(57)【要約】【課題】ビタミンＤ活性を有する新規なリトコール酸誘導体、並びに上記リトコール酸誘導体を含む医薬、ビタミンＤ受容体活性化剤及びビタミンＤ受容体関連疾患の予防及び／又は治療剤を提供すること。【解決手段】３位にヒドロキシアルキル基を有するリトコール酸誘導体、その塩、又はそのプロドラッグ。【選択図】なし【特許請求の範囲】
【請求項１】
下記一般式（Ｉ）で示される化合物、その塩、又はそのプロドラッグ。
【化１】
2019055913.tif 000009
（式中、Ｒ1及びＲ2はそれぞれ独立して、水素原子又は炭素数１から６のアルキル基を示す。Ｒ3、Ｒ4、Ｒ5及びＲ6はそれぞれ独立して、水素原子又は炭素数１から６のアルキル基を示す。ｎは１から３の整数を示す。）
【請求項２】
Ｒ1及びＲ2がメチル基である、請求項１に記載の化合物、その塩、又はそのプロドラッグ。
【請求項３】
Ｒ3、Ｒ4、Ｒ5及びＲ6が水素原子である、請求項１又は２に記載の化合物、その塩、又はそのプロドラッグ。
【請求項４】
ｎが１である、請求項１から３の何れか一項に記載の化合物、その塩、又はそのプロドラッグ。
【請求項５】
下記の何れかの化合物、その塩、又はそのプロドラッグ。
【化２】
2019055913.tif 000010
【請求項６】
請求項１から５の何れか一項に記載の化合物、その塩、又はそのプロドラッグを含む医薬。
【請求項７】
請求項１から５の何れか一項に記載の化合物、その塩、又はそのプロドラッグを含む、ビタミンＤ受容体活性化剤。
【請求項８】
請求項１から５の何れか一項に記載の化合物、その塩、又はそのプロドラッグを含む、ビタミンＤ受容体関連疾患の予防及び／又は治療剤。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、ビタミンＤ活性を有するリトコール酸誘導体に関する。本発明はさらに、上記リトコール酸誘導体を含む、医薬、ビタミンＤ受容体活性化剤並びにビタミンＤ受容体関連疾患の予防及び／又は治療剤に関する。
【背景技術】
【０００２】
ビタミンＤは、代謝活性化体である１α，２５−ジヒドロキシビタミンＤ３がビタミンＤ受容体（ＶＤＲ）に結合し、特異的遺伝子の発現を制御する。この遺伝子の発現の制御により、ビタミンＤは、血中のカルシウム濃度維持、骨形成、免疫機能、細胞の分化・増殖制御などの重要な生理作用を担っている。これまでに、骨粗鬆症、乾癬及びがんなどの治療薬の開発を目的として、多数のＶＤＲリガンドが開発され、そのうちの幾つかは医薬品として臨床応用されている。既存のＶＤＲリガンドの多くは、天然型の１α，２５−ジヒドロキシビタミンＤ３と同様にセコステロイド骨格を有している。セコステロイド骨格は、高活性を有する誘導体の開発には有用であるが、一般に化学的安定性が低く、煩雑な合成を要し、ビタミンＤ作用の多様な医薬応用性が限られている。そのため、非セコステロイド型の骨格を有するＶＤＲリガンドの開発が望まれているが、そのような非セコステロイド型ＶＤＲリガンドの報告は少ない。
【０００３】
リトコール酸が、ＶＤＲの内因性リガンドであることが見いだされているが、リトコール酸のＶＤＲ親和性は非常に弱く、生理的意義は不明である。特許文献１には、リトコール酸誘導体であるリトコール酸プロピオネートがＣＤＲを活性化できることが記載され、非特許文献１には、リトコール酸アセテート及びリトコール酸プロピオネートが記載されている。
【先行技術文献】
【特許文献】
【０００４】
【特許文献１】特許第５２８３０４３号公報
【非特許文献】
【０００５】
【非特許文献１】Masuno et al, Journal of Lipid Research, Volume 54, 2013, pages 2206-2213
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【０００６】
上記の通り、ビタミンＤ３活性を有するリトコール酸誘導体の報告はあるが、既存のリトコール酸誘導体はビタミンＤ３受容体に対する親和性が弱く、ビタミンＤ３活性は十分なものではなかった。本発明は、十分なビタミンＤ３活性を有する新規なリトコール酸誘導体を提供することを解決すべき課題とする。さらに本発明は、並びに上記リトコール酸誘導体を含む医薬、ビタミンＤ受容体活性化剤並びにビタミンＤ受容体関連疾患の予防及び／又は治療剤を提供することを解決すべき課題とする。
【課題を解決するための手段】
【０００７】
本発明者らは上記課題を解決するために鋭意検討した結果、３位にヒドロキシアルキル基を有するリトコール酸誘導体であって、前記３位のヒドロキシアルキル基の主鎖の炭素数が２以上であるリトコール酸誘導体が、優れたビタミンＤ３活性を有することを見出し、発明を完成するに至った。
【０００８】
本発明によれば、以下の発明が提供される。
［１］  下記一般式（Ｉ）で示される化合物、その塩、又はそのプロドラッグ。
【化１】
2019055913.tif 000002
（式中、Ｒ1及びＲ2はそれぞれ独立して、水素原子又は炭素数１から６のアルキル基を示す。Ｒ3、Ｒ4、Ｒ5及びＲ6はそれぞれ独立して、水素原子又は炭素数１から６のアルキル基を示す。ｎは１から３の整数を示す。）
［２］  Ｒ1及びＲ2がメチル基である、［１］に記載の化合物、その塩、又はそのプロドラッグ。
［３］  Ｒ3、Ｒ4、Ｒ5及びＲ6が水素原子である、［１］又は［２］に記載の化合物、その塩、又はそのプロドラッグ。
［４］  ｎが１である、［１］から［３］の何れか一に記載の化合物、その塩、又はそのプロドラッグ。
［５］  下記の何れかの化合物、その塩、又はそのプロドラッグ。
【化２】
2019055913.tif 000003
［６］  ［１］から［５］の何れか一に記載の化合物、その塩、又はそのプロドラッグを含む医薬。
［７］  ［１］から［５］の何れか一に記載の化合物、その塩、又はそのプロドラッグを含む、ビタミンＤ受容体活性化剤。
［８］  ［１］から［５］の何れか一に記載の化合物、その塩、又はそのプロドラッグを含む、ビタミンＤ受容体関連疾患の予防及び／又は治療剤。
【０００９】
本発明によればさらに以下の発明が提供される。
［９］  ［１］から［５］の何れか一に記載の化合物、その塩、又はそのプロドラッグをヒトを含む哺乳動物に投与することを含む、ビタミンＤ受容体を活性化する方法。
［１０］  ［１］から［５］の何れか一に記載の化合物、その塩、又はそのプロドラッグをヒトを含む哺乳動物に投与することを含む、ビタミンＤ受容体関連疾患の予防及び／又は治療のための方法。
［１１］  ビタミンＤ受容体の活性化において使用するための、［１］から［５］の何れか一に記載の化合物、その塩、又はそのプロドラッグ。
［１２］  ビタミンＤ受容体関連疾患の予防及び／又は治療において使用するための、［１］から［５］の何れか一に記載の化合物、その塩、又はそのプロドラッグ。
［１３］  医薬の製造のための、［１］から［５］の何れか一に記載の化合物、その塩、又はそのプロドラッグの使用。
［１４］  ビタミンＤ受容体活性化剤の製造のための、［１］から［５］の何れか一に記載の化合物、その塩、又はそのプロドラッグの使用。
［１５］  ビタミンＤ受容体関連疾患の予防及び／又は治療剤の製造のための、［１］から［５］の何れか一に記載の化合物、その塩、又はそのプロドラッグの使用。
【発明の効果】
【００１０】
本発明の化合物は、十分なビタミンＤ３活性を有する新規なリトコール酸誘導体である。本発明の化合物は、ビタミンＤ受容体活性化剤、並びにビタミンＤ受容体関連疾患の予防及び／又は治療剤等の医薬として有用である。また、本発明の化合物は、セコステロイド骨格を有さないことから、セコステロイド骨格を有する化合物より一般に化学的安定性が高い。
【図面の簡単な説明】
【００１１】
【図１】図１は、ＨＬ−６０細胞に対する分化誘導作用の用量作用曲線を示す。
【発明を実施するための形態】
【００１２】
以下、本発明について更に具体的に説明する。
本発明の化合物は、下記一般式（Ｉ）で示される。
【化３】
2019055913.tif 000004
（式中、Ｒ1及びＲ2はそれぞれ独立して、水素原子又は炭素数１から６のアルキル基を示す。Ｒ3、Ｒ4、Ｒ5及びＲ6はそれぞれ独立して、水素原子又は炭素数１から６のアルキル基を示す。ｎは１から３の整数を示す。）
ステロイド骨格の３位の置換基（即ち、ＨＯＣ（Ｒ1）（Ｒ2）（ＣＨ2）n−で示される基）の立体配置は特に限定されず、α置換体又はβ置換体の何れでもよい。
【００１３】
本明細書における炭素数１から６のアルキル基は、直鎖状、分枝鎖状、環状、又はこれらの組み合わせのいずれでもよい。炭素数１から６のアルキル基は、特に制限されないが、メチル基、エチル基、ｎ−プロピル基、イソプロピル基、シクロプロピルメチル基、ｎ−ブチル基、ｓｅｃ−ブチル基、ｔｅｒｔ−ブチル基、シクロブチル基、シクロブチルメチル基、シクロペンチル基、シクロヘキシル基などを挙げることができ、中でも、メチル基、エチル基を好ましく挙げることができ、メチル基が特に好ましい。
【００１４】
Ｒ1及びＲ2はそれぞれ独立に、同一の基でも異なる基でもよいが、同一の基であることが好ましい。Ｒ1及びＲ2がともにメチル基であることが特に好ましい。
Ｒ3、Ｒ4、Ｒ5及びＲ6はそれぞれ独立に、同一の基でも異なる基でもよい。Ｒ3、Ｒ4、Ｒ5及びＲ6は全て水素原子であることが特に好ましい。
ｎは１から３の整数を示し、好ましくは１又は２であり、より好ましくは１である。
【００１５】
本発明の化合物の具体例としては、以下の化合物2及び化合物3を挙げることができ、中でもＨＬ−６０細胞に対する分化誘導作用の観点からは、化合物2がより好ましい。
【００１６】
【化４】
2019055913.tif 000005
【００１７】
一般式（Ｉ）で示される化合物は、１個又は２個以上の不斉炭素を有する場合があるが、不斉炭素に基づく任意の光学活性体、ジアステレオ異性体などの立体異性体、立体異性体の任意の混合物、ラセミ体などはいずれも本発明の範囲に包含される。
【００１８】
一般式（Ｉ）で示される化合物は、酸付加塩又は塩基付加塩などの塩の形態で存在する場合もあるが、それらも本発明の範囲に包含される。酸付加塩としては、例えば、塩酸塩、臭化水素酸塩、硫酸塩、硝酸塩などの鉱酸塩、ｐ−トルエンスルホン酸塩、メタンスルホン酸塩、シュウ酸塩、酒石酸塩、マレイン酸塩などの有機酸塩を挙げることができ、塩基付加塩としては、例えば、ナトリウム塩、カリウム塩、マグネシウム塩、カルシウム塩などの金属塩、アンモニウム塩、トリエチルアミン塩、エタノールアミン塩などの有機アミン塩などを挙げることができる。これらのほか、グリシン塩などのアミノ酸塩なども本発明の範囲に包含される。
【００１９】
一般式（Ｉ）で示される化合物は、プロドラッグにしてもよい。プロドラッグは、生体に投与された後、酵素の作用や代謝的加水分解などにより、医薬的に活性な化合物になる。プロドラッグは、当業者に知られている酸誘導体であればよく、例えば、一般式（Ｉ）で示される化合物と適当なアルコールとの反応によって製造されるエステル、一般式（Ｉ）で示される化合物と適当なアミンとの反応によって製造されるアミド、カルボシル基の還元型として、２４−アルコール体などが挙げられるが特に限定されない。
【００２０】
一般式（Ｉ）で示され化合物、その塩及びそのプロドラッグは、水あるいは各種溶媒との付加物（水和物又は溶媒和物）の形で存在することもあるが、これらの付加物も本発明の範囲内のものである。溶媒和物における溶媒としては、メタノール、エタノール、アセトニトリル等を挙げることができるが、特に限定されない。付加物（水和物又は溶媒和物）は、単独のものでもよいし、複数種の混合物でもよい。
【００２１】
一般式（Ｉ）で示される化合物、その塩及びそのプロドラッグの任意の結晶形も本発明の範囲内のものである。
【００２２】
一般式（Ｉ）に包含される代表的な化合物（上記化合物2及び上記化合物3）の製造方法を本明細書の実施例に詳細かつ具体的に記載した。当業者は、実施例に記載された具体的製造方法を参照しつつ、原料化合物、反応条件、試薬などを適宜選択し、必要に応じてこれらの方法に適宜の修飾ないし改変を加えることにより、一般式（１）に包含される化合物を製造することが可能である。
【００２３】
例えば、化合物2の合成は、特に限定されないが、後記の実施例１に記載の方法に準じて行うことができるが、実施例１において出発原料として使用する化合物11は、後記参考例１に記載の方法に準じて、リトコール酸を出発原料として合成することができる。化合物11は、適当な溶媒（例えば、無水メタノール等）中で水素化ホウ素ナトリウム (61.3 mg, 1.62 mmol)と反応させることにより、化合物16が得られる。化合物１6は適当な溶媒（例えば、ピリジン等）p-トルエンスルフォニルクロライドと反応させることにより化合物17が得られる。化合物17は適当な溶媒（例えば、DMSO等）中でシアン化ナトリウムと反応させることにより、化合物18が得られる。
【００２４】
化合物18は、適当な溶媒（例えば、ジエチルエーテル等）中で、メチルリチウムと反応させ、さらに塩酸を加えることによって、化合物19が得られる。なお、ここでメチルリチウムの代わりに、他のアルキルリチウムを使用することにより、一般式（Ｉ）においてＲ1及び又はＲ2がメチル基以外である化合物を合成することができる。
【００２５】
化合物19は、適当な溶媒（例えば、ジエチルエーテル 等）中で、メチルリチウムと反応させ、さらに塩化アンモニウムを加えることによって、化合物20が得られる。なお、ここでメチルリチウムの代わりに、水素化ホウ素ナトリウムなどの還元剤又は他のアルキルリチウムを使用することにより、一般式（Ｉ）においてＲ1又はＲ2がメチル基以外である化合物を合成することができる。
【００２６】
化合物20は、適当な溶媒（例えば、メタノール等）中で、水酸化パラジウムと反応させ、水素置換することにより、化合物21が得られる。化合物21は適当な溶媒（例えば、アセトン）中で、Jones試薬（酸化クロム(VI)を水に溶かし、濃硫酸を加えたもの）を反応させることにより、化合物2が得られる。
【００２７】
化合物3の合成も同様に、特に限定されないが、後記の実施例２に記載の方法に準じて行うことができる。
【００２８】
本発明の化合物は、ビタミンＤ受容体（ＶＤＲ）に結合し、ＶＤＲを活性化することができる。本発明の化合物がビタミンＤ受容体（ＶＤＲ）に結合し、それを活性化することは、ヒト急性前骨髄球性白血病細胞HL-60に対する細胞分化誘導作用を検定することにより検証することができる。細胞分化誘導の検定アッセイは、後記する試験例１に記載の通り、 Fujii et al. Bioorg. Med. Chem. 22 (2014) 5891-5901の「4.3.1. Assay of HL-60 cell differentiation-inducing activity」に記載の方法に準じた方法により行うことができる。
【００２９】
リトコール酸は、ＶＤＲ以外にも、核内受容体であるファルネソイドＸ受容体（Farnesoid X receptor：ＦＸＲ）、Ｇタンパク質共役型胆汁酸受容体（ＧＰＢＡＲ１）（ＴＧＲ５とも言う）を活性化させる作用を有することが知られている。従って、本発明の化合物は、ＶＤＲ以外にも、ＦＸＲ、及び／又はＧＰＢＡＲ１に結合し、それらを活性化させる作用を示す可能性がある。
【００３０】
上記の通り、本発明の式（Ｉ）で示される化合物は、ＶＤＲを活性化する作用を有し、さらにＦＸＲやＧＰＢＡＲ１を活性化する作用を有する可能性がある。従って、式（Ｉ）で示される本発明の化合物、その塩、又はそのプロドラッグを有効成分として含む医薬は、ビタミンＤ受容体活性化剤、又はビタミンＤ作用剤として有用である。式（Ｉ）で示される本発明の化合物、その塩、又はそのプロドラッグは、ビタミンＤ受容体関連疾患の予防及び／又は治療剤として用いることができる。ビタミンＤ受容体関連疾患としては、例えば、くる病、骨軟化症、骨粗鬆症、腎臓障害に基づく骨疾患や副甲状腺機能低下症、乾癬などの皮膚疾患、がん（白血病、乳がん、前立腺がん、大腸がんなど）、自己免疫性疾患（慢性関節リウマチ、全身性ループスエリテマトーシスなど）、感染症（結核など）などが挙げられるが、特に限定されない。
【００３１】
ＦＸＲは、コレステロール生合成の中間体であるファルネソールに応答する核内受容体として同定され、ケノデオキシコール酸等の胆汁酸分子がＦＸＲに結合し、転写共役因子をリクルートすることにより、ＦＸＲ標的遺伝子の転写を増強することが報告されている。ＦＸＲ標的遺伝子としては、胆汁酸の胆汁中への排泄を担うBSEP（bile salt export pump）が知られている。ＦＸＲは、ＢＳＥＰの遺伝子発現を増強することにより肝内からの胆汁酸の排出を促し、肝内胆汁うっ滞症を改善すると考えられている。また、ＦＸＲは、脂質代謝・糖代謝において重要な機能を果たしていると考えられている。ＦＸＲ関連疾患としては、脂質異常症、コレステロール吸収疾患、アテローム性動脈硬化症、末梢閉塞性疾患、虚血性脳卒中、糖尿病（特にＩＩ型糖尿病）、メタボリックシンドローム、糖尿病性腎症、肥満、コレステロール胆石症、肝内胆汁うっ滞／肝線維症、非アルコール性脂肪性肝炎、非アルコール性脂肪肝疾患、乾癬、がん、骨粗鬆症、パーキンソン病及びアルツハイマー病などが挙げられるが特に限定されない。本発明の医薬は、上記したＦＸＲ関連疾患の予防及び／又は治療剤として用いることができる。
【００３２】
ＧＰＢＡＲ１の生物学的作用としては、単球／マクロファージ移動／活性化、樹状細胞分化の制御、リンパ球活性化の制御、炎症の増殖および分化制御、サイトカイン産生および／または放出の制御、前炎症性メディエーター産生および／または放出の制御、免疫応答の制御、ＧＬＰ（グルカゴン様ペプチド）−１分泌、インスリン分泌、食欲、膵臓再生、膵臓β細胞分化、膵臓β細胞増殖、インスリン抵抗性、エネルギー消費などが知られている。ＧＰＢＡＲ１関連疾患としては、特に限定されないが、炎症性疾患、自己免疫疾患、ウイルス性疾患、移植片拒絶、がん、神経障害、心臓血管障害、ＩＩ型糖尿病、肥満などが挙げられる。
本発明の医薬は、上記したＧＰＢＡＲ１関連疾患の予防及び／又は治療剤として用いることもできる。
【００３３】
本発明の医薬、ビタミンＤ受容体活性化剤及びビタミンＤ受容体関連疾患の予防及び／又は治療剤の有効成分としては、一般式（Ｉ）で示される化合物、その塩、又はそのプロドラッグを用いることができる。本発明の医薬、ビタミンＤ受容体活性化剤及びビタミンＤ受容体関連疾患の予防及び／又は治療剤としては、上記有効成分をそのまま投与してもよいが、一般的には、上記有効成分と１種又は２種以上の製剤用添加物を含む医薬組成物を調剤して投与することが望ましい。
【００３４】
本発明の医薬、ビタミンＤ受容体活性化剤及びビタミンＤ受容体関連疾患の予防及び／又は治療剤の投与経路は特に限定されず。経口投与でも非経口投与でもよい。非経口投与としては、静脈内、筋肉内、皮下又は皮内等への注射、直腸内投与、経粘膜投与などが挙げられるが特に限定されない。
【００３５】
経口投与に適する医薬用組成物としては、例えば、錠剤、カプセル剤、散剤、細粒剤、顆粒剤、液剤、及びシロップ剤等を挙げることができる。
非経口投与に適する医薬組成物としては、例えば、注射剤、点滴剤、坐剤、吸入剤、点鼻剤、経皮吸収剤、軟膏剤、クリーム剤、及び貼付剤等を挙げることができる。
【００３６】
製剤用添加物としては、例えば、賦形剤、崩壊剤ないし崩壊補助剤、結合剤、滑沢剤、コーティング剤、色素、希釈剤、基剤、溶解剤ないし溶解補助剤、等張化剤、ｐＨ調節剤、安定化剤、噴射剤、及び粘着剤等を用いることができ、医薬組成物の形態に応じて適宜のものを選択して使用することが可能である。
【００３７】
経口投与用の製剤の調製に用いることができる製剤用添加物として、例えば、ブドウ糖、乳糖、D-マンニトール、デンプン、又は結晶セルロース等の賦形剤；カルボキシメチルセルロース、デンプン、又はカルボキシメチルセルロースカルシウム等の崩壊剤又は崩壊補助剤；ヒドロキシプロピルセルロース、ヒドロキシプロピルメチルセルロース、ポリビニルピロリドン、又はゼラチン等の結合剤；ステアリン酸マグネシウム又はタルク等の滑沢剤；ヒドロキシプロピルメチルセルロース、白糖、ポリエチレングリコール又は酸化チタン等のコーティング剤；ワセリン、流動パラフィン、ポリエチレングリコール、ゼラチン、カオリン、グリセリン、精製水、又はハードファット等の基剤を用いることができる。
【００３８】
注射あるいは点滴用の製剤の調製に用いることができる製剤用添加物としては、注射用蒸留水、生理食塩水、プロピレングリコール、界面活性剤等の水性あるいは用時溶解型注射剤を構成しうる溶解剤又は溶解補助剤；ブドウ糖、塩化ナトリウム、D-マンニトール、グリセリン等の等張化剤；無機酸、有機酸、無機塩基又は有機塩基等のpH調節剤等の製剤用添加物を用いることができる。
【００３９】
本発明の医薬、ビタミンＤ受容体活性化剤及びビタミンＤ受容体関連疾患の予防及び／又は治療剤はヒトなどの哺乳動物に投与することができる。
本発明の医薬、ビタミンＤ受容体活性化剤及びビタミンＤ受容体関連疾患の予防及び／又は治療剤の投与量は患者の年齢、性別、体重、症状、及び投与経路などの条件に応じて適宜増減されるべきであるが、一般的には、成人一日あたりの有効成分の量として１０μg／ｋｇから５０００ｍｇ／ｋｇ程度の範囲であり、好ましくは１００μｇ／ｋｇから１０００ｍｇ／ｋｇ程度の範囲である。上記投与量の薬剤は一日一回に投与してもよいし、数回（例えば、２〜４回程度）に分けて投与してもよい。
【００４０】
また、本発明の一般式（Ｉ）で示される化合物、その塩又はそのプロドラッグは、実験用試薬として用いることもできる。ビタミンＤ受容体を有する細胞、組織、器官又は動物個体を本発明の一般式（Ｉ）で示される化合物、その塩又はそのプロドラッグで処理することによって、ビタミンＤ受容体を活性化させることができる。ビタミンＤ受容体を有する細胞としては、腎臓、腸管粘膜、骨髄、骨、乳腺、皮膚、神経由来の細胞などを挙げることができるが、特に限定されない。また、株化された動物細胞にビタミンＤ受容体遺伝子を導入することにより得られる組換え細胞を用いることもできる。ビタミンＤ受容体を有する組織及び器官としては、腎臓、腸管粘膜、骨髄、リンパ組織、骨、乳腺、皮膚、神経などを挙げることができるが、特に限定されない。動物個体としては、マウス、ラット、ハムスター、ウサギ、ニワトリなどを挙げることができるが、特に限定されない。ビタミンＤ受容体の活性化は、ＶＤＲ標的遺伝子（例えば、CYP24など）の発現誘導を測定することにより、確認することができるが特に限定されない。
【００４１】
以下の実施例により本発明を具体的に説明するが、本発明は実施例によって限定されることはない。
【実施例】
【００４２】
略号は以下を意味する。
ＴＨＦ：テトラヒドロフラン
ＤＭＦ：  Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド
ＡｃＯＥｔ：酢酸エチル
ＤＭＳＯ：ジメチルスルホキシド
ＤＩＢＡＬ：水素化ジイソブチルアルミニウム
【００４３】
参考例１：化合物1の合成
化合物1を、リトコール酸からScheme 1に従って合成した。
【００４４】
【化５】
2019055913.tif 000006
【００４５】
（１）化合物4の合成
アルゴン雰囲気下、リトコール酸 (4.78 g, 0.013 mol)、p-トルエンスルフォン酸・1水和物 (237.6 mg, 1.4 mmol) の無水ジクロロメタン(60.0 mL) 溶液を0℃に冷却し、3,4-ジヒドロ-2H-ピラン (4.0 mL, 0.044 mmol) を加え、0℃で1時間20分間撹拌した。反応溶液に飽和炭酸水素ナトリウム水溶液を加え、ジクロロメタンで抽出し、有機層を食塩水で洗浄した。無水MgSO4で乾燥後、溶媒を留去し、黄色オイル状の化合物4 と4'の混合物(8.90 g) を得た。
1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ4.72 (m, 1 H), 3.92 (m, 1 H), 3.62 (m, 1 H), 3.48 (m, 1 H), 2.40 (ddd, J = 15.7, 10.4, 5.2 Hz, 1 H), 2.26 (ddd, J = 15.8, 9.6, 6.4 Hz, 1 H), 2.00-0.95 (m, 32 H), 0.92 (d, J = 7.8 Hz, 3 H), 0.91 (s, 3 H), 0.64 (s, 3 H).
【００４６】
（２）化合物5の合成
アルゴン雰囲気下、水素化アルミニウムリチウム (696.3 mg, 0.018 mol) を入れたTHF (30 mL) 溶液に、化合物4 と4'の混合物(8.38 g, 0.012 mol相当) のTHF (60 mL) 溶液を加え、90℃で1時間還流した。反応溶液を0℃に冷却し、酢酸エチルと水を加え、セライトろ過の後、抽出、有機層を食塩水で洗浄した。無水硫酸マグネシウムで乾燥後、溶媒を留去し粗生生物 (7.63 g) を得た。シリカゲルカラムクロマトグラフィー (AcOEt / n-hexane = 1/6 → 1/4 → 1/0) で精製して、無色オイル状の化合物5 (5.36 g, 0.012 mmol, quant. in 2 steps) を得た。
1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ4.72 (m, 1 H), 3.92 (m, 1 H), 3.61 (m, 3 H), 3.48 (m, 1 H), 1.96 (dt, J = 12.4, 3.2 Hz, 1 H), 1.91-0.85 (m, 33 H), 0.92 (d, J = 7.3 Hz, 3 H), 0.91 (s, 3 H), 0.64 (s, 3 H).
【００４７】
（３）化合物6の合成
水素化ナトリウム(60%, 1.41g, 35.2 mmol) をヘキサンで洗浄し、DMF (10.0 mL) を加え、0℃に冷却した。ここに化合物5 (2.24 g, 5.0 mmol) のDMF (15.0 mL) 溶液を加え、0℃で30分撹拌した。臭化ベンジル(3.4 mL, 28.6 mmol) を加え、0℃で30分撹拌した後、室温で6時間30分撹拌した。反応溶液を0℃に冷却し、メタノールを加えて0℃で30分撹拌した後、溶媒を留去した。酢酸エチルと飽和炭酸水素ナトリウム水溶液、水を加えて抽出し、有機層を水と食塩水で洗浄した。無水硫酸マグネシウムで乾燥後、溶媒を留去し粗生生物  (3.86 g) を得た。シリカゲルカラムクロマトグラフィー (CHCl3) で精製して、淡黄色オイル状の化合物6 (2.07 g, 3.9 mmol, 77%) を得た。
1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ7.34 (d, J = 4.6 Hz, 4 H), 7.31-7.25 (m, 1 H), 4.72 (m, 1 H), 4.50 (s, 2 H), 3.92 (m, 1 H), 3.62 (m, 1 H), 3.48 (m, 1 H), 3.44 (t, J = 6.6 Hz, 2 H), 1.95 (dt, J = 12.4, 3.2 Hz, 1 H), 1.91-0.85 (m, 33 H), 0.91 (s, 3 H), 0.91 (d, J = 6.4 Hz, 3 H), 0.63 (s, 3 H).
【００４８】
（４）化合物7の合成
化合物6 (2.07 g, 3.9 mmol) のジクロロメタン (5.0 mL) とメタノール(15.0 mL) 混合溶液に、p-トルエンスルフォン酸・1水和物 (50.8 mg, 0.27 mmol) を加え、室温で7時間撹拌した。反応溶液の溶媒を留去し、酢酸エチルを加え、2 M 水酸化ナトリウム水溶液で中和した。水を加えた後、有機層をとり、食塩水で洗浄した。無水硫酸マグネシウムで乾燥後、溶媒を留去し粗生生物(1.44 g) を得た。シリカゲルカラムクロマトグラフィー (AcOEt / n-hexane = 1/14 → 1/7 → 1/4) で精製して、白色固体の化合物7 (1.28 g, 2.8 mmol, 73%) を得た。
1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ7.34 (d, J = 4.6 Hz, 4 H), 7.31-7.25 (m, 1 H), 4.50 (s, 2 H), 3.62 (m, 1 H), 3.44 (t, J = 6.6 Hz, 2 H), 1.96 (d, J = 11.9 Hz, 1 H), 1.91-0.86 (m, 27 H), 0.92 (s, 3 H), 0.91 (d, J = 5.5 Hz, 3 H), 0.64 (s, 3 H).
【００４９】
（５）化合物8の合成
0℃に冷却した化合物7 (4.89 g, 0.011 mol) の無水ピリジン (40.0 mL) 溶液に、再結晶したp-トルエンスルフォニルクロリド (3.09 g, 0.016 mol) を加え、0℃で1時間30分撹拌した後、室温で4時間撹拌した。0℃に冷却してp-トルエンスルフォニルクロリド (2.06 g, 0.010 mol) を加え、0℃で1時間撹拌した後、室温で16時間30分撹拌した。反応溶液に水を加え、酢酸エチルで抽出し、有機層を水、2 M 塩酸、食塩水で洗浄した。無水硫酸マグネシウムで乾燥後、溶媒を留去し、黄白色固体の化合物8 (5.98 g, 9.9 mmol, 91%) を得た。
1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ7.79 (d, J = 8.2 Hz, 2 H), 7.34 (d, J = 4.1 Hz, 4 H), 7.32 (d, J = 7.8 Hz, 2 H), 7.31-7.25 (m, 1 H), 4.50 (s, 2 H), 4.46 (m, 1 H), 3.43 (t, J = 6.4 Hz, 2 H), 2.44 (s, 3 H), 2.05-1.91 (m, 2 H), 1.89-0.85 (m, 26 H), 0.90 (d, J = 6.4 Hz, 3 H), 0.88 (s, 3 H), 0.62 (s, 3 H).
【００５０】
（６）化合物9の合成
化合物8 (2.07 g, 3.4 mmol) の無水DMSO (20.0 mL) 溶液にシアン化ナトリウム (0.523 g, 10.7 mmol) を加え、80℃で6時間30分撹拌した。反応溶液を室温まで冷ました後、水を加え、酢酸エチルで抽出した。有機層を水、食塩水で洗浄した。無水硫酸マグネシウムで乾燥後、溶媒を留去し粗生生物(1.58 g) を得た。シリカゲルカラムクロマトグラフィー (CHCl3 / n-hexane = 1/1 → 3/2) で精製して、白色固体の化合物9 (1.11 g, 2.4 mmol, 71%) を得た。
1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ7.34 (d, J = 4.1 Hz, 4 H), 7.31-7.25 (m, 1 H), 4.50 (s, 2 H), 3.43 (dt, J = 6.6, 2.1 Hz, 2 H), 3.01 (br, 1 H), 2.10-0.95 (m, 28 H), 1.00 (s, 3 H), 0.91 (d, J = 6.4 Hz, 3 H), 0.64 (s, 3 H).
【００５１】
（７）化合物10の合成
アルゴン雰囲気下、化合物9 (500.1 mg, 1.1 mmol) の無水ジクロロメタン (25.0 mL) 溶液を-71℃に冷却し、1.0 M DIBAL (ヘキサン溶液, 1.9 mL, 1.9 mmol) を加え、-68℃で1時間10分撹拌した。反応溶液に飽和塩化アンモニウム水溶液を加え、ジクロロメタンで抽出した。有機層を水、食塩水で洗浄した。無水硫酸マグネシウムで乾燥後、溶媒を留去し粗生生物(502.0 mg) を得た。フラッシュカラムクロマトグラフィー (CHCl3 / n-hexane = 3/4, 4/5) で精製して、無色オイル状の化合物10 (263.4 mg, 0.57 mmol, 53%) を得た。
1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ9.72 (s, 1 H), 7.34 (d, J = 4.6 Hz, 4 H), 7.31-7.25 (m, 1 H), 4.50 (s, 2 H), 3.44 (dt, J = 6.6, 1.7 Hz, 2 H), 2.45 (br, 1 H), 2.10-0.80 (m, 28 H), 0.91 (d, J = 6.8 Hz, 3 H), 0.88 (s, 3 H), 0.64 (s, 3 H).
【００５２】
（８）化合物11の合成
化合物10 (856.0 mg, 1.7 mmol) の無水THF (16.0 mL) および無水メタノール(20.0 mL)混合溶液に炭酸カリウム(649.5 mg, 4.7 mmol) を加え、室温で7時間撹拌した。反応溶液を減圧留去し、クロロホルムと水を加え抽出した。有機層を水、食塩水で洗浄した。無水硫酸マグネシウムで乾燥後、溶媒を留去し粗生生物(1.00 g) を得た。フラッシュカラムクロマトグラフィー (CHCl3 / n-hexane = 2/3) で精製して、無色オイル状の化合物11 (497.5 mg, 1.07 mmol, 62% in 2 steps) を得た。
1H NMR (500 MHz, CDCl3) δ9.64 (d, J =1.4 Hz, 1 H), 7.34 (d, J = 4.6 Hz, 4 H), 7.31-7.25 (m, 1 H), 4.50 (s, 2 H), 3.43 (dt, J = 6.7, 1.4 Hz, 2 H), 2.27 (dt, J = 12.5, 1.1 Hz, 1 H), 2.00-0.80 (m, 28 H), 0.96 (s, 3 H), 0.91 (d, J = 6.6 Hz, 3 H), 0.64 (s, 3 H).
【００５３】
（９）化合物12の合成
りん酸二水素ナトリウム二水和物 (380.0 mg, 2.4 mmol) と亜塩素酸ナトリウム (254.4 mg, 2.8 mmol) を水 (3.5 mL) に溶かし、酸化溶液を調製した。0℃に冷却した化合物11 (111.1 mg, 0.24 mmol) の2-メチル-2-ブテン (2.0 mL) およびt-ブタノール (8.0 mL) 混合溶液に、酸化溶液 (3.5 mL) を加え、0℃で15分、室温で1時間40分撹拌した。反応溶液に飽和塩化アンモニウム水溶液を加え、ジエチルエーテルで抽出した。有機層を無水硫酸マグネシウムで乾燥後、溶媒を留去し粗生生物(140.2 mg)を得た。シリカゲルカラムクロマトグラフィー (AcOEt / n-hexane = 1/5 → 1/1 → 1/0) で精製して、白色固体の化合物12 (101.6 mg, 0.21 mmol, 88%) を得た。
1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ7.34 (d, J = 4.6 Hz, 4 H), 7.31-7.25 (m, 1 H), 4.50 (s, 2 H), 3.43 (t, J = 6.6 Hz, 2 H), 2.37 (tt, J = 12.4, 3.7 Hz, 1 H), 2.00-0.80 (m, 28 H), 0.94 (s, 3 H), 0.91 (d, J = 6.4 Hz, 3 H), 0.64 (s, 3 H).
【００５４】
（１０）化合物13の合成
化合物12 (70.9 mg, 0.15 mmol) のクロロホルム(0.6 mL) およびメタノール (4.0 mL) 混合溶液を0℃に冷却し、濃硫酸 (0.6 mL) を加え、80℃で2時間還流した。反応溶液を減圧留去し、水を加え、ジクロロメタンで抽出し、有機層を食塩水で洗浄した。無水硫酸マグネシウムで乾燥後、溶媒を留去し、黄色オイル状の化合物13 (66.6 mg, 0.13 mmol, 91%) を得た。
1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ7.34 (d, J = 4.1 Hz, 4 H), 7.31-7.25 (m, 1 H), 4.50 (s, 2 H), 3.67 (s, 3 H), 3.44 (t, J = 6.6 Hz, 2 H), 2.32 (tt, J = 12.4 3.9 Hz, 1 H), 2.00-0.80 (m, 28 H), 0.93 (s 3 H), 0.91 (d, J = 6.9 Hz, 3 H), 0.63 (s, 3 H).
【００５５】
（１１）化合物14の合成
アルゴン雰囲気下、化合物13 (24.2 mg, 0.049 mmol) のTHF (4.0 mL) 溶液を-69℃に冷却し、1.08 M メチルリチウム(ジエチルエーテル溶液, 0.10 mL, 0.108 mmol) を加え、-69℃で1時間20分撹拌した。再度1.08 M チルリチウム(ジエチルエーテル溶液, 0.20 mL, 0.216 mmol) を加え、-69℃で55分撹拌した。反応溶液に飽和塩化アンモニウム水溶液を加え、室温にした後、水を加え、酢酸エチルで抽出し、有機層を食塩水で洗浄した。無水硫酸マグネシウムで乾燥後、溶媒を留去し粗生生物 (23.1 mg) を得た。シリカゲルカラムクロマトグラフィー (AcOEt / n-hexane = 1/5 → 1/0) で精製して、無色オイル状の化合物14 (16.4 mg, 0.033 mmol, 68%) を得た。
1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ7.34 (d, J = 4.1 Hz, 4 H), 7.31-7.25 (m, 1 H), 4.50 (s, 2 H), 3.43 (t, J = 6.6, 1.4 Hz, 2 H), 2.00-1.93 (d, J = 11.9 Hz, 1 H), 1.93-1.75 (m, 3 H), 1.75-0.80 (m, 25 H), 1.18 (s, 6 H), 0.93 (s, 3 H), 0.91 (d, J = 6.4 Hz, 3 H), 0.64 (s, 3 H).
【００５６】
（１２）化合物15の合成
化合物14 (9.8 mg, 0.020 mmol) のメタノール (2.5 mL) 溶液に水酸化パラジウム (2 mg) を加え、水素置換をした後、室温で1時間50分撹拌した。反応溶液をセライトろ過した後、溶媒を留去し、白色固体の化合物15 (7.5 mg, 0.019 mmol, 94%) を得た。
1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ3.61 (dt, J = 6.6, 2.5 Hz, 2 H), 1.96 (dt, J = 11.7, 2.9 Hz, 1 H), 1.94-1.77 (m, 3 H), 1.71-0.85 (m, 25 H), 1.18 (s, 6 H), 0.93 (s, 3 H), 0.92 (d, J = 6.9 Hz, 3 H), 0.65 (s, 3 H).
【００５７】
（１３）化合物1の合成
酸化クロム(VI) (1.06 g) を水 (3.1 mL) に溶かし、氷冷下で濃硫酸 (0.92 mL) を加えてJones試薬を調製した。化合物15 (11.4 mg, 0.028 mmol) の無水アセトン (6.0 mL) 溶液に、Jones試薬 (0.1 mL) を加え、室温で30分間撹拌した。反応溶液に水を加え、アセトンを留去した後、ジエチルエーテルで抽出し、有機層を食塩水で洗浄した。無水硫酸マグネシウムで乾燥後、溶媒を留去し粗生生物(12.6 mg) を得た。GPC (CHCl3) によって精製し、白色固体の化合物1 (7.9 mg, 0.019 mmol, 69%) を得た。
1H NMR (600 MHz, CDCl3) δ2.39 (ddd, J = 15.6, 10.5, 5.1 Hz, 1 H), 2.24 (ddd, J = 16.1, 9.8, 6.2 Hz, 1 H), 1.95 (dt, J = 12.0, 3.2 Hz, 1 H), 1.91-1.76 (m, 4 H), 1.60-0.80 (m, 22 H), 1.18 (s, 6 H), 0.92 (s, 3 H), 0.91 (d, J = 5.4 Hz, 3 H), 0.64 (s, 3 H); 13C NMR (150 MHz, CDCl3) ・・179.82, 73.21, 56.58, 56.02, 49.86, 43.76, 42.87, 40.77, 40.26, 37.49, 35.96, 35.45, 35.03, 31.02, 30.89, 28.32, 28.02, 27.77, 27.28, 27.21, 26.65, 24.32, 24.12, 22.09, 20.95, 18.39, 12.20.
【００５８】
実施例１：化合物2の合成
化合物2は、化合物11からScheme 2に従って合成した。
【００５９】
【化６】
2019055913.tif 000007
【００６０】
（１）化合物16の合成
化合物11 (330.5 mg, 0.71 mmol) の無水メタノール (60.0 mL) 溶液を0℃に冷却し、水素化ホウ素ナトリウム (61.3 mg, 1.62 mmol) を加え、0℃で40分撹拌した。反応溶液を減圧留去した後、酢酸エチルと水を加え抽出し、有機層を食塩水で洗浄した。無水硫酸マグネシウムで乾燥後、溶媒を留去し、無色オイル状の化合物16 (280.1 mg, 0.60 mmol, 84%) を得た。
1H NMR (500 MHz, CDCl3) δ7.34 (d, J = 4.6 Hz, 4 H), 7.31-7.25 (m, 1 H), 4.50 (s, 2 H), 3.48 (d, J = 6.0 Hz, 2 H), 3.43 (dt, J = 6.7, 2.6 Hz, 2 H), 1.95 (d, J = 12.3 Hz, 1 H), 1.93-1.77 (m, 3 H), 1.75-1.64 (m, 1 H), 1.64-0.85 (m, 24 H), 0.94 (s, 3 H), 0.91 (d, J = 6.6 Hz, 3 H), 0.64 (s, 3 H).
【００６１】
（２）化合物17の合成
化合物16 (48.4 mg, 0.10 mmol) の無水ピリジン (5.0 mL) 溶液を0℃に冷却し、再結晶したp-トルエンスルフォニルクロライド(42.6 mg, 0.22 mmol) を加え、0℃で30分、室温で1時間10分撹拌した。反応溶液を0℃に冷却してp-トルエンスルフォニルクロライド (43.0 mg, 0.23 mmol) を加え、0℃で10分、室温で6時間撹拌した。反応溶液に水を加え、酢酸エチルで抽出し、有機層を水、2 M 塩酸、食塩水で洗浄した。無水硫酸マグネシウムで乾燥後、溶媒を留去し、無色オイル状の化合物17 (60.5 mg, 0.098 mmol, 94%) を得た。
1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ7.79 (dd, J = 7.3, 1.8 Hz, 2 H), 7.34 (d, J = 8.2 Hz, 2 H), 7.34 (d, J = 4.1 Hz, 4 H), 7.31-7.25 (m, 1 H), 4.50 (s, 2 H), 3.84 (d, J = 6.4 Hz, 2 H), 3.43 (dt, J = 6.6, 1.4 Hz, 2 H), 2.45 (s, 3 H), 1.94 (d, J = 11.9 Hz, 1 H), 1.90-1.74 (m, 3 H), 1.74-1.60 (m, 2 H), 1.60-0.82 (m, 29 H), 0.62 (s, 3 H).
【００６２】
（３）化合物18の合成
化合物17 (273.9 mg, 0.44 mmol) の無水DMSO (17.5 mL) 溶液にシアン化ナトリウム (67.2 mg, 1.37 mmol) を加え、80℃で2時間30分撹拌した。反応溶液を室温まで冷ました後、水を加え、酢酸エチルで抽出した。有機層を水、食塩水で洗浄した。無水硫酸マグネシウムで乾燥後、溶媒を留去し粗生生物 (213.6 mg) を得た。フラッシュカラムクロマトグラフィー (AcOEt / n-hexane = 1/14) で精製して、無色オイル状の化合物18 (176.2 mg, 0.37 mmol, 84%) を得た。
1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ7.34 (d, J = 4.6 Hz, 4 H), 7.31-7.25 (m, 1 H), 4.50 (s, 2 H), 3.44 (dt, J = 6.5, 1.1 Hz, 2 H), 2.26 (d, J = 6.9 Hz, 2 H), 1.96 (dt, J = 11.9, 2.7 Hz, 1 H), 1.93-1.76 (m, 3 H), 1.76-1.64 (m, 2 H), 1.64-0.96 (m, 23 H), 0.94 (s, 3 H), 0.91 (d, J = 6.9 Hz, 3 H), 0.64 (s, 3 H).
【００６３】
（４）化合物19の合成
アルゴン雰囲気下、化合物18 (96.1 mg, 0.20 mmol) のジエチルエーテル(7.0 mL) 溶液を0℃に冷却し、1.08 M メチルリチウム(ジエチルエーテル溶液, 0.90 mL, 0.97 mmol) を加え、0℃で40分撹拌した。反応溶液に2 M 塩酸を加え、室温で40分撹拌した。反応溶液に28% アンモニア水を加え、ジクロロメタンで抽出し、有機層を食塩水で洗浄した。無水硫酸マグネシウムで乾燥後、溶媒を留去し粗生生物(95.5 mg) を得た。シリカゲルカラムクロマトグラフィー(AcOEt / n-hexane = 1/8, 1/9) とフラッシュカラムクロマトグラフィー (AcOEt / n-hexane = 1/19) で精製して、無色オイル状の化合物19 (76.2 mg, 0.15 mmol, 77%) を得た。
1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ7.34 (d, J = 4.6 Hz, 4 H), 7.31-7.25 (m, 1 H), 4.50 (s, 2 H), 3.43 (dt, J = 6.8, 1.5 Hz, 2 H), 2.32 (d, J = 6.9 Hz, 2 H), 2.12 (s, 3 H), 1.95 (d, J = 11.9 Hz, 1 H), 1.91-1.62 (m, 5 H), 1.62-0.88 (m, 23 H), 0.92 (s, 3 H), 0.91 (d, J = 6.4 Hz, 3 H), 0.63 (s, 3 H).
【００６４】
（５）化合物20の合成
アルゴン雰囲気下、化合物19 (62.6 mg, 0.13 mmol) のジエチルエーテル (5.0 mL) 溶液を-69℃に冷却し、1.08 M メチルリチウム(ジエチルエーテル溶液, 0.30 mL, 0.32 mmol) を加え、-69℃で2時間30分撹拌した。再度1.08 M メチルリチウム(ジエチルエーテル溶液, 0.10 mL, 0.11 mmol) を加え、-69℃で2時間撹拌した。反応溶液に飽和塩化アンモニウム水溶液を加え、室温にした後水を加え、酢酸エチルで抽出した。有機層を食塩水で洗浄した。無水硫酸マグネシウムで乾燥後、溶媒を留去し粗生生物(59.8 mg) を得た。フラッシュカラムクロマトグラフィー (AcOEt / n-hexane = 1/9) で精製して、無色オイル状の化合物20 (46.4 mg, 0.09 mmol, 72%) を得た。
1H NMR (500 MHz, CDCl3) δ7.34 (d, J = 4.3 Hz, 4 H), 7.31-7.25 (m, 1 H), 4.50 (s, 2 H), 3.44 (dt, J = 6.7, 2.6 Hz, 2 H), 1.95 (d, J = 11.7 Hz, 1 H), 1.90-0.85 (m, 30 H), 1.22 (s, 6 H), 0.91 (d, J = 6.3 Hz, 3 H), 0.91 (s, 3 H), 0.63 (s, 3 H);
13C NMR (150 MHz, CDCl3) δ138.83, 128.48, 127.78, 127.60, 72.97, 71.88, 71.21, 56.72, 56.35, 51.42, 43.77, 42.85, 40.68, 40.38, 37.63, 36.10, 36.01, 35.73, 35.17, 34.87, 32.33, 30.17, 30.14, 29.96, 28.45, 27.62, 26.66, 26.44, 24.38, 24.15, 20.98, 18.75, 12.19.
【００６５】
（６）化合物21の合成
化合物20 (24.3 mg, 0.048 mmol) のメタノール (4.0 mL) 溶液に水酸化パラジウム(5.4 mg) を加え、水素置換をした後、室温で3時間撹拌した。反応溶液をセライトろ過した後、溶媒を留去し、白色固体の化合物21 (20.6 mg, 0.048 mmol, quant.) を得た。
1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ3.61 (m, 2 H), 1.95 (dd, J = 11.4, 3.7 Hz, 1 H), 1.90-1.79 (m, 2 H), 1.75 (d, J = 13.3 Hz, 1 H), 1.70-0.85 (m, 27 H), 1.22 (s, 6 H), 0.92 (d, J = 7.3 Hz, 3 H), 0.91 (s, 3 H), 0.64 (s, 3 H).
【００６６】
（７）化合物2の合成
酸化クロム(VI)  (266.3 mg) を水 (0.77 mL) に溶かし、氷冷下で濃硫酸 (0.23 mL) を加えてJones試薬を調製した。化合物21 (7.6 mg, 0.018 mmol) の無水アセトン (5.0 mL) 溶液に、Jones試薬 (0.1 mL) を加え、室温で40分撹拌した。反応溶液に水を加え、アセトンを留去した後、ジエチルエーテルで抽出し、有機層を食塩水で洗浄した。無水硫酸マグネシウムで乾燥後、溶媒を留去し粗生生物(10.5 mg) を得た。GPC (CHCl3) によって精製し、白色固体の化合物2 (4.3 mg, 0.010 mmol, 55%) を得た。
1H NMR (600 MHz, CDCl3) δ2.40 (ddd, J = 15.8, 10.4, 5.3 Hz, 1 H), 2.26 (ddd, J = 15.9, 9.9, 6.3 Hz, 1 H), 1.94 (dd, J = 12.0, 3.6 Hz, 1 H), 1.88-1.77 (m, 3 H), 1.74 (d, J = 13.8 Hz, 1 H), 1.60-0.80 (m, 24 H), 1.22 (s, 6 H), 0.92 (d, J = 6.6 Hz, 3 H), 0.91 (s, 3 H), 0.64 (s, 3 H);
13C NMR (150 MHz, CDCl3) δ179.59, 71.94, 56.67, 56.05, 51.38, 43.73, 42.89, 40.63, 40.32, 37.60, 36.06, 35.98, 35.46, 35.14, 34.85, 30.97, 30.91, 30.16, 30.11, 29.94, 28.34, 27.57, 26.62, 24.34, 24.14, 20.96, 18.39, 12.20.
【００６７】
実施例２：化合物3の合成
化合物3は、化合物10からScheme 2に従って合成した。
（１）化合物22の合成
化合物10 (310.1 mg, 0.69 mmol) の無水メタノール (60.0 mL) 溶液を0℃に冷却し、水素化ホウ素ナトリウム (61.6 mg, 1.63 mmol) を加え、0℃で40分撹拌した。反応溶液を減圧留去した後、酢酸エチルと水を加え抽出し、有機層を食塩水で洗浄した。無水硫酸マグネシウムで乾燥後、溶媒を留去し粗生生物(320.0 mg) を得た。シリカゲルカラムクロマトグラフィー (AcOEt / n-hexane = 1/4) で精製して、淡黄色オイル状の化合物22 (296.0 mg, 0.63 mmol, 95%) を得た。
1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ7.34 (d, J = 4.1 Hz, 4 H), 7.31-7.25 (m, 1 H), 4.50 (s, 2 H), 3.67 (m, 2 H), 3.43 (dt, J = 6.6, 1.2 Hz, 2 H), 2.05-1.76 (m, 5 H), 1.76-0.98 (m, 24 H), 0.92 (s, 3 H), 0.91 (d, J = 6.4 Hz, 3 H), 0.64 (s, 3 H).
【００６８】
（２）化合物23の合成
化合物22 (281.2 mg, 0.60 mmol) の無水ピリジン (22.0 mL) 溶液を0℃に冷却し、再結晶したp-トルエンスルフォニルクロライド (230.9 mg, 1.21 mmol) を加え、0℃で30分、室温で2時間撹拌した。反応溶液を0℃に冷却してp-トルエンスルフォニルクロライド (230.6 mg, 1.21 mmol) を加え、0℃で1時間、室温で4時間30分撹拌した。反応溶液に水を加え、酢酸エチルで抽出し、有機層を水、2 M 塩酸、食塩水で洗浄した。無水硫酸マグネシウムで乾燥後、溶媒を留去し粗生生物(358.5 mg) を得た。シリカゲルカラムクロマトグラフィー(AcOEt / n-hexane = 1/8, 1/10) で精製して、無色オイル状の化合物23 (325.9 mg, 0.52 mmol, 87%) を得た。
1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ7.79 (d, J = 8.2 Hz, 2 H), 7.34 (d, J = 9.2 Hz, 2 H), 7.34 (d, J = 4.6 Hz, 4 H), 7.31-7.25 (m, 1 H), 4.49 (s, 2 H), 4.05 (m, 2 H), 3.43 (dt, J = 6.6, 1.9 Hz, 2 H), 2.45 (s, 3 H), 2.10 (br, 1 H), 1.99-1.87 (m, 2 H), 1.87-1.62 (m, 3 H), 1.62-0.94 (m, 22 H), 0.90 (d, J = 6.4 Hz, 3 H), 0.84 (s, 3 H), 0.79 (dt, J = 14.2, 4.1 Hz, 1 H), 0.61 (s, 3 H).
【００６９】
（３）化合物24の合成
化合物23 (51.9 mg, 0.084 mmol) の無水 DMSO (4.0 mL) 溶液にシアン化ナトリウム(12.0 mg, 0.245 mmol) を加え、80℃で22時間撹拌した。反応溶液を室温まで冷ました後水を加え、酢酸エチルで抽出し、有機層を水、食塩水で洗浄した。無水硫酸マグネシウムで乾燥後、溶媒を留去し粗生生物(39.2 mg) を得た。GPC (CHCl3) で精製し、白色固体の化合物24 (29.9 mg, 0.063 mmol, 75%) を得た。
1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ7.34 (d, J = 4.1 Hz, 4 H), 7.31-7.25 (m, 1 H), 4.50 (s, 2 H), 3.43 (dt, J = 6.6, 1.8 Hz, 2 H), 2.44 (d, J = 8.2 Hz, 2 H), 2.27 (br, 1 H), 2.11 (dt, J = 14.0, 5.0 Hz, 1 H), 1.97 (dd, J = 12.1, 3.0 Hz, 1 H), 1.94-1.76 (m, 2 H), 1.76-1.63 (m, 2 H), 1.63-0.97 (m, 22 H), 0.94 (s, 3 H), 0.91 (d, J = 6.9 Hz, 3 H), 0.64 (s, 3 H).
【００７０】
（４）化合物25の合成
アルゴン雰囲気下、化合物24 (160.5 mg, 0.34 mmol) のジエチルエーテル(9.0 mL) 溶液を0℃に冷却し、1.08 M  メチルリチウム(ジエチルエーテル溶液, 1.40 mL, 1.51 mmol) を加え、0℃で30分撹拌した。反応溶液に2 M 塩酸を加え、室温で40分撹拌した。反応溶液に28% アンモニア水を加え、ジクロロメタンで抽出し、有機層を食塩水で洗浄した。無水硫酸マグネシウムで乾燥後、溶媒を留去し粗生生物(153.0 mg) を得た。フラッシュカラムクロマトグラフィー (AcOEt / n-hexane = 1/19) で精製して、無色オイル状の化合物25 (133.5 mg, 0.27 mmol, 80%) を得た。
1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ7.34 (d, J = 4.6 Hz, 4 H), 7.31-7.25 (m, 1 H), 4.50 (s, 2 H), 3.43 (dt, J = 6.6, 1.4 Hz, 2 H), 2.52 (d, J = 7.3 Hz, 2 H), 2.39 (br, 1 H), 2.13 (s, 3 H), 2.03 (dt, J = 13.6, 5.3 Hz, 1 H), 1.96 (d, J = 11.9 Hz, 1 H), 1.91-1.76 (m, 2 H), 1.76-0.95 (m, 24 H), 0.93 (s, 3 H), 0.91 (d, J = 6.9 Hz, 3 H), 0.63 (s, 3 H).
【００７１】
（５）化合物26の合成
アルゴン雰囲気下、化合物25 (69.7 mg, 0.14 mmol) のジエチルエーテル(5.0 mL) 溶液を-69℃に冷却し、1.08 M メチルリチウム(ジエチルエーテル溶液, 0.50 mL, 0.54 mmol) を加え、-69℃で2時間撹拌した。再度1.08 M メチルリチウム(ジエチルエーテル溶液, 0.25 mL, 0.27 mmol) を加え、-69℃で1時間30分撹拌した。反応溶液に飽和塩化アンモニウム水溶液を加え、室温にした後水を加え、酢酸エチルで抽出し、有機層を食塩水で洗浄した。無水硫酸マグネシウムで乾燥後、溶媒を留去し粗生生物(69.9 mg) を得た。フラッシュカラムクロマトグラフィー (AcOEt / n-hexane = 1/9) で精製して、無色オイル状の化合物26 (61.4 mg, 0.12 mmol, 85%) を得た。
1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ7.34 (d, J = 4.1 Hz, 4 H), 7.31-7.25 (m, 1 H), 4.50 (s, 2 H), 3.43 (dt, J = 6.6, 1.4 Hz, 2 H), 2.06-1.92 (m, 3 H), 1.92-1.76 (m, 2 H), 1.76-0.98 (m, 26 H), 1.22 (s, 6 H), 0.92 (s, 3 H), 0.91 (d, J = 6.9 Hz, 3 H), 0.64 (s, 3 H).
【００７２】
（６）化合物27の合成
化合物26 (52.2 mg, 0.10 mmol) のメタノール(7.0 mL) 溶液に水酸化パラジウム(11 mg) を加え、水素置換をした後、室温で2時間30分撹拌した。反応溶液をセライトろ過した後、溶媒を留去し粗生生物(43.2 mg) を得た。シリカゲルカラムクロマトグラフィー (AcOEt / n-hexane = 1/3) で精製して、白色固体の化合物27 (38.0 mg, 0.091 mmol, 89%) を得た。
1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ3.61 (br, 2 H), 2.06-1.92 (m, 3 H), 1.92-1.76 (m, 2 H), 1.60-0.98 (m, 26 H), 1.22 (s, 6 H), 0.92 (d, J = 6.4 Hz, 3 H), 0.92 (s, 3 H), 0.65 (s, 3 H).
【００７３】
（７）化合物3の合成
酸化クロム(VI)  (266.3 mg) を水 (0.77 mL) に溶かし、氷冷下で濃硫酸 (0.23 mL) を加えてJones試薬を調製した。化合物27 (25.7 mg, 0.061 mmol) の無水アセトン (10.0 mL) 溶液に、Jones試薬 (0.1 mL) を加え、室温で40分撹拌した。再度Jones試薬 (0.1 mL) を加え、室温で40分撹拌した。反応溶液に水を加え、アセトンを留去した後、ジエチルエーテルで抽出し、有機層を食塩水で洗浄した。無水硫酸マグネシウムで乾燥後、溶媒を留去し粗生生物(31.2 mg) を得た。GPC (CHCl3) によって精製し、白色固体の化合物3 (24.1 mg, 0.056 mmol, 91%)を得た。
1H NMR (600 MHz, CDCl3) δ2.40 (ddd, J = 15.8, 10.4, 5.2 Hz, 1 H), 2.26 (ddd, J = 15.9, 9.9, 6.3 Hz, 1 H), 2.04-1.92 (m, 3 H), 1.90-1.76 (m, 3 H), 1.61-0.98 (m, 23 H), 1.22 (s, 6 H), 0.92 (s, 3 H), 0.92 (d, J = 6.6 Hz, 3 H), 0.64 (s, 3 H); 
13C NMR (150 MHz, CDCl3) δ179.37, 72.26, 56.71, 56.05, 46.30, 42.89, 40.36, 40.06, 37.89, 35.87, 35.46, 35.18, 32.95, 31.62, 31.01, 30.91, 29.70, 29.64, 29.43, 28.34, 27.48, 27.07, 26.55, 24.42, 24.33, 21.09, 18.38, 12.20.
【００７４】
試験例１：HL-60細胞における細胞分化誘導検定
化合物1、化合物2、及び化合物3に関して、ヒト急性前骨髄球性白血病細胞HL-60に対する細胞分化誘導作用を検討した。比較として活性型ビタミンD3を用いた。
【００７５】
細胞分化誘導の検定アッセイは、 Fujii et al. Bioorg. Med. Chem. 22 (2014) 5891-5901の「4.3.1. Assay of HL-60 cell differentiation-inducing activity」に記載の方法と同様に行った。具体的には以下の通りである。
【００７６】
ＨＬ−６０細胞を、５％ＦＢＳ（胎児ウシ血清）、ペニシリンG及びストレプトマイシンを添加したＲＰＭＩ−１６４０培地において、３７℃、５％ＣＯ2で培養した。細胞は、ＲＰＭＩ−１６４０（５％ＦＢＳ）で８．０×１０4細胞／ｍＬに希釈し、被験化合物のエタノール溶液を、最終濃度１０-10〜１０-5Ｍになるように添加した。対照の細胞は、同量のエタノールのみで処理した。１α，２５−ジヒドロキシビタミンＤ３は陽性対照として同時にアッセイした。細胞を３７℃、５％ＣＯ2で４日間インキュベートした。分化した細胞の割合は、ニトロブルーテトラゾリウム（NBT）の還元能測定により測定した。細胞は、ＲＰＭＩ−１６４０（５％ＦＢＳ）と、ＮＢＴ（０．２％）及び12-O-テトラデカノイルホルボール13-アセテート (TPA; 200 ng/mL)を含む同量のリン酸緩衝生理食塩水（ＰＢＳ）中において３７℃で２０分間インキュベートした。濃い藍色のホルマザンを含む細胞の割合を、最低限の２００細胞において測定した。
ＮＢＴ還元能から算出した分化した細胞の割合（％）を、表１および図１に示す。
【００７７】
【表１】
2019055913.tif 000008
【００７８】
表１及び図１の結果から分かるように、本発明の化合物2及び化合物3は、参考用の化合物1と比較して、HL-60細胞に対する分化誘導作用が高い。
【図１】
2019055913.tif 000011