(57)【要約】【課題】形状又はサイズの均質性の高い細胞凝集塊を形成する。【解決手段】所望の細胞凝集塊を形成するための細胞接着部の周囲にダミー領域を設ける。【選択図】図３
2019110871.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
複数のウェルが形成され、
前記複数のウェルの各々の周囲には仕切り壁が形成されており、
前記複数のウェルの一つのウェルの表面には、
複数の第１の細胞接着部と、
第２の細胞接着部と、を有し、
前記複数の第１の細胞接着部は、前記一つのウェル内の第１の領域に形成され、
前記第２の細胞接着部は、前記一つのウェル内の第２の領域に形成され、
前記複数の第１の細胞接着部の全ては第１の形状を有しており、
前記第２の細胞接着部は、第２の形状を有しており、
前記第１の形状と前記第２の形状とは異なっており、
前記複数の第１の細胞接着部の全ては、前記第２の細胞接着部とは少なくとも細胞非接着部によって隔てられていること、
を特徴とする細胞培養プレート。
【請求項２】
請求項１に記載の細胞培養プレートにおいて、
前記複数の第１の細胞接着部の各々の第１の細胞接着部は、当該各々の第１の細胞接着部に前記複数の第１の細胞接着部のうち最も隣接する第１の細胞接着部とは、細胞非接着部により隔てられていること、
を特徴とする細胞培養プレート。
【請求項３】
請求項１又は２に記載の細胞培養プレートにおいて、
前記複数の第１の細胞接着部のうちいかなる二つの第１の細胞接着部の間には、前記第２の細胞接着部が形成されていないこと、
を特徴とする細胞培養プレート。
【請求項４】
請求項１乃至３のいずれかに記載の細胞培養プレートにおいて、
前記第２の細胞接着部は、前記複数の第１の細胞接着部と前記仕切り壁との間に形成されていること、
を特徴とする細胞培養プレート。
【請求項５】
請求項１乃至４のいずれかに記載の細胞培養プレートにおいて、
前記複数の第１の細胞接着部の各々の面積は、前記第２の細胞接着部の面積より小であること、
を特徴とする細胞培養プレート。
【請求項６】
請求項１乃至５のいずれかに記載の細胞培養プレートにおいて、
さらに第３の細胞接着部を有しており、
前記第３の細胞接着部は、前記第２の細胞接着部から少なくとも細胞非接着部によって隔てられていること、
を特徴とする細胞培養プレート。
【請求項７】
請求項６に記載の細胞培養プレートにおいて、
前記第３の細胞接着部は、前記第２の形状を有していること、
を特徴とする細胞培養プレート。
【請求項８】
請求項６又は７に記載の細胞培養プレートにおいて、
前記第２の細胞接着部と前記第３の細胞接着部との間には、前記複数の第１の細胞接着部が形成されていること、
を特徴とする細胞培養プレート。
【請求項９】
請求項６乃至８のいずれかに記載の細胞培養プレートにおいて、
前記第３の細胞接着部は、前記複数の第１の細胞接着部と前記仕切り壁との間に形成されていること、
を特徴とする細胞培養プレート。
【請求項１０】
請求項６乃至９のいずれかに記載の細胞培養プレートにおいて、
前記複数の第１の細胞接着部の全てが、前記第３の細胞接着部とは少なくとも細胞非接着部によって隔てられていること、
を特徴とする細胞培養プレート。
【請求項１１】
請求項６乃至１０のいずれかに記載の細胞培養プレートにおいて、
前記複数の第１の細胞接着部の各々の面積は、前記第３の細胞接着部の面積より小であること、
を特徴とする細胞培養プレート。
【請求項１２】
請求項１乃至５のいずれかに記載の細胞培養プレートにおいて、
さらに複数の第４の細胞接着部を有しており、
前記複数の第４の細胞接着部の全ては、前記第２の細胞接着部から少なくとも細胞非接着部によって隔てられていること、
を特徴とする細胞培養プレート。
【請求項１３】
請求項１２に記載の細胞培養プレートにおいて、
前記複数の第４の細胞接着部の各々は、互いに少なくとも細胞非接着部によって隔てられていること、
を特徴とする細胞培養プレート。
【請求項１４】
請求項１２又は１３に記載の細胞培養プレートにおいて、
前記複数の第４の細胞接着部の各々は、前記第２の形状を有していること、
を特徴とする細胞培養プレート。
【請求項１５】
請求項１２乃至１４のいずれかに記載の細胞培養プレートにおいて、
前記複数の第４の細胞接着部の各々は、少なくとも前記複数の第１の細胞接着部の全てから少なくとも細胞非接着部によって隔てられていること、
を特徴とする細胞培養プレート。
【請求項１６】
請求項１２乃至１５のいずれかに記載の細胞培養プレートにおいて、
前記複数の第４の細胞接着部のうち二つの第４の細胞接着部の間には、少なくとも前記複数の第１の細胞接着部が形成されていること、
を特徴とする細胞培養プレート。
【請求項１７】
請求項１２乃至１６のいずれかに記載の細胞培養プレートにおいて、
前記複数の第４の細胞接着部の各々の面積は、前記複数の第１の細胞接着部のいずれの面積より大であること、
を特徴とする細胞培養プレート。
【請求項１８】
請求項１乃至１７のいずれかに記載の細胞培養プレートにおいて、
前記複数の第１の細胞接着部の全ての面積は、実質的に同一であること、
を特徴とする細胞培養プレート。
【請求項１９】
請求項１乃至１８のいずれかに記載の細胞培養プレートにおいて、
前記第２の形状は一つの直線を有すること、
を特徴とする細胞培養プレート。
【請求項２０】
請求項１乃至１９のいずれかに記載の細胞培養プレートにおいて、
前記第２の形状は実質的に互いに平行な二つの直線を含んでいること、
を特徴とする細胞培養プレート。
【請求項２１】
請求項１乃至２０のいずれかに記載の細胞培養プレートにおいて、
前記第２の形状は長方形であること、
を特徴とする細胞培養プレート。
【請求項２２】
請求項１乃至２１のいずれかに記載の細胞培養プレートと、
複数の細胞凝集塊と、を含むこと、
を特徴とする細胞複合体。
【請求項２３】
請求項２２に記載の細胞複合体において、
前記複数の細胞凝集塊の各々は前記複数の第１の細胞接着部の一つの第１の細胞接着部に形成されており、
前記複数の細胞凝集塊のうち、前記複数の第１の細胞接着部の中で前記第２の細胞接着部に最も近い位置の第１の細胞接着部に形成された第１の細胞凝集塊の前記一つのウェルの表面と平行な断面の面積は、前記複数の細胞凝集塊の第２の細胞凝集塊の前記表面と平行な断面に対して１．２倍以下であり、
前記第１の細胞凝集塊は、前記第２の細胞接着部と前記第２の細胞凝集塊との間に位置していること、
を特徴とする細胞複合体。
【請求項２４】
請求項２３に記載の細胞複合体において、
前記第２の細胞凝集塊は、前記第１の細胞凝集塊と前記複数の細胞凝集塊の第３の細胞凝集塊との間に位置すること、
を特徴とする細胞複合体。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明のいくつかの態様は、細胞培養プレート及び細胞複合体に関する。
【背景技術】
【０００２】
細胞を培養するための培養面と、培養液交換型ダイアフラム式培養容器に装着し、ダイアフラムを作動させたときにダイアフラムが直接細胞面に接触することを防ぐための凸部を培養面上に有することを特徴とする細胞培養プレートが知られている（特許文献１）。
【先行技術文献】
【特許文献】
【０００３】
【特許文献１】特開平１０−３１３８５２号公報
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００４】
しかしながら、上記のような従来の細胞培養プレートでは、培養された細胞凝集塊又はスフェロイドが形成される位置が定まらないため、分光学的又は機械的な観察等の際に測定条件を一定することができない等の問題があった。
【０００５】
本発明のいくつかの態様は上記の課題を解決すべく行われたものであり、細胞凝集塊の形成される位置を制御できる細胞培養プレートを提供する。
【課題を解決するための手段】
【０００６】
本発明のいくつかの態様に係る細胞培養プレートは、複数のウェルが形成され、前記複数のウェルの各々の周囲には仕切り壁が形成されており、前記複数のウェルの一つのウェルの表面には、複数の第１の細胞接着部と、第２の細胞接着部と、を有し、前記複数の第１の細胞接着部は、前記一つのウェル内の第１の領域に形成され、前記第２の細胞接着部は、前記一つのウェル内の第２の領域に形成され、前記複数の第１の細胞接着部の全ては第１の形状を有しており、前記第２の細胞接着部は、第２の形状を有しており、前記第１の形状と前記第２の形状とは異なっており、前記複数の第１の細胞接着部の全ては、前記第２の細胞接着部とは少なくとも細胞非接着部によって隔てられていることを特徴とする。
【０００７】
上記の細胞培養プレートにおいて、「細胞接着部」とは、典型的には細胞を播種することにより細胞凝集塊が形成される部分を言い、「細胞非接着部」とは、典型的には細胞を播種しても細胞凝集塊が形成されない部分を言う。
【０００８】
上記の細胞培養プレートにおいて、前記複数の第１の細胞接着部の各々の第１の細胞接着部は、当該各々の第１の細胞接着部に前記複数の第１の細胞接着部のうち最も隣接する第１の細胞接着部とは、細胞非接着部により隔てられていることが好ましい。これにより、例えば、所望の位置に細胞凝集塊を形成することが可能となる。
【０００９】
上記のいずれかの細胞培養プレートにおいて、前記複数の第１の細胞接着部は互いに細胞非接着部により隔てられていることが好ましい。これにより、例えば、所望の場所に細胞凝集塊を形成することが可能となる。
【００１０】
上記のいずれかの細胞培養プレートにおいて、前記複数の第１の細胞接着部のうちいかなる二つの第１の細胞接着部の間には、前記第２の細胞接着部が形成されていないことが好ましい。
【００１１】
上記のいずれかの細胞培養プレートにおいて、前記第２の細胞接着部は、前記複数の第１の細胞接着部と前記仕切り壁との間に形成されていることが好ましい。このような構成の典型的な例は、前記第２の細胞接着部が、前記複数の第１の細胞接着部に対して周辺部にある構成である。これにより、例えば、播種した細胞のうち余剰な細胞が前記第２の細胞接着部に移動することで、前記複数の第１の細胞接着部に形成された細胞凝集塊の形状又はサイズ等の均質性を向上させることが可能となる。
【００１２】
上記のいずれかの細胞培養プレートにおいて、前記複数の第１の細胞接着部の各々の面積は、前記第２の細胞接着部の面積より小であることが好ましい。これにより、例えば、前記第２の細胞接着部が播種した細胞のうち余剰の細胞を収容して、前記複数の第１の細胞接着部に形成された複数の細胞凝集塊の形状又はサイズ等の均質性を向上させることが可能となる。
【００１３】
上記のいずれかの細胞培養プレートにおいて、さらに第３の細胞接着部を有しており、前記第３の細胞接着部は、前記第２の細胞接着部から少なくとも細胞非接着部によって隔てられていることが好ましい。
【００１４】
上記のいずれかの細胞培養プレートにおいて、前記第３の細胞接着部は、前記第２の形状を有していることが好ましい。つまり、前記第２の細胞接着部と前記第３の細胞接着部とを実質的に同一の形状にすることで、例えば、播種した細胞のうち余剰な細胞の収容量をある程度揃えられ、前記複数の第１の細胞接着部に形成される細胞凝集塊の形状又はサイズ等の均質性を向上させることが可能となる。
【００１５】
上記のいずれかの細胞培養プレートにおいて、前記第２の細胞接着部と前記第３の細胞接着部との間には、前記複数の第１の細胞接着部が形成されていることが好ましい。このような構成のうち典型的なものは、例えば、前記複数の第１の細胞接着部を挟んで前記第２の細胞接着部と前記第３の細胞接着部とが位置する構成である。これにより、例えば、播種した細胞のうち前記第１の細胞接着部の周囲の余剰な細胞が前記第２の細胞接着部及び前記第３の細胞接着部の各々に収容されるため、前記複数の第１の細胞接着部に形成される細胞凝集塊の形状又はサイズ等の均質性を向上させることが可能となる。
【００１６】
上記のいずれかの細胞培養プレートにおいて、前記第３の細胞接着部は、前記複数の第１の細胞接着部と前記仕切り壁との間に形成されていることが好ましい。このような構成のうち典型的なものは、例えば、前記第３の細胞接着部が、前記第１の複数の細胞接着部より外側に位置する構成である。これにより、例えば、播種した細胞のうち前記第１の細胞接着部の周囲の余剰な細胞が前記第３の細胞接着部に収容されるため、前記複数の第１の細胞接着部に形成される細胞凝集塊の形状又はサイズ等の均質性を向上させることが可能となる。
【００１７】
上記のいずれかの細胞培養プレートにおいて、前記複数の第１の細胞接着部の全てが、前記第３の細胞接着部とは少なくとも細胞非接着部によって隔てられていることが好ましい。これにより、例えば、播種した細胞のうち細胞非接着部に配置されたものは、一定の確率で前記複数の第１の細胞接着部と前記第３の細胞接着部に移動するため、前記複数の第１の細胞接着部には余剰の細胞が集まり難くなり、前記複数の第１の細胞接着部に形成される細胞凝集塊の形状又はサイズ等の均質性を向上せることが可能となる。
【００１８】
上記のいずれかの細胞培養プレートにおいて、前記複数の第１の細胞接着部の各々の面積は、前記第３の細胞接着部の面積より小であることが好ましい。これにより、例えば、播種した細胞のうち余剰なものは、前記第３の細胞接着部に収容され易くなるため、前記複数の第１の細胞接着部には余剰の細胞が集まり難くなり、前記複数の第１の細胞接着部に形成される細胞凝集塊の形状又はサイズ等の均質性を向上せることが可能となる。
【００１９】
上記のいずれかの細胞培養プレートにおいて、さらに複数の第４の細胞接着部を有しており、前記複数の第４の細胞接着部の全ては、前記第２の細胞接着部から少なくとも細胞非接着部によって隔てられていることが好ましい。これにより、例えば、前記複数の第４の細胞接着部が、播種した細胞のうち余剰の細胞を収容して、前記複数の第１の細胞接着部に形成された複数の細胞凝集塊の形状又はサイズ等の均質性を向上させることが可能となる。
【００２０】
上記のいずれかの細胞培養プレートにおいて、前記複数の第４の細胞接着部の各々は、互いに少なくとも細胞非接着部によって隔てられていることが好ましい。これにより、例えば、播種された細胞のうち余剰なものは、効率良く前記複数の第４の細胞接着部に収容され易くなる。
【００２１】
上記のいずれかの細胞培養プレートにおいて、前記複数の第４の細胞接着部の各々は、前記第２の形状を有していることが好ましい。これにより、例えば、播種された細胞のうち余剰なものは、一定の確率で前記複数の第４の細胞接着部の各々に収容され易くなるため、前記複数の第１の細胞接着部に形成される細胞凝集塊の形状又はサイズ等の均質性を向上させることが可能となる。
【００２２】
上記のいずれかの細胞培養プレートにおいて、前記複数の第４の細胞接着部の各々は、少なくとも前記複数の第１の細胞接着部の全てから細胞非接着部によって隔てられていることが好ましい。これにより、例えば、播種された細胞のうち細胞非接着部にあった余剰なものは、効率良く前記複数の第４の細胞接着部に収容され易くなる。
【００２３】
上記のいずれかの細胞培養プレートにおいて、前記複数の第４の細胞接着部のうち二つの第４の細胞接着部の間には、少なくとも前記複数の第１の細胞接着部が形成されていることが好ましい。これにより、例えば、細胞を播種した際の前記複数の第１の細胞接着部周辺の余剰な細胞は、前記複数の第４の細胞接着部に収容され、前記複数の第１の細胞接着部に形成される細胞凝集塊の形状又はサイズ等の均質性を向上させることが可能となる。
【００２４】
上記のいずれかの細胞培養プレートにおいて、前記複数の第４の細胞接着部の各々の面積は、前記複数の第１の細胞接着部のいずれの面積より大であることが好ましい。これにより、例えば、播種された細胞のうち前記複数の第１の細胞接着部の周辺に最初に配置された余剰な細胞は、前記複数の第４の細胞接着部に収容され、前記複数の第１の細胞接着部に形成される細胞凝集塊の形状又はサイズ等の均質性を向上させることが可能となる。
【００２５】
上記のいずれかの細胞培養プレートにおいて、前記複数の第１の細胞接着部の全ての面積は、実質的に同一であることが好ましい。これにより、例えば、前記複数の第１の細胞接着部に形成される細胞凝集塊の形状又はサイズ等の均質性を向上させることが可能となる。
【００２６】
上記のいずれかの細胞培養プレートにおいて、前記第２の形状は一つの直線を有することが好ましい。このような構成として典型的なものとしては、例えば、前記複数の第１の細胞接着部の最も前記第２の細胞接着部の近くに位置する一列の第１の細胞接着部と前記一つの直線との距離を実質的に同一にすることができるため、当該一列の第１の細胞接着部の各々周辺に配置された余剰な播種細胞を均等に前記第２の細胞接着部に収容することができるため、前記複数の第１の細胞接着部に形成される細胞凝集塊の形状又はサイズ等の均質性を向上させることが可能となる。
【００２７】
上記のいずれかの細胞培養プレートにおいて、前記第２の形状は実質的に互いに平行な二つの直線を含んでいることが好ましい。このような構成として典型的なものとしては、例えば、前記複数の第１の細胞接着部の最も前記第２の細胞接着部の近くに位置する一列の第１の細胞接着部と前記二つの直線との距離を実質的に同一にすることができるため、当該一列の第１の細胞接着部の各々周辺に当初配置された余剰な播種細胞を均等に前記第２の細胞接着部に収容することができるため、前記複数の第１の細胞接着部に形成される細胞凝集塊の形状又はサイズ等の均質性を向上させることが可能となる。
【００２８】
上記のいずれかの細胞培養プレートにおいて、前記第２の形状は長方形であることが好ましい。このような構成として典型的なものとしては、例えば、前記複数の第１の細胞接着部の最も前記第２の細胞接着部の近くに位置する一列の第１の細胞接着部と前記長方形の互いに平行な二つの直線との距離を実質的に同一にすることができるため、当該一列の第１の細胞接着部の各々周辺に当初配置された余剰な播種細胞を均等に前記第２の細胞接着部に収容することができる。このため、前記複数の第１の細胞接着部に形成される細胞凝集塊の形状又はサイズ等の均質性を向上させることが可能となる。
【００２９】
本発明のいくつかの態様に係る細胞複合体は、上記のいずれかの細胞培養プレートと、複数の細胞凝集塊と、を含むことを特徴とする。
【００３０】
上記の細胞複合体において、前記複数の細胞凝集塊の各々は前記複数の第１の細胞接着部の一つの第１の細胞接着部に形成されており、前記複数の細胞凝集塊のうち、前記複数の第１の細胞接着部の中で前記第２の細胞接着部に最も近い位置の第１の細胞接着部に形成された第一の細胞凝集塊の前記一つのウェルの表面と平行な断面の面積は、前記複数の細胞凝集塊の第２の細胞凝集塊の前記一つのウェルの表面と平行な断面に対して１．２倍以下であり、前記第１の細胞凝集塊は、前記第２の細胞接着部と前記第２の細胞凝集塊との間に位置していることが好ましい上記の細胞複合体において、前記第２の細胞凝集塊は、前記第１の細胞凝集塊と前記複数の細胞凝集塊の第３の細胞凝集塊との間に位置することが好ましい。
【図面の簡単な説明】
【００３１】
【図１】本発明の一つの態様に係る細胞培養プレートの外観を示す図である。
【図２】本発明の一つの態様に係る細胞培養プレートのウェルの構造を示す図である。
【図３】本発明の一つの態様に係るウェル内の構成例である。
【図４】本発明の一つの態様に係るウェル内の構成例である。
【図５】本発明の一つの態様に係るウェル内の構成例である。
【図６】本発明の一つの態様に係るウェル内の構成例である。
【図７】本発明の一つの態様に係るウェル内の構成例である。
【図８】本発明の一つの態様に係るウェル内の構成例である。
【図９】本発明の一つの態様に係るウェル内の構成例である。
【発明を実施するための形態】
【００３２】
以下、本発明に係る好適な実施形態について説明する。
【００３３】
本発明のいくつかの態様に係る細胞培養プレートの例として図１に示したような細胞培養プレートを示す。当該細胞培養プレートは複数のウェルＷを有している。
【００３４】
図１に示した細胞培養プレートの紙面に対して垂直方向の断面図を図２に示した。図２に示したようにウェルＷは、仕切り壁１によって隣接するウェルＷと隔てられている。ウェルＷは底部２を有する。
【００３５】
図３には、一つのウェルＷ内の底部２には複数の細胞接着部３、複数の細胞接着部４及び細胞非接着部５が形成されている。複数の細胞接着部３及び複数の細胞接着部４はそれぞれ播種された細胞が細胞凝集塊を形成する部分であり、細胞非接着部５は、播種された細胞が細胞凝集塊を実質的に形成しない部分である。
【００３６】
複数の細胞接着部３は全て実質的に同一のサイズ及び形状を有しており、図３に示した例では、複数の細胞接着部３は円形の形状を有している。複数の細胞接着部４も全て実質的に同一のサイズ及び形状を有しており、一つの第１の直線部分と対向する二つの第２の直線部分と仕切り壁１の一部に沿って形成された曲線部分とを有している。上記の一つ第１の直線部分は、上記の対向する二つ第２の直線部分より長くなっており、上記の一つ第１の直線部分は、前記複数の細胞接着部４の各々において、前記複数の細胞接着部３に最も近い位置にある。上記の曲線部分は、上記の一つの第１の直線部分と対向する位置にある。複数の細胞接着部３と複数の細胞接着部４とは互いにサイズも形状も異なっている。図３に示した構成例においては、複数の細胞接着部４の各々は、複数の細胞接着部３の各々より大きな面積を有している。また、複数の細胞接着部４の各々の外周の少なくとも一部を成す直線と複数の細胞接着部３のうち一組又は一列の細胞接着部３が実質的に等距離になるように形成されていることが好ましい。これにより、播種された細胞のうち当該一組又は一列の細胞接着部３の付近の余剰の細胞が同じような確率で細胞接着部４に収容され、複数の細胞接着部３に形成された細胞凝集塊の形状やサイズの均質性を向上させることが可能となる。
【００３７】
図３（ａ）に示した構成例と図３（ｂ）に示した構成例では、複数の細胞接着部３の配列が異なっている。図３（ａ）に示した構成では、ウェルＷの外周を成す仕切り壁１の一部に沿った、細胞接着部４の曲線部分と対向する位置にある第１の直線部分と実質的に平行になるように形成された細胞接着部３の一列の個数は、当該第１の直線部分からの距離によらず一定であるのに対して、図３（ｂ）に示した構成例では、当該第１の直線部分と実質的に平行になるように形成された細胞接着部３の一列の個数は、当該第１の直線部分からの距離によって異なっている。具体的には、図３（ｂ）に示した構成では、細胞接着部３の一列の個数は、当該第１の直線部分からの距離によって、３個、２個と二種類の個数になるように形成されている。
【００３８】
複数の細胞接着部３は互いに少なくとも細胞非接着部５により隔てられている。複数の細胞接着部４も互いに少なくとも細胞非接着部５により隔てられている。複数の細胞接着部３のうち複数の細胞接着部４の一つの細胞接着部４に最も近い位置にある細胞接着部３と当該一つの細胞接着部４との間も細胞非接着部５により隔てられている。
【００３９】
細胞非接着部５は、例えば、比較的極性の高いポリマーにより形成されている。具体的には、主鎖として、例えば、ポリビニルアルコールを、ポリエチレングリコール及びポリエチレンオキシド等が挙げられる。また、主鎖中に複数のアミド結合を有するポリマーであってもよい。
【００４０】
複数の細胞接着部３及び複数の細胞接着部４は、典型的には基材表面が露出するようにすることで形成される。
【００４１】
図３に示したような複数の細胞接着部３、複数の細胞接着部４及び細胞非接着部５を含むパターンは、典型的には、感光性樹脂組成物を塗布後、パターン露光することによって得られる。
【００４２】
図４に示した構成例は、図３に示した構成における複数の細胞接着部３と、図３に示した複数の細胞接着部４とは異なる形状を有する複数の細胞接着部６と、細胞非接着部５と、を有している。
【００４３】
複数の細胞接着部６の各々は、対向する第１の組の二つの直線と対向する第２の組の二つの直線とから構成される形状を有している。典型的には、複数の細胞接着部６は、長方形を有している。複数の細胞接着部６の各々は、図３に示した構成例とは異なり、ウェルＷの外周を成す仕切り壁１に沿って形成された曲線部分を有していない。
【００４４】
上記の第１の組の二つの直線と第２の組の二つの直線のうち、より長い直線で構成されるのは、上記第１の組である。上記第１の組の二つの直線のうち少なくとも一つの直線に平行になるように複数の細胞接着部３のうち当該少なくとも一つの直線に最も近い位置にある一列の細胞接着部３は、当該少なくとも一つの直線と実質的に平行に配列されている。
【００４５】
複数の細胞接着部６のうち対向して形成された二つの細胞接着部６の間には、少なくとも複数の細胞接着部３が形成されている。
【００４６】
複数の細胞接着部６の各々とウェルＷの外周を成す仕切り壁１との間の少なくとも一部分には細胞非接着部５が形成されている。
【００４７】
複数の細胞接着部３は互いに細胞非接着部５により隔てられている。複数の細胞接着部６も互いに細胞非接着部５により隔てられている。複数の細胞接着部３のうち複数の細胞接着部６の一つの細胞接着部６に最も近い位置にある細胞接着部３と当該一つの細胞接着部６との間も細胞非接着部５により隔てられている。
【００４８】
細胞非接着部５は、例えば、比較的極性の高いポリマーにより形成されている。具体的には、主鎖として、例えば、ポリビニルアルコールを、ポリエチレングリコール及びポリエチレンオキシド等が挙げられる。また、主鎖中に複数のアミド結合を有するポリマーであってもよい。
【００４９】
複数の細胞接着部３及び複数の細胞接着部６は、典型的には基材表面が露出するようにすることで形成される。
【００５０】
図３に示したような複数の細胞接着部３、複数の細胞接着部４及び細胞非接着部５を含むパターンは、典型的には、感光性樹脂組成物を塗布後、パターン露光することによって得られる。
【００５１】
図５に示した構成例は、図４に示した構成における複数の細胞接着部３とは異なる形状を有する複数の細胞接着部７と、図４に示した複数の細胞接着部６と、細胞非接着部５と、を有している。
【００５２】
複数の細胞接着部７の各々は、対向する第１の組の二つの直線と対向する第２の組の二つの直線とから構成される形状を有している。典型的には、複数の細胞接着部７の各々は、長方形を有している。
【００５３】
上記の第１の組の二つの直線と第２の組の二つの直線のうち、より短い直線で構成されるのは、上記第２の組である。複数の細胞接着部７の上記第２の組の二つの直線のうち少なくとも一つの直線は全て互いに実質的に平行であり、当該互いに平行な直線は、複数の細胞接着部６の一つの形状を構成する一辺と実質的に平行になるように形成されている。
【００５４】
図５に示した構成例では、複数の細胞接着部６は複数の細胞接着部７と長手方向が一致する一組の細胞接着部６を含む。複数の細胞接着部６と当該複数の細胞接着部７と長手方向が一致する一組の細胞接着部６とを面積も形状も実質的に同一するものとして良いが、例えば、当該一組の細胞接着部６のうち少なくとも一つの面積を変更しても良いし、当該一組の細胞接着部６のうち少なくとも一つの長辺と短辺の長さの比を変更しても良い。
【００５５】
複数の細胞接着部７は互いに細胞非接着部５により隔てられている。複数の細胞接着部６も互いに細胞非接着部５により隔てられている。複数の細胞接着部７のうち複数の細胞接着部６の一つの細胞接着部６に最も近い位置にある細胞接着部７と当該一つの細胞接着部６との間も細胞非接着部５により隔てられている。
【００５６】
図６に示した構成例は、図５に示した構成における複数の細胞接着部７と、図３に示した複数の細胞接着部４と、細胞非接着部５と、を有している。
【００５７】
複数の細胞接着部７の各々は、対向する第１の組の二つの直線と対向する第２の組の二つの直線とから構成される形状を有している。典型的には、複数の細胞接着部７の各々は、長方形を有している。
【００５８】
上記の第１の組の二つの直線と第２の組の二つの直線のうち、より短い直線で構成されるのは、上記第２の組である。複数の細胞接着部７の上記第２の組の二つの直線のうち少なくとも一つの直線は全て互いに実質的に平行であり、当該互いに平行な直線は、複数の細胞接着部４の一つの形状を構成する、ウェルＷの外周を成す曲線の一部に沿った部分に対向する一辺と実質的に平行になるように形成されている。
【００５９】
図６に示した構成例では、複数の細胞接着部４は複数の細胞接着部７と長手方向が一致する一組の細胞接着部７を含む。
【００６０】
複数の細胞接着部７は互いに細胞非接着部５により隔てられている。複数の細胞接着部４も互いに細胞非接着部５により隔てられている。複数の細胞接着部７のうち複数の細胞接着部４の一つの細胞接着部４に最も近い位置にある細胞接着部７と当該一つの細胞接着部４との間も細胞非接着部５により隔てられている。
【００６１】
図７に示した構成例は、図５及び図６に示した構成例における複数の細胞接着部７と、複数の細胞接着部８と、複数の細胞接着部９と、細胞非接着部５と、を有している。
【００６２】
図３乃至６に示した構成例とは異なり、図７に示した構成例では播種された細胞のうち余剰の細胞を収容する細胞接着部の形状が異なっている。具体的には、複数の細胞接着部８と複数の細胞接着部９とは、形状又は面積が異なっている。例えば、複数の細胞接着部８の各々の形状は円形であり、複数の細胞接着部９の各々の形状は長方形である。
【００６３】
複数の細胞接着部７の各々と複数の細胞接着部７のうち最も近い位置にある細胞接着部７との間の第１の距離と、複数の細胞接着部７のうち最も近い細胞接着部９のいずれかに最も近い位置にある細胞接着部７と当該最も近い細胞接着部９との間の第２の距離と、を互いに異ならせることができる。典型的には、第２の距離は第１の距離より大とすることが好ましい。
【００６４】
図３乃至図７に示した構成例において、細胞接着部４、６、８及び９は、所望の細胞凝集塊を形成するための細胞接着部３及び７とウェルＷの外周との間に形成されたダミー領域として使用することが可能である。
【００６５】
ダミー領域は、例えば、播種された細胞のうち余剰なものを収容することが可能である。典型的には、ダミー領域に形成された細胞凝集塊は、観察対象として利用しないことが好ましい。
【００６６】
後述する実施例に記載したように上記のようなダミー領域を所望の細胞凝集塊を形成させるための細胞接着部の周囲に形成していない場合は、当該細胞接着部の位置によって形成された細胞凝集塊のサイズや形状が大きく異なる場合がある。
【００６７】
これに対して、図８に示したように、複数の細胞接着部４を複数の細胞接着部３とウェルＷの外周を成す境界との間に配置されたダミー領域として用いることで、複数の細胞接着部３に形成された細胞凝集塊のサイズ又は形状の均一性を向上させることができる。
【００６８】
図８に示した構成は、図３（ａ）に示した構成例を実際の細胞培養に対して使用する場合であって、複数の細胞接着部３の３Ａは、複数の細胞接着部４の一つの細胞接着部４に最も近接している細胞接着部３であり、３Ｂは、３Ａに比べて当該一つの細胞接着部４に対して遠い位置にある。播種された細胞により複数の細胞接着部３には細胞凝集塊が形成されるが、３Ａに形成された細胞凝集塊は、３Ｂに形成された細胞凝集塊より僅かに大となるものの、直径は１．２倍以下に抑えられる。
【００６９】
一つの細胞凝集塊であっても、ダミー領域を用いることにより、形状を制御することが可能である。
【００７０】
例えば、図９に示した構成例は、図５に示した構成例を実際の細胞培養に対して使用する場合について説明する。細胞接着部７に形成された細胞凝集塊の細胞接着部７の長手方向に対して垂直方向かつ表面（底部）２に平行方向である７Ａの部分の幅は、当該細胞凝集塊の細胞接着部７の長手方向に対して垂直方向かつ表面（底部）２に平行方向である７Ｂの部分の幅より小となるものの、７Ｂの部分の当該幅を７Ａの部分の当該幅の１．２倍以下に抑えることができる。つまり周辺側に位置する細胞凝集塊に位置する部分の幅を広くなることを防ぐことができる。
【００７１】
[実施例１]
増殖性細胞であるヒト結腸癌細胞であるＤＬＤ−１細胞は、細胞１００，０００個／ｍＬの濃度で１０％ＦＢＳを含むＲＰＭＩ１６４０培地に懸濁する。９６ウェルプレート１ウェル当たり１００μＬを良く分散させた状態で細胞培養プレートに播種する。細胞を播種した細胞培養プレートを、播種後すぐに３７℃、０．５％二酸化炭素雰囲気、湿度９５％のインキュベータに移し、細胞が細胞接着部に接着するまで静置する。細胞が細胞接着部に接着するのに要する時間は、４時間程度である。培養５日目に培養表面のサークルパターンに形成された細胞凝集塊（スフェロイド）の直径を測定した結果、通常のパターンでは外周部のサークルに形成されたスフェロイド径の平均値は、それより内側に形成されたスフェロイド径平均値の約１．４倍を示し、全スフェロイドの直径のバラツキはＣＶ（％）が１７．５％である。
【００７２】
これに対して、培養表面にダミー培養領域を有する細胞培養プレートを用いた場合、外周部に形成されたスフェロイド径の平均値は、それより内側に形成されたスフェロイド径の平均値の１．１倍を示し、全スフェロイドのバラツキはＣＶ（％）が１７．５％に改善される。
【００７３】
[実施例２]
非増殖性の細胞ヒト初代肝細胞は細胞２００，０００個／ｍＬの濃度でＲＭ−１０１培地（肝細胞培養用培地，東洋合成工業）に懸濁する。９６ウェルプレート１ウェル当たり１００μＬを良く分散させた状態で播種する。細胞を播種したプレートを、播種後すぐに３７℃、０．５％二酸化炭素雰囲気、湿度９５％のインキュベータに移し、細胞が細胞接着部に接着するまで静置する。細胞が細胞接着部に接着するのに要する時間は、４８時間程度である。細胞播種３日目に培養表面のサークルパターンに形成されたスフェロイドの直径を測定した結果、通常のパターンでは外周部のサークルに形成されたスフェロイド径の平均値は、それより内側に形成されたスフェロイド径平均値の約１．３倍を示し、全スフェロイドの直径のバラツキはＣＶ（％）が１４．７％である。これに対し、培養表面に「ダミー培養領域」が形成された上記いずれかの細胞培養プレートを用いた場合、外周部に形成されたスフェロイド径の平均値は、それより内側に形成されたスフェロイド径の平均値とほぼ同じ値を示し、全スフェロイドのバラツキはＣＶ（％）が５．２％に改善される。
【符号の説明】
【００７４】
Ｗ  ウェル
１  仕切壁
２  表面（底部）
３  細胞接着部
４  細胞接着部
５  細胞非接着部
６  細胞接着部
７  細胞接着部
８  細胞接着部
９  細胞接着部
【図１】
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【図２】
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【図３】
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【図４】
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【図５】
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【図６】
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【図７】
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【図８】
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【図９】
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