(57)【要約】  本発明は、新種の化合物、上記化合物を含む医薬組成物および上記化合物を用いることにより、キナーゼ活性の異常または調節障害に関連した疾病または障害、特にＡｂ１、ＢＣＲ−Ａｂ１、Ｂｍｘ、ＣＳＫ、ＴｒｋＢ、ＦＧＦＲ３、Ｆｅｓ、Ｌｃｋ、Ｂ−ＲＡＦ、Ｃ−ＲＡＦ、ＭＫＫ６、ＳＡＰＫ２αおよびＳＡＰＫ２βキナーゼの異常な活性化を伴う疾病または障害を処置または予防する方法を提供する。【特許請求の範囲】
【請求項１】
式（Ｉ）
【化１】
2007504159.tif 000022
［式中、
Ｗは、ＣＨおよびＮから選択され、
Ｙは、Ｃ、ＳおよびＳ（Ｏ）から選択され、
Ｚは、−Ｙ（Ｏ）ＮＲ５−および−ＮＲ５Ｙ（Ｏ）−から選択される二価基であって、Ｙは、Ｃ、ＳおよびＳ（Ｏ）から選択され、Ｒ５は水素およびＣ１−１２アルキルから選択されるものとし、
Ｒ１は、水素、ハロ、ヒドロキシ、Ｃ１−６アルキル、Ｃ１−６アルコキシおよび−ＮＲ６Ｒ７から選択され、Ｒ６は、水素およびＣ１−６アルキルから選択され、Ｒ７は、Ｃ６−１０アリール、Ｃ５−１０ヘテロアリール、Ｃ３−１２シクロアルキルおよびＣ３−８ヘテロシクロアルキルから選択されるか、またはＲ６およびＲ７は、Ｒ６およびＲ７の両方が結合している窒素と一緒になって、Ｃ３−８ヘテロシクロアルキルまたはＣ５−１０ヘテロアリールを形成し、Ｒ７またはＲ６およびＲ７の組み合わせのアリール、ヘテロアリール、シクロアルキルまたはヘテロシクロアルキルは、所望により、ハロ、シアノ、ニトロ、Ｃ１−６アルキル、Ｃ２−６アルケニル、Ｃ２−６アルキニル、ハロ−置換−Ｃ１−６アルキル、Ｃ１−６アルコキシ、ハロ−置換−Ｃ１−６アルコキシ、−ＸＮＲ８Ｒ８、−ＸＣ（Ｏ）ＮＲ８Ｒ８、−ＸＣ（Ｏ）ＮＲ８ＸＯＲ８、−ＸＳ（Ｏ）０−２ＮＲ８Ｒ８、−ＸＳ（Ｏ）０−２Ｒ８、−ＸＮＲ８Ｓ（Ｏ）０−２Ｒ８、−ＸＮＲ８Ｃ（Ｏ）Ｒ８、−ＸＮＲ８ＳＲ８、−ＸＰ（Ｏ）ＮＲ８Ｒ８、−ＸＣＲ８（ＯＲ８）Ｒ８、−ＸＯＣ（Ｏ）Ｒ８、−ＸＯＲ８および−ＸＯＲ９から選択される１〜３個の基により置換され得、Ｘは結合またはＣ１−１２アルキレンであり、Ｒ８は、独立して水素およびＣ１−６アルキルから選択され、Ｒ９は、Ｃ６−１０アリールおよびＣ５−１０ヘテロアリールから選択されるものとし、
Ｒ２は、水素およびＣ１−６アルキルから選択され、
Ｒ３は、水素、ヒドロキシ、Ｃ１−６アルキル、Ｃ２−６アルケニル、Ｃ２−６アルキニル、Ｃ１−６アルコキシ、メルカプト、ハロ、ニトロおよびシアノから選択され、
ｎは、０、１または２であり、
Ｒ４は、水素、ハロ、ヒドロキシ、シアノ、ニトロ、Ｃ１−６アルキル、ハロ−置換−Ｃ１−６アルキル、Ｃ１−１２アルコキシ、ハロ−置換−Ｃ１−１２アルコキシおよび−ＸＲ１０から選択され、Ｘは、結合またはＣ１−６アルキレンであり、Ｒ１０は、Ｃ６−１０アリール、Ｃ５−１０ヘテロアリール、Ｃ３−１２シクロアルキルおよびＣ３−８ヘテロシクロアルキルから選択され、Ｒ１０のアリール、ヘテロアリール、シクロアルキルまたはヘテロシクロアルキルは、所望により、ハロ、ヒドロキシ、シアノ、ニトロ、Ｃ１−６アルキル、ハロ−置換−Ｃ１−６アルキル、Ｃ１−６アルコキシおよびハロ−置換−Ｃ１−６アルコキシから選択される基により置換されていてもよく、
ｍは、１、２または３であり、フェニル環ＡおよびＢは、独立して、−Ｎ＝により置換された４個以下の−Ｃ＝基を有し得るものとする］
で示される化合物、およびその医薬上許容される塩、水和物、溶媒和物および異性体。
【請求項２】
ＷがＮであり、
ＹがＣであり、
Ｚが−Ｃ（Ｏ）ＮＲ５−および−ＮＲ５Ｃ（Ｏ）−から選択される二価基であって、Ｒ５が水素およびＣ１−６アルキルから選択され、
Ｒ１が、水素、ハロ、ヒドロキシおよび−ＮＲ６Ｒ７から選択され、Ｒ６が、水素およびＣ１−６アルキルから選択され、Ｒ７がＣ６−１０アリールおよびＣ５−１０ヘテロアリールから選択されるか、またはＲ６およびＲ７が、Ｒ６およびＲ７の両方が結合している窒素と一緒になって、Ｃ３−８ヘテロシクロアルキルを形成し、Ｒ７またはＲ６およびＲ７の組み合わせのアリール、ヘテロアリールまたはヘテロシクロアルキルが、所望により、ハロ、シアノ、Ｃ１−６アルキル、Ｃ２−６アルケニル、ハロ−置換−Ｃ１−６アルキル、ハロ−置換−Ｃ１−６アルコキシ、−ＸＮＲ８Ｒ８、−ＸＣ（Ｏ）ＮＲ８Ｒ８、−ＸＣ（Ｏ）ＮＲ８ＸＯＲ８、−ＸＳ（Ｏ）２ＮＲ８Ｒ８、−ＸＳＲ８、−ＸＮＲ８Ｓ（Ｏ）２Ｒ８、−ＸＮＲ８Ｃ（Ｏ）Ｒ８、−ＸＯＣ（Ｏ）Ｒ８、−ＸＯＲ８および−ＸＯＲ９から選択される１〜３個の基により置換され得、Ｘが結合またはＣ１−６アルキレンであり、Ｒ８が水素またはＣ１−６アルキルであり、Ｒ９がＣ６−１０アリールであり
Ｒ２が、水素またはＣ１−６アルキルであり、
Ｒ３が、Ｃ１−６アルキルであり、
ｎが１であり、そして
Ｒ４が、ハロ、ハロ−置換−Ｃ１−６アルキルおよび−ＸＲ１０から選択され、Ｘが結合またはＣ１−６アルキレンであり、Ｒ１０がＣ５−１０ヘテロアリールおよびＣ３−８ヘテロシクロアルキルから選択され、Ｒ１０のヘテロアリールまたはヘテロシクロアルキルが所望によりＣ１−６アルキルにより置換されていてもよく、ｍが１、２または３である、
請求項１記載の化合物。
【請求項３】
Ｚが、−Ｃ（Ｏ）ＮＨ−および−ＮＨＣ（Ｏ）−から選択される二価基である、請求項２記載の化合物。
【請求項４】
Ｒ１が、水素、ハロ、ヒドロキシおよび−ＮＨＲ７から選択され、Ｒ７がフェニルおよびピリジニルから選択されるか、またはＲ６およびＲ７が、Ｒ６およびＲ７の両方が結合している窒素と一緒になってモルホリノを形成し、Ｒ７またはＲ６およびＲ７の組み合わせのアリール、ヘテロアリールまたはヘテロシクロアルキルが、所望により、ハロ、シアノ、トリフルオロメチル、トリフルオロメトキシ、ジメチルアミノ、アミノ、アミノカルボニル、メチル−アミノカルボニル、アミノスルホニル、１−ヒドロキシ−エチル、ヒドロキシメチル、アセトキシ−メチル、メチル−スルファニル、フェノキシ、メチル−カルボキシ−メチル、ブチル−アミノ−スルホニル、メチル、イソプロペニル、メトキシ−エチル−アミノ−カルボニル、１−ヒドロキシ−１−メチル−エチル、メチル−スルホニル−アミノおよびメチル−カルボニル−アミノから選択される１〜３個の基により置換され得、そしてＲ３が水素またはメチルである、請求項２記載の化合物。
【請求項５】
Ｒ４が、ハロ、トリフルオロメチルおよび−ＸＲ１０から選択され、Ｘが結合またはメチレンであり、Ｒ１０が、イミダゾリル、ピペラジニルおよびモルホリノから選択され、ヘテロアリールまたはヘテロシクロアルキルが所望によりメチルにより置換されていてもよい、請求項２記載の化合物。
【請求項６】
４−(３−トリフルオロメチル−フェニルアミノ)−ピロロ[２,３−ｄ]ピリミジン−７−カルボン酸 [３−(４−モルホリン−４−イル−フェニルカルバモイル)−フェニル]−アミド; ４−(４−トリフルオロメチル−１−フェニルアミノ)−ピロロ[２,３−ｄ]ピリミジン−７−カルボン酸 {２−メチル−５−[４−(４−メチル−ピペラジン−１−イルメチル)−ベンゾイルアミノ]−フェニル}−アミド; ４−(３−ジメチルアミノ−フェニルアミノ)−ピロロ[２,３−ｄ]ピリミジン−７−カルボン酸 {２−メチル−５−[３−(４−メチル−イミダゾール−１−イル)−５−トリフルオロメチル−ベンゾイルアミノ]−フェニル}−アミド; ４−(３−カルバモイル−フェニルアミノ)−ピロロ[２,３−ｄ]ピリミジン−７−カルボン酸 {２−メチル−５−[４−(４−メチル−ピペラジン−１−イルメチル)−ベンゾイルアミノ]−フェニル}−アミド; ４−(３−スルファモイル−フェニルアミノ)−ピロロ[２,３−ｄ]ピリミジン−７−カルボン酸 {２−メチル−５−[４−(４−メチル−ピペラジン−１−イルメチル)−ベンゾイルアミノ]−フェニル}−アミド; ４−[３−(１−ヒドロキシ−エチル)−フェニルアミノ]−ピロロ[２,３−ｄ]ピリミジン−７−カルボン酸 {２−メチル−５−[３−(４−メチル−イミダゾール−１−イル)−５−トリフルオロメチル−ベンゾイルアミノ]−フェニル}−アミド; ４−(３−カルバモイル−フェニルアミノ)−ピロロ[２,３−ｄ]ピリミジン−７−カルボン酸 {２−メチル−５−[３−(４−メチル−イミダゾール−１−イル)−５−トリフルオロメチル−ベンゾイルアミノ]−フェニル}−アミド; ４−(３−スルファモイル−フェニルアミノ)−ピロロ[２,３−ｄ]ピリミジン−７−カルボン酸 {２−メチル−５−[３−(４−メチル−イミダゾール−１−イル)−５−トリフルオロメチル−ベンゾイルアミノ]−フェニル}−アミド; ４−[３−(１−ヒドロキシ−エチル)−フェニルアミノ]−ピロロ[２,３−ｄ]ピリミジン−７−カルボン酸 [５−(３−フルオロ−５−トリフルオロメチル−ベンゾイルアミノ)−２−メチル−フェニル]−アミド; ４−ヒドロキシ−ピロロ[２,３−ｄ]ピリミジン−７−カルボン酸 {２−メチル−５−[３−(４−メチル−イミダゾール−１−イル)−５−トリフルオロメチル−ベンゾイルアミノ]−フェニル}−アミド; ４−(４−カルバモイル−フェニルアミノ)−ピロロ[２,３−ｄ]ピリミジン−７−カルボン酸 {２−メチル−５−[３−(４−メチル−イミダゾール−１−イル)−５−トリフルオロメチル−ベンゾイルアミノ]−フェニル}−アミド; ４−(３−ヒドロキシメチル−フェニルアミノ)−ピロロ[２,３−ｄ]ピリミジン−７−カルボン酸 {２−メチル−５−[３−(４−メチル−イミダゾール−１−イル)−５−トリフルオロメチル−ベンゾイルアミノ]−フェニル}−アミド; 酢酸 ３−(７−{２−メチル−５−[３−(４−メチル−イミダゾール−１−イル)−５−トリフルオロメチル−ベンゾイルアミノ]−フェニルカルバモイル}−７Ｈ−ピロロ[２,３−ｄ]ピリミジン−４−イルアミノ)−ベンジルエステル; ピロロ[２,３−ｄ]ピリミジン−７−カルボン酸 {２−メチル−５−[３−(４−メチル−イミダゾール−１−イル)−５−トリフルオロメチル−ベンゾイルアミノ]−フェニル}−アミド; ４−(４−トリフルオロメチル−フェニルアミノ)−ピロロ[２,��−ｄ]ピリミジン−７−カルボン酸 [３−(４−モルホリン−４−イル−フェニルカルバモイル)−フェニル]−アミド; ４−(４−トリフルオロメチル−フェニルアミノ)−ピロロ[２,３−ｄ]ピリミジン−７−カルボン酸 [４−(４−モルホリン−４−イル−フェニルカルバモイル)−フェニル]−アミド; ４−(４−トリフルオロメトキシ−フェニルアミノ)−ピロロ[２,３−ｄ]ピリミジン−７−カルボン酸 [３−(４−モルホリン−４−イル−フェニルカルバモイル)−フェニル]−アミド; ４−(３−ブロモ−フェニルアミノ)−ピロロ[２,３−ｄ]ピリミジン−７−カルボン酸 [３−(４−モルホリン−４−イル−フェニルカルバモイル)−フェニル]−アミド; ４−(３−ジメチルアミノ−フェニルアミノ)−ピロロ[２,３−ｄ]ピリミジン−７−カルボン酸 {２−メチル−５−[４−(４−メチル−ピペラジン−１−イルメチル)−ベンゾイルアミノ]−フェニル}−アミド; ４−(３−ブロモ−フェニルアミノ)−ピロロ[２,３−ｄ]ピリミジン−７−カルボン酸 {２−メチル−５−[４−(４−メチル−ピペラジン−１−イルメチル)−ベンゾイルアミノ]−フェニル}−アミド; ４−(３−メチルスルファニル−フェニルアミノ)−ピロロ[２,３−ｄ]ピリミジン−７−カルボン酸 {２−メチル−５−[４−(４−メチル−ピペラジン−１−イルメチル)−ベンゾイルアミノ]−フェニル}−アミド; ４−(ピリジン−３−イルアミノ)−ピロロ[２,３−ｄ]ピリミジン−７−カルボン酸 {２−メチル−５−[４−(４−メチル−ピペラジン−１−イルメチル)−ベンゾイルアミノ]−フェニル}−アミド; ４−(３−フェノキシ−フェニルアミノ)−ピロロ[２,３−ｄ]ピリミジン−７−カルボン酸 {２−メチル−５−[４−(４−メチル−ピペラジン−１−イルメチル)−ベンゾイルアミノ]−フェニル}−アミド; ４−(３−ヒドロキシメチル−フェニルアミノ)−ピロロ[２,３−ｄ]ピリミジン−７−カルボン酸 {２−メチル−５−[４−(４−メチル−ピペラジン−１−イルメチル)−ベンゾイルアミノ]−フェニル}−アミド; ４−(３−ブチルスルファモイル−フェニルアミノ)−ピロロ[２,３−ｄ]ピリミジン−７−カルボン酸 {２−メチル−５−[４−(４−メチル−ピペラジン−１−イルメチル)−ベンゾイルアミノ]−フェニル}−アミド; ４−(４−フルオロ−２−メチル−フェニルアミノ)−ピロロ[２,３−ｄ]ピリミジン−７−カルボン酸 {２−メチル−５−[４−(４−メチル−ピペラジン−１−イルメチル)−ベンゾイルアミノ]−フェニル}−アミド; ４−(３−クロロ−フェニルアミノ)−ピロロ[２,３−ｄ]ピリミジン−７−カルボン酸 {２−メチル−５−[４−(４−メチル−ピペラジン−１−イルメチル)−ベンゾイルアミノ]−フェニル}−アミド; ４−(３−フルオロ−フェニルアミノ)−ピロロ[２,３−ｄ]ピリミジン−７−カルボン酸 {２−メチル−５−[４−(４−メチル−ピペラジン−１−イルメチル)−ベンゾイルアミノ]−フェニル}−アミド; ４−ｍ−トリルアミノ−ピロロ[２,３−ｄ]ピリミジン−７−カルボン酸 {２−メチル−５−[３−(４−メチル−イミダゾール−１−イル)−５−トリフルオロメチル−ベンゾイルアミノ]−フェニル}−アミド; ４−(３−シアノ−フェニルアミノ)−ピロロ[２,３−ｄ]ピリミジン−７−カルボン酸 {２−メチル−５−[３−(４−メチル−イミダゾール−１−イル)−５−トリフルオロメチル−ベンゾイルアミノ]−フェニル}−アミド; ４−クロロ−ピロロ[２,３−ｄ]ピリミジン−７−カルボン酸 {２−メチル−５−[３−(４−メチル−イミダゾール−１−イル)−５−トリフルオロメチル−ベンゾイルアミノ]−フェニル}−アミド; ４−クロロ−ピロロ[２,３−ｄ]ピリミジン−７−カルボン酸 {２−メチル−５−[４−(４−メチル−ピペラジン−１−イルメチル)−ベンゾイルアミノ]−フェニル}−アミド; 酢酸 ３−(７−{２−メチル−５−[４−(４−メチル−ピペラジン−１−イルメチル)−ベンゾイルアミノ]−フェニルカルバモイル}−７Ｈ−シクロペンタピリミジン−４−イルアミノ)−ベンジルエステル; ４−(３−イソプロペニル−フェニルアミノ)−ピロロ[２,３−ｄ]ピリミジン−７−カルボン酸 {２−メチル−５−[３−(４−メチル−イミダゾール−１−イル)−５−トリフルオロメチル−ベンゾイルアミノ]−フェニル}−アミド; ４−[３−(２−メトキシ−エチルカルバモイル)−フェニルアミノ]−ピロロ[２,３−ｄ]ピリミジン−７−カルボン酸 {２−メチル−５−[３−(４−メチル−イミダゾール−１−イル)−５−トリフルオロメチル−ベンゾイルアミノ]−フェニル}−アミド; ４−[３−(１−ヒドロキシ−１−メチル−エチル)−フェニルアミノ]−ピロロ[２,３−ｄ]ピリミジン−７−カルボン酸 {２−メチル−５−[３−(４−メチル−イミダゾール−１−イル)−５−トリフルオロメチル−ベンゾイルアミノ]−フェニル}−アミド; ４−[３−(１−ヒドロキシ−エチル)−フェニルアミノ]−ピロロ[２,３−ｄ]ピリミジン−７−カルボン酸 [５−(３−フルオロ−５−トリフルオロメチル−ベンゾイルアミノ)−２−メチル−フェニル]−アミド; ４−クロロ−ピロロ[２,３−ｄ]ピリミジン−７−カルボン酸 [２−メチル−５−(３−トリフルオロメチル−ベンゾイルアミノ)−フェニル]−アミド; ４−ヒドロキシ−ピロロ[２,３−ｄ]ピリミジン−７−カルボン酸 [２−メチル−５−(３−トリフルオロメチル−ベンゾイルアミノ)−フェニル]−アミド; ４−(３−ジメチルアミノ−フェニルアミノ)−ピロロ[２,３−ｄ]ピリミジン−７−カルボン酸 [２−メチル−５−(３−トリフルオロメチル−ベンゾイルアミノ)−フェニル]−アミド; ４−[３−(１−ヒドロキシ−エチル)−フェニルアミノ]−ピロロ[２,３−ｄ]ピリミジン−７−カルボン酸 [２−メチル−５−(３−トリフルオロメチル−ベンゾイルアミノ)−フェニル]−アミド; ４−(３−ヒドロキシメチル−フェニルアミノ)−ピロロ[２,３−ｄ]ピリミジン−７−カルボン酸 [２−メチル−５−(３−トリフルオロメチル−ベンゾイルアミノ)−フェニル]−アミド; ４−(３−カルバモイル−フェニルアミノ)−ピロロ[２,３−ｄ]ピリミジン−７−カルボン酸 [２−メチル−５−(３−トリフルオロメチル−ベンゾイルアミノ)−フェニル]−アミド; ４−(３−メタンスルホニルアミノ−フェニルアミノ)−ピロロ[２,３−ｄ]ピリミジン−７−カルボン酸 [２−メチル−５−(３−トリフルオロメチル−ベンゾイルアミノ)−フェニル]−アミド; ４−(３−アセチルアミノ−フェニルアミノ)−ピロロ[２,３−ｄ]ピリミジン−７−カルボン酸 [２−メチル−５−(３−トリフルオロメチル−ベンゾイルアミノ)−フェニル]−アミド; ４−(３−スルファモイル−フェニルアミノ)−ピロロ[２,３−ｄ]ピリミジン−７−カルボン酸 [２���メチル−５−(３−トリフルオロメチル−ベンゾイルアミノ)−フェニル]−アミド; ４−(４−カルバモイル−フェニルアミノ)−ピロロ[２,３−ｄ]ピリミジン−７−カルボン酸 [２−メチル−５−(３−トリフルオロメチル−ベンゾイルアミノ)−フェニル]−アミド; ４−(３−メチルカルバモイル−フェニルアミノ)−ピロロ[２,３−ｄ]ピリミジン−７−カルボン酸 {２−メチル−５−[３−(４−メチル−イミダゾール−１−イル)−５−トリフルオロメチル−ベンゾイルアミノ]−フェニル}−アミド; ４−(３−アセチルアミノ−フェニルアミノ)−ピロロ[２,３−ｄ]ピリミジン−７−カルボン酸 {２−メチル−５−[３−(４−メチル−イミダゾール−１−イル)−５−トリフルオロメチル−ベンゾイルアミノ]−フェニル}−アミド; ４−(３−メタンスルホニルアミノ−フェニルアミノ)−ピロロ[２,３−ｄ]ピリミジン−７−カルボン酸 {２−メチル−５−[３−(４−メチル−イミダゾール−１−イル)−５−トリフルオロメチル−ベンゾイルアミノ]−フェニル}−アミド; ４−モルホリン−４−イル−ピロロ[２,３−ｄ]ピリミジン−７−カルボン酸 {２−メチル−５−[３−(４−メチル−イミダゾール−１−イル)−５−トリフルオロメチル−ベンゾイルアミノ]−フェニル}−アミド; ４−モルホリン−４−イル−ピロロ[２,３−ｄ]ピリミジン−７−カルボン酸 [５−(３−フルオロ−５−トリフルオロメチル−ベンゾイルアミノ)−２−メチル−フェニル]−アミド; ４−(３−ジメチルアミノ−フェニルアミノ)−ピロロ[２,３−ｄ]ピリミジン−７−カルボン酸 (３−{[３−(４−メチル−イミダゾール−１−イル)−５−トリフルオロメチル−ベンゾイルアミノ]−メチル}−フェニル)−アミド; および ４−(３−ジメチルアミノ−フェニルアミノ)−ピロロ[２,３−ｄ]ピリミジン−７−カルボン酸 {２−メチル−３−[３−(４−メチル−イミダゾール−１−イル)−５−トリフルオロメチル−ベンゾイルアミノ]−フェニル}−アミドから選択される、請求項１記載の化合物。
【請求項７】
医薬上許容される賦形剤と組み合わせて請求項１記載の化合物の治療有効量を含む医薬組成物。
【請求項８】
キナーゼ活性の阻害により、疾患の病状および／または総合的症状が予防、阻止または改善され得る、動物における疾患の処置方法であって、請求項１記載の化合物の治療有効量を動物に投与することを含む方法。
【請求項９】
キナーゼが、Ａｂ１、ＢＣＲ−Ａｂ１、Ｂｍｘ、ＣＳＫ、ＴｒｋＢ、ＦＧＦＲ３、Ｆｅｓ、Ｌｃｋ、Ｂ−ＲＡＦ、Ｃ−ＲＡＦ、ＭＫＫ６、ＳＡＰＫ２αおよび／またはＳＡＰＫ２βキナーゼから選択される、請求項８記載の方法。
【請求項１０】
Ａｂ１、ＢＣＲ−Ａｂ１、Ｂｍｘ、ＣＳＫ、ＴｒｋＢ、ＦＧＦＲ３、Ｆｅｓ、Ｌｃｋ、Ｂ−ＲＡＦ、Ｃ−ＲＡＦ、ＭＫＫ６、ＳＡＰＫ２αおよび／またはＳＡＰＫ２βのキナーゼ活性が疾患の病状および／または総合的症状の一因となる、動物における疾患を処置するための医薬の製造における請求項１記載の化合物の使用。
【発明の詳細な説明】
【発明の詳細な説明】
【０００１】
発明の背景
関連出願の引用
本願は、３５Ｕ.Ｓ.Ｃ.§１１９（ｅ）のもと、２００４年８月２６日付け米国非仮特許出願（出願番号はまだ割当てられていない）および２００３年８月２８日付け出願の米国仮特許出願番号第６０／４９８５３２号に対する優先権の利益を主張している。先行出願の開示内容については、出典明示により援用する。
【０００２】
発明の分野
本発明は、キナーゼ活性の異常または調節障害に関連した疾病または障害、特にＡｂ１、ＢＣＲ−Ａｂ１、Ｂｍｘ、ＣＳＫ、ＴｒｋＢ、ＦＧＦＲ３、Ｆｅｓ、Ｌｃｋ、Ｂ−ＲＡＦ、Ｃ−ＲＡＦ、ＭＫＫ６、ＳＡＰＫ２αおよび／またはＳＡＰＫ２βキナーゼの異常な活性化を伴う疾病または障害を処置または予防するための新種の化合物、上記化合物を含む医薬組成物および上記化合物の使用方法を提供する。
【０００３】
背景
プロテインキナーゼは、広く多様な細胞過程の調節および細胞機能全体にわたる制御の維持において中心的な役割を演じるタンパク質の大きなファミリーを代表する。これらのキナーゼの部分的な非制限的リストには、受容体チロシンキナーゼ、例えば神経成長因子受容体、ｔｒｋＢ、および線維芽細胞成長因子受容体、ＦＧＦＲ３、非受容体チロシンキナーゼ、例えばＡｂ１および融合キナーゼＢＣＲ−Ａｂ１、Ｌｃｋ、Ｃｓｋ、Ｆｅｓ、Ｂｍｘおよびｃ−ｓｒｃ、およびセリン／トレオニンキナーゼ、例えばｃ−ＲＡＦ、ｓｇｋ、ＭＡＰキナーゼ（例、ＭＫＫ４、ＭＫＫ６など）、ＳＡＰＫ２αおよびＳＡＰＫ２βが含まれる。異常なキナーゼ活性は、良性および悪性増殖性疾患ならびに免疫および神経系の不適切な活性化に起因する疾患を含む多くの疾患状態において観察されている。
【０００４】
本発明の新規化合物は、１種またはそれ以上のプロテインキナーゼの活性を阻害するため、キナーゼ関連疾患の処置において有用であると期待される。
【０００５】
発明の要約
一態様において、本発明は、式（Ｉ）
【化１】
2007504159.tif 000002
［式中、
Ｗは、ＣＨおよびＮから選択され、
Ｙは、Ｃ、ＳおよびＳ（Ｏ）から選択され、
Ｚは、−Ｙ（Ｏ）ＮＲ５−および−ＮＲ５Ｙ（Ｏ）−から選択される二価基であって、Ｙは、Ｃ、ＳおよびＳ（Ｏ）から選択され、Ｒ５は水素およびＣ１−１２アルキルから選択されるものとし、
Ｒ１は、水素、ハロ、ヒドロキシ、Ｃ１−６アルキル、Ｃ１−６アルコキシおよび−ＮＲ６Ｒ７から選択され、Ｒ６は、水素およびＣ１−６アルキルから選択され、Ｒ７は、Ｃ６−１０アリール、Ｃ５−１０ヘテロアリール、Ｃ３−１２シクロアルキルおよびＣ３−８ヘテロシクロアルキルから選択されるか、またはＲ６およびＲ７は、Ｒ６およびＲ７の両方が結合している窒素と一緒になって、Ｃ３−８ヘテロシクロアルキルまたはＣ５−１０ヘテロアリールを形成し、Ｒ７またはＲ６およびＲ７の組み合わせのアリール、ヘテロアリール、シクロアルキルまたはヘテロシクロアルキルは、所望により、ハロ、シアノ、ニトロ、Ｃ１−６アルキル、Ｃ２−６アルケニル、Ｃ２−６アルキニル、ハロ−置換−Ｃ１−６アルキル、Ｃ１−６アルコキシ、ハロ−置換−Ｃ１−６アルコキシ、−ＸＮＲ８Ｒ８、−ＸＣ（Ｏ）ＮＲ８Ｒ８、−ＸＣ（Ｏ）ＮＲ８ＸＯＲ８、−ＸＳ（Ｏ）０−２ＮＲ８Ｒ８、−ＸＳ（Ｏ）０−２Ｒ８、−ＸＮＲ８Ｓ（Ｏ）０−２Ｒ８、−ＸＮＲ８Ｃ（Ｏ）Ｒ８、−ＸＮＲ８ＳＲ８、−ＸＰ（Ｏ）ＮＲ８Ｒ８、−ＸＣＲ８（ＯＲ８）Ｒ８、−ＸＯＣ（Ｏ）Ｒ８、−ＸＯＲ８および−ＸＯＲ９から選択される１〜３個の基により置換され得、Ｘは結合またはＣ１−１２アルキレンであり、Ｒ８は、独立して水素およびＣ１−６アルキルから選択され、Ｒ９は、Ｃ６−１０アリールおよびＣ５−１０ヘテロアリールから選択されるものとし、
Ｒ２は、水素およびＣ１−６アルキルから選択され、
Ｒ３は、水素、ヒドロキシ、Ｃ１−６アルキル、Ｃ２−６アルケニル、Ｃ２−６アルキニル、Ｃ１−６アルコキシ、メルカプト、ハロ、ニトロおよびシアノから選択され、
ｎは、０、１または２であり、
Ｒ４は、水素、ハロ、ヒドロキシ、シアノ、ニトロ、Ｃ１−６アルキル、ハロ−置換−Ｃ１−６アルキル、Ｃ１−１２アルコキシ、ハロ−置換−Ｃ１−１２アルコキシおよび−ＸＲ１０から選択され、Ｘは、結合またはＣ１−６アルキレンであり、Ｒ１０は、Ｃ６−１０アリール、Ｃ５−１０ヘテロアリール、Ｃ３−１２シクロアルキルおよびＣ３−８ヘテロシクロアルキルから選択され、Ｒ１０のアリール、ヘテロアリール、シクロアルキルまたはヘテロシクロアルキルは、所望により、ハロ、ヒドロキシ、シアノ、ニトロ、Ｃ１−６アルキル、ハロ−置換−Ｃ１−６アルキル、Ｃ１−６アルコキシおよびハロ−置換−Ｃ１−６アルコキシから選択される基により置換されていてもよく、
ｍは、１、２または３であり、フェニル環ＡおよびＢは、独立して、−Ｎ＝により置換された４個以下の−Ｃ＝基を有し得るものとする］
で示される化合物、ならびにそのＮ−酸化物誘導体、プロドラッグ誘導体、保護誘導体、個々の異性体および異性体混合物、および上記化合物の医薬上許容される塩および溶媒和物（例、水和物）を提供する。
【０００６】
第２の態様において、本発明は、１種またはそれ以上の適切な賦形剤と混合した形で、式（Ｉ）の化合物またはそのＮ−酸化物誘導体、個々の異性体および異性体混合物、またはその医薬上許容される塩を含む医薬組成物を提供する。
【０００７】
第３の態様において、本発明は、キナーゼ活性、特にＡｂ１、ＢＣＲ−Ａｂ１、Ｂｍｘ、ＣＳＫ、ＴｒｋＢ、ＦＧＦＲ３、Ｆｅｓ、Ｌｃｋ、Ｂ−ＲＡＦ、Ｃ−ＲＡＦ、ＭＫＫ６、ＳＡＰＫ２αおよび／またはＳＡＰＫ２β活性の阻害により、疾患の病状および／または総合的症状が予防、阻止または改善され得る、ヒトを含む動物における疾患の処置方法であって、式（Ｉ）の化合物またはそのＮ−酸化物誘導体、個々の異性体および異性体混合物、またはその医薬上許容される塩の治療有効量を動物に投与することを含む方法を提供する。
【０００８】
第４の態様において、本発明は、キナーゼ活性、特にＡｂ１、ＢＣＲ−Ａｂ１、Ｂｍｘ、ＣＳＫ、ＴｒｋＢ、ＦＧＦＲ３、Ｆｅｓ、Ｌｃｋ、Ｂ−ＲＡＦ、Ｃ−ＲＡＦ、ＭＫＫ６、ＳＡＰＫ２αおよび／またはＳＡＰＫ２β活性が、疾患の病状および／または総合的症状の一因である、動物における疾患を処置するための医薬の製造における式（Ｉ）の化合物の使用に関するものである。
【０００９】
第５の態様において、本発明は、式（Ｉ）の化合物およびそのＮ−酸化物誘導体、プロドラッグ誘導体、保護誘導体、個々の異性体および異性体混合物、およびその医薬上許容される塩の製造方法を提供する。
【００１０】
発明の詳細な記載
（定義）
一つの基として、および他の基、例えばハロ置換アルキルおよびアルコキシの構造成分としての「アルキル」は、直鎖または分枝状であり得る。Ｃ１−４−アルコキシには、メトキシ、エトキシなどがある。ハロ置換アルキルには、トリフルオロメチル、ペンタフルオロエチルなどがある。特記しない場合、「アルキル」は、所望により−Ｏ−により中断されているかまたは所望により−ＯＨにより置換され得る。
【００１１】
「アリール」は、６〜１０個の環炭素原子を含む単環式または縮合二環式芳香族環集合体を意味する。例えば、アリールは、フェニルまたはナフチル、好ましくはフェニルであり得る。「アリーレン」はアリール基から誘導された二価基を意味する。「ヘテロアリール」は、環構成員の１個またはそれ以上がヘテロ原子であるアリールとして定義される。例えば、ヘテロアリールには、ピリジル、インドリル、インダゾリル、キノキサリニル、キノリニル、ベンゾフラニル、ベンゾピラニル、ベンゾチオピラニル、ベンゾ［１,３］ジオキソール、イミダゾリル、ベンゾ−イミダゾリル、ピリミジニル、フラニル、オキサゾリル、イソオキサゾリル、トリアゾリル、テトラゾリル、ピラゾリル、チエニルなどがある。
【００１２】
「シクロアルキル」は、示された数の環原子を含む飽和または部分不飽和、単環式、縮合二環式または架橋多環式環集合体をいう。例えば、Ｃ３−１０シクロアルキルには、シクロプロピル、シクロブチル、シクロペンチル、シクロヘキシルなどがある。「ヘテロシクロアルキル」は、本願で定義されているシクロアルキルであって、示された環炭素の１個またはそれ以上が、−Ｏ−、−Ｎ＝、−ＮＲ−、−Ｃ（Ｏ）−、−Ｓ−、−Ｓ（Ｏ）−または−Ｓ（Ｏ）２−（式中、Ｒは、水素、Ｃ１−４アルキルまたは窒素保護基である）から選択される部分により置換されているものをいう。例えば、本発明化合物を記載するのに本願で使用されているＣ３−８ヘテロシクロアルキルには、モルホリノ、ピロリジニル、ピペラジニル、ピペリジニル、ピペリジニロン、１,４−ジオキサ−８−アザ−スピロ［４.５］デカ−８−イルなどがある。
【００１３】
「ハロゲン」（またはハロ）は、好ましくはクロロまたはフルオロを表すが、ブロモまたはヨードでもあり得る。
【００１４】
「処置する」、「処置の」および「処置」は、病気および／またはそれに付随する症状を緩和または軽減する方法をいう。
【００１５】
好ましい実施態様の記載
融合タンパク質ＢＣＲ−Ａｂ１は、Ａｂ１プロト−オンコジーンをＢｃｒ遺伝子と融合させた相互転座の結果である。従って、ＢＣＲ−Ａｂ１は、マイトジェン活性の増加を通じてＢ細胞を形質転換し得る。この増加により、アポトーシスに対する感受性が低減化し、ＣＭＬ始原細胞の接着および回帰が改変される。本発明は、キナーゼ関連疾患、特にＡｂ１、ＢＣＲ−Ａｂ１、Ｂｍｘ、ＣＳＫ、ＴｒｋＢ、ＦＧＦＲ３、Ｆｅｓ、Ｌｃｋ、Ｂ−ＲＡＦ、Ｃ−ＲＡＦ、ＭＫＫ６、ＳＡＰＫ２αおよび／またはＳＡＰＫ２βキナーゼ関連疾患の処置についての化合物、組成物および処置方法を提供する。例えば、白血病およびＢＣＲ−Ａｂ１に関連した他の増殖性疾患は、ＢＣＲ−Ａｂ１の野生型および突然変異形態の阻害を通して処置され得る。
【００１６】
一実施態様では、式（Ｉ）の化合物に関して、ＷはＮであり、ＹはＣであり、Ｚは−Ｃ（Ｏ）ＮＲ５−および−ＮＲ５Ｃ（Ｏ）−から選択される二価基であって、Ｒ５は水素およびＣ１−６アルキルから選択される。
【００１７】
別の実施態様では、は、水素、ハロ、ヒドロキシおよび−ＮＲ６Ｒ７から選択され、Ｒ６は、水素およびＣ１−６アルキルから選択され、Ｒ７はＣ６−１０アリールおよびＣ５−１０ヘテロアリールから選択されるか、またはＲ６およびＲ７は、Ｒ６およびＲ７の両方が結合している窒素と一緒になって、Ｃ３−８ヘテロシクロアルキルを形成し、Ｒ７またはＲ６およびＲ７の組み合わせのアリール、ヘテロアリールまたはヘテロシクロアルキルは、所望により、ハロ、シアノ、Ｃ１−６アルキル、Ｃ２−６アルケニル、ハロ−置換−Ｃ１−６アルキル、ハロ−置換−Ｃ１−６アルコキシ、−ＸＮＲ８Ｒ８、−ＸＣ（Ｏ）ＮＲ８Ｒ８、−ＸＣ（Ｏ）ＮＲ８ＸＯＲ８、−ＸＳ（Ｏ）２ＮＲ８Ｒ８、−ＸＳＲ８、−ＸＮＲ８Ｓ（Ｏ）２Ｒ８、−ＸＮＲ８Ｃ（Ｏ）Ｒ８、−ＸＯＣ（Ｏ）Ｒ８、−ＸＯＲ８および−ＸＯＲ９から選択される１〜３個の基により置換され得、Ｘは結合またはＣ１−６アルキレンであり、Ｒ８は水素またはＣ１−６アルキルであり、Ｒ９はＣ６−１０アリールである。
【００１８】
さらなる実施態様では、Ｒ２は、水素およびＣ１−６アルキルから選択され、Ｒ３はＣ１−６アルキルであり、ｎは１であり、そしてＲ４は、ハロ、ハロ−置換−Ｃ１−６アルキルおよび−ＸＲ１０から選択され、Ｘは結合またはＣ１−６アルキレンであり、Ｒ１０はＣ５−１０ヘテロアリールおよびＣ３−８ヘテロシクロアルキルから選択され、Ｒ１０のヘテロアリールまたはヘテロシクロアルキルは、所望によりＣ１−６アルキルにより置換されていてもよく、そしてｍは１、２または３である。
【００１９】
別の実施態様において、Ｚは、−Ｃ（Ｏ）ＮＨ−および−ＮＨＣ（Ｏ）−から選択される二価基である。
【００２０】
別の実施態様では、Ｒ１は、水素、ハロ、ヒドロキシおよび−ＮＨＲ７から選択され、Ｒ７はフェニルおよびピリジニルから選択されるか、またはＲ６およびＲ７は、Ｒ６およびＲ７の両方が結合している窒素と一緒になってモルホリノを形成し、Ｒ７またはＲ６およびＲ７の組み合わせのアリール、ヘテロアリールまたはヘテロシクロアルキルは、所望により、ハロ、シアノ、トリフルオロメチル、トリフルオロメトキシ、ジメチルアミノ、アミノ、アミノカルボニル、メチル−アミノカルボニル、アミノスルホニル、１−ヒドロキシ−エチル、ヒドロキシメチル、アセトキシ−メチル、メチル−スルファニル、フェノキシ、メチル−カルボキシ−メチル、ブチル−アミノ−スルホニル、メチル、イソプロペニル、メトキシ−エチル−アミノ−カルボニル、１−ヒドロキシ−１−メチル−エチル、メチル−スルホニル−アミノおよびメチル−カルボニル−アミノから選択される１〜３個の基により置換され得、そしてＲ３は水素またはメチルである。
【００２１】
さらなる実施態様では、Ｒ４は、ハロ、トリフルオロメチルおよび−ＸＲ１０から選択され、Ｘは結合またはメチレンであり、Ｒ１０は、イミダゾリル、ピペラジニルおよびモルホリノから選択され、ヘテロアリールまたはヘテロシクロアルキルは所望によりメチルにより置換されていてもよい。
【００２２】
本発明の好ましい化合物は、４−(３−トリフルオロメチル−フェニルアミノ)−ピロロ[２,３−ｄ]ピリミジン−７−カルボン酸 [３−(４−モルホリン−４−イル−フェニルカルバモイル)−フェニル]−アミド; ４−(４−トリフルオロメチル−１−フェニルアミノ)−ピロロ[２,３−ｄ]ピリミジン−７−カルボン酸 {２−メチル−５−[４−(４−メチル−ピペラジン−１−イルメチル)−ベンゾイルアミノ]−フェニル}−アミド; ４−(３−ジメチルアミノ−フェニルアミノ)−ピロロ[２,３−ｄ]ピリミジン−７−カルボン酸 {２−メチル−５−[３−(４−メチル−イミダゾール−１−イル)−５−トリフルオロメチル−ベンゾイルアミノ]−フェニル}−アミド; ４−(３−カルバモイル−フェニルアミノ)−ピロロ[２,３−ｄ]ピリミジン−７−カルボン酸 {２−メチル−５−[４−(４−メチル−ピペラジン−１−イルメチル)−ベンゾイルアミノ]−フェニル}−アミド; ４−(３−スルファモイル−フェニルアミノ)−ピロロ[２,３−ｄ]ピリミジン−７−カルボン酸 {２−メチル−５−[４−(４−メチル−ピペラジン−１−イルメチル)−ベンゾイルアミノ]−フェニル}−アミド; ４−[３−(１−ヒドロキシ−エチル)−フェニルアミノ]−ピロロ[２,３−ｄ]ピリミジン−７−カルボン酸 {２−メチル−５−[３−(４−メチル−イミダゾール−１−イル)−５−トリフルオロメチル−ベンゾイルアミノ]−フェニル}−アミド; ４−(３−カルバモイル−フェニルアミノ)−ピロロ[２,３−ｄ]ピリミジン−７−カルボン酸 {２−メチル−５−[３−(４−メチル−イミダゾール−１−イル)−５−トリフルオロメチル−ベンゾイルアミノ]−フェニル}−アミド; ４−(３−スルファモイル−フェニルアミノ)−ピロロ[２,３−ｄ]ピリミジン−７−カルボン酸 {２−メチル−５−[３−(４−メチル−イミダゾール−１−イル)−５−トリフルオロメチル−ベンゾイルアミノ]−フェニル}−アミド; ４−[３−(１−ヒドロキシ−エチル)−フェニルアミノ]−ピロロ[２,３−ｄ]ピリミジン−７−カルボン酸 [５−(３−フルオロ−５−トリフルオロメチル−ベンゾイルアミノ)−２−メチル−フェニル]−アミド; ４−ヒドロキシ−ピロロ[２,３−ｄ]ピリミジン−７−カルボン酸 {２−メチル−５−[３−(４−メチル−イミダゾール−１−イル)−５−トリフルオロメチル−ベンゾイルアミノ]−フェニル}−アミド; ４−(４−カルバモイル−フェニルアミノ)−ピロロ[２,３−ｄ]ピリミジン−７−カルボン酸 {２−メチル−５−[３−(４−メチル−イミダゾール−１−イル)−５−トリフルオロメチル−ベンゾイルアミノ]−フェニル}−アミド; ４−(３−ヒドロキシメチル−フェニルアミノ)−ピロロ[２,３−ｄ]ピリミジン−７−カルボン酸 {２−メチル−５−[３−(４−メチル−イミダゾール−１−イル)−５−トリフルオロメチル−ベンゾイルアミノ]−フェニル}−アミド; 酢酸 ３−(７−{２−メチル−５−[３−(４−メチル−イミダゾール−１−イル)−５−トリフルオロメチル−ベンゾイルアミノ]−フェニルカルバモイル}−７Ｈ−ピロロ[２,３−ｄ]ピリミジン−４−イルアミノ)−ベンジルエステル; ピロロ[２,３−ｄ]ピリミジン−７−カルボン酸 {２−メチル−５−[３−(４−メチル−イミダゾール−１−イル)−５−トリフルオロメチル−ベンゾイルアミノ]−フェニル}−アミド; ４−(４−トリフルオロメチル−��ェニルアミノ)−ピロロ[２,３−ｄ]ピリミジン−７−カルボン酸 [３−(４−モルホリン−４−イル−フェニルカルバモイル)−フェニル]−アミド; ４−(４−トリフルオロメチル−フェニルアミノ)−ピロロ[２,３−ｄ]ピリミジン−７−カルボン酸 [４−(４−モルホリン−４−イル−フェニルカルバモイル)−フェニル]−アミド; ４−(４−トリフルオロメトキシ−フェニルアミノ)−ピロロ[２,３−ｄ]ピリミジン−７−カルボン酸 [３−(４−モルホリン−４−イル−フェニルカルバモイル)−フェニル]−アミド; 
【００２３】
４−(３−ブロモ−フェニルアミノ)−ピロロ[２,３−ｄ]ピリミジン−７−カルボン酸 [３−(４−モルホリン−４−イル−フェニルカルバモイル)−フェニル]−アミド; ４−(３−ジメチルアミノ−フェニルアミノ)−ピロロ[２,３−ｄ]ピリミジン−７−カルボン酸 {２−メチル−５−[４−(４−メチル−ピペラジン−１−イルメチル)−ベンゾイルアミノ]−フェニル}−アミド; ４−(３−ブロモ−フェニルアミノ)−ピロロ[２,３−ｄ]ピリミジン−７−カルボン酸 {２−メチル−５−[４−(４−メチル−ピペラジン−１−イルメチル)−ベンゾイルアミノ]−フェニル}−アミド; ４−(３−メチルスルファニル−フェニルアミノ)−ピロロ[２,３−ｄ]ピリミジン−７−カルボン酸 {２−メチル−５−[４−(４−メチル−ピペラジン−１−イルメチル)−ベンゾイルアミノ]−フェニル}−アミド; ４−(ピリジン−３−イルアミノ)−ピロロ[２,３−ｄ]ピリミジン−７−カルボン酸 {２−メチル−５−[４−(４−メチル−ピペラジン−１−イルメチル)−ベンゾイルアミノ]−フェニル}−アミド; ４−(３−フェノキシ−フェニルアミノ)−ピロロ[２,３−ｄ]ピリミジン−７−カルボン酸 {２−メチル−５−[４−(４−メチル−ピペラジン−１−イルメチル)−ベンゾイルアミノ]−フェニル}−アミド; ４−(３−ヒドロキシメチル−フェニルアミノ)−ピロロ[２,３−ｄ]ピリミジン−７−カルボン酸 {２−メチル−５−[４−(４−メチル−ピペラジン−１−イルメチル)−ベンゾイルアミノ]−フェニル}−アミド; ４−(３−ブチルスルファモイル−フェニルアミノ)−ピロロ[２,３−ｄ]ピリミジン−７−カルボン酸 {２−メチル−５−[４−(４−メチル−ピペラジン−１−イルメチル)−ベンゾイルアミノ]−フェニル}−アミド; ４−(４−フルオロ−２−メチル−フェニルアミノ)−ピロロ[２,３−ｄ]ピリミジン−７−カルボン酸 {２−メチル−５−[４−(４−メチル−ピペラジン−１−イルメチル)−ベンゾイルアミノ]−フェニル}−アミド; ４−(３−クロロ−フェニルアミノ)−ピロロ[２,３−ｄ]ピリミジン−７−カルボン酸 {２−メチル−５−[４−(４−メチル−ピペラジン−１−イルメチル)−ベンゾイルアミノ]−フェニル}−アミド; ４−(３−フルオロ−フェニルアミノ)−ピロロ[２,３−ｄ]ピリミジン−７−カルボン酸 {２−メチル−５−[４−(４−メチル−ピペラジン−１−イルメチル)−ベンゾイルアミノ]−フェニル}−アミド; ４−ｍ−トリルアミノ−ピロロ[２,３−ｄ]ピリミジン−７−カルボン酸 {２−メチル−５−[３−(４−メチル−イミダゾール−１−イル)−５−トリフルオロメチル−ベンゾイルアミノ]−フェニル}−アミド; ４−(３−シアノ−フェニルアミノ)−ピロロ[２,３−ｄ]ピリミジン−７−カルボン酸 {２−メチル−５−[３−(４−メチル−イミダゾール−１−イル)−５−トリフルオロメチル−ベンゾイルアミノ]−フェニル}−アミド; ４−クロロ−ピロロ[２,３−ｄ]ピリミジン−７−カルボン酸 {２−メチル−５−[３−(４−メチル−イミダゾール−１−イル)−５−トリフルオロメチル−ベンゾイルアミノ]−フェニル}−アミド; ４−クロロ−ピロロ[２,３−ｄ]ピリミジン−７−カルボン酸 {２−メチル−５−[４−(４−メチル−ピペラジン−１−イルメチル)−ベンゾイルアミノ]−フェニル}−アミド; 酢酸 ３−(７−{２−メチル−５−[４−(４−メチル−ピペラジン−１−イルメチル)−ベンゾイルアミノ]−フェニルカルバモイル}−７Ｈ−シクロペンタピリミジン−４−イルアミノ)−ベンジルエステル; ４−(３−イソプロペニル−フェニルアミノ)−ピロロ[２,３−ｄ]ピリミジン−７−カルボン酸 {２−メチル−５−[３−(４−メチル−イミダゾール−１−イル)−５−トリフルオロメチル−ベンゾイルアミノ]−フェニル}−アミド; ４−[３−(２−メトキシ−エチルカルバモイル)−フェニルアミノ]−ピロロ[２,３−ｄ]ピリミジン−７−カルボン酸 {２−メチル−５−[３−(４−メチル−イミダゾール−１−イル)−５−トリフルオロメチル−ベンゾイルアミノ]−フェニル}−アミド; ４−[３−(１−ヒドロキシ−１−メチル−エチル)−フェニルアミノ]−ピロロ[２,３−ｄ]ピリミジン−７−カルボン酸 {２−メチル−５−[３−(４−メチル−イミダゾール−１−イル)−５−トリフルオロメチル−ベンゾイルアミノ]−フェニル}−アミド; ４−[３−(１−ヒドロキシ−エチル)−フェニルアミノ]−ピロロ[２,３−ｄ]ピリミジン−７−カルボン酸 [５−(３−フルオロ−５−トリフルオロメチル−ベンゾイルアミノ)−２−メチル−フェニル]−アミド; ４−クロロ−ピロロ[２,３−ｄ]ピリミジン−７−カルボン酸 [２−メチル−５−(３−トリフルオロメチル−ベンゾイルアミノ)−フェニル]−アミド; ４−ヒドロキシ−ピロロ[２,３−ｄ]ピリミジン−７−カルボン酸 [２−メチル−５−(３−トリフルオロメチル−ベンゾイルアミノ)−フェニル]−アミド; ４−(３−ジメチルアミノ−フェニルアミノ)−ピロロ[２,３−ｄ]ピリミジン−７−カルボン酸 [２−メチル−５−(３−トリフルオロメチル−ベンゾイルアミノ)−フェニル]−アミド; ４−[３−(１−ヒドロキシ−エチル)−フェニルアミノ]−ピロロ[２,３−ｄ]ピリミジン−７−カルボン酸 [２−メチル−５−(３−トリフルオロメチル−ベンゾイルアミノ)−フェニル]−アミド; ４−(３−ヒドロキシメチル−フェニルアミノ)−ピロロ[２,３−ｄ]ピリミジン−７−カルボン酸 [２−メチル−５−(３−トリフルオロメチル−ベンゾイルアミノ)−フェニル]−アミド; ４−(３−カルバモイル−フェニルアミノ)−ピロロ[２,３−ｄ]ピリミジン−７−カルボン酸 [２−メチル−５−(３−トリフルオロメチル−ベンゾイルアミノ)−フェニル]−アミド; ４−(３−メタンスルホニルアミノ−フェニルアミノ)−ピロロ[２,３−ｄ]ピリミジン−７−カルボン酸 [２−メチル−５−(３−トリフルオロメチル−ベンゾイルアミノ)−フェニル]−アミド; ４−(３−アセチルアミノ−フェニルアミノ)−ピロロ[２,３−ｄ]ピリミジン−７−カルボン酸 [２−メチル−５−(３−トリフルオロメチル−ベンゾイルアミノ)−フェニル]−アミド; ４−(３−スルファモイル−フェニルアミノ)−ピロロ[２,３−ｄ]ピリミジン−７−カルボン酸 [２−メチル−５−(３−トリフルオロメチル−ベンゾイルアミノ)−フェニル]−アミド; 
【００２４】
４−(４−カルバモイル−フェニルアミノ)−ピロロ[２,３−ｄ]ピリミジン−７−カルボン酸 [２−メチル−５−(３−トリフルオロメチル−ベンゾイルアミノ)−フェニル]−アミド; ４−(３−メチルカルバモイル−フェニルアミノ)−ピロロ[２,３−ｄ]ピリミジン−７−カルボン酸 {２−メチル−５−[３−(４−メチル−イミダゾール−１−イル)−５−トリフルオロメチル−ベンゾイルアミノ]−フェニル}−アミド; ４−(３−アセチルアミノ−フェニルアミノ)−ピロロ[２,３−ｄ]ピリミジン−７−カルボン酸 {２−メチル−５−[３−(４−メチル−イミダゾール−１−イル)−５−トリフルオロメチル−ベンゾイルアミノ]−フェニル}−アミド; ４−(３−メタンスルホニルアミノ−フェニルアミノ)−ピロロ[２,３−ｄ]ピリミジン−７−カルボン酸 {２−メチル−５−[３−(４−メチル−イミダゾール−１−イル)−５−トリフルオロメチル−ベンゾイルアミノ]−フェニル}−アミド; ４−モルホリン−４−イル−ピロロ[２,３−ｄ]ピリミジン−７−カルボン酸 {２−メチル−５−[３−(４−メチル−イミダゾール−１−イル)−５−トリフルオロメチル−ベンゾイルアミノ]−フェニル}−アミド; ４−モルホリン−４−イル−ピロロ[２,３−ｄ]ピリミジン−７−カルボン酸 [５−(３−フルオロ−５−トリフルオロメチル−ベンゾイルアミノ)−２−メチル−フェニル]−アミド; ４−(３−ジメチルアミノ−フェニルアミノ)−ピロロ[２,３−ｄ]ピリミジン−７−カルボン酸 (３−{[３−(４−メチル−イミダゾール−１−イル)−５−トリフルオロメチル−ベンゾイルアミノ]−メチル}−フェニル)−アミド; および ４−(３−ジメチルアミノ−フェニルアミノ)−ピロロ[２,３−ｄ]ピリミジン−７−カルボン酸 {２−メチル−３−[３−(４−メチル−イミダゾール−１−イル)−５−トリフルオロメチル−ベンゾイルアミノ]−フェニル}−アミドから選択される。
【００２５】
式（Ｉ）のさらなる好ましい化合物は、下記実施例および表１で詳述されている。
【００２６】
薬理学および有用性
本発明化合物は、プロテインチロシンキナーゼ活性をモジュレーションし、それら自体、Ａｂ１、ＢＣＲ−Ａｂ１、Ｂｍｘ、ＣＳＫ、ＴｒｋＢ、ＦＧＦＲ３、Ｆｅｓ、Ｌｃｋ、Ｂ−ＲＡＦ、Ｃ−ＲＡＦ、ＭＫＫ６、ＳＡＰＫ２αおよびＳＡＰＫ２βキナーゼ活性が疾病の病状および／または総合的症状の一因となる疾病または障害の処置に有用である。
【００２７】
エイブルソンチロシンキナーゼ（すなわち、Ａｂ１、ｃ−Ａｂ１）は、細胞周期の調節、遺伝子傷害性ストレスに対する細胞性応答、およびインテグリンシグナリングを通した細胞環境についての情報の伝達に関与している。全体的にみて、Ａｂ１タンパク質は、様々な細胞外および細胞内発生源からのシグナルを統合し、細胞周期およびアポトーシスに関する決定に影響を及ぼす細胞モジュールとしての複雑な役割を果たすと思われる。エイブルソンチロシンキナーゼは、サブタイプ誘導体、例えばチロシンキナーゼ活性の調節障害を伴うキメラ融合体（腫瘍タンパク質）ＢＣＲ−Ａｂ１またはｖ−Ａｂ１を含む。ＢＣＲ−Ａｂ１は、慢性骨髄性白血病（ＣＭＬ）の９５％および急性リンパ性白血病の１０％の発病における重大な要因である。ＳＴＩ−５７１（グリーベック）は、発癌性ＢＣＲ−Ａｂ１チロシンキナーゼの阻害剤であり、慢性骨髄性白血病（ＣＭＬ）の処置に使用される。しかしながら、ＣＭＬの急性転化段階にある患者の中には、ＢＣＲ−Ａｂ１キナーゼにおける突然変異故にＳＴＩ−５７１に対して耐性を示す場合もある。２２の突然変異において、現在までのところ、最もよく見られるのはＧ２５０Ｅ、Ｅ２５５Ｖ、Ｔ３１５Ｉ、Ｆ３１７ＬおよびＭ３５１Ｔであることが報告されている。
【００２８】
本発明化合物は、ａｂ１キナーゼ、特にｖ−ａｂ１キナーゼを阻害する。本発明化合物はまた、野生型ＢＣＲ−Ａｂ１キナーゼおよびＢＣＲ−Ａｂ１キナーゼの突然変異体を阻害するため、Ｂｃｒ−ａｂ１陽性癌および腫瘍疾患、例えば白血病（特に慢性骨髄性白血病および急性リンパ芽球性白血病、この場合特にアポトーシス作用機序が見出される）の処置に適切であり、また白血病性幹細胞のサブグループに対する効果ならびにこれらの細胞の除去（例えば骨髄除去）後における上記細胞のインビトロ精製および癌細胞を取り除いた後の細胞の再移植（例えば、精製骨髄細胞の再移植）についての可能性を示している。
【００２９】
ニューロトロフィン受容体のｔｒｋファミリー（ｔｒｋＡ、ｔｒｋＢ、ｔｒｋＣ）は、ニューロンおよび非ニューロン組織の生存、成長および分化を促進する。ＴｒｋＢタンパク質は、小腸および結腸における神経内分泌型細胞、膵臓のアルファ細胞、リンパ節および脾臓の単球およびマクロファージ、および表皮の顆粒層において発現される（Shibayamaおよび Koizumi、１９９６）。ＴｒｋＢタンパク質の発現は、ウィルムス腫瘍および神経芽細胞腫の好ましくない進行と関連している。さらに、ＴｋｒＢは、正常細胞ではなく癌性前立腺細胞で発現される。ｔｒｋ受容体のシグナリング経路下流は、Ｓｈｃ、活性化Ｒａｓ、ＥＲＫ−１およびＥＲＫ−２遺伝子を通したＭＡＰＫ活性化のカスケード、およびＰＬＣ−ｇａｍｍａｌ変換経路を含む（Sugimoto et al.、２００１）。
【００３０】
Ｔｅｃファミリーキナーゼ、Ｂｍｘ、非受容体タンパク質−チロシンキナーゼは、哺乳類上皮癌細胞の増殖を制御する。
【００３１】
線維芽細胞成長因子受容体３（ＦＧＦＲ３）は、骨の成長に対する負の調節効果および軟骨細胞増殖の阻害作用を有することが示された。死に至る形成異常は、線維芽細胞成長因子受容体３における種々の突然変異により誘発され、そして一突然変異体、ＴＤIIＦＧＦＲ３は、転写因子Ｓｔａｔ１を活性化して、細胞周期阻害剤の発現、成長抑止および異常な骨発達をまねく構成的チロシンキナーゼ活性を有する（Su et al.、Nature、１９９７、３８６、２８８−２９２）。ＦＧＦＲ３はまた、多発性骨髄腫型癌で発現されることが多い。
【００３２】
Ｌｃｋは、Ｔ細胞シグナリングにおいてある一定の役割を演じる。Ｌｃｋ遺伝子を欠くマウスの場合、胸腺細胞発生能力が不十分である。Ｔ細胞シグナリングの正の活性化因子としてＬｃｋが機能することは、Ｌｃｋ阻害剤が自己免疫疾患、例えば慢性関節リウマチの処置に有用であり得ることを示唆している。
【００３３】
ＪＮＫは、他のＭＡＰＫと一緒になって、癌、トロンビン誘導血小板凝集、免疫不全疾患、自己免疫疾患、細胞死、アレルギー、オステオポローシスおよび心臓病に対する細胞性応答の伝達においてある一定の役割を有すると考えられる。ＪＮＫ経路の活性化に関連した治療標的には、慢性骨髄性白血病（ＣＭＬ）、慢性関節リウマチ、喘息、変形性関節症、虚血、癌および神経変性疾患が含まれる。肝臓病または肝臓虚血症状の発現に関してＪＮＫ活性化が重要であることから、本発明化合物はまた様々な肝臓疾患を処置するのにも有用であり得る。また、ＪＮＫが様々な心臓ストレス形態に対する肥大応答を伝達することが示されたため、心臓血管疾患、例えば心筋梗塞またはうっ血性心不全におけるＪＮＫについての役割も報告されている。ＪＮＫカスケードはまた、ＩＬ−２プロモーターの活性化を含むＴ細胞活性化においてある一定の役割を演じることが立証されている。すなわち、ＪＮＫの阻害剤は、病気に伴う免疫応答の改変に関する治療的価値を有し得る。様々な癌におけるＪＮＫ活性化についての役割もまた確立されており、癌におけるＪＮＫ阻害剤の使用についての可能性が示唆されている。例えば、構成的活性化ＪＮＫは、ＨＴＬＶ−１介在による腫瘍発生と関連している［Oncogene、１３：１３５−４２（１９９６）］。ＪＮＫは、カポジ肉腫（ＫＳ）においてある一定の役割を演じ得る。ＫＳ増殖に関与する他のサイトカイン、例えば血管内皮成長因子（ＶＥＧＦ）、ＩＬ−６およびＴＮＦαの他の増殖作用もまた、ＪＮＫにより伝達され得る。さらに、ｐ２１０ ＢＣＲ−ＡＢＬ形質転換細胞におけるｃ−ｊｕｎ遺伝子の調節作用は、ＪＮＫの活性と一致していることから、慢性骨髄性白血病（ＣＭＬ）に対する処置におけるＪＮＫ阻害剤についてのある一定の役割が示唆されている［Blood、９２：２４５０−６０（１９９８）］。
【００３４】
ある種の異常な増殖状態は、ｒａｆ発現と関連していると考えられているため、ｒａｆ発現の阻害に応答していると考えられる。ｒａｆタンパク質の異常に高い発現レベルもまた、形質転換および異常な細胞増殖に関与している。これらの異常な増殖状態もまた、ｒａｆ発現の阻害に応答性を示すと考えられる。例えば、全肺癌細胞系の６０％は異常に高いレベルのｃ−ｒａｆ ｍＲＮＡおよびタンパク質を発現することが報告されているため、ｃ−ｒａｆタンパク質の発現は、異常な細胞増殖においてある一定の役割を演じると考えられる。異常な増殖状態のさらなる例は、過剰増殖性疾患、例えば癌、腫瘍、過形成、肺線維症、新脈管形成、乾癬、アテローム性動脈硬化症および血管における平滑筋細胞増殖、例えば血管形成術後の狭窄または再狭窄である。ｒａｆがその一部である細胞シグナリング経路はまた、例えばＴ細胞増殖（Ｔ細胞活性化および成長）を特徴とする炎症性疾患、例えば組織移植拒絶、内毒素ショックおよび糸球体腎炎に関与している。
【００３５】
ストレス活性化プロテインキナーゼ（ＳＡＰＫ）は、ｃ−ｊｕｎ転写因子の活性化およびｃ−ｊｕｎにより調節される遺伝子の発現をもたらすシグナル伝達経路における最後から２番目の段階を代表する一群のプロテインキナーゼである。特に、ｃ−ｊｕｎは、遺伝子毒性傷害により損傷を受けたＤＮＡの修復に関与するタンパク質をコード化する遺伝子の転写に関与する。従って、細胞においてＳＡＰＫ活性を阻害する薬剤は、ＤＮＡ修復を阻止し、ＤＮＡ損傷を誘導するかまたはＤＮＡ合成を阻止し、細胞のアポトーシスを誘導するかまたは細胞増殖を阻害する薬剤に対して細胞を感作する。
【００３６】
マイトジェン活性化プロテインキナーゼ（ＭＡＰＫ）は、様々な細胞外シグナルに応答して転写因子、翻訳因子および他の標的分子を活性化する保存されたシグナル伝達経路の要員である。ＭＡＰＫは、マイトジェン活性化プロテインキナーゼキナーゼ類（ＭＫＫ）による配列Ｔｈｒ−Ｘ−Ｔｙｒを有する二重リン酸化モチーフでのリン酸化により活性化される。より高等な真核生物では、ＭＡＰＫシグナリングの生理学的役割は、細胞事象、例えば増殖、発癌、発生および分化と相関関係を示している。従って、これらの経路による（特にＭＫＫ４およびＭＫＫ６による）シグナル伝達の調節能力により、ＭＡＰＫシグナリングに関連したヒト疾患、例えば炎症性疾患、自己免疫疾患および癌についての処置および予防的治療の開発が導かれ得る。
【００３７】
Ｃｓｋは、Ｓｒｃ酵素のＣ−末端における単一チロシン残基をリン酸化することによりキナーゼ活性をダウンレギュレーションする（Okada et al.、J.Biol.Cheｍ.２６６：２４２４９−２４２５２、１９９１；および Bergman et al.、EMBO J.１１：２９１９−２９２４、１９９２）。この主たる調節機能により、Ｃｓｋは、Ｔ細胞活性化、ニューロン発達、細胞骨格体制および細胞周期制御を含む多くの生物学的機能に直接的影響を有する。
【００３８】
Ｆｅｓファミリーからの非受容体チロシンキナーゼの活性に関連した病気の例には、間葉由来の腫瘍および造血器官由来の腫瘍があるが、これらに限定されるわけではない。
【００３９】
上記によると、本発明は、さらに処置を必要とする対象において上記疾患または障害のいずれかを予防または処置する方法であって、対象に式（Ｉ）の化合物またはその医薬上許容される塩の治療有効量（下記「投与および医薬組成物」参照）を投与することを含む方法を提供する。上記使用のいずれについても、必要とされる投与量は、投与方法、処置される特定の状態および所望の効果により変動する。
【００４０】
投与および医薬組成物
一般に、本発明化合物は、単独または１種またはそれ以上の治療剤と組み合わせて、当業界で公知の通常の許容される方法のいずれかにより治療有効量で投与される。治療有効量は、病気の重篤度、対象の年齢および相対的健康状態、使用される化合物の効力および他の因子により広い範囲で変化し得る。一般に、満足すべき結果は、全身的に体重１ｋｇ当たり約０.０３〜２.５ｍｇの一日投与量で得られると示されている。大型哺乳類、例えばヒトにおける指示一日用量は、約０.５ｍｇ〜約１００ｍｇの範囲であり、好都合には例えば一日４回までの分割用量または遅延形態で投与される。経口投与に適切な単位用量形態は、約１〜５０ｍｇの有効成分を含む。
【００４１】
本発明化合物は、慣用的経路により、特に腸溶的、例えば錠剤またはカプセル剤の形態で例えば経口的に、または例えば注射可能溶液または懸濁液形態で非経口的に、例えばローション、ゲル、軟膏またはクリーム形態で局所的に、または鼻適用または坐剤形態での医薬組成物として投与され得る。少なくとも１種の医薬上許容される担体または希釈剤と共に本発明化合物の遊離形態または医薬上許容される塩形態を含む医薬組成物は、混合、造粒またはコーティング法による慣用的方法で製造され得る。例えば、経口組成物は、ａ）希釈剤、例えば、乳糖、デキストロース、しょ糖、マンニトール、ソルビトール、セルロースおよび／またはグリシン、ｂ）滑沢剤、例えば、シリカ、タルク、ステアリン酸、そのマグネシウムまたはカルシウム塩および／またはポリエチレングリコール、また錠剤についてはｃ）結合剤、例えば珪酸アルミニウムマグネシウム、澱粉ペースト、ゼラチン、トラガカント、メチルセルロース、カルボキシメチルセルロースナトリウムおよび・またはポリビニルピロリドン、所望ならばｄ）崩壊剤、例えば澱粉、寒天、アルギン酸またはそのナトリウム塩、または起沸性混合物；および／またはｅ）吸収剤、着色剤、香味料および甘味料と一緒に有効成分を含む錠剤またはゼラチンカプセル剤であり得る。注射可能組成物は、水性等張溶液または懸濁液であり得、坐剤は脂肪性エマルションまたは懸濁液から製造され得る。組成物は、滅菌され、および／またはアジュバント、例えば保存、安定、湿潤または乳化剤、溶解促進剤、浸透圧調節用の塩および／または緩衝液を含み得る。さらに、それらはまた、他の治療上貴重な物質を含み得る。経皮適用に適切な製剤は、担体と共に本発明化合物の有効量を含む。担体は、宿主の皮膚への貫通を助ける吸収可能な薬理学上許容される溶媒を含み得る。例えば、経皮装置は、裏当て部材、化合物を所望により担体と含んでいてもよいレザーバー、所望による長期間にわたって予め定められた制御速度で宿主の皮膚へ化合物を送達するための速度制御バリアー、および皮膚への装置確保手段を含む包帯形態である。マトリックス経皮製剤もまた使用され得る。例えば皮膚および目への局所適用に適切な製剤は、好ましくは当業界でよく知られている水溶液、軟膏、クリームまたはゲルである。それらは可溶化剤、安定剤、浸透促進剤、緩衝液および保存剤を含み得る。
【００４２】
本発明化合物は、１種またはそれ以上の治療剤（医薬組成物）と組み合わせて治療有効量で投与され得る。例えば、シクロスポリン、ラパマイシンまたはアスコマイシン、またはその免疫抑制性類似体、例えばシクロスポリンＡ（ＣｓＡ）、シクロスポリンＧ、ＦＫ−５０６、ラパマイシン、または同等の化合物、コルチコステロイド、シクロホスファミド、アザチオプリン、メトトレキセート、ブレキナール、レフルノミド、ミゾリビン、ミコフェノール酸、ミコフェノレートモフェチル、１５−デオキシスペルグアリン、免疫抑制性抗体、特に白血球受容体、例えばＭＨＣ、ＣＤ２、ＣＤ３、ＣＤ４、ＣＤ７、ＣＤ２５、ＣＤ２８、Ｂ７、ＣＤ４５、ＣＤ５８またはそれらのリガンドについてのモノクローナル抗体、または他の免疫調節性化合物、例えばＣＴＬＡ４１ｇと組み合わせて使用されるとき、例えば、他の免疫調節性または抗炎症性物質との相乗効果が生じ得る。本発明化合物が他の治療と連係的に投与される場合、併用投与される化合物の投与量は、勿論使用される併用薬剤のタイプ、使用される特定薬剤、処置されている状態などにより異なる。
【００４３】
本発明はまた、ａ）本明細書に開示されている本発明化合物の遊離形態または医薬上許容される塩形態である第一薬剤、およびｂ）少なくとも１種の併用薬剤を含む組み合わせ医薬品、例えばキットを提供する。キットは、その投与についての使用説明書を含み得る。
【００４４】
本明細書で使用されている「併用投与」または「組み合わせ投与」などの語は、一患者への選択された治療剤の投与を包含することを意味し、薬剤が、必ずしも同一投与経路により、または同時に投与されるとは限らない治療法を含むものとする。
【００４５】
本明細書で使用されている「組み合わせ医薬品」の語は、複数の有効成分を混合または組み合わせることにより得られ、有効成分の固定的および非固定的組み合わせの両方を包含する製品をいう。「固定的組み合わせ」の語は、有効成分、例えば式（Ｉ）の化合物および併用薬剤が両方とも単一物体または用量形態で同時に患者に投与されることを意味する。「非固定的組み合わせ」の語は、有効成分、例えば式（Ｉ）の化合物および併用薬剤が、別々の物質として同時に、平行してまたは連続的に、特定の時間制限を伴わずに患者に投与されることを意味し、その場合上記投与により、患者の体内において２化合物の治療有効レベルがもたらされる。後者はまた、カクテル療法、例えば３種またはそれ以上の有効成分の投与に適用される。
【００４６】
本発明化合物の製造方法
本発明はまた、本発明化合物の製造方法を含む。記載されている反応では、反応性官能基、例えばヒドロキシ、アミノ、イミノ、チオまたはカルボキシ基を保護することが必要であり得、その場合、これらは、反応におけるそれらの望ましくない関与を回避するために、最終生成物において要望される。慣用的保護基は、標準的実施法に従って使用され得、例えばT.W.GreeneおよびP.G.M.Wuts 、“Protective Groups in Organic Chemistry”、ジョン・ワイリー・アンド・サンズ、１９９９年、第３版参照。
【００４７】
式（Ｉ）（式中、Ｒ１は−ＮＲ６Ｒ７である）の化合物は、以下の反応スキームＩに示した要領で進めることにより製造され得る：
反応スキームＩ
【化２】
2007504159.tif 000003
［式中、
Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｗ、Ｙ、Ｚ、ｍおよびｎは、「発明の要約」で式（Ｉ）について記載した意味であり、Ｖはメチルスルホニル基、またはハロ基、例えばヨードまたはクロロ、好ましくはクロロを表す］
【００４８】
式（Ｉ）の化合物は、６０〜８０℃の温度範囲で、適切な溶媒（例、ｎ−ブタノール、酢酸など）の存在下、式２の化合物を式３の化合物と反応させることにより製造され得、完了するのに３６時間程度までかかり得る。
【００４９】
式（Ｉ）（式中、Ｙは炭素である）の化合物は、以下の反応スキームIIに示した要領で製造され得る：
反応スキームII
【化３】
2007504159.tif 000004
［式中、
Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｗ、Ｚ、ｍおよびｎは、「発明の要約」で式（Ｉ）について記載した意味であり、Ｌは脱離基である］
【００５０】
式（Ｉ）の化合物は、０℃〜約９０℃の温度範囲で、適切な溶媒（例、ＴＨＦなど）の存在下、トリホスゲンまたはホスゲンおよび適切な塩基（例、ＤＩＥＡなど）を用いて、式４の化合物を式５の化合物と反応させることにより製造され得、完了するのに２４時間程度までかかり得る。
【００５１】
反応スキームＩおよびIIは、参考文献および下記実施例において典型的に示されている。
【００５２】
本発明化合物の追加的製造方法
本発明化合物は、化合物の遊離塩基形態を医薬上許容される無機または有機酸と反応させることにより医薬上許容される酸付加塩として製造され得る。別法として、本発明化合物の医薬上許容される塩基付加塩は、化合物の遊離酸形態を医薬上許容される無機または有機塩基と反応させることにより製造され得る。別法として、本発明化合物の塩形態は、出発物質または中間体の塩を用いて製造され得る。
【００５３】
本発明化合物の遊離酸または遊離塩基形態は、対応する塩基付加塩または酸付加塩形態からそれぞれ製造され得る。例えば、本発明化合物の酸付加塩形態は、適切な塩基（例、水酸化アンモニウム溶液、水酸化ナトリウムなど）で処理することにより対応する遊離塩基に変換され得る。本発明化合物の塩基付加塩形態は、適切な酸（例、塩酸など）で処理することにより対応する遊離酸に変換され得る。
【００５４】
本発明化合物の非酸化形態は、０〜８０℃で適切な不活性有機溶媒（例、アセトニトリル、エタノール、水性ジオキサンなど）中、還元剤（例、硫黄、二酸化硫黄、トリフェニルホスフィン、水素化ホウ素リチウム、水素化ホウ素ナトリウムなど）で処理することにより本発明化合物のＮ−酸化物から製造され得る。
【００５５】
本発明化合物のプロドラッグ誘導体は、当業者に公知の方法により製造され得る（例、さらなる詳細については、Saulnier et al.、（１９９４）、Bioorganiic and Medicinal Chemistry Letters、第４巻、１９８５頁参照）。例えば、適切なプロドラッグは、本発明の非誘導体化化合物を適切なカルバミル化剤（例、１,１−アシルオキシアルキルカルバノクロリデート、パラ−ニトロフェニルカーボネートなど）と反応させることにより製造され得る。
【００５６】
本発明化合物の保護誘導体は、当業者に公知の手段により製造され得る。保護基の生成およびそれらの除去に適用可能な技術の詳細な説明は、T.W.Greene、“Protecting Groups in Organic Chemistry”、第３版（ジョン・ワイリー・アンド・サンズ、インコーポレイテッド、１９９９）に記載されている。
【００５７】
本発明化合物は、好都合には本発明製法中に溶媒和物（例、水和物）として製造または形成され得る。本発明化合物の水和物は、好都合には有機溶媒、例えばダイオキシン、テトラヒドロフランまたはメタノールを用いることにより、水性／有機溶媒混合物からの再結晶化により製造され得る。
【００５８】
本発明化合物は、光学活性分割剤と化合物のラセミ混合物を反応させて一対のジアステレオマー化合物を形成させ、ジアステレオマーを分離し、光学的に純粋な鏡像体を回収することにより、それらの個々の立体異性体として製造され得る。さらに鏡像体は、キラル分取ＨＰＬＣにより、または鏡像異性的に純粋な試薬を用いて分離され得る。鏡像体の分割は本発明化合物の共有結合ジアステレオマー誘導体を用いて実施され得るが、解離可能な複合体（例、結晶性ジアステレオマー塩）が好ましい。ジアステレオマーは、独特な物理特性（例、融点、沸点、溶解度、反応性など）を有するため、これらの相違点を利用することにより容易に分離され得る。ジアステレオマーは、クロマトグラフィー、または好ましくは、溶解度の差異に基づいた分離／分割技術により分離され得る。次いで、光学的に純粋な鏡像体は、ラセミ化を誘発することのない実践的手段により、分割剤と一緒に回収される。化合物の立体異性体をそれらのラセミ混合物から分割するのに適用され得る技術のさらに詳細な説明は、Jean Jacques、Andre Collet、Samuel H.Wilen、“Enantiomers, Racemates and Resolutions”（ジョン・ワイリー・アンド・サンズ、インコーポレイテッド、１９８１）に記載されている。
【００５９】
要約すると、式（Ｉ）の化合物は、以下の工程を含む製法により製造され得る：
（ａ）反応スキームＩおよびIIの工程、および
（ｂ）所望により本発明化合物を医薬上許容される塩に変換し、
（ｃ）所望により本発明化合物の塩形態を非塩形態に変換し、
（ｄ）所望により本発明化合物の非酸化形態を医薬上許容されるＮ−酸化物に変換し、
（ｅ）所望により本発明化合物のＮ−酸化物形態をその非酸化形態に変換し、
（ｆ）所望により本発明化合物の個々の異性体を異性体の混合物から分割し、
（ｇ）所望により本発明の非誘導体化化合物を医薬上許容されるプロドラッグ誘導体に変換し、そして
（ｈ）所望により本発明化合物のプロドラッグ誘導体をその非誘導体化形態に変換する。
【００６０】
出発物質の製造を具体的に記載していない場合、化合物は公知であるかまたは当業界で公知の方法と同様にしてまたは後記実施例で開示されている要領で製造され得る。
【００６１】
当業者であれば、上記形質転換は本発明化合物の製造方法の代表的なものに過ぎず、他の公知方法でも同様に使用され得ることは容易に理解できるはずである。
【００６２】
実施例
以下の実施例では、中間体の製法（参考例）および代表的な本発明化合物の製法（実施例）を詳細に記載しているが、これらは説明を目的としたものであって、本発明を制限するものではない。
【００６３】
参考例１
４−クロロ−ピロロ［２,３−ｄ］ピリミジン−７−カルボン酸［４−（４−モルホリン−４−イル−フェニルカルバモイル）−フェニル］−アミド樹脂
【化４】
2007504159.tif 000005
４−モルホリノアニリンをもつＰＡＬ樹脂（ミッドウェスト・バイオ−テック）（１ｇ、１ｍｍｏｌ）、ＤＩＥＡ（１.０４ｍＬ、６ｍｍｏｌ）、およびニトロベンゾイルクロリド（３ｍｍｏｌ）を、ＣＨ２Ｃｌ２（１０ｍＬ）中で混合し、溶液を室温で１６時間振とうする。生成した混合物を濾過し、樹脂をＤＭＦ（３×１０ｍＬ）、ＣＨ２Ｃｌ２（３×１０ｍＬ）、ＭｅＯＨ（３×１０ｍＬ）で洗浄し、真空下で乾燥する。樹脂（１０ｍｇ）を３０分間ＴＦＡ／ＣＨ２Ｃｌ２／Ｈ２Ｏ（４５／５０／５）（２００μＬ）で処理する。ＬＣ−ＭＳは唯一のピークを示した。観察されたＭＳ（Ｍ＋Ｈ＋）は３２８.１であり、計算されたＭＳ（Ｍ＋Ｈ＋）は３２８.１２である。
【００６４】
生成した樹脂を、ＮＭＰ（１０ｍＬ）中のＳｎＣｌ２・２Ｈ２Ｏ（２.２６ｇ、１０ｍｍｏｌ）と混合し、４８時間振とうする。溶液を濾過し、樹脂をＮＭＰ（３×１０ｍＬ）、ＣＨ２Ｃｌ２（３×１０ｍＬ）、ＭｅＯＨ（３×１０ｍＬ）で洗浄し、真空下で乾燥することにより、固体支持４−アミノ−Ｎ−（４−モルホリン−４−イル−フェニル）−ベンズアミドを得る。この樹脂（１０ｍｇ）を３０分間ＴＦＡ／ＣＨ２Ｃｌ２／Ｈ２Ｏ（４５／５０／５）（２００μＬ）で処理する。ＬＣ−ＭＳは唯一のピークを示した。観察されたＭＳ（Ｍ＋Ｈ＋）は２９８.１であり、計算されたＭＳ（Ｍ＋Ｈ＋）は２９８.１５である。
【００６５】
６−クロロ−７−デアザプリン（３００ｍｇ、２ｍｍｏｌ）、トリホスゲン（２９０ｍｇ、１ｍｍｏｌ）およびＤＩＥＡ（６８０μＬ、３.９ｍｍｏｌ）を、０℃で２時間、ＴＨＦ（１０ｍＬ）中で攪拌する。ＴＨＦを蒸発により除去し、残さをＴＨＦ（１０ｍＬ）に溶かす。溶液を４−アミノ−Ｎ−（４−モルホリン−４−イル−フェニル）−ベンズアミド樹脂と混合し、１８時間振とうする。溶液を濾過し、樹脂をＤＭＦ（３×１０ｍＬ）、ＣＨ２Ｃｌ２（３×１０ｍＬ）、ＭｅＯＨ（３×１０ｍＬ）で洗浄し、真空下で乾燥することにより、４−クロロ−ピロロ［２,３−ｄ］ピリミジン−７−カルボン酸−［４−（４−モルホリン−４−イル−フェニルカルバモイル）−フェニル］−アミド樹脂を得る。さらに、１０ｍｇの樹脂を３０分間ＴＦＡ／ＣＨ２Ｃｌ２／Ｈ２Ｏ（４５／５０／５）（２００μＬ）で処理する。ＬＣ−ＭＳは唯一のピークを示した。観察されたＭＳ（Ｍ＋Ｈ＋）は４７７.１０であり、計算されたＭＳ（Ｍ＋Ｈ＋）は４７７.１４である。４−クロロ−ピロロ［２,３−ｄ］ピリミジン−７−カルボン酸メチル−［４−（３−モルホリン−４−イル−フェニルカルバモイル）−フェニル］−アミド樹脂および４−クロロ−ピロロ［２,３−ｄ］ピリミジン−７−カルボン酸［３−（４−モルホリン−４−イル−フェニルカルバモイル）−フェニル］−アミド樹脂も適切な出発物質を用いて同様の方法で製造される。
【００６６】
参考例２
４−クロロ−ピロロ［２,３−ｄ］ピリミジン−７−カルボン酸｛２−メチル−５−［４−（４−メチル−ピペラジン−１−イルメチル）−ベンゾイルアミノ］フェニル｝−アミド樹脂
【化５】
2007504159.tif 000006
４−メチル−３−ニトロ−アナリンＰＡＬ樹脂（５ｇ、５ｍｍｏｌ）、ＤＩＥＡ（５.３４ｍＬ、２０ｍｍｏｌ）、および４−（クロロメチル）−ベンゾイルクロリド（１.８９ｇ、１０ｍｍｏｌ）をＣＨ２Ｃｌ２（５０ｍＬ）中で混合し、１８時間室温で振とうする。溶液を濾過し、樹脂をＤＭＦ（３×５０ｍＬ）、ＣＨ２Ｃｌ２（３×５０ｍＬ）、ＭｅＯＨ（３×５０ｍＬ）で洗浄し、真空下で乾燥する。この樹脂（１０ｍｇ）を３０分間ＴＦＡ／ＣＨ２Ｃｌ２／Ｈ２Ｏ（４５／５０／５）（２００μＬ）で処理する。ＬＣ−ＭＳは一つの主要ピークを示す。観察されたＭＳ（Ｍ＋Ｈ＋）は３０５.０であり、計算されたＭＳ（Ｍ＋Ｈ＋）は３０４.０６である。
【００６７】
樹脂をＤＭＳＯ（５０ｍＬ）中で１−メチルピペラジン（５.５６ｍＬ、４９.２ｍｍｏｌ）と混合し、一晩振とうした後、濾過し、ＤＭＦ（３×５０ｍＬ）、ＣＨ２Ｃｌ２（３×５０ｍＬ）、ＭｅＯＨ（３×５０ｍＬ）で洗浄し、真空下で乾燥する。この樹脂（１０ｍｇ）を３０分間ＴＦＡ／ＣＨ２Ｃｌ２／Ｈ２Ｏ（４５／５０／５）（２００μＬ）で処理する。ＬＣ−ＭＳは唯一のピークを示す。観察されたＭＳ（Ｍ＋Ｈ＋）は３６９.２であり、計算されたＭＳ（Ｍ＋Ｈ＋）は３６９.１８である。
【００６８】
生成した樹脂を、ＮＭＰ（５０ｍＬ）中のＳｎＣｌ２・２Ｈ２Ｏ（１１.３ｇ、５０ｍｍｏｌ）と混合し、４８時間振とうする。溶液を濾過し、樹脂をＮＭＰ（３×５０ｍＬ）、ＣＨ２Ｃｌ２（３×５０ｍＬ）、ＭｅＯＨ（３×５０ｍＬ）で洗浄し、真空下で乾燥することにより、固体支持Ｎ−（３−アミノ−４−メチル−フェニル）−Ｎ−メチル−４−（４−メチル−ピペラジン−１−イルメチル）−ベンズアミドを得る。この樹脂（１０ｍｇ）を３０分間ＴＦＡ／ＣＨ２Ｃｌ２／Ｈ２Ｏ（４５／５０／５）（２００μＬ）で処理する。ＬＣ−ＭＳは唯一のピークを示す：観察されたＭＳ（Ｍ＋Ｈ＋）は３３９.２であり、計算されたＭＳ（Ｍ＋Ｈ＋）は３３９.２１である。
【００６９】
６−クロロ−７−デアザプリン（１.５０ｇ、１０ｍｍｏｌ）、トリホスゲン（１.４５ｇ、５ｍｍｏｌ）およびＤＩＥＡ（３.４ｍＬ、１９.５ｍｍｏｌ）を、０℃で３時間、ＴＨＦ（５０ｍＬ）中で攪拌する。ＴＨＦを蒸発により除去後、残さをＴＨＦ（５０ｍＬ）に溶かし、溶液をＮ−（３−アミノ−４−メチル−フェニル）−Ｎ−メチル−４−（４−メチル−ピペラジン−１−イルメチル）−ベンズアミド樹脂と混合し、１８時間振とうする。溶液を濾過し、樹脂をＤＭＦ（３×５０ｍＬ）、ＣＨ２Ｃｌ２（３×５０ｍＬ）、ＭｅＯＨ（３×５０ｍＬ）で洗浄し、真空下で乾燥することにより、４−クロロ−ピロロ［２,３−ｄ］ピリミジン−７−カルボン酸｛２−メチル−５−［４−（４−メチル−ピペラジン−１−イルメチル）−ベンゾイルアミノ］−フェニル｝−アミド樹脂を得る。この樹脂（１０ｍｇ）を３０分間ＴＦＡ／ＣＨ２Ｃｌ２／Ｈ２Ｏ（４５／５０／５）（２００μＬ）で処理する。ＬＣ−ＭＳ：観察されたＭＳ（Ｍ＋Ｈ＋）は５１８.２０であり、計算されたＭＳ（Ｍ＋Ｈ＋）は５１８.２である。
【００７０】
参考例３
４−クロロ−ピロロ［２,３−ｄ］ピリミジン−７−カルボン酸｛２−メチル−５−［３−（４−メチル−イミダゾール−１−イル）−５−トリフルオロメチル−ベンゾイルアミノ］−フェニル｝−アミド樹脂
【化６】
2007504159.tif 000007
ＰＡＬ樹脂４−メチル−３−ニトロ−アニリン（５ｇ、５ｍｍｏｌ）、ビス（２−オキソ−３−オキサゾリジニル）ホスフィン酸クロリド（５.０９ｇ、２０ｍｍｏｌ）、ＤＩＥＡ（３.５ｍＬ、２０ｍｍｏｌ）、および３−（４−メチル−イミダゾール−１−イル）−５−トリフルオロメチル−安息香酸（２.７１ｇ、１０.０ｍｍｏｌ）をＤＭＦ（５０ｍＬ）中で混合し、１８時間室温で振とうする。生成した混合物を濾過し、樹脂をＤＭＦ（３×５０ｍＬ）、ＣＨ２Ｃｌ２（３×５０ｍＬ）、ＭｅＯＨ（３×５０ｍＬ）で洗浄し、真空下で乾燥する。この樹脂１０ｍｇを３０分間ＴＦＡ／ＣＨ２Ｃｌ２／Ｈ２Ｏ（４５／５０／５）（２００μＬ）で処理する。ＬＣ−ＭＳは唯一のピークを示す：観察されたＭＳ（Ｍ＋Ｈ＋）は４０５.１であり、計算されたＭＳ（Ｍ＋Ｈ＋）は４０５.１１である。
【００７１】
生成した樹脂を、ＮＭＰ（５０ｍＬ）中のＳｎＣｌ２・２Ｈ２Ｏ（１１.３ｇ、５０ｍｍｏｌ）と混合し、室温で４８時間振とうする。溶液を濾過し、樹脂をＮＭＰ（３×５０ｍＬ）、ＣＨ２Ｃｌ２（３×５０ｍＬ）、ＭｅＯＨ（３×５０ｍＬ）で洗浄し、真空下で乾燥することにより、Ｎ−（３−アミノ−４−メチル−フェニル）−３−（４−メチル−イミダゾール−１−イル）−５−トリフルオロメチル−ベンズアミド樹脂を得る。この樹脂（１０ｍｇ）を３０分間ＴＦＡ／ＣＨ２Ｃｌ２／Ｈ２Ｏ（４５／５０／５）（２００μＬ）で処理する。ＬＣ−ＭＳは唯一のピークを示す：観察されたＭＳ（Ｍ＋Ｈ＋）は３７５.１であり、計算されたＭＳ（Ｍ＋Ｈ＋）は３７５.１４である。
【００７２】
６−クロロ−７−デアザプリン（１.５０ｇ、１０ｍｍｏｌ）、トリホスゲン（１.４５ｇ、５ｍｍｏｌ）およびＤＩＥＡ（３.４ｍＬ、２０ｍｍｏｌ）を、０℃で３時間、ＴＨＦ（５０ｍＬ）中で攪拌する。ＴＨＦを蒸発により除去し、残さをＴＨＦ（５０ｍＬ）に溶かし、溶液をＰａｌ Ｎ−（３−アミノ−４−メチル−フェニル）−３−（４−メチル−イミダゾール−１−イル）−５−トリフルオロメチル−ベンズアミド樹脂（５ｇ、５ｍｍｏｌ）と混合し、室温で１８時間振とうする。溶液を濾過し、樹脂をＤＭＦ（３×５０ｍＬ）、ＣＨ２Ｃｌ２（３×５０ｍＬ）、ＭｅＯＨ（３×５０ｍＬ）で洗浄し、真空下で乾燥することにより、４−クロロ−ピロロ［２,３−ｄ］ピリミジン−７−カルボン酸｛２−メチル−５−［３−（４−メチル−イミダゾール−１−イル）−５−トリフルオロメチル−ベンゾイルアミノ］−フェニル｝−アミド樹脂を得る。この樹脂（１０ｍｇ）を３０分間ＴＦＡ／ＣＨ２Ｃｌ２／Ｈ２Ｏ（４５／５０／５）（２００μＬ）で処理する。ＬＣ−ＭＳは唯一のピークを示す：観察されたＭＳ（Ｍ＋Ｈ＋）は５５４.１であり、計算されたＭＳ（Ｍ＋Ｈ＋）は５５４.１２である。
【００７３】
参考例４
参考例３の液相合成は、室温で１２時間攪拌しながら、ＤＭＦ（１５ｍＬ）中で３−ニトロ−４−メチルアニリン（３.００ｇ、１１.１ｍｍｏｌ）、Ｏ−（７−アザベンゾトリアゾール−１−イル）−Ｎ,Ｎ,Ｎ',Ｎ'−テトラメチルウロニウムヘキサフルオロホスフェート（５.４９ｇ、１４.４ｍｍｏｌ）、ＤＩＥＡ（５.００ｍＬ、２８.８ｍｍｏｌ）、および３−（４−メチル−イミダゾール−１−イル）−５−トリフルオロ−メチル−安息香酸（２.０２ｇ、１３.３ｍｍｏｌ）を混合することにより達成される。水（１５０ｍＬ）を溶液に加え、明黄色沈澱物を濾過し、水で洗浄し、真空下で乾燥することにより、４.３ｇの生成物を得る（収率９７％）。ＬＣ−ＭＳは唯一のピークを示した：観察されたＭＳ（Ｍ＋Ｈ＋）は４０５.１であり、計算されたＭＳ（Ｍ＋Ｈ＋）は４０５.１１である。
【００７４】
明黄色固体を、Ｈ２下、ＭｅＯＨ（５０ｍＬ）中で１０−ｗｔ％ Ｐｄ／Ｃ（６００ｍｇ）と攪拌する。２４時間後、懸濁した溶液を濾過し、Ｐｄ／ＣをＭｅＯＨ（３×５０ｍＬ）で洗浄する。ＭｅＯＨ溶液を合わせ、濃縮し、真空下で乾燥することにより、Ｎ−（３−アミノ−４−メチル−フェニル）−３−（４−メチル−イミダゾール−１−イル）−５−トリフルオロメチル−ベンズアミドを得る（３.５ｇ、収率８４％）。ＬＣ−ＭＳは唯一のピークを示す：観察されたＭＳ（Ｍ＋Ｈ＋）は３７５.１であり、計算されたＭＳ（Ｍ＋Ｈ＋）は３７５.１４である。
【００７５】
６−クロロ−７−デアザプリン（３.９ｇ、２５.５ｍｍｏｌ）、トリホスゲン（３.８０ｇ、１２.８ｍｍｏｌ）、およびＤＩＥＡ（８.９ｍＬ、５１ｍｍｏｌ）を、０℃で３時間、ＴＨＦ（１００ｍＬ）中で攪拌する。ＴＨＦを蒸発により除去し、残さをＴＨＦ（１００ｍＬ）に溶かす。溶液を、Ｎ−（３−アミノ−４−メチル−フェニル）−３−（４−メチル−イミダゾール−１−イル）−５−トリフルオロメチル−ベンズアミド（３.５ｇ、９.３ｍｍｏｌ）と混合し、室温で１８時間振とうする。溶媒を蒸発させ、残さをシリカゲルカラムクロマトグラフィー（ＣＨ２Ｃｌ２中２％のＭｅＯＨ）により精製して、４−クロロ−ピロロ［２,３−ｄ］ピリミジン−７−カルボン酸｛２−メチル−５−［３−（４−メチル−イミダゾール−１−イル）−５−トリフルオロメチル−ベンゾイルアミノ］−フェニル｝−アミドを得る（３.４ｇ、収率６５％）。1Ｈ ＮＭＲ (４００ ＭＨｚ, ＤＭＳＯ-ｄ6) δ 11.07 (s, 1Ｈ), 10.71 (s, 1Ｈ), 9.62 (s, 1Ｈ), 8.99 (s, 1Ｈ), 8.62 (s, 1Ｈ), 8.55 (s, 1Ｈ), 8.46 (d, Ｊ = 4.0 Ｈｚ, 1Ｈ), 8.24 (d, Ｊ = 4.0 Ｈｚ, 1Ｈ), 8.18 (s, 1Ｈ), 7.62 (d, Ｊ = 8.0 Ｈｚ, 1Ｈ), 7.35 (d, Ｊ = 8.0 Ｈｚ, 1Ｈ), 6.96 (d, Ｊ = 4.0 Ｈｚ, 1Ｈ), 2.47 (s, 3Ｈ), 2.37 (s, 3Ｈ); ＥＳＩＭＳ ｍ／ｚ 554.1 (Ｍ+ + 1)。
【００７６】
実施例１
４−(３−トリフルオロメチル−フェニルアミノ)−ピロロ[２,３−ｄ]ピリミジン−７−カルボン酸 [３−(４−モルホリン−４−イル−フェニルカルバモイル)−フェニル]−アミド
【化７】
2007504159.tif 000008
ｎ−ブタノール（２ｍＬ）中の参考例１と同様にして製造された、４−クロロ−ピロロ［２,３−ｄ］ピリミジン−７−カルボン酸［３−（４−モルホリン−４−イル−フェニルカルバモイル）−フェニル］−アミド樹脂（５０ｍｇ、０.０５ｍｍｏｌ）を、アセチルクロリド（１７.８μＬ、０.２５ｍｍｏｌ）および３−トリフルオロメチル−アニリン（３１μＬ、０.２５ｍｍｏｌ）と混合するか、または３−トリフルオロメチル−アニリンのＨＣｌ塩（５０ｍｇ、０.２５ｍｍｏｌ）のみと混合し、８０℃で２４時間振とうする。生成した混合物を濾過し、樹脂を３０分間ＴＦＡ／ＣＨ２Ｃｌ２／Ｈ２Ｏ（４５／５０／５）（６００μＬ）で処理した後、濾過し、ＣＨ２Ｃｌ２（３×２ｍＬ）、ＭｅＯＨ（３×２ｍＬ）で洗浄する。次いで、洗浄液を合わせ、濃縮する。残さを分取ＨＰＬＣで精製することにより、４−(３−トリフルオロメチル−フェニルアミノ)−ピロロ[２,３−ｄ]ピリミジン−７−カルボン酸 [３−(４−モルホリン−４−イル−フェニルカルバモイル)−フェニル]−アミド（１９.０ｍｇ、収率６４％）を得る。1Ｈ ＮＭＲ (４００ ＭＨｚ, ＤＭＳＯ-ｄ6) δ 11.75 (s, 1Ｈ), 10.16 (s, 1Ｈ), 10.09 (s, 1Ｈ), 8.69 (s, 1Ｈ), 8.31 (s, 1Ｈ), 8.22 (d, Ｊ = 8.3 Ｈｚ, 1Ｈ), 8.15 (s, 1Ｈ), 7.94 (d, Ｊ = 8.2 Ｈｚ, 1Ｈ), 7.92 (d, Ｊ = 3.9 Ｈｚ, 1Ｈ), 7.77 (d, Ｊ = 7.7 Ｈｚ, 1Ｈ), 7.64 (d, Ｊ = 8.8 Ｈｚ, 2Ｈ), 7.63 (d, Ｊ = 6.9 Ｈｚ, 1Ｈ), 7.58 (t, Ｊ = 8.0 Ｈｚ, 1Ｈ), 7.44 (d, Ｊ = 7.7 Ｈｚ, 1Ｈ), 7.13 (d, Ｊ = 4.0 Ｈｚ, 1Ｈ), 6.95 (d, Ｊ = 9.0 Ｈｚ, 2Ｈ), 3.74 (t, Ｊ = 4.6 Ｈｚ, 4Ｈ), 3.08 (t, Ｊ = 4.7 Ｈｚ, 4Ｈ); ＥＳＩＭＳ ｍ／ｚ 602.20 (Ｍ+ + 1)。
【００７７】
実施例２
４−(４−トリフルオロメチル−１−フェニルアミノ)−ピロロ[２,３−ｄ]ピリミジン−７−カルボン酸｛２−メチル−５−[４−(４−メチル−ピペラジン−１−イルメチル)−ベンゾイルアミノ］−フェニル｝−アミド
【化８】
2007504159.tif 000009
ｎ−ブタノール（２ｍＬ）中の参考例２と同様にして製造された、４−クロロ−ピロロ［２,３−ｄ］ピリミジン−７−カルボン酸｛２−メチル−５−［４−（４−メチル−ピペラジン−１−イルメチル）−ベンゾイルアミノ］−フェニル｝アミド樹脂（５０ｍｇ、０.０５ｍｍｏｌ）を、アセチルクロリド（１７.８μＬ、０.２５ｍｍｏｌ）および４−（トリフルオロメチル）アニリン（３１μＬ、０.２５ｍｍｏｌ）と混合するか、または４−トリフルオロメチル−アニリン塩酸塩（４９.４ｍｇ、０.２５ｍｍｏｌ）のみと混合し、８０℃で２４時間振とうする。生成した混合物を濾過し、樹脂を３０分間ＴＦＡ／ＣＨ２Ｃｌ２／Ｈ２Ｏ（４５／５０／５）（６００μＬ）で処理した後、濾過し、ＣＨ２Ｃｌ２（３×２ｍＬ）、ＭｅＯＨ（３×２ｍＬ）で洗浄する。次いで、洗浄液を合わせ、濃縮する。残さを分取ＨＰＬＣで精製することにより、４−(４−トリフルオロメチル−１−フェニルアミノ)−ピロロ[２,３−ｄ]ピリミジン−７−カルボン酸｛２−メチル−５−[４−(４−メチル−ピペラジン−１−イルメチル)−ベンゾイルアミノ]−フェニル｝−アミド（１８.６ｍｇ、収率５８％）を得る。1Ｈ ＮＭＲ (４００ ＭＨｚ, ＤＭＳＯ-ｄ6) δ 11.47 (s, 1Ｈ), 10.34 (s, 1Ｈ), 10.16 (s, 1Ｈ), 8.67 (s, 1Ｈ), 8.54 (s, 1Ｈ), 8.15 (d, Ｊ = 8.5 Ｈｚ, 2Ｈ), 8.03 (d, Ｊ = 8.0 Ｈｚ, 2Ｈ), 7.93 (d, Ｊ = 3.9 Ｈｚ, 1Ｈ), 7.76 (d, Ｊ = 8.6 Ｈｚ, 2Ｈ), 7.59 (d, Ｊ = 8.0 Ｈｚ, 1Ｈ), 7.56 (d, Ｊ = 8.0 Ｈｚ, 2Ｈ), 7.30 (d, Ｊ = 8.0 Ｈｚ, 1Ｈ), 7.17 (d, Ｊ = 3.9 Ｈｚ, 1Ｈ), 4.01 (s, 2Ｈ), 3.80-3.20 (ｍ, 8Ｈ), 2.83 (s, 3Ｈ), 2.46 (s, 3Ｈ); ＥＳＩＭＳ ｍ／ｚ 643.20 (Ｍ+ + 1)。
【００７８】
実施例３
４−（３−ジメチルアミノ−フェニルアミノ）−ピロロ［２,３−ｄ］ピリミジン−７−カルボン酸｛２−メチル−５−［３−（４−メチル−イミダゾール−１−イル）−５−トリフルオロメチル−ベンゾイルアミノ］−フェニル｝アミド
【化９】
2007504159.tif 000010
ｎ−ブタノール（２ｍＬ）中の参考例３と同様にして製造された、４−クロロ−ピロロ［２,３−ｄ］ピリミジン−７−カルボン酸｛２−メチル−５−［３−（４−メチル−イミダゾール−１−イル）−５−トリフルオロメチル−ベンゾイルアミノ］−フェニル｝アミド樹脂（５０ｍｇ、０.０５ｍｍｏｌ）を、Ｎ,Ｎ−ジメチル−１,３−フェニレンジアミン二塩酸塩（５２.３ｍｇ、０.２５ｍｍｏｌ）と混合するかまたはアセチルクロリド（１７.８μＬ、０.２５ｍｍｏｌ）およびアニリンと混合し、８０℃で２４時間振とうする。生成した混合物を濾過し、樹脂を３０分間ＴＦＡ／ＣＨ２Ｃｌ２／Ｈ２Ｏ（４５／５０／５）（６００μＬ）で処理した後、濾過し、ＣＨ２Ｃｌ２（３×２ｍＬ）、ＭｅＯＨ（３×２ｍＬ）で洗浄する。次いで、洗浄液を合わせ、濃縮する。残さを分取ＨＰＬＣ−ＭＳで精製することにより、４−（３−ジメチルアミノ−フェニルアミノ）−ピロロ［２,３−ｄ］ピリミジン−７−カルボン酸｛２−メチル−５−［３−（４−メチル−イミダゾール−１−イル）−５−トリフルオロメチル−ベンゾイルアミノ］−フェニル｝アミド（２３.２ｍｇ、収率７１％）を得る。1Ｈ ＮＭＲ (４００ ＭＨｚ, ＤＭＳＯ-ｄ6) δ 11.60 (s, 1Ｈ), 10.65 (s, 1Ｈ), 9.68 (s, 1Ｈ), 9.61 (s, 1Ｈ), 8.60 (s, 1Ｈ), 8.54 (s, 1Ｈ), 8.53 (s, 1Ｈ), 8.46 (s, 1Ｈ), 8.41 (s, 1Ｈ), 8.16 (s, 1Ｈ), 7.82 (d, Ｊ = 3.9 Ｈｚ, 1Ｈ), 7.60 (d, Ｊ = 8.2 Ｈｚ, 1Ｈ), 7.32 (d, Ｊ = 3.6 Ｈｚ, 1Ｈ), 6.54 (d, Ｊ = 8.4 Ｈｚ, 1Ｈ), 2.92 (s, 6Ｈ), 2.45 (s, 3Ｈ), 2.35 (s, 3Ｈ); ＥＳＩＭＳ ｍ／ｚ 654.2 (Ｍ+ + 1)。
【００７９】
実施例４
４−(３−カルバモイル−フェニルアミノ)−ピロロ[２,３−ｄ]ピリミジン−７−カルボン酸 {２−メチル−５−[４−(４−メチル−ピペラジン−１−イルメチル)−ベンゾイルアミノ]−フェニル}−アミド
【化１０】
2007504159.tif 000011
ｎ−ブタノール（２ｍＬ）中の参考例２と同様にして製造された、４−クロロ−ピロロ［２,３−ｄ］ピリミジン−７−カルボン酸｛２−メチル−５−［４−（４−メチル−ピペラジン−１−イルメチル）−ベンゾイルアミノ］−フェニル｝−アミド樹脂（５０ｍｇ、０.０５ｍｍｏｌ）を、アセチルクロリド（１７.８μＬ、０.２５ｍｍｏｌ）および３−アミノベンズアミド（３４ｍｇ、０.２５ｍｍｏｌ）と混合し、８０℃で２４時間振とうする。生成した混合物を濾過し、樹脂を３０分間ＴＦＡ／ＣＨ２Ｃｌ２／Ｈ２Ｏ（４５／５０／５）（６００μＬ）で処理した後、濾過し、ＣＨ２Ｃｌ２（３×２ｍＬ）、ＭｅＯＨ（３×２ｍＬ）で洗浄する。次いで、洗浄液を合わせ、濃縮する。残さを分取ＨＰＬＣ−ＭＳで精製することにより、４−(３−カルバモイル−フェニルアミノ)−ピロロ[２,３−ｄ]ピリミジン−７−カルボン酸 {２−メチル−５−[４−(４−メチル−ピペラジン−１−イルメチル)−ベンゾイルアミノ]−フェニル}−アミド（１８.５ｍｇ、収率６０％）を得る。1Ｈ ＮＭＲ (４００ ＭＨｚ, ＤＭＳＯ-ｄ6) δ11.52 (s, 1Ｈ), 10.31 (s, 1Ｈ), 9.99 (s, 1Ｈ), 8.60 (s, 1Ｈ), 8.52 (d, Ｊ = 1.71 Ｈｚ, 1Ｈ), 8.23 (s, 1Ｈ), 8.12 (d, Ｊ = 7.59 Ｈｚ, 1Ｈ), 8.00 (s, 1Ｈ), 7.98 (d, Ｊ = 8.02 Ｈｚ, 2Ｈ), 7.87 (d, Ｊ = 3.89 Ｈｚ, 1Ｈ), 7.59 (dd, Ｊ = 17.87, 9.00 Ｈｚ, 2Ｈ), 7.49 (d, Ｊ = 7.98 Ｈｚ, 2Ｈ), 7.47 (s, 1Ｈ), 7.38 (s, 1Ｈ), 7.29 (d, Ｊ = 8.48 Ｈｚ, 1Ｈ), 7.11 (d, Ｊ = 3.89 Ｈｚ, 1Ｈ), 3.75 (s, 2Ｈ), 3.43-2.79 (ｍ, 8Ｈ), 2.50 (s, 3Ｈ), 2.49 (s, 3Ｈ); ＥＳＩＭＳ ｍ／ｚ 618.20 (Ｍ+ + 1)。
【００８０】
実施例５
４−(３−スルファモイル−フェニルアミノ)−ピロロ[２,３−ｄ]ピリミジン−７−カルボン酸 {２−メチル−５−[４−(４−メチル−ピペラジン−１−イルメチル)−ベンゾイルアミノ]−フェニル}−アミド
【化１１】
2007504159.tif 000012
ｎ−ブタノール（２ｍＬ）中の参考例２と同様にして製造された、４−クロロ−ピロロ［２,３−ｄ］ピリミジン−７−カルボン酸｛２−メチル−５−［４−（４−メチル−ピペラジン−１−イルメチル）−ベンゾイルアミノ］−フェニル｝−アミド樹脂（５０ｍｇ、０.０５ｍｍｏｌ）を、アセチルクロリド（１７.８μＬ、０.２５ｍｍｏｌ）および３−アミノベンゼンスルホンアミド（４３ｍｇ、０.２５ｍｍｏｌ）と混合し、８０℃で２４時間振とうする。生成した混合物を濾過し、樹脂を３０分間ＴＦＡ／ＣＨ２Ｃｌ２／Ｈ２Ｏ（４５／５０／５）（６００μＬ）で処理した後、濾過し、ＣＨ２Ｃｌ２（３×２ｍＬ）、ＭｅＯＨ（３×２ｍＬ）で洗浄する。次いで、洗浄液をｎ−ブタノールと合わせ、濃縮する。残さを分取ＨＰＬＣ−ＭＳで精製することにより、４−(３−スルファモイル−フェニルアミノ)−ピロロ[２,３−ｄ]ピリミジン−７−カルボン酸 {２−メチル−５−[４−(４−メチル−ピペラジン−１−イルメチル)−ベンゾイルアミノ]−フェニル}−アミド（１８.０ｍｇ、収率５５％）を得る。1Ｈ ＮＭＲ (４００ ＭＨｚ, ＤＭＳＯ-d6) δ 11.45 (s, 1Ｈ), 10.27 (s, 1Ｈ), 10.09 (s, 1Ｈ), 8.59 (s, 1Ｈ), 8.49 (s, 1Ｈ), 8.29 (s, 1Ｈ), 8.17 (d, Ｊ = 7.95 Ｈｚ, 1Ｈ), 7.95 (d, Ｊ = 7.94, 2Ｈ), 7.87 (d, Ｊ = 3.85 Ｈｚ, 1Ｈ), 7.54 (dd, Ｊ = 7.61, 15.51 Ｈｚ, 2Ｈ), 7.52 (s, 1Ｈ), 7.45 (d, Ｊ = 7.88 Ｈｚ, 2Ｈ), 7.37 (s, 2Ｈ), 7.25 (d, Ｊ = 8.30 Ｈｚ, 1Ｈ), 7.11 (d, Ｊ = 3.88 Ｈｚ, 1Ｈ), 3.69 (s, 2Ｈ), 3.54-3.3.17 (ｍ, 2Ｈ), 3.01-2.93 (ｍ, 6Ｈ), 2.75 (s, 3Ｈ), 2.41 (s, 3Ｈ); ＥＳＩＭＳ ｍ／ｚ 654.20 (Ｍ+ + 1)。
【００８１】
実施例６
４−[３−(１−ヒドロキシ−エチル)−フェニルアミノ]−ピロロ[２,３−ｄ]ピリミジン−７−カルボン酸 {２−メチル−５−[３−(４−メチル−イミダゾール−１−イル)−５−トリフルオロメチル−ベンゾイルアミノ]−フェニル}−アミド
【化１２】
2007504159.tif 000013
ｎ−ブタノール（２ｍＬ）中の参考例３と同様にして製造された、４−クロロ−ピロロ［２,３−ｄ］ピリミジン−７−カルボン酸｛２−メチル−５−［３−（４−メチル−イミダゾール−１−イル）−５−トリフルオロメチル−ベンゾイルアミノ］−フェニル｝アミド樹脂（５０ｍｇ、０.０５ｍｍｏｌ）を、アセチルクロリド（１７.８μＬ、０.２５ｍｍｏｌ）および３−（１−ヒドロキシエチル）アニリン（３４ｍｇ、０.２５ｍｍｏｌ）と混合し、８０℃で２４時間振とうする。生成した混合物を濾過し、樹脂を３０分間ＴＦＡ／ＣＨ２Ｃｌ２／Ｈ２Ｏ（４５／５０／５）（６００μＬ）で処理した後、濾過し、ＣＨ２Ｃｌ２（３×２ｍＬ）、ＭｅＯＨ（３×２ｍＬ）で洗浄する。次いで、洗浄液をｎ−ブタノールと合わせ、濃縮する。残さを分取ＨＰＬＣ−ＭＳで精製することにより、４−[３−(１−ヒドロキシ−エチル)−フェニルアミノ]−ピロロ[２,３−ｄ]ピリミジン−７−カルボン酸 {２−メチル−５−[３−(４−メチル−イミダゾール−１−イル)−５−トリフルオロメチル−ベンゾイルアミノ]−フェニル}−アミドを得る（１６.６ｍｇ、収率５１％）。1Ｈ ＮＭＲ (４００ ＭＨｚ, ＤＭＳＯ-ｄ6) δ 11.60 (s, 1Ｈ), 10.68 (s, 1Ｈ), 9.85 (s, 1Ｈ), 9.62 (s, 1Ｈ), 8.62 (s, 1Ｈ), 8.57 (s, 1Ｈ), 8.54 (s, 1Ｈ), 8.47 (s, 1Ｈ), 8.43 (s, 1Ｈ), 8.17 (s, 1Ｈ), 7.85 (d, Ｊ = 4.1 Ｈｚ, 2Ｈ), 7.70 (s, 1Ｈ), 7.61 (dd, Ｊ = 6.5, 8.2 Ｈｚ, 1Ｈ), 7.35 (d, Ｊ = 2.3 Ｈｚ, 1Ｈ), 7.33 (t, Ｊ = 7.8 Ｈｚ, 1Ｈ), 7.09 (s, 1Ｈ), 7.08 (d, Ｊ = 6.8 Ｈｚ, 1Ｈ), 4.75 (q, Ｊ = 6.4 Ｈｚ, 1Ｈ), 2.47 (s, 3Ｈ), 2.36 (s, 3Ｈ), 1.36 (d, Ｊ = 6.4 Ｈｚ, 3Ｈ); ＥＳＩＭＳ ｍ／ｚ 655.2 (Ｍ+ + 1)。
【００８２】
実施例７
４−(３−カルバモイル−フェニルアミノ)−ピロロ[２,３−ｄ]ピリミジン−７−カルボン酸 {２−メチル−５−[３−(４−メチル−イミダゾール−１−イル)−５−トリフルオロメチル−ベンゾイルアミノ]−フェニル}−アミド
【化１３】
2007504159.tif 000014
氷酢酸（２ｍＬ）中、参考例３と同様にして製造された、４−クロロ−ピロロ［２,３−ｄ］ピリミジン−７−カルボン酸｛２−メチル−５−［３−（４−メチル−イミダゾール−１−イル）−５−トリフルオロメチル−ベンゾイルアミノ］−フェニル｝アミド（５０ｍｇ、０.０９ｍｍｏｌ）を、３−アミノベンズアミド（２４.５ｍｇ、０.１８ｍｍｏｌ）と混合し、２４時間８０℃で振とうする。生成した混合物を直接分取ＨＰＬＣ−ＭＳで精製することにより、４−(３−カルバモイル−フェニルアミノ)−ピロロ[２,３−ｄ]ピリミジン−７−カルボン酸 {２−メチル−５−[３−(４−メチル−イミダゾール−１−イル)−５−トリフルオロメチル−ベンゾイルアミノ]−フェニル}−アミドを得る（４２.９ｍｇ、収率７３％）。1Ｈ ＮＭＲ (４００ ＭＨｚ, ＤＭＳＯ-ｄ6) δ 11.54 (s, 1Ｈ), 10.65 (s, 1Ｈ), 9.96 (s, 1Ｈ), 9.68 (s, 1Ｈ), 8.59 (d, Ｊ = 13.1 Ｈｚ, 1Ｈ), 8.51 (s, 1Ｈ), 8.50 (s, 1Ｈ), 8.45 (s, 1Ｈ), 8.41 (s, 1Ｈ), 8.19 (d, Ｊ = 10.1 Ｈｚ, 2Ｈ), 8.09 (d, Ｊ = 7.9 Ｈｚ, 1Ｈ), 7.94 (s, 1Ｈ), 7.83 (d, Ｊ = 3.9 Ｈｚ, 1Ｈ), 7.58 (d, Ｊ = 8.2 Ｈｚ, 1Ｈ), 7.57 (d, Ｊ = 4.7 Ｈｚ, 1Ｈ), 7.43 (t, Ｊ = 7.9 Ｈｚ, 1Ｈ), 7.35 (s, 1Ｈ), 7.30 (d, Ｊ = 8.5 Ｈｚ, 1Ｈ), 7.08 (d, Ｊ = 3.9 Ｈｚ, 1Ｈ), 2.43 (s, 3Ｈ), 2.34 (s, 3Ｈ); ＥＳＩＭＳ ｍ／ｚ 654.1 (Ｍ+ + 1)。
【００８３】
実施例８
４−(３−スルファモイル−フェニルアミノ)−ピロロ[２,３−ｄ]ピリミジン−７−カルボン酸 {２−メチル−５−[３−(４−メチル−イミダゾール−１−イル)−５−トリフルオロメチル−ベンゾイルアミノ]−フェニル}−アミド
【化１４】
2007504159.tif 000015
氷酢酸（２ｍＬ）中、参考例３と同様にして製造された、４−クロロ−ピロロ［２,３−ｄ］ピリミジン−７−カルボン酸｛２−メチル−５−［３−（４−メチル−イミダゾール−１−イル）−５−トリフルオロメチル−ベンゾイルアミノ］−フェニル｝アミド（５０ｍｇ、０.０９ｍｍｏｌ）を、３−アミノベンゼンスルホンアミド（３１ｍｇ、０.１８ｍｍｏｌ）と混合し、２４時間８０℃で振とうする。生成した混合物を直接分取ＨＰＬＣ−ＭＳで精製することにより、４−(３−スルファモイル−フェニルアミノ)−ピロロ[２,３−ｄ]ピリミジン−７−カルボン酸 {２−メチル−５−[３−(４−メチル−イミダゾール−１−イル)−５−トリフルオロメチル−ベンゾイルアミノ]−フェニル}−アミドを得る（３５.３ｍｇ、収率５７％）。1Ｈ ＮＭＲ (４００ ＭＨｚ, ＤＭＳＯ-ｄ6) δ 11.51 (s, 1Ｈ), 10.64 (s, 1Ｈ), 10.10 (s, 1Ｈ), 9.58 (s, 1Ｈ), 8.60 (s, 1Ｈ), 8.58 (s, 1Ｈ), 8.51 (s, 1Ｈ), 8.50 (s, 1Ｈ), 8.29 (s, 1Ｈ), 8.17 (d, Ｊ = 8.1 Ｈｚ, 1Ｈ), 8.14 (s, 1Ｈ), 7.87 (d, Ｊ = 3.9 Ｈｚ, 1Ｈ), 7.59 (d, J = 1.8 Ｈｚ, 1Ｈ), 7.57 (d, Ｊ = 7.6 Ｈｚ, 1Ｈ), 7.53 (d, 5.9 Ｈｚ, 1Ｈ), 7.37 (s, 2Ｈ), 7.30 (d, Ｊ = 8.5 Ｈｚ, 1Ｈ), 7.11 (d, Ｊ = 3.9 Ｈｚ, 1Ｈ), 2.44 (s, 3Ｈ), 2.33 (s, 3Ｈ); ＥＳＩＭＳ ｍ／ｚ 690.1 (Ｍ+ + 1)。
【００８４】
適切な出発物質を用いて、上記実施例に記載された手順を反復することにより、表１に示された、以下の式（Ｉ）で示される化合物が得られる。
【００８５】
【表１】
2007504159.tif 000016
【表２】
2007504159.tif 000017
【表３】
2007504159.tif 000018
【表４】
2007504159.tif 000019
【表５】
2007504159.tif 000020
【表６】
2007504159.tif 000021
【００８６】
検定法
本発明化合物を検定にかけて、親３２Ｄ細胞の場合と比較したＢＣＲ−Ａｂ１を発現する３２Ｄ細胞（３２Ｄ−ｐ２１０）の細胞増殖を選択的に阻害する能力を測定する。これらのＢＣＲ−Ａｂ１形質転換細胞の増殖を選択的に阻害する化合物を、ＢＣＲ−Ａｂ１の野生型または突然変異形態を発現するＢａ／Ｆ３細胞に対する抗増殖活性について試験する。さらに、化合物を検定にかけて、Ｂ−ＲＡＦを阻害するそれらの能力を測定する。
【００８７】
細胞性ＢＣＲ−Ａｂ１依存的増殖の阻害（高スループット法）
使用されるマウス細胞系は、ＢＣＲ−Ａｂ１ ｃＤＮＡにより形質転換された３２Ｄ造血始原細胞系（３２Ｄ−ｐ２１０）である。これらの細胞を、ペニシリン５０μｇ／ｍＬ、ストレプトマイシン５０μｇ／ｍＬおよびＬ−グルタミン２００ｍＭを補ったＲＰＭＩ／１０％胎児ウシ血清（ＲＰＭＩ／ＦＣＳ）中で維持する。ＩＬ３の供給源として１５％のＷＥＨＩ条件培地を加えて、非形質転換３２Ｄ細胞を同様に維持する。
【００８８】
５０μｌの３２Ｄまたは３２Ｄ−ｐ２１０細胞懸濁液を、グレイナー３８４ウェルマイクロプレート（ブラック）において１ウェル当たり５０００細胞の密度で平板培養する。試験化合物（ＤＭＳＯストック溶液中１ｍＭ）５０ｎＬを、各ウェルに加える（ＳＴＩ５７１は陽性対照として含まれる）。細胞を、３７℃、５％ＣＯ２で７２時間インキュベーションする。６０％アラマーブルー溶液（テック・ダイアグノスティクス）１０μＬを各ウェルに加え、細胞をさらに２４時間インキュベーションする。アクウェスト（Acquest、登録商標）システム（モレキュラー・ディヴァイシーズ）を用いて蛍光強度（５３０ｎｍで励起、５８０ｎｍで放射）を定量する。
【００８９】
細胞性ＢＣＲ−Ａｂ１依存的増殖の阻害
３２Ｄ−ｐ２１０細胞を、１ウェル当たり１５０００細胞の密度で９６ウェルＴＣプレートに平板培養する。試験化合物の２倍系列希釈液５０μＬ（Ｃｍａｘは４０μＭ）を各ウェルに加える（ＳＴＩ５７１は陽性対照として含まれる）。３７℃、５％ＣＯ２で４８時間細胞をインキュベーション後、１５μＬのＭＴＴ（プロメガ）を各ウェルに加え、細胞をさらに５時間インキュベーションする。５７０ｎｍでの光学密度を分光測光法により定量し、５０％阻害に要求される化合物濃度であるＩＣ５０値を用量応答曲線から測定する。
【００９０】
細胞周期分布に対する作用
３２Ｄおよび３２Ｄ−ｐ２１０細胞を、５ｍＬの培地中、１ウェル当たり２.５×１０６細胞で６ウェルＴＣプレートに平板培養し、１または１０μＭの試験化合物を加える（ＳＴＩ５７１は対照として含まれる）。次いで、細胞を３７℃、５％ＣＯ２で２４または４８時間インキュベーションする。細胞懸濁液２ｍｌをＰＢＳで洗浄し、１時間７０％ＥｔＯＨに固定し、ＰＢＳ／ＥＤＴＡ／リボヌクレアーゼＡで３０分間処理する。よう化プロピジウム（Ｃｆ＝１０μｇ／ｍｌ）を加え、ＦＡＣＳｃａｌｉｂｕｒ（登録商標）システム（ＢＤバイオサイエンシーズ）でのフローサイトメトリーにより蛍光強度を定量する。本発明の試験化合物は、３２Ｄ−ｐ２１０細胞に対してアポトーシス作用を示すが、３２Ｄ親細胞においてアポトーシスを誘導することはない。
【００９１】
細胞性ＢＣＲ−Ａｂ１自己リン酸化に対する作用
ｃ−ａｂｌ特異的捕捉抗体および抗ホスホチロシン抗体を用いる捕捉Ｅｌｉｓａにより、ＢＣＲ−Ａｂ１自己リン酸化を定量する。３２Ｄ−ｐ２１０細胞を、５０μＬの培地において１ウェル当たり２×１０５細胞で９６ウェルＴＣプレートに平板培養する。試験化合物の２倍系列希釈液５０μＬ（Ｃｍａｘは１０μＭである）を、各ウェルに加える（ＳＴＩ５７１は、陽性対照として含まれる）。細胞を３７℃、５％ＣＯ２で９０分間インキュベーションする。次いで、細胞を１時間氷上で、プロテアーゼおよびホスファターゼ阻害剤を含む１５０μＬの溶菌緩衝液（５０ｍＭのトリス−ＨＣｌ、ｐＨ７.４、１５０ｍＭのＮａＣｌ、５ｍＭのＥＤＴＡ、１ｍＭのＥＧＴＡおよび１％ＮＰ−４０）により処理する。細胞ライゼート５０μＬを、先に抗ａｂｌ特異抗体でコーティングし、遮断しておいた９６ウェルのオプティプレートに加える。プレートを４℃で４時間インキュベーションする。ＴＢＳ−トウィーン２０緩衝液で洗浄後、アルカリ性ホスファターゼコンジュゲート抗ホスホチロシン抗体５０μＬを加え、プレートをさらに４℃で一晩インキュベーションする。ＴＢＳ−トウィーン２０緩衝液で洗浄後、ルミネセンス基質９０μＬを加え、アクウェスト（Acquest、登録商標）システム（モレキュラー・ディヴァイシーズ）を用いてルミネセンスを定量する。ＢＣＲ−Ａｂ１発現細胞の増殖を阻害する本発明の試験化合物は、用量依存的に細胞性ＢＣＲ−Ａｂ１自己リン酸化を阻害する。
【００９２】
ＢＣＲ−Ａｂ１の突然変異形態を発現する細胞の増殖に対する作用
本発明化合物を、ＳＴＩ５７１に対する耐性を付与するか感受性の低下をまねくＢＣＲ−Ａｂ１の野生型または突然変異形態（Ｇ２５０Ｅ、Ｅ２５５Ｖ、Ｔ３１５Ｉ、Ｆ３１７Ｌ、Ｍ３５１Ｔ）を発現するＢａ／Ｆ３細胞に対するそれらの抗増殖作用について試験する。突然変異体−ＢＣＲ−Ａｂ１発現細胞および非形質転換細胞に対するこれらの化合物の抗増殖作用を、上記要領により（ＩＬ３を欠く培地中）１０、３.３、１.１および０.３７μＭで試験した。形質転換細胞に対する毒性を欠く化合物のＩＣ５０値を、上記で得られた用量応答曲線から測定した。
【００９３】
Ｂ−ＲＡＦ
本発明化合物を、それらのＢ−ＲＡＦ活性阻害能力について試験する。黒壁および透明底の３８４ウェルマキシソープ(MaxiSorp)プレート（ＮＵＮＣ）で検定を実施する。基質、ＩκＢαをＤＰＢＳ中で希釈（１：７５０）し、１５μＬを各ウェルに加える。プレートを一晩４℃でインキュベーションし、ＥＭＢＬＡプレート洗浄機を用いてＴＢＳＴ（２５ｍＭのトリス、ｐＨ８.０、１５０ｍＭのＮａＣｌおよび０.０５％のトウィーン−２０）で３回洗浄する。プレートを室温で３時間スーパーブロック（１５μＬ／ウェル）により遮断し、ＴＢＳＴで３回洗浄し、軽くたたいて乾燥させる。２０μＭのＡＴＰ（１０μＬ）を含む検定緩衝液を各ウェルに加え、続いて１００ｎＬまたは５００ｎＬの化合物を加える。Ｂ−ＲＡＦを検定緩衝液中で希釈し（１μＬから２５μＬへ）、１０μＬの希釈Ｂ−ＲＡＦを各ウェルに加える（０.４μｇ／ウェル）。プレートを室温で２.５時間インキュベーションする。ＴＢＳＴで６回プレートを洗浄することにより、キナーゼ反応を停止させる。Ｐｈｏｓｐｈ−ＩκＢα（Ｓｅｒ３２／３６）抗体をスーパーブロックで希釈（１：１００００）し、１５μＬを各ウェルに加える。プレートを４℃で一晩インキュベーションし、ＴＢＳＴで６回洗浄する。ＡＰ−コンジュゲートヤギ−抗マウスＩｇＧを、スーパーブロックで希釈し（１：１５００）、１５μＬを各ウェルに加える。プレートを室温で１時間インキュベーションし、ＴＢＳＴで６回洗浄する。１５μＬのアトフォス(Attophos)ＡＰ基質を各ウェルに加え、プレートを室温で１５分間インキュベーションする。蛍光強度Ｎａｎｘｉｎ ＢＢＴアニオン（５０５二色鏡）を用いて、プレートをアクウェストまたはアナリストＧＴで読取る。
【００９４】
アップステート・キナーゼプロファイラー（Upstate KinaseProfiler、登録商標）−ラジオ−酵素フィルター結合検定法
本発明化合物を、一連のキナーゼ類の個々の要員（キナーゼの部分的な非限定的リストには、ＢＭＸ、ＣＳＫ、ＴｒｋＢ、ＦＧＦＲ３、Ｆｅｓ、Ｌｃｋ、Ｂ−ＲＡＦ、Ｃ−ＲＡＦ、ＭＫＫ６、ＳＡＰＫ２αおよびＳＡＰＫ２βが含まれる）を阻害するそれらの能力について評価する。この一般的プロトコルに従って、１０μＭの最終濃度で化合物をデュプリケイトで試験する。ただし、キナーゼ緩衝液組成物および基質は、「アップステート・キナーゼプロファイラー」（Upstate KinaseProfiler、登録商標）パネルに含まれる種々のキナーゼについて変化するものとする。この一般的プロトコルに従って、１０μＭの最終濃度で化合物をデュプリケイトで試験する。ただし、キナーゼ緩衝液組成物および基質は、アップステート・キナーゼプロファイラー（Upstate KinaseProfiler、登録商標）パネルに含まれる種々のキナーゼについて変化するものとする。キナーゼ緩衝液（２.５μＬ、１０×−必要ならばＭｎＣｌ２含有）、活性キナーゼ（０.００１〜０.０１単位、２.５μＬ）、キナーゼ緩衝液中の特異的またはポリ（Ｇｌｕ４−Ｔｙｒ）ペプチド（５〜５００μＭまたは.０１ｍｇ／ｍｌ）およびキナーゼ緩衝液（５０μＭ、５μＬ）を、氷上のエッペンドルフで混合する。Ｍｇ／ＡＴＰミックス（１０μＬ；６７.５（または３３.７５）ｍＭのＭｇＣｌ２、４５０（または２２５）μＭのＡＴＰおよび１μＣｉ／μｌ［γ−３２Ｐ］−ＡＴＰ（３０００Ｃｉ／ｍｍｏｌ））を加え、反応物を約３０℃で約１０分間インキュベーションする。反応混合物を、２ｃｍ×２ｃｍのＰ８１（ホスホセルロース、正に荷電したペプチド基質の場合）またはホワットマンＮｏ.１（ポリ（Ｇｌｕ４−Ｔｙｒ）ペプチド基質の場合）四角い紙片へスポット（２０μＬ）する。四角い検定紙を４回各々５分間０.７５％リン酸で洗浄し、アセトンで１回５分間洗浄する。四角い検定紙をシンチレーションバイアルへ移し、５ｍｌシンチレーションカクテルを加え、ペプチド基質への３２Ｐ取込（ｃｐｍ）を、ベックマンシンチレーション計数管で定量する。阻害パーセンテージを各反応について計算する。
【００９５】
式（Ｉ）の化合物の遊離形態または医薬上許容される塩形態は、例えば、本明細書記載のインビトロ試験で示されているように、貴重な薬理学的特性を呈する。例えば、式（Ｉ）の化合物は、好ましくは野生型ＢＣＲ−Ａｂ１およびＧ２５０Ｅ、Ｅ２５５Ｖ、Ｔ３１５Ｉ、Ｆ３１７ＬおよびＭ３５１Ｔ ＢＣＲ−Ａｂ１突然変異体について１×１０−１０〜１×１０ −５Ｍの範囲、好ましくは１００ｎＭ未満のＩＣ５０を示す。例えば：４−(３−カルバモイル−フェニルアミノ)−ピロロ[２,３−ｄ]ピリミジン−７−カルボン酸 {２−メチル−５−[３−(４−メチル−イミダゾール−１−イル)−５−トリフルオロメチル−ベンゾイルアミノ]−フェニル}−アミド（実施例７）は、野生型、Ｇ２５０Ｅ、Ｅ２５５Ｖ、Ｔ３１５Ｉ、Ｆ３１７ＬおよびＭ３５１Ｔ ＢＣＲ−Ａｂ１についてそれぞれ５ｎＭ、４７ｎＭ、３１ｎＭ、１１５ｎＭ、９ｎＭおよび５ｎＭのＩＣ５０を有する。１０μＭの濃度で、化合物は、Ａｂ１、ＢＣＲ−Ａｂ１、Ｂｍｘ、ＣＳＫ、ＴｒｋＢ、ＦＧＦＲ３、Ｆｅｓ、Ｌｃｋ、Ｂ−ＲＡＦ、Ｃ−ＲＡＦ、ＭＫＫ６、ＳＡＰＫ２αおよびＳＡＰＫ２βキナーゼの活性を５０％より大、好ましくは７５％を越える割合で阻害する。例えば、４−(３−カルバモイル−フェニルアミノ)−ピロロ[２,３−ｄ]ピリミジン−７−カルボン酸 {２−メチル−５−[３−(４−メチル−イミダゾール−１−イル)−５−トリフルオロメチル−ベンゾイルアミノ]−フェニル}−アミド（実施例７）は、Ｂｍｘ（１００％）、ｃ−Ｒａｆ（９９％）、ＣＳＫ（１００％）、Ｆｅｓ（９８％）、ＦＧＦＲ３（９５％）、Ｌｃｋ（９６％）、ＭＫＫ６（９８％）、ＳＡＰＫ２α（１００％）、ＳＡＰＫ２β（１００％）およびＴｒｋＢ（９８％）の阻害パーセンテージを示す。
【００９６】
４−（３−ジメチルアミノ−フェニルアミノ）−ピロロ［２,３−ｄ］ピリミジン−７−カルボン酸｛２−メチル−５−［３−（４−メチル−イミダゾール−１−イル）−５−トリフルオロメチル−ベンゾイルアミノ］−フェニル｝アミド（実施例３）は、野生型、Ｇ２５０Ｅ、Ｅ２５５Ｖ、Ｔ３１５Ｉ、Ｆ３１７ＬおよびＭ３５１Ｔ ＢＣＲ−Ａｂ１についてそれぞれ２２ｎＭ、１７０ｎＭ、２２０ｎＭ、３７０ｎＭ、５０ｎＭおよび２９ｎＭのＩＣ５０を有する。化合物は、Ｂ−Ｒａｆについては３２ｎＭのＩＣ５０を有する。１０μＭの濃度で、化合物は、Ｂｍｘ（１００％）、ｃ−Ｒａｆ（８３％）、ＣＳＫ（９０％）、Ｆｅｓ（８２％）、Ｌｃｋ（９５％）、ＳＡＰＫ２β（９５％）およびＴｒｋＢ（１００％）の阻害パーセンテージを示す。
【００９７】
本明細書に記載されている実施例および実施態様は、説明を目的としているのに過ぎず、それに照らして様々な修正または変形を加えることは、当業者に容易に想到されるものであり、それらも本願の精神および範囲内並びに添付の請求の範囲内に包含されることは言うまでもない。本明細書で引用されている出版物、特許および特許出願については、出典明示により援用する。
【国際調査報告】
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