(57)【要約】      （修正有）【課題】関節の健康の維持又は関節障害の防止若しくは治療のための、より効果的で安全な組成物の提供。【解決手段】軟骨破壊を防止又は治療するための使用のための、オレウロペイン及び／又はヒドロキシチロソールを含む組成物。組成物は、クルクミンを更に含み、加えてケルセチンも含むことが好ましい。また、組成物は、抗酸化剤、抗炎症化合物、グリコサミノグリカン、プレバイオティクス、繊維、プロバイオティクス、脂肪酸、ミネラル、微量元素、及び／又はビタミンから選択される少なくとも１種の化合物を更に含むことが、より好ましい。【選択図】なし【特許請求の範囲】
【請求項１】
軟骨破壊を防止又は治療するための使用のための、オレウロペイン及び／又はヒドロキシチロソールを含む組成物。
【請求項２】
クルクミンをさらに含む、請求項１に記載の使用のための組成物。
【請求項３】
ケルセチンをさらに含む、請求項１又は２に記載の使用のための組成物。
【請求項４】
抗酸化剤、抗炎症化合物、グリコサミノグリカン、プレバイオティクス、繊維、プロバイオティクス、脂肪酸、ミネラル、微量元素、及び／又はビタミンからなる群から選択される少なくとも１種の化合物をさらに含む、請求項１〜３のいずれか一項に記載の使用のための組成物。
【請求項５】
少なくとも１種の抗炎症化合物をさらに含む、請求項４に記載の使用のための組成物。
【請求項６】
前記少なくとも１種の抗炎症化合物は植物抽出物である、請求項４又は５に記載の使用のための組成物。
【請求項７】
前記植物抽出物は、デビルズクロー（ハルパゴフィツム・プロクムベンス（Ｈａｒｐａｇｏｐｈｙｔｕｍ  ｐｒｏｃｕｍｂｅｎｓ））、ロスマリヌス・オフィキナリス（Ｒｏｓｍａｒｉｎｕｓ  ｏｆｆｉｃｉｎａｌｉｓ）、ヒソップ、ショウガ（ジンギベル・オフィキナレ（Ｚｉｎｇｉｂｅｒ  ｏｆｆｉｃｉｎａｌｅ））、ウコン（クルクマ・ロンガ（Ｃｕｒｃｕｍａ  ｌｏｎｇａ））、アルニカモンタナ（Ａｒｎｉｃａ  ｍｏｎｔａｎａ）、ヤナギの樹皮、ザクロ（プニカ・グラナトゥム（Ｐｕｎｉｃａ  ｇｒａｎａｔｕｍ））、緑茶（カメリア・シネンシス（Ｃａｍｅｌｌｉａ  ｓｉｎｅｎｓｉｓ））、キャッツクロー（ウンカリア・トメトサ（Ｕｎｃａｒｉａ  ｔｏｍｅｔｏｓａ）及びウンカリア・ギアネンシス（Ｕｎｃａｒｉａ  ｇｕｉａｎｅｎｓｉｓ））、インディアン・オリバナム（ボスウェリア・セラータ（Ｂｏｓｗｅｌｉａ  ｓｅｒｒａｔａ））、及びパイナップルブロメライン（アナナス・コモスス（Ａｎａｎａｓ  ｃｏｍｏｓｕｓ））、ブラックシード（ニゲラ・サティバ（Ｎｉｇｅｌｌａ  ｓａｔｉｖｅ））、セイヨウオトギリソウ、ヒペルフォリン、ゴールデンシール、ジャーマンカモミール（マトリカリア・レクティタ（Ｍａｔｒｉｃａｒｉａ  ｒｅｃｕｔｉｔａ））からなる群から選択される１種又は複数種の植物からの抽出物である、請求項６に記載の使用のための組成物。
【請求項８】
少なくとも１種の抗酸化剤をさらに含む、請求項４〜７のいずれか一項に記載の使用のための組成物。
【請求項９】
前記少なくとも１種の抗酸化剤は、アスタキサンチン、カロテノイド、コエンザイムＱ１０（「ＣｏＱ１０」）、フラボノイド、グルタチオン、ゴジ（クコ）、ヘスペリジン、ラクトウルフベリー、リグナン、ルテイン、リコピン、ポリフェノール、セレン、ビタミンＡ、ビタミンＣ、ビタミンＥ、ゼアキサンチンからなる群から選択される、請求項８に記載の使用のための組成物。
【請求項１０】
栄養組成物である、請求項１〜９のいずれか一項に記載の使用のための組成物。
【請求項１１】
医薬組成物である、請求項１〜９のいずれか一項に記載の使用のための組成物。
【請求項１２】
前記栄養組成物はメディカルフードである、請求項１０に記載の使用のための組成物。
【請求項１３】
前記使用は軟骨におけるコラーゲンの分解を抑制又は減少させるためのものである、請求項１〜１２のいずれか一項に記載の使用のための組成物。
【請求項１４】
請求項１〜１３のいずれか一項に記載の使用のための栄養組成物を製造する方法であって、栄養組成物用の１種又は複数種の成分、オレウロペイン及び／又はヒドロキシチロソール、及び任意選択でさらにクルクミン及びケルセチンのうちの１種又は複数種を用意するステップと、それらを混合するステップと、を含む方法。
【請求項１５】
軟骨の破壊を防止又は治療する方法であって、それを必要とする個体に有効量の請求項１〜１３のいずれか一項に記載の組成物を投与することを含む方法。
【発明の詳細な説明】
【発明の技術分野】
【０００１】
本発明は、関節の健康、特に、軟骨破壊の防止若しくは治療、又は関節の健康の維持のための、オレウロペイン及び／又はヒドロキシチロソールを含む組成物の使用に関する。
【発明の背景】
【０００２】
変形性関節症（ＯＡ）は、重要な社会経済的影響を伴う、有病率が高い疾患である。変形性関節症は関節軟骨の変性疾患で、関節炎の最も一般的な形態であり、成人人口の１０％が罹患している。ＯＡは、世界中で高齢者の障害及び医療費の主要な原因である。
【０００３】
関節軟骨の進行性破壊及び喪失は、他の関節構造への変化、例えば、滑膜増殖、軟骨下骨の硬化及び肥厚、関節縁での骨棘形成、靭帯弛緩及び筋萎縮などを伴う病的状態の主な特徴の１つであり、それらのすべてがＯＡの臨床症状に寄与する。これらの症状は、重度の疼痛、硬直、関節運動の喪失、及び障害を含む。
【０００４】
ＯＡに罹患している個体が増加しているが、未だ治療法がなく、現在の薬物療法は依然として対症療法的なものであり、症状の緩和に焦点を当てたものにすぎない。例えば、疼痛及び炎症は、鎮痛薬（例えばアセトアミノフェン）及び非ステロイド系抗炎症薬（ＮＳＡＩＤ）を用いて治療される。さらに、これらの薬物の使用は、胃腸及び心血管のリスクなどの副作用に関連することが多い。
【０００５】
故に、ＯＡの治療における使用のための改善された組成物が有利であり得るが、特に、より効果的で安全な組成物が望まれる。
【発明の概要】
【０００６】
オレウロペイン及びヒドロキシチロソールの抗炎症性及び抗酸化性が以前に観察されている。しかし、本発明者らは驚くべきことに、これらの化合物がまた、軟骨に対する抗異化効果を有することを実証している。
【０００７】
そこで、本発明の目的は、関節の健康の改善における使用のための組成物を提供することに関する。特に、軟骨破壊を防止又は治療することによって関節の健康を改善する組成物を提供することが本発明の目的であり、胃腸及び／又は心臓血管のリスクなどの副作用に関して従来技術の上記の問題を解決する。
【０００８】
すなわち、本発明の一態様は、軟骨破壊を防止又は治療するための使用のための、オレウロペイン及び／又はヒドロキシチロソールを含む組成物に関する。
【０００９】
本発明の別の態様は、本発明による使用のための組成物の製造方法に関する。
【図面の簡単な説明】
【００１０】
【図１Ａ】図１Ａ（ＦＩＧ．１Ａ）は、細胞の正常状態を模倣するＩＬ１ａの非存在状態におけるＧＡＰＤＨに対するＡＤＡＭＴＳ−５  ｍＲＮＡの相対発現量を示す。各条件はＣＴＬ−と統計学的に比較された。
【図１Ｂ】図１Ｂ（ＦＩＧ．１Ｂ）は、細胞の疾患状態を模倣するＩＬ１ａの存在状態におけるＧＡＰＤＨに対するＡＤＡＭＴＳ−５  ｍＲＮＡの相対発現量を示す。ＣＴＬ−と比較されたＩＬ１ａ（実験の検証）を除いて、各条件はＩＬ１ａと統計学的に比較された。
【図２Ａ】図２Ａ（ＦＩＧ．２Ａ）は、細胞の正常状態を模倣するＩＬ１ａの非存在状態におけるＧＡＰＤＨに対するＣＯＸ−２  ｍＲＮＡの相対発現量を示す。各条件はＣＴＬ−と統計学的に比較された。
【図２Ｂ】図２Ｂ（ＦＩＧ．２Ｂ）は、細胞の疾患状態を模倣するＩＬ１ａの存在状態におけるＧＡＰＤＨに対するＣＯＸ−２  ｍＲＮＡの相対発現量を示す。ＣＴＬ−と比較されたＩＬ１ａ（実験の検証）を除いて、各条件はＩＬ１ａと統計学的に比較された。
【図３Ａ】図３Ａ（ＦＩＧ．３Ａ）は、細胞の正常状態を模倣するＩＬ１ａの非存在状態におけるＧＡＰＤＨに対するＭＭＰ−１３  ｍＲＮＡの相対発現量を示す。各条件はＣＴＬ−と統計学的に比較された。
【図３Ｂ】図３Ｂ（ＦＩＧ．３Ｂ）は、細胞の疾患状態を模倣するＩＬ１ａの存在状態におけるＧＡＰＤＨに対するＭＭＰ−１３  ｍＲＮＡの相対発現量を示す。ＣＴＬ−と比較されたＩＬ１ａ（実験の検証）を除いて、各条件はＩＬ１ａと統計学的に比較された。
【図４−１】図４（Ｆｉｇｕｒｅ  ４）は、モルモットの膝の組織学的切片（ヘマトキシリン、ファストグリーン及びサフラニンＯ染色）を示す。４Ａ及び４ＢはＡ群（オレウロペイン）を示す。４Ｃ及び４ＤはＣ群（ルチン）を示す。４Ｅ及び４ＦはＤ群（ルチン及びクルクミン）を示す。４Ｇ及び４ＨはＢ群（対照）を示す。
【図４−２】図４（Ｆｉｇｕｒｅ  ４）は、モルモットの膝の組織学的切片（ヘマトキシリン、ファストグリーン及びサフラニンＯ染色）を示す。４Ａ及び４ＢはＡ群（オレウロペイン）を示す。４Ｃ及び４ＤはＣ群（ルチン）を示す。４Ｅ及び４ＦはＤ群（ルチン及びクルクミン）を示す。４Ｇ及び４ＨはＢ群（対照）を示す。
【図５】図５（Ｆｉｇｕｒｅ  ５）は各群の総ＯＡスコアを示す。
【図６Ａ】図６Ａ（Ｆｉｇｕｒｅ  ６Ａ）は、血漿中の炎症性ＰＧＥ２バイオマーカーの濃度を示す。
【図６Ｂ】図６Ｂ（Ｆｉｇｕｒｅ  ６Ｂ）は、４週目及び３５週目の血漿中ＰＧＥ２レベルと対応するＯＡスコアとの相関を示す。
【図７】図７（ＦＩＧ．７）は、コラーゲン２分解に関連する血漿中のＣｏｌｌ  ２−１  ＮＯ２バイオマーカーの濃度を経時的に示す。
【図８Ａ】図８Ａ（Ｆｉｇｕｒｅ  ８Ａ）は、コラーゲン２分解に関連する血漿中のＣｏｌｌ  ２−１  ＮＯ２バイオマーカーの濃度を示す。
【図８Ｂ】図８Ｂ（Ｆｉｇｕｒｅ  ８Ｂ）は、４週目及び３５週目の血漿中のＣｏｌｌ  ２−１  ＮＯ２バイオマーカーの濃度と対応するＯＡスコアとの相関を示す。
【図９】図９（Ｆｉｇｕｒｅ  ９）は、ＯＡ患者における軟骨細胞の肥大化作用に関連する血漿中のフィブリン３−１バイオマーカーの濃度を示す。
【図１０Ａ】図１０Ａ（Ｆｉｇｕｒｅ  １０Ａ）は、ＯＡ患者における軟骨細胞の肥大化作用に関連する血漿中のフィブリン３−１バイオマーカーの濃度を示す。
【図１０Ｂ】図１０Ｂ（Ｆｉｇｕｒｅ  １０Ｂ）は、４週目及び３５週目の血漿中のフィブリン３−１バイオマーカーの濃度と対応するＯＡスコアとの相関を示す。
【発明の詳細な説明】
【００１１】
定義：
本発明をさらに詳細に考察する前に、以下の用語及び表記法を最初に定義する。
【００１２】
本発明に関連して言及されるパーセントは、特に断らない限り重量／重量パーセントである。
【００１３】
「Ｘ及び／又はＹ」の文脈において使用される用語「及び／又は」は、「Ｘ」又は「Ｙ」又は「Ｘ及びＹ」と解釈されるべきである。
【００１４】
本明細書で使用される数値範囲は、具体的に開示されているか否かを問わず、その範囲内に含まれるすべての数及び数のサブセットを含むことが意図される。さらに、これらの数値範囲は、その範囲における任意の数又は数のサブセットに関する請求項の根拠を提供するものとして解釈されるべきである。例えば、１から１０までの開示は、１から８まで、３から７まで、４から９まで、３．６から４．６まで、３．５から９．９まで、等の範囲の根拠となるものとして解釈されるべきである。
【００１５】
別段の規定があるか、又は文脈上明白に反対のことが含意される場合でない限り、本発明の単数形の特徴又は限定への言及はすべて、対応する複数形の特徴又は限定を含むものとし、その逆も同様である。
【００１６】
別段の定義がない限り、本明細書で使用されるすべての技術用語及び科学用語は当業者に一般に理解される意味と同じ意味を有する。
【００１７】
使用のための組成物：
オレウロペインは、炎症及び骨代謝に有益な効果を有することが以前に示されているポリフェノールである。ヒドロキシチロソールは関連する化合物であり、オレウロペインの代謝産物であり、また、それらの効果を有することが示されている。本発明者らは、本発明において、驚くべきことに、オレウロペイン及びヒドロキシチロソールは、各々が軟骨破壊に対して有益な効果を有することも示している。
【００１８】
関節疾患は多かれ少なかれ炎症を併発し得る。一部の疾患では、例えば関節リウマチ（ＲＡ）などでは、炎症は最も重要な要素である。他の疾患、例えばＯＡでは、炎症はそれほど著明には現れない。しかし、両疾患は関節軟骨が破壊される異化要素を有する。
【００１９】
本発明者らは、オレウロペインの提供により、ＯＡの動物モデルにおいて軟骨破壊を防止できることを示している。ヒドロキシチロソールはまた、軟骨モデル系において異化酵素を阻害することが示されている。
【００２０】
すなわち、第１の態様において、本発明は、軟骨破壊を防止又は治療するための使用のための、オレウロペイン及び／又はヒドロキシチロソールを含む組成物に関する。
【００２１】
別の様式において、本発明のこの態様は、軟骨破壊の防止又は治療のための医薬の製造におけるオレウロペイン及び／又はヒドロキシチロソールの使用として記載され得る。
【００２２】
軟骨破壊を防止又は治療するための使用は、軟骨破壊を抑制又は減少させるための使用と同義である。
【００２３】
すなわち、本発明の実施形態は、軟骨破壊を防止又は治療するための使用のための、オレウロペインを含む組成物、及び軟骨破壊を防止又は治療するための使用のための、ヒドロキシチロソールを含む組成物を含む。
【００２４】
本発明のさらに別の実施形態は、軟骨破壊を防止又は治療するための使用のための、オレウロペイン及びヒドロキシチロソールを含む組成物を含む。
【００２５】
本発明のさらなる実施形態は、クルクミンをさらに含む本発明による使用のための上記組成物、及びケルセチンをさらに含む本発明による使用のための上記組成物を含む。
【００２６】
本発明の実施形態において、本発明による使用のための組成物は、オレウロペイン及び／又はヒドロキシチロソールと、１種又は複数種のさらなるポリフェノール、例えば、クルクミン及びケルセチンからなる群から選択される１種又は複数種のさらなるポリフェノールと、を含む。
【００２７】
本発明の一実施形態は、オレウロペイン及び／又はヒドロキシチロソールを含み、クルクミンをさらに含む、本発明による使用のための組成物に関する。
【００２８】
オレウロペイン及びクルクミンの組み合わせ並びにヒドロキシチロソール及びクルクミンの組み合わせの両方が、軟骨のインビトロモデルにおいて異化酵素を阻害することが示されている（図１及び３、実施例１参照）。
【００２９】
本発明の別の実施形態は、オレウロペイン及び／又はヒドロキシチロソールを含み、さらにケルセチンを含む、本発明による使用のための組成物に関する。
【００３０】
オレウロペイン及びケルセチンの組み合わせ並びにヒドロキシチロソール及びケルセチンの組み合わせの両方が、軟骨のインビトロモデルにおいて異化酵素を阻害することが示されている（図１及び３、実施例１参照）。
【００３１】
さらに別の実施形態において、本発明による使用のための組成物は、オレウロペイン及び／又はヒドロキシチロソールを含み、さらにクルクミン及びケルセチンを含む。
【００３２】
オレウロペイン＋クルクミン＋ケルセチン、又はヒドロキシチロソール＋クルクミン＋ケルセチンの組み合わせは、各々が軟骨破壊において活性な異化酵素に対する相乗効果及び特異的効果を有することが示されている（図１及び３、実施例１参照）。
【００３３】
成分：
主な生理活性化合物：
オレウロペイン、ヒドロキシチロソール、クルクミン、及びケルセチンは本発明による主な生理活性分子である。それらは任意の適切な供給源由来であり得る。好ましい実施形態において、オレウロペイン、ヒドロキシ、クルクミン、及びケルセチンは植物供給源から得られる。オレウロペイン及びヒドロキシチロソールは例えばオリーブ植物から得られる。
【００３４】
さらなる生理活性化合物：
本発明による使用のための組成物はまた、少なくとも１種のさらなる生理活性化合物、例えば、抗酸化剤、抗炎症化合物、グリコサミノグリカン、プレバイオティクス、繊維、プロバイオティクス、脂肪酸、ミネラル、微量元素、及び／又はビタミンからなる群から選択される化合物を含み得る。
【００３５】
本願に関連して使用される用語「生理活性」は、化合物が個体の健康に寄与すること、又は基本的な栄養上の要求を満たすという効果を超える人体に対する効果を有することを意味する。
【００３６】
少なくとも１種のさらなる生理活性化合物は天然供給源由来であり得る。すなわち、化合物は、植物、動物、魚、真菌、藻類、微生物発酵物の抽出物由来であり得る。ミネラルもこの定義内の天然供給源由来と考えられる。
【００３７】
抗炎症化合物及び／又は抗酸化剤：
抗炎症化合物との組み合わせ：
本発明は、一態様において、軟骨破壊を防止又は治療するための使用のための組成物に関する。
【００３８】
本発明の一実施形態において、本発明による組成物は、少なくとも１種の抗炎症化合物との併用のためのものである。
【００３９】
少なくとも１種の抗炎症化合物は、例えば連続的に又は同時に、本発明の組成物と組み合わせて投与され得る。
【００４０】
少なくとも１種の抗炎症化合物は、本発明の組成物と同じ組成物中に提供され得、あるいは別々の組成物中で、例えば、キットオブパーツ（ｋｉｔ  ｏｆ  ｐａｒｔｓ）又は相互作用する一連の製品中で提供され得る。
【００４１】
本発明による使用のための組成物及び少なくとも１種の抗炎症化合物が、１つ又は複数の別々の組成物中で提供される場合、それらは投与前に混合され得、又は同時に若しくは連続的に投与され得る。
【００４２】
さらなる実施形態において、本発明による使用のための組成物は、少なくとも１種のさらなる生理活性化合物として少なくとも１種の抗炎症化合物を含む。他の好ましい実施形態において、本発明による使用のための組成物は、少なくとも１種のさらなる生理活性化合物として少なくとも１種の抗酸化剤を含む。
【００４３】
少なくとも１種の抗炎症及び／又は抗酸化化合物は、抗炎症及び／又は抗酸化効果を有する任意の適切な化合物であり得る。
【００４４】
いくつかの抗炎症化合物は抗酸化効果も有することに留意されたい。化合物は、いずれか又は両方の性質を有することに基づいて組み入れのために選択され得る。
【００４５】
本発明の組成物に含まれ得る抗炎症化合物の例は天然供給源からの抗炎症化合物である。
【００４６】
すなわち、本発明の一実施形態は、少なくとも１種の抗炎症化合物がオメガ−３多価不飽和脂肪酸（これは例えば魚から抽出され得る。）を含む、本発明による使用のための組成物に関する。
【００４７】
本発明の他の実施形態は、含まれる少なくとも１種の抗炎症化合物が少なくとも１種の植物抽出物である、本発明による使用のための組成物に関する。
【００４８】
植物抽出物は、例えば、フラボノイド、ポリフェノール、プロアントシアニン、脂質（例えば、アボカドダイズ不鹸化物、オメガ−３多価不飽和脂肪酸）を含み得る。
【００４９】
植物抽出物は、デビルズクロー（ハルパゴフィツム・プロクムベンス（Ｈａｒｐａｇｏｐｈｙｔｕｍ  ｐｒｏｃｕｍｂｅｎｓ））、ロスマリヌス・オフィキナリス（Ｒｏｓｍａｒｉｎｕｓ  ｏｆｆｉｃｉｎａｌｉｓ）、ヒソップ、ショウガ（ジンギベル・オフィキナレ（Ｚｉｎｇｉｂｅｒ  ｏｆｆｉｃｉｎａｌｅ））、ウコン（クルクマ・ロンガ（Ｃｕｒｃｕｍａ  ｌｏｎｇａ））、アルニカモンタナ（Ａｒｎｉｃａ  ｍｏｎｔａｎａ）、ヤナギの樹皮、ザクロ（プニカ・グラナトゥム（Ｐｕｎｉｃａ  ｇｒａｎａｔｕｍ））、緑茶（カメリア・シネンシス（Ｃａｍｅｌｌｉａ  ｓｉｎｅｎｓｉｓ））、キャッツクロー（ウンカリア・トメトサ（Ｕｎｃａｒｉａ  ｔｏｍｅｔｏｓａ）及びウンカリア・ギアネンシス（Ｕｎｃａｒｉａ  ｇｕｉａｎｅｎｓｉｓ））、インディアン・オリバナム（Ｉｎｄｉａｎ  ｏｌｉｂａｕｍ）（ボスウェリア・セラータ（Ｂｏｓｗｅｌｉａ  ｓｅｒｒａｔａ））、及びパイナップルブロメライン（アナナス・コモスス（Ａｎａｎａｓ  ｃｏｍｏｓｕｓ））、ブラックシード（ニゲラ・サティバ（Ｎｉｇｅｌｌａ  ｓａｔｉｖｅ））、セイヨウオトギリソウ、ヒペルフォリン、ゴールデンシール、ジャーマンカモミール（マトリカリア・レクティタ（Ｍａｔｒｉｃａｒｉａ  ｒｅｃｕｔｉｔａ））からなる群から選択される１種又は複数種の植物からの抽出物であり得る。
【００５０】
本発明の組成物中に含まれ得る少なくとも１種の抗酸化剤は、アスタキサンチン、カロテノイド、コエンザイムＱ１０（「ＣｏＱ１０」）、フラボノイド、グルタチオン、ゴジ（クコ）、ヘスペリジン、ラクトウルフベリー、リグナン、ルテイン、リコピン、ポリフェノール、セレン、ビタミンＡ、ビタミンＣ、ビタミンＥ、ゼアキサンチンからなる群から選択され得る。
【００５１】
好ましい実施形態において、抗酸化剤は、天然供給源、例えば植物抽出物などに由来する。
【００５２】
グリコサミノグリカン：
グリコサミノグリカンは、健康な軟骨中に存在する、大きな、強く荷電した分子である。グリコサミノグリカンの例はグルコサミン及びコンドロイチン硫酸である。
【００５３】
すなわち、本発明による使用のための組成物の一実施形態はグルコサミン及び／又はコンドロイチン硫酸を含む。
【００５４】
プレバイオティクス：
一部の実施形態において、本発明による使用のための組成物は１種又は複数種のプレバイオティクスを含む。プレバイオティクスの非限定的な例は、アカシアガム、アルファグルカン、アラビノガラクタン、ベータグルカン、デキストラン、フラクトオリゴ糖、フコシルラクトース、ガラクトオリゴ糖、ガラクトマンナン、ゲンチオオリゴ糖、グルコオリゴ糖、グアーガム、イヌリン、イソマルトオリゴ糖、ラクトネオテトラオース、ラクトスクロース、ラクツロース、レバン、マルトデキストリン、ミルクオリゴ糖、部分加水分解グアーガム、ペクチンオリゴ糖、難消化性デンプン、老化デンプン、シアロオリゴ糖、シアリルラクトース、ダイズオリゴ糖、糖アルコール、キシロオリゴ糖、それらの加水分解物、又はそれらの組み合わせを含む。
【００５５】
繊維：
本発明による使用のための組成物は繊維を含み得る。繊維は、可溶性繊維、不溶性繊維、又はそれらの組み合わせであり得る。可溶性繊維は、例えば、フラクトオリゴ糖、アカシアガム、イヌリン、寒天、アルギン酸塩、イナゴマメ、カラギーナン、アラビアガム、グアーガム、カラヤガム、ペクチン又はキサンタンガムなどを含み得るが、これらの可溶性繊維は加水分解又は非加水分解の形態である。不溶性繊維は、例えば、エンドウ豆の外側繊維を含み得る。
【００５６】
プロバイオティクス：
本発明による使用のための組成物は１種又は複数種のプロバイオティクスを含み得る。プロバイオティクスの非限定的な例は、アエロコッカス属（Ａｅｒｏｃｏｃｃｕｓ）、アスペルギルス属（Ａｓｐｅｒｇｉｌｌｕｓ）、バクテロイデス属（Ｂａｃｔｅｒｏｉｄｅｓ）、ビフィドバクテリウム属（Ｂｉｆｉｄｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ）、カンジダ属（Ｃａｎｄｉｄａ）、クロストリジウム属（Ｃｌｏｓｔｒｉｄｉｕｍ）、デバリオマイセス属（Ｄｅｂａｒｏｍｙｃｅｓ）、エンテロコッカス属（Ｅｎｔｅｒｏｃｏｃｃｕｓ）、フゾバクテリウム属（Ｆｕｓｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ）、ラクトバチルス属（Ｌａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓ）、ラクトコッカス属（Ｌａｃｔｏｃｏｃｃｕｓ）、ロイコノストック属（Ｌｅｕｃｏｎｏｓｔｏｃ）、メリッソコッカス属（Ｍｅｌｉｓｓｏｃｏｃｃｕｓ）、ミクロコッカス属（Ｍｉｃｒｏｃｏｃｃｕｓ）、ムコール属（Ｍｕｃｏｒ）、オエノコッカス属（Ｏｅｎｏｃｏｃｃｕｓ）、ペディオコッカス属（Ｐｅｄｉｏｃｏｃｃｕｓ）、ペニシリウム属（Ｐｅｎｉｃｉｌｌｉｕｍ）、ペプトストレプトコッカス属（Ｐｅｐｔｏｓｔｒｅｐｏｃｏｃｃｕｓ）、ピキア属（Ｐｉｃｈｉａ）、プロピオニバクテリウム属（Ｐｒｏｐｉｏｎｉｂａｃｔｅｒｉｕｍ）、シュードカテニュレイタム属（Ｐｓｅｕｄｏｃａｔｅｎｕｌａｔｕｍ）、リゾプス属（Ｒｈｉｚｏｐｕｓ）、サッカロミセス属（Ｓａｃｃｈａｒｏｍｙｃｅｓ）、ブドウ球菌属（Ｓｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｕｓ）、連鎖球菌属（Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ）、トルロプシス属（Ｔｏｒｕｌｏｐｓｉｓ）、ワイセラ属（Ｗｅｉｓｓｅｌｌａ）、非複製性微生物、及びそれらの組み合わせを含む。
【００５７】
ミネラル及び微量元素：
本発明による組成物中に含まれ得るミネラル及び微量元素の例は、ミネラル元素及び微量元素、例えば、カルシウム、マグネシウム、ナトリウム、カリウム、リン、銅、亜鉛、鉄、セレン、クロミウム、及びモリブデン、並びにそれらの組み合わせを含む。
【００５８】
ビタミン：
本発明による使用のための組成物はまた、ビタミンＡ、ビタミンＤ、ビタミンＥ、ビタミンＫ、ビタミンＣ、葉酸、チアミン、リボフラビン、ビタミンＢ６、ビタミンＢ１２、ナイアシン、ビオチン、及びパントテン酸から選択される１種又は複数種のさらなるビタミンを含み得る。
【００５９】
量：
本発明による使用のための組成物は、主な生理活性成分であるオレウロペイン、ヒドロキシチロソール、クルクミン及びケルセチンを、各々、１食当たり０．０１ｍｇ〜約１ｇ、好ましくは０．１ｍｇ〜１ｇ、さらに好ましくは１ｍｇ〜約１ｇの量で含み得る。
【００６０】
栄養組成物：
本発明による使用のための組成物は栄養組成物又は医薬組成物であり得、また、ヒト又は動物用のものであり得る。
【００６１】
すなわち、好ましい実施形態において、本発明による使用のための組成物は栄養組成物である。
【００６２】
本発明に関連して使用される「栄養組成物」は、個体への栄養供給源である任意の組成物を意味する。
【００６３】
本発明の栄養製品又は組成物は完全栄養の供給源であり得、又は不完全栄養の供給源であり得る。
【００６４】
本明細書で使用される「完全栄養」は、投与対象の動物のための栄養の唯一の供給源となるのに十分な種類及びレベルの主要栄養素（タンパク質、脂肪、及び炭水化物）及び微量栄養素を含む栄養製品及び組成物を含む。患者は、そのような完全栄養組成物から栄養所要量の１００％を受け取ることができる。
【００６５】
本明細書で使用される「不完全栄養」は、投与対象の動物のための栄養の唯一の供給源となるのに十分なレベルの主要栄養素（タンパク質、脂肪、及び炭水化物）及び微量栄養素を含まない栄養製品及び組成物を含む。部分的又は不完全栄養組成物は栄養補助食品として使用することができる。
【００６６】
本発明の栄養組成物はメディカルフード（ｍｅｄｉｃａｌ  ｆｏｏｄ）であり得る。メディカルフードは、特定の条件の食事管理を実現するように設計された特別なクラスの栄養組成物である。メディカルフードは、１９８３年のオーファンドラッグ法第５項［３６０ｅｅ］（ｂ）（２）（Ｄ）により設定及び規制される一定の基準を満たす。
【００６７】
栄養組成物成分：
タンパク質源：
一実施形態において、本発明による使用のための組成物はタンパク質の供給源を含む。タンパク質源は、動物性タンパク質（例えば、乳タンパク質、食肉タンパク質、又は卵タンパク質）、植物性タンパク質（例えば、ダイズタンパク質、コムギタンパク質、米タンパク質、及びエンドウマメタンパク質）、又はそれらの組み合わせを含む（但し、これらに限定されない）食物タンパク質であり得る。一実施形態において、タンパク質は、乳清、チキン、トウモロコシ、カゼイン、コムギ、アマ、ダイズ、イナゴマメ、エンドウマメ、又はそれらの組み合わせからなる群から選択される。
【００６８】
炭水化物源：
一実施形態において、組成物は炭水化物の供給源を含む。デンプン、ショ糖、乳糖、ブドウ糖、果糖、コーンシロップ固形物、マルトデキストリン、加工デンプン、アミロースデンプン、タピオカデンプン、トウモロコシデンプン、キシリトール、ソルビトール、又はそれらの組み合わせを含む（但し、これらに限定されない）任意の適切な炭水化物が本発明の組成物中で使用され得る。
【００６９】
脂肪源：
一実施形態において、組成物は脂肪の供給源を含む。脂肪の供給源は、任意の適切な脂肪又は脂肪混合物を含み得る。例えば、脂肪源は、植物性脂肪（例えば、オリーブ油、トウモロコシ油、ヒマワリ油、高オレイン酸ヒマワリ油、ナタネ油、キャノーラ油、ヘーゼルナッツ油、ダイズ油、パーム油、ココナッツ油、クロフサスグリ種子油、ボラージ油、レシチン）、及び動物性脂肪（例えば乳脂肪）、又はそれらの組み合わせを含む（但し、これらに限定されない）。脂肪の供給源は、また、上に列挙する脂肪のあまり精製されていない形態（例えば、ポリフェノール含量についてのオリーブ油）であり得る。
【００７０】
香味剤等：
さらに、本発明による使用のための組成物は、天然又は人工の香味料、例えば、バナナ、オレンジ、モモ、パイナップル、ラズベリーなどの果実香味料、又はバニラ、ココア、コーヒーなどの他の植物香味料も含み得る。
【００７１】
栄養組成物の形態：
栄養組成物は、主な生理活性成分及び任意のさらなる生理活性成分以外に、任意選択で、１種又は複数種のタンパク質、炭水化物及び脂肪源、従来の食品添加物（合成又は天然）、例えば、１種又は複数種の酸味料、追加の増粘剤、ｐＨ調整用の緩衝剤又は薬剤、キレート剤、着色剤、乳化剤、賦形剤、香味剤、ミネラル、浸透剤、薬学的に許容される担体、保存剤、安定剤、糖、甘味料、テクスチャライザー、及び／又はビタミンを含む任意の数の任意選択の追加の食品成分を含み得る。任意選択の成分は任意の適切な量で添加することができる。
【００７２】
栄養組成物は任意の適切な形態で提供され得る。
【００７３】
本発明による使用のための組成物が提供され得る栄養組成物の形態の例は、溶液、すぐに消費可能な（ｒｅａｄｙ−ｆｏｒ−ｃｏｎｓｕｍｐｔｉｏｎ）組成物（例えば、レディ・トゥ・ドリンク組成物又はインスタント飲料）、液体食料品、ソフトドリンク、ジュース、スポーツ飲料、乳飲料、ミルクセーキ、ヨーグルト飲料、スープなどを含む。
【００７４】
他の実施形態において、栄養組成物は、濃縮物、粉末、又は顆粒（例えば発泡性顆粒）の形態で提供されてもよく、これらは、水又はミルク若しくはフルーツジュースなど他の液体で希釈され、すぐに消費可能な組成物をもたらす。
【００７５】
さらなる栄養組成物の形態は、焼製品、乳製品、デザート、菓子製品、シリアルバー、及び朝食用シリアルを含む。乳製品の例は、ミルク及びミルク飲料、ヨーグルト及び他の発酵乳製品、アイスクリーム、及びチーズを含む。焼製品の例は、パン、ビスケット、及びケーキを含む。
【００７６】
一実施形態において、本発明による使用のための組成物は、特に犬又は猫用の動物食品として設計された湿式形態、半湿式形態又は乾燥形態、特にビスケットの形態、それらの形態を問わず、多種多様な形態でも利用可能であり得る。
【００７７】
投与経路：
本開示の栄養組成物は、ヒトへの投与のため、特に、胃腸管の任意の部分における投与のための適切な任意の手段により投与され得る。腸内投与、経口投与、及びチューブ又はカテーテルを介した投与のすべてが本開示の対象となる。栄養組成物はまた、経口、直腸、舌下、唇下、口腔内、局所などから選択される手段により投与され得る。
【００７８】
栄養組成物は、任意の公知の形態、例えば、錠剤、カプセル剤、液剤、チュアブル、ソフトゲル、サシェ剤、散剤、シロップ剤、液体懸濁剤、乳剤、及び便利な剤形の液剤で投与され得る。軟カプセルにおいて、活性成分は、脂肪油、パラフィン油、又は液体ポリエチレングリコールなどの適当な液体中に溶解又は懸濁されることが好ましい。任意選択で安定剤が添加され得る。
【００７９】
栄養組成物が経管栄養により投与される場合、栄養組成物は短期又は長期の経管栄養のために使用され得る。
【００８０】
病的状態における軟骨破壊の抑制又は減少：
本発明の組成物は、特に関節軟骨において、軟骨の破壊を減少させることが示されている。
【００８１】
関節軟骨は、関節、例えば、指関節、膝関節、腰関節、顎関節、肘関節に存在する。
【００８２】
すなわち、本発明は、一実施形態において、軟骨破壊を防止又は治療するための使用のための本発明による組成物に関する。換言すれば、本発明は、一実施形態において、軟骨破壊を抑制又は減少させるための使用のための本発明による組成物に関する。
【００８３】
軟骨破壊は、病的状態（慢性又は急性のいずれか）、外傷、又はそれらの組み合わせの結果であり得る。
【００８４】
軟骨破壊は、炎症により支配される病的状態（例えば関節リウマチ）及び炎症がそれほど著明ではない病的状態（例えば変形性関節症）の両方において生じる。
【００８５】
外傷はまた、軟骨破壊過程の開始をもたらし得る。例えば、膝靭帯断裂は膝関節の不安定化を導き、破壊過程が開始される。
【００８６】
本願に関連する外傷は、外部の原因（例えば、落下、又は車に衝突される）により生じる生理学的傷害を指す。それはまた、関節での「摩耗」（“ｗｅａｒ  ａｎｄ  ｔｅａｒ”）と呼ばれ得るものを含む。
【００８７】
しばしば手術で外傷を治療することが好まれるが、一実施形態において、本発明は、外傷が、手術によって、また、本発明の組成物を投与することによっても治療される治療方法に関する。
【００８８】
すなわち、本発明による使用の実施形態は、病的状態又は外傷の結果である軟骨破壊を抑制又は減少させるための使用を含む。
【００８９】
軟骨破壊を伴い、それ故、本発明の組成物が有用であり得る病的状態としては、例えば、変形性関節症、関節リウマチ、痛風及び擬似痛風、敗血症性関節炎、強直性脊椎炎、若年性特発性関節炎、スティル病、乾癬（乾癬性関節炎）、反応性関節炎、エーラス・ダンロス症候群、ヘモクロマトーシス、肝炎、ライム病、炎症性腸疾患（クローン病及び潰瘍性大腸炎を含む）、ヘノッホ−シェーンライン紫斑病、反復性の発熱を伴う高免疫グロブリン血症Ｄ、サルコイドーシス、ＴＮＦ受容体が関連する定期的な症候群、ウェゲナー肉芽腫症（及び多くの他の血管炎症候群）、家族性地中海熱、全身性エリテマトーデスが挙げられる。
【００９０】
好ましい実施形態において、本発明の組成物は、ＲＡ及び／又はＯＡにおける軟骨破壊を抑制又は減少させるための使用のためである。
【００９１】
さらに好ましい実施形態において、本発明の組成物は、ＯＡにおける軟骨破壊を抑制又は減少させるための使用のためである。
【００９２】
非炎症性の病的状態及び外傷における破壊の抑制又は減少：
本発明の組成物は軟骨破壊を防止することができることが本明細書に示されている。
【００９３】
理論に拘束されることは望まないが、炎症はしばしば関節において軟骨破壊をもたらすのに対して、軟骨破壊は、炎症性要素がそれほど著明ではない、そしておそらくは無視できる状況においても生じることが観察されている。
【００９４】
例えば、ＯＡでは、炎症は軟骨の破壊によって二次的に生じるものである。すなわち、炎症は疾患の結果又は症状であり、疾患を開始させる原因又は駆動因子ではない。
【００９５】
例えば、関節への外傷は、例えばＲＡにおいて存在する著明な炎症性要素なしに軟骨破壊を開始させるであろう。外傷は、例えば、靭帯断裂、又は関節（例えば、膝、指）への衝撃外傷を伴い得る。外傷はまた、経時的な小さな損傷の蓄積、いわゆる「摩耗」状態であり得る。
【００９６】
別の例において、ＯＡは、一次的には関節変性疾患であり、炎症性要素はより少ない。
【００９７】
オレウロペインは、抗炎症作用を有する他、軟骨破壊及びコラーゲン分解を防止できることも本明細書に示されている。
【００９８】
すなわち、本発明は一実施形態において、炎症性要素をほとんど又は全く有しない病的状態（例えば外傷又はＯＡ）において生じる軟骨破壊を抑制又は減少させるための、本発明による使用のための組成物に関する。
【００９９】
好ましい実施形態において、本発明は、使用がＯＡにおける軟骨破壊を抑制又は減少させるためのものである、本発明による使用のための組成物に関する。
【０１００】
さらなる実施形態において、本発明は、炎症性要素をほとんど又は全く有しない病的状態（例えば外傷又はＯＡ）において生じる軟骨破壊を抑制又は減少させるための使用のためのオレウロペインに関する。
【０１０１】
コラーゲン分解の抑制又は減少：
オレウロペインは、コラーゲンの分解生成物の出現を減少させることが本明細書に示されている（例えば図８Ａ）。すなわち、オレウロペインは軟骨中のコラーゲン分解を抑制又は減少させるように作用する。
【０１０２】
すなわち、本発明は一実施形態において、軟骨破壊を抑制又は減少させるためのオレウロペインの使用に関する。さらなる実施形態において、本発明は、特に軟骨において、コラーゲン分解を抑制又は減少させるためのオレウロペインの使用に関する。さらなる実施形態は、特に軟骨において、コラーゲンＩＩの分解を抑制又は減少させるためのオレウロペインの使用に関する。
【０１０３】
他の実施形態は、軟骨破壊を抑制又は減少させるための、本明細書に記載される本発明による使用のための組成物に関する。本発明の別の実施形態は、軟骨におけるコラーゲンの分解、例えば、軟骨におけるコラーゲンＩＩの分解を抑制又は減少させるための、本発明による使用のための組成物に関する。
【０１０４】
コラーゲンＩＩの分解は軟骨破壊における重要な事象である。理論に拘束されることを望まないが、関節軟骨からのグルコサミノグリカンの放出は、可逆的であり得る事象であると考えられる。しかし、コラーゲンの分解は、線維ネットワークが損なわれることを意味する。コラーゲンの分解は、グリコサミノグリカン喪失よりも後の事象であり、グリコサミノグリカン喪失ほど可逆的ではないかもしれない。これは、関節におけるコラーゲン、特にコラーゲンＩＩの分解を抑制又は減少させることが非常に重要であることを意味する。
【０１０５】
軟骨破壊を防止及び／又は治療することは、軟骨破壊を抑制及び／又は減少させることを含み、また、コラーゲン分解を抑制及び／又は減少させることを含む。軟骨中の主なコラーゲンはコラーゲンＩＩであり、したがって、コラーゲンの分解の抑制又は減少はコラーゲンＩＩの分解の抑制及び／又は減少を含む。
【０１０６】
本発明の組成物は、軟骨破壊において活性であることが公知であるプロテアーゼを阻害できることが示されている。タンパク質分解活性を抑制又は減少させることによって、軟骨の成分の分解が抑制又は減少される。コラーゲン線維ネットワークの破壊を抑制又は減少させることが特に重要である。これは、このネットワークは軟骨の構造的完全性を保持するために重要であるからである。
【０１０７】
すなわち、一実施形態において、本発明は、軟骨におけるコラーゲンの分解を抑制又は減少させるための、本発明による使用のための組成物に関する。さらなる実施形態において、本発明は、軟骨におけるコラーゲンＩＩの分解を抑制又は減少させるための、本発明による使用のための組成物に関する。
【０１０８】
加齢に伴う可動性の低下の治療又は防止：
本発明による使用のための組成物はタンパク質分解活性を抑制又は減少させることが示されている。
【０１０９】
老化は軟骨破壊を導く。使用したモルモットモデルは、軟骨破壊が加齢とともに自然に発生することを示す。
【０１１０】
すなわち、本発明は、加齢に関連する軟骨破壊を抑制又は減少させるための使用のための本発明の組成物に関する。
【０１１１】
別の実施形態において、本発明は、加齢に関連する軟骨破壊におけるコラーゲンの分解を抑制又は減少させるための使用、例えば、加齢に関連する軟骨におけるコラーゲンＩＩの分解を抑制又は防止するための使用のための本発明の組成物に関する。
【０１１２】
軟骨の破壊は、患者において可動性の低下を導く関節硬直及び関節痛の原因となり得る。
【０１１３】
本発明による使用のための組成物は、他の実施形態において、加齢の間に軟骨機能を含む関節機能を維持又は改善するために使用され得る。
【０１１４】
さらなる実施形態において、本発明は、対象、例えば成人又は老年期哺乳動物において可動性を改善するための、本発明による使用のための組成物に関する。
【０１１５】
すなわち、好ましい実施形態において、本発明による組成物は、例えば、変形性関節症を防止することによって、及び／又は軟骨破壊を抑制又は減少させることによって、個体の活動性及び／又は可動性を改善するための使用のためのものであり得る。
【０１１６】
他の好ましい実施形態は、軟骨破壊を防止して健康な関節を維持するため、又は可動性を維持又は改善するためのものである、本発明による使用のための組成物に関する。
【０１１７】
さらなる実施形態において、本発明の組成物は、軟骨の状態を維持するための使用のためのものであり得る。
【０１１８】
特定の組み合わせ（オレウロペイン＋クルクミン＋ケルセチン；及びヒドロキシチロソール＋クルクミン＋ケルセチン）：
オレウロペイン、クルクミン及びケルセチンを含む本発明による組成物、又はヒドロキシチロソール、クルクミン及びケルセチンを含む本発明による組成物の両方が、軟骨破壊に関連するプロテアーゼを強く下方制御する。
【０１１９】
特に疾患を模倣する状況において、これらの２つの組み合わせは、軟骨破壊に関連するプロテアーゼを下方制御するのに極めて有効である。
【０１２０】
すなわち、本発明は、一実施形態において、軟骨破壊の治療又は防止における使用のためのこれらの組成物に関する。
【０１２１】
例えば、これらの組成物はＯＡの防止又は治療のために有用であり得る。
【０１２２】
炎症及び軟骨破壊：
オレウロペイン及び／又はヒドロキシチロソールと、さらにクルクミン及びケルセチンのうちの少なくとも１種と、を含む本発明の組成物は、軟骨破壊において活性であるプロテアーゼを下方制御し、また、炎症マーカーを下方制御することが示されている。
【０１２３】
すなわち、本発明は、別の実施形態において、軟骨破壊を抑制又は減少させるため、及び炎症を抑制又は減少させるための使用のためのこれらの組成物に関する。
【０１２４】
オレウロペイン、クルクミン及びケルセチンを含む本発明による組成物、又はヒドロキシチロソール、クルクミン及びケルセチンを含む本発明による組成物の両方が、軟骨破壊に関連するプロテアーゼを強く下方制御し、さらに炎症マーカーを下方制御する。
【０１２５】
すなわち、本発明は、一実施形態において、軟骨破壊及び炎症の治療又は防止における使用のためのこれらの組成物に関する。
【０１２６】
例えば、これらの組成物はＲＡの治療又は防止において有用であり得る。
【０１２７】
関節疾患：
さらなる実施形態において、本発明は、オレウロペイン及び／又はヒドロキシチロソールを含み、さらに、クルクミン、ケルセチンからなる群から選択される少なくとも１種を含む、本発明による使用のための組成物に関する。
【０１２８】
本発明のこれらの組成物は、軟骨破壊に関連するタンパク質分解酵素を下方制御し、また、炎症マーカーであるＣＯＸ２に対する下方制御効果を有することが示されている。
【０１２９】
すなわち、本発明の一実施形態は、関節疾患の防止又は治療における使用のための、本発明の前記組成物に関する。前記関節疾患は、任意の関節疾患、例えば著明な炎症性要素を有する関節疾患（例えばＲＡ）又は例えば変形性関節疾患（例えばＯＡ）であり得る。
【０１３０】
標的集団：
本発明による使用のための組成物の標的集団は、軟骨破壊を呈する任意の哺乳動物であり得る。これは、例えば、任意の哺乳動物は、本明細書で言及される軟骨破壊を含む病的状態のうちの１種又は複数種に罹患するからである。軟骨破壊は、視覚的手段、例えばＸ線撮影などにより検出され得る。あるいは、軟骨の破壊生成物の検出は体液中で検出され得る。例えば、１種又は複数種のコラーゲンＩＩエピトープ（Ｃｏｌ２−１、Ｃｏｌ２−１  ＮＯ、ＣＴＸ−ＩＩなど）は、血漿サンプル又は尿サンプルなどのサンプル中で検出され得る。
【０１３１】
別の標的集団は、軟骨破壊をまだ呈さないが、軟骨破壊についてのリスク、例えば、ＯＡ、ＲＡ、又は本明細書で言及される軟骨破壊を含む病的状態のいずれかについてのリスクのある任意の哺乳動物であり得る。
【０１３２】
本発明の特定の実施形態は、例えば、変形性関節症を防止又は治療することによって、及び／又は老齢又は高齢の個体における軟骨破壊を抑制又は減少させることによって、個体の活動性及び／又は可動性を改善するための使用のための組成物に関する。
【０１３３】
さらなる実施形態において、本発明による使用のための組成物は、哺乳動物（例えばヒト）又はペットにおける使用のためのものであり得る。ペットの例はネコ、イヌ及びウマを含む。
【０１３４】
本発明は多くの種々の年齢群において有用であり得るが、好ましい実施形態において、本発明による可動性を増加させるための使用のための組成物は、老齢集団、特に健康な老齢及び／又は高齢哺乳動物を標的とする。
【０１３５】
本発明の栄養組成物を製造する方法：
本発明は、さらなる態様において、本発明による使用のための栄養組成物を製造する方法であって、
栄養組成物用の成分とオレウロペインを用意し、栄養組成物がオレウロペインを含むように混合するステップ
を含む方法に関する
【０１３６】
さらなる実施形態において、本発明による使用のための栄養組成物を製造する方法であって、
栄養組成物用の１種又は複数種の成分、オレウロペイン及び／又はヒドロキシチロソール、及び任意選択でさらにクルクミン及びケルセチンのうちの１種又は複数種を用意し、それらを混合するステップ
を含む方法に関する。
【０１３７】
使用のための医薬組成物：
さらなる実施形態において、本発明は、本発明による軟骨破壊を抑制又は防止するための使用のための組成物であって、医薬組成物である組成物に関する。
【０１３８】
医薬組成物は、医療においてヒト又は動物における疾患を防止、診断、緩和、治療し又は治癒させるために身体の表面又は内部で物質が使用される、栄養組成物以外の組成物を意味する。本発明により、医薬組成物は軟骨破壊を抑制又は減少させるために使用され得る。
【０１３９】
医薬組成物はヒトによる使用のためのものであり得る。あるいは、例えば、イヌ、ネコ、又はウマ、特にサラブレッド馬に適した動物用組成物であり得る。
【０１４０】
好ましい一実施形態において、本発明の医薬組成物はオレウロペインを含む。
【０１４１】
別の好ましい実施形態において、本発明の医薬組成物はオレウロペイン及び／又はヒドロキシチロソールを含む。
【０１４２】
本発明は、さらに、本発明の組成物の使用として本明細書において記載される、本発明による医薬組成物の使用に関する。
【０１４３】
本発明による使用のための医薬組成物は、薬学的に許容される賦形剤により構成される群から選択される少なくとも１種の賦形剤と組み合わせて、オレウロペイン、又はオレウロペイン及び／又はヒドロキシチロソールのうちの１種若しくは複数種、又はさらにクルクミン及び／又はケルセチンを含む。本発明による医薬組成物の調製のための手順は、例えば、ハンドブック  Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ’ｓ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｓｃｉｅｎｃｅｓ，  Ｍｉｄ．Ｐｕｂｌｉｓｈｉｎｇ  Ｃｏ，  Ｅａｓｔｏｎ，Ｐａ．，ＵＳＡにおいて当業者が容易に見出すことができる。生理学的に許容される賦形剤、溶剤、及びアジュバントはまた、Ｈａｎｄｂｏｏｋ  ｏｆ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｅｘｃｉｐｉｅｎｔｓ，  Ｓｅｃｏｎｄ  ｅｄｉｔｉｏｎ，  Ａｍｅｒｉｃａｎ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ａｓｓｏｃｉａｔｉｏｎ，１９９４というタイトルのハンドブックに記載されている。本発明による医薬組成物を製剤化するために、当業者は好都合にも欧州薬局方又は米国薬局方（ＵＳＰ）の最新版を参照することができるであろう。当業者は、特に、好都合にも欧州薬局方第４版「２００２」又はアメリカ薬局方（米国薬局方）のＵＳＰ２５−ＮＦ２０版を参照することができるであろう。
【０１４４】
有利なことに、上で定義したような医薬組成物は経口、非経口、又は静脈内投与に適している。本発明による使用のための医薬組成物が少なくとも１種の薬学的又は生理学的に許容される賦形剤を含む場合、医薬組成物は特に、経口経路による組成物の投与に適した賦形剤、又は非経口経路による組成物の投与に適した賦形剤中にある。
【０１４５】
本発明による使用のための医薬組成物は、固体又は液体の形態で区別なしに利用可能である。経口投与のためには、錠剤、カプセル、又はゼラチンカプセルの形態における固体医薬組成物が好ましいであろう。
【０１４６】
液体形態で、水性若しくは非水性懸濁液の形態における、又は油中水型若しくは水中油型エマルジョンの形態における医薬組成物が好ましい。
【０１４７】
固体の医薬形態は、溶剤、アジュバント又は賦形剤として、少なくとも１種の希釈剤、１種の香味料、１種の可溶化剤、１種の滑沢剤、１種の懸濁剤、１種の結合剤、１種の崩壊剤、及び１種の封入剤を含む。そのような化合物は、例えば、炭酸マグネシウム、ステアリン酸マグネシウム、タルク、ラクトース、ペクチン、デキストリン、デンプン、ゼラチン、セルロース系材料、ココアバターなどである。液体形態の組成物は、水を、場合によりプロピレングリコール又はポリエチレングリコールとの混合物として含んでもよく、また、場合により着色剤、香味料、安定剤、及び増粘剤を含んでもよい。
【０１４８】
治療の方法：
本発明はまた、軟骨破壊、例えば、軟骨破壊が生じる病的状態、又は軟骨破壊に関連する外傷の防止又は治療の方法であって、それを必要とする個体に有効量の本方法による組成物を投与することを含む方法に関する。例えば、本方法は有効量のオレウロペインの投与を含む。他の例において、本発明の方法は、有効量の、オレウロペイン及び／又はヒドロキシチロソールのうちの１種又は複数種を投与することを含む。好ましい実施形態において、治療方法は、オレウロペイン及び／又はヒドロキシチロソールと、１種又は複数種のさらなるポリフェノール、例えば、クルクミン、ケルセチン及びルチンからなる群から選択される１種又は複数種のさらなるポリフェノールと、を含む有効量の本発明による使用のための組成物を投与することを含む。
【０１４９】
本明細書で使用される「有効量」は、欠乏を防止し、個体における疾患又は医学的状態を治療し、あるいはより一般的には、症状を低下させ、疾患の進行を管理し、又は個体に栄養学的、生理学的若しくは医学的利益をもたらす量である。
【０１５０】
治療効果を達成するために要求される本発明による組成物の有効量は、当然、特定の組成物、投与の経路、レシピエントの年齢及び状態、並びに治療されている特定の障害又は疾患によって変動し得る。
【０１５１】
本発明はさらに、軟骨破壊を伴う病的状態（例えばＯＡ又はＲＡ）を防止又は治療する、軟骨破壊を抑制又は減少させる、軟骨におけるコラーゲンの分解を抑制又は減少させる、又は軟骨におけるコラーゲンＩＩの分解を抑制又は減少させる方法であって、個体に有効量の本発明による使用のための組成物を投与することを含む方法を提供する。
【０１５２】
一実施形態において、本発明による治療方法は変形性関節症の防止又は治療に関する。
【０１５３】
本発明による治療方法は、ヒトなどの哺乳動物、又はペット、例えば、イヌ、ネコ及び／又はウマにおけるものであり得る。
【０１５４】
特定の実施形態において、本発明による治療方法において投与される本発明の組成物は、１種又は複数種の本発明の栄養組成物及び／又は本発明の医薬組成物であり得る。
【０１５５】
開示の組み合わせ：
本発明の態様の１つの状況において記載される実施形態及び特徴は本発明の他の態様にも適用されることに留意されたい。
【０１５６】
本発明による使用のための組成物は、本明細書において、異なるパラメータ、例えば、成分、栄養組成物の形態、使用、標的集団などにおいて記載される。本発明による使用のための組成物のパラメータの１つの状況において記載される実施形態及び特徴はまた、明示的な別段の記述がない限り、別のパラメータの状況において記載される他の実施形態及び特徴と組み合わせてもよい。
【０１５７】
本願で引用されるすべての特許及び非特許参考文献は、その全体が参照により本明細書に組み入れられる。
【０１５８】
本発明は、以下の非限定的な実施例においてさらに詳細に説明される。
【実施例】
【０１５９】
実施例１（インビトロ試験：  アルギン酸ビーズにおけるウシ初代軟骨細胞）：
材料及び方法：
オレウロペイン：  十分に精製されたオレウロペイン（＞９８％）をＥｘｔｒａｓｙｎｔｈｅｓｅ（Ｇｅｎａｙ，Ｆｒａｎｃｅ）から購入した。
ヒドロキシチロソール：  十分に精製されたヒドロキシチロソール（＞９８％）をＥｘｔｒａｓｙｎｔｈｅｓｅ（Ｇｅｎａｙ，Ｆｒａｎｃｅ）から購入した。オレウロペインの代謝産物。
ケルセチン：  十分に精製されたケルセチン（＞９７％）をＨＷＩ  Ａｎａｌｙｔｉｋ  ＧｍｂＨ（Ｒｕｅｌｚｈｅｉｍ，Ｇｅｒｍａｎｙ）から購入した。ルチンの代謝産物。
ルチン：  十分に精製されたルチン（＞９４％）をＳｉｇｍａ−Ａｌｄｒｉｃｈ（Ｂｕｃｈｓ，Ｓｗｉｔｚｅｒｌａｎｄ）から購入した。
クルクミン：  十分に精製されたルチン（＞７０％）をＳｉｇｍａ−Ａｌｄｒｉｃｈ（Ｂｕｃｈｓ，Ｓｗｉｔｚｅｒｌａｎｄ）から購入した。
【０１６０】
細胞培養：
若牛の足を洗浄し、土を除去した。皮膚を足から除去した。関節を横方向に開いた。関節内靭帯を切除した。開いた関節を、リン酸緩衝生理食塩水で洗浄した。外科用メスの刃で軟骨の全層スライスを切り開き、１０ｍＭ  ｈｅｐｅｓ及び１％ペニシリン−ストレプトマイシンを含むＤＭＥＭ高グルコース中に回収した。軟骨の切片を１０ｍＭ  ｈｅｐｅｓ及び１％ペニシリン−ストレプトマイシンを含むＤＭＥＭ高グルコース中で洗浄した。
【０１６１】
次いで、軟骨を、０．５ｍｇ／ｍｌのヒアルロニダーゼにより３０分間、１．０ｍｇ／ｍｌのプロナーゼＥにより６０分間、１．０ｍｇ／ｍｌのコラゲナーゼにより一晩、ゆっくりと撹拌しながら連続的に消化させた。
【０１６２】
酵素インキュベーション後、細胞懸濁液を、７０μｍセルストレーナーを通して濾過し、細胞クラスターを分離し、組織片を除去した。細胞懸濁液を遠心分離し、細胞を沈殿させた。
【０１６３】
培地を捨て、細胞沈殿物を遠心分離により洗浄し、１０ｍＭ  ｈｅｐｅｓを含む０．９％塩化ナトリウム溶液中に再懸濁した。
【０１６４】
細胞を、１．２％アルギン酸塩を含む０．９％ＮａＣｌ、１０ｍＭ  ＨＥＰＥＳ溶液中に懸濁し、１ｍｌ当たり４．３×１０６細胞の密度を得た。懸濁液は、ニードルに介した滴下によって１０２ｍＭ  ＣａＣｌ２溶液中に投入した。１０分後、ビーズを重合させ、０．９％ＮａＣｌ、１０ｍＭ  ＨＥＰＥＳで洗浄した。１０個のビーズを、１ｍｌの完全培地（２ｍＭ  Ｌ−グルタミン、０．５ｍｇ／ｍｌアスコルビン酸、０．２ｍｇ／ｍｌ  Ｌ−プロリン、及び１０％ウシ胎児血清を含むＤＭＥＭ高グルコース）を含む２４ウェル培養プレートの各ウェルに置いた。細胞を２日間培地中に維持し、次いで、インターロイキン１アルファの存在下又は非存在下、１．５μＭ  オレウロペイン、１．５μＭ  ヒドロキシチロソール、１．５μＭ  ケルセチン、１．５μＭ  クルクミン、１．５μＭ  オレウロペイン＋１．５μＭ  ケルセチン、１．５μＭ  オレウロペイン＋１．５μＭ  クルクミン、１．５μＭ  ヒドロキシチロソール＋１．５μＭ  ケルセチン、１．５μＭ  ヒドロキシチロソール＋１．５μＭ  クルクミン、１．５μＭ  ケルセチン＋１．５μＭ  クルクミン、１．５μＭ  オレウロペイン＋１．５μＭ  ケルセチン＋１．５μＭ  クルクミン、１．５μＭ  ヒドロキシチロソール＋１．５μＭ  ケルセチン＋１．５μＭ  クルクミンの処理液中に維持した。処理液はジメチルスルホキシド（ＤＭＳＯ）に溶解した。ＤＭＳＯの最終濃度は０．１％であった。細胞は３日間処理液に曝露した。
【０１６５】
処理の終了時、ビーズを洗浄し、０．１Ｍクエン酸ナトリウム＋０．１５Ｍ塩化ナトリウム溶液中に再懸濁した。懸濁液を遠心分離し、細胞を含む沈殿物を全ＲＮＡ抽出のために採取した。
【０１６６】
遺伝子発現：
全ＲＮＡを４０個のビーズのプールから単離し、ＱｉａｇｅｎからのＲＮｅａｓｙキットを使用して単離した。ｃＤＮＡはＴａｋａｒａからのＰｒｉｍｅｓｃｒｉｐｔ  １ｓｔ  ｓｔｒａｎｄ  ｃＤＮＡ  Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓキットを用いて、ＲＮＡの逆転写により得た。ＡＤＡＭＴＳ−５、ＣＯＸ−２、ＭＭＰ−１３、及びＧＡＰＤＨのｍＲＮＡ発現を、リアルタイムＰＣＲ（ＳＹＢＲ  Ｇｒｅｅｎ）において定量化した。
【０１６７】
プライマー（Ｂｏｓ  Ｔａｕｒｕｓから入手）は下記表１に記載の通りである。
表１（プライマー）：
【表１】
2019110899.tif 000002
【０１６８】
結果：
図１〜３は、３日間の培養後のＧＡＰＤＨ  ｍＲＮＡ発現量により標準化されたＡＤＡＭＴＳ−５、ＣＯＸ−２及びＭＭＰ−１３のｍＲＮＡ発現量を示す。データは、陰性対照（完全培地中で培養された細胞）と比較した遺伝子発現量の変化倍率（ｆｏｌｄ  ｃｈａｎｇｅ）として表した。結果は２−ΔΔＣＴ法に従って算出した。
ＣＴＬ−：  陰性対照
ＯＬＰ：  オレウロペイン
ＨＴＹ：  ヒドロキシチロソール
ＱＲＣ：  ケルセチン
ＣＵＲ：  クルクミン
ＩＬ１ａ：  インターロイキン１アルファ  １０ｎｇ／ｍｌ
【０１６９】
データは中央値±ＳＥ中央値として表した（各回３連の２回の実験）。統計は、クラスカル・ウォリス検定、それに続くマンホイットニーＵ検定（両側）によって行った。＊ｐ＜０．０５；＊＊＜０．０１；＊＊＊ｐ＜０．００１対陰性対照（ＣＴＬ−）又はインターロイキン１アルファ（ＩＬ１ａ）。
【０１７０】
図１Ａは、細胞の正常状態を模倣するＩＬ１ａの非存在状態におけるＧＡＰＤＨに対するＡＤＡＭＴＳ−５  ｍＲＮＡの相対発現量を示す。各条件はＣＴＬ−と統計学的に比較した。
【０１７１】
図１Ｂは、細胞の疾患状態を模倣するＩＬ１ａの存在状態におけるＧＡＰＤＨに対するＡＤＡＭＴＳ−５  ｍＲＮＡの相対発現量を示す。ＣＴＬ−と比較されたＩＬ１ａ（実験の検証）を除いて、各条件はＩＬ１ａと統計学的に比較した。
【０１７２】
正常状態では、ＯＬＰ、ＨＴＹ、ＱＲＣ又はＣＵＲの添加がＡＤＡＭＴＳ−５（軟骨破壊のマーカー）の発現を減少させる。これらの異なるポリフェノールの組み合わせは相乗効果を有する。
【０１７３】
疾患状態では、ＯＬＰ、ＨＴＹ、ＱＲＣ又はＣＵＲの添加が、ＩＬ−１アルファにより刺激された軟骨細胞を相殺し、ＡＤＡＭＴＳ−５の発現を減少させることができる。これらの異なるポリフェノールの組み合わせは相乗効果を有する。
【０１７４】
図２Ａは、細胞の正常状態を模倣するＩＬ１ａの非存在状態におけるＧＡＰＤＨに対するＣＯＸ−２  ｍＲＮＡの相対発現量を示す。各条件はＣＴＬ−と統計学的に比較した。
【０１７５】
図２Ｂは、細胞の疾患状態を模倣するＩＬ１ａの存在状態におけるＧＡＰＤＨに対するＣＯＸ−２  ｍＲＮＡの相対発現量を示す。ＣＴＬ−と比較されたＩＬ１ａ（実験の検証）を除いて、各条件はＩＬ１ａと統計学的に比較した。
【０１７６】
正常状態では、ＱＲＣの添加がＣＯＸ−２（炎症状態のマーカー）の発現を低下させることができる。ＯＬＰ、ＨＴＹ、ＱＲＣ又はＣＵＲの２種又は３種の組み合わせは相乗効果を有する。
【０１７７】
疾患状態では、ＱＲＣ又はＣＵＲの添加が、ＩＬ−１アルファにより刺激された細胞を相殺し、ＣＯＸ−２の発現を減少させることができる。ＯＬＰ、ＨＴＹ、ＱＲＣ又はＣＵＲの２種又は３種の組み合わせは相乗効果を有する。
【０１７８】
図３Ａは、細胞の正常状態を模倣するＩＬ１ａの非存在状態におけるＧＡＰＤＨに対するＭＭＰ−１３  ｍＲＮＡの相対発現量を示す。各条件はＣＴＬ−と統計学的に比較した。
【０１７９】
図３Ｂは、細胞の疾患状態を模倣するＩＬ１ａの存在状態におけるＧＡＰＤＨに対するＭＭＰ−１３  ｍＲＮＡの相対発現量を示す。ＣＴＬ−と比較されたＩＬ１ａ（実験の検証）を除いて、各条件はＩＬ１ａと統計学的に比較した。
【０１８０】
正常状態では、ＯＬＰ、ＨＴＹ、ＱＲＣ又はＣＵＲの単独又は組み合わせでの添加がＭＭＰ−１３（細胞外マトリックスの分解に関与、ＯＡにおける関節軟骨代謝回転に関連）の発現を減少させる。
【０１８１】
疾患状態では、ＯＬＰ、ＨＴＹ、ＱＲＣ又はＣＵＲの添加が、ＩＬ−１アルファにより刺激された軟骨細胞を相殺し、ＭＭＰ−１３の発現を減少させることができる。ＯＬＰ、ＨＴＹ、ＱＲＣ又はＣＵＲの３種の組み合わせは相乗効果を有する。
【０１８２】
実施例２（インビボ試験：  Ｈａｒｔｌｅｙモルモットにおける変形性関節症の自然発生）：
動物及び処置：
３週齢の６５匹の雄ＨａｒｔｌｅｙモルモットをＣｈａｒｌｅｓ  Ｒｉｖｅｒ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓ（Ｐａｒｉｓ）から入手した。動物を平底ケージにおいて１ケージ当たり５匹を収容し、ビタミンＣ（１ｍｇ／ｇ）及びビタミンＤ３（３．４ＩＵ／ｇ）を含む標準モルモット食、並びに水を不断給餌した。すべての動物を、オレウロペイン、ルチン、及び／又はクルクミンの投与前に、１週間にわたって収容条件に順応させた。ＰＶＣパイプをケージに加えて収容条件を改善し、ストレスを最小限にした。
【０１８３】
１週間後、４週齢の雄Ｈａｒｔｌｅｙモルモットを実験群において無作為化した。
Ａ群（ｎ＝１５）には、３１週間、１日用量のオレウロペインが与えられた。
Ｂ群（ｎ＝１５）には、３１週間、標準食が与えられた（対照）。
Ｃ群（ｎ＝１５）には、３１週間、１日用量のルチンが与えられた。
Ｄ群（ｎ＝１５）には、３１〜５週間、１日用量のルチン及びクルクミンが与えられた。
Ｅ群（ｎ＝５、参照群）は、組み入れ時に安楽死させ、いずれの介入も受けなかった。
【０１８４】
オレウロペイン、ルチン及びクルクミンを食事に組み込んだ。動物を毎週秤量し、識別はマイクロチップによりなされた。食物摂取量は追加の及び残りの食物の毎日の量を秤量することによって、Ｗ９、Ｗ１５、Ｗ２１、Ｗ２６及びＷ３４に制御した。
【０１８５】
血液採取：
６時間の断食後の血液を、午前中に、ケタミン／キシラジンによる鎮静作用下、耳の表在静脈で得た。これを、６週間毎に、すなわちＷ４（＝Ｔ０）、Ｗ１０、Ｗ１６、Ｗ２２及びＷ２８に行った。Ｗ３５において、全身麻酔下、安楽死の直前に心臓内穿刺により血液を採取した。
【０１８６】
安楽死：
秤量後、動物の安楽死をペントバルビタールナトリウム１００ｍｇ／ｋｇの心臓内血液穿刺後に実施した。主な重要臓器が観察され、異常（心臓、消化管及び尿管、副腎）が検出された。肝臓及び副腎を秤量した。各動物からの右膝関節を４％緩衝パラホルムアルデヒド中で２４時間固定し、続いてパラフィン包埋の前、４℃、４時間のＨＣｌ酸（ＤＣ２，Ｌａｂｏｎｏｒｄ，ベルギー）中での脱灰が行われる。
【０１８７】
組織学的検査：
ＯＡＲＳＩにより推奨されるように、パラフィンを包埋した右膝を、Ｃｕｓｈｉｎ面に従って、メニスカスによりカバーされていない中央領域において、６μｍ切片にミクロトーム（Ｌｅｉｃａ）で切開した。
【０１８８】
２００μｍ間隔の３つの切片を、ヘマトキシリン、ファストグリーン、及びサフラニンＯで染色し、１つの補足的な中央切片をトルイジンブルーで染色した。
【０１８９】
切片の各区画（脛骨中央値、脛骨横、大腿中央値、及び大腿横）をＯＡＲＳＩ推奨事項に従って、経験を積んだ２人の専門家により盲検でスコア化し、グローバルスコアを評価し、各区画のスコアを加えた。
【０１９０】
結果を図４及び５に示す。
【０１９１】
ＰＧＥ２、Ｃｏｌｌ２−１ＮＯ２、及びＦｉｂ３−１アッセイ：
ＰＧＥ２を、競合ＥＬＩＳＡキット（Ａｒｂｏｒ  Ａｓｓａｙｓ，ＵＳＡ）を使用してモルモットの血清中で測定した。
【０１９２】
結果を図６に示す。オレウロペイン処置によって、３５週間の処置後に血漿中ＰＧＥ２レベルを減少させることができる。
【０１９３】
血漿中のＰＧＥ２レベルはＯＡスコアと正の相関を示し得る。これにより、ＰＧＥ２がモルモットモデルにおけるＯＡの発症及び進行の関連バイオマーカーであり、処置の有効性を評価するためのバイオマーカーであることが確認される。ニトロシル化エピトープＣｏｌｌ２−１ＮＯ２（ＩＩ型コラーゲンのヘリカルドメインに局在化）を、ポリクローナルウサギ抗血清（Ｄ３７，Ａｒｔｉａｌｉｓ，ベルギー）を用いた３連の競合ＥＬＩＳＡによってモルモット血清中で定量化した。Ｃｏｌｌ２−１ＮＯ２免疫アッセイは高い特異性及び親和性でニトロ化アミノ酸配列を定量化した。
【０１９４】
結果を図７及び８に示す。オレウロペイン、ルチン、及びルチン＋クルクミン処置により、血漿中のｃｏｌｌ２−１  ＮＯ２のレベルにより測定されるコラーゲン分解を減少させることができる。ｃｏｌｌ２−１  ＮＯ２の量はＯＡスコアと正の相関を示す。これにより、Ｃｏｌｌ−２−１  ＮＯ２がモルモットモデルにおけるＯＡの発症及び進行の関連バイオマーカーであり、処置の有効性を評価するためのバイオマーカーであることが確認される。
【０１９５】
Ｆｉｂ３−１は、ＯＡ患者の血清中で増加しているフィブリン３の断片である。Ｆｉｂ３−１を、ポリクローナルウサギ抗血清（ＡＳ８８，Ａｒｔｉａｌｉｓ，ベルギー）を用いた３連の競合ＥＬＩＳＡによってモルモット血清中で定量化した。
【０１９６】
結果を図９及び１０に示す。ルチン＋クルクミン処置は血漿中のフィブリン３−１レベルを減少させることができる。血漿中のフィブリン３−１レベルはＯＡスコアと正の相関を示し得る。これにより、ｆｉｂ３−１がモルモットモデルにおけるＯＡの発症及び進行の関連バイオマーカーであり、処置の有効性を評価するためのバイオマーカーであることが確認される。
【０１９７】
アッセイ内及びアッセイ間ＣＶは１０％未満であり、希釈曲線は両方のアッセイについての標準曲線と平行であった。
【０１９８】
結果：
結果（平均±ＳＤ）を各パラメータについて算出した。正規性検定に続き、ダネットのポスト検定又はピアソン相関を用いたパラメトリックＡＮＯＶＡをすべての実験で実施した。＊ｐ＜０．０５；＊＊＜０．０１；＊＊＊ｐ＜０．００１。
【０１９９】
対照  Ｗ４  Ｅ群（ｎ＝５、参照群）の動物は、組み入れ時に安楽死させ、いずれの介入も受けなかった。
対照  Ｗ３５  Ｂ群（ｎ＝１５）には、３１週間、標準食が与えられた。
Ａ  Ｗ３５  Ａ群（ｎ＝１５）には、３１週間、１日用量のオレウロペインが与えられた。
Ｃ  Ｗ３５  Ｃ群（ｎ＝１５）には、３１週間、１日用量のルチンが与えられた。
Ｄ  Ｗ３５  Ｄ群（ｎ＝１５）には、３１週間、１日用量のルチン及びクルクミンが与えられた。
【０２００】
オレウロペイン、ルチン、及びルチン＋クルクミン処置は、異なる機構によりモルモットにおけるＯＡスコアを減少させることができる。
【図１Ａ】
2019110899.tif 000003
【図１Ｂ】
2019110899.tif 000004
【図２Ａ】
2019110899.tif 000005
【図２Ｂ】
2019110899.tif 000006
【図３Ａ】
2019110899.tif 000007
【図３Ｂ】
2019110899.tif 000008
【図４−１】
2019110899.tif 000009
【図４−２】
2019110899.tif 000010
【図５】
2019110899.tif 000011
【図６Ａ】
2019110899.tif 000012
【図６Ｂ】
2019110899.tif 000013
【図７】
2019110899.tif 000014
【図８Ａ】
2019110899.tif 000015
【図８Ｂ】
2019110899.tif 000016
【図９】
2019110899.tif 000017
【図１０Ａ】
2019110899.tif 000018
【図１０Ｂ】
2019110899.tif 000019
【配列表】
2019110899000001.app
【手続補正書】
【提出日】平成31年2月7日(2019.2.7)
【手続補正１】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】０１５８
【補正方法】変更
【補正の内容】
【０１５８】
本発明の実施形態は例えば下記実施形態１〜１５を含む。
実施形態１：
軟骨破壊を防止又は治療するための使用のための、オレウロペイン及び／又はヒドロキシチロソールを含む組成物。
実施形態２：
クルクミンをさらに含む、実施形態１に記載の使用のための組成物。
実施形態３：
ケルセチンをさらに含む、実施形態１又は２に記載の使用のための組成物。
実施形態４：
抗酸化剤、抗炎症化合物、グリコサミノグリカン、プレバイオティクス、繊維、プロバイオティクス、脂肪酸、ミネラル、微量元素、及び／又はビタミンからなる群から選択される少なくとも１種の化合物をさらに含む、実施形態１〜３のいずれかに記載の使用のための組成物。
実施形態５：
少なくとも１種の抗炎症化合物をさらに含む、実施形態４に記載の使用のための組成物。
実施形態６：
前記少なくとも１種の抗炎症化合物は植物抽出物である、実施形態４又は５に記載の使用のための組成物。
実施形態７：
前記植物抽出物は、デビルズクロー（ハルパゴフィツム・プロクムベンス（Ｈａｒｐａｇｏｐｈｙｔｕｍ  ｐｒｏｃｕｍｂｅｎｓ））、ロスマリヌス・オフィキナリス（Ｒｏｓｍａｒｉｎｕｓ  ｏｆｆｉｃｉｎａｌｉｓ）、ヒソップ、ショウガ（ジンギベル・オフィキナレ（Ｚｉｎｇｉｂｅｒ  ｏｆｆｉｃｉｎａｌｅ））、ウコン（クルクマ・ロンガ（Ｃｕｒｃｕｍａ  ｌｏｎｇａ））、アルニカモンタナ（Ａｒｎｉｃａ  ｍｏｎｔａｎａ）、ヤナギの樹皮、ザクロ（プニカ・グラナトゥム（Ｐｕｎｉｃａ  ｇｒａｎａｔｕｍ））、緑茶（カメリア・シネンシス（Ｃａｍｅｌｌｉａ  ｓｉｎｅｎｓｉｓ））、キャッツクロー（ウンカリア・トメトサ（Ｕｎｃａｒｉａ  ｔｏｍｅｔｏｓａ）及びウンカリア・ギアネンシス（Ｕｎｃａｒｉａ  ｇｕｉａｎｅｎｓｉｓ））、インディアン・オリバナム（ボスウェリア・セラータ（Ｂｏｓｗｅｌｉａ  ｓｅｒｒａｔａ））、及びパイナップルブロメライン（アナナス・コモスス（Ａｎａｎａｓ  ｃｏｍｏｓｕｓ））、ブラックシード（ニゲラ・サティバ（Ｎｉｇｅｌｌａ  ｓａｔｉｖｅ））、セイヨウオトギリソウ、ヒペルフォリン、ゴールデンシール、ジャーマンカモミール（マトリカリア・レクティタ（Ｍａｔｒｉｃａｒｉａ  ｒｅｃｕｔｉｔａ））からなる群から選択される１種又は複数種の植物からの抽出物である、実施形態６に記載の使用のための組成物。
実施形態８：
少なくとも１種の抗酸化剤をさらに含む、実施形態４〜７のいずれかに記載の使用のための組成物。
実施形態９：
前記少なくとも１種の抗酸化剤は、アスタキサンチン、カロテノイド、コエンザイムＱ１０（「ＣｏＱ１０」）、フラボノイド、グルタチオン、ゴジ（クコ）、ヘスペリジン、ラクトウルフベリー、リグナン、ルテイン、リコピン、ポリフェノール、セレン、ビタミンＡ、ビタミンＣ、ビタミンＥ、ゼアキサンチンからなる群から選択される、実施形態８に記載の使用のための組成物。
実施形態１０：
栄養組成物である、実施形態１〜９のいずれかに記載の使用のための組成物。
実施形態１１：
医薬組成物である、実施形態１〜９のいずれかに記載の使用のための組成物。
実施形態１２：
前記栄養組成物はメディカルフードである、実施形態１０に記載の使用のための組成物。
実施形態１３：
前記使用は軟骨におけるコラーゲンの分解を抑制又は減少させるためのものである、実施形態１〜１２のいずれかに記載の使用のための組成物。
実施形態１４：
実施形態１〜１３のいずれかに記載の使用のための栄養組成物を製造する方法であって、栄養組成物用の１種又は複数種の成分、オレウロペイン及び／又はヒドロキシチロソール、及び任意選択でさらにクルクミン及びケルセチンのうちの１種又は複数種を用意するステップと、それらを混合するステップと、を含む方法。
実施形態１５：
軟骨の破壊を防止又は治療する方法であって、それを必要とする個体に有効量の実施形態１〜１３のいずれかに記載の組成物を投与することを含む方法。
本発明は、以下の非限定的な実施例においてさらに詳細に説明される。
【手続補正２】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
炎症性の原因をほとんど又は全く有しない病的状態において生じる軟骨破壊を抑制又は減少させるための組成物であって、オレウロペインを含む組成物。
【請求項２】
クルクミンをさらに含む、請求項１に記載の組成物。
【請求項３】
ケルセチンをさらに含む、請求項１又は２に記載の組成物。
【請求項４】
グリコサミノグリカン、プレバイオティクス、繊維、プロバイオティクス、脂肪酸、ミネラル、微量元素、及び／又はビタミンからなる群から選択される少なくとも１種の化合物をさらに含む、請求項１〜３のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項５】
少なくとも１種の抗炎症化合物をさらに含む、請求項１〜４のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項６】
前記少なくとも１種の抗炎症化合物は植物抽出物である、請求項５に記載の組成物。
【請求項７】
前記植物抽出物は、デビルズクロー（ハルパゴフィツム・プロクムベンス（Ｈａｒｐａｇｏｐｈｙｔｕｍ  ｐｒｏｃｕｍｂｅｎｓ））、ロスマリヌス・オフィキナリス（Ｒｏｓｍａｒｉｎｕｓ  ｏｆｆｉｃｉｎａｌｉｓ）、ヒソップ、ショウガ（ジンギベル・オフィキナレ（Ｚｉｎｇｉｂｅｒ  ｏｆｆｉｃｉｎａｌｅ））、ウコン（クルクマ・ロンガ（Ｃｕｒｃｕｍａ  ｌｏｎｇａ））、アルニカモンタナ（Ａｒｎｉｃａ  ｍｏｎｔａｎａ）、ヤナギの樹皮、ザクロ（プニカ・グラナトゥム（Ｐｕｎｉｃａ  ｇｒａｎａｔｕｍ））、緑茶（カメリア・シネンシス（Ｃａｍｅｌｌｉａ  ｓｉｎｅｎｓｉｓ））、キャッツクロー（ウンカリア・トメトサ（Ｕｎｃａｒｉａ  ｔｏｍｅｔｏｓａ）及びウンカリア・ギアネンシス（Ｕｎｃａｒｉａ  ｇｕｉａｎｅｎｓｉｓ））、インディアン・オリバナム（ボスウェリア・セラータ（Ｂｏｓｗｅｌｉａ  ｓｅｒｒａｔａ））、及びパイナップルブロメライン（アナナス・コモスス（Ａｎａｎａｓ  ｃｏｍｏｓｕｓ））、ブラックシード（ニゲラ・サティバ（Ｎｉｇｅｌｌａ  ｓａｔｉｖｅ））、セイヨウオトギリソウ、ヒペルフォリン、ゴールデンシール、ジャーマンカモミール（マトリカリア・レクティタ（Ｍａｔｒｉｃａｒｉａ  ｒｅｃｕｔｉｔａ））からなる群から選択される１種又は複数種の植物からの抽出物である、請求項６に記載の組成物。
【請求項８】
少なくとも１種の抗酸化剤をさらに含む、請求項１〜７のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項９】
前記少なくとも１種の抗酸化剤は、アスタキサンチン、カロテノイド、コエンザイムＱ１０（「ＣｏＱ１０」）、フラボノイド、グルタチオン、ゴジ（クコ）、ヘスペリジン、ラクトウルフベリー、リグナン、ルテイン、リコピン、ポリフェノール、セレン、ビタミンＡ、ビタミンＣ、ビタミンＥ、ゼアキサンチンからなる群から選択される、請求項８に記載の組成物。
【請求項１０】
栄養組成物である、請求項１〜９のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項１１】
医薬組成物である、請求項１〜９のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項１２】
前記栄養組成物はメディカルフードである、請求項１０に記載の組成物。
【請求項１３】
軟骨におけるコラーゲンの分解を抑制又は減少させるための組成物である、請求項１〜１２のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項１４】
個体の活動性及び／又は可動性を維持又は改善するための組成物である、請求項１〜１３のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項１５】
関節痛を減少させるための組成物である、請求項１〜１４のいずれか一項に記載の組成物。
【外国語明細書】
2019110899000001.pdf