(57)【要約】多くの金属キレーターは、細胞膜の通過を困難とする極性官能基または荷電官能基を有する。本発明のポリアミン／金属キレーター接合体は、金属キレーターである第一の部分とポリアミンである第二の部分からなり、該ポリアミン部分が生理学的ｐＨで正に荷電できる三つ以上の窒素原子を含む化合物である。スペルミン／Ｌ１接合体は、Ｌ１２１０細胞に非複合Ｌ１キレーターよりも数百倍蓄積することが示された。本発明は、金属キレーターである第一の部分とポリアミンである第二の部分からなる化合物において、該ポリアミン部分が生理学的ｐＨで正に荷電できる三つ以上の窒素原子を含む化合物、またはその塩、溶媒和物または水和物に関する。【特許請求の範囲】
【請求項１】
金属キレーターである第一の部分およびポリアミンである第二の部分を含む化合物であって、該ポリアミン部分が生理学的ｐＨで正に荷電され得る三つ以上の窒素原子を含む化合物、またはその塩、溶媒和物もしくは水和物。
【請求項２】
前記金属キレーターが、アルミニウム、スカンジウム、チタン、バナジウム、クロム、マンガン、鉄、コバルト、ニッケル、銅、亜鉛、イットリウム、ジルコニウム、モリブデン、パラジウム、銀、白金、金、カドミウム、鉛、ビスマス、水銀、ルテニウム、ロジウム、インジウム、錫、ハフニウム、タンタル、タングステン、レニウム、オスミウム、イリジウム、タリウム、ポロニウム、ランタン、セリウム、プラセオジミウム、ネオジム、プロメチウム、サマリウム、ユウロピウム、ガドリニウム、テルビウム、ジスプロシウム、ホルミウム、エルビウム、ツリウム、イッテルビウム、ルテチウム、アクチニウム、トリウム、プロトアクチニウム、ウラン、ネプツニウム、プルトニウム、アメリシウム、キュリウム、バークリウムおよびカリホルニウムからなる群より選択される金属をキレートする、請求項１に記載の化合物。
【請求項３】
前記ポリアミン部分が、ｐＨが約７．０〜約７．６である場合に、正に荷電され得る三つ以上の窒素原子を含む、請求項１に記載の化合物。
【請求項４】
前記金属キレーター部分が、鉄キレーター部分である、請求項１に記載の化合物。
【請求項５】
前記鉄キレーター部分が、約２５℃、約ｐＨ７および約０．１Ｍモル強度で、鉄（ＩＩ）または鉄（ＩＩＩ）と少なくとも約１０１２の全生成定数を有する、請求項４に記載の化合物。
【請求項６】
前記鉄キレーター部分が、約２５℃、約ｐＨ７および約０．１Ｍモル強度で、鉄（ＩＩ）または鉄（ＩＩＩ）と少なくとも約１０２５の全生成定数を有する、請求項５に記載の化合物。
【請求項７】
前記鉄キレーター部分が、約２５℃、約ｐＨ７および約０．１Ｍモル強度で、鉄（ＩＩ）または鉄（ＩＩＩ）と少なくとも約１０３５の全生成定数を有する、請求項６に記載の化合物。
【請求項８】
前記鉄キレーター部分が、二座、三座、四座または五座である、請求項５に記載の化合物。
【請求項９】
前記鉄キレーター部分が、六座、七座、八座、九座または十座である、請求項５に記載の化合物。
【請求項１０】
前記ポリアミン部分が、末端窒素により直接的または間接的に前記鉄キレーター部分に結合する、請求項５に記載の化合物。
【請求項１１】
前記ポリアミン部分および前記鉄キレーター部分が、共有結合により直接的に結合する、請求項１０に記載の化合物。
【請求項１２】
前記ポリアミン部分および前記鉄キレーター部分が、結合基により間接的に結合する、請求項１０に記載の化合物。
【請求項１３】
前記ポリアミン部分および前記鉄キレーター部分が、切断可能な官能基により直接的または間接的に結合する、請求項１０に記載の化合物。
【請求項１４】
前記鉄キレーター部分が、一つ以上のヒドロキサメート部分を含む、請求項１０に記載の化合物。
【請求項１５】
前記鉄キレーター部分が、一つ以上のカテコール部分を含む、請求項１０に記載の化合物。
【請求項１６】
前記鉄キレーター部分が、デスフェリチオシンまたはその類似体もしくは誘導体である、請求項１０に記載の化合物。
【請求項１７】
前記鉄キレーター部分が、２−（２，４−ジヒドロキシフェニル）−４（Ｓ）−メチルチアゾリン−４−カルボン酸である、請求項１６に記載の化合物。
【請求項１８】
前記鉄キレーター部分が、一つ以上のポルフィリン、アミン、ヒドロキシル、カルボキシレート、チオール、イミダゾール、フェノールまたはジチオカルバメート部分またはそれらの組合せを含む、請求項１０に記載の化合物。
【請求項１９】
前記鉄キレーター部分が、切断可能な保護基により保護される、請求項５に記載の化合物。
【請求項２０】
前記化合物への共有結合前の前記ポリアミン部分が、天然に存在するポリアミンである、請求項１０に記載の化合物。
【請求項２１】
前記ポリアミン部分が、スペルミン、スペルミジン、ノルスペルミン、ノルスペルミジン、ホモスペルミンまたはホモスペルミジンである、請求項２０に記載の化合物。
【請求項２２】
前記化合物への共有結合前の前記ポリアミン部分が、天然には存在しないポリアミンである、請求項１０に記載の化合物。
【請求項２３】
前記ポリアミン部分が、末端アルキル化されたスペルミン、スペルミジン、ノルスペルミン、ノルスペルミジン、ホモスペルミンまたはホモスペルミジンである、請求項２２に記載の化合物。
【請求項２４】
前記化合物が、鉄を含む塩である、請求項５に記載の化合物。
【請求項２５】
前記化合物が、実質的に金属を含まない、請求項１に記載の化合物。
【請求項２６】
前記化合物が、実質的に鉄を含まない、請求項１に記載の化合物。
【請求項２７】
下記構造式（Ｉ）：
【化１】
2007505044.tif 000019
によって表される化合物、またはその塩、溶媒和物もしくは水和物であって、
ここで、
ａ、ｂおよびｃはそれぞれ独立して１〜５の整数であり；
Ｒは、−Ｈまたは置換もしくは非置換の、アルキル基、アシル基もしくはアリール基であり；
Ｒ’は、−Ｈまたは置換もしくは非置換のアシル基であり；そして
Ｒ’’は、−Ｈまたは置換もしくは非置換のアルキル基である、
化合物、またはその塩、溶媒和物もしくは水和物。
【請求項２８】
ＲおよびＲ’が、両方とも−Ｈである、請求項２７に記載の化合物。
【請求項２９】
ａ、ｂおよびｃが、それぞれ独立して３または４である、請求項２８に記載の化合物。
【請求項３０】
ａが３であり、ｂが４であり、ｃが３である、請求項２９に記載の化合物。
【請求項３１】
ａ、ｂおよびｃが、それぞれ３である、請求項２９に記載の化合物。
【請求項３２】
下記構造式（ＩＩ）：
【化２】
2007505044.tif 000020
によって表される化合物、またはその塩、溶媒和物もしくは水和物であって、
ここで、
ｄ、ｅおよびｆはそれぞれ独立して１〜５の整数であり；
Ｒａは、−Ｈまたは置換もしくは非置換の、アルキル基、アシル基もしくはアリール基であり；
Ｒｂは、−Ｈ、または置換もしくは非置換のアルキル基、または一つ以上の酸素原子が間に入った置換もしくは非置換のヒドロカルビル基であり；そして
各Ｒｃは、独立して−Ｈまたは置換もしくは非置換のアシル基である、
化合物、またはその塩、溶媒和物もしくは水和物。
【請求項３３】
Ｒａおよび各Ｒｃが−Ｈである、請求項３２に記載の化合物。
【請求項３４】
ｄ、ｅおよびｆがそれぞれ独立して３または４である、請求項３３に記載の化合物。
【請求項３５】
Ｒｂが、一つ以上の酸素原子が間に入った非置換のヒドロカルビル基である、請求項３４に記載の化合物。
【請求項３６】
ｄが３であり、ｅが４であり、ｆが３である、請求項３４に記載の化合物。
【請求項３７】
Ｒｂが３，６，９−トリオキサデシル基である、請求項３６に記載の化合物。
【請求項３８】
ｄ、ｅおよびｆがそれぞれ３である、請求項３４に記載の化合物。
【請求項３９】
下記構造式（ＩＩＩ）：
【化３】
2007505044.tif 000021
によって表される化合物、またはその塩、溶媒和物もしくは水和物であって、
ここで、
ｇ、ｈおよびｉはそれぞれ独立して１〜５の整数であり；
Ｌは結合基であり；
Ｒｄは、−Ｈまたは置換もしくは非置換の、アルキル基、アシル基もしくはアリール基であり；そして
各Ｒｅは、独立して−Ｈまたは置換もしくは非置換のアシル基である、
化合物、またはその塩、溶媒和物もしくは水和物。
【請求項４０】
Ｒｄおよび各Ｒｅが−Ｈである、請求項３９に記載の化合物。
【請求項４１】
ｇ、ｈおよびｉがそれぞれ独立して３または４である、請求項４０に記載の化合物。
【請求項４２】
Ｌが置換または非置換のアルキレン基である、請求項４１に記載の化合物。
【請求項４３】
ｇ、ｈおよびｉがそれぞれ３である、請求項４２に記載の化合物。
【請求項４４】
Ｌがペンタメチレン基である、請求項４３に記載の化合物。
【請求項４５】
ｇが３であり、ｈが４であり、ｉが３である、請求項４２に記載の化合物。
【請求項４６】
下記構造式（ＶＩＩ）：
【化４】
2007505044.tif 000022
によって表される化合物、またはその塩、溶媒和物もしくは水和物であって、
ここで、
ｊおよびｋはそれぞれ独立して１〜５の整数であり；
ｍは１〜１２の整数であり；
Ｒｆは、−Ｈまたは置換もしくは非置換の、アルキル基、アシル基もしくはアリール基であり；
Ｒｇは、−Ｈまたは置換もしくは非置換のアシル基であり；
Ｒｈは、−Ｈまたは置換もしくは非置換のアルキル基またはアリール基であり；
Ｒｉは、−Ｈ、または置換もしくは非置換のアルキル基であり；そして
ＲｊおよびＲｋは、それぞれ独立して−Ｈまたは置換もしくは非置換のアルキル基である、
化合物、またはその塩、溶媒和物もしくは水和物。
【請求項４７】
Ｒｆが−Ｈである、請求項４６に記載の化合物。
【請求項４８】
ｊおよびｋがそれぞれ３であり、ｍが３〜６の整数である、請求項４７に記載の化合物。
【請求項４９】
Ｒｇが−Ｈまたは非置換のアシル基であり、Ｒｈが−Ｈまたは非置換のアルキル基であり、Ｒｉが非置換のアルキル基である、請求項４７に記載の化合物。
【請求項５０】
ｊおよびｋがそれぞれ３であり、ｍが４であり、Ｒｇ、ＲｊおよびＲｋがそれぞれ−Ｈであり、Ｒｈがエチル基であり、Ｒｉがメチル基である、請求項４７に記載の化合物。
【請求項５１】
薬学的に受容可能なキャリアまたは希釈剤と、金属キレーターである第一の部分およびポリアミンである第二の部分を含む化合物またはその塩、溶媒和物もしくはその水和物とを含有する薬学的組成物であって、該ポリアミン部分は、生理学的ｐＨで正に荷電され得る三つ以上の窒素原子を含む、薬学的組成物。
【請求項５２】
前記金属キレーターが、アルミニウム、スカンジウム、チタン、バナジウム、クロム、マンガン、鉄、コバルト、ニッケル、銅、亜鉛、イットリウム、ジルコニウム、モリブデン、パラジウム、銀、白金、金、カドミウム、鉛、ビスマス、水銀、ルテニウム、ロジウム、インジウム、錫、ハフニウム、タンタル、タングステン、レニウム、オスミウム、イリジウム、タリウム、ポロニウム、ランタン、セリウム、プラセオジミウム、ネオジム、プロメチウム、サマリウム、ユウロピウム、ガドリニウム、テルビウム、ジスプロシウム、ホルミウム、エルビウム、ツリウム、イッテルビウム、ルテチウム、アクチニウム、トリウム、プロトアクチニウム、ウラン、ネプツニウム、プルトニウム、アメリシウム、キュリウム、バークリウムおよびカリホルニウムからなる群より選択される金属をキレートする、請求項５１に記載の薬学的組成物。
【請求項５３】
前記ポリアミン部分が、ｐＨが約７．０〜約７．６である場合に、正に荷電され得る三つ以上の窒素原子を含む、請求項５１に記載の薬学的組成物。
【請求項５４】
前記金属キレーター部分が、鉄キレーター部分である、請求項５１に記載の薬学的組成物。
【請求項５５】
前記鉄キレーター部分が、約２５℃、約ｐＨ７および約０．１Ｍモル強度で、鉄（ＩＩ）または鉄（ＩＩＩ）と少なくとも約１０１２の全生成定数を有する、請求項５４に記載の薬学的組成物。
【請求項５６】
前記鉄キレーター部分が、二座、三座、四座または五座である、請求項５４に記載の薬学的組成物。
【請求項５７】
前記鉄キレーター部分が、六座、七座、八座、九座または十座である、請求項５４に記載の薬学的組成物。
【請求項５８】
前記ポリアミン部分が、末端窒素により直接的または間接的に前記鉄キレーター部分に結合する、請求項５４に記載の薬学的組成物。
【請求項５９】
前記化合物への共有結合前の前記ポリアミン部分が、天然に存在するポリアミンである、請求項５８に記載の薬学的組成物。
【請求項６０】
前記化合物への共有結合前の前記ポリアミン部分が、天然には存在しないポリアミンである、請求項５８に記載の薬学的組成物。
【請求項６１】
前記ポリアミン部分および前記鉄キレーター部分が、共有結合により直接的に結合する、請求項５８に記載の薬学的組成物。
【請求項６２】
前記ポリアミン部分および前記鉄キレーター部分が、結合基により間接的に結合する、請求項５８に記載の薬学的組成物。
【請求項６３】
前記鉄キレーター部分が、切断可能な保護基により保護される、請求項５４に記載の薬学的組成物。
【請求項６４】
薬学的に受容可能なキャリアまたは希釈剤および下記構造式（Ｉ）：
【化５】
2007505044.tif 000023
によって表される化合物、またはその塩、溶媒和物もしくは水和物を含有する薬学的組成物であって、
ここで、
ａ、ｂおよびｃはそれぞれ独立して１〜５の整数であり；
Ｒは、−Ｈまたは置換もしくは非置換の、アルキル基、アシル基もしくはアリール基であり；
Ｒ’は、−Ｈまたは置換もしくは非置換のアシル基であり；そして
Ｒ’’は、−Ｈまたは置換もしくは非置換のアルキル基である、
薬学的組成物。
【請求項６５】
ＲおよびＲ’が両方とも−Ｈであり、ａが３であり、ｂが４であり、ｃが３である、請求項６４に記載の薬学的組成物。
【請求項６６】
薬学的に受容可能なキャリアまたは希釈剤および下記構造式（ＩＩ）：
【化６】
2007505044.tif 000024
によって表される化合物、またはその塩、溶媒和物もしくは水和物を含有する薬学的組成物であって、
ここで、
ｄ、ｅおよびｆはそれぞれ独立して１〜５の整数であり；
Ｒａは、−Ｈまたは置換もしくは非置換の、アルキル基、アシル基もしくはアリール基であり；
Ｒｂは、−Ｈ、または置換もしくは非置換のアルキル基、または一つ以上の酸素原子が間に入った置換もしくは非置換のヒドロカルビル基であり；そして
各Ｒｃは、独立して−Ｈまたは置換もしくは非置換のアシル基である、
薬学的組成物。
【請求項６７】
Ｒａおよび各Ｒｃが−Ｈであり、ｄが３であり、ｅが４であり、ｆが３であり、Ｒｂが３，６，９−トリオキサデシル基である、請求項６６に記載の薬学的組成物。
【請求項６８】
薬学的に受容可能なキャリアまたは希釈剤および下記構造式（ＩＩＩ）：
【化７】
2007505044.tif 000025
によって表される化合物、またはその塩、溶媒和物もしくは水和物を含有する薬学的組成物であって、
ここで、
ｇ、ｈおよびｉはそれぞれ独立して１〜５の整数であり；
Ｌは結合基であり；
Ｒｄは、−Ｈまたは置換もしくは非置換の、アルキル基、アシル基もしくはアリール基であり；そして
各Ｒｅは、独立して−Ｈまたは置換もしくは非置換のアシル基である、
薬学的組成物。
【請求項６９】
Ｒｄおよび各Ｒｅが−Ｈであり、ｇ、ｈおよびｉがそれぞれ３であり、Ｌがペンタメチレン基である、請求項６８に記載の薬学的組成物。
【請求項７０】
薬学的に受容可能なキャリアまたは希釈剤および下記構造式（ＶＩＩ）：
【化８】
2007505044.tif 000026
によって表される化合物、またはその塩、溶媒和物もしくは水和物を含有する薬学的組成物であって、
ここで、
ｊおよびｋはそれぞれ独立して１〜５の整数であり；
ｍは１〜１２の整数であり；
Ｒｆは、−Ｈまたは置換もしくは非置換の、アルキル基、アシル基もしくはアリール基であり；
Ｒｇは、−Ｈまたは置換もしくは非置換のアシル基であり；
Ｒｈは、−Ｈまたは置換もしくは非置換の、アルキルまたはアリール基であり；
Ｒｉは、−Ｈ、または置換もしくは非置換のアルキル基であり；そして
ＲｊおよびＲｋは、それぞれ独立して−Ｈまたは置換もしくは非置換のアルキル基である、
薬学的組成物。
【請求項７１】
ｊおよびｋがそれぞれ３であり、ｍが４であり、Ｒｆ、Ｒｇ、ＲｊおよびＲｋがそれぞれ−Ｈであり、Ｒｈがエチル基であり、Ｒｉがメチル基である、請求項７０に記載の薬学的組成物。
【請求項７２】
被験体における癌または腫瘍を治療する方法であって、薬学的に受容可能なキャリアまたは希釈剤と、金属キレーターである第一の部分およびポリアミンである第二の部分を含む化合物またはその塩、溶媒和物もしくはその水和物とを含有する薬学的組成物を治療有効量、該被験体に投与する工程を包含し、該ポリアミン部分は、生理学的ｐＨで正に荷電され得る三つ以上の窒素原子を含む、方法。
【請求項７３】
前記ポリアミン部分が、ｐＨが約７．０〜約７．６である場合に、正に荷電され得る三つ以上の窒素原子を含む、請求項７２に記載の方法。
【請求項７４】
前記金属キレーター部分が、鉄キレーター部分である、請求項７２に記載の方法。
【請求項７５】
前記金属キレーター部分が、約２５℃、約ｐＨ７および約０．１Ｍモル強度で、鉄（ＩＩ）または鉄（ＩＩＩ）と少なくとも約１０１２の全生成定数を有する、請求項７４に記載の方法。
【請求項７６】
前記鉄キレーター部分が、二座、三座、四座または五座である、請求項７５に記載の方法。
【請求項７７】
前記鉄キレーター部分が、六座以上である、請求項７５に記載の方法。
【請求項７８】
前記ポリアミン部分が、末端窒素により直接的または間接的に前記金属キレーター部分に結合する、請求項７５に記載の方法。
【請求項７９】
前記化合物への共有結合前の前記ポリアミン部分が、天然に存在するポリアミンである、請求項７５に記載の方法。
【請求項８０】
前記化合物への共有結合前の前記ポリアミン部分が、天然には存在しないポリアミンである、請求項７５に記載の方法。
【請求項８１】
前記ポリアミン部分および前記鉄キレーター部分が、共有結合により直接的に結合する、請求項７８に記載の方法。
【請求項８２】
前記ポリアミン部分および前記鉄キレーター部分が、結合基により間接的に結合する、請求項７８に記載の方法。
【請求項８３】
前記鉄キレーター部分が、切断可能な保護基により保護される、請求項７５に記載の方法。
【請求項８４】
さらに、前記被験体に一つ以上のポリアミン合成阻害剤を投与する工程を包含する、請求項７５に記載の方法。
【請求項８５】
前記ポリアミン合成阻害剤が、オルニチンデカルボキシラーゼ阻害剤である、請求項８４に記載の方法。
【請求項８６】
前記ポリアミン合成阻害剤が、Ｓ−アデノシルメチオニンデカルボキシラーゼ阻害剤である、請求項８４に記載の方法。
【請求項８７】
前記ポリアミン合成阻害剤が、スペルミジンシンターゼ阻害剤である、請求項８４に記載の方法。
【請求項８８】
前記ポリアミン合成阻害剤が、スペルミンシンターゼ阻害剤である、請求項８４に記載の方法。
【請求項８９】
さらなる抗腫瘍剤を被験体に投与する工程をさらに包含する、請求項７５に記載の方法。
【請求項９０】
被験体における癌または腫瘍を治療する方法であって、該方法は、薬学的に受容可能なキャリアまたは希釈剤および下記構造式（Ｉ）：
【化９】
2007505044.tif 000027
によって表される化合物、またはその塩、溶媒和物もしくは水和物を含有する薬学的組成物の治療有効量を該被験体に投与する工程を包含し、
ここで、
ａ、ｂおよびｃはそれぞれ独立して１〜５の整数であり；
Ｒは、−Ｈまたは置換もしくは非置換の、アルキル基、アシル基もしくはアリール基であり；
Ｒ’は、−Ｈまたは置換もしくは非置換のアシル基であり；そして
Ｒ’’は、−Ｈまたは置換もしくは非置換のアルキル基である。
、方法。
【請求項９１】
前記ＲおよびＲ’が両方とも−Ｈであり、ａが３であり、ｂが４であり、ｃが３である、請求項９０に記載の方法。
【請求項９２】
被験体における癌または腫瘍を治療する方法であって、該方法は、薬学的に受容可能なキャリアまたは希釈剤および下記構造式（ＩＩ）：
【化１０】
2007505044.tif 000028
によって表される化合物、またはその塩、溶媒和物もしくは水和物を含有する薬学的組成物の治療有効量を該被験体に投与する工程を包含し、
ここで、
ｄ、ｅおよびｆはそれぞれ独立して１〜５の整数であり；
Ｒａは、−Ｈまたは置換もしくは非置換の、アルキル基、アシル基もしくはアリール基であり；
Ｒｂは、−Ｈ、または置換もしくは非置換のアルキル基、または一つ以上の酸素原子が間に入った置換もしくは非置換のヒドロカルビル基であり；そして
各Ｒｃは、独立して−Ｈまたは置換もしくは非置換のアシル基である、
方法。
【請求項９３】
Ｒａおよび各Ｒｃが−Ｈであり、ｄが３であり、ｅが４であり、ｆが３であり、Ｒｂが３，６，９−トリオキサデシル基である、請求項９２に記載の方法。
【請求項９４】
被験体における癌または腫瘍を治療する方法であって、該方法は、薬学的に受容可能なキャリアまたは希釈剤および下記構造式（ＩＩＩ）：
【化１１】
2007505044.tif 000029
によって表される化合物、またはその塩、溶媒和物もしくは水和物を含有する薬学的組成物の治療有効量を該被験体に投与する工程を包含し、
ここで、
ｇ、ｈおよびｉはそれぞれ独立して１〜５の整数であり；
Ｌは結合基であり；
Ｒｄは、−Ｈまたは置換もしくは非置換の、アルキル基、アシル基もしくはアリール基であり；そして
各Ｒｅは、独立して−Ｈまたは置換もしくは非置換のアシル基である、
方法。
【請求項９５】
Ｒｄおよび各Ｒｅが−Ｈであり、ｇ、ｈおよびｉがそれぞれ３であり、Ｌがペンタメチレン基である、請求項９４に記載の方法。
【請求項９６】
被験体における癌または腫瘍を治療する方法であって、該方法は、薬学的に受容可能なキャリアまたは希釈剤および下記構造式（ＶＩＩ）：
【化１２】
2007505044.tif 000030
によって表される化合物、またはその塩、溶媒和物もしくは水和物を含有する薬学的組成物の治療有効量を該被験体に投与する工程を包含し、
ここで、
ｊおよびｋはそれぞれ独立して１〜５の整数であり；
ｍは１〜１２の整数であり；
Ｒｆは、−Ｈまたは置換もしくは非置換の、アルキル基、アシル基もしくはアリール基であり；
Ｒｇは、−Ｈまたは置換もしくは非置換のアシル基であり；
Ｒｈは、−Ｈまたは置換もしくは非置換の、アルキル基もしくはアリール基であり；
Ｒｉは、−Ｈ、または置換もしくは非置換のアルキル基であり；そして
ＲｊおよびＲｋは、それぞれ独立して−Ｈまたは置換もしくは非置換のアルキル基である、
方法。
【請求項９７】
ｊおよびｋがそれぞれ３であり、ｍが４であり、Ｒｆ、Ｒｇ、ＲｊおよびＲｋがそれぞれ−Ｈであり、Ｒｈがエチル基であり、Ｒｉがメチル基である、請求項９６に記載の方法。
【請求項９８】
金属過多状態を罹患する被験体を治療する方法であって、該方法は、薬学的に受容可能なキャリアまたは希釈剤と、金属キレーターである第一の部分およびポリアミンである第二の部分を含む化合物またはその塩、溶媒和物もしくはその水和物とを含有する薬学的組成物の治療有効量を該被験体に投与する工程を包含し、該ポリアミン部分が生理学的ｐＨで正に荷電され得る三つ以上の窒素原子を含む、方法。
【請求項９９】
前記ポリアミン部分が、ｐＨが約７．０〜約７．６である場合に正に荷電され得る三つ以上の窒素原子を含む、請求項９８に記載の方法。
【請求項１００】
前記金属キレーター部分が、鉄キレーター部分である、請求項９９に記載の方法。
【請求項１０１】
前記金属過多状態が、鉄過多状態である、請求項１００に記載の方法。
【請求項１０２】
前記鉄過多状態が、全体的な鉄過多により特徴付けられる、請求項１０１に記載の方法。
【請求項１０３】
前記鉄過多状態が、原発性ヘモクロマトーシスである、請求項１０２に記載の方法。
【請求項１０４】
前記鉄過多状態が、慢性の輸血により引き起こされる、請求項１０２に記載の方法。
【請求項１０５】
前記鉄過多状態が、局所的な鉄過多により特徴付けられる、請求項１０１に記載の方法。
【請求項１０６】
前記鉄過多状態が、神経学的疾患または神経変性疾患により特徴付けられる、請求項１０５に記載の方法。
【請求項１０７】
前記鉄キレーター部分が、約２５℃、約ｐＨ７および約０．１Ｍモル強度で、鉄（ＩＩ）または鉄（ＩＩＩ）と少なくとも約１０１２の全生成定数を有する、請求項１０１に記載の方法。
【請求項１０８】
前記鉄キレーター部分が、六座、七座、八座、九座または十座である、請求項１０１に記載の方法。
【請求項１０９】
前記ポリアミン部分が、末端窒素により直接的または間接的に前記金属キレーター部分に結合する、請求項１０１に記載の方法。
【請求項１１０】
前記化合物への共有結合前の前記ポリアミン部分が、天然に存在するポリアミンである、請求項１０１に記載の方法。
【請求項１１１】
前記ポリアミン部分および前記鉄キレーター部分が、共有結合により直接的に結合する、請求項１０９に記載の方法。
【請求項１１２】
前記ポリアミン部分および前記鉄キレーター部分が、結合基により間接的に結合する、請求項１０９に記載の方法。
【請求項１１３】
前記鉄キレーター部分が、切断可能な保護基により保護される、請求項１０１に記載の方法。
【請求項１１４】
前記被験体に一つ以上のポリアミン合成阻害剤を投与する工程をさらに包含する、請求項１０１に記載の方法。
【請求項１１５】
鉄過多状態を罹患する被験体を治療する方法であって、該方法は、薬学的に受容可能なキャリアまたは希釈剤および下記構造式（Ｉ）：
【化１３】
2007505044.tif 000031
によって表される化合物、またはその塩、溶媒和物もしくは水和物を含有する薬学的組成物の治療有効量を該被験体に投与する工程を包含し、
ここで、
ａ、ｂおよびｃはそれぞれ独立して１〜５の整数であり；
Ｒは、−Ｈまたは置換もしくは非置換の、アルキル基、アシル基もしくはアリール基であり；
Ｒ’は、−Ｈまたは置換もしくは非置換のアシル基であり；そして
Ｒ’’は、−Ｈまたは置換もしくは非置換のアルキル基である、
方法。
【請求項１１６】
ＲおよびＲ’が両方とも−Ｈであり、ａが３であり、ｂが４であり、ｃが３である、請求項１１５に記載の方法。
【請求項１１７】
鉄過多状態を罹患する被験体を治療する方法であって、該方法は、薬学的に受容可能なキャリアまたは希釈剤および下記構造式（ＩＩ）：
【化１４】
2007505044.tif 000032
によって表される化合物、またはその塩、溶媒和物もしくは水和物を含有する薬学的組成物の治療有効量を該被験体に投与する工程を包含し、
ここで、
ｄ、ｅおよびｆはそれぞれ独立して１〜５の整数であり；
Ｒａは、−Ｈまたは置換もしくは非置換の、アルキル基、アシル基もしくはアリール基であり；
Ｒｂは、−Ｈ、または置換もしくは非置換のアルキル基、または一つ以上の酸素原子が間に入った置換または非置換のヒドロカルビル基であり；そして
各Ｒｃは、独立して−Ｈまたは置換もしくは非置換のアシル基である、
方法。
【請求項１１８】
Ｒａおよび各Ｒｃが−Ｈであり、ｄが３であり、ｅが４であり、ｆが３であり、Ｒｂが３，６，９−トリオキサデシル基である、請求項１１７に記載の方法。
【請求項１１９】
鉄過多状態を罹患する被験体を治療する方法であって、該方法は、薬学的に受容可能なキャリアまたは希釈剤および下記構造式（ＩＩＩ）：
【化１５】
2007505044.tif 000033
によって表される化合物、またはその塩、溶媒和物もしくは水和物を含有する薬学的組成物の治療有効量を該被験体に投与する工程を包含し、
ここで、
ｇ、ｈおよびｉはそれぞれ独立して１〜５の整数であり；
Ｌは結合基であり；
Ｒｄは、−Ｈまたは置換もしくは非置換の、アルキル基、アシル基もしくはアリール基であり；そして
各Ｒｅは、独立して−Ｈまたは置換もしくは非置換のアシル基である、
方法。
【請求項１２０】
ＲｄおよびＲｅが−Ｈであり、ｇ、ｈおよびｉがそれぞれ３であり、Ｌがペンタメチレン基である、請求項１１９に記載の方法。
【請求項１２１】
鉄過多状態を罹患する被験体を治療する方法であって、該方法は、薬学的に受容可能なキャリアまたは希釈剤および下記構造式（ＶＩＩ）：
【化１６】
2007505044.tif 000034
によって表される化合物、またはその塩、溶媒和物もしくは水和物を含有する薬学的組成物の治療有効量を該被験体に投与する工程を包含し、
ここで、
ｊおよびｋはそれぞれ独立して１〜５の整数であり；
ｍは１〜１２の整数であり；
Ｒｆは、−Ｈまたは置換もしくは非置換の、アルキル基、アシル基もしくはアリール基であり；
Ｒｇは、−Ｈまたは置換もしくは非置換のアシル基であり；
Ｒｈは、−Ｈまたは置換もしくは非置換の、アルキル基またはアリール基であり；
Ｒｉは、−Ｈ、または置換もしくは非置換のアルキル基であり；そして
ＲｊおよびＲｋは、それぞれ独立して−Ｈまたは置換もしくは非置換のアルキル基である、
方法。
【請求項１２２】
ｊおよびｋがそれぞれ３であり、ｍが４であり、Ｒｆ、Ｒｇ、ＲｊおよびＲｋが、それぞれ−Ｈであり、Ｒｈがエチル基であり、Ｒｉがメチル基である、請求項１２１に記載の方法。
【請求項１２３】
酸化ストレスの治療を必要とする被験体における酸化ストレスを低減する方法であって、該方法は、薬学的に受容可能なキャリアまたは希釈剤と、金属キレーターである第一の部分およびポリアミンである第二の部分を含む化合物またはその塩、溶媒和物もしくはその水和物とを含有する薬学的組成物の治療有効量を該被験体に投与する工程を包含し、該ポリアミン部分が生理学的ｐＨで正に荷電され得る三つ以上の窒素原子を含む、方法。
【請求項１２４】
前記ポリアミン部分が、ｐＨが約７．０〜約７．６である場合に、正に荷電され得る三つ以上の窒素原子を含む、請求項１２３に記載の方法。
【請求項１２５】
前記金属キレーター部分が、鉄キレーター部分である、請求項１２３に記載の方法。
【請求項１２６】
前記鉄キレーター部分が、約２５℃、約ｐＨ７および約０．１Ｍモル強度で、鉄（ＩＩ）または鉄（ＩＩＩ）と少なくとも約１０３０の全生成定数を有する、請求項１２５に記載の方法。
【請求項１２７】
前記鉄キレーター部分が、二座、三座、四座、五座、六座、七座、八座、九座または十座である、請求項１２６に記載の方法。
【請求項１２８】
前記ポリアミン部分が、末端窒素により直接的または間接的に前記金属キレーター部分に結合する、請求項１２６に記載の方法。
【請求項１２９】
前記ポリアミン部分および前記鉄キレーター部分が、共有結合により直接的に結合する、請求項１２８に記載の方法。
【請求項１３０】
前記ポリアミン部分と前記鉄キレーター部分が、結合基により間接的に結合する、請求項１２８に記載の方法。
【請求項１３１】
前記鉄キレーター部分が、切断可能な保護基により保護される、請求項１２６に記載の方法。
【請求項１３２】
さらに、前記被験体に一つ以上のポリアミン合成阻害剤を投与する工程を包含する、請求項１２６に記載の方法。
【請求項１３３】
酸化ストレスの治療を必要とする被験体における酸化ストレスを低減する方法であって、該方法は、薬学的に受容可能なキャリアまたは希釈剤および下記構造式（Ｉ）：
【化１７】
2007505044.tif 000035
によって表される化合物、またはその塩、溶媒和物もしくは水和物を含有する薬学的組成物の治療有効量を該被験体に投与する工程を包含し、
ここで、
ａ、ｂおよびｃはそれぞれ独立して１〜５の整数であり；
Ｒは、−Ｈまたは置換もしくは非置換の、アルキル基、アシル基もしくはアリール基であり；
Ｒ’は、−Ｈまたは置換もしくは非置換のアシル基であり；そして
Ｒ’’は、−Ｈまたは置換もしくは非置換のアルキル基である、
方法。
【請求項１３４】
ＲおよびＲ’が両方とも−Ｈであり、ａが３であり、ｂが４であり、ｃが３である、請求項１３３に記載の方法。
【請求項１３５】
酸化ストレスの治療を必要とする被験体における酸化ストレスを低減する方法であって、該方法は、薬学的に受容可能なキャリアまたは希釈剤および下記構造式（ＩＩ）：
【化１８】
2007505044.tif 000036
によって表される化合物、またはその塩、溶媒和物もしくは水和物を含有する薬学的組成物の治療有効量を該被験体に投与する工程を包含し、
ここで、
ｄ、ｅおよびｆはそれぞれ独立して１〜５の整数であり；
Ｒａは、−Ｈまたは置換もしくは非置換の、アルキル基、アシル基もしくはアリール基であり；
Ｒｂは、−Ｈ、または置換もしくは非置換のアルキル基、または一つ以上の酸素原子が間に入った置換または非置換のヒドロカルビル基であり；そして
各Ｒｃは、独立して−Ｈまたは置換もしくは非置換のアシル基である、
方法。
【請求項１３６】
Ｒａおよび各Ｒｃが−Ｈであり、ｄが３であり、ｅが４であり、ｆが３であり、Ｒｂが３，６，９−トリオキサデシル基である、請求項１３５に記載の方法。
【請求項１３７】
酸化ストレスの治療を必要とする被験体における酸化ストレスを低減する方法であって、該方法は、薬学的に受容可能なキャリアまたは希釈剤および下記構造式（ＩＩＩ）：
【化１９】
2007505044.tif 000037
によって表される化合物、またはその塩、溶媒和物もしくは水和物を含有する薬学的組成物の治療有効量を該被験体に投与する工程を包含し、
ここで、
ｇ、ｈおよびｉはそれぞれ独立して１〜５の整数であり；
Ｌは結合基であり；
Ｒｄは、−Ｈまたは置換もしくは非置換の、アルキル基、アシル基もしくはアリール基であり；そして
各Ｒｅは、独立して−Ｈまたは置換もしくは非置換のアシル基である、
方法。
【請求項１３８】
Ｒｄおよび各Ｒｅが−Ｈであり、ｇ、ｈおよびｉがそれぞれ３であり、Ｌがペンタメチレン基である、請求項１３７に記載の方法。
【請求項１３９】
酸化ストレスの治療を必要とする被験体における酸化ストレスを低減する方法であって、該方法は、薬学的に受容可能なキャリアまたは希釈剤および下記構造式（ＶＩＩ）：
【化２０】
2007505044.tif 000038
によって表される化合物、またはその塩、溶媒和物もしくは水和物を含有する薬学的組成物の治療有効量を該被験体に投与する工程を包含し、
ここで、
ｊおよびｋはそれぞれ独立して１〜５の整数であり；
ｍは１〜１２の整数であり；
Ｒｆは、−Ｈまたは置換もしくは非置換の、アルキル基、アシル基もしくはアリール基であり；
Ｒｇは、−Ｈまたは置換もしくは非置換のアシル基であり；
Ｒｈは、−Ｈまたは置換もしくは非置換の、アルキル基またはアリール基であり；
Ｒｉは、−Ｈ、または置換もしくは非置換のアルキル基であり；そして
ＲｊおよびＲｋは、それぞれ独立して−Ｈまたは置換もしくは非置換のアルキル基である、
方法。
【請求項１４０】
ｊおよびｋはそれぞれ３であり、ｍは４であり、Ｒｆ、Ｒｇ、ＲｊおよびＲｋはそれぞれ−Ｈであり、Ｒｈはエチル基であり、Ｒｉはメチル基である、請求項１３９に記載の方法。
【請求項１４１】
金属キレーターの細胞への取り込みを高める方法であって、該方法は、ポリアミンを、任意に結合基によって間接的に該金属キレーターに共有結合させて、ポリアミン部分を有する接合体を形成する工程、および該細胞を該接合体またはその塩、溶媒和物または水和物と接触させる工程を包含し、該ポリアミン部分は、生理学的ｐＨで正に荷電され得る三つ以上の窒素原子を含む、方法。
【請求項１４２】
前記ポリアミン部分が、ｐＨが約７．０〜約７．６である場合に正に荷電され得る三つ以上の窒素原子を含む、請求項１４１に記載の方法。
【請求項１４３】
前記金属キレーター部分が、鉄キレーター部分である、請求項１４２に記載の方法。
【請求項１４４】
前記鉄キレーター部分が、約２５℃、約ｐＨ７および約０．１Ｍモル強度で、鉄（ＩＩ）または鉄（ＩＩＩ）と少なくとも約１０１２の全生成定数を有する、請求項１４３に記載の方法。
【請求項１４５】
前記鉄キレーター部分が、二座、三座、四座または五座である、請求項１４４に記載の方法。
【請求項１４６】
前記鉄キレーター部分が、六座、七座、八座、九座または十座である、請求項１４４に記載の方法。
【請求項１４７】
前記ポリアミン部分が、末端窒素により直接的または間接的に金属キレーター部分に結合する、請求項１４４に記載の方法。
【請求項１４８】
さらに、前記細胞を一つ以上のポリアミン合成阻害剤に接触させる工程を包含する、請求項１４４に記載の方法。
【請求項１４９】
被験体中の一つ以上の器官、組織、腫瘍またはそれらの組合せを画像化または検査する方法であって、該方法は、薬学的に受容可能なキャリアまたは希釈剤と、金属キレーターである第一の部分およびポリアミンである第二の部分を含む化合物の金属塩とを含有する薬学的組成物を該被験体に投与する工程、および該器官、組織、腫瘍またはこれらの組合せを画像化またはスキャニングする工程を包含し、該ポリアミン部分は、生理学的ｐＨで正に荷電され得る三つ以上の窒素原子を含む、方法。
【請求項１５０】
前記金属塩が造影剤である、請求項１４９に記載の方法。
【請求項１５１】
前記金属塩の金属が、ガドリニウム、鉄、マンガン、クロム、ジスプロシウム、テクネチウム、スカンジウム、バリウム、アルミニウムまたはホルミウムである、請求項１４９に記載の方法。
【請求項１５２】
前記画像化工程または検査工程が、Ｘ線方法を用いて実施される、請求項１４９に記載の方法。
【請求項１５３】
前記画像化工程が、磁気画像化工程である、請求項１４９に記載の方法。
【請求項１５４】
前記画像化工程が、磁気共鳴画像化工程である、請求項１５３に記載の方法。
【請求項１５５】
前記画像化工程または検査工程が、放射化学方法を用いて実施される、請求項１４９に記載の方法。
【請求項１５６】
前記金属塩が、放射性金属塩である、請求項１４９に記載の方法。
【請求項１５７】
治療を必要とする被験体中の腫瘍を治療するか、または細胞機能を阻害する方法であって、該方法は、
、薬学的に受容可能なキャリアまたは希釈剤と、金属キレーターである第一の部分およびポリアミンである第二の部分を含む化合物の放射性金属塩とを含有する薬学的組成物の治療有効量を該被験体に投与する工程を包含し、該ポリアミン部分は、生理学的ｐＨで正に荷電され得る三つ以上の窒素原子を含む、方法。
【請求項１５８】
腫瘍が治療され、該腫瘍が悪性である、請求項１５７に記載の方法。
【請求項１５９】
腫瘍が治療され、該腫瘍が良性である、請求項１５７に記載の方法。
【請求項１６０】
細胞機能が甲状腺において阻害される、請求項１５７に記載の方法。
【請求項１６１】
前記放射性金属が、６０Ｃｏ、６７Ｃｕ、９０Ｓｒ、９０Ｙ、１０６Ｒｕ、１１１Ｉｎ、１５３Ｓｍ、１８６Ｒｅ、１８８Ｒｅ、１９２Ｉｒ、１９８Ａｕ、２１０Ｐｂ、２１０Ｂｉ、２１２Ｐｂ、２１２Ｂｉおよび２４１Ａｍからなる群より選択される、請求項１５７に記載の方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
（関連出願）
本出願は、米国仮特許出願番号第６０／５０１．３４１号（２００３年９月９日出願）の利益を主張する。この出願の全体的教示は、本明細書中に参考として援用される。
（政府支援）
本発明は、米国国立衛生研究所の補助金Ｒ０１−ＤＫ４９１０８により全てまたは部分的に支援を受けた。米国政府は本発明に一定の権利を有する。
【背景技術】
【０００２】
（発明の背景）
金属イオンは、荷電中和、電圧ゲート、シグナル、酸素輸送、電子輸送、構造安定化と調節および酵素活性への寄与を含む一連の生物学的機能を有する。しかし、金属イオンの活性は金属の場所と量の両方に依存する。過剰な金属が存在するとき、または金属が望まれない場所に存在する場合、これは典型的には金属過多（ｏｖｅｒｌｏａｄ）と称される状態をもたらす。
【０００３】
金属過多状態は遺伝子欠陥（例えば、金属の過剰な吸収または過剰な蓄積）、食事または中毒から生じうる。金属過多状態は、被験体が規則的な輸血を受ける場合のある種の血症（例えば、サラセミアから生じる血症）を有する被験体にも起こる。これらの輸血からの鉄は時間とともに被験体に蓄積し、やがて生物学的損傷を引き起こす。
【０００４】
金属過多状態において最も大きな懸念となる金属は、鉄、クロムおよび銅等の酸化還元活性金属である。これらの酸化還元活性金属は、過酸化物やチオールとの反応等により被験体にフリーラジカル損傷を起こしうる。鉄（ＩＩ）および過酸化水素の反応は、ヒドロキシルラジカルを作るＦｅｎｔｏｎ反応として知られている。ヒドロキシルラジカルは非常に反応性があり、多くの有機分子から水素原子を容易に引き抜き、このことが顕著な生物学的損傷を導きうる。したがって、そのような金属過多状態は治療する必要がある。
【０００５】
金属欠乏は一般的に食事手段により治療することができるが、金属過多状態の治療はさらに困難である。金属過多疾患の治療はしばしば、過剰な金属を除去するために被験体をキレート化剤により処置することをともなう。キレート化剤は、金属に結合する一つ以上の官能基を有する。キレート官能基は極性があり、しばしば荷電しているために、キレート化剤は細胞に容易には取り込まれない。その結果、治療量のキレート化剤を細胞内で達成することが困難となることがあり、細胞から除去される金属は望まれるよりも少ない。これらの因子はキレート治療の成功を制限する。
【０００６】
また、金属キレーターは、がん等の金属過多に直接関連しない状態に利用性を有する。これらのさらなる状態の金属キレーターによる治療の成功も、細胞に輸送されるキレーターの一般的に低い濃度によって制限される。
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【０００７】
すなわち、キレート治療および金属キレーターによる他の治療の有効性を高めるためにキレート化剤の細胞への取り込みを増加させる方法を見出す必要がある。
【課題を解決するための手段】
【０００８】
（発明の要旨）
金属キレート化剤をポリアミンと反応させることにより、金属キレーターである第一の部分とポリアミンである第二の部分からなる化合物をもたらすことによって金属キレート化剤の取り込みを著しく増加させることができることが今回発見された。一例において、１−（１２−アミノ−４，９−ジアザドデシル）−２−メチル−３−ヒドロキシ−４−（１Ｈ）−ピリジドンがスペルミンと３−Ｏ−ベンジルマルトールから合成された。この化合物は、鉄（ＩＩＩ）と３：１接合体を形成することが示され、Ｌ１２１０白血病細胞のポリアミン輸送体によって、濃度勾配に対して１９００倍取り込まれた。また、この化合物は、Ｌ１２１０ネズミ白血病細胞の増殖を抑制するのにその親リガンドである１，２−ジメチル−３−ヒドロキシピリジン−４−オンよりも少なくとも２３０倍以上の活性があったように、抗がん剤としても有効である。スペルミンとポリ（ヒドロキサム酸）からなる化合物も、ポリアミン輸送体に取り込まれ、白血病細胞の増殖を抑制するのに有効であった。
【０００９】
本発明は、金属キレーターである第一の部分とポリアミンである第二の部分からなる化合物において、該ポリアミン部分が生理学的ｐＨで正に荷電できる三つ以上の窒素原子を含む化合物、またはその塩、溶媒和物または水和物に関する。そのような化合物は、本出願において、「接合体」と称される。本発明の特定の実施態様において、金属キレーターは鉄キレーターである。
【００１０】
一実施態様において、接合体は、下記構造式（Ｉ）：
【００１１】
【化２１】
2007505044.tif 000002
（式中、
ａ、ｂおよびｃはそれぞれ独立して１〜５の整数であり；
Ｒは、−Ｈまたは置換または非置換のアルキル、アシルまたはアリール基であり、好ましくは−Ｈまたは置換または非置換のアルキルまたはアリール基であり；
Ｒ’は、−Ｈまたは置換または非置換のアシル基であり；および
Ｒ’’は、−Ｈまたは置換または非置換のアルキル基である。）により表わされるか、またはその塩、溶媒和物または水和物である。
【００１２】
別の実施態様において、接合体は、下記構造式（ＩＩ）：
【００１３】
【化２２】
2007505044.tif 000003
（式中、
ｄ、ｅおよびｆはそれぞれ独立して１〜５の整数であり；
Ｒａは、−Ｈまたは置換または非置換のアルキル、アシルまたはアリール基であり、好ましくは−Ｈまたは置換または非置換のアルキルまたはアリール基であり；
Ｒｂは、−Ｈ、または置換または非置換のアルキル基、または一つ以上の酸素原子により中断された置換または非置換のヒドロカルビル基であり；および
各Ｒｃは独立して−Ｈまたは置換または非置換のアシル基である。）により表わされるか、またはその塩、溶媒和物または水和物である。
【００１４】
さらに別の実施態様において、接合体は下記構造式（ＩＩＩ）：
【００１５】
【化２３】
2007505044.tif 000004
（式中、
ｇ、ｈおよびｉはそれぞれ独立して１〜５の整数であり；
Ｌは結合基であり；
Ｒｄは、−Ｈまたは置換または非置換のアルキル、アシルまたはアリール基であり、好ましくは−Ｈまたは置換または非置換のアルキルまたはアリール基であり；および
各Ｒｅは独立して−Ｈまたは置換または非置換のアシル基である。）により表わされるか、またはその塩、溶媒和物または水和物である。
【００１６】
さらなる実施態様において、接合体は下記構造式（ＶＩＩ）：
【００１７】
【化２４】
2007505044.tif 000005
（式中、
ｊおよびｋはそれぞれ独立して１〜５の整数であり；
ｍは１〜１２の整数であり；
Ｒｆは、−Ｈまたは置換または非置換のアルキル、アシルまたはアリール基であり、好ましくは−Ｈまたは置換または非置換のアルキルまたはアリール基であり；
Ｒｇは、−Ｈまたは置換または非置換のアシル基であり；
Ｒｈは、−Ｈまたは置換または非置換のアルキルまたはアリール基であり；
Ｒｉは、−Ｈまたは置換または非置換のアルキル基であり；および
ＲｊおよびＲｋは、それぞれ独立して−Ｈまたは置換または非置換のアルキル基である。）により表わされるか、またはその塩、溶媒和物または水和物である。
【００１８】
また、本発明は、薬学的に許容される担体または希釈剤およびここに開示の接合体の一つからなる薬学的組成物を含む。
【００１９】
本発明の化合物および薬学的組成物は、該化合物および薬学的組成物を被験体に投与することからなる、被験体のがんまたは腫瘍を治療する方法に用いることができる。
【００２０】
また、本発明の化合物および薬学的組成物は、該化合物および薬学的組成物を被験体に投与することからなる、金属過多状態に苦しむ被験体を治療する方法に用いることができる。
【００２１】
さらに、本発明の化合物および薬学的組成物は、酸化ストレスの治療を必要とする被験体に、該薬学的組成物を被験体に投与することからなる、酸化ストレスを減少させる方法に用いることができる。
【００２２】
本発明の別の特徴は、ポリアミンを、任意に結合基を経て金属キレーターに共有結合して、ポリアミン部分と金属キレーター部分を有する接合体において該ポリアミン部分が生理学的ｐＨで正に荷電できる三つ以上の窒素原子を含む接合体を形成し、細胞を接合体またはその塩、溶媒和物または水和物に接触させることをからなる金属キレーターの細胞への取り込みを高める方法である。
【００２３】
また、本発明は、薬学的に許容される担体または希釈剤と、金属キレーターである第一の部分とポリアミンである第二の部分からなり、該ポリアミン部分が生理学的ｐＨで正に荷電できる三つ以上の窒素原子を含む化合物の金属塩とからなる薬学的組成物を被験体に投与し、そして器官、組織、腫瘍またはそれらの組合せを画像化またはスキャンニングすることからなる、被験体中の一つ以上の器官、組織、腫瘍またはそれらの組合せを画像化または検査する方法を含む。
【００２４】
本発明の別の実施態様は、薬学的に許容される担体または希釈剤と、金属キレーターである第一の部分とポリアミンである第二の部分からなり、該ポリアミン部分が生理学的ｐＨで正に荷電できる三つ以上の窒素原子を含む化合物の放射性金属塩とからなる薬学的組成物を被験体に投与することからなる、治療を必要とする被験体中の腫瘍を治療するか、または細胞機能を抑制する方法である。
【００２５】
本発明は、ここに開示された化合物または薬学的組成物の医学治療での使用を含む。また、本発明は、ここに開示された化合物または薬学的組成物の、ここに開示された状態の治療に用いられる医薬製造における使用も含む。
【００２６】
本発明のポリアミン／金属キレーター接合体は分子の金属キレート化性質を維持しながら、金属キレーターの細胞への取り込みを非常に向上させる利点を有する。これは、さらに高い濃度の金属キレーターが細胞中に存在することを可能とする。この増加した細胞内濃度の金属キレーターは、悪性細胞の増殖の阻止等、キレーターの治療剤としての有効性を高める。
【発明を実施するための最良の形態】
【００２７】
（発明の詳細な説明）
本発明は、金属キレーター部分とポリアミン部分からなる複合化合物およびその塩、溶媒和物および水和物に関する。該ポリアミンは、典型的には、生理学的ｐＨで正に荷電できる三つ以上の窒素原子を含む。好ましい実施態様において、該ポリアミン部分は、ｐＨが約７．０〜約７．６である場合に正に荷電できる三つ以上の窒素原子を含む。
【００２８】
金属キレーターは、ここでは、中央金属に配位結合することにより環状構造を有する接合体を形成することのできる二つ以上のドナー原子を有する分子と定義する。キレーターが全体的に正電荷または中性電荷、典型的には中性電荷を有するように、ドナー原子は加水分解可能な官能基により任意に保護することができる。金属キレーター中の負に電荷した基は加水分解可能な官能基により保護されることで未電荷の保護されたキレート化基を作ることが特に好ましい。
【００２９】
金属キレーター錯体は熱力学的に安定で、このことは、金属の配位圏から非キレート性リガンド（例えば、溶媒、特に水）が放出することから生じるエントロピーによるものと考えられる。ここで用いられるキレーターは大員環も包含するものとする。したがって、本発明の接合体中の金属キレーター部分は、金属に結合することのできる二つ以上の原子または二つ以上の官能基を有する。本発明の金属キレーター部分は、例えば、二座、三座、四座、五座、六座、七座、八座、九座または十座であることができる。一実施態様において、キレート化される金属は、鉄（ＩＩ）または鉄（ＩＩＩ）であり、金属キレーター部分は五座以下である。別の実施態様において、キレート化される金属は、鉄（ＩＩ）または鉄（ＩＩＩ）であり、金属キレーター部分は六座以上である。
【００３０】
金属キレーターは一つ以上の金属、典型的には遷移金属、主なグループの金属、重金属、ランタニドまたはアクチニドに結合することができる。アルミニウムおよびガリウムが主なグループの金属である。遷移金属として、スカンジウム、チタン、バナジウム、クロム、マンガン、鉄、コバルト、ニッケル、銅、亜鉛、イットリウム、ジルコニウム、モリブデン、パラジウム、銀、白金および金が挙げられる。重金属として、カドミウム、鉛、ビスマス、水銀、ルテニウム、ロジウム、インジウム、錫、ハフニウム、タンタル、タングステン、レニウム、オスミウム、イリジウム、タリウムおよびポロニウムが挙げられる。ランタニドとして、ランタン、セリウム、プラセオジミウム、ネオジム、プロメチウム、サマリウム、ユウロピウム、ガドリニウム、テルビウム、ジスプロシウム、ホルミウム、エルビウム、ツリウム、イッテルビウムおよびルテチウムが挙げられる。アクチニドとして、アクチニウム、トリウム、プロトアクチニウム、ウラン、ネプツニウム、プルトニウム、アメリシウム、キュリウム、バークリウムおよびカリホルニウムが挙げられる。
【００３１】
ここに開示の接合体の金属キレーター部分は、鉄（ＩＩ）または鉄（ＩＩＩ）等の金属イオンとのその生成定数により特徴付けることができる。例えば、金属キレーター部分は、約２５℃、約ｐＨ７および約０．１Ｍモル強度で少なくとも約１０１２の全体的な生成定数を有することができる。好ましくは、金属キレーター部分はこれらの条件下で少なくとも約１０２５の全体的な生成定数を有する。さらに好ましくは、全体的な生成定数は、これらの条件下で少なくとも約１０３５である。金属／金属キレーターの対は、約２５℃、約ｐＨ７および約０．１Ｍモル強度で少なくとも約１０３０、１０４０、１０４５または１０５０の全体的な生成定数を有するように選択できる。
【００３２】
また、金属キレーター部分は、一つまたはいくつかの（例えば、二、三の）特別な金属イオンに対するそれらの選択性に基づいて選択することもできる。好ましくは、選択的な金属キレーター部分は、他の金属イオンよりも標的金属イオンに対して少なくとも約一桁大きい全体的な生成定数を有する。さらに好ましくは、選択的な金属キレーター部分は、他の金属イオンよりも標的金属イオンに対して少なくとも約三桁大きい全体的な生成定数を有する。
【００３３】
本発明の金属キレーター部分は、典型的には二つ以上の求核性または負に荷電した官能基を有する。金属に対する（適当な官能基を有する）適当なキレーターはハード〜ソフト酸−塩基理論の原理を用いて選択することができる。一般的に、「ハード」金属イオンは「ハード」塩基とさらに安定な接合体を形成し、「ソフト」金属イオンは「ソフト」塩基とさらに安定な接合体を形成する。ハードな金属イオンは高荷電および／または小さいイオン半径により特徴付けられ、該イオンとしてＭｎ２＋、Ａｌ３＋、Ｇａ３＋、Ｔｌ３＋、Ｌｎ３＋、Ｔｉ２＋、Ｙｂ２＋、Ｓｍ２＋、Ｅｕ２＋、Ｃｒ３＋、Ｃｏ３＋およびＦｅ３＋が挙げられる。ソフトな金属イオンは、低電荷および／または大きいイオン半径を持つ傾向があり、該イオンとして、Ｃｕ＋、Ａｇ＋、Ａｕ＋、Ｔｌ＋、Ｈｇ＋、Ｃｄ２＋、Ｐｄ２＋、Ｐｔ２＋、Ｐｔ４＋およびＨｇ２＋が挙げられる。中間硬度の金属イオンとして、Ｆｅ２＋、Ｃｏ２＋、Ｎｉ２＋、Ｃｕ２＋、Ｚｎ２＋、Ｐｂ２＋、Ｓｎ２＋、Ｔｃ２＋およびＲｕ２＋が挙げられる。ハード塩基（リガンド）は、比較的小さいイオン半径と高い電気陰性度（例えば、電子密度を容易に供与しない）により特徴付けられ、該塩基として、ヒドロキシル、ヒドロキサメート、エーテル、リン酸エステル、アミンおよびカルボキシレート基が挙げられる。ソフト塩基は低い電気陰性度を有し、該塩基として、チオール、チオエーテル、ホスフィンおよびイソニトリルが挙げられる。イミダゾール、アリールアミンおよびピリジンは中間軟度の塩基である。
【００３４】
鉄キレーター部分は、鉄（ＩＩ）、鉄（ＩＩＩ）またはその両方をキレート化することのできる部分をいう。適当な鉄キレーター部分は、鉄に結合することのできる二つ以上の原子または二つ以上の官能基を含む。適当な鉄キレーター部分として、ヒドロキサメート、カテコール、ポルフィリン、アミン、ヒドロキシル、カルボキシレート、チオール、イミダゾール、フェノールまたはジチオカルバメート基およびそれらの組合せが挙げられるが、これらに限定されない。例えば、鉄キレーター部分は、二種類以上の官能基を含んでよい。
【００３５】
普通の鉄キレーターとして、エチレンジアミンテトラ酢酸（ＥＤＴＡ）、ニトリロ酢酸（ＮＴＡ）、ジエチレントリアミンペンタ酢酸（ＤＴＰＡ）およびＮ，Ｎ’−ビス（２−ヒドロキシベンジル）エチレンジアミン−Ｎ，Ｎ’−二酢酸（ＨＢＥＤ）が挙げられる。
【００３６】
鉄キレーターの一般的な種類は、微生物により作られる多様な種類の鉄キレーターであるシデロホアである。シデロホアの多くはヒドロキサメートまたはカテコール部分を有する。シデロホアの例として、エンテロバクチン、パラバクチン、アグロバクチン、フルビアバクチン、ブルニバクチン、ビブリオバクチン、フェリオキサミンＢ、フェリオキサミンＥ、アエロバクチンおよびフェリクロムが挙げられる。
【００３７】
シデロホアの一タイプはデスフェリチオシン（ｄｅｓｆｅｒｒｉｔｈｉｏｃｉｎ）およびその類似体および誘導体である。デスフェリチオシンの構造を以下に示す：
【００３８】
【化２５】
2007505044.tif 000006
他のシデロホアの例は下記構造式（Ｖ）と（ＶＩ）により表わされる：
【００３９】
【化２６】
2007505044.tif 000007
式中、
Ｒ７は−ＯＨ、−ＯＲ１４または−Ｎ（ＯＨ）Ｒ１５であり；
Ｒ８は−Ｈ、−ＣＨ３または２〜６炭素のアルキル基であり；
Ｒ９は−Ｈ、−ＣＨ３または２〜６炭素のアルキル基であり；
Ｒ１０は−Ｈ、−ＣＨ３または２〜６炭素のアルキル基であり、またはＲ８とＲ９は一緒に二重結合を形成し；
Ｒ１１は−Ｈまたはアシルであり；
Ｒ１２は−Ｈ、−ＯＨ、−Ｏ−アシル、−Ｏ−アルキルまたは−Ｌ−Ｘであり；
Ｒ１３は−Ｈ、−ＯＨ、アルキル、ハロゲン、−Ｌ−Ｙであるか、または−Ｃ＝Ｃ−Ｃ＝Ｃ−であり、Ｒ１８とともに以下の縮合環系を形成する：
【００４０】
【化２７】
2007505044.tif 000008
Ｒ１４はアルキルまたは任意に置換されたベンジルであり；
Ｒ１５は−Ｈ、アルキル、任意に置換されたベンジル、
【００４１】
【化２８】
2007505044.tif 000009
であり；
Ｒ１６は−Ｈ、アルキルまたは任意に置換されたベンジルであり；
Ｒ１８は−Ｈ、−ＯＨ、−Ｏ−アシル、−Ｏ−アルキルまたは利用可能な電子であり；
Ａは−Ｎ−、−ＣＨ−または−Ｃ（ＯＨ）−であり；
Ｂは−Ｓ−、−Ｏ−、−ＮＲ１６−、−ＣＨ２−または−ＣＨ２Ｓ−であり；
Ｌは、一つ以上の酸素原子により任意に中断される３〜約２０炭素原子のアルキレン基であり；
ａは２または３であり；
ｍは１〜８の整数であり；
ｎは０、１または２であり；
ｐは０、１または２であり；
Ｘは、
【００４２】
【化２９】
2007505044.tif 000010
であり；
Ｙは、
【００４３】
【化３０】
2007505044.tif 000011
であり；
Ｚは、
【００４４】
【化３１】
2007505044.tif 000012
であり；
（上記式で示されている各置換基は既に定義されている。）または該シデロホアは構造式（Ｖ）または（ＶＩ）により表わされる化合物の薬学的に許容される塩または該化合物の立体異性体または立体異性体の混合物である。
【００４５】
デスフェリチオシンの好ましい類似体は、４−ヒドロキシ−デスアザデスフェリチオシンとしても知られている２−（２，４−ジヒドロキシフェニル）−４−（Ｓ）−メチルチアゾリン−４−カルボン酸である。
【００４６】
さらなる金属キレーターが、「Ｉｒｏｎ  Ｃｈｅｌａｔｏｒｓ  ａｎｄ  Ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃ  Ｕｓｅｓ，」  ｂｙ  Ｒ．Ｊ．  Ｂｅｒｇｅｒｏｎ，  Ｊ．Ｓ．  ＭｃＭａｎｉｓ，  Ｗ．Ｒ．  Ｗｅｉｍａｒ，  Ｊ．  Ｗｉｅｇａｎｄ  ａｎｄ  Ｅ．  Ｅｉｌｅｒ−ＭｃＭａｎｉｓ  ｉｎ  Ｂｕｒｇｅｒ’ｓ  Ｍｅｄｉｃｉｎａｌ  Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ  ａｎｄ  Ｄｒｕｇ  Ｄｉｓｃｏｖｅｒｙ，  Ｓｉｘｔｈ  Ｅｄｉｔｉｏｎ，  Ｖｏｌｕｍｅ  ３：  Ｃａｒｄｉｏｖａｓｃｕｌａｒ  Ａｇｅｎｔｓ  ａｎｄ  Ｅｎｄｏｃｒｉｎｅｓ，  ｅｄｉｔｅｄ  ｂｙ  Ｄ．Ｊ．  Ａｂｒａｈａｍ，  Ｊｏｈｎ  Ｗｉｌｅｙ  ＆  Ｓｏｎｓ，  Ｉｎｃ．，  ２００３（これらの内容は文献の援用により本文中に編入される）に記載されている。米国特許第６，０８３，９６６号、同第６，５２１，６５２号、同第６，５２５，０８０号および同第６，５５９，３１５号（これらの内容は文献の援用により本文中に編入される）も本発明に使用される金属キレーターを提供する。さらなる金属キレーターが２００３年９月９日出願のＰＣＴ出願第ＰＣＴ／ＵＳ０３／２８３０４号（これらの内容は文献の援用により本文中に編入される）に開示されている。
【００４７】
本発明の鉄キレート化部分は切断可能な基により保護することができる。アミン類用およびヒドロキシル基用の特に適切な保護基はアシル基である。
【００４８】
金属キレーター部分とポリアミン部分が結合して接合体分子を形成する手段は重大とは考えられない。しかし、結合の手段は金属キレーター部分のキレート化能力に有害な影響を与えるべきではないし、またポリアミン部分の電荷を三カチオン未満に減少させるべきでないことを理解されたい。下記の構造で図示するように、ポリアミン部分を、末端（第一）窒素により直接的または間接的に金属キレーター部分に結合させるのが好ましい。
【００４９】
【化３２】
2007505044.tif 000013
本発明の一実施態様において、ポリアミン部分と金属キレーター部分は下記のように共有結合により直接連結させる。
【００５０】
ポリアミン―金属キレーター
これらの接合体は、例えば、実施例１に記載のように、金属キレーターをポリアミンに直接反応させて接合体を形成させることにより形成する。
【００５１】
別の実施態様において、ポリアミン部分と金属キレーター部分は下記のように結合基により間接的に結合する。
【００５２】
ポリアミン−結合基−金属キレーター
例えば、これらの接合体はポリアミンまたは金属キレーターのいずれかを結合基前駆体と反応させて中間生成物を形成し、続いて中間生成物を金属キレーターまたはポリアミンと反応させることにより形成される。
【００５３】
ポリアミン部分と金属キレーター部分は、切断可能な官能基により直接的または間接的に結合させることができる。切断可能な官能基は親のポリアミン、金属キレーターおよび／または結合基前駆体に由来するものでよい。
【００５４】
ポリアミン部分は、天然のポリアミンに由来するものでよい。そのような天然のポリアミンはフィードバック機構によりポリアミン合成を遅らせるかもしれないが、そのようなポリアミンはポリアミン代謝を実質的に変えることはないであろう。そのような天然のポリアミンとして、スペルミン、スペルミジン、ノルスペルミン、ノルスペルミジン、ホモスペルミンおよびホモスペルミジンが挙げられる。スペルミン、スペルミジン、ノルスペルミンおよびノルスペルミジンは哺乳類細胞に存在する。ポリアミン部分は、天然には存在しないポリアミンに由来するものであってもよい。これらの非天然のポリアミンはポリアミン代謝酵素（例えば、ポリアミンオキシダーゼ）により容易には処理されないので、それらポリアミンは一般的にポリアミン代謝を変えるだろう。そのような非天然のポリアミンとして、末端がアルキル化されたスペルミン、スペルミジン、ノルスペルミン、ノルスペルミジン、ホモスペルミンおよびホモスペルミジン等の末端がアルキル化されたポリアミン類が挙げられる。末端がアルキル化されたポリアミンは、好ましくは末端窒素原子がモノアルキル化されている。アルキル化ポリアミンを用いる場合、ポリアミンの非アルキル化窒素原子は、ポリアミン部分を、接合体分子残りの部分（すなわち、第一アミン）に結合させることが望ましい。
【００５５】
本発明の使用に適するポリアミンの一群は下記構造式（ＩＶ）により表わされる。
【００５６】
【化３３】
2007505044.tif 000014
Ｒ１〜Ｒ６は独立して水素、アルキル、アリール、アリールアルキル、シクロアルキルであるか、またはアルキル鎖が一つ以上のエーテル性酸素原子により中断された前記の基である。
【００５７】
Ｎ１、Ｎ２、Ｎ３およびＮ４は生理学的ｐＨでプロトン化されうる窒素原子である。
【００５８】
ｊおよびｋは独立して１〜４の整数である。
【００５９】
Ａ、ＢおよびＣは独立して窒素原子間の架橋基である。これらの架橋基は、たとえば環内にポリアミンの窒素原子の一つを導入する１〜８炭素原子、シクロアルカン、シクロアルケンまたは複素環基を有するアルキレン基であってよい。好ましくは、ヒトまたは非ヒト動物への投与の際にポリアミンが標的細胞による取り込みを受けられるように、架橋基は窒素原子間の距離を維持する。標的細胞による取り込みの際に、正に荷電した窒素原子間の静電的相互作用により、ポリアミンが、標的細胞中の細胞内天然のポリアミンと実質的に同一の生物学的対アニオンに競合的に結合するように、架橋基は窒素原子間の距離を保つこともできる。
【００６０】
本発明に使用されるさらなる適当なポリアミンは米国特許第５，０９１，５７６号、同第５，３４２，９４５号、同第５，４５５，２７７号、同第５，８６６，６１３号、同第５，８８６，０５１号、同第６，１８４，２３２号および同第６，３４２，５３４号（これらの内容は文献の援用により本文中に編入される）に見ることができる。
【００６１】
下記構造式（Ｉ）で表わされる本発明の接合体について、ＲおよびＲ’は好ましくはそれぞれ−Ｈであり、Ｒ’’は好ましくはメチルである。
【００６２】
【化３４】
2007505044.tif 000015
ＲおよびＲ’がそれぞれ−Ｈであり、Ｒ’’がメチルである一実施態様において、ａ、ｂおよびｃはそれぞれ独立して３または４である。好ましい実施態様において、Ｒ’’はメチルであり、ａ、ｂおよびｃはそれぞれ３である。別の好ましい実施態様において、Ｒ’’はメチルであり、ａは３であり、ｂは４であり、ｃは３である。
【００６３】
構造式（ＩＩ）により表わされる本発明の接合体について、Ｒａおよび各Ｒｃが−Ｈであることが好ましい。
【００６４】
【化３５】
2007505044.tif 000016
Ｒａおよび各Ｒｃが−Ｈである一実施態様において、ｄ、ｅおよびｆはそれぞれ３または４である。一つの好ましい実施態様において、ｄ、ｅおよびｆはそれぞれ３である。別の好ましい実施態様において、ｄは３であり、ｅは４であり、ｆは３である。別の実施態様において、Ｒｂは好ましくは、一つ以上の酸素原子が間に入った非置換のヒドロカルビル基、例えば、３，６，９−トリオキサデシル基である。特に好ましい実施態様において、ｄ、ｅおよびｆは上記数値の組の一つを有し、Ｒｂは３，６，９−トリオサデシル基である。
【００６５】
下記構造式（ＩＩＩ）で表わされる本発明の接合体について、Ｒｄおよび各Ｒｅは好ましくは−Ｈである。
【００６６】
【化３６】
2007505044.tif 000017
Ｒｄおよび各Ｒｅが−Ｈである一実施態様において、ｇ、ｈおよびｉはそれぞれ独立して３または４である。一つの好ましい実施態様において、ｇ、ｈおよびｉはそれぞれ３である。別の好ましい実施態様において、ｇは３であり、ｈは４であり、ｉは３である。別の実施態様において、Ｌは好ましくは置換または非置換のアルキレン基、さらに好ましくは非置換のアルキレン基、例えばジメチレン、トリメチレン、テトラメチレン、ペンタメチレン、ヘキサメチレン、ヘプタメチレンまたはオクタメチレン基である。本発明の特に好ましい実施態様において、ｇ、ｈおよびｉは上記数値の組の一つを有し、Ｌはペンタメチレン基である。
【００６７】
下記構造式（ＶＩＩ）により表わされる本発明の接合体について、Ｒｆは好ましくは−Ｈである。
【００６８】
【化３７】
2007505044.tif 000018
Ｒｆが−Ｈである一実施態様において、ｊおよびｋは独立して３または４であり、ｍは３〜６の整数である。一つの好ましい実施態様において、ｊおよびｋはともに３であり、ｍは４である。Ｒｆが−Ｈであり、ｊ、ｋおよびｍが上で開示された数値を有する別の実施態様において、Ｒｇは−Ｈまたは非置換のアシル基であり、好ましくは−Ｈまたはアセチル基であり、Ｒｈは−Ｈまたは非置換のアルキル基、好ましくはエチル基であり、Ｒｉは非置換のアルキル基、好ましくはメチル基であり、ＲｊおよびＲｋはそれぞれ−Ｈまたは非置換のアルキル基（例えば、メチル）であり、好ましくは−Ｈである。特に好ましい実施態様において、ｊおよびｋはともに３であり、ｍは４であり、Ｒｆ、Ｒｇ、ＲｊおよびＲｋは−Ｈであり、Ｒｈはエチル基であり、Ｒｉはメチル基である。
【００６９】
がんまたは腫瘍を治療する方法のために、一実施態様において、鉄キレーター部分は、鉄中心に配位結合する５個以下の原子を有する。したがって、がんまたは腫瘍を治療するために用いられる鉄キレーター部分は典型的には二座、三座、四座または五座である。別の実施態様において、鉄キレーター部分は鉄中心（例えば、六座および八座部分）に配位結合する６個以上の原子を有する。
【００７０】
本発明の接合体は、ここに開示する治療法において一種類以上の他の活性物質とともに投与することができる。本発明の接合体とともに投与できる活性物質の一群はポリアミン合成阻害剤である。ポリアミン合成阻害剤として、オルニチンデカルボキシラーゼ阻害剤、Ｓ−アデノシルメチオニン阻害剤、スペルミジンシンターゼ阻害剤およびスペルミンシンターゼ阻害剤が挙げられる。そのようなポリアミン合成阻害剤は本発明の化合物および薬学的組成物の細胞による取り込みを高めるだろう。一般的に、本発明の化合物または薬学的組成物を共に投与することは、例えば治療の有効性を向上させ、治療が病気の症状を低減する速度を増加させ、および／または本発明の化合物または薬学的組成物に関連する副作用を減少させよう。
【００７１】
オルニチンデカルボキシラーゼ阻害剤として、アルファ−ジフルオロメチルオルニチン（ＤＦＭＯ）、アルファ−モノフルオロメチルオルニチン、（２Ｒ，５Ｒ）−デルタ−メチルアセチレニックプトレシン、（Ｅ）−アルファ−モノフルオロメチルデヒドロオルニチンおよびそのエステル（例えば、メチルエステル）、３−アミノオキシ−１−プロパンアミンおよび３−（アミノオキシ）−２−フルオロ−１−プロパンアミンが挙げられる。
【００７２】
Ｓ−アデノシルメチオニン阻害剤として、Ｓ−（５’−デオキシ−５−アデノシル）メチルチオエチルヒドロキシルアミン、５’−デオキシ−５’−［（２−アミノオキシエチル）メチルアミノ］アデノシン、５’−デオキシ−５’−［（３−ヒドラジノプロピル）メチルアミノ］アデノシン、５’−｛［（Ｚ）−４−アミノ−２−ブテニル］メチルアミノ｝−５’−デオキシアデノシン、Ｓ−（５’−デオキシ−５’−アデノシル）−１−アミノ−４−メチルチオ−２−シクロペンテン、メチルグリオキサールビス（グアニルヒドラゾン）、エチルグリオキサールビス（グアニルヒドラゾン）、ジエチルグリオキサールビス（グアニルヒドラゾン）、［２，２−ビピリジン］−６，６−ジカルボキシイミダミドおよび４−アミジノインダン−１−オン２’−アミジノヒドラゾンが挙げられる。
【００７３】
スペルミジンシンターゼ阻害剤として、Ｓ−アデノシル−１，８−ジアミノ−３−チオオクタン、シクロヘキシルアミン、ｎ−ブチルアミンおよびｔｒａｎｓ−４−メチルシクロヘキシルアミンが挙げられる。
【００７４】
スペルミンシンターゼ阻害剤として、Ｓ−アデノシル−１，１２−ジアミノ−３−チオ−９−アザドデカン、Ｎ−（ｎ−ブチル）−１，３−ジアミノプロパンおよびＮ−（３−アミノプロピル）シクロヘキシルアミンが挙げられる。
【００７５】
本発明の接合体はさらなる抗腫瘍剤とともに投与することもできる。抗腫瘍剤の具体例として、代謝拮抗物質（例えば、アザシチジン、シタラビン、フルオロウラシル、メルカプトプリン、メトトレキセート、チオグアニン、クラドリビン、フルダラビン、アロプリノール）、ブレオマイシンペプチド抗生物質、ポドフィリンアルカロイド類（例えば、エトポシド、テニポシド）、植物アルカロイド類（例えば、ビンクリスチン、ビンブラスチン、パクリタキセル、ドセタキセル）、アルキル化剤（例えば、ブスルファン、シクロホスファミド、メクロレタミン、メルファラン、チオテパ、クロラムブシル、トリエチレンメラミン）、抗生物質（例えば、ダクチノマイシン、ダヌオルビシン、ドキソルビシン、プリカマイシン、マイトマイシン）、シス−プラチン、カルボプラチン、プロカルバジン、ダカルバジン、アルトレタミン、ニトロソウレア類（例えば、ビス（クロロエチル）ニトソロウレア（カルムスチン）、１−（２−クロロエチル）−３−シクロヘキシル−１−ニトロソウレア（ロムスチン）、１−（２−クロロエチル）−３−（４−メチルシクロヘキシル）−１−ニトロソウレア（セムスチン））、ホルモン剤（例えば、テストステロンおよびフルオキシメステロン等のアンドロゲン、フルタミド等の抗アンドロゲン、ジエチルスチルベストロールおよびエチニルエストラジオール等のエストロゲン、タモキシフェン等の抗エストロゲン、ヒドロキシプロゲステロン、メドロキシプロゲステロンおよびメゲストロール等のプロゲスチン、ヒドロコルチゾンおよびプレドニゾン等のアドレノコルチコスレロイド、ゴセレリンおよびロイプロリド等のゴナドトロピン放出ホルモンアゴニスト、アミノグルテチミドおよびアナストロゾール等のアロマターゼ阻害剤、オクトレオチド等のペプチドホルモン阻害剤）および多様な抗腫瘍剤（例えば、アムサクリン、アスパラギナーゼ、ヒドロキシウレア、ミトキサントロン、ミトタン、レチン酸誘導体、骨髄成長因子、アミホスチン）が挙げられる。
【００７６】
本発明により治療することのできる腫瘍またはがんとして、白血病、ホジキン病、非ホジキンリンパ腫、多発性骨髄腫、マクログロブリン血症、真正多血症、肺腫瘍、頭および首の腫瘍、脳腫瘍（神経芽腫）、子宮内膜腫瘍、卵巣腫瘍、子宮頸部腫瘍、乳腫瘍、絨毛がん、精巣腫瘍、前立腺腫瘍、Ｗｉｌｍｓ腫瘍、甲状腺腫瘍、副腎腫瘍、胃腫瘍、膵臓腫瘍、結腸腫瘍、カルチノイド、インスリノーマ、骨腫瘍（骨原性肉腫）、雑多な肉腫および皮膚がん（黒色腫）が挙げられるが、これらに限定されない。
【００７７】
金属過多状態に苦しむ被験体は、過剰に存在する単一金属または複数の金属に特異的および／または強固に結合する接合体によって処置することができる。例えば、鉄過多状態は好ましくは鉄キレーター部分を有する接合体により処置する。さらに好ましくは、この適用のための鉄キレーター部分は六座以上である。
【００７８】
鉄過多状態または疾患は全身性の鉄過多または局所的な鉄過多により特徴付けることができる。全身性鉄過多状態は、通常は多組織に過剰な鉄または生物全身にわたる過剰な鉄をともなう。全身性鉄過多状態は、被験体による鉄の過剰な摂取、例えば食事中の鉄または輸血からの鉄の過剰な保存および／または保持から生じうる。一つの全身性鉄過多状態は一次血色素症であり、これは典型的に遺伝子疾患である。第二の全身性鉄過多状態は二次血色素症であり、これは典型的には多回数の輸血を受けた結果である。輸血はしばしばサラミセアまたは鎌状赤血球貧血に苦しむ被験体に必要とされる。食事中の鉄過多の一つのタイプはバンツーシデローシスと称され、これは自家製醸造ビールの高い鉄含量に関連する。
【００７９】
局所的な鉄過多状態において、過剰な鉄は一種類または二〜三種類の細胞タイプまたは組織または特定の器官に限定される。もしくは、過剰な鉄に関連する徴候は、心臓、肺、肝臓、膵臓、腎臓または脳等の別々の器官に限定される。局所的な鉄過多は、パーキンソン病、アルツハイマー病、ハンチントン病、ニューロフェリチノパシー、筋萎縮性側索硬化症および多発性硬化症等の神経学的または神経変性疾患を導きうると考えられる。
【００８０】
ウイルソン病は、本発明の接合体、好ましくは銅に特異的および／または強固に結合する金属キレーター部分を有する接合体を用いて治療することのできる銅過多状態である。
【００８１】
酸化ストレスの減少を必要とする被験体は、還元剤の減少レベル、反応性酸素種の増加レベル、抗酸化剤酵素（例えば、Ｃｕ／Ｚｎスーパーオキシドジスムターゼ、Ｍｎスーパーオキシドジスムターゼ、グルタチオンレダクターゼ、グルタチオンパーオキシダーゼ、チオレドキシン、チオレドキシンパーオキシダーゼ、ＤＴ−ジアホラーゼ）の変異または減少レベル、金属結合タンパク質（例えば、トランスフェリン、フェリチン、セルロプラスミン、アルブミン、メタロチオネイン）の変異またはその減少レベル、スーパーオキシドを作ることができる変異または過活性酵素（例えば、酸化窒素シンターゼ、ＮＡＤＰＨオキシダーゼ、キサンチンオキシダーゼ、ＮＡＤＨオキシダーゼ、アルデヒドオキシダーゼ、ジヒドロオロテートデヒドロゲナーゼ、チトクロムｃオキシダーゼ）および照射傷害等の状態の一つ以上を有しうる。還元剤、反応性酸素種およびタンパク質の増加または減少レベルは、健康なヒトに典型的に見られるそのような物質の量を基準にして決定する。
【００８２】
酸化ストレスの減少を必要とする被験体は、虚血性出来事から苦しみうる。虚血性出来事は、動脈が狭くなったり、壊れたりする等によって血液供給の機械的な傷害のために局所的な貧血が存在する場合に起こりうる。狭心症や心筋梗塞を引き起こしうる心筋虚血は、通常、冠状動脈病による血液の心筋へ不十分な循環から起こる。２４時間以内に消散する脳中の虚血性出来事は一時的な虚血性発作と称される。さらに長く続く虚血性出来事である脳卒中は非可逆的な脳の損傷をともない、ここで徴候の種類と程度は、循環が損なわれている脳組織の位置と程度に依存する。虚血性出来事に苦しむ危険性のある患者は、典型的にはアテローム性動脈硬化症、血管の他の疾患、血液が凝固する増加傾向、または心臓病に苦しむ。本発明の化合物はこれらの疾患を治療するために用いることができる。
【００８３】
酸化ストレスの減少を必要とする患者は炎症に苦しむことがありうる。炎症は、傷害または物理的、化学的または生物的因子により引き起こされる異常な刺激に応答して血管または隣接する組織に起こる細胞学的および化学的反応の複合からなる基本的な病理学的プロセスである。炎症疾患は、長期間続く（すなわち、慢性炎症）か、または組織を損傷する炎症により特徴付けられる。そのような炎症疾患は、呼吸器、関節、腸および軟組織等の多様な組織に影響を与えうる。本発明の化合物はこれらの疾患を治療するために用いることができる。
【００８４】
金属キレーター部分（例えば、鉄キレーター部分）は、接合体の鉄キレーター部分が金属のすべての配位部位に結合できるように、酸化ストレスを減少させるのに使用するために選択することができる。例えば、鉄キレーター部分は、鉄に結合するために利用可能な六つ以上の原子（すなわち、六座以上）を有することができるか、または利用可能な配位部位のすべてを満たす安定な接合体を形成することができる。
【００８５】
理論に縛られるわけではないが、接合体は、多様な機構により酸化ストレスを減少させる能力を引き出すと考えられる。一機構において、接合体は金属、特に酸化還元活性金属（例えば、銅、鉄）に結合し、金属の配位部位のすべてを満たす。金属配位部位のすべてが満たされている場合、酸化および／または還元剤は、金属と相互作用し、酸化還元サイクルを引き起こす減少能力を有すると考えられる。別の機構において、接合体の金属キレーター部分は、酸化還元サイクルをあまり受けないように金属を特別な酸化状態で安定化する。さらに別の機構において、金属キレーター部分自体は抗酸化活性（例えば、フリーラジカル捕捉、反応性酸素または窒素種の捕捉）を有する。デスフェリチオシンおよびその誘導体および類似体は、米国出願第１０／２２７，１５８号および同第６０／４０５，４６３号（ともに２００２年８月２２日出願）および米国出願第１０／６４５，３４８号（２００３年８月２１日出願）（これらの内容は文献の援用により本文中に編入される）に記載されているように、固有の抗酸化活性を有することが知られている。
【００８６】
一つ以上の器官、組織、腫瘍またはそれらの組み合わせの画像化または検査は、本発明の接合体の金属塩を被験体に投与した後に実施することができる。画像化または検査の方法は、Ｘ線法（ＣＳスキャンおよび慣用のＸ線像等）、磁気画像化（磁気共鳴画像化、電子常磁性共鳴画像化）および放射性化学法等の診断に用いられる多様な機器技術を含むものである。
【００８７】
典型的には、画像化または検査に用いられる金属塩は造影剤として役立つ。造影剤として役立てることのできる金属として、ガドリニウム、鉄、マンガン、クロム、ジスプロシウム、テクネチウム、スカンジウム、バリウム、アルミニウムおよびホルミウムが挙げられる。放射性金属塩は、２４１Ａｍ、５１Ｃｒ、６０Ｃｏ、５７Ｃｏ、５８Ｃｏ、６４Ｃｕ、１５３Ｇｄ、６７Ｇａ、１９８Ａｕ、１１３ｍＩｎ、１１１Ｉｎ、５９Ｆｅ、５５Ｆｅ、１９７Ｈｇ、２０３Ｈｇ、９９ｍＴｃ、２０１Ｔｌおよび１６９Ｙｂ等の同位元素から作ることができる。
【００８８】
本発明の接合体の放射性金属塩は、腫瘍の治療または細胞機能の阻害をするために、それを必要とする被験体においても有用である。この方法により治療することのできる腫瘍は悪性または良性であってよい。治療することのできる腫瘍の具体的な種類は上記の通りである。細胞機能を阻害することは、好ましくは特定の領域における細胞の増殖を遅らせるか、またはそれらの活性を阻害するためにそれら細胞を損傷するか、または破壊することを伴う。例えば、甲状腺または膵臓島細胞は、作られる甲状腺ホルモンまたはインシュリンの量を減少させるために損傷させることができる。同様に、本発明を用いて、ある細胞または組織によるホルモンまたは他の生物学的分子の生産または放出を阻害または妨げることができると考えられる。本発明に使用される放射性金属同位元素の例として、６０Ｃｏ、６７Ｃｕ、９０Ｓｒ、９０Ｙ、１０６Ｒｕ、１１１Ｉｎ、１５３Ｓｍ、１８６Ｒｅ、１８８Ｒｅ、１９２Ｉｒ、１９８Ａｕ、２１０Ｐｂ、２１０Ｂｉ、２１２Ｐｂ、２１２Ｂｉおよび２４１Ａｍが挙げられる。
【００８９】
ここに記載の接合体の塩および薬学的に許容される塩も本発明に含まれる。十分に酸性の官能基、十分に塩基性の官能基またはその両方を有するここに開示の接合体は多くの有機または無機の塩基および無機および有機の酸のいずれかと反応して塩を形成することができる。
【００９０】
酸性基は、アルカリおよびアルカリ土類金属（例えば、ナトリウム、カリウム、マグネシウム、カルシウム）とともに、一種類以上の上記金属と塩を形成することができる。さらに、酸性基はアミンとともに塩を形成することができる。本発明の一部実施態様において、金属塩等の接合体を（例えば被験体に）供給するのが有利である。例えば、接合体の鉄（鉄（ＩＩ）または鉄（ＩＩＩ））塩を被験体に投与することができる。もしくは、接合体を、実質的に金属を含まない（例えば、鉄を含まない）塩として供給する。金属を含まない塩は、典型的にはアルカリおよびアルカリ土類金属塩を包含することを意図するものではない。金属を含まない塩は、例えば金属過多状態に苦しむ被験体に有利に投与される。
【００９１】
塩基性基を有する化合物から酸付加塩を形成するために普通用いられる酸は、塩酸、臭化水素酸、ヨウ化水素酸、硫酸、リン酸等の無機酸およびｐ−トルエンスルホン酸、メタンスルホン酸、シュウ酸、ｐ−ブロモフェニル−スルホン酸、炭酸、コハク酸、クエン酸、安息香酸、酢酸等の有機酸である。そのような塩の具体例として、水酸化物、硫酸塩、ピロ硫酸塩、重硫酸塩、亜硫酸塩、重亜硫酸塩、リン酸塩、一水素リン酸塩、二水素リン酸塩、メタリン酸塩、ピロリン酸塩、塩化物、臭化物、ヨウ化物、酢酸塩、プロピオン酸塩、デカン酸塩、カプリル酸塩、アクリル酸塩、ギ酸塩、イソ酪酸塩、カプロン酸塩、ヘプタン酸塩、プロピオル酸塩、シュウ酸塩、マロン酸塩、コハク酸塩、スベリン酸塩、セバシン酸塩、フマル酸塩、マレイン酸塩、ブチン−１，４−ジオエート、ヘキシン−１，６−ジオエート、安息香酸塩、クロロ安息香酸塩、メチル安息香酸塩、ジニトロ安息香酸塩、ヒドロキシ安息香酸塩、メトキシ安息香酸塩、フタル酸塩、スルホン酸塩、キシレンスルホン酸塩、フェニル酢酸塩、フェニルプロピオン酸塩、フェニル酪酸塩、クエン酸塩、乳酸塩、ガンマ−ヒドロキシ酪酸塩、グリコール酸塩、酒石酸塩、メタンスルホン酸塩、プロパンスルホン酸塩、ナフタレン−１−スルホン酸塩、ナフタレン−２−スルホン酸塩、マンデル酸塩等が挙げられる。
【００９２】
ここに開示される接合体はそれらの水和物、例えば半水和物、一水和物、二水和物、三水和物、四水和物等として、および溶媒和物として調製することができる。
【００９３】
「被験体」とは、典型的にはヒトであるが、治療を必要する動物、例えば伴侶動物（例えば、イヌ、ネコ等）、農場動物（例えば、ウシ、ブタ、ウマ、ヒツジ、ヤギ等）および実験動物（例えば、ラット、マウス、モルモット等）であってもよい。
【００９４】
本発明の接合体またはその薬学的に許容される塩は適当な経路により投与することができる。投与の適当な経路として、経口、腹腔内、皮下、筋内、皮内、経皮、直腸内、舌下、静脈内、頬または吸入が挙げられるが、これらに限定されない。
【００９５】
経口投与に適する形態として、当分野で認識されている操作により調製される錠剤、トローチ、カプセル、エリキシル、懸濁液、シロップ、ウエハー、チューインガム等が挙げられる。そのような治療に有用な組成物または調製物中の有効化合物の量は適当な投与量が得られるようなものとする。
【００９６】
本発明の薬学的組成物は、化合物または混合物を経口、非経口、静脈内、皮内、筋内または皮下、直腸内、吸入または頬投与、または経皮により投与可能とするのに適当な薬学的に許容される担体または希釈剤を含むことが好ましい。有効成分は、慣用の薬学的に許容される担体または希釈剤に混合または配合してよい。投与のいかなる態様、有効物質に関して不活性な慣用のベヒクルまたは担体を本発明の薬学的組成物の調製と投与に用いてよいことは当業者により理解されよう。そのような方法、ベヒクルおよび担体を例示するものは、例えば、Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ’ｓ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｓｃｉｅｎｃｅｓ，  １８ｔｈ  ｅｄ．（１９９０）（その内容は文献の援用により本文中に編入される）に記載されている。
【００９７】
被験体に使用される本発明の処方物は、本物質を一種類以上の許容される担体または希釈剤および任意に他の治療成分とともに含む。担体および希釈剤は、処方物の他の成分に対して適合性があり、かつその受容者に対して有害ではないという意味で「許容される」ものでなければならない。処方物は、便利には単位投与形で提示され、薬学の分野でよく知られたいずれかの方法により調製することができる。すべての方法は、本物質を、一種類以上の補助成分を構成する担体または希釈剤と混合する工程を有する。一般的に、処方物は、本物質を担体と均一かつ十分混合にし、次に、必要に応じ、その生成物をその単位投与量に分割することにより調製する。
【００９８】
非経口投与に適する処方物は、便利には、好ましくは受容者の血液に等張の本物質の滅菌水性調製物を含む。適当な担体溶液として、リン酸緩衝生理食塩水、生理食塩水、水、ラクテートリンガーまたはデキストロース（水中５％）が挙げられる。そのような配合物は、便利には、本物質を水と混合して溶液または懸濁液を作り、これを滅菌容器に充填し、細菌汚染に対して密閉することで調製することができる。好ましくは、滅菌材料は、最終滅菌の必要がないように無菌製造条件下に用いる。
【００９９】
そのような処方物は、メチルヒドロキシベンゾエート、クロロクレゾール、メタクレゾール、フェノールおよび塩化ベンズアルコニウム等の保存剤を含むことのできる一種類以上のさらなる成分を任意に含むことができる。そのような物質は、処方物が多投与量容器で提示される場合に特別な価値を有する。
【０１００】
さらに、緩衝液を処方物に適当なｐＨ値を提供するために含ませることができる。適当な緩衝液材料として、リン酸ナトリウムおよび酢酸塩が挙げられる。塩化ナトリウムまたはグリセリンを用いて処方物を血液に対して等張にすることができる。
【０１０１】
所望であれば、処方物は、窒素等の不活性雰囲気下に容器に充填することができ、便利には、例えば密閉アンプル中の単位投与量または多投与量形で提示することができる。
【０１０２】
当業者は、本発明の方法にしたがって被験体に投与される本発明の組成物の多様な成分の量が上記の因子に依存することを知っているであろう。
【０１０３】
本発明の組成物は、経口または頬投与により投与される場合、シロップ、錠剤、カプセルおよび薬用ドロップとして処方できる。シロップ処方物は一般的に、香料または着色剤を含む、エタノール、グリセリンまたは水等の液体担体中の本化合物または塩の懸濁液または溶液からなる。組成物が錠剤の形にある場合、固体調製物を調製するために普通用いられる一種類以上の医薬担体を用いることができる。そのような担体の例として、ステアリン酸マグネシウム、デンプン、ラクトースおよびスクロースが挙げられる。組成物がカプセルの形にある場合、慣用のカプセル化の使用が一般的に適切であり、例えば、上記の担体を硬ゼラチンカプセルシェルに用いる。組成物が軟ゼラチンシェルカプセルの形にある場合、分散物または懸濁物を調製するために慣用的に用いられる医薬担体、例えば、水性ガム、セルロース類、シリケート類またはオイル類が考えられ、軟ゼラチンカプセルシェルに配合する。
【０１０４】
典型的な座薬処方物として、このように投与された場合に活性のある接合体またはその薬学的に許容される塩を、結合剤および／または潤滑剤、例えば、ポリマーグリコール、ゼラチン、ココアバターまたは他の低融点植物ワックスまたは脂肪とともに含む。
【０１０５】
典型的な経皮処方物として、慣用の水性または非水性ベヒクル、例えば、クリーム、軟膏、ローションまたはペーストが挙げられ、または薬が加えられたプラスチック、パッチまたはメンブレンの形態を有する。
【０１０６】
吸入用の典型的な組成物は、ジクロロジフルオロメタンまたはトリクロロフルオロメタン等の慣用の噴射剤を用いるエアゾールの形で投与することのできる溶液、懸濁液または乳濁液の形態を有する。
【０１０７】
本発明の接合体または薬学的組成物の治療効果のある量は、それぞれの場合で、幾つかの因子、例えば治療される被験体の健康、年齢、性別、大きさおよび状態、投与の意図する態様および所望の投与形物を取り入れる被験体の能力にとりわけ依存する。有効物質の治療効果量は、治療される状態に所望の効果を有するのに十分な量である。例えば、がんまたは腫瘍を治療する方法において、所望の効果は、がん転移を含むがんまたは腫瘍の進展の部分的または全体的な阻害、遅延または防止；がん転移を含むがんまたは腫瘍の再発の阻害、遅延または防止；または哺乳類、例えばヒトにおけるがんまたは腫瘍の発症または発達の防止（化学的予防）である。金属過多状態に苦しむ被験体を治療する方法において、有効物質の治療効果のある量は、例えば、被験体中の金属の負担を減少させるか、金属過多に関連する症状を減少させるか、または金属過多に関連する症状の発症および／または激しさを防止、阻害または遅延するのに十分な量である。酸化ストレスの治療を必要とする被験体において酸化ストレスを低減する方法では、有効物質の治療効果のある量は、例えば酸化ストレスに関連した症状を減少させるか、または酸化ストレスに関連する症状の発症および／または激しさを防止、阻害または遅延するのに十分な量である。
【０１０８】
被験体に投与される本発明の化合物の典型的な量は、（被験体が７０ｋｇとして）１日につき約５００マイクログラム〜約５グラムである。特に、その量は約１ミリグラム〜１グラムの範囲、例えば、約５０ミリグラム〜約５００ミリグラム等の約５ミリグラム〜約７００ミリグラムの範囲であってよい。
【０１０９】
アルキル基は分子中の飽和炭化水素であり、分子中でその炭素原子の一つからの単一の共有結合により他の一つの基に結合している。アルキル基は環式または非環式かつ分鎖または未分鎖であってよい。典型的には、アルキル基は１〜約６炭素原子または１〜約４炭素原子を有する。低級アルキル基は１〜４炭素原子を有し、例えば、メチル、エチル、ｎ−プロピル、ｉｓｏ−プロピル、ｎ−ブチル、ｓｅｃ−ブチルおよびｔｅｒｔ−ブチルが挙げられる。
【０１１０】
アルキレン基は分子中の飽和炭化水素であり、分子中で単一の共有結合により他の二つの基に結合している。アルキレン基は環式または非環式かつ分鎖または未分鎖であってよい。典型的には、アルキレン基は１〜約６炭素原子または１〜約４炭素原子を有する。
【０１１１】
アシル基は、式−Ｃ（Ｏ）Ｒ（式中、Ｒは置換または非置換アルキル基である）により表わされる。アシル基は、化合物から酵素、酸または塩基により加水分解または切断させることができる。アシル基の一つ以上の水素原子は下記のように置換することができる。典型的には、アシル基は、本発明の化合物が鉄（ＩＩＩ）等の金属イオンに結合する前に除去される。
【０１１２】
ヒドロカルビル基は一価または二価の炭化水素である。ヒドロカルビル基は置換または非置換、環式または非環式、分鎖または未分鎖、飽和または未飽和であってよい。上記のように、ヒドロカルビル基はエーテル結合を形成するために一つ以上の酸素原子により任意に中断されてよい。典型的には、ヒドロカルビル基は１〜約１２炭素原子、１〜約６炭素原子または１〜約４炭素原子を含む。
【０１１３】
アルキル基、アルキレン基、ヒドロカルビル基およびアシル基の適当な置換基として、−ＯＨ、−Ｏ（Ｒ’）、−Ｏ−ＣＯ−（Ｒ’）、−ＮＯ２、−ＣＯＯＨ、＝Ｏ、−ＮＨ２、−ＮＨ（Ｒ’）、−Ｎ（Ｒ’）２、−ＣＯＯ（Ｒ’）、−ＣＯＮＨ２、−ＣＯＮＨ（Ｒ’）、−ＣＯＮ（Ｒ’）２およびグアニジンが挙げられる。各Ｒ’は独立してアルキル基またはアリール基である。これらの基はさらにアリール基によって置換してよい（例えば、アルキル基は芳香族基により置換されてアリールアルキル基を形成できる）。置換されたアルキル、アルキレン、ヒドロカルビルまたはアシル基は二つ以上の置換基を有することができる。
【０１１４】
アリール基として、フェニル、ｐ−トリル、１−ナフチル、２−ナフチル、１−アントラシルおよび２−アントラシル等の炭素環式芳香族基が挙げられる。アリール基として、さらにＮ−イミダゾリル、２−イミダゾール、２−チエニル、３−チエニル、２−フラニル、３−フラニル、２−ピリジル、３−ピリジル、４−ピリジル、２−ピリミジル、４−ピリミジル、２−ピラニル、３−ピラニル、３−ピラゾリル、４−ピラゾリル、５−ピラゾリル、２−ピラジニル、２−チアゾリル、４−チアゾリル、５−チアゾリル、２−オキサゾリル、４−オキサゾリルおよび５−オキサゾリル等の複素芳香族基が挙げられる。
【０１１５】
アリール基として、炭素環式、脂環式または芳香族環またはヘテロアリール環が一つ以上の他のヘテロアリールまたはアリール環に縮合した縮合多環式芳香族環系も挙げられる。具体例として、２−ベンゾチエニル、３−ベンゾチエニル、２−ベンゾフラニル、３−ベンゾフラニル、２−インドリル、３−インドリル、２−キノリニル、３−キノリニル、２−ベンゾチアゾール、２−ベンゾオキサゾール、２−ベンゾイミダゾール、２−キノリニル、３−キノリニル、１−イソキノリニル、３−キノリニル、１−イソインドリルおよび３−イソインドリルが挙げられる。
【０１１６】
切断可能な官能基は化学的または酵素的に切断することができる。好ましくは、切断可能な官能基は加水分解性である。切断可能な官能基の具体例として、エステル、アミド、カルバメート、カルボネート、ジチオカルバメート、ホスフェートエステルおよびホスフィトエステル基が挙げられる。
【０１１７】
ここで用いられる結合基は接合体の金属キレーター部分を同接合体のポリアミン部分に結合させる。結合基は典型的には二つの部分を互いに結合させるために各末端に適当な官能基を有する。結合基が金属キレーター部分の金属キレート化活性またはポリアミン部分の窒素原子のｐＫａに悪影響を与えないようにそれら結合基を選択する。結合基は、接合体から金属キレーター部分およびポリアミン部分のいずれかまたは両方の放出を可能とするように、一つ以上の切断可能な官能基を任意に含むことができる。好ましくは、いずれかの部分または両部分の放出が細胞内で起こる。適当な結合基として、上記のようにヒドロカルビル基が挙げられる。好ましくは、結合基はペンタメチレン基等のアルキレン基である。
【０１１８】
金属キレーター部分がポリアミン部分に共有結合で直接結合している場合、接合体には結合基は存在しない。そのような接合体の例を実施例１に示す。ポリアミン部分と金属キレーター部分とが直接結合する接合体の一種類において、ポリアミン部分は金属キレーター部分から単一の単位として切断することはできない（ただし、アミノプロピル断片は個々に切断できる）。
【実施例】
【０１１９】
ここで、本発明を下記実施例により詳細に示すが、本発明は決して実施例により限定されるものではない。
【０１２０】
（実施例１）
（１−（１２−アミノ−４，９−ジアザドデシル）−２−メチル−３−ヒドロキシ−４（１Ｈ）−ピリジノン四塩酸（化合物３）の合成）
合成を模式的に図１に示す。
【０１２１】
試薬はＡｌｄｒｉｃｈ  Ｃｈｅｍｉｃａｌ  Ｃｏ．（Ｍｉｌｗａｕｋｅｅ，  ＷＩ）から購入し、Ｆｉｓｈｅｒ  Ｏｐｔｉｍａグレードの溶媒を日常的に用いた。Ｓｅｌｅｃｔｏ  Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ，  Ｉｎｃ．（Ｓｕｗａｎｅｅ，  ＧＡ）からのシリカゲル３２〜６３をフラッシュカラムクロマトグラフィーに用い、セファデックスＬＨ−２０はＡｍｅｒｓｈａｍ  Ｂｉｏｓｃｉｅｎｃｅｓ（Ｐｉｓｃａｔａｗａｙ，  ＮＪ）から得た。融点は未補正である。ＮＭＲスペクトルは、３００ＭＨｚ（１Ｈ）または７５ＭＨｚ（１３Ｃ）で、Ｄ２Ｏ中Ｖａｒｉａｎ  Ｕｎｉｔｙ  ３００により得られ、３−（トリメチルシリル）プロピオン酸ナトリウム−２，２，３，３−ｄ４（０．０）または１，４−ジオキサン（６７．１９）をそれぞれリファレンスとしたピーピーエムで与えられる化学シフト（δ）を有した。カップリング定数（Ｊ）はヘルツで表わされる。元素分析はＡｔｌａｎｔｉｃ  Ｍｉｃｒｏｌａｂｓ（Ｎｏｒｃｒｏｓｓ，  ＧＡ）により実施した。
【０１２２】
（１−（１２−アミノ−４，９−ジアザドデシル）−２−メチル−３−（フェニルメトキシ）−４（１Ｈ）−ピリジノン四塩酸（化合物２））
水酸化ナトリウム（２Ｎ、１９０ｍＬ、０．３８ｍｏｌ）を、氷浴で冷却しながら、３９％水性ＥｔＯＨ（５７０ｍＬ）中の３−ベンジルオキシ−２−メチル−４−ピロン（化合物１）（１１．４９ｇ、５３．１５ｍｍｏｌ）とスペルミン・４ＨＣｌ（２０．２０ｇ、５８．０１ｍｍｏｌ）の溶液に少しずつ加えた。反応混合物を室温で１日間攪拌し、その体積をロータリー蒸発により減少させた。水（２００ｍＬ）を加えた後、ＣＨＣｌ３抽出を数回行った。有機部分を飽和ＮａＣｌで洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥し、減圧下に濃縮した。フラッシュクロマトグラフィー（３０％濃縮ＮＨ４ＯＨ／ＣＨ３ＯＨ）およびＥｔＯＨ中の濃ＨＣｌによる酸化により化合物２（３．３５ｇ、１２％）を白色固体として得た：  融点１８８〜１９０℃；  １Ｈ  ＮＭＲδ１．７−１．８（ｍ，４Ｈ），２．０−２．２（ｍ，４Ｈ），２．２８（ｓ，３Ｈ），３．０−３．２（ｍ，１０Ｈ），４．２３（ｔ，２Ｈ，Ｊ＝７．７），５．１２（ｓ，２Ｈ），６．９１（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝７．２），７．４−７．５（ｍ，５Ｈ），７．９８（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝７．５）；  １３Ｃ  ＮＭＲδ１３．５，２３．４，２４．４，２６．８，３７．２，４４．８，４５．２，４７．６，４７．７，５３．７，７６．０，１１４．３，１２９．５，１２９．９，１３０．３，１３５．８，１４２．５，１４３．７，１５０．６，１６５．９。分析値（Ｃ２３Ｈ４０Ｃｌ４Ｎ４Ｏ２・２Ｈ２Ｏ）Ｃ，Ｈ，Ｎ。
【０１２３】
（１−（１２−アミノ−４，９−ジアザドデシル）−２−メチル−３−ヒドロキシ−４（１Ｈ）−ピリジノン四塩酸（化合物３））
蒸留溶媒、および３ＮのＨＣｌに１５分間前もって浸しておいたガラス製品を用いた。Ｐｄ−Ｃ（１０％、４００ｍｇ）を、３８％水性ＣＨ３ＯＨ（１３０ｍＬ）中の化合物２（１．４３ｇ、２．６２ｍｍｏｌ）に加えた。反応混合物は、Ｈ２下で１気圧、５時間攪拌し、Ｃｅｌｉｔｅでろ過し、水（１０ｍＬ）とＥｔＯＨ（３０ｍＬ）で洗浄した。溶媒を減圧下に除去した後、セファデックスＬＨ−２０（ＥｔＯＨ）によるクロマトグラフィーにより化合物３（０．９１１ｇ、７６％）を白色固体として得た：  融点２１６〜２１８℃；  １Ｈ  ＮＭＲδ１．７−１．８（ｍ，４Ｈ），２．０２−２．１５（ｍ，２Ｈ），２．１８−２．３１（ｍ，２Ｈ），２．５７（ｓ，３Ｈ），３．０−３．２（ｍ，１０Ｈ），４．３９（ｔ，２Ｈ，Ｊ＝７．６），６．９９（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝７．０），７．９７（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝７．０）；  １３Ｃ  ＮＭＲδ１２．８，２３．４，２４．４，２６．９，３７．２，４４．９，４５．２，４７．６，５３．８，１１２．０，１３９．０，１４２．５，１４３．６，１６０．１。分析値（Ｃ１６Ｈ３４Ｃｌ４Ｎ４Ｏ２・Ｈ２Ｏ）Ｃ，Ｈ，Ｎ。
【０１２４】
環形成を単一の第一アミンに向けるように設計された化合物３の合成において、Ｎ１，Ｎ４，Ｎ９−トリス（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）スペルミンを化合物１およびＥｔＯＨ中のＮａＯＨとともに加熱して、化合物２のｔｒｉｓ（ＢＯＣ）誘導体を９％収率で得た。
【０１２５】
（実施例２）
（金属／リガンド接合体の化学量論）
１，２−ジメチル−３−ヒドロキシピリジン−４−オン（Ｌ１）は、Ｈ．Ｈ．ピーター博士（Ｃｉｂａ−Ｇｅｉｇｙ，Ｂａｓｅｌ、スイス）からの寛大な寄贈品であった。
【０１２６】
金属／リガンド接合体の化学量論は、化合物３とＬ１に関して、鉄接合体の可視吸収バンドのλｍａｘ（図２Ａと２Ｂ、それぞれ４５９ｎｍと４５５ｎｍ）にて分光光度法で決定した。簡単に説明すれば、０．５ｍＭのＦｅ（ＩＩＩ）ニトリロトリアセテート（ＮＴＡ）溶液を、使用の直前に５０ｍＭのＦｅ（ＩＩＩ）−ＮＴＡ保存溶液をトリス緩衝液による希釈を用いて調製した。次に、異なるリガンド／Ｆｅ（ＩＩＩ）比を有する鉄接合体の溶液を、リガンドとＦｅ（ＩＩＩ）の組み合わせた濃度が１．００ｍＭで一定となるように１００ｍＭトリス塩酸、ｐＨ７．４中の０．５ｍＭリガンドと０．５ｍＭ  Ｆｅ（ＩＩＩ）−ＮＴＡの適当な量を混合することにより調製した。次に各組の混合物に関するＪｏｂのプロットを引き出した。
【０１２７】
化合物３とＬ１に関するプロットは基本的に同一であり、両化合物は３：１のリガンド／金属接合体を形成することを示した。これらの結果は、Ｌ１／ポリアミン接合体化合物３のスペルミン断片が鉄接合体の化学量論を変えないことを明らかに示した。
【０１２８】
（実施例３）
（接合体の細胞増殖に対する効果）
Ｎ１−アセチルスペルミン（ＡｃＳＰＭ）をその三塩酸塩（Ａ−２６７９）として、Ｓｉｇｍａ（Ｓｔ．Ｌｏｕｉｓ，  ＭＯ）から購入した。
【０１２９】
ネズミＬ１２１０白血病細胞は、水ジャケット付きの５％ＣＯ２インキュベーター中、３７℃で、１０％ウシ胎児血清（Ｇｉｂｃｏ）、２％ＨＥＰＥＳ−ＭＯＰＳ緩衝液、１ｍＭのＬ−グルタミン（Ｇｉｂｃｏ）および１ｍＭアミノグアニジンを含むＲＰＭＩ−１６４０培地（Ｇｉｂｃｏ，  Ｇｒａｎｄ  Ｉｓｌａｎｄ，  ＮＹ）中で懸濁培養物として対数増殖で維持した。
【０１３０】
細胞を２５ｃｍ２組織培養フラスコで１０ｍＬの全体積で増殖させた。Ｂｅｒｇｅｒｏｎ，  Ｒ．Ｊ．，  Ｍuｌｌｅｒ，  Ｒ．，  Ｂｕｓｓｅｎｉｕｓ，  Ｊ．，  ＭｃＭａｎｉｓ，  Ｊ．Ｓ．，  Ｍｅｒｒｉｍａｎ，  Ｒ．Ｌ．，  Ｓｍｉｔｈ，  Ｒ．Ｅ．，  Ｙａｏ，  Ｈ．，  Ｗｅｉｍａｒ，  Ｗ．Ｒ．，  「Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ  ａｎｄ  Ｅｖａｌｕａｔｉｏｎ  ｏｆ  Ｈｙｄｒｏｘｙｌａｔｅｄ  Ｐｏｌｙａｍｉｎｅ  Ａｎａｌｏｇｕｅｓ  ａｓ  Ａｎｔｉｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｖｅｓ，」  Ｊ．  Ｍｅｄ．  Ｃｈｅｍ  ４３：２２４−２３５（２０００）に記載のように、培養物は対数増殖中（０．５〜１．０×１０５細胞／ｍＬ）、興味のある化合物で処理し、再播種し、インキュベートした。細胞数の計測とコントロール成長のパーセントの計算もＢｅｒｇｅｒｏｎらにより記載されたように実施した。ＩＣ５０は、定められた間隔の露出後に、細胞成長をコントロール成長の５０％に減少させるのに必要な化合物の濃度と定義される。
【０１３１】
幾つかの異なるポリアミンについて細胞増殖に対する効果を調べた（図３）。トリカチオンであるＮ１−アセチルスペルミン（ＡｃＳＰＭ）；  テトラカチオンであるＮ１−エチルスペルミン（ＭＥＳＰＭ）、；および別のトリカチオンであるＮ８−プロピルスペルミジン［ＭＰＳＰＤ（Ｎ８）］。これらのポリアミンのいずれかにおいて、分子の一末端が、接合体３におけるように、第一アミンをアミノプロピル基に固定させている。それぞれの場合において、４８時間と９６時間のＩＣ５０とＫｉ値を示す。ＭＥＳＰＭとＭＰＳＰＤ（Ｎ８）に関する数値は史料である；  ＡｃＳＰＭ、Ｌ１および化合物３は最近の一連の実験で調べられた。４８時間の処理後、三モデルのポリアミン類似体のいずれも有意なＩＣ５０値を有さず、ＩＣ５０値はＭＥＳＰＭに関して９９μＭであり、ＭＰＳＰＤ（Ｎ８）およびＡｃＳＰＭに関して１００μＭを超える。この状況は、ＭＥＳＰＭに関して９６時間の時点で顕著に異なる（０．３３μＭ）；  ＭＰＳＰＤ（Ｎ８）およびＡｃＳＰＭのいずれも特に活性はない（それぞれ、５５μＭおよび＞１００μＭ）。親の鉄キレーターであるＬ１は４８時間（４６μＭ）および９６時間（５５μＭ）のいずれも特に有効でない。しかし、接合体３はかなり効果的である。ＩＣ５０は、両時間点において０．２μＭであり、親のリガンドよりも少なくとも２３０倍高い活性がある。４８時間の時点で、化合物３は親のポリアミン類似体のいずれに対しても５００倍近く活性が高いが、９６時間の時点までにそのＩＣ５０はＭＥＳＰＭに匹敵するようになる。接合体とポリアミン類似体との最も重要な違いは、処置の長さが減少するにしたがってアルキルポリアミン類似体のＩＣ５０値が減少する一方で、接合体のＩＣ５０は４８時間の時点で低く、９８時間の時点で同一であることである。この挙動は、その挙動が静的であるキレーター部分Ｌ１のそれに類似するが、その対応するＩＣ５０値は化合物３よりもはるかに高い。
【０１３２】
（実施例４）
（ポリアミン輸送体の競合）
Ｂｅｒｇｅｒｏｎ，  Ｒ．  Ｊ．，  Ｈａｗｔｈｏｒｎｅ，  Ｔ．Ｒ．，  Ｖｉｎｓｏｎ，  Ｊ．Ｒ．Ｔ．，  Ｂｅｃｋ，  Ｄ．Ｅ．，  Ｊｒ．，  Ｉｎｇｅｎｏ，  Ｍ．Ｊ．，「Ｒｏｌｅ  ｏｆ  ｔｈｅ  Ｍｅｔｈｙｌｅｎｅ  Ｂａｃｋｂｏｎｅ  ｉｎ  ｔｈｅ  Ａｎｔｉｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｖｅ  Ａｃｔｉｖｉｔｙ  ｏｆ  Ｐｏｌｙａｍｉｎｅ  Ａｎａｌｏｇｕｅｓ  ｏｎ  Ｌ１２１０  Ｃｅｌｌｓ，」  Ｃａｎｃｅｒ  Ｒｅｓ．  ４９：２９５９−２９６４（１９８９）；  Ｂｅｒｇｅｒｏｎ，  Ｒ．Ｊ．，  ＭｃＭａｎｉｓ，  Ｊ．Ｓ．，  Ｌｉｕ，  Ｃ．Ｚ．，  Ｆｅｎｇ，  Ｙ．，  Ｗｅｉｍａｒ，  Ｗ．Ｒ．，  Ｌｕｃｈｅｔｔａ，  Ｇ．Ｒ．，  Ｗｕ，  Ｑ．，  Ｏｒｔｉｚ−Ｏｃａｓｉｏ，  Ｊ．，  Ｖｉｎｓｏｎ，  Ｊ．Ｒ．Ｔ．，  Ｋｒａｍｅｒ，  Ｄ．，  Ｐｏｒｔｅｒ，  Ｃ．，「Ａｎｔｉｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｖｅ  Ｐｒｏｐｅｒｔｉｅｓ  ｏｆ  Ｐｏｌｙａｍｉｎｅ  Ａｎａｌｏｇｕｅｓ：  Ａ  Ｓｔｒｕｃｔｕｒｅ−Ａｃｔｉｖｉｔｙ  Ｓｔｕｄｙ，」  Ｊ．  Ｍｅｄ．  Ｃｈｅｍ．  ３７：３４６４−３４７６（１９９４）；およびＢｅｒｇｅｒｏｎ，  Ｒ．Ｊ．，  Ｗｅｉｍａｒ，  Ｗ．Ｒ．，  Ｗｕ，  Ｑ．，  Ｆｅｎｇ，  Ｙ．，  ＭｃＭａｎｉｓ，  Ｊ．Ｓ．，「Ｐｏｌｙａｍｉｎｅ  Ａｎａｌｏｇｕｅ  Ｒｅｇｕｌａｔｉｏｎ  ｏｆ  ＮＭＤＡ  ＭＫ−８０１  Ｂｉｎｄｉｎｇ：  Ａ  Ｓｔｒｕｃｔｕｒｅ−Ａｃｔｉｖｉｔｙ  Ｓｔｕｄｙ，」  Ｊ．  Ｍｅｄ．  Ｃｈｅｍ．  ３９：５２５７−５２６６（１９９６）に記載されたように、興味のある化合物を、インビトロでＬ１２１０白血病細胞懸濁液への取り込みに関して［３Ｈ］ＳＰＤと競合する能力について調べた。簡単に説明すると、細胞懸濁液を、放射標識ＳＰＤのみ、または徐々に増加する濃度のキレーターまたは誘導体の存在下の放射標識ＳＰＤを含有する１ｍＬの培養培地中でインキュベートした。インキュベーション時間の最後に、チューブを遠心した；  シンチレーション計測前に、得られたペレットを洗浄し、消化し、中和した。Ｌｉｎｅｗｅａｖｅｒ−ＢｕｒｋプロットはＳＰＤに関して単純な競合阻害を示した。
【０１３３】
各ポリアミン類似体はポリアミン輸送装置（ｐｏｌｙａｍｉｎｅ  ｔｒａｎｓｐｏｒｔ  ａｐｐａｒａｔｕｓ）に対して効果的に競合した。Ｋｉ値は、ＡｃＳＰＭ、ＭＥＳＰＭおよびＭＰＳＰＤ（Ｎ８）に関してそれぞれ１０、１．７および８．５μＭであった（図３）。親リガンドＬ１は輸送競合物ではないが、そのスペルミン接合体３は非常に効果的な輸送競合物であり（Ｋｉ、３．７μＭ）、該ポリアミンはリガンドのベクターとして働かないことを示唆している（図３）。
【０１３４】
（実施例５）
（ポリアミンプールに対する接合体の効果および類似体の蓄積）
対数増殖中、Ｌ１２１０白血病細胞を、興味ある化合物により、４８時間のＩＣ５０濃度で処理した。処理時間の最後に、細胞懸濁液をサンプリングし、氷冷の不完全媒体で三回洗浄し、０．６Ｎ過塩素酸を用いる抽出のためにペレット化し、次に液体窒素／熱水で三回凍結破砕した。各上清を、ＨＰＬＣによるポリアミン含量の分析まで−２０℃で凍結した。Ｌ１はＨＰＬＣ法により文献に記載のＵＶ検出を用いて測定したが、下記の改良を行った：  移動相Ａ、２０％緩衝液／８０％ＣＨ３ＯＨ；  移動相Ｂ、９８％緩衝液／２％ＣＨ３ＣＮ。緩衝液はリン酸カリウム（１０ｍＭ）およびＥＤＴＡ（２ｍＭ）、ｐＨ２．９からなった。これらの条件下に、ポリアミンはクロマトグラム上で下記のように溶出した（分）：  プトレシン、１０．８；  ＡｃＳＰＭ、２７．３；  スペルミジン、３３．１；  化合物３、４７．１；  スペルミン、４８．０。
【０１３５】
そのままのポリアミンに対する効果は未処理のコントロール細胞に見られるポリアミンのパーセントとして報告し、類似体蓄積はｍＭとして報告する（図４）。接合体３等、四つすべてのポリアミン類似体のうち、ＭＥＳＰＭはポリアミンプールを減少するのに最も効果的であった。１００μＭの処理濃度において、プトレシン、スペルミジンおよびスペルミンはコントロールのそれぞれ０、１および２１％まで減少した。同じ処理濃度において、ＭＰＳＰＤ（Ｎ８）はプトレシンおよびスペルミジンを低下させたが、スペルミンは影響を受けなかった（１０３％）。しかし、１００μＭの処理濃度において、ＡｃＳＰＭはプトレシンに実質的な効果を有し、スペルミジンのわずかな減少を引き起こし、スペルミンレベルを増加した。これらの三つのポリアミンのうち、ＭＰＳＰＤ（Ｎ８）は最大の細胞内濃度（３．５２ｍＭ）を達成し、ＡｃＳＰＭとＭＥＳＰＭはそれぞれこの半分以下の濃度（それぞれ１．６２および１．２４ｍＭ）に達した。恐らく驚くべきことでないであろうが、Ｌ１（５０μＭ）による細胞の処理はそのままのポリアミンにほとんど衝撃を与えなかった（図４）；プトレシンおよびスペルミジンはコントロールレベルに近く、スペルミンはコントロール値の１２７％まで上昇した。接合体３の挙動は、そのＩＣ５０濃度（０．２μＭ）で与えられたときに、Ｌ１とは非常に異なり、ＡｃＳＰＭとは非常に類似した。プトレシンはコントロールの３３％まで減少し、スペルミジンはコントロールの６４％まで減少し、スペルミンはコントロール値の１３９％まで増加した。接合体３は細胞に非常に効率的に運ばれた；０．３９ｍＭの細胞内濃度は細胞外処理濃度よりも１９００倍超高く、親リガンドＬ１により達成された細胞内濃度よりも数百倍高い。
【０１３６】
（実施例６）
（ポリアミン代謝酵素に対する効果）
オルニチンデカルボキシラーゼ（ＯＤＣ）およびアデノシルメチオニンデカルボキシラーゼ（ＡｄｏＭｅｔＤＣ）活性を、Ｓｅｅｌｙ，  Ｊ．Ｅ．，  Ｐｅｇｇ，  Ａ．Ｅ．，「Ｏｒｎｉｔｈｉｎｅ  Ｄｅｃａｒｂｏｘｙｌａｓｅ（Ｍｏｕｓｅ  Ｋｉｄｎｅｙ），」  Ｍｅｔｈｏｄｓ  Ｅｎｚｙｍｏｌ．  ９４：１５８−１６１（１９８３）およびＰｅｇｇ，  Ａ．Ｅ．，  Ｐoｓo，  Ｈ．，「Ｓ−Ａｄｅｎｏｓｙｌｍｅｔｈｉｏｎｉｎｅ  Ｄｅｃａｒｂｏｘｙｌａｓｅ（Ｒａｔ  Ｌｉｖｅｒ），」  Ｍｅｔｈｏｄｓ  Ｅｎｚｙｍｏｌ．  ９４：２３４−２３９（１９８３）の手順にそれぞれ従って、［１４Ｃ］カルボキシル標識Ｌ−オルニチンまたはＳ−アデノシル−Ｌ−メチオニンから放出された１４ＣＯ２の定量に基づいて決定した。陰性コントロールとして未処理Ｌ１２１０細胞、陽性コントロールとして、各酵素に対して公知の再現性のある効果を有する医薬であるＤＥＨＳＰＭで処理した細胞を各アッセイに含めた。
【０１３７】
スペルミジン／スペルミンＮｌ−アセチルトランスフェラーゼ（ＳＳＡＴ）活性は、Ｌｉｂｂｙ，  Ｐ．Ｒ．，  Ｂｅｒｇｅｒｏｎ，  Ｒ．Ｊ．，  Ｐｏｒｔｅｒ，  Ｃ．Ｗ．，「Ｓｔｒｕｃｔｕｒｅ−Ｆｕｎｃｔｉｏｎ  Ｃｏｒｒｅｌａｔｉｏｎｓ  ｏｆ  Ｐｏｌｙａｍｉｎｅ  Ａｎａｌｏｇ−Ｉｎｄｕｃｅｄ  Ｉｎｃｒｅａｓｅｓ  ｉｎ  Ｓｐｅｒｍｉｄｉｎｅ／Ｓｐｅｒｍｉｎｅ  Ａｃｅｔｙｌｔｒａｎｓｆｅｒａｓｅ  Ａｃｔｉｖｉｔｙ，」  Ｂｉｏｃｈｅｍ．  Ｐｈａｒｍａｃｏｌ．  ３８：１４３５−１４４２（１９８９）の方法にしたがって、ＳＰＤの［１４Ｃ］アセチルコエンザイムＡによるアセチル化により形成された［１４Ｃ］−Ｎｌ−アセチルスペルミジンの定量に基づいた。ＤＥＮＳＰＭで処理された細胞は陽性コントロールであった。
【０１３８】
ＭＥＳＰＭおよびＭＰＳＰＤ（Ｎ８）の両方が三種類のすべてのポリアミン酵素に対してかなり顕著な効果をおよぼした（図５）。ＭＥＳＰＭは、ＯＤＣとＡｄｏＭｅｔＤＣをそれぞれコントロールの１０％と２７％まで低下させ、ＳＳＡＴ活性をコントロールの１５０％までわずかに増加させた。ＯＤＣに対するその衝撃はＭＥＳＰＭに類似するが、ＭＰＳＰＤ（Ｎ８）は、ＡｄｏＭｅｔＤＣをより低い程度（コントロールの６４％）まで減少させ、ＳＳＡＴ活性をコントロールの５００％まで実質的に増強した。ＡｃＳＰＭの場合、ＯＤＣに対するその衝撃は他の二つのポリアミンの衝撃（コントロールの２５±１１％）に匹敵するが、ＡｄｏＭｅｔＤＣに対するその効果はそのようには高くなかった（８６±１１％）；  このポリアミンはＳＳＡＴ活性をコントロールの１８０±１１％まで高めた。親キレーターＬ１がポリアミン酵素のいずれの活性にも実質的に影響を与えなかった（ＯＤＣ、１１４±５％；ＡｄｏＭｅｔＤＣ、１２０±４％；ＳＳＡＴ、１０８±５８％）ことは予期されないものではなかった。接合体３はＭＰＳＰＤ（Ｎ８）とかなり同じように働き、ＯＤＣとＡｄｏＭｅｔＤＣをそれぞれコントロールの２０±４％と７７±１１％まで減少させ、ＳＳＡＴ活性をコントロールの２７５±６％まで増加させた。これらの結果はさらに接合体の取り込みという考えを支持する。
【０１３９】
（実施例７）
（デスフェリオキサミンの無トリエーテルアミド類似体のスペルミン接合体の調製）
この反応順序を図６に概略的に示す。トリヒドロキサム酸試薬７を、ＣＨ２Ｃｌ２中のトリフルオロ酢酸（ＴＦＡ）を用いてＯ−ベンジルヒドロキシルアミン８に変換した。ピリジン中の無水コハク酸を用いて四炭素スペーサーを８に付加して、カルボン酸９を形成する。酸９はカルボニルジイミダゾールにより活性化し、Ｎ１，Ｎ４，Ｎ９−トリス−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）スペルミン（５）で処理して、完全に保護されたキレーター１０を得た。１０のベンジル基の水素化分解およびセファデックスＬＨ−２０を用いる精製によって、アミンが保護されたままであるトリヒドロキサメート１１を得た。エタノール性ＨＣｌによる１１の処理によりトリアミノキレーター１２を作った。１１をＴＦＡとともに攪拌することにより、アミノ基のきれいな脱保護を実施し、イオン交換により三塩酸塩１２を得た。
【０１４０】
（実施例８）
（デスフェリオキサミンの無トリエーテルアミド類似体のスペルミン接合体の細胞増殖に対する効果）
Ｌ１２１０ネズミ白血病細胞（ＩＣ５０）の増殖に対する類似体１２（実施例７）の効果およびポリアミン輸送装置に対する放射能標識スペルミジンとのその競合能力（Ｋｉ）を実施例４に記載の方法を用いて調べた。９６時間のＩＣ５０値は１．５μＭであり、これは多くのテトラアミン類似体に匹敵する。Ｋｉ値は７μＭであり、ポリアミン輸送装置に対する良好な競合を示した。
【０１４１】
（実施例９）
（ノルスペルミジン／デスフェリオキサミン接合体の調製）
反応順序を図７Ａ〜７Ｃに概略的に示す。ジ（ｔ−ブチル）ジカルボネート、炭酸ナトリウムおよび水性ジオキサンとの反応により、デスフェラル（１７）をＮ−ＢＯＣ誘導体１８に変換した。１８のヒドロキサメートを、ジメチルホルムアミド（ＤＭＦ）中室温で１日間、３．２当量の臭化ベンジルと３．３当量の水素化ナトリウムによってベンジル化し、３ｇのテトラ保護ＤＦＯ試薬１９を得た。トリフルオロ酢酸による１９の部分的な脱保護によりＯ，Ｏ’，Ｏ’’−トリベンジルデスフェリオキサミン（１４）を得た。
【０１４２】
ノルスペルミジン（２０）を、ＤＭＦ中、１．４当量の水酸化セシウム一水和物および４Åモレキュラーシーブの存在下に室温で１日間、ベンジル４−ブロモブチルエーテル（２Ｌ、１．２当量）と反応させて、２２を得た。アミノ基を、水性テトラヒドロフラン（ＴＨＦ）中のジ（ｔ−ブチル）ジカルボネートを用いて保護して２３を得た。アンモニアとＴＨＦ中のカルシウムにより効果的にアルコール２４を作った。アルコールを、ＣＨ２Ｃｌ２中のピリジニウムジクロメートを用いてアルデヒドに変換した。
【０１４３】
アルデヒドおよびＯ，Ｏ’，Ｏ’’−トリベンジルデスフェリオキサミン（１４）をＣＨ２Ｃｌ２中のＮａＢＨ（ＣＨ３ＣＯ２）３の存在を用いて結合して１６を作った。１６を、エタノール中でＨ２とＰｄ−Ｃにより部分的に脱保護した。脱保護をトリフルオロ酢酸により完結して、ノルスペルミジン／デスフェリオキサミン接合体１３を得た。
【０１４４】
複合物１３を、実施例３に記載のようにＩＣ５０アッセイで調べ、８０マイクロモルであると決定された。接合体１３に関するＫｉを実施例４に記載のように測定し、５マイクロモルであることがわかった。
【０１４５】
（実施例１０）
（ノルスペルミジン−４’−ヒドロキシデスアザデスフェリチオシン接合体（ノルスペルミジン−（Ｓ）−４’−（ＯＨ）ＤＡＤＦＴ接合体）の調製）
試薬はＡｌｄｒｉｃｈ  Ｃｈｅｍｉｃａｌ  Ｃｏ．（Ｍｉｌｗａｕｋｅｅ，  ＷＩ）から購入し、Ｆｉｓｈｅｒ  Ｏｐｔｉｍａグレードの溶媒を普通に用いた。Ｓｅｌｅｃｔｏ  Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ，  Ｉｎｃ．（Ｓｕｗａｎｅｅ，  ＧＡ）のシリカゲル３２〜６３をフラッシュカラムクロマトグラフィーに用い、セファデックスＬＨ−２０をＡｍｅｒｓｈａｍ  Ｂｉｏｓｃｉｅｎｃｅｓ（Ｐｉｓｃａｔａｗａｙ，  ＮＪ）から得た。融点は補正しない。ＮＭＲスペクトルは、３００ＭＨｚ（１Ｈ）または７５ＭＨｚ（１３Ｃ）で、Ｄ２Ｏ中Ｖａｒｉａｎ  Ｕｎｉｔｙ  ３００により得られ、３−（トリメチルシリル）プロピオン酸ナトリウム−２，２，３，３−ｄ４（０．０）または１，４−ジオキサン（６７．１９）をそれぞれリファレンスとしてピーピーエムで与えられる化学シフト（δ）を有した。カップリング定数（Ｊ）はヘルツで表わされる。元素分析はＡｔｌａｎｔｉｃ  Ｍｉｃｒｏｌａｂｓ（Ｎｏｒｃｒｏｓｓ，  ＧＡ）により実施した。
【０１４６】
図９に示されるノルスペルミジン−（Ｓ）−４’−（ＨＯ）−ＤＡＤＦＴ接合体（化合物９と１０）を調製するための反応式を図８と図９に示す。合成の最初の工程は、図８に示されているように、Ｎｌに４−ヒドロキシブチルコネクターを有する保護トリアミン（２０）の調製を伴った。ビス（ＢＯＣ）アミノニトリル１５を、エタノール性ＮａＯＨ中の高いアルカリ条件下にラネーニッケルによりＮ１，Ｎ４−ビス（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）ノルスペルミジン（１６）へと水素化した。ω−ヒドロキシ鎖を１６のアミノ末端に二段階で付加した。塩化メシチレンスルホニルを、水性ＮａＯＨとＣＨ２Ｃｌ２中で１６に反応させ（二段階で８５％の収率）、得られたスルホンアミド１７を、ＮａＨとＤＭＦの存在下で１．１当量のベンジル４−ブロモブチルエーテルによりアルキル化して、ベンジルエーテル１８を７８％の収率で得た。１８の三窒素および酸素を、酢酸中の３０％ＨＢｒとＣＨ２Ｃｌ２中のフェノールを用いて脱マスクし、トリヒドロブロミド塩１９のアミノ基を、ＴＨＦおよびトリエチルアミン中のジ−（ｔ−ブチル）−ジカルボネートを用いて、それらのｔｅｒｔ−ブチルカルバメートとして捕捉し、Ｎ１−（４−ヒドロキシブチル）−Ｎ１，Ｎ４，Ｎ７−トリス（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）ノルスペルミジン（２０）を５９％の収率で１８から得た。
【０１４７】
ＮＳＰＤ試薬２０のアルコール基を、トリエチルアミンおよびＣＨ２Ｃｌ２中の塩化トシルによりトシレートとして８０％収率で活性化した（図９）。（Ｓ）−４’−（ＨＯ）−ＤＡＤＦＴ（８）を、ＤＭＦ中のヨードエタンとＮ，Ｎ−ジプロピルエチルアミン（ＤＩＥＡ）を用いて、エチル（Ｓ）−２−（２，４−ジヒドロキシフェニル）−４，５−ジヒドロ−４−メチル−４−チアゾールカルボキシレート（２２）に９２％の収率で変換した。エトキシドナトリウムおよび６０℃での加熱を用いて、エタノール中のトシレート２１による２２の脱プロトン化はレソルシノール系のモノアルキル化を６７％収率で達成した。２３の構造的な帰属は、２，４−ジヒドロカルボキシル系の選択的４−Ｏ−アルキル化および最終生成物１０のＮＯＥＳＹに基づいた。エーテル機能のα−メチレンに対応するδ４．１８での照射は、δ６．５９および６．６９での芳香族シグナルならびに直鎖のβ−メチレンを顕著に増強した。同様に、２−ヒドロキシ−４−メトキシベンズアルデヒドのメチル基から、芳香族環上の隣接するプロトン（Ｈ−３とＨ−５）へのＮＯＥ相関が観察された。しかし、わずかに一つの環プロトン（Ｈ−３）が、４−ヒドロキシ−２−メトキシベンズアルデヒドによる類似の実験でかなり影響を受けた。すなわち、図９中の２３のＯ−アルキル基の４’位が確認された。塩化アセチルからその場で発生させたエタノールＨＣｌによる２３の処理はＢＯＣ基を除去し、ＮＳＰＤ−（Ｓ）−４’−（ＨＯ）−ＤＡＤＦＴ接合体のエチルエステル（図９の９）が得られた（７５％）。水性メタノール中の１Ｎ  ＮａＯＨによる２３中のエステルのけん化はトリス（ＢＯＣ）酸２４を７０％の収率でもたらした。２４のカルバメートを、ＣＨ２Ｃｌ２中のトリフルオロ酢酸（ＴＦＡ）で切断した後、イオン交換クロマトグラフィーにより、（Ｓ）−４，５−ジヒドロ−２−［２−ヒドロキシ−４−（１２−アミノ−５，９−ジアザドデシルオキシ）フェニル］−４−メチル−４−チアゾールカルボン酸三塩酸（図９の１０）を６８％の収率で得た。
【０１４８】
（実施例１１）
（ノルスペルミジン−４’−ヒドロキシデスアザデスフェリチオシン接合体（図９の化合物１０）のイオン結合化学量論）
このアッセイは実施例２に記載の操作を用いて実施した。（Ｓ）−４，５−ジヒドロ−２−［２−ヒドロキシ−４−（１２−アミノ−５，９−ジアザドデシルオキシ）フェニル］−４−メチル−４−チアゾールカルボン酸三塩酸の鉄接合体の化学量論をそのλｍａｘ、４８０ｎｍにて分光光度法で決定した。簡単に説明すれば、異なるリガンド／Ｆｅ（ＩＩＩ）比を有する溶液を、［リガンド］＋［Ｆｅ（ＩＩＩ）］＝１．０ｍＭとなるように調製した。データ点を、（１）０〜０．６０および（２）０．７０〜１．００のモル分率に適合させた；  それぞれｒ２＝０．９９９７（４データ点）および０．９９９９（５データ点）。２：１のリガンド／Ｆｅ接合体の最大の理論的モル分率は０．６６７である；最大０．６７５の直線切片が見られた。接合体のＪｏｂのプロット（図１０）は、この接合体に関する２：１リガンド／金属接合体と一致し、非複合の対応するものと同じである。
【０１４９】
（実施例１２）
（細胞増殖に対するノルスペルミジン−４’−ヒドロキシデスアザフェリチオシン接合体の効果）
Ｌ１２１０細胞中のＩＣ５０値を４８時間と９６時間の両時点で決定した（図１１Ａおよび１１Ｂ）。ＤＥＳＰＭ（１）、ＦＤＥＳＰＭ（２）、Ｌ１（４）およびＳＰＭ−Ｌ１接合体（５）に関する値を比較の目的から図１１Ａおよび図１１Ｂに含める。ＦＤＥＳＰＭ（２）はＩＣ５０アッセイで活性がないが（＞１００μＭ）、ＩＣ５０アッセイでのＤＥＳＰＭ（１）の挙動は多くのポリアミン類似体に典型的なものであり、すなわち、処置の長さが増加するにしたがって、ＩＣ５０は、この場合では、４８時間での３０μＭから９６時間での０．２μＭに減少する。
【０１５０】
ネズミＬ１２１０白血病細胞は、水ジャケット付きの５％ＣＯ２インキュベーター中、３７℃で、１０％ウシ胎児血清（Ｇｉｂｃｏ）、２％ＨＥＰＥＳ−ＭＯＰＳ緩衝液、１ｍＭのＬ−グルタミン（Ｇｉｂｃｏ）および１ｍＭアミノグアニジンを含むＲＰＭＩ−１６４０培地（Ｇｉｂｃｏ，  Ｇｒａｎｄ  Ｉｓｌａｎｄ，  ＮＹ）にて懸濁培養物として対数増殖に維持した。
【０１５１】
処理時間が進むにしたがって、鉄キレーターは典型的には一定のＩＣ５０値を維持する。例えば、同じ時間点で、ＤＦＯ（３）は７μＭ（４８時間）と６μＭ（９６時間）のＩＣ５０値を有する；  Ｌ１（４）ＩＣ５０値は幾分か高く、４８時間と９６時間の時点でそれぞれ４６μＭと５５μＭである。ポリアミンベクターのＬ１（５）への付加は、４８時間と９６時間の両時点でＩＣ５０を０．２μＭへとかなり減少させた。
【０１５２】
これらの発見に一致して、４８時間と９６時間の時点の４’−ヒドロキシデスアザデスフェリチオシン（（Ｓ）−４’−（ＨＯ）−ＤＡＤＦＴ（８））のＩＣ５０値は、それぞれ誤差内のそれぞれ１９と２０μＭであった。ＮＳＰＤ−（Ｓ）−４’−（ＨＯ）−ＤＡＤＦＴ（１０）を作るブチル結合によるノルスペルミジン（ＮＳＰＤ）の（Ｓ）−４’−（ＨＯ）−ＤＡＤＦＴ（８）の４’−ヒドロキシルへの付加は４８時間と９６時間のＩＣ５０値を４０μＭに増加させたが、この接合体の対応するエチルエステル（９）への変換は、ＩＣ５０を両時間点で１．５μＭに減少させた。テレフタレート類似体のＮｌ−テレフタロイルスペルミジンメチルエステル（ＮＴＳ−ＭＥ、６）またはＮｌ−テレフタロイルスペルミジン（ＮＴＳ、７）のいずれも細胞増殖に衝撃を与えなかった；両化合物に関する４８時間と９６時間のＩＣ５０値は＞１００μＭであった。
【０１５３】
（実施例１３）
（ポリアミン輸送体に対する競合での荷電の役割）
興味のある分子を、インビトロでのＬ１２１０白血病細胞懸濁液中への取り込みに関して［３Ｈ］ＳＰＤと競合する能力について研究した。簡単に説明すると、細胞懸濁液を、放射標識ＳＰＤのみ、または徐々に増加する濃度のキレーターまたは誘導体の存在下の放射標識ＳＰＤを含有する１ｍＬの培養培地中でインキュベートした。インキュベーション時間の最後に、チューブを遠心した；シンチレーション計測前に、得られたペレットを洗浄し、消化し、中和した。Ｌｉｎｅｗｅａｖｅｒ−ＢｕｒｋプロットはＳＰＤに関して単純な競合阻害を示した。
【０１５４】
生理学的ｐＨでトリカチオンである、テレフタル酸のモノメチルエステルとのスペルミジンの接合体は、３．１μＭのＫｉを有するポリアミン輸送体とよく競合した。しかし、アミドのメチルエステルは、生理学的ｐＨでアニオンであるカルボン酸へと切断された場合、Ｋｉは２７μＭへと９倍増加した。これらの結果は、ポリアミンのカチオン中心が輸送体中の負の対イオンに結合できることを示す。すなわち、カチオン中心を有する接合体は、アニオン特性を有する接合体に比較して、輸送装置に対して増加した結合、または増加した細胞取り込みを示すだろう。例えば、ＮＳＰＤ−（Ｓ）−４’−（ＨＯ）−ＤＡＤＦＴ接合体（図１１Ｂの化合物９および１０）により、アッセイ条件下でカルボキシレートアニオンとして存在する遊離酸のＫｉは７３μＭであり、これは５．７μＭのＫｉを有する、対応する「カルボキシレート−中性」エチルエーテルよりも実質的に（１２．８倍）高い。
【０１５５】
（実施例１４）
（ポリアミン、鉄キレーターおよびポリアミン／キレーター接合体の細胞内濃度）
対数増殖中、細胞を該化合物で処理した。処理時間の終わりに、細胞懸濁液をサンプリングし、氷冷の不完全媒体で三回洗浄し、０．６Ｎ過塩素酸を用いる抽出のためにペレット化し、次に液体窒素／熱水で三回凍結破砕した。各上清を、ＨＰＬＣによる類似体含量の分析まで−２０℃で凍結した。
【０１５６】
テレフタル酸／ポリアミン接合体（図１１Ａおよび１１Ｂの６および７）。分析的分離は、Ｒａｉｎｉｎ  Ｉｎｓｔｒｕｍｅｎｔ  Ｃｏｍｐａｎｙ  ＨＰＬＣシステムを用いて、ガードカラムを有するＷａｔｅｒｓ  Ｓｙｍｍｅｔｒｙ  Ｃ１８カラム（２５０ｍｍ×４．６ｍｍ、５μｍ）により実施した。使用された緩衝液は、リン酸カリウム（２５ｍＭ）、ｐＨ３．０中のオクタンスルホン酸ナトリウム（２．５ｍＭ）であった。移動相Ａは５％ＣＨ３ＣＮ、９５％緩衝液からなり、移動相Ｂは６０％ＣＨ３ＣＮ、４０％緩衝液からなった。溶媒の勾配プログラムは、２０％移動相Ｂから４０％移動相Ｂに増加する４０分間にわたる直線勾配および５分間にわたる１００％Ｂへの５分間勾配を用いた。カラム後の誘導体化は、ｏ−フタルジアルデヒド（緩衝液１ＬあたりＣＨ３ＯＨ中の１０ｍＬの４％  ｗ／ｖ溶液）を含有するホウ酸緩衝液系（Ｈ３ＢＯ３、３．１％  ｗ／ｖ；  ＫＯＨ、２．６％  ｗ／ｖ；  ２−メルカプトエタノール、０．６％  ｖ／ｖ）を用いた。流速は０．４ｍＬ／分、イソクラチック；  ＵＶ検出（λｅｘ、３４０ｎｍ；  λｅｍ、４４５ｎｍ）を利用した。
【０１５７】
ノルスペルミジン／（Ｓ）−４’−（ＨＯ）−ＤＡＤＦＴ接合体（図１１Ｂの９および１０）。分析的分離は、上記のシステムを用いて、逆相Ｓｕｐｅｌｃｏ  Ｄｉｓｃｏｖｅｒｙ  ＲＰ  Ａｍｉｄｅ  Ｃ１６カラム（１５０×４．６ｍｍ、５μｍ）により実施し、ＵＶ検出は３００ｎｍで行った。移動相は、１．５ｍＬ／分の流速にてポンプで供給した。緩衝液および移動相ＡとＢは上記のものと同一であった。溶媒勾配プログラムは、５％移動相Ｂ（９５％Ａ）を有する最初の１０分間のイソクラチック部分を用いた後に、３５分の時点で８０％移動相Ｂまで増加させる直線勾配、次に５分間の勾配で１００％Ｂとし、この濃度を１０分間保持し、次に８分間（５８〜６５分合計）にわたる５％移動相Ｂへの勾配を用いた。この方法は直接の注入物として０．２μＭの検出限界を有した；  これは湿重量１ｇあたり１０ｎｍｏｌの組織濃度に対応する。
【０１５８】
両方の場合で、濃度は、Ｒａｉｎｉｎ  Ｄｙｎａｍａｘ  ＨＰＬＣ  Ｍｅｔｈｏｄ  Ｍａｎａｇｅｒソフトウエア（Ｒａｉｎｉｎ  Ｉｎｓｔｒｕｍｅｎｔ  Ｃｏ．）による非加重最少二乗直線回帰による検量線に適合させたピーク領域から計算した。
【０１５９】
以前の研究は、細胞外処理濃度が３０μＭである場合、ＤＥＳＰＭが４００μＭの細胞内レベルに達することを示した（図１１Ａ）。しかし、ポリアミン輸送装置に対して不十分なＫｉを示した二カチオン性ＦＤＥＳＰＭ（２）は細胞中に効果的に濃縮されなかった。１００μＭの細胞外処理濃度においてさえ、ＦＤＥＳＰＭは＜２０μＭの細胞レベルを達成した。Ｌ１自体は５０μＭの細胞外処理濃度で１μＭの細胞内レベルに達したのみであったが、スペルミジン５とのその接合体は、０．２μＭの細胞外濃度で３９０μＭの細胞内レベルに達した（図１１Ａ）。
【０１６０】
メチルテレフタレート／ＳＰＤ接合体６で１００μＭの濃度にて処理された細胞は４３０μＭの細胞内医薬レベルを達成した。しかし、対応する酸接合体（７）で１００μＭの濃度にて処理された細胞は＜７０μＭの細胞内レベルに達した。
【０１６１】
類似する結果が（Ｓ）−４’−（ＨＯ）−ＤＡＤＦＴシリーズ（８〜１０）により観察された。それぞれの場合で、細胞外処理濃度は１００μＭであった。これらの処理条件下、親リガンドである（Ｓ）−４’−（ＨＯ）−ＤＡＤＦＴ（８）の細胞内濃度は５０μＭを超えない（図１１Ｂ）。しかし、ＮＳＰＤ−（Ｓ）−４’−（ＨＯ）−ＤＡＤＦＴ接合体（９）のエチルエステルは細胞内に効果的に運ばれ、９４７±１１０μＭの濃度を達成した；  さらに、加水分解生成物である酸接合体１０はエステルの量の約３倍（２９８０±２８０μＭ）存在した。ＮＳＰＤ接合体酸１０自体で処理した細胞において、細胞内医薬量は約７０μＭに上昇した。両シリーズ（６／７、９／１０）において、それらの結果は、対応する遊離酸ポリアミン接合体（それぞれ７および１０）に比較してエステル（６および９）のＫｉの有意な低下と一致し、輸送装置が、負の電荷を持たない基質を好むことを示した。さらに、エステル６および９は細胞内に運ばれ、次にそれぞれの遊離酸に加水分解されるように思われる。
【０１６２】
（実施例１５）
（ポリアミン／キレーター接合体の鉄除去効率）
キレーター接合体対親キレーター、すなわち、Ｌ１（図１１Ａの５対４）および（Ｓ）−４’−（ＨＯ）−ＤＡＤＦＴシリーズ（図１１Ｂの９および１０対８）の挙動をげっ歯動物鉄クリアランスモデルである胆管にカニューレ挿入したラットで評価した。このモデルにおいて、キレーターで促進された鉄排出を胆汁中と尿中で測定する。さらに、本方法は複数の胆汁試料を集めることを可能とするので、鉄排出の速度論を決定することができる。それぞれの場合で、医薬を皮下投与した。Ｌ１とそのＳＰＭ接合体（４および５）を４５０μｍｏｌ／ｋｇの投与量で投与し、（Ｓ）−４’−（ＨＯ）−ＤＡＤＦＴ（８）およびそのＮＳＰＤ接合体（９および１０）を３００μｍｏｌ／ｋｇの投与量で投与した；すなわち全て当量鉄結合容量で投与した。（Ｌ１およびそのＳＰＭ接合体は３：１リガンド／金属接合体を形成する一方、（Ｓ）−４’−（ＨＯ）−ＤＡＤＦＴ系化合物は２：１リガンド／金属接合体を形成する。エステル１０が投与された動物の組織は主として遊離酸を含有したので、エチルエステルが非特異的な血清エステラーゼよりも長く残ることはありそうもない。）
げっ歯動物モデル（図１２）において、Ｌ１（４）は２．２±０．９％の鉄除去効率を有した；  鉄の７４％は胆汁に存在し、２６％は尿に存在した。対応するＳＰＭ接合体（５）の性能はほとんど同じ（１．８±０．９％）であったが、鉄排出の態様は５３％胆汁中および４７％尿中とわずかに変化した。親（Ｓ）−４’−（ＨＯ）−ＤＡＤＦＴリガンド（８）の効率は１．１±０．６％であった；  胆汁／尿比は９３：７であった。ＮＳＰＤベクターを（Ｓ）−４’−（ＨＯ）−ＤＡＤＦＴにいったん付加して接合体１０を提供すると、効率は９．２±２．６％に増加した。対応するエステル（９）の場合、効率はさらに１３．６±３．３％に増加した。鉄排出の態様は親化合物８のものと類似していた。しかし、遊離（Ｓ）−４’−（ＨＯ）−ＤＡＤＦＴ（８）に対してポリアミンベクター化（Ｓ）−４’−（ＨＯ）−ＤＡＤＦＴ（９および１０）に関連する鉄速度論の重大な違いは注目すべきものである（図１３）。ＮＳＰＤ接合体（９および１０）の両方が、遅延性の胆嚢鉄クリアランスを引き出した。対照的に、非接合体リガンドが誘導する鉄クリアランスは、８の単一投与後の９時間後に基本的にベースラインに戻った。接合体酸１０の場合、ベースラインへの戻りは医薬投与後の４８時間までには起こらなかった。エステル９の場合、鉄排出は、動物を安楽死させる時点の７２時間後でさえベースラインに戻らなかった。
【０１６３】
（実施例１６）
（テレフタル酸接合体（図１１Ａおよび図１１Ｂの６および７）の合成）
Ｎ１，Ｎ４，Ｎ９−トリス（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）スペルミンを、１，１’−カルボニルジイミダゾール（ＣＤＩ）により活性化させておいたモノ−メチルテレフタレート（１２）によって７０％の収率でアシル化した。得られた付加物１３のアミン保護基を、メタノール性ＨＣｌを用いて除去し、トリアミノアミド／メチルエステル６を７５％収率で生成させた。もしくは、水性メタノール中のＮａＯＨによる中間体１３中エステルの最初の切断はトリス（ＢＯＣ）酸１４をもたらした。１４のカルバメートをトリフルオロ酢酸により切断した後、イオン交換クロマトグラフィーによって、スペルミンのテレフタル酸誘導体をその三塩酸塩７として４５％の収率で１３から得た。
【０１６４】
本発明を、その好適な実施態様により特に詳細に説明し、記載してきたが、当業者は形態と詳細の多様な変更が添付の特許請求の範囲に包含される本発明の範囲から離れることなくなされてよいことを理解するだろう。
【図面の簡単な説明】
【０１６５】
【図１】図１は、スペルミン／Ｌ１接合体の概略的合成を示す。
【図２】図２Ａと図２Ｂは、鉄（ＩＩＩ）とのスペルミン／Ｌ接合体とＬ１のそれぞれのＪｏｂのプロットを示す。
【図３】図３は、いくつかの一置換ポリアミン、Ｌ１、およびスペルミン／Ｌ１接合体に関するＬ１２１０細胞成長の阻害および輸送を示す。
【図４】図４は、Ｌ１２１０細胞中のポリアミンプールに対するいくつかの一置換ポリアミン、Ｌ１、およびスペルミン／Ｌ１接合体の効果を示す。
【図５】図５は、Ｌ１２１０細胞中のオルニチンデカルボキシラーゼ（ＯＤＣ）、Ｓ−アデノシルメチオニンデカルボキシラーゼ（ＡｄｏＭｅｔＤＣ）およびスペルミン／スペルミジン−Ｎ１−アセチルトランスフェラーゼ（ＳＳＡＴ）に対するいくつかの一置換ポリアミン、Ｌ１、およびスペルミン／Ｌ１接合体の衝撃を示す。
【図６】図６は、トリエーテルアミドのないデスフェリオキサミンのスペルミン誘導体の概略的合成を示す。
【図７Ａ】図７Ａは、ノルスペルミジン／デスフェリオキサミン接合体の概略的合成を示す。
【図７Ｂ】図７Ｂは、ノルスペルミジン／デスフェリオキサミン接合体の概略的合成を示す。
【図７Ｃ】図７Ｃは、ノルスペルミジン／デスフェリオキサミン接合体の概略的合成を示す。
【図８】図８は、Ｎ１に４−ヒドロキシブチルコネクターを有する保護ノルスペルミジンの概略的合成を示す。
【図９】図９は、Ｎ１に４−ヒドロキシブチルコネクターを有するノルスペルミジンからのノルスペルミジン／４−ヒドロキシデスアザデスメチルデスフェリチオシン接合体の概略的合成を示す。
【図１０】図１０は、鉄（ＩＩＩ）とのノルスペルミジン／４−ヒドロキシデスアザデスメチルデスフェリチオシン接合体のＪｏｂのプロットを示す。
【図１１Ａ】図１１Ａおよび１１Ｂは、Ｌ１２１０細胞の増殖を阻害する多様なポリアミン、鉄キレーター、およびポリアミン／キレーター接合体のＩＣ５０値を示し（実施例１２）、これらの化合物の細胞内濃度を示す（実施例１４）。
【図１１Ｂ】図１１Ａおよび１１Ｂは、Ｌ１２１０細胞の増殖を阻害する多様なポリアミン、鉄キレーター、およびポリアミン／キレーター接合体のＩＣ５０値を示し（実施例１２）、これらの化合物の細胞内濃度を示す（実施例１４）。
【図１２】図１２は、げっ歯動物における複合化または非複合化キレーターの鉄除去効率を示す。
【図１３】図１３は、胆管にカニューレ挿入したラット（各化合物につきｎ＝４）に皮下投与された３００μｍｏｌ／ｋｇの投与量において、遊離の（Ｓ）−４’−ヒドロキシデスアザデスフェリチオシン（８）、その遊離酸のノルスペルミジン（９）との接合体、およびその対応するエチルエステル（１０）の胆汁鉄速度論を示す。
【図１】
2007505044.tif 000039
【図２】
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【図３】
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【図４】
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【図５】
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【図６】
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【図７Ａ】
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【図７Ｂ】
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【図７Ｃ】
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【図８】
2007505044.tif 000048
【図９】
2007505044.tif 000049
【図１０】
2007505044.tif 000050
【図１１Ａ】
2007505044.tif 000051
【図１１Ｂ】
2007505044.tif 000052
【図１２】
2007505044.tif 000053
【図１３】
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【国際調査報告】
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2007505044.tif 000056
2007505044.tif 000057
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