(57)【要約】本発明は、フロルフェニコール（プロドラッグ）およびフロルフェニコールアナログのリン酸エステルを開示する。本発明のフロルフェニコールおよびそのアナログのリン酸エステルは、インビボにて動物への投与の際に、フロルフェニコールおよびそのアナログに加水分解される、優れた水溶性を有する。本発明はまた、本発明の化合物を含む、薬学的組成物を提供する。さらに本発明は、この薬学的組成物を使用して、細菌感染症を処置する方法を提供する。
2007516286.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
以下の化学構造：
【化１】
2007516286.tif 000020
を有するフロルフェニコールリン酸エステルまたはその塩。
【請求項２】
以下の化学構造：
【化２】
2007516286.tif 000021
を有するフロルフェニコールプロドラッグである、請求項１に記載のフロルフェニコールリン酸エステルであって、
ここで、Ｍ１＋およびＭ２＋は、Ｈ＋または薬学的に受容可能な一価のカチオンであるか、あるいは一緒になって、薬学的に受容可能な二価のカチオンである、フロルフェニコールリン酸エステル。
【請求項３】
Ｍ１＋およびＭ２＋は、Ｈ＋、Ｎａ＋、ＮＨ４＋およびＫ＋からなる群より独立して選択される、請求項２に記載のフロルフェニコールプロドラッグ。
【請求項４】
Ｍ１＋またはＭ２＋はＨ＋であり、Ｈ＋ではないＭ１＋またはＭ２＋は、Ｎａ＋である、請求項３に記載のフロルフェニコールプロドラッグ。
【請求項５】
Ｍ１＋およびＭ２＋は、両方ともＮａ＋である、請求項３に記載のフロルフェニコールプロドラッグ。
【請求項６】
Ｍ１＋およびＭ２＋は、Ｈ＋およびプロトン化アミンからなる群より独立して選択される、請求項２に記載のフロルフェニコールプロドラッグ。
【請求項７】
前記プロトン化アミンは、ＮＲ１Ｒ２Ｒ３Ｈ＋であり、そしてＲ１、Ｒ２およびＲ３は、Ｈ，メチル、エチル、プロピル、イソプロピル、−ＣＨ２ＣＨ２ＯＨおよび−ＣＨ２Ｃ（ＣＨ２ＯＨ）３のいずれかであるように独立して選択される、請求項６に記載のフロルフェニコールプロドラッグ。
【請求項８】
前記プロトン化アミンは、以下：
【化３】
2007516286.tif 000022
からなる群より選択される、請求項７に記載のフロルフェニコールプロドラッグ。
【請求項９】
前記プロトン化アミンが：
【化４】
2007516286.tif 000023
である、請求項８に記載のフロルフェニコールプロドラッグ。
【請求項１０】
請求項７に記載のフロルフェニコールプロドラッグであって、
ここで、Ｒ１は、Ｈ、メチル、エチル、プロピル、イソプロピル、−ＣＨ２ＣＨ２ＯＨおよび−ＣＨ２Ｃ（ＣＨ２ＯＨ）３のいずれかであり；
Ｒ２およびＲ３は、結合して５員環または６員環を形成する
フロルフェニコールプロドラッグ。
【請求項１１】
前記５員環または６員環は、ピロリジン、ピペリジンまたはモルホリンからなる群より選択される、請求項１０に記載のフロルフェニコールプロドラッグ。
【請求項１２】
Ｍ１＋およびＭ２＋は、それぞれ、Ｈ＋および二塩基性アミノ酸の一価のカチオン形態を含む、請求項２に記載のフロルフェニコールプロドラッグ。
【請求項１３】
Ｍ１＋およびＭ２＋は、Ｈ＋、メグルミン、ベンゾカインまたはプロカインのいずれかであるように独立して選択される、請求項２に記載のフロルフェニコールプロドラッグ。
【請求項１４】
Ｍ１＋およびＭ２＋は、一緒になってＣａ２＋、Ｍｇ２＋、ビス−プロトン化ジアミン、および二塩基性アミノ酸の二価のカチオン形態からなる群より選択される、請求項２に記載のフロルフェニコールプロドラッグ。
【請求項１５】
薬学的に受容可能なキャリア中に請求項２に記載のフロルフェニコールプロドラッグを含有する、薬学的組成物。
【請求項１６】
前記薬学的に受容可能なキャリアが水溶液である、請求項１５に記載の薬学的組成物。
【請求項１７】
前記フロルフェニコールプロドラッグの２種類以上の塩の混合物を含有する、請求項１６に記載の薬学的組成物。
【請求項１８】
前記水溶液のｐＨは、ｐＨ３．５〜ｐＨ６．５の間である、請求項１６に記載の薬学的組成物。
【請求項１９】
前記水溶液のｐＨは、ｐＨ４．０〜ｐＨ６の間である、請求項１８に記載の薬学的組成物。
【請求項２０】
前記水溶液のｐＨは、ｐＨ４．５〜ｐＨ５．５の間である、請求項１９に記載の薬学的組成物。
【請求項２１】
請求項１６に記載の薬学的組成物であって、前記フロルフェニコールリン酸エステルは、フロルフェニコールリン酸エステルの塩形態およびフロルフェニコールリン酸エステルの酸形態の混合物であり；そしてここで、フロルフェニコールリン酸エステルの酸形態と合わせられる塩基のモル比は、０．６〜１．４の範囲である、薬学的組成物。
【請求項２２】
前記モル比は、０．８〜１．２の範囲である、請求項２１に記載の薬学的組成物。
【請求項２３】
前記モル比は、０．９〜１．１の範囲である、請求項２２に記載の薬学的組成物。
【請求項２４】
以下の化学式：
【化５】
2007516286.tif 000024
を有する化合物、またはその薬学的に受容可能な塩であって、
ここで、Ｒ２およびＲ３は、水素、（１Ｃ〜４Ｃ）アルキル、ハロ、−ＣＦ３、−ＮＨ２、−ＣＮおよびＮ３からなる群より独立して選択され；
ここで、Ｒ４は、以下：
【化６】
2007516286.tif 000025
からなる群より選択され、
ここで、Ａ１は炭素または窒素であり、環中の炭素原子は、水素、（１Ｃ〜４Ｃ）アルキル、（３Ｃ〜６Ｃ）シクロアルキル、（１Ｃ〜４Ｃ）アルキルＯ−、−ＣＦ３、−ＯＨ、−ＣＮ、ハロ、（１Ｃ〜４Ｃ）アルキルＳＯ−、（１Ｃ〜４Ｃ）アルキルＳＯ２−、ＮＨ２ＳＯ２−、（１Ｃ〜４Ｃ）アルキルＮＨＳＯ２−、（（１Ｃ〜４Ｃ）アルキル）２ＮＳＯ２−、−ＮＨ２、（１Ｃ〜４Ｃ）アルキルＮＨ−、（（１Ｃ〜４Ｃ）アルキル）２Ｎ−、（１Ｃ〜４Ｃ）アルキルＳＯ２ＮＨ−、（１Ｃ〜４Ｃ）アルキルＣ（Ｏ）−、（３Ｃ〜６Ｃ）シクロアルキルＣ（Ｏ）−、（１Ｃ〜４Ｃ）アルキルＯＣ（Ｏ）−、（１Ｃ〜４Ｃ）アルキルＣ（Ｏ）ＮＨ−、−Ｃ（Ｏ）ＮＨ２、（１Ｃ〜４Ｃ）アルキルＮＨＣ（Ｏ）−および（（１Ｃ〜４Ｃ）アルキル）２ＮＣ（Ｏ）−からなる群より選択される存在で独立して置換され、ここで、該置換基内の任意のアルキル基は、非置換であっても、ハロおよびヒドロキシから選択される基で置換されてもよく；
ここで、Ａ２、Ａ３、Ａ４およびＡ５は、炭素、窒素、酸素、および硫黄からなる群より独立して選択されるが、ただし、Ａ１〜Ａ５の少なくとも１つは、炭素ではなく、該環中の窒素原子、酸素原子および硫黄原子の合計は、４を超えず、そして該環が芳香族であり；そして、Ａ１が炭素であり、かつ該環が酸素も硫黄も含有しない場合、窒素原子の１つは、必要に応じて（１Ｃ〜４Ｃ）アルキル、（１Ｃ〜４Ｃ）アルキルＳＯ２−および−ＮＨ２からなる群より選択される存在で置換され得；そして
Ａ６、Ａ７、Ａ８、Ａ９およびＡ１０は、炭素、窒素および
【化７】
2007516286.tif 000026
からなる群より独立して選択されるが、ただし、同時にＡ６〜Ａ１０の１つのみが、
【化８】
2007516286.tif 000027
であり得、そしてＡ６〜Ａ１０原子の１つ、２つまたは３つが窒素であり；そしてここで、該環中の炭素原子は、水素、（１Ｃ〜４Ｃ）アルキル、（３Ｃ〜６Ｃ）シクロアルキル、（１Ｃ〜４Ｃ）アルキルＯ−、−ＣＦ３、−ＯＨ、−ＣＮ、ハロ、（１Ｃ〜４Ｃ）アルキルＳＯ−、（１Ｃ〜４Ｃ）アルキルＳＯ２−、ＮＨ２ＳＯ２−、（１Ｃ〜４Ｃ）アルキルＮＨＳＯ２−、（（１Ｃ〜４Ｃ）アルキル）２ＮＳＯ２−、−ＮＨ２、（１Ｃ〜４Ｃ）アルキルＮＨ−、（（１Ｃ〜４Ｃ）アルキル）２Ｎ−、（１Ｃ〜４Ｃ）アルキルＳＯ２ＮＨ−、（１Ｃ〜４Ｃ）アルキルＣ（Ｏ）−、（３Ｃ〜６Ｃ）シクロアルキルＣ（Ｏ）−、（１Ｃ〜４Ｃ）アルキルＯＣ（Ｏ）−、（１Ｃ〜４Ｃ）アルキルＣ（Ｏ）ＮＨ−、−Ｃ（Ｏ）ＮＨ２、（１Ｃ〜４Ｃ）アルキルＮＨＣ（Ｏ）−、（（１Ｃ〜４Ｃ）アルキル）２ＮＣ（Ｏ）−および−ＯＣＨ２Ｏ−からなる群より選択される存在で独立して置換され、
ここで−ＯＣＨ２Ｏ−置換基に関する酸素原子は、隣接する環炭素原子に結合され、そしてここで、任意の該置換基内の任意のアルキル基は、非置換でも、ハロおよびヒドロキシから選択される基で置換されてもよく；そして
Ｒ２およびＲ３が両方ともＦである場合にＲ８が水素またはＦであることを除いて、Ｒ８は、全ての化合物中で水素であり；そして、該化合物は、示される相対的な立体化学を有するラセミ体であるか、または実質的に立体化学的に純粋であり、かつ示される絶対的な立体化学を有するかのいずれかである、化合物。
【請求項２５】
薬学的に受容可能なキャリア中に請求項２４に記載の化合物を含む、薬学的組成物。
【請求項２６】
細菌感染症の処置または予防を必要とする被験体に、請求項１５に記載の薬学的組成物の治療有効量または予防有効量を投与する工程を包含する、細菌感染症を処置または予防する方法。
【請求項２７】
前記薬学的組成物は、経口投与されるか、または非経口投与される、請求項２６に記載の方法。
【請求項２８】
以下の化学構造：
【化９】
2007516286.tif 000028
を有するフロルフェニコールリン酸エステルの酸形態を合成する方法であって、該方法は：
（ａ）第１の適切な溶媒中で、テトラゾールの存在下にてフロルフェニコールとジ−ｔｅｒｔ−ブチルホスホラミダイトとを反応させ、第１の中間体を生じる工程；
（ｂ）第２の適切な溶媒中で酸化剤を該第１の中間体に添加して、第２の中間体を生じる工程；
（ｃ）該第２の中間体を単離する工程；
（ｄ）該第２の中間体を、第３の適切な溶媒中に溶解する工程；および
（ｅ）該第２の中間体をトリフルオロ酢酸と反応させ、フロルフェニコールリン酸エステルの酸形態を生じる工程
を包含する、方法。
【請求項２９】
フロルフェニコールリン酸エステルの酸形態を単離する工程をさらに包含する、請求項２８に記載の方法。
【請求項３０】
以下の化学構造：
【化１０】
2007516286.tif 000029
を有するフロルフェニコールリン酸エステルの塩形態を合成する方法であって、
ここで、Ｍ１＋およびＭ２＋は、薬学的に受容可能な一価のカチオンであるか、または一緒になって薬学的に受容可能な二価のカチオンであり；
該方法は、単離された請求項２９に記載のフロルフェニコールリン酸エステルの酸形態と、薬学的に受容可能なカチオンまたは二価のカチオンを含む塩基の水溶液とを合わせて、カチオンまたは二価のカチオンの塩としてフロルフェニコールリン酸エステルの形成を生じる工程を包含する
方法。
【請求項３１】
前記薬学的に受容可能なカチオンまたは二価のカチオンは、それぞれ、プロトン化アミン、またはビス−プロトン化ジアミンである、請求項３０に記載の方法。
【請求項３２】
前記フロルフェニコールリン酸エステルの塩形態を単離する工程をさらに包含する、請求項３０に記載の方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
（関連出願の相互参照）
本出願は、米国特許法第１１９条（ｅ）項に基づいて２００３年１２月２３日に出願された米国仮特許出願第６０／５３２，２２７号（この内容は、本明細書によりその全体が参考として援用される）の優先権を主張する非仮特許出願である。
【０００２】
（発明の分野）
本発明は、フロルフェニコールのリン酸エステル（良好な水溶性を有するフロルフェニコールプロドラッグが挙げられる）、およびフロルフェニコールアナログのリン酸エステルに関する。
【背景技術】
【０００３】
（発明の背景）
フロルフェニコールは、チアンフェニコールの構造アナログであり、次にこれは、クロラムフェニコールの誘導体である（例えば、特許文献１、特許文献２（これらの内容は、本明細書によりその全体が参考として援用される）を参照のこと）。
【０００４】
【化１１】
2007516286.tif 000003
フロルフェニコールは、多くのグラム陰性菌およびグラム陽性菌に対する活性を有する広域スペクトルの抗生物質である（鳥類、爬虫類、魚類、甲殻類および哺乳類において感受性の病因に起因する細菌感染症の予防ならびに処置における利用が挙げられる）。フロルフェニコールの主要な用途の１つは、Ｍａｎｎｈｅｍｉａ  ｈａｅｍｏｌｙｔｉｃａ、Ｐａｓｔｕｒｅｌｌａ  ｍｕｌｔｏｃｉｄａおよび／またはＨａｅｍｏｐｈｉｌｕｓ  ｓｏｍｎｕｓ（Ｈｉｓｔｏｐｈｉｌｕｓ  ｓｏｍｎｉとしても知られる）により引き起こされるウシにおける肺炎および関連する呼吸器系の感染症（しばしば、一般的にウシ呼吸器系疾患、すなわちＢＲＤと称される）の処置である。フロルフェニコールはまた、以下の処置においても指摘されている：Ｆｕｓｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ  ｎｅｃｒｏｐｈｏｒｕｍおよびＢａｃｔｅｒｉｏｉｄｅｓ  ｍｅｌａｎｉｎｏｇｅｎｉｃｕｓにより引き起こされるウシの足底部皮膚炎（ｐｏｄｏｄｅｒｍａｔｉｔｉｓ）；Ｐａｓｔｅｕｒｅｌｌａ  ｍｕｌｔｏｃｉｄａ、Ａｃｔｉｎｏｂａｃｉｌｌｕｓ  ｐｌｅｕｒｏｐｎｅｕｍｏｎｉａｅ、Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ  ｓｕｉｓ、Ｓａｌｍｏｎｅｌｌａ  ｃｈｏｌｅｒａｓｕｉｓおよび／またはＭｙｃｏｐｌａｓｍａ  ｓｐｐ．により引き起こされるブタ呼吸器疾患；Ｅｓｃｈｅｒｉｃｈｉａ  ｃｏｌｉにより引き起こされるニワトリの大腸菌症；Ｅｄｗａｒｄｓｉｅｌｌａ  ｉｃｔａｌｕｒｉにより引き起こされるナマズの腸溶性敗血症；およびＡｅｒｏｍｏｎａｓ  ｓａｌｍｏｎｉｃｉｄａにより引き起こされるサーモンのフルンケル症。フロルフェニコールに対する感受性を示した細菌の他の属としては、Ｅｎｔｅｒｏｂａｃｔｅｒ、Ｋｌｅｂｓｉｅｌｌａ、Ｓｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｕｓ、Ｅｎｔｅｒｏｃｏｃｃｕｓ、Ｂｏｒｄｅｔｅｌｌａ、ＰｒｏｔｅｕｓおよびＳｈｉｇｅｌｌａが挙げられる。特に、生物（例えば、Ｋ．ｐｎｅｕｍｏｎｉａｅ、Ｅ．ｃｌｏａｃａｅ、Ｓ．ｔｙｐｈｕｓおよびＥ．ｃｏｌｉ）のクロラムフェニコール耐性株は、フロルフェニコールに感受性である。
【０００５】
フロルフェニコールは、その利点から恩恵を受け得る被験体に、経口的かまたは非経口的かのいずれか（後者は、おもに筋肉内かまたは静脈内である）で頻繁に投与される。その非常に低い水溶性（約１ｍｇ／ｍｌ）に起因して、市販の処方物中には、所望される生成物の濃度を達成するために、有機溶媒が添加されなければならない。例えば、ＮＵＦＬＯＲ（登録商標）（米国およびカナダにおいて獣医学の標識をされた（ｖｅｒｔｅｒｉｎａｒｙ−ｌａｂｅｌｅｄ）フロルフェニコール処方物）において、有機溶媒のＮ−メチルピロリジノン、プロピレングリコール、および／またはポリエチレングリコールが使用されて、３００ｍｇ／ｍｌのフロルフェニコールの溶解度を提供する。不運にも非経口投与される場合、これらの溶媒は、しばしば有意な局所的刺激を引き起こす。
【特許文献１】米国特許第４，２３５，８９２号明細書
【特許文献２】米国特許第５，３５２，８３２号明細書
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【０００６】
従って、フロルフェニコールのより水溶性の形態に対する必要性が存在する。
【課題を解決するための手段】
【０００７】
本明細書中の任意の参考文献の引用は、このような参考文献が本出願に対する「先行技術」として利用可能である承認のように解釈されるべきでない。
【０００８】
（発明の要旨）
したがって、本発明は、フロルフェニコール自体よりも実質的により水溶性なフロルフェニコールの水溶性形態を提供する。好ましくは、本発明のフロルフェニコールの水溶性形態はまた、インビボにてフロルフェニコールに素早くかつ効率的に変換するプロドラッグである。したがって、本発明の１つの局面は、以下の化学構造：
【０００９】
【化１２】
2007516286.tif 000004
を有するフロルフェニコールリン酸エステル（例えば、フロルフェニコールプロドラッグ）を提供する。
【００１０】
本発明は、このフロルフェニコールリン酸エステルの塩をさらに提供する。このような塩は、フロルフェニコールリン酸エステルの安定な貯蔵において有用であり得る。好ましくは、このフロルフェニコールリン酸エステル塩は、薬学的に受容可能なカウンターイオンを含有する。特定の実施形態において、酸および本発明の薬学的に受容可能なフロルフェニコールリン酸エステル塩は、以下：
【００１１】
【化１３】
2007516286.tif 000005
に示され得、
ここで、Ｍ１＋およびＭ２＋は、Ｈ＋か、または薬学的に受容可能な一価のカチオンのいずれかであるように独立して選択されるか、あるいは、Ｍ１＋およびＭ２＋は、一緒になって薬学的に受容可能な二価のカチオンであり得る。
【００１２】
本発明の１つの実施形態において、Ｍ１＋およびＭ２＋は、Ｈ＋、Ｎａ＋、ＮＨ４＋またはＫ＋であるように独立して選択される。この型の特定の実施形態において、Ｍ１＋およびＭ２＋は、それぞれ、Ｈ＋およびＮａ＋である。この型の別の特定の実施形態において、Ｍ１＋およびＭ２＋は両方ともＮａ＋である。さらに別の実施形態において、Ｍ１＋およびＭ２＋は、一緒になってＣａ２＋である。なお別の実施形態において、Ｍ１＋およびＭ２＋は、一緒になってＭｇ２＋である。
【００１３】
本発明のさらに別の実施形態において、Ｍ１＋およびＭ２＋は、Ｈ＋か、またはプロトン化アミンのいずれかであるように独立して選択される。本発明の別の実施形態において、Ｍ１＋およびＭ２＋は、それぞれ、Ｈ＋および化学式ＮＲ１Ｒ２Ｒ３Ｈ＋を含有するプロトン化アミンである。なお別の実施形態において、Ｍ１＋およびＭ２＋は、両方とも化学式ＮＲ１Ｒ２Ｒ３Ｈ＋を含有するプロトン化アミンである。化学式ＮＲ１Ｒ２Ｒ３Ｈ＋を含有するプロトン化アミンに関して、Ｒ１、Ｒ２およびＲ３は、Ｈ，メチル、エチル、プロピル、イソプロピル、−ＣＨ２ＣＨ２ＯＨおよび−ＣＨ２Ｃ（ＣＨ２ＯＨ）３のいずれかであるように独立して選択される。あるいは、Ｒ１は、上記のとおりであるが、Ｒ２およびＲ３は、結合して５員環または６員環を形成する。この型の特定の実施形態において、この環は、ピロリジン、ピペリジンまたはモルホリンである。
【００１４】
本発明のアミンカチオンの例としては、以下：
【００１５】
【化１４】
2007516286.tif 000006
が挙げられるが、これらに限定されない。
【００１６】
なお別の実施形態において、Ｍ１＋およびＭ２＋は、一緒になってビス−プロトン化ジアミンを形成する。本発明のビスプロトン化ジアミンの例としては、以下：
【００１７】
【化１５】
2007516286.tif 000007
が挙げられる。
【００１８】
さらに別の実施形態において、Ｍ１＋およびＭ２＋は、それぞれ、Ｈ＋および二塩基性アミノ酸の一価のカチオン形態を含有する。この型の特定の実施形態において、二塩基性アミノ酸の一価のカチオン形態は、以下の２つの化学式：
【００１９】
【化１６】
2007516286.tif 000008
の一方を含有する。
【００２０】
なお別の実施形態において、Ｍ１＋およびＭ２＋は、一緒になって二塩基性アミノ酸の二価のカチオン形態を含有する。この型の特定の実施形態において、二塩基性アミノ酸の二価のカチオン形態は、以下の２つの化学式：
【００２１】
【化１７】
2007516286.tif 000009
の一方を含有する。
【００２２】
本発明のさらに別の実施形態において、Ｍ１＋およびＭ２＋は、Ｈ＋、メグルミン、ベンゾカインまたはプロカインのいずれかであるように独立して選択される。この型の特定の実施形態において、Ｍ１＋およびＭ２＋のいずれかは、Ｈ＋であるが、他方は、メグルミン、ベンゾカイン、またはプロカインのいずれかである。
【００２３】
なお別の実施形態において、本発明は、２種類以上の塩の混合物として式Ｉを含有する処方物を提供する。この型の特定の実施形態において、第１の塩について、Ｍ１＋またはＭ２＋はＨ＋であり、対して他方は、特定のカウンターイオンであり、第２の塩について、Ｍ１＋およびＭ２＋の両方は、特定のカウンターイオンである。関連する実施形態において、第１の塩のＭ１＋およびＭ２＋は、同一のカウンターイオンであるが、Ｈ＋ではなく、対して第２の塩のＭ１＋およびＭ２＋はまた、同一のカウンターイオンであるが、Ｈ＋でも第１の塩の特定のカウンターイオンでもない。さらに別の実施形態において、この処方物は、２種類以上の塩の混合物として式Ｉを含有し、異なる塩のカウンターイオンの全ては、独立して選択される。好ましい実施形態において、これらの処方物中のカウンターイオンは、本明細書中に開示される。
【００２４】
本発明は、フロルフェニコールアナログのリン酸エステル（クロラムフェニコールおよびチアンフェニコールのリン酸エステルが挙げられる）をさらに提供する。これらのリン酸エステルは、抗生物質および／または抗生物質のプロドラッグとして有用であり得る。本発明は、これらのフロルフェニコールアナログのリン酸エステル塩（好ましくは、本明細書中に提供されるカウンターイオンを含有する塩）をさらに提供する。近年、フロルフェニコールアナログの１つの適切なファミリーが、合成され、特徴づけられた（米国特許出願番号２００４００８２５５３、ＷＯ０３／０７７８２８  この内容は、その全体が本明細書により参考として援用される）。これらのフロルフェニコールアナログのリン酸エステルおよびこれらの塩は、米国特許出願第２００４００８２５５３号およびＷＯ０３／０７７８２８の教示を考慮して、本明細書中に提供される教示により調製され、そして抗生物質および／または抗生物質のプロドラッグとして使用され得る。
【００２５】
特定の実施形態において、本発明のフロルフェニコールアナログのリン酸エステルは、以下：
【００２６】
【化１８】
2007516286.tif 000010
の化学構造を有し、
ここで、Ｒ２およびＲ３は、水素、（１Ｃ〜４Ｃ）アルキル、ハロ、−ＣＦ３、−ＮＨ２、−ＣＮおよびＮ３からなる群より独立して選択され；
ここで、Ｒ４は、以下：
【００２７】
【化１９】
2007516286.tif 000011
からなる群より選択され、
ここで、Ａ１は炭素または窒素であり、環中の炭素原子は、水素、（１Ｃ〜４Ｃ）アルキル、（３Ｃ〜６Ｃ）シクロアルキル、（１Ｃ〜４Ｃ）アルキルＯ−、−ＣＦ３、−ＯＨ、−ＣＮ、ハロ、（１Ｃ〜４Ｃ）アルキルＳＯ−、（１Ｃ〜４Ｃ）アルキルＳＯ２−、ＮＨ２ＳＯ２−、（１Ｃ〜４Ｃ）アルキルＮＨＳＯ２−、（（１Ｃ〜４Ｃ）アルキル）２ＮＳＯ２−、−ＮＨ２、（１Ｃ〜４Ｃ）アルキルＮＨ−、（（１Ｃ〜４Ｃ）アルキル）２Ｎ−、（１Ｃ〜４Ｃ）アルキルＳＯ２ＮＨ−、（１Ｃ〜４Ｃ）アルキルＣ（Ｏ）−、（３Ｃ〜６Ｃ）シクロアルキルＣ（Ｏ）−、（１Ｃ〜４Ｃ）アルキルＯＣ（Ｏ）−、（１Ｃ〜４Ｃ）アルキルＣ（Ｏ）ＮＨ−、−Ｃ（Ｏ）ＮＨ２、（１Ｃ〜４Ｃ）アルキルＮＨＣ（Ｏ）−および（（１Ｃ〜４Ｃ）アルキル）２ＮＣ（Ｏ）−からなる群より選択される存在で独立して置換され、ここで、上記置換基内の任意のアルキル基は、非置換であっても、ハロおよびヒドロキシから選択される基で置換されてもよく；
ここで、Ａ２、Ａ３、Ａ４およびＡ５は、炭素、窒素、酸素、および硫黄からなる群より独立して選択されるが、ただし、Ａ１〜Ａ５の少なくとも１つは、炭素ではなく、上記環中の窒素原子、酸素原子および硫黄原子の合計は、４を超えず、そしてこの環は芳香族であり；そして、Ａ１が炭素であり、かつこの環が酸素も硫黄も含有しない場合、窒素原子の１つは、必要に応じて（１Ｃ〜４Ｃ）アルキル−、（１Ｃ〜４Ｃ）アルキルＳＯ２−および−ＮＨ２からなる群より選択される存在で置換され得；そして
Ａ６、Ａ７、Ａ８、Ａ９およびＡ１０は、炭素、窒素および
【００２８】
【化２０】
2007516286.tif 000012
からなる群より独立して選択されるが、ただし、同時にＡ６〜Ａ１０の１つのみが、
【００２９】
【化２１】
2007516286.tif 000013
であり得、そしてＡ６〜Ａ１０原子の１つ、２つまたは３つが窒素であり；そしてここで、この環中の炭素原子は、水素、（１Ｃ〜４Ｃ）アルキル、（３Ｃ〜６Ｃ）シクロアルキル、（１Ｃ〜４Ｃ）アルキルＯ−、−ＣＦ３、−ＯＨ、−ＣＮ、ハロ、（１Ｃ〜４Ｃ）アルキルＳＯ−、（１Ｃ〜４Ｃ）アルキルＳＯ２−、ＮＨ２ＳＯ２−、（１Ｃ〜４Ｃ）アルキルＮＨＳＯ２−、（（１Ｃ〜４Ｃ）アルキル）２ＮＳＯ２−、−ＮＨ２、（１Ｃ〜４Ｃ）アルキルＮＨ−、（（１Ｃ〜４Ｃ）アルキル）２Ｎ−、（１Ｃ〜４Ｃ）アルキルＳＯ２ＮＨ−、（１Ｃ〜４Ｃ）アルキルＣ（Ｏ）−、（３Ｃ〜６Ｃ）シクロアルキルＣ（Ｏ）−、（１Ｃ〜４Ｃ）アルキルＯＣ（Ｏ）−、（１Ｃ〜４Ｃ）アルキルＣ（Ｏ）ＮＨ−、−Ｃ（Ｏ）ＮＨ２、（１Ｃ〜４Ｃ）アルキルＮＨＣ（Ｏ）−、（（１Ｃ〜４Ｃ）アルキル）２ＮＣ（Ｏ）−および−ＯＣＨ２Ｏ−からなる群より選択される存在で独立して置換され、ここで−ＯＣＨ２Ｏ−置換基の酸素原子は、隣接する環炭素原子に結合され、そしてここで、任意の置換基内の任意のアルキル基は、非置換でも、ハロおよびヒドロキシからなる群より選択される基で置換されてもよく；そして
Ｒ２およびＲ３が両方ともＦである場合、Ｒ８は水素またはＦであることを除いて、Ｒ８は、全ての化合物中で水素であり；そして、この化合物は、示される相対的な立体化学を有するラセミ体であるか、または実質的に立体化学的に純粋であり、かつ絶対的な立体化学を示すかのいずれかである。この型の好ましい実施形態において、フロルフェニコールアナログのリン酸エステルは、対応するフロルフェニコールアナログのプロドラッグとして使用し得る。
【００３０】
本発明のフロルフェニコールリン酸エステルの全ての形態（例えば、フロルフェニコールプロドラッグ）、およびフロルフェニコールアナログのリン酸エステルの全ての形態は、１種以上の薬学的に受容可能なキャリア（例えば、溶媒）および／または１種以上の薬学的に受容可能な賦形剤を含有する薬学的組成物において調製され得る。さらに、本発明はまた、単離された形態および／または精製された形態における、本発明のフロルフェニコールリン酸エステルの全ての形態ならびにフロルフェニコールアナログのリン酸エステルの全ての形態を提供する。
【００３１】
したがって、本発明は、薬学的に受容可能なキャリア中に、本発明のフロルフェニコールプロドラッグ（またはフロルフェニコールアナログのリン酸エステル）を含有する薬学的組成物を提供する。特定の実施形態において、薬学的組成物は、フロルフェニコールプロドラッグの２種類以上の混合物を含有する。関連する実施形態において、この薬学的組成物は、フロルフェニコールアナログのリン酸エステルの２種類以上の塩の混合物を含有する。
【００３２】
１つの実施形態において、薬学的に受容可能なキャリアは、有機溶媒を含有する。この型の特定の実施形態において、この有機溶媒は、非プロトン性溶媒である。関連する実施形態において、薬学的に受容可能なキャリアは、水溶液と有機溶媒との混合物である。好ましい実施形態において、薬学的に受容可能なキャリアは、水溶液である。この型の実施形態において、この水溶液のｐＨは、ｐＨ３．５〜ｐＨ６．５の間である。別の実施形態において、この水溶液のｐＨは、ｐＨ４．０〜ｐＨ６．０の間である。なお別の実施形態において、この水溶液のｐＨは、ｐＨ４．５〜ｐＨ５．５の間である。特定の実施形態において、この水溶液のｐＨは、ｐＨ４．２〜ｐＨ４．８の間である。
【００３３】
本発明の好ましい実施形態において、本発明の薬学的組成物は、フロルフェニコールリン酸エステルの酸形態とともに、フロルフェニコールのリン酸エステルの塩形態の混合物を含有する。１つのこのような実施形態において、フロルフェニコールリン酸エステルの酸形態と合わされる塩基（例えば、遊離アミン）のモル比は、０．６〜１．４の範囲である。別の実施形態において、このモル比は、０．８〜１．２の範囲である。なお別の実施形態において、このモル比は、０．９〜１．１の範囲である。
【００３４】
本発明による、フロルフェニコールリン酸エステル（例えば、フロルフェニコールプロドラッグ）、またはフロルフェニコールアナログのリン酸エステル、および／あるいはいずれかの塩は、細菌感染症（例えば、上に列挙したもの）を処置または予防することを必要とする被験体に、フロルフェニコールプロドラッグまたはその塩および／あるいはフロルフェニコールアナログのリン酸エステルまたはその塩を含有する、治療有効量の薬学的組成物あるいは予防有効量の薬学的組成物を投与することにより、この細菌感染症を処置または予防するために使用され得る。
【００３５】
特定の実施形態において、本発明の薬学的組成物は、経口投与される。この型の特定の実施形態において、本発明の薬学的組成物は、水溶液である。１つのこのような実施形態において、この薬学的組成物は、被験体により摂取されるべき液体（例えば、飲料水）中に入れられる。
【００３６】
本発明の別の実施形態において、この薬学的組成物は、非経口投与される。非経口投与は、筋肉内注射または静脈内注射を包含し得る。非経口投与はまた、皮下注射を包含し得る。
【００３７】
本発明のフロルフェニコールリン酸エステル（例えば、フロルフェニコールプロドラッグ）および／またはその塩、ならびに本発明のフロルフェニコールアナログのリン酸エステルおよび／またはその塩は、多くの方法により調製され得る。好ましい実施形態において、フロルフェニコールプロドラッグは、第１の適切な溶媒中でテトラゾールの存在下にて、フロルフェニコールとジ−ｔｅｒｔ−ブチルホスホルアミダイトとを反応させ、第１の中間体を生じることにより調製される。次に、酸化剤が、第２の適切な溶媒中で第１の中間体に添加され、第２の中間体を生じる。第２の中間体を単離した後、この第２の中間体は、第３の適切な溶媒に溶解される。第２の中間体は、次いで、トリフルオロ酢酸と反応され、酸形態のフロルフェニコールホスフェートを生じる。フロルフェニコールホスフェートの酸形態は、その後、単離され得る。特定の実施形態において、第１の適切な溶媒、第２の適切な溶媒および／または第３の適切な溶媒の１つ以上は、非プロトン性溶媒である。
【００３８】
単離されたフロルフェニコールリン酸エステルの酸形態は、次いで、薬学的に受容可能なカチオンまたは二価のカチオンを含有する塩基の水溶液に添加され得る（あるいは、この塩基の水溶液と合わされ得る）。フロルフェニコールプロドラッグの塩形態は、次いで、単離され、薬学的に受容可能なカチオンまたは二価のカチオンを有する、単離されたフロルフェニコールプロドラッグを生じ得る。
【００３９】
本発明のフロルフェニコールプロドラッグを調製するプロセスの１つの実施形態において、第１の適切な溶媒は、テトラヒドロフランを含有する。別の実施形態において、使用される酸化剤は、ｍ−クロロ過安息香酸である。なお別の実施形態において、第２の適切な溶媒は、ジクロロメタンである。特定の実施形態において、第２の中間体を単離する工程は、フラッシュカラムクロマトグラフィーを包含する。さらに別の実施形態において、第３の適切な溶媒は、ジクロロメタンを含有する。なお別の実施形態において、薬学的に受容可能なカチオンは、Ｎａ＋である。さらに別の実施形態において、薬学的に受容可能なカチオンは、プロトン化アミンである。なお別の実施形態において、薬学的に受容可能な二価のカチオンは、ビス−プロトン化ジアミンである。
【発明を実施するための最良の形態】
【００４０】
（発明の詳細な説明）
したがって、本発明は、フロルフェニコールのエステル化形態（例えば、フロルフェニコールプロドラッグ）またはフロルフェニコールアナログのエステル化形態を提供する。このようなエステル化形態は、非常に水溶性であり、そして細菌感染症を処置および／または予防するために使用され得る。フロルフェニコールまたはフロルフェニコールアナログの水溶性形態が、被験体に投与される場合、フロルフェニコールまたはフロルフェニコールアナログのエステル化形態は、それぞれ、遊離フェニコールまたは遊離フェニコールアナログに効率的に変換される。
【００４１】
本発明をより十分に理解するために、以下の定義が提供される。
【００４２】
本明細書中で使用される場合、「薬学的組成物」とは、薬学的に受容可能な賦形剤および／またはキャリアを有する、本発明のフロルフェニコールのリン酸エステル（この塩を含む）の処方物、または本発明のフロルフェニコールアナログのリン酸エステル（この塩を含む）の処方物をいう。好ましい実施形態において、このキャリアは、溶媒（例えば、水）である。
【００４３】
「賦形剤」とは、活性成分の投与をさらに容易にするために、薬学的組成物に添加される不活性な物質をいう。賦形剤の非限定的な例としては、炭酸カルシウム、リン酸カルシウム、種々の糖類およびデンプンの型、セルロース誘導体、ゼラチン、植物油ならびにポリエチレングリコールが挙げられる。
【００４４】
用語「治療有効量」とは、本明細書中で使用される場合、十分に素早く加水分解する本発明のプロドラッグの量、ならびに被験体において、細菌感染症の１つ以上の症状をある程度まで軽減し得る濃度でフロルフェニコール（またはフロルフェニコールアナログ）を提供するのに十分な量をいう。特定の実施形態において、治療有効量とは、本発明のフロルフェニコールリン酸エステルの量をいう。この量は、被験体に投与される場合、十分な血漿濃度のフロルフェニコールを被験体に送達して：（１）被験体の体内の細菌細胞の集合を低下させ、そして好ましくは排除し；（２）細菌細胞の増殖を阻害し（すなわち、低下させるか、または好ましくは停止し）；（３）細菌感染症の拡大を阻害し（すなわち、低下させるか、または好ましくは停止し）；そして／または（４）この感染に付随する１つ以上の症状を軽減する（好ましくは排除する）。
【００４５】
用語「予防有効量」は、本発明のフロルフェニコールまたはフロルフェニコールアナログのプロドラッグ量をいう。この量は、加水分解の際に、フロルフェニコールまたは対応するフロルフェニコールアナログの十分な血漿濃度を提供して：（１）前もって投与された治療有効量のプロドラッグまたはいくつかの他の適切な薬物により達成される、細菌細胞の集合のレベルの減少を維持し；（２）治療有効量の薬物の投与により達成される細菌増殖阻害のレベルを維持し；（３）治療有効量の薬物の投与により達成される、感染の拡大の阻害の程度を維持し；そして／または（４）１つ以上の症状の軽減のレベルを維持するか、あるいは、症状が排除された場合、本発明の（例えば、フロルフェニコールの）プロドラッグまたはいくつかの他の適切な薬物の治療有効量を投与することにより達成される、細菌感染症に付随する症状の非存在を維持する。予防有効量とはまた、本発明のフロルフェニコールプロドラッグまたは本発明のフロルフェニコールアナログのプロドラッグを含有する組成物の量をいう。この量は、十分な血漿濃度で、フロルフェニコールまたはフロルフェニコールアナログを送達して、細菌が感受性の生物体中で感染を引き起こすのに十分な量に蓄積するのを予防する。
【００４６】
「非プロトン性溶媒」とは、酸素原子、窒素原子または硫黄原子に結合した１個以上の水素原子（この水素原子は、解離し得るか、または水素結合に関与し得る）を含まない有機溶媒をいう。
【００４７】
本明細書中で使用される場合、「適切な」溶媒とは、反応物が溶解し得、そしてその溶媒自体が反応混合物の１つ以上の成分と反応することによるか、または互いの成分の反応に干渉することにより、その反応物が反応中に不利に沈殿しない溶媒をいう。任意の所与の反応について、適切な溶媒を選択することは、十分に当業者の能力の内であり、そして過度の実験をすることなく、達成され得る。
【００４８】
用語「被験体」とは、病原性細菌により感染され得る動物種をいい、特定の実施形態において、ヒトが挙げられる。適切な動物被験体としてはまた、野生動物、家畜（例えば、肉用、乳用、バター用、卵用、毛皮用、革用、羽毛用および／または毛用のために飼育される動物）、役畜、調査研究用動物、コンパニオンアニマル、ならびに動物園、野生環境および／またはサーカスのために／動物園、野生環境および／またはサーカスで飼育される動物が挙げられる。
【００４９】
特定の実施形態において、本発明の「被験体」は、「食料を生産する」動物である。本発明の目的のために、用語「食料を生産する」動物は、ヒトにより消費または消費可能である（例えば、乳牛、産卵用ニワトリなど）ために飼育される全ての動物および／または他の動物を含むことが理解されるべきである。このような動物の非限定的なリストとしては、トリ（例えば、ニワトリ、七面鳥、ガチョウ、アヒル、ダチョウなど）、ウシ（畜牛、乳牛、バッファロー）、ヒツジ（例えば、ヤギまたはバーバリシープ）、ブタ（例えば、雄ブタまたは子ブタ）、ウマ科（例えば、ウマ）など、ならびに水棲動物（甲殻類および魚類（例えば、マスまたはサーモン）が挙げられる）およびヒトの消費のために飼育または捕獲される他の種が挙げられる。本発明の種々の目的のために、用語「魚類」としては、魚類のＴｅｌｅｏｓｔｉ群（すなわち、硬骨魚類）が挙げられるがこれらに限定されないことが理解されるべきである。Ｓａｌｍｏｎｉｆｏｒｍｅｓ目（Ｓａｌｍｏｎｉｄａｅ科を含む）およびＰｅｒｃｉｆｏｒｍｅｓ目（Ｃｅｎｔｒａｒｃｈｉｄａｅ科を含む）の両方は、Ｔｅｌｅｏｓｔｉ群内に含まれる。
【００５０】
潜在的な魚類のレシピエントの例としては、Ｓａｌｍｏｎｉｄａｅ科、Ｓｅｒｒａｎｉｄａｅ科、Ｓｐａｒｉｄａｅ科、Ｃｉｃｈｌｉｄａｅ科、Ｃｅｎｔｒａｒｃｈｉｄａｅ科、Ｔｈｒｅｅ−Ｌｉｎｅ  Ｇｒｕｎｔ（Ｐａｒａｐｒｉｓｔｉｐｏｍａ  ｔｒｉｌｉｎｅａｔｕｍ）、およびＢｌｕｅ−Ｅｙｅｄ  Ｐｌｅｃｏｓｔｏｍｕｓ（Ｐｌｅｃｏｓｔｏｍｕｓ  ｓｐｐ）が挙げられる。
【００５１】
【化２２】
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【００５２】
【化２３】
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【００５３】
【化２４】
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別の実施形態において、この被験体は、コンパニオンアニマルである。本発明の目的のために、用語「コンパニオン」アニマルは、イエネコ（ネコ科）、イヌ（イヌ科）、ウサギ種、ウマ（ウマ科）、げっ歯類（例えば、モルモット、リス、ラット、マウス、アレチネズミおよびハムスター）、霊長類（例えば、サル）、および鳥類（例えば、イエバト、ハト、オウム、インコ、コンゴウインコ、カナリアなど）が挙げられると理解されるべきである。
【００５４】
他の動物（有袋動物（例えば、カンガルー）、爬虫類（例えば、養殖亀（ｆａｒｍｅｄ  ｔｕｒｔｌｅ））、猟鳥、白鳥、平胸類の鳥および他の経済的に重要な家畜が挙げられる）もまた、本発明のフロルフェニコールリン酸エステルから恩恵を受けることが企図される。
【００５５】
上記のように、フロルフェニコールは、わずかに水溶性（すなわち、約１ｍｇ／ｍｌまで）である。しかし、市販の処方物において、３００ｍｇ／ｍＬまたはそれ以上の濃度が、しばしば所望される。このような濃度を達成するために、フロルフェニコールが容易に可溶性である有機溶媒が、処方物中で使用される。不幸なことに、これらの溶媒の多くは、このようなフロルフェニコール含有組成物が、注射（好ましい投与形態）により被験体に投与される場合、時折非常に厳しい刺激を引き起こす。本発明は、改善された水溶性を有するフロルフェニコールプロドラッグを提供することにより、この問題に対する解決案を提供し、そしてさらに、フロルフェニコールのインビボ送達において効果的かつ効率的に使用され得る。しかし、この目的を達成することは、些細な問題でないと証明されている。
【００５６】
多くの可能なフロルフェニコールプロドラッグ（例えば、フロルフェニコールのグルタル酸エステル）は、完全に水溶性（すなわち、１ミリリットルあたり数百ミリグラムを超える）である。しかし、これらのプロドラッグの多くは、フロルフェニコールを血清中に容易には送達せず、したがって、インビボでもそうであると予測される。例えば、図１は、接触の４時間後に、ウシ血清においてはフロルフェニコールグルタル酸エステルの約６％だけが、加水分解してフロルフェニコールになり、ラット血清においては約３％だけであることを示す。
【００５７】
まったく驚いたことに、本発明のフロルフェニコールリン酸エステルは、非常に高い水溶性（すなわち、６００ｍｇ／ｍＬを超える）を有するだけでなく、効率的に、実質的な量のフロルフェニコールに変換することが見出された。このことはまた、図１に示される。図１は、４時間にわたって、ラット血清およびウシ血清において、フロルフェニコールリン酸のナトリウム塩が、それぞれ、約４０％および約６０％程度まで変換されたことが見られ得る。インビトロにおけるこれらの変換レベルは、インビボにおける治療学的に有効な変換の良好な指針として、当業者に考慮される。予測されるように、フロルフェニコールの実質的な濃度は、ウシ、イヌ、およびブタ（図２〜４を参照のこと）において本発明のフロルフェニコールリン酸エステルの静脈内投与後に、血漿中で検出された。
【００５８】
本発明のフロルフェニコールのリン酸エステル（例えば、フロルフェニコールのプロドラッグ）および／またはこれらの塩（または、フロルフェニコールアナログのリン酸エステルおよび／またはこれらの塩）は、任意の従来の手段（経口、または注射）により被験体に投与され得る。
【００５９】
注射物が、投与されるべきである場合、フロルフェニコールプロドラッグを使用前の水溶液中に入れることが好ましい。溶液中において、フロルフェニコールのプロドラッグの最大限の安定性および貯蔵寿命を達成するために、好ましくは、フロルフェニコールリン酸エステルの酸形態と合わされる塩基（例えば、遊離アミン）のモル比が、その水溶液中で、０．６〜１．４の範囲に維持される。この水溶液中で、０．８〜１．２のモル比を維持することがより好ましい。この水溶液中で、０．９〜１．１のモル比を維持することがさらにより好ましい。特定の実施形態において、この溶液のｐＨは、約ｐＨ４．５に維持されるべきである。
【００６０】
本発明は、本発明の例示として提供される、以下の非限定的な実施例を参照することにより、より良好に理解され得る。以下の実施例は、本発明の実施形態をより十分に例示するために提示され、そしていかなる様式においても、本発明の広範な範囲を限定すると解釈されない。
【実施例】
【００６１】
（スキーム１）
（フロルフェニコールリン酸エステルの二ナトリウム塩の合成）
【００６２】
【化２５】
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（実施例１：［１Ｒ，２Ｓ−１−（４−メタンスルホニルフェニル）−２−（２，２−ジクロロアセチルアミノ）−３−フルオロプロピル］−ジ−ｔｅｒｔ−ブチルホスフェート（１））
フロルフェニコール（１４．３２ｇ、４０ｍｍｏｌ）およびテトラゾール（３．９６ｇ、５６ｍｍｏｌ）の無水テトラヒドロフラン溶液（ＴＨＦ、７０ｍＬ）に、窒素下で、Ｎ，Ｎ−ジエチルジ−ｔｅｒｔ−ブチルホスホルアミダイト（１２．８ｍＬ，４６ｍｍｏｌ）を滴下した。得られた溶液を、周囲温度にて１．５時間攪拌し、その間に微粒子沈殿を形成した。その懸濁液を−７８℃に冷却し、ｍ−クロロ過安息香酸（７５％、１２ｇ）のジクロロメタン溶液（６０ｍＬ）を滴下した後、攪拌をさらに２２．５時間続けた。得られた溶液を、周囲温度にて１．５時間攪拌し、次いで真空で濃縮した。残渣を、酢酸エチル（２００ｍＬ）に溶解し、１００ｍＬの炭酸水素ナトリウムの飽和水溶液で３回洗浄した。次いで、その有機層を無水硫酸ナトリウムで乾燥し、真空で濃縮し、ゴム状のものを得て、これを、シリカゲルフラッシュカラムクロマトグラフィーにより精製して、１０．６１ｇの化合物１を白色の泡状物として得た。
【００６３】
１Ｈ  ＮＭＲ（ｄ６  ＤＭＳＯ，４００ＭＨｚ）：δ８．９２（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝９．２），７．９１（ｄ，２Ｈ，Ｊ＝８．５），７．６２（ｄ，２Ｈ，Ｊ＝８．５），６．４８（ｓ，１Ｈ），５．５２（ｄｄ，１Ｈ，Ｊ＝８．５，３．２），４．７−４．３２（ｍ，３Ｈ），３．１９（ｓ，３Ｈ），１．３１（ｓ，９Ｈ），１．２９（ｓ，９Ｈ）。
【００６４】
ＥＳＭＳ（ネガティブモード，括弧の中に相対的な存在度を示す）：ｍ／ｚ  ２０８．８０（１００），４９１．６６（９０），４９３．５４（７０）．５４７．６８（３０），５４９．５１（２５，Ｍ＋）。
【００６５】
ＨＰＬＣ：ｔＲ  １１．２分、９６．６％純度（カラム：ＡＣＥ  ５  Ｃ１８，４．６×１５０ｍｍ；移動相０．１％  Ｈ３ＰＯ４／ＣＨ３ＣＮ水溶液勾配）。
【００６６】
（実施例２：［１Ｒ，２Ｓ−１−（４−メタンスルホニルフェニル）−２−（２，２−ジクロロアセチルアミノ）−３−フルオロプロピル］ホスフェート（２））
化合物１（１２．７５ｇ、２３．２ｍｍｏｌ）の無水ジクロロメタン溶液（１５０ｍＬ）に、窒素下で、トリフルオロ酢酸（１５ｍＬ）を添加し、この溶液を、周囲温度にて２時間攪拌した。次いで、この溶液を、真空で濃縮して、ゴム状のものを得、これを、ジエチルエーテルを用いて粉砕（ｔｒｉｔｕｒａｔｅ）し、９．９７ｇの化合物２を白色の固形物として得た。
【００６７】
１Ｈ  ＮＭＲ（ｄ６  ＤＭＳＯ，４００ｍＨｚ）：δ８．８１（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝９．０），７．８７（ｄ，２Ｈ，Ｊ＝８．４），７．６３（ｄ，２Ｈ，Ｊ＝８．４），６．４３（ｓ，１Ｈ），５．５８（ｄｄ，１Ｈ，Ｊ＝９．６，２．０），４．８０−４．３（ｍ，３Ｈ），３．１８（ｓ，３Ｈ）。
【００６８】
ＥＳＭＳ（ネガティブモード，括弧の中に相対的な存在度を示す）：ｍ／ｚ  ４３５．５５（１００），４３７．４５（７５）。
【００６９】
ＨＰＬＣ：ｔＲ  ９．１分，９１．９％純度（カラム：ＡＣＥ  ５  Ｃ１８，４．６×１５０ｍｍ，移動相０．１％  Ｈ３ＰＯ４／ＣＨ３ＣＮ勾配）。
【００７０】
（実施例３：［１Ｒ，２Ｓ−１−（４−メタンスルホニルフェニル）−２−（２，２−ジクロロアセチルアミノ）−３−フルオロプロピル］ホスフェートニナトリウム塩（３））
酸性化合物２（９．９７ｇ，２２．８ｍｍｏｌ）を、炭酸水素ナトリウム水溶液（３．８２ｇ，４５ｍＬの水中４５．５ｍｍｏｌ）に少しづつ添加した。得られた溶液を、溶出剤として水を用いてＨＰ−２０樹脂カラムを通した。生成物を含有する画分をプールし、そして凍結乾燥して、８．８１ｇの化合物３を白色の固形物として得た。
【００７１】
１Ｈ  ＮＭＲ（Ｄ２Ｏ，４００ｍＨｚ）：δ７．７５（ｄ，１Ｈ  Ｊ＝７．１），７．５７（ｄ，２Ｈ，Ｊ＝７．１），６．０３（ｓ，１Ｈ），５．３０（ｂｒ  ｄ，１Ｈ，Ｊ−９．７），４．７５（ｄｄｄ，１Ｈ，Ｊ＝４５．５，９．０，４．３），４．４７（ｄｔ，１Ｈ，Ｊ＝４７，９．０），４．３３（ｂｒ  ｍ，ｌｈ），３．０７（ｓ，３Ｈ）。
【００７２】
ＥＳＭＳ（ネガティブモード，括弧の中に相対的な存在度を示す）：ｍ／ｚ  ４３５．６０（１００），４３７．４９（７０）。
【００７３】
ＨＰＬＣ：ｔＲ  ９．２分，９７．３％純度（カラム：ＡＣＥ  ５  Ｃａ８，４．６×１５０ｍｍ，移動相：０．１％  Ｈ３ＰＯ４／ＣＨ３ＣＮ勾配）。
【００７４】
（実施例４：血清中のフロルフェニコールホスフェートのフロルフェニコールへの変換）
フロルフェニコールホスフェートを、３７℃にて、ラット血清またはウシ血清の０．１Ｍリン酸塩（ＫＨ２ＰＯ４）緩衝化媒体に溶解し得る。次いで、１００μＬのフロルフェニコールホスフェート含有媒体を、０時間後、０．５時間後、１時間後、２時間後、３時間後および４時間後に取り出し、１００μＬのアセトニトリル（ＣＨ３ＣＮ）と混合し、カラムクロマトグラフィー（Ｚｏｒｂａｘ  Ｃ８カラム  ４．６×１５ｃｍ，溶出：０．１％  Ｈ３ＰＯ４／ＣＨ３ＣＮ）により分析して、プロドラッグのフロルフェニコールへの変換％を決定し得る。
【００７５】
（実施例５：血清中のフロルフェニコールグルタレートのフロルフェニコールへの変換）
フロルフェニコールグルタレートを、３７℃にて、ラット血清またはウシ血清の０．１Ｍリン酸塩（ＫＨ２ＰＯ４）緩衝化媒体に溶解し得る。次いで、１００μＬのフロルフェニコールグルタレート含有媒体を、０時間後、０．５時間後、１時間後、２時間後、３時間後および４時間後に取り出し、１００μＬのアセトニトリル（ＣＨ３ＣＮ）と混合し、カラムクロマトグラフィー（Ｚｏｒｂａｘ  Ｃ８カラム  ４．６×１５ｃｍ，溶出：０．１％  Ｈ３ＰＯ４／ＣＨ３ＣＮ）により分析して、プロドラッグのフロルフェニコールへの変換％を決定し得る。
【００７６】
（実施例６：フロルフェニコールのリン酸エステルのプロドラッグの水溶性の測定）
固体リン酸エステルのプロドラッグ（ナトリウム塩）の連続アリコートを、攪拌しながら水に添加した。高粘度に起因して混合が困難になるまで添加を続け、その時点で、プロドラッグの全てを溶液中に維持した。この溶液（既知の容量）のアリコートを、既知の量の水で希釈し、ＨＰＬＣにより分析して、本来の濃度を決定した。濃度は、７００ｍｇ／ｍＬより高いことが見出された。
【００７７】
（実施例７：水溶液中のホスフェートプロドラッグの安定性）
水溶液中で相対的に安定であるが、延長された期間にわたって、フロルフェニコールのリン酸エステル（式Ｉ）は、ゆっくりとした崩壊を受け、遊離フロルフェニコールの放出ならびに環状リン酸ジエステルの形成をもたらす。環状ジエステルの形成は、リン酸アニオンのフッ素との置換を介して起こり、リン酸の二価のアニオンとの関与を必要とし、これは、対応する一価のアニオンよりも非常に求核性である。したがって、環状ジエステルの形成の速度は、溶液のｐＨに主に依存するか、またはより一般的には、リン酸のイオン化の程度に依存する。フロルフェニコールホスフェートの二ナトリウム塩プロドラッグの溶液を加熱することにより、プロドラッグから環状ジエステルへのほとんどの量の変換をもたらす。このプロドラッグの水溶液中の十分な安定性は、水酸化ナトリウムまたはエタノールアミンのいずれかの１等量に近い量を、フロルフェニコールホスフェートプロドラッグの濃縮した水溶液に添加して、約ｐＨ４．５〜ｐＨ５．５の範囲のｐＨを生じる場合に、達成し得る。しかし、ｐＨのこのようなわずかな変化でさえも、形成される環状リン酸ジエステルの量に注目すべき差異をもたらす。
【００７８】
【化２６】
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同様の結果が、エタノールアミンを使用して溶液のｐＨを調節した場合に、得られた。
【００７９】
【化２７】
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フロルフェニコールホスフェートプロドラッグは、ｐＨ４未満あるいは、中性またはそれ以上のｐＨ範囲においてより不安定であった。さらに、イオン強度の増加は、溶液中のフロルフェニコールホスフェートプロドラッグの水中での安定性を減少した。
【００８０】
（実施例８：ウシにおけるフロルフェニコールホスフェートのフロルフェニコールへの変換）
フロルフェニコールホスフェートを、約６００ｍｇ／ｍＬの濃度まで水に溶解した。次いで、この溶液を、６９〜１２１ｋｇの体重を有する３匹のウシに静脈内注射し、ウシの体重１ｋｇあたり約１０ｍｇの用量を提供した。薬物投与後に、血漿サンプルを回収し、ＨＰＬＣ−ＭＳ／ＭＳによりフロルフェニコールの濃度について分析した。血漿のフロルフェニコール濃度は、処置後急速に増加した（図２）。これらのデータは、プロドラッグが、ウシにおいて迅速にフロルフェニコールに切断されることを証明する。
【００８１】
（実施例９：イヌにおけるフロルフェニコールホスフェートのフロルフェニコールへの変換）
フロルフェニコールホスフェートを、約２００ｍｇ／ｍＬの濃度まで水に溶解した。次いで、この溶液を、９〜１５ｋｇの体重を有する３匹のイヌに静脈内注射し、体重１ｋｇあたり約１１ｍｇの用量を提供した。薬物投与後に、血漿サンプルを回収し、ＨＰＬＣ−ＭＳ／ＭＳによりフロルフェニコールの濃度について分析した。血漿のフロルフェニコール濃度は、処置後急速に増加した（図３）。これらのデータは、プロドラッグが、イヌにおいて迅速にフロルフェニコールに切断されることを証明する。
（実施例１０：ブタにおけるフロルフェニコールホスフェートのフロルフェニコールへの変換）
フロルフェニコールホスフェートを、約３００ｍｇ／ｍＬの濃度まで水に溶解した。次いで、この溶液を、１０〜１５ｋｇの体重を有する３匹のブタに静脈内注射し、体重１ｋｇあたり約６．７ｍｇの用量を提供した。薬物投与後に、血漿サンプルを回収し、フロルフェニコールの濃度について分析した。血漿のフロルフェニコール濃度は、処置後急速に増加した（図４）。これらのデータは、プロドラッグが、ブタにおいて迅速にフロルフェニコールに切断されることを証明する。
【００８２】
当業者に理解されるように、本発明の多くの改変およびバリエーションは、その精神および範囲から逸脱することなくなされ得る。本明細書中に記載される特定の実施形態は、例示のためのみに提供され、そして本発明は、権利を付与された特許請求の範囲に対する等価物の全範囲とともに、添付の特許請求の範囲によってのみ限定される。
【図面の簡単な説明】
【００８３】
【図１】図１は、ラットおよびウシ血清においてグルタル酸エステルと比較した、本発明のフロルフェニコールの、リン酸エステルへの変換速度および変換率のプロットを示す（三角形−ウシ血清のリン酸エステル；円−ラット血清のリン酸エステル；菱形−ウシ血清のグルタル酸エステル；四角形−ラット血清のグルタル酸エステル）。
【図２】図２は、フロルフェニコールリン酸エステルの静脈内投与後に、子ウシの血漿中で検出されたフロルフェニコール濃度の図を示す。プロットは、子ウシの体重１ｋｇあたり約１０ｍｇの用量において、フロルフェニコールリン酸エステルプロドラッグの静脈内投与後の、３匹の子ウシの血漿中で検出されたフロルフェニコール濃度を示す。各々の記号は、異なる子ウシのデータを示す。
【図３】図３は、フロルフェニコールリン酸エステルの静脈内投与後の、イヌ血漿中で検出されたフロルフェニコール濃度の図を示す。このプロットは、体重１ｋｇあたり約１１．１ｍｇの用量（この用量は、８．３ｍｇ／ｋｇのフロルフェニコール等価物の用量に等しい）において、フロルフェニコールリン酸エステルプロドラッグの静脈内投与後に、３匹のイヌの血漿中のフロルフェニコール濃度を示す。各々の記号は、異なるイヌのデータを示す。
【図４】図４は、フロルフェニコールリン酸エステルの静脈内投与後の、ブタ血漿中のフロルフェニコール濃度の図を示す。このプロットは、体重１ｋｇあたり約６．７ｍｇの用量（この用量は、５ｍｇ／ｋｇのフロルフェニコール等価物の用量に等しい）において、フロルフェニコールリン酸エステルプロドラッグの静脈内投与後に、３匹のブタの血漿中のフロルフェニコール濃度を示す。各々の記号は、異なるブタのデータを示す。
【図１】
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【図２】
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【図３】
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【図４】
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【国際調査報告】
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