(57)【要約】本発明は、新規なビタミンＤ類似体、即ち、２−メチレン−１９−ノル−２０（Ｓ）−２５−メチル−１α−ヒドロキシカルシフェロールを提供する。化合物は、下記の式：2007527399.tif 000025を有する。この２−置換化合物は、骨形成が望まれる疾患、特に骨粗鬆症の治療のための新規な治療薬に帰着する相対的に高い腸内カルシウム輸送活性及び相対的に低い骨カルシウム移動活性によって特徴付けられる。これらの化合物はまた、分化されない細胞の増殖を抑止し、そしてその単球への分化を誘発することにおいて明白な活性を示し、従って抗癌剤として、そして乾癬のような疾患の治療のための使用を証明する。
2007527399.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
以下の式：
【化１】
2007527399.tif 000020
［式中、Ｙ１及びＹ２は、同一又は別個であることができ、各々、水素及びヒドロキシ保護基から成る群から選択される］
を有する化合物。
【請求項２】
２−メチレン−１９−ノル−２０（Ｓ）−２５−メチル−１α−ヒドロキシカルシフェロール。
【請求項３】
請求項１に請求される少なくとも１つの化合物、並びに医薬的に受容可能な賦形剤を含有する医薬組成物。
【請求項４】
２−メチレン−１９−ノル−２０（Ｓ）−２５−メチル−１α−ヒドロキシカルシフェロールを約０．０１μｇないし約１００μｇの量で含有する、請求項３に記載の医薬組成物。
【請求項５】
２−メチレン−１９−ノル−２０（Ｓ）−２５−メチル−１α−ヒドロキシカルシフェロールを約０．１μｇないし約５０μｇの量で含有する、請求項３に記載の医薬組成物。
【請求項６】
骨量の維持又は増加が望まれる代謝性骨疾患を治療する方法であって、以下の式：
【化２】
2007527399.tif 000021
［式中、Ｙ１及びＹ２は、同一又は別個であることができ、各々、水素及びヒドロキシ保護基から成る群から選択される］
を有する化合物の有効量を該疾患を患っている患者に投与することを含む、前記方法。
【請求項７】
前記疾患が、老人性骨粗鬆症である、請求項６に記載の方法。
【請求項８】
前記疾患が、閉経期後骨粗鬆症である、請求項６に記載の方法。
【請求項９】
前記疾患が、ステロイド誘導性骨粗鬆症である、請求項６に記載の方法。
【請求項１０】
前記疾患が、低骨代謝回転性骨粗鬆症である、請求項６に記載の方法。
【請求項１１】
前記疾患が、骨軟化症である、請求項６に記載の方法。
【請求項１２】
前記疾患が、腎性骨形成異常症である、請求項６に記載の方法。
【請求項１３】
前記化合物が、経口的に投与される、請求項６に記載の方法。
【請求項１４】
前記化合物が、非経口的に投与される、請求項６に記載の方法。
【請求項１５】
前記化合物が、経皮的に投与される、請求項６に記載の方法。
【請求項１６】
前記化合物が、０．０１μｇ／日ないし１００μｇ／日の投与量で投与される、請求項６に記載の方法。
【請求項１７】
前記化合物が、２−メチレン−１９−ノル−２０（Ｓ）−２５−メチル−１α−ヒドロキシカルシフェロールである、請求項６に記載の方法。
【請求項１８】
乾癬を治療する方法であって、以下の式：
【化３】
2007527399.tif 000022
［式中、Ｙ１及びＹ２は、同一又は別個であることができ、各々、水素及びヒドロキシ保護基から成る群から選択される］
を有する化合物の有効量を前記疾患を患っている患者に投与することを含む、前記方法。
【請求項１９】
前記化合物が、２−メチレン−１９−ノル−２０（Ｓ）−２５−メチル−１α−ヒドロキシカルシフェロールである、請求項１８に記載の方法。
【請求項２０】
前記有効量が前記化合物の約０．０１μｇ／日ないし約１００μｇ／日を含む、請求項１８に記載の方法。
【請求項２１】
癌疾患を治療する方法であって、以下の式
【化４】
2007527399.tif 000023
［式中、Ｙ１及びＹ２は、同一又は別個であることができ、各々、水素及びヒドロキシ保護基から成る群から選択される］
を有する有効量の化合物を前記疾患を患っている患者に投与することを含む、前記方法。
【請求項２２】
前記疾患が、白血病である、請求項２１に記載の方法。
【請求項２３】
前記疾患が、大腸癌である、請求項２１に記載の方法。
【請求項２４】
前記疾患が、乳癌である、請求項２１に記載の方法。
【請求項２５】
前記疾患が、前立腺癌である、請求項２１に記載の方法。
【請求項２６】
前記化合物が、経口的に投与される、請求項２１に記載の方法。
【請求項２７】
前記化合物が、非経口的に投与される、請求項２１に記載の方法。
【請求項２８】
前記化合物が、経皮的に投与される、請求項２１に記載の方法。
【請求項２９】
前記化合物が、２−メチレン−１９−ノル−２０（Ｓ）−２５−メチル−１α−ヒドロキシカルシフェロールである、請求項２１に記載の方法。
【請求項３０】
前記化合物が、０．０１μｇ／日ないし１００μｇ／日の投与量で投与される、請求項２１に記載の方法。
【請求項３１】
以下の式：
【化５】
2007527399.tif 000024
を有する（２０Ｓ）−デ−Ａ，Ｂ−２５−メチルコレスタン−８−オン。
【発明の詳細な説明】
【背景技術】
【０００１】
発明の背景
本発明は、炭素２位で置換したビタミンＤ誘導体類、そしてより具体的には、２−メチレン−１９−ノル−２０（Ｓ）−２５−メチル−１α−ヒドロキシカルシフェロール及びその医薬的使用に関する。
【０００２】
天然のホルモン、１α，２５−ジヒドロキシビタミンＤ３及びそのエルゴステロール系列の類似体、即ち１α，２５−ジヒドロキシビタミンＤ２は、動物及びヒトのカルシウム恒常性の非常に強力な制御剤として知られ、そして細胞分化におけるその活性が確立されている（Ｏｓｔｒｅｍ  ｅｔ  ａｌ．，Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ，８４，２６１０（１９８７））。これらの代謝物の多くの構造的類似体は、１α−ヒドロキシビタミンＤ３、１α−ヒドロキシビタミンＤ２、各種の側鎖ホモログ化ビタミン及びフッ素化類似体を含み調製され、そして試験されている。これらの化合物のいくつかは、細胞分化及びカルシウム制御における興味ある活性の分離を示す。この活性の差は、腎性骨異栄養症、ビタミンＤ抵抗性くる病、骨粗鬆症、乾癬、及びある種の悪性腫瘍のような各種の疾患の治療において有用であることができる。
【０００３】
最近になって、ビタミンＤ類似体の新しい群、即ちビタミンＤ系の典型におけるＡ環の環外メチレン基（炭素１９）の、二つの水素原子による置き換えによって特徴付けられる、いわゆる１９−ノル−ビタミンＤ化合物が発見された。
【０００４】
このような１９−ノル−類似体（例えば、１α，２５−ジヒドロキシ−１９−ノル−ビタミンＤ３）の生物学的試験は、細胞分化を誘導することにおける高度の効力、及び非常に低いカルシウム移動活性を伴なう選択的活性の特性を明らかにした。従って、これらの化合物は、悪性腫瘍の治療、又は各種の皮膚障害の治療のための治療剤として潜在的に有用である。このような１９−ノル−ビタミンＤ類似体の合成の二つの異なった方法が記載されている（Ｐｅｒｌｍａｎ  ｅｔ  ａｌ．，Ｔｅｔｒａｈｅｄｒｏｎ  Ｌｅｔｔ．３１，１８２３（１９９０）；Ｐｅｒｌｍａｎ  ｅｔ  ａｌ．，Ｔｅｔｒａｈｅｄｒｏｎ  Ｌｅｔｔ．３２，７６６３（１９９１）、及びＤｅＬｕｃａ  ｅｔ  ａｌ．，米国特許第５，０８６，１９１号）。
【０００５】
米国特許第４，６６６，６３４号において、１α，２５−ジヒドロキシビタミンＤ３の２β−ヒドロキシ及びアルコキシ（例えば、ＥＤ−７１）類似体が、Ｃｈｕｇａｉグループによって、骨粗鬆症に対する潜在的薬物として、そして抗腫瘍剤として記載され、そして試験されている。更にＯｋａｎｏ  ｅｔ  ａｌ．，Ｂｉｏｃｈｅｍ．Ｂｉｏｐｈｙｓ．Ｒｅｓ．Ｃｏｍｍｕｎ．１６３，１４４４（１９８９）も参照されたい。１α，２５−ジヒドロキシビタミンＤ３の、他の２−置換された（ヒドロキシアルキルで、例えば、ＥＤ−１２０、及びフルオロアルキル基で）Ａ環類似体も更に調製され、そして試験されている（Ｍｉｙａｍｏｔｏ  ｅｔ  ａｌ．，Ｃｈｅｍ．Ｐｈａｒｍ．Ｂｕｌｌ．４１，１１１１（１９９３）；Ｎｉｓｈｉｉ  ｅｔ  ａｌ．，Ｏｓｔｅｏｐｏｒｏｓｉｓ  Ｉｎｔ．Ｓｕｐｐｌ．１，１９０（１９９３）；Ｐｏｓｎｅｒ  ｅｔ  ａｌ．，Ｊ．Ｏｒｇ．Ｃｈｅｍ．５９，７８５５（１９９４）、及びＪ．Ｏｒｇ．Ｃｈｅｍ．６０，４６１７（１９９５））。
【０００６】
最近になって、１α，２５−ジヒドロキシ−１９−ノルビタミンＤ３の２−置換された類似体、即ち２位においてヒドロキシ又はアルコキシ基で置換された化合物（ＤｅＬｕｃａ  ｅｔ  ａｌ．，米国特許第５，５３６，７１３号）も合成され、これらは、興味ある、そして選択的な活性の特性を示す。全てのこれらの研究は、ビタミンＤ受容体の結合部位が、合成されたビタミンＤ類似体のＣ−２における異なった置換基を受入れることができることを示す。
【０００７】
薬理学的に重要なビタミンＤ化合物の１９−ノル群を開発する継続する努力において、炭素２（Ｃ−２）におけるアルキリデン（具体的にはメチレン）置換基の存在によって特徴付けられるそれらの類似体、即ち、２−アルキリデン−１９−ノル−ビタミンＤ化合物が、現在、合成され、そして試験されている。特に興味あるのは、通常のビタミンＤ骨格に存在する炭素１０（Ｃ−１０）ないし炭素２（Ｃ−２）のＡ環の環外に位置するメチレン基のトランス位置によって特徴付けられる類似体、即ち、２−メチレン−１９−ノル−ビタミンＤ化合物である。このようなビタミンＤ類似体は、Ｃ−２における比較的小さいアルキリデン（具体的にはメチレン）基が、ビタミンＤ受容体への結合に妨害される筈がないために興味ある標的と見受けられた。更に、１α−ヒドロキシ−２−メチレン−１９−ノル−ビタミン類モデルにおいて実行された分子機構の研究は、このような分子の修飾がシクロヘキサンジオール環Ａのコンホメーションを実質的に変化しないことを示す。然しながら、２−メチレン基の１９−ノル−ビタミンＤの炭素骨格への導入は、その１α−及び３β−のＡ環ヒドロキシルの特徴を変化する。これらは、いまや両方とも天然のホルモン、１α，２５−（ＯＨ）２Ｄ３の分子中の１α−ヒドロキシ基（生物学的活性に対して非常に重要）と同様に、アリル的位置にある。
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【０００８】
発明の概要
本発明は、２−メチレン−１９−ノル−２０（Ｓ）−２５−メチル−１α−ヒドロキシカルシフェロール、その生物学的活性、及びこの化合物（本明細書において、以下「ＴＭＭ」と称する）の各種の医薬的使用に関する。２−メチレン−１９−ノル−（２０Ｓ）−１α，２５−ジヒドロキシコレカルシフェロールとは異なり、ＴＭＭは、２５−ヒドロキシを持たず、そして、２−メチレン−１９−ノル−（２０Ｓ）−１α−ヒドロキシコレカルシフェロールとは異なり、ＴＭＭは、２５−メチル基の存在のため、インビボで２５−ヒドロキシル化され得ない。
【０００９】
構造的には、この１９−ノル類似体は、以下に示す一般式Ｉ：
【００１０】
【化１】
2007527399.tif 000003
【００１１】
によって特徴付けられる。
上記の新規化合物は、所望する、そして非常に好都合な生物学的活性のパターンを示す。この化合物は、１α，２５−ジヒドロキシビタミンＤ３と比較して、相対的に高い腸内カルシウム運搬活性を有し、一方、１α，２５−ジヒドロキシビタミンＤ３と比較して、  骨からカルシウムを移動するその安定性において、相対的に低い活性を示すことによって特徴付けられる。従って、この化合物は、血漿カルシウム上昇（ｃａｌｃｅｍｉｃ）活性に非常に特異的である。その優先的な腸内カルシウム輸送活性は、骨の喪失が主要な関心事である代謝性骨疾患の治療のためのこの化合物のインビボの投与を可能にする。その腸内血漿カルシウム上昇活性のために、この化合物は、骨粗鬆症、特に低骨代謝回転性骨粗鬆症、ステロイド誘発性骨粗鬆症、老人性骨粗鬆症又は閉経後骨粗鬆症、並びに骨軟化症及び腎性骨形成異常症のような骨形成が所望される疾患の治療のための好ましい治療剤であるものである。治療は、経皮的、経口又は非経口であってよい。化合物は、組成物中に、約０．０１μｇ／グラムないし約１００μｇ／グラム組成物、好ましくは約０．１μｇ／グラムないし約５０μｇ／グラム組成物の量で存在してもよく、そして、約０．０１μｇ／日ないし約１００μｇ／日、好ましくは約０．１μｇ／日ないし約５０μｇ／日の投与量で投与してもよい。
【００１２】
本発明の化合物は、更に免疫系の不均衡によって特徴付けられるヒトの障害、例えば多発性硬化症、真性糖尿病、宿主対移植片反応、及び移植の拒絶を含む自己免疫性疾患の治療及び予防のために；そして更に関節リウマチ、喘息、及び腹腔性疾患及びクローン病のような炎症性大腸疾患のような炎症性疾患の治療、並びに骨折の治癒の改良及び改良された骨移植片のために特に適していることも見出されている。座瘡、脱毛症、乾燥皮膚（皮膚の水分補給の欠如）、過度の皮膚弛緩（不十分な皮膚の堅固さ）、不十分な皮脂の分泌及び皺のような皮膚の症状、及び高血圧は、本発明の化合物で治療することができる他の症状である。
【００１３】
上記の化合物は、高い細胞分化活性によっても特徴付けられる。従って、この化合物は、更に乾癬の治療のための、又は特に白血病、大腸癌、乳癌及び前立腺癌に対する抗癌剤としての治療剤を提供する。化合物は、乾癬及び／又は癌を治療するための組成物中に、約０．０１μｇ／グラムないし約１００μｇ／グラム組成物の量で存在することができ、そして局所的、経皮的、経口的又は非経口的に、約０．０１μｇ／日ないし約１００μｇ／日の投与量で投与することができる。
【００１４】
本発明はまた、構造Ｉの最終生成物の製造のための新規な合成、並びに合成中に形成された新規なケトン中間体も提供する。
【課題を解決するための手段】
【００１５】
発明の詳細な説明
本明細書及び特許請求の範囲において使用されるように、用語「ヒドロキシ保護基」は、ヒドロキシ官能基、例えば、アルコキシカルボニル、アシル、アルキルシリル若しくはアルキルアリールシリル基（本明細書では、以下、単に「シリル」基と称する）、及びアルコキシアルキル基の一時的な保護のために共通して使用される何れかの基を意味する。アルコキシカルボニル保護基は、アルキル−Ｏ−ＣＯ−基、例えば、メトキシカルボニル、エトキシカルボニル、プロポキシカルボニル、イソプロポキシカルボニル、ブトキシカルボニル、イソブトキシカルボニル、ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル、ベンジルオキシカルボニル又はアリルオキシカルボニルである。用語「アシル」は、異性体の全てにおいて、１ないし６の炭素のアルカノイル基、または１ないし６の炭素のカルボキシアルカノイル基、例えば、オキサリル、マロニル、スクシニル、グルタリル基、又は芳香族アシル基、例えば、ベンゾイル、又はハロ、ニトロアルキル置換ベンゾイル基を意味する。本明細書及び特許請求の範囲において使用される単語「アルキル」は、異性体の全てにおいて、１ないし１０の炭素の直鎖又は分岐したアルキル基を示す。アルコキシアルキル保護基は、メトキシメチル、エトキシメチル、メトキシエトキシメチル、又はテトラヒドロフラニル及びテトラヒドロピラニルのような基である。好ましいシリル保護基は、トリメチルシリル、トリエチルシリル、ｔ−ブチルジメチルシリル、ジブチルメチルシリル、ジフェニルメチルシリル、フェニルジメチルシリル、ジフェニル−ｔ−ブチルシリル及び類似するアルキル化シリル基である。用語「アリール」は、フェニル−、又はアルキル−、ニトロ−又はハロ−置換フェニル基を規定する。
【００１６】
「保護されたヒドロキシ」基は、ヒドロキシ官能基、例えば、前記に定義されるようなシリル、アルコキシアルキル、アシル又はアルコキシカルボニルの一時的又は永久的な保護のために通用使用される上述の基のいずれかによって誘導又は保護されたヒドロキシ基である。用語「ヒドロキシアルキル」、「デューテロアルキル」及び「フルオロアルキル」は、それぞれ、１以上のヒドロキシ、デューテリウム又はフルオロ基によって置換されたアルキル基を意味する。
【００１７】
基本構造Ｉを有する２−メチレン−１９−ノル−２０（Ｓ）−２５−メチル−１α−ヒドロキシカルシフェロールの調製は、普通の一般的方法、即ち、以下の式：
【００１８】
【化２】
2007527399.tif 000004
【００１９】
の二環式Ｗｉｎｄａｕｓ−Ｇｒｕｎｄｍａｎｎ型ケトンＩＩの、アリル的ホスフィンオキシドＩＩＩとの、対応する２−メチレン−１９−ノル−ビタミンＤ類似体ＩＶへの縮合、それに続く後者の化合物のＣ−１及びＣ−３におけるヒドロキシルの脱保護によって達成することができる。構造ＩＩＩ及びＩＶにおいて、基Ｙ１及びＹ２は、ヒドロキシ保護基であり、縮合反応に敏感であるか、又はそれを妨害することができるいずれもの官能基が、当該技術分野において周知であるように適当に保護されることも更に理解されることである。先に示した方法は、収斂合成の概念の適用を表し、これは、ビタミンＤ化合物の調製のために有効に適用されている［例えば、Ｌｙｔｈｇｏｅ  ｅｔ  ａｌ．，Ｊ．Ｃｈｅｍ．Ｓｏｃ．Ｐｅｒｋｉｎ  Ｔｒａｎｓ．Ｉ，５９０（１９７８）；Ｌｙｔｈｇｏｅ，Ｃｈｅｍ．Ｓｏｃ．Ｒｅｖ．９，４４９（１９８３）；Ｔｏｈ  ｅｔ  ａｌ．，Ｊ．Ｏｒｇ．Ｃｈｅｍ．４８，１４１４（１９８３）；Ｂａｇｇｉｏｌｉｎｉ  ｅｔ  ａｌ．，Ｊ．Ｏｒｇ．Ｃｈｅｍ．５１，３０９８（１９８６）；Ｓａｒｄｉｎａ  ｅｔ  ａｌ．，Ｊ．Ｏｒｇ．Ｃｈｅｍ．５１，１２６４（１９８６）；Ｊ．Ｏｒｇ．Ｃｈｅｍ．５１，１２６９（１９８６）；ＤｅＬｕｃａ  ｅｔ  ａｌ．，米国特許第５，０８６，１９１号；ＤｅＬｕｃａ  ｅｔ  ａｌ．，米国特許第５，５３６，７１３号］。
【００２０】
一般的な構造ＩＩのヒドリンダノンは、既知の方法によって調製することができる。１つの具体的な方法は、ビタミンＤ２のオゾン化を用いるものであり、スキーム１及び２と関連して、本明細書に記載され、図解される。
【００２１】
必要な一般構造ＩＩＩのホスフィンオキシドの調製のために、市販の（１Ｒ，３Ｒ，４Ｓ，５Ｒ）−（−）−キナ酸から、Ｐｅｒｌｍａｎ  ｅｔ  ａｌ．，Ｔｅｔｒａｈｅｄｒｏｎ  Ｌｅｔｔ．３２，７６６３（１９９１）及びＤｅＬｕｃａ  ｅｔ  ａｌ．，米国特許第５，０８６，１９１号によって記載されているように容易に得られるキナ酸メチル誘導体から出発する、新しい合成経路が開発されている。出発物質のメチルエステルの所望されるＡ環シントンへの変換の全過程は、これら２つの参照文献に詳細に要約され、米国５，０８６，１９１におけるそのような合成の開示は、参照により本明細書に具体的に援用される。合成の最終工程は、典型的には、ヒドロキシ保護基の加水分解であり、２−メチレン−１９−ノル−２０（Ｓ）−２５−メチル−１α−ヒドロキシカルシフェロール（ＴＭＭ）を与えるであろう。
【００２２】
本発明は、下記の例証される実施例によって記載される。これらの実施例では、アラビア数字（例えば、１、２、３など）によって同定される特定の生産物は、前述の記載及びスキーム１、スキーム２及びスキーム３に同定されるような特定の構造を意味する。参照は、実施例１についてはスキーム１及び２に、そして、実施例２についてはスキーム３に対してなされるべきである。
【実施例】
【００２３】
実施例１
（２０Ｓ）−デ−Ａ，Ｂ−８β−（ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリル）オキシ−２０−（ヒドロキシメチル）プレグナン（２）の調製
オゾンを、ビタミンＤ２（３ｇ、７．６ｍｍｏｌ）のメタノール（２５０ｍＬ）中の溶液及びピリジン（２．４４ｇ、２．５ｍＬ、３１ｍｍｏｌ）を通して５０分間−７８℃で通過させた。次いで反応混合物を酸素で１５分間置換して、残留したオゾンを除去し、そして溶液をＮａＢＨ４（０．７５ｇ、２０ｍｍｏｌ）で処理した。２０分後、第２の部分のＮａＢＨ４（０．７５ｇ、２０ｍｍｏｌ）を加え、そして混合物を室温まで温めた。次いで第３の部分のＮａＢＨ４（０．７５ｇ、２０ｍｍｏｌ）を加え、そして反応混合物を１８時間撹拌した。反応を水（４０ｍＬ）でクエンチし、そして溶液を減圧下で濃縮した。残留物を酢酸エチル（３×８０ｍＬ）で抽出し、そして混合した有機相を１ＭのＨＣｌ水溶液、飽和ＮａＨＣＯ３水溶液で洗浄し、乾燥（Ｎａ２ＳＯ４）し、そして減圧下で濃縮した。残留物をヘキサン／酢酸エチル（７５：２５）によるシリカゲルのクロマトグラフィーにかけて、（２０Ｓ）−デ−Ａ，Ｂ−２０−（ヒドロキシメチル）プレグナン−８β−オール１（１．２１ｇ、７５％収率）を白色の結晶として得た。
【００２４】
ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリルトリフルオロメタンスルホネート（３．２４ｍＬ、３．７２ｇ、１４．１ｍｍｏｌ）を、８β，２０−ジオール１（１ｇ、４．７ｍｍｏｌ）及びルチジン（１．６４ｍＬ、１．５１ｇ、１４．１ｍｍｏｌ）の無水ＤＭＦ（１５ｍＬ）中の０℃の溶液に加えた。混合物をアルゴン下で０℃で１時間、次いで、室温で１８時間核酸した。反応を水（５０ｍＬ）で停止させ、酢酸エチル（３×３０ｍＬ）で抽出した。混合した有機層をブラインで洗浄し、乾燥（Ｎａ２ＳＯ４）し、そして減圧下で濃縮した。残留物を無水ＴＨＦ（８ｍＬ）、トリエチルアミン（３ｍＬ、２．１７ｇ、２１．５ｍｍｏｌ）で溶解し、そして、フッ化テトラブチルアンモニウムの溶液（ＴＨＦ中の１Ｍ、６．５ｍＬ、６．５ｍｍｏｌ）を添加し、続いて新しく活性化したモレキュラーシーブ４Ａ（３ｇ）を加えた。反応混合物をアルゴン下の室温で４時間撹拌し、次いでセライトの短い層を通して濾過し、蒸発した。残留物を酢酸エチル（３０ｍＬ）で溶解し、ブライン、水で洗浄し、乾燥（Ｎａ２ＳＯ４）し、そして減圧下で濃縮した。ヘキサン／酢酸エチル（９７．５：２．５→９５：５）によるシリカゲルのクロマトグラフィーによって、アルコール２（１．４２ｇ、９３％収率）を無色の油状物として得た：
【００２５】
【化３】
2007527399.tif 000005
【００２６】
（２０Ｓ）−デ−Ａ，Ｂ−８β−（ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリル）オキシ−２０−ホルミルプレグナン（３）の調製
三酸化硫黄ピリジン複合体（１．３２ｇ、８．２８ｍｍｏｌ）を無水塩化メチレン（３０ｍＬ）および無水ＤＭＳＯ（５ｍＬ）中のアルコール２（４５１ｍｇ、１．３８ｍｍｏｌ）、トリエチルアミン（９６０μＬ、６９７ｍｇ、６．９ｍｍｏｌ）の溶液に０℃で添加した。反応混合物をアルゴン下で０℃で２０分間撹拌し、次いで濃縮した。残留物をヘキサン／酢酸エチル（９５：５）によるシリカゲルのカラムクロマトグラフィーによって精製して、アルデヒド３（３６４ｍｇ、８１％収率）を油状物として得た：
【００２７】
【化４】
2007527399.tif 000006
【００２８】
（２０Ｒ）−デ−Ａ，Ｂ−８β−（ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリル）オキシ−２０−（ヒドロキシメチル）プレグナン（４）の調製
アルデヒド３（３６４ｍｇ、１．１２ｍｍｏｌ）を、塩化メチレン（１５ｍＬ）中に溶解し、そしてｎ−Ｂｕ４ＮＯＨの４０％水溶液（１．４７ｍＬ、１．４５ｇ、２．２４ｍｍｏｌ）を加えた。得られた混合物をアルゴン下で室温で１６時間撹拌し、塩化メチレン（２０ｍＬ）で希釈し、水で洗浄し、乾燥（Ｎａ２ＳＯ４）し、そして減圧下で濃縮した。残留物をヘキサン／酢酸エチル（９５：５）によるシリカゲルのクロマトグラフィーにかけて、アルデヒド３及びその２０−エピマー（２９２ｍｇ、８０％収率）の約１：２の比（１Ｈ  ＮＭＲによる）の混合物を得た。
【００２９】
このアルデヒドの混合物（２９２ｍｇ、０．９ｍｍｏｌ）を、ＴＨＦ（５ｍＬ）中に溶解し、そしてＮａＢＨ４（６４ｍｇ、１．７ｍｍｏｌ）を加え、続いてエタノール（５ｍＬ）を滴下により加えた。反応混合物を室温で３０分間撹拌し、そしてこれを飽和ＮＨ４Ｃｌ水溶液でクエンチした。混合物をエーテル（３×２０ｍＬ）で抽出し、そして混合した有機層を水で洗浄し、乾燥（Ｎａ２ＳＯ４）し、そして減圧下で濃縮した。残留物をヘキサン／酢酸エチル（９６：４→８０：２０）によるシリカゲルのクロマトグラフィーにかけて、所望する純粋な（２０Ｒ）−アルコール４（１６０ｍｇ、５５％収率）を油状物として、そして４及びその２０−エピマー２の混合物（１２６ｍｇ、４３％収率）を約１：３の比（１Ｈ  ＮＭＲによる）で得た。
【００３０】
【化５】
2007527399.tif 000007
【００３１】
（２０Ｒ）−デ−Ａ，Ｂ−８β−（ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリル）オキシ−２０−［（ｐ−トルエンスルホニル）オキシメチル］プレグナン（５）の調製
アルコール４（１３４ｍｇ、０．４１ｍｍｏｌ）、４−ジメチルアミノピリジン（１０ｍｇ、０．０８ｍｍｏｌ）及びトリエチルアミン（２５８μＬ、１８７ｍｇ、１．８５ｍｍｏｌ）の無水の塩化メチレン（６ｍＬ）中の撹拌された溶液に、塩化ｐ−トルエンスルホニル（１１８ｍｇ、０．６２ｍｍｏｌ）を０℃で加えた。反応混合物を室温まで温め（４時間）、そして攪拌を更に２２時間継続した。塩化メチレン（２０ｍＬ）を加え、そして混合物を飽和ＮａＨＣＯ３水溶液で洗浄し、乾燥（Ｎａ２ＳＯ４）し、そして減圧下で濃縮した。残留物を、ヘキサン／酢酸エチル（９５：５）によるシリカゲルのクロマトグラフィーにかけて、トシラート５（１９２ｍｇ、９８％収率）を無色の油状物として得た：
【００３２】
【化６】
2007527399.tif 000008
【００３３】
（２０Ｓ）−デ−Ａ，Ｂ−８β−（ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリル）オキシ−２５−メチルコレスタン（８）の調製
マグネシウム切削片（０．５３ｇ、２２ｍｍｏｌ）、１−クロロ−３，３−ジメチルブタン６（１．３２ｇ、１１ｍｍｏｌ）及びヨウ素（２結晶）を、無水のＴＨＦ（１５ｍＬ）中で６時間還流した。形成されたグリニャール試薬７の溶液を−７８℃に冷却し、そしてトシラート５（１８３ｍｇ、０．３８ｍｍｏｌ）の無水のＴＨＦ（３ｍＬ）中の−７８℃の溶液に、カニューレを経由して滴下により加えた。次いで６ｍＬのＬｉ２ＣｕＣｌ４［乾燥ＬｉＣｌ（２３２ｍｇ、５．４６ｍｍｏｌ）及び乾燥ＣｕＣｌ２（３６８ｍｇ、２．７５ｍｍｏｌ）を無水のＴＨＦ（２７ｍＬ）中に溶解することによって調製］の溶液を−７８℃の反応混合物にカニューレを経由して滴下により加えた。冷却浴を取り除き、そして混合物を室温で２０時間撹拌し、そして次いで氷（約１００ｇ）を含有する１ＭのＨ２ＳＯ４水溶液（２５ｍＬ）中に注いだ。混合物を塩化メチレン（３×５０ｍＬ）で抽出し、そして混合した有機層を飽和ＮＨ４Ｃｌ水溶液、飽和ＮａＨＣＯ３水溶液で洗浄し、乾燥（Ｎａ２ＳＯ４）し、そして減圧下で濃縮した。残留物をヘキサンによるシリカゲルのクロマトグラフィーにかけて、製造物８（１３０ｍｇ、８７％収率）を無色の油状物として得た：
【００３４】
【化７】
2007527399.tif 000009
【００３５】
（２０Ｓ）−デ−Ａ，Ｂ−２５−メチルコレスタン−８β−オール（９）の調製
保護したアルコール８（１００ｍｇ、２５４μｍｏｌ）を無水メタノール（５ｍＬ）で溶解させ、そして、フッ化水素−ピリジン（２．５ｍＬ）を添加した。混合物をアルゴン下で室温で３日間撹拌し、次いで酢酸エチル（２０ｍＬ）を添加した。有機層をブライン及び水で洗浄し、乾燥（Ｎａ２ＳＯ４）し、そして減圧下で濃縮した。残留物をヘキサンで希釈し、ヘキサンによるシリカゲルのクロマトグラフィーにかけて、基質８（１６ｍｇ）を除去した。ヘキサン／酢酸エチル（８：２）による溶出により、純粋なアルコール９（５８ｍｇ、８２％収率）を無色の油状物として得た：
【００３６】
【化８】
2007527399.tif 000010
【００３７】
（２０Ｓ）−デ−Ａ，Ｂ−２５−メチルコレスタン−８−オン（ＩＩ）の調製
二クロム酸ピリジニウム（１０２ｍｇ、２７１μｍｏｌ）を、アルコール９（１９ｍｇ、６８μｍｏｌ）及びｐ−トルエンスルホン酸ピリジニウム（２ｍｇ、８μｍｏｌ）の無水の塩化メチレン（６ｍＬ）中の溶液に加えた。得られた懸濁液を室温で４時間撹拌した。反応混合物をＷａｔｅｒｓのシリカＳｅｐ−Ｐａｋカートリッジ（２ｇ）を通して濾過し、これを更にヘキサン／酢酸メチル（８：２）で洗浄した。溶媒の除去後、ケトンＩＩ（１６ｍｇ、８５％収率）を無色の油状物として得た：
【００３８】
【化９】
2007527399.tif 000011
【００３９】
実施例２
（２０Ｓ）−２−メチレン−１９−ノル−２５−メチル−１α−ヒドロキシカルシフェロール（Ｉ）の調製
ホスフィンオキシド１０（４５ｍｇ、７７μｍｏｌ）の無水のＴＨＦ（５００μＬ）中の−２０℃の溶液に、ＰｈＬｉ（シクロヘキサン−エーテル中の１．５６Ｍ、１００μＬ、１５６μｍｏｌ）をアルゴン下で撹拌しながらゆっくりと加えた。溶液は濃いオレンジ色に変わった。３０分後、混合物を−７８℃に冷却し、そして予備冷却（−７８℃）したケトンＩＩ（１７ｍｇ、６１μｍｏｌ）の無水のＴＨＦ（２００＋１００μＬ）中の溶液をゆっくりと加えた。混合物をアルゴン下の−７８℃で３時間、そして０℃で１８時間撹拌した。酢酸エチルを加え、そして有機層をブラインで洗浄し、乾燥（Ｎａ２ＳＯ４）し、そして蒸発した。残留物をヘキサン中に溶解し、そしてＷａｔｅｒｓのシリカＳｅｐ−Ｐａｋカートリッジ（２ｇ）にかけた。カートリッジをヘキサン及びヘキサン／酢酸エチル（９９．５：０．５）で洗浄して、１９−ノルビタミン誘導体１１（２４ｍｇ）を得た。次いでＳｅｐ−Ｐａｋをヘキサン／酢酸エチル（９６：４）で洗浄して、未変化のＣ、Ｄ−環ケトンＩＩ（４ｍｇ）を回収し、そして酢酸エチルでジフェニルホスフィンオキシド１０（２１ｍｇ）を回収した。保護されたビタミン１１を、ヘキサン／２−プロパノール（９９．９：０．１）を溶媒系として使用する、ＨＰＬＣ（１０×２５０ｍｍのＺｏｒｂａｘ−Ｓｉｌｉｃａカラム、４ｍＬ／分）によって更に精製した。純粋な化合物１１（１９．９ｍｇ、５１％収率）を、Ｒｖ＝１５ｍＬで無色の油状物として溶出した：ＵＶ（ヘキサン中）λｍａｘ  ２６２．２、２５２．２、２４３．３ｎｍ；
【００４０】
【化１０】
2007527399.tif 000012
【００４１】
保護されたビタミン１１（１．７ｍｇ、２．６μｍｏｌ）を、無水のＴＨＦ（３ｍＬ）中に溶解し、そしてフッ化テトラブチルアンモニウムの溶液（ＴＨＦ中の１Ｍ、５０μＬ、５０μｍｏｌ）を、続いて新しく活性化したモレキュラーシーブ４Ａ（３００ｍｇ）を加えた。混合物をアルゴン下の室温で１８時間撹拌し、次いで２ｍＬのヘキサン／酢酸エチル（６：４）で希釈し、そしてＷａｔｅｒｓのシリカＳｅｐ−Ｐａｋカートリッジ（２ｇ）にかけた。同じ溶媒系による溶出により、粗製の生成物Ｉを得て、これをヘキサン／２−プロパノール（９：１）の溶媒系を使用するＨＰＬＣ（１０×２５０ｍｍのＺｏｒｂａｘ−Ｓｉｌｉｃａカラム、４ｍＬ／分）によって更に精製した。分析的に純粋な２−メチレン−１９−ノルビタミンＩ（７６８μｇ、７１％収率）を、Ｒｖ＝２６ｍＬで無色の油状物として収集した：ＵＶ（ＥｔＯＨ中）λｍａｘ  ２６１．２、２５１．３、２４３．１ｎｍ；
【００４２】
【化１１】
2007527399.tif 000013
【００４３】
２−メチレン−１９−ノル−２０（Ｓ）−２５−メチル−１α−ヒドロキシカルシフェロールの生物学的活性
ブタの腸内受容体への類似体の競合結合は、Ｄａｍｅら（Ｂｉｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ  ２５，４５２３−４５３４，１９８６）によって記載された方法によって実行した。
【００４４】
ＨＬ−６０の前骨髄球の単球への分化は、Ｏｓｔｒｅｍら（Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．２６２，１４１６４−１４１７１，１９８７）によって記載されたように決定した。
ブタの腸内受容体への１α，２５−（ＯＨ）２Ｄ３及び合成したビタミンＤ類似体の競合結合は、２つの異なる場合において三重に実行した。ＥＤ５０値は、投与量応答曲線から得ることができ（図１）、そして、受容体タンパク質から放射標識した１α，２５−（ＯＨ）２Ｄ３の５０％の置換に必要とされる類似体濃度を表す。次いで、結合比は、類似体平均ＥＤ５０と１α，２５−（ＯＨ）２Ｄ３のＥＤ５０の比から決定され得る。
【００４５】
１α，２５−（ＯＨ）２Ｄ３及び合成したビタミンＤ類似体によるＨＬ６０の前骨髄球の単球への分化誘導は、ニトロブルーテトラゾリウム（ＮＢＴ）を減少する細胞のパーセントを測定することによって決定した。実験は３回繰り返した。ＥＤ５０値は投与量応答曲線から誘導することができ（図２）、５０％飽和を誘導することができる類似体濃度を表す。次いで、分化活性比は、類似体平均ＥＤ５０と１α，２５−（ＯＨ）２Ｄ３のＥＤ５０の比から決定することができる。
【００４６】
実施例３
目的：ＴＭＭが骨カルシウム移動活性を有するか否か、及びそれが１，２５−（ＯＨ）２Ｄ３及び２−メチレン−１９−ノル−２０（Ｓ）−１α，２５−（ＯＨ）２Ｄ３（以下、２ＭＤと称する）とどのように比較すべきかの決定
【００４７】
動物：
５−６週齢のＣＤ−１マウスを＋Ｄマウス部屋に置き、食餌療法で飼育した。０．０２％カルシウム及び０．３％Ｐを含有するＹａｎｇら（Ａｒｃｈ．Ｂｉｏｃｈｅｍ．Ｂｉｐｈｙｓ．３０３，９８，１９９３）によって記載される精製した食餌に切り替える前に、５日間順化させるようにした。食餌切り替えの２日後、投与を開始した。
【００４８】
実験設計：
全ての動物の体重を投与前に測定した。５動物／グループを含むグループに動物を分けた。全ての動物に対して、一度に口からチューブによって胃に薬物を投与した。１００μｌのネオビー（Ｎｅｏｂｅｅ）油／２５ｇマウスで投与量を輸送した。血液（約８０μｌ）を眼窩洞（ｒｅｔｒｏｏｒｂｉｔａｌ  ｓｉｎｕｓ）から、吸入前、投与後２４時間、４８時間、及び７２時間に回収し、そして、全血清カルシウムを原子吸光分析法を用いて測定した。
【００４９】
【表１】
2007527399.tif 000014
【００５０】
結果：
表１は、０．０２％のカルシウムの食餌を与えたマウスの血清カルシウムにおける上昇を示し、ベヒクル、ベヒクル＋１α，２５（ＯＨ）２Ｄ３、ベヒクル＋２ＭＤ、又はベヒクル＋ＴＭＭの何れかが提供される。血清カルシウムの上昇は、カルシウムが腸から利用できないため、骨移動のみから起こる。
【００５１】
【表２】
2007527399.tif 000015
【００５２】
０．０２％カルシウム食餌を与えたマウスは、骨を再吸収することによって血清カルシウムレベルを唯一上昇させることができ、これは、腸内吸収を通じてカルシウムを利用できないためである。表１のデータは、最大投与量でのＴＭＭだけがインビボで骨の再吸収を引き起こしたことを示す。より低い投与量では、血清カルシウムの有意な上昇はなかった。対照的に、１α，２５（ＯＨ）２Ｄ３は、５０μｇ／ｋｇ体重及び４５０μｇ／ｋｇ体重で効果的であることが見出された。このように、ＴＭＭは、血清カルシウムの上昇において１α，２５（ＯＨ）２Ｄ３におおよそ等しいが、この点において２ＭＤに対してたった１０分の１の活性である。このように骨カルシウム移動については２５−ヒドロキシルの重要性が例証される。
【００５３】
図３は、ＴＭＭが、約１０の力価による腸内カルシウム吸収において１α，２５（ＯＨ）２Ｄ３よりより活性であることを示す。この測定では、アレンドロネート（ａｌｅｎｄｒｏｎａｔｅ）を使用し、骨吸収を遮断したため、血清カルシウムにおける上昇は、腸からのカルシウム吸収の上昇による。
【００５４】
実施例４
目的：ＴＭＭが腸内カルシウム輸送活性を有するか否か、及び１，２５（ＯＨ）２Ｄ３とどのように比較されるかの決定
【００５５】
動物：
５−６週齢のＣＤ−１マウスを＋Ｄマウスルームに置き、食餌を与えた。０．４７％カルシウムを含有する食餌に切り替える前に７日間順応させるようにした。
【００５６】
実験設計：
全ての動物の体重を投与前に測定した。５動物／グループを含むグループに動物を分けた。１ゲージ当り２−３匹の動物で飼った。全ての動物に対して、一度に口からチューブによって胃にビタミンＤ類似体を投与し、そして、一度に腹膜内接種によってアレンドロネートを投与した。１００μｌのネオビー油／２５ｇマウス（ビタミンＤ類似体）及び１００μｌのＰＢＳ／マウス（アレンドロネート）で投与量を輸送した。アレンドロネートは、骨活性化合物の投与前に、骨に働きかけるようにするために、ビタミンＤ類似体の前１日投与した。血液（約８０μｌ）を眼窩洞（ｒｅｔｒｏｏｒｂｉｔａｌ  ｓｉｎｕｓ）から、吸入前、投与後２４時間、４８時間、及び７２時間に回収した。一度、すべての時間点を回収し、０．１％の塩化ランタンで１：５０に希釈し、そして、全血清カルシウムレベルを原子吸光分析法を用いて測定した。
【００５７】
【表３】
2007527399.tif 000016
【００５８】
結果：
図３は、骨カルシウム移動活性とは対照的に、ＴＭＭが１，２５（ＯＨ）２Ｄ３より腸内カルシウム輸送活性を有することを図示する。
【００５９】
図１−３及び表１の生物学的データは、下記のように概要され得る：
２５−メチル誘導のＴＭＭの組換えラットビタミンＤ受容体への結合は、ＴＭＭが、天然のホルモンである１，２５（ＯＨ）２Ｄ３と比べて、ビタミンＤ受容体への結合が１０分の１であることを示した。これは驚くことであり、ＴＭＭが２５−ヒドロキシル基を欠如しているためである。しかしながら、ＴＭＭは、ＨＬ−６０分化で試験した場合、１，２５（ＯＨ）２Ｄ３に本質的に等しい活性を示した。つまり、ＴＭＭは、２５−ヒドロキシル基なしでさえ非常に強力である。非常に興味あることに、ＣＤ−１マウスにおいて得られたインビボデータがある。指示したレベルでの化合物の１回の投与後の動物のデータは、ＴＭＭが、骨カルシウム移動活性が非常に少ないことを示した。骨カルシウム移動（血清カルシウムレベル）は、ＴＭＭ／ｋｇ体重の１３．５マイクログラムまででさえ最低であった。つまり、その活性は、２−メチレン−１９−ノル−２０（Ｓ）−１α,２５−（ＯＨ）２Ｄ３又は２ＭＤより下に下がるだけでなく、天然のホルモンである１，２５（ＯＨ）２Ｄ３よりも下に下がった。しかしながら、考慮すべき興味は、ＴＭＭが腸内カルシウム吸収における非常に強力な効果を有していたことである。腸内カルシウム吸収におけるＴＭＭの活性は、前回の実験において、２−メチレンン−１９−ノル−２０（Ｓ）−１α,２５−（ＯＨ）２Ｄ３とほとんど同様の活性を示した１，２５（ＯＨ）２Ｄ３の１０倍である。つまり、ＴＭＭは、腸への影響については選択性を示し、環境のカルシウムの利用は、関連する骨カルシウム移動なしに非常に期待される。骨移動による骨の欠失が期待されない患者において維持のビタミンＤ化合物として使用され得る。そのような環境は、骨粗鬆症のいずれかの形体であり得る。細胞分化及びＨＬ−６０の細胞増殖の抑制を引き起こすＴＭＭの活性はまた、悪性疾患の治療、又は乾癬の治療、皮膚のケラチノサイト疾患の過剰増殖でのその使用と一致する。
【００６０】
治療の目的のために、式Ｉによって定義される本発明の新規化合物は、無害な溶媒中の溶液として、或いは適した溶媒又は担体中の乳液、懸濁液若しくは分散物として、或いは丸薬、錠剤又はカプセルとして固体の担体といっしょに、当該技術分野において既知の慣用的方法によって医薬的適用のために処方することができる。いずれものこのような処方は、更に安定剤、抗酸化剤、結合剤、着色剤又は乳化剤或いは味覚改良剤のような他の医薬的に受容可能な、そして非毒性の賦形剤を含有することもできる。
【００６１】
化合物は、経口的に、局所的に、非経口的に又は経皮的に投与することができる。化合物は、注射又は静脈内注入によって、又は適した滅菌溶液、或いは液体又は固体の投与の形態で消化環を経由して、或いはクリーム、軟膏、貼布又は経皮適用に適した同様なベヒクルの形態で都合よく投与することができる。一日当り０．０１μｇないし１００μｇの化合物の投与量が治療の目的に適当であり、このような投与量は、治療される疾患、その重度及び患者の反応によって、当該技術分野において十分に理解されているように調節される。新規化合物が作用の特異性を示すために、異なった程度の骨のミネラルの移動及びカルシウム運搬刺激が好都合であることが見出される状況では、それぞれは、単独で、或いはもう一つの活性なビタミンＤ化合物−−例えば、１α−ヒドロキシビタミンＤ２若しくはＤ３、又は１α，２５−ジヒドロキシビタミンＤ３−−の段階的な投与量といっしょに、適当に投与することができる。
【００６２】
上述した治療において使用するための組成物は、活性成分としての有効な量の上記の式Ｉによって定義されるような２−メチレン−１９−ノル−ビタミンＤ及び適した担体を含んでなる。本発明によって使用するための有効な量のこのような化合物は、組成物のｇｍあたり、約０．０１μｇないし約１００μｇであり、そして局所的に、経皮的に、経口的に又は非経口的に、約０．０１μｇ／日ないし約１００μｇ／日の投与量で投与することができる。
【００６３】
化合物は、クリーム、ローション、軟膏、局所貼布、丸薬、カプセル又は錠剤、或いは医薬的に無害な、そして受容可能な溶媒又は油中の溶液、乳剤、分散物、又は懸濁液のような液体の形態として処方することができ、そしてこのような製剤は、更に安定剤、抗酸化剤、乳化剤、着色剤、結合剤又は味覚改良剤のような他の医薬的に無害の或いは利益のある成分を含有することができる。
【００６４】
化合物は、前骨髄球の正常なマクロファージへの分化に影響するために十分な量で都合よく投与される。先に記載したような投与量が適しており、与えられた量が疾患の重度、並びに患者の症状及び反応によって、当該技術分野において十分に理解されているように調節されることは理解されることである。
【００６５】
従って本発明の処方は、活性成分を医薬的に受容可能な担体及び所望による他の治療成分と共に含んでなる。担体は、処方の他の成分と適合性であり、そしてその受容者にとって有害ではないという意味で“受容可能”でなければならない。
【００６６】
経口投与のために適した本発明の製剤は、それぞれ所定の量の活性成分を含有するカプセル、サッシェ、錠剤又はロザンジのような別々の単位の形態；粉末又は顆粒の形態；水性液体又は非水性液体中の溶液或いは懸濁液の形態；或いは水中油又は油中水乳剤の形態であることができる。
【００６７】
直腸投与のための製剤は、活性成分及びココアバターのような担体を組込んだ座薬の形態、又は浣腸の形態であることができる。
非経口投与のために適した製剤は、都合よくは、活性成分の滅菌油性又は水性製剤を含んでなり、これは好ましくは受容者の血液と等張である。
【００６８】
局所投与のために適した製剤は、リニメント、ローション、アプリカント、クリーム、軟膏又はペーストのような水中油又は油中水乳剤のような液体又は半液体製剤；或いは滴剤のような溶液又は懸濁液；或いは噴霧剤を含む。
【００６９】
喘息の治療のために、噴霧缶、ネブライザー又はアトマイザーに分配された、粉末の吸入、自己噴射又は噴霧製剤を使用することができる。製剤は、分配されるとき、好ましくは１０ないし１００μの範囲の粒子の大きさを有する。
【００７０】
製剤は、都合よくは投与量単位形態で与えることができ、そして薬学の技術の公知の方法のいずれかによって調製することができる。用語“投与量単位”によって、単一性、即ち活性成分をそのまま、或いは固体又は液体の医薬的希釈剤若しくは担体とのその混合物のいずれかを含んでなる物理的及び化学的に安定な単位投与量として、患者に投与することが可能である単一の投与量を意味する。
【００７１】
【化１２】
2007527399.tif 000017
【００７２】
【化１３】
2007527399.tif 000018
【００７３】
【化１４】
2007527399.tif 000019
【図面の簡単な説明】
【００７４】
【図１】図１は、ビタミンＤブタ腸内核受容体に対する［３Ｈ］−１，２５−（ＯＨ）２−Ｄ３の結合と競合する、２−メチレン−１９−ノル−（２０Ｓ）−２５−メチル−１α−ヒドロキシカルシフェロール又は１α，２５−ジヒドロキシビタミンＤ３の相対的活性を例示するグラフである。
【図２】図２は、２−メチレン−１９−ノル−２０（Ｓ）−２５−メチル−１α−ヒドロキシカルシフェロール又は１α，２５−ジヒドロキシビタミンＤ３の濃度の関数としてのＨＬ−６０細胞分化のパーセントを例示するグラフである。
【図３】図３は、ベヒクル＋アレンドロネートで、１α，２５−ジヒドロキシＤ３＋アレンドロネートで、又は２−メチレン−１９−ノル−２０（Ｓ）−２５−メチル−１α−ヒドロキシカルシフェロール（ＴＭＭ）＋アレンドロネートで接種したマウスの時間に対する血清カルシウムを例示するグラフである。アレンドロネートは骨吸収を遮断するため、血清カルシウムの上昇は、腸内吸収だけを反映する。
【図１】
2007527399.tif 000026
【図２】
2007527399.tif 000027
【図３】
2007527399.tif 000028
【手続補正書】
【提出日】平成19年4月3日(2007.4.3)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
以下の式：
【化１】
2007527399.tif 000029
［式中、Ｙ１及びＹ２は、同一又は別個であることができ、各々、水素及びヒドロキシ保護基から成る群から選択される］
を有する化合物。
【請求項２】
２−メチレン−１９−ノル−２０（Ｓ）−２５−メチル−１α−ヒドロキシカルシフェロール。
【請求項３】
請求項１に記載の少なくとも１つの化合物及び医薬的に受容可能な賦形剤を含有する医薬組成物。
【請求項４】
骨量の維持又は増加が望まれる代謝性骨疾患、乾癬及び癌疾患からなる群から選択される少なくとも１の疾患を治療するための請求項３記載の医薬組成物。
【請求項５】
代謝性骨疾患が、老人性骨粗鬆症、閉経期後骨粗鬆症、ステロイド誘導性骨粗鬆症、低骨代謝回転性骨粗鬆症、骨軟化症及び腎性骨形成異常症からなる群から選択される少なくとも１の疾患である、請求項４記載の医薬組成物。
【請求項６】
癌疾患が、白血病、大腸癌、乳癌及び前立腺癌からなる群から選択される少なくとも１の疾患である、請求項４記載の医薬組成物。
【請求項７】
組成物が、経口的、非経口的及び経皮的からなる群から選択される少なくとも１の方法により投与される、請求項３〜６のいずれか１項記載の医薬組成物。
【請求項８】
化合物が２−メチレン−１９−ノル−２０（Ｓ）−２５−メチル−１α−ヒドロキシカルシフェロールである、請求項３〜７のいずれか１項記載の医薬組成物。
【請求項９】
２−メチレン−１９−ノル−２０（Ｓ）−２５−メチル−１α−ヒドロキシカルシフェロールを約０．０１μｇないし約１００μｇの量で含有する、請求項３〜８のいずれか１項記載の医薬組成物。
【請求項１０】
２−メチレン−１９−ノル−２０（Ｓ）−２５−メチル−１α−ヒドロキシカルシフェロールを約０．１μｇないし約５０μｇの量で含有する、請求項３〜８のいずれか１項記載の医薬組成物。
【請求項１１】
化合物が、０．０１μｇ／日ないし１００μｇ／日の投与量で投与される、請求項３〜１０のいずれか１項記載の医薬組成物。
【請求項１２】
以下の式：
【化２】
2007527399.tif 000030
を有する（２０Ｓ）−デ−Ａ，Ｂ−２５−メチルコレスタン−８−オン。
【国際調査報告】
2007527399.tif 000031
2007527399.tif 000032
2007527399.tif 000033