(57)【要約】【課題】概日リズム改善用組成物の提供。【解決手段】本発明によれば、ラクトバチルス・パラカゼイ（Lactobacillus paracasei）菌体および／またはその処理物を有効成分として含んでなる、概日リズム改善用組成物が提供される。概日リズムは、好ましくは睡眠覚醒リズムである。ラクトバチルス・パラカゼイは、好ましくはＫＷ３１１０菌株（ＦＥＲＭ ＢＰ−０８６３４）である。【選択図】なし【特許請求の範囲】
【請求項１】
ラクトバチルス・パラカゼイ（Lactobacillus paracasei）菌体および／またはその処理物を有効成分として含んでなる、概日リズム改善用組成物。
【請求項２】
概日リズムが、睡眠覚醒リズムである、請求項１に記載の組成物。
【請求項３】
高齢者の概日リズム改善に用いるための、請求項１または２に記載の組成物。
【請求項４】
非ストレス条件下の対象の概日リズム改善に用いるための、請求項１〜３のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項５】
食品の形態である、請求項１〜４のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項６】
ラクトバチルス・パラカゼイが、ＫＷ３１１０菌株（ＦＥＲＭ ＢＰ−０８６３４）である、請求項１〜５のいずれか一項に記載の組成物。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、概日リズム改善用組成物に関する。
【背景技術】
【０００２】
生物は体内に時間測定機構である概日時計を備え、環境の１日周期の変動に対応して、活動性に約２４時間の顕著な周期性、すなわち概日リズムを有する。概日リズム（サーカディアンリズム）は、生物にとって基本的な現象である睡眠覚醒リズム、体温リズムおよびホルモン分泌リズムなどを制御し、特にヒトや動物の活動基盤をなす睡眠覚醒リズムは概日リズムの強い制御を受けることが知られている。また、概日リズムの機能低下は、睡眠障害、肥満、糖尿病、癌および精神疾患などの種々の疾患要因となる。
【０００３】
概日リズム機能は、加齢や、社会的役割などの同調因子の減弱などの要因により低下することが知られている。例えば、高齢者では、加齢による睡眠自体の機能低下に加え、概日リズムの機能低下により睡眠覚醒リズムが乱れる。この睡眠覚醒リズムの乱れは、不穏やせん妄との関連性も指摘されており、高齢者自身の危険の増加や身体的・精神的苦痛に加え、社会生活のリズムに合致しないことで、介護者の負担が増加するなど、種々の問題が指摘されている（非特許文献１）。また、概日リズム機能の加齢変化は、睡眠覚醒リズムのみならず、自律神経系や内分泌系活動をはじめとする各種の生理機能全般に影響する。このように、概日リズムや睡眠覚醒リズムの機能低下は社会的な問題になりつつあり、これらの改善が求められているといえる。
【先行技術文献】
【非特許文献】
【０００４】
【非特許文献１】角濱春美、日本看護技術学会誌、Vol.1,No.1, p11-19（2002）
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００５】
本発明は、概日リズム改善用組成物および概日リズム改善剤を提供することを目的とする。
【課題を解決するための手段】
【０００６】
本発明者らは今般、マウス高齢群ではマウス若齢群と比べて、休息期（明期）における活動量が多い傾向があり、活動期（暗期）における活動量が有意に少ないこと、また、マウス高齢群ではマウス若齢群と比べて、睡眠覚醒リズムの振幅が有意に減少し、睡眠覚醒リズム、すなわち、概日リズムが悪化することを見出した。本発明者らはまた、乳酸菌摂取群では標準食摂取群と比べて、休息期（明期）における活動量が有意に少なく、活動期（暗期）における活動量が多い傾向があること、また、乳酸菌摂取群では標準食摂取群と比べて、睡眠覚醒リズムの振幅が有意に増大し、睡眠覚醒リズム、すなわち、概日リズムが改善することを見出した。本発明はこれらの知見に基づくものである。
【０００７】
本発明によれば以下の発明が提供される。
［１］ラクトバチルス・パラカゼイ（Lactobacillus paracasei）菌体および／またはその処理物を有効成分として含んでなる、概日リズム改善用組成物（以下、「本発明の組成物」ということがある）および概日リズム改善剤（以下、「本発明の用剤」ということがある）。
［２］概日リズムが、睡眠覚醒リズムである、上記［１］に記載の組成物および用剤。
［３］高齢者の概日リズム改善に用いるための、上記［１］または［２］に記載の組成物および用剤。
［４］非ストレス条件下の対象の概日リズム改善に用いるための、上記［１］〜［３］のいずれかに記載の組成物および用剤。
［５］食品の形態である、上記［１］〜［４］のいずれかに記載の組成物および用剤。
［６］ラクトバチルス・パラカゼイが、ＫＷ３１１０菌株（ＦＥＲＭ ＢＰ−０８６３４）である、上記［１］〜［５］のいずれかに記載の組成物および用剤。
【０００８】
本発明によれば、概日リズムを改善する組成物および用剤が提供される。本発明の有効成分であるラクトバチルス・パラカゼイ（Lactobacillus paracasei）は乳酸菌の一種であり、ヒトが食品として長年摂取してきた発酵食品に含まれていることから、本発明はヒトを含む哺乳類に安全な機能性素材として利用できる点で有利である。
【図面の簡単な説明】
【０００９】
【図１Ａ】図１は、マウスの活動期および休息期における活動量と加齢との関係を示した図である。図１Ａは、若齢群および高齢群の休息期（明期）における活動量を示す図である。
【図１Ｂ】図１Ｂは、若齢群および高齢群の活動期（暗期）における活動量を示す図である。＊＊はｐ＜０．０１（ｔ検定）を示す。
【図１Ｃ】は、若齢群および高齢群の明期の活動量に対する暗期の活動量の比を示す図である。＊＊はｐ＜０．０１（ｔ検定）を示す。
【図２Ａ】図２は、高齢マウスにおける睡眠覚醒リズムに対する乳酸菌の効果を示した図である。図２Ａは、標準食摂取群（ＣＴＬ）および乳酸菌摂取群（ＫＷ）の休息期（明期）における活動量を示す図である。＊はｐ＜０．０５（ｔ検定）を示す。
【図２Ｂ】図２Ｂは、標準食摂取群（ＣＴＬ）および乳酸菌摂取群（ＫＷ）の活動期（暗期）における活動量を示す図である。
【図２Ｃ】図２Ｃは、標準食摂取群（ＣＴＬ）および乳酸菌摂取群（ＫＷ）の明期の活動量に対する暗期の活動量の比を示す図である。＊はｐ＜０．０５（ｔ検定）を示す。
【発明の具体的説明】
【００１０】
本発明において有効成分として用いられる乳酸菌は、ラクトバチルス・パラカゼイ（Lactobacillus paracasei）に属する乳酸菌（以下、「本発明の乳酸菌」ということがある）であり、好ましくはラクトバチルス・パラカゼイＫＷ３１１０株を用いることができる。
【００１１】
ラクトバチラス・パラカゼイＫＷ３１１０株は、L.casei L14株として、日本乳業技術協会から入手することができる。なお、日本乳業技術協会の記載によれば、L14株はL.caseiとの記載があるが、QUALICON社製リボプリンターを用いたRFLP（Restriction Flagment Length Polymorphism）およびAFLP（Amplified Flagment Length Polymorphism）を用いて解析したところ、当該株はL.paracaseiと判断されたため、本発明においてはラクトバチラス・パラカゼイと記載した。ラクトバチラス・パラカゼイＫＷ３１１０株は、上記の通り日本乳業技術協会から入手することができるが、さらに、特許微生物の寄託のためのブダペスト条約に基づく国際寄託当局である、独立行政法人産業技術総合研究所特許生物寄託センター（〒３０５−８５６６  日本国茨城県つくば市東１丁目１番地１ 中央第６）（現在は、独立行政法人製品評価技術基盤機構  バイオテクノロジーセンター  特許生物寄託センター(NITE-IPOD)（〒292-0818  千葉県木更津市かずさ鎌足2-5-8 120号室））に、ＦＥＲＭ  ＢＰ−０８６３４として寄託されている（寄託日：２００４年２月２０日）。また、ラクトバチラス・パラカゼイＫＷ３１１０株の派生株は、ＦＥＲＭ  ＢＰ−０８６３５として同特許生物寄託センターに寄託されている。
【００１２】
本発明の組成物および用剤は、ラクトバチルス・パラカゼイ菌体およびその処理物のいずれかまたは両方を有効成分として含むものである。
【００１３】
ラクトバチルス・パラカゼイの生菌は、培地で培養することにより調製することができる。ラクトバチルス・パラカゼイの培養は、公知の培地を用いた公知の方法で行うことができる。培地としては、M.R.S.培地、GAM培地、LM17培地を用いることができ、適宜無機塩類、ビタミン、アミノ酸、抗生物質、血清等を添加して用いればよい。培養は、２５〜４０℃で数時間〜数日行えばよい。培養後、ラクトバチルス・パラカゼイ菌体を遠心分離やろ過により集菌する。本発明の有効成分であるラクトバチルス・パラカゼイは、単離形態のみならず、培養物の形態のものも含む。
【００１４】
本発明の有効成分であるラクトバチルス・パラカゼイは、生菌体または死菌体の破砕物（例えば、超音波破砕物）、生菌体または死菌体の乾燥物（例えば、凍結乾燥物）、該乾燥物の破砕物、生菌体または死菌体の酵素処理物などの処理物の形態であってもよい。死菌体は、例えば、加熱処理、抗生物質などの薬物による処理、ホルマリンなどの化学物質による処理、紫外線による処理、γ線などの放射線による処理により得ることができる。また、酵素処理物には、乳酸菌の細胞壁を酵素若しくは機械的手段により除去した処理物も含まれる。さらに、ラクトバチルス・パラカゼイの核酸含有画分（例えば、ＤＮＡ、ＲＮＡ）もラクトバチルス・パラカゼイの処理物に含まれ、ラクトバチルス・パラカゼイ菌体を界面活性剤等によって溶解した後、エタノール等によって沈殿させて得ることができる。以下、本明細書において、ラクトバチルス・パラカゼイ菌体およびその処理物を、単に「本発明の乳酸菌」ということがある。
【００１５】
本発明の組成物および用剤は、本発明の乳酸菌単独で提供することができ、あるいは、本発明の乳酸菌と他の成分（例えば、製剤添加物）とを混合して提供することもできる。本発明の組成物および用剤における本発明の乳酸菌の配合量は、その目的、用途、形態、剤型、症状、体重等に応じて任意に定めることができ、本発明はこれに限定されないが、その含量としては、全体量に対して、０．０１〜９０質量％の含量で配合することができ、さらに好ましくは０．１〜５０質量％の含量で配合することができる。本発明においては、本発明の用剤を本発明の乳酸菌からなるものとし、本発明の組成物を本発明の乳酸菌と他の成分とを含んでなるものとすることができる。
【００１６】
本発明の組成物および用剤は概日リズムの改善に用いるためのものである。本発明において「概日リズム」とは、環境の変化を排除した恒常条件のもとにおいて、約２４時間周期で変動する生物現象をいい、概日リズムは睡眠覚醒リズム、体温リズム、ホルモン分泌リズムなどの生物リズムを制御することが知られている。従って、本発明において「概日リズム」は、これらの生物リズム（特に、睡眠覚醒リズム）を含む意味で用いられる、本発明において「睡眠覚醒リズム」とは、睡眠と覚醒にみられる周期をいい、ヒトでは休息期（睡眠期）と活動期（覚醒期）が２４時間周期でみられることをいう。
【００１７】
本発明において「概日リズム改善」とは、悪化した概日リズムまたは悪化の兆しがある概日リズムを回復させること、および概日リズムの悪化（乱れ）を抑制することを含む意味で用いられる。睡眠覚醒リズムが概日リズムによる強い制御を受けることから、概日リズムの改善は睡眠覚醒リズムを指標にして評価することができる。例えば、後述の休息期の活動量に対する活動期の活動量の比が増大する場合に、概日リズムが改善されたと判断することができる。
【００１８】
本発明において、「睡眠覚醒リズム改善」とは、悪化した睡眠覚醒リズムまたは悪化の兆しがある睡眠覚醒リズムを回復させること、および睡眠覚醒リズムの悪化を抑制することを含む意味で用いられ、概日リズムの改善を通じて睡眠覚醒リズムを改善することを含む。「睡眠覚醒リズム改善」は、睡眠覚醒リズムの振幅、すなわち、休息期の活動量に対する活動期の活動量の比（活動期の活動量／休息期の活動量）を指標にして評価することができる。例えば、休息期の活動量に対する活動期の活動量の比が増大する場合に、睡眠覚醒リズムが改善されたと判断することができる。
【００１９】
本発明の乳酸菌は睡眠覚醒リズムの振幅を増大させ、睡眠覚醒リズムを改善することができるが、睡眠覚醒リズムの振幅の増大により、良質で深い夜間睡眠（熟睡感）と日中の高い覚醒水準を維持することが可能となる。従って、本発明の別の面によれば、本発明の乳酸菌を有効成分として含んでなる、睡眠の質の維持および改善剤や、睡眠リズムの維持および改善剤が提供される。
【００２０】
概日リズムおよび睡眠覚醒リズムの悪化や乱れは、睡眠障害、肥満、糖尿病、癌、精神疾患、循環器疾患、脂肪性肝炎、内分泌異常、炎症性疾患、過食などの種々の疾患要因となることが知られている（柴田重信、日本家政学会誌、Vol.63,No.6,p337-341(2012)、Martin E. Young et al., Sleep Medicine, Vol.8,No.6, p656-667(2007)）。後記実施例に示される通り、本発明の乳酸菌は概日リズムおよび睡眠覚醒リズムを改善することができる。従って、本発明の組成物および用剤は概日リズムの改善により治療、予防または改善しうる疾患または症状の治療、予防または改善に用いることができる。概日リズム（特に、睡眠覚醒リズム）の改善により治療、予防または改善しうる疾患または症状としては、例えば、睡眠障害、肥満、糖尿病、癌、精神疾患、循環器疾患、脂肪性肝炎、内分泌異常、炎症性疾患、過食が挙げられる。
【００２１】
本発明の乳酸菌は、概日リズムの改善効果を有することから、概日リズムが悪化した対象あるいは悪化する兆しがある対象や、概日リズムが悪化しやすい対象に摂取させることができる。摂取対象はヒトには限定されず、ヒト以外の動物（ウマ、ウシ、イヌ、ネコ等）であってもよい。
【００２２】
本発明において「概日リズムの改善」には、活動期の活動量を十分維持できない状態の改善が含まれる。ここで、「活動期の活動量を十分維持できない状態」とは、対象が本来持つあるいは持っていた活動期の活動量（期待活動量）より少ない量の活動しかできない状態をさす。たとえば、ヒト高齢者において昼間に活動したいという気持ちに反して活動できない状態や、昼間に活動する気持ちになれず活動できない状態を意味する。
【００２３】
本発明において、「活動期の活動量を十分維持できない状態の改善」とは、低下した活動期の活動量または低下の兆しがある活動期の活動量を回復させること、および活動期の活動量の低下を抑制することを含む意味で用いられる。
【００２４】
本発明の乳酸菌を食品として提供する場合には、それをそのまま食品として提供することができ、あるいはそれを食品に含有させて提供することができる。このようにして提供された食品は本発明の乳酸菌を有効量含有した食品である。本明細書において、本発明の乳酸菌を「有効量含有した」とは、個々の食品において通常喫食される量を摂取した場合に後述するような範囲で本発明の乳酸菌が摂取されるような含有量をいう。また「食品」とは、健康食品、機能性食品、栄養補助食品、保健機能食品（例えば、特定保健用食品、栄養機能食品、機能性表示食品）、特別用途食品（例えば、幼児用食品、妊産婦用食品、病者用食品）およびサプリメントを含む意味で用いられる。なお、本発明の乳酸菌をヒト以外の動物に摂取させる場合には、本発明でいう食品が飼料として使用されることはいうまでもない。すなわち、本発明において「食品」は「飼料」を含む意味で用いられるものとする。
【００２５】
本発明の乳酸菌は、概日リズム改善効果を有するため、日常摂取する食品に含有させることができ、あるいは、サプリメントとして提供することができる。すなわち、本発明の組成物および用剤は食品の形態で提供することができる。この場合、本発明の組成物および用剤は１食当たりに摂取する量が予め定められた単位包装形態で提供することができる。１食当たりの単位包装形態としては、例えば、パック、包装、缶、ボトル等で一定量を規定する形態が挙げられる。本発明の組成物および用剤の各種作用をよりよく発揮させるためには、後述する、本発明の乳酸菌の１回当たりの摂取量に従って１食当たりの摂取量を決定できる。本発明の食品は、摂取量に関する説明事項が包装に表示されるか、あるいは説明事項が記載された文書等と一緒に提供されてもよい。
【００２６】
単位包装形態においてあらかじめ定められた１食当たりの摂取量は、１日当たりの有効摂取量であっても、１日当たりの有効摂取量を２回またはそれ以上（好ましくは２または３回）に分けた摂取量であってもよい。従って、本発明の組成物および用剤の単位包装形態には、後述のヒト１日当たりの摂取量で本発明の乳酸菌を配合することができ、あるいは、後述のヒト１日当たりの摂取量の２分の１あるいは３分の１の量で本発明の乳酸菌を配合することができる。本発明の組成物および用剤は、摂取の便宜上、１食当たりの摂取量が１日当たりの有効摂取量である、「１食当たりの単位包装形態」で提供することが好ましい。
【００２７】
「食品」の形態は特に限定されるものではなく、例えば、飲料の形態であっても、半液体やゲル状の形態であっても、固形体や粉末状の形態であってもよい。また、「サプリメント」としては、本発明の乳酸菌に賦形剤、結合剤等を加え練り合わせた後に打錠することにより製造された錠剤や、カプセルになどに封入されたカプセル剤が挙げられる。
【００２８】
本発明で提供される食品は、本発明の乳酸菌を含有する限り、特に限定されるものではないが、例えば、清涼飲料水、炭酸飲料、果汁入り飲料、野菜汁入り飲料、果汁および野菜汁入り飲料、牛乳、豆乳、乳飲料、ドリンクタイプのヨーグルト、ドリンクタイプのゼリー、コーヒー、ココア、茶飲料、栄養ドリンク、スポーツドリンク、ミネラルウォーター、ニア・ウォーターなどの非アルコール飲料；飯類、麺類、パン類およびパスタ類等炭水化物含有飲食品；クッキー、ケーキ、チョコレートなどの洋菓子類、饅頭や羊羹等の和菓子類、キャンディー類、ガム類、ヨーグルト、ゼリーやプリンなどの冷菓や氷菓、スナック菓子などの各種菓子類；ウイスキー、バーボン、スピリッツ、リキュール、ワイン、果実酒、日本酒、中国酒、焼酎、ビール、アルコール度数１％以下のノンアルコールビール、発泡酒、その他雑酒、酎ハイなどのアルコール飲料；卵を用いた加工品、魚介類や畜肉（レバー等の臓物を含む）の加工品（珍味を含む）、スープ類などの加工食品、濃厚流動食などの流動食などを例示することができる。なお、ミネラルウォーターは、発泡性および非発泡性のミネラルウォーターのいずれもが包含される。
【００２９】
茶飲料としては、発酵茶、半発酵茶および不発酵茶のいずれもが包含され、例えば、紅茶、緑茶、麦茶、玄米茶、煎茶、玉露茶、ほうじ茶、ウーロン茶、ウコン茶、プーアル茶、ルイボスティー、ローズ茶、キク茶、ハーブ茶（例えば、ミント茶、ジャスミン茶）が挙げられる。
【００３０】
果汁入り飲料や果汁および野菜汁入り飲料に用いられる果物としては、例えば、リンゴ、ミカン、ブドウ、バナナ、ナシ、モモ、マンゴー、アサイー、ブルーベリーおよびウメが挙げられる。また、野菜汁入り飲料や果汁および野菜汁入り飲料に用いられる野菜としては、例えば、トマト、ニンジン、セロリ、カボチャ、キュウリおよびスイカが挙げられる。
【００３１】
本発明の乳酸菌の摂取量は、摂取対象の性別、年齢および体重、症状、摂取時間、剤形、投与経路並びに組み合わせる薬剤等に依存して決定できる。本発明の乳酸菌を概日リズムの改善を目的として摂取させる場合のヒト１日あたりの摂取量は、例えば、乳酸菌乾燥菌体質量として、１〜１０００ｍｇ、好ましくは１０〜５００ｍｇ、より好ましくは２５〜１００ｍｇであり、この量は適宜増減できる。また、本発明の乳酸菌を概日リズムの改善を目的として摂取させる場合のヒト１日あたりの摂取量は、例えば、菌数として、１×１０８〜１×１０１４個、好ましくは１×１０８〜１×１０１３個、より好ましくは１×１０９〜１×１０１２個であり、この量は適宜増減できる。摂取期間は、通常１日以上、好ましくは３日以上、より好ましくは１週間以上である。摂取回数に特に制限はなく、上記有効摂取量を１日１回摂取させても、数回に分けて摂取させてもよい。また、摂取タイミングについても特に制限はなく、対象が摂取しやすい時期に摂取することができる。
【００３２】
本発明の組成物および用剤は、長期摂取によりその効果をよりよく発揮することができ、例えば、３日以上継続的に摂取させることができ、好ましくは６日以上、より好ましくは１０日以上、継続的に摂取させることができる。ここで、「継続的に」とは毎日摂取を続けることを意味する。本発明の組成物および用剤を包装形態で提供する場合には、継続的摂取のために一定期間（例えば、１週間）の有効摂取量をセットで提供してもよい。
【００３３】
本発明の組成物および用剤は人類が長年食経験を有する食品素材である乳酸菌を有効成分として利用することから、継続使用しても副作用の懸念がなく、安全性が高い。このため本発明の組成物および用剤を既存の概日リズム改善剤と組み合わせて用いると、既存薬剤の用量を低減することができ、ひいては既存薬剤の副作用を軽減あるいは解消することができる。他の薬剤との併用に当たっては、他の薬剤と本発明の組成物および用剤を別個に調製しても、他の薬剤と本発明の組成物および用剤（あるいは本発明の乳酸菌）を同一の組成物に配合してもよい。
【００３４】
本発明の組成物および用剤並びに食品には、概日リズムの改善効果あるいは睡眠覚醒リズムの改善効果を有する旨の表示が付されてもよい。この場合、消費者に理解しやすい表示とするため本発明の組成物および用剤並びに食品には以下の一部または全部の表示が付されてもよい。なお、本発明において「概日リズム改善」および「睡眠覚醒リズム改善」が以下の表示を含む意味で用いられることはいうまでもない。
・健康的な生活リズムをサポートする
・生活リズムの乱れを整える
・加齢による生活リズムの乱れを整える
・就寝起床リズムを整える
・睡眠リズムの改善
・睡眠の質を維持する、睡眠の質を高める
・熟睡感の改善
・寝覚めの改善
・活動的な毎日に
【００３５】
本発明の別の面によれば、有効量の本発明の乳酸菌を哺乳動物に摂取させるか、あるいは投与することを含んでなる、概日リズムの改善方法が提供される。本発明の方法は、本発明の組成物および用剤に関する記載に従って実施することができる。
【００３６】
本発明の別の面によればまた、有効量の本発明の乳酸菌を哺乳動物に摂取させるか、あるいは投与することを含んでなる、概日リズムの改善により治療、予防または改善しうる疾患または症状の治療、予防または改善方法が提供される。本発明の治療、予防または改善方法は、本発明の組成物および用剤に関する記載に従って実施することができる。
【００３７】
本発明の方法はヒトを含む哺乳動物における使用であってもよく、治療的使用と非治療的使用のいずれもが意図される。本明細書において、「非治療的」とはヒトを手術、治療または診断する行為（すなわち、ヒトに対する医療行為）を含まないことを意味し、具体的には、医師または医師の指示を受けた者がヒトに対して手術、治療または診断を行う方法を含まないことを意味する。
【００３８】
本発明のさらに別の面によれば、概日リズム改善剤の製造のための本発明の乳酸菌の使用と、概日リズム改善剤としての本発明の乳酸菌の使用が提供される。本発明によればまた、概日リズムの改善により治療、予防または改善しうる疾患または症状の治療剤、予防剤または改善剤の製造のための、本発明の乳酸菌の使用と、概日リズムの改善により治療、予防または改善しうる疾患または症状の治療剤、予防剤または改善剤としての、本発明の乳酸菌の使用が提供される。本発明の使用は、本発明の組成物および用剤に関する記載に従って実施することができる。
【００３９】
本発明のさらにまた別の面によれば、概日リズムの改善に用いるためのラクトバチルス・パラカゼイ菌体および／またはその処理物と、概日リズムの改善により治療、予防または改善しうる疾患または症状の治療、予防または改善に用いるためのラクトバチルス・パラカゼイ菌体および／またはその処理物が提供される。上記のラクトバチルス・パラカゼイ菌体およびその処理物は、本発明の組成物および用剤に関する記載に従って実施することができる。
【実施例】
【００４０】
以下の例に基づき本発明をより具体的に説明するが、本発明はこれらの例に限定されるものではない。
【００４１】
例１：マウスの活動期および休息期における活動量と加齢との関係
５週齢のＣ５７ＢＬ／６雄性マウス（日本チャールス・リバー社より入手）を「若齢群」（１０匹）とし、２週間の馴化を含めて１０週間通常飼育した。６３週齢のＣ５７ＢＬ／６雄性マウス（日本チャールス・リバー社より入手）を「高齢群」（１６匹）として、２週間の馴化を含めて１２週間通常飼育した。馴化を含めた通常飼育期間および試験期間を通して、各群に標準食飼料ＡＩＮ９３Ｍ（オリエンタル酵母工業社製、以下同様）を自由摂取させて、明期１２時間および暗期１２時間の明暗サイクル条件下で飼育した。マウスは夜行性であるため、暗期は活動期であり、明期は休息期である。馴化を含めた通常飼育後、活動量センサー（自発運動量簡易測定センサー、株式会社ニューロサイエンス社製）を用いて、明期および暗期における各個体の活動量を測定した。具体的には、マウス１匹を入れたケージ内を赤外線でスキャンし、マウスが一定量動いた回数をカウントし、明期および暗期それぞれのカウント数を計測して明期活動量および暗期活動量とした。試験は１週間行い、各個体について、各日の明期活動量または暗期活動量から１日あたりの平均値を算出した。また、各個体について、明期（休息期）の活動量に対する暗期（活動期）の活動量の比（本明細書および図面において、「明期の活動量に対する暗期の活動量の比」あるいは単に「活動量の比」ということがある）を以下の算出式にて求めた。
【数１】
2019112328.tif 000002
【００４２】
明期の活動量に対する暗期の活動量の比が大きいほど、睡眠覚醒リズムの振幅が大きくなり、睡眠覚醒リズム、すなわち、概日リズムがより良好であると評価することができる。
【００４３】
結果を図１に示す。図１Ａおよび図１Ｂの結果から、高齢群では若齢群と比べて、休息期（明期）における活動量が多い傾向が示され、また、活動期（暗期）における活動量が有意に少ないことが示された。また、図１Ｃの結果から、高齢群では若齢群と比べて、明期の活動量に対する暗期の活動量の比が有意に減少することが示された。明期の活動量に対する暗期の活動量の比が大きいほど、睡眠覚醒リズムの振幅が大きくなり、睡眠覚醒リズム、すなわち、概日リズムがより良好であると評価することができる。従って、高齢群では若齢群と比べて、睡眠覚醒リズムの振幅が有意に減少し、睡眠覚醒リズム、すなわち、概日リズムが低下することが確認された。
【００４４】
例２：高齢マウスにおける睡眠覚醒リズムに対する乳酸菌の効果
（１）乳酸菌凍結乾燥菌体の調製
乳酸菌ラクトバチルス・パラカゼイ（Lactobacillus paracasei）ＫＷ３１１０株（日本乳業技術協会より入手）をＭＲＳ培地（de Man, Rogosa, Sharpe、Ｏｘｏｉｄ社製）に接種し、３７℃で４８時間培養した。次いで、菌体を集菌後、滅菌水で３回洗浄し、１００℃で３０分間オートクレーブすることにより殺菌した。菌体を凍結乾燥し、ＫＷ３１１０株の凍結乾燥菌体を調製した。
【００４５】
（２）乳酸菌混餌飼料の調製
上記（１）で調製したＫＷ３１１０株凍結乾燥菌体２５０ｍｇ（乾燥質量）を１ｋｇの標準食飼料ＡＩＮ９３Ｍと混合し、「ＫＷ３１１０株混餌飼料」を調製した。
【００４６】
（３）試験方法
１１か月齢のＣ５７ＢＬ／６雄性マウス（１４匹、日本クレア社より入手）を、「標準食摂取群」および「乳酸菌摂取群」の２群（各群７匹）に分け、２週間馴化した。馴化期間、馴化期間経過後１０か月間（摂取期間）および試験期間を通して、「標準食摂取群」には標準食飼料ＡＩＮ９３Ｍを自由摂取させて、「乳酸菌摂取群」には上記（２）で調製したＫＷ３１１０菌株混餌飼料を自由摂取させて、明期１２時間および暗期１２時間の明暗サイクル条件下で飼育した。なお、乳酸菌摂取群のマウス１匹の１日あたりのＫＷ３１１０菌株凍結乾燥菌体摂取量は約１ｍｇであった。１０か月間の摂取期間終了後に、例１の記載と同様にして、活動量を測定する試験を１週間行い、各個体について、明期または暗期あたりの活動量の平均値を算出した。また、各個体について、明期の活動量に対する暗期の活動量の比を算出した。また、各群について、明期または暗期あたりの活動量の平均値および明期の活動量に対する暗期の活動量の比を算出した。
【００４７】
結果を図２に示す。図２Ａおよび図２Ｂの結果から、ラクトバチルス・パラカゼイＫＷ３１１０菌株を摂取させた乳酸菌摂取群（ＫＷ）では標準食摂取群（ＣＴＬ）と比べて、休息期（明期）における活動量が有意に少ないこと、また、活動期（暗期）における活動量が多い傾向が示された。また、図２Ｃの結果から、乳酸菌摂取群では標準食摂取群と比べて、明期の活動量に対する暗期の活動量の比、すなわち、睡眠覚醒リズムの振幅が、有意に増大することが示された。前述の通り、明期の活動量に対する暗期の活動量の比が大きいほど、睡眠覚醒リズムの振幅が大きくなり、睡眠覚醒リズム、すなわち、概日リズムがより良好であると評価することができる。従って、乳酸菌摂取群では標準食摂取群と比べて、睡眠覚醒リズムの振幅が有意に増大し、睡眠覚醒リズム、すなわち、概日リズムが改善することが確認された。
【図１Ａ】
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【図１Ｂ】
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【図１Ｃ】
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【図２Ａ】
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【図２Ｂ】
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【図２Ｃ】
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