(57)【要約】  本発明は、治療化合物とペプチドとのコンジュゲートである新規なプロドラッグを提供し、ここで、該コンジュゲートは、ジペプチジル−ペプチダーゼにより、より好ましくはＤＰＰＩＶ（ジペプチジルアミノジペプチダーゼＩＶ）としても知られているＣＤ２６により切断可能である。本発明のプロドラッグは、式（Ｉ）【化１】2007526872.tif 000022  ［式中、ｎは１〜５であり；Ｙはプロリン、アラニン、ヒドロキシプロリン、ジヒドロキシプロリン、チアゾリジンカルボン酸（チオプロリン）、デヒドロプロリン、ピペコリン酸（Ｌ−ホモプロリン）、アゼチジンカルボン酸、アジリジンカルボン酸、グリシン、セリン、バリン、ロイシン、イソロイシンおよびトレオニンであり；ＸはＤ−もしくはＬ−立体配置の任意のアミノ酸から選択され；［Ｙ−Ｘ］の各反復におけるＸおよびＹは、相互から独立してそして他の反復から独立して選択され；Ｚは直接結合または１〜４個の炭素原子を有する２価の直鎖状もしくは分枝鎖状飽和炭化水素基であり；Ｒ1はアリール、ヘテロアリール、アリールオキシ、ヘテロアリールオキシ、アリールオキシＣ1〜4アルキル、ヘテロシクロアルキルオキシ、ヘテロシクロアルキルＣ1〜4アルキルオキシ、ヘテロアリールオキシＣ1〜4アルキル、ヘテロアリールＣ1〜4アルキルオキシであり；Ｒ2はアリールＣ1〜4アルキルであり；Ｒ3はＣ1〜10アルキル、Ｃ2〜6アルケニルもしくはＣ3〜7シクロアルキルＣ1〜4アルキルであり；Ｒ4は水素もしくはＣ1〜4アルキルである］その立体異性体および塩を有する。本発明はさらに、薬剤としての該プロドラッグの使用ならびに該プロドラッグを製造する方法を提供する。
2007526872.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
式
【化１】
2007526872.tif 000016
［式中、
ｎは１、２、３、４もしくは５であり；
Ｙはプロリン、アラニン、ヒドロキシプロリン、ジヒドロキシプロリン、チアゾリジンカルボン酸（チオプロリン）、デヒドロプロリン、ピペコリン酸（Ｌ−ホモプロリン）、アゼチジンカルボン酸、アジリジンカルボン酸、グリシン、セリン、バリン、ロイシン、イソロイシンおよびトレオニンであり；
ＸはＤ−もしくはＬ−立体配置の任意のアミノ酸から選択され；
［Ｙ−Ｘ］の各反復におけるＸおよびＹは、相互に独立し、そして他の反復から独立して選択され；
Ｚは直接結合または１〜４個の炭素原子を有する２価の直鎖状もしくは分枝鎖状飽和炭化水素基であり；
Ｒ1はアリール、ヘテロアリール、アリールオキシ、ヘテロアリールオキシ、アリールオキシＣ1〜4アルキル、ヘテロシクロアルキルオキシ、ヘテロシクロアルキルＣ1〜4アルキルオキシ、ヘテロアリールオキシＣ1〜4アルキル、ヘテロアリールＣ1〜4アルキルオキシであり；
Ｒ2はアリールＣ1〜4アルキルであり；
Ｒ3はＣ1〜10アルキル、Ｃ2〜6アルケニルもしくはＣ3〜7シクロアルキルＣ1〜4アルキルであり；
Ｒ4は水素もしくはＣ1〜4アルキルであり；
アリールは、単独でもしくは別の基と組み合わせて用いる場合に、場合によりＣ1〜4アルキル、ヒドロキシ、Ｃ1〜4アルキルオキシ、ニトロ、シアノ、ハロ、アミノ、モノ−もしくはジ（Ｃ1〜4アルキル）アミノおよびアミドよりなる群から各々個々に選択される１個もしくはそれ以上の置換基で置換されていてもよいフェニルを意味し；
ヘテロアリールは、単独でもしくは別の基と組み合わせて用いる場合に、１個もしくはそれ以上の酸素、硫黄もしくは窒素へテロ原子を有する単環式もしくは二環式芳香族複素環を意味し、この芳香族複素環は、場合によりＣ1〜4アルキル、Ｃ1〜4アルキルオキシ、アミノ、ヒドロキシ、アリール、アミド、モノ−もしくはジ（Ｃ1〜4アルキル）アミノ、ハロ、ニトロ、ヘテロシクロアルキルおよびＣ1〜4アルキルオキシカルボニルよりなる群から選択される置換基で１個もしくはそれ以上の炭素原子上で置換されていてもよく、そしてこの芳香族複素環はまた、場合によりＣ1〜4アルキルもしくはアリールＣ1〜4アルキルにより第二級（ｓｅｃｏｎｄａｒｙ）窒素原子上で置換されていてもよく；
ヘテロシクロアルキルは、単独でもしくは別の基と組み合わせて用いる場合に、１個もしくはそれ以上の酸素、硫黄もしくは窒素へテロ原子を有する飽和したもしくは部分的に不飽和の単環式もしくは二環式複素環を意味し、この複素環は、場合によりＣ1〜4アルキル、Ｃ1〜4アルキルオキシ、ヒドロキシ、ハロおよびオキソよりなる群から選択される置換基で１個もしくはそれ以上の炭素原子上で置換されていてもよく、そしてこの複素環はまた、場合によりＣ1〜4アルキルもしくはアリールＣ1〜4アルキルにより第二級窒素原子上で置換されていてもよい］
を有するプロドラッグ、またはその立体異性体もしくは塩。
【請求項２】
各Ｘが独立して天然に存在するアミノ酸から選択される請求項１に記載のプロドラッグ。
【請求項３】
ｎが１、２もしくは３である請求項１もしくは２に記載のプロドラッグ。
【請求項４】
ｎが２もしくは３であり、そして少なくとも１つのＸが疎水性もしくは芳香族アミノ酸である請求項１〜３のいずれか１つに記載のプロドラッグ。
【請求項５】
ｎが２もしくは３であり、そして少なくとも１つのＸが中性もしくは酸性アミノ酸である請求項１〜４のいずれか１つに記載のプロドラッグ。
【請求項６】
ｎが２もしくは３であり、そして少なくとも１つのＸが塩基性アミノ酸である請求項１〜５のいずれか１つに記載のプロドラッグ。
【請求項７】
−（Ｙ−Ｘ）nがアミノ末端でＸ−Ｐｒｏ、Ｘ−Ａｌａ、Ｘ−Ｇｌｙ、Ｘ−Ｓｅｒ、Ｘ−ＶａｌもしくはＸ−Ｌｅｕを含んでなる請求項１〜６のいずれか１つに記載のプロドラッグ。
【請求項８】
−（Ｙ−Ｘ）nがアミノ末端でＸ−プロリンもしくはＸ−アラニンを含んでなる請求項１〜７のいずれか１つに記載のプロドラッグ。
【請求項９】
各Ｙが独立してプロリン、アラニン、グリシン、セリン、バリンもしくはロイシンである請求項１〜８のいずれか１つに記載のプロドラッグ。
【請求項１０】
各Ｙが独立してプロリンもしくはヒドロキシプロリンもしくはジヒドロキシプロリンもしくはアラニンである請求項１〜９のいずれか１つに記載のプロドラッグ。
【請求項１１】
各Ｙが独立してプロリンもしくはアラニンである請求項１〜１０のいずれか１つに記載のプロドラッグ。
【請求項１２】
−（Ｙ−Ｘ）nが−（Ｙ−Ｘ）1もしくは2−Ｙ−Ｖａｌである請求項１〜１１のいずれか１つに記載のプロドラッグ。
【請求項１３】
−（Ｙ−Ｘ）nが−（Ｙ−Ｘ）1もしくは2−Ｐｒｏ−Ｖａｌである請求項１〜１２のいずれか１つに記載のプロドラッグ。
【請求項１４】
（Ｙ−Ｘ）nオリゴペプチドがＰｒｏ−Ｖａｌ、Ｐｒｏ−Ａｓｐ、Ｐｒｏ−Ｓｅｒ、Ｐｒｏ−Ｌｙｓ、Ｐｒｏ−Ａｒｇ、Ｐｒｏ−Ｈｉｓ、Ｐｒｏ−Ｐｈｅ、Ｐｒｏ−Ｉｌｅ、Ｐｒｏ−Ｌｅｕ、Ａｌａ−Ｖａｌ、Ａｌａ−Ａｓｐ、Ａｌａ−Ｓｅｒ、Ａｌａ−Ｌｙｓ、Ａｌａ−Ａｒｇ、Ａｌａ−Ｈｉｓ、Ａｌａ−Ｐｈｅ、Ａｌａ−ＩｌｅおよびＡｌａ−Ｌｅｕよりなる群から選択される（Ｙ−Ｘ）反復で構築される請求項１〜１３のいずれか１つに記載のプロドラッグ。
【請求項１５】
Ｒ1がヘテロシクロアルキルオキシ、ヘテロアリール、ヘテロアリールＣ1〜4アルキルオキシ、アリールもしくはアリールオキシＣ1〜4アルキルである請求項１〜１４のいずれか１つに記載のプロドラッグ。
【請求項１６】
Ｒ1がヘキサヒドロフロ［２，３−ｂ］フラン−３−イル−オキシ、テトラヒドロフラン−３−イル−オキシ、キノリン−２−イル、チアゾール−５−イルメチルオキシ、３−ヒドロキシ−２−メチル−１−フェニル、２，６−ジメチルフェノキシメチルである請求項１〜１５のいずれか１つに記載のプロドラッグ。
【請求項１７】
Ｒ1がヘキサヒドロフロ［２，３−ｂ］フラン−３−イル−オキシ、テトラヒドロフラン−３−イル−オキシ、キノリン−２−イル、チアゾール−５−イルメチルオキシ、３−ヒドロキシ−２−メチル−１−フェニル、２，６−ジメチルフェノキシメチルである請求項１〜１６のいずれか１つに記載のプロドラッグ。
【請求項１８】
Ｒ1が（３Ｒ，３ａＳ，６ａＲ）−ヘキサヒドロフロ［２，３−ｂ］フラン−３−イル−オキシである請求項１〜１７のいずれか１つに記載のプロドラッグ。
【請求項１９】
Ｒ2がフェニルメチルであり；Ｒ3がイソブチルであり、そしてＲ4が水素である請求項１〜１８のいずれか１つに記載のプロドラッグ。
【請求項２０】
Ｚがメチレンである請求項１〜１９のいずれか１つに記載のプロドラッグ。
【請求項２１】
プロドラッグが
【化２】
2007526872.tif 000017
もしくはその塩である請求項１に記載のプロドラッグ。
【請求項２２】
プロドラッグが
【化３】
2007526872.tif 000018
もしくはその塩である請求項１に記載のプロドラッグ。
【請求項２３】
プロドラッグが
【化４】
2007526872.tif 000019
もしくはその塩である請求項１に記載のプロドラッグ。
【請求項２４】
薬剤として使用するための請求項１〜２３のいずれか１つに記載のプロドラッグ。
【請求項２５】
ＨＩＶ感染を予防するかもしくは処置するために有用な薬剤の製造のための請求項１〜２３のいずれか１つに記載のプロドラッグの使用。
【請求項２６】
ＨＩＶ感染を予防するかもしくは処置するために有効な量の請求項１〜２３のいずれか１つに記載のプロドラッグをヒト、非ヒト動物および哺乳動物を包含する任意のホストに投与することによりＨＩＶ感染を予防するかもしくは処置する方法。
【請求項２７】
通常の製薬学的に無害の賦形剤および助剤に加えて請求項１〜２３のいずれか１つに記載のプロドラッグの少なくとも１つの有効用量を含有する製薬学的製剤。
【請求項２８】
治療化合物
【化５】
2007526872.tif 000020
に式Ｈ−（Ｘ−Ｙ）nのペプチドを連結することにより該プロドラッグの水溶性を調節する、血漿タンパク質結合および／もしくは生物学的利用能を調節する方法（ここで、ｎ、Ｘ、Ｙ、Ｒ1、Ｒ2、Ｒ3、Ｒ4およびＺは請求項１〜２３のいずれか１つに定義するとおりであり、そしてここで、得られるコンジュゲートはジペプチジル−ペプチダーゼにより切断可能である）。
【請求項２９】
ジペプチジル−ペプチダーゼがＣＤ２６である請求項２８に記載の方法。
【請求項３０】
治療化合物および式Ｈ−（Ｘ−Ｙ）nのペプチドを連結する段階を含んでなる、治療化合物
【化６】
2007526872.tif 000021
のプロドラッグ（ここで、該プロドラッグはジペプチジル−ペプチダーゼにより切断可能である）を製造する方法（ここで、ｎ、Ｘ、Ｙ、Ｒ1、Ｒ2、Ｒ3、Ｒ4およびＺは請求項１〜２０のいずれか１つに定義するとおりであり、そしてここで、得られるコンジュゲートはジペプチジル−ペプチダーゼにより切断可能である）。
【請求項３１】
ジペプチジル−ペプチダーゼがＣＤ２６である請求項３０に記載の方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、ＨＩＶ阻害化合物がペプチド部分のタンパク質分解により遊離されるかもしくは活性化されるＨＩＶ阻害化合物のプロドラッグに関する。本発明はまた、ＨＩＶ阻害化合物の経口摂取を増加する、血清タンパク質結合、血液脳関門透過もしくは溶解性および生物学的利用能を改変する方法にも関する。
【背景技術】
【０００２】
現代の薬剤発見技術（例えば、組み合わせ化学、ハイスループット薬理学的スクリーニング、構造に基づく薬剤設計）は、非常に特異的なそして有力な薬剤分子を提供している。しかしながら、これらの新規な化学構造が都合の悪い物理化学的および生物製薬学的（ｂｉｏｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ）性質を有することはかなり一般的である。その上、新規治療薬の開発中に、研究者は典型的に薬理学的および／もしくは生物学的性質に焦点を当て、物理化学的性質への関心は低い。しかしながら、薬剤分子の物理化学的性質（解離定数、溶解性、分配係数、安定性）は、その製薬学的および生物製薬学的挙動に有意な影響を有する。従って、物理化学的性質は、薬剤開発中に、必要に応じて、決定されそして改変される必要がある。さらに、すでに市場に出回っている多数の既存の薬剤分子の物理化学的性質は、最適ではない。
【０００３】
現在、薬剤候補は難水溶性もしくは不十分な吸収の問題のために中断されることが多く、無数の医学の進歩を実現されないままにしている。それでもなお他の製品は市場に到達するが、安全性もしくは効能の懸念のためにそれらの完全な商業的可能性を決して実現しない。プロドラッグは、両方の課題を克服する可能性を有する。該技術は、薬剤の活性型へのプロドラッグの選択的生物転化に内因性酵素を利用する。この技術は、有望な新薬候補を開発の間中ずっと存続させ、そして既存の薬剤製品の安全性および効能を改善する能力を有する。
【０００４】
プロドラッグは、体内で活性の親薬剤を遊離するために化学的もしくは酵素的生体内転化を必要とする薬剤分子のほとんど不活性の誘導体である。プロドラッグは、薬剤の都合の悪い性質を克服するように設計される。そのようなものとして、この技術は様々な薬剤の物理化学的、生物製薬学的および／もしくは薬物動態学的性質を改善するために適用することができる。通常、プロドラッグはそのようなものとして生物学的に不活性である。従って、プロドラッグは、薬剤標的に到達するやいなや顕著な効能に達するように親薬剤に効率よく転化される必要がある。
【０００５】
一般に、プロドラッグは、改善された薬剤吸収を得るために生体膜を越える薬剤の透過を改善するように、薬剤の作用の持続期間を延長するように（プロドラッグからの親薬剤の徐放、薬剤の減少した初回通過代謝）、薬剤作用を標的に向けるように（例えば、脳もしくは腫瘍ターゲッティング）、薬剤（ｉ．ｖ．製剤、点眼薬など）の水溶解性および安定性を改善するように、局所薬剤送達（例えば、皮膚および眼球薬剤送達）を改善するように、薬剤（例えばペプチド）の化学的／酵素的安定性を改善するようにもしくは薬剤副作用を減少するように設計される。
【０００６】
多くのプロドラッグ技術は、転化されなければならない薬剤の種類によりすでに開発されている。これらのプロドラッグ技術には、一般に、ペプチドおよびペプチド模倣物のための環状プロドラッグ化学、第三級アミン、フェノールおよびヒンダードアルコールの可溶化のためのホスホノオキシメチル（ＰＯＭ）化学ならびにエステル化が包含される。また、ターゲッティング戦略は、前立腺癌を標的とするために用いられるペプチドもしくはＰＳＡ（前立腺特異抗原）のＮ末端のホルミル基を切断する細菌のペプチドデホルミラーゼ（ｄｅｆｏｒｍｙｌａｓｅ）のような特定の酵素により切断可能な基を連結することにより推進される。
【０００７】
治療薬へのペプチドもしくはアミノ酸の連結は、いくつかの理由でこれまでにすでに推進されている。アンチセンス−アンチ遺伝子分野において、治療薬の細胞の取り込みを増加するためにオリゴヌクレオチドもしくはインターカレーターがペプチドに結合されている。しかしながら、これらのオリゴヌクレオチドおよびインターカレーターは、細胞透過後に遊離される必要はなく、そしてプロドラッグとみなすことはできない。治療化合物へのアミノ酸連結の例は、サイトメガロウイルス感染の予防および治療に用いられる、ガンシクロビルのＬ−バリルエステルプロドラッグ、バルガンシクロビルである。経口投与後に、該プロドラッグは腸および肝臓エステラーゼによりガンシクロビルに迅速に転化される。最近、新規の抗腫瘍ベンゾチアゾールのアラニンおよびリシンプロドラッグが研究されている。ヌクレオシドアナログのアミノ酸エステルプロドラッグのペプチドキャリアーにより媒介される膜輸送は、すでに示されている［非特許文献１；非特許文献２］。薬剤の経口生物学的利用能は、好ましくはＬ−立体配置の、アミノ酸を含有するアミノ酸プロドラッグ誘導体により媒介できることが実際に示されている。Ｌ−バリンは、腸吸収のためのアミノ酸の鎖長およびβ−炭素での分枝の最適な組み合わせを有するようである。ｈＰＥＰＴ−１は、Ｌ−バリンエステルプロドラッグの増加した全身送達の主要吸収経路として関与することが見出されている。最近、ｈＰＥＰＴ−１トランスポーターは遊離のＮＨ2、カルボニル基および脂肪親和性存在と最適に相互作用する必要があり、そしてその標的分子と数個の追加のＨ−架橋を形成し得ることが示された。Ｌ−バリン連結ヌクレオシドアナログエステルは、効率のよいｈＰＥＰＴ−１基質活性のこれらの必要条件を満たし得る［非特許文献３］。しかしながら、アミノ酸がエステル結合によってたいてい連結される小有機分子のアミノ酸プロドラッグ（１個のみのアミノ酸を連結する）は、エステラーゼによりもとの遊離の治療薬に容易に転化されるので、溶解性および生物学的利用能を改善するための先行技術は、それらのみを示す。
【０００８】
先行技術文献は、アミノペプチダーゼ（特許文献１）およびアミノトリペプチダーゼ（特許文献２）のような多数のプロテアーゼによるプロドラッグのプロセシングを記述する。特許文献３は、ＣＤ２６／ＤＰＰＩＶによるプロセシングの際に活性になりそしてその後に該プロテアーゼを不活性化するＣＤ２６／ＤＰＰＩＶインヒビターのターゲッティング戦略を記述する。
【０００９】
しかしながら、新規の、代わりのそしてより優れたプロドラッグ技術の必要性が依然としてあり、そしてこの必要性は、組み合わせ化学およびハイスループットスクリーニングが高分子量、高いｌｏｇＰ［分配係数］もしくは難水溶性を有する莫大な数の新規化合物を製造し続けるにつれて、大きくなると予測される。
【特許文献１】ＰＣＴ出願ＷＯ０１／６８１４５明細書
【特許文献２】ＰＣＴ出願ＷＯ０２／００２６３明細書
【特許文献３】ＰＣＴ出願ＷＯ９９／６７２７８明細書
【非特許文献１】Ｈａｎ  ｅｔ  ａｌ．Ｐｈａｒｍ．Ｒｅｓ．（１９９８）１５：１１５４−１１５９
【非特許文献２】Ｈａｎ  ｅｔ  ａｌ  Ｐｈａｒｍ．Ｒｅｓ．（１９９８）１５：１３８２−１３８６
【非特許文献３】Ｆｒｉｅｄｒｉｃｈｓｅｎ  ｅｔ  ａｌ．Ｅｕｒ．Ｊ．Ｐｈａｒｍ．Ｓｃｉ．（２００２）１６：１−１３
【発明の開示】
【００１０】
［発明の要約］
本発明は、治療化合物の溶解性および／もしくは生物学的利用能を改善するために適用することができる新規プロドラッグ技術を提供する。本発明は、治療化合物の溶解性および／もしくは生物学的利用能を改善するためにそれらの誘導体化を含んでなる。本発明は、ペプチド性部分と治療化合物とのコンジュゲートを提供し、ここで、該コンジュゲートは、ＣＤ２６のようなジペプチジル−ペプチダーゼにより切断可能である。この技術はさらに、治療化合物Ｄのタンパク質結合を調節するためにそして哺乳動物における特定の部位を標的とするために用いることができる。特定の治療化合物はＨＩＶ阻害化合物、特にＨＩＶプロテアーゼ阻害化合物、さらに特に式（Ｉａ）の化合物である。
【００１１】
本発明は、薬剤の溶解性、タンパク質結合および／もしくは生物学的利用能を調節するために新規プロドラッグ技術および新規プロドラッグを提供する。本発明において、プロドラッグは治療化合物Ｄとペプチドのコンジュゲートであり、ここで、該コンジュゲートはジペプチジル−ペプチダーゼにより、より好ましくはジペプチジル−ペプチダーゼＩＶにより切断可能である。本発明はさらに、該プロドラッグを製造する方法を提供する。本発明はまた、薬剤をより選択的に標的に向けるために、薬剤の脳およびリンパ系送達を改変する、特に高めるためにそして／もしくは血漿における薬剤半減期を延長するためにもプロドラッグ技術を提供する。
【００１２】
１つの態様として、本発明は治療化合物Ｄのプロドラッグを含んでなる製薬学的組成物に関する。治療化合物Ｄはペプチドもしくはタンパク質ではなく、そしてアミノ酸のカルボキシル基と結合することができる末端第一級もしくは第二級アミノ基を含む。あるいはまた、治療化合物Ｄは、アミノ酸のカルボキシル基と結合することができる第一級もしくは第二級アミノ基を含んでなるリンカーＡmに結合している。プロドラッグは、該プロドラッグがオリゴペプチドに連結している該治療化合物Ｄを含んでなることを特徴とし、該オリゴペプチドは一般構造Ｈ−［Ｘ−Ｙ］nからなり、ここで、ｎは１〜５の間であり、ここで、［Ｘ−Ｙ］の各反復におけるＸおよびＹは、相互に独立し、そして他の反復から独立して選択され、そしてここで、Ｘはアミノ酸であり、そしてＹはプロリン、アラニン、ヒドロキシプロリン、ジヒドロキシプロリン、チアゾリジンカルボン酸（チオプロリン）、デヒドロプロリン、ピペコリン酸（Ｌ−ホモプロリン）、アゼチジンカルボン酸、アジリジンカルボン酸、グリシン、セリン、バリン、ロイシン、イソロイシンおよびトレオニンよりなる群から選択されるＬアミノ酸であり、そしてここで、Ｈ−［Ｘ−Ｙ］nのカルボキシ末端とＤもしくはそのリンカーＡmのアミノ基との間の結合は、アミドによって起こる。Ｈ−［Ｘ−Ｙ］nペプチドは遊離アミノ末端、すなわち、未修飾ＮＨ2基を有する。１つの態様として、治療化合物は抗ウイルス薬、特にＨＩＶプロテアーゼのインヒビター、さらに特に式（Ｉａ）の化合物であり、そしてプロドラッグは式（Ｉ）を有する。
【００１３】
１つの態様として、ペプチドは２〜５個の間のＣＤ２６切断可能反復を有する。別の態様として、ＣＤ２６切断可能オリゴペプチドＨ−［Ｘ−Ｙ］nはテトラペプチドもしくはヘキサペプチドであり、ここで、少なくとも１つのＸは疎水性もしくは芳香族アミノ酸であり、あるいはまたここで、少なくとも１つのＸは中性もしくは酸性アミノ酸であり、あるいはまたここで、少なくとも１つのＸは塩基性アミノ酸である。特定の態様として、オリゴペプチドＨ−［Ｘ−Ｙ］nは、ＸおよびＹの選択により、優れた腸吸収、続いて溶解性の改変と組み合わせた治療化合物の徐放もしくは迅速放出を有するためにＶａｌ−Ｙ−［Ｘ−Ｙ］1〜2、さらに特にＶａｌ−Ｐｒｏ−［Ｘ−Ｙ］1〜2の群から選択されるテトラペプチドもしくはヘキサペプチドである。１つの態様として、テトラもしくはヘキサペプチドは、一般構造Ｖａｌ−Ｙ−［Ｘ−Ｙ］もしくはＶａｌ−Ｙ−［Ｘ−Ｙ］2を有する。
【００１４】
１つの態様によれば、Ｙはプロリンもしくはヒドロキシプロリンもしくはジヒドロキシプロリンもしくはアラニンである。別の態様によれば、Ｘはバリン、アスパラギン酸、セリン、リシン、アルギニン、ヒスチジン、フェニルアラニン、イソロイシンもしくはロイシンから選択される。別の態様によれば、Ｘは、遅い切断を有するために酸性アミノ酸アスパラギン酸もしくはグルタミン酸から、治療化合物Ｄの迅速放出を有するために正に荷電したアミノ酸アルギニン、ヒスチジンもしくはリシンから選択される。
【００１５】
オリゴペプチド［Ｘ−Ｙ］nは、治療化合物の芳香族基のような有機分子／原子上に存在する、炭水化物上に存在するまたはヌクレオシド上もしくは複素環式基上に存在するまたはアルキル、アルケニルもしくはアルキニル上に存在するまたは無機（ａｎｏｒｇａｎｉｃ）分子／原子上に存在するアミノ基にアミド結合によって連結されることができる。
【００１６】
１つの態様として、オリゴペプチドＨ−［Ｘ−Ｙ］nは、治療化合物の芳香族基上に存在する、炭水化物上に存在するもしくはヌクレオシド上に存在するアミノ基にアミド結合によって連結される。あるいはまた、オリゴペプチドＨ−［Ｘ−Ｙ］nは、アミノ基を含んでなるリンカーを介して治療化合物Ｄに間接的に連結される。そのようなリンカーはオリゴペプチドＡmの一般構造を有することができ、ここで、ｍは１〜１５の間、そしてさらに特に１〜３の間であり、もしくはｍ＝１。構造ＡmにおけるＡは、任意のアミノ酸であることができる。１つの態様によれば、ｍ＝１、そしてＡはバリンである。そのようなリンカーを有するプロドラッグは、一般構造Ｈ−［Ｘ−Ｙ］n−Ａm−Ｄを有する。オリゴペプチドＡmもしくはアミノ酸Ａは、オリゴペプチドＨ−［Ｘ−Ｙ］nにアミド結合によってそのアミノ末端で連結される。オリゴペプチドＡmもしくはアミノ酸Ａは、治療化合物Ｄにアミドもしくはエステル結合によってそのカルボキシ末端で連結される。製薬学的組成物は、ウイルス感染の予防もしくは処置のための薬剤のプロドラッグを含んでなることができる。１つの態様として、治療化合物は抗ウイルス薬、特にＨＩＶプロテアーゼのインヒビター、さらに特に式（Ｉａ）の化合物であり、そしてプロドラッグは式（Ｉ）を有する。
【００１７】
別の態様として、本発明は治療化合物Ｄのプロドラッグ構築物に関し、ここで、該治療化合物Ｄはペプチドもしくはタンパク質ではなく、そしてここで、治療化合物Ｄはアミノ酸のカルボキシル基と結合することができる末端第一級もしくは第二級アミノ基を含むか、またはここで、治療化合物Ｄはアミノ酸のカルボキシル基と結合することができる第一級もしくは第二級アミノ基を含んでなるリンカーに結合しており、該プロドラッグは、一般構造Ｈ−［Ｘ−Ｙ］nを有するオリゴペプチドに結合している該治療化合物からなり、そしてｎ＝１〜５を特徴とし、ここで、［Ｘ−Ｙ］の各反復におけるＸおよびＹは、相互から独立してそして他の反復から独立して選択され、そしてここで、Ｘはアミノ酸であり、そしてＹはプロリン、アラニン、ヒドロキシプロリン、ジヒドロキシプロリン、チアゾリジンカルボン酸（チオプロリン）、デヒドロプロリン、ピペコリン酸（Ｌ−ホモプロリン）、アゼチジンカルボン酸、アジリジンカルボン酸、グリシン、セリン、バリン、ロイシン、イソロイシンおよびトレオニンよりなる群から選択されるＬ  −アミノ酸であり、そしてここで、Ｈ−［Ｘ−Ｙ］nのカルボキシ末端とＤのアミノ基との間の結合は、アミドによって起こる。１つの態様として、治療化合物は抗ウイルス薬、特にＨＩＶプロテアーゼのインヒビター、さらに特に式（Ｉａ）の化合物であり、そしてプロドラッグは式（Ｉ）を有する。
【００１８】
１つの態様によれば、このプロドラッグは、活性化の際に、ＣＤ２６／ＤＰＰＩＶ酵素への阻害作用を有さない。１つの態様として、オリゴペプチドＨ−［Ｘ−Ｙ］nはテトラペプチドもしくはヘキサペプチドであり、ここで、少なくとも１つのＸは疎水性もしくは芳香族アミノ酸であり、あるいはまたここで、少なくとも１つのＸは中性もしくは酸性アミノ酸であり、あるいはまたここで、少なくとも１つのＸは塩基性アミノ酸である。特定の態様として、オリゴペプチドＨ−［Ｘ−Ｙ］nは、Ｖａｌ−Ｐｒｏ、Ａｓｐ−Ｐｒｏ、Ｓｅｒ−Ｐｒｏ、Ｌｙｓ−Ｐｒｏ、Ａｒｇ−Ｐｒｏ、Ｈｉｓ−Ｐｒｏ、Ｐｈｅ−Ｐｒｏ、Ｉｌｅ−Ｐｒｏ、Ｌｅｕ−Ｐｒｏ、Ｖａｌ−Ａｌａ、Ａｓｐ−Ａｌａ、Ｓｅｒ−Ａｌａ、Ｌｙｓ−Ａｌａ、Ａｒｇ−Ａｌａ、Ｈｉｓ−Ａｌａ、Ｐｈｅ−Ａｌａ、Ｉｌｅ−ＡｌａおよびＬｅｕ−Ａｌａの群から選択される［Ｘ−Ｙ］反復で構築される。１つの態様によれば、Ｙはプロリンもしくはヒドロキシプロリンもしくはジヒドロキシプロリンもしくはアラニンである。
【００１９】
１つの態様によれば、オリゴペプチド［Ｘ−Ｙ］nは、治療化合物の芳香族基上に存在する、炭水化物上に存在するもしくはヌクレオシド上に存在するアミノ基にアミド結合によって連結される。あるいはまた、オリゴペプチド［Ｘ−Ｙ］nは、アミノ基を含んでなるリンカーを介して治療化合物Ｄに間接的に連結される。このリンカーは、有機分子（すなわち、アルキルアミノ、ペプチド、もしくは両方の組み合わせ）を含んでなる。ある態様として、ＣＤ２６切断可能オリゴペプチドと治療化合物Ｄとの間のリンカーにおけるアミノ酸の数ｍは、１〜１５の間である。特定の態様として、そのようなリンカーはオリゴペプチドＡmの一般構造を有することができ、ここで、ｍは１〜１５の間、そしてさらに特に１〜３の間であり、もしくはｍ＝１。構造ＡmにおけるＡは、任意のアミノ酸であることができる。１つの態様によれば、ｍ＝１、そしてＡはバリンである。そのようなリンカーを有するプロドラッグは、一般構造Ｈ−［Ｘ−Ｙ］n−Ａm−Ｄを有する。１つの態様によれば、プロドラッグはウイルス感染の予防もしくは処置のための治療化合物のプロドラッグである。別の態様によれば、プロドラッグは式（Ｉ）の一般構造を有するＨＩＶプロテアーゼインヒビタープロドラッグである。
【００２０】
別の態様として、本発明は治療化合物Ｄの水溶性および／もしくは血漿タンパク質結合および／もしくは生物学的利用能を該治療化合物にペプチドを連結する（それにより、得られるコンジュゲートはジペプチジル−ペプチダーゼにより切断可能である）ことにより調節する（増加するもしくは減少する）方法に関する。１つの態様によれば、ジペプチジル−ペプチダーゼはＣＤ２６であり、そして治療化合物Ｄはペプチドもしくはタンパク質ではなく、そして治療化合物Ｄはアミノ酸のカルボキシル基と結合することができる末端第一級もしくは第二級アミノ基を含むか、または治療化合物Ｄはアミノ酸のカルボキシル基と結合することができる第一級もしくは第二級アミノ基を含んでなるリンカーに結合しており、そしてここで、オリゴペプチドは一般構造Ｈ−［Ｘ−Ｙ］nからなり、ここで、ｎは１〜５の間であり、ここで、［Ｘ−Ｙ］の各反復におけるＸおよびＹは、相互から独立してそして他の反復から独立して選択され、そしてここで、Ｘはアミノ酸であり、そしてＹはプロリン、アラニン、ヒドロキシプロリン、ジヒドロキシプロリン、チアゾリジンカルボン酸（チオプロリン）、デヒドロプロリン、ピペコリン酸（Ｌ−ホモプロリン）、アゼチジンカルボン酸、アジリジンカルボン酸、グリシン、セリン、バリン、ロイシン、イソロイシンおよびトレオニンよりなる群から選択されるＬアミノ酸であり、そしてここで、Ｈ−［Ｘ−Ｙ］nのカルボキシ末端とＤのアミノ基との間の結合は、アミドによって起こる。１つの態様によれば、オリゴペプチドＨ−［Ｘ−Ｙ］nはテトラペプチドもしくはヘキサペプチドであり、ここで、少なくとも１つのＸは疎水性もしくは芳香族アミノ酸であり、あるいはまたここで、少なくとも１つのＸは中性もしくは酸性アミノ酸であり、あるいはまたここで、少なくとも１つのＸは塩基性アミノ酸である。１つの態様として、治療化合物は抗ウイルス薬、特にＨＩＶプロテアーゼのインヒビター、さらに特に式（Ｉａ）の化合物であり、そしてプロドラッグは式（Ｉ）を有する。
【００２１】
本発明の別の態様は、プロドラッグがジペプチジル−ペプチダーゼにより切断可能である、プロドラッグを製造する方法に関し、該方法は治療的に有効な薬剤Ｄと構造Ｈ−［Ｘ−Ｙ］nを有するペプチドを連結する段階を含んでなり、それにより、得られるコンジュゲートはＣＤ２６により切断可能である。１つの態様によれば、ジペプチジル−ペプチダーゼはＣＤ２６であり、そして治療化合物Ｄはペプチドもしくはタンパク質ではなく、そして治療化合物Ｄはアミノ酸のカルボキシル基と結合することができる末端第一級もしくは第二級アミノ基を含むか、または治療化合物Ｄはアミノ酸のカルボキシル基と結合することができる第一級もしくは第二級アミノ基を含んでなるリンカーに結合しており、そしてここで、オリゴペプチドは一般構造Ｈ−［Ｘ−Ｙ］nからなり、ここで、ｎは１〜５の間であり、ここで、［Ｘ−Ｙ］の各反復におけるＸおよびＹは、相互から独立してそして他の反復から独立して選択され、そしてここで、Ｘはアミノ酸であり、そしてＹはプロリン、アラニン、ヒドロキシプロリン、ジヒドロキシプロリン、チアゾリジンカルボン酸（チオプロリン）、デヒドロプロリン、ピペコリン酸（Ｌ−ホモプロリン）、アゼチジンカルボン酸、アジリジンカルボン酸、グリシン、セリン、バリン、ロイシン、イソロイシンおよびトレオニンよりなる群から選択されるＬアミノ酸であり、そしてここで、Ｈ−［Ｘ−Ｙ］nのカルボキシ末端とＤのアミノ基との間の結合は、アミドによって起こる。１つの態様によれば、オリゴペプチドＨ−［Ｘ−Ｙ］nはテトラペプチドもしくはヘキサペプチドであり、ここで、少なくとも１つのＸは疎水性もしくは芳香族アミノ酸であり、あるいはまたここで、少なくとも１つのＸは中性もしくは酸性アミノ酸であり、あるいはまたここで、少なくとも１つのＸは塩基性アミノ酸である。１つの態様として、治療化合物は抗ウイルス薬、特にＨＩＶプロテアーゼのインヒビター、さらに特に式（Ｉａ）の化合物であり、そしてプロドラッグは式（Ｉ）を有する。
【００２２】
別の態様として、本発明はウイルス感染の処置もしくは予防用の薬剤の製造のための治療化合物Ｄのプロドラッグの使用に関する。治療化合物Ｄはペプチドもしくはタンパク質ではなく、そして治療化合物Ｄはアミノ酸のカルボキシル基と結合することができる末端第一級もしくは第二級アミノ基を含むか、または治療化合物Ｄはアミノ酸のカルボキシル基と結合することができる第一級もしくは第二級アミノ基を含んでなるリンカーに結合しており、そして該プロドラッグがオリゴペプチドに結合している該治療化合物Ｄを含んでなることを特徴とし、該オリゴペプチドは一般構造Ｈ−［Ｘ−Ｙ］nからなり、ここで、ｎは１〜５の間であり、ここで、［Ｘ−Ｙ］の各反復におけるＸおよびＹは、相互から独立してそして他の反復から独立して選択され、ここで、Ｘはアミノ酸であり、そしてＹはプロリン、アラニン、ヒドロキシプロリン、ジヒドロキシプロリン、チアゾリジンカルボン酸（チオプロリン）、デヒドロプロリン、ピペコリン酸（Ｌ−ホモプロリン）、アゼチジンカルボン酸、アジリジンカルボン酸、グリシン、セリン、バリン、ロイシン、イソロイシンおよびトレオニンよりなる群から選択されるＬアミノ酸であり、そしてここで、Ｈ−［Ｘ−Ｙ］nのカルボキシ末端とＤのアミノ基との間の結合は、アミドによって起こる。１つの態様として、治療化合物は抗ウイルス薬、特にＨＩＶプロテアーゼのインヒビター、さらに特に式（Ｉａ）の化合物であり、そしてプロドラッグは式（Ｉ）を有する。
【００２３】
本発明のさらに別の態様は、治療化合物ＤのＣＤ２６切断可能プロドラッグの製造に一般構造Ｈ−［Ｘ−Ｙ］nを有するペプチドを用いるプロドラッグの製造の製法に関する。治療化合物Ｄはペプチドもしくはタンパク質ではなく、そして治療化合物Ｄはアミノ酸のカルボキシル基と結合することができる末端第一級もしくは第二級アミノ基を含むか、あるいはまた、治療化合物Ｄはアミノ酸のカルボキシル基と結合することができる第一級もしくは第二級アミノ基を含んでなるリンカーに結合している。プロドラッグは、該プロドラッグがオリゴペプチドに結合している該治療化合物Ｄを含んでなることを特徴とし、該オリゴペプチドは一般構造Ｈ−［Ｘ−Ｙ］nからなり、ここで、ｎは１〜５の間であり、ここで、［Ｘ−Ｙ］の各反復におけるＸおよびＹは、相互に独立し、そして他の反復から独立して選択され、そしてここで、Ｘはアミノ酸であり、そしてＹはプロリン、アラニン、ヒドロキシプロリン、ジヒドロキシプロリン、チアゾリジンカルボン酸（チオプロリン）、デヒドロプロリン、ピペコリン酸（Ｌ−ホモプロリン）、アゼチジンカルボン酸、アジリジンカルボン酸、グリシン、セリン、バリン、ロイシン、イソロイシンおよびトレオニンよりなる群から選択されるＬアミノ酸であり、そしてここで、Ｈ−［Ｘ−Ｙ］nのカルボキシ末端とＤもしくはそのリンカーのアミノ基との間の結合は、アミドによって起こる。１つの態様として、治療化合物は抗ウイルス薬、特にＨＩＶプロテアーゼのインヒビター、さらに特に式（Ｉａ）の化合物であり、そしてプロドラッグは式（Ｉ）を有する。
【００２４】
１つの態様として、ペプチドは２〜５個の間のＣＤ２６切断可能反復を有する。別の態様として、ＣＤ２６切断可能オリゴペプチドと治療化合物との間のリンカーＡmにおけるアミノ酸の数ｍは１であり、そしてＡはバリンである。別の態様として、ＣＤ２６切断可能オリゴペプチドＨ−［Ｘ−Ｙ］nはテトラペプチドもしくはヘキサペプチドであり、ここで、少なくとも１つのＸは疎水性もしくは芳香族アミノ酸であり、あるいはまた、ここで、少なくとも１つのＸは中性もしくは酸性アミノ酸であり、あるいはまたここで、少なくとも１つのＸは塩基性アミノ酸である。特定の態様として、オリゴペプチドＨ−［Ｘ−Ｙ］nは、Ｘの選択により、優れた腸吸収、続いて治療化合物の徐放もしくは迅速放出を有するためにＶａｌ−Ｐｒｏ−［Ｘ−Ｙ］1〜2の群から選択されるテトラペプチドもしくはヘキサペプチドである。プロドラッグ構築物Ｈ−［Ｘ−Ｙ］n−Ｄ内で、治療化合物Ｄは、Ｈ−［Ｘ−Ｙ］nペプチドのカルボキシ末端アミノ酸のＣＯＯＨ基に結合している第一級（ＮＨ2）もしくは第二級（ＮＨ）アミノ基を有する。治療化合物ＤがＮＨ2もしくはＮＨ基を有さないか、またはＮＨもしくはＮＨ2基が反応することができない（例えば立体障害のために）場合、治療化合物Ｄは、Ｈ−［Ｘ−Ｙ］nペプチドのカルボキシ末端アミノ酸のＣＯＯＨ基と反応することができる、ＮＨ2もしくはＮＨ基を反応後に有するリンカーと反応させることができる。
【００２５】
１つの態様によれば、各Ｙは独立してプロリンもしくはヒドロキシプロリンもしくはジヒドロキシプロリンもしくはアラニンである。１つの態様として、オリゴペプチドＨ−［Ｘ−Ｙ］nは、治療化合物の芳香族基上に位置する、炭水化物上に位置するもしくはヌクレオシド上に位置するアミノ基にアミド結合によって連結される。あるいはまた、オリゴペプチドＨ−［Ｘ−Ｙ］nは、アミノ基を含んでなるリンカーを介して治療化合物Ｄに間接的に連結される。そのようなリンカーはオリゴペプチドＡmの一般構造を有することができ、ここで、ｍは１〜１５の間、そしてさらに特に１〜３の間であり、もしくはｍ＝１。構造ＡmにおけるＡは、任意のアミノ酸であることができる。１つの態様によれば、ｍ＝１、そしてＡはバリンである。そのようなリンカーを有するプロドラッグは、一般構造Ｈ−［Ｘ−Ｙ］n−Ａm−Ｄを有する。オリゴペプチドＡmもしくはアミノ酸Ａは、オリゴペプチドＨ−［Ｘ−Ｙ］nにアミド結合によってそのアミノ末端で連結される。オリゴペプチドＡmもしくはアミノ酸Ａは、治療化合物Ｄにアミドもしくはエステル結合によってそのカルボキシ末端で連結される。製薬学的組成物は、ウイルス感染の予防もしくは処置のための薬剤のプロドラッグを含んでなることができる。１つの態様として、治療化合物は抗ウイルス薬、特にＨＩＶプロテアーゼのインヒビター、さらに特に式（Ｉａ）の化合物であり、そしてプロドラッグは式（Ｉ）を有する。
［発明の詳細な記述］
「プロドラッグ（１つもしくは複数）（ｐｒｏｄｒｕｇ  ｏｒ  ｐｒｏｄｒｕｇｓ）」という用語は、本明細書において用いる場合、活性の親薬剤を遊離するために化学的もしくは酵素的転化を必要とする治療化合物のほとんど不活性の誘導体（もしくは強力に減少した活性、すなわち、非誘導薬剤分子の２０％未満、１０％未満、５％未満もしくはさらに１％未満の残存活性を有する誘導体）をさす。本発明のプロドラッグは、一般構造Ｈ−［Ｘ−Ｙ］n−Ｄを有する。このプロドラッグの化学的性質は、以下に詳細に説明される。プロドラッグは、薬剤の都合の悪い性質を克服するように設計される。そのようなものとして、この技術は様々な薬剤の物理化学的、生物製薬学的および／もしくは薬物動態学的性質を改善するために適用することができる。通常、プロドラッグはそのようなものとして生物学的に不活性である。従って、プロドラッグは、薬剤標的に到達するやいなや顕著な効能に達するように親薬剤に効率よく転化される必要がある。この活性化は、体内に存在する酵素により行われることができ、あるいはまた、酵素をプロドラッグと共投与する。
【００２６】
一般に、プロドラッグは、改善された薬剤吸収を得るために生体膜を越える薬剤の透過を改善するように、薬剤の作用の持続期間を延長するように（プロドラッグからの親薬剤の徐放、薬剤の減少した初回通過代謝）、薬剤作用を標的に向けるように（例えば、脳もしくは腫瘍ターゲッティング）、薬剤（ｉ．ｖ．製剤、点眼薬など）の水溶解性および安定性を改善するように、局所薬剤送達（例えば、皮膚および眼球薬剤送達）を改善するように、薬剤（例えばペプチド）の化学的／酵素的安定性を改善するようにもしくは薬剤副作用を減少するように設計される。
【００２７】
「治療化合物Ｄ」という用語は、本明細書において用いる場合、疾患に有益な効果を有する任意の因子、ある種の疾患もしくは障害の治療として用いられるかもしくは将来に用いられる任意の因子をさす。これはまた、まだ発見もしくは開発段階であるそしてそれらの効能および安全性がまだ証明されていない全ての分子もさす。これには、小有機分子、タンパク質、ペプチド、オリゴヌクレオチド、炭水化物、脂肪族炭素鎖、芳香族化合物ならびにアナログおよび誘導体が包含される。
【００２８】
（末端）アミノ基、さらに特に第一級もしくは第二級アミノ基を有する治療化合物Ｄは、遊離アミノ基（第一級もしくは第二級）、すなわちＮＨＲ基（ここで、Ｒは水素（第一級）もしくは当該技術分野において既知である任意の他の化学基であることができる）を有する治療化合物をさす。該アミノ基は飽和もしくは不飽和炭素によって治療化合物Ｄに、カルボニルに連結されることができ、もしくはアミノ基が含まれる他のより広範な官能基（アミド、カルバメートなど）の一部であることができるが、各場合におけるアミノ基は、安定なアミド結合を形成するためにアミノ酸と反応することができなければならない。特定の態様として、治療化合物のアミノ基ＮＨＲは、アミン機能（ｆｕｎｃｔｉｏｎｓ）の官能基に属し、そしてアミドもしくはカルバメートのようなより広範な一般官能基に属さない。
【００２９】
治療化合物はまた、リンカーを介してオリゴペプチドに連結されることもできる。このリンカーは、それによりアミノ酸を包含する、任意の有機構造を有することができ、そして上記のようなＮＨＲ基を含有する。
【００３０】
「ＣＤ２６」は、本明細書において用いる場合、その膜結合型および遊離型のジペプチジル−ペプチダーゼＩＶ（ＥＣ３．４．１４．５）をさす。ＣＤ２６の同義語は、ＤＰＰＩＶ、ＤＰＰ４、ＣＤ２６／ＤＰＰＩＶもしくはＡＤＣＰ２（アデノシンデアミナーゼ複合タンパク質２）である。
【００３１】
本明細書において用いる場合、「ジペプチジル−ペプチダーゼ（１つもしくは複数）」は、ジペプチジルアミノペプチダーゼ活性を有する、すなわち、基質における２番目のＣＯ−ＮＨアミド結合の切断により基質側のアミノ末端側からジペプチドを取り除く酵素をさす。ＣＤ２６と匹敵する活性およびタンパク質分解特異性を有するＣＤ２６以外の酵素（すなわち、プロリルオリゴペプチダーゼ）は、「ジペプチジル−ペプチダーゼ（１つもしくは複数）」で呼ばれる。「ジペプチジル−ペプチダーゼＩＶ」は、ＣＤ２６をさす。
【００３２】
本明細書において用いる場合、「ペプチド」もしくは「オリゴペプチド」という用語は、アミド結合により連結されている２個もしくはそれ以上のアミノ酸をさす。治療化合物Ｄとともに記載される場合、ペプチドもしくはオリゴペプチドは、ペプチドのＣＯＯＨ基と治療化合物Ｄもしくは治療化合物に連結されるリンカー上のＮＨ2もしくはＮＨ基に由来する、アミド結合により連結されている２個もしくはそれ以上のアミノ酸をさす。ペプチドの長さは、ペプチドという語の前に来るギリシャ数字により示される（ジペプチド、トリペプチド、テトラペプチド、ペンタペプチド、ヘキサペプチド、ヘプタペプチド、オクタペプチド、ノナペプチド、デカペプチドなど）。
【００３３】
本発明において、新規プロドラッグ技術は、治療薬へのペプチドの連結に基づいて提供され、それにより、コンジュゲートのアミド結合はＣＤ２６のようなジペプチジル−ペプチダーゼにより切断可能である。そのようなものとして、一般に治療化合物Ｄの溶解性、生物学的利用能および効能をより広範に調節することができる。リンパ球表面糖タンパク質ＣＤ２６は、膜結合ペプチダーゼの独特なクラスに属する。それは一連の多様な機能特性を特徴とし、そしてそれはジペプチジル−ペプチダーゼＩＶ（ＤＰＰ  ＩＶ、ＥＣ３．４．１４．５）と同一である。ＤＰＰ  ＩＶは、プロリル結合を加水分解することができる一群の非定型セリンプロテイナーゼ、プロリルオリゴペプチダーゼ（ＰＯＰ；ＥＣ３．４．２１．２６）ファミリーのメンバーである。７６６アミノ酸の長さのＣＤ２６は、単一の疎水性セグメントにより細胞の脂質二重層膜に固定されており、そして６アミノ酸の短い細胞質尾部を有する［Ａｂｂｏｔｔ  ｅｔ  ａｌ．Ｉｍｍｕｎｏｇｅｎｅｔｉｃｓ（１９９４）４０：３３１−３３８］。膜アンカーは、大きな細胞外グリコシル化領域、高システイン領域およびＣ末端の触媒ドメインにつながっている（Ａｂｏｔｔ  ｅｔ  ａｌ．上記に引用）。ＣＤ２６は、上皮細胞（すなわち、腎近位尿細管、腸）上でそしていくつかのタイプの内皮細胞および繊維芽細胞、ならびに白血球サブセット上で強く発現される［Ｈｅｇｅｎ，Ｍ．Ｌｅｕｋｏｃｙｔｅ  Ｔｙｐｉｎｇ  ＶＩ．Ｋｉｓｈｉｍｏｔｏ，Ｔ．，ｅｄ．Ｇａｒｌａｎｄ  Ｐｕｂｌｉｓｈｉｎｇ，（１９９７），ｐｐ．４７８−４８１］。ＣＤ２６はまた、精液、血漿および脳脊髄液に存在する可溶型としても存在する。それは、細胞内尾部および膜貫通領域を欠く［Ｄｅ  Ｍｅｅｓｔｅｒ  ｅｔ  ａｌ．Ｒｅｖ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．Ｔｏｄａｙ（１９９９）２０：３６７−３７５］。ＣＤ２６は、そのエキソペプチダーゼ活性に加えて、その基質結合部位の外側でいくつかのタンパク質に特異的に結合する［すなわち、アデノシンデアミナーゼ［Ｔｒｕｇｎａｎ  ｅｔ  ａｌ．Ｃｅｌｌ−Ｓｕｒｆａｃｅ  Ｐｅｐｔｉｄａｓｅｓ  ｉｎ  Ｈｅａｌｔｈ  ａｎｄ  Ｄｉｓｅａｓｅ．Ｋｅｎｎｙ，＆  Ｂｏｕｓｔｅａｄ，ｅｄｓ．ＢＩＯＳ，（１９９７），ｐｐ．２０３−２１７］、フィブロネクチン［Ｇｏｎｚａｌｅｚ−Ｇｒｏｎｏｗ，ｅｔ  ａｌ．Ｆｉｂｒｉｎｏｌｙｓｉｓ（１９９６），１０（Ｓｕｐｐｌ．３）：３２］、コラーゲン［Ｌｏｓｔｅｒ  ｅｔ  ａｌ．Ｂｉｏｃｈｅｍ．Ｂｉｏｐｈｙｓ．Ｒｅｓ．Ｃｏｍｍｕｎ．（１９９５），２１７：３４１−３４８］］。ＣＤ２６は、興味深い（ジペプチジル）ペプチダーゼ触媒活性に恵まれており、そしてそれは様々な天然ぺプチドのＮ末端の最後から２番目の位置にプロリンもしくはアラニンを有するペプチドに高い選択性を有する。
【００３４】
いくつかのサイトカイン、造血成長因子、神経ペプチドおよびホルモンは、それらのＮ末端でＸ−ＰｒｏもしくはＸ−Ａｌａモチーフを共有し、そして該酵素の効率のよい基質として働くことが示されている［Ｄｅ  Ｍｅｅｓｔｅｒ  ｅｔ  ａｌ．Ｒｅｖ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．Ｔｏｄａｙ（１９９９）２０：３６７−３７５およびＭｅｎｔｌｅｉｎ  Ｒｅｇｕｌ．Ｐｅｐｔ．（１９９９）８５：９−２４に概説される］。さらに、サブスタンスＰは、そのＨ末端にＡｒｇ−Ｐｒｏ−Ｌｙｓ−Ｐｒｏ［配列番号：１］配列を有し、そしてＡｒｇ−ＰｒｏおよびＬｙｓ−Ｐｒｏの段階的遊離により活性ヘプタペプチドにＣＤ２６により切断される１１アミノ酸の天然ペプチドの例である［Ａｈｍａｄ  ｅｔ  ａｌ．Ｐｈａｒｍａｃｏｌ．Ｅｘｐ．Ｔｈｅｒ．（１９９２），２６０：１２５７−１２６１］。ＣＤ２６は、非常に小さい天然ペプチド［すなわち、ペンタペプチドエンテロスタチン（Ｖａｌ−Ｐｒｏ−Ａｓｐ−Ｐｒｏ−Ａｒｇ）［配列番号：２］［Ｂｏｕｒａｓ  ｅｔ  ａｌ．Ｐｅｐｔｉｄｅｓ（１９９５），１６：３９９−４０５］からそれらのアミノ末端にＳｅｒ−Ｐｒｏ、Ｌｙｓ−ＰｒｏおよびＶａｌ−Ｐｒｏ配列をそれぞれ含有するより大きいペプチド［ケモカインＲＡＮＴＥＳおよびＳＤＦ−１αおよびＩＰ−１０（６８〜７７アミノ酸）を包含する］［Ｏｒａｖｅｃｚ  ｅｔ  ａｌ．Ｊ．Ｅｘｐ．Ｍｅｄ．（１９９７），１８６：１８６５−１８７２；Ｐｒｏｏｓｔ  ｅｔ  ａｌ．Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．（１９９８），２７３：７２２２−７２２７；Ｏｈｔｓｕｋｉ  ｅｔ  ａｌ．ＦＥＢＳ  Ｌｅｔｔ．（１９９８），４３１：２３６−２４０；Ｐｒｏｏｓｔ  ｅｔ  ａｌ．ＦＥＢＳ  Ｌｅｔｔ．（１９９８），４３２：７３−７６］までジペプチドを切断することができる。
【００３５】
比較的限られた基質特異性（最後から２番目のＰｒｏもしくはＡｌａ）がＣＤ２６に認められているが、最後から２番目のアミノ酸がＰｒｏもしくはＡｌａの代わりにＧｌｙ、Ｓｅｒ、ＶａｌもしくはＬｅｕであった場合に、より低い切断速度が認められていることもある（Ｄｅ  Ｍｅｅｓｔｅｒ  ｅｔ  ａｌ．上記に引用）。また、末端アミノ酸の性質は、ＣＤ２６の最終的触媒効率において役割も果たす。ＣＤ２６によるペプチドの効率のよい切断にアミノ末端で好ましい１番目のアミノ酸として疎水性（すなわち、脂肪族：Ｖａｌ、Ｉｌｅ、Ｌｅｕ、Ｍｅｔおよび芳香族Ｐｈｅ、Ｔｙｒ、Ｔｒｐ）から塩基性（すなわち、Ｌｙｓ、Ａｒｇ、Ｈｉｓ）〜中性（すなわち、Ｇｌｙ、Ａｌａ、Ｔｈｒ、Ｃｙｓ、Ｐｒｏ、Ｓｅｒ、Ｇｌｎ、７Ａｓｎ）〜酸性（すなわち、Ａｓｐ、Ｇｌｕ）アミノ酸に減少する優先傾向がある（Ｄｅ  Ｍｅｅｓｔｅｒ  ｅｔ  ａｌ．上記に引用）。また、非天然アミノ酸も認識される。ＣＤ２６によるマクロファージ由来ケモカイン（ＭＤＣ）の二重トランケーションが起こることができ、それによりＧｌｙ1−Ｐｒｏ2続いてＴｙｒ3−Ｇｌｙ4を順次失うという結果は、ＣＤ２６の基質活性が一般に認められているより最後から２番目のＰｒｏもしくはＡｌａにそれほど制限されない可能性があることを示唆する［Ｐｒｏｏｓｔ，Ｐ．ｅｔ  ａｌ．Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．（１９９９），２７４：３９８８−３９９３］。
【００３６】
多数の他のヒドロラーゼ（ＥＣ３）、さらに特にペプチダーゼ（ＥＣ３．４）ならびになおさらに特にプロリルアミノペプチダーゼ（ＥＣ３．４．１１．５）およびＸ−Ｐｒｏアミノペプチダーゼ（ＥＣ３．４．１１．９）のようなアミノペプチダーゼ（ＥＣ３．４．１１）は、すでに同定されている。また、他のジペプチダーゼ（ＥＣ３．４．１３）、ペプチジル−ジペプチダーゼ（ＥＣ３．４．１５）およびジペプチジル−ペプチダーゼ（ＥＣ３．４．１４、このＥＣ群にはまたトリペプチジル−ペプチダーゼも包含される）も、ＣＤ２６の次に存在する。ジペプチジル−ペプチダーゼＩ（ＥＣ３．４．１４．１）はリソソームに存在し、そしてＸ1がＡｒｇもしくはＬｙｓであるかまたはＸ2もしくはＸ3がＰｒｏである場合を除いて共通配列Ｘ1−Ｘ2−Ｘ3を有するペプチドからジペプチドを切断する。ジペプチジル−ペプチダーゼＩＩ（ＥＣ３．４．１４．２）は、酸性ｐＨで最大限に活性であるリソソームペプチダーゼであり、そして配列Ｘ1−Ｘ2−Ｘ3（ここで、Ｘ2は好ましくはＡｌａもしくはＰｒｏである）を有するオリゴペプチド（優先的にトリペプチド）からジペプチドを遊離する。ＤＰＰ  ＩＩＩ（ＥＣ３．４．１４．４）は細胞質ペプチダーゼであり、そして４個もしくはそれ以上の残基を含んでなるペプチドからジペプチドを切断する。ジペプチジル−ジペプチダーゼ（ＥＣ３．４．１４．６）。Ｘ−Ｐｒｏジペプチジル−ペプチダーゼ（ＥＣ３．４．１４．１１）は、ＣＤ２６と同様の活性を有する微生物ペプチダーゼである。それらのあるものはヒトおよび他の哺乳動物に存在し、一方、あるものは酵母および真菌のような微生物により生産される。それらは、まず第一にアミノ酸配列においてだけでなく、アミノ酸配列を認識するそれらの特異性においても異なる。さらに、ＤＰＰＩＶでのデータベーススクリーニングは、新規のプロリン特異的ジペプチダーゼ（ＤＰＰ８、ＤＰＰ９、ＤＰＰ１０）を明らかにした［Ｑｉ  ｅｔ  ａｌ．Ｂｉｏｃｈｅｍ  Ｊ．（２００３）３７３，１７９−１８９］。これらのプロリン特異的ジペプチダーゼの大部分は、リソソームに細胞内で存在し、そして酸性ｐＨで作用する。ＤＰＰＩＶのみが細胞の外側で膜結合タンパク質としてもしくは分泌タンパク質として存在する。従って、１つの態様によれば、本発明の化合物は中性ｐＨで細胞外もしくは膜結合ジペプチジル−ペプチダーゼにより切断可能である。
【００３７】
本発明は、ペプチジルプロドラッグ誘導体がＣＤ２６のエキソジペプチジル−ペプチダーゼ活性により親化合物に効率よく転化されることを示す。本発明はさらに、ペプチジルプロドラッグ誘導体が親治療化合物に細胞外でプロセシングされることを示す。
【００３８】
Ｌ−バリン部分はジペプチジルプロドラッグ方法に関与することができるので、この技術は、脂肪親和性化合物を著しくより水溶性でそしてより少ないタンパク質結合にするだけでなく、親分子の経口生物学的利用能および血漿送達ならびにＣＤ２６を発現する細胞への親薬剤のより選択的な送達を高める強力な手段になり得る。
【００３９】
この結果を考慮して、本発明は薬剤の溶解性、血漿タンパク質結合を調節するためにそして／もしくは生物学的利用能を高めるために新規プロドラッグ技術を提供する。本発明の別の態様として、プロドラッグは、薬剤をより選択的に標的に向けるために、薬剤の脳およびリンパ系送達を高めるためにそして／もしくは血漿における薬剤半減期を延長するために送達される。本発明は、プロドラッグがジペプチジル−ペプチダーゼＣＤ２６もしくはＣＤ２６と同じ活性およびタンパク質分解特異性を有する他の酵素により切断可能であることを特徴とする、新規プロドラッグを提供する。好ましい態様として、本発明のプロドラッグは、ＣＤ２６のようなジペプチジル−ペプチダーゼの切断部位を含有するアミノ酸配列を含む、ペプチド−薬剤コンジュゲートおよびその誘導体である。そのようなものとして、本発明はまた、ＣＤ２６のようなジペプチジル−ペプチダーゼにより特異的に切断される、アミド結合によってペプチドに連結される治療化合物Ｄを含んでなる治療プロドラッグ組成物も提供する。
【００４０】
治療化合物Ｄは、直接もしくはリンカー基を介してアミノ酸のカルボキシ基に連結されることができる。好ましい態様として、治療化合物Ｄおよびペプチドは、アミド結合によって直接連結される。治療化合物Ｄは、アミノ酸のカルボキシル基と、より好ましくはα−カルボキシル基と連結されることができる遊離アミノ基（第一級もしくは第二級）アミドを有することができる。別の好ましい態様として、治療化合物Ｄおよびペプチドはリンカーを介して連結され、ここで、リンカーは非ペプチド性もしくはペプチド性の性質のものであることができる。治療化合物Ｄとペプチドとの間の連結がリンカーを介して行われる場合、リンカーと第一のアミノ酸との間の連結は、好ましくはアミド結合である。リンカーは、当業者に既知である任意の結合タイプおよび化学基によって、より好ましくは共有結合により治療化合物Ｄに連結されることができる。リンカーは、切断後に永久に治療化合物Ｄ上にとどまることができ、または哺乳動物に存在する因子とのさらなる反応によりもしくは自己切断段階において、その後に取り除かれることができる。リンカーの切断に影響を及ぼし得る外部因子には、酵素、タンパク質、有機もしくは無機試薬、プロトンおよび他の因子が包含される。リンカーが薬剤に結合したままである態様として、リンカーはペプチドの切断後に薬剤の活性を実質的に阻害しない任意の基であることができる。別の態様として、リンカーは自己切断する。自己切断するリンカーは、ＣＤ２６のようなジペプチジル−ペプチダーゼによるペプチドの切断後に薬剤から切断する傾向があるものである。リンカーの自己切断に関与する機序は、例えば分子内環化もしくは自然ＳN１加溶媒分解であり、そしてペプチド切断の際に薬剤を遊離する。リンカーのいくつかの例は、Ａｔｗｅｌｌ  ｅｔ  ａｌ．（Ａｔｗｅｌｌ  ｅｔ  ａｌ．Ｊ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．１９９４，３７：３７１−３８０）に提供される。リンカーは、一般に、ペプチドのカルボキシ末端にアミド結合を形成する第一級アミンを含有する。リンカーはまた、薬剤上に存在する第一級アミンにアミド結合を形成するカルボン酸を含有することもできる。リンカーは、当業者に利用可能な反応から選択される１つもしくはそれ以上の反応により薬剤に連結されることができる。
【００４１】
１つの態様として、プロドラッグのタンパク質分解に用いることができるプロテアーゼはＣＤ２６である。得られる実験データは、ＣＤ２６がその切断にジペプチド構造にのみ依存することを示す。その活性は、プロリンと薬剤部分との間のアミド結合のすぐ後の治療化合物Ｄの存在により妨げられない。同じ関連で、従って、ジペプチド薬剤間に追加のペプチドもしくは他のリンカー分子を有する必要はなく、そしてさらに、異なる臓器（高いレベルからより低いレベルに：腎臓、肺、副腎、空腸、肝臓、耳下腺、脾臓、精巣そしてまた皮膚、心臓、膵臓、脳、脊髄、血清上）および異なる細胞タイプ（胸腺細胞、内皮細胞、リンパ球、小グリア細胞のような）上のその組織発現（癌および正常組織の両方上）のために、いくつかの用途およびいくつかの治療用途が予想されることができる。ジペプチドのタンパク質分解の速度は、アミノ末端のアミノ酸および／もしくは２番目のアミノ酸を改変することにより調節することができる。一緒にもしくは加水分解の調節とは独立に、ジペプチドプロドラッグの物理化学的性質を改変することができる。
【００４２】
本発明のプロドラッグに用いることができる治療化合物には、ペプチドに直接もしくは間接的に連結されることができそしてそれによりコンジュゲートがＣＤ２６のようなジペプチジル−ペプチダーゼにより切断可能である任意の薬剤（ペプチドホルモンのようなタンパク質もしくはペプチド薬剤以外）が包含される。既知の治療化合物に加えて、本発明はまた現在薬剤開発中である新規薬剤分子にもしくはすでに臨床使用中である薬剤分子に適用することもできる。別の好ましい態様として、治療化合物Ｄは小有機分子であり、そしてペプチド、タンパク質、インターカレーターもしくはオリゴヌクレオチドもしくはそのアナログ（ＨＮＡ、ＰＮＡなどのような）ではない。治療分子は、心臓血管、神経学的、呼吸器系、腫瘍学、代謝性疾患、免疫学、泌尿器学、抗感染薬、炎症および全ての他の治療分野において活性を有することができる。さらに別のより好ましい態様として、治療化合物Ｄは抗ウイルス活性を有する。なおさらに好ましい態様として、治療化合物Ｄは抗ＨＩＶ活性を有する。
【００４３】
好ましい薬剤は、第一級アミンを含有するものである。第一級アミンの存在は、薬剤とペプチドとの間のアミド結合の形成を可能にする。第一級アミンは、一般に提供されるような薬剤において見出されることができ、もしくはそれらを化学合成により薬剤に付加することができる。
【００４４】
ＦＤＡの生物薬剤学分類体系（Ｂｉｏｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃｓ  Ｃｌａｓｓｉｆｉｃａｔｉｏｎ  Ｓｙｓｔｅｍ）（ＢＣＳ）に従って、薬剤物質は以下のように分類される：クラスＩ−高い透過性、高い溶解性；クラスＩＩ−高い透過性、低い溶解性；クラスＩＩＩ−低い透過性、高い溶解性およびクラスＩＶ−低い透過性、低い溶解性。薬剤がこの分類体系において分類される方法は、ＢＣＳの指針に記述されている。好ましい態様として、本発明において使用することができる治療化合物Ｄは、クラスＩＩ、ＩＩＩおよびＩＶから選択される。
【００４５】
本発明は、ジペプチジル−ペプチダーゼにより切断可能であるプロドラッグを提供する。ジペプチジル−ペプチダーゼは、ペプチダーゼ（ＥＣ３．４）ならびになおさらに特にプロリルアミノペプチダーゼ（ＥＣ３．４．１１．５）およびＸ−Ｐｒｏアミノペプチダーゼ（ＥＣ３．４．１１．９）のようなアミノペプチダーゼ（ＥＣ３．４．１１）の群から、ジペプチダーゼ（ＥＣ３．４．１３）、ペプチジル−ジペプチダーゼ（ＥＣ３．４．１５）ならびにジペプチジル−ペプチダーゼＩ（ＥＣ３．４．１４．１）、ＩＩ（ＥＣ３．４．１４．２）、ＩＩＩ（ＥＣ３．４．１４．４）、ＩＶ（ＥＣ３．４．１４．５）、ジペプチジル−ジペプチダーゼ（ＥＣ３．４．１４．６）およびＸ−Ｐｒｏジペプチジル−ペプチダーゼ（ＥＣ３．４．１４．１１）のようなジペプチジル−ペプチダーゼ（ＥＣ３．４．１４、このＥＣ群にはまたトリペプチジル−ペプチダーゼも包含される）の群から選択することができる。好ましい態様として、プロドラッグは哺乳動物にもしくはより好ましくはヒトに存在するジペプチジル−ペプチダーゼにより切断可能である。より好ましい態様として、プロドラッグはジペプチジル−ペプチダーゼＩＶ（ＣＤ２６）により、精液、血漿および脳脊髄液に存在する可溶型によるのと同様に細胞表面結合型によっても切断可能である。ＣＤ２６の２つの異なるタイプの存在は、細胞膜での活性化のためのそして体液における活性化のためのプロドラッグの適用を可能にする。それは、プロドラッグがあることができる本発明の別の利点である。
【００４６】
１つの特定の態様として、本発明は式（Ｉ）
【００４７】
【化１】
2007526872.tif 000003
【００４８】
［式中、
ｎは１、２、３、４もしくは５であり；
Ｙはプロリン、アラニン、ヒドロキシプロリン、ジヒドロキシプロリン、チアゾリジンカルボン酸（チオプロリン）、デヒドロプロリン、ピペコリン酸（Ｌ−ホモプロリン）、アゼチジンカルボン酸、アジリジンカルボン酸、グリシン、セリン、バリン、ロイシン、イソロイシンおよびトレオニンであり；
ＸはＤ−もしくはＬ−立体配置の任意のアミノ酸から選択され；
［Ｙ−Ｘ］の各反復におけるＸおよびＹは、相互に独立し、そして他の反復から独立して選択され；
Ｚは直接結合または１〜４個の炭素原子を有する２価の直鎖状もしくは分枝鎖状飽和炭化水素基であり；
Ｒ1はアリール、ヘテロアリール、アリールオキシ、ヘテロアリールオキシ、アリールオキシＣ1〜4アルキル、ヘテロシクロアルキルオキシ、ヘテロシクロアルキルＣ1〜4アルキルオキシ、ヘテロアリールオキシＣ1〜4アルキル、ヘテロアリールＣ1〜4アルキルオキシであり；
Ｒ2はアリールＣ1〜4アルキルであり；
Ｒ3はＣ1〜10アルキル、Ｃ2〜6アルケニルもしくはＣ3〜7シクロアルキルＣ1〜4アルキルであり；
Ｒ4は水素もしくはＣ1〜4アルキルであり；
アリールは、単独でもしくは別の基と組み合わせて用いる場合に、場合によりＣ1〜4アルキル、ヒドロキシ、Ｃ1〜4アルキルオキシ、ニトロ、シアノ、ハロ、アミノ、モノ−もしくはジ（Ｃ1〜4アルキル）アミノおよびアミドよりなる群から各々個々に選択される１個もしくはそれ以上の置換基で置換されていてもよいフェニルを意味し；
ヘテロアリールは、単独でもしくは別の基と組み合わせて用いる場合に、１個もしくはそれ以上の酸素、硫黄もしくは窒素へテロ原子を有する単環式もしくは二環式芳香族複素環を意味し、この芳香族複素環は、場合によりＣ1〜4アルキル、Ｃ1〜4アルキルオキシ、アミノ、ヒドロキシ、アリール、アミド、モノ−もしくはジ（Ｃ1〜4アルキル）アミノ、ハロ、ニトロ、ヘテロシクロアルキルおよびＣ1〜4アルキルオキシカルボニルよりなる群から選択される置換基で１個もしくはそれ以上の炭素原子上で置換されていてもよく、そしてこの芳香族複素環はまた、場合によりＣ1〜4アルキルもしくはアリールＣ1〜4アルキルにより第二級窒素原子上で置換されていてもよく；
ヘテロシクロアルキルは、単独でもしくは別の基と組み合わせて用いる場合に、１個もしくはそれ以上の酸素、硫黄もしくは窒素へテロ原子を有する飽和したもしくは部分的に不飽和の単環式もしくは二環式複素環を意味し、この複素環は、場合によりＣ1〜4アルキル、Ｃ1〜4アルキルオキシ、ヒドロキシ、ハロおよびオキソよりなる群から選択される置換基で１個もしくはそれ以上の炭素原子上で置換されていてもよく、そしてこの複素環はまた、場合によりＣ1〜4アルキルもしくはアリールＣ1〜4アルキルにより第二級窒素原子上で置換されていてもよい］
のプロドラッグ化合物、その立体異性体および塩に関する。
【００４９】
基もしくは基の一部としてのＣ1〜4アルキルという用語は、１〜４個の炭素原子を含有する直鎖状および分枝鎖状の飽和した１価の炭化水素基を意味する。そのようなＣ1〜4アルキル基の例には、メチル、エチル、ｎ−プロピル、イソプロピル、ｎ−ブチル、イソブチル、ｓｅｃ−ブチル、ｔｅｒｔ−ブチルなどが包含される。
【００５０】
基もしくは基の一部としてのＣ1〜6アルキルという用語は、１〜６個の炭素原子を含有する直鎖状および分枝鎖状の飽和した１価の炭化水素基を意味する。そのようなＣ1〜6アルキル基の例には、メチル、エチル、ｎ−プロピル、イソプロピル、ｎ−ブチル、イソブチル、ｓｅｃ−ブチル、ｔｅｒｔ−ブチル、２−メチルブチル、ペンチル、イソアミル、ヘキシル、３−メチルペンチルなどが包含される。
【００５１】
基もしくは基の一部としてのＣ1〜10アルキルという用語は、１〜１０個の炭素原子を含有する直鎖状および分枝鎖状の飽和した１価の炭化水素基を意味する。そのようなＣ1〜10アルキル基の例には、Ｃ1〜6アルキル基の例およびヘプチル、オクチル、ノニル、デシル、３−エチル−ヘプチルなどが包含される。
【００５２】
基もしくは基の一部としてのＣ2〜6アルケニルは、少なくとも１個の二重結合を有しそして２〜６個の炭素原子を含有する直鎖状および分枝鎖状の１価の炭化水素基を意味する。そのようなＣ2〜6アルケニル基の例には、エテニル、プロペニル、１−ブテニル、２−ブテニル、イソブテニル、２−メチル−１−ブテニル、１−ペンテニル、２−ペンテニル、１−ヘキセニル、２−ヘキセニル、３−ヘキセニル、３−メチル−２−ペンテニルなどが包含される。
【００５３】
「ハロ」もしくは「ハロゲン」という用語は、単独でもしくは別の基と組み合わせて用いる場合に、フルオロ、クロロ、ブロモもしくはヨードの総称である。
【００５４】
Ｃ3〜7シクロアルキルという用語は、単独でもしくは別の基と組み合わせて用いる場合に、シクロプロピル、シクロブチル、シクロペンチル、シクロヘキシルおよびシクロヘプチルの総称である。
【００５５】
治療用途には、本発明のプロドラッグ化合物の塩は、対イオンが製薬学的にもしくは生理学的に許容しうるものである。しかしながら、製薬学的に許容できない対イオンを有する塩もまた、例えば、本発明の製薬学的に許容しうる化合物の製造もしくは精製において、用途を見出すことができる。全ての塩は、製薬学的に許容しうるかもしくはそうでないにしても、本発明の範囲内に包含される。
【００５６】
本発明のプロドラッグ化合物が形成することのできる製薬学的に許容しうるもしくは生理学的に許容しうる酸付加塩形態は、例えば、ハロゲン化水素酸、例えば塩酸もしくは臭化水素酸、硫酸、硝酸、リン酸などのような無機酸；もしくは例えば、酢酸、プロパン酸、ヒドロキシ酢酸、乳酸、ピルビン酸、シュウ酸、マロン酸、コハク酸、マレイン酸、フマル酸、リンゴ酸、酒石酸、クエン酸、メタンスルホン酸、エタンスルホン酸、ベンゼンスルホン酸、ｐ−トルエンスルホン酸、シクラミン酸、サリチル酸、ｐ−アミノサリチル酸、パモン酸などのような有機酸のような適切な酸を用いて都合よく製造することができる。
【００５７】
逆に、該酸付加塩形態を適切な塩基での処理により遊離塩基形態に転化することができる。
【００５８】
酸性プロトンを含有する本発明のプロドラッグ化合物はまた、適切な有機および無機塩基での処理によりそれらの無毒の金属もしくはアミン付加塩形態に転化することもできる。適切な塩基塩形態は、例えば、アンモニウム塩、第四級アンモニウム塩、アルカリおよびアルカリ土類金属塩、例えば、リチウム、ナトリウム、カリウム、マグネシウム、カルシウム塩など、有機塩基との塩、例えば、ベンザチン、Ｎ−メチル，−Ｄ−グルカミン、ヒドラバミン（ｈｙｄｒａｂａｍｉｎｅ）塩、ならびに例えば、アルギニン、リシンなどのようなアミノ酸との塩を含んでなる。
【００５９】
逆に、該塩基付加塩形態を適切な酸での処理により遊離酸形態に転化することができる。
【００６０】
「塩」という用語はまた、本発明のプロドラッグ化合物が形成することのできる水和物および溶媒付加形態も含んでなる。そのような形態の例は、例えば、水和物、アルコラートなどである。「塩」という用語はまた、本発明の化合物の窒素原子の四級化も含んでなる。塩基性窒素は、例えば、低級アルキルハロゲン化物、硫酸ジアルキル、長鎖ハロゲン化物およびアリールアルキルハロゲン化物を包含する当業者に既知である任意の因子で四級化することができる。
【００６１】
本発明のプロドラッグ化合物はまた、それらの互変異性形態で存在することもできる。そのような形態は、上記の式において明白に示されないが、本発明の範囲内に包含されるものとする。
【００６２】
１つの態様として、−（Ｙ−Ｘ）nにより形成されるペプチド結合の末端アミノ酸の末端アミノ基は、場合によりアセチル、スクシニル、ベンジルオキシカルボニル、グルタリル、モルホリノカルボニルおよびＣ1〜4アルキルから選択される１もしくは２個のキャッピング基を含有してもよい。
【００６３】
１つの態様として、各Ｘは独立して天然に存在するアミノ酸から選択される。
【００６４】
１つの態様として、各Ｘは独立してアラニン、アルギニン、アスパラギン、アスパラギン酸、システイン、グルタミン、グルタミン酸、グリシン、ヒスチジン、イソロイシン、ロイシン、リシン、メチオニン、フェニルアラニン、プロリン、セリン、トレオニン、トリプトファン、チロシンもしくはバリンよりなる群から選択されるＬ−アミノ酸である。
【００６５】
１つの態様として、各Ｙは独立してプロリン、アラニン、グリシン、セリン、バリンもしくはロイシンであり；好ましくは、各Ｙは独立してプロリンもしくはアラニンである。
【００６６】
１つの態様として、ｎは１、２もしくは３である。
【００６７】
１つの態様として、−（Ｙ−Ｘ）nは−（Ｙ−Ｘ）1もしくは2−Ｙ−Ｖａｌであり、さらに特に−（Ｙ−Ｘ）nは−（Ｙ−Ｘ）1もしくは2−Ｐｒｏ−Ｖａｌである。
【００６８】
１つの態様として、（Ｙ−Ｘ）nオリゴペプチドはＰｒｏ−Ｖａｌ、Ｐｒｏ−Ａｓｐ、Ｐｒｏ−Ｓｅｒ、Ｐｒｏ−Ｌｙｓ、Ｐｒｏ−Ａｒｇ、Ｐｒｏ−Ｈｉｓ、Ｐｒｏ−Ｐｈｅ、Ｐｒｏ−Ｉｌｅ、Ｐｒｏ−Ｌｅｕ、Ａｌａ−Ｖａｌ、Ａｌａ−Ａｓｐ、Ａｌａ−Ｓｅｒ、Ａｌａ−Ｌｙｓ、Ａｌａ−Ａｒｇ、Ａｌａ−Ｈｉｓ、Ａｌａ−Ｐｈｅ、Ａｌａ−ＩｌｅおよびＡｌａ−Ｌｅｕよりなる群から選択される（Ｙ−Ｘ）反復で構築される。
【００６９】
１つの態様として、Ｒ1はヘテロシクロアルキルオキシ、ヘテロアリール、ヘテロアリールＣ1〜4アルキルオキシ、アリールもしくはアリールオキシＣ1〜4アルキルである。
【００７０】
１つの態様として、Ｒ1はヘキサヒドロフロ［２，３−ｂ］フラニル−オキシ、テトラヒドロフラニル−オキシ、キノリニル、チアゾリルメチルオキシ、アリール、アリールオキシメチルである。
【００７１】
１つの態様として、Ｒ1はヘキサヒドロフロ［２，３−ｂ］フラン−３−イル−オキシ、テトラヒドロフラン−３−イル−オキシ、キノリン−２−イル、チアゾール−５−イルメチルオキシ、３−ヒドロキシ−２−メチル−１−フェニル、２，６−ジメチルフェノキシメチルである。
【００７２】
１つの態様として、Ｒ1は（３Ｒ，３ａＳ，６ａＲ）−ヘキサヒドロフロ［２，３−ｂ］フラン−３−イル−オキシ、（３Ｓ）−テトラヒドロフラン−３−イル−オキシ、キノリン−２−イル、チアゾール−５−イルメチルオキシ、３−ヒドロキシ−２−メチル−１−フェニル、２，６−ジメチルフェノキシメチルである。
【００７３】
化合物の興味深い群は、以下の制約の１つもしくはそれ以上が当てはまるその式（Ｉ）の化合物の群である：
・ｎが１、２もしくは３である；
・Ｙがプロリンである；
・各Ｘが独立してバリン、アスパラギン酸、リシンもしくはプロリンから選択される；
・Ｚがメチレンである；
・Ｒ1がヘテロシクロアルキルオキシである；
・Ｒ2がフェニルメチルである；
・Ｒ3がＣ1〜10アルキルである；
・Ｒ4が水素である。
【００７４】
興味深い化合物は、Ｒ2がフェニルメチルである式（Ｉ）の化合物もしくはその任意の特定の亜群である。
【００７５】
興味深い化合物は、Ｒ3がＣ1〜4アルキルである、特にＲ3がイソブチルである式（Ｉ）の化合物もしくはその任意の特定の亜群である。
【００７６】
興味深い化合物は、Ｒ4が水素である式（Ｉ）の化合物もしくはその任意の特定の亜群である。
【００７７】
興味深い化合物は、Ｒ2がフェニルメチルであり；Ｒ3がイソブチルであり、そしてＲ4が水素である式（Ｉ）の化合物もしくはその任意の特定の亜群である。
【００７８】
興味深い化合物は、Ｚ4がメチレンである式（Ｉ）の化合物もしくはその任意の特定の亜群である。
【００７９】
興味深い化合物は、Ｒ1がヘキサヒドロフロ［２，３−ｂ］フラニル−オキシ、テトラヒドロフラニル−オキシ、キノリニル、チアゾリルメチルオキシ、アリール、アリールオキシメチルであり；Ｒ2がフェニルメチルであり；Ｒ3がイソブチルであり、そしてＲ4が水素である式（Ｉ）の化合物もしくはその任意の特定の亜群である。
【００８０】
化合物の特定の群は、
ｎが１、２もしくは３であり；
Ｙがプロリンもしくはアラニンであり；
各Ｘが独立して天然に存在するアミノ酸から選択され；
Ｚが直接結合もしくはメチレンであり；
Ｒ1がヘテロシクロアルキルオキシ、ヘテロアリール、ヘテロアリールＣ1〜4アルキルオキシ、アリールもしくはアリールオキシＣ1〜4アルキルであり；
Ｒ2がフェニルメチルであり；
Ｒ3がイソブチルであり；
Ｒ4が水素である
式（Ｉ）の化合物もしくはその任意の特定の亜群である。
【００８１】
また、化合物の特定の群は、
ｎが１、２もしくは３であり；
Ｙがプロリンであり；
各Ｘが独立して天然に存在するアミノ酸から選択され；
Ｚがメチレンであり；
Ｒ1がヘキサヒドロフロ［２，３−ｂ］フラニル−オキシ、テトラヒドロフラニル−オキシ、キノリニル、チアゾリルメチルオキシ、アリール、アリールオキシメチルであり；
Ｒ2がフェニルメチルであり；
Ｒ3がイソブチルであり；
Ｒ4が水素である
式（Ｉ）の化合物もしくはその任意の特定の亜群でもある。
【００８２】
好ましいプロドラッグは、治療化合物が
【００８３】
【化２】
2007526872.tif 000004
【００８４】
であるプロドラッグである。
【００８５】
好ましいプロドラッグには、
【００８６】
【化３】
2007526872.tif 000005
【００８７】
およびそれらの塩形態が包含される。
【００８８】
特に、プロドラッグにおけるペプチドのアミノ末端側終端は、Ｘ−Ｐｒｏ、Ｘ−Ａｌａ、Ｘ−Ｇｌｙ、Ｘ−Ｓｅｒ、Ｘ−ＶａｌもしくはＸ−Ｌｅｕを含んでなり、ここで、Ｘは任意のアミノ酸もしくはその異性体（すなわち、Ｌ−もしくはＤ−立体配置）を表す。２番目の位置にヒドロキシプロリン、ジヒドロキシプロリン、チアゾリジンカルボン酸（チオプロリン）、デヒドロプロリン、ピペコリン酸（Ｌ−ホモプロリン）、アゼチジンカルボン酸およびアジリジンカルボン酸を有する他のジペプチドもまた、ＣＤ２６により切断可能である。好ましい態様として、ペプチドはアミノ末端にＸ−プロリンもしくはＸ−アラニンを含んでなる。そのようなものとしてアミノ酸は、アラニン、アルギニン、アスパラギン、アスパラギン酸、システイン、グルタミン、グルタミン酸、グリシン、ヒスチジン、イソロイシン、ロイシン、リシン、メチオニン、フェニルアラニン、プロリン、セリン、トレオニン、トリプトファン、チロシン、バリンおよびその誘導体から選択することができる。また、改変された（すなわち、ヒドロキシルプロリン）もしくは非天然のアミノ酸を含むこともできる。別の好ましい態様として、ペプチドの長さは２〜１０アミノ酸の間であり、そしてそれ故に２、３、４、５、６、７、８、９もしくは１０個のアミノ酸を有することができる。別の好ましい態様として、ペプチドは［Ｘ−Ｙ］n反復単位を含んでなり、ここで、Ｘは任意のアミノ酸を表し、ＹはＰｒｏ、Ａｌａ、Ｇｌｙ、Ｓｅｒ、ＶａｌもしくはＬｅｕから選択され、そしてｎは１、２、３、４もしくは５から選択される。別のさらに好ましい態様として、該ペプチドはジペプチドである。さらにより好ましい態様として、ジペプチドはＬｙｓ−Ｐｒｏである。別のさらにより好ましい態様として、アミノ酸はＬ−立体配置を有する。ペプチドのアミノ末端はまた、通常のキャッピング基を含有することもできる。そのようなキャッピング基には、アセチル、スクシニル、ベンジルオキシカルボニル、グルタリル、モルホリノカルボニル、メチルおよび当該技術分野において既知である多数の他のものが包含される。当業者は、コンジュゲートの溶解性、生物学的利用能およびターゲッティングに関するより優れたプロファイルを有するペプチドを得るために置換を行うことができる。従って、本発明には、上記のようなペプチド配列、ならびにコンジュゲートがＣＤ２６のようなジペプチジル−ペプチダーゼにより切断可能なままである限り、そのアナログもしくは誘導体が包含される。
【００８９】
別の態様として、本発明のリンカーペプチドは、ＣＤ２６により切断可能である構造［Ｘ−Ｙ］nを有する１つもしくはそれ以上の反復的Ｘ−Ｙジペプチドからなり、ＣＤ２６切断可能ペプチドとプロドラッグとの間に１個もしくはそれ以上のアミノ酸を含んでなり、そして一般構造［Ｘ−Ｙ］n−Ａmを有する。ここで、Ａは任意のアミノ酸である。［Ｘ−Ｙ］nオリゴペプチドと連続したＡアミノ酸との間の結合は、ＣＤ２６タンパク質分解を可能にするアミド結合である。２個のＡアミノ酸の間およびＡアミノ酸とプロドラッグとの間の結合は、アミド結合もしくはエステル結合のいずれかであることができる。ｍは１〜１５の間の長さで変わることができる。１つの態様として、ｍは１であり、そしてｍはエステラーゼもしくはアミノペプチダーゼによりプロドラッグから加水分解されることができる。
【００９０】
別の態様として、ＣＤ２６切断可能オリゴペプチド［Ｘ−Ｙ］nは、少なくとも１つのＸが疎水性もしくは芳香族アミノ酸である、あるいはまた少なくとも１つのＸが中性もしくは酸性アミノ酸である、あるいはまた少なくとも１つのＸが塩基性アミノ酸であるペプチドである。より長いペプチド（ｎが３、４、５である）の疎水性および／もしくはタンパク質分解速度を調節するために、１つより多くのＸは所望の効果を得るための側鎖の特定のタイプを有する。
【００９１】
また、Ｙの選択もプロドラッグのタンパク質分解速度、疎水性、溶解性、生物学的利用能および効能に影響を及ぼし得る。
【００９２】
さらに別の態様として、一般構造［Ｘ−Ｙ］nを有するペプチドは、ＸＦ−Ｙ−ＸＦ−Ｙ、ＸＦ−Ｙ−ＸＳ−Ｙ、ＸＳ−Ｙ−ＸＦ−Ｙ、ＸＳ−Ｙ−ＸＳ−Ｙ、ＸＢ−Ｙ−Ｘ−Ｙ、Ｘ−Ｙ−ＸＢ−ＹおよびＸＢ−Ｙ−ＸＢ−Ｙの群から選択される構造を有するテトラペプチドもしくはヘキサペプチド、またはＸＦ−Ｙ−ＸＦ−Ｙ−ＸＦ−Ｙ、ＸＳ−Ｙ−ＸＦ−Ｙ−ＸＦ−Ｙ、ＸＦ−Ｙ−ＸＳ−Ｙ−ＸＦ−Ｙ、ＸＦ−Ｙ−ＸＦ−Ｙ−ＸＳ−Ｙ、ＸＦ−Ｙ−ＸＳ−Ｙ−ＸＳ−Ｙ、ＸＳ−Ｙ−ＸＦ−Ｙ−ＸＳ−Ｙ、ＸＳ−Ｙ−ＸＳ−Ｙ−ＸＦ−ＹおよびＸＳ−Ｙ−ＸＳ−Ｙ−ＸＳ−Ｙ、ＸＢ−Ｙ−Ｘ−Ｙ−Ｘ−Ｙ、ＸＢ−Ｙ−ＸＢ−Ｙ−Ｘ−Ｙ、Ｘ−Ｙ−ＸＢ−Ｙ−ＸＢ−Ｙ、ＸＢ−Ｙ−Ｘ−Ｙ−ＸＢ−ＹおよびＸＢ−Ｙ−ＸＢ−Ｙ−ＸＢの群から選択される構造を有するヘキサペプチドである。ここで、Ｆは迅速を表し、そしてＸＦはＣＤ２６によるジペプチドの迅速放出をもたらすアミノ酸である（例えば、アスパラギン酸およびグルタミン酸のような酸性および中性アミノ酸）。ここで、Ｓは遅いを表し、そしてＸＳはＣＤ２６によるジペプチドの徐放をもたらすアミノ酸である（例えば、荷電および中性アミノ酸）。ここで、Ｂは塩基性を表し、そしてＸＢは荷電および親水性ジペプチドの中程度の放出をもたらす塩基性アミノ酸（Ｌｙｓ、ＡｒｇおよびＨｉｓ）である。そのような組み合わせは、特定の疎水性と一緒に明確な分解速度をプロドラッグに与えるペプチドの注文通りの組み合わせを可能にする。例えば、Ｔｙｒ／Ｐｈｅ−Ｐｒｏジペプチドを有する疎水性プロドラッグの分解は、追加のアミノ末端のＧｌｙ−Ｐｒｏジペプチドの存在により遅らせることができ、Ｇｌｙ−Ｐｒｏ−Ｔｙｒ／Ｐｈｅ−Ｐｒｏ［配列番号：３］テトラペプチドプロドラッグをもたらす。疎水性は、追加のＴｙｒ／Ｐｈｅ−Ｐｒｏジペプチドを付加することによりさらに増すことができ、ヘキサペプチドプロドラッグＧｌｙ−Ｐｒｏ−Ｔｙｒ／Ｐｈｅ−Ｐｒｏ−Ｔｙｒ／Ｐｈｅ−Ｐｒｏ［配列番号：４］をもたらす。徐放を有する荷電ペプチドプロドラッグが所望される場合、Ａｓｐ−Ｐｒｏ−Ｌｙｓ−Ｐｒｏ［配列番号：５］はＧｌｙ−Ｐｒｏより好ましい可能性がある。他の組み合わせは当業者により開発されることができ、ここで、テトラペプチドもしくはヘキサペプチドは、ＣＤ２６によるペプチドプロドラッグの溶解性および分解速度の調節を可能にする。他の目的のために、プロリンをアラニンで置換することができる。未消化の、部分的に消化されたおよび完全に消化されたプロドラッグの物理化学的性質および分解速度は、逆相クロマトグラフィー上でのその保持時間の決定により評価することができる。
【００９３】
本発明は、式（Ｉ）のペプチジルプロドラッグ誘導体がＣＤ２６のエキソジペプチジル−ペプチダーゼ活性により式（Ｉａ）
【００９４】
【化４】
2007526872.tif 000006
【００９５】
［式中、Ｒ1、Ｒ2、Ｒ3、Ｒ4およびＺは、式（Ｉ）の化合物において定義するとおりである］
の親治療化合物に効率よく転化されることを示す。
【００９６】
式（Ｉａ）のこれらの治療化合物は、ＨＩＶプロテアーゼ阻害活性を有することが既知であり、そして全て引用することにより本明細書に組み込まれるＥＰ６５６８８７、ＥＰ７１５６１８、ＥＰ８１０２０９、ＵＳ５７４４４８１、ＵＳ５７８６４８３、ＵＳ５８３０８９７、ＵＳ５８４３９４６、ＵＳ５９６８９４２、ＵＳ６０４６１９０、ＵＳ６０６０４７６、ＵＳ６２４８７７５、ＷＯ９９／６７４１７に記述されている。
【００９７】
式（Ｉａ）の治療化合物はＨＩＶの複製のインヒビターであるという事実によって、式（Ｉ）のプロドラッグ化合物は、ＨＩＶに感染した温血動物、特にヒトの処置において有用である。本発明の化合物で予防するかもしくは処置することができるＨＩＶと関連する症状には、エイズ、エイズ関連複合体（ＡＲＣ）、進行性全身性リンパ節腫（ＰＧＬ）、ならびに例えばＨＩＶにより媒介される痴呆症および多発性硬化症のような、レトロウイルスにより引き起こされる慢性ＣＮＳ疾患が包含される。
【００９８】
従って、本発明のプロドラッグ化合物は、上記の症状に対する薬剤としてもしくはそれらを処置する方法において用いることができる。薬剤もしくは処置の方法としての該使用は、ＨＩＶに感染した温血動物、特にＨＩＶに感染したヒトへの式（Ｉ）の化合物の有効治療量の全身投与を含んでなる。従って、本発明のプロドラッグ化合物は、ＨＩＶ感染と関連する症状を処置するために有用な薬剤の製造において用いることができる。
【００９９】
本発明の化合物の立体化学的異性体という用語は、上記に用いる場合、本発明の化合物が有することのできる、同じ結合順序により結合されている同じ原子で構成されているが互いに交換できない異なる３次元構造を有する全ての可能な化合物を定義する。他に記載されないかもしくは示されない限り、化合物の化学表示には該化合物が有することのできる全ての可能な立体化学的異性体の混合物が包含される。該混合物は、該化合物の基本分子構造の全てのジアステレオマーおよび／もしくは鏡像異性体を含有することができる。純粋形態のもしくは相互に混合した両方の本発明の化合物の全ての立体化学的異性体は、本発明の範囲内に包含されるものとする。
【０１００】
本明細書に記載するような化合物および中間体の純粋な立体異性体は、該化合物もしくは中間体の同じ基本分子構造の他の鏡像異性体もしくはジアステレオマー形態を実質的に含まない異性体と定義される。特に、「立体異性的に純粋な」という用語は、少なくとも８０％の立体異性体過剰率（すなわち、最低８０％の一方の異性体および最高２０％のもう一方の可能な異性体）〜１００％の立体異性体過剰率（すなわち、１００％の一方の異性体およびもう一方は全くない）を有する化合物もしくは異性体、さらに特に、９０％〜１００％の立体異性体過剰率を有する、なおさらに特に９４％〜１００％の立体異性体過剰率を有する、そして最も特に９７％〜１００％の立体異性体過剰率を有する化合物もしくは中間体に関する。「鏡像異性的に純粋な」および「ジアステレオマー的に純粋な」という用語は、同様にしかしその一方で問題になっている混合物のそれぞれ鏡像異性体過剰率およびジアステレオマー過剰率を考慮して理解されるべきである。
【０１０１】
本発明の化合物および中間体の純粋な立体異性体は、当該技術分野で既知の方法の適用により得ることができる。例えば、鏡像異性体は、光学活性酸でのそれらのジアステレオマー塩の選択的結晶化により相互から分離することができる。あるいはまた、鏡像異性体は、キラル固定相を用いてクロマトグラフィー技術により分離することができる。該純粋な立体化学的異性体はまた、適切な出発物質の対応する純粋な立体化学的異性体から得ることもでき、ただし、該反応は立体特異的に起こる。好ましくは、特定の立体異性体が所望される場合、該化合物は立体特異的な製造方法により合成される。これらの方法は、鏡像異性的に純粋な出発物質を都合よく用いる。
【０１０２】
本発明の化合物のジアステレオマーラセミ体は、常法により別個に得ることができる。都合よく用いることができる適切な物理的分離方法は、例えば、選択的結晶化およびクロマトグラフィー、例えばカラムクロマトグラフィーである。
【０１０３】
化合物は１個もしくはそれ以上の不斉中心を含有する可能性があり、従って、異なる立体異性体として存在し得る。化合物に存在する可能性がある各不斉中心の絶対立体配置は、立体化学記述子ＲおよびＳにより示すことができ、このＲおよびＳ表記法は、Ｐｕｒｅ  Ａｐｐｌ．Ｃｈｅｍ．１９７６，４５，１１−１３に記述されている規則に対応する。
【０１０４】
１つの態様として、Ｒ2置換基を有する炭素原子は「Ｓ」立体配置を有し、そしてヒドロキシ置換基を有する隣接する炭素原子は「Ｒ」立体配置を有する。
【０１０５】
本発明はまた、本発明の化合物上に存在する原子の全ての同位体も包含するものとする。同位体には、同じ原子番号を有するが異なる質量数を有する原子が包含される。一般的な例としてそして限定されることなしに、水素の同位体にはトリチウムおよび重水素が包含される。炭素の同位体には、Ｃ−１３およびＣ−１４が包含される。
【０１０６】
本発明はさらに、式（Ｉ）のプロドラッグを製造する方法を提供し、ここで、該プロドラッグはＣＤ２６のようなジペプチジル−ペプチダーゼにより切断可能である。式（Ｉ）のプロドラッグを製造するこの方法は、式（Ｉａ）の治療的に有効な薬剤とペプチドを連結する段階を含んでなる。より好ましい態様として、治療的に有効な薬剤もしくはペプチドは、式（Ｉａ）の治療化合物とペプチドをアミド結合によって後の段階で連結することができるように第一段階において誘導体化される。アミド結合を形成するようにカルボキシルとアミノ基を連結する多数の許容しうる方法は、当業者に既知である。
【０１０７】
一般に、式（Ｉａ）の治療化合物は、ＥＰ６５６８８７、ＥＰ７１５６１８、ＥＰ８１０２０９、ＵＳ５７４４４８１、ＵＳ５７８６４８３、ＵＳ５８３０８９７、ＵＳ５８４３９４６、ＵＳ５９６８９４２、ＵＳ６０４６１９０、ＵＳ６０６０４７６、ＵＳ６２４８７７５、ＷＯ９９／６７４１７に記述されているように製造することができる。
【０１０８】
一般的なペプチド化学は当業者にとって容易であり、そしてペプチドを形成するために天然アミノ酸の連結を含む。いくつかの化学戦略が利用可能であり、これらのうち、フルオレニルメチルオキシカルボニル（Ｆｍｏｃ）およびｔｅｒｔ−ブチルオキシカルボニル（Ｂｏｃ）化学は最も広く使用されているものである。Ｆｉｅｌｄｓ  Ｇ．Ｂ．は、アミノ酸を相互にもしくは治療化合物Ｄに連結するために適用することができるペプチド化学の詳細な記述を与える［Ｆｉｅｌｄｓｉｎ  Ｍｅｔｈｏｄｓ  ｉｎ  Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｂｉｏｌｏｇｙ，Ｖｏｌ．３５：Ｐｅｐｔｉｄｅ  Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ  Ｐｒｏｔｏｃｏｌｓ  Ｈｕｍａｎａ  Ｐｒｅｓｓ  Ｉｎｃ．：Ｔｏｔａｗａ，（１９９４），ｐｐ．１７−２７］。固相ならびに液相化学を適用することができる［Ａｔｈｅｒｔｏｎ  ＆  Ｓｈｅｐｐａｒｄ  Ｓｏｌｉｄ  Ｐｈａｓｅ  Ｐｅｐｔｉｄｅ  Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ  ＩＲＬ  Ｐｒｅｓｓ：Ｏｘｆｏｒｄ−Ｎｅｗ  Ｙｏｒｋ−Ｔｏｋｙｏ，（１９８９）］。プロドラッグ製造方法中に反応することができない治療化合物の官能基を保護基の連結によってブロックする保護戦略が用いられなければならない。
【０１０９】
さらに特に、式（Ｉ）のプロドラッグ化合物は、当該技術分野で既知のペプチド化学を用いて式（Ｉａ）の治療化合物から出発して製造することができる。
【０１１０】
【化５】
2007526872.tif 000007
【０１１１】
例えば、アミノ酸をスキーム１に示すようにペプチド結合を形成するように治療化合物に連結することができる。この連結反応は、ＤＣＣ（ジシクロヘキシルカルボジイミド）もしくはＥＤＣＩ（１−（３−ジメチルアミノプロピル）−３−エチルカルボジイミド塩酸塩）およびＨＯＡｔ（１−ヒドロキシ−７−アザベンゾトリアゾール）のようなカップリング剤もしくはその機能的同等物の存在下で、式ＰＧ−Ｙ−ＯＨ（式中、ＰＧ（保護基）は、例えば、Ｂｏｃ（ｔｅｒｔ−ブチルオキシカルボニル）、Ｃｂｚ（ベンジルオキシカルボニル）もしくはＦｍｏｃであることができる）のアミノ保護アミノ酸で、Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド、アセトニトリル、ジクロロメタン、テトラヒドロフランのような適切な反応不活性溶媒もしくは試薬を可溶化する任意の他の溶媒において行うことができる。このようにして形成されるペプチドを次に例えばジクロロメタンにおけるトリフルオロ酢酸での脱保護のような通常の脱保護技術を用いて脱保護することができる。
【０１１２】
この連結およびその後の脱保護反応段階は、所望のペプチド結合を形成するために試薬としてＰＧ−Ｘ−ＯＨを用いて繰り返すことができる。
【０１１３】
例えばリシンおよびアスパラギン酸のような、アミノ酸のいくつかは、第二の保護基を必要とする可能性があり、そして式ＰＧ−（ＸＰＧ）−ＯＨもしくはＰＧ−（ＹＰＧ）−ＯＨにおいて表すことができる。
【０１１４】
あるいはまた、式ＰＧ−Ｘ−Ｙ−ＯＨもしくはＰＧ−（Ｘ）n−ＯＨもしくはＰＧ−（Ｘ−Ｙ）n−ＯＨの試薬を上記の反応方法において用いることができる。
【０１１５】
上記に提示する製造において、反応生成物を反応媒質から単離することができ、そして必要に応じて、例えば、抽出、結晶化、蒸留、研和およびクロマトグラフィーのような当該技術分野において一般に既知である方法論に従ってさらに精製することができる。
【０１１６】
上記の方法において製造されるような式（Ｉ）の化合物は、立体異性体の混合物として、特に鏡像異性体のラセミ混合物の形態で合成される可能性があり、それらを当該技術分野で既知の分割方法に従って相互から分離することができる。式（Ｉ）のラセミ化合物は、適当なキラル酸との反応により対応するジアステレオマー塩形態に転化することができる。次に、該ジアステレオマー塩形態を例えば選択的もしくは分別結晶化により分離し、そして鏡像異性体をアルカリによりそれから遊離させる。式（Ｉ）の化合物の鏡像異性体を分離する代わりの方法は、キラル固定相を用いる液体クロマトグラフィーを含む。該純粋な立体化学的異性体はまた、適切な出発物質の対応する純粋な立体化学的異性体から得ることもでき、ただし、該反応は立体特異的に起こる。好ましくは、特定の立体異性体が所望される場合、該化合物は立体特異的な製造方法により合成される。これらの方法は、鏡像異性的に純粋な出発物質を都合よく用いる。
【０１１７】
化合物の溶解性を予測する方法は存在する。例えば、Ｊ  Ｃｈｅｍ  Ｉｎｆ  ＣｏｍｐｕｔＳｃｉ  １９９８  Ｍａｙ−Ｊｕｎ；３８（３）：４５０−６に分子トポロジーおよび神経ネットワークモデリングに基づく薬剤の水溶解性予測が記述されている。
【０１１８】
実際に、溶解性および生物学的利用能に関連する全てのパラメーター（ｐＫａ、分配係数など）を決定することができる。「Ｄｒｕｇ  Ｂｉｏａｖａｉｌａｂｉｌｉｔｙ：Ｅｓｔｉｍａｔｉｏｎ  ｏｆ  Ｓｏｌｕｂｉｌｉｔｙ，Ｐｅｒｍｅａｂｉｌｉｔｙ，Ａｂｓｏｒｐｔｉｏｎ  ａｎｄ  Ｂｉｏａｖａｉｌａｂｉｌｉｔｙ」は、これらのパラメーターおよびそれらの決定もしくは予測の包括的総括を与える（ＩＳＢＮ  ３５２７３０４３８Ｘ）。
【０１１９】
分配係数は、脂肪親和性の尺度である。「ｌｏｇＰ」値として数字で表され、それらは水／オクタノールもしくは水／リポソームのような２つの不混和相における物質の濃度間の比であり、そしてそれらを容易に計算することができる。高いｌｏｇＰ値を有する物質は、水におけるより脂肪および油においてよく溶解する。これは、受動拡散により体内で脂質（脂肪に基づく）膜に入るそれらの能力を高め、それによりそれらの吸収の可能性を高める。
【０１２０】
多くの薬剤は１〜４の間のｌｏｇＰ値を有し、それらを経口送達方法に適当にする。高いｌｏｇＰを有する薬剤は、通常、水に難溶性である。それらは脂溶性であり得るが、それらはＧＩ管において溶解することができず、従って、腸壁中に拡散することができない。たとえそれらが膜に入るとしても、それらは捕捉されるようになる可能性があり、結果として起こる有毒作用を有する。
【０１２１】
分配係数はまた、計算することもできる。Ｍｏｌｉｎｓｐｉｒａｔｉｏｎで開発されたｌｏｇＰ予測の方法（ｍｉＬｏｇＰ１．２）は、グループ寄与に基づく。グループ寄与は、数千の薬剤様分子のトレーニングセットの実験的ｌｏｇＰと計算されたｌｏｇＰを適合させることにより得られている。該方法は、ｗｗｗ．ｍｏｌｉｎｓｐｉｒａｔｉｏｎ．ｃｏｍ／ｓｅｒｖｉｃｅｓ／ｌｏｇｐ．ｈｔｍｌ（ＱＳＡＲ  １５，４０３（１９９６））で使用することにより用いることができる。多数の他のＬｏｇＰ決定プログラムが利用可能である。
【０１２２】
本発明のある種の態様として、式（Ｉ）のプロドラッグを薬剤として用いることができる。別の態様として、式（Ｉ）のプロドラッグは、ＨＩＶ感染を予防するかもしくは処置する薬剤を製造するために用いることができる。
【０１２３】
本発明はさらに、本発明による式（Ｉ）のプロドラッグを投与することによりＨＩＶ感染を予防するかもしくは処置する方法を提供する。式（Ｉ）のプロドラッグは、ＨＩＶ感染を予防するかもしくは処置するために有効な量で、ヒト、非ヒト動物および哺乳動物を包含する任意のホストに投与することができる。
【０１２４】
式（Ｉ）のプロドラッグの薬物動態プロファイルをさらに最適化するために、それらを疾患の部位でプロドラッグもしくは治療化合物Ｄの必要な濃度を維持するために有用な適当な送達媒体（例えば、マイクロカプセル、微小球、生体分解性ポリマーフィルム、リポソームおよび脂質フォーム（ｌｉｐｉｄ  ｆｏａｍ）のような脂質に基づく送達系、粘性のあるｉｎｓｔｉｌｌａｔｅｓならびに吸収性の機械的バリア）と併せて投与することができる。
【０１２５】
プロドラッグもしくは「薬剤」は、熟練者の知識の範囲内の任意の適当な方法により投与することができる。治療薬の当該技術分野において既知である投与の形態には、非経口、例えば、静脈内（例えば抗体インヒビターの）、腹腔内、筋肉内、皮内、ならびに皮下および皮内を包含する上皮、経口、もしくは粘膜面への使用、例えば、エアロゾル懸濁液の吸入を用いる鼻腔内投与による、そして被験体における筋肉もしくは他の組織に埋め込むことによるが包含される。座薬および局所用の、局所的に使用する製剤もまた意図される。投与の経路および場所により、プロドラッグのより疎水性もしくは親水性のペプチド部分を考慮することができる。
【０１２６】
本発明において、式（Ｉ）のプロドラッグは、ＨＩＶ感染を予防するか、減少するかもしくは処置するために十分な量で導入される。
【０１２７】
本発明の方法におけるプロドラッグもしくは「薬剤」の投与の最も有効な形態および用量処方計画は、ＨＩＶ感染の重症度、被験体の健康、以前の病歴、年齢、体重、身長、性別および処置への応答ならびに処置する医師の判断により決まる。従って、投与するプロドラッグの量、ならびにその後の投与の回数およびタイミングは、個々の被験体の応答に基づいて治療を行う医療専門家により決定される。最初に、そのようなパラメーターは、安全性および効能に関して動物モデルにおいて、そしてプロドラッグ製剤の臨床試験中にヒト被験体において適切な試験を用いて熟練した医師により容易に決定される。投与後に、プロドラッグを用いる治療の効能は、臨床像の評価を包含する様々な方法により評価される。
【０１２８】
従って、本発明の化合物は、それ自体が医薬品として、相互との混合物においてもしくは製薬学的製剤の形態で動物において、好ましくは哺乳動物において、そして特にヒトにおいて用いることができる。
【０１２９】
さらに、本発明は、通常の製薬学的に無害の賦形剤および助剤に加えて式（Ｉ）のプロドラッグの少なくとも１つの有効用量を含有する製薬学的製剤に関する。製薬学的製剤は、通常、０．１〜９０重量％のプロドラッグを含有する。製薬学的製剤は、当業者にそれ自体既知である方法で製造することができる。この目的のために、１つもしくはそれ以上の固形もしくは液状の製薬学的賦形剤および／もしくは助剤と一緒に、そして所望に応じて、別の製薬学的活性化合物と組み合わせて、本発明のプロドラッグの少なくとも１つを適当な投与形態もしくは投与形態物にし、それを次にヒト医薬もしくは獣医薬における薬剤として用いることができる。
【０１３０】
該製薬学的組成物およびそれらの製剤に使用する適当な製薬学的担体は当業者に周知であり、そして本発明内のそれらの選択に特定の制限はない。当業者に既知である適当な担体もしくは賦形剤は、食塩水、リンガー溶液、デキストロース溶液、ハンクス溶液、不揮発性油、オレイン酸エチル、食塩水中５％のデキストロース、等張性（糖もしくは塩化ナトリウムのような）および化学安定性を高める物質、バッファーならびに防腐剤である。他の適当な担体には、タンパク質、多糖、ポリ乳酸、ポリグリコール酸、ポリマーアミノ酸およびアミノ酸コポリマーのような組成物を与える個体に有害な抗体の生産をそれ自体が誘導しない任意の担体が包含される。それらにはまた、湿潤剤、分散剤、接着剤（ｓｔｉｃｋｅｒｓ）、粘着剤、乳化剤、溶媒、コーティング、抗菌剤および抗真菌剤（例えば、フェノール、ソルビン酸、クロロブタノール）などのような添加剤を、それらが製薬学的実践と一致するという条件で、すなわち、哺乳動物に永久的な損傷を与えない担体および添加剤を包含することもできる。本発明の製薬学的組成物は、任意の既知の方法で、例えば、選択した担体材料と１段階もしくは多段階の方法で有効成分を均質に混合すること、コーティングすることおよび／もしくは研和することにより製造することができ、そして必要に応じて、界面活性剤のような他の添加剤もまた、例えば、通常は約１〜１０μｍの直径を有する微小球の形態でそれらを得ることを考慮して、すなわち、有効成分の制御もしくは持続放出用のマイクロカプセルの製造のために、微粉末化（ｉｎｉｃｒｏｎｉｓａｔｉｏｎ）により製造することができる。
【０１３１】
本発明の製薬学的組成物に使用するために適当な界面活性剤は、優れた乳化、分散および／もしくは湿潤特性を有する非イオン性、カチオン性および／もしくはアニオン性物質である。適当なアニオン性界面活性剤には、水溶性石鹸および水溶性合成界面活性剤の両方が包含される。適当な石鹸は、高級脂肪酸（ＣＩＯ−Ｃ２２）の（例えばオレイン酸もしくはステアリン酸のナトリウムもしくはカリウム塩）、またはココナッツ油もしくは獣脂油から得ることができる天然脂肪酸混合物のアルカリもしくはアルカリ土類金属塩、非置換のもしくは置換されたアンモニウム塩である。合成界面活性剤には、ポリアクリル酸のナトリウムもしくはカルシウム塩；脂肪スルホネートおよびサルフェート：スルホン化ベンズイミダゾール誘導体ならびにアルキルアリールスルホネートが包含される。脂肪スルホネートもしくはサルフェートは、通常、８〜２２個の炭素原子を有するアルカリもしくはアルカリ土類金属塩、非置換のアンモニウム塩またはアルキルもしくはアシル基で置換されたアンモニウム塩、例えば、リグノスルホン酸もしくはドデシルスルホン酸または天然脂肪酸から得られる脂肪アルコールサルフェートの混合物のナトリウムもしくはカルシウム塩、硫酸もしくはスルホン酸エステルのアルカリもしくはアルカリ土類金属塩（ラウリル硫酸ナトリウムのような）および脂肪アルコール／エチレンオキシド付加物のスルホン酸の形態である。適当なスルホン化ベンズイミダゾール誘導体は、好ましくは８〜２２個の炭素原子を含有する。アルキルアリールスルホネートの例は、ドデシルベンゼンスルホン酸もしくはジブチル−ナフタレンスルホン酸のナトリウム、カルシウムもしくはアルカノールアミン塩またはナフタレン−スルホン酸／ホルムアルデヒド縮合生成物である。また、適当であるのは対応するホスフェート、例えば、リン酸エステルの塩ならびにエチレンおよび／もしくはプロピレンオキシドとｐ−ノニルフェノールとの付加物、またはリン脂質である。この目的に適当なリン脂質は、例えばホスファチジルエタノールアミン、ホスファチジルセリン、ホスファチジルグリセリン、リゾレシチン、カルジオリピン、ジオクタニルホスファチジルコリン、ジパルミトイルホスファチジルコリンおよびそれらの混合物のような、セファリンもしくはレシチンタイプの天然（動物もしくは植物細胞に由来する）もしくは合成リン脂質である。
【０１３２】
適当な非イオン性界面活性剤には、分子に少なくとも１２個の炭素原子を含有するアルキルフェノール、脂肪アルコール、脂肪酸、脂肪族アミンもしくはアミドのポリエトキシル化およびポリプロポキシル化誘導体、脂肪族および脂環式アルコール、飽和および不飽和脂肪酸ならびにアルキルフェノールのポリグリコールエーテル誘導体のようなアルキルアレーンスルホネートおよびジアルキルスルホスクシネートが包含され、該誘導体は、好ましくは、３〜１０個のグリコールエーテル基および（脂肪族）炭化水素部分に８〜２０個の炭素原子およびアルキルフェノールのアルキル部分に６〜１８個の炭素原子を含有する。さらに適当な非イオン性界面活性剤は、アルキル鎖に１〜１０個の炭素原子を含有するポリプロピレングリコール、エチレンジアミノポリプロピレングリコールとポリエチレンオキシドとの水溶性付加物であり、これらの付加物は、２０〜２５０個のエチレングリコールエーテル基および／もしくは１０〜１００個のプロピレングリコールエーテル基を含有する。そのような化合物は、通常、プロピレングリコール単位当たり１〜５個のエチレングリコール単位を含有する。非イオン性界面活性剤の代表的な例は、ノニルフェノール−ポリエトキシエタノール、ヒマシ油ポリグリコールエーテル、ポリプロピレン／ポリエチレンオキシド付加物、トリブチルフェノキシポリエトキシエタノール、ポリエチレングリコールおよびオクチルフェノキシポリエトキシエタノールである。ポリエチレンソルビタン（ポリオキシエチレンソルビタントリオレエートのような）、グリセロール、ソルビタン、ショ糖およびペンタエリトリトールの脂肪酸エステルもまた、適当な非イオン性界面活性剤である。
【０１３３】
適当なカチオン性界面活性剤には、場合によりハロ、フェニル、置換されたフェニルもしくはヒドロキシで置換されていてもよい４個の炭化水素基を有する第四級アンモニウム塩、好ましくはハロゲン化物；例えばＮ−置換基として少なくとも１つのＣ８Ｃ２２アルキル基（例えば、セチル、ラウリル、パルミチル、ミリスチル、オレイルなど）そしてさらなる置換基として非置換のもしくはハロゲン化低級アルキル、ベンンジルおよび／もしくはヒドロキシ−低級アルキル基を含有する第四級アンモニウム塩が包含される。
【０１３４】
この目的に適当な界面活性剤のさらに詳細な記述は、例えば、「ＭｃＣｕｔｃｈｅｏｎ’ｓ  Ｄｅｔｅｒｇｅｎｔｓ  ａｎｄ  Ｅｍｕｌｓｉｆｉｅｒｓ  Ａｎｎｕａｌ」（ＭＣ  Ｐｕｂｌｉｓｈｉｎｇ  Ｃｒｏｐ．，Ｒｉｄｇｅｗｏｏｄ，Ｎｅｗ  Ｊｅｒｓｅｙ，１９８１）」、「Ｔｅｎｓｉｄ−Ｔａｓｃｈｅｎｂｕｃｈ」，２ｄ  ｅｄ．（Ｈａｎｓｅｒ  Ｖｅｒｌａｇ，Ｖｉｅｎｎａ，１９８１）および「Ｅｎｃｙｃｌｏｐａｅｄｉａ  ｏｆ  Ｓｕｒｆａｃｔａｎｔｓ」，（Ｃｈｅｍｉｃａｌ  Ｐｕｂｌｉｓｈｉｎｇ  Ｃｏ．，Ｎｅｗ  Ｙｏｒｋ，１９８１）に見出すことができる。
【０１３５】
組成物における有効成分の作用の持続期間を制御するために追加の成分を含むことができる。従って、制御放出組成物は、例えばポリエステル、ポリアミノ酸、ポリビニルピロリドン、エチレン−酢酸ビニルコポリマー、メチルセルロース、カルボキシメチルセルロース、硫酸プロタミンなどのような適切なポリマー担体を選択することにより得ることができる。薬剤放出の速度および作用の持続期間はまた、有効成分をヒドロゲル、ポリ乳酸、ヒドロキシメチルセルロース、ポリニエチルメタクリレートおよび他の上記のポリマーのようなポリマー物質の粒子、例えばマイクロカプセルに導入することにより制御することもできる。
【０１３６】
そのような方法には、リポソーム、微小球、マイクロエマルジョン、ナノ粒子、ナノカプセルなどのようなコロイド薬剤送達系が包含される。投与の経路により、製薬学的組成物は保護コーティングを必要とし得る。注入可能な用途に適当な製薬学的形態には、滅菌した水溶液または非水性の溶液もしくは分散液（懸濁液、エマルジョン）およびその即時調製用の滅菌した粉末が包含される。従って、この目的のために典型的な担体には、生体適合性の水性バッファー、エタノール、グリセロール、プロピレングリコール、ポリエチレングリコール、オリーブ油のような植物油、およびオレイン酸エチルのような注入可能な有機エステルなどならびにその混合物が包含される。非経口用賦形剤には、塩化ナトリウム溶液、リンガーデキストロース、デキストロースおよび塩化ナトリウム、乳酸加リンガー液もしくは不揮発性油が包含される。静脈内用賦形剤には、流体および栄養補充薬、電解質補充薬（リンガーデキストロースに基づくもののような）などが包含される。例えば、抗微生物剤、抗酸化剤、キレート剤および不活性ガスなどのような防腐剤および他の添加剤もまた存在することができる。
【０１３７】
本発明は、請求項に記述する本発明の範囲を限定しない、以下の実施例においてさらに記述される。
［実施例］
【０１３８】
式（Ｉ）の化合物の製造の実験部分
式（Ｉ）のプロドラッグ化合物の製造を記述する実施例は、以下にＰＩ１と称する式
【０１３９】
【化６】
2007526872.tif 000008
【０１４０】
を有するＨＩＶプロテアーゼインヒビターに基づく。
【実施例１】
【０１４１】
Ｖａｌ−Ｐｒｏ−ＰＩ１
段階１
【０１４２】
【化７】
2007526872.tif 000009
【０１４３】
化合物１．１（０．９５ｇ；１．６９ｍｍｏｌ）およびＢｏｃ−Ｖａｌ−Ｐｒｏ−ＯＨ（０．５３ｇ；１．７ｍｍｏｌ）を１０ｍｌのＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミドに溶解した。ＥＤＣＩ（０．３６ｇ；１．９ｍｍｏｌ）およびＨＯＡｔ（０．０２３ｇ；０．１７ｍｍｏｌ）を加え、そして室温で２０時間攪拌した。反応混合物をＨ2Ｏに注ぎ、そして酢酸エチルで２回抽出した。合わせた有機層をブラインで洗浄し、そして次にＮａ2ＳＯ4上で乾燥させた。溶媒を除き、そして得られる粗生成物をカラムクロマトグラフィー（溶離剤：酢酸エチル）により精製した。化合物１．２は、白色の固体として得られた（収率５５％、純度９５％  ＬＣ−ＭＳ）。
段階２
【０１４４】
【化８】
2007526872.tif 000010
【０１４５】
１０ｍｌのＣＨ2Ｃｌ2中の化合物１．２（０．７７ｇ；０．９ｍｍｏｌ）の溶液に１０ｍｌのトリフルオロ酢酸を加えた。反応混合物を室温で３時間攪拌した後に、溶媒を除いた。粗混合物をカラムクロマトグラフィーにより精製し、０．４２ｇの化合物１．３を生成せしめた（収率６１％、純度９５％  ＬＣ−ＭＳ）。
【実施例２】
【０１４６】
Ａｓｐ−Ｐｒｏ−ＰＩ１
段階１
【０１４７】
【化９】
2007526872.tif 000011
【０１４８】
化合物２．１（３．１６ｇ；５．６３ｍｍｏｌ）およびＢｏｃ−Ｐｒｏ−ＯＨ（１．３３ｇ；６．１８ｍｍｏｌ）を３０ｍｌのＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミドに溶解した。ＥＤＣＩ（１．１８ｇ；６．１８ｍｍｏｌ）およびＨＯＡｔ（０．０７７ｇ；０．５ｍｍｏｌ）を加え、そして３６時間攪拌した。酢酸エチルおよび０．１Ｎ  ＨＣｌを加え、そして得られる反応混合物を酢酸エチルで３回抽出した。合わせた有機層を０．１Ｎ  ＨＣｌ、Ｈ2Ｏ、飽和ＮａＨＣＯ3、水およびブラインで洗浄した。Ｎａ2ＳＯ4上で乾燥させ、そして溶媒の蒸発後に、白色の泡状物（４．３９ｇ、１０３％）が得られた。ジイソプロピルエーテルにおける研和後に、３．９ｇの化合物２．２が得られた（収率９３％、純度９７％  ＬＣ−ＭＳ）。
段階２
【０１４９】
【化１０】
2007526872.tif 000012
【０１５０】
４０ｍｌのＣＨ2Ｃｌ2中の化合物２．３（３．７ｇ；４．８ｍｍｏｌ）および１５ｍｌのトリフルオロ酢酸の混合物を室温で２時間攪拌した。溶媒の蒸発後に、粗混合物を酢酸エチルと飽和ＮａＨＣＯ3との間で分配した。有機層を分離し、ブラインで洗浄し、そしてＮａ2ＳＯ4上で乾燥させた。ジイソプロピルエーテルにおける粗固体の再スラリーおよび濾過により２．７３ｇの化合物２．３を生成せしめた（収率８５％、純度＞９０％  ＮＭＲ）。
段階３
【０１５１】
【化１１】
2007526872.tif 000013
【０１５２】
３０ｍｌのＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド中の化合物２．３（１．０ｇ；１．５ｍｍｏｌ）およびＢｏｃ−Ａｓｐ（ＯｔＢｕ）−ＯＨ（０．４８ｇ；１．７ｍｍｏｌ）の溶液にＥＤＣＩ（０．３２ｇ；１．７ｍｍｏｌ）およびＨＯＡｔ（０．０２ｇ；０．１５ｍｍｏｌ）を加えた。室温で一晩攪拌した後に、反応混合物を酢酸エチルと０．１Ｎ  ＨＣｌとの間で分配した。Ｈ2Ｏ層を３回抽出し、そして合わせた有機層を０．１Ｎ  ＨＣｌ、Ｈ2Ｏ、飽和ＮａＨＣＯ3およびＨ2Ｏで洗浄した。Ｎａ2ＳＯ4上で乾燥させた後に、溶媒を除き、そして残留物をジイソプロピエーテルにおいて研和した。１．１２ｇの化合物２．４が得られた（収率７９％、純度９４％  ＬＣ−ＭＳ）。
段階４
【０１５３】
【化１２】
2007526872.tif 000014
【０１５４】
化合物２．５への化合物２．４の脱保護は、化合物２．３に化合物２．２を脱保護する方法と同様にして行った。
【実施例３】
【０１５５】
Ａｓｐ−Ｐｒｏ−Ｌｙｓ−Ｐｒｏ−ＰＩ１
【０１５６】
【化１３】
2007526872.tif 000015
【０１５７】
実施例１および２に記述するのと同様の反応方法を用いて、Ｂｏｃ−Ｌｙｓ（Ｆｍｏｃ）−ＯＨを化合物３．１（実施例２において製造するとおり）に連結して、化合物３．２を生成せしめた。Ｂｏｃ脱保護後に、化合物３．３が得られた。次に、Ｂｏｃ−Ｐｒｏ−ＯＨを化合物３．３に連結し、化合物３．４を生成せしめ、それを次にＢｏｃ脱保護し、このようにして化合物３．５を生成せしめた。化合物３．５をＢｏｃ−Ａｓｐ（ＯｔＢｕ）−ＯＨと連結し、化合物３．６を生成せしめ、それを最初にＢｏｃ脱保護し、そして次にテトラヒドロフラン中でジメチルアミンを用いてＦｍｏｃ脱保護し、このようにしてＡｓｐ−Ｐｒｏ−Ｌｙｓ−Ｐｒｏ−ＰＩ１に対応する化合物３．８を生成せしめた。
【実施例４】
【０１５８】
精製されたＣＤ２６、ヒトおよびウシ血清によるＰＩ１へのＶａｌ−Ｐｒｏ−ＰＩ１の転化
ＰＩ１のジペプチド（Ｖａｌ−Ｐｒｏ）誘導体（Ｖａｌ−Ｐｒｏ−ＰＩ１）を精製されたＣＤ２６（図１０）、およびＰＢＳ（リン酸緩衝食塩水）に希釈した１０％もしくは２％のヒトもしくはウシ血清（図１０および１１）にさらした。Ｖａｌ−Ｐｒｏ−ＰＩ１は、試験した全ての条件においてＰＩ１に効率よく転化された。６０分以内に、Ｖａｌ−Ｐｒｏ−ＰＩ１は精製されたＣＤ２６によりＰＩ１に完全に転化された。１０％のＢＳもしくはＨＳは、１時間でＶａｌ−Ｐｒｏ−ＰＩ１の４０〜７０％をＰＩ１に転化した（図１０）。２％のＢＳおよびＨＳは、Ｖａｌ−Ｐｒｏ−ＰＩ１をＰＩ１にそれぞれ８％および２５％転化した。４時間後に、３５％および９５％の化合物が、それぞれ、ＢＳおよびＨＳにより加水分解された（図１１）。
【０１５９】
５０μＭのＧＰ−ｐＮＡ（グリシルプロリル−パラ−ニトロアニリド）の存在下で、１００μＭのＶａｌ−Ｐｒｏ−ＰＩ１はＣＤ２６の基質と効率よく競合した（図１２）。２０μＭのＶａｌ−Ｐｒｏ−ＰＩ１もまた、おそらくＣＤ２６により触媒される反応の競合阻害により、ＧＰ−ｐＮＡからのｐＮＡの遊離を阻害することができた。ＰＢＳ中２％のＢＳによるｐＮＡへのＧＰ−ｐＮＡの転化は、精製されたＣＤ２６よりさらに効率よくＶａｌ−Ｐｒｏ−ＰＩ１により阻害された（図１３）。また、ＨＳ（ＰＢＳ中２％）により触媒されるｐＮＡへのＧＰ−ｐＮＡ転化は、Ｖａｌ−Ｐｒｏ−ＰＩ１により競合的に阻害された（図１４）。
【実施例５】
【０１６０】
Ｖａｌ−Ｐｒｏ−ＰＩ１およびＰＩ１化合物の分離
化合物をバッファーＡ（５０ｍＭ  ＮａＨ2Ｐｏ4＋５ｍＭヘプタンスルホン酸ｐＨ３．２）およびバッファーＢ（アセトニトリル）での勾配を用いて逆相ＲＰ−８（Ｍｅｒｃｋ）上で分離した。
【０１６１】
０→２分：２％バッファーＢ；２→８分：２０％バッファーＢ；８→１０分：２５％バッファーＢ；１０→１２分：３５％バッファーＢ；１２→３０分：５０％バッファーＢ；３０→３５分：５０％バッファーＢ；３５→４０分：２％バッファーＢ；４０→４５分：２％バッファーＢ。Ｖａｌ−Ｐｒｏ−ＰＩ１およびＰＩ１のＲｔ値は、それぞれ、１８．７および１７．７分であった。
【実施例６】
【０１６２】
製薬学的組成物
カプセル剤
式（Ｉ）の化合物をエタノール、メタノールもしくは塩化メチレンのような有機溶媒、好ましくはエタノールと塩化メチレンの混合物に溶解する。酢酸ビニルとのポリビニルピロリドンコポリマー（ＰＶＰ−ＶＡ）もしくはヒドロキシプロピルメチルセルロース（ＨＰＭＣ）のようなポリマー、典型的に５ｍＰａ．ｓをエタノール、メタノール、塩化メチレンのような有機溶媒に溶解する。好適には、ポリマーをエタノールに溶解する。ポリマーおよび化合物溶液を混合し、そして次に噴霧乾燥させる。化合物／ポリマーの比率は、１／１〜１／６から選択した。中間範囲は、１／１．５および１／３である。適当な比率は、１／６である。次に、噴霧乾燥した粉末、固体分散体を投与用のカプセルに詰める。１個のカプセルにおける薬剤装填量は、使用するカプセルサイズにより５０〜１００ｍｇの間である。
フィルムコート錠
錠剤コアの製造
１００ｇの式（Ｉ）の化合物、５７０ｇのラクトースおよび２００ｇの澱粉の混合物をよく混合し、そしてその後で約２００ｍｌの水中５ｇのドデシル硫酸ナトリウムおよび１０ｇのポリビニルピロリドンの溶液で湿らせる。湿った粉末混合物をふるいにかけ、乾燥させ、そして再びふるいにかける。次に、１００ｇの微晶質セルロースおよび１５ｇの水素化植物油を加えた。全体をよく混合し、そして錠剤に圧縮し、各々１０ｍｇの式（Ｉ）のプロドラッグを含んでなる１０．０００個の錠剤を生成せしめる。
コーティング
７５ｍｌの変性エタノール中１０ｇのメチルセルロースの溶液に１５０ｍｌのジクロロメタン中５ｇのエチルセルロースの溶液を加える。次に、７５ｍｌのジクロロメタンおよび２．５ｍｌの１，２，３−プロパントリオールを加える。１０ｇのポリエチレングリコールを融解し、そして７５ｍｌのジクロロメタンに溶解する。後者の溶液を前者に加え、そして次に２．５ｇのオクタデカン酸マグネシウム、５ｇのポリビニルピロリドンおよび３０ｍｌの濃縮色懸濁液を加え、そして全体を均質化する。このようにして得られる混合物で錠剤コアをコーティング装置においてコーティングする。
【図面の簡単な説明】
【０１６３】
【図１】５（左側の棒）、１０（真ん中の棒）もしくは１５分（右側の棒）の反応でＣＤ２６により触媒されるＧＰ＋ｐＮＡへの発色基質ＧＰ−ｐＮＡ（２５μＭ）の転化に対するジペプチドＶａｌ−Ｐｒｏの異なる濃度の阻害効果を示す。ＣＤ２６触媒反応は、４００ｎｍでｐＮＡ遊離により引き起こされる吸収の増加を記録することにより測定した。
【図２】時間の関数としてＰＩ１（ＨＩＶプロテアーゼインヒビター）へのＶａｌ−Ｐｒｏ−ＰＩ１プロドラッグの転化を示す。Ａ：ＣＤ２６；Ｂ：ウシ血清；Ｃ：ヒト血清（両方ともＰＢＳ中１０％）。
【図３】時間の関数としてＰＩ１（ＨＩＶプロテアーゼインヒビター）へのＶａｌ−Ｐｒｏ−ＰＩ１プロドラッグの転化を示す。図３ａ：ウシ血清（ＰＢＳ中２％）、図３ｂ：ヒト血清（ＰＢＳ中２％）。
【図４】ＣＤ２６により触媒されるＧＰ＋ｐＮＡ（黄色）へのＧＰ−ｐＮＡの転化へのＶａｌ−Ｐｒｏ−ＰＩ１の阻害（競合）効果を示す。
【図５】２％ヒト血清（ＰＢＳ中）におけるＣＤ２６により触媒されるＧＰ＋ｐＮＡ（黄色）へのＧＰｐＮＡの転化へのＶａｌ−Ｐｒｏ−ＰＩ１の阻害（競合）効果を示す。
【図６】２％ウシ血清（ＰＢＳ中）におけるＣＤ２６により触媒されるＧＰ＋ｐＮＡ（黄色）へのＧＰｐＮＡの転化へのＶａｌ−Ｐｒｏ−ＰＩ１の阻害（競合）効果を示す。
【図１】
2007526872.tif 000023
2007526872.tif 000024
2007526872.tif 000025
【図４】
2007526872.tif 000026
【図５】
2007526872.tif 000027
【図６】
2007526872.tif 000028
【配列表】
2007526872000001.xml
【手続補正書】
【提出日】平成17年11月22日(2005.11.22)
【手続補正１】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００４５
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００４５】
本発明は、ジペプチジル−ペプチダーゼにより切断可能であるプロドラッグを提供する。ジペプチジル−ペプチダーゼは、ペプチダーゼ（ＥＣ３．４）ならびになおさらに特にプロリルアミノペプチダーゼ（ＥＣ３．４．１１．５）およびＸ−Ｐｒｏアミノペプチダーゼ（ＥＣ３．４．１１．９）のようなアミノペプチダーゼ（ＥＣ３．４．１１）の群から、ジペプチダーゼ（ＥＣ３．４．１３）、ペプチジル−ジペプチダーゼ（ＥＣ３．４．１５）ならびにジペプチジル−ペプチダーゼＩ（ＥＣ３．４．１４．１）、ＩＩ（ＥＣ３．４．１４．２）、ＩＩＩ（ＥＣ３．４．１４．４）、ＩＶ（ＥＣ３．４．１４．５）、ジペプチジル−ジペプチダーゼ（ＥＣ３．４．１４．６）およびＸ−Ｐｒｏジペプチジル−ペプチダーゼ（ＥＣ３．４．１４．１１）のようなジペプチジル−ペプチダーゼ（ＥＣ３．４．１４、このＥＣ群にはまたトリペプチジル−ペプチダーゼも包含される）の群から選択することができる。好ましい態様として、プロドラッグは哺乳動物にもしくはより好ましくはヒトに存在するジペプチジル−ペプチダーゼにより切断可能である。より好ましい態様として、プロドラッグはジペプチジル−ペプチダーゼＩＶ（ＣＤ２６）により、精液、血漿および脳脊髄液に存在する可溶型によるのと同様に細胞表面結合型によっても切断可能である。ＣＤ２６の２つの異なるタイプの存在は、細胞膜での活性化のためのそして体液における活性化のためのプロドラッグの適用を可能にする。
【手続補正書】
【提出日】平成19年4月4日(2007.4.4)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】請求項２６
【補正方法】変更
【補正の内容】
【請求項２６】
請求項１〜２３のいずれか１つに記載のプロドラッグを有効成分として含んでなるＨＩＶ感染を予防するかもしくは治療するための製薬学的製剤。
【国際調査報告】
2007526872.tif 000031
2007526872.tif 000032
2007526872.tif 000033
2007526872.tif 000034
2007526872.tif 000035
2007526872.tif 000036