(57)【要約】本発明は、薬物部分をリガンドに連結するために有用な複素環式リンカー化合物を提供する。上記化合物はまた、選択された細胞集団を標的することができるリガンドを含む薬物−リガンド結合体、および複素環式リンカー部分によってリガンドに結合された薬物も含む。上記リンカー部分は、アミド結合でペプチドを切断する細胞内酵素、例えばカテプシンについての基質であるペプチド配列を含む。上記ペプチドは、薬物とタンパク質ペプチド配列を結合する自壊的部分をさらに含む。細胞内酵素によるペプチド配列の切断時に、自壊化部分は、薬物部分が非誘導体化形態および活性化形態であるように薬物部分からそれ自体を切断する。
2007527421.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
式Ｉａ、ＩＩａおよびＩＩＩａ：
【化１】
2007527421.tif 000069
から選択される複素環式リンカー化合物であって、
ここで、
Ｕは、Ｏ、ＳまたはＮＲ６であり；
Ｑは、ＣＲ４またはＮであり；
Ｖ１、Ｖ２およびＶ３は、独立にＣＲ４またはＮであり、但し、式ＩＩａおよびＩＩＩａに関してＱ、Ｖ１およびＶ２の少なくとも１個はＮであり；
Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３およびＲ４は、Ｈ、Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ、ＯＨ、−Ｎ（Ｒ５）２、―Ｎ（Ｒ５）３＋、Ｃ１−Ｃ８ハロゲン化アルキル、カルボキシレート、サルフェート、スルファメート、スルホネート、−ＳＯ２Ｒ５、−Ｓ（＝Ｏ）Ｒ５、−ＳＲ５、−ＳＯ２Ｎ（Ｒ５）２、−Ｃ（＝Ｏ）Ｒ５、−ＣＯ２Ｒ５、−Ｃ（＝Ｏ）Ｎ（Ｒ５）２、−ＣＮ、−Ｎ３、−ＮＯ２、Ｃ１−Ｃ８アルコキシ、Ｃ１−Ｃ８ハロ置換アルキル、ポリエチレンオキシ、ホスホネート、ホスフェート、Ｃ１−Ｃ８アルキル、Ｃ１−Ｃ８置換アルキル、Ｃ２−Ｃ８アルケニル、Ｃ２−Ｃ８置換アルケニル、Ｃ２−Ｃ８アルキニル、Ｃ２−Ｃ８置換アルキニル、Ｃ６−Ｃ２０アリール、Ｃ６−Ｃ２０置換アリール、Ｃ１−Ｃ２０複素環およびＣ１−Ｃ２０置換複素環から独立して選択されるか；または一緒になって、Ｒ２およびＲ３は、カルボニル（＝Ｏ）または３−７個の炭素原子のスピロ炭素環を形成し；そして
Ｒ５およびＲ６は、Ｈ、Ｃ１−Ｃ８アルキル、Ｃ１−Ｃ８置換アルキル、Ｃ２−Ｃ８アルケニル、Ｃ２−Ｃ８置換アルケニル、Ｃ２−Ｃ８アルキニル、Ｃ２−Ｃ８置換アルキニル、Ｃ６−Ｃ２０アリール、Ｃ６−Ｃ２０置換アリール、Ｃ１−Ｃ２０複素環およびＣ１−Ｃ２０置換複素環から独立して選択され；
ここで、Ｃ１−Ｃ８置換アルキル、Ｃ２−Ｃ８置換アルケニル、Ｃ２−Ｃ８置換アルキニル、Ｃ６−Ｃ２０置換アリールおよびＣ２−Ｃ２０置換複素環は、Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ、ＯＨ、−Ｎ（Ｒ５）２、−Ｎ（Ｒ５）３＋、Ｃ１−Ｃ８ハロゲン化アルキル、カルボキシレート、サルフェート、スルファメート、スルホネート、Ｃ１−Ｃ８アルキルスルホネート、Ｃ１−Ｃ８アルキルアミノ、４−ジアルキルアミノピリジニウム、Ｃ１−Ｃ８アルキルヒドロキシル、Ｃ１−Ｃ８アルキルチオール、−ＳＯ２Ｒ５、−Ｓ（＝Ｏ）Ｒ５、−ＳＲ５、−ＳＯ２Ｎ（Ｒ５）２、−Ｃ（＝Ｏ）Ｒ５、−ＣＯ２Ｒ５、−Ｃ（＝Ｏ）Ｎ（Ｒ５）２、−ＣＮ、−Ｎ３、−ＮＯ２、Ｃ１−Ｃ８アルコキシ、Ｃ１−Ｃ８トリフルオロアルキル、Ｃ１−Ｃ８アルキル、Ｃ３−Ｃ１２炭素環、Ｃ６−Ｃ２０アリール、Ｃ２−Ｃ２０複素環、ポリエチレンオキシ、ホスホネートおよびホスフェートから選択される１つ以上の置換基で独立して置換され；
Ｒ７は、アミノ酸の側鎖であり、必要に応じて保護基で保護されており；
ＸおよびＹは独立して、Ｈであるか；Ｆｍｏｃ、Ｂｏｃ、カルボベンズオキシ（ＣＢｚ）、ベンジヒドリル、アリルオキシカルボニルおよびトリフェニルメチルから選択される保護基を形成するか；またはＮ−ヒドロキシスクシンイミド、パラ−ニトロフェニルカルボネート、パラ−ニトロフェニルカルバメート、ペンタフルオロフェニル、ハロアセトアミドおよびマレイミドから選択される反応性官能基を形成し；そして
ｍは、１、２、３、４、５または６である、
複素環式リンカー化合物。
【請求項２】
以下の構造：
【化２】
2007527421.tif 000070
を有する、請求項１に記載の複素環式リンカー化合物。
【請求項３】
以下の構造：
【化３】
2007527421.tif 000071
を有する、請求項１に記載の複素環式リンカー化合物。
【請求項４】
式Ｉ、ＩＩおよびＩＩＩ：
【化４】
2007527421.tif 000072
から選択される複素環式自壊的部分を含むリンカーによって結合体化した薬物部分および細胞特異的リガンドを含有する、薬物−リガンド結合体化合物であって、
ここで、波線は、該細胞特異的リガンドおよび該薬物部分への共有結合部位を示し、ここで、
Ｕは、Ｏ、ＳまたはＮＲ６であり；
Ｑは、ＣＲ４またはＮであり；
Ｖ１、Ｖ２およびＶ３は、独立にＣＲ４またはＮであり、但し、式ＩＩおよびＩＩＩに関してＱ、Ｖ１およびＶ２の少なくとも１個はＮであり；
Ｔは、該薬物部分から突き出たＮＨ、ＮＲ６、ＯまたはＳであり；
Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３およびＲ４は、Ｈ、Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ、ＯＨ、−Ｎ（Ｒ５）２、―Ｎ（Ｒ５）３＋、Ｃ１−Ｃ８ハロゲン化アルキル、カルボキシレート、サルフェート、スルファメート、スルホネート、−ＳＯ２Ｒ５、−Ｓ（＝Ｏ）Ｒ５、−ＳＲ５、−ＳＯ２Ｎ（Ｒ５）２、−Ｃ（＝Ｏ）Ｒ５、−ＣＯ２Ｒ５、−Ｃ（＝Ｏ）Ｎ（Ｒ５）２、−ＣＮ、−Ｎ３、−ＮＯ２、Ｃ１−Ｃ８アルコキシ、Ｃ１−Ｃ８ハロ置換アルキル、ポリエチレンオキシ、ホスホネート、ホスフェート、Ｃ１−Ｃ８アルキル、Ｃ１−Ｃ８置換アルキル、Ｃ２−Ｃ８アルケニル、Ｃ２−Ｃ８置換アルケニル、Ｃ２−Ｃ８アルキニル、Ｃ２−Ｃ８置換アルキニル、Ｃ６−Ｃ２０アリール、Ｃ６−Ｃ２０置換アリール、Ｃ１−Ｃ２０複素環およびＣ１−Ｃ２０置換複素環から独立して選択されるか、または一緒になって、Ｒ２およびＲ３は、カルボニル（＝Ｏ）または３−７個の炭素原子のスピロ炭素環を形成し；そして
Ｒ５およびＲ６は、Ｈ、Ｃ１−Ｃ８アルキル、Ｃ１−Ｃ８置換アルキル、Ｃ２−Ｃ８アルケニル、Ｃ２−Ｃ８置換アルケニル、Ｃ２−Ｃ８アルキニル、Ｃ２−Ｃ８置換アルキニル、Ｃ６−Ｃ２０アリール、Ｃ６−Ｃ２０置換アリール、Ｃ１−Ｃ２０複素環およびＣ１−Ｃ２０置換複素環から独立して選択され；
ここで、Ｃ１−Ｃ８置換アルキル、Ｃ２−Ｃ８置換アルケニル、Ｃ２−Ｃ８置換アルキニル、Ｃ６−Ｃ２０置換アリールおよびＣ２−Ｃ２０置換複素環は、Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ、ＯＨ、−Ｎ（Ｒ５）２、−Ｎ（Ｒ５）３＋、Ｃ１−Ｃ８ハロゲン化アルキル、カルボキシレート、サルフェート、スルファメート、スルホネート、Ｃ１−Ｃ８アルキルスルホネート、Ｃ１−Ｃ８アルキルアミノ、４−ジアルキルアミノピリジニウム、Ｃ１−Ｃ８アルキルヒドロキシル、Ｃ１−Ｃ８アルキルチオール、−ＳＯ２Ｒ５、−Ｓ（＝Ｏ）Ｒ５、−ＳＲ５、−ＳＯ２Ｎ（Ｒ５）２、−Ｃ（＝Ｏ）Ｒ５、−ＣＯ２Ｒ５、−Ｃ（＝Ｏ）Ｎ（Ｒ５）２、−ＣＮ、−Ｎ３、−ＮＯ２、Ｃ１−Ｃ８アルコキシ、Ｃ１−Ｃ８トリフルオロアルキル、Ｃ１−Ｃ８アルキル、Ｃ３−Ｃ１２炭素環、Ｃ６−Ｃ２０アリール、Ｃ２−Ｃ２０複素環、ポリエチレンオキシ、ホスホネートおよびホスフェートから選択される１以上の置換基で独立して置換される、
薬物−リガンド結合体化合物。
【請求項５】
式ＩＶ：
Ｌ−［Ａｎ−Ｚｍ−Ｘ−Ｄ］ｐ            ＩＶ
を有する請求項４に記載の薬物−リガンド結合体化合物であって、
ここで、
Ｌは、細胞特異的リガンドであり；
Ａは、スペーサー単位であり；
Ｚは、アミノ酸であり；
Ｘは、式Ｉ、ＩＩおよびＩＩＩから選択される複素環式自壊的部分であり；
Ｄは、薬物部分であり；
ｍは、１、２、３、４、５または６であり；
ｎは、０または１であり；そして
ｐは、１、２、３、４、５、６、７または８である；
薬物−リガンド結合体化合物。
【請求項６】
Ｘが式Ｉである、請求項５に記載の薬物−リガンド結合体化合物。
【請求項７】
ＱがＮであり、そしてＵがＳである、請求項６に記載の薬物−リガンド結合体化合物。
【請求項８】
ＱがＣＨであり、そしてＵがＯである、請求項６に記載の薬物−リガンド結合体化合物。
【請求項９】
Ｒ１がＣＦ３である、請求項６に記載の薬物−リガンド結合体化合物。
【請求項１０】
Ｒ１がＨである、請求項６に記載の薬物−リガンド結合体化合物。
【請求項１１】
ＴがＮまたはＮＨである、請求項６に記載の薬物−リガンド結合体化合物。
【請求項１２】
Ｘが式ＩＩである、請求項５に記載の薬物−リガンド結合体化合物。
【請求項１３】
ＱがＮであり；Ｖ１がＣＨであり；そしてＶ２がＣＨである、請求項１２に記載の薬物−リガンド結合体化合物。
【請求項１４】
ＱがＣＨであり；Ｖ１がＣＨであり；そしてＶ２がＮである、請求項１２に記載の薬物−リガンド結合体化合物。
【請求項１５】
ＱがＮであり；Ｖ１がＣＨであり；そしてＶ２がＮである、請求項１２に記載の薬物−リガンド結合体化合物。
【請求項１６】
ＱがＮであり；Ｖ１がＮであり；そしてＶ２がＮである、請求項１２に記載の薬物−リガンド結合体化合物。
【請求項１７】
ＱがＮであり；Ｖ１がＮであり；そしてＶ２がＣＨである、請求項１２に記載の薬物−リガンド結合体化合物。
【請求項１８】
ＴがＮまたはＮＨである、請求項１２に記載の薬物−リガンド結合体化合物。
【請求項１９】
Ｘが式ＩＩＩである、請求項５に記載の薬物−リガンド結合体化合物。
【請求項２０】
ＱがＮであり；そしてＶ１、Ｖ２およびＶ３が各々ＣＨである、請求項１９に記載の薬物−リガンド結合体化合物。
【請求項２１】
ＱがＣＨであり；そしてＶ１、Ｖ２およびＶ３が各々ＣＨである、請求項１９に記載の薬物−リガンド結合体化合物。
【請求項２２】
ＴがＮまたはＮＨである、請求項１９に記載の薬物−リガンド結合体化合物。
【請求項２３】
ｍが１であり、そしてＺが、アラニン、２−アミノ−２−シクロヘキシル酢酸、２−アミノ−２−フェニル酢酸、アルギニン、アスパラギン、アスパラギン酸、システイン、グルタミン、グルタミン酸、グリシン、ヒスチジン、イソロイシン、ロイシン、リシン、メチオニン、フェニルアラニン、プロリン、セリン、トレオニン、トリプトファン、チロシン、バリン、γ−アミノ酪酸、α，α−ジメチルγ−アミノ酪酸、β，β−ジメチルγ−アミノ酪酸、オルニチン、シトルリン、およびこれらの保護された形態から選択される、請求項５に記載の薬物−リガンド結合体化合物。
【請求項２４】
ｍが２であり、そしてＺｍが、グリシン−グリシン、アラニン−フェニルアラニン、フェニルアラニン−リシン、バリン−シトルリンおよびバリン−リシンから選択されるジペプチドである、請求項５に記載の薬物−リガンド結合体化合物。
【請求項２５】
ｍが３であり、そしてＺｍが、グリシン−グリシン−グリシン、グリシン−アラニン−フェニルアラニン、グリシン−フェニルアラニン−リシン、グリシン−バリン−シトルリンおよびグリシン−バリン−リシンから選択されるトリペプチドである、請求項５に記載の薬物−リガンド結合体化合物。
【請求項２６】
ｎが１であり、そしてＡが、タンパク質、ペプチドまたは抗体であるＬのＣｙｓ残基に結合している、請求項５に記載の薬物−リガンド結合体化合物。
【請求項２７】
請求項５に記載の薬物−リガンド結合体化合物であって、ここで、ｎが１であり、そしてＡが構造：
【化５】
2007527421.tif 000073
を有し、
ここで、波線は、Ｌの硫黄原子およびＺｍへの共有結合部位を示し、そしてＲ１７は、（ＣＨ２）ｒ、Ｃ３−Ｃ８カルボシクリル、Ｏ（ＣＨ２）ｒ、アリーレン、（ＣＨ２）ｒ−アリーレン、−アリーレン−（ＣＨ２）ｒ−、（ＣＨ２）ｒ−（Ｃ３−Ｃ８カルボシクリル）、（Ｃ３−Ｃ８カルボシクリル）−（ＣＨ２）ｒ、Ｃ３−Ｃ８ヘテロシクリル、（ＣＨ２）ｒ−（Ｃ３−Ｃ８ヘテロシクリル）、−（Ｃ３−Ｃ８ヘテロシクリル）−（ＣＨ２）ｒ、−（ＣＨ２）ｒＣ（Ｏ）ＮＲｂ（ＣＨ２）ｒ−、−（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）ｒ−、−（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）ｒ−ＣＨ２−、−（ＣＨ２）ｒＣ（Ｏ）ＮＲｂ（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）ｒ−、−（ＣＨ２）ｒＣ（Ｏ）ＮＲｂ（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）ｒ−ＣＨ２−、−（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）ｒＣ（Ｏ）ＮＲｂ（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）ｒ−、−（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）ｒＣ（Ｏ）ＮＲｂ（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）ｒ−ＣＨ２−、および−（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）ｒＣ（Ｏ）ＮＲｂ（ＣＨ２）ｒ−から選択され、ｒは、独立して１−１０の範囲の整数である、
薬物−リガンド結合体化合物。
【請求項２８】
Ｒ１７が、（ＣＨ２）５、（ＣＨ２）２、（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）２ＣＨ２、およびＣＨ２ＣＨ２Ｃ（Ｏ）ＮＨ（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）２ＣＨ２から選択される、請求項２７に記載の薬物−リガンド結合体化合物。
【請求項２９】
ｎが１であり、そしてＡが、４−（Ｎ−スクシンイミドメチル）シクロヘキサン−１−カルボニル、ｍ−スクシンイミドベンゾイル、４−（ｐ−スクシンイミドフェニル）ブチリル、４−（２−アセトアミド）ベンゾイル、３−チオプロピオニル、４−（１−チオエチル）−ベンゾイルおよび６−（３−チオプロピオニルアミド）−ヘキサノイルから選択される、請求項５に記載の薬物−リガンド結合体化合物。
【請求項３０】
Ｄがアウリスタチン薬物部分である、請求項５に記載の薬物−リガンド結合体化合物。
【請求項３１】
Ｄが、Ｎ８−アセチルスペルミジン、アクチノマイシン、９−アミノカンプトテシン、アミノプテリン、アンギジン、アントラサイクリン、ブレオマイシン、酪酸、カリケアマイシン、カンプトテシン、カンプトテシン、１−（２クロロエチル）−１，２−ジメタンスルホニルヒドラジド、シス−プラチン、ダウノルビシン、ジアセトキシペンチルドキソルビシン、１，８−ジヒドロキシ−ビシクロ［７．３．１］トリデカ−４，９−ジエン−２，６−ジイン−１３−オン、ドキソルビシン、エスペラマイシン、エトポシド、マイタンシン、メイタンシノール、６−メルカプトプリン、メトトレキサート、マイトマイシン−Ｃ、マイトマイシン−Ａ、モルホリノ−ドキソルビシン、レチノイン酸、タリソマイシン、タキソール、ビンブラスチンおよびビンクリスチン；ならびにこれらの異性体、塩形態および誘導体から選択される薬物部分である、請求項５に記載の薬物−リガンド結合体化合物。
【請求項３２】
Ｌが、以下の（１）−（３５）：
（１）ＢＭＰＲ１Ｂ（骨形態発生タンパク質レセプターＩＢ型、Ｇｅｎｂａｎｋ登録番号ＮＭ＿００１２０３）；
（２）Ｅ１６（ＬＡＴ１、ＳＬＣ７Ａ５、Ｇｅｎｂａｎｋ登録番号ＮＭ＿００３４８６）；
（３）ＳＴＥＡＰ１（前立腺の６回膜貫通型上皮抗原、Ｇｅｎｂａｎｋ登録番号ＮＭ＿０１２４４９）；
（４）０７７２Ｐ（ＣＡ１２５、ＭＵＣ１６、Ｇｅｎｂａｎｋ登録番号ＡＦ３６１４８６）；
（５）ＭＰＦ（ＭＰＦ、ＭＳＬＮ、ＳＭＲ、巨核球増殖因子、メソテリン、Ｇｅｎｂａｎｋ登録番号ＮＭ＿００５８２３）；
（６）Ｎａｐｉ３ｂ（ＮＡＰＩ−３Ｂ、ＮＰＴＩＩｂ、ＳＬＣ３４Ａ２、溶質キャリアファミリー３４（リン酸ナトリウム）、メンバー２、ＩＩ型ナトリウム依存性リン酸トランスポーター３ｂ、Ｇｅｎｂａｎｋ登録番号ＮＭ＿００６４２４）；
（７）Ｓｅｍａ  ５ｂ（ＦＬＪ１０３７２、ＫＩＡＡ１４４５、Ｍｍ．４２０１５、ＳＥＭＡ５Ｂ、ＳＥＭＡＧ、セマフォリン５ｂ  Ｈｌｏｇ、セマドメイン、７回のトロンボスポンジン反復（１型および１型様）、膜貫通ドメイン（ＴＭ）および短い細胞質ドメイン、（セマフォリン）５Ｂ、Ｇｅｎｂａｎｋ登録番号ＡＢ０４０８７８）；
（８）ＰＳＣＡ  ｈｌｇ（２７０００５０Ｃ１２Ｒｉｋ、Ｃ５３０００８Ｏ１６Ｒｉｋ、ＲＩＫＥＮ  ｃＤＮＡ  ２７０００５０Ｃ１２、ＲＩＫＥＮ  ｃＤＮＡ  ２７０００５０Ｃ１２遺伝子、Ｇｅｎｂａｎｋ登録番号ＡＹ３５８６２８）；
（９）ＥＴＢＲ（エンドセリンＢ型レセプター、Ｇｅｎｂａｎｋ登録番号ＡＹ２７５４６３）；
（１０）ＭＳＧ７８３（ＲＮＦ１２４、仮想タンパク質ＦＬＪ２０３１５、Ｇｅｎｂａｎｋ登録番号ＮＭ＿０１７７６３）；
（１１）ＳＴＥＡＰ２（ＨＧＮＣ＿８６３９、ＩＰＣＡ−１、ＰＣＡＮＡＰ１、ＳＴＡＭＰ１、ＳＴＥＡＰ２、ＳＴＭＰ、前立腺癌関連遺伝子１、前立腺癌関連タンパク質１、前立腺の６回膜貫通型上皮抗原２、６回膜貫通型前立腺タンパク質、Ｇｅｎｂａｎｋ登録番号ＡＦ４５５１３８）；
（１２）ＴｒｐＭ４（ＢＲ２２４５０、ＦＬＪ２００４１、ＴＲＰＭ４、ＴＲＰＭ４Ｂ、一過性レセプター潜在的陽イオンチャネル、サブファミリーＭ、メンバー４、Ｇｅｎｂａｎｋ登録番号ＮＭ＿０１７６３６）；
（１３）ＣＲＩＰＴＯ（ＣＲ、ＣＲ１、ＣＲＧＦ、ＣＲＩＰＴＯ、ＴＤＧＦ１、奇形癌由来増殖因子、Ｇｅｎｂａｎｋ登録番号ＮＰ＿００３２０３またはＮＭ＿００３２１２）；
（１４）ＣＤ２１（ＣＲ２（補体レセプター２）またはＣ３ＤＲ（Ｃ３ｄ／エプスタイン−バーウイルスレセプター）またはＨｓ．７３７９２、Ｇｅｎｂａｎｋ登録番号Ｍ２６００４）；
（１５）ＣＤ７９ｂ（ＣＤ７９Ｂ、ＣＤ７９β、ＩＧｂ（免疫グロブリン関連β）、Ｂ２９、Ｇｅｎｂａｎｋ登録番号ＮＭ＿０００６２６）；
（１６）ＦｃＲＨ２（ＩＦＧＰ４、ＩＲＴＡ４、ＳＰＡＰ１Ａ（ホスファターゼアンカータンパク質１ａを含むＳＨ２ドメイン）、ＳＰＡＰ１Ｂ、ＳＰＡＰ１Ｃ、Ｇｅｎｂａｎｋ登録番号ＮＭ＿０３０７６４）；
（１７）ＨＥＲ２（Ｇｅｎｂａｎｋ登録番号Ｍ１１７３０）；
（１８）ＮＣＡ（Ｇｅｎｂａｎｋ登録番号Ｍ１８７２８）；
（１９）ＭＤＰ（Ｇｅｎｂａｎｋ登録番号ＢＣ０１７０２３）；
（２０）ＩＬ２０Ｒα（Ｇｅｎｂａｎｋ登録番号ＡＦ１８４９７１）；
（２１）Ｂｒｅｖｉｃａｎ（Ｇｅｎｂａｎｋ登録番号ＡＦ２２９０５３）；
（２２）Ｅｐｈｂ２Ｒ（Ｇｅｎｂａｎｋ登録番号ＮＭ＿００４４４２；）
（２３）ＡＳＬＧ６５９（Ｇｅｎｂａｎｋ登録番号ＡＸ０９２３２８）；
（２４）ＰＳＣＡ（Ｇｅｎｂａｎｋ登録番号ＡＪ２９７４３６）；
（２５）ＧＥＤＡ（Ｇｅｎｂａｎｋ登録番号ＡＹ２６０７６３）；
（２６）ＢＡＦＦ−Ｒ（Ｂ細胞活性化因子レセプター、ＢＬｙＳレセプター３、ＢＲ３、ＮＰ＿４４３１７７．１）；および
（２７）ＣＤ２２（Ｂ細胞レセプターＣＤ２２−Ｂアイソフォーム、ＮＰ−００１７６２．１）；
（２８）ＣＤ７９ａ（ＣＤ７９Ａ、ＣＤ７９α、免疫グロブリン関連α、Ｉｇβ（ＣＤ７９Ｂ）と共有結合的に相互作用し、ＩｇＭ分子と共に表面上で複合体を形成するＢ細胞特異的タンパク質は、Ｂ細胞分化に関与するシグナルを伝達する）、Ｇｅｎｂａｎｋ登録番号ＮＰ＿００１７７４．１）；
（２９）ＣＸＣＲ５（バーキットリンパ腫レセプター１、ＣＸＣＬ１３ケモカインによって活性化されるＧタンパク質共役レセプターは、リンパ球移動および体液性防御において機能し、ＨＩＶ−２感染およびおそらくＡＩＤＳ、リンパ腫、骨髄腫および白血病の発症に役割を果たす、Ｇｅｎｂａｎｋ登録番号ＮＰ＿００１７０７．１）；
（３０）ＨＬＡ−ＤＯＢ（ペプチドに結合して、それらをＣＤ４＋Ｔリンパ球に提示するＭＨＣクラスＩＩ分子（Ｉａ抗原）のβサブユニット、Ｇｅｎｂａｎｋ登録番号ＮＰ＿００２１１１．１）；
（３１）Ｐ２Ｘ５（プリン作動性レセプターＰ２Ｘリガンド依存性イオンチャネル５、細胞外ＡＴＰによって開閉されるイオンチャネルは、シナプス伝達および神経発生に関与し得、欠損は特発性不安定膀胱の病態生理学に寄与し得る、Ｇｅｎｂａｎｋ登録番号ＮＰ＿００２５５２．２）；
（３２）ＣＤ７２（Ｂ細胞分化抗原ＣＤ７２、Ｌｙｂ−２）、Ｇｅｎｂａｎｋ登録番号ＮＰ＿００１７７３．１）；
（３３）ＬＹ６４（リンパ球抗原６４（ＲＰ１０５）、ロイシンリッチリピート（ＬＲＲ）ファミリーのＩ型膜タンパク質は、Ｂ細胞活性化およびアポトーシスを調節し、機能の喪失は全身性エリテマトーデスを有する患者における疾患活性上昇に関連する、Ｇｅｎｂａｎｋ登録番号ＮＰ＿００５５７３．１）；
（３４）ＦＣＲＨ１（Ｆｃレセプター様タンパク質１、Ｃ２型Ｉｇ様ドメインおよびＩＴＡＭドメインを含む免疫グロブリンＦｃドメインについての推定上のレセプターは、Ｂリンパ球分化において役割を有し得る、Ｇｅｎｂａｎｋ登録番号ＮＰ＿４４３１７０．１）；および
（３５）ＩＲＴＡ２（おそらくＢ細胞発生とリンパ腫発生において役割を有する推定上の免疫レセプター、免疫グロブリンスーパーファミリーレセプタートランスロケーション関連２；トランスロケーションによる遺伝子の調節不全は一部のＢ細胞悪性疾患において生じる、Ｇｅｎｂａｎｋ登録番号ＮＰ＿１１２５７１．１）；
から選択される１以上の腫瘍関連抗原または細胞表面レセプターに結合する抗体である、請求項５に記載の薬物−リガンド結合体化合物。
【請求項３３】
前記抗原がＨＥＲ−２である、請求項３２に記載の薬物−リガンド結合体化合物。
【請求項３４】
Ｌが、ボンベシン、ＥＤＧ、トランスフェリン、ガストリン、ガストリン放出ペプチド、血小板由来増殖因子、ＩＬ−２、ＩＬ−６、ＴＦＧ−α、ＴＦＧ−β、ＶＧＦ、インスリンおよびインスリン様増殖因子Ｉおよびインスリン様増殖因子ＩＩからなる群より選択されるリガンドである、請求項５に記載の薬物−リガンド結合体化合物。
【請求項３５】
哺乳動物における腫瘍を処置する方法であって、該方法は、請求項４に記載の薬物−リガンド結合体化合物の有効量を該哺乳動物に投与する工程を包含し、該結合体のリガンドが腫瘍細胞に結合する、方法。
【請求項３６】
前記薬物−リガンド結合体化合物が前記腫瘍細胞に内在化される、請求項３５に記載の方法。
【請求項３７】
細胞を死滅させる方法であって、該方法は、該細胞を請求項４に記載の薬物−リガンド結合体化合物と接触させる工程を包含し、該結合体化合物のリガンドが該細胞に結合する、方法。
【請求項３８】
前記薬物−リガンド結合体化合物が前記細胞に内在化される、請求項３７に記載の方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
（発明の分野）
本発明は、薬物部分をリガンドに連結するために有用な複素環式リンカー化合物、および上記リガンドによって標的される特定細胞または組織型において薬物が結合体から酵素的に切断される、薬物−リガンド結合体に関する。
【背景技術】
【０００２】
（発明の背景）
標的抗癌治療薬は、従来の癌化学療法に比べて非特異的毒性を低下させ、効果を増大させるように設計される。このアプローチは、極めて強力な複合低分子治療薬を癌細胞に特異的に送達する、モノクローナル抗体の強力なターゲティング能力によって具体化される。毒性の問題に対処する試みとして、化学療法剤（薬物）は、高度の特異性で腫瘍細胞に結合して抗体−薬物結合体（ＡＤＣ）または免疫結合体と称される化合物を形成する、抗体またはタンパク質レセプターリガンドなどの標的分子に結合された。免疫結合体は、細胞傷害性薬物を特定細胞表面抗原またはレセプターを過剰発現する腫瘍へと向けるので、理論上毒性は低いはずである。この戦略は、一部には大型抗体またはタンパク質レセプターリガンドに結合体化した場合細胞傷害性薬物が不活性になるかまたはより活性が低くなる傾向があるので、その成功は限られてきた。免疫結合体に関する有望な進歩が、腫瘍部位または腫瘍細胞の内部で切断されるリンカーを介して抗体に連結された細胞傷害性薬物に見られた。
【０００３】
細胞特異的リガンドに結合体化した細胞傷害性薬物または細胞増殖抑制性薬物の標的送達に対する化学的解決法は、結合体内で薬物部分をリガンドに結合する、「自壊的リンカー（ｓｅｌｆ−ｉｍｍｏｌａｔｉｖｅ  ｌｉｎｋｅｒ）」、ＰＡＢＣまたはＰＡＢ（パラ−アミノベンジルオキシカルボニル）である（非特許文献１；非特許文献２）。ＰＡＢリンカー単位は電子カスケードスペーサーとも称される。ペプチド単位のカルボキシ末端とＰＡＢのパラアミノベンジルを連結するアミド結合は基質であり得、特定のプロテアーゼによって切断され得る。芳香族アミンは電子供与性となり、脱離基の排除を導く電子カスケードを開始させて、二酸化炭素の脱離後に遊離薬物を放出する（非特許文献３）。カテプシンＢは遍在システインプロテアーゼである。転移性腫瘍（非特許文献４）または慢性関節リウマチ（非特許文献５）などの病的状態を除き、カテプシンＢは細胞内酵素である。従って、カテプシンＢ−切断リンカーと共に産生される結合体は、循環中で安定である可能性が高い。ＰＡＢＣに隣接するペプチド結合の切断、すなわち細胞内酵素による切断の際に、薬物がリガンドから遊離し、それによってリンカーの残りの部分の結合がなくなる（非特許文献６；非特許文献７）。
【０００４】
ペプチド単位と結合してパラ−アミノベンジルオキシカルボニル（ＰＡＢまたはＰＡＢＣ）単位を含むリンカーは、薬物部分を抗体などの標的リガンドから遊離させる酵素条件、加水分解条件または他の代謝条件下での１，６脱離および切断の「自壊化（ｓｅｌｆ−ｉｍｍｏｌａｔｉｎｇ）」または「自壊的（ｓｅｌｆ−ｉｍｍｏｌａｔｉｖｅ）」機構によって開発された（特許文献１；特許文献２；特許文献３；特許文献４；特許文献５；特許文献６；特許文献７；特許文献８；特許文献９；特許文献１０；特許文献１１；特許文献１２；特許文献１３；特許文献１４；特許文献１５）。２−ニトロイミダゾール−５−イルメチル基は、切断プロドラッグ単位として報告された（非特許文献８）。プロドラッグおよび結合体におけるＰＡＢ単位の使用に関してはまた、非特許文献９；非特許文献１０；非特許文献１１；非特許文献１２；非特許文献１３；非特許文献１４；非特許文献１５も参照のこと。
【特許文献１】米国特許第６２１４３４５号明細書
【特許文献２】米国特許出願公開第２００３／０１３０１８９号明細書
【特許文献３】米国特許出願公開第２００３／００９６７４３号明細書
【特許文献４】米国特許第６７５９５０９号明細書
【特許文献５】米国特許出願公開第２００４／００５２７９３号明細書
【特許文献６】米国特許第６２１８５１９号明細書
【特許文献７】米国特許第６８３５８０７号明細書
【特許文献８】米国特許第６２６８４８８号明細書
【特許文献９】米国特許出願公開第２００４／００１８１９４号明細書
【特許文献１０】国際公開第９８／１３０５９号パンフレット
【特許文献１１】米国特許出願公開第２００４／００５２７９３号明細書
【特許文献１２】米国特許第６６７７４３５号明細書
【特許文献１３】米国特許第５６２１００２号明細書
【特許文献１４】米国特許出願公開第２００４０１２１９４０号明細書
【特許文献１５】国際公開第２００４／０３２８２８号パンフレット
【非特許文献１】Ｃａｒｌら、「Ｊ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．」、１９８１年、第２４巻、ｐ．４７９−４８０
【非特許文献２】Ｃｈａｋｒａｖａｒｔｙら、「Ｊ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．」、１９８３年、第２６巻、ｐ．６３８−６４４
【非特許文献３】ｄｅ  Ｇｒｏｏｔら、「Ｊｏｕｒｎａｌ  ｏｆ  Ｏｒｇａｎｉｃ  Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ」、２００１年、第６６巻、第２６号、ｐ．８８１５−８８３０
【非特許文献４】Ｓｉｎｈａら、「Ｐｒｏｓｔａｔｅ」、２００１年、第４９巻、ｐ．１７２−１８４
【非特許文献５】Ｈａｓｈｉｍｏｔｏら、「Ｂｉｏｃｈｅｍ．Ｂｉｏｐｈｙｓ．Ｒｅｓ．Ｃｏｍｍｕｎ．」、２００１年、第２８３巻、ｐ．３３４−３３９
【非特許文献６】ｄｅ  Ｇｒｏｏｔら、「Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｃａｎｃｅｒ  Ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃｓ」、２００２年、第１巻、第１１号、ｐ．９０１−９１１
【非特許文献７】ｄｅ  Ｇｒｏｏｔら、「Ｊ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．」、１９９９年、第４２巻、第２５号、ｐ．５２７７−５２８３
【非特許文献８】Ｈａｙら、「Ｂｉｏｏｒｇ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．Ｌｅｔｔ．」、１９９９年、第９巻、ｐ．２２３７
【非特許文献９】Ｗａｌｋｅｒら、「Ｂｉｏｏｒｇａｎｉｃ  ＆  Ｍｅｄｉｃｉｎａｌ  Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ  Ｌｅｔｔｅｒｓ」、２００４年、第１４巻、第１６号、ｐ．４３２３−４３２７
【非特許文献１０】Ｄｅｖｙら、「ＦＡＳＥＢ  Ｊｏｕｒｎａｌ」、２００４年、第１８巻、第３号、ｐ．５６５−５６７、１０．１０９６／ｆｊ．０３−０４６２ｆｊｅ
【非特許文献１１】Ｆｒａｎｃｉｓｃｏら、「Ｂｌｏｏｄ」、２００３年、第１０２巻、第４号、ｐ．１４５８−１４６５
【非特許文献１２】Ｄｏｒｏｎｉｎａら、「Ｎａｔｕｒｅ  Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ」、２００３年、第２１巻、第７号、ｐ．７７８−７８４
【非特許文献１３】Ｋｉｎｇら、「Ｊｏｕｒｎａｌ  ｏｆ  Ｍｅｄｉｃｉｎａｌ  Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ」、２００２年、第４５巻、第１９号、ｐ．４３３６−４３４３
【非特許文献１４】Ｄｕｂｏｗｃｈｉｋら、「Ｂｉｏｃｏｎｊｕｇａｔｅ  Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ」、２００２年、第１３巻、第４号、ｐ．８５５−８６９
【非特許文献１５】Ｄｕｂｏｗｃｈｉｋら、「Ｂｉｏｏｒｇａｎｉｃ  ＆  Ｍｅｄｉｃｉｎａｌ  Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ  Ｌｅｔｔｅｒｓ」、２００２年、第１２巻、第１１号、ｐ．１５２９−１５３２
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【０００５】
ＰＡＢ型自壊的リンカーの限界は、結合体の低い溶解度と凝集を生じさせる傾向である。さらに、一部のＰＡＢ含有結合体は、特定の切断酵素に関して適切な基質ではないか、または切断が遅過ぎて効果を達成できないことがある。自壊的リンカーの構造を最適化することによって薬物−リガンド結合体の性質を改善することが望ましい。
【課題を解決するための手段】
【０００６】
（発明の要旨）
本発明は、式Ｉａ、ＩＩａおよびＩＩＩａ：
【０００７】
【化６】
2007527421.tif 000003
から選択される複素環式リンカー化合物を提供し、
ここで、
Ｒ７は、アミノ酸の側鎖であり、必要に応じて保護基で保護されており；
ＸおよびＹは、独立して、Ｈであるか、Ｆｍｏｃ、Ｂｏｃ、トリフェニルメチルから選択される保護基を形成するか、またはＮ−ヒドロキシスクシンイミド、パラ−ニトロフェニルカルボネート、パラ−ニトロフェニルカルバメート、ペンタフルオロフェニル、ハロアセトアミドおよびマレイミドから選択される反応性官能基を形成し；そして
ｍは１、２、３、４、５または６である。
【０００８】
本発明の別の局面は、細胞特異的リガンドおよび複素環式リンカーによって結合される薬物を含む、組織特異的薬物−リガンド結合体を提供し、ここで、上記リンカーは、式Ｉ、ＩＩおよびＩＩＩ：
【０００９】
【化７】
2007527421.tif 000004
から選択される複素環式自壊的部分を含み、
ここで、波線は、細胞特異的リガンドおよび薬物部分への共有結合部位を示す。
【００１０】
本発明の別の局面は、式ＩＶ：
Ｌ−［Ａｎ−Ｚｍ−Ｘ−Ｄ］ｐ            ＩＶ
のリガンド−薬物結合体化合物を提供し、ここで、
Ｌは、選択細胞集団を特異的に標的し得る細胞特異的リガンドであり；
Ａはスペーサー単位であり；
Ｚはアミノ酸であり；
Ｘは、式Ｉ、ＩＩおよびＩＩＩから選択される複素環式自壊的部分であり；
Ｄは薬物部分であり；
ｍは１、２、３、４、５または６であり；
ｎは０または１であり；そして
ｐは１、２、３、４、５、６、７または８である。
【００１１】
別の局面では、本発明は、本発明の結合体化合物の有効量を投与する工程を包含し、上記結合体のリガンドが腫瘍細胞に結合する、哺乳動物において腫瘍を処置する方法を提供する。
【００１２】
本発明の別の局面では、本発明の結合体化合物の有効量を投与する工程を包含する、哺乳動物において細胞を死滅させる方法が提供される。
【発明を実施するための最良の形態】
【００１３】
（発明の詳細な説明）
本発明の特定の実施形態を詳細に参照し、付属の構造および式においてそれらの例を示す。列挙した実施形態に関連して本発明を説明するが、それらは、本発明をそれらの実施形態に限定することを意図しないことが理解される。逆に、本発明は、特許請求の範囲によって規定される本発明の範囲内に包含され得る全ての代替物、改変物および等価物を包含することが意図されている。
【００１４】
当業者は、本発明の実施において使用できる、本明細書中で記載するものに類似または等価の多くの方法および材料を認識する。本発明は、いかなる意味においても記載される方法および材料に限定されない。
【００１５】
以下の詳細な説明および添付の特許請求の範囲の中で、使用される略語および命名法は、アミノ酸およびペプチド化学において標準であるものであることが理解される。
【００１６】
（定義）
他に述べない限り、本明細書中で使用する以下の用語および語句は以下の意味を有することが意図される。
【００１７】
本明細書中では「抗体」という用語は最も広い意味で使用され、詳細には、モノクローナル抗体、ポリクローナル抗体、多重特異性抗体（例えば二重特異性抗体）、およびそれらが所望の生物学的活性を示す限り、抗体フラグメントを包含する。抗体は、マウス抗体、ヒト抗体、ヒト化抗体、キメラ抗体または他の種に由来するものであり得る。
【００１８】
抗体は、特異的抗原を認識し、結合することができる、免疫系によって産生されるタンパク質である。（Ｊａｎｅｗａｙら、（２００１）「Ｉｍｍｕｎｏｂｉｏｌｏｇｙ」、第５版、Ｇａｒｌａｎｄ  Ｐｕｂｌｉｓｈｉｎｇ，Ｎｅｗ  Ｙｏｒｋ）。標的抗原は一般に、多数の抗体上のＣＤＲ（相補性決定領域）によって認識される、エピトープとも称される多数の結合部位を有する。異なるエピトープに特異的に結合する各々の抗体は異なる構造を有する。それ故、１個の抗原は２個以上に対応する抗体を有し得る。
【００１９】
本明細書中で使用する、「抗体」という用語はまた、全長免疫グロブリン分子または全長免疫グロブリン分子の免疫活性部分、すなわち目的の標的の抗原またはその部分に免疫特異的に結合する抗原結合部位を含む分子を指し、そのような標的としては、癌細胞または自己免疫疾患に関連する自己免疫抗体を産生する細胞が挙げられるが、これらに限定されない。本明細書中で開示する免疫グロブリンは、任意の型（例えばＩｇＧ、ＩｇＥ、ＩｇＭ、ＩｇＤおよびＩｇＡ）、クラス（例えばＩｇＧ１、ＩｇＧ２、ＩｇＧ３、ＩｇＧ４、ＩｇＡ１およびＩｇＡ２）またはサブクラスの免疫グロブリン分子でもあり得る。免疫グロブリンはいかなる種に由来してもよい。しかし、１つの局面では、免疫グロブリンはヒト、マウスまたはウサギ起源である。
【００２０】
「抗体フラグメント」は、完全長抗体の一部、一般にはその抗原結合領域または可変領域を包含する。抗体フラグメントの例としては、Ｆａｂフラグメント、Ｆａｂ’フラグメント、Ｆ（ａｂ’）２フラグメントおよびＦｖフラグメント；ジアボディ（ｄｉａｂｏｄｉｅｓ）；線形抗体（ｌｉｎｅａｒ  ａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ）；Ｆａｂ発現ライブラリーによって産生されるフラグメント、抗イディオタイプ（抗Ｉｄ）抗体、ＣＤＲ、ＥＣＤ（細胞外ドメイン）、および癌細胞抗原、ウイルス抗原または微生物抗原に免疫特異的に結合する、上記のいずれかのエピトープ結合フラグメント、一本鎖抗体分子；および抗体フラグメントから形成される多重特異性抗体を含む。
【００２１】
本明細書中では「インタクトな抗体」は、ＶＬドメインおよびＶＨドメイン、ならびに完全軽鎖定常ドメインおよび完全重鎖定常ドメインを含むものである。
【００２２】
本明細書中で使用する「モノクローナル抗体」という用語は、実質的に均一な抗体の集団から得られる抗体を指し、すなわち集団を構成する個々の抗体は、わずかな量で存在し得る可能な天然に生じる突然変異を除いて同一である。モノクローナル抗体は高度に特異的であり、単一抗原部位を指向する。さらに、異なる決定基（エピトープ）に対して指向する異なる抗体を含むポリクローナル抗体調製物とは異なり、各々のモノクローナル抗体は抗原上の単一決定基を指向する。それらの特異性に加えて、モノクローナル抗体は、他の抗体によって汚染されずに合成され得るという点で有益である。「モノクローナル」という修飾語句は、実質的に均一な抗体の集団から得られるという抗体の性質を示し、何らかの特定方法による抗体の産生を必要とすると解釈されるべきではない。例えば本発明に従って使用されるモノクローナル抗体は、Ｋｏｈｌｅｒら、（１９７５）Ｎａｔｕｒｅ  ２５６：４９５によって最初に記載されたハイブリドーマ法によって作製され得るか、または組換えＤＮＡ法（米国特許第４８１６５６７号を参照のこと）によって作製され得る。「モノクローナル抗体」はまた、例えばＣｌａｃｋｓｏｎら、（１９９１）Ｎａｔｕｒｅ，３５２：６２４−６２８；Ｍａｒｋｓら、（１９９１）Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．，２２２：５８１−５９７に記載される技術を用いてファージ抗体ライブラリーから単離され得る。
【００２３】
本明細書中で使用する、「キメラ抗体」という用語は、通常組換えＤＮＡ技術によって作製される、１つの供給源または種からの可変領域、すなわち結合領域および異なる供給源または種に由来する定常領域の少なくとも一部を含むモノクローナル抗体を指す。マウス可変領域およびヒト定常領域を含むキメラ抗体は、容易に作製され、純粋なマウスモノクローナル抗体よりも抗原性が低いと考えられるので、本発明の特定の適用において、特にヒト治療において特に好ましい。そのようなマウス／ヒトキメラ抗体は、マウス免疫グロブリン可変領域をコードするＤＮＡセグメントおよびヒト免疫グロブリン定常領域をコードするＤＮＡセグメントを含む、発現された免疫グロブリン遺伝子の産物である。キメラモノクローナル抗体は腫瘍関連抗原に対する特異性を有し得る。本発明によって包含される他の形態のキメラ抗体は、クラスまたはサブクラスがもとの抗体のものから修飾されたまたは変更されたものである。このような「キメラ」抗体はまた、「クラス転換抗体」とも称される。キメラ抗体を産生するための方法は、従来の組換えＤＮＡおよび現在当技術分野において周知の遺伝子トランスフェクション技術を含む。例えばＭｏｒｒｉｓｏｎ，Ｓ．Ｌ，ら、Ｐｒｏｃ．Ｎａｔ’ｌ  Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．、８１、６８５１（１９８４）を参照のこと。
【００２４】
フレームワークまたは「相補性決定領域（ＣＤＲ）」が、親免疫グロブリンのものと比較して異なる特異性の免疫グロブリンのＣＤＲを含むように修飾された抗体である、「ヒト化抗体」の概念は「キメラ抗体」という用語に包含される。例示的実施形態では、「ヒト化抗体」を調製するためにマウスＣＤＲがヒト抗体のフレームワーク領域に移植される。例えばＬ．Ｒｉｅｃｈｍａｎｎら、Ｎａｔｕｒｅ  ３３２，３２３（１９８８）；Ｍ．Ｓ．Ｎｅｕｂｅｒｇｅｒら、Ｎａｔｕｒｅ  ３１４，２６８（１９８５）を参照のこと。例示的なＣＤＲは、ＣＤＲ修飾抗体についてのその教示が本明細書中に参考として援用される、キメラおよび二価抗体（ｂｉｆｕｎｃｔｉｏｎａｌ  ａｎｔｉｂｏｄｙ）（欧州特許願第０  ２３９  ４００号）について上述した抗原を認識する配列を提示するＣＤＲに相当する。
【００２５】
「アルキル」は、正常の、第二級、第三級または環状の炭素原子を含むＣ１−Ｃ１８炭化水素部分である。アルキルラジカルの例としては、メチル（Ｍｅ、−ＣＨ３）、エチル（Ｅｔ、−ＣＨ２ＣＨ３）、１−プロピル（ｎ−Ｐｒ、ｎ−プロピル、−ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ３）、２−プロピル（ｉ−Ｐｒ、ｉ−プロピル、−ＣＨ（ＣＨ３）２）、１−ブチル（ｎ−Ｂｕ、ｎ−ブチル、−ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ３）、２−メチル−１−プロピル（ｉ−Ｂｕ、ｉ−ブチル、−ＣＨ２ＣＨ（ＣＨ３）２）、２−ブチル（ｓ−Ｂｕ、ｓ−ブチル、−ＣＨ（ＣＨ３）ＣＨ２ＣＨ３）、２−メチル−２−プロピル（ｔ−Ｂｕ、ｔ−ブチル、−Ｃ（ＣＨ３）３）、１−ペンチル（ｎ−ペンチル、−ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ３）、２−ペンチル（−ＣＨ（ＣＨ３）ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ３）、３−ペンチル（−ＣＨ（ＣＨ２ＣＨ３）２）、２−メチル−２−ブチル（−Ｃ（ＣＨ３）２ＣＨ２ＣＨ３）、３−メチル−２−ブチル（−ＣＨ（ＣＨ３）ＣＨ（ＣＨ３）２）、３−メチル−１−ブチル（−ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ（ＣＨ３）２）、２−メチル−１−ブチル（−ＣＨ２ＣＨ（ＣＨ３）ＣＨ２ＣＨ３）、１−ヘキシル（−ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ３）、２−ヘキシル（−ＣＨ（ＣＨ３）ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ３）、３−ヘキシル（−ＣＨ（ＣＨ２ＣＨ３）（ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ３））、２−メチル−２−ペンチル（−Ｃ（ＣＨ３）２ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ３）、３−メチル−２−ペンチル（−ＣＨ（ＣＨ３）ＣＨ（ＣＨ３）ＣＨ２ＣＨ３）、４−メチル−２−ペンチル（−ＣＨ（ＣＨ３）ＣＨ２ＣＨ（ＣＨ３）２）、３−メチル−３−ペンチル（−Ｃ（ＣＨ３）（ＣＨ２ＣＨ３）２）、２−メチル−３−ペンチル（−ＣＨ（ＣＨ２ＣＨ３）ＣＨ（ＣＨ３）２）、２，３−ジメチル−２−ブチル（−Ｃ（ＣＨ３）２ＣＨ（ＣＨ３）２）、３，３−ジメチル−２−ブチル（−ＣＨ（ＣＨ３）Ｃ（ＣＨ３）３）、１−ヘプチル、１−オクチル、シクロプロピル、シクロブチル、シクロペンチル、シクロヘキシル、シクロヘプチルおよびシクロオクチルなどのＣ１−Ｃ８炭化水素部分が挙げられる。
【００２６】
「アルケニル」は、少なくとも１個の不飽和部位、すなわち炭素−炭素、ｓｐ２二重結合を有する、正常の、第二級、第三級または環状の炭素原子を含むＣ２−Ｃ１８炭化水素部分である。アルケニルラジカルの例としては、エチレンまたはビニル（−ＣＨ＝ＣＨ２）、アリル（−ＣＨ２ＣＨ＝ＣＨ２）、１−シクロペント−１−エニル、１−シクロペント−２−エニル、１−シクロペント−３−エニル、５−ヘキセニル（−ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ＝ＣＨ２）、１−シクロへキス−１−エニル、１−シクロへキス−２−エニルおよび１−シクロへキス−３−エニルなどの、但しこれらに限定されない、Ｃ２−Ｃ８炭化水素部分が挙げられる
「アルキニル」は、少なくとも１個の不飽和部位、すなわち炭素−炭素、ｓｐ三重結合を有する、正常の、第二級、第三級または環状の炭素原子を含むＣ２−Ｃ１８炭化水素部分である。アルキニルラジカルの例としては、アセチレニック（−Ｃ-≡ＣＨ）およびプロパルギル（−ＣＨ２Ｃ-≡ＣＨ）などの、但しこれらに限定されない、Ｃ２−Ｃ８炭化水素部分が挙げられる。
【００２７】
「アルキレン」は、親アルカンの同じかまたは２個の異なる炭素原子からの２個の水素原子の除去によって誘導される２個の一価ラジカル中心を有する、１−１８個の炭素原子の飽和、分枝または直鎖または環状炭化水素ラジカルを指す。アルキレンラジカルの例としては、メチレン（−ＣＨ２−）１，２−エチル（−ＣＨ２ＣＨ２−）、１，３−プロピル（−ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２−）、１，４−ブチル（−ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２−）などのような、但しこれらに限定されない、Ｃ１−Ｃ８炭化水素部分が挙げられる。
【００２８】
「アルケニレン」は、親アルケンの同じかまたは２個の異なる炭素原子からの２個の水素原子の除去によって誘導される２個の一価ラジカル中心を有する、２−１８個の炭素原子の不飽和、分枝または直鎖または環状炭化水素ラジカルを指す。アルケニレンラジカルの例としては、１，２−エチレン（−ＣＨ＝ＣＨ−）などの、但しこれらに限定されない、Ｃ２−Ｃ８炭化水素部分が挙げられる。
【００２９】
「アルキニレン」は、親アルキンの同じかまたは２個の異なる炭素原子からの２個の水素原子の除去によって誘導される２個の一価ラジカル中心を有する、２−１８個の炭素原子の不飽和、分枝または直鎖または環状炭化水素ラジカルを指す。アルキニレンラジカルの例としては、アセチレン（−Ｃ≡Ｃ−）、プロパルギル（−ＣＨ２Ｃ-≡Ｃ−）、および４−ペンチニル（−ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２Ｃ≡ＣＨ−）などの、但しこれらに限定されない、Ｃ２−Ｃ８炭化水素部分が挙げられる。
【００３０】
「アリール」は、親芳香環系の１個の炭素原子からの１個の水素原子の除去によって誘導される６−２０個の炭素原子の一価芳香族炭化水素ラジカルを意味する。一部のアリール基は、例示的な構造では「Ａｒ」と表わされる。代表的アリール基としては、ベンゼン、置換ベンゼン、ナフタレン、アントラセン、ビフェニルなどに由来するラジカルが挙げられるが、これらに限定されない。
【００３１】
「アリールアルキル」は、炭素原子、代表的には末端またはｓｐ３炭素原子に結合した水素原子の１個がアリールラジカルで置換されている非環式アルキルラジカルを指す。代表的アリールアルキル基としては、ベンジル、２−フェニルエタン−１−イル、２−フェニルエテン−１−イル、ナフチルメチル、２−ナフチルエタン−１−イル、２−ナフチルエテン−１−イル、ナフトベンジル、２−ナフトフェニルエタン−１−イルなどが挙げられるが、これらに限定されない。アリールアルキル基は６−２０個の炭素原子を含み、例えばアリ−ルアルキル基の、アルカニル基、アルケニル基またはアルキニル基を含むアルキル部分は１−６個の炭素原子であり、アリール部分は５−１４個の炭素原子である。
【００３２】
「ヘテロアリールアルキル」は、炭素原子、代表的には末端またはｓｐ３炭素原子に結合した水素原子の１個がヘテロアリールラジカルで置換されている非環式アルキルラジカルを指す。代表的ヘテロアリールアルキル基としては、２−ベンズイミダゾリルメチル、２−フリルエチルなどが挙げられるが、これらに限定されない。ヘテロアリールアルキル基は６−２０個の炭素原子を含み、例えばヘテロアリ−ルアルキル基の、アルカニル基、アルケニル基またはアルキニル基を含むアルキル部分は１−６個の炭素原子であり、ヘテロアリール部分は、５−１４個の炭素原子ならびにＮ、Ｏ、ＰおよびＳから選択される１−３個のヘテロ原子である。ヘテロアリールアルキル基のヘテロアリール部分は、３−７個の環メンバーを有する単環（２−６個の炭素原子）または７−１０個の環メンバーを有する二環（４−９個の炭素原子およびＮ、Ｏ、ＰおよびＳから選択される１−３個のヘテロ原子）、例えばビシクロ［４，５］、［５，５］、［５，６］または［６，６］系であり得る。
【００３３】
「置換アルキル」、「置換アリール」および「置換アリールアルキル」は、それぞれ、１以上の水素原子が各々独立して置換基で置換されている、アルキル、アリールおよびアリールアルキルを意味する。代表的な置換基としては、−Ｘ、−Ｒ、−Ｏ−、−ＯＲ、−ＳＲ、−Ｓ−、−ＮＲ２、−ＮＲ３、＝ＮＲ、−ＣＸ３、−ＣＮ、−ＯＣＮ、−ＳＣＮ、−Ｎ＝Ｃ＝Ｏ、−ＮＣＳ、−ＮＯ、−ＮＯ２、＝Ｎ２、−Ｎ３、−ＮＣ（＝Ｏ）Ｒ、−Ｃ（＝Ｏ）Ｒ、−Ｃ（＝Ｏ）ＮＲ２、−ＳＯ３−、−ＳＯ３Ｈ、−Ｓ（＝Ｏ）２Ｒ、−ＯＳ（＝Ｏ）２ＯＲ、−Ｓ（＝Ｏ）２ＮＲ、−Ｓ（＝Ｏ）Ｒ、−ＯＰ（＝Ｏ）（ＯＲ）２、−Ｐ（＝Ｏ）（ＯＲ）２、−ＰＯ−３、−ＰＯ３Ｈ２、−Ｃ（＝Ｏ）Ｒ、−Ｃ（＝Ｏ）Ｘ、−Ｃ（＝Ｓ）Ｒ、−ＣＯ２Ｒ、−ＣＯ２−、−Ｃ（＝Ｓ）ＯＲ、−Ｃ（＝Ｏ）ＳＲ、−Ｃ（＝Ｓ）ＳＲ、−Ｃ（＝Ｏ）ＮＲ２、−Ｃ（＝Ｓ）ＮＲ２、−Ｃ（＝ＮＲ）ＮＲ２が挙げられるが、これらに限定されず、ここで、各々のＸは、独立してハロゲン：Ｆ、Ｃｌ、ＢｒまたはＩであり；そして各々のＲは、独立してＨ、Ｃ１−Ｃ１８アルキル、Ｃ６−Ｃ２０アリール、Ｃ３−Ｃ１４複素環、または保護基である。上述したアルキレン基、アルケニレン基およびアルキニレン基も同様に置換され得る。
【００３４】
「ヘテロアリール」、「ヘテロシクリル」および「複素環」は全て、１以上の環原子がヘテロ原子（例えば窒素、酸素および硫黄）である環系を指す。複素環ラジカルは、１−２０個の炭素原子およびＮ、Ｏ、ＰおよびＳから選択される１−５個のヘテロ原子を含む。複素環は、３−７個の環メンバーを有する単環（２−６個の炭素原子およびＮ、Ｏ、ＰおよびＳから選択される１−３個のヘテロ原子）または７−１０個の環メンバーを有する二環（４−９個の炭素原子およびＮ、Ｏ、ＰおよびＳから選択される１−３個のヘテロ原子）、例えばビシクロ［４，５］、［５，５］、［５，６］または［６，６］系であり得る。複素環は、Ｐａｑｕｅｔｔｅ，Ｌｅｏ  Ａ．；「Ｐｒｉｎｃｉｐｌｅｓ  ｏｆ  Ｍｏｄｅｒｎ  Ｈｅｔｅｒｏｃｙｃｌｉｃ  Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ」（Ｗ．Ａ．Ｂｅｎｊａｍｉｎ，Ｎｅｗ  Ｙｏｒｋ，１９６８）、特に１、３、４、６、７および９章；「Ｔｈｅ  Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ  ｏｆ  Ｈｅｔｅｒｏｃｙｃｌｉｃ  Ｃｏｍｐｏｕｎｄｓ，Ａ  ｓｅｒｉｅｓ  ｏｆ  Ｍｏｎｏｇｒａｐｈｓ」（Ｊｏｈｎ  Ｗｉｌｅｙ  ＆  Ｓｏｎｓ，Ｎｅｗ  Ｙｏｒｋ，１９５０  ｔｏ  ｐｒｅｓｅｎｔ）、特に１３、１４、１６、１９および２８巻；およびＪ．Ａｍ．Ｃｈｅｍ．Ｓｏｃ．（１９６０）８２：５５６６に述べられている。
【００３５】
複素環の例としては、限定ではなく例として、ピリジル、ジヒドロピリジル（ｄｉｈｙｄｒｏｙｐｙｒｉｄｙｌ）、テトラヒドロピリジル（ピペリジル）、チアゾリル、テトラヒドロチオフェニル、硫黄酸化テトラヒドロチオフェニル、ピリミジニル、フラニル、チエニル、ピロリル、ピラゾリル、イミダゾリル、テトラゾリル、ベンゾフラニル、チアナフタレニル、インドリル、インドレニル、キノリニル、イソキノリニル、ベンズイミダゾリル、ピペリジニル、４−ピペリドニル、ピロリジニル、２−ピロリドニル、ピロリニル、テトラヒドロフラニル、ビス−テトラヒドロフラニル、テトラヒドロピラニル、ビス−テトラヒドロピラニル、テトラヒドロキノリニル、テトラヒドロイソキノリニル、デカヒドロキノリニル、オクタヒドロイソキノリニル、アゾシニル、トリアジニル、６Ｈ−１，２，５−チアジアジニル、２Ｈ，６Ｈ−１，５，２−ジチアジニル、チエニル、チアントレニル、ピラニル、イソベンゾフラニル、クロメニル、キサンテニル、フェノキサチニル、２Ｈ−ピロリル、イソチアゾリル、イソキサゾリル、ピラジニル、ピリダジニル、インドリジニル、イソインドリル、３Ｈ−インドリル、１Ｈ−インダゾリル、プリニル、４Ｈ−キノリジニル、フタラジニル、ナフチリジニル、キノキサリニル、キナゾリニル、シンノリニル、プテリジニル、４Ａｈ−カルバゾリル、カルバゾリル、β−カルボリニル、フェナントリジニル、アクリジニル、ピリミジニル、フェナントロリニル、フェナジニル、フェノチアジニル、フラザニル、フェノキサジニル、イソクロマニル、クロマニル、イミダゾリジニル、イミダゾリニル、ピラゾリジニル、ピラゾリニル、ピペラジニル、インドリニル、イソインドリニル、キヌクリジニル、モルホリニル、オキサゾリジニル、ベンゾトリアゾリル、ベンズイソキサゾリル、オキシインドリル、ベンズオキサゾリニル、およびイサチノイルが挙げられる。
【００３６】
限定ではなく例として、炭素結合複素環は、ピリジンの２、３、４、５または６位で、ピリダジンの３、４、５または６位で、ピリミジンの２、４、５または６位で、ピラジンの２、３、５または６位で、フラン、テトラヒドロフラン、チオフラン、チオフェン、ピロールまたはテトラヒドロピロールの２、３、４または５位で、オキサゾール、イミダゾールまたはチアゾールの２、４または５位で、イソキサゾール、ピラゾールまたはイソチアゾールの３、４または５位で、アジリジンの２または３位で、アゼチジンの２、３または４位で、キノリンの２、３、４、５、６、７または８位で、あるいはイソキノリンの１、３、４、５、６、７または８位で結合される。さらにより代表的には、炭素結合複素環としては、２−ピリジル、３−ピリジル、４−ピリジル、５−ピリジル、６−ピリジル、３−ピリダジニル、４−ピリダジニル、５−ピリダジニル、６−ピリダジニル、２−ピリミジニル、４−ピリミジニル、５−ピリミジニル、６−ピリミジニル、２−ピラジニル、３−ピラジニル、５−ピラジニル、６−ピラジニル、２−チアゾリル、４−チアゾリルまたは５−チアゾリルが挙げられる。
【００３７】
限定ではなく例として、窒素結合複素環は、アジリジン、アゼチジン、ピロ−ル、ピロリジン、２−ピロリン、３−ピロリン、イミダゾール、イミダゾリジン、２−イミダゾリン、３−イミダゾリン、ピラゾール、ピラゾリン、２−ピラゾリン、３−ピラゾリン、ピペリジン、ピペラジン、インドール、インドリン、１Ｈ−インダゾールの１位で、イソインドールまたはイソインドリンの２位で、モルホリンの４位で、およびカルバゾールまたはβ−カルボリンの９位で結合される。さらにより代表的には、窒素結合複素環としては、１−アジリジル、１−アゼテジル、１−ピロリル、１−イミダゾリル、１−ピラゾリルおよび１−ピペリジニルが挙げられる。
【００３８】
「炭素環」および「カルボシクリル」は、単環として３−７個の炭素原子または二環として７−１２個の炭素原子を有する飽和または不飽和の環を意味する。単環式炭素環は、３−６個の環原子、なおより代表的には５または６個の環原子を有する。二環式炭素環は、例えばビシクロ［４，５］、［５，５］、［５，６］または［６，６］系として配置された、７−１２個の環原子、またはビシクロ［５，６］または［６，６］系として配置された、９−１０個の環原子を有する。単環式炭素環の例としては、シクロプロピル、シクロブチル、シクロペンチル、１−シクロペント−１−エニル、１−シクロペント−２−エニル、１−シクロペント−３−エニル、シクロヘキシル、１−シクロへキス−１−エニル、１−シクロへキス−２−エニル、１−シクロへキス−３−エニル、シクロヘプチルおよびシクロオクチルが挙げられる。
【００３９】
「反応性官能基」としては、オレフィン、アセチレン、アルコール、フェノール、エーテル、酸化物、ハロゲン化物、アルデヒド、ケトン、カルボン酸、エステル、カルボネート、アミド、シアネート、イソシアネート、チオシアネート、イソチオシアネート、アミン、ヒドラジン、ヒドラゾン、ヒドラジド、ジアゾ、ジアゾニウム、ニトロ、ニトリル、メルカプタン（チオール）、スルフィド、ジスルフィド、スルホキシド、スルホン、スルホン酸、スルフィン酸、アセタール、ケタール、無水物、サルフェート、スルフェン酸、イソニトリル、アミジン、イミド、イミデート、ニトロン、ヒドロキシルアミン、オキシム、ヒドロキサム酸、チオヒドロキサム酸、アレン、オルトエステル、スルファイト、エナミン、イナミン、尿素、プソイド尿素、セミカルバジド、カルボジイミド、カルバメート、イミン、アジド、アゾ化合物、アゾキシ化合物およびニトロソ化合物が挙げられるが、これらに限定されない。例示的な反応性官能基としては、Ｎ−ヒドロキシスクシンイミド（ＮＨＳ）エステル、パラ−ニトロフェニル（ＰＮＰ）カルボネート、ペンタフルオロフェニル（ＰＦＰ）カルボネート、およびマレイミドが挙げられる。ＳａｎｄｌｅｒおよびＫａｒｏ編、「Ｏｒｇａｎｉｃ  Ｆｕｎｃｔｉｏｎａｌ  Ｇｒｏｕｐ  Ｐｒｅｐａｒａｔｉｏｎｓ」、Ａｃａｄｅｍｉｃ  Ｐｒｅｓｓ、Ｓａｎ  Ｄｉｅｇｏ、１９８９を参照のこと。
【００４０】
「保護基」という用語は、化合物上の他の官能基と反応するが、特定の官能基をブロックまたは保護するために一般的に用いられる置換基を指す。例えば「アミノ保護基」は、化合物内のアミノ官能基をブロックまたは保護する、アミノ基に結合した置換基である。適切なアミノ保護基としては、アセチル、トリフルオロアセチル、ｔ−ブトキシカルボニル（ＢＯＣ）、ベンジルオキシカルボニル（ＣＢｚ）および９−フルオレニルメチレンオキシカルボニル（Ｆｍｏｃ）が挙げられる。同様に、「ヒドロキシ保護基」は、ヒドロキシ官能基をブロックまたは保護する、ヒドロキシ基の置換基を指す。適切な保護基としては、アセチル、ベンジル、ベンゾイル、テトラヒドロピラニルおよびトリアルキルシリルが挙げられる。「カルボキシ保護基」は、カルボキシ官能基をブロックまたは保護する、カルボキシ基の置換基を指す。一般的なカルボキシ保護基としては、−ＣＨ２ＣＨ２ＳＯ２Ｐｈ、シアノエチル、２−（トリメチルシリル）エチル、２−（トリメチルシリル）エトキシメチル、２−（ｐ−トルエンスルホニル）エチル、２−（ｐ−ニトロフェニルスルフェニル）エチル、２−（ジフェニルホスフィノ）エチル、ニトロエチルなどが挙げられる。保護基の一般的説明およびそれらの使用に関しては、Ｔ．Ｗ．Ｇｒｅｅｎｅ，Ｐｒｏｔｅｃｔｉｖｅ  Ｇｒｏｕｐｓ  ｉｎ  Ｏｒｇａｎｉｃ  Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ，Ｊｏｈｎ  Ｗｉｌｅｙ  ＆  Ｓｏｎｓ，Ｎｅｗ  Ｙｏｒｋ，１９９１を参照のこと。
【００４１】
「リンカー」、「リンカー単位」または「リンク」は、抗体を薬物部分に共有結合する、共有結合または原子の鎖を含む化学成分を意味する。例示的なリンカーの略語としては、ＭＣ＝６−マレイミドカプロイル、ＭＰ＝マレイミドプロパノイル、ｖａｌ−ｃｉｔ＝バリン−シトルリン、プロテアーゼ切断リンカー内のジペプチド部位、ａｌａ−ｐｈｅ＝アラニン−フェニルアラニン、プロテアーゼ切断リンカー内のジペプチド部位、ＰＡＢ＝ｐ−アミノベンジルオキシカルボニル、ＳＰＰ＝Ｎ−スクシンイミジル４−（２−ピリジルチオ）ペンタノエート、ＳＭＣＣ＝Ｎ−スクシンイミジル４−（Ｎ−マレイミドメチル）シクロヘキサン−１カルボキシレート、ＳＩＡＢ＝Ｎ−スクシンイミジル（４−ヨード−アセチル）アミノベンゾエートが挙げられる。
【００４２】
「キラル」という用語は、鏡像パートナーの重ね合わせ不可能性という性質を有する分子を指し、一方「アキラル」という用語は、それらの鏡像パートナーに重ね合わせ可能である分子を指す。
【００４３】
「立体異性体」という用語は、同一化学構造を有するが、空間的な原子または基の配置に関して異なる化合物を指す。
【００４４】
「ジアステレオマー」は、２以上のキラル中心を有し、その分子が互いの鏡像ではない立体異性体を指す。ジアステレオマーは異なる物理的性質、例えば融点、沸点、スペクトル特性および反応性を有する。ジアステレオマーの混合物は、電気泳動およびクロマトグラフィーなどの高分解能分析手順の下で分離し得る。
【００４５】
「鏡像異性体」は、互いの重ね合わせ不可能な鏡像である、１つの化合物の２つの立体異性体を指す。
【００４６】
本明細書中で使用する立体化学の定義および慣例は、一般にＳ．Ｐ．Ｐａｒｋｅｒ，編，ＭｃＧｒａｗ−Ｈｉｌｌ  Ｄｉｃｔｉｏｎａｒｙ  ｏｆ  Ｃｈｅｍｉｃａｌ  Ｔｅｒｍｓ（１９８４）ＭｃＧｒａｗ−Ｈｉｌｌ  Ｂｏｏｋ  Ｃｏｍｐａｎｙ，Ｎｅｗ  Ｙｏｒｋ；ならびにＥｌｉｅｌ，Ｅ．およびＷｉｌｅｎ，Ｓ．，Ｓｔｅｒｅｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ  ｏｆ  Ｏｒｇａｎｉｃ  Ｃｏｍｐｏｕｎｄｓ（１９９４）Ｊｏｈｎ  Ｗｉｌｅｙ  ＆  Ｓｏｎｓ，Ｉｎｃ．，Ｎｅｗ  Ｙｏｒｋに従う。多くの有機化合物が光学活性形態で存在する、すなわちそれらは、平面偏光の偏光面を回転させる能力を有する。光学活性化合物を記載する場合、ＤおよびＬ、またはＲおよびＳの接頭辞は、そのキラル中心についての分子の絶対立体配置を示すために使用される。ｄおよびｌまたは（＋）および（−）の接頭辞は、化合物による平面偏光の回転の記号を表わすために用いられ、（−）またはｌは、化合物が左旋性であることを意味する。（＋）またはｄの接頭辞のついた化合物は右旋性である。所定の化学構造に関して、これらの立体異性体は、互いの鏡像であることを除いて同一である。特定の立体異性体は鏡像異性体とも称されることもあり、そのような異性体の混合物は多くの場合鏡像異性体混合物と呼ばれる。鏡像異性体の５０：５０混合物はラセミ混合物またはラセミ化合物と称され、化学反応またはプロセスにおいて立体選択性または立体特異性が存在しなかった場合に生じ得る。「ラセミ混合物」および「ラセミ化合物」という用語は、光学活性を欠く、２つの鏡像異性体種の等モル混合物を指す。
【００４７】
本明細書において使用する略語は、他に示さない限り、以下の通りである：ＡｃＯＨ：酢酸；Ａｌａ：Ｌ−アラニン；Ａｌｌｏｃ：アリルオキシ−カルボニル；Ａｒｇ：Ｌ−アルギニン；Ｂｏｃ：ｔ−ブチルオキシカルボニル；Ｃｉｔ：Ｌ−シトルリン；ＣＤＩ：Ｎ，Ｎ−カルボニルジイミダゾール；ＤＢＵ：ジアゾビシクロウンデセン；ＤＣＣ：ジシクロヘキシルカルボジイミド；ＤＣＩ：直接化学的イオン化；ＤＣＵ：ジシクロヘキシル尿素；ＤＩＥＡ：ジイソプロピルエチルアミン；ＤＭＡＰ：４−ジメチルアミノピリジン；ＤＭＥ：１，２−ジメトキシエタン；ＤＯＸ：ドキソルビシン；ＤＴＴ：ジチオトレイトール；ＥＥＤＱ：Ｎ−エトキシカルボニル−２−エトキシ−１，２−ジヒドロキノリン；ＥｔＯＡｃ：酢酸エチル；Ｆｍｏｃ：フルオレニルメトキシカルボニル；ＧＡＢＡ：γ−アミノ酪酸；Ｇｌｙ：グリシン；ＨＯＢｔ：Ｎ−ヒドロキシベンゾトリアゾール；ＨＲＭＳ：高分解能質量分析；Ｉｌｅ：Ｌ−イソロイシン；ＬＡＨ：水素化アルミニウムリチウム；Ｌｅｕ：Ｌ−ロイシン；Ｌｙｓ：Ｌ−リシン；ＭＣ：６−マレイミドカプロイル；ＭＭＡ：マイトマイシンＡ；ＭＭＣ：マイトマイシンＣ；Ｍｔｒ：４−メトキシトリチル；ＮＨＳ：Ｎ−ヒドロキシスクシンイミド；ＮＭＰ：Ｎ−メチルピロリジノン；ＰＡＢＣ：ｐ−アミノベンジル−カルバモイル；ＰＡＢ−ＯＨ：ｐ−アミノベンジルアルコール；Ｐｈｅ：Ｌ−フェニルアラニン；ＰＮＰ：ｐ−ニトロフェノール；ＰＮＰＣＦ：ｐ−ニトロフェニルクロロホルメート；ＴＦＡ：トリフルオロ酢酸；ＴＨＦ：テトラヒドロフラン；Ｔｒｐ：Ｌ−トリプトファン；Ｖａｌ：Ｌ−バリン；Ｚ：ベンジルオキシカルボニル。
【００４８】
（複素環式自壊的連結結合体）
本発明は、選択細胞集団を標的することができるリガンドおよびリンカー部分によってリガンドに結合された薬物を含む新規薬物−リガンド結合体を提供する。リンカー部分は、薬物に結合した式Ｉ、ＩＩまたはＩＩＩの複素環式「自壊的部分」を含み、細胞内プロテアーゼによる加水分解時に、最終的に薬物が活性形態で結合体から遊離されるように薬物から自壊的部分を切断する反応を開始させるアミド基を組み込んでいる。リンカー部分は、自壊的部分と共有されるアミド結合でペプチドを切断する細胞内酵素、例えばカテプシンＢなどのカテプシン、の基質である、自壊的部分に隣接するペプチド配列をさらに含む。リガンド分子は、抗体もしくはそのフラグメントなどの免疫反応性タンパク質、ボンベシンなどの非免疫反応性タンパク質またはペプチドリガンド、またはレクチンなどの細胞関連レセプターを認識する結合リガンド、またはアミン基（−ＮＨ２）、アルデヒド基（−ＣＨＯ）、カルボキシル基（−ＣＯＯＨ）もしくはスルフヒドリル基（−ＳＨ）などの反応性官能基を有するか、またはそのような官能基を含むように修飾され得る任意のタンパク質またはペプチドであり得る。スペーサー単位は、アミド、アミンまたはチオエーテル結合によってリガンドに連結される。薬物部分は、第一級アミン基または第二級アミン基、ヒドロキシル基、スルフヒドリル基またはカルボキシル基などの、薬物から突き出た化学反応性官能基によってリンカーの自壊的部分に結合される。
【００４９】
本発明の結合体は、一般式ＩＶ：
Ｌ−［Ａｎ−Ｚｍ−Ｘ−Ｄ］ｐ            ＩＶ
によって表され、
ここで、Ｌは、選択された細胞集団を特異的に標的することができる細胞特異的リガンドであり、Ｄは薬物部分であり、そして［Ａ−Ｚｍ−Ｘ］はリンカーであり、ここで、Ａは必要に応じてスペーサー単位として存在し（ｎは０または１である）、Ｚｍは酵素的に切断可能なペプチド（アミノ酸）配列であり（ｍは１、２、３、４、５または６である）、そしてＸは薬物部分Ｄおよび酵素的に切断可能なペプチド配列Ｚを結合する複素環式自壊的部分である。リガンド当りの薬物部分の数、すなわち薬物負荷値ｐは、１−約８である。複素環式自壊的基Ｘは、式Ｉ、ＩＩおよびＩＩＩ：
【００５０】
【化８】
2007527421.tif 000005
から選択され、
ここで、波線は、細胞特異的リガンドおよび薬物部分への共有結合部位を示し、ここで、
Ｕは、Ｏ、ＳまたはＮＲ６であり；
Ｑは、ＣＲ４またはＮであり；
Ｖ１、Ｖ２およびＶ３は、独立にＣＲ４またはＮであり、但し、式ＩＩおよびＩＩＩに関してＱ、Ｖ１およびＶ２の少なくとも１個はＮであり；
Ｔは、上記薬物部分から突き出たＮＨ、ＮＲ６、ＯまたはＳであり；
Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３およびＲ４は、Ｈ、Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ、ＯＨ、−Ｎ（Ｒ５）２、―Ｎ（Ｒ５）３＋、Ｃ１−Ｃ８ハロゲン化アルキル、カルボキシレート、サルフェート、スルファメート、スルホネート、−ＳＯ２Ｒ５、−Ｓ（＝Ｏ）Ｒ５、−ＳＲ５、−ＳＯ２Ｎ（Ｒ５）２、−Ｃ（＝Ｏ）Ｒ５、−ＣＯ２Ｒ５、−Ｃ（＝Ｏ）Ｎ（Ｒ５）２、−ＣＮ、−Ｎ３、−ＮＯ２、Ｃ１−Ｃ８アルコキシ、Ｃ１−Ｃ８ハロ置換アルキル、ポリエチレンオキシ、ホスホネート、ホスフェート、Ｃ１−Ｃ８アルキル、Ｃ１−Ｃ８置換アルキル、Ｃ２−Ｃ８アルケニル、Ｃ２−Ｃ８置換アルケニル、Ｃ２−Ｃ８アルキニル、Ｃ２−Ｃ８置換アルキニル、Ｃ６−Ｃ２０アリール、Ｃ６−Ｃ２０置換アリール、Ｃ１−Ｃ２０複素環およびＣ１−Ｃ２０置換複素環から独立して選択されるか、または一緒になって、Ｒ２およびＲ３は、カルボニル（＝Ｏ）または３−７個の炭素原子のスピロ炭素環を形成し；そして
Ｒ５およびＲ６は、Ｈ、Ｃ１−Ｃ８アルキル、Ｃ１−Ｃ８置換アルキル、Ｃ２−Ｃ８アルケニル、Ｃ２−Ｃ８置換アルケニル、Ｃ２−Ｃ８アルキニル、Ｃ２−Ｃ８置換アルキニル、Ｃ６−Ｃ２０アリール、Ｃ６−Ｃ２０置換アリール、Ｃ１−Ｃ２０複素環およびＣ１−Ｃ２０置換複素環から独立して選択され；
ここで、Ｃ１−Ｃ８置換アルキル、Ｃ２−Ｃ８置換アルケニル、Ｃ２−Ｃ８置換アルキニル、Ｃ６−Ｃ２０置換アリールおよびＣ２−Ｃ２０置換複素環は、Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ、ＯＨ、−Ｎ（Ｒ５）２、−Ｎ（Ｒ５）３＋、Ｃ１−Ｃ８ハロゲン化アルキル、カルボキシレート、サルフェート、スルファメート、スルホネート、Ｃ１−Ｃ８アルキルスルホネート、Ｃ１−Ｃ８アルキルアミノ、４−ジアルキルアミノピリジニウム、Ｃ１−Ｃ８アルキルヒドロキシル、Ｃ１−Ｃ８アルキルチオール、−ＳＯ２Ｒ５、−Ｓ（＝Ｏ）Ｒ５、−ＳＲ５、−ＳＯ２Ｎ（Ｒ５）２、−Ｃ（＝Ｏ）Ｒ５、−ＣＯ２Ｒ５、−Ｃ（＝Ｏ）Ｎ（Ｒ５）２、−ＣＮ、−Ｎ３、−ＮＯ２、Ｃ１−Ｃ８アルコキシ、Ｃ１−Ｃ８トリフルオロアルキル、Ｃ１−Ｃ８アルキル、Ｃ３−Ｃ１２炭素環、Ｃ６−Ｃ２０アリール、Ｃ２−Ｃ２０複素環、ポリエチレンオキシ、ホスホネートおよびホスフェートから選択される１以上の置換基で独立して置換される。
【００５１】
（複素環式自壊的部分（Ｘ））
本発明の薬物−リガンド結合体は、薬物部分および切断可能ペプチド配列部分に共有結合した複素環式自壊的部分（Ｘ）を用いる。自壊的部分は、２個の間隔をあけた化学的部分を正常に安定な分子へと共有結合することができ、上記の間隔をあけた化学的部分の１個を酵素切断によって分子から放出し、上記酵素切断後に、上記の間隔をあけた化学的部分の他方を二官能性化学基の残りの部分から自発的に切断して放出する、二官能性化学基と定義され得る。本発明に従って、自壊的部分は、その末端の１つで、直接的にまたはスペーサー単位を通して間接的に、アミド結合によってリガンドに共有結合され、そしてその他方の末端で、薬物から突き出た化学反応性部位（官能基）に共有結合される。自壊的部分による薬物の誘導体化は、薬物が切断されるまで、薬物を薬理学的により低い活性（例えばより低い毒性）にし得るかまたは活性でないものにし得る。
【００５２】
上記結合体は、細胞外ではまたは自壊的部分のアミド結合を切断し得る酵素の非在下では安定である。しかし、細胞に入ると、または適切な酵素に暴露されると、アミド結合が切断されて自発的自壊的反応が開始され、自壊的部分を薬物に共有結合している結合の切断をもたらし、それによって非誘導体化または薬理学的に活性な形態での薬物の放出を生じさせる。１つの実施形態では、自壊的リンカーは、アミド結合を切断して自壊的反応を開始させる細胞内酵素のための基質を提供する、酵素的に切断可能なペプチド配列を通して、リガンドに連結される。
【００５３】
本発明の結合体内の自壊的部分は、１以上のヘテロ原子を組み込んでおり、それによって改善された溶解度を提供し、切断の速度を改善して、結合体の凝集傾向を低下させる。非複素環式ＰＡＢ型リンカーに対して本発明の複素環式自己犠牲リンカー構築物のこれらの改善は、高い効果、低い毒性およびより望ましい薬物動態などの驚くべき予想外の生物学的性質をもたらし得る。
【００５４】
ＴがＮＨである場合、薬物部分から突き出た第一級アミン（−ＮＨ２）から誘導されること（自壊的部分への結合の前に）およびＴがＮである場合、薬物部分からの第二級アミン（−ＮＨ−）から誘導されること（自壊的部分への結合の前に）が理解される。同様に、ＴがＯまたはＳである場合、自壊的部分への結合の前に、それぞれ薬物部分から突き出たヒドロキシル（−ＯＨ）基またはスルフヒドリル（−ＳＨ）基から誘導される。
【００５５】
理論または特定の機構に限定されるべきではないが、式Ｉ、ＩＩまたはＩＩＩリンカーの複素環上の電子求引性基の存在は、切断の速度を調節し得る。図１は、酵素によって切断される本発明の結合体の自壊的機構を例示する説明図である。
【００５６】
１つの実施形態では、自壊的部分は、ＱがＮであり、ＵがＯまたはＳである、式Ｉの基である。そのような基は、結合体の溶解度を改善する非線形構造特徴を有する。これに関して、ＲはＨ、メチル、ニトロまたはＣＦ３であり得、一方Ｔは薬物部分Ｄから突き出たＮまたはＮＨである。１つの実施形態では、ＱはＮであり、ＵはＯであり、それによってオキサゾール環を形成し、そしてＲはＨである。別の実施形態では、ＱはＮであり、ＵはＳであり、それによって必要に応じてＲにおいてＭｅ基またはＣＦ３基で置換されたチアゾール環を形成し、そしてＴは薬物部分Ｄから突き出たＮまたはＮＨである。ＴがＮＨである場合、薬物部分から突き出た第一級アミン（−ＮＨ２）から誘導されること（自壊的部分への結合の前に）、およびＴがＮである場合、薬物部分からの第二級アミン（−ＮＨ−）から誘導されること（自壊的部分への結合の前に）が理解される。同様に、ＴがＯまたはＳであるときは、自壊的部分への結合の前に、それぞれ薬物部分から突き出たヒドロキシル（−ＯＨ）基またはスルフヒドリル（−ＳＨ）基から誘導される。
【００５７】
別の例示的な実施形態では、自壊的部分は、ＱがＮであり、Ｖ１およびＶ２が独立してＮまたはＣＨであり、そしてＴがＮまたはＮＨである、式ＩＩの基である。別の実施形態では、Ｑ、Ｖ１およびＶ２は各々Ｎである。別の実施形態では、ＱおよびＶ１はＮであるが、Ｖ２はＣＨである。別の実施形態では、ＱおよびＶ２はＮであるが、Ｖ１はＣＨである。別の実施形態では、ＱおよびＶ１はどちらもＣＨであるが、Ｖ２はＮである。別の実施形態では、ＱはＮであるが、Ｖ１およびＶ２はどちらもＣＨである。
【００５８】
別の実施形態では、自壊的部分は、Ｑ、Ｖ１、Ｖ２およびＶ３が各々独立してＮまたはＣＨであり、そしてＴがＮまたはＮＨである、式ＩＩＩの基である。別の実施形態では、ＱはＮであるが、Ｖ１、Ｖ２およびＶ３は各々Ｎである。別の実施形態では、Ｑ、Ｖ１およびＶ２は各々ＣＨであるが、Ｖ３はＮである。別の実施形態では、Ｑ、Ｖ２およびＶ３は各々ＣＨであるが、Ｖ１はＮである。別の実施形態では、Ｑ、Ｖ１およびＶ３は各々ＣＨであるが、Ｖ２はＮである。別の実施形態では、ＱおよびＶ２はどちらもＮであるが、Ｖ１およびＶ３はどちらもＣＨである。別の実施形態では、ＱおよびＶ２はどちらもＣＨであるが、Ｖ１およびＶ３はどちらもＮである。別の実施形態では、ＱおよびＶ３はどちらもＮであるが、Ｖ１およびＶ２はどちらもＣＨである。
【００５９】
（切断可能ペプチド配列（ＺＭ））
式ＩＶの結合体において、各々のｍは、独立して１、２、３、４、５または６である。例示的実施形態では、ｍは、それぞれ１個のアミノ酸、ジペプチドおよびトリペプチドアミノ酸単位を形成するために１、２または３であり得る。アミノ酸単位Ｚは、天然および非天然のアミノ酸から選択される。側鎖を有する炭素は、ＤまたはＬ（ＲまたはＳ）立体配置であり得る。アミノ酸単位Ｚは、アラニン、２−アミノ−２−シクロヘキシル酢酸、２−アミノ−２−フェニル酢酸、アルギニン、アスパラギン、アスパラギン酸、システイン、グルタミン、グルタミン酸、グリシン、ヒスチジン、イソロイシン、ロイシン、リシン、メチオニン、フェニルアラニン、プロリン、セリン、トレオニン、トリプトファン、チロシン、バリン、γ−アミノ酪酸、α，α−ジメチルγ−アミノ酪酸、β，β−ジメチルγ−アミノ酪酸、オルニチンおよびシトルリン（Ｃｉｔ）であり得る。アミノ酸単位Ｚは、必要に応じて、側鎖の反応性官能基が保護されている、保護された形態のアミノ酸を含む。保護されたアミノ酸試薬および中間体は周知であり、アセチル、ホルミル、トリフェニルメチル（トリチル）およびモノメトキシトリチル（ＭＭＴ）で保護されたリシンを含む。他の保護されたアミノ酸単位としては、トシル基またはニトロ基で保護されたアルギニン、アセチル基またはホルミル基で保護されたオルニチンが挙げられる。
【００６０】
各々のＺｍ単位は独立して、以下の四角いかっこ内に示す式を有し、
【００６１】
【化９】
2007527421.tif 000006
ここで、ｍが０から６までの範囲の整数であり：
ここで、Ｒ７としては、水素、メチル、イソプロピル、イソブチル、ｓｅｃ−ブチル、フェニル、ベンジル、ｐ−ヒドロキシベンジル、−ＣＨ２ＯＨ、−ＣＨ２ＳＨ、−ＣＨ２ＣＨ２ＯＨ、−ＣＨ２ＣＨ２ＳＨ、−ＣＨ（ＯＨ）ＣＨ３、−ＣＨ２ＳＣＨ３、−ＣＨ２ＣＨ２ＳＣＨ３、−ＣＨ２ＣＯＮＨ２、−ＣＨ２ＣＯＯＨ、−ＣＨ２ＣＨ２ＣＯＮＨ２、−ＣＨ２ＣＨ２ＣＯＯＨ、−（ＣＨ２）３ＮＨＣ（＝ＮＨ）ＮＨ２、−（ＣＨ２）３ＮＨ２、−（ＣＨ２）３ＮＨＣＯＣＨ３、−（ＣＨ２）３ＮＨＣＨＯ、−（ＣＨ２）４ＮＨＣ（＝ＮＨ）ＮＨ２、−（ＣＨ２）４ＮＨ２、−（ＣＨ２）４ＮＨＣＯＣＨ３、−（ＣＨ２）４ＮＨＣＨＯ、−（ＣＨ２）３ＮＨＣＯＮＨ２、−（ＣＨ２）４ＮＨＣＯＮＨ２、−ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ（ＯＨ）ＣＨ２ＮＨ２、２−ピリジルメチル−、３−ピリジルメチル−、４−ピリジルメチル−、フェニル、シクロヘキシル、
【００６２】
【化１０】
2007527421.tif 000007
が挙げられるが、これらに限定されない。
【００６３】
ペプチド単位配列Ｚｍは、一種以上の細胞プロテアーゼによって薬物部分から選択的に酵素切断されるように特異的に調整される。ペプチドリンカーのアミノ酸残基鎖の長さは、１アミノ酸残基から約８アミノ酸残基の範囲である。以下は、例示的な本発明の酵素切断可能ペプチド配列である：どちらかの方向の、Ｇｌｙ−Ｇｌｙ、Ｐｈｅ−Ｌｙｓ、Ｖａｌ−Ｌｙｓ、Ｐｈｅ−Ｐｈｅ−Ｌｙｓ、Ｄ−Ｐｈｅ−Ｐｈｅ−Ｌｙｓ、Ｇｌｙ−Ｐｈｅ−Ｌｙｓ、Ａｌａ−Ｌｙｓ、Ｖａｌ−Ｃｉｔ、Ｐｈｅ−Ｃｉｔ、Ｌｅｕ−Ｃｉｔ、Ｉｌｅ−Ｃｉｔ、Ｔｒｐ−Ｃｉｔ、Ｐｈｅ−Ａｌａ、Ａｌａ−Ｐｈｅ、Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ、Ｇｌｙ−Ａｌａ−Ｐｈｅ、Ｇｌｙ−Ｖａｌ−Ｃｉｔ、Ｇｌｙ−Ｐｈｅ−Ｌｅｕ−Ｇｌｙ、Ａｌａ−Ｌｅｕ−Ａｌａ−Ｌｅｕ、Ｐｈｅ−Ｎ９−トシル−Ａｒｇ、およびＰｈｅ−Ｎ９−ニトロ−Ａｒｇ。本発明における使用に適する数多くの特異的切断可能ペプチド配列を設計することができ、特定の細胞内酵素、例えば腫瘍関連プロテアーゼによる酵素切断についての選択性を最適化することができる。本発明における使用のための切断可能ペプチドは、Ｐｈｅ−Ｌｙｓ、Ａｌａ−ＰｈｅおよびＶａｌ−Ｃｉｔなどの、プロテアーゼ、カテプシンＢ、ＣおよびＤに対して最適化されるものを含む。本発明における使用のための別のペプチド配列は、腫瘍の浸潤および転移に関与する、腫瘍関連プロテアーゼ、プラスミンによって選択的に認識されるトリペプチドＤ−Ａｌａ−Ｐｈｅ−Ｌｙｓである（ｄｅ  Ｇｒｏｏｔら、（２００２）Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｃａｎｃｅｒ  Ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃｓ  １（１１）：９０１−９１１；ｄｅ  Ｇｒｏｏｔら、（１９９９）Ｊ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．４２（２５）：５２７７−５２８３）。
【００６４】
Ｒ７が結合する各々の炭素原子は、独立して（Ｓ）立体配置または（Ｒ）立体配置またはラセミ混合物である。従って、アミノ酸単位は、鏡像異性的に純粋、ラセミまたはジアステレオマーであり得る。
【００６５】
（スペーサー単位（Ａ））
例示的実施形態では、式ＩＶの結合体は、必要に応じて、切断可能ペプチド（Ｚｍ）のＮ末端をリガンドＬに結合する二価部分であるスペーサー単位「Ａ」（すなわちｎは１である）を組み込む。スペーサー単位は、切断可能ペプチド配列が切断酵素（例えばカテプシンＢ）に接触することおよび切断可能ペプチドを自壊的部分Ｘに連結するアミド結合の加水分解を可能にする長さである。スペーサー単位Ａはアミド結合によってＺｍに共有結合される。あるいは、スペーサー単位は結合であり、リガンドＬは自壊的部分Ｘに直接共有結合する。この場合、リガンドＬおよび自壊的部分Ｘは、タンパク質分解の際に自壊的反応を開始させ、薬物Ｄを最終的に放出させるアミド結合を形成する。
【００６６】
スペーサー単位Ａは、アミド基またはチオエーテル基またはジスルフィド基を形成するアミン（例えばＬｙｓ残基からの−ＮＨ２）、カルボキシル（Ａｓｐ残基またはＧｌｕ残基からの−ＣＯＯＨ）またはスルフヒドリル（例えばＣｙｓ残基からの−ＳＨ）などの、リガンドＬから突き出た官能基に共有結合する。スペーサー単位は、アルキルジイル部分、アリールジイル部分、ヘテロアリールジイル部分などの二価ラジカル（例えば、−（ＣＲ２）ｎＯ（ＣＲ２）ｎ−）、アルキルオキシ（例えばポリエチレンオキシ、ＰＥＧ、ポリメチレンオキシ）の反復単位およびアルキルアミノ（例えばポリエチレンアミノ、ＪｅｆｆａｍｉｎｅＴＭ）、およびスクシネート、スクシンアミド、ジグリコレート、マロネートおよびカプロンアミドを含むニ酸エステルおよびアミドを含み得る。
【００６７】
スペーサー単位ＡがリガンドＬのスルフヒドリル官能基と反応して（例えばＬがＣｙｓを含むペプチドまたは還元抗体である場合）チオエーテル結合を形成する本発明の結合体としては、式Ｖａ−Ｖｅによって表される結合体が挙げられ、
【００６８】
【化１１】
2007527421.tif 000008
ここで、スペーサー単位「Ａ」は、かっこ内の化合物であり、
ここで、Ｒ１７は、（ＣＨ２）ｒ、Ｃ３−Ｃ８カルボシクリル、Ｏ−（ＣＨ２）ｒ、アリーレン、（ＣＨ２）ｒ−アリーレン、−アリーレン−（ＣＨ２）ｒ−、（ＣＨ２）ｒ−（Ｃ３−Ｃ８カルボシクリル）、（Ｃ３−Ｃ８カルボシクリル）−（ＣＨ２）ｒ、Ｃ３−Ｃ８ヘテロシクリル、（ＣＨ２）ｒ−（Ｃ３−Ｃ８ヘテロシクリル）、−（Ｃ３−Ｃ８ヘテロシクリル）−（ＣＨ２）ｒ−、−（ＣＨ２）ｒＣ（Ｏ）ＮＲｂ（ＣＨ２）ｒ−、−（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）ｒ−、−（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）ｒ−ＣＨ２−、−（ＣＨ２）ｒＣ（Ｏ）ＮＲｂ（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）ｒ−、−（ＣＨ２）ｒＣ（Ｏ）ＮＲｂ（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）ｒ−ＣＨ２−、−（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）ｒＣ（Ｏ）ＮＲｂ（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）ｒ−、−（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）ｒＣ（Ｏ）ＮＲｂ（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）ｒ−ＣＨ２−、および−（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）ｒＣ（Ｏ）ＮＲｂ（ＣＨ２）ｒ−から選択され、ｒは、独立して１−１０の範囲の整数である。Ｌ、Ｙ、Ｚ、Ｘ、Ｄおよびｍは、上に定義したとおりである。
【００６９】
例示的スペーサー単位Ａは、マレイミドカプロイル−Ｎ−ヒドロキシスクシンイミド（ＭＣ−ＮＨＳ）から作製される、Ｒ１７が−（ＣＨ２）５−である、マレイミドカプロイル（ＭＣ）：
【００７０】
【化１２】
2007527421.tif 000009
を含む式Ｖａのものである。
【００７１】
例示的スペーサー単位Ａは、Ｒ１７が−（ＣＨ２）２−である、マレイミド−プロパノイル（ＭＰ）：
【００７２】
【化１３】
2007527421.tif 000010
から誘導される式Ｖａのものである。
【００７３】
別の例示的スペーサー単位Ａは、Ｒ１７が−（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）ｒ−ＣＨ２−であり、ｒが２である、式Ｖａ：
【００７４】
【化１４】
2007527421.tif 000011
のものである。
【００７５】
別の例示的スペーサー単位Ａは、Ｒ１７が−（ＣＨ２）ｒＣ（Ｏ）ＮＲｂ（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）ｒ−ＣＨ２−であり、ＲｂがＨであり、各々のｒが２である式Ｖａ：
【００７６】
【化１５】
2007527421.tif 000012
のものである。
【００７７】
別の例示的スペーサー単位Ａは、スクシンイミジル４−（Ｎ−マレイミドメチル）−シクロヘキサン−１−カルボキシレート（ＳＭＣＣ、Ｐｉｅｒｃｅカタログ）から作製される、Ｖｂ：
【００７８】
【化１６】
2007527421.tif 000013
におけるようなＳＭＣＣである。
【００７９】
別の例示的スペーサー単位は、Ｖｃ：
【００８０】
【化１７】
2007527421.tif 000014
におけるように、ｍ−マレイミドベンゾイル−Ｎ−ヒドロキシスクシンイミドエステル（ＭＢＳ）（Ｐｉｅｒｃｅカタログｐ．Ｅ−１６（１９９２））から作製される。
【００８１】
別の例示的スペーサー単位は、Ｖｄ：
【００８２】
【化１８】
2007527421.tif 000015
におけるように、スクシンイミジル４−（ｐ−マレイミドフェニル）ブチレート（ＳＭＰＢ、Ｐｉｅｒｃｅカタログ）から作製される。
【００８３】
別の例示的スペーサー単位は、Ｖｅ：
【００８４】
【化１９】
2007527421.tif 000016
におけるように、Ｎ−スクシンイミジル（４−ヨードアセチル）アミノベンゾエート（ＳＩＡＢ、Ｐｉｅｒｃｅ  Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ，Ｉｎｃ．）から作製される。
【００８５】
スペーサー単位ＡおよびリガンドＬがチオエーテル基によって連結されている他の結合体は、リガンドＬから突き出たスルフヒドリル官能基をスペーサー単位Ａの活性化ジスルフィド含有前駆体と反応させることによって調製され得る。式ＶＩａ−ｄはこのタイプの結合体を代表する。
【００８６】
【化２０】
2007527421.tif 000017
。
【００８７】
別の例示的スペーサー単位は、ＶＩｂ：
【００８８】
【化２１】
2007527421.tif 000018
におけるように、４−スクシンイミジルオキシカルボニル−α−メチル−α−（２−ピリジルジチオ）トルエン（ＳＭＰＴ、Ｐｉｅｒｃｅ  Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ，Ｉｎｃ．）から作製される。
【００８９】
別の例示的スペーサー単位は、ＶＩｃ：
【００９０】
【化２２】
2007527421.tif 000019
に示すようなスクシンイミジル６−［３−（２−ピリジルジチオ）−プロピオンアミド］ヘキサノエート（ＬＣ−ＳＰＤＰ、Ｐｉｅｒｃｅ  Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ，Ｉｎｃ．）から作製される。
【００９１】
別の例示的スペーサー単位は、ＶＩｃ：
【００９２】
【化２３】
2007527421.tif 000020
に示すような、ハロアセトアミド試薬から作製される。
【００９３】
別の例示的スペーサー単位Ａは、Ｒ１７が−（ＣＨ２）５−である式ＶＩｄのもの：
【００９４】
【化２４】
2007527421.tif 000021
である。
【００９５】
本発明のスペーサー単位は、Ｐｉｅｒｃｅ  Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ，Ｉｎｃ．，Ｃｕｓｔｏｍｅｒ  Ｓｅｒｖｉｃｅ  Ｄｅｐａｒｔｍｅｎｔ，Ｐ．Ｏ．Ｂｏｘ  １１７，Ｒｏｃｋｆｏｒｄ，ＩＬ．６１１０５  ＵＳＡ，１−８００−８７４−３７２３、Ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ＋８１５−９６８−０７４７から市販されている、架橋試薬：ＢＭＰＥＯ、ＢＭＰＳ、ＥＭＣＳ、ＧＭＢＳ、ＨＢＶＳ、ＬＣ−ＳＭＣＣ、ＭＢＳ、ＭＰＢＨ、ＳＢＡＰ、ＳＩＡ、ＳＩＡＢ、ＳＭＣＣ、ＳＭＰＢ、ＳＭＰＨ、スルホ−ＥＭＣＳ、スルホ−ＧＭＢＳ、スルホ−ＫＭＵＳ、スルホ−ＭＢＳ、スルホ−ＳＩＡＢ、スルホ−ＳＭＣＣおよびスルホ−ＳＭＰＢ、およびＳＶＳＢ（スクシンイミジル（４−ビニルスルホン）ベンゾエート）、ならびにビスマレイミド試薬：ＤＴＭＥ、ＢＭＢ、ＢＭＤＢ、ＢＭＨ、ＢＭＯＥ、ＢＭ（ＰＥＯ）３およびＢＭ（ＰＥＯ）４を用いて調製される結合体を明白に企図するが、これらに限定されない。ｔｈｅ  Ａｐｐｌｉｃａｔｉｏｎｓ  Ｈａｎｄｂｏｏｋ  ａｎｄ  Ｃａｔａｌｏｇ、２００３−２００４、４６７−４９８ページを参照のこと。ビスマレイミド試薬は、抗体のシステイン残基のチオール基がチオール含有薬物部分、標識またはリンカー中間体に連続的または同時に結合することを可能にする。抗体のチオール基、薬物部分、標識またはリンカー中間体と反応性であるマレイミド以外の他の官能基としては、ヨードアセトアミド、ブロモアセトアミド、ビニルピリジン、ジスルフィド、ピリジルジスルフィド、イソシアネートおよびイソチオシアネートが挙げられる
【００９６】
【化２５】
2007527421.tif 000022
。
【００９７】
有用なスペーサー試薬はまた、Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｂｉｏｓｃｉｅｎｃｅｓ  Ｉｎｃ．（Ｂｏｕｌｄｅｒ，ＣＯ）などの他の市販の供給源によって入手され得るか、またはＴｏｋｉら、（２００２）Ｊ．Ｏｒｇ．Ｃｈｅｍ．６７：１８６６−１８７２；Ｆｉｒｅｓｔｏｎｅらの米国特許第６２１４３４５号；国際公開第０２０８８１７２号；米国特許出願公開第２００３１３０１８９号；米国特許出願公開第２００３０９６７４３号；国際公開第０３０２６５７７号；国際公開第０３０４３５８３号；および国際公開第０４０３２８２８号に記載されている手順に従って合成され得る。
【００９８】
スペーサー単位Ａがアミド結合によってリガンドＬに結合している本発明の結合体は、リガンドＬ上の遊離アミン官能基を、スペーサー単位Ａの前駆体を含む活性エステルと反応させることによって調製され得る。例えばスペーサー単位上のカルボキシル基は、Ｎ−ヒドロキシスクシンイミドと反応させ、次いでＬ−ＮＨ２と反応させて、ＬおよびＡがアミド基によって結合される結合体を形成することによって活性化され得る。
【００９９】
自然にまたは化学的操作によって、スペーサー単位に連結するための抗体上の有用な官能基としては、スルフヒドリル（−ＳＨ）、アミノ、ヒドロキシル、炭水化物のアノマーヒドロキシル基、およびカルボキシルが挙げられるが、これらに限定されない。１つの局面では、抗体上の反応性官能基はスルフヒドリルおよびアミノである。スルフヒドリル基は、抗体の分子内システインジスルフィド結合の還元によって生成され得る。あるいは、スルフヒドリル基は、２−イミノチオラン（トラウト試薬）または別のスルフヒドリル生成試薬を用いた抗体のリシン部分のアミノ基の反応によって生成することができる。
【０１００】
別の実施形態では、スペーサー単位は、抗体単位の硫黄原子とスペーサー単位の硫黄原子との間のジスルフィド結合によって抗体単位に連結される。この実施形態の代表的スペーサー単位は、式ＶＩＩの四角いかっこ内に示されており、ここで、Ａｂ、Ｒ１７、Ｚｍ、Ｘ、Ｄおよびｍは上で定義したとおりである。抗体単位当りの薬物部分の平均数はｐで表わされ、１−約８であり得る。
【０１０１】
【化２６】
2007527421.tif 000023
。
【０１０２】
なお別の実施形態では、スペーサーの反応基は、抗体の第一級アミノ基または第二級アミノ基と結合を形成し得る反応部位を含む。これらの反応部位の例としては、スクシンイミドエステル、４−ニトロフェニルエステル、ペンタフルオロフェニルエステル、テトラフルオロフェニルエステル、無水物、酸塩化物、スルホニル塩化物、イソシアネートおよびイソチオシアネートなどの活性化エステルが挙げられるが、これらに限定されない。この実施形態の代表的スペーサー単位は、式ＶＩＩＩａおよびＶＩＩＩｂ：
【０１０３】
【化２７】
2007527421.tif 000024
の四角いかっこ内に示されている。
【０１０４】
さらに別の実施形態では、スペーサーの反応基は、グリコシル化抗体の糖（炭水化物）上のアルデヒド基、アセタール基またはケタール基と反応する。例えば過ヨウ素酸ナトリウムなどの試薬を用いて炭水化物を穏やかに酸化することができ、酸化炭水化物の生じた（−ＣＨＯ）単位を、ヒドラジド、オキシム、第一級アミンまたは第二級アミン、ヒドラジン、チオセミカルバゾン、ヒドラジンカルボキシレート、およびＫａｎｅｋｏ，Ｔ．ら、（１９９１）Ｂｉｏｃｏｎｊｕｇａｔｅ  Ｃｈｅｍ  ２：１３３−４１によって記載されているようなアリールヒドラジドなどの官能基を含むスペーサーと縮合することができる。この実施形態の代表的スペーサー単位は、式ＩＸａ、ＩＸｂおよびＩＸｃ：
【０１０５】
【化２８】
2007527421.tif 000025
の四角いかっこ内に示されている。
【０１０６】
（薬物部分（Ｄ））
本発明の薬物結合体は、対応する薬物が有効であるために有効であり、リガンドに固有の、薬物をそれが特に有益である所望細胞へと輸送する能力に起因して卓越した効果および安全性を有する。さらに、本発明の結合体は、所定の生物学的応答を改変するために使用することができるので、薬物部分は伝統的化学治療薬に限定されると解釈されるべきではない。例えば薬物部分は、所望の生物学的活性を有するタンパク質またはポリペプチドであり得る。このようなタンパク質としては、例えば腫瘍壊死因子などのタンパク質が挙げられ得る。
【０１０７】
本発明における使用のための例示的薬物は、細胞傷害性薬物、特に癌治療のために使用されるものである。このような薬物としては、一般に、ＤＮＡ損傷薬、代謝拮抗薬、天然生成物およびそれらの類似体が挙げられる。例示的なクラスの細胞傷害性薬剤としては、ジヒドロ葉酸レダクターゼインヒビターおよびチミジル酸シンターゼインヒビターなどの酵素インヒビター、ＤＮＡインターカレート剤、ＤＮＡ切断剤、トポイソメラーゼインヒビター、アントラサイクリンファミリーの薬物、ビンカ薬物、マイトマイシン、ブレオマイシン、細胞傷害性ヌクレオシド、プテリジンファミリーの薬物、ジイネン、ポドフィロトキシン、ドラスタチン、メイタンシノイド、分化誘導剤およびタキソールが挙げられる。それらのクラスの特に有用なメンバーとしては、例えばメトトレキサート、メトプテリン、ジクロロメトトレキサート、５−フルオロウラシル、６−メルカプトプリン、シトシンアラビノシド、メルファラン、ロイロシン、ロイロシデイン、アクチノマイシン、ダウノルビシン、ドキソルビシン、マイトマイシンＣ、マイトマイシンＡ、カルミノマイシン、アミノプテリン、タリソマイシン、ポドフィロトキシンおよびエトポシドまたはリン酸エトポシドなどのポドフィロトキシン誘導体、ビンブラスチン、ビンクリスチン、ビンデシン、タキソール、タキソテール、レチノイン酸、酪酸、Ｎ８−アセチルスペルミジン、カンプトテシン、カリケアマイシン（ｃａｌｉｃｈｅａｍｉｃｉｎ）、エスペラマイシン、エン−ジイン、およびそれらの類似体が挙げられる。
【０１０８】
例示的な薬物としては、ドラスタチンおよびその類似体が挙げられ、ドラスタチンＡ（米国特許第４４８６４１４号）、ドラスタチンＢ（米国特許第４４８６４１４号）、ドラスタチン１０（米国特許第４８１６４４４号、米国特許第５４１００２４号、米国特許第５５０４１９１号、米国特許第５５２１２８４号、米国特許第５５３００９７号、米国特許第５５９９９０２号、米国特許第５６３５４８３号、米国特許第５６６３１４９号、米国特許第５６６５８６０号、米国特許第５７８０５８８号、米国特許第６０３４０６５号、米国特許第６３２３３１５号）、ドラスタチン１３（米国特許第４９８６９８８号）、ドラスタチン１４（米国特許第５１３８０３６号）、ドラスタチン１５（米国特許第４８７９２７８号）、ドラスタチン１６（米国特許第６２３９１０４号）、ドラスタチン１７（米国特許第６２３９１０４号）およびドラスタチン１８（米国特許第６２３９１０４号）が挙げられる（各々の特許はその全体が本明細書中に参考として援用される）。
【０１０９】
本発明の例示的実施形態では、薬物部分Ｄは、マイトマイシン、ビンカアルカロイド、タキソール、アントラサイクリン、カリケアマイシン、メイタンシノイドまたはアウリスタチン（ａｕｒｉｓｔａｔｉｎ）である。
【０１１０】
所望化合物の反応を、本発明の結合体を調製する目的でより好都合にするために、化合物に化学修飾を施し得ることは理解される。例えば官能基（例えばアミン、ヒドロキシルまたはスルフヒドリル）を、薬物の活性または他の性質に最小限のまたは許容される影響を有する位置で薬物に付加し得る。
【０１１１】
式Ｉの結合体において、Ｄは、その骨格にぶら下がった、薬物骨格がそれによってタンパク質ペプチドリンカーに結合する化学反応性官能基を有する薬物部分であり、上記官能基は、第一級アミンまたは第二級アミン、ヒドロキシル、スルフヒドリルまたはカルボキシルからなる群より選択される。
【０１１２】
自壊的部分への結合のためにアミン官能基を含む薬物としては、マイトマイシン−Ｃ、マイトマイシン−Ａ、ダウノルビシン、ドキソルビシン、アミノプテリン、アクチノマイシン、ブレオマイシン、９−アミノカンプトテシン、Ｎ８−アセチルスペルミジン、１−（２−クロロエチル）−１，２−ジメタンスルホニルヒドラジド、タリソマイシン、シタラビン、ドラスタチン（アウリスタチンを含む）およびそれらの誘導体が挙げられる。
【０１１３】
自壊的部分への結合のためにヒドロキシル官能基を含む薬物としては、エトポシド、カンプトテシン、タキソール、エスペラマイシン、１，８−ジヒドロキシ−ビシクロ［７．３．１］トリデカ−４−９−ジエン−２，６−ジイン−１３−オン、（米国特許第５１９８５６０号）、ポドフィロトキシン、アンギジン、ビンクリスチン、ビンブラスチン、モルホリン−ドキソルビシン、ｎ−（５，５−ジアセトキシ−ペンチル）ドキソルビシンおよびそれらの誘導体が挙げられる。
【０１１４】
自壊的部分への結合のためにスルフヒドリル官能基を含む薬物としては、エスペラマイシンおよび６−メルカプトプリンおよびそれらの誘導体が挙げられる。
【０１１５】
自壊的部分への結合のために１以上のカルボキシル官能基を含む薬物としては、メトトレキサート、カンプトテシン（ラクトンの開環形態）、酪酸、レチノイン酸およびこれらの誘導体が挙げられる。
【０１１６】
本発明における薬物としての使用のための例示的細胞傷害性薬剤としては、以下の式の薬物が挙げられる。
【０１１７】
式（１）のマイトマイシン群：
【０１１８】
【化２９】
2007527421.tif 000026
ここで、Ｒ１は水素またはメチルであり；Ｒ２は、−ＮＨ２、−ＯＣＨ３、−Ｏ（ＣＨ２）２ＯＨ、−ＮＨ（ＣＨ２）２ＳＳ（ＣＨ２）２ＮＨＡｃ、−ＮＨＣＨ−Ｃ≡ＣＨ、−ＮＨ（ＣＨ２）２ＳＳ（Ｃ６Ｈ４）ＮＯ２、−Ｏ（ＣＨ２）２ＳＳ（ＣＨ２）２ＯＨ、−Ｎ＝ＣＨ−ＮＨＯＣＨ３、−ＮＨ（Ｃ６Ｈ４）ＯＨ、−ＮＨ（ＣＨ２）２ＳＳ（ＣＨ２）２ＮＨＣＯ（ＣＨ２）２ＣＨ（ＮＨ２）ＣＯＯＨ、および：
【０１１９】
【化３０】
2007527421.tif 000027
である。
【０１２０】
式（２）のブレオマイシン群：
【０１２１】
【化３１】
2007527421.tif 000028
ここで、Ｒ１は、ヒドロキシ、アミノ、Ｃ１−Ｃ３アルキルアミノ、ジ（Ｃ１−Ｃ３アルキル）アミノ、Ｃ４−Ｃ６ポリメチレンアミノ、
【０１２２】
【化３２】
2007527421.tif 000029
である。
【０１２３】
式（３）のメトトレキサート群：
【０１２４】
【化３３】
2007527421.tif 000030
ここで、Ｒ１はアミノまたはヒドロキシであり；Ｒ２は水素またはメチルであり；Ｒ３は、水素、フルオロ、クロロ、ブロモまたはヨードであり；Ｒ４は、ヒドロキシまたはカルボン酸の塩を完全にする部分である。
【０１２５】
式（４）のメルファラン：
【０１２６】
【化３４】
2007527421.tif 000031
。
【０１２７】
式（５）のメルカプトプリン：
【０１２８】
【化３５】
2007527421.tif 000032
。
【０１２９】
式（６）のシトシンアラビノシド：
【０１３０】
【化３６】
2007527421.tif 000033
。
【０１３１】
式（７）のポドフィロトキシン：
【０１３２】
【化３７】
2007527421.tif 000034
ここで、Ｒ２は水素であり、Ｒ１は水素または
【０１３３】
【化３８】
2007527421.tif 000035
であり、
ここで、Ｒ３は、ＮＨ２、ＯＨ、ＯＣＨ３、ＮＨ（Ｃ１−Ｃ３アルキル）またはＮ（Ｃ１−Ｃ３アルキル）２であり；Ｒ４はＯＨまたはＮＨ２であり；Ｒ５はメチルまたはチエニルであり；そしてＲ６は水素またはメチルまたはそれらのリン酸塩である。
【０１３４】
式（８）のビンカアルカロイド群の薬物：
【０１３５】
【化３９】
2007527421.tif 000036
ここで、Ｒ１は、Ｈ、ＣＨ３またはＣＨＯであり；
Ｒ２およびＲ３を１個ずつ考慮する場合、Ｒ３はＨであり、そしてＲ４およびＲ２の一方はエチルであり、他方はＨまたはＯＨであり；Ｒ２およびＲ３を、それらが結合している炭素一緒になっている場合、それらはオキシラン環を形成し、その場合Ｒ４はエチルであり；Ｒ５は、水素、（Ｃ１−Ｃ３アルキル）−ＣＯまたはクロロ置換（Ｃ１−Ｃ３アルキル）−ＣＯである。本明細書中で使用する「Ｃ１−Ｃ３アルキル」は１−３個の炭素原子を有する直鎖または分枝炭素鎖を意味し；例としては、メチル、エチル、ｎ−プロピルおよびイソプロピルが挙げられる。
【０１３６】
式（９）のジフルオロヌクレオシド：
【０１３７】
【化４０】
2007527421.tif 000037
ここで、Ｒ１は、式：
【０１３８】
【化４１】
2007527421.tif 000038
の内の1つの塩基であり、
ここで、Ｒ２は、水素、メチル、ブロモ、フルオロ、クロロまたはヨードであり；Ｒ３は、−ＯＨまたは−ＮＨ２であり；Ｒ４は、水素、ブロモ、クロロまたはヨードである。
【０１３９】
式（１０）のタキソール：
【０１４０】
【化４２】
2007527421.tif 000039
ここで、Ｒ１はヒドロキシであり；Ｒ２は、水素、ヒドロキシまたはフルオロであり；Ｒ３は、水素、ヒドロキシまたはアセトキシであり；Ｒ４は、アリール、置換アリール、Ｃ１−６アルキル、Ｃ２−６アルケニル、Ｃ２−６アルキニルまたはｔ−ブトキシであり；Ｒ５は、Ｃ１−６アルキル、Ｃ２−６アルケニル、Ｃ２−６アルキニルまたは−Ｚ−Ｒ６であり；Ｚは、直接結合、Ｃ１−６アルキルまたはＣ２−６アルケニルであり；Ｒ６は、アリール、置換アリール、Ｃ３−６シクロアルキル、チエニルまたはフリルである。
【０１４１】
式（１１）のアンギジン：
【０１４２】
【化４３】
2007527421.tif 000040
ここで、Ｒ１はＯＨまたはＯであり；Ｒ２はＨまたはＯである。アンギジンは、エステルまたはヒドラゾンとしてＣ−３位、Ｃ−４位、Ｃ−８位またはＣ−１５位で標的され得る。
【０１４３】
式（１２）のアントラサイクリン系抗生物質：
【０１４４】
【化４４】
2007527421.tif 000041
ここで、Ｒ１は、−ＣＨ３、−ＣＨ２ＯＨ、−ＣＨ２ＯＣＯ（ＣＨ２）３ＣＨ３または−ＣＨ２ＯＣＯＣＨ（ＯＣ２Ｈ５）２であり；Ｒ２は、−ＯＣＨ３、−ＯＨまたはＨであり；Ｒ３は、−ＮＨ２、−ＮＨＣＯＣＦ３、４−モルホリニル、３−シアノ−４−モルホリニル、１−ピペリジニル、４−メトキシ−１−ピペリジニル、ベンジルアミン、ジベンジルアミン、シアノメチルアミン、１−シアノ−２−メトキシエチルアミンまたはＮＨ−（ＣＨ２）４−ＣＨ（ＯＡｃ）２であり；Ｒ４は、−ＯＨ、−ＯＴＨＰまたは−Ｈであり；そしてＲ５は、−ＯＨまたは−Ｈであり、但し、Ｒ４が−ＯＨまたは−ＯＴＨＰである場合、Ｒ５は−ＯＨではない。
【０１４５】
上記構造および説明は、薬物または薬物の誘導体である化合物、および当該分野において異なる一般名、商標名または慣用名を有する化合物を包含することが認識される。
【０１４６】
以下の表Ｉは、本発明における使用のための例示である、多くのアントラサイクリン系薬物とそれらの一般名または慣用名を表わす。表Ｉに示すドキソルビシン（本明細書中では「ＤＯＸ」とも称する）は、Ｒ１が−ＣＨ２ＯＨであり、Ｒ２が−ＯＣＨ３であり、Ｒ３が−ＮＨ２であり、Ｒ４が−ＯＨであり、そしてＲ５が−Ｈである、式（１２）のアントラサイクリンである。
【０１４７】
【表１】
2007527421.tif 000042
式（１３）のアウリスタチン：
式Ｉの結合体の薬物部分（Ｄ）としては、ドラスタチンおよびそれらのペプチド類似体および誘導体、アウリスタチン（米国特許第５６３５４８３号；同第５７８０５８８号）が挙げられる。ドラスタチンおよびアウリスタチンは、微小管の動力学、ＧＴＰ加水分解、ならびに核および細胞の分裂に干渉し（Ｗｏｙｋｅら、（２００１）Ａｎｔｉｍｉｃｒｏｂ．Ａｇｅｎｔｓ  ａｎｄ  Ｃｈｅｍｏｔｈｅｒ．４５（１２）：３５８０−３５８４）、抗癌活性（米国特許第５６６３１４９号）および抗真菌活性（Ｐｅｔｔｉｔら、（１９９８）Ａｎｔｉｍｉｃｒｏｂ．Ａｇｅｎｔｓ  ａｎｄ  Ｃｈｅｍｏｔｈｅｒ．４２：２９６１−２９６５）を有することが示された。ドラスタチンまたはアウリスタチンの薬物部分は、ペプチド薬物部分のＮ（アミノ）末端またはＣ（カルボキシル）末端を介して抗体に結合され得る（国際公開第０２０８８１７２号）。
【０１４８】
Ｎ末端結合したモノメチルアウリスタチン薬物部分ＤＥおよびＤＦを含む式Ｉの抗体−薬物結合体（ＡＤＣ）の薬物部分（Ｄ）の実施形態は、２００４年３月２８日に発表された、Ｓｅｎｔｅｒら、Ｐｒｏｃｅｅｄｉｎｇｓ  ｏｆ  ｔｈｅ  Ａｍｅｒｉｃａｎ  Ａｓｓｏｃｉａｔｉｏｎ  ｆｏｒ  Ｃａｎｃｅｒ  Ｒｅｓｅａｒｃｈ、第４５巻、Ａｂｓｔｒａｃｔ  Ｎｕｍｂｅｒ  ６２３に開示されており、構造：
【０１４９】
【化４５】
2007527421.tif 000043
を有し、
ここで、ＤＥおよびＤＦの波線は、リンカーのＡ、ＷまたはＹへの共有結合部位を示し、各々の位置で独立して：
Ｒ２は、ＨおよびＣ１−Ｃ８アルキルから選択され；
Ｒ３は、Ｈ、Ｃ１−Ｃ８アルキル、Ｃ３−Ｃ８炭素環、アリール、Ｃ１−Ｃ８アルキル−（Ｃ６−Ｃ２０アリール）、Ｃ１−Ｃ８アルキル−（Ｃ３−Ｃ８炭素環）、Ｃ３−Ｃ８複素環およびＣ１−Ｃ８アルキル−（Ｃ３−Ｃ８複素環）から選択され；
Ｒ４は、Ｈ、Ｃ１−Ｃ８アルキル、Ｃ３−Ｃ８炭素環、Ｃ６−Ｃ２０アリール、Ｃ１−Ｃ８アルキル−（Ｃ６−Ｃ２０アリール）、Ｃ１−Ｃ８アルキル−（Ｃ３−Ｃ８炭素環）、Ｃ３−Ｃ８複素環およびＣ１−Ｃ８アルキル−（Ｃ３−Ｃ８複素環）から選択され；
Ｒ５は、Ｈおよびメチルから選択され；
またはＲ４とＲ５は結合して炭素環を形成し、式−（ＣＲａＲｂ）ｎ−を有し、ここで、ＲａおよびＲｂは、Ｈ、Ｃ１−Ｃ８アルキルおよびＣ３−Ｃ８炭素環から独立して選択され、ｎは、２、３、４、５および６から選択され；
Ｒ６は、ＨおよびＣ１−Ｃ８アルキルから選択され；
Ｒ７は、Ｈ、Ｃ１−Ｃ８アルキル、Ｃ３−Ｃ８炭素環、Ｃ６−Ｃ２０アリール、Ｃ１−Ｃ８アルキル−（Ｃ６−Ｃ２０アリール）、Ｃ１−Ｃ８アルキル−（Ｃ３−Ｃ８炭素環）、Ｃ３−Ｃ８複素環およびＣ１−Ｃ８アルキル−（Ｃ３−Ｃ８複素環）から選択され；
各Ｒ８は、Ｈ、ＯＨ、Ｃ１−Ｃ８アルキル、Ｃ３−Ｃ８炭素環およびＯ−（Ｃ１−Ｃ８アルキル）から独立して選択され；
Ｒ９は、ＨおよびＣ１−Ｃ８アルキルから選択され；
Ｒ１０は、Ｃ６−Ｃ２０アリールまたはＣ３−Ｃ８複素環から選択され；
Ｚは、Ｏ、Ｓ、ＮＨまたはＮＲ１２であり、ここで、Ｒ１２はＣ１−Ｃ８アルキルであり；
Ｒ１１は、Ｈ、Ｃ１−Ｃ２０アルキル、アリール、Ｃ３−Ｃ８複素環、−（Ｒ１３Ｏ）ｍ−Ｒ１４または−（Ｒ１３Ｏ）ｍ−ＣＨ（Ｒ１５）２から選択され；
ｍは、１−１０００の範囲の整数であり；
Ｒ１３は、Ｃ２−Ｃ８アルキルであり；
Ｒ１４は、ＨまたはＣ１−Ｃ８アルキルであり；
Ｒ１５の各出現例は、独立してＨ、ＣＯＯＨ、−（ＣＨ２）ｎ−Ｎ（Ｒ１６）２、−（ＣＨ２）ｎ−ＳＯ３Ｈまたは−（ＣＨ２）ｎ−ＳＯ３−Ｃ１−Ｃ８アルキルであり；
Ｒ１６の各出現例は、独立してＨ、Ｃ１−Ｃ８アルキルまたは−（ＣＨ２）ｎ−ＣＯＯＨであり；
Ｒ１８は、−Ｃ（Ｒ８）２−Ｃ（Ｒ８）２−（Ｃ６−Ｃ２０アリール）、−Ｃ（Ｒ８）２−Ｃ（Ｒ８）２−（Ｃ３−Ｃ８複素環）および−Ｃ（Ｒ８）２−Ｃ（Ｒ８）２−（Ｃ３−Ｃ８炭素環）から選択され；そして
ｎは０−６の範囲の整数である。
【０１５０】
Ｒ１１の例示的実施形態としては、
【０１５１】
【化４６】
2007527421.tif 000044
が挙げられる。
【０１５２】
薬物部分ＤＥの１つの例示的実施形態は、ＭＭＡＥ：
【０１５３】
【化４７】
2007527421.tif 000045
である。
【０１５４】
薬物部分ＤＦの１つの例示的実施形態は、ＭＭＡＦ：
【０１５５】
【化４８】
2007527421.tif 000046
である。
【０１５６】
代表的には、ペプチドに基づく薬物部分は、２以上のアミノ酸および／またはペプチドフラグメントの間にペプチド結合を形成することによって調製され得る。そのようなペプチド結合は、例えばペプチド化学の分野において周知である液相合成法（Ｅ．ＳｃｈｒｏｅｄｅｒおよびＫ．Ｌｕｅｂｋｅ、「Ｔｈｅ  Ｐｅｐｔｉｄｅｓ」、第１巻、ｐｐ７６−１３６，１９６５，Ａｃａｄｅｍｉｃ  Ｐｒｅｓｓ）に従って調製され得る。アウリスタチン／ドラスタチン薬物部分は、米国特許第５６３５４８３号；米国特許第５７８０５８８号；Ｐｅｔｔｉｔら、（１９８９）Ｊ．Ａｍ．Ｃｈｅｍ．Ｓｏｃ．１１１：５４６３−５４６５；Ｐｅｔｔｉｔら、（１９９８）Ａｎｔｉ−Ｃａｎｃｅｒ  Ｄｒｕｇ  Ｄｅｓｉｇｎ  １３：２４３−２７７；Ｐｅｔｔｉｔ，Ｇ．Ｒら、Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ，１９９６、７１９−７２５；およびＰｅｔｔｉｔら、（１９９６）Ｊ．Ｃｈｅｍ．Ｓｏｃ．Ｐｅｒｋｉｎ  Ｔｒａｎｓ．１５：８５９−８６３の方法に従って調製され得る。
【０１５７】
カリケアマイシン、エン−ジイン誘導体（１４）：
式ＩＶの化合物に関する薬物部分の別の有用なクラスは、カリケアマイシンのエン−ジインファミリー（米国特許第５０５３３９４号；米国特許第４９７０１９８号；米国特許第５０７９２３３号；米国特許第５７７３００１号；米国特許第５６０６０４０号；米国特許第５７３９１１６号；米国特許第５２６４５８６号；米国特許第５３８４４１２号）およびエスペラマイシン（米国特許第５８７７２９６号）である。
【０１５８】
式（１５）のメイタンシノイド誘導体：
式ＩＶの結合体の薬物部分（Ｄ）は、構造：
【０１５９】
【化４９】
2007527421.tif 000047
を有するメイタンシノイドを含み、
ここで、波線は、式ＩＶの化合物、例えば抗体薬物結合体（ＡＤＣ）のリンカー（Ｌ）へのＤの硫黄原子の共有結合を示す。Ｒは独立してＨまたはＣ１−Ｃ６アルキルであり得る。アミド基を硫黄原子に結合するアルキレン鎖は、メタニル、エタニルまたはプロピルであり得、すなわちｍは１、２または３である。
【０１６０】
マイタンシン（ｍａｙｔａｎｓｉｎｅ）化合物は、微小管タンパク質、チューブリンの重合の阻害を介して有糸分裂中の微小管の形成を阻害することによって細胞増殖を阻害する（Ｒｅｍｉｌｌａｒｄら、（１９７５）Ｓｃｉｅｎｃｅ  １８９：１００２−１００５；米国特許第５２０８０２０号）。マイタンシンは東アフリカの低木、Ｍａｙｔｅｎｕｓ  ｓｅｒｒａｔａから単離され、メトトレキサート、ダウノルビシンおよびビンクリスチンのような従来の癌化学療法剤よりも１００倍から１０００倍細胞傷害性であることが示された（米国特許第３８９６１１１号）。その後、一部の微生物も、メイタンシノールおよびメイタンシノールのＣ−３エステルなどのメイタンシノイドを産生することが発見された（米国特許第４１５１０４２号）。メイタンシノールの合成Ｃ−３エステルおよびメイタンシノールの類似体も報告されている（Ｋｕｐｃｈａｎら、（１９７８）Ｊ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．２１：３１−３７；Ｈｉｇａｓｈｉｄｅら、（１９７７）Ｎａｔｕｒｅ  ２７０：７２１−７２２；Ｋａｗａｉら、３２  Ｃｈｅｍ．Ｐｈａｒｍ．（１９８４）Ｂｕｌｌ．３４４１−３４５１）。Ｃ−３エステルが調製されたメイタンシノールの類似体としては、芳香環（例えばデクロロ）上またはＣ−９、Ｃ−１４（例えばヒドロキシル化メチル基）、Ｃ−１５、Ｃ−１８、Ｃ−２０およびＣ−４，５に修飾を有するメイタンシノールが挙げられる。天然に存在するＣ−３エステルおよび合成Ｃ−３エステルは、２つの群：
（ａ）簡単なカルボン酸を有するＣ−３エステル（米国特許第４２４８８７０号；同第４２６５８１４号；同第４３０８２６８号；同第４３０８２６９号；同第４３０９４２８号；同第４３１７８２１号；同第４３２２３４８号；および同第４３３１５９８号）、および
（ｂ）Ｎ−メチル−Ｌ−アラニンの誘導体を有するＣ−３エステル（米国特許第４１３７２３０号および同第４２６０６０８号；およびＫａｗａｉら、（１９８４）Ｃｈｅｍ．Ｐｈａｒｍ．Ｂｕｌｌ．３２：３４４１−３４５１）に分類され得る。（ｂ）群のエステルは（ａ）群のエステルよりもはるかに細胞傷害性であることが見出された。
【０１６１】
他の薬物部分と同様に、メイタンシノイド薬物部分の全ての立体異性体、すなわちＤのキラル炭素におけるＲおよびＳ立体配置のいかなる組合せも本発明の化合物に関して企図される。１つの実施形態では、メイタンシノイド薬物部分（Ｄ）は以下の立体化学：
【０１６２】
【化５０】
2007527421.tif 000048
を有する。
【０１６３】
メイタンシノイド薬物部分の例示的実施形態としては、構造：
【０１６４】
【化５１】
2007527421.tif 000049
を有する、ＤＭ１、（ＣＲ２）ｍ＝ＣＨ２ＣＨ２；ＤＭ３、（ＣＲ２）ｍ＝ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ（ＣＨ３）；およびＤＭ４、（ＣＲ２）ｍ＝ＣＨ２ＣＨ２Ｃ（ＣＨ３）２が挙げられる。
【０１６５】
（リガンド（Ｌ））
「リガンド」部分Ｌは、所定の標的細胞集団に結合するレセプターまたは他の受容部分と特異的に結合するかまたは反応的に関連するかまたは複合するいかなる分子もその範囲内に包含する。この細胞反応性分子は、遊離反応性スルフヒドリル（−ＳＨ）基、アミン（−ＮＨ２）基、アルデヒド（−ＣＨＯ）基またはカルボキシル（−ＣＯＯＨ）基によって結合体のリンカー部分に連結されるかまたはそのようなスルフヒドリル基、アミン基、アルデヒド基またはカルボキシル基を含むように修飾され得る。リガンドＬは、治療活性薬物部分Ｄを、そのリガンドが反応する特定標的細胞集団へと送達するように働き、そのような細胞によって内在化されて、そこで活性薬物の放出のための酵素に暴露される。そのようなリガンド分子としては、高分子量タンパク質（例えば抗体）、より低分子量のタンパク質、ポリペプチドまたはペプチドリガンドおよび非ペプチド性リガンドが挙げられるが、これらに限定されない。
【０１６６】
式ＩＶの抗体−薬物結合体（ＡＤＣ）においてＬを含む有用な非免疫反応性タンパク質、ポリペプチドまたはペプチド抗体としては、トランスフェリン、上皮増殖因子（「ＥＧＦ」）、ボンベシン、ガストリン、ガストリン放出ペプチド、血小板由来増殖因子、ＩＬ−２、ＩＬ−６、ＴＧＦ−αおよびＴＧＦ−βなどのトランスフォーミング増殖因子（「ＴＧＦ」）、ワクシニア増殖因子（「ＶＧＦ」）、インスリンおよびインスリン様増殖因子ＩおよびＩＩ、レクチンおよび低密度リポタンパク質からのアポタンパク質が挙げられるが、これらに限定されない。
【０１６７】
（抗体）
式ＩＶのリガンドＬが抗体である場合、抗体単位（Ａｂ−）は、所定の標的細胞集団に関連するレセプター、抗原または他の受容成分と結合するかまたは反応的に関連するかまたは複合するいかなる単位の抗体（Ａｂ）もその範囲内に包含する。抗体は、治療的にまたはさもなければ生物学的に改変しようとする細胞集団の部分と結合するか、複合するかまたは反応する任意のタンパク質またはタンパク質様分子であり得る。１つの局面では、抗体単位は、薬物部分を、その抗体単位が反応する特定標的細胞集団に送達するように働く。そのような抗体としては、全長抗体および抗体フラグメントなどの高分子量タンパク質が挙げられるが、これらに限定されない。
【０１６８】
式ＩＶの抗体−薬物結合体（ＡＤＣ）においてＬを含み、癌の処置において有用であり得る抗体としては、腫瘍関連抗原（ＴＡＡ）に対する抗体が挙げられるが、これらに限定されない。そのような腫瘍関連抗原は当該分野で公知であり、抗体を産生するときに使用するための当該分野で周知の方法および情報を用いて調製することができる。癌の診断および治療のための有効な細胞標的を発見する試みとして、研究者らは、１以上の正常非癌細胞と比較して、１以上の特定型の癌細胞の表面上で特異的に発現される膜貫通ポリペプチドまたはさもなければ腫瘍関連ポリペプチドを同定しようとした。多くの場合、そのような腫瘍関連ポリペプチドは、非癌細胞の表面と比較して癌細胞の表面上でより豊富に発現される。そのような腫瘍関連細胞表面抗原ポリペプチドの同定は、抗体に基づく治療によって癌細胞を破壊のために特異的に標的する能力を生じさせた。
【０１６９】
ＴＡＡの例としては、以下に列挙するＴＡＡ（１）−（３５）が挙げられるが、これらに限定されない。便宜上、それら全てが当該分野において公知である、これらの抗原に関する情報が以下に列挙されており、名称、選択的名称、Ｇｅｎｂａｎｋ登録番号および主要参考文献を含む。抗体によって標的される腫瘍関連抗原としては、引用参考文献中で同定される配列に対して少なくとも約７０％、８０％、８５％、９０％または９５％の配列同一性を有するか、または引用参考文献中に見出される配列を有するＴＡＡと実質的に同じ生物学的性質または特徴を示す、全てのアミノ酸配列改変体およびアイソフォームが挙げられる。例えば改変配列を有するＴＡＡは一般的に、列挙する対応配列を有するＴＡＡに特異的に結合する抗体に特異的に結合することができる。本明細書中で特に列挙する参考文献中の配列および開示は、明白に参考として援用される。
【０１７０】
（主要関連抗原（１）−（３５））：
（１）ＢＭＰＲ１Ｂ（骨形態発生タンパク質レセプターＩＢ型、Ｇｅｎｂａｎｋ登録番号ＮＭ＿００１２０３）
ｔｅｎ  Ｄｉｊｋｅ，Ｐ．ら、Ｓｃｉｅｎｃｅ  ２６４（５１５５）：１０１−１０４（１９９４），Ｏｎｃｏｇｅｎｅ  １４（１１）：１３７７−１３８２（１９９７））；国際公開第２００４０６３３６２号（請求項２）；国際公開第２００３０４２６６１号（請求項１２）；米国特許出願公開第２００３１３４７９０−Ａ１号（３８−３９ページ）；国際公開第２００２１０２２３５号（請求項１３；２９６ページ）；国際公開第２００３０５５４４３号（９１−９２ページ）；国際公開第２００２９９１２２号（実施例２；５２８−５３０ページ）；国際公開第２００３０２９４２１号（請求項６）；国際公開第２００３０２４３９２号（請求項２；図１１２）；国際公開第２００２９８３５８号（請求項１；１８３ページ）；国際公開第２００２５４９４０号（１００−１０１ページ）；国際公開第２００２５９３７７号（３４９−３５０ページ）；国際公開第２００２３０２６８号（請求項２７；３７６ページ）；国際公開第２００１４８２０４号（実施例；図４）。
ＮＰ＿００１１９４骨形態発生タンパク質レセプターＩＢ型／ｐｉｄ＝ＮＰ＿００１１９４．１−
相互参照：ＭＩＭ：６０３２４８；ＮＰ＿００１１９４．１；ＮＭ＿００１２０３＿１。
【０１７１】
（２）Ｅ１６（ＬＡＴ１、ＳＬＣ７Ａ５、Ｇｅｎｂａｎｋ登録番号ＮＭ＿００３４８６）
Ｂｉｏｃｈｅｍ．Ｂｉｏｐｈｙｓ．Ｒｅｓ．Ｃｏｍｍｕｎ．２５５（２），２８３−２８８（１９９９），Ｎａｔｕｒｅ  ３９５（６６９９）：２８８−２９１（１９９８），Ｇａｕｇｉｔｓｃｈ，Ｈ．Ｗ．ら、（１９９２）Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．２６７（１６）：１１２６７−１１２７３）；国際公開第２００４０４８９３８号（実施例２）；国際公開第２００４０３２８４２号（実施例ＩＶ）；国際公開第２００３０４２６６１号（請求項１２）；国際公開第２００３０１６４７５号（請求項１）；国際公開第２００２７８５２４号（実施例２）；国際公開第２００２９９０７４号（請求項１９；１２７−１２９ページ）；国際公開第２００２８６４４３号（請求項２７；２２２、３９３ページ）；国際公開第２００３００３９０６号（請求項１０；２９３ページ）；国際公開第２００２６４７９８号（請求項３３；９３−９５ページ）；国際公開第２０００１４２２８号（請求項５；１３３−１３６ページ）；米国特許出願公開第２００３２２４４５４号（図３）；国際公開第２００３０２５１３８号（請求項１２；１５０ページ）；
ＮＰ＿００３４７７溶質キャリアファミリー７（陽イオンアミノ酸トランスポーター、ｙ＋系）、メンバー５／ｐｉｄ＝ＮＰ＿００３４７７．３−Ｈｏｍｏ  ｓａｐｉｅｎｓ
相互参照：ＭＩＭ：６００１８２；ＮＰ＿００３４７７．３；ＮＭ＿０１５９２３：ＮＭ＿００３４８６＿１。
【０１７２】
（３）ＳＴＥＡＰ１（前立腺の６回膜貫通型上皮抗原、Ｇｅｎｂａｎｋ登録番号ＮＭ＿０１２４４９）
Ｃａｎｃｅｒ  Ｒｅｓ．６１（１５），５８５７−５８６０（２００１），Ｈｕｂｅｒｔ，Ｒ．Ｓ．ら、（１９９９）Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．Ｕ．Ｓ．Ａ．９６（２５）：１４５２３−１４５２８）；国際公開第２００４０６５５７７号（請求項６）；国際公開第２００４０２７０４９号（図１Ｌ）；欧州特許第１３９４２７４号（実施例１１）；国際公開第２００４０１６２２５号（請求項２）；国際公開第２００３０４２６６１号（請求項１２）；米国特許出願公開第２００３１５７０８９号（実施例５）；米国特許出願公開第２００３１８５８３０号（実施例５）；米国特許出願公開第２００３６４３９７号（図２）；国際公開第２００２８９７４７号（実施例５；６１８−６１９ページ）；国際公開第２００３０２２９９５号（実施例９；図１３Ａ，実施例５３；１７３ページ、実施例２；図２Ａ）；
ＮＰ＿０３６５８１  前立腺の６回膜貫通型上皮抗原
相互参照：ＭＩＭ：６０４４１５；ＮＰ＿０３６５８１．１ＮＭ＿０１２４４９＿１。
【０１７３】
（４）０７７２Ｐ（ＣＡ１２５、ＭＵＣ１６、Ｇｅｎｂａｎｋ登録番号ＡＦ３６１４８６）
Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．２７６（２９）：２７３７１−２７３７５（２００１））；国際公開第２００４０４５５５３（請求項１４）；国際公開第２００２９２８３６号（請求項６；図１２）；国際公開第２００２８３８６６号（請求項１５；１１６−１２１ページ）；米国特許出願公開第２００３１２４１４０号（実施例１６）；米国特許出願公開第２００３０９１５８０号（請求項６）；国際公開第２００２０６３１７号（請求項６；４００−４０８ページ）；
相互参照：ＧＩ：３４５０１４６７；ＡＡＫ７４１２０．３；ＡＦ３６１４８６＿１。
【０１７４】
（５）ＭＰＦ（ＭＰＦ、ＭＳＬＮ、ＳＭＲ、巨核球増殖因子（ｍｅｇａｋａｒｙｏｃｙｔｅ  ｐｏｔｅｎｔｉａｔｉｎｇ  ｆａｃｔｏｒ）、メソテリン（ｍｅｓｏｔｈｅｌｉｎ）、Ｇｅｎｂａｎｋ登録番号ＮＭ＿００５８２３）
Ｙａｍａｇｕｃｈｉ，Ｎ．ら、Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．２６９（２），８０５−８０８（１９９４），Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．Ｕ．Ｓ．Ａ．９６（２０）：１１５３１−１１５３６（１９９９），Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．Ｕ．Ｓ．Ａ．９３（１）：１３６−１４０（１９９６）、Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．２７０（３７）：２１９８４−２１９９０（１９９５））；国際公開第２００３１０１２８３号（請求項１４）；国際公開第２００２１０２２３５号（請求項１３；２８７−２８８ページ）；国際公開第２００２１０１０７５号（請求項４；３０８−３０９ページ）；国際公開第２００２７１９２８号（３２０−３２１ページ）；国際公開第９４１０３１２号（５２−５７ページ）；
相互参照：ＭＩＭ：６０１０５１；ＮＰ＿００５８１４．２；ＮＭ＿００５８２３＿１。
【０１７５】
（６）Ｎａｐｉ３ｂ（ＮＡＰＩ−３Ｂ、ＮＰＴＩＩｂ、ＳＬＣ３４Ａ２、溶質キャリアファミリー３４（リン酸ナトリウム）、メンバー２、ＩＩ型ナトリウム依存性リン酸トランスポーター３ｂ、Ｇｅｎｂａｎｋ登録番号ＮＭ＿００６４２４）
Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．２７７（２２）：１９６６５−１９６７２（２００２），Ｇｅｎｏｍｉｃｓ  ６２（２）；２８１−２８４（１９９９），Ｆｅｉｌｄ，Ｊ．Ａ．ら、（１９９９）Ｂｉｏｃｈｅｍ．Ｂｉｏｐｈｙｓ．Ｒｅｓ．Ｃｏｍｍｕｎ．２５８（３）：５７８−５８２；国際公開第２００４０２２７７８号（請求項２）；欧州特許第１３９４２７４号（実施例１１）；国際公開第２００２１０２２３５号（請求項１３；３２６ページ）；欧州特許第８７５５６９号（請求項１；１７−１９ページ）；国際公開第２００１５７１８８号（請求項２０；３２９ページ）；国際公開第２００４０３２８４２号（実施例ＩＶ）；国際公開第２００１７５１７７号（請求項２４；１３９−１４０ページ）；
相互参照：ＭＩＭ：６０４２１７；ＮＰ＿００６４１５．１；ＮＭ＿００６４２４＿１。
【０１７６】
（７）Ｓｅｍａ  ５ｂ（ＦＬＪ１０３７２、ＫＩＡＡ１４４５、Ｍｍ．４２０１５、ＳＥＭＡ５Ｂ、ＳＥＭＡＧ、セマフォリン５ｂ  Ｈｌｏｇ、セマドメイン、７回のトロンボスポンジン反復（１型および１型様）、膜貫通ドメイン（ＴＭ）および短い細胞質ドメイン、（セマフォリン）５Ｂ、Ｇｅｎｂａｎｋ登録番号ＡＢ０４０８７８）
Ｎａｇａｓｅ  Ｔ．ら、（２０００）ＤＮＡ  Ｒｅｓ．７（２）：１４３−１５０）；国際公開第２００４０００９９７号（請求項１）；国際公開第２００３００３９８４号（請求項１）；国際公開第２００２０６３３９号（請求項１；５０ページ）；国際公開第２００１８８１３３号（請求項１；４１−４３ページ、４８−５８ページ）；国際公開第２００３０５４１５２号（請求項２０）；国際公開第２００３１０１４００号（請求項１１）；
登録番号：Ｑ９Ｐ２８３；ＥＭＢＬ；ＡＢ０４０８７８；ＢＡＡ９５９６９．１．Ｇｅｎｅｗ；ＨＧＮＣ：１０７３７；
（８）ＰＳＣＡ  ｈｌｇ（２７０００５０Ｃ１２Ｒｉｋ、Ｃ５３０００８Ｏ１６Ｒｉｋ、ＲＩＫＥＮ  ｃＤＮＡ  ２７０００５０Ｃ１２、ＲＩＫＥＮ  ｃＤＮＡ  ２７０００５０Ｃ１２遺伝子、Ｇｅｎｂａｎｋ登録番号ＡＹ３５８６２８）；
米国特許出願公開第２００３１２９１９２号（請求項２）；米国特許出願公開第２００４０４４１８０号（請求項１２）；米国特許出願公開第２００４０４４１７９号（請求項１１）；米国特許出願公開第２００３０９６９６１号（請求項１１）；米国特許出願公開第２００３２３２０５６号（実施例５）；国際公開第２００３１０５７５８号（請求項１２）；米国特許出願公開第２００３２０６９１８号（実施例５）；欧州特許第１３４７０４６号（請求項１）；国際公開第２００３０２５１４８号（請求項２０）；
相互参照：ＧＩ：３７１８２３７８；ＡＡＱ８８９９１．１；ＡＹ３５８６２８＿１。
【０１７７】
（９）ＥＴＢＲ（エンドセリンＢ型レセプター、Ｇｅｎｂａｎｋ登録番号ＡＹ２７５４６３）；
Ｎａｋａｍｕｔａ  Ｍ．ら、Ｂｉｏｃｈｅｍ．Ｂｉｏｐｈｙｓ．Ｒｅｓ．Ｃｏｍｍｕｎ．１７７：３４−３９，１９９１；Ｏｇａｗａ  Ｙ．ら、Ｂｉｏｃｈｅｍ．Ｂｉｏｐｈｙｓ．Ｒｅｓ．Ｃｏｍｍｕｎ．１７８：２４８−２５５，１９９１；Ａｒａｉ  Ｈ．ら、Ｊｐｎ．Ｃｉｒｃ．Ｊ．５６，１３０３−１３０７，１９９２；Ａｒａｉ  Ｈ．ら、Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．２６８，３４６３−３４７０，１９９３；Ｓａｋａｍｏｔｏ  Ａ．，Ｙａｎａｇｉｓａｗａ  Ｍ．ら、Ｂｉｏｃｈｅｍ．Ｂｉｏｐｈｙｓ．Ｒｅｓ．Ｃｏｍｍｕｎ．１７８，６５６−６６３，１９９１；Ｅｌｓｈｏｕｒｂａｇｙ  Ｎ．Ａ．ら、Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．２６８，３８７３−３８７９，１９９３；Ｈａｅｎｄｌｅｒ  Ｂ．，ら、Ｊ．Ｃａｒｄｉｏｖａｓｃ．Ｐｈａｒｍａｃｏｌ．２０，Ｓ１−Ｓ４，１９９２；Ｔｓｕｔｓｕｍｉ  Ｍ．ら、  Ｇｅｎｅ  ２２８，４３−４９，１９９９；Ｓｔｒａｕｓｂｅｒｇ  Ｒ．Ｌ．ら、Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．Ｕ．Ｓ．Ａ．９９，１６８９９−１６９０３，２００２；Ｂｏｕｒｇｅｏｉｓ  Ｃ．ら、Ｊ．Ｃｌｉｎ．Ｅｎｄｏｃｒｉｎｏｌ．Ｍｅｔａｂ．８２，３１１６−３１２３，１９９７；Ｏｋａｍｏｔｏ  Ｙ．ら、  Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．２７２，２１５８９−２１５９６，１９９７；Ｖｅｒｈｅｉｊ  Ｊ．Ｂ．ら、Ａｍ．Ｊ．Ｍｅｄ．Ｇｅｎｅｔ．１０８，２２３−２２５，２００２；Ｈｏｆｓｔｒａ  Ｒ．Ｍ．Ｗ．ら、Ｅｕｒ．Ｊ．Ｈｕｍ．Ｇｅｎｅｔ．５，１８０−１８５，１９９７；Ｐｕｆｆｅｎｂｅｒｇｅｒ  Ｅ．Ｇ．ら、Ｃｅｌｌ  ７９，１２５７−１２６６，１９９４；Ａｔｔｉｅ  Ｔ．ら、Ｈｕｍ．Ｍｏｌ．Ｇｅｎｅｔ．４，２４０７−２４０９，１９９５；Ａｕｒｉｃｃｈｉｏ  Ａ．ら、Ｈｕｍ．Ｍｏｌ．Ｇｅｎｅｔ．５：３５１−３５４，１９９６；Ａｍｉｅｌ  Ｊ．ら、Ｈｕｍ．Ｍｏｌ．Ｇｅｎｅｔ．５，３５５−３５７，１９９６；Ｈｏｆｓｔｒａ  Ｒ．Ｍ．Ｗ．ら、Ｎａｔ．Ｇｅｎｅｔ．１２，４４５−４４７，１９９６；Ｓｖｅｎｓｓｏｎ  Ｐ．Ｊ．ら、Ｈｕｍ．Ｇｅｎｅｔ．１０３，１４５−１４８，１９９８；Ｆｕｃｈｓ  Ｓ．ら、Ｍｏｌ．Ｍｅｄ．７，１１５−１２４，２００１；Ｐｉｎｇａｕｌｔ  Ｖ．ら、（２００２）Ｈｕｍ．Ｇｅｎｅｔ．１１１，１９８−２０６；国際公開第２００４０４５５１６号（請求項１）；国際公開第２００４０４８９３８号（実施例２）；国際公開第２００４０４００００（請求項１５１）；国際公開第２００３０８７７６８号（請求項１）；国際公開第２００３０１６４７５号（請求項１）；国際公開第２００３０１６４７５号（請求項１）；国際公開第２００２６１０８７号（図１）；国際公開第２００３０１６４９４号（図６）；国際公開第２００３０２５１３８号（請求項１２；１４４ページ）；国際公開第２００１９８３５１号（請求項１；１２４−１２５ページ）；欧州特許第５２２８６８号（請求項８；図２）；国際公開第２００１７７１７２号（請求項１；２９７−２９９ページ）；米国特許出願公開第２００３１０９６７６号；米国特許第６５１８４０４号（図３）；米国特許第５７７３２２３号（請求項１ａ；３１−３４段）；国際公開第２００４００１００４号。
【０１７８】
（１０）ＭＳＧ７８３（ＲＮＦ１２４、仮想タンパク質ＦＬＪ２０３１５、Ｇｅｎｂａｎｋ登録番号ＮＭ＿０１７７６３）；
国際公開第２００３１０４２７５号（請求項１）；国際公開第２００４０４６３４２号（実施例２）；国際公開第２００３０４２６６１号（請求項１２）；国際公開第２００３０８３０７４号（請求項１４；６１ページ）；国際公開第２００３０１８６２１号（請求項１）；国際公開第２００３０２４３９２号（請求項２；図９３）；国際公開第２００１６６６８９号（実施例６）；
相互参照：遺伝子座ＩＤ：５４８９４；ＮＰ＿０６０２３３．２；ＮＭ＿０１７７６３＿１。
【０１７９】
（１１）ＳＴＥＡＰ２（ＨＧＮＣ＿８６３９、ＩＰＣＡ−１、ＰＣＡＮＡＰ１、ＳＴＡＭＰ１、ＳＴＥＡＰ２、ＳＴＭＰ、前立腺癌関連遺伝子１、前立腺癌関連タンパク質１、前立腺の６回膜貫通型上皮抗原２、６回膜貫通型前立腺タンパク質、Ｇｅｎｂａｎｋ登録番号ＡＦ４５５１３８）
Ｌａｂ．Ｉｎｖｅｓｔ．８２（１１）：１５７３−１５８２（２００２）；国際公開第２００３０８７３０６号；米国特許出願公開第２００３０６４３９７号（請求項１；図１）；国際公開第２００２２７２５９６号（請求項１３；５４−５５ページ）；国際公開第２００１７２９６２号（請求項１；図４Ｂ）；国際公開第２００３１０４２７０号（請求項１１）；国際公開第２００３１０４２７０号（請求項１６）；米国特許出願公開第２００４００５５９８号（請求項２２）；国際公開第２００３０４２６６１号（請求項１２）；米国特許出願公開第２００３０６０６１２号（請求項１２；図１０）；国際公開第２００２２６８２２号（請求項２３；図２）；国際公開第２００２１６４２９号（請求項１２；図１０）；
相互参照：ＧＩ：２２６５５４８８；ＡＡＮ０４０８０．１；ＡＦ４５５１３８＿１。
【０１８０】
（１２）ＴｒｐＭ４（ＢＲ２２４５０、ＦＬＪ２００４１、ＴＲＰＭ４、ＴＲＰＭ４Ｂ、一過性レセプター潜在的陽イオンチャネル、サブファミリーＭ、メンバー４、Ｇｅｎｂａｎｋ登録番号ＮＭ＿０１７６３６）
Ｘｕ，Ｘ．Ｚ．ら、Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．Ｕ．Ｓ．Ａ．９８（１９）：１０６９２−１０６９７（２００１），Ｃｅｌｌ  １０９（３）：３９７−４０７（２００２），Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．２７８（３３）：３０８１３−３０８２０（２００３）；米国特許出願公開第２００３１４３５５７号（請求項４）；国際公開第２０００４０６１４号（請求項１４；１００−１０３ページ）；国際公開第２００２１０３８２号（請求項１；図９Ａ）；国際公開第２００３０４２６６１号（請求項１２）；国際公開第２００２３０２６８号（請求項２７；３９１ページ）；米国特許出願公開第２００３２１９８０６号（請求項４）；国際公開第２００１６２７９４号（請求項１４；図１Ａ−Ｄ）；
相互参照：ＭＩＭ：６０６９３６；ＮＰ＿０６０１０６．２；ＮＭ＿０１７６３６＿１。
【０１８１】
（１３）ＣＲＩＰＴＯ（ＣＲ、ＣＲ１、ＣＲＧＦ、ＣＲＩＰＴＯ、ＴＤＧＦ１、奇形癌由来増殖因子、Ｇｅｎｂａｎｋ登録番号ＮＰ＿００３２０３またはＮＭ＿００３２１２）
Ｃｉｃｃｏｄｉｃｏｌａ，Ａ．ら、ＥＭＢＯ  Ｊ．８（７）：１９８７−１９９１（１９８９）、Ａｍ．Ｊ．Ｈｕｍ．Ｇｅｎｅｔ．４９（３）：５５５−５６５（１９９１）；米国特許出願公開第２００３２２４４１１号（請求項１）；国際公開第２００３０８３０４１号（実施例１）；国際公開第２００３０３４９８４号（請求項１２）；国際公開第２００２８８１７０号（請求項２；５２−５３ページ）；国際公開第２００３０２４３９２号（請求項２；図５８）；国際公開第２００２１６４１３号（請求項１；９４−９５、１０５ページ）；国際公開第２００２２２８０８号（請求項２；図１）；米国特許第５８５４３９９号（実施例２；１７−１８段）；米国特許第５７９２６１６号（図２）；
相互参照：ＭＩＭ：１８７３９５；ＮＰ＿００３２０３．１；ＮＭ＿００３２１２＿１。
【０１８２】
（１４）ＣＤ２１（ＣＲ２（補体レセプター２）またはＣ３ＤＲ（Ｃ３ｄ／エプスタイン−バーウイルスレセプター）またはＨｓ．７３７９２、Ｇｅｎｂａｎｋ登録番号Ｍ２６００４）
Ｆｕｊｉｓａｋｕら、（１９８９）Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．２６４（４）：２１１８−２１２５；Ｗｅｉｓ  Ｊ．Ｊ．ら、Ｊ．Ｅｘｐ．Ｍｅｄ．１６７，１０４７−１０６６，１９８８；Ｍｏｏｒｅ  Ｍ．ら、Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．Ｕ．Ｓ．Ａ．８４，９１９４−９１９８，１９８７；Ｂａｒｅｌ  Ｍ．ら、Ｍｏｌ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．３５，１０２５−１０３１，１９９８；Ｗｅｉｓ  Ｊ．Ｊ．ら、Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．Ｕ．Ｓ．Ａ．８３，５６３９−５６４３，１９８６；Ｓｉｎｈａ  Ｓ．Ｋ．ら、（１９９３）Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．１５０，５３１１−５３２０；国際公開第２００４０４５５２０号（実施例４）；米国特許出願公開第２００４００５５３８号（実施例１）；国際公開第２００３０６２４０１号（請求項９）；国際公開第２００４０４５５２０号（実施例４）；国際公開第９１０２５３６号（図９．１−９．９）；国際公開第２００４０２０５９５号（請求項１）；
登録番号：Ｐ２００２３；Ｑ１３８６６；Ｑ１４２１２；ＥＭＢＬ；Ｍ２６００４；ＡＡＡ３５７８６．１。
【０１８３】
（１５）ＣＤ７９ｂ（ＣＤ７９Ｂ、ＣＤ７９β、ＩＧｂ（免疫グロブリン関連β）、Ｂ２９、Ｇｅｎｂａｎｋ登録番号ＮＭ＿０００６２６または１１０３８６７４）
Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．Ｕ．Ｓ．Ａ．（２００３）１００（７）：４１２６−４１３１；Ｂｌｏｏｄ（２００２）１００（９）：３０６８−３０７６、Ｍｕｌｌｅｒら、（１９９２）Ｅｕｒ．Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．２２（６）：１６２１−１６２５；国際公開第２００４０１６２２５号（請求項２、図１４０）；国際公開第２００３０８７７６８号、米国特許出願公開第２００４１０１８７４号（請求項１、１０２ページ）；国際公開第２００３０６２４０１号（請求項９）；国際公開第２００２７８５２４号（実施例２）；米国特許出願公開第２００２１５０５７３号（請求項５、１５ページ）；米国特許第５６４４０３３号；国際公開第２００３０４８２０２号（請求項１、３０６および３０９ページ）；国際公開第９９／５５８６５８号、米国特許第６５３４４８２号（請求項１３、図１７Ａ／Ｂ）；国際公開第２０００５５３５１号（請求項１１、１１４５−１１４６ページ）；
相互参照：ＭＩＭ：１４７２４５；ＮＰ＿０００６１７．１；ＮＭ＿０００６２６＿１。
【０１８４】
（１６）ＦｃＲＨ２（ＩＦＧＰ４、ＩＲＴＡ４、ＳＰＡＰ１Ａ（ホスファターゼアンカータンパク質１ａを含むＳＨ２ドメイン）、ＳＰＡＰ１Ｂ、ＳＰＡＰ１Ｃ、Ｇｅｎｂａｎｋ登録番号ＮＭ＿０３０７６４）
Ｇｅｎｏｍｅ  Ｒｅｓ．１３（１０）：２２６５−２２７０（２００３），Ｉｍｍｕｎｏｇｅｎｅｔｉｃｓ  ５４（２）：８７−９５（２００２），Ｂｌｏｏｄ  ９９（８）：２６６２−２６６９（２００２），Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．Ｕ．Ｓ．Ａ．９８（１７）：９７７２−９７７７（２００１），Ｘｕ，Ｍ．Ｊ．ら、（２００１）Ｂｉｏｃｈｅｍ．Ｂｉｏｐｈｙｓ．Ｒｅｓ．Ｃｏｍｍｕｎ．２８０（３）：７６８−７７５；国際公開第２００４０１６２２５号（請求項２）；国際公開第２００３０７７８３６号；国際公開第２００１３８４９０号（請求項５；図１８Ｄ−１−１８Ｄ−２）；国際公開第２００３０９７８０３号（請求項１２）；国際公開第２００３０８９６２４号（請求項２５）；
相互参照：ＭＩＭ：６０６５０９；ＮＰ＿１１０３９１．２；ＮＭ＿０３０７６４＿１。
【０１８５】
（１７）ＨＥＲ２（ＥｒｂＢ２、Ｇｅｎｂａｎｋ登録番号Ｍ１１７３０）
Ｃｏｕｓｓｅｎｓ  Ｌ．ら、Ｓｃｉｅｎｃｅ（１９８５）２３０（４７３０）：１１３２−１１３９；Ｙａｍａｍｏｔｏ  Ｔ．ら、Ｎａｔｕｒｅ  ３１９，２３０−２３４，１９８６；Ｓｅｍｂａ  Ｋ．ら、Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．Ｕ．Ｓ．Ａ．８２，６４９７−６５０１，１９８５；Ｓｗｉｅｒｃｚ  Ｊ．Ｍ．ら、Ｊ．Ｃｅｌｌ．Ｂｉｏｌ．１６５，８６９−８８０，２００４；Ｋｕｈｎｓ  Ｊ．Ｊ．ら、Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．２７４，３６４２２−３６４２７，１９９９；Ｃｈｏ  Ｈ．−Ｓ．ら、Ｎａｔｕｒｅ  ４２１，７５６−７６０，２００３；Ｅｈｓａｎｉ  Ａ．ら、（１９９３）Ｇｅｎｏｍｉｃｓ  １５，４２６−４２９；国際公開第２００４０４８９３８号（実施例２）；国際公開第２００４０２７０４９号（図１Ｉ）；国際公開第２００４００９６２２号；国際公開第２００３０８１２１０号；国際公開第２００３０８９９０４号（請求項９）；国際公開第２００３０１６４７５号（請求項１）；米国特許第２００３１１８５９２号；国際公開第２００３００８５３７号（請求項１）；国際公開第２００３０５５４３９号（請求項２９；図１Ａ−Ｂ）；国際公開第２００３０２５２２８号（請求項３７；図５Ｃ）；国際公開第２００２２２６３６号（実施例１３；９５−１０７ページ）；国際公開第２００２１２３４１号（請求項６８；図７）；国際公開第２００２１３８４７号（７１−７４ページ）；国際公開第２００２１４５０３号（１１４−１１７ページ）；国際公開第２００１５３４６３号（請求項２；４１−４６ページ）；国際公開第２００１４１７８７号（１５ページ）；国際公開第２０００４４８９９号（請求項５２；図７）；国際公開第２０００２０５７９号（請求項３；図２）；米国特許第５８６９４４５号（請求項３；３１−３８段）；国際公開第９６３０５１４号（請求項２；５６−６１ページ）；欧州特許第１４３９３９３号（請求項７）；国際公開第２００４０４３３６１号（請求項７）；国際公開第２００４０２２７０９号；国際公開第２００１００２４４号（実施例３；図４）；
登録番号：Ｐ０４６２６；ＥＭＢＬ；Ｍ１１７６７；ＡＡＡ３５８０８．１．ＥＭＢＬ；Ｍ１１７６１；ＡＡＡ３５８０８．１。
【０１８６】
（１８）ＮＣＡ（ＣＥＡＣＡＭ６、Ｇｅｎｂａｎｋ登録番号Ｍ１８７２８）；
Ｂａｒｎｅｔｔ  Ｔ．ら、Ｇｅｎｏｍｉｃｓ  ３，５９−６６，１９８８；Ｔａｗａｒａｇｉ  Ｙ．ら、Ｂｉｏｃｈｅｍ．Ｂｉｏｐｈｙｓ．Ｒｅｓ．Ｃｏｍｍｕｎ．１５０，８９−９６，１９８８；Ｓｔｒａｕｓｂｅｒｇ  Ｒ．Ｌ．，ら、Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．Ｕ．Ｓ．Ａ．９９：１６８９９−１６９０３，２００２；国際公開第２００４０６３７０９号；欧州特許第１４３９３９３号（請求項７）；国際公開第２００４０４４１７８号（実施例４）；国際公開第２００４０３１２３８号；国際公開第２００３０４２６６１号（請求項１２）；国際公開第２００２７８５２４号（実施例２）；国際公開第２００２８６４４３号（請求項２７；４２７ページ）；国際公開第２００２６０３１７号（請求項２）；
登録番号：Ｐ４０１９９；Ｑ１４９２０；ＥＭＢＬ；Ｍ２９５４１；ＡＡＡ５９９１５．１．ＥＭＢＬ；Ｍ１８７２８。
【０１８７】
（１９）ＭＤＰ（ＤＰＥＰ１、Ｇｅｎｂａｎｋ登録番号ＢＣ０１７０２３）
Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．Ｕ．Ｓ．Ａ．９９（２６）：１６８９９−１６９０３（２００２）；国際公開第２００３０１６４７５号（請求項１）；国際公開第２００２６４７９８号（請求項３３；８５−８７ページ）；日本特許第０５００３７９０号（図６−８）；国際公開第９９４６２８４号（図９）；
相互参照：ＭＩＭ：１７９７８０；ＡＡＨ１７０２３．１；ＢＣ０１７０２３＿１。
【０１８８】
（２０）ＩＬ２０Ｒα（ＩＬ２０Ｒａ、ＺＣＹＴＯＲ７、Ｇｅｎｂａｎｋ登録番号ＡＦ１８４９７１）；
Ｃｌａｒｋ  Ｈ．Ｆ．ら、Ｇｅｎｏｍｅ  Ｒｅｓ．１３，２２６５−２２７０，２００３；Ｍｕｎｇａｌｌ  Ａ．Ｊ．ら、Ｎａｔｕｒｅ  ４２５，８０５−８１１，２００３；Ｂｌｕｍｂｅｒｇ  Ｈ．ら、Ｃｅｌｌ  １０４，９−１９，２００１；Ｄｕｍｏｕｔｉｅｒ  Ｌ．ら、Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．１６７，３５４５−３５４９，２００１；Ｐａｒｒｉｓｈ−Ｎｏｖａｋ  Ｊ．ら、Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．２７７，４７５１７−４７５２３，２００２；Ｐｌｅｔｎｅｖ  Ｓ．ら、（２００３）Ｂｉｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ  ４２：１２６１７−１２６２４；Ｓｈｅｉｋｈ  Ｆ．ら、（２００４）Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．１７２，２００６−２０１０；欧州特許第１３９４２７４号（実施例１１）；米国特許出願公開第２００４００５３２０号（実施例５）；国際公開第２００３０２９２６２号（７４−７５ページ）；国際公開第２００３００２７１７号（請求項２；６３ページ）；国際公開第２００２２２１５３号（４５−４７ページ）；米国特許出願公開第２００２０４２３６６号（２０−２１ページ）；国際公開第２００１４６２６１号（５７−５９ページ）；国際公開第２００１４６２３２号（６３−６５ページ）；国際公開第９８３７１９３号（請求項１；５５−５９ページ）；
登録番号：Ｑ９ＵＨＦ４；Ｑ６ＵＷＡ９；Ｑ９６ＳＨ８；ＥＭＢＬ；ＡＦ１８４９７１；ＡＡＦ０１３２０．１。
【０１８９】
（２１）Ｂｒｅｖｉｃａｎ（ＢＣＡＮ、ＢＥＨＡＢ、Ｇｅｎｂａｎｋ登録番号ＡＦ２２９０５３）
Ｇａｒｙ  Ｓ．Ｃ．ら、Ｇｅｎｅ  ２５６，１３９−１４７，２０００；Ｃｌａｒｋ  Ｈ．Ｆ．ら、Ｇｅｎｏｍｅ  Ｒｅｓ．１３，２２６５−２２７０，２００３；Ｓｔｒａｕｓｂｅｒｇ  Ｒ．Ｌ．ら、Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．Ｕ．Ｓ．Ａ．９９，１６８９９−１６９０３，２００２；米国特許出願公開第２００３１８６３７２号（請求項１１）；米国特許出願公開第２００３１８６３７３号（請求項１１）；米国特許出願公開第２００３１１９１３１号（請求項１；図５２）；米国特許出願公開第２００３１１９１２２号（請求項１；図５２）；米国特許出願公開第２００３１１９１２６号（請求項１）；米国特許出願公開第２００３１１９１２１号（請求項１；図５２）；米国特許出願公開第２００３１１９１２９号（請求項１）；米国特許出願公開第２００３１１９１３０号（請求項１）；米国特許出願公開第２００３１１９１２８号（請求項１；図５２）；米国特許出願公開第２００３１１９１２５号（請求項１）；国際公開第２００３０１６４７５号（請求項１）；国際公開第２００２０２６３４号（請求項１）；
（２２）ＥｐｈＢ２Ｒ（ＤＲＴ、ＥＲＫ、Ｈｅｋ５、ＥＰＨＴ３、Ｔｙｒｏ５、Ｇｅｎｂａｎｋ登録番号ＮＭ＿００４４４２）
Ｃｈａｎ，Ｊ．およびＷａｔｔ，Ｖ．Ｍ．，（１９９１）Ｏｎｃｏｇｅｎｅ  ６（６），１０５７−１０６１；Ｏｎｃｏｇｅｎｅ（１９９５）１０（５）：８９７−９０５；Ａｎｎｕ．Ｒｅｖ．Ｎｅｕｒｏｓｃｉ．２１：３０９−３４５（１９９８），Ｉｎｔ．Ｒｅｖ．Ｃｙｔｏｌ．１９６：１７７−２４４（２０００）；国際公開第２００３０４２６６１号（請求項１２）；国際公開第２０００５３２１６号（請求項１；４１ページ）；国際公開第２００４０６５５７６号（請求項１）；国際公開第２００４０２０５８３号（請求項９）；国際公開第２００３００４５２９号（１２８−１３２ページ）；国際公開第２０００５３２１６号（請求項１；４２ページ）；
相互参照：ＭＩＭ：６００９９７；ＮＰ＿００４４３３．２；ＮＭ＿００４４４２＿１。
【０１９０】
（２３）ＡＳＬＧ６５９（Ｂ７ｈ、Ｇｅｎｂａｎｋ登録番号ＡＸ０９２３２８）
米国特許出願公開第２００４０１０１８９９号（請求項２）；国際公開第２００３１０４３９９号（請求項１１）；国際公開第２００４０００２２１号（図３）；米国特許出願公開第２００３１６５５０４号（請求項１）；米国特許出願公開第２００３１２４１４０号（実施例２）；米国特許出願公開第２００３０６５１４３号（図６０）；国際公開第２００２１０２２３５号（請求項１３；２９９ページ）；米国特許出願公開第２００３０９１５８０号（実施例２）；国際公開第２００２１０１８７号（請求項６；図１０）；国際公開第２００１９４６４１号（請求項１２；図７ｂ）；国際公開第２００２０２６２４号（請求項１３；図１Ａ−１Ｂ）；米国特許出願公開第２００２０３４７４９号（請求項５４；４５−４６ページ）；国際公開第２００２０６３１７号（実施例２；３２０−３２１ページ、請求項３４；３２１−３２２ページ）；国際公開第２００２７１９２８号（４６８−４６９ページ）；国際公開第２００２０２５８７号（実施例１；図１）；国際公開第２００１４０２６９号（実施例３；１９０−１９２ページ）；国際公開第２０００３６１０７号（実施例２；２０５−２０７ページ）；国際公開第２００４０５３０７９号（請求項１２）；国際公開第２００３００４９８９号（請求項１）；国際公開第２００２７１９２８号（２３３−２３４、４５２−４５３ページ）；国際公開第０１１６３１８号。
【０１９１】
（２４）ＰＳＣＡ（前立腺幹細胞抗原前駆体、Ｇｅｎｂａｎｋ登録番号ＡＪ２９７４３６）
Ｒｅｉｔｅｒ  Ｒ．Ｅ．ら、Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．Ｕ．Ｓ．Ａ．９５，１７３５−１７４０，１９９８；Ｇｕ  Ｚ．ら、Ｏｎｃｏｇｅｎｅ  １９，１２８８−１２９６，２０００；Ｂｉｏｃｈｅｍ．Ｂｉｏｐｈｙｓ．Ｒｅｓ．Ｃｏｍｍｕｎ．（２０００）２７５（３）：７８３−７８８；国際公開第２００４０２２７０９号；欧州特許第１３９４２７４号（実施例１１）；米国特許出願公開第２００４０１８５５３号（請求項１７）；国際公開第２００３００８５３７号（請求項１）；国際公開第２００２８１６４６号（請求項１；１６４ページ）；国際公開第２００３００３９０６号（請求項１０；２８８ページ）；国際公開第２００１４０３０９号（実施例１；図１７）；米国特許出願公開第２００１０５５７５１号（実施例１；図１ｂ）；国際公開第２０００３２７５２号（請求項１８；図１）；国際公開第９８５１８０５号（請求項１７；９７ページ）；国際公開第９８５１８２４号（請求項１０；９４ページ）；国際公開第９８４０４０３号（請求項２；図１Ｂ）；
登録番号：Ｏ４３６５３；ＥＭＢＬ；ＡＦ０４３４９８；ＡＡＣ３９６０７．１。
【０１９２】
（２５）ＧＥＤＡ（Ｇｅｎｂａｎｋ登録番号ＡＹ２６０７６３）；
ＡＡＰ１４９５４  脂肪腫ＨＭＧＩＣ融合パートナー様タンパク質／ｐｉｄ＝ＡＡＰ１４９５４．１−Ｈｏｍｏ  ｓａｐｉｅｎｓ
種：Ｈｏｍｏ  ｓａｐｉｅｎｓ（ヒト）
国際公開第２００３０５４１５２号（請求項２０）；国際公開第２００３０００８４２号（請求項１）；国際公開第２００３０２３０１３号（実施例３、請求項２０）；米国特許出願公開第２００３１９４７０４号（請求項４５）；
相互参照：ＧＩ：３０１０２４４９；ＡＡＰ１４９５４．１；ＡＹ２６０７６３＿１。
【０１９３】
（２６）ＢＡＦＦ−Ｒ（Ｂ細胞活性化因子レセプター、ＢＬｙＳレセプター３、ＢＲ３、Ｇｅｎｂａｎｋ登録番号ＮＰ＿４４３１７７．１）；
ＮＰ＿４４３１７７  ＢＡＦＦレセプター／ｐｉｄ＝ＮＰ＿４４３１７７．１−Ｈｏｍｏ  ｓａｐｉｅｎｓ
Ｔｈｏｍｐｓｏｎ，Ｊ．Ｓ．ら、Ｓｃｉｅｎｃｅ  ２９３（５５３７），２１０８−２１１１（２００１）；国際公開第２００４０５８３０９号；国際公開第２００４０１１６１１号；国際公開第２００３０４５４２２号（実施例；３２−３３ページ）；国際公開第２００３０１４２９４号（請求項３５；図６Ｂ）；国際公開第２００３０３５８４６号（請求項７０；６１５−６１６ページ）；国際公開第２００２９４８５２号（１３６−１３７段）；国際公開第２００２３８７６６号（請求項３；１３３ページ）；国際公開第２００２２４９０９号（実施例３；図３）；
相互参照：ＭＩＭ：６０６２６９；ＮＰ＿４４３１７７．１；ＮＭ＿０５２９４５＿１。
【０１９４】
（２７）ＣＤ２２（Ｂ細胞レセプターＣＤ２２−Ｂアイソフォーム、Ｇｅｎｂａｎｋ登録番号ＮＰ−００１７６２．１）；
Ｓｔａｍｅｎｋｏｖｉｃ，Ｉ．およびＳｅｅｄ，Ｂ．、Ｎａｔｕｒｅ  ３４５（６２７０），７４−７７（１９９０）；米国特許出願公開第２００３１５７１１３号；米国特許出願公開第２００３１１８５９２号；国際公開第２００３０６２４０１号（請求項９）；国際公開第２００３０７２０３６号（請求項１；図１）；国際公開第２００２７８５２４号（実施例２）；
相互参照：ＭＩＭ：１０７２６６；ＮＰ＿００１７６２．１；ＮＭ＿００１７７１＿１。
【０１９５】
（２８）ＣＤ７９ａ（ＣＤ７９Ａ、ＣＤ７９α、免疫グロブリン関連α、Ｉｇβ（ＣＤ７９Ｂ）と共有結合的に相互作用し、ＩｇＭ分子と共に表面上で複合体を形成して、Ｂ細胞分化に関与するシグナルを伝達する、Ｂ細胞特異的タンパク質）ＰＲＯＴＥＩＮ  ＳＥＱＵＥＮＣＥ  Ｆｕｌｌ  ｍｐｇｇｐｇｖ．．．ｄｖｑｌｅｋｐ（１．．２２６；２２６ａａ）、ｐＩ：４．８４、ＭＷ：２５０２８  ＴＭ：２［Ｐ］  遺伝子染色体：１９ｑ１３．２、Ｇｅｎｂａｎｋ登録番号ＮＰ＿００１７７４．１０）
国際公開第２００３０８８８０８号、米国特許出願公開第２００３０２２８３１９号；国際公開第２００３０６２４０１号（請求項９）；米国特許出願公開第２００２１５０５７３号（請求項４，１３−１４ページ）；国際公開第９９５８６５８号（請求項１３、図１６）；国際公開第９２０７５７４号（図１）；米国特許第５６４４０３３号；Ｈａら、（１９９２）Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．１４８（５）：１５２６−１５３１；Ｍｕｅｌｌｅｒら、（１９９２）Ｅｕｒ．Ｊ．Ｂｉｏｃｈｅｍ．２２：１６２１−１６２５；Ｈａｓｈｉｍｏｔｏら、（１９９４）Ｉｍｍｕｎｏｇｅｎｅｔｉｃｓ  ４０（４）：２８７−２９５；Ｐｒｅｕｄ’ｈｏｍｍｅら、（１９９２）Ｃｌｉｎ．Ｅｘｐ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．９０（１）：１４１−１４６；Ｙｕら、（１９９２）Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．１４８（２）：６３３−６３７；Ｓａｋａｇｕｃｈｉら、（１９８８）ＥＭＢＯ  Ｊ．７（１１）：３４５７−３４６４。
【０１９６】
（２９）ＣＸＣＲ５（バーキットリンパ腫レセプター１、ＣＸＣＬ１３ケモカインによって活性化され、リンパ球移動および体液性防御において機能し、ＨＩＶ−２感染およびおそらくＡＩＤＳ、リンパ腫、骨髄腫および白血病の発症に役割を果たすＧタンパク質共役レセプター）ＰＲＯＴＥＩＮ  ＳＥＱＵＥＮＣＥ  Ｆｕｌｌ  ｍｎｙｐｌｔｌ．．．ａｔｓｌｔｔｆ（１．．３７２；３７２ａａ）、ｐＩ：８．５４、ＭＷ：４１９５９  ＴＭ：７［Ｐ］  遺伝子染色体：１１ｑ２３．３、Ｇｅｎｂａｎｋ登録番号ＮＰ＿００１７０７．１）
国際公開第２００４０４００００号；国際公開第２００４０１５４２６号；米国特許出願公開第２００３１０５２９２号（実施例２）；米国特許第６５５５３３９号（実施例２）；国際公開第２００２６１０８７号（図１）；国際公開第２００１５７１８８号（請求項２０、２６９ページ）；国際公開第２００１７２８３０号（１２−１３ページ）；国際公開第２０００２２１２９号（実施例１、１５２−１５３ページ、実施例２、２５４−２５６ページ）；国際公開第９９２８４６８号（請求項１、３８ページ）；米国特許第５４４００２１号（実施例２、４９−５２段）；国際公開第９４２８９３１号（５６−５８ページ）；国際公開第９２１７４９７号（請求項７、図５）；Ｄｏｂｎｅｒら、（１９９２）Ｅｕｒ．Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．２２：２７９５−２７９９；Ｂａｒｅｌｌａら、（１９９５）Ｂｉｏｃｈｅｍ．Ｊ．３０９：７７３−７７９。
【０１９７】
（３０）ＨＬＡ−ＤＯＢ（ペプチドに結合して、それらをＣＤ４＋Ｔリンパ球に提示するＭＨＣクラスＩＩ分子（Ｉａ抗原）のβサブユニット）ＰＲＯＴＥＩＮ  ＳＥＱＵＥＮＣＥ  Ｆｕｌｌ  ｍｇｓｇｗｖｐ．．．ｖｌｌｐｑｓｃ（１．．２７３；２７３ａａ）、ｐＩ：６．５６、ＭＷ：３０８２０  ＴＭ：１［Ｐ］  遺伝子染色体：６ｐ２１．３、Ｇｅｎｂａｎｋ登録番号ＮＰ＿００２１１１．１）
Ｔｏｎｎｅｌｌｅら、（１９８５）ＥＭＢＯ  Ｊ．４（１１）：２８３９−２８４７；Ｊｏｎｓｓｏｎら、（１９８９）Ｉｍｍｕｎｏｇｅｎｅｔｉｃｓ  ２９（６）：４１１−４１３；Ｂｅｃｋら、（１９９２）Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．２２８：４３３−４４１；Ｓｔｒａｕｓｂｅｒｇら、（２００２）Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ  ９９：１６８９９−１６９０３；Ｓｅｒｖｅｎｉｕｓら、（１９８７）Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．２６２：８７５９−８７６６；Ｂｅｃｋら、（１９９６）Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．２５５：１−１３；Ｎａｒｕｓｅら、（２００２）Ｔｉｓｓｕｅ  Ａｎｔｉｇｅｎｓ  ５９：５１２−５１９；国際公開第９９５８６５８号（請求項１３、図１５）；米国特許第６１５３４０８号（３５−３８段）；米国特許第５９７６５５１号（１６８−１７０段）；米国特許第６０１１１４６号（１４５−１４６段）；Ｋａｓａｈａｒａら、（１９８９）Ｉｍｍｕｎｏｇｅｎｅｔｉｃｓ  ３０（１）：６６−６８；Ｌａｒｈａｍｍａｒら、（１９８５）Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．２６０（２６）：１４１１１−１４１１９。
【０１９８】
（３１）Ｐ２Ｘ５（プリン作動性レセプターＰ２Ｘリガンド依存性イオンチャネル５、細胞外ＡＴＰによって開閉されるイオンチャネルは、シナプス伝達および神経発生に関与し得、欠損は特発性不安定膀胱の病態生理学に寄与し得る）ＰＲＯＴＥＩＮ  ＳＥＱＵＥＮＣＥ  Ｆｕｌｌ  ｍｇｑａｇｃｋ．．．ｌｅｐｈｒｓｔ（１．．４２２；４２２ａａ）、ｐＩ：７．６３、ＭＷ：４７２０６  ＴＭ：１［Ｐ］  遺伝子染色体：１７ｐ１３．３、Ｇｅｎｂａｎｋ登録番号ＮＰ＿００２５５２．２）
Ｌｅら、（１９９７）ＦＥＢＳ  Ｌｅｔｔ．４１８（１−２）；１９５−１９９；国際公開第２００４０４７７４９号；国際公開第２００３０７２０３５号（請求項１０）；Ｔｏｕｃｈｍａｎら、（２０００）Ｇｅｎｏｍｅ  Ｒｅｓ．１０：１６５−１７３；国際公開第２００２２２６６０号（請求項２０）；国際公開第２００３０９３４４４号（請求項１）；国際公開第２００３０８７７６８号（請求項１）；国際公開第２００３０２９２７７号（８２ページ）。
【０１９９】
（３２）ＣＤ７２（Ｂ細胞分化抗原ＣＤ７２、Ｌｙｂ−２）ＰＲＯＴＥＩＮ  ＳＥＱＵＥＮＣＥ  Ｆｕｌｌ  ｍａｅａｉｔｙ．．．ｔａｆｒｆｐｄ（１．．３５９；３５９ａａ）、ｐＩ：８．６６、ＭＷ：４０２２５  ＴＭ：１［Ｐ］  遺伝子染色体：９ｐ１３．３、Ｇｅｎｂａｎｋ登録番号ＮＰ＿００１７７３．１）
国際公開第２００４０４２３４６号（請求項６５）；国際公開第２００３０２６４９３号（５１−５２、５７−５８ページ）；国際公開第２０００７５６５５号（１０５−１０６ページ）；Ｖｏｎ  Ｈｏｅｇｅｎら、（１９９０）Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．１４４（１２）：４８７０−４８７７；Ｓｔｒａｕｓｂｅｒｇら、（２００２）Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ  ９９：１６８９９−１６９０３。
【０２００】
（３３）ＬＹ６４（ロイシンリッチリピート（ＬＲＲ）ファミリーのＩ型膜タンパク質であるリンパ球抗原６４（ＲＰ１０５）は、Ｂ細胞活性化とアポトーシスを調節し、機能の喪失は全身性エリテマトーデスを有する患者における疾患活性上昇に関連する）ＰＲＯＴＥＩＮ  ＳＥＱＵＥＮＣＥ  Ｆｕｌｌ  ｍａｆｄｖｓｃ．．．ｒｗｋｙｑｈｉ（１．．６６１；６６１ａａ）、ｐＩ：６．２０、ＭＷ：７４１４７  ＴＭ：１［Ｐ］  遺伝子染色体：５ｑ１２、Ｇｅｎｂａｎｋ登録番号ＮＰ＿００５５７３．１）
米国特許出願公開第２００２１９３５６７号；国際公開第９７０７１９８号（請求項１１、３９−４２ページ）；Ｍｉｕｒａら、（１９９６）Ｇｅｎｏｍｉｃｓ  ３８（３）：２９９−３０４；Ｍｉｕｒａら、（１９９８）Ｂｌｏｏｄ  ９２：２８１５−２８２２；国際公開第２００３０８３０４７号；国際公開第９７４４４５２号（請求項８、５７−６１ページ）；国際公開第２０００１２１３０号（２４−２６ページ）。
【０２０１】
（３４）ＦＣＲＨ１（Ｃ２型Ｉｇ様およびＩＴＡＭドメインを含む免疫グロブリンＦｃドメインについての推定上のレセプターであるＦｃレセプター様タンパク質１は、Ｂリンパ球分化において役割を有し得る）ＰＲＯＴＥＩＮ  ＳＥＱＵＥＮＣＥ  Ｆｕｌｌ  ｍｌｐｒｌｌｌ．．．ｖｄｙｅｄａｍ（１．．４２９；４２９ａａ）、ｐＩ：５．２８、ＭＷ：４６９２５  ＴＭ：１［Ｐ］  遺伝子染色体：１ｑ２１−１ｑ２２、Ｇｅｎｂａｎｋ登録番号ＮＰ＿４４３１７０．１）
国際公開第２００３０７７８３６号；国際公開第２００１３８４９０号（請求項６、図１８Ｅ−１−１８−Ｅ−２）；Ｄａｖｉｓら、（２００１）Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ  ９８（１７）：９７７２−９７７７；国際公開第２００３０８９６２４号（請求項８）；欧州特許第１３４７０４６号（請求項１）；国際公開第２００３０８９６２４号（請求項７）。
【０２０２】
（３５）ＩＲＴＡ２（おそらくＢ細胞発生およびリンパ腫発生において役割を有する推定上の免疫レセプターである、免疫グロブリンスーパーファミリーレセプタートランスロケーション関連２；トランスロケーションによる遺伝子の調節不全は一部のＢ細胞悪性疾患において起こる）ＰＲＯＴＥＩＮ  ＳＥＱＵＥＮＣＥ  Ｆｕｌｌ  ｍｌｌｗｖｉｌ．．．ａｓｓａｐｈｒ（１．．９７７；９７７ａａ）、ｐＩ：６．８８、ＭＷ：１０６４６８  ＴＭ：１［Ｐ］  遺伝子染色体：１ｑ２１、Ｇｅｎｂａｎｋ登録番号ＮＰ＿１１２５７１．１）
国際公開第２００３０２４３９２号（請求項２、図９７）；Ｎａｋａｙａｍａら、（２０００）Ｂｉｏｃｈｅｍ．Ｂｉｏｐｈｙｓ．Ｒｅｓ．Ｃｏｍｍｕｎ．２７７（１）：１２４−１２７；国際公開第２００３０７７８３６号；国際公開第２００１３８４９０号（請求項３、図１８Ｂ−１−１８Ｂ−２）；
腫瘍関連抗原を認識する、本発明における使用のための他の例示的モノクローナル抗体としては、以下の表ＩＩに列挙するものが挙げられる。
【０２０３】
【表２−１】
2007527421.tif 000050
【０２０４】
【表２−２】
2007527421.tif 000051
【０２０５】
【表２−３】
2007527421.tif 000052
腫瘍関連抗原およびそれに対する特異的抗体に関する他の開示については、国際公開第０４／０４５５１６号；国際公開第０３／０００１１３号；国際公開第０２／０１６４２９号；国際公開第０２／１６５８１号；国際公開第０３／０２４３９２号；国際公開第０４／０１６２２５号；国際公開第０１／４０３０９号；および２００３年１１月１７日出願の米国特許仮出願第６０／５２０８４２号「ＣＯＭＰＯＳＩＴＩＯＮＳ  ＡＮＤ  ＭＥＴＨＯＤＳ  ＦＯＲ  ＴＨＥ  ＴＲＥＡＴＭＥＮＴ  ＯＦ  ＴＵＭＯＲ  ＯＦ  ＨＥＭＡＴＯＰＯＩＥＴＩＣ  ＯＲＩＧＩＮ」（これらは全て、本明細書中にその全体が参考として援用される）も参照のこと。
【０２０６】
他の例示的抗体およびそれらの略語としては、Ｈｅｒｃｅｐｔｉｎ（登録商標）（トラスツズマブ）＝全長、ヒト化抗ＨＥＲ２（分子量１４５１６７）、Ｈｅｒｃｅｐｔｉｎ（登録商標）Ｆ（ａｂ’）２＝抗ＨＥＲ２から酵素的に誘導される（分子量１０００００）、４Ｄ５＝全長マウス抗ＨＥＲ２、ハイブリドーマ由来、ｒｈｕ４Ｄ５＝一過性に発現される全長ヒト化抗体、ｒｈｕＦａｂ４Ｄ５＝組換えヒト化Ｆａｂ（分子量４７７３８）、４Ｄ５Ｆｃ８＝変異したＦｃＲｎ結合ドメインを有する、全長マウス抗ＨＥＲ２が挙げられる。
【０２０７】
本発明の抗体−薬物結合体（ＡＤＣ）の抗体は、ＥｒｂＢ遺伝子によってコードされるレセプターに特異的に結合し得る。上記抗体は、ＥＧＦＲ、ＨＥＲ２、ＨＥＲ３およびＨＥＲ４から選択されるＥｒｂＢレセプターに特異的に結合し得る。ＡＤＣは、ＨＥＲ２レセプターの細胞外ドメインに特異的に結合して、ＨＥＲ２レセプターを過剰発現する腫瘍細胞の増殖を阻害し得る。ＨＥＲＣＥＰＴＩＮ（登録商標）（トラスツズマブ）は、ヒト上皮増殖因子レセプター２タンパク質、ＨＥＲ２（ＥｒｂＢ２）の細胞外ドメイン（ＥＣＤ）に選択的に結合する（米国特許第５８２１３３７号；米国特許第６０５４２９７号；米国特許第６４０７２１３号；米国特許第６６３９０５５号；Ｃｏｕｓｓｅｎｓら、（１９８５）Ｓｃｉｅｎｃｅ  ２３０：１１３２−９；Ｓｌａｍｏｎら、（１９８９）Ｓｃｉｅｎｃｅ  ２４４：７０７−１２）。トラスツズマブは、ＨＥＲ２に結合するマウス抗体（４Ｄ５）の相補性決定領域（ｃｄｒ）と共にヒトフレームワーク領域を含むＩｇＧ１κ抗体である。トラスツズマブはＨＥＲ２抗原に結合し、従ってＨＥＲ２を過剰発現するヒト腫瘍細胞の増殖を阻害する（Ｈｕｄｚｉａｋ  ＲＭら、（１９８９）Ｍｏｌ  Ｃｅｌｌ  Ｂｉｏｌ  ９：１１６５−７２；Ｌｅｗｉｓ  ＧＤら、（１９９３）Ｃａｎｃｅｒ  Ｉｍｍｕｎｏｌ  Ｉｍｍｕｎｏｔｈｅｒ；３７：２５５−６３；Ｂａｓｅｌｇａ  Ｊら、（１９９８）Ｃａｎｃｅｒ  Ｒｅｓ．５８：２８２５−２８３１）。
【０２０８】
ＡＤＣの抗体は、モノクローナル抗体、例えばマウスモノクローナル抗体、キメラ抗体またはヒト化抗体であり得る。ヒト化抗体は、ｈｕＭＡｂ４Ｄ５−１、ｈｕＭＡｂ４Ｄ５−２、ｈｕＭＡｂ４Ｄ５−３、ｈｕＭＡｂ４Ｄ５−４、ｈｕＭＡｂ４Ｄ５−５、ｈｕＭＡｂ４Ｄ５−６、ｈｕＭＡｂ４Ｄ５−７またはｈｕＭＡｂ４Ｄ５−８（トラスツズマブ）であり得る。上記抗体は、抗体フラグメント、例えばＦａｂフラグメントであり得る。
【０２０９】
癌の処置または予防のための公知の抗体をＡＤＣとして結合体化することができる。癌細胞抗原に免疫特異的な抗体は、市販のものを入手し得るかまたは、例えば組換え発現技術などの当業者に公知の任意の方法によって産生することができる。癌細胞抗原に免疫特異的な抗体をコードするヌクレオチド配列は、例えばＧｅｎＢａｎｋデータベースまたはそれに類似したデータベース、文献出版物から、または日常的なクローニングおよび配列決定によって入手され得る。癌の処置のために利用可能な抗体の例としては、転移性乳癌を有する患者の処置のためのヒト化抗ＨＥＲ２モノクローナル抗体；非ホジキンリンパ腫を有する患者の処置のためのキメラ抗ＣＤ２０モノクローナル抗体であるＲＩＴＵＸＡＮ（登録商標）（リツキシマブ；Ｇｅｎｅｎｔｅｃｈ）；卵巣癌の処置のためのマウス抗体であるＯｖａＲｅｘ（ＡｌｔａＲｅｘ  Ｃｏｒｐｏｒａｔｉｏｎ，ＭＡ）；結腸直腸癌の処置のためのマウスＩｇＧ２ａ抗体であるＰａｎｏｒｅｘ（Ｇｌａｘｏ  Ｗｅｌｌｃｏｍｅ，ＮＣ）；頭頸部癌などの上皮増殖因子陽性癌の処置のための抗ＥＧＦＲ  ＩｇＧキメラ抗体であるＣｅｔｕｘｉｍａｂ  Ｅｒｂｉｔｕｘ（Ｉｍｃｌｏｎｅ  Ｓｙｓｔｅｍｓ  Ｉｎｃ．，ＮＹ）；肉腫の処置のためのヒト化抗体であるＶｉｔａｘｉｎ（ＭｅｄＩｍｍｕｎｅ，Ｉｎｃ．，ＭＤ）；慢性リンパ性白血病（ＣＬＬ）の処置のためのヒト化ＩｇＧ１抗体であるＣａｍｐａｔｈ  Ｉ／Ｈ（Ｌｅｕｋｏｓｉｔｅ，ＭＡ）；急性骨髄性白血病（ＡＭＬ）の処置のためのヒト化抗ＣＤ３３  ＩｇＧ抗体であるＳｍａｒｔ  ＭＩ９５（Ｐｒｏｔｅｉｎ  Ｄｅｓｉｇｎ  Ｌａｂｓ，Ｉｎｃ．，ＣＡ）；非ホジキンリンパ腫の処置のためのヒト化抗ＣＤ２２  ＩｇＧ抗体であるＬｙｍｐｈｏＣｉｄｅ（Ｉｍｍｕｎｏｍｅｄｉｃｓ，Ｉｎｃ．，ＮＪ）；非ホジキンリンパ腫の処置のためのヒト化抗ＨＬＡ−ＤＲ抗体であるＳｍａｒｔ  ＩＤ１０（Ｐｒｏｔｅｉｎ  Ｄｅｓｉｇｎ  Ｌａｂｓ，Ｉｎｃ．，ＣＡ）；非ホジキンリンパ腫の処置のための放射標識マウス抗ＨＬＡ−Ｄｒ１０抗体であるＯｎｃｏｌｙｍ（Ｔｅｃｈｎｉｃｌｏｎｅ，Ｉｎｃ．，ＣＡ）；ホジキン病または非ホジキンリンパ腫の処置のためのヒト化抗ＣＤ２  ＭＡｂであるＡｌｌｏｍｕｎｅ（ＢｉｏＴｒａｎｓｐｌａｎｔ，ＣＡ）；肺および結腸直腸癌の処置のための抗ＶＥＧＦヒト化抗体であるＡｖａｓｔｉｎ（Ｇｅｎｅｔｅｃｈ，Ｉｎｃ．，ＣＡ）；非ホジキンリンパ腫の処置のための抗ＣＤ２２抗体であるＥｐｒａｔｕｚａｍａｂ（Ｉｍｍｕｎｏｍｅｄｉｃｓ，Ｉｎｃ．，ＮＪおよびＡｍｇｅｎ，ＣＡ）；および結腸直腸癌の処置のためのヒト化抗ＣＥＡ抗体であるＣＥＡｃｉｄｅ（Ｉｍｍｕｎｏｍｅｄｉｃｓ，Ｉｎｃ．，ＮＪ）が挙げられるが、これらに限定されない。
【０２１０】
ハイブリッドまたは二価抗体は、上述したように、生物学的に、細胞融合技術によって、または化学的に、特に架橋剤またはジスルフィド架橋形成試薬によって誘導することができ、全抗体および／またはそのフラグメントで構成され得る（欧州特許第０１０５３６０号）。そのようなハイブリッド抗体を得るための方法は、例えば、国際公開第８３／０３６７９号および欧州特許第０２１７５７７号（どちらも本明細書中に参考として援用される）に開示されている。二価抗体は、「ポリドーマ」または「クァドローマ」から生物学的に調製されるもの、あるいはビス−（マレイミド）−メチルエーテル（「ＢＭＭＥ」）などの架橋剤でまたは当業者が精通する他の架橋剤で合成によって調製されるものを含む。
【０２１１】
免疫グロブリン抗体は腫瘍関連抗原を認識することができる。使用される場合、「免疫グロブリン」は、ＩｇＧ、ＩｇＡ、ＩｇＭ、ＩｇＤまたはＩｇＥなどの認識されているいかなるクラスまたはサブクラスの免疫グロブリンも意味し得る。免疫グロブリンは、ヒト、マウスまたはウサギ起源などのいかなる種にも由来し得る。さらに、免疫グロブリンは、ポリクローナル、モノクローナルまたはフラグメントであり得る。そのような免疫グロブリンフラグメントは、例えばＦａｂ’フラグメント、Ｆ（ａｂ’）２フラグメント、ＦｖフラグメントまたはＦａｂフラグメント、または他の抗原認識免疫グロブリンフラグメントを含み得る。そのような免疫グロブリンフラグメントは、例えばタンパク質分解酵素消化によって、例えばペプシンまたはパパイン消化、還元的アルキル化または組換え技術によって調製することができる。そのような免疫グロブリンフラグメントを調製するための材料および方法は当業者に周知である（Ｐａｒｈａｍ，（１９８３）Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｙ，１３１：２８９５；Ｌａｍｏｙｉら、（１９８３）Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｉｃａｌ  Ｍｅｔｈｏｄｓ，５６：２３５；Ｐａｒｈａｍ，（１９８２）Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｉｃａｌ  Ｍｅｔｈｏｄｓ，５３：１３３；およびＭａｔｔｈｅｗら、（１９８２）Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｉｃａｌ  Ｍｅｔｈｏｄｓ，５０：２３９）。
【０２１２】
さらに、免疫グロブリンは一本鎖抗体（「ＳＣＡ」）であり得る。これらは、可変軽（「ＶＬ」）ドメインおよび可変重（「ＶＨ」）ドメインがペプチド架橋またはジスルフィド結合によって結合されている一本鎖Ｆｖフラグメント（「ｓｃＦｖ」）から構成され得る。また、免疫グロブリンは、抗原結合活性を有する単一ＶＨドメインで構成され得る（ｄＡｂ）。例えばＧ．ＷｉｎｔｅｒおよびＣ．Ｍｉｌｓｔｅｉｎ，Ｎａｔｕｒｅ，３４９，２９５（１９９１）；Ｒ．Ｇｌｏｃｋｓｈｕｂｅｒら、Ｂｉｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ  ２９，１３６２（１９９０）；およびＥ．Ｓ．Ｗａｒｄら、Ｎａｔｕｒｅ  ３４１，５４４（１９８９）を参照のこと。
【０２１３】
免疫グロブリンは、キメラ抗体、例えばヒト化抗体であり得る。また、免疫グロブリンは、「二価」または「ハイブリッド」抗体、すなわち腫瘍関連抗原などの１つの抗原部位に特異性を有する１本の腕を有し、他方の腕は異なる標的、例えば抗原担持腫瘍細胞に致死的な物質に結合しているまたは結合されているハプテンを認識する抗体であり得る。あるいは、二価抗体は、各々の腕が、治療的または生物学的に修飾される細胞の腫瘍関連抗原の異なるエピトープに特異性を有するものであり得る。いかなる場合も、ハイブリッド抗体は、選択したハプテンに特異的な１つ以上の結合部位または標的抗原、例えば腫瘍、感染性生物または他の疾患状態に関連する抗原に特異的な１つ以上の結合部位を有する、二重特異性を有し得る。
【０２１４】
当業者は、キメラ抗体またはヒト化抗体のより低い免疫原性、ならびに上記の二価抗体の可撓性、特に治療処置のための可撓性という恩恵を有する、二価−キメラ抗体が調製できることを認識する。そのような二価−キメラ抗体は、例えば架橋剤を用いる化学合成によっておよび／または上述したタイプの組換え法によって合成することができる。いかなる場合も、本発明は、二価、キメラ、二価−キメラ、ヒト化または抗原認識フラグメントまたはその誘導体のいずれかの抗体産生の任意の特定方法によって範囲を限定されると解釈されるべきではない。
【０２１５】
さらに、本発明は、免疫グロブリン（上記で定義したような）または活性タンパク質（例えば１９８６年３月１３日公開の、Ｎｅｕｂｅｒｇｅｒら、ＰＣＴ出願、国際公開第８６／０１５３３号の中で開示される種類の酵素）に融合した免疫グロブリンフラグメントをその範囲内に包含する（このような生成物の開示は、本明細書中に参考として援用される）。
【０２１６】
上述したように、「二価」、「融合」、「キメラ」（ヒト化を含む）および「二価−キメラ」（ヒト化を含む）の抗体構築物はまた、抗原認識フラグメントを含む構築物をそれら個々の範囲内に包含する。そのようなフラグメントは、インタクトな二価抗体、キメラ抗体、ヒト化抗体またはキメラ−二価抗体の伝統的酵素切断によって調製され得る。しかし、関与する構築物の性質のために、インタクトな抗体がそのような切断を受けない場合、上記構築物は免疫グロブリンフラグメントを出発物質として使用して調製され得るか、または組換え技術を使用する場合は、ＤＮＡ配列自体を、発現されたとき、化学的または生物学的手段によって、最終的な所望のインタクトな免疫グロブリン「フラグメント」を調製するようにインビボまたはインビトロで結合され得る、所望の「フラグメント」をコードするように調整することができる。従って、「フラグメント」という用語が使用されるのはこれに関してである。
【０２１７】
さらに、上述したように、本発明において使用される免疫グロブリン（抗体）またはそのフラグメントは、本質的にポリクローナルまたはモノクローナルであり得る。そのようなポリクローナルまたはモノクローナル抗体の調製は、当然のことながら、本発明において使用できる有用な免疫グロブリンを十分に作製することができる当業者には周知である。例えばＧ．ＫｏｈｌｅｒおよびＣ．Ｍｉｌｓｔｅｉｎ，Ｎａｔｕｒｅ  ２５６，４９５（１９７５）を参照のこと。さらに、そのようなハイブリドーマによって産生され、本発明の実施において有用なハイブリドーマおよび／またはモノクローナル抗体は、アメリカンタイプカルチャーコレクション（Ａｍｅｒｉｃａｎ  Ｔｙｐｅ  Ｃｕｌｔｕｒｅ  Ｃｏｌｌｅｃｔｉｏｎ）（「ＡＴＣＣ」）１２３０１  Ｐａｒｋｌａｗｎ  Ｄｒｉｖｅ，Ｒｏｃｋｖｉｌｌｅ，Ｍｄ．２０８５２などの供給源から公的に入手し得るか、または例えばＢｏｅｈｒｉｎｇｅｒ−Ｍａｎｎｈｅｉｍ  Ｂｉｏｃｈｅｍｉｃａｌｓ，Ｐ．Ｏ．Ｂｏｘ  ５０８１６，Ｉｎｄｉａｎａｐｏｌｉｓ，Ｉｎｄ．４６２５０から市販されている。
【０２１８】
例示的実施形態では、リガンド含有結合体は、１９９１年１月１０日公開のＰＣＴ出願公開ＷＯ９１／００２９５号およびそれに等価の、１９９０年６月２６日出願の米国特許出願第０７／５４４，２４６号に開示されている、キメラ抗体ＢＲ９６、「ＣｈｉＢＲ９６」に由来する。ＣｈｉＢＲ９６は、内在化するマウス／ヒトキメラ抗体であり、上述したように、乳癌、肺癌、結腸癌および卵巣癌に由来するもののようなヒト癌細胞によって発現されるフコシル化ルイスＹ抗原と反応性である。キメラＢＲ９６を発現し、ＣｈｉＢＲ９６と同定されたハイブリドーマは、ブダペスト条約の約定の下に、１９９０年５月２３日にアメリカンタイプカルチャーコレクション（「ＡＴＣＣ」）、１２３０１  Ｐａｒｋｌａｗｎ  Ｄｒｉｖｅ，Ｒｏｃｋｖｉｌｌｅ，Ｍｄ．２０８５２に寄託された。このハイブリドーマの試料は登録番号ＡＴＣＣ  ＨＢ  １０４６０の下で入手可能である。ＣｈｉＢＲ９６は、一部には、その供給源親であるＢＲ９６に由来する。ＢＲ９６を発現するハイブリドーマは、ブダペスト条約の約定の下に、１９８９年２月２１日にＡＴＣＣに寄託され、登録番号ＨＢ  １００３６の下で入手可能である。ブダペスト条約の規定の下にアメリカンタイプカルチャーコレクション、１２３０１  Ｐａｒｋｌａｗｎ  Ｄｒｉｖｅ，Ｒｏｃｋｖｉｌｌｅ，Ｍｄ．２０８５２に寄託され、受諾された他のハイブリドーマとしては、Ｌ６抗体を産生する、１９８４年１２月６日に寄託されたＨＢ８６７７、ＢＲ６４抗体を産生する、１９８８年１１月１６日に寄託されたＨＢ９８９５、および１９８６年１１月１４日に寄託されたＨＢ９２４０、およびキメラＬ６抗体を産生する、１９８６年１０月２４日に寄託されたＨＢ９２４１が挙げられる。上記ハイブリドーマ全てに関して、寄託物への公的アクセスに対する全ての制約は、本出願に対する特許の発行時に取り消し不能に取り除かれ、生育可能試料が保管所によって分配できない場合、寄託物は取り替えられ、寄託の日から３０年間または試料の最終請求後５年間または特許の有効期間中のいずれか長い方の期間、公的保管所に維持される。所望のハイブリドーマを培養し、生じた抗体を、現在当該分野で周知の標準技術を用いて細胞培養上清から単離する。例えば「Ｍｏｎｏｃｌｏｎａｌ  Ｈｙｂｒｉｄｏｍａ  Ａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ：Ｔｅｃｈｎｉｑｕｅｓ  ａｎｄ  Ａｐｐｌｉｃａｔｉｏｎｓ」，Ｈｕｒｅｌｌ（編）（ＣＲＣ  Ｐｒｅｓｓ，１９８２）を参照のこと。
【０２１９】
従って、使用されるとき「免疫グロブリン」または「抗体」は、上述した免疫グロブリン／抗体形態または構築物の全ての意味を包含する。
【０２２０】
（結合体の調製）
本発明の薬物−リガンド結合体は、市販の試薬から確立された有機化学技術を用いて、複素環式自壊的部分を組み込んだペプチド配列で作られるリンカーを介して薬物部分ＤをリガンドＬに結合することによって構築され得る。式Ｉａ、ＩＩａおよびＩＩＩａの複素環式リンカー化合物は、式Ｉの薬物−リガンド結合体化合物を調製するために有用である。式Ｉａ、ＩＩａおよびＩＩＩａの末端は、公知の合成手順を用いた一連の反応を通して薬物部分およびリガンドへの共有結合のために適切な保護基および反応性官能基（ＸおよびＹ）を有する。
【０２２１】
複素環式リンカー化合物は、式Ｉａ、ＩＩａおよびＩＩＩａ：
【０２２２】
【化５２】
2007527421.tif 000053
を有し、
ここで、
Ｕは、Ｏ、ＳまたはＮＲ６であり；
Ｑは、ＣＲ４またはＮであり；
Ｖ１、Ｖ２およびＶ３は、独立にＣＲ４またはＮであり、但し、式ＩＩａおよびＩＩＩａに関してＱ、Ｖ１およびＶ２の少なくとも１個はＮであり
Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３およびＲ４は、Ｈ、Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ、ＯＨ、−Ｎ（Ｒ５）２、―Ｎ（Ｒ５）３＋、Ｃ１−Ｃ８ハロゲン化アルキル、カルボキシレート、サルフェート、スルファメート、スルホネート、−ＳＯ２Ｒ５、−Ｓ（＝Ｏ）Ｒ５、−ＳＲ５、−ＳＯ２Ｎ（Ｒ５）２、−Ｃ（＝Ｏ）Ｒ５、−ＣＯ２Ｒ５、−Ｃ（＝Ｏ）Ｎ（Ｒ５）２、−ＣＮ、−Ｎ３、−ＮＯ２、Ｃ１−Ｃ８アルコキシ、Ｃ１−Ｃ８ハロ置換アルキル、ポリエチレンオキシ、ホスホネート、ホスフェート、Ｃ１−Ｃ８アルキル、Ｃ１−Ｃ８置換アルキル、Ｃ２−Ｃ８アルケニル、Ｃ２−Ｃ８置換アルケニル、Ｃ２−Ｃ８アルキニル、Ｃ２−Ｃ８置換アルキニル、Ｃ６−Ｃ２０アリール、Ｃ６−Ｃ２０置換アリール、Ｃ１−Ｃ２０複素環およびＣ１−Ｃ２０置換複素環から独立して選択されるか、または一緒になって、Ｒ２およびＲ３は、カルボニル（＝Ｏ）または３−７個の炭素原子のスピロ炭素環を形成し；そして
Ｒ５およびＲ６は、Ｈ、Ｃ１−Ｃ８アルキル、Ｃ１−Ｃ８置換アルキル、Ｃ２−Ｃ８アルケニル、Ｃ２−Ｃ８置換アルケニル、Ｃ２−Ｃ８アルキニル、Ｃ２−Ｃ８置換アルキニル、Ｃ６−Ｃ２０アリール、Ｃ６−Ｃ２０置換アリール、Ｃ１−Ｃ２０複素環およびＣ１−Ｃ２０置換複素環から独立して選択され；
ここで、Ｃ１−Ｃ８置換アルキル、Ｃ２−Ｃ８置換アルケニル、Ｃ２−Ｃ８置換アルキニル、Ｃ６−Ｃ２０置換アリールおよびＣ２−Ｃ２０置換複素環は、Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ、ＯＨ、−Ｎ（Ｒ５）２、−Ｎ（Ｒ５）３＋、Ｃ１−Ｃ８ハロゲン化アルキル、カルボキシレート、サルフェート、スルファメート、スルホネート、Ｃ１−Ｃ８アルキルスルホネート、Ｃ１−Ｃ８アルキルアミノ、４−ジアルキルアミノピリジニウム、Ｃ１−Ｃ８アルキルヒドロキシル、Ｃ１−Ｃ８アルキルチオール、−ＳＯ２Ｒ５、−Ｓ（＝Ｏ）Ｒ５、−ＳＲ５、−ＳＯ２Ｎ（Ｒ５）２、−Ｃ（＝Ｏ）Ｒ５、−ＣＯ２Ｒ５、−Ｃ（＝Ｏ）Ｎ（Ｒ５）２、−ＣＮ、−Ｎ３、−ＮＯ２、Ｃ１−Ｃ８アルコキシ、Ｃ１−Ｃ８トリフルオロアルキル、Ｃ１−Ｃ８アルキル、Ｃ３−Ｃ１２炭素環、Ｃ６−Ｃ２０アリール、Ｃ２−Ｃ２０複素環、ポリエチレンオキシ、ホスホネートおよびホスフェートから選択される１つ以上の置換基で独立して置換され；
Ｒ７は、アミノ酸の側鎖であり、必要に応じて保護基で保護されており；
ＸおよびＹは独立して、Ｈであるか；Ｆｍｏｃ、Ｂｏｃ、カルボベンズオキシ（ＣＢｚ）、ベンジヒドリル、アリルオキシカルボニルおよびトリフェニルメチルから選択される保護基を形成するか；またはＮ−ヒドロキシスクシンイミド、パラ−ニトロフェニルカルボネート、パラ−ニトロフェニルカルバメート、ペンタフルオロフェニル、ハロアセトアミドおよびマレイミドから選択される反応性官能基を形成し；そして
ｍは１、２、３、４、５または６である。
【０２２３】
一般的方法では、結合体は、標準ペプチド合成を用いて調製される酵素的に切断可能なペプチド配列Ｚｍ（例えばＰｈｅ−Ｌｙｓ、Ｖａｌ−Ｃｉｔなど）から出発して調製され得る。切断可能ペプチド配列を、そのＮ末端アミンを介してスペーサー単位Ａ（例えばマレイミドカプロイル−Ｎ−ヒドロキシスクシンイミド（ＭＣ−ＮＨＳ））に結合し、Ａ−Ｚｍで表わされる中間体を形成する。切断可能ペプチド配列のＣ末端カルボキシル基を、次いで、自壊的部分Ｘのアルコール中間体（式Ｉｂ、ＩＩｂまたはＩＩＩｂ）：
【０２２４】
【化５３】
2007527421.tif 000054
のアミンと反応させて、アミド結合中間体Ａ−Ｚｍ−Ｘを作製する。次に、この中間体を、薬物部分Ｄから突き出たアミン、ヒドロキシルまたはスルフヒドリルと反応性のアルコール中間体を作製するためにｐ−ニトロフェニルクロロホルメート（ＰＮＰＣＦ）などの適切な試薬と反応させて、中間体Ａ−Ｚｍ−Ｘを得る。この中間体を、次いで、スペーサー単位Ａをスルフヒドリルなどの適切な官能基と結合することによってリガンドＬ（例えば抗体またはレセプター結合タンパク質またはペプチド）に連結し、最終結合体Ｌ−Ａ−Ｚｍ−Ｘ−Ｄを得る。以下は、Ｌ、Ａ、Ｚ、Ｘ、ｍ、Ｄ、Ｑ、ＵおよびＲが本明細書中で記載する意味を有し、かっこ内の官能基が親基の一部（例えばＡ−ＣＯＯＨ）を表わす、本発明の結合体を合成するための代表的な一般的スキームである。
【０２２５】
【化５４】
2007527421.tif 000055
あるいは、薬物部分Ｄ上の官能性アミン基を、最初にジホスゲンＣｌ３ＣＯＣ（Ｏ）−Ｃｌおよび／またはＣＤＩ（Ｎ，Ｎ−カルボニルジイミダゾール）と反応させ、その後アルコール中間体Ｉｂ（またはＩＩｂまたはＩＩＩｂ）と反応させて、複素環式自壊的単位Ｘと薬物部分Ｄの間にカルバメート結合を形成する。
【０２２６】
代替的な一般合成方法では、カルボン酸エステル中間体Ｉｃ（またはＩＩｃまたはＩＩＩｃ）：
【０２２７】
【化５５】
2007527421.tif 000056
（ここで、Ｒは、メチル、エチル、イソプロピルなどのアルキルである）を、最初に切断可能ペプチド配列Ｚｍに結合し、それを対応するアルコールに変換して、次に薬物部分上の官能基との結合のためにパラ−ニトロフェニルクロロホルメート（ＰＮＰＣｌ）と反応させる。生じた中間体Ｚｍ−Ｘ−Ｄを、アミド結合によって適切なスペーサー単位Ａに連結して、中間体Ａ−Ｚｍ−Ｘ−Ｄを形成し、それをリガンド部分Ｌに結合して、最終結合体化合物を得る（一般的スキームＩＩ）。
【０２２８】
【化５６】
2007527421.tif 000057
代替的な実施形態は、薬物部分Ｄ上の官能性アミン基を用いて、最初にジホスゲンＣｌ３ＣＯＣ（Ｏ）Ｃｌおよび／またはＣＤＩと反応させ、その後アルコール中間体Ｉｂ、ＩＩｂまたはＩＩＩｂと反応させて、自壊的単位Ｘと薬物部分Ｄとの間にカルバメート結合を形成する。一般的スキームＩおよびＩＩに示す中間体Ｉｂ、ＩＩｂ、ＩＩＩｂ、Ｉｃ、ＩＩｃおよびＩＩＩｃは、市販のものを入手し得るかまたは市販されている試薬から確立された合成技術を用いて調製され得る。
【０２２９】
これらの一般的な例を記載するとき、式、例えば式Ｉａと命名される場合、「またはＩＩａまたはＩＩＩａ」などの語句は、式ＩＩａおよび／またはＩＩＩａの化合物も、記載されているのと類似した様式で反応し得ることを示すことが理解される。
【０２３０】
リガンドが抗体である本発明の結合体を調製するための例示的なプロセスは、リン酸緩衝液またはＰＢＳ中の抗体の溶液を、Ｎ２下で約２５−４５℃で約１−１０時間、ジチオトレイトール（ＤＴＴ）の溶液で処理する工程を包含する。次にその溶液を、ダイアフィルトレーションセルの大きさとＮ２下での溶液の容量に依存して１／２時間から１２時間、流出液がＳＨ基を含まなくなるまで、リン酸緩衝生理食塩水（ＰＢＳ）に対してダイアフィルトレーションし、その後、０±１０℃で１５分間から８時間、蒸留水中の式［Ａ−Ｚｍ−Ｘ］−Ｄによって表わされるペプチド−自壊的部分−薬物中間体の適切な量（ＭＡｂ中のＳＨ基の数に基づく（エルマン滴定（Ｅｌｌｍａｎ  ｔｉｔｒａｔｉｏｎ）によって決定される））で処理する。その溶液を、次に、室温で約２４時間ＰＢＳに対して透析し、その後ろ過して、ろ液をバイオビーズと共に室温で１５分間から８時間振とうし、その後もう一度ろ過する。同様にして、リガンドが、Ｃｙｓ残基側鎖などのスルフヒドリル基を組み込んだタンパク質またはペプチドである結合体を調製し得る。
【実施例】
【０２３１】
（一般的手順）
特に異なる記載がない限り、重水素化ＤＭＳＯ中１Ｈ  ３００ＭＨｚで、Ｖａｒｉａｎ−３００分光計でＮＭＲを得た。全ての化学シフトはテトラメチルシランを参照する。質量スペクトルは、ＰＥ  ＳＣＩＥＸ，ＡＰＩ  ２０００ＬＣ−ＭＳ分光計で決定した。有機溶媒中の溶液を、無水Ｎａ２ＳＯ４で乾燥した。溶媒は、減圧下でＢｕｃｈｉ回転エバポレーターでエバポレートさせた。ガラスで裏打ちしたシリカゲルプレート（Ｍｅｒｃｋ  ６０  Ｆ２５４）でＴＬＣを実施し、ＵＶ光（２５４ｎｍ）によって成分を視覚化した。シリカゲル（Ｍｅｒｃｋ  ２３０−４００メッシュ）でフラッシュカラムクロマトグラフィーを実施した。
【０２３２】
ＤＣＭは、ジクロロメタンを指す；ＤＩＥＡは、ジイソプロピルエチルアミンを指す；ＣＤＩは、１，１’−カルボニルジイミダゾールを指す；ＲＴは、室温を指す；ＨＢＴＵは、Ｏ−ベンゾトリアゾール−Ｎ，Ｎ，Ｎ’，Ｎ’−テトラメチルウロニウムヘキサフルオロホスフェートを指す。
【０２３３】
（実施例１）
【０２３４】
【化５７】
2007527421.tif 000058
Ｂｏｃ−シトルリン８．６ｇをＤＭＦ２５０ｍｌに溶解した。その溶液にＤＩＥＡ  ７．２ｍＬおよびＣＤＩ  ６．７ｇを添加した。室温で３０分間攪拌した後、溶液にエチル２−アミノ−４−（トリフルオロメチル）−５−チアゾールカルボキシレート５ｇ（Ｍａｔｒｉｘ  Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ，Ｃｏｌｕｍｂｉａ  Ｓｏｕｔｈ  Ｃａｒｏｌｉｎａ  ＵＳＡ）を加えた。室温でさらに２時間おいた後、水２５ｍｌを添加して反応をクエンチした。この混合物をＥｔＯＡｃ  ２５０ｍｌで希釈した。有機層を１Ｎ  ＨＣｌ、ブラインで洗浄し、一般手順に記載されているように処理した。ＤＣＭ中５％ＭｅＯＨで溶出する新鮮シリカゲルカラムでの精製によって純粋な表題化合物（１Ａ）を得た（５．６ｇ、収率５４％）。
【０２３５】
（実施例２）
【０２３６】
【化５８】
2007527421.tif 000059
エチル２−アミノ−４−メチルチアゾール−５−カルボキシレート（５０ｍｇ、Ａｖｏｃａｄｏ  Ｒｅｓｅａｒｃｈ  Ｃｈｅｍｉｃａｌｓ  ＬＴＤ）、Ｎ，Ｎ−ジ−Ｂｏｃ−リシン  １４０ｍｇ、ＤＩＥＡ  ９５μｌおよびＨＢＴＵ  １５３ｍｇをＤＭＦ  １．５ｍｌに溶解した。室温で４８時間攪拌した後、水０．５ｍｌを加えて反応をクエンチし、ＥｔＯＡｃ４０ｍｌで希釈した。この有機層を１Ｎ  ＨＣｌ、ブラインで洗浄し、一般手順に記載されているように処理した。ヘキサン中３０％ＥｔＯＡｃで溶出する新鮮シリカゲルカラムでの精製によって純粋な表題化合物（１Ｂ）を得た（３０ｍｇ、収率２２％）。
【０２３７】
（実施例３）
【０２３８】
【化５９】
2007527421.tif 000060
エチル２−アミノ−４−メチルチアゾール−５−カルボキシレート（５００ｍｇ）、Ｎ−Ｃｂｚ−Ｎ−Ｂｏｃ−リシン  １．５ｇ、ＤＩＥＡ  ０．９９ｍｌおよびＨＢＴＵ  ２．０ｇをＤＭＦ  １５ｍｌに溶解した。室温で４８時間攪拌した後、水０．５ｍｌを加えて反応をクエンチし、ＥｔＯＡｃ  ４０ｍｌで希釈した。この有機層を１Ｎ  ＨＣｌ、ブラインで洗浄し、一般手順に記載されているように処理した。ヘキサン中３０％ＥｔＯＡｃで溶出する新鮮シリカゲルカラムでの精製によって純粋な表題化合物（１Ｃ）を得た（１．３ｇ、８８％）。
【０２３９】
（実施例４）
【０２４０】
【化６０】
2007527421.tif 000061
Ｉ．ＥｔＯＡｃ  ２０ｍｌ中のメチル５−ニトロ−２−フロエート  １００ｍｇ（Ｌａｎｃａｓｔｅｒ  Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ，Ｗｉｎｄｈａｍ，ＮＨ，ＵＳＡ）の溶液を、１気圧の水素ガス下でＰｄ／Ｃ（１０％）２０ｍｇと共に攪拌した。室温で２時間後、この混合物をセライトパッドでろ過し、濃縮した。ヘキサン中３０％ＥｔＯＡｃで溶出する新鮮シリカゲルカラムでの精製によって純粋なメチル５−アミノ−２−フロエートを得た。
【０２４１】
ＩＩ．メチル５−アミノ−２−フロエート  ５０ｍｇ、Ｎ−Ｃｂｚ−Ｎ−Ｂｏｃ−リシン  ２０２ｍｇ、ＤＩＥＡ  １２３μｌおよびＨＢＴＵ  ２０２ｍｇをＤＭＦ  １．５ｍｌに溶解した。室温で４８時間攪拌した後、水０．５ｍｌを加えて反応をクエンチし、ＥｔＯＡｃ  ４０ｍｌで希釈した。この有機層を１Ｎ  ＨＣｌおよびブラインで洗浄し、一般手順に記載されているように処理した。ヘキサン中３０％ＥｔＯＡｃで溶出する新鮮シリカゲルカラムでの精製によって純粋な表題化合物（１Ｄ）を得た（５６ｍｇ、３１％）。
【０２４２】
（実施例５）
【０２４３】
【化６１】
2007527421.tif 000062
１Ａの３ｇをＴＨＦ  ９０ｍｌに溶解した。この溶液に０℃の水素化アルミニウムリチウム（ＬＡＨ、ＴＨＦ中１．０Ｍ溶液）１２ｍｌを添加した。０℃で２時間攪拌した後、水１０ｍｌを加えて反応をクエンチし、ＥｔＯＡｃ２５０ｍｌで希釈して、セライトパッドでろ過した。有機層をブラインで洗浄し、一般手順に記載されているように処理した。ＤＣＭ中５％ＭｅＯＨで溶出する新鮮シリカゲルカラムでの精製によって純粋な表題化合物（２Ａ）を得た（２．２ｇ、収率８０％）。
【０２４４】
（実施例６）
【０２４５】
【化６２】
2007527421.tif 000063
化合物２Ａ（１．５ｇ）をメタノール４５ｍｌに溶解した。この溶液にジオキサン（４．０Ｍ）中のＨＣｌ  ８ｍｌを添加した。室温（ＲＴ）で２時間攪拌した後、減圧下で回転エバポレーターで溶液を濃縮した。粗生成物を室温で減圧下でさらに１８時間乾燥し、さらなる精製を行わずに次の反応のために使用した。
【０２４６】
（実施例７）
【０２４７】
【化６３】
2007527421.tif 000064
化合物３Ａ（１．２ｇ）、Ｂｏｃ−バリン１．１ｇ、ＤＩＥＡ１．４ｍｌおよびＨＢＴＵ  ３．３ｇをＤＭＦ  ３６ｍｌに溶解した。室温で１８時間攪拌した後、水５ｍｌを加えて反応をクエンチし、ＥｔＯＡｃ  ４００ｍｌで希釈した。この有機層をブラインで洗浄し、一般手順に述べられているように処理した。ＤＣＭ中１０％ＭｅＯＨで溶出する新鮮シリカゲルカラムでの精製によって純粋な表題化合物（４Ａ）を得た（１．４ｇ、収率７５％）。
【０２４８】
（実施例８）
【０２４９】
【化６４】
2007527421.tif 000065
化合物４Ａ（１．４ｇ）をメタノール４０ｍｌに溶解した。この溶液にジオキサン（４．０Ｍ）中のＨＣｌを１０ｍｌ添加した。室温で２時間攪拌した後、減圧下で回転エバポレーターで溶液を濃縮した。粗生成物を室温で減圧下でさらに１８時間乾燥し、さらなる精製を行わずに次の反応のために使用した。
【０２５０】
（実施例９）
【０２５１】
【化６５】
2007527421.tif 000066
化合物５Ａ（１．１ｇ）、マレイミドカプロン酸０．８ｇ、ＤＩＥＡ  １．１ｍｌおよびＨＢＴＵ  ２．５ｇをＤＭＦ  ３３ｍｌに溶解した。室温で１８時間攪拌した後、水５ｍｌを加えて反応をクエンチし、ＥｔＯＡｃ  ４００ｍｌで希釈した。この有機層をブラインで洗浄し、一般手順に記載されているように処理した。ＤＣＭ中１０％ＭｅＯＨで溶出する新鮮シリカゲルカラムでの精製によって純粋な表題化合物（６Ａ）を得た（１．４ｇ、収率８９％）。
【０２５２】
（実施例１０）
【０２５３】
【化６６】
2007527421.tif 000067
化合物４Ａ（５０ｍｇ）をＴＨＦおよびＤＣＭ（１：１）０．５ｍｌに溶解した。この溶液に４−ニトロフェニルイソシアネート  ３０ｍｇを添加した。室温で４８時間攪拌した後、この混合物を、ＤＣＭ中５％ＭｅＯＨで溶出するシリカゲルカラムに直接充填して、純粋な表題化合物（７Ａ）を得た。
【０２５４】
（実施例１１）
【０２５５】
【化６７】
2007527421.tif 000068
化合物６Ａ（３０ｍｇ）をＴＨＦおよびＤＣＭ（１：１）０．５ｍｌに溶解した。この溶液に４−ニトロフェニルイソシアネート  ３０ｍｇを添加した。室温で４８時間攪拌した後、この混合物を、ＤＣＭ中５％ＭｅＯＨで溶出するシリカゲルカラムに直接充填して、純粋な表題化合物（７Ｂ）を得た。
【０２５６】
（実施例１２  ７Ａおよび７ＢのカテプシンＢ切断）
切断可能ペプチド単位および複素環式自壊的部分を有するモデル化合物ならびに式Ｉの結合体は、Ｇｒｏｏｔら、（１９９９）Ｊ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．４２（２５）：５２７７−５２８３の方法によって安定性および酵素的加水分解の反応速度論に関して試験し得る。
【０２５７】
細胞内酵素の存在下で機能する、すなわち非誘導体化薬物を遊離する本発明の結合体の能力を実証するために、中間体７Ａおよび７ＢをカテプシンＢに暴露し、生じる切断産物、パラ−ニトロフェニルアミンを検出した。図２は、切断機構の図式的表示である。
【０２５８】
２８．４μＭのカテプシンＢ（ＣａｌＢｉｏｃｈｅｍ）ストック溶液を、２ｍＭ  ＤＴＴを含む５０ｍＭ  酢酸ナトリウム緩衝液ｐＨ７．５中で１μＭに希釈した。３７℃で１５分間活性化を実施した。
【０２５９】
基質化合物７Ａおよび７Ｂを、５０ｍＭ酢酸ナトリウム緩衝液ｐＨ５中で１００μＭに希釈した。活性化カテプシンＢを１００ｎＭの最終濃度まで添加し、１ｍＭシステインの存在下または非存在下で３７℃で１６時間切断反応を実施した。
【０２６０】
Ａｇｉｌｅｎｔ  １１００  ＨＰＬＣシステムを用いて切断産物の逆相分離を実施した。ＵＶシグナルを２１４ｎｍ、２５４ｎｍおよび３８０ｎｍでモニタリングした。ＡｇｉｌｅｎｔからのＰｏｒｏｓｈｅｌｌ  ３００ＳＢ−Ｃ１８カラム（Ｎｏ．６６０７５０−９０２）を使用した。移動相ＡおよびＢは、それぞれ０．０５％ＴＦＡ水溶液および０．０５％ＴＦＡを含むＣＨ３ＣＮを含んだ。未処理コントロール試料のアリコート（５０μｌ）；カテプシンＢ単独で処理した試料、およびシステイン＋カテプシンＢで処理した試料をカラムに注入し、２１分間で０−５０％Ｂの直線勾配で溶出した。４−ニトロアニリンの切断産物を、空隙容量中３８０ｎｍでその異なる吸光度によってモニタリングした。７Ａおよび７Ｂに関する切断反応は、７Ａおよび７Ｂの完全な消失によって証明されたように各々完全であった。
【図面の簡単な説明】
【０２６１】
【図１】図１は、酵素によって切断される本発明の結合体の自壊的機構を例示する概略図である。
【図２】図２は、カテプシンＢによる、チアゾール含有自壊的部分の切断を例示する概略図である。
【図１】
2007527421.tif 000074
【図２】
2007527421.tif 000075
【国際調査報告】
2007527421.tif 000076