＢＡＦで処理することにより、ｔｅｒｔ−ブチルＮ−［２−［２−クロロ−６−（ジエトキシメチル）ピロロ［２，３−ｄ］ピリミジン−７−イル］−２メチル−プロピル］カルバメートを合成した。
LCMS (ESI) (M+H) 427.
【０３９２】
実施例１２８
７−［２−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ）−１，１−ジメチルエチル］−２−クロロ−ピロロ［２，３−ｄ］ピリミジン−６カルボン酸の合成、化合物１２８
【化２２８】
2019055954.tif 000247
７−［２−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ）エチル］−２−クロロ−５−（ｏ−トリル）ピロロ［２，３−ｄ］ピリミジン−６カルボン酸の合成に対して記載されたものと同様の実験手順を用いて、７−［２−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ）−１，１−ジメチルエチル］−２−クロロ−ピロロ［２，３−ｄ］ピリミジン−６カルボン酸を合成した。
LCMS (ESI) 369 (M + H).
【０３９３】
実施例１２９
化合物１２９の合成
【化２２９】
2019055954.tif 000248
クロロ三環系アミド、化合物１１９、の合成に対して記載されたものと同様の手順を用いて、クロロ三環系アミド、化合物１２９、を合成した。
LCMS (ESI) 251 (M + H).
【０３９４】
実施例１３０
化合物１３０の合成
【化２３０】
2019055954.tif 000249
化合物１２４に関してのものと同様の実験条件を用いて、クロロ三環系アミン化合物１２９をトランス-４-アミノシクロヘキサノールで処理することにより、化合物１３０を合成した。
LCMS (ESI) 330 (M + H).  1HNMR (600 MHz, DMSO-d6) δ ppm 1.07 - 1.34 (m, 4 H) 1.47 - 2.05 (m, 10 H) 3.09 (m, 1H) 3.51 (d, J = 2.91 Hz, 2 H) 3.57 (m, 1H) 4.50 (br. s., 1 H) 6.89 (s, 1 H) 6.94 - 7.05 (m, 1 H) 8.04 (br. s., 1 H) 8.60 (s, 1 H) 9.00 (br. s., 1 H).
【０３９５】
実施例１３１
ベンジルＮ−［１−［［（５-ブロモ-２-クロロ-ピリミジン-４-イル）アミノ］メチル］プロピル］カルバメートの合成、化合物１３１
【化２３１】
2019055954.tif 000250
ｔｅｒｔ−ブチルＮ−［２−［（５−ブロモ−２−クロロ−ピリミジン−４−イル）アミノ］エチル］カルバメートの合成に対して記載されたと同様の実験条件を用いて、ベンジルＮ−［１−（アミノメチル）プロピル］カルバメートで５−ブロモ−２、４−−ジクロロピリミジンを処理することにより、ベンジルＮ−［１−［［（５−ブロモ−２−クロロ−ピリミジン−４−イル）アミノ］メチル］プロピル］カルバメートを合成した。
LCMS (ESI) (M+H) 413.
【０３９６】
実施例１３２
ベンジルＮ−［１−［［［２−クロロ−５−（３、３−ジエトキシプロプ−１−イニル）ピリミジン−４−イル］アミノ］メチル］プロピル］カルバメートの合成、化合物１３２
【化２３２】
2019055954.tif 000251
ｔｅｒｔ−ブチルＮ−［２−［［２−クロロ−５−（３、３−ジエトキシプロプ−１−イニル）ピリミジン−４−イル］アミノ］エチル］カルバメートの合成に対して記載されたと同様の実験条件を用いて、ベンジルＮ−［１−［［（５−ブロモ−２−クロロ−ピリミジン−４−イル）アミノ］メチル］プロピル］−カルバメートを、Ｐｄｄｂａ等の触媒の存在下、３、３−ジエトキシプロプ−１−インで処理することにより、ベンジルＮ−［１−［［［２−クロロ−５−（３、３−ジエトキシプロプ−１−イニル）ピリミジン−４−イル］アミノ］メチル］プロピル］カルバメートを調製した。
LCMS (ESI) (M+H) 461.
【０３９７】
実施例１３３
カルバミン酸ベンジルＮ−［１−［［２−クロロ−６−（ジエトキシメチル）ピロロ［２，３−ｄ］ピリミジン−７−イル］メチル］プロピル］の合成、化合物１３３
【化２３３】
2019055954.tif 000252
合成ｔｅｒｔ−ブチルＮ−［２−［２−クロロ−６−（ジエトキシメチル）ピロロ［２，３ｄ］ピリミジン−７−イル］エチル］カルバメートに対して記載されたと同様の実験条件を用いて、ＴＢＡＦでベンジルＮ−［１−［［［２−クロロ−５−（３、３−ジエトキシプロプ−１−イニル）ピリミジン−４−イル］アミノ］メチル］プロピル］カルバメートを処理することにより、ベンジルＮ−［１−［［２−クロロ−６−（ジエトキシメチル）ピロロ［２，３−ｄ］ピリミジン−７−イル］メチル］プロピル］カルバメートを合成した。
LCMS (ESI) (M+H) 461.
【０３９８】
実施例１３４
７−［２−（ベンジルオキシカルボニルアミノ）ブチル］−２−クロロ−ピロロ［２，３−ｄ］ピリミジン−６カルボン酸の合成、化合物１３４
【化２３４】
2019055954.tif 000253
７−［２−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ）エチル］−２−クロロ−５−（ｏ−トリル）ピロロ［２，３−ｄ］ピリミジン−６カルボン酸の合成に対して記載されたものと同様の実験手順を用いて、７−［２−（ベンジルオキシカルボニルアミノ）ブチル］−２−クロロ−ピロロ［２，３−ｄ］ピリミジン−６カルボン酸を合成した。
LCMS (ESI) 403 (M + H).
【０３９９】
実施例１３５
化合物１３５の合成
【化２３５】
2019055954.tif 000254
ジクロロメタン中の７−［２−（ベンジルオキシカルボニルアミノ）ブチル］−２−クロロ−ピロロ［２，３−ｄ］ピリミジン−６カルボン酸の溶液に、ＨＢｒを添加し、反応物を、４５度で３時間撹拌した。濃縮の後、２ＮのＮａＯＨを添加し、反応物を塩基性化し（ｐＨ＝８．０）、続いて、ＴＨＦ（２０ｍｌ）を添加した。その後Ｂｏｃ２Ｏを添加し（１．２ｅｑ）、反応物を１６時間撹拌した。その後、粗反応物混合物に、酢酸エチル（１００ｍｌ）及び水（５０ｍｌ）を添加し、有機相を分離し、乾燥し（硫酸マグネシウム）、その後、真空下で濃縮した。粗製品にジクロロメタン（３０ｍｌ）を加え、続いてＤＩＣ及びＤＭＡＰを加えた。２時間の撹拌の後、ＴＦＡを加え、内容物を１時間撹拌した。溶媒を真空下で蒸発させ、残留物を飽和ＮａＨＣＯ３で塩基性化させた。その後酢酸エチルを加え、その後有機層を分離し、乾燥し（硫酸マグネシウム）、その後、真空下で濃縮した。ヘキサン／酢酸エチル（０〜１００％）によるカラムクロマトグラフィーを行い、望ましいクロロ三環系コア、化合物１３５、を提供した。
LCMS (ESI) 251 (M + H).
【０４００】
実施例１３６
化合物１３６の合成
【化２３６】
2019055954.tif 000255
化合物１２４に関しての同様の実験条件を用いて、クロロ三環系アミン（化合物１３５）をトランス−４−アミノシクロヘキサノールで処理することにより、化合物１３６を合成した。
LCMS (ESI) 330 (M + H).  1HNMR (600 MHz, DMSO-d6) δ ppm 0.80 - 0.95 (m, 3 H) 1.35 - 1.92 (m, 10 H) 3.66 (br. m., 3 H) 4.17 (br. s., 2 H) 4.47 (br. s., 1 H) 6.85 (s, 1 H) 6.96 (br. s., 1 H) 8.15 (br. s., 1 H) 8.62 (br. s., 1 H).
【０４０１】
実施例１３７
ｔｅｒｔ−ブチルＮ−［１−［［（５−ブロモ−２−クロロ−ピリミジン−４−イル）アミノ］メチル］シクロペンチル］カルバメートの合成、化合物１３７
【化２３７】
2019055954.tif 000256
ｔｅｒｔ−ブチルＮ−［２−［（５−ブロモ−２−クロロ−ピリミジン−４−イル）アミノ］エチル］カルバメートの合成に対して記載されたと同様の実験条件を用いて、５−ブロモ−２、４−−ジクロロピリミジンをｔｅｒｔ−ブチルＮ−［１−（アミノメチル）シクロペンチル］カルバメートで処理することにより、ｔｅｒｔ−ブチルＮ−［１−［［（５−ブロモ−２−クロロ−ピリミジン−４−イル）アミノ］メチル］シクロペンチル］カルバメートを合成した。
LCMS (ESI) 405 (M+H).
【０４０２】
実施例１３８
ｔｅｒｔ−ブチルＮ−［１−［［［２−クロロ−５−（３、３−ジエトキシプロプ−１−イニル）ピリミジン−４−イル］アミノ］メチル］シクロペンチル］カルバメートの合成、化合物１３８
【化２３８】
2019055954.tif 000257
ｔｅｒｔ−ブチルＮ−［２−［［２−クロロ−５−（３、３−ジエトキシプロプ−１−イニル）ピリミジン−４イル］アミノ］エチル］カルバメートの合成に対して記載されたと同様の実験条件を用いて、ｔｅｒｔ−ブチルＮ−［１−［［（５−ブロモ−２−クロロ−ピリミジン−４−イル）アミノ］メチル］シクロペンチル］カルバメートを、Ｐｄｄｂａ等の触媒の存在下、３、３−ジエトキシプロプ−１−インで処理することにより、ｔｅｒｔ−ブチルＮ−［１−［［［２−クロロ−５−（３、３−ジエトキシプロプ−１−イニル）ピリミジン−４−イル］アミノ］メチル］シクロペンチル］カルバメートを合成した。
LCMS (ESI) 453 (M+H).
【０４０３】
実施例１３９
ｔｅｒｔ−ブチルＮ−［１−［［２−クロロ−６−（ジエトキシメチル）ピロロ［２，３−ｄ］ピリミジン−７−イル］メチル］シクロペンチル］カルバメートの合成、化合物１３９
【化２３９】
2019055954.tif 000258
ｔｅｒｔ−ブチルＮ−［２−［２−クロロ−６−（ジエトキシメチル）ピロロ［２，３ｄ］ピリミジン−７−イル］エチル］カルバメートの合成に対して記載されたと同様の実験条件を用いて、ｔｅｒｔ−ブチルＮ−［２−［［２−クロロ−５−（３、３−ジエトキシプロプ−１−イニル）ピリミジン−４−イル］アミノ］−２メチル−プロピル］カルバメートをＴＢＡＦで処理することにより、ｔｅｒｔ−ブチルＮ−［１−［［２−クロロ−６−（ジエトキシメチル）ピロロ［２，３−ｄ］ピリミジン−７−イル］メチル］シクロペンチル］カルバメートを合成した。
LCMS (ESI) 453 (M+H).
【０４０４】
実施例１４０
７−［［１−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ）シクロペンチル］メチル］−２−クロロ−ピロロ［２，３−ｄ］ピリミジン−６カルボン酸の合成、化合物１４０
【化２４０】
2019055954.tif 000259
７−［２−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ）エチル］−２−クロロ−５−（ｏ−トリル）ピロロ［２，３−ｄ］ピリミジン−６カルボン酸の合成に対して記載されたものと同様の実験手順を用いて、７−［［１−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ）シクロペンチル］メチル］−２−クロロ−ピロロ［２，３−ｄ］ピリミジン−６カルボン酸を合成した。
LCMS (ESI) 395 (M + H).
【０４０５】
実施例１４１
化合物１４１の合成
【化２４１】
2019055954.tif 000260
クロロ三環系アミド、化合物１１９、の合成に対して記載されたものと同様の実験手順を用いて、クロロ三環系コア、化合物１４１、を合成した。
LCMS (ESI) 277 (M + H).
【０４０６】
実施例１４２
化合物１４２の合成
【化２４２】
2019055954.tif 000261
化合物１２４に関して同様の実験条件を用いて、クロロ三環系アミン、化合物１４１、を、トランス−４−アミノシクロヘキサノールで処理することにより、化合物１４２を合成した。
LCMS (ESI) 356 (M + H).  1HNMR (600 MHz, DMSO-d6) δ ppm 1.08 - 1.32 (m, 8 H) 1.60 - 2.09 (m, 8 H) 3.03 - 3.17 (m, 1 H) 3.35 (s, 2 H) 3.54 - 3.62 (m, 1 H) 4.51 (d, J=4.39 Hz, 1 H) 6.88 (s, 1 H) 6.96 (br. s., 1 H) 8.07 (br. s., 1 H) 8.58 (s, 1 H).
【０４０７】
実施例１４３
ｔｅｒｔ−ブチルＮ−［［１−［（５−ブロモ−２−クロロ−ピリミジン−４−イル）アミノ］シクロペンチル］メチル］カルバメートの合成、化合物１４３
【化２４３】
2019055954.tif 000262
ｔｅｒｔ−ブチルＮ−［２−［（５−ブロモ−２−クロロ−ピリミジン−４−イル）アミノ］エチル］カルバメートの合成に対して記載されたと同様の実験条件を用いて、ｔｅｒｔ−ブチルＮ−［（１−アミノシクロペンチル）メチル］カルバメートで５−ブロモ−２、４−−ジクロロピリミジンを処理することにより、ｔｅｒｔ−ブチルＮ−［［１−［（５−ブロモ−２−クロロ−ピリミジン−４−イル）アミノ］シクロペンチル］メチル］カルバメートを合成した。
LCMS (ESI) 405 (M+H).
【０４０８】
実施例１４４
ｔｅｒｔ−ブチルＮ−［２−［［２−クロロ−５−（３、３−ジエトキシプロプ−１−イニル）ピリミジン−４−イル］アミノ］−２メチル−プロピル］カルバメートの合成、化合物１４４
【化２４４】
2019055954.tif 000263
ｔｅｒｔ−ブチルＮ−［２−［［２−クロロ−５−（３、３−ジエトキシプロプ−１−イニル）ピリミジン−４イル］アミノ］エチル］カルバメートの合成に対して記載されたと同様の実験条件を用いて、ｔｅｒｔ−ブチルＮ−［２−［（５−ブロモ−２−クロロ−ピリミジン−４−イル）アミノ］−２メチル−プロピル］カルバメートを、Ｐｄｄｂａ等の触媒の存在下、３、３−ジエトキシプロプ−１−インで処理することにより、ｔｅｒｔ−ブチルＮ−［［１−［［２−クロロ−５−（３、３−ジエトキシプロプ−１−イニル）ピリミジン−４−イル］アミノ］シクロペンチル］メチル］カルバメートを合成した。
LCMS (ESI) 453 (M+H).
【０４０９】
実施例１４５
ｔｅｒｔ−ブチルＮ−［［１−［２−クロロ−６−（ジエトキシメチル）ピロロ［２，３−ｄ］ピリミジン−７−イル］シクロペンチル］メチル］カルバメートの合成、化合物１４５
【化２４５】
2019055954.tif 000264
合成ｔｅｒｔ−ブチルＮ−［２−［２−クロロ−６−（ジエトキシメチル）ピロロ［２，３ｄ］ピリミジン−７−イル］エチル］カルバメートに対して記載された同様の実験条件を用いて、ｔｅｒｔ−ブチルＮ−［２−［［２−クロロ−５−（３、３−ジエトキシプロプ−１−イニル）ピリミジン−４−イル］アミノ］−２メチル−プロピル］カルバメートをＴＢＡＦで処理することにより、ｔｅｒｔ−ブチルＮ−［［１−［２−クロロ−６−（ジエトキシメチル）ピロロ［２，３−ｄ］ピリミジン−７−イル］シクロペンチル］メチル］カルバメートを合成した。
LCMS (ESI) 4534 (M+H).
【０４１０】
実施例１４６
７−［２−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ）−１，１−ジメチルエチル］−２−クロロ−ピロロ［２，３−ｄ］ピリミジン−６カルボン酸の合成、化合物１４６
【化２４６】
2019055954.tif 000265
７−［２−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ）エチル］−２−クロロ−５−（ｏ−トリル）ピロロ［２，３−ｄ］ピリミジン−６カルボン酸の合成に対して記載されたものと同様の実験手順を用いて、７−［２−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ）−１，１−ジメチルエチル］−２−クロロ−ピロロ［２，３−ｄ］ピリミジン−６カルボン酸を合成した。
LCMS (ESI) 395 (M + H).
【０４１１】
実施例１４７
化合物１４７の合成
【化２４７】
2019055954.tif 000266
クロロ三環系アミド、化合物１１９、に対して記載されたものと同様の実験手順を用いて、クロルトリシクリックアミド、化合物１４７、を合成した。
LCMS (ESI) 277 (M + H).
【０４１２】
実施例１４８
化合物１４８の合成
【化２４８】
2019055954.tif 000267
化合物１２４に関しての同様の実験条件を用いて、クロロ三環系アミン、化合物１４７、をトランス-４-アミノシクロヘキサノールで処理することにより、化合物１４８を合成した。
LCMS (ESI) 356 (M + H).  1HNMR (600 MHz, DMSO-d6) δ ppm 1.06 - 1.35 (m, 8 H) 1.45 - 1.95 (m, 8 H) 3.10 (m, 1 H) 3.58 (br. s., 2 H) 3.95 (br. s., 1 H) 4.49 (br. s., 1 H) 6.84 (s, 1 H) 6.85 - 6.93 (m, 1 H) 8.29 (s, 1 H) 8.61 (br. s., 1 H).
【０４１３】
実施例１４９
化合物１４９の合成
【化２４９】
2019055954.tif 000268
ステップ１：Ａ．  Ｓａｒｋａｒ  ｅｔ  ａｌ．  （ＪＯＣ，  ２０１１，  ７６，  ７１３２−７１４０）の方法に従い、化合物５９を、Ｂｏｃ保護する。
ステップ２：Ｂｏｃ保護された化合物５９を、ＣＯ２（１気圧）の下、ＤＭＩ中の５ｍｏｌ％  ＮｉＣｌ２（Ｐｈ３）２、０．１ｅｑトリフェニルホスフィン、３ｅｑ  Ｍｎ、０．１ｅｑヨウ化テトラエチルアンモニウムで、２５℃で２０時間処理して、ハロゲン化アリール誘導体をカルボン酸に変換する。
ステップ３：ステップ２からのカルボン酸を、標準的な条件を用いて、対応する酸塩化物に変換する。
ステップ４：ステップ３からの酸塩化物を、Ｎメチルピペラジンと反応させて、対応するアミドを生成する。
ステップ５：ステップ４からのアミドを、ジクロロメタン中のトリフルオロ酢酸を用いて脱保護して、ターゲット化合物を生成する。
化合物１４９を、シリカゲルカラムクロマトグラフィーにより、ジクロロメタン−メタノール勾配で溶出させて、精製して、化合物１４９を提供する。
化合物１１９〜１４９のそれぞれ及び様々なＲ８、Ｒ１及びＺの定義を含む対応する各化合物は、水素化ナトリウム及びハロゲン化アルキル又は他のハロゲン化物と反応してもよく、これにより、化合物１２０の合成に対して上記したように、アミンによる反応物への前に所望のＲ置換を挿入して、式Ｉ、ＩＩ、ＩＩＩ、ＩＶ又はＶの所望の製品を生成させてもよい。
【０４１４】
実施例１５０
ＣＤＫ４／６阻害インビトロアッセイ
ここに開示される化合物を選択して、Ｎａｎｏｓｙｎ（米国カリフォルニア州サンタクララ）によって、ＣＤＫ４／ｃｙｃｌｉｎＤ１、ＣＤＫ６／ＣｙｃＤ３  ＣＤＫ２／ＣｙｃＡ及びＣＤＫ２／ｃｙｃｌｉｎＥキナーゼアッセイの試験を行い、これらのＣＤＫに対するそれらの抑制性効果を決定した。マイクロ流体キナーゼ検出技術（Ｃａｌｉｐｅｒ  Ａｓｓａｙ  Ｐｌａｔｆｏｒｍ）を用いて、アッセイを実行した。ｓｉｎｇｌｉｃａｔｅの１２点ドーズ反応フォーマットで、ＡＴＰに対してＫｍで化合物の試験を行った。全てのアッセイで用いたホスホアクセプタ基体ペプチド濃度は、１μＭであり、全てのアッセイに対する参照化合物として、スタウロスポリンを用いた。
【０４１５】
各アッセイの規定のは、下記のように以下の通りである：
ＣＤＫ２／ＣｙｃｌｉｎＡ：酵素濃度：０．２ｎＭ；ＡＴＰ濃度：５０μＭ；インキュベーション時間：３時間
ＣＤＫ２／ｃｙｃｌｉｎＥ：酵素濃度：０．２８ｎＭ；ＡＴＰ濃度：１００μＭ；インキュベーション時間：１時間
ＣＤＫ４／ＣｙｃｌｉｎＤ１：酵素濃度：１ｎＭ；ＡＴＰ濃度：２００μＭ；インキュベーション時間：１０時間
ＣＤＫ６／ＣｙｃｌｉｎＤ３：酵素濃度：１ｎＭ；ＡＴＰ濃度：３００μＭ；インキュベーション時間：３時間。
ＣＤＫ４／ＣｙｃＤ１、ＣＤＫ２／ＣｙｃＥ、ＣＤＫ２／ＣｙｃＡに関して表１の化合物に対する抑制性ＩＣ５０値、ならびに、倍選択性が、表２に示される。
【０４１６】
【表２】
2019055954.tif 000269
2019055954.tif 000270
2019055954.tif 000271
【０４１７】
さらにそのキナーゼ活性のキャラクテリゼーションを行うため、ＤｉｓｃｏｖｅＲｘのＫＩＮＯＭＥｓｃａｎ（商標）プロフィリングサービスを用いて、４５６（３９５の非変異体）のキナーゼに対して、化合物Ｔをスクリーニングした。１０００ｎＭ（Ｃｄｋ４のＩＣ５０に対して＞１０００倍）の単一濃度を用いて、化合物をスクリーニングした。このスクリーニングの結果から、Ｃｄｋ４に対する高い能力及び対Ｃｄｋ２の高い選択性が確認された。さらに、ｋｉｎｏｍｅプロフィリングにより、試験された他のキナーゼと比較して、化合物Ｔは、Ｃｄｋ４及びＣｄｋ６に対する選択性が比較的高かったことが、示された。
【０４１８】
具体的に、抑制性の閾値として６５  ％、９０  ％又は９９  ％を用いた場合、化合物Ｔは、３９５の非変異体キナーゼのうち、９２（２３．３  ％）、３１（７．８  ％）又は６（１．５  ％）を、それぞれ抑制した。ＣＤＫ４キナーゼ活性に加えて、いくつかの化合物は、ＣＤＫ６キナーゼ活性に対しても試験された。ＣＤＫ６／ＣｙｃＤ３キナーゼアッセイの結果を、ＣＤＫ４／ｃｙｃｌｉｎＤ１、ＣＤＫ２／ＣｙｃＡ及びＣＤＫ２／ｃｙｃｌｉｎＥキナーゼアッセイとともに、ＰＤ０３３２９９１（参照）及び化合物Ｔ、Ｑ、ＧＧ及びＵに対して、表３に示した。ＣＤＫ４／ｃｙｃｌｉｎＤ１に対する１０ｎＭ及びＣＤＫ１２／ｃｙｃｌｉｎＥに対する１０ｕＭののＩＣ５０は、ＰＤ０３３２９９１に対してあらかじめ発表されたレポートと、良く合致する（Ｆｒｙ  ｅｔ  ａｌ．  Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｃａｎｃｅｒ  Ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃｓ  （２００４）  ３（１１）１４２７−１４３７；  Ｔｏｏｇｏｏｄ  ｅｔ  ａｌ．  Ｊｏｕｒｎａｌ  ｏｆ  Ｍｅｄｉｃｉｎａｌ  Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ  （２００５）  ４８，  ２３８８−２４０６）。化合物Ｔ、Ｑ、ＧＧ及びＵは、参照化合物（ＰＤ０３３２９９１）に関して、より有能（ＩＣ５０が低い）であり、そして、参照化合物に対して、より高い倍選択性（ＣＤＫ２／ＣｙｃＥのＩＣ５０を、ＣＤＫ４／ＣｙｃＤ１のＩＣ５０で除す）を示す。
【０４１９】
【表３】
2019055954.tif 000272
【０４２０】
実施例１５１
Ｇ１期停止（細胞Ｇ１及びＳ期）アッセイ
様々な処理の後の細胞サイクルの様々な段階における細胞画分の決定のために、ＨＳ６８細胞（ヒト皮膚繊維芽細胞系統（Ｒｂポジティブな））を、プロピジウムヨウ化物染色液で染色し、Ｄａｋｏ  Ｃｙａｎ  Ｆｌｏｗ  Ｃｙｔｏｍｅｔｅｒで実行した。Ｇ０−Ｇ１ＤＮＡ細胞サイクルの細胞の画分対Ｓ期ＤＮＡ細胞サイクルの画分を、ＦｌｏｗＪｏ７．２．２分析により測定した。表１にリストされる化合物を、細胞サイクルのＧ１期でＨＳ６８細胞を停止する能力に関して、試験した。細胞Ｇ１期停止アッセイの結果から、ＨＳ６８細胞のＧ１期停止のために必要な抑制性ＥＣ５０値の範囲は、２２ｎＭ〜１５００ｎＭであった（表４の「細胞Ｇ１期停止ＥＣ５０」というタイトルの欄を参照）。
【０４２１】
実施例１５２
Ｃｄｋ４／６依存的細胞における化合物Ｔによる細胞サイクル進行の停止
完全なＧ１期停止を誘発するＣｄｋ４／６阻害剤の能力を試験するため、２つのＣｄｋ４／６依存的細胞系統（ｔＨＳ６８及びＷＭ２６６４；Ｒｂ−ポジティブ）及び１つのＣｄｋ４／６−非依存的細胞系統（Ａ２０５８；  Ｒｂ−ネガティブ）からなる細胞ベースのスクリーニング方法を用いた。表面被覆の２４時間後、用量依存的方法で、各細胞系統を化合物Ｔで２４時間処理した。
実験の末尾で、細胞を採取し、固定し、そして、４８８ｎｍのライトで励起されると強く赤い蛍光を発する（最大発光６３７ｎｍ）プロピジウムヨウ化物（ＤＮＡインターカレータ）で染色した。サンプルを、Ｄａｋｏ  Ｃｙａｎ  Ｆｌｏｗ  Ｃｙｔｏｍｅｔｅｒで実行し、そして、＞１０，０００イベントを各サンプルに対して収集した。ＴｒｅｅＳｔａｒ社によって開発されたＦｌｏｗＪｏ２．２ソフトウェアを用いて、データを分析した。
【０４２２】
図２Ｂは、ｔＨＳ６８細胞（ＣＤＫ４／６依存的細胞系統）の数対細胞のＤＮＡ含有率（プロピジウム沃化物によって計測される）のグラフである。細胞をＤＭＳＯで２４時間処理し、細胞サイクル分布のために採取し分析した。図２Ｃは、ＷＭ２６６４細胞（ＣＤＫ４／６依存的細胞系統）の数対細胞のＤＮＡ含有率（プロピジウム沃化物によって計測される）のグラフである。細胞をＤＭＳＯで２４時間処理し、細胞サイクル分布のために採取し分析した。図２Ｄは、Ａ２０５８細胞（ＣＤＫ４／６から独立した細胞系統）の数対細胞のＤＮＡ含有率（プロピジウム沃化物によって計測される）のグラフである。細胞をＤＭＳＯで２４時間処理し、細胞サイクル分布のために採取し分析した。図２Ｅは、化合物Ｔによる処理後の、ｔＨＳ６８細胞（ＣＤＫ４／６依存的細胞系統）の数対細胞のＤＮＡ含有率（プロピジウム沃化物によって計測される）のグラフである。細胞は、化合物Ｔ（３００ｎＭ）で２４時間処理され、細胞サイクル分布のために採取し分析した。実施例１５２に記載されるように、化合物ＴによるｔＨＳ６８細胞の処置は、Ｓ期ピーク（矢印によって示される）の損失を与える。図２Ｆは、化合物Ｔによる処理後の、ＷＭ２６６４細胞（ＣＤＫ４／６依存的細胞系統）の数対細胞のＤＮＡ含有率（プロピジウム沃化物によって計測される）のグラフである。細胞は、化合物Ｔ（３００ｎＭ）で２４時間処理され、細胞サイクル分布のために採取し分析した。実施例１５２に記載されるように、化合物ＴによるＷＭ２６６４細胞の処置は、Ｓ期ピーク（矢印によって示される）の損失を与える。図２Ｇは、化合物Ｔによる処理後の、Ａ２０５８細胞（ＣＤＫ４／６から独立した細胞系統）の数対細胞のＤＮＡ含有率（プロピジウム沃化物によって計測される）のグラフである。細胞は、化合物Ｔ（３００ｎＭ）で２４時間処理され、細胞サイクル分布のために採取し分析した。実施例１５２に記載されるように、化合物ＴによるＡ２０５８細胞の処置は、Ｓ期ピーク（矢印によって示される）の損失を与えない。
【０４２３】
実施例１５３
化合物ＴがＲＢのリン酸化を抑制する
Ｃｄｋ４／６−サイクリンＤ錯体は、ＤＮＡ細胞サイクルのＧ１からＳ期まで進行のために必須である。この錯体は、網膜芽細胞腫腫瘍サプレッサタンパク質（Ｒｂ）をリン酸化する。Ｃｄｋ４／６阻害のＲｂリン酸化（ｐＲｂ）への影響を実証するため、化合物Ｔは、３つの細胞系統、すなわち２つのＣｄｋ４／６依存的（ｔＨＳ６８、ＷＭ２６６４；  Ｒｂ−ポジティブ）及び１つのＣｄｋ４／６非依存的（Ａ２０５８；  Ｒｂ−ネガティブ）、に曝露された。シーディングの２４時間後、細胞は、４、８、１６及び２４時間、３００ｎＭ終濃度で、化合物Ｔで処理された。サンプルは溶解され、タンパク質はウェスタンブロット解析によってアッセイされた。Ｒｂリン酸化は、Ｃｄｋ４／６−サイクリンＤ錯体、Ｓｅｒ７８０及びＳｅｒ８０７／８１１によってターゲットにされる２つのサイトで、種特異抗体を用いて計測された。結果によれば、化合物Ｔは、１６時間のポスト曝露によってＲｂ依存的細胞系統におけるＲｂリン酸化をブロックする一方で、Ｒｂ−非依存的細胞（図３）に対する効果を有していないということが、実証される。
【０４２４】
実施例１５４
小細胞肺癌（ＳＣＬＣ）細胞がＣＤＫ４／６阻害物質耐性を示す
網膜芽細胞腫（ＲＢ）腫瘍サプレッサは、主要なネガティブ細胞サイクル調節因子であり、これは全てのヒト癌の約１１  ％で不活化される。ＲＢの官能性損失は、小細胞肺癌（ＳＣＬＣ）発現における絶対的なイベントである。ＲＢコンピテント腫瘍において、活性Ｃｄｋ２／４／６は、ＲＢ（及び関連したファミリーメンバー）をリン酸化し、かつ不活化することにより、Ｇ１期からＳ期への段階横断を促進する。反対に、ＲＢ欠失又は失活を含む癌は、細胞サイクル進行のためにＣｄｋ４／６活性を必要としない。ＲＢの失活がＳＣＬＣ発現における絶対的なイベントであるので、この腫瘍タイプは、高いＣｄｋ４／６阻害剤耐性を示し、ＳＣＬＣに用いられる等のＤＮＡ損傷化学療法剤によるＣｄｋ４／６阻害剤の同時投与は、この薬剤の効能を拮抗してはならない。
【０４２５】
いくつかの化合物（ＰＤ０３３２９９１、化合物ＧＧ及び化合物Ｔ）は、ＲＢの既知の遺伝子が損失したＳＣＬＣ細胞系統のパネルの中で、細胞増殖をブロックするそれらの能力に関してに試験された。ＳＣＬＣ細胞は、ＤＭＳＯ又は指示されたＣｄｋ４／６阻害剤で２４時間処理された。増殖に対するＣｄｋ４／６阻害の効果は、ＥｄＵ取込みによって計測された。ＲＢ−無傷Ｃｄｋ４／６依存的細胞系統（ＷＭ２６６４又はｔＨＳ６８）及びＲＢ−ネガティブＳＣＬＣ細胞系統（Ｈ６９、Ｈ８２、Ｈ２０９、Ｈ３４５、ＮＣＩ４１７又はＳＨＰ  ７７）のパネルが、様々なＣＤＫ４／６阻害物質による成長阻害について分析された。
【０４２６】
図４に示すように、Ｒｂ−ネガティブＳＣＬＣ細胞は、Ｃｄｋ４／６阻害耐性を示す。図４Ａでは、ＰＤ０３３２９９１は、Ｒｂ−ポジティブ細胞系統（ＷＭ２６６４）を抑制するものの、Ｒｂネガティブ小細胞肺癌細胞系統（Ｈ３４５、Ｈ６９、Ｈ２０９、ＳＨＰ−７７、ＮＣＩ４１７及びＨ８２）の成長に影響を及ぼさない。図４Ｂでは、化合物ＧＧは、Ｒｂ−ポジティブ細胞系統（ｔＨＳ６８）を抑制するものの、Ｒｂネガティブ細胞系統（Ｈ３４５、Ｈ６９、ＳＨＰ−７７及びＨ８２）の成長に影響を及ぼさない。図４Ｃでは、化合物Ｔは、Ｒｂ−ポジティブ細胞系統（ｔＨＳ６８）を抑制するものの、Ｒｂネガティブ細胞系統（Ｈ６９、ＳＨＰ−７７及びＨ２０９）の成長に影響を及ぼさない。この分析では、ＲＢ−ヌルＳＣＬＣ細胞系統は、Ｃｄｋ４／６阻害耐性を示したことが実証され、何故なら、化合物Ｔ及び化合物ＧＧを含む試験した全てのＣｄｋ４／６阻害剤による処理において、Ｓ期の細胞のパーセントに変化はないことが確認された一方で、各実験におけるＲｂ成熟細胞系統がＣｄｋ４／６阻害に敏感であり、ほとんどの細胞が処理後２４時間Ｓ期に残っていなかったからである。
【０４２７】
実施例１５５
Ｒｂネガティブ癌細胞は、ＣＤＫ４／６阻害物質耐性を示す
以下のＲｂ−ネガティブ癌細胞系統：Ｈ６９（ヒト小細胞肺癌  ―  Ｒｂ−ネガティブ）細胞又はＡ２０５８（ヒト転移黒色腫細胞  ―  Ｒｂ−ネガティブ）を用いて、細胞増殖アッセイを実した。これらの細胞を、Ｃｏｓｔｅｒ社（米国マサチューセッツ州テュークスバリー）３０９３号、９６ウェル組織培養処理白壁／透明底板、に播種した。細胞を、１０ｕＭ〜１ｎＭの９点ドーズ応答希釈物系列として、表１の化合物で処理した。細胞を化合物に曝露し、その後、製造者の推奨に従い、示される通り、４日後（Ｈ６９）又は６日後（Ａ２０５８）に、ＣｅｌｌＴｉｔｅｒ−Ｇｌｏ（商標）発光細胞生存率測定を用いて細胞生存能力を決定した。プレートを、ＢｉｏＴｅｋ社（バーモント州Ｗｉｎｏｏｓｋｉ）のＳｙｎｇｅｒｇｙ２マルチモードプレートリーダで読み込んだ。可変モル濃度から相対発光量（ＲＬＵ）をプロットし、Ｇｒａｐｈｐａｄ社の（カリフォルニア州ＬａＪｏｌｌａ）プリズム５統計ソフトウェアを用いてデータを分析し、各化合物についてＥＣ５０を決定した。
【０４２８】
ここに開示される化合物を選択して、小細胞肺癌細胞系統（Ｈ６９）、及びヒト転移性メラノーマ細胞ライン（Ａ２０５８）、２つのＲｂ欠損（Ｒｂ−ネガティブ）細胞系統に対して評価した。これらの細胞阻害アッセイの結果を、表４に示す。Ｈ６９小細胞肺癌細胞の阻害のために必要な抑制性ＥＣ５０値の範囲は、２０４０ｎＭ〜＞３０００ｎＭであった。Ａ２０５８悪性黒色腫細胞増殖の阻害のために必要な抑制性ＥＣ５０値の範囲は、１３１３ｎＭ〜＞３０００ｎＭであった。Ｒｂ−ポジティブ細胞系統上で予測される大きな阻害と対照的に、
試験された化合物は、小細胞肺癌又は黒色腫細胞の増殖を抑制することに対して大変有効というわけではなかったことが、見出された。
【０４２９】
【表４】
2019055954.tif 000273
2019055954.tif 000274
2019055954.tif 000275
2019055954.tif 000276
【０４３０】
実施例１５６
ＨＳＰＣ成長抑制の研究
ＨＳＰＣｓ上のＰＤ０３３２９９１の効果を、前もって実証した。図５は、マウスＨＳＰＣ及び脊髄前駆細胞のＥｄＵ取込みを示し、Ｒｏｂｅｒｔｓ  ｅｔ  ａｌ．  Ｍｕｌｔｉｐｌｅ  Ｒｏｌｅｓ  ｏｆ  Ｃｙｃｌｉｎ−Ｄｅｐｅｎｄｅｎｔ  Ｋｉｎａｓｅ  ４／６  Ｉｎｈｉｂｉｔｏｒｓ    ｉｎ  Ｃａｎｃｅｒ  Ｔｈｅｒａｐｙ．  ＪＣＮＩ  ２０１２；１０４（６）：４７６−４８７で報告されるように、経口薬強制飼養による１５０ｍｇ／ｋｇのＰＤ０３３２９９１の単一ドーズの後、骨髄停止に関して過渡的ＣＤＫ４／６阻害の時間効果を評価する。図５から分かるように、ＰＤ０３３２９９１の単一経口薬ドーズにより、３６時間を超えてＨＳＰＣ（ＬＫＳ＋）及び脊髄前駆細胞（ＬＫＳ−）の低下が維持された。経口薬ドーズ後４８時間経過前に、ＨＳＰＣ及び脊髄前駆細胞は、ベースライン細胞分割に戻っている。
【０４３１】
実施例１５７
ＥｄＵ取込み及びフローサイトメトリー分析法を用いて評価される骨髄増殖
ＨＳＰＣ増殖実験のため、若い成熟した雌のＦＶＢ／Ｎマウスを、経口強制飼養により、化合物Ｔ、化合物Ｑ、化合物ＧＧ又はＰＤ０３３２９９１で示される単一ドーズで処理した。その後、指示時間（化合物投与後の０、１２、２４、３６又は４８時間）にマウスを解剖し、前述のとおり（Ｊｏｈｎｓｏｎ  ｅｔ  ａｌ．  Ｊ．  Ｃｌｉｎ．  Ｉｎｖｅｓｔ．  （２０１０）  １２０（７），  ２５２８−２５３６）、骨髄を採取した（時点当たりのマウス数ｎ  ＝  ３）。骨髄採取の４時間前に、マウスを、腹こう内投与（インビトロジェン）により、１００μｇのＥｄＵで処理した。骨髄単核細胞を採取し、前記の方法を用いて免疫表現型を特定し、その後、ＥｄＵ陽性細胞パーセンテージを決定した（Ｊｏｈｎｓｏｎ  ｅｔ  ａｌ．  Ｊ．  Ｃｌｉｎ．  Ｉｎｖｅｓｔ．  （２０１０）  １２０（７），  ２５２８−２５３６）。手短に言えば、ＨＳＰＣｓは、系統マーカー（Ｌｉｎ−）、Ｓｃａ１（Ｓ＋）及びｃ−Ｋｉｔ（Ｋ＋）の発現によって特定された。
【０４３２】
マウスの分析により、化合物Ｔ、化合物Ｑ及び化合物ＧＧが、骨髄幹細胞（ＨＳＰＣ）（図６）のドーズ依存的、過渡滴及び可逆的Ｇ１期停止を実証したことが決定された。グループ当たり６匹のマウスに対し、１５０ｍｇ／ｋｇの化合物Ｔ、化合物Ｑ、化合物ＧＧ又はビヒクルのみ、を経口強制飼養によって投薬した。４時間前に動物を解剖して骨髄を採取し、マウスを、腹こう内投与によってＥｄＵ１００μｇで処理した。グループ当たり３匹のマウスを１２時間で解剖し、グループ当たり残りの３匹の動物を２４時間で解剖した。結果は、コントロールと比較した１２又は２４時間の時点での処理した動物に対するＥｄＵ陽性細胞の比として、図６Ａに示す。
化合物Ｔ及びＧＧは、１２時間でＥｄＵ取込みが低下し、それは２４時間に正常に戻り始めていたことを、実証した。また、化合物Ｑでは、１２時間で若干低下し、化合物Ｑの経口薬生体有用性が低いという事実にもかかわらず２４時間でベースラインに戻り始めたことを実証した。
【０４３３】
追実験は、化合物Ｔで完了され、化合物処理のドーズ応答及びより長い期間を検討した。化合物Ｔは、経口強制飼養によって５０、１００又は１５０ｍｇ／ｋｇでドーズされ、骨髄へのＥｄＵ取込みは、上記のように１２及び２４時間で決定された。代替的には、化合物Ｔは１５０ｍｇ／ｋｇで経口強制飼養によってドーズされ、骨髄へのＥｄＵ取込みは１２、２４、３６及び４８時間で決定された。図６Ｂおよび５Ｃから分かるように、また、細胞ウォッシュアウト実験と同様に、多数のドーズの経口強制飼養後２４時間でのＥｄＵ取込みにより測定されたように、骨髄細胞、及び特にＨＳＰＣｓは正常細胞分裂に戻っていた。図６Ｃ中の化合物Ｔの１５０ｍｇ／ｋｇの経口薬ドーズは、２４及び３６時間で細胞は依然分裂せず（ＥｄＵ取込みが低かったと測定された）４８時間でようやくに正常値に戻った図５に示されるＰＤ０３３２９９１の同じドーズの結果と、直接比較できる。
【０４３４】
実施例１５８
化合物Ｔ及びＰＤ０３３２９９１を比較したＨＳＰＣ成長抑制研究
図７は、ＰＤ０３３２９９１（三角）又は化合物Ｔ（逆三角）で処理されるマウスのＥｄＵ陽性ＨＳＰＣ細胞のパーセンテージの、化合物の投与（時間）後の時間に対するグラフである。両方の化合物は、経口強制飼養によって１５０ｍｇ／ｋｇで投与された。骨髄採取の１時間の前、ＥｄＵを腹腔内に注入し、サイクリング細胞を標識した。骨髄は、化合物処理の後１２、２４、３６及び４８時間で採取し、ＥｄＵ陽性ＨＳＰＣ細胞のパーセンテージを各時点で決定した。
【０４３５】
図７で理解されるように、ＰＤ０３３２９９１の単一経口薬ドーズにより、３６時間を超えて、ＨＳＰＣｓの低下が維持された。対照的に、化合物Ｔの単一経口薬ドーズでは、１２時間でＨＳＰＣ増殖が当初低下したが、ＨＳＰＣｓの増殖は、化合物Ｔのドーズの後、２４時間で再開した。
【０４３６】
実施例１５９
細胞ウォッシュアウト実験
ＨＳ６８細胞は、１０  ％のウシ胎児血清、１００Ｕ／ｍｌのペニシリン／ストレプトマイシン及び記載される１ｘ  Ｇｌｕｔａｍａｘ（インビトロジェン）を含んだＤＭＥＭ中で、１日目に６０ｍｍのディッシュ中４０，０００の細胞／ウェルで播種された（Ｂｒｏｏｋｅｓ  ｅｔ  ａｌ．  ＥＭＢＯ  Ｊ，  ２１（１２）２９３６−２９４５  （２００２）  ａｎｄ  Ｒｕａｓ  ｅｔ  ａｌ．  Ｍｏｌ  Ｃｅｌｌ  Ｂｉｏｌ，  ２７（１２）４２７３−４２８２  （２００７））。
シーディング２４時間後、細胞は、化合物Ｔ、化合物Ｑ、化合物ＧＧ、化合物Ｕ、ＰＤ０３３２９９１、又はＤＭＳＯビヒクル単独で、これら試験化合物の終濃度３００ｎＭで、処理された。３日目に、１セットの処理細胞試料を、三組（０時間のサンプル）で採取した。残留細胞をＰＢＳ−ＣＭＦ中で２回洗浄し、試験化合物が無い培養基に戻された。サンプルのセットは、２４、４０及び４８時間に、三組で採取された。
【０４３７】
代替的には、同じ実験を、米国菌培養収集所（ＡＴＣＣ、バージニア州マナサス）から得られる通常の腎近位尿細管上皮細胞（Ｒｂ−ポジティブ）を用いて、行った。細胞は、、３７℃加湿インキュベーター内での腎臓上皮細胞成長キット（ＡＴＣＣ）を追加した腎臓上皮細胞基底培地（ＡＴＣＣ）により、３７℃のインキュベーター内で５  ％ＣＯ２加湿空気中培養された。
【０４３８】
細胞を採取し、サンプルを、プロピジウムヨウ化物染色液で染色し、サンプルはＤａｋｏ  Ｃｙａｎ  Ｆｌｏｗ  Ｃｙｔｏｍｅｔｅｒで実行された。
Ｇ０−Ｇ１ＤＮＡ細胞サイクルの細胞の画分対Ｓ期ＤＮＡ細胞サイクルの画分を、ＦｌｏｗＪｏ７．２．２分析により測定した。
【０４３９】
図８は、細胞ウォッシュアウト実験を示し、本発明の阻害剤化合物が、異なる細胞型において、短期かつ過渡的なＧ１期停止効果を有することを、実証した。ヒト繊維芽細胞細胞（Ｒｂ−ポジティブ）（図８Ａ及び８ｂ）又はヒト腎近位尿細管上皮細胞（Ｒｂ−ポジティブ）（図８Ｃ及び８Ｄ）について、化合物Ｔ、Ｑ、ＧＧ及びＵを、ＰＤ０３３２９９１と比較し、化合物のウォッシュアウト後の細胞サイクルに対する効果を、２４、３６、４０及び４８時間で決定した。
【０４４０】
図８に示すように、そして、図５で示す生体内の結果と同様に、ＰＤ０３３２９９１では、細胞が通常のベースライン細胞分裂に戻るためには、ウォッシュアウト後４８時間以上を必要とした。これは、図８Ａ及び図８Ｂで認められ、Ｇ０−Ｇ１画分又は細胞分裂のＳ期のそれぞれに対して、ＤＭＳＯコントロールに対する等価な値が得られた。対照的に、本発明の化合物で処理されたＨＳ６８細胞は、わずか２４時間又は４０時間で、通常のベースライン細胞分裂に戻り、これらの同じ時点におけるＰＤ０３３２９９１とは異なっていた。また、ヒト腎近位尿細管上皮細胞を用いた結果（図８Ｃ及び８Ｄ）では、ＰＤ０３３２９９１処理した細胞は、化合物Ｔ、Ｑ、ＧＧ又はＵで処理された細胞と比較して、細胞分裂のベースラインレベルに戻るためには著しく長い時間を要したことが示された。
【０４４１】
実施例１６０
本発明のＣＤＫ４／６阻害物質化合物の薬物動態及び薬力学的特性は、良好な薬物動態及び薬力学的特性であることが、実証される。化合物Ｔ、Ｑ、ＧＧ及びＵは、経口強制飼養によって３０ｍｇ／ｋｇで、又は静脈内注射により１０ｍｇ／ｋｇで、マウスにドーズされた。血液サンプルを、ドーズ後０、０．２５、０．５、１．０、２．０、４．０及び８．０時間で取得し、化合物Ｔ、Ｑ、ＧＧ又はＵの血漿濃度を、ＨＰＬＣによって決定した。化合物Ｔ、ＧＧ及びＵが、表５で示すように優れた経口薬物動態及び薬力学的特性を有することが、実証された。これは、経口生体有用性（Ｆ（％））が５２  ％〜８０  ％と非常に高いこと、及び、経口薬投与後のプラズマ半減期が３〜５時間であることを含む。化合物Ｔ、Ｑ、ＧＧ及びＵは、静脈内投与によって供給された場合に、優れた薬物動態及び薬力学的特性を有することが実証された。全ての４つのｃｏｐｏｕｎｄｓのための代表的なＩＶ及び経口薬ＰＫカーブは、図９に示される。
【０４４２】
【表５】
2019055954.tif 000277
【０４４３】
実施例１６１
代謝安定性
化合物Ｔの代謝安定性を、ＰＤ０３３２９９１と比較し、ヒト、犬、ネズミ、猿及びマウス肝ミクロソームで決定した。ヒト、マウス及び犬肝ミクロソームは、Ｘｅｎｏｔｅｃｈ社から購入し、スピローグ−ドーリーネズミ肝ミクロソームを、Ａｂｓｏｒｐｔｉｏｎ  Ｓｙｓｔｅｍｓにより調製した。０．５ｍｇ／ｍｌの肝ミクロソーム、１００ｍＭのリン酸カリウム、ｐＨ７．４、５ｍＭのマグネシウムクロリド、及び１μＭのテスト化合物を含む反応物混合物を調製した。テスト化合物を、１ｕＭ終濃度で、反応物混合物に加えた。反応物混合物（共同因子なし）の均等量を、３７℃で３分間水浴を振盪して培養した。コントロール化合物、テストステロン、を、別々の反応物中で、テスト化合物と同時に行った。共同因子（ＮＡＤＰＨ）の添加により、反応を開始し、その後、混合物を、３７℃で振盪中の水浴中で培養した。テスト化合物に対しては０、１０、２０、３０及び６０分、テストステロンに対しては０、１０、３０及び６０分で、均等量（１００μＬ）を回収した。テスト化合物サンプルを、内部標準を含む氷冷アセトニトリル１００μＬと直ちに混合し、反応を終了させた。テストステロンサンプルは、０．１  ％の蟻酸及び内部標準を含む８００μＬの氷冷５０／５０アセトニトリル／ｄＨ２Ｏと直ちに混合し、反応を終了させた。サンプルは、確認されたＬＣ-ＭＳ／ＭＳ方法を用いてアッセイされた。Ｏｒｂｉｔｒａｐ高分解能質量分析計を用いてテスト化合物サンプルを分析し、ペアレント試験化合物の消失を定量化するとともに、代謝生成物の出現を検出した。内部標準に対するピーク面積応答割当量（ＰＡＲＲ）を、時間０におけるＰＡＲＲと比較し、テスト化合物のパーセンテージ又はその時点で残っているポジティブコントロールを決定した。ＧｒａｐｈＰａｄソフトウェアを用いて半減期を計算し、単一相指数関数減衰方程式に当てはめた。
【０４４４】
半減期を、ｔ１／２  ＝  ０．６９３ｋのベースで計算し、式中、ｋは、インキュベーション時間に対する残留する自然対数パーセンテージの勾配プロットに基づく排出速度定数である。計算された半減期が実験の所要時間より長かったとき、半減期は＞最も長いインキュベーション時間、と表現された。計算された半減期は、括弧内にもリストされる。計算された半減期が＞２xの場合は、実験の所要時間、半減期は報告されなかった。細胞増殖のタイムリーな再開は、組織修復のために必要であり、したがって、あまりに長い期間の停止は、ＨＳＰＣｓ等の正常細胞に好ましくない。その停止持続時間に影響するＣＤＫ４／６阻害物質の特性は、その薬物動態（ＰＫ）及び酵素の半減期である。一旦開始されれば、循環する化合物が抑制性レベルにとどまる限り、及び、化合物が酵素に係わる限り、Ｇ１期停止は生体内で維持される。ＰＤ０３２９９１は、たとえば、全ＰＫ半減期が長く、酵素オフ速度が非常に低速である。ヒトでは、ＰＤ０３３２９９１は、ＰＫ半減期は２７時間と示される（Ｓｃｈｗａｒｔｚ，ＧＫ  ｅｔ  ａｌ．（２０１１）ＢＪＣ，１０４：１８６２−１８６８を参照）。ヒトでは、ＰＤ０３３２９９１の単一投与は、約１週間続いたＨＳＰＣの細胞サイクル進行を停止させる。これは、化合物（５半減期×２７時間の半減期）が消失するために６日かかること、ならびに、酵素のＣＤＫ４／６機能の阻害に付加的に１．５〜２日がかかることを反映している。この計算は、通常の骨髄機能が戻るためには合計７＋日を要し、その間、新しい血液の生成が低下することを示唆する。これらの観察は、診療室レベルでＰＤ０３３２９９１に認められる深刻な顆粒球減少を説明することができる。
【０４４５】
追実験は、化合物Ｔ及びＰＤ０３３２９９１で完了され、ヒト、犬、ネズミ、猿及びマウス肝ミクロソームの代謝安定性（半減期）を比較した。図１０で示すように、肝ミクロソーム中の化合物の安定性を、種を横断して分析れば、化合物Ｔの決定できる半減期は、ＰＤ０３３２９９１について報告されたそれらと比較して、各種についてより短期である。さらに、上記及び図８中で説明されるように、ＰＤ０３３２９９１はまた、酵素の半減期が長期であるように思われ、これは、ヒト細胞中に、はっきりした細胞サイクル進行の停止の発生によって明示され、化合物が細胞培養株培地から除去された後（すなわち、インビトロウォッシュアウト実験で）でさえ、４０時間以上続いた。図８にさらに示されるように、ここに記載される化合物を培養基から除去すれば、増殖が迅速な再開し、これは高い酵素オフ速度と一致する。図５、６Ｃ及び７に示すように、酵素のオフ速度のこれらの差は、薬力学的（ＰＤ）効果の著しい差につながる。示されるように、ＰＤ０３３２９９１の単一経口薬ドーズは、ネズミ骨髄中の造血幹細胞及び前駆細胞（ＨＳＰＣｓ）の３６＋時間成長停止を生じさせ、これは、マウスにおけるＰＤ０３３２９９１の６時間のＰＫ半減期で説明したものよりも長い。対照的に、化合物Ｔの効果は非常に短期であり、細胞サイクルへの迅速な復帰を与え、ＨＳＰＣ増殖の鋭いインヴィヴォコントロールを提供する。
【０４４６】
実施例１６２
化合物Ｔは、化学療法剤誘発性細胞死、ＤＮＡ損傷及びカスパーゼ活性化を予防する
化合物Ｔ処理によって誘発される薬理学的休止が、異なる作用機構を伴う化学療法剤への耐性を提供することを実証するため、テロメリヒト２倍体繊維芽細胞を用いて生体外モデルを開発した（ｔＨＤＦｓ；ヒトテロメラーゼの発現で不死化されるヒト包皮繊維芽細胞系統）。Ｃｄｋ４／６阻害剤による処理後のそれらの完全なＧ１期停止によって実証されるように、これらの細胞は、増殖に対するＣｄｋ４／６−依存性が高い（Ｒｏｂｅｒｔｓ  ＰＪ，  ｅｔ  ａｌ．  Ｍｕｌｔｉｐｌｅ  Ｒｏｌｅｓ  ｏｆ  Ｃｙｃｌｉｎ−Ｄｅｐｅｎｄｅｎｔ  Ｋｉｎａｓｅ  ４／６  Ｉｎｈｉｂｉｔｏｒｓ    ｉｎ  Ｃａｎｃｅｒ  Ｔｈｅｒａｐｙ．  Ｊ  Ｎａｔｌ  Ｃａｎｃｅｒ  Ｉｎｓｔ  ２０１２；Ｍａｒ  ２１；１０４（６）：  ４７６−８７参照）。細胞生残性は、Ｃｅｌｌ  ＴｉｔｅｒＧｌｏアッセイにより、製造者の推奨に従って決定された。γ−Ｈ２ＡＸ及びカスパーゼ３／７アッセイの両方に対して、細胞をプレートに入れ、２４時間付着させた。その後細胞を、化合物Ｔ（指示濃度で）で、又はビヒクルコントロールで、１６時間処理し、その間、指示の化学療法剤を、前処理された細胞に加えた。γ−Ｈ２ＡＸに対し、化学療法剤曝露の８時間後に、分析のために細胞を採取した。γ−Ｈ２ＡＸアッセイに対し、細胞を固定し、透過処理し、そしてγ−Ｈ２ＡＸフローキット（Ｍｉｌｌｉｐｏｒｅ）に従って抗−γ−Ｈ２ＡＸで染色され、フローサイトメトリーによって定量化した。ＴｒｅｅＳｔａｒ社によって開発されたＦｌｏｗＪｏ２．２ソフトウェアを用いて、データを分析した。インビトロカスパーゼ３／７アッセイのために、細胞は、化学療法剤処理後２４時間で採取された。カスパーゼ３／７活性化は、Ｃａｓｐａｓｅ−Ｇｌｏ（商標）３／７Ａｓｓａｙ  Ｓｙｓｔｅｍ（Ｐｒｏｍｅｇａ）を用いて、製造者の推奨に従い、測定された。
【０４４７】
図１１で示すように、化合物Ｔは、カルボプラチン及びエトポシド誘発性細胞死からの選択的保護を提供する。エトポシドの存在下（５μＭ；図１１Ａ）又はカルボプラチンの存在下（１００μＭ；図１１Ｂ）で、ｔＨＳ６８ヒト繊維芽細胞を高濃度の化合物Ｔで処理すれば、Ｃｅｌｌ  ＴｉｔｅｒＧｌｏで測定したように、用量依存的細胞生残性が選択的に誘発される。数種のＤＮＡ損傷剤（例えば、カルボプラチン、ドキソルビシン、エトポシド、カンプトセシン）又は細胞分裂阻止性物質（パクリタキセル）による処理の前に、化合物Ｔによる処理を行えば、γ−Ｈ２ＡＸ形成（図１２Ａ）によって計測されるＤＮＡ損傷は弱くなった。
【０４４８】
さらに、カルボプラチン、ドキソルビシン、エトポシド、カンプトセシン及びパクリタキセルへの曝露への前に、ｔＨＤＦ細胞を化合物Ｔで処理すれば、ドーズ依存性方法（図１２Ｂ）中のカスパーゼ３／７活性化に激しい減少を引き起こした。これらのデータは、Ｃｄｋ４／６阻害によって誘導されるＧ１期の過渡的細胞サイクル進行の停止が、Ｃｄｋ４／６−感受性細胞における骨髄抑制に関係した、一般的に用いられる様々な細胞毒化学療法剤の毒性を低減することを示している。
【０４４９】
実施例１６３
化合物Ｔは、造血幹細胞及び／又は前駆細胞（ＨＳＰＣｓ）の増殖を抑制する
異なるマウス造血細胞の増殖に関して、化合物Ｔ処理の効果を特徴づけるため、８週間目の雌のＣ５７Ｂｌ／６マウスに対して、ビヒクル単独の単一ドーズ（２０  ％Ｓｏｌｕｔｏｌ）又は化合物Ｔ（１５０ｍｇ／ｋｇ）を、経口強制飼養で与えた。１０時間後、全てのマウスに、１００ｍｃｇＥｄＵ（５−エチニル−２’−デオキシウリジン）を単一腹腔内注入で与えて、細胞サイクルのＳ期細胞を標識した。全ての処理したマウスを、ＥｄＵ注入の２時間後に安楽死させ、骨髄細胞を採取し、ＥｄＵ取込みのフローサイトメトリー解析のための処理を行った（図１３）。
【０４５０】
図１３は、処理なし、ＥｄＵ処理のみ、又はＥｄＵプラス化合物Ｔ処理の各細胞に対して、ＥｄＵ取込みによって計測した、ＷＢＭ（全体骨髄；上）及びＨＳＰＣｓ（造血幹細胞及び前駆細胞；  ＬＳＫ；下）における増殖の代表的な等高線プロットを示す。化合物Ｔは、全骨髄及び造血幹細胞及び前駆細胞の増殖を低減することが、見出された。
【０４５１】
ビヒクル処理したマウスと比較して、化合物Ｔ処理されたマウスは、分析される全ての造血系統中、著しく少ないＥｄＵポジティブ（ＥｄＵ＋）細胞を示した。Ｓ期へのエントリーが低下しているため、ＥｄＵ＋細胞頻度の低下が最も期待でき、そしてそれは化合物ＴがＣｄｋ４／６活性を強力に抑制するという事実と、一致している。全体として、化合物Ｔ処理は、非分画全骨髄細胞（図１３及び図１４を参照）におけるＥｄＵ＋細胞頻度の〜７０％低下を引き起こす。造血幹細胞及び前駆細胞（ＨＳＰＣ）において、化合物Ｔによる処理は、全体の造血系統階層中最初の細胞である造血幹細胞（ＨＳＣ、７４  ％の阻害）に加えて、多能性前駆細胞（ＭＰＰ、９０  ％の阻害）、ＨＳＣｓのすぐ次の後代（図１４Ａ）で、細胞サイクル進行の能力の停止を引き起こす。
【０４５２】
図１４Ｂに示すように、系統分化階層のさらに下では、系統制限脊髄（ＣＭＰ、ＧＭＰ及びＭＥＰ）及びリンパ様前駆細胞（ＣＬＰ）の増殖が、化合物Ｔによって著しく抑制され、ＥｄＵ＋細胞頻度が７６〜９２  ％も低下したことを示した。
【０４５３】
実施例１６４
化合物Ｔは、分化した造血細胞の増殖を抑制する
上記の実施例Ｘで議論され図１３及び１４に示されたと同じ実験的なプロトコルを使用して、分化した造血細胞の増殖に対する化合物Ｔの効果を調査した。分化した造血細胞に対して化合物Ｔで得られた効果は、ＨＳＰＣｓに認められるよりも、可変的であった。Ｔ及びＢ細胞前駆細胞が化合物Ｔに非常に敏感（それぞれＥｄＵ＋細胞頻度で＞９９  ％及び＞８０  ％の低下）であるが、分化した骨髄赤血球細胞の増殖は、より高い化合物Ｔ耐性を示し、Ｍａｃ１＋Ｇ１＋骨髄性細胞では、ＥｄＵ＋細胞頻度で４６  ％の低下を示し、Ｔｅｒ１１９＋赤芽細胞では、ＥｄＵ＋細胞頻度で５８  ％の低下を示す（図１５）。纏めると、これらのデータは、全ての造血細胞が化合物Ｔ誘発性細胞サイクル進行の停止に敏感であるものの、細胞系統が異なると、その阻害の程度も異なり、細胞増殖に対する化合物Ｔの影響は、骨髄性細胞は他の細胞系統で認められるよりも小さいことを、示唆している。
【０４５４】
実施例１６５
化合物ＧＧは、骨髄前駆細胞を保護する
骨髄中のカルボプラチン誘発性細胞毒性に対する化合物ＧＧの過渡的ＣＤＫ４／６阻害に対する影響を評価するため、ＦＶＢ／ｎマウス（グループ当たりｎ＝３）は、ビヒクルコントロール、腹こう内投与による９０ｍｇ／ｋｇのカルボプラチン、又は経口強制飼養による１５０ｍｇ／ｋｇの化合物ＧＧ、プラス、腹こう内投与による９０ｍｇ／ｋｇのカルボプラチンで、それぞれ処理された。処理の２４時間後、骨髄を採取し、上記で説明したように、サイクリング骨髄前駆細胞のパーセンテージが、ＥｄＵ取込みによって計測された。図１６に示すように、カルボプラチン投与と同時に、化合物ＧＧを投与すれば、骨髄前駆細胞の大きな保護が与えられる。対照動物でのＥｄＵ取込みを規格化して１００  ％とし、カルボプラチン処理した動物又はカルボプラチンからの骨髄と、化合物ＧＧ処理した動物からの骨髄とで、骨髄に対するＥｄＵ取込みを比較した。
【０４５５】
実施例１６６
化合物Ｔは、５ＦＵ誘発性骨髄抑制を低減する
化学療法剤誘発性骨髄抑制を調節する化合物Ｔの能力を決定するため、十分に特徴づけられた単一ドーズ５‐フルオロウラシル（５ＦＵ）療法は、マウスでは骨髄抑制は高いことが知られており、これが利用された。
ＦＶＢ／ｎ雌マウスは、ビヒクル又は化合物Ｔ１５０ｍｇ／ｋｇが単一経口薬ドーズで与えられ、続いて３０分後、１５０ｍｇ／ｋｇの５ＦＵの単一腹腔内ドーズがなされた。
全血球数の計数を６日目に開始し、２日おきに計数した。
【０４５６】
化合物Ｔの同時投与は、５−ＦＵ誘発性骨髄抑制からの全ての造血系統の回復に明らかに影響を与えた。図１７は、５ＦＵ投与へ前化合物Ｔ又はビヒクルコントロールで処理されたマウスにおける、異なる血球タイプの回復の時間経過を実証する。試験される各造血細胞系統（全血球、好中球、リンパ球、血小板及び赤血球）において、化合物Ｔは、５ＦＵで処理された細胞のみ、さらなる迅速な回復を提供したことが、決定された。これらのデータは、化合物Ｔ処理は、おそらくＨＳＰＣｓにおける５ＦＵ誘発性ＤＮＡ損傷を低減し、化学療法剤後に、促進血球値の回復に至ることを示す。
【０４５７】
図１８は、上記に説明され図１７に示される骨髄抑制研究の１４日目からのデータを示す。
全血液細胞数が、１４日目に分析された。図１８は、白血球（図１８Ａ）、好中球（図１８Ｂ）、リンパ球（図１８Ｃ）、赤血球（図１８Ｄ）、及び血小板（図１８Ｅ）のそれぞれの結果を示す。
全ての場合で、化合物Ｔは、５ＦＵと共に投与される場合は、５ＦＵ処理単独での骨髄抑制効果と比較して、１４日目に、各細胞型に大きな保護を与えた。
【０４５８】
実施例１６７
化合物Ｔは、５ＦＵ処理の反復サイクルを通して、５ＦＵ誘発性骨髄抑制を低減する
化学療法剤誘発性骨髄抑制を調節する化合物Ｔの能力を決定するため、十分に特徴づけられた５‐フルオロウラシル（５ＦＵ）療法はマウスの骨髄抑制が高いことを知られており、これが利用された。８週間目の雌のＣ５７Ｂｌ／６のマウスに対して、ビヒクル（２０  ％のＳｏｌｕｔｏｌ）又は化合物Ｔ１５０ｍｇ／ｋｇの単一経口薬ドーズが与えられ、続いて３０分後に、腹腔内ドーズによって１５０ｍｇ／ｋｇの５ＦＵのてが与えられた。これは、２１日ごとに３サイクル繰り返された。血液サンプルは、サイクル１〜３の１０日目に、血液学分析のために取り出された。
【０４５９】
化合物Ｔの同時投与により、第３のサイクル（図１９）ならびに他のサイクル（データは示されない）の１０日目の骨髄抑制が低減した。上記に記載される単一ドーズの研究に従い、これらのデータは、化合物Ｔ処理は、おそらくＨＳＰＣｓにおける５ＦＵ誘発性ＤＮＡ損傷を低減し、改良された造血血球数に至ることを、示している。
【０４６０】
実施例１６８
ヒト腎近位尿細管細胞の中にＤＮＡ細胞サイクル分析
非造血細胞中で完全なＧ１期停止を誘発するＣｄｋ４／６阻害剤の能力を試験するため、ヒト腎近位尿細管細胞におけるＧ１期停止が検討された。用量依存的方法により、細胞を化合物Ｔで２４時間処理した。実験の末尾で、細胞を採取し、固定し、そして、４８８ｎｍのライトで励起されると強く赤い蛍光を発する（最大発光６３７ｎｍ）プロピジウムヨウ化物（ＤＮＡインターカレータ）で染色した。サンプルを、Ｄａｋｏ  Ｃｙａｎ  Ｆｌｏｗ  Ｃｙｔｏｍｅｔｅｒで実行した。ＴｒｅｅＳｔａｒ社によって開発されたＦｌｏｗＪｏ２．２ソフトウェアを用いて、データを分析した。アッセイは、三本行い、そして、エラーバーは検出不能であった。図２０に認められるように、化合物Ｔは、ヒト腎近位尿細管細胞に強くＧ１細胞サイクル進行の停止を誘発したが、これは、化合物Ｔの量を増やして処理した場合に、ほとんど全ての細胞がＧ０−Ｇ１期であると見出されたからである。
【０４６１】
実施例１６９
化合物Ｔは、腎近位尿細管上皮細胞を化学療法剤誘発性ＤＮＡ損傷から保護する
ヒト腎近位尿細管細胞を化学療法剤誘発性ＤＮＡ損傷から保護するＣｄｋ４／６阻害剤の能力を、エトポシド及びシスプラチンを用いて分析した。細胞は、用量依存的方法（１０ｎＭ、３０ｎＭ、１００ｎＭ、３００ｎＭ又は１０００ｎＭで、化合物Ｔで処理された。実験の末尾で、細胞を採取し、固定し、そして、４８８ｎｍのライトで励起されると強く赤い蛍光を発する（最大発光６３７ｎｍ）プロピジウムヨウ化物（ＤＮＡインターカレータ）で染色した。サンプルを、Ｄａｋｏ  Ｃｙａｎ  Ｆｌｏｗ  Ｃｙｔｏｍｅｔｅｒで実行した。ＴｒｅｅＳｔａｒ社によって開発されたＦｌｏｗＪｏ２．２ソフトウェアを用いて、データを分析した。図２１に認められるように、これらの結果は、化合物Ｔが腎近位尿細管上皮細胞を化学療法剤誘発性ＤＮＡ損傷から保護することを示すが、それは、エトポシド又はシスプラチンと組み合わせた化合物Ｔの用量を増やせば、Ｓ期細胞のパーセンテージが減少し、これに伴い、Ｇ０−Ｇ１期の細胞のパーセンテージが上がるからである。
【０４６２】
実施例１７０
化合物Ｔは、ヒト腎近位尿細管細胞の化学療法剤誘発性ＤＮＡ損傷及びカスパーゼ活性化を予防する
ＣＤＫ４／６阻害物質処理によって誘発される薬理学的休止が、非造血細胞における化学療法剤に対する耐性を提供することを実証するため、ヒト腎近位尿細管細胞の化合物Ｔの防護効果を分析した。通常の腎近位尿細管上皮細胞は、米国菌培養収集所（ＡＴＣＣ、バージニア州マナサス）より得られた。細胞は、、３７℃加湿インキュベーター内での腎臓上皮細胞成長キット（ＡＴＣＣ）を追加した腎臓上皮細胞基底培地（ＡＴＣＣ）により、３７℃のインキュベーター内で５  ％ＣＯ２加湿空気中培養された。細胞は、シスプラチンが不存在又は２５μＭ存在下、ＤＭＳＯ又は１０ｎＭ、３０ｎＭ、１００ｎＭ、３００ｎＭ、又は１μＭの化合物Ｔで処理された。γ−Ｈ２ＡＸアッセイに対し、細胞を固定し、透過処理し、そしてγ−Ｈ２ＡＸフローキット（Ｍｉｌｌｉｐｏｒｅ）に従って抗−γ−Ｈ２ＡＸで染色され、フローサイトメトリーによって定量化した。ＴｒｅｅＳｔａｒ社によって開発されたＦｌｏｗＪｏ２．２ソフトウェアを用いて、データを分析した。製造者のインストラクションに従い、カスパーゼ−Ｇｌｏ３／７アッセイシステム（Ｐｒｏｍｅｇａ社、ウィスコンシン州マディソン）を用いて、カスパーゼ３／７活性化を計測した。
【０４６３】
γ−Ｈ２ＡＸ形成（図２２）により計測されるように、シスプラチンと組み合わせた化合物Ｔによる腎近位尿細管細胞の処理は、ＤＮＡ損傷を減弱した。図２２に認められるように、シスプラチンにより引き起こされるＤＮＡ損傷は、ドーズ依存性方法化合物Ｔによる処理後、低減した。
【０４６４】
腎近位尿細管上皮細胞をシスプラチン誘発性アポトーシス（カスパーゼ３／７活性化）から保護する化合物Ｔの能力も、調査された。図２３で示すように、化合物Ｔは、これらの細胞のカスパーゼ３／７活性化におけるドーズ依存性低下を実証した。カスパーゼ３／７活性の中にこの低下は、試験されたシスプラチンの全ての三つのレベル（２５ｕＭ、５０ｕＭ又は１００ｕＭ）で認められた。これらのデータは、Ｃｄｋ４／６阻害によって誘導される、Ｇ１期の過渡的細胞サイクル進行の停止は、腎近位尿細管細胞を化学療法剤誘発性ＤＮＡ損傷から保護できることを示している。
【０４６５】
実施例１７１
薬剤製品の作製
本発明の活性化合物は、以下の手順を用いて静脈内投与用に調製可能である。
賦形剤ヒドロキシプロピル・ベータ−シクロデキストリン及びブドウ糖を、バッチ体積９０％のＵＳＰ注入又は洗浄用滅菌水に、撹拌しながら加えることができ、これを溶解するまで撹拌する。塩酸塩の形態での活性化合物を加え、それが溶解されるまで撹拌する。ｐＨがｐＨ４．３  ＋  ０．１となるよう１ＮのＮａＯＨで調整し、必要に応じて、１ＮのＨＣｌを用いて逆漸増してもよい。ＵＳＰ注入又は洗浄用滅菌水を用いて、溶液を最終的なバッチ重量に合わせることができる。次にｐＨを再確認して、ｐＨが確実にｐＨ  ４．３  ＋  ０．１であるようにする。ｐＨがこの範囲の外にある場合は、１ＮのＨＣｌ又は１ＮのＮａＯＨを適当に加えて、ｐＨを４．３  ＋  ０．１に合わせる。次に溶液を濾過し無菌化し、５０又は１００ｍｌのフリントガラスバイアルを満たし、栓をし、端を曲げる。
【０４６６】
この明細書は、本発明の実施形態に関して記載された。本発明は様々な実施形態に関して記載され、それは付随する実施例により例示される。しかしながら、本発明は、これらとは異なる形態で表されてもよく、ここに記載された実施形態に限定されるように解釈されてはならない。ここに与えられた教示により、当業者は所望された目的のために本発明を変更することができ、この変更は本発明の範囲内であると考えられる。
【図１】
2019055954.tif 000334
【図２Ａ】
2019055954.tif 000335
【図２Ｂ】
2019055954.tif 000336
【図２Ｃ】
2019055954.tif 000337
【図２Ｄ】
2019055954.tif 000338
【図２Ｅ】
2019055954.tif 000339
【図２Ｆ】
2019055954.tif 000340
【図２Ｇ】
2019055954.tif 000341
【図３】
2019055954.tif 000342
【図４Ａ】
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【図４Ｂ】
2019055954.tif 000344
【図４Ｃ】
2019055954.tif 000345
【図５】
2019055954.tif 000346
【図６Ａ】
2019055954.tif 000347
【図６Ｂ】
2019055954.tif 000348
【図６Ｃ】
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【図７】
2019055954.tif 000350
【図８Ａ】
2019055954.tif 000351
【図８Ｂ】
2019055954.tif 000352
【図８Ｃ】
2019055954.tif 000353
【図８Ｄ】
2019055954.tif 000354
【図９Ａ】
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【図９Ｂ】
2019055954.tif 000356
【図９Ｃ】
2019055954.tif 000357
【図９Ｄ】
2019055954.tif 000358
【図１０】
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【図１１Ａ】
2019055954.tif 000360
【図１１Ｂ】
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【図１２Ａ】
2019055954.tif 000362
【図１２Ｂ】
2019055954.tif 000363
【図１３】
2019055954.tif 000364
【図１４Ａ】
2019055954.tif 000365
【図１４Ｂ】
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【図１５Ａ】
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【図１５Ｂ】
2019055954.tif 000368
【図１５Ｃ】
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【図１６】
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【図１７Ａ】
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【図１７Ｂ】
2019055954.tif 000372
【図１７Ｃ】
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【図１７Ｄ】
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【図１７Ｅ】
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【図１７Ｆ】
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【図１８Ａ】
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【図１８Ｂ】
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【図１８Ｃ】
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【図１８Ｄ】
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【図１８Ｅ】
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【図１９Ａ】
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【図１９Ｂ】
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【図１９Ｃ】
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【図１９Ｄ】
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【図１９Ｅ】
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【図２０】
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【図２１】
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【図２２】
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【図２３】
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【図２４】
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【図２５】
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【図２６】
2019055954.tif 000393
【図２７Ａ】
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【図２７Ｂ】
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【図２７Ｃ】
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【図２８Ａ】
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【図２８Ｂ】
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【図２８Ｃ】
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【図２８Ｄ】
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【図２９Ａ】
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【図２９Ｂ】
2019055954.tif 000402
【図２９Ｃ】
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【図３０Ａ】
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【図３０Ｂ】
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【図３１Ａ】
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【図３１Ｂ】
2019055954.tif 000407
【図３１Ｃ】
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【図３１Ｄ】
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【図３１Ｅ】
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【図３１Ｆ】
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【手続補正書】
【提出日】平成30年11月29日(2018.11.29)
【手続補正１】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】０４６６
【補正方法】変更
【補正の内容】
【０４６６】
この明細書は、本発明の実施形態に関して記載された。本発明は様々な実施形態に関して記載され、それは付随する実施例により例示される。しかしながら、本発明は、これらとは異なる形態で表されてもよく、ここに記載された実施形態に限定されるように解釈されてはならない。ここに与えられた教示により、当業者は所望された目的のために本発明を変更することができ、この変更は本発明の範囲内であると考えられる。
（１）
サイクリン依存的キナーゼ４／６（ＣＤＫ４／６）複製非依存的癌又は異常細胞増殖の治療を受けている被検体の正常細胞に対する化学療法剤の影響を低減する方法であって、前記正常細胞は、造血幹細胞、造血前駆細胞又は腎臓上皮細胞であり、
前記方法は、式Ｉ、ＩＩ、ＩＩＩ、ＩＶもしくはＶから成る群より選択される化合物、又はその薬理学的に許容される塩の有効量を、被検体に投与することを含み、
【化２５０】
2019055954.tif 000412
式中、Ｚは、−（ＣＨ２）ｘ−で、ｘは１、２、３、又は４、または−Ｏ−（ＣＨ２）ｚ−であり、ｚは２、３又は４であり、
各Ｘは、独立してＣＨ又はＮであり、
各Ｘ’は、独立してＣＨ又はＮであり、
Ｘ’’は、独立してＣＨ２、Ｓ又はＮＨであり、構成部分が安定５員環となるよう配置され、
Ｒ、Ｒ８及びＲ１１は、独立してＨ、Ｃ１−Ｃ３のアルキル又はハロアルキル、シクロアルキル、又は、Ｎ、ＯもしくはＳから選択される１つ以上のヘテロ原子を含んだシクロアルキル、−（アルキレン）ｍ−  Ｃ３−Ｃ８シクロアルキル、−（アルキレン）ｍ−アリール、−（アルキレン）ｍ−ヘテロシクロ、−（アルキレン）ｍ−ヘテロアリール、−（アルキレン）ｍ−ＮＲ３Ｒ４、−（アルキレン）ｍ−Ｃ（Ｏ）−ＮＲ３Ｒ４、−（アルキレン）ｍ−Ｏ−Ｒ５、−（アルキレン）ｍ−  Ｓ（Ｏ）ｎ−Ｒ５、又は−（アルキレン）ｍ−Ｓ（Ｏ）ｎ−ＮＲ３Ｒ４であって、これらのいずれかは、電子価的に可能な限りにおいて１つ以上のＲ基で任意に独立して置換されてもよく、同じ又は隣接した原子に結合した２つのＲｘ基を任意に組み合せて環を形成してもよく、各Ｒ１は独立して、アリール、アルキル、シクロアルキル又はハロアルキルであり、前記アルキル、シクロアルキル及びハロアルキル基の各々は、鎖中の炭素の代わりに任意にＯ又はＮヘテロ原子を含み、
隣接した環原子又は同じ環原子の２つのＲ１のものは、環原子と共に、任意に結合される３−８員環を形成し、
ｙは、０、１、２、３又は４であり、
Ｒ２は、−（アルキレン）ｍ−ヘテロシクロ、−（アルキレン）ｍ−ヘテロアリール、−（アルキレン）ｍ−ＮＲ３Ｒ４、−（アルキレン）ｍ−Ｃ（Ｏ）−ＮＲ３Ｒ４、−（アルキレン）ｍ−Ｃ（Ｏ）−Ｏ−アルキル、−（アルキレン）ｍ−Ｏ−Ｒ５、−（アルキレン）ｍ−Ｓ（Ｏ）ｎ−Ｒ５、又は−（アルキレン）ｍ−Ｓ（Ｏ）ｎ−ＮＲ３Ｒ４であり、これらのいずれかは、電子価的に可能な限りにおいて１つ以上のＲｘ基で任意に独立して置換されてもよく
同じ又は隣接した原子に結合した２つのＲｘ基は任意に組み合わされて環を形成してもよく、
ｍは０又は１、ｎは０、１又は２であり、
Ｒ３及びＲ４はその発生毎に、独立して以下の通りである：（ｉ）水素又は
（ｉｉ）アルキル、シクロアルキル、ヘテロシクロ、アリール、ヘテロアリール、シクロアルキルアルキル、ヘテロシクロアルキル、アリールアルキル又はヘテロアリールアルキル
これらのいずれかは、電子価的に可能な限りにおいて１つ以上のＲｘ基で任意に独立して置換されてもよく
同じ又は隣接した原子に結合した２つのＲｘ基は任意に組み合わされて環を形成してもよく、又は
Ｒ３及びＲ４は、これらが結合される窒素原子と共に組み合わされて、電子価的に可能な限りにおいて１つ以上のＲｘ基で任意に独立して置換されるヘテロシクロ環を形成してもよく、
同じ又は隣接した原子に結合した２つのＲｘ基は任意に組み合わされて環を形成してもよく、
Ｒ５及びＲ５＊はその発生毎に、独立して以下の通りである：（ｉ）水素又は
（ｉｉ）アルキル、アルケニル、アルキニル、シクロアルキル、ヘテロシクロ、アリール、ヘテロアリール、シクロアルキルアルキル、ヘテロシクロアルキル、アリールアルキル又はヘテロアリールアルキルであり、これらのいずれかは、電子価的に可能な限りにおいて１つ以上のＲｘ基で任意に独立して置換されてもよく、Ｒｘは、その発生毎に独立して、ハロ、シアノ、ニトロ、オキソ、アルキル、ハロアルキル、アルケニル、アルキニル、シクロアルキル、シクロアルケニル、ヘテロシクロ、アリール、ヘテロアリール、アリールアルキル、ヘテロアリールアルキル、シクロアルキルアルキル、ヘテロシクロアルキル、−（アルキレン）ｍ−ＯＲ５、−（アルキレン）ｍ−Ｏ−アルキレン−ＯＲ５、−（アルキレン）ｍ−Ｓ（Ｏ）ｎ−Ｒ５、−（アルキレン）ｍ−ＮＲ３Ｒ４、−（アルキレン）ｍ−ＣＮ、−（アルキレン）ｍ−Ｃ（Ｏ）−Ｒ５、−（アルキレン）ｍ−Ｃ（Ｓ）−Ｒ５、−（アルキレン）ｍ−Ｃ（Ｏ）−ＯＲ５、−（アルキレン）ｍ−Ｏ−Ｃ（Ｏ）−Ｒ５、−（アルキレン）ｍ−Ｃ（Ｓ）−ＯＲ５、−（アルキレン）ｍ−Ｃ（Ｏ）−（アルキレン）ｍ−ＮＲ３Ｒ４、−（アルキレン）ｍ−Ｃ（Ｓ）−ＮＲ３Ｒ４、−（アルキレン）ｍ−Ｎ（Ｒ３）−Ｃ（Ｏ）−ＮＲ３Ｒ４、−（アルキレン）ｍ−Ｎ（Ｒ３）−Ｃ（Ｓ）−ＮＲ３Ｒ４、−（アルキレン）ｍ−Ｎ（Ｒ３）−Ｃ（Ｏ）−Ｒ５、−（アルキレン）ｍ−Ｎ（Ｒ３）−Ｃ（Ｓ）−Ｒ５、−（アルキレン）ｍ−Ｏ−Ｃ（Ｏ）−ＮＲ３Ｒ４、−（アルキレン）ｍ−Ｏ−Ｃ（Ｓ）−ＮＲ３Ｒ４、−（アルキレン）ｍ−ＳＯ２−ＮＲ３Ｒ４、−（アルキレン）ｍ−Ｎ（Ｒ３）−ＳＯ２−Ｒ５、−（アルキレン）ｍ−Ｎ（Ｒ３）−ＳＯ２−ＮＲ３Ｒ４、−（アルキレン）ｍ−Ｎ（Ｒ３）−Ｃ（Ｏ）−ＯＲ５、−（アルキレン）ｍ−Ｎ（Ｒ３）−Ｃ（Ｓ）−ＯＲ５、又は−（アルキレン）ｍ−Ｎ（Ｒ３）−ＳＯ２−Ｒ５であり、
ここで、前記アルキル、ハロアルキル、アルケニル、アルキニル、シクロアルキル、シクロアルケニル、ヘテロシクロ、アリール、ヘテロアリール、アリールアルキル、ヘテロアリールアルキル、シクロアルキルアルキル及びヘテロシクロアルキル基は、以下の１つ以上でさらに独立して置換されてもよく：
−（アルキレン）ｍ−ＣＮ、−（アルキレン）ｍ−ＯＲ５＊、−（アルキレン）ｍ−Ｓ（Ｏ）ｎ−Ｒ５＊、−（アルキレン）ｍ−ＮＲ３＊Ｒ４＊、−（アルキレン）ｍ−Ｃ（Ｏ）−Ｒ５＊、−（アルキレン）ｍ−Ｃ（＝Ｓ）Ｒ５＊、−（アルキレン）ｍ−Ｃ（＝Ｏ）ＯＲ５＊、−（アルキレン）ｍ−ＯＣ（＝Ｏ）Ｒ５＊、−（アルキレン）ｍ−Ｃ（Ｓ）−ＯＲ５＊、−（アルキレン）ｍ−Ｃ（Ｏ）−ＮＲ３＊Ｒ４＊、−（アルキレン）ｍ−Ｃ（Ｓ）−ＮＲ３＊Ｒ４＊、−（アルキレン）ｍ−Ｎ（Ｒ３＊）−Ｃ（Ｏ）−ＮＲ３＊Ｒ４＊、−（アルキレン）ｍ−Ｎ（Ｒ３＊）−Ｃ（Ｓ）−ＮＲ３＊Ｒ４＊、−（アルキレン）ｍ−Ｎ（Ｒ３＊）−Ｃ（Ｏ）−Ｒ５＊、−（アルキレン）ｍ−Ｎ（Ｒ３＊）−Ｃ（Ｓ）−Ｒ５＊、−（アルキレン）ｍ−Ｏ−Ｃ（Ｏ）−ＮＲ３＊Ｒ４＊、−（アルキレン）ｍ−Ｏ−Ｃ（Ｓ）−ＮＲ３＊Ｒ４＊、−（アルキレン）ｍ−ＳＯ２−ＮＲ３＊Ｒ４＊、−（アルキレン）ｍ−Ｎ（Ｒ３＊）−ＳＯ２−Ｒ５＊、−（アルキレン）ｍ−Ｎ（Ｒ３＊）−ＳＯ２−ＮＲ３＊Ｒ４＊、−（アルキレン）ｍ−Ｎ（Ｒ３＊）−Ｃ（Ｏ）−ＯＲ５＊、−（アルキレン）ｍ−Ｎ（Ｒ３＊）−Ｃ（Ｓ）−ＯＲ５＊、又は−（アルキレン）ｍ−Ｎ（Ｒ３＊）−ＳＯ２−Ｒ５＊、の１つ以上でさらに独立して置換されてもよく、
ｎは、０、１又は２であり、ｍは０又は１であり、
Ｒ３＊及びＲ４＊は、独立してその発生毎に以下の通りであり：
（ｉ）水素又は（ｉｉ）アルキル、アルケニル、アルキニル  シクロアルキル、ヘテロシクロ、アリール、ヘテロアリール、シクロアルキルアルキル、ヘテロシクロアルキル、アリールアルキル又はヘテロアリールアルキルであって、
これらのいずれかは、電子価的に可能な限りにおいて１つ以上のＲｘ基で任意に独立して置換されてもよく又は
Ｒ３＊及びＲ４＊は、それらに結合される窒素原子と共に組み合わせて、価電子によって与えられる１つ以上のＲｘ基と任意に独立して置換されるヘテロシクロ環を形成してもよく、
Ｒ６はＨ又は低級アルキル、−（アルキレン）ｍ−ヘテロシクロ、−（アルキレン）ｍ−ヘテロアリール、−（アルキレン）ｍ−ＮＲ３Ｒ４、−（アルキレン）ｍ−Ｃ（Ｏ）−ＮＲ３Ｒ４、−（アルキレン）ｍ−Ｏ−Ｒ５、−（アルキレン）ｍ−Ｓ（Ｏ）ｎ−Ｒ５、又は−（アルキレン）ｍ−Ｓ（Ｏ）ｎ−ＮＲ３Ｒ４であり、これらのいずれかは、電子価的に可能な限りにおいて１つ以上のＲｘ基で任意に独立して置換されてもよく、
同じ又は隣接した原子に結合した２つのＲｘ基は任意に組み合わされて環を形成してもよく、Ｒ１０は
（ｉ）  ＮＨＲＡであり、
ここで、ＲＡは非置換又は置換Ｃ１−Ｃ８アルキル、シクロアルキルアルキル、又は、−ＴＴ−ＲＲ、Ｃ１−Ｃ８シクロアルキル、又は、Ｎ、Ｏ及びＳから選択されるヘテロ原子を１つ以上含むシクロアルキルであり、ＴＴは、非置換又は置換Ｃ１−Ｃ８アルキル又はＣ３−Ｃ８シクロアルキルリンカーであり、そして、ＲＲはヒドロキシル、非置換又は置換Ｃ１−Ｃ６アルコキシ、アミノ、非置換又は置換Ｃ１−Ｃ６アルキルアミノ、非置換又は置換ジ−Ｃ１−Ｃ６アルキルアミノ、非置換又は置換Ｃ６−Ｃ１０アリール、１又は２個の５員又は６員環及びＮ、Ｏ及びＳから選択される１−４個のヘテロ原子を含む非置換又は置換ヘテロアリール、非置換又は置換Ｃ３−Ｃ１０炭素環、又は、１又は２個の５員又は６員環及びＮ、Ｏ及びＳから選択される１−４個のヘテロ原子を含む非置換又は置換ヘテロ環であり、又は
（ｉｉ）−Ｃ（Ｏ）−Ｒ１２又は−Ｃ（Ｏ）Ｏ−Ｒ１３であり、
ここで、Ｒ１２はＮＨＲＡ又はＲＡであり、Ｒ１３はＲＡである、前記方法。
（２）
Ｒ８が、水素又はＣ１〜Ｃ３アルキルである、（１）に記載の方法。
（３）
前記化合物が、図２７に示される構造から選択される式を有する、（１）に記載の方法。
（４）
前記化合物が、図２８に示される構造から選択される式を有する、（１）に記載の方法。
（５）
前記化合物が、図２９に示される構造から選択される式を有する、（１）に記載の方法。
（６）
前記化合物が、図３０に示される構造から選択される式を有する、（１）に記載の方法。
（７）
前記化合物が、図３１に示される構造から選択される式を有する、（１）に記載の方法。
（８）
前記化合物が、以下の式を有する、（１）に記載の方法。
【化２５１】
2019055954.tif 000413
（９）
前記化合物が、以下の式を有する、（１）に記載の方法。
【化２５２】
2019055954.tif 000414
（１０）
前記化合物が、以下の式を有する、（１）に記載の方法。
【化２５３】
2019055954.tif 000415
（１１）
前記化合物が、以下の式を有する、（１）に記載の方法。
【化２５４】
2019055954.tif 000416
（１２）
前記化合物が、以下の式を有する、（１）に記載の方法。
【化２５５】
2019055954.tif 000417
（１３）
前記化合物が、以下の式を有する、（１）に記載の方法。
【化２５６】
2019055954.tif 000418
（１４）
前記化合物が、以下の式を有する、（１）に記載の方法。
【化２５７】
2019055954.tif 000419
（１５）
前記化合物が、以下の式を有する、（１）に記載の方法。
【化２５８】
2019055954.tif 000420
（１６）
前記化合物が、以下の式を有する、（１）に記載の方法。
【化２５９】
2019055954.tif 000421
（１７）
前記化合物が、以下の式を有する、（１）に記載の方法。
【化２６０】
2019055954.tif 000422
（１８）
前記化合物が、以下の式を有する、又はその薬理学的に許容される塩である、（１）に記載の方法。
【化２６１】
2019055954.tif 000423
［式中、Ｒは、Ｃ（Ｈ）Ｘ、ＮＸ、Ｃ（Ｈ）Ｙ又はＣ（Ｘ）２であり、ここで、Ｘは、水素、直鎖、分枝又は環状Ｃ１〜Ｃ５アルキル基であり、メチル、エチル、プロピル、シクロプロピル、イソプロピル、ブチル、ｓｅｃ−ブチル、ｔｅｒｔ−ブチル、イソブチル、シクロブチル、ペンチル、イソペンチル、ネオペンチル、ｔｅｒｔ−ペンチル、ｓｅｃ−ペンチル及びシクロペンチルを含み、Ｙは、ＮＲ１Ｒ２であり、ここでＲ１及びＲ２は独立してＸであり、又はＲ１及びＲ２はアルキル基であり、これらは一緒に１又は２個のヘテロ原子（Ｎ、Ｏ又はＳ）を含む架橋を形成し、かつ、２個のＸ基は一緒にアルキル架橋又は１又は２個のヘテロ原子（Ｎ、Ｓ又はＯ）を含む架橋を形成して、スピロ化合物を形成することができる。］
（１９）
前記化合物が、以下から成る群より選択される、（１）に記載の方法。
【化２６２】
2019055954.tif 000424
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（２０）
前記化合物が以下の通りである、（１９）に記載の方法。
【化２６３】
2019055954.tif 000440
（２１）
前記化合物が以下の通りである、（１９）に記載の方法。
【化２６４】
2019055954.tif 000441
（２２）
前記化合物が以下の通りである、（１９）に記載の方法。
【化２６５】
2019055954.tif 000442
（２３）
前記化合物が以下の通りである、（１９）に記載の方法。
【化２６６】
2019055954.tif 000443
（２４）
一つのＸは、Ｎであり、一つのＸは、Ｃである、（１）に記載の方法。
（２５）
前記被検体はヒトである、（１）〜（２４）のいずれかに記載の方法。
（２６）
前記細胞毒化合物への曝露の前２４時間以下の時間に、前記化合物が前記被検体に投与される、（１）〜（２４）のいずれかに記載の方法。
（２７）
前記被検体が、癌を有する、（１）〜（２６）のいずれかに記載の方法。
（２８）
前記被検体が、異常細胞増殖を有する、（１）〜（２６）のいずれかに記載の方法。（２９）
前記癌又は異常細胞増殖が、網膜芽細胞腫腫瘍サプレッサタンパク質（ＲＢ）の損失又は欠如によって特徴付けられる、（１）〜（２８）のいずれかに記載の方法。
（３０）
前記癌が、小細胞肺癌、網膜芽細胞腫、トリプルネガティブ乳癌、ヒト乳頭腫ウイルス（ＨＰＶ）ポジティブ頭頚部癌、又はＨＰＶポジティブ子宮頸癌である、（１）〜（２６）のいずれかに記載の方法。
（３１）
前記化学療法剤が、アルキル化剤、ＤＮＡインターカレータ、タンパク合成阻害剤、ＤＮＡ又はＲＮＡ合成の阻害剤、ＤＮＡ塩基同族体、トポイソメラーゼ阻害剤、テロメラーゼ阻害剤又はテロメアＤＮＡ結合性化合物からから選択される、（１）〜（３０）のいずれかに記載の方法。
（３２）
前記癌が小細胞肺癌であり、前記化学療法剤が、エトポシド、シスプラチン及びカルボプラチン又はこれらの組合せから成る群より選択される、（１）〜（３０）のいずれかに記載の方法。
（３３）
ＨＳＰＣｓの少なくとも８０％以上は、前記化合物の最後の投与から３６時間未満で、細胞サイクルにリエントリーする、（１）〜（３２）のいずれかに記載の方法。（３４）
前記正常細胞は、造血幹細胞又は造血前駆細胞である、（１）〜（３３）のいずれかに記載の方法。
（３５）
前記正常細胞は、腎臓上皮細胞である、（１）〜（３３）のいずれかに記載の方法。
（３６）
併用療法で、被験体におけるＲｂネガティブ癌又は異常細胞増殖を治療する方法であって、
化学療法剤と、式Ｉ、ＩＩ、ＩＩＩ、ＩＶ又はＶから成る群より選択されるサイクリン依存的キナーゼ４／６（ＣＤＫ４／６）化合物、又は、その薬理学的に許容される塩、又は、別の化学療法剤化合物と組み合わせた、組合せの有効量を、被験体に投与することを含み、
【化２６７】
2019055954.tif 000444
式中、Ｚは、−（ＣＨ２）ｘ−で、ｘは１、２、３、もしくは４、または−Ｏ−（ＣＨ２）ｚ−で、ｚは２、３又は４であり、
各Ｘは、独立してＣＨ又はＮであり、
各Ｘ’は、独立してＣＨ又はＮであり、
Ｘ’’は、独立してＣＨ２、Ｓ又はＮＨであり、構成部分が安定５員環となるよう配置され、
Ｒ、Ｒ８及びＲ１１は、独立してＨ、Ｃ１−Ｃ３のアルキル又はハロアルキル、シクロアルキル又はＮ、Ｏ又はＳから選択される１つ以上のヘテロ原子を含んだシクロアルキル、−（アルキレン）ｍ−Ｃ３−Ｃ８シクロアルキル、−（アルキレン）ｍ−アリール、−（アルキレン）ｍ−ヘテロシクロ、−（アルキレン）ｍ−ヘテロアリール、−（アルキレン）ｍ−ＮＲ３Ｒ４、−（アルキレン）ｍ−Ｃ（Ｏ）−ＮＲ３Ｒ４、−（アルキレン）ｍ−Ｏ−Ｒ５、−（アルキレン）ｍ−  Ｓ（Ｏ）ｎ−Ｒ５、又は−（アルキレン）ｍ−Ｓ（Ｏ）ｎ−ＮＲ３Ｒ４であり、これらのいずれかは、電子価的に可能な限りにおいて１つ以上のＲ基で任意に独立に置換されてもよく、同じ又は隣接した原子に結合した２つのＲｘ基を任意に組み合せて環を形成してもよく、
各Ｒ１は独立して、アリール、アルキル、シクロアルキル又はハロアルキルであり、前記アルキル、シクロアルキル及びハロアルキル基の各々は、鎖中の炭素の代わりに任意にＯ又はＮヘテロ原子を含み、
隣接した環原子又は同じ環原子の２つのＲ１のものは、環原子と共に、任意に結合される３−８員環を形成し、
ｙは、０、１、２、３又は４であり、
Ｒ２は、−（アルキレン）ｍ−ヘテロシクロ、−（アルキレン）ｍ−ヘテロアリール、−（アルキレン）ｍ−ＮＲ３Ｒ４、−（アルキレン）ｍ−Ｃ（Ｏ）−ＮＲ３Ｒ４、−（アルキレン）ｍ−Ｃ（Ｏ）−Ｏ−アルキル、−（アルキレン）ｍ−Ｏ−Ｒ５、−（アルキレン）ｍ−Ｓ（Ｏ）ｎ−Ｒ５、又は−（アルキレン）ｍ−Ｓ（Ｏ）ｎ−ＮＲ３Ｒ４であり、これらのいずれかは、電子価的に可能な限りにおいて１つ以上のＲｘ基で任意に独立して置換されてもよく
同じ又は隣接した原子に結合した２つのＲｘ基は、任意に組み合わされて環を形成してもよく、
ｍは０又は１、ｎは０、１又は２であり、
Ｒ３及びＲ４はその発生毎に、独立して以下の通りである：（ｉ）水素又は
（ｉｉ）アルキル、シクロアルキル、ヘテロシクロ、アリール、ヘテロアリール、シクロアルキルアルキル、ヘテロシクロアルキル、アリールアルキル又はヘテロアリールアルキルであり、
これらのいずれかは、電子価的に可能な限りにおいて１つ以上のＲｘ基で任意に独立して置換されてもよく
同じ又は隣接した原子に結合した２つのＲｘ基は任意に組み合わされて環を形成してもよく、又は
Ｒ３及びＲ４は、これらが結合される窒素原子と共に組み合わされて、電子価的に可能な限りにおいて１つ以上のＲｘ基で任意に独立して置換されるヘテロシクロ環を形成してもよく、
同じ又は隣接した原子に結合した２つのＲｘ基は任意に組み合わされて環を形成してもよく、
Ｒ５及びＲ５＊はその発生毎に、独立して以下の通りである：（ｉ）水素又は
（ｉｉ）アルキル、アルケニル、アルキニル、シクロアルキル、ヘテロシクロ、アリール、ヘテロアリール、シクロアルキルアルキル、ヘテロシクロアルキル、アリールアルキル又はヘテロアリールアルキルであって、これらのいずれかは、電子価的に可能な限りにおいて１つ以上のＲｘ基で任意に独立して置換されてもよく
Ｒｘは、その発生毎に独立して、ハロ、シアノ、ニトロ、オキソ、アルキル、ハロアルキル、アルケニル、アルキニル、シクロアルキル、シクロアルケニル、ヘテロシクロ、アリール、ヘテロアリール、アリールアルキル、ヘテロアリールアルキル、シクロアルキルアルキル、ヘテロシクロアルキル、−（アルキレン）ｍ−ＯＲ５、−（アルキレン）ｍ−Ｏ−アルキレン−ＯＲ５、−（アルキレン）ｍ−Ｓ（Ｏ）ｎ−Ｒ５、−（アルキレン）ｍ−ＮＲ３Ｒ４、−（アルキレン）ｍ−ＣＮ、−（アルキレン）ｍ−Ｃ（Ｏ）−Ｒ５、−（アルキレン）ｍ−Ｃ（Ｓ）−Ｒ５、−（アルキレン）ｍ−Ｃ（Ｏ）−ＯＲ５、−（アルキレン）ｍ−Ｏ−Ｃ（Ｏ）−Ｒ５、−（アルキレン）ｍ−Ｃ（Ｓ）−ＯＲ５、−（アルキレン）ｍ−Ｃ（Ｏ）−（アルキレン）ｍ−ＮＲ３Ｒ４、−（アルキレン）ｍ−Ｃ（Ｓ）−ＮＲ３Ｒ４、−（アルキレン）ｍ−Ｎ（Ｒ３）−Ｃ（Ｏ）−ＮＲ３Ｒ４、−（アルキレン）ｍ−Ｎ（Ｒ３）−Ｃ（Ｓ）−ＮＲ３Ｒ４、−（アルキレン）ｍ−Ｎ（Ｒ３）−Ｃ（Ｏ）−Ｒ５、−（アルキレン）ｍ−Ｎ（Ｒ３）−Ｃ（Ｓ）−Ｒ５、−（アルキレン）ｍ−Ｏ−Ｃ（Ｏ）−ＮＲ３Ｒ４、−（アルキレン）ｍ−Ｏ−Ｃ（Ｓ）−ＮＲ３Ｒ４、−（アルキレン）ｍ−ＳＯ２−ＮＲ３Ｒ４、−（アルキレン）ｍ−Ｎ（Ｒ３）−ＳＯ２−Ｒ５、−（アルキレン）ｍ−Ｎ（Ｒ３）−ＳＯ２−ＮＲ３Ｒ４、−（アルキレン）ｍ−Ｎ（Ｒ３）−Ｃ（Ｏ）−ＯＲ５、−（アルキレン）ｍ−Ｎ（Ｒ３）−Ｃ（Ｓ）−ＯＲ５、又は−（アルキレン）ｍ−Ｎ（Ｒ３）−ＳＯ２−Ｒ５であり、
ここで、前記アルキル、ハロアルキル、アルケニル、アルキニル、シクロアルキル、シクロアルケニル、ヘテロシクロ、アリール、ヘテロアリール、アリールアルキル、ヘテロアリールアルキル、シクロアルキルアルキル及びヘテロシクロアルキル基は、以下の１つ以上でさらに独立して置換されてもよく：
−（アルキレン）ｍ−ＣＮ、−（アルキレン）ｍ−ＯＲ５＊、−（アルキレン）ｍ−Ｓ（Ｏ）ｎ−Ｒ５＊、−（アルキレン）ｍ−ＮＲ３＊Ｒ４＊、−（アルキレン）ｍ−Ｃ（Ｏ）−Ｒ５＊、−（アルキレン）ｍ−Ｃ（＝Ｓ）Ｒ５＊、−（アルキレン）ｍ−Ｃ（＝Ｏ）ＯＲ５＊、−（アルキレン）ｍ−ＯＣ（＝Ｏ）Ｒ５＊、−（アルキレン）ｍ−Ｃ（Ｓ）−ＯＲ５＊、−（アルキレン）ｍ−Ｃ（Ｏ）−ＮＲ３＊Ｒ４＊、−（アルキレン）ｍ−Ｃ（Ｓ）−ＮＲ３＊Ｒ４＊、−（アルキレン）ｍ−Ｎ（Ｒ３＊）−Ｃ（Ｏ）−ＮＲ３＊Ｒ４＊、−（アルキレン）ｍ−Ｎ（Ｒ３＊）−Ｃ（Ｓ）−ＮＲ３＊Ｒ４＊、−（アルキレン）ｍ−Ｎ（Ｒ３＊）−Ｃ（Ｏ）−Ｒ５＊、−（アルキレン）ｍ−Ｎ（Ｒ３＊）−Ｃ（Ｓ）−Ｒ５＊、−（アルキレン）ｍ−Ｏ−Ｃ（Ｏ）−ＮＲ３＊Ｒ４＊、−（アルキレン）ｍ−Ｏ−Ｃ（Ｓ）−ＮＲ３＊Ｒ４＊、−（アルキレン）ｍ−ＳＯ２−ＮＲ３＊Ｒ４＊、−（アルキレン）ｍ−Ｎ（Ｒ３＊）−ＳＯ２−Ｒ５＊、−（アルキレン）ｍ−Ｎ（Ｒ３＊）−ＳＯ２−ＮＲ３＊Ｒ４＊、−（アルキレン）ｍ−Ｎ（Ｒ３＊）−Ｃ（Ｏ）−ＯＲ５＊、−（アルキレン）ｍ−Ｎ（Ｒ３＊）−Ｃ（Ｓ）−ＯＲ５＊、又は−（アルキレン）ｍ−Ｎ（Ｒ３＊）−ＳＯ２Ｒ５＊、の１つ以上でさらに独立して置換されてもよく、ｎは、０、１又は２であり、ｍは０又は１であり、
Ｒ３＊及びＲ４＊は、独立してその発生毎に以下の通りであり：
（ｉ）水素又は（ｉｉ）アルキル、アルケニル、アルキニルシクロアルキル、ヘテロシクロ、アリール、ヘテロアリール、シクロアルキルアルキル、ヘテロシクロアルキル、アリールアルキル又はヘテロアリールアルキルであって、
これらのいずれかは、電子価的に可能な限りにおいて１つ以上のＲｘ基で任意に独立して置換されてもよく又は
Ｒ３＊及びＲ４＊は、それらに結合される窒素原子と共に組合せられて、価電子によって与えられる１つ以上のＲｘ基と任意に独立して置換されるヘテロシクロ環を形成してもよく、
Ｒ６はＨ又は低級アルキル、−（アルキレン）ｍ−ヘテロシクロ、−（アルキレン）ｍ−ヘテロアリール、−（アルキレン）ｍ−ＮＲ３Ｒ４、−（アルキレン）ｍ−Ｃ（Ｏ）−ＮＲ３Ｒ４、−（アルキレン）ｍ−Ｏ−Ｒ５、−（アルキレン）ｍ−Ｓ（Ｏ）ｎ−Ｒ５、又は−（アルキレン）ｍ−Ｓ（Ｏ）ｎ−ＮＲ３Ｒ４であり、これらのいずれかは、電子価的に可能な限りにおいて１つ以上のＲｘ基で任意に独立して置換されてもよく、同じ又は隣接した原子に結合した２つのＲｘ基は任意に組み合わされて環を形成してもよく、
Ｒ１０は
（ｉ）  ＮＨＲＡであり、
ここで、ＲＡは非置換又は置換Ｃ１−Ｃ８アルキル、シクロアルキルアルキル、又は、−ＴＴ−ＲＲ、Ｃ１−Ｃ８シクロアルキル、又は、Ｎ、Ｏ及びＳから選択されるヘテロ原子を１つ以上含むシクロアルキルであり、ＴＴは、非置換又は置換Ｃ１−Ｃ８アルキル又はＣ３−Ｃ８シクロアルキルリンカーであり、そして、ＲＲはヒドロキシル、非置換又は置換Ｃ１−Ｃ６アルコキシ、アミノ、非置換又は置換Ｃ１−Ｃ６アルキルアミノ、非置換又は置換ジ−Ｃ１−Ｃ６アルキルアミノ、非置換又は置換Ｃ６−Ｃ１０アリール、１又は２個の５員又は６員環及びＮ、Ｏ及びＳから選択される１−４個のヘテロ原子を含む非置換又は置換ヘテロアリール、非置換又は置換Ｃ３−Ｃ１０炭素環式化合物、又は、１又は２個の５員又は６員環及びＮ、Ｏ及びＳから選択される１−４個のヘテロ原子を含む非置換又は置換ヘテロ環であり、又は
（ｉｉ）−Ｃ（Ｏ）−Ｒ１２又は−Ｃ（Ｏ）Ｏ−Ｒ１３であり、ここで、Ｒ１２は、ＮＨＲＡ又はＲＡであり、Ｒ１３は、ＲＡである、前記方法。（３７）
前記ＣＤＫ４／６阻害物質が、以下の通りである：
【化２６８】
2019055954.tif 000445
［式中、Ｒは、Ｃ（Ｈ）Ｘ、ＮＸ、Ｃ（Ｈ）Ｙ又はＣ（Ｘ）２であり、ここで、Ｘは、水素、直鎖、分枝又は環状Ｃ１〜Ｃ５アルキル基であり、メチル、エチル、プロピル、シクロプロピル、イソプロピル、ブチル、ｓｅｃ−ブチル、ｔｅｒｔ−ブチル、イソブチル、シクロブチル、ペンチル、イソペンチル、ネオペンチル、ｔｅｒｔ−ペンチル、ｓｅｃ−ペンチル及びシクロペンチルを含み、
Ｙは、ＮＲ１Ｒ２であり、ここでＲ１及びＲ２は独立してＸであり、
又はＲ１及びＲ２はアルキル基であり、これらは一緒に１又は２個のヘテロ原子（Ｎ、Ｏ又はＳ）を含む架橋を形成し、かつ、２個のＸ基は一緒にアルキル架橋又は１又は２個のヘテロ原子（Ｎ、Ｓ又はＯ）を含む架橋を形成して、スピロ化合物を形成することができる］、又は、その薬理学的に許容される塩又はプロドラッグである、（３６）に記載の方法。
（３８）
前記化合物が、以下から成る群より選択される、（３６）に記載の方法。
【化２６９】
2019055954.tif 000446
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2019055954.tif 000459
2019055954.tif 000460
2019055954.tif 000461
（３９）
前記化合物が以下の通りである、（３６）に記載の方法。
【化２７０】
2019055954.tif 000462
（４０）
前記化合物が以下の通りである、（３６）に記載の方法。
【化２７１】
2019055954.tif 000463
（４１）
前記化合物が以下の通りである、（３６）に記載の方法。
【化２７２】
2019055954.tif 000464
（４２）
前記化合物が以下の通りである、（３６）に記載の方法。
【化２７３】
2019055954.tif 000465
（４３）
前記化学療法剤化合物が、ｍＴＯＲ阻害剤、ＰＩ３キナーゼ阻害剤、デュアルｍＴＯＲ−ＰＩ３Ｋ阻害剤、ＭＥＫ阻害剤、ＲＡＳ阻害剤、ＡＬＫ阻害剤、ＡＫＴ阻害剤、ＨＳＰ阻害剤、ＢＣＬ−２阻害剤、アポトーシス誘発化合物、ＰＤ−１阻害剤及びＦＬＴ−３阻害剤、又はこれらの組み合わせを含む化合物から選択される、（３６）に記載の方法。（４４）
以下の式の化合物：
【化２７４】
2019055954.tif 000466
又はその薬理学的に許容される塩。
（４５）
（１）の化合物、又はその薬理学的に許容される塩、を含む医薬品組成物であって、適切な用量形態で、化学療法中に、正常細胞の化学防護を達成する、前記医薬品組成物。（４６）
サイクリン依存的キナーゼ４／６（ＣＤＫ４／６）複製非依存的癌又は異常細胞増殖のための治療を受けている被験体における、ここに記載されたいずれかの化合物の使用であって、前記正常細胞は、造血幹細胞、造血前駆細胞又は腎臓上皮細胞である、前記使用。（４７）
化学療法剤と組み合わせた、被験体のＲｂネガティブ癌又は異常細胞増殖の治療に対する、ここに記載されたいずれかの化合物の使用。
（４８）
前記化合物が、（１９）に記載されたものである、（４６）に記載の使用。
（４９）
前記化合物が、（１９）に記載されたものである、（４７）に記載の使用。
【手続補正２】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
化学療法剤カルボプラチンおよび化学療法剤エトポシドと共に用いて、サイクリン依存的キナーゼ４／６（ＣＤＫ４／６）複製非依存的小細胞肺癌の治療を受けたヒトの正常細胞に対する化学療法の影響を低減するための薬剤であって、前記正常細胞は、造血幹細胞又は造血前駆細胞であり、
前記薬剤は、式：
【化１】
2019055954.tif 000467
のＣＤＫ４／６阻害剤またはその薬理学的に許容される塩を含んでなる、薬剤。
【請求項２】
カルボプラチンおよびエトポシドの投与の前に、前記ＣＤＫ４／６阻害剤が前記ヒトに投与される、請求項１に記載の薬剤。
【請求項３】
カルボプラチンおよびエトポシドの投与の前約４時間以内に、前記ＣＤＫ４／６阻害剤が前記ヒトに投与される、請求項２に記載の薬剤。
【請求項４】
カルボプラチンおよびエトポシドの投与の前約３０分以内に、前記ＣＤＫ４／６阻害剤が投与される、請求項３に記載の薬剤。
【請求項５】
化学療法剤カルボプラチンおよび化学療法剤エトポシドと共に用いて、サイクリン依存的キナーゼ４／６（ＣＤＫ４／６）複製非依存的小細胞肺癌の治療を受けたヒトの正常細胞に対する化学療法の影響を低減するための薬剤であって、前記正常細胞は、造血幹細胞又は造血前駆細胞であり、前記化学療法は２１日の化学療法治療サイクル中に実施され、
前記薬剤は、式：
【化２】
2019055954.tif 000468
のＣＤＫ４／６阻害剤またはその薬理学的に許容される塩を含んでなる、薬剤。
【請求項６】
カルボプラチンおよびエトポシドの投与の前約４時間以内に、前記ＣＤＫ４／６阻害剤が前記ヒトに投与される、請求項５に記載の薬剤。
【請求項７】
エトポシドの投与の前約４時間以内に、前記ＣＤＫ４／６阻害剤が前記ヒトに投与される、請求項５に記載の薬剤。
【請求項８】
カルボプラチンおよびエトポシドの投与の前約３０分以内に、前記ＣＤＫ４／６阻害剤が投与される、請求項６に記載の薬剤。
【請求項９】
エトポシドの投与の前約３０分以内に、前記ＣＤＫ４／６阻害剤が投与される、請求項７に記載の薬剤。
【請求項１０】
化学療法剤カルボプラチンおよび化学療法剤エトポシドと共に用いて、サイクリン依存的キナーゼ４／６（ＣＤＫ４／６）複製非依存的小細胞肺癌の治療を受けたヒトの正常細胞に対する化学療法の影響を低減するための薬剤であって、前記正常細胞は、造血幹細胞又は造血前駆細胞であり、
前記薬剤は、式：
【化３】
2019055954.tif 000469
のＣＤＫ４／６阻害剤またはその薬理学的に許容される塩を含んでなる、薬剤。
【請求項１１】
カルボプラチンおよびエトポシドの投与の前に、前記ＣＤＫ４／６阻害剤が前記ヒトに投与される、請求項１０に記載の薬剤。
【請求項１２】
カルボプラチンおよびエトポシドの投与の前約４時間以内に、前記ＣＤＫ４／６阻害剤が前記ヒトに投与される、請求項１１に記載の薬剤。
【請求項１３】
カルボプラチンおよびエトポシドの投与の前約３０分以内に、前記ＣＤＫ４／６阻害剤が前記ヒトに投与される、請求項１２に記載の薬剤。
【請求項１４】
エトポシドの投与の前約４時間以内に、前記ＣＤＫ４／６阻害剤が前記ヒトに投与される、請求項１０に記載の薬剤。
【請求項１５】
エトポシドの投与の前約３０分以内に、前記ＣＤＫ４／６阻害剤が投与される、請求項１４に記載の薬剤。
【請求項１６】
化学療法剤カルボプラチンおよび化学療法剤エトポシドと共に用いて、サイクリン依存的キナーゼ４／６（ＣＤＫ４／６）複製非依存的小細胞肺癌の治療を受けたヒトの正常細胞に対する化学療法の影響を低減するための薬剤であって、前記正常細胞は、造血幹細胞又は造血前駆細胞であり、前記化学療法は２１日の化学療法治療サイクル中に実施され、
前記薬剤は、式：
【化４】
2019055954.tif 000470
のＣＤＫ４／６阻害剤またはその薬理学的に許容される塩を含んでなる、薬剤。
【請求項１７】
カルボプラチンおよびエトポシドの投与の前約４時間以内に、前記ＣＤＫ４／６阻害剤が前記ヒトに投与される、請求項１６に記載の薬剤。
【請求項１８】
エトポシドの投与の前約４時間以内に、前記ＣＤＫ４／６阻害剤が前記ヒトに投与される、請求項１６に記載の薬剤。
【請求項１９】
カルボプラチンおよびエトポシドの投与の前約３０分以内に、前記ＣＤＫ４／６阻害剤が投与される、請求項１７に記載の薬剤。
【請求項２０】
エトポシドの投与の前約３０分以内に、前記ＣＤＫ４／６阻害剤が投与される、請求項１６に記載の薬剤。
【外国語明細書】
2019055954000001.pdf