(57)【要約】  ＯＴ作働薬活性を示した一般式（Ｉ）による新規化合物が開示される。2007504263.tif 000020
2007504263.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
下記一般式Ｉによる化合物または該化合物の製薬上許容される塩。
【化１】
2007504263.tif 000018
［式中、
Ｒ１、Ｒ２およびＲ３はそれぞれ独立に、Ｈ、アルキル、ＦおよびＣｌから選択され；Ｒ４は、下記式ＩＩ、ＩＩＩおよびＩＶ：
【化２】
2007504263.tif 000019
から選択される。］
【請求項２】
４−（３，５−ジヒドロキシ−ベンジル）−ピペラジン−１−カルボン酸２−メチル−４−（３−メチル−４，１０−ジヒドロ−３Ｈ−２，３，４，９−テトラアザ−ベンゾ［fｆ］アズレン−９−カルボニル）−ベンジルアミド；
４−（３，５−ジヒドロキシ−ベンジル）−ピペラジン−１−カルボン酸２，６−ジメチル−４−（３−メチル−４，１０−ジヒドロ−３Ｈ−２，３，４，９−テトラアザ−ベンゾ［ｆ］アズレン−９−カルボニル）−ベンジルアミド；
４−（３，５−ジヒドロキシ−ベンジル）−ピペラジン−１−カルボン酸３−クロロ−４−（３−メチル−４，１０−ジヒドロ−３Ｈ−２，３，４，９−テトラアザ−ベンゾ［ｆ］アズレン−９−カルボニル）−ベンジルアミド；
４−（３，５−ジヒドロキシ−ベンジル）−ピペラジン−１−カルボン酸２−フルオロ−４−（３−メチル−４，１０−ジヒドロ−３Ｈ−２，３，４，９−テトラアザ−ベンゾ［ｆ］アズレン−９−カルボニル）−ベンジルアミド；
４−（３−ジメチルカルバモイル−ベンジル）−ピペラジン−１−カルボン酸２−メチル−４−（３−メチル−４，１０−ジヒドロ−３Ｈ−２，３，４，９−テトラアザ−ベンゾ［ｆ］アズレン−９−カルボニル）−ベンジルアミド；および
４−（３−ジメチルチオカルバモイル−ベンジル）−ピペラジン−１−カルボン酸２−メチル−４−（３−メチル−４，１０−ジヒドロ−３Ｈ−２，３，４，９−テトラアザ−ベンゾ［ｆ］アズレン−９−カルボニル）−ベンジルアミド
からなる群から選択される請求項１に記載の化合物。
【請求項３】
活性薬剤として請求項１または２に記載の化合物を含む医薬組成物。
【請求項４】
製薬上許容される補助剤、希釈剤または担体をさらに含む請求項３に記載の医薬組成物。
【請求項５】
経口投与用の錠剤またはカプセルとして製剤された請求項３または４に記載の医薬組成物。
【請求項６】
男性勃起不全、射精障害および女性性的機能不全などの性的障害；前立腺、乳房、卵巣および骨の癌；骨粗鬆症；良性前立腺肥大；産後出血；および抑鬱から選択される障害の治療用の請求項３〜５のいずれかに記載の医薬組成物。
【請求項７】
男性勃起不全の治療用の請求項６に記載の医薬組成物。
【請求項８】
男性勃起不全、射精障害および女性性的機能不全などの性的障害；前立腺、乳房、卵巣および骨の癌；骨粗鬆症；良性前立腺肥大；産後出血；および抑鬱から選択される障害の治療における請求項１または２に記載の化合物あるいは該化合物の製薬上許容される塩の使用。
【請求項９】
出産または胎盤娩出を誘発し、動脈血圧を低下させ、ストレスに対する過剰応答を低下させ、侵害受容閾値を上昇させる上での、請求項１または２に記載の化合物あるいは該化合物の製薬上許容される塩の使用。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、一連の非ペプチドオキシトシン作働薬およびそのような化合物を含む医薬組成物に関する。本組成物は、勃起不全などの一定の生理障害の治療に有用である。
【背景技術】
【０００２】
神経下垂体ホルモン
神経下垂体ホルモンであるオキシトシン（ＯＴ）およびバソプレッシン（ＶＰ）は、脳下垂体後葉により分泌される環状ノナペプチドである。これらは、２００３年２月１４日出願の名称「オキシトシン作働薬およびバソプレッシン拮抗薬（Oxytocin Agonists and Vasopression Antagonists）」の同時係属中の特許出願（ＥＰ出願番号０３００３３９４．８）の例えば１〜２ページにも記載されている。この出願では、２〜４ページにオキシトシンおよびバソプレッシン作働薬および拮抗薬について記載されている。この出願は、多くのＶＩａ拮抗薬およびそれの使用について特許請求しているが、本発明の化合物は開示していない。
【０００３】
２００２年８月６日出願の国際特許出願ＷＯ０３／０１６３１６には、本発明の化合物に関連する多くの化合物が特許請求されているが、本発明の化合物は具体的に開示されていない。
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【０００４】
代わりとなるＯＴ受容体作働薬がなお必要とされている。それらは、不十分なオキシトシン様活性に関連する疾患を治療する上で有用であると考えられる。そのような化合物は有利には、合成が容易な非ペプチドであることができる。好ましくはそれは、ＶＰ受容体に比べてＯＴ受容体に対して選択性であると考えられる。
【課題を解決するための手段】
【０００５】
第１の態様によれば本発明は、請求項１に記載の化合物およびそれの許容される塩に関するものである。
【０００６】
第２の態様によれば本発明は、新規なＯＴ作働薬およびそれの製薬上許容される塩に関するものである。
【０００７】
第３の態様によれば本発明は、これら新規な化合物を含む医薬組成物であって、特に男性勃起不全の治療に有用な組成物に関する。
【０００８】
第４の態様によれば本発明は、特に不十分なオキシトシン様活性が病理において示唆される状態の治療用である医薬組成物の製造における、これら新規化合物の使用に関する。
【０００９】
さらに別の態様によれば本発明は、治療での上記化合物および組成物の使用、ならびに上記化合物および組成物を用いる治療方法に関するものである。
【発明を実施するための最良の形態】
【００１０】
第１の態様において本発明は、下記一般式Ｉによる新規化合物およびそれの製薬上許容される塩を含む。
【００１１】
【化３】
2007504263.tif 000003
【００１２】
式中、Ｒ１、Ｒ２およびＲ３はそれぞれ独立に、Ｈ、アルキル、ＦおよびＣｌから選択され；Ｒ４は、下記式ＩＩ、ＩＩＩおよびＩＶ：
【００１３】
【化４】
2007504263.tif 000004
【００１４】
から選択される。
【００１５】
本明細書で使用される場合、「アルキル」という用語は、低級アルキル基、すなわち、炭素原子数１〜６の飽和炭化水素基を示すものであり、これは、直鎖、分枝鎖および環状アルキル基を包含する。「アルキル」の例には、Ｃ１−メチル、Ｃ２−エチル、Ｃ３−プロピル、イソプロピル、シクロプロピル、Ｃ４−ｎ−ブチル、ｓｅｃ−ブチル、イソブチル、ｔｅｒｔ−ブチル、シクロブチル、シクロプロピルメチル、メチルシクロプロピル、Ｃ５−ｎ−ペンチル、ネオペンチル、シクロプロピルエチル、ジメチルシクロプロピル、およびＣ６−ｎ−ヘキシル、シクロヘキシル、ビシクロ［３．１．０］ヘキシルなどがあるが、これらに限定されるものではない。
【００１６】
本発明による化合物は、１以上の立体中心（「不斉炭素原子」）を有する場合があることから、光学異性を示すことがある。本発明の範囲は、一般式Ｉによる化合物の全てのエピマー、エナンチオマーおよびジアステレオマーを含むものであり、それには単一の異性体、混合物およびラセミ体が包含される。
【００１７】
本発明による化合物は、塩基性窒素原子を含有することから、塩酸、硫酸、リン酸、酢酸、トリフルオロ酢酸、安息香酸、マレイン酸、クエン酸、フマル酸、メタンスルホン酸などのプロトン酸との付加塩を形成することができる。本発明の化合物は、Ｒ７およびＲ８においてカルボン酸基などの酸性基を含有することもできる。これらの化合物は、分子内錯塩（両性イオン）として、またはナトリウム、カリウム、マグネシウム、カルシウムもしくはテトラ−アルキルアンモニウム塩などの塩として存在することができる。こうした塩は、医薬適合性である限り、本発明の範囲内に包含される。
【００１８】
本発明に含まれる個々の好ましい化合物には、
４−（３，５−ジヒドロキシ−ベンジル）−ピペラジン−１−カルボン酸２−メチル−４−（３−メチル−４，１０−ジヒドロ−３Ｈ−２，３，４，９−テトラアザ−ベンゾ［fｆ］アズレン−９−カルボニル）−ベンジルアミド；
４−（３，５−ジヒドロキシ−ベンジル）−ピペラジン−１−カルボン酸２，６−ジメチル−４−（３−メチル−４，１０−ジヒドロ−３Ｈ−２，３，４，９−テトラアザ−ベンゾ［ｆ］アズレン−９−カルボニル）−ベンジルアミド；
４−（３，５−ジヒドロキシ−ベンジル）−ピペラジン−１−カルボン酸３−クロロ−４−（３−メチル−４，１０−ジヒドロ−３Ｈ−２，３，４，９−テトラアザ−ベンゾ［ｆ］アズレン−９−カルボニル）−ベンジルアミド；
４−（３，５−ジヒドロキシ−ベンジル）−ピペラジン−１−カルボン酸２−フルオロ−４−（３−メチル−４，１０−ジヒドロ−３Ｈ−２，３，４，９−テトラアザ−ベンゾ［ｆ］アズレン−９−カルボニル）−ベンジルアミド；
４−（３−ジメチルカルバモイル−ベンジル）−ピペラジン−１−カルボン酸２−メチル−４−（３−メチル−４，１０−ジヒドロ−３Ｈ−２，３，４，９−テトラアザ−ベンゾ［ｆ］アズレン−９−カルボニル）−ベンジルアミド；および
４−（３−ジメチルチオカルバモイル−ベンジル）−ピペラジン−１−カルボン酸２−メチル−４−（３−メチル−４，１０−ジヒドロ−３Ｈ−２，３，４，９−テトラアザ−ベンゾ［ｆ］アズレン−９−カルボニル）−ベンジルアミド
などがある。
【００１９】
これらの個々に好ましい化合物は、既存のものに比べていくつか長所を有する。これらは、高活性の特異的ＯＴ作働薬である。
【００２０】
さらに、それらは非ペプチド系小分子である。そのような化合物が、ペプチドと比較して経口活性が有意に高いことは良く知られている。従って、それらはペプチドのものと比較して、簡便性および患者の服用遵守において優れている。さらにそれらは、合成が容易である。特に、個々に好ましい化合物は、キラル中心を持たないことから、合成が特に簡単となる。
【００２１】
本発明の化合物は、標準的な化学的手法によって製造することができる。そのような手法は例えば、ＥＰ特許出願０３００３３９４．８の１４ページ３２行〜２０ページ３１行およびＷＯ０３／０１６３１６のｐ．１２〜１７に記載されている。
【００２２】
本発明による化合物は、ヒトおよび／または動物の治療法において有用である。そのような使用を行う場合、それら化合物は適切な形態で製剤される。従って本発明の第３の態様は、上記の化合物を有効成分として含む医薬製剤である。本発明の第４の態様は、そのような組成物の製造における第１の態様による化合物の使用である。
【００２３】
本発明による化合物は、いくつかの疾患、障害または状態の治療において有用である。本明細書で使用される「治療」という用語は、疾患、障害または状態を治癒または改善するための治療と、疾患、障害または状態の発生を予防するための処置の両方に関するものである。その治療は、急性的または慢性的に行うことができる。治療を受けるヒトまたは動物、すなわち患者は、本発明による治療の必要性があるあらゆるヒトまたは非ヒト哺乳動物であることができる。
【００２４】
本発明のさらに別の態様は、上記疾患、障害または状態の治療方法に関するものである。本発明による方法によれば、治療上有効量の上記の化合物または医薬組成物を、その治療を必要とする患者に対して投与する。
【００２５】
「治療上有効量」という用語は、所望の治療効果を生じる量に関するものである。治療上有効量は、全ての適切な要素を考慮して、担当医が決定する。一般に単一用量は、０．１ｍｇ〜１０００ｍｇ、好ましくは１ｍｇ〜２５０ｍｇの本発明による活性化合物を含む。この用量は、単回で、あるいは繰り返し投与することができる。繰り返し投与する場合、その投与は、治療対象の状態に従って、例えば１日１回、２回または３回のような一定間隔で、あるいは必要な時に行うことができる。
【００２６】
本発明による医薬組成物は、当業界で公知の形態で提供することができる。例えばその製剤は、錠剤、カプセル、粉剤、坐剤、クリーム、液剤または懸濁液として、あるいは粘着貼付剤などのより複雑な形態で提供することができる。その製剤は、希釈剤、増量剤、結合剤、分散剤、溶媒、保存剤、香味剤などの１以上の賦形剤を含む。製剤を錠剤またはカプセルとして提供する場合、賦形剤は、低ｐＨでは不溶であるが、中性または高ｐＨでは可溶であるポリマーのコーティングなどの活性種の放出を制御する１以上の薬剤を含んでいても良い。そのようなコーティング（「腸溶コーティング」と称される）は、胃での活性薬剤の放出を防止するが、腸でのそれの放出を可能とする。その製剤は、１以上の別の薬理活性種を含むこともできる。好ましくはその製剤は、そのような別の活性薬剤を含まない。
【００２７】
さらに別の態様では本発明は、ヒトおよび／または動物の治療法での本発明による組成物、従って本発明の化合物の使用、ならびにその組成物および化合物のそのような使用が関与する治療方法を含むものである。本発明の新規化合物は、強力かつ選択的なＯＴ作働薬であることから、それらおよびそれらを含む医薬組成物は、病態生理において不十分なオキシトシン様活性が示唆される状態の治療において有用である。
【００２８】
そのような状態には、男性勃起不全、射精障害および女性性的機能不全などの性的障害、前立腺、乳房、卵巣および骨の癌、骨粗鬆症、良性前立腺肥大、産後出血および抑鬱などがあるが、これらに限定されるものではない。その組成物を用いて、出産または胎盤娩出を誘発し、動脈血圧を低下させ、ストレスに対する過剰応答を低下させ、侵害受容閾値を上昇させることもできる。
【００２９】
好ましい実施形態では、前記組成物を用いて、男性および／または女性の性的機能不全、より好ましくは勃起不全を治療する。
【００３０】
治療薬として用いる場合、本発明の組成物は、当業界で公知である適切な経路で投与することができる。例えばそれらは、経口、口腔、舌下、直腸、膣、鼻、肺または経皮経路によって投与することができる。あるいはそれらは、静脈注射、皮下注射または筋肉注射などの注射によって投与することができる。
【００３１】
長期治療の場合、繰り返し投与に代わる方法として、デポー用量の投与を行うことができる。この投与方法では、活性薬剤を乳酸およびグリコール酸のコポリマーなどの生体分解性ポリマーの基材に導入し、その製剤を皮下（ｓ．ｃ．）または筋肉（ｉ．ｍ．）のいずれかで投与して、ポリマーが分解するに連れて活性薬剤が放出される堆積物を形成する。
【００３２】
一般式Ｉを有する化合物が選択的ＯＴ作働薬であるか否かを決定するため、化合物のアッセイを行って、それが無傷の細胞においてＯＴ受容体を刺激する能力を求めることができる。そのアッセイでは、化合物は３０μＭ以下の濃度で有意な刺激を引き起こす。好ましい化合物は、３００ｎＭ以下の濃度で有意な刺激を引き起こす。
【００３３】
以下の実施例で、本発明についてさらに説明するが、それら実施例は本発明の応用を示すものであって、本発明の範囲を限定するものではない。
【００３４】
実施例
下記の略称を用いた。
【００３５】
【表１】
2007504263.tif 000005
【００３６】
実施例Ａ〜Ｇに、中間体の合成を記載してある。本発明による化合物は、実施例１〜６に記載してある。
【００３７】
（実施例Ａ）
【００３８】
【化５】
2007504263.tif 000006
【００３９】
５−アミノ−１−メチル−１Ｈ−ピラゾール−４−カルボン酸エチルエステル
メ（メトキシ−メチレン）シアノ酢酸エチル（２４．９ｇ、１４７ｍｍｏｌ）のエタノール（２５０ｍＬ）溶液にチルヒドラジン（８．６ｍＬ、１６２ｍｍｏｌ）を加え、混合物を３日間加熱還流した。溶媒を減圧下に除去し、残留物をＥｔＯＡｃ／石油エーテルからの再結晶によって精製して白色固体を得て、それは５−アミノ−１−メチル−１Ｈ−ピラゾール−４−カルボン酸エチルエステルであると同定された（２１．１ｇ、８５％）。
【００４０】
１−メチル−５−（２−ニトロ−フェニルアミノ）−１Ｈ−ピラゾール−４−カルボン酸エチルエステル
５−アミノ−１−メチル−１Ｈ−ピラゾール−４−カルボン酸エチルエステル（２１．１ｇ、１２５ｍｍｏｌ）の脱水ＴＨＦ（３００ｍＬ）懸濁液に０℃で、水素化ナトリウム（オイル中６０％分散品、７．０ｇ、１７０ｍｍｏｌ）を少量ずつ加えた。混合物を昇温させて室温とし、０．７５時間攪拌し、冷却して０℃とした。１−フルオロ−２−ニトロベンゼン（１７．６ｇ、１２５ｍｍｏｌ）を加え、得られた懸濁液を室温で１８時間攪拌した。ＥｔＯＡｃおよび０．３Ｍ  ＫＨＳＯ４を加え、分液した。水層をＥｔＯＡｃで抽出し、合わせた有機層をブラインで洗浄し、脱水し、減圧下に濃縮した。残留物をフラッシュシリカゲルでのクロマトグラフィー（溶離液：５０％ヘキサン／５０％酢酸エチル）によって精製して、１−メチル−５−（２−ニトロ−フェニルアミノ）−１Ｈ−ピラゾール−４−カルボン酸エチルエステル（２０．８ｇ、５８％）を得た。
【００４１】
５−（２−アミノ−フェニルアミノ）−１−メチル−１Ｈ−ピラゾール−４−カルボン酸エチルエステル
１−メチル−５−（２−ニトロ−フェニルアミノ）−１Ｈ−ピラゾール−４−カルボン酸エチルエステル（２０．８ｇ、７２ｍｏｌ）をメタノール（３３０ｍＬ）に溶かし、１０％Ｐｄ／Ｃ触媒で４時間水素化した。混合物をセライト（登録商標）フィルター材で濾過し、濾液を減圧下に濃縮して白色固体を得た。それは５−（２−アミノ−フェニルアミノ）−１−メチル−１Ｈ−ピラゾール−４−カルボン酸エチルエステルと同定された（１６．２ｇ、８７％）。
【００４２】
３−メチル−４，９−ジヒドロ−３Ｈ−２，３，４，９−テトラアザ−ベンゾ［ｆ］アズレン−１０−オン
５−（２−アミノ−フェニルアミノ）−１−メチル−１Ｈ−ピラゾール−４−カルボン酸エチルエステル（３．３８ｇ、１３ｍｍｏｌ）の酢酸／２−プロパノール（１：９、５０ｍＬ）溶液を、４日間加熱還流した。溶媒を減圧下に除去し、残留物をトルエンと共沸させ、エタノールからの再結晶によって精製して、３−メチル−４，９−ジヒドロ−３Ｈ−２，３，４，９−テトラアザ−ベンゾ［ｆ］アズレン−１０−オン（１．７８ｇ、６４％）を得た。
【００４３】
３−メチル−３，４，９，１０−テトラヒドロ−２，３，４，９−テトラアザ−ベンゾ［ｆ］アズレン
３−メチル−４，９−ジヒドロ−３Ｈ−２，３，４，９−テトラアザ−ベンゾ［ｆ］アズレン−１０−オン（１．７８ｇ、８．３ｍｍｏｌ）の脱水ＴＨＦ（２５ｍＬ）懸濁液に０℃で、ＬｉＡｌＨ４（１．２１ｇ、３３ｍｍｏｌ）を少量ずつ加えた。得られた懸濁液を１８時間加熱還流し、放冷して室温とした。追加のＬｉＡｌＨ４（６００ｍｇ、１７ｍｍｏｌ）を加え、混合物を６時間加熱還流した。混合物を冷却して０℃とし、３５％アンモニア溶液（４ｍＬ）を滴下し、混合物を0．5時間攪拌した。得られた懸濁液をセライト（登録商標）フィルター材で濾過し、濾液を減圧下に濃縮し、トルエンと共沸させて固体を得た。それは３−メチル−３，４，９，１０−テトラヒドロ−２，３，４，９−テトラアザ−ベンゾ［ｆ］アズレンと同定された（１．６ｇ、９６％）。
【００４４】
（実施例Ｂ）
【００４５】
【化６】
2007504263.tif 000007
【００４６】
４−シアノ−３−メチル安息香酸
４−ブロモ−２−メチルベンゾニトリル（２．０ｇ、１０．２ｍｍｏｌ）のＴＨＦ（１００ｍＬ）溶液に−７８℃で窒素雰囲気下にて、２．５Ｍ  ｎ−ブチルリチウム溶液（４．４８ｍＬ、１１．２ｍｍｏｌ）を滴下した。混合物を−７８℃で１時間攪拌し、ＴＨＦ（５０ｍＬ）中の固体二酸化炭素（５ｇ）に投入した。混合物を昇温させて室温とした。水（２００ｍＬ）を加え、混合物をジエチルエーテルで抽出した（３回）。濃ＨＣｌを加えることで水層を酸性とし、クロロホルムで抽出した（３回）。合わせたクロロホルム抽出液を水で洗浄し、ＭｇＳＯ４で脱水し、減圧下に濃縮して白色固体を得た。それは４−シアノ−３−メチル安息香酸と同定された（１．２ｇ、７３％）。
【００４７】
（実施例Ｃ）
【００４８】
【化７】
2007504263.tif 000008
【００４９】
４−（３，５−ジヒドロキシ−ベンジル）−ピペラジン−１−カルボン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステル
ピペラジン−１−カルボン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステル（１．５６ｇ、８．４ｍｍｏｌ）および３，５−ジヒドロキシベンズアルデヒド（１．１６ｇ、８．４ｍｍｏｌ）のメタノールおよび酢酸混合液（９９：１、２５ｍＬ）溶液を１時間攪拌した。水素化シアノホウ素ナトリウム（６９０ｍｇ、１０．９ｍｍｏｌ）を少量ずつ加え、混合物を３日間攪拌した。混合物を減圧下に濃縮し、残留物をＥｔＯＡｃおよび５％ＫＨＣＯ３に取った。混合物を分液し、有機層をブラインで洗浄し、脱水し、減圧下に減量した。残留物をシリカゲルでのフラッシュカラムクロマトグラフィー（溶離液：ＥｔＯＡｃ：シクロヘキサン、４：１）によって精製して白色泡状物を得た。それは４−（３，５−ジヒドロキシ−ベンジル）−ピペラジン−１−カルボン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステルと同定された（２．２１ｇ、８５％）。
【００５０】
５−ピペラジン−１−イルメチル−ベンゼン−１，３−ジオール・２塩酸塩
４−（３，５−ジヒドロキシ−ベンジル）−ピペラジン−１−カルボン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステル（２．２１ｇ、７．２ｍｍｏｌ）のメタノール溶液に、４Ｍ塩化水素のジオキサン溶液（１０ｍＬ）を加え、混合物を１時間攪拌した。混合物を減圧下に減量し、トルエンと共沸させて白色固体を得た。それは５−ピペラジン−１−イルメチル−ベンゼン−１，３−ジオール・２塩酸塩と同定された（１．８８ｇ、９３％）。
【００５１】
（実施例Ｄ）
【００５２】
【化８】
2007504263.tif 000009
【００５３】
４−ブロモ−２，６−ジメチルベンゾニトリル
４−ブロモ−２，６−ジメチルアニリン（４．４９ｇ、２２．４ｍｍｏｌ）を水（２５ｍＬ）に取り、濃塩酸（８．０ｍＬ）を加えた。混合物を超音波処理して、微細懸濁液を形成し、冷却して０℃とした。亜硝酸ナトリウム（１．６７ｇ、２４．２ｍｍｏｌ）の水溶液（水５ｍＬ）を滴下して、反応温度を０〜５℃に維持した。混合物を０〜５℃で３０分間攪拌し、固体重炭酸ナトリウムを加えて中和した。得られた溶液を、シアン化銅（２．４２ｇ、２７．０ｍｍｏｌ）およびシアン化カリウム（３．６５ｇ、５６．１ｍｍｏｌ）の水溶液（水２５ｍＬ）に７０℃で少量ずつ加えた。混合物を７０℃で３０分間攪拌し、放冷し、トルエンで抽出した（２回）。合わせた抽出液を水およびブラインで洗浄し、ＭｇＳＯ４で脱水し、減圧下に濃縮した。残留物をシリカでのフラッシュクロマトグラフィー（溶離液５％酢酸エチル／９５％石油エーテル）によって精製して、橙赤色固体を得た。それは４−ブロモ−２，６−ジメチルベンゾニトリルであると同定された（３．２ｇ、６８％）。
【００５４】
４−シアノ−３，５−ジメチル安息香酸
実施例Ｂの方法に従って４−ブロモ−２，６−ジメチルベンゾニトリル（３．２０ｇ、１５．２ｍｍｏｌ）を反応させて、黄褐色固体を得た。それは４−シアノ−３，５−ジメチル安息香酸であると同定された（１．５ｇ、５６％）。
【００５５】
（実施例Ｅ）
【００５６】
【化９】
2007504263.tif 000010
【００５７】
４−アミノ−２−クロロ安息香酸メチルエステル
４−アミノ−２−クロロ安息香酸（２．２２ｇ、１２．９ｍｍｏｌ）のメタノール（７５ｍＬ）溶液を攪拌しながら、それに塩化アセチル（２．５ｍＬ）を滴下した。混合物を１８時間加熱還流し、冷却し、減圧下に減量した。残留物をＥｔＯＡｃに取り、飽和炭酸水素ナトリウム溶液およびブラインで洗浄し、脱水し、減圧下に減量して、ベージュ固体を得た。それは４−アミノ−２−クロロ安息香酸メチルエステルと同定された。収量２．３２ｇ、９７％。
【００５８】
２−クロロ−４−シアノ安息香酸メチルエステル
４−アミノ−２−クロロ安息香酸メチルエステル（４．７ｇ、２５ｍｍｏｌ）を水（１２ｍＬ）に取り、濃塩酸（１２ｍＬ）を加えた。混合物を超音波処理して微細懸濁液を形成し、冷却して０℃とした。亜硝酸ナトリウム（１．９１ｇ、２７．７ｍｍｏｌ）の水溶液（水１５ｍＬ）を滴下して、反応温度を０〜５℃に維持した。混合物を０〜５℃で１５分間攪拌し、固体重炭酸ナトリウムを加えて中和した。得られた溶液を、シアン化銅（２．７９ｇ、３１ｍｍｏｌ）およびシアン化カリウム（４．０ｇ、６１ｍｍｏｌ）の水溶液（水２５ｍＬ）に７５℃で加えた。混合物を７５℃で４５分間攪拌し、放冷し、トルエンで抽出した（２回）。合わせた抽出液をブラインで洗浄し、脱水し、減圧下に濃縮した。残留物をシリカでのフラッシュクロマトグラフィー（溶離液：２０％酢酸エチル／８０％石油エーテル）によって精製して、淡橙赤色固体を得た。それは２−クロロ−４−シアノ安息香酸メチルエステルと同定された。収量２．６１ｇ、５３％。
【００５９】
２−クロロ−４−シアノ安息香酸
水酸化リチウム１水和物（１．１８ｇ、２８ｍｍｏｌ）を、２−クロロ−４−シアノ安息香酸メチルエステル（２．６１ｇ、１３ｍｍｏｌ）のＴＨＦおよび水混合液（４：１、１００ｍＬ）溶液に加え、１８時間攪拌した。混合物を減圧下に減量し、残留物を１Ｎ塩酸で酸性とし、メタノールおよびクロロホルムの混合液（５：９５）で抽出した。有機抽出液をブラインで洗浄し、脱水し、減量した。残留物をジオキサン／石油エーテルから再結晶して、淡橙赤色固体を得た。それは２−クロロ−４−シアノ安息香酸と同定された。収量１．３４ｇ、５５％。
【００６０】
（実施例Ｆ）
【００６１】
【化１０】
2007504263.tif 000011
【００６２】
３−フルオロ−４−メチル安息香酸メチルエステル
３−フルオロ−４−メチル安息香酸（２．５ｇ、１６．２ｍｍｏｌ）のトルエン（５０ｍＬ）溶液に塩化チオニルを加え、３時間加熱還流した。混合物を冷却し、減圧下に減量し、トルエンと共沸させ、塩化メチレン（３０ｍＬ）に取った。混合物を氷／水浴で冷却し、メタノール（３０ｍＬ）を加えた。混合物を昇温させて室温とし、３日間攪拌し、減圧下に減量した。残留物をフラッシュカラムクロマトグラフィー（溶離液ＥｔＯＡｃ：ヘキサン、１０：９０）によって精製して、無色油状物を得た。それは３−フルオロ−４−メチル安息香酸メチルエステルと同定された。収量２．１ｇ、７７％。
【００６３】
４−ブロモメチル−３−フルオロ安息香酸メチルエステル
Ｎ−ブロモコハク酸イミド（２．４ｇ、１３．５ｍｍｏｌ）および２，２′−アゾビスイソブチロニトリル（２１３ｍｇ、１．３ｍｍｏｌ）を、３−フルオロ−４−メチル安息香酸メチルエステル（２．１ｇ、１２．５ｍｍｏｌ）の四塩化炭素（６０ｍＬ）溶液に加え、１８時間加熱還流した。混合物を冷却し、濾過し、減圧下に減量した。残留物をにシリカゲルでのフラッシュカラムクロマトグラフィー（溶離液ＥｔＯＡｃ：ヘキサン、１０：９０）よって精製して、無色油状物を得た。それは４−ブロモメチル−３−フルオロ安息香酸メチルエステルと同定された。収量２．１ｇ、６８％。
【００６４】
４−アジドメチル−３−フルオロ安息香酸メチルエステル
アジ化ナトリウム（６０９ｍｇ、９．３６ｍｍｏｌ）を４−ブロモメチル−３−フルオロ安息香酸メチルエステル（２．１ｇ、８．５ｍｍｏｌ）のＤＭＦ（３０ｍＬ）溶液に加え、１８時間攪拌した。混合物をＥｔＯＡｃで希釈し、水およびブラインで洗浄し、脱水し、減圧下に減量して、無色油状物を得た。それは４−アジドメチル−３−フルオロ安息香酸メチルエステルと同定された。収量１．７８ｇ、１００％。
【００６５】
４−アミノメチル−３−フルオロ安息香酸メチルエステル
４−アジドメチル−３−フルオロ安息香酸メチルエステル（１．７８ｇ、８．５ｍｍｏｌ）をメタノール（５０ｍＬ）に溶かし、１０％Ｐｄ／Ｃ触媒（８５０ｍｇ）で１時間水素化した。混合物をセライト（登録商標）フィルター材で濾過し、濾液を減圧下に濃縮して、固体を得た。それは４−アミノメチル−３−フルオロ安息香酸メチルエステルと同定された。収量１．５３ｇ、９８％。
【００６６】
４−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ−メチル）−３−フルオロ安息香酸メチルエステル
ジ−ｔｅｒｔ−ブチル−ジカーボネート（２．１９ｇ、１０ｍｍｏｌ）を、４−アミノメチル−３−フルオロ安息香酸メチルエステル（１．５３ｇ、８．５ｍｍｏｌ）およびトリエチルアミン（１．７５ｍＬ、１２．６ｍｍｏｌ）の塩化メチレン（３０ｍＬ）溶液に加え、１８時間攪拌した。混合物を減圧下に減量し、残留物をフラッシュカラムクロマトグラフィー（溶離液ＥｔＯＡｃ：ヘキサン、３０：７０）によって精製して、白色固体を得た。それは４−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ−メチル）−３−フルオロ安息香酸メチルエステルと同定された。収量１．８ｇ、７６％。
【００６７】
４−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ−メチル）−３−フルオロ安息香酸
１Ｎ水酸化ナトリウム溶液（１０ｍＬ）を４−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ−メチル）−３−フルオロ安息香酸メチルエステル（１．８ｇ、６．４ｍｍｏｌ）のジオキサン（２５ｍＬ）溶液に加え、１時間攪拌した。追加の水酸化ナトリウム溶液を加え、混合物を３日間攪拌した。混合物を減圧下に減量し、残留物をＥｔＯＡｃに取り、１ＮＫＨＳＯ４、水およびブラインで洗浄し、脱水し、減圧下に減量した。残留物をシリカゲルでのフラッシュカラムクロマトグラフィー（溶離液ヘキサン：ＥｔＯＡｃ：酢酸、９０：９：１）によって精製して、白色固体を得た。それは４−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ−メチル）−３−フルオロ安息香酸と同定された。収量１．０８ｇ、６４％。
【００６８】
（実施例Ｇ）
【００６９】
【化１１】
2007504263.tif 000012
【００７０】
３，Ｎ，Ｎ−トリメチルベンズアミド
ＨＯＢｔ（５．９６ｇ、４４ｍｍｏｌ）およびＷＳＣＤ（６．７７ｇ、３５．２ｍｍｏｌ）を、氷／水浴で冷却しながら、ｍ−トルイル酸（４．０ｇ、２９．４ｍｍｏｌ）の塩化メチレン（４０ｍＬ）溶液に加えた。混合物を昇温させて室温とし、１時間攪拌し、氷／水浴で冷却した。ＤＩＥＡ（１５．４ｍＬ、８８．lｍｍｏｌ）およびジメチルアミン塩酸塩（３．５９ｇ、４４．１ｍｍｏｌ）を加え、混合物を昇温させて室温とした。混合物を３日間攪拌し、減圧下に減量し、残留物をＥｔＯＡｃと２Ｎ  ＨＣl（水溶液）との間で分配した。有機層を１Ｎ  ＨＣｌ（水溶液）、水およびブラインで洗浄し、脱水し、減圧下に減量した。残留物を、それ以上精製せずに用いた。
【００７１】
３−ブロモメチル−Ｎ，Ｎ−ジメチル−ベンズアミド
Ｎ−ブロモコハク酸イミド（４．０９ｇ、２３ｍｍｏｌ）および２，２′−アゾビスイソブチロニトリル（３７８ｍｇ、２．３ｍｍｏｌ）を、上記手順からの粗３，Ｎ，Ｎ−トリメチルベンズアミドの四塩化炭素（１５０ｍＬ）溶液に加え、１８時間加熱還流した。混合物を冷却し、減圧下に減量した。残留物をフラッシュカラムクロマトグラフィー（溶離液ＥｔＯＡｃ：ヘキサン、８５：１５）によって精製して、３，Ｎ，Ｎ−トリメチルベンズアミドおよび３−ブロモメチル−Ｎ，Ｎ−ジメチル−ベンズアミドの混合物を得た。収量２．０ｇ。
【００７２】
４−（３−ジメチルカルバモイル−ベンジル）−ピペラジン−１−カルボン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステル
上記手順からの３，Ｎ，Ｎ−トリメチルベンズアミドおよび３−ブロモメチル−Ｎ，Ｎ−ジメチル−ベンズアミドの混合物（２．０ｇ）を、ピペラジン−１−カルボン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステル（１．００ｇ、５．３７ｍｍｏｌ）およびトリエチルアミン（１．４５ｍＬ、１０．３ｍｍｏｌ）の塩化メチレン（１５ｍＬ）溶液に加え、１８時間攪拌した。混合物を減圧下に減量し、残留物をフラッシュカラムクロマトグラフィー（溶離液ＥｔＯＡｃ１００％、次に塩化メチレン：メタノール、９７．５：２．５）によって精製して、４−（３−ジメチルカルバモイル−ベンジル）−ピペラジン−１−カルボン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステルを得た。収量６５５ｍｇ。
【００７３】
Ｎ，Ｎ−ジメチル−３−ピペラジン−１−イルメチル−ベンズアミド・２塩酸塩
４−（３−ジメチルカルバモイル−ベンジル）−ピペラジン−１−カルボン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステル（３２２ｍｇ、０．９３ｍｍｏｌ）を、氷／水浴で冷却しながら、４Ｍ塩化水素のジオキサン溶液（１０ｍＬ）に溶かした。混合物を昇温させて室温とし、１時間攪拌した。混合物を減圧下に減量して、Ｎ，Ｎ−ジメチル−３−ピペラジン−１−イルメチル−ベンズアミドジ・２塩酸塩を得た。収量２４４ｍｇ、８２％。
【００７４】
４−（３−ジメチルチオカルバモイル−ベンジル）−ピペラジン−１−カルボン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステル
２，４−ビス（４−フェノキシフェニル）−１，３−ジチア−２，４−ジホスフェタン−２，４−ジスルフィド（２７９ｍｇ、０．５３ｍｍｏｌ）を、４−（３−ジメチルカルバモイル−ベンジル）−ピペラジン−１−カルボン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステル（３３３ｍｇ、０．９６ｍｍｏｌ）のエチレングリコールジメチルエーテル（１０ｍＬ）溶液に加え、１８時間攪拌した。フラッシュカラムクロマトグラフィー（溶離液ＥｔＯＡｃ：ヘキサン、７５：２５）によって、４−（３−ジメチルチオカルバモイル−ベンジル）−ピペラジン−１−カルボン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステルを得た。収量１１０ｍｇ、３２％。
【００７５】
Ｎ，Ｎ−ジメチル−３−ピペラジン−１−イルメチル−チオベンズアミド・２塩酸塩
４−（３−ジメチルチオカルバモイル−ベンジル）−ピペラジン−１−カルボン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステル（１１０ｍｇ、０．３０ｍｍｏｌ）を、氷／水浴で冷却しながら、４Ｎ塩化水素のジオキサン溶液（８ｍＬ）に溶かした。混合物を昇温させて室温とし、1時間攪拌した。混合物を減圧下に減量し、トルエンおよびジエチルエーテルと共沸させて、Ｎ，Ｎ−ジメチル−３−ピペラジン−１−イルメチル−チオベンズアミド・２塩酸塩を得た。収量９７ｍｇ、９６％。
【実施例】
【００７６】
（実施例１）
４−（３，５−ジヒドロキシ−ベンジル）−ピペラジン−１−カルボン酸２−メチル−４−（３−メチル−４，１０−ジヒドロ−３Ｈ−２，３，４，９−テトラアザ−ベンゾ［ｆ］アズレン−９−カルボニル）−ベンジルアミド
【００７７】
【化１２】
2007504263.tif 000013
【００７８】
１Ａ：２−メチル−４−（３−メチル−４，１０−ジヒドロ−３Ｈ−２，３，４，９−テトラアザベンゾ［ｆ］アズレン−９−カルボニル）−ベンゾニトリル
実施例Ｂからの４−シアノ−３−メチル安息香酸（１．２９ｇ、８．０ｍｍｏｌ）のトルエン（２５ｍＬ）懸濁液を攪拌しながら、それに塩化チオニル（１．８ｍＬ、２７ｍｍｏｌ）を加えた。混合物を２時間加熱還流し、冷却して室温とし、減圧下に濃縮した。残留物をトルエンと共沸させ、塩化メチレンに溶かした（１０ｍＬ）。得られた溶液を、実施例Ａからの３−メチル−３，４，９，１０−テトラヒドロ−２，３，４，９−テトラアザ−ベンゾ［ｆ］アズレン（１．６ｇ、８ｍｍｏｌ）およびトリエチルアミン（１．４ｍＬ、１０ｍｍｏｌ）の塩化メチレン（１５ｍＬ）懸濁液を攪拌したものに加えた。混合物を室温で終夜攪拌し、減圧下に濃縮した。残留物をクロロホルムと０．３Ｍ  ＫＨＳＯ４との間で分配した。水相をクロロホルム／２−プロパノール（８０：２０）で抽出した。合わせた有機相を飽和ＮａＨＣＯ３およびブラインで洗浄し、ＮａＳＯ４で脱水し、減圧下に濃縮した。残留物をフラッシュシリカゲルでのクロマトグラフィー（溶離液５％メタノール／クロロホルム）によって精製して、淡黄色固体を得た。それは２−メチル−４−（３−メチル−４，１０−ジヒドロ−３Ｈ−２，３，４，９−テトラアザベンゾ［ｆ］アズレン−９−カルボニル）−ベンゾニトリルと同定された（２．４ｇ、８７％）。
【００７９】
１Ｂ：（４−アミノメチル−３−メチル−フェニル）−（３−メチル−４，１０−ジヒドロ−３Ｈ−２，３，４，９−テトラアザ−ベンゾ［ｆ］アズレン−９−イル）−メタノン
２−メチル−４−（３−メチル−４，１０−ジヒドロ−３Ｈ−２，３，４，９−テトラアザベンゾ［ｆ］アズレン−９−カルボニル）−ベンゾニトリル（１．１５ｇ、３．３５ｍｍｏｌ）のメタノール（３５ｍＬ）溶液を氷冷したものに、塩化コバルト（ＩＩ）・６水和物（１．５９ｇ、６．７ｍｍｏｌ）を加えた。水素化ホウ素ナトリウム（１．２７ｇ、３３．５ｍｍｏｌ）を０℃で少量ずつ加え、混合物を室温で１時間攪拌し、１Ｍ  ＫＨＳＯ４で反応停止し、減圧下に濃縮した。水系残留物を１Ｍ  ＫＨＳＯ４（４０ｍＬ）で希釈し、セライト（登録商標）フィルター材で濾過した。濾液をジエチルエーテルで洗浄し（５０ｍＬで２回）、２Ｍ  ＮａＯＨで塩基性とし、クロロホルムで抽出した。有機相をＮａ２ＳＯ４で脱水し、減圧下に濃縮して、淡褐色固体を得た。それは（４−アミノメチル−３−メチル−フェニル）−（３−メチル−４，１０−ジヒドロ−３Ｈ−２，３，４，９−テトラアザ−ベンゾ［ｆ］アズレン−９−イル）−メタノンと同定された（７４５ｍｇ、６４％）。
【００８０】
１Ｃ：４−（３，５−ジヒドロキシ−ベンジル）−ピペラジン−１−カルボン酸２−メチル−４−（３−メチル−４，１０−ジヒドロ−３Ｈ−２，３，４，９−テトラアザ−ベンゾ［ｆ］アズレン−９−カルボニル）−ベンジルアミド
１，１′−カルボニルジイミダゾール（１２８ｍｇ、０．７９ｍｍｏｌ）およびＤＩＥＡ（２５０μＬ、１．４４ｍｍｏｌ）を、（４−アミノメチル−３−メチル−フェニル）−（３−メチル−４，１０−ジヒドロ−３Ｈ−２，３，４，９−テトラアザ−ベンゾ［ｆ］アズレン−９−イル）−メタノン（２５０ｍｇ、０．７２ｍｍｏｌ）のＤＭＦ（５ｍＬ）溶液に加え、１時間攪拌した。実施例Ｃからの５−ピペラジン−１−イルメチル−ベンゼン−１，３−ジオール・２塩酸塩（２２８ｍｇ、０．８１ｍｍｏｌ）およびＤＩＥＡ（２５０μＬ、１．４４ｍｍｏｌ）を加え、混合物を１８時間攪拌した。混合物を減圧下に減量し、残留物をＥｔＯＡｃおよび最少量のメタノールに取った。混合物をブラインで洗浄し、減圧下に減量し、再度ＥｔＯＡｃと最少量のメタノールに取った。混合物をＮａＨＣＯ３およびブラインで洗浄し、脱水し、減圧下に減量した。残留物を、シリカゲルでのフラッシュカラムクロマトグラフィー（溶離液ＣＨ２Ｃｌ２：メタノール：アンモニア溶液、９０：９：１）によって２回精製し、ＥｔＯＡｃおよびメタノールから結晶化させて、白色粉末を得た。それは４−（３，５−ジヒドロキシ−ベンジル）−ピペラジン−１−カルボン酸２−メチル−４−（３−メチル−４，１０−ジヒドロ−３Ｈ−２，３，４，９−テトラアザ−ベンゾ［ｆ］アズレン−９−カルボニル）−ベンジルアミドと同定された。収量１１８ｍｇ、２８％。
【００８１】
１Ｈ  ＮＭＲ：ｄ６−ＤＭＳＯδ２．１０（３Ｈ、ｓ）、２．２０〜２．３６（４Ｈ、ｍ）、３．２１〜３．４１（６Ｈ、ｍ）、３．７７（３Ｈ、ｓ）、３．８７（１Ｈ、ｄ、Ｊ＝１４．４Ｈｚ）、４．０９（２Ｈ、ｓ）、５．６７（１Ｈ、ｄ、Ｊ＝１４．４Ｈｚ）、６．０７（１Ｈ、ｓ）、６．１５（２Ｈ、ｓ）、６．６１〜６．７８（２Ｈ、ｍ）、６．８５〜６．９３（３Ｈ、ｍ）、６．９９（１Ｈ、ｓ）、７．０６〜７．２０（２Ｈ、ｍ）、７．２２〜７．３２（１Ｈ、ｍ）、８．６２（１Ｈ、ｓ）、９．１８（２Ｈ、ｓ）ｐｐｍ。
【００８２】
ＭＳ：［Ｍ＋Ｈ］＋＝５８２．３。
【００８３】
（実施例４）
４−（３，５−ジヒドロキシ−ベンジル）−ピペラジン−１−カルボン酸２−フルオロ−４−（３−メチル−４，１０−ジヒドロ−３Ｈ−２，３，４，９−テトラアザ−ベンゾ［ｆ］アズレン−９−カルボニル）−ベンジルアミド
【００８４】
【化１３】
2007504263.tif 000014
【００８５】
４Ａ：［２−フルオロ−４−（３−メチル−４，１０−ジヒドロ−３Ｈ−２，３，４，９−テトラアザ−ベンゾ［ｆ］アズレン−９−カルボニル）−ベンジル］−カルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステル
実施例Ｆからの４−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ−メチル）−３−フルオロ安息香酸（５００ｍｇ、１．８６ｍｍｏｌ）および過剰量のトリエチルアミンを塩化メチレン（２０ｍＬ）に溶かした。ＷＳＣＤ（５９０ｍｇ、３．０８ｍｍｏｌ）および４−（ジメチルアミノ）ピリジン（２００ｍｇ、１．６４ｍｍｏｌ）を加え、０．５時間攪拌した。実施例Ａからの３−メチル−３，４，９，１０−テトラヒドロ−２，３，４，９−テトラアザ−ベンゾ［ｆ］アズレン（３０９ｍｇ、１．６４ｍｍｏｌ）を加え、４８時間攪拌した。混合物を減圧下に減量し、シリカゲルでのフラッシュカラムクロマトグラフィー（溶離液ＥｔＯＡｃ：ヘキサン、５０：５０から１００：０）によって精製して、淡黄褐色泡状物を得た。それは［２−フルオロ−４−（３−メチル−４，１０−ジヒドロ−３Ｈ−２，３，４，９−テトラアザ−ベンゾ［ｆ］アズレン−９−カルボニル）−ベンジル］−カルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステルと同定された。収量３５５ｍｇ、５１％。
【００８６】
４Ｂ：（４−アミノメチル−３−フルオロ−フェニル）−（３−メチル−４，１０−ジヒドロ−３Ｈ−２，３，４，９−テトラアザ−ベンゾ［ｆ］アズレン−９−イル）−メタノン
［２−フルオロ−４−（３−メチル−４，１０−ジヒドロ−３Ｈ−２，３，４，９−テトラアザ−ベンゾ［ｆ］アズレン−９−カルボニル）−ベンジル］−カルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステル（３３５ｍｇ、０．７４ｍｍｏｌ）を４Ｍ塩化水素のジオキサン溶液（６ｍＬ）に溶かし、１時間攪拌した。混合物を減圧下に減量して、白色固体を得た。それは（４−アミノメチル−３−フルオロ−フェニル）−（３−メチル−４，１０−ジヒドロ−３Ｈ−２，３，４，９−テトラアザ−ベンゾ［ｆ］アズレン−９−イル）−メタノンと同定された。収量２８８ｍｇ、１００％。
【００８７】
４Ｃ：４−（３，５−ジヒドロキシ−ベンジル）−ピペラジン−１−カルボン酸２−フルオロ−４−（３−メチル−４，１０−ジヒドロ−３Ｈ−２，３，４，９−テトラアザ−ベンゾ［ｆ］アズレン−９−カルボニル）−ベンジルアミド
（４−アミノメチル−３−フルオロ−フェニル）−（３−メチル−４，１０−ジヒドロ−３Ｈ−２，３，４，９−テトラアザ−ベンゾ［ｆ］アズレン−９−イル）−メタノン（９０ｍｇ、０．２３ｍｍｏｌ）を、実施例１Ｃの方法に従って、実施例Ｃからの５−ピペラジン−１−イルメチル−ベンゼン−１，３−ジオール・２塩酸塩（７５ｍｇ、０．２７ｍｍｏｌ）と反応させて、白色固体を得た。それは４−（３，５−ジヒドロキシ−ベンジル）−ピペラジン−１−カルボン酸２−フルオロ−４−（３−メチル−４，１０−ジヒドロ−３Ｈ−２，３，４，９−テトラアザ−ベンゾ［ｆ］アズレン−９−カルボニル）−ベンジルアミドと同定された。収量６８ｍｇ、５０％。
【００８８】
１Ｈ  ＮＭＲ：ｄ６−ＤＭＳＯδ２．２０〜２．３２（４Ｈ、ｍ）、３．１６〜３．３０（６Ｈ、ｍ）、３．７７（３Ｈ、ｓ）、３．９２（１Ｈ、ｄ、Ｊ＝１４．８Ｈｚ）、４．１５（２Ｈ、ｓ）、５．６５（１Ｈ、ｄ、Ｊ＝１４．８Ｈｚ）、６．０７（１Ｈ、ｓ）、６．１６（２Ｈ、ｓ）、６．６０〜７．３０（９Ｈ、ｍ）、８．６４（１Ｈ、ｓ）、９．１６（２Ｈ、ｓ）ｐｐｍ。
【００８９】
ＭＳ：［Ｍ＋Ｈ］＋＝５８６．２。
【００９０】
上記の実施例１および４について記載のものと同様の手順を用いて、実施例２、３、５および６を製造した。
【００９１】
【表２】
2007504263.tif 000015
【００９２】
化合物の名称は下記の通りである。
【００９３】
【表３】
2007504263.tif 000016
【００９４】
例示化合物の質量スペクトラムデータ
【００９５】
【表４】
2007504263.tif 000017
【００９６】
実験手順
実施例１〜６がヒトＯＴ受容体の作働薬であるか否かを決定するため、標準的なトランスフェクション技術を用いて、チャイニーズハムスター卵巣（ＣＨＯ）などの哺乳動物細胞を、安定にまたは一時的にヒトＯＴ受容体を発現するよう組み換えたアッセイを、それらに化合物について行う。さらに、好適なプロモーター、例えばＮＦＡＴプロモーターの制御下に蛍ルシフェラーゼの遺伝子で細胞をトランスフェクションする。作働薬とＯＴ受容体を接触させることで、市販の試薬を用いて測定できる程度にルシフェラーゼ合成の刺激を行う。データを４パラメータロジスティック曲線に適合させることで、応答が最大の５０％である濃度を計算する。ＯＴで認められる最大刺激と比較して、最大効率を計算する。
【００９７】
引用した参考文献はいずれも、参照によってその全体が本明細書に組み込まれる。
【国際調査報告】
2007504263.tif 000021
2007504263.tif 000022