(57)【要約】  本発明は、肝臓抑制性、細胞溶解性、及び胆汁うっ滞性症候群、肝臓の疾患及び損傷において発生する肝内門脈圧亢進症によって表される肝不全を治癒させるための、肝臓の再生のための、極端な環境条件下での緊張の予防のための、生体の有酸素生産性の改善のための、エネルギー供給における脂質関与の程度を増加させ、体筋肉重量の体脂肪重量に対する比率を改善するための、エンテロコッカス・ファシウムM菌株（VKPM B-3490）及びエンテロコッカス・ファシウムM-3185菌株（VKPM B-3491）、前記菌株をベースとする組成物及びビラクチン製剤の使用に関する。上記発明はまた、肝臓抑制性、細胞溶解性、及び胆汁うっ滞性症候群、肝臓の疾患及び損傷において発生する肝内門脈圧亢進症によって表される肝不全の治療及び予防のための、肝臓の再生のための、極端な環境条件下での緊張の予防のための、生体の有酸素生産性の改善のための、エネルギー供給における脂質関与の程度を増加させ、体筋肉重量の体脂肪重量に対する比率を改善するための、方法にも関する。【特許請求の範囲】
【請求項１】
肝臓抑制性、細胞溶解性、及び胆汁うっ滞性症候群、肝臓の疾患及び損傷において発生する肝内門脈圧亢進症を含む肝不全を治療するための、エンテロコッカス・フェシウムM菌株（VKPM B-3490）の使用。
【請求項２】
肝臓抑制性、細胞溶解性、及び胆汁うっ滞性症候群、肝臓の疾患及び損傷において発生する肝内門脈圧亢進症を含む肝不全を治療するための、エンテロコッカス・フェシウムM-3185菌株（VKPM B-3491）の使用。
【請求項３】
肝臓の再生のための、エンテロコッカス・フェシウムM菌株（VKPM B-3490）の使用。
【請求項４】
肝臓の再生のための、エンテロコッカス・フェシウムM-3185菌株（VKPM B-3491）の使用。
【請求項５】
極端な環境条件下での緊張を予防するための、エンテロコッカス・フェシウムM菌株（VKPM B-3490）の使用。
【請求項６】
極端な環境条件下での緊張を予防するための、エンテロコッカス・フェシウムM-3185菌株（VKPM B-3491）の使用。
【請求項７】
生体の有酸素生産性を改善するための、エンテロコッカス・フェシウムM菌株（VKPM B-3490）の使用。
【請求項８】
生体の有酸素生産性を改善するための、エンテロコッカス・フェシウムM-3185菌株（VKPM B-3491）の使用。
【請求項９】
エネルギー供給における脂質関与の程度を増加させ、体筋肉重量の体脂肪重量に対する比率を改善するための、エンテロコッカス・フェシウムM菌株（VKPM B-3490）の使用。
【請求項１０】
エネルギー供給における脂質関与の程度を増加させ、体筋肉重量の体脂肪重量に対する比率を改善するための、エンテロコッカス・フェシウムM-3185菌株（VKPM B-3491）の使用。
【請求項１１】
肝臓抑制性、細胞溶解性、及び胆汁うっ滞性症候群、肝臓の疾患及び損傷において発生する肝内門脈圧亢進症を含む肝不全を治療するための、エンテロコッカス・ファシウムM菌株（VKPM B-3490）及びエンテロコッカス・ファシウムM-3185菌株（VKPM B-3491）をベースとする組成物の使用。
【請求項１２】
肝臓の再生のための、エンテロコッカス・ファシウムM菌株（VKPM B-3490）及びエンテロコッカス・ファシウムM-3185菌株（VKPM B-3491）をベースとする組成物の使用。
【請求項１３】
極端な環境条件下での緊張を予防するための、エンテロコッカス・ファシウムM菌株（VKPM B-3490）及びエンテロコッカス・ファシウムM-3185菌株（VKPM B-3491）をベースとする組成物の使用。
【請求項１４】
生体の有酸素生産性を改善するための、エンテロコッカス・ファシウムM菌株（VKPM B-3490）及びエンテロコッカス・ファシウムM-3185菌株（VKPM B-3491）をベースとする組成物の使用。
【請求項１５】
エネルギー供給における脂質関与の程度を増加させ、体筋肉重量の体脂肪重量に対する比率を改善するための、エンテロコッカス・ファシウムM菌株（VKPM B-3490）及びエンテロコッカス・ファシウムM-3185菌株（VKPM B-3491）をベースとする組成物の使用。
【請求項１６】
肝臓抑制性、細胞溶解性、及び胆汁うっ滞性症候群、肝臓の疾患及び損傷において発生する肝内門脈圧亢進症を含む肝不全を治療するための、エンテロコッカス・ファシウムM菌株（VKPM B-3490）の細菌集団を４０〜６０％、エンテロコッカス・ファシウムM-3185菌株（VKPM B-3491）の細菌集団を４０〜６０％、及び培地の可溶性物質を２０％以下の量で含む、「ビラクチン」製剤の使用。
【請求項１７】
肝臓の再生のための、エンテロコッカス・ファシウムM菌株（VKPM B-3490）の細菌集団を４０〜６０％、エンテロコッカス・ファシウムM-3185菌株（VKPM B-3491）の細菌集団を４０〜６０％、及び培地の可溶性物質を２０％以下の量で含む、「ビラクチン」製剤の使用。
【請求項１８】
極端な環境条件下での緊張を予防するための、エンテロコッカス・ファシウムM菌株（VKPM B-3490）の細菌集団を４０〜６０％、エンテロコッカス・ファシウムM-3185菌株（VKPM B-3491）の細菌集団を４０〜６０％、及び培地の可溶性物質を２０％以下の量で含む、「ビラクチン」製剤の使用。
【請求項１９】
生体の有酸素生産性を改善するための、エンテロコッカス・ファシウムM菌株（VKPM B-3490）の細菌集団を４０〜６０％、エンテロコッカス・ファシウムM-3185菌株（VKPM B-3491）の細菌集団を４０〜６０％、及び培地の可溶性物質を２０％以下の量で含む、「ビラクチン」製剤の使用。
【請求項２０】
エネルギー供給における脂質関与の程度を増加させ、体筋肉重量の体脂肪重量に対する比率を改善するための、エンテロコッカス・ファシウムM菌株（VKPM B-3490）の細菌集団を４０〜６０％、エンテロコッカス・ファシウムM-3185菌株（VKPM B-3491）の細菌集団を４０〜６０％、及び培地の可溶性物質を２０％以下の量で含む、「ビラクチン」製剤の使用。
【請求項２１】
肝臓抑制性、細胞溶解性、及び／又は胆汁うっ滞性症候群、肝臓の疾患及び損傷において発生する肝内門脈圧亢進症を含む肝不全を治療及び予防するための方法であって、エンテロコッカス・ファシウムM菌株（VKPM B-3490）及びエンテロコッカス・ファシウムM-3185菌株（VKPM B-3491）をベースとする組成物または製剤の、少なくとも１０11CFUの単一用量の１０〜９０日間、1日１〜３回の経口投与を含む、前記方法。
【請求項２２】
生体の有酸素生産性を改善するための方法であって、エンテロコッカス・ファシウムM菌株（VKPM B-3490）及びエンテロコッカス・ファシウムM-3185菌株（VKPM B-3491）をベースとする組成物または製剤の、少なくとも１０11CFUの単一用量の１０〜３０日間または極端な因子が作用している期間全体、その後の必要なリハビリテーション期間にわたる、1日１〜３回の経口投与を含む、前記方法。
【請求項２３】
エネルギー供給における脂質関与の程度を増加させ、体筋肉重量の体脂肪重量に対する比率を改善するための方法であって、エンテロコッカス・ファシウムM菌株（VKPM B-3490）及びエンテロコッカス・ファシウムM-3185菌株（VKPM B-3491）をベースとする組成物または製剤の、少なくとも１０11CFUの単一用量をスポーツトレーニングセッションの間または特別な身体的エクササイズを行っている時の、１日１〜３回の経口投与を含む、前記方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、医薬及びバイオテクノロジー、そして特別には、エンテロコッカス・フェシウムM菌株（VKPM B-3490）及びエンテロコッカス・フェシウムM3185菌株（VKPM B-3491）（現在はRussian National Collection of Industrial Microorganismsである、All-Union Collection of Industrial Microorganisms）の使用、並びに肝臓抑制性、細胞溶解性、及び胆汁うっ滞性症候群、肝臓の疾患及びウイルス性の、毒物による、及び他の発生メカニズムにより誘発された損傷において発生する肝内門脈圧亢進症を含む肝不全の治療（治癒）のため、肝臓再生のため、並びに極端な環境条件下での緊張症候群の予防のため、並びに肝臓における代謝過程の強化のためのそれらをベースとする組成物の使用に関する。
【背景技術】
【０００２】
肝臓保護剤、グルココルチコステロイド製剤及び／または免疫調節手段の使用を含む肝不全の治療方法が本分野で知られている（Nikitin I.G., Storozbakov G.I.//Clinical Prospects in Gastroenterology, Hepatology.−2001, No. 3, pp. 7-11; Katikova O. Yu. et al.//Problems of Medical Chemistry.−2001, vol. 47, Issue 6; Robert P Perrillo et al.// Hepatology−1999, vol. 30-No. 4, Pt. 2:301A(Abstruct No. 561); Glue P, et al.//Clinical Pharmacological Therapy.−2000, vol. 68, pp. 556-567）。上記方法は、特に持続投与における禁忌、及び他の場合においては低い有効性の両方によるそれらの限定された用途のために不利である。
【０００３】
肝臓中での代謝過程を強化し、そして極端な環境条件下での緊張症候群を予防するための方法も知られており、該方法は、タンパク同化ホルモン、アンチヒポキサント（antihypoxant）剤及び／又はアクトプロテクティブ（actoprotective）剤を含む（Bulanov Yu.B., Anabolics.Moscow, 1993）。上記方法は、副作用の根源が持続投与にあり、麻薬製剤と並んで、いくつかの病気、特に肝臓病のケースにおけるそれらの使用のかなりの制限によって不利である。
【０００４】
エンテロコッカス・フェシウムM菌株（VKPM B-3490）及びエンテロコッカス・フェシウムM-３１８５菌株（VKPM B-3491）並びにそれらをベースとする組成物であって、該菌株を０．５対１．５及び１．５対０．５の比率で免疫調節剤として含み、免疫状態、ウイルス疾患に対する耐性、ストレス耐性を向上させる組成物が本分野で知られている（PCT/RU96.00132）。
【０００５】
本発明は、肝臓の疾患及び損傷のケースにおいて薬用の及び予防的な剤として使用することによって、肝不全を治療し、肝臓中の代謝過程を強化し、そして極端な環境条件下での緊張症候群を予防するために、並びにエンテロコッカス・フェシウムM菌株（VKPM B-3490）及びエンテロコッカス・フェシウムM-3185菌株（VKPM B-3491）、それらをベースとする組成物及び「ビラクチン（Bilaktin）」製剤を投与することによって、肝臓における代謝過程を強化し、そして緊張症候群を予防するために、既知の方法の不利益を克服することにむけられている。
【０００６】
発明の要約
著者らは、先に知られたエンテロコッカス・フェシウムM菌株（VKPM B-3490）及びエンテロコッカス・フェシウムM-3185菌株（VKPM B-3491）並びに先に知られた組成物の、肝臓の疾患及び損傷の治療及び予防のため、緊張の予防のため、並びに肝臓における代謝過程の強化のための高い治療効果を思いがけなく発見した。
【０００７】
本発明は、肝臓抑制性、細胞溶解性、及び胆汁うっ滞性症候群、肝臓の疾患及び損傷における肝内門脈圧亢進症を含む肝不全の治療のため、肝臓再生のため、極端な環境条件下での緊張症候群の予防のため、生体の有酸素生産性の改善のため、並びにエネルギー供給における脂質関与の程度を増加させ、体筋肉重量の体脂肪重量に対する比率を改善するための、エンテロコッカス・フェシウムM菌株（VKPM B-3490）及びエンテロコッカス・フェシウムM-3185菌株（VKPM B-3491）、それをベースとする組成物及び「ビラクチン（Bilaktin））」製剤の使用を提供する。
【０００８】
本発明はさらに、肝臓抑制性、細胞溶解性、及び／または胆汁うっ滞性症候群、肝臓の疾患及び損傷における肝内門脈圧亢進症を含む肝不全の治療及び予防方法；生体の有酸素生産性の改善方法及びエネルギー供給における脂質関与の程度を増加させ、体筋肉重量の体脂肪重量に対する比率を改善する方法を提供する。
【０００９】
発明の詳細な説明
ヒトの体の最大の器官である肝臓は、消化、代謝、血液循環の過程に参加し、体内環境の定常性を維持することを目的とする、特別な保護的、解毒、酵素的及び排出機能をはたす。わずかに挙げると、異なる病因による感染、毒物、機械的損傷、（かなりの身体的負荷、高温を含む）極端な環境因子の作用は、機能障害、肝臓の疾患及び損傷の発生の原因となる。肝臓の機能不全は、かなりの程度、肝細胞の細胞膜の透過性の変化によって引き起こされ、肝臓による代謝の乱れ及び血液中のある物質の含量の増加を導き、その含量のモニタリングは肝臓の疾患及び損傷の診断に使用されている。かかる物質は以下の：
アラニン−アミノトランスフェラーゼ（ALT）、
アスパルテート−アミノトランスフェラーゼ（AST）、
ガンマ−グルタミルトランスペプチダーゼ（GGTP）、
アルカリホスファターゼ（AP）、
ビリルビン、
コレステロール、
を含む。
【００１０】
肝臓は、炭水化物、タンパク質及び脂肪代謝における決定的なステップを担っている。生体の有酸素生産性のレベルは、コリ回路で肝臓において起こる乳酸からグリコーゲンへの変換の速度に直接に関連しており：エネルギー消費及びADPからATPへの還元を提供するには不十分な酸素供給による筋肉内の集中的な作業において、（O2の関与しない）炭水化物の嫌気的消化の過程−解糖が起こることが知られている。得られた乳酸は血液中に入り、肝臓への血流中に入ったあとグリコーゲンに変換される。肝臓中の乳酸の約２０％が、酸素の存在下で二酸化炭素と水に酸化され、それによって乳酸からグリコーゲンへの変換過程へのエネルギーを提供する。身体的負荷レベルが、肝臓の機能が反応物である乳酸をすべてグリコーゲンに変換する点である有酸素閾値と呼ばれる値を超えると、乳酸が生体内に蓄積し始め、血液のpＨが低下し、代謝過程が妨害され、エネルギーの蓄えが急速に失われ、結果として、筋肉疲労が始り、身体的負荷を達成する能力が完全に失われる。
【００１１】
生体のエネルギー所要量を提供するために、脂肪酸総量の少なくとも６０％の酸化を肝臓が保障している。「疲労毒素」と呼ばれる、アセトン及びｂ−ヒドロキシブチル酸、アセト酢酸、アセトオキシブチル酸（「ケトン体」）などの大量の中間産物が脂肪酸の酸化の間に形成される。ケトン体のさらなる分解は予備的にかなりのエネルギー消費を必要とする。集中的な身体的負荷によって、少なくとも少量がケトン体の「燃焼」のために必要とされるグルコースが不足している条件下では、脂肪酸酸化の過程はケトン体の形成段階においてブロックされ、乳酸とともに血液のpHを酸性側にシフトし、疲労症候群を形成する。生体のエネルギー源である炭水化物及び脂質が使い果たされるか又はエネルギー支出の要求量をつくることができない条件下では、生体はその目的のためにタンパク物質を使い始め、それは、ついに筋肉系のるいそうを起こす。
【００１２】
正常の条件下では、肝臓の細胞（肝細胞）の有糸分裂は、むしろ稀な細胞でしか起こらない（正常条件下では肝細胞有糸分裂率は０．０００３％）。肝細胞の有糸分裂活性の刺激は有糸分裂過程の完結を保障し、適切な時期の肝細胞の新生、損傷を受けた細胞の交換、小葉及びセグメントの修復に貢献する。
【００１３】
既知のエンテロコッカス・フェシウムM菌株（VKPM B-3490）及びエンテロコッカス・フェシウムM-3185菌株（VKPM B-3491）並びにそれらをベースとする組成物の、肝臓の異なる病気及び機能障害の治療及び予防のための使用は、予想外に高い治療効果をともなって、肝臓障害の治療期間を短縮し、肝臓中での再生過程の活性を亢進し、肝機能不全の進行の程度を低下させ、免疫系の障害を修正し、生体の有酸素生産性を改善し、エネルギー供給における脂質の関与の程度を増加させ、そして体筋肉重量の体脂肪重量に対する比率を改善することを可能とした。
【００１４】
本発明は、肝不全の治療のため、及びさらなる又は単独療法としてのプロトタイプに従う肝臓の再生のため、及び生体の有酸素生産性の増加のため、エネルギー供給における脂質の関与の程度を増加させ、そして体筋肉重量の体脂肪重量に対する比率を改善するため、及び、緊張症候群の予防のための治療計画を提供し、経口投与用に製剤が患者に処方され、該製剤は生きたエンテロコッカス・ファシウムM菌株（VKPM B-3490）及びエンテロコッカス・フェシウムM-3185菌株（VKPM B-3491）の単独培養物を少なくとも１０11CFUの用量で含み、1日１又は３回、１０〜９０日間又は極端な因子が作用している間ずっと、経口用の製剤が処方され、必要なリハビリテーション期間がその後にある。
【００１５】
肝不全の治療のための上記菌株及びそれらをベースとする組成物の使用は、肝臓抑制性、細胞溶解性、及び胆汁うっ滞性症候群の持続をかなり低下させ、肝臓の合成機能を改善し、免疫障害を修正し、エネルギー過程を刺激することを可能とし、これは治療結果及び患者の生活の質の改善にかなりの貢献をする。
【００１６】
肝臓再生のための上記菌株及びそれらをベースとする組成物の使用は、肝細胞の有糸分裂活性を刺激し、有糸分裂過程の完結を保障し、そして肝臓再生速度を増加させることを可能とする。
【００１７】
緊張症候群の予防のための、生体の有酸素生産性を改善するための、そしてエネルギー供給における脂質の関与の程度を増加して体筋肉重量の体脂肪重量に対する比率を改善するための上記菌株及びそれらをベースとする組成物の使用は、肝臓のコリ回路における乳酸からグルコースへの還元を増加し、エネルギー供給に参加する脂質の比率を増加させることによって肝細胞の細胞代謝を強化することを可能とする。
【００１８】
肝不全を治療し、そして肝臓の再生を促進し、生体の有酸素生産性を改善し、エネルギー供給における脂質の関与の程度を増加して体筋肉重量の体脂肪重量に対する比率を改善し、緊張症候群を予防することにおける、エンテロコッカス・ファシウムM菌株（VKPM B-3490）及びエンテロコッカス・フェシウムM-3185菌株（VKPM-3491）の高い有効性を考慮すると、「ビラクチン」製剤（登録証番号第004339.P.643.07.2002号）がこれらの菌株をベースとして開発された。
【００１９】
「ビラクチン」製剤は通常、カプセル及び／又は錠剤の形態で製造される。該製剤は以下の：
エンテロコッカス・ファシウムM（VKPM B-3490）の凍結乾燥した細菌集団、４０〜６０％
エンテロコッカス・ファシウムM-3185（VKPM B-3491）の凍結乾燥した細菌集団、４０〜６０％
２０％以下の残りの量の培地の可溶性乾燥物質
を含む。
【００２０】
本発明は、本発明をサポートすることのみを意図し、出願人の請求項の範囲を制限する基礎と考えてはならない、好ましい実施例によって例解される。当業者は、以下に示すような出願人の請求項の範囲内に間違いなく入る、本発明の他の実施態様の可能性を容易に見出すであろう。
【実施例】
【００２１】
実施例１
患者G、女性、３８歳、２００２年１２月１１日〜２００２年１２月２７日、病院の消化器科で治療を受けた。
診断：原発性胆汁性肝硬変、クラスA〜B、中度の活動性。肝脾性症候群。肝不全の程度1〜２。肝性脳障害０。
愁訴：脱力感を夕方に感じる。明白な皮膚のかゆみ、消化不良障害、黄色い皮膚外皮。
病歴から：自分が４〜５年間病気であると考えている。この２，３年は、「肝硬変、原因不明、中程度の活動性」と診断され繰り返し入院させられている。
治療：エッセンシャル（Essentiale）、カーシル（Karsil）、レガロン（Legalon）、治療中に細胞溶解性及び胆汁うっ滞性症候群の徴候の陽性の動態なし。
【００２２】
臨床処置：輸注療法、酵素療法、ビタミン。患者の入院の時点からエンテロコッカス・ファシウムM菌株（VKPM B-3490）及びエンテロコッカス・フェシウムM-3185菌株（VKPM B-3491）の単独培養の濃縮物を含む「ビラクチン」製剤を1日３回２カプセルずつ処方した。「ビラクチン」製剤の投与は、患者が退院後も継続し：２カプセル、1日３回、１ヶ月まで。
【００２３】
上記のとおりに実施した治療によって、１週間後に皮膚のかゆみが消失し、全体的な健康状態（睡眠、実効可能性（workability））が改善し、消化不良障害の徴候が軽減した。１ヶ月の製剤の摂取の後、ALTとAST指標及びGAMスケール（全体的な身体的及び精神的状態／活動性／気分のスケール（General physical and mental state/Activity/mood scale））のすべての指数が改善した。肝臓の超音波結果は、肝臓サイズの減少を示した。）
【００２４】
肝臓のバイオプシー：原発性肝硬変、Knodellスコア８
【表１】
2007522075.tif 000002
患者は顕著に改善して退院した。
【００２５】
実施例２
患者M、女性、３８歳、２００２年１０月１７日〜２００２年１１月１４日、消化器科で治療を受けた。
診断：肝硬変、外毒素病因、クラスB〜C、明らかな活動性。
愁訴：夕方に脱力感を感じ、皮膚のかゆみ、消化不良障害、腹部のサイズの増加。
病歴から：２〜３年自分が病気であると考えている。
入院の診断：肝臓中の亜代償性肝硬変
治療経過：ヘプトラル（Heptral）、デュファラック（Duphalac）、輸注療法。かかる治療の１週間後、検査指標の悪化を観察し、そしてしたがって、「ビラクチン」を患者に処方した：２カプセルを1日３回、病院での治療の完結まで。ヘプトラル及びデュファラックは保留した。
単独療法の形態の「ビラクチン」製剤投与の７日後、皮膚のかゆみが消失し、健康状態が改善し（睡眠、身体的緊張、実効可能性）、消化不良障害の徴候が軽減した。
１ヶ月後、細胞溶解性及び胆汁うっ滞性症候群を特徴付ける検査指標が正常になり、GAMスケールによるすべての指標が改善した。
【００２６】
検査研究データ
【表２】
2007522075.tif 000003
患者は良い状態で退院し、「ビラクチン」製剤を、１ヶ月間、1日１カプセルの用量で推奨した。
【００２７】
実施例３
患者M、男性、２７歳。
診断：非アルコール性脂肪性肝炎、中程度の活動性。
愁訴：日中及び夕方に意欲のない感じの脱力感。
病歴から：２００１年に、患者血液の生化学検査において、抗HB抗体が患者血液中に検出され、一方、血液はHBV-DNAに関しては陰性であった。肝臓の肝組織のバイオプシーサンプルは、HBV-DNA陽性であった。患者は抗ウイルス治療を受けた：ラミブジン（Lamivudine） 100mg/日＋レオフェロン（Rheoferon）、６mln AU×一週間に３回（６ヶ月間）;
６ヵ月後、HBV-DNAは肝臓のバイオプシーサンプル中に見出されなかった。治療にもかかわらず、細胞溶解性症候群は患者中に残存した：ALT、１４０；AST、８０；ビリルビン、２５；これが、「ビラクチン」製剤の外来患者への投与（２カプセル、１ヶ月の間、１日３回、その後、１ヶ月の間、１日１回に変更）の理由である。
【００２８】
「ビラクチン」治療によって、健康状態（睡眠、実効可能性、注意）は１週間後に改善し；良好な実効可能性が１ヶ月後もよく保たれた。
【００２９】
肝臓のバイオプシー：慢性肝炎の側面、５％までの脂肪変性、Knodellスコア９。
【００３０】
検査研究データ：
【表３】
2007522075.tif 000004
【００３１】
実施例４
「ビラクチン」製剤を、特徴のない雄性アルビノラット及び特徴のない雄性白色マウスに、胃腸内に７日間、D1=１０ｇ／ｋg、D2＝３０ｇ／kg、D3＝７０g／kgで投与した。断頭によって動物をと殺後、形態学的な検査を行った。マクロ調製物の検査は、器官に変化のないことを明らかにした。顕微鏡的検査は、分裂前期及び分裂中期から分裂終期への異なる相における多数の有糸分裂相にある肝細胞が、正常に有糸分裂する肝細胞の特徴を有さないことを明らかにした（正常の条件下では、肝細胞の有糸分裂率は０．０００３％）。多数の二核性の肝細胞も明らかとなり、これは、肝細胞の有糸分裂活性の明白な刺激、有糸分裂の完結及び肝臓再生の指標である。
【００３２】
実施例５
トレーニングキャンプコースのフレームワーク内で、高い標準的負荷のバックグラウンドに対して、５人の質の高いスポーツマンが、３週間の間に「ビラクチン」製剤（メイングループ）を受容し、他の５人の質の高いスポーツマンはプラセボ（対照グループ）を受容した。臨床検査試験及び身体的試験、６分間のトレッドバーン（treadbahn）上でのランニング中の心臓の収縮回数の測定、動脈圧の測定をする間の皮下脂肪のノギスによる測定、一般的実効可能性、乳酸グルコース含量、肝機能を特徴付けるいくつかの生化学的指標の測定を行い、体の筋肉及び脂肪の質量を特徴づける指標を、高温および低湿度において、３週間のトレーニングサイクルのはじめと終わりに測定した。
【００３３】
メイングループにおける最終の試験の結果から、負荷量の増加につれて、実効可能性のレベルがより高いこと（Cooper's試験）、乳酸の増加の無いこと、脂肪質量の減少につれて筋肉重量が安定化することが観察された。
【００３４】
肝機能を特徴づけるもの（AST、ALT、尿素）を含む生化学的指標のレベルは、正常範囲内でのみ変動した一方、対照グループのスポーツマンにおいては、ALTレベルの標準を超える増加を２つのケースにおいて記録し、３つのケースにおいてASTの増加を記録した。実験グループのスポーツマンにおいては、３週間のトレーニングコース後に、コレステロールレベルが標準範囲内に留まった一方、対照グループの２人のスポーツマンでは、該指標はトレーニングキャンプコース完了後に標準値を越えた。
【表４】
2007522075.tif 000005
【００３５】
実施例６
エンテロコッカス・ファシウムM菌株（VKPM B-3490）及びエンテロコッカス・ファシウムM-3185（VKPM B-3491）の組成物をベースとして「ビラクチン」製剤を開発した。この製剤は、肝不全の治療及び肝臓再生のため、生体の有酸素生産性を改善し、エネルギー供給における脂質の関与の程度を増加して体筋肉重量の体脂肪重量に対する比率を改善し、緊張症候群を予防することにおいて使用される。製剤の弁別的な特徴は、特別な培地及び培養条件を使用し、並びに特別な保護的培地を適用せずに細菌細胞の高い生存性を保つことを可能とする濃縮及び乾燥方法、によって達成された生きた細胞の高い濃度（コロニー形成単位―CFU/g）である。該製剤は、無毒性の調査のための包括的な複合調査をパスし、第４の毒性クラス（無毒性物質）及び第３のアレルギー化クラス（弱いアレルゲン）に割り当てられた。該製剤は、Ministry of Public Health of the Russian Federation によって生物学的に活性な食品添加物（BAA）−登録証第004339.P.643.07.2002号として登録された。
【００３６】
該製剤は、フラスコに充填した、乾燥粉末様のエンテロコッカス・ファシウムM菌株（VKPM B-3490）及びエンテロコッカス・ファシウムM-3185（VKPM B-3491）の生きた細菌細胞集団を含むカプセルの形態、またはエンテロコッカス・ファシウムM菌株（VKPM B-3490）及びエンテロコッカス・ファシウムM-3185（VKPM B-3491）の単独培養物の凍結成形したペーストを乾燥することによって調製される錠剤の形態で製造する。該製剤を経口投与する。
【００３７】
産業上利用可能性
エンテロコッカス・ファシウムM菌株（VKPM B-3490）及びエンテロコッカス・ファシウムM-3185菌株（VKPM B-3491）、エンテロコッカス・ファシウムM菌株（VKPM B-3490）及びエンテロコッカス・ファシウムM-3185菌株（VKPM B-3491）の組成物、及び「ビラクチン」製剤並びに疾患及び損傷の治療及び予防のために開発された方法は、肝臓の疾患または損傷の場合の肝不全（肝臓抑制性、細胞溶解性、及び胆汁うっ滞性症候群）の治療のため、肝臓再生のため、極端な環境条件下での緊張の予防のため、生体の有酸素生産性の改善のため、エネルギー供給における脂質の関与の程度を増加して体筋肉重量の体脂肪重量に対する比率を改善するために使用されることができる。
【００３８】
参考文献
【表５】
2007522075.tif 000006
【手続補正書】
【提出日】平成18年8月25日(2006.8.25)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
肝臓抑制性、細胞溶解性、及び胆汁うっ滞性症候群、肝臓の疾患及び損傷において発生する肝内門脈圧亢進症を含む肝不全の治療のため、肝臓の再生のため、極端な環境条件下での緊張の予防のため、生体の有酸素生産性の改善のため、又は、エネルギー供給における脂質関与の程度を増加させ、体筋肉重量の体脂肪重量に対する比率を改善するための、エンテロコッカス・フェシウムM菌株（VKPM B-3490）を含む医薬組成物。
【請求項２】
肝臓抑制性、細胞溶解性、及び胆汁うっ滞性症候群、肝臓の疾患及び損傷において発生する肝内門脈圧亢進症を含む肝不全の治療のため、肝臓の再生のため、極端な環境条件下での緊張の予防のため、生体の有酸素生産性の改善のため、又は、エネルギー供給における脂質関与の程度を増加させ、体筋肉重量の体脂肪重量に対する比率を改善するための、エンテロコッカス・フェシウムM-3185菌株（VKPM B-3491）を含む医薬組成物。
【請求項３】
肝臓抑制性、細胞溶解性、及び胆汁うっ滞性症候群、肝臓の疾患及び損傷において発生する肝内門脈圧亢進症を含む肝不全の治療のため、肝臓の再生のため、極端な環境条件下での緊張の予防のため、生体の有酸素生産性の改善のため、又は、エネルギー供給における脂質関与の程度を増加させ、体筋肉重量の体脂肪重量に対する比率を改善するための、エンテロコッカス・ファシウムM菌株（VKPM B-3490）及びエンテロコッカス・ファシウムM-3185菌株（VKPM B-3491）をベースとする医薬組成物。
【請求項４】
肝臓抑制性、細胞溶解性、及び胆汁うっ滞性症候群、肝臓の疾患及び損傷において発生する肝内門脈圧亢進症を含む肝不全の治療のため、肝臓の再生のため、極端な環境条件下での緊張の予防のため、生体の有酸素生産性の改善のため、又は、エネルギー供給における脂質関与の程度を増加させ、体筋肉重量の体脂肪重量に対する比率を改善するための、エンテロコッカス・ファシウムM菌株（VKPM B-3490）の細菌集団を４０〜６０％、エンテロコッカス・ファシウムM-3185菌株（VKPM B-3491）の細菌集団を４０〜６０％、及び培地の可溶性物質を２０％以下の量で含む、「ビラクチン」製剤。
【請求項５】
肝臓抑制性、細胞溶解性、及び胆汁うっ滞性症候群、肝臓の疾患及び損傷において発生する肝内門脈圧亢進症を含む肝不全を治療及び予防するための、エンテロコッカス・ファシウムM菌株（VKPM B-3490）及びエンテロコッカス・ファシウムM-3185菌株（VKPM B-3491）をベースとする医薬組成物または製剤であって、少なくとも１０11CFUの単一用量で１０〜９０日間、1日１〜３回、経口投与される、前記医薬組成物または製剤。
【請求項６】
生体の有酸素生産性を改善するための、エンテロコッカス・ファシウムM菌株（VKPM B-3490）及びエンテロコッカス・ファシウムM-3185菌株（VKPM B-3491）をベースとする医薬組成物または製剤であって、少なくとも１０11CFUの単一用量で１０〜３０日間または極端な因子が作用している期間全体、その後の必要なリハビリテーション期間にわたって、1日１〜３回、経口投与される、前記医薬組成物または製剤。
【請求項７】
エネルギー供給における脂質関与の程度を増加させ、体筋肉重量の体脂肪重量に対する比率を改善するための、エンテロコッカス・ファシウムM菌株（VKPM B-3490）及びエンテロコッカス・ファシウムM-3185菌株（VKPM B-3491）をベースとする医薬組成物または製剤であって、少なくとも１０11CFUの単一用量でスポーツトレーニングセッションの間または特別な身体的エクササイズを行っている時に、１日１〜３回、経口投与される、前記医薬組成物または製剤。
【国際調査報告】
2007522075.tif 000007
2007522075.tif 000008