(57)【要約】  本発明は、噴霧乾燥粉末及びその製造方法に関する。本発明の粉末は、医薬有効成分ならびに下記化合物、1,4 O-結合型D-gal-サッカロース（ラクトスクロース）、1,4 O-結合型D-glu-サッカロース（グルコシルスクロース）又は1,4 O-結合型glu-glu-サッカロース（マルトシルスクロース）から選択される1,4 O-結合型サッカロース誘導体を１種以上を含む。好ましくは、グルコシルスクロース又はマルトシルスクロースが含まれる組合せである。【特許請求の範囲】
【請求項１】
医薬有効成分と、
1,4 O-結合型D-gal-サッカロース（ラクトスクロース）、
1,4 O-結合型D-glu-サッカロース（グルコシルスクロース）又は
1,4 O-結合型glu-glu-サッカロース（マルトシルスクロース）から選択される1,4 O-結合型サッカロース誘導体の１種以上とを含む、噴霧乾燥粉末。
【請求項２】
前記サッカロース誘導体がラクトスクロースであることを特徴とする請求項１記載の噴霧乾燥粉末。
【請求項３】
前記噴霧乾燥粉末が、さらに単糖類、ニ糖類及び／又は多糖類の１種以上を含むことを特徴とする請求項２記載の噴霧乾燥粉末。
【請求項４】
前記噴霧乾燥粉末が、さらにラクトース及びサッカロースを含むことを特徴とする請求項３記載の噴霧乾燥粉末。
【請求項５】
前記ラクトスクロースの比率が、前記粉末に含まれる糖分に対して少なくとも55質量％であることを特徴とする請求項２〜４のいずれか１項記載の噴霧乾燥粉末。
【請求項６】
グルコシルスクロースとマルトシルスクロースとを含む混合物であることを特徴とする請求項１記載の噴霧乾燥粉末。
【請求項７】
前記噴霧乾燥粉末が、さらに単糖類、ニ糖類及び／又は多糖類の１種以上を含むことを特徴とする請求項６記載の噴霧乾燥粉末。
【請求項８】
前記噴霧乾燥粉末が、さらにフルクトース、グルコース及び／又はサッカロースを含むことを特徴とする請求項７記載の噴霧乾燥粉末。
【請求項９】
前記グルコシルスクロース及びマルトシルスクロースの総比率が、前記粉末に含まれる糖分に対して少なくとも25質量％であることを特徴とする請求項６〜８のいずれか１項記載の噴霧乾燥粉末。
【請求項１０】
前記マルトシルスクロースと前記グルコシルスクロースのそれぞれの比率が、前記粉末に含まれる糖分に対して少なくとも18質量％であることを特徴とする請求項９記載の噴霧乾燥粉末。
【請求項１１】
少なくとも１種の1,4 O-結合型サッカロース誘導体を含む前記糖分が、前記粉末の乾燥質量の25〜99.99質量％であることを特徴とする請求項１〜１０のいずれか１項記載の噴霧乾燥粉末。
【請求項１２】
前記医薬有効成分の比率が、前記粉末の乾燥質量の0.01〜75質量％で、かつ、質量パーセントの合計が100％となることを特徴とする請求項１〜１１のいずれか１項記載の噴霧乾燥粉末。
【請求項１３】
前記医薬有効成分が生物学的高分子であることを特徴とする請求項１〜１２のいずれか１項記載の噴霧乾燥粉末。
【請求項１４】
前記噴霧乾燥粉末の乾燥質量基準で、25〜90質量％の少なくとも１種の1,4 O-結合型サッカロース誘導体又は少なくとも１種の1,4 O-結合型サッカロース誘導体を含む糖混合物と、75質量％までの医薬有効成分とを含む噴霧乾燥粉末であって、ラクトスクロース、マルトシルスクロース及び／又はグルコシルスクロースの比率が、前記粉末の乾燥質量に対して少なくとも20質量％で、かつ質量パーセントの粉末に対する合計が最大で100質量％であることを特徴とする請求項１〜１３のいずれか１項記載の噴霧乾燥粉末。
【請求項１５】
前記噴霧乾燥粉末が、他の医薬的に適合する賦形剤の１種以上及び／又は塩の１種以上を含むことを特徴とする請求項１〜１４のいずれか１項記載の噴霧乾燥粉末。
【請求項１６】
前記賦形剤がイソロイシンであることを特徴とする請求項１５記載の噴霧乾燥粉末。
【請求項１７】
前記賦形剤がペプチドであることを特徴とする請求項１５記載の噴霧乾燥粉末。
【請求項１８】
前記賦形剤がトリペプチドであることを特徴とする請求項１６記載の噴霧乾燥粉末。
【請求項１９】
前記トリペプチドがトリロイシンであることを特徴とする請求項１８記載の噴霧乾燥粉末。
【請求項２０】
前記噴霧乾燥粉末の乾燥質量基準で、25〜90質量％の少なくとも１種の1,4 O-結合型サッカロース誘導体又は少なくとも１種の1,4 O-結合型サッカロース誘導体を含む糖混合物と、１〜19.99質量％のイソロイシンとを含む噴霧乾燥粉末であって、質量パーセントの合計が100質量％を超えないことを特徴とする請求項１７記載の噴霧乾燥粉末。
【請求項２１】
前記噴霧乾燥粉末の乾燥質量基準で、25〜90質量％の少なくとも１種の1,4 O-結合型サッカロース誘導体又は少なくとも１種の1,4 O-結合型サッカロース誘導体を含む糖混合物と、１〜39質量％のトリペプチドを含む噴霧乾燥粉末であって、質量パーセントの合計が100質量％を超えないことを特徴とする請求項１８記載の噴霧乾燥粉末。
【請求項２２】
前記粉末中の粒子のＭＭＤが１〜10μｍであることを特徴とする請求項１〜２１のいずれか１項記載の噴霧乾燥粉末。
【請求項２３】
前記粉末中の粒子のＭＭＡＤが１〜7.5μｍであることを特徴とする請求項１〜２２のいずれか１項記載の噴霧乾燥粉末。
【請求項２４】
請求項１〜２３のいずれか１項記載の噴霧乾燥粉末を含む医薬組成物。
【請求項２５】
請求項１記載の噴霧乾燥粉末の製造方法であって、
ａ）医薬有効成分を水溶液／懸濁液に溶解／懸濁し、
ｂ）ラクトスクロース、グルコシルスクロース及びマルトシルスクロースからなる群から選択される1,4 O-結合型サッカロース誘導体の１種以上、又は、これらの1,4 O-結合型サッカロース誘導体の少なくとも１種を含有する糖混合物を水溶液／懸濁液に溶解／懸濁し、
ｃ）有効成分と、1,4 O-結合型サッカロース誘導体の１種以上又は少なくとも１種の1,4 O-結合型サッカロース誘導体を含む糖混合物とが別々の溶液／懸濁液に溶解／懸濁している場合は、それらを混合し、
ｄ）1,4 O-結合型サッカロース誘導体の１種以上と医薬有効成分とを含む溶液／懸濁液を、温度200℃未満／120℃未満（入口温度／出口温度）で、好ましくは186℃未満／96℃未満で噴霧することを特徴とする、噴霧乾燥粉末の製造方法。
【請求項２６】
前記医薬有効成分が生物学的高分子であることを特徴とする請求項２５記載の方法。
【請求項２７】
前記サッカロース誘導体がラクトスクロースであることを特徴とする請求項２５又は２６記載の方法。
【請求項２８】
前記噴霧溶液又は懸濁液が、単糖類、ニ糖類又は多糖類の１種以上を含むことを特徴とする請求項２７記載の方法。
【請求項２９】
前記噴霧溶液又は懸濁液が、さらにラクトース及びサッカロースを含むことを特徴とする請求項２８記載の方法。
【請求項３０】
ラクトスクロースの比率が、前記噴霧溶液又は懸濁液中に存在する糖分の少なくとも55質量％であることを特徴とする請求項２８又は２９記載の方法。
【請求項３１】
前記サッカロース誘導体がグルコシルスクロースとマルトシルスクロースとの混合物であることを特徴とする請求項２５又は２６記載の方法。
【請求項３２】
前記噴霧溶液又は懸濁液が、単糖類、ニ糖類又は多糖類の１種以上を含むことを特徴とする請求項３１記載の方法。
【請求項３３】
前記噴霧溶液又は懸濁液が、フルクトース、サッカロース及び／又はグルコースを含むことを特徴とする請求項３１又は３２記載の方法。
【請求項３４】
グルコシルスクロース及びマルトシルスクロースの比率の合計が、前記噴霧溶液又は懸濁液の少なくとも25質量％であることを特徴とする請求項３１〜３３のいずれか１項記載の方法。
【請求項３５】
マルトシルスクロースとグルコシルスクロースのそれぞれの比率が、前記噴霧溶液又は懸濁液の少なくとも18質量％であることを特徴とする請求項３４記載の方法。
【請求項３６】
前記1,4 O-結合型サッカロース誘導体又は少なくとも１種の1,4 O-結合型サッカロース誘導体を含む糖混合物の比率が、前記噴霧溶液又は懸濁液の乾燥質量基準で25〜99.99質量％であることを特徴とする請求項２５〜３５のいずれか１項記載の方法。
【請求項３７】
前記医薬有効成分の比率が、前記噴霧溶液又は懸濁液の乾燥質量基準で0.01〜75質量％であり、かつ、質量パーセントの合計が100質量％を超えないことを特徴とする請求項２５〜３６のいずれか１項記載の方法。
【請求項３８】
前記噴霧溶液又は懸濁液が、他の医薬的に許容される賦形剤の１種以上及び／又は塩の１種以上を含むことを特徴とする請求項２５〜３７のいずれか１項記載の方法。
【請求項３９】
前記賦形剤がアミノ酸であることを特徴とする請求項３８記載の方法。
【請求項４０】
前記アミノ酸がイソロイシンであることを特徴とする請求項３９記載の方法。
【請求項４１】
前記賦形剤がペプチドであることを特徴とする請求項３８記載の方法。
【請求項４２】
前記賦形剤がトリペプチドであることを特徴とする請求項４１記載の方法。
【請求項４３】
前記トリペプチドがトリイソロイシンであることを特徴とする請求項４２記載の方法。
【請求項４４】
前記噴霧溶液又は懸濁液が、乾燥質量基準で25〜90質量％の少なくとも１種の1,4 O-結合型サッカロース誘導体又は少なくとも１種の1,4 O-結合型サッカロース誘導体を含む糖混合物と、１〜19.99質量％のイソロイシンを含み、質量パーセントの合計が100質量％を超えないことを特徴とする請求項４０記載の方法。
【請求項４５】
前記噴霧溶液又は懸濁液が、乾燥質量基準で60〜90質量％の少なくとも１種の1,4 O-結合型サッカロース誘導体又は少なくとも１種の1,4 O-結合型サッカロース誘導体を含む糖混合物と、１〜39質量％のトリペプチドを含むことを特徴とする請求項４２記載の方法。
【請求項４６】
医薬品を製造するための、請求項１〜２４のいずれか１項記載の噴霧乾燥粉末の使用。
【請求項４７】
吸入医薬品を製造するための請求項２３又は２３記載の噴霧乾燥粉末の使用。
【発明の詳細な説明】
【発明の詳細な説明】
【０００１】
（発明の分野）
本発明は、医薬組成物、なかでも医薬有効成分を含む粉末を製造及び安定化させるための、新規なオリゴ糖／オリゴ糖混合物の使用に関する。この粉末は、噴霧乾燥又は凍結乾燥による製造が好ましい。とりわけ、本発明は抗体を含む前記対応の粉末に関するものであり、その製造方法に関する。
（発明の背景）
水溶液状態の活性物質／活性物質調剤は幾分不安定になりやすく、その結果、有効性又はバイオアクティビティの低下及び毒性又は不耐性反応が上昇することがある。このことは従来からの医薬品だけでなく、ペプチド有効成分又はタンパク質を含有する有効成分にもあてはまる。医薬有効成分を安定化させるには、それ自体の構造を修飾すること（内的）又は好適な賦形剤の添加（外的）によって好影響が得られる。
医薬有効成分の一般的な外的安定化方法は、好適な賦形剤を利用することである。有効成分を安定化させるための賦形剤は、通常、次のカテゴリー、即ち、糖及びポリオール類、アミノ酸類、アミン類、塩類、ポリマー類、界面活性剤類（tensides）に分類することができる。
【０００２】
糖類及びポリオール類は不特定安定化剤として使用することが多い。生物学的活性物質の場合、その安定化効果は主に「優先的排除（preferential exclusion）」によるものである（Xie及びTimasheff著（1997）、Biophysical Chemistry、64(1-3)、25-43；Xie及びTimasheff著（1997）、Protein Science、6(1)、211-221；Timasheff著（1998）、Advances in protein chemistry、51、355-432）。生物学的活性物質と一緒に使用するための糖類を選択する際、還元糖を避けるのが一般的である。非還元糖としての選択からサッカロースやトレハロースが使用される。好適な賦形剤の例として他にはグルコース、ソルビトール、グリセロール（Boctor及びMehta著（1992）Journal of Pharmacy and Pharmacology、44 (7)、600-3；Timasheff著（1993）Annual review of biophysics and biomolecular structure、22、67-97；Chang等（1993）Pharmaceutical Research、10(10)、1478-83）及びマンニトール（Hermann等（1996）Pharmaceutical Biotechnology、9（Formulation, Characterization, and Stability of Protein Drugs）、303-328；Chan等（1996）Pharmaceutical Research、13(5)、756-761）が挙げられる。さらに、医薬的活性物質、主に、例えば抗体等のようなタンパク質類に、広範なポリマー類が安定化効果を及ぼすことはよく知られている。過去においてヒト血清アルブミン（ＨＡＳ）が多用されていたのは、安定化及び凝集抑制特性が非常に優れているからであるが、「血液によって運ばれる」の病原体による潜在的な汚染という理由から最適ではない。現時点で公知のポリマーのなかでは、ヒドロキシプロピル-β-シクロデキストリン（ＨＰ−β−ＣＤ）が特に適しているこがわかっており、安全に非経口投与できる。この他、高分子量デキストラン（18〜82kD）、ＰＶＰ、ヘパリン、ゼラチンタイプＡ及びＢ、ヒドロキシエチルデンプン（ＨＥＳ）、ヘパリン、硫酸デキストラン、ポリリン酸、ポリ-Ｌ‐グルタミン酸、ポリ-Ｌ‐リジンが挙げられる。
【０００３】
糖類及びポリオール類とならび、アミノ酸も単独又は他の安定化賦形剤と共に使用することができる。アミノ酸はタンパク質の安定化に好適に使用される。例えば、10mMのリン酸ナトリウム緩衝液（ｐＨ7.0）でのrhKGF（組換えヒトケラチノサイト増殖因子）の凝集は、ヒスチジン、グリシン、アスパラギン酸ナトリウム（Na-Asp）、グルタメート及び塩酸リジン（Lys-HCl）と５％のマンニトールとの組合せで抑えることができる（Zhang等（1995）「Biochemistry」34 (27)、 8631-41）。アミノ酸とプロピレングリコールを組合せることにより、rhCNTF（組換えヒト繊毛様神経栄養因子）の構造的安定性が向上する（Dix等（1995）「Pharmaceutical Research (Supplement)」12、97頁）。リジンとアルギニンはIL-1Rの熱安定性を向上させる（Tm-増加）が、一方では、グリシンとアラニンは不安定化作用を有する（Remmele等（1998）「Pharmaceutical Research」15(2)、200-208）。
さらに、医薬的活性物質の安定性は、乾燥工程の違いによって向上する。しかしながら一般に、乾燥も賦形剤の存在下で行うものであり、賦形剤は活性物質の安定性を維持し、乾燥粉体の特性を向上させることを目的としている。乾燥による安定化の決定的要因は、非晶質なマトリックス中で活性物質を固定化することである。非晶質な状態は粘度が高く、分子運動性が低く、反応性が低い。そのため、有用な賦形剤とは、可能な限りガラス化温度の高い非晶質マトリックスを形成することができなければならず、そのなかに活性物質を埋め込む賦形剤である。したがって、賦形剤は、特にその安定化性能に応じて選択される。さらに、賦形剤の医薬的許容性や粒子形成への影響力、分散性及び流動性といった要因が重大な役割を果たし、特に噴霧乾燥の場合はなおさらのことである。
【０００４】
ペプチド／タンパク質類似の医薬的活性物質の化学的及び物理的安定性を向上させるには、噴霧乾燥が特に好適であることが示されている（(Maa等（1998）「Pharmaceutical Research」15(5)、768-775)。特に、肺疾患の治療分野では、噴霧乾燥の利用が増大している（米国特許第5,626,874号、米国特許第5,972,388号、Broadhead等（1994）「J. Pharm. Pharmacol.」46(6)、458-467）。それは、全身性疾患の治療において吸入投与も選択肢の１つとして考えられているからである（ＷＯ99/07340）。前提条件となるのは粉体の平均粒径が１〜10μｍ、好ましくは１〜7.5μｍの範囲にあることで、肺の奥深い部分に到達し最終的に血液循環にのることができる。例えばＤＥ-Ａ-1792207には、該当する噴霧乾燥粒子の製造が記載されている。該当する粉体の製造方法については、数多くの記載がある（ＷＯ95/31479、ＷＯ96/09814、ＷＯ96/32096、ＷＯ96/32149、ＷＯ97/41833、ＷＯ97/44013、ＷＯ98/16205、ＷＯ98/31346、ＷＯ99/66903、ＷＯ00/10541、ＷＯ01/13893、Maa等（1998）同上、Vidgren等（1987）「Int. J. Pharmaceutics」35、139-144、Niven等（1994）「Pharmaceutical Research」11(8)、1101-1109）。
糖類及びそのアルコール類は賦形剤に適しているが（例えば、トレハロース、ラクトース、サッカロース又はマンニトール）、同様に様々なポリマー類も適している（Maa等（1997）「Pharm. Development and Technology」2(3)、213-223；Maa等（1998）同上；論文Adler（1998）エアランゲン大学；Costantino等（1998）「J. Pharm. Sci.」87(11)、1406-1411）。しかしながら、主に使用されている賦形剤にはそれぞれ短所がある。例えば、トレハロースやマンニトールを添加すると噴霧乾燥製剤の流動性に悪影響を及ぼす（C. Bosquillon等（2001）「Journal of Controlled Release」70(3)、329-339）。また、マンニトールは、濃度が20質量％をこえると再結晶する傾向があることから（Costantino等（1998）同上）、安定化効果が急激に減衰する。ラクトースはよく使用される賦形剤であり、噴霧乾燥製剤の流動性を改善する（C. Bosquillon等（2001）同上）が、ペプチド活性物質／タンパク質含有活性物質を用いた製剤においては問題がある。それは、ラクトースはその還元特性によりペプチド／タンパク質とマイラード反応を起こし不安定化を伴う可能性があるからである。
【０００５】
安定化剤を添加せずに抗体を噴霧乾燥すると、一定の脱水、熱及び剪断により第２の構造が発現し、その結果としてバイオアクティビティーが失われる。こうなると、すでに内側を向く抗体の疎水性部分が外側を向く。これは、噴霧乾燥工程中に生じる水滴と空気との疎水性界面においてかなりの割合で起こる。さらに加えて、抗体は水相内で凝集し二量体又はより高次な凝集体になる。こうした凝集は不可逆性であることが多い。また、タンパク質を噴霧する際の高温は重大なパラメータとなる。高エネルギーを付加することで、ペプチド結合が不安定化し、抗体が変性する可能性がある。さらに、粉体の保存期間中に噴霧乾燥抗体は凝集体を形成する。この場合は、とりわけ、粉体中の残留水分が悪影響を及ぼす。タンパク質の凝集体は生物的活性が減退もしくは喪失し、抗原性が強まるという特徴を有する。
ラクトスクロースならびにマルトシルスクロースとグルコシルスクロースとを主成分とするカップリングシュガーと呼ばれる多糖類（オリゴ糖類）が、食品分野で利用されている。これらは、アスパルテームのような甘味剤とともに膨張剤や分散剤として、またチューインガムのほのかな甘味成分として、トレハロースシロップが結晶化しないように安定化させるために、またはいわゆるＮＤＯ（難消化性オリゴ糖類）として使用されている。アスパラギルペプチドの甘味特性の向上と安定化、又は、バラスト（ballast）と甘味剤とを含む飲料系における甘味／酸味比の向上と安定化も既知である（米国特許第2003/0059511、ＥＰ1223175、ＤＥ19953727）。さらに、米国特許第5,489,577号及びＥＰ0630651には、治療用タンパク質と油脂基剤とで構成される懸濁液を安定化させるための、オリゴ糖類の使用が開示されている。開示には、前記タンパク質を前もってオリゴ糖と混合しておかないと、疎水性半固体のかたまりと一緒に混合して加工する際にタンパク質活性が失われるおそれがあると記載されている。保存期間にわたり、疎水性混合物又は粉体における安定化の潜在能力については何も言及されていない。
【０００６】
本発明の目的は医薬製剤を調製する際に使用する新規な賦形剤を提供することである。これに対応する製剤は、特に長期にわたる優れた安定性という特徴を有するはずである。
さらなる本発明の目的は、乾燥医薬製剤の作製に使用する新規な賦形剤を提供することである。これに対応する粉末状医薬製剤の特徴は長期安定性に優れていること、さらにできれば吸入性を有することである。
さらに別の本発明の目的は、ペプチド医薬製剤又はタンパク質を含有する医薬製剤を製造する際に使用する新規な賦形剤を提供することであり、とりわけこれらの製剤が噴霧乾燥で製造される場合である。これに対応するペプチド医薬製剤／タンパク質含有医薬製剤は長期安定性と、できれば吸入性を有することに特徴づけられる。
また、本発明の別の目的は、治療用の抗体又は抗体誘導体を処方する際に使用する新規な賦形剤を提供することであり、特にこれらが噴霧乾燥で製造される場合である。これに対応する抗体含有医薬製剤は、長期安定性と、できれば吸入性を有することに特徴づけられる。
さらに別の本発明の目的は、吸入投与用の該当する医薬製剤を提供することで、製剤の形態が、乾燥粉末、噴射剤ガスを含む定量エアロゾル又は噴射剤ガスを含まない吸入溶液のいずれかである。
本発明の基礎となる前記目的は、以下の実施形態により、また、特許クレームに示したもの／方法により達成される。
【０００７】
（発明の概要）
本発明は、医薬有効成分と、1,4 O-結合型D-gal-サッカロース（ラクトスクロース）、1,4 O-結合型D-glu-サッカロース（グルコシルスクロース）又は1,4 O-結合型glu-glu-サッカロース（マルトシルスクロース）から選択される1,4 O-結合型サッカロース誘導体の１種以上とを含む、噴霧乾燥粉末に関する。好ましい粉末は、サッカロース誘導体としてラクトスクロースを含むか、あるいは、グルコシルスクロース及びマルトシルスクロースの混合物を含むが、ラクトスクロースの方がとりわけ好ましい。
さらに、ラクトスクロースという用語は下記の構造式を有する分子を意味する。
【０００８】
【化１】
2007536313.tif 000002
【０００９】
また、本発明に関しては、グルコシルスクロースは下記の構造式を有する分子を意味する。
【００１０】
【化２】
2007536313.tif 000003
【００１１】
また、マルトシルスクロースという用語は、下記の構造式を有する分子を意味する。
【００１２】
【化３】
2007536313.tif 000004
【００１３】
本発明のさらなる実施形態によると、当該粉末には、1,4 O-結合型サッカロース誘導体とともに、単糖類、ニ糖類及び／又は多糖類の１種以上が含まれるが、粉末製造工程においては単糖類及び／又はニ糖類の添加利用が好ましい。さらに、グルコシルスクロース及びマルトシルスクロースの混合物を含む粉末が本発明に対応することは既に記載したが、好ましくは他の単糖類、ニ糖類及び／又は多糖類と一緒に含まれるとよい。
医薬有効成分については、ポリペプチドあるいは例えば成長ホルモン、酵素又は抗体等のタンパク質になりうる生物学的高分子（biological macromolecule）であることが好ましい。特に、粉末の乾燥質量基準で、（ａ）25〜99.99質量％、好ましくは80〜90質量％の少なくとも１種の1,4 O-結合型サッカロース誘導体又は少なくとも1,4 O-結合型サッカロース誘導体を含む糖混合物と、（ｂ）医薬有効成分として生物学的高分子を好ましくは0.01〜75質量％の濃度で含み、糖／糖混合物と生物学的高分子との質量パーセントの合計が100質量％以下である、噴霧乾燥粉体が本発明では好ましい。噴霧乾燥の結果得られた当該粉末は、期せずして、（ｉ）非晶質構造を形成し、（ii）比較的高収率（使用した固形材料に対して少なくとも75％）で製造され、（iii）ガラス化温度が40℃より高く、（iv）再結晶化傾向が低いということがわかった。
【００１４】
本発明の噴霧乾燥粉末は、1,4 O-結合型サッカロース誘導体又は少なくとも1,4 O-結合型サッカロース誘導体を含む糖混合物に加えて、例えば、アミノ酸、ペプチド、タンパク質又は他の糖類等といった上記以外の賦形剤を含有することができる。1,4 O-結合型サッカロース誘導体又は少なくとも1,4 O-結合型サッカロース誘導体を含む糖混合物に加え、さらに、医薬有効成分に加えて、少なくとも１種のアミノ酸、ペプチド、好ましくはジペプチドもしくはトリペプチド及び／又は塩を含む粉末が、特に有用である。好ましい実施形態の１つによると、本発明は、粉末の乾燥質量基準で、（ａ）25〜90質量％の少なくとも１種の1,4 O-結合型サッカロース誘導体又は少なくとも１種の1,4 O-結合型サッカロース誘導体を含む糖混合物と、（ｂ）追加賦形剤として１〜39.99質量％の少なくとも１種のアミノ酸及び／又は少なくとも１種のペプチドと、（ｃ）好ましくは0.01質量％の医薬有効成分とを含む噴霧乾燥粉末に関する。他の賦形剤として好ましいのは、アミノ酸のイソロイシン又は少なくとも１個のイソロイシン残基を有するジペプチドもしくはトリペプチドである。特に好ましい実施形態として、本発明は、粉末の乾燥質量基準で、（ａ）およそ60〜80質量％の少なくとも１種の1,4 O-結合型サッカロース誘導体又は少なくとも１種の1,4 O-結合型サッカロース誘導体を含む糖混合物と、（ｂ）およそ10〜19.99質量％のアミノ酸、好ましくはイソロイシンと、（ｃ）およそ0.01〜30質量％の医薬有効成分、好ましくはペプチド／例えば抗体等のタンパク質とを含む噴霧乾燥粉末に関する。また別の実施形態として、本発明は、粉末の乾燥質量基準で、（ａ）およそ60〜90質量％の少なくとも１種の1,4 O-結合型サッカロース誘導体又は少なくとも１種の1,4 O-結合型サッカロース誘導体を含む糖混合物と、（ｂ）およそ１〜19.99質量％の、イソロイシン含有トリペプチド、好ましくはトリイソロイシンと、（ｃ）およそ0.01〜39質量％の医薬有効成分、好ましくはペプチド／例えば抗体等のタンパク質とを含む噴霧乾燥粉末に関する。これらに該当する粉末は、アミノ酸、好ましくはイソロイシン、又はペプチド、好ましくはイソロイシン含有トリペプチドと一緒に混合することにより、とりわけ良好な流動特性を示し、吸入可能粒子の割合が非常に高くなるという特徴を示す。さらに、該当する粉末は加工安定性及び保存安定性において非常に優れている。
【００１５】
また、本発明の別の実施形態は、（ａ）１種以上の1,4 O-結合型サッカロース誘導体又は少なくとも１種の1,4 O-結合型サッカロース誘導体を含む糖混合物と、（ｂ）少なくとも１種の医薬有効成分とを含有する噴霧乾燥粉末であって、該噴霧乾燥粉末のガラス化温度が40℃より高く、好ましくは45℃より高く、さらに好ましくは50℃より高く、特に好ましくは55℃より高く、きわめて好ましくは60℃より高い、噴霧乾燥粉末に関する。従来より、本発明に対応する粉末の最高ガラス化温度は約96〜110℃である。別の場合では、前記の値はより高くてもよい。特に、粉末中の1,4 O-結合型サッカロース誘導体部位又は誘導体混合物の割合が、対応するガラス化温度の決定に主として関っている。
別の実施例によると、本発明は吸入投与用の医薬組成物に関するもので、本発明による前記記載の粉末の１種を含有する医薬組成物、前記記載の粉末からなる医薬組成物、又は前記記載の粉末から製造される医薬組成物に関する。これに関連して、再構成後に吸入用粉末として、噴射剤ガスを含む定量エアロゾルとして、又は噴射剤ガスを含まない吸入溶液として、本発明の粉末を含有する医薬組成物が好ましい。前記医薬組成物の製造に使用する本発明の噴霧乾燥粉末は、さらに別の実施形態によると、空気動力学的粒径（ＭＭＡＤ）が10μｍ未満、好ましくは0.5〜7.5μｍ、さらに好ましくは0.5〜5.5μｍ、とりわけ好ましくは0.5〜5.0μｍの吸入可能粒子が高い割合で存在することを特徴とする。
さらに、本発明は、前記記載の本発明による噴霧乾燥粉末の製造方法を提供するもので、（ａ）１種以上の1,4 O-結合型サッカロース誘導体又はそれらを含む糖混合物と、（ｂ）少なくとも１種の医薬有効成分とを含む溶液又は懸濁液を製造し、適切な条件下で噴霧することを特徴とする製造方法である。噴霧工程の温度は、好ましくは50〜200℃（入口温度）及び30〜150℃（出口温度）である。
【００１６】
（発明の詳細な説明）
定義：
本発明の明細書中の文脈で使用している用語及び名称は、本願明細書で以下に定義する意味を有するものとする。特に記載のない限り、質量及び質量パーセントの記載は粉末の乾燥質量又は溶液／懸濁液の乾燥後の固形分に関する。「含んでいる」「含む」という概括的実施形態は、「〜で構成される」という特定実施形態を包含する。さらに、「単数」及び「複数」は、限定するために使用するものではない。
「1,4 O-結合型サッカロース誘導体又は少なくとも１種の1,4 O-結合型サッカロース誘導体を含む糖混合物」という表記の定義は、（ｉ）1,4 O-結合型サッカロース誘導体、好ましくは本件記載の式を有する誘導体、（ii）その混合物で好ましくはマルトシルスクロース及びグルコシルスクロースで構成される混合物、（iii）本願明細書前記記載の式のいずれか１つを有する少なくとも１種の1,4 O-結合型サッカロース誘導体と他の糖との混合物で、好ましくは、ラクトスクロースとラクトースとサッカロースとの混合物、あるいは、グルコシル及び／又はマルトシルスクロース、サッカロース、フルクトース及びグルコースとで構成される混合物、（iv）少なくとも55質量％のラクトスクロースと最大で25質量％のラクトースと最大で10質量％のサッカロースとの混合物、（ｖ）少なくとも88質量％のラクトスクロースと最大で10質量％のラクトースとサッカロースとの混合物、（vi）少なくとも25質量％のグルコシル及び／又はマルトシルスクロース、48〜56質量％のサッカロース及び／又は10質量％をこえるグルコース及びフルクトースとで構成される混合物、（vii）グルコシルスクロースとマルトシルスクロースをそれぞれ18質量％と、11〜15質量％のサッカロースと、５〜９質量％のグルコースとで構成される混合物、（viii）「乳果オリゴ（登録商標）LS40L」（LS40Lと略記）、「乳果オリゴ（登録商標）LS55L」（LS55Lと略記）、「乳果オリゴ（登録商標）LS55P」（LS55Pと略記）、「乳果オリゴ（登録商標）LS90P」（LS90Pと略記）、「カップリングシュガー（登録商標）」もしくは「カップリングシュガーＳ（登録商標）」（株式会社林原商事、日本）と呼ばれる糖混合物である。
【００１７】
「噴霧乾燥粉末調剤」又は「乾燥粉末調剤」という表記は、残留水分が約10質量％未満、好ましくは７質量％未満、さらに好ましくは５質量％未満、特に好ましくは３質量％未満の従来からの粉末調剤を意味する。残留水分は、噴霧、真空乾燥又は凍結乾燥の条件が一定で賦形剤が同一であれば、基本的に、その粉末調剤中の医薬有効成分の種類と割合によって決まる。
「非晶質」という用語は、結晶部位が10％未満、好ましくは７％未満、さらに好ましくは５％未満、特に好ましくは４、３、２又は１％未満である粉末調剤を意味する。
「吸入可能な」という用語は、肺への投与に適した粉末として定義される。吸入可能粉末は吸入器を用いて分散させることができ、吸入によって粒子が肺に到達し、必要に応じて肺胞を介して全身に作用を発現させる。吸入可能な粒子は、例えば平均粒径が0.4〜10μｍ（ＭＭＤ＝質量平均粒径）、通常0.5〜５μｍ、好ましくは１〜３μｍ、及び／又は、空気動力学的粒径（ＭＭＡＤ）が0.5〜10μｍ、好ましくは0.5〜7.5μｍ、さらに好ましくは0.5〜5.5μｍ、より好ましくは１〜５μｍ、特に好ましくは１〜4.5μｍである。
「質量平均粒径」又は「ＭＭＤ（mass mean diameter）」が平均粒径分布の測定値であるのは、本発明の粉末が通常、多分散系だからである。これは、すべての処理量の全質量分布の50％における粒径として表される。ＭＭＤ値は、例えば、レーザー回折法（これについては「実施例」のセクションの「方法」を参照）によって求めることができるが、従来からの他の方法が使用可能であるのは当然のことである（例えば、電子顕微鏡検査法、遠心沈降法等）。
【００１８】
「空気動力学的粒径（ＭＭＡＤ（mass median aerodynamic diameter））」という用語は、粉体粒子の50％が通常有する小さな空気動力学的粒径を指す。明確でない場合は、本願記載の方法（これについては「実施例」のセクションの「方法」を参照）が、ＭＭＡＤを求めるための参考の方法となる。
「細粒分」（ＦＰＦ）という用語は、ＭＭＡＤが５μｍ以下の粒径を有する粒子からなる吸入可能な粉末部分を指す。吸入が良好にできる粉末は、ＦＰＦが20％より多く、好ましくは30％より多く、特に好ましくは40％より多く、さらに好ましくは50％より多く、格別に好ましくは55％より多い。明細書中に使用の「カットオフ粒径」という用語は、ＦＰＦを求める際に考慮する径を指す。カットオフ粒径が５μｍでＦＰＦが30％（ＦＰＦ5）という場合、粉末中の全粒子の少なくとも30％が体積平均空気動力学的粒径５μｍ未満の粒子であることを意味する。
「噴霧溶液」という用語は、医薬有効成分を少なくとも１種の賦形剤と共に溶解／懸濁した水溶液又は懸濁液を意味する。
「飛行時間」という用語は標準的測定方法の名称で、「実施例」のセクションでより徹底的に説明されている。飛行時間の測定時に、ＭＭＡＤ及びＦＰＦが同時に測定される（これについては「実施例」のセクションの「方法」を参照）。
「医薬的に許容される賦形剤」、「ビヒクル」又は「マトリックス」という用語は、本発明における調剤中で任意に含有させることができる賦形剤を指す。例えば、賦形剤は、被験者又は被験者の肺に著しい毒性副作用を及ぼすことなく肺への投与が可能なものである。
【００１９】
「医薬的に許容される塩」とは、例を挙げると以下の塩が含まれるがこれに限定されるものではない。無機酸の塩、例えば、塩酸塩、硫酸塩、リン酸塩、ニリン酸塩、臭化物及び硝酸塩。さらに、有機酸の塩として、リンゴ酸塩、マレイン酸塩、フマル酸塩、酒石酸塩、コハク酸塩、エチルコハク酸塩、クエン酸塩、酢酸塩、乳酸塩、メタンスルホン酸塩、安息香酸塩、アスコルビン酸塩、パラトルエンスルホン酸塩、パモ酸塩（palmoate）、サリチル酸塩及びステアリン酸塩、ならびにエストレート、グルセプテート及びラクトビオネートが挙げられる。
「医薬的に許容されるカチオン」という用語は例えば、リチウム、ナトリウム、カリウム、カルシウム、アルミニウム及びアンモニウム（置換アンモニウムを含む）などが例示できるが、これらに限定されるものではない。
「多糖」又は「オリゴ糖」という用語は、少なくとも３個の糖残基で構成される多糖を意味する。
「医薬有効成分」とは、有機的組織体、器官又は細胞に接触すると、有機的組織体、器官及び／又は細胞に対して通常良い薬理学的効果を及ぼす、物質、医薬品、組成物又はその組合せを意味する。患者へ投与すると、局所的又は全身的効果を及ぼすことができるものである。
「生物学的高分子」という用語は、ペプチド、タンパク質、脂肪、脂肪酸又は核酸を意味する。
【００２０】
「ペプチド」又は「ポリペプチド」という用語の定義は、２〜100個のアミノ酸残基で構成されるアミノ酸高分子である。「ペプチド」又は「ポリペプチド」という用語は、匿名として用いられることもあり、ホモペプチドとヘテロペプチドの両方を含む。即ち、同一のアミノ酸残基又は異なるアミノ酸残基で構成されるアミノ酸高分子が含まれる。したがって、「ジペプチド」はペプチド結合による２個のアミノ酸で構成されており、「トリペプチド」はペプチド結合による３個のアミノ酸で構成される。本願明細書で使用する「タンパク質」という用語は、100個を超えるアミノ酸残基を有するアミノ酸高分子である。
「類似」という用語は、ペプチド／タンパク質において、１個又は多数のアミノ酸が置換されたもの、削除されたもの（例えば、断片）、付け足されたもの（例えば、Ｃ−又はＮ−末端を延長した誘導体）、さもなければ、固有の（生来の）シーケンスに対して変性されたものを説明する際に使用する。同様に、例えば、糖類、ポリエチレングリコール等を用いて、固有のタンパク質から誘導体を調製することも可能である。類似物は、固有の合成していないタンパク質のバイオアクティビティーの少なくとも10、20、30又は40％、好ましくは少なくとも50、60又は70％、とりわけ好ましくは少なくとも80、90、95、100％、あるいは100％を超えることが好ましい。
【００２１】
「アミノ酸」という用語は、少なくとも１個のアミノ基と少なくとも１個のカルボキシル基とを含む化合物を意味する。従来、カルボキシル基に対してアミノ基はα‐位置にあるが、分子中の構成が他のものも考えられる。また、アミノ酸は、例えば、アミノ基、カルボキサミド基、カルボキシル基、イミダゾール基、チオ基等の他の官能基を含有していてもよい。天然アミノ酸、合成アミノ酸、ラセミ体、又は立体異性体の比率が様々な鏡像異性体（Ｄ体もしくはＬ体）を使用することができる。例えば、イソロイシンという用語には、Ｄ−イソロイシン、Ｌ−イソロイシン、ラセミ体のイソロイシン及び２つの鏡像異性体の比率の異なるものが含まれる。
「タンパク質のみの調剤（pure protein formulation）」という用語は、１種以上のタンパク質からなる噴霧乾燥粉末であって、任意で１種の好適な緩衝剤（通常、乾燥粉末の質量に対して０〜15質量％）を含んでもよい粉末を意味する。
当該粉末は本質的には他の賦形剤を含有しない。即ち、他の賦形剤の含有量は乾燥粉末の質量に対して１質量％未満である。
「界面活性」物質とは、溶液の表面張力を減少させることができる物質であり、その溶液中に溶解される。表面活性は、例えば、Lecomte du Nouy（Bauer、Fromming、Fuhrer、第６版）後のテンシオメーター法を用いて測定される。
【００２２】
本発明の粉末：
本発明は、医薬有効成分及び1,4 O-結合型D-gal-サッカロース（ラクトスクロース）、1,4 O-結合型D-glu-サッカロース（グルコシルスクロース）又は1,4 O-結合型gul-gul-サッカロース（マルトシルスクロース）を含む群から選択される1,4 O-結合型サッカロース誘導体の１種以上を含む、噴霧乾燥粉末に関する。
本発明のさらなる実施形態によると、当該粉末は、1,4 O-結合型サッカロース誘導体とともに、１種以上の単糖類、ニ糖類及び／又は多糖類を含むが、粉末製造工程において単糖類及び／又はニ糖類の添加利用が好ましい。したがって、ラクトスクロースとラクトースとサッカロースとを含む当該粉末も本発明に含まれるが、粉末中の糖が占める総割合に対してラクトスクロース部分が40質量％以上、好ましくは55質量％以上、さらに88質量％以上が好ましい。好適な実施形態の１つによると、本発明の粉末は、医薬有効成分とともに、「乳果オリゴ（登録商標）LS55P」（株式会社林原商事、日本）と呼ばれ（LS55Pと略記）、少なくとも55％のラクトスクロースと、最大で25質量％のラクトースと最大で10質量％のサッカロースとを含む糖混合物を含有する。別の好ましい実施形態によると、本発明の粉末は、医薬有効成分とともに、「乳果オリゴ（登録商標）LS90P」（株式会社林原商事、日本）と呼ばれ（LS90Pと略記）、少なくとも88％のラクトスクロースと、最大で10質量％のラクトースとサッカロースとを含む糖混合物を含有する。
さらに、グルコシルスクロースとマルトシルスクロースの組合せを含む粉末が本発明に合致することは既に示したが、好ましくは別の単糖類、ニ糖類及び／又は多糖類を一緒に含むとよい。したがって、本発明には、グルコシルスクロースとマルトシルスクロースとの混合物、サッカロース、グルコース及び／又はフルクトースを含有する対応の粉末も含まれ、この場合、粉末中の糖が占める総割合に対してグルコシルスクロースとマルトシルスクロース混合物の比率が25質量％以上であると好ましい。さらに別の実施形態によると、グルコシルスクロースとマルトシルスクロースのそれぞれの比率が、粉末中の糖が占める総割合に対して少なくとも18質量％である。別の好適な実施形態によると、本発明の噴霧乾燥粉末は、医薬有効成分のほかに、「カップリングシュガー（登録商標）」（株式会社林原商事、日本）と呼ばれる糖混合物を含み、この糖混合物は、グルコシルスクロースとマルトシルスクロースを少なくとも18質量％、サッカロースを11〜15質量％、グルコースとフルクトースをそれぞれ５〜９質量％含む。さらにまた本発明は、医薬有効成分に加えて、「カップリングシュガーＳ（登録商標）」（株式会社林原商事、日本）と呼ばれる糖混合物を含む噴霧乾燥粉末に関するもので、この糖混合物は、グルコシルスクロース及び／又はマルトシルスクロースを少なくとも25質量％、サッカロースを48〜56質量％、グルコースとフルクトースを10質量％以下含む。
【００２３】
噴霧乾燥粉末は、粉末の乾燥質量に対する1,4 O-結合型サッカロース誘導体の割合又は少なくとも1,4 O-結合型サッカロース誘導体を含む糖混合物の割合が25〜99.99質量％が好ましく、より好ましくは60〜99質量％、さらに好ましくは70〜90質量％、とりわけ好ましくは80〜90質量％で、例えば、25、25.1、25.2、25.3、---25.7、25.8、25.9等；26、27、28、29、30等；31、32、33、---38、39、40等；41、42、43、---48、49、50等；51、52、53、---58、59、60等；61、62、63、---68、69、70等；71、72、73、---78、79、80等；81、82、83、---88、89、90等；91、92、93、---98、99等；99.1、99.2、99.3、---99.8、99.9等；99.91、99.92、99.93、---99.98、99.99質量％である噴霧乾燥粉末が特に有用であることがわかってきた。LS55P又はLS90Pを使用する場合は、比率80〜90質量％が特に有利であることもわかった。全体的にみて、1,4 O-結合型サッカロース誘導体の割合又は少なくとも１種の1,4 O-結合型サッカロース誘導体を含む糖混合物の割合は、噴霧乾燥粉末が少なくとも部分的に非晶質状態、好ましくは完全な非晶質状態になるように選択するとよい。1,4 O-結合型サッカロース誘導体の割合又は少なくとも１種の1,4 O-結合型サッカロース誘導体を含む糖混合物の割合は、60質量％より少なくすることもできる。この場合は、適量の安定化賦形剤を粉末にさらに添加する。この安定化賦形剤の例については本願明細書中別のところに記載する。
【００２４】
本発明の粉末の乾燥質量における医薬有効成分の割合は、一般に、0.01〜75質量％、好ましくは0.33〜50質量％、さらに好ましくは0.33〜45質量％、特に好ましくは0.33〜40質量％である。また別の好ましい実施形態によると、本発明の粉末の固形分における医薬有効成分の割合は0.33〜35質量％、好ましくは0.33〜30質量％、さらに好ましくは0.33〜25質量％、特に好ましくは0.33〜10質量％である。したがって、その比率は例えば、0.01、0.02、0.03、---0.08、0.09等；0.1、0.2、0.3、---0.8、0.9等；１、２、３、---８、９、10等；11、12、13、---18、19、20等；21、22、23、---28、29、30等；31、32、33、---38、39、40等；41、42、43、---48、49、50等；51、52、53、---58、59、60等；61、62、63、---68、69、70等；71、72、73、74、74.1、74.2、74.3、---74.8、74.9等；74.91、74.92、74.93、---74.98、74.99、75質量％である。
そのため、本発明の粉末では、1,4 O-結合型サッカロース誘導体又は少なくとも１種の1,4 O-結合型サッカロース誘導体を含む糖混合物／有効成分の比率が、例えば、25/75、26/74、27/73、28/72、29/71、30/70、31/69、32/68、33/67、34/66、35/65、36/64、37/63、38/62、39/61、40/60、41/59、42/58、43/57、44/56、45/55、46/54、47/53、48/52、49/51、50/50、51/49、52/48、53/47、54/46、55/45、56/44、57/43、58/42、59/41、60/40、61/39、62/38、63/37、64/36、65/35、66/34、67/33、68/32、69/31、70/30、71/29、72/28、73/27、74/26、75/25、76/24、77/23、78/22、79/21、80/20、81/19、82/18、83/17、84/16、85/15、86/14、87/13、88/12、89/11、90/10、91/9、92/8、93/7、94/6、95/5、96/4、97/3、98/2、99/1、99.1/0.9、99.2/0.8、99.3/0.7、99.4/0.6、99.5/0.5、99.6/0.4、99.66/0.33、99.7/0.3、99.8/0.2、99.9/0.1、99.99/0.01質量％となる。
【００２５】
当該粉末が１種以上の追加賦形剤を含む場合は、1,4 O-結合型サッカロース誘導体もしくは少なくとも１種の1,4 O-結合型サッカロース誘導体を含む糖混合物の比率又は医薬有効成分の比率のどちらか、あるいは、両方の比率を適宜下げることができ、それによって、1,4 O-結合型サッカロース誘導体又は少なくとも１種の1,4 O-結合型サッカロース誘導体を含む糖混合物の粉末の乾燥質量に対する比率が、80質量％から90質量％の範囲内のいずれかの値をとると好ましい。
本発明の目的のための医薬有効成分としては、一般的な定義に含まれる医薬有効成分に加えて、なかでも抗生物質、抗ウイルス活性物質、抗癲癇性剤、鎮痛剤、抗炎症性活性物質又は気管支拡張剤が挙げられる。さらに、一例としてであるが、末梢神経系、アドレナリン作動性受容体、コリン作動性受容体、骨格筋組織、循環系、平滑筋組織、血液循環系、シナプス部位、神経効果器接合部、内分泌系、免疫系、生殖系、骨格系、オータコイド系、消化器及び排泄系、ヒスタミン系ならびに中枢神経系に作用する活性物質が挙げられる。例えば、好適な有効成分として、催眠剤や鎮静剤、抗鬱剤、精神安定剤、抗痙攣薬、筋肉弛緩剤、抗パーキンソン症候群性活性物質、鎮痛剤、抗炎症性活性物質、筋収縮剤、抗菌性活性物質、避妊薬等のホルモン性活性物質、交感神経様作用薬、利尿剤、脂質代謝調整用活性物質、抗アンドレゲン活性物質、駆虫剤、新生物形成剤、抗新生物剤及び血糖降下剤等が挙げられる。
【００２６】
さらに、医薬有効成分という用語には、呼吸器系に効果を及ぼす活性物質、例えば、以下の障害の１つに抵抗する活性物質も含まれる。喘息、慢性閉塞性肺疾患（ＣＯＰＤ）、気腫性慢性気管支炎、気管支肺異形成症（ＢＰＤ）、呼吸窮迫症候群（ＲＤＳ）、気管支梢炎、偽膜性喉頭炎、抜管後の喘息、肺繊維症、肺炎又は嚢胞性繊維症（ＣＦ）。
気管支拡張剤の代表例として、なかでも、ベータ作用薬、抗コリン作用薬又はメチルキサンチンが挙げられる。抗炎症性活性物質の例としては、ステロイド、クロモリン、ネドクロミル及びロイコトリエン抑制剤が挙げられる。ステロイドの例としては、ベクロメタゾン、ベータメタゾン、ビクロメタゾン（biclomethasone）、デキサメタゾン、トリアムシノロン、ブデソニド、ブチクソコート（butixocort）、シクレソニド、フルチカゾン、フルニソリド、イコメタゾン（icomethasone）、モメタゾン、チクソコルトル（tixocortol）及びロテプレノール（loteprenol）が挙げられる。このほか、ブデソニド、プロピオン酸フルチカゾン、ジプロピオン酸ベクロメタゾン、フォメテロール（fometerol）及びトリムシノロンアセトニド（trimcinolone acetonide）が挙げられる。
【００２７】
抗菌性活性物質の例としては、エリスロマイシン、オレアンドマイシン、トロレアンドマイシン、ロキシスロマイシン、クラリスロマイシン、ダベルシン（davercin）、アジスロマイシン、フルリスロマイシン、ジリスロマイシン、ジョサマイシン、スピロマイシン、ミデカマイシン、ロイコマイシン、ミオカマイシン、ロキタマイシン、アンダジスロマイシン及びスウィノリドＡ（swinolide）；フルオロキノロン類、例えば、シプロフロキサシン、オフロキサシン、レボフロキサシン、トロバフロキサシン、アラトロフロキサシン、モキシフロキシン、ノルフロキサシン、エノキサシン、グレパフロキサシン、ガチフロキサシン、ロメフロキサシン、スパルフロキサシン、テマフロキサシン、ペフロキサシン、アミフロキサシン、フレロキサシン、トスフロキサシン、プルリフロキサシン、イルロキサシン、パズフロキサシン、クリナフロキサシン及びシタフロキサシン；アミノグリコシド類、例えば、ゲンタマイシン、ネチルマイシン、パラマイシン、トブラマイシン、アミカシン、カナマイシン、ネオマイシン、ストレプトマイシン、バンコマイシン、テイコプラニン、ラムポラニン（rampolanin）、ミデプラニン（mideplanin）、コリスチン、ダプトマイシン、グラミシジン、コリスチメテート（colistimethate）；ポリミキシン類、例えば、ポリミキシンＢ、カプレオマイシン、バシトラシン、ペネメ（peneme）、ペニシリナーゼ感応性活性物質をはじめとするペニシリン、例えばペニシリンＧ、ペニシリンＶ、ペニシリナーゼ耐性活性物質、例えばメチシリン、オキサシリン、クロキサシリン、ジクロキサシリン、フロキサシリン、ナフシリン；グラム陰性菌抵抗性活性物質、例えば、アンピシリン、アモキシシリン、ヘタシリン、シリン及びガラムピシリン（galampicillin）；抗緑膿菌活性ペニシリン、例えば、カルベニシリン、チカルシリン、アズロシリン、メズロシリン及びピペラシリン；セファロスポリン、例えば、セフポドキシム、セフプロジル、セフチブテン、セフチゾキシム、セフトリアキソン、セファロチン、セファピリン、セファレキシン、セファラジン、セフォキシチン、セファマンドール、セファゾリン、セファロリジン、セファクロル、セファドロキシル、セファログリシン、セフロキシム、セフォラニド、セフォタキシム、セファトリジン、セファセトリル、セフェピム、セフィキシム、セフォニジド（cefonizide）、セフォペラゾン、セフォテタン、セフメタゾール、セフタジジム、ロラカルベフ及びモキサラクタム（moxalactam）；モノバクタム類（monobaktam）、例えばアズトレオナム；ならびにカルバペネム系抗生物質、例えば、イミペネム、メロペネム、イセチオン酸ペンタミジン、硫酸アルブテロール、リドカイン、硫酸メタプロテレノール、ジプロピオン酸ベクロメタゾン、トリアムシノロンアセトアミド、ブデソニドアセトニド、フルチカゾン、臭化イプラトロピウム、フルニソリド、クロモリンナトリウム、酒石酸エルゴタミンで、適用可能な類似物、作用薬、拮抗薬、抑制剤及び医薬的に使用可能な塩の形等である。
【００２８】
医薬有効成分は、別の実施形態では生物学的高分子である。本願明細書で既に記載した定義によると、ペプチド、タンパク質、脂肪、脂肪酸又は核酸が含まれる。
生物薬剤学上重要なタンパク質／ポリペプチドとしては、例えば、抗体、酵素、ステロイド等の発育因子、サイトカイン、リンフォカイン、接着分子、受容体及びそれらの誘導体又は断片が挙げられるが、これらに限定されるものではない。一般に、作用薬もしくは拮抗薬として作用すること、及び／又は、治療用もしくは診断用として利用することができるすべてのポリペプチドが重要である。
【００２９】
本発明での好適なペプチド又はタンパク質とは、例えば、インシュリン、インシュリン様成長因子、ヒト成長ホルモン（hGH）及び他の成長因子、組織プラスミノゲン活性化因子（tPA）、エリスロポエチン（EPO）、サイトカイン、例えばインターロイキン（IL）で、IL-1、IL-2、IL-3、IL-4、IL-5、IL-6、IL-7、IL-8、IL-9、IL-10、IL-11、IL-12、IL-13、IL-14、IL-15、IL-16、IL-17、IL-18、インターフェロン(IFN)-アルファ、IFN-ベータ、IFN-ガンマ、IFN-オメガ又はIFN-タウ、腫瘍壊死因子（TNF）で、例えばTNF-アルファ、TNF-ベータ又はTNF-ガンマ、TRAIL、G-CSF、GM-CSF、M-CSF、MCP-1及びVEGF等である。さらなる例として、モノクローナル抗体、ポリクローナル抗体、多特異性抗体及び単鎖抗体ならびにその断片で、例えばFab、Fab'、F(ab')2、Fc及びFc'断片、免疫グロブリンの軽いL鎖と重いH鎖、それらによる定常領域、可変領域又は超可変領域、ならびにFv及びFd断片（Chamov等（1999）「Antibody Fusion Proteins」Wiley-Liss社）が挙げられる。抗体はヒト抗体又はヒト以外の抗体でもよい。例えば、ヒトの場合はここに挙げるクラスIgA、IgD、IgE、IgG及びIgM、さらにそれらのそれぞれのサブクラスである例えばIgA1、IgA2及びIgG1、IgG2、IgG3、IgG4等が知られている。また、ヒト化抗体やキメラ抗体も含まれる。なかでも、CD4、CD20又はCD44等の様々な表面抗原、例えば、IL2、IL4又はIL5等の様々なサイトカインに対する抗体である粉末調剤がとりわけ治療的な重要性を持つため、本発明の主題である。他の例としては、免疫グロブリンの特定のクラスに抵抗する抗体（例えば抗IgE抗体）、又は、ウイルスタンパク質に抵抗する抗体（例えば、抗-RSV抗体、抗-CMV抗体等）が挙げられる。
【００３０】
Fab断片（抗原結合フラグメント＝Fab）は、両方の鎖の可変領域を有し、この可変領域同士は隣接する定常領域によって保持されている。別の抗体断片がF(ab')2断片で、これはペプシンによるタンパク質分解性消化により産生させることができる。重いＨ鎖の可変領域（VH）と軽いＬ鎖の可変領域（VL）のみで構成される短い抗体断片も、遺伝子クローン化により産生することができる。これはFv断片（＝可変領域断片）と呼ばれている。この抗体断片は、単鎖Fv断片（scFv）とも言われる。scFv抗体の例はよく知られており、記述もある（例えば、Huston等（1988）Proc. Natl. Acad. Sci. USA、16、5879ff参照）。
多重結合のscFv誘導体、例えば二重特異性抗体（diabody）、三重特異性抗体（tribody）、五重特異性抗体（pentabody）等を産生させるために、これまで色々な方策がとられてきた。２価の同質ニ量体scFv誘導体をこの分野の当業者は「二重特異性抗体」と呼んでいる。scFv分子中のペプチドリンカーを５〜10個のアミノ酸に短くすると、VH及びVLが重なり合って同質ニ量体を形成する。さらに、ジスルフィド結合を組み入れることにより二重特異性抗体を安定化させることができる。二重特異性抗体の例については、文献、例えばPerisic等（1994）Structure、2、1217ffに見ることができる。２価の同質ニ量体scFv誘導体は、この分野の当業者により、「ミニ抗体（minibody）」とも言われている。
これは、二量体化領域として、免疫グロブリンのなかでも好ましくはIgG、とりわけIgG1のCH3領域を有する融合タンパク質で構成される。これもまたIgGのヒンジ領域及びリンカー領域を介してscFv断片を結合する。このような「ミニ抗体」の例については、Hu等（1996）「Cancer Res.」56、3055ffに記載されている。３価の同質三量体scFv誘導体は、当該分野の当業者により「三重特異性抗体」と呼ばれている（Kortt等（1997）「Protein Engineering」10、423ff）。リンカーシーケンスを用いずにVH-VLを直接融合させることで、三量体が形成される。
【００３１】
この分野の専門家に「ミニ抗体」と呼ばれている断片は、２価、３価又は５価の構造を有するが、いずれもscFv断片の誘導体である。この場合、ニ量体、三量体又は五量体コイルドコイル構造を用いて多量体化を行う（Pack, P.等（1993）「Biotechnology」11、1271ff；Lovejoy, B.等（1993）「Science」259、1288ff；Pack, P.等（1995）「J. Mol. Biol.」246、28ff）。
本発明の特に好ましい実施形態として、抗体クラスのタンパク質、より正確に言うならば、免疫グロブリンGタイプ１のタンパク質が挙げられる。この場合、前記は、95％のヒト抗体と５％のネズミ抗体のシーケンスを有するヒト化モノクローナル抗体である。この抗体の分子量は約148キロダルトン（kDa）であり、２本の軽い鎖と２本の重い鎖からなり、合計で４本のジスルフィド結合を有する。
有効成分として、ペプチド又はタンパク質あるいはペプチド／ペプチド、ペプチド／タンパク質又はタンパク質／タンパク質の組合せを含む噴霧乾燥粉末がとりわけ有利である。これに対応する生物学的高分子を、粉末の乾燥質量に対して0.01〜75質量％、好ましくは0.01〜50質量％含むことができる。即ち、この比率は、例えば0.01、0.02、0.03、---、0.08、0.09、0.1、0.2、0.3、---0.8、0.9等；１、２、３、---８、９、10等；11、12、13、---18、19、20等；21、22、23、---28、29、30等；31、32、33、---38、39、40等；41、42、43、---48、49、49.1、49.2、49.3、---49.8、49.9等；49.91、49.92、49.93、---49.98、49.99、50質量％である。
【００３２】
1,4 O-結合型サッカロース誘導体又は少なくとも１種の1,4 O-結合型サッカロース誘導体を含む糖混合物のペプチド／タンパク質に対する比率が、例えば、25/75、26/74、27/73、28/72、29/71、30/70、31/69、32/68、33/67、34/66、35/65、36/64、37/63、38/62、39/61、40/60、41/59、42/58、43/57、44/56、45/55、46/54、47/53、48/52、49/51、50/50、51/49、52/48、53/47、54/46、55/45、56/44、57/43、58/42、59/41、60/40、61/39、62/38、63/37、64/36、65/35、66/34、67/33、68/32、69/31、70/30、71/29、72/28、73/27、74/26、75/25、76/24、77/23、78/22、79/21、80/20、81/19、82/18、83/17、84/16、85/15、86/14、87/13、88/12、89/11、90/10、91/9、92/8、93/7、94/6、95/5、96/4、97/3、98/2、99/1、99.1/0.9、99.2/0.8、99.3/0.7、99.4/0.6、99.5/0.5、99.6/0.4、99.66/0.33、99.7/0.3、99.8/0.2、99.9/0.1、99.99/0.01（w/w）となる粉末、好ましくは噴霧乾燥粉末が本発明ではとりわけ好ましい。これに該当する粉末が１種以上の追加賦形剤を含む場合は、1,4 O-結合型サッカロース誘導体もしくは少なくとも１種の1,4 O-結合型サッカロース誘導体を含む糖混合物の比率又は医薬有効成分の比率、あるいは、両方の比率を適宜下げることができ、それによって、1,4 O-結合型サッカロース誘導体又は少なくとも１種の1,4 O-結合型サッカロース誘導体を含む糖混合物の比率が、80質量％から90質量％の範囲内のいずれかの値をとると好ましい。
【００３３】
本発明の粉末に、例えば分子量が10kDa未満、好ましくは５kDa未満の非常に小さなタンパク質／ペプチド、例えば、成長因子であるサイトカイン等が含有される場合、この割合は、粉末の総質量に対して好ましくは0.1〜10質量％、さらに好ましくは0.2〜５質量％であると好ましい。そこで、サイトカインの割合が、0.2、0.3、0.4、---0.8、0.9等；１、２、３、---等；4.1、4.2、4.3、---4.8、4.9等；4.91、4.92、4.93、---4.98、4.99質量％となる粉末が好ましい。
一方、医薬有効成分が１種以上の抗体又はその誘導体（好ましい実施形態）を有する場合、粉末の固形分における有効成分部位が0.01〜75質量％、好ましくは0.1〜50質量％、さらに好ましくは0.33〜50質量％、具体的には、0.1、0.2、0.3、0.33、---0.66、0.7、0.8、0.9等；１、２、３、---８、９、10等；11、12、13、--18、19、20等；21、22、23、---28、29、30等；31、32、33、---38、39、40等；41、42、43、---48、49等；49.1、49.2、49.3、---49.8、49.9等；49.91、49.92、49.93、--49.98、49.99、50質量％であるとよい。
好適な実施形態によると、粉末の固形分における抗体部位は、10〜50質量％、好ましくは10〜30質量％、さらに好ましくは10〜20質量％である。1,4 O-結合型サッカロース誘導体又は少なくとも１種の1,4 O-結合型サッカロース誘導体を含む糖混合物の抗体に対する比率が、例えば、50/50、51/49、52/48、53/47、54/46、55/45、56/44、57/43、58/42、59/41、60/40、61/39、62/38、63/37、64/36、65/35、66/34、67/33、68/32、69/31、70/30、71/29、72/28、73/27、74/26、75/25、76/24、77/23、78/22、79/21、80/20、81/19、82/18、83/17、84/16、85/15、86/14、87/13、88/12、89/11又は90/10（w/w）となる粉末、好ましくは噴霧乾燥粉末がとりわけ有用であり本発明に合致するものである。
【００３４】
さらに別の実施形態によると、本発明は、噴霧乾燥粉末の乾燥質量中、少なくとも25質量％、好ましくは50〜99.99質量％、特に好ましくは60〜90質量％の糖（少なくとも１種の1,4 O-結合型サッカロース誘導体を含む）と、75質量％までの医薬有効成分を含むことを特徴とし、それによって、ラクトスクロース、マルトシルスクロース及び／又はグルコシルスクロースの比率が、粉末の乾燥質量に対して少なくとも20質量％であり、かつ、質量パーセンテージの合計が最大で100質量％となる噴霧乾燥粉末に関する。この分野の当業者であれば、該当する粉末を製造することは可能である。即ち、この分野の当業者は、1,4 O-結合型サッカロース誘導体又は少なくとも１種の1,4 O-結合型サッカロース誘導体を含む糖混合物の割合を90％とする場合は、噴霧する溶液の総固形分に対して最大10質量％の医薬有効成分を混合できるということがわかる。
さらに、本発明の粉末は、他の賦形剤である、例えばアミノ酸、ペプチド、非生物学的もしくは生物学的高分子及び／又は１種以上の糖を含んでもよい。他の従来からの賦形剤、例えば脂質、脂肪酸、脂肪酸エステル、ステロイド（例：コレステロール）又はキレートバインダー（例：EDTA）ならびに様々なカチオン（上記参照）が挙げられる。特に好ましいのはガラス化温度が高い賦形剤で、例えば、ガラス化温度が40℃を超えるもの、好ましくは45℃を超えるもの、あるいは55℃を超えるものが好ましい。好適な賦形剤の一覧は、例えば、Kippe (Eds.)「Handbook of Pharmaceutical Excipients」３版（2000）が参考となる。
【００３５】
タンパク質含有賦形剤の好適なものとしては、例えば、アルブミン（ヒト由来又は組換え型）、ゼラチン、カゼイン、ヘモグロビン等が挙げられる。糖は、好ましくは単糖、ニ糖、オリゴ糖又は多糖類、あるいはそれらの組合せであることが好ましい。フルクトース、マルトース、ガラクトース、グルコース、D-マンノース、ソルボース等が単糖類の例である。本発明での好適なニ糖類には、ラクトース、サッカロース、トレハロース、セロビオース等がある。三糖以上の多糖類としては、ラフィノース、メレチトース、デキストリン、デンプン等が最適である。マンニトール、キシリトール、マルチトール、ガラクチトール、アラビニトール、アドニトール、ラクチトール、ソルビトール（グルシトール）、ピラノシルソルビトール、イノシトール、ミオイノシトール等が、糖アルコールとして考察される。好ましいアミノ酸としては、例えば、アラニン、グリシン、アルギニン、ヒスチジン、グルタメート、アスパラギン、システイン、ロイシン、リジン、イソロイシン、バリン、トリプトファン、メチオニン、フェニルアラニン、チロシン、シトルリン、L-アスパルチル-L-フェニルアラニンメチルエステル（＝アスパルテーム）、トリメチルアンモニオアセテート（＝ベタイン）等が挙げられる。緩衝剤として作用するアミノ酸（例えばグリシン又はヒスチジン）及び／又は分散剤として作用するアミノ酸の使用が好ましい。後者のグループには、特に、実質的に疎水性であるアミノ酸、例えばロイシン、バリン、イソロイシン、トリプトファン、アラニン、メチオニン、フェニルアラニン、チロシン、ヒスチジン又はプロリン等が挙げられる。本発明では、1,4 O-結合型サッカロース誘導体又は少なくとも１種の1,4 O-結合型サッカロース誘導体を含む糖混合物と一緒にイソロイシンを使用することが有利であることがわかるが、イソロイシンの使用は好ましくは濃度１〜19.99質量％、特に好ましくは５〜19.99質量％、さらに10〜19.99質量％が好ましい。粉末の固形分が最大で100質量％となるように、1,4 O-結合型サッカロース誘導体又は少なくとも１種の1,4 O-結合型サッカロース誘導体を含む糖混合物の比率あるいは医薬有効成分の比率を相応に下げて、イソロイシンの比率を40質量％まで増やすことができる。
【００３６】
追加賦形剤として、前記の実質的に疎水性であるアミノ酸残基を１つ以上含むジペプチド、トリペプチド、オリゴペプチド又はポリペプチドの使用も特に有用である。なかでも、20個までのアミノ酸を有するペプチドが好ましく、さらには15個までのアミノ酸を有するペプチド、またさらには、12個までのアミノ酸を有するペプチド、さらに11個までのもの、さらには10個までのもの、また、９個までのアミノ酸を有するペプチド、８個までのもの、さらには、７個までのもの、また７個、６個、５個、４個又は３個までのアミノ酸を有するペプチドが好ましい。この場合、安定化のために使用するペプチドが、医薬有効成分と同時に一致することはない。
【００３７】
トリペプチドの好適な例として、例えば下記のトリペプチドの１種以上が挙げられる。Leu-Leu-Gly、Leu-Leu-Ala、Leu-Leu-Val、Leu-Leu-Leu、Leu-Leu-Met、Leu-Leu-Pro、Leu-Leu-Phe、Leu-Leu-Trp、Leu-Leu-Ser、Leu-Leu-Thr、Leu-Leu-Cys、Leu-Leu-Tyr、Leu-Leu-Asp、Leu-Leu-Glu、Leu-Leu-Lys、Leu-Leu-Arg、Leu-Leu-His、Leu-Gly-Leu、Leu-Ala-Leu、Leu-Val-Leu、Leu-Met-Leu、Leu-Pro-Leu、Leu-Phe-Leu、Leu-Trp-Leu、Leu-Ser-Leu、Leu-Thr-Leu、Leu-Cys-Leu、Leu-Try-Leu、Leu-Asp-Leu、Leu-Glu-Leu、Leu-Lys-Leu、Leu-Arg-Leu及びLeu-His-Leu。一般式Ile-X-X；X-Ile-X；X-X-Ileで表されるトリペプチドの使用は特に有利であることがわかった（式中、Ｘは以下のアミノ酸の１つであればよい：アラニン、グリシン、アルギニン、ヒスチジン、グルタミン酸、グルタミン、アスパラギン、アスパラギン酸、システイン、ロイシン、リジン、イソロイシン（Ile）、バリン、トリプトファン、メチオニン、フェニルアラニン、プロリン、セリン、トレオニン、チロシン、L-アスパルチル-L-フェニルアラニン-メチルエステル（＝アスパルテーム）、トリメチルアンモニオ-アセテート。式（Ile）2-X、例えば、Ile-I0le-X、Ile-X-IIe又はX-IIe-Ileで表される対応のトリペプチドが特に好ましい（式中、Ｘはここでも前記列挙したアミノ酸のいずれか１つであればよい）。例えば、下記のトリペプチドがここでは挙げられる： Ile-Ile-Gly、Ile-Ile-Ala、Ile-Ile-Val、Ile-Ile-Ile、Ile-Ile-Met、Ile-Ile-Pro、Ile-Ile-Phe、Ile-Ile-Trp、Ile-Ile-Ser、Ile-Ile-Thr、Ile-Ile-Cys、Ile-Ile-Tyr、Ile-Ile-Asp、Ile-Ile-Glu、Ile-Ile-Lys、Ile-Ile-Arg、Ile-Ile-His、Ile-Gly-Ile、Ile-Ala-Ile、Ile-Val-Ile、Ile-Met-Ile、Ile-Pro-Ile、Ile-Phe-Ile、Ile-Trp-Ile、Ile-Ser-Ile、Ile-Thr-Ile、Ile-Cys-Ile、Ile-Try-lie、Ile-Asp-lie、Ile-Glu-Ile、Ile-Lys-Ile、Ile-Arg-Ile、Ile-His-Ile。なかでも有利なのは、Ile-Ile-Ileの使用である。
【００３８】
好適なポリマーとしては、例えば、本願明細書で既に賦形剤として記載したポリマー、ポリビニルピロリドン、セルロース誘導体（例として、ヒドロキシメチル、ヒドロキシエチル又はヒドロキシプロピルエチルセルロース等）、高分子の糖類（例として、フィスコール（fiscoll））、デンプン類（例として、ヒドロキシエチルデンプン又はヒドロキシプロピルデンプン等）、例えばシクロデキストリン等のデキストリン類（例として、2-ヒドロキシプロピル-β-シクロデキストリン、スホブチルエーテル-β-シクロデキストリン）、ポリエチレン、グリコール類及び／又はペクチン類が挙げられる。
塩の場合は、例えば、塩化物、硫酸塩、リン酸塩、ニリン酸塩、臭化水素酸塩及び／又は硝酸塩等の無機塩が挙げられる。さらに、本発明の粉末は、リンゴ酸塩、マレイン酸塩、フマル酸塩、酒石酸塩、コハク酸塩、エチルコハク酸塩、クエン酸塩、酢酸塩、乳酸塩、メタンスルホン酸塩、安息香酸塩、アスコルビン酸塩、パラトルエンスルホン酸塩、パモ酸塩（palmoate）、サリチル酸塩、ステアリン酸塩、エストレート、グルセプテート又はラクトビオネート等の有機塩を含有してもよい。同時に、対応の塩は医薬的に許容できるカチオン、例えば、ナトリウム、カリウム、カルシウム、アルミニウム、リチウム又はアンモニウム等を含んでいてもよい。タンパク質の安定化とともに、対応のカチオンを使用することが特に好ましい。そのため、さらに別の実施形態の１つによると、本発明は、1,4 O-結合型サッカロース誘導体又は少なくとも１種の1,4 O-結合型サッカロース誘導体を含む糖混合物及び医薬有効成分と共に、医薬的に許容できる塩を含む噴霧乾燥粉末に関する。
【００３９】
そこで、本発明は、1,4 O-結合型サッカロース誘導体又は少なくとも１種の1,4 O-結合型サッカロース誘導体を含む糖混合物及び医薬有効成分と共に、医薬的に許容できる賦形剤の１種以上及び／又は塩の１種以上を含む噴霧乾燥粉末に関する。
さらなる実施形態によると、本発明は、1,4 O-結合型サッカロース誘導体又は少なくとも１種の1,4 O-結合型サッカロース誘導体を含む糖混合物及び医薬有効成分と共に、１種以上のアミノ酸、好ましくは１種のアミノ酸を追加賦形剤として含む噴霧乾燥粉末に関する。これに関連して、本発明は前記粉末であって、その乾燥質量に対して、（ａ）少なくとも25質量％、好ましくは50〜90質量％、特に好ましくは60〜90質量％の1,4 O-結合型サッカロース誘導体又は少なくとも１種の1,4 O-結合型サッカロース誘導体を含む糖混合物と、（ｂ）１〜19.99質量％のアミノ酸と、（ｃ）0.01〜74質量％の医薬有効成分、好ましくは生物学的高分子とを含み、その質量比の合計が最大で100質量％となる粉末に関する。好ましい実施形態では、粉末の乾燥質量に対する1,4 O-結合型サッカロース誘導体又は少なくとも１種の1,4 O-結合型サッカロース誘導体を含む糖混合物の割合が少なくとも60質量％、好ましくは60〜90質量％である。該当する調剤の１つとしては、アミノ酸の比率が１〜19.99質量％で、医薬有効成分の比率が0.01〜39質量％であると好ましい。
【００４０】
そこで、別の実施形態によると、本発明は、例えば、80％の1,4 O-結合型サッカロース誘導体もしくは少なくとも１種の1,4 O-結合型サッカロース誘導体を含む糖混合物と、19質量％のアミノ酸と、１質量％の医薬有効成分を含有する、比率（80/19/1）の粉末、あるいは、(80/18/2)、(80/17/13)、(80/16/4)、(80/15/5)、(80/14/6)、(80/13/7)、(80/12/8)、(80/11/9)、(80/10/10)、(70/20/10)、(70/19/11)、(70/18/12)、(70/17/13)、(70/16/14)、(70/15/15)、(70/14/16)、(70/13/17)、(70/12/18)、(70/11/19)、(70/10/20)、(60/20/20)、(60/19/21)、(60/18/22)、(60/17/23)、(60/16/24)、(60/15/25)、(60/14/26)、(60/13/27)、(60/12/28)、(60/11/29)又は(60/10/30)の粉末、あるいは、これらを含んでいる粉末又はこれらからなる粉末に関する。有効成分部位を20質量％から0.01質量％にまで減らすのであれば、例えば、9.99、---9.9、9.8、9.7、---9.3、9.2、9.1、---9、8、7、6、5、4、3、2、1、---0.9、0.8、0.7、---0.66、---0.6、0.5、0.4、0.3、0.2、0.1、0.09、0.08、0.07、0.06、0.05、0.04、0.03、0.02、0.01質量％に減らすのであれば、それに応じて1,4 O-結合型サッカロース誘導体又は少なくとも１種の1,4 O-結合型サッカロース誘導体を含む糖混合物の割合を、例えば、80.01、---80.1、80.2、80.3、---80.8、80.9、81、82、83、84、85、86、87、88、89、---89.1、89.2、89.3、---89.33、---89.4、89.5、89.6、89.7、89.8、89.9、---89.91、89.92、89.93、---89.97、89.98、89.99質量％にまで増やすことができ、粉末の乾燥質量に対してそれぞれの粉末成分の質量比の合計が最大で100質量％となる。追加賦形剤又は塩をさらに添加することにより、1,4 O-結合型サッカロース誘導体又は少なくとも１種の1,4 O-結合型サッカロース誘導体を含む糖混合物と、アミノ酸と、ペプチド及び／又は医薬有効成分の比率を相応に適応、減少させ、それぞれの成分の質量比が全体で最大100質量％になるようにする。
【００４１】
添加するアミノ酸がイソロイシンの場合、別の実施形態によると、（ａ）1,4 O-結合型サッカロース誘導体又は少なくとも１種の1,4 O-結合型サッカロース誘導体を含む糖混合物の比率が少なくとも25質量％、好ましくは50〜90質量％、特に好ましくは60〜90質量％、（ｂ）イソロイシンの比率が１〜19.99質量％、（ｃ）医薬有効成分、好ましくはペプチド／タンパク質の比率が少なくとも0.01質量％、好ましくは0.01から最大で74質量％の粉末が、本発明に対応するものである。好ましくは、イソロイシンの比率は、粉末の全固形分中、５〜19.99質量％、さらに好ましくは10〜19.99質量％である。これも、それぞれの成分の質量パーセントの合計が最大100質量％となるということが該当する。さらに、本発明によると、以下の組成を有する粉末は本発明に合致する。80質量％の1,4 O-結合型サッカロース誘導体又は少なくとも１種の1,4 O-結合型サッカロース誘導体を含む糖混合物／10質量％のアミノ酸又はペプチド／10質量％の医薬有効成分、即ち、(80/10/10)、あるいは、(79/11/10)、(78/12/10)、(77/13/10)、(76/14/10)、(75/15/10)、(74/16/10)、(73/17/10)、(72/18/10)、(71/19/10)、(70/20/10)の比率であり、さらに前記において、医薬有効成分の割合を10質量％から0.01質量％まで減らすことができ、例えば、9.99、---9.9、9.8、9.7、---9.3、9.2、9.1、---9、8、7、6、5、4、3、2、1、---0.9、0.8、0.7、---0.66、---0.6、0.5、0.4、0.3、0.2、0.1、0.09、0.08、0.07、0.06、0.05、0.04、0.03、0.02、0.01質量％に減らし、それに応じて1,4 O-結合型サッカロース誘導体又は少なくとも１種の1,4 O-結合型サッカロース誘導体を含む糖混合物の比率を、例えば、80.01、---80.1、80.2、80.3、---80.8、80.9、81、82、83、84、85、86、87、88、89、---89.1、89.2、89.3、---89.33、89.4、89.5、89.6、89.7、89.8、89.9、---89.91、89.92、89.93、---89.97、89.98、89.99質量％に増やすことができ、粉末の乾燥質量に対する質量比の合計を100質量％とする。そのため、以下の組成を有する粉末も本発明に合致する。80質量％の1,4 O-結合型サッカロース誘導体又は少なくとも１種の1,4 O-結合型サッカロース誘導体を含む糖混合物／19質量％のイソロイシン／１質量％の医薬有効成分、即ち、(80/19/1)、あるいは、(80/18/2)、(80/17/3)、(80/16/4)、(80/15/5)、(80/14/6)、(80/13/7)、(80/12/8)、(80/11/9)、(80/10/10)、(70/19/11)、(70/18/12)、(70/17/13)、(70/16/14)、(70/15/15)、(70/14/16)、(70/13/17)、(70/12/18)、(70/11/19)、(70/10/20)、(60/19/21)、(60/18/22)、(60/17/23)、(60/16/24)、(60/15/25)、(60/14/26)、(60/13/27)、(60/12/28)、(60/11/29)、(60/10/30)。追加賦形剤又は塩をさらに添加することにより、1,4 O-結合型サッカロース誘導体又は少なくとも１種の1,4 O-結合型サッカロース誘導体を含む糖混合物及びイソロイシン及び／又は医薬有効成分の比率を相応に適応させ、それぞれの成分の質量比が全体で最大100質量％になるようにする。
【００４２】
本発明の別の実施形態は、好ましくは、ペプチド、タンパク質又はそれらの混合物を医薬有効成分として含む粉末を安定化させるための、少なくとも１種の1,4 O-結合型サッカロース誘導体又は少なくとも１種の1,4 O-結合型サッカロース誘導体を含む糖混合物及びペプチド、好ましくはトリペプチドの使用に関する。本願明細書では例としていくつかのトリペプチドを挙げているが、これを、1,4 O-結合型サッカロース誘導体又は少なくとも１種の1,4 O-結合型サッカロース誘導体を含む糖混合物と一緒に使用し、本発明の粉末を製造することができる。特定の実施形態は、ペプチド、好ましくはトリペプチドが、少なくとも１個のイソロイシン、好ましくは２個のイソロイシンを含むもので、特に有用な実施形態では、３個のイソロイシンからなるトリペプチドである。
【００４３】
これに関連して、（ａ）少なくとも１種の1,4 O-結合型サッカロース誘導体又は少なくとも１種の1,4 O-結合型サッカロース誘導体を含む糖混合物の比率が少なくとも25質量％、好ましくは60〜99質量％、特に好ましくは80〜90質量％、（ｂ）ペプチド、好ましくはトリペプチド、特に好ましくはトリイソロイシンの比率が１〜19.99質量％、（ｃ）医薬有効成分、好ましくはペプチド／タンパク質で、その比率が0.01質量％から最大で74質量％を有する粉末は、本発明によるものとみなされる。この場合も、個々の固形分の合計が最大で100質量％になるということがあてはまる。さらに、本発明によると、下記の組成を有する粉末は本発明に合致する。89質量％の少なくとも１種の1,4 O-結合型サッカロース誘導体又は少なくとも１種の1,4 O-結合型サッカロース誘導体を含む糖混合物／１質量％のペプチド、好ましくはトリペプチド、さらに好ましくはイソロイシン含有トリペプチド、特に好ましくはトリイソロイシン／10質量％の医薬有効成分、即ち、(89/1/10)、あるいは、(88/2/10)、(87/3/10)、(86/4/10)、(85/5/10)、(84/6/10)、(83/7/10)、(82/8/10)、(81/9/10)、(80/10/10)、(79/11/10)、(78/12/10)、(77/13/10)、(76/14/10)、(75/15/10)、(74/16/10)、(73/17/10)、(72/18/10)又は(71/19/10)で、前記において、医薬有効成分の割合を10質量％から0.01質量％まで減らすことができ、例えば、9.99、---9.9、9.8、9.7、---9.3、9.2、9.1、---9、8、7、6、5、4、3、2、1、---0.9、0.8、0.7、---0.66、---0.6、0.5、0.4、0.3、0.2、0.1、0.09、0.08、0.07、0.06、0.05、0.04、0.03、0.02、0.01質量％に減らし、それに応じて1,4 O-結合型サッカロース誘導体又は少なくとも１種の1,4 O-結合型サッカロース誘導体を含む糖混合物の比率を、例えば、80.01、---80.1、80.2、80.3、---80.8、80.9、81、82、83、84、85、86、87、88、89、---89.1、89.2、89.3、---89.33、89.4、89.5、89.6、89.7、89.8、89.9、---89.91、89.92、89.93、---89.97、89.98、89.99質量％に増やすことができ、粉末の乾燥質量に対する質量比の合計が100質量％になるようにする。そこで、以下の組成を有する粉末も本発明に合致する。80質量％の少なくとも１種の1,4 O-結合型サッカロース誘導体又は少なくとも１種の1,4 O-結合型サッカロース誘導体を含む糖混合物／19質量％のペプチド、好ましくはトリペプチド、特に好ましくはトリイソロイシン／１質量％の医薬有効成分、即ち、(80/19/1)、あるいは、(80/18/2)、(80/17/3)、(80/16/4)、(80/15/5)、(80/14/6)、(80/13/7)、(80/12/8)、(80/11/9)、(80/10/10)、(70/19/11)、(70/18/12)、(70/17/13)、(70/16/14)、(70/15/15)、(70/14/16)、(70/13/7)、(70/12/18)、(70/11/19)、(70/10/20)、(60/20/20)、(60/19/21)、(60/18/22)、(60/17/23)、(60/16/24)、(60/15/25)、(60/14/26)、(60/13/27)、(60/12/28)、(60/11/29)、(60/10/30)で、トリペプチド、好ましくはトリイソロイシンの比率を10質量％から１質量％に減らすこともでき、例えば、9.99、---9.9、9.8、9.7、---9.3、9.2、9.1、---9、8、7、6、5、4、3、2、1.9、1.8、1.7、---1.66、---1.6、1.5、1.4、1.3、1.2、1.1、１質量％まで減らすことができ、それに応じて、医薬有効成分、好ましくはペプチド／タンパク質の比率を、例えば、30.1、30.2、30.3、---30.8、30.9、31、32、33、34、35、36、37、38、38.1、38.2、38.3、---38.33、---38.4、38.5、38.6、38.7、38.8、38.9、---39質量％まで増やすことができ、粉末の乾燥質量に対する質量比の合計を100質量％とする。ペプチド（治療用有効成分として提供されるものではないペプチド）、好ましくはトリペプチドの比率を本願明細書に示したように10質量％から１質量％に下げると、粉末における1,4 O-結合型サッカロース誘導体又は少なくとも１種の1,4 O-結合型サッカロース誘導体を含む糖混合物の比率を上げることもできる。例えば、有効成分を10質量％で一定にして、1,4 O-結合型サッカロース誘導体又は少なくとも１種の1,4 O-結合型サッカロース誘導体を含む糖混合物の比率が80.1、80.2、80.3、---80.8、80.9、81、82、83、84、85、86、87、88、88.1、88.2、88.3、---88.33、---88.4、88.5、88.6、88.7、88.8、88.9又は89質量％の粉末を製造することができる。
【００４４】
さらに、本発明の別の実施形態によると、粉末に、Tween 20、40、60、80、Brij 35、Pluronic F 88及びPluronic F 127等のような界面活性物質が含まれてもよい。これらの物質は、0.01〜0.1質量％濃度で使用することが好ましい。少なくとも１種の1,4 O-結合型サッカロース誘導体又は少なくとも１種の1,4 O-結合型サッカロース誘導体を含む糖混合物を含有し、さらにTween 20を界面活性物質として濃度0.01〜0.1質量％で含む噴霧乾燥粉末が特に好ましい。
更なる実施形態によると、本発明の粉末中の粒子は、ＭＭＤ及び／又はＭＭＡＤが１〜10μｍ、好ましくは１〜５μｍである。
別の実施形態では、本発明は本願明細書中に記載の組成物のいずれか１つを有する噴霧乾燥粉末であって、ガラス化温度が40℃より高いことを特徴とする噴霧乾燥粉末に関する。従来、本発明に該当する粉末の最高ガラス化温度は、およそ96〜110℃である。別のケースとして、この値がさらに高くてもよい。
また、本発明は、本願明細書に記載した本発明による噴霧乾燥粉末のうちの少なくとも１種を含有する医薬組成物に関する。
【００４５】
本発明の噴霧乾燥粉末の製造：
また、本発明は、本願明細書でより徹底的に説明した噴霧乾燥粉末の１つの製造方法を提供する。この製造方法は、医薬有効成分と少なくとも１種の1,4 O-結合型サッカロース誘導体又は少なくとも１種の1,4 O-結合型サッカロース誘導体を含む糖混合物とを含む噴霧用溶液／懸濁液を、200／120℃（入口温度／出口温度）未満で、好ましくは186／96℃で、また、好ましくは186／96℃〜60／40℃で、例えば、180〜150℃／95〜80℃で噴霧することを特徴とする。本発明の方法は、いくつかの実施例を参照する「実施例」のセクションにより詳細に記載されている。
基本的には、本発明の粉末は、医薬有効成分、好ましくはペプチド又はタンパク質の形態の生物学的高分子を、それぞれの有効成分の溶解条件に応じて水溶液に溶解する。通常、ｐＨ３〜11、好ましくはｐＨ3.5〜９の緩衝液が用いられる。吸入可能な粉末を調製するには、ｐＨ４〜7.8の水溶液が特に有利である。十分な溶解度を得るには、溶液のｐＨ値をペプチド／タンパク質のｐＩより低くするとよい。水溶液にはさらに、例えばアセトン、アルコール等のような水溶性有機溶媒を付加的に含有させてもよい。メタノール、エタノール、プロパノール（ｎ-プロパノール又はイソプロパノール）等の低級アルコール類が特に好適である。こうして得られる混合溶媒系は、水溶性有機溶媒を通常は10〜20容量％含む。噴霧溶液中の固形分は、通常0.01〜20質量％、好ましくは0.05〜10質量％、特に好ましくは0.1〜５質量％である。本発明では、噴霧乾燥粉末は、固形分10質量％、3.33質量％又は2.00質量％の水溶液から調製した。凍結乾燥粉末は、固形分10質量％の水溶液から始めて調製した。
【００４６】
通常、本願明細書で例を挙げて記載した賦形剤又は好適な賦形剤の混合物を、製薬グレードの水又はｐＨ３〜11、好ましくはｐＨ3.5〜９、特に好ましくはｐＨ4.0〜7.8の適当な緩衝液を用いて第２の容器中で溶解し、第２工程で有効成分溶液と一緒に混合する。その後、この溶液／懸濁液を、製薬グレードの水又はｐＨ３〜11、好ましくはｐＨ3.5〜９、特に好ましくはｐＨ4.0〜7.8の好適な緩衝液を用いて所望の固形分になるよう調整する。
そこで、本発明は以下の特徴を有する噴霧乾燥粉末の製造方法に関する。
ａ）医薬有効成分を水溶液／懸濁液に溶解／懸濁し、
ｂ）ラクトスクロース、グルコシルスクロースもしくはマルトシルスクロースといった化合物の群から選択される1,4 O-結合型サッカロース誘導体の１種以上、又は、これらの1,4 O-結合型サッカロース誘導体の少なくとも１種を含有する糖混合物を水溶液／懸濁液に溶解／懸濁し、
ｃ）医薬有効成分と、1,4 O-結合型サッカロース誘導体又は少なくとも１種の1,4 O-結合型サッカロース誘導体を含む糖混合物とが別々の溶液／懸濁液に溶解／懸濁している場合は、それらを混合し、
ｄ）1,4 O-結合型サッカロース誘導体の１種以上と医薬有効成分とを含む溶液／懸濁液を、温度200／120℃（入口温度／出口温度）未満で、好ましくは温度60／40℃から温度186／95℃の範囲で噴霧することを特徴とする。
【００４７】
1,4 O-結合型サッカロース誘導体は、少なくとも１種の1,4 O-結合型サッカロース誘導体を含む糖混合物の一部とすることもできる。好適な糖混合物に相当する例については、「定義」のセクションで例を挙げてより徹底的に記載されている。この場合、糖混合物は、1,4 O-結合型サッカロース誘導体とともに、１種以上の単糖類、ニ糖類及び／又は多糖類を含むことができるが、粉末製造上から単糖類及び／又はニ糖類を添加して使うことが好ましい。本発明では、例えば、ラクトスクロース、ラクトース及びサッカロースを含む糖混合物の使用が可能であり、糖類の割合全体に対するラクトスクロースの比率は40質量％以上、好ましくは55質量％以上、特には88質量％以上が好ましい。好ましい糖混合物としては、「乳果オリゴ（登録商標）LS55P」（株式会社林原商事、日本）と呼ばれ、LS55Pと略記されるもので、少なくとも55％のラクトスクロースと、最大で25質量％のラクトースと最大で10質量％のサッカロースとを含む糖混合物である。別の実施形態によると、「乳果オリゴ（登録商標）LS90P」と呼ばれ、LS90Pと略記される糖混合物で（株式会社林原商事、日本）、少なくとも88％のラクトスクロースと、最大で10質量％のラクトースとサッカロースとを含む糖混合物である。さらに、グルコシルスクロース及びマルトシルスクロースの組合せで構成される糖混合物を使用することができ、他の単糖類、ニ糖類及び／又は多糖類と一緒に使用することが好ましい。また、本発明では、グルコシルスクロースとマルトシルスクロース、サッカロース、グルコース及び／又はフルクトースで構成される、対応の糖混合物が好適であり、糖の割合全体に対してグルコシルスクロースとマルトシルスクロースの比率は25質量％以上であることが好ましい。さらに好ましい実施形態によると、グルコシルスクロースとマルトシルスクロースそれぞれの比率は、糖の割合全体に対して少なくとも18質量％である。また別の好ましい実施形態では、糖混合物が「カップリングシュガー（登録商標）」（株式会社林原商事、日本）と呼ばれる糖混合物であり、グルコシルスクロースとマルトシルスクロースを少なくとも18質量％、サッカロースを11〜15質量％、グルコースとフルクトースをそれぞれ５〜９質量％含む。さらに本発明では、糖混合物が「カップリングシュガーＳ（登録商標）」（株式会社林原商事、日本）と呼ばれる糖混合物で、グルコシルスクロース及び／又はマルトシルスクロースを少なくとも25質量％、サッカロースを48〜56質量％、グルコースとフルクトースを10質量％以下含む。
【００４８】
1,4 O-結合型サッカロース誘導体又は少なくとも１種の1,4 O-結合型サッカロース誘導体を含む糖混合物の噴霧用溶液／懸濁液中の賦形剤含有量は、噴霧溶液の固形分に対して25〜99.99質量％、好ましくは60〜99質量％、さらに好ましくは60〜90質量％、特に好ましくは80〜90質量％である。医薬有効成分濃度は、噴霧用溶液又は懸濁液の固形分に対して通常0.01〜75質量％、好ましくは0.01〜40質量％、特に好ましくは0.01〜30質量％である。この分野の当業者であれば、本願明細書前記記載の粉末組成物を使って噴霧用の溶液／懸濁液を作製することは可能であり、噴霧後、該当の粉末組成物となる。
また本発明は、前記記載の噴霧乾燥粉末の製造方法であって、噴霧用溶液／懸濁液の固形分中に25〜99.99質量％、好ましくは60〜99質量％の少なくとも１種の1,4 O-結合型サッカロース誘導体又は少なくとも１種の1,4 O-結合型サッカロース誘導体を含む糖混合物を含むことを特徴とする製造方法に関する。別の実施形態によると、本発明は対応の製造方法であり、噴霧用溶液／懸濁液の固形分中に0.01〜75質量％、好ましくは0.01〜30質量％、特に好ましくは0.33〜30質量％の医薬有効成分を含むことを特徴とする方法に関する。
本発明のさらなる実施形態によると、固形分の、（ａ）少なくとも25質量％、例えば、25〜99.99質量％が少なくとも１種の1,4 O-結合型サッカロース誘導体又は少なくとも１種の1,4 O-結合型サッカロース誘導体を含む糖混合物であり、（ｂ）少なくとも0.01質量％、好ましくは0.01〜75質量％が医薬有効成分、好ましくは生物学的高分子である、噴霧溶液／懸濁液を製造、噴霧するものであって、質量パーセントの合計が噴霧溶液の固形分に対して最大で100質量％となる。好ましい実施形態の１つによると、固形分の、（ａ）少なくとも60質量％、好ましくは60〜90質量％が少なくとも１種の1,4 O-結合型サッカロース誘導体又は少なくとも１種の1,4 O-結合型サッカロース誘導体を含む糖混合物であり、（ｂ）0.01〜40質量％が医薬有効成分、好ましくは生物学的高分子である噴霧用溶液／懸濁液を製造、噴霧するものであって、溶液又は懸濁液の質量パーセントの合計が噴霧溶液の固形分に対して最大で100質量％となる。
【００４９】
さらに、本願明細書で前記記載の本発明の粉末によると、本発明の噴霧用溶液／懸濁液は、別の実施形態では１種以上の医薬的に許容できる賦形剤及び／又は１種以上の塩を含む。賦形剤としては、アミノ酸、ペプチドもしくはその塩、糖類、ポリオール、有機酸の塩及び／又はポリマーが好ましい。
医薬有効成分と少なくとも１種の1,4 O-結合型サッカロース誘導体又は少なくとも１種の1,4 O-結合型サッカロース誘導体を含む糖混合物に加えて、追加賦形剤としてアミノ酸及び／又はペプチド又はタンパク質を１種以上含むのが好ましい。そこで、本発明は、噴霧乾燥粉末の製造方法であって、噴霧用溶液／懸濁液が、その固形分を基準に（ａ）少なくとも25質量％、好ましくは少なくとも60質量％の少なくとも１種の1,4 O-結合型サッカロース誘導体又は少なくとも１種の1,4 O-結合型サッカロース誘導体を含む糖混合物と、（ｂ）１〜39.99質量％の少なくとも１種のアミノ酸及び／又は少なくとも１種のペプチドと、（ｃ）少なくとも0.01質量％の医薬有効成分とを含むことを特徴とする製造方法に関する。医薬的に許容できる塩、ペプチド及びアミノ酸をはじめとする好適な賦形剤の例は、本願明細書の「本発明の粉末」のセクションに記載されている。ここに記載のペプチド類は医薬有効成分を表すものではなく、たとえ医薬有効成分自体がペプチドであるとしてもさらに添加して使うものである。
【００５０】
さらに好ましい実施形態の噴霧溶液は、少なくとも１種の1,4 O-結合型サッカロース誘導体又は少なくとも１種の1,4 O-結合型サッカロース誘導体を含む糖混合物に加えて、追加賦形剤として１種以上のアミノ酸を含む。噴霧溶液／懸濁液の固形分を基準に、（ａ）少なくとも25質量％、好ましくは60〜90質量％の少なくとも１種の1,4 O-結合型サッカロース誘導体又は少なくとも１種の1,4 O-結合型サッカロース誘導体を含む糖混合物と、（ｂ）１〜19.99質量％のアミノ酸、（ｃ）少なくとも0.01質量％の医薬有効成分、好ましくは、例えば、抗体としてのペプチド／タンパク質を含む噴霧溶液／懸濁液が有利であると考えられる。この場合、医薬有効成分の割合は、好ましくは0.01質量％から最大で74質量％で、好ましくは0.01〜39質量％で、固形分の全量が最大で100％となる。この場合、当業者であれば、該当する粉末を製造し、その質量比を微調整して固形分の割合全体で、最大100質量％になるようにすることができる。
医薬有効成分の割合（全固形分基準）が例えば10質量％で、少なくとも１種の1,4 O-結合型サッカロース誘導体又は少なくとも１種の1,4 O-結合型サッカロース誘導体を含む糖混合物の割合が80質量％である場合、この分野の当業者であれば、噴霧溶液／懸濁液にアミノ酸を最大で10質量％添加できることがわかる。
【００５１】
別の好ましい実施形態によると、噴霧溶液は、少なくとも１種の1,4 O-結合型サッカロース誘導体又は少なくとも１種の1,4 O-結合型サッカロース誘導体を含む糖混合物に加えて、追加賦形剤として１種のイソロイシンを含む。噴霧溶液／懸濁液の固形分を基準に（ａ）少なくとも25質量％、好ましくは60〜90質量％の少なくとも１種の1,4 O-結合型サッカロース誘導体又は少なくとも１種の1,4 O-結合型サッカロース誘導体を含む糖混合物、（ｂ）１〜19.99質量％のイソロイシン、（ｃ）少なくとも0.01質量％の医薬有効成分、好ましくは、例えば、抗体としてのペプチド／タンパク質を含む噴霧溶液／懸濁液が有利であると考えられる。この場合、医薬有効成分の割合は、固形分の比率の合計を最大100％とした場合、少なくとも１種の1,4 O-結合型サッカロース誘導体又は少なくとも１種の1,4 O-結合型サッカロース誘導体を含む糖混合物の濃度に対し、0.01質量％から最大で74質量％が好ましく、0.01〜39質量％がさらに好ましい。この場合、この分野の当業者であれば、該当する粉末を製造し、その質量比を微調整して固形分の比率を合わせて最大100質量％になるようにすることができる。医薬有効成分の割合（全固形分基準）が例えば10質量％で、少なくとも１種の1,4 O-結合型サッカロース誘導体又は少なくとも１種の1,4 O-結合型サッカロース誘導体を含む糖混合物の割合が80質量％である場合、この分野の当業者であれば、噴霧溶液／懸濁液にイソロイシンを最大で10質量％添加できることがわかる。
【００５２】
別の実施形態によると、噴霧溶液は、少なくとも１種の1,4 O-結合型サッカロース誘導体又は少なくとも１種の1,4 O-結合型サッカロース誘導体を含む糖混合物に加えて、１種以上のトリペプチド、好ましくはイソロイシン含有トリペプチド、特に好ましくはトリイソロイシンを含む。噴霧溶液又は懸濁液の固形分を基準に、（ａ）少なくとも25質量％、好ましくは60〜90質量％の少なくとも１種の1,4 O-結合型サッカロース誘導体又は少なくとも１種の1,4 O-結合型サッカロース誘導体を含む糖混合物、（ｂ）１〜19.99質量％のトリペプチド、好ましくはトリイソロイシン、（ｃ）少なくとも0.01質量％の医薬有効成分、好ましくは、例えば抗体としてのペプチド／タンパク質を含み、固形分比率の合計が最大で100質量％である噴霧溶液又は懸濁液が有利だと思われる。この場合、医薬有効成分の割合は、固形分の割合の合計を最大で100％として、少なくとも１種の1,4 O-結合型サッカロース誘導体又は少なくとも１種の1,4 O-結合型サッカロース誘導体を含む糖混合物の濃度に対し0.01質量％から最大で74質量％が好ましく、0.01〜39質量％がさらに好ましい。この場合、この分野の当業者であれば、該当する粉末を製造し、その質量比を微調整して固形分の割合全体を最大で100質量％とすることができる。医薬有効成分の割合（全固形分基準）が例えば10質量％で、少なくとも１種の1,4 O-結合型サッカロース誘導体又は少なくとも１種の1,4 O-結合型サッカロース誘導体を含む糖混合物の割合が80質量％である場合、この分野の当業者であれば、噴霧溶液／懸濁液にトリペプチド、好ましくはトリイソロイシンを最大で10質量％添加できることがわかる。
既に記したように、噴霧用溶液をｐＨ３〜11、好ましくは3.5〜９、特に好ましくは4.0〜7.8で製造及び噴霧すると有利である。好適な緩衝剤系はこの分野の当業者には公知である。一般に、無機塩又は有機塩を緩衝剤系として利用することが、とりわけ有利であることがわかっている。
【００５３】
通常、それぞれのタンパク質又はペプチドに対する最適な賦形剤やタンパク質含有量は実験的に求められる。本発明の好ましい調剤には、少なくとも１種の追加賦形剤が含まれるとよい。これは分散性や流動性などの粉末特性を改善しながら、凝集体の形成をさらに抑え続けることが目的である。
噴霧は、従来の噴霧乾燥器、例えば、ニロ社（ソーボー（Soeborg）、デンマーク）、Buchi Labortechnik社（フラウィル、スイス）等が製造した装置で行う。噴霧乾燥の最適条件はそれぞれの処方によって異なるので、実験的に求めなければならない。通常、使用するガスは空気であるが、窒素又はアルゴン等のような不活性ガスも好適である。さらに、噴霧乾燥温度、即ち、入口温度及び出口温度は使用する有効成分の温度に対する反応性にしたがって、それぞれのケースで使用する安定化剤に応じて決められる。入口温度は通常50〜200℃、一方、出口温度は通常30〜150℃である。本発明においては、入口温度は約170〜185℃、出口温度は80〜100℃を採用した。しかしながら、入口温度は200℃まで、好ましくは60〜185℃、出口温度は120℃まで、好ましくは40〜105℃を、安定化剤部位に応じて採用可能である。噴霧は、通常、およそ20〜150psi、好ましくは約30又は40〜100psi、例えば、約30、40、50、60、70、80、90又は100psiの圧力で行う。
【００５４】
噴霧乾燥器ビュッヒB290（Buchi B290）の場合、「液体供給量」は通常0.1〜100ml／分、好ましくは0.1〜30ml／分で、例えば約３ml／分である。これに関連して、アスピレータ流量は20〜40m3／時、好ましくは30〜40m3／時、例えば38.3m3／時であり、霧化速度は0.3〜2.5m3／時、好ましくは約0.67m3／時、1.05m3／時、1.74m3／時が適切であることがわかった。
噴霧乾燥有効成分調剤、好ましくはタンパク質粉末調剤に、任意であるが第２のゆるやかな乾燥（後乾燥）を施すことができる。その目的は調剤中の残留含水量をより均一にすることで、好ましくは２質量％未満にすることで、有効成分の安定性を向上させるとともに粉末特性であるガラス化温度、流動及び分散性を改善する。後乾燥工程の条件は、有効成分の凝集体の形成が著しく増えないよう選択しなければならない。このことは、特に生物学的高分子、例えばペプチド／タンパク質を使用するときに該当する。噴霧乾燥有効成分含有粉末調剤は、好ましくは乾燥条件下（低い相対湿度のもと）で製造、さらに加工及び保存されることが好ましい。噴霧乾燥後の残留含水量が比較的多くても、第２の乾燥工程によって粉末中の水分を一層減少させることが可能である。驚くべきことに、処理条件及び保存条件が最適でないとしても、好適な調剤においては、本発明の賦形剤によりタンパク質が安定化する。
【００５５】
噴霧乾燥した乾燥粉末調剤の特性
本発明に従って製造した乾燥タンパク質粉末調剤の残留含水量は15質量％未満、通常は10質量％未満、好ましくは６質量％未満である。特に好ましくは、噴霧乾燥した乾燥タンパク質粉末調剤の残留含水量は５質量％未満で、さらに好ましくは３質量％未満、0.2〜2.0質量％の残留含水量が最も好ましい。残留含水量が低いほど、充填及び保存期間中の調剤の安定性は向上する。さらに、本発明の乾燥タンパク質粉末調剤はとりわけ吸湿性を示す。即ち、この調剤は周囲の水分を吸収する傾向を有する。これを防ぐために、通常、粉末の保存は、大気中の水分を中に入れない容器に入れる等、例えばブリスター包装にする。驚いたことに、本発明の粉末の調剤のうち選ばれたいくつかでは、相対湿度43％で１ヶ月間開放状態で保存しても、タンパク質の安定性と吸入性の両方の面で安定した状態を保っていることがわかった。
本願明細書で記載した賦形剤による安定化効果で、噴霧乾燥中及び保存中のタンパク質を非常に厳しいストレスから保護することができる。賦形剤が存在しないと、噴霧乾燥させたタンパク質調剤はかなりの凝集体を形成する。熱、剪断応力及び空気と水との界面での変性といった処理にかかわる要因により、噴霧乾燥時に凝集が起こり（凝集体：およそ3.7又は6.6％まで）、さらにその後の第２の乾燥でも凝集が起こる（凝集体：およそ4.0又は5.8％まで）。保存中、タンパク質を安定化させるための水和物の殻がないため、大量の凝集体が形成される（凝集体：およそ11.8〜18.9％）。
本発明の好適な噴霧乾燥調剤は、タンパク質のみの調剤と比較して、噴霧乾燥後の凝集体の形成を抑えることができるし、また、種々の保存条件下で保存しても凝集体の形成を低い割合に抑えることができる。タンパク質のみの調剤の場合は約4.0％の凝集体含有率であるが、それに対して、噴霧乾燥及びそれに続く第２の乾燥で凝集体は約0.5〜約1.8％にとどまる。とりわけ厳しい保存条件（40℃、相対温度75％）、即ち、強制的保存安定性の場合、タンパク質のみの調剤（凝集体：約18.2〜18.9％）や賦形剤としてトレハロースを用いた類似の参照用調剤に対して、本発明の好適な調剤は、凝集体含有率約1.0〜約13.1％であり、この優位性は明白である。この優位性は実施例４に示す調剤との比較で特に顕著となる。噴霧溶液にトリイソロイシンを添加することにより、粉末の空気力学特性が著しく向上する。驚くべきことに、少なくとも１種の1,4 O-結合型サッカロース誘導体とトリイソロイシン、とりわけLS55PとトリイソロイシンやLS90Pとトリイソロイシンを含む組合せの場合のみ、タンパク質が凝集体を形成しないように（凝集体：0.7〜4.4％のみ）保存することができる。ＷＯ01/32144記載のトリロイシンとラフィノースとの組合せ（凝集体：12.6％）又はヒドロキシエチルデンプンとの組合せ（凝集体：約18.6％）だけでなく、従来技術で優れた安定化剤として記載されているトレハロースの場合も、トリイソロイシンとの組合せでは特に厳しい条件下でのタンパク質凝集体形成を防ぐことはできない。LS55P-トリイソロイシン調剤及びLS90P-イソロイシン調剤はいずれも、サッカロース-トリイソロイシン調剤（凝集体：5.6％）やサッカロース-ラクトース-トリイソロイシン調剤（凝集体：8.8％）と比べると明らかに優れている。このことはかなり驚くべきことであるが、それは、LS55Pにはサッカロースとともにラクトースも25％まで含有されているからである。還元糖のラクトースがタンパク質の安定性に及ぼすマイナスの影響が、LS55Pの場合、1,4 O-結合型サッカロース誘導体により、含まれているラクトスクロースにより過大に補われていることが明らかである。粉末調剤の糖部分においてラクトスクロースの割合が高いほど、タンパク質安定性にとって非常に有利になる（LS90P組成参照）。
【００５６】
調剤が、著しい不安定化条件下での比較的短い保存期間（１週間、40℃、相対湿度75％）したところ、混合されているタンパク質に対して既に顕著な安定化効果を及ぼしているのであれば、かなり穏やかな標準的保存条件のもとで長期間（１年間、乾燥、約25℃）にわたる保存であっても、タンパク質は安定化する。
平衡化（equilibration）後、乾燥状態、40℃で４週間保存（「平衡化保存安定性」）すると、LS55Pやカップリングシュガーを含む粉末調剤は、凝集体含有率が低い（約1.4〜3.2％）という特徴を示すが、これはタンパク質だけの粉末（凝集体含有率：約11.8％）と比較すると顕著である。
真空化後、乾燥状態、40℃で４週間保存（「真空乾燥保存安定性」）すると、LS55Pやカップリングシュガーを含む粉末調剤は、凝集体含有率が低い（約1.1〜2.1％）という特徴を示すが、これはタンパク質だけの粉末（凝集体含有率：約13.2％）と比較すると顕著である。
細粒分が約35％の、LS55P（80％）とイソロイシン（10％）とIgG1（10％）とによる調剤の場合、真空乾燥を行った後に窒素雰囲気下で充填し、乾燥状態で２〜８℃、25℃、40℃で３ヶ月間保存すると、凝集体含有率は1.9％未満である。
【００５７】
LS55P（80％）とトリイソロイシン（10％）とIgG1（10％）の調剤は、噴霧乾燥後のＭＭＡＤが約3.9μｍで細粒分が約58.3％であるが、真空乾燥を行った後に窒素雰囲気下で充填し、乾燥状態で２〜８℃、25℃で３ヶ月間保存すると、凝集体含有率は1.9％未満で、また、乾燥状態、40℃で保存すると（３ヶ月安定性）、凝集体含有率2.6％未満を示す。
さらに、前記のLS55P（80％）とトリイソロイシン（10％）とIgG1（10％）との調剤は、相対湿度が約43％で温度25℃での１ヶ月間の開放状態の保存（１ヶ月開放状態安定性）後も、ＭＭＡＤがほぼ同じくらい低く（約3.8μｍ）、同じように細粒分が高い（約59.6％）状態で、凝集体含有率は低いままだった（約1.3％）。
LS90P（90％）とIgG1（10％）との調剤は、噴霧乾燥後のＭＭＡＤが約3.8μｍ、ＭＭＤが約2.8μｍで、細粒分が約24％であるが、真空乾燥を行った後に窒素雰囲気下で充填し、乾燥状態で２〜８℃、25℃、40℃で１ヶ月又は３ヶ月間保存すると（１ヶ月安定性又は３ヶ月安定性）、凝集体含有率1.2％未満又は2.2％未満を示す。
LS90P（80％）とイソロイシン（10％）とIgG1（10％）との細粒分約28％の調剤は、真空乾燥を行った後に窒素雰囲気下で充填し、乾燥状態で２〜８℃、25℃、40℃で１ヶ月又は３ヶ月間保存すると（１ヶ月安定性又は３ヶ月安定性）、凝集体含有率0.9％未満又は1.1％未満を示す。
LS90P（80％）とトリイソロイシン（10％）とIgG1（10％）との調剤で、噴霧乾燥後のＭＭＡＤが約4.8μｍ、細粒分が約53.2％の調剤は、真空乾燥を行った後に窒素雰囲気下で充填し、乾燥状態で２〜８℃、25℃、40℃で１ヶ月又は３ヶ月間保存すると（１ヶ月安定性又は３ヶ月安定性）、凝集体含有率1.0％未満又は2.3％未満を示す。
【００５８】
さらに、前記LS90P（80％）とトリイソロイシン（10％）とIgG1（10％）との調剤の様々な種類においては、相対湿度約43％、温度25℃で１ヶ月又は３ヶ月間開放状態で保存すると（１ヶ月又は３ヶ月開放状態安定性）、0.5％から0.7又は0.8％の低い凝集体含有率を示し続ける。噴霧乾燥後、ＭＭＡＤは約3.9〜3.3μｍ、細粒分は約55.6〜58.9％である。相対湿度43％、温度25℃での１ヶ月開放保存後、前記調剤のＭＭＡＤは低いままで（約4.1〜3.5μｍ）、細粒分は高いまま（約62.3〜67.3％）を示し続ける。
様々な噴霧乾燥条件で粉末を製造することができ、質量平均粒径（ＭＭＤ）が好ましくは20μｍ未満、さらに好ましくは10μｍ未満の粉末を製造することができる。特に好ましい実施形態によると、本発明のこの粒子の平均粒径は7.5μｍ未満、好ましくは５μｍ未満である。平均粒径が４μｍ未満の粒子は特に好ましく、さらに、3.5μｍ未満はさらに好ましい。一般に、平均粒径が0.1〜５μｍ、好ましくは0.2〜４μｍの粒子を製造することができる。別の実施形態では、ラクトースのような非吸入性粒子で、粒径が少なくとも40μｍ、好ましくは40〜200μｍの粒子を当該粒子に添加する。この割合は、好ましくは少なくとも15％、より好ましくは少なくとも20％、さらに好ましくは少なくとも30％、さらにより好ましくは少なくとも40％、特に好ましくは少なくとも50％又は60％である。
【００５９】
平均粒径（ＭＭＤ＝質量平均粒径）とともに、空気動力学的粒径（ＭＭＡＤ）によって本質的に吸入性が決まる。好ましくは、本発明の粒子のＭＭＡＤは10μｍ未満が好ましく、特に好ましくは7.5μｍ未満である。ＭＭＡＤが5.5μｍ未満、好ましくは５μｍ未満、さらに好ましくは4.5μｍ未満の粒子からなる粉末が特に有利である。実施例に記載の粉末は、最適な噴霧乾燥条件と、本発明の賦形剤の選択と濃度とを組み合わせることによって、相応の粒径を有するものを製造することができる。特に、アミノ酸及び／又はトリペプチドを混合すると、粒子特性を改善し、ＭＭＡＤが7.5μｍ未満、好ましくは5.5μｍ未満の吸入可能粒子の割合を増やすことになる。イソロイシン又はトリイソロイシンの添加により、ＦＰＦが28％より多い、好ましくは40％より多い、さらに好ましくは50％より多い、より好ましくは55％より多い吸入可能粉末を製造することができる（実施例参照）。
本発明の粉末は、ガラス化温度が少なくとも40℃、好ましくは少なくとも50℃、さらに好ましくは少なくとも55℃、さらにより好ましくは少なくとも60℃であるという特徴をさらに有する。特に好ましい粉末のガラス化温度は少なくとも65℃である。一般に、本発明の粉末のガラス化温度は40〜110℃である。したがって、本発明は、医薬有効成分と、LS90P、LS55P、カップリングシュガー又はカップリングシュガーＳとを含む粉末、好ましくは噴霧乾燥粉末であって、そのガラス化温度が40℃以上、好ましくは45〜60℃以上の粉末に関する。さらに好ましい実施形態によると、ガラス化温度は55℃以上、好ましくは55〜60℃以上である。
【００６０】
噴霧乾燥粉末の使用
本発明の粉末は医薬品の製造に適しており、好ましくは、吸入性医薬品の製造に適している。
凍結乾燥粉末：
別の方法として、凍結乾燥とその後の微粉砕によって粉末を製造することもできる（実施例参照）。本願明細書に記載の実施例においては、凍結乾燥用バイアル中でスパチュラを使ってできるだけ簡単に微粉砕工程を行う。当然のことながら、カッティングミル、ボールミル、ロッドミル、モルタルミル、エアジェットミル等のミル又は他の好適な方法でも凍結乾燥物を微粉砕することができる（Bauer、Fromming, Fuhrer、６版参照）。
凍結乾燥後に微粉砕した乾燥粉末調剤の特性：
本発明で作製する乾燥タンパク質粉末調剤の残留含水量は15質量％未満、通常は10質量％未満、好ましくは５質量％未満である。噴霧乾燥によるタンパク質粉末調剤の残留含水量は３質量％未満であるとさらに好ましく、２質量％未満であると特に好ましく、0.2〜1.5質量％の残留含水量が最も好ましい。残留含水量が低いほど、充填中及び保存期間中の調剤の安定性は向上する。さらに、本発明の乾燥タンパク質粉末調剤は、とりわけ吸湿性を示す。即ち、この調剤は周囲の水分を吸収する傾向を有する。これを防ぐために、通常、粉末の保存は、大気中の水分を中に入れない容器、例えばブリスター包装などにする。
【００６１】
本願明細書で記載した賦形剤の安定化効果により、凍結乾燥中及び保存期間中の過酷なストレスからタンパク質を保護することができる。賦形剤が存在しない場合、凍結乾燥させたタンパク質のみの調剤はかなりの凝集体を形成する。凍結時のストレス、濃縮、ｐＨの変化、及び、空気と水との界面での変性といった処理にかかわる要因により、凍結乾燥の間に凝集が起こる（凝集体：およそ2.1％まで）。タンパク質を安定化させるための水和物の殻がないため、保存期間中に大量の凝集体が形成される（凝集体：20.5％）。
本発明の好適な凍結乾燥調剤は、タンパク質のみの調剤と比べると、凍結乾燥後の凝集体の形成を抑えることができるし、また、保存条件が様々であっても凝集体の形成を非常に低く抑えておくことができる。凍結乾燥後に微粉砕した凍結乾燥物は、とりわけ厳しい保存条件（40℃、相対温度75％）において、即ち、「強制的保存安定性」において、タンパク質のみの調剤（凝集体含有率：約14.5％）や賦形剤としてマンニトールを含む類似の参照用調剤（凝集体含有率：約34.0％）に対して、本発明の好適な調剤は凝集体含有率が約1.2〜約1.5％という明瞭な優位性で際立つ。
特に不安定にさせる条件で比較的短い保存期間（１週間、40℃、相対湿度75％）に、混合したタンパク質に対して顕著な安定化効果を既に及ぼしている調剤であれば、長期にわたりかなり穏やかな標準的保存条件のもとであれば（例えば１年間、乾燥状態、約25℃）タンパク質を安定化させる。
【００６２】
凍結乾燥後、微粉砕、平衡化し、40℃かつ乾燥状態で４週間保存（「平衡化保存安定性」）すると、LS55P及びカップリングシュガーを含む粉末調剤は凝集体含有率が低い（約2.6％及び約4.6％）という特徴を示すが、これは、タンパク質のみの粉末（凝集体含有率：約15.3％）やマンニトールを賦形剤に使った類似の参照用調剤（凝集体含有率：約11.6％）と比較すると顕著である。
凍結乾燥後、微粉砕、真空乾燥を行い、40℃かつ乾燥状態で４週間保存（「真空乾燥保存安定性」）すると、LS55P及びカップリングシュガーを含む粉末調剤は凝集体含有率が低い（約1.2％及び約1.5％）という特徴を示すが、これは、タンパク質のみの粉末（凝集体含有率：約14.5％）やマンニトールを賦形剤に使った類似の参照用調剤（凝集体含有率：約6.2％）と比較すると顕著である。
本発明の粉末はさらに、ガラス化温度が少なくとも40℃、好ましくは少なくとも50℃、さらに好ましくは少なくとも55℃という特徴を有する。一般に、本発明の粉末のガラス化温度は40〜110℃であるが、この値を超えるケースがあってもよい。したがって、本発明は、医薬有効成分と、LS90P、LS55P、カップリングシュガー又はカップリングシュガーＳとを含む粉末、好ましくは凍結乾燥粉末であって、そのガラス化温度が40℃以上、好ましくは45〜60℃以上の粉末に関する。さらに好ましい実施形態によると、ガラス化温度は55℃以上、好ましくは55〜60℃以上、又は110℃までである。
【００６３】
本発明の粉末の投与：
本発明の粉末製剤は、基本的には、いわゆる乾燥粉末吸入器を用いて乾燥粉末のまま直接投与するか、あるいは、懸濁又はエアロゾル状態に再構成してからいわゆる噴霧器を用いて投与することができる。この場合、本発明の吸入粉末は、従来技術から公知の吸入器を用いて投与できる。
本発明による吸入粉末は、例えば、ＵＳ4,570,630Ａに記載されているような計量チャンバーによって保存チャンバーから一回分の投与量を放出する吸入器を用いて、あるいは、ＤＥ3625685Ａに記載されているような他の装置を使って投与することができる。本発明の吸入粉末は、例えばＷＯ94/28958に記載されているような吸入器で使用されているカプセルに充填する（いわゆるインハレット(inhalettes))ことも好ましい。
この他の好適な吸入器の例は、とりわけ米国特許第5,458,135号、米国特許第5,785,049号又はＷＯ01/00263に記載されている。この他の好適な吸入器は、ＷＯ97/41031、米国特許第3,906,950号及び米国特許第4,013,075号からも公知である。乾燥粉末調剤用の分散式吸入器は、他にもＥＰ129985、ＥＰ472598、ＥＰ467172及び米国特許第5,522,385号に記載されている。
本発明の吸入粉末は、例えば、公知の「ターボヘイラー（Turbohaler）（登録商標）」（アストラゼネカＬＰ製）という手段で、あるいは、例えばＥＰ237507Ａに開示されているような吸入器を用いて投与することができる。この他の好適な吸入器としては、「ロタヘイラー（Rotahaler）（登録商標）」又は「ディスカス（Discus）（登録商標）」（ともにグラクソスミスクライン社製）、「スピロス（Spiros）(商標）インヘイラー」（Dura Pharmaceuticals社製）及び「スピンヘイラー（Spinhaler）（登録商標）」（フィスコン社製）が挙げられる。
【００６４】
図２４に、インハレット状態の本発明の医薬品組成物を投与するための特に好ましい吸入器を示す。カプセルから粉末状医薬品を吸入するためのこの吸入器（「ハンディヘラー」）は、２個の窓２を含むハウジング１と、空気導入口が設けられ、スクリーンハウジング４で固定されたスクリーン５を備えたデッキ３と、デッキ３に連結し、研いだ２本のピン７を備え、バネ８に対して可動する押しボタン９を有する吸入チャンバー６と、シャフト１０を介してハウジング１、デッキ３及びキャップ１１と連結し、折り返し可能なマウスピース１２と、流動抵抗を調整するための空気貫通孔１３とによって特徴づけられる。
本願明細書で既に記載したように、好ましい投与を考慮して本発明の吸入粉末をカプセルに充填する場合（インハレット）、充填量は１〜30mgとすることができる。
また、本発明の粉末は、噴射剤ガスを含有する吸入用エアロゾルとして投与することも、噴射剤ガスを使わずに投与することもできる。この場合、本発明の粉末は、溶液又は溶液混合物に懸濁させて圧力をかけて溶かすか、あるいは、水溶液に溶かす。好適な懸濁液又は溶液はこの分野で公知である。溶かして再構成する場合は、例えば、ｐＨ３〜11、好ましくはｐＨ４〜９の生理溶液に粉末を溶かすことが有利である。ｐＨ5.5〜7.8の水溶液に溶かすことが特に有利である。本発明の粉末を溶かすための噴射剤ガスを含む懸濁液又は溶液には、さらに、安定剤、乳化剤、界面活性剤又は水溶性有機溶媒という状態の賦形剤を含んでもよい。該当する物質は当業者には既知であり、例えば、Bauer、Lehrbuch der Pharmazeutischen Technologie、Wissenschaftl、Verlagsgesellschaft mbH、Stuttgart、178-184；Adler、1998「Journal of Pharmaceutical Sciences」88(2)、199-208に記載されている。本発明の粉末を懸濁又は溶かして調製した、該吸入用エアロゾルも本発明である。
【００６５】
本発明の吸入エアロゾルの調製に使用できる噴射剤ガスは、従来技術から既知である。ｎ−プロパン、ｎ−ブタン又はイソブタン等の炭化水素化合物、及び、メタン、エタン、プロパン、ブタン、シクロプロパン又はシクロブタンの好ましくは塩素化誘導体及びフッ素化誘導体等のハロゲン化炭化水素化合物を含む群から、適当な噴射剤ガスを選択する。この場合、上記噴射剤ガスは単独で、又はその混合物として使用できる。特に好ましい噴射剤ガスは、ＴＧ１１、ＴＧ１２、ＴＧ１３４ａ（1,1,1,2-テトラフルオロエタン）、ＴＧ２２７（1,1,1,2,3,3,3-ヘプタフルオロプロパン）及びこれらの混合物から選択されるハロゲン化アルカン誘導体であり、この中でもＴＧ１３４ａ、ＴＧ２２７及びその混合物の噴射剤ガスが好ましい。
本発明による噴射剤ガスを含む吸入エアロゾルは、有効成分を５質量％まで含んでいるとよい。本発明のエアロゾルは医薬有効成分を、例えば、0.002〜5質量％、0.01〜３質量％、0.015〜２質量％、0.1〜２質量％、0.5〜２質量％又は0.5〜１質量％含有する。対応する有効成分濃度を有する吸入用エアロゾルを、相応する量の溶媒中で特定の溶解を行い本発明の粉末に調整することができる。
【００６６】
前述の本発明による噴射剤ガスを含有する吸入用エアロゾルは、従来の技術において公知である吸入器(定量噴霧吸入器（ＭＤＩ））を用いて投与することができる。吸入器「ベントリン（登録商標）」（ベントリンファーマシー社）、あるいは米国特許5,32,094号又は米国特許第5,672,581号に記載の吸入器が一例として参照できる。従って、本発明の別の態様としては、噴射剤ガス含有エアロゾルを投与するのに適した１種以上の吸入器と組み合わせた、噴射剤ガス含有エアロゾル状態の医薬品に関する。更に、本発明は、本発明による前記噴射剤ガス含有エアロゾルを収容することを特徴とする吸入器に関するものである。
さらに、本発明は、好適な吸入器で使用するための適切なバルブが設けられ、かつ、本発明による上記噴射剤ガス含有吸入エアロゾルの１種を収容する、カートリッジに関する。好適なカートリッジ、さらには本発明による噴射剤ガス含有吸入エアロゾルをカートリッジに充填する方法については、従来技術から公知である。
また、本発明の粉末は、噴射剤ガスを含有しない吸入溶液又は懸濁液に溶かして使うこともできる。該当する噴射剤を含有しない吸入溶液は、例えば水性溶媒又はアルコール系溶媒、好ましくはエタノール性溶媒を含有するが、必要に応じてエタノール性溶媒と水性溶媒とを混合してもよい。
【００６７】
水性溶媒とエタノール性溶媒との混合物の場合、水に対するエタノールの相対的割合は限定されないが、最大でエタノールが70容量％までが好ましく、特に60容量％までが好ましい。残りの容量を水で構成する。本発明による噴射剤を含有しない吸入溶液には、前記記載のように、補助溶剤又は他の賦形剤を受け入れることができる。例えば、補助溶剤が使える場合、ヒドロキシル基又は他の極性基を含むもので、例えばアルコール類、特にイソプロピルアルコール、グリコール類、特にプロピレングリコール、ポリエチレングリコール、ポリプロピレングリコール、グリコールエーテル、グリセロール、ポリオキシエチレンアルコール類及びポリオキシエチレン脂肪酸エステル類を使うことができる。これに関連した賦形剤及び添加剤は、それ自体は活性物質ではないが、薬理学的に好適な溶媒中で１種以上の活性物質と共に処方することができ、活性物質を含む調剤の定性的特性を改善することができる、薬理学的に許容される任意の物質を意味する。これらの物質は、一般に又は提供する治療において、顕著な薬理的作用を持たないことが好ましい。あるいは、少なくとも望ましくない薬理作用を有していないことが好ましい。前記賦形剤及び添加剤に加えて、例えば下記のものが挙げられる。例えば、大豆レシチン、オレイン酸、ポリソルベート等のソルビタンエステル類、ポリビニルピロリドンなどの界面活性剤、他の安定剤、錯化剤、医薬品製剤の使用可能期間を保証又は延長する酸化防止剤及び／又は防腐剤、香味付与剤、ビタミン類及び／又は公知の他の添加剤が挙げられる。また、該添加剤には、例えば塩化ナトリウム等の薬理学的に安全な塩が等張剤として含まれる。好ましい賦形剤としては、例えばｐＨ調整に使用していなければアスコルビン酸、さらにはビタミンＡ、ビタミンＥ、トコフェロール及び類似のビタミン類又は人体組織内で産生するプロビタミン類等の酸化防止剤が挙げられる。防腐剤を使用して細菌による汚染から該処方物を保護することができる。公知の防腐剤が適しており、特に従来技術において公知の濃度の塩化セチルピリジニウム、塩化ベンザルコニウム又は安息香酸もしくは安息香酸ナトリウム等の安息香酸塩である。上記防腐剤は、好ましくは50mg/100mlまで、特に好ましくは５〜20mg/100mlの範囲の濃度で含有されることが好ましい。従って、本発明による粉末を溶かして調製する噴射剤を含有しない吸入エアロゾルも本発明に含まれる。
【００６８】
本発明の噴射剤を含有しない吸入エアロゾルの投与には、特に、治療に必要な投与量の少量の液体調剤を数秒間以内で霧状にして治療用の吸入に適したエアロゾルを生成することができるタイプの吸入器が好適である。本発明において、100μL未満、好ましくは50μL未満、より好ましくは10〜30μLの量の有効成分を、好ましくは１回のスプレー操作で、平均粒径が20μm未満、好ましくは10μm未満のエアロゾルに変換することができ、エアロゾルの吸入可能な部分が治療上の有効量に相当するように変換することのできるエアロゾル生成装置が好ましい。
吸入投与用液状医薬品の定量を噴射剤無しで投与するタイプの装置については、例えば国際特許出願ＷＯ91/14468及びＷＯ97/12687（特に図６ａ及び図６ｂ参照）に詳しく記載されている。ＷＯ97/12687の該当の図６ａ及び図６ｂならびに明細書中の関連箇所を含み、本発明に具体的に引用するものである。また、エアロゾル生成器（装置）は、「Respimat（登録商標）」（ベーリンガーインゲルハイムファーマ社）という名称でも知られている。この装置は円筒状で、長さ９cm未満〜15cm及び幅２〜４cmの取り扱い易いサイズであることから、患者は常に携行することができる。エアロゾル生成器は、高圧を用いて小さなノズルから所定量の医薬品調剤を噴霧して吸入可能なエアロゾルを生成するものである。
好ましいエアロゾル生成器は、上部ハウジング部と、ポンプハウジングと、ノズルと、ブロック機構と、バネハウジングと、バネと、供給容器から実質的になり、
【００６９】
−  上部ハウジング部に固定され、その一端にはノズル又はノズル装置を備えたノズル本体を搭載するポンプハウジング、
−  バルブ本体を備えた中空ピストン、
−  中空ピストンが中に固定され、上部ハウジング部に配置されたフランジ、
−  上部ハウジング部に配置されたブロック機構、
−  内部にバネを収容し、回転軸受けによって上部ハウジング部に回動可能に取り付けられているバネハウジング、
−  バネハウジング上に軸方向に取り付けられている下部ハウジング部、とによって特徴づけられる。
バルブ本体を備えた中空ピストンは、ＷＯ97/12687に開示の装置に対応する。中空ピストンは、ポンプハウジングのシリンダ内に一部が突き出ており、シリンダ内を移動可能状態で配置されている。とりわけ本発明の文脈に、図１乃至図４、特に図３及び明細書の関連部分を引用する。バルブ本体を備えた中空ピストンは、バネが作動すると、その高圧末端において５〜60Mpa（約50〜600bar）、流体、即ち定量の有効成分溶液に対して好ましくは10〜60Mpa（約100〜600bar）の圧力をかける。この場合、１回のスプレーによる量は、好ましくは10〜50μL、特に好ましくは10〜20μLで、最も好ましい量は15μLである。
【００７０】
バルブ本体は、好ましくは、ノズル本体の方に向く中空ピストン端部に取り付ける。
ノズル本体内のノズルは微細構造を有することが好ましく、即ち、マイクロテクノロジーによって作製されたものであることが好ましい。微細構造を有するノズル本体については、例えばＷＯ94/07607に開示されており、そこの開示されている内容、特に図１及びその関連説明について本願明細書に引用する。ノズル本体は、例えば、互いに強固に結合した２枚のガラス及び／又はシリコンシートからなり、２枚のうちの少なくとも１枚には、１本以上の微細構造により作製された溝があり、この溝によってノズル入口側がノズル出口側と連結している。ノズル出口側には、深さ２〜10μmで幅５〜15μm、好ましくは深さが4.5〜6.5μmで、長さが７〜９μmの少なくとも１個の円形又は非円形開口部がある。ノズル開口部が複数個、好ましくは２個ある場合、ノズル本体内におけるノズルの噴射方向は互いに平行に延びてもよいし、あるいはノズル開口方向に互いに対して傾斜している。出口側に少なくとも２つのノズル開口部を有するノズル本体において、噴射方向は、20〜160°、好ましくは60〜150°、特に好ましくは80〜100°の角度で互いに対して傾いているとよい。ノズル開口部は、好ましくは10〜200μm、より好ましくは10〜100μm、特に好ましくは30〜70μmの間隔をおいて配置される。50μmの間隔が最も好ましい。
したがって、噴射方向はノズル開口部領域で互いに収束し合う。
【００７１】
液状医薬品調剤は、初期圧力600barまで、好ましくは200〜300barでノズル本体に突き当たり、ノズル開口部を通って霧化され吸入可能なエアロゾルになる。エアロゾルの好ましい粒径または液滴径は20μmまで、好ましくは３〜10μmである。
ブロック機構は、力学的エネルギーを保存するためのバネ、好ましくは円筒状の圧縮コイルバネを有する。このバネは作動部として駆動フランジに作用するが、フランジの移動はブロック部材の位置によって決まる。この駆動フランジの移動は、上部および下部の止め（stop）によって正確に定められている。上部ハウジング部が下部ハウジング部内のバネハウジングと反対に回転する際に発生する外部トルクによって、力を伝達する装置、例えば螺旋状アドバンスギア等を用いてバネが偏向されるのが好ましい。この場合、上部ハウジング部及び駆動フランジは、単一又は多数の楔形ギアを受け入れる。
絡まりのあるフロック加工表面を有するブロック部材は、駆動フランジの回りにリング状に配置されている。ブロック部材は、例えば、径方向に弾性変形するプラスチック又は金属製のリングで構成される。このリングは、エアロゾル生成器の軸に対して直角をなす面に配置される。バネに張力をかけると、ブロック部材のブロック面は駆動フランジ通路内に押し込まれバネが緩まないようにする。ブロック部材はボタンによって作動する。この作動ボタンはブロック部材に接続又は連結している。ブロック機構を解除するには、作動ボタンをリング平面に対して平行に、好ましくはエアロゾル生成器内に押し込み、これによって変形性リングがリング面において変形する。ブロック機構の構成に関する詳細はＷＯ97/20590に記載されている。
【００７２】
バネハウジングの上からハウジング下部が軸方向に押し込まれ、軸受、スピンドル駆動装置及び流体用供給容器を収容する。
エアロゾル生成器を作動させると、上部ハウジング部が下部ハウジング部と反対に回転し、それによって下部ハウジング部がバネハウジングを一緒に回転させる。結果として、バネは螺旋状アドバンスギアを介して圧縮、偏向され、ブロック機構が自動的に嵌合する。回転角は360度分の整数度、例えば180度が好ましい。バネによる張力がかかると同時に、上部ハウジング部における駆動部が所定の距離だけ移動し、中空ピストンがポンプハウジング内のシリンダ内部に引き戻され、その結果として、流体の一部が供給容器から吸い出され、ノズル前方の高圧スペースに送りこまれる。
必要に応じて、エアロゾル用の流体を収容する取替え可能な複数個の供給容器を、エアロゾル生成器に装填して使用することもできる。供給容器には、本発明の水性エアロゾル調剤が収容される。
エアロゾル生成工程は作動ボタンを軽く押すことにより開始される。この場合、ブロック機構が出力部用の通路を開ける。張力をかけられたバネによって、ポンプハウジングのシリンダ内にピストンが押し込まれる。流体は、霧状態となってエアロゾル生成器のノズルから放出される。
構造についての更なる詳細については、ＰＣＴ出願ＷＯ97/12683及びＷＯ97/20590に開示されており、これらの内容を本願明細書に引用する。
【００７３】
エアロゾル生成器（ネブライザー）の構成部品は、その機能に適合する材料で作製される。エアロゾル生成器のハウジング、さらには機能上許されるならば他の部品も同様に、プラスチック製が好ましく、例えば射出成型によって製造される。医療用装置という用途には生理学的に安全な材料が用いられる。
ＷＯ97/12687の図６ａ／図６ｂは、その関連説明とともに再度本願明細書に引用されるもので、該当するエアロゾル生成器（「Respimat（登録商標）」）が記載されている。これは、本発明による噴射剤を含まない吸入エアロゾルの投与にとりわけ適している。
ＷＯ97/12687の図６ａは、バネが引っ張られた状態のエアロゾル生成器の長手方向断面図であり、一方、ＷＯ97/12687の図６ｂは、バネが緩んだ状態のエアロゾル生成器の長手方向断面図である。上部ハウジング部（５１）はポンプハウジング（５２）を収容し、その端部にはエアロゾル生成器ノズル用の台（５３）が取付けられている。この台にはノズル本体（５４）及びフィルタ（５５）が配置されている。ブロック機構の駆動フランジ（５６）内に固定された中空ピストン（５７）は、ポンプハウジングのシリンダ内にその一部が突き出ている。中空ピストンは、その端部においてバルブ本体（５８）を担持する。中空ピストンは、シール（５９）によって封止されている。バネが緩んだ状態の時には駆動フランジが載る止め（６０）が上部ハウジング部の中に配置されている。駆動フランジの上に止め（６１）があり、バネが偏向状態になると駆動フランジがこの止めに保持される。バネの偏向後、略リング状のブロック部材（６２）は、上部ハウジング部内の止め（６１）と支持体（６３）との間を移動する。作動ボタン（６４）がブロック部材に連結している。上部ハウジング部は、マウスピース（６５）で終端しており、マウスピースに嵌合可能な保護キャップ（６６）により閉じられている。圧縮バネ（６８）を備えたバネハウジング（６７）は、バネ式の爪（６９）及び回転軸受けによって上部ハウジング部に回動自在に取付けられている。下部ハウジング部（７０）はバネハウジングの上から押しかぶせられている。バネハウジング内部には、噴霧する流体（７２）用の取替え可能な保存容器（７１）がある。保存容器はストッパー又はキャップ（７３）が装着され、これを介して中空ピストンは保存容器内に突き出し、その端部が流体中に浸漬される。機械的カウンタ用のスピンドル（７４）は、バネハウジングの外側に取付けられている。上部ハウジング部に面したスピンドルの端部には、駆動ピニオン（７５）が存在する。スライダ（７６）がスピンドル上に配置されている。
【００７４】
本発明の調剤を、本願明細書前記記載の方法（「Respimat（登録商標）」）を用いてエアロゾル化する場合、噴出する質量は、吸入器の全作動（ピストン運動）の少なくとも97％、好ましくは少なくとも98％で、最大25％、好ましくは20％の許容範囲を有する規定量に相当するとよい。好ましくは、５〜30mg、特に好ましくは５〜20mgの調剤を規定質量として１回ごとのピストン動作で放出することが好ましい。
しかしながら、上記以外の吸入器、例えば、ジェット流吸入器又は他の据え置き型エアロゾル生成器を使って、本発明の調剤をエアロゾル化することもできる。
したがって、本発明の更なる態様は、上記のような噴射剤を含有しない吸入溶液又は懸濁液状態の医薬品であって、この調剤の投与に適した装置、好ましくは「Respimat（登録商標）」と組み合わせた、噴射剤を含有しない吸入溶液又は懸濁液状態の医薬品に関する。好ましくは、本発明は、本発明の粉末の１種を含有し噴射剤を用いない吸入溶液又は懸濁液であって、「Respimat（登録商標）」という名称の従来技術の装置と組み合わせた吸入溶液又は懸濁液に関する。さらに本発明は、前記吸入用の装置、好ましくは「Respimat（登録商標）」であって、本願明細書で記載した本発明の噴射剤を含有しない吸入溶液又は懸濁液を収容していることを特徴とする、前記吸入用装置に関する。
調剤形態の１つである本発明による本願明細書に記載の粉末の１種を含有するの吸入溶液が、本発明では好ましい。
【００７５】
本発明による噴射剤を含有しない吸入溶液又は懸濁液は、上記記載に加えて、濃縮物又は「Respimat（登録商標）」で投与するための溶液又は懸濁液として直ぐに使用できる無菌吸入剤の状態とすることもできる。直ぐに使用可能な調剤は、例えば等張性の生理食塩水を添加することによって濃縮物から調製できる。直ぐに使用できる無菌調剤は、ベンチュリの原理又は他の原理にしたがって超音波又は圧縮空気を用いて吸入性エアロゾルを生成する動力駆動型の据付タイプ又は持運び可能なエアロゾル生成器を使用して投与することができる。
したがって、本発明の別の態様は、本願明細書前記記載のような吸入溶液又は懸濁液状態の医薬品であって、濃縮物又は直ぐに使用可能な無菌調剤の形態をとり、前記溶液を投与するのに適した装置と組み合わせた医薬品で、該装置が、ベンチュリの原理又は他の原理にしたがって超音波又は圧縮空気を用いてエアロゾルを生成する、動力駆動式の据付型又は持運び可能なエアロゾル生成器であることを特徴とする。
再構成したエアロゾルを吸入投与するのに適したエアロゾル生成器として、他には「AERx（商標）」（Aradigm社）、「Ultravent（登録商標）」（Mallinkrodt社）及び「Aconll（登録商標）」（Maquest Medical Products社）が挙げられる。
【００７６】
（実施形態例）
（材料と方法）
１．０  材料
IgG1として、ベーリンガーインゲルハイム社（ドイツ）の分子量約148kDaのヒト化単クローン抗体を使用した。この抗体はマウス抗体由来であり、マウス抗体の相補性決定領域をヒト抗体構造に移したものである。ヒト抗体分95％とマウス抗体分５％のキメラ抗体が産生された。この抗体はマウスの骨髄腫細胞株で発現した。十字流精密濾過（tangential flow microfiltration）で細胞を取り除き、細胞が除かれた溶液をクロマトグラフィーの様々な方法で精製する。さらに、ヌクレアーゼ処理、低ｐＨ値での処理及びナノ濾過の工程を行う。抗体含有バルク溶液は、緩衝剤として25mMヒスチジンと1.6mMグリシンを含み、この溶液を、ダイアフィルトレーションにより約100mg/mlまで濃縮して噴霧乾燥用溶液を調製した。噴霧溶液を調製するためのバルクには、凝集体が0.4〜0.8％含まれていた。最終製品としての薬剤は２〜８℃で少なくとも２年間は保存することができる。「乳果オリゴ（登録商標）LS55P」、「乳果オリゴ（登録商標）LS90P」、「カップリングシュガー（登録商標）」及び「カップリングシュガーＳ（登録商標）」は株式会社林原商事（日本）から入手した。サッカロース、ラクトース、マンニトール、ラフィノース、ヒドロキシエチルデンプン及びＬ−イソロイシンは、シグマアルドリッチケミカル社（ドイツ）から入手した。トレハロースはゲオルグ・ブロイヤー社（ドイツ）から調達した。トリイソロイシンはIris Biotech社（ドイツ）から入手した。卵白リゾチーム（135500U/mg）は、SERVA Electrophoresis社（ドイツ）から入手した。合成の鮭カルシトニン（カルシトニン）はBiotrend Chemikalien社（ドイツ）から入手した。
【００７７】
２．０  ビュッヒＢ−２９０による噴霧乾燥
ビュッヒラボテクニック社製のビュッヒミニスプレードライヤーB-290を用いて噴霧乾燥を行った。基本的には、「Spray Drying Handbook」（５版）、K. Masters、John Wiley and Sons社、NY、NY（1991）に記載の説明にしたがって調剤の噴霧乾燥を行った。
このスプレードライヤーは、加熱系、フィルター、アスピレータ、乾燥系、サイクロン、入口温度及び出口温度を測定する温度センサー及び回収容器で構成されている。蠕動ポンプを用いて噴霧用溶液を２流体ノズル（two-substance nozzle）にくみ上げる。ノズルでは、圧縮空気を用いて溶液を霧化して小滴とする。温めた空気を使って噴霧塔で乾燥を行うが、この温めた空気はアスピレータを使って連続的な流入法で噴霧塔に吸引する。サイクロンを通過させた後、生成物を回収容器に回収する。
２種の異なるサイクロンを使用した。
−  サイクロンＩ：ビュッヒサイクロン（シリアルナンバー4189）
−  サイクロンII：ビュッヒ高性能サイクロン（シリアルナンバー46369）
噴霧した溶液の固形分は、50〜600ml中10％（質量／容積）、3.33％、2.00％であった。入口温度はおよそ170〜185℃、液体供給速度は約３〜3.33ml／分、アスピレータ流量は約36.8〜38.3m3／時、噴霧空気流量は約0.67m3／時、1.05m3／時及び1.74m3／時で、その結果、出口温度は約80〜95℃になった。
【００７８】
３．０  凍結乾燥
凍結乾燥は、Martin Christ Gefriertrocknungsanlagen社の凍結乾燥器Christ LPC-16/NT Epsilon 2-12 D型を使って行った。この凍結乾燥器は、乾燥室、昇華した溶媒を分離する凝縮器、真空形成用ポンプ及び電気系統で構成されている。乾燥は、表面温度と乾燥室の真空度とにより調整する。
凍結乾燥用溶液の固形分は５％（質量／容積）であった。溶液を２Ｒバイアルに0.5mlずつ小分けにして、ねじ式凍結乾燥ストッパー（threaded freeze drying stoppers）で凍結乾燥器に入れた。最初は、-40℃ｘ30分で溶液を凍結させた。引き続き、0.11mbarで乾燥の主工程を３段階にわけて行った。第１段階が-40℃ｘ30時間、その次が-30℃ｘ８時間、最後が-16℃ｘ８時間である。その次の工程は後乾燥で、これは20℃ｘ20時間で0.001mbarで行った。最終工程として、最初に挿入しておいただけの凍結乾燥ストッパーでバイアルを自動的に封止した。こうして得られた凍結乾燥物は、バイアルの中にあるスパチュラで微粉化された。
【００７９】
４．０  Ｘ線回折法（広角Ｘ線回折（ＷＡＸＳ））
乾燥後の試料の結晶化度を求めるために、Ｘ線回折計XRD3000TT（ザイフェルト社製（アヒレンスバーグ、ドイツ））を用いて、温度22℃に調整したチャンバー内で試料を調べた。Ｘ線管Ｃｕアノード、波長λ＝0.15418mmのCu-Kα線（ニッケル一次フィルタ）を、アノード電圧40kV及び電流強さ30mAにして操作した。試料皿を装置内に置いた後、試料を５〜40°の範囲にわたり各角度の測定時間を２秒にして走査速度２θ＝0.05°で測定した。
SC1000VデテクタにScanX-Rayflexアプリケーション、バージョン3.07デバイスXRD3000（Scan）とRayflexバージョン2.1、1996（analysis）を用いて、粉末ディフラクトグラムを記録した。
５．０  サイズ排除クロマトグラフィー（ＳＥＣ−ＨＰＬＣ）
ａ）IgG1タンパク質凝集体
再構成した粉末中のIgG1タンパク質凝集体を定量化するために、SEC-HPLCを行った。SEC-HPLCはアジレント社のHP1090で行った。トーソー・バイオセップのTSK3000SWXLカラム（300 x 7.8mm）（トーソー・バイオサイエンス、シュトットガルト、ドイツ）を分離用として用いた。流体として、0.1Mリン酸水素ニナトリウムニ水和物と0.1M硫酸ナトリウムで構成される緩衝液を脱水し、オルトリン酸85％でｐＨ6.8に調整した。投入した試料の量は、タンパク質濃度２〜10mg/mlで25μｌであった。アジレント社製ダイオードアレイ検知器を用いて、280nmでタンパク質を検出した。アジレント社製のＨＰケムステーション（Chemstation）ソフトウェアを用いてクロマトグラムの評価を行った。
【００８０】
ｂ）カルシトニンタンパク質凝集体
再構成した粉末中のカルシトニンタンパク質凝集体を定量化するために、SEC-HPLCを行った。SEC-HPLCはアジレント社のHP1100で行った。トーソー・バイオセップのTSK2000SWXLカラム（300 x 7.8mm）（トーソー・バイオサイエンス、シュトットガルト、ドイツ）を分離用として用いた。流体として、0.25硫酸ナトリウムで構成される、ｐＨ値がおよそ６の緩衝液を用いた（Windisch等、1997）。あるいは、0.1Mリン酸水素ニナトリウムニ水和物と0.1M硫酸ナトリウムで構成される脱水した緩衝液で、オルトリン酸85％でｐＨ6.8に調整したものを使うこともできる。投入した試料の量は、タンパク質濃度0.5〜２mg/mlで20μｌであった。アジレント社製ＵＶ検知器を用いて、210nmでタンパク質を検出した。アジレント社製のＨＰケムステーションソフトウェアを用いてクロマトグラムの評価を行った。
ｃ）リゾチーム残留モノマー含有量
再構成したリゾチーム調剤中のリゾチーム残留モノマー含有量を定量化するために、改造したSEC-HPLC（van de Weert、2000）を行った。トーソー・バイオセップのTSK2000SWXLカラム（300 x 7.8mm）（トーソー・バイオサイエンス、シュトットガルト、ドイツ）を分離用として用いた。流体として、0.1Mリン酸水素ニナトリウムニ水和物と0.2M塩化ナトリウムで構成される緩衝液を、オルトリン酸85％でｐＨ7.0に調整した。投入した試料の量は、タンパク質濃度２〜10mg/mlで25μｌであった。アジレント社製ダイオードアレイ検知器を用いて、280nmでタンパク質を検出した。アジレント社製のＨＰケムステーションソフトウェアを用いてクロマトグラムの評価を行った。
【００８１】
調剤の評価として、残留可溶性モノマーを下記の方法で定量化した。濃度2.5mg/ml、5.0mg/ml及び10mg/mlのリゾチーム標準溶液を使って、最初に検量線を得た。その後、評価した標準溶液の相当するリゾチーム濃度との相関からモノマーピークのＡＵＣを考察した。
評価した様々なリゾチーム調剤における残留モノマー含有量は、検量線を基にして算出した。調剤の残留モノマー含有量が高くなるほどタンパク質安定性は向上する。
６．０  粒径の測定（ＭＭＤ）
体積平均径（ＭＭＤ）又は平均粒径は、Sympatech社製（クラウスタール-ツェラーフェルト、ドイツ）のSympatech Helosを用いて測定した。測定原理は、ヘリウムネオンレーザーを用いたレーザー回折に基づく。１〜３mgの粉末を空気圧２barで分散させ、フーリエレンズ（50mm）の手前でレーザー平行光を通過させた。フラウンホーファーモデルを用いて粒径分布を評価した。１種の粉末について２回の測定を行った。
【００８２】
７．０  空気動力学的粒径（ＭＭＡＤ）及び細粒分（ＦＰＦ）
12〜18mgの粉末をハードゼラチンカプセル（サイズ３号）にそれぞれ充填し、ハンディヘラー（ベーリンガーインゲルハイム社の粉末吸入器）に導入したものを測定に使用した。アダプターを使ってハンディヘラーをＵＳＰ／ＥＰインパクターインレットののど部に接続した。流速39.0リットル/分、吸入時間6.15秒で粉末を導入した。空気処理量は外部コントロールパネルで調整した。それぞれの粉末について、少なくとも３個のカプセルを測定した。
インパクターインレット3306と組み合わせてTSI社（米国、ミネソタ州）のAPS3321を同時に使い、粒子の飛行時間を求めることにより空気動力学的粒径（体積平均空気動力学的粒径、ＭＭＡＤ）を、また、シングルステージインパクター（流速39リットル／分で有効カットオフ粒径5.0μｍ）により細粒分（ＦＰＦ）を求めた。粉末は、ＥＰ／ＵＳＰ準拠ののど部又は試料誘導ポートをとおり細い毛管へ移動するが、ここで、等速サンプリングできる条件で、飛行時間の測定をするために粉末量の0.2％を採取する。飛行時間は、毛管２本のレーザー光線を通り抜けることで測定するが、このレーザー光線は光の壁として特定の距離の飛行時間を検出する。得られた結果は数値的分布であり、これをさらに体積分布に変換し、体積平均空気動力学的粒径（ＭＭＡＤ）に変換する。
毛管を通った粉末母集団のうちの99.8％がシングルステージインパクターで分離される。5.0μｍよりも大きい画分が、慣性質量（mass inertia）の結果としてインパクター内の衝突面上で分離する。細粒分（ＦＰＦ）は空気の流れに従い、最終的にはデプスフィルター中で分離する。細粒分は重量測定で求める。使用した粉末の総量、即ち、カプセル１個あたりの秤量した粉末に対するフィルター中で分取した粉末画分から細粒分を算出する。
【００８３】
８．０  残留水分量
乾燥後の製品の残留含水量を、電量滴定で求めた（703滴定レベルのメトローム737KF電量計（メトローム社、ドイツ））。残留含水量を求めるのに、粉末をメタノール（ハイドラナール−乾燥メタノール、VWR/Merck Eurolab社製）に溶解又は分散させた。メトローム電量計の測定溶液（ハイドラナール−クーロマット液、VWR/Merck Eurolab社）を、測定開始時に調整した。即ち、測定溶液を滴定して含水量ゼロにした。試料を滴定セルに注入して測定した。
９．０  安定性の測定
粉末又は粉末に含まれるタンパク質の噴霧乾燥後の様々な安定性を調べた。製剤の安定性を測定するために、タンパク質凝集体のパーセンテージを測定単位で定めた。タンパク質だけの製剤、類似のトレハロース製剤、類似のラフィノース製剤、類似のサッカロース製剤、類似のサッカロース−ラクトース製剤又は類似のヒドロキシエチルデンプン製剤の一部を参照用として、本発明に記載の革新的なアジュバンドと比較した。凝集体は、ＵＶ検出（ＤＡＤ）を用いて有効なサイズ排除クロマトグラフィー（ＳＥＣ−ＨＰＬＣ）で分析した。このため、前処理をした粉末を、まず最初に純水（ｐＨ６〜８）に溶かした。
−  強制的保存安定性：選択した製剤について、温度約40℃、相対湿度約75％において（40℃、75％ＲＨ）開放したガラスバイアルに入れ、開放状態で１週間保存した後の安定性を調べた。
【００８４】
−  平衡化（equilibrated）保存安定性：噴霧乾燥後の製剤を選択し、温度約22℃、相対湿度50〜55％において開放したガラスバイアルに入れて１日保存した（平衡化）。その後、ガラスバイアルを前記規定の条件下で封止、ビード処理を行い、約40℃の乾燥状態で４週間保存した後に安定性を調べた。
−  真空乾燥保存安定性：噴霧乾燥後の製剤を選択し、温度約30℃、約0.15mbarでMemmert社製（ドイツ）の真空乾燥キャビネット内で開放したガラスバイアルに入れて１日保存した（真空乾燥）。その後、ガラスバイアルを真空乾燥キャビネットから取り出し、封止、ビード処理を行い、約40℃の乾燥状態で４週間保存した後の安定性を調べた。
−  ３ヶ月安定性：噴霧乾燥後の製剤を選択し、開放したガラスバイアルにいれて真空乾燥させた（上記参照）。窒素雰囲気下でガラスバイアルを封止、ビード処理し、３つの異なる温度、２〜８℃、25℃、40℃で保存した。１ヵ月後の粉末の安定性を調べた。
−  １ヶ月又は３ヶ月開放状態安定性：噴霧乾燥後の製剤を選択し、開放したガラスバイアルに入れて温度25℃、相対湿度約29％及び／又は43％でそれぞれ保存した。１ヶ月及び３ヵ月後の粉末の安定性を調べた。このうち幾つかの製剤については、粒子の飛行時間の測定により粉末の空気動力学的性能を求めた（前記参照）。
【００８５】
１．０．０  実施例１
10％(w/v)IgG1製剤の噴霧乾燥
ｐＨ６のグリシン−ヒスチジン緩衝液に処方した濃度約109mg/mlの純粋なIgG1（「材料」の項参照）を脱塩水（ｐＨ約7.5）で100mg/mlまで希釈し、他のアジュバントを入れずに、サイクロンＩを使って噴霧空気量を約0.67m3/時間で前記記載のようにして噴霧乾燥を行った。溶液の量は50mlであった。凝集体含有率は前記記載の方法で調べた。
−  相対湿度75％、温度40℃の開放状態で１週間保存したところ（強制的保存安定性）、粉末を溶かして調製した溶液の凝集体含有率はそれぞれ約18.9％と18.2％であった。
−  １日平衡にした後、40℃、乾燥状態で４週間保存したところ、粉末を溶かして調製した溶液の凝集体含有率は約11.8％であった。
−  １日真空乾燥を行った後、40℃、乾燥状態で４週間保存したところ、粉末を溶かして調製した溶液の凝集体含有率は約13.2％であった。
【００８６】
3.33％(w/v)IgG1製剤の噴霧乾燥
ｐＨ６のグリシン−ヒスチジン緩衝液に処方した濃度約102.8mg/mlの純粋なIgG1（「材料」の項参照）を脱塩水（ｐＨ約7.5）で33mg/mlまで希釈し、他のアジュバントを入れずに、サイクロンＩを使って噴霧空気量を約0.67m3/時間で前記記載のようにして噴霧乾燥を行った。溶液の量は150mlであった。凝集体含有率は前記記載の方法で調べた。
−  相対湿度75％、温度40℃の開放状態で１週間保存したところ（強制的保存安定性）、粉末を溶かして調製した溶液の凝集体含有率は約16.3％であった。
−  ２〜８℃で１ヶ月及び３ヶ月保存したところ（３ヶ月安定性）、粉末を溶かして調製した溶液の凝集体含有率はそれぞれ約4.5％と約4.4％であった。
−  25℃で１ヶ月及び３ヶ月保存したところ（３ヶ月安定性）、粉末を溶かして調製した溶液の凝集体含有率はそれぞれ約7.4％と約7.1％であった。
−  40℃で１ヶ月及び３ヶ月保存したところ（３ヶ月安定性）、粉末を溶かして調製した溶液の凝集体含有率はそれぞれ約13.3％と約18.1％であった。
−  相対湿度約29％、温度25℃で１ヶ月及び３ヶ月保存したところ、粉末を溶かして調製した溶液の凝集体含有率はそれぞれ約5.5％と約6.6％であった。
−  相対湿度約43％、温度25℃で１ヶ月及び３ヶ月保存したところ、粉末を溶かして調製した溶液の凝集体含有率はそれぞれ約5.6％と約7.0％であった。
【００８７】
９％(w/v)トレハロース及び１％(w/v)IgG1含有製剤の噴霧乾燥
4.5gのトレハロースを約40mlの脱塩水（ｐＨ約7.5）に溶解した。次に、ｐＨ６のグリシン−ヒスチジン緩衝液に処方した濃度約109mg/mlの約4.6mlの純粋なIgG1（「材料」の項参照）を添加し、脱塩水（ｐＨ約7.5）で希釈し50mlにした。こうして得られた溶液には約９％(w/v)のアジュバント又はマトリックスと１％(w/v)のタンパク質が含まれており、サイクロンＩを使って噴霧空気量を約0.67m3/時間で前記記載のようにして噴霧乾燥させた。凝集体含有率は前記記載の方法で調べた。
下記の凝集体含有率は、保存安定性として求めた。
−  相対湿度75％、温度40℃の開放状態で１週間保存したところ（強制的保存安定性）、粉末を溶かして調製した溶液の凝集体含有率は約12.6％であった。
【００８８】
3.00％(w/v)LS90P及び0.33％(w/v)IgG1含有製剤の噴霧乾燥
4.5gのLS90Pを約140mlの脱塩水（ｐＨ約7.5）に溶解した。次に、ｐＨ６のグリシン−ヒスチジン緩衝液に処方した濃度約102.8mg/mlの約4.864mlの純粋なIgG1（「材料」の項参照）を添加し、脱塩水（ｐＨ約7.5）で希釈し150mlにした。こうして得られた溶液には約3.00％(w/v)のアジュバント又はマトリックスと0.33％(w/v)のタンパク質が含まれており、サイクロンＩを使って噴霧空気量を約0.67m3/時間で前記記載のようにして噴霧乾燥させた。凝集体含有率は前記記載の方法で調べた。
下記の凝集体含有率は、保存安定性として求めた。
−  相対湿度75％、温度40℃の開放状態で１週間保存したところ（強制的保存安定性）、粉末を溶かして調製した溶液の凝集体含有率は約1.0％であった。
−  ２〜８℃で１ヶ月及び３ヶ月保存したところ（３ヶ月安定性）、粉末を溶かして調製した溶液の凝集体含有率はそれぞれ約0.6％と約0.9％であった。
−  25℃で１ヶ月及び３ヶ月保存したところ（３ヶ月安定性）、粉末を溶かして調製した溶液の凝集体含有率はそれぞれ約0.8％と約1.3％であった。
−  40℃で１ヶ月及び３ヶ月保存したところ（３ヶ月安定性）、粉末を溶かして調製した溶液の凝集体含有率はそれぞれ約1.1％と約2.2％であった。
粉末のＭＭＤを前記記載のようにして求めた。
−  噴霧乾燥後の粉末のＭＭＤは2.8μｍであった。
粉末のＭＭＡＤ及びＦＰＦを前記記載のようにして求めた。
−  噴霧乾燥後の粉末のＭＭＡＤは3.8μｍ、ＦＰＦは粉末カプセル質量に対して23.6％であった。
【００８９】
9.9％(w/v)LS55P及び0.1％(w/v)IgG1含有製剤の噴霧乾燥
4.950gのLS55Pを約40mlの脱塩水（ｐＨ約7.5）に溶解した。次に、ｐＨ６のグリシン−ヒスチジン緩衝液に処方した濃度約96.55mg/mlの約0.518mlの純粋なIgG1（「材料」の項参照）を添加し、脱塩水（ｐＨ約7.5）で希釈し50mlにした。こうして得られた溶液には約9.9％(w/v)のアジュバント又はマトリックスと0.1％(w/v)のタンパク質が含まれており、サイクロンＩを使って噴霧空気量を約0.67m3/時間で前記記載のようにして噴霧乾燥させた。凝集体含有率は前記記載の方法で調べた。
下記の凝集体含有率は、保存安定性として求めた。
−  相対湿度75％、温度40℃の開放状態で１週間保存したところ（強制的保存安定性）、粉末を溶かして調製した溶液の凝集体含有率は約5.7％であった。
−  １日真空乾燥を行った後、40℃、乾燥状態で４週間保存したところ、粉末を溶かして調製した溶液の凝集体含有率は約4.7％であった。
【００９０】
９％(w/v)LS55P及び１％(w/v)IgG1含有製剤の噴霧乾燥
4.5gのLS55Pを約40mlの脱塩水（ｐＨ約7.5）に溶解した。次に、ｐＨ６のグリシン−ヒスチジン緩衝液に処方した濃度約109mg/mlの約4.6mlの純粋なIgG1（「材料」の項参照）を添加し、脱塩水（ｐＨ約7.5）で希釈し50mlにした。こうして得られた溶液には約９％(w/v)のアジュバント又はマトリックスと１％(w/v)のタンパク質が含まれており、サイクロンＩを使って噴霧空気量を約0.67m3/時間で前記記載のようにして噴霧乾燥させた。凝集体含有率は前記記載の方法で調べた。
下記の凝集体含有率は、保存安定性として求めた。
−  相対湿度75％、温度40℃の開放状態で１週間保存したところ（強制的保存安定性）、粉末を溶かして調製した溶液の凝集体含有率は約2.3％であった。
−  １日平衡にした後、40℃、乾燥状態で４週間保存したところ、粉末を溶かして調製した溶液の凝集体含有率は約1.8％であった。
−  １日真空乾燥を行った後、40℃、乾燥状態で４週間保存したところ、粉末を溶かして調製した溶液の凝集体含有率は約1.4％であった。
【００９１】
６％(w/v)LS55P及び４％(w/v)IgG1含有製剤の噴霧乾燥
3.0gのLS55Pを約15mlの脱塩水（ｐＨ約7.5）に溶解した。次に、ｐＨ６のグリシン−ヒスチジン緩衝液に処方した濃度約102.8mg/mlの約19.45mlの純粋なIgG1（「材料」の項参照）を添加し、脱塩水（ｐＨ約7.5）で希釈し50mlにした。こうして得られた溶液には約６％(w/v)のアジュバント又はマトリックスと４％(w/v)のタンパク質が含まれており、サイクロンＩを使って噴霧空気量を約0.67m3/時間で前記記載のようにして噴霧乾燥させた。凝集体含有率は前記記載の方法で調べた。
下記の凝集体含有率は、保存安定性として求めた。
−  相対湿度75％、温度40℃の開放状態で１週間保存したところ（強制的保存安定性）、粉末を溶かして調製した溶液の凝集体含有率は約4.0％であった。
【００９２】
４％(w/v)LS55P及び６％(w/v)IgG1含有製剤の噴霧乾燥
2.0gのLS55Pを約15mlの脱塩水（ｐＨ約7.5）に溶解した。次に、ｐＨ６のグリシン−ヒスチジン緩衝液に処方した濃度約102.8mg/mlの約29.18mlの純粋なIgG1（「材料」の項参照）を添加し、脱塩水（ｐＨ約7.5）で希釈し50mlにした。こうして得られた溶液には約４％(w/v)のアジュバント又はマトリックスと６％(w/v)のタンパク質が含まれており、サイクロンＩを使って噴霧空気量を約0.67m3/時間で前記記載のようにして噴霧乾燥させた。凝集体含有率は前記記載の方法で調べた。
下記の凝集体含有率は、保存安定性として求めた。
−  相対湿度75％、温度40℃の開放状態で１週間保存したところ（強制的保存安定性）、粉末を溶かして調製した溶液の凝集体含有率は約6.9％であった。
【００９３】
2.5％(w/v)LS55P及び7.5％(w/v)IgG1含有製剤の噴霧乾燥
1.25gのLS55Pを約10mlの脱塩水（ｐＨ約7.5）に溶解した。次に、ｐＨ６のグリシン−ヒスチジン緩衝液に処方した濃度約96.55mg/mlの約38.84mlの純粋なIgG1（「材料」の項参照）を添加し、脱塩水（ｐＨ約7.5）で希釈し50mlにした。こうして得られた溶液には約2.5％(w/v)のアジュバント又はマトリックスと7.5％(w/v)のタンパク質が含まれており、サイクロンＩを使って噴霧空気量を約0.67m3/時間で前記記載のようにして噴霧乾燥させた。凝集体含有率は前記記載の方法で調べた。
下記の凝集体含有率は、保存安定性として求めた。
−  相対湿度75％、温度40℃の開放状態で１週間保存したところ（強制的保存安定性）、粉末を溶かして調製した溶液の凝集体含有率は約5.9％であった。
−  １日真空乾燥を行った後、40℃、乾燥状態で４週間保存したところ、粉末を溶かして調製した溶液の凝集体含有率は約6.1％であった。
【００９４】
1.0％(w/v)LS55P及び9.0％(w/v)IgG1含有製剤の噴霧乾燥
0.50gのLS55Pを約５mlの脱塩水（ｐＨ約7.5）に溶解した。次に、ｐＨ６のグリシン−ヒスチジン緩衝液に処方した濃度約96.55mg/mlの約41.43mlの純粋なIgG1（「材料」の項参照）を添加し、脱塩水（ｐＨ約7.5）で希釈し50mlにした。こうして得られた溶液には約1.0％(w/v)のアジュバント又はマトリックスと9.0％(w/v)のタンパク質が含まれており、サイクロンＩを使って噴霧空気量を約0.67m3/時間で前記記載のようにして噴霧乾燥させた。凝集体含有率は前記記載の方法で調べた。
下記の凝集体含有率は、保存安定性として求めた。
−  相対湿度75％、温度40℃の開放状態で１週間保存したところ（強制的保存安定性）、粉末を溶かして調製した溶液の凝集体含有率は約10.8％であった。
−  １日真空乾燥を行った後、40℃、乾燥状態で４週間保存したところ、粉末を溶かして調製した溶液の凝集体含有率は約8.0％であった。
【００９５】
0.5％(w/v)LS55P及び9.5％(w/v)IgG1含有製剤の噴霧乾燥
0.25gのLS55Pを約2.5mlの脱塩水（ｐＨ約7.5）に溶解した。次に、ｐＨ６のグリシン−ヒスチジン緩衝液に処方した濃度約102.8mg/mlの約46.21mlの純粋なIgG1（「材料」の項参照）を添加し、脱塩水（ｐＨ約7.5）で希釈し50mlにした。こうして得られた溶液には約0.5％(w/v)のアジュバント又はマトリックスと9.5％(w/v)のタンパク質が含まれており、サイクロンＩを使って噴霧空気量を約0.67m3/時間で前記記載のようにして噴霧乾燥させた。凝集体含有率は前記記載の方法で調べた。
下記の凝集体含有率は、保存安定性として求めた。
−  相対湿度75％、温度40℃の開放状態で１週間保存したところ（強制的保存安定性）、粉末を溶かして調製した溶液の凝集体含有率は約13.7％であった。
【００９６】
3.00％(w/v)LS55P及び0.33％(w/v)IgG1含有製剤の噴霧乾燥
9.0gのLS55Pを約280mlの脱塩水（ｐＨ約7.5）に溶解した。次に、ｐＨ６のグリシン−ヒスチジン緩衝液に処方した濃度約102.8mg/mlの約9.73mlの純粋なIgG1（「材料」の項参照）を添加し、脱塩水（ｐＨ約7.5）で希釈し300mlにした。こうして得られた溶液には約3.0％(w/v)のアジュバント又はマトリックスと0.33％(w/v)のタンパク質が含まれており、サイクロンIIを使って噴霧空気量を約0.67m3/時間で前記記載のようにして噴霧乾燥させた。凝集体含有率は前記記載の方法で調べた。
下記の凝集体含有率は、保存安定性として求めた。
−  相対湿度75％、温度40℃の開放状態で１週間保存したところ（強制的保存安定性）、粉末を溶かして調製した溶液の凝集体含有率は約5.0％であった。
粉末のＭＭＤを前記記載のようにして求めた。
−  噴霧乾燥後の粉末のＭＭＤは2.9μｍであった。
粉末のＭＭＡＤ及びＦＰＦを前記記載のようにして求めた。
−  噴霧乾燥後の粉末のＭＭＡＤは4.3μｍ、ＦＰＦは粉末カプセル質量に対して15.9％であった。
【００９７】
9.9％(w/v)カップリングシュガー及び0.1％(w/v)IgG1含有製剤の噴霧乾燥
6.290gのカップリングシュガー含有シロップ（カップリングシュガー4.950gに相当）を約40mlの脱塩水（ｐＨ約7.5）に溶解した。次に、ｐＨ６のグリシン−ヒスチジン緩衝液に処方した濃度約96.55mg/mlの約0.518mlの純粋なIgG1（「材料」の項参照）を添加し、脱塩水（ｐＨ約7.5）で希釈し50mlにした。こうして得られた溶液には約9.9％(w/v)のアジュバント又はマトリックスと0.1％(w/v)のタンパク質が含まれており、サイクロンＩを使って噴霧空気量を約0.67m3/時間で前記記載のようにして噴霧乾燥させた。凝集体含有率は前記記載の方法で調べた。
下記の凝集体含有率は、保存安定性として求めた。
−  相対湿度75％、温度40℃の開放状態で１週間保存したところ（強制的保存安定性）、粉末を溶かして調製した溶液の凝集体含有率は約14.9％であった。
【００９８】
９％(w/v)カップリングシュガー及び１％(w/v)IgG1含有製剤の噴霧乾燥
5.71gのカップリングシュガー含有シロップ（カップリングシュガー4.5gに相当）を約40mlの脱塩水（ｐＨ約7.5）に溶解した。次に、ｐＨ６のグリシン−ヒスチジン緩衝液に処方した濃度約109mg/mlの約4.6mlの純粋なIgG1（「材料」の項参照）を添加し、脱塩水（ｐＨ約7.5）で希釈し50mlにした。こうして得られた溶液には約９％(w/v)のアジュバント又はマトリックスと１％(w/v)のタンパク質が含まれており、サイクロンＩを使って噴霧空気量を約0.67m3/時間で前記記載のようにして噴霧乾燥させた。凝集体含有率は前記記載の方法で調べた。
下記の凝集体含有率は、保存安定性として求めた。
−  相対湿度75％、温度40℃の開放状態で１週間保存したところ（強制的保存安定性）、粉末を溶かして調製した溶液の凝集体含有率は約4.9％であった。
−  １日平衡にした後、40℃、乾燥状態で４週間保存したところ、粉末を溶かして調製した溶液の凝集体含有率は約3.2％であった。
−  １日真空乾燥を行った後、40℃、乾燥状態で４週間保存したところ、粉末を溶かして調製した溶液の凝集体含有率は約2.1％であった。
【００９９】
６％(w/v)カップリングシュガー及び４％(w/v)IgG1含有製剤の噴霧乾燥
3.81gのカップリングシュガー含有シロップ（カップリングシュガー3.0gに相当）を約25mlの脱塩水（ｐＨ約7.5）に溶解した。次に、ｐＨ６のグリシン−ヒスチジン緩衝液に処方した濃度約102.8mg/mlの約19.45mlの純粋なIgG1（「材料」の項参照）を添加し、脱塩水（ｐＨ約7.5）で希釈し50mlにした。こうして得られた溶液には約６％(w/v)のアジュバント又はマトリックスと４％(w/v)のタンパク質が含まれており、サイクロンＩを使って噴霧空気量を約0.67m3/時間で前記記載のようにして噴霧乾燥させた。凝集体含有率は前記記載の方法で調べた。
下記の凝集体含有率は、保存安定性として求めた。
−  相対湿度75％、温度40℃の開放状態で１週間保存したところ（強制的保存安定性）、粉末を溶かして調製した溶液の凝集体含有率は約5.0％であった。
【０１００】
４％(w/v)カップリングシュガー及び６％(w/v)IgG1含有製剤の噴霧乾燥
2.54gのカップリングシュガー含有シロップ（カップリングシュガー2.0gに相当）を約15mlの脱塩水（ｐＨ約7.5）に溶解した。次に、ｐＨ６のグリシン−ヒスチジン緩衝液に処方した濃度約xmg/mlの約29.18mlの純粋なIgG1（「材料」の項参照）を添加し、脱塩水（ｐＨ約7.5）で希釈し50mlにした。こうして得られた溶液には約４％(w/v)のアジュバント又はマトリックスと６％(w/v)のタンパク質が含まれており、サイクロンＩを使って噴霧空気量約0.67m3/時間で前記記載のようにして噴霧乾燥させた。凝集体含有率は前記記載の方法で調べた。
下記の凝集体含有率は、保存安定性として求めた。
−  相対湿度75％、温度40℃の開放状態で１週間保存したところ（強制的保存安定性）、粉末を溶かして調製した溶液の凝集体含有率は約9.9％であった。
【０１０１】
2.5％(w/v)カップリングシュガー及び7.5％(w/v)IgG1含有製剤の噴霧乾燥
1.59gのカップリングシュガー含有シロップ（カップリングシュガー1.250gに相当）を約８mlの脱塩水（ｐＨ約7.5）に溶解した。次に、ｐＨ６のグリシン−ヒスチジン緩衝液に処方した濃度約96.56mg/mlの約38.84mlの純粋なIgG1（「材料」の項参照）を添加し、脱塩水（ｐＨ約7.5）で希釈し50mlにした。こうして得られた溶液には約2.5％(w/v)のアジュバント又はマトリックスと7.5％(w/v)のタンパク質が含まれており、サイクロンＩを使って噴霧空気量約0.67m3/時間で前記記載のようにして噴霧乾燥させた。凝集体含有率は前記記載の方法で調べた。
下記の凝集体含有率は、保存安定性として求めた。
−  相対湿度75％、温度40℃の開放状態で１週間保存したところ（強制的保存安定性）、粉末を溶かして調製した溶液の凝集体含有率は約10.8％であった。
【０１０２】
1.0％(w/v)カップリングシュガー及び9.0％(w/v)IgG1含有製剤の噴霧乾燥
0.653gのカップリングシュガー含有シロップ（カップリングシュガー0.50gに相当）を約５mlの脱塩水（ｐＨ約7.5）に溶解した。次に、ｐＨ６のグリシン−ヒスチジン緩衝液に処方した濃度約96.56mg/mlの約41.43mlの純粋なIgG1（「材料」の項参照）を添加し、脱塩水（ｐＨ約7.5）で希釈し50mlにした。こうして得られた溶液には約1.0％(w/v)のアジュバント又はマトリックスと9.0％(w/v)のタンパク質が含まれており、サイクロンＩを使って噴霧空気量約0.67m3/時間で前記記載のようにして噴霧乾燥させた。凝集体含有率は前記記載の方法で調べた。
下記の凝集体含有率は、保存安定性として求めた。
−  相対湿度75％、温度40℃の開放状態で１週間保存したところ（強制的保存安定性）、粉末を溶かして調製した溶液の凝集体含有率は約13.1％であった。
【０１０３】
９％(w/v)カップリングシュガーＳ及び１％(w/v)IgG1含有製剤の噴霧乾燥
5.86gのカップリングシュガーＳ含有シロップ（カップリングシュガーＳ4.5gに相当）を約40mlの脱塩水（ｐＨ約7.5）に溶解した。次に、ｐＨ６のグリシン−ヒスチジン緩衝液に処方した濃度約109mg/mlの約4.6mlの純粋なIgG1（「材料」の項参照）を添加し、脱塩水（ｐＨ約7.5）で希釈し50mlにした。こうして得られた溶液には約９％(w/v)のアジュバント又はマトリックスと１％(w/v)のタンパク質が含まれており、サイクロンＩを使って噴霧空気量約0.67m3/時間で前記記載のようにして噴霧乾燥させた。凝集体含有率は前記記載の方法で調べた。
下記の凝集体含有率は、保存安定性として求めた。
−  相対湿度75％、温度40℃の開放状態で１週間保存したところ（強制的保存安定性）、粉末を溶かして調製した溶液の凝集体含有率は約5.4％であった。
【０１０４】
２．０．０  実施例２
８％(w/v)トレハロース、１％(w/v)Ｌ−イソロイシン及び１％(w/v)IgG1含有製剤の噴霧乾燥
4.0gのトレハロース及び0.5gのＬ−イソロイシンを、超音波浴中、約40mlの脱塩水（ｐＨ約7.5）に溶解した。次に、ｐＨ６のグリシン−ヒスチジン緩衝液に処方した濃度約109mg/mlの約4.6mlの純粋なIgG1（「材料」の項参照）を添加し、脱塩水（ｐＨ約7.5）で希釈し50mlにした。こうして得られた溶液には約９％(w/v)のアジュバント又はマトリックスと１％(w/v)のタンパク質が含まれており、サイクロンＩを使って噴霧空気量約0.67m3/時間で前記記載のようにして噴霧乾燥させた。凝集体含有率は前記記載の方法で調べた。
−  相対湿度75％、温度40℃の開放状態で１週間保存したところ（強制的保存安定性）、粉末を溶かして調製した溶液の凝集体含有率は約22.2％であった。
【０１０５】
2.66％(w/v)LS90P、0.33％(w/v)Ｌ−イソロイシン及び0.33％(w/v)IgG1含有製剤の噴霧乾燥
4.0gのLS90P及び0.50gのＬ−イソロイシンを、超音波浴中、約140mlの脱塩水（ｐＨ約7.5）に溶解した。次に、ｐＨ６のグリシン−ヒスチジン緩衝液に処方した濃度約102.8mg/mlの約4.864mlの純粋なIgG1（「材料」の項参照）を添加し、脱塩水（ｐＨ約7.5）で希釈し150mlにした。こうして得られた溶液には約3.00％(w/v)のアジュバント又はマトリックスと0.33％(w/v)のタンパク質が含まれており、サイクロンIIを使って噴霧空気量約0.67m3/時間で前記記載のようにして噴霧乾燥させた。凝集体含有率は前記記載の方法で調べた。
下記の凝集体含有率は、保存安定性として求めた。
−  相対湿度75％、温度40℃の開放状態で１週間保存したところ（強制的保存安定性）、粉末を溶かして調製した溶液の凝集体含有率は約0.7％であった。
−  ２〜８℃で１ヶ月及び３ヶ月保存したところ（３ヶ月安定性）、粉末を溶かして調製した溶液の凝集体含有率はそれぞれ約0.7％と約1.0％であった。
−  25℃で１ヶ月及び３ヶ月保存したところ（３ヶ月安定性）、粉末を溶かして調製した溶液の凝集体含有率はそれぞれ約0.8％と約1.1％であった。
−  40℃で１ヶ月及び３ヶ月保存したところ（３ヶ月安定性）、粉末を溶かして調製した溶液の凝集体含有率はそれぞれ約0.6％と約1.1％であった。
粉末のＭＭＡＤ及びＦＰＦを前記記載のようにして求めた。
−  噴霧乾燥後の粉末のＭＭＡＤは7.3μｍ、ＦＰＦは粉末カプセル質量に対して28.1％であった。
【０１０６】
８％(w/v)LS55P、１％(w/v)Ｌ−イソロイシン及び１％(w/v)IgG1含有製剤の噴霧乾燥
4.00gのLS55P及び0.50gのＬ−イソロイシンを、超音波浴中、約40mlの脱塩水（ｐＨ約7.5）に溶解した。次に、ｐＨ６のグリシン−ヒスチジン緩衝液に処方した濃度約109mg/mlの約4.60mlの純粋なIgG1（「材料」の項参照）を添加し、脱塩水（ｐＨ約7.5）で希釈し50mlにした。こうして得られた溶液には約９％(w/v)のアジュバント又はマトリックスと１％(w/v)のタンパク質が含まれており、サイクロンＩを使って噴霧空気量約0.67m3/時間で前記記載のようにして噴霧乾燥させた。凝集体含有率は前記記載の方法で調べた。
−  相対湿度75％、温度40℃の開放状態で１週間保存したところ（強制的保存安定性）、粉末を溶かして調製した溶液の凝集体含有率は約5.5％であった。
−  １日平衡にした後、40℃、乾燥状態で４週間保存したところ、粉末を溶かして調製した溶液の凝集体含有率は約1.8％であった。
−  １日真空乾燥を行った後、40℃、乾燥状態で４週間保存したところ、粉末を溶かして調製した溶液の凝集体含有率は約1.8％であった。
【０１０７】
2.66％(w/v)LS55P、0.33％(w/v)Ｌ−イソロイシン及び0.33％(w/v)IgG1含有製剤の噴霧乾燥
8.0gのLS55P及び１gのＬ−イソロイシンを、超音波浴中、約280mlの脱塩水（ｐＨ約7.5）に溶解した。次に、ｐＨ６のグリシン−ヒスチジン緩衝液に処方した濃度約102.8mg/mlの約9.7mlの純粋なIgG1（「材料」の項参照）を添加し、脱塩水（ｐＨ約7.5）で希釈し300mlにした。こうして得られた溶液には約３％(w/v)のアジュバント又はマトリックスと0.33％(w/v)のタンパク質が含まれており、サイクロンIIを使って噴霧空気量約0.67m3/時間で前記記載のようにして噴霧乾燥させた。凝集体含有率は前記記載の方法で調べた。
−  相対湿度75％、温度40℃の開放状態で１週間保存したところ（強制的保存安定性）、粉末を溶かして調製した溶液の凝集体含有率は約5.9％であった。
−  ２〜８℃で１ヶ月及び３ヶ月保存したところ（３ヶ月安定性）、粉末を溶かして調製した溶液の凝集体含有率はそれぞれ約1.6％であった。
−  25℃で１ヶ月及び３ヶ月保存したところ（３ヶ月安定性）、粉末を溶かして調製した溶液の凝集体含有率はそれぞれ約1.6％と約1.8％であった。
−  40℃で１ヶ月及び３ヶ月保存したところ（３ヶ月安定性）、粉末を溶かして調製した溶液の凝集体含有率はそれぞれ約1.6％と約1.8％であった。
粉末のＭＭＡＤ及びＦＰＦを前記記載のようにして求めた。
−  噴霧乾燥後の粉末のＭＭＡＤは4.9μｍ、ＦＰＦは粉末カプセル質量に対して34.7％であった。
【０１０８】
８％(w/v)カップリングシュガー、１％(w/v)Ｌ−イソロイシン及び１％(w/v)IgG1含有製剤の噴霧乾燥
5.08gのカップリングシュガー含有シロップ（カップリングシュガー4.0gに相当）及び0.50gのＬ−イソロイシンを、超音波浴中、約40mlの脱塩水（ｐＨ約7.5）に溶解した。次に、ｐＨ６のグリシン−ヒスチジン緩衝液に処方した濃度約109mg/mlの約4.60mlの純粋なIgG1（「材料」の項参照）を添加し、脱塩水（ｐＨ約7.5）で希釈し50mlにした。こうして得られた溶液には約９％(w/v)のアジュバント又はマトリックスと１％(w/v)のタンパク質が含まれており、サイクロンＩを使って噴霧空気量約0.67m3/時間で前記記載のようにして噴霧乾燥させた。凝集体含有率は前記記載の方法で調べた。
−  相対湿度75％、温度40℃の開放状態で１週間保存したところ（強制的保存安定性）、粉末を溶かして調製した溶液の凝集体含有率は約7.1％であった。
−  １日平衡にした後、40℃、乾燥状態で４週間保存したところ、粉末を溶かして調製した溶液の凝集体含有率は約2.5％であった。
−  １日真空乾燥を行った後、40℃、乾燥状態で４週間保存したところ、粉末を溶かして調製した溶液の凝集体含有率は約1.1％であった。
【０１０９】
８％(w/v)カップリングシュガーＳ、１％(w/v)Ｌ−イソロイシン及び１％(w/v)IgG1含有製剤の噴霧乾燥
5.21gのカップリングシュガーＳ含有シロップ（カップリングシュガーＳ4.0gに相当）及び0.50gのＬ−イソロイシンを、超音波浴中、約40mlの脱塩水（ｐＨ約7.5）に溶解した。次に、ｐＨ６のグリシン−ヒスチジン緩衝液に処方した濃度約109mg/mlの約4.60mlの純粋なIgG1（「材料」の項参照）を添加し、脱塩水（ｐＨ約7.5）で希釈し50mlにした。こうして得られた溶液には約９％(w/v)のアジュバント又はマトリックスと１％(w/v)のタンパク質が含まれており、サイクロンＩを使って噴霧空気量約0.67m3/時間で前記記載のようにして噴霧乾燥させた。凝集体含有率は前記記載の方法で調べた。
−  相対湿度75％、温度40℃の開放状態で１週間保存したところ（強制的保存安定性）、粉末を溶かして調製した溶液の凝集体含有率は約6.8％であった。
【０１１０】
３．０．０  実施例３
３％(w/v)トレハロース、６％(w/v)Ｌ−シトルリン及び１％(w/v)IgG1含有製剤の噴霧乾燥
1.50gのトレハロース及び3.00gのＬ−シトルリンを、超音波浴中、約40mlの脱塩水（ｐＨ約7.5）に溶解した。次に、ｐＨ６のグリシン−ヒスチジン緩衝液に処方した濃度約109mg/mlの約4.6mlの純粋なIgG1（「材料」の項参照）を添加し、脱塩水（ｐＨ約7.5）で希釈し50mlにした。こうして得られた溶液には約９％(w/v)のアジュバント又はマトリックスと１％(w/v)のタンパク質が含まれており、サイクロンＩを使って噴霧空気量約0.67m3/時間で前記記載のようにして噴霧乾燥させた。凝集体含有率は前記記載の方法で調べた。
−  相対湿度75％、温度40℃の開放状態で１週間保存したところ（強制的保存安定性）、粉末を溶かして調製した溶液の凝集体含有率は約5.9％であった。
【０１１１】
３％(w/v)LS55P、６％(w/v)Ｌ−シトルリン及び１％(w/v)IgG1含有製剤の噴霧乾燥
1.50gのLS55P及び3.00gのＬ−シトルリンを、超音波浴中、約40mlの脱塩水（ｐＨ約7.5）に溶解した。次に、ｐＨ６のグリシン−ヒスチジン緩衝液に処方した濃度約109mg/mlの約4.60mlの純粋なIgG1（「材料」の項参照）を添加し、脱塩水（ｐＨ約7.5）で希釈し50mlにした。こうして得られた溶液には約９％(w/v)のアジュバント又はマトリックスと１％(w/v)のタンパク質が含まれており、サイクロンＩを使って噴霧空気量約0.67m3/時間で前記記載のようにして噴霧乾燥させた。凝集体含有率は前記記載の方法で調べた。
−  相対湿度75％、温度40℃の開放状態で１週間保存したところ（強制的保存安定性）、粉末を溶かして調製した溶液の凝集体含有率は約2.9％であった。
−  １日平衡にした後、40℃、乾燥状態で４週間保存したところ、粉末を溶かして調製した溶液の凝集体含有率は約1.8％であった。
−  １日真空乾燥を行った後、40℃、乾燥状態で４週間保存したところ、粉末を溶かして調製した溶液の凝集体含有率は約1.3％であった。
【０１１２】
３％(w/v)カップリングシュガー、６％(w/v)Ｌ−シトルリン及び１％(w/v)IgG1含有製剤の噴霧乾燥
1.91gのカップリングシュガー含有シロップ（カップリングシュガー1.5gに相当）及び3.00gのＬ−シトルリンを、超音波浴中、約40mlの脱塩水（ｐＨ約7.5）に溶解した。次に、ｐＨ６のグリシン−ヒスチジン緩衝液に処方した濃度約109mg/mlの約4.60mlの純粋なIgG1（「材料」の項参照）を添加し、脱塩水（ｐＨ約7.5）で希釈し50mlにした。こうして得られた溶液には約９％(w/v)のアジュバント又はマトリックスと１％(w/v)のタンパク質が含まれており、サイクロンＩを使って噴霧空気量約0.67m3/時間で前記記載のようにして噴霧乾燥させた。凝集体含有率は前記記載の方法で調べた。
−  相対湿度75％、温度40℃の開放状態で１週間保存したところ（強制的保存安定性）、粉末を溶かして調製した溶液の凝集体含有率は約3.9％であった。
−  １日平衡にした後、40℃、乾燥状態で４週間保存したところ、粉末を溶かして調製した溶液の凝集体含有率は約1.4％であった。
−  １日真空乾燥を行った後、40℃、乾燥状態で４週間保存したところ、粉末を溶かして調製した溶液の凝集体含有率は約1.3％であった。
【０１１３】
３％(w/v)カップリングシュガーＳ、６％(w/v)Ｌ−シトルリン及び１％(w/v)IgG1含有製剤の噴霧乾燥
1.95gのカップリングシュガーＳ含有シロップ（カップリングシュガーＳ1.5gに相当）及び3.00gのＬ−シトルリンを、超音波浴中、約40mlの脱塩水（ｐＨ約7.5）に溶解した。次に、ｐＨ６のグリシン−ヒスチジン緩衝液に処方した濃度約109mg/mlの約4.60mlの純粋なIgG1（「材料」の項参照）を添加し、脱塩水（ｐＨ約7.5）で希釈し50mlにした。こうして得られた溶液には約９％(w/v)のアジュバント又はマトリックスと１％(w/v)のタンパク質が含まれており、サイクロンＩを使って噴霧空気量約0.67m3/時間で前記記載のようにして噴霧乾燥させた。凝集体含有率は前記記載の方法で調べた。
−  相対湿度75％、温度40℃の開放状態で１週間保存したところ（強制的保存安定性）、粉末を溶かして調製した溶液の凝集体含有率は約3.1％であった。
【０１１４】
４．０．０  実施例４
2.66％(w/v)トレハロース、0.33％(w/v)トリイソロイシン及び0.33％(w/v)IgG1含有製剤の噴霧乾燥
8.0gのトレハロース及び１gのトリイソロイシンを、超音波浴中、約280mlの脱塩水（ｐＨ約7.5）に溶解した。次に、ｐＨ６のグリシン−ヒスチジン緩衝液に処方した濃度約96.55mg/mlの約12.30mlの純粋なIgG1（「材料」の項参照）を添加し、脱塩水（ｐＨ約7.5）で希釈して300mlにした。こうして得られた溶液には約３％(w/v)のアジュバント又はマトリックスと0.33％(w/v)のタンパク質が含まれており、サイクロンIIを使って噴霧空気量約0.67m3/時間で前記記載のようにして噴霧乾燥させた。凝集体含有率は前記記載の方法で調べた。
−  相対湿度75％、温度40℃の開放状態で１週間保存したところ（強制的保存安定性）、粉末を溶かして調製した溶液の凝集体含有率は約26.7％であった。
【０１１５】
2.66％(w/v)ラフィノース、0.33％(w/v)トリイソロイシン及び0.33％(w/v)IgG1含有製剤の噴霧乾燥
8.0gのラフィノース及び１gのトリイソロイシンを、超音波浴中、約140mlの脱塩水（ｐＨ約7.5）に溶解した。次に、ｐＨ６のグリシン−ヒスチジン緩衝液に処方した濃度約102.8mg/mlの約4.87mlの純粋なIgG1（「材料」の項参照）を添加し、脱塩水（ｐＨ約7.5）で希釈し300mlにした。こうして得られた溶液には約３％(w/v)のアジュバント又はマトリックスと0.33％(w/v)のタンパク質が含まれており、サイクロンIIを使って噴霧空気量約0.67m3/時間で前記記載のようにして噴霧乾燥させた。凝集体含有率は前記記載の方法で調べた。
−  相対湿度75％、温度40℃の開放状態で１週間保存したところ（強制的保存安定性）、粉末を溶かして調製した溶液の凝集体含有率は約12.6％であった。
【０１１６】
2.66％(w/v)ヒドロキシエチルデンプン（HES）、0.33％(w/v)トリイソロイシン及び0.33％(w/v)IgG1含有製剤の噴霧乾燥
8.0gのＨＥＳ及び１gのトリイソロイシンを、超音波浴中、約80℃で攪拌しながら約140mlの脱塩水（ｐＨ約7.5）に溶解した。次に、ｐＨ６のグリシン−ヒスチジン緩衝液に処方した濃度約102.8mg/mlの約4.87mlの純粋なIgG1（「材料」の項参照）を先に冷却しておいた濁った溶液に添加し、脱塩水（ｐＨ約7.5）で希釈し150mlにした。こうして得られた溶液には約３％(w/v)のアジュバント又はマトリックスと0.33％(w/v)のタンパク質が含まれており、サイクロンIIを使って噴霧空気量約0.67m3/時間で前記記載のようにして噴霧乾燥させた。凝集体含有率は前記記載の方法で調べた。
−  相対湿度75％、温度40℃の開放状態で１週間保存したところ（強制的保存安定性）、粉末を溶かして調製した溶液の凝集体含有率は約18.6％であった。
−  相対湿度約43％、温度25℃の開放状態で１ヶ月及び３ヶ月保存したところ（３ヶ月開放状態安定性）、粉末を溶かして調製した溶液の凝集体含有率はそれぞれ約11.9％と約15.4％であった。
【０１１７】
2.00％(w/v)サッカロース、0.66％(w/v)ラクトース、0.33％(w/v)トリイソロイシン及び0.33％(w/v)IgG1含有製剤の噴霧乾燥
6.0gのサッカロース、2.0gのラクトース及び１gのトリイソロイシンを、超音波浴中、約280mlの脱塩水（ｐＨ約7.5）に溶解した。次に、ｐＨ６のグリシン−ヒスチジン緩衝液に処方した濃度約102.8mg/mlの約9.73mlの純粋なIgG1（「材料」の項参照）を添加し、脱塩水（ｐＨ約7.5）で希釈し300mlにした。こうして得られた溶液には約３％(w/v)のアジュバント又はマトリックスと0.33％(w/v)のタンパク質が含まれており、サイクロンIIを使って噴霧空気量約0.67m3/時間で前記記載のようにして噴霧乾燥させた。凝集体含有率は前記記載の方法で調べた。
−  相対湿度75％、温度40℃の開放状態で１週間保存したところ（強制的保存安定性）、粉末を溶かして調製した溶液の凝集体含有率は約8.8％であった。
【０１１８】
2.66％(w/v)サッカロース、0.33％(w/v)トリイソロイシン及び0.33％(w/v)IgG1含有製剤の噴霧乾燥
8.0gのサッカロース及び１gのトリイソロイシンを、超音波浴中、約280mlの脱塩水（ｐＨ約7.5）に溶解した。次に、ｐＨ６のグリシン−ヒスチジン緩衝液に処方した濃度約102.8mg/mlの約9.73mlの純粋なIgG1（「材料」の項参照）を添加し、脱塩水（ｐＨ約7.5）で希釈し300mlにした。こうして得られた溶液には約３％(w/v)のアジュバント又はマトリックスと0.33％(w/v)のタンパク質が含まれており、サイクロンIIを使って噴霧空気量約0.67m3/時間で前記記載のようにして噴霧乾燥させた。凝集体含有率は前記記載の方法で調べた。
−  相対湿度75％、温度40℃の開放状態で１週間保存したところ（強制的保存安定性）、粉末を溶かして調製した溶液の凝集体含有率は約5.6％であった。
【０１１９】
2.66％(w/v)LS90P、0.33％(w/v)トリイソロイシン及び0.33％(w/v)IgG1含有製剤の噴霧乾燥
4.0gのLS90P及び0.50gのトリイソロイシンを、約140mlの脱塩水（ｐＨ約7.5）に溶解した。次に、ｐＨ６のグリシン−ヒスチジン緩衝液に処方した濃度約102.8mg/mlの約4.864mlの純粋なIgG1（「材料」の項参照）を添加し、脱塩水（ｐＨ約7.5）で希釈し150mlにした。こうして得られた溶液には約3.00％(w/v)のアジュバント又はマトリックスと0.33％(w/v)のタンパク質が含まれており、サイクロンIIを使って噴霧空気量約0.67m3/時間で前記記載のようにして噴霧乾燥させた。凝集体含有率は前記記載の方法で調べた。
下記の凝集体含有率は、保存安定性として求めた。
−  相対湿度75％、温度40℃の開放状態で１週間保存したところ（強制的保存安定性）、粉末を溶かして調製した溶液の凝集体含有率は約2.3％であった。
−  ２〜８℃で１ヶ月及び３ヶ月保存したところ（３ヶ月安定性）、粉末を溶かして調製した溶液の凝集体含有率はそれぞれ約0.7％と約1.0％であった。
−  25℃で１ヶ月及び３ヶ月保存したところ（３ヶ月安定性）、粉末を溶かして調製した溶液の凝集体含有率はそれぞれ約0.8％と約1.4％であった。
−  40℃で１ヶ月及び３ヶ月保存したところ（３ヶ月安定性）、粉末を溶かして調製した溶液の凝集体含有率はそれぞれ約0.9％と約2.2％であった。
−  相対湿度約29％、温度25℃の開放状態で１ヶ月及び３ヶ月保存したところ、粉末を溶かして調製した溶液の凝集体含有率はそれぞれ約0.4％と約0.7％であった。
−  相対湿度約43％、温度25℃の開放状態で１ヶ月及び３ヶ月保存したところ、粉末を溶かして調製した溶液の凝集体含有率はそれぞれ約0.5％と約0.6％であった。
粉末のＭＭＤを前記記載のようにして求めた。
−  噴霧乾燥後の粉末のＭＭＤは4.7μｍであった。
粉末のＭＭＡＤ及びＦＰＦを前記記載のようにして求めた。
−  噴霧乾燥後の粉末のＭＭＡＤは4.8μｍ、ＦＰＦは粉末カプセル質量に対して53.2％であった。
【０１２０】
2.66％(w/v)LS90P、0.33％(w/v)トリイソロイシン及び0.33％(w/v)IgG1含有製剤の噴霧乾燥
4.0gのLS90P及び0.50gのトリイソロイシンを、約140mlの脱塩水（ｐＨ約7.5）に溶解した。次に、ｐＨ６のグリシン−ヒスチジン緩衝液に処方した濃度約102.8mg/mlの約4.864mlの純粋なIgG1（「材料」の項参照）を添加し、脱塩水（ｐＨ約7.5）で希釈し150mlにした。こうして得られた溶液には約3.00％(w/v)のアジュバント又はマトリックスと0.33％(w/v)のタンパク質が含まれており、サイクロンIIを使って噴霧空気量約1.05m3/時間で前記記載のようにして噴霧乾燥させた。凝集体含有率は前記記載の方法で調べた。
下記の凝集体含有率は、保存安定性として求めた。
−  相対湿度75％、温度40℃の開放状態で１週間保存したところ（強制的保存安定性）、粉末を溶かして調製した溶液の凝集体含有率は約2.2％であった。
−  相対湿度約29％、温度25℃で１ヶ月及び３ヶ月保存したところ（３ヶ月開放状態安定性）、粉末を溶かして調製した溶液の凝集体含有率はそれぞれ約0.5％と約0.6％だった。
−  相対湿度約43％、温度25℃で１ヶ月及び３ヶ月保存したところ（３ヶ月開放状態安定性）、粉末を溶かして調製した溶液の凝集体含有率はそれぞれ約0.5％と約0.7％だった。
粉末のＭＭＤを前記記載のようにして求めた。
−  噴霧乾燥後の粉末のＭＭＤは2.7μｍであった。
粉末のＭＭＡＤ及びＦＰＦを前記記載のようにして求めた。
−  噴霧乾燥後の粉末のＭＭＡＤは3.6μｍ、ＦＰＦは粉末カプセル質量に対して58.0％であった。
【０１２１】
2.66％(w/v)LS90P、0.33％(w/v)トリイソロイシン及び0.33％(w/v)IgG1含有製剤の噴霧乾燥
4.0gのLS90P及び0.50gのトリイソロイシンを、約140mlの脱塩水（ｐＨ約7.5）に溶解した。次に、ｐＨ６のグリシン−ヒスチジン緩衝液に処方した濃度約102.8mg/mlの約4.864mlの純粋なIgG1（「材料」の項参照）を添加し、脱塩水（ｐＨ約7.5）で希釈し150mlにした。こうして得られた溶液には約3.00％(w/v)のアジュバント又はマトリックスと0.33％(w/v)のタンパク質が含まれており、サイクロンIIを使って噴霧空気量約1.74m3/時間で前記記載のようにして噴霧乾燥させた。凝集体含有率は前記記載の方法で調べた。
下記の凝集体含有率は、保存安定性として求めた。
−  相対湿度75％、温度40℃の開放状態で１週間保存したところ（強制的保存安定性）、粉末を溶かして調製した溶液の凝集体含有率は約％であった。
−  相対湿度約29％、温度25℃で１ヶ月及び３ヶ月保存したところ（３ヶ月開放状態安定性）、粉末を溶かして調製した溶液の凝集体含有率はそれぞれ約0.5％と約0.6％だった。
−  相対湿度約43％、温度25℃で１ヶ月及び３ヶ月保存したところ（３ヶ月開放状態安定性）、粉末を溶かして調製した溶液の凝集体含有率はそれぞれ約0.5％と約0.8％だった。
粉末のＭＭＤを前記記載のようにして求めた。
−  噴霧乾燥後の粉末のＭＭＤは2.6μｍであった。
粉末のＭＭＡＤ及びＦＰＦを前記記載のようにして求めた。
−  噴霧乾燥後の粉末のＭＭＡＤは3.3μｍ、ＦＰＦは粉末カプセル質量に対して58.9％であった。
【０１２２】
1.60％(w/v)LS90P、0.20％(w/v)トリイソロイシン及び0.20％(w/v)IgG1含有製剤の噴霧乾燥
4.0gのLS90P及び0.50gのトリイソロイシンを、約220mlの脱塩水（ｐＨ約7.5）に溶解した。次に、ｐＨ６のグリシン−ヒスチジン緩衝液に処方した濃度約102.8mg/mlの約4.864mlの純粋なIgG1（「材料」の項参照）を添加し、脱塩水（ｐＨ約7.5）で希釈し250mlにした。こうして得られた溶液には約1.80％(w/v)のアジュバント又はマトリックスと0.20％(w/v)のタンパク質が含まれており、サイクロンIIを使って噴霧空気量約0.67m3/時間で前記記載のようにして噴霧乾燥させた。凝集体含有率は前記記載の方法で調べた。
下記の凝集体含有率は、保存安定性として求めた。
−  相対湿度75％、温度40℃の開放状態で１週間保存したところ（強制的保存安定性）、粉末を溶かして調製した溶液の凝集体含有率は約2.2％であった。
−  相対湿度約29％、温度25℃で１ヶ月及び３ヶ月保存したところ（３ヶ月開放状態安定性）、粉末を溶かして調製した溶液の凝集体含有率はそれぞれ約0.5％と約0.5％だった。
−  相対湿度約43％、温度25℃で１ヶ月及び３ヶ月保存したところ（３ヶ月開放状態安定性）、粉末を溶かして調製した溶液の凝集体含有率はそれぞれ約0.7％と約0.7％だった。
粉末のＭＭＤを前記記載のようにして求めた。
−  噴霧乾燥後の粉末のＭＭＤは3.2μｍであった。
粉末のＭＭＡＤ及びＦＰＦを前記記載のようにして求めた。
−  噴霧乾燥後の粉末のＭＭＡＤは3.9μｍ、ＦＰＦは粉末カプセル質量に対して55.6％であった。
【０１２３】
2.833％(w/v)LS90P、0.166％(w/v)トリイソロイシン及び0.33％(w/v)IgG1含有製剤の噴霧乾燥
4.25gのLS90P及び0.25gのトリイソロイシンを、約140mlの脱塩水（ｐＨ約7.5）に溶解した。次に、ｐＨ６のグリシン−ヒスチジン緩衝液に処方した濃度約102.8mg/mlの約4.864mlの純粋なIgG1（「材料」の項参照）を添加し、脱塩水（ｐＨ約7.5）で希釈し150mlにした。こうして得られた溶液には約3.00％(w/v)のアジュバント又はマトリックスと0.33％(w/v)のタンパク質が含まれており、サイクロンIIを使って噴霧空気量約0.67m3/時間で前記記載のようにして噴霧乾燥させた。凝集体含有率は前記記載の方法で調べた。
下記の凝集体含有率は、保存安定性として求めた。
−  相対湿度75％、温度40℃の開放状態で１週間保存したところ（強制的保存安定性）、粉末を溶かして調製した溶液の凝集体含有率は約1.5％であった。
−  相対湿度約29％、温度25℃で１ヶ月及び３ヶ月保存したところ（３ヶ月開放状態安定性）、粉末を溶かして調製した溶液の凝集体含有率はそれぞれ約0.5％と約0.5％だった。
−  相対湿度約43％、温度25℃で１ヶ月及び３ヶ月保存したところ（３ヶ月開放状態安定性）、粉末を溶かして調製した溶液の凝集体含有率はそれぞれ約0.5％と約0.6％だった。
粉末のＭＭＤを前記記載のようにして求めた。
−  噴霧乾燥後の粉末のＭＭＤは4.8μｍであった。
粉末のＭＭＡＤ及びＦＰＦを前記記載のようにして求めた。
−  噴霧乾燥後の粉末のＭＭＡＤは5.2μｍ、ＦＰＦは粉末カプセル質量に対して45.7％であった。
【０１２４】
2.9166％(w/v)LS90P、0.0833％(w/v)トリイソロイシン及び0.33％(w/v)IgG1含有製剤の噴霧乾燥
4.375gのLS90P及び0.125gのトリイソロイシンを、約140mlの脱塩水（ｐＨ約7.5）に溶解した。次に、ｐＨ６のグリシン−ヒスチジン緩衝液に処方した濃度約102.8mg/mlの約4.864mlの純粋なIgG1（「材料」の項参照）を添加し、脱塩水（ｐＨ約7.5）で希釈し150mlにした。こうして得られた溶液には約3.00％(w/v)のアジュバント又はマトリックスと0.33％(w/v)のタンパク質が含まれており、サイクロンIIを使って噴霧空気量約0.67m3/時間で前記記載のようにして噴霧乾燥させた。凝集体含有率は前記記載の方法で調べた。
下記の凝集体含有率は、保存安定性として求めた。
−  相対湿度75％、温度40℃の開放状態で１週間保存したところ（強制的保存安定性）、粉末を溶かして調製した溶液の凝集体含有率は約1.2％であった。
−  相対湿度約29％、温度25℃で１ヶ月及び３ヶ月保存したところ（３ヶ月開放状態安定性）、粉末を溶かして調製した溶液の凝集体含有率はそれぞれ約0.4％と約0.5％だった。
−  相対湿度約43％、温度25℃で１ヶ月及び３ヶ月保存したところ（３ヶ月開放状態安定性）、粉末を溶かして調製した溶液の凝集体含有率はそれぞれ約0.5％と約0.6％だった。
粉末のＭＭＤを前記記載のようにして求めた。
−  噴霧乾燥後の粉末のＭＭＤは4.2μｍであった。
粉末のＭＭＡＤ及びＦＰＦを前記記載のようにして求めた。
−  噴霧乾燥後の粉末のＭＭＡＤは6.1μｍ、ＦＰＦは粉末カプセル質量に対して39.6％であった。
【０１２５】
2.66％(w/v)LS55P、0.33％(w/v)トリイソロイシン及び0.33％(w/v)IgG1含有製剤の噴霧乾燥
8.0gのLS55P及び１gのトリイソロイシンを、超音波浴中、約280mlの脱塩水（ｐＨ約7.5）に溶解した。次に、ｐＨ６のグリシン−ヒスチジン緩衝液に処方した濃度約102.8mg/mlの約9.73mlの純粋なIgG1（「材料」の項参照）を添加し、脱塩水（ｐＨ約7.5）で希釈し300mlにした。こうして得られた溶液には約３％(w/v)のアジュバント又はマトリックスと0.33％(w/v)のタンパク質が含まれており、サイクロンIIを使って噴霧空気量約0.67m3/時間で前記記載のようにして噴霧乾燥させた。凝集体含有率は前記記載の方法で調べた。
−  相対湿度75％、温度40℃の開放状態で１週間保存したところ（強制的保存安定性）、粉末を溶かして調製した溶液の凝集体含有率は約2.1％であった。
−  ２〜８℃で１ヶ月及び３ヶ月保存したところ（３ヶ月安定性）、粉末を溶かして調製した溶液の凝集体含有率はそれぞれ約0.8％と約1.5％であった。
−  25℃で１ヶ月及び３ヶ月保存したところ（３ヶ月安定性）、粉末を溶かして調製した溶液の凝集体含有率はそれぞれ約0.9％と約1.5％であった。
−  40℃で１ヶ月及び３ヶ月保存したところ（３ヶ月安定性）、粉末を溶かして調製した溶液の凝集体含有率はそれぞれ約1.3％と約2.6％であった。
−  相対湿度約43％、温度25℃で１ヶ月及び３ヶ月保存したところ（３ヶ月開放状態安定性）、粉末を溶かして調製した溶液の凝集体含有率はそれぞれ約1.0％と約1.0％だった。
粉末のＭＭＤを前記記載のようにして求めた。
−  噴霧乾燥後の粉末のＭＭＤは3.4μｍであった。
粉末のＭＭＡＤ及びＦＰＦを前記記載のようにして求めた。
−  噴霧乾燥後の粉末のＭＭＡＤは3.9μｍ、ＦＰＦは粉末カプセル質量に対して58.3％であった。
−  相対湿度約43％、温度25℃で１ヶ月保存したところ（３ヶ月開放状態安定性）、ＭＭＡＤは3.8μｍ、ＦＰＦは粉末カプセル質量に対して59.6％であった。
【０１２６】
2.833％(w/v)LS55P、0.166％(w/v)トリイソロイシン及び0.33％(w/v)IgG1含有製剤の噴霧乾燥
8.5gのLS55P及び0.5gのトリイソロイシンを、超音波浴中、約280mlの脱塩水（ｐＨ約7.5）に溶解した。次に、ｐＨ６のグリシン−ヒスチジン緩衝液に処方した濃度約102.8mg/mlの約9.73mlの純粋なIgG1（「材料」の項参照）を添加し、脱塩水（ｐＨ約7.5）で希釈し300mlにした。こうして得られた溶液には約３％(w/v)のアジュバント又はマトリックスと0.33％(w/v)のタンパク質が含まれており、サイクロンIIを使って噴霧空気量約0.67m3/時間で前記記載のようにして噴霧乾燥させた。凝集体含有率は前記記載の方法で調べた。
−  相対湿度75％、温度40℃の開放状態で１週間保存したところ（強制的保存安定性）、粉末を溶かして調製した溶液の凝集体含有率は約3.4％であった。
−  相対湿度約43％、温度25℃で１ヶ月及び３ヶ月保存したところ（３ヶ月開放状態安定性）、粉末を溶かして調製した溶液の凝集体含有率はそれぞれ約1.3％と約1.5％だった。
粉末のＭＭＤを前記記載のようにして求めた。
−  噴霧乾燥後の粉末のＭＭＤは2.9μｍであった。
粉末のＭＭＡＤ及びＦＰＦを前記記載のようにして求めた。
−  噴霧乾燥後の粉末のＭＭＡＤは4.4μｍ、ＦＰＦは粉末カプセル質量に対して58.6％であった。
【０１２７】
2.9166％(w/v)LS55P、0.0833％(w/v)トリイソロイシン及び0.33％(w/v)IgG1含有製剤の噴霧乾燥
8.75gのLS55P及び0.25gのトリイソロイシンを、約280mlの脱塩水（ｐＨ約7.5）に溶解した。次に、ｐＨ６のグリシン−ヒスチジン緩衝液に処方した濃度約102.8mg/mlの約9.73mlの純粋なIgG1（「材料」の項参照）を添加し、脱塩水（ｐＨ約7.5）で希釈し300mlにした。こうして得られた溶液には約３％(w/v)のアジュバント又はマトリックスと0.33％(w/v)のタンパク質が含まれており、サイクロンIIを使って噴霧空気量約0.67m3/時間で前記記載のようにして噴霧乾燥させた。凝集体含有率は前記記載の方法で調べた。
−  相対湿度75％、温度40℃の開放状態で１週間保存したところ（強制的保存安定性）、粉末を溶かして調製した溶液の凝集体含有率は約4.4％であった。
−  相対湿度約43％、温度25℃で１ヶ月及び３ヶ月保存したところ（３ヶ月開放状態安定性）、粉末を溶かして調製した溶液の凝集体含有率はそれぞれ約0.7％と約0.8％だった。
粉末のＭＭＤを前記記載のようにして求めた。
−  噴霧乾燥後の粉末のＭＭＤは2.9μｍであった。
粉末のＭＭＡＤ及びＦＰＦを前記記載のようにして求めた。
−  噴霧乾燥後の粉末のＭＭＡＤは4.4μｍ、ＦＰＦは粉末カプセル質量に対して58.6％であった。
【０１２８】
５．０．０  実施例５
６．０．０  本発明による別の粉末の製造
3.33％(w/v)リゾチーム含有製剤の噴霧乾燥
５gのリゾチームを約140mlの脱塩水（ｐＨ約7.5）に溶解し、脱塩水（ｐＨ約7.5）で希釈して150mlにした。こうして得られた溶液を、サイクロンIIを使って前記記載のようにして噴霧乾燥させた。
残留モノマー含有率を前記記載の方法で求めた。強制的保存の後、粉末を溶かして調製した溶液の残留モノマー含有率は約35.3％であった。粉末のＭＭＤを前記記載のようにして求めた。粉末のＭＭＤは3.2μｍであった。
粉末のＭＭＡＤ及びＦＰＦを前記記載のようにして求めた。ＭＭＡＤは4.0μｍ、ＦＰＦは粉末カプセル質量に対して70.4％であった。
【０１２９】
3.00％(w/v)LS90P及び0.33％(w/v)リゾチーム含有製剤の噴霧乾燥
9.0gのLS90Pを、超音波浴中、約280mlの脱塩水（ｐＨ約7.5）に溶解した。次に、１ｇのリゾチームを添加し、脱塩水（ｐＨ約7.5）で希釈し300mlにした。こうして得られた溶液を、サイクロンIIを使って前記記載のようにして噴霧乾燥させた。
残留モノマー含有率を前記記載の方法で求めた。強制的保存の後、粉末を溶かして調製した溶液の残留モノマー含有率は約62.1％であった。粉末のＭＭＤを前記記載のようにして求めた。粉末のＭＭＤは4.0μｍであった。
粉末のＭＭＡＤ及びＦＰＦを前記記載のようにして求めた。ＭＭＡＤは3.7μｍ、ＦＰＦは粉末カプセル質量に対して24.7％であった。
【０１３０】
2.66％(w/v)LS90P、0.33％(w/v)イソロイシン及び0.33％(w/v)リゾチーム含有製剤の噴霧乾燥
8.0gのLS90Pと１gのイソロイシンとを、超音波浴中約280mlの脱塩水（ｐＨ約7.5）に溶解した。次に、１ｇのリゾチームを添加し、脱塩水（ｐＨ約7.5）で希釈して300mlにした。こうして得られた溶液をサイクロンIIを使って前記記載のようにして噴霧乾燥させた。
残留モノマー含有率は前記記載の方法で求めた。強制的保存の後、粉末を溶かして調製した溶液の残留モノマー含有率は約47.9％であった。粉末のＭＭＤを前記記載のようにして求めた。粉末のＭＭＤは3.9μｍであった。
粉末のＭＭＡＤ及びＦＰＦを前記記載のようにして求めた。ＭＭＡＤは4.1μｍ、ＦＰＦは粉末カプセル質量に対して29.0％であった。
【０１３１】
2.66％(w/v)LS90P、0.33％(w/v)トリイソロイシン及び0.33％(w/v)リゾチーム含有製剤の噴霧乾燥
8.0gのLS90Pと１gのトリイソロイシンとを、超音波浴中約280mlの脱塩水（ｐＨ約7.5）に溶解した。次に、１ｇのリゾチームを添加し、脱塩水（ｐＨ約7.5）で希釈して300mlにした。こうして得られた溶液を、サイクロンIIを使って前記記載のようにして噴霧乾燥させた。
残留モノマー含有率を前記記載の方法で求めた。強制的保存の後、粉末を溶かして調製した溶液の残留モノマー含有率は約47.9％であった。粉末のＭＭＤを前記記載のようにして求めた。粉末のＭＭＤは2.7μｍであった。
粉末のＭＭＡＤ及びＦＰＦを前記記載のようにして求めた。ＭＭＡＤは3.6μｍ、ＦＰＦは粉末カプセル質量に対して58.6％であった。
【０１３２】
3.33％(w/v)カルシトニン含有製剤の噴霧乾燥
１gのカルシトニンを約25mlの脱塩水（ｐＨ約7.5）に溶解し、脱塩水（ｐＨ約7.5）で希釈し30mlにした。こうして得られた溶液を、サイクロンIIを使って前記記載のようにして噴霧乾燥させた。
凝集体含有率を前記記載の方法で求めた。
−  ２〜８℃で３ヶ月保存したところ（３ヶ月安定性）、粉末を溶かして調製した溶液の凝集体含有率は約4.1％であった。
−  25℃で３ヶ月保存したところ（３ヶ月安定性）、粉末を溶かして調製した溶液の凝集体含有率は約4.9％であった。
−  40℃で３ヶ月保存したところ（３ヶ月安定性）、粉末を溶かして調製した溶液の凝集体含有率は約7.4％であった。
粉末のＭＭＡＤ及びＦＰＦを前記記載のようにして求めた。ＭＭＡＤは3.9μｍ、ＦＰＦは粉末カプセル質量に対して59.0％であった。
【０１３３】
3.166％(w/v)LS90P及び0.166％(w/v)カルシトニン含有製剤の噴霧乾燥
4.750gのLS90Pを約140mlの脱塩水（ｐＨ約7.5）に溶解した。次に、0.250gのカルシトニンを添加し脱塩水（ｐＨ約7.5）で希釈して150mlにした。こうして得られた溶液を、サイクロンIIを使って前記記載のようにして噴霧乾燥させた。
凝集体含有率を前記記載の方法で求めた。
−  ２〜８℃で３ヶ月保存したところ（３ヶ月安定性）、粉末を溶かして調製した溶液の凝集体含有率は約3.6％であった。
−  25℃で３ヶ月保存したところ（３ヶ月安定性）、粉末を溶かして調製した溶液の凝集体含有率は約3.9％であった。
−  40℃で３ヶ月保存したところ（３ヶ月安定性）、粉末を溶かして調製した溶液の凝集体含有率は約4.6％であった。
粉末のＭＭＤを前記記載のようにして求めた。粉末のＭＭＤは2.6μｍであった。粉末のＭＭＡＤ及びＦＰＦを前記記載のようにして求めた。ＭＭＡＤは4.3μｍ、ＦＰＦは粉末カプセル質量に対して47.3％であった。
【０１３４】
2.833％(w/v)LS90P、0.33％(w/v)イソロイシン及び0.166％(w/v)カルシトニン含有製剤の噴霧乾燥
4.250gのLS90P及び0.50gのイソロイシンを、超音波浴中で約140mlの脱塩水（ｐＨ約7.5）に溶解した。次に、0.250gのカルシトニンを添加し脱塩水（ｐＨ約7.5）で希釈して150mlにした。こうして得られた溶液を、サイクロンIIを使って前記記載のようにして噴霧乾燥させた。
凝集体含有率を前記記載の方法で求めた。
−  ２〜８℃で３ヶ月保存したところ（３ヶ月安定性）、粉末を溶かして調製した溶液の凝集体含有率は約3.3％であった。
−  25℃で３ヶ月保存したところ（３ヶ月安定性）、粉末を溶かして調製した溶液の凝集体含有率は約3.6％であった。
−  40℃で３ヶ月保存したところ（３ヶ月安定性）、粉末を溶かして調製した溶液の凝集体含有率は約3.6％であった。
粉末のＭＭＤを前記記載のようにして求めた。粉末のＭＭＤは2.8μｍであった。粉末のＭＭＡＤ及びＦＰＦを前記記載のようにして求めた。ＭＭＡＤは4.4μｍ、ＦＰＦは粉末カプセル質量に対して49.2％であった。
【０１３５】
2.866％(w/v)LS90P、0.33％(w/v)トリイソロイシン及び0.166％(w/v)カルシトニン含有製剤の噴霧乾燥
4.250gのLS90P及び0.50gのトリイソロイシンを、超音波浴中で約140mlの脱塩水（ｐＨ約7.5）に溶解した。次に、0.250gのカルシトニンを添加し脱塩水（ｐＨ約7.5）で希釈し150mlにした。こうして得られた溶液を、サイクロンIIを使って前記記載のようにして噴霧乾燥させた。
凝集体含有率を前記記載の方法で求めた。
−  ２〜８℃で３ヶ月保存したところ（３ヶ月安定性）、粉末を溶かして調製した溶液の凝集体含有率は約3.3％であった。
−  25℃で３ヶ月保存したところ（３ヶ月安定性）、粉末を溶かして調製した溶液の凝集体含有率は約3.6％であった。
−  40℃で３ヶ月保存したところ（３ヶ月安定性）、粉末を溶かして調製した溶液の凝集体含有率は約3.9％であった。
粉末のＭＭＤを前記記載のようにして求めた。粉末のＭＭＤは2.5μｍであった。粉末のＭＭＡＤ及びＦＰＦを前記記載のようにして求めた。ＭＭＡＤは3.5μｍ、ＦＰＦは粉末カプセル質量に対して60.4％であった。
【０１３６】
７．０．０  実施例６
５％(w/v)IgG1調剤の凍結乾燥
ｐＨ６のグリシン−ヒスチジン緩衝液に処方した濃度約109mg/mlの純粋なIgG1（「材料」の項参照）を、脱塩水（ｐＨ約7.5）で50mg/mlまで希釈し、他のアジュバントを加えずに凍結乾燥させた。凍結乾燥前の溶液の量は50mlで市販の２Ｒバイアルに分けておいた。前記記載のように、２Ｒバイアル中で凍結乾燥させ、スパチュラを使ってさらに処理を行った。
凝集体含有率は前記記載の方法で調べた。
−  相対湿度75％、温度40℃の開放状態で１週間保存したところ（強制的保存安定性）、粉末を溶かして調製した溶液の凝集体含有率は約20.5％であった。
−  １日平衡にした後、40℃、乾燥状態で４週間保存したところ、粉末を溶かして調製した溶液の凝集体含有率は約15.3％であった。
−  １日真空乾燥を行った後、40℃、乾燥状態で４週間保存したところ、粉末を溶かして調製した溶液の凝集体含有率は約12.6％であった。
【０１３７】
4.5％(w/v)マンニトール及び0.5％(w/v)IgG1含有製剤の凍結乾燥
2.25gのマンニトールを約40mlの脱塩水（ｐＨ約7.5）に溶解した。次に、ｐＨ６のグリシン−ヒスチジン緩衝液に処方した濃度約109mg/mlの2.3mlの純粋なIgG1（「材料」の項参照）を、脱塩水（ｐＨ約7.5）で希釈して50mg/mlにした。こうして得られた溶液には約4.5％(w/v)のアジュバント又はマトリックスと0.5％(w/v)のタンパク質が含まれており、市販の２Ｒバイアルに分け、前記記載のようにして凍結乾燥させた。前記記載のように、２Ｒバイアル中で凍結乾燥させ、スパチュラを使ってさらに処理を行った。凝集体含有率は前記記載の方法で調べた。
下記の凝集体含有率は、保存安定性として求めた。
−  相対湿度75％、温度40℃の開放状態で１週間保存したところ（強制的保存安定性）、粉末を溶かして調製した溶液の凝集体含有率は約34.0％であった。
−  １日平衡にした後、40℃、乾燥状態で４週間保存したところ、粉末を溶かして調製した溶液の凝集体含有率は約11.6％であった。
−  １日真空乾燥を行った後、40℃、乾燥状態で４週間保存したところ、粉末を溶かして調製した溶液の凝集体含有率は約6.2％であった。
【０１３８】
4.5％(w/v)LS55P及び0.5％(w/v)IgG1含有製剤の凍結乾燥
2.25gのLS55Pを約40mlの脱塩水（ｐＨ約7.5）に溶解した。次に、ｐＨ６のグリシン−ヒスチジン緩衝液に処方した濃度約109mg/mlの2.3mlの純粋なIgG1（「材料」の項参照）を、脱塩水（ｐＨ約7.5）で希釈して50mg/mlにした。こうして得られた溶液には約4.5％(w/v)のアジュバント又はマトリックスと0.5％(w/v)のタンパク質が含まれており、市販の２Ｒバイアルに分け、前記記載のようにして凍結乾燥させた。前記記載のように、２Ｒバイアル中で凍結乾燥させ、スパチュラを使ってさらに処理を行った。凝集体含有率は前記記載の方法で調べた。
下記の凝集体含有率は、保存安定性として求めた。
−  相対湿度75％、温度40℃の開放状態で１週間保存したところ（強制的保存安定性）、粉末を溶かして調製した溶液の凝集体含有率は約2.5％であった。
−  １日平衡にした後、40℃、乾燥状態で４週間保存したところ、粉末を溶かして調製した溶液の凝集体含有率は約2.6％であった。
−  １日真空乾燥を行った後、40℃、乾燥状態で４週間保存したところ、粉末を溶かして調製した溶液の凝集体含有率は約1.2％であった。
【０１３９】
4.5％(w/v)カップリングシュガー及び0.5％(w/v)IgG1含有製剤の凍結乾燥
2.25gのカップリングシュガーを約40mlの脱塩水（ｐＨ約7.5）に溶解した。次に、ｐＨ６のグリシン−ヒスチジン緩衝液に処方した濃度約109mg/mlの2.3mlの純粋なIgG1（「材料」の項参照）を、脱塩水（ｐＨ約7.5）で希釈して50mg/mlにした。こうして得られた溶液には約4.5％(w/v)のアジュバント又はマトリックスと0.5％(w/v)のタンパク質が含まれており、市販の２Ｒバイアルに分け、前記記載のようにして凍結乾燥させた。前記記載のように、２Ｒバイアル中で凍結乾燥させ、スパチュラを使ってさらに処理を行った。凝集体含有率は前記記載の方法で調べた。
下記の凝集体含有率は、保存安定性として求めた。
−  相対湿度75％、温度40℃の開放状態で１週間保存したところ（強制的保存安定性）、粉末を溶かして調製した溶液の凝集体含有率は約5.5％であった。
−  １日平衡にした後、40℃、乾燥状態で４週間保存したところ、粉末を溶かして調製した溶液の凝集体含有率は約4.6％であった。
−  １日真空乾燥を行った後、40℃、乾燥状態で４週間保存したところ、粉末を溶かして調製した溶液の凝集体含有率は約1.5％であった。
−  粉末を溶かして調製した溶液の凝集体含有率は、40℃で約1.5％であった。
【０１４０】
明細書中に記載のパーセントのデータはすべて溶液中の固形分濃度（質量／質量）を指す。下記記載の図面の説明文は、すべて噴霧乾燥や微粉化を伴う凍結乾燥によって得られる粉末の組成比（質量／質量）を指している。さらに、図面説明文によると、溶液中の総固形分濃度（総固形分＝ＴＳ）がパーセント（質量／質量）で規定されている。図８の説明では、カップリングシュガーをＣＳと略記している。図１８、図１９、図２０及び図２１の説明では、トリイソロイシンをIle3と略記している。さらに、図１５、図１６、図１７、図１８、図１９、図２０及び図２１では、ビュッヒ社（Buchi）のB-290に設定した噴霧乾燥工程中の霧化速度（ＡＡＦ＝噴霧空気流量）が指定されている。その数値４０は、実際の流量約0.67m3/時間に相当し、数値５０は、実際の流量約1.05m3/時間に相当し、数値６０は、実際の流量約1.74m3/時間に相当する。他のすべての図面では、霧化速度４０が実際の流量約0.67m3/時間に対応している。
【図面の簡単な説明】
【０１４１】
【図１】凍結乾燥を行い、微粉化後に相対湿度75％及び温度40℃の開放状態で１週間保存し（強制的保存安定性）、再構成した後の凝集体含有率を示す。ａ）4.5％のLS55P分及び0.5％のIgG分、ｂ）4.5％のカップリングシュガー分及び0.5％のIgG分、ｃ）5.0％のIgG分、ｄ）4.5％のマンニトール分及び0.5％のIgG分をそれぞれ含む水溶液を凍結乾燥した。LS55Pを含む粉末とカップリングシュガーを含む粉末は、凝集分が低いことを特徴とする。
【０１４２】
【図２】凍結乾燥を行い、微粉化、平衡化後、温度40℃の乾燥状態で４週間保存し（平衡化保存安定性）、再構成した後の凝集体含有率を示す。ａ）4.5％のLS55P分及び0.5％のIgG分、ｂ）4.5％のカップリングシュガー分及び0.5％のIgG分、ｃ）5.0％のIgG分、ｄ）4.5％のマンニトール分及び0.5％のIgG分をそれぞれ含む水溶液を凍結乾燥した。LS55Pを含む粉末とカップリングシュガーを含む粉末は、凝集分が低いことを特徴とする。
【０１４３】
【図３】凍結乾燥を行い、微粉化、真空乾燥後、温度40℃の乾燥状態で４週間保存し（真空乾燥保存安定性）、再構成後の凝集体含有率を示す。ａ）4.5％のLS55P分及び0.5％のIgG分、ｂ）4.5％のカップリングシュガー分及び0.5％のIgG分、ｃ）5.0％のIgG分、ｄ）4.5％のマンニトール分及び0.5％のIgG分をそれぞれ含む水溶液を凍結乾燥した。LS55Pを含む粉末とカップリングシュガーを含む粉末は、凝集分が低いことを特徴とする。
【０１４４】
【図４】噴霧乾燥を行い、相対湿度75％及び温度40℃の開放状態で１週間保存し（強制的保存安定性）、再構成後の凝集体含有率を示す。ａ）９％のLS55P分及び１％のIgG分、ｂ）９％のカップリングシュガー分及び１％のIgG分、ｃ）９％のカップリングシュガーＳ分及び１％のIgG分、ｄ）９％のトレハロース分及び１％のIgG分、ｅ）10％のIgG分をそれぞれ含む水溶液を噴霧乾燥した。LS55Pを含む粉末、ならびにカップリングシュガーを含む粉末とカップリングシュガーＳを含む粉末は、凝集分が低いことを特徴とする。
【０１４５】
【図５】噴霧乾燥を行い、相対湿度75％及び温度40℃の開放状態で１週間保存し（強制的保存安定性）、再構成後の凝集体含有率を示す。ａ）８％のLS55P分、１％のイソロイシン分及び１％のIgG分、ｂ）８％のカップリングシュガー分、１％のイソロイシン分及び１％のIgG分、ｃ）８％のカップリングシュガーＳ分、１％のイソロイシン分及び１％のIgG分、ｄ）８％のトレハロース分、１％のイソロイシン分及び１％のIgG分、ｅ）10％のIgG分をそれぞれ含む水溶液を噴霧乾燥した。LS55Pを含む粉末、ならびにカップリングシュガーを含む粉末とカップリングシュガーＳを含む粉末は、凝集分が低いことを特徴とする。
【０１４６】
【図６】噴霧乾燥を行い、相対湿度75％及び温度40℃の開放状態で１週間保存し（強制的保存安定性）、再構成後の凝集体含有率を示す。ａ）３％のLS55P分、６％のシトルリン分及び１％のIgG分、ｂ）３％のカップリングシュガー分、６％のシトルリン分及び１％のIgG分、ｃ）３％のカップリングシュガーＳ分、16％のシトルリン分及び１％のIgG分、ｄ）３％のトレハロース分、６％のシトルリン分及び１％のIgG分、ｅ）10％のIgG分をそれぞれ含む水溶液を噴霧乾燥した。LS55Pを含む粉末、ならびにカップリングシュガーを含む粉末とカップリングシュガーＳを含む粉末は、凝集分が低いことを特徴とする。
【０１４７】
【図７】噴霧乾燥を行い、相対湿度75％及び温度40℃の開放状態で１週間保存し（強制的保存安定性）、再構成後の凝集体含有率を示す。ａ）9.9％のLS55P分及び0.1％のIgG分、ｂ）９％のLS55P分及び１％のIgG分、ｃ）６％のLS55P分及び４％のIgG分、ｄ）４％のLS55P分及び６％のIgG分、ｅ）2.5％のLS55P分及び7.5％のIgG分、ｆ）９％のLS55P分及び１％のIgG分、ｇ）0.5％のLS55P分及び9.5％のIgG分、ｈ）10％のIgG分をそれぞれ含む水溶液を噴霧乾燥した。LS55Pを含む粉末は凝集分が低いことを特徴とする。
【０１４８】
【図８】噴霧乾燥を行い、相対湿度75％及び温度40℃の開放状態で１週間保存し（強制的保存安定性）、再構成後の凝集体含有率を示す。ａ）9.9％のカップリングシュガー分及び0.1％のIgG分、ｂ）９％のカップリングシュガー分及び１％のIgG分、ｃ）６％のカップリングシュガー分及び４％のIgG分、ｄ）４％のカップリングシュガー分及び６％のIgG分、ｅ）2.5％のカップリングシュガー分及び7.5％のIgG分、ｆ）１％のカップリングシュガー分及び９％のIgG分、ｇ）10％のIgG分をそれぞれ含む水溶液を噴霧乾燥した。LS55Pを含む粉末は凝集分が低いことを特徴とする。
【０１４９】
【図９】噴霧乾燥を行い、相対湿度75％及び温度40℃の開放状態で１週間保存し（強制的保存安定性）、再構成後の凝集体含有率を示す。ａ）3.00％のLS55P分及び0.33％のIgG分、ｂ）2.9166％のLS55P分、0.0833％のトリイソロイシン分及び0.33％のIgG分、ｃ）2.833％のLS55P分、0.166％のトリイソロイシン分及び0.33％のIgG分、ｄ）2.66％のLS55P分、0.33％のトリイソロイシン分及び0.33％のIgG分をそれぞれ含む水溶液を噴霧乾燥した。LS55Pを含む粉末は凝集分が低いことに特徴付けられる。LS55Pを含む粉末の総固形分に対して、トリイソロイシン分が０％から10％に増えると、タンパク質凝集体は著しく減少する。
【０１５０】
【図１０】噴霧乾燥を行い、相対湿度75％及び温度40℃の開放状態で１週間保存し（強制的保存安定性）、再構成後の凝集体含有率を示す。ａ）3.00％のLS90P分及び0.33％のIgG分、ｂ）2.9166％のLS90P分、0.0833％のトリイソロイシン分及び0.33％のIgG分、ｃ）2.833％のLS90P分、0.166％のトリイソロイシン分及び0.33％のIgG分、ｄ）2.66％のLS90P分、0.33％のトリイソロイシン分及び0.33％のIgG分をそれぞれ含む水溶液を噴霧乾燥した。LS90P含有粉末は凝集分が低いことを特徴とする。
【０１５１】
【図１１】噴霧乾燥を行い、相対湿度75％及び温度40℃の開放状態で１週間保存し（強制的保存安定性）、再構成後の凝集体含有率を示す。ａ）2.66％のLS90P分、0.33％のトリイソロイシン分及び0.33％のIgG分、ｂ）2.66％のLS55P分、0.33％のトリイソロイシン分及び0.33％のIgG分、ｃ）2.66％のサッカロース分、0.33％のトリイソロイシン分及び0.33％のIgG分、ｄ）2.00％のサッカロース分、0.66％のラクトース分、0.33％のトリイソロイシン分及び0.33％のIgG分、ｅ）2.66％のラフィノース分、0.33％のトリイソロイシン分及び0.33％のIgG分、ｆ）2.66％のヒドロキシエチルデンプン（HES）分、0.33％のトリイソロイシン分及び0.33％のIgG分、ｇ）2.66％のトレハロース分、0.33％のトリイソロイシン分及び0.33％のIgG分をそれぞれ含む水溶液を噴霧乾燥した。LS90P含有粉末及びLS55P含有粉末は、特に現状技術としてのラフィノースやヒドロキシエチルデンプン（HES）と比較すると凝集分が著しく低い。
【０１５２】
【図１２】噴霧乾燥を行い、真空乾燥後に温度40℃の乾燥状態で４週間保存し（真空乾燥保存安定性）、再構成した後の凝集体含有率を示す。ａ）９％のカップリングシュガー分及び１％のIgG分、ｂ）８％のカップリングシュガー分、１％のイソロイシン分及び１％のIgG分、ｃ）３％のカップリングシュガー分、６％のシトルリン及び１％のIgG分、ｄ）10％のIgG分をそれぞれ含む水溶液を噴霧乾燥した。カップリングシュガーを含む粉末は、凝集分が低いことを特徴とする。
【０１５３】
【図１３】噴霧乾燥を行い、真空乾燥後に温度40℃の乾燥状態で４週間保存し（真空乾燥保存安定性）、再構成した後の凝集体含有率を示す。ａ）9.9％のLS55P分及び0.1％のIgG分、ｂ）９％のLS55P分及び１％のIgG分、ｃ）2.5％のLS55P分及び7.5％のIgG分、ｄ）１％のLS55P分及び９％のIgG分、ｅ）10％のIgG分、ｆ）８％のLS55P分、１％のイソロイシン分及び１％のIgG分、ｇ）３％のLS55P分、６％のシトルリン分及び１％のIgG分をそれぞれ含む水溶液を噴霧乾燥した。LS55Pを含む粉末は凝集分が低いことを特徴とする。
【０１５４】
【図１４ａ】噴霧乾燥を行い、真空乾燥後に温度２〜８℃、25℃、40℃の乾燥状態で１ヶ月又は３ヶ月保存し（１ヶ月又は３ヶ月安定性）、再構成した後の凝集体含有率を示す。ａ）3.00％のLS90P分及び0.33％のIgG分、ｂ）2.66％のLS55P分、0.33％のイソロイシン分及び0.33％のIgG分、ｃ）2.66％のLS90P分、0.33％のイソロイシン分及び0.33％のIgG分、ｄ）2.66％のLS55P分、0.33％のトリイソロイシン分及び0.33％のIgG分、ｅ）2.66％のLS90P分、0.33％のトリイソロイシン分及び0.33％のIgG分、ｆ）3.33％のIgG分をそれぞれ含む水溶液を噴霧乾燥した。３ヶ月の保存後、LS90Pを含む粉末及びLS55Pを含む粉末は凝集分がとりわけ低いことを特徴とする。
【０１５５】
【図１４ｂ】噴霧乾燥を行い、真空乾燥後に温度２〜８℃、25℃、40℃の乾燥状態で１ヶ月又は３ヶ月保存し（１ヶ月又は３ヶ月安定性）、再構成した後の凝集体含有率を示す。ａ）3.00％のLS90P分及び0.33％のIgG分、ｂ）2.66％のLS55P分、0.33％のイソロイシン分及び0.33％のIgG分、ｃ）2.66％のLS90P分、0.33％のイソロイシン分及び0.33％のIgG分、ｄ）2.66％のLS55P分、0.33％のトリイソロイシン分及び0.33％のIgG分、ｅ）2.66％のLS90P分、0.33％のトリイソロイシン分及び0.33％のIgG分、ｆ）3.33％のIgG分をそれぞれ含む水溶液を噴霧乾燥した。３ヶ月の保存後、LS90Pを含む粉末及びLS55Pを含む粉末は凝集分がとりわけ低いことを特徴とする。
【０１５６】
【図１５ａ】噴霧乾燥を行い、真空乾燥後に温度25℃で相対湿度29％と43％の開放状態でそれぞれ１ヶ月又は３ヶ月乾燥状態で保存し（開放状態の１ヶ月又は３ヶ月安定性）、再構成した後の凝集体含有率を示す。ａ）2.9166％のLS90P分、0.0833％のトリイソロイシン分及び0.33％のIgG分（ＡＡＦ値４０）、ｂ）2.833％のLS90P分、0.166％のトリイソロイシン分及び0.33％のIgG分（ＡＡＦ値４０）、ｃ）2.66％のLS90P分、0.33％のトリイソロイシン分及び0.33％のIgG分（ＡＡＦ値４０）、ｄ）1.60％のLS90P分、0.20％のトリイソロイシン分及び0.33％のIgG分（ＡＡＦ値４０）、ｅ）2.66％のLS90P分、0.33％のトリイソロイシン分及び0.33％のIgG分（ＡＡＦ値５０）、ｆ）2.66％のLS90P分、0.33％のトリイソロイシン分及び0.33％のIgG分（ＡＡＦ値６０）、ｇ）3.33％のIgG分（ＡＡＦ値４０）をそれぞれ含む水溶液を噴霧乾燥した。３ヶ月の保存後、LS90Pを含む粉末は凝集分がとりわけ低いことを特徴とする。
【０１５７】
【図１５ｂ】噴霧乾燥を行い、真空乾燥後に温度25℃で相対湿度29％と43％の開放状態でそれぞれ１ヶ月又は３ヶ月乾燥状態で保存し（開放状態の１ヶ月又は３ヶ月安定性）、再構成した後の凝集体含有率を示す。ａ）2.9166％のLS90P分、0.0833％のトリイソロイシン分及び0.33％のIgG分（ＡＡＦ値４０）、ｂ）2.833％のLS90P分、0.166％のトリイソロイシン分及び0.33％のIgG分（ＡＡＦ値４０）、ｃ）2.66％のLS90P分、0.33％のトリイソロイシン分及び0.33％のIgG分（ＡＡＦ値４０）、ｄ）1.60％のLS90P分、0.20％のトリイソロイシン分及び0.33％のIgG分（ＡＡＦ値４０）、ｅ）2.66％のLS90P分、0.33％のトリイソロイシン分及び0.33％のIgG分（ＡＡＦ値５０）、ｆ）2.66％のLS90P分、0.33％のトリイソロイシン分及び0.33％のIgG分（ＡＡＦ値６０）、ｇ）3.33％のIgG分（ＡＡＦ値４０）をそれぞれ含む水溶液を噴霧乾燥した。３ヶ月の保存後、LS90Pを含む粉末は凝集分がとりわけ低いことを特徴とする。
【０１５８】
【図１６】種々の粉末に関し、粒径５μｍ未満の粒子を除いた細かい粒子の分画（ＦＰＦ）を示す。LS55PとIgG1とを含んだ水溶液又はLS55PとイソロイシンとIgG1とを含んだ水溶液を噴霧乾燥させて、粉末を製造した。溶液の調製及び噴霧については、実施例の項で記載のようにして行った。イソロイシン含有粉末のＦＰＦは約35％であるが、イソロイシンを含まない粉末のＦＰＦは約16％にとどまっている。
【０１５９】
【図１７】種々の粉末に関し、粒径５μｍ未満の粒子を除いた細かい粒子の分画（ＦＰＦ）を示す。LS90PとIgG1とを含んだ水溶液又はLS90PとイソロイシンとIgG1とを含んだ水溶液を噴霧乾燥させて、粉末を製造した。溶液の調製及び噴霧については、実施例の項で記載のようにして行った。イソロイシン含有粉末のＦＰＦは約28％であるが、イソロイシンを含まない粉末のＦＰＦは約23％にとどまっている。
【０１６０】
【図１８】種々の粉末に関し、粒径５μｍ未満の粒子を除いた細かい粒子の分画（ＦＰＦ）を示す。LS55PとIgG1とを含んだ水溶液又はLS55PとトリイソロイシンとIgG1とを含んだ水溶液を噴霧乾燥させて、粉末を製造した。溶液の調製及び噴霧については、実施例の項で記載のようにして行った。トリイソロイシン含有粉末のＦＰＦは50又は58％を超えるが、トリイソロイシンを含まない粉末のＦＰＦは約16％にとどまっている。
【０１６１】
【図１９】様々な粉末における空気動力学的粒径（ＭＭＡＤ）及び質量平均粒径（ＭＭＤ）を示す。LS55PとIgG1とを含んだ水溶液又はLS55PとトリイソロイシンとIgG1とを含んだ水溶液を噴霧乾燥させて、粉末を製造した。溶液の調製及び噴霧については、実施例の項で記載のようにして行った。いずれの粉末のＭＭＡＤも、５μｍ未満であり、ＭＭＤは3.5μｍ未満である。総固形分濃度及び噴霧パラメータが一定の場合の、トリイソロイシンのＭＭＡＤ及びＭＭＤへの影響が図からわかる。調剤中の総固形分に対してトリイソロイシン分が10％であると、ＭＭＡＤを著しく減少する。
【０１６２】
【図２０】様々な粉末におけるカットオフ粒径５μｍ未満の細粒分（ＦＰＦ）を示す。LS90PとIgG1とを含んだ水溶液又はLS90PとトリイソロイシンとIgG1とを含んだ水溶液を噴霧乾燥させて、粉末を製造した。溶液の調製及び噴霧については、実施例の項で記載のようにして行った。トリイソロイシン含有粉末のＦＰＦは約40〜約59％であるが、トリイソロイシンを含まない粉末のＦＰＦは約24％にとどまっている。
【０１６３】
【図２１】様々な粉末における質量平均粒径（ＭＭＤ）及び空気動力学的粒径（ＭＭＡＤ）を示す。LS90PとIgG1とを含んだ水溶液又はLS90PとトリイソロイシンとIgG1とを含んだ水溶液を噴霧乾燥させて、粉末を製造した。溶液の調製及び噴霧については、実施例の項で記載のようにして行った。いずれの粉末のＭＭＡＤも、6.5μｍ未満であり、ＭＭＤは５μｍ未満である。総固形分濃度及び噴霧パラメータが一定の場合の、トリイソロイシン分のＭＭＡＤ及びＭＭＤに対する影響が図からわかる。調剤中の総固形分に対してトリイソロイシン分が10％であると、ＭＭＡＤを著しく減少する。固形分が減少し（例えば、ＴＳ２％）かつ噴霧圧力が上昇（ＡＡＦ値、50又は60）すると、ＭＭＤが著しく低下する。
【０１６４】
【図２２】噴霧乾燥を行い、強制的保存後に再構成したものの残留モノマー含有率を示す。ａ）リゾチーム3.33質量％、ｂ）リゾチーム0.33質量％及びLS90P 3.0質量％、ｃ）リゾチーム0.33質量％、イソロイシン0.33質量％及びLS90P 2.66質量％、ｄ）リゾチーム0.33質量％、トリイソロイシン0.33質量％及びLS90P 2.66質量％をそれぞれ含む水溶液を噴霧した。LS90P含有粉末は残留モノマー含有率が高いことが顕著である。
【０１６５】
【図２３】噴霧乾燥を行い、真空乾燥後に乾燥状態かつ温度２〜８℃、25℃、40℃で３ヶ月保存し（３ヶ月安定性）、再構成した後の凝集体含有率を示す。ａ）3.33質量％のカルシトニン、ｂ）0.166質量％のカルシトニン及び3.166質量％のLS90P分、ｃ）0.166質量％のカルシトニン、0.33質量％のイソロイシン分及び2.833質量％のLS90P分、ｄ）0.166質量％のカルシトニン、0.33質量％のトリイソロイシン分及び2.833質量％のLS90P分をそれぞれ含む水溶液を噴霧した。LS90Pを含む粉末は凝集分がとりわけ低いことに特徴付けられる。
【０１６６】
【図２４】乾燥粉末調剤の投与用吸入器を示す。
【図１】
2007536313.tif 000005
【図２】
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【図３】
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【図４】
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【図５】
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【図６】
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【図７】
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【図８】
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【図９】
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【図１０】
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【図１１】
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【図１２】
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【図１３】
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【図１６】
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【図１７】
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【図１８】
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【図１９】
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【図２０】
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【図２１】
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【図２２】
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【図２４】
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【図１４ａ】
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【図１４ｂ】
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【図１５ａ】
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【図１５ｂ】
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【図２３】
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【手続補正書】
【提出日】平成19年7月25日(2007.7.25)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
医薬有効成分と、
1,4 O-結合型D-gal-サッカロース、
1,4 O-結合型D-glu-サッカロース又は
1,4 O-結合型glu-glu-サッカロースから選択される1,4 O-結合型サッカロース誘導体の１種以上とを含む、噴霧乾燥粉末。
【請求項２】
前記サッカロース誘導体が1,4 O-結合型D-gal-サッカロースであることを特徴とする請求項１記載の噴霧乾燥粉末。
【請求項３】
前記噴霧乾燥粉末が、さらに単糖類、ニ糖類及び／又は多糖類の１種以上を含むことを特徴とする請求項２記載の噴霧乾燥粉末。
【請求項４】
1,4 O-結合型D-glu-サッカロースと1,4 O-結合型glu-glu-サッカロースとを含む混合物であることを特徴とする請求項１記載の噴霧乾燥粉末。
【請求項５】
前記医薬有効成分が生物学的高分子であることを特徴とする請求項１〜４のいずれか１項記載の噴霧乾燥粉末。
【請求項６】
前記噴霧乾燥粉末の乾燥質量基準で、25〜90質量％の少なくとも１種の1,4 O-結合型サッカロース誘導体又は少なくとも１種の1,4 O-結合型サッカロース誘導体を含む糖混合物と、75質量％までの医薬有効成分とを含む噴霧乾燥粉末であって、1,4 O-結合型D-gal-サッカロース、1,4 O-結合型glu-glu-サッカロース及び／又は1,4 O-結合型D-glu-サッカロースの比率が、前記粉末の乾燥質量に対して少なくとも20質量％で、かつ質量パーセントの粉末に対する合計が最大で100質量％であることを特徴とする請求項１〜５のいずれか１項記載の噴霧乾燥粉末。
【請求項７】
前記噴霧乾燥粉末が、他の医薬的に適合する賦形剤の１種以上及び／又は塩の１種以上を含むことを特徴とする請求項１〜６のいずれか１項記載の噴霧乾燥粉末。
【請求項８】
前記賦形剤がイソロイシンであることを特徴とする請求項７記載の噴霧乾燥粉末。
【請求項９】
前記賦形剤がペプチドであることを特徴とする請求項７記載の噴霧乾燥粉末。
【請求項１０】
前記賦形剤がトリペプチドであることを特徴とする請求項８記載の噴霧乾燥粉末。
【請求項１１】
前記トリペプチドがトリロイシンであることを特徴とする請求項１０記載の噴霧乾燥粉末。
【請求項１２】
前記噴霧乾燥粉末の乾燥質量基準で、25〜90質量％の少なくとも１種の1,4 O-結合型サッカロース誘導体又は少なくとも１種の1,4 O-結合型サッカロース誘導体を含む糖混合物と、１〜39質量％のトリペプチドを含む噴霧乾燥粉末であって、質量パーセントの合計が100質量％を超えないことを特徴とする請求項１１記載の噴霧乾燥粉末。
【請求項１３】
前記粉末中の粒子の質量平均粒径（ＭＭＤ）が１〜10μｍであることを特徴とする請求項１〜１２のいずれか１項記載の噴霧乾燥粉末。
【請求項１４】
前記粉末中の粒子の空気動力学的粒径（ＭＭＡＤ）が１〜7.5μｍであることを特徴とする請求項１〜１２のいずれか１項記載の噴霧乾燥粉末。
【請求項１５】
請求項１〜１４のいずれか１項記載の噴霧乾燥粉末を含む医薬組成物。
【請求項１６】
請求項１記載の噴霧乾燥粉末の製造方法であって、
ａ）医薬有効成分を水溶液又は懸濁液に溶解又は懸濁し、
ｂ）1,4 O-結合型D-gal-サッカロース、1,4 O-結合型D-glu-サッカロース及び1,4 O-結合型glu-glu-サッカロースからなる群から選択される1,4 O-結合型サッカロース誘導体の１種以上、又は、これらの1,4 O-結合型サッカロース誘導体の少なくとも１種を含有する糖混合物を水溶液又は懸濁液に溶解又は懸濁し、
ｃ）有効成分と、1,4 O-結合型サッカロース誘導体の１種以上又は少なくとも１種の1,4 O-結合型サッカロース誘導体を含む糖混合物とが別々の溶液又は懸濁液に溶解又は懸濁している場合は、それらを混合し、
ｄ）1,4 O-結合型サッカロース誘導体の１種以上と医薬有効成分とを含む溶液又は懸濁液を、温度200℃未満／120℃未満（入口温度／出口温度）で、好ましくは186℃未満／96℃未満で噴霧することを特徴とする、噴霧乾燥粉末の製造方法。
【請求項１７】
前記医薬有効成分が生物学的高分子であることを特徴とする請求項１６記載の方法。
【請求項１８】
前記サッカロース誘導体が1,4 O-結合型D-gal-サッカロースであることを特徴とする請求項１６又は１７記載の方法。
【請求項１９】
前記サッカロース誘導体が1,4 O-結合型D-glu-サッカロースと1,4 O-結合型glu-glu-サッカロースとの混合物であることを特徴とする請求項１６又は１７記載の方法。
【請求項２０】
前記1,4 O-結合型サッカロース誘導体又は少なくとも１種の1,4 O-結合型サッカロース誘導体を含む糖混合物の比率が、前記噴霧溶液又は懸濁液の乾燥質量基準で25〜99.99質量％であることを特徴とする請求項１６〜１９のいずれか１項記載の方法。
【請求項２１】
前記医薬有効成分の比率が、前記噴霧溶液又は懸濁液の乾燥質量基準で0.01〜75質量％であり、かつ、質量パーセントの合計が100質量％を超えないことを特徴とする請求項１６〜２０のいずれか１項記載の方法。
【請求項２２】
前記噴霧溶液又は懸濁液が、他の医薬的に許容される賦形剤の１種以上及び／又は塩の１種以上を含むことを特徴とする請求項１６〜２１のいずれか１項記載の方法。
【請求項２３】
前記賦形剤がアミノ酸であることを特徴とする請求項２２記載の方法。
【請求項２４】
前記アミノ酸がイソロイシンであることを特徴とする請求項２３記載の方法。
【請求項２５】
前記賦形剤がペプチドであることを特徴とする請求項２２記載の方法。
【請求項２６】
前記賦形剤がトリペプチドであることを特徴とする請求項２５記載の方法。
【請求項２７】
前記トリペプチドがトリイソロイシンであることを特徴とする請求項２６記載の方法。
【請求項２８】
前記噴霧溶液又は懸濁液が、乾燥質量基準で60〜90質量％の少なくとも１種の1,4 O-結合型サッカロース誘導体又は少なくとも１種の1,4 O-結合型サッカロース誘導体を含む糖混合物と、１〜39質量％のトリペプチドを含むことを特徴とする請求項２６又は２７記載の方法。
【請求項２９】
医薬品を製造するための、請求項１〜１５のいずれか１項記載の噴霧乾燥粉末の使用。
【請求項３０】
吸入医薬品を製造するための請求項１３又は１４記載の噴霧乾燥粉末の使用。
【国際調査報告】
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