(57)【要約】  本発明は、トリサイクリック誘導体またはその薬学的に許容される塩、その製造方法およびそれを含有する薬学的組成物に関する。具体的に、本発明は、コルヒチンの誘導体としてのトリサイクリック誘導体またはその薬学的に許容される塩、その製造方法およびそれを含有する薬学的組成物に関する。  本発明に係るトリサイクリック誘導体は、癌細胞株に対しては非常に強い細胞毒性を示し、動物毒性実験ではコルヒチンまたはタクソール注射剤より著しく減少した毒性を示し、腫瘍の大きさおよび腫瘍の重量を著しく減少させ、ＨＵＶＥＣ細胞で強力な血管新生抑制作用を示すので、臨床的に有用な抗癌剤、抗増殖抑制剤および血管新生抑制剤として使用できる。
2007520422.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
下記化学式１で表わされるトリサイクリック誘導体またはその薬学的に許容される塩。
【化１】
2007520422.tif 000113
（式中、（１）Ｒ１は、化学式−Ｔ１−Ｂ１であり；
前記において、Ｔ１は、−Ｘ１−、−Ｘ１−Ｃ（Ｘ２）−、−Ｎ（Ｒ５）−、−Ｎ（Ｒ５）Ｃ（Ｘ２）−、−Ｎ（Ｒ５）Ｓ（Ｏ）ｎ１−、−Ｎ（Ｒ５）Ｃ（Ｏ）−Ｘ１−または−Ｎ（Ｒ５）Ｃ（Ｘ１）ＮＨ−であり、この際、Ｘ１、Ｘ２はそれぞれＯまたはＳであり、Ｒ５はそれぞれ水素またはＣ１〜Ｃ５アルキル基であり、ｎ１は１〜２の整数であり；Ｂ１は下記（ａ）〜（ｊ）の基よりなる群から選択され、
【化２】
2007520422.tif 000114
前記において、Ｒ６とＲ８は、それぞれ水素、ハロゲン、ヒドロキシ、Ｃ１〜Ｃ３アルコキシ、アミノ、ニトロ、シアノまたはＣ１〜Ｃ３低級アルキル基であり；Ｒ７とＲ９は、それぞれ独立にハロゲン、ヒドロキシ、メルカプト、−ＯＮＯ、−ＯＮＯ２またはＳＮＯであり、この際、Ｒ７とＲ９は、互いに同じでも異なってもよく；
【化３】
2007520422.tif 000115
は、ヘテロ原子を１〜２つ含むＣ５〜Ｃ６の飽和または不飽和複素環であり、この際、前記へテロ原子は、Ｏ、ＳおよびＮよりなる群から選択され、好ましくは、
【化４】
2007520422.tif 000116
であり、最も好ましくは、位置２番および６番または２番および５番に置換されたＣ１（ピリジル基）、２番および５番または２番および４番に置換されたＣ７（ピロリル基）、Ｃ１１（チオフェニル基）またはＣ１２（フラニル基）であり、置換体の結合は、対称および非対称の位置にありうり；Ｚ１は、Ｃ１〜Ｃ１０の直鎖または分岐鎖アルキル基、好ましくは、Ｃ２〜Ｃ５直鎖または分岐鎖アルキル基、または置換基を有するシクロアルキル基であり；Ｚ２とＺ３は、それぞれ独立に水素またはメチル基を意味し、この際、Ｚ２がメチル基のときにはＺ３は水素であり、Ｚ３がメチル基のときにはＺ２が水素であり；Ｔ２は−Ｘ１−または−Ｘ１−Ｃ（Ｘ２）−であり、この際、Ｘ１、Ｘ２は、それぞれＯまたはＳであり、Ｂ２は、前記（ａ）、（ｂ）、（ｃ）、（ｄ）または（ｅ）の基よりなる群から選ばれ；ｎ２は０〜３の整数であり、ｎ３は０〜５の整数であり、ｎ４は１〜５の整数であり、ｎ５とｎ６はそれぞれ独立に１〜６の整数であり；
（２）Ｒ２とＲ３は、それぞれ独立に水素、−ＰＯ３Ｈ２、ホスホン酸塩、硫酸塩、Ｃ３〜Ｃ７シクロアルキル、Ｃ２-〜Ｃ７アルケニル、Ｃ２〜Ｃ７アルキニル、Ｃ１〜Ｃ７アルカノイル、Ｃ１〜Ｃ７直鎖または分岐鎖アルキルまたは糖であり、この際、糖は、グルクロニル、グルコシルまたはガラクトシルなどの単糖類を意味し；
（３）Ｒ４は、ＯＣＨ３、ＳＣＨ３またはＮＲ１０Ｒ１１であり、この際、Ｒ１０とＲ１１は、それぞれ独立に水素、Ｃ１〜５アルキルであり；
（４）Ｘは、ＯまたはＳである。）
【請求項２】
前記化学式１の化合物が、
（１）Ｒ１は、化学式−Ｔ１−Ｂ１であり；
前記において、Ｔ１は、−Ｎ（Ｒ５）Ｃ（Ｘ２）−、Ｎ（Ｒ５）Ｃ（Ｏ）−Ｘ１−または−Ｎ（Ｒ５）Ｃ（Ｘ１）ＮＨ−であり、この際、Ｘ１、Ｘ２はそれぞれＯであり、Ｒ５はそれぞれ水素またはＣ１〜Ｃ５アルキル基であり；Ｂ１は下記（ａ）〜（ｊ）の基よりなる群から選択され、
【化５】
2007520422.tif 000117
前記において、Ｒ６とＲ８は、それぞれ水素、ハロゲン、ヒドロキシ、Ｃ１〜Ｃ３アルコキシ、アミノ、ニトロ、シアノまたはＣ１〜Ｃ３低級アルキル基であり；Ｒ７とＲ９は、それぞれ独立にハロゲン、ヒドロキシ、メルカプト（チオール基）、−ＯＮＯ、−ＯＮＯ２またはＳＮＯであり、この際、Ｒ７とＲ９は、お互い同じでも異なってもよく；
【化６】
2007520422.tif 000118
は、ヘテロ原子を１〜２つ含むＣ５〜Ｃ６の飽和または不飽和複素環であり、この際、前記へテロ原子は、Ｏ、ＳおよびＮよりなる群から選択され、好ましくは、
【化７】
2007520422.tif 000119
であり、最も好ましくは、位置２番および６番または２番および５番に置換されたＣ１（ピリジル基）、２番および５番または２番および４番に置換されたＣ７（ピロリル基）、Ｃ１１（チオフェニル基）またはＣ１２（フラニル基）であり、置換体の結合は、対称および非対称の位置にありうり；Ｚ１は、Ｃ１〜Ｃ１０直鎖または分岐鎖アルキル基、好ましくは、Ｃ２〜Ｃ５直鎖または分岐鎖アルキル基、または置換基を有するシクロアルキル基であり；Ｚ２とＺ３は、それぞれ独立に水素またはメチル基を意味し、この際、Ｚ２がメチル基のときにはＺ３は水素であり、Ｚ３がメチル基のときにはＺ２が水素であり；Ｔ２は−Ｘ１−または−Ｘ１−Ｃ（Ｘ２）−であり、この際、Ｘ１、Ｘ２は、それぞれＯまたはＳであり；Ｂ２は、前記（ａ）、（ｂ）、（ｃ）、（ｄ）または（ｅ）の基よりなる群から選択され；ｎ２は０〜３の整数であり、ｎ３は０〜５の整数であり、ｎ４は１〜３の整数であり、ｎ５とｎ６はそれぞれ独立に１〜３の整数であり；
（２）Ｒ２とＲ３は、それぞれ独立にＣ３〜Ｃ７シクロアルキルまたはＣ１〜Ｃ７アルキルであり；
（３）Ｒ４は、ＳＣＨ３またはＯＣＨ３であり；
（４）Ｘは、ＯまたはＳであることを特徴とする、トリサイクリック誘導体またはその薬学的に許容される塩。
【請求項３】
前記トリサイクリック誘導体が、
１）６−ニトロオキシメチル−Ｎ−［（７Ｓ）−１，２，３−トリメトキシ−１０−メチルスルファニル−９−オキソ−５，６，７，９−テトラヒドロ−ベンゾ［ａ］ヘプタレン−７−イル］−ニコチンアミド；
２）５−ニトロオキシメチル−フラン−２−カルボン酸−［（７Ｓ）−１，２，３−トリメトキシ−１０−メチルスルファニル−９−オキソ−５，６，７，９−テトラヒドロ−ベンゾ［ａ］ヘプタレン−７−イル］−アミド；
３）Ｎ−［（７Ｓ）−３−イソプロポキシ−１，２−ジメトキシ−１０−メチルスルファニル−９−オキソ−５，６，７，９−テトラヒドロ−ベンゾ［ａ］ヘプタレン−７−イル］−３−ニトロオキシメチル−ベンズアミド；
４）Ｎ−［（７Ｓ）−３−エトキシ−１，２−ジメトキシ−１０−メチルスルファニル−９−オキソ−５，６，７，９−テトラヒドロ−ベンゾ［ａ］ヘプタレン−７−イル］−３−ニトロオキシメチル−ベンズアミド；
５）６−ニトロオキシメチル−ピリジン−２−カルボン酸−［（７Ｓ）−１，２，３−トリメトキシ−１０−メチルスルファニル−９−オキソ−５，６，７，９−テトラヒドロ−ベンゾ［ａ］ヘプタレン−７−イル］−アミド；
６）５−ニトロオキシメチル−チオフェン−２−カルボン酸−［（７Ｓ）−１，２，３−トリメトキシ−１０−メチルスルファニル−９−オキソ−５，６，７，９−テトラヒドロ−ベンゾ［ａ］ヘプタレン−７−イル］−アミド；
７）Ｎ−［（７Ｓ）−３−シクロペンチルオキシ−１，２−ジメトキシ−１０−メチルスルファニル−９−オキソ−５，６，７，９−テトラヒドロ−ベンゾ［ａ］ヘプタレン−７−イル］−３−ニトロオキシメチル−ベンズアミド；
８）Ｎ−［（７Ｓ）−３−エトキシ−１，２−ジメトキシ−１０−メチルスルファニル−９−オキソ−５，６，７，９−テトラヒドロ−ベンゾ［ａ］ヘプタレン−７−イル］−２−フルオロ−３−ニトロオキシメチル−ベンズアミド；
９）２−フルオロ−Ｎ−［（７Ｓ）−３−イソプロポキシ−１，２−ジメトキシ−１０−メチルスルファニル−９−オキソ−５，６，７，９−テトラヒドロ−ベンゾ［ａ］ヘプタレン−７−イル］−３−ニトロオキシメチル−ベンズアミド；
１０）２−フルオロ−３−ニトロオキシメチル−Ｎ−［（７Ｓ）−１，２，３−トリメトキシ−１０−メチルスルファニル−９−オキソ−５，６，７，９−テトラヒドロ−ベンゾ［ａ］ヘプタレン−７−イル］−ベンズアミド；
１１）Ｎ−［（７Ｓ）−３−シクロペンチルオキシ−１，２−ジメトキシ−１０−メチルスルファニル−９−オキソ−５，６，７，９−テトラヒドロ−ベンゾ［ａ］ヘプタレン−７−イル］−２−フルオロ−３−ニトロオキシメチル−ベンズアミド；
１２）３−フルオロ−５−ニトロオキシメチル−Ｎ−［（７Ｓ）−１，２，３−トリメトキシ−１０−メチルスルファニル−９−オキソ−５，６，７，９−テトラヒドロ−ベンゾ［ａ］ヘプタレン−７−イル］−ベンズアミド；
１３）Ｎ−［（７Ｓ）−３−エトキシ−１，２−ジメトキシ−１０−メチルスルファニル−９−オキソ−５，６，７，９−テトラヒドロ−ベンゾ［ａ］ヘプタレン−７−イル］−３−フルオロ−５−ニトロオキシメチル−ベンズアミド；
１４）３−フルオロ−Ｎ−［（７Ｓ）−３−イソプロポキシ−１，２−ジメトキシ−１０−メチルスルファニル−９−オキソ−５，６，７，９−テトラヒドロ−ベンゾ［ａ］ヘプタレン−７−イル］−５−ニトロオキシメチル−ベンズアミド；
１５）Ｎ−［（７Ｓ）−３−シクロペンチルオキシ−１，２−ジメトキシ−１０−メチルスルファニル−９−オキソ−５，６，７，９−テトラヒドロ−ベンゾ［ａ］ヘプタレン−７−イル］−３−フルオロ−５−ニトロオキシメチル−ベンズアミド；
１６）４−フルオロ−３−ニトロオキシメチル−Ｎ−［（７Ｓ）−１，２，３−トリメトキシ−１０−メチルスルファニル−９−オキソ−５，６，７，９−テトラヒドロ−ベンゾ［ａ］ヘプタレン−７−イル］−ベンズアミド；
１７）２−フルオロ−５−ニトロオキシメチル−Ｎ−［（７Ｓ）−１，２，３−トリメトキシ−１０−メチルスルファニル−９−オキソ−５，６，７，９−テトラヒドロ−ベンゾ［ａ］ヘプタレン−７−イル］−ベンズアミド；
１８）３−ヒドロキシ−５−ニトロオキシメチル−Ｎ−［（７Ｓ）−１，２，３−トリメトキシ−１０−メチルスルファニル−９−オキソ−５，６，７，９−テトラヒドロ−ベンゾ［ａ］ヘプタレン−７−イル］−ベンズアミド；
１９）３，５−ｂｉｓ−ニトロオキシメチル−Ｎ−［（７Ｓ）−１，２，３−トリメトキシ−１０−メチルスルファニル−９−オキソ−５，６，７，９−テトラヒドロ−ベンゾ［ａ］ヘプタレン−７−イル］−ベンズアミド；
２０）２−ヒドロキシ−４−ニトロオキシメチル−Ｎ−［（７Ｓ）−１，２，３−トリメトキシ−１０−メチルスルファニル−９−オキソ−５，６，７，９−テトラヒドロ−ベンゾ［ａ］ヘプタレン−７−イル］−ベンズアミド；
２１）４−ニトロオキシメチル−チオフェン−２−カルボン酸［（７Ｓ）−１，２，３−トリメトキシ−１０−メチルスルファニル−９−オキソ−５，６，７，９−テトラヒドロ−ベンゾ［ａ］ヘプタレン−７−イル］−アミド；
２２）３−ニトロオキシメチル−チオフェン−２−カルボン酸［（７Ｓ）−１，２，３−トリメトキシ−１０−メチルスルファニル−９−オキソ−５，６，７，９−テトラヒドロ−ベンゾ［ａ］ヘプタレン−７−イル］−アミド；
２３）２−（３−ニトロオキシメチル−フェニル）−Ｎ−［（７Ｓ）−１，２，３−トリメトキシ−１０−メチルスルファニル−９−オキソ−５，６，７，９−テトラヒドロ−ベンゾ［ａ］ヘプタレン−７−イル］−アセトアミド；
２４）３−（２−ニトロオキシ−エチル）−Ｎ−［（７Ｓ）−１，２，３−トリメトキシ−１０−メチルスルファニル−９−オキソ−５，６，７，９−テトラヒドロ−ベンゾ［ａ］ヘプタレン−７−イル］−ベンズアミド；
２５）３−ニトロオキシ安息香酸−５−［（７Ｓ）−１，２，３−トリメトキシ−１０−メチルスルファニル−９−オキソ−５，６，７，９−テトラヒドロ−ベンゾ［ａ］ヘプタレン−７−イル−カルバモイル］−ピリジン−２−イル−メチルエステル；
２６）４−ニトロオキシ酪酸−５−［（７Ｓ）−１，２，３−トリメトキシ−１０−メチルスルファニル−９−オキソ−５，６，７，９−テトラヒドロ−ベンゾ［ａ］ヘプタレン−７−イル−カルバモイル］−ピリジン−２−イル−メチルエステル；
２７）３−ニトロオキシメトキシ安息香酸−６−［（７Ｓ）−１，２，３−トリメトキシ−１０−メチルスルファニル−９−オキソ−５，６，７，９−テトラヒドロ−ベンゾ［ａ］ヘプタレン−７−イル−カルバモイル］−ピリジン−２−イル−メチルエステル；
２８）４−ニトロオキシ酪酸−６−［（７Ｓ）−１，２，３−トリメトキシ−１０−メチルスルファニル−９−オキソ−５，６，７，９−テトラヒドロ−ベンゾ［ａ］ヘプタレン−７−イル−カルバモイル］−ピリジン−２−イル−メチルエステル；
２９）３−ニトロオキシメチル安息香酸−２−［（７Ｓ）−１，２，３−トリメトキシ−１０−メチルスルファニル−９−オキソ−５，６，７，９−テトラヒドロ−ベンゾ［ａ］ヘプタレン−７−イル−カルバモイル］−フェニルエステル；
３０）４−ニトロオキシ酪酸−２−［（７Ｓ）−１，２，３−トリメトキシ−１０−メチルスルファニル−９−オキソ−５，６，７，９−テトラヒドロ−ベンゾ［ａ］ヘプタレン−７−イル−カルバモイル］−フェニルエステル；
３１）３−ニトロオキシメチル安息香酸−３−［（７Ｓ）−１，２，３−トリメトキシ−１０−メチルスルファニル−９−オキソ−５，６，７，９−テトラヒドロ−ベンゾ［ａ］ヘプタレン−７−イル−カルバモイル］−フェニルエステル；
３２）４−ニトロオキシ酪酸−３−［（７Ｓ）−１，２，３−トリメトキシ−１０−メチルスルファニル−９−オキソ−５，６，７，９−テトラヒドロ−ベンゾ［ａ］ヘプタレン−７−イル−カルバモイル］−フェニルエステル；
３３）３−ニトロオキシメチル安息香酸−３−［（７Ｓ）−１，２，３−トリメトキシ−１０−メチルスルファニル−９−オキソ−５，６，７，９−テトラヒドロ−ベンゾ［ａ］ヘプタレン−７−イル−カルバモイル］−ベンジルエステル；
３４）４−ニトロオキシ酪酸−３−［（７Ｓ）−１，２，３−トリメトキシ−１０−メチルスルファニル−９−オキソ−５，６，７，９−テトラヒドロ−ベンゾ［ａ］ヘプタレン−７−イル−カルバモイル］−ベンジルエステル；
３５）２−ニトロソチオ−Ｎ−［（７Ｓ）−１，２，３−トリメトキシ−１０−メチルスルファニル−９−オキソ−５，６，７，９−テトラヒドロ−ベンゾ［ａ］ヘプタレン−７−イル］−ベンズアミド；
３６）３−ニトロソオキシメチル−Ｎ−［（７Ｓ）−１，２，３−トリメトキシ−１０−メチルスルファニル−９−オキソ−５，６，７，９−テトラヒドロ−ベンゾ［ａ］ヘプタレン−７−イル］−ベンズアミド；
３７）３−フルオロ−５−ニトロソオキシメチル−Ｎ−［（７Ｓ）−１，２，３−トリメトキシ−１０−メチルスルファニル−９−オキソ−５，６，７，９−テトラヒドロ−ベンゾ［ａ］ヘプタレン−７−イル］−ベンズアミド；
３８）３−ニトロソチオメチル−Ｎ−［（７Ｓ）−１，２，３−トリメトキシ−１０−メチルスルファニル−９−オキソ−５，６，７，９−テトラヒドロ−ベンゾ［ａ］ヘプタレン−７−イル］−ベンズアミド；
３９）３−フルオロ−５−ニトロソチオメチル−Ｎ−［（７Ｓ）−１，２，３−トリメトキシ−１０−メチルスルファニル−９−オキソ−５，６，７，９−テトラヒドロ−ベンゾ［ａ］ヘプタレン−７−イル］−ベンズアミド；
４０）３−フルオロ−５−ニトロオキシメチル−Ｎ−［（７Ｓ）−１，２，３，１０−テトラメトキシ−９−オキソ−５，６，７，９−テトラヒドロ−ベンゾ［ａ］ヘプタレン−７−イル］−ベンズアミド；
４１）３−ニトロオキシメチル−Ｎ−メチル−Ｎ−［（７Ｓ）−１，２，３−トリメトキシ−１０−メチルスルファニル−９−オキソ−５，６，７，９−テトラヒドロ−ベンゾ［ａ］ヘプタレン−７−イル］−ベンズアミド；
４２）３−フルオロ−Ｎ−メチル−５−ニトロオキシメチル−Ｎ−［（７Ｓ）−１，２，３−トリメトキシ−１０−メチルスルファニル−９−オキソ−５，６，７，９−テトラヒドロ−ベンゾ［ａ］ヘプタレン−７−イル］−ベンズアミド；
４３）２−（３−フルオロ−５−ニトロオキシメチル−フェニル）−Ｎ−［（７Ｓ）−１，２，３−トリメトキシ−１０−メチルスルファニル−９−オキソ−５，６，７，９−テトラヒドロ−ベンゾ［ａ］ヘプタレン−７−イル］−アセトアミド；または
４４）２−（２−フルオロ−５−ニトロオキシメチル−フェニル）−Ｎ−［（７Ｓ）−１，２，３−トリメトキシ−１０−メチルスルファニル−９−オキソ−５，６，７，９−テトラヒドロ−ベンゾ［ａ］ヘプタレン−７−イル］−アセトアミドであることを特徴とする、請求項１に記載のトリサイクリック誘導体またはその薬学的に許容される塩。
【請求項４】
下記反応式１で表されるように、
（１）化学式（III）の化合物を化学式（IV）の化合物または化学式（VI）の化合物と反応させて化学式（Ｖ）の化合物または化学式（VII）の化合物を製造し、あるいは生成された化学式（VII）の化合物をハロゲン化合物と反応させて化学式（Ｖ）の化合物を製造する段階（第１段階）と、
（２）前記製造された化学式（Ｖ）の化合物または化学式（VII）の化合物をニトロ化反応またはニトロソ化反応させて化学式（IIａ）の化合物を製造する段階（第２段階）とを含む、トリサイクリック誘導体を製造する方法。
【化８】
2007520422.tif 000120
（前記反応式において、Ｄは、
【化９】
2007520422.tif 000121
であり、この際、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４およびＸは、請求項１の化学式１で定義したとおりであり；
Ｒ５は、水素または低級アルキルを示し、Ｘ１は、ＯまたはＳを示し、Ｈａｌ１とＨａｌ２は、ハロゲンを示し、一般式（IV）のＨａｌ１とＨａｌ２は、それぞれ同一または異なるハロゲン、例えばＦ、Ｃｌ、ＢｒまたはＩを示し、Ｙは、下記の一般式（a’）、（ｂ’）、（ｃ’）、（ｄ’）または（ｅ’）を示し、
【化１０】
2007520422.tif 000122
この際、
【化１１】
2007520422.tif 000123
、Ｒ６、Ｒ８、Ｒ９、Ｚ１、Ｚ２、Ｚ３、ｎ２、ｎ３、ｎ４、ｎ５およびｎ６は、請求項１の化学式１で定義したとおりである。）
【請求項５】
請求項１〜３のいずれか１項に記載のトリサイクリック誘導体またはその薬学的に許容される塩を有効成分として含有する抗癌剤または抗増殖抑制剤。
【請求項６】
請求項１〜３のいずれか１項に記載のトリサイクリック誘導体またはその薬学的に許容される塩を有効成分として含有する血管新生抑制剤。
【発明の詳細な説明】
【発明の詳細な説明】
【０００１】
〔技術分野〕
本発明は、下記化学式１で表わされるトリサイクリック誘導体またはその薬学的に許容される塩、その製造方法およびそれを含有する薬学的組成物に関する。
【０００２】
【化１】
2007520422.tif 000003
【０００３】
（式中、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４およびＸは、下記に記載されているとおりである。）
【０００４】
〔背景技術〕
コルヒチンは、シュードアルカロイド(psudo-alkaloid)化合物であって、抗炎症作用を持っており、関節リウマチ(rheumatoid arthritis)の治療にも使用されるという報告［臨床雑誌内科、86, No.2, 342-345, 2000］があり、コルヒチンおよびチオコルヒチン誘導体は、筋肉弛緩作用および抗炎症作用を示し(US 5 973 204, EP 0870761 A1)、チオコルヒコシド(thiocolchicoside)は、骨格筋に対する痙縮および炎症状態の治療に使用されている。また、コルヒチンは、動物移植試験において移植臓器に対して単球(monocyte)およびＴ細胞の浸潤(infiltration)を抑制させ且つ炎症性サイトカインであるＴＮＦ−α、ＩＬ−１およびＩＬ−６の生成を減少させることにより、免疫抑制作用を示すものと報告されている［J. Am. Soc. Nephrol., 4(6), 1294-1299, 1993; Transplantation Proceedings, 32, 2091-2092, 2002］。したがって、コルヒチンを免疫抑制剤として開発する研究（WO 02/100824）も行われている。
【０００５】
コルヒチンは、チューブリン(tubulin)との反応によって微小管(microtubule)を不安定化させる作用を行うことにより、細胞分裂を抑制する［The Alkaloids, 1991, 41, 125-176; US 4 533 675 ］。このようなコルヒチンは、痛風(gout)およびそれに関連した炎症性疾患の治療剤として用いられている。ところが、コルヒチンは、胃腸管毒性および制限的な治療指数(therapeutic index) によって、その使用が急性炎症性疾患の治療剤に限られている［Pharmacotherapy, 11, 3, 196-211, 1991］。
【０００６】
また、コルヒチン誘導体を抗癌剤として開発するための研究［US 3 222 253; US 00/6080739; WO 97/01570］が行われてきたが、現在まで成功しておらず、デメコルチン(demecolcine)のみが白血病治療剤として病院で採用されている。ところが、デメコルチンも、胃腸管毒性および制限的な治療指数は解決されていない。
【０００７】
本発明者らは、毒性を減少させて安定的な治療指数を示し、優れた抗癌作用、抗増殖抑制作用および血管新生抑制作用を有するコルヒチン誘導体を開発することにより、本発明を完成した。
【０００８】
〔発明の概要〕
本発明の目的は、毒性を減少させて安定的な治療指数を示し、優れた抗癌作用、抗増殖抑制作用および血管新生抑制作用を有するトリサイクリック誘導体またはその薬学的に許容される塩を提供することにある。
【０００９】
また、本発明の他の目的は、前記トリサイクリック誘導体またはその薬学的に許容される塩の製造方法を提供することにある。
【００１０】
また、本発明の別の目的は、前記トリサイクリック誘導体またはその薬学的に許容される塩を含有する薬学的組成物を提供することにある。
【００１１】
本発明は、下記化学式１で表わされるトリサクリック誘導体またはその薬学的に許容される塩を提供する。
【００１２】
【化２】
2007520422.tif 000004
【００１３】
（式中、（１）Ｒ１は、化学式−Ｔ１−Ｂ１であり；
前記において、Ｔ１は、−Ｘ１−、−Ｘ１−Ｃ（Ｘ２）−、−Ｎ（Ｒ５）−、−Ｎ（Ｒ５）Ｃ（Ｘ２）−、−Ｎ（Ｒ５）Ｓ（Ｏ）ｎ１−、−Ｎ（Ｒ-５）Ｃ（Ｏ）−Ｘ１−または−Ｎ（Ｒ５）Ｃ（Ｘ１）ＮＨ−であり、この際、Ｘ１、Ｘ２はそれぞれＯまたはＳであり、Ｒ５はそれぞれ水素またはＣ１〜Ｃ５アルキル基であり、ｎ１は１〜２の整数であり；Ｂ１は下記（ａ）〜（ｊ）の基よりなる群から選択され、
【００１４】
【化３】
2007520422.tif 000005
【００１５】
前記において、Ｒ６とＲ８は、それぞれ水素、ハロゲン、ヒドロキシ、Ｃ１〜Ｃ３アルコキシ、アミノ、ニトロ、シアノまたはＣ１〜Ｃ３低級アルキル基であり；Ｒ７とＲ９は、それぞれ独立にハロゲン、ヒドロキシ、メルカプト、−ＯＮＯ、−ＯＮＯ２またはＳＮＯであり、この際、Ｒ７とＲ９は、互いに同じでも異なってもよく；
【００１６】
【化４】
2007520422.tif 000006
【００１７】
は、ヘテロ原子を１〜２つ含むＣ５〜Ｃ６の飽和または不飽和複素環であり、この際、前記へテロ原子は、Ｏ、ＳおよびＮよりなる群から選択され、好ましくは、
【００１８】
【化５】
2007520422.tif 000007
【００１９】
であり、最も好ましくは、位置２番および６番または２番および５番に置換されたＣ１（ピリジル基）、２番および５番または２番および４番に置換されたＣ７（ピロリル基）、Ｃ１１（チオフェニル基）またはＣ１２（フラニル基）であり、置換体の結合は、対称および非対称の位置にありうり；Ｚ１は、Ｃ１〜Ｃ１０の直鎖または分岐鎖アルキル基、好ましくは、Ｃ２〜Ｃ５直鎖または分岐鎖アルキル基、または置換基を有するシクロアルキル基であり；Ｚ２とＺ３は、それぞれ独立に水素またはメチル基を意味し、この際、Ｚ２がメチル基のときにはＺ３は水素であり、Ｚ３がメチル基のときにはＺ２が水素であり；Ｔ２は−Ｘ１−または−Ｘ１−Ｃ（Ｘ２）−であり、この際、Ｘ１、Ｘ２は、それぞれＯまたはＳであり、Ｂ２は、前記（ａ）、（ｂ）、（ｃ）、（ｄ）または（ｅ）の基よりなる群から選ばれ；ｎ２は０〜３の整数であり、ｎ３は０〜５の整数であり、ｎ４は１〜５の整数であり、ｎ５とｎ６はそれぞれ独立に１〜６の整数であり；
（２）Ｒ２とＲ３は、それぞれ独立に水素、−ＰＯ３Ｈ２、ホスホン酸塩、硫酸塩、Ｃ３〜Ｃ７シクロアルキル、Ｃ２〜Ｃ７アルケニル、Ｃ２〜Ｃ７アルキニル、Ｃ１〜Ｃ７アルカノイル、Ｃ１〜Ｃ７直鎖または分岐鎖アルキルまたは糖であり、この際、糖は、グルクロニル、グルコシルまたはガラクトシルなどの単糖類を意味し；
（３）Ｒ４は、ＯＣＨ３、ＳＣＨ３またはＮＲ１０Ｒ１１であり、この際、Ｒ１０とＲ１１は、それぞれ独立に水素、Ｃ１〜５アルキルであり；
（４）Ｘは、ＯまたはＳである。）
【００２０】
好ましくは、前記化学式１において、
（１）Ｒ１は、化学式−Ｔ１−Ｂ１であり；
前記において、Ｔ１は、−Ｎ（Ｒ５）Ｃ（Ｘ２）−、Ｎ（Ｒ５）Ｃ（Ｏ）−Ｘ１−または−Ｎ（Ｒ５）Ｃ（Ｘ１）ＮＨ−であり、この際、Ｘ１、Ｘ２はそれぞれＯであり、Ｒ５はそれぞれ水素またはＣ１〜Ｃ５アルキル基であり；Ｂ１は下記（ａ）〜（ｊ）の基よりなる群から選択され、
【００２１】
【化６】
2007520422.tif 000008
【００２２】
前記において、Ｒ６とＲ８は、それぞれ水素、ハロゲン、ヒドロキシ、Ｃ１〜Ｃ３アルコキシ、アミノ、ニトロ、シアノまたはＣ１〜Ｃ３低級アルキル基であり；Ｒ７とＲ９は、それぞれ独立にハロゲン、ヒドロキシ、メルカプト（チオール基）、−ＯＮＯ、−ＯＮＯ２またはＳＮＯであり、この際、Ｒ７とＲ９は、お互い同じでも異なってもよく；
【００２３】
【化７】
2007520422.tif 000009
【００２４】
は、ヘテロ原子を１〜２つ含むＣ５〜Ｃ６の飽和または不飽和複素環であり、この際、前記へテロ原子は、Ｏ、ＳおよびＮよりなる群から選択され、好ましくは、
【００２５】
【化８】
2007520422.tif 000010
【００２６】
であり、最も好ましくは、位置２番および６番または２番および５番に置換されたＣ１（ピリジル基）、２番および５番または２番および４番に置換されたＣ７（ピロリル基）、Ｃ１１（チオフェニル基）またはＣ１２（フラニル基）であり、置換体の結合は、対称および非対称の位置にありうり；Ｚ１は、Ｃ１〜Ｃ１０直鎖または分岐鎖アルキル基、好ましくは、Ｃ２〜Ｃ５直鎖または分岐鎖アルキル基、または置換基を有するシクロアルキル基であり；Ｚ２とＺ３は、それぞれ独立に水素またはメチル基を意味し、この際、Ｚ２がメチル基のときにはＺ３は水素であり、Ｚ３がメチル基のときにはＺ２が水素であり；Ｔ２は−Ｘ１−または−Ｘ１−Ｃ（Ｘ２）−であり、この際、Ｘ１、Ｘ２は、それぞれＯまたはＳであり；Ｂ２は、前記（ａ）、（ｂ）、（ｃ）、（ｄ）または（ｅ）の基よりなる群から選択され；ｎ２は０〜３の整数であり、ｎ３は０〜５の整数であり、ｎ４は１〜３の整数であり、ｎ５とｎ６はそれぞれ独立に１〜３の整数であり；
（２）Ｒ２とＲ３は、それぞれ独立にＣ３〜Ｃ７シクロアルキルまたはＣ１〜Ｃ７アルキルであり；
（３）Ｒ４は、ＳＣＨ３またはＯＣＨ３であり；
（４）Ｘは、ＯまたはＳである。）
【００２７】
本発明に係る好適なトリサイクリック誘導体は、
１）６−ニトロオキシメチル−Ｎ−［（７Ｓ）−１，２，３−トリメトキシ−１０−メチルスルファニル−９−オキソ−５，６，７，９−テトラヒドロ−ベンゾ［ａ］ヘプタレン−７−イル］−ニコチンアミド；
２）５−ニトロオキシメチル−フラン−２−カルボン酸−［（７Ｓ）−１，２，３−トリメトキシ−１０−メチルスルファニル−９−オキソ−５，６，７，９−テトラヒドロ−ベンゾ［ａ］ヘプタレン−７−イル］−アミド；
３）Ｎ−［（７Ｓ）−３−イソプロポキシ−１，２−ジメトキシ−１０−メチルスルファニル−９−オキソ−５，６，７，９−テトラヒドロ−ベンゾ［ａ］ヘプタレン−７−イル］−３−ニトロオキシメチルベンズアミド；
４）Ｎ−［（７Ｓ）−３−エトキシ−１，２−ジメトキシ−１０−メチルスルファニル−９−オキソ−５，６，７，９−テトラヒドロ−ベンゾ［ａ］ヘプタレン−７−イル］−３−ニトロオキシメチルベンズアミド；
５）６−ニトロオキシメチルピリジン−２−カルボン酸−［（７Ｓ）−１，２，３−トリメトキシ−１０−メチルスルファニル−９−オキソ−５，６，７，９−テトラヒドロ−ベンゾ［ａ］ヘプタレン−７−イル］−アミド；
６）５−ニトロオキシメチルチオフェン−２−カルボン酸−［（７Ｓ）−１，２，３−トリメトキシ−１０−メチルスルファニル−９−オキソ−５，６，７，９−テトラヒドロ−ベンゾ［ａ］ヘプタレン−７−イル］−アミド；
７）Ｎ−［（７Ｓ）−３−シクロペンチルオキシ−１，２−ジメトキシ−１０−メチルスルファニル−９−オキソ−５，６，７，９−テトラヒドロ−ベンゾ［ａ］ヘプタレン−７−イル］−３−ニトロオキシメチルベンズアミド；
８）Ｎ−［（７Ｓ）−３−エトキシ−１，２−ジメトキシ−１０−メチルスルファニル−９−オキソ−５，６，７，９−テトラヒドロ−ベンゾ［ａ］ヘプタレン−７−イル］−２−フルオロ−３−ニトロオキシメチルベンズアミド；
９）２−フルオロ−Ｎ−［（７Ｓ）−３−イソプロポキシ−１，２−ジメトキシ−１０−メチルスルファニル−９−オキソ−５，６，７，９−テトラヒドロ−ベンゾ［ａ］ヘプタレン−７−イル］−３−ニトロオキシメチルベンズアミド；
１０）２−フルオロ−３−ニトロオキシメチル−Ｎ−［（７Ｓ）−１，２，３−トリメトキシ−１０−メチルスルファニル−９−オキソ−５，６，７，９−テトラヒドロ−ベンゾ［ａ］ヘプタレン−７−イル］−ベンズアミド；
１１）Ｎ−［（７Ｓ）−３−シクロペンチルオキシ−１，２−ジメトキシ−１０−メチルスルファニル−９−オキソ−５，６，７，９−テトラヒドロ−ベンゾ［ａ］ヘプタレン−７−イル］−２−フルオロ−３−ニトロオキシメチルベンズアミド；
１２）３−フルオロ−５−ニトロオキシメチル−Ｎ−［（７Ｓ）−１，２，３−トリメトキシ−１０−メチルスルファニル−９−オキソ−５，６，７，９−テトラヒドロ−ベンゾ［ａ］ヘプタレン−７−イル］−ベンズアミド；
１３）Ｎ−［（７Ｓ）−３−エトキシ−１，２−ジメトキシ−１０−メチルスルファニル−９−オキソ−５，６，７，９−テトラヒドロ−ベンゾ［ａ］ヘプタレン−７−イル］−３−フルオロ−５−ニトロオキシメチルベンズアミド；
１４）３−フルオロ−Ｎ−［（７Ｓ）−３−イソプロポキシ−１，２−ジメトキシ−１０−メチルスルファニル−９−オキソ−５，６，７，９−テトラヒドロ−ベンゾ［ａ］ヘプタレン−７−イル］−５−ニトロオキシメチルベンズアミド；
１５）Ｎ−［（７Ｓ）−３−シクロペンチルオキシ−１，２−ジメトキシ−１０−メチルスルファニル−９−オキソ−５，６，７，９−テトラヒドロ−ベンゾ［ａ］ヘプタレン−７−イル］−３−フルオロ−５−ニトロオキシメチルベンズアミド；
１６）４−フルオロ−３−ニトロオキシメチル−Ｎ−［（７Ｓ）−１，２，３−トリメトキシ−１０−メチルスルファニル−９−オキソ−５，６，７，９−テトラヒドロ−ベンゾ［ａ］ヘプタレン−７−イル］−ベンズアミド；
１７）２−フルオロ−５−ニトロオキシメチル−Ｎ−［（７Ｓ）−１，２，３−トリメトキシ−１０−メチルスルファニル−９−オキソ−５，６，７，９−テトラヒドロ−ベンゾ［ａ］ヘプタレン−７−イル］−ベンズアミド；
１８）３−ヒドロキシ−５−ニトロオキシメチル−Ｎ−［（７Ｓ）−１，２，３−トリメトキシ−１０−メチルスルファニル−９−オキソ−５，６，７，９−テトラヒドロ−ベンゾ［ａ］ヘプタレン−７−イル］−ベンズアミド；
１９）３，５−ｂｉｓ−ニトロオキシメチル−Ｎ−［（７Ｓ）−１，２，３−トリメトキシ−１０−メチルスルファニル−９−オキソ−５，６，７，９−テトラヒドロ−ベンゾ［ａ］ヘプタレン−７−イル］−ベンズアミド；
２０）２−ヒドロキシ−４−ニトロオキシメチル−Ｎ−［（７Ｓ）−１，２，３−トリメトキシ−１０−メチルスルファニル−９−オキソ−５，６，７，９−テトラヒドロ−ベンゾ［ａ］ヘプタレン−７−イル］−ベンズアミド；
２１）４−ニトロオキシメチル−チオフェン−２−カルボン酸［（７Ｓ）−１，２，３−トリメトキシ−１０−メチルスルファニル−９−オキソ−５，６，７，９−テトラヒドロ−ベンゾ［ａ］ヘプタレン−７−イル］−アミド；
２２）３−ニトロオキシメチル−チオフェン−２−カルボン酸［（７Ｓ）−１，２，３−トリメトキシ−１０−メチルスルファニル−９−オキソ−５，６，７，９−テトラヒドロ−ベンゾ［ａ］ヘプタレン−７−イル］−アミド；
２３）２−（３−ニトロオキシメチル−フェニル）−Ｎ−［（７Ｓ）−１，２，３−トリメトキシ−１０−メチルスルファニル−９−オキソ−５，６，７，９−テトラヒドロ−ベンゾ［ａ］ヘプタレン−７−イル］−アセトアミド；
２４）３−（２−ニトロオキシ−エチル）−Ｎ−［（７Ｓ）−１，２，３−トリメトキシ−１０−メチルスルファニル−９−オキソ−５，６，７，９−テトラヒドロ−ベンゾ［ａ］ヘプタレン−７−イル］−ベンズアミド；
２５）３−ニトロオキシ安息香酸−５−［（７Ｓ）−１，２，３−トリメトキシ−１０−メチルスルファニル−９−オキソ−５，６，７，９−テトラヒドロ−ベンゾ［ａ］ヘプタレン−７−イル−カルバモイル］−ピリジン−２−イルメチルエステル；
２６）４−ニトロオキシ酪酸−５−［（７Ｓ）−１，２，３−トリメトキシ−１０−メチルスルファニル−９−オキソ−５，６，７，９−テトラヒドロ−ベンゾ［ａ］ヘプタレン−７−イル−カルバモイル］−ピリジン−２−イルメチルエステル；
２７）３−ニトロオキシメトキシ安息香酸−６−［（７Ｓ）−１，２，３−トリメトキシ−１０−メチルスルファニル−９−オキソ−５，６，７，９−テトラヒドロ−ベンゾ［ａ］ヘプタレン−７−イル−カルバモイル］−ピリジン−２−イルメチルエステル；
２８）４−ニトロオキシ酪酸−６−［（７Ｓ）−１，２，３−トリメトキシ−１０−メチルスルファニル−９−オキソ−５，６，７，９−テトラヒドロ−ベンゾ［ａ］ヘプタレン−７−イル−カルバモイル］−ピリジン−２−イルメチルエステル；
２９）３−ニトロオキシメチル安息香酸−２−［（７Ｓ）−１，２，３−トリメトキシ−１０−メチルスルファニル−９−オキソ−５，６，７，９−テトラヒドロ−ベンゾ［ａ］ヘプタレン−７−イル−カルバモイル］−フェニルエステル；
３０）４−ニトロオキシ酪酸−２−［（７Ｓ）−１，２，３−トリメトキシ−１０−メチルスルファニル−９−オキソ−５，６，７，９−テトラヒドロ−ベンゾ［ａ］ヘプタレン−７−イル−カルバモイル］−フェニルエステル；
３１）３−ニトロオキシメチル安息香酸−３−［（７Ｓ）−１，２，３−トリメトキシ−１０−メチルスルファニル−９−オキソ−５，６，７，９−テトラヒドロ−ベンゾ［ａ］ヘプタレン−７−イル−カルバモイル］−フェニルエステル；
３２）４−ニトロオキシ酪酸−３−［（７Ｓ）−１，２，３−トリメトキシ−１０−メチルスルファニル−９−オキソ−５，６，７，９−テトラヒドロ−ベンゾ［ａ］ヘプタレン−７−イル−カルバモイル］−フェニルエステル；
３３）３−ニトロオキシメチル安息香酸−３−［（７Ｓ）−１，２，３−トリメトキシ−１０−メチルスルファニル−９−オキソ−５，６，７，９−テトラヒドロ−ベンゾ［ａ］ヘプタレン−７−イル−カルバモイル］−フェニルエステル；
３４）４−ニトロオキシ酪酸−３−［（７Ｓ）−１，２，３−トリメトキシ−１０−メチルスルファニル−９−オキソ−５，６，７，９−テトラヒドロ−ベンゾ［ａ］ヘプタレン−７−イル−カルバモイル］−ベンジルエステル；
３５）２−ニトロソチオ−Ｎ−［（７Ｓ）−１，２，３−トリメトキシ−１０−メチルスルファニル−９−オキソ−５，６，７，９−テトラヒドロ−ベンゾ［ａ］ヘプタレン−７−イル］−ベンズアミド；
３６）３−ニトロソオキシメチル−Ｎ−［（７Ｓ）−１，２，３−トリメトキシ−１０−メチルスルファニル−９−オキソ−５，６，７，９−テトラヒドロ−ベンゾ［ａ］ヘプタレン−７−イル］−ベンズアミド；
３７）３−フルオロ−５−ニトロソオキシメチル−Ｎ−［（７Ｓ）−１，２，３−トリメトキシ−１０−メチルスルファニル−９−オキソ−５，６，７，９−テトラヒドロ−ベンゾ［ａ］ヘプタレン−７−イル］−ベンズアミド；
３８）３−ニトロソチオメチル−Ｎ−［（７Ｓ）−１，２，３−トリメトキシ−１０−メチルスルファニル−９−オキソ−５，６，７，９−テトラヒドロ−ベンゾ［ａ］ヘプタレン−７−イル］−ベンズアミド；
３９）３−フルオロ−５−ニトロソチオメチル−Ｎ−［（７Ｓ）−１，２，３−トリメトキシ−１０−メチルスルファニル−９−オキソ−５，６，７，９−テトラヒドロ−ベンゾ［ａ］ヘプタレン−７−イル］−ベンズアミド；
４０）３−フルオロ−５−ニトロオキシメチル−Ｎ−［（７Ｓ）−１，２，３，１０−テトラメトキシ−９−オキソ−５，６，７，９−テトラヒドロ−ベンゾ［ａ］ヘプタレン−７−イル］−ベンズアミド；
４１）３−ニトロオキシメチル−Ｎ−メチル−Ｎ−［（７Ｓ）−１，２，３−トリメトキシ−１０−メチルスルファニル−９−オキソ−５，６，７，９−テトラヒドロ−ベンゾ［ａ］ヘプタレン−７−イル］−ベンズアミド；
４２）３−フルオロ−Ｎ−メチル−５−ニトロオキシメチル−Ｎ−［（７Ｓ）−１，２，３−トリメトキシ−１０−メチルスルファニル−９−オキソ−５，６，７，９−テトラヒドロ−ベンゾ［ａ］ヘプタレン−７−イル］−ベンズアミド；
４３）２−（３−フルオロ−５−ニトロオキシメチル−フェニル）−Ｎ−［（７Ｓ）−１，２，３−トリメトキシ−１０−メチルスルファニル−９−オキソ−５，６，７，９−テトラヒドロ−ベンゾ［ａ］ヘプタレン−７−イル］−アセトアミド；または
４４）２−（２−フルオロ−５−ニトロオキシメチル−フェニル）−Ｎ−［（７Ｓ）−１，２，３−トリメトキシ−１０−メチルスルファニル−９−オキソ−５，６，７，９−テトラヒドロ−ベンゾ［ａ］ヘプタレン−７−イル］−アセトアミドである。
【００２８】
また、本発明は、前記化学式１で表わされる化合物の薬学的に許容される塩を提供する。本発明の薬学的に許容される塩は、本発明に係る化合物が十分塩基性の場合、本発明に係る化合物の酸付加塩を含む。このような酸付加塩は、例えばハロゲン化水素などの薬学的に許容される陰イオンを提供する無機酸または有機酸を保有する塩、または硫酸またはリン酸を保有する塩、またはトリフルオロ酢酸、クエン酸またはマレイン酸を保有する塩を含む。好ましい塩としては、例えば塩酸塩、臭化水素酸塩、リン酸塩、硫酸塩、アルキルスルフォン酸塩、アリールスルホン酸塩、酢酸塩、安息香酸塩、クエン酸塩、マレイン酸塩、フマル酸塩、琥珀酸塩、乳酸塩および酒石酸塩が挙げられる。また、本発明に係る化合物が十分酸性の場合、薬学的に許容される塩は、薬学的に受容可能な陽イオンを提供する無機塩基または有機塩基で形成することができる。前記無機塩基としては、例えばナトリウム塩、カリウム塩、カルシウム塩またはマグネシウム塩などが挙げられ、前記有機塩基としては、例えばメチルアミン塩、ジメチルアミン塩、トリメチルアミン塩、ピペリジン塩またはモルホリン塩などが挙げられる。
【００２９】
また、本発明は、前記化学式１で表わされるトリサイクリック誘導体の製造方法を提供する。本発明に係るトリサクリック誘導体の製造方法は、下記反応式１〜下記反応式８に表現されており、具体的には、前記化学式１において、Ｒ１が−Ｔ１−Ｂ１であり、Ｂ１が前記（ａ）、（ｂ）、（ｃ）、（ｄ）、（ｅ）基のいずれか一つである場合、反応式１〜反応式６の方法で製造され、前記化学式１において、Ｒ１が−Ｔ１−Ｂ１であり、Ｂ１が前記（ｆ）、（ｇ）、（ｈ）、（ｉ）、（ｊ）基のいずれか一つである場合、反応式７と反応式８の方法で製造される。また、反応式１〜反応式８において、化学式１の具体的な化合物は、一般式（IIａ）、（IIｂ）、（IIｃ）、（IIｄ）、（IIｅ）、（IIｆ）、（IIｇ）、（IIｈ）、（IIｉ）、（IIｊ）、（IIｋ）、（II１）、（IIｍ）、（IIｎ）、（IIｏ）および（IIｐ）で表わす。
【００３０】
【化９】
2007520422.tif 000011
【００３１】
【化１０】
2007520422.tif 000012
【００３２】
【化１１】
2007520422.tif 000013
【００３３】
【化１２】
2007520422.tif 000014
【００３４】
【化１３】
2007520422.tif 000015
【００３５】
【化１４】
2007520422.tif 000016
【００３６】
【化１５】
2007520422.tif 000017
【００３７】
【化１６】
2007520422.tif 000018
【００３８】
この際、前記反応式において、Ｅは、それぞれ下記Ｅ１〜Ｅ６を示し；
【００３９】
【化１７】
2007520422.tif 000019
【００４０】
この際、Ｘ１、Ｘ２およびＸ３は、それぞれＯまたはＳである。
【００４１】
前記反応式において、Ｄは
【００４２】
【化１８】
2007520422.tif 000020
【００４３】
であり、この際、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４およびＸは、前記化学式１で定義したとおりであり；
Ｒ５は、水素または低級アルキルを示し、Ｘ１、Ｘ２またはＸ３は、それぞれ独立にＯまたはＳを示し、Ｈａｌ１とＨａｌ２は、ハロゲンを示し、一般式（IV）と（IX）のＨａｌ１とＨａｌ２は、それぞれ同一または異なるハロゲン、例えばＦ、Ｃｌ、ＢｒまたはＩを示し、Ｐは、例えばメトキシメチル、ｔ−ブチルジメチルシリルまたはベンジルなどの通常のヒドロキシ保護基を示し、ＹとＹ’は、互いに同じでも異なってもよく、それぞれ下記一般式（a’）、（ｂ’）、（ｃ’）、（ｄ’）および（ｅ’）を示し、
【００４４】
【化１９】
2007520422.tif 000021
【００４５】
この際、
【００４６】
【化２０】
2007520422.tif 000022
【００４７】
、Ｒ６、Ｒ８、Ｒ９、Ｚ１、Ｚ２、Ｚ３、ｎ２、ｎ３、ｎ４、ｎ５およびｎ６は、下記化学式１で定義したとおりであり、ｎ７およびｎ８は、１〜２の整数である。
【００４８】
以下、本発明の製造方法を詳細に説明する。
【００４９】
〔方法１〕
化学式（IIａ）および（IIｂ）の化合物を製造する本発明の方法１によれば、第１段階では、化学式（III）のアミン化合物と化学式（IV）のハロゲン化合物とを反応させる一般的なアミド化反応(amidation reaction)によって化学式（Ｖ）の化合物を製造する。この反応は、塩基を使用することなく行うことができるが、一般には、アミド化反応に使用できる塩基、例えばピリジン、トリエチルアミン、ジエチルイソプロピルアミンまたはＮ−メチルモルホリンなどの存在下で反応に悪影響を及ぼさない溶媒、例えばジクロロメタン、クロロホルム、テトラヒドロフラン、ジエチルエーテル、トルエンまたはジメチルホルムアミドなどを用いて反応を行う。反応温度は、特に制限されないが、一般に、反応は、冷温ないし加温の下に行うことができ、好ましくは常温で行う。
【００５０】
第２段階では、第１段階で生成された化学式（Ｖ）の化合物を、ニトロ化反応(nitration reaction)を用いて化学式（IIａ）のニトロオキシ化合物（ｎ７が２の場合）に転換させ、ニトロソ化反応(nitrosation-reaction)を用いて化学式（IIａ）のニトロソオキシ化合物（ｎ７が１の場合）に転換させる。ニトロ化反応は、一般に、ハロゲンをニトロ化反応させることが可能な化合物を使用することができ、好ましくは、硝酸銀（ＡｇＮＯ３）、ｔ−ブチルアンモニウムニトラート（Ｂｕ４ＮＮＯ３）などを用いて、反応に悪影響を及ぼさない溶媒、例えばクロロホルム、アセトニトリル、アセトニトリルと水溶液との混合溶液、またはジクロロメタンなどの存在下に行う。ニトロソ化反応は、一般には、ハロゲンをニトロソ化させることが可能な化合物を使用することができ、好ましくは、亜硝酸銀（ＡｇＮＯ２）、亜硝酸ナトリウム（ＮａＮＯ２）などを用いて、反応に悪影響を及ぼさない溶媒、例えばクロロホルム、アセトニトリル、アセトニトリルと水溶液との混合溶液、水溶液、またはジクロロメタンなどの存在の下で行う。反応温度は、特に制限されないが、一般に冷温ないし加温の下に行うことができ、好ましくは常温で行う。
【００５１】
化学式（IIａ）の化合物を合成する別の方法は、化学式（III）の化合物を化学式（VI）の化合物と反応させて化学式（VII）の化合物を生成させ、生成された化学式（VII）の化合物を化学式（IIａ）の化合物に転換させる方法で合成することができる。化学式（III）と化学式（VI）の化合物の反応条件は、カップリング試薬(coupling reagent)である１−（３−ジメチルアミノプロピル）−３−エチルカルボジイミド(1-(3-dimethylaminopropyl)-3-ethylcarbodiimide、ＥＤＣＩ)、１−ヒドロキシベンゾトリアゾールハイドレイト(１−hydroxybenzotriazole hydrate、ＨＯＢＴ)または１，３−ジシクロヘキシルカルボジイミド(1,3-dicyclohexyl carbodiimide、ＤＣＣ)などの存在下に反応させる。この反応は、塩基を使用することなく行うことができるが、アミド化反応に使用できる一般的な塩基、例えば４−ジメチルアミノピリジン、ピリジン、トリエチルアミン、ジエチルイソプロピルアミン、Ｎ−メチルモルホリンまたはジメチルフェニルアミンなどの存在下に、反応に悪影響を及ぼさない溶媒、例えばアセトニトリル、ジメチルホルムアミド、ジクロロメタンなどを用いて行う。
【００５２】
反応温度は、特に制限されないが、一般に、反応は、冷温ないし加温の下に行うことができるが、好ましくは、冷温または常温で行う。また、化学式（VII）の化合物は、一般に、アルコールをトリフェニルホスフィン(triphenylphosphine、ＰＰｈ３)、Ｎ−ブロモスクシニミド(N-bromo succinimide、ＮＢＳ)および硝酸銀または亜硝酸銀と反応させて直接化学式（IIａ）の化合物に転換させる。この際、使用される溶媒は、反応に悪影響を及ぼさない溶媒、例えばクロロホルム、アセトニトリル、ジクロロメタン、アセトニトリルとジクロロメタンとの混合溶液などの存在下に行うことができ、反応温度は、特に制限されず、一般に、反応は、冷温ないし常温の下に行う。化学式（VII）の化合物を化学式（IIａ）の化合物に転換させる別の方法は、化学式（VII）の化合物を、ハロゲン化合物である化学式（Ｖ）の化合物に転換させた後、化学式（IIａ）の化合物に転換させる方法で得ることができる。この際、ハロゲン化合物の転換は、一般に、ヒドロキシ基をハロゲンに転換させる試薬、例えばトリブロモホスフィン、テトラブロモメタンなどを用いて、反応に悪影響を及ぼさない溶媒、例えばクロロホルム、アセトニトリル、ジクロロメタンなどの存在下で行うことができ、反応温度は、特に制限されないが、一般に、反応は、冷温ないし常温の下に行う。
【００５３】
本発明の方法１の化学式（IIｂ）の化合物を製造する方法は、化学式（VII）のアルコールの水素をメシラート、トシレートまたはトリフラートなどの離脱基(leaving group)に転換させた後、チオ酢酸カリウムと反応させてチオ酢酸エステル化合物を作り、その後塩基の存在下に加水分解させて化学式（VIII）の化合物を合成する。この際、使用される塩基は、エステル化合物を加水分解することが可能な一般的な塩基、例えば水酸化ナトリウム、水酸化カリウムまたはチオメトキシドナトリウムなどを用いて反応を行い、溶媒は、メタノール、エタノールなどのアルコール溶液を使用する。反応温度は、特に制限されないが、一般に、反応は、冷温ないし加温の下に行うことができ、好ましくは冷温または常温で行う。化学式（VIII）の化合物を酸条件で亜硝酸ナトリウムと反応させて化学式（IIｂ）のニトロソチオ化合物に転換させる。この際、使用される溶媒は、反応に悪影響を及ぼさない溶媒、例えばメタノール、エタノール、アセトニトリル、アセトニトリルと水溶液との混合溶液、またはジクロロメタンなどの存在下で行う。反応温度は、特に制限されないが、一般に、反応は、冷温ないし加温の下に行うことができ、好ましくは常温で行う。
【００５４】
〔方法２〕
化学式（IIｃ）および（IIｄ）の化合物を製造する本発明の方法２によれば、まず、第１段階では、化学式（III）の化合物を化学式（IX）の化合物と反応させて化学式（Ｘ）の化合物を製造する。この反応は、一般に、方法１の化学式（III）の化合物を化学式（Ｖ）の化合物に転換させるアミド化反応と同様の条件で行う。
【００５５】
第２段階では、第１段階で生成された化合物（Ｘ）を用いてニトロ化およびニトロソ化反応を行って化学式（IIｃ）の化合物を合成する。この反応は、一般には、方法１の化学式（Ｖ）の化合物を化学式（IIａ）の化合物に転換させる反応と同様の条件で反応を行う。
【００５６】
化学式（IIｃ）の化合物を合成する別の方法は、化学式（III）の化合物を化学式（ＸＩ）の化合物と反応させて化学式（ＸII）の化合物を生成させ、この化学式（ＸII）の化合物を化学式（IIｃ）の化合物に転換させる方法によって合成することができる。化学式（III）と化学式（ＸＩ）の化合物の反応条件は、方法１の化学式（III）の化合物を化学式（Ｖ）の化合物に転換させるアミド化反応と同様の条件で行う。化学式（ＸII）の化合物を化学式（IIｃ）の化合物に転換させる方法は、方法１の化学式（VII）の化合物を化学式（IIａ）の化合物に転換させる方法と同様の条件で行う。
【００５７】
化学式（ＸII）の化合物を化学式（IIｄ）の化合物に転換させる方法は、方法１の化学式VIIの化合物を化学式IIｂの化合物に転換させる方法と同様の条件で行う。
【００５８】
〔方法３〕
化学式（IIｅ）および（IIｆ）の化合物を製造する本発明の方法３によれば、まず、第１段階では、化学式（ＸIV）の化合物と化学式（IV）の化合物を反応させて化学式（ＸＶ）の化合物を生成させる。この反応は、一般には、アルコール（Ｘ２＝Ｏ）またはチオアルコール（Ｘ２＝Ｓ）とアシルまたはチオアシルハライドとのエステル化反応(esterification reaction)によって、一般的なエステル化反応に使用できる塩基の存在下で行う。このような目的で好ましく使用することが可能な塩基としては、例えばピリジン、４−ジメチルアミノピリジン、トリエチルアミン、ジエチルイソプロピルアミン、２，６−ルチジン、水素化ナトリウム（ＮａＨ）、炭酸セシウムまたは水酸化ナトリウムを挙げることができ、ベンジルトリエチルアンモニウムクロライドのような相間移動触媒(phase transfer catalyst)を共に使用することができる。また、前記反応は、好ましくは反応に悪影響を及ぼさない溶媒の存在下で行うが、このような目的で使用できる溶媒の例としては、ジクロロメタン、クロロホルム、テトラヒドロフラン、ジエチルエーテル、トルエン、ジメチルホルムアミド、アセトニトリルまたは水溶液などが挙げられる。反応温度は、特に制限されないが、一般に、反応は、冷温ないし加温の下に行うことができ、好ましくは常温で行う。
【００５９】
第２段階では、第１段階で生成された化学式（ＸＶ）の化合物を用いてニトロ化反応およびニトロソ化反応によって化学式（IIｅ）の化合物を生成させる。この反応は、一般には、方法１の化学式（Ｖ）の化合物を化学式（IIａ）の化合物に転換させる反応と同様の条件で行う。
【００６０】
化学式（IIｅ）の化合物を合成する別の方法は、化学式（ＸIV）の化合物を、アルコール基に保護基を有する化学式（ＶＩ’）の化合物と反応させて化学式（ＸVII）の化合物を製造し、脱保護反応の後、化学式（ＸVIII）の化合物を作って化学式（IIｅ）の化合物に転換させる方法で合成する。この際、化学式（ＸIV）の化合物と化学式（VI’）の化合物との反応条件は、一般的なアルコール（Ｘ２＝Ｏ）またはチオアルコール（Ｘ２＝Ｓ）とカルボン酸またはチオカルボン酸とのエステル化反応で行うが、この際、反応条件は、塩酸、硫酸、ドデシルベンゼンスルホン酸またはｐ−トルエンスルホン酸などの酸を用いて水溶液上で常温または加温の下に行うか、あるいは方法１の化学式（III）の化合物を化学式（VII）の化合物に転換させる反応と同様の条件で行う。別のエステル化反応は、トリフェニルホスフィンとアゾジカルボン酸ジエチルを使用するミツノブ反応を用いて行うが、この反応は、好ましくは、反応に悪影響を及ぼさない溶媒の存在下で行われる。このような目的で使用できる溶媒の例としては、ジクロロメタン、クロロホルム、テトラヒドロフラン、ジエチルエーテル、トルエンまたはアセトニトリルなどがある。この際、反応温度は、特に制限されないが、一般に冷温ないし常温で行う。アルコール基の保護反応と脱保護反応は、一般的な有機合成における公知の方法によって行う。
【００６１】
また、化学式（ＸVIII）の化合物は、化学式（ＸIV）の化合物と化学式（ＸVI）の化合物とを反応させて得ることができ、この反応は、方法３の化学式（ＸIV）の化合物を化学式（ＸＶ）の化合物に転換させる反応と同様の条件で行う。
【００６２】
化学式（ＸVIII）の化合物を化学式（IIｅ）の化合物に転換させる方法は、方法１の化学式（VII）の化合物を化学式（IIａ）の化合物に転換させる条件と同様の条件で行う。
【００６３】
化学式（ＸVIII）の化合物を化学式（IIｆ）の化合物に転換させる方法は、方法１の化学式（VII）の化合物を化学式（IIｂ）の化合物に転換させる方法と同様の条件で行う。
【００６４】
〔方法４〕
化学式（IIｇ）および（IIｈ）の化合物を製造する本発明の方法４によれば、まず、第１段階では、化学式（III）の化合物と化学式（ＸＸ）の化合物とを反応させて化学式（ＸＸＩ）の化合物を生成させる。
【００６５】
化学式（IIｇ）の化合物がスルフィニルアミド（ｎ８が１の場合）の場合、化学式（III）の化合物と化学式（ＸＸ）のスルフィニルハライドとの反応は、塩基を使用することなく行うか、あるいはアミド化反応に一般に使用できる塩基、例えばピリジン、トリエチルアミン、ジエチルイソプロピルアミン、Ｎ−メチルモルホリンまたはジメチルフェニルアミンなどの存在下で、反応に悪影響を及ぼさない溶媒、例えばジクロロメタン、クロロホルム、テトラヒドロフラン、ジエチルエーテル、トルエンまたはジメチルホルムアミドなどを用いて行う。反応温度は、特に制限されないが、一般に、反応は、冷温ないし加温の下に行うことができ、好ましくは常温で行う。
【００６６】
化学式（IIｇ）の化合物が、スルフィニルアミド（ｎ８が２の場合）の場合、化学式（III）の化合物と化学式（ＸＸ）のスルホニルハライドとの反応は、塩基を使用することなく行うか、あるいはアミド化反応に一般に使用できる塩基、例えばピリジン、トリエチルアミン、ジエチルイソプロピルアミン、Ｎ−メチルモルホリン、水酸化ナトリウム、炭酸ナトリウムまたは炭酸カリウムなどの存在下で、反応に悪影響を及ぼさない溶媒、例えばジクロロメタン、クロロホルム、テトラヒドロフラン、ジエチルエーテル、トルエンまたはジメチルホルムアミドなどを用いて行う。反応温度は、特に制限されないが、一般に、反応は、冷温ないし加温の下に行うことができ、好ましくは常温で行う。
【００６７】
第２段階では、第１段階で生成された化学式（ＸＸＩ）の化合物を化学式（IIｇ）の化合物に転換させるが、方法１の化学式（VII）の化合物を化学式（IIａ）の化合物に転換される条件と同様に行う。
【００６８】
化学式（ＸＸＩ）の化合物を化学式（IIｈ）の化合物に転換させる方法は、方法１の化学式（VII）の化合物を化学式（IIｂ）の化合物に転換させる条件と同様に行う。
【００６９】
〔方法５〕
化学式（IIｉ）および（IIｊ）の化合物を製造する本発明の方法５によれば、第１段階では、化学式（III）の化合物とアルコール基に保護基を有する化学式（ＸＸIII）の化合物とを反応させ、脱保護反応の後、化学式（ＸＸIV）の化合物を作って化学式（IIｉ）の化合物に転換させる方法で合成する。この際、化学式（III）の化合物と化学式（ＸＸIII）の化合物との反応は、カップリング試薬、例えば二塩化カルボニル、トリホスゲン、ジ−ｔ−ブチルジカルボネートまたは１、１’−カルボニルジイミダゾールなどを用いて行う。この反応は、塩基を使用することなく行うことができるが、一般には、アミド生成反応に使用できる塩基、例えばピリジン、トリエチルアミン、ジエチルイソプロピルアミン、Ｎ−メチルモルホリンまたはジメチルフェニルアミンなどの存在下で、反応に悪影響を及ぼさない溶媒、例えばジクロロメタン、クロロホルム、テトラヒドロフラン、ジエチルエーテル、エタノールまたはジメチルホルムアミドなどを用いて行う。反応温度は、特に制限されないが、一般に、反応は、冷温ないし常温で行う。そして、脱保護反応は、一般的な有機合成における公知の方法によって行う。
【００７０】
第２段階では、第１段階で生成された化学式（ＸＸIV）の化合物を化学式（IIｉ）の化合物に転換させるが、方法１の化学式（VII）の化合物を化学式（IIａ）の化合物に転換させる条件と同様に行う。
【００７１】
化学式（ＸＸIV）の化合物を化学式（IIｊ）の化合物に転換させる方法は、方法１の化学式（VII）の化合物を化学式（IIｂ）の化合物に転換させる条件と同様に行う。
【００７２】
〔方法６〕
化学式（IIｋ）および（IIｌ）の化合物を製造する本発明の方法６によれば、第１段階では、化学式（III）の化合物とアルコール基に保護基を有する化学式（ＸＸVI）の化合物とを反応させ、脱保護反応の後、化学式（ＸＸVII）の化合物を生成させた後、化学式（IIｋ）の化合物に転換させる方法で合成する。この際、化学式（III）の化合物と化学式（ＸＸVI）の化合物との反応は、塩基を使用することなく行うことができるが、一般には、アミド化反応に使用できる塩基、例えばピリジン、トリエチルアミン、ジエチルイソプロピルアミンまたはＮ−メチルモルホリンなどの存在下で、反応に悪影響を及ぼさない溶媒、例えばジクロロメタン、クロロホルム、テトラヒドロフラン、ジエチルエーテル、ベンゼン、アセトニトリルなどを用いて行う。反応温度は、特に制限されないが、一般に、反応は、冷温ないし常温で行う。この際、アルコール基の保護反応と脱保護反応は、一般的な有機合成における公知の方法によって行う。
【００７３】
第２段階では、第１段階で生成された化学式（ＸＸVII）の化合物を化学式（IIｋ）の化合物に転換させるが、方法１の化学式（VII）の化合物を化学式（IIａ）の化合物に転換させる条件と同様に行う。
【００７４】
化学式（ＸＸVII）の化合物を化学式（IIｌ）の化合物に転換させる方法は、方法１の化学式（VII）の化合物を化学式（IIｂ）の化合物に転換させる条件と同様に行う。
【００７５】
〔方法７〕
化学式（IIｍ）および（IIｎ）の化合物を製造する本発明の方法７は、化学式（ＸＸIX）の化合物を用いて方法３と同様の合成法で行う。
【００７６】
〔方法８〕
化学式（IIｏ）および（IIｐ）の化合物を製造する本発明の方法８によれば、第１段階では、化学式（ＸＸIX）の化合物を化学式（IX’）の化合物と反応させて化学式（ＸＸＸIV）の化合物を生成させる。この反応は、一般に、アルコール（Ｘ２＝Ｏ）またはチオアルコール（Ｘ-２＝Ｓ）とアルキルハライドとのエーテル化反応によって、エーテル生成反応に使用できる塩基の存在下に行う。このような目的で好ましく使用することが可能な塩基の例としては、水素化ナトリウム（ＮａＨ）、ｔ−ブトキシドナトリウム（ｔ−ＢｕＯＫ）、ｎ−ブチルリチウム（ｎ−ＢｕＬｉ）、水酸化ナトリウム、水酸化カリウム、ベンジルトリエチルアンモニウムクロライドなどの相間移動触媒(phase transfer catalyst)、またはクラウンエーテル(crown ether)を使用することができる。また、前記反応は、好ましくは反応に悪影響を及ぼさない溶媒の存在の下で行うが、このような目的で使用できる溶媒の例としては、ジクロロメタン、クロロホルム、テトラヒドロフラン、ジエチルエーテル、トルエン、ジメチルホルムアミド、水溶液、ジメチルスルホキシドまたはベンゼンなどがある。反応温度は、特に制限されないが、一般に、反応は、冷温ないし加温の下に行うことができ、好ましくは冷温ないし常温で行う。
【００７７】
第２段階では、第１段階で生成された化合物（ＸＸＸIV）を用いてニトロ化またはニトロソ化反応を行って化学式（IIｏ）の化合物を合成する。この反応は、一般には方法１の化学式（Ｖ）の化合物を化学式（IIａ）の化合物に転換させる反応と同様の条件で行う。
【００７８】
化学式（IIｏ）の化合物を合成する別の方法は、化学式（ＸＸIX）の化合物とアルコールが保護基を有する化学式（ＸＩ’）の化合物とを反応させ、脱保護反応の後、化学式（ＸＸＸＶ）の化合物を生成させ、この化学式（ＸＸＸＶ）の化合物を化学式（IIｏ）の化合物に転換させる方法で合成することができる。化学式（ＸＸIX）の化合物を化学式（ＸＩ’）の化合物と反応させ、方法８の化学式（ＸＸIX）の化合物を化学式（ＸＸＸIV）の化合物に転換させるエーテル生成反応条件と同様の条件で行う。
【００７９】
化学式（ＸＸＸＶ）の化合物を化学式（IIｏ）の化合物に転換させる方法は、方法１の化学式（VII）の化合物を化学式（IIａ）の化合物に転換させる反応と同様に行う。
【００８０】
化学式（ＸＸＸＶ）の化合物を化学式（IIｐ）の化合物に転換させる方法は、方法１の化学式（VII）の化合物を化学式（IIｂ）の化合物に転換させる反応と同様の条件で行う。
【００８１】
前記反応式で生成された目的の化合物は、通常の方法、例えばカラムクロマトグラフィ、再結晶化などの方法を用いて分離精製することができる。
【００８２】
また、本発明は、前記化学式１で表わされるトリサイクリック誘導体またはその薬学的に許容される塩を含有する薬学的組成物を提供する。
【００８３】
本発明に係るトリサイクリック誘導体またはその薬学的に許容される塩は、癌細胞株に対しては非常に強い細胞毒性を示し、動物毒性試験ではコルヒチンまたはタクソール注射剤より毒性が顕著に減少する。
【００８４】
また、本発明のトリサイクリック誘導体は、ヒト肺癌細胞株であるＮＣＩ−Ｈ４６０細胞を移植したＢＡＬｂ／ｃヌードマウスに投与した場合、腫瘍の大きさおよび腫瘍の重量を著しく減少させるが、この際、投与用量が高いほど、腫瘍の大きさおよび腫瘍の重量は減少する。
【００８５】
また、本発明のトリサイクリック誘導体は、ＨＵＶＥＣ細胞で強力な血管新生抑制作用を示す。
【００８６】
したがって、本発明に係るトリサイクリック誘導体またはその薬学的に許容される塩は、抗癌剤、抗増殖抑制剤および血管新生抑制剤として有用に使用できる。
【００８７】
本発明の組成物は、前記トリサイクリック誘導体またはその薬学的に許容される塩に、さらに同一または類似の機能を示す有効成分を１種以上含有することができる。
【００８８】
前記トリサイクリック誘導体またはその薬学的に許容される塩は、臨床投与の際に経口または非経口で投与が可能であり、一般的な医薬品製剤の形で使用できる。すなわち、本発明のトリサイクリック誘導体またはその薬学的に許容される塩は、実際臨床投与の際に経口および非経口の各種剤形にして投与できるが、製剤化する場合には、通常使用する充填剤、増量剤、結合剤、湿潤剤、崩壊剤および界面活性剤などの希釈剤または賦形剤を用いて調製される。経口投与のための固形製剤には、錠剤、丸剤、散剤、顆粒剤およびカプセル剤などが含まれる。このような固形製剤は、トリサイクリック誘導体またはその薬学的に許容される塩に少なくとも一つの賦形剤、例えば澱粉、炭酸カルシウム、スクロース、ラクトースおよびゼラチンなどを混ぜて調製される。また、単純な賦形剤以外に、ステアリン酸マグネシウム、タルクなどの潤滑剤も使用される。経口投与のための液状製剤としては、懸濁剤、内溶液剤、乳剤およびシロップ剤などがあるが、よく使用される単純希釈剤である水、リキッドパラフィン以外に、各種賦形剤、例えば湿潤剤、甘味剤、芳香剤および保存剤などが含まれる。非経口投与のための製剤には、滅菌した水溶液、非水性溶剤、懸濁剤、乳剤、凍結乾燥製剤および坐剤が含まれる。非水性溶剤と懸濁溶剤としては、プロピレングリコール、ポリエチレングリコール、オリブ油などの植物性油、オレイン酸エチルなどの注射可能なエステルなどが使用できる。坐剤の基剤としては、ウィテップゾール(Witepsol)、マクロゴール、ツイーン６１、カカオ脂、ラウリン脂、グリセロールおよびゼラチンなどが使用できる。
【００８９】
本発明の組成物は、目的の方法に応じて非経口投与（例えば、静脈内、皮下、腹腔内または局所に適用）または経口投与することができ、投与量は、患者の体重、年齢、性別、健康状態、食餌、投与時間、投与方法、排泄率および疾患の重症度などによってその範囲が様々である。一日投与量は、本発明のトリサイクリック誘導体が３〜３０ｍｇ／ｋｇであり、一日１回〜数回に分けて投与することがさらに好ましい。
【００９０】
〔実施例〕
以下、本発明を下記実施例によって詳細に説明する。ところが、本発明は下記実施例によって限定されるものではない。
【００９１】
下記実施例で使用された７−脱アセチンコルヒチン(7-deacetylcolchicine)は、文献［EP 0493064; Synthetic Communications 1997, 27(2). 293-296］の方法によって合成した。
【００９２】
７−アミノ−１，２，３−トリメトキシ−１０−メチルスルファニル−６，７−ジヒドロ−５Ｈ−ベンゾ［ａ］−ヘプタレン−９−オンは、文献（WO 9421598; Bioorganic & Medicinal Chemistry, Vol 5, No.12, pp2277-2282, 1997）の方法によって合成した。
【００９３】
チオデメコルチンは、参考文献（J. Med. Chem, 1985,28, 1204-1208）の方法によって合成した。
【００９４】
（７Ｓ）−７−アミノ−３−シクロペンチルオキシ−１，２−ジメトキシ−１０−メチルスルファニル−６，７−ジヒドロ−５Ｈ−ベンゾ［ａ］ヘプタレン−９−オン、（７Ｓ）−７−アミノ−３−イソプロポキシ−１，２−ジメトキシ−１０−メチルスルファニル−６，７−ジヒドロ−５Ｈ−ベンゾ［ａ］ヘプタレン−９−オン、（７Ｓ）−７−アミノ−３−エトキシ−１，２−ジメトキシ−１０−メチルスルファニル−６，７−ジヒドロ−５Ｈ−ベンゾ［ａ］ヘプタレン−９−オンは、参考文献（WO 9611184）の方法によって合成した。
【００９５】
〔実施例１〕６−ニトロオキシメチル−Ｎ−［（７Ｓ）−１，２，３−トリメトキシ−１０−メチルスルファニル−９−オキソ−５，６，７，９−テトラヒドロ−ベンゾ［ａ］ヘプタレン−７−イル］−ニコチンアミドの合成
（段階１）６−ヒドロキシメチル−Ｎ−［（７Ｓ）−１，２，３−トリメトキシ−１０−メチルスルファニル−９−オキソ−５，６，７，９−テトラヒドロ−ベンゾ［ａ］ヘプタレン−７−イル］−ニコチンアミドの合成
【００９６】
【化２１】
2007520422.tif 000023
【００９７】
６−ヒドロキシメチル−ニコチン酸は、参考文献（Bioorg. Med. Chem. Lett, 1996, 6, 3025-3028）の方法によって合成した。
【００９８】
７−アミノ−１，２，３−トリメトキシ−１０−メチルスルファニル−６，７−ジヒドロ−５Ｈ−ベンゾ［ａ］−ヘプタレン−９−オン（３００ｍｇ、０．８０ｍｍｏＬ）と６−ヒドロキシメチルニコチン酸（１３５ｍｇ、０．８８ｍｍｏＬ）、ＤＭＡＰ（６０ｍｇ、０．４８ｍｍｏＬ）をアセトニトリル１０ｍＬに溶解させ、０℃に降温した後、ＥＤＣＩ（３０８ｍｇ、１．６０ｍｍｏＬ）を滴加した。これを常温で２時間攪拌させ、水を加えて反応を終結させた後、酢酸エチルで抽出し、無水硫酸ナトリウムで乾燥させた後、溶媒を減圧濃縮した。残余物をカラムクロマトグラフィ（酢酸エチル：メタノール＝８：１）で精製して標題化合物（２４４ｍｇ、収率：６０％、黄色固体）を得た。
【００９９】
1H NMR (400MHz, CDCl3): δ2.07-2.15(m, 1H), 2.31-2.44(m, 2H), 2.45(s, 3H), 2.56-2.59(m, 1H), 3.75(s, 3H), 3.91(s, 3H), 3.97(s, 3H), 4.66(q, J=10.2Hz, 2H), 4.90-4.93(m, 1H), 6.56(s, 1H), 7.13(t, J=9.1Hz, 2H), 7.40(d, J=10.2Hz, 1H), 7.52(s, 1H), 8.15(dd, J=2.2, 5.8Hz, 1H), 8.80(d, J=6.9Hz, 1H), 8.96(s, 1H) 
【０１００】
（段階２）６−ニトロオキシメチル−Ｎ−［（７Ｓ）−１，２，３−トリメトキシ−１０−メチルスルファニル−９−オキソ−５，６，７，９−テトラヒドロ−ベンゾ［ａ］ヘプタレン−７−イル］−ニコチンアミドの合成
【０１０１】
【化２２】
2007520422.tif 000024
【０１０２】
前記実施例１の段階１で製造した化合物（１００ｍｇ、０．１９ｍｍｏＬ）とトリフェニルホスフィン（５７ｍｇ、０．２１ｍｍｏＬ）をアセトニトリル／ジクロロメタン（１．２５ｍＬ／０．５ｍＬ）に溶解させ、−３５℃に降温した後、ＮＢＳ（４２ｍｇ、０．２３ｍｍｏＬ）を滴加して２０分間攪拌した。ここに硝酸銀（４０ｍｇ、０．２３ｍｍｏＬ）をゆっくり滴加し、常温にゆっくり昇温させた後、１８時間攪拌した。水を加えて反応を終結させ、クロロホルムで抽出した後、無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、溶媒を減圧濃縮して残余物をカラムクロマトグラフィ（クロロホルム：メタノール＝１０：１）で精製して標題化合物（１８ｍｇ、収率：３５％、黄色固体）を得た。
【０１０３】
1H NMR (400MHz, CDCl3): δ2.09-2.13(m, 1H), 2.31-2.43(m, 2H), 2.46(s, 3H), 2.55-2.64(m, 1H), 3.75(s, 3H), 3.91(s, 3H), 3.97(s, 3H),  4.93-4.98(m, 1H), 5.50(s, 2H), 6.56(s, 1H), 7.16(t, J=10.9Hz, 1H), 7.26(d, J=8.8Hz, 1H), 7.40(d, J=10.6Hz, 1H), 7.59(s, 1H), 8.27(dd, J=2.2, 5.8Hz, 1H), 8.77(d, J=7.3Hz, 1H), 9.08(s, 1H) 
【０１０４】
〔実施例２〜４〕
実施例２〜実施例４は、前記実施例１に記載の方法と類似の方法で合成し、必要な中間体は、下記の方法によって製造した。
【０１０５】
（中間体１）５−ヒドロキシメチル−フラン−２−カルボン酸の合成
５−ヒドロキシメチル−フラン−２−カルボンは、文献(Helv. Chim. Acta, 1926, 9, 1068)に記載の方法によって合成した。
【０１０６】
（中間体２）３−ヒドロキシメチル安息香酸の合成
【０１０７】
【化２３】
2007520422.tif 000025
【０１０８】
イソフタル酸ジエチルエステル（９．１００ｇ、４０．９５ｍｍｏＬ）をテトラヒドロフラン（２０ｍＬ）に溶解させ、リチウムボロハイドライド（１１．２６ｍＬ、２２．５２ｍｍｏＬ、２Ｍテトラヒドロフラン溶液）をゆっくり滴加して３時間還流した。水を加えて反応を終結させ、０℃で１Ｎ塩酸水溶液によって中和して酢酸エチルで抽出した。有機溶媒層を無水硫酸マグネシウムで乾燥、ろ過し、溶媒を減圧濃縮した。得られた残余物カラムクロマトグラフィ（ヘキサン：酢酸エチル＝２：１）で精製して３−ヒドロキシメチル安息香酸エチルエステル（５．７６ｇ、反応収率：７７．１％、無色液体）を得た。
【０１０９】
上で生成されたエステル化合物（１．３１７ｇ、７．３１１ｍｍｏＬ）をエタノール（６ｍＬ）に溶解させ、２Ｎ水酸化ナトリウム（１１．０ｍＬ、２１．９３ｍｍｏＬ）水溶液をゆっくり滴加して１時間常温で攪拌した。反応混合物を１％塩酸水溶液で中和し、酢酸エチルで抽出した後、飽和塩化ナトリウム水溶液で洗浄した。有機溶媒層を無水硫酸マグネシウムで乾燥、ろ過し、溶媒を減圧、濃縮した。得られた残余物をカラムクロマトグラフィ（酢酸エチル：メチルアルコール＝５：１）で精製して標題化合物（１．０３ｇ、収率：９２．８％、白色固体）を得た。
【０１１０】
1H NMR (400MHz, CD3OD): δ4.66(s, 2H), 7.44(t, J=7.7Hz, 1H), 7.58(d, J=7.7Hz, 1H), 7.92(d, J=7.7Hz, 1H), 8.04(s, 1H) 
【０１１１】
〔実施例２〕５−ニトロオキシメチル−フラン−２−カルボン酸−［（７Ｓ）−１，２，３−トリメトキシ−１０−メチルスルファニル−９−オキソ−５，６，７，９−テトラヒドロ−ベンゾ［ａ］ヘプタレン−７−イル］−アミド
【０１１２】
【化２４】
2007520422.tif 000026
【０１１３】
1H NMR (400MHz, CDCl3): δ2.37-2.51(m, 3H), 2.46(s, 3H), 2.61-2.92(m, 1H), 3.74(s, 3H), 3.93(s, 3H), 3.98(s, 3H), 4.82-4.85(m, 1H), 4.85(d, J=13.2Hz, 1H), 4.90(d, J=13.2Hz, 1H), 6.39(s, 1H), 6.58(s, 1H), 6.64(s, 1H), 7.16(d, J=10.6Hz, 1H), 7.42(d, J=10.2Hz, 1H), 7.72(s, 1H), 8.99(s, 1H) 
【０１１４】
〔実施例３〕Ｎ−［（７Ｓ）−３−イソプロポキシ−１，２−ジメトキシ−１０−メチルスルファニル−９−オキソ−５，６，７，９−テトラヒドロ−ベンゾ［ａ］ヘプタレン−７−イル］−３−ニトロオキシメチル−ベンズアミド
【０１１５】
【化２５】
2007520422.tif 000027
【０１１６】
1H NMR (400MHz, CDCl3): δ1.42(t, J=6.6Hz, 6H), 2.22-2.27(m, 1H), 2.34-2.49(s, 2H), 2.54-2.57(m, 1H), 3.75(s, 3H), 3.96(s, 3H), 4.59-4.63(m, 1H), 4.93-4.97(m, 1H), 5.23(q, J=13.0Hz, 2H), 6.56(s, 1H), 7.15(d, J=10.6Hz, 1H), 7.18-7.25(m, 1H), 7.33(d, J=8.0Hz, 2H), 7.46(d, J=10.2Hz, 1H), 7.64(s, 1H),7.71(d, J=8.0Hz, 1H), 7.88(s, 1H), 8.40(s, 1H) 
【０１１７】
〔実施例４〕Ｎ−［（７Ｓ）−３−エトキシ−１，２−ジメトキシ−１０−メチルスルファニル−９−オキソ−５，６，７，９−テトラヒドロ−ベンゾ［ａ］ヘプタレン−７−イル］−３−ニトロオキシメチル−ベンズアミド
【０１１８】
【化２６】
2007520422.tif 000028
【０１１９】
1H NMR (400MHz, CDCl3): δ1.49(t, J=6.9Hz, 3H), 2.17-2.24(m, 1H), 2.34-2.47(m, 2H), 2.45(s, 3H), 2.49-2.58(m, 1H), 3.75(s, 3H), 3.97(s, 3H), 4.12-4.15(m, 2H), 4.89-4.96(m, 1H), 5.24(q, J=12.0Hz, 2H), 6.56(s, 1H), 7.15(d, J=10.2Hz, 1H), 7.21-7.25(m, 1H), 7.31-7.35(m, 1H), 7.41(d, J=10.6Hz, 1H), 7.60(s, 1H), 7.71(d, J=7.3Hz, 1H), 7.78(s, 1H), 8.23(s, 1H) 
【０１２０】
〔実施例５〕６−ニトロオキシメチル−ピリジン−２−カルボン酸−［（７Ｓ）−１，２，３−トリメトキシ−１０−メチルスルファニル−９−オキソ−５，６，７，９−テトラヒドロ−ベンゾ［ａ］ヘプタレン−７−イル］−アミドの合成
（段階１）６−ヒドロキシメチル−ピリジン−２−カルボン酸−［（７Ｓ）−１，２，３−トリメトキシ−１０−メチルスルファニル−９−オキソ−５，６，７，９−テトラヒドロ−ベンゾ［ａ］ヘプタレン−７−イル］−アミドの合成
【０１２１】
【化２７】
2007520422.tif 000029
【０１２２】
６−ヒドロキシメチル−ピリジン−２−カルボン酸（２３ｍｇ、０．１７ｍｍｏＬ）を用いて前記実施例１の段階１と同様の方法で合成して標題化合物（３５ｍｇ、収率：５３％、黄色固体）を得た。
【０１２３】
1H NMR (400MHz, CDCl3): δ2.45(s, 3H), 2.33-2.50(m, 3H) 2.52-2.73(m, 1H), 3.75(s, 3H), 3.92(s, 3H), 3.97(S, 3H), 4.28(d, J=14Hz, 1H), 4.44(d, J=14Hz, 1H) 4.86-4.92(m, 1H), 6.57(s, 1H), 7.13(d, J=10.4Hz, 1H), 7.37-7.48(m, 4H), 7.73(s, 1H), 9.80(d, J=8Hz, 1H) 
【０１２４】
（段階２）６−ブロモメチル−ピリジン−２−カルボン酸−［（７Ｓ）−１，２，３−トリメトキシ−１０−メチルスルファニル−９−オキソ−５，６，７，９−テトラヒドロ−ベンゾ［ａ］ヘプタレン−７−イル］−アミドの合成
【０１２５】
【化２８】
2007520422.tif 000030
【０１２６】
前記段階１で製造した化合物（５０ｍｇ、０．０９８ｍｍｏＬ）をジクロロメタン（６ｍＬ）に溶解させ、０℃でトリブロモホスフィン（ＰＢｒ３、０．００５ｍＬ、０．０５ｍｍｏＬ）をゆっくり滴加して常温で３時間攪拌した。メタノールを加えて反応を終結させ、溶媒を減圧濃縮した後、残余物をカラムクロマトグラフィ（クロロホルム：メタノール＝９９：１）で精製して標題化合物（４０ｍｇ、収率：７１％、黄色固体）を得た。
【０１２７】
1H NMR (400MHz, CDCl3): δ2.06-2.14(m, 1H), 2.33-2.41(m, 1H), 2.41(s, 3H), 2.46-2.54(m, 1H) 2.58-2.63(m, 1H), 3.72(s, 3H), 3.90(s, 3H), 3.95(S, 3H), 4.55(d, J=2.8Hz, 2H),  4.77-4.83(m, 1H), 6.57(s, 1H), 7.04(d, J=10.4Hz, 1H), 7.29(s, 1H), 7.31(d, J=10.4Hz, 1H), 7.58(d, J=7.6Hz, 1H), 7.78(t, J=7.6Hz, 1H), 7.90(d, J=8.0Hz, 1H), 8.53(d, J=7.6Hz, 1H) 
【０１２８】
（段階３）６−ニトロオキシメチル−ピリジン−２−カルボン酸−［（７Ｓ）−１，２，３−トリメトキシ−１０−メチルスルファニル−９−オキソ−５，６，７，９−テトラヒドロ−ベンゾ［ａ］ヘプタレン−７−イル］−アミドの合成
【０１２９】
【化２９】
2007520422.tif 000031
【０１３０】
前記段階２で製造した化合物（４０ｍｇ、０．０７０ｍｍｏＬ）をアセトニトリル（３ｍＬ）に溶解させ、硝酸銀（２３ｍｇ、０．１４ｍｍｏＬ）を滴加して常温で１２時間攪拌した。反応混合物を水で洗浄し、減圧濃縮した後、残余物をカラムクロマトグラフィ（クロロホルム：メタノール＝９９：１）で精製して標題化合物（１７ｍｇ、収率：４４．７％、黄色固体）を得た。
【０１３１】
1H NMR (400MHz, CDCl3): δ2.03-2.10(m, 1H), 2.33-2.41(m, 1H), 2.43(s, 3H), 2.46-2.54(m, 1H) 2.58-2.65(m, 1H), 3.73(s, 3H), 3.92(s, 3H), 3.95(S, 3H), 4.77-4.83(m, 1H), 5.63(d, J=3.2Hz, 2H), 6.58(s, 1H), 7.06(d, J=10.4Hz, 1H), 7.27(s, 1H), 7.31(d, J=10.4Hz, 1H), 7.53(d, J=7.6Hz, 1H), 7.88(t, J=8.0Hz, 1H), 8.02(d, J=7.2Hz, 1H), 8.39(d, J=7.2Hz, 1H) 
【０１３２】
〔実施例６〜２４〕
実施例６〜実施例２４は、前記実施例５に記載の方法と類似の方法で合成し、必要な中間体は、下記の方法によって製造した。
【０１３３】
（中間体３）６−ヒドロキシメチル−ピリジン−２−カルボン酸の合成
【０１３４】
【化３０】
2007520422.tif 000032
【０１３５】
６−ヒドロキシメチル−ピリジン−２−カルボン酸エチルエステル（２００ｍｇ、１．１ｍｍｏＬ）（J. Amer. Chem. Soc, 1982, 104, 2251-2257）をメタノール（１ｍＬ）に溶解させ、２Ｎ水酸化ナトリウム水溶液（１ｍＬ）を滴加して常温で１時間攪拌した。反応混合物を２Ｎ塩酸で酸性化（ｐＨ＝３）し、溶媒を減圧濃縮した後、メタノールに溶かして濾過した。濾過液を減圧濃縮して標題化合物（１５０ｍｇ、収率：８９％、白色固体）を得た。
【０１３６】
1H NMR (400MHz, CD3OD): δ5.05(s, 2H), 8.34(d, J=8.0Hz, 1H), 8.47(d, J=8.0Hz, 1H) 8.73(d, J=8.0Hz, 1H) 
【０１３７】
（中間体４）５−ヒドロキシメチル−チオフェン−２−カルボン酸の合成
【０１３８】
【化３１】
2007520422.tif 000033
【０１３９】
チオフェン−２，５−ジカルボン酸（４ｇ、２３．３ｍｍｏＬ）をメタノール（３００ｍＬ）に溶解させ、触媒量の硫酸を滴加して加熱還流することにより、チオフェン−２，５−ジカルボン酸ジメチルエステル（３．８ｇ、反応収率：８１．７％、白色固体）を得た後、窒素の下に室温で無水テトラヒドロフラン（５０ｍＬ）にチオフェン−２，５−ジカルボン酸ジメチルエステル（３．７ｇ、１８．８４ｍｍｏＬ）を溶かした後、０℃で２．０Ｍのリチウムボロハイドライドテトラヒドロフラン溶液（５．５ｍＬ、１１ｍｍｏＬ）を滴加して３時間加熱還流することにより、５−ヒドロキシ−メチルチオフェン−２−カルボン酸メチルエステル（２．１ｇ、反応収率：６４．７％、白色固体）を得た。５−ヒドロキシメチルチオフェン−２−カルボン酸メチルエステル（２．１ｇ、１２．２ｍｍｏＬ）をメタノール（２０ｍＬ）に溶解させ、２Ｎ水酸化ナトリウム水溶液（１５ｍＬ）を滴加して常温で１時間攪拌することにより、標題化合物（１．７５ｇ、収率：８９％、白色固体）を得た。
【０１４０】
1H NMR (400MHz, CDCl3): δ3.90(Br, 1H), 4.79(d, J=0.8Hz, 2H), 6.97(d, J=4Hz, 1H), 7.66(d, J=4Hz, 1H) 
【０１４１】
（中間体５）２−フルオロ−３−ヒドロキシメチル安息香酸の合成
【０１４２】
【化３２】
2007520422.tif 000034
【０１４３】
２−フルオロイソフタル酸（３ｇ、１６．３ｍｍｏＬ）(J. Amer. Chem. Soc., 1943, 65, 2308)をメタノール（１５０ｍＬ）に溶解させ、触媒量の硫酸を滴加して加熱還流した。反応混合物の溶媒を減圧濃縮して除去した後、酢酸エチルに溶解させ、有機溶媒層を飽和炭酸ナトリウムで洗浄した後、無水硫酸ナトリウムで乾燥させて溶媒を減圧濃縮した。残余物をカラムクロマトグラフィ（酢酸エチル：ヘキサン＝１：２）して２−フルオロ−イソフタル酸ジメチルエステル（３．１ｇ、反応収率：８８％、白色固体）を得た後、窒素の下に室温で無水テトラヒドロフラン（５０ｍＬ）にチオフェン−２，５−ジカルボン酸ジメチルエステル（３．１ｇ、１４．６ｍｍｏＬ）を溶かした後、０℃で２．０Ｍリチウムボロハイドライドテトラヒドロフラン溶液（４．４ｍＬ、８．７ｍｍｏＬ）を滴加して３時間還流した。反応混合物を１Ｎ塩酸水溶液で酸性化して減圧濃縮し、溶媒を除去した後、クロロホルムで抽出した。有機溶媒層を無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、ろ過した後、溶媒を減圧濃縮した。得られた残余物をカラムクロマトグラフィ（ジクロロメタン：メタノール＝９９：１）して２−フルオロ−３−ヒドロキシメチル安息香酸メチルエステル（１．５ｇ、反応収率：５８％、白色固体）を得た。２−フルオロ−３−ヒドロキシメチル安息香酸メチルエステル（１．３ｇ、７．６ｍｍｏＬ）をメタノール（２０ｍＬ）に溶解させ、２Ｎ水酸化ナトリウム水溶液（１４ｍＬ）を滴加して常温で１時間攪拌した。反応混合物を２Ｎ塩酸で酸性化（ｐＨ＝３）し、溶媒を減圧濃縮した後、メタノールに溶かして濾過した。濾過液を減圧濃縮して標題化合物（１．１５ｇ、収率：８８％、白色固体）を得た。
【０１４４】
1H NMR (400MHz, DMSO-d6): δ4.58(d, J=5.2Hz, 2H),5.37(t, J=5.2Hz, 1H) 7.28(t, J=8Hz, 1H), 7.68(t, J=8Hz, 1H), 7.74(t, J=8Hz, 1H) 
【０１４５】
（中間体６）３−フルオロ−５−ヒドロキシメチル安息香酸の合成
（段階１）３−フルオロ−５−ヒドロキシメチル安息香酸メチルエステルの合成
【０１４６】
【化３３】
2007520422.tif 000035
【０１４７】
５−フルオロイソフタル酸ジメチルエステル（１．６ｇ、７．５４ｍｍｏＬ）(J. Org. Chem; 1969, 34, 1960-10-1961)をテトラヒドロフラン（１５ｍＬ）に溶解させ、０℃で２．０Ｍリチウムボロハイドライドテトラヒドロフラン溶液（２．６ｍＬ、５．２７ｍｍｏＬ）を滴加して３時間還流した。反応混合物を１Ｎ塩酸水溶液で酸性化して減圧濃縮し、溶媒を除去した後、クロロホルムで抽出した。有機溶媒層を無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過した後、溶媒を減圧濃縮した。得られた残余物をカラムクロマトグラフィ（ジクロロメタン：メタノール＝９９：１）して標題化合物（８００ｍｇ、収率：５７％、白色固体）を得た。
【０１４８】
1H NMR (400MHz, CDCl3): δ3.92(d, J=1.6Hz, 3H), 4.75(d, J=4Hz, 2H), 7.29-7.32(m, 1H), 7.61(dd, J=9.2, 1.6Hz, 1H), 7.8(d, J=0.8Hz, 1H) 
【０１４９】
(段階２)３−フルオロ−５−ヒドロキシメチル安息香酸の合成
【０１５０】
【化３４】
2007520422.tif 000036
【０１５１】
前記段階１で製造した化合物を用いて中間体３の製造方法と同様の方法で合成して標題化合物（１．６ｇ、収率：９４％、白色固体）を得た。
【０１５２】
1H NMR(400MHz, CD3OD): δ4.66(d, J=0.8Hz, 2H), 7.33-7.36(m, 1H), 7.56-7.59(m, 1H), 7.83-7.84(m, 1H) 
【０１５３】
（中間体７）４−フルオロ−３−ヒドロキシメチル安息香酸の合成
（段階１）４−フルオロイソフタル酸の合成
【０１５４】
【化３５】
2007520422.tif 000037
【０１５５】
４−フルオロ−３−メチル安息香酸（２．５２ｇ、１６．３４６ｍｍｏＬ）と過マンガン酸カリウム（１０．３３ｇ、６５．３８２ｍｍｏＬ）を水溶液（３００ｍＬ）に溶解させ、１日間還流した。反応混合物を濾過して濾液を常温に降温した後、濃い塩酸を滴加した。生成された固体を加熱して完全に溶かした後、さらに常温に降温して固体を濾過することにより、標題化合物（２．０８ｇ、収率：６９．１％、白色固体）を得た。
【０１５６】
1H NMR (400MHz, CD3OD): δ7.32(dd, J=10.4, 8.6Hz, 1H), 8.21-8.25(m, 1H), 8.59(dd, J=7.0, 2.4Hz, 1H) 
【０１５７】
（段階２）４−フルオロ−イソフタル酸ジメチルエステルの合成
【０１５８】
【化３６】
2007520422.tif 000038
【０１５９】
前記段階１で製造した化合物（２．０８ｇ、１１．２９ｍｍｏＬ）をメタノール（３０ｍＬ）に溶解させた後、濃い硫酸を１０滴り滴加した。この反応溶液を１日間還流させた後、飽和炭酸水素ナトリウム水溶液で中和させ、クロロホルム溶液で抽出した後、無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、溶媒を減圧濃縮して標題化合物（２．２１ｇ、収率：９２．２％、白色固体）を得た。
【０１６０】
1H NMR (400MHz, CDCl3): δ3.96(s, 3H), 3.97(s, 3H), 7.22(dd, J=10.3, 8.8Hz, 1H), 8.20-8.23(m, 1H), 8.64(dd, J=7.0, 2.2Hz, 1H) 
【０１６１】
（段階３）４−フルオロ−３−ヒドロキシメチル安息香酸メチルエステルと２−フルオロ−５−ヒドロキシメチル安息香酸メチルエステルの合成
【０１６２】
【化３７】
2007520422.tif 000039
【０１６３】
前記段階２で製造した化合物（１０４．５ｍｇ、０．４９３ｍｍｏＬ）をテトラヒドロフラン溶液（４ｍＬ）に溶かした後、２Ｍリチウムボロハイドライドテトラヒドロフラン溶液（０．１２３ｍＬ、０．２４６ｍｍｏＬ）を滴加して１日間還流させた。水を加えて反応を終結させた後、０℃で１Ｍ塩酸溶液によってｐＨを５に合わせた後、酢酸エチルで抽出した。抽出溶液を無水硫酸マグネシウムで乾燥させ、ろ過した後、減圧濃縮し、カラムクロマトグラフィ（ヘキサン：酢酸エチル＝２：１）して４−フルオロ−３−ヒドロキシメチル安息香酸メチルエステル（４５．４ｍｇ、反応収率：５０．１％、無色液体）と２−フルオロ−５−ヒドロキシメチル安息香酸メチルエステル（１５．４ｍｇ、反応収率：１７．０％、無色液体）を得た。
【０１６４】
４−フルオロ−３−ヒドロキシメチル安息香酸メチルエステル：
1H NMR (400MHz, CDCl3): δ2.73(t, J=5.1Hz, 1H), 3.90(s, 3H), 4.78(d, J=5.1Hz, 2H), 7.07(dd, J=9.2, 9.2Hz, 1H), 7.93-7.97(m, 1H), 8.14(dd, J=7.1, 2.2Hz, 1H)
２−フルオロ−５−ヒドロキシ安息香酸メチルエステル：
1H NMR (400MHz, CDCl3): δ1.96(t, J=4.4Hz, 1H), 3.94(s, 3H), 4.70(d, J=4.4Hz, 2H), 7.13(dd, J=10.6, 8.4Hz, 1H), 7.52-7.56(m, 1H), 7.92(dd, J=7.0, 2.2Hz, 1H) 
【０１６５】
（段階４）４−フルオロ−３−ヒドロキシメチル安息香酸の合成
【０１６６】
【化３８】
2007520422.tif 000040
【０１６７】
前記段階３で製造した化合物（１．０７４ｇ、５．３８０ｍｍｏＬ）を除いては、中間体３の製造方法と同様の方法で合成して、標題化合物（０．９０６ｇ、収率：９１．３％、白色固体）を得た。
【０１６８】
1H NMR (400MHz, CD3OD): δ4.69(s, 2H),  7.13(dd, J=9.9, 8.8Hz, 1H), 7.90-7.97(m, 1H), 8.16(dd, J=7.3, 2.2Hz, 1H) 
【０１６９】
（中間体８）２−フルオロ−５−ヒドロキシメチル安息香酸の合成
【０１７０】
【化３９】
2007520422.tif 000041
【０１７１】
前記中間体７の段階３で得られた２−フルオロ−５−ヒドロキシメチル安息香酸メチルエステルから中間体３の製造方法と同様の方法で合成した。
1H NMR (400 MHz, CD3OD): δ4.61(s, 2H), 7.17(dd, J=11.0, 8.4Hz, 1H), 7.55-7.59(m, 1H), 7.93(dd, J=7.1, 2.4Hz, 1H) 
【０１７２】
（中間体９）３−ヒドロキシ−５−ヒドロキシメチル安息香酸の合成
【０１７３】
【化４０】
2007520422.tif 000042
【０１７４】
０℃、窒素の下でテトラヒドロフラン（２０ｍＬ）に５−ヒドロキシイソフタル酸メチルエステル（３００ｍｇ、１．４２ｍｍｏＬ）を溶かした後、リチウムアルミニウムハイドライド（３０ｍｇ、０．７ｍｍｏＬ）を加えた。温度を室温に昇温し、３時間攪拌した。水を加えて反応を終結させ、酢酸エチルで抽出した後、１Ｎ塩酸水溶液で洗浄した。無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、減圧濃縮した後、カラムクロマトグラフィ（ジクロロメタン：メタノール＝２０：１）で精製した。前記で得た３−ヒドロキシ−４−ヒドロキシメチル安息香酸メチルエステル（１７０ｍｇ、０．９３ｍｍｏＬ）をメタノール（１ｍＬ）に溶解させ、１Ｎ水酸化ナトリウム水溶液（１ｍＬ）を滴加して常温で１時間攪拌した。反応混合物を２Ｎ塩酸で酸性化（ｐＨ＝３）し、溶媒を減圧濃縮した後、メタノールに溶かして濾過した。濾過液を減圧濃縮して標題化合物（１５０ｍｇ、収率：９６％、白色固体）を得た。
【０１７５】
1H NMR (400MHz, CD3OD): δ3.87(s, 3H), 4.57(s, 2H), 7.02(s, 1H), 7.31(s, 1H), 7.48(s, 1H) 
【０１７６】
（中間体１０）３，５−ｂｉｓ−ヒドロキシメチル安息香酸の合成
（段階１）３，５−ｂｉｓ−ヒドロキシメチル安息香酸メチルエステルの合成
【０１７７】
【化４１】
2007520422.tif 000043
【０１７８】
ベンゼン−１，３，５−トリカルボン酸トリメチルエステル（１．０１０ｇ、４．００３ｍｍｏＬ）をテトラヒドロフラン（１５ｍＬ）に溶解させ、０℃に降温した後、リチウムアルミニウムハイドライド（０．１６０ｇ、４．００３ｍｍｏＬ）をゆっくり滴加して常温で３時間攪拌した。反応混合物に水（０．１５ｍＬ）と１５％の水酸化ナトリウム水溶液（０．１５ｍＬ）をゆっくり滴加して反応を終結し、さらに水溶液（０．４５ｍＬ）に加えて濾過した後、溶媒を減圧濃縮した。得られた残余物をカラムクロマトグラフィ（ヘキサン：酢酸エチル＝１：２）して標題化合物（０．３４ｇ、収率：４３．１％、無色液体）を得た。
【０１７９】
1H NMR (400MHz, CD3OD): δ3.91(s, 3H), 4.66(s, 4H), 7.59(s, 1H), 7.93(s, 2H) 
【０１８０】
（段階２）３，５−ｂｉｓ−ヒドロキシメチル安息香酸の合成
【０１８１】
【化４２】
2007520422.tif 000044
【０１８２】
前記段階１で製造した化合物（１．５０ｇ、７．６５ｍｍｏＬ）を用いて前記中間体３Ｄの製造方法と同様の方法で合成して標題化合物（０．６１７ｇ、収率：４４．３％、白色固体）を得た。
【０１８３】
1H NMR (400MHz, CD3OD): δ5.21(s, 4H), 7.55(s, 1H), 7.92(s, 2H) 
【０１８４】
（中間体１１）２−ヒドロキシ−４−ヒドロキシメチル安息香酸の合成
（段階１）２−ヒドロキシ−４−ヒドロキシメチル安息香酸メチルエステルの合成
【０１８５】
【化４３】
2007520422.tif 000045
【０１８６】
２−ヒドロキシ−４−メチル安息香酸メチルエステル（１６６ｍｇ、１ｍｍｏＬ）をＣＣｌ４（１．５ｍＬ）に溶解させ、Ｎ−ブロモスクシニミド（ＮＢＳ、１７７ｍｇ、１ｍｍｏＬ）、過酸化ベンゾイル（５ｍｇ、０．０２ｍｍｏＬ）を加える。７０℃で１２時間攪拌した。反応混合物を水で洗浄した後、無水硫酸ナトリウムで乾燥させてろ過した後、溶媒を減圧濃縮した。得られた残余物をカラムクロマトグラフィ（ジクロロメタン：ヘキサン＝１：４）して４−ブロムメチル−２−ヒドロキシ安息香酸メチルエステル（１３０ｍｇ、反応収率：５３％、白色固体）を得た。前記反応生成物（１３０ｍｇ、０．５３ｍｍｏＬ）を水溶液（１．５ｍＬ）、１．４−ジオキサン（１．５ｍＬ）に溶解させ、９０℃で１２時間攪拌した。反応溶液をクロロホルムで抽出した後、無水硫酸ナトリウムで乾燥させて濾過した後、溶媒を減圧濃縮した。得られた残余物をカラムクロマトグラフィ（酢酸エチル：ヘキサン＝１：４）して標題化合物（５５ｍｇ、収率：５７％、白色固体）を得た。
【０１８７】
1H NMR (400MHz, CDCl3): δ3.95(s, 3H), 4.71(d, J=6Hz, 2H), 6.88(d, J=8Hz, 1H), 6.99(s, 1H), 7.82(d, J=8Hz, 1H), 10.79(s, 1H) 
【０１８８】
（段階２）２−ヒドロキシ−４−ヒドロキシメチル安息香酸の合成
【０１８９】
【化４４】
2007520422.tif 000046
【０１９０】
前記段階１で製造した化合物を用いて中間体３の製造方法と同様の方法で合成して標題化合物（４５ｍｇ、収率：９０％、白色固体）を得た。
【０１９１】
（中間体１２）４−ヒドロキシメチル−チオフェン−２−カルボン酸の合成
（段階１）Ａ：４−メチル−チオフェン−２−カルボン酸、
Ｂ：３−メチル−チオフェン−２−カルボン酸の合成
【０１９２】
【化４５】
2007520422.tif 000047
【０１９３】
２．５Ｍブチルリチウム（１２．２ｍＬ、３０．５５ｍｍｏＬ）を窒素の下に室温でジエチルエーテル（１ｍＬ）に溶解させた後、３−メチルチオフェン（３ｇ、３０．５５ｍｍｏＬ）をジエチルエーテルに溶かし、その後ゆっくり滴加し、加熱還流して２時間攪拌した。反応容器を０℃に冷却した後、ドライアイスをゆっくり入れる。４５ｍＬの水を加えて反応を終結させた後、ジエチルエーテル層を抽出して除去し、水層を１Ｎ塩酸溶液で酸性化した後、酢酸エチルで抽出した。有機溶媒層を無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、減圧濃縮した。残余物をカラムクロマトグラフィ（ヘキサン：酢酸エチル＝９：１）して精製して標題化合物Ａ（９００ｍｇ、白色固体）および標題化合物Ｂ（６５０ｍｇ、白色固体）を得た。
【０１９４】
（段階２）４−ブロモメチル−チオフェン−２−カルボン酸メチルエステルの合成
【０１９５】
【化４６】
2007520422.tif 000048
【０１９６】
前記段階１で生成された４−メチル−チオフェン−２−カルボン酸（９００ｍｇ、６．３３ｍｍｏＬ）をメタノール（１５ｍＬ）に溶解させ、触媒量の硫酸を滴加して加熱還流することにより、４−メチル−チオフェン−２−カルボン酸メチルエステル（８９０ｍｇ、反応収率：９０％、白色固体）を得た後、窒素の下に室温で４−メチル−チオフェン−２−カルボン酸メチルエステル（２００ｍｇ、１．２８ｍｍｏＬ）、Ｎ−ブロモスクシニミド（ＮＢＳ、２１５ｍｇ、１．２１６ｍｍｏＬ）、触媒量の過酸化ベンゾイルをテトラクロロメタン溶液（５ｍＬ）に溶解させた後、７０℃で３時間加熱還流して標題化合物（１６５ｍｇ、反応収率：５５％、白色固体）を得た。
【０１９７】
1H NMR(400MHz, CDCl3); δ3.89(s, 3H), 4.46(s, 2H), 7.49(s, 1H), 7.80(s, 1H) 
【０１９８】
（段階３）４−ヒドロキシメチル−チオフェン−２−カルボン酸の合成
【０１９９】
【化４７】
2007520422.tif 000049
【０２００】
前記段階２で生成された化合物（１５０ｍｇ、０．６３８ｍｍｏＬ）を１，４−ジオキサン（１．５ｍＬ）、水（１．５ｍＬ）に溶解させ、硝酸銀（１３０ｍｇ、０．７６５ｍｍｏＬ）をゆっくり滴加して常温で１２時間攪拌することにより、４−ヒドロキシメチル−チオフェン−２−カルボン酸メチルエステル（６０ｍｇ、反応収率：５５％、白色固体）を得た後、前記で得た化合物（６０ｍｇ、０．３４８ｍｍｏＬ）を室温でメタノール（１ｍＬ）に溶解させ、１Ｎ水酸化ナトリウム水溶液（１ｍＬ）を滴加して常温で１時間攪拌することにより、標題化合物（５０ｍｇ、反応収率：９５％、白色固体）を得た。
【０２０１】
（中間体１３）３−ヒドロキシメチル−チオフェン−２−カルボン酸の合成
（段階１）３−ブロモメチル−チオフェン−２−カルボン酸メチルエステルの合成
【０２０２】
【化４８】
2007520422.tif 000050
【０２０３】
前記中間体１２の段階１で製造した３−メチル−チオフェン−２−カルボン酸（６５０ｍｇ、４．５７ｍｍｏＬ）を用いて中間体１２の段階２と同様の方法で合成することにより、標題化合物（７５０ｍｇ、反応収率：７９％、白色固体）を得た。
【０２０４】
1H NMR(400MHz, CDCl3); δ3.90(s, 3H), 4.91(s, 2H), 7.18(d, J=5.2Hz, 1H), 7.46(d, J=5.2Hz, 1H) 
【０２０５】
（段階２）３−ヒドロキシメチル−チオフェン−２−カルボン酸の合成
【０２０６】
【化４９】
2007520422.tif 000051
【０２０７】
前記段階１で製造した化合物（７５０ｍｇ、３．１９ｍｍｏＬ）を用いて中間体１２の段階３と同様の方法で合成することにより、標題化合物（２１０ｍｇ、反応収率：９２％、白色固体）を得た。
【０２０８】
（中間体１４）（３−ヒドロキシメチル−フェニル）−酢酸の合成
【０２０９】
【化５０】
2007520422.tif 000052
【０２１０】
ｍ−トリル酢酸エチルエステル（１ｇ、５．６ｍｍｏＬ）とＮ−ブロモスクシニミド（ＮＢＳ、９４８ｍｇ、５．３３ｍｍｏＬ）と触媒量の過酸化ベンゾイルをテトラクロロメタン（１５ｍＬ）に溶解させ、７０℃で３時間加熱還流して（３−ブロモメチル−フェニル）−酢酸エチルエステル（６００ｍｇ、反応収率：４２％、白色固体）を得た。次の反応は、（３−ブロモメチル−フェニル）−酢酸エチルエステル（１３０ｍｇ、０．５０ｍｍｏＬ）と炭酸カルシウム（３００ｍｇ、３ｍｍｏＬ）を水（２ｍＬ）、１，４−ジオキサン（２ｍＬ）に入れて加熱還流することにより、（３−ヒドロキシメチル−フェニル）−酢酸エチルエステル（８５ｍｇ、反応収率：８７％、白色固体）を得た後、室温で（３−ヒドロキシメチル−フェニル）−酢酸エチルエステル（８５ｍｇ、０．４３ｍｍｏＬ）をメタノール（１ｍＬ）に溶解させ、１Ｎ水酸化ナトリウム水溶液（１ｍＬ）を滴加して常温で１時間攪拌することにより、標題化合物（６５ｍｇ、反応収率：９１％、白色固体）を得た。
【０２１１】
1H NMR(400MHz, CDCl3); δ3.66(s, 2H), 4.57(s, 2H), 7.21-7.32(m, 4H) 
【０２１２】
（中間体１５）３−（２−ヒドロキシ−エチル）−安息香酸の合成
【０２１３】
【化５１】
2007520422.tif 000053
【０２１４】
イソフタル酸（５ｇ、３０ｍｍｏＬ）をメタノール（５０ｍＬ）に溶解させた後、触媒量の硫酸を加えて１２時間加熱還流することにより、イソフタル酸ジメチルエステル（５．２ｇ、反応収率：９０％、白色固体）を得、イソフタル酸ジメチルエステル（５．２ｇ、２６．７ｍｍｏＬ）をテトラヒドロフラン（３０ｍＬ）に溶解させた後、２Ｍリチウムボロハイドライドテトラヒドロフラン（１３ｍＬ、２６．７ｍｍｏＬ）を入れて加熱還流することにより、３−ヒドロキシメチル−安息香酸メチルエステル（２．７ｇ、反応収率：６３％、無色液体）を得た。次の反応は、３−ヒドロキシメチル−安息香酸メチルエステル（２００ｍｇ、１．２０ｍｍｏＬ）をジクロロメタン（５ｍＬ）に溶解させた後、ＰＣＣ（３８８ｍｇ、１．８ｍｍｏＬ）を入れて室温で３時間攪拌することにより、３−ホルミル−安息香酸メチルエステル（１４０ｍｇ、反応収率：７２％、白色固体）を得た。窒素の下で（メトキシメチル）トリフェニルホスホニウムクロライド（７７０ｍｇ、２．２４ｍｍｏＬ）をテトラヒドロフラン（５ｍＬ）に溶解させた後、−７８℃に降温し、１Ｍビストリメチルシリルアミドナトリウム（ＮａＨＭＤＳ）テトラヒドロフラン（２ｍＬ、２．０４ｍｍｏＬ）をゆっくり加えて１時間攪拌させた後、３−ホルミル−安息香酸メチルエステル（１６０ｍｇ、０．９７５ｍｍｏＬ）をテトラヒドロフラン（２ｍＬ）に溶解させた後、ゆっくり加えた。室温で２４時間攪拌することにより、３−（２−メトキシ−ビニル）−安息香酸メチルエステル（１２１ｍｇ、反応収率：６５％、白色固体）を得、３−（２−メトキシ−ビニル）−安息香酸メチルエステル（１２０ｍｇ、０．６３ｍｍｏＬ）をテトラヒドロフラン（３ｍＬ）に溶かした後、４Ｍ ＨＣｌ（２ｍＬ）を仕込んで室温で２４時間攪拌することにより、３−（２−オキソ−エチル）−安息香酸メチルエステル（６０ｍｇ、反応収率：５４％、白色固体）を得た。その後、３−（２−オキソ−エチル）−安息香酸メチルエステル（６０ｍｇ、０．０３６ｍｍｏＬ）をエタノール（２ｍＬ）に溶かした後、０℃に降温し、その後水素化ホウ素ナトリウム（ＮａＢＨ４、２５ｍｇ、０．６７ｍｍｏＬ）を加えて１時間攪拌することにより、３−（２−ヒドロキシ−エチル）−安息香酸メチルエステル（５０ｍｇ、反応収率：８４％、白色固体）を得た。その後、３−（２−ヒドロキシ−エチル）−安息香酸メチルエステル（５０ｍｇ、０．２８ｍｍｏＬ）をメタノール（１ｍＬ）に溶解させ、１Ｎ水酸化ナトリウム水溶液（１ｍＬ）を滴加して常温で１時間攪拌することにより、標題化合物（４３ｍｇ、反応収率：９５％、白色固体）を得た。
【０２１５】
1H NMR(400MHz, CDCl3); δ2.32(br, 1H), 2.89(t, J=6.4Hz, 2H), 3.85(t, J=6.4Hz, 2H), 7.36(t, J=7.6Hz, 1H), 7.42(d, J=5.6Hz, 1H), 7.88(d, J=8.8Hz, 1H), 7.89(s, 1H) 
【０２１６】
〔実施例６〕５−ニトロオキシメチルチオフェン−２−カルボン酸−［（７Ｓ）−１，２，３−トリメトキシ−１０−メチルスルファニル−９−オキソ−５，６，７，９−テトラヒドロ−ベンゾ［ａ］ヘプタレン−７−イル］−アミド
【０２１７】
【化５２】
2007520422.tif 000054
【０２１８】
1H NMR(400MHz, CDCl3); δ2.07-2.11(m, 1H), 2.32-2.45(m, 2H), 2.45(s, 3H), 2.53-2.56(m, 1H), 3.71(s, 3H), 3.91(s, 3H), 3.96(S, 3H), 4.84-4.91(m, 1H), 5.46(s, 2H), 6.56(s, 1H), 6.95(d, J=3.6Hz, 1H), 7.13(d, J=10.8Hz, 1H), 7.37(d, J=10.8Hz, 1H), 7.58(d, J=4.0Hz, 1H), 7.61(s, 1H), 8.50(d, J=6.8Hz, 1H) 
【０２１９】
〔実施例７〕Ｎ−［（７Ｓ）−３−シクロペンチルオキシ−１，２−ジメトキシ−１０−メチルスルファニル−９−オキソ−５，６，７，９−テトラヒドロ−ベンゾ［ａ］ヘプタレン−７−イル］−３−ニトロオキシメチル−ベンズアミド
【０２２０】
【化５３】
2007520422.tif 000055
【０２２１】
1H NMR(400MHz, CDCl3); δ1.61-1.73(m, 2H), 1.85-2.00(m, 6H),  2.21-2.65(m, 4H), 2.44(s, 3H), 3.75(s, 3H), 3.93(s, 3H), 4.82-4.88(m, 1H), 4.92-5.00(m, 1H), 5.16(dd, J=12, 31.2Hz, 2H), 6.55(s, 1H), 7.13-7.17(m, 2H), 7.28(d, J=6.4Hz, 1H), 7.41(d, J=10.8Hz, 1H), 7.68-7.70(m, 1H), 7.72(s, 1H), 7.78(s, 1H), 8.78(d, J=7.2Hz, 1H) 
【０２２２】
〔実施例８〕Ｎ−［（７Ｓ）−３−エトキシ−１，２−ジメトキシ−１０−メチルスルファニル−９−オキソ−５，６，７，９−テトラヒドロ−ベンゾ［ａ］ヘプタレン−７−イル］−２−フルオロ−３−ニトロオキシメチル−ベンズアミド
【０２２３】
【化５４】
2007520422.tif 000056
【０２２４】
1H NMR(400MHz, CDCl3); δ1.49(t, J=6.9Hz, 3H), 1.93-1.98(m, 1H), 2.31-2.39(m, 1H), 2.43(s, 3H), 2.46-2.49(m, 1H), 2.51-2.59(m, 1H), 3.73(s, 3H), 3.96(s, 3H), 4.11-4.14(m, 2H), 4.83-4.86(m, 1H), 5.53(d, J=12.8Hz, 1H), 5.59(d, J=12.4Hz, 1H), 6.56(s, 1H), 7.07(d, J=10.2Hz, 1H), 7.10-7.15(m, 1H), 7.20-7.28(m, 1H), 7.31(d, J=10.2Hz, 1H), 7.57(t, J=6.4Hz, 1H), 7.97(t, J=6.9Hz, 1H) 
【０２２５】
〔実施例９〕２−フルオロ−Ｎ−［（７Ｓ）−３−イソプロポキシ−１，２−ジメトキシ−１０−メチルスルファニル−９−オキソ−５，６，７，９−テトラヒドロ−ベンゾ［ａ］ヘプタレン−７−イル］−３−ニトロオキシメチル−ベンズアミド
【０２２６】
【化５５】
2007520422.tif 000057
【０２２７】
1H NMR(400MHz, CDCl3); δ1.41(q, J=6.0Hz, 6H), 1.92-1.99(m, 1H), 2.31-2.40(m, 1H), 2.43(s, 3H), 2.46-2.52(m, 1H), 2.55-2.60(m, 1H), 3.72(s, 3H), 3.94(s, 3H), 4.57-4.63(m, 1H), 4.83-4.89(m, 1H), 5.53(d, J=12.8Hz, 1H), 5.59(d, J=12.4Hz, 1H), 6.57(s, 1H), 7.07(d, J=10.6Hz, 1H), 7.15-7.19(m, 1H), 7.23-7.27(m, 1H), 7.34(d, J=10.2Hz, 1H), 7.56(t, J=7.1Hz, 1H), 7.7(t, J=7.5Hz, 1H) 
【０２２８】
〔実施例１０〕２−フルオロ−ニトロオキシメチル−Ｎ−［（７Ｓ）−１，２，３−トリメトキシ−１０−メチルスルファニル−９−オキソ−５，６，７，９−テトラヒドロ−ベンゾ［ａ］ヘプタレン−７−イル］−ベンズアミド
【０２２９】
【化５６】
2007520422.tif 000058
【０２３０】
1H NMR(400MHz, CDCl3); δ1.95-2.02(m, 1H), 2.31-2.54(m, 2H), 2.43(s, 3H), 2.59-2.63(m, 1H), 3.73(s, 3H),  3.87(s, 3H), 3.92(s, 3H), 4.82-4.88(m, 1H), 5.51(d, J=12.8Hz, 1H), 5.60(d, J=12.8Hz, 1H), 6.58(s, 1H), 7.06(d, J=10.6Hz, 1H), 7.22-7.27(m, 2H), 7.28(s, 1H), 7.32(d, J=10.6Hz, 1H), 7.54-7.58(m, 1H), 7.93-7.98(m, 1H) 
【０２３１】
〔実施例１１〕Ｎ−［（７Ｓ）−３−シクロペンチルオキシ−１，２−ジメトキシ−１０−メチルスルファニル−９−オキソ−５，６，７，９−テトラヒドロ−ベンゾ［ａ］ヘプタレン−７−イル］−２−フルオロ−３−ニトロオキシメチル−ベンズアミド
【０２３２】
【化５７】
2007520422.tif 000059
【０２３３】
1H NMR(400MHz, CDCl3); δ1.61-1.73(m, 2H), 1.85-2.00(m, 6H),  2.35-2.52(m, 4H), 2.42(s, 3H), 3.72(s, 3H), 3.93(s, 3H), 4.82-4.88(m, 2H), 5.57(dd, J=12.8, 37.6Hz, 2H), 6.55(s, 1H), 7.05(d, J=10.4Hz, 1H), 7.09-7.13(m, 1H), 7.26(d, J=7.2Hz, 2H), 7.32(d, J=10.4Hz, 1H), 7.55-7.59(m, 1H), 7.96-8.00(m, 1H) 
【０２３４】
〔実施例１２〕３−フルオロ−５−ニトロオキシメチル−Ｎ−［（７Ｓ）−１，２，３−トリメトキシ−１０−メチルスルファニル−９−オキソ−５，６，７，９−テトラヒドロ−ベンゾ［ａ］ヘプタレン−７−イル］−ベンズアミド
【０２３５】
【化５８】
2007520422.tif 000060
【０２３６】
1H NMR(400MHz, CDCl3); δ2.31-2.45(m, 3H), 2.46(s, 3H), 2.59-2.63(m, 1H), 3.75(s, 3H), 3.93(s, 3H), 3.98(S, 3H), 4.90-4.95(m, 1H), 5.11(dd, J=12.8, 45.6Hz, 2H), 6.57(s, 1H), 7.03(d, J=7.6Hz,1H), 7.19(d, J=8.8Hz, 1H), 7.30-7.33(m, 1H), 7.42(d, J=10.8Hz, 1H), 7.55(s, 1H), 7.68(s, 1H), 8.76(d, J=7.2Hz, 1H) 
【０２３７】
〔実施例１３〕Ｎ−［（７Ｓ）−（３−エトキシ−１，２−ジメトキシ−１０−メチルスルファニル−９−オキソ−５，６，７，９−テトラヒドロ−ベンゾ［ａ］ヘプタレン−７−イル］−３−フルオロ−５−ニトロオキシメチル−ベンズアミド
【０２３８】
【化５９】
2007520422.tif 000061
【０２３９】
1H NMR(400MHz, CDCl3); δ1.50(t, J=6.9, 3H), 2.33~2.42(m, 3H), 2.46(s, 3H), 2.51~2.59(m, 1H), 3.75(s, 3H), 3.98(s, 3H), 4.11~4.16(m, 2H), 4.90~4.93(m, 1H), 5.05(d, J=12.4, 1H), 5.17(d, J=12.4, 1H), 6.56(s, 1H), 7.03(d, J=7.3, 1H), 7.20(d, J=10.6, 1H), 7.31(d, J=9.1, 1H), 7.45(d, J=10.6, 1H), 7.55(s, 1H), 7.69(s, 1H), 8.88(d, J=7.3, 1H) 
【０２４０】
〔実施例１４〕３−フルオロ−Ｎ−［（７Ｓ）−３−イソプロポキシ−１，２−ジメトキシ−１０−メチルスルファニル−９−オキソ−５，６，７，９−テトラヒドロ−ベンゾ［ａ］ヘプタレン−７−イル］−５−ニトロオキシメチル−ベンズアミド
【０２４１】
【化６０】
2007520422.tif 000062
【０２４２】
1H NMR(400MHz, CDCl3); δ1.37~1.44(m, 6H), 2.34~2.41(m, 3H), 2.46(s, 3H), 2.51~2.58(m, 1H), 3.75(s, 3H), 3.96(s, 3H), 4.57~4.62(m, 1H), 4.91~4.95(m, 1H), 5.05(d, J=12.4, 1H), 5.17(d, J=12.4, 1H), 6.56(s, 1H), 7.03(d, J=8.4, 1H), 7.20(d, J=10.6, 1H), 7.31(d, J=7.3, 1H), 7.45(d, J=10.6, 1H), 7.55(s, 1H), 7.70(s, 1H), 8.91(d, J=7.3, 1H) 
〔実施例１５〕Ｎ−［（７Ｓ）−３−シクロペンチルオキシ−１，２−ジメトキシ−１０−メチルスルファニル−９−オキソ−５，６，７，９−テトラヒドロ−ベンゾ［ａ］ヘプタレン−７−イル］−３−フルオロ−５−ニトロオキシメチル−ベンズアミド
【０２４３】
【化６１】
2007520422.tif 000063
【０２４４】
1H NMR(400MHz, CDCl3); δ1.64~1.69(m, 2H), 1.83~1.98(m, 6H), 2.35~2.43(m, 3H), 2.46(s, 3H), 2.51~2.58(m, 1H), 3.74(s, 3H), 3.94(s, 3H), 4.82~4.84(m, 1H), 4.91~4.94(m, 1H), 5.04(d, J=12.4, 1H), 5.16(d, J=12.4, 1H), 6.55(s, 1H), 7.02(d, J=8.4, 1H), 7.20(d, J=10.6, 1H), 7.31(d, J=7.3, 1H), 7.45(d, J=10.2, 1H), 7.55(s, 1H), 7.70(s, 1H), 8.93(d, J=6.9, 1H) 
【０２４５】
〔実施例１６〕４−フルオロ−３−ニトロオキシメチル−Ｎ−［（７Ｓ）−１，２，３−トリメトキシ−１０−メチルスルファニル−９−オキソ−５，６，７，９−テトラヒドロ−ベンゾ［ａ］ヘプタレン−７−イル］−ベンズアミド
【０２４６】
【化６２】
2007520422.tif 000064
【０２４７】
1H NMR(400MHz, CDCl3); δ2.22-2.51(m, 3H), 2.46(s, 3H), 2.55-2.63(m, 1H), 3.76(s, 3H), 3.92(s, 3H), 3.98(s, 3H), 4.90-4.97(m, 1H), 5.10(d, J=12.1Hz, 1H), 5.35(d, J=12.1Hz, 1H), 6.57(s, 1H), 6.86(dd, J=9.2, 8.8Hz, 1H), 7.18(d, J=10.3Hz, 1H), 7.43(d, J=10.3Hz, 1H), 7.72(s, 1H), 7.76-7.80(m, 1H), 7.91(dd, J=6.80, 2.2Hz, 1H), 8.93(d, J=7.2Hz, 1H) 
【０２４８】
〔実施例１７〕２−フルオロ−５−ニトロオキシメチル−Ｎ−［（７Ｓ）−１，２，３−トリメトキシ−１０−メチルスルファニル−９−オキソ−５，６，７，９−テトラヒドロ−ベンゾ［ａ］ヘプタレン−７−イル］−ベンズアミド
【０２４９】
【化６３】
2007520422.tif 000065
【０２５０】
1H NMR(400MHz, CDCl3); δ1.94-2.01(m, 1H), 2.31-2.54(m, 2H), 2.43(s, 3H), 2.58-2.63(m, 1H), 3.73(s, 3H), 3.92(s, 3H), 3.97(s, 3H), 4.81-4.87(m, 1H), 5.36(s, 2H), 6.57(s, 1H), 7.06(d, J=10.3Hz, 1H), 7.16-7.28(m, 2H), 7.26(s, 1H), 7.33(d, J=10.3Hz, 1H), 7.51-7.55(m, 1H), 7.99(dd, J=7.3, 2.6Hz, 1H) 
【０２５１】
〔実施例１８〕３−ヒドロキシ−５−ニトロオキシメチル−Ｎ−［（７Ｓ）−１，２，３−トリメトキシ−１０−メチルスルファニル−９−オキソ−５，６，７，９−テトラヒドロ−ベンゾ［ａ］ヘプタレン−７−イル］−ベンズアミド
【０２５２】
【化６４】
2007520422.tif 000066
【０２５３】
1H NMR(400MHz, CDCl3); δ2.30-2.43(m, 6H), 2.56-2.57(m, 1H), 3.61(s, 3H), 3.90(s, 3H), 3.92(s, 3H), 4.82-4.85(m, 1H), 5.00(dd, J=30.8Hz, 12.8Hz, 2H), 6.56(s, 1H), 6.62(s, 1H), 7.11(s, 2H), 7.16-7.19(m, 2H), 7.41(d, J=10.8Hz, 1H), 7.66(s, 1H), 8.57(br s , 1H, NH), 8.78(brs , 1H,  OH) 
【０２５４】
〔実施例１９〕３，５−ｂｉｓ−ニトロオキシメチル−Ｎ−［（７Ｓ）−１，２，３−トリメトキシ−１０−メチルスルファニル−９−オキソ−５，６，７，９−テトラヒドロ−ベンゾ［ａ］ヘプタレン−７−イル］−ベンズアミド
【０２５５】
【化６５】
2007520422.tif 000067
【０２５６】
1H NMR(400MHz, CDCl3); δ2.29-2.51(m, 3H), 2.46(s, 3H), 2.60-2.62(m, 1H), 3.77(s, 3H), 3.93(s, 3H), 3.99(s, 3H), 4.94-4.98(m, 1H), 5.18(s, 4H), 6.58(s, 1H), 7.20(d, J=10.6Hz, 1H), 7.26(s, 1H), 7.45(d, J=10.6Hz, 1H), 7.77(s, 2H), 7.81(s, 1H), 9.12(d, J=7.0Hz, 1H) 
【０２５７】
〔実施例２０〕２−ヒドロキシ−４−ニトロオキシメチル−Ｎ−［（７Ｓ）−１，２，３−トリメトキシ−１０−メチルスルファニル−９−オキソ−５，６，７，９−テトラヒドロ−ベンゾ［ａ］ヘプタレン−７−イル］−ベンズアミド
【０２５８】
【化６６】
2007520422.tif 000068
【０２５９】
1H NMR(400MHz, CDCl3); δ2.25-2.63(m, 4H), 2.47(s, 3H), 3.74(s, 3H), 3.91(s, 3H), 3.97(S, 3H), 4.85-4.92(m, 1H), 5.27(d, J=4.8Hz, 2H), 6.53(d, J=8.4Hz, 1H), 6.57(s, 1H), 6.61(s, 1H), 7.20(d, J=10.4Hz, 1H), 7.42(d, J=10Hz, 1H), 7.63(s, 1H), 7.72(d, J=8Hz, 1H), 9.13(d, J=6.8Hz, 1H), 12.29(s, 1H) 
【０２６０】
〔実施例２１〕４−ニトロオキシメチル−チオフェン−２−カルボン酸−［（７Ｓ）−１，２，３−トリメトキシ−１０−メチルスルファニル−９−オキソ−５，６，７，９−テトラヒドロ−ベンゾ［ａ］ヘプタレン−７−イル］−アミド
【０２６１】
【化６７】
2007520422.tif 000069
【０２６２】
1H NMR(400MHz, CDCl3); δ2.21-2.29(m, 1H), 2.34-2.46(m, 5H), 2.51-2.58(m, 1H), 3.71(s, 3H), 3.91(s, 3H), 3.96(S, 3H), 4.88-4.95(m, 1H), 5.18(dd, J=12.8, 20Hz, 2H), 6.56(s, 1H),  7.17(d, J=10.4Hz, 1H), 7.30(s, 1H), 7.41(d, J=10.4Hz, 1H), 7.61(s, 1H), 7.74(s, 1H), 8.81(d, J=6.4Hz, 1H) 
【０２６３】
〔実施例２２〕３−ニトロキシメチル−チオフェン−２−カルボン酸−［（７Ｓ）−１，２，３−トリメトキシ−１０−メチルスルファニル−９−オキソ−５，６，７，９−テトラヒドロ−ベンゾ［ａ］ヘプタレン−７−イル］−アミド
【０２６４】
【化６８】
2007520422.tif 000070
【０２６５】
1H NMR(400MHz, CDCl3); δ2.04-2.17(m, 1H), 2.30-2.45(m, 5H), 2.57-2.64(m, 1H), 3.73(s, 3H), 3.91(s, 3H), 3.96(S, 3H), 4.67-4.88(m, 1H), 5.66(d, J=13.6Hz, 1H), 5.80(d, J=13.6Hz, 1H), 6.56(s, 1H), 7.02(d, J=4.4Hz, 1H), 7.08(d, J=10.4Hz, 1H), 7.26(d, J=4.4Hz, 1H), 7.29(d, J=10.4Hz, 1H), 7.43(s, 1H), 7.45(d, J=7.2Hz, 1H) 
【０２６６】
〔実施例２３〕２−（３−ニトロオキシメチル−フェニル）−Ｎ−［（７Ｓ）−１，２，３−トリメトキシ−１０−メチルスルファニル−９−オキソ−５，６，７，９−テトラヒドロ−ベンゾ［ａ］ヘプタレン−７−イル］−アセトアミド
【０２６７】
【化６９】
2007520422.tif 000071
【０２６８】
1H NMR(400MHz, CDCl3); δ1.82-1.95(m, 1H), 2.21-2.28(m, 1H), 2.31-2.42(m, 1H), 2.45(s, 3H), 2.47-2.53(m, 1H), 3.51(d, J=14.0Hz, 1H), 3.64(s, 3H), 3.66(d, J=14.0Hz, 1H), 3.88(s, 3H), 3.93(s, 3H), 4.66-4.72(m, 1H), 5.40(s, 2H), 6.51(s, 1H), 7.11(d, J=10.4Hz, 1H), 7.24-7.38(m, 5H), 7.48(s, 1H), 7.90(d, J=7.2Hz, 1H) 
【０２６９】
〔実施例２４〕３−（２−ニトロオキシ−エチル）−Ｎ−［（７Ｓ）−１，２，３−トリメトキシ−１０−メチルスルファニル−９−オキソ−５，６，７，９−テトラヒドロ−ベンゾ［ａ］ヘプタレン−７−イル］−ベンズアミド
【０２７０】
【化７０】
2007520422.tif 000072
【０２７１】
1H NMR(400MHz, CDCl3); δ2.05-2.11(m, 1H), 2.17-2.56(m, 2H), 2.46(s, 3H), 2.56-2.60(m, 1H), 2.81-2.91(m, 2H), 3.69(s, 3H), 3.91(s, 3H), 3.97(s, 3H), 4.45(t, J=6.8,Hz, 2H), 4.89-4.95(m, 1H), 6.56(s, 1H), 7.12-7.24(m, 3H), 7.39(d, J=10.4Hz, 1H), 7.61-7.64(m, 2H), 7.69(s, 1H), 8.22(d, J=6.8Hz, 1H) 
【０２７２】
〔実施例２５〕３−ニトロオキシ安息香酸−５−［（７Ｓ）−１，２，３−トリメトキシ−１０−メチルスルファニル−９−オキソ−５，６，７，９−テトラヒドロ−ベンゾ［ａ］ヘプタレン−７−イル−カルバモイル］−ピリジン−２−イル−メチルエステルの合成
（段階１）３−クロロメチル安息香酸−｛５−［（７Ｓ）−１，２，３−トリメトキシ−１０−メチルスルファニル−９−オキソ−５，６，７，９−テトラヒドロ−ベンゾ［ａ］ヘプタレン−７−イル−カルバモニル］−ピリジン−２−イル｝−メチルエステルの合成
【０２７３】
【化７１】
2007520422.tif 000073
【０２７４】
前記実施例１の段階１で製造した化合物（１００ｍｇ、０．１９ｍｍｏＬ）をジクロロメタン（３ｍＬ）に溶解させた後、３−（クロロメチル）ベンゾイルクロライド（０．０３０ｍＬ、０．２１ｍｍｏＬ）とトリエチルアミン（０．０８２ｍＬ、０．５９ｍｍｏＬ）をそれぞれ滴加した。これを常温で１０分間反応させ、水を加えて反応を終結させた後、ジクロロメタンで抽出し、無水硫酸ナトリウムで乾燥させて溶媒を減圧濃縮した。残余物をカラムクロマトグラフィ（酢酸エチル）で精製することにより、標題化合物（９９ｍｇ、収率：７９％、黄色固体）を得た。
【０２７５】
1H NMR (400MHz, CDCl3): δ2.14-2.16(m, 1H), 2.30-2.39(m, 1H), 2.43-2.45(m, 1H), 2.48(s, 3H), 2.68-2.96(m, 1H), 3.67(s, 3H), 3.90(s, 3H), 3.91(s, 3H), 4.83-4.93(m, 1H), 4.88(s, 2H), 5.51(s, 2H), 6.77(s, 1H), 7.27(s, 1H), 7.52(t, J=7.7Hz, 1H), 7.65-7.70(m, 2H), 8.05(d, J=7.7Hz, 1H), 8.14(s, 1H), 8.28(d, J=10.6Hz, 1H), 9.02(s, 1H) 
【０２７６】
（段階２）３−ニトロオキソ安息香酸−｛５−［（７Ｓ）−１，２，３−トリメトキシ−１０−メチルスルファニル−９−オキソ−５，６，７，９−テトラヒドロ−ベンゾ［ａ］ヘプタレン−７−イル−カルバモニル］−ピリジン−２−イル｝−メチルエステルの合成
【０２７７】
【化７２】
2007520422.tif 000074
【０２７８】
前記段階１で製造した化合物（９０ｍｇ、０．１３ｍｍｏＬ）とヨウ化ナトリウム（３１ｍｇ、０．２０ｍｍｏＬ）を３ｍＬのアセトンに溶解させた後、常温で１日間反応させた。水を加えて反応を終結させた後、酢酸エチルで抽出し、溶媒を減圧濃縮した。反応濃縮液と硝酸銀（３０ｍｇ、０．０４５ｍｍｏＬ）を５ｍＬのアセトニトリルに溶解させて常温で１日間反応させた。水を加えて反応を終結させた後、酢酸エチルで抽出し、溶媒を減圧濃縮した。残余物を短いカラムクロマトグラフィ（酢酸エチル）で精製し、ＰＬＣで精製することにより、標題化合物（２６ｍｇ、収率：２９％、黄色固体）を得た。
【０２７９】
1H NMR (400MHz, CDCl3): δ2.09-2.17(m, 1H), 2.35-2.41(m, 2H), 2.44(s, 3H), 2.55-2.58(m, 1H), 3.74(s, 3H), 3.91(s, 3H), 3.96(s, 3H),  4.92-4.95(m, 1H), 5.45(s, 2H), 5.47(s, 2H), 6.56(s, 1H), 7.13(d, J=10.2Hz, 1H), 7.35(t, J=9.1Hz, 2H), 7.50(t, J=8.5Hz, 1H), 7.54(s, 1H), 7.62(d, J=7.3Hz, 1H), 8.14(d, J=8.3Hz, 2H), 8.24(dd, J=2.2, 6.2Hz, 1H, ArH), 8.36(d, J=6.9Hz, 1H), 9.09(s, 1H) 
【０２８０】
〔実施例２６〜３４〕
実施例２６〜３４は、前記実施例２５に記載の方法と類似の方法で合成し、必要な中間体は、下記の方法によって製造した。
【０２８１】
（中間体１６）２−ヒドロキシ−Ｎ−［（７Ｓ）−１，２，３−トリメトキシ−１０−メチルスルファニル−９−オキソ−５，６，７，９−テトラヒドロ−ベンゾ［ａ］ヘプタレン−７−イル］−ベンズアミドの合成
【０２８２】
【化７３】
2007520422.tif 000075
【０２８３】
２−ヒドロキシ安息香酸（２０３ｍｇ、１．４７ｍｍｏＬ）とＥＤＣＩ（３８５ｍｇ、２．０１ｍｍｏＬ）、ＨＯＢｔ（２７１ｍｇ、２．０１ｍｍｏＬ）をジメチルホルムアミド（１０ｍＬ）に溶解させ、トリエチルアミン（０．３７ｍＬ、２．６７ｍｍｏＬ）を滴加して１日間常温で攪拌した。ここに化合物７−アミノ−１，２，３−トリメトキシ−１０−メチルスルホニル−６，７−ジヒドロ−５Ｈ−ベンゾ［ａ］−ヘプタレン−９−オン（５００ｍｇ、１．３４ｍｍｏＬ）を滴加して常温で１日間攪拌し、水を加えて反応を終結させ、ジエチルエーテルで抽出した後、無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、その後溶媒を減圧濃縮した。残余物をカラムクロマトグラフィ（ヘキサン：酢酸エチル＝１：５）した後、メタノールで再結晶して標題化合物（５１６ｍｇ、収率：７８％、黄色固体）を得た。
【０２８４】
1H NMR (400MHz, CDCl3): δ2.14-2.17(m, 1H), 2.31-2.37(m, 1H), 2.40-2.44(s, 1H), 2.45(s, 3H), 2.56-2.60(m, 1H), 3.74(s, 3H), 3.91(s, 3H), 3.97(s, 3H),  4.85-4.92(m, 1H), 6.56(s, 1H), 6.64(d, J=7.7Hz, 1H), 6.77(d, J=8.4Hz, 1H), 7.15(d, J=10.6Hz, 1H), 7.22(d, J=7.3Hz, 1H), 7.38(d, J=10.6Hz, 1H), 7.57(s,  1H), 7.71(d, J=8.0Hz, 1H) 
【０２８５】
（中間体１７）３−ヒドロキシ−Ｎ−［（７Ｓ）−１，２，３−トリメトキシ−１０−メチルスルファニル−９−オキソ−５，６，７，９−テトラヒドロ−ベンゾ［ａ］ヘプタレン−７−イル］−ベンズアミドの合成
【０２８６】
【化７４】
2007520422.tif 000076
【０２８７】
３−ヒドロキシ安息香酸（４９７ｍｇ、１．３３ｍｍｏＬ）を用いて前記中間体１６の製造方法と同様の方法で合成して標題化合物（５５８ｍｇ、収率：８５％、黄色固体）を得た。
【０２８８】
1H NMR (400MHz, DMSO-d6): δ2.07-2.15(m, 1H), 2.18-2.35(m, 6H),  3.55(s, 3H), 3.80(s, 3H), 3.84(s, 3H), 4.53-4.56(m, 1H), 6.81(s, 1H), 6.92(d, J=6.8Hz, 1H), 7.10(s, 1H), 7.15-7.31(m, 5H), 8.98(d, J=7.6Hz, 1H, -NH), 9.70(s, 1H, -OH) 
【０２８９】
〔実施例２６〕４−ニトロオキシ酪酸−５−［（７Ｓ）−１，２，３−トリメトキシ−１０−メチルスルファニル−９−オキソ−５，６，７，９−テトラヒドロ−ベンゾ［ａ］ヘプタレン−７−イル−カルバモイル］−ピリジン−２−イル−メチルエステル
【０２９０】
【化７５】
2007520422.tif 000077
【０２９１】
1H NMR (400MHz, CDCl3): δ2.06-2.16(m, 1H), 2.08-2.11(m, 2H), 2.31-2.49(m, 1H), 2.45(s, 3H), 2.57(t, J=7.1Hz, 2H), 3.75(s, 3H), 3.91(s, 3H), 3.96(s, 3H),  4.52(t, J=6.4Hz, 2H), 4.91-4.94(m, 1H), 5.21(s, 2H), 6.56(s, 1H), 7.13(d, J=10.9Hz, 1H), 7.21-7.25(m, 1H), 7.38(d, J=10.6Hz, 1H), 7.52(s, 1H), 8.22(d, J=8.0Hz, 1H), 9.05(s, 1H) 
【０２９２】
〔実施例２７〕３−ニトロオキシメトキシ安息香酸−６−［（７Ｓ）−１，２，３−トリメトキシ−１０−メチルスルファニル−９−オキソ−５，６，７，９−テトラヒドロ−ベンゾ［ａ］ヘプタレン−７−イル−カルバモイル］−ピリジン−２−イル−メチルエステル
【０２９３】
【化７６】
2007520422.tif 000078
【０２９４】
1H NMR (400MHz, CDCl3): δ1.84-1.92(m, 1H), 2.33-2.60(m, 1H), 2.43(s, 3H), 2.46-2.54(m, 1H) 2.55-2.60(m, 1H), 3.73(s, 3H), 3.92(s, 3H), 3.96(S, 3H), 4.74-4.81(m, 1H), 5.51(s, 2H) 5.57(d, J=4.0Hz, 1H), 6.56(s, 1H), 7.04(d, J=10.4Hz, 1H), 7.25(d, J=10.4Hz, 1H), 7.54-7.60(m, 2H), 7.65(d, J=7.6Hz, 1H), 7.87(t, J=8.0Hz, 1H), 7.99(d, J=7.6Hz, 1H), 8.21(s, 2H), 8.22(s, 1H), 8.41(d, J=7.2Hz, 1H) 
【０２９５】
〔実施例２８〕４−ニトロオキシ酪酸−６−［（７Ｓ）−１，２，３−トリメトキシ−１０−メチルスルファニル−９−オキソ−５，６，７，９−テトラヒドロ−ベンゾ［ａ］ヘプタレン−７−イル−カルバモイル］−ピリジン−２−イル−メチルエステル
【０２９６】
【化７７】
2007520422.tif 000079
【０２９７】
1H NMR (400MHz, CDCl3): δ2.02-2.09(m, 1H), 2.11-2.18(m, 2H), 2.21-2.40(m, 2H), 2.43(s, 3H), 2.47-2.56(m, 1H), 2.63(t, J=7.2Hz, 2H), 3.73(s, 3H), 3.92(s, 3H), 3.96(S, 3H), 4.57(t, J=6.4Hz, 2H), 4.77-4.83(m, 1H), 5.30(d, J=4.8Hz, 2H), 6.58(s, 1H), 7.05(d, J=10.4Hz, 1H), 7.25(S, 1H), 7.32(d, J=10.4Hz, 1H), 7.52(d, J=8.0Hz, 1H), 7.84(t, J=8.0Hz, 1H), 7.98(d, J=8.0Hz, 1H), 8.45(d, J=6.8Hz, 1H) 
【０２９８】
〔実施例２９〕３−ニトロオキシメチル安息香酸−２−［（７Ｓ）−１，２，３−トリメトキシ−１０−メチルスルファニル−９−オキソ−５，６，７，９−テトラヒドロ−ベンゾ［ａ］ヘプタレン−７−イル−カルバモイル］−フェニルエステル
【０２９９】
【化７８】
2007520422.tif 000080
【０３００】
1H NMR (400MHz, CDCl3): δ1.48-1.55(m, 1H), 1.83-1.89(m, 1H), 2.22-2.39(m, 2H), 2.42(s, 3H), 3.62(s, 3H), 3.87(s, 3H), 3.92(s, 3H), 4.63-4.70(m, 1H), 5.54(s, 2H), 6.47(s, 1H), 6.89(d, J=7.4Hz, 1H), 7.03(d, J=10.2Hz, 1H), 7.17(s, 1H), 7.23(d, J=10.1Hz, 1H), 7.35(t, J=7.3Hz, 1H), 7.54(t, J=7.4Hz, 1H), 7.58(t, J=7.6Hz, 1H), 7.72(d, J=8.0Hz, 1H), 7.83(d, J=7.7Hz, 1H), 8.26(m, 2H) 
【０３０１】
〔実施例３０〕４−ニトロオキシ酪酸−２−［（７Ｓ）−１，２，３−トリメトキシ−１０−メチルスルファニル−９−オキソ−５，６，７，９−テトラヒドロ−ベンゾ［ａ］ヘプタレン−７−イル−カルバモイル］−フェニルエステル
【０３０２】
【化７９】
2007520422.tif 000081
【０３０３】
1H NMR (400MHz, CDCl3): δ1.60-1.90(m, 1H), 2.10-2.14(m, 2H), 2.26-2.39(m, 1H), 2.44(s, 3H), 2.46-2.51(m, 1H), 2.56-2.61(m, 1H), 2.80(t, J=7.1Hz, 2H),  3.70(s, 3H), 3.92(s, 3H), 3.96(s, 3H),  4.55(t, J=6.2Hz, 2H), 4.74-4.81(m, 1H),  6.57(s, 1H), 6.82(d, J=6.9Hz, 1H), 7.08(d, J=10.6Hz, 1H), 7.13(d, J=9.1Hz, 1H), 7.23(s, 1H), 7.28-7.36(m, 1H), 7.47(t, J=9.9Hz, 1H), 7.68(d, J=9.5Hz, 1H) 
【０３０４】
〔実施例３１〕３−ニトロオキシメチル安息香酸−３−［（７Ｓ）−１，２，３−トリメトキシ−１０−メチルスルファニル−９−オキソ−５，６，７，９−テトラヒドロ−ベンゾ［ａ］ヘプタレン−７−イル−カルバモイル］−フェニルエステル
【０３０５】
【化８０】
2007520422.tif 000082
【０３０６】
1H NMR (400MHz, CDCl3): δ2.05-2.15(m, 1H), 2.23-2.59(m, 6H), 3.75(s, 3H), 3.91(s, 3H), 3.97(s, 3H), 4.90-5.00(m, 1H), 5.49(s, 2H), 6.56(s, 1H), 7.03(d, J=10.4Hz, 1H), 7.27(s, 2H), 7.34(d, J=8.8Hz, 2H) 7.53-7.65(m, 2H), 7.76(s, 1H), 7.77(d, J=6.4Hz, 1H), 8.13(m, 3H) 
【０３０７】
〔実施例３２〕４−ニトロオキシ酪酸−３−［（７Ｓ）−１，２，３−トリメトキシ−１０−メチルスルファニル−９−オキソ−５，６，７，９−テトラヒドロ−ベンゾ［ａ］ヘプタレン−７−イル−カルバモイル］−フェニルエステル
【０３０８】
【化８１】
2007520422.tif 000083
【０３０９】
1H NMR (400MHz, CDCl3): δ2.04-2.18(m, 3H), 2.25-2.60(m, 6H), 2.65(t, J=6.8Hz, 2H), 3.74(s, 3H), 3.91(s, 3H), 3.96(s, 3H), 4.56(t, J=6.4Hz, 2H), 4.87-4.94(m, 1H), 6.56(s, 1H), 7.08-7.12(m, 2H), 7.26-7.35(m, 2H), 7.48(s, 1H), 7.59(s, 1H), 7.71(d, J=8.0Hz, 1H), 7.75 (d, J=7.6Hz, 1H, -NH) 
【０３１０】
〔実施例３３〕３−ニトロオキシメチル安息香酸−３−［（７Ｓ）−１，２，３−トリメトキシ−１０−メチルスルファニル−９−オキソ−５，６，７，９−テトラヒドロ−ベンゾ［ａ］ヘプタレン−７−イル−カルバモイル］−ベンジルエステル
【０３１１】
【化８２】
2007520422.tif 000084
【０３１２】
1H NMR (400MHz, CDCl3): δ2.05-2.18(m, 1H), 2.31-2.47(m, 2H), 2.40(s, 3H), 2.55-2.59(m, 1H), 3.75(s, 3H), 3.91(s, 3H), 3.97(s, 3H), 4.90-4.96(m, 1H), 5.24(s, 2H), 5.44(s, 2H), 6.56(s, 1H), 7.09(d, J=10.6Hz, 1H), 7.27(dd, J=7.6, 7.6Hz, 1H), 7.36(d, J=10.6Hz, 1H), 7.44(d, J=7.6Hz, 1H), 7.45(dd, J=8.0, 7.6Hz, 1H), 7.58(d, J=8.0Hz, 1H), 7.59(s, 1H), 7.79(d, J=7.6Hz, 1H), 7.91(s, 1H), 8.05(d, J=7.6Hz, 1H), 8.06(s, 1H), 8.18(d, J=7.2Hz, 1H) 
【０３１３】
〔実施例３４〕４−ニトロオキシ酪酸−３−［（７Ｓ）−１，２，３−トリメトキシ−１０−メチルスルファニル−９−オキソ−５，６，７，９−テトラヒドロ−ベンゾ［ａ］ヘプタレン−７−イル−カルバモイル］−ベンジルエステル
【０３１４】
【化８３】
2007520422.tif 000085
【０３１５】
1H NMR (400MHz, CDCl3): δ2.00-2.14(m, 3H), 2.31-2.51(m, 4H), 2.44(s, 3H), 2.56-2.60(m, 1H), 3.75(s, 3H), 3.92(s, 3H), 3.97(s, 3H), 4.49(t, J=6.2Hz, 2H), 4.89-4.95(m, 1H), 4.99(d, J=12.4Hz, 1H), 5.04(d, J=12.4Hz, 1H), 6.56(s, 1H), 7.11(d, J=10.6Hz, 1H), 7.26(dd, J=7.6, 7.6Hz, 1H), 7.35-7.37(m, 2H), 7.54(s, 1H), 7.76(d, J=8.0Hz, 1H), 7.81(s, 1H), 8.00(d, J=7.6Hz, 1H) 
【０３１６】
〔実施例３５〕２−ニトロソチオ−Ｎ−［（７Ｓ）−１，２，３−トリメトキシ−１０−メチルスルファニル−９−オキソ−５，６，７，９−テトラヒドロ−ベンゾ［ａ］ヘプタレン−７−イル］−ベンズアミドの合成
（段階１）２−メルカプト−Ｎ−［（７Ｓ）−１，２，３−トリメトキシ−１０−メチルスルファニル−９−オキソ−５，６，７，９−テトラヒドロ−ベンゾ［ａ］ヘプタレン−７−イル］−ベンズアミドの合成
【０３１７】
【化８４】
2007520422.tif 000086
【０３１８】
チオサリチル酸（１１５ｍｇ、０．７５ｍｍｏＬ）に過量の塩化チオニルを加えて１日間加熱攪拌した。これを減圧濃縮して塩化チオニルを除去し、クロライド系化合物を合成した。７−アミノ−１，２，３−トリメトキシ−１０−メチルスルホニル−６，７−ジヒドロ−５Ｈ−ベンゾ［ａ］−ヘプタレン−９−オン（２４３ｍｇ、０．６２ｍｍｏＬ）を、精製されたジクロロメタンに溶解させ、トリエチルアミン（０．２６ｍＬ、１．８６ｍｍｏＬ）を滴加し、０℃に降温下後、チオサリチル酸塩化物をジクロロメタンに溶解させて滴加した。これを３０分間攪拌し、水を加えて反応を終結させた後、クロロホルムで抽出して炭酸水素ナトリウム水溶液で洗浄した。溶媒を無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、減圧濃縮することにより、残余物をカラムクロマトグラフィ(クロロホルム：メタノール＝１２：１)して標題化合物（２１０ｍｇ、収率：６６％、白色固体）を得た。
【０３１９】
1H NMR (400MHz, CDCl3) : δ2.06-2.17(m, 1H), 2.33-2.49(m, 2H), 2.42(s, 3H), 2.54-2.59(m, 1H), 3.72(s, 3H), 3.92(s, 3H), 3.96(s, 3H),  4.86-4.93(m, 1H), 6.56(s, 1H), 7.06(d, J=10.6Hz, 1H), 7.14(t, J=7.5Hz, 1H), 7.24(d, J=7.7Hz, 1H), 7.31(d, J=10.6Hz, 1H), 7.51(s,  1H), 7.58(d, J=7.3Hz, 1H), 7.63(t, J=8.6Hz, 2H) 
【０３２０】
（段階２）２−ニトロソチオ−Ｎ−［（７Ｓ）−１，２，３−トリメトキシ−１−メチルスルファニル−９−オキソ−５，６，７，９−テトラヒドロ−ベンゾ［ａ］ヘプタレン−７−イル］−ベンズアミドの合成
【０３２１】
【化８５】
2007520422.tif 000087
【０３２２】
前記段階１で製造した化合物（４０ｍｇ、０．０７８ｍｍｏＬ）をメタノールに溶解させ、１Ｎ塩酸水溶液（３ｍＬ）を滴加した後、亜硝酸ナトリウム（ＮａＮＯ２、６．５ｍｇ、０．０９４ｍｍｏＬ）を水（１．５ｍＬ）に溶解させて滴加した。これを常温で１時間攪拌して炭酸水素ナトリウムで反応を終結させ、クロロホルムで抽出して溶媒を無水硫酸ナトリウムで乾燥させて減圧濃縮し、残余物をカラムクロマトグラフィ（クロロホルム：メタノール＝１２：１）して標題化合物（３４．１ｍｇ、収率：８１％、黄色固体）を得た。
【０３２３】
1H NMR (400MHz, CDCl3): δ2.07-2.14(m, 1H), 2.31-2.37(m, 1H), 2.42(s, 3H), 2.45-2.48(m, 1H), 2.54-2.59(m, 1H), 3.72(s, 3H), 3.91(s, 3H), 3.96(s, 3H),  4.88-4.94(m, 1H), 6.56(s, 1H), 7.06(d, J=10.6Hz, 1H), 7.10(t, J=7.5Hz, 1H), 7.21(t, J=6.9Hz, 1H), 7.31(d, J=10.6Hz, 1H), 7.54(s,  1H), 7.64(t, J=8.6Hz, 2H), 7.72(d, J=7.3Hz, 1H) 
【０３２４】
〔実施例３６〕３−ニトロソオキシメチル−Ｎ−［（７Ｓ）−１，２，３−トリメトキシ−１０−メチルスルファニル−９−オキソ−５，６，７，９−テトラヒドロ−ベンゾ［ａ］ヘプタレン−７−イル］−ベンズアミドの合成
【０３２５】
【化８６】
2007520422.tif 000088
【０３２６】
３−クロロメチル−Ｎ−［（７Ｓ）−１，２，３−トリメトキシ−１０−メチルスルファニル−９−オキソ−５，６，７，９−テトラヒドロ−ベンゾ［ａ］ヘプタレン−７−イル］ベンズアミド（１１９．８ｍｇ、０．２２８ｍｍｏＬ）とヨウ化ナトリウム（１３６，５ｍｇ、０．９１１ｍｍｏＬ）をアセトン（１５ｍＬ）に溶解させ、１日間５５℃で攪拌した。反応混合物をクロロホルムで抽出し、飽和塩化ナトリウム水溶液で洗浄した後、無水硫酸ナトリウムで乾燥、濾過した後、溶媒を減圧濃縮した。得られた残余物と亜硝酸銀（１２５．５ｍｇ、０．８１２ｍｍｏＬ）をアセトニトリル（５ｍＬ）に溶解させ、１日間常温で攪拌した。反応混合物をクロロホルムで抽出し、有機溶媒層を無水硫酸マグネシウムで乾燥ろ過して溶媒を減圧濃縮した。得られた残余物をカラムクロマトグラフィ（酢酸エチル：クロロホルム＝４：１）して標題化合物（３５．４ｍｇ、収率：３２．４％、黄色固体）を得た。
【０３２７】
1H NMR (400 MHz, CDCl3): δ2.35-2.55(m, 3H), 2.48(s, 3H), 2.62-2.66(m, 1H), 3.76(s, 3H), 3.84(d, J=12.8Hz, 1H), 3.92(s, 3H), 3.98(s, 3H), 4.26(d, J=12.8Hz, 1H), 4.91-4.97(m, 1H), 6.58(s, 1H), 6.96(dd, J=7.7, 7.7Hz, 1H), 7.22(d, J=10.6Hz, 1H), 7.26-7.30(m, 2H), 7.44-7.47(m, 2H), 7.86(s, 1H), 9.30(d, J=6.8Hz, 1H) 
【０３２８】
〔実施例３７〕３−フルオロ−５−ニトロソオキシメチル−Ｎ−［（７Ｓ）−１，２，３−トリメトキシ−１０−メチルスルファニル−９−オキソ−５，６，７，９−テトラヒドロ−ベンゾ［ａ］ヘプタレン−７−イル］−ベンズアミド
前記実施例３６に記載の方法と類似の方法で合成して標題化合物を得た。
【０３２９】
【化８７】
2007520422.tif 000089
【０３３０】
1H NMR (400 MHz, CDCl3): δ2.04~2.20(m, 1H), 2.47(s, 3H), 2.52~2.62(m, 2H), 2.67~2.72(m, 1H), 3.81(s, 3H), 3.91(s, 3H), 3.97(s, 3H), 4.71(s, 2H), 4.93~4.96(m, 1H), 6.42(d, J=6.2, 1H), 6.58(s, 1H), 7.14~7.21(m, 2H), 7.30(d, J=8.4, 1H), 7.42(s, 1H), 7.53(d, J=10.6, 1H) 
【０３３１】
〔実施例３８〕３−ニトロソチオメチル−Ｎ−［（７Ｓ）−１，２，３−トリメトキシ−１０−メチルスルファニル−９−オキソ−５，６，７，９−テトラヒドロ−ベンゾ［ａ］ヘプタレン−７−イル］−ベンズアミドの合成
（段階１）メタンスルホン酸−３−［（７Ｓ）−１，２，３−トリメトキシ−１０−メチルスルファニル−９−オキソ−５，６，７，９−テトラヒドロ−ベンゾ［ａ］ヘプタレン−７−イル−カルバモイル］−ベンジルエステルの合成
【０３３２】
【化８８】
2007520422.tif 000090
【０３３３】
３−ヒドロキシメチル−Ｎ−［（７Ｓ）−１，２，３−トリメトキシ−１０−メチルスルファニル−９−オキソ−５，６，７，９−テトラヒドロ−ベンゾ［ａ］ヘプタレン−７−イル］−ベンズアミド（２５２．５ｍｇ、０．４９７ｍｍｏＬ）をジクロロメタン（１０ｍＬ）に溶解させ、０℃に降温した後、塩化メタンスルホニル（４２．４μＬ、０．５４７ｍｍｏＬ）とトリエチルアミン（０．１０４ｍＬ、０．７４５ｍｍｏＬ）をそれぞれ滴加し、常温で２時間攪拌した。反応混合物をクロロホルムで抽出し、有機溶媒層を無水硫酸ナトリウムで乾燥ろ過させて溶媒を減圧濃縮した。得られた残余物をクロムクロマトグラフィ（酢酸エチル：クロロホルム＝３：２）して標題化合物（１８２．３ｍｇ、収率：６２．６％、黄色固体）を得た。
【０３３４】
1H NMR (400 MHz, CDCl3): δ2.14-2.21(m, 1H), 2.31-2.50(m, 2H), 2.46(s, 3H), 2.57-2.62(m, 1H), 2.85(s, 3H), 3.76(s, 3H), 3.92(s, 3H), 3.97(s, 3H), 4.87-4.94(m, 1H), 5.06(d, J=12.7Hz, 1H), 5.10(d, J=12.7Hz, 1H), 6.57(s, 1H), 7.14(d, J=10.6Hz, 1H), 7.28(dd, J=7.7, 7.7Hz, 1H), 7.38-7.42(m, 2H), 7.56(s, 1H), 7.74(d, J=8.0Hz, 1H), 8.24(d, J=7.7Hz, 1H) 
【０３３５】
（段階２）チオ酢酸−Ｓ−｛３−［（７Ｓ）−１，２，３−トリメトキシ−１０−メチルスルファニル−９−オキソ−５，６，７，９−テトラヒドロ−ベンゾ［ａ］ヘプタレン−７−イル−カルバモイル］−ベンジル｝エステルの合成
【０３３６】
【化８９】
2007520422.tif 000091
【０３３７】
前記段階１で製造した化合物（１８２．３ｍｇ、０．３１１ｍｍｏＬ）をアセトン（６ｍＬ）に溶解させ、０℃に降温した後、チオ酢酸カリウム（５３．２ｍｇ、０．４６７ｍｍｏＬ）を滴加して１時間攪拌した。反応混合物をクロロホルムで抽出し、有機溶媒層を無水硫酸ナトリウムで乾燥、濾過した後、溶媒を減圧濃縮して標題化合物（１７３．６ｍｇ、収率：９８．６％、黄色固体）を得た。
【０３３８】
1H NMR (400MHz, CDCl3): δ2.05-2.14(m, 1H), 2.30(s, 2H), 2.32-2.49(m, 2H), 2.44(s, 3H), 2.52-2.61(m, 1H), 3.74(s, 3H), 3.92(s, 3H), 3.97(s, 3H), 4.01(d, J=13.9Hz, 1H), 4.05(d, J=13.9Hz, 1H), 4.87-4.93(m, 1H), 6.56(s, 1H), 7.10(d, J=10.3Hz, 1H), 7.21(dd, J=7.7, 7.7Hz, 1H), 7.32-7.36(m, 2H), 7.49(s, 1H), 7.64-7.71(m, 3H) 
【０３３９】
（段階３）３−メルカプトメチル−Ｎ−［（７Ｓ）−１，２，３−トリメトキシ−１０−メチルスルファニル−９−オキソ−５，６，７，９−テトラヒドロ−ベンゾ［ａ］ヘプタレン−７−イル］−ベンズアミドの合成
【０３４０】
【化９０】
2007520422.tif 000092
【０３４１】
前記段階２で製造した化合物（１６５．２ｍｇ、０．２９２ｍｏＬ）をメタノール（６ｍＬ）に溶解させ、０℃に降温した後、チオメトキシドナトリウム（２１．５ｍｇ、０．３０７ｍｍｏＬ）を滴加して常温で３０分間攪拌した。反応混合物を０．１Ｎ塩酸水溶液で終結し、クロロホルムで抽出して飽和塩化ナトリウム水溶液で洗った。有機溶媒層を無水硫酸ナトリウムで乾燥ろ過し、溶媒を減圧濃縮した。得られた残余物をカラムクロマトグラフィ（酢酸エチル：クロロホルム＝１：１）して標題化合物（１８２．３ｍｇ、収率：６２．６％、黄色固体）を得た。
【０３４２】
1H NMR (400MHz, CDCl3): δ1.70(t, J=7.3Hz, 1H), 2.12-2.19(m, 1H), 2.31-2.50(m, 2H), 2.18(s, 3H), 2.57-2.61(m, 1H), 3.58(d, J=7.3Hz, 1H), 3.74(s, 3H), 3.92(s, 3H), 3.97(s, 3H), 4.89-4.95(m, 1H), 6.57(s, 1H), 7.12(d, J=10.3Hz, 1H), 7.19(dd, J=7.7, 7.7Hz, 1H), 7.34(d, J=7.7Hz, 1H), 7.37(d, J=10.3Hz, 1H), 7.55(s, 1H), 7.59(d, J=7.7Hz, 1H), 7.70(s, 1H), 7.93(d, J=7.3Hz, 1H) 
【０３４３】
（段階４）３−ニトロソチオメチル−Ｎ−［（７Ｓ）−１，２，３−トリメトキシ−１０−メチルスルファニル−９−オキソ−５，６，７，９−テトラヒドロ−ベンゾ［ａ］ヘプタレン−７−イル］−ベンズアミドの合成
【０３４４】
【化９１】
2007520422.tif 000093
【０３４５】
前記段階３で製造した化合物（１０１．２ｍｇ、０．１９３ｍｏＬ）を３ｍＬのメタノールと３ｍＬのジメチルホルムアミドに溶解させ、０℃に降温した後、３ｍＬの０．１Ｎ塩酸水溶液と１６．０ｍｇの亜硝酸ナトリウムを滴加して常温で２時間攪拌した。反応混合物をクロロホルムで抽出して飽和炭酸ナトリウム水溶液で洗浄した後、有機溶媒層を無水硫酸ナトリウムで乾燥ろ過し、溶媒を減圧濃縮した。得られた残余物をカラムクロマトグラフィ（酢酸エチル：クロロホルム：ヘキサン＝３：２：１．５）して標題化合物（１９．５ｍｇ、収率：１８．３％、黄色固体）を得た。
【０３４６】
1H NMR (400MHz, CDCl3): δ2.08-2.16(m, 1H), 2.31-2.51(m, 2H), 2.45(s, 3H), 2.57-2.61(m, 1H), 3.57(s, 3H), 3.80(s, 2H), 3.92(s, 3H), 3.97(s, 3H), 4.89-4.96(m, 1H), 6.57(s, 1H), 7.10(d, J=10.3Hz, 1H), 7.25(dd, J=7.7, 7.7Hz, 1H), 7.36(d, J=10.3Hz, 1H), 7.38(d, J=7.7Hz, 1H), 7.53(s, 1H), 7.68(d, J=7.7Hz, 1H), 7.77(s, 1H), 7.79(d, J=7.0Hz, 1H) 
【０３４７】
〔実施例３９〕３−フルオロ−５−ニトロソチオメチル−Ｎ−［（７Ｓ）−１，２，３−トリメトキシ−１０−メチルスルファニル−９−オキソ−５，６，７，９−テトラヒドロ−ベンゾ［ａ］ヘプタレン−７−イル］−ベンズアミ
前記実施例３８に記載の方法と類似の方法で合成して実施例３９の化合物を得た。
【０３４８】
【化９２】
2007520422.tif 000094
【０３４９】
1H NMR (400MHz, CDCl3): δ2.30~2.48(m, 3H), 2.44(s, 3H), 2.56~2.59(m, 1H), 3.57(q, J=13.9, 16.5, 2H), 3.73(s, 3H), 3.91(s, 3H), 3.97(s, 3H), 4.97~5.03(m, 1H), 6.57(s, 1H), 7.02(d, J=8.4, 1H), 7.15(d, J=10.6, 1H), 7.39(d, J=10.2, 1H), 7.43(s, 1H), 7.64(d, J=9.1, 1H), 7.73(s, 1H), 8.96(d, J=7.3, 1H) 
【０３５０】
〔実施例４０〕３−フルオロ−５−ニトロオキシメチル−Ｎ−［（７Ｓ）−１，２，３，１０−テトラメトキシ−９−オキソ−５，６，７−９−テトラヒドロ−ベンゾ［ａ］ヘプタレン−７−イル］−ベンズアミドの合成
（段階１）３−フルオロ−５−ヒドロキシメチル−Ｎ−［（７Ｓ）−１，２，３，１０−テトラメトキシ−９−オキソ−５，６，７，９−テトラヒドロ−ベンゾ［ａ］ヘプタレン−７−イル］−ベンズアミドの合成
【０３５１】
【化９３】
2007520422.tif 000095
【０３５２】
デアセチルコルヒチン（１５０ｍｇ、０．４２ｍｍｏＬ）と３−フルオロ−５−ヒドロキシメチル−安息香酸（８５ｍｇ、０．５０ｍｍｏＬ）、ＨＯＢｔ（６７ｍｇ、０．５０ｍｍｏＬ）を２ｍＬのジメチルホルムアミド溶液に溶解させ、０℃に降温した後、ＥＤＣＩ（９５ｍｇ、０．５０ｍｍｏＬ）を滴加した。これを常温で攪拌させ、水を加えて反応を終結させた後、酢酸エチルで抽出し、無水硫酸ナトリウムで乾燥させた後、溶媒を減圧濃縮した。残余物をカラムクロマトグラフィ（クロロホルム：酢酸エチル＝２：１）で精製して標題化合物（１１０ｍｇ、反応収率：５２％、黄色固体）を得た。
【０３５３】
1H NMR (400MHz, CDCl3): δ2.40-2.58(m, 3H), 2.62-2.69(m, 1H), 3.64-3.78(m, 1H), 3.74(s, 3H), 3.92(s, 3H), 3.98(s, 3H), 4.07(S, 3H), 4.23-4.28(m, 1H), 4.81-4.88(m, 1H), 6.58(s, 1H), 6.87(d, J=9.2Hz, 1H), 6.97(d, J=9.2Hz, 1H), 7.03(d, J=10.4Hz, 1H), 7.38(s, 1H), 7.50(d, J=10.4Hz, 1H),  7.96(s, 1H), 9.64(d, J=6.0Hz, 1H) 
【０３５４】
（段階２）３−フルオロ−５−ニトロオキシメチル−Ｎ−［（７Ｓ）−１，２，３，１０−テトラメトキシ−９−オキソ−５，６，７−９−テトラヒドロ−ベンゾ［ａ］ヘプタレン−７−イル］−ベンズアミドの合成
【０３５５】
【化９４】
2007520422.tif 000096
【０３５６】
前記段階１で製造した化合物（９０ｍｇ、０．１８ｍｍｏＬ）を用いて実施例５の段階２および段階３と同様の方法で合成して標題化合物（３０ｍｇ、反応収率：３０％、黄色固体）を得た。
【０３５７】
1H NMR (400MHz, CDCl3): δ2.38-2.49(m, 3H), 2.58-2.59(m, 1H), 3.75(s, 3H), 3.92(s, 3H), 3.98(s, 3H), 4.05(S, 3H), 4.89-4.93(m, 1H), 4.94(d, J=12.8Hz, 1H), 5.10(d, J=12.8Hz, 1H), 6.58(s, 1H), 6.96(d, J=8.4Hz, 1H), 7.01(d, J=10.4Hz, 1H), 7.17(d, J=8.4Hz, 1H), 7.45(s, 1H), 7.48(d, J=10.4Hz, 1H), 7.89(s, 1H), 9.25(d, J=6.4Hz, 1H)
【０３５８】
〔実施例４１〕３−ニトロオキシメチル−Ｎ−メチル−Ｎ−［（７Ｓ）−１，２，３−トリメトキシ−１０−メチルスルファニル−９−オキソ−５，６，７，９−テトラヒドロ−ベンゾ［ａ］ヘプタレン−７−イル］−ベンズアミドの合成
（段階１）３−クロロメチル−Ｎ−メチル−Ｎ−［（７Ｓ）−１，２，３−トリメトキシ−１０−メチルスルファニル−９−オキソ−５，６，７，９−テトラヒドロ−ベンゾ［ａ］ヘプタレン−７−イル］−ベンズアミドの合成
【０３５９】
【化９５】
2007520422.tif 000097
【０３６０】
チオデメルコルチン（５０ｍｇ、０．１２９ｍｍｏＬ）とピリジン（０．０１２ｍＬ、０．１５４ｍｍｏＬ）をジクロロメタンに溶解させ、０℃に降温した後、３−（クロロメチル）ベンゾイルクロライド（０．０２２ｍＬ、０．１５４ｍｍｏＬ）を滴加した。これを常温で攪拌させ、水を加えて反応を終結させた後、酢酸エチルで抽出し、無水硫酸ナトリウムで乾燥させた後、溶媒を減圧濃縮した。残余物をカラムクロマトグラフィ（クロロホルム：酢酸エチル＝２：１）で精製して標題化合物（４５ｍｇ、反応収率：６７％、黄色固体）を得た。
【０３６１】
1H NMR (400MHz, CDCl3): δ2.24-2.38(m, 2H), 2.44(s, 3H),2.45-2.58(m, 1H), 2.61-2.74(m, 1H), 3.25(s, 3H), 3.72(s, 3H), 3.91(s, 3H), 3.92(s, 3H), 4.54(s, 2H), 5.05(br, 1H), 6.57(s, 1H), 7.06(d, J=10.0Hz, 1H), 7.09(s, 1H), 7.22-7.41(m, 5H) 
【０３６２】
（段階２）３−ニトロオキシメチル−Ｎ−メチル−Ｎ−［（７Ｓ）−１，２，３−トリメトキシ−１０−メチルスルファニル−９−オキソ−５，６，７，９−テトラヒドロ−ベンゾ［ａ］ヘプタレン−７−イル］−ベンズアミドの合成
【０３６３】
【化９６】
2007520422.tif 000098
【０３６４】
前記段階１で製造した化合物（４５ｍｇ、０．０８５ｍｍｏＬ）を用いて実施例２５の段階２と同様の方法で合成して標題化合物（４０ｍｇ、反応収率：８３％、黄色固体）を得た。
【０３６５】
1H NMR (400MHz, CDCl3): δ2.24-2.38(m, 2H), 2.44(s, 3H),2.45-2.58(m, 1H), 2.61-2.74(m, 1H), 3.24(s, 3H), 3.71(s, 3H), 3.91(s, 3H), 3.92(s, 3H), 4.77(br, 1H), 5.58(s, 2H), 6.85(s, 2H), 7.21(d, J=10.0Hz, 1H), 7.29(d, J=10.4Hz, 1H), 7.40-7.53(m, 4H) 
【０３６６】
〔実施例４２〕３−フルオロ−Ｎ−メチル−５−ニトロオキシメチル−Ｎ−［（７Ｓ）−１，２，３−トリメトキシ−１０−メチルスルファニル−９−オキソ−５，６，７−９−テトラヒドロ−ベンゾ［ａ］ヘプタレン−７−イル］−ベンズアミドの合成
（段階１）３−フルオロ−５−ヒドロキシメチル−Ｎ−メチル−Ｎ−［（７Ｓ）−１，２，３−トリメトキシ−１０−メチルスルファニル−９−オキソ−５，６，７−９−テトラヒドロ−ベンゾ［ａ］ヘプタレン−７−イル］−ベンズアミドの合成
【０３６７】
【化９７】
2007520422.tif 000099
【０３６８】
窒素の下で３−フルオロ−５−ヒドロキシメチル−安息香酸（５２ｍｇ、０．３０９ｍｍｏＬ）をジクロロメタン（３ｍＬ）に溶解させ、０℃に降温した後、エチルクロロホルメート（０．０２２ｍＬ、０．２３１ｍｍｏＬ）、トリエチルアミン（ＴＥＡ、０．０４２ｍＬ、０．３０９ｍｍｏＬ）を滴加した。０℃で３０分間攪拌させた後、ピリジン（０．０１２ｍＬ、０．１５４ｍｍｏＬ）、チオデメルコルチン（６０ｍｇ、０．１５４ｍｍｏＬ）を入れる。これを常温で３時間攪拌させ、水を加えて反応を終結させた後、酢酸エチルで抽出し、無水硫酸ナトリウムで乾燥させた後、溶媒を減圧濃縮した。残余物をカラムクロマトグラフィ（クロロホルム：酢酸エチル＝２：１）で精製して標題化合物（３０ｍｇ、反応収率：２１％、黄色固体）を得た。
【０３６９】
1H NMR (400MHz, CDCl3): δ1.76(br, 1H), 2.24-2.38(m, 2H), 2.44(s, 3H),2.45-2.58(m, 1H), 2.61-2.74(m, 1H), 3.23(s, 3H), 3.72(s, 3H), 3.93(s, 3H), 3.97(s, 3H), 4.65(s, 2H), 5.02(br, 1H), 6.57(s, 1H), 6.92(s, 1H), 6.99-7.24(m, 4H), 7.34(s, 1H) 
【０３７０】
（段階２）３−フルオロ−Ｎ−メチル−５−ニトロオキシメチル−Ｎ−［（７Ｓ）−１，２，３−トリメトキシ−１０−メチルスルファニル−９−オキソ−５，６，７−９−テトラヒドロ−ベンゾ［ａ］ヘプタレン−７−イル］−ベンズアミドの合成
【０３７１】
【化９８】
2007520422.tif 000100
【０３７２】
前記段階１で製造した化合物（５５ｍｇ、０．１０１ｍｍｏＬ）を用いて実施例５の段階２および段階３と同様の方法で合成して標題化合物（２０ｍｇ、反応収率：３７％、黄色固体）を得た。
【０３７３】
1H NMR (400MHz, CDCl3): δ2.22-2.41(m, 2H), 2.45(s, 3H), 2.45-2.58(m, 1H), 2.61-2.74(m, 1H), 3.24(s, 3H), 3.75(s, 3H), 3.91(s, 3H), 3.95(s, 3H), 5.02(br, 1H), 5.39(s, 2H), 6.57(s, 1H), 7.05-7.24(m, 5H), 7.34(s, 1H) 
【０３７４】
〔実施例４３〕２−（３−フルオロ−５−ニトロオキシメチル−フェニル）−Ｎ−［（７Ｓ）−１，２，３−トリメトキシ−１０−メチルスルファニル−９−オキソ−５，６，７−９−テトラヒドロ−ベンゾ［ａ］ヘプタレン−７−イル］−アセトアミドの合成
（段階１）（３−フルオロ−５−ヒドロキシメチル−フェニル）−酢酸の合成
【０３７５】
【化９９】
2007520422.tif 000101
【０３７６】
前記中間体６の段階１で製造した化合物（２．５ｇ、１３．５７ｍｍｏＬ）をジクロロメタン（３０ｍＬ）に溶解させ、トリブロモホスフィン（ＰＢｒ３、１．１５ｍＬ、１２．２１ｍｍｏＬ）を加えて室温で３時間攪拌した後、３−ブロモメチル−５−フルオロ−安息香酸メチルエステル（１．６ｇ、反応収率：５０％、白色固体）を得、３−ブロモメチル−５−フルオロ−安息香酸メチルエステル（１．５ｇ、６．１ｍｍｏＬ）とシアン化カリウム（ＫＣＮ、１．６ｇ、２４．４ｍｍｏＬ）、１８−クラウン−６（８２０ｍｇ、３．１ｍｍｏＬ）をアセトニトリル（１０ｍＬ）に溶解させた後、室温で１８時間攪拌し、その後３−シアノメチル−５−フルオロ−安息香酸メチルエステル（９００ｍｇ、反応収率：７７％、白色固体）を得た後、３−シアノメチル−５−フルオロ−安息香酸メチルエステル（９００ｍｇ、４．６５ｍｍｏＬ）をテトラヒドロフラン（１０ｍＬ）に溶解させた後、２Ｍリチウムボロハイドライドテトラヒドロフラン（２．３ｍＬ、４．６ｍｍｏＬ）を仕込んで加熱還流して（３−フルオロ−５−ヒドロキシメチル−フェニル）−アセトニトリル（４３０ｍｇ、反応収率：５６％、白色固体）を得、（３−フルオロ−５−ヒドロキシメチル−フェニル）−アセトニトリル（４００ｍｇ、２．４２ｍｍｏＬ）と水酸化カリウム（１．３４ｇ、２３．８ｍｍｏＬ）をエタノール（１０ｍＬ）、水（５ｍＬ）に溶かした後、２４時間加熱還流して標題化合物（３５６ｍｇ、反応収率：８０％、白色固体）を得た。
【０３７７】
1H NMR(400MHz, CD3OD); δ3.62(s, 2H), 4.59(s, 2H), 6.94(d, J=9.6Hz, 1H), 7.04(d, J=9.6Hz, 1H), 7.08(s, 1H) 
【０３７８】
（段階２）２−（３−フルオロ−５−ヒドロキシメチル−フェニル）−Ｎ−［（７Ｓ）−１，２，３−トリメトキシ−１０−メチルスルファニル−９−オキソ−５，６，７，９−テトラヒドロ−ベンゾ［ａ］ヘプタレン−７−イル］−アセトアミドの合成
【０３７９】
【化１００】
2007520422.tif 000102
【０３８０】
前記段階１で製造した化合物（３０ｍｇ、０．１６ｍｍｏＬ）を用いて前記実施例４０の段階１と同様の方法で合成して標題化合物（５８ｍｇ、反応収率：７０％、黄色固体）を得た。
【０３８１】
1H NMR (400MHz, CDCl3): δ1.92-2.01(m, 1H), 2.19-2.40(m, 2H), 2.41(s, 3H), 2.46-2.52(m, 1H), 3.46(d, J=14.0,Hz, 1H), 3.52(d, J=14.0,Hz, 1H), 3.63(s, 3H), 3.89(s, 3H), 3.91(s, 3H), 4.64-4.74(m, 1H), 4.75(s, 2H), 6.53(s, 1H), 6.86-6.94(m, 3H), 7.07(d, J=10.8Hz, 1H), 7.13(s, 1H), 7.30(d, J=10.8Hz, 1H), 7.39(s, 1H) 
【０３８２】
（段階３）メタンスルホン酸３−フルオロ−５−［（７Ｓ）−（１，２，３−トリメトキシ−１０−メチルスルファニル−９−オキソ−５，６，７，９−テトラヒドロ−ベンゾ［ａ］ヘプタレン−７−イル−カルバモイル）−メチル］−ベンジルエステルの合成
【０３８３】
【化１０１】
2007520422.tif 000103
【０３８４】
前記段階２で製造した化合物（５８ｍｇ、０．１０７ｍｍｏＬ）を用いて実施例３８の段階１と同様の方法で合成して標題化合物（６０ｍｇ、反応収率：９０％、黄色固体）を得た。
【０３８５】
（段階４）２−（３−フルオロ−５−ニトロオキシメチル−フェニル）−Ｎ−［（７Ｓ）−１，２，３−トリメトキシ−１０−メチルスルファニル−９−オキソ−５，６，７，９−テトラヒドロ−ベンゾ［ａ］ヘプタレン−７−イル］−アセトアミドの合成
【０３８６】
【化１０２】
2007520422.tif 000104
【０３８７】
前記段階３で製造した化合物（６０ｍｇ、０．０９７ｍｍｏＬ）を使用した以外は、前記実施例２５の段階２と同様の方法で合成して標題化合物（３０ｍｇ、反応収率：８３％、黄色固体）を得た。
【０３８８】
1H NMR (400MHz, CDCl3): δ1.92-1.98(m, 1H), 2.22-2.42(m, 2H), 2.46(s, 3H), 2.49-2.52(m, 1H), 3.50(d, J=14.0,Hz, 1H), 3.65(s, 3H), 3.66(d, J=14.0,Hz, 1H),  3.89(s, 3H), 3.93(s, 3H), 4.64-4.74(m, 1H), 5.37(s, 2H), 6.52(s, 1H), 6.97(d, J=8.8Hz, 1H), 7.11-7.17(m, 3H), 7.35(d, J=10.8Hz, 1H),  7.50(s, 1H), 8.04(d, J=7.2Hz, 1H) 
【０３８９】
〔実施例４４〕２−（２−フルオロ−５−ニトロオキシメチル−フェニル）−Ｎ−［（７Ｓ）−１，２，３−トリメトキシ−１０−メチルスルファニル−９−オキソ−５，６，７，９−テトラヒドロ−ベンゾ［ａ］ヘプタレン−７−イル］−アセトアミド
前記実施例４３に記載の方法と類似の方法で合成し、必要な中間体は、下記の方法によって製造した。
【０３９０】
【化１０３】
2007520422.tif 000105
【０３９１】
1H NMR (400MHz, CDCl3): δ1.89-1.93(m, 1H), 2.26-2.29(m, 1H), 2.34-2.40(m, 1H), 2.43(s, 3H), 2.49-2.54(m, 1H), 3.61(s, 3H), 3.62(d, J=15.2Hz, 1H), 3.72(d, J=15.2Hz, 1H),  3.89(s, 3H), 3.92(s, 3H), 4.70-4.75(m, 1H), 5.49(s, 2H), 6.53(s, 1H), 7.06-7.11(m, 2H), 7.25-7.31(m, 2H), 7.35(t, J=7.6Hz, 1H), 7.44(s, 1H), 7.57(d, J=7.2Hz, 1H) 
【０３９２】
（中間体１８）（２−フルオロ−５−ヒドロキシメチル−フェニル）−酢酸の合成
【０３９３】
【化１０４】
2007520422.tif 000106
【０３９４】
前記中間体５で製造された化合物（２．２ｇ、１１．９４ｍｍｏＬ）を用いて実施例４３の段階１と同様の方法で合成することにより、標題化合物（４００ｍｇ、反応収率：９０％、白色固体）を得た。
【０３９５】
〔実験例１〕癌細胞株に対する細胞毒性測定試験  
薬物のインビトロ(in vitro)抗癌活性度を測定するために開発されたスルホローダミン(Sulforhodamin)−Ｂ<ＳＲＢ>法（１９８９、米国国立癌研究所（ＮＣＩ）を用いてＡ５４９（韓国化学研究院）、ＳＫ−ＯＶ−３（韓国化学研究院）、ＳＫ−ＭＥＬ−２（韓国化学研究院）、ＨＣＴ−１５（韓国化学研究院）およびＭＣＦ７細胞（ソウル大学校医科大学癌研究所細胞株銀行）に対する細胞毒性を測定した。実験に使用する細胞は、０．２５％のトリプシン−ＥＤＴＡ溶液で付着面から分離させ、５×１０３〜２×１０４細胞／ウェルの細胞懸濁液に製造した後、９６ウェルプレートにウェル当たり１００Ｌずつ加えて３７℃、５％ＣＯ２培養器で２４時間培養した。試料は、本発明によって実施例で製造した化合物を使用し、実験直前にジメチルスルホキシドに溶解させた後、培地（ＲＰＭＩ１６４０）で希釈して使用した。試料の最終濃度は、１μＭ〜０．００００１μＭの様々な濃度で使用した。９６ウェルプレートの培地を除去した後、試料希釈液を１００Ｌずつ加えた後、３７℃、５％ＣＯ２培養器で４８時間培養した。試料を加えた時点でＴｚ(time zero)プレートを収集した。培養の完了後、Ｔｚプレートと共に各ウェルから培地を除去し、１０％トリクロロ酢酸（ＴＣＡ）をウェル当たり１００Ｌずつ加えた。４℃で１時間放置して細胞をプレートの底面に固定させた。細胞の固定が完了した後、プレートを水で５〜６回洗浄して、残存したトリクロロ酢酸溶液を完全に除去し、水気が残らないように室温で乾燥させた。１％酢酸溶液に０．４％スルホローダミン−Ｂを溶解させた染色溶液を、完全に乾燥したプレートにウェル当たり１００Ｌずつ加えて３０分間細胞を染色した。これをさらに１％酢酸溶液で５〜６回洗浄して、細胞に結合していないスルホローダミン−Ｂを全て除去した後、プレートをさらに室温で乾燥させた。ここに１０ｍＭトリス溶液１００Ｌを加えて染料を溶解させ、マイクロプレートリーダーで５２０ｎｍにおける光学密度（ＯＤ、optical density）値を測定した。
【０３９６】
試料の癌細胞に対するＥＤ５０-値（癌細胞の成長を５０％抑制する濃度、５０％有効濃度(effective dose、ｎＭ／ｍＬ)を次のように計算した。試料を加えて培養を開始する時間のＯＤ値をＴｚ値と定め、試料を処理せずに培養するウェルのＯＤ値を対照値（Ｃ）、試料を処理して培養したウェルのＯＤ値を試験値（Ｔ）とそれぞれ定めた。Ｔｚ、ＣおよびＴを求めた後、下記数式１によって試料の細胞毒性の度合いを測定した。
<数学式１>
Ｔ≦Ｔｚの場合、（Ｔ−Ｔｚ）／（Ｃ−Ｔｚ）×１００
Ｔ＞Ｔｚの場合、（Ｔ−Ｔｚ）／Ｔｚ×１００
【０３９７】
前記数式１によって計算された値からロータスプログラムの回帰機能を用いて薬物の癌細胞成長を５０％抑制する濃度、すなわち有効濃度ＥＤ５０を計算した。
【０３９８】
また、対照物質としてパクリタキセル、ドキソルビシンおよびコルヒチンに対しても、前記と同様の方法で実験した。
【０３９９】
その結果は、表１に示した。
【０４００】
【表１】
2007520422.tif 000107
【０４０１】
表１に示すように、本発明に係るトリサイクリック誘導体は、癌細胞株に対して非常に強い細胞毒性を示した。
【０４０２】
〔実験例２〕本発明のトリサイクリック誘導体の腫瘍成長抑制活性に及ぼす影響
本発明のトリサイクリック誘導体の腫瘍成長抑制活性に及ぼす影響を調べるために、下記のような実験を行った。
【０４０３】
実験に使用した試料は、実験期間中に冷蔵保管した。マウスへの投与用量は、実施例８で製造した化合物（１０ｍｇ／ｋｇ）、実施例１２で製造した化合物（１、３、１０ｍｇ／ｋｇ）、陽性対照物質［タクソール(Taxol)−３ｍｇ／ｋｇ、アドリアマイシン(Adriamycin)−２ｍｇ／ｋｇ］に設定した。実施例１２の化合物は、４％ツイーン８０、陽性対照物質であるタクソールの場合には５％エタノール＋２５％クレモフォール(cremophor)＋７５％ＰＢＳを溶媒として使用した。調製された試料は、放置すれば沈澱が生ずるという問題があって、投与直前にチップソニケーション(tip sonication)を施してよく分散させた後、動物に投与した。
【０４０４】
実験動物は、日本Ｃｈａｒｌｅｓ Ｒｉｖｅｒ社の７週齢雌Ｓ．Ｐ．Ｆ ＢＡＬＢ／ｃヌードマウスを使用した。実験動物は、１週間以上無菌動物室で適応させた後、実験に使用した。動物室は、温度が２１±２℃、湿度が５５±５％であり、明暗が１２時間周期で自動調節された。実験動物用固形試料（韓国の第一製糖）は放射線滅菌製品であり、飲み水は高圧蒸気滅菌器で滅菌した。試料と飲み水は、自由摂取させた。癌細胞株は、韓国生命工学研究院で保存中のヒト肺癌細胞株(Human lung tumor cell line; ＮＣＩ−Ｈ４６０)を使用した。
【０４０５】
実験動物に移植する癌細胞は、液体窒素の中で冷凍保管していた細胞を解凍(thawing)した後、ＣＯ２培養器内で温度３７℃とＣＯ２濃度５％に合わせて適切な期間培養した後、最終日に全ての細胞を収去して計数し、ＰＢＳを用いて３×１０７ｃｅｌｌｓ／ｍＬの細胞濃度に調節した。このように調節された細胞培養液をマウスに１匹当たり０．３ｍＬずつ右側の肩胛部と胸壁間の腋窩部位皮下に注入した。ＮＣＩ−Ｈ４６０異種移植されたヌードマウス(xenografted nude mice)は、癌細胞移植の後、翌日から毎日１回マウス体重２０ｇ当たり０．２ｍＬずつ腹腔投与を開始した。
【０４０６】
癌細胞移植の後、腫瘍の大きさを個体別に測定するが、腫瘍の大きさはノギス(vernier caliper)を用いて３方向から測定した後、下記数式２で表現した。
<数学式２>
腫瘍の大きさ(Tumor volume)＝（長さ×広さ×高さ）／２
【０４０７】
動物の体重変化は、週３回程度測定した。それぞれの癌細胞移植ヌードマウスは、最終剖検日に動物を犠牲させて腫瘍を分離し、重量を測定した。
【０４０８】
腫瘍の大きさおよび重量測定結果は、表２、図１、図３および図５に示し、マウスの体重変化は、表３、図２および図４に示した。
【０４０９】
【表２】
2007520422.tif 000108
【０４１０】
【表３】
2007520422.tif 000109
【０４１１】
表２、図１、図３および図５に示すように、本発明のトリサイクリック誘導体（実施例８および実施例１２）を、ヒト肺癌細胞株ＮＣＩ−Ｈ４６０細胞を移植したＢＡＬＢ／ｃヌードマウスに投与した場合、溶媒のみを投与した群（Ｖ．Ｃ−１、Ｖ．Ｃ−２）および陽性対照物質（タクソール、アドリアマイシン）を投与した群より腫瘍の大きさおよび腫瘍の重量が著しく減少した。特に、実施例１２化合物の場合は、１ｍｇ／ｋｇを投与したときより１０ｍｇ／ｋｇを投与したときに腫瘍の大きさおよび腫瘍の重量が著しく減少し、実施例８の化合物の場合は、１０ｍｇ／ｋｇを投与したときに８５％の腫瘍大きさ抑制率を示した。したがって、腫瘍の大きさおよび腫瘍の重量の減少率は、本発明のトリサイクリック誘導体の投与量に比例することが分かる。
【０４１２】
また、表３、図２および図４に示すように、本発明のトリサイクリック誘導体（実施例８および実施例１２）を、ヒト肺癌細胞株であるＮＣＩ−Ｈ４６０細胞を移植したＢＡＬＢ／ｃヌードマウスに１０ｍｇ／ｋｇで投与した場合、溶媒のみを投与した群（Ｖ．Ｃ−１、Ｖ．Ｃ−２）および陽性対照物質（タクソール、アドリアマイシン）を投与した群よりマウスの体重が約１０％程度減少した。
【０４１３】
したがって、本発明のトリサイクリック誘導体は、腫瘍の大きさおよび腫瘍の重量を減少させて優れた抗癌抑制効果を示すので、抗癌剤および抗増殖抑制剤として有用に使用できる。
【０４１４】
〔実験例３〕ＨＵＶＥＣ細胞における本発明のトリサイクリック誘導体の血管形成抑制活性に及ぼす影響(Capillary-like tube formation assay)
実験に使用したマトリゲル(matrigel)は、ＢｉｏＣｏａｔ社の製品を使用し、使用前に、２４時間冷蔵保管して解凍させた。解凍したマトリゲル、９６ウェルプレートおよびイエローチップ(yellow tip)を氷上に置いた後、マトリゲルを９６ウェルプレートに４０μＬずつ分注した。分注の後、プレートは３０分間３７℃の培養器で重合(polymerization)させた。各プレートにＨＵＶＥＣ細胞を２×１０４ｃｅｌｌｓ／ｍＬの濃度で１８０μＬ、前記実施例１２で製造した化合物溶液(in free serum media)を用量別（０．３、１、３、１０および３０μｇ／ｍＬ）に２０μＬずつそれぞれ分注した後、２４時間培養させた。
【０４１５】
評価方法は、顕微鏡上で写真撮影してチューブ形成の度合いから新生血管生成抑制活性を判断した。
【０４１６】
陽性対照物質としては、フマギリン(fumagilin)とドキソルビシン(doxorubicin)を使用した。
【０４１７】
その結果は、図６に示した。
【０４１８】
図６に示すように、本発明のトリサイクリック誘導体（実施例１２）は、０．３μｇ／ｍＬ以上で血管形成阻害効果を示し、陽性対照物質であるフマギリン１０μｇ／ｍＬと同等な阻害効果を示すことが分かり、本発明のトリサイクリック誘導体（実施例１２）が、１０μｇ／ｍＬ以上では血管形成が完全に阻害されることを観察することができた。
【０４１９】
したがって、本発明のトリサイクリック誘導体は、血管新生抑制剤として有用に使用できる。
【０４２０】
〔実験例４〕急性毒性実験
実験動物として、５週齢の体重２５〜３０ｇのＩＣＲマウス（ＳＰＦ、生産会社：日本ＳＬＣ社）を、それぞれの実験化合物当たり雌雄１つずつ使用した。各グループ当たり実験動物１０匹からなるグループ（Ｔ２、Ｔ３、Ｔ４およびＴ５）を指定し、前記実施例１２で製造した化合物を用いて急性毒性を測定した。また、下記表４に示されている用量で実験動物に前記実施例１２で製造した化合物を溶媒剤［５％ＤＭＳＯ；２０％ツイーン８０；７５％ＰＢＳ（−）］に溶解させて腹腔注射した後、７日間観察した。対照群Ｔ１として、前記実施例１２で製造した化合物を除いた溶媒剤のみを投与したグループに対しても前記と同様の実験を行った。その結果は表４に示した。
【０４２１】
比較物質としてのコルヒチンに対しても、前記と同様の方法で実験動物に対する急性毒性を観察した。コルヒチンに対して、グループは実験動物６匹から構成されている。その結果は表５に示した。
【０４２２】
比較物質としての、現在市販されているブリストルマイヤーズスクイブ社のタクソール注射剤に対しても、前記同様の方法で実験動物に対する急性毒性を観察した。その結果は表６に示した。
【０４２３】
【表４】
2007520422.tif 000110
【０４２４】
【表５】
2007520422.tif 000111
【０４２５】
【表６】
2007520422.tif 000112
【０４２６】
表４、表５および表６に示すように、天然物であるコルヒチンのマウスに対する毒性は、ＬＤ５０＝２ｍｇ／ｋｇを示して、文献に報告されたＬＤ５０＝１．６ｍｇ／ｋｇに近接した結果［参考：Medicinal Research Reviews, Vol.8, No.1, 77-94(1988)］を示している。また、パクリタキセル製剤であるタクソール注射剤の毒性は、ＬＤ５０＝９〜１３ｍｇ／ｋｇ程度（ｉ.ｖ．投与）であった。ところが、本発明に係る実施例１２で製造された化合物の場合、ＬＤ５０＝６０ｍｇ／ｋｇ以上を示して、コルヒチンより３０倍以上毒性が弱く、パクリタキセル製剤であるタクソール注射剤よりも毒性が弱いことが分かる。したがって、本発明に係る化合物は、コルヒチンまたはタクソール注射剤より正常細胞に対する毒性が低いことが分かる。
【０４２７】
〔産業上の利用可能性〕
本発明に係るトリサイクリック誘導体は、癌細胞株に対しては非常に強い細胞毒性を示し、動物毒性実験ではコルヒチンまたはタクソール注射剤より著しく減少した毒性を示し、腫瘍の大きさおよび腫瘍の重量を著しく減少させ、ＨＵＶＥＣ細胞で強力な血管新生抑制作用を示すので、臨床的に有用な抗癌剤、抗増殖抑制剤および血管新生抑制剤として使用できる。また、本発明に係るトリサイクリック誘導体は、比較的簡単かつ容易に得ることができ、水溶解度が高くて経口用製剤、注射剤などへの製剤化がより容易であるという利点をもっている。
【図面の簡単な説明】
【０４２８】
【図１】ヒト肺癌細胞株ＮＣＩ−Ｈ４６０細胞を移植したＢＡＬＢ／ｃヌードマウスに本発明のトリサイクリック誘導体（実施例８）を投与したときの腫瘍の大きさの変化を示す図である。
【図２】ヒト肺癌細胞株ＮＣＩ−Ｈ４６０細胞を移植したＢＡＬＢ／ｃヌードマウスに本発明のトリサイクリック誘導体（実施例８）を投与したときのマウスの体重の変化を示す図である。
【図３】ヒト肺癌細胞株ＮＣＩ−Ｈ４６０細胞を移植したＢＡＬＢ／ｃヌードマウスに本発明のトリサイクリック誘導体（実施例１２）を濃度別（１、３、１０ｍｇ／ｋｇ）に投与したときの腫瘍の大きさの変化を示す図である。
【図４】ヒト肺癌細胞株ＮＣＩ−Ｈ４６０細胞を移植したＢＡＬＢ／ｃヌードマウスに本発明のトリサイクリック誘導体（実施例１２）を濃度別（１、３、１０ｍｇ／ｋｇ）に投与したときのマウスの体重の変化を示す図である。
【図５】ヒト肺癌細胞株ＮＣＩ−Ｈ４６０細胞を移植したＢＡＬＢ／ｃヌードマウスに本発明のトリサイクリック誘導体を投与し、１４日目にヒト肺癌細胞株ＮＣＩ−Ｈ４６０細胞を分離して腫瘍の大きさを写真で示した図である。
【図６】ＨＵＶＥＣ細胞における本発明のトリサイクリック誘導体の血管形成抑制活性を示す図である。
【図１】
2007520422.tif 000124
【図２】
2007520422.tif 000125
【図３】
2007520422.tif 000126
【図４】
2007520422.tif 000127
【図５】
2007520422.tif 000128
【図６】
2007520422.tif 000129
【手続補正書】
【提出日】平成17年1月25日(2005.1.25)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
下記化学式１
【化１】
2007520422.tif 000130
（式中、（１）Ｒ１は、化学式−Ｔ１−Ｂ１であり；
前記において、Ｔ１は、−Ｎ（Ｒ５）Ｃ（Ｏ）−であり、この際、Ｒ５は水素またはＣ１〜Ｃ５のアルキル基であり；
Ｂ１は下記（ａ）〜（ｃ）からなる群から選択され、
【化２】
2007520422.tif 000131
ここで、
【化３】
2007520422.tif 000132
Ｒ６は、水素またはハロゲンであり；Ｒ７は、ヒドロキシまたは−ＯＮＯ２である。但し、Ｒ６が水素である場合にはＲ７は−ＯＮＯ２であり；
Ｔ２は−Ｏ−Ｃ（Ｏ）−であり；
Ｂ２は、前記（ａ）または−（ＣＨ２）ｎ３−Ｒ７であり；
ｎ１は０〜１の整数であり；ｎ２は０〜５の整数であり；ｎ３は２〜５の整数であり；
（２）Ｒ２はＣＨ３であり；
（３）Ｒ３はＣ１〜Ｃ４の直鎖または分岐鎖アルキルまたはＣ３〜Ｃ７のシクロアルキルである。但し、Ｂ１が（ａ）であり、且つＲ６が水素である場合には、Ｒ３はＣ２Ｈ５である。）
で表わされるトリサイクリック誘導体またはその薬学的に許容される塩。
【請求項２】
上記トリサイクリック誘導体が、
１）６−ニトロオキシメチル−Ｎ−［（７Ｓ）−１，２，３−トリメトキシ−１０−メチルスルファニル−９−オキソ−５，６，７，９−テトラヒドロ−ベンゾ［ａ］ヘプタレン−７−イル］−ニコチンアミド；
４）Ｎ−［（７Ｓ）−３−エトキシ−１，２−ジメトキシ−１０−メチルスルファニル−９−オキソ−５，６，７，９−テトラヒドロ−ベンゾ［ａ］ヘプタレン−７−イル］−３−ニトロオキシメチル−ベンズアミド；
５）６−ニトロオキシメチル−ピリジン−２−カルボン酸−［（７Ｓ）−１，２，３−トリメトキシ−１０−メチルスルファニル−９−オキソ−５，６，７，９−テトラヒドロ−ベンゾ［ａ］ヘプタレン−７−イル］−アミド；
６）５−ニトロオキシメチル−チオフェン−２−カルボン酸−［（７Ｓ）−１，２，３−トリメトキシ−１０−メチルスルファニル−９−オキソ−５，６，７，９−テトラヒドロ−ベンゾ［ａ］ヘプタレン−７−イル］−アミド；
８）Ｎ−［（７Ｓ）−３−エトキシ−１，２−ジメトキシ−１０−メチルスルファニル−９−オキソ−５，６，７，９−テトラヒドロ−ベンゾ［ａ］ヘプタレン−７−イル］−２−フルオロ−３−ニトロオキシメチル−ベンズアミド；
９）２−フルオロ−Ｎ−［（７Ｓ）−３−イソプロポキシ−１，２−ジメトキシ−１０−メチルスルファニル−９−オキソ−５，６，７，９−テトラヒドロ−ベンゾ［ａ］ヘプタレン−７−イル］−３−ニトロオキシメチル−ベンズアミド；
１０）２−フルオロ−３−ニトロオキシメチル−Ｎ−［（７Ｓ）−１，２，３−トリメトキシ−１０−メチルスルファニル−９−オキソ−５，６，７，９−テトラヒドロ−ベンゾ［ａ］ヘプタレン−７−イル］−ベンズアミド；
１２）３−フルオロ−５−ニトロオキシメチル−Ｎ−［（７Ｓ）−１，２，３−トリメトキシ−１０−メチルスルファニル−９−オキソ−５，６，７，９−テトラヒドロ−ベンゾ［ａ］ヘプタレン−７−イル］−ベンズアミド；
１３）Ｎ−［（７Ｓ）−３−エトキシ−１，２−ジメトキシ−１０−メチルスルファニル−９−オキソ−５，６，７，９−テトラヒドロ−ベンゾ［ａ］ヘプタレン−７−イル］−３−フルオロ−５−ニトロオキシメチル−ベンズアミド；
１４）３−フルオロ−Ｎ−［（７Ｓ）−３−イソプロポキシ−１，２−ジメトキシ−１０−メチルスルファニル−９−オキソ−５，６，７，９−テトラヒドロ−ベンゾ［ａ］ヘプタレン−７−イル］−５−ニトロオキシメチル−ベンズアミド；
１５）Ｎ−［（７Ｓ）−３−シクロペンチルオキシ−１，２−ジメトキシ−１０−メチルスルファニル−９−オキソ−５，６，７，９−テトラヒドロ−ベンゾ［ａ］ヘプタレン−７−イル］−３−フルオロ−５−ニトロオキシメチル−ベンズアミド；
１７）２−フルオロ−５−ニトロオキシメチル−Ｎ−［（７Ｓ）−１，２，３−トリメトキシ−１０−メチルスルファニル−９−オキソ−５，６，７，９−テトラヒドロ−ベンゾ［ａ］ヘプタレン−７−イル］−ベンズアミド；
２１）４−ニトロオキシメチル−チオフェン−２−カルボン酸［（７Ｓ）−１，２，３−トリメトキシ−１０−メチルスルファニル−９−オキソ−５，６，７，９−テトラヒドロ−ベンゾ［ａ］ヘプタレン−７−イル］−アミド；
２２）３−ニトロオキシメチル−チオフェン−２−カルボン酸［（７Ｓ）−１，２，３−トリメトキシ−１０−メチルスルファニル−９−オキソ−５，６，７，９−テトラヒドロ−ベンゾ［ａ］ヘプタレン−７−イル］−アミド；
２９）３−ニトロオキシメチル安息香酸−２−［（７Ｓ）−１，２，３−トリメトキシ−１０−メチルスルファニル−９−オキソ−５，６，７，９−テトラヒドロ−ベンゾ［ａ］ヘプタレン−７−イル−カルバモイル］−フェニルエステル；
３０）４−ニトロオキシ酪酸−２−［（７Ｓ）−１，２，３−トリメトキシ−１０−メチルスルファニル−９−オキソ−５，６，７，９−テトラヒドロ−ベンゾ［ａ］ヘプタレン−７−イル−カルバモイル］−フェニルエステル；
３１）３−ニトロオキシメチル安息香酸−３−［（７Ｓ）−１，２，３−トリメトキシ−１０−メチルスルファニル−９−オキソ−５，６，７，９−テトラヒドロ−ベンゾ［ａ］ヘプタレン−７−イル−カルバモイル］−フェニルエステル；
３２）４−ニトロオキシ酪酸−３−［（７Ｓ）−１，２，３−トリメトキシ−１０−メチルスルファニル−９−オキソ−５，６，７，９−テトラヒドロ−ベンゾ［ａ］ヘプタレン−７−イル−カルバモイル］−フェニルエステル；
３３）３−ニトロオキシメチル安息香酸−３−［（７Ｓ）−１，２，３−トリメトキシ−１０−メチルスルファニル−９−オキソ−５，６，７，９−テトラヒドロ−ベンゾ［ａ］ヘプタレン−７−イル−カルバモイル］−ベンジルエステル；
３４）４−ニトロオキシ酪酸−３−［（７Ｓ）−１，２，３−トリメトキシ−１０−メチルスルファニル−９−オキソ−５，６，７，９−テトラヒドロ−ベンゾ［ａ］ヘプタレン−７−イル−カルバモイル］−ベンジルエステル；
からなる群より選ばれるものであることを特徴とする請求項１に記載のトリサイクリック誘導体またはその薬学的に許容される塩。
【請求項３】
下記反応式１
【化４】
2007520422.tif 000133
（反応式１において、Ｄは、
【化５】
2007520422.tif 000134
であり、この際、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４およびＸは、請求項１の化学式１で定義したとおりであり；
Ｒ５は、水素またはＣ１〜Ｃ５のアルキル基であり；
Ｘ１は、Ｏであり；
Ｈａｌ１およびＨａｌ２は、ハロゲンであり；式（IV）のＨａｌ１およびＨａｌ２は、それぞれ同一または異なるハロゲン、例えばＦ、Ｃｌ、ＢｒまたはＩであり；Ｙは、下記化学式（a’）、（ｂ’）からなる群から選ばれるものであり、
【化６】
2007520422.tif 000135
この際、
【化７】
2007520422.tif 000136
、Ｒ６、ｎ１およびｎ２は、請求項１の化学式１で定義したとおりである。）
で表されるように、
（１）化学式（III）の化合物を、化学式（IV）の化合物若しくは化学式（VI）の化合物と反応させて、化学式（Ｖ）の化合物若しくは化学式（VII）の化合物を生成、または生成した化学式（VII）の化合物をハロゲン化合物と反応させて化学式（Ｖ）の化合物を製造する段階（第１段階）と、
（２）前記製造された化学式（Ｖ）の化合物または化学式（VII）の化合物をニトロ化反応またはニトロソ化反応させて、化学式（IIａ）の化合物を製造する段階（第２段階）とを含むトリサイクリック誘導体の製造方法。
【請求項４】
請求項１または２に記載のトリサイクリック誘導体またはその薬学的に許容される塩を有効成分として含有する抗癌剤または抗増殖抑制剤。
【請求項５】
請求項１または２に記載のトリサイクリック誘導体またはその薬学的に許容される塩を有効成分として含有する血管新生抑制剤。
【国際調査報告】
2007520422.tif 000137
2007520422.tif 000138