(57)【要約】本発明は、免疫細胞の機能の少なくとも一つの刺激剤および、細胞増殖を阻害および／または細胞死を誘導する少なくとも一つの物質を含む医薬組成物に関する。好ましい一実施形態では、免疫系および／または細胞の機能の少なくとも一つの刺激剤は、ＴＧＦ−ベータをコードするメッセンジャーＲＮＡおよび、またはＤＮＡのある範囲とハイブリダイズするオリゴヌクレオチドの群から選択され、および細胞増殖を阻害および／または細胞死を誘導する少なくとも一つの物質は、テモゾロマイド、ニトロソ尿素、ビンカ（Ｖｉｎｃａ）アルカロイド、プリンおよびピリミジン塩基の拮抗剤、細胞分裂抑制活性抗生物質、カンプトテシン誘導体、抗エストロゲン、抗アンドロゲン、およびゴナドトロピン放出ホルモンのアナログの群から選択される。
2007518709.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
−     ＴＧＦ−ベータをコードするメッセンジャーＲＮＡ（ｍ−ＲＮＡ）および／またはＤＮＡのある範囲とハイブリダイズするオリゴヌクレオチド、
−     ＴＧＦ−ベータを結合する、ＴＧＦ−ベータ受容体および／またはその一部
−     ＴＧＦ−ベータを阻害する、抗体以外のタンパク質
−     ＴＧＦ−ベータを阻害する、１００ｋＤａ未満のペプチド
−     ＴＧＦ−ベータの一部であるペプチド
の群から選択される、少なくとも一つのＴＧＦ−ベータ拮抗剤、
および、
テモゾロマイド、ニトロソ尿素、ビンカ（Ｖｉｎｃａ）アルカロイド、プリンおよびピリミジン塩基の拮抗剤、細胞分裂抑制活性抗生物質、カンプトテシン誘導体、抗アンドロゲン、抗エストロゲン、抗プロゲステロン、およびゴナドトロピン放出ホルモンのアナログ
の群から選択される、細胞増殖を阻害および／または細胞死を誘導する少なくとも一つの物質
を含む医薬組成物。
【請求項２】
少なくとも一つのＴＧＦ−ベータ拮抗剤、および、細胞増殖を阻害および／または細胞死を誘導する少なくとも一つの物質が混合されている、請求項１の医薬組成物。
【請求項３】
少なくとも一つのＴＧＦ−ベータ拮抗剤、および、細胞増殖を阻害および／または細胞死を誘導する少なくとも一つの物質が分離されている、請求項１の医薬組成物。
【請求項４】
オリゴヌクレオチドが、配列表中で特定された配列番号１ないし１４６の配列のうちなくとも一つを含む、請求項１から３の医薬組成物。
【請求項５】
オリゴヌクレオチドの少なくとも一つのヌクレオチドが、糖成分、塩基および／またはヌクレオチド間の結合で修飾される、請求項４の医薬組成物。
【請求項６】
少なくとも一つの修飾されたヌクレオチド間の結合がホスホロチオネート結合である、請求項５の医薬組成物。
【請求項７】
−     ニトロソ尿素がＡＣＮＵ、ＢＣＮＵおよびＣＣＮＵの群から選択され、
−     ビンカアルカロイドがビンブラスチン、ビンクリスチン、ビンデシンの群から選択され、
−     プリンおよびピリミジン塩基の拮抗剤が５−フルオロウラシル、５−フルオロデオキシウリジン、シタラビンおよびゲムシタビンの群から選択され、
−     細胞分裂抑制性抗生物質がドキソルビシンおよびリポソームＰＥＧ化ドキソルビシンの群から選択され、
−     カンプトテシン誘導体がイリノテカンおよびトポテカンの群から選択され、
−     抗エストロゲンがタモキシフェン、エキセメスタン、アナストロゾールおよびフルベストラントの群から選択され、
−     抗アンドロゲンがフルタミドおよびビカルタミドの群から選択され、
−     抗プロゲステロンがミフェプリストンの群から選択され、
−     ゴナドトロピン放出ホルモンのアナログがロイプロリドおよびゴセレリンの群から選択される、
請求項１から６に記載の医薬組成物。
【請求項８】
免疫系および／または免疫細胞の機能の少なくとも一つの刺激剤、および細胞増殖を阻害および／または細胞死を誘導する少なくとも一つの物質を含む医薬組成物。
【請求項９】
免疫系および／または免疫細胞の機能の少なくとも一つの刺激剤、および細胞増殖を阻害および／または細胞死を誘導する少なくとも一つの物質が分離されている、請求項８の医薬組成物。
【請求項１０】
免疫系および／または免疫細胞の機能の少なくとも一つの刺激剤、および細胞増殖を阻害および／または細胞死を誘導する少なくとも一つの物質が混合されている、請求項９の医薬組成物。
【請求項１１】
免疫系および／または免疫細胞の機能の少なくとも一つの刺激剤が
−     ＧＭ−ＣＳＦ、ＳＣＦ、ＣＳＦ、ＩＦＮ、ＦＬＴ−３−リガンド、単球走化タンパク質（ＭＣＰ−１）、リンフォタクチン、インターロイキン−２、インターロイキン−４、インターロイキン−６、インターロイキン−１２、インターロイキン−１８および／またはインターフェロンガンマといったサイトカインの合成および／または機能を刺激および／または促進するかまたはこれらのサイトカインの一つであり、
−     ウイルス、ウイルス抗原、腫瘍細胞または病原体で発現されるが正常細胞では、発現されない抗原、罹患臓器で発現するその生物にとって不可欠でない臓器特異的抗原、樹状細胞および腫瘍細胞の融合細胞、および樹状細胞自体の群から選択され、
−     免疫系の機能に負に影響する因子の拮抗剤、またはワクチンであり、
および
−     細胞増殖を阻害および／または細胞死を誘導する少なくとも一つの物質が抗悪性腫瘍化学療法剤である
請求項８から１０の医薬組成物。
【請求項１２】
免疫系の機能に負の影響を及ぼす因子の拮抗剤が、ＤＮＡまたはＲＮＡ画分、アンチセンスオリゴヌクレオチド、これらの活性な誘導体、抗体、抗体の一部、タンパク質、受容体、受容体の一部、ペプチドおよび１０，０００Ｄａ未満の分子の群から選択される、請求項１１の医薬組成物。
【請求項１３】
アンチセンスオリゴヌクレオチドが、ＴＧＦ−ベータ、ＶＥＧＦ、ＰＧＥ２またはＩＬ−１０および／またはこれらの受容体をコードするメッセンジャーＲＮＡ（ｍ−ＲＮＡ）および／またはＤＮＡのある範囲とハイブリダイズするオリゴヌクレオチドである、請求項１２の医薬組成物。
【請求項１４】
腫瘍の治療のための医薬組成物の調製のための、
−     ＴＧＦ−ベータをコードするメッセンジャーＲＮＡ（ｍ−ＲＮＡ）および／またはＤＮＡのある範囲とハイブリダイズするオリゴヌクレオチド、
−     ＴＧＦ−ベータを結合する、ＴＧＦ−ベータ受容体および／またはその一部
−     ＴＧＦ−ベータを阻害する、抗体以外のタンパク質
−     ＴＧＦ−ベータを阻害する、１００ｋＤａ未満のペプチド
−     ＴＧＦ−ベータの一部であるペプチド
の群から選択される、少なくとも一つのＴＧＦ−ベータ拮抗剤、
および、
テモゾロマイド、ニトロソ尿素、ビンカアルカロイド、プリンおよびピリミジン塩基の拮抗剤、細胞分裂抑制活性抗生物質、カンプトテシン誘導体、抗エストロゲン、抗アンドロゲン、およびゴナドトロピン放出ホルモンのアナログ
の群から選択される、細胞増殖を阻害および／または細胞死を誘導する少なくとも一つの物質
を含む組成物の使用。
【請求項１５】
免疫系および／または免疫細胞の機能の少なくとも一つの刺激剤、および細胞増殖を阻害および／または細胞死を誘導する少なくとも一つの物質を含む、腫瘍の治療のための医薬組成物の調製のための、医薬組成物の使用。
【請求項１６】
充実性腫瘍；白血病、急性または慢性の骨髄性またはリンパ芽球性白血病といった血液感染性腫瘍；腫瘍転移；良性腫瘍、たとえば血管腫、聴神経腫、神経繊維腫、トラコーマ、および化膿性肉芽腫；前がん腫瘍；星細胞腫、芽細胞腫、脊索腫、頭蓋咽頭腫、上衣細胞腫、ユーイング腫瘍、胚細胞腫、神経膠腫、膠芽細胞腫、血管芽細胞腫、ヘマンジオペリカチオマ(ｈｅｍａｎｇｉｏｐｅｒｙｃａｔｉｏｍａ)、ホジキンズリンパ腫、髄芽細胞腫、白血病、中皮腫、神経芽腫、非ホジキンズリンパ腫、松果体腫、網膜細胞芽腫、肉腫（脈管腫、軟骨肉腫、内皮肉腫、線維肉腫、平滑筋肉腫、脂肪肉腫、リンファメジオ・オテリオサルコマ(ｌｙｍｐｈａｎｇｉｏｏｔｈｅｌｉｏｓａｒｃｏｍａ)、リンパ管肉腫、髄芽細胞腫、黒色腫、髄腹腫、筋肉腫、神経鞘腫、乏突起膠腫、骨原性肉腫、骨肉腫を含む）、セミノーマ、上衣下腫、ウィルムス腫瘍の群から選択される、または、胆汁腺管がん、膀胱がん、脳腫瘍、乳がん、気管支がん、腎がん、頚がん、絨毛がん、嚢胞腺がん、胎生期がん、上皮がん、食道がん、頚がん、結腸がん、大腸がん、子宮内膜がん、胆嚢がん、胃がん、頭部および頸部がん、肝がん、肺がん、髄様がん、非小細胞気管支／肺がん、卵巣がん、すい臓がん、乳頭状がん、乳頭腺がん、前立腺がん、小腸がん、直腸がん、腎細胞がん、皮膚がん、小細胞気管支／肺がん、扁平上皮がん、脂腺がん、精巣がん、子宮がんの群から選択される、腫瘍の治療のための請求項１４または１５の使用。
【請求項１７】
神経膠腫、膠芽細胞腫および／または未分化星細胞腫の治療のための、請求項１５または１６の使用。
【請求項１８】
少なくとも一つのＴＧＦ−ベータ拮抗剤を、
細胞増殖を阻害および／または細胞死を誘導する少なくとも一つの物質と併用投与する工程
および／または放射線を照射する工程を含む、腫瘍を治療する方法。
【請求項１９】
免疫系および／または免疫細胞の機能の少なくとも一つの刺激剤を、
細胞増殖を阻害および／または細胞死を誘導する少なくとも一つの物質と併用投与する工程
および／または放射線を照射する工程を含む、腫瘍を治療する方法。
【請求項２０】
腫瘍が、胆汁腺管がん、膀胱がん、脳腫瘍、乳がん、気管支がん、腎がん、頚がん、絨毛がん、嚢胞腺がん、胎生期がん、上皮がん、食道がん、頚がん、結腸がん、大腸がん、子宮内膜がん、胆嚢がん、胃がん、頭部のがん、肝がん、肺がん、髄様がん、頸部がん、非小細胞気管支／肺がん、卵巣がん、すい臓がん、乳頭状がん、乳頭腺がん、前立腺がん、小腸がん、前立腺がん、直腸がん、腎細胞がん、皮膚がん、小細胞気管支／肺がん、扁平上皮がん、脂腺がん、精巣がん、子宮がん、聴神経腫、神経繊維腫、トラコーマ、および化膿性肉芽腫；前がん腫瘍；関節リューマチ；乾癬；星細胞腫、聴神経腫、芽細胞腫、ユーイング腫瘍、星細胞腫、頭蓋咽頭腫、上衣細胞腫、髄芽細胞腫、神経膠腫、血管芽細胞腫、ホジキンズリンパ腫、髄芽細胞腫，白血病，中皮腫，神経芽腫、神経線維腫、非ホジキンズリンパ腫、松果体腫、網膜細胞芽腫、網膜細胞芽腫、肉腫（脈管腫、軟骨肉腫、内皮肉腫、線維肉腫、平滑筋肉腫、脂肪肉腫、リンファメジオ・オテリオサルコマ(ｌｙｍｐｈａｎｇｉｏｏｔｈｅｌｉｏｓａｒｃｏｍａ)、リンパ管肉腫、黒色腫、髄腹腫、筋肉腫、乏突起膠腫、骨原性肉腫、骨肉腫を含む）、セミノーマ、トラコーマ、ウィルムス腫瘍から選択される、請求項１８または１９の腫瘍を治療する方法。
【請求項２１】
医薬組成物を投与する工程が、放射線を照射する前または後である、請求項１８または１９の腫瘍を治療する方法。
【請求項２２】
医薬組成物を投与する工程が、放射線の照射と同時である、請求項１８または１９の腫瘍を治療する方法。
【請求項２３】
１サイクル内の全放射量が約１０Ｇｙから約１００Ｇｙである、請求項２１または２２の腫瘍を治療する方法。
【請求項２５】
１サイクルの全放射量が約１Ｇｙから約２Ｇｙのいくつか画分によって照射される、請求項２３の腫瘍を治療する方法。
【請求項２６】
ＴＧＦ−ベータ１、ＴＧＦ−ベータ２および／またはＴＧＦ−ベータ３およびそれらの保存的アナログの群から選択されるタンパク質の約５から約５０のアミノ酸を含むペプチド。
【請求項２７】
ＴＧＦ−ベータ１、ＴＧＦ−ベータ２および／またはＴＧＦ−ベータ３およびそれらの保存的アナログの群から選択されるタンパク質の約５から約５０のアミノ酸を含むペプチドを含有する医薬組成物。
【請求項２８】
ＴＧＦ−ベータ１、ＴＧＦ−ベータ２および／またはＴＧＦ−ベータ３およびそれらの保存的アナログの群から選択されるタンパク質の約５から約５０のアミノ酸を含むペプチドの使用。
【請求項２９】
ＴＧＦ−ベータ１、ＴＧＦ−ベータ２および／またはＴＧＦ−ベータ３およびそれらの保存的アナログの群から選択されるタンパク質の約５から約５０のアミノ酸を含むペプチドを使用することによって、腫瘍を治療する方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、腫瘍を治療するための医薬組成物および方法に関し、好ましい一実施形態では神経膠腫、神経膠芽腫または星細胞腫といった脳の腫瘍に関する。
【０００２】
抗悪性腫瘍化学療法剤および放射線は、腫瘍の治療のための、外科手術以外の最も一般的な薬剤および方法である。抗悪性腫瘍化学療法剤は、たとえばアルキル化剤、代謝拮抗剤および植物由来アルカロイドを含む。これらの抗悪性腫瘍化学療法剤および放射線の一般的な作用は、それぞれ、これまで完全には解明されていない幅広い異なる機構による、細胞増殖の非特異的阻害および細胞死の非特異的誘導である。
【０００３】
細胞増殖の誘導および細胞死の誘導は、それぞれ、腫瘍細胞のような速やかに増殖している細胞に主に影響する。しかし同時に、毛包、結腸粘膜細胞といった他の速やかに増殖している細胞、およびまた免疫細胞の増殖も阻害される。阻害される免疫細胞は、たとえばＴリンパ球、Ｂリンパ球、ナチュラルキラー細胞、顆粒球、マクロファージ、小膠細胞、およびそれぞれの骨髄の前駆細胞である。非特異的に細胞増殖を阻害する抗悪性腫瘍化学療法剤の投与は、したがって、重度の副作用および免疫系の機能の全般的抑制を伴い、これは多数の「ｉｎ  ｖｉｔｒｏ」および「ｉｎ  ｖｉｖｏ」結果によって証明されている。たとえば、これまでの標準的分類にしたがって明らかに分類することができないダカルバジンは、マウス細胞において体液性および細胞媒介性免疫反応を阻害すると報告されている（ジャンピエトリ（Ｇｉａｍｐｉｅｔｒｉ）１９７８，ナーデリ（Ｎａｒｄｅｌｌｉ）１９８４）。同じ結果は、ダカルバジンの活性代謝産物であるテモゾロマイドについても見られる。さらにテモゾロマイドの「ｉｎ  ｖｉｔｒｏ」試験は、リンパ球活性化キラー細胞の細胞傷害性の阻害を示す（アルヴィノ（Ａｌｖｉｎｏ）ら、１９９９）。アルキル化抗悪性腫瘍剤の代表としてのＣＣＮＵ（ロムスチン）は、Ｔ細胞およびＢ細胞の両方を（ベルネゴ（Ｂｅｒｎｅｇｏ）ら、１９８４）たとえばＴ細胞媒介細胞傷害性を抑制することによって抑制し、およびさらにＴ細胞媒介細胞傷害性を抑制する（アインシュタイン（Ｅｉｎｓｔｅｉｎ）ら、１９７５）。さらに、アルキル化剤シクロホスファミド、代謝拮抗剤５−フルオロウラシル、アルカロイドのビンクリスチンおよび抗生物質ドキソルビシンの「ｉｎ  ｖｉｔｒｏ」比較試験は、細胞傷害性Ｔ細胞機能の抑制を共通して示している（ゲレイス（Ｇｅｒｅｉｓ）ら、１９８７）。
【０００４】
一部の腫瘍の化学療法は非常にうまくいく一方、多くの腫瘍は不良な平均余命を伴う。
【０００５】
腫瘍の治療における別の手法は、免疫系の刺激である。たとえば、免疫細胞誘引物質，ウイルスおよび抗原処理，提示または輸送に関与する分子，樹状細胞および腫瘍細胞の融合細胞といった、免疫系の機能および／または免疫細胞の幅広い刺激剤が存在する。免疫系の機能をダウンレギュレートする物質の拮抗剤もまた、免疫系の刺激剤と見なされる。
【０００６】
共通原理として、これらの免疫刺激剤は、「外来」腫瘍細胞を選択的に殺す一方で他の速やかに成長する「自己」細胞を除外する、免疫系の能力を利用する。これはもちろん、それぞれ上記の抗悪性腫瘍化学療法剤および放射線の原理である、すべての増殖する細胞の非特異的阻害または生物の細胞の非特異的破壊と比較して、腫瘍を治療するためのよりよい手法である。
【０００７】
免疫系の強力な阻害剤の一例は、腫瘍が免疫監視から逃れるのを媒介する、ＴＧＦ−ベータ（形質転換増殖因子−ベータ）である（ヴォトヴィッツ・プラガ（Ｗｏｊｔｏｗｉｃｚ−Ｐｒａｇａ），Ｓ．１９９７）。細胞免疫は、高レベルのＴＧＦ−ベータを産生する腫瘍の患者では高度に抑制される（デ・ヴィッサー（ｄｅ  Ｖｉｓｓｅｒ），Ｋ．Ｅ．ら、１９９９）。
【０００８】
ＴＧＦ−ベータ産生を特異的に阻害しおよびそれによって免疫系を刺激する物質を用いることは、腫瘍の治療のための有望な手法である（シュタウダー（Ｓｔａｕｄｅｒ），Ｇ．ら、２００３）。
【０００９】
これらの有望な結果にもかかわらず、免疫刺激剤を用いた腫瘍治療法は、少なくとも、非常に速やかに増殖する腫瘍において限界を有するように見える。
【００１０】
したがって、速やかに増殖する腫瘍の治療のための、より信頼でき、副作用がより少なく、および腫瘍に罹患した患者の余命を伸ばす新しい治療剤の開発が緊急に必要である。
【００１１】
第Ｉ／ＩＩ相臨床試験において、免疫刺激剤（免疫抑制剤ＴＧＦ−ベータの拮抗剤）の投与に際して、我々は驚くべきことに、抗悪性腫瘍化学療法剤を用いて治療した患者の、この免疫刺激剤を用いた治療前の全体の生存率の中央値は、抗悪性腫瘍化学療法剤で前処置されなかった患者と比較して明らかに長かったことを認めた。
【００１２】
抗悪性腫瘍剤は、上記の通り、免疫担当細胞の増殖を阻害することによって免疫系を抑制するため、現在までヒトにおいてこれらの抗悪性腫瘍剤を免疫系の刺激剤と組み合わせる手法は腫瘍治療法または腫瘍薬のための適当な手法でないと考えられていた。免疫系の刺激による腫瘍治療法について報告する文献では、化学療法剤および免疫反応を刺激する物質の投与の間には十分な時間遅延がなければならないことが強調されている（たとえばツィマーマン（Ｔｉｍｍｅｒｍａｎｎ），Ｊ．Ｍ．２００２）。
【００１３】
免疫系の細胞に対する化学療法剤のこの阻害作用はまた、実験で証明された。これらの実験では、免疫系の細胞を、抗悪性腫瘍治療剤および免疫系の刺激剤、すなわちＴＧＦ−ベータを阻害するアンチセンスオリゴヌクレオチドで処理した。これらの検定法を実施例４に記載し、および結果を図９および１０に示す。
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【００１４】
驚くべきことに、本発明に記載の抗悪性腫瘍化学療法剤および免疫系の刺激剤の併用を用いて処置した患者は、これらの治療剤のどちらかを用いて治療した患者と比較して有意に長い寿命を示した。
【００１５】
本発明は、免疫系および／または免疫細胞の機能の刺激剤、および細胞増殖を阻害および／または細胞死を誘導する物質を含む医薬組成物を含む。
【００１６】
好ましい一実施形態では本発明は、ＴＧＦ−ベータの少なくとも一つの拮抗剤、および少なくとも一つの抗悪性腫瘍化学療法剤を含む医薬組成物である。少なくとも２つの物質は混合されているかまたは分離している。ＴＧＦ−ベータの拮抗剤は、ＴＧＦ−ベータ特異的ヌクレオチド、抗体でないＴＧＦ−ベータ結合タンパク質、ＴＧＦ−ベータ結合受容体、ＴＧＦ−ベータ結合受容体の一部、ＴＧＦ−ベータ特異的ペプチドおよびＴＧＦ−ベータを結合する低分子物質、または、ＴＧＦ−ベータの機能を阻害するそのタンパク質、受容体、受容体タンパク質の一部または低分子物質のいずれかから成る群から選択される。
【００１７】
さらに別の一実施形態では、ＴＧＦ−ベータ拮抗剤は、ＴＧＦ−ベータをコードするメッセンジャーＲＮＡ（ｍ−ＲＮＡ）および／またはＤＮＡのある範囲とハイブリダイズするオリゴヌクレオチド、ＴＧＦ−ベータを結合するＴＧＦ−ベータ受容体および／またはその一部、ＴＧＦ−ベータを阻害する抗体以外のタンパク質、ＴＧＦ−ベータを阻害する１００ｋＤａ未満のペプチド、ＴＧＦ−ベータの一部であるペプチドから成る群から選択される。
【００１８】
さらにより好ましい一実施形態では、ＴＧＦ−ベータ特異的ヌクレオチドはＴＧＦ−ベータに対するアンチセンスオリゴヌクレオチドである。
【００１９】
本発明の別の一部は、ＴＧＦ−ベータの一部であるペプチド、医薬組成物の調製のためのその使用、およびこの調製物を用いて腫瘍を治療する方法である。
【００２０】
腫瘍を治療するための方法もまた、本発明の一部である。免疫系の機能および／または免疫細胞を刺激する物質または方法が、細胞増殖を阻害および／または細胞死を誘導する物質と共に投与される。物質は薬物を投与するための任意の公知の経路によって投与される。
【００２１】
本発明に記載の医薬組成物の少なくとも２つの物質は、随意的に同一のキャリヤー処方中でまたは別々の医薬キャリヤー中で、混合されているかまたは別々である。
【００２２】
望まれない腫瘍に罹患する患者の、好ましい一実施形態では追加的に放射線を伴う、上記の通りの医薬組成物を用いた治療もまた、本発明の一部である。
【００２３】
本発明に記載の医薬組成物の少なくとも２つの物質は、同時に、順番に、同一の経路または異なる経路を通じて、放射線と共に、放射線の前または後に投与される。
【００２４】
驚くべきことに、免疫系および／または免疫細胞を刺激する少なくとも一つの物質で、細胞増殖を阻害および／または細胞死を誘導する物質、および／または放射線を共に用いて治療した、腫瘍に罹患している患者は、これらの薬物および／または治療法のそれぞれを単独で用いて治療した患者と比較して明らかにより長い寿命を示す。
【００２５】
このことは、投与されているこれらの薬物および／または治療法の用量の低減、およびしたがって潜在的な望ましくない副作用の低減に繋がりうる。
【００２６】
本発明の別の一実施形態は、ＴＧＦ−ベータの一部であるペプチドである。これらのペプチド、医薬組成物の調製のためのその使用、腫瘍の治療のためのこの組成物の使用、およびそれらのペプチドを用いて腫瘍患者を治療する方法もまた本発明の一部である。
【発明を実施するための最良の形態】
【００２７】
本明細書に記載の文献、特許または出願特許公報は、参照により本開示に含まれる。
【００２８】
本発明の方法は任意の哺乳類に適用可能である。本方法を有用に適用しうる哺乳類の例は、マウス，ラットおよびモルモットといったげっ歯類を含む実験動物；ウシ、ヒツジ、ブタ、およびヤギといった家畜；イヌおよびネコといったペット；およびサル、類人猿およびヒトといった霊長類を含む。本発明は非常に好ましくはヒト臨床例に、特に患者が臓器または組織移植、または患者の免疫系の抑制が適応される任意の他の形の手術後に免疫抑制療法を受けている場合に適用される。しかし、他の哺乳類もまた本発明の実施から利益を受けうる。これらのその他の高価値の動物、たとえばウマ、およびミンクのような毛皮動物。
【００２９】
本発明の一実施形態では、免疫細胞および／または免疫系の機能の少なくとも一つの刺激剤および細胞増殖を阻害および／または細胞死を誘導する少なくとも一つの物質は、純粋なまたはここでは併用ともいう医薬品として許容されるキャリヤーに含まれる、これらの少なくとも２つの成分の、混合物である。
【００３０】
本発明の別の一実施形態では、免疫細胞および／または免疫系の機能の少なくとも一つの刺激剤および細胞増殖を阻害および／または細胞死を誘導する少なくとも一つの物質は、一つの医薬組成物中で別々である。これらの各部分は純粋であるかまたは医薬品として許容されるキャリヤーに含まれる。医薬組成物のその少なくとも２つの部分は、同一のまたは異なる、医薬品として許容されるキャリヤーを有する。医薬組成物のこれらの別々の部分もまたここでは併用という。
【００３１】
免疫細胞は、リンパ系細胞、たとえばＴ細胞、Ｂ細胞、ＮＫ細胞（ナチュラルキラー細胞）、ＮＫＴ細胞（ナチュラルキラーＴ細胞）、顆粒球、たとえば好中球、好酸球、抗塩基球、および単核細胞、たとえば単球、マクロファージ、樹状細胞および肥満細胞である。
【００３２】
本発明に記載の免疫刺激剤は、医薬品として許容されるキャリヤーに含まれる、直接的にまたは間接的に、腫瘍細胞増殖を低減または阻害しおよび／または望まれない腫瘍の細胞死を誘導する高い能力のための、免疫細胞および／または免疫系の機能を誘導する任意の物質である。
【００３３】
上記の通り免疫細胞および／または免疫系の機能を誘導する装置および／または方法もまた本発明の範囲内にある。
【００３４】
一実施形態では、免疫刺激剤は、リンフォタクチン、インターロイキン１、インターロイキン２、インターロイキン６、インターロイキン１２、インターフェロン、および／または免疫細胞誘引物質を含むがそれらに限定されないケモカインの群から選択される。
【００３５】
さらに別の一実施形態では、免疫刺激剤は、レトロウイルス、アデノウイルス、パピローマウイルス、エプスタイン・バー・ウイルス、およびニューカッスル病ウイルス、牛痘ウイルスを含む非病原性であるウイルスを含む、ウイルスおよび／またはウイルスの一部の群から選択される。
【００３６】
別の一実施形態では、免疫刺激剤は、自家、異種ＭＨＣ分子、抗原処理に関与する分子、抗原提示に関与する分子、免疫細胞作用の媒介に関与する分子、免疫細胞傷害作用の媒介に関与する分子、抗原輸送に関与する分子、共刺激性分子、免疫細胞による認識および／または免疫細胞の細胞傷害作用を促進するペプチドの群から選択される。
【００３７】
さらに別の一実施形態では、免疫刺激剤は、免疫細胞による望まれない腫瘍の認識および／または免疫細胞の細胞傷害作用を促進するペプチドであり、ｒａｓタンパク質、ｐ５３タンパク質、ＥＧＦ−受容体タンパク質、融合ペプチドおよび／または融合タンパク質、網膜芽細胞腫タンパク質、がん遺伝子および／またはがん原遺伝子によってコードされるタンパク質、および／またはがん抑制遺伝子および／または腫瘍抑制遺伝子によってコードされるタンパク質の一つ以上の突然変異および／またはアミノ酸置換を含む。
【００３８】
さらに別の実施形態では、免疫刺激剤は、遺伝子再配列および／または遺伝子翻訳に起因する一つ以上の変異体またはアミノ酸置換を含有する免疫細胞および／または免疫細胞の細胞障害性効果による望ましくない腫瘍の認識を促進するペプチドである。
【００３９】
さらに別の実施形態では、免疫刺激剤は、同じ有機体中に発現されるタンパク質とは一つ以上のアミノ酸が異なる標的細胞中のタンパク質から由来する、免疫細胞および／または免疫細胞の細胞障害性効果による望ましくない腫瘍の認識を促進するペプチドである。
【００４０】
さらに別の好ましい実施形態では、ウィルス抗原由来であり、および／または、ウィルス核酸によってコードされる、免疫細胞および／または免疫細胞の細胞障害性効果による望ましくない腫瘍の認識を促進するペプチドである。
【００４１】
さらに別の実施形態では、免疫刺激剤は、疾患組織中には発現されるが、神経系、筋肉、造血系または他の生存に不可欠な臓器には発現されないタンパク質に由来する。罹患臓器は、たとえば、前立腺、卵巣、乳房、メラニン産生細胞等である。
【００４２】
さらに別の実施形態では、免疫抑制剤は、標的細胞中のタンパク質が有機体中の他の細胞とは異なる一つ以上のアミノ酸、腫瘍細胞抽出物、腫瘍細胞溶出物および／またはアジュバントを含有するペプチドである。
【００４３】
さらに別の一実施形態では、免疫刺激剤は、樹状細胞および腫瘍細胞の融合細胞であるかまたは樹状細胞である。これらの融合細胞は、樹状細胞および腫瘍細胞の混合物に由来するハイブリドーマ細胞である。樹状細胞は、たとえば、ＧＭ−ＣＳＦおよびＩＬ−４、またはＧＭ−ＣＳＦ、ＩＬ−４およびＩＦＮ−γまたはＦＬＴ−３リガンドの混合物を用いたＰＢＭＣの処理によって作製される。樹状細胞の腫瘍細胞との融合は、たとえば、ＰＥＧ（ポリエチレングリコール）または電気融合（ハヤシ（Ｈａｙａｓｈｉ），Ｔ．ら、２００２，パークハスト（Ｐａｒｋｈｕｓｔ），Ｍ．Ｒ．２００３，Ｐｈａｎ，Ｖ．２００３）を用いて達成されうる。
【００４４】
さらに別の好ましい一実施形態では、免疫刺激剤は、免疫系の機能に負の影響を与える因子の拮抗剤である。これらの因子は、たとえばＴＧＦ−ベータ（形質転換増殖因子ベータ）、ＶＥＧＦ（血管内皮増殖因子）、ＰＧＥ２（プロスタグランジンＥ２）、ＩＬ１０（インターロイキン１０）である。
【００４５】
さらに別の一実施形態では、免疫刺激剤はワクチンである。
【００４６】
本発明に記載のワクチンは、全（照射）腫瘍細胞、たとえばニューカッスル病ウイルス（ＮＤＶ）改変腫瘍細胞ワクチン（シュナイダー（Ｓｃｈｎｅｉｄｅｒ），Ｔ．ら、２００１）、腫瘍細胞溶解物の群から選択される医薬品として許容されるキャリヤー中の物質を含むがそれらに限定されない。
【００４７】
好ましい一実施形態では、ワクチンは、ペプチド、サイトカイン（たとえばＩＬ−２、ＩＬ−１２、ＧＭ−ＣＳＦ）と組み合わせたペプチド、またはアジュバント（たとえばフロイント不完全アジュバント、ＱＳ２１）と組み合わせたペプチドである。
【００４８】
ワクチン接種のさらに別の一実施形態では、がん抗原をコードする組み換えウイルス構造は、たとえばアデノウイルス、ワクシニア、鶏痘および／またはアビポックスの一部である。
【００４９】
さらに別の一実施形態では、ワクチンはがん抗原をコードする裸のＤＮＡである。
【００５０】
さらに別の一実施形態ではワクチンは、樹状細胞、がん抗原に由来するペプチドを負荷した樹状細胞、異なる腫瘍抗原をコードする組み換えウイルスまたはＲＮＡ、ＤＮＡおよび／またはｃＤＮＡでトランスフェクションした樹状細胞、腫瘍溶解物とパルスした樹状細胞、および／または全腫瘍細胞と融合した樹状細胞である。他のワクチンについては、イェーガー（Ｊａｇｅｒ），Ｅ．ら、２００３も参照。
【００５１】
本発明の好ましい一実施形態では、免疫刺激剤は、免疫系の機能に負に影響する因子の拮抗剤である。
【００５２】
「拮抗剤」とはここでは、たとえばサイトカインの産生および／またはサイトカインの作用を阻害する任意の物質である。免疫系に負に影響するサイトカインの例は、たとえばＴＧＦ−ベータ、ＶＥＧＦ、ＩＬ−１０、ＰＧＥ−Ｅ２である。阻害は、一実施形態では、サイトカインが結合タンパク質へ、受容体へ、またはこの受容体の一部へ結合することによって、サイトカインが抗体、サイトカインまたはその産生を阻害する低分子物質と結合することによって、または前記サイトカインのシグナル経路を阻害することによって、たとえばこれらのサイトカインの受容体またはサイトカインの活性化カスケードの下流にある任意の他の連結を阻害することによって、作用する。
【００５３】
ＴＧＦ−ベータ拮抗剤の好ましい実施形態についてさらに詳細が与えられ、これは上記のサイトカインにもまた移行することができる。
【００５４】
免疫系の拮抗剤とはここでは、免疫系の活性を阻害する任意の物質または方法である。
【００５５】
「低分子物質」または「低分子」はここでは、約１０ｋＤａ未満および約１Ｄａより大の分子量を有する、有機または無機機嫌の物質を含む。
【００５６】
好ましい一実施形態では、本発明の医薬組成物の少なくとも一つの免疫刺激剤はＴＧＦ−ベータ拮抗剤である。
【００５７】
本発明との関連において、ＴＧＦ−ベータ（形質転換増殖因子ベータ）はＴＧＦ−ベータのすべてのサブクラスを含み、好ましいサブクラスはＴＧＦ−ベータ１、ＴＧＦ−ベータ２およびＴＧＦ−ベータ３である。
【００５８】
本発明との関連において、ＴＧＦ−ベータ拮抗剤とは、ＴＧＦ−ベータによって誘導される任意の作用が阻害されるという意味で、ＴＧＦ−ベータの機能を阻害する任意の物質である。
【００５９】
好ましい実施形態では、ＴＧＦ−ベータ拮抗剤は、ＴＧＦ−ベータの産生を阻害する物質であり、ＴＧＦ−ベータに結合する物質であり、および／またはＴＧＦ−ベータの機能を阻害し活性化カスケードの下流に位置する物質である。ＴＧＦ−ベータ拮抗剤についてのさらなる詳細はまた、参照により本開示に含まれるヴォトヴィッツ・プラガ（Ｗｏｊｔｏｗｉｃｚ−Ｐｒａｇａ）（２００３）を参照。ＴＧＦ−ベータ拮抗剤の例は実施例７に示す。
【００６０】
一実施形態ではＴＧＦ−ベータの産生を阻害するＴＧＦ−ベータ拮抗剤は、ＴＧＦ−ベータのメッセンジャーＲＮＡ（ｍＲＮＡ）および／またはＴＧＦ−ベータをコードするＤＮＡのある範囲とハイブリダイズし、およびこれによってＴＧＦ−ベータの産生を阻害する、オリゴヌクレオチドおよび／またはその活性な誘導体である。
【００６１】
さらに別の一実施形態では、ＴＧＦ−ベータの産生を阻害する物質は、ペプチド、１００ｋＤａ未満のペプチド、ＴＧＦ−ベータの一部であるペプチド、タンパク質、抗体ではないタンパク質、および／または低分子、たとえばトラニラスト（Ｎ−［３，４−ジメトキシシンナモイル］−アントラニル酸）（ウィルケンソン（Ｗｉｌｋｅｎｓｏｎ），Ｋ．Ａ．２０００）である。
【００６２】
一実施形態では、ＴＧＦ−ベータの一部であるペプチドは、実施例８で与えられる配列である。実施例８は、参照により本開示に含まれるミットル（Ｍｉｔｔｌ）（１９９６）でも公開されているＴＧＦ−ベータ１、ＴＧＦ−ベータ２、およびＴＧＦ−ベータ３のアミノ酸配列を提示する。
【００６３】
好ましい一実施形態では、ペプチドは実施例８に本発明に記載の通り、ＴＧＦ−ベータ１、ＴＧＦ−ベータ２またはＴＧＦ−ベータ３ペプチドの最後から数え始めて１１２アミノ酸を含む。それらのペプチドの開始は、ＴＧＦ−ベータ１、ＴＧＦ−ベータ２またはＴＧＦ−ベータ３ペプチドの最後の前１１３アミノ酸で終わるＲＸＸＲモチーフの後であり、ここでＲはアミノ酸のアルギニンであり、およびＸＸは任意のアミノ酸を表しまたはアミノ酸無しですらある。
【００６４】
一実施形態では、ＴＧＦ−ベータの一部であるペプチドは、実施例８に示す配列の一部であり、このペプチドのアミノ酸の１個ないし全部を含み、別の実施形態では好ましいペプチドはそれらのペプチドの約１〜１００アミノ酸、約２〜５０アミノ酸、約３〜３０アミノ酸または約５〜２０アミノ酸を含む。
【００６５】
さらに別の実施形態では、好ましいアミノ酸は、それぞれ番号１〜２１でＴＧＦ−ベータ１、ＴＧＦ−ベータ２およびＴＧＦ−ベータ３について実施例８で提示されるものである。
【００６６】
さらに好ましい実施形態は、約１〜５０アミノ酸、約１〜４０、約２〜３０、約３〜２５、約４〜１８、約５〜１５または約６〜１２アミノ酸を有する、上記の通りのアミノ酸の一部である。
【００６７】
上記のペプチドのさらに別の実施形態では、ヒスチジン（Ｈ）、リジン（Ｋ）および／またはアルギニン（Ｒ）の群から選択される塩基性アミノ酸の少なくとも一つが、ＴＧＦ−ベータ拮抗作用を失うことなく、この群から選択される別の塩基性アミノ酸で置換されている。
【００６８】
上記のペプチドのさらに別の実施形態では、グルタミン酸（Ｅ）および／またはアスパラギン酸（Ｄ）の群から選択される酸性アミノ酸の少なくとも一つが、ＴＧＦ−ベータ拮抗作用を失うことなく、この群の対応物で置換されている。
【００６９】
実施例８に示される配列と比較して一部のアミノ酸が保存的に置換されているＴＧＦ−ベータの一部であるペプチドもまた、ＴＧＦ−ベータ１、ＴＧｆ−ベータ２および／またはＴＧＦ−ベータ３のアナログと呼ばれる。
【００７０】
一部の実施形態では、ＴＧＦベータ１、ＴＧＦ−ベータ２およびＴＧＦ−ベータ３のアナログ中のアミノ酸の１から約３０％、約２％から約２０％、約３％から約１５％、４％から約１２％または約５％から約１０％のアミノ酸が保存的に置換されている。
【００７１】
保存的に置換されたアミノ酸とは、本発明との関連においてペプチドの保存的アナログまたは活性な誘導体ともいうが、ペプチドまたはタンパク質の少なくとも一つのアミノ酸を置換することを意味する。好ましくは少なくとも一つの酸性アミノ酸（グルタミン酸（Ｅ）、アスパラギン酸（Ｄ））がそれぞれもう一つの酸性アミノ酸で置換され、同様に少なくとも一つの塩基性アミノ酸が別の塩基性アミノ酸で置換され、極性基（−ＯＨ、−ＳＨ、−ＣＯＮＨ２）を有する少なくとも一つのアミノ酸が極性基を有する別のアミノ酸で置換され、および／または純粋な炭素側鎖を有するアミノ酸が純粋な炭素側鎖を有する別のアミノ酸で置換される。アミノ酸が保存的に置換されたペプチドおよび／またはタンパク質はなお本発明の範囲内にある。
【００７２】
別の一実施形態では、上記のペプチドは単独でありおよび化学療法剤と組み合わされていない。さらに別の一実施形態では、これらのペプチドは、医薬品として許容されるキャリヤーと共に、医薬組成物を調製するのに用いられる。さらに別の一実施形態では、これらのペプチドは、腫瘍の治療のための医薬組成物によって構成され、およびさらに別の一実施形態では、これらのペプチドは、本発明に本発明に記載の腫瘍、より好ましい神経膠腫、星細胞腫および／または神経膠芽腫を治療する方法に用いられる。
【００７３】
さらに別の一実施形態では、ＴＧＦ−ベータ拮抗剤は、ＴＧＦ−ベータを結合する受容体および／またはその一部であり、およびそのようにしてＴＧＦ−ベータの機能を阻害する。
【００７４】
さらに別の一実施形態では、ＴＧＦ−ベータ拮抗剤は、ＴＧＦ−ベータを結合する抗体および／またはその一部であり、およびこれによってＴＧＦ−ベータの機能を阻害する。それらの抗体は市販されており、たとえばＲ＆Ｄシステムズ社（Ｒ＆Ｄ  Ｓｙｓｔｅｍｓ，Ｉｎｃ．）を参照。それらの抗体の産生は本分野でよく知られている。たとえばニワトリ、マウス、ウサギ、ヤギといった動物が、ヒトＴＧＦ−ベータで免疫される。ＩｇＹが次いでたとえばアフィニティクロマトグラフィーによって、たとえばクーパー（Ｃｏｏｐｅｒ），Ｈ．Ｍ．（１９９５）によって記載された通り精製される。さらに別の実施形態では、ＴＧＦ−ベータ抗体はさらに修飾され、たとえばビオチン化される。
【００７５】
より好ましい一実施形態では、ＴＧＦ−ベータ抗体はヒト化抗体である。ヒト化抗体についてさらに詳しくは、カーリントン（Ｃａｒｒｉｎｇｔｏｎ）（１９９８）も参照。
【００７６】
さらに別の一実施形態では、ＴＧＦ−ベータ拮抗剤は、ＴＧＦ−ベータに結合するタンパク質および／またはペプチドであり、およびこれによってＴＧＦ−ベータの機能を阻害する。これらのペプチドの好ましい実施形態は、たとえば潜時関連ペプチドであり、およびＴＧＦ−ベータのアイソフォーム３つすべて（ＴＧＦ−ベータ１、ＴＧＦ−ベータ２およびＴＧＦ−ベータ３）を阻害しうる。
【００７７】
別の一実施形態では、ＴＧＦ−ベータ阻害剤は、細胞外でまたは細胞内で作用する、ＴＧＦ−ベータ受容体の機能を阻害する、タンパク質、ペプチドまたは低分子である。
【００７８】
さらに別の実施形態では、ＴＧＦ−ベータ拮抗剤は、ＴＧＦ−ベータ活性化カスケードの下流の任意の連結を阻害することによって阻害する、ＴＧＦ−ベータ活性を阻害するタンパク質、ペプチド、抗体および／または低分子を含む。
【００７９】
本発明の好ましい一実施形態では、ペプチド、サイトカインおよび／または受容体の拮抗剤は核酸である。
【００８０】
「核酸」および「オリゴヌクレオチド」の語は、リン酸基および可変の有機塩基と結合した複数のヌクレオチド（すなわち、糖、たとえばリボースまたはデオキシリボースを含む分子）をいい、有機塩基は置換ピリミジン、たとえばシトシン（Ｃ）、チミン（Ｔ）またはウラシル（Ｕ）、または置換プリン、たとえばアデニン（Ａ）またはグアニン（Ｇ）のどちらか、またはその修飾である。ここでは、それらの語はオリゴリボヌクレオチドおよびオリゴデオキシリボヌクレオチドをいう。それらの語はまた、オリゴヌクレオシド（すなわちリン酸を除くオリゴヌクレオチド）および任意の他の有機塩基を含むポリマーもまた含む。核酸は二本鎖または一本鎖でありうる。二本鎖分子はｉｎ  ｖｉｖｏでより安定となることができ、一方、一本鎖分子はより高い活性を有しうる。一実施形態では、ヌクレオチドは約６ないし約１００ヌクレオチドの長さを有し、さらに別の一実施形態では、ヌクレオチドはそれぞれ約８ないし約４０ヌクレオチド、約１２ないし約３２ヌクレオチドの長さを有する。
【００８１】
核酸の結合単位に関してここでは、「結合した」または「結合」の語は、二つのものが任意の物理化学的方法によって互いに結びついていることを意味する。当業者に公知である任意の、共有または非共有結合が包含される。核酸の個々の単位を結びつける通常天然に見られる天然結合が非常に一般的である。核酸の個々の単位は、しかし、合成または改変された結合によって結合されうる。
【００８２】
一実施形態では、この直鎖ポリマー構造の各末端はさらに結合させて円構造を形成しうる。しかし、開直線構造が一般的に好ましい。オリゴヌクレオチド構造の中で、リン酸基はオリゴヌクレオチドのヌクレオシド間骨格を形成すると一般に言われる。ＲＮＡおよびＤＮＡの通常の結合または骨格は、３´から５´方向のホスホジエステル結合である。
【００８３】
一実施形態では、「核酸」、「ヌクレオチド」、「オリゴヌクレオチド」、それぞれ「アンチセンスオリゴヌクレオチド」の語は、免疫系および／または免疫細胞の機能を刺激する物質であり、および／または本明細書に記載の通りのＴＧＦ−ベータの拮抗剤である。好ましい実施形態では、それらは、ＴＧＦ−ベータおよび／またはその受容体、ＶＥＧＦおよび／またはその受容体、インターロイキン１０（ＩＬ−１０）および／またはその受容体、ＰＧＥ２および／またはその受容体をコードするＤＮＡ断片またはＲＮＡ断片を含み、またはそれぞれのアンチセンスヌクレオチドであり、および／またはリボザイムである。
【００８４】
さらに別の実施形態では、核酸はアンチセンス核酸でなく、つまり核酸は細胞内の相補的ゲノムＤＮＡまたはＲＮＡ種と結合しおよびそれによって前記ゲノムＤＮＡまたはＲＮＡ種の機能を阻害することによって機能するのではない。
【００８５】
一実施形態では、配列は、参照により本開示に含まれる欧州特許第０６９５３５４号明細書および欧州特許第１００８６４９号明細書に記載された配列および国際公開第０１／６８１４６号、第９８／３３９０４号および第９９／６３９７５号パンフレットとして公開された国際出願特許の配列を含む。ＴＧＦ−ベータアンチセンスオリゴヌクレオチドは好ましい一実施形態では、配列番号１〜１２７として示された少なくとも一つの配列を含む。
【００８６】
オリゴヌクレオチドまたは核酸は、同様の機能を持つ天然に存在しない部分を有するオリゴヌクレオチドを含む。そのような修飾または置換されたオリゴヌクレオチドは、たとえば、細胞取り込みの増大、核酸標的（たとえばタンパク質）への親和性の増大、細胞内局在の変化およびヌクレアーゼ存在下での安定性の増大といった望ましい性質のために、しばしば天然型よりも好ましい。ここで用いられるようなオリゴヌクレオチドの修飾は、糖、塩基部分および／またはヌクレオシド間結合の任意の化学修飾を含む。
【００８７】
一実施形態では、共有結合により修飾された塩基および／または糖を有する核酸またはオリゴヌクレオチドは、水酸基以外の低分子量有機基と３´位および／または２´位でおよびリン酸基以外と５´位で共有結合している骨格糖を有する核酸を含む。したがって、修飾された核酸は、２´−Ｏ−アルキル化リボース基を含みうる。さらに別の一実施形態では、修飾された核酸は、リボースの代わりにアラビノースといった糖を含む。したがって、核酸は骨格組成が不均一となることができ、それによってペプチド−核酸（核酸塩基を含むアミノ酸骨格を有する）のように任意の可能な組み合わせの結合したポリマー単位を含みうる。一部の実施形態では、核酸は骨格組成において均一である。
【００８８】
核酸の置換プリンおよびピリミジンは、シトシンといった標準的なプリンおよびピリミジン、および、置換塩基といった塩基アナログを含む（ワグナー（Ｗａｇｎｅｒ）ら、１９９６）。プリンおよびピリミジンは、アデニン、シトシン、グアニン、チミン、５−メチルシトシン、２−アミノプリン、２−アミノ−６−クロロプリン、２，６−ジアミノプリン、ヒポキサンチン、および他の天然に存在するおよび天然に存在しない核酸塩基、置換および非置換芳香族基を含むがそれらに限定されない。
【００８９】
各オリゴヌクレオチドまたはポリヌクレオチドポリマー中の一つのヌクレオチドは、同一の修飾を含むことができ、これらの修飾の組み合わせを含むことができ、またはホスホジエステル結合とこれらの修飾を組み合わせることができる。オリゴヌクレオチドまたはポリヌクレオチドポリマーをヌクレアーゼ耐性にする方法は、プリンまたはピリミジン塩基を共有結合によって修飾することを含むがそれらに限定されない。たとえば、塩基は、オリゴヌクレオチドまたはポリヌクレオチドが実質的に酸およびヌクレアーゼに耐性となるように、メチル化、ヒドロキシメチル化、またはその他置換（たとえばグリコシル化）することができる。
【００９０】
好ましい一実施形態では、オリゴヌクレオチド上の少なくとも一つの末端ブロックは、ビオチン、ビオチンアナログ、アビジン、またはアビジンアナログである。これらの分子は、保護されたオリゴヌクレオチドまたはポリヌクレオチドの分解をブロックし、および修飾された核酸の固相担体への高親和性結合のための手段を提供する両方の能力を有する。本発明の試薬を調製するために用いることができるアビジンおよびビオチン誘導体は、ストレプトアビジン、スクシニル化アビジン、アビジンモノマー、ビオシチン（ビオチン−イプシロン−Ｎ−リジン）、ビオシチンヒドラジド、２−イミノビオチンのアミンまたはスルフヒドリル誘導体、およびビオチニル−イプシロン−アミノカプロン酸ヒドラジドを含む。他のビオチン誘導体、たとえばビオチン−Ｎ−ヒドロキシスクシンイミドエステル、ビオチニル−イプシロン−アミノカプロン酸−Ｎ−ヒドロキシスクシンイミドエステル、スルホスクシンイミジル６−（ビオチンアミド）ヘキサノアート、Ｎ−ヒドロキシスクシンイミドイミノビオチン、ビオチンブロモアセチルヒドラジド、ｐ−ジアゾベンゾイルビオシチンおよび３−（Ｎ−マレイミドプロピオニル）ビオシチン、もまた、本発明のポリヌクレオチド上で末端ブロック基として用いることができる。
【００９１】
別の一実施形態では、修飾オリゴヌクレオチドまたはポリヌクレオチド中のヌクレオチドのリボース基の環構造は、Ｎ−Ｈ、Ｎ−Ｒ（Ｒアルキルまたはアリール置換基である）、Ｓおよび／またはメチレンで置換された環構造中に酸素を有する。
【００９２】
さらに別の一実施形態では、塩基単位は適当な核酸標的化合物とのハイブリダイゼーションのために維持される。一つのそのようなオリゴマー化合物である、秀れたハイブリダイゼーション特性を有することが示されているオリゴヌクレオチドミメティックは、ペプチド核酸（ＰＮＡ）と呼ばれる。ＰＮＡ化合物，オリゴヌクレオチドの糖骨格は、アミドを含む骨格、特にアミノエチルグリシン骨格で置換される。核酸塩基は、骨格のアミド部分のアザ窒素原子に直接にまたは関節に結合する。ＰＮＡ化合物の調製を教示する代表的な米国特許は、それぞれ参照により本開示に含まれる米国特許第５，５３９，０８２号明細書；第５，７１４，３３１号明細書；および第５，７１９，２６２号明細書を含むがそれらに限定されない。ＰＮＡ化合物のさらなる教示はニールセン（Ｎｉｅｌｓｅｎ）ら（１９９１）に見出される。
【００９３】
他の修飾オリゴヌクレオチド骨格は、たとえば、標準の３´−５´結合を有するホスホロチオエート、キラルホスホロチオエート、ホスホロジチオエート、ホスホロトリエステル、アミノアルキルホスホロトリエステル、３´−アルキレンホスホナートおよびキラルホスホナートを含むメチルおよびその他のアルキルホスホナート、ホスフィナート、３´−アミノホスホロアミダートおよびアミノアルキルホルホロアミダートを含むホスホロアミダート、チオノホスホロアミダート、チオノアルキルホスホナート、チオノアルキルホスホトリエステル、およびボラノホスフェート、これらの２´−５´結合アナログ、およびヌクレオシド単位の隣接する対が３´−５´から５´−３´または２´−５´から５´−２´に結合した逆極性を有するものを含む。さまざまな塩、混合塩、および遊離酸型もまた含まれる。
【００９４】
実施形態では、オリゴヌクレオチドの少なくとも一つのヌクレオチドは、上記の修飾のうちの一つに記載の通り修飾される。修飾はオリゴヌクレオチドを連続的にまたは非規則に占めることができる。
【００９５】
さらに別の一実施形態では、上記の少なくとも二つの修飾が一つのオリゴヌクレオチド内に組み合わされている。
【００９６】
別の一実施形態では、オリゴヌクレオチドの３´および／または５´末端の１から約１２または１から約８または１から約４または１から約２オリゴヌクレオチドおよび／またはヌクレオチド結合は上記の通り修飾されている。
【００９７】
一実施形態では、本発明のオリゴヌクレオチドは、標的、たとえばＴＧＦ−ベータまたはそのサブタイプ、ＶＥＧＦ、ＩＬ−１０、ＰＧＥ２とハイブリダイズされる。含むとは本発明との関連において、配列表のオリゴヌクレオチドのうちの一つが、各ｍ−ＲＮＡのアンチセンスオリゴヌクレオチドの一部であることを意味する。一実施形態では、標的のｍ−ＲＮＡの完全なアンチセンスオリゴヌクレオチドさえ、本発明の意味で免疫刺激剤である。さらに別の一実施形態では、免疫系の機能に負に影響する、標的アンチセンスｍ−ＲＮＡの任意の部分は、本発明の範囲内にある。このことは、３´および／または５´末端のうち少なくとも一つと、好ましい一実施形態では、２´および／または５´末端のうち少なくとも一つと結合した、追加で約１ないし約１０００ヌクレオチド、約１ないし約５００、約１ないし約１００、約１ないし約５０、約１ないし約２０、約１ないし約１０、約１ないし約５または約１ないし約２ヌクレオチドを含む各アンチセンスｍ−ＲＮＡの配列のオリゴヌクレオチドを有する配列のオリゴヌクレオチドはなお本発明の範囲内にあることを意味する。
【００９８】
免疫細胞および／または免疫系の機能に負に影響する因子の標的のヌクレオチド配列、および各アンチセンス配列は当業者に公知である。好ましい一実施形態では、標的はＴＧＦ−ベータ１、ＴＧＦ−ベータ２および／またはＴＧＦ−ベータ３のｍ−ＲＮＡの群から選択される。ＴＧＦ−ベータ−１、ＴＧＦベータ−２、ＴＧＦ−ベータ−３、インターロイキン１０、ＶＥＧＦおよびＰＧＥ２シンターゼのアンチセンスｍ−ＲＮＡの配列は実施例６に示す。
【００９９】
本発明における使用のために、核酸は本分野で公知であるいくつかの手順のうち任意のものを用いてｄｅ  ｎｏｖｏ合成できる。そのような化合物を「合成核酸」という。たとえば、ｂ−シアノエチルホルホロアミダイト法（ビューケージ（Ｂｅａｕｃａｇｅ）ら、１９８１）；ヌクレオシドＨ−ホスホナート法（ギャレグ（Ｇａｒｅｇｇ）ら、１９８６，フローラー（Ｆｒｏｅｈｌｅｒ）ら、１９８６，ギャレグら、１９８６，ガフニー（Ｇａｆｆｎｅｙ）ら、１９８８）。これらの化学は市販のさまざまな自動化オリゴヌクレオチド合成装置によって実施できる。
【０１００】
代替的に、核酸はプラスミド中で大スケールで作製（たとえば、サムブルック（Ｓａｍｂｒｏｏｋ）ら、１９８９を参照）およびより小さい部分に分離または全体を投与することができる。核酸は、既存の核酸配列（たとえば、ゲノムまたはｃＤＮＡ）から、公知の方法、たとえば制限酵素、エキソヌクレアーゼまたはエンドヌクレアーゼを用いる方法によって調製できる。この方法で調製された核酸を単離核酸という。「抗悪性腫瘍核酸」の語は合成および単離抗悪性腫瘍核酸の両方を包含する。
【０１０１】
ホスホロチオエート結合をもつもののような修飾骨格核酸は、たとえば、ホスホロアミダートまたはＨ−ホスホナート化学を利用する自動化法を用いて合成しうる。アリール−およびアルキル−ホスホナートは、たとえば、米国特許第４，４６９，８６３号明細書に記載の通りに作製できる。アルキルホスホトリエステルは、その中の荷電した酸素部分は米国特許第５，０２３，２４３号明細書および欧州特許第０９２，５７４号明細書に記載の通りアルキル化されているが、市販の試薬を用いて自動化固相合成によって調製できる。他の核酸骨格修飾および置換を作製するための方法は記載されている（ウールマン（Ｕｈｌｍａｎｎ）ら、１９９０，グッドチャイルド（Ｇｏｏｄｃｈｉｌｄ）１９９０）。
【０１０２】
ホスホロチオエートは、ホスホロアミダートまたはＨ−ホスホナート化学のどちらかを利用する自動化法を用いて合成しうる。アリール−およびアルキル−ホスホナートは、たとえば、米国特許第４，４６９，８６３号明細書に記載の通り作製できる；およびアルキルホスホトリエステル（その中の荷電した酸素部分は米国特許第５，０２３，２４３号明細書および欧州特許第０９２，５７４号明細書に記載の通りアルキル化されている）は、市販の試薬を用いて自動化固相合成によって調製できる。他の核酸骨格修飾および置換を作製するための方法は記載されている（ウールマン（Ｕｈｌｍａｎｎ），Ｅ．ら、１９９０，グッドチャイルド（Ｇｏｏｄｃｈｉｌｄ），Ｊ．１９９０）。
【０１０３】
本発明のペプチドの合成
本発明のタンパク質およびまたはペプチドを合成するための一つの方法はメリフィールド合成である。この方法は、ｔｅｒｔ−ブチルを基礎とする一時的なα−アミノ保護および永続的な側鎖保護のためのベンジル、または置換ベンジル基の使用によって特徴づけられる。最新技術である、ポリスチレンおよびポリエチレングリコールを基礎とする、ペプチド合成に適した１００種類を超える異なる置換樹脂が存在する。これらの樹脂は、置換，縮合または付加反応のどれかによるアミノ酸の導入を可能にする。メリフィールド合成に用いられる従来の樹脂は、クロロメチルフェニル置換樹脂である。最初のアミノ酸はＢＯＣ−アミノ酸のセシウム塩による塩化物の置換によって樹脂に結合され、ベンジルエステルとの等量を生じる。
【０１０４】
一時ＢＯＣ基の脱保護はジクロロメタン中トリフルオロ酢酸（ＴＦＡ）２０〜５０％溶液を用い、および結果として生じるアンモニウム塩を、障害三級塩基を用いて、次いで中和しなければならない。樹脂からの最後の切断およびベンジル基を有する側鎖保護基の脱保護は、強酸、通常は液体フッ化水素酸またはトリフルオロメタンスルホン酸を用いて達成される。そのような手順は特化した器具を必要とし、および高度に酸性名条件はいくつかの可能な転位を触媒する。
【０１０５】
本発明に記載のタンパク質および／またはペプチドを合成するさらに別の方法は、エリック・アサートン（Ｅｒｉｃ  Ａｔｈｅｒｔｏｎ）およボブ・シェパード（Ｂｏｂ  Ｓｈｅｐｐａｒｄ）によってケンブリッジの分子生物学研究所（Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ  ｏｆ  Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｂｉｏｌｏｇｙ）で１９７０年代後半に開発されたＦｍｏｃポリアミド合成である。メリフィールド法と比較した場合のＦｍｏｃポリアミド戦略の基本的な差は、反応が連続流下で実施されること、およびα−アミノ脱保護および樹脂からの切断のための条件がはるかに穏和であることである。このことは、α−アミノ保護のための基本不安定なＦｍｏｃ保護基の使用から生じる。側鎖は一般的にｔｅｒｔ−ブチルを基礎とする基で保護され、これは、樹脂への結合と共通して、スカベンジャーの存在下でＴＦＡによって切断されうる。
【０１０６】
上述の通り、多数の樹脂が利用可能である。従来は、４−ヒドロキシメチルフェノキシ置換を有する樹脂が用いられる。これらは、最初のアミノ酸の無水物とエステル化される。パラ酸素原子に供与されるメソメリックな電子の結果として生じたカルボカチオンの安定化の結果、樹脂からのペプチドの切断はより穏和な酸性条件下で、典型的にはトリフルオロ酢酸をスカベンジャーと共に用いて生じる。
【０１０７】
連続流の使用とは、樹脂に支持されるペプチドを入れた反応容器に試薬を通過させることを意味する。この容器を通過したら、試薬は容器内へ再循環、または廃液回収瓶へ取ることができる。このことは、樹脂から過剰の試薬および不要の反応産物を洗い流すことを可能にし、これは今度はルシャトリエの原理にしたがって脱保護段階を完了へ進めるのを助ける。加えて、溶液をＵＶ検出器に通しおよびＦｍｏｃ発色団に適した波長で監視することができる。
【０１０８】
典型的なサイクルは下記から成る：
１．前の残基のピペリジンを用いた脱保護。
２．洗浄して１から残存試薬を除去。
３．再循環モードでアシル化。
４．洗浄して過剰の試薬を除去。
自動化アプライド・バイオシステムズ社（ａｐｐｌｉｅｄ  Ｂｉｏｓｙｓｔｅｍｓ）４３２Ａペプチド合成装置を使用できる。
【０１０９】
ここで使用される「腫瘍」という用語は有機体本体の組織および／または血球の新しくおよび異常な成長または形成を意味する。好ましくない腫瘍は、充実性腫瘍；白血病、急性または慢性の骨髄性またはリンパ芽球性白血病といった血液感染性腫瘍；腫瘍転移；良性腫瘍、たとえば血管腫、聴神経腫、神経繊維腫、トラコーマ、および化膿性肉芽腫；前がん腫瘍；毛様細胞を含む星細胞腫、星細胞腫ＷＨＯグレードＩ、星細胞腫ＷＨＯグレードＩＩ、星細胞腫ＷＨＯグレードＩＩＩ、芽細胞腫、脊索腫、頭蓋咽頭腫、上衣細胞腫、ユーイング腫瘍、胚細胞腫、神経膠腫、膠芽細胞腫、血管芽細胞腫、ヘマンジオペリカチオマ(ｈｅｍａｎｇｉｏｐｅｒｙｃａｔｉｏｍａ)、ホジキンズリンパ腫、髄芽細胞腫、白血病、中皮腫、神経芽腫、非ホジキンズリンパ腫、松果体腫、網膜細胞芽腫、肉腫（脈管腫、軟骨肉腫、内皮肉腫、線維肉腫、平滑筋肉腫、脂肪肉腫、リンファメジオ・オテリオサルコマ(ｌｙｍｐｈａｎｇｉｏｏｔｈｅｌｉｏｓａｒｃｏｍａ)、リンパ管肉腫、髄芽細胞腫、黒色腫、髄腹腫、筋肉腫、神経鞘腫、乏突起膠腫、骨原性肉腫、骨肉腫を含む）、セミノーマ、上衣下腫、ウィルムス腫瘍を含むが、これらに限定されないか、または、胆汁腺管がん、膀胱がん、脳腫瘍、乳がん、気管支がん、腎がん、頚がん、絨毛がん、嚢胞腺がん、胎生期がん、上皮がん、食道がん、頚がん、結腸がん、大腸がん、子宮内膜がん、胆嚢がん、胃がん、頭部および頸部がん、肝がん、肺がん、髄様がん、非小細胞気管支／肺がん、卵巣がん、すい臓がん、乳頭状がん、乳頭腺がん、前立腺がん、小腸がん、直腸がん、腎細胞がん、皮膚がん、小細胞気管支／肺がん、扁平上皮がん、脂腺がん、精巣がん、子宮がんの群から選択される。
【０１１０】
本発明の医薬組成物は免疫刺激剤に加えて、細胞増殖を阻害および／または細胞死を誘導する少なくとも一つの物質を含む。
【０１１１】
ここでは「抗悪性腫瘍化学療法剤」とは、細胞増殖を阻害および／または細胞死を誘導する物質であり、および好ましい一実施形態では、さらにここに記載のように免疫細胞および／または免疫系の機能を刺激することによってではなく転位の形成を阻害する。抗悪性腫瘍化学療法剤の語は、抗悪性腫瘍剤、抗悪性腫瘍補助増強剤および放射性剤を含むがそれらに限定されない。この群の例を本明細書に示す。
【０１１２】
一実施形態では、抗悪性腫瘍物質は、テモゾロマイド、ニトロソ尿素、ビンカ（Ｖｉｎｃａ）アルカロイド、プリンおよびピリミジン塩基の拮抗剤、細胞分裂抑制性抗生物質、カンプトテシン誘導体、抗エストロゲン、抗アンドロゲンおよびゴナドトロピン放出ホルモンのアナログの群から選択される。
【０１１３】
好ましい一実施形態では、ニトロソ尿素の群はＡＣＮＵ、ＢＣＮＵ、ＣＣＮＵを含む。
【０１１４】
別の一実施形態では、抗悪性腫瘍化学療法剤は、ニトロソ尿素、たとえばＡＣＮＵ、ＢＣＮＵおよび／またはＣＣＮＵ、細胞傷害活性抗生物質、たとえばドキソルビシン、ＰＥＧ化リポソームドキソルビシン（シーリクス（Ｃａｅｌｙｘ）（登録商標））、５−フルオロデオキシウリジン、５−フルオロウラシル、５−フルオロウリジン、ゲムシタビン、プロカルバジン、タキソール、タキソテール、テモゾロマイド、ビンブラスチン、ビンクリスチンの群から選択される。
【０１１５】
ＡＣＮＵの同義語は、３−［（−４−アミノ−２−メチル−５−ピリミジニル）メチル］−１−（２−クロロエチル）−１−ニトロソ尿素塩酸塩、ＣＳ−４３９ＨＣｌ、塩酸ニドラン、塩酸ニムスチン、ＮＳＣ−２４５３８２である。
【０１１６】
ＢＣＮＵはビスクロロエチルニトロソ尿素であり、化学名はＮ，Ｎ´−ビス（２−クロロエチル）−Ｎ−ニトロソ尿素であり、別名はＢｉＣＮＵ、カルムスチンである。
【０１１７】
ＣＣＮＵは１−（２−クロロエチル）−３−シクロヘキシル−１−ニトロソ尿素である。同義語はＮ−（２−クロロエチル）−Ｎ´−シクロヘキシル−Ｎ−ニトロソ尿素、ベルスチン、ＣｅｅＮＵ、クロロエチルシクロヘキシルニトロソ尿素、ＩＣＩＧ１１０９、ロムスチン、ＮＳＣ７９０３７である。
【０１１８】
テモゾロマイドの一つの化学名は３，４−ジヒドロ−３−メチル−４−オキソイミダゾ−＞５，１ｄ´１，２，３，４−テトラジン−８−カルボキシイミドである。テモゾロマイドの別名はテモダール、テモダール、メタゾラストン、ＣＣＲＧ８１０４５、ＳＣＨ５２３６５、ＮＳＣ３６２８５６、Ｍ＆Ｂ３９８３６である。
【０１１９】
テニポシドの同義語は、４´−デメチルエピポドフィロトキシン、９−（４，６−Ｏ−２−テニリデン−ｂ−Ｄ−グルコピラノシド）、エピポドフィロトキシン、ＥＰＴ、テニポシドＶＭ−２６、ＶＭ２６、５，８，８ａ，９−テトラヒドロ−５−（４−ヒドロキシ−３，５−ジメトキシフェニル）−９−｛［４，６−Ｏ−（２−チエニルメチレン）−ｂ−Ｄ−グルコピラノシル］オキシ｝フロ［３´，４´：６，７］ナフト［２，３−ｄ］−１，３−ジオキソール−６（５ａＨ）−オンである。
【０１２０】
一実施形態では、ビンカアルカロイドはビンクリスチン、ビンブラスチン、ビンデシンおよびそれらの活性な誘導体を含む。
【０１２１】
一実施形態では、プリンおよびピリミジン塩基の拮抗剤は、５−フルオロウラシル、５−フルオロデオキシウリジン、シタラビンおよびゲムシタビンの群から選択される。
【０１２２】
他の実施形態では、細胞分裂抑制性抗生物質はドキソルビシンおよびリポソームＰＥＧ化ドキソルビシンの群から選択され、カンプトテシン誘導体はイリノテカンおよびトポテカンの群から選択され、抗エストロゲンはタモキシフェン、エキセメスタン、アナストロゾールおよびフルベストラントの群から選択され、抗アンドロゲンはフルタミドおよびビカルタミドの群から選択され、抗プロゲステロンはミフェプリストンの群から選択され、ゴナドトロピン放出ホルモンのアナログはロイプロリドおよびゴセレリンの群から選択される。
【０１２３】
他の実施例では、本発明の少なくとも１つの免疫刺激剤は、下記の群から選択される少なくとも１つの抵腫瘍薬と併用される：
アシビシン；アクラルビシン；塩酸アコダゾール；アクロニン；アドゼレシン；アドリアマイシン；アルデスロイキン；アルトレタミン；アンボマイシン；酢酸アメタントロン；アミノグルテチミド；アムサクリン；アナストロゾール；アンスラマイシン；アスパラギナーゼ；アスペルリン（Ａｓｐｅｒｌｉｎ）；アザシチジン；アゼテパ；アゾトマイシン（アゾトマイシン（Ａｚｏｔｏｍｙｃｉｎ）；バチマスタット；ベンゾデパ；ビカルタミド；塩酸ベンゾデパ；二メシル酸ビスナフィド；ビゼレシン；硫酸ブレオマイシン；ブレキナルナトリウム；ブロピミン；ブスルファン；カクチノマイシン；カルステロン；カラセミド；カルベチマー；カルボプラチン；カルムスチン；塩酸カルブシン（Ｃａｒｕｂｉｃｉｎ）；カルゼレシン；セデフィンゴール；セツキシマブ；クロラムブシル；シロレマイシン（Ｃｉｒｏｌｅｍｙｃｉｎ）；シスプラチン；クラドリビン（Ｃｉｒｏｌｅｍｙｃｉｎ）；メシル酸クリスナトール；シクロホスファミド；シタラビン；ダカルバジン；ＤＡＣＡ（Ｎ２（ジメチルアミノ）エチルアクリジン−４−カルボキサミド）；ダクチノマイシン；塩酸ダウノルビシン；ダウノマイシン；デシタビン；デキソルマプラチン；デザグアニン；メシル酸デザグアニン；ジアジクオン；ドセタキセル；ドキソルビシン；塩酸ドキソルビシン；ドロロキシフェル；クエン酸ドロロキシフェル；プロピオン酸ドロモスタノロン；デュアゾマイシン（Ｄｕａｚｏｍｙｃｉｎ）；エダトレキサート；塩酸エフロルニチン；エルサミトルシン（Ｅｌｓａｍｉｔｒｕｃｉｎ）；エンロプラチン；エンプロマート；エピプロピジン；塩酸エピルビシン；エルズロゾール（Ｅｒｂｕｌｏｚｏｌｅ）；エルロチニブ；塩酸エソルビシン（Ｅｓｏｒｕｂｉｃｉｎ）；エストラムスチン；エストラムスチンリン酸ナトリウム；エタニタゾール；エチオダイズド油Ｉ１３１；エトポシド；リン酸エトポシド；エトプリン；塩酸ファドロゾール；ファザラビン；フェンレチニド；フロクスウリジン；リン酸フルダラビン；フルオロウラシル；５−ＦｄＵＭＰ；フルロシタビン；ホスキドン；ホストリエシンナトリウム；ゲフィチニブ；塩酸ゲムシタビンゲムシタビン；金Ａｕ１９８；ヒドロキシ尿素；塩酸イダルブシン；イフォスファミド；イルモホシン；メシル酸イマチニブ；インターフェロンアルファ−２ａ；インターフェロンアルファ−２ｂ；インターフェロンアルファ−ｎ１；インターフェロンアルファ−ｎ１；インターフェロンベータ−Ｉａ；インターフェロンガンマ−Ｉｂ；イプロプラチン；イレッサ；塩酸イリノテカン；酢酸ランレオチド；レトロゾール；酢酸ロイプロリド；塩酸リアロゾール；ロメトキシソールナトリウム；ロムスチン；塩酸ロソキサントロン；マソプロコール；マイタンシン；塩酸メクロレタミン；酢酸メゲストロール；酢酸メレンゲストロール；メルファラン；メノガリル；メルカプトプリン；メトトレキサート；メトトレキサートナトリウム；メトプリン；メツレデパ；ミチンドミド；マイトカルシン（Ｍｉｔｏｃａｒｃｉｎ）；ミトクロミン；マイトギリン（Ｍｉｔｏｇｉｌｌｉｎ）；マイトマルシン（Ｍｉｔｏｍａｌｃｉｎ）；マイトマイシン；マイトスパー（Ｍｉｔｏｓｐｅｒ）；ミトタン；塩酸ミトザントロン；ミコフェノール酸；ノコダゾール；ノガラマイシン；オルマプラチン；オキシスラン；パクリタキセル；ペガスパルガーゼ；ペリオマイシン（Ｐｅｌｉｏｍｙｃｉｎ）；ペンタムスチン；硫酸ペプロマイシン；ペルホスファミド；ピポブロマン；ピポスルファン；塩酸ピロキサントロン；プリカマイシン；プロメスタン；ポルフィマーナトリウム；ポルフィロマイシン；プレドニムスチン；塩酸プロカルバジン；プロマイシン；塩酸プロマイシン；ピラゾフリン；リボプリン；リツキシマブ；ログレチミド；サフィノール；塩酸サフィンゴール；セムスチン；シムトラゼン；スパルフォセートナトリウム；スパルソマイシン；塩酸スピロゲルマニウム；スプロムスチン；スピロプラチン；ストレプトニグリン；ストレプトゾシン；ストロンチウム塩化物Ｓｒ８９；スロフェヌル；タリソマイシン；タキサン；タキソイド；テコガランナトリウム；テガフル；塩酸テロキサントロン；テモポルフィン；テニポイド；テロキシロン；テストラクトン；チアミプリン；チオグアニン；チオテパ；チミタック；チアゾフリン；チラパザミン；トムデックス；ＴＯＰ−５３；塩酸トポテカン；クエン酸トレミフェン；トラスツズマブ；酢酸トレストロン（Ｔｒｅｓｔｏｌｏｎｅ）；リン酸トリシリビン；トリメトレキサート；グルクロン酸トリメトレキサート；トリプトレリン；塩酸ツブロゾール；ウラシル・マスタード；ウレデパ；バプレオチド；ベルテポルフィン；ビンブラスチン；硫酸ビンブラスチン；ヴィンクリスチン；硫酸ヴィンクリスチン；ビンデシン；硫酸ビンデシン；硫酸バインピジン（Ｖｉｎエピｄｉｎｅ）；硫酸ヴィングリシネート（Ｖｉｎｇｌｙｃｉｎａｔｅ）；硫酸ビンレウロシン（Ｖｉｎｌｅｕｒｏｓｉｎｅ）；酒石酸ビノレビリン；硫酸ヴィンロシジン（ｖｉｎｒｏｓｉｄｉｎｅ）；硫酸ヴィンゾリディン；ボロゾール；ゼニプラチン；ジノスタチン；塩酸ゾルビシン；２−クロロデオキシアデノシン；２’−デオキシホルマイシン；９−アミノカンプトセシン；ラルチドレキセド；Ｎ−プロパルギル−５，８−アザ葉酸；２−クロロ−２’−アラビノ−フルオロー２’−デオキシアデノシン；２−クロロ−２’−デオキシアデノシン；アニソマイシン；トリコスタチンＡ；ｈＰＲＬ−Ｇ１２９Ｒ；ＣＥＰ−７５１；リノマイド。
【０１２４】
他の抗腫瘍剤は下記を含む：
２０−エピ−１，２５二水酸化ビタミンＤ３；５−エチニルウラシル；アビラテロン；アクラルビシン；アシルフルベン；アデシペノール（ａｄｅｃｙｐｅｎｏｌ）；アドゼレシン；アルデスロイキン；ＡＬＬ−ＴＫ阻害剤；アルトレタミン；アンバムスチン；アミドクス；アミホスチン；アミノレブリン酸；アムルビシン；アムサクリン；アナグレリド；アナストロゾール；アンドログラフォロイド；新脈管形成阻害剤；拮抗薬Ｄ；拮抗薬Ｇ；アンタレリクス；抗背側化形態形成タンパク質−１；抗アンドロゲン、前立腺がん；抗エストロゲン；抗腫瘍薬；アンチセンスオリゴヌクレオチド；グリシン酸アフィジコリン；アポトーシス遺伝子モジュレータ；アポトーシス調節剤；アプリン酸；アラ−ＣＤＰ−ＤＬ−ＰＴＢＡ；アルギニンデアミナーゼ；アスラクリン（ａｓｕｌａｃｒｉｎｅ）；アタメスタン；アトリムスチン；アキシナスタチン（ａｘｉｎａｓｔａｔｉｎ）１；アキシナスタチン（ａｘｉｎａｓｔａｔｉｎ）２；アキシナスタチン（ａｘｉｎａｓｔａｔｉｎ）３；アザセトロン；アザトキシン；アザチロシン；バッカチンＩＩＩ誘導体；バラノル（ｂａｌａｎｏｌ）；バチマスタット；ＢＣＲ／ＡＢＬ拮抗薬；ベンゾクロリン；ベンゾイルスタイロスポリン；ベータラクタム誘導体；ベータアレシン（ｂｅｔａ−ａｌｅｔｈｉｎｅ）；ベータクラマイシン（ｂｅｔａ−ａｌｅｔｈｉｎｅ）Ｂ；ベツリン酸；ｂＦＧＦ阻害剤；ビカルタミド；ビサントレン；ビサジリヂニルスペルミン（ｂｉｓａｚｉｒｉｄｉｎｙｌｓｐｅｒｍｉｎｅ）；ビスナフィド；ビストラテン（ｂｉｓｔｒａｔｅｎｅ）Ａ；ビゼレシン；ブレフレート（ｂｒｅｆｌａｔｅ）；ブロピミン；ブドチタン；ブチオニンスルフォキシミン；カルシポトリオール；カルフォスチンＣ；カンプトテシン誘導体（たとえば、１０水酸基カンプトテシン）；カナリポックスＩＬ−２；カペシタビン；カルボキサミド−アミノ−トリアゾール；カルボキシアミドトリアゾール；ＣａＲｅｓｔＭ３；ＣＡＲＮ７００；軟骨由来阻害剤；カルゼレシン；カゼインキナーゼ阻害剤（ＩＣＯＳ）；カスタノスペルミン；セクロピンＢ；セトロリクス；クロリン；クロロキノキサリンスルホンアミド；シカプロスト；シス−ポリフィリン；クラドリビン（Ｃｉｒｏｌｅｍｙｃｉｎ）；クロミフェンアナログ；クロトリマゾール；コリスマイシン（ｃｏｌｌｉｓｍｙｃｉｎ）Ａ；コリスマイシン（ｃｏｌｌｉｓｍｙｃｉｎ）Ｂ；コンブレスタチンＡ４；コンブレスタチンアナログ；コナゲニン；クラムベスシジン（ｃｒａｍｂｅｓｃｉｄｉｎ）８１６；クリスナトール；クリプトフィシン８；クリプトフィシンＡ誘導体；クラシン（ｃｕｒａｃｉｎ）Ａ；シクロペンタンスラキノロン（ｃｙｃｌｏｐｅｎｔａｎｔｈｒａｑｕｉｎｏｎｅｓ）；シクロプラタム（ｃｙｃｌｏｐｌａｔａｍ）；サイパーマイシン（ｃｙｃｌｏｐｌａｔａｍ）；シタラビンオクフォスファート；細胞溶解因子；サイトスタチン；ダクリキシマブ（ｄａｃｌｉｘｉｍａｂ）；デシタビン；デヒドロダイデムニンＢ；デスロレイン（ｄｅｓｌｏｒｅｌｉｎ）；デキソフォスファミド（ｄｅｘｉｆｏｓａｍｉｄｅ）；デクスラゾキサン；デクスベラパミル；ジアジクオン；ダイデムニンＢ；ディドクス（ｄｉｄｏｘ）；ジエチルノルスペルミン；ジヒドロ−５−アザシチジン；ジヒドロタキソール，９−；ディオキサマイシン（ｄｉｏｘａｍｙｃｉｎ）；ジフェニルスプロムスチン；ディスコダーモライド；ドコサノール；ドラセトロン；ドキシフルリジン；ドロロキシフェル；ドロナビノール；デュオカルマイシンＳＡ；エブセレン；エコムスチン；エデルホシン；エドレコロマブ；エフロルニチン；エレメン；エミテフル；エピルビシン；デソキシエポチロン（Ａ，Ｒ．ｄｂｄ．Ｈ；Ｂ，Ｒ．ｄｂｄ．Ｍｅ）を含むエポチロン類；エピシロン；エプリステリド；エストラムスチンアナログ；エストロゲン作動薬；エストロゲン拮抗薬；エタニタゾール；エトポシド；エトポシド４’−リン酸（エトポフォス（ｅｔｏｐｏｆｏｓ））；エクセメスタン；ファドロゾール；ファザラビン；フェンレチニド；フィルグラスティム；フィナステリド；フラボピリドール；フレゼラスチン；フルアステロン；フルダラビン；塩酸フルオロダウロルニシン（ｆｌｕｏｒｏｄａｕｎｏｒｕｎｉｃｉｎ）；フォルフェニメクス；ホルメスタン；ホストリエシン；ホテムスチン；ガドリニウムテキサフィリン；硝酸ガリウム；ガロシタビン；ガニレリックス；ゼラチナーゼ阻害剤；ゲムシタビン；グルタチオン阻害剤；ヘプスルファム（ヘレグリン）；ヘレグリン；ヘキサメチレンビスアセトアミド；ピペリシン；イバンドロン酸；イダルブシン；イドキシフェン；イドラマントン；イルモホシン；イロマスタット；イミダゾアクリドン類；イミキモド；免疫刺激剤ペプチド；インスリン様増殖因子−１受容体  阻害剤；インターフェロン作動薬；インターフェロン；インターロイキン；イオベングアン；ヨードドキソルビシン；イポメアノール，４−；イリノテカン；イロプラクト（ｉｒｏｐｌａｃｔ）；イルソグラジン；イソベンガゾール（ｉｓｏｂｅｎｇａｚｏｌｅ）；イソホモハリコンドリン（ｉｓｏｈｏｍｏｈａｌｉｃｏｎｄｒｉｎ）Ｂ；イタセトロン；ジャスプラキノライド；カハラライドＦ；ラメラリン−Ｎトリアセテート；ランレオチド；レイナマイシン；レノグラスチム；硫酸レンチナン；レプトルスタチン（ｌｅｐｔｏｌｓｔａｔｉｎ）；レトロゾール；白血病抑制因子；白血球アルファ・インターフェロン；リュープロライド＋エストロゲン＋プロゲステロン；リュープロレリン；レバミゾール；リアロゾール；直線ポリアミンアナログ；親油性二糖類ペプチド；親油性プラチナ化合物；リソクリナミド（ｌｉｓｓｏｃｌｉｎａｍｉｄｅ）７；ロバプラチン；ロンブリシン；ロメトキシソール；ロニダミン；ロソキサントロン；ロバスタチン；ロキソリビン；ルルトテカン（ｌｕｒｔｏｔｅｃａｎ）；ルテチウムテキサフィリン；リソフィリン；溶解ペプチド；マイタンシン；マンノスタチンＡ；マリマスタット；マソプロコール；マスピン；マトリンシン  阻害剤；マトリックスメタロプロテアーゼ阻害剤；メノガリル；メルバロン（ｍｅｒｂａｒｏｎｅ）；メテレリン；メチオニナーゼ；メトクロプラミド；ＭＩＦ  阻害剤；ミフェプリストン；ミルテホシン；ミリモスチム；対応が合致しない二重ＲＮＡ；ミトラマイシン；ミトグアゾン；ミトラクトール；マイトマイシンアナログ；メトナフィド；マイトトキシン線維芽細胞増殖因子−サポリン；ミトキサントロン；モファロテン；モルグラモスチム；モノクローナル抗体，ヒト絨毛性ゴナドトロピン；一リン酸化脂質Ａ＋マイコバクテリウム細胞壁ｓｋ；モピダモール；多剤耐性遺伝子阻害剤；多腫瘍抑制剤１に基づく治療；マスタード抗がん剤；マイカペロキシド（ｍｙｃａｐｅｒｏｘｉｄｅ）Ｂ；マイコバクテリア細胞壁抽出物；ミリアポロン；Ｎ−アセチルジナリン；Ｎ−置換ベンズアミド；ナファレリン；ナグレスティップ（ｎａｇｒｅｓｔｉｐ）；ナロキソン＋ペンタゾシン；ナパヴィンｎａｐａｖｉｎ；ナフテルピン；ナルトグラスチム；ネダプラチン；ネモロビシン（ｎｅｍｏｒｕｂｉｃｉｎ）；ネリドロン酸；中性エンドペプチダーゼ；ニルタミド；ニサマイシン（ｎｉｓａｍｙｃｉｎ）；酸化窒素モジュレータ；窒素酸化物抗酸化物質；ｎｉｔｒｕｌｌｙｎ（ニトルリン）；Ｏ６−ベンジルグアニン；オクトレノイド；オキセノン；オリゴヌクレオチド；オナプリストン；オンダンセトロン；オンダンセトロン；オラシン；経口サイトカイン誘導物質；オルマプラチン；オサテロン；オキサリプラチン；オキザウノマイシン；パクリタキセル  アナログ；パクリタキセル誘導体；パラウアミン；パルミトイルリゾキシン；パミドロン酸；パナキシトリオール；パノミフェン；パラバクチン（ｐａｒａｂａｃｔｉｎ）；パゼリプチン；ペガスパルガーゼ；ペルデシン；ポリ硫酸ペントサンナトリウム；ペントスタチン；ペントロゾール（ｐｅｎｔｒｏｚｏｌｅ）；ペルフルブロン；ペルホスファミド；ペリリルアルコール；フェナジノマイシン；フェニル酢酸；ホスファターゼ阻害剤；ピシバニル；塩酸ピロカルピン；ピラルビシン；ピリトレキシム；プラセチンＡ；プラセチンＢ；プラスミノゲン・アクチベータ阻害剤；プラチナ錯；プラチナ化合物；プラチナ−トリアミン錯体；ポドフィロトキシン；ポルフィマーナトリウム；ポルフィロマイシン；プロピルビス−アクリドン；プロスタグランジンＪ２；プロテアソーム阻害剤；タンパク質Ａに基づく免疫調節剤；プロテインキナーゼＣ阻害剤；プロテインキナーゼＣ阻害剤類、微細藻類；タンパク質チロシンホスファターゼ阻害剤；プリン・ヌクレオシド・ホスホリラーゼ阻害剤；プルプリン；ピラゾロアクリジン；ピリドキシレート化ヘモグロビンポリオキシエチレン複合体；ｒａｆ拮抗薬；ラルチドレキセド；ラモセトロン；ｒａｓファルネシルタンパク質トランスフェラーゼ阻害剤；ｒａｓ阻害剤；ｒａｓ−ＧＡＰ阻害剤；脱メチル化レテリプチン；エチドロン酸レニウムＲｅ  １８６；リゾキシン；リボザイム；ＲＩＩレチナミド（ｒｅｔｉｎａｍｉｄｅ）；ログレチミド；ロヒツキン（ｒｏｈｉｔｕｋｉｎｅ）；ロムルチド；ロキニメクス；ｒｕｂｉｇｉｎｏｎｅ（ルビギノン）Ｂ１；ルボキシル；サフィンゴール；ｓａｉｎｔｏｐｉｎ（サイントピン）；ＳａｒＣＮＵ；サルコフィトールＡ；サルグラモスチム；Ｓｄｉ１ミメテクス；セムスチン；セネセンス由来阻害剤１；センスオリゴヌクレオチド；シグナル変換阻害剤；シグナル変換  調節剤；一本鎖抗原結合部分；シゾフィラン；ソブゾキサン；ボロカプタートナトリウム；フェニル酢酸ナトリウム；ソルベロール（ｓｏｌｖｅｒｏｌ）；ソマトメジン結合タンパク質；ソネルミン；スパルホス酸；スピカマイシンＤ；スプロムスチン；スプレノペンチン（ｓｐｌｅｎｏｐｅｎｔｉｎ）；スポンジスタチン１；スクアラミン；幹細胞阻害剤；幹細胞分割阻害剤；スティピアミド（ｓｔｉｐｉａｍｉｄｅ）；ストロメライシン阻害剤；スルフィノシン（ｓｕｌｆｉｎｏｓｉｎｅ）；超活性血管活性腸管ペプチド拮抗薬；ｓｕｒａｄｉｓｔａ（スラディスタ）；スラミン；スワンソニン；合成グルコサミノグリカン；タリムスチン；タモキシフェンメチオジド；タウロムスチン；タザロテン；テコガランナトリウム；テガフル；テルラピリニウム（ｔｅｌｌｕｒａｐｙｒｙｌｉｕｍ）；テロメラーゼ阻害剤；テモポルフィン；テモゾロマイド；テニポイド；テラクロロデキサオキシド（ｔｅｒａｃｈｌｏｒｏｄｅｃａｏｘｉｄｅ）；テラゾミン（ｔｅｒａｚｏｍｉｎｅ）；サリブラスチン（ｔｈａｌｉｂｌａｓｔｉｎｅ）；サリドマイド；チオコラリン；トロンボポエチン；トロンボポエチン模倣薬；チマルファシン；サイモポエチン受容体作動薬；チモトリナン；甲状腺刺激ホルモン；チンエチルエチオプルプリン；チラパザミン；二塩化チタノセン；トポテカン；トプセンチン（ｔｏｐｓｅｎｔｉｎ）；トレミフェン；全能性幹細胞因子ｒ；翻訳阻害剤；トレチノイン；トリアセチルリジン；トリシリビン；トリメトレキサート；トリプトレリン；トロピセトロン；ツロステリド；チロシン・キナーゼ阻害剤；チルフォスチン；ＵＢＣ阻害剤；ウベニメクス；尿生殖洞由来成長阻害因子；ウロキナーゼ受容体拮抗薬；バプレオチド；バリオリン  Ｂ；ベクトルシステム、赤血球遺伝子療法；ベラレソール；ベラミン；ベルジン；ベルテポルフィン；ビノレビリン；ビンキサルチン；バイタクシン；ボロゾール；ザノテロン（ｚａｎｏｔｅｒｏｎｅ）；ゼニプラチン；ジラスコルブ；ジノスタチンスチマラマー。
抗腫瘍補助促進剤：
三環系抗うつ剤（たとえば、イミプラミン、デシプラミン、アミトリプチリン、クロミプラミン、トリミプラミン、ドクサピン、ノルトリプチリン、プロトリプチリン、アモキサピンおよびマプロチリン）；非三環系抗うつ剤（たとえば、セトラリン、トラゾドンおよびシタロプラム）；Ｃａ．ｓｕｐ．＋＋拮抗薬（たとえば、ベラパミル、ニフェジピン、ニトレンジピンおよびカロベリン）；カルモジュリン阻害剤（たとえば、プレニラミン，トリフルオロペラジンおよびクロミプラミン）；アンホテリシンＢ；トリパラノールアナログ（たとえば、タモキシフェン）；抗不整脈薬（たとえば、キニジン）；抗高血圧薬（たとえば、レゼルピン）；チオールディプリーター（たとえば、ブチオニンおよびスルフォキシミン）およびクレモホールＥＬといった多剤耐性還元剤。本発明の化合物は、顆粒球コロニー刺激因子といったサイトカインとも併用投与できる。
抗増殖剤：イセチオン酸ピリトレキシム
放射性物質：
フィブリノゲンＩ１２５；フルデオキシグルコースＦ１８；フルオロドパＦ１８；インスリンＩ１２５；インスリンＩ１３１；イオベングアンＩ１２３；ヨージパミド・ナトリウムＩ１３１；ヨードアンチピリンＩ１３１；ヨードコレステロールＩ１３１；ヨウ化ヒプル酸ナトリウムＩ１２３；ヨウ化ヒプル酸ナトリウムＩ１２５；ヨウ化ヒプル酸ナトリウムＩ１３１；ヨードピラセトＩ１２５；ヨードピラセトＩ１３１；塩酸イオフェタミンＩ１２３；イオメチンＩ１２５；イオメチンＩ１３１；ヨータラム酸ナトリウムＩ１２５ヨータラム酸ナトリウムＩ１３１；イオチロシンＩ１３１；リオチロニンＩ１２５；リオチロニンＩ１３１；酢酸メリソプロールＨｇ１９７；酢酸メリソプロールＨｇ２０３；メリソプロールＨｇ１９７；セレノメチオニンＳｅ７５；アンチモン三硫化物コロイドテクネチウムＴｃ９９ｍ；Ｂｉｃｉｓａｔｅ（ビシセート）テクネチウムＴｃ９９ｍ；ジソフェニンテクネチウムＴｃ９９ｍ；エチドロン酸テクネチウムＴｃ９９ｍ；エクサメタジムテクネチウムＴｃ９９ｍ；フリホスミンテクネチウムＴｃ９９ｍ；グルセプテートテクネチウムＴｃ９９ｍ；リドフェニンテクネチウムＴｃ９９ｍ；メブロフェニンテクネチウムＴｃ９９ｍ；メドロネートテクネチウムＴｃ９９ｍ；メドロネート二ナトリウムテクネチウムＴｃ９９ｍ；メルチアチドテクネチウムＴｃ９９ｍ；オキシドロネート（Ｏｘｉｄｒｏｎａｔｅ）テクネチウムＴｃ９９ｍ；ペンテタートテクネチウムＴｃ９９ｍ；ペンテタートカルシウム三ナトリウムテクネチウムＴｃ９９ｍ；セスタミビテクネチウムＴｃ９９ｍ；シボロキシムテクネチウムＴｃ９９ｍ；サクシマーテクネチウムＴｃ９９ｍ；硫黄コロイドテクネチウムＴｃ９９ｍ；トルポロキシムテクネチウムＴｃ９９ｍ；テトロホスミンテクネチウムＴｃ９９ｍ；チアチドテクネチウムＴｃ９９ｍ；チロキシンＩ１２５；チロキシンＩ１３１；トルポピドンＩ１３１；トリオレイン１２５；トリオレイン１３１。
【０１２５】
抗悪性腫瘍化学療法剤また薬剤の語は血管新生の阻害のための核酸分子およびチューブリンの凝集の誘導因子を含む。
【０１２６】
抗悪性腫瘍化学療法剤の活性な誘導体、およびプロドラッグもまた本発明の一部である。
【０１２７】
抗悪性腫瘍剤の一般的であるが耐容される副作用は吐き気および嘔吐であるため、吐き気および／または嘔吐を誘導する抗悪性腫瘍剤と共に制吐剤を投与することによってこれらの作用を緩和できることは当業者に明らかである。たとえば、オンダンセトロンを、約８ｍｇの用量で、吐き気／嘔吐を誘導する抗悪性腫瘍剤が投与される約３０分前に経口投与しうる。もちろん、ハサルドール、ベナドリル、およびアティバンといった他の制吐剤もまた必要に応じて使用しうる。
【０１２８】
本発明の抗悪性腫瘍化学療法剤は市販されている。たとえばテモゾロマイドの合成についてはたとえばスティーブンス（Ｓｔｅｖｅｎｓ）ら（１９８４）またはワング（Ｗａｎｇ）ら（１９９４）を参照。
【０１２９】
放射線は、約１Ｇｙから約１００Ｇｙ、より好ましい約２０ないし約８０Ｇｙおよび非常に好ましい、たとえば星細胞腫、神経膠芽腫および神経膠腫のために約４０ないし約６０Ｇｙの用量で用いられる。
【０１３０】
好ましい実施形態では用量は分割され、つまり、約０．１ないし約１０Ｇｙまたは約１Ｇｙないし約５Ｇｙまたは約１Ｇｙないし約２Ｇｙが、約１から約２０週、約２から約１０週または４から約８週の間に数回反復する１セッションに用いられる。拮抗剤および／または本発明の細胞増殖を阻害および／または細胞死を誘導する物質は、放射線の前、後、または同時に投与しうる。腫瘍サイズの減少に応じて、放射線治療法の一サイクルおよび放射線の数サイクルが可能である。
【０１３１】
放射線は通常は６０Ｃｏを用いて実施される。中性子、陽子、負パイ中間子を用いた放射線、または中性子捕捉もまた同様に適用可能である。
【０１３２】
用量はさらに腫瘍の大きさ、患者の体格および適用される照射の種類にも依存することが当業者には明らかである。特定の実施形態では、用量は、該用量が適用される画分の数にも依存し、上記の約２倍ないし約１００倍と高くなるか、または低くなる。
【０１３３】
一実施形態では、少なくとも一つの免疫刺激剤および少なくとも一つの抗腫瘍剤の組み合わせは、充実性腫瘍；白血病、急性または慢性の骨髄性またはリンパ芽球性白血病といった血液感染性腫瘍；腫瘍転移；良性腫瘍、たとえば血管腫、聴神経腫、神経繊維腫、トラコーマ、および化膿性肉芽腫；前がん腫瘍；星細胞腫、芽細胞腫、脊索腫、頭蓋咽頭腫、上衣細胞腫、ユーイング腫瘍、胚細胞腫、神経膠腫、膠芽細胞腫、血管芽細胞腫、ヘマンジオペリカチオマ(ｈｅｍａｎｇｉｏｐｅｒｙｃａｔｉｏｍａ)、ホジキンズリンパ腫、髄芽細胞腫、白血病、中皮腫、神経芽腫、非ホジキンズリンパ腫、松果体腫、網膜細胞芽腫、肉腫（脈管腫、軟骨肉腫、内皮肉腫、線維肉腫、平滑筋肉腫、脂肪肉腫、リンファメジオ・オテリオサルコマ(ｌｙｍｐｈａｎｇｉｏｏｔｈｅｌｉｏｓａｒｃｏｍａ)、リンパ管肉腫、髄芽細胞腫、黒色腫、髄腹腫、筋肉腫、神経鞘腫、乏突起膠腫、骨原性肉腫、骨肉腫を含む）、セミノーマ、上衣下腫、ウィルムス腫瘍を含むが、これらに限定されないか、または、胆汁腺管がん、膀胱がん、脳腫瘍、乳がん、気管支がん、腎がん、頚がん、絨毛がん、嚢胞腺がん、胎生期がん、上皮がん、食道がん、頚がん、結腸がん、大腸がん、子宮内膜がん、胆嚢がん、胃がん、頭部および頸部がん、肝がん、肺がん、髄様がん、非小細胞気管支／肺がん、卵巣がん、すい臓がん、乳頭状がん、乳頭腺がん、前立腺がん、小腸がん、直腸がん、腎細胞がん、皮膚がん、小細胞気管支／肺がん、扁平上皮がん、脂腺がん、精巣がん、子宮がんの群から選択される腫瘍の治療に有効である。
【０１３４】
別の一実施形態では、少なくとも一つの作用剤および少なくとも一つの抗悪性腫瘍剤の組成物は、疾患の治療のための他の手順と併用して用いることができる。たとえば、腫瘍は従来は手術および／または放射線を用いて治療でき、およびその後、本発明に記載の免疫刺激剤および抗悪性腫瘍化学療法剤の組成物を続いて患者に投与して、微小転移の休止を延長しおよび残存する望ましくない腫瘍を安定化しそれぞれ減少させる。
【０１３５】
好ましい一実施形態では、少なくとも一つの抗悪性腫瘍剤および少なくとも一つの拮抗剤の併用は、転移性病変（その時点で臨床的に識別可能であってもなくてもよい）を有する可能性が高い部位に投与される。具体的に転移性病変が存在する可能性が高いその部位（または組織）に埋め込まれた徐放処方はこれらの後者の場合に適する。
【０１３６】
免疫細胞および／または免疫系の少なくとも一つの刺激剤および細胞増殖を阻害および／または細胞死を誘導する少なくとも一つの物質の併用の実施形態は、有効量で送られる。一般的に、拮抗剤および／または抗悪性腫瘍剤の「有効量」の語は、目的の生物学的作用を実現するのに必要または十分である量をいう。具体的に、有効量とは腫瘍の速度を低下させまたは形成を完全に阻害する量をいう。たとえば、対象が腫瘍を有する場合、有効量はその望まれない腫瘍を減少または消失させる量である。加えて、有効量は、新しい望まれない腫瘍の増大を防ぐかまたは減少を生じさせる量でありうる。
【０１３７】
有効量は併用が単回または反復用量として用いられるかどうかに応じて変化する。本文書で示される用量は成人についてである。これらの用量は、ヒトが小児、追加の疾患または他の環境によってストレスを受けた人である場合には変更しなければならないことが当業者に明らかである。
【０１３８】
有効用量は、デリバリーの方法および手段にも依存し、これは局所的または全身的でありうる。たとえば、皮膚がんまたは眼がんの治療のような一部の用途では、組み合わせは好ましくは局所または眼キャリヤー中で送られる。
【０１３９】
一実施形態では、本明細書に記載の化合物の対象用量は、典型的には投与当たり約０．１μｇないし約１０ｍｇの範囲であり、毎時間、毎日、毎週、または毎月、およびその中間の任意の他の時間で与えることができるのに応じる。さらに別の一実施形態では、用量は投与当たり約１０μｇないし約５ｍｇまたは約１００μｇないし約１ｍｇの範囲であって、１〜１０回投与が数時間、日、または週間隔である。一部の実施形態では、しかし、用量は上記の典型的な用量よりも２ないし１００倍も高くまたは低い範囲で使用しうる。
【０１４０】
本発明の一実施形態では、本発明による医薬組成物の免疫刺激剤は、拮抗剤であり、より好ましいＴＧＦ−ベータの拮抗剤であり、および最も好ましい約１μｇ／ｋｇ／日ないし約１００ｍｇ／ｋｇ／日または約１０μｇ／ｋｇ／日ないし約１０ｍｇ／ｋｇ／日または約１００μｇ／ｋｇ／日ないし約１ｍｇ／ｋｇ／日の範囲の用量で投与されるＴＧＦ−ベータアンチセンスオリゴヌクレオチドである。
【０１４１】
本明細書に記載の医薬組成物の好ましい実施形態では、少なくとも一つの免疫刺激剤、より好ましいＴＧＦ−ベータ拮抗剤、非常に好ましいＴＧＦ−ベータアンチセンスオリゴヌクレオチドはカテーテルを用いて望まれない腫瘍へ直接に投与される。これらのアンチセンスオリゴヌクレオチドの濃度は、約０．１μＭ／Ｌないし約１Ｍ／Ｌ、より好ましい約１μＭ／Ｌないし約５００μＭ／Ｌ、およびさらにより好ましい約１０ないし約２００μＭ／Ｌまたは約５０μＭ／Ｌないし約１５０μＭ／Ｌを含む滅菌水溶液である。さらに別の好ましい一実施形態では、この溶液は約０．１μＬ／分から約５０μＬ／分、または約２μＬ／分から約１２μＬ／分、または約３μＬ／分から約１０μＬ／分の流速で腫瘍へ投与される。
【０１４２】
さらに別の実施形態では、一つ以上の抗腫瘍化学療法剤は、一つ以上の免疫刺激剤および／または放射線と併用される、約１ｍｇ／ｍ２ないし約１０００ｍｇ／ｍ２の範囲の用量で、より好ましい約５０ｍｇ／ｍ２ないし約５００ｍｇ／ｍ２の用量で、および最も好ましい約１５０ｍｇ／ｍ２ないし２００ｍｇ／ｍ２の単回投与で、６週間ごとに静脈投与されるニトロソ尿素、より好ましいＢＣＮＵ、ＣＣＮＵおよび／またはＡＣＮＵの群から選択される。単回投与でもよく、または、連続する２日間において約７５ｍｇ／ｍ２ないし約１００ｍｇ／ｍ２といった一日注射量に分割してもよい。
【０１４３】
さらに別の実施形態では、腫瘍の治療において、抗腫瘍化学療法剤はゲムシタビンであり、および一つ以上の免疫刺激剤および／または放射線と併用して、約１０ｍｇ／ｍ２ないし約１０ｇ／ｍ２、より好ましい約１００ｍｇないし約５ｇ／ｍ２、および最も好ましい約５００ｍｇ／ｍ２ないし約２０００ｍｇ／ｍ２の用量で、投与される。
【０１４４】
別の実施形態では、ゲムシタビンの用量は、約１０分ないし約１２０分、より好ましい約１５分ないし約６０分、および最も好ましい約２０分ないし約４０分以内に投与される。さらに別の実施形態では、この単回投与は、約４ないし約１０日、それぞれ約５ないし約８日以内に、および最も好ましい約７日以内に反復して投与される。約１ないし約８、より好ましい約２ないし約６、最も好ましい約３ないし約４回の単回投与が投与される。この後、約２ないし約６０日、より好ましい約５ないし約３０日、および最も好ましい約１０ないし約２０日の治療間欠期が適用される。これらサイクルは数回反復できる。
【０１４５】
さらに別の実施形態では、一つ以上の抗腫瘍化学療法剤はテモゾロマイドであり、および、約５００ないし約１２００ｍｇ／ｍ２の全用量で、約２ないし約２８連続日の期間、より好ましい約４ないし約７連続日の期間、および最も好ましくは約５連続日の期間、投与される。このように、約５日の期間に投与されるべき全用量が約１０００ｍｇ／ｍ２である場合、この期間の日用量は約２００ｍｇ／ｍ２／日である。テモゾロマイドは、１日あたり１回以上投与しなければならない。好ましくは、投与計画は１日２回、１日３回、または１日４回であろう。テモゾロマイド投与の初日から数えて、約２８ないし約４２日、または約２８ないし約３５日、またはより好ましくは、２８日の期間の後、別の投与サイクルを開始してもよい。
【０１４６】
さらに別の実施形態では、テモゾロマイドは用量を低減してはるかに長い期間投与してもよい。たとえば、テモゾロマイドは、約５０ｍｇ／ｍ２／日ないし約１５０ｍｇ／ｍ２、好ましくは、約７５ｍｇ／ｍ２／日の日用量で、一日２回以上、６週間まで投与しうる。より好ましいこの日用量は、１日に２回以上投与されるべく、２回以上に均等に分けられる。
【０１４７】
さらに別の実施形態では、ビンブラスチンは、約０．１ｍｇ／ｍ２ないし約５０ｍｇ／ｍ２、より好ましい約１ｍｇ／ｍ２ないし約１０ｍｇ／ｍ２、および、さらにより好ましい約４ｍｇ／ｍ２ないし約８ｍｇ／ｍ２の用量で投与される。
【０１４８】
別の実施形態では、ビンクリスチンは、約０．１ｍｇ／ｍ２ないし１０ｍｇ／ｍ２の用量で、より好ましい約０．５ｍｇ／ｍ２ないし約５ｍｇ／ｍ２の用量で、および、より好ましい約０．８ｍｇ／ｍ２ないし約２ｍｇ／ｍ２の用量で週に一度投与され、一方神経毒が用量規制因子である。最も一般的には、硫酸ビンクリスチンの溶液約０．１ｍｇ／ｍＬないし約１０ｍｇ／ｍＬが、約０．１ｍｇ／ｍ２ないし約５０ｍｇ／ｍ２、より好ましい約０．５ｍｇ／ｍ２ないし約１０ｍｇ／ｍ２、およびさらにより好ましい約１ｍｇ／ｍ２ないし約５．０ｍｇ／ｍ２の単回投与で投与される。
【０１４９】
一実施形態では、神経膠腫、神経膠芽腫および／または未分化星細胞腫の治療のための医薬組成物は、少なくとも一つの免疫刺激剤、より好ましいＴＧＦ−ベータの拮抗剤、さらにより好ましいＴＧＦ−ベータのアンチセンスオリゴヌクレオチド、および非常に好ましい、配列番号１〜１２７として配列表中で特定されるアンチセンスオリゴヌクレオチド、およびさらにより好ましい配列番号２２〜４８の配列、および、好ましくはテモゾロマイド、ＡＣＮＵ、ＢＣＮＵ、ＣＣＮＵ、ビンブラスチン、ビンクリスチン、ビンデシンおよびそれらの活性な誘導体、５−フルオロウラシル、５−フルオロデオキシウリジン、シタラビン、ゲムシタビン、リポソームＰＥＧ化ドキソルビシン、プロカルバジンおよびビンクリスチンの群から選択される細胞増殖を阻害および／または細胞死を誘導する少なくとも一つの物質の組み合わせを含む。
【０１５０】
別の実施形態では、抗腫瘍化学療法剤、プロカルバジン、ＣＣＮＵおよびビンクリスチンは、ともに免疫刺激剤、より好ましい拮抗剤、さらにより好ましいＴＧＦ−ベータのアンチセンスオリゴヌクレオチド、および最も好ましい配列表において配列番号１〜１２７として配列表中で特定されるアンチセンスオリゴヌクレオチドと併用され、およびさらに配列番号２２〜４８で特定される配列は、医薬組成物の成分である。本実施形態での用量は、経口による約４０ｍｇ／ｍ２ないし約８０ｍｇ／ｍ２のプロカルバジン（約８ないし約２１日目）、経口による約８０ないし約１２０ｍｇ／ｍ２のＣＣＮＵ（約１日目）、経口による約１．２ｍｇ／ｍ２ないし約１．８ｍｇ／ｍ２のビンクリスチン（約１日目）であり、最大用量は約８日、および約２９日目の静注約２ｍｇ／ｍ２である。免疫刺激剤は、これら３つの物質の前、とともに、または後に与えられる。
【０１５１】
別の実施形態では、サイクルは約６ないし約８週間後に１回または数回繰り返される。
【０１５２】
さらに好ましい実施形態では、一つ以上の免疫刺激剤、より好ましい拮抗剤、さらにより好ましいＴＧＦ−ベータのアンチセンスオリゴヌクレオチド、および最も好ましい配列番号１〜１２７として配列表中で特定されるアンチセンスオリゴヌクレオチド、および、さらにより好ましい配列番号２２〜４８で特定される配列およびテロゾロミド（ｔｅｌｏｚｏｌｏｍｉｄｅ）は医薬組成物の一部である。この場合、望ましくない腫瘍、より好ましい神経膠腫、膠芽細胞腫および／または未分化星細胞腫の治療のためのテモゾロマイドの用量は、サイクルの１ないし５日目の経口による約１２０ないし約１８０ｍｇ／ｍ２である。より好ましい実施形態では、免疫刺激剤は、約１μｇ／ｋｇ／日ないし約５０ｍｇ／ｋｇ／日投与される。サイクルは約３ないし５週間後に繰り返される。
【０１５３】
神経膠腫、膠芽細胞腫および／または未分化星状細胞腫といった腫瘍の治療のために上述の実施形態のうちより好ましい実施形態では、免疫刺激剤は、ＴＧＦ−ベータの拮抗剤、さらにより好ましい配列番号１〜１２７として配列表中で特定されるアンチセンスオリゴヌクレオチド、およびさらにより好ましい配列番号２２〜４８で特定されるオリゴヌクレオチドである。
【０１５４】
神経膠腫の治療のためのさらに好ましい実施形態では、上述の標準日程にしたがって放射線がさらに投与される。一実施形態では、放射線は、上述の組み合わせ投与とともに適用される。他の実施形態では、放射線は本発明による医薬組成物の投与の前または後に適用される。
【０１５５】
腫瘍の治療のための医薬組成物の一実施形態では、より好ましい膵臓腫瘍である一つ以上の細胞増殖を阻害および／または細胞死を誘導する物質は、シスプラチン、カルボプラチン、シクロフォスファミド、ドセタキセル、ＰＥＧ−リポソームドキソルビシン、エトポシド、フォリン酸、５−フルオロウラシル、ミトキサントロン、パクリタキセル、トポテカンおよび／またはトレオサルファンの群から選択される。
【０１５６】
腫瘍の治療のためのより好ましい実施形態では、抗腫瘍化学療法剤であるパクリタキセルまたはカルボプラチンは、本発明による一つ以上の医薬組成物の一部である。約１００ｍｇ／ｍ２ないし約２００ｍｇ／ｍ２、より好ましい約１７５ｍｇ／ｍ２のパクリタキセルまたはカルボプラチンが、静注でサイクルの第１日に投与される。サイクルは、約２０ないし約３０日後に繰り返される。
【０１５７】
膵臓腫瘍といった腫瘍の治療のためのさらに別の実施形態では、本発明による医薬組成物の一つ以上の抗腫瘍化学療法剤は、ゲムシタビンである。ゲムシタビンは、約８００ｍｇ／ｍ２ないし約１２００ｍｇ／ｍ２、より好ましい約１０００ｍｇ／ｍ２の用量で、静注により、約１０分ないし約６０分以内に、より好ましい約１２分ないし約２０分以内に投与される。この適用は約５ないし約１０日間繰り返される。
【０１５８】
さらに別の実施形態では、カルボプラチンと併用されるパクリタキセル、カルボプラチンと併用されるドセタキセル、シクロフォスファミドと併用されるカルボプラチン、トレオサルファンと併用されるシスプラチン、エトポシド、ミトキサントロンと併用されるフォリン酸、および５−フルオロウラシル、トポテクト（ｔｏｐｏｔｅｃｔ）、またはＰＥＧ−リポソームドキソルビシンが、一つ以上の膵臓腫瘍の治療のための本発明による医薬組成物の抗腫瘍化学療法剤である。
【０１５９】
膵臓腫瘍の治療のための上述の実施形態のうちより好ましい実施形態では、拮抗剤は、ＴＧＦ−ベータの拮抗剤、さらにより好ましい配列番号１〜１２７として配列表中で特定されるアンチセンスオリゴヌクレオチド、およびさらにより好ましい配列番号２２〜４８の配列である。
【０１６０】
別の実施形態では、医薬組成物の投与に関して、放射線療法が上述の標準日程にしたがって適用される。
【０１６１】
非小細胞肺がん（ＮＳＣＬＣ）
非小細胞肺がん（ＮＳＣＬＣ）の治療のための医薬組成物の一実施形態では、一つ以上の抗腫瘍化学療法剤は、シスプラチン、エトポシド、カルボプラチン、マイトマイシン、パクリタキセル、ゲムシタビン、およびビノレビリンの群から選択される。
【０１６２】
ＮＳＣＬＣの治療のためのさらに別の実施形態では、放射線が上述の日程にしたがってさらに適用される。
【０１６３】
さらに好ましい実施形態では、エトポシドと併用されるシスプラチンは、ＮＳＣＬＣといった腫瘍の治療のために投与される一つ以上の抗腫瘍化学療法剤である。より好ましい実施形態では、シスプラチンは、第１日目に、約４０ｍｇ／ｍ2ないし約８０ｍｇ／ｍ2の用量で投与され、より好ましい約６０ｍｇ／ｍ2が注入され、および、エトポシドは約８０ｍｇ／ｍ2ないし約１５０ｍｇ／ｍ2の用量で、サイクルの第１ないし第３日に、約３０分ないし約２００分以内に注入される。さらに好ましい実施形態では、さらに肺の放射線は、約１Ｇｙないし約２Ｇｙで、１日に約１ないし約２回、１サイクル内の全用量を約３０Ｇｙないし約６０Ｇｙとして行われる。放射線療法は、本発明による医薬組成物の投与の前に、と平行して、または後となる。別の好ましい実施形態では、この療法の１サイクルは、約１５ないし約３０日、より好ましい約２２日を含む。約１ないし約１０サイクルが適用される。
【０１６４】
ＮＳＣＬＣの治療のためのさらに別の実施形態では、細胞増殖を阻害する一つ以上の物質、シスプラチンが（約２０ｍｇ／ｍ2ないし約４０ｍｇ／ｍ2の用量で）１サイクルの約１、８、２９、３６日目に、約１時間注入され、またはシスプラチンは（約４ｍｇ／ｍ2ないし約８ｍｇ／ｍ2の用量で）サイクルにおいて毎日、注入される。さらに好ましい実施形態では、放射線が、約２Ｇｙの用量および約０．５Ｇｙを毎日同時追加し、一日あたり約０．３ないし約０．８Ｇｙを同時追加し、および１サイクル内の最大全用量が約４０Ｇｙないし約８０Ｇｙ、より好ましい約５０Ｇｙないし約７０Ｇｙで、適用される。サイクルは、約２５ないし約５０日、より好ましい約３０ないし約４０日、最も好ましい約３２ないし約３８日の長さを有する。
【０１６５】
ＮＳＣＬＣの治療のための上述の実施形態のうちより好ましい実施形態では、疫刺激剤は、ＴＧＦ−ベータの拮抗剤であり、さらにより好ましい配列番号１〜１２７として配列表中で特定されるアンチセンスオリゴヌクレオチドであり、および、さらにより好ましい配列番号１〜２１の配列が上述の日程のとおりに投与される。
【０１６６】
腫瘍、より好ましい結腸、直腸、胃、小腸、肝臓および／または食道の腫瘍といった消化管腫瘍の治療のための本発明の別の実施形態では、一つ以上の抗腫瘍化学療法剤は、カペシタビン、シスプラチン、エピルビシン、５−フルオロウラシル、メトトレキサート、フォリン酸、イリノテカン、マイトマイシンＣ、オキサリプラチンおよびビノレビリンの群から選択される。
【０１６７】
食道腫瘍といった腫瘍の治療のためのさらに別の実施形態では、５−フルオロウラシルおよびシスプラチンが、本発明の医薬組成物の細胞増殖を阻害および／または細胞死を誘導する２つの物質である。５−フルオロウラシルが約８００ｍｇ／ｍ２ないし約１２００ｍｇ／ｍ２の用量で連続して、より好ましい１サイクルの第１日目ないし第５日目に注入される。さらに、約６０ｍｇ／ｍ２ないし約９０ｍｇ／ｍ２の用量のシスプラチンが、静注で、好ましくはサイクルの約第１日目に投与される。
【０１６８】
消化管腫瘍の治療のための上述の実施形態のうちさらにより好ましい実施形態では、拮抗剤は、ＴＧＦ−ベータの拮抗剤、さらにより好ましい配列番号１〜１２７として配列表中で特定されるアンチセンスオリゴヌクレオチド、およびより好ましい配列番号１〜２１の配列である。
【０１６９】
消化管腫瘍といった腫瘍の治療のためのさらに好ましい実施形態では、放射線がさらに、１サイクル内で約４０Ｇｙないし約６０Ｇｙの全用量で、適用される。さらにより好ましくは、用量は約５回、１週あたり約１Ｇｙないし約２Ｇｙへと分割される。サイクルは、約２０ないし約４０日後、約２５ないし約３５日後、または約３０日後、繰り返される。
【０１７０】
さらに好ましい実施形態では、黒色腫といった腫瘍の治療のための本発明の医薬組成物では、細胞増殖を阻害および／または細胞死を誘導する一つ以上の物質は、ＡＣＮＵ、ＢＣＮＵ、ＣＣＮＵ、シスプラチン、ダカルバジン、ＤＴＩＣ、ホテムスチン、インターフェロンアルファ、インターロイキン−２、インターフェロンアルファ−２−ａ、テモゾロマイド、ビンブラスチンの群から選択される。
【０１７１】
黒色腫の治療のための上述のさらにより好ましい実施形態では、免疫刺激剤は、ＴＧＦ−ベータの拮抗剤、さらにより好ましい配列番号１〜１２７として配列表中で特定されるＴＧＦ−ベータアンチセンスオリゴヌクレオチド、および、さらにより好ましい１〜７８の配列番号の配列である。
【０１７２】
さらに好ましい実施形態は、前立腺がんといった腫瘍の治療のための本発明による医薬組成物である。好ましい 実施形態では、細胞増殖を阻害および／または細胞死を誘導する一つ以上の物質は、ドセタキセル、エストラムスチンリン酸およびミトキサントロンの群から選択される。
【０１７３】
前立腺がんといった腫瘍の治療のための上述の実施形態のうち、さらにより好ましい実施形態では、拮抗剤は、ＴＧＦ−ベータの拮抗剤、さらにより好ましい配列番号１〜１２７として配列表中で特定されるアンチセンスオリゴヌクレオチド、および、さらにより好ましい配列番号１〜２１の配列である。
【０１７４】
さらに別の実施形態では、細胞増殖を抑制し、および／または特定の適応において細胞を誘導する一つ以上の物質を投与するための日程は、最新技術の文献、たとえば、参照により本開示に含まれるプライス（Ｐｒｅｉｓｓ）２００２から取り出しうる。
【０１７５】
本発明の拮抗剤の医薬組成物は、単独で、または細胞増殖を阻害および／または細胞死を誘導する一つ以上の物質と混合されて送られる。混合物は、免疫抑制剤のほかに抗腫瘍剤、より好ましい免疫系の機能に負の影響を与える拮抗剤、より好ましいＴＧＦ−ベータ拮抗剤、さらにより好ましいＴＧＦベータアンチセンスオリゴヌクレオチドから構成されうる。本明細書中のこれら二つ以上の物質は化合物とも呼ばれる。
【０１７６】
一実施形態では、二つ以上の化合物は混合され、および、純粋なまたは医薬品として許容されるキャリヤー内にある。さらに別の実施形態では、医薬組成物の二つ以上の化合物は、分離されおよび純粋であるか、または分離されおよび医薬品として許容されるキャリヤー内にある。一実施形態では、二つ以上の成分は同一の医薬品として許容されるキャリヤーにあり、さらに別の実施形態では、二つ以上の化合物は異なる医薬品として許容されるキャリヤーにある。
【０１７７】
本発明の医薬組成物を「投与」することは、当業者に公知である任意の手段によって達成されうる。投与経路は、経口、鼻内、気管内、眼、肺、膣、直腸、非経口（たとえば筋肉内、皮内、静脈内、腫瘍内または皮下または直接注射）、局所、経皮を含むがそれらに限定されない。
【０１７８】
望まれない腫瘍の治療のための医薬組成物の一実施形態では、細胞増殖を阻害および／または細胞死を誘導する少なくとも一つの物質および少なくとも一つの免疫刺激剤の組み合わせは、生分解性ポリマーインプラントまたは埋め込みカテーテルによって送られる。
【０１７９】
「医薬組成物」の語は、この組成物の液体または物質が純粋であるおよび／または医薬品として許容されるキャリヤーと組み合わされていることを含意する。
【０１８０】
「医薬品として許容されるキャリヤー」は、ヒトまたは他の動物への投与に適した一つ以上の適合する固体または液体増量剤、希釈剤または封入物質を意味する。「キャリヤー」の語は、有効成分が投与を円滑にするために組み合わされている、天然または合成の、有機または無機成分を示す。医薬組成物の成分はまた、本発明の化合物と、および互いに、目的の医薬効力を実質的に損なう相互作用が無いような方法で、混合されうる。
【０１８１】
そのようなキャリヤーは、治療すべき対象による経口摂取のために本発明の化合物が錠剤、コーティング錠、発泡錠、顆粒剤、トローチ剤、粉剤、丸剤、糖衣錠、（マイクロ）カプセル剤、液剤、ジェル、シロップ剤、スラリー、懸濁剤、乳剤などとして処方されるのを可能にする。
【０１８２】
医薬組成物はまた、顆粒剤、粉剤、錠剤、コーティング錠、（マイクロ）カプセル剤、坐剤、シロップ剤、乳剤、懸濁剤、クリーム、ドロップ、顕微鏡的金粒子上に被覆、または活性化合物の持続的放出もまた含むことができ、それらの調製物中では、賦形剤および添加剤および／または助剤、たとえば崩壊剤、結合剤、コーティング剤、膨張剤、滑沢剤、香料、甘味料、または可溶化剤が上記のように通例用いられる。
【０１８３】
ドラッグデリバリーのための現在の方法の短い総説については、参照により本開示に含まれるランガー（Ｌａｎｇｅｒ）（１９９０）を参照。
【０１８４】
経口投与のためには、化合物（すなわち、少なくとも一つの免疫刺激剤および細胞増殖を阻害および／または細胞死を誘導する少なくとも一つの物質）は、医薬キャリヤー無しで単独で送られ、または化合物を医薬品として許容されるキャリヤーと組み合わせることによって容易に処方される。
【０１８５】
一実施形態では、経口使用のための医薬調製物は固体の賦形剤として得られ、結果として生じる混合物を随意的にすりつぶし、および顆粒の混合物を処理し、必要に応じて適当な助剤を加えた後、錠剤または糖衣錠の核を得る。適当な賦形剤は、特に、乳糖、ショ糖、マンニトール、またはソルビトールを含む糖；セルロース調製物、たとえば、トウモロコシデンプン、コムギデンプン、コメデンプン、バレイショデンプン、ゼラチン、トラガントガム、メチルセルロース、ヒドロキシプロピルメチルセルロース、カルボキシメチルセルロースナトリウム、および／またはポリビニルピロリドン（ＰＶＰ）のような増量剤である。
【０１８６】
さらに別の一実施形態では、架橋ポリビニルピロリドン、アガー、またはアルギン酸またはアルギン酸ナトリウムのようなその塩といった崩壊剤が加えられる。随意的に、経口処方はまた、生理食塩水、または内部酸性条件を中和するための緩衝液中に処方されうる。
【０１８７】
さらに別の一実施形態では、糖衣錠核が適当なコーティングと共に提供される。この目的のために、濃縮糖溶液を用いることができ、これは随意的に、アラビアガム、タルク、ポリビニルピロリドン、カーボポールゲル、ポリエチレングリコール、および／または二酸化チタン、ラッカー溶液、および適当な有機溶媒または溶媒混合物を含みうる。
【０１８８】
さらに別の一実施形態では、同定のためまたは有効化合物用量の異なる組み合わせを特徴づけるため、染料または色素が錠剤または糖衣錠コーティングに添加される。
【０１８９】
別の一実施形態では、経口的に用いることができる医薬調製物「ベジキャップ」は、ゼラチン製の硬カプセル、および、ゼラチンおよびグリセロールまたはソルビトールといった可塑剤でできた柔らかい密封カプセルを含む。一実施形態では、硬カプセルは、乳糖といった増量剤、デンプンといった結合剤、および／またはタルクまたはステアリン酸マグネシウムといった滑沢剤、および、随意的に、安定剤との混合物に含まれる有効成分を含む。軟カプセルの別の一実施形態では、有効化合物は、脂肪油、液体パラフィン、または液体ポリエチレングリコールっといった適当な液体中に溶解または懸濁されている。加えて、安定剤を添加できる。
【０１９０】
さらに別の一実施形態では、経口投与のために処方されるミクロスフィアが用いられ、当業者によく知られている。
【０１９１】
経口投与のための処方は、そのような投与に適した用量である。
【０１９２】
口内投与のためのさらに別の一実施形態では、組成物は従来の方法で処方された錠剤またはトローチ剤の形を取りうる。
【０１９３】
吸入による投与のためのさらに別の一実施形態では、本発明に記載の使用のための化合物は、エアロゾルスプレーの形で、加圧容器またはネブライザーから、適当な推進剤、たとえば、ジクロロジフルオロメタン、トリクロロフルオロメタン、ジクロロテトラフルオロエタン、二酸化炭素または他の適当な気体を用いて、便利に送ることができる。加圧エアロゾルの場合、用量単位は計量した量を送るためのバルブを提供することによって測定しうる。吸入器または通気器での使用のためのたとえばゼラチンのカプセルおよびカートリッジは、化合物および乳糖またはデンプンといった適当な粉末基剤の混合物を入れて処方しうる。
【０１９４】
適当な医薬キャリヤーは、たとえば、吸入用の水溶液または生理食塩溶液、マイクロカプセル化、結合、リポソームに封入、噴霧された、エアロゾルである。
【０１９５】
さらに別の一実施形態では、非経口、くも膜下、脳室内または腫瘍内投与のための化合物の医薬品として許容されるキャリヤーは、緩衝剤、希釈剤、および透過促進剤、キャリヤー化合物および他の医薬品として許容されるキャリヤーまたは賦形剤といった、しかしそれらに限られない他の適当な添加剤もまた含みうる滅菌水溶液を含む。
【０１９６】
化合物の全身デリバリーのためのさらに別の一実施形態では、化合物は、注射（たとえば、ボーラス注射または連続輸液による）による非経口投与のための医薬キャリヤーに含まれる。注射用処方は、単位用量剤形で、たとえば、アンプルでまたは複数回投与容器で、添加された保存料と共に与えることができる。医薬組成物は、懸濁剤、液剤、または油性または水性媒体中の乳剤といった形を取り、および懸濁剤、安定剤および／または分散剤といった処方用物質を含む。
【０１９７】
一実施形態では、非経口投与用の医薬キャリヤーは、水溶型の活性化合物の水溶液を含む。
【０１９８】
さらに別の一実施形態では、化合物の懸濁液が適当な油性注射懸濁剤として調製される。適当な親油性溶媒または媒体は、ゴマ油といった脂肪油、またはオレイン酸エチルまたはトリグリセリドといった合成脂肪酸エステル、またはリポソームを含む。水性注射懸濁剤は、カルボキシメチルセルロースナトリウム、ソルビトール、またはデキストランといった、懸濁液の粘度を高める物質を含む。随意的に、懸濁剤はまた、適当な安定剤、または高度に濃縮された溶液の調製を可能にするための化合物の溶解度を高める物質も含みうる。
【０１９９】
さらに別の一実施形態では、活性化合物は、たとえば、パイロジェンフリー滅菌水といった適当な媒体を用いた使用前の再構成のための粉末形であることができ、または鋭利な物体上で乾燥させて皮膚に掻き入れることができる。
【０２００】
さらに別の一実施形態では、化合物は、カカオバターまたは他のグリセリドといった従来の坐剤基剤を含む、たとえば坐剤または保留浣腸または錠剤といった直腸または膣組成物に処方される。
【０２０１】
さらに別の一実施形態では、化合物はデポ調製物として処方される。一実施形態では、そのような長期に作用する処方は、適当なポリマー材料または疎水性材料（たとえば許容される油中の乳液として）またはイオン交換樹脂と共に、またはやや溶けにくい誘導体として、たとえばやや溶けにくい塩として、処方される。
【０２０２】
別の実施形態では、デリバリーシステムは、徐放、遅延放出、または持続放出デリバリーシステムを含む。そのような系は、化合物の反復投与を回避でき、対象および医師にとっての利便性を高める。多数の種類の放出デリバリーシステムが利用可能でありおよび当業者に公知である。
【０２０３】
一実施形態では、デリバリーシステムはポリ（ラクチド−グリコリド）、オキサラート共重合体、ポリカプロラクトン、ポリエステルアミド、ポリオルトエステル、ポリヒドロキシ酪酸、およびポリ無水物といったポリマー基礎系を含む。前記ポリマーの薬物入りのマイクロカプセルは、たとえば、米国特許第５，０７５，１０９号明細書に記載されている。
【０２０４】
別の一実施形態では、デリバリーシステムは、たとえばコレステロールといったステロール，コレステロールエステルおよび脂肪酸またはモノ、ジ、およびトリグリセリドといった中性脂肪を含む脂質；ハイドロゲル放出系；シラスチック系；ペプチドを基礎とする系；ワックスコーティング；従来の結合剤および賦形剤を用いる圧縮錠；部分的に融合したインプラント；などである非ポリマー系を含む。
【０２０５】
具体例は、（ａ）本発明の薬剤が米国特許第４，４５２，７７５号、第４，６７５，１８９号および第５，７３６，１５２号明細書に記載のもののようなマトリクス内部の形で含まれる腐食系、および（ｂ）有効成分が米国特許第３，８５４，４８０号、第５，１３３，９７４号および第５，４０７，６８６号明細書に記載のもののようなポリマーから調節された速度で浸透する拡散系を含むがそれらに限定されない。加えて、ポンプを基礎とするハードウェアデリバリーシステムを用いることができ、その一部は埋め込みに適応される。
【０２０６】
さらに別の実施形態では、拮抗剤および抗悪性腫瘍剤は、緩やかに分解する修飾コラーゲン線維から成る市販製品であるゲルフォーム（ＧＥＬＦＯＡＭ）（登録商標）と共に処方される。
【０２０７】
一実施形態では、医薬組成物はまた適当な固相またはゲル相キャリヤーまたは賦形剤を含む。そのようなキャリヤーまたは賦形剤の例は、炭酸カルシウム、リン酸カルシウム、さまざまな糖、デンプン、セルロース誘導体、ゼラチン、およびポリエチレングリコールのようなポリマーを含むがそれらに限定されない。
【０２０８】
一実施形態では、免疫刺激剤および細胞増殖を阻害および／または細胞死を誘導する物質は、希釈せずにまたは医薬として許容可能な塩の形で投与される。塩は医薬として許容可能でなければならないが、しかし医薬として許容されない塩は、その医薬として許容可能な塩を調製するために便利に使用されうる。そのような塩は、下記の酸から調製されるものを含むがそれらに限定されない：塩酸、臭化水素酸、硫酸、硝酸、リン酸、マレイン酸、酢酸、サリチル酸、ｐ−トルエンスルホン酸、酒石酸、クエン酸、メタンスルホン酸、ギ酸、マロン酸、コハク酸、ナフタレン−２−スルホン酸、およびベンゼンスルホン酸。また、そのような塩は、カルボン酸基のナトリウム、カリウムまたはカルシウム塩といった、アルカリ金属塩またはアルカリ土類塩として調製しうる。
【０２０９】
一実施形態では、適当な緩衝剤は：酢酸および塩（１〜２％ｗ／ｖ）；クエン酸および塩（１〜３％ｗ／ｖ）；ホウ酸および塩（０．５〜２．５％ｗ／ｖ）；およびリン酸および塩（０．８〜２％ｗ／ｖ）を含むがそれらに限定されない。
【０２１０】
適当な保存料は、塩化ベンザルコニウム（０．００３〜０．０３％ｗ／ｖ）；クロロブタノール（０．３〜０．９％ｗ／ｖ）；パラベン（０．０１〜０．２５％ｗ／ｖ）およびチメロサール（０．００４〜０．０２％ｗ／ｖ）を含む。
【０２１１】
一実施形態では、本発明に記載の医薬組成物の少なくとも２つの化合物の局所投与のための医薬品として許容されるキャリヤーは、経皮パッチ、軟膏、ローション、クリーム、ジェル、ドロップ、坐剤、スプレー、液剤および粉剤を含む。従来の医薬キャリヤー、水性、粉末または油性基剤、増粘剤などが必要または望ましい可能性がある。さらに別の一実施形態では、コーティングしたコンドーム、手袋などが有用である。
【０２１２】
さらに別の一実施形態では、医薬組成物はまた、食事性配送を促進するために透過促進剤を含む。透過促進剤は五つの広いカテゴリ、すなわち、脂肪酸、胆汁酸塩、キレート剤、界面活性剤および非界面活性剤（リー（Ｌｅｅ）ら、１９９１，ムラニシ（Ｍｕｒａｎｉｓｈｉ）１９９０）のうちの一つに属すると分類しうる。これらの広いカテゴリのうち一つ以上からの一つ以上の透過促進剤を含めることができる。
【０２１３】
透過促進剤として作用する、さまざまな脂肪酸およびその誘導体は、たとえば、オレイン酸、ラウリン酸、カプリン酸、ミリスチン酸、パルミチン酸、ステアリン酸、リノール酸、リノレン酸、ジカプリン酸、トリカプリン酸、レシンリエート（ｒｅｃｉｎｌｅａｔｅ）、モノオレイン（別名１−モノオレオイル−ｒａｃ−グリセロール）、ジラウリン、カプリル酸、アラキドン酸、１−モノカプリン酸グリセリル、１−ドデシルアザシクロヘプタン−２−オン、アシルカルニチン、アシルコリン、モノおよびジグリセリドおよびそれらの生理的に許容可能な塩（すなわち、オレイン酸塩、ラウリン酸塩、カプリン酸塩、ミリスチン酸塩、パルミチン酸塩、ステアリン酸塩、リノール酸塩など）を含む（リー（Ｌｅｅ）ら、１９９１，ムラニシ（Ｍｕｒａｎｉｓｈｉ）１９９０，エル・ハリリ（Ｅｌ−Ｈａｒｉｒｉ）ら、１９９２）。一部の現在好ましい脂肪酸の例はカプリン酸ナトリウムラウリン酸ナトリウムであり、単独でまたは組み合わせて０．５から５％の濃度にて用いられる。
【０２１４】
胆汁の生理的役割は、脂質および脂溶性ビタミンの分散および吸収の促進を含む（ブルントン（Ｂｒｕｎｔｏｎ）１９９６）。さまざまな天然胆汁酸塩、およびその合成誘導体が透過促進剤として作用する。したがって、「胆汁酸塩」の語は、胆汁の天然に存在する成分のすべておよびそれらの任意の合成誘導体を含む。現在好ましい胆汁酸塩はケノデオキシコール酸（ＣＤＣＡ）（シグマ・ケミカル社（Ｓｉｇｍａ  Ｃｈｅｍｉｃａｌ  Ｃｏｍｐａｎｙ）、ミズーリ州セントルイス）であり、一般的に０．５から２％の濃度にて用いられる。
【０２１５】
一つ以上の透過促進剤を含む複合処方を用いることができる。たとえば、胆汁酸塩は脂肪酸と組み合わせて用いて複合処方を作ることができる。好ましい組み合わせは、カプリン酸ナトリウムまたはラウリン酸ナトリウム（一般的に０．５から５％）と組み合わせたＣＤＣＡを含む。
【０２１６】
一実施形態では、エチレンジアミン四酢酸二ナトリウム（ＥＤＴＡ）、クエン酸、サリチル酸塩（たとえば、サリチル酸ナトリウム、５−メトキシサリチル酸塩およびホモバニラート）、コラーゲンのＮ−アシル誘導体、ラウレス−９、およびベータ−ジケトンのＮ−アミノアシル誘導体（エナミン）（Ｌｅｅら、１９９１；Ｍｕｒａｎｉｓｈｉ  １９９０；Ｂｕｕｒら、１９９０）を含むがそれらに限定されないキレート剤が追加として用いられる。キレート剤は、ＤＮアーゼ阻害剤としても作用する追加の長所を有する。
【０２１７】
さらに別の一実施形態では、加えて界面活性剤が用いられる。界面活性剤は、たとえば、ラウリル硫酸ナトリウム、ポリオキシエチレン−９−ラウリルエーテルおよびポリオキシエチレン−２０−セチルエーテル（リー（Ｌｅｅ）ら、１９９１）；およびペルフルオロケミカルエマルション、たとえばＦＣ−４３（タカハシ（Ｔａｋａｈａｓｈｉ）ら、１９８８）を含む。
【０２１８】
非界面活性剤は、たとえば、不飽和環状尿素、１−アルキル−および１−アルケニルアザシクロ−アルカノン誘導体（リー（Ｌｅｅ）ら、１９９１）；および非ステロイド抗炎症剤、たとえばジクロフェナクナトリウム、インドメタシンおよびフェニルブタゾン（ヤマシタ（Ｙａｍａｓｈｉｔａ）ら、１９８７）を含む。
【０２１９】
一実施形態では、本発明の医薬組成物は加えて、本分野で確立された使用レベルで、医薬組成物に従来見られる他の添加成分を含む。したがって、たとえば組成物は、たとえば鎮痒薬、収斂薬、局所麻酔薬または抗炎症剤といった医薬として活性である適合する追加の材料を含むことができ、または、色素、香料、保存料、抗酸化剤、乳白剤、増粘剤および安定剤といった、本発明の組成物のさまざまな剤形を物理的に処方するのに有用である追加の成分を含みうるが、しかし、そのような材料は、添加される場合、本発明の組成物の成分の生物活性に過度に干渉すべきでない。
【実施例】
【０２２０】
本明細書に示される臨床試験は主として安全性試験として設計され、および部門倫理委員会によって承認され、および現行のヒトを対象とする医学的研究のヘルシンキ宣言およびＧＣＰに準拠して実施され、および募集前に書面のインフォームドコンセントに署名しなければならなかった。
【０２２１】
特記されない場合は、抗悪性腫瘍剤を用いた治療は通常のスケジュールに従った。ＴＧＦ−ベータ拮抗剤である配列番号３０のＴＧＦ−ベータのアンチセンスオリゴヌクレオチドを用いた処置の前に、患者は下記の判定基準に従って選択された。
【０２２２】
患者は、標準の治療法（手術、放射線療法、および抗悪性腫瘍物質を用いた異なる治療法）に不応性またはその後再発した、未分化星細胞腫ＷＨＯグレードＩＩＩ、または神経膠芽腫ＷＨＯグレードＩＶのどちらかの重度神経膠腫を有した。患者は拮抗剤の投与の１０日前以内に抗悪性腫瘍剤を投与されていなかった。患者は１８歳ないし７５歳であった。カルノフスキー一般状態尺度（ＫＰＳ）は少なくとも７０％であった。臨床的に重大な急性感染、心臓疾患異常または管理が不十分な発作のある患者および妊婦および授乳婦は除外した。
【０２２３】
手術計画はコンピューター断層撮影または磁気共鳴像を基礎とした。カテーテルの穿孔部を腫瘍の固形の造影部分に配置した。室、嚢胞、以前の外科的介入に由来する切除腔、血管および脳の機能野は、カテーテル経路によって避けられなければならない。カテーテルは標準的な頭蓋の穿孔を通して最大の腫瘍病変の中心へ導入された。カテーテルの遠位端は皮膚を通して頭蓋下に数センチメートル通し、および生理食塩水で満たした。配列番号３０のＴＧＦ−ベータ２特異的アンチセンスオリゴヌクレオチドを、連続的高流量微小灌流として、体外ポンプ系のグラズビー（Ｇｒａｓｅｂｙ）３２００（スミス・メディカル社（Ｓｍｉｔｈ  Ｍｅｄｉｃａｌ）、ロンドン、ＧＢＭ）を用いて腫瘍内に投与した。ポート系およびポンプは図１にしたがって配置した。投与系は輸液の終了後に除去した。安全性評価のために、患者を２８日間追跡した。試験後ＭＲＩおよび死亡までの生存データが試験者によって回収された。
【０２２４】
実施例１
組織学的にグレードＩＩＩ未分化星細胞腫と診断された４７歳男性が、いくつかの抗悪性腫瘍剤および配列番号３０のＴＧＦ−ベータ２特異的アンチセンスオリゴヌクレオチドの併用療法を受けた。投与した抗悪性腫瘍剤は、ＡＣＮＵと共にテノポシド、テモゾロマイド、およびＰＥＧ化リポソームドキソルビシン（シーリクス（Ｃａｅｌｙｘ）（登録商標））であった。ＡＣＮＵは一部テノポシドと並行して投与され、各サイクルの初日にＡＣＮＵ９０ｍｇ／ｍ2および各サイクルの１〜３日にテノポシド６０ｍｇ／ｍ2であった。各サイクルは４２日で構成され、これらのサイクルの４回が実現した。約２年後、患者は３サイクルのテモゾロマイドで治療された。２８日の各サイクルは、１〜５日目のテモゾロマイド７５ｍｇ／ｍ2の投与で開始した。この治療の約８ヶ月後、ＰＥＧ化リポソームドキソルビシン（シーリクス（登録商標））を４２日の５サイクルで投与し、サイクルの４日目と１４日目に２０ｍｇ／ｍ2、次いで一週間朝および夜に１６０ｍｇタモキシフェン投与を行った。
【０２２５】
標準のスケジュールに準拠したこれらの抗悪性腫瘍剤を用いた治療法は最終的に不成功であり、およびしたがって患者は配列番号３０のＴＧＦ−ベータ２特異的アンチセンスオリゴヌクレオチドを用いた試験に入れられ、驚くべき成功を示した。この試験の開始時に磁気共鳴像は、３個の腫瘍を左前頭葉に、および別の１個の腫瘍を右半球に、および全体の浮腫を示した。上記の抗悪性腫瘍剤を用いた化学療法の後に、１サイクルの配列番号３０のＴＧＦ−ベータ２特異的アンチセンスオリゴヌクレオチド（１０μＭを含む滅菌パイロジェンフリー等張０．９％ＮａＣｌ溶液、４μＬ／分、計１．４２ｍｇを４日間で）が腫瘍内に、最大の腫瘤内への埋め込みカテーテルによって適用された。配列番号３０のＴＧＦ−ベータ２特異的アンチセンスオリゴヌクレオチドの開始から６ヶ月後、最大の腫瘍病変の明らかな縮小が診断可能であった。カテーテルによって個別に標的にされなかったが、３個のより小さい腫瘍もまた完全に消失した。加えて、浮腫が低減した。配列番号３０のＴＧＦ−ベータ２特異的アンチセンスオリゴヌクレオチドの最初の投与から１７ヶ月後、最大の腫瘍はもうほとんど計測できなかった。４ヶ月後、完全な反応が３名の別の専門家によって評価された。これらの知見は、臨床的改善を伴った。患者は腫瘍再発の徴候無しに心筋梗塞のため死亡し、および、最初の再発後１９５週、および未分化星細胞腫の診断後２０８週の全生存期間を経験した。
【０２２６】
実施例２
４５歳の男性患者が未分化星細胞腫（ＷＨＯグレードＩＩＩ）と診断された。診断に続いて手術および放射線療法を実施した。３回２００ｍｇ／ｍ2のテモゾロマイドを標準スケジュールに従って２ヶ月の間に投与した。ここでもこの治療法は不成功であった。したがって患者は配列番号３０のＴＧＦ−ベータ２特異的アンチセンスオリゴヌクレオチドを用いた試験に入れられた。このオリゴヌクレオチドを２サイクル、濃度８０μＭおよび流速８μｌ／分で各４日間、腫瘍組織内部に配置されたカテーテルを通じて投与した。その後、患者は追加の１０サイクルを４ヶ月の間に投与された。オリゴヌクレオチドの最後のサイクル後、最初のオリゴヌクレオチド処置から約１０ヶ月後に、患者は７サイクルのリポソームドキソルビシン（シーリクス（Ｃａｅｌｙｘ）（登録商標））を投与された。
【０２２７】
化学療法を心毒性（心室性頻拍）のために中断しなければならなかったため、予定の８回目のサイクルは開始できなかった。その時から患者は抗腫瘍治療法または副腎皮質ステロイドを全く投与されなかった。最後の磁気共鳴像は、オリゴヌクレオチド処置の開始の１９．４ヶ月後に撮影された。これらの画像は評価され、および中央の読みに顕著な部分反応（８３％腫瘍縮小）およびこれまで文献に報告されていない全生存期間を示した。
【０２２８】
これは、驚くべきことに放射線療法、抗悪性腫瘍剤および拮抗剤の併用は明らかに、たとえば神経膠腫、神経膠芽腫および／または星細胞腫といった腫瘍の治療において相乗作用を示すことのさらなる証明である。
【０２２９】
実施例３
抗悪性腫瘍剤を免疫系に負に影響する因子の拮抗剤（ここでは配列番号３０のＴＧＦ−ベータのアンチセンスオリゴヌクレオチド）と併用して治療した患者の生存データの、抗悪性腫瘍単独を用いた治療についての文献データとの比較。生存期間は腫瘍再発後の最初の化学療法の開始から与えられる。抗悪性腫瘍剤および配列番号３０のＴＧＦ−ベータ２特異的アンチセンスオリゴヌクレオチドで治療した全患者の全生存期間中央値（未分化星細胞腫：８名、神経膠芽腫、２３名）が、最新の文献データ（テオドソポウロス（Ｔｈｅｏｄｏｓｏｐｏｕｌｏｓ），Ｐ．Ｖ．ら、２００１）と比較される。
【０２３０】
【表１】
2007518709.tif 000003
１ＡＡ，未分化星細胞腫；ＧＢＭ，多型性神経膠芽腫
２Ｆ，女性；Ｍ，男性
３ＫＰＳ，カルノフスキー一般状態尺度
４ベースラインの腫瘍サイズ；ｎ／ｅ＝評価不能
５複数病変，全病変の総量が表示されている
６ＴＭＺ，テモゾロマイド；ＣａｅＴａｍ，シーリクス（Ｃａｅｌｙｘ）（登録商標）＋タモキシフェン；Ｓｕｒｇ，手術
７詳細は表１を参照
８ＤＥＸ，デキサメタゾン；ＭＰ，メチルプレドニゾロン
【０２３１】
試験からの患者の特徴の要約。患者０１、１３および１６は各２サイクルのＰＥＧ化リポソームドキソルビシン（シーリクス（Ｃａｅｌｙｘ）（登録商標））を投与され、患者１４は２サイクルのＰＣＶ（プロカルバジン、ロムスチン（ＣＣＮＵ）、ビンクリスチン）を配列番号３０のＴＧＦ−ベータ２特異的アンチセンスオリゴヌクレオチド処置後に投与され，他のすべての患者はオリゴヌクレオチド処置後に抗腫瘍治療を受けなかった。患者１７は追加の１０回のオリゴヌクレオチドサイクルを投与された。オリゴヌクレオチドの最後のサイクル後、その患者は７サイクルのＰＥＧ化リポソームドキソルビシンを投与された。
【０２３２】
患者０４および１７の腫瘍量の縮小は８０％を超えた。腫瘍量は最初の層における造影病変の最大の断面径、および最初のものと直角な、同一の平面および層における最大の断面径の測定によって評価された。第３の次元については、最初のものと直角なすべての他の面の最大の断面径を測定した。
【０２３３】
抗悪性腫瘍剤単独を用いた治療についての文献データと比較して、生存データは、一つ以上の抗悪性腫瘍剤（たとえばテモゾロマイドおよび／またはプロカルバジン）を用いて配列番号３０のＴＧＦ−ベータ２特異的アンチセンスオリゴヌクレオチドの投与前に処置した患者の、明らかに長い生存を示す。
【０２３４】
データは化学治療の開始後に計算される。この手法によると、我々の試験における全生存期間中央値はＡＡについて１４７週およびＧＢＭについて４２．４週であった。データは、オリゴヌクレオチドを化学治療（主にテモゾロマイド）後に用いた場合、最も新しくおよび正確な生存データが利用可能なテモゾロマイド単独についての比較可能な文献データよりも長い全生存期間中央値を示す：それぞれ未分化星細胞腫について約１４７週対４２週（テオドソポウロス（Ｔｈｅｏｄｏｓｏｐｏｕｌｏｓ），Ｐ．Ｖ．ら、２００１）、およびＧＢＭについて４５週対約３２週（テオドソポウロス，Ｐ．Ｖ．ら、２００１；ユン（Ｙｕｎｇ），Ｗ．Ｋ．ら、２０００；ユン，Ｗ．Ｋ．２０００；ブランデス（Ｂｒａｎｄｅｓ），Ａ．Ａ．ら、２００１）。
【０２３５】
これらの結果は、驚くべきことに、腫瘍、たとえばＡＡに罹患した患者において、拮抗剤、配列番号３０のＴＧＦ−ベータ２特異的アンチセンスオリゴヌクレオチドおよび少なくとも一つの他の抗悪性腫瘍剤（たとえばテモゾロマイド）の併用で治療した患者の明らかな生存の利益があることを示す（平均全生存期間１４６．６週対すべての未分化星細胞腫患者の９０週）。
【０２３６】
実施例４
テモゾロマイドは、従来の医薬キャリヤーと混合されるカプセル形で経口投与されうる。テモゾロマイドカプセル処方の一例は下記：
【表２】
2007518709.tif 000004
【０２３７】
配列番号３０で特定されるＴＧＦ−ベータ２アンチセンスオリゴヌクレオチドは無菌条件下で滅菌パイロジェンフリー０．９％ＮａＣｌ溶液に溶解され、および、外科的に埋め込まれて開口端が腫瘍内に配置されたカテーテルへの投与のために用意される。カテーテルは市販のポート系と接続され、その中へＡＰ１２００９溶液が投与される。
【０２３８】
実施例５
ヒト形質転換成長因子ＴＧＦ−ベータ１に対するアンチセンスｍ−ＲＮＡ：
CTGCAGCCTTGACCTCCCAGGATCAAGTGATCCTCCCACCTTAGCCTCCAGAGTAGCTGGGACCACAGGTGTACATTTTTTAAAAGTGTTTTGTAGAGATAGGGTCTCACTATGTTACCCAGGCTGGTCTCAAATGCCTGGATTCAAGTATCCTCCCATCTCTGCCTCCCAAAAGTGCTAGGATTACAGGCGTGAGCACCCCGCCTGGCCTGAACTACTATCTTTTATTGTCTTCTTCACTATCCCCCACTAAAGCAGGTTCCTGGTGGGCAGGAACTCCTCCCTTAACCTCTCTGGGCTTGTTTCCTCAACCTTTAAAATGGGTGTTATCAGAGTCCCTGCCATCTCAGAGTGTTGCTATGGTGACTGAATGAGTTCATTAATGTAAGGCACTTCAACAGTGCCCAAGGTGCTCAATAAATAGATCTAACTACAGTAGTGTTCCCCACTGGTCCCCTGTGCCTTGATGCCGGGCAAAGGAATAGTGCAGACAGGCAGGAGGAGGCAGAGAGGGAGAGAGAGGGAGTGGGAGTGGGGGAACGTCAGGGATGGAGACCCCAGGCAGGCGCCCAATGACACAGAGATCCGCAGTCCTCTCTCCATCTTTAATGGGGCCCCAGGTGGGCTTGGGGCACGGTGTCCTTAAATACAGCCCCCATGGGCAAGGCAGCGGGGGCGGGGCGGGGTGGGGCCGGGCCTGCCGGGGCGGGGCGGGGCGGGGCGGGACCTCAGCTGCACTTGCAGGAGCGCACGATCATGTTGGACAGCTGCTCCACCTTGGGCTTGCGGCCCACGTAGTACACGATGGGCAGCGGCTCCAGCGCCTGCGGCACGCAGCACGGCGCCGCCGAGGCGCCCGGGTTATGCTGGTTGTACAGGGCCAGGACCTTGCTGTACTGCGTGTCCAGGCTCCAAATGTAGGGGCAGGGCCCGAGGCAGAAGTTGGCATGGTAGCCCTTGGGCTCGTGGATCCACTTCCAGCCGAGGTCCTTGCGGAAGTCAATGTACAGCTGCCGCACGCAGCAGTTCTTCTCCGTGGAGCTGAAGCAATAGTTGGTGTCCAGGGCTCGGCGGTGCCGGGAGCTTTGCAGATGCTGGGCCCTCTCCAGCGGGGTGGCCATGAGAAGCAGGAAAGGCCGGTTCATGCCATGAATGGTGGCCAGGTCACCTCGGCGGCCGGTAGTGAACCCGTTGATGTCCACTTGCAGTGTGTTATCCCTGCTGTCACAGGAGCAGTGGGCGCTAAGGCGAAAGCCCTCAATTTCCCCTCCACGGCTCAACCACTGCCGCACAACTCCGGTGACATCAAAAGATAACCACTCTGGCGAGTCGCTGGGTGCCAGCAGCCGGTTGCTGAGGTATCGCCAGGAATTGTTGCTGTATTTCTGGTACAGCTCCACGTGCTGCTCCACTTTTAACTTGAGCCTCCTCAGCAGACGCAGCTCTGCCCGGGAGAGCAACACGGGTTCAGGTACCGCTTCTCGGAGCTCTGATGTGTTGAAGAACATATATATGCTGTGTGTACTCTGCTTGAACTTGTCATAGATTTCGTTGTGGGTTTCCACCATTAGCACGCGGGTGACCTCCTTGGCGTAGTAGTCGGCCTCAGGCTCGGGCTCCGGTTCTGCACTCTCCCCGGCCACCCGGTCGCGGGTGCTGTTGTACAGGGCGAGCACGGCCTCGGGCAGCGGGCCGGGCGGCACCTCCCCCTGGCTCGGGGGGCTGGCGAGCCGCAGCTTGGACAGGATCTGGCCGCGGATGGCCTCGATGCGCTTCCGCTTCACCAGCTCCATGTCGATAGTCTTGCAGGTGGATAGTCCCGCGGCCGGCGGGCCAGGCGTCAGCACCAGTAGCCACAGCAGCGGTAGCAGCAGCGGCAGCAGCCGCAGCCCGGAGGGCGGCATGGGGGAGGCGGCGCCCCCCGGCACTGCCGAGAGCGCGAACAGGGCTGGTGTGGTGGGGAGGCCCCGCCCCTGCAGGGGCTGGGGGTCTCCCGGCAAAAGGTAGGAGGGCCTCGAGGGAAAGCTGAGGCTCCTCAGGGAGAAGGGCGCAGTGGTGGAGGGGAGGCTTGGACCGGGGGTGTCTCAGTATCCCACGGAAATAACCTAGATGGGCGCGATCTGGTACCAGAAGGTGGGTGGTCTTGAATAGGGGATCTGTGGCAGGTCGGAGAGAGATCCGTCTCCTGGAGGAGAAAGGGTCTAGGATGCGCGGGGGCTCAGGAGACAGGCCGGGGATGAAGGCGGCGTGCAGGGGGTGCGCCCGAGGTCTGGGGAAAAGTCTTTGCGGGAGGCCGGGTCGGCGACTCCCGAGGGCTGGTCCGGAATGGGGGCGCCTGAGGGACGCCGTGTAGGGGGCAGGGAGGGAGCAAGCGTCCCCGGCGGCAAAGGGAGGCGGTCTGGGGTCCCCAAGTCCTGCCTCCTCGCGGGGCAGCGTCGCGCCAAGAGGTCCCCGCGCCTCCGGCTCCCAGCGGCAACGGAAAAGTCTCAAAAGTTTTTTTCCTCTTCTCCCGACCAGCTCGTCCCTCCTCCCGCTCCTCCTCCCCCTCCTCCCCGCAGTGGCGGGGGCGGCGGCGGCTCGTCTCAGACTCTGGGGCCTCAGGCTGCTCCTCGGCGACTCCTTCCTCCGCTCCGGGCCGAGGCCGGCCCCGCGGGCGGCTCAGAGCCGGGGGGGGTGCCCCGGACGGGGCGTCCCCCCTGCCCCCGGCCGGGGCCCTCGCTGTCTGGCTGCTCCGCGGAGGGAGGT
【０２３９】
ヒト形質転換成長因子ＴＧＦ−ベータ２のアンチセンスｍ−ＲＮＡ：
TTTAAAAAAATTTGCTTCTTGTCTCTCTCACTTACAAAGTAGGTGAAATGTAGAATAAGGCCTTCAACTTTTTTTGTGTCAGATGCCAGTTTTAACAAACAGAACACAAACTTCCAAAGTGTCTGAACTAGTACCGCCTTTTCAAAAATTTTTTAACACTGATGAACCAAGGCTCTCTTATGTTTTCTTGTTACAAGCATCATCGTTGTCGTCGTCATCATCATTATCATCATCATTGTCATTTTGGTCTTGCCACTTTTCCAAGAATTTTAGCTGCATTTGCAAGACTTTACAATCATATTAGAAAGCTGTTCAATCTTGGGTGTTTTGCCAATGTAGTAGAGAATGGTTAGAGGTTCTAAATCTTGGGACACGCAGCAAGGAGAAGCAGATGCTTCTGGATTTATGGTATTATATAAGCTCAGGACCCTGCTGTGCTGAGTGTCTGAACTCCATAAATACGGGCATGCTCCAGCACAGAAGTTGGCATTGTACCCTTTGGGTTCGTGTATCCATTTCCACCCTAGATCCCTCTTGAAATCAATGTAAAGTGGACGTAGGCAGCAATTATCCTGCACATTTCTAAAGCAATAGGCCGCATCCAAAGCACGCTTCTTCCGCCGGTTGGTCTGTTGTGACTCAAGTCTGTAGGAGGGCAATAACATTAGCAGGAGATGTGGGGTCTTCCCACTGTTTTTTTTCCTAGTGGACTTTATAGTTTTCTGATCACCACTGGTATATGTGGAGGTGCCATCAATACCTGCAAATCTTGCTTCTAGTTCTTCACTTTTATTTGGGATGATGTAATTATTAGATGGTACAAAAGTGCAGCAGGGACAGTGTAAGCTTATTTTAAATCCCAGGTTCCTGTCTTTATGGTGAAGCCATTCATGAACAGCATCAGTTACATCGAAGGAGAGCCATTCGCCTTCTGCTCTTGTTTTCACAACTTTGCTGTCGATGTAGCGCTGGGTTGGAGATGTTAAATCTTTGGACTTGAGAATCTGATATAGCTCAATCCGTTGTTCAGGCACTCTGGCTTTTGGGTTCTGCAAACGAAAGACTCTGAACTCTGCTTTCACCAAATTGGAAGCATTCTTCTCCATTGCTGAGACGTCAAATCGAACAATTCTGAAGTAGGGTCTGTAGAAAGTGGGCGGGATGGCATTTTCGGAGGGGAAGAAGGGCGGCATGTCTATTTTGTAAACCTCCTTGGCGTAGTACTCTTCGTCGCTCCTCTCGCGCTCGCAGGCGGCCGCCCTCCGGCTCGCCTTCTCCTGGAGCAAGTCCCTGGTGCTGTTGTAGATGGAAATCACCTCCGGGGGGACTTCCTCGGGCTCAGGATAGTCTTCTGGGGGACTGGTGAGCTTCAGCTTGCTCAGGATCTGCCCGCGGATCGCCTCGATCCTCTTGCGCATGAACTGGTCCATATCGAGTGTGCTGCAGGTAGACAGGCTGAGCGCGACCGTGACCAGATGCAGGATCAGAAAAGCGCTCAGCACACAGTAGTGCATTTTTTAAAAAAGTGGAAAAAAAAGTTGTTTTTAAAAGTCAGAATAAAAAAAAAGAAATCAACAATTCTCAAAGTATAGATCAAGGAGAGTTGTTTGGTTTTTTGTTGTTGTTGTTTGTTTTTGATGCGAAACTTTTGCAAACAATCTAGTCAATGCCCAACAGAAAAACGTATCCTGCTTG
【０２４０】
ヒトＴＧＦ−ベータ３のｍ−ＲＮＡのアンチセンス
CAGGATGCCCCAAAAATATTTATTTATACAAAGATTTTGAGAGTAATATTCATACTTGTCTTTATACCTCAGTCTATGCGTCTGGGGCCAAGTCACTGTGTGGCACATGTCGAGCTTCCCCGAATGCCTCACATGTTGTCGCACCTGCTTCCAGGAACACCAAATGAACACAGGGTCTTGGAGGGGAAGTGGGGGAAGAACCCATAATGCCCCAACCCTGCATGGAACCACAATCCAGAAATGTGCATCCTGACCTGGAAGGCGTCTAACCAAGTGTCCAAGGGGAAATATGATCGAGGGAGAGGTGAGAGGAGGGACCCAGAGGCAGACAGGAGAGGGTTGATTTCCACCCTTTCTTCTGCGTTCAGCATATCCAAAAGGCCCAATACAGTTGATGGGCCAGGAACTGCATGACCTGGATTTTCTCCCTGTAGTGACCCACGATGTTAATTGATGTAGAGGACAGTTTGCAAAAGTAATAGATTTGCCCTTAATCCCAGACAGTATGAGATACAATTCTGGGACTTTGTCTTCGTAACCTGTCTTTAAAAAAAAAAAAAAATGCTTGCCTTGTATAACATAATCCAGATTCCCTAGAGCAGATGTGGTACAGCAATGAGCAAATCCAACCTCAGATCTGAAGTGTCTTCCAGTCTGGCCCTGACCCAGCCATTCTCTGCCCTTCCTTCTCCCTTTAGGGTAGCCCAAATCCCATTGCCACACAACATCTCAACTTACCATCCCTTTCCTCTATCCCCATCCCCTCTGTCTGCGTCACAGAAAGTCTGTGTGTTCTGAAGAGTTCAGCCTTCCTCTAACCAAACCCACACTTTCTTTACCACCGTGATTCTCAGAGCCAGCAAGAAAGAAATGTTCCAAAAGGAAACCTCCATCTCAGCCATTTGCCCGGAGCCGAAGGTTGTGGGCTCCAGGCCTCTCAGTGAGGTTTGTTGCTTGTGTGTTTCCCGAGGAGCGGGCAGTCAGGCAGTGGTGGTTCTCTCTCCCCTCTCTCTGTCGCACGTGGGGTCTCAGCTACATTTACAAGACTTCACCACCATGTTGGAGAGCTGCTCCACTTTGGGGGTCCTCCCAACATAGTACAGGATGGTCAGGGGCTCCAGGTCCTGGGGCACGCAGCAAGGCGAGGCAGATGCTTCAGGGTTCAGAGTGTTGTACAGTCCCAGCACCGTGCTGTGGGTTGTGTCTGCACTGCGGAGGTATGGGCAAGGGCCTGAGCAGAAGTTGGCATAGTAGCCCTTAGGTTCATGGACCCACTTCCAGCCCAGATCCTGTCGGAAGTCAATGTAGAGGGGGCGCACACAGCAGTTCTCCTCCAAGTTGCGGAAGCAGTAATTGGTGTCCAAAGCCCGCTTCTTCCTCTGACCCCCCTGGCCCGGGTTGTCGAGCCGGTGTGGGGGAATCATCATGAGGATTAGATGAGGGTTGTGGTGATCCTTCTGCTTCTTGAGGCGCCCCAGATCTCCACGGCCATGGTCATCCTCATTGTCCACGCCTTTGAATTTGATTTCCATCACCTCGTGAATGTTTTCCAGGATATCTCCATTGGGCTGAAAGGTGTGACATGGACAGTGAATGCTGATTTCTAGACCTAAGTTGGACTCTCTTCTCAACAGCCACTCACGCACAGTGTCAGTGACATCAAAGGACAGCCACTCGGCAGTGCCCCGTGTGGGCAGATTCTTGCCACCGATATAGCGCTGTTTGGCAATGTGCTCATCTGGCCGAAGGATCTGGAAGAGCTCGATCCTCTGCTCATTCCGCTTAGAGCTGGGGTTGGGCACCCGCAAGACCCGGAATTCTGCTCGGAATAGGTTGGTTCTATTTTTCTCCACTGAGGACACATTGAAGCGGAAAACCTTGGAGGTAATTCCTTTAGGGCAGACAGCCAGTTCGTTGTGCTCCGCCAGCCCCTGGATCATGTCGAATTTATGGATTTCTTTGGCATAGTATTCCGACTCGGTGTTTTCCTGGGTGCAGCCTTCCTCCCTCTCCCCATGCATCTCCTCCAGCAGCTCCCGGGTGCTGTTGTAAAGGGCCAGGACCTGATAGGGGACGTGGGTCATCACCGTTGGCTCAGGGGGGCTGGTGAGCCTGAGCTTGCTCAAGATCTGTCCCCTAATGGCTTCCACCCTCTTCTTCTTGATGTGGCCGAAGTCCAAGGTGGTGCAAGTGGACAGAGAGAGGCTGACCGTGGCAAAGTTCAGCAGGGCCAGGACCACCAGAGCCCTTTGCAAGTGCATCTTCATGTGTGAGCTGGGAAGAGAGGCCAGGGGGACGGCAAGGCCTGGAGAGGAAGAGACCCCAGCAGACGTGCAGAAGGAGGGAGGAAAACCAGGCGGCCTCCCCAGATCCCAAAGACTGAGGCTTGGCAAGAAGGTGCATGAACTCACTGCACTGCGAGAGCTTCAGGACTTCCAGGAAGCGCTGGCAACCCTGAGGACGAAGAAGCGGACTGTGTGCCTTGTAGCGCTGGGATTCTTGTCCATGTGTCTAAACAGGTTTTGCTGG
【０２４１】
ヒトインターロイキン１０アンチセンスのｍ−ＲＮＡのアンチセンス
TCACCCTATGGAAACAGCTTAAAAACAGGTGAAAATAATAAATATTGAAAAAAATTATAATATTGGGCTTCTTTCTAAATCGTTCACAGAGAAGCTCAGTAAATAAATAGAAATGGGGGTTGAGGTATCAGAGGTAATAAATATTCTATAAGAGAGGTACAATAAGGTTTCTCAAGGGGCTGGGTCAGCTATCCCAGAGCCCCAGATCCGATTTTGGAGACCTCTAATTTATGTCCTAGAGTCTATAGAGTCGCCACCCTGATGTCTCAGTTTCGTATCTTCATTGTCATGTAGGCTTCTATGTAGTTGATGAAGATGTCAAACTCACTCATGGCTTTGTAGATGCCTTTCTCTTGGAGCTTATTAAAGGCATTCTTCACCTGCTCCACGGCCTTGCTCTTGTTTTCACAGGGAAGAAATCGATGACAGCGCCGTAGCCTCAGCCTGAGGGTCTTCAGGTTCTCCCCCAGGGAGTTCACATGCGCCTTGATGTCTGGGTCTTGGTTCTCAGCTTGGGGCATCACCTCCTCCAGGTAAAACTGGATCATCTCAGACAAGGCTTGGCAACCCAGGTAACCCTTAAAGTCCTCCAGCAAGGACTCCTTTAACAACAAGTTGTCCAGCTGATCCTTCATTTGAAAGAAAGTCTTCACTCTGCTGAAGGCATCTCGGAGATCTCGAAGCATGTTAGGCAGGTTGCCTGGGAAGTGGGTGCAGCTGTTCTCAGACTGGGTGCCCTGGCCTGGGCTGGCCCTCACCCCAGTCAGGAGGACCAGGCAACAGAGCAGTGCTGAGCTGTGCATGCCTTCTTTTGCAAGTCTGTCTTGTGGTTTGGTTTTGCAAGAGCAACCCCCTGATGTGTAGACCTTCACCTCTCTGTCCCCCTTTTATATTGTAAGCTCAGGGAGGCCTCTTCATTCATTAAAAAGCCACAATCAAGGTTTCCCGGCACAGGATTTTTTCTGCTTAGAGCTCCTCCTTCTCTAACCTCTCTAATAAACTTAGTTTTCAATTTTTGCATCGTAAGCAAAAATGATTGGTTGAACATGAACTTCTGCATTACAGCTATTTTTAGGATGGGCTACCTCTCTTAGAATAATTTTTTAGCTTCTCAATTAAAAAAAGTTGATTTCCTGGGGAGAACAGCTGTTCTGTCCGCAGAGGCCCTCAGCTGTGGGTTCTCATTCGCGTGTTCCTAGGTCACAGTGACGTGGACAAATTGCCCATTCCAGAATACAATGGGATTGAGAAATAATTGG
【０２４２】
ヒトプロスタグランジンＥ２シンターゼのアンチセンスｍ−ＲＮＡ
tttttttttttttttttttttttttttttttttttttttttttttttttttttttttCCATGAGATGCCTGCCATGACAGGCGCCACAAACCTTTCCTTTATTGCAAACATGTCCCAGTCCCGGGAGGCTTGGGAAGAGTGGGAACCAGGGGAACCCAGGGATGGGATTCCACTGAAAACAAACCGTCCTGCTGTCCTGTCGAGGGCCCCCACCCACAGGATGTAGCCATGGGACAGCCACTGAGGGTCCAGGAAGAGGGGCGGCAGAGCAGGGAGGCAGGGACAGGGAGGGGTCGCCCCAGGGCAGTGGCAGGGCTGGAACTCGTCCCTAACATCCCTGAGCCCCAGCAGGTGCCCTGTGTTAGAAGCGAGAGGGCTGGTGGGGGTGCGTGGACAAGGGGCAGAATGATCCTGCCCCCAACCAGTATCGCCAGGCGCTGGCCCAGTGGCCCCAGGCCCTGGCAGCTGGCGTCTTCCGCTGCCTTCCCTCTGCTCTGCGCGGGGACATTCAGTGCGCTGGGGAGGCCTCGGTGATGGCCCTCTCCACCCGCAGGTACCAGGGCTGGATGTGCGTGTGCTGCATCAGGTCATCGAATGCATCCAGCCCCTCCATCACACGCAGCACGCCATACACCGCCAAATCAGCGAGATTCGGCTTCTGGCCCCCCATGAAGGGCCGGTCCTTGCCCACAGCAGCCACCCACTTGTCAGCAGCCTCATAGAGGTCCTCGCGCACGTTGTCCTGGAGGCGGTGCCTGCTCTTGAGTCGCTTGCTGATGAGGTACATGGCCGCTGCACCCATGTACTTGGCCACGGCACCCTCCACGGCTCCGAACTTGCCCTCGCGGACAATGTAGTCAAAGGACGCCAGAGCCTCGGTGGGCGTGCGGTACACATTGGGGGAGATCAGGTGCACCAGCCAGTCGTCCGCCCACTGCCGCCACTTCATCTCCTCCGTCCTGGCCTCCTTCCCACCATACACTTGCTGGGCCTCCTTCTCGTTGAGCATGAGCCAGTACTTATTGCCGAACTCGGTCACCTCCTTGCCCTGCTCGTTCACAGCCTTCATGGCTGGGTAGTAGGTGATGATCTCTTCCAGGGGCTGCCCCGACACCAGGTAGGTCTTGAGGGCGCTGATGATGACAGAGGAGTCATTTAGTTGTTGCGAGCTTTCTCCTTCCTGGGCCACCAGGATGGGCACCTTTCTGTAGGAGGAGAACTTGATCTCAGCCCTGCGCACAGGGTTCACCTCCACCACCTGGTAGGGCAGGGCATGGAAGTCGAGGAAGGCTCGGACCTTGCTGCAGAAGGGACACGTCTTGTACTGGTACAGGGTCAGCTGCAGGCGGCTGGACAGGGAGAGCTGCGCGGCTGAGCGCTCTGCGTGGAGGTCCTGGGCGCGCAGGTGCCACCGCGCCGTGTGGTACAGCCCCAGGGCTCCCCCCAGGGCCAGCGCCGCAGCTCCCAGCAGCCGCGGGCTCCCCTTACGAGCTGCAGCCACGGGGCTCGGGCCGCCCGCCGCCCCCGCGAAGCCAGCCCGGCTCTGCGTGGGTAGCAGCGGCTGGGGGCGGCCTCCCAGCCTCCAGGCCAAGGCGCACCCACCAGGCCACAGCGCCCGCACCACCCGCGCAGCCGGGTCCATGTTCGCTCCGCCGGCGCCGCGGGCGGGCGCGCGAAACGAAGACGCCGAGGCACGCGCGGCGTTTAAAGGGCCAGGACTCTGGCGCCCCGCGGGTTGGCCGGGGTGAGGGCGACGCTAAGGGAACCCTCAGCGCTCTCGGGACTGGGCGTGTGCCCGGCGCCCAAGTTCGAAACGCCCGCC
【０２４３】
ヒトＶＥＧＦのアンチセンスｍ−ＲＮＡ
CAGTGTGCTGGCGGCCGCGGTGTGTCTACAGGAATCCCAGAAATAAAACTCTCTAATCTTCCGGGCTCGGTGATTTAGCAGCAAGAAAAATAAAATGGCGAATCCAATTCCAAGAGGGACCGTGCTGGGTCACCCGCCCGGGAATGCTTCCGCCGGAGTCTCGCCCTCCGGACCCAAAGTGCTCTGCGCAGAGTCTCCTCTTCCTTCATTTCAGGTTTCTGGATTAAGGACTGTTCTGTCGATGGTGATGGTGTGGTGGCGGCAGCGTGGTTTCTGTATCGATCGTTCTGTATCAGTCTTTCCTGGTGAGAGATCTGGTTCCCGAAACCCTGAGGGAGGCTCCTTCCTCCTGCCCGGCTCACCGCCTCGGCTTGTCACATCTGCAAGTACGTTCGTTTAACTCAAGCTGCCTCGCCTTGCAACGCGAGTCTGTGTTTTTGCAGGAACATTTACACGTCTGCGGATCTTGTACAAACAAATGCTTTCTCCGCTCTGAGCAAGGCCCACAGGGATTTTCTTGTCTTGCTCTATCTTTCTTTGGTCTGCATTCACATTTGTTGTGCTGTAGGAAGCTCATCTCTCCTATGTGCTGGCCTTGGTGAGGTTTGATCCGCATAATCTGCATGGTGATGTTGGACTCCTCAGTGGGCACACACTCCAGGCCCTCGTCATTGCAGCAGCCCCCGCATCGCATCAGGGGCACACAGGATGGCTTGAAGATGTACTCGATCTCATCAGGGTACTCCTGGAAGATGTCCACCAGGGTCTCGATTGGATGGCAGTAGCTGCGCTGATAGACATCCATGAACTTCACCACTTCGTGATGATTCTGCCCTCCTCCTTCTGCCATGGGTGCAGCCTGGGACCACTTGGCATGGTGGAGGTAGAGCAGCAAGGCGAGGCTCCAATGCACCCAAGACAGCAGAAAGTTCATGGTTTCGGAGGCCCGACCGGGGCCGGGCCGGCTCGCGCCGGGCCGCCAGCACACTG
【０２４４】
実施例６
ＴＧＦ−ベータを阻害する小分子
グラクソスミスクライン社（カラハン（Ｃａｌｌａｈａｎ）ら，２００２、ラピング（Ｌａｐｉｎｇ）ら、２００２、インマン（Ｉｎｍａｎ）ら、２００２）からのＳＢ−４３１５４２ＴβＲＩキナーゼ阻害剤
サイオス社（デュモン（Ｄｕｍｏｎｔ）およびアルテアガ（Ａｒｔｅａｇａ）、２００３）からのＮＰＣ３０３４５ＴβＲＩキナーゼ阻害剤
ＳＤ−０９３ＴβＲ−Ｉキナーゼ阻害剤（スブラマニアン（Ｓｕｂｒａｍａｎｉａｎ），Ｇら、２００３）
ＬＹ３６４９４７ＴβＲＩキナーゼ阻害剤（リリー社（ソーヤ（Ｓａｗｙｅｒ）ら、２００３）から）
デコリン、さまざまな形態の活性なＴＧＦ−βと結合する小さなコンドロイチン−デルマタン硫酸プロテオグリカン（ボーダー（Ｂｏｒｄｅｒ）ら、１９９２）
ＴＧＦ−ベータを阻害するタンパク質
エンドグリン、ＴＧＦ−βと結合する９５ｋＤａの糖タンパク質（グーゴ（Ｇｏｕｇｏｓ）ら、１９９２）
【０２４５】
ＴＧＦ−ベータと結合する抗体
ジエンザイム社／ＣＡＴからのＣＡＴ−１９２ヒト化ＴＧＦ−ベータ１ｍＡＢ（ベニグニ（Ｂｅｎｉｇｎｉ）ら、２００３）
ジエンザイム社／ＣＡＴからのＣＡＴ−１９２ヒト化ＴＧＦ−ベータ２ｍＡＢ（シリワルデナ（Ｓｉｒｉｗａｒｄｅｎａ）ら、２００２）
ジエンザイム社／ＣＡＴからの１Ｄ１１ＴＧＦ−ベータ１、２、３ｍＡＢ（アナンス（Ａｎａｎｔｈ）ら、１９９９）
ジェネンテック社からの２Ｇ７ＴＧＦ−ベータ１、２、３モノクローナルＩｇＧ２（アルテアガ（Ａｒｔｅａｇａ）ら、１９９３）
【０２４６】
Ｒ＆Ｄからの抗ＴＧＦ−ベータ１／２／３抗体
たとえば、米国５５４１３、ミネソタ州、ミネアポリス、マッキンリープレースＮＥのＲ＆Ｄシステムズ社のカタログ６１４を参照。
ウサギ抗ＴＧＦ−ベータ２ＬＡＰ：（シュロツワー−シュルハード（Ｓｃｈｌｏｔｚｅｒ−Ｓｃｈｒｅｈａｒｄｔ），Ｕら、２００１）
【０２４７】
可溶性受容体
バイオゲン社（ムラオカ（Ｍｕｒａｏｋａ）ら、２００２、ローランド−ゴールドスミス（Ｒｏｗｌａｎｄ−Ｇｏｌｄｓｍｉｔｈ）ら、２００１）からのｓＴβＲＩＩ：Ｆｃ（ＲＩＩ／ＦｃｈｕＩｇＧ１融合タンパク質）
ｓＴβＲＩＩ：Ｆｃ（ヤン（Ｙａｎｇ），Ｙ．Ａ．ら、２００２）
ベータグリカン（組み換え型可溶性ＴβＲＩＩＩ）（バンディオアディエイ（Ｂａｎｄｙｏｐａｄｈｙａｙ）ら、２００２）
【０２４８】
実施例７
細胞媒介細胞傷害性検出法：
ＮＳＣＬＣ（非小細胞肺がん細胞）株ＮＣＩ−Ｈ６６１、神経膠腫細胞株Ａ−１７２、および膵臓がん細胞株Ｈｕｐ−Ｔ３を標的細胞として使用して、細胞媒介細胞傷害性をＣＡＲＥ−ＬＡＳＳ検出法（リヒテンフェル（Ｌｉｃｈｔｅｎｆｅｌｓ）ら、１９９４）で定量した。ＮＣＩ−Ｈ６６１細胞を、５μＭのＴＧＦ（形質転換成長因子）−ベータ１特異的アンチセンスホスホロチオネートオリゴデオキシヌクレオチド（ＰＴＯ）、配列番号１４で前処理した。Ａ−１７２およびＨｕｐ−Ｔ３細胞を、細胞株供給業者の指示どおりに、５μＭのＴＧＦ−ベータ２特異的アンチセンスホスホロチオネートオリゴデオキシヌクレオチド、配列番号３０で、５％ＣＯ２の培地中で、および３７℃で３日間前処理した。さらに、Ｈｕｐ−Ｔ３細胞に対して、３μｇ／ｍｌのリポフェクチン（登録商標）を使用して、ＰＴＯの細胞取り込みを促進した。未処理の細胞および３μｇ／ｍｌのリポフェクチン（登録商標）細胞を対照として使用した。
【０２４９】
リンフォカイン活性化キラー細胞（ＬＡＫ細胞）をエフェクター細胞として使用した。ＬＡＫ細胞は、健常志願者由来の５ｘ１０６個のＰＢＭＣを、１０％ウシ胎仔血清を添加したＲＰＭＩ１６４０培地４μＬ中で、ｒｈＩＬ−２（組み換えヒトインターロイキン２）１０ｎｇ／ｍｌの存在下で、５％ＣＯ２雰囲気中で３７℃にて培養した。さらに腫瘍細胞の存在を模倣するために、エフェクター細胞の一部を、ｒｈＴＧＦ−β（ＮＣＩ−Ｈ６６１に対する２０００ｐｇ／ｍｌのｒｈＴＧＦ−β１、Ａ−１７２およびＨｕｐ−Ｔ３に対する５００ｐｇ／ｍｌのｒｈＴＧＦ−β２）とともにインキュベートした。細胞の他の部分は、追加処理なしにインキュベートした。
【０２５０】
エフェクター細胞を、細胞増殖抑制剤の存在下および非存在下で、標的細胞とともに４時間インキュベートした。阻害の超相加効果は、それぞれ、化学療法剤の特異性細胞溶解から、対照の特異性細胞溶解を減算することによって算出した。徴候を考慮に入れて、この差に、図に示すとおり、ＴＧＦ−ベータの阻害剤の特異的溶解を加える。化学療法剤およびＴＧＦ−ベータ阻害剤との組み合わせの特異的溶解が合計値よりも高い場合、これは超相加効果と解釈される。併用の特異的溶解が合計値よりも低い場合、これは阻害と解釈される。
【０２５１】
実施例８
ＴＧＦ−ベータ１、ＴＧＦ−ベータ２およびＴＧＦ−ベータのアミノ酸配列を、アミノ酸の国際１文字略字で示す。
ＲＸＸＲ：成熟した（活性化）部分の節だ部位（ＸＸは何でもよい）
ＡＳＰＣ：このモチーフのＣは、２個の単量体を機能性二量体へと結合する分子間シスチン架橋のＣである
ＣＣＣ：分子間システイン架橋（システインノットモチーフ）
ＴＧＦ−ベータ１、２および３の成熟したタンパク質は、一覧の最後から始めて１１２のアミノを含有する
【０２５２】
ＴＧＦ−ベータ１
MPPSGLRLLLLLLPLLWLLVLTPGRPAAGLSTCKTIDMELVKRKRIEAIRGQILSKLRLASPPSQGEVPPGPLPEAVLALYNSTRDRVAGESAEPEPEPEADYYAKEVTRVLMVETHNEIYDKFKQSTHSIYMFFNTSELREAVPEPVLLSRAELRLLRLKLKVEQHVELYQKYSNNSWRYLSNRLLAPSDSPEWLSFDVTGVVRQWLSRGGEIEGFRLSAHCSCDSRDNTLQVDINGFTTGRRGDLATIHGMNRPFLLLMATPLERAQHLQSSRHRR
ALDTNYCFSSTEKNCCVRQLYIDFRKDLGWKWIHEPKGYHANFCLGPCPYIWSLDTQYSKVLALYNQHNPGASAAPCCVPQALEPLPIVYYVGRKPKVEQLSNMIVRSCKCS
【０２５３】
ＴＧＦ−ベータ１の好ましいアミノ酸配列：
1)     ALDTNYCFSSTEKNCCVRQL
2)     YIDFRKDLGWKWIHEPKGYH
3)     ANFCLGPCPYIWSLDTQYSK
4)     VLALYNQHNPGASAAPCCVP
5)     QALEPLPIVYYVGRKPKVEQ
6)     LSNMIVRSCKCS
7)     TEKNCCVRQLYIDFRKDLGW
8)     KWIHEPKGYHANFCLGPCPY
9)     WSLDTQYSKVLALYNQHNP
10)    GASAAPCCVPQALEPLPIVY
11)    YVGRKPKVEQLSNMIVRSCKCS
12)    QYSKVLALYNQHNPGASAAPCCVPQALEPLPIVYYVGRKP
13)    QYSKVLALYNQHNPGASAAPCCVPQALEPLPIVYYVGRKP
I
QYSKVLALYNQHNPGASAAPCCVPQALEPLPIVYYVGRKP
（ＡＡＰＣモチーフのシトシンとｓ−ｓ架橋で結合した、ＴＧＦ−ベータ１アミノ酸配列番号１２の二量体）
14)ALDTNYCFSSTEKNCCVRQLYIDFRKDLGWKWIHEPKGYHANFCLGPCPYIWSLDTQYSKVLALYNQHNPGASAAPCCVPQALEPLPIVYYVGRKPKVEQLSNMIVRSCKCS
15)    ALDTNYCFSSTEKNCCVRQLYIDFRKDLGW
16)    KWIHEPKGYHANFCLGPCPYIWSLDTQYSK
17)    VLALYNQHNPGASAAPCCVPQALEPLPIVY
18)    YVGRKPKVEQLSNMIVRSCKCS
19)    CVRQLYIDFRKDLGWKWIHEPKGYHANFCL
20)    GPCPYIWSLDTQYSKVLALYNQHNPGASAA
21)    PCCVPQALEPLPIVYYVGRKPKVEQLSNMI
【０２５４】
ＴＧＦ−ベータ２
MHYCVLSAFLILHLVTVALSLSTCSTLDMDQFMRKRIEAIRGQILSKLKLTSPPEDYPEPEEVPPEVISIYNSTRDLLQEKASRRAAACERERSDEEYYAKEVYKIDMPPFFPSENAIPPTFYRPYFRIVRFDVSAMEKNASNLVKAEFRVFRLQNPKARVPEQRIELYQILKSKDLTSPTQRYIDSKVVKTRAEGEWLSFDVTDAVHEWLHHKDRNLGFKISLHCPCCTFVPSNNYIIPNKSEELEARFAGIDGTSTYTSGDQKTIKSTRKKNSGKTPHLLLMLLPSYRLESQQTNRRKR
ALDAAYCFRNVQDNCCLRPLYIDFKRDLGWKWIHEPKGYNANFCAGACPYLWSSDTQHSRVLSLYNTINPEASASPCCVSQDLEPLTILYYIGKTPKIEQLSNMIVKSCKCS
【０２５５】
ＴＧＦ−ベータ２の好ましいアミノ酸配列
1)     ALDAAYCFRNVQDNCCLRPL
2)     YIDFKRDLGWKWIHEPKGYN
3)     ANFCAGACPYLWSSDTQHSR
4)     VLSLYNTINPEASASPCCVS
5)     QDLEPLTILYYIGKTPKIEQ
6)     LSNMIVKSCKCS
7)     VQDNCCLRPLYIDFKRDLGW
8)     KWIHEPKGYNANFCAGACPY
9)     LWSSDTQHSRVLSLYNTINP
10)    EASASPCCVSQDLEPLTILY
11)    YIGKTPKIEQLSNMIVKSCKCS
12)    QHSRVLSLYNTINPEASASPCCVSQDLEPLTILYYIGKTPK
13)    QHSRVLSLYNTINPEASASPCCVSQDLEPLTILYYIGKTPK
I
QHSRVLSLYNTINPEASASPCCVSQDLEPLTILYYIGKTPK
（ＡＳＰＣモチーフのシトシンとｓ−ｓ架橋で結合した、ＴＧＦ−ベータ２アミノ酸配列番号１２の二量体）
14)ALDAAYCFRNVQDNCCLRPLYIDFKRDLGWKWIHEPKGYNANFCAGACPYLWSSDTQHSRVLSLYNTINPEASASPCCVSQDLEPLTILYYIGKTPKIEQLSNMIVKSCKCS
15)    ALDAAYCFRNVQDNCCLRPLYIDFKRDLGW
16)    KWIHEPKGYNANFCAGACPYLWSSDTQHSR
17)    VLSLYNTINPEASASPCCVSQDLEPLTILY
18)    YIGKTPKIEQLSNMIVKSCKCS
19)    CLRPLYIDFKRDLGWKWIHEPKGYNANFCA
20)    GACPYLWSSDTQHSRVLSLYNTINPEASAS
21)    PCCVSQDLEPLTILYYIGKTPKIEQLSNMI
【０２５６】
ＴＧＦ−ベータ３
MKMHLQRALVVLALLNFATVSLSLSTCTTLDFGHIKKKRVEAIRGQILSKLRLTSPPEPTVMTHVPYQVLALYNSTRELLEEMHGEREEGCTQENTESEYYAKEIHKFDMIQGLAEHNELAVCPKGITSKVFRFNVSSVEKNRTNLFRAEFRVLRVPNPSSKRNEQRIELFQILRPDEHIAKQRYIGGKNLPTRGTAEWLSFDVTDTVREWLLRRESNLGLEISIHCPCHTFQPNGDILENIHEVMEIKFKGVDNEDDHGRGDLGRLKKQKDHHNPHLILMMIPPHRLDNPGQGGQRKKR
ALDAAYCFRNVQDNCCLRPLYIDFKRDLGWKWIHEPKGYNANFCAGACPYLWSSDTQHSRVLSLYNTINPEASASPCCVSQDLEPLTILYYIGKTPKIEQLSNMIVKSCKCS
【０２５７】
ＴＧＦ−ベータ３の好ましいアミノ酸配列
1)     ALDTNYCFRNLEENCCVRPL
2)     YIDFRQDLGWKWVHEPKGYY
3)     ANFCSGPCPYLRSADTTHST
4)     VLGLYNTLNPEASASPCCVP
5)     QDLEPLTILYYVGRTPKVEQ
6)     LSNMVVKSCKCS
7      NLEENCCVRPLYIDFRQDLG
8      WKWVHEPKGYYANFCSGPCP
9)     YLRSADTTHSTVLGLYNTLN
10)    PEASASPCCVPQDLEPLTIL
11)    YYVGRTPKVEQLSNMVVKSCKCS
12)    THSTVLGLYNTLNPEASASPCCVPQDLEPLTILYYVGRTPK
13)    THSTVLGLYNTLNPEASASPCCVPQDLEPLTILYYVGRTPK
I
THSTVLGLYNTLNPEASASPCCVPQDLEPLTILYYVGRTPK
（ＡＳＰＣモチーフのシトシンとｓ−ｓ架橋で結合した、ＴＧＦ−ベータ３アミノ酸配列番号１２の二量体）
14)ALDAAYCFRNVQDNCCLRPLYIDFKRDLGWKWIHEPKGYNANFCAGACPYLWSSDTQHSRVLSLYNTINPEASASPCCVSQDLEPLTILYYIGKTPKIEQLSNMIVKSCKCS
15)    ALDAAYCFRNVQDNCCLRPLYIDFKRDLGW
16)    KWIHEPKGYNANFCAGACPYLWSSDTQHSR
17)    VLSLYNTINPEASASPCCVSQDLEPLTILY
18)    YIGKTPKIEQLSNMIVKSCKCS
19)    CLRPLYIDFKRDLGWKWIHEPKGYNANFCA
20)    GACPYLWSSDTQHSRVLSLYNTINPEASAS
21)    PCCVSQDLEPLTILYYIGKTPKIEQLSNMI
【０２５８】
参考文献
特許および特許公報
欧州特許第０６９ ５３ ５４号明細書，シュリンゲンシーペン(Ｓｃｈｌｉｎｇｅｎｓｉｅｐｅｎ)ら，２００２年１月９日
欧州特許第１００ ８６ ４９号明細書，シュリンゲンシーペン(Ｓｃｈｌｉｎｇｅｎｓｉｅｐｅｎ)ら，２００３年３月２６日
欧州特許第００９ ２５ ７４号明細書，チュリス(Ｔｕｌｌｉｓ），２０００年１２月２７日
米国特許第６，４５５，６８９号明細書，シュリンゲンシーペン(Ｓｃｈｌｉｎｇｅｎｓｉｅｐｅｎ)ら，２００２年９月２４日
米国特許第５，５３９，０８２号明細書，ニールセン（Ｎｉｅｌｓｅｎ）ら，１９９６年７月２３日
米国特許第５，７１４，３３１号明細書，ブチャート（Ｂｕｃｈａｒｄｔ）（故人）ら，１９９８年２月３日
米国特許第５，７１９，２６２号明細書，ブチャート（Ｂｕｃｈａｒｄｔ）（故人）ら，１９９８年２月１７日
米国特許第４，４６９，８６３号明細書，ツオ（Ｔｓ’ｏ）ら，１９８４年９月４日
米国特許第５，０２３，２４３号明細書，チュリス(Ｔｕｌｌｉｓ），１９９１年６月１１日
米国特許第５，０７５，１０９号明細書，タイス（Ｔｉｃｅ）ら，１９９１年１２月２４日
米国特許第４，４５２，７７５号明細書，ケント（Ｋｅｎｔ），１９８４年６月５日
米国特許第４，６７５，１８９号明細書，ケント（Ｋｅｎｔ）ら，１９８７年６月２３日
米国特許第５，７３６，１５２号明細書，ダン（Ｄｕｎｎ），１９９８年４月７日
米国特許第３，８５４，４８０号明細書，ザファロニ（Ｚａｆｆａｒｏｎｉ），１９７４年１２月１７日
米国特許第５，１３３，９７４号明細書，パラディシス（Ｐａｒａｄｉｓｓｉｓ）ら，１９９２年７月２８日
米国特許第５，４０７，６８６号明細書，ペーテル（Ｐａｔｅｌ）ら，１９９５年４月１８日
国際公開第９８／３３ ９０４号，シュリンゲンシーペン(Ｓｃｈｌｉｎｇｅｎｓｉｅｐｅｎ)ら，１９９８年８月６日公開
国際公開第９９／６３ ９７５号，シュリンゲンシーペン(Ｓｃｈｌｉｎｇｅｎｓｉｅｐｅｎ)ら，１９９９年１２月１６日，公開
国際公開第０１／６８ １４６号，シュリンゲンシーペン(Ｓｃｈｌｉｎｇｅｎｓｉｅｐｅｎ)ら，２００１年１２月２０日公開
他参考文献
アルビノ（Ａｌｖｉｎｏ） Ｅ．ら，Ｊ． Ｐｈａｒｍａｃｏｌ． Ｅｘｐ． Ｔｈｅｒ． ２９１：１２９２−１３００， １９９９
アナンス（Ａｎａｎｔｈ）ら，Ｃａｒｃｉｎｏｍａ Ｒｅｓ． ５９（９）：２２１０−６，１９９９
アルティーガ（Ａｒｔｅａｇａ）ら，Ｊ Ｃｌｉｎ Ｉｎｖｅｓｔ． ９２（６）： ２５６９−７６， １９９３
バンドヨパドヘイ（Ｂａｎｄｙｏｐａｄｈｙａｙ）ら，Ｃａｒｃｉｎｏｍａ Ｒｅｓ． ６２：４６９０−４６９５， ２００２
ボーケージ（Ｂｅａｕｃａｇｅ）Ｓ．Ｌ．，カルサーズ（Ｃａｒｕｔｈｅｒｓ）Ｍ．Ｈ．， Ｔｅｔ． Ｌｅｔ． ２２：１８５９，１９８１
ベニグニ（Ｂｅｎｉｇｎｉ）ら，Ｊ． Ａｍ． Ｓｏｃ． Ｎｅｐｈｒｏｌ． ２００３ ７月；１４（７）：１８１６−２４， ２００３
ベルネゴ（Ｂｅｒｎｅｇｏ）ら，１９８４
ボーダー（Ｂｏｒｄｅｒ）ら，Ｎａｔｕｒｅ ３６０：３６１−３６４， １９９２
ブランデス（Ｂｒａｎｄｅｓ），Ａ．Ａ．ら， Ａｎｎ Ｏｎｃｏｌ １２：２５５−２５７， ２００１
ブラントン（Ｂｒｕｎｔｏｎ），第３８章：グッドマン（Ｇｏｏｄｍａｎ）およびギルマン（Ｇｉｌｍａｎ）の治療の薬理学的基礎（Ｔｈｅ Ｐｈａｒｍａｃｏｌｏｇｉｃａｌ Ｂａｓｉｓ ｏｆ Ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃｓ），第９版
ブール（Ｂｕｕｒ）ら，Ｊ． Ｃｏｎｔｒｏｌ Ｒｅｌ． １４：４３−５１， １９９０
カラハン（Ｃａｌｌａｈａｎ），Ｊ．Ｆ．ら，Ｊ． Ｍｅｄ． Ｃｈｅｍ． ４５：９９９−１００１， ２００２
カリントン（Ｃａｒｒｉｎｇｔｏｎ） Ｌ．， アランビー（Ａｌｌａｍｂｙ） Ｄ．， マックロード（ＭｃＬｅｏｄ） Ｄ．， ブーロン（Ｂｏｕｌｏｎ） Ｍ．， Ｉｎｃｅｓｔ． Ｏｐｈｔｈａｌｍｏｌ． Ｖｉｓ． Ｓｃｉ． ３９：５６６，１９９８
クーパー（Ｃｏｏｐｅｒ），Ｈ．Ｍ．およびペーターソン（Ｐａｔｅｒｓｏｎ），Ｙ．，免疫学における現代のプロトコール（Ｃｕｒｒｅｎｔ ｐｒｏｔｏｃｏｌｓ ｉｎ Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｙ）， ２．４．１−２．５．１７， １９９５
デュモン（Ｄｕｍｏｎｔ），アルティーガ（Ａｒｔｅａｇａ）． がん細胞（Ｃａｒｃｉｎｏｍａ Ｃｅｌｌ）， ３： ５３１−５３６， ２００３
アインシュタイン（Ｅｉｎｓｔｅｉｎ） Ａ． Ｂ． Ｊｒ．， ファス（Ｆａｓｓ） Ｌ．，フィーファー（Ｆｅｆｅｒ） Ａ．， Ｃａｒｃｉｎｏｍａ Ｒｅｓ． ３５（３）：４９２−４９６， １９７５
エル−ハリリ（Ｅｌ−Ｈａｒｉｒｉ）ら， Ｊ． Ｐｈａｒｍ． Ｐｈａｒｍａｃｏｌ． ４４：６５１−６５４， １９９２
フローフラー（Ｆｒｏｅｈｌｅｒ）ら， Ｎｕｃｌ． Ａｃｉｄ． Ｒｅｓ． １４：５３９９ ５４０７， １９８６
ガフニー（Ｇａｆｆｎｅｙ）ら， Ｔｅｔ． Ｌｅｔ． ２９：２６１９ ２６２２， １９８８
ガレグ（Ｇａｒｅｇｇ）ら， Ｔｅｔ． Ｌｅｔ． ２７：４０５１ ４０５４， １９８６
ゲレイス（Ｇｅｒｅｉｓ） Ｍ．， バーフォード−メーソン（Ｂｕｒｆｏｒｄ−Ｍａｓｏｎ） Ａ．Ｐ．， ワトキンス（Ｗａｔｋｉｎｓ） Ｓ． Ｍ．， 乳がん治療に一般的に使用される細胞毒性薬によるin vitro末梢血リンパ球有糸分裂誘発の抑制（Ｓｕｐｐｒｅｓｓｉｏｎ ｏｆ ｉｎ ｖｉｔｒｏ ｐｅｒｉｐｈｅｒａｌ ｂｌｏｏｄ ｌｙｍｐｈｏｃｙｔｅ ｍｉｔｏｇｅｎｅｓｉｓ ｂｙ ｃｙｔｏｔｏｘｉｃ ｄｒｕｇｓ ｃｏｍｍｏｎｌｙ ｕｓｅｄ ｉｎ ｔｈｅ ｔｒｅａｔｍｅｎｔ ｏｆ ｂｒｅａｓｔ ｃａｒｃｉｎｏｍａ）， １９８７
ジアンピートリ（Ｇｉａｍｐｉｅｔｒｉ） Ａ．， ボンマッサー（Ｂｏｎｍａｓｓａｒ） Ｅ．， ゴールディン（Ｇｏｌｄｉｎ） Ａ．， Ｊ． Ｉｍｍｕｎｏｐｈａｒｍａｃｏｌ ７９ １（１）， ６１−８６， １９７８
グッドチャイルド（Ｇｏｏｄｃｈｉｌｄ）， Ｊ．， Ｂｉｏｃｏｎｊｕｇａｔｅ Ｃｈｅｍ． １：１６５， １９９０
ゴウゴス（Ｇｏｕｇｏｓ）ら， Ｉｎｔ Ｉｍｍｕｎｏｌ． ４（１）： ８３−９２， １９９２
ハードマン（Ｈａｒｄｍａｎ）ら， マグローヒル編， ニューヨーク州ニューヨーク ：９３４−９３５， １９９６
ハヤシ（Ｈａｙａｓｈｉ），Ｔ．ら， Ｃｌｉｎ． Ｉｍｍｕｎｏｌ． １０４：１４−２０， ２００２
インマン（Ｉｎｍａｎ）ら， Ｍｏｌ． Ｐｈａｒｍａｃｏｌ． ６２：６５−７４， ２００２
ジャガー（Ｊａｇｅｒ），Ｅ．， ジャガー（Ｊａｇｅｒ），Ｄ．， クヌス（Ｋｎｕｔｈ）， Ａ．， Ｉｎｔ． Ｊ． Ｃａｒｃｉｎｏｍａ １０６：８１７−８２０， ２００３
ジャンシェフ（Ｊａｎｔｓｃｈｅｆｆ），Ｐ．， スパグノリ（Ｓｐａｇｎｏｌｉ），Ｇ．， ザジャック（Ｚａｊａｃ），Ｐ．， ロクリッツ（Ｒｏｃｈｌｉｔｚ），Ｃ．Ｆ．， Ｃａｒｃｉｎｏｍａ Ｉｍｍｕｎｏｌ Ｉｍｍｕｎｏｔｈｅｒ ５１：３６７−３７５， ２００２
ランガー（Ｌａｎｇｅｒ）， Ｓｃｉｅｎｃｅ ２４９：１５２７−１５３３， １９９０
ラピン（Ｌａｐｉｎｇ）ら， Ｍｏｌ． Ｐｈａｒｍａｃｏｌ． ６２：５８−６４， ２００２
リー（Ｌｅｅ）ら，Ｃｒｉｔｉｃａｌ Ｒｅｖｉｅｗｓ ｉｎ Ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃ Ｄｒｕｇ Ｃａｒｒｉｅｒ Ｓｙｓｔｅｍｓ ８：２， ９１−１９２， １９９１
リヒテンフェルズ（Ｌｉｃｈｔｅｎｆｅｌｓ）ら； Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｉｃａｌ Ｍｅｔｈｏｄｓ １７２：２２７−２３９， １９９４
リーベルマン（Ｌｉｅｂｅｒｍａｎ），Ｄ．Ｍ．， ラスク（Ｌａｓｋｅ），Ｄ．Ｗ．， モリソン（Ｍｏｒｒｉｓｏｎ），Ｐ．Ｆ．， バンキウィックス（Ｂａｎｋｉｅｗｉｃｚ），Ｋ．Ｓ．， オールドフィールド（Ｏｌｄｆｉｅｌｄ），Ｅ． Ｈ． Ｊ Ｎｅｕｒｏｓｕｒｇ ８２：１０２１−１０２９， １９９５
ミットル（Ｍｉｔｔｌ）ｐ．， プリーストル（Ｐｒｉｅｓｔｌｅ）Ｊ．Ｐ．， コックス（Ｃｏｘ）Ｄ．Ａ．， マックマスター（ＭｃＭａｓｔｅｒ） Ｇ．， セルレッティ（Ｃｅｒｌｅｔｔｉ）Ｎ．， グルッター（Ｇｒuｔｔｅｒ） Ｇ．， ＴＧＦベータ３の結晶構造およびＴＧＦベータ２との比較：受容体結合の示唆（Ｔｈｅ ｃｒｙｓｔａｌ ｓｔｒｕｃｔｕｒｅ ｏｆ ＴＧＦ−ｂｅｔａ ３ ａｎｄｃｏｍｐａｒｉｓｏｎ ｔｏ ＴＧＦ−ｂｅｔａ ２：Ｉｍｐｌｉｃａｔｉｏｎｓ ｆｏｒ ｒｅｃｅｐｔｏｒ ｂｉｎｄｉｎｇ）， Ｐｒｏｔｅｉｎ Ｓｃｉｅｎｃｅ ５ １２６１−１２７１， １９９６
モリソン（Ｍｏｒｒｉｓｏｎ），Ｐ．Ｆ．， ラスク（Ｌａｓｋｅ），Ｄ．Ｗ．， ボボ（Ｂｏｂｏ），Ｈ．， オールドフィールド（Ｏｌｄｆｉｅｌｄ），Ｅ．Ｈ． およびデドリック（Ｄｅｄｒｉｃｋ），Ｒ．Ｌ．， Ａｍ． Ｊ． Ｐｈｙｓｉｏｌ． ２６６：Ｒ ２９２−３０５， １９９４
ムラニシ（Ｍｕｒａｎｉｓｈｉ）， Ｃｒｉｔｉｃａｌ Ｒｅｖｉｅｗｓ ｉｎ Ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃ Ｄｒｕｇ Ｃａｒｒｉｅｒ Ｓｙｓｔｅｍｓ， ７：１， １−３３， １９９０
ムラオカ（Ｍｕｒａｏｋａ）ら， Ｊ． Ｃｌｉｎ． Ｉｍｍｕｎｏｌ． ＣＩ １０９：１５５１−１５５９， ２００２
ナルデリ（Ｎａｒｄｅｌｌｉ） Ｂ．， プセッティ（Ｐｕｃｃｅｔｔｉ） ｐ．， ロマーニ（Ｒｏｍａｎｉ） Ｌ．， セーバ（Ｓａｖａ） Ｇ．， ボンマッサー（Ｂｏｎｍａｓｓａｒ） Ｅ．， フィオレッティ（Ｆｉｏｒｅｔｔｉ） Ｍ．Ｃ．， Ｃａｒｃｉｎｏｍａ Ｉｍｍｕｎｏｌ． Ｉｍｍｕｎｏｔｈｅｒ． １７（３） ２１３−２１７， １９８４
ニールセン（Ｎｉｅｌｓｅｎ）ら， Ｓｃｉｅｎｃｅ  ２５４：１４９７−１５００， １９９１
パークハースト（Ｐａｒｋｈｕｒｓｔ）， Ｍ．Ｒ．， デパン（ＤｅＰａｎ），Ｃ．， リリー（Ｒｉｌｅｙ），Ｊ．Ｐ．， ローゼンバーグ（Ｒｏｓｅｎｂｅｒｇ），Ｓ．Ａ．， シュー（Ｓｈｕ）， Ｓ．， Ｊ． Ｉｍｍｕｎｏｌ． １７０， ５３１７−５３２５， ２００３
ファン（Ｐｈａｎ）， Ｖ．ら， Ｎａｔ Ｍｅｄ ９：１２１５−１２１９， ２００３
プライス（Ｐｒｅｉｓｓ）， ドーンホフ（Ｄｏｒｎｈｏｆｆ）， ハグマン（Ｈａｇｍａｎｎ）， シュミーダー（Ｓｃｈｍｉｅｄｅｒ）， Ｅｍｐｆｅｈｌｕｎｇｅｎ ｚｕｒ Ｔｈｅｒａｐｙ， １１． Ａｕｆｌａｇｅ， Ｗ． Ｚｕｃｋｓｃｈｅｒｄｔ Ｖｅｒｌａｇ ＧｍｂＨ， ミュンヘン， ベルン， ウィーン， ニューヨーク， ２００２
ローランド−ゴールドスミス（Ｒｏｗｌａｎｄ−Ｇｏｌｄｓｍｉｔｈ）ら， Ｃｌｉｎ． Ｃａｒｃｉｎｏｍａ Ｒｅｓ． ７：２９３１−２９４０， ２００１
サムブルーク（Ｓａｍｂｒｏｏｋ），ら， 分子クローニング：実験室マニュアル（Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｃｌｏｎｉｎｇ：Ａ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ Ｍａｎｕａｌ）， コールドスプリングハーバーラボラトリープレス， ニューヨーク， １９８９
ソーヤー（Ｓａｗｙｅｒ）ら， Ｊ． Ｍｅｄ． Ｃｈｅｍ． ４６（１９）：３９５３−３９５６， ２００３
シュレッツアー−シュレハード（Ｓｃｈｌｏｔｚｅｒ−Ｓｃｈｒｅｈａｒｄｔ），Ｕ．， ゼンケル（Ｚｅｎｋｅｌ），Ｍ．， クシュル（Ｋｕｃｈｌｅ），Ｍ．， サカイ（Ｓａｋａｉ），Ｌ．Ｙ．， ノーマン（Ｎａｕｍａｎｎ）， Ｇ．Ｏ．， Ｅｘｐ． Ｅｙｅ Ｒｅｓ． ７３， ７６５−７８０， ２００１
シュナイダー（Ｓｃｈｎｅｉｄｅｒ），Ｔ．， ゲルハルツ（Ｇｅｒｈａｒｄｓ），Ｒ．， キルシュス（Ｋｉｒｃｈｅｓ），Ｅ． ファーシング（Ｆｉｒｓｃｈｉｎｇ），Ｒ．， Ｊ Ｎｅｕｒｏｏｎｃｏｌ ５３：３９−４６， ２００１
シリワーデナ（Ｓｉｒｉｗａｒｄｅｎａ）ら， Ｏｐｈｔａｌｍｏｌｏｇｙ １０９：４２７−４３１， ２００２
スタウダー（Ｓｔａｕｄｅｒ），Ｇ．ら， Ｐｒｏｃ． Ａｍ． Ｓｏｃ． Ｃｌｉｎ． Ｏｎｃｏｌ． ２２：１０９ （ａｂｓｔｒ ４３６）， ２００３
スチーブンス（Ｓｔｅｖｅｎｓ）ら， Ｊ． Ｍｅｄ． Ｃｈｅｍ． ２７：１９６−２０１， １９８４
サブラマニアン（Ｓｕｂｒａｍａｎｉａｎ），Ｇ．， シュワルツ（Ｓｃｈｗａｒｚ），Ｒ．， リュー（Ｌｉｕ），Ｄ．， レイス（Ｒｅｉｓｓ），Ｍ．， がんおよび他の疾患の発病における役割（Ｒｏｌｅｓ ｉｎ ｔｈｅ ｐａｔｈｏｇｅｎｅｓｉｓ ｏｆ ｃａｒｃｉｎｏｍａ ａｎｄ ｏｔｈｅｒ ｄｉｓｅａｓｅｓ） Ｂ ２６， Ｌａ Ｊｏｌｌａ， ２００３
タカハシ（Ｔａｋａｈａｓｈｉ）ら， Ｊ． Ｐｈａｒｍ． Ｐｈａｒｍａｃｏｌ．， ４０：２５２−２５７， １９８８
セオドソポウロス（Ｔｈｅｏｄｏｓｏｐｏｕｌｏｓ）， Ｐ．Ｖ．ら， Ｐｒｏｃ Ａｎｎｕ Ｍｅｅｔ Ａｍ Ｓｏｃ Ｃｌｉｎ Ｏｎｃｏｌ， ２０ 抄録２０５９（サンフランシスコ， ２００１）
ティマーマン（Ｔｉｍｍｅｒｍａｎｎ） Ｊ．Ｍ．， チェルヴィンスキ（Ｃｚｅｒｗｉｎｓｋｉ）Ｄ．Ｋ．， デービス（Ｄａｖｉｓ） Ｔ．Ａ．， スウ（Ｈｓｕ） Ｆ．Ｊ．， ベニーク（Ｂｅｎｉｋｅ） Ｃ．， ハオ（Ｈａｏ）， Ｚ．Ｍ．， タイディ（Ｔａｉｄｉ） Ｂ．， ファジャパスカ（Ｆａｊａｐａｋｓａ） Ｒ．， カスパー（Ｃａｓｐａｒ） Ｃ．Ｂ．， オカダ（Ｏｋａｄａ） Ｃ． Ｙ．， ヴァン・ベックホーベン（ｖａｎ Ｂｅｃｋｈｏｖｅｎ） Ａ．， ライルス（Ｌｉｌｅｓ） Ｔ．Ｍ．， アーングルマン（Ｅｅｎｇｌｅｍａｎ） Ｅ． Ｇ．， レビー（Ｌｅｖｙ） Ｒ．， Ｂｌｏｏｄ ９９（５）：１５１７−１５２８， ２００２
ウールマン（Ｕｈｌｍａｎｎ）， Ｅ．， ペイマン（Ｐｅｙｍａｎ）， Ａ．， Ｃｈｅｍ． Ｒｅｖ． ９０：５４４， １９９０
デ・ビサー（ｄｅ Ｖｉｓｓｅｒ）， Ｋ．Ｅ．， カスト（Ｋａｓｔ）， Ｗ．Ｍ．， Ｌｅｕｋｅｍｉａ １３：１１８８−９９， １９９９
ワグナー（Ｗａｇｎｅｒ）ら， Ｎａｔｕｒｅ Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ １４：８４０ ８４４， １９９６
ワン（Ｗａｎｇ）ら， Ｊ． Ｃｈｅｍ． Ｃｏｍｍｕｎ． １６８７−１６８８， １９９４
ウィルキンソン（Ｗｉｌｋｅｎｓｏｎ）， Ｋ．Ａ．， マーティン（Ｍａｒｔｉｎ）， Ｔ． Ｄ．， レバ（Ｒｅｂａ） Ｓ．Ｍ．， アウン（Ａｕｎｇ） Ｈ．， レッドライン（Ｒｅｄｌｉｎｅ） Ｒ．Ｗ．， ブーム（Ｂｏｏｍ） Ｗ．Ｈ．， ツーシ（Ｔｏｏｓｓｉ） Ｚ．， フルトン（Ｆｕｌｔｏｎ） Ｓ．Ａ．， Ｉｎｆｅｃｔ． ｉｍｍｕｎｅ． ８６（１１）：６５０５−６５０８， ２０００
ヴォトヴィッツ−プラガ（Ｗｏｊｔｏｗｉｃｚ−Ｐｒａｇａ）， Ｓ．， Ｊ． Ｉｍｍｕｎｏｔｈｅｒ． ２０， １６５−７７， １９９７
ヴォトヴィッツ−プラガ（Ｗｏｊｔｏｗｉｃｚ−Ｐｒａｇａ）， Ｓ．， Ｉｎｖｅｓｔｉｇａｔｉｏｎａｌ Ｎｅｗ Ｄｒｕｇｓ ２１：２１−３２， ２００３
ヤマシタ（Ｙａｍａｓｈｉｔａ）ら， Ｊ． Ｐｈａｒｍ． Ｐｈａｒｍａｃｏｌ． ３９：６２１−６２６， １９８７
ヤン（Ｙａｎｇ）， Ｙ．Ａ．ら，Ｊ． Ｃｌｉｎ． Ｉｎｖｅｓｔ． １０９：１６０７−１６１５， ２００２
ユン（Ｙｕｎｇ）， Ｗ．Ｋ．ら， Ｂｒ． Ｊ． Ｃａｒｃｉｎｏｍａ ８３：５８８−８９３， ２０００
ユン（Ｙｕｎｇ）， Ｗ．Ｋ．， Ｓｅｍｉｎ Ｏｎｃｏｌ ２７：２７−３４， ２０００
【０２５９】
【表３】
2007518709.tif 000005
2007518709.tif 000006
2007518709.tif 000007
2007518709.tif 000008
【図面の簡単な説明】
【０２６０】
【図１】図１は神経膠腫細胞に対するリンフォカイン活性化キラー細胞（ＬＡＫ細胞）媒介細胞傷害性の比較試験を示す。細胞の一部は配列番号３０のＴＧＦ−ベータ２特異的アンチセンスオリゴヌクレオチドと共にインキュベートし、残りの一部は追加としてＣＣＮＵを用いて処理した。図は明らかに、配列番号３０のＴＧＦ−ベータ２特異的アンチセンスオリゴヌクレオチドと組み合わせてＣＣＮＵで処理したＬＡＫ細胞の細胞傷害性活性は配列番号３０のＴＧＦ−ベータ２特異的アンチセンスオリゴヌクレオチドだけで処理したＬＡＫ細胞と比較して優位であることを示す。  ５ｘ１０６個のＰＢＭＣ（末梢血単核球）を、１０％ウシ胎仔血清を添加したＲＰＭＩ１６４０培地４μＬ中で、ｒｈＩＬ−２（組み換えヒトインターロイキン２）１０ｎｇ／ｍｌの存在下で、５％ＣＯ２雰囲気中で３７℃にて培養した。最初の３日間、配列番号３０のＴＧＦ−ベータ２特異的アンチセンスオリゴヌクレオチド５μＭを加えた。その後、細胞の一部をＣＣＮＵ１０μＭと共にさらに６時間インキュベートした。ＣＡＲＥ−ＬＡＳＳ検定法（リヒテンフェルス（Ｌｉｃｈｔｅｎｆｅｌｓ）ら、１９９４）によって定量される、配列番号３０のＴＧＦ−ベータ２特異的アンチセンスオリゴヌクレオチドＬＡＫ細胞の細胞媒介細胞傷害性（横線）を、ＣＣＮＵと組み合わせて配列番号３０のＴＧＦ−ベータ２特異的アンチセンスオリゴヌクレオチドで処理したＬＡＫ細胞（斜線）と比較した。表示は４連の平均値±ＳＤである。
【図２】図２は神経膠腫細胞に対するリンフォカイン活性化キラー細胞（ＬＡＫ細胞）媒介細胞傷害性の比較試験を示す。細胞の一部は配列番号３０のＴＧＦ−ベータ２特異的アンチセンスオリゴヌクレオチドと共にインキュベートし、残りの一部は続いてテモゾロマイド（ＴＭＺ）で処理した。図は明らかに、配列番号３０のＴＧＦ−ベータ２特異的アンチセンスオリゴヌクレオチドを用いた処理後にテモゾロマイド処理ＬＡＫ細胞の細胞傷害性活性は配列番号３０のＴＧＦ−ベータ２特異的アンチセンスオリゴヌクレオチドだけで処理したＬＡＫ細胞と比較して優位であることを示す。  ５ｘ１０６個のＬＡＫを、１０％ウシ胎仔血清を添加したＲＰＭＩ培地中で、ｒｈＩＬ−２（組み換えヒトインターロイキン２）１０ｎｇ／ｍｌの存在下で、５％ＣＯ２雰囲気中で３７℃にて培養した。最初の３日間、配列番号３０のＴＧＦ−ベータ２特異的アンチセンスオリゴヌクレオチド５μＭを加えた。細胞媒介細胞傷害性を次いで、ＣＡＲＥ−ＬＡＳＳ検定法（リヒテンフェルス（Ｌｉｃｈｔｅｎｆｅｌｓ）ら、１９９４）によって、追加処理無しの細胞の一部で（配列番号３０のＴＧＦ−ベータ２特異的アンチセンスオリゴヌクレオチドのみ、横線）、３０μＭテモゾロマイド存在下の残りの一部で（ＴＭＺ、斜線）定量した。表示は４連の平均値±ＳＤである。
【図３】図３は、標準スケジュールにしたがってテモゾロマイドのみで治療した患者の全生存期間中央値と比較した、標準スケジュールにしたがってテモゾロマイドでの治療後に配列番号３０のＴＧＦ−ベータアンチセンスオリゴヌクレオチドを用いて治療した患者の生存データである。生存期間は腫瘍再発後の最初の化学療法の開始から与えられる。臨床試験での全生存期間中央値を、未分化星細胞腫患者３名および神経膠芽腫患者１０名から評価した。生存データを文献の生存データと比較した。我々のデータは、配列番号３０のＴＧＦ−ベータ２特異的アンチセンスオリゴヌクレオチドをテモゾロマイドに続いて用いた場合に、テモゾロマイド単独についての比較可能な文献データよりも長い全生存期間中央値を示す：未分化星細胞腫に罹患した患者について１４６．６週対４２．０週、および神経膠芽腫に罹患した患者について４５．１週対３２．０週。
【図４】図４は、実施例７の記載にしたがってエフェクター細胞対標的細胞が２０：１の比で実施した、Ａ−１７２細胞株を用いたｉｎ  ｖｉｔｒｏ検定法における腫瘍細胞の特異的溶解を示す。配列番号３０のアンチセンスオリゴヌクレオチドを、５μＭの濃度で試験し、細胞溶解を促進した。対照的に、４μＭの濃度でＢＣＮＵはＬＡＫ細胞誘導性細胞溶解を阻害し、これはＢＣＮＵの免疫抑制作用を示す。驚くべきことに、配列番号３０（５μＭ）の細胞溶解作用は、ＢＣＮＵ（４μＭ）との併用で超相加的に増大した（特異的細胞溶解、対照：２５．２％、ＢＣＮＵ１５．６％、配列番号３０：２９．４％、配列番号３０とＢＣＮＵの併用：４０．７％）。
【図５】図５は、実施例７の記載にしたがってエフェクター細胞対標的細胞が１．２５：１の比で実施した、Ａ−１７２細胞株を用いたｉｎ  ｖｉｔｒｏ検定法における腫瘍細胞の特異的溶解を示す。配列番号３０のアンチセンスオリゴヌクレオチドを、５μＭの濃度で試験し、細胞溶解を促進した。対照的に、１０μＭの濃度でＣＣＮＵはＬＡＫ細胞誘導性細胞溶解を阻害し、これはＣＣＮＵの免疫抑制作用を示す。驚くべきことに、配列番号３０（５μＭ）の細胞溶解作用は、ＣＣＮＵ（１０μＭ）との併用で超相加的に増大した（特異的細胞溶解、対照：２．６％、ＣＣＮＵ０．５％、配列番号３０：４．４％、配列番号３０とＣＣＮＵの併用：１３．３％）。
【図６】図６は、実施例７の記載にしたがってエフェクター細胞対標的細胞が１０：１の比で実施した、Ｈｕｐ−Ｔ３細胞株を用いたｉｎ  ｖｉｔｒｏ検定法における腫瘍細胞の特異的溶解を示す。配列番号３０のアンチセンスオリゴヌクレオチドを、５μＭの濃度で試験し、細胞溶解を促進した。対照的に、２０μｇ／ｍｌの濃度でジェムザールはＬＡＫ細胞誘導性細胞溶解を阻害し、これはジェムザールの免疫抑制作用を示す。驚くべきことに、配列番号３０（５μＭ）の細胞溶解作用は、ジェムザール（２０μｇ／ｍｌ）との併用で超相加的に増大した（特異的細胞溶解、対照：３２．９％、ジェムザール３４．５％、配列番号３０：５９．５％、配列番号３０とジェムザールの併用：７５．４％）。
【図７】図７は、実施例７の記載にしたがってエフェクター細胞対標的細胞が１０：１の比で実施した、Ａ−１７２細胞株を用いたｉｎ  ｖｉｔｒｏ検定法における腫瘍細胞の特異的溶解を示す。配列番号３０のアンチセンスオリゴヌクレオチドを、５μＭの濃度で試験し、細胞溶解を促進した。濃度３０μＭでのテモゾロマイド存在下のＬＡＫ細胞誘導細胞溶解に、非常に少量の増加がみとめられうる。しかし、驚くべきことに、配列番号３０（５μＭ）の細胞溶解作用は、テモゾロマイド（５０μＭ）との併用で超相加的に増大した（特異的細胞溶解、対照：２５．２％、テモゾロマイド３１．３％、配列番号３０：３９．２％、配列番号３０とテモゾロマイドの併用：５０．４％）。
【図８】図８は、実施例７の記載にしたがってエフェクター細胞対標的細胞が２．５：１の比で実施した、Ａ−１７２細胞株を用いたｉｎ  ｖｉｔｒｏ検定法における腫瘍細胞の特異的溶解を示す。配列番号３０のアンチセンスオリゴヌクレオチドを、５μＭの濃度で試験し、細胞溶解を促進した。濃度０．０４ｐＭ／ｍｌでのビンクリスチン存在下のＬＡＫ細胞誘導細胞溶解に、非常に少量の増加がみとめられうる。しかし、驚くべきことに、配列番号３０（５μＭ）の細胞溶解作用は、ビンクリスチン（０．０４ｐＭ／ｍｌ）との併用で超相加的に増大した（特異的細胞溶解、対照：１０．１％、ビンクリスチン１２．６％、配列番号３０：１３．９％、配列番号３０とビンクリスチンの併用：２０．５％）。
【図９】図９は、実施例７の記載にしたがってエフェクター細胞対標的細胞が１．２５：１の比で実施した、ＮＣＬ−Ｈ６６１細胞株を用いたｉｎ  ｖｉｔｒｏ検定法における腫瘍細胞の特異的溶解を示す。配列番号１４のアンチセンスオリゴヌクレオチドを、５μＭの濃度で試験し、細胞溶解を促進した。対照的に、０．３７μｇ／ｍｌの濃度で、タクソテールはＬＡＫ細胞誘導性細胞溶解を低下させた。しかしこの場合、配列番号１４（５μＭ）の細胞溶解作用は、タクソテール（０．３７μｇ／ｍｌ）との併用で低下した（特異的細胞溶解、対照：４９．６％、タクソテール３０．５％、配列番号１４：６５．３％、配列番号３０とタクソテールの併用：３９．７％）。
【図１０】図１０は、実施例７の記載にしたがってエフェクター細胞対標的細胞が５：１の比で実施した、ＮＣＬ−Ｈ６６１細胞株を用いたｉｎ  ｖｉｔｒｏ検定法における腫瘍細胞の特異的溶解を示す。配列番号３０のアンチセンスオリゴヌクレオチドを、５μＭの濃度で試験し、細胞溶解を促進した。対照的に、３ｎＭ／ｍｌの濃度で、プロカルバシンはＬＡＫ細胞誘導性細胞溶解を低下させた。しかしこの場合、配列番号３０（５μＭ）の細胞溶解作用は、プロカルバシン（３ｎＭ／ｍｌ）との併用で低下した（特異的細胞溶解、対照：８．３１％、プロカルバシン６．１％、配列番号１４：１６．４％、配列番号３０とプロカルバシンの併用：５．７％）。
【図１】
2007518709.tif 000009
【図２】
2007518709.tif 000010
【図３】
2007518709.tif 000011
【図４】
2007518709.tif 000012
【図５】
2007518709.tif 000013
【図６】
2007518709.tif 000014
【図７】
2007518709.tif 000015
【図８】
2007518709.tif 000016
【図９】
2007518709.tif 000017
【図１０】
2007518709.tif 000018
【手続補正書】
【提出日】平成18年9月13日(2006.9.13)
【手続補正１】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】０２５３
【補正方法】変更
【補正の内容】
【０２５３】
ＴＧＦ−ベータ１の好ましいアミノ酸配列：
1)   ALDTNYCFSSTEKNCCVRQL
2)   YIDFRKDLGWKWIHEPKGYH
3)   ANFCLGPCPYIWSLDTQYSK
4)   VLALYNQHNPGASAAPCCVP
5)   QALEPLPIVYYVGRKPKVEQ
6)   LSNMIVRSCKCS
7)   TEKNCCVRQLYIDFRKDLGW
8)   KWIHEPKGYHANFCLGPCPY
9)   WSLDTQYSKVLALYNQHNP
10)  GASAAPCCVPQALEPLPIVY
11)  YVGRKPKVEQLSNMIVRSCKCS
12)  QYSKVLALYNQHNPGASAAPCCVPQALEPLPIVYYVGRKP
2007518709.tif 000019
（ＡＡＰＣモチーフのシステインとｓ−ｓ架橋で結合した、ＴＧＦ−ベータ１アミノ酸配列番号１２の二量体）
14)ALDTNYCFSSTEKNCCVRQLYIDFRKDLGWKWIHEPKGYHANFCLGPCPYIWSLDTQYSKVLALYNQHNPGASAAPCCVPQALEPLPIVYYVGRKPKVEQLSNMIVRSCKCS
15)  ALDTNYCFSSTEKNCCVRQLYIDFRKDLGW
16)  KWIHEPKGYHANFCLGPCPYIWSLDTQYSK
17)  VLALYNQHNPGASAAPCCVPQALEPLPIVY
18)  YVGRKPKVEQLSNMIVRSCKCS
19)  CVRQLYIDFRKDLGWKWIHEPKGYHANFCL
20)  GPCPYIWSLDTQYSKVLALYNQHNPGASAA
21)  PCCVPQALEPLPIVYYVGRKPKVEQLSNMI
【手続補正２】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】０２５５
【補正方法】変更
【補正の内容】
【０２５５】
ＴＧＦ−ベータ２の好ましいアミノ酸配列
1)   ALDAAYCFRNVQDNCCLRPL
2)   YIDFKRDLGWKWIHEPKGYN
3)   ANFCAGACPYLWSSDTQHSR
4)   VLSLYNTINPEASASPCCVS
5)   QDLEPLTILYYIGKTPKIEQ
6)   LSNMIVKSCKCS
7)   VQDNCCLRPLYIDFKRDLGW
8)   KWIHEPKGYNANFCAGACPY
9)   LWSSDTQHSRVLSLYNTINP
10)  EASASPCCVSQDLEPLTILY
11)  YIGKTPKIEQLSNMIVKSCKCS
12)  QHSRVLSLYNTINPEASASPCCVSQDLEPLTILYYIGKTPK
2007518709.tif 000020
（ＡＳＰＣモチーフのシステインとｓ−ｓ架橋で結合した、ＴＧＦ−ベータ２アミノ酸配列番号１２の二量体）
14)ALDAAYCFRNVQDNCCLRPLYIDFKRDLGWKWIHEPKGYNANFCAGACPYLWSSDTQHSRVLSLYNTINPEASASPCCVSQDLEPLTILYYIGKTPKIEQLSNMIVKSCKCS
15)  ALDAAYCFRNVQDNCCLRPLYIDFKRDLGW
16)  KWIHEPKGYNANFCAGACPYLWSSDTQHSR
17)  VLSLYNTINPEASASPCCVSQDLEPLTILY
18)  YIGKTPKIEQLSNMIVKSCKCS
19)  CLRPLYIDFKRDLGWKWIHEPKGYNANFCA
20)  GACPYLWSSDTQHSRVLSLYNTINPEASAS
21)  PCCVSQDLEPLTILYYIGKTPKIEQLSNMI
【手続補正３】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】０２５７
【補正方法】変更
【補正の内容】
【０２５７】
ＴＧＦ−ベータ３の好ましいアミノ酸配列
1)   ALDTNYCFRNLEENCCVRPL
2)   YIDFRQDLGWKWVHEPKGYY
3)   ANFCSGPCPYLRSADTTHST
4)   VLGLYNTLNPEASASPCCVP
5)   QDLEPLTILYYVGRTPKVEQ
6)   LSNMVVKSCKCS
7    NLEENCCVRPLYIDFRQDLG
8    WKWVHEPKGYYANFCSGPCP
9)   YLRSADTTHSTVLGLYNTLN
10)  PEASASPCCVPQDLEPLTIL
11)  YYVGRTPKVEQLSNMVVKSCKCS
12)  THSTVLGLYNTLNPEASASPCCVPQDLEPLTILYYVGRTPK
2007518709.tif 000021
（ＡＳＰＣモチーフのシステインとｓ−ｓ架橋で結合した、ＴＧＦ−ベータ３アミノ酸配列番号１２の二量体）
14)ALDAAYCFRNVQDNCCLRPLYIDFKRDLGWKWIHEPKGYNANFCAGACPYLWSSDTQHSRVLSLYNTINPEASASPCCVSQDLEPLTILYYIGKTPKIEQLSNMIVKSCKCS
15)  ALDAAYCFRNVQDNCCLRPLYIDFKRDLGW
16)  KWIHEPKGYNANFCAGACPYLWSSDTQHSR
17)  VLSLYNTINPEASASPCCVSQDLEPLTILY
18)  YIGKTPKIEQLSNMIVKSCKCS
19)  CLRPLYIDFKRDLGWKWIHEPKGYNANFCA
20)  GACPYLWSSDTQHSRVLSLYNTINPEASAS
21)  PCCVSQDLEPLTILYYIGKTPKIEQLSNMI
【国際調査報告】
2007518709.tif 000022
2007518709.tif 000023
2007518709.tif 000024
2007518709.tif 000025
2007518709.tif 000026
2007518709.tif 000027
2007518709.tif 000028