(57)【要約】本発明は、浸透膜蒸留(ＯＭＤ)を用いた濃縮されたガルシニア抽出物を得るための非熱処理方法に関する。【特許請求の範囲】
【請求項１】
ａ）ガルシニア属の種、ガルシニア・ペドゥンクラータおよびガルシニア・コーワから選択される果実の外皮を集め、切断するステップと、
ｂ）１１５〜１３０℃で２０〜３０分間、体積比１：４で前記切断外皮を脱イオン水で抽出し、抽出物を得るステップと、
ｃ）前記抽出物を濾過し、無粒子抽出物を得るステップと、
ｄ）前記抽出物の体積が元の体積の１／５に減少するまで、浸透物質の存在下で並流モードで前記無粒子抽出物を浸透膜蒸留するステップと、
を有する、ガルシニア抽出物を濃縮する非熱処理方法。
【請求項２】
さらに、ステップ（ｄ）の前記濃縮抽出物からヒドロキシクエン酸を得るステップを有する、請求項１記載の方法。
【請求項３】
疎水膜は、適切な空間を有するモジュールの２つの鉄骨フレームＳＳ３１６の間に配置される、請求項１記載の方法。
【請求項４】
前記抽出物は、多段蠕動ポンプを用いて前記膜の片側を流速１００〜１５０ｍｌ／分で循環させられる、請求項１記載の方法。
【請求項５】
疎水膜浸透物質（ＯＡ）は、多段蠕動ポンプを用いて前記膜のもう一方の側に配置される、請求項１記載の方法。
【請求項６】
前記浸透物質は、飽和塩化カルシウムである、請求項１記載の方法。
【請求項７】
前記浸透膜蒸留は、２５±１℃の室温および１気圧の圧力下で行われる、請求項１記載の方法。
【請求項８】
前記浸透膜蒸留は、前記抽出物が供給タンク中で濃縮されるまで、約４〜６時間行われる、請求項１記載の方法。
【請求項９】
前記濃縮生成物中の前記遊離ヒドロキシクエン酸の含有率は、ＨＰＬＣ法で測定して３３〜３５％の範囲内である、請求項１記載の方法。
【請求項１０】
ヒドロキシクエン酸の含有率が４〜６倍に上昇し、かつ、ＨＣＡはラクトンを生成することなくその商業的および栄養的価値を増大させる天然型（誘導体ではない）として存在する、請求項１記載の方法。
【請求項１１】
ａ）ガルシニア属の種から生じる乾燥果実の外皮を集めるステップと、
ｂ）ガルシニア・ペドゥンクラータ／ガルシニア・コーワの外皮を３×９ｍｍ〜６×１４ｍｍの大きさに手作業で切断するステップと、
ｃ）１１０〜１３０℃で１５〜３５分間、体積比１：４で脱イオン水で抽出するステップと、
ｄ）前記抽出物を濾布で濾過するステップと、
ｅ）並流平膜モジュール内で浸透膜蒸留(ＯＭＤ)を行うことによりＨＣＡを濃縮するステップと、
ｆ）モジュールの適切な空間を有する２つの鉄骨フレームＳＳ３１６の間に、疎水膜を配置するステップと、
ｇ）多段蠕動ポンプを用いて、前記膜の片側に流速１００〜１５０ｍｌ／分で前記抽出物を循環させるステップと、
ｈ）多段蠕動運動ポンプを用いて前記膜のもう一方の側に疎水膜浸透物質（ＯＡ）ステップと、
ｉ）前記抽出物が供給タンク中で濃縮されるまで、約４〜６時間ＯＭＤを行うステップと、
を有する、ガルシニア抽出物を濃縮する非熱処理方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明はガルシニア抽出物を濃縮する非熱処理方法に関する。本発明は特に浸透膜蒸留（osmotic membrane distillation：ＯＭＤ）を用いて濃縮ガルシニア抽出物を得る方法に関する。
【背景技術】
【０００２】
ダイエットサプリメントとして、（−）−ヒドロキシクエン酸（ＨＣＡ）はあらゆる体重管理プログラムに効果的な物質である。Allison et al.は減量の代替療法の一つとしてＨＣＡを用いることを検討している（Crit. Rev. Food Sci. Nutr. 2001, 41, 1-28）。ＨＣＡの誘導体は、減量の促進、心保護の増進、脂質異常改善の促進および持久力の増進を目的として他の成分と組み合わされて多くの医薬品に含まれている（Jena et al., 2002, J. Agric. Food Chemistry, 50, 10-22）。今まで、ＨＣＡは、ガルシニア・カンボジア（G. cambogia）、ガルシニア・インディカ（G. indica）、ガルシニア・アトロヴィリディス（G. atroviridis）およびガルシニア・コーワ（G. cowa）を含むガルシニア属の特定の種の果実の中で発見されている（Lewis, Y. S. 1969, Methods in enzymology, 13, 613-623; Jena et al., 2002, J. Agric. Food Chemistry, 50, 10-22）。最近、ＨＣＡの化学および生化学について議論されている（Jena et al., 2002, J. Agric. Food Chemistry, 50, 10-22）。大規模な動物実験を行った結果、ＨＣＡは、食欲抑制、食物摂取の抑制、肝グリコーゲン合成の促進、脂肪酸合成および脂質生成の低減ならびに体重増加の低減を効果的に行うことが証明された。
【０００３】
ガルシニア属（オトギリソウ科）は、熱帯アジア、アフリカおよびポリネシアに分布する雑性花（polygamous）の木または潅木の大きな属である。ガルシニア属は１８０種から成り、その内の約３０種はインドで見られる。ガルシニア・ペドゥンクラータ（G. pedunculata）およびガルシニア・コーワは、インド北東部およびアンダマン諸島に生育している。アッサム地方では、ガルシニア・コーワは、その酸味のある果実のためにしばしば農家で栽培されている（The Wealth of India, 1956）。ガルシニア属のこれら２つの種の果実は、その強い酸味のせいで味が良いとはいえない。アッサム地方では、果実のスライスを天日干ししたものが、料理のためおよび民間薬として用いられている。
【０００４】
ＨＣＡのカルシウム塩を含有するガルシニア・カンボジア抽出物の商品サンプルを参照することができる（Sawada, et al, 1997, Nihon yukagaka kaishi, vol 1467-1474）。しかし、カルシウムが過剰な場合、溶解度および生体利用性は液体抽出物に比べて低下してしまう。
【０００５】
また、米国特許第６５６３１４号（Ashok kumar., Ravindranath, B., and Balasubramamanvam, 1996）も参照することができる。この方法は、水抽出、それに続くイオン交換樹脂への通液および活性炭を用いた脱色、ならびに真空蒸発を用いた最終的な濃縮を含む。この方法の主な欠点は、熱処理方法（thermal process）であること、および最終生成物を得るまでに非常に多くの単位操作を行うことである。
【０００６】
また、ガルシニア属の果実からヒドロキシクエン酸カリウムを調製する方法が報告されており、参照することができる（Majeed, M., Badmaev, V and Rajendran, R., 米国特許第５７８３６０３号, 1998）。この方法は、アルキルアルコールを用いたガルシニア属の果実の抽出を含み、抽出物を水酸化カリウムで処理した後、還流し、ヒドロキシクエン酸カリウムの沈殿を生成させる。この方法の主な欠点は、カリウム塩が吸湿性であることである。さらに、天然型（natural state）のＨＣＡを利用することができないため、生体利用性および医薬品を目的とする多用途な利用可能性が制限されてしまう。
【０００７】
これらの参照はすべてＨＣＡ誘導体の調製についての報告であることが注目される。しかし、ＨＣＡを濃縮する非熱処理方法（non-thermal process）の報告はなく、天然型（誘導体ではない）のＨＣＡを濃縮する非熱処理方法の報告もない。
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【０００８】
本発明の主な目的は、ガルシニア・ペドゥンクラータ／ガルシニア・コーワ由来の液状の濃縮されたガルシニア抽出物を調製する方法を開発することである。
【０００９】
本発明の別の目的は、抽出物を濃縮する非熱処理方法を開発することである。
【００１０】
本発明のさらに別の目的は、浸透膜蒸留（ＯＭＤ）を用いてガルシニア抽出物を濃縮する方法を開発することである。
【００１１】
本発明のさらに別の目的は、単純な１ステップであり、かつ効率的で経済的な、天然型（native form）のＨＣＡを濃縮する方法を提供することである。
【課題を解決するための手段】
【００１２】
したがって、本発明は、
ａ）ガルシニア属の種から生じる乾燥果実の外皮を集めること、
ｂ）ガルシニア・ペドゥンクラータ／ガルシニア・コーワの外皮を３×９ｍｍ〜６×１４ｍｍの大きさに手作業で切断すること、
ｃ）１１０〜１３０℃で１５〜３５分間、体積比１：４で脱イオン水で抽出すること、
ｄ）前記抽出物を濾布で濾過すること、
ｅ）並流平膜モジュール内で浸透膜蒸留(ＯＭＤ)を行うことによりＨＣＡを濃縮すること、
ｆ）モジュールの適切な空間を有する２つの鉄骨フレームＳＳ３１６の間に、疎水膜を配置すること、
ｇ）多段蠕動ポンプを用いて、前記膜の片側に流速１００〜１５０ｍｌ／分で前記抽出物を循環させること、
ｈ）多段蠕動運動ポンプを用いて前記膜のもう一方の側の疎水膜浸透物質（hydrophobic membrane osmotic agent：ＯＡ）、
ｉ）前記抽出物が供給タンク中で濃縮されるまで、約４〜６時間ＯＭＤを行うこと、
を含む、ガルシニア抽出物を濃縮する非熱処理方法を提供する。
【発明を実施するための最良の形態】
【００１３】
本発明の一実施形態では、ＨＣＡ濃縮物は、ガルシニア・ペドゥンクラータおよびガルシニア・コーワの水抽出物から得られる。
【００１４】
本発明の別の実施形態では、濃縮されたガルシニア抽出物は、非熱的な膜処理方法、すなわち、室温（２５±１℃）および環境気圧（１気圧）下で浸透膜蒸留（ＯＭＤ）を行うことにより得られる。
【００１５】
本発明のさらに別の実施形態では、濃縮ガルシニア抽出物のＨＣＡ含有率は、ＨＰＬＣ法で測定して３３〜３７％の範囲内である。
【００１６】
本発明のさらに別の実施形態では、ＨＣＡ含有率が４〜６倍に上昇し、かつ、ＨＣＡはラクトンを生成することなくその商業的および栄養的価値を増大させる天然型（誘導体ではない）として存在する、単純な１ステップの方法により、ガルシニア抽出物は濃縮される。
【００１７】
本発明では、ガルシニア・ペドゥンクラータ／ガルシニア・コーワの外皮を小断片に切断し、脱イオン水で抽出した。その抽出物を濾布（フィルタークロス）でろ過した。
【００１８】
ＨＣＡは、並流平膜モジュール（co-current flat membrane module）内で浸透膜蒸留を行うことにより濃縮した。膜モジュールは２つの鉄骨フレームＳＳ３１６から成り、その間に疎水性の膜を配置した。多段蠕動ポンプ（multi-stage peristaltic pump）を用いて、濾液全体をＯＭＤ膜の片側で循環させ、もう一方の側では浸透物質（osmotic agent：ＯＡ）を循環させた。望ましい時間循環した後、抽出物は供給タンク中で濃縮された。
【００１９】
調製物の純度は、Jayaprakasha, G. K. and Sakariah, K. K.により報告されたようにＨＰＬＣ法で分析した（J. Liquid Chromatography & Related Technologies, 23, 915-923, 2000）。濃縮ヒドロキシクエン酸（０.１ｇ）を水に溶解し、水を加えて１００ｍｌにし、濾過した。高速液体クロマトグラフィーシステムには、ウォーターズ・マイクロボンダパックＴＭＣ１８カラム（長さ２５０ｍｍ×内径４.６ｍｍ：ウォーターズ社、ミルフォード、マサチューセッツ州、アメリカ）を装着した、ヒューレット・パッカード・ＨＰＬＣモデル・ＨＰ１１００シリーズ（ヒューレット・パッカード社、カリフォルニア州、アメリカ）を用いた。導入システム（レオダイン社）には、２０μＬのサンプルループを用いた。
【００２０】
検出は、ＨＰ１１００シリーズ可変波長検出器により２１０ｎｍの波長で行った。溶出は８ｍＭの硫酸を用いて行い、流速はアイソクラティック条件下で１.０ｍｌ／分とした。既知量（１０μｌ）の試料をＨＰＬＣに導入し、希釈係数を適用してＨＣＡ濃度をピーク面積から直接求めた。試料のＨＣＡ濃度は、試料１００ｇあたりのグラム数（ｇ／試料１００ｇ）で表した。ヒドロキシクエン酸の純度は、３３〜３５重量％であった。
【００２１】
本発明の重要な特徴を以下に示す。
１．濃縮ガルシニア抽出物を非熱的な膜処理により得ることができる。
２．本方法は、１ステップで濃縮抽出物を得ることができる。
３．本方法では、相変化が生じない。
４．本方法は、室温下および環境気圧下で行われるので、生成物に熱的損傷が生じない。
５．ＨＣＡ含有率が４〜６倍に上昇する。
４．本方法では、ラクトンが生成されない。
【実施例】
【００２２】
以下に示される実施例は、本発明の例示のためのものであって、本発明の範囲を限定するものであると解釈されるべきではない。
【００２３】
実施例１
ガルシニア・ペドゥンクラータの果実外皮５００ｇを小片に切断し、１２０℃で２０分間、１.５リットルの脱イオン水で抽出した。この抽出物を濾布で濾過した。抽出物を取り出し、微細孔性かつ疎水性の０.０５μｍのポリプロピレン膜を用いた並流平膜モジュール内において１００ｍｌ／分の流速で浸透膜蒸留を行うことにより濃縮した。モジュールは、浸透物質として飽和塩化カルシウムを用いて並流モードで動作させた。抽出物の体積が元の体積の１／５に減少するまで濃縮した。ＨＣＡの濃度は、６°Ｂｒｉｘ（ブリックス濃度）から６２°Ｂｒｉｘに上昇した。ＨＣＡ含有率をＨＰＬＣ法により測定したところ、ＨＣＡは最初の５.０９％から３３.５８％に上昇した（６倍の上昇）。
【００２４】
実施例２
ガルシニア・コーワの果実外皮１０００ｇを小片に切断し、オートクレーブを用いて１３０ｐｓｉの圧力で３０分間、３リットルの脱イオン水で抽出した。この抽出物を濾布で濾過した。抽出物を取り出し、微細孔性かつ疎水性の０.０５μｍのポリプロピレン膜を用いた並流平膜モジュール内において１３０ｍｌ／分の流速で浸透膜蒸留を行うことにより濃縮した。モジュールは、浸透物質として飽和塩化カルシウムを用いて並流モードで動作させた。抽出物の体積が元の体積の１／５に減少するまで濃縮した。ＨＣＡの濃度は、６°Ｂｒｉｘから６２°Ｂｒｉｘに上昇した。ＨＣＡ含有率をＨＰＬＣ法により測定したところ、ＨＣＡは最初の６％から３５.５％に上昇した（７倍の上昇）。
【００２５】
実施例３
ガルシニア・ペドゥンクラータの果実外皮１００ｇを小片に切断し、オートクレーブを用いて１２０℃で５０分間、１リットルの脱イオン水で抽出した。この抽出物を濾布で濾過した。抽出物を取り出し、微細孔性かつ疎水性の０.０５μｍのポリプロピレン膜を用いた並流平膜モジュール内において１５０ｍｌ／分の流速で浸透膜蒸留を行うことにより濃縮した。モジュールは、浸透物質として飽和塩化カルシウムを用いて並流モードで動作させた。抽出物の体積が元の体積の１／５に減少するまで濃縮した。ＨＣＡの濃度は、６°Ｂｒｉｘから６２°Ｂｒｉｘに上昇した。ＨＣＡ含有率をＨＰＬＣ法により測定したところ、ＨＣＡは最初の５％から３４.５％に上昇した（６倍の上昇）。
【００２６】
本発明の主な利点を以下に示す。
１．本方法は、単純な１ステップで濃縮された遊離ＨＣＡを得ることができる方法である。
２．この濃縮ガルシニア抽出物は、ナトリウム塩、カリウム塩およびカルシウム塩などの誘導体ではなく天然型である。したがって、この濃縮ガルシニア抽出物はより優れた生体利用性を有する。
３．本方法は非熱的であるため、生成物はいかなる熱的損傷も受けない。したがって、生成物は食物や治療への応用に適している。
４．本方法は容易にスケールアップすることができる。
【手続補正書】
【提出日】平成18年12月18日(2006.12.18)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】請求項１
【補正方法】変更
【補正の内容】
【請求項１】
ａ）ガルシニア属の種、ガルシニア・ペドゥンクラータおよびガルシニア・コーワから選択される果実の外皮を集め、切断するステップと、
ｂ）１１５〜１３０℃で２０〜３０分間、体積比１：４で前記切断外皮を脱イオン水で抽出し、抽出物を得るステップと、
ｃ）前記抽出物を濾過し、無粒子抽出物を得るステップと、
ｄ）前記抽出物の体積が元の体積の１／５に減少するまで、浸透物質の存在下で並流モードで前記無粒子抽出物を浸透膜蒸留するステップと、
を有する、濃縮ガルシニア抽出物の製造方法。
【手続補正２】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】請求項８
【補正方法】変更
【補正の内容】
【請求項８】
前記浸透膜蒸留は、前記抽出物が供給タンク中で濃縮されるまで、４〜６時間行われる、請求項１記載の方法。
【手続補正３】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】請求項１１
【補正方法】変更
【補正の内容】
【請求項１１】
ａ）ガルシニア属の種から生じる乾燥果実の外皮を集めるステップと、
ｂ）ガルシニア・ペドゥンクラータ／ガルシニア・コーワの外皮を３×９ｍｍ〜６×１４ｍｍの大きさに手作業で切断するステップと、
ｃ）１１０〜１３０℃で１５〜３５分間、体積比１：４で脱イオン水で抽出するステップと、
ｄ）前記抽出物を濾布で濾過するステップと、
ｅ）並流平膜モジュール内で浸透膜蒸留(ＯＭＤ)を行うことによりＨＣＡを濃縮するステップと、
ｆ）モジュールの適切な空間を有する２つの鉄骨フレームＳＳ３１６の間に、疎水膜を配置するステップと、
ｇ）多段蠕動ポンプを用いて、前記膜の片側に流速１００〜１５０ｍｌ／分で前記抽出物を循環させるステップと、
ｈ）多段蠕動運動ポンプを用いて前記膜のもう一方の側に疎水膜浸透物質（ＯＡ）ステップと、
ｉ）前記抽出物が供給タンク中で濃縮されるまで、４〜６時間ＯＭＤを行うステップと、
を有する、濃縮ガルシニア抽出物の製造方法。
【国際調査報告】
2007527359.tif 000002
2007527359.tif 000003