(57)【要約】  本発明は、少なくとも５０％のジオレオイルホスファチジルエタノールアミン（ＤＯＰＥ）と、１〜５０％のポリソルベート８０（Ｐ８０）とを含む粒子組成物に関する。全ての部はａ＋ｂの重量の合計に対する重量比で示され、前記組成物は、非ラメラ粒子を含むか又は水性流体と接触させると非ラメラ粒子を形成する。前記組成物は有利な安定性を有するとともに毒性が低く、本発明はその医薬組成物にも関する。【特許請求の範囲】
【請求項１】
ａ）少なくとも５０％のジオレオイルホスファチジルエタノールアミン（ＤＯＰＥ）と、
ｂ）１〜５０％のポリソルベート８０（Ｐ８０）と、
を含み（全ての部はａ＋ｂの重量の合計に対する重量比で示される）、
非ラメラ粒子を含むか又は水性流体と接触させると非ラメラ粒子を形成する粒子組成物。
【請求項２】
ａ）少なくとも５０％のジオレオイルホスファチジルエタノールアミン（ＤＯＰＥ）と、
ｂ）１〜５０％のポリソルベート８０（Ｐ８０）と、
ｃ）必要に応じて溶媒と、
からなる両親媒性担体製剤を含み（全ての部はａ＋ｂの重量の合計に対する重量比で示される）、
非ラメラ粒子を含むか又は水性流体と接触させると非ラメラ粒子を形成し、
該担体製剤は、ラットにおいて、対象の１ｋｇあたりの成分ａ＋ｂが少なくとも１０００ｍｇまでのレベルでは急性毒性を示さない粒子組成物。
【請求項３】
ａ）少なくとも５０％のジオレオイルホスファチジルエタノールアミン（ＤＯＰＥ）と、
ｂ）１〜５０％のポリソルベート８０（Ｐ８０）と、
ｃ）必要に応じて溶媒と、
からなる両親媒性担体製剤を含み（全ての部はａ＋ｂの重量の合計に対する重量比で示される）、
非ラメラ粒子を含むか又は水性流体と接触させると非ラメラ粒子を形成し、
該担体製剤は、ウサギにおいて、対象の１ｋｇあたりの成分ａ＋ｂの５％分散液が少なくとも５ｍｌまでのレベルで非経口投与した場合、発熱性を示さない粒子組成物。
【請求項４】
少なくとも１つの活性剤をさらに含む請求項１から３のいずれかに記載の組成物。
【請求項５】
少なくとも５０％の非ラメラ粒子を含む請求項１から４のいずれかに記載の組成物。
【請求項６】
水性流体と接触すると少なくとも５０％の非ラメラ粒子を形成する請求項１から４のいずれかに記載の組成物。
【請求項７】
前記水性流体が体液である請求項６に記載の組成物。
【請求項８】
前記粒子の平均粒度が１０〜１５０μｍである請求項１から７のいずれかに記載の組成物。
【請求項９】
前記粒子がコロイド状である請求項１から７のいずれかに記載の組成物。
【請求項１０】
前記粒子が、少なくとも１０日の室温での保存に対して相挙動および粒度の点で安定している請求項９に記載の組成物。
【請求項１１】
乾燥粉末状である請求項１から１０のいずれかに記載の組成物。
【請求項１２】
請求項１から１１のいずれかに記載の組成物を含む医薬製剤。
【請求項１３】
少なくとも１つの製薬上許容可能な担体または賦形剤をさらに含む請求項１２に記載の製剤。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、活性剤の保護、安定化および送達に有用な組成物に関する。特に、本発明は、両親媒性の組成物および製剤ならびにこれらに基づいた活性剤送達システムに関する。
【背景技術】
【０００２】
両親媒性物質を基剤とする製剤は、多くの物質の送達において、特にインビボでのヒトまたは動物の体への送達に関して、非常に大きな可能性を示している。両親媒性物質は、かたまりとなって極性および非極性領域を形成する極性基および非極性基の両方を有しているため、極性化合物および非極性化合物のいずれをも有効に可溶化することができる。加えて、極性および／または非極性溶媒中で両親媒性物質／構造化剤によって形成される構造の多くは、他の両親媒性化合物を吸着および安定化させることができる非常に大きな面積の極性／非極性境界を有する。
【０００３】
両親媒性物質／水、両親媒性物質／油および両親媒性物質／水／油の相図における非ラメラ状領域の形成はよく知られた現象である。このような相は、分子レベルでは流体であるが顕著な長距離秩序を示すキュービックＰ、キュービックＤ、キュービックＧおよびヘキサゴナル相のような液晶相と、液晶相の長距離秩序が無い二分子層シートの多重相互接続３次元両連続ネットワークを含むＬ3「スポンジ」相とを含んでいる。これらの相は、それぞれの曲率に応じて、順（非極性領域に向かう平均曲率）または逆（極性領域に向かう平均曲率）として説明し得る。脂質系の自発曲率がほぼゼロである場合、構造は典型的にユニラメラまたはマルチラメラ小胞／リポソームのようなラメラ状であり、自発曲率がさらにゼロより大きいかまたは小さい場合は、ミセル、キュービックおよびヘキサゴナル相が典型的に支配的となる。
【０００４】
非ラメラ状の液晶相およびＬ3相は、熱力学的に安定な系である。すなわち、これらの相は、層やラメラ相などへと分離および／または改質する単なる準安定状態ではなく、混合物の熱力学的に安定な形態である。
【０００５】
ラメラ状および非ラメラ状のいずれの系についても、食事療法剤、化粧品用剤、栄養剤、診断用剤および医薬用剤のための担体ならびに／または賦形剤としての特性が研究されているが、非ラメラ状の系は、極性および非極性領域間の内部表面積が大きい点で非常に有利であると考えられている。このため、特に放出制御製剤における、比較的難溶性の化合物を可溶化するための非ラメラ相の研究が非常に多く行われている。
【０００６】
前述のように、バルク非ラメラ相は典型的に熱力学的に安定な系である。加えて、このバルク相を極性または非極性溶媒中に分散させてバルク溶媒中で非ラメラ（特に液晶）相の粒子を形成し得る。これにより、バルク非混和相を用いると問題が生じる状況、例えば非経口適用において、バルク非ラメラ相の利点を適用することができる。このような非ラメラ粒子の分散液により、化合物の放出プロファイルのさらなる制御も達成し得る。
【０００７】
液晶またはＬ3相は、過剰の溶媒と熱力学的に平衡または略平衡になることが可能であり、非ラメラ粒子のコロイド的に安定な分散液に分散し得る。このような粒子は、完全に（つまり熱力学的に）安定であり得るかあるいは徐々に分解し得、それにより、このような粒子と共に製剤化された活性剤の放出プロファイルが制御される。分散液の形成は、自発的なこともあり、せん断または超音波のような機械的な力の結果であることもある。これらの非ラメラ粒子は、活性剤の送達において非常に興味深いものであり、多くのこのような活性剤用の担体として提案されている。
【０００８】
ジオレオイルホスファチジルエタノールアミン（ＤＯＰＥ）の系の相挙動ならびにＰＥＧ置換ジステアロイルホスファチジルエタノールアミン、脂質ＤＳＰＥ−ＰＥＧ（２０００）およびＤＳＰＥ−ＰＥＧ（７５０）が、ジョンソン（Ｊｏｈｎｓｓｏｎ）らによって研究されたが、非常に不安定なために価値が無い分散液を形成することがわかっている。
【０００９】
液晶またはＬ3内部相の公知の粒子は、この相に表面相形成剤の溶液を添加し、攪拌して粗分散液を形成し、得られた混合物を細分化するなどの方法によって形成し得る。
【００１０】
液晶相の存在を評価するためには、小角Ｘ線回折（ＳＡＸ）、ｃｒｙｏ−透過型電子顕微鏡法（ｃｒｙｏ−ＴＥＭ）または核磁気共鳴（ＮＭＲ）分光法を用いて見込みのある液晶材料を調べることができる。分散粒子の大きさおよび粒度分布は、光散乱により、特にレーザ光散乱装置を用いて調べることができる。
【００１１】
有効成分を含有する分散液、特にヒトまたは動物の体への静脈内投与用の分散液は、コロイド状である、すなわち、粒度が１０μｍ以下、特に５μｍ以下、とりわけ１μｍ以下であるのが好ましい。分散液内の粒子がこの大きさを超えると、分散液がコロイド的に安定でないことがあり、調製剤を静脈内投与する際に塞栓症を引き起こす恐れが非常に大きい。さらに、いかなる活性剤の放出の制御をも最大限に行うために、粒度の分布が狭いのが好ましい。粒子組成物を静脈内投与以外の方法（例えば、経口投与、筋肉内投与、皮下投与、経直腸投与または吸入による投与）によって投与する場合は、粒子は必ずしもコロイド状でなくてもよいが、粒子の分解および／または活性剤の放出の速度を制御するためには、特徴がはっきりした再現可能な粒度分布とすることがやはり有利である。
【００１２】
粒子組成物の粒度は、非常に長期間にわたる保存に対して安定していることも必要である。粒度の分布が著しく変化すると、組成物の有効輸送率（例えば、任意の活性剤の拡散性および放出速度による）に悪影響が及ぶことがある。より重要性が高いのは、静脈内投与用のコロイド分散液中の粒度の安定性である。このような分散液の粒度分布が（例えば保存および流通に対して）安定していないと、時間が経つにつれて大きな粒子が生じることがあり、投与時に危険となり得る。直接危険とはならなくても、保存の不安定性により、薬物動態学、力学および／または有効性において著しいばらつきが生じる可能性がある。
【００１３】
水のような溶媒中での非ラメラ相の分散粒子の形成方法が米国特許第５，５３１，９２５号に記載されている。このような粒子は、非ラメラ液晶またはＬ3内部相とラメラまたはＬ3表面相とを有し、有効成分も含有し得る。
【００１４】
粒度を制御するのに加えて、所望の相つまり非ラメラ相にある粒子の割合を最大化することが、放出制御および再現性の点でこの有益効果を最大化するために好ましい。したがって、ユニラメラまたはマルチラメラ小胞のようなラメラ粒子の割合は最小化する必要がある。
【００１５】
公知の非ラメラ相分散粒子形成方法は、非常に有効ではあるが、典型的に、粒度の分布が比較的広くなり、一定の割合の「夾雑」ラメラ小胞粒子を生じる。粒度分布を狭くするために製剤中の細分化および／または安定化剤（例えば、界面活性剤、コポリマーおよび／またはタンパク質）の割合を増加させたり均質化処理のエネルギー投入量を増加させたりしてもよいが、ラメラ粒子の割合を増加させてしまうという犠牲を払うことになる。
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【００１６】
現在入手可能であるかあるいは提案されている非ラメラ組成物の１つの限界は、それらが、高濃度ではインビボであまり許容されない脂質にしばしば依存していることである。一般に用いられているモノアシルグリセロール（よく用いられるモノオレイン酸グリセリル−ＧＭＯを含む）は、高濃度では、用量制限的であり得る毒性を有する可能性がある。脂質担体による毒性の可能性によって、活性剤が用いられる適応症の範囲も副作用の危険が許容され得る非常に重篤なものに限定されることがある。したがって、粒子状分散液のように形成可能で安定しており、予測可能な非ラメラ相挙動を示し、かつ、広く用いられている組成物（例えば、ＧＭＯを含む組成物）と比較して毒性が少ない（例えば、溶血指数および／または急性毒性の調査からわかる）脂質組成物を提供することは、非常に大きな進歩である。このような製剤がコロイドサイズの粒子分散液（例えば、直径０．０５〜約２μｍの粒子の分散液）のように形成可能で非常に安定しており、狭い単峰型の粒度分布を有していると、さらに有利である。
【課題を解決するための手段】
【００１７】
本発明は、２つの特定の両親媒性成分の混合物が、安定な非ラメラ分散液を形成するのに非常に有効であり、インビボで驚くほど低い毒性を示し得ることを新規に立証したものである。
【発明を実施するための最良の形態】
【００１８】
したがって、第１の局面において、本発明は、
ａ）少なくとも５０％のジオレオイルホスファチジルエタノールアミン（ＤＯＰＥ）と、
ｂ）１〜５０％のポリソルベート８０（Ｐ８０）と、
を含み（全ての部はａ＋ｂの重量の合計に対する重量比で示される）、
非ラメラ粒子を含むか又は水性流体と接触させると非ラメラ粒子を形成する粒子組成物を提供する。
【００１９】
本発明の好適な組成物は、本明細書に記載のような少なくとも１つの活性剤をさらに含有し、溶媒（特に、水または水性溶媒もしくは溶媒混合液）を含有してもよい。組成物は、適切な担体、賦形剤、充填剤、安定化剤などの成分も含有し得る。
【００２０】
さらなる局面において、本発明は、少なくとも１つの本発明の組成物と、少なくとも１つの製薬上許容可能な担体または賦形剤とを含む医薬製剤を提供する。
【００２１】
本発明の両親媒性組成物は、ジオレオイルホスファチジルエタノールアミン（ＤＯＰＥ−成分ａ）と、「構造膨張」剤ポリソルベート８０（Ｐ８０−成分ｂ）とを含む。成分ｂは、組成物の細分化を容易にもする。全両親媒性成分（ａ＋ｂ）のうち少なくとも５０重量％（すなわち、５０〜９９％）がＤＯＰＥであることが必要であり、１〜５０％がＰ８０であることが必要である。
【００２２】
ＤＯＰＥの割合は、好ましくは６０〜９５％、より好ましくは６５〜９０％、典型的には８０〜９０％である。これに対応して、Ｐ８０のレベルは、好ましくはａ＋ｂの５〜４０重量％、より好ましくは１０〜３５％、最も好ましくは１０〜２０％であることが必要である。
【００２３】
ＤＯＰＥは、過剰の水の中で単独で製剤化されると、逆ヘキサゴナル相を形成するものである。これは、水中で混合物を調製し、公知かつ／または本明細書に記載の技術（小角Ｘ線散乱（ＳＡＸＳ）、偏光顕微鏡法および／もしくはｃｒｙｏ−透過型電子顕微鏡法（ｃｒｙｏ−ＴＥＭ）を含む）のいずれかによって相挙動を分析することによって容易に立証することができる。
【００２４】
ＤＯＰＥは組成物中の主な成分であるため、この成分が生体適合性を有することが特に重要である。従来、多くの非ラメラ組成物は、所望の秩序構造および安定性を得るために、比較的高い急性毒性を有する主要な構造形成成分に依存してきた。本発明の組成物を用いることにより、理想的とはいえない生物学的特性を有する脂質の使用の削減または廃止までもが可能になる。
【００２５】
脂質の生物活性の１つの尺度は、水または水溶液への溶解度である。水溶解度が比較的高い成分は、溶液中の溶解脂質モノマーのより高い平衡濃度を維持し、このことは、観察される生物学的効果に少なくとも部分的に関与し得る。例えば、一般に用いられている「モノオレイン酸グリセロール」（ＧＭＯ）は、室温で少なくとも１０-7Ｍ、生理的温度ではそれを上回る平衡水溶解度を有する。これに対して、ＤＯＰＥの溶解度は約１０-10Ｍである。
【００２６】
ポリソルベート８０（Ｐ８０）は、ポリオキシエチレンソルビタン脂肪酸エステルＰＥＧ（２０）ソルビタンモノオレエートの一般名である。この化合物は、ＤＯＰＥの格子を膨張させて、ＤＯＰＥがより容易に分散粒子形態をとることができるようにする。
【００２７】
成分ｂは、細分化剤としても作用し、相挙動の制御および安定と、非ラメラ相の粒子への細分化の促進および安定化との両方に役立つ。
【００２８】
構造膨張剤としてＰ８０を特に選択することで安定性の高い粒子状分散液が得られることがわかっている。
【００２９】
成分ｂは、ＤＯＰＥ相構造の細分化を容易にするのに、かつ／または細分化された非ラメラ相粒子を安定化するのに十分なレベルで含まれる。このような細分化は、自発的であってもよく、又はせん断および／もしくは超音波処理によるような物理的細分化を必要としてもよい。当業者は、本明細書中の実施例に鑑みて任意の組成物が十分な細分化剤を含有しているかどうかを容易に評価できるであろう。
【００３０】
本発明の組成物は、非ラメラ粒子を含むか又は水性流体と接触するとこのような粒子を形成する。このような流体は、対象への送達用の流体（例えば、水または無菌食塩水）であってもよく、又は体液、特に胃液、腸液、粘膜表面液または血液であってもよい。
【００３１】
本明細書において、用語「非ラメラ」は、ラメラ相またはリポソームにおいて見られるようなラメラ構造とは対照的なものとして、キュービックもしくはヘキサゴナルもしくはＬ3相またはこれらの任意の組み合わせを示すために用いられる。粒子が非ラメラ相または構造を有すると記載されている場合は、少なくとも粒子内部がこの構造を有することを示す。粒子は一般に２つの別個の領域、つまり内部領域と周囲の表面領域とを有している。表面領域は、「非ラメラ」粒子においてさえもラメラ状または結晶状であり得、非常に規則正しい結晶または液晶相から実質的に無秩序な流体層までのいかなる相でもあり得る。
【００３２】
用語「ラメラ粒子」は、本明細書において、内側の溶媒室を取り囲む１つまたは複数の外側の両親媒性物質ラメラ二分子層を含むことを特徴とする小胞粒子（例えば、リポソーム）を示すために用いられる。
【００３３】
本発明の１つの局面において、組成物は非ラメラ粒子を含む。このことは、存在する（好ましくはコロイド）粒子のうち、少なくとも５０％、好ましくは少なくとも７５％、最も好ましくは少なくとも８５％（容積比）が、非ラメラ状であることを示している（例えば、レーザ回折とｃｒｙｏ−ＴＥＭまたはＳＡＸＳとの併用によって判断）。本発明の別の局面において、組成物は水性流体と接触すると非ラメラ粒子を形成する。このことは、水性流体（例えば、本明細書に記載のもの）と接触すると、粒子のうちの少なくとも５０％、好ましくは少なくとも７５％、最も好ましくは少なくとも８５％（容積比）が非ラメラ粒子になることを示している。
【００３４】
活性剤を本発明の組成物中で製剤化する場合、活性剤はしばしば構造化剤の相挙動に影響を及ぼす。例えば、ある活性剤（サイクロスポリンＡなど）は、ＤＯＰＥよりも大きな負の曲率を生じさせ、高濃度では、キュービックまたはヘキサゴナル液晶相ではなく逆ミセルＬ2相のような非常に負に湾曲した相を形成させ得る。それにもかかわらず、ＤＯＰＥと自発曲率の負の程度がそれほど大きくないＰ８０との適切な混合物を用いて製剤化することにより、このような活性剤を例えば逆ヘキサゴナル相に製剤化し得る。この方法により、混合物全体として適切な負の曲率が得られ、本発明の組成物における使用が可能になる。
【００３５】
当業者は、特定の混合物の自発曲率の程度または活性剤を含むことが自発曲率の程度に及ぼす影響を評価するために、標準的な方法を用いることができる。これは、例えば、水中でのＤＯＰＥ／Ｐ８０混合物のバルク相挙動を調査し、その後、含まれる活性剤の濃度を様々に変えて調査することによって行い得る。相は、本明細書中に示した方法（例えば、偏光、ＳＡＸＳ、ｃｒｙｏ−ＴＥＭなど）のいずれかと、その都度選択された成分の適切な混合物とによって調べることができる。活性剤が混合物の相挙動に及ぼす影響が大きいような状況によっては、選択されたＤＯＰＥ／Ｐ８０混合物はそれ自体所望の非ラメラ相を提供しない（例えば、非常に小さいか非常に大きい自発曲率を有する）ことがあるが、活性剤と共に製剤化された場合にのみこの相を生じる。このため、平衡相は、活性剤の添加により、例えばキュービック相からヘキサゴナル液晶相へと変化し得る。
【００３６】
好適な実施形態において、本発明の組成物は少なくとも１つの活性剤を含む。適切な活性剤は、ヒトならびに獣医用薬剤およびワクチン、診断用剤、植物精油、抽出物または香料のような「代替」活性剤、化粧品用剤、栄養剤、栄養補助食品などを含む。適切な薬剤としては、例えば、βラクタムまたは大環状ペプチド抗生物質のような抗菌剤、ポリエンマクロライド（例えば、アンホテリシンＢ）またはアゾール抗真菌剤のような抗真菌剤、ヌクレオシド類似体、パクリタクセルおよびその誘導体のような抗がんおよび／または抗ウイルス薬、非ステロイド系抗炎症薬のような抗炎症薬、コレステロール低下および血圧低下薬を含む心臓血管作用薬、鎮痛薬、セロトニン吸収阻害剤を含む抗鬱薬、ワクチンならびに骨調節剤が挙げられる。
【００３７】
コロイド組成物においては、例えば光散乱法（レーザ回折など）で測定すると、平均（中間）粒度は典型的に０．１〜０．６μｍの範囲である。好ましくは、０．０５〜１．５μｍの範囲から外れるのは粒子のうち１％以下であり、より好ましくはこの範囲から外れるのは０．１％以下であり、最も好ましくはこの範囲から外れる粒子は（レーザ回折では）検出されない。非コロイド製剤においては、平均粒度は典型的に１０〜１５０μｍの範囲である。
【００３８】
さらに、本発明のコロイド製剤は、典型的に、周囲温度での長期保存に対して物理的に安定している。このような製剤は、室温で少なくとも１０日、より典型的には少なくとも３ヶ月、好ましくは少なくとも６ヶ月、より好ましくは１２ヶ月以上の期間にわたって、相挙動と粒度のいずれの点においても本質的に安定しているはずである。これに対して、同様の粒度の公知の分散液は、粒度が室温で１０日未満しか安定していないこともある。
【００３９】
保存期間中の平均粒度の増加が２倍以下であれば、粒度分布が保存に対して本質的に安定していると考えることができる。好ましくは、保存期間中の平均粒度の増加は５０％以下であり、より好ましくは２０％以下である。同様に、保存期間中の分布の半値幅の増加は、好ましくは５０％以下、より好ましくは２０％以下、最も好ましくは１０％以下である。分布が単峰型である場合は、保存期間中は単峰型のままであるのが好ましい。非常に好適な実施形態において、本発明の組成物の粒子の粒度分布は、上記の期間にわたる保存時に、平均粒度および粒度分布の半値幅の変化が１０％以下であり、単峰型のままである。
【００４０】
静脈内または動脈内投与用のコロイド分散液の場合は、保存および使用中に粒度分布が安定していることが特に重要である。比較的小さな成分の非コロイド粒子を含有する組成物であっても、血流への直接投与により塞栓症または少なくとも予測不可能な放出速度を引き起こし得る。同様に、活性剤の放出制御は、その他のいかなる経路による投与用の組成物においても、信頼性の高い粒度分布に依存し得る。医薬用、診断用および獣医用製品もまた数ヶ月間の保存に対して安定しているのが好ましく、そうでなければ製品のコストおよび有用性に重大な悪影響が及ぶ。
【００４１】
本発明の組成物は、溶媒（水性溶媒など）中でＤＯＰＥとＰ８０の分散液を調製し、その後、必要に応じて分散液の加熱および冷却処理を１サイクルまたは複数サイクル行うことによって生成し得る。
【００４２】
本発明の組成物は、溶媒（水性溶媒など）中でＤＯＰＥとＰ８０の分散液を調製することによって生成し得る。この製剤は、本明細書中の実施例ならびに米国特許第５，５３１，９２５号、国際公開第ＷＯ０２／０２７１６号、ＷＯ０２／０６８５６１号、ＷＯ０２／０６６０１４号およびＷＯ０２／０６８５６２号に示されているような確立した方法によって調製し得る。これらおよび本明細書中の全ての引用文献の開示を参照により本明細書に援用する。このような方法は、両親媒性物質／水液晶相（水中のＤＰＯＥなど）を細分化剤（Ｐ８０）の水溶液に添加し、混合物を自然に細分化させるかあるいは例えば機械的攪拌、ボルテックス、回転−固定子混合、高圧均質化、ミクロ流動化および／または超音波を用いてこの過程を促進させることを含んでいる。
【００４３】
非ラメラ形態の粒子の存在は、２０を超える粒子、好ましくは５０を超える粒子の試料を示しているのが好ましい１組のｃｒｙｏ−透過型電子顕微鏡粒子画像から評価するのが好ましい。非ラメラ粒子の存在はＸ線散乱実験によっても評価し得る。
【００４４】
粒子は、（例えば限外濾過もしくは透析によって）濃縮してもよく、かつ／または例えば噴霧乾燥、流動層乾燥もしくは凍結乾燥によって乾燥させてもよい。乾燥粒子の場合、乾燥処理は、凝集および造粒工程を１回または繰り返し実施して粒度を拡大した後で行い得る。このようにして生成された、濃縮、乾燥および／または凝集状態の粒子製剤は、そのまま用いてもよく、特にインビボでの活性物質の送達用に適した非ラメラ粒子分散液を得るために水和および／または分散させてもよい。このような濃縮、乾燥および／または凝集状態の粒子製剤と、それらを再懸濁／水和することによって得られる分散液は、本発明のさらなる局面となる。
【００４５】
本発明の製剤は、少なくとも１つの本発明の組成物と、少なくとも１つの担体または賦形剤とを含む。製剤が医薬製剤である場合は、担体または賦形剤は製薬上許容可能なものである。
【００４６】
組成物は、水性担体（例えば、注射用水）、結合剤、充填剤、安定化剤、オスモル濃度調節剤、発泡剤、ｐＨ緩衝剤および調整剤、粘度調整剤、甘味剤、滑沢剤、乳化剤、香料、コーティング剤（例えば、耐胃液コーティング）などの従来の医薬用担体、希釈剤ならびに／または賦形剤を用いて製剤化し得る。本発明の組成物と少なくとも１つの製薬上許容可能な担体および／または希釈剤とを含む製剤は、懸濁剤、散剤、錠剤、カプセル、コーティングカプセル、コーティング錠、エアゾール剤、坐剤、クリーム、経皮貼付剤、スプレー剤などを含むいかなる公知の剤型にも製剤化し得る。本発明の組成物を乾燥させた場合は、これを、投与前に適切な媒質（精製水または生理的オスモル濃度の溶液など）中に再懸濁するのに適した形態（散剤など）として製剤化してもよい。
【００４７】
本発明の一実施形態において、製剤は、非経口投与（例えば、筋肉内、皮下または静脈内注射もしくは注入による投与）に適している。別の実施形態において、製剤は、経口投与、吸入による投与、局所投与（例えば、クリームまたは点眼剤として）、経直腸投与などを含むその他の方法による投与に適している。
【００４８】
以下の本発明を限定するものではない実施例および添付の図面を参照することにより、本発明についてさらに説明する。
【実施例１】
【００４９】
両親媒性粒子
ＤＯＰＥ（アヴァンティポーラーリピッズ（Ａｖａｎｔｉ  Ｐｏｌａｒ  Ｌｉｐｉｄｓ）社、米国、０．８０ｇ）とＰ８０（０．２ｇ）を脱イオン水（４９．０ｇ）中で混合し、マグネチックスターラーで２４時間攪拌することによって、キュービックおよびラメラ粒子の分散液を形成した。
【００５０】
図１は、８０：２０の比率のＤＯＰＥ：Ｐ８０の粗分散液の非ラメラ粒子のｃｒｙｏ−透過型電子顕微鏡（ｃｒｙｏ−ＴＥＭ）画像を示す。
【実施例２】
【００５１】
安定性
実施例１で調製した分散液の相挙動を、周囲温度での１０日間の保存の前後に調べた。粒度または相挙動の変化は見られなかった。
【実施例３】
【００５２】
毒性試験
３．１  溶血
実施例１により得られた分散液（白色）を、ミクロ流動化装置において周囲温度で１０分間（８回）高圧（３５０バール）で均質化し、オートクレーブ（１２０℃、２０分）し、室温まで冷却した。
【００５３】
ＤＯＰＥ：Ｐ８０の重量比は８０：２０であり、全両親媒性物質濃度が５重量％になるまで水中に分散させた。この溶液を、様々な最終濃度となるように水で希釈した。
【００５４】
様々な濃度での分散液の溶血効果を測定した。分散液は、１重量％までの全両親媒性物質濃度では非溶血性であることがわかった。
【００５５】
対応する方法によってグリセロールモノオレインのキュービック分散液を調製し、同じ条件で溶血効果試験を行った。ＧＭＯを基剤とする分散液は、０．１重量％という低い全両親媒性物質濃度で著しい溶血効果を示した。
【００５６】
３．２  発熱性
実施例３．１と同様にＤＯＰＥ／Ｐ８０製剤を調製し、ウサギモデルにおいて発熱性試験を行った。組成物は、少なくとも５ｍｌ／ｋｇ（全両親媒性物質５重量％）の用量までは非発熱性であることがわかった。
【００５７】
３．３  急性毒性
実施例３．１と同様にＤＯＰＥ／Ｐ８０およびＧＭＯを基剤とする組成物を調製し、ラットモデルにおいて急性毒性試験を行った。
【００５８】
ＤＯＰＥを基剤とするキュービック相分散液は、１０ｍｌ／ｋｇ（両親媒性物質１０重量％）までの用量で用量依存的に検討したところ急性毒性を示さなかった。
【００５９】
他方、グリセロールモノオレインを基剤とするキュービック相分散液は、対応する脂質用量で毒性があることがわかった。
【図面の簡単な説明】
【００６０】
【図１】図１は、ＤＯＰＥとＰ８０の粗分散液の非ラメラ粒子のｃｙｒｏ−ＴＥＭ画像を示す。
【図１】
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【国際調査報告】
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