(57)【要約】        本発明は、アムロジピンのゲンチシン酸塩及びその製造方法に関し、更に詳しくは、アムロジピン（amlodipine）とゲンチシン酸（gentisic acid）を反応させて製造した結晶性酸付加塩として低い毒性と優れた安定性が確保され、薬効増進はもちろん、投与後、有効血中濃度が長時間維持されるため、心臓血管疾患の治療剤として有効なアムロジピンのゲンチシン酸塩及びその製造方法に関する。【特許請求の範囲】
【請求項１】
下記化学式（１）に表されることを特徴とするアムロジピンのゲンチシン酸塩。
【化１】
2007513997.tif 000012
【請求項２】
前記化合物は（Ｓ）−（−）−異性体であることを特徴とする請求項１記載のアムロジピンのゲンチシン酸塩。
【請求項３】
下記化学式（２）に表されるアムロジピンと下記化学式（３）に表されるゲンチシン酸を反応させて製造することを特徴とする下記化学式（１）に表されるアムロジピンのゲンチシン酸塩の製造方法。
【化２】
2007513997.tif 000013
【化３】
2007513997.tif 000014
【化１】
2007513997.tif 000015
【請求項４】
前記反応においてアムロジピンの濃度が約３〜約６０重量％であることを特徴とする請求項３記載の製造方法。
【請求項５】
前記化学式（３）に表されるゲンチシン酸はアムロジピンに対して約０．１〜約５．０当量で使用することを特徴とする請求項３記載の製造方法。
【請求項６】
前記反応が温度約−１０〜約６０℃で行われることを特徴とする請求項３記載の製造方法。
【請求項７】
前記反応における溶媒が水、メタノール、エタノール、イソプロパノール及びアセトニトリルで構成された群から選択された溶媒を各々単独または混合して使用することを特徴とする請求項３記載の製造方法。
【請求項８】
下記化学式（１）に表されるアムロジピンのゲンチシン酸塩は（Ｓ）−（−）−異性体であることを特徴とする請求項３記載の製造方法。
【化１】
2007513997.tif 000016
【請求項９】
下記化学式（１）に表されるアムロジピンのゲンチシン酸塩が活性成分として使用される心臓血管疾患治療のための医薬組成物。
【化１】
2007513997.tif 000017
【請求項１０】
下記化学式（１）に表されるアムロジピンのゲンチシン酸塩は（Ｓ）−（−）−異性体であることを特徴とする請求項９記載の医薬組成物。
【化１】
2007513997.tif 000018
【請求項１１】
前記組成物は錠剤、カプセル剤または注射剤に剤形化されたものであることを特徴とする請求項１０または１１記載の医薬組成物。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、アムロジピンのゲンチシン酸塩及びその製造方法に関するものである。更に詳しくは、本発明は、心臓血管疾患の治療に有効な下記化学式（１）に表されるアムロジピンのゲンチシン酸塩である結晶性酸付加塩に関するものである。アムロジピンのゲンチシン酸塩は、アムロジピンとゲンチシン酸とを反応させることによって製造され、低い毒性、優れた安定性、改良された薬剤効果、及び有効血中濃度の長時間維持といった利点を有する。
【化１】
2007513997.tif 000002
【背景技術】
【０００２】
アムロジピンは３−エチル−５−メチル−２−（２−アミノエトキシ−メチル）−４−（２−クロロフェニル）−６−メチル−１，４−ジヒドロ−３，５−ピリジンジカルボキシレートであり、カルシウムチャンネル遮断薬として虚血性心疾患と高血圧性心疾患の治療に用いられてきた。また、アムロジピンが、長期間活性を示す効率的で有用な物質であることはよく知られている。
【０００３】
アムロジピンは欧州特許第８９，１６７号で、１，４−ジヒドロピリジン系の新しい化合物として最初に開示された。前記欧州特許第８９，１６７号では医薬上許容可能なアムロジピンの塩は、塩酸塩、臭酸塩、硫酸塩、リン酸塩、酢酸塩、マレイン酸塩、フマル酸塩、乳酸塩、酒石酸塩、クエン酸塩及びグルコン酸塩のような医薬上許容可能な陰イオンを有する非毒性の酸から形成され得る塩であり、このうちマレイン酸塩が最も好ましいことが記載されている。
【０００４】
アムロジピンそのものの形状でも医薬上有用であるが、安定性が落ちるという短所を有するため、医薬上許容可能な酸の塩の形状で投与されている。
【０００５】
大韓民国特許第９０，４７９号は医薬上許容可能な塩の製造において、（１）優れた水溶解性、（２）優れた安定性、（３）非吸湿性、（４）錠剤製剤への加工性、の４つの物理化学的特性を充足させなければならないということを開示している。しかし、前記４つの条件を全て充足させることは非常に難しく、現在最も好ましい医薬形態として提示されているマレイン酸塩さえも溶液中で数週間以内に分解されることが明らかにされた。
【０００６】
大韓民国特許第９１，０２０号にはアムロジピンベシレートが従来のアムロジピンの塩よりも優れ、優れた製剤加工性を有することが開示されている。しかし、アムロジピンベシレートの製造過程において、腐食性と毒性のある化合物であるベンゼンスルホン酸が使用されるためその安全性の問題が提起されてきた。
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【０００７】
本発明の発明者は、上述の問題を克服するために徹底した研究を行い、既存のベンゼンスルホン酸に比べて比較的毒性が低い有機酸であるゲンチシン酸とアムロジピンを反応させることによって、アムロジピンの新規結晶性酸付加塩であるアムロジピンのゲンチシン酸塩を製造することに成功した。アムロジピンのゲンチシン酸塩は、長時間の活性を有する優れた薬剤効果だけでなく、低い毒性と、温度、水分及び光に対する優れた安定性を有し、それによって医薬上許容可能な塩として全ての要求を充足させる。
【０００８】
したがって、本発明の一つの目的は、毒性が低く物理化学的特性が優れた、医薬上許容可能なアムロジピン酸の塩を提供することである。
【０００９】
また、本発明の他の目的は、治療上許容可能な塩として要求される物理化学的特性を全て充足させる酸付加塩であるアムロジピンのゲンチシン酸塩の製造方法を提供することである。
【００１０】
また、本発明の別の目的は、心臓血管疾患治療に効果的な活性成分としてアムロジピンのゲンチシン酸塩といった酸付加塩を含有する医薬組成物を提供することである。
【課題を解決するための手段】
【００１１】
本発明は毒性が低く安定性及び薬剤効果が優れ、血中濃度が長時間維持されるといった利点を有し、心臓血管疾患の治療に有効な下記化学式（１）に表されるアムロジピンのゲンチシン酸塩に関するものである。
【化１】
2007513997.tif 000003
【００１２】
また、下記化学式（１）に表される本発明のアムロジピンのゲンチシン酸塩はアムロジピンの異性体及びこれら異性体の混合物を全て含む。
【００１３】
一方、本発明は前記化学式（１）に表されるアムロジピンのゲンチシン酸塩の製造方法に関するものである。アムロジピンのゲンチシン酸塩は下記反応式１に表されるように、下記化学式（２）に表されるアムロジピンと下記化学式（３）に表されるゲンチシン酸を反応させることで製造される。
【化４】
2007513997.tif 000004
【発明の効果】
【００１４】
本発明によるアムロジピンのゲンチシン酸塩は医薬剤形に適合したアムロジピンの結晶性酸付加塩であり、毒性の高いベンゼンスルホン酸を使用して製造される既存のアムロジピンベシレートにとは異なり比較的毒性が低いゲンチシン酸を使用しながらもアムロジピンベシレートと少なくとも同様な物理化学的要求を充足させる。そのため心臓血管疾患の治療のための医薬組成物として有用である。
【発明を実施するための最良の形態】
【００１５】
前記反応式１に表されるアムロジピンの酸付加塩の製造を各過程別に表すと、
１）アムロジピンを溶解または懸濁させる段階と、
２）ゲンチシン酸を溶解させた後、前記アムロジピン溶液に加えて混合物を製造する段階と、及び
３）前記混合物を攪拌して得た固体を濾過、洗浄及び乾燥させてアムロジピンのゲンチシン酸塩である結晶性酸付加塩を形成する段階とで構成される。
【００１６】
上述したように、本発明によるアムロジピンのゲンチシン酸塩の結晶性酸付加塩は、前記化学式（２）に表されるアムロジピンを含む溶液内にゲンチシン酸を加えて製造される。具体的な詳細は、以下の通りである。
【００１７】
第１段階では、反応液内のアムロジピンの濃度が重要であり、結晶化を効率的に促進するためにはアムロジピンの濃度を３〜６重量％の範囲であることが好ましい。Ｒ−アムロジピンまたはＳ−アムロジピンといった各異性体、またはこれら異性体の混合物が用いられ、効果的な医薬活性を考慮すると、Ｓ−アムロジピンを使用することがより好ましい。
【００１８】
第２段階では、ゲンチシン酸はアムロジピンに対して約０．１〜約５．０当量の範囲で使用することが好ましい。前記第１段階及び第２段階では反応用媒として水または通常の有機溶媒を使用することができる。特に好ましくは、反応溶媒は、水またはメタノール、エタノール、イソプロパノール及びアセトニトリルの中から選択された溶媒を各々単独または混合使用する。
【００１９】
第３段階では、アムロジピンのゲンチシン酸塩の結晶性酸付加塩を形成する反応を、約−１０〜約６０℃の温度範囲で行う。
【００２０】
アムロジピンのゲンチシン酸塩はアムロジピンベシレートに比べて毒性が低く、医薬上許容可能な塩として要求される物理化学的特性を全て充足させる（実験例１及び２参考）ものとして知られている。したがって、本発明は、心臓血管疾患治療のための活性成分として前記化学式（１）に表されるアムロジピンのゲンチシン酸塩の異性体または異性体混合物を有する医薬組成物を含む。
【００２１】
本発明による医薬組成物は、経口または非経口剤形で、または一般的な医薬上許容可能な投薬形態で投与が可能である。経口及び非経口剤形での製剤において、増量剤、稀釈剤、結合剤、湿潤剤、崩壊剤、界面活性剤または賦形剤を使用して調剤される。経口投与用固形製剤には錠剤、丸剤、散剤、顆粒剤、カプセル剤などが含まれる。このような固形製剤は有効化合物として少なくとも一つ以上の賦形剤、例を挙げると、澱粉、スクロース、ラクトースまたはゼラチンを含むことができる。また、ステアリン酸マグネシウム、タルクのような潤滑剤なども使用される。
【００２２】
経口投与用液状製剤としては懸濁剤、内溶液剤、乳剤、シロップ剤などが含まれ、これら液状製剤には水や液体パラフィンなどの稀釈剤、湿潤剤、甘味剤、芳香剤、保存剤などのような賦形剤が含まれる。非経口投与用製剤としては滅菌された水溶液、非水性溶剤、懸濁剤、乳剤、凍結乾燥製剤及び坐剤が含まれる。非水性溶剤、懸濁溶剤としてはプロピレングリコール、ポリエチレングリコール、オリーブオイルのような植物性オイル、エチルオラートのような注射可能なエステルなどが使用される。坐剤の製剤としてはウィテップゾール（witepsol）、マクロゴール、ツイン（Tween）６１、カカオ脂、ラウリン脂、グリセリンゼラチンなどの基剤を用いることによって調合される。
【００２３】
医薬組成物の量は、患者の年齢、体重、性別、投与形態、健康状態及び疾患程度を考慮して決定される。医師または薬剤師により化合物は１日１回または複数回投与される。アムロジピンのゲンチシン酸塩の適切な投与量はアムロジピンの塩基を基準に１日に１．０〜１０．０ｍｇの範囲である。
【００２４】
（実施例）
以下に詳述される実施例において本発明のよりよい理解が与えられるが、これらの実施例によって限定されるものではない。
【実施例１】
【００２５】
（R，S）−（±）−アムロジピンのゲンチシン酸塩の製造
（R，S）−（±）−アムロジピンのゲンチシン酸塩５．０ｇ（１２．２ｍｍｏｌ）をエタノール３０ｍｌに溶解させ混合液を５℃に冷却させた。ゲンチシン酸１．８８ｇ（１２．２ｍｍｏｌ）をエタノール２０ｍｌに溶解させた後、前記アムロジピン溶液に徐々に加えた。反応液を室温で２時間攪拌し、生成された固体を冷却水２０ｍｌで洗浄した後ろ過し、５０℃で真空乾燥させて黄色の結晶の標題化合物６．６２ｇ（収率：９６．２％）を得た。
ｍ．ｐ １５６−１５９℃；１Ｈ−ＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６） δ（ｐｐｍ）  ７．３５−７．１２（ｍ，５Ｈ，Ａｒｈ）、６．６１（ｄ．ｄ．，１Ｈ）、６．４７（ｄ，１Ｈ）、５．３１（ｓ，１Ｈ）、４．７４−４．５５（ｄ．ｄ．，２Ｈ）、３．９９−３．９４（ｍ，２Ｈ）、３．６８（ｂｒｔ，２Ｈ）、３．５０（ｓ，３Ｈ）、３．０９（ｂｒｔ，２Ｈ）、２．３０（ｓ，３Ｈ）、１．１０（ｔ，３Ｈ）
【実施例２】
【００２６】
（Ｓ）−（−）−アムロジピンのゲンチシン酸塩の製造
（Ｓ）−（−）−アムロジピンのゲンチシン酸塩５．０ｇ（１２．２ｍｍｏｌ）をエタノール７．５ｍｌに懸濁させて攪拌した。ゲンチシン酸１．９ｇ（１２．３ｍｏｌ）を水５０ｍｌに溶解させた後、前記アムロジピン溶液に徐々に加えた。反応液を室温で２時間攪拌し、生成された固体を冷却水２０ｍｌで洗浄した後ろ過し、５０℃で真空乾燥させて黄色の結晶の標題化合物６．６１ｇ（収率：９６％）を得た。
ｍ．ｐ １６２−１６５℃；１Ｈ−ＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６） δ（ｐｐｍ）  ７．３５−７．１１（ｍ，５Ｈ，Ａｒｈ）、６．６２（ｄ．ｄ．，１Ｈ）、６．４８（ｄ，１Ｈ）、５．３０（ｓ，１Ｈ）、４．７４−４．５５（ｄ．ｄ．，２Ｈ）、３．９９−３．９５（ｍ，２Ｈ）、３．６８（ｂｒｔ，２Ｈ）、３．５０（ｓ，３Ｈ）、３．１０（ｂｒｔ，２Ｈ）、２．３０（ｓ，３Ｈ）、１．１０（ｔ，３Ｈ）；Ｃ６Ｈ３１Ｎ２Ｏ９Ｃｌに対する元素分析実測値：Ｃ ５７．４０％、Ｈ ５．６０％、Ｎ ４．８０％ 理論値：Ｃ ５７．６０％、Ｈ ５．５５％、Ｎ ４．９８％；キラルＨＰＬＣ：９９．９％ｅ．ｅ．
【実施例３】
【００２７】
アムロジピンのゲンチシン酸塩含有錠剤の剤形化
無水リン酸水素カルシウム３１５ｇ及び微結晶性セルロース５２５ｇ（９０μｍ）を混合してドラムに移した。それからアムロジピンのゲンチシン酸塩７０ｇ及び微結晶性セルロース１８７．５ｇ（５０μｍ）を配合して前記ドラムにスクリーン（ふるい）を通して入れた。前記スクリーン（ふるい）を微結晶性セルロース５２５ｇ（９０μｍ）で洗浄した。無水リン酸水素カルシウム（３１５ｇ）を前記混合物に加えて全体混合物を１０分間混合した。その次に、澱粉グリコール酸ナトリウム４０ｇを前記混合物に加えてさらに６分間混合した。最終的に、ステアリン酸マグネシウム（２０ｇ）を加えて生成された混合物を３分間混合した。そして粉末混合物を従来の方法により錠剤形に圧着させた。
【実施例４】
【００２８】
アムロジピンのゲンチシン酸塩含有カプセル剤の剤形化
微結晶性セルロース５２５ｇ（９０μｍ）及び乾燥コーンスターチを予混合した。アムロジピンのゲンチシン酸塩７０ｇを前記予混合物の一部と混合させた後、篩にかけた。予混合物の残りを１０分間混合し、篩にかけた後、５分間更に混合した。そして、適切なサイズのカプセルに充填させてカプセル剤を製造した。
【実施例５】
【００２９】
アムロジピンのゲンチシン酸塩含有注射剤の剤形化
塩化ナトリウムを注射用滅菌水に溶解し、プロピレングリコールと混合させた。混合液にアムロジピンのゲンチシン酸塩を加えて溶解させた後、滅菌水を加えて目的とする濃度の溶液に製造した。最終的に、この溶液を滅菌用フィルターを通して濾過し、注射剤容器として使用される滅菌されたアンプルに充填した。
【００３０】
＜実験例１＞  経口毒性テスト
下記表１に、アムロジピンベシレートの結晶性酸付加塩を形成するベンゼンスルホン酸とアムロジピンゲンチシン酸塩の結晶性酸付加塩を形成するゲンチシン酸の経口毒性を比較した。ベンゼンスルホン酸の基礎資料は化学物質の毒性登録リスト（Registry of Toxic Effects of Chemical Substances（ＲＴＥＣＳ））から抜粋した。
【表１】
2007513997.tif 000005
【００３１】
前記表１に表された通り、アムロジピンの結晶性酸付加塩製造に使用されるベンゼンスルホン酸は化合物自体としても高い毒性を有するが、本発明でアムロジピンの結晶性酸付加塩製造に使用されるゲンチシン酸はベンゼンスルホン酸に比べ比較的低い毒性を表すことが確認される。
【００３２】
＜実験例２＞  安定性テスト
本実験例はアムロジピン塩の安定性を確認するためのものである。薬物を特定剤形に加工するためには薬物は充分な安定性を有する必要がある。例えば錠剤またはカプセル剤への剤形化においては薬物の大気安定性が特に要求され、注射剤への剤形化においては水溶液中での安定性が特に要求される。
【００３３】
下記表２は温度４０℃、湿度７５％の条件で、（±）−アムロジピンベシレート、 Ｓ−（−）−アムロジピンのゲンチシン酸塩を保管して２週、４週、８週が経過した後、活性物質の初期値に対する含有率を液体高速クロマトグラフィーで測定した結果を表したものである。下記表３は温度６０℃、湿度７５％の条件で上記と同様の結果を表したものである。
【表２】
2007513997.tif 000006
【表３】
2007513997.tif 000007
【００３４】
下記表４は本発明のアムロジピンのゲンチシン酸塩の光安定性の結果をアムロジピンベシレートのそれと比較して表したもので、紫外線（ＵＶ）の総光量は２００Ｗ・ｈ／ｍ２であった。
【表４】
2007513997.tif 000008
【００３５】
前記表２〜表４に表した通り、従来のアムロジピンベシレートに比べ、Ｓ−（−）−アムロジピンのゲンチシン酸塩は紫外線または可視光線下での光安定性が優れている。
【００３６】
＜実験例３＞  経口投与後の活性物質の血中濃度のテスト
S−(−)−アムロジピンのゲンチシン酸塩と（±）−アムロジピンベシレートとを１０ｍｇ／ｋｇ（遊離塩基）の容量で２５０〜２７０ｇの体重を有するスプレーグ−ドウレイのラットに経口投与し、投与後０．５、１、２、４、６、８時間にヘパリンで処理したピペットで血液試料を採取した。採取した血液を１４，０００ｒｐｍで２分間遠心分離して血しょうを取得した。このうち８０μｌをメタノール２４０μｌと混ぜて１０秒間ボルテックスした後、１４，０００ｒｐｍで２分間再び遠心分離した。上澄み液は分析前まで−８０℃で保管し、ガードカラムＣ１８と連結された逆相カプセルパックカラムＣ１８に移動相（３５％アセトニトリル／２０ｍM ＫＨ２ＰＯ４）を１．０ｍＬ／分の速度で流した。
【００３７】
下記表５は経過時間に応じて血液から採取した活性物質（アムロジピン）の濃度を表したものである。
【表５】
2007513997.tif 000009
【００３８】
前記表5に表した通り、Ｓ−（−）−アムロジピンのゲンチシン酸塩はラットに投与した後４〜６時間の生理的に有用な時間帯に最高の血中濃度を示し、その値は（±）−アムロジピンベシレートに比べ１２０％増加した。
【００３９】
＜実験例４＞  光学活性Ｓ−（−）アムロジピンのゲンチシン酸塩と（±）−アムロジピンベシレートの薬効比較
本実験は（±）−アムロジピンベシレートとＳ−（−）−アムロジピンゲンチシン酸塩の抗高血圧活性を比較するためのものである。 先天性高血圧のネズミ（ＳＨＲ，雄，１３〜１４週）をチャールス・リバー社（日本）から購入した。ラットは温度２２．５±１℃、湿度５５±５％に保たれ１２時間間隔で明暗が自動調節される清浄動物飼育室で安定化させて実験に使用した。ＳＨＲは収縮期血圧が１７０ｍｍＨｇ以上であるものだけを使用し、１群当り8匹とした。血圧測定はテイルカフ法（tail−cuff method）を利用し、マルチチャンネル８０００（Multichannel 8000）（ＴＳＥ社，ドイツ）で測定した。血圧を円滑に測定するために、ラットを３７℃の恒温容器に約10分間閉じ込め、試験物質５ｍｇ／ｋｇを蒸留水（１．０ｍｌ／１００g−ラット）に溶解した後、経口投与した。血圧測定は薬物投与２、４、６、８、１０、２４時間後に各々行われた。実験結果はS.E.M.で表示し、実験結果の統計分析はシグマ・スタット（Sigma Stat）プログラム（ジャンデル（Jandel）社、米国）を利用して対応のないｔ検定及び一元配置分散分析（ANOVA）で処理し、２次検定はダネット多重比較検定で行った。先天性高血圧のネズミに対する（±）−アムロジピンベシレート及びＳ−（−）−アムロジピンのゲンチシン酸塩の抗高血圧活性を測定した実験結果を図1、表６及び表７に示した。
【表６】
2007513997.tif 000010
【表７】
2007513997.tif 000011
【００４０】
（±）−アムロジピンベシレート（表６）及びＳ−（−）−アムロジピンのゲンチシン酸塩（表７）を経口投与されたいずれのラット群においても、量依存性の抗高血圧効果を示し、血圧降下傾向も全ての投与群で似たように表れた。二つの試験物質両方が薬物投与３０分後から有意な血圧降下効果を示し、投与１時間後に最大の効果が表れた。これら抗高血圧効果は投与後６時間まで有意に持続され、特に光学活性Ｓ−（−）−アムロジピンのゲンチシン酸塩の抗高血圧効果は（±）−アムロジピンベシレートの半分の投与量でアムロジピンベシレートと類似した効果を表した。（±）−アムロジピンベシレートの最大抗高血圧効果は２．５ｍｇ／ｋｇの投与量で２０．８±７．３％で、半分の投与量の１．２５ｍｇ／ｋｇで光学活性Ｓ−（−）−アムロジピンのゲンチシン酸塩の最大抗高血圧効果は１９．８±５．５％であった。さらに、５ｍｇ／ｋｇの投与量で（±）−アムロジピンベシレートの最大抗高血圧効果は２８．６±７．５％で、投与量の２．５ｍｇ／ｋｇで光学活性Ｓ−（−）−アムロジピンのゲンチシン酸塩の最大抗高血圧効果は２４．５±７．９％であった。
【００４１】
即ち、（±）−アムロジピンベシレート及び光学活性Ｓ−（−）アムロジピンのゲンチシン酸塩の両者ともに量依存性の抗高血圧効果を表した。（±）−アムロジピンベシレートの半分の投与量で光学活性Ｓ−（−）−アムロジピンゲンチシン酸塩の血圧降下効果が似たように表れたという結果から、光学活性Ｓ−（−）−アムロジピンのゲンチシン酸塩がアムロジピンベシレートより２倍も優れた薬効を表すと結論づけることができる。
【００４２】
本発明は好適な実施例によって詳細に説明されたが、当業者がこの開示を考慮の上、本発明の精神と範囲を逸脱しない範囲において変更及び改良することができる。
【図面の簡単な説明】
【００４３】
【図１】（±）−アムロジピンベシレートまたはＳ−(−)−アムロジピンのゲンチシン酸塩の抗高血圧効果を示す。
【図１】
2007513997.tif 000019
【国際調査報告】
2007513997.tif 000020
2007513997.tif 000021