(57)【要約】      （修正有）【課題】ヘリコバクター・ピロリの成長や炎症や動脈硬化の発生を抑える海洋深層水有機抽出物を提供する。【解決手段】Ｃ１８濾過膜を用いて海水組成物から抽出した固体有機物質を含む海洋深層水有機抽出物であり、前記固体有機物質は、前記Ｃ１８濾過膜を通過せず、前記Ｃ１８濾過膜に残留したものであり、前記海水組成物は、海洋深層水、または、マイクロレベルの精密濾過膜を有する濾過デバイスを少なくとも１つ用いた濾過処理により処理された海洋深層水である。【選択図】なし【特許請求の範囲】
【請求項１】
Ｃ１８濾過膜を用いて海水組成物から抽出した固体有機物質を含む海洋深層水有機抽出物であり、
前記固体有機物質は、前記Ｃ１８濾過膜を通過せず、前記Ｃ１８濾過膜に残留したものであり、
前記海水組成物は、海洋深層水、または、マイクロレベルの精密濾過膜を有する濾過デバイスを少なくとも１つ用いた濾過処理により処理された海洋深層水であることを特徴とする海洋深層水有機抽出物。
【請求項２】
前記海洋深層水は、海水面から深度２００メートル以下で取られた海水であることを特徴とする請求項１に記載の海洋深層水有機抽出物。
【請求項３】
前記マイクロレベルの精密濾過膜の平均孔径は、０．２μｍ〜５μｍの範囲内にあることを特徴とする請求項１または請求項２に記載の海洋深層水有機抽出物。
【請求項４】
Ｃ１８濾過膜を用いて、請求項１〜請求項３のいずれか一項に記載の海水組成物を抽出処理した後、Ｃ１８濾過膜に残留したものを回収することにより、請求項１〜請求項３のいずれか一項に記載の海洋深層水有機抽出物を得ることを特徴とする海洋深層水有機抽出物の製造方法。
【請求項５】
一酸化窒素合成酵素及びシクロオキシゲナーゼの活性を抑えるために用いられる、請求項１〜請求項３のいずれか一項に記載の海洋深層水有機抽出物。
【請求項６】
ヘリコバクター・ピロリの成長を抑えるために用いられる、請求項１〜請求項３のいずれか一項に記載の海洋深層水有機抽出物。
【請求項７】
血管内の細胞の増殖及び移動を抑えるために用いられる、請求項１〜請求項３のいずれか一項に記載の海洋深層水有機抽出物。
【請求項８】
血液内の脂質を低下させるために用いられる、請求項１〜請求項３のいずれか一項に記載の海洋深層水有機抽出物。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、海洋深層水有機抽出物に関し、特に健康を向上する用途を有する海洋深層水有機抽出物に関する。
【背景技術】
【０００２】
心血管疾患、例えばアテローム性動脈硬化(粥状動脈硬化) は、慢性炎症が生じる疾患であり、世界各国においても上位の死亡原因の１つである。アテローム性動脈硬化の原因は、動脈内膜下に脂質が蓄積されながら平滑筋細胞（ｓｍｏｏｔｈ ｍｕｓｃｌｅ ｃｅｌｌ、略称ＳＭＣ)及び結合組織が生じて、動脈内膜下に線維性プラークが形成されることにあり、動脈の壁が厚く、硬くなり、且つ動脈の内腔が狭くなる。一般に、アテローム性動脈硬化は、血管拡張薬、脂質降下薬または手術で治療する。しかし、手術は感染または死亡の恐れがあり、血管拡張薬及び脂質降下薬は、天然物ではなく、様々な副作用が起こる恐れがある。
【０００３】
ヘリコバクター・ピロリは、ヒトなどの胃や十二指腸に生息する。ヘリコバクター・ピロリの感染は、胃の粘膜に炎症を起こして、胃潰瘍や十二指腸潰瘍が発生するのみならず、胃癌などの発生にも繋がる。
【０００４】
一般の治療方法として、抗生物質と、Ｈ２受容体拮抗薬（Ｈ２ ｒｅｃｅｐｔｏｒ ａｎｔａｇｏｎｉｓｔ）またはプロトンポンプ阻害薬（ｐｒｏｔｏｎ−ｐｕｍｐ ｉｎｈｉｂｉｔｏｒ、略称ＰＰＩ）と、を組み合わせて投与することにより、ヘリコバクター・ピロリを除菌する。しかし、Ｈ２受容体拮抗薬及びプロトンポンプ阻害薬は、天然素材で製造されるものではなく、様々の副作用が起こる恐れがある。Ｈ２受容体拮抗薬は、主にめまいなどの副作用があり、大量且つ長期間に使用すると、骨折、ビタミンＢ１２欠乏、腎不全などの副作用が起こるリスクが大きくなる。一方、天然素材でヘリコバクター・ピロリを除菌する、例えば特許文献１に記載されている方法もある。
【０００５】
特許文献１には、天然素材である海洋深層水有機抽出物を用いて、ヘリコバクター・ピロリの成長を抑える医薬品を製造することが記載されている。
【先行技術文献】
【特許文献】
【０００６】
【特許文献１】台湾特許公告第Ｉ５７００７３号明細書
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００７】
しかし、特許文献１の海洋深層水有機抽出物は、ヘリコバクター・ピロリの成長を抑える効果しかないので、本発明は、ヘリコバクター・ピロリの成長を抑える以外、炎症や動脈硬化の発生を抑える効果もある海洋深層水有機抽出物の提供を目的とする。
【課題を解決するための手段】
【０００８】
上記目的を達成すべく、本発明は、Ｃ１８濾過膜を用いて海水組成物から抽出した固体有機物質を含む海洋深層水有機抽出物であり、前記固体有機物質は、前記Ｃ１８濾過膜を通過せず、前記Ｃ１８濾過膜に残留したものであり、前記海水組成物は、海洋深層水、または、マイクロレベルの精密濾過膜を有する濾過デバイスを少なくとも１つ用いた濾過処理により処理された海洋深層水であることを特徴とする海洋深層水有機抽出物を提供する。
【０００９】
また、Ｃ１８濾過膜を用いて、上記の海水組成物を抽出処理した後、Ｃ１８濾過膜に残留したものを回収することにより、上記の海洋深層水有機抽出物を得ることを特徴とする海洋深層水有機抽出物の製造方法を提供する。
【００１０】
また、上記の海洋深層水有機抽出物は、一酸化窒素合成酵素及びシクロオキシゲナーゼの活性を抑えるために使用することができる。
【００１１】
また、上記の海洋深層水有機抽出物は、ヘリコバクター・ピロリの成長を抑えるために使用することができる。
【００１２】
また、上記の海洋深層水有機抽出物は、血管内の細胞の増殖及び移動を抑えるために使用することができる。
【００１３】
また、上記の海洋深層水有機抽出物は、血液内の脂質を低下させるために使用することができる。
【発明の効果】
【００１４】
上記の内容によれば、一酸化窒素合成酵素及びシクロオキシゲナーゼの活性を抑える効果、ヘリコバクター・ピロリの成長を抑える効果、血管内の細胞の増殖及び移動を抑える効果、血液内の脂質を低下させる効果を有する海洋深層水有機抽出物を提供できる。
【図面の簡単な説明】
【００１５】
【図１】本発明の実施例及び比較例における誘導型一酸化窒素合成酵素及びシクロオキシゲナーゼの発現量（Ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ）を示すグラフである。
【図２】本発明の実施例及び比較例における一酸化窒素の生成量を示すグラフである。
【図３】本発明の実施例及び比較例におけるヘリコバクター・ピロリの成長を示すグラフである。
【図４】本発明の実施例及び比較例における血管内の細胞の増殖及び移動の結果を示すグラフである。
【図５】本発明の実施例及び比較例における血管内の細胞の増殖の結果を示すグラフである。
【図６】本発明の実施例及び比較例における血管内の細胞の移動の結果を示すグラフである。
【図７】本発明の実施例及び比較例の実験動物における肝組織のコレステロールの総量を示すグラフである。
【図８】本発明の実施例及び比較例の実験動物における肝組織のトリアシルグリセロールの含有量を示すグラフである。
【発明を実施するための形態】
【００１６】
＜海洋深層水有機抽出物及びその製造方法＞
本発明の海洋深層水有機抽出物は、Ｃ１８濾過膜を用いて海水組成物から抽出した固体有機物質を含む海洋深層水有機抽出物である。
【００１７】
該固体有機物質は、Ｃ１８濾過膜を通過せず、Ｃ１８濾過膜に残留したものである。
【００１８】
該海水組成物は、海水面から深度２００メートル以下で、即ち深度２００メートルかそれより深い地点で採取された海洋深層水、または、このような海洋深層水であって更に処理された海洋深層水である。
【００１９】
なお、海洋深層水に対する処理とは、例えばマイクロレベルの精密濾過膜（ｍｉｃｒｏｆｉｌｔｒａｔｉｏｎ ｍｅｍｂｒａｎｅ）を有する濾過デバイスを少なくとも１つ用いた濾過処理である。該濾過処理の目的は、海洋深層水内に含有する砂、微生物（例えば、細菌や藻類など）などの不純物を除去することにある。
【００２０】
該マイクロレベルの精密濾過膜の平均孔径は、０．２μｍ〜５μｍの範囲内にある。
【００２１】
本発明の実施形態においては処理された海洋深層水を用いる。４つの該濾過デバイスを直列して濾過処理に用い、且つ、該マイクロレベルの精密濾過膜の平均孔径は、０．２２μｍである。
【００２２】
該Ｃ１８濾過膜は、一種の固相抽出ディスクである。該固相抽出ディスクは、ポリテトラフルオロエチレン（ｐｏｌｙｔｅｔｒａｆｌｕｏｒｏｅｔｈｙｌｅｎｅ、略称ＰＴＦＥ）により構成されている本体及びその本体に分散された吸着剤を含む。該吸着剤は、シリカ（ｓｉｌｉｃａ）にＣ１８結合（即ち、オクタデシル基が導入）された材料を含む。該固相抽出ディスクの総量を１００ｗｔ％とすると、吸着剤の含有量が９０ｗｔ％から１００ｗｔ％未満の範囲内にある。該Ｃ１８濾過膜としては、３Ｍ社製の商品エムポア（登録商標）固相抽出ディスク製品番号２２１５または２３１５などが挙げられる。
【００２３】
抽出処理は、吸引濾過装置により行うことができる。該吸引濾過装置は、Ｃ１８濾過膜を設置するための漏斗と、Ｃ１８濾過膜を通過するものを収容するために該漏斗の下方に取り付けられている吸引ビンと、該吸引ビンに接続して該吸引ビン内の空気を吸引するポンプと、を含む。該漏斗としては、ブフナー漏斗（Ｂuｃｈｎｅｒ ｆｕｎｎｅｌ）などが挙げられる。
【００２４】
本発明の海洋深層水有機抽出物の製造方法は、Ｃ１８濾過膜を用いて、上記の海水組成物を抽出処理した後、Ｃ１８濾過膜に残留・累積したものを回収することにより、上記の海洋深層水有機抽出物を得る。
【００２５】
＜海洋深層水有機抽出物の用途＞
本発明の海洋深層水有機抽出物は、その用途の一つとして、一酸化窒素合成酵素（ＮＯ ｓｙｎｔｈｅｔａｓｅ、略称ｎｏｓ）及びシクロオキシゲナーゼ（ｃｙｃｌｏｏｘｙｇｅｎａｓｅ、略称ＣＯＸ）の活性を抑えて、生物組織において損傷、出血または感染によって起こる炎症を抑えることができる。例えば、マクロファージ（ｍａｃｒｏｐｈａｇｅ）がリポ多糖体（ｌｉｐｏｐｏｌｙｓａｃｃｈａｒｉｄｅ、略称ＬＰＳ）に刺激されると、一酸化窒素合成酵素またはシクロオキシゲナーゼが表出して作用するので、一酸化窒素が生じると共に炎症が起きる。従って、一酸化窒素合成酵素及びシクロオキシゲナーゼの活性を抑えることにより、炎症を抑えることができる。
【００２６】
本発明の実施形態において、一酸化窒素合成酵素は誘導型一酸化窒素合成酵素（略称ｉＮＯＳ）であり、シクロオキシゲナーゼはシクロオキシゲナーゼ−２(略称ＣＯＸ−２)である。
【００２７】
また、本発明の海洋深層水有機抽出物は、血管内の細胞の増殖及び移動を抑えて、動脈硬化などの血管の病気を防ぐことができる。特に、経皮的冠動脈形成術（ｐｅｒｃｕｔａｎｅｏｕｓ ｔｒａｎｓｌｕｍｉｎａｌ ｃｏｒｏｎａｒｙ ａｎｇｉｏｐｌａｓｔｙ、略称ＰＴＣＡ）により誘発される動脈硬化の再発を防ぐことができる。本発明の実施形態において、該細胞は平滑筋細胞である。
【００２８】
また、本発明の海洋深層水有機抽出物は、血液内の脂質（例えばトリアシルグリセロールまたはコレステロール）を低下させて、糖尿病や、腎臓の病気を防ぐことができる。
【００２９】
また、本発明の海洋深層水有機抽出物は、ヘリコバクター・ピロリの成長を抑えることができる。
【００３０】
上述の各種効果は、下記の各実施例と比較例及びこれらに関する実験結果から確かめられる。
【００３１】
＜実施例＞
台湾東部海域における海水面から深度２００メートル以下で取られた海水を、４つの濾過デバイスを順に通過させて、砂、微生物（例えば、細菌や藻類など）などの不純物を除去する濾過処理を行う。濾過処理された海水において、ナトリウムの含有量は１２１００ｍｇであり、カリウムの含有量は４４３ｍｇであり、カルシウムの含有量は４２７ｐｐｍであり、マグネシウムの含有量は１４３０ｍｇである。４つの濾過デバイスは直列に排列されている。各濾過デバイスは、平均孔径が０．２２μｍのマイクロレベルの精密濾過膜(台湾ＵＬＴＲＡ−ＰＲＯ ＩＮＴＥＲＮＡＴＩＯＮＡＬ社製、製品番号：ＰＵＰ−００１−ＤＯＥ−２０−Ｖ)を備える。
【００３２】
Ｃ１８濾過膜（３Ｍ社製の商品エムポア（登録商標）固相抽出ディスク、製品番号２２１５または２３１５である）を上記の吸引濾過装置のブフナー漏斗に設置して、該濾過処理された海水を抽出処理し、Ｃ１８濾過膜に残留したものを回収して、固体有機物質を含む海洋深層水有機抽出物を得た。
【００３３】
海水内のナトリウム、カリウム、カルシウム及びマグネシウムがほとんどＣ１８濾過膜を通過したので、海洋深層水有機抽出物には、ナトリウム、カリウム、カルシウム及びマグネシウムがほとんど含まれない。誘導結合プラズマ器（ｉｎｄｕｃｔｉｖｅｌｙ ｃｏｕｐｌｅｄ ｐｌａｓｍａ、略称ＩＣＰ）を用いて、該海洋深層水有機抽出物を分析した結果により、海洋深層水有機抽出物において、ナトリウムの含有量は６６７ｍｇであり、カリウムの含有量は３９ｍｇであり、カルシウムの含有量は２ｍｇであり、マグネシウムの含有量は９５ｍｇであった。即ち、濾過処理された海水において、９４．４％［（１２１００−６６７）×１００％／１２１００］のナトリウム、９１．２％［（４４３−３９）×１００％／４４３］のカリウム、９９．５％［（４２７−２）×１００％／４２７］のカルシウム及び９３．３％［（１４３０−９５）×１００％／１４３０］のマグネシウムがＣ１８濾過膜を通過した。
【００３４】
＜一酸化窒素合成酵素及びシクロオキシゲナーゼの活性の抑制効果＞
実施例１
９６ウェルプレート（９６−ｗｅｌｌ）の各ウェルに２×１０6個のＲＡＷ ２６４マクロファージ細胞を配置した後、ＤＭＥＭ（ｄｕｌｂｅｃｃｏ‘ｓ ｍｏｄｉｆｉｅｄ ｅａｇｌｅ ｍｅｄｉｕｍダルベッコ変法イーグル培地）培地を添加する。該ＤＭＥＭ培地は、ペニシリン（ｐｅｎｉｃｉｌｌｉｎ）、ストレプトマイシン（ｓｔｒｅｐｔｏｍｙｃｉｎ）及びウシ胎仔血清（ｆｅｔａｌ ｂｏｖｉｎｅ ｓｅｒｕｍ、略称ＦＢＳ）を含有する。ペニシリンの濃度が１００Ｕｎｉｔ／ｍＬであり、ストレプトマイシンの濃度が１００Ｕｎｉｔ／ｍＬであり、ウシ胎仔血清の濃度が１０ｖｏｌ％である。そして、該９６ウェルプレートを３７℃且つ５％のＣＯ2雰囲気の細胞培養器に２時間培養させた後取り出した。その後に新しいＤＭＥＭ培地及び濃度１μｇ／ｍＬのリポ多糖体溶液を添加する。ひき続いて、１８時間培養させた後、培養物が生成された。そして、該培養物に濃度が０．２５ｗｔ％の海洋深層水有機抽出物溶液（海洋深層水有機抽出物及びアルコールを含む）を添加して、混合物を得た。
【００３５】
実施例２〜３
実施例２〜３は、海洋深層水有機抽出物溶液の濃度がそれぞれ０．５ｗｔ％、１ｗｔ％である以外、実施例１と同じ方法で混合物を得た。
【００３６】
比較例１
比較例１は、実施例１の培養物と同じものである。即ち、比較例１では海洋深層水有機抽出物溶液を添加しない。
【００３７】
比較例２
比較例２は、海洋深層水有機抽出物溶液の替わりにアルコールを添加する以外、実施例１と同じ方法で混合物を得た。
【００３８】
［ｉＮＯＳ及びＣＯＸ−２の含有量の測定］
実施例１〜３及び比較例１〜２のｉＮＯＳ及びＣＯＸ−２の含有量は、下記の方法により測定された。
【００３９】
濃度が既に知られている複数のウシ血清アルブミン（ｂｏｖｉｎｅ ｓｅｒｕｍ ａｌｂｕｍｉｎ）溶液で、横軸が吸光値（ａｂｓｏｒｂａｎｃｅ、あるいはｏｐｔｉｃａｌ ｄｅｎｓｉｔｙ、略称Ｏ.Ｄ.）であり、縦軸が濃度値である標準曲線を作成した。冷たいリン酸緩衝食塩水（ｐｈｏｓｐｈａｔｅ ｂｕｆｆｅｒ ｓａｌｉｎｅ、略称ＰＢＳ）で実施例１〜３及び比較例２の混合物及び比較例１の培養物を２回洗った後、適量の溶解緩衝液（ｌｙｓｉｓ ｂｕｆｆｅｒ）を添加して、ＤＭＥＭ培地の表面に均等に分散させることにより、分析物を得る。４℃の環境で該分析物に対して１４０００ｒｐｍで１０分間の遠心分離を行う。そして、上澄み液を取り出して、分光光度計を用いて５８０ｎｍの吸光値を測定し、上記の標準曲線及び吸光値に基づいて、実施例１〜３及び比較例１〜２のタンパク質の濃度を計算する。
【００４０】
また、該上澄み液の１／５の量のローディングダイ（ｌｏａｄｉｎｇ ｄｙｅ）を該上澄み液に添加し、１００℃で５分間加熱した後、４℃の環境で該分析物を１４０００ｒｐｍで１０分間の遠心分離を行う。該ローディングダイは、１０％のドデシル硫酸ナトリウム（ｓｏｄｉｕｍ ｄｏｄｅｃｙｌ ｓｕｌｆａｔｅ、略称ＳＤＳ）、０．２Ｍ ＴｒｉｓＨＣｌ ｐＨ６．８ ０．０５％のブロモフェノールブルー（ｂｒｏｍｏｐｈｅｎｏｌ ｂｌｕｅ)及び２０％のグリセロール（ｇｌｙｃｅｒｏｌ）を含む。
【００４１】
そして、上記遠心分離を行なった後に上澄み液を取り出して、１０％のＳＤＳ−ＰＡＧＥゲル内に設置した後、電気泳動器（ｅｌｅｃｔｒｏｐｈｏｒｅｓｉｓ ｃｅｌｌ）内に設置し、１００Ｖの電圧で電気泳動分析を行う。その後、ＳＤＳ−ＰＡＧＥゲルを、メタノールに浸漬したポリフッ化ビニリデン（ｐｏｌｙｖｉｎｙｌｉｄｅｎｅ ｄｉｆｌｕｏｒｉｄｅ、略称ＰＶＤＦ）膜と貼り合わせる共に、転写槽に設置し、１００ｍＡの電流で２時間の転写を行う。転写が終わった後、該ポリフッ化ビニリデン膜を、５％の無脂肪牛乳及びＴＢＳＴ（Ｔｒｉｓ−ｂｕｆｆｅｒｅｄ Ｓａｌｉｎｅ ｗｉｔｈ Ｔｗｅｅｎ ２０）を含むブロッキングバッファー（ｂｌｏｃｋｉｎｇ ｂｕｆｆｅｒ）内で２時間のブロッキング反応を行う。反応後、ＴＢＳＴで毎回５分間、４回洗浄した後、該ポリフッ化ビニリデン膜を、ｉＮＯＳ及びＣＯＸ−２を認識するための一次抗体を含む緩衝液に浸入し、４℃の環境で翌日まで低速振盪する。そして、ＴＢＳＴで毎回５分間、４回洗い、該ポリフッ化ビニリデン膜に西洋ワサビペルオキシダーゼ（ｈｏｒｓｅｒａｄｉｓｈ ｐｅｒｏｘｉｄａｓｅ、略称ＨＲＰ)が結合している二次抗体（二次抗体：ＴＢＳＴ＝１：５０００）を添加し、５％の無脂肪牛乳を含むＴＢＳＴ内で１時間作用させる。そして、ＴＢＳＴで毎回５分間、４回洗い、エンハンスド化学発光試薬（ＥＣＬ）を該ポリフッ化ビニリデン膜に添加し、Ｘ線フィルムを用いて該ポリフッ化ビニリデン膜から発する蛍光を感光させた後、Ｘ線フィルムを現像して、ＳｉｇｍａＰｌｏｔ分析ソフトで該Ｘ線フィルムの現像を分析することにより、ｉＮＯＳ及びＣＯＸ−２の発現量を定量分析する。その結果は図１に示されている。
【００４２】
［亜硝酸ナトリウム（ＮａＮＯ2）の含有量の測定］
実施例１〜３及び比較例１〜２の亜硝酸ナトリウムの含有量は、下記の方法により測定された。
【００４３】
濃度が既に知られている複数の亜硝酸ナトリウム溶液で、横軸が吸光値であり、縦軸が濃度値である標準曲線を作成した。実施例１〜３及び比較例１〜２それぞれ１００μＬに、５０μＬのＧｒｉｅｓｓ Ι［０．５ｇのスルファニルアミド（ｓｕｌｆａｎｉｌａｍｉｄｅ）及び２．５ｇのリン酸を混合して、体積が５０ｍＬになるまで水を添加したもの］及び５０μＬのＧｒｉｅｓｓ ΙΙ［０．０５ｇのＮ−（１−ナフチル）エチレンジアミン二塩酸塩（Ｎ-（１-ｎａｐｈｔｈｙｌ）ｅｔｈｙｌｅｎｅｄｉａｍｉｎｅ ｄｉｈｙｄｒｏｃｈｌｏｒｉｄｅ）に、体積が５０ｍＬになるまで水を添加したもの］と混合して反応し、そして、分光光度計を用いて５５０ｎｍの吸光値を測定し、上記の標準曲線及び吸光値に基づいて、実施例１〜３及び比較例１〜２の亜硝酸ナトリウムの含有量を計算する。そして、次の数式1で亜硝酸ナトリウムの含有量（％）を計算する。その結果は図２に示されている。
数式１：亜硝酸ナトリウムの含有量（％）＝（各実施例または比較例の亜硝酸ナトリウムの含有量／比較例１の亜硝酸ナトリウムの含有量）×１００％
【００４４】
図１及び図２のデータにより、本発明の海洋深層水有機抽出物は一酸化窒素合成酵素及びシクロオキシゲナーゼの活性を抑えて、一酸化窒素の生成を減少することができることがわかる。
【００４５】
＜ヘリコバクター・ピロリの成長抑制効果＞
実施例４
菌体濃度が約１０9ＣＦＵ／Ｌになるまで、胃炎菌株（ｇａｓｔｒｉｔｉｓ ｓｔｒａｉｎｓ）１４株の増殖培養を１０日間行う。そして、本発明に係る海洋深層水有機抽出物を添加した後、培地組成物を有する培養皿に塗り、３〜４日培養させて、培養物を得る。該培地組成物は、ＣＤＣ嫌気性菌用ヒツジ血液寒天培地（ＣＤＣ ａｎａｅｒｏｂｉｃ ｂｌｏｏｄ ａｇａｒ）またはブレインハートインフュージョン培地（ｂｒａｉｎ ｈｅａｒｔ ｉｎｆｕｓｉｏｎ ａｇａｒ、略称ＢＨＩ ａｇａｒ）である。
【００４６】
比較例３
比較例３は、海洋深層水有機抽出物溶液を添加しない以外、実施例４と同じ方法で培養物を得る。
【００４７】
比較例４
比較例４は、海洋深層水有機抽出物溶液に替わり電気透析水を添加する以外、実施例４と同じ方法で培養物を得る。該電気透析水は、陰イオン交換膜（ＡＳＶ）を用いて二価の陰イオン（例えばＳＯ42-）を除去し、且つ、陽イオン交換膜（ＣＳＯ）を用いて一価の陽イオン（例えばＮａ+、Ｋ+）を除去して、二価の陽イオン（例えばカルシウムイオン、マグネシウムイオン）を含有する水である。
【００４８】
［吸光値の測定］
実施例４、比較例３及び比較例４の培養物それぞれを１ｍＬの生理食塩水に溶解し、分光光度計で６００ｎｍの吸光値を測定する。その結果は図３に示されている。
【００４９】
吸光値が高ければ高いほど、ヘリコバクター・ピロリの含有量が高いので、図３のデータより、本発明の海洋深層水有機抽出物はヘリコバクター・ピロリの成長を抑えることができることがわかる。
【００５０】
＜血管内の細胞の増殖及び移動を抑える効果＞  
実施例５
ＳＤラット（台湾ＢｉｏＬＡＳＣＯ社から購入）６匹に対して０．１ｍＬの海洋深層水有機抽出物溶液（海洋深層水有機抽出物及びアルコールを含む）を経口ゾンデで一日一回のペースで三週間投与する。投与した一週後、経皮的冠動脈形成術を行う。
【００５１】
比較例５
比較例５は、海洋深層水有機抽出物溶液に替わり逆浸透水を投与する以外、実施例５と同じ方法でＳＤラットを飼養する。
【００５２】
比較例６
比較例６は、海洋深層水有機抽出物溶液に替わりアルコールを投与する以外、実施例５と同じ方法でＳＤラットを飼養する。
【００５３】
［動脈硬化の測定］
ＳＤラットに過量の麻酔薬を注射した後、生理食塩水で全身の血液を除去する。そして、両側の総頸動脈を切り取って、７５ｗｔ％のアルコール溶液に置いて組織固定処理を行う。２４時間後、固定完了の血管組織を冷凍包埋剤(Ｔｉｓｓｕｅ Ｆｒｅｅｚｉｎｇ Ｍｅｄｉｕｍ、独Ｌｅｉｃａ社から購入)で組織包埋処理及び凍結切片処理を行い、血管組織切片を得る。
【００５４】
該血管組織切片をヘマトキシリン・エオジン（ｈｅｍａｔｏｘｙｌｉｎ−ｅｏｓｉｎ）染色し、ＩｍａｇｅＪ画像処理ソフトで、血管壁の中膜（ｍｅｄｉａ）の面積及び新生の内膜（ｎｅｏｉｎｔｉｍａ）の面積を計算し、その両者の比の値（略称Ｎ／Ｍ）を計算した。その結果は図４に示されている。Ｎ／Ｍが大きいほど、経皮的冠動脈形成術により誘発される血管内膜の増殖が多い。
【００５５】
図４のデータにより、本発明の海洋深層水有機抽出物は経皮的冠動脈形成術により誘発する動脈硬化の再発を防ぐことができることがわかる。
【００５６】
実施例６
ラット血管平滑筋細胞株（Ａ１０ ｃｅｌｌｓ、＃６０１２７、台湾  財団法人食品工業発展研究所のＢｉｏｒｅｓｏｕｒｃｅ Ｃｏｌｌｅｃｔｉｏｎ ａｎｄ Ｒｅｓｅａｒｃｈ Ｃｅｎｔｅｒから購入）を３７℃且つ５％のＣＯ2雰囲気の細胞培養器に入れ、ＤＭＥＭ培地で培養処理を行った後、３日ごとにＤＭＥＭ培地を交換し、培養物を得る。該ＤＭＥＭ培地は、ウシ胎仔血清、ペニシリン及びストレプトマイシンを含む。該ウシ胎仔血清の濃度は１０ｖｏｌ％であり、ペニシリンの濃度は１００Ｕｎｉｔ／ｍＬであり、ストレプトマイシンの濃度は１００ｍｇ／ｍＬである。培養処理の後、培養物を９６ウェルプレートに、各ウェルにおける細胞の数が８×１０3個となるように分ける。そして、濃度０．２ｗｔ％の海洋深層水有機抽出物溶液（海洋深層水有機抽出物及びアルコール）を添加する。２４時間後、ウシ胎仔血清を含まないＤＭＥＭ培地に加える。更に２４時間後、ウシ胎仔血清を含まないＤＭＥＭ培地を、１５ｖｏｌ％のウシ胎仔血清を含むＤＭＥＭ培地１００μＬに交換し、更に２４時間の培養処理を行い、試料を作製した。
【００５７】
実施例７〜１０
実施例７〜１０は、海洋深層水有機抽出物溶液の濃度がそれぞれ０．４ｗｔ％、０．６ｗｔ％、０．８ｗｔ％及び１ｗｔ％である以外、実施例６と同じ方法で試料を作製する。
【００５８】
比較例７
比較例７は、海洋深層水有機抽出物溶液を添加しない以外、実施例６と同じ方法で試料を作製する。
【００５９】
比較例８
比較例８は、海洋深層水有機抽出物溶液の替わりに０．２ｗｔ％のアルコール溶液（アルコールと水を含む）を添加する以外、実施例６と同じ方法で試料を作製する。
【００６０】
比較例９〜１２
比較例９〜１２は、海洋深層水有機抽出物溶液の替わりに、濃度がそれぞれ０．４ｗｔ％、０．６ｗｔ％、０．８ｗｔ％及び１ｗｔ％のアルコール溶液を添加する以外、比較例８と同じ方法で試料を作製する。
【００６１】
［細胞生存率の測定］
下記の方法で、実施例６〜１０及び比較例７〜１２の細胞生存率を測定する。
【００６２】
遮光の環境において、１０μＬの３−（４,５−ジメチルチアゾール−２−イル)−２,５−ジフェニルテトラゾリウムブロミド[３−（４,５−Ｄｉｍｅｔｈｙｌｔｈｉａｚｏｌ−２−ｙｌ）−２,５−ｄｉｐｈｅｎｙｌｔｅｔｒａｚｏｌｉｕｍ ｂｒｏｍｉｄｅ、略称ＭＴＴ]を各ウエルに添加し、４時間後、吸引で培地を除去し、リン酸緩衝食塩水でウシ胎仔血清を洗浄除去する。そして、各ウエルにジメチルスルホキシド（ｄｉｍｅｔｈｙｌ ｓｕｌｆｏｘｉｄｅ、略称ＤＭＳＯ）を１０μＬ添加して、細胞から生じるホルマザン（ｆｏｒｍａｚａｎ）結晶を溶解する。２０分後、酵素免疫測定器で、参考波長を６２０ｎｍとして、５９０ｎｍの吸光値を測定して、数式２で細胞生存率（％）を計算する。その結果は図５に示されている。
数式２：細胞生存率（％）＝（実施例または比較例の吸光値/比較例７の吸光値）×１００％
【００６３】
図５のデータにより、本発明の海洋深層水有機抽出物は細胞の増殖を抑えることができることがわかる。また、ＩＣ50は０．７１ｗｔ％である。
【００６４】
実施例１１
ラット血管平滑筋細胞株（Ａ１０ ｃｅｌｌｓ、＃６０１２７、台湾  財団法人食品工業発展研究所のＢｉｏｒｅｓｏｕｒｃｅ Ｃｏｌｌｅｃｔｉｏｎ ａｎｄ Ｒｅｓｅａｒｃｈ Ｃｅｎｔｅｒから購入）を３７℃且つ５％のＣＯ2雰囲気の細胞培養器に入れ、ＤＭＥＭ培地で培養処理を行った後、３日ごとにＤＭＥＭ培地を交換し、培養物を得る。該ＤＭＥＭ培地は、ウシ胎仔血清、ペニシリン及びストレプトマイシンを含む。該ウシ胎仔血清の濃度は１０ｖｏｌ％であり、ペニシリンの濃度は１００Ｕｎｉｔ／ｍＬであり、ストレプトマイシンの濃度は１００ｍｇ／ｍＬである。培養処理の後、培養物を６ウェルプレート（６−ｗｅｌｌ）に、各ウェルにおける細胞の数が４×１０4個となるように分ける。そして、培養器に入れて２４時間の培養処理を行う。そして、上澄み液を除去してから、２００μＬのマイクロピペットの先端で各ウェルの中央部に十文字状の測定エリアを書き出す。そして、ウシ胎仔血清を含まないＤＭＥＭ培地を添加して、細胞の残骸を洗浄除去する。そして、５００μＬの０．５ｖｏｌ％ウシ胎仔血清を含むＤＭＥＭ培地及び本発明に係る海洋深層水有機抽出物を添加し、３７℃且つ５％のＣＯ2雰囲気の細胞培養器で２４時間の培養処理を行う。
【００６５】
比較例１３
比較例１３は、海洋深層水有機抽出物溶液を添加しない以外、実施例１１と同じ方法で培養物を得る。
【００６６】
比較例１４
比較例１４は、海洋深層水有機抽出物溶液の替わりに逆浸透水を添加する以外、実施例１１と同じ方法で培養物を得る。
【００６７】
［細胞の移動の測定］
下記の方法で、実施例１１、比較例１３及び比較例１４の細胞の移動を測定する。
【００６８】
対比染料で実施例１１、比較例１３及び比較例１４を染色し、倒立顕微鏡で十文字状の測定エリア外の細胞を観察し、その結果に基づいて以下の式で細胞移動率を算出する。細胞移動率（ｐｅｒｃｅｎｔ ｃｌｏｓｕｒｅ、％)=[移動した細胞表面積（ｍｉｇｒａｔｅｄ ｃｅｌｌ ｓｕｒｆａｃｅ ａｒｅａ）/総表面積（ｔｏｔａｌ ｓｕｒｆａｃｅ ａｒｅａ）]×１００％。その結果は図６に示されている。
【００６９】
図６のデータにより、本発明の海洋深層水有機抽出物は細胞の移動を抑えることができることがわかる。
【００７０】
＜血液内の脂質を低下させる効果＞
台湾財団法人国家実験研究院国家実験動物センター（National Laboratory Animal Center: ＮＬＡＣ）から購入した６〜７週齢、体重約１００ｇのゴールデンハムスター４８匹を実験動物とした。これら実験動物は、台湾国立台東大学の動物ルームにおいて、一日の日照時間１２時間、温度２３±２°Ｃ、湿度５０〜６０％の環境で飼養されていたものである。
【００７１】
比較例１５
アメリカ栄養学会（Ｔｈｅ Ａｍｅｒｉｃａｎ Ｓｏｃｉｅｔｙ ｆｏｒ Ｎｕｔｒｉｔｉｏｎ）による実験動物飼料ＡＩＮ９３Ｇ配合組成（下表に示されている）一日分と水を実験動物に毎日提供して、自由に食べさせる。
【００７２】
【表１】
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【００７３】
比較例１６
高脂肪飼料（ＡＩＮ９３Ｇ配合組成に０．２％のコレステロールを添加したものである。下表に示されている）一日分と水を実験動物に毎日提供して、自由に食べさせる。
【００７４】
【表２】
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【００７５】
実施例１２
比較例１６の高脂肪飼料一日分と水、及び低用量の海洋深層水有機抽出物を実験動物に毎日提供して、自由に食べさせる。
【００７６】
実施例１３
比較例１６の高脂肪飼料一日分と水、及び高用量の海洋深層水有機抽出物を実験動物に毎日提供して、自由に食べさせる。
【００７７】
実施例１２、実施例１３、比較例１５及び比較例１６それぞれの実験動物を１２時間断食させ、採血針で実験動物の下大静脈から採血し、そして、血液をエッペンドルフ型チューブ（ｅｐｐｅｎｄｏｒｆ ｔｕｂｅ）に放置し、２層状態に分かれた後、速度１７５０ｘｇで遠心分離し、上層の血清を取ってエッペンドルフ型チューブに放置して、それぞれの血清サンプルを得た。
【００７８】
生化学自動分析装置(米Ｂｅｃｋｍａｎ Ｃｏｕｌｔｅｒ社製、Ｂｅｃｋｍａｎ−７００)で、上記の血清サンプルの総コレステロール（ＴＣ）の濃度及びトリアシルグリセロール（ＴＧ）の濃度を測定する。その結果は図７及び図８に示されている。なお、図７における日数とは、上記飲食物（高脂肪飼料一日分と水、及び高用量の海洋深層水有機抽出物）の実験動物への提供開始からの日数である。即ち、上記飲食物の実験動物への提供開始から７日ごとに採血する。
【００７９】
図７及び図８のデータにより、本発明の海洋深層水有機抽出物は血液内の脂質を低下させることができることがわかる。
【産業上の利用可能性】
【００８０】
本発明の海洋深層水有機抽出物は、一酸化窒素合成酵素及びシクロオキシゲナーゼの活性を抑えること、ヘリコバクター・ピロリの成長を抑えること、血管内の細胞の増殖及び移動を抑えること、血液内の脂質を低下させることに好適である。
【図１】
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【図２】
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【図３】
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【図４】
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【図５】
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【図６】
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【図７】
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【図８】
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