(57)【要約】  開示されたのはＶＬＡ−４に結合する抱合体類である。これら抱合体類の幾つかは白血球接着、具体的にはＶＬＡ−４が介在する白血球接着モ阻止する。当該抱合体類は、喘息、アルツハイマー病、アテローム性動脈硬化症、ＡＩＤＳ、認知症、糖尿病、炎症性腸疾患、リューマチ性関節炎、組織移植、腫瘍転移および心筋虚血のような哺乳類患者、例えばヒトにおける炎症性疾患に有効である。当該抱合体類は多発性硬化症のような炎症性脳疾患群の治療にも投与することができる。【特許請求の範囲】
【請求項１】
式Ｉの抱合体またはその薬学的に許容できる塩に関し：
【化１】
2007518825.tif 000064
式中、ＲはＰＯＡＭ部分またはＲａで、Ｒａはアミノ、ヒドロキシル、アルコキシ、置換アルコキシ、置換アミノ、アルキルおよび置換アルキル、−アルキル−Ｏ−アルキル、置換−アルキル−Ｏ−アルキルでからなる群から選択され、各Ｒａは場合によりＲａと状況に応じてリンカーにより共有結合したＰＯＡＭ部分で置換されており；
Ａｒ１はアリール、置換アリール、ヘテロアリールおよび置換ヘテロアリールからなる群から選択され、各Ａｒ１は場合によりＡｒ１と状況によりリンカーで共有結合したＰＯＡＭ部分で置換されており；
Ａｒ２はアリール、置換アリール、ヘテロアリールおよび置換ヘテロアリールからなる群から選択され、各Ａｒ２は場合によりＡｒ２と状況によりリンカーで共有結合したＰＯＡＭ部分で置換されており；
Ｗは−（ＣＨ２）ｍ−、−ＣＨ２−Ｃ（Ｏ）−、−Ｃ（Ｏ）−および−ＣＨ２−Ｃ（Ｏ）−ＣＨ２−からなる群から選ばれ；
Ｘは−Ｓ−、−ＳＯ−、−ＳＯ２および状況により置換されている−ＣＨ２−からなる群から選ばれ、；
Ｙは−Ｏ−、−Ｓ−および−ＮＲ１−からなる群から選ばれ、Ｒ１は水素およびＣ１〜Ｃ５アルキルからなる群から選ばれ；
Ｖは、
（ａ）−Ｙ（ＣＯ）−と場合によりリンカーにより共有結合しているＰＯＡＭ部分；および
（ｂ）式中Ｒ２とＲ３はアルキルおよび置換アルキルからなる群から別個に選ばれる−ＮＲ２Ｒ３であるＶａ；そして
（ｃ）複素環または置換された複素環を表す、−ＮＲ２Ｒ３であるＶｂ、
（式中ＶａおよびＶｂのそれぞれは場合によりＰＯＡＭ部分で置換され、当該ＰＯＡＭ部分はＶａおよびＶｂ内でアルキル、置換アルキル、複素環類または置換された複素環類に、場合によりリンカーにより共有結合している）からなる群から選ばれ；
ｍは０、１または２に相当する整数で、ｍが０のときＸは場合により置換−ＣＨ２−であり；そして
ｎは０、１または２に相当する整数であるが；
ただしＲ、Ａｒ１、Ａｒ２、Ｖおよび−ＮＲ２Ｒ３の少なくとも１つがＰＯＡＭ部分を含有するのが条件で；更にＲがＰＯＡＭ部分である場合、ｎは１でＸは−Ｓ−、−ＳＯ−、−ＳＯ２−ではないのが条件で；そして更に式Ｉの抱合体は１００，０００以下の分子量を有するのが条件である、前記式Ｉの抱合体またはその薬学的に許容できる塩。
【請求項２】
以下の式１ａである、
【化２】
2007518825.tif 000065
請求項１記載の抱合体。
【請求項３】
以下の式ＩＩである、
【化３】
2007518825.tif 000066
請求項１記載の抱合体。
【請求項４】
以下の式ＩＩＩである、
【化４】
2007518825.tif 000067
請求項１記載の抱合体。
【請求項５】
以下の式ＩＶであるが、
【化５】
2007518825.tif 000068
ただしＲ、Ａｒ１、Ａｒ２および−ＮＲ２Ｒ３の少なくとも１つが場合によりリンカーを含むＰＯＡＭ部分を含有するのが条件で；そして更に式ＩＶの抱合体は１００，０００以下の分子量を有するのが条件である、請求項１記載の抱合体。
【請求項６】
以下の式Ｖであるが、
【化６】
2007518825.tif 000069
ただしＡｒ１、Ａｒ２および−ＮＲ２Ｒ３の少なくとも１つが場合によりリンカーを含むＰＯＡＭ部分を含有するのが条件で；そして更に式Ｖの抱合体は１００，０００以下の分子量を有するのが条件である、請求項１記載の抱合体。
【請求項７】
以下の式ＶＩであり、
【化７】
2007518825.tif 000070
式中Ｒ４は場合によりリンカーで環に共有結合したＰＯＡＭ部分であり；
Ｒ５はアルキルおよび置換アルキルからなる群から選ばれ；
Ａｒ３はアリール、置換アリール、ヘテロアリールおよび置換ヘテロアリールからなる群から選ばれ；
Ｘは−Ｓ−または場合により置換された−ＣＨ２−からなる群から選ばれ；
ｍは０，１または２に相当する整数で；
ｎは０から２に相当する整数であるが；
ただし式ＶＩの抱合体は１００，０００以下の分子量を有することが条件である、請求項１記載の抱合体。
【請求項８】
以下の式ＶＩＩであり、
【化８】
2007518825.tif 000071
式中、Ｒ４は場合によりリンカーで環に共有結合したＰＯＡＭ部分であり；
Ｒ５はアルキルおよび置換アルキルからなる群から選ばれ；
Ａｒ３はアリール、置換アリール、ヘテロアリールおよび置換ヘテロアリールからなる群から選ばれ；
ｎは０から２に相当する整数であるが；
ただし式ＶＩＩの抱合体は１００，０００以下の分子量を有することが条件である、請求項１記載の抱合体。
【請求項９】
以下の式ＶＩＩＩであり、
【化９】
2007518825.tif 000072
式中、Ｒ４は場合によりリンカーで当該環に共有結合したＰＯＡＭ部分であり；
Ａｒ３はアリール、置換アリール、ヘテロアリールおよび置換ヘテロアリールからなる群から選ばれるが；
ただし式ＶＩＩＩの抱合体は１００，０００以下の分子量を有することが条件である、請求項１記載の抱合体。
【請求項１０】
請求項１記載の抱合体であって、式中Ａｒ１がＰＯＡＭ部分を含有しない場合、Ａｒ１は：フェニル、４−メチルフェニル、４−ｔ−ブチルフェニル、２，４，６−トリメチルフェニル、２−フルオロフェニル、３−フルオロフェニル、４−フルオロフェニル、２，４−ジフルオロフェニル、３，４−ジフルオロフェニル、３，５−ジフルオロフェニル、２−クロロフェニル、３−クロロフェニル、４−クロロフェニル、３，４−ジクロロフェニル、３，５−ジクロロフェニル、３−クロロ−４−フルオロフェニル、４−ブロモフェニル、２−メトキシフェニル、３−メトキシフェニル、４−メトキシフェニル、３，４−ジメトキシフェニル、４−ｔ−ブトキシフェニル、４−（３'−ジメチルアミノ−ｎ−プロポキシ）−フェニル、２−カルボキシフェニル、２−（メトキシカルボニル）フェニル、４−（Ｈ２ＮＣ（Ｏ）−）フェニル、４−（Ｈ２ＮＣ（Ｓ）−）フェニル、４−シアノフェニル、４−トリフルオロメチルフェニル、４−トリフルオロメトキシフェニル、３，５−ジ−（トリフルオロメチル）フェニル、４−ニトロフェニル、４−アミノフェニル、４−（ＣＨ３Ｃ（Ｏ）ＮＨ−）フェニル、４−（ＰｈＮＨＣ（Ｏ）ＮＨ−）フェニル、４−アミジノフェニル、４−メチルアミジノフェニル、４−［ＣＨ３ＳＣ（＝ＮＨ）−］フェニル、４−クロロ−３−［Ｈ２ＮＳ（Ｏ）２−］フェニル、１−ナフチル、２−ナフチル、ピリジン−２−イル、ピリジン−３−イル、ピリジン−４−イル、ピリミジン−２−イル、キノリン−８−イル、２−（トリフルオロアセチル）−１，２，３，４−テトラヒドロイソキノリン−７−イル、２−チエニル、５−クロロ−２−チエニル、２，５−ジクロロ−４−チエニル、１−Ｎ−メチルイミダゾール−４−イル、１−Ｎ−メチルピラゾール−３−イル、１−Ｎ−メチルピラゾール−４−イル、１−Ｎ−ブチルピラゾール−４−イル、１−Ｎ−メチル−３−メチル−５−クロロピラゾール−４−イル；１−Ｎ−メチル−５−メチル−３−クロロピラゾール−４−イル；２−チアゾリルおよび５−メチル−１，３，４−チアジアゾール−２−イルからなる群から選ばれる、前記請求項1記載の抱合体。
【請求項１１】
請求項１記載の抱合体であって、Ａｒ１がＰＯＡＭ基を含有する場合、Ａｒ１、当該ＰＯＡＭ基および任意のリンカーは好ましくは以下の式で表され：
−Ａｒ１−Ｚ−（ＣＨ２ＣＨＲ７Ｏ）ｐＲ８
式中Ａｒ１はアリール、置換アリール、ヘテロアリールおよび置換ヘテロアリールからなる群から選ばれ、
Ｚは共有結合、１から４０原子の連結鎖、−Ｏ−、−Ｓ−および−ＮＲ９−からなる群から選ばれ、Ｒ９は水素およびＣ１〜Ｃ５アルキルからなる群から選ばれ、
Ｒ７は水素およびメチルからなる群から選ばれ；
Ｒ８は水素、アルキル、置換アルキル、アリール、置換アリールおよび−ＣＨ２ＣＨＲ７ＮＲ１０Ｒ１１からなる群から選ばれ、Ｒ７は前に定義したもので、Ｒ１０およびＲ１１は水素およびアルキルからなる群から別個に選ばれ；そして
ｐはＰＯＡＭ部分の分子量が約１００から１００，０００の範囲であるような整数である、前記請求項１記載の抱合体。
【請求項１２】
請求項１記載の抱合体であって、ＲがＰＯＡＭ部分を含有しない場合、置換基の式は以下で：
【化１０】
2007518825.tif 000073
式中Ｒ'は場合により置換されたＣ１〜Ｃ５アルキルであり、好ましくはアゼチジニル、チアゾリジニル、チアゾリドニル、ピペリジニル、ピペラジニル、チオモルホリニル、ピロリジニル、ピログルタミル、４−ヒドロキシピロリジニル、４−オキソピロリジニル、４−フルオロピロリジニル、４，４−ジフルオロピロリジニル、４−（チオモルホリン−４−イルＣ（Ｏ）Ｏ−）ピロリジニル、４−［ＣＨ３Ｓ（Ｏ）２Ｏ−］ピロリジニル、３−フェニルピロリジニル、３−チオフェニルピロリジニル、４−アミノピロリジニル、３−メトキシピロリジニル、４，４−ジメチルピロリジニル、４−Ｎ−Ｃｂｚ−ピペラジニル、４−［ＣＨ３Ｓ（Ｏ）２−］ピペラジニル、５，５−ジメチルチアゾリンジン−４−イル、１，１−ジオキソ−チアゾリジニル、１，１−ジオキソ−５，５−ジメチルチアゾリジン−２−イルおよび１，１−ジオキソチオモルホリニルからなる群から選ばれる、前記請求項１記載の抱合体。
【請求項１３】
請求項１記載の抱合体であって、その中で以下の式の置換基がＰＯＡＭ部分を含有する場合、
【化１１】
2007518825.tif 000074
置換基は以下の式で：
【化１２】
2007518825.tif 000075
式中、Ｗは−（ＣＨ２）ｍ−で、ｍは０、１または２に相当する整数で；
Ｚは共有結合、１から４０個の原子の連結基、−Ｏ−、−Ｓ−および−ＮＲ９−からなる群から選ばれ、Ｒ９は水素およびＣ１〜Ｃ５アルキルからなる群から選ばれ、
Ｒ７は水素およびメチルからなる群から選ばれ；
Ｒ８は水素、アルキル、置換アルキル、アリール、置換アリールおよび−ＣＨ２ＣＨＲ７ＮＲ１０Ｒ１１からなる群から選ばれ、Ｒ７は前に定義したものであり、Ｒ１０およびＲ１１は水素およびアルキルからなる群から別個に選ばれ；そして
ｐはＰＯＡＭ部分の分子量が約１００から１００，０００の範囲であるような整数である、前記請求項１記載の抱合体。
【請求項１４】
Ａｒ２がＰＯＡＭ部分を含有しない場合、Ａｒ２はフェニル、２−ピリジル、３−ピリジル、４−ピリジルおよび４−ピリド−２−オニルからなる群から選ばれる、請求項１記載の抱合体。
【請求項１５】
請求項１記載の抱合体であって、Ａｒ２がＰＯＡＭ部分を含有する場合、Ａｒ２は、当該ＰＯＡＭ部分および任意のリンカーは以下の式で表され：
【化１３】
2007518825.tif 000076
式中、Ａｒ２はアリール、置換アリール、ヘテロアリールおよび置換ヘテロアリールからなる群から選ばれ；
Ｚは共有結合、１から４０個の原子の連結基、−Ｏ−、−Ｓ−および−ＮＲ９−からなる群から選ばれ、Ｒ９は水素およびＣ１〜Ｃ５アルキルからなる群から選ばれ、
Ｒ７は水素およびメチルからなる群から選ばれ；
Ｒ８は水素、アルキル、置換アルキル、アリール、置換アリールおよび−ＣＨ２ＣＨＲ７ＮＲ１０Ｒ１１からなる群から選ばれ、Ｒ７は前に定義したもので、Ｒ１０およびＲ１１は水素およびアルキルからなる群から別個に選ばれ；そして
ｐはＰＯＡＭ部分の分子量が約１００から１００，０００の範囲であるような整数である、前記請求項１記載の抱合体。
【請求項１６】
式中−ＹＣ（Ｏ）Ｖが−ＯＣ（Ｏ）ＮＲ２Ｒ３である、請求項１記載の抱合体。
【請求項１７】
請求項１６記載の抱合体であって、Ｒ２およびＲ３がＰＯＡＭ部分を含有しない場合、−ＯＣ（Ｏ）ＮＲ２Ｒ３は：
（ＣＨ３）ＮＣ（Ｏ）Ｏ−、（ピペリジン−１−イル）Ｃ（Ｏ）Ｏ−、（ピペリジン−４−イル）Ｃ（Ｏ）Ｏ−、（１−メチルピペリジン−４−イル）Ｃ（Ｏ）Ｏ−；（４−ヒドロキシピペリジン−１−イル）Ｃ（Ｏ）Ｏ−、（４−ホルミルオキシピペリジン−１−イル）Ｃ（Ｏ）Ｏ−、（４−エトキシカルボニルピペリジン−１−イル）Ｃ（Ｏ）Ｏ−、（４−カルボキシルピペリジン−１−イル）Ｃ（Ｏ）Ｏ−、（３−ヒドロキシメチルピペリジン−１−イル）Ｃ（Ｏ）Ｏ−、（４−ヒドロキシメチルピペリジン−１−イル）Ｃ（Ｏ）Ｏ−、（４−フェニル−１−Ｂｏｃ−ピペリジン−４−イル）−Ｃ（Ｏ）Ｏ−、（４−ピペリドン−１−イルエチレンケタール）Ｃ（Ｏ）Ｏ−、（ピペラジン−４−イル）−Ｃ（Ｏ）Ｏ−、（１−Ｂｏｃ−ピペラジン−４−イル）−Ｃ（Ｏ）Ｏ−、（４−メチルピペラジン−１−イル）Ｃ（Ｏ）Ｏ−；（４−メチルホモピペラジン−１−イル）Ｃ（Ｏ）Ｏ−、（４−（２−ヒドロキシエチル）ピペラジン−１−イル）Ｃ（Ｏ）Ｏ−、（４−フェニルピペラジン−１−イル）Ｃ（Ｏ）Ｏ−、（４−（ピリジン−２−イル）ピペラジン−１）−イル）Ｃ（Ｏ）Ｏ−、（４−（４−トリフルオロメチルピリジン−２−イル）ピペラジン−１−イル）Ｃ（Ｏ）Ｏ−、（４−（ピリミジン−２−イル）ピペラジン−１−イル）Ｃ（Ｏ）Ｏ−、（４−アセチルピペラジン−１−イル）Ｃ（Ｏ）Ｏ−、（４−（フェニルＣ（Ｏ）−）ピペラジン−１−イル）Ｃ（Ｏ）Ｏ、（４−（ピリジン−４’−イルＣ（Ｏ）−）ピペラジン−１−イル）Ｃ（Ｏ）Ｏ、（４−（フェニルＮＨＣ（Ｏ）−）ピペラジン−１−イル）Ｃ（Ｏ）Ｏ−、（４−（フェニルＮＨＣ（Ｓ）−）ピペラジン−１−イル）Ｃ（Ｏ）Ｏ−、（４−メタンスルホニルピペラジン−１−イル−Ｃ（Ｏ）Ｏ−、（４−トリフルオロメタンスルホニルピペラジン−１−イル−Ｃ（Ｏ）Ｏ−、（モルホリン−４−イル）Ｃ（Ｏ）Ｏ−、（チオモルホリン−４−イル）Ｃ（Ｏ）Ｏ−、（チオモルホリン−４'−イルスルホン）−Ｃ（Ｏ）Ｏ−、（ピロリジン−１−イル）Ｃ（Ｏ）Ｏ−、（２−メチルピロリジン−１−イル）Ｃ（Ｏ）Ｏ−、（２−（メトキシカルボニル）ピロリジン−１−イル）Ｃ（Ｏ）Ｏ−、（２−（ヒドロキシメチル）ピロリジン−１−イル）Ｃ（Ｏ）Ｏ−、（２−（Ｎ，Ｎ−ジメチルアミノ）エチル）（ＣＨ３）ＮＣ（Ｏ）Ｏ−、（２−（Ｎ−メチル−Ｎ−トルエン−４−スルホニルアミノ）エチル）（ＣＨ３）Ｎ−Ｃ（Ｏ）Ｏ−、（２−（モルホリン−４−イル）エチル）（ＣＨ３）ＮＣ（Ｏ）Ｏ−、（２−（ヒドロキシ）エチル（ＣＨ３）ＮＣ（Ｏ）Ｏ−、ビス（２−（ヒドロキシ）エチル）ＮＣ（Ｏ）Ｏ−、（２−（ホルミルオキシ）エチル）（ＣＨ３）ＮＣ（Ｏ）Ｏ−、（ＣＨ３ＯＣ（Ｏ）ＣＨ２）ＨＮＣ（Ｏ）Ｏ−および２−（フェニルＮＨＣ（Ｏ）Ｏ−）エチル−］ＨＮＣ（Ｏ）Ｏ−からなる群から選ばれる、前記請求項１６記載の抱合体。
【請求項１８】
式中Ｒ２および／またはＲ３がＰＯＡＭ部分である場合、当該ＰＯＡＭ部分および任意のリンカーは以下の式で表され：
−Ｚ'−（ＣＨ２ＣＨＲ７Ｏ）ｐＲ８
Ｚ'は共有結合および１から４０原子の連結基からなる群から選ばれ；
Ｒ７は水素およびメチルからなる群から選ばれ；
Ｒ８は水素、アルキル、置換アルキル、アリール、置換アリールおよび−ＣＨ２ＣＨＲ７ＮＲ１０Ｒ１１からなる群から選ばれ、Ｒ７は前に定義したもので、Ｒ１０およびＲ１１は水素およびアルキルからなる群から別個に選ばれ；そして
ｐはＰＯＡＭ部分の分子量が約１００から１００，０００の範囲になるような整数である、請求項１６記載の抱合体。
【請求項１９】
請求項１６記載の抱合体であって、−ＹＣ（Ｏ）Ｖ置換基は以下からなる群から選ばれ、
−ＯＣ（Ｏ）ＮＨ（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）ｐＣＨ２ＣＨ２ＮＨ２；
−ＯＣ（Ｏ）ＮＨ（ＣＨ２ＣＨ（ＣＨ３）Ｏ）ｐＣＨ２ＣＨ（ＣＨ３）ＮＨ２；
−ＮＨＣ（Ｏ）Ｏ（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）ｐＨ；
−ＮＨＣ（Ｏ）Ｏ（ＣＨ２ＣＨ（ＣＨ３）Ｏ）ｐＨ；
−ＮＨＣ（Ｏ）Ｏ（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）ｐＣＨ３；
−ＮＨＣ（Ｏ）Ｏ（ＣＨ２ＣＨ（ＣＨ３）Ｏ）ｐＣＨ３；
−ＮＨＣ（Ｏ）Ｏ（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）ｐ−φ；
−ＮＨＣ（Ｏ）Ｏ（ＣＨ２ＣＨ（ＣＨ３）Ｏ）ｐ−φ；
−ＮＨＣ（Ｏ）ＮＨ（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）ｐＣＨ２ＣＨ２ＮＨ２；
−ＮＨＣ（Ｏ）ＮＨ（ＣＨ２ＣＨ（ＣＨ３）Ｏ）ｐＣＨ２ＣＨ（ＣＨ３）ＮＨ２；
−ＯＣ（Ｏ）ＮＨ−（１，４）−φ−Ｏ−（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）ｐＨ；
−ＯＣ（Ｏ）ＮＨ−（１，４）−φ−Ｏ−（ＣＨ２ＣＨ（ＣＨ３）Ｏ）ｐＨ；
−ＯＣ（Ｏ）ＮＨ−（１，４）−φ−Ｏ−（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）ｐＣＨ３；
−ＯＣ（Ｏ）ＮＨ−（１，４）−φ−Ｏ−（ＣＨ２ＣＨ（ＣＨ３）Ｏ）ｐＣＨ３；
−ＯＣ（Ｏ）ＮＨ（ＣＨ２ＣＨ（ＣＨ３）Ｏ）ｐＣＨ２ＣＨ（ＣＨ３）ＯＣＨ３；
−ＮＨＣ（Ｏ）ＮＨ（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）ｐＣＨ３；
−ＮＨＣ（Ｏ）ＮＨ（ＣＨ２ＣＨ（ＣＨ３）Ｏ）ｐＣＨ３；
【化１４−１】
2007518825.tif 000077
【化１４−２】
2007518825.tif 000078
【化１４−３】
2007518825.tif 000079
【化１４−４】
2007518825.tif 000080
【化１４−５】
2007518825.tif 000081
式中、φまたはＣ６Ｈ５はフェニルで、ｐは当該ＰＯＡＭ部分の分子量が約１００から１００，０００の範囲になるような整数で、ｖは１から５である、前記請求項１６記載の抱合体。
【請求項２０】
請求項１記載の抱合体につき、以下の群およびその薬学的に許容できる塩類からなる群から選ばれ、
【化１５−１】
2007518825.tif 000082
【化１５−２】
2007518825.tif 000083
【化１５−３】
2007518825.tif 000084
【化１５−４】
2007518825.tif 000085
式中、各々の場合でＰＯＡＭは約２０，０００の分子量（Ｍｗ）を有しているメチルで封鎖されたポリエチレンオキシド基である、請求項１記載の抱合体。
【請求項２１】
薬学的に許容できる担体および請求項１記載の抱合体またはその混合物の治療的効果量を含んでいる医薬組成物。
【請求項２２】
当該薬学的に許容できる担体が非経口投与に適したものである、請求項２１記載の医薬組成物。
【請求項２３】
当該薬学的に許容できる担体が皮下投与に適しているものである、請求項２１記載の医薬組成物。
【請求項２４】
当該薬学的に許容できる担体が注入で投与するのに適しているものである、請求項２１記載の医薬組成物。
【請求項２５】
当該薬学的に許容できる担体が注射で投与するのに適しているものである、請求項２１記載の医薬組成物。
【請求項２６】
当該薬学的に許容できる担体が経口投与に適しているものである、請求項２１記載の医薬組成物。
【請求項２７】
当該薬学的に許容できる担体が直腸投与に適しているものである、請求項２１記載の医薬組成物。
【請求項２８】
患者においてα４インテグリン介在白血球結合が少なくとも部分的に引き起こすかまたは悪化させる病状を治療する方法であって、請求項１記載の抱合体の効果量を投与することを含む前記方法。
【請求項２９】
阻害されるα４β１結合の相互作用がＶＣＡＭ−１によるものである、請求項２８の方法。
【請求項３０】
阻害されるα４β１結合の相互作用がフィブロネクチンによるものである、請求項２８の方法。
【請求項３１】
前記病状が自己免疫の病状である、請求項２８記載の方法。
【請求項３２】
請求項１の抱合体による治療で、自己免疫反応により引き起こされた炎症および続いて起こる組織損傷を軽減させる、請求項３１の方法。
【請求項３３】
当該病状が多発性硬化症、髄膜炎、脳炎、脳卒中および他の脳の外傷である、請求項２８の方法。
【請求項３４】
当該病状が多発性硬化症である、請求項２８の方法。
【請求項３５】
前記病状が喘息、成人型呼吸窮迫症候群および急性白血球介在肺損傷からなる群から選ばれる、請求項２８記載の方法。
【請求項３６】
当該病状が喘息である、請求項３５記載の方法。
【請求項３７】
前記病状がリューマチ性関節炎である、請求項２８記載の方法。
【請求項３８】
前記病状が、結節性紅斑、アレルギー性関節炎、視神経炎、ブドウ膜炎、アレルギー性鼻炎、強直性脊椎炎、乾癬性関節炎、血管炎、ライター症候群、全身性紅斑性狼瘡、進行性全身性硬化症、多発性筋炎、皮膚筋炎、ヴェグナー肉芽腫症、大動脈炎、サルコイドーシス、リンパ球減少症、側頭動脈炎、心膜炎、心筋炎、うっ血性心不全、結節性多発性動脈炎、過敏性症候群、アレルギー、好酸球増加症候群、チャーグ−シュトラウス症候群、慢性閉塞性肺疾患、過敏性肺炎、慢性活動性肝炎、間質性膀胱炎、自己免疫性内分泌不全、原発性胆汁性肝硬変、自己免疫再生不良性貧血、慢性持続性肝炎および甲状腺炎からなる群から選ばれる炎症性病状である、請求項２８記載の方法。
【請求項３９】
当該抱合体が以下の式１ａ、
【化１６】
2007518825.tif 000086
である、請求項２８記載の方法。
【請求項４０】
当該抱合体が以下の式ＩＩ、
【化１７】
2007518825.tif 000087
である、請求項２８記載の方法。
【請求項４１】
当該抱合体が以下の式ＩＩＩ、
【化１８】
2007518825.tif 000088
である、請求項２８の方法。
【請求項４２】
当該抱合体が以下の式ＩＶ、
【化１９】
2007518825.tif 000089
であるが、ただしＲ、Ａｒ１、Ａｒ２および−ＮＲ２Ｒ３の少なくとも１つが場合によりリンカーを含むＰＯＡＭ部分を含有することが条件で、更に式ＩＶの抱合体は１００，０００以下の分子量を有するのが条件である、請求項２８記載の方法。
【請求項４３】
当該抱合体が以下の式Ｖ、
【化２０】
2007518825.tif 000090
であるが、ただしＡｒ１、Ａｒ２および−ＮＲ２Ｒ３の少なくとも１つは場合によりリンカーを含むＰＯＡＭ部分を含有することが条件で、更に式Ｖの抱合体は１００，０００以下の分子量を有するのが条件である、前記請求項２８記載の方法。
【請求項４４】
請求項２８記載の方法であって、当該抱合体は以下の式ＶＩで、
【化２１】
2007518825.tif 000091
式中、Ｒ４は場合によりリンカーで環に共有結合したＰＯＡＭ部分であり；
Ｒ５はアルキルおよび置換アルキルからなる群から選ばれ；
Ａｒ３はアリール、置換アリール、ヘテロアリールおよび置換ヘテロアリールからなる群から選ばれ；
Ｘは−Ｓ−または場合により置換された−ＣＨ２−からなる群から選ばれ；
ｍは０，１または２に相当する整数で；
ｎは０から２に相当する整数であるが；
ただし式ＶＩの抱合体は１００，０００以下の分子量を有することが条件である、前記請求項２８記載の方法。
【請求項４５】
請求項２８記載の方法であって、当該抱合体は以下の式ＶＩＩで、
【化２２】
2007518825.tif 000092
式中Ｒ４は場合によりリンカーで当該環に共有結合したＰＯＡＭ部分であり；
Ｒ５はアルキルおよび置換アルキルからなる群から選ばれ；
Ａｒ３はアリール、置換アリール、ヘテロアリールおよび置換ヘテロアリールからなる群から選ばれ；
ｎは０から２に相当する整数であるが；
ただし式ＶＩＩの抱合体は１００，０００以下の分子量を有することが条件となる、前記請求項２８記載の方法。
【請求項４６】
請求項２８記載の方法であって、当該抱合体は式ＶＩＩＩであり、
【化２３】
2007518825.tif 000093
式中Ｒ４は場合によりリンカーで環に共有結合したＰＯＡＭ部分であり；
Ａｒ３はアリール、置換アリール、ヘテロアリールおよび置換ヘテロアリールからなる群から選ばれるが；
ただし式ＶＩＩＩの抱合体は１００，０００以下の分子量を有することが条件である、前記請求項２８記載の方法。
【請求項４７】
当該病状がシェーグレン病である、請求項２８の方法。
【請求項４８】
当該病状がクローン病である、請求項２８の方法。
【請求項４９】
当該病状が炎症性腸疾患である、請求項２８の方法。
【請求項５０】
当該病状が潰瘍性結腸炎である、請求項２８の方法。
【請求項５１】
請求項１記載の抱合体をα４β７阻害剤と組合せて含む、医薬組成物。
【請求項５２】
患者において少なくとも部分的にアルファ４インテグリン介在白血球結合が引き起こすかまたは悪化させる病状を治療する方法であって、請求項１記載の抱合体の効果量とα４β７阻害剤の効果量の同時投与を含む前記方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
（関連出願の相互参照）
本出願は２００４年１月２３日に提出し、その全体は参照により本明細書に組入れている米国仮出願番号６０／５３８，５７３号に基づいて優先権を主張する。
【０００２】
（本発明の背景）
（本発明の分野）
本発明は白血球接着、詳しくはアルファ４インテグリン類が介在する白血球接着を阻害する化合物類に関する。本発明の化合物類は共有的に結合している１つ以上のポリエチレングリコール置換基を含有する抱合体類であることを特長とする。当該抱合体類はポリエチレングリコール置換基がない化合物類と比較して血清中半減期が長くなり、そして他の有利な薬物動態学的性質を示す。
【背景技術】
【０００３】
（当該技術の状況）
炎症性白血球の相互および身体の他の細胞との物理的相互作用は免疫および炎症作用を調節する際に重要な役割を果たす［Ｓｐｒｉｎｇｅｒ，Ｔ．Ａ．Ｎａｔｕｒｅ，３４６，４２５，（１９９０）；Ｓｐｒｉｎｇｅｒ，Ｔ．Ａ．Ｃｅｌｌ  ７６，３０１、（１９９１）］。これらの相互作用の多くは細胞接着分子と呼ばれる特定の細胞表面分子類が集団で仲介する。これらの接着分子類はそれらの構造に基づき異なる群に更に分けられる。免疫および炎症反応を調節する際に重要な役目を果たすと考えられる接着分子類の１つの族はインテグリン族である。この細胞表面糖タンパク質の族は典型的には非共有結合したヘテロ二量体構造を有している。
【０００４】
本明細書の興味ある特有なインテグリン亜類にはアルファ４（α４）鎖が含まれ、それは２つの異なるベータ鎖であるベータ１（β１）およびベータ７（β７）と対形成することができる［Ｓｏｎｎｅｎｂｅｒｇ，Ａ．同書］。当該α４β１対形成は循環している白血球類にて生じるが（例えばリンパ球類、単球類および好酸球類）、循環している好中球類では起こらないか起こっても低いレベルである。最初ＨｅｌｍｅｒおよびＴａｋｅｄａ１が同定したＶＬＡ−４（最晩期抗原−４、α４β１インテグリンおよびＣＤ４９ｄ／ＣＤ２９とも呼ばれる）は細胞表面受容体類のβ１インテグリン族の一員である。ＶＬＡ−４はα４鎖とβ１鎖から構成されている。少なくとも９種のβ１インテグリン類があり、全てが同じβ１鎖を分かち合い、各々異なるα鎖を有している。これら９種の受容体類は全てフィブロネクチン、ラミニンおよびコラーゲンのような種々の細胞マトリックス分子類の異なる補体に結合する。例えば、ＶＬＡ−４はフィブロネクチンに結合する。ＶＬＡ−４は内皮および他の細胞が発現する非マトリックス分子類とも結合する。
【０００５】
ＶＬＡ−４（α４β１インテグリン）は血管細胞接着分子−１（またはＶＣＡＭ−１）と呼ばれる接着分子に結合し、しばしば炎症部位にある内皮細胞類において上方制御される［Ｏｓｂｏｒｎｅ，Ｌ．Ｃｅｌｌ，６２，３（１９９０）］．ＶＣＡＭ−１は非マトリックス分子で、中枢神経系（ＣＮＳ）へ白血球を輸送するのに関与すると考えられている。α４β１は基質分子のフィブロネクチンにおいて少なくとも３個所で結合することが示されている［Ｈｕｍｐｈｒｉｅｓ，Ｍ．Ｊ．ｅｔ  ａｌ．Ｃｉｂａ  Ｆｏｕｎｄａｔｉｏｎ  Ｓｙｍｐｏｓｉｕｍ，１８９，１７７（１９９５）］．ＶＬＡ−４の異なるエピトープ類はフィブロネクチンおよびＶＣＡＭ−１結合活性に関与し、各々別個に阻害されることが示されている。２動物モデル群におけるモノクローナル抗体群で得られたデータに基づくと、α４β１と他の細胞類上のリガンド群や細胞外マトリックスとの相互作用が白血球の遊走や活性化に重要な役割を果たしている［Ｙｅｄｎｏｃｋ，Ｔ．Ａ．ｅｔ  ａｌ．Ｎａｔｕｒｅ，３５６，６３（１９９２）］。
【０００６】
α４とβ７の対形成で生じるインテグリンはＬＰＡＭ−１［Ｈｏｌｚｍａｎｎ，Ｂ  ａｎｄ  Ｗｅｉｓｓｍａｎ，Ｉ．ＥＭＢＯ  Ｊ．８，１７３５，（１９８９）］と呼ばれ、α４β１同様にＶＣＡＭ−１およびフィブロネクチンに結合できる。更に加えて、アルファ４ベータ７は白血球のＭＡｄＣＡＭ−１と名付けた粘膜組織へのホーミングに関与すると考えられている接着分子に結合する［Ｂｅｒｌｉｎ，Ｃ．ｅｔ  ａｌ．Ｃｅｌｌ，７４，１８５，（１９９３）］。α４β７とＭＡｄＣＡＭ−１の間の相互作用は粘膜組織外の炎症部位においても重要である［Ｙａｎｇ，Ｘ−Ｄ．ｅｔ  ａｌ．ＰＮＡＳ，９１，１２６０４（１９９４）］。
【０００７】
ＶＬＡ−４および他細胞表面受容体類が仲介する細胞間接着は多くの炎症反応に関連している。傷害部位または他の炎症性刺激部位では、活性化した血管内皮細胞群が白血球群に接着する分子群を発現する。白血球の内皮細胞群への接着の機構は、1つには白血球群上にある細胞表面受容体群の内皮細胞群上にある対応する細胞表面分子に対する識別と結合が関係する。一旦結合すると、当該白血球群は血管壁を通って遊走して傷害部位に入り、感染と戦う化学メディエーター類を放出する。免疫系の接着受容体類の概説については、例えばＳｐｒｉｎｇｅｒ３およびＯｓｂｏｒｎ４を参照。
【０００８】
多発性硬化症（ＭＳ）、髄膜炎、脳炎および実験的自己免疫脳脊髄炎（ＥＡＥ）という病気モデルのような炎症性脳障害群は中枢神経系障害群の実例で、その中では内皮細胞／白血球接着機構が、それがなければ健康である脳組織に破壊を生じる。これらの炎症性疾患を有する患者類にては数多くの白血球が当該血液脳関門（ＢＢＢ）を通して遊走する。当該白血球は広範囲の細胞損傷と死を生じる毒性メディエーターを放出し、神経伝動の損傷および麻痺を起こす。脳炎および髄膜炎での同様の出来事は、これらの病気は適当な細胞接着阻害剤類で治療ができることを示唆する。
【０００９】
他の器官系では、組織損傷は白血球の遊走または活性化を生じる接着機構を経由しても起こる。例えば、炎症性腸疾患１５（潰瘍性大腸炎およびクローン病を含む）は少なくともある程度はα４β７のＭａｄＣＡＭとの相互作用を経由する腸内皮を通じる白血球の輸送とともに、可能性としてこの組織中に発現するα４β１のＶＣＡＭ−１との相互作用により引き起こされる。喘息６〜８、リウマチ性関節炎１８〜２１および組織移植片拒絶反応２２は全てα４β１のＶＣＡＭ−１および／またはフィブロネクチンの相互作用、おそらくは両方に基づく要素を有すると考えられている。心筋（心臓組織）虚血を伴う最初の損傷は、更なる損傷を引き起こす白血球の損傷部への侵入で一段と複雑化する（Ｖｅｄｄｅｒ  ｅｔ  ａｌ．５）。接着分子機構が仲介する他の炎症または病状には、例としてアルツハイマー病、アテローム性動脈硬化症９〜１０、エイズによる認知症１１、糖尿病１２〜１４（急性若年型糖尿病を含む）、腫瘍転移２３〜２８、脳卒中および他の脳外傷、腎炎、網膜炎、アトピー性皮膚炎、乾癬および成人呼吸不全症候群で生じるような急性白血球介在肺損傷が含まれる。
【００１０】
抗炎症剤群として見込みがあるＶＬＡ−４拮抗剤類の一群は、例えば米国特許第６，４８９，３００号３１で示されているようなスルホニル化−プロリン−フェニルアラニン化合物類の部類である。これらの化合物類はＶＬＡ−４／ＶＣＡＭ−１結合の非常に強力な拮抗剤類である。
【００１１】
大規模な初回通過の肝臓代謝により、これらの化合物は経口利用がしづらい。これらの化合物類で治療できる病状の多くは慢性的症状なので、投与する化合物について血中半減期が延びれば、哺乳類での治療におけるこれらの種類の化合物類に関する有効性が増加するであろう。
【００１２】
薬物の半減期は体内の薬物量が通常の代謝および排出経路により半分に減少するまでの時間の尺度である。米国特許第６，４８９，３００号で開示されたものを含むＶＬＡ−４は、製剤処方で静脈内投与しても約１０から２０分間の短い半減期に悩みがある。患者のために当該薬物の効果量をそれらの系中で妥当な時間維持するには、当該薬物を非常に多量投与しなければならないか、そして／または当該薬物を一日に何度も投与しなければならない。
【００１３】
そのように短い半減期のＶＬＡ−４阻害剤群は市販での有望な治療候補ではない。そこで、ＶＬＡ−４阻害剤に関して顕著に延びた血清中半減期が必要とされる；好ましくは数時間から数日の範囲である。
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【００１４】
（発明の概要）
本発明は改善された血清半減期を持ちＶＬＡ−４拮抗特性を示す抱合体類を提供する。本発明の抱合体類は共有的に結びついた１個以上のポリエチレングリコール置換基類を含有する。いずれの理論に制限されることなしで、当該改善された血清半減期は当該化合物の構造への少なくとも１個のポリエチレングリコール構成要素の共有的抱合が関連していると考えられる。
【課題を解決するための手段】
【００１５】
１つの態様では、本発明は以下の式Ｉの抱合体およびその薬学的に許容できる塩類を提供するが：
【化１】
2007518825.tif 000002
式中ＲはＰＯＡＭ部分またはＲａで、Ｒａはアミノ、ヒドロキシル、アルコキシ、置換アルコキシ、置換アミノ、アルキルおよび置換アルキル、−アルキル−Ｏ−アルキル、置換−アルキル−Ｏ−アルキルで構成されている群から選択され、各ＲａはＲａと状況に応じてリンカーにより共有結合したＰＯＡＭ部分で場合により置換されており；
Ａｒ１はアリール、置換アリール、ヘテロアリールおよび置換ヘテロアリールからなる群から選択され、各Ａｒ１はＡｒ１と状況によりリンカーで共有結合したＰＯＡＭ部分で場合により置換されており；
Ａｒ２はアリール、置換アリール、ヘテロアリールおよび置換ヘテロアリールからなる群から選択され、各Ａｒ２はＡｒ２と状況によりリンカーで共有結合したＰＯＡＭ部分で場合により置換されており；
Ｗは−（ＣＨ２）ｍ−、−ＣＨ２−Ｃ（Ｏ）−、−Ｃ（Ｏ）−および−ＣＨ２−Ｃ（Ｏ）−ＣＨ２−からなる群から選ばれ；
Ｘは−Ｓ−、−ＳＯ−、−ＳＯ２および状況により置換されている−ＣＨ２−からなる群から選ばれ、；
Ｙは−Ｏ−、−Ｓ−および−ＮＲ１−からなる群から選ばれ、Ｒ１は水素およびＣ１〜Ｃ５アルキルからなる群から選ばれ；
Ｖは、
（ａ）−Ｙ（ＣＯ）−と場合によりリンカーにより共有結合しているＰＯＡＭ部分；
（ｂ）Ｖａは−ＮＲ２Ｒ３で、式中Ｒ２とＲ３はアルキルおよび置換アルキルからなる群から別個に選ばれ；そして
（Ｃ）Ｖｂは−ＮＲ２Ｒ３で、複素環または置換された複素環を表わすものから構成される群より選ばれ、
ＶａおよびＶｂのそれぞれは場合によりＰＯＡＭ部分で置換され、当該ＰＯＡＭ部分はＶａおよびＶｂ内でアルキル、置換アルキル、複素環類或いは置換された複素環類に場合によりリンカーにより共有結合しており；
ｍは０、１または２に相当する整数で、ｍが０のときＸは場合により置換−ＣＨ２−であり；そして
ｎは０、１または２に相当する整数であるが；
ただしＲ、Ａｒ１、Ａｒ２、Ｖおよび−ＮＲ２Ｒ３の少なくとも１つがＰＯＡＭ部分を含有するのが条件で；更にＲがＰＯＡＭ部分である場合、ｎは１でＸは−Ｓ−、−ＳＯ−、−ＳＯ２−ではないのが条件で；そして更に式Ｉの抱合体は１００，０００以下の分子量を有するのが条件である。
【００１６】
本発明は、例えば薬学的に許容できる担体および本発明の抱合体またはその混合物の治療的効果量を含んでいる医薬組成物も提供する。
【００１７】
本発明は、患者にて少なくともある程度ＶＬＡ−４が介在する病気を治療する方法も提供し、その方法は薬学的に許容できる担体および本発明の抱合体またはその混合物の治療的効果量を含んでいる医薬組成物の投与を含んでいる。
【００１８】
本発明には、患者にて少なくともある程度ＶＬＡ−４が介在する病気を治療する際に用いる薬物を製造するために本発明の抱合体およびその薬学的に許容できる塩類の使用も含まれる。
【００１９】
当該抱合体類および医薬組成物類は、少なくともある程度ＶＬＡ−４または白血球接着が介在する病状を治療する際に使用することができる。当該病状には、例として喘息、アルツハイマー病、アテローム性動脈硬化症、エイズによる認知症、糖尿病（急性若年型糖尿病を含む）、炎症性腸疾患（潰瘍性大腸炎およびクローン病を含む）、多発性硬化症、リューマチ性関節炎、組織移植、腫瘍転移、髄膜炎、脳炎、脳卒中および他の脳外傷、腎炎、網膜炎、シェーグレン病、アトピー皮膚炎、疥癬、心筋虚血および成人呼吸不全症候類にて生じるような急性白血球介在肺損傷が含まれる。
【００２０】
本発明の抱合体類および組成物類を使用して治療できる他の病状は、これだけには限らないが結節性紅斑、アレルギー性関節炎、視神経炎、ブドウ膜炎、アレルギー性鼻炎、強直性脊椎炎、乾癬性関節炎、血管炎、ライター症候群、全身性紅斑性狼瘡、進行性全身性硬化症、多発性筋炎、皮膚筋炎、ヴェグナー肉芽腫症、大動脈炎、サルコイドーシス、リンパ球減少症、側頭動脈炎、心膜炎、心筋炎、うっ血性心不全、結節性多発性動脈炎、過敏性症候群、アレルギー、好酸球増加症候群、チャーグ−シュトラウス症候群、慢性閉塞性肺疾患、過敏性肺炎、慢性活動性肝炎、間質性膀胱炎、自己免疫性内分泌不全、原発性胆汁性肝硬変、自己免疫再生不良性貧血、慢性持続性肝炎および甲状腺炎が含まれる。
【００２１】
好ましくは、本発明の抱合体および医薬組成物群は喘息、リューマチ性関節炎および多発性硬化症の治療法に使用される。後者の病気については、本発明の抱合体類は生体内に投与されると抗炎症効果をもたらすのみならず、更に脱髄に関係する病状および病気の治療にも使用される。
【００２２】
本発明は本発明の抱合体類およびこれらの方法において使用される中間体類の調製法も提供する。
【発明を実施するための最良の形態】
【００２３】
（本発明の詳細な説明）
上記の如く、本発明は白血球接着および、具体的には少なくともある程度ＶＬＡ−４が仲介する白血球接着を阻害する抱合体類に関する。
【００２４】
好ましくは式Ｉの抱合体類は以下に示すようなＬ異性体である。
【化２】
2007518825.tif 000003
【００２５】
好ましい式Ｉの抱合体類およびＩａには以下の式ＩＩの抱合体類およびそれの薬学的に許容できる塩類が含まれ；
【化３】
2007518825.tif 000004
式中Ａｒ１、Ａｒ２、ＹおよびＶは上で定義したものであるが；
ただしＡｒ１、Ａｒ２、Ｖおよび−ＮＲ２Ｒ３の少なくとも１つが、場合によりリンカーを含むＰＯＡＭ部分を含有するのが条件で；
そして更に式ＩＩの抱合体は１００，０００未満の分子量を有するのが条件である。
【００２６】
好ましい式ＩおよびＩａの抱合体類には以下の式ＩＩＩの抱合体類およびその薬学的に許容できる塩類が含まれ、
【化４】
2007518825.tif 000005
式中Ｒ、Ａｒ１、Ａｒ２、Ｙ、Ｖおよびｎは前に定義したものであるが；
ただしＲ、Ａｒ１、Ａｒ２、Ｖおよび−ＮＲ２Ｒ３の少なくとも１つは、場合によりリンカーを含むＰＯＡＭ部分を含有することが条件で；
そして更に式ＩＩＩの抱合体は１００，０００以下の分子量を有することが条件である。
【００２７】
好ましい式ＩおよびＩａの抱合体類には、以下の式ＩＶの抱合体類およびその薬学的に許容できる塩類が含まれ、
【化５】
2007518825.tif 000006
式中Ｒ、Ｒ２、Ｒ３、Ａｒ１、Ａｒ２およびｎは前に定義したものであるが；
ただしＲ、Ａｒ１、Ａｒ２および−ＮＲ２Ｒ３の少なくとも１つは、場合によりリンカーを含むＰＯＡＭ部分を含有することが条件で；
そして更に式ＩＶの抱合体は１００，０００以下の分子量を有することが条件である。
【００２８】
好ましい式ＩおよびＩａの抱合体類には以下の式Ｖの抱合体類およびその薬学的に許容できる塩類が含まれ、
【化６】
2007518825.tif 000007
式中Ｒ２、Ｒ３、Ａｒ１およびＡｒ２は前に定義したとおりであるが；
ただしＡｒ１、Ａｒ２および−ＮＲ２Ｒ３の少なくとも１つは、場合によりリンカーを含むＰＯＡＭ部分を含有することが条件で；
そして更に式Ｖの抱合体は１００，０００以下の分子量を有することが条件である。
【００２９】
式ＩおよびＩａの好ましい抱合体類には以下の式ＶＩの抱合体類およびその薬学的に許容できる塩類が含まれ、
【化７】
2007518825.tif 000008
式中Ｗは前に定義したとおりであり；
Ｒ４は場合によりリンカーで環に共有結合したＰＯＡＭ部分であり；
Ｒ５はアルキルおよび置換アルキルからなる群から選ばれ；
Ａｒ３はアリール、置換アリール、ヘテロアリールおよび置換ヘテロアリールからなる群から選ばれ；
Ｘは−Ｓ−、−ＳＯ−および−ＳＯ２−或いは場合により置換された−ＣＨ２−からなる群から選ばれ；
ｍは０，１または２に相当する整数で；
ｎは０から２に相当する整数であるが；
ただし式ＶＩの抱合体は１００，０００以下の分子量を有することが条件である。
【００３０】
式ＩおよびＩａの好ましい抱合体類には式ＶＩＩの抱合体類およびその薬学的に許容できる塩類が含まれ、
【化８】
2007518825.tif 000009
式中Ｒ４は場合によりリンカーで当該環に共有結合したＰＯＡＭ部分であり；
Ｒ５はアルキルおよび置換アルキルからなる群から選ばれ；
Ａｒ３はアリール、置換アリール、ヘテロアリールおよび置換ヘテロアリールからなる群から選ばれ；
ｎは０から２に相当する整数であるが；
ただし式ＶＩＩの抱合体は１００，０００以下の分子量を有することが条件となる。
【００３１】
好ましい式ＩおよびＩａの抱合体類には式ＶＩＩＩの抱合体類およびその薬学的に許容できる塩類が含まれ、
【化９】
2007518825.tif 000010
式中Ｒ４は、場合によりリンカーで環に共有結合したＰＯＡＭ部分であり；
Ａｒ３はアリール、置換アリール、ヘテロアリールおよび置換ヘテロアリールからなる群から選ばれるが；
ただし式ＶＩＩＩの抱合体は１００，０００以下の分子量を有することが条件である。
【００３２】
好ましくは、Ａｒ１がＰＯＡＭ部分を含有しない場合、式Ｉ〜ＶでのＡｒ１および式ＶＩ〜ＶＩＩＩでのＡｒ３は：フェニル；４−メチルフェニル；４−ｔ−ブチルフェニル；２，４，６−トリメチルフェニル；２−フルオロフェニル；３−フルオロフェニル；４−フルオロフェニル；２，４−ジフルオロフェニル；３，４−ジフルオロフェニル；３，５−ジフルオロフェニル；２−クロロフェニル；３−クロロフェニル；４−クロロフェニル；３，４−ジクロロフェニル；３，５−ジクロロフェニル；３−クロロ−４−フルオロフェニル；４−ブロモフェニル；２−メトキシフェニル；３−メトキシフェニル；４−メトキシフェニル；３，４−ジメトキシフェニル；４−ｔ−ブトキシフェニル；４−（３'−ジメチルアミノ−ｎ−プロポキシ）−フェニル；２−カルボキシフェニル；２−（メトキシカルボニル）フェニル；４−（Ｈ２ＮＣ（Ｏ）−）フェニル；４−（Ｈ２ＮＣ（Ｓ）−）フェニル；４−シアノフェニル；４−トリフルオロメチルフェニル；４−トリフルオロメトキシフェニル；３，５−ジ−（トリフルオロメチル）フェニル；４−ニトロフェニル；４−アミノフェニル；４−（ＣＨ３Ｃ（Ｏ）ＮＨ−）フェニル；４−（ＰｈＮＨＣ（Ｏ）ＮＨ−）フェニル；４−アミジノフェニル；４−メチルアミジノフェニル；４−［ＣＨ３ＳＣ（＝ＮＨ）−］フェニル；４−クロロ−３−［Ｈ２ＮＳ（Ｏ）２−］フェニル；１−ナフチル；２−ナフチル；ピリジン−２−イル；ピリジン−３−イル；ピリジン−４−イル；ピリミジン−２−イル；キノリン−８−イル；２−（トリフルオロアセチル）−１，２，３，４−テトラヒドロイソキノリン−７−イル；２−チエニル；５−クロロ−２−チエニル；２，５−ジクロロ−４−チエニル；１−Ｎ−メチルイミダゾール−４−イル；１−Ｎ−メチルピラゾール−３−イル；１−Ｎ−メチルピラゾール−４−イル；１−Ｎ−ブチルピラゾール−４−イル；１−Ｎ−メチル−３−メチル−５−クロロピラゾール−４−イル；１−Ｎ−メチル−５−メチル−３−クロロピラゾール−４−イル；２−チアゾリルおよび５−メチル−１，３，４−チアジアゾール−２−イルからなる群から選ばれる。
【００３３】
Ａｒ１が任意のリンカーを通してＰＯＡＭ基で置換される場合、Ａｒ１、当該ＰＯＡＭ基および任意のリンカーは好ましくは以下の式で表され：
−Ａｒ１−Ｚ−（ＣＨ２ＣＨＲ７Ｏ）ｐＲ８
式中Ａｒ１はアリール、置換アリール、ヘテロアリールおよび置換ヘテロアリールからなる群から選ばれ、
Ｚは共有結合、１から４０原子の連結鎖、−Ｏ−、−Ｓ−および−ＮＲ９−からなる群から選ばれ、Ｒ９−は水素およびＣ１〜Ｃ５アルキルからなる群から選ばれ、
Ｒ７は水素およびメチルからなる群から選ばれ；
Ｒ８は水素、アルキル、置換アルキル、アリール、置換アリールおよび−ＣＨ２ＣＨＲ７ＮＲ１０Ｒ１１からなる群から選ばれ、Ｒ７は前に定義したものでＲ１０およびＲ１１は水素およびアルキルからなる群から別個に選ばれ；そして
ｐはＰＯＡＭ部分の分子量が約１００から１００，０００の範囲であるような整数である。
【００３４】
好ましくは、ＲがＰＯＡＭ部分を含有しない場合、置換基の式は以下で：
【化１０】
2007518825.tif 000011
式中Ｗ、Ｘ、ｍおよびｎは前に定義したもので、Ｒ'は場合により置換されたＣ１〜Ｃ５アルキルであり、好ましくはアゼチジニル、チアゾリジニル、チアゾリドニル、ピペリジニル、ピペラジニル、チオモルホリニル、ピロリジニル、ピログルタミル、４−ヒドロキシピロリジニル、４−オキソピロリジニル、４−フルオロピロリジニル、４，４−ジフルオロピロリジニル、４−（チオモルホリン−４−イルＣ（Ｏ）Ｏ−）ピロリジニル、４−［ＣＨ３Ｓ（Ｏ）２Ｏ−］ピロリジニル、３−フェニルピロリジニル、３−チオフェニルピロリジニル、４−アミノピロリジニル、３−メトキシピロリジニル、４，４−ジメチルピロリジニル、４−Ｎ−Ｃｂｚ−ピペラジニル、４−［ＣＨ３Ｓ（Ｏ）２−］ピペラジニル、５，５−ジメチルチアゾリンジン−４−イル、１，１−ジオキソ−チアゾリジニル、１，１−ジオキソ−５，５−ジメチルチアゾリジン−２−イルおよび１，１−ジオキソチオモルホリニルからなる群から選ばれる。
【００３５】
以下の式の置換基がＰＯＡＭ部分を含有する場合、
【化１１】
2007518825.tif 000012
好ましくは置換基が以下の式で：
【化１２】
2007518825.tif 000013
式中、Ｗは−（ＣＨ２）ｍ−で、ｍは０、１または２に相当する整数で；
Ｚは共有結合、１から４０個の原子の連結基、−Ｏ−、−Ｓ−および−ＮＲ９−からなる群から選ばれ、Ｒ９は水素およびＣ１〜Ｃ５アルキルからなる群から選ばれ、
Ｒ７は水素およびメチルからなる群から選ばれ；
Ｒ８は水素、アルキル、置換アルキル、アリール、置換アリールおよび−ＣＨ２ＣＨＲ７ＮＲ１０Ｒ１１からなる群から選ばれ、Ｒ７は前に定義したものであり、Ｒ１０およびＲ１１は水素およびアルキルからなる群から別個に選ばれ；そして
ｐはＰＯＡＭ部分の分子量が約１００から１００，０００の範囲であるような整数である。
【００３６】
好ましくは、Ａｒ２がＰＯＡＭ部分を含有しない場合、式Ｉ〜ＶにおけるＡｒ２は好ましくはフェニル、２−ピリジル、３−ピリジル、４−ピリジルおよび４−ピリド−２−オニルからなる群から選ばれる。
【００３７】
Ａｒ２がＰＯＡＭ部分を含有する場合、式１〜ＶにおけるＡｒ２は好ましくは以下の式で表され：
【化１３】
2007518825.tif 000014
式中、Ａｒ２はアリール、置換アリール、ヘテロアリールおよび置換ヘテロアリールからなる群から選ばれ；
Ｚは共有結合、１から４０個の原子の連結基、−Ｏ−、−Ｓ−および−ＮＲ９−からなる群から選ばれ、Ｒ９は水素およびＣ１〜Ｃ５アルキルからなる群から選ばれ、
Ｒ７は水素およびメチルからなる群から選ばれ；
Ｒ８は水素、アルキル、置換アルキル、アリール、置換アリールおよび−ＣＨ２ＣＨＲ７ＮＲ１０Ｒ１１からなる群から選ばれ、Ｒ７は前に定義したもので、Ｒ１０およびＲ１１は水素およびアルキルからなる群から別個に選ばれ；そして
ｐはＰＯＡＭ部分の分子量が約１００から１００，０００の範囲であるような整数である。
【００３８】
好ましくは、式Ｉ〜ＩＩＩの式では−ＹＣ（Ｏ）Ｖは−ＯＣ（Ｏ）ＮＲ２Ｒ３である。Ｒ２およびＲ３がＰＯＡＭ部分を含有しない場合、式Ｉ〜Ｖにおける−ＯＣ（Ｏ）ＮＲ２Ｒ３は好ましくは：
（ＣＨ３）ＮＣ（Ｏ）Ｏ−；（ピペリジン−１−イル）Ｃ（Ｏ）Ｏ−；（４−ヒドロキシピペリジン−１−イル）Ｃ（Ｏ）Ｏ−；（４−ホルミルオキシピペリジン−１−イル）Ｃ（Ｏ）Ｏ−；（４−エトキシカルボニルピペリジン−１−イル）Ｃ（Ｏ）Ｏ−；（４−カルボキシルピペリジン−１−イル）Ｃ（Ｏ）Ｏ−；（３−ヒドロキシメチルピペリジン−１−イル）Ｃ（Ｏ）Ｏ−；（４−ヒドロキシメチルピペリジン−１−イル）Ｃ（Ｏ）Ｏ−；（４−ピペリドン−１−イルエチレンケタール）Ｃ（Ｏ）Ｏ−；（ピペラジン−１−イル）−Ｃ（Ｏ）Ｏ−；（１−Ｂｏｃ−ピペラジン−４−イル）−Ｃ（Ｏ）Ｏ−；（４−メチルピペラジン−１−イル）Ｃ（Ｏ）Ｏ−；（４−メチルホモピペラジン−１−イル）Ｃ（Ｏ）Ｏ−；（４−（２−ヒドロキシエチル）ピペラジン−１−イル）Ｃ（Ｏ）Ｏ−；（４−フェニルピペラジン−１−イル）Ｃ（Ｏ）Ｏ−；（４−（ピリジン−２−イル）ピペラジン−１）−イル）Ｃ（Ｏ）Ｏ−；（４−（４−トリフルオロメチルピリジン−２−イル）ピペラジン−１−イル）Ｃ（Ｏ）Ｏ−；（４−（ピリミジン−２−イル）ピペラジン−１−イル）Ｃ（Ｏ）Ｏ−；（４−アセチルピペラジン−１−イル）Ｃ（Ｏ）Ｏ−；（４−（フェニルＣ（Ｏ）−）ピペラジン−１−イル）Ｃ（Ｏ）Ｏ−；（４−（ピリジン−４'−イルＣ（Ｏ）−）ピペラジン−１−イル）Ｃ（Ｏ）Ｏ−；（４−（フェニルＮＨＣ（Ｏ）−）ピペラジン−１−イル）Ｃ（Ｏ）Ｏ−；（４−（フェニルＮＨＣ（Ｓ）−）ピペラジン−１−イル）Ｃ（Ｏ）Ｏ−；（４−メタンスルホニルピペラジン−１−イル−Ｃ（Ｏ）Ｏ−；（４−トリフルオロメタンスルホニルピペラジン−１−イル−Ｃ（Ｏ）Ｏ−；（モルホリン−４−イル）Ｃ（Ｏ）Ｏ−；（チオモルホリン−４−イル）Ｃ（Ｏ）Ｏ−；（チオモルホリン−４'−イルスルホン）−Ｃ（Ｏ）Ｏ−；（ピロリジン−１−イル）Ｃ（Ｏ）Ｏ−；（２−メチルピロリジン−１−イル）Ｃ（Ｏ）Ｏ−；（２−（メトキシカルボニル）ピロリジン−１−イル）Ｃ（Ｏ）Ｏ−；（２−（ヒドロキシメチル）ピロリジン−１−イル）Ｃ（Ｏ）Ｏ−；（２−（Ｎ，Ｎ−ジメチルアミノ）エチル）（ＣＨ３）ＮＣ（Ｏ）Ｏ−；（２−（Ｎ−メチル−Ｎ−トルエン−４−スルホニルアミノ）エチル）（ＣＨ３）Ｎ−Ｃ（Ｏ）Ｏ−；（２−（モルホリン−４−イル）エチル）（ＣＨ３）ＮＣ（Ｏ）Ｏ−；（２−（ヒドロキシ）エチル（ＣＨ３）ＮＣ（Ｏ）Ｏ−；ビス（２−（ヒドロキシ）エチル）ＮＣ（Ｏ）Ｏ−；（２−（ホルミルオキシ）エチル）（ＣＨ３）ＮＣ（Ｏ）Ｏ−；（ＣＨ３ＯＣ（Ｏ）ＣＨ２）ＨＮＣ（Ｏ）Ｏ−および２−［フェニルＮＨＣ（Ｏ）Ｏ−］エチル−）ＨＮＣ（Ｏ）Ｏ−の群より選ぶ。
【００３９】
Ｒ２および／またはＲ３がＰＯＡＭ部分に共有結合している場合、当該リンカー−ＰＯＡＭ基は好ましくは以下の式で表され：
−Ｚ'−（ＣＨ２ＣＨＲ７Ｏ）ｐＲ８
Ｚ'は共有結合および１から４０原子の連結基からなる群から選ばれ；
Ｒ７は水素およびメチルからなる群から選ばれ；
Ｒ８は水素、アルキル、置換アルキル、アリール、置換アリールおよび−ＣＨ２ＣＨＲ７ＮＲ１０Ｒ１１からなる群から選ばれ、Ｒ７は前に定義したもので、Ｃ１０およびＲ１１は水素およびアルキルからなる群から別個に選ばれ；そして
ｐはＰＯＡＭ部分の分子量が約１００から１００，０００の範囲になるような整数である。
【００４０】
ＰＯＡＭ部分を含んでいる好ましい−ＹＣ（Ｏ）Ｖ置換基には以下が含まれる：
−ＯＣ（Ｏ）ＮＨ（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）ｐＣＨ２ＣＨ２ＮＨ２；
−ＯＣ（Ｏ）ＮＨ（ＣＨ２ＣＨ（ＣＨ３）Ｏ）ｐＣＨ２ＣＨ（ＣＨ３）ＮＨ２；
−ＮＨＣ（Ｏ）Ｏ（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）ｐＨ；
−ＮＨＣ（Ｏ）Ｏ（ＣＨ２ＣＨ（ＣＨ３）Ｏ）ｐＨ；
−ＮＨＣ（Ｏ）Ｏ（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）ｐＣＨ３；
−ＮＨＣ（Ｏ）Ｏ（ＣＨ２ＣＨ（ＣＨ３）Ｏ）ｐＣＨ３；
−ＮＨＣ（Ｏ）Ｏ（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）ｐ−φ；
−ＮＨＣ（Ｏ）Ｏ（ＣＨ２ＣＨ（ＣＨ３）Ｏ）ｐ−φ；
−ＮＨＣ（Ｏ）ＮＨ（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）ｐＣＨ２ＣＨ２ＮＨ２；
−ＮＨＣ（Ｏ）ＮＨ（ＣＨ２ＣＨ（ＣＨ３）Ｏ）ｐＣＨ２ＣＨ（ＣＨ３）ＮＨ２；
−ＯＣ（Ｏ）ＮＨ−（１，４）−φ−Ｏ−（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）ｐＨ；
−ＯＣ（Ｏ）ＮＨ−（１，４）−φ−Ｏ−（ＣＨ２ＣＨ（ＣＨ３）Ｏ）ｐＨ；
−ＯＣ（Ｏ）ＮＨ−（１，４）−φ−Ｏ−（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）ｐＣＨ３；
−ＯＣ（Ｏ）ＮＨ−（１，４）−φ−Ｏ−（ＣＨ２ＣＨ（ＣＨ３）Ｏ）ｐＣＨ３；
−ＯＣ（Ｏ）ＮＨ（ＣＨ２ＣＨ（ＣＨ３）Ｏ）ｐＣＨ２ＣＨ（ＣＨ３）ＯＣＨ３；
−ＮＨＣ（Ｏ）ＮＨ（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）ｐＣＨ３；
−ＮＨＣ（Ｏ）ＮＨ（ＣＨ２ＣＨ（ＣＨ３）Ｏ）ｐＣＨ３；
【化１４−１】
2007518825.tif 000015
【化１４−２】
2007518825.tif 000016
【化１４−３】
2007518825.tif 000017
【化１４−４】
2007518825.tif 000018
【化１４−５】
2007518825.tif 000019
式中、φまたはＣ６Ｈ５はフェニルで、ｐは当該ＰＯＡＭ部分の分子量が１００から１００，０００の範囲になるような整数で、ｖは１から５である。
【００４１】
本発明の好ましい抱合体類には以下に説明するものが含まれ：
【化１５】
2007518825.tif 000020
式中、各々の場合でＰＯＡＭは約２０，０００の分子量（Ｍｗ）を有していてメチルで封鎖されたポリエチレンオキシド基である。
【化１６】
2007518825.tif 000021
式中、各々の場合ＰＯＡＭは約２０，０００の分子量（Ｍｗ）を有するエチルで封鎖されたポリオキシエチレンオキシド基である。
【００４２】
本発明で有用な中間体類には式ＩＸの中間体類が含まれ：
【化１７】
2007518825.tif 000022
式中、ＲはＰＯＡＭ部分またはＲａで、Ｒａはアミノ、ヒドロキシル、アルコキシ、置換アルコキシ、置換アミノ、アルキルおよび置換アルキル、−アルキル−Ｏ−アルキル、置換−アルキル−Ｏ−アルキルからなる群から選ばれ、各Ｒａは状況に応じてＲａと場合によりリンカーで共有結合したＰＯＡＭ部分で置換されており；
Ｒｃはカルボキシルエステルで；
Ａｒ１はアリール、置換アリール、ヘテロアリールおよび置換ヘテロアリールからなる群から選ばれ、各Ａｒ１は状況に応じて、Ａｒ１と場合によりリンカーで共有結合しているＰＯＡＭで置換されており；
Ａｒ２はアリール、置換アリール、ヘテロアリールおよび置換ヘテロアリールからなる群から選ばれ、各Ａｒ１は状況に応じて、Ａｒ２と場合によりリンカーで共有結合しているＰＯＡＭで置換されており；
Ｘは−Ｓ−、−ＳＯ−、−ＳＯ２−および場合により置換−ＣＨ２−からなる群から選ばれ；
Ｙは−Ｏ−、−Ｓ−および−ＮＲ１−からなる群から選ばれ、Ｒ１は水素およびＣ１〜Ｃ５アルキルからなる群から選ばれ；
Ｖは以下の群より選ばれ、
（ａ）−Ｙ（ＣＯ）−と場合によりリンカーで共有結合したＰＯＡＭ部分；
（ｂ）Ｖａは、Ｒ２およびＲ３がアルキルおよび置換アルキルからなる群から別個に選ばれる−ＮＲ２Ｒ３；そして
（ｃ）Ｖｂは−ＮＲ２Ｒ３で複素環または置換複素環を表し、
式中、ＶａおよびＶｂのそれぞれは場合によりＰＯＡＭ部分で置換されており、当該ＰＯＡＭ部分はＶａおよびＶｂ内でアルキル、置換アルキル、複素環類または置換複素環類と場合によりリンカーで共有結合されていて；
ｍは０，１または２に相当する整数で、ｍが０の場合、そのときＸは場合により−ＣＨ２−で置換され；そして
ｎは０，１または２に相当する整数であるが；
ただしＲ，Ａｒ１、Ａｒ２、Ｖおよび−ＮＲ２Ｒ３の少なくとも１つはＰＯＡＭ部分を含有することが条件であり；
更にＲがＰＯＡＭ部分である場合、ｎは１であり、Ｘは−Ｓ−、−ＳＯ−または−ＳＯ２−ではなく；
そしてなお更に式ＩＸの抱合体は１００，０００以下の分子量を有することが条件となる。
【００４３】
（定義）
本明細書で使用するとき、“アルキル”は１から１０個の炭素原子類を有し、好ましくは１から６個の炭素原子類を有する直鎖および分岐アルキル基類である。当該用語はメチル、ｔ−ブチル、ｎ−ヘプチル、オクチルなどのような基で示される。用語アルキルの前でｘが整数であるＣｘの意味はアルキル鎖における炭素数であり、範囲を指示する場合はより小さい数もより大きい数も範囲に入る。
【００４４】
“置換アルキル”は、アルコキシ、置換アルコキシ、アシル、アシルアミノ、アシルオキシ、アミノ、置換アミノ、アミノアシル、アミノカルボニルアミノ、アミノカルボニルオキシ、アリール、置換アリール、アリールオキシ、置換アリールオキシ、カルボキシル、カルボキシルエステル類、シアノ、シクロアルキル、置換シクロアルキル、シクロアルキルオキシ、置換シクロアルキルオキシ、ハロゲン、ヘテロアリール、置換ヘテロアリール、ヘテロアリールオキシ、置換ヘテロアリールオキシ、複素環、置換複素環、ヒドロキシル、ニトロおよびオキシカルボニルアミノからなる群から別個に選ばれる１から５個の置換基類を有するアルキル基を称する。
【００４５】
“アルキレン”は１から１０個の炭素原子類を有する直鎖および分岐の二価アルキレン基類を称する。この用語は前の置換アルキルに関し定義したような１から５個の置換基で場合により置換されたメチレン、１，６−ヘプチレン、１，８−オクチレンなどの基が範例である。
【００４６】
“アルコキシ”は例としてメトキシ、エトキシ、ｎ−プロポキシ、イソ−プロポキシ、ｎ−ブトキシ、三級ブトキシ、二級ブトキシ、ｎ−ペントキシ、ｎ−ヘキソキシ、１，２−ジメチルブトキシなどが含まれる“アルキル−Ｏ−”基を称する。
【００４７】
“置換アルコキシ”は“置換アルキル−Ｏ−”基を称する。
【００４８】
“アルキル−Ｏ−アルキル”の各アルキルは、アルコキシ、置換アルコキシ、アシル、アシルアミノ、アシルオキシ、アミノ、置換アミノ、アミノアシル、アミノカルボニルアミノ、アミノカルボニルオキシ、アリール、置換アリール、アリールオキシ、置換アリールオキシ、カルボキシル、カルボキシルエステル類、シアノ、シクロアルキル、置換シクロアルキル、シクロアルキルオキシ、置換シクロアルキルオキシ、ハロゲン、ヘテロアリール、置換ヘテロアリール、ヘテロアリールオキシ、置換ヘテロアリールオキシ、複素環、置換複素環、ヒドロキシル、ニトロおよびオキシカルボニルアミノからなる群から別個に選ばれる１から５個の置換基類で場合により別個に置換されている。
【００４９】
“アルケニル”は２から１０個の炭素原子、より好ましくは２から６個の原子を有し、アルケニル不飽和を少なくとも１、好ましくは１〜２個所有しているアルケニル基類を称する。
【００５０】
“置換アルケニル”はアルコキシ、置換アルコキシ、アシル、アシルアミノ、アシルオキシ、アミノ、置換アミノ、アミノアシル、アミノカルボニルアミノ、アミノカルボニルオキシ、アリール、置換アリール、アリールオキシ、置換アリールオキシ、カルボキシル、カルボキシルエステル類、シアノ、シクロアルキル、置換シクロアルキル、シクロアルキルオキシ、置換シクロアルキルオキシ、ハロゲン、ヘテロアリール、置換ヘテロアリール、ヘテロアリールオキシ、置換ヘテロアリールオキシ、複素環、置換複素環、ヒドロキシル、ニトロおよびオキシカルボニルアミノからなる群から別個に選ばれる１から５個の置換基類を有するアルケニル基類を称する。
【００５１】
“アシル”は、Ｈ−Ｃ（Ｏ）−、アルキル−Ｃ（Ｏ）−、置換アルキル−Ｃ（Ｏ）−、アルケニル−Ｃ（Ｏ）−、置換アルケニル−Ｃ（Ｏ）−、シクロアルキル−Ｃ（Ｏ）−、置換シクロアルキル−Ｃ（Ｏ）−、アリール−Ｃ（Ｏ）−、置換アリール−Ｃ（Ｏ）−、ヘテロアリール−Ｃ（Ｏ）−、置換ヘテロアリール−Ｃ（Ｏ）−、複素環−Ｃ（Ｏ）−および置換複素環−Ｃ（Ｏ）−の基を称する。
【００５２】
“アシルアミノ”は、各Ｒ２０が水素、アルキル、置換アルキル、アルケニル、置換アルケニル、アリール、置換アリール、シクロアルキル、置換シクロアルキル、ヘテロアリール、置換ヘテロアリール、複素環、置換複素環からなる群から別個に選ばれ、各Ｒ２０は当該窒素原子とともに複素環または置換複素環を形成するのに加わる、−Ｃ（Ｏ）ＮＲ２０Ｒ２０基を称する。
【００５３】
“アシルオキシ”はアルキル−Ｃ（Ｏ）Ｏ−、置換アルキル−Ｃ（Ｏ）Ｏ−、アルケニル−Ｃ（Ｏ）Ｏ−、置換アルケニル−Ｃ（Ｏ）Ｏ−、アリール−Ｃ（Ｏ）Ｏ−、置換アリール−Ｃ（Ｏ）Ｏ−、シクロアルキル−Ｃ（Ｏ）Ｏ−、置換シクロアルキル−Ｃ（Ｏ）Ｏ−、ヘテロアリール−Ｃ（Ｏ）Ｏ−、置換ヘテロアリール−Ｃ（Ｏ）Ｏ−、複素環−Ｃ（Ｏ）Ｏ−および置換複素環−Ｃ（Ｏ）Ｏ−の基を称する。
【００５４】
“アミノ”は−ＮＨ２の基を称する。
【００５５】
“置換アミノ”は−ＮＲ２１Ｒ２１の基を称し、各Ｒ２１は水素、アルキル、置換アルキル、アルケニル、置換アルケニル、シクロアルキル、置換シクロアルキル、アリール、置換アリール、ヘテロアリール、置換ヘテロアリール、複素環および置換複素環からなる群から別個に選ばれるが、ただしＲ２１基の両方とも水素ではないこと；または当該Ｒ２１基群は当該窒素原子とともに複素環または置換複素環を形成するのに加わることができるのが条件である。
【００５６】
“アミノアシル”は−ＮＲ２２Ｃ（Ｏ）アルキル、−ＮＲ２２Ｃ（Ｏ）置換アルキル、−ＮＲ２２Ｃ（Ｏ）シクロアルキル、−ＮＲ２２Ｃ（Ｏ）置換シクロアルキル、−ＮＲ２２Ｃ（Ｏ）アルケニル、−ＮＲ２２Ｃ（Ｏ）置換アルケニル、−ＮＲ２２Ｃ（Ｏ）アリール、−ＮＲ２２Ｃ（Ｏ）置換アリール、−ＮＲ２２Ｃ（Ｏ）ヘテロアリール、−ＮＲ２２Ｃ（Ｏ）置換ヘテロアリール、−ＮＲ２２Ｃ（Ｏ）複素環および−ＮＲ２２Ｃ（Ｏ）置換複素環の基を称し、各Ｒ２２は水素またはアルキルである。
【００５７】
“アミノカルボニルオキシ”は−ＮＲ２２Ｃ（Ｏ）Ｏ−アルキル、−ＮＲ２２Ｃ（Ｏ）Ｏ−置換アルキル、−ＮＲ２２Ｃ（Ｏ）Ｏ−アルケニル、−ＮＲ２２Ｃ（Ｏ）Ｏ−置換アルケニル、−ＮＲ２２Ｃ（Ｏ）Ｏ−シクロアルキル、−ＮＲ２２Ｃ（Ｏ）Ｏ−置換シクロアルキル、−ＮＲ２２Ｃ（Ｏ）Ｏ−アリール、−ＮＲ２２Ｃ（Ｏ）Ｏ−置換アリール、−ＮＲ２２Ｃ（Ｏ）Ｏ−ヘテロアリール、−ＮＲ２２Ｃ（Ｏ）Ｏ−置換ヘテロアリール、−ＮＲ２２Ｃ（Ｏ）Ｏ−複素環および−ＮＲ２２Ｃ（Ｏ）Ｏ−置換複素環の基を称し、式中Ｒ２２は水素かアルキルである。
【００５８】
“オキシカルボニルアミノ”は−ＯＣ（Ｏ）−アミノおよび−ＯＣ（Ｏ）−置換アミノの基を称する。
【００５９】
“アミノカルボニルアミノ”は−ＮＲ２２Ｃ（Ｏ）−アミノおよび−ＮＲ２２Ｃ（Ｏ）−置換アミノの基を称し、Ｒ２２は水素またはアルキルである。
【００６０】
“アリール”または“Ａｒ”は単環（例えばフェニル）または多縮合環（例えばナフチルまたはアントリル）を有する６から１４個の炭素原子の不飽和芳香族炭素環式基を称し、その縮合環は芳香族であってもなくてもよいが（例えば、２−ベンゾキサゾリノン、２Ｈ−１，４−ベンゾキサジン−３（４Ｈ）−オン−７イルなど）、ただし結びつく位置は芳香族環原子を経ることが条件である。好ましいアリール類にはフェニル、ナフチルおよび５，６，７，８−テトラヒドロナフト−２−イルが含まれる。
【００６１】
“置換アリール”は、ヒドロキシ、アシル、アシルアミノ、アシルオキシ、アルキル、置換アルキル、アルコキシ、置換アルコキシ、アルケニル、置換アルケニル、アミノ、置換アミノ、アミノアシル、アミノカルボニルオキシ、アミノカルボニルアミノ、アリール、置換アリール、アリールオキシ、置換アリールオキシ、シクロアルコキシ、置換シクロアルコキシ、ヘテロアリールオキシ、置換ヘテロアリールオキシ、ヘテロシクリルオキシ、置換ヘテロシクリルオキシ、カルボキシル、カルボキシルエステル類、シアノ、シクロアルキル、置換シクロアルキル、ハロ、ニトロ、ヘテロアリール、置換ヘテロアリール、複素環、置換複素環およびオキシカルボニルアミノからなる類より選ばれる１から３個の置換基で置換されているアリール基類を称する。
【００６２】
“アリールオキシ”は例としてフェノキシ、ナフトキシなどが含まれるアリール−Ｏ−の基を称する。
【００６３】
“置換アリールオキシ”は置換アリール−Ｏ−基を称する。
【００６４】
“カルボキシル”は−ＣＯＯＨおよびその薬学的に許容できる塩類の基を称する。
【００６５】
“カルボキシルエステル類”は、−Ｃ（Ｏ）Ｏ−アルキル、−Ｃ（Ｏ）Ｏ−置換アルキル、−Ｃ（Ｏ）Ｏ−アルケニル、−Ｃ（Ｏ）Ｏ−置換アルケニル、−Ｃ（Ｏ）Ｏ−アリール、−Ｃ（Ｏ）Ｏ−置換アリール、−Ｃ（Ｏ）Ｏ−シクロアルキル、−Ｃ（Ｏ）Ｏ−置換シクロアルキル、−Ｃ（Ｏ）Ｏ−ヘテロアリール、−Ｃ（Ｏ）Ｏ−置換ヘテロアリール、−Ｃ（Ｏ）Ｏ−複素環および−Ｃ（Ｏ）Ｏ−置換複素環を称する。
【００６６】
“シクロアルキル”は、例としてアダマンチル、シクロプロピル、シクロブチル、シクロペンチル、シクロヘキシル、シクロオクチルなどを含む単環または多縮合環を有する３から１２個の炭素原子のシクロアルキル基類を称する。
【００６７】
“置換シクロアルキル”は、オキソ（＝Ｏ）、チオキソ（＝Ｓ）、アルキル、置換アルキル、アルコキシ、置換アルコキシ、アシル、アシルアミノ、アシルオキシ、アミノ、置換アミノ、アミノアシル、アミノカルボニルアミノ、アミノカルボニルオキシ、アリール、置換アリール、アリールオキシ、置換アリールオキシ、カルボキシル、カルボキシルエステル類、シアノ、シクロアルキル、置換シクロアルキル、シクロアルキルオキシ、置換シクロアルキルオキシ、ハロゲン、ヘテロアリール、置換ヘテロアリール、ヘテロアリールオキシ、置換ヘテロアリールオキシ、複素環、置換複素環、ヒドロキシル、ニトロおよびオキシカルボニルアミノからなる群から選ばれる１から５個の置換基類を有するシクロアルキル基を称する。
【００６８】
“シクロアルコキシ”は−Ｏ−シクロアルキル基類を称する。
【００６９】
“置換シクロアルコキシ”は−Ｏ−置換シクロアルキル基類を称する。
【００７０】
“ハロ”または“ハロゲン”はフルオロ、クロロ、ブロモおよびヨードを称し、好ましくはフルオロ、クロロまたはブロモである。
【００７１】
“ヘテロアリール”は、当該環またはその酸化物内に２から１０個の炭素原子および酸素、窒素および硫黄から選ばれる１から４個のヘテロ原子の芳香族基を称する。当該ヘテロアリール基類は単環（例えば、ピリジルまたはフリル）または多縮合環を有すことができ、その中では縮合環の１個が芳香族であってもなくてもよいが、ただし結びつく位置は芳香族環原子を経ることが条件である。加えて、当該ヘテロアリール基のヘテロ原子類は酸化され、即ちピリジンＮオキシド類または１，１−ジオキソ−１，２，５−チアジアゾール類などを形成する。好ましいヘテロアリール類にはピリジル、ピロリル、インドリル、フリル、ピリダジニル、ピリミジニル、ピラジニル、１−オキソ−１，２，５−チアジアゾリルおよび１，１−ジオキソ−１，２，５−チアジアゾリルが含まれる。
【００７２】
“置換ヘテロアリール”は、置換アリールに関して前に定義したものからなる群から選ばれる１から３個の置換基類で置換されているヘテロアリール基類を称する。
【００７３】
“ヘテロアリールオキシ”は−Ｏ−ヘテロアリールの基を、“置換ヘテロアリールオキシ”は−Ｏ−置換ヘテロアリールの基を称する。
【００７４】
“複素環”または“複素環式”は、１から１０個の炭素原子群および当該環内にある窒素、硫黄または酸素から選ばれた１から４個のヘテロ原子群の単環または多縮合環類を有する飽和または不飽和基を称し、縮合環系においては当該環類の１個以上はアリールまたはヘテロアリールでありえるが、ただし結びつく位置は複素環の原子を経ることが条件となる。
【００７５】
“置換複素環式”は、置換シクロアルキルとして定義されたものからなる群から選ばれる１から３個の置換基類により置換されている複素環類を称する。
【００７６】
複素環類およびヘテロアリール類の例には、これだけに限らないがアゼチジン、ピロール、イミダゾール、ピラゾール、ピリジン、ピラジン、ピリミジン、ピリダジン、インドリジン、イソインドール、インドール、ジヒドロインドール、インダゾール、プリン、キノリジン、イソキノリン、キノリン、フタラジン、ナフチルピリジン、キノキサリン、キナゾリン、シンノリン、プテリジン、カルバゾール、カルボリン、フェナントリジン、アクリジン、フェナントロリン、イソチゾール、フェナジン、イソキサゾール、フェノキサジン、フェノチアジン、イミダゾリジン、イミダゾリン、ピペリジン、ピペラジン、インドリン、フタルイミド、１，２，３，４−テトラヒドロイソキノリン、４，５，６，７−テトラヒドロベンゾ［ｂ］チオフェン、チアゾール、チアゾリジン、チオフェン、ベンゾ［ｂ］チオフェン、モルホリノ、チオモルホリノ、ピペリジニル、ピロリジン、テトラヒドロフラニルなどが含まれる。
【００７７】
“ヘテロシクリルオキシ”は−Ｏ−複素環式の基を称し、“置換ヘテロシクリルオキシ”は−Ｏ−置換複素環の基を称する。用語“抱合体”および“重合体抱合体”は1個以上のＰＯＡＭ重合体類に抱合しているＶＬＡ−４拮抗剤を含んでいる部分を称する（以下に定義する“化合物”または“活性化合物”）。
【００７８】
用語“化合物”および“活性化合物”は本発明の抱合体のＶＬＡ−４拮抗剤部分、またはＰＯＡＭ重合体に抱合する以前に存在するＶＬＡ−４拮抗剤を称するのに使用される。
【００７９】
用語“ポリオキシアルキレン高分子”（“ＰＯＡＭ”または“ＰＯＡＭ部分”）は、１個以上の付加ポリアルキレンオキシド類に場合により共有結合している少なくとも１個のポリアルキレンオキシド部分を含む高分子を称し、当該ポリアルキレンオキシド類は同一または異なってもよい。非制限的である例には、ポリエチレングリコール（ＰＥＧ）、ポリプロピレングリコール（ＰＰＧ）、ポリイソプレングリコール（ＰＩＰＧ）、ＰＥＧ−ＰＥＧ、ＰＥＧ−ＰＰＧ、ＰＰＧ−ＰＩＰＧなどが含まれる。これに加えて、用語“ポリオキシアルキレン高分子”は、当該ポリアルキレンオキシド部分が場合により互いにリンカーで接続されている高分子を称する。説明のための実例としてはＰＥＧ−リンカー−ＰＥＧ、ＰＥＧ−リンカー−ＰＩＰＧなどである。より具体的な例には市販されて入手できるポリ［ジ（エチレングリコール）アジペート類、ポリ［ジ（エチレングリコール）フタレートジオール類などが含まれる。他の例はオキシアルキレン、ポリエチレングリコール、ポリプロピレングリコールおよびポリオキシエチレン化ポリオール単位のブロック共重合体類である。一般的には、当該ポリアルキレン高分子類は、好ましくはアルキル、アリール、置換アルキルおよび置換アリールから選ばれた置換基で一方が封鎖されている。
【００８０】
用語“リンカー”、“連結基”または“１から４０個の原子のリンカー”は、（１）ＰＯＡＭを活性化合物に共有的に連結、および／または（２）ＰＯＡＭのポリアルキレンオキシド部分を互いに共有結合的に連結する基或いは基類を称する。いずれかの個々の重合体抱合体内では、ＰＯＡＭのポリアルキレンオキシド部分を接続しているリンカーと活性化合物にＰＯＡＭを結合しているリンカーは同じでもまたは異なってもよい（即ち、同じまたは異なる化学構造を有してもよい）。その連結基が1つ以上の連結を有する代表的な官能基の連結には、アミド類、エーテル類、カルバメート類、チオカルバメート類、尿素類、チオ尿素類、アミノ基類、カルボニル基類、アルコキシ基類などである。当該リンカーはその原子内容において同質または異質であってよい（例えば、炭素原子類のみを含有するリンカー類または炭素原子とともにリンカーに1個以上のヘテロ原子類が存在するリンカー）。好ましくは、当該リンカーは１から２５個の炭素原子および酸素、ＮＲ２２、硫黄、−Ｓ（Ｏ）−および−Ｓ（Ｏ）２−より選ばれた０から１５個のヘテロ原子類を含有し、そのＲ２２は前に定義したものである。当該リンカーはキラルまたはアキラル、直鎖、分岐或いは環状であってもよい。
【００８１】
当該官能基連結群または当該リンカー内の結合の間に介在すると、当該リンカーは更にスペーサー基類を含有することができ、スペーサー類はこれに限られることはないがアルキル、置換アルキル、アリール、置換アリール、シクロアルキル、置換シクロアルキル、ヘテロアリール、置換ヘテロアリール、複素環式、置換複素環式およびそれらの組合せから選ばれる。当該スペーサーはその元素内容は同質または異質であってよい（例えば、炭素原子のみを含有するスペーサー、または炭素原子とともに1種以上のヘテロ原子が当該スペーサーに存在するスペーサー）。好ましくは、当該スペーサーは１から２５個の炭素原子および酸素、ＮＲ２２、硫黄、−Ｓ（Ｏ）−および−Ｓ（Ｏ）２−から選んだ０から１５個のヘテロ原子を含有し、Ｒ２２は前に定義したものである。当該リンカーはキラルまたはアキラル、直鎖、分岐または環状であってもよい。好ましいリンカー類は以下に説明する。
【００８２】
スペーサー類の非限定的な例として、直鎖または分岐アルキレン鎖、フェニレン、ビフェニレンなどの環、その全てが当該活性化合物と連結を形成することができる官能基を１個または１個以上持つことができ、１個以上のポリアルキレンオキシド部分である。多官能リンカー−スペーサー基の特定な例はリシンで、それは２つのポリアルキレンオキシド部分に活性化合物をＣ４アルキレン鎖の上に置換されている２つのアミノ基を経て連結することができる。他の非限定の例には、連結形成につき個々に利用できる２および３個の官能基を有するｐ−アミノ安息香酸および３，５−ジアミノ安息香酸が含まれる。
【００８３】
当該ＰＯＡＭ基と当該リンカーとの共有結合を供与する従来の化学手法を用いて当該リンカーに当該ＰＯＡＭ基または官能基を共有結合的に連結させる。当該リンカーは次に当該活性化合物と共有結合的に結びつける。そのような連結を生じる反応化学は当技術分野ではよく知られている。当該反応化学では当該リンカー、当該活性化合物および当該ＰＯＡＭ基上の補助的官能基類の利用を伴う。好ましくは、当該リンカー上の補助的官能基類は、結合のためＰＯＡＭ基上にて利用できる官能基であるか、または結合するためにＰＯＡＭ基上にどれが導入できる官能基類であるかに関連して選ばれる。この場合もやはり当該補助的官能基につき当技術分野ではよく知られている。例えば、適切でよく知られた活性化剤の存在下にて当該リンカーまたは当該ＰＯＡＭ基のいずれかのカルボン酸と当該ＰＯＡＭ基または当該リンカーの一級または二級アミンとの間の反応は、当該ＰＯＡＭ基を当該リンカーに共有結合させるアミドを形成することになり；当該リンカーまたは当該ＰＯＡＭ基のいずれかのアミン基と当該ＰＯＡＭまたは当該リンカーのハロゲン化スルホニルの反応は当該ＰＯＡＭ基を当該リンカーに結合してスルホンアミド結合を生じ；当該リンカーまたは当該ＰＯＡＭ基のいずれかのアルコールまたはフェノール基と当該ＰＯＡＭ基または当該リンカーのハロゲン化アルキルまたはハロゲン化アリールの間の反応は当該ＰＯＡＭ基と当該リンカーを共有結合させてエーテル結合を形成することになる。
【００８４】
以下の表１は多くの補助的反応基類およびそれらの間の反応で形成して生じる結合群を示す。
【表１】
2007518825.tif 000023
【００８５】
好ましいリンカー類には、例示として以下の−Ｏ−、−ＮＲ２２−、−ＮＲ２２Ｃ（Ｏ）Ｏ−、−ＯＣ（Ｏ）ＮＲ２２−、−ＮＲ２２Ｃ（Ｏ）−、−Ｃ（Ｏ）ＮＲ２２−、−ＮＲ２２Ｃ（Ｏ）ＮＲ２２−、−アルキレン−ＮＲ２２Ｃ（Ｏ）Ｏ−、−アルキレン−ＮＲ２２Ｃ（Ｏ）ＮＲ２２−、−アルキレン−ＯＣ（Ｏ）ＮＲ２２−、−アルキレン−ＮＲ２２−、−アルキレン−Ｏ−、−アルキレン−ＮＲ２２Ｃ（Ｏ）−、−アルキレン−Ｃ（Ｏ）ＮＲ２２−、−ＮＲ３Ｃ（Ｏ）Ｏ−アルキレン−、−ＮＲ２２Ｃ（Ｏ）ＮＲ２２−アルキレン−、−ＯＣ（Ｏ）ＮＲ２２−アルキレン−、−ＮＲ２２−アルキレン−、−Ｏ−アルキレン−、−ＮＲ２２Ｃ（Ｏ）−アルキレン−、−Ｃ（Ｏ）ＮＲ２２−アルキレン−、−アルキレン−ＮＲ２２Ｃ（Ｏ）Ｏ−アルキレン、−アルキレン−ＮＲ３Ｃ（Ｏ）ＮＲ２２−アルキレン、−アルキレン−ＯＣ（Ｏ）ＮＲ２２−アルキレン、−アルキレン−ＮＲ２２−アルキレン、アルキレン−Ｏ−アルキレン−、−アルキレン−ＮＲ２２Ｃ（Ｏ）−アルキレン、−Ｃ（Ｏ）ＮＲ２２−アルキレンおよび
【化１８】
2007518825.tif 000024
が含まれ式中、
【化１９】
2007518825.tif 000025
はアリール、置換アリール、シクロアルキル、置換シクロアルキル、ヘテロアリール、置換ヘテロアリールおよび置換複素環およびＢとＣは、結合、−Ｏ−、−ＣＯ−、−ＮＲ２２−、−ＮＲ２２Ｃ（Ｏ）Ｏ−、−ＯＣ（Ｏ）ＮＲ２２−、−ＮＲ２２Ｃ（Ｏ）−、−Ｃ（Ｏ）ＮＲ２２−、−ＮＲ２２Ｃ（Ｏ）ＮＲ２２−、−アルキレン−ＮＲ２２Ｃ（Ｏ）Ｏ−、−アルキレン−ＮＲ２２Ｃ（Ｏ）ＮＲ２２−、−アルキレン−ＯＣ（Ｏ）ＮＲ２２−、−アルキレン−ＮＲ２２、−アルキレン−Ｏ−、−アルキレン−ＮＲ２２Ｃ（Ｏ）−、−アルキレン−Ｃ（Ｏ）ＮＲ２２−、−ＮＲ２２Ｃ（Ｏ）Ｏ−アルキレン−、−ＮＲ２２Ｃ（Ｏ）ＮＲ２２−アルキレン−、−ＯＣ（Ｏ）ＮＲ２２−アルキレン−、−ＮＲ２２−アルキレン−、−Ｏ−アルキレン−、−ＮＲ２２Ｃ（Ｏ）−アルキレン−、−Ｃ（Ｏ）ＮＲ２２−アルキレン−、−アルキレン−ＮＲ２２Ｃ（Ｏ）Ｏ−アルキレン、−アルキレン−ＮＲ２２Ｃ（Ｏ）ＮＲ２２−アルキレン、−アルキレン−ＯＣ（Ｏ）ＮＲ２２−アルキレン、−アルキレン−ＮＲ２２−アルキレン、アルキレン−Ｏ−アルキレン、−アルキレン−ＮＲ２２Ｃ（Ｏ）−アルキレンおよび−Ｃ（Ｏ）ＮＲ２２−アルキレンからなる群から別個に選ばれ、Ｒ２２は前に定義したものである。
【００８６】
上記リンカー類の好ましいアルキレン基類にはＣ１〜Ｃ１６アルキレン基類、より好ましくはＣ１〜Ｃ６アルキレン基類および大層好ましくはＣ１〜Ｃ３アルキレン基類が含まれる。好ましい複素環基類にはピペラジニル、ピペリジニル、ホモピペラジニル、ホモピペリジニル、ピロリジニルおよびイミダゾリジニルが含まれる。
【００８７】
当該用語“オキシアルキレン”は−ＯＣＨ２（ＣＨＲｄ）ｑ−を称し、ｑは１，２，３または４で、Ｒｄは各場合において別個でＨまたはアルキルである。好ましくは、ｑは１である。重合化オキシアルキレン類はポリアルキレンオキシド類またはポリアルキレングリコール類を称し、その非限定的例にはＰＥＧ、ポリプロピレングリコール、ポリブチレングリコール、ポリイソプロピレングリコールなどが含まれる。
【００８８】
本発明で使用されるポリオキシアルキレン高分子（ＰＯＡＭｓ）は好ましくは約１００から１００，０００；好ましくは１，０００から５０，０００；より好ましくは約１０，０００から約４０，０００の数平均分子量を有する。特別に好ましい実施形態では、当該分子に結合された単一または複数ＰＯＡＭ部分から生まれるＰＯＡＭの全量の分子量は１００，０００；より好ましくは５０，０００そしてより好ましくは４０，０００を超えない。
【００８９】
好ましい実施形態では、当該−［連結基］ｕ−ＰＯＡＭ基のｕはゼロまたは１であり、以下の式で表すことができ：
−Ｚ'−［（ＣＨ２ＣＨＲ７Ｏ）ｐＲ８］ｔ
式中Ｚ'は共有結合、１から４０個の原子の連結基、−Ｏ−、−Ｓ−、−ＮＲ２２−、−Ｃ（Ｏ）Ｏ−、−Ｃ（Ｏ）ＮＲ２２−および−Ｃ（Ｏ）−からなる群から選ばれ、Ｒ２２は水素およびアルキルからなる群から選ばれ、
Ｒ７は水素およびメチルからなる群から選ばれ；
Ｒ８は水素、アルキル、置換アルキル、アリール、置換アリール、−ＣＨ２ＣＨＲ７ＳＲ７および−ＣＨ２ＣＨＲ７ＮＲ１０Ｒ１１からなる群から選ばれ、Ｒ７は前に定義されたもので、Ｒ１０およびＲ１１は水素およびアルキルからなる群から別個に選ばれ；
ｐはＰＯＡＭ部分の分子量が約１００から１００，０００の範囲になるような整数であり；そして
ｔは１から５の整数であるが、ただしｔは当該連結基の価数より１少なく、連結基がなければ１であるのが条件となる。
【００９０】
Ｚ'が連結基である場合、複数のＰＯＡＭ基が存在できる。例えば、当該連結基が三価である場合、２つのＰＯＡＭ基が結びつくことができ、残りの価数は式Ｉの分子と連結するのに使用される。好ましくはＰＯＡＭ基の数は１または２である。いずれの場合も、複数のＰＯＡＭ基が存在する場合、当該ＰＯＡＭ基の全集合分子量は１００，０００を超えない。
【００９１】
“薬学的に許容できる塩”とは、本発明の抱合体類の生物的効果および性質を保持し、生物的または他の意味で望ましくないものではない。多くの場合、本発明の抱合体類はアミノおよび／またはカルボキシル基あるいはそれと同様な基の存在により酸および／または塩基の塩を形成することができる。
【００９２】
薬学的に許容できる塩基付加塩類は無機および有機塩基類から調製できる。無機塩基類からできる塩類は、例示としてのみだがナトリウム、カリウム、リチウム、アンモニウム、カルシウムおよびマグネシウム塩類である、有機塩基類からできる塩類には、非限定的であるがアルキルアミン類、ジアルキルアミン類、トリアルキルアミン類、置換アルキルアミン類、ジ（置換アルキル）アミン類、トリ（置換アルキル）アミン類、アルケニルアミン類、ジアルケニルアミン類、トリアルケニルアミン類、置換アルケニルアミン類、ジ（置換アルケニル）アミン類、トリ（置換アルケニル）アミン類、シクロアルキルアミン類、ジ（シクロアルキル）アミン類、トリ（シクロアルキル）アミン類、置換シクロアルキルアミン類、二置換シクロアルキルアミン、三置換シクロアルキルアミン類、シクロアルケニルアミン類、ジ（シクロアルケニル）アミン類、トリ（シクロアルケニル）アミン類、置換シクロアルケニルアミン類、二置換シクロアルケニルアミン、三置換シクロアルケニルアミン類、アリールアミン類、ジアリールアミン類、トリアリールアミン類、ヘテロアリールアミン類、ジヘテロアリールアミン類、トリヘテロアリールアミン類、複素環アミン類、二環性複素環アミン類、三環性複素環アミン類、混合ジおよびトリアミン類で少なくとも当該アミン上の置換基の２つは異なり、アルキル、置換アルキル、アルケニル、置換アルケニル、シクロアルキル、置換シクロアルキル、シクロアルケニル、置換シクロアルケニル、アリール、ヘテロアリール、複素環などからなる類より選ばれるものが含まれる。同様に含まれるアミン類は、当該２つまたは３つの置換基類が当該アミノの窒素とともに複素環式基またはヘテロアリール基を形成する。
【００９３】
適切なアミン類の例には、非限定的な例ではあるがイソプロピルアミン、トリメチルアミン、ジエチルアミン、トリ（イソプロピル）アミン、トリ（ｎ−プロピル）アミン、エタノールアミン、２−ジメチルアミノエタノール、トロメタミン、リシン、アルギニン、ヒスチジン、カフェイン、プロカイン、ヒドラブアミン、コリン、ベタイン、エチレンジアミン、グルコサミン、Ｎ−アルキルグルカミン類、テオブロミン、プリン類、ピペラジン、ピペリジン、モルホリン、Ｎ−エチルピペラジンなどが含まれる。他のカルボン酸誘導体、例えばカルボキシアミド類、低級アルキルカルボキシアミド類、ジアルキルカルボキシアミド類などを含んでいるカルボン酸アミド類は本発明の実施において有用であろうことも理解されるべきである。
【００９４】
薬学的に許容できる酸付加塩類は無機および有機酸類から調製できる。無機酸類からできる塩類には、塩酸、臭化水素酸、硫酸、硝酸、リン酸などが含まれる。有機酸類からできる塩類には、酢酸、プロピオン酸、グリコール酸、ピルビン酸、シュウ酸、リンゴ酸、マロン酸、コハク酸、マレイン酸、フマール酸、酒石酸、クエン酸、安息香酸、桂皮酸、マンデル酸、メタンスルホン酸、エタンスルホン酸、ｐ−トルエンスルホン酸、サルチル酸などが含まれる。
【００９５】
当該用語“薬学的に許容されるカチオン”は薬学的に許容される塩のカチオンを称する。
【００９６】
本明細書で定義した全ての置換される基では、それ自身への更なる置換基類を伴う置換基類を定義することで生じる重合体類は（例えば、それ自身が置換アリール基で置換されている置換アリール基を置換基として有する置換アリールなど）本明細書に包含する意図がないことは理解される。その場合、当該置換基類の最大数は３である。即ち、前の定義の各々は、例えば置換アリール基類は置換アリール−（置換アリール）−（置換アリール）であるという制限に制約される。
【００９７】
同様に、前の定義類には許されない置換様式（例えば、５個のフルオロ基を有するメチル、またはエチレン或いはアセチレン式不飽和のアルファ位置のヒドロキシル基）を含む意図はないことは理解されるであろう。当該許されない置換様式は当技術分野の当事者であればよく知っていることである。
【００９８】
（化合物の調製）
本発明の抱合物類は容易に利用できる出発原料から以下の一般的な方法および手順を用いて調製できる。典型的または好ましい工程条件（即ち、反応温度、時間、反応物のモル比、溶剤類、圧力など）が決まれば、他の工程条件は他に書いてなければ同様に使用できることは理解できるであろう。最適な反応条件は使用する特定の反応物または使用溶媒により変化するが、当該条件は当技術分野の当事者であれば所定の最適化手順で決定することができる。
【００９９】
これに加えて、当技術分野の当事者であれば明らかなようにある種の官能基が望ましくない反応を起こさないように防止するのに必要な従来の保護基が必要とされるであろう。種々な官能基用に適切な保護基とともに個々の官能基類を保護および脱保護するための適切な条件は当技術分野ではよく知られている。例えば、Ｔ．Ｗ．Ｇｒｅｅｎｅ  ａｎｄ  Ｇ．Ｍ．Ｗｕｔｓ，Ｐｒｏｔｅｃｔｉｎｇ  Ｇｒｏｕｐｓ  ｉｎ  Ｏｒｇａｎｉｃ  Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ，Ｓｅｃｏｎｄ  Ｅｄｉｔｉｏｎ，Ｗｉｌｅｙ，Ｎｅｗ  Ｙｏｒｋ，１９９１およびその中に引用してある参考文献中に数多くの保護基類が記述されている。
【０１００】
更に、本発明の抱合体類を形成する化合物類は典型的に１個以上のキラル中心を含んでいる。従って、望めば当該化合物類は純粋な立体異性体類、即ち個々の光学異性体類またはジアステレオマー類、或いは立体異性体に富む混合物として調製または単離できる。全てのそのような立体異性体類（およびそれに富んだ混合物）は、他に表さなければ本発明の範囲内に含まれる。純粋な立体異性体類（またはそれに富んだ混合物類）は、例えば当技術分野ではよく知られている光学活性出発原料または立体選択的試薬類を用いて調製できる。それに代わる方法としては、例えばキラルカラムクロマトグラフィー、キラル分離剤類などを用いれば当該化合物のラセミ混合物類は分離が可能である。
【０１０１】
本発明の抱合体類は１つ以上のＰＯＡＭ部分を式Ｉの活性化合物における幾つかの部位の１つ以上にて含有している：
【化２０】
2007518825.tif 000026
【０１０２】
具体的には、当該ＰＯＡＭ部分はＡｒ１置換基、当該Ｒ置換基、当該Ａｒ２置換基中および／または当該ＰＯＡＭ部分が直接結びつくかまたはリンカーを経由して結びつくかのどちらかである−ＹＣ（Ｏ）Ｖ置換基に組み込むことができる。ＰＯＡＭ部分のそれらの位置へそれぞれ組み込む合成の手順は同様で、ＰＯＡＭ部分上の官能基またはＰＯＡＭ部分に共有結合した連結基と非ＰＯＡＭ置換化合物上の補助官能基との反応を引き起こす。
【０１０３】
初めに、式Ｉの非ＰＯＡＭ置換化合物類は当技術分野ではよく知られていて、これだけに限らないがその全体が参照で本明細書に組み込まれている米国特許第６，４８９，３００号および第６，４３６，９０４号の両方を含む数多くの交付済み特許に例示されている。式Ｉの化合物類の非ＰＯＡＭ変種には補助官能基類を有するもの、またはＡｒ１、Ｒ、Ａｒ２および−ＹＣ（Ｏ）Ｖ部分の１つ以上にある補助官能基に誘導体化できる官能基を有するものが含まれる。説明の目的のために、Ａｒ２部分上に補助官能基（−ＯＨ）を有する化合物類（例えば、チロシン）を当該分子に直接またはリンカーを通じてＰＯＡＭ基を付加するために適した出発点として以下に列挙する。
【０１０４】
当該化合物類はまず複素環アミノ酸１を以下のスキームで例示したように適切な塩化アリールスルホニルと連結して調製できる：
【化２１】
2007518825.tif 000027
式中Ｒ、Ａｒ１、Ｘ，ｍおよびｎは前に定義したとおりである。
【０１０５】
具体的には、上のスキーム１における複素環アミノ酸１をアリールスルホニルハライド２の化学両論的に当量または過剰な量（好ましくは約１．１から約２当量）と、ジクロロメタンなどのような適切な不活性溶媒中で結合させる。一般的に当該反応は約７０℃から約４０℃の間の温度で、典型的には１から２４時間内で起きる実質的に当該反応が終結するまで行う。好ましくは、当該反応は当該反応間に生じる酸を除去するために適切な塩基の存在下で実施される。適切な塩基には、例示であるがトリエチルアミン、ジイソプロピルエチルアミン、Ｎ−メチルモルホリンなどのような三級アミンが含まれる。これに代わるものとして、当該反応は水酸化ナトリウム水溶液のようなアルカリ水溶液、ｐＨ７．４に中和したリン酸塩水溶液などを使用するＳｃｈｏｔｔｅｎ−Ｂａｕｍａｎｎ型条件下で実施することができる。得られる生成物３はクロマトグラフィー、ろ過、蒸発、結晶化などやそれに代わる方法により回収でき、精製および／または単離をせずに次の工程で使用する。
【０１０６】
上の反応において使用する複素環アミノ酸１は既知の化合物類または従来の合成手順で既知化合物類から調製できる化合物類のどちらかである。本反応で用いる適切なアミノ酸の例は、これに限らないがＬ−プロリン、トランス−４−ヒドロキシル−Ｌ−プロリン、シス−４−ヒドロキシル−Ｌ−プロリン、トランス−３−フェニル−Ｌ−プロリン、シス−３−フェニル−プロリン、Ｌ−（２−メチル）プロリン、Ｌ−ピペコリン酸、Ｌ−アゼチジン−２−カルボン酸、Ｌ−チアゾリジン−４−カルボン酸、Ｌ−（５，５−ジメチル）チアゾリジン−４−カルボン酸、Ｌ−チアモルホリン−３−カルボン酸が含まれる。望めば、当該アミノ酸１のメチルエステル類、エチルエステル類、三級ブチルエステル類などのような相当するカルボン酸エステル類は塩化アリールスルホニルとの上記反応で使用できる。次いで従来の試薬類および条件、即ちメタノール／水のような不活性希釈液中でアルカリ金属水酸化物との処理を用いて当該エステル基を加水分解してカルボン酸とする、Ｎ−スルホニルアミノ酸３が与えられる。
【０１０７】
同じように、上の反応で使用する塩化アリールスルホニル類２は、既知の化合物類または既知の化合物から従来の合成手順で調製できる化合物類である。当該化合物類は典型的には相当するスルホン酸、即ち式Ａｒ１ＳＯ３Ｈの化合物類でＡｒ１は前に定義した化合物から三塩化リンおよび五塩化リンを用いて調製する。本反応は一般的に当該スルホン酸を約２から５モル当量の三塩化リンおよび五塩化リンをそのまま或いはジクロロメタンのような不活性溶媒中で０℃から約８０℃で約１から約４８時間接触させると、当該塩化スルホニルを与える。これに代わるものとして、当該塩化アリールスルホニル類２は、相当するチオール化合物、即ちＡｒ１は本明細書で定義したものであるＡｒ１−ＳＨの化合物類から、塩素（Ｃｌ２）および水で当該チオールを従来反応条件で処理すると調製できる。
【０１０８】
これに代わるものとして、上記反応で使用する塩化アリールスルホニル２は、置換ベンゼンまたは複素環アルキル基につきＣｌＳＯ３Ｈを用いてクロロスルホニル化することで調製できる。
【０１０９】
本発明で使用するのに適当な塩化アリールスルホニル類の例には、これだけに限ることはないが塩化ベンゼンスルホニル、塩化１−ナフタレンスルホニル、塩化２−ナフタレンスルホニル、塩化ｐ−トルエンスルホニル、塩化ｏ−トルエンスルホニル、塩化４−アセトアミドベンゼンスルホニル、塩化４−三級ブチルベンゼンスルホニル、塩化４−臭化ベンゼンスルホニル、塩化２−カルボキシベンゼンスルホニル、塩化４−シアノベンゼンスルホニル、塩化３，４−ジクロロベンゼンスルホニル、塩化３，５−ジクロロベンゼンスルホニル、塩化３，４−ジメトキシベンゼンスルホニル、塩化３，５−ジトリフルオロメチルベンゼンスルホニル、塩化４−フルオロベンゼンスルホニル、塩化４−メトキシベンゼンスルホニル、塩化２−メトキシカルボニルベンゼンスルホニル、塩化４−メチルアミド−ベンゼンスルホニル、塩化４−ニトロベンゼンスルホニル、塩化４−トリフルオロメチルベンゼンスルホニル、塩化４−トリフルオロメトキシベンゼンスルホニル、塩化２，４，６−トリメチルベンゼンスルホニル、塩化２−チオフェンスルホニル、塩化５−クロロ−２−チオフェンスルホニル、塩化２、５−ジクロロ−２−チオフェンスルホニル、塩化２−チアゾールスルホニル、塩化2−メチル−４−チアゾールスルホニル、塩化１−メチル−４−イミダゾールスルホニル、塩化１−メチル−４−ピラゾールスルホニル、塩化５−クロロ−１，３−ジメチル−４−ピラゾールスルホニル、塩化３−ピリミジンスルホニル、塩化２−ピリミジンスルホニルなどが含まれる。望めば、フッ化スルホニル、臭化スルホニルまたは無水スルホン酸が塩化スルホニルの代わりに上記反応において使用してもよく、Ｎ−スルホニルアミノ酸３を形成する。
【０１１０】
当該Ｎ−アリールスルホニルアミノ酸３はそののち以下のスキーム２にて示すように市販で入手できるチロシンエステル類と連結させるが：
【化２２】
2007518825.tif 000028
式中Ｒ、Ａｒ１、Ｘ、ｍおよびｎは前に定義した如くで、Ｒａは水素またはアルキルで、好ましくは三級ブチルのようなアルキル基、Ｚはアリール環上の任意な置換基、そしてｑは０、１または２である。
【０１１１】
このカップリング反応は典型的にはカルボジイミド類、ＢＯＰ試薬（ベンゾｔリアゾール−１−イルオキシ−トリス（ジメチルアミノ）−ホスホニウムヘキサフルオロホスホナート）などのような既知のカップリング試薬を用いて実施する。適切なカルボジイミド類には例示であるが、ジシクロヘキシルカルボジイミド（ＤＣＣ）、１−（３−ジメチルアミノプロピル）−３−エチルカルボジイミド（ＥＤＣ）などが含まれる。必要であれば、カルボジイミドカップリング試薬類の重合体担持形も、例えばＴｅｔｒａｈｅｄｒｏｎ  Ｌｅｔｔｅｒｓ，３４（４８），７６８５（１９９３）に記載されているものを含めて使用できる。これに加えて、Ｎ−ヒドロキシスクシンイミド、１−ヒドロキシベンゾトリアゾールなど既知のカップリング促進剤類がカップリング反応を促進するのに使用できる。
【０１１２】
本カップリング反応は通常ではＮ−スルホニルアミノ酸３と当該カップリング試薬約１から２当量およびチロシン誘導体４少なくとも１当量、好ましくは約１から約１．２当量をジクロロメタン、クロロホルム、アセトニトリル、テトラヒドロフラン、Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミドなどの不活性希釈剤中で接触させて実施する。一般的には、本反応は約０℃から約３７℃の温度範囲で約１２から約２４時間実施する。当該反応が終了したら、当該化合物５は中和、蒸発、抽出、沈殿、クロマトグラフィー、ろ過などを含んだ従来法により回収する。
【０１１３】
これに代わるものとして、当該Ｎ−スルホニルアミノ酸３は酸ハロゲン化物に変換でき、それを化合物４と連結させて化合物５を与える。当該酸ハロゲン化物は化合物３と、塩化チオニル、三塩化リン、三臭化リンまたは五塩化リン、または好ましくは塩化オキサリルのような無機酸ハロゲン化物と従来条件下で接触させて調製できる。一般的に、本反応は約１から５モル当量の無機酸ハロゲン化物または塩化オキサリルを用い、そのまま或いはジクロロメタンまたは四塩化炭素のような不活性溶媒中、約０℃から約８０℃の温度範囲で約１から約４８時間実施する。ＤＭＦのような触媒も本反応で同じく使用できる。
【０１１４】
Ｎ−スルホニルアミノ酸の酸ハロゲン化物３をその後、少なくとも１当量、好ましくは約１．１から約１．５当量のチロシン誘導体４とジクロロメタンのような不活性希釈剤中で約−７０℃から約４０℃の温度範囲で約１から約２４時間接触させる。好ましくは当該反応中に発生する酸を除去する適切な塩基の存在で本反応を実施する。適切な塩基類には、例としてトリエチルアミン、ジイソプロピルエチルアミン、Ｎ−メチルモルホリンのような三級アミン類などが含まれる。もう1つの方法として、当該反応は水酸化ナトリウムなどのような水溶性あるかりを用い、Ｓｃｈｏｔｔｅｎ−Ｂａｕｍａｎｎ型条件下で実施することができる。当該反応の終了時、化合物５は中和、蒸発、抽出、沈殿化、クロマトグラフィー、ろ過などを含む従来法で回収する。
【０１１５】
もう1つの方法として、化合物５は最初にジアミノ酸誘導体を形成し、その後当該ジアミノ酸を塩化アリールスルホニル２と以下のスキーム３に示すように連結させるが：
【化２３】
2007518825.tif 000029
式中、Ｒ、Ｒａ、Ａｒ１、Ｘ、Ｚ、ｍ、ｎおよびｑは前に定義した通りである。
【０１１６】
当該ジアミノ酸６は、アミノ酸１とアミノ酸４を従来のアミノ酸カップリング手法およびカルボジイミド類、ＢＯＰ試薬などのような試薬類を用いてカップリングして容易に調製できる。ジアミノ酸６はその後塩化スルホニル２を用いてスルホネート化でき、上で説明した合成手順を用いれば化合物７を与える。
【０１１７】
上記反応で使用したチロシン誘導体類４は既知の化合物類或いは従来の合成手順で既知の化合物から調製できる化合物のどちらかである。例えば、上記反応に使用するのに適したチロシン誘導体４には、これに限られないがＬ−チロシンメチルエステル、Ｌ−チロシン三級ブチルエステル、Ｌ−３，５−ジヨードチロシンメチルエステル、Ｌ−３−ヨードチロシンメチルエステル、β−（４−ヒドロキシ−ナフト−１−イル）−Ｌ−アラニンメチルエステル、β−（６−ヒドロキシ−ナフト−２−イル）−Ｌ−アラニンメチルエステルなどが含まれる。必要であれば、勿論上記化合物類の他のエステル類またはアミド類も使用できる。
【０１１８】
当該Ｎ−アリールスルホニル−複素環アミノ酸−チロシン誘導体７はＰＯＡＭ誘導体類を以下に示すスキーム４〜１４のカップリング反応によりＡｒ２基の位置で調製する出発時点として使用できるが、そのカップリング反応はポリエチレングリコール誘導体類（ＰＥＧ）のようなＰＯＡＭ部分の導入のやり方を示す例証にすぎない。ある場合、当該ＰＯＡＭ部分は直接的にフェノキシ基上に導入でき、他の場合では当該ＰＯＡＭ部分はリンカー部分を通した連結で導入できる。
【０１１９】
詳しくは、スキーム４で以下に図示するが：
【化２４】
2007518825.tif 000030
式中Ａｒ１、Ｒ，Ｒａ，ｍ、ｎ、ｑ、ＸおよびＺは前に定義した如くである一方、Ｑは酸素、硫黄およびＮＨ，ＰｇはＣＢＺ、Ｂｏｃなどのようなアミン保護基であるが、それはＲａのカルボキシル保護基と比較して好ましい直角的な除去が可能で、ＰＥＧは好ましくはメチル封鎖した約１００から１００，０００の分子量を有するポリ（オキシエチレン）基である。
【０１２０】
スキーム４において、当該ＰＥＧ部分はＮ−ピペラジニルカルボニルチロシン部分（Ｒ２／Ｒ３はそれが結合している窒素原子とともに連結してピペラジン環を形成する）に以下の基を構成するリンカー構成要素を通して共有結合する。
【化２５】
2007518825.tif 000031
【０１２１】
詳しくは、スキーム４において上記のように調製された化合物７は少なくとも当量および好ましくは過剰の４−ニトロフェニルクロロギ酸８と塩化メチレン、クロロホルムなどの適切な溶媒中で、好ましくは不活性雰囲気にて結合させる。当該反応は好ましくは約−４０℃から０℃で、生成する酸を除去するための適した塩基の存在下で実施する。適した塩基類には、例としてトリエチルアミン、ジイソプロピルエチルアミンなどが含まれる。中間体混合カルボナート（非表示）の形成後、少なくともほぼ当量のＮ−Ｐｇピペラジン８ａを当該反応溶液に添加する。本反応は室温で約１から２４時間連続させる。本反応の終了後、当該化合物９は、中和、蒸発、抽出、沈殿化、クロマトグラフィー、ろ過などを含めた従来法またはそれに代わる方法で回収し、生成および／または単離することなしに次の反応に使用する。
【０１２２】
当該保護基の従来法での除去で遊離ピペラジン誘導体１０を与える。除去は使用した保護基に応じて達成する。例えば、トリフルオロメチルカルボニル保護基は炭酸カリウムの水溶液により容易に除去される。更に、種々なる官能基に対する適した保護基とともに、個々の官能基の保護化および脱保護化についての適した条件については当技術分野ではよく知られている。例えばＴ．Ｗ．Ｇｒｅｅｎ  ａｎｄ  Ｇ．Ｍ．Ｗｕｔｓ，Ｐｒｏｔｅｃｔｉｎｇ  Ｇｒｏｕｐｓ  ｉｎ  Ｏｒｇａｎｉｃ  Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ，Ｓｅｃｏｎｄ  Ｅｄｉｔｉｏｎ，Ｗｉｌｅｙ，Ｎｅｗ  Ｙｏｒｋ，１９９１およびそこで引用している参考を参照。
【０１２３】
当該遊離ピペリジン誘導体１０はそののち、トルエン（Ｆｌｕｋａ社）、ジクロロメタンおよび重炭酸塩水溶液中でのホスゲンの二相性反応混合物における反応で相当する塩化カルバミル１１に変換する。当該塩化カルバミル１１と、市販で入手できるＣＨ３（ＯＣＨ２ＣＨ２）ｐＯＨのような一端封鎖のＰＥＧとの反応はＰＥＧ誘導体１２を与える。当該反応は塩化メチレン、クロロホルムなどのような適した溶媒中、通常はＤＭＡＰの触媒量および反応中に発生する酸を除去する塩基の存在下実施する。当該反応は実質的に完結するまで続けるが、通常は４から２４時間である。
【０１２４】
Ｒａがアルキルである場合、当該エステル誘導体のその後の加水分解で遊離のカルボキシル基またはその塩を与える。
【０１２５】
当該ピペラジン誘導体１０生成にいたるまでの本反応スキームの具体的な例を以下のスキーム５で図示する：
【化２６】
2007518825.tif 000032
【０１２６】
具体的には、市販で入手できる３−ピリジンスルホン酸２１を従来法により当技術分野でよく知られている条件下でＰＯＣｌ３／ＰＣｌ５と接触させて相当する塩化スルホニル２２に変換する。塩化スルホニル２２と市販で入手できるＳ−５，５−ジメチルチアゾリジン−４−カルボン酸２３との結合はリン酸緩衝液（ｐＨ７．４）の存在において過剰な塩化スルホニルを用い従来の条件下で達成した。当該反応は好ましくは約−１０から２０℃の温度で当該反応が実質的に完了するまで実施されるが、この時間は通常０．５から５時間である。当該得られた生成物２４はクロマトグラフィー、ろ過、蒸発、結晶化などの従来法でまたはそれに代わる方法で回収でき、精製および／または単離せずに次の工程で使用される。
【０１２７】
Ｎ−ピリジルスルホニル−５，５−ジメチルチアゾリジン−４−カルボン酸化合物２３は次に従来のアミノ酸カップリング条件を用いてｔ−ブチルチロシンと結合する。具体的には、このカップリング反応は１−（３−ジメチルアミノプロピル）−３−エチルカルボジイミド（ＥＤＣ）、１−ヒドロキシ−ベンゾトリアゾール（ＨＯＢｔ）およびＮ−メチルモルホリンのようなカップリング試薬を用いて行うと当該カップリング反応が促進される。
【０１２８】
本カップリング反応は通常Ｎ−スルホニルアミノ酸２３を約１から約２当量のカップリング試薬および少なくとも１当量、好ましくは約１から１．２当量の三級ブチルエステルをジクロロメタン、クロロホルム、アセトニトリル、テトラヒドロフラン、Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミドなどの不活性希釈剤中で接触させて実施する。一般的に、本反応は約０℃から約２２℃の温度範囲で、約１２から２４時間実施する。当該反応の完了した時点で、当該化合物２４は中和、蒸発、抽出、沈殿化、クロマトグラフィー、ろ過などを含む従来法、またはそれに代わる方法で回収し、精製および／または単離することなしに次の工程で使用する。
【０１２９】
別個に、モノ−Ｎ−Ｂｏｃ−ピペラジン２５を前に記述したホスゲンとの反応で相当する塩化カルバミルに変換する。当該反応が完了した時点で、当該化合物２６は中和、蒸発、抽出、沈殿化、クロマトグラフィー、ろ過などまたはそれに代わる方法を含む従来方法により回収され、精製および／または単離することなく次の工程で使用する。
【０１３０】
化合物２４と化合物２６により化合物２７を与えるカップリングは、ジクロロメタンのような不活性希釈剤中にてＤＭＡＰの触媒量および好ましくは生成する酸を除去する塩基の存在下で進行する。当該反応は約−２０から約２２℃の温度で約２から約２４時間行う。当該反応が完了した時点で、化合物２７は、中和、蒸発、沈殿化、クロマトグラフィー、ろ過など、またはそれに代わる方法を含む従来方法で回収し、精製および／または単離することなく次の工程で使用する。
【０１３１】
当該アミノのＢｏｃ保護基およびｔ−ブチルエステルの両方はトリフルオロ酢酸の存在下で除去されて化合物２８を与え、それは中和、蒸発、抽出、沈殿化、クロマトグラフィー、ろ過などを含む従来法で回収できる。
【０１３２】
フェニルアラニン化合物に見られるカルボキシル保護基に対してアミノ基の１つが直交的に保護されているので、以下のスキーム６はカップリング後当該ピペラジン保護基を当該カルボキシル保護基とは異なるやり方で除去できるピペラジン化合物の調製法を例示している。当該直交的な保護は、得られた化合物に対する次の反応において望ましくない副反応を避けるためにカルボキシル保護基が要求されれば必要である。
【化２７】
2007518825.tif 000033
【０１３３】
具体的には、スキーム６において化合物２４は前に記述された方法で調製される。Ｎ−ｔ−Ｂｏｃ−ピペラジン２５は、反応で生じる酸を除去するためトリメチルアミンのように適したアミンの存在下、ジクロロメタンのような適切な溶媒中で過剰なトリフルオロ無水酢酸と接触させてＮ−ｔ−Ｂｏｃ−Ｎ'−トリフルオロメチル−カルボニルピペラジン２９へ従来通りに変換する。一般的に、本発明は約−２０℃から約２２℃の温度範囲で、約１から約２４時間行われる。当該反応を完了した時点で、化合物２９は中和、蒸発、抽出、沈殿化、クロマトグラフィー、ろ過など、またはそれに代わる方法を含む従来法で回収し、好ましくは精製および／または単離することなしで次の工程で使用する。
【０１３４】
次に当該Ｎ−ｔ−Ｂｏｃ−Ｎ'−トリフルオロメチルカルボニルピペラジン２９上のｔ−Ｂｏｃ保護基の塩化メチレン、ＥｔＯＡｃ、ＥｔＯ２などの不活性溶媒を通したガス状ＨＣｌを用いて行う従来法により室温での除去はＮ'−トリフルオロメチルカルボニルピペラジン３０の塩酸塩を与える。一般的に本反応は約−２０℃から約２２℃の温度範囲にて約０．５から約４時間実施する。当該反応が完了する時点で、化合物３０は中和、蒸発、抽出、沈殿化、クロマトグラフィー、ろ過など、またはそれに代わる方法を含んだ従来法により回収でき、精製および／または単離することなく次の工程で使用される。
【０１３５】
Ｎ'−トリフルオロメチルカルボニルピペラジン３０の当該Ｎ−塩化カルバミル誘導体３１への変換は前に記述した方法にてホスゲンと接触させて従来通り進行させる。当該反応が完了する時点で、化合物３１は中和、蒸発、抽出、沈殿化、クロマトグラフィー、ろ過など、またはそれに代わる方法を含む従来法で回収でき、精製および／または単離をすることなく次の工程で使用される。
【０１３６】
化合物３１および２４は前に記述したのと同様な条件で結合させると、当該フェニルアラニン基のカルボキシル部分と同様にピペラジン基のアミノ部分にて直交的に保護されている化合物３２を与える。トリフルオロメチルカルボニルアミノ保護基の選択的除去は炭酸カリウム水溶液を用いた従来条件下で進み、化合物３３を与える。
【０１３７】
以下のスキーム７は化合物２８を誘導化してＰＥＧ置換基を与える第一の経路を示す。本スキームにおいては、当該ピペラジン基のアミノ部分は当該リシン誘導体の活性化カルボキシル基への補助的官能基として使用されて共有結合のアミド基を形成、それにより以下の式のリンカーを通じて２つのＰＥＧ部分を当該化合物へそれにより導入するが、
【化２８】
2007518825.tif 000034
式中のリンカーは８個の炭素原子および５個のヘテロ原子を含む。
【化２９】
2007518825.tif 000035
【０１３８】
具体的には、スキーム７において過剰な化合物２８（１．１から１０当量）の市販で入手できるジ−ＰＥＧ置換リシン誘導体のＮ−ヒドロキシスクシンイミジルエステルによる抱合化はリン酸緩衝水溶液の存在下で抱合体２９を与え、それは透析により回収される。当該市販で入手できるジ−ＰＥＧ置換リシン誘導体のＮ−ヒドロキシ−スクシンイミジルエステルは約４０，０００の重量平均分子量を有しており、このことは各ＰＥＧ部分が約２０，０００の数平均分子量を有することを意味する。当該反応は約０から約２２°の温度で行われる。
【０１３９】
スキーム８はＰＥＧ置換を与える誘導体化の第二の経路を示す。このスキームでは、当該ピペラジン基のアミノ部分は、市販され入手できるカルボキシル−ＰＥＧのそのままで形成した活性カルボキシル基への補助官能基として使用され、それは従来の反応性条件下で共有アミド結合を形成して、それにより単一ＰＥＧ部分を当該化合物に導入する。本実施形態では、当該カルボキシル−ＰＥＧは式ＨＯＯＣ（ＣＨ２）ｖ（ＯＣＨ２ＣＨ２）ｐＯＣＨ３で表され、式中ｐおよびｖは前に定義した如くで、得られるＰＥＧ基へのリンカーは−Ｃ（Ｏ）（ＣＨ２）ｖ−で表される。カルボキシル化ＰＥＧｓは従来の方法および試薬類を使用してヒドロキシＰＥＧ末端部分の酸化で作ることができる。
【化３０】
2007518825.tif 000036
【０１４０】
具体的には、スキーム８ではスキーム７の如く調製した過剰な（１．１から１０当量）の化合物３３に、市販で入手できるカルボキシル−ＰＥＧの少なくとも当量を加え、そのまま少なくとも当量および好ましくは過剰のＨＡＴＵ［Ｏ−（７−アザベンゾトリアゾール−１−イル）−１，１，３，３−テトラメチルウロニウムヘキサフルオロホスフェート］とトリエチルアミンのような適したアミンの存在下で接触させて活性化エステル（示していない）に変換する。カルボキシル−ＰＥＧの化合物３３へのカップリングは好ましくは約０℃から約２２°の温度で約２から２４時間で進行する。当該反応が完了した時点で、当該抱合体３４は中和、蒸発、抽出、沈殿化、クロマトグラフィー、ろ過など、またはそれに代わる方法で回収され、精製および／または単離なしで次の工程で使用される。
【０１４１】
過剰なギ酸による三級ブチルカルボキシル保護基の従来法除去で、本発明の式Ｉのモノ−ＰＥＧ抱合体を与える。
【０１４２】
スキーム９はＰＥＧ置換を与える誘導化の第三の経路を図示する。このスキームでは、ピペラジン基のアミノ部分を市販され入手できるモノ−ヒドロキシ−ＰＥＧのその場で形成するクロロギ酸エステルへの補助官能基として使い、それが従来の活性条件下で共有結合的カルバメート結合を形成することにより、当該化合物に単一のＰＥＧ部分を導入する。本実施形態では、当該モノ−ヒドロキシ−ＰＥＧは式ＨＯＣＨ２ＣＨ２（ＯＣＨ２ＣＨ２）ｐＯＣＨ３で表され、式中ｐは前に定義された如くで、得られるリンカーは−Ｃ（Ｏ）−で表される。
【化３１】
2007518825.tif 000037
【０１４３】
具体的には、スキーム９において市販で入手できるモノ−ヒドロキシＰＥＧ３６のヒドロキシル基はトルエン（Ｆｌｕｋａ社）、ジクロロメタン中のホスゲンと反応して相当するクロロギ酸エステルに変換される。当該生成物は蒸発すると単離され、更なる精製なしで次の工程で使用される。
【０１４４】
僅かに過剰の（１．１から１０当量）クロロギ酸エステル３７を上記のように調製した化合物３３と生成する酸を除去するためのトリエチルアミンのような適した塩基の存在下で接触させる。当該クロロギ酸エステル−ＰＥＧの化合物３３とのカップリングは好ましくは約０から約２２℃の温度で約２から約４時間で進行する。当該反応の完了した時点で、当該抱合体３８は中和、蒸発、抽出、沈殿化、クロマトグラフィー、ろ過など、またはそれに代わる方法を含む従来法で回収され、生成および／または単離することなしで次の工程で使用される。
【０１４５】
過剰なギ酸によるｔ−ブチルカルボキシル保護基の従来的除去で本発明の式Ｉのモノ−ＰＥＧ抱合体３９を与える。
【０１４６】
スキーム１０は次なるＰＥＧ置換基に有用な２つの中間体の合成を図示する。このスキームでは、当該ピペラジン基のアミノ部分は補助的官能基として使用され、それが次なるＰＥＧ置換基のための誘導化をされる。
【化３２】
2007518825.tif 000038
【０１４７】
具体的には、スキーム１０において当該ピペラジン基のアミノ部分を相当する塩化Ｎ−カルバミル誘導体４０への変換は、反応の間に発生する酸を除去するため重炭酸ナトリウムのような適した塩基の存在下で過剰のホスゲンと接触させると進行する。当該反応が完了した時点で、化合物４０は中和、蒸発、抽出、沈殿化、クロマトグラフィー、ろ過など、またはこれに代わる方法を含む従来方法により回収でき、好ましくは精製および／または単離なしで次の工程（スキーム１１に示す）にて使用する。
【０１４８】
それに代わるものとして、化合物３３のピペラジン基のアミノ部分は、生じる酸を除去するためのピリジンのような塩基（溶媒としても作用する）の存在下、少なくとも当量および好ましくは過剰の塩化４−ニトロベンゾイルとの反応で相当するアミドである化合物４１に変換することができる。当該反応は好ましくは約０から約２２℃の温度において約１から約２４時間で進行する。当該反応が完了する時点で、化合物４１は中和、蒸発、抽出、沈殿化、クロマトグラフィー、ろ過など、またはこれに代わる方法を含む従来方法により回収でき、精製および／または単離なしで次の工程にて使用する。
【０１４９】
当該フェニル基のパラニトロ置換基をそれに続いて還元すると化合物４２でのアミン置換基を与える。還元は従来通り水素雰囲気中、通常メタノールのような適切な希釈剤中、高めた圧力においてパラジウム／炭素を用いて実施される。当該反応は実質的に完了するまで進行するが、それは通常約２４から約７２時間内で生じる。当該反応において反応を完了させるのに必要なときには追加の触媒を添加する。当該反応が完了する時点で、当該化合物４２は中和、蒸発、抽出、沈殿化、クロマトグラフィー、ろ過など、またはこれに代わる方法を含む従来方法により回収でき、精製および／または単離なしで次の工程にて使用する。
【０１５０】
化合物４２のフェニル基のパラアミノ置換基を相当するイソシアナート４３へ変換するには、発生する酸を除去する重炭酸ナトリウムのような適した塩基の存在中で過剰のホスゲンと反応して行われる。当該反応は実質的に完了するまで進行するが、それは通常約０．５から約５時間、約０℃から約２２℃で生じる。当該反応が完了する時点で、当該化合物４３は中和、蒸発、抽出、沈殿化、クロマトグラフィー、ろ過など、またはこれに代わる方法を含む従来方法により回収でき、精製および／または単離なしで次の工程にて使用する。
【０１５１】
スキーム１１はＰＥＧ置換基を与える誘導化に関する第４の経路を図示する。本スキームでは、化合物４０のピペラジン基の塩化カルバミル部分を補助的官能基として利用し、市販され入手できるモノヒドロキシまたはモノアミノ−ＰＥＧとカルバメート結合または尿素結合を従来反応条件下で形成させる。本実施形態では、当該ＰＥＧは式ＨＱＣＨ２ＣＨ２（ＯＣＨ２ＣＨ２）ｐＯＣＨ３で表され、ｐおよびＱは前に定義したごとくで、得られるリンカーは−Ｃ（Ｏ）−で表される。
【化３３】
2007518825.tif 000039
【０１５２】
具体的には、スキーム１１では過剰な（１．１から１０当量）塩化カルバニル４０を適切なモノヒドロキシまたはモノアミノ−ＰＥＧと、トリエチルアミンのような適した塩基および／または触媒量の４−Ｎ，Ｎ−ジメチルアミノピリジン（ＤＭＡＰ）の存在下、ジクロロメタンのような不活性溶媒中で接触させる。当該反応は実質的に完了するまで進行するが、それは通常約４から約４８時間内に完了する。当該反応が完了すると、当該抱合体４４は中和、蒸発、抽出、沈殿化、クロマトグラフィー、ろ過など、またはこれに代わる方法を含む従来方法により回収でき、精製および／または単離なしで次の工程にて使用する。
【０１５３】
Ｑがヒドロキシル基であれば、得られる生成物は−Ｃ（Ｏ）−で表されるリンカーを通じて当該ＰＥＧ基をＶＬＡ−４拮抗剤に共有結合的に連結するカルバメート官能基を含有する。Ｑがアミノ基であれば、得られる生成物は−Ｃ（Ｏ）−で表されるリンカーを通じて当該ＰＥＧ基とＶＬＡ−拮抗剤を共有結合的に連結する尿素官能基を含有する。
【０１５４】
過剰なギ酸による三級ブチルカルボキシル保護基の従来的な除去は、本発明の式Ｉａのモノ−ＰＥＧ抱合体を与える。
【０１５５】
スキーム１２はＰＥＧ置換基を与える誘導化についての第５の経路を図示する。本スキームでは、化合物４３のフェニル基のイソシアネート部分を補助的官能基として使用し、市販され入手可能なモノヒドロキシまたはモノアミノ−ＰＥＧと従来的反応条件下でカルバメート結合または尿素結合を形成する。本実施形態では、当該ＰＥＧ化合物は式ＨＱＣＨ２ＣＨ２（ＯＣＨ２ＣＨ２）ｐＯＣＨ３で表され、ｐおよびＱは前に定義したごとくで、得られるリンカーは以下のように表され、
【化３４】
2007518825.tif 000040
式中、当該リンカーは８個の炭素原子および３個のヘテロ原子を含む。
【化３５】
2007518825.tif 000041
【０１５６】
具体的に、スキーム１２では過剰な（１．１から１０当量）イソシアナート４３を適切なモノヒドロキシまたはモノアミノ−ＰＥＧとジクロロメタンまたはトルエンのような適切な不活性希釈剤中で接触させる。当該反応は好ましくは約０℃から約１０５℃の温度で実質的な完了まで維持するが、通常約１から約２４時間内で終了する。当該反応が完了した時点で、抱合体４６は中和、蒸発、抽出、沈殿化、クロマトグラフィー、ろ過など、またはこれに代わる方法を含む従来方法により回収でき、精製および／または単離なしで次の工程にて使用する。
【０１５７】
Ｑがヒドロキシル基であれば、得られる生成物は−Ｃ（Ｏ）−連結基を通じて当該ＰＥＧ基をＶＬＡ−拮抗剤に共有結合的に連結するカルバメート官能基を含有する。Ｑがアミノ基であれば、得られる生成物は−Ｃ（Ｏ）−連結基を通じて当該ＰＥＧ基をＶＬＡ−拮抗剤に共有結合的に連結する尿素官能基を含有する。
【０１５８】
三級ブチルカルボキシル保護基の過剰なギ酸での従来的除去は本発明の式ＩのモノＰＥＧ抱合体４７を与える。
【０１５９】
当該スキームでは、当該分子の他の部位に位置するアミン部分は前に記述した方法にて利用できて、ＰＥＧ基を当該分子に共有結合的に連結する。例えば、Ａｒ１、複素環アミノ酸またはＡＲ２上に位置するアミン類は同様にＰＥＧ置換基用に誘導化できる。当該アミン部分は合成の間はこれらの置換基の中に含むことができ、必要に応じて適切に保護されている。これに代わるものとして、アミン前駆体が使用できる。例えば、スキーム１０で示すようにニトロ基を還元すれば相当するアミンを与える。同様に、シアノ基の還元はＨ２ＮＣＨ２−基を与える。ニトロおよびシアノ置換Ａｒ１基は、アミノ置換Ａｒ１基として米国特許第６，４８９，３００号中に供されている。
【０１６０】
更に、当該アミノ置換は複素環アミノ酸官能基に組み込まれ、その後誘導体化されて式ＩでＲとして見られるＰＥＧ部分を含むようになる。例えば、当該複素環アミノ酸官能基は米国特許第６，４８９，３００号で表されている２−カルボキシルピペラジンになりうる。これに代わるものとして、市販され入手できる３−または４−ヒドロキシプロリンは相当するケトンに酸化でき、その後にシアノボロ水素化ナトリウムの存在下でアンモニアによる還元的アミン化されて相当するアミン部分を形成する。そして更に、４−シアノプロリンは還元されて式−ＣＨ２ＮＨ２の置換アルキル基を提供し、それはアミンを通じて誘導体化できる。
【０１６１】
そして更に、当該アミン部分はＡＲ２官能基中に組み込むことができる。好ましくは、当該アミン部分はＡｒ２に結合したニトロまたはシアノ基のようなアミン前駆体として存在する。
【０１６２】
上記スキームにおいて、当該アミンと補助的官能基との反応は逆反応も可能なので、当該カルボキシルまたはヒドロキシル基は式Ｉａ（いかなるＰＥＧ置換基なしの）のＶＬＡ−４拮抗剤の上に存在し、当該アミン基はＰＥＧ部分の一部分であることが可能である。そのような場合、好ましくは当該ＰＥＧ部分の末端であるアミン基はホスゲンおよびＥｔ３Ｎを用いてイソシアナートに変換でき、そして当該ヒドロキシル基と反応できて以下のスキーム１３で図示したようなカルバメートを形成する：
【化３６】
2007518825.tif 000042
【０１６３】
具体的には、米国特許第６，４８９，３００号に記述されている化合物４８を少なくとも当量および好ましくは過剰な４９と上記した方法で接触させて相当するカルバメート５０を与える。上記したような脱保護基をすると抱合体５１を与える。
【０１６４】
これに代わるものとして、スキーム１３において当該ヒドロキシル官能基はホスゲンと反応できてクロロカルボニルオキシ誘導体を与え、それがモノアミン化合物のアミン基と反応してカルバメートを与える。
【０１６５】
カルボキシル官能基、例えばＡＲ１部分上のものはスキーム８において上記した方法でモノアミン−ＰＥＧと反応させて相当するアミドに変換できる。
【化３７】
2007518825.tif 000043
【０１６６】
具体的には、スキーム１４において米国特許第６，４８９，３００号で記述されている既知化合物５２は慣例の条件で三級ブチル保護化され、当該シアノ化合物５３を与え、それは従来の条件で水素化されてアミノメチル化合物５４を与える。当該アミノメチル基はスキーム９で以前図示したようにＥｔ３ＮおよびＰＥＧクロロギ酸エステルと反応してカルバメート−連結した抱合体三級ブチルエステル５５を与える。三級ブチルエステルをＨＣＯ２Ｈで処理すると抱合体カルボン酸５６を与える。
【０１６７】
適切なＰＥＧ部分は市販で入手できるか当分野で既知の手順で調製できる。例えば、一端がアミンで一端封鎖の直鎖ＰＥＧｓは変動する分子量（例えば、Ｎｅｋｔａｒ，Ｓａｎ  Ｃａｔｌｏｓ，ＣＡから入手できる２キロダルトン（ｋＤａ）、５ｋＤａ、１０ｋＤａおよび２０ｋＤａ）のものを利用できる。一端がアミン基を有する好ましい一端封鎖ＰＥＧｓは式Ｈ２ＮＣＨ２ＣＨ２（ＯＣＨ２ＣＨ２）ｐＯＣＨ３で表すことができる。
【０１６８】
一端がアルコールで一端封鎖した直鎖ＰＥＧｓは変動する分子量（例えば、Ｎｅｋｔａｒ，Ｓａｎ  Ｃａｔｌｏｓ，ＣＡから入手できる２キロダルトン（ｋＤａ）、５ｋＤａ、１０ｋＤａおよび２０ｋＤａ）のものが使用できる。一端がアルコールを有する好ましい一端封鎖直鎖ＰＥＧｓは式ＨＯＣＨ２ＣＨ２（ＯＣＨ２ＣＨ２）ｐＯＣＨ３で表すことができる。
【０１６９】
以下のスキーム１５は、アミノ基にて次のＰＥＧ置換をするために本発明で出発原料として有用な３−アミノピロリジニル誘導体類のこれに代わる合成法を図示する。
【化３８】
2007518825.tif 000044
【０１７０】
従来の方法を用いて市販で入手できるシス−またはトランス−４−ヒドロキシＬ−プロリン５７をメタノール性塩化水素にて還流で数時間処理し、次いで蒸発させ、生じたメチルエステル塩酸塩をピリジン中で過剰な塩化トシルと２日間、室温で処理すると生成物５８を与える。化合物５８は、弱酸水溶液を用いてピリジンを中和し、ＥｔＯＡｃのような有機溶媒で生成物を抽出して単離する。当該生成物５８は結晶化、フラッシュクロマトグラフィーで精製するか、またはより好ましくは精製せずに次なる工程で使用する。
【０１７１】
５８をＤＭＦ中の過剰なアジ化ナトリウムの飽和溶液と室温で１５日間反応させると、化合物５９を与える。化合物５９は当該反応混合物を水で希釈し、次いでＥｔＯＡｃのような有機溶媒で抽出すると単離される。当該生成物５９は結晶化、フラッシュクロマトグラフィーで精製してもよく、またはより好ましくは精製せずに次の工程で使用する。
【０１７２】
化合物５９を水とメタノールの混合液中にて水酸化ナトリウムで処理すると、メチルエステルが加水分解されてカルボン酸が生成し、それを酸性にしてＥｔＯＡＣのような有機溶媒で抽出することで単離される。当該カルボン酸をＤＭＦ中でＬ−チロシン三級ブチルエステル［Ｈ−Ｔｙｒ（Ｈ）−ＯｔＢｕ］、ＥＤＡＣ、ＨＯＢｔおよびＥｔ３Ｎで処理すると、ジペプチドが生成し、それは水により希釈し、ＥｔＯＡｃのような有機溶媒で抽出することで単離される。当該ジペプチドをＤＣＭ中でＣｌＣＯＮＭｅ２、Ｅｔ３ＮおよびＤＭＡＰで還流により２４時間処理すると、当該カルバメート６０が生成し、それはＥｔＯＡｃによる希釈、連続した希酸水溶液および塩基水溶液での洗浄およびその後の蒸発で単離される。化合物６０はフラッシュクロマトグラフィーにより厳密に精製する。
【０１７３】
最後に、メタノール中の６０の溶液を水素雰囲気下でＰｄ／Ｃ触媒で振とうすることで化合物６１が調製される。当該生成物６１はろ過および蒸発により触媒を除去することにより単離される。
【０１７４】
そして更に、種々なる一端封鎖モノヒドロキシＰＥＧｓの合成はＣａｍｐｂｅｌｌの米国特許第４，６０４，１０３号で詳細に記述されており、それはその全体が参照で本明細書に組み込まれてある。一端封鎖モノアミノＰＥＧが好ましければ、当該一端封鎖モノヒドロキシＰＥＧｓは容易に従来法で相当する塩化物に変換でき、次いで過剰なアンモニアとの接触でアミンに変換する。
【０１７５】
本発明のＰＥＧｓには、例えば以下があり：
【表２】
2007518825.tif 000045
式中、ｐおよびアルキレンは本明細書で定義した如くで、Ｒｂは好ましくはアルキル、置換アルキル、アリールおよび置換アリールからなる群から選ばれる。
【０１７６】
（製剤処方）
医薬品として使用するとき、本発明の抱合体類は通常医薬組成物の形態で投与される。これらの組成物は経口、直腸、経皮、皮下、静脈、筋肉内および鼻腔を含んだ種々なる経路で投与される。好ましい投与経路には皮下および静脈が含まれる。特に好ましいのは皮下である。当該組成物類は製剤技術でよく知られている方法で調製され、少なくとも１つの活性な抱合体を含む。
【０１７７】
本発明は、本発明記載の抱合体、例えば式Ｉの抱合体をα４β７阻害剤である別の化合物との組合せで含む医薬組成物も提供する。当該組成物類は薬学的に許容できる担体または賦形剤も含むであろうし、本明細書の他の部分で検討するように投与してもよい。
【０１７８】
本発明は、活性成分として上記した１種以上の式Ｉ〜ＶＩＩＩの抱合体と関連する薬学的に許容できる担体類を含有する医薬組成物も含む。本発明の組成物類を作成する際に、当該活性成分は通常賦形剤と混合されるか、賦形剤で希釈されるか、或いは滅菌注入可能な溶液類および滅菌包装粉末に入りうる担体内に封入される。皮下投与に関して、単純な担体は水、Ｎａ２ＨＰＯ４、ＮａＨ２ＰＯ４およびＮａＣｌの滅菌溶液を等張性で生理的に許容できるｐＨを与える比率で含むことができ、ＰＢＳまたはリン酸緩衝生理食塩水として知られているものである。他の選択肢は当分野の当事者であれば知っており、吸収および全接触の速度に影響を与える混合溶媒系を含んでいる。これらの選択肢にはグリセリン、ポリエチレングリコール４００および綿実油を含有する混合溶媒系が含まれる。同様に使用可能性があるのはエタノール、Ｎ，Ｎ−ジメチルアセトアミド、プロピレングリコールおよびベンジルアルコールで、全て透過性亢進および高浸透圧性を調整するのに使用できる。
【０１７９】
処方を調製する際、当該活性成分は他の成分類と合わせる前に適した粒子径となるように粉末化する必要がある。当該活性化合物が実質的に非可溶性であれば、２００メッシュ未満の粒子径に粉末化するのが普通である。当該活性化合物が実質的に水溶性であれば、当該粒子径は粉砕により当該処方において実質的に均一な分布を与えるように通常調整し、例えば約４０メッシュとする。
【０１８０】
適切な賦形剤の幾つかの例には、乳糖、デキストロース、蔗糖、ソルビトール、マンニトール、でんぷん類、アカシアガム、リン酸カルシウム、アルギン酸塩、トラガント、ゼラチン、ケイ酸カルシウム、マイクロクリスタリンセルロース、ポリビニルピロリドン、セルロース、水、シロップおよびメチルセルロースが含まれる。当該処方群は更に、タルク、ステアリン酸マグネシウムおよび鉱油のような潤滑剤；湿潤剤；乳化および懸濁剤；メチルおよびプロピルヒドロキシ安息香酸エステル類のような保存剤；甘味料および風味剤が含まれる。本発明の組成物群は、当技術分野で知られている手順を用いて患者に投与した後、活性成分の迅速、徐放または遅延放出を与えるように処方できる。
【０１８１】
皮下または静脈内投与用製剤による治療薬の投与は製薬工業においてはよく知られている。皮下または静脈内投与用製剤は、当該治療剤が溶解する組成物というだけではなく一定の特質を備えるべきである。例えば、当該処方は当該活性成分（類）の全ての安定性を促進するべきであり、同時に当該処方製造での費用効率をよくすべきでもある。これらの因子群の全てが静脈内投与用製剤の首尾および有効性を結局のところ決定する。
【０１８２】
本発明の抱合体類の製薬処方類に含まれてよい他の付属的添加物群は以下である：溶媒類は：エタノール、グリセロール、プロピレングリコール；安定剤類は：ＥＤＴＡ（エチレンジアミン四酢酸）、クエン酸；抗微生物保存剤類は：ベンジルアルコール、メチルパラベン、プロピルパラベン；緩衝剤類は：クエン酸／クエン酸ナトリウム、酒石酸水素カリウム、酒石酸水素ナトリウム、酢酸／酢酸ナトリウム、マレイン酸／マレイン酸ナトリウム、フタール酸水素ナトリウム、リン酸／リン酸二水素カリウム、リン酸／リン酸水素二ナトリウムおよび等張調整剤類は：塩化ナトリウム、マンニトール、デキストロースである。
【０１８３】
緩衝剤の存在は水溶性ｐＨを約４から約８の範囲、より好ましくは約４から約６の範囲で保つのに必要である。当該緩衝系は一般的に弱酸とその可溶性塩の組合せ、例えばクエン酸ナトリウム／クエン酸；または二塩基酸のモノカチオンまたはジカチオン塩、例えば酒石酸水素カリウム；酒石酸水素ナトリウム、リン酸／リン酸二水素カリウムおよびリン酸／リン酸水素二ナトリウムである。
【０１８４】
使用する緩衝系の量は（１）望ましいｐＨ；および（２）薬物の量に依存する。一般的に使用する緩衝剤の量は処方での緩衝剤：アレンドロネートのモル比率を０．５：１から５０：１（緩衝剤のモルは緩衝成分、例えばクエン酸ナトリウムおよびクエン酸の組合せたモル数とする）で、ｐＨを４と８の範囲で保ち、一般的には緩衝剤と存在する薬物のモル比１：１から１０：１を使用する。
【０１８５】
本発明の有用な緩衝剤はｍｌ当たり５から５０ｍｇの範囲のクエン酸ナトリウムに対しｍｌ当たり１から１５ｍｇのクエン酸で、当該組成物の水系ｐＨを４〜６に維持するのに十分な量である。
【０１８６】
当該緩衝剤は、ガラス容器類またはゴム栓から浸出するか普通の水道水に存在する溶解している金属イオン類、例えばＣａ、Ｍｇ、Ｆｅ、Ａｌ、Ｂａと溶解性金属錯体形成することにより薬物の沈殿を防止するためにも存在することもできる。当該物質は当該薬物の競合的錯体形成剤として作用し、溶解性金属錯体を作り望ましくない粒子状物質を生じることになるかもしれない。
【０１８７】
これに加えて薬剤、例えば浸透圧をヒト血液と同じ値に調整する約１〜８ｍｇ／ｍｌ量の塩化ナトリウムの存在は、静脈内投与用製剤の投与で赤血球の膨張または収縮で吐き気または下痢および関連した血液障害を起こすのを避けるのに必要とされるであろう。一般的に、当該処方の浸透圧はヒト血液の浸透圧に合わせ、それは２８２から２８８ｍＯｓｍ・ｋｇの範囲で、一般的には２８５ｍＯｓｍ／ｋｇで、塩化ナトリウムの０．９％溶液に相当する浸透圧と同等である。
【０１８８】
当該静脈内投与用製剤は直接静脈内注射、静脈内ボーラスで投与できるか、０．９％塩化ナトリウム注射剤または他の適合性輸液のような適切な輸液に加えることにより点滴で投与できる。
【０１８９】
当該組成物群は好ましくは単位剤形に処方され、各用量は当該活性成分を約５から約１００ｍｇ、より通常では約１０から約３０ｍｇ含有する。当該用語“単位剤形”は、ヒト被験者および他の哺乳類に対する単一用量として適した物的に別個の単位を称し、各単位は望ましい治療効果を生み出すように計算した活性材料の所定量を適切な製剤学的賦形剤とともに含有する。
【０１９０】
当該抱合体は広い用量範囲にて効果があり、一般的には製薬的効果量を投与する。しかしながら、実際に投与される当該抱合体の量は、治療する病状、投与の選択経路、投与される実際の抱合体、年齢、体重および患者個人の反応、患者症状の重度などを含む関連する事情を考慮しながら医者が決めることは理解されるであろう。
【０１９１】
錠剤のような固体組成物を調製するには、当該主な抱合体は製剤的賦形剤と混合し、本発明の抱合体の均一な混合物を含む固体の前処方組成物を形成する。これら前処方組成物が均一と称する場合、当該抱合体は当該組成物全体で均一に分散されていて、当該組成物は容易に錠剤群、丸薬群およびカプセル群のような同等に効果的な単位剤形に再分割できる。この固体前処方はその後、例えば本発明の当該活性成分の０．１から約５００ｍｇを含有する前記の形の単位剤形に再分割される。
【０１９２】
本発明の錠剤類または丸薬類は被覆されるか、それでなければ持続性作用の長所を与える剤形に混合する。例えば、当該錠剤または丸薬は内部用量と外部用量の要素を含み、後者は前者の外側の外皮を形成している。当該２つの要素群は腸溶性層で分けられ、それは胃中では分解しにくく、内部要素はそのまま十二指腸に通過するか放出が遅延するようにしている。種々の材料群がそのような腸溶性層群または被膜群に使用できて当該材料には数多くの重合体酸および重合体酸の混合物にシェラック、セチルアルコールおよび酢酸セルロースのような材料が伴う。
【０１９３】
本発明の新規組成物が経口または注射の投与用に組み込まれた液体形態類には、適切に香りをつけたシロップ水溶液、水溶液または油懸濁液および綿実油、ゴマ油、ココナッツ油またはピーナッツ油のような食用油を伴う香りをつけた乳化物が含まれる。
【０１９４】
吸引または吸送用の組成物群には、薬学的に許容できる水性または有機溶媒或いはそれらの混合物中の溶液群と懸濁液群および粉体群が含まれる。当該液体または固体組成物群は上記したような適切な薬学的に許容できる賦形剤類を含有することができる。好ましくは、当該組成物群は局所または全身の効果のためには経口または鼻呼吸経路で投与される。好ましい薬学的に許容できる溶媒類中の組成物は不活性ガスを使用して霧状にする。霧状化溶液類は霧状化器具から直接吸息するか、または当該霧状化器具はフェースマスクテントまたは断続的陽圧呼吸機器に取り付ける。溶液、懸濁液または粉体組成物類は、当該処方を適切な方法で送り込む器具類から経口または経鼻的に投与できる。
【０１９５】
（重合体抱合体）
処方され、投与される本発明の化合物類は重合体抱合体類である。重合体抱合体類は非抱合体化重合体類より溶解度改善および生体内安定性のような利点を示す。
【０１９６】
そのようなものとして、単一重合体分子が本発明の化合物類を抱合するのに使用できるが、１つ以上の重合体分子が同様に結合できることも意図はしている。本発明の抱合した化合物類は生体内と同時に生体外での応用の両方で有用性を見出すことができる。これに加えて、当該抱合している重合体はいずれの他の官能基、部分または他の抱合した種を最終用途で適したものとして利用できることは理解されるであろう。一例として、幾つかの応用において当該重合体に耐ＵＶ劣化性または抗酸化性または他の特性或いは当該重合体に特徴を付与する官能部分を結合するのは有効となりうる。更なる例として、幾つかの応用では当該重合体を機能化させたり、反応性を与えて薬物分子に架橋結合させたりして抱合化材料全体の種々なる特性または特徴を亢進する。従って、当該重合体はいかなる官能基、反復基、結合または本発明組成物の抱合した化合物の意図する目的に対して効果を妨げることがない他の構成素構造を含有することができる。
【０１９７】
これらの望ましい特徴を達成するのに有効に使用される実例の重合体類は上とともに、その全体が本明細書に参照として組み込まれているＰＣＴ  ＷＯ  ０１／５４６９０（Ｚｈｅｎｇ等の）に記述されている。当該重合体は活性化合物（好ましくはリンカー部分を経由して）に連結されてヒト酵素類では際立って分解できない安定な結合を形成する。一般的に“際立って”分解されない結合には、これだけに限らないが高速液体クロマトグラフィー（ＨＰＬＣ）を含む当該分野の標準手法で測定するとき、２４時間内に分解されるのが当該重合体と重合体が連結している化合物を結び付けている結合の約２０％未満であることが必要とすされる。
【０１９８】
本発明の抱合体は大層好ましくは当該重合体上の末端反応基を経て調製されるが、抱合は非末端反応性基類から分岐することもありうる。反応性基を伴う重合体は本明細書では“活性化重合体”と名付けられている。当該反応性基は選択的に当該化合物類上の反応性基と反応する。当該活性化重合体（類）は反応して、それが抱合するはずの化合物類上の利用できる官能基のいずれにおいても結合が起こりうる。当該化合物類のアミノ、炭素、遊離カルボキシル基、適切に活性化したカルボニル基、ヒドロキシル、グアニジル、酸化された炭化水素部分、アミノ、炭素およびメルカプト基群（可能な場合）は結合部位として使用できる。
【０１９９】
一般的に当該化合物のモル当たり活性化重合体の約１．０から１０モルが濃度によって使用される。当該最終量は、当該生成物の非特異的修飾を最小としながら当該反応の程度を最大とさせることと、同時に最適活性度を保持しながら同時に当該化合物類の半減期を最適化する化学反応を規定することとのバランスである。好ましくは、当該化合物類の生物活性の少なくとも約５０％を保持し、そして大層好ましくは１００％を保持する。
【０２００】
本発明の好ましい実施で前記したように、Ｃ１〜Ｃ４アルキルおよびポリオキシエチル化ポリオール類のポリアルキレングリコール残基類のようなポリオキシアルキレン高分子類（ＰＯＡＭｓ）が関心のある重合体が有利なように組み込まれる。そこで、当該活性化合物が結合しているＰＯＡＭは室温で好ましくは水溶性である。当該重合体の非限定的例にはＰＥＧまたはポリプロピレングリコール類、ポリオキシエチレン化グリコール類、それらの共重合体類およびそれらのブロック共重合体類のようなポリアルキレンオキシド単独重合体類が含まれるが、当該ブロック共重合体の水溶性が保たれることが条件である。
【０２０１】
ポリオキシエチル化ポリオール類の例には、これだけには限らないがポリオキシエチル化グリセロール、ポリオキシエチル化ソルビトール、ポリオキシエチル化グルコースなどが含まれる。ポリオキシエチル化グルセロールのグリセロール骨格は、例えば動物類およびヒトにおいてモノ、ジおよびトリグリセリド類として天然に生じるのと同じ骨格である。そこで、この分岐は体において異物として判断される必要性はないであろう。
【０２０２】
当技術分野の当事者であれば前述の表は単なる例示で、本明細書に記載した品質を有する重合体材料類は全て意図されているものと理解するであろう。当該重合体はいかなる特定の分子量を有する必要がないが、当該分子量は約１００と１００，０００の間、より好ましくは１０，０００と４０，０００の間であるのが好ましい。具体的には２０，０００以上の大きさが腎臓でのろ過による当該生成物の損失を防止するのに大層効果的である。
【０２０３】
ＰＥＧ誘導体はポリエチレングリコール重合体を意味し、その中でポリエチレングリコール自身に見られる末端ヒドロキシ基の一端または両方は修飾されている。適切な修飾の例には１個または両方のヒドロキシル基（類）がそれに代わる官能基類、それは保護または非保護されていてもよいが低分子量の配位子類または他の高分子或いは重合体で置換されることが含まれる。ポリエチレングリコールにおける末端ヒドロキシル基類の修飾は当該ポリエチレングリコールと、ポリエチレングリコール中のヒドロキシル基と反応する官能基類を含む補助的反応性官能基類を含む材料を反応することで達せられる。本発明の抱合体類は、それに連結基で共有結合している１個以上のポリエチレングリコール（ＰＥＧ）を含有することができる。
【０２０４】
以下の処方例は本発明の医薬組成物を例示する。
【０２０５】
（処方例１）
以下の成分を含有する硬ゼラチンカプセルを調製する：
【表３】
2007518825.tif 000046
【０２０６】
上記成分群を混合し、硬ゼラチンカプセル中に３４０ｍｇ量を充填する。
【０２０７】
（処方例２）
錠剤処方を以下の成分群を使用して調製する：
【表４】
2007518825.tif 000047
【０２０８】
当該成分群を混合し、圧縮して錠剤を形成したが、各々重量は２４０ｍｇである。
【０２０９】
（処方例３）
乾燥粉末吸入処方は以下の成分群を含有して調製される：
成分                                重量％
活性成分                            ５
乳糖                              ９５
【０２１０】
活性混合物を乳糖と混合し、当該混合物を乾燥粉末吸入器具に入れた。
【０２１１】
（処方例４）
各々３０ｍｇの活性成分を含有する錠剤を以下のように調製する：
成分                                重量（ｍｇ／錠剤）
活性成分                            ３０．０ｍｇ
澱粉                                ４５．０ｍｇ
マイクロクリスタリンセルロース      ３５．０ｍｇ
ポリビニルピロリドン
（水中に１０％溶液として）            ４．０ｍｇ
カルボキシメチル澱粉ナトリウム        ４．５ｍｇ
ステアリン酸マグネシウム              ０．５ｍｇ
タルク                                １．０ｍｇ
計                                  １２０  ｍｇ
【０２１２】
活性成分、澱粉およびセルロースをＮｏ．２０メッシュの米国篩を通して、完全に混合する。ポリビニルピロリドンの溶液を得られた粉末と混合し、それをその後１６メッシュ米国篩を通過させる。こうして製造した顆粒を５０℃から６０℃で乾燥し、１６メッシュ米国篩を通過させる。Ｎｏ．３０メッシュ米国篩を通過させておいたカルボキシメチル澱粉ナトリウム、ステアリン酸マグネシウムおよびタルクを当該顆粒に添加し、それを混合後の錠剤機で圧縮し各１５０ｍｇ重量の錠剤を作り出す。
【０２１３】
各々薬物４０ｍｇを含有しているカプセル類を以下のように製造する：
量目
成分                                              （ｍｇ／カプセル）
活性成分                                          ４０．０ｍｇ
澱粉                                            １０９．０ｍｇ
ステアリン酸マグネシウム                            １．０ｍｇ
計                                              １５０．０ｍｇ
【０２１４】
当該活性成分、セルロース、でんぷん、ステアリン酸マグネシウムを混合、Ｎｏ．２０メッシュ米国篩を通し、１５０ｍｇを硬ゼラチンカプセル群に充填する。
【０２１５】
（処方例６）
各々活性成分２５ｍｇを含有している座薬群を以下のように製造する：
成分                                                  量
活性成分                                          ２５ｍｇ
飽和脂肪酸グリセリド類で                    ２，０００ｍｇとする
【０２１６】
当該活性成分をＮｏ．６０メッシュの米国篩を通し、必要最小限の熱を用いて溶融しておいた当該飽和脂肪酸グリセリド類中に懸濁させる。当該混合物はその後、公称２．０ｇ容量の座薬金型に注入し、冷却する。
【０２１７】
（処方例７）
５．０ｍｌ用量当たり５０ｍｇの薬物を各々含有する懸濁液を以下のように製造する：
成分                                                      量
活性成分                                        ５０．０ｍｇ
キサンタンガム                                    ４．０ｍｇ
カルボキシメチルセルロースナトリウム（１１％）  
マイクロクリスタリンセルロース（８９％）        ５０．０ｍｇ
蔗糖                                            １．７５ｇ
安息香酸ナトリウム                              １０．０ｍｇ
香料および色材                                    任意
精製水で                                    ５．０ｍｌとする
【０２１８】
薬物、蔗糖およびキサンタンガムを混合し、Ｎｏ．１０メッシュの米国篩を通過させ、そののちマイクロクリスタリンセルロースとカルボキシメチルセルロースを水で溶液としておいたものと混合する。当該安息香酸ナトリウム、香料および色材は幾らかの水で希釈し、加えて混合する。十分な水をそののち添加して必要な容量にする。
（処方例８）
成分                                          量（ｍｇ／カプセル）
活性成分                                      １５．０ｍｇ
澱粉                                        ４０７．０ｍｇ
ステアリン酸マグネシウム                        ３．０ｍｇ
計                                          ４２５．０ｍｇ
【０２１９】
当該活性成分、セルロース、澱粉およびステアリン酸マグネシウムを混合し、Ｎｏ．２０メッシュの米国篩を通し、５６０ｍｇを硬ゼラチンカプセル群に充填する。
【０２２０】
（処方例９）
静脈内投与用製剤は以下のように調製できる：
成分                                                  量
活性成分                                  ２５０．０ｍｇ
等張生理食塩水                              １０００ｍｌ
（処方例１０）
局所用処方は以下のように調製できる：
成分                                                  量
活性成分                                  １〜１０ｇ
乳化蝋                                      ３０ｇ
流動パラフィン                              ２０ｇ
白色軟パラフィンで                        １００ｇとする
【０２２１】
当該白色軟パラフィンを溶融するまで加熱する。当該流動パラフィンおよび乳化蝋を組み込んで溶解するまで攪拌する。当該活性成分を添加し、分散するまで攪拌を続ける。当該混合物を冷却して固体とする。
【０２２２】
本発明の方法において使用する他の好ましい処方は経皮送達用具（“貼付剤”）を使用する。当該経皮貼付剤は本発明の抱合体類の調節した量を連続または非連続的に注入するのに使用される。医薬品送達用の経皮貼付剤の構成および使用は当技術分野ではよく知られている。例えば１９９１年６月１１日に公表され、参照として本明細書に組み込まれている米国特許第５，０２３，２５２号を参照。当該貼付剤は医薬品の連続的、パルス的或いは要求される送達に応じて構成される。
【０２２３】
直接または間接装着手法は当該医薬組成物を脳に導入するのが望ましいか必要なとき使用される。直接手法は血液−脳関門を迂回するために通常薬物送達カテーテルを宿主心室系へ装着することを必要とする。生物因子群を身体の特定な解剖学的領域に輸送するために使用される１つのそのような埋め込み型送達系は、本明細書に参照で組み込まれている米国特許第５，０１１，４７２号に記載されている。
【０２２４】
一般的に好まれる間接手法は通常親水性薬物を油溶性薬物に変換することによる薬物潜在化を供するための当該組成物群の製剤化に関与する。潜在化は一般的に、薬物の上に存在するヒドロキシ、カルボニル、サルフェートおよび第一級アミン基の封鎖を通じて当該薬物をより油溶性とし、血液−脳関門を通って輸送しやすくする。それに代わるものとしては、血液−脳関門を一時的に開くことができる等張溶液の動脈内注入で、親水性薬物類の伝達を増加させることができる。
（実用性）
【０２２５】
本発明の抱合体群はＶＬＡ−４拮抗剤でもあり、幾つかはアルファ４ベータ７インテグリン類に部分的親和性があり、それに加えて非抱合化合物類と比べて亢進した生体内保持性を与える。当該抱合体の改善した生体内保持性は当該薬物の必要とされる用量を低める結果を生じ、次いで少ない副作用および毒性の可能性を低下させる。加えて、当該製剤は当該患者への少ない頻度で投与ができる一方で、同じまたは改善された治療効果を成し遂げる。
【０２２６】
本発明の抱合体類はＶＬＡ−４へ競合的に結合して、生体内でＶＬＡ−４が仲介する白血球の内皮細胞群への接着阻害を改善する。好ましくは本発明の抱合体群は、例えば注入または皮下或いは経口投与によりＶＬＡ−４または白血球接着により仲介される病気の治療に使用できる。種々の炎症性脳障害、特に内皮細胞／白血球接着機構が、それがなければ健常な脳組織に損傷を起こして生じる中枢神経系障害を治療するのに本発明の抱合体群は使用できる。こうして本発明の抱合体群は、例えば実験的自己免疫脳脊髄炎（ＥＡＥ）、多発性硬化症（ＭＳ）、髄膜炎および脳炎の治療に使用可能である。
【０２２７】
本発明の抱合体群は他の器官系における組織損傷、即ち白血球の遊走または活性化を生じる接着機構を経由して同じように生じる組織損傷による障害および病気を治療するのにも使用可能である。哺乳類の患者における例は、喘息、アルツハイマー病、アテローム性動脈硬化症、エイズによる認知症、糖尿病（急性若年型糖尿病を含む）、炎症性腸疾患（潰瘍性大腸炎およびクローン病を含む）、リューマチ性関節炎、組織移植拒絶、腫瘍転移、脳卒中および他の脳外傷、腎炎、網膜炎、アトピー皮膚炎、疥癬、心筋虚血および成人呼吸不全症候類にて生じるような急性白血球介在肺損傷のような炎症性病気である。
【０２２８】
本発明の抱合体群を用いて治療できる更に他の病気症状群には結節性紅斑、アレルギー性関節炎、視神経炎、ブドウ膜炎、アレルギー性鼻炎、強直性脊椎炎、乾癬性関節炎、血管炎、ライター症候類、全身性紅斑性狼瘡、進行性全身性硬化症、多発性筋炎、皮膚筋炎、ヴェグナー肉芽腫症、大動脈炎、サルコイドーシス、リンパ球減少症、側頭動脈炎、心膜炎、心筋炎、うっ血性心不全、結節性多発性動脈炎、過敏性症候群、アレルギー、好酸球増加症候群、チャーグ−シュトラウス症候群、慢性閉塞性肺疾患、過敏性肺炎、慢性活動性肝炎、間質性膀胱炎、自己免疫性内分泌不全、原発性胆汁性肝硬変、自己免疫再生不良性貧血、慢性持続性肝炎および甲状腺炎が含まれる。
【０２２９】
本発明は患者において少なくともある程度アルファ４インテグリン仲介白血球結合により起こされるかまたは悪化させた病状を治療する方法を提供し、その方法は本発明の抱合体の効果量、例えば式Ｉの抱合体およびα４β７阻害剤である別の化合物の効果量を同時投与を含んでいる。当該同時投与は同時または連続的に行うことができる。例えば、本発明の抱合体の投与はα４β７阻害剤の投与に数分間または数時間先んじて行う。これに代わるものとして、当該α４β７阻害剤を本発明の抱合体に先んじて投与することができる。
【０２３０】
炎症性反応を治療する際の効果を示す適切な生体モデルにはマウス、ラット、モルモットまたは霊長類におけるＥＡＥ（実験的自己免疫脳脊髄炎）とともに他のα４インテグリンに依存する炎症性モデルが含まれる。
【０２３１】
炎症性腸疾患はクローン病および潰瘍性大腸炎と呼ばれる２種の同じような病気用の総称である。クローン病は肉芽腫性炎症反応による極く限定的で典型的には腸の全層の貫壁性侵襲が特徴である突発性で慢性の潰瘍収縮性炎症性疾患である。消化管のいずれの部分、口腔から肛門まで関連するが、当該病気は殆ど通常は回腸末端および／または結腸に影響を与える。潰瘍性結腸炎は結腸粘膜および粘膜下層に殆ど限られた炎症反応である。リンパ球およびマクロファージは炎症性大腸炎の病巣に多く、炎症性損傷に寄与している。
【０２３２】
喘息は気管支気道の発作性収縮を増強する種々の刺激に対する気管気管支樹の亢進した反応性で特徴付けられる。当該刺激がＩｇＥ−被覆マストセルから、ヒスタミン、抗酸性および抗中球走化性因子群、ロイコトリエン群、プラスタグランジンおよび血小板活性化因子を含む種々な炎症メディエーター類の放出を起こす。
【０２３３】
アテローム性動脈硬化症は動脈（例えば、冠状動脈、頚動脈、大動脈および腸骨）の病気である。基礎病変、アテローム（粉瘤）は脈管内膜内の増加した病巣の血小板からなり、脂質および覆っている繊維状蓋の核を有している。アテロームは動脈血流を危うくし、侵された動脈を弱める。心筋および脳梗塞はこの病気の主なる結果である。マクロファージ群および白血球群はアテロームに補給され、炎症性損傷に寄与する。
【０２３４】
リューマチ性関節炎は主に関節の損傷および破壊を起こす慢性で再発性炎症性である。リューマチ性関節炎は通常初めに手および脚の小関節を侵すが、そののち手首、肘、足首および膝を巻き込む。当該関節炎は滑膜細胞と、循環から関節類の滑膜被覆に浸潤する白血球の相互作用から生じる。例えばＰａｕｌ，Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｙ（３ｄ  ｅｄ．、Ｒａｖｅｎ  Ｐｒｅｓｓ，１９９３）を参照。
【０２３５】
本発明の抱合体群に関する他の適応はＶＬＡ−４が仲介する器官または移植片の拒絶の治療である。近年では、皮膚、腎臓、肝臓、心臓、肺、膵臓および骨髄のような組織および器官の移植に関する外科手法の効率においては顕著な改善がなされた。おそらく主に目立った問題点は受容者に移植した同種移植片または器官に対する免疫寛容を誘導するのに満足な薬物がないことである。同種異系細胞または器官が宿主に移植されたとき（即ち、提供者と受給者は同じ種からの異なる個体）、当該宿主免疫系が異物抗原に免疫反応をおそらく開始し（宿主対移植片病）、当該移植組織の破壊に導く。ＣＤ８＋細胞、ＣＤ４細胞群および単球群が全て移植組織の拒絶に関与する。アルファ−４インテグリンに結合する本発明の抱合体群はとりわけ受容者における同種抗原誘導の免疫反応を阻止するのに有効で、それにより当該細胞群が当該移植組織または器官の破壊に参加するのを防止する。例えばＰａｕｌ  ｅｔ  ａｌ．，Ｔｒａｎｓｐｌａｎｔ  Ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ  ９，４２０〜４２５（１９９６）；Ｇｅｏｒｃｚｙｎｓｋｉ  ｅｔ  ａｌ．，Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｙ  ８７，５７３〜５８０（１９９６）；Ｇｅｏｒｃｙｚｎｓｋｉ  ｅｔ  ａｌ．，Ｔｒａｎｓｐｌａｎｔ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．３，５５〜６１（１９９５）；Ｙａｎｇ  ｅｔ  ａｌ．，Ｔｒａｎｓｐｌａｎｔａｔｉｏｎ  ６０，７１〜７６（１９９５）；Ａｎｄｅｒｓｏｎ  ｅｔ  ａｌ．，ＡＰＭＩＳ  １０２、２３〜２７（１９９４）。
【０２３６】
ＶＬＡ−４に結合する本発明の抱合体類についての関連する用途は“移植片対宿主”病（ＧＶＨＤ）に関与する免疫反応を調節することにある。例えば、Ｓｃｈｌｅｇｅｌ  ｅｔ  ａｌ．，Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．１５５，３８５６〜３８６５（１９９５）を参照。ＧＶＨＤは免疫的競合細胞が同種異系受容者に移転されるとき生じ、死に至る病気の可能性がある。この状況で、当該供与者の免疫競合細胞群は当該受容者の組織を攻撃するであろう。皮膚の組織、腸上皮および肝臓がしばしば目標であり、ＧＶＨＤの経過にて破壊されるであろう。当該病気は例えば骨髄移植のような免疫組織移植のとき特に重度の問題を呈するが、より軽度のＧＶＨＤは心臓および肝臓移植を含む他の場合でも報告されている。本発明の治療薬は、とりわけ当該供与Ｔ細胞の活性化を阻止するのに使用され、それにより宿主内の目標細胞群を溶解するそれらの能力を妨害する。
【０２３７】
本発明の処方群は特に多発性硬化症、リューマチ性関節炎および喘息の治療に有効である。
【０２３８】
本発明の抱合体類の更なる利用は腫瘍転移の阻止である。幾つかの腫瘍細胞はＶＬＡ−４を発現することが報告されており、ＶＬＡ−４に結合する化合物類は腫瘍細胞群の内皮細胞群への接着を阻止する。Ｓｔｅｉｎｂａｃｋ  ｅｔ  ａｌ．，Ｕｒｏｌ．Ｒｅｓ．２３，１７５〜８３（１９９５）；Ｏｒｏｓｚ  ｅｔ  ａｌ．，Ｉｎｔ．Ｊ．Ｃａｎｃｅｒ  ６０，８６７〜７１（１９９５）；Ｆｒｅｅｄｍａｎ  ｅｔ  ａｌ．，Ｌｅｕｌ．Ｌｙｍｐｈｏｍａ  １３，４７〜５２（１９９４）；Ｏｋａｈａｒａ  ｅｔ  ａｌ．，Ｃａｎｃｅｒ  Ｒｅｓ．５４，３２３３〜６（１９９４）。
【０２３９】
望ましい生物活性を有する化合物類は、改善された薬理学的性質（例えば、生体内安定性、生物的利用率）、診断面での応用において検出される性能のような望ましい性質を供するのに必要なように修飾される。安定性はペプチダーゼ群またはヒト血漿または血清と培養して当該タンパク質類の半減期を測定するような種々の方法で測定可能である。数多くの当該タンパク質安定性のアッセイはこれまで記述されてきた（例えば、Ｖｅｒｈｏｅｆ  ｅｔ  ａｌ．，Ｅｕｒ．Ｊ．Ｄｒｕｇ  Ｍｅｔａｂ．Ｐｈａｒｍａｃｏｋｉｎｅｔ．，１９９０、１５（２）：８３〜９３）。
【０２４０】
本発明の抱合体群の更なる利用は多発性硬化症の治療にある。多発性硬化症は進行性神経系自己免疫疾患で、米国では推定２５０，０００から３５０，０００人が侵されている。多発性硬化症はある種の白血球が神経線維を覆っている絶縁被覆であるミエリンを攻撃し、破壊を開始する特有の自己免疫反応の結果と考えられている。多発性硬化症に関する動物モデルでは、ＶＬＡ−４に対するげっ歯類モノクローナル抗体群が内皮への白血球の接着を阻止するので、当該中枢神経系の炎症と動物において次に起こる麻痺を防ぐことが示された１６。
【０２４１】
本発明の医薬組成物は種々の薬物送達系に使用するのに適している。本発明で使用される適切な処方類はＲｅｍｉｎｇｔｏｎ'ｓ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｓｃｉｅｎｃｅ，Ｍａｃｅ  Ｐｕｂｌｉｓｈｉｎｇ  Ｃｏｍｐａｎｙ，ｐｈｉｌａｄｅｌｐｈｉａ，ＰＡ，１７ｔｈ  ｅｄ．（１９８５）に見られる。
【０２４２】
患者に投与される量は、投与されるもの、予防か治療かなどの当該投与の目的、当該患者の状態、投与の方法などにより変動する。治療的応用では、組成物類は病気に罹っている患者を治療するために、または少なくともある程度当該病気の症状およびその合併症を阻むのに十分な量を投与される。このことを達成するのに適当な量を“治療的効果用量”と定義する。この使用に関する効果ある量は治療する病状に依存するとともに担当臨床医が炎症の重度、年齢、当該患者の全般的症状などのような因子による判断による。
【０２４３】
患者に投与される組成物群は上記した医薬組成物の形態である。これらの組成物は従来的手法で滅菌するまたは滅菌的ろ過してもよい。得られる水溶液はそのまま使用するために詰めるか凍結乾燥され、当該凍結乾燥製剤は投与前に滅菌水溶性担体と混合する。
【０２４４】
本発明の抱合体類の治療用量は、例えば当該治療を行う特定の使用法、当該抱合体の投与法、当該患者の健康と病状および処方する医者の判断により変化する。例えば、静脈内投与では一回量は典型的には体重ｋｇ当たり２０μｇから約２０００μｇ、好ましくは約２０μｇから約５００μｇ、より好ましくは体重ｋｇ当たり約１００μｇから約３００μｇの範囲である。経鼻投与での適した用量範囲は体重ｋｇ当たり一般的に約０．１ｐｇから１ｍｇである。効果用量は生体外または動物モデル試験系からの用量反応曲線から外挿することができる。
【０２４５】
本発明の抱合体群はα６β１，α９β１，α４β７，αｄβ２，αｅβ７インテグリン群（α４β１およびα９β１が本発明では好ましいが）の作用を拘束するか拮抗することができる。従って、本発明の抱合体群は、これらのインテグリン類がそれぞれの配位子群と結合することで誘導される症状、傷害または病気を防止または回復させるのにも有用である。
【０２４６】
例えば、１９９８年１２月３日に公開された国際公開  ＷＯ  ９８／５３８１７（この開示物はその全体を参照として本明細書に組み込んである）およびそこに引用されている参照はα４β７が仲介する傷害について記載している。本参照はＶＣＡＭ−Ｉｇ融合タンパク質へのα４β７依存結合の拮抗作用を測定するためのアッセイにつき記述している。
【０２４７】
これに加えて、αｄβ２およびαｅβ７インテグリン群に結合する化合物類は特に喘息および関連肺疾患の治療に有効である。例えば、Ｍ．Ｈ．Ｇｒａｙｓｏｎ  ｅｔ  ａｌ．，Ｊ。Ｅｘｐ．Ｍｅｄ．１９９８，１８８（１１）２１８７〜２１９１。αｅβ７インテグリンに結合する化合物類は全身性紅斑性狼瘡（例えば、Ｍ．Ｐａｎｇ  ｅｔ  ａｌ．，Ａｒｔｈｒｉｔｉｓ  Ｒｈｅｕｍ．１９９８，４１（８）、１４５６〜１４６３を参照）；クローン病、潰瘍性大腸炎および炎症性腸疾患（ＩＢＤ）（例えば、Ｄ．Ｅｌｅｗａｕｔ  ｅｔ  ａｌ．，Ｓｃａｎｄ  Ｊ．Ｇａｓｔｒｏｅｎｔｅｒｏｌ  １９９８，３３（７）７４３〜７４８参照）；Ｓｊｏｇｒｅｎ'ｓ症候群（例えば、Ｕ．Ｋｒｏｎｅｌｄ  ｅｔ  ａｌ．，Ｓｃａｎｄ  Ｊ．Ｇａｓｔｒｏｅｎｔｅｒｏｌ  １９８８，２７（３），２１５〜２１８参照）；およびリューマチ性関節炎（例えば、Ｓｃａｎｄ  Ｊ．Ｇａｓｔｒｏｅｎｔｅｒｏｌ  １９９６，４４（３），２９３〜２９８参照）の治療にも有効である。そしてα６β１に結合する化合物類は受精を防止するのにも有効でありうる（例えば、Ｈ．Ｃｈｅｎ  ｅｔ  ａｌ．，Ｃｈｅｍ．Ｂｉｏｌ．１９９９，６，１〜１０参照）。
【０２４８】
本発明の他の態様では、本明細書に記述されている抱合体類および組成物類は、例えば多発性硬化症の場合における血流から中枢神経系への、またはミエリンの炎症誘導破壊を生じる領域への免疫細胞遊走を阻止するのに使用することができる。好ましくは、これらの試薬類は脱髄阻害および更に再ミエリン化を促進するやり方で免疫細胞の遊走を阻止する。当該試薬類は先天性代謝障害に関して中枢神経系の脱髄を防止し、再ミエリン化を促進するが、そこでは浸潤免疫細胞群が主にＣＮＳの発育ミエリン鞘を侵す。当該試薬群は脱髄性疾患または症状で誘発された麻痺を伴う患者に投与されるとき、好ましくは麻痺も軽減する。
【０２４９】
本明細書で開示した組成物類、抱合体類および方法による治療に含まれる炎症性病気には一般的には脱髄に関係する症状が含まれる。組織学的に、ミエリン異常は脱髄または髄鞘形成不全のいずれかである。脱髄はミエリンの破壊を意味する。髄鞘形成不全は乏突起神経膠細胞の機能不全で生じるミエリンの形成または保持の不全である。好ましくは、本明細書で開示した組成物類および方法は脱髄に関する病気および症状を治療し、再ミエリン化を補助することを意図する。治療を意図する更なる病気および症状には髄膜炎、脳炎および脊髄損傷、そして炎症反応の結果として脱髄を誘導する症状一般が含まれる。本明細書で開示した抱合体類、組成物類および方法は、例えば不適切なミエリン形成、例えば髄鞘形成不全を導く遺伝的欠陥がある場合には適用しない。
【０２５０】
本明細書で開示した組成物類、抱合体類および混合物類は脱髄に関係する症状および病気群を治療するのに使用することを意図する。脱髄を含む病気および症状には、これに限らないが多発性硬化症、先天性代謝障害（例えば、フェニルケトン症、テイ・サックス病、ニーマン・ピック病、ゴーシェ病、フルラー症候群、クラッベ病および他の白質ジストロフィー）、異常な髄鞘形成を伴う神経障害（例えば、ギラン・バレー症候群、慢性免疫性脱髄性多発神経障害（ＣＩＤＰ）、多発性ＣＩＤＰ、抗ＭＡＧ症候群、ＧＡＬＯＰ症候群、抗スルファチド抗体症候群、抗ＧＭ２抗体症候群、ＰＯＥＭＳ症候群、神経周囲炎、ＩｇＭ抗−ＧＤ１ｂ抗体症候群）、薬物関連脱髄症（例えば、クロロキン、ＦＫ５０６、ペルヘキシリン、プロカインアミドおよびジメルジンの投与により引き起こされる）、他の遺伝性脱髄症状（例えば、糖鎖欠損糖タンパク質症候群、コケーン症候群、先天性低ミエリン形成、先天性筋ジストロフィー、ファーバー病、マリネスコ・シェグレン症候群、異染性白質ジストロフィー、ペリツェウス・メルツバッヘル病、レフサム病、プリオン関連症状およびサラ病）および他の脱髄症状（例えば、髄膜炎、脳炎または脊髄損傷）または病気が含まれる。
【０２５１】
生体内でこれらの病気を研究するのに使用できる種々な疾患モデル類がある。例えば、動物モデル群には以下が含まれるが、これに限られることはない：
（表５）
（表３）                                  
病気モデル                                    種                    
ＥＡＥ                                  マウス、ラット、モルモット
ミエリン−乏突起神経膠細胞（ＭＯＧ）        ラット
誘導ＥＡＥ
脱髄のＴＮＦ−α遺伝子組み換えモデル        マウス                    
【０２５２】
（多発性硬化症）
最も普遍的な脱髄疾患は多発性硬化症であるが、多くの他の代謝および炎症性の障害は欠陥のある、または異常なミエリン形成を生じる。ＭＳは慢性神経性疾患で、成人早期に発生して多くの場合重度の能力障害に進行する。米国だけでＭＳ（多発性硬化症）は約３５０，０００件の症例がある。外傷を除けば、ＭＳが成人中期の早々における神経性能力障害の最も高頻度の原因である。
【０２５３】
ＭＳの原因は未だに定まっていない。ＭＳは慢性的炎症、脱髄および神経膠症（瘢痕化）が特徴である。脱髄は軸索伝導に負または正の効果のいずれかを生じる。正の伝導異常には遅延した軸索伝導、高い−低くはない−振動数の連続した刺激が存在する際に生じる変動する伝導ブロックまたは完全な伝導ブロックが含まれる。正の伝導異常には異所性の刺激発生、自然的または続いて生じる機械的ストレスおよび脱髄したエクソン間の異常な“混線”が含まれる。
【０２５４】
ミエリンタンパク質に対して反応性のＴ細胞群、ミエリン塩基タンパク質（ＭＢＰ）またはミエリンプロテオリピッドタンパク質（ＰＬＰ）が実験的アレルギー性脳脊髄炎におけるＣＮＳ炎症を介在することが見出されている。患者ではＣＮＳ免疫グロブリン（Ｉｇ）の亢進したレベルも観察されていた。ＭＳで見られる組織損傷の幾らかは、活性化したＴ細胞群、マクロファージ群または星状細胞のサイトカイン生成物が仲介することも更にありうる。
【０２５５】
現在ＭＳと診断された患者の８０％は病気の開始から２０年生存している。ＭＳを管理する治療には（１）急性悪化の治療および当該疾病の長期間抑制を含んだ疾病経過の改善を目的とした治療；（２）ＭＳの症状の治療；（３）内科的合併症の防止および治療、および（４）二次的な個人および社会的問題の管理が含まれる。
【０２５６】
ＭＳの発症は劇的或いは患者が治療を求めることをしないように緩和であるかもしれない。最も普通の症状には一本以上の肢の衰弱、視神経炎による視力のぼやけ、感覚の障害、複視および運動失調が含まれる。病気の経過は三段階の一般的カテゴリーの分けられる：（１）再発性ＭＳ、（２）慢性進行性ＭＳおよび（３）不活性ＭＳ。再発性ＭＳは神経機能障害の反復性発病が特徴とされる。ＭＳ発病は一般的に数日から数週間にわたり進行し、次いで完全回復、部分的回復または回復しないことも起こる。発病からの回復は一般的に症状のピークから数週間から数ヶ月内に起こるが、稀には幾らかの回復は２年以上続くことがある。
【０２５７】
慢性進行性ＭＳは安定期または一時的回復がなくて次第に進行性悪化を生じる。再発性ＭＳの初期である患者ではこの形態が進行するが、患者の２０％では再発が起こらない。急性再発も進行性経過の間で起こることがありうる。
【０２５８】
第三の形態は不活性ＭＳである。不活性ＭＳは変動する等級の固定性神経欠損が特徴である。不活性ＭＳの多くの患者は再発性ＭＳの初期履歴を有する。
【０２５９】
疾病経過は当該患者の年齢にも依存する。例えば、恵まれた予後因子には早期の発病（子供期は除く）、再発経過および発病から５年で僅かな残存機能障害が含まれる。これに反して、悪い予後は晩期の発病（即ち４０歳以上）および進行性経過である。これらの変数は独立しており、慢性進行性ＭＳは通常年をとってから始まるので再発性ＭＳである。慢性進行性ＭＳによる機能障害は通常は患者の進行性対麻痺または四肢麻痺（麻痺）である。本発明の1つの態様では、患者が当該病気の再発期ではなく寛解期であるときに患者を治療するのが好ましいであろう。
【０２６０】
副腎皮質刺激ホルモンまたは経口副腎皮質ホルモン類（例えば、経口プレドニソンまたは静脈内投与用メチルプレドニソロン）のどちらかの短期使用がＭＳの急性悪化した患者の治療に関する唯一の具体的な治療指標である。
【０２６１】
ＭＳに関するより新しい治療法にはインターフェロンベータ−１ｂ、インターフェロンベータ−１ａおよびＣｏｐａｘｏｎｅ（登録商標）（以前は共重合体１として知られていた）による当該患者の治療が含まれる。これら３種の薬物は当該病気の再発率を顕著に低減することを示した。これら３種の薬物は自己投与で筋肉内または静脈内に投与される。
【０２６２】
しかしながら、現状の治療様式はどれも脱髄を阻止せず、自然な再ミエリン化を促進するか可能にするか、または麻痺の軽減をさせるに過ぎない。本発明の１つの態様は本明細書で開示した薬剤を単独または他の標準治療様式と組合せてＭＳを治療することを意図している。
【０２６３】
（先天的代謝障害）
先天的代謝異常にはフェニルケトン症（ＰＫＵ）および他のアミノ酸尿症、テイ・サックス病、ニーマン・ピック病、ゴーシェ病、ハーラー病、クラッベ病および、以下により詳しく説明するような発育中の鞘に影響を与える他の白質ジストロフィーが含まれる。
【０２６４】
ＰＫＵは酵素フェニルアラニンヒドロキシラーゼの欠損症で生じる代謝の遺伝性エラーである。この酵素の不在は精神的遅滞、器官損傷、異常な姿勢を生じ、母性ＰＫＵの場合妊娠を重度に傷つける。ＰＫＵ研究のモデルはマウスで見出されている。好ましくはＰＫＵと判断された幼児はフェニルアラニンなし、或いは減少させた食事で生育させる。本発明の態様では、そのような食事を本明細書で開示した抱合体類および組成物類とともに組合せ、脱髄を防ぎＰＫＵで損傷した細胞を再ミエリン化することになる。
【０２６５】
古典的なテイ・サックス病は約６ヶ月の被験者に現れ、結果として５歳までに被験者は死に至る。当該病気は脳および神経細胞のある種の脂肪物質の分解に必要とされる酵素ヘキソアミニダーゼ（ｈｅｘ  Ａ）の不在による。当該酵素がないと、当該物質が蓄積し、神経細胞群の破壊を導く。ｈｅｘ  Ａ酵素欠損症の他の形態は生涯の後半に起こり、ｈｅｘ  Ａ欠損症の若年性、慢性および成人性発症と呼ばれる。症状は古典的テイ・サックス病を特徴付けるものと類似している。当該酵素欠乏症の成人発症形態もある。現状では当該病気／欠乏に対する治療法または手当てがなく、当該病気については胎児の子宮内検査の予防的対策のみである。そこで、本明細書で開示した抱合体類および組成物類が当該細胞の破壊の改善または防止にて有効でありうる。
【０２６６】
ニーマン・ピック病は３つのカテゴリーに分けられる：急性幼児期形態、Ｂ型はより一般的ではない慢性で非神経系形態、Ｃ型は当該疾患の生化学および遺伝的に独特な形態である。正常な個人では、細胞性コレステロールは処理用にリソソーム中に取り込まれ、そののちそれは放出される。ニーマン・ピック病の被験者から取り出した細胞群は、リソソーム群からコレステロール放出する際に欠陥があることが示されている。これがリソソーム群内のコレステロールの過剰蓄積を導き、処理エラーを引き起こす。ＮＰＣ１は他のタンパク質群におけるのと同じような既知のステロール検知領域を有していることが見出され、このことはコレステロール輸送の調節において役割を果たしていることを示唆する。ニーマン・ピック病のＡ型およびＣ型に関しては成功した治療法は確認されていない。Ｃ型については、患者は低コレステロールの食事を推奨されている。そして、本明細書で開示した抱合体群および組成物群は当該細胞群の破壊の改善をするか防止するのに有用でありうる。
【０２６７】
ゴーシェ病は遺伝子の突然変異で起こされる遺伝的病気である。通常、この遺伝子は体が脂質であるグルコセレブルシドを分解するのに必要とするグルコセレブロシダーゼと呼ばれる酵素に関与している。ゴーシェ病の患者群では体がこの酵素を適切に産生することができず、当該脂質は分解されることができない。テイ・サックス病のようにゴーシェ病は東欧（アシュケナジ）からのユダヤ民族の子孫では相当普通に見られるが、いずれの民族集団からの個人にも影響を及ぼす。アシュケナジ系ユダヤ民族の間でゴーシェ病は最も普通な遺伝的障害で、約４５０人中に１人の出現率である。一般社会ではゴーシェ病は約１００，０００人に１人に影響をしている。
【０２６８】
１９９１年に、ゴーシェ病に関する最初の効果的治療として酵素交換治療が利用できるようになった。当該治療はグルコセレブロシダーゼ酵素の修飾形態を静脈内投与で与えることで構成される。本明細書で開示された組成物類および抱合体類は、単独またはより好ましくはグルコセレブロシダーゼ投与と組合せて罹患患者の病気を治療する際に使用しうることを意図している。
【０２６９】
ムコ多糖症Ｉ型として知られているハーラー症候群は重複した病気の類である。これらの遺伝的病気は線維芽細胞におけるムコポリサッカライド類の細胞内蓄積を通常共有する。これらの病気は遺伝的に区別することができる。線維芽細胞および骨髄の移植は有効とは思われないので、病気の重度および進行の改善に有効である化合物類および組成物類が必要とされている。病気の進行および／または重度を改善するために本明細書で開示された抱合体類および組成物類を患者に投与することができる。
【０２７０】
クラッベ病（グロボイド細胞性脳白質ジストロフィーとしても知られている）は、ミエリンの主な脂質成分を異化するリソソームの酵素であるガラクトシルセラミダーゼ（またはガラクトセレブロシダーゼ）欠損症から生じる常染色体劣性疾患である。フランスでの発生は概算で１：１５０，０００人誕生とされている。当病気は中枢および末梢神経系の脱髄を導く。発症が一般的に生命の最初の年に起こると疾患は急速に進行するが、少年、青年または成人の発病形態の進行は種々な速度であると報告されている。診断は酵素アッセイ（ガラクトシルセラミダーゼ欠損症）で行われる。数種類の自然動物モデル（マウス、イヌ、サル）がある。クラッベ病は全ての白質ジストロフィーのように既知の治療剤または効果的な治療は知られていない。当該発明の１つの実施形態は、本明細書で開示した組成物類および抱合体類を使用してクラッベ病および他の白質異栄養症を治療または改善することにある。
【０２７１】
白質ジストロフィーは脳、脊髄および末梢神経に影響を与える遺伝的に定まった進行性障害の群である。これらには副腎白質ジストロフィー（ＡＬＤ）、副腎脊髄神経障害（ＡＭＮ）、アイカルディ・ゴーシェ症候群、アレキサンダー病、ＣＡＣＨ（即ち、中枢神経系ミエリン形成不全または脳白質の喪失病を伴う小児期運動失調）、ＣＡＤＡＳＩＬ（即ち、皮質下梗塞および白質脳症を伴う脳常染色体優性動脈症）、カナバン病（海綿状変性）、脳腱黄色腫症（ＣＴＸ）、クラッベ病（前に検討した）、異染性白質ジストロフィー（ＭＬＤ）、新生児副腎白質ジストロフィー、オバリオ白質ジストロフィー症候群、ペリツェウス・メルツバッヘル病（Ｘ染色体連鎖痙性対麻痺）、レフサム症候群、ファンデルクナープ症候群（皮質下膿胞を伴う空胞化白質ジストロフィー）およびツエルガー症候群が含まれる。当該病気のいずれも唯一で治癒する効果的な治療法は持たない。結局、本明細書で開示したような組成物類および抱合体類を用いて当該病気の症状を治療または改善する治療する方法が必要とされている。
【０２７２】
（異常なミエリン化を伴う神経障害群）
当該患者には脱髄を生じる種々な慢性の免疫性多発性神経障害がある。当該疾患に関する発病する年齢は条件により変化する。これらの病気に関する標準的治療が存在し、本明細書で開示した組成物類および抱合体類との組合せることができる。それに代わるものとして開示した当該組成物類および抱合体類はそれだけでも使用可能である。存在する標準治療法には以下のものが含まれる：
【表６−１】
2007518825.tif 000048
【表６−２】
2007518825.tif 000049
【０２７３】
（薬物および照射の誘導する脱髄）
ある種の薬物および照射は患者の脱髄を誘導できる。脱髄の原因である薬物類には、これに限らないがクロロキン、ＦＫ５０６，ペルヘキシリン、プロカインアミドおよびジメルジンが含まれる。
【０２７４】
Ｘ線照射もまた脱髄を誘導する。Ｘ線照射による中枢神経系（ＣＮＳ）毒性は（１）血管構造への損傷、（２）乏突起神経膠細胞−２星状膠細胞前駆細胞および成熟乏突起神経膠細胞の欠失、（３）海馬、小脳および皮質における神経幹細胞集団の欠失およびサイトカイン発現の一般的変質により起こると考えられている。多くのＸ線照射損傷はある種のガンの治療間に投与された放射線療法から生じる。Ｂｅｌｋａ  ｅｔ  ａｌ．，２００１  Ｂｒ．Ｊ．Ｃａｎｃｅｒ  ８５：１２３３〜９の概説を参照。しかしながら、Ｘ線照射は宇宙飛行士にとっても問題（Ｈｏｐｅｗｅｌｌ，１９９４  Ａｄｖ．Ｓｐａｃｅ  Ｒｅｓ．１４：４３３〜４２）であるとともに放射能物質への曝露の事件でも問題である。
【０２７５】
薬物類を受けた、または偶然或いは意図的にＸ線照射に曝露した患者は本明細書で開示された抱合体類または組成物類の１つの投与が役立ち、脱髄を防止するか、または再ミエリン化を促進することになる。
【０２７６】
脱髄を生じる更なる遺伝の症候群／病気には、コケーン症候群、先天性低ミエリン化症、ファーバー病、異染性白質ジストロフィー、ペリツェウス・メルツバッフェル病、レフサム症候群、プリオン関連疾患およびサラ病が含まれる。
【０２７７】
コケーン症候群（ＣＳ）は稀な遺伝障害で、この場合その人々は太陽光に過敏となり、低い身長で、早期老化の容貌を有する。コケーン症候群（Ｉ型）の古典的形態では、症状は進行性で典型的に１年の年齢が経つと明確になる。コケーン症候群（ＩＩ型）の早期発症または先天性形態は生まれた時点で明らかである。興味深いことに、他のＤＮＡ修復疾患とは異なりコケーン症候群はガンと結びつかない。ＣＳは多臓器障害で、体細胞および脳の重度の成長不全並びに進行性悪液質、網膜、蝸牛および神経変質を起こし白質ジストロフィーおよび脱髄を伴うが、ガンの増加はない。ＵＶ（例えば、太陽光）に曝されると、コケーン症候群に罹った被験者は転写共役ＤＮＡ修復を行うことがもはやできない。コケーン症候群における２種の遺伝子欠陥、ＣＳＡおよびＣＳＢがこれまでに同定された。当該ＣＳＡ遺伝子は第５染色体上に見出されている。転写装置の要素およびＤＮＡと相互作用を行うタンパク質に関する両方の遺伝子コードがタンパク質群を修復する。
【０２７８】
これまで、この疾患に罹った患者に対しての救済方法または効果的な治療法が認められていない。そこで、本発明の１つの態様は、本明細書で開示した抱合体類および組成物類による当該疾患の治療である。
【０２７９】
先天性低ミエリン化は先天性脱髄化神経障害、先天性低ミエリン化多発性神経障害、先天性ミエリン形成不全（オニオンバブル）多発性神経障害、先天性ミエリン形成不全神経障害、ミエリン形成不全で起こる先天性神経障害、低ミエリン化神経障害およびＣＨＮを含む幾つかの名称を持っている。ヒトにおける最も普遍的な遺伝障害の中で、遺伝性末梢神経障害は複雑で、臨床的および遺伝的に異質な障害の群で、末梢神経群の進行性劣化を生じる。先天性低ミエリン化は障害群の一群の１つである。この群には遺伝性圧脆弱性神経障害、シャルコー・マリー・ツース・病、デジュリーヌ・ソッタス症候群および先天性ミエリン形成不全神経障害が含まれる。これらの障害のいずれに対しても救済手段または効果的な治療法は知られていない。
【０２８０】
ハーバー病は：ハーバー脂肪肉芽腫症、セラミダーゼ欠乏症、酸性セラミダーゼ欠乏症、ＡＣ欠乏症、Ｎ−ラウリルスフィンゴシンデアシラーゼ欠乏症およびＮ−アシルスフィンゴシンアミドヒドロラーゼ欠乏症を含む幾つかの名称を有する。幾つかの名称が示すように、当該疾病は酸性セラミダーゼ（Ｎ−アシルスフィンゴシンアミドヒドロラーゼ、ＡＳＡＨとしても知られている）の欠乏により生じる。当該酵素の欠乏は神経細胞群およびグリア細胞群における非スルホン化ムコ多糖の蓄積が生じる。当該病気の患者は通常２歳になる前に死亡する。
【０２８１】
異染性白質ジストロフィー（ＭＬＤ）は酵素のアリールスルファターゼＡの欠乏で引き起こされる遺伝的障害である。これはミエリン鞘の成長に影響を与える白質ジストロフィーと呼ばれる遺伝的障害群の１群の１種である。３形態のＭＬＤがある：幼児期晩期、青少年および成人である。最も普通である幼児期晩期形態では、症状の発症は６ヶ月と２年の間に開始する。当該幼児は通常生まれたときは普通であるが、結局は以前持っていた能力を失う。症状には弛緩（低筋肉緊張）、発話異常、知能喪失、失明、硬直（即ち、調節できない筋肉緊張）、痙攣、嚥下障害、麻痺および認知症。当該青少年形態の症状は４歳と１４歳の間で始まり、学校での挙動障害、精神劣化、運動失調、発作および認知症が含まれる。１６歳以降に始まる成人の形態では集中障害、鬱病、精神障害、運動失調、振戦および認知症が含まれるであろう。発作は成人形態でも起こるが、他の形態より余り一般的ではない。３種全ての形態では、精神劣化が通常最初の徴候である。
【０２８２】
ペリツェウス・メルツバッフェル病（出産前後期スダン好性白質ジストロフィー）はＸ染色体に連鎖した遺伝性障害で、それはプロテオリピッドタンパク質の異常を生じる。当該異常性は１歳になる前に典型的には幼児死亡が起きる。当該病気に関しては治療法または救済手段は知られていない。
【０２８３】
レフサム病（フィタン酸オキシダーゼ欠乏症、遺伝性多発神経炎性失調、または遺伝性運動感覚性神経障害ＩＶ型、ＨＭＳＮ  ＩＶとも称される）はフィタノイル−ＣｏＡヒドロキシラーゼ（ＰＡＨＸまたはＰＨＹＨ）をコードしている遺伝子の突然変異で起こされる。主な臨床的特徴は網膜色素変性症、慢性多発性神経障害および小脳徴候である。独特な分岐鎖脂肪酸（３，７，１１，１５−テトラメチル−ヘキサデカン酸）であるフィタン酸が当該病気に罹った患者の組織および体液中に堆積し、ＰＡＨＸの欠乏で代謝することができない。月に１回または２回血漿交換をすると、体から当該酸が効果的に除去され、フィタン酸摂取を制限する食事制限から免れる。
【０２８４】
プリオン関連疾患にはゲルストマン・ストロイスラー病（ＧＳＤ）、クロイツフェルト・ヤコブ病（ＣＪＤ）、致死性家族性不眠症が含まれ、プリオンタンパク質の異常イソ型がこれらの障害とともにクルやスクレーピー（ヒツジで見られる病気）において感染性剤として作用できる。当該用語プリオンは“タンパク質性感染物質”（Ｐｒｕｓｉｎｅｒ，Ｓｃｉｅｎｃｅ  ２１６：１３６〜４４、１９８２）。当該プリオン関連タンパク質のタンパク質分解があり、それがアミロイド生成性ペプチドを生じ、重合して不溶性原線維となる。
【０２８５】
サラ病およびシアルウリアスの他の型はシアル酸蓄積が係わる病気である。これらは重度の幼児期形態（即ち、ＩＳＳＤ）またはフィンランドで流行している緩和な進行性成人形態を示す常染色体劣性神経変性障害である。当該主な徴候は弛緩、小脳性運動失調症および知能発達不全である。これらの疾患および病気の苦痛緩和または改善する治療も意図している。
【０２８６】
脱髄を生じる他の疾患には感染後の脳炎（急性散在性脳脊髄炎、ＡＤＥＭとしても知られている）、髄膜炎および脊髄への損傷が含まれる。本明細書に開示された組成物類および抱合体類はこれら他の脱髄疾患を治療する際に使用することも意図している。
【０２８７】
以下の合成的および生物的実施例は本発明を例証するのに提供され、いかなる形でも当該発明の目的を制限するようには解釈はしない。他に述べなければ、全ての温度は摂氏である。
【実施例】
【０２８８】
以下の実施例では、次なる略号が以下の意味を有する。もし略号が定義されていなければ、それは一般的に受け入れられている意味である。
ＡＣＮ                  ＝  アセトニトリル
ｂｓ                    ＝  幅広一重線
Ｂｏｃ                  ＝  Ｎ−三級ブトキシカルボニル
ＢＯＰ                  ＝  ベンゾトリアゾール−１−イルオキシ−トリス
（ジメチルアミノ）ホスホニウムヘキサフルオ
ロホスフェート
Ｃｂｚ                  ＝  カルボベンジルオキシ
ＣＨ２Ｃｌ２              ＝  ジクロロメタン
ｄ                      ＝  二重線
ｄｄ                    ＝  二重の二重線
ＤＣＣ                  ＝  １，３−ジシクロヘキシルカルボジイミド
ＤＭＡＰ                ＝  ４−Ｎ，Ｎ−ジメチルアミノピリジン
ＥＤＣ                  ＝  塩酸１−（３−ジメチルアミノプロピル）−３
−エチルカルボジイミド
Ｅｔ３Ｎ                 ＝  トリエチルアミン
ＦｍｏｃＯＮＳｕ           ＝  Ｎ−（９−フルオレニルメトキシカルボニル）
スクシンイミド
ｇ                      ＝  グラム
ｈおよびｈｒ            ＝  時間
Ｈ２Ｏ                   ＝  水  
ＨＯＢＴ                ＝  １−ヒドロキシベンゾトリアゾール水和物
ＨＰＬＣ                ＝  高速（圧）液体クロマトグラフィー
ｋｇ                    ＝  キログラム
Ｋ２ＣＯ３                ＝  炭酸カリウム
ｋＤａ                  ＝  キロダルトン
Ｌ                      ＝  リットル
ｍ                      ＝  多重線
ＭｅＯＨ                ＝  メタノール
Ｍ                      ＝  モル
ｍｇ                    ＝  ミリグラム
ｍｉｎ                  ＝  分
ｍＬ                    ＝  ミリリットル
ｍｍ                    ＝  ミリメートル
ｍＭ                    ＝  ミリモル
ｍｍｏｌ                ＝  ミリモル
Ｎ                      ＝  ノルマル
ＮａＨＣＯ３             ＝  重炭酸ナトリウム
ｎＭ                    ＝  ナノモル
ｑ                      ＝  四重線
ｓ                      ＝  一重線
ｓａｔ．                ＝  飽和
ｔ                      ＝  三重線
ｔ−ＢｕＯＨ            ＝  三級ブタノール
ＴＦＡ                  ＝  トリフルオロ酢酸
ＴＬＣまたはｔｌｃ      ＝  薄層クロマトグラフィー
Ｔｓ                    ＝  トシル
ＴｓＣｌ                ＝  塩化トシル
ＴｓＯＨ                ＝  トシレート
μＬ                    ＝  マイクロリットル
μｇ                    ＝  マイクログラム
μｍ                    ＝  ミクロンまたはマイクロメーター
【０２８９】
以下の方法は本発明の抱合体類を調製する際に使用できる。下のスキーム１６に概説した方法は当該調製の説明に役立つ。
【化３９】
2007518825.tif 000050
【０２９０】
以下の実施例はスキーム６および上記スキーム１６で示した化合物類および抱合体類を調製する方法に関して記述する。他に表示しなければ以下のＨＰＬＣ法の幾つかまたは全ては以下の典型的な化合物類の調製に使用した。
【０２９１】
方法Ａ：１００ｍｇより多い抱合体類の試料群を、Ｖａｒｉａｎ社のＵＶ検出器を備えた５μｍのＰｈｅｎｏｍｅｎｅｘ  Ｌｕｎａ  Ｃ１８（２）、２５０ｍｍ×２１．２ｍｍのカラムの逆相ＨＰＬＣで、４０〜６０％ＡＣＮ＋０．１％ＴＦＡのグラジエントを用い１５ｍＬ／ｍｉｎにて１００分で精製した。
【０２９２】
方法Ｂ：１００ｍｇより多く５００ｍｇより少ない抱合体類の試料群を、Ｖａｒｉａｎ社のＵＶ検出器を備えた１０μｍのＰｈｅｎｏｍｅｎｅｘ  Ｌｕｎａ  Ｃ１８（２）、２５０ｍｍ×５０ｍｍのカラムの逆相ＨＰＬＣにて、４０〜６０％ＡＣＮ＋０．１％ＴＦＡのグラジエントを用い６０ｍＬ／ｍｉｎにて１００分で精製した。
【０２９３】
方法Ｃ：抱合体類の純度はＳｅｄｅｘ７５（３５℃、増幅率＝５）蒸発光散乱検出器を備えたＬｕｎａ  ３μｍ  Ｃ１８（２）カラム（３０×４．６ｍｍ）の逆相ＨＰＬＣにて、２０〜７０％ＡＣＮ＋０．１％ＴＦＡのグラジエントを１．５ｍＬ／ｍｉｎの流速で用いて確認した。
【０２９４】
実施例１：２ｋＤａの尿素結合ｍＰＥＧ抱合カルボン酸の調製
工程１：化合物２９の調製
【化４０】
2007518825.tif 000051
【０２９５】
化合物２５（２０ｇ、０．１１ｍｏｌ）（上のスキーム６で示す）を窒素中ＣＨ２Ｃｌ２（５００ｍＬ）に溶解した。当該反応混合物を０℃まで冷却した。トリエチルアミン（１８．１２ｍＬ、０．１３ｍｏｌ）を添加し、次いで無水トリフルオロ酢酸（１８．１４ｍＬ、０．１３ｍｏｌ）を滴下した。当該反応は一晩で室温まで暖めた。当該反応混合物を真空で濃縮し、残留物を酢酸エチル（２００ｍＬ）に溶解した。当該有機相をＨ２Ｏ、飽和ＮａＨＣＯ３、塩水で洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４上で乾燥、ろ過そして真空で濃縮すると標記化合物２９が黄色固体として２９．７３ｇ（９６％）得られた。
１ＨＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）δ３．６４〜３．６０（ｍ、２Ｈ）、３．５５〜３．５３（ｍ、２Ｈ）、３．４９〜３．４５（ｍ、４Ｈ）、１．４４（ｓ、９Ｈ）。
１３ＣＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）δ１５５．７（ＪＣ〜Ｆ＝３６Ｈｚ）、１５４．３、１１６．４（ＪＣ〜Ｆ＝２８８Ｈｚ）、８０．８、４５．７、４３．３、２８．３。
【０２９６】
工程２：化合物３０の調製：
【化４１】
2007518825.tif 000052
【０２９７】
化合物２９（２９．２６ｇ、０．１０ｍｏｌ）を、４ＮＨＣｌのジオキサン（２００ｍＬ）溶液を入れた５００ｍＬフラスコに０℃で滴下した。当該反応物を氷浴中で４時間攪拌したとき、ＴＬＣ（３：１ヘキサン：酢酸エチル）では生成物の１００％変換を示した。当該反応混合物を真空で濃縮し、エチルエーテル（５００ｍＬ）で処理した。当該生成物をろ過し、乾燥すると白色の一塩酸塩として２２．５３ｇ（９９％）の化合物３０を得た。
１ＨＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ６）δ３．８２〜３．７９（ｍ、４Ｈ）、３．５３（ｓ、１Ｈ）、３．１８〜３．１６（ｍ、４Ｈ）。
１３ＣＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ６）δ１５４．３（ＪＣ〜Ｆ＝３５Ｈｚ）、１５５．９、（ＪＣ〜Ｆ＝２８９Ｈｚ）、６６．１、４２．０、４１．９、４１．５。
【０２９８】
工程３：化合物３１の調製：
【化４２】
2007518825.tif 000053
【０２９９】
２５０ｍＬフラスコに化合物３０（１．０ｇ、４．６ｍｍｏｌ）、ＣＨ２Ｃｌ２（４０ｍＬ）および飽和ＮａＨＣＯ３（４０ｍＬ）を充填した。当該反応混合物を０℃で１５分間激しく攪拌した。攪拌を終えて当該層を分離させた。２．０Ｍホスゲンのトルエン溶液（９ｍＬ、１８ｍｍｏｌ）を当該反応混合物に加え、温度を０℃に保ったまま３０分間激しく攪拌した。当該層を分離し、水相をＣＨ２Ｃｌ２（１５ｍＬ）で洗浄した。当該合わせた有機相を塩水で洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４上で乾燥、ろ過そして真空で濃縮した。当該残留物をＣＨ２Ｃｌ２に溶解し、真空で再び濃縮すると白色固体として化合物３１を１．０４ｇ（９２％）得た。
ＭＳ（ＰＩ−ＦＡＢ）２４５，（Ｍ＋Ｈ）＋。
１Ｈ  ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）δ３．８０〜３．６８（ｍ，８Ｈ）。
１３ＣＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）δ１５５．９（ＪＣ〜Ｆ＝３７Ｈｚ）、１４８．７（ＪＣ〜Ｆ＝１２Ｈｚ）、１１６．３（ＪＣ〜Ｆ＝２８９Ｈｚ）、４８．３、４７．８、４５．７、４５．３、４５．１、４２．９、４２．７。
【０３００】
工程４：化合物３２の調製
【化４３】
2007518825.tif 000054
【０３０１】
２５ｍＬのフラスコに化合物２４（５．９７ｇ、０．０１１ｍｏｌ）、ＤＭＡＰ（１．３４ｇ、０．０１１ｍｏｌ）およびＣＨ２Ｃｌ２（２２ｍＬ）を充填した。トリエチルアミン（２．４ｍＬ、０．０１７ｍｏｌ）を添加し、ついで化合物３１（４．２ｍｇ、０．０１７ｍｏｌ）を加えた。当該反応混合物を加熱し、２０時間還流した。当該反応混合物を真空で濃縮し、残留物を酢酸エチルに溶解した。当該有機相は飽和ＮａＨＣＯ３、Ｈ２Ｏ、塩水で洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４上で乾燥、ろ過そして真空で濃縮すると、薄赤色の発泡体が９．３１ｇ（１１５％）得られた。当該粗物質をフラッシュクロマトグラフィー（５０％酢酸エチル／ヘキサンから７５％酢酸エチル／ヘキサンまでのグラジエント）で精製して淡薄赤色の発泡体として化合物３２を６．１ｇ（７６％）得た。Ｒｆ＝０．１４（１：１  ヘキサン：酢酸エチル）
ＭＳ（ＰＩ−ＦＡＢ）７３０，（Ｍ＋Ｈ）＋。
１ＨＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）δ９．０８〜９．０７（ｍ、１Ｈ）、８．８７〜８．８５（ｍ、１Ｈ）、８．１６〜８．１４（ｍ、１Ｈ）、７．５２〜７．４８（ｍ、１Ｈ）、７．２５〜７．２２（ｄ、２Ｈ）、７．０３〜７．００（ｄ、２Ｈ）、６．９１〜６．８８（ｄ．１Ｈ）、４．７８〜４．７０（ｑ、１Ｈ）、４．６０〜４．４４（ｄｄ、２Ｈ）、３．８８（ｓ、１Ｈ）、３．７５〜３．６０（ｍ、８Ｈ）、３．０９〜３．０６（ｍ、２Ｈ）、１．４２（ｓ、９Ｈ）、１．１８（ｓ、３Ｈ）、１．１６（ｓ、３Ｈ）。
【０３０２】
工程５：化合物３３の調製
【化４４】
2007518825.tif 000055
【０３０３】
化合物３２（６．１１ｇ、８．４ｍｍｏｌ）のＭｅＯＨ（９０ｍＬ）溶液に、炭酸カリウム（５．７９ｇ、４２ｍｍｏｌ）の水溶液（１０ｍＬ）を添加した。当該反応物は室温で１５分間攪拌し、そののち真空で濃縮した。当該残留物はろ過し、大量のＨ２Ｏで洗浄すると化合物３３を白色固体として４．６５ｇ（８８％）を得た。Ｒｆ＝０．０８（５％ＭｅＯＨ／ＣＨ２Ｃｌ２）。
ＭＳ（ＰＩ−ＦＡＢ）６３４，（Ｍ＋Ｈ）＋。
１ＨＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）δ９．０９〜９．０８（ｍ、１Ｈ）、８．８７〜８．８５（ｍ、１Ｈ）、８．１６〜８．１４（ｍ、１Ｈ）、７．５２〜７．４８（ｍ、１Ｈ）、７．２３〜７．２０（ｄ、２Ｈ）、７．０３〜７．００（ｄ、２Ｈ）、６．９１〜６．８８（ｄ、１Ｈ）、４．７８〜４．７０（ｑ、１Ｈ）、４．５９〜４．４６（ｄｄ、２Ｈ）、３．８９（ｓ、１Ｈ）、３．６５〜３．５０（ｍ、４Ｈ）、３．０９〜３．０６（ｍ、２Ｈ）、２．９２〜２．８８（ｍ、４Ｈ）、１．４３（ｓ、９Ｈ）、１．１９（ｓ、３Ｈ）、１．１７（ｓ、３Ｈ）。
１３ＣＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）δ１７０．１、１６７．９、１５４．５、１５３．９、１５０．７、１４８．８、１３６．０、１３３．４、１３３．２、１３０．６、１２４．１、１２１．９、８３．０、７３．９、５５．０、５３．７、５０．７、４６．０、４５．７、４５．０、３７．９、２９．３，２８．０，２４．０。
【０３０４】
工程６：化合物４０の調製
【化４５】
2007518825.tif 000056
【０３０５】
２５０ｍＬのフラスコに化合物３３（２．５ｇ、３．９ｍｍｏｌ）、ＣＨ２Ｃｌ２（４０ｍＬ）および飽和ＮａＨＣＯ３（４０ｍＬ）を充填した。当該反応混合物を０℃で１５分間激しく攪拌した。攪拌終了後、当該層を分離させた。２．０Ｍのホスゲンのトルエン溶液（７．９ｍＬ、１６ｍｍｏｌ）を素早く当該反応混合物に添加し、０℃に保持しながら６０分間激しく攪拌した。当該層を分離し、水相をＣＨ２Ｃｌ２（３０ｍＬ）で洗浄した。合わせた有機相を０．２Ｎクエン酸、塩水で洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４上で乾燥、ろ過そして真空で濃縮すると白色発泡体が２．７６ｇ（１００％）得られた。当該粗物質はシリカ充填層を通して１００％の酢酸エチルで溶出すると、白色発泡体として化合物４０を２．１５ｇ（７８％）得た。Ｒｆ＝０．４３（３：１酢酸エチル：ヘキサン）。
【０３０６】
１ＨＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）δ９．０９〜９．０８（ｍ、１Ｈ）、８．８７〜８．８５（ｍ、１Ｈ）、８．１６〜８．１４（ｄ、１Ｈ）、７．５２〜７．４８（ｍ、１Ｈ）、７．２５〜７．２２（ｄ、２Ｈ）、７．０３〜７．０１（ｄ、２Ｈ）、６．９０〜６．８８（ｄ．１Ｈ）、４．７８〜４．７０（ｑ、１Ｈ）、４．６０〜４．４５（ｄｄ、２Ｈ）、３．８８（ｓ、１Ｈ）、３．７９〜３．６５（ｍ、８Ｈ）、３．１０〜３．０７（ｍ、２Ｈ）、１．４３（ｓ、９Ｈ）、１．１８（ｓ、３Ｈ）、１．１７（ｓ、３Ｈ）。
【０３０７】
１３ＣＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）δ１６９．９、１６７．９、１５４．１、１５３．６、１５０．２、１４８．５、１３６．１、１３３．８、１３０．６、１２４．２、１２１．７、８２．９、７３．７、５４．８、５３．８、５０．６、４８．３、４５．８、３７．７、２９．２，２７．９，２３．９。
【０３０８】
工程７：２ｋＤａの尿素結合ｍＰＥＧ抱合体ｔ−ブチルエステルの調製
【化４６】
2007518825.tif 000057
【０３０９】
２キロダルトンのｍＰＥＧ−アミン（１９２ｍｇ、０．０９ｍｍｏｌ）およびＤＭＡＰ（１１ｍｇ、０．０９ｍｍｏｌ）をＣＨ２Ｃｌ２（０．６ｍＬ）に溶解した。トリエチルアミン（１９．５μＬ、０．１４ｍｍｏｌ）、次いで化合物４０（１００ｍｇ、０．１４ｍｍｏｌ）を添加した。当該反応混合物を加熱して２０時間還流した。当該反応を真空で濃縮し、残留物をＭｅＯＨ（２５ｍＬ）に溶解した。２％架橋結合したポリスチレンスルホン酸樹脂（３００ｍｇ）を加え、反応容器を２時間攪拌した。当該混合物をその後ろ過し、真空で濃縮するとベージュ色の固体が１８２ｍｇ（約５０％）で得られ、それをＨＰＬＣ法Ｂで精製すると白色ワックスとして２ｋＤａのｍＰＥＧ抱合体ｔ−ブチルエステルを５０．７ｍｇ得た。Ｒｆ＝０．１２（５％ＭｅＯＨ／ＣＨ２Ｃｌ２）。ＨＰＬＣ方法Ｃで抱合体を定量すると、９９％より純度が高く、化合物３３またはｍＰＥＧ−アミン（保持時間＝１．９２４）は残存しなかった。
１ＨＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）δ８．２１〜８．１８（ｄ、１Ｈ）、７．２３〜７．２１（ｄ、２Ｈ）、７．０３〜７．００（ｄ、２Ｈ）、６．９１〜６．８８（ｄ、１Ｈ）、４．７６〜４．７３（ｑ、１Ｈ）、４．６０〜４．４６（ｄｄ、２Ｈ）、３．９１〜３．８６（ｍ、３Ｈ）、３．６４（ｂｓ、１８４Ｈ）、３．３７（ｓ、３Ｈ）、３．０９〜３．０６（ｍ、３Ｈ）、１．４３（ｓ、９Ｈ）、１．２０（ｓ、３Ｈ）、１．１７（ｓ、３Ｈ）。
【０３１０】
工程８：２ｋＤａの尿素結合ｍＰＥＧ抱合体カルボン酸の調製
【化４７】
2007518825.tif 000058
【０３１１】
２ｋＤａの尿素結合ｍＰＥＧ抱合体ｔ−ブチルエステル（９４ｍｇ、０．０４ｍｍｏｌ）をギ酸（５ｍＬ）に溶解し、４０℃で４８時間加熱した。当該反応物を真空で濃縮するとベージュ色のゲルが８８ｍｇ（１００％）得られ、それをＨＰＬＣ方法Ａで精製すると白色ワックスとして当該遊離カルボン酸が５３．７ｍｇ（約６０％）得られた。Ｒｆ＝０．４５（７／３ＭｅＯＨ：Ｈ２Ｏ＋０．１％ＴＦＡ；Ｃ−１８逆相）。ＨＰＬＣ方法Ｃで定量すると抱合体が９９％より高純度であった（保持時間＝２．１８８）。
１ＨＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）δ９．０７（ｂｓ、１Ｈ）、８．８６〜８．８５（ｍ、１Ｈ）、８．２３〜８．２０（ｄ、１Ｈ）、７．５９〜７．５５（ｍ、１Ｈ）、７．２６〜７．２１（ｄ、２Ｈ）、７．０２〜６．９６（ｍ、２Ｈ）、４．８２〜４．８０（ｍ、１Ｈ）、４．６０〜４．４９（ｄｄ、２Ｈ）、３．９９（ｓ、１Ｈ）、３．６２（ｂｓ、１８４Ｈ）、３．３７（ｓ、３Ｈ）、３．１５〜３．１３（ｍ、２Ｈ）、１．２５（ｓ、３Ｈ）、１．２３（ｓ、３Ｈ）。
【０３１２】
実施例２：５Ｄａ尿素結合ｍＰＥＧ抱合体カルボン酸の調製
５ｋＤａ尿素結合ｍＰＥＧ抱合体ｔ−ブチルエステルを上記２ｋＤａ抱合体と同じ方法で、５ｋＤａｍＰＥＧ−アミンを使用して調製し、白色固体４７６ｍｇ（約９０％）を得た。当該粗物質（２００ｍｇ、０．０４ｍｍｏｌ）の保護基を上記方法と同じ方法で外し、ベージュ色のガムを１８２ｍｇ（１００％）生じた。これをＨＰＬＣ方法Ｂで精製し，白色粉末として５ｋＤａ尿素結合ｍＰＥＧ抱合体カルボン酸を７４．５ｍｇ得た。Ｒｆ＝０．１６（７／３ＭｅＯＨ：Ｈ２Ｏ＋０．１％ＴＦＡ：Ｃ−１８逆相）。ＨＰＬＣ方法Ｃによる定量では抱合体は９９％より高純度であった（保持時間＝２．２６０）。
１ＨＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）δ９．０７（ｂｓ、１Ｈ）、８．８６〜８．８５（ｍ、１Ｈ）、８．１７〜８．１５（ｄ、１Ｈ）、７．５４〜７．５０（ｍ、１Ｈ）、７．２６〜７．２２（ｄ、２Ｈ）、７．０３〜７．００（ｄ、２Ｈ）、６．９５〜６．９３（ｄ、１Ｈ）、５．４６（ｂｓ、１Ｈ）、４．８３〜４．８１（ｍ、１Ｈ）、４．６０〜４．４６（ｄｄ、２Ｈ）、３．９３（ｓ、１Ｈ）、３．６４（ｂｓ、４９０Ｈ）、３．３７（ｓ、３Ｈ）、３．１６（ｍ、３Ｈ）、１．２２（ｓ、６Ｈ）。
【０３１３】
実施例３：２ｋＤａカルバメート結合ｍＰＥＧ抱合体ｔ−ブチルエステル
【化４８】
2007518825.tif 000059
【０３１４】
当該カルバメート結合抱合体類は国際特許公開番号ＷＯ９２／１６５５５からの方法を変更したものに基づいて調製した。そこで、２ｋＤａのｍＰＥＧ−アルコール（５００ｍｇ、０．２５ｍｍｏｌ）をトルエン（５ｍＬ）中で共沸により乾燥した。当該溶液を室温まで冷却し、ＣＨ２Ｃｌ２（５ｍＬ）、次いで２．０Ｍホスゲンのトルエン（０．３８ｍＬ、０．７５ｍｍｏｌ）溶液を添加した。当該反応物は室温で１８時間攪拌した後、真空で濃縮すると白色固体の２ｋＤａｍＰＥＧクロロギ酸エステルが５００ｍｇ（１００％）得られた。化合物３３（３１７ｍｇ、０．５ｍｍｏｌ）のＣＨ２Ｃｌ２（３ｍＬ）溶液を、ＣＨ２Ｃｌ２（２ｍＬ）に溶かした２ｋＤａのｍＰＥＧクロロギ酸エステル（５００ｍｇ、０．２５ｍｍｏｌ）に添加した。トリエチルアミン（３５μＬ、０．２５ｍｍｏｌ）を添加し、反応物は室温で３０分間攪拌した。当該反応混合物を真空で濃縮し、残留物をＭｅＯＨ（１０ｍＬ）に溶かした。２％架橋ポリスチレンスルホン酸樹脂（７５０ｍｇ）を加え、当該反応容器を２時間渦攪拌した。当該混合物をそののちろ過し、真空で濃縮すると白色固体として２ｋＤａカルバメート結合ｍＰＥＧ抱合体ｔ−ブチルエステルが４７０ｍｇ（７５％）を生じた。ＨＰＬＣ方法Ｃでは９６％より高い純度を示した（保持時間＝２．６３９）。
【０３１５】
実施例４：２ｋＤａカルバメート結合ｍＰＥＧ抱合体カルボン酸の調製
【化４９】
2007518825.tif 000060
【０３１６】
当該粗２ｋＤａのカルバネート結合ｍＰＥＧ抱合体ｔ−ブチルエステル（２５０ｍｇ、０．１ｍｍｏｌ）をギ酸（５ｍＬ）に溶解し、４０℃で４８時間加熱した。当該反応物を真空で濃縮すると、ベージュ色のゲルとして２ｋＤａカルバメート結合ｍＰＥＧ抱合体カルボン酸２８０ｍｇ（１００％）を生じた。
生物の実施例
【０３１７】
実施例Ａ：ＶＬＡ−４に結合する候補化合物類を定量する生体外アッセイ
生体外アッセイを用いて候補化合物類のα４β１インテグリンへの結合を評価した。本アッセイで結合する化合物類は生物試料群中のＶＣＡＭ−１レベルを従来のアッセイ（例えば、競合アッセイ）で評価するのに使用することができる。本アッセイは約１ｎＭ程度のＩＣ５０値でも感度がよい。
【０３１８】
α４β１インテグリンの活性は溶解性ＶＣＡＭ−１と、高いレベルのα４β１インテグリンを発現するヒトＴ細胞株であるジャーカット細胞群（例えば、Ａｍｅｒｉｃａｎ  Ｔｙｐｅ  Ｃｕｌｔｕｒｅ  Ｃｏｌｌｅｃｔｉｏｎ  Ｎｏｓ．ＴＩＢ１５２，ＴＩＢ１５３，ａｎｄ  ＣＲＬ８１６３）との相互作用で測定した。ＶＣＡＭ−１は当該細胞表面とα４β１インテグリン依存様式で相互作用する（Ｙｅｄｎｏｃｋ，ｅｔ  ａｌ．Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．，１９９５，２７０：２８７４０）。
【０３１９】
組み換え型溶解性ＶＣＡＭ−１はＮ末端にＶＣＡＭ−１の７つの細胞外領域およびＣ末端に当該ヒトＩｇＧ１重鎖定常部を含むキメラ融合タンパク質として発現される。当該ＶＣＡＭ−１融合タンパク質を作成し、上記Ｙｅｄｎｏｃｋが記述した方法で精製した。
【０３２０】
ジャーカット細胞群は、上記Ｙｅｄｎｏｃｋが記述したように１０％仔牛血清、ペニシリン、ストレプトマイシンおよびグルタミンを補足したＲＰＭＩ  １６４０中で生育した。
【０３２１】
ジャーカット細胞群は１．５ｍＭ  ＭｎＣｌ２および５μｇ／ｍＬの１５／７抗体とともに氷上で３０分間培養した。Ｍｎ＋２は当該受容体を活性化し、配位子結合を亢進し、そして１５／７はα４β１インテグリンの活性化され／配位子で占拠された立体構造を認識し、当該分子をこの立体構造に固定することでＹｅｄｎｏｃｋ等が上記したＶＣＡＭ−１／α４β１インテグリンの相互作用を安定化するモノクローナル抗体である。１５／７抗体に類似する抗体群は他の研究者が調製したので（Ｌｕｑｕｅ，ｅｔ  ａｌ．，１９９６，Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．２７１：１１０６７），本アッセイで使用してもよい。
【０３２２】
細胞群はそののち６６μＭから０．０１μＭの範囲の種々な濃度の候補化合物類とともに標準的５点連続希釈法を用いて室温で３０分間培養する。１５μＬの可溶性組み換え型ＶＣＡＭ−１溶融タンパク質をそののちジャーカット細胞群に添加して氷上で３０分間培養した（Ｙｅｄｎｏｃｋ  ｅｔ  ａｌ．，上記）。
【０３２３】
細胞群は２回洗浄し、ＰＥ−抱合ヤギＦ（ａｂ'）２抗マウスＩｇＧ  Ｆｃ（Ｉｍｍｕｎｏｔｅｃｈ，Ｗｅｓｔｂｒｏｏｋ，ＭＥ）中に１：２００で再懸濁させ、氷上で暗中３０分間培養した。細胞群は２回洗浄し、Ｙｅｄｎｏｃｋ等が上記説明したような標準蛍光活性化細胞分別機（“ＦＡＣＳ”）分析法で分析した。
【０３２４】
約１５μＭ未満のＩＣ５０を有する化合物類はα４β１への結合親和性を有する。
【０３２５】
本アッセイで試験すると、上記実施例で調製した抱合体類は１５μＭ未満のＩＣ５０を有する或いは有すると予想される（または生体内で活性ありと予想される）。
【０３２６】
実施例Ｂ：候補化合物類のα４β１への結合を定量するための生体外飽和アッセイ
以下では、次の実施例または他の生体モデルで説明される実験的自己免疫脳脊髄炎（“ＥＡＥ”）モデルにて活性化合物であるのに必要な血清レベルを測定するための生体外アッセイを説明する。
【０３２７】
対数増殖期のジャーカット細胞群を洗浄し、１５／７抗体（上記実施例で記述）２０μｇ／ｍｌを含有する正常動物血漿中に再懸濁させた。
【０３２８】
当該ジャーカット細胞群は、検量線用に標準１２点連続希釈を用いて６６μＭから０．０１μＭの範囲の種々な濃度にて既知の候補化合物量を含有する正常血漿試料、或いは候補化合物で治療した動物の末梢血液から得た血漿試料のどちらかに２倍希釈で入れた。
【０３２９】
細胞群はそののち室温で３０分間培養し、２％の仔牛血清および未結合１５／７抗体を除去するための塩化カルシウムと塩化マグネシウム（アッセイ培地）各１ｍＭを含有するリン酸塩緩衝生理食塩水（“ＰＢＳ”）で２回洗浄した。
【０３３０】
当該細胞群はそののち、検討する動物種からの血清５％と共培養することにより全ての非特異的交差反応性につき吸着させたフィコエリトリン抱合ヒツジＦ（ａｂ'）２抗マウスＩｇＧ  Ｆｃ（Ｉｍｍｕｎｏｔｅｃｈ，Ｗｅｓｔｂｒｏｏｋ，ＭＥ）と１：２００で曝し、暗所において４℃で３０分間培養した。
【０３３１】
細胞群は２回アッセイ培地で洗浄し、アッセイ培地に再懸濁する。それらはそののちＹｅｄｏｃｋ  ｅｔ  ａｌ．，Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．，１９９５，２７０：２８７４０にて記述されている標準蛍光活性化細胞分別機（“ＦＡＣＳ”）分析法で分析する。
【０３３２】
当該データはそののち蛍光対用量、例えば標準用量反応様式でグラフ化する。当該曲線の上方平坦域を生じる用量レベルは生体内モデルにおける効果を得るのに必要なレベルである。
【０３３３】
本アッセイはα４β１に最も近い関係にあるα９β１インテグリン（Ｐａｌｍｅｒｅｔ  ａｌ．，１９９３，Ｊ．Ｃｅｌｌ  Ｂｉｏ．，１２３：１２８９）のような他のインテグリンの結合部位を飽和するのに必要とされる血漿レベルを定量する際にも使用できる。当該結合性で、例として気道過敏性と慢性喘息とともに生じる閉塞、アテローム性度脈硬化症での平滑筋細胞増殖、血管新生を生じる血管閉塞、腎臓病の結果としての線維症と糸球体瘢痕化、大動脈弁狭窄症、リューマチ性関節炎における滑膜の肥大および潰瘍性大腸炎とクローン病の進行による生じる炎症と瘢痕化が含まれるα９β１インテグリンで仲介される炎症疾患に対する生体内有効性の予測ができる。
【０３３４】
従って、上記アッセイはジャーカット細胞群の代わりにｃＤＮＡコード化α９インテグリン（Ｙｏｋｏｓａｋｉ  ｅｔ  ａｌ．，１９９４，Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．，２６９：２６６９１）で形質移入したＳＷ４８０（ＡＴＴＣ＃ＣＣＬ２２８）であるヒト結腸腫瘍細胞系で実施してもα９β１インテグリンの結合性を測定できる。対照として、他のαおよびβ１サブユニットを発現するＳＷ４８０細胞群が使用できる。
【０３３５】
従って、本発明の他の態様は哺乳類患者におけるα９β１が仲介する病気を治療する方法を目指し、その方法は本発明の化合物の治療的に効果的量を前記患者に投与することを含む。当該化合物類は好ましくは前に記述した医薬組成物にて投与される。効果的な一日の投与量は年齢、体重、当該患者の疾患によるが、その因子群は担当医が容易に確認できる。しかしながら、好ましい実施形態では当該化合物類は一日当たり約２０から５００μｇ／ｋｇで投与される。
【０３３６】
実施例Ｃ：生体内評価
標準的多発性硬化症モデルである実験的自己免疫（またはアレルギー性）脳脊髄炎（“ＥＡＥ”）を用いてラットまたはモルモットにおける運動障害を軽減する際の候補化合物類の効果を測定した。運動障害における軽減は白血球および内皮細胞間の接着の阻止に基づいており、候補化合物における抗炎症活性に相関する。このモデルは以前Ｋｅｓｚｔｈｅｌｙｉ  ｅｔ  ａｌ．，Ｎｅｕｒｏｌｏｇｙ，１９９６，４７：１０５３〜１０５９に記載されており、病気の発病の遅延を判定する。
【０３３７】
成熟モルモットの脳および脊髄をリン酸緩衝生理食塩水の等量中で均質化した。フロインド完全アジュバント（結核菌１００ｍｇ＋フロインド不完全アジュバント１０ｍｌ）の等量を当該均質物に添加した。当該混合物は蠕動ポンプにより２０分間２０ｍｌ注射器を繰り返し循環的に通過させて乳化させた。
【０３３８】
雌Ｌｅｗｉｓ系ラット（２〜３ヶ月齢、１７０〜２２０ｇ）またはハートレイ系モルモット（２０日齢、１８０〜２００ｇ）をイソフルランで麻酔し、各腹部に当該乳化物の各０．１ｍｌを３回注射した。運動障害発病は約９日で見られた。
【０３３９】
候補化合物処置は症状の開始直前の８日目に開始した。化合物類は皮下（“ＳＣ”）、経口（“ＰＯ”）または腹腔内（“ＩＰ”）で投与した。一回分は１０ｍｇ／ｋｇから２００ｍｇ／ｋｇの範囲で、一日２回、５日間与えるが、典型的にはＳＣで１０から１００ｍｇ／ｋｇ、ＰＯで１０から５０ｍｇ／ｋｇそしてＩＰで１０から１００ｍｇ／ｋｇである。
【０３４０】
症状の発病を遅らすα４β１インテグリンに対する抗体ＧＧ５／３（Ｋｅｓｚｔｈｅｌｙｌ  ｅｔ  ａｌ．，Ｎｅｕｒｏｌｏｇｙ，１９９６，４７：１０５３〜１０５９）を陽性対象として使用し、８日目および１１日目に３ｍｇ／ｋｇを皮下注射した。
【０３４１】
体重および運動障害は毎日観測した。運動障害は以下の臨床スコアで格付けした：
０          変化なし
１          尾の衰弱または麻痺
２          後肢の衰弱
３          後肢の麻痺
４          瀕死状態または死亡
【０３４２】
症状の開始を遅らせれば、例えば得られた臨床スコアが２未満、或いは対照と比べて体重減量を遅らせれば、候補化合物は活性があるとされる。
【０３４３】
実施例Ｄ：喘息モデル
α４β１インテグリンが仲介する炎症症状には、例えば気道過敏症および慢性喘息により生じる閉塞が含まれる。以下では、喘息を治療するのに用いる本発明の化合物類の生体内効果を研究するのに用いることができる喘息モデルを説明する。
【０３４４】
それらの全体は両方とも参照で組み込まれているＡｂｒａｈａｍ  ｅｔ  ａｌ．，Ｊ．Ｃｌｉｎ．Ｉｎｖｅｓｔ．，９３：７７６〜７８７（１９９４）およびＡｂｒａｈａｍ  ｅｔ  ａｌ．，Ａｍ．Ｊ．Ｒｅｓｐｉｒ．Ｃｒｉｔ．Ｃａｒｅ  Ｍｅｄ．，１５６：６９６〜７０３（１９９７）で記載されている手順に従う。本発明の化合物類はエアロゾルに処方され、豚回虫抗原に過敏なヒツジに投与される。早期抗原誘発気管支反応を低減し、晩期気道反応を阻止する化合物類、例えば抗原誘発遅発反応および気道過敏症（“ＡＨＲ”）に対する保護効果を有する化合物類は本モデルで活性があると考えられる。
【０３４５】
豚回虫抗原を吸入すると早期および遅延性気管支反応の発症を示すアレルギー性ヒツジを候補化合物類の気道における効果を研究するのに使用する。２％のリドカインで鼻腔の局所麻酔に次いで、バルーンカテーテルを１つの鼻孔を通して食道奥まで挿入する。当該動物群にはその後柔軟な気管支内視鏡をガイドとしてカフ付き気管チューブを他の鼻腔を通して挿管する。
【０３４６】
胸腔内圧はＡｂｒａｈａｍ（１９９４）に従って概算する。カスケードインパクターにて測定したとき空気動力学的粒径３．２μｍのエアロゾルを供する使い捨て医療用噴霧器を用いてエアロゾル（処方は以下参照）を発生させる。当該噴霧器はソレノイドバルブおよび圧縮空気（２０ｐｓｉ）源からなる線量計系に接続されている。噴霧器の出力はプラスチック製Ｔ形片内に導かれるが、その一端はピストン型人工呼吸器の吸気部分に接続されている。当該ソレノイドバルブは当該人工呼吸器の吸入循環における最初の１秒間活性化する。エアロゾルは５００ｍｌのＶＴ、２０呼吸／分の速度で供給する。
【０３４７】
気管支反応性を評価するために、カルバコールに対しての累積的濃度−反応曲線はＡｂｒａｈａｍ（１９９４）に従って作成できる。気管支の生検は処置の開始の前と後、および抗原誘発後の２４時間目に採取できる。気管支の生検はＡｂｒａｈａｍ（１９９４）に従って実施できる。
【０３４８】
肺胞マクロファージの生体外での接着研究は同様にＡｂｒａｈａｍ（１９９４）に従って実施でき、接着細胞群のパーセントを計数する。
【０３４９】
エアゾール処方
０．５％重炭酸ナトリウム／生理食塩水（ｗ／ｖ）中、３０．０ｍｇ／ｍＬの濃度の候補化合物溶液は以下の手順を用いて調製される。
【０３５０】
Ａ．０．５％重炭酸ナトリウム／生理食塩水原液の調製：１００．０Ｌ
【表７】
2007518825.tif 000061
手順：
１．１００ｍＬのメスフラスコに０．５ｇの重炭酸ナトリウムを加える。
２．約９０．０ｍＬの生理食塩水を加え、溶解するまで超音波をかける。
３．生理食塩水で１００．０ｍＬまで加え、十分混合する。
【０３５１】
Ｂ．３０．０ｍｇ／ｍＬの候補化合物の調製：１０．０ｍＬ
【表８】
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手順：
１．１０．０ｍＬのメスフラスコに０．３００ｇの候補化合物を加える。
２．０．５％の重炭酸ナトリウム／生理食塩水原液約９．７ｍＬを添加する。
３．当該候補化合物が完全に溶解するまで超音波処理する。
４．０．５％の重炭酸ナトリウム／生理食塩水原液で１０．０ｍＬまで適量添加し、十分混合する。
従来の経口用処方を用いると、本発明の化合物類は本モデルで活性であろう。
【０３５２】
実施例Ｅ：同種移植片モデル
炎症細胞群の浸潤を伴う同種移植片拒絶は長期の同種移植片生存の妨げとなる。細胞表面接着分子群は生体外におけるアロ抗原認識を容易にし、生体内におけるリンパ球の往来にとって重要である。如何には同種移植片拒絶の調節における生体内における本発明化合物類の効果を研究する際に使用できるモデルを説明する。
【０３５３】
以下の手順はＣｏｉｔｏ  ｅｔ  ａｌ．，Ｔｒａｎｓｐｌａｎｔａｔｉｏｎ（１９９８）６５（６）６９９〜７０６およびＫｏｒｏｍ  ｅｔ  ａｌ．，Ｔｒａｎｓｐｌａｎｔａｔｉｏｎ（１９９８）６５（６）：８５４〜８５９において記載され、両方ともその全体が参照で組入れられている。
【０３５４】
ＣｏｉｔｏおよびＫｏｒｏｍが記述した手順に従って、約２００〜２５０ｇの雄成熟ラットをこのモデルに使用した。Ｌｅｗｉｓ系ラットをＬｅｗｉｓ  Ｘ系  Ｂｒｏｗｎ  Ｎｏｒｗａｙラットからの心臓同種移植受容者として使用する。心臓は標準微小血管手法を用いて腹部大血管へと移植する。
【０３５５】
候補化合物を適切な製剤的担体中に入れて移植受容者に移植の初日から７日間の治療コースで投与する。一回量は０．３から３０ｍｇ／ｋｇ／日である。対照受容者は製剤的担体のみを受けた。当該ラット群は安楽死させ、心臓同種移植体はＣｏｉｔｏおよびＫｏｒｏｍが記述した通りに分析した。
【０３５６】
従来の処方を用えば、本発明の化合物類は本モデルにおいて活性であろう。
【０３５７】
実施例Ｆ：α４β１への候補化合物類の結合を測定するための生体外飽和アッセイ
以下では、次の実施例に記述した実験的自己免疫性脳脊髄炎（“ＥＡＥ”）モデルまたは他の生体モデル群にて活性である化合物の必要な血漿レベルを定量する生体外アッセイを記述する。
【０３５８】
対数増殖記期のジャーカット細胞群は洗浄し、２０μｇ／ｍｌの１５／７抗体（上記実施例に記載）を含有する正常動物血漿に再懸濁させる。
【０３５９】
当該ジャーカット細胞群は、検量線用の標準１２点連続的希釈を用いて６６μＭｋから０．０１μＭの範囲の種々な濃度の既知候補化合物量を含有する正常血漿試料群、或いは候補化合物処理動物群の末梢血液から得た血漿試料のどちらかに２倍希釈で入れた。
【０３６０】
細胞群はそののち室温で３０分間培養し、２％仔牛血清および塩化カルシウムと塩化マグネシウム（アッセイ培地）各１ｍＭを含有するリン酸塩緩衝生理食塩水（“ＰＢＳ”）で２回洗浄して結合していない１５／７抗体を除去した。
【０３６１】
当該細胞群はそののち、検討している動物種からの５％血清と共培養して全ての非特異的交差反応性について吸着したフィコエリスリン抱合ヒツジＦ（ａｂ'）２抗マウスＩｇＧ  Ｆｃ（Ｉｍｍｕｎｏｔｅｃｈ，Ｗｅｓｔｂｒｏｏｋ，ＭＥ）に１：２００で曝し、暗所にて４℃で３０分間培養した。
【０３６２】
細胞群はアッセイ培地で洗浄し、当該培地に再懸濁する。それらはそののちＹｅｄｎｏｃｋ  ｅｔ  ａｌ．，Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．，１９９５，２７０：２８７４０で記述されたような標準蛍光活性化細胞分別器（“ＦＡＣＳ”）分析法で分析する。
【０３６３】
当該データはそののち蛍光対用量、例えば標準用量反応様式にてグラフ化する。種々な希釈液における試験試料で生じた蛍光を測定することにより、化合物の血中濃度を定量できる。化合物の半減期とともに、生体モデルにおける効果を得る際に必要なレベルを表す曲線の上方平坦域レベルを保持するのに必要な投薬の頻度が測定できる。
【０３６４】
実施例Ｇ：ラットにおけるアジュバント誘発関節炎
アジュバント誘発関節炎（“ＡＩＡ”）はリューマチ性関節炎（ＲＡ）の研究で有用な動物モデルで、Ｌｅｗｉｓ系ラットの尾の底部にＭ．ｔｕｂｅｒｃｕｌｏｓｉｓを注入して誘発される。注射後の１０および１５日の間に動物は重度で進行性の関節炎を発症する。
【０３６５】
通常、化合物類のラットにおけるアジュバント誘発浮腫から生じる後足の腫れおよび骨損傷を修正する能力につき試験を行う。ＡＩＡから生じる後足の腫れの阻止を定量するために、炎症の２相が規定されている：（１）一次および二次注射した後足、および（２）二次非注射の後足で、それは通常注射した後足における炎症の誘発から約１１日目頃発症が開始する。後者タイプの炎症の軽減は免疫抑制活性の印である。参照、Ｃｈａｎｇ，Ａｒｔｈ．Ｒｈｅｕｍ．，２０、１１３５〜１１４１。
【０３６６】
ＡＩＡのような動物モデルを用いれば、当該病気の早期に関与する細胞の事象が検討できる。マクロファージやリンパ球におけるＣＤ４４発現はアジュバント関節炎の発生初期においては上方制御であるが、ＬＦＡ−１発現は当該病気の発生の後期にて上方制御である。アジュバント関節炎の最初期での接着分子群と内皮細胞間の相互作用について理解すると、ＲＡの治療に用いられる方法群で顕著な進歩をもたらす。
【０３６７】
本発明の種々具体的な好ましい実施形態および手法に関して記述されている。しかしながら本発明の精神と範囲でありながら多くの変化および修正ができることは理解すべきである。
【０３６８】
参考文献
以下の文献、特許および特許出願は上付き番号として本出願で引用している。
【表９】
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【０３６９】
上記文献、特許および特許出願の全てにつき、各個々の文献、特許および出願特許が具体的および個々にその全体を参照で組入れたと示したような程度まで、その全体につき参照として本明細書に組み込んである。
【国際調査報告】
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