(57)【要約】  生体試料、特に全血を採集するための採集装置および方法は、全血をその複数の成分に分離するための分離部材と、分離された試料の成分と選択的に相互作用するように配置された少なくとも試薬とを含む。その試薬は、血漿／血清と選択的に相互作用することができ、その全血と接触即ち相互作用しないように妨げられている。
2007501398.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
生体試料を採集するための装置であって、
第１の開口端部および第２の開口端部を有する容器と、
前記容器内で前記第１の開口端部と前記第２の開口端部との間に配され、前記試料を別々の成分に分離することができる分離部材と、
前記第１の開口端部と前記部材との間の空間によって形成されたリザーバ部と、
前記部材と前記第２の開口端部との間に配置された少なくとも１つの試薬と、
を含む装置。
【請求項２】
前記容器は、前記第１の開口端部内および前記第２の開口端部内に閉塞部を有する管である請求項１に記載の装置。
【請求項３】
前記管は、大気圧より低い圧力に排気される請求項２に記載の装置。
【請求項４】
前記試薬は、核酸安定剤である請求項１に記載の装置。
【請求項５】
前記核酸安定剤は、全血試料から分離された血漿または血清成分と選択的に接触するように配置される請求項４に記載の装置。
【請求項６】
前記分離部材は、機械的分離要素である請求項１に記載の装置。
【請求項７】
前記分離部材は、ゲルである請求項１に記載の装置。
【請求項８】
前記ゲルの分離部材は、前記試薬から物理的に分離される請求項７に記載の装置。
【請求項９】
前記分離部材は、血漿と残存する細胞成分との中間、または血清と赤血球との中間の密度を有する請求項１に記載の装置。
【請求項１０】
前記分離部材は、フィルタである請求項１に記載の装置。
【請求項１１】
前記試薬は、溶液、懸濁液またはその他の液体、小丸剤、錠剤、カプセル、スプレードライ物質、フリーズドライ物質、粉剤、粒状剤、ゲル剤、結晶および凍結乾燥物質からなる群から選択される形式である請求項１に記載の装置。
【請求項１２】
前記試薬は、タンパク質安定剤である請求項１に記載の装置。
【請求項１３】
前記リザーバ部分は、血液凝固阻害または血液凝固活性化のための試剤を含む請求項１に記載の装置。
【請求項１４】
前記血液凝固活性化剤は、シリカを基剤としたものである請求項１３に記載の装置。
【請求項１５】
前記管は、さらに抗凝血剤を含む請求項１に記載の装置。
【請求項１６】
検体採集および調製のための方法であって、
閉塞部を有する開口上端部および閉塞部を有する開口下端部と、前記上端部と前記下端部との間に配置され、それによって前記上端部と部材の間にリザーバ部分を形成し、前記試料を別々の成分に分離することができる分離部材と、前記部材と前記下端部との間に配置された少なくとも１つの試薬とを含む管を設け、
前記採集された試料は前記試薬から分離されたまま、前記リザーバ部分に試料を採集し、
前記管を、前記試料を別々の成分に分離させる処理にかけ、
分離を引き起こす前記処理が混合を引き起こすことによって、または別個の混合工程によって、前記試料の前記所望の別々の成分を前記試薬と混合させることを含む方法。
【請求項１７】
前記試料は、全血である請求項１６に記載の方法。
【請求項１８】
前記管を、前記試料を分離させる処理にかける前記工程、および前記試料の前記所望の別々の成分を前記試薬と混合させる前記工程は、
前記下端部を上に向けて前記管を遠心分離機内に配置し、
血漿または血清を前記残存する血液成分から分離させるために前記管を遠心分離機に配置し、
前記血漿または血清を前記試薬に接触させることを可能にし、または前記試薬との接触を開始させるために前記管を逆さまにすることを含む請求項１７に記載の方法。
【請求項１９】
前記試薬と接触する前記別々の成分は、血漿である請求項１８に記載の方法。
【請求項２０】
前記試薬は、核酸安定剤である請求項１８に記載の方法。
【請求項２１】
前記混合する工程は、前記管を逆さまにすることを含む請求項１８に記載の方法。
【請求項２２】
前記試料を分離させる前記処理は、遠心分離である請求項１６に記載の方法。
【請求項２３】
前記分離部材は、機械的分離要素である請求項１６に記載の方法。
【請求項２４】
前記分離部材は、ゲルである請求項１６に記載の方法。
【請求項２５】
前記ゲル分離部材は、前記試薬から物理的に分離される請求項２４に記載の方法。
【請求項２６】
前記分離部材は、フィルタである請求項１６に記載の方法。
【請求項２７】
前記試薬は、溶液、懸濁液またはその他の液体、小丸剤、錠剤、カプセル、スプレードライ材料、フリーズドライ材料、粉剤、粒状剤、ゲル剤、結晶および凍結乾燥材料からなる群から選択される形式である請求項１６に記載の方法。
【請求項２８】
前記混合する工程は、前記管を逆さまにすることを含む請求項１６に記載の方法。
【請求項２９】
前記試薬は、核酸安定剤である請求項１６に記載の方法。
【請求項３０】
前記試薬は、タンパク質安定剤である請求項１６に記載の方法。
【請求項３１】
生体試料を採集するための装置であって、
第１の開口端部および閉じた下端部を有する容器と、
前記容器内に配置され、前記試料を別々の成分に分離させることができる分離部材と、
前記分離部材より上方に配置された少なくとも１つの試薬解放機構と、
前記試薬解放機構内に配置された少なくとも１つの試薬とを備え、
前記試薬解放機構は、前記生体試料が別々の成分に分離される後まで、前記試薬と前記生体試料との接触を防ぐ装置。
【請求項３２】
前記分離部材は、前記閉じた下端部に配置される請求項３１に記載の装置。
【請求項３３】
前記分離部材は、前記上端部と前記下端部との中間に配置される請求項３１に記載の装置。
【請求項３４】
前記試薬解放機構は、前記第１の開口端部に配置される請求項３１に記載の装置。
【請求項３５】
前記容器は、前記第１の開口端部内に閉塞部を有する管である請求項３１に記載の装置。
【請求項３６】
前記試薬解放機構は、前記閉塞部に固定されている請求項３５に記載の装置。
【請求項３７】
前記試薬解放機構は、前記管の前記内壁上の一体の構造部材によって支持される請求項３５に記載の装置。
【請求項３８】
前記構造部材は、一体的なリブを含む請求項３７に記載の装置。
【請求項３９】
前記管は、大気圧より低い圧力に排気される請求項３５に記載の装置。
【請求項４０】
前記試薬は、核酸安定剤である請求項３１に記載の装置。
【請求項４１】
前記核酸安定剤は、前記全血から分離された血漿または血清成分と選択的に接触するように配置される請求項４０に記載の装置。
【請求項４２】
前記分離部材は、機械的分離要素である請求項３１に記載の装置。
【請求項４３】
前記分離部材は、ゲルである請求項３１に記載の装置。
【請求項４４】
前記ゲル分離部材は、前記試薬から物理的に分離される請求項４３に記載の装置。
【請求項４５】
前記分離部材は、血漿と残存する細胞成分との中間、または血清と赤血球との中間の密度を有する請求項３１に記載の装置。
【請求項４６】
前記分離部材は、フィルタである請求項３１に記載の装置。
【請求項４７】
前記試薬は、溶液、懸濁液またはその他の液体、小丸剤、錠剤、カプセル、スプレードライ材料、フリーズドライ材料、粉剤、粒状剤、ゲル剤、結晶または凍結乾燥材料からなる群から選択される形式である請求項３１に記載の装置。
【請求項４８】
前記試薬は、タンパク質安定剤である請求項３１に記載の装置。
【請求項４９】
前記試薬解放機構を作動させることにより、前記試薬が望ましくない成分と接触せずに、前記分離された生体試料の前記所望の別々の成分と接触することが可能になる請求項３１に記載の装置。
【請求項５０】
前記試薬解放機構は、受動式作動システムを含む請求項３１に記載の装置。
【請求項５１】
前記試薬解放機構により、前記試薬解放機構アセンブリからカバーを外すことによって、前記試薬が前記別々の成分と接触可能となる請求項５０に記載の装置。
【請求項５２】
前記試薬解放機構により、前記解放機構アセンブリ内の試薬出口を開くことによって、前記試薬が前記別々の成分と接触可能となる請求項５０に記載の装置。
【請求項５３】
前記試薬解放機構は、前記生体試料の遠心分離によって作動される請求項３１に記載の装置。
【請求項５４】
前記試薬解放機構は、前記生体試料の分離後、手動の動作によって作動される請求項３１に記載の装置。
【請求項５５】
前記容器はさらに、抗凝血剤を含む請求項３１に記載の装置。
【請求項５６】
検体の採集および調製のための方法であって、
閉塞部を有する上端部および閉じた下端部と、前記容器内に配置され試料を別々の成分に分離することができる分離部材と、前記分離部材より上方に配置された試薬を含む少なくとも１つの試薬解放機構とを含む管を設け、
前記試料が前記試薬から分離されるように前記管内に前記試料を採集し、
前記管を、前記試料を別々の成分に分離させる処理にかけ、
前記試薬を前記別々の成分と接触させることが可能になるように、手動で、または分離を引き起こす処理の作用によって、前記試薬解放機構を作動させ、
分離を引き起こす前記処理で前記混合を引き起こすことを可能にすることによって、または別個の混合工程によって、前記試料の前記望ましい別々の成分と前記試薬を混合することを含む方法。
【請求項５７】
前記試料は、全血である請求項５６に記載の方法。
【請求項５８】
前記管を、前記試料を分離させる処理にかける前記工程、および前記試薬解放機構を作動させる前記工程は、
前記管を、前記上端部を上に向けて遠心分離機内に配置し、
血漿または血清を残りの血液成分から分離させるために前記管を遠心分離機にかけ、
前記試薬解放機構を手動で作動させること、または前記機構が前記遠心分離時に作動することを可能にすることを含む請求項５７に記載の方法。
【請求項５９】
前記試薬と接触する前記別々の成分は、血漿である請求項５８に記載の方法。
【請求項６０】
前記試薬は、核酸安定剤である請求項５８に記載の方法。
【請求項６１】
混合する工程は、前記管を手動で逆さまにすることを含む請求項５６に記載の方法。
【請求項６２】
前記試料を分離させる前記処理は、遠心分離である請求項５６に記載の方法。
【請求項６３】
前記分離部材は、機械的分離要素である請求項５６に記載の方法。
【請求項６４】
前記分離部材は、ゲルである請求項５６に記載の方法。
【請求項６５】
前記ゲル分離部材は、前記試薬と物理的に分離される請求項６４に記載の方法。
【請求項６６】
前記分離部材は、フィルタである請求項５６に記載の方法。
【請求項６７】
前記試薬は、溶液、懸濁液またはその他の液体、小丸剤、錠剤、カプセル、スプレードライ材料、フリーズドライ材料、粉剤、粒状剤、ゲル剤、結晶または凍結乾燥材料からなる群から選択される形式である請求項５６に記載の方法。
【請求項６８】
前記試薬解放機構は、受動式作動システムを含む請求項５６に記載の方法。
【請求項６９】
前記試薬解放機構により、前記試薬解放機構アセンブリからカバーを外すことによって、前記試薬が前記別々の成分と接触可能になる請求項６８に記載の方法。
【請求項７０】
前記試薬解放機構により、前記解放機構アセンブリ内の試薬出口を開くことによって、前記試薬が前記別々の成分と接触可能になる請求項６８に記載の装置。
【請求項７１】
前記試薬解放機構は、前記生体試料の遠心分離によって作動される請求項５６に記載の方法。
【請求項７２】
前記試薬解放機構は、前記生体試料の前記分離処理後、手動で作動される請求項５６に記載の方法。
【請求項７３】
前記試薬は、核酸安定剤である請求項５６に記載の方法。
【請求項７４】
前記試薬は、タンパク質安定剤である請求項５６に記載の方法。
【請求項７５】
前記試薬解放機構は、分離前、前記閉塞部に固定される請求項５６に記載の方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、生体試料、特に全血試料を、患者から直接採集し、安定化させるための装置および方法に関する。より詳細には、本発明は、生体試料採集時に核酸を安定化させその保存または移送中の分解を防ぐための安定化添加剤がその内部に収容された試料採集装置に関する。
【背景技術】
【０００２】
診断検査では、患者の全血試料を、血漿または血清（すなわちより軽い相の成分）と赤血球（すなわちより重い相の成分）などの成分に分離することが必要となる場合がある。例えば、その病気を診断しそれに対処する目的で、ＨＩＶ感染患者のＨＩＶ  ＲＮＡウィルス量を監視するために、既知の増幅技術を用いて血漿試料を検査することができる。承認薬、新薬、および複合薬治療に対する患者の反応を、患者のＨＩＶ  ＲＮＡウィルス量を監視することによって評価することができる。ＨＩＶウィルスに加え、Ｃ型肝炎ウィルスなど、その他多くの感染症がウィルス量を監視することによる恩恵を受ける。
【０００３】
現在、血漿ウィルスの監視は、通常注射器または真空の採集管に取り付けられたカニューレまたは針で静脈穿刺を行い、全血試料を抜き出すことによって実施される。注射器または管を遠心分離機内で回転させることにより、血液が血漿とその他の細胞成分に、または、血清と赤血球に分離される。そのような技術では、通常分離された試料の２つの相の間で動く障壁を使用し、それにより、後で各成分を検査するために成分を分離状態に維持する。通常、試料は、次に、作業者が試料に特定の検査を行う実験室など別の場所に移送されなければならない。一般に、試料獲得からその分析までにかなりの時間が経過する。従って、生体試料の分析の前に、操作および／または調製中の不可欠な物質の分解、変質、または破壊を防止するように生体試料を維持することが、一般的な、継続的に発生する問題となる。
【０００４】
現在、血液試料は、ＥＤＴＡ管内に採集され血漿を得るために回転される。次いで血漿試料は、さらなる分析のために氷の上または冷蔵状態にある１次または２次管に入れて輸送される。低温輸送により、ｖＲＮＡの分解が低減される。
【０００５】
【特許文献１】米国特許第３，９１９，０８５号明細書
【特許文献２】米国特許第６，５１６，９５３号明細書
【特許文献３】米国特許第６，４０６，６７１号明細書
【特許文献４】米国特許第６，４０９，５２８号明細書
【特許文献５】米国特許第６，４９７，３２５号明細書
【特許文献６】米国特許第５，９０６，７４４号明細書
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【０００６】
増幅技術で使用するための血漿試料を採集、処理、移送するために設計された、標準的な装置が必要とされている。最も好ましくは、この装置は、検体処理の規格化を助け、閉じたシステムを提供し、血漿を細胞成分から隔離させ、血漿の希釈を最低限に抑え、核酸検査との干渉を最低限に抑えることができるべきである。
【課題を解決するための手段】
【０００７】
本発明は、生体試料を採集するための装置を対象とし、この装置は、試料を受けるためのリザーバ部分を有する容器と、試料をその複数の成分に分離するために容器内に配置された分離部材と、分離された試料のうち少なくとも１つの成分と選択的に相互作用するように容器内に配置された、例えば核酸を安定化させるための安定剤など少なくとも１つの試薬とを含む。一実施例では、この容器は、第１の端部および第２の端部を有する管であり、この管は、部分的に排気することができる。
【０００８】
一般に、生体試料は全血である。好ましくは試薬を、全血との相互作用を防ぐように配置する。より好ましくは試薬を、全血のその他の成分から実質的に隔離しながら、血漿または血清成分と選択的に相互作用するように配置することができる。
【０００９】
一実施例では、分離部材は機械的分離要素であり、代替実施例では、分離部材はゲルである。また、ゲル分離部材は、試薬から物理的に分離させることができる。
【００１０】
また、本発明は、例えば核酸検査など、後に続く検査用の、血漿または血清検体の採集および調製のための方法を対象とする。この方法は、全血試料を受けるための管を設けることを含む。この管は、上端部および下端部と、試料をその複数の成分に分離するために管内に配置された分離部材と、例えば核酸安定剤など少なくとも１つの試薬とを含む。この方法はさらに、全血試料を管内に採集し、全血試料を試薬から分離して維持し、血漿または血清をその他の血液成分から分離し、血漿または血清を管内で試薬と混合させることとを含む。
【発明を実施するための最良の形態】
【００１１】
本発明は、多くの異なる形態の実施例により適合されるが、本発明の好ましい実施例が本明細書で詳細に説明されるだろう。その結果、本開示は本発明の原理の例示として考えられるべきであり、本発明を図示および説明される実施例に限定することを意図するものではないと理解すべきである。当業者により本発明の精神から逸脱することなく数多くの変形例がなされ得る。本発明の範囲は、添付の請求の範囲およびその均等物によって判定されるだろう。特に、本発明は、核酸安定剤である試薬に関して述べられるが、安定化以外あるいはそれに加えて、様々な効用をもたらすことができる試薬のようなその他の試薬が可能である。そのような代替物の１つは、タンパク質安定用試薬である。
【００１２】
本発明を、核酸を含有するいかなる生体試料と共に使用することは可能であるが、好ましくは、その生体試料は、患者から抜かれた何らかの体液である。最も好ましくは、生体試料は、全血またはその成分である。その他の生体試料の例としては、血漿、血清、尿、骨髄液状物、脳脊髄液、組織、細胞、糞便、唾液および口内分泌物、鼻汁、気管支洗浄用液、頚管液、リンパ液などがある。
【００１３】
いくつかの図にわたって同一の符合が同一の部品を指す図面を参照すると、図１は、本発明の一実施例を示し、概ね、血液成分を分離するための分離部材１２（例えば機械的分離要素またはゲル）と、生体試料を安定化させるための安定剤１４とを有する試料採集容器１０を含む。分離部材は、以下により詳細に説明されるように、その技術分野で知られており、分離される複数の成分の密度における中間の密度を有する。遠心分離時、分離部材は、密度関係によりこれらの成分の間で移動する。図示した実施例では、容器１０は、開口下端部１８から開口上端部２０へと延びる側壁１７を有するリザーバ即ち内部チャンバ１６を形成する中空管を備える。分離部材１２は、容器チャンバ１６内に設けられ、安定剤１４は、チャンバ１６内で分離部材１２の下方の下端部１８付近に設けられる。分離部材１２は、例えば遠心分離によって、試料の成分の分離を助けるように役立つ。容器１０は、適当な体積の生体液、好ましくは血液を採集するように寸法決めされる。開口端部１８、２０を覆うための閉塞手段２２が、容器１０を閉塞するために設けられる。真空排気された採集管では、所要の保存期間中、真空状態を閉じ込めるように締まり嵌めのエラストマーの栓が一般に使用される。好ましくは、閉塞部２２は、容器１０を効果的に閉塞し、生体試料をチャンバ１６内に保持することができるシールを形成する。チャンバ１６内の圧力は、好ましくは、所定の体積の生体試料をチャンバ１６内に引き込むように選択される。好ましくは、閉塞部２２は、大気圧と大気圧未満の圧力との間の内部圧力差を維持することができる弾性材料で作られる。閉塞部２２は、その技術分野で知られているように、生体試料を容器１０内に導入するために針２６または他のカニューレによって穿刺することができるものである。好ましくは、閉塞部２２は、再封止することができる。閉塞部２２に適した材料としては、例えば、シリコーンゴム、天然ゴム、スチレンブタジエンゴム、エチレン−プロピレンコポリマー、およびポリクロロプレンなどが挙げられる。
【００１４】
本発明の方法は、生体試料を取得すること、および試料を容器１０に導入することを含む。様々な静脈穿刺装置が、生体試料取得を容易にするために開発されており、こうした装置のひとつの形式は、内部にチャンバを形成するハウジングを有するニードルアッセンブリを組み込み、ノッチを有する単一のカニューレまたは両端部が尖った２つの別々のカニューレがハウジングに固定される。カニューレの静脈側（ＩＶ）端部は、患者の静脈を穿通するようになっており、カニューレにおける患者と反対側の端部は、封止可能なスリーブを有し、真空容器内に配置された穿通可能な栓を穿通するようになっている。例えば、図２に示されるように、血液標本試料２８が、上端部２０を通じて容器１０内へと移送可能とされ、分離部材１２が検体を下端部１８に対して封止し、試料が安定剤１４に接触するのを妨げるとき、その検体は、まず、チャンバ１６内で分離部材１２の上方に保持される。採集後、血液試料は、遠心分離機内で容器１０を回転させるなどして、血漿とその他の細胞成分に、または血清と赤血球に分離される。好ましい実施例では、容器１０は下端部１８を上方に向けて遠心分離機内に配置され、その管が遠心分離にかけられる。遠心分離のとき、分離部材１２は、細長く延びてその回りの流れが可能になる。血液の細胞成分はより密度が高いため、これらの成分は、分離部材の回りで下方へと移動し、一方、分離部材は、相対的な密度により上方へと移動する。遠心分離が停止するとき、分離部材は、血漿または血清が安定剤に隣接するように複数の成分相互間にシールを形成する。このようにして安定剤は、以下でより詳述するように、処理全体を通して血液の細胞成分から実質的に分離される。図３を参照すると、遠心分離後、血液３０の細胞成分が分離部材１２の下方に留まり、血漿または血清３２が、分離部材１２の上方に留まり安定剤１４と接触する。分離後、それから、安定剤が血漿または血清液に溶解しあるいはそれと相互作用し、容器１０に収容された核酸（またはその他の成分）の分解が最低限に抑えられるように、容器１０を逆さまにするなどして血漿または血清３２は、通常、安定剤１４と混合される。
【００１５】
好ましい実施例において、安定剤は、試料取得直後、保存または移送前に、血漿または血清と混合される。全血試料を採集するときなどに、患者から直接的に生体試料を採集し、血漿または血清を血液細胞成分から直ちに分離させ、次いで安定剤を血漿内に導入することは、試料が安定剤と化合されずに保存または移送される場合、そうでない場合に生じる核酸の分解および／または分断を実質的に低減させ、またはそれを防ぐこともできる可能性があることがわかった。好都合なことに、安定剤が血漿内に導入されたならば、試料を冷蔵状態で保存または移送する必要がない。
【００１６】
図１に示される実施例においては、試料採集容器１０は、血漿の分離に適した端部が２つある管を含む。容器１０は、血液の血漿または血清の処理に適したいかなる採集装置とすることもできる。容器１０の適当な例としては、端部が閉じた管、単一壁管、および多層管などを含む。適当な容器１０の例が、全体として参照することにより本明細書の一部を構成する、Ａｙｒｅｓによる米国特許第３９１９０８５号（特許文献１）に開示されている。
【００１７】
容器１０は、ガラス、プラスチック、またはその他の適当な材料で作ることができる。採集容器１０の製造に使用されるいくつかの好ましい材料としては、ポリプロピレン、ポリエチレン、ポリエチレンテレフタレート、ポリスチレン、ポリカーボネート、およびセルロース系材料が挙げられる。ポリテトラフルオロエチレン、およびその他のフッ素化ポリマーなどのようなより高価なプラスチックが使用されてもよい。上記材料に加えて、その他の適当な材料の例としては、ポリオレフィン、ポリアミド、ポリエステル、シリコーン、ポリウレタン、エポキシ化合物、アクリル樹脂、ポリアクリレート（ポリアクリル酸エステル）、ポリスルホン、ポリメタクリレート、ポリエーテルエーテルケトン（ＰＥＥＫ）、ポリイミド、ならびに、ＰＴＦＥテフロン（登録商標）、ＦＥＰテフロン（登録商標）、テフゼル（登録商標）、ｐｏｌｙ（ポリフッ化ビニリデン）、ＰＶＤＦ、およびパーフルオロアルコキシ樹脂などのフルオロポリマーなどを含む。石英ガラスを含むガラス製品も、採集装置の製造に使用することができる。ガラス製品の１つの例は、ＰＹＬＥＸ（登録商標）（ニューヨーク州コーニング、Ｃｏｒｎｉｎｇ  Ｇｌａｓｓ社から入手可能）である。本発明の実施例に従って、セラミック製の採集装置を使用することもできる。本発明による採集装置を形成するために紙および強化紙などのようなセルロース系材料の容器も、使用可能である。
【００１８】
一実施例において、本発明における試薬は、生体試料の保存または移送中に核酸の破壊を阻止することができる何れかの核酸安定用試薬である。これらの試薬は、細胞のタンパク質と共に核酸を塩析させる塩を含む。ほとんどの場合、これらの塩は、脱水剤である傾向がある。その試薬は、血漿または血清試料を安定化させ、核酸の分解および／または分断を阻止するまたは防ぐ安定した組成物を生成する。その技術分野で知られた様々な核酸安定剤が使用されてもよい。適当な例として、硫酸アンモニウム、重硫酸アンモニウム、硫酸セシウム、硫酸カドミウム、硫酸セシウム鉄（ＩＩ）、硫酸コバルト（ＩＩ）、硫酸銅（ＩＩ）、硫酸リチウム、硫酸マグネシウム、硫酸マンガン、硫酸カリウム、硫酸ナトリウム、および硫酸亜鉛などのような、硫酸塩を含む。少なくとも１つの適当な安定剤が、ＲＮＡｌａｔｅｒ（商標）の商標名でＡｍｂｉｏｎ社により市販されている。上記のように、細胞成分と試薬との接触を避けようとする場合、いかなる所望の作用をもたらすその他の試薬も可能である。そのような可能な試薬の１つは、タンパク質安定剤である。
【００１９】
上述のように、細胞成分と試薬との接触を避けることが望まれる場合、いかなる所望の作用をもたらすその他の試薬も可能である。例えば、試薬が全血中の細胞を破損する場合、血清または血漿が分離されるまで、試薬を全血試料から分離しておくことが望ましい。
【００２０】
その試薬は、溶液、懸濁液またはその他の液体、小丸剤、錠剤、カプセル、スプレードライ物質、フリーズドライ物質、粉剤、粒状剤、ゲル剤、結晶または凍結乾燥物質を含むいかなる適当な形式でもよいが、これに限定されない。その試薬は、その試薬と容器内のゲル分離部材などその他の要素との望ましくない相互作用を防ぐためにカプセルに封入され得る。試料採集時、溶解するカプセル物質は、その技術分野でよく知られている。さらに安定剤は、生体試料中におけるその分散および溶解度を高め、および／または最終的な生成物の製造およびその後の処理／移送中の安定性を向上させるように、他の賦形剤と混合され得る。例えば、いくつかのそのような物質としては、ポリビニルピロリドン（ＰＶＰ）、アビセル（商標）などの微結晶性セルロースなどを含む。図１に示す実施例においては、錠剤が容器１０の下端部１８に隣接して配置される状態で錠剤などの固形の試薬を有することが有用である。
【００２１】
その採集容器が、好ましくは製造業者により予め安定剤を装填され、すぐ使用できる形式で包装可能である。通常、包装された採集装置は、滅菌されまた無菌包装材料で包装される。その試薬は、好ましくは、容器内に予め装填され、全血またはその他の生体試料が入るところから離して配置され、分離部材が、全血または分離されていない血液との接触を妨げるようにそれらの間に置かれる。例えば、この第１の実施例では、図２から分かるように、安定剤１４が、分離部材１２より下方で、全血３０またはその他の生体試料の取入口の反対側に配置される。
【００２２】
血漿または血清用の管内に分離部材を設け、安定剤が全血に接触することを防ぐことは、特に有利である。具体的には、全血が安定剤に接触する場合、安定剤の多くが細胞の溶解を引き起こす傾向がある。そのような溶解は、細胞内に正常に保持されている細胞成分をすべて放出させ、従って、所望の量またはタイプの核酸（ＤＮＡ、ＲＮＡ、ｖＲＮＡなど）の取得に悪影響を及ぼす。分離部材１２により、好都合なことには、安定剤が血液試料の細胞成分と接触または相互作用することが防止されると同時に、安定剤が血液試料の血漿または血清成分のみと選択的に接触または相互作用させることが可能になる。安定剤と血漿とが混合されるならば、血漿または血清内の核酸が安定化され、試料を冷蔵された状態で保存または輸送する必要がなくなる。
【００２３】
その安定剤は、本実施例の採集装置内に様々な方法によって装填され得る。例示的な一方法として、安定剤の錠剤が遠心力によって動かないようにそれを装置内へと押し込み得る。他の方法は、キャリヤ上に安定剤をコーティングし、そして次に、それを装置内に押し込むことを含み得る。安定剤を備える採集装置を提供するためのさらなる方法もまた可能である。その安定剤の量および位置は、応用例の形態、使用される特定の安定剤、採集装置の内容積および内圧、および容器内に採集される生体試料の体積を含めて、変化する複数の要素によって決まる。
【００２４】
再び図１を参照すると、分離部材１２は、機械的分離装置を含むことができる。その機械的分離装置は、浮力分離装置として働くことにより、容器１０内で、血液試料の細胞／血餅から血漿／血清を所望のように分離する。有用な機械的分離部材が、例えば、米国特許第６５１６９５３号（特許文献２）、第６４０６６７１号（特許文献３）、第６４０９５２８号（特許文献４）、及び、第６４９７３２５号（特許文献５）に見られ、その内容は、全体として参照することにより本明細書の一部を構成する。採集の間、その機械的分離部材は、リザーバ内の２つの部分の相互間に物理的な封止をもたらし、それによって、全血が安定剤と相互作用しないよう妨げる。遠心分離中、遠心力によって分離部材が引き伸ばされて、分離部材のシールの外径が縮小し、これにより、分離部材が血漿または血清とその他の成分との間のある位置に（密度に基づいて）移動可能とされ、血液成分がそれに関連して分離部材の外部の回りを流れることが可能になる。遠心分離が停止するとき、分離部材は、再び内側管壁を封止し、それによって血液成分を分離する。
【００２５】
図４を参照すると、分離部材がゲル３４を含む代替実施例が、示されている。そのゲルは、望ましくは、チキソトロピーポリマーゲルの調合物である。そのゲルは、ホモポリマーまたはコポリマーとすることができ、例えば、ポリシロキサンなどのシリコーンを基材にしたゲル、または、例えば、ポリアクリル、ポリエステル、ポリオレフィン、酸化されたシスポリブタジエン、ポリブテン、エポキシ化大豆油と塩化炭化水素の混合物、二酸およびプロパンジオールのコポリマー、水素化されたシクロペンタジエン、およびマレイン酸ジアルキルを含むαオレフィンのコポリマーなどの有機炭化水素を基礎にしたゲルを含むことができる。そのゲルは、望ましくは、その技術分野で知られた密度分離媒体として働くことにより、管内で血漿および／血清を、血液試料の細胞／血餅から分離する。ゲルを利用する、単一の端部を有する血漿処理用管の例が、Ｃａｒｒｏｌらの米国特許第５９０６７４４号（特許文献６）に開示されており、その内容は、全体として参照することにより本明細書の一部を構成する。ゲルの分離材料の場合、安定剤とゲルとの間に、物理的または化学的分離部を設けることも望ましい。例えば、その安定剤の一部がゲルに混和するまたはゲルと反応するならば、その安定剤の効力が低減されるおそれがある。図４に示されるように、安定剤１４をゲル３４から分離するために、血漿によって可溶な障壁３６が使用され得る。上述したように、カプセルが、その安定剤とゲルの間に化学的な障壁を設けるように代替的に使用され得る。採集の間、そのゲル分離部材は、障壁と共にリザーバ内の２つの部分の相互間に物理的なシールを形成し、それにより、全血が安定剤と相互作用することが妨げられる。その他の分離部材、例えば、フィルタまたは手動の分離要素がその技術分野で知られており、本発明にも適当であり得る。
【００２６】
一般に、分離部材は、そのリザーバを第１および第２の部分に区切り、第１および第２の部分のうち一方が試薬を含む。他方の部分（すなわち、試薬を含んでいない方）は、例えば、凝固阻害または凝固活性化のための他の試薬を含み得る。凝固活性化剤（ｃｌｏｔ  ａｃｔｉｖａｔｉｎｇ  ａｇｅｎｔ）は、シリカを基剤とされ得る。代替的に、凝固活性化剤は、カオリンまたはトロンビンとすることができる。凝固阻害剤（ｃｌｏｔ  ｉｎｈｉｂｉｔｉｎｇ  ａｇｅｎｔ）は、ヒルジン、ヒルジン誘導体、キレート剤、またはキレート剤の誘導体を含み得る。特定の血液凝固阻害剤としては、クエン酸塩、エチレンジアミン四酢酸、ヘパリン、ＣＰＡＤ、ＣＴＡＤ、ＣＰＤＡ−１、ＣＰ２Ｄ、シュウ酸カリウム、フッ化ナトリウム、またはＡＣＤなどが挙げられる。
【００２７】
図５から図１５は、開口上端部および閉じた下端部を有する管を有する本発明の様々な実施例を示す。このような実施例では、通常、処理された血漿または血清試料が回収されるのと同じ端部内へと、血液が引込まれる。これには、試薬を開口端部、またはその付近に配置すること、および、試薬を血液試料の所望の部分に接触させるために試薬解放機構（好都合には、受動試薬解放機構）を使用することが必要となる。従って、その試薬解放機構は、血液採集および分離中に試薬を全血試料と接触させないようにするが、分離された（例えば遠心分離後の）試料の所望の成分と試薬が混合することを可能にする。試薬を血漿または血清試料と接触させるために（閉塞部をねじるまたはボタンを押すなど）特別な手動の工程を必要とする手動で作動される試薬解放機構とは対照的に、受動試薬解放機構は、分離処理によって作動される。
【００２８】
図５Ａ、図５Ｂ、図５Ｃおよび図５Ｄは、開口上端部および閉じた下端部を有し、ゲル分離部材１０１を収容する管１００を示す。図５Ａおよび図５Ｂは、管閉塞部１０２に対して封止するカップ１０４内に収容された試薬１０８を示す。予め圧縮されたばね１０５が、カップ１０４と充填管１０６との間に配置され、閉塞部１０２の存在によってその状態に保持される。そのカップは、充填管１０６上のフランジ１０９を用いて封止される。全血試料は、閉塞部１０２から充填管１０６を通り管１００内に導入される。図５Ｃは、遠心分離中に、試薬アセンブリ１１１全体が閉塞部からＹ方向に離れ、血漿／血液１０７の表面に浮くことを示す。しかしながら、試薬カップ１０４は、浮力の差を利用して、または遠心分離中に部分的に巻かれたままとなるばねを選択することによって、封止されたままとなる。図５Ｄは、遠心分離の完了後、ばね１０５が試薬カップ１０４をＸ方向に持ち上げ、それにより、分離された血漿１１２に試薬１０８が入り、混合されることが可能になることを示す。（１１２は、また、図５Ｄ、図６Ｄ、図８Ｆからはっきりと分かるように、互いに混合された分離された血漿および試薬を表すことに留意されたい。）
図６Ａから図６Ｅは、開口上端部および閉じた下端部を有し、ゲル分離部材１０１を収容する管１００を示す。図６Ａおよび図６Ｂは、遠心分離前に管閉塞部１２１の下面に懸架された伸縮式カップ１２０内に収容された試薬１０８を示す。図６Ｃは、試薬カップの上部即ち摺動カバー１２２が、遠心分離中に、Ｚ方向に引き降ろされ圧縮ばね１２３によりかけられる力に打ち勝つことを示す。図６Ｄおよび図６Ｅは、遠心分離が完了する場合、２つのカップ部分１２０と１２２との間の摩擦により、ばね１２３がカップ１２０および１２２の両部分をＡ方向に押し上げることが可能になり、それによって、試薬１０８のための通路を開き、逃がし、分離された血漿１１２と混合することを示す。
【００２９】
図７Ａから図７Ｆは、開口上端部および閉じた下端部を有し、ゲル分離部材１０１を収容する管１００を示す。図７Ａおよび図７Ｂは、管閉塞部１４２に係合され充填管１４３に対し封止されたカップ１４０内に収容された試薬１４１を示す。アクセス管１４４が、充填管１４３内に配置され、ばね１４５が、充填管およびアクセス管における相補形のウインドー１４７とウインドー１４８とが揃えられる基準位置に配置される。図７Ｃは、遠心分離中、アクセス管１４４がＸ方向下方に、圧縮ばね１４５に抗して押し下げられ、それによって、ウインドーを閉じることを示す。次いで、図７Ｄは、遠心分離中のこの時点で、試薬カップ１４０がＹ方向に管閉塞部１４２から離れ、充填管におけるウインドー１４７のところに位置することを示す。図７Ｅおよび図７Ｆは、遠心分離後、アクセス管１４４が圧縮ばね１４５によってその基準状態に戻り、ウインドー１４７および１４８が再び揃い、試薬１４１が分離された血漿１１２中へ出ることが可能になることを示す。
【００３０】
図８Ａから図８Ｆは、開口上端部と閉じた下端部を有し、ゲル分離部材１０１を収容する管１００を示す。図８Ａおよび図８Ｂは、中空のボール１５２内に収容された試薬１５１を示す。中空のボール１５２の内部には、軽量のばね１５４によって管閉塞部に向けて付勢されたバラストウエイト１５３がある。図８Ｃは、バラストウエイト１５３が、ボール１５２の底部へとＸ方向に引かれた結果、遠心分離中、中空のボール１５２がシール１５５から解放され、中空のボール１５２の浮力により、血漿／血液１５６の表面に浮くことを示す。バラストウエイト１５３を動かすことによって重心が中空のボール１５２の底部へと移されることにより、ボール１５２が、試薬アクセス孔１５７を流体表面１５６より上にして安定して浮く。遠心分離後、図８Ｄは、ばね１５４が浮力の中心より上の元の休止位置へと戻った結果として、バラストウエイト１５３が再びＹ方向に上昇するであろうことを示す。これにより、中空のボール１５２が不安定になり、図８Ｅおよび図８Ｆに示されるように、Ｚ方向に回転し、分離された血漿１１２中に試薬１５１を解放するだろう。
【００３１】
図９Ａから図９Ｄは、開口上端部と閉じた下端部を有し、ゲル分離部材１０１を収容する管１００を示す。図９Ａおよび図９Ｂは、遠心分離前の一体となったスプリングフィンガー１６３を備えるキャップ１６２の下に収容された試薬１６１を示す。試薬ハウジングは、管の底部側の半分まである内部リブ１６５によって支持された支持プレート１６４上に取り付けられる。スプリングフィンガー１６３は、ロッキングリング１６６によって固定位置に保持される。図９Ｃは、遠心分離中、ロッキングリング１６６がＸ方向に動き、スプリングフィンガー１６３を外れ、フィンガを開かせ、試薬キャップ１６１を解放することを示す。ただし、試薬１６１は、依然、キャップ１６１に作用している重力により遠心分離中もその解放が妨げられるので分離されたままとなる。図９Ｄは、遠心分離後、重力の低減により内部ばね１６７が試薬キャップ１６２をＹ方向に外すことが可能になり、その結果、試薬１６１を分離された血漿１１２と混合可能となることを示す。
【００３２】
図１０Ａから図１０Ｄは、開口上端部と閉じた下端部を有し、ゲル分離部材１０１を収容する管１００を示す。図１０Ａおよび図１０Ｂは、試薬１７１がツウーピースのカプセル１７２内に収容された遠心分離前の実施例を示す。カプセル１７２は、キャップ１７３および下側ハウジング１７４を備え、キャップ１７３は、下側ハウジング１７４におけるカムトラック１７６に係合する２つの歯１７５を有する。図１０Ｃは、遠心分離中、カプセル１７２がＸ方向に試料を通過し、管の内面上の支持リブ１７７に接触するまで沈み、下側ハウジング１７４がそこで移動を停止することを示す。ただし、キャップ１７３は、ヘリカルカムトラック１７６に続いて進み続け、進むにつれてＺ方向にねじれる。図１０Ｄは、遠心分離後、キャップ１７３における歯１７５が、下側ハウジング１７４内の出口トラック１７８内に配置されることを示す。次いで、ばね１７９が、キャップ１７３および試薬１７１を分離された血漿１１２中に放出する。
【００３３】
図１１Ａから図１１Ｆは、開口上端部および閉じた下端部を有し、ゲル分離部材１０１を収容する管１００を示す。図１１Ａ、図１１Ｂ、図１１Ｃは、遠心分離前の実施例を示し、試薬１８１が、カップ１８４、シールパッド１８５、およびカバー１８６からなり、２つのプラスチックカップが互いにパチンと嵌められることにより形成される封止されたチャンバアセンブリ１８２内に収容される。２つのフィンガ１８３が、スナップ構成１８９からチャンバの底部の外側に延びる。管の内面上の一体リブ１８８が、固定カムリング１８７を支持する。遠心分離状態で、図１１Ｄおよび図１１Ｅは、いかにして封止されたチャンバアセンブリ１８２が固定カムリング１８７内へと押し込まれるまで管内を下に移動し、次いで固定カムリング１８７が２つのフィンガ１８３を撓ませ、それによってチャンバアセンブリ１８２上のスナップ１８９を解放するかを示す。遠心分離が完了する場合、図１１Ｆは、チャンバアセンブリ内の小さいばね１９０が、試薬錠剤１８１、チャンバのカバー１８６、およびシールパッド１８５を分離された血漿１１２中へ放出することを示す。
【００３４】
図１２Ａから図１２Ｅは、開口上端部と閉じた下端部を有しゲル分離部材１０１を収容する管１００を示す。図１２Ａおよび図１２Ｂは、遠心分離前の実施例を示し、試薬２０１が、試薬カップ２０３、シール２０４、キャリヤ２０５、およびエラストマーワッシャ２０６からなる封止されたチャンバアセンブリ２０２内に収容される。試薬カップ２０３は、キャリヤ２０５から解放され持ち上がるように、ばね２０７による負荷がかけられているが、線細工または板状のばね２１０によって保持されている。遠心分離状態で、図１２Ｃは、試薬カップ２０３が、いかにしてＲ方向にエラストマーワッシャ２０６に抗して押し下げられ、それによって板ばね２１０を解放し、それをその基準位置へと戻すかを示す。遠心分離が完了する場合、図１２Ｄおよび図１２Ｅは、チャンバアセンブリ２０２内のばね２０７が試薬カップ２０３を持ち上げ、試薬２０１が、エラストマーワッシャ２０６の中央を通り出て、分離された血漿１１２中へ入ることが可能になることを示す。
【００３５】
図１３Ａから図１３Ｅは、開口上端部と閉じた下端部を有しゲル分離部材１０１を収容する管１００を示す。図１３Ａおよび図１３Ｂは、遠心分離前の実施例を示し、ペレット形の試薬２２１が２つのプラスチックの円筒、外側円筒２２３および貫通管２２４によって囲まれる環状チャンバアセンブリ２２２内に収容され、エラストマーワッシャ２２５がその両方に固定されチャンバの上部を取り囲み、ベルビルワッシャ２２７が、外側円筒２２３の下部に固定され、貫通管２２４に対し封止される。図１３Ｃは、環状チャンバアセンブリ２２２がいかにしてその外側円筒の周縁部に沿って管の内面上のリブ２２６によって支持されるかを示す。遠心分離中、貫通管２２４の質量により、ベルビルワッシャ２２７が、Ｐ方向に恒久的に反転するように押される。これにより、エラストマーワッシャ２２５が引き伸ばされる。それから、図１３Ｄおよび図１３Ｅは、遠心分離が完了する場合、エラストマーワッシャ２２５がばねの復元力Ｑを貫通管２２４に対しもたらし、血漿中に入るように試薬２２１のための通路が開く。
【００３６】
図１４Ａから図１４Ｅは、開口上端部と閉じた下端部を有しゲル分離部材１０１を収容する管１００を示す。図１４Ａおよび図１４Ｂは、遠心分離前の実施例を示し、試薬２３１が開口下端部でカバープレート２３３およびシール２３４によって封止され、その上部で一体丁番２３８によって支持プレート２３７に取り付けられる転倒カップ２３２内に収容されている。バラストウエイト２３５がカップ２３２の片側に取り付けられ、一体成型されたプラスチック板ばね２３６が、反対側に配置される。図１４Ｃは、遠心分離中、偏心バラストウエイト２３５により、いかにして、カップ２３２が一体丁番２３８の回りで、管１００の内壁に接触し板ばね２３６を圧縮するまで回転するかを示す。カバープレート２３３は、遠心分離による重力が増大した状態で離れ、試薬錠剤２３１が滑り落ちる。図１４Ｄは、試薬錠剤２３１がいかにして、管壁との接触によりカップから完全に出ないように妨げられるかを示す。図１４Ｅは、遠心分離が完了する場合、板ばねがカップをその基準位置へ戻し、試薬錠剤２３１が分離された血漿１１２中に入ることが可能になることを示す。
【００３７】
図１５Ａから図１５Ｅは、開口上端部と閉じた下端部を有しゲル分離部材１０１を収容する管１００を示す。図１５Ａおよび図１５Ｂは、遠心分離前の実施例を示し、試薬錠剤２４１が転倒カップ２４６、カバー２４３、およびシールパッド２４４からなり、その上部で支持プレート２４５に取り付けられ、ばねの形で所定位置に保持されるチャンバアセンブリ２４２内に収容される。カバー２４３は、ばねアーム２４７およびシール２４４を支持プレート２４５に対して止める。図１５Ｃは、遠心分離状態で、いかにしてばねアーム２４７がＰ方向に変形し、それによりカバー２４３が転倒カップ２４６から外れ、ゲル層１０１へと移動し、しかし、試薬錠剤２４１が、重力が増大するためたわみ位置にとどまるばねアーム２４７との接触により、完全にカップを出ることが妨げられるかを示す。図１５Ｄおよび図１５Ｅは、遠心分離が完了する場合、ばねアーム２４７がＹ方向に開き、試薬錠剤２４１が分離された血漿１１２中に入ることが可能になることを示す。
【００３８】
図１６Ａから図１６Ｄは、開口上端部と閉じた下端部を有しゲル分離部材１０１を収容する管１００を示す。図１６Ａおよび図１６Ｂは、遠心分離前の実施例を示し、試薬錠剤２５１が、穿孔された支持プレート２５４から懸架されたエラストマー管２５３からなるエラストマー管アセンブリ２５２内に収容され、また、バラストウエイト２５５および保護カバー２５６がエラストマー管２５３の底部に取り付けられる。図１６Ｃは、遠心分離状態で、バラストウエイト２５５により、いかにしてエラストマー管２５３がＰ方向に引き伸ばされ、それによってその直径が小さくなり試薬錠剤２５１を半径方向に把持するかを示す。その結果、保護カバー２５６がエラストマー管２５３から外れ、ゲル層１０１へと移動するが、しかし、試薬錠剤２５１は、重力が増大した結果生じる半径方向の把持力によって、エラストマー管２５３から完全に出ないように妨げられる。図１６Ｄは、遠心分離が完了する場合、エラストマー管２５３がその初期状態に戻り、それにより半径方向の把持力を減少させ、分離された血漿１１２中に試薬２５１を放出することを示す。
【００３９】
図１７Ａから図１７Ｄは、開口上端部と閉じた下端部を有しゲル分離部材１０１を収容する管１００を示す。図１７Ａおよび図１７Ｂは、遠心分離前の実施例を示し、試薬錠剤２６１が、周縁部にシールリング２６４を有するプレート２６３によって下側が封止された転倒カップ２６２内に収容される。プレート２６３は、転倒カップ２６２上の移動止め２６５によって所定位置に保持される。図１７Ｃは、遠心分離中、いかにして転倒カップ２６２が、管１００内の支持リブ２６７と接触するまで管１００から引きおろされるかを示す。重力が増大することにより、プレート２６３は管内を下降し続け、移動止め２６５から開放されるが、転倒カップ２６２を出ることは妨げられる。図１４Ｄは、遠心分離が完了する場合、重力が減少することにより、小さい圧縮ばね２６８によって転倒カップ２６２および試薬錠剤２６１が、プレートから分離された血漿１１２中へ解放されることが可能になることを示す。
【００４０】
図１８Ａおよび図１８Ｂは、開口上端部と閉じた下端部を有しゲル分離部材を収容する管１００を示す。図１８Ａは、遠心分離前の実施例を示し、試薬錠剤２７１が、試薬カップ２７２内に収容され、管の開口端部に隣接する管１００の内径および／または管閉塞部２７３の下面に固定されている。図１８Ｂは、遠心分離中、いかにして試薬カップ２７２が管１００内をＰ方向に管１００の底部へと移動し、ゲル層１０１より下方に配置されるのに対して、試薬錠剤２７１が、管の開口端部に隣接する管１００の内径、および／または管閉塞部２７３の下面に固定されたままとなるかを示す。次いで、露出した試薬２７１は、管を単に逆さまにすることによって、分離された血漿１１２と混合される。
【００４１】
図１９Ａおよび図１９Ｂは、開口上端部と閉じた下端部を有しゲル分離部材を収容する管１００を示す。図１９Ａは、遠心分離前の実施例を示し、試薬錠剤２８１およびプラスチック矢じり２８２が、管１００内の固定位置にあるカプセル２８３内に収容される。フォイル障壁２８４がカプセル２８３の基部を封止する間、遠心分離後、試料にアクセスするためのセプタム２８５がその上部に配置される。図１９Ｂは、遠心分離中、いかにしてプラスチック矢じり２８２がフォイル障壁２８４を穿刺し、管１００の底部へと降下し、ゲル層１０１より下方に配置され、次いで試薬錠剤２８１が落下し、部分的にカプセル２８３から外に出て、カプセル２８３と一体でありフォイル障壁２８４の下方に突出した３つの保持用フィンガ２８６によって血漿の液面２８７より上方に保持されるかを示す。次いで、露出された試薬２８１は、単に管１００を逆さまにすることによって、分離された血漿１１２と混合される。
【００４２】
図２０Ａから図２０Ｄは、開口上端部と閉じた下端部を有しゲル分離部材１０１を収容する管１００を示す。図２０Ａは、遠心分離前の実施例を示し、試薬２９１が、管閉塞部２９３の下面と嵌め合わされ、それによって封止される試薬カップ２９２内に収容される。図２０Ｂは、遠心分離中に、いかにして試薬カップ２９２が管閉塞部２９３から離れ、血漿１１２の表面上に浮くかを示す。図２０Ｃは、遠心分離が完了する場合、管１００を逆さまにすることにより、試薬カップ２９２がゲル層１０１に向かって浮き、分離された血漿１１２中に試薬２９１を出すことを示す。図２０Ｄは、遠心分離前において、試薬カップ２９５の設計における代替実施例を示す。
【００４３】
図２１Ａおよび図２１Ｂは、開口上端部および閉じた下端部を有しゲル分離部材１０１を収容する管１００を示す。図２１Ａは、遠心分離前の実施例を示し、試薬３０１が、管閉塞部３０３の下面によって封止された試薬カップ３０２内に収容されている。図２１Ｂは、遠心分離中、いかにして試薬カップ３０２が管閉塞部３０３から外れ、管の内壁内のトラック３０４をＰ方向に滑り落ちるかを示す。トラック３０４は、試薬カップ３０２と締り嵌めを形成するようにわずかに先細になっており、変位した位置３０６に試薬カップ３０２を保持する。次いで、露出した試薬錠剤３０１は、単に管１００を逆さまにすることによって、分離された血漿１１２と混合される。
【００４４】
図２２Ａから図２２Ｃは、開口上端部および閉じた下端部を有しゲル分離部材１０１を収容する管１００を示す。図２２Ａおよび図２２Ｂは、遠心分離前の実施例を示し、管１００の内壁およびキャップ３１３に取り付けられた薄い剥ぎ取り式のシール３１２の背後に試薬３１１が収容される。図２２Ｃは、遠心分離が完了する場合、キャップ３１３がＺ方向に回転され、シール３１２を剥がし、試薬３１１が分離された血漿１１２を混合可能になることを示す。
【００４５】
上述の実施例にあるように、試薬解放機構は概ね、以下の要素によって機能する（それに限定されない）。
（ａ）試薬解放機構を閉じた状態に保持する（ばね、または、ベルビルワッシャなどの）バイアス要素。分離プロセス（例えば遠心分離）が付勢力に打ち勝ち、分離後に試薬との接触が可能になる（受動式）。
（ｂ）分離後に手動で開くことができる、破断可能または穿刺可能な小袋／仕切り（手動式）。
（ｃ）管閉塞部に取り付けられ、この閉塞部に取り付けられたことにより、試薬解放機構が閉じた状態で保持される容器。分離プロセス（例えば遠心分離）が取付力に打ち勝ち、容器を解放し、分離後、試薬との接触が可能になる（受動式）。または、
（ｄ）カバーに取り付けられた容器であって、そのカバーが試薬との接触を防ぐ。分離プロセス（例えば遠心分離）が取付力に打ち勝ち、カバーを解放し、分離後、試薬との接触が可能になる。
例えば、分離プロセスがロック機構を解放するが、容器または通路を開くように手動工程が必要とされる場合など、受動式と手動式のいくつかの組合せが可能であることに留意されたい。
【００４６】
上述実施例にあるように、試薬解放機構は、概ね以下のように配される（それに限定されない）。
（ａ）管閉塞部に直接的に取り付けられる。
（ｂ）例えば、閉塞部付近に配置された構造部材上に載るように管閉塞部に隣接する。
（ｃ）管の内壁と一体のリブなどの構造部材上に載っている分離部材の最終位置に隣接するがそれより上方の管の位置。
【００４７】
本発明の装置は、様々なチューブコーティング（ｔｕｂｅ  ｃｏａｔｉｎｇｓ）、または安定剤に添加するその他の化合物を含んでもよい。代替の一実施例においては、スプレードライされた抗凝固剤調合物が、全血試料と相互作用させるように、容器の内側に被覆されてもよい。本発明の装置に血液が採集された後、血液を凝固させるカスケード反応が生じる場合がある。抗凝血剤は、凝固を引き起こすカスケード機構を阻止することによって、血液凝固を防ぐために使用される物質である。血漿試料を全血から採集するために、通常、抗凝血剤が、試料の完全無欠性を維持するために直ちに加えられる。クエン酸ナトリウム、ヘパリン、ＥＤＴＡカリウムなどの多くのタイプの抗凝血剤を含む血漿採集用の管が市販されている。使用する抗凝血剤のタイプの選択は、ｂＤＮＡ法、ＰＣＲ法、または核酸検査で使用されるその他の増幅技術との干渉を避けるように選択され得る。血漿／血清の採集に適した市販の採血管としては、以下のものが挙げられる。すべてニュージャージー州Ｆｒａｎｋｌｉｎ  ＬａｋｅｓのＢｅｃｔｏｎ,Ｄｉｃｋｉｎｓｏｎ  ａｎｄ  Ｃｏｍｐａｎｙ社から、Ｂｅｃｔｏｎ,Ｄｉｃｋｉｎｓｏｎ  ａｎｄ  Ｃｏｍｐａｎｙ社に属する登録商標および商標として販売されている、ＶＡＣＵＴＡＩＮＥＲ（登録商標）血液用チューブ（ｈｅｍａｔｏｌｏｇｙ  ｔｕｂｅｓ）、カタログ番号３６７６５０−１、３６７６６１、６４０５、６３８５、６５６４、３６７６５３、３６７６６５、３６７６５８、３６７６６９、６４５０−８、６５３５−３７および３６７６６２；ＶＡＣＵＴＡＩＮＥＲ（登録商標），Ｋ２ＥＤＴＡチューブ、カタログ番号３６７８４１−２、３６７８５６、および３６７８６１；ＶＡＣＵＴＡＩＮＥＲ（登録商標）ＰＳＴチューブ、カタログ番号３６７７９３−４、６６９８、６５９５、および６６７２；ＶＡＣＵＴＡＩＮＥＲ（登録商標）ＣＰＴチューブ、カタログ番号３６２７５３、および３６２７６０−１；ＶＡＣＵＴＡＩＮＥＲ（登録商標）ＳＳＴチューブ、カタログ番号３６７７８２−８９、６５０９−１７、および６５９０−９２；ならびに、ＶＡＣＵＴＡＩＮＥＲ（登録商標）ＡＣＤチューブ、カタログ番号３６７７５６、３６４０１２、および４８１６。
【００４８】
本発明の装置は、核酸検査用の検体を採集および調製するために使用され得る。まず、管内に配置された安定剤から全血試料を隔離したまま、全血試料または前処理された血液の細胞分画などの検体が、準備された管内に採集される。次に、管を遠心分離機にかけて、赤血球、白血球、および血小板から血漿を分離させ、より高密度の白血球、赤血球、および血小板と、より低密度の血液試料の血漿分画との中間点に分離部材が移動するようにし、それによって、血漿の隔離およびそれに続く取出しを促進する。その管内の血漿は、例えば、管を手で逆さまにすることによって、核酸安定剤と接触しそれと混合される。
【００４９】
本発明は、製薬会社、生物工学会社、臨床試験受託機関、大学の研究者、研究病院、および核酸の研究への関心を有するいかなる機関または個人によって使用され得る。本発明により、研究者は、冷蔵状態での保存または輸送の必要なしに、後続の分析用の血漿試料を簡便かつ容易に保護および処理することが可能になる。さらに、本発明は、選択された血液成分にのみ接触させることが望まれる、いかなる試剤と共に使用することもできる。
【００５０】
さらに、本発明のアセンブリは、開業医によるいかなる追加工程または処理も必要とせず、血液または流体試料を、標準的なやり方で標準的な試料採集機器を使用して採集することができる。
【００５１】
なお、各実施例において、ゲル分離部材を示す部分に代わりに機械的分離部材が使用可能であり、またその逆も可能であることに留意されたい。また、血漿という用語について述べる部分に、血清などいかなる分離された血液成分を当てはめることもでき、またその逆も可能である。
【図面の簡単な説明】
【００５２】
【図１】本発明の一実施例に従う血液採集装置の断面図である。
【図２】試料の装置内への導入中であるが遠心分離前の、図１の血液採集装置の断面図である。
【図３】１８０°まで回転され、複数の成分に遠心促進分離した後の図２の試料の断面図である。
【図４】ゲル分離部材を有する本発明の血液採集装置の代替実施例を示す断面図である。
【図５Ａ】ゲル分離部材を有する本発明の血液採集装置の代替実施例を示す断面図である。
【図５Ｂ】図５Ａの血液採集装置の試薬解放機構を示す拡大断面図である。
【図５Ｃ】遠心分離の初期段階で全試料を収容した図５Ａの血液採集装置の断面図である。
【図５Ｄ】複数の成分に遠心促進分離後、試薬解放機構が作動した図５Ａの血液採集装置の断面図である。
【図６Ａ】ゲル分離部材を有する本発明の血液採集装置の代替実施例を示す断面図である。
【図６Ｂ】遠心分離前における図６Ａの血液採集装置の試薬解放機構を示す拡大断面図である。
【図６Ｃ】遠心分離中における図６Ａの血液採集装置の試薬解放機構を示す拡大断面図である。
【図６Ｄ】複数の成分に遠心促進分離後、試薬解放機構が作動した図６Ａの血液採集装置を示す断面図である。
【図６Ｅ】遠心分離後における図６Ａの血液採集装置の試薬解放機構を示す拡大断面図である。
【図７Ａ】ゲル分離部材を有する本発明の血液採集装置の代替実施例を示す断面図である。
【図７Ｂ】遠心分離前における図７Ａの血液採集装置の試薬解放機構を示す拡大断面図である。
【図７Ｃ】遠心分離の初期段階で図７Ａの血液採集装置の試薬解放機構を示す拡大断面図である。
【図７Ｄ】遠心分離の最終段階で図７Ａの血液採集装置の試薬解放機構を示す断面図である。
【図７Ｅ】遠心分離後における図７Ａの血液採集装置の試薬解放機構を示す断面図である。
【図７Ｆ】複数の成分に遠心促進分離後、試薬解放機構が作動した図７Ａの血液採集装置の断面図である。
【図８Ａ】ゲル分離部材を有する本発明の血液採集装置の代替実施例を示す断面図である。
【図８Ｂ】遠心分離前における図８Ａの血液採集装置の試薬解放機構を示す拡大断面図である。
【図８Ｃ】遠心分離中における図８Ａの血液採集装置の試薬解放機構を示す拡大断面図である。
【図８Ｄ】遠心分離直後における図８Ａの血液採集装置の試薬解放機構を示す拡大断面図である。
【図８Ｅ】遠心分離後における図８Ａの血液採集装置の試薬解放機構を示す拡大断面図である。
【図８Ｆ】複数の成分に遠心促進分離後、試薬解放機構が作動した図８Ａの血液採集装置を示す断面図である。
【図９Ａ】ゲル分離部材を有する本発明の血液採集装置の代替実施例を示す断面図である。
【図９Ｂ】遠心分離前における図９Ａの血液採集装置の試薬解放機構を示す拡大断面図である。
【図９Ｃ】遠心分離中における図９Ａの血液採集装置の試薬解放機構を示す拡大断面図である。
【図９Ｄ】複数の成分に遠心促進分離後、試薬解放機構が作動した図９Ａの血液採集装置の試薬解放機構を示す断面図である。
【図１０Ａ】ゲル分離部材を有する本発明の血液採集装置の代替実施例を示す断面図である。
【図１０Ｂ】遠心分離前における図１０Ａの血液採集装置の試薬解放機構を示す拡大断面図である。
【図１０Ｃ】遠心分離中における図１０Ａの血液採集装置の断面図である。
【図１０Ｄ】複数の成分に遠心促進分離後、試薬解放機構が作動した図１０Ａの血液採集装置の試薬解放機構を示す断面図である。
【図１１Ａ】ゲル分離部材を有する本発明の血液採集装置の代替実施例を示す断面図である。
【図１１Ｂ】遠心分離前における図１１Ａの血液採集装置の試薬解放機構を示す拡大断面図である。
【図１１Ｃ】平面Ｍ−Ｍから見た図１１Ａの血液採集装置の試薬解放機構を示す断面図である。
【図１１Ｄ】遠心分離中における図１１Ａの血液採集装置の断面図である。
【図１１Ｅ】遠心分離中における図１１Ａの血液採集装置の試薬解放機構を示す拡大断面図である。
【図１１Ｆ】複数の成分に遠心促進分離後、試薬解放機構が作動した図１１Ａの血液採集装置を示す断面図である。
【図１２Ａ】ゲル分離部材を有する本発明の血液採集装置の代替実施例を示す断面図である。
【図１２Ｂ】遠心分離前における図１２Ａの血液採集装置の試薬解放機構を示す拡大断面図である。
【図１２Ｃ】遠心分離中における図６Ａの血液採集装置の試薬解放機構を示す拡大断面図である。
【図１２Ｄ】複数の成分に遠心促進分離後、試薬解放機構が作動した図６Ａの血液採集装置の断面図である。
【図１２Ｅ】遠心分離後における図１２Ａの血液採集装置の試薬解放機構を示す拡大断面図である。
【図１３Ａ】ゲル分離部材を有する本発明の血液採集装置の代替実施例を示す断面図である。
【図１３Ｂ】遠心分離前における図１３Ａの血液採集装置の試薬解放機構を示す拡大断面図である。
【図１３Ｃ】遠心分離中における図１３Ａの血液採集装置の試薬解放機構を示す拡大断面図である。
【図１３Ｄ】複数の成分に遠心促進分離後、試薬解放機構が作動した図１３Ａの血液採集装置の断面図である。
【図１３Ｅ】遠心分離後における図１３Ａの血液採集装置の試薬解放機構を示す拡大断面図である。
【図１４Ａ】ゲル分離部材を有する本発明の血液採集装置の代替実施例を示す断面図である。
【図１４Ｂ】遠心分離前における図１４Ａの血液採集装置の試薬解放機構を示す拡大断面図である。
【図１４Ｃ】遠心分離の初期段階で図１４Ａの血液採集装置の試薬解放機構を示す拡大断面図である。
【図１４Ｄ】遠心分離の最終段階で図１４Ａの血液採集装置の試薬解放機構を示す拡大断面図である。
【図１４Ｅ】複数の成分に遠心促進分離後、試薬解放機構が作動した図１４Ａの血液採集装置の断面図である。
【図１５Ａ】ゲル分離部材を有する本発明の血液採集装置の代替実施例を示す断面図である。
【図１５Ｂ】遠心分離前における図１５Ａの血液採集装置の試薬解放機構を示す拡大断面図である。
【図１５Ｃ】遠心分離中における図１５Ａの血液採集装置の試薬解放機構を示す拡大断面図である。
【図１５Ｄ】遠心分離後における図１５Ａの血液採集装置の試薬解放機構を示す拡大断面図である。
【図１５Ｅ】複数の成分に遠心促進分離後、試薬解放機構が作動した図１５Ａの血液採集装置の断面図である。
【図１６Ａ】ゲル分離部材を有する本発明の血液採集装置の代替実施例を示す断面図である。
【図１６Ｂ】図１６Ａの血液採集装置の試薬解放機構を示す拡大断面図である。
【図１６Ｃ】遠心分離中における全試料を収容した図１６Ａの血液採集装置の断面図である。
【図１６Ｄ】複数の成分に遠心促進分離後、試薬解放機構が作動した図１６Ａの血液採集装置の断面図である。
【図１７Ａ】ゲル分離部材を有する本発明の血液採集装置の代替実施例を示す断面図である。
【図１７Ｂ】図１７Ａの血液採集装置の試薬解放機構を示す拡大断面図である。
【図１７Ｃ】遠心分離中における図１７Ａの血液採集装置の試薬解放機構を示す拡大断面図である。
【図１７Ｄ】複数の成分に遠心促進分離後、試薬解放機構が作動した図１７Ａの血液採集装置の断面図である。
【図１８Ａ】ゲル分離部材を有する本発明の血液採集装置の代替実施例を示す断面図である。
【図１８Ｂ】複数の成分に遠心促進分離後、試薬解放機構が作動した図１８Ａの血液採集装置の断面図である。
【図１９Ａ】ゲル分離部材を有する本発明の血液採集装置の代替実施例を示す断面図である。
【図１９Ｂ】複数の成分に遠心促進分離後、試薬解放機構が作動した図１９Ａの血液採集装置の断面図である。
【図２０Ａ】ゲル分離部材を有する本発明の血液採集装置の代替実施例を示す断面図である。
【図２０Ｂ】複数の成分に遠心促進分離後、試薬解放機構が作動した図２０Ａの血液採集装置の断面図である。
【図２０Ｃ】遠心分離後、１８０°まで反転され、所望の別々の成分と試薬との混合を促進する図２０Ａの血液採集装置を示す断面図である。
【図２０Ｄ】ゲル分離部材を有する図２０Ａの血液採集装置の代替実施例を示す断面図である。
【図２１Ａ】ゲル分離部材を有する本発明の血液採集装置の代替実施例を示す断面図である。
【図２１Ｂ】複数の成分に遠心促進分離後、試薬解放機構が作動した図２１Ａの血液採集装置の断面図である。
【図２２Ａ】ゲル分離部材を有する本発明の血液採集装置の代替実施例を示す断面図である。
【図２２Ｂ】図２２Ａの血液採集装置の試薬解放機構を示す拡大断面図である。
【図２２Ｃ】複数の成分に遠心促進分離後、試薬解放機構が作動した図２２Ａの血液採集装置の断面図である。
【図１】
2007501398.tif 000003
【図２】
2007501398.tif 000004
【図３】
2007501398.tif 000005
【図４】
2007501398.tif 000006
【図５Ａ】
2007501398.tif 000007
【図５Ｂ】
2007501398.tif 000008
【図５Ｃ】
2007501398.tif 000009
【図５Ｄ】
2007501398.tif 000010
【図６Ａ】
2007501398.tif 000011
【図６Ｂ】
2007501398.tif 000012
【図６Ｃ】
2007501398.tif 000013
【図６Ｄ】
2007501398.tif 000014
【図６Ｅ】
2007501398.tif 000015
【図７Ａ】
2007501398.tif 000016
【図７Ｂ】
2007501398.tif 000017
【図７Ｃ】
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【図７Ｄ】
2007501398.tif 000019
【図７Ｅ】
2007501398.tif 000020
【図７Ｆ】
2007501398.tif 000021
【図８Ａ】
2007501398.tif 000022
【図８Ｂ】
2007501398.tif 000023
【図８Ｃ】
2007501398.tif 000024
【図８Ｄ】
2007501398.tif 000025
【図８Ｅ】
2007501398.tif 000026
【図８Ｆ】
2007501398.tif 000027
【図９Ａ】
2007501398.tif 000028
【図９Ｂ】
2007501398.tif 000029
【図９Ｃ】
2007501398.tif 000030
【図９Ｄ】
2007501398.tif 000031
【図１０Ａ】
2007501398.tif 000032
【図１０Ｂ】
2007501398.tif 000033
【図１０Ｃ】
2007501398.tif 000034
【図１０Ｄ】
2007501398.tif 000035
【図１１Ａ】
2007501398.tif 000036
【図１１Ｂ】
2007501398.tif 000037
【図１１Ｃ】
2007501398.tif 000038
【図１１Ｄ】
2007501398.tif 000039
【図１１Ｅ】
2007501398.tif 000040
【図１１Ｆ】
2007501398.tif 000041
【図１２Ａ】
2007501398.tif 000042
【図１２Ｂ】
2007501398.tif 000043
【図１２Ｃ】
2007501398.tif 000044
【図１２Ｄ】
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【図１２Ｅ】
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【図１３Ａ】
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【図１３Ｂ】
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【図１３Ｃ】
2007501398.tif 000049
【図１３Ｄ】
2007501398.tif 000050
【図１３Ｅ】
2007501398.tif 000051
【図１４Ａ】
2007501398.tif 000052
【図１４Ｂ】
2007501398.tif 000053
【図１４Ｃ】
2007501398.tif 000054
【図１４Ｄ】
2007501398.tif 000055
【図１４Ｅ】
2007501398.tif 000056
【図１５Ａ】
2007501398.tif 000057
【図１５Ｂ】
2007501398.tif 000058
【図１５Ｃ】
2007501398.tif 000059
【図１５Ｄ】
2007501398.tif 000060
【図１５Ｅ】
2007501398.tif 000061
【図１６Ａ】
2007501398.tif 000062
【図１６Ｂ】
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【図１６Ｃ】
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【図１６Ｄ】
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【図１７Ａ】
2007501398.tif 000066
【図１７Ｂ】
2007501398.tif 000067
【図１７Ｃ】
2007501398.tif 000068
【図１７Ｄ】
2007501398.tif 000069
【図１８Ａ】
2007501398.tif 000070
【図１８Ｂ】
2007501398.tif 000071
【図１９Ａ】
2007501398.tif 000072
【図１９Ｂ】
2007501398.tif 000073
【図２０Ａ】
2007501398.tif 000074
【図２０Ｂ】
2007501398.tif 000075
【図２０Ｃ】
2007501398.tif 000076
【図２０Ｄ】
2007501398.tif 000077
【図２１Ａ】
2007501398.tif 000078
【図２１Ｂ】
2007501398.tif 000079
【図２２Ａ】
2007501398.tif 000080
【図２２Ｂ】
2007501398.tif 000081
【図２２Ｃ】
2007501398.tif 000082
【国際調査報告】
2007501398.tif 000083
2007501398.tif 000084
2007501398.tif 000085