(57)【要約】本発明は、新規β２アドレナリン作動性レセプターアゴニスト化合物を提供する。本発明はまた、そのような化合物を含む薬学的組成物、β２アドレナリン作動性レセプター活性に関連する疾患を処置するためにそのような化合物を使用する方法、ならびにそのような化合物を調製するために有用なプロセスおよび中間体を提供する。本発明の化合物は、強力かつ選択的なβ２アドレナリン作動性レセプターアゴニストであることが見出されている。さらに、本発明の化合物は、驚くべきかつ予想外の作用の長い持続時間を有することが見出されており、この長い持続時間は一日一回またはさらに少ない頻度の投薬を可能にする。【特許請求の範囲】
【請求項１】
式（Ｉ）の化合物：
【化１】
2007505931.tif 000020
あるいはその薬学的に受容可能な塩または溶媒和物または立体異性体であって、
ここで、
Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３およびＲ４の各々は、独立して、水素、アミノ、ハロ、ヒドロキシ、−ＣＨ２ＯＨおよび−ＮＨＣＨＯから選択されるか、または一緒にして考えられるＲ１およびＲ２は、−ＮＨＣ（＝Ｏ）ＣＨ＝ＣＨ−、−ＣＨ＝ＣＨＣ（＝Ｏ）ＮＨ−、−ＮＨＣ（＝Ｏ）Ｓ−もしくは−ＳＣ（＝Ｏ）ＮＨ−であり；
Ｒ５およびＲ６の各々は、独立して、水素、Ｃ１〜６アルキル、−Ｃ（＝Ｏ）Ｒｄ、Ｃ２〜６アルケニル、Ｃ２〜６アルキニルおよびＣ３〜６シクロアルキルであり、各Ｃ１〜６アルキル、Ｃ２〜６アルケニル、Ｃ２〜６アルキニルおよびＣ３〜６シクロアルキルは、必要に応じて、アリール、ヘテロアリール、ヘテロシクリル、−ＯＲａおよび−ＮＲｂＲｃから独立して選択される１以上の置換基で置換され、各アリール、ヘテロアリールおよびヘテロシクリルは、必要に応じて、−ＯＲａおよび−ＮＲｂＲｃから独立して選択される１以上の置換基で置換されるか、あるいは
Ｒ５およびＲ６は、それらが結合する窒素原子と一緒に、５〜７個の環原子を有する複素環を形成し、該環は、必要に応じて、酸素、窒素および硫黄から独立して選択されるさらなるヘテロ原子を含み、硫黄は、必要に応じて、１または２個の酸素で置換され；
Ｒ７およびＲ８の各々は、独立して、水素またはＣ１〜６アルキルであり；
Ｒ９、Ｒ１０およびＲ１１の各々は、独立して、水素、Ｃ１〜６アルキル、アリール、ハロ、−ＯＲａおよび−ＮＲｂＲｃから選択され；
Ｒｄは、水素またはＣ１〜３アルキルであり、必要に応じて、−ＯＲａ、−ＮＲｂＲｃ、ピペリジニルおよびピロリジニルから独立して選択される1以上の置換基で置換され；そして
Ｒａ、ＲｂおよびＲｃは、独立して、水素またはＣ１〜３アルキルである
化合物。
【請求項２】
Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３およびＲ４の各々が、独立して、水素、アミノ、ハロ、ヒドロキシ、−ＣＨ２ＯＨおよび−ＮＨＣＨＯから選択されるか、または一緒にして考えられるＲ１およびＲ２が、−ＮＨＣ（＝Ｏ）ＣＨ＝ＣＨ−もしくは−ＣＨ＝ＣＨＣ（＝Ｏ）ＮＨ−である、請求項１に記載の化合物。
【請求項３】
Ｒ９、Ｒ１０およびＲ１１が、各々水素である、請求項１または２に記載の化合物。
【請求項４】
Ｒ７よびＲ８が、各々水素である、請求項１〜３のいずれか１項に記載の化合物。
【請求項５】
式（ＩＩ）の化合物：
【化２】
2007505931.tif 000021
である請求項１に記載の化合物、あるいはその薬学的に受容可能な塩または溶媒和物または立体異性体であって、
ここで、
Ｒ１は、−ＣＨ２ＯＨまたは−ＮＨＣＨＯであり、そしてＲ２は水素であるか、または一緒にして考えられるＲ１およびＲ２は、−ＮＨＣ（＝Ｏ）ＣＨ＝ＣＨ−もしくは−ＣＨ＝ＣＨＣ（＝Ｏ）ＮＨ−であり；
Ｒ５およびＲ６の各々は、独立して、水素、Ｃ１〜６アルキル、Ｃ２〜６アルケニル、Ｃ２〜６アルキニルおよびＣ３〜６シクロアルキルから選択され、各Ｃ１〜６アルキル、Ｃ２〜６アルケニル、Ｃ２〜６アルキニルおよびＣ３〜６シクロアルキルは、必要に応じて、アリール、ヘテロアリール、ヘテロシクリル、−ＯＲａおよび−ＮＲｂＲｃから独立して選択される１以上の置換基で置換され、各アリール、ヘテロアリールおよびヘテロシクリルは、必要に応じて、−ＯＲａおよび−ＮＲｂＲｃから独立して選択されるか、あるいは
Ｒ５およびＲ６は、それらが結合する窒素原子と一緒に、５〜７個の環原子を有し、かつ酸素、窒素および硫黄から独立して選択される１または２個のヘテロ原子を含む複素環を形成し、硫黄は、必要に応じて１または２個の酸素で置換され；そして
各Ｒａ、ＲｂおよびＲｃは、独立して、水素またはＣ１〜３アルキルである
化合物。
【請求項６】
Ｒ５およびＲ６の各々が、独立して、水素、Ｃ１〜６アルキルおよびＣ３〜６シクロアルキルから選択され、各Ｃ１〜６アルキルは、必要に応じて、ヘテロシクリル、−ＯＲａおよび−ＮＲｂＲｃから選択される１以上の置換基で置換されるか、またはＲ５およびＲ６が、それらが結合する窒素原子と一緒に、５〜７個の環原子を有し、かつ酸素、窒素および硫黄から独立して選択される１または２個のヘテロ原子を含む複素環を形成する、請求項１〜５のいずれか１項に記載の化合物。
【請求項７】
Ｒ５およびＲ６の各々が、独立して、水素またはＣ１〜３アルキルであり、各Ｃ１〜３アルキルは、必要に応じて、ヒドロキシ、アミノ、ピペリジニルおよびピロリジニルから独立して選択される１つの置換基で置換されるか、またはＲ５およびＲ６が、それらが結合する窒素原子と一緒に、モルホリニル環もしくはピペリジニル環を形成する、請求項１〜６のいずれか１項に記載の化合物。
【請求項８】
Ｒ５およびＲ６の各々が、独立して、水素またはＣ１〜３アルキルである、請求項１〜７のいずれか１項に記載の化合物。
【請求項９】
ヒドロキシル基を有するアルキレン炭素における立体化学が（Ｒ）である、請求項１〜８のいずれか１項に記載の化合物。
【請求項１０】
以下：
５−（（Ｒ）−２−｛２−［４−（（Ｒ）−２−アミノ−２−フェニルエチルアミノ）フェニル］エチルアミノ｝−１−ヒドロキシ−エチル）−８−ヒドロキシ−１Ｈ−キノリン−２−オン；
Ｎ−［５−（（Ｒ）−２−｛２−［４−（（Ｒ）−２−アミノ−２−フェニルエチルアミノ）フェニル］エチルアミノ｝−１−ヒドロキシエチル）−２−ヒドロキシフェニル］ホルムアミド；
５−（（Ｒ）−２−｛２−［４−（（Ｓ）−２−アミノ−２−フェニルエチルアミノ）フェニル］エチルアミノ｝−１−ヒドロキシ−エチル）−８−ヒドロキシ−１Ｈ−キノリン−２オン；
Ｎ−［５−（（Ｒ）−２−｛２−［４−（（Ｓ）−２−アミノ−２−フェニルエチルアミノ）フェニル］エチルアミノ｝−１−ヒドロキシエチル）−２−ヒドロキシフェニル］ホルムアミド；
５−（（Ｒ）−２−｛２−［４−（（Ｒ）−２−メチルアミノ−２−フェニルエチルアミノ）フェニル］エチルアミノ｝−１−ヒドロキシエチル）−８−ヒドロキシ−１Ｈ−キノリン−２−オン；
５−（（Ｒ）−２−｛２−［４−（（Ｒ）−２−ジメチルアミノ−２−フェニルエチルアミノ）フェニル］エチルアミノ｝−１−ヒドロキシエチル）−８−ヒドロキシ−１Ｈ−キノリン−２−オン；
Ｎ−［５−（（Ｒ）−２−｛２−［４−（（Ｒ）−２−メチルアミノ−２−フェニルエチルアミノ）フェニル］エチルアミノ｝−１−ヒドロキシエチル）−２−ヒドロキシフェニル］ホルムアミド；
Ｎ−［５−（（Ｒ）−２−｛２−［４−（（Ｒ）−２−ジメチルアミノ−２−フェニルエチルアミノ）フェニル］エチルアミノ｝−１−ヒドロキシエチル）−２−ヒドロキシフェニル］−ホルムアミド；
５−（（Ｒ）−２−｛２−［４−（（Ｓ）−２−メチルアミノ−２−フェニルエチルアミノ）フェニル］エチルアミノ｝−１−ヒドロキシエチル）−８-ヒドロキシ−１Ｈ−キノリン−２−オン；
５−（（Ｒ）−２−｛２−［４−（（Ｓ）−２−ジメチルアミノ−２−フェニルエチルアミノ）フェニル］エチルアミノ｝−１−ヒドロキシエチル）−８−ヒドロキシ−１Ｈ−キノリン−２−オン；
Ｎ−［５−（（Ｒ）−２−｛２−［４−（（Ｓ）−２−メチルアミノ−２−フェニルエチルアミノ）フェニル］エチルアミノ｝−１−ヒドロキシエチル）−２−ヒドロキシフェニル］ホルムアミド；および
Ｎ−［５−（（Ｒ）−２−｛２−［４−（（Ｓ）−２−ジメチルアミノ−２−フェニルエチルアミノ）フェニル］エチルアミノ｝−１−ヒドロキシエチル）−２−ヒドロキシフェニル］−ホルムアミド；
これらの薬学的に受容可能な塩および溶媒和物および立体異性体
から選択される、請求項１に記載の化合物。
【請求項１１】
以下：
５−（（Ｒ）−２−｛２−［４−（（Ｒ）−２−アミノ−２−フェニルエチルアミノ）フェニル］エチルアミノ｝−１−ヒドロキシエチル）−８−ヒドロキシ−１Ｈ−キノリン−２−オン；
Ｎ−［５−（（Ｒ）−２−｛２−［４−（（Ｒ）−２−アミノ−２−フェニルエチルアミノ）フェニル］エチルアミノ｝−１−ヒドロキシエチル）−２−ヒドロキシフェニル］ホルムアミド；
５−（（Ｒ）−２−｛２−［４−（（Ｓ）−２−アミノ−２−フェニルエチルアミノ）フェニル］エチルアミノ｝−１−ヒドロキシエチル）−８−ヒドロキシ−１Ｈ−キノリン−２−オン；
Ｎ−［５−（（Ｒ）−２−｛２−［４−（（Ｓ）−２−アミノ−２−フェニルエチルアミノ）フェニル］エチルアミノ｝−１−ヒドロキシエチル）−２−ヒドロキシフェニル］ホルムアミド；
５−（（Ｒ）−２−｛２−［４−（（Ｒ）−２−メチルアミノ−２−フェニルエチルアミノ）フェニル］エチルアミノ｝−１−ヒドロキシエチル）−８−ヒドロキシ−１Ｈ−キノリン−２−オン；および
Ｎ−［５−（（Ｒ）−２−｛２−［４−（（Ｒ）−２−メチルアミノ−２−フェニルエチルアミノ）フェニル］エチルアミノ｝−１−ヒドロキシエチル）−２−ヒドロキシフェニル］ホルムアミド；ならびに
それらの薬学的に受容可能な塩および溶媒和物および立体異性体
から選択される、請求項１０に記載の化合物。
【請求項１２】
結晶性のＮ−［５−（（Ｒ）−２−｛２−［４−（（Ｒ）−２−アミノ−２−フェニルエチルアミノ）フェニル］エチルアミノ｝−１−ヒドロキシエチル）−２−ヒドロキシフェニル］ホルムアミドヒドロクロリド。
【請求項１３】
治療有効量の請求項１〜１２のいずれか１項に記載の化合物、および薬学的に受容可能なキャリアを含む、薬学的組成物。
【請求項１４】
前記組成物が、治療有効量の１以上の他の治療剤をさらに含む、請求項１３に記載の薬学的組成物。
【請求項１５】
前記他の治療剤が、コルチコステロイド、抗コリン作用薬またはＰＤＥ４インヒビターである、請求項１４に記載の薬学的組成物。
【請求項１６】
前記組成物が、吸入による投与のために処方される、請求項１３〜１５のいずれか１項に記載の薬学的組成物。
【請求項１７】
請求項１〜１２のいずれか１項に記載の化合物と、１以上の他の治療剤とを含む、組み合わせ。
【請求項１８】
前記他の治療剤が、コルチコステロイド、抗コリン作用薬またはＰＤＥ４インヒビターである、請求項１７に記載の組み合わせ。
【請求項１９】
請求項１〜１２のいずれか１項に記載の化合物と、プロピオン酸フルチカゾン、６α，９α−ジフルオロ−１７α−［（２−フラニルカルボニル）オキシ］−１１β−ヒドロキシ−１６α−メチル−３−オキソ−アンドロスタ−１，４−ジエン−１７β−カルボチオ酸Ｓ−フルオロメチルエステルおよび６α，９α−ジフルオロ−１１β−ヒドロキシ−１６α−メチル−３−オキソ−１７α−プロピオニルオキシ−アンドロスタ−１，４−ジエン−１７β−カルボチオ酸Ｓ−（２−オキソ−テトラヒドロフラン−３Ｓ−イル）エステルからなる群より選択される化合物とを含む、組み合わせ。
【請求項２０】
β２アドレナリン作動性レセプター活性に関連する疾患または状態を有する哺乳動物を処置する方法であって、該方法は、請求項１〜１２のいずれか１項に記載の化合物の治療有効量を該哺乳動物に投与する工程を包含する、方法。
【請求項２１】
前記疾患または状態が、肺疾患または肺の状態である、請求項２０に記載の方法。
【請求項２２】
前記肺疾患および肺の状態が、喘息または慢性閉塞性肺疾患である、請求項２１に記載の方法。
【請求項２３】
前記疾患または状態が、早期陣痛、神経障害、心臓の障害および炎症からなる群より選択される、請求項２０に記載の方法。
【請求項２４】
治療有効量の１以上の他の治療剤を投与する工程をさらに包含する、請求項２０に記載の方法。
【請求項２５】
前記他の治療剤が、コルチコステロイド、抗コリン作用薬またはＰＤＥ４インヒビターである、請求項２４に記載の方法。
【請求項２６】
前記方法が、吸入により前記薬学的組成物を投与する工程を包含する、請求項２０に記載の方法。
【請求項２７】
式（Ｉ）の化合物を調製するためのプロセスであって、該プロセスは、以下：
式（ＩＩＩ）の化合物：
【化３】
2007505931.tif 000022
と式（ＩＶ）の化合物：
【化４】
2007505931.tif 000023
とを反応させて、式（Ｖ）の化合物：
【化５】
2007505931.tif 000024
を提供する工程であって、
ここで、Ｐ１は、ヒドロキシ保護基であり、Ｌは脱離基であり、Ｒ１ａ、Ｒ２ａ、Ｒ３ａおよびＲ４ａの各々は、独立して、請求項１におけるＲ１、Ｒ２、Ｒ３およびＲ４と同一であるように規定されるかまたは−ＯＰ２であり、Ｐ２は、ヒドロキシ保護基であり、
ここで、Ｒ５、Ｒ６、Ｒ７、Ｒ８、Ｒ９、Ｒ１０およびＲ１１は、請求項１のように規定される、工程；
保護基Ｐ１を除去して、式（ＶＩ）の化合物：
【化６】
2007505931.tif 000025
を提供する工程；ならびに
Ｒ１ａ、Ｒ２ａ、Ｒ３ａまたはＲ４ａのうちのいずれかが−ＯＰ２である場合、保護基Ｐ２を除去して、式（Ｉ）の化合物、あるいはその塩または立体異性体を提供する工程
を包含する、プロセス。
【請求項２８】
請求項２７に記載のプロセスによって調製される、生成物。
【請求項２９】
治療において使用するための、請求項１〜１２のいずれか１項に記載の化合物。
【請求項３０】
医薬の製造のための、請求項１〜１２のいずれか１項に記載の化合物の使用。
【請求項３１】
前記医薬は、β２アドレナリン作動性レセプター活性に関連する哺乳動物における疾患または状態を処置するためのものである、請求項３０に記載の使用。
【請求項３２】
前記疾患または状態が、肺疾患または肺の状態である、請求項３１に記載の使用。
【請求項３３】
前記肺疾患および肺の状態が、喘息または慢性閉塞性肺疾患である、請求項３２に記載の使用。
【請求項３４】
前記医薬が、吸入によって投与するために適切である、請求項３１〜３３のいずれか１項に記載の使用。
【請求項３５】
生物学的システムまたは生物学的サンプルにおけるβ２アドレナリン作動性レセプターを作動させる方法であって、該方法は、β２アドレナリン作動性レセプターを含む生物学的システムまたは生物学的サンプルを、β２アドレナリン作動性レセプターを作動させる量の請求項１〜１２のいずれか１項に記載の化合物に接触させる工程を包含する、方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
（発明の分野）
本発明は、新規β２アドレナリン作動性レセプターアゴニストに関する。本発明はまた、このような化合物を含む薬学的組成物、β２アドレナリンレセプター活性に関連する疾患を処置するためにそのような化合物を使用する方法、ならびにこのような化合物を調製するために有用なプロセスおよび中間体に関する。
【背景技術】
【０００２】
（発明の背景）
β２アドレナリン作動性レセプターアゴニストは、喘息および慢性閉塞性肺疾患（慢性気管支炎および気腫を含む）のような肺疾患の処置に有効な薬剤として認識される。β２アドレナリン作動性レセプターアゴニストはまた、早期陣痛を処置するために有用であり、そして神経障害および心臓障害を処置するために潜在的に有用である。特定のβ２アドレナリン作動性レセプターアゴニストを用いて達成された成功にもかかわらず、現在の薬剤は、望ましい作用の持続時間、効力、選択性および／または発現に満たない。従って、改善された特性（例えば、改善された作用の持続時間、効力、選択性および／または発現）を有する新しいβ２アドレナリン作動性レセプターアゴニストに対する必要性が存在する。
【発明の開示】
【課題を解決するための手段】
【０００３】
（発明の要旨）
本発明は、β２アドレナリン作動性レセプターアゴニスト活性を有する新規化合物を提供する。他の特性のうち、本発明の化合物は、強力かつ選択的なβ２アドレナリン作動性レセプターアゴニストであることが見出されている。さらに、本発明の化合物は、驚くべきかつ予想外の作用の長い持続時間を有することが見出されており、この長い持続時間は一日一回またはさらに少ない頻度の投薬を可能にする。
【０００４】
従って、本発明は、式（Ｉ）の化合物：
【０００５】
【化７】
2007505931.tif 000002
あるいはその薬学的に受容可能な塩または溶媒和物または立体異性体を提供し、ここで、
Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３およびＲ４の各々は、独立して、水素、アミノ、ハロ、ヒドロキシ、−ＣＨ２ＯＨおよび−ＮＨＣＨＯから選択されるか、または一緒にして考えられるＲ１およびＲ２は、−ＮＨＣ（＝Ｏ）ＣＨ＝ＣＨ−、−ＣＨ＝ＣＨＣ（＝Ｏ）ＮＨ−、−ＮＨＣ（＝Ｏ）Ｓ−もしくは−ＳＣ（＝Ｏ）ＮＨ−であり；
Ｒ５およびＲ６の各々は、独立して、水素、Ｃ１〜６アルキル、−Ｃ（＝Ｏ）Ｒｄ、Ｃ２〜６アルケニル、Ｃ２〜６アルキニルおよびＣ３〜６シクロアルキルであり、各Ｃ１〜６アルキル、Ｃ２〜６アルケニル、Ｃ２〜６アルキニルおよびＣ３〜６シクロアルキルは、必要に応じて、アリール、ヘテロアリール、ヘテロシクリル、−ＯＲａおよび−ＮＲｂＲｃから独立して選択される１以上の置換基で置換され、各アリール、ヘテロアリールおよびヘテロシクリルは、必要に応じて、−ＯＲａおよび−ＮＲｂＲｃから独立して選択される１以上の置換基で置換されるか、あるいは
Ｒ５およびＲ６は、それらが結合する窒素原子と一緒に、５〜７個の環原子を有する複素環を形成し、該環は、必要に応じて、酸素、窒素および硫黄から独立して選択されるさらなるヘテロ原子を含み、硫黄は、必要に応じて、１または２個の酸素で置換され；
Ｒ７およびＲ８の各々は、独立して、水素またはＣ１〜６アルキルであり；
Ｒ９、Ｒ１０およびＲ１１の各々は、独立して、水素、Ｃ１〜６アルキル、アリール、ハロ、−ＯＲａおよび−ＮＲｂＲｃから選択され；
Ｒｄは、水素またはＣ１〜３アルキルであり、必要に応じて、−ＯＲａ、−ＮＲｂＲｃ、ピペリジニルおよびピロリジニルから独立して選択される1以上の置換基で置換され；そして
Ｒａ、ＲｂおよびＲｃは、独立して、水素またはＣ１〜３アルキルである。
【０００６】
本発明はまた、本発明の化合物および薬学的に受容可能なキャリアを含む薬学的組成物を提供する。本発明はさらに、本発明の化合物と１以上の他の治療剤とを含む組み合わせ、ならびにそのような組み合わせを含む薬学的組成物を提供する。
【０００７】
本発明はまた、哺乳動物においてβ２アドレナリン作動性レセプター活性に関連する疾患または状態（例えば、肺疾患（例えば、喘息または慢性閉塞性肺疾患）、早期陣痛、神経障害、心臓障害または炎症）を処置する方法を提供し、この方法は、哺乳動物に治療有効量の本発明の化合物を投与する工程を包含する。本発明はさらに、処置方法を提供し、その方法は、治療有効量の本発明の化合物と１以上の他の治療剤との組み合わせを投与する工程を包含する。
【０００８】
本発明はまた、哺乳動物においてβ２アドレナリン作動性レセプター活性に関係する疾患または状態を処置する方法を提供し、その方法は、哺乳動物に治療有効量の本発明の薬学的組成物を投与する工程を包含する。
【０００９】
本発明の化合物は、研究用のツールとして（すなわち、生物学的システムまたは生物学的サンプルを研究するためか、あるいは新しいβ２アドレナリン作動性レセプターアゴニストを発見するために）使用され得る。従って、その方法局面の１つでは、本発明は、生物学的システムまたは生物学的サンプル中でβ２アドレナリン作動性レセプターを作動させる方法に関し、その方法は、β２アドレナリン作動性レセプターを含む生物学的システムまたは生物学的サンプルを、β２アドレナリン作動性レセプターを作動させる量の式（Ｉ）の化合物またはその薬学的に受容可能な塩もしくは溶媒和物もしくは立体異性体と接触させる工程を包含する。
【００１０】
別の異なる局面において、本発明はまた、本明細書中に記載されるような合成プロセスおよび中間体を提供し、これらは、本発明の化合物を調製するために有用である。
【００１１】
本発明はまた、医学的治療で使用するための、本明細書中に記載されるような本発明の化合物、ならびに哺乳動物においてβ２アドレナリン作動性レセプター活性に関連する疾患または状態（例えば、肺疾患（例えば、喘息または慢性閉塞性肺疾患）、早期陣痛、神経障害、心臓障害または炎症）を処置するための処方物または医薬の製造における本発明の化合物の使用を提供する。
【発明を実施するための最良の形態】
【００１２】
（発明の詳細な説明）
本発明は、式（Ｉ）の新規アミノ置換エチルアミノβ２アドレナリン作動性レセプターアゴニスト、あるいはその薬学的に受容可能な塩または溶媒和物または立体異性体を提供する。ラジカル、置換基および範囲に対する以下の例示的かつ好ましい値は、例示のみのためであり、これらは、ラジカルおよび置換基に対する他の規定値または他の規定範囲内の値を除外しない。
【００１３】
Ｒ１についての特定の値の例は、ハロ、−ＣＨ２ＯＨおよび−ＮＨＣＨＯであり、クロロ、−ＣＨ２ＯＨおよび−ＮＨＣＨＯが挙げられる。
【００１４】
Ｒ１に対する別の特定の値は、−ＣＨ２ＯＨまたは−ＮＨＣＨＯである。
【００１５】
Ｒ２に対する特定の値は、水素である。
【００１６】
Ｒ１およびＲ２に対する特定の値は、一緒にして考えられるＲ１およびＲ２であり、それは、−ＮＨＣ（＝Ｏ）ＣＨ＝ＣＨ−または−ＣＨ＝ＣＨＣ（＝Ｏ）ＮＨ−である。
【００１７】
Ｒ３に対する特定の値の例は、ヒドロキシおよびアミノである。
【００１８】
Ｒ４に対する特定の値の例は、水素およびハロであり、水素およびクロロが挙げられる。
【００１９】
式（Ｉ）の化合物の１つの群は、Ｒ１が−ＮＨＣＨＯであり、Ｒ３がヒドロキシであり、そしてＲ２およびＲ４が各々水素である化合物である。
【００２０】
式（Ｉ）の化合物の別の群は、一緒にして考えられるＲ１およびＲ２が−ＮＨＣ（＝Ｏ）ＣＨ＝ＣＨ−または−ＣＨ＝ＣＨＣ（＝Ｏ）ＮＨ−であり、Ｒ３がヒドロキシであり、そそしてＲ４が水素である化合物である。
【００２１】
Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３およびＲ４に対する別の特定の値は、Ｒ１が−ＣＨ２ＯＨであり、Ｒ３がヒドロキシであり、そしてＲ２およびＲ４が各々水素である。
【００２２】
Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３およびＲ４に対するさらに別の特定の値は、Ｒ１およびＲ４がクロロであり、Ｒ３がアミノであり、そしてＲ２が水素である。
【００２３】
Ｒ５およびＲ６に対する特定の値の例は、Ｒ５およびＲ６が各々独立して、水素、Ｃ１〜６アルキルおよびＣ３〜６シクロアルキルから選択され、ここで、各Ｃ１〜６アルキルは、必要に応じて、へテロシクリル、−ＯＲａおよび−ＮＲｂＲｃから独立して選択される１以上の置換基で置換される。Ｒ５およびＲ６の他の例は、Ｒ５およびＲ６がそれらが結合する窒素原子と一緒に、５〜７個の環原子を有しかつ酸素、窒素および硫黄から独立して選択される１〜２個のヘテロ原子を含む複素環を形成する。
【００２４】
１つの実施形態において、Ｒ５およびＲ６は各々独立して、水素またはＣ１〜３アルキルであり、ここで、各Ｃ１〜３アルキルは、必要に応じて、ヒドロキシル、アミノ、ピペリジニルおよびピロリジニルから独立して選択される１つの置換基で置換される。別の実施形態において、Ｒ５およびＲ６は、それらが結合する窒素原子と一緒に、モルホリニル環またはピペリジニル環を形成する。
【００２５】
さらに別の実施形態において、Ｒ５およびＲ６は、各々独立して、水素またはＣ１〜３アルキルである。
【００２６】
Ｒ７に対する特定の値は、水素である。
【００２７】
Ｒ８に対する特定の値は、水素である。
【００２８】
Ｒ９に対する特定の値の例は、水素、ハロおよび−ＯＲａであり，Ｒａは、水素またはＣ１〜３アルキルである。
【００２９】
Ｒ９に対する特定の値の別の例は、ヒドロキシおよびメトキシである。
【００３０】
Ｒ９に対する別の特定の値は、水素である。
【００３１】
Ｒ１０に対する特定の値の例は、水素、ハロおよび−ＯＲａであり，Ｒａは、Ｒａは、水素またはＣ１〜３アルキルである。
【００３２】
Ｒ１０に対する特定の値の別の例は、ヒドロキシおよびメトキシである。
【００３３】
Ｒ１０に対する別の特定の値は、水素である。
【００３４】
Ｒ１１に対する特定の値の例は、水素、ハロおよび−ＯＲａであり，Ｒａは、Ｒａは、水素またはＣ１〜３アルキルである。
【００３５】
Ｒ１１に対する特定の値の別の例は、ヒドロキシおよびメトキシである。
【００３６】
Ｒ１１に対する別の特定の値は、水素である。
【００３７】
本発明の１つの実施形態において、式（Ｉ）の化合物は、式（ＩＩ）の化合物：
【００３８】
【化８】
2007505931.tif 000003
あるいはその薬学的に受容可能な塩または溶媒和物または立体異性体であり、ここで、
Ｒ１は、−ＣＨ２ＯＨまたは−ＮＨＣＨＯであり、そしてＲ２は水素であるか、または一緒にして考えられるＲ１およびＲ２は、−ＮＨＣ（＝Ｏ）ＣＨ＝ＣＨ−もしくは−ＣＨ＝ＣＨＣ（＝Ｏ）ＮＨ−であり；
Ｒ５およびＲ６の各々は、独立して、水素、Ｃ１〜６アルキル、Ｃ２〜６アルケニル、Ｃ２〜６アルキニルおよびＣ３〜６シクロアルキルから選択され、各Ｃ１〜６アルキル、Ｃ２〜６アルケニル、Ｃ２〜６アルキニルおよびＣ３〜６シクロアルキルは、必要に応じて、アリール、ヘテロアリール、ヘテロシクリル、−ＯＲａおよび−ＮＲｂＲｃから独立して選択される１以上の置換基で置換され、各アリール、ヘテロアリールおよびヘテロシクリルは、必要に応じて、−ＯＲａおよび−ＮＲｂＲｃから独立して選択されるか、あるいは
Ｒ５およびＲ６は、それらが結合する窒素原子と一緒に、５〜７個の環原子を有し、かつ酸素、窒素および硫黄から独立して選択される１または２個のヘテロ原子を含む複素環を形成し、硫黄は、必要に応じて１または２個の酸素で置換され；そして
各Ｒａ、ＲｂおよびＲｃは、独立して、水素またはＣ１〜３アルキルである。
【００３９】
式（ＩＩ）の化合物の１つの群は、Ｒ５およびＲ６の各々が独立して、水素、Ｃ１〜６アルキル、Ｃ３〜６シクロアルキルから選択される化合物であって、各Ｃ１〜６アルキルが、必要に応じてヘテロシクリル、−ＯＲａ、−ＮＲｂＲｃから独立して選択される１以上の置換基で置換される化合物か、あるいはＲ５およびＲ６がそれらが結合する窒素原子と一緒に、５〜７個の環原子を有しかつ酸素、窒素および硫黄から独立して選択される１〜２個のヘテロ原子を含む複素環を形成する化合物である。
【００４０】
式（ＩＩ）の化合物の別の群では、Ｒ５およびＲ６の各々が独立して、水素またはＣ１〜３アルキルであり、ここで各Ｃ１〜３アルキルが、必要に応じて、ヒドロキシ、アミノ、ピペリジニルおよびピロリジニルから独立して選択される１つの置換基で置換されるか、あるいはＲ５およびＲ６がそれらが結合する窒素原子と一緒に、モルホリニル環またはピペリジニル環を形成する。式（ＩＩ）のさらに別の群では、Ｒ５およびＲ６の各々が水素またはＣ１〜３アルキルである。
【００４１】
以下の化合物について特に言及がなされ得る：
５−（（Ｒ）−２−｛２−［４−（（Ｒ）−２−アミノ−２−フェニルエチルアミノ）フェニル］エチルアミノ｝−１−ヒドロキシ−エチル）−８−ヒドロキシ−１Ｈ−キノリン−２−オン：
【００４２】
【化９】
2007505931.tif 000004
；
Ｎ−［５−（（Ｒ）−２−｛２−［４−（（Ｒ）−２−アミノ−２−フェニルエチルアミノ）フェニル］エチルアミノ｝−１−ヒドロキシエチル）−２−ヒドロキシフェニル］ホルムアミド：
【００４３】
【化１０】
2007505931.tif 000005
；
５−（（Ｒ）−２−｛２−［４−（（Ｓ）−２−アミノ−２−フェニルエチルアミノ）フェニル］エチルアミノ｝−１−ヒドロキシ−エチル）−８−ヒドロキシ−１Ｈ−キノリン−２オン；
Ｎ−［５−（（Ｒ）−２−｛２−［４−（（Ｓ）−２−アミノ−２−フェニルエチルアミノ）フェニル］エチルアミノ｝−１−ヒドロキシエチル）−２−ヒドロキシフェニル］ホルムアミド；
５−（（Ｒ）−２−｛２−［４−（（Ｒ）−２−メチルアミノ−２−フェニルエチルアミノ）フェニル］エチルアミノ｝−１−ヒドロキシエチル）−８−ヒドロキシ−１Ｈ−キノリン−２−オン；
５−（（Ｒ）−２−｛２−［４−（（Ｒ）−２−ジメチルアミノ−２−フェニルエチルアミノ）フェニル］エチルアミノ｝−１−ヒドロキシエチル）−８−ヒドロキシ−１Ｈ−キノリン−２−オン；
Ｎ−［５−（（Ｒ）−２−｛２−［４−（（Ｒ）−２−メチルアミノ−２−フェニルエチルアミノ）フェニル］エチルアミノ｝−１−ヒドロキシエチル）−２−ヒドロキシフェニル］ホルムアミド；
Ｎ−［５−（（Ｒ）−２−｛２−［４−（（Ｒ）−２−ジメチルアミノ−２−フェニルエチルアミノ）フェニル］エチルアミノ｝−１−ヒドロキシエチル）−２−ヒドロキシフェニル］−ホルムアミド；
５−（（Ｒ）−２−｛２−［４−（（Ｓ）−２−メチルアミノ−２−フェニルエチルアミノ）フェニル］エチルアミノ｝−１−ヒドロキシエチル）−８-ヒドロキシ−１Ｈ−キノリン−２−オン；
５−（（Ｒ）−２−｛２−［４−（（Ｓ）−２−ジメチルアミノ−２−フェニルエチルアミノ）フェニル］エチルアミノ｝−１−ヒドロキシエチル）−８−ヒドロキシ−１Ｈ−キノリン−２−オン；
Ｎ−［５−（（Ｒ）−２−｛２−［４−（（Ｓ）−２−メチルアミノ−２−フェニルエチルアミノ）フェニル］エチルアミノ｝−１−ヒドロキシエチル）−２−ヒドロキシフェニル］ホルムアミド；および
Ｎ−［５−（（Ｒ）−２−｛２−［４−（（Ｓ）−２−ジメチルアミノ−２−フェニルエチルアミノ）フェニル］エチルアミノ｝−１−ヒドロキシエチル）−２−ヒドロキシフェニル］−ホルムアミド；
ここで、化学命名法は、ＭＤＬ  Ｉｎｆｏｒｍａｔｉｏｎ  Ｓｙｓｔｅｍｓ，ＧｍｂＨ（Ｆｒａｎｋｆｕｒｔ、Ｇｅｒｍａｎｙ）によって提供されるように、自動命名プログラムＡｕｔｏＮｏｍの化学命名法に従う。
【００４４】
上で示されるように、本発明の化合物は、１つ以上のキラル中心を含む。従って、本発明は、他に示されない限り、このような異性体のラセミ混合物、純粋な立体異性体（すなわち、個々の鏡像異性体またはジアステレオマー）、および立体異性体に富む混合物を包含する。特定の立体異性体が示される場合、他に示されない限り、微量の他の立体異性体が本発明の組成物中に存在し得、ただし、そのような他の異性体の存在によって全体としてのその組成物の有用性はなくならないことが当業者により理解される。
【００４５】
特に、本発明の化合物は、ヒドロキシ基が結合する式（Ｉ）および式（ＩＩ）のアルキレン炭素において、キラル中心を含む。立体異性体の混合物が使用される場合、ヒドロキシ基を有するキラル中心において（Ｒ）配向を有する立体異性体の量について、対応する（Ｓ）立体異性体の量よりも多いことが有利である。同じ化合物の立体異性体を比較する場合、（Ｒ）立体異性体が（Ｓ）立体異性体を上回るのが好ましい。
【００４６】
（定義）
本発明の化合物、組成物および方法を記載する場合、以下の用語は、他に示されない限り、以下の意味を有する。
【００４７】
用語「アルキル」は、一価の飽和炭化水素基を意味し、これは、直鎖もしくは分枝鎖またはそれらの組み合わせであり得る。代表的なアルキル基としては、例えば、メチル、エチル、ｎ−プロピル、イソプロピル、ｎ−ブチル、ｓｅｃ−ブチル、イソブチル、ｔｅｒｔ−ブチル、ｎ−ペンチル、ｎ−ヘキシル、ｎ−ヘプチル、ｎ−オクチル、ｎ−ノニル、ｎ−デシルなどが挙げられる。
【００４８】
炭素原子の特定の数が、本明細書中で使用される特定の用語に対して意図される場合、その炭素原子の数は、その用語の前に示される。例えば、用語「Ｃ１〜６アルキル」は、１〜６個の炭素原子を有するアルキル基を意味する。
【００４９】
用語「アルケニル」は、少なくとも１つの炭素−炭素二重結合（代表的には、１または２個の炭素−炭素二重結合）を含む一価の不飽和炭化水素基を意味し、これは、直鎖もしくは分枝鎖またはそれらの組み合わせであり得る。代表的なアルケニル基としては、例えば、ビニル、アリル、イソプロペニル、ブタ−２−エニル、ｎ−ペンタ−２−エニル、ｎ−ヘキサ−２−エニル、ｎ−ヘプタ−２−エニル、ｎ−オクタ−２−エニル、ｎ−ノナ−２−エニル、ｎ−デカ−４−エニル、ｎ−デカ−２，４−ジエニルなどが挙げられる。
【００５０】
用語「アルキニル」は、少なくとも１つの炭素−炭素三重結合（代表的には、１つの炭素−炭素三重結合）を含む一価の不飽和炭化水素基を意味し、これは、直鎖もしくは分枝鎖またはそれらの組み合わせであり得る。代表的なアルキニル基としては、例えば、エチニル、プロパルギル、ブタ−２−イニルなどが挙げられる。
【００５１】
用語「シクロアルキル」は、一価の飽和炭素環式基を意味し、これは、単環式または多環式であり得る。代表的なシクロアルキル基としては、例えば、シクロプロピル、シクロブチル、シクロペンチル、シクロヘキシル、シクロヘプチル、シクロオクチルなどが挙げられる。
【００５２】
用語「アリール」は、単一の環（すなわち、フェニル）または縮合環（すなわち、ナフタレン）を有する一価の芳香族炭化水素を意味する。他に示されない限り、そのようなアリール基は、代表的には、６〜１０個の炭素環原子を含む。代表的なアリール基としては、例えば、フェニルおよびナフタレン−１−イル、ナフタレン−２−イルなどが挙げられる。
【００５３】
用語「ヘテロアリール」は、単一の環または２つの縮合環を有しかつその環中に窒素、酸素および硫黄から選択される少なくとも１つのヘテロ原子（代表的には、１〜３個のヘテロ原子）を含む一価の芳香族基を意味する。他に示されない限り、そのようなヘテロアリール基は、代表的には、５〜１０個の原子の全環原子を含む。代表的なヘテロアリール基としては、例えば、ピロリル（ｐｙｒｒｏｙｌ）イソキサゾリル、イソチアゾリル、ピラゾリル、ピリジル（もしくは同等に、ピリジニル）、オキサゾリル、オキサジアゾリル、チアジアゾリル、チアゾリル、イミダゾリル、トリアゾリル、テトラゾリル、フラニル、トリアジニル、チエニル、ピリミジル、ピリダジニル、ピラジニル、ベンゾキサゾリル、ベンゾチアゾリル、ベンズイミダゾリル、ベンゾフラニル、ベンゾチオフェニル、キノリル、インドリル、イソキノリルなどが挙げられ、結合点は、任意の利用可能な炭素環原子または窒素環原子である。
【００５４】
用語「ヘテロシクリル」または「複素環（ｈｅｔｅｒｏｃｙｃｌｉｃ  ｒｉｎｇ）」は、一価の飽和もしくは部分不飽和の環式非芳香族基を意味し、これは、単環式または多環式（すなわち、縮合または架橋）であり得、そして窒素、酸素および硫黄から選択される少なくとも１つのヘテロ原子（代表的には、１〜３個のヘテロ原子）を含む。他に示されない限り、そのようなヘテロシクリル基は、代表的には、５〜１０個の全環原子を含む。代表的なヘテロシクリル基としては、例えば、ピロリジニル、ピペリジニル、ピペラジニル、イミダゾリジニル、モルホリニル、インドリン−３−イル、２−イミダゾリニル、１，２，３，４−テトラヒドロイソキノリン−２−イル、キヌクリジニルなどが挙げられる。
【００５５】
用語「ハロ」は、フルオロ、クロロ、ブロモ、ヨードを意味する。
【００５６】
用語「アミノ」は、−ＮＨ２を意味する。
【００５７】
用語「治療有効量」は、処置を必要とする患者に投与される場合、処置を行うのに十分な漁を意味する。
【００５８】
用語「処置（ｔｒｅａｔｍｅｎｔ）」は、本明細書中で使用される場合、患者（例えば、哺乳動物（特に、ヒト））における疾患または病状の処置を意味し、処置は、以下：
（ａ）疾患または病状の発症を予防すること（すなわち、患者の予防的処置）；
（ｂ）疾患または病状を改善すること（すなわち、患者において疾患または病状を排除させるか、または疾患または病状の退行を生じさせること）；
（ｃ）疾患または病状を抑制すること（すなわち、患者における疾患または病状の進展を遅延または停止させること）；あるいは
（ｄ）患者における疾患または病状の症状を軽減すること。
【００５９】
句「β２アドレナリン作動性レセプター活性に関連する疾患または状態」としては、現在β２アドレナリン作動性レセプター活性に関連することが認められるか、または将来的にβ２アドレナリン作動性レセプター活性に関連することが見出されるすべての疾患状態（ｄｉｓｅａｓｅ  ｓｔａｔｅ）および／または状態（ｃｏｎｄｉｔｉｏｎ）が挙げられる。そのような疾患状態としては、喘息および慢性閉塞性肺疾患（慢性気管支炎および気腫を含む）のような肺疾患、ならびに神経障害および心臓障害が挙げられるが、これらに限定されない。β２アドレナリン作動性レセプター活性はまた、早期陣痛と関連すること（米国特許第５，８７２，１２６号を参照のこと）、および炎症のいくつかの型と関連すること（国際特許出願公開第ＷＯ９９／３０７０３号および米国特許第５，２９０，８１５号を参照のこと）が公知である。
【００６０】
用語「薬学的に受容可能な塩」は、患者（例えば、哺乳動物）への投与のために利用可能な塩基または酸から調製される塩を意味する。そのような塩は、薬学的に受容可能な無機塩基または有機塩基および薬学的に受容可能な無機酸または有機酸由来であり得る。
【００６１】
薬学的に受容可能な酸に由来する塩としては、酢酸、ベンゼンスルホン酸、安息香酸、カンファースルホン酸、クエン酸、エタンスルホン酸、フマル酸、グルコン酸、グルタミン酸、臭化水素酸、塩酸、乳酸、マレイン酸、リンゴ酸、マンデル酸、メタンスルホン酸、粘液酸、硝酸、パントテン酸、リン酸、コハク酸、硫酸、酒石酸、ｐ−トルエンスルホン酸、キシナホイン酸（ｘｉｎａｆｏｉｃ  ａｃｉｄ）（１−ヒドロキシ−２−ナフトエ酸）などが挙げられるが、これらに限定されない。特に好ましいのは、フマル酸、臭化水素酸、塩酸、酢酸、硫酸、メタンスルホン酸、キシナホイン酸および酒石酸に由来する塩である。
【００６２】
薬学的に受容可能な無機塩基に由来する塩としては、アルミニウム塩、アンモニウム塩、カルシウム塩、銅塩、第二鉄塩、第一鉄塩、リチウム塩、マグネシウム塩、マンガン塩、亜マンガン塩、カリウム塩、ナトリウム塩、亜鉛塩などが挙げられる。特に好ましいのは、アンモニウム塩、カルシウム塩、マグネシウム塩、カリウム塩およびナトリウム塩である。薬学的に受容可能な有機塩基に由来する塩としては、第一級アミン、第二級アミンおよび第三級アミン（置換アミン、環状アミン、天然に存在するアミンなどを含む）（例えば、アルギニン、ベタイン、カフェイン、コリン、Ｎ，Ｎ’−ジベンジルエチレンジアミン、ジエチルアミン、２−ジエチルアミノエタノール、２−ジメチルアミノエタノール、エタノールアミン、エチレンジアミン、Ｎ−エチルモルホリン、Ｎ−エチルピペリジン、グルカミン、グルコサミン、ヒスチジン、ヒドラバミン（ｈｙｄｒａｂａｍｉｎｅ）、イソプロピルアミン、リジン、メチルグルカミン、モルホリン、ピペラジン（ｐｉｐｅｒａｚｉｎｅ）、ピペラジン（ｐｉｐｅｒａｄｉｎｅ）、ポリアミン樹脂、プロカイン、プリン、テオブロミン、トリエチルアミン、トリメチルアミン、トリプロピルアミン、トロメタミンなど）の塩が挙げられる。
【００６３】
用語「溶媒和物」は、溶質（すなわち、本発明の化合物またはその薬学的に受容可能な塩）のうちの１以上の分子と、溶媒のうちの１以上の分子とによって形成される複合体または凝集体を意味する。そのような溶媒和物は、代表的には、実質的に溶質と溶媒との固定したモル比を有する結晶性固体である。代表的な溶媒としては、例えば、水、メタノール、エタノール、酢酸などが挙げられる。溶媒が水である場合、形成される溶媒和物は水和物である。
【００６４】
用語「あるいはその薬学的に受容可能な塩または溶媒和物または立体異性体」は、塩、溶媒和物または立体異性体についてのすべての順列（例えば、式（Ｉ）の化合物の立体異性体の薬学的に受容可能な塩の溶媒和物）を包含することが意図されることが理解される。
【００６５】
用語「脱離基」は、置換反応（例えば、求核置換反応）において別の官能基または原子によって置換され得る官能基または原子を意味する。例えば、代表的な脱離基としては、クロロ基、ブロモ基およびヨード基；スルホン酸エステル基（例えば、メシレート、トシレート、ブロシレート、ノシレートなど）；ならびにアシルオキシ基（例えば、アセトキシ、トリフルオロアセトキシなど）が挙げられる。
【００６６】
用語「アミノ保護基」は、アミノ窒素における望ましくない反応を防ぐために適切な保護基を意味する。代表的なアミノ保護基としては、ホルミル；アシル基（例えば、アセチルのようなアルカノイル基）；アルコキシカルボニル基（例えば、ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル（Ｂｏｃ））；アリールメトキシカルボニル基（例えば、ベンジルオキシカルボニル（Ｃｂｚ）および９−フルオレニルメトキシカルボニル（Ｆｍｏｃ））；アリールメチル基（例えば、ベンジル（Ｂｎ）、トリチル（Ｔｒ）および１，１−ジ−（４’−メトキシフェニル）メチル）；シリル基（例えば、トリメチルシリル（ＴＭＳ）およびｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリル（ＴＢＳ））などが挙げられるが、これらに限定されない。
【００６７】
用語「ヒドロキシ保護基」は、ヒドロキシ基における望ましくない反応を防ぐために適切な保護基を意味する。代表的なヒドロキシ保護基としては、アルキル基（例えば、メチル、エチルおよびｔｅｒｔ−ブチル）；アシル基（例えば、アセチルのようなアルカノイル基）；アリールメチル基（例えば、ベンジル（Ｂｎ）、ｐ−メトキシベンジル（ＰＭＢ）、９−フルオレニルメチル（Ｆｍ）およびジフェニルメチル（ベンズヒドリル、ＤＰＭ））；シリル基（例えば、トリメチルシリル（ＴＭＳ）およびｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリル’（ＴＢＳ））などが挙げられるが、これらに限定されない。
【００６８】
（一般的な合成手順）
本発明の化合物は、以下の一般的な方法および手順を用いて、容易に入手可能な出発物質から調製され得る。本発明の特定の局面が、以下の式で示されるが、当業者は、本発明のすべての局面が、本明細書中に記載される方法あるいは当該分野で公知の他の方法、試薬および出発物質の説明に調製によりすべて調製され得ることを理解する。代表的または好ましいプロセス条件（すなわち、温度、モル比、溶媒、圧力など）が与えられる場合、他に示されない限り、他のプロセス条件もまた使用され得ることが理解される。最適な反応条件は、使用される特定の反応物または溶媒で変化し得るが、そのような条件は、慣用的な最適化手段によって当業者により決定され得る。
【００６９】
さらに、当業者に明らかなように、従来の保護基は、特定の官能基に望ましくない反応
が起こるのを防ぐために必要であり得る。特定の官能基に対して適切な保護基の選択、ならびに保護および脱保護に適切な条件は、当該分野で周知である。例えば、多くの保護基、ならびにそれらの導入および除去が、Ｔ．Ｗ．ＧｒｅｅｎｅおよびＧ．Ｍ．Ｗｕｔｓ、Ｐｒｏｔｅｃｔｉｎｇ  Ｇｒｏｕｐｓ  ｉｎ  Ｏｒｇａｎｉｃ  Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ、第３版、Ｗｉｌｅｙ、Ｎｅｗ  Ｙｏｒｋ（１９９９）、および本明細書中に引用される参考文献に記載されている。
【００７０】
合成の１つの方法において、式（Ｉ）および（ＩＩ）の化合物は、スキームＡに示されるように合成される。（以下のスキームに示される置換基および変数は、他に示されない限り、先に提供される定義を有する。）
【００７１】
【化１１】
2007505931.tif 000006
ここで、Ｐ１は、ヒドロキシ保護基を表し、Ｐ２は、ヒドロキシ保護基を表し、そしてＬは、ブロモのような脱離基を表す。
【００７２】
スキームＡに示されるように、式１の化合物は、まず、（Ｒ）−Ｎ２−［４−（２−アミノエチル）フェニル］−１−フェニルエタン−１，２−ジアミン（２）と反応されて、式３の中間体が得られる。代表的には、この反応は、極性の非プロトン性溶媒中で、塩基の存在下、加熱しながら行われる。保護基Ｐ１は、代表的には、シリル保護基であり、これは、代表的には、フッ化物試薬または酸試薬を用いて式３の中間体から除去されて、式４の中間体が得られる。保護基Ｐ２は、代表的には、ベンジル保護基であり、これは、代表的には、パラジウム触媒または炭素触媒を用いる水素化によって式４の中間体から除去されて、生成物が得られる。
【００７３】
本出願において記載される反応で使用される式１の化合物は、当該分野で公知の手順、ならびに例えば、米国特許第６，６５３，３２３号Ｂ２明細書および同第６，６７０，３７６号Ｂ１明細書（これらは、本明細書中に参考として援用される）、ならびに本明細書中の参考文献に記載される手順によって容易に調製される。中間体２は、容易に入手可能な出発物質から、例えば、スキームＢに示される手順によって調製される。
【００７４】
【化１２】
2007505931.tif 000007
スキームＢにおいて、Ｐ３は、アミノ保護基を表し、そしてＰ４は、アミノ保護基を表す。
【００７５】
スキームＢに示されるように、保護基Ｐ３は、２−（４−ニトロフェニル）エチルアミン５のアミノ窒素に付加されて、式６の中間体が得られる。保護基Ｐ３は、代表的には、ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル（Ｂｏｃ）基であり、これは、代表的には、塩基条件下でのジ−ｔｅｒｔ−ブチルジカーボネート（Ｂｏｃ２Ｏ）の反応によって付加される。中間体６は還元されて、式７の中間体が得られる。中間体６の還元は、代表的には、炭素触媒のパラジウムを用いる水素化によって行われる。中間体７のアミンは、保護されたフェニルグリシン８と結合されて、式９の中間体が得られる。中間体７と８との結合は、カップリング剤（例えば、１−［３−（ジメチルアミノ）プロピル］−３−エチルカルボジイミド（ＥＤＣ））を用いて行われ得、触媒（例えば、１−ヒドロキシベンゾトリアゾール水和物（ＨＯＢＴ）または１−ヒドロキシ−７−アザベンゾトリアゾール水和物（ＨＯＡＴ））を使用し得る。中間体９は、代表的には、酸性条件下で脱保護されて、式１０の中間体が得られ、これは、代表的には、ボラン還元を用いて還元されて、（Ｒ）−Ｎ２−［４−（２−アミノエチル）フェニル］−１−フェニルエタン−１，２−ジアミン（２）が形成される。
【００７６】
中間体２の調製はさらに、以下の実施例１のａ〜ｅに記載される。
【００７７】
あるいは、本発明の化合物は、スキームＣに示されるように調製され得る。
【００７８】
【化１３】
2007505931.tif 000008
スキームＣに従って、中間体１は、（Ｓ）−２−［４−（２−アミノエチル）−フェニルアミノ］−１−フェニルエタノール（１１）と結合されて、式１２の中間体が得られる。代表的には、この反応は、極性の非プロトン性溶媒中で、塩基の存在下、加熱しながら行われる。中間体１２は、試薬（例えば、アルコールを脱離基に変換し、求核性のアジドアニオンを提供するジフェニルホスホリルアジド）と反応されて、式１３の中間体が得られる。あるいは、二試薬系が使用されて、中間体１２がアジド１３に変換される。次いで、保護基Ｐ１（代表的には、シリル保護基）が、代表的にはフッ化物試薬または酸試薬の使用によって除去されて、式１４の中間体が得られる。この生成物は、Ｐ２が水素化によって除去される基（例えば、ベンジル）である場合、アジドの水素化と式１４の中間体の保護基Ｐ２の脱保護とを同時に行うことによって得られ得る。保護基Ｐ２が水素化に対して不安定でない場合、さらなる脱保護工程が必要とされる。
【００７９】
中間体１１は、以下の実施例３のａに記載されるように、２−（４−アミノフェニル）エチルアミンとキラルのスチレンオキシドとの反応によって容易に調製される。
【００８０】
本発明の代表的な化合物またはそれらに対する中間体を調製するための特定の反応条件および他の手順に関するさらなる詳細は、以下の実施例に記載される。
【００８１】
従って、方法局面において、本発明は、式（Ｉ）の化合物あるいはその塩または立体異性体または保護された誘導体を調製するためのプロセスを提供し、そのプロセスは、以下：
式（ＩＩＩ）の化合物：
【００８２】
【化１４】
2007505931.tif 000009
と式（ＩＶ）の化合物：
【００８３】
【化１５】
2007505931.tif 000010
とを反応させて、式（Ｖ）の化合物：
【００８４】
【化１６】
2007505931.tif 000011
を得る工程であって、
ここで、Ｐ１は、ヒドロキシ保護基であり、Ｌは、脱離基であり、Ｒ１ａ、Ｒ２ａ、Ｒ３ａおよびＲ４ａの各々は、独立して、式（Ｉ）におけるＲ１、Ｒ２、Ｒ３およびＲ４と同一であるように規定されるか、または−ＯＰ２であり、
ここで、Ｐ２は、ヒドロキシ保護基であり、
ここで、Ｒ５、Ｒ６、Ｒ７、Ｒ８、Ｒ９、Ｒ１０およびＲ１１は、式（Ｉ）でのように規定される、工程；
保護基Ｐ１を除去して、式（ＶＩ）の化合物：
【００８５】
【化１７】
2007505931.tif 000012
を得る工程；ならびに
Ｒ１ａ、Ｒ２ａ、Ｒ３ａまたはＲ４ａのうちのいずれかが−ＯＰ２である場合、保護基Ｐ２を除去して、式（Ｉ）の化合物、あるいはその塩または立体異性体を得る工程
を包含する。
【００８６】
（薬学的組成物）
本発明はまた、本発明の化合物を含む薬学的組成物を提供する。従って、好ましくは薬学的に受容可能な塩の形態である上記化合物は、任意の適切な投与の形態（例えば、経口または非経口投与、あるいは吸入による投与）に処方され得る。
【００８７】
例示の目的で、上記化合物は従来の薬学的キャリアおよび賦形剤と混合され得、そして粉末、錠剤、カプセル、エリキシル、懸濁液、シロップ、ウエハースなどの形態で使用され得る。このような薬学的組成物は、重量で約０．０５〜約９０％、より一般的には、約０．１％〜約３０％の活性化合物を含む。上記薬学的組成物は一般的なキャリアおよび賦形剤（例えば、コーンスターチまたはゼラチン、乳糖、硫酸マグネシウム、ステアリン酸マグネシウム、ショ糖、微結晶性セルロース、カオリン、マンニトール、リン酸二カルシウム、塩化ナトリウム、およびアルギン酸）を含み得る。本発明の処方物において一般に用いられる崩壊薬としては、クロスカルメロース、微結晶性セルロース、コーンスターチ、デンプングリコール酸ナトリウムおよびアルギン酸が挙げられる。
【００８８】
液体組成物は一般に、適切な液体キャリア（例えば、エタノール、グリセリン、ソルビトール、非水性溶媒（例えばポリエチレングリコール）、油または水）中の上記化合物または薬学的に受容可能な塩の懸濁液または溶液からなり、必要に応じて、懸濁剤、可溶化剤（例えばシクロデキストリン）、保存剤、界面活性剤、湿潤剤、香料添加剤または着色剤を有する。あるいは、液体処方物は、再構成可能な粉末から調製され得る。
【００８９】
例えば、活性化合物、懸濁剤、ショ糖および甘味料を含む粉末は、水とともに再構成され得て、懸濁液を形成し；活性成分、ショ糖および甘味料を含む粉末からシロップが調製され得る。
【００９０】
錠剤の形態の組成物が、固体の組成物を調製するために慣用的に用いられる、任意の適切な薬学的キャリアをもちいて調製され得る。このようなキャリアの例としては、ステアリン酸マグネシウム、デンプン、乳糖、ショ糖、微結晶性セルロースおよび結合剤（例えばポリビニルピロリドン）が挙げられる。上記錠剤はまた、カラーフィルムコーティング、または上記キャリアの部分として含まれる色素と共に提供され得る。そのうえ活性化合物は、親水性マトリックスまたは疎水性マトリックスを含む錠剤として、徐放投薬量形態で処方され得る。
【００９１】
カプセルの形態の組成物は、慣用的なカプセル化手順（例えば、活性化合物および賦形剤を、ハードゼラチンカプセルに取り込むことで）を用いて調製され得る。あるいは、活性化合物および高分子量ポリエチレングリコールの半固体マトリックスが調製され得、そしてハードゼラチンカプセルに充填され得；あるいは、ポリエチレングリコール中の活性化合物の溶液、または食用油（例えば、流動パラフィンまたは分別されたやし油）中の懸濁液が調製され得、そしてソフトゼラチンカプセルに充填され得る。
【００９２】
含まれ得る錠剤結合剤としては、アラビアゴム、メチルセルロース、カルボキシメチルセルロースナトリウム、ポリビニルピロリドン（Ｐｏｖｉｄｏｎｅ）、ヒドロキシプロピルメチルセルロース、ショ糖、デンプンおよびエチルセルロースが挙げられ得る。用いられ得る潤滑剤としては、ステアリン酸マグネシウムまたは他のステアリン酸金属塩、ステアリン酸、液体シリコン、滑石、ワックス、油およびコロイド状シリカが挙げられる。
【００９３】
香料添加剤（例えば、ペパーミント、ウィンターグリーン油、桜香味料など）もまた用いられ得る。さらに、上記投薬形態を見かけ上より魅力的にし、または生産物の識別を助けるために、着色剤を加えることが所望され得る。
【００９４】
非経口的に与えられた場合に活性である、本発明の化合物およびその薬学的に受容可能な塩は、筋肉投与、髄腔内投与、または静脈内投与について処方され得る。
【００９５】
筋肉投与または髄腔内投与のための代表的な組成物は、油（例えば、ラッカセイ油またはゴマ油）中の活性成分の懸濁液または溶液からなる。静脈内投与または髄腔内投与のための代表的な組成物は、例えば、活性成分およびデキストロースまたは塩化ナトリウム、あるいはデキストロースおよび塩化ナトリウムの混合物を含む、滅菌した等張性水溶液からなる。他の例は、乳酸化リンガー液、デキストロースを加えた乳酸化リンガー液、Ｎｏｒｍｏｓｏｌ−Ｍおよびデキストロース、Ｉｓｏｌｙｔｅ  Ｅ、アシル化リンガー液などである。必要に応じて、共溶媒（例えば、ポリエチレングリコール）；キレート剤（例えば、エチレンジアミン四酢酸）；可溶化剤（例えば、シクロデキストリン）；および抗酸化剤（例えば、メタ重亜硫酸ナトリウム）が、上記処方物に含まれ得る。あるいは、上記溶液は凍結乾燥され得、次いで投与の直前に適切な溶媒で再構成され得る。
【００９６】
局所的な投与において活性である、本発明の化合物およびその薬学的に受容可能な塩は、経皮的組成物または経皮的送達デバイス（「パッチ」）として処方され得る。このような組成物としては、例えば、裏当て（ｂａｃｋｉｎｇ）、活性化合物リザーバ、調節膜（ｃｏｎｔｒｏｌ  ｍｅｍｂｒａｎｅ）、裏地およびコンタクト型接着剤が挙げられる。このような経皮パッチは、調節された量の本発明の化合物の連続的な注入または非連続的な注入を提供するために用いられ得る。薬学的物質の送達のための経皮パッチの作製および使用は、当該分野で周知である。例えば、米国特許第５，０２３，２５２号明細書を参照のこと。このようなパッチは、薬学的物質の連続的送達、拍動的送達または応需型送達について作製され得る。
【００９７】
本発明の化合物の投与のための１つの好ましい様式は吸入である。吸入は、薬剤を直接気道に送達するための効果的な手段である。３種類の一般的な型の薬学的吸入デバイスがある：噴霧吸入器、乾燥粉末吸入器（ＤＰＩ）、定量吸入器（ＭＤＩ）。通常の噴霧器デバイスは、患者の気道中に運び込まれる霧として治療薬を噴霧させる高速空気の流れを提供する。上記治療薬は液体の形態（例えば、呼吸に適した大きさの微粉にされた粒子の溶液または懸濁液）にて処方され、ここで微粉化は代表的には、約１０μｍ未満の直径の粒子を約９０％以上有するとして定義される。
【００９８】
通常の噴霧器デバイスとしての使用のための代表的な処方物は、約０．０５μｇ／ｍＬ〜約１ｍｇ／ｍＬの活性薬剤濃度の上記活性薬剤の薬学的塩の等張性水溶液である。適切な噴霧器デバイスは、例えばＰＡＲＩ  ＧｍｂＨ（Ｓｔａｒｎｂｅｒｇ、Ｇｅｒｍａｎｙ）によって、商業的に提供される。他の噴霧器デバイスが、例えば米国特許第６，１２３，０６８号明細書に開示される。
【００９９】
ＤＰＩは代表的には、吸気の間に患者の気流中に分散され得る、自由に流れる粉末の形態にて治療薬を投与する。粉末を分散させるために外部エネルギー源を用いる、代替のＤＰＩデバイスもまた開発されている。自由に流れる粉末を得るためには、上記治療薬は適切な賦形剤（例えば乳糖またはデンプン）と共に処方され得る。例えば、乾燥した乳糖の粒子を、適切な形態（代表的には薬学的に受容可能な塩）の本発明の化合物（すなわち活性薬剤）の微粉粒子と併せ、そして乾式混合することで、乾燥粉末処方物が作られ得る。あるいは、上記薬剤は賦形剤無しで処方され得る。上記処方物は乾燥粉末ディスペンサー、あるいは、乾燥粉末送達デバイスとしての使用のための吸入カートリッジまたはカプセルに充填される。
【０１００】
商業的に提供されるＤＰＩ送達デバイスの例としては、Ｄｉｓｋｈａｌｅｒ（ＧｌａｘｏＳｍｉｔｈＫｌｉｎｅ、Ｒｅｓｅａｒｃｈ  Ｔｒｉａｎｇｌｅ  Ｐａｒｋ、ＮＣ）（例えば、米国特許第５，０３５，２３７号明細書を参照のこと）；Ｄｉｓｋｕｓ（ＧｌａｘｏＳｍｉｔｈＫｌｉｎｅ）（例えば、米国特許第６，３７８，５１９号明細書を参照のこと）；Ｔｕｒｂｕｈａｌｅｒ（ＡｓｔｒａＺｅｎｅｃａ、Ｗｉｌｍｉｎｇｔｏｎ、ＤＥ）（例えば、米国特許第４，５２４，７６９号明細書を参照のこと）；およびＲｏｔａｈａｌｅｒ（ＧｌａｘｏＳｍｉｔｈＫｌｉｎｅ）（例えば、米国特許第４，３５３，３６５号明細書を参照のこと）が挙げられる。適切なＤＰＩデバイスのさらなる例は、米国特許第５，４１５，１６２号明細書、同第５，２３９，９９３号明細書、および同第５，７１５，８１０号明細書、ならびにそれらの参考文献に記述される。
【０１０１】
ＭＤＩは代表的には、圧縮噴霧剤ガスを用いて定量の治療薬を放出する。ＭＤＩ投与のための処方物は、液化噴霧剤中の活性成分の溶液または懸濁液を含む。従来はクロロフルオロカーボン（例えばＣＣｌ３Ｆ）が噴霧剤として用いられたが、このような因子のオゾン層への有害な影響に関する懸念により、ヒドロフルオロアルカン（ｈｙｄｒｏｆｌｕｏｒｏａｌｋｌａｎｅ）（ＨＦＡ）（例えば、１，１，１，２−テトラフルオロエタン（ＨＦＡ  １３４ａ）および１，１，１，２，３，３，３，−ヘプタフルオロ−ｎ−プロパン（ＨＦＡ  ２２７））が開発された。ＭＤＩ投与のためのＨＦＡ処方物のさらなる成分としては、共溶媒（例えばエタノールまたはペンタン）、および界面活性剤（例えば、ソルビタントリオレエート、オレイン酸、レシチン、およびグリセリン）が挙げられる。（例えば、米国特許第５，２２５，１８３号明細書、欧州特許出願公開第０７１７９８７  Ａ２号明細書、および国際公開９２／２２２８６号パンフレットを参照のこと）。
【０１０２】
従って、ＭＤＩ投与のための適切な処方物は、約０．００１重量％〜約２重量％の本結晶性の形態、約０重量％〜約２０重量％のエタノール、および約０重量％〜約５重量％の界面活性剤を含み得、残りはＨＦＡ噴霧剤である。１つのアプローチにおいて、上記処方物を調製するために、凍結された、または加圧されたヒドロフルオロアルカンが、本結晶性の形態、エタノール（存在する場合）および界面活性剤（存在する場合）を含有するバイアルに加えられる。懸濁液を調製するために、上記薬学的塩が微粉化された粒子として提供される。上記処方物がエアロゾル缶に充填され、ＭＤＩデバイスの一部分を形成する。ＨＦＡ噴霧剤とともに使用するために特異的に開発されたＭＤＩデバイスの例は、米国特許第６，００６，７４５号明細書および同第６，１４３，２２７号明細書に提供される。
【０１０３】
代替の調製において、懸濁液処方物は、活性化合物の薬学的塩の微粉化粒子上に界面活性剤のコーティングを噴霧乾燥することで調製される。（例えば、国際公開第９９／５３９０１号パンフレットおよび同第００／６１１０８号パンフレットを参照のこと。）呼吸に適した粒子、ならびに吸入投薬に適切な処方物およびデバイスを調製する方法のさらなる例については、米国特許第６，２６８，５３３号明細書、同第５，９８３，９５６号明細書、同第５，８７４，０６３号明細書、および同第６，２２１，３９８号明細書、ならびに国際公開第９９／５５３１９号パンフレットおよび同第００／３０６１４号パンフレットを参照のこと。
【０１０４】
特定の投与方法に適切な、本発明の化合物の任意の形態（すなわち、遊離の塩基、薬学的塩、または溶媒和化合物）が、上に議論した薬学的組成物において使用されうる事が理解される。
【０１０５】
上記活性化合物は、β２アドレナリン受容体アゴニストとして有用であり、それゆえ哺乳動物において、β２アドレナリン受容体によって媒介される医学的疾患または医学的状態、あるいはβ２アドレナリン受容体活性に関連する医学的疾患または医学的状態（すなわちβ２アドレナリン受容体アゴニストの処置によって寛解される医学的状態）の処置に有用である。このような医学的条件としては、肺疾患（例えば、喘息または慢性の閉塞性肺疾患）、早期分娩、神経性障害、心臓障害、または炎症が挙げられるが、これらに限らない。
【０１０６】
上記活性化合物は、広い用量範囲にわたって効果的であり、そして一般に治療有効量が投与される。しかし、実際に投与される上記化合物の量は、関連する状況を考慮して医師によって決定され、上記状況としては、処置される状態、選択された投与経路、投与される実際の化合物およびその相対的活性、年齢、体重、ならびに個々の患者の反応、患者の症状の重篤度などが挙げられることが理解される。
【０１０７】
吸入投与のための治療薬の適切な用量は、一般的には約０．０５μｇ／日〜約１０００μｇ／日の範囲であり、好ましくは約０．１μｇ／日〜約５００μｇ／日の範囲である。特定の送達デバイスに特有の、肺へ送達される活性薬剤の画分が、吸入投与のための適切な用量を決定する再に考慮されることが理解される。
【０１０８】
化合物は定期的な用量で投与され得る：毎週、１週間あたり複数回、毎日、または１日あたり複数用量。処置レジメンは長期間（例えば、数週間または数ヶ月）にわたる投与を必要とし得、あるいは処置レジメンは慢性的な投与を必要とし得る。経口投与のために適切な用量は、一般に約０．０５μｇ／日〜約１００ｍｇ／日の範囲であり、好ましくは０．５μｇ／日〜１０００μｇ／日の範囲である。
【０１０９】
他の性質もあるが、本発明の化合物は、β２アドレナリン受容体の潜在的および選択的アゴニストであることが分かっている。特に、本発明の化合物は、β１アドレナリン受容体およびβ３アドレナリン受容体と比較して、β２アドレナリン受容体について優れた選択性を示す。さらに、本発明の化合物は、驚くべきかつ予想外の活動期間を持つことが分かっている。下記の生物学的アッセイに記述するように、本発明の化合物は、気管支保護の動物モデルにおいて２４時間を越える活動期間を示す。
【０１１０】
従って本発明は、治療有効量の本発明の化合物または本発明の化合物を含む薬学的組成物を、哺乳動物に投与する工程を含む、β２アドレナリン受容体活性に関連する哺乳動物の疾患または状態を処置する方法を提供する。
【０１１１】
本活性薬剤はまた、１つ以上の治療因子とともに共投与され得る。例えば本薬剤は、抗炎症薬剤（例えば、コルチコステロイドおよび非ステロイド性抗炎症薬剤（ＮＳＡＩＤ））、抗コリン作用（ａｎｔｉｃｈｌｏｌｉｎｅｒｇｉｃ）薬剤（特にムスカリン性受容体アンタゴニスト）、他のβ２アドレナリン受容体アゴニスト、抗感染薬剤（例えば抗生物質または抗ウイルス剤）または抗ヒスタミン剤から選択される１つ以上の治療薬と組み合わせて投与され得る。従って本発明は、さらなる局面において、本発明の化合物と１つ以上の治療薬（例えば、抗炎症薬剤、抗コリン作用薬剤、別のβ２アドレナリン受容体アゴニスト、抗感染薬剤または抗ヒスタミン剤）とを共に含む併用を提供する。
【０１１２】
他の治療因子は、薬学的に受容可能な塩または溶媒和物の形態で用いられ得る。必要に応じて、他の治療因子が光学的に純粋な立体異性体として用いられ得る。
【０１１３】
適切な抗炎症薬剤としては、コルチコステロイドおよびＮＳＡＩＤが挙げられる。本発明の化合物と併用して用いられ得る適切なコルチコステロイドは、これらの経口コルチコステロイドおよび吸入コルチコステロイド、ならびに抗炎症活性を有する、そのプロドラッグである。例としては、メチルプレドニゾロン、プレドニゾロン、デキサメタゾン、プロピオン酸フルチカゾン、６α，９α−ジフルオロ−１７α−［（２−フラニルカルボニル）オキシ］−１１β−ヒドロキシ−１６α−メチル−３−オキソ−アンドロスタ−１，４−ジエン−１７β−カルボチオ酸（ｃａｒｂｏｔｈｉｏｉｃ  ａｃｉｄ）Ｓ−フルオロメチルエステル、６α，９α−ジフルオロ−１１β−ヒドロキシ−１６α−メチル−３−オキソ−１７α−プロピオニルオキシ−アンドロスタ−１，４−ジエン−１７β−カルボチオ酸Ｓ−（２−オキソ−テトラヒドロ−フラン−３Ｓ−イル）エステル、ベクロメタゾンエステル（例えば、１７−プロピオン酸エステルまたは１７，２１−ジプロピオン酸エステル）、ブデソニド、フルニソリド、モメタゾンエステル（例えばフロエート（ｆｕｒｏａｔｅ）エステル）、トリアムシノロンアセトニド、ロフレポニド（ｒｏｆｌｅｐｏｎｉｄｅ）、シクレソニド（ｃｉｃｌｅｓｏｎｉｄｅ）、ブチキソコートプロピオネート（ｂｕｔｉｘｏｃｏｒｔ  ｐｒｏｐｉｏｎａｔｅ）、ＲＰＲ−１０６５４１、およびＳＴ−１２６が挙げられる。好ましいコルチコステロイドとしては、プロピオン酸フルチカゾン、６α，９α−ジフルオロ−１１β−ヒドロキシ−１６α−メチル−１７α−［（４−メチル−１，３−チアゾール−５−カルボニル）オキシ］−３−オキソ−アンドロスタ−１，４−ジエン−１７β−カルボチオ酸Ｓ−フルオロメチルエステルおよび６α，９α−ジフルオロ−１７α−［（２−フラニルカルボニル）オキシ］−１１β−ヒドロキシ−１６α−メチル−３−オキソ−アンドロスタ−１，４−ジエン−１７β−カルボチオ酸Ｓ−フルオロメチルエステルが挙げられ、より好ましくは、６α，９α−ジフルオロ−１７α−［（２−フラニルカルボニル）オキシ］−１１β−ヒドロキシ−１６α−メチル−３−オキソ−アンドロスタ−１，４−ジエン−１７β−カルボチオ酸Ｓ−フルオロメチルエステルが挙げられる。
【０１１４】
適切なＮＳＡＩＤとしては、クロモグリク酸ナトリウム；ネドクロミルナトリウム；ホスホジエステラーゼ（ＰＤＥ）インヒビター（例えば、テオフィリン、ＰＤＥ４インヒビターまたは、混合したＰＤＥ３／ＰＤＥ４インヒビター）；ロイコトリエンアンタゴニスト（例えばモンテルーカスト（ｍｏｎｔｅｌｅｕｋａｓｔ））；ロイコトリエン合成のインヒビター；ｉＮＯＳインヒビター；プロテアーゼインヒビター（例えばトリプターゼインヒビターおよびエラスターゼインヒビター）；β−２インテグリンアンタゴニストおよび、アデノシンレセプターアゴニストまたはアデノシンレセプターアンタゴニスト（例えばアデノシン２ａアゴニスト）；サイトカインアンタゴニスト（例えば、ケモカインアンタゴニスト（例えば、インターロイキン抗体（αＩＬ抗体）、特にαＩＬ−４治療、αＩＬ−１３治療、またはそれらの併用））；またはサイトカイン合成のインヒビターが挙げられる。適切な他のβ２−アドレナリン受容体アゴニストとしては、サルメテロール（例えばジナフォエート（ｘｉｎａｆｏａｔｅ）として）、サルブタモール（例えば硫酸塩または遊離の塩基として）、フォルモテロール（例えばフマレートとして）、フェノテロールまたはテルブタリン、およびそれらの塩が挙げられる。
【０１１５】
また目的となるのは、本活性薬剤の、ホスホジエステラーゼ４（ＰＤＥ４）インヒビター、または混合ＰＤＥ３／ＰＤＥ４インヒビターとの併用における使用である。代表的なホスホジエステラーゼ−４（ＰＤＥ４）インヒビター、または混合ＰＤＥ３／ＰＤＥ４インヒビターとしては、シス４−シアノ−４−（３−シクロペンチルオキシ−４−メトキシフェニル）シクロヘキサン−１−カルボン酸、２−カルボメトキシ−４−シアノ−４−（３−シクロプロピルメトキシ−４−ジフルオロメトキシフェニル）シクロヘキサン−１−オン；シス−［４−シアノ−４−（３−シクロプロピルメトキシ−４−ジフルオロメトキシフェニル）シクロヘキサン−１−オール］；シス−４−シアノ−４−［３−（シクロペンチルオキシ）−４−メトキシフェニル］シクロヘキサン−１−カルボン酸など、またはそれらの薬学的に受容可能な塩が挙げられる。他の代表的なＰＤＥ４インヒビターまたは混合ＰＤＥ４／ＰＤＥ３インヒビターとしては、ＡＷＤ−１２−２８１（ｅｌｂｉｏｎ）；ＮＣＳ−６１３（ＩＮＳＥＲＭ）；Ｄ−４４１８（ＣｈｉｒｏｓｃｉｅｎｃｅおよびＳｃｈｅｒｉｎｇ−Ｐｌｏｕｇｈ）；ＣＩ−１０１８またはＰＤ−１６８７８７（Ｐｆｉｚｅｒ）；国際公開第９９／１６７６６号パンフレットに開示されるベンゾジオキソール（ｂｅｎｚｏｄｉｏｘｏｌｅ）化合物（Ｋｙｏｗａ  Ｈａｋｋｏ）；Ｋ−３４（Ｋｙｏｗａ  Ｈａｋｋｏ）；Ｖ−１１２９４Ａ（Ｎａｐｐ）；ロフルミラスト（ｒｏｆｌｕｍｉｌａｓｔ）（Ｂｙｋ−Ｇｕｌｄｅｎ）；国際公開第９９／４７５０５号パンフレットに開示されるプタラジノン（ｐｔｈａｌａｚｉｎｏｎｅ）化合物（Ｂｙｋ−Ｇｕｌｄｅｎ）；プーマフェントリン（Ｐｕｍａｆｅｎｔｒｉｎｅ）（Ｂｙｋ−Ｇｕｌｄｅｎ、現在はＡｌｔａｎａ）；アロフィリン（ａｒｏｆｙｌｌｉｎｅ）（Ａｌｍｉｒａｌｌ−Ｐｒｏｄｅｓｆａｒｍａ）；ＶＭ５５４／ＵＭ５６５（Ｖｅｒｎａｌｉｓ）；Ｔ−４４０（Ｔａｎａｂｅ  Ｓｅｉｙａｋｕ）；およびＴ２５８５（Ｔａｎａｂｅ  Ｓｅｉｙａｋｕ）が挙げられる。
【０１１６】
適切な抗コリン作動薬剤は、ムスカリン性レセプターにおいてアンタゴニストとして作用するこれらの化合物であり、特に、Ｍ１レセプター、Ｍ２レセプター、またはＭ３レセプター、あるいはそれらの組み合わせのアンタゴニストであるこれらの化合物である。例示的な化合物としては、アトロピン、スコポラミン、ホマトロピン、ヒヨスチアミンのように例示されるような、ベラドンナ植物のアルカロイドが挙げられ；これらの化合物は通常塩として投与され、三級アミンである。これらの薬剤、特に塩の形態は、多くの商業的原料から容易に利用可能であり、または文献データの経由から作製または調製され得、すなわち：
アトロピン−ＣＡＳ−５１−５５−８またはＣＡＳ−５１−４８−１（無水の形態）、硫酸アトロピン−ＣＡＳ−５９０８−９９−６；酸化アトロピン−ＣＡＳ−４４３８−２２−６、またはそのＨＣｌ塩−ＣＡＳ−４５７４−６０−１および、メチルアトロピン硝酸塩−ＣＡＳ−５２−８８−０。
【０１１７】
ホマトロピン−ＣＡＳ−８７−００−３、臭化水素塩−ＣＡＳ−５１−５６−９、臭化メチル塩−ＣＡＳ−８０−４９−９。
【０１１８】
ヒヨスチアミン（ｄ，ｌ）−ＣＡＳ−１０１−３１−５、臭化水素塩−ＣＡＳ−３０６−０３−６、および硫酸塩−ＣＡＳ−６８３５−１６−１。
【０１１９】
スコポラミン−ＣＡＳ−５１−３４−３、臭化水素塩−ＣＡＳ−６５３３−６８−２、臭化メチル塩−ＣＡＳ−１５５−４１−９。
【０１２０】
好ましい抗コリン作動薬剤としては、イプラトロピウム（例えば臭化物として）（Ａｔｒｏｖｅｎｔの名前で販売される）、オキシトロピウム（例えば臭化物として）およびチオトロピウム（例えば臭化物として）（ＣＡＳ−１３９４０４−４８−１）が挙げられる。また目的となるのは：メタンテリン（ＣＡＳ−５３−４６−３）、臭化プロパンテリン（ＣＡＳ−５０−３４−９）、臭化メチルアニソトロピンまたはＶａｌｐｉｎ  ５０（ＣＡＳ−８０−５０−２）、臭化クリジニウム（Ｑｕａｒｚａｎ、ＣＡＳ−３４８５−６２−９）、コピロレート（ｃｏｐｙｒｒｏｌａｔｅ）（Ｒｏｂｉｎｕｌ）、ヨウ化イソプロパミド（ＣＡＳ−７１−８１−８）、臭化メペンゾレート（米国特許第２，９１８，４０８号明細書）、トリジヘキセチルクロリド（Ｐａｔｈｉｌｏｎｅ、ＣＡＳ−４３１０−３５−４）、およびメチル硫酸ヘキソシクリウム（Ｔｒａｌ、ＣＡＳ−１１５−６３−９）である。また、シクロペントレート塩酸塩（ＣＡＳ−５８７０−２９−１）、トロピカミド（ＣＡＳ−１５０８−７５−４）、トリヘキシフェニジル塩酸塩（ＣＡＳ−１４４−１１−６）、ピレンゼピン（ＣＡＳ−２９８６８−９７−１）、テレンゼピン（ｔｅｌｅｎｚｅｐｉｎｅ）（ＣＡＳ−８０８８０−９０−９）、ＡＦ−ＤＸ  １１６、またはメトクトラミン（ｍｅｔｈｏｃｔｒａｍｉｎｅ）、および国際公開第０１／０４１１８に開示される化合物（その開示は本明細書内で参考として援用される）も参照のこと。
【０１２１】
適切な抗ヒスタミン剤（Ｈ１−レセプターアンタゴニストとしても呼ばれる）は、Ｈ１−レセプターを阻害する公知の多数のアンタゴニストの１つ以上のいずれかを含み、ヒトにおける使用について安全である。全て、ヒスタミンとＨ１−レセプターとの相互作用の可逆的かつ競合的なインヒビターである。これらのインヒビターの多くは、ほとんど第一世代のアンタゴニストであるが、それらのコアの構造に基づいて、エタノールアミン、エチレンジアミン、およびアルキルアミンとして特徴付けられる。加えて、他の第一世代の抗ヒスタミン剤は、ピペリジンおよびフェノチアジンに基づいて特徴付けられ得る抗ヒスタミン剤を含む。第二世代のアンタゴニストは、非鎮静的であるが、類似した構造−活性の関係を有し、それらは、コアのエチレン基（アルキルアミン）、あるいはピペラジン（ｐｉｐｅｒｉｚｉｎｅ）またはピペリジンを模倣した三級アミン基を保持する。例示的なアンタゴニストは以下の通りである：
エタノールアミン：マレイン酸カルビノキサミン、フマル酸クレマスチン、ジフェニルヒドラミン塩酸塩、およびジメンヒドリナート。
【０１２２】
エチレンジアミン：ピリラミンアムレート（ｐｙｒｉｌａｍｉｎｅ  ａｍｌｅａｔｅ）、塩酸トリペレナミン、およびクエン酸トリペレナミン。
【０１２３】
アルキルアミン：クロルフェニラミンおよびその塩（例えばマレイン酸塩）、およびアクリバスチン（ａｃｒｉｖａｓｔｉｎｅ）。
【０１２４】
ピペラジン：塩酸ヒドロキシジン、ヒドロキシジンパモエート（ｈｙｄｒｏｘｙｚｉｎｅ  ｐａｍｏａｔｅ）、塩酸シクリジン、乳酸シクリジン、塩酸メクリジン、および塩酸セチリジン。
【０１２５】
ピペリジン：アステミゾール、塩酸レボカバスチン、ロラタジン（ｌｏｒａｔａｄｉｎｅ）またはそのデスカルボエトキシアナログ、ならびにテルフェナジンおよび塩酸フェキソフェナジンまたは他の薬学的に許容可能な塩。
【０１２６】
アゼラスチン塩酸塩は、本発明の化合物と併用で用いられ得る、なお別のＨ１レセプターアンタゴニストである。
【０１２７】
好ましい抗ヒスタミン剤の例としては、メタピリレンおよびロラタジンが挙げられる。
【０１２８】
従って本発明はさらなる局面において、式（Ｉ）の化合物あるいはその薬学的に受容可能な塩または溶媒和物または立体異性体、およびコルチコステロイドを含有する組み合わせを提供する。特に本発明は、上記コルチコステロイドがプロピオン酸フルチカゾン、または上記コルチコステロイドが６α，９α−ジフルオロ−１７α−［（２−フラニルカルボニル）オキシ］−１１β−ヒドロキシ−１６α−メチル−３−オキソ−アンドロスタ−１，４−ジエン−１７β−カルボチオ酸Ｓ−フルオロメチルエステル、または６α，９α−ジフルオロ−１１β−ヒドロキシ−１６α−メチル−３−オキソ−１７α−プロピオニルオキシ−アンドロスタ−１，４−ジエン−１７βーカルボチオ酸Ｓ−（２−オキソ−テトラヒドロ−フラン−３Ｓ−イル）エステルである組み合わせを提供する。
【０１２９】
従って本発明はさらなる局面において、式（Ｉ）の化合物、あるいはその薬学的に受容可能な塩または溶媒和物または立体異性体、およびＰＤＥ４インヒビターを含有する組み合わせを提供する。
【０１３０】
従って本発明はさらなる局面において、式（Ｉ）の化合物、あるいはその薬学的に受容可能な塩または溶媒和物または立体異性体、および抗コリン作動薬剤を含有する組み合わせを提供する。
【０１３１】
従って本発明はさらなる局面において、式（Ｉ）の化合物、あるいはその薬学的に受容可能な塩または溶媒和物または立体異性体、および抗ヒスタミン剤を含有する組み合わせを提供する。
【０１３２】
従って本発明はさらなる局面において、式（Ｉ）の化合物、あるいはその薬学的に受容可能な塩または溶媒和物または立体異性体を、ＰＤＥ４インヒビターおよびコルチコステロイドと共に含有する組み合わせを提供する。
【０１３３】
従って本発明はさらなる局面において、式（Ｉ）の化合物、あるいはその薬学的に受容可能な塩または溶媒和物または立体異性体を、抗コリン作動薬剤およびコルチコステロイドと共に含有する組み合わせを提供する。
【０１３４】
上記の組み合わせに用いられるように、用語「式（Ｉ）の化合物」は式（ＩＩ）の化合物およびその好ましい基、ならびに個々に開示された化合物を含む。
【０１３５】
従って、本発明の薬学的組成物は、必要に応じて、式（Ｉ）の化合物あるいはその薬学的に受容可能な塩または溶媒和物または立体異性体と、上記に記述されたような１つ以上の他の医薬品とを含み得る。
【０１３６】
このような組み合わせの個々の化合物は、別々の薬学的処方物または一体にされた薬学的処方物として、連続的にまたは同時に、のいずれかにおいて投与され得る。公知の治療因子の適切な用量は、当業者によって容易に理解される。それゆえ、本発明の処置の方法は、このような組み合わせの個々の化合物を、別々の薬学的処方物または一体にされた薬学的処方物として、連続的にまたは同時に、のいずれかにおける投与を含む。
【０１３７】
従って、さらなる局面に従って本発明は、哺乳動物におけるβ２アドレナリン受容体活性に関連する疾患または状態を処置する方法を提供し、これは、式（Ｉ）の化合物あるいはその薬学的に受容可能な塩または溶媒和物または立体異性体と、１つ以上の他の治療薬の組み合わせを治療有効量、哺乳動物に投与する工程を含有する。
【０１３８】
本発明の化合物はβ２アドレナリン受容体アゴニストであるので、このような化合物はまた、β２アドレナリン受容体を有する生物学系または生物学サンプルを調査または研究するための、あるいは、新しいβ２アドレナリン受容体アゴニストを発見するための研究道具として有用である。さらに、本発明の化合物は、他のβアドレナリンサブタイプの受容体における結合活性および機能活性に比べて、β２アドレナリン受容体に対する選択性を示すので、このような化合物はまた、生物学的系または生物学的サンプルにおけるβ２アドレナリン受容体の選択的アゴニスト性（ａｇｏｎｉｓｍ）の効果を研究するために有用である。β２アドレナリン受容体を有する任意の適切な生物学的系または生物学的サンプルが、インビトロまたはインビボのいずれかで行われ得る、このような研究において使用され得る。
【０１３９】
このような研究に適切な、代表的な生物学的系または生物学的サンプルとしては、細胞、細胞抽出液、原形質膜、組織サンプル、哺乳動物（例えば、マウス、ラット、モルモット、ウサギ、イヌ、ブタなど）などが挙げられるが、これらに限定しない。β２アドレナリン受容体をアゴナイズ（ａｇｏｎｉｚｉｎｇ）する効果は、通常の手順および設備（例えば、放射性リガンド結合アッセイおよび機能アッセイ（例えば、下に記述する細胞内の環状アデノシン一リン酸（ｃＡＭＰ）のリガンド媒介性変化についてのアッセイ、または類似した性質のアッセイ））を用いて決定される。本発明の化合物のβ２アドレナリン受容体アゴナイズ量は、代表的には、約１ナノモーラー〜約１０００ナノモーラーの範囲である。本発明の化合物が、新たなβ２アドレナリン受容体アゴニストの発見のための研究道具として用いられる場合、本発明はまた、別々の実施形態として、比較データの生成（適切なアッセイを用いて）および、目的の試験化合物を同定するための試験データの解析の双方を含む。
【０１４０】
以下の限定しない実施例は、代表的な本発明の薬学的組成物を例示する。本発明の活性化合物の処方物に適切なさらなるキャリアがまた、Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ：Ｔｈｅ  Ｓｃｉｅｎｃｅ  ａｎｄ  Ｐｒａｃｔｉｃｅ  ｏｆ  Ｐｈａｒｍａｃｙ、第２０版、Ｌｉｐｐｉｎｃｏｔｔ  Ｗｉｌｌｉａｍｓ  ＆  Ｗｉｌｋｉｎｓ、Ｐｈｉｌａｄｅｌｐｈｉａ、ＰＡ、２０００に見出され得る。
【実施例】
【０１４１】
（処方実施例Ａ）
本実施例は、本発明の化合物の経口投与のための代表的な薬学的組成物の調製を例示する：
【０１４２】
【表１】
2007505931.tif 000013
上記の成分を混合し、そして硬い殻のゼラチンカプセルに充填する。
【０１４３】
（処方実施例Ｂ）
本実施例は、本発明の化合物の経口投与のための、別の代表的な薬学的組成物の調製を例示する：
【０１４４】
【表２】
2007505931.tif 000014
上記の成分を完全に混合し、そして単一の切れ目を入れた錠剤にプレスして作る。
【０１４５】
（処方実施例Ｃ）
本実施例は、本発明の化合物の経口投与のための代表的な薬学的組成物の調製を例示する。
【０１４６】
経口懸濁液を、以下の組成を有するように調製する。
【０１４７】
【表３】
2007505931.tif 000015
（処方実施例Ｄ）
本実施例は、本発明の化合物を含む代表的な薬学的組成物の調製を例示する。
【０１４８】
ｐＨが４となるように緩衝剤で処理された注射用調製物を、以下の組成物を有するように調製する：
【０１４９】
【表４】
2007505931.tif 000016
（処方実施例Ｅ）
本実施例は、本発明の化合物を注射するための代表的な薬学的組成物の調製を例示する。
【０１５０】
１ｍｇの本発明の化合物に２０ｍＬの滅菌水を加えることで、再構成した溶液を調製する。次いで使用の前に、活性化合物と適合性の静脈内輸液２００ｍＬで希釈する。このような流体は、５％のデキストロース溶液、０．９％の塩化ナトリウム、または、５％のデキストロースおよび０．９％の塩化ナトリウムの混合物から選択される。他の例は、乳酸加リンガー液、乳酸加リンガー液＋５％デキストロース、Ｎｏｒｍｏｓｏｌ−Ｍおよび５％デキストロース、Ｉｓｏｌｙｔｅ  Ｅ、およびアシル化リンガー液である。
【０１５１】
（処方実施例Ｆ）
本実施例は、本発明の化合物の局所使用のための代表的な薬学的組成物の調製を例示する。
【０１５２】
【表５】
2007505931.tif 000017
上の成分の全ては水を除いて混合し、そして攪拌しながら６０℃まで温める。次いで、上記の成分を乳化するように激しく攪拌しつつ、十分な量の６０℃の水を加え、次いで水を１００ｇに足りるだけ加える。
【０１５３】
（処方実施例Ｇ）
本実施例は、本発明の化合物を含む代表的な薬学的組成物の調製を例示する。
【０１５４】
噴霧器における使用のための水性エアロゾル処方物を、活性化合物の薬学的塩０．１ｍｇを、クエン酸で酸性化した０．９％塩化ナトリウム溶液に溶解することで調製する。この混合物を攪拌し、そして上記活性な塩が溶解するまで超音波処理する。ゆっくりとＮａＯＨを加えることで、上記溶液のｐＨを３〜８の範囲の値に調製する。
【０１５５】
（処方実施例Ｈ）
本実施例は、吸入カートリッジにおける使用のための、本発明の化合物を含む乾燥粉末処方物の調製を例示する。
【０１５６】
ゼラチン吸入カートリッジを、以下の成分を有する薬学的組成物で満たす：
【０１５７】
【表６】
2007505931.tif 000018
上記活性化合物の薬学的塩は、乳糖との混合に先立って微粉化する。カートリッジの内容物を、粉末吸入器を用いて投与する。
【０１５８】
（処方実施例Ｉ）
本実施例は、乾燥粉末吸入デバイスにおける使用のための、本発明の化合物を含む乾燥粉末処方物の調製を例示する。
【０１５９】
薬学的組成物を、微粉化した薬学的塩をラクトースに対して１：２００のバルク処方物の割合で有するように調製する。上記組成物を、一用量あたり約１０μｇ〜約１００μｇの活性薬物成分を送達し得る、乾燥粉末吸入デバイスに充填する。
【０１６０】
（処方実施例Ｊ）
本実施例は、定用量吸入器における使用のための、本発明の化合物を含む処方物の調製を例示する。
【０１６１】
活性化合物の薬学的塩を５％、レシチンを０．５％、およびトレハロースを０．５％含む懸濁液を、１００ｍＬの脱塩水に溶解した０．５ｇのトレハロースおよび０．５ｇのレシチンから形成されるコロイド性溶液中に、平均サイズが１０μｍ未満の微粉化された粒子として５ｇの活性化合物を分散させることで調製する。上記懸濁液を噴霧乾燥し、そして結果として生じた物質を、平均直径が１．５μｍ未満である粒子に微粉化する。上記粒子を、加圧した１，１，１，２−テトラフルオロエタンを有するキャニスターに充填する。
【０１６２】
（処方実施例Ｋ）
本実施例は、定用量吸入器における使用のための、本発明の化合物を含む処方物の調製を例示する。
【０１６３】
活性化合物の薬学的塩を５％およびレシチンを０．１％含む懸濁液を、２００ｍＬの脱塩水中に溶解した０．２ｇのレシチンから形成される溶液中に、平均サイズが１０μｍ未満の微粉化された粒子として１０ｇの活性化合物を分散させることで調製する。上記懸濁液を噴霧乾燥し、そして結果として生じた物質を、平均直径が１．５μｍ未満である粒子に微粉化する。上記粒子を、加圧した１，１，１，２，３，３，３−ヘプタフルオロ−ｎ−プロパンを有するキャニスターに充填する。
【０１６４】
（生物学的アッセイ）
本発明の化合物およびその薬学的に受容可能な塩は、生物学的活性を示し、そして医療用処置のために有用である。化合物のβ２アドレナリン受容体への結合の能力、ならびに、その選択性、アゴニスト効力および内因活性は、以下の試験Ａ〜Ｂを用いて立証されても、当該分野で公知のその他の試験を用いて立証されても良い。
【０１６５】
（略語）
％Ｅｆｆ  ％効力
ＡＴＣＣ  アメリカンタイプカルチャーコレクション
ＢＳＡ  ウシ血清アルブミン
ｃＡＭＰ  アデノシン３’：５’−環状一リン酸
ＤＭＥＭ  ダルベッコの改変イーグル培地
ＤＭＳＯ  ジメチルスルホキシド
ＥＤＴＡ  エチレンジアミン四酢酸
Ｅｍａｘ  最大効力
ＦＢＳ  ウシ胎仔血清
Ｇｌｙ  グリシン
ＨＥＫ−２９３  ヒト胎児腎臓−２９３
ＰＢＳ  リン酸緩衝化生理食塩水
ｒｐｍ  一分あたりの回転
Ｔｒｉｓ  トリス（ヒドロキシメチル）アミノメタン
（ヒトβ１アドレナリン受容体またはヒトβ２アドレナリン受容体を発現する細胞からの膜調製）
クローン化されたヒトβ１アドレナリン受容体またはヒトβ２アドレナリン受容体をそれぞれ安定に発現するＨＥＫ−２９３由来の細胞株を、５００μｇ／ｍＬのジェネテシンの存在下で１０％の透析したＦＢＳを含むＤＭＥＭ中で、コンフルエンシー近くまで培養した。上記細胞単層を、細胞スクレイパーを用いて、ヴェルセン１：５，０００（ＰＢＳ中の０．２ｇ／ＬのＥＤＴＡ）と共に持ち上げた。細胞を１，０００ｒｐｍでの遠心分離によってペレットにし、そして細胞ペレットを−８０℃で凍結保存するか、または即座に膜を調製するかのいずれかをした。調製のために、細胞ペレットを溶解バッファー（４℃、ｐＨ７．４、１０ｍＭのＴｒｉｓ／ＨＣＬ、５０ｍＬ緩衝液あたり１錠の「Ｃｏｍｐｌｅｔｅ  Ｐｒｏｔｅａｓｅ  Ｉｎｈｉｂｉｔｏｒ  Ｃｏｃｋｔａｉｌ  Ｔａｂｌｅｔｓ  ｗｉｔｈ  ２ｍＭ  ＥＤＴＡ」（Ｒｏｃｈｅカタログ番号１６９７４９８、Ｒｏｃｈｅ  Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｂｉｏｃｈｅｍｉｃａｌｓ、Ｉｎｄｉａｎａｐｏｌｉｓ、ＩＮ））に再懸濁し、そして氷上の、きつくしたダウンス型ガラスホモジナイザー（２０回）を用いてホモジナイズした。上記ホモジネートを２０，０００×ｇで遠心分離し、ペレットを溶解緩衝液で一回再懸濁し、および上記のように遠心分離することで洗浄した。最終のペレットを膜緩衝液（ｐＨ７．４、７５ｍＭのＴｒｉｓ／ＨＣｌ、１２．５ｍＭのＭｇＣｌ２、１ｍＭのＥＤＴＡで２５℃）に再懸濁した。膜懸濁液のタンパク質濃度を、ブラッドフォード法（Ｂｒａｄｆｏｒｄ  ＭＭ．、Ａｎａｌｙｔｉｃａｌ  Ｂｉｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ、１９７６、７２、２４８−５４）によって決定した。膜は−８０℃にてアリコートで凍結保存した。
【０１６６】
（試験Ａ）
（ヒトβ１アドレナリン受容体およびヒトβ２アドレナリン受容体上の放射性リガンド結合アッセイ）
結合アッセイを、ヒトβ２アドレナリン受容体を含む膜について膜タンパク質５μｇを、またはヒトβ１アドレナリン受容体を含む膜について膜タンパク質２．５μｇを、アッセイ緩衝液（７５ｍＭ、ｐＨ７．４、２５℃のＴｒｉｓ／ＨＣｌ、１２．５ｍＭのＭｇＣｌ２、１ｍＭのＥＤＴＡ、０．２％のＢＳＡ）中に有する、総アッセイ体積１００μＬにて、９６−ウェルマイクロタイタープレートにて行った。放射性リガンドのＫｄ値を決定するための飽和結合調査を、［３Ｈ］ジヒドロアルプレノロール（ＮＥＴ−７２０、１００Ｃｉ／ｍｍｏｌ、ＰｅｒｋｉｎＥｌｍｅｒ  Ｌｉｆｅ  Ｓｃｉｅｎｃｅｓ  Ｉｎｃ．、Ｂｏｓｔｏｎ、ＭＡ）を、０．０１ｎＭ〜２００ｎＭの範囲の１０種の異なる濃度にて用いて行った。化合物のｐＫｉ値を決定するための置換アッセイを、１ｎＭおよび、４０ｐＭ〜１０μＭの範囲の異なる１０種の化合物濃度における［３Ｈ］ジヒドロアルプレノロールとともに行った。化合物を溶解緩衝液（５０％のＤＭＳＯとともに２５ｍＭ、ｐＨ３．０のＧｌｙ−ＨＣｌ）中に１０ｍＭの濃度で溶解し、次いで５０ｍＭ、ｐＨ３．０のＧｌｙ−ＨＣｌ中にて１ｍＭまで希釈し、そしてそこから連続的にアッセイ緩衝液中に希釈した。非特異的結合を、１０μＭの非標識アルプレノロールの存在下にて決定した。アッセイは室温にて９０分間インキュベートし、０．３％のポリエチレンイミン中に予浸したＧＦ／Ｂガラスファイバーフィルタープレート（Ｐａｃｋａｒｄ  ＢｉｏＳｃｉｅｎｃｅ  Ｃｏ．、Ｍｅｒｉｄｅｎ、ＣＴ）上にて高速濾過することで結合反応を終止させた。フィルタープレートを濾過緩衝液（７５ｍＭ、ｐＨ７．４、４℃のＴｒｉｓ／ＨＣｌ、１２．５ｍＭのＭｇＣｌ２、１ｍＭのＥＤＴＡ）にて三回洗浄し、未結合の放射活性を除いた。プレートを乾燥させ、５０μＬのＭｉｃｒｏｓｃｉｎｔ−２０液体シンチレーション液（Ｐａｃｋａｒｄ  ＢｉｏＳｃｉｅｎｃｅ  Ｃｏ．、Ｍｅｒｉｄｅｎ、ＣＴ）を加え、そしてプレートをＰａｃｋａｒｄ  Ｔｏｐｃｏｕｎｔ液体シンチレーション計数器（Ｐａｃｋａｒｄ  ＢｉｏＳｃｉｅｎｃｅ  Ｃｏ．、Ｍｅｒｉｄｅｎ、ＣＴ）で計数した。結合データを、１部位の競合について３パラメータのモデルを用いた、ＧｒａｐｈＰａｄ  Ｐｒｉｓｍ  Ｓｏｆｔｗａｒｅパッケージ（ＧｒａｐｈＰａｄ  Ｓｏｆｔｗａｒｅ，Ｉｎｃ．、Ｓａｎ  Ｄｉｅｇｏ、ＣＡ）による非線形回帰解析によって解析した。曲線最小値は非特異的結合についての値に固定し、これは１０μＭのアルプレノロールの存在下にて決定した。化合物群についてのＫｉ値を、チェン−プルゾフ（Ｃｈｅｎｇ−Ｐｒｕｓｏｆｆ）式（Ｃｈｅｎｇ  Ｙ、およびＰｒｕｓｏｆｆ  ＷＨ．、Ｂｉｏｃｈｅｍｉｃａｌ  Ｐｈａｒｍａｃｏｌｏｇｙ、１９７３、２２、２３、３０９９−１０８）を用いて、放射性リガンドの観察されたＩＣ５０値およびＫｄ値から計算した。レセプターのサブタイプの選択性を、Ｋｉ（β１）／Ｋｉ（β２）の比として計算した。本発明の化合物は、β１アドレナリン受容体よりもβ２アドレナリン受容体に大きな結合性を示し、すなわち、約１００を超える選択性にてＫｉ（β１）＞Ｋｉ（β２）であった。
【０１６７】
（試験Ｂ）
（ヒトβ１アドレナリン受容体、β２アドレナリン受容体、およびβ３アドレナリン受容体を、それぞれ異なって発現する細胞株における、全細胞ｃＡＭＰフラッシュプレートアッセイ）
クローン化されたヒトβ１アドレナリン受容体（クローンＨ３４．１）を安定して発現するＨＥＫ−２９３細胞株を、１０％のＦＢＳおよび５００μｇ／ｍＬのジェネテシンを追加したＤＭＥＭからなる培地中で、約７０％〜９０％のコンフルエンシーまで培養した。クローン化されたヒトβ２アドレナリン受容体（クローンＨ２４．１４）を安定して発現するＨＥＫ−２９３細胞株を、同じ培地中で十分なコンフルエンシーまで培養した。クローン化されたヒトβ３アドレナリン受容体を安定して発現するＣＨＯ−Ｋ１細胞株を、１０％のＦＢＳおよび、毎５継代ごとに加えられる８００μｇ／ｍＬのジェネテシンを追加したハムのＦ−１２培地中で、約７０％〜９０％のコンフルエンシーまで培養した。アッセイ前日に、培養物を、抗生物質を除いた同じ培養培地に移した。
【０１６８】
ｃＡＭＰアッセイを、１２５Ｉ−ｃＡＭＰを用いたＦｌａｓｈｐｌａｔｅ  Ａｄｅｎｙｌｙｌ  Ｃｙｃｌａｓｅ  Ａｃｔｉｖａｔｉｏｎ  Ａｓｓａｙ  Ｓｙｓｔｅｍ（ＮＥＮ  ＳＭＰ００４、ＰｅｒｋｉｎＥｌｍｅｒ  Ｌｉｆｅ  Ｓｃｉｅｎｃｅｓ  Ｉｎｃ．、Ｂｏｓｔｏｎ、ＭＡ）を用いたラジオイムノアッセイ形式にて、製品の指示書に従って行った。
【０１６９】
アッセイ当日、細胞をＰＢＳで一回リンスし、ヴェルセン１：５，０００（ＰＢＳ中の０．２ｇ／ＬのＥＤＴＡ）と共に持ち上げ、そして計数した。細胞を１，０００ｒｐｍでの遠心分離にてペレットにし、そして３７℃に予熱した刺激緩衝液中に再懸濁した。β１−アドレナリン受容体を発現する細胞について、１０ｎＭのＩＣＩ  １１８，５５１を上記刺激緩衝液に加え、そして細胞を３７℃にて１０分間インキュベートした。β１−アドレナリン受容体発現細胞、β２−アドレナリン受容体発現細胞、およびβ３−アドレナリン受容体発現細胞についてそれぞれ、最終濃度３０，０００細胞／ウェル、４０，０００細胞／ウェルおよび７０，０００細胞／ウェルにて細胞を用いた。化合物をＤＭＳＯ中に１０ｍＭの濃度にて溶解し、次いで５０ｍＭ、ｐＨ３．０のＧｌｙ−ＨＣｌ中に１ｍＭまで希釈し、そしてそこからアッセイバッファー（７５ｍＭ、ｐＨ７．４、２５℃のＴｒｉｓ／ＨＣｌ、１２．５ｍＭのＭｇＣｌ２、１ｍＭのＥＤＴＡ、０．２％のＢＳＡ）中に連続的に希釈した。このアッセイにおいて化合物を、１０μＭ〜９．５ｐＭの範囲における１１種の異なる濃度にて試験した。反応液を３７℃にて１０分間インキュベートし、そして１００μｌの氷冷した検出緩衝液を加えることで停止させた。プレートをシールし、４℃にて一晩インキュベートし、そして翌朝トップカウントシンチレーション計数器（Ｐａｃｋａｒｄ  ＢｉｏＳｃｉｅｎｃｅ  Ｃｏ．、Ｍｅｒｉｄｅｎ、ＣＴ）にて計数した。反応液１ｍＬあたりで生成されたｃＡＭＰの量は、製造業者の利用者マニュアルに記述されているように、サンプルおよびｃＡＭＰ標準物質について観察された計数に基づいて計算した。シグモイド用量−反応についての３パラメータのモデル（ヒルスロープ（Ｈｉｌｌ  ｓｌｏｐｅ）＝１）を用いて、ＧｒａｐｈＰａｄ  Ｐｒｉｓｍ  Ｓｏｆｔｗａｒｅパッケージ（ＧｒａｐｈＰａｄ  Ｓｏｆｔｗａｒｅ，Ｉｎｃ．、Ｓａｎ  Ｄｉｅｇｏ、ＣＡ）による非線形回帰解析によって、データを解析した。アゴニストの効力を、ｐＥＣ５０値として表した。
【０１７０】
本発明の化合物はこのアッセイにおいて、約８．５を超えるｐＥＣ５０値によって証明されるように、β２アドレナリン受容体における強力な活性を示した。加えて、試験した化合物群は、β１受容体およびβ３受容体における機能的活性に比較して、β２受容体における機能的活性において選択性を示した。特に本発明の化合物は、約５０を超えるＥＣ５０（β１）／ＥＣ５０（β２）を、約６００を超えるＥＣ５０（β３）／ＥＣ５０（β２）を示した。
【０１７１】
（試験Ｃ）
（ヒトβ２アドレナリン作動性レセプターを内因的に発現している肺上皮細胞株を用いた全細胞ｃＡＭＰフラッシュプレートアッセイ）
内因性レベルのβ２アドレナリン作動性レセプターを発現する細胞株におけるアゴニストの有効性および効力を決定するために、ヒト肺上皮細胞株（ＢＥＡＳ−２Ｂ；ＡＴＣＣ  ＣＲＬ−９６０９，Ａｍｅｒｉｃａｎ  Ｔｙｐｅ  Ｃｕｌｔｕｒｅ  Ｃｏｌｌｅｃｔｉｏｎ，Ｍａｎａｓｓａｓ，  ＶＡ；Ｊａｎｕａｒｙ  Ｂ，  ｅｔ  ａｌ．，Ｂｒｉｔｉｓｈ  Ｊｏｕｒｎａｌ  ｏｆ  Ｐｈａｒｍａｃｏｌｏｇｙ，１９９８，１２３，４，７０１−１１）を、使用した。細胞を、完全な無血清培地（ＬＨＣ−９  ＭＥＤＩＵＭ  ｃｏｎｔａｉｎｉｎｇ  Ｅｐｉｎｅｐｈｒｉｎｅ  ａｎｄ  Ｒｅｔｉｎｏｉｃ  Ａｃｉｄ，  ｃａｔ  ＃  １８１−５００，  Ｂｉｏｓｏｕｒｃｅ  Ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ，  Ｃａｍａｒｉｌｌｏ，  ＣＡ）中で、７５％〜９０％コンフルエントまで増殖させた。このアッセイの前日に、培地を、ＬＨＣ-8（エピネフリンまたはレノイン酸（ｒｅｔｉｎｏｉｃ  ａｃｉｄ）を含まない；カタログ番号１４１−５００，  Ｂｉｏｓｏｕｒｃｅ  Ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ，Ｃａｍａｒｉｌｌｏ，ＣＡ）に取り換えた。
【０１７２】
ｃＡＭＰアッセイを、製造業者の指示書にしたがって、１２５Ｉ−ｃＡＭＰ  （ＮＥＮ  ＳＭＰ００４，  ＰｅｒｋｉｎＥｌｍｅｒ  Ｌｉｆｅ  Ｓｃｉｅｎｃｅｓ  Ｉｎｃ．，  Ｂｏｓｔｏｎ，  ＭＡ）と伴にＦｌａｓｈｐｌａｔｅ  Ａｄｅｎｙｌｙｌ  Ｃｙｃｌａｓｅ  Ａｃｔｉｖａｔｉｏｎ  Ａｓｓａｙ  Ｓｙｓｔｅｍを使用してラジオイムノアッセイ様式で実施した。
【０１７３】
このアッセイの日に、細胞を、ＰＢＳで濯いで、５ｍＭ  ＥＤＴＡを含むＰＢＳで破砕することによってリフティングし（ｌｉｆｔ）、計数した。細胞を、１，０００ｒｐｍで遠心分離によりペレット化して、最終濃度にして６００，０００細胞／ｍＬで、３７℃まで予め暖めた刺激緩衝液（ｓｔｉｍｕｌａｔｉｏｎ  ｂｕｆｆｅｒ）で再懸濁していた。細胞を、このアッセイにおいて最終濃度３０，０００細胞／ウェルで使用した。溶解用緩衝液（２５  ｍＭ  Ｇｌｙ−ＨＣｌ  ｐＨ  ３．０  ｗｉｔｈ  ５０％  ＤＭＳＯ）に１０ｍＭの濃度になるまで、化合物を溶解して、ついで、５０  ｍＭのＧｌｙ−ＨＣｌ（ｐＨ  ３．０）で１ｍＭまで希釈し、ここから、アッセイ緩衝液（７５  ｍＭ  Ｔｒｉｓ／ＨＣｌ  ｐＨ  ７．４＠２５oＣ，１２．５ｍＭ  ＭｇＣｌ２，１ｍＭ  ＥＤＴＡ，０．２％  ＢＳＡ）まで連続希釈した。
【０１７４】
化合物を、１０種の異なる濃度におけるアッセイにて試験した。この濃度は、１０μＭ〜４０ｐＭの範囲であった。最大応答は、１０μＭのイソプロパノールの存在下で、決定された。反応物を、１０分間にわたって３７℃でインキュベートして、１００μｌの氷冷した検出緩衝液を添加することによって停止させた。プレートを密封して、４℃で一晩インキュベートして、トップカウントシンチレーションカウンター（Ｐａｃｋａｒｄ  ＢｉｏＳｃｉｅｎｃｅ  Ｃｏ．，Ｍｅｒｉｄｅｎ，ＣＴ）で次の朝に計測した。反応物１ｍＬあたりによって生成されたｃＡＭＰの量は、製造者の指示書に記載されるように、サンプルおよびｃＡＭＰ標準について観測された計数に基づいて計算した。データを、傾きを可変量とした用量応答Ｓ字曲線（ｓｉｇｍｏｉｄａｌ  ｄｏｓｅ−ｒｅｓｐｏｎｓｅ  ｗｉｔｈ  ｖａｒｉａｂｌｅ  ｓｌｏｐｅ）に関する４パラメータモデルを利用してＧｒａｐｈＰａｄ  Ｐｒｉｓｍ  Ｓｏｆｔｗａｒｅ  ｐａｃｋａｇｅ  （ＧｒａｐｈＰａｄ  Ｓｏｆｔｗａｒｅ，Ｉｎｃ．，Ｓａｎ  Ｄｉｅｇｏ，  ＣＡ）で非線形回帰分析によって分析した。このアッセイにおいて試験した本発明の化合物は、約８よりも多きいｐＥＣ５０値を実証した。
【０１７５】
化合物効力（％Ｅｆｆ）を、観察されたＥｍａｘ（近似曲線の頂点）の割合および１０μＭのイソプロテレノールに対して得られた最大応答から計算し、イソプロテレノールに対する％Ｅｆｆとして表した。試験した化合物は、約５０より大きい％Ｅｆｆを示した。
【０１７６】
（試験Ｄ）
（モルモットモデルにおけるアセチルコリン誘導性気管支痙攣に対する気管支保護のアッセイ）
２５０ｇと３５０ｇとの間の、６匹の雄性のモルモットの群（Ｄｕｎｃａｎ−Ｈａｒｔｌｅｙ（ＨｓｄＰｏｃ：ＤＨ）Ｈａｒｌａｎ，Ｍａｄｉｓｏｎ，ＷＩ）を、ケージカードによって個々に識別した。本研究全体にわたり、動物を、飼料および水に自由に近づけられるようにした。
【０１７７】
試験化合物を、全身曝露投薬チャンバー（Ｒ＆Ｓ  Ｍｏｌｄｓ，Ｓａｎ  Ｃａｒｌｏｓ，ＣＡ）中で、１０分間にわたり吸入を介して投与した。この投薬チャンバーを、エアロゾルが中央のマニホルドから６個の個々のチャンバーに同時に送達されるように配置した。６０分間の順化期間および注射用滅菌水（ＷＦＩ）への１０分間の曝露の後、モルモットを試験化合物またはビヒクル（ＷＦＩ）のエアロゾルに曝露させた。これらのエアロゾルは、気体混合物（ＣＯ２＝５％、Ｏ２＝２１％およびＮ２＝７４％）により２２ｐｓｉの圧力で駆動されるＬＣ  Ｓｔａｒ  Ｎｅｂｕｌｉｚｅｒ  Ｓｅｔ（Ｍｏｄｅｌ  ２２Ｆ５１、ＰＡＲＩ  Ｒｅｓｐｉｒａｔｏｒｙ  Ｅｑｕｉｐｍｅｎｔ，Ｉｎｃ．Ｍｉｄｌｏｔｈｉａｎ，ＶＡ）  を用いて、水溶液から生成した。この作動圧で噴霧器を通る気体流は、おおよそ３Ｌ／分であった。生成した気体を、陽圧によりチャンバーへ送った。エアロゾル化された溶液の送達中に、希釈気体は使用しなかった。１０分間の噴霧中に、おおよそ１．８ｍＬの溶液を噴霧した。これは、充填した噴霧器の噴霧前と噴霧後を重量測定法で比較することにより測定した。
【０１７８】
吸入を介して投与した化合物の気管支保護効果を、投与の１．５時間後、２４時間後、４８時間後および７２時間後に、全身プレチスモグラフィーを用いて評価した。肺の評価の開始４５分前に、各モルモットにケタミン（４３．７５ｍｇ／ｋｇ）、キシラジン（３．５０ｍｇ／ｋｇ）およびアセプロマジン（１．０５ｍｇ／ｋｇ）を筋肉内注射して麻酔した。手術部位を剃毛し７０％アルコールで清浄した後、頚部の腹側面に２〜５ｃｍの正中切開を行った。次いで、頚静脈を単離し、生理食塩水を充填したポリエチレンカテーテル（ＰＥ−５０、Ｂｅｃｔｏｎ  Ｄｉｃｋｉｎｓｏｎ、Ｓｐａｒｋｓ、ＭＤ）をカニューレ挿入して、生理食塩水中のアセチルコリン（Ａｃｈ）（Ｓｉｇｍａ−Ａｌｄｒｉｃｈ，Ｓｔ．Ｌｏｕｉｓ，ＭＯ）の０．１ｍｇ／ｍＬ溶液の静脈内注入を可能にした。次いで、気管を解剖して取り除き、１４Ｇのテフロン（登録商標）チューブ（＃ＮＥ−０１４、Ｓｍａｌｌ  Ｐａｒｔｓ、Ｍｉａｍｉ  Ｌａｋｅｓ、ＦＬ）をカニューレ挿入した。望ましい場合、上記の麻酔薬カクテルをさらに筋肉内注射して、麻酔を維持した。麻酔の深さを測定し、その動物が足のピンチングに応答した場合、または呼吸速度が１００呼吸／分を超えた場合は調節した。
【０１７９】
一旦カニューレ挿入が完了すると、動物を、プレチスモグラフ（＃ＰＬＹ３１１４、Ｂｕｘｃｏ  Ｅｌｅｃｔｏｒｎｉｃｓ，Ｉｎｃ．，Ｓｈａｒｏｎ，ＣＴ）に置き、食道内圧カニューレを挿入して、肺の駆動圧（圧力）を測定した。テフロン（登録商標）トロカールチューブをプレチスモグラフの開口部に取り付けて、モルモットにチャンバーの外から室内の空気を呼吸できるようにした。次いで、チャンバーを密封した。加熱ランプを使用して体温を維持し、そして１０ｍＬのキャリブレーションシリンジ（＃５５２０シリーズ、Ｈａｎｓ  Ｒｕｄｏｌｐｈ、Ｋａｎｓａｎ  Ｃｉｔｙ、ＭＯ）を使用して４ｍＬの大気でモルモットの肺を３回膨らませて、下気道が虚脱してないことおよびその動物が過呼吸に罹患していないことを確認した。
【０１８０】
一旦、ベースライン値が、コンプライアンスについて０．３〜０．９ｍＬ／ｃｍ  Ｈ２Ｏであり、抵抗について１秒当たり０．１〜０．１９９ｃｍ  Ｈ２Ｏ／ｍＬであることを確認したら、肺の評価を開始した。Ｂｕｘｃｏ肺測定コンピュータプログラムにより、肺の値の収集および導出が可能である。このプログラムを開始して、実験プロトコルおよびデータ収集を始めた。各呼吸に伴ってプレチスモグラフ内に生じる体積の経時変化を、Ｂｕｘｃｏ圧力変換器を介して測定した。この信号を時間積分することにより、流動（ｆｌｏｗ）の測定を各呼吸に対して計算した。この信号（一緒に肺の駆動圧が変化する）（Ｓｅｎｓｙｍ圧力変換器（＃ＴＲＤ４１００）を用いて収集される）を、Ｂｕｘｃｏ（ＭＡＸ  ２２７０）前置増幅器を介してデータ収集インターフェース（＃ＳＦＴ３４００および＃３８１３）に接続した。すべての他の肺のパラメータを、これらの２つの入力から得た。
【０１８１】
ベースライン値を５分間収集し、その後、モルモットをＡｃｈでチャレンジした。Ａｃｈを１分間シリンジポンプ（ｓｐ２１０ｉｗ、Ｗｏｒｌｄ  Ｐｒｅｃｉｓｉｏｎ  Ｉｎｓｔｒｕｍｅｎｔｓ，Ｉｎｃ．，Ｓａｒａｓｏｔａ，ＦＬ）静脈内に、以下の用量および実験開始から指示された時間注入した：１．９μｇ／分で５分間、３．８μｇ／分で１０分間、７．５μｇ／分で１５分間、１５．０μｇ／分で２０分間、３０μｇ／分で２５分間および６０μｇ／分で３０分間。抵抗またはコンプライアンスが各Ａｃｈ用量の３分後にベースラインの値に戻らなかった場合、そのモルモットの肺を１０ｍＬのキャリブレーションシリンジから４ｍＬの大気で３回膨らませた。記録した肺のパラメータは、呼吸頻度（呼吸／分）、コンプライアンス（ｍＬ／ｃｍ  Ｈ２Ｏ）および肺の抵抗（１秒あたりのｃｍ  Ｈ２Ｏ／ｍＬ）を含んだ（Ｇｉｌｅｓら、１９７１）。一旦、肺の機能測定がこのプロトコルの３５分で完了すると、そのモルモットをプレチスモグラフから取り出し、ＣＯ２窒息により安楽死させた。
【０１８２】
ＰＤ２量（これは、ベースラインの肺抵抗の倍加を生じるのに必要なＡｃｈの量と定義される）を、以下の等式を用いるＡｃｈチャレンジの範囲にわたる流動（ｆｌｏｗ）と圧力（ｐｒｅｓｓｕｒｅ）からの肺抵抗値用いて計算した。これは、臨床におけるＰＣ２０値を計算するために使用される等式に由来する（Ａｍ．Ｔｈｒａｃｉｃ  Ｓｏｃ，２０００）。
【０１８３】
【数１】
2007505931.tif 000019
ここで、
Ｃ１＝最後のＡｃｈ濃度の時間（Ｃ２の前の濃度）
Ｃ２＝Ａｃｈの最終濃度（肺抵抗（ＲＬ）において２倍の増加を生じる濃度）
Ｒ０＝ベースラインＰＬ値
Ｒ１＝Ｃ１後のＲＬ値
Ｒ２＝Ｃ２後のＲＬ値
である。
【０１８４】
データの計学的分析を、一元分散分析、その後、Ｂｏｎｆｅｒｒｏｎｉ／Ｄｕｎｎ検定を用いる後知恵解析を使用して行った。０．０５未満のＰ値を有意であると見なした。
【０１８５】
用量応答曲線を、ＧｒａｐｈＰａｄ  Ｐｒｉｓｍ（Ｗｉｎｄｏｗｓ（登録商標）用バージョン３．００）（ＧｒａｐｈＰａｄ  Ｓｏｆｔｗａｒｅ、Ｓａｎ  Ｄｉｅｇｏ、Ｃａｌｉｆｏｒｎｉａ）を用いて４つのパラメータ論理式にフィッティングさせた。
【０１８６】
Ｙ＝Ｍｉｎ＋（Ｍａｘ−Ｍｉｎ）／（１＋１０＾（（ｌｏｇＥＤ５０−Ｘ）＊Ｈｉｌｌｓｌｏｐｅ））、
ここで、Ｘは用量の対数であり、Ｙは応答（ＰＤ２）であり、そしてＹはＭｉｎで始まりシグモイド形でＭａｘまで漸近的に近づく。
【０１８７】
本発明の代表的な化合物は、投薬後２４時間を超えた時点で気管支保護活性を有することが見出された。
【０１８８】
以下の合成実施例は、本発明を例示するために提供され、決して本発明の範囲を限定するように構成されない。
【０１８９】
概略：他に示されない限り、試薬、出発物質および溶媒は、商業的供給業者（例えば、Ｓｉｇｍａ−Ａｌｄｒｉｃｈ（Ｓｔ．Ｌｏｕｉｓ，ＭＯ）、Ｊ．Ｔ．Ｂａｋｅｒ（Ｐｈｉｌｌｉｐｓｂｕｒ，ＮＪ）およびＨｏｎｅｙｗｅｌｌ  Ｂｕｒｄｉｃｋ  ａｎｄ  Ｊａｃｋｓｏｎ（Ｍｕｓｋｅｇｏｎ，ＭＩ））から購入し、さらなる精製は行わずに使用した。反応は、窒素雰囲気下で行った。反応混合物は、薄層クロマトグラフィー（シリカＴＬＣ）、分析用高速液体クロマトグラフィー（分析用ＨＰＬＣ）または質量分析によってモニタリングした。反応混合物は、一般に、シリカゲルでのフラッシュクロマトグラフィー、または以下に記載する一般的なプロトコルを使用する分取用ＨＰＬＣによって精製した。ＮＭＲサンプルを重水素化溶媒（ＣＤ３ＯＤ、ＣＤＣｌ３、またはＤＭＳＯ−ｄ６）に溶解させ、スペクトルを標準的なパラメータ下でＶａｒｉａｎ  Ｇｅｍｉｎｉ  ２０００機器（３００ＭＨｚ）で取得した。そして、質量分光学的同定を、ＰｅｒｋｉｎＥｌｍｅｒ機器（ＰＥ  ＳＣＩＥＸ  ＡＰＩ  １５０  ＥＸ）を用いてエレクトロスプレーイオン化法（ＥＳＭＳ）によって行った。
【０１９０】
（実施例１：５−（（Ｒ）−２−｛２−［４−（（Ｒ）−２−アミノ−２−フェニルエチルアミノ）−フェニル］エチルアミノ｝−１−ヒドロキシエチル）−８−ヒドロキシ−１Ｈ−キノリン−２−オンの合成）
（ａ．［２−（４−ニトロフェニル）エチル］カルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステルの調製）
ジ−ｔｅｒｔ−ブチルカーボネート）（２０ｇ、９２ｍｍｏｌ）を、飽和炭酸水素ナトリウム（２００ｍＬ）に懸濁させ、０℃まで冷却した。ジオキサン（１０ｍＬ）を添加した。２−（４−ニトロフェニル）エチルアミンヒドロクロリド（２０ｇ、９９ｍｍｏｌ）を、水（１５０ｍＬ）中で調製し、滴下した。添加中、結晶化が生じたようであった。添加が完了した後、その混合物を、０℃でさらに１５分間攪拌し、次いで、室温で１６時間攪拌した。その生成物を、濾過により回収し、５００ｍＬの水で洗浄し、空気乾燥させた。
【０１９１】
（ｂ．［２−（４−アミノフェニル）エチル］カルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステルの調製）
上記工程の部分的に乾燥した固形物（ｃａｋｅ）に、パラジウム炭素（２ｇ、１０％Ｐｄ）を添加した後、メタノール（２５０ｍＬ、窒素下）を添加した。大気を水素に置換し、混合物を大気圧で２４時間攪拌した。パラジウム残渣を濾過により除去し、溶媒を減圧下で除去した。表題の中間体を、灰白色固体（２０ｇ、８５ｍｍｏｌ、２工程にわたって９３％）として得た。
【０１９２】
（ｃ．（Ｒ）−｛［４−（２−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノエチル）フェニルカルバモイル］フェニル−メチルカルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステルの調製｝
［２−（４−アミノフェニル）エチル］カルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステル（１ｇ、４．２ｍｍｏｌ）、（（Ｒ）−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ）フェニル酢酸（９２０ｍｇ、３．７ｍｍｏｌ）および１−ヒドロキシベンゾトリアゾール（６００ｍｇ、４．４ｍｍｏｌ）を、窒素下でＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（１０ｍＬ）に溶解させ、０℃まで冷却した。１−（３−ジメチルアミノプロピル）−３−エチルカルボジイミドヒドロクロリド（８５０ｍｇ、４．４ｍｍｏｌ）を添加し、その混合物を０℃で１０分間攪拌し、次いで、室温で２１時間攪拌した。その混合物を、水と酢酸エチルとの間で分配し、有機物を０．５Ｍのクエン酸、飽和炭酸水素ナトリウムそして飽和塩化ナトリウムで洗浄した。次いで、その有機物を、硫酸ナトリウムで乾燥させ、エバポレートして乾燥させた。表題の中間体を、さらに精製することなく使用した。
【０１９３】
（ｄ．（Ｒ）−２−アミノ−Ｎ−［４−（２−アミノエチル）フェニル］−２−フェニルアセトアミドの調製）
上記工程の粗生成物を、ジクロロメタン（１０ｍＬ）に溶解させ、トリフルオロ酢酸（１０ｍＬ）を添加した。その混合物を、１時間攪拌し、次いで、揮発物を減圧下で除去した。その油状物を、ジクロロメタン中に取り入れ（ｔａｋｅ  ｕｐ）、１Ｎの水酸化ナトリウムで洗浄した。そのジクロロメタン相を、硫酸ナトリウムで乾燥させ、エバポレートして乾燥させ、表題の中間体（６９０ｍｇ、２．６ｍｍｏｌ）を得た。これを、さらに精製することなく使用した。
【０１９４】
（ｅ．（Ｒ）−Ｎ２−［４−（２−アミノエチル）フェニル］−１−フェニルエタン−１，２−ジアミンの調製）
上記工程の粗生成物（６９０ｍｇ、２．６ｍｍｏｌ）を、テトラヒドロフラン（７ｍＬ）に溶解させ、ボラン−硫化ジメチル錯体（１ｍＬ）で処理した。その混合物を５時間還流し、室温まで冷却した。メタノール（３０ｍＬ）を添加し、その混合物をエバポレートして乾燥させた。メタノール（３０ｍＬ）を再度添加し、その混合物をエバポレートして乾燥させた。表題の中間体を、さらに精製することなく使用した。
【０１９５】
（ｆ．５−（（Ｒ）−２−｛２−［４−（（Ｒ）−２−アミノ−２−フェニルエチルアミノ）フェニル］エチルアミノ｝−１−（ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシラニルオキシ）エチル）−８−ベンジルオキシ−１Ｈ−キノリン−２−オンの調製）
窒素下で、上記工程の粗生成物（３３０ｍｇ、１．３ｍｍｏｌ）、８−ベンジルオキシ−５−［（Ｒ）−２−ブロモ−１−（ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシラニルオキシ）エチル］−１Ｈ−キノリン−２−オン（４９０ｍｇ、１．０ｍｍｏｌ）、ヨウ化ナトリウム（１５０ｍｇ、１．０ｍｍｏｌ）および炭酸水素ナトリウム（２５０ｍｇ、３．０ｍｍｏｌ）を、ジメチルスルホキシド（２．５ｍＬ）で処理し、１５分間１４０℃に加熱した。その混合物を室温まで冷却し、水と酢酸エチルとの間で分配した。有機物を飽和塩化ナトリウムで洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥させ、エバポレートして乾燥させた。その生成物を逆相ＨＰＬＣで精製し、凍結乾燥により単離して表題の中間体をそのトリフルオロ酢酸塩として得た。
【０１９６】
（ｇ．５−（（Ｒ）−２−｛２−［４−（（Ｒ）−２−アミノ−２−フェニルエチルアミノ）フェニル］エチルアミノ｝−１−ヒドロキシエチル）−８−ベンジルオキシ−１Ｈ−キノリン−２−オンの調製）
上記工程の生成物を、テトラヒドロフラン（１．５ｍＬ）に溶解させ、トリエチルアミン−三フッ化水素（１６０μＬ）で２４時間処理した。その混合物を１Ｎの水酸化ナトリウムと酢酸エチルとの間で分配した。有機物を無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、エバポレートして乾燥させて、表題の中間体（４２ｍｇ）を得た。これを、さらに精製することなく使用した。
【０１９７】
（ｈ．５−（（Ｒ）−２−｛２−［４−（（Ｒ）−２−アミノ−２−フェニルエチルアミノ）フェニル］エチルアミノ｝−１−ヒドロキシエチル）−８−ヒドロキシ−１Ｈ−キノリン−２−オンの合成）
上記工程の粗生成物（４２ｍｇ）を、ジクロロメタン（１ｍＬ）に溶解させ、三塩化ホウ素（ジクロロメタン中１．０Ｍ、４００μＬ）を添加した。１５分後、水（５ｍＬ）およびアセトニトリル（５００μＬ）を添加し、減圧下でジクロロメタンを除去した。表題の化合物を、逆相ＨＰＬＣにより精製し、凍結乾燥によりそのトリフルオロ酢酸塩として得た。１Ｈ  ＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）：１０．４（ｂｒ  ｓ，２Ｈ），９．２（ｂｒ  ｓ，１Ｈ），８．６（ｂｒ  ｓ，３Ｈ），８．１（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝１０．２Ｈｚ），７．２−７．４（ｍ，５Ｈ），７．０（ｄ，１Ｈ，８．２Ｈｚ），６．８−６．９（ｍ，３Ｈ），６．５（ｄ，２Ｈ，Ｊ＝８．０Ｈｚ），６．４（ｓ，１Ｈ，Ｊ＝１０．２Ｈｚ），５．３（ｂｒ  ｄ，１Ｈ，Ｊ＝７．７Ｈｚ），４．３（ｍ，１Ｈ），３．４（ｄｄ，１Ｈ，Ｊ＝７．１，１３．９Ｈｚ），３．３（ｄｄ，１Ｈ，Ｊ＝６．５，１３．９Ｈｚ），２．８−３．０（ｍ，４Ｈ），２．６−２．８（ｍ，２Ｈ）。ｍ／ｚ：［Ｍ＋Ｈ＋］  Ｃ２７Ｈ３０Ｎ４Ｏ３に対する計算値：４５９．２；実測値４５９．４。
【０１９８】
（実施例２：Ｎ−［５−（（Ｒ）−２−｛２−［４−（（Ｒ）−２−アミノ−２−フェニル−エチルアミノ）フェニル］エチルアミノ｝−１−ヒドロキシエチル）−２−ヒドロキシフェニル］ホルムアミドの合成）
（ａ．Ｎ−［５−（（Ｒ）−２−｛２−［４−（（Ｒ）−２−アミノ−２−フェニルエチルアミノ）フェニル］−エチルアミノ｝−１−（ｔｅｒｔ−ブチルジメチルジラニルオキシ）エチル）−２−ベンジルオキシフェニル］ホルムアミドの調製）
窒素下で、粗製の（Ｒ）−Ｎ２−［４−（２−アミノエチル）フェニル］−１−フェニルエタン−１，２−ジアミン（実施例１、工程ｅ）（３２０ｍｇ、１．３ｍｍｏｌ）、Ｎ−［２−ベンジルオキシ−５−（（Ｒ）−２−ブロモ−１−（ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシラニルオキシ）エチル）フェニル］ホルムアミド（４５０ｍｇ、１．０ｍｍｏｌ）、ヨウ化ナトリウム（１５０ｍｇ、１．０ｍｍｏｌ）および炭酸カリウム（５５０ｍｇ、４．０ｍｍｏｌ）を、ジメチルスルホキシド（２．５ｍＬ）で処理し、１５分間１４０℃まで加熱した。その混合物を室温まで冷却し、水と酢酸エチルとの間で分配した。有機物を飽和塩化ナトリウムで洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥させ、エバポレートして乾燥させた。その生成物を逆相ＨＰＬＣで精製し、凍結乾燥により単離して表題の中間体をそのトリフルオロ酢酸塩として得た。
【０１９９】
（ｂ．Ｎ−［５−（（Ｒ）−２−｛２−［４−（（Ｒ）−２−アミノ−２−フェニルエチルアミノ）フェニル］−エチルアミノ｝−１−ヒドロキシエチル）−２−ベンジルオキシフェニル］ホルムアミドの調製）
上記工程の生成物を、テトラヒドロフラン（２．０ｍＬ）に溶解させ、トリエチルアミン−フッ化三水素（２００μＬ）で２３時間処理した。その混合物を、１Ｎの水酸化ナトリウムと酢酸エチルとの間で分配した。有機物を無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、エバポレートして乾燥させて、表題の中間体（５５ｍｇ）を得た。これを、さらに精製することなく使用した。
【０２００】
（ｃ．Ｎ−［５−（（Ｒ）−２−｛２−［４−（（Ｒ）−２−アミノ−２−フェニルエチルアミノ）フェニル］エチルアミノ｝−１−ヒドロキシエチル）−２−ヒドロキシフェニル］ホルムアミドの調製）
上記工程の生成物の混合物（５５ｍｇ）およびパラジウム炭素（１０％Ｐｄ、１１ｍｇ）に、窒素下でメタノール（２ｍＬ）を添加した。その懸濁液を、水素下（大気圧）で、２３時間激しく攪拌した。触媒を濾過により除去し、溶液を酢酸で酸性にし、水で希釈した。表題の化合物を逆相ＨＰＬＣにより精製し、統括乾燥によりそのトリフルオロ酢酸塩として得た。１Ｈ  ＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）：１０．０（ｓ，１Ｈ），９．５（ｓ，１Ｈ），８．５（ｂｒ  ｓ，２Ｈ），８．３（ｂｒ  ｓ，３Ｈ），８．２（ｓ，１Ｈ），８．０（ｓ，１Ｈ），７．２−７．４（ｍ，５Ｈ），６．９（ｄ，２Ｈ，Ｊ＝８．０Ｈｚ），６．８（ｄｄ，１Ｈ），６．７（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝８．２Ｈｚ），６．５（ｄ，２Ｈ，Ｊ＝８．２Ｈｚ），６．０（ｍ，１Ｈ），５．６（ｍ，１Ｈ），４．６（ｍ，１Ｈ），４．２（ｍ，１Ｈ），２．８−３（ｍ，４Ｈ），２．６−２．７（ｍ，２Ｈ）。ｍ／ｚ：［Ｍ＋Ｈ＋］  Ｃ２５Ｈ３０Ｎ４Ｏ３に対する計算値：４３５．２；実測値  ４３５．３。
【０２０１】
（実施例３：５−（（Ｒ）−２−｛２−［４−（（Ｒ）−２−アミノ−２−フェニル−エチルアミノ）フェニル］エチルアミノ｝−１−ヒドロキシエチル）−８−ヒドロキシ−１Ｈ−キノリン−２−オンの代替的な合成）
（ａ．（Ｓ）−２−［４−（２−アミノエチル）フェニルアミノ］−１−フェニルエタノールの調製）
１０００ｍＬの３口フラスコに、２−（４−アミノフェニル）エチルアミン）（２０ｇ、１４７ｍｍｏｌ）および１，３−ジメチル−３，４，５，６−テトラヒドロ−２（１Ｈ）ピリミジノン（ＤＭＰＵ）を添加した。その反応フラスコに、間接攪拌器（ｏｖｅｒｈｅａｄ  ｓｔｉｒｒｅｒ）および温度計を取り付けた。その反応フラスコを窒素でパージ（ｐｕｒｇｅ）し、冷水浴中に置いた。その反応混合物を、テトラヒドロフラン中の１．０Ｍ  ビス（トリメチルシリル）アミドナトリウム（１６５ｍＬ、１６５ｍｍｏｌ）とチャージ（ｃｈａｒｇｅ）した（温度は３０℃以下に維持した）。そのビス（トリメチルシリル）アミドナトリウム溶液を、激しく攪拌しながら一度に添加した。その反応混合物を−１０℃まで冷却し、（Ｓ）−スチレンオキシド（１７ｍＬ、１５０ｍｍｏｌ）を添加した。−１０℃以下の温度に維持するように添加速度を調節した。その反応物を、（Ｓ）−スチレンオキシドの添加１５分後、２０℃まで温め、３０分以内に２８℃まで到達させた。その反応物を２５℃まで冷却し、反応を９０ｍＬの水を滴下することによりクエンチした。その反応混合物を分液漏斗に移し、１００ｍＬの酢酸イソプロピルで希釈し、９０ｍＬの飽和水性塩化ナトリウムで洗浄した。その有機層を、水（９０ｍＬ）と飽和水性塩化ナトリウム（９０ｍＬ）との混合物で３回洗浄し、最後に１８０ｍＬの飽和水性塩化ナトリウムで洗浄した。その有機層を真空下で濃縮した。残渣をイソプロパノールから２回再濃縮し（１００ｍＬ部分）、次いで、イソプロパノール（５００ｍＬ）に再溶解させ、攪拌しながら７０℃まで加熱した。濃塩酸（２７ｍＬ、３２７ｍｍｏｌ）を２分間にわたって添加した。その混合物を、室温まで冷却し、１４時間攪拌した。沈殿した生成物を濾過により単離し、イソプロパノールおよび酢酸イソプロピルで洗浄した。その生成物を真空下で、５０℃の水浴で１時間乾燥させ、次いで、８０ｍＬの水に溶解させ、分液漏斗に移した。酢酸イソプロピル（８０ｍＬ）および１０Ｎの水性水酸化ナトリウム（４０ｍＬ、４００ｍｍｏｌ）を添加した。その分液漏斗を振り、相を分離させた。その有機層を、４０ｍＬの飽和ＮａＣｌで１回洗浄し、硫酸マグネシウムで乾燥させた。その固体を回収し、濾液を濃縮した。残渣をトルエンから２回再濃縮して、表題の中間体を油状物（１４．７ｇ、５９ｍｍｏｌ、４０％）として得た。
【０２０２】
（ｂ．５−（（Ｒ）−２−｛２−［４−（（Ｓ）−２−ヒドロキシ−２−フェニルエチルアミノ）フェニル］−エチルアミノ｝−１−（ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシラニルオキシ）エチル）−８−ベンジルオキシ−１Ｈ−キノリン−２−オンの調製）
窒素下で、（Ｓ）−２−［４−（２−アミノエチル）−フェニルアミノ］−１−フェニルエタノール（１．７ｇ、６．６ｍｍｏｌ）および８−ベンジルオキシ−５−［（Ｒ）−２−ブロモ−１−（ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシラニルオキシ）エチル］−１Ｈ−キノリン−２−オン（１．５ｇ、３．１ｍｍｏｌ）を、ジメチルスルホキシド（４．０ｍＬ）で処理し、４０分間１２０℃まで加熱した。その混合物を室温までゆっくりと冷却し、（いくらかの不溶性のグミ状残渣をデカンテーションにより除去した後）水と酢酸エチルとの間で分配した。有機物を、０．９Ｍの酢酸ナトリウム／酢酸、飽和炭酸水素ナトリウムそして飽和塩化ナトリウムで洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥させ、エバポレートして乾燥させた。表題の中間体をさらに精製することなく使用した。
【０２０３】
（ｃ．５−（（Ｒ）−２−｛２−［４−（（Ｒ）−２−アジド−２−フェニルエチルアミノ）フェニル］エチルアミノ｝−１−（ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシラニルオキシ）エチル）−８−ベンジルオキシ−１Ｈ−キノリン−２−オンの調製）
窒素下で、上記工程の生成物（５００ｇ、０．７５ｍｍｏｌ）をテトラヒドロフラン（９ｍＬ）に溶解させ、ジフェニルホスホリルアジド（ｄｉｐｈｅｎｙｌｐｈｏｐｈｏｒｙｌ  ａｚｉｄｅ）（３２５μＬ、１．５ｍｍｏｌ）および１，８−ジアザビシクロ［５．４．０］ウンデカ−７−エン（２２６μＬ、１．５ｍｍｏｌ）で処理した。その混合物を３．５時間還流し、次いで１６時間室温まで冷却した。さらなるジフェニルホスホリルアジド（１６０μＬ、０．７５ｍｍｏｌ）および１，８−ジアザビシクロ［５．４．０］ウンデカ−７−エン（１１３μＬ，０．７５ｍｍｏｌ）を添加し、その混合物をさらに３時間還流し、次いで室温まで冷却した。その混合物を酢酸エチルと水との間で分配した。有機物を０．９Ｍの酢酸ナトリウム／酢酸、飽和炭酸水素ナトリウムそして飽和塩化ナトリウムで洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥させ、エバポレートして乾燥させた。その生成物を逆相ＨＰＬＣで精製し、凍結乾燥により単離して表題の中間体をそのトリフルオロ酢酸塩（１１０ｍｇ）として得た。
【０２０４】
（ｄ．５−（（Ｒ）−２−｛２−［４−（（Ｒ）−２−アジド−２−フェニルエチルアミノ）フェニル］エチルアミノ｝−１−ヒドロキシエチル）−８−ベンジルオキシ−１Ｈ−キノリン−２−オンの調製）
上記工程の生成物（１１０ｍｇ）をテトラヒドロフラン（２．０ｍＬ）に溶解させ、トリエチルアミン−フッ化三水素（２００μＬ）で２３時間処理した。その混合物を無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、エバポレートして乾燥させて表題の中間体（５０ｍｇ）を得た。これを、さらに精製することなく使用した。
【０２０５】
（ｅ．５−（（Ｒ）−２−｛２−［４−（（Ｒ）−２−アミノ−２−フェニルエチルアミノ）フェニル］−エチルアミノ｝−１−ヒドロキシエチル）−８−ヒドロキシ−１Ｈ−キノリン−２−オンの合成）
上記工程の生成物（５０ｍｇ）とパラジウム炭素（１０％Ｐｄ、１０ｍｇ）との混合物に、窒素下で、ジクロロメタン（５００μＬ）およびエタノール（５００μＬ）を添加した。その懸濁液を水素下（大気圧）で２３時間激しく攪拌した。さらなる触媒（１０ｍｇ）およびＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（１ｍＬ）を添加し、その懸濁液をさらに２４時間攪拌した。その触媒を濾過により除去し、その混合物を減圧下で濃縮した。表題の化合物を逆相ＨＰＬＣにより精製し、凍結乾燥によりそのトリフルオロ酢酸塩として単離した。
【０２０６】
（実施例４：Ｎ−［５−（（Ｒ）−２−｛２−［４−（（Ｒ）−２−アミノ−２−フェニル−エチルアミノ）フェニル］エチルアミノ｝−１−ヒドロキシエチル）−２−ヒドロキシフェニル］ホルムアミドの代替的な合成）
（ａ．Ｎ−［５−（（Ｒ）−２−｛２−［４−（（Ｓ）−２−ヒドロキシ−２−フェニルエチルアミノ）フェニル］−エチルアミノ｝−１−（ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシラニルオキシ）エチル）−２−ベンジルオキシフェニル］ホルムアミドの調製）
窒素下で、（Ｓ）−２−［４−（２―アミノエチル）フェニルアミノ］−１−フェニルエタノール（実施例３、工程ａ）（１．７ｇ、６．６ｍｍｏｌ）、Ｎ−［２−ベンジルオキシ−５−（（Ｒ）−２−ブロモ−１−（ｔｅｒｔ−ブチル−ジメチルシラニルオキシ）エチル）フェニル］ホルムアミド）（２．４ｇ、５．２ｍｍｏｌ）、炭酸カリウム（２．８ｇ、２０ｍｍｏｌ）およびヨウ化ナトリウム（８６０ｍｇ、５．７ｍｍｏｌ）を、ジメチルスルホキシド（４．７ｍＬ）で処理し、１２分間１４０℃まで加熱した。その混合物を、室温まで冷却し、（いくらかの不溶性のグミ状残渣をデカンテーションにより除去した後）水と５０％酢酸エチル／酢酸イソプロピルとの間で分配した。有機物を水、０．９Ｍの酢酸ナトリウム酢酸、飽和炭酸水素ナトリウムそして塩化ナトリウムで洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥させ、エバポレートして乾燥させた。表題の中間体をさらに精製することなく使用した。
【０２０７】
（ｂ．Ｎ−［５−（（Ｒ）−２−｛２−［４−（（Ｒ）−２−アジド−２−フェニルエチルアミノ）フェニル］−エチルアミノ｝−１−（ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシラニルオキシ）エチル）−２−ベンジルオキシフェニル］ホルムアミドの調製）
窒素下で、上記工程の生成物（９００ｍｇ、１．４ｍｍｏｌ）をテトラヒドロフラン（９ｍＬ）に溶解させ、ジフェニルホスホリルアジド（６１０μ、Ｌ２．８ｍｍｏｌ）およびＣ（４２０μＬ、２．８ｍｍｏｌ
）で処理した。その混合物を３．５時間攪拌し、次いで、１６時間室温まで冷却した。さらなるジフェニルホスホリルアジド（３０５μＬ、１．４ｍｍｏｌ）およびジフェニルホスホリルアジド（２１０μＬ、１．４ｍｍｏｌ）を添加し、その混合物をさらに３時間還流し、次いで室温前冷却した。その混合物を酢酸エチルと水との間で分配した。有機物を０．９Ｍの酢酸ナトリウム、飽和炭酸始水素ナトリウムそして飽和塩化ナトリウムで洗浄し、硫酸ナトリウムで洗浄し、エバポレートして乾燥させた。その生成物を逆相ＨＰＬＣにより精製し、凍結乾燥によって単離して表記の中間体をそのトリフルオロ酢酸塩（１８０ｍｇ）として得た。
【０２０８】
（ｃ．Ｎ−［５−（（Ｒ）−２−｛２−［４−（（Ｒ）−２−アジド−２−フェニルエチルアミノ）フェニル］−エチルアミノ｝−１−ヒドロキシエチル）−２−ベンジルオキシフェニル］ホルムアミドの調製）
上記工程の生成物（１３０ｍｇ）をテトラヒドロフラン（２．０ｍＬ）に溶解させ、トリエチルアミン−フッ化三水素（２００μＬ）で２３時間処理した。その混合物を、１Ｎの水酸化ナトリウムと酢酸エチルとの間で分配した。有機物を無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、エバポレートして乾燥させて表題の中間体（９０ｍｇ）を得た。これを、さらに精製することなく使用した。
【０２０９】
（ｄ．Ｎ−［５−（（Ｒ）−２−｛２−［４−（（Ｒ）−２−アミノ−２−フェニルエチルアミノ）フェニル］−エチルアミノ｝−１−ヒドロキシエチル）−ヒドロキシフェニル］ホルムアミドの合成）
上記工程の生成物（９０ｍｇ）とパラジウム炭素（１０％Ｐｄ、１８ｍｇ）との混合物に、窒素下で、ジクロロメタン（１ｍＬ）およびエタノール（１ｍＬ）を添加した。その懸濁液を、水素下（大気圧）で２３時間激しく攪拌した。さらなる触媒（１８ｍｇ）およびＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（１ｍＬ）を添加し、その懸濁液をさらに２４時間攪拌した。触媒を濾過により除去し、その混合物を減圧下で濃縮した。表題の化合物を逆相ＺＨＰＬＣにより精製して、凍結乾燥によりそのトリフルオロ酢酸塩として単離した。
【０２１０】
（実施例５：（Ｒ）−Ｎ２−［４−（２−アミノエチル）フェニル］−１−フェニルエタン−１，２−ジアミンの代替的な調製）
（ａ．［２−（４−アミノフェニル）エチル］カルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステルの調製）
ジクロロメタン（１．５Ｌ）中の４−アミノフェニルエチルアミン（６５．１ｇ、１．０当量）に、０℃で、ジクロロメタン（３００ｍＬ）中のジ−ｔｅｒｔ−ブチルジカーボネート（９９．２ｇ、０．９５当量）を滴下した。その溶液をゆっくりと室温まで温め、１８時間攪拌した。水２００ｍＬを添加し、溶媒を減圧下でおおよそ１Ｌの容積までエバポレートし、その水層および有機層を分離し、有機層を水（２００ｍＬ）で洗浄し、その後、飽和水性塩化ナトリウム（１００ｍＬ）で洗浄した。有機層を無水硫酸ナトリウム（４０ｇ）で乾燥させた。固体を濾過し、濾液を濃縮して表題の化合物（１００．７ｇ）を得、これを、ヘキサン（７４５ｍＬ）と酢酸エチル（１５０ｍＬ）との混合物中に懸濁させた。そのスラリーを透明な溶液が得られるまで加熱し、次いで、その溶液をゆっくりと室温まで冷却した。得られる触媒を濾過し、１０％酢酸エチル／ヘキサン溶液（１００ｍＬ）で洗浄し、真空下で乾燥させて表題の中間体（５５．１ｇ、４８％収率）が得られる。
【０２１１】
（ｂ．（Ｒ）−｛［４−（２−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノエチル）フェニルカルバモイル］フェニル−メチルカルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステルの調製）
１Ｌフラスコに、上記工程の生成物（３０．０ｇ、１．０７当量）、（（Ｒ）−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ）フェニル酢酸（３０．０ｇ、１．０当量）およびＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（２４０ｍＬ）中の１−ヒドロキシ−７−アザベンゾトリアゾールの溶液を充填した。その溶液を、すべての固体が溶解するまで攪拌した。その溶液を氷浴で１５分間冷却し、１−［３−ジメチルアミノプロピル］−３−エチルカルボジイミドヒドロクロリド（２６．９ｇ、1.１８当量）を添加した。その反応物を０℃で８０分間攪拌した。その混合物を水と酢酸エチルとの間で分配し、有機相を順に、水、１Ｎの塩酸、飽和水性重炭酸ナトリウム、そして飽和水性塩化ナトリウムで洗浄した。その有機層を無水硫酸ナトリウムで乾燥させた。その固体を濾過し、濾液を濃縮して表題の中間体を固体（５７ｇ、定量的収率）を得た。これをさらに精製することなく使用した。
【０２１２】
（ｃ．（Ｒ）−２−アミノ−Ｎ−［４−（２−アミノエチル）フェニル］−２−フェニルアセトアミドの調製）
上記工程の粗生成物（５７ｇ）を、ジクロロメタン（１００ｍＬ）と合わせた。その混合物を０℃まで冷却し、トリフルオロ酢酸（１５０ｍＬ）１５分にわたって添加した。その混合物を１．５時間攪拌し、次いで、揮発物を減圧下で除去した。得られた油状物をジクロロメタン（３００ｍＬ）に取り入れ、１Ｎの水酸化ナトリウム（２００ｍＬ）を添加し、その後１０Ｎの水酸化ナトリウム（５０ｍＬ）を添加した。層を分離し、塩基性の水層をジクロロメタン（３×２００ｍＬ）で抽出した。有機層を合わせ、無水硫酸ナトリウム（２０ｇ）で乾燥させた。固体を濾過により除去し、濾液を濃縮して表題の中間体（３３．３ｇ、定量的収率）得た。これをさらに精製することなく使用した。
【０２１３】
（ｄ．（Ｒ）−Ｎ２−［４−（２−アミノエチル）フェニル］−１−フェニルエタン−１，２−ジアミンの調製）
上記工程の粗生成物（３３．３ｇ、１．０当量）をテトラヒドロフラン（２５０ｍＬ）に溶解させ、氷浴で冷却した。ボラン−硫化ジメチル錯体（４５．５ｍＬ、４．０当量）を添加した。その溶液を６５℃まで加熱し、２時間攪拌し、次いで、０℃まで冷却した。メタノール（６５０ｍＬ）を添加し、その後、トリフルオロ酢酸（５ｍＬ）を添加し、その混合物をエバポレートして乾燥させた。残渣をメタノール（２００ｍＬ）に溶解させ、その後、トリフルオロ酢酸（５ｍＬ）に溶解させ、再度エバポレートして乾燥させた。残渣をメタノール（１５０ｍＬ）に溶解させ、１Ｎの水酸化ナトリウム（１５０ｍＬ）を添加し、その後、１０Ｎの水酸化ナトリウム（４０ｍＬ）を添加した。その溶液を濃縮して有機溶媒を除去し、残渣の水層をジクロロメタン（４００ｍＬ、その後、３×１００ｍＬ）で抽出した。その有機層を合わせ、無水硫酸ナトリウムで乾燥させた。固体を濾過により除去し、濾液を濃縮して粗製の表題の中間体（２９．８ｇ）を得た。
【０２１４】
粗生成物をエタノール（６００ｍＬ）に溶解させ、８０℃で３０分間攪拌した。水（９０ｍＬ）中のＬ−マレイン酸（１６．６ｇ、１．０６当量）の溶液を添加し、その後、エタノール（350ｍＬ）を滴下した。その混合物を８０℃で３０分間攪拌し、次いで、室温で１２時間攪拌した。固体を真空濾過により回収し、１０％水／エタノール（１３０ｍＬ）でリンスし、次いで、エタノール（１３０ｍＬ）でリンスした。結晶を真空下で乾燥させて、表題の中間体（３８．６ｇ）のＬ−リンゴ酸塩を得た。そのＬ−リンゴ酸塩を水（１５０ｍＬ）に溶解させ、ジクロロメタン（１７５ｍＬ）を添加した。その混合物を攪拌し、０℃まで冷却し、１０．０Ｎの水酸化ナトリウム（５０ｍＬ）を添加した。層を分離し、水層をジクロロメタン（２×１７５ｍＬ）で抽出した。有機層を合わせ、無水硫酸ナトリウム（２０ｇ）で乾燥させた。固体を濾過により除去し、濾液を濃縮して表題の中間体（２４．９ｇ、ｅ．ｅ．＞９９％）を無色の油状物として得た。
【０２１５】
（実施例６：Ｎ−［５−（（Ｒ）−２−｛２−［４−（（Ｒ）−２−アミノ−２−フェニル−エチルアミノ）フェニル］エチルアミノ｝−１−ヒドロキシエチル）−２−ヒドロキシフェニル］ホルムアミドの代替的な合成）
（ａ．Ｎ−［５−（（Ｒ）−２−｛２−［４−（（Ｒ）−２−アミノ−２−フェニル［エチルアミノ）フェニル］−エチルアミノ｝−１−（ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシラニルオキシ）エチル）−２−ベンジルオキシフェニル］ホルムアミドの調製）
窒素下で、（Ｒ）−Ｎ２−［４−（２−アミノエチル）フェニル］−１−フェニルエタン−１，２−ジアミン（実施例５）（２２．４ｇ、１．４当量）、Ｎ−［２−ベンジルオキシ−５−（（Ｒ）−ブロモ−１−（ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシラニルオキシ）エチル）フェニル］ホルムアミド（２９．２ｇ、１．０当量）、炭酸カリウム（３４．７ｇ、４．０当量）を、ジメチルスルホキシド（３５ｍＬ）と混合した。得られたスラリーを、１００℃で８５分間攪拌した。その混合物を室温まで冷却し、水（２００ｍＬ）および酢酸イソプロピル（２００ｍＬ）を添加した。層を分離し、有機層を水（２００ｍＬ）で洗浄し、その後、水性飽和塩化ナトリウム（１５０ｍＬ）で洗浄し、無水硫酸マグネシウム（２０ｇ）で乾燥させた。固体を濾過により除去し、濾液を濃縮して粗製の表題の中間体を灰白色の油状物として得た。
【０２１６】
（ｂ．Ｎ−［５−（（Ｒ）−２−｛２−［４−（（Ｒ）−２−アミノ−２−フェニルエチルアミノ）フェニル］−エチルアミノ｝−１−ヒドロキシエチル）−２−ベンジルオキシフェニル］ホルムアミドの調製）
上記工程の生成物（５０．５ｇ、１．０当量）をテトラヒドロフラン（３００ｍＬ）に溶解させ、トリエチルアミン−フッ化三水素（１９．１ｇ、１．５当量）で室温にて１２時間処理した。有機上清をデカンテーションし、残りの生成物を含むグミ状固体を残し、これに、酢酸イソプロピル（２００ｍＬ）を添加し、その後、１．０Ｎの水性水酸化ナトリウム（２００ｍＬ）を添加した。その混合物を固体のほとんどが溶解するまで攪拌した。二相混合物の上層をデカンテーションし、保管した。酢酸イソプロピル（１５０ｍＬ）を水層に添加し、すべての固体が溶解するまで攪拌し、次いで、二相混合物を、保管した有機層と合わせた。その層を分離し、塩基性の水層を再度酢酸イソプロピル（１５０ｍＬ）で抽出した。その有機層を合わせ、無水硫酸ナトリウムで乾燥させた。固体を濾過により除去し、溶媒をエバポレートして粗製の表題の中間体（３８．３ｇ）を灰白色の残渣として得た。
【０２１７】
その粗生成物を、３つのバッチに分けた。代表的なバッチにおいて、粗生成物（１８．１ｇ）をアセトニトリル（１２５ｍＬ）に溶解させ、溶液をエバポレートして乾燥させた。残渣を水（４０ｍＬ）、アセトニトリル（２０ｍＬ）および酢酸（４ｍＬ）で希釈した。その溶液を濾過し、分取用ＨＰＬＣで精製し、清浄な画分を合わせ、凍結乾燥により濃縮して表題の中間体のトリフルオロ酢酸塩を無定形固体として得た。３つのバッチの総収量：２０ｇ、３４％収率。
【０２１８】
（ｃ．Ｎ−［５−（（Ｒ）−２−｛２−［４−（（Ｒ）−２−アミノ−２−フェニルエチルアミノ）フェニル］エチルアミノ｝−１−ヒドロキシエチル）−２−ヒドロキシフェニリル］ホルムアミドの合成）
上記工程の生成物（１６．０ｇ、１．０当量）をテトラヒドロフラン（６４０ｍＬ）に溶解させ、水酸化パラジウム炭素（３．２ｇ、０．２当量）を窒素流下で添加した。その溶液を水素下で３〜５時間攪拌した。その反応フラスコを窒素でパージし、その反応混合物をセライト（３０．０ｇ）で濾過し、テトラヒドロフラン（１００ｍＬ）で洗浄した。その溶媒を真空下で除去して粗製の表題の中間体（１６．０）を油状物として得た。
【０２１９】
その粗生成物を３つのバッチに分けた。代表的なバッチにおいて、粗生成物（４．０ｇ）を水（１０ｍＬ）に可溶化させ、１０分間攪拌して溶解させた。その溶液を濾過し、分取用ＨＰＬＣにより精製し、清浄な画分を合わせ、凍結乾燥により濃縮して表題の中間体のトリフルオロ酢酸塩を無定形固体として得た。３つのバッチの総収量：８．４ｇ、６０％収率。
【０２２０】
（実施例７：結晶性Ｎ−［５−（（Ｒ）−２−｛２−［４−（（Ｒ）−２−アミノ−２−フェニルエチルアミノ）フェニル］エチルアミノ｝−１−ヒドロキシエチル）−２−ヒドロキシフェニル］ホルムアミド塩酸塩の合成）
（ａ．Ｎ−［５−（（Ｒ）−２−｛２−［４−（（Ｒ）−２−アミノ−２−フェニルエチルアミノ）フェニル］−エチルアミノ｝−１−ヒドロキシエチル）−２−ベンジルオキシフェニル］ホルムアミド遊離塩基の調製）
Ｎ−［５−（（Ｒ）−２−｛２−［４−（（Ｒ）−２−アミノ−２−フェニルエチルアミノ）フェニル］−エチルアミノ｝−１−ヒドロキシエチル）−２−ベンジルオキシフェニル］ホルムアミド（実施例６、パートｂ）のトリフルオロ酢酸塩を、ジクロロメタン（１００ｍＬ）と１．０  Ｎ水酸化ナトリウム水溶液（１００ｍＬ）との間に分配した。有機層を、さらなる１．０  Ｎ水酸化ナトリウム水溶液（１００ｍＬ）で洗浄し、続いて水（１００ｍＬ）で洗浄した。その有機層を、無水硫酸ナトリウムで１５分間乾燥した。固形物を減圧濾過で収集し、溶媒を蒸発して、表題の中間体を油状物として得た。
【０２２１】
（ｂ．Ｎ−［５−（（Ｒ）−２−｛２−［４−（（Ｒ）−２−アミノ−２−フェニルエチルアミノ）フェニル］−エチルアミノ｝−１−ヒドロキシエチル）−２−ヒドロキシフェニル］ホルムアミド遊離塩基の調製）
前工程の生成物（１．５ｇ）を、２０％ｗ／ｗの炭素担持水酸化パラジウム（３００ｍｇ）を添加し、続いて１：１テトラヒドロフラン：エタノール混合物（６０ｍＬ）を添加した。生じたスラリーを、水素下で一晩、激しく撹拌した。触媒を濾過によって除去し、その濾液を減圧下で濃縮し、粗製の表題生成物（１．２ｇ）を得た。
【０２２２】
（ｃ．Ｎ−［５−（（Ｒ）−２−｛２−［４−（（Ｒ）−２−アミノ−２−フェニルエチルアミノ）フェニル］−エチルアミノ｝−１−ヒドロキシエチル）−２−ヒドロキシフェニル］ホルムアミド塩酸塩の種結晶の調製）
丸底フラスコ中で、前工程の遊離塩基生成物（１２０ｍｇ）を、イソプロピルアルコール（３．６ｍＬ）と一緒に、５０℃で、溶液が均一になるまで撹拌し、その後、０．５Ｎ  ＨＣｌ（０．５８ｍＬ）を添加し、その溶液をさらに５分間、５０℃で撹拌した。その溶液を１．５時間かけて室温にまで徐々に冷却し、次いで、一晩撹拌した。生じた結晶を濾過し、減圧下で乾燥し、表題の結晶性生成物（７８．０ｍｇ）を得た。
【０２２３】
（ｄ．結晶性Ｎ−［５−（（Ｒ）−２−｛２−［４−（（Ｒ）−２−アミノ−２−フェニルエチルアミノ）フェニル］−エチルアミノ｝−１−ヒドロキシエチル）−２−ヒドロキシフェニル］ホルムアミド塩酸塩の合成）
丸底フラスコ中で、工程ｂ（１．０ｇ）の遊離塩基生成物を、その溶液が均一になるまで、イソプロピルアルコール（３０ｍＬ）中に溶解し、続いて、０．５Ｎ  ＨＣｌ（４．８ｍＬ）を添加した。その溶液を、数分間加熱し、そして前工程で生成した種結晶（約５ｍｇ）を添加した。その溶液を３５℃に冷却し、２時間撹拌した。その溶液を、２時間かけて室温までゆっくりと冷却した。生じた結晶を単離し、空気濾過によって乾燥させ、表題の塩酸塩（６９０ｍｇ）を得た。イソプロピルアルコール（７ｍＬ）および水（３．３６ｍＬ）を添加し、その結晶を４５℃にまで再加熱した。イソプロピルアルコール（１４ｍＬ）を添加し、スラリーを１時間撹拌した。その溶液を室温までゆっくりと冷却し、次いで４０℃で５時間、再加熱した。その溶液を室温までゆっくりと冷却し、一晩撹拌した。その結晶を濾過によって単離し、空気中で乾燥させ、表題の結晶性塩酸塩（５５０ｍｇ）を得た。
【０２２４】
（実施例８：結晶性Ｎ−［５−（（Ｒ）−２−｛２−［４−（（Ｒ）−２−アミノ−２−フェニルエチルアミノ）フェニル］エチルアミノ｝−１−ヒドロキシエチル）−２−ヒドロキシフェニル］ホルムアミド塩酸塩の特徴付け）
実施例７、パートｄで調製した表題の結晶性塩酸塩のサンプルを、以下のように特徴付けた：１Ｈ  ＮＭＲ（３００ＭＨｚ）：９．５（ｓ，１Ｈ），８．２（ｓ，１Ｈ），８．０（ｂｒ  ｓ，１Ｈ），７．１−７．４（ｍ，６Ｈ），６．７−６．９（ｍ，５Ｈ），６．４（ｄ，２Ｈ），５．５（ｂｒ  ｓ，２Ｈ），４．５（ｄ，１Ｈ），４．０（ｔ，１Ｈ），３．１（ｂｒ  ｓ，２Ｈ），２．６−２．８（ｍ，４Ｈ），２．３（ｍ，５Ｈ）；ｍ／ｚ：［Ｍ＋Ｈ＋］Ｃ２５Ｈ３０Ｎ４Ｏ３についての計算値：４３５．４；検出値４３５．５；元素分析（ｗｔ％）Ｃ２５Ｈ３０Ｎ４Ｏ３・ＨＣｌについての計算値：Ｃ，６３．８，Ｈ，６．６，Ｎ，１１．９，Ｏ，１０．２，Ｃｌ，７．５；検出値：Ｃ，６３．７，Ｈ，６．８，Ｎ，１１．８，Ｏ，９．７，Ｃｌ，８．１；Ｋａｒｌ  Ｆｉｓｈｅｒ分析による含水量０．９％。
【０２２５】
示差走査型熱量測定トレース（ＴＡ機器モデルＤＳＣ２０１０、３０℃で平衡化し、５℃／分で３００℃に加熱した）は、約１８５℃と約２００℃との間に吸熱性熱流の鋭いピークを示した。
【０２２６】
３°／分の走査速度および０．０３°／ポイントのステップサイズでＣｕ  Ｋα発生（３０ｋＶ、１５ｍＡ）を使用してＲｉｇａｋｕ  Ｘ−Ｒａｙ  Ｍｉｎｉｆｌｅｘ回折計で得られた粉末ｘ線回折像を、図に示す。
【０２２７】
（実施例９：Ｎ−[５−（（Ｒ）−２−｛２−[４−（（Ｓ）−２−アミノ−２−フェニル−エチルアミノ）フェニル]エチルアミノ｝−１−ヒドロキシエチル）−２−ヒドロキシフェニル]−ホルムアミドの合成）
（ａ．（Ｓ）−｛[４−（２−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ）フェニルカルバモイル]フェニル−メチルカルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステルの調製）
[２−（４−アミノフェニル）エチル]カルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステル（３．９５ｇ、１６．７ｍｍｏｌ）および（（Ｓ）−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ）フェニル酢酸（３．９７ｇ、１５．７ｍｍｏｌ）を、Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（３１．７６ｍＬ）中の１−ヒドロキシ−７−アザベンゾトリアゾールの０．５Ｍ溶液を、窒素下で溶解させ、それを０℃まで冷却した。１−（３−ジメチルアミノプロピル）−３−エチルカルボジイミドヒドロクロリド（３．５７ｇ、１８．６ｍｍｏｌ）を、添加し、その混合物を、０℃にて１０分間攪拌し、室温で１．５時間攪拌した。その混合物を、水と酢酸との間で分配し、その有機物を、１．０Ｎ  ＨＣｌ、飽和炭酸水素ナトリウム、および飽和塩化ナトリウムで洗浄した。その後、その有機物を、硫酸ナトリウムで乾燥させ、エバポレートして乾燥させた。表題中間体を、さらに精製することなく使用した。
【０２２８】
（ｂ．（Ｓ）−２−アミノ−Ｎ−[４−（２−アミノエチル）フェニル]−２−フェニルアセトアミドの調製）
上記工程の粗生成物を、ジクロロメタン（１５ｍＬ）中に溶解し、０℃まで冷却させた。トリフルオロ酢酸（１５ｍＬ）を添加し、その混合物を、０℃にて３０分間攪拌した。その溶液を室温まで加温し、１時間攪拌し、その揮発物を、減圧下で除去した。その油状物をジクロロメタン中に溶かし込み、１Ｎ水酸化ナトリウムで洗浄した。その有機相を、硫酸ナトリウムで乾燥させ、エバポレートして乾燥させて、表題中間体（４．３ｇ、１６．２ｍｍｏｌ）を得た。この表題中間体を、さらに精製することなく使用した。
【０２２９】
（ｃ．（Ｓ）−Ｎ２−[４−（２−アミノエチル）フェニル]−１−フェニルエタン−１，２−ジアミンの調製）
上記工程の粗生成物（４．３ｇ、１６．２ｍｍｏｌ）を、テトラヒドロフラン（５０ｍＬ）中に溶解し、ボラン−硫化ジメチル複合体（５．７ｍＬ）で処理した。その混合物を、６５℃にて２時間還流させ、そして室温まで冷却した。メタノール（５０ｍＬ）を、３０分間かけて添加し、その後、トリフルオロ酢酸（３ｍＬ）を添加した。その混合物を、エバポレートして乾燥させた。それを、メタノール（５０ｍＬ）およびトリフルオロ酢酸（１ｍＬ）中に溶かし込み、再度エバポレートして乾燥させた。その後、得られた油状物を、メタノール（３０ｍＬ）で溶解し、１０水酸化ナトリウム（３０ｍＬ）で溶解し、その後、１０．０Ｎ水酸化ナトリウム（５ｍＬ）を添加した。その溶液を、１０分間攪拌し、その後、水で希釈し、そしてジクロロメタンで抽出した。その有機層を、硫酸ナトリウムで乾燥させ、エバポレートして乾燥させた。その後、その粗表題中間体（３．７ｇ、１４．４ｍｍｏｌ）を、エチルアルコール（１０５ｍＬ)中に溶解し、８０℃まで加熱した。Ｈ２Ｏ中のＤ−リンゴ酸（２．１６ｇ、１６．１ｍｍｏｌ）の溶液を、上記の加熱した溶液に添加し、その後、エチルアルコール（４５ｍＬ）を添加した。その溶液を、室温まで冷却し、そして１５時間攪拌した。その沈殿物を、濾過し、そして水とジクロロメタンとの間で分配した。その有機物を、１．０Ｎ  ＮａＯＨおよび飽和塩化ナトリウムで洗浄した。その後、その有機物を、硫酸ナトリウムで乾燥させ、エバポレートして乾燥させて、表題中間体（２．０ｇ、７．８ｍｍｏｌ）を得た。
【０２３０】
（ｄ．Ｎ−[５−（（Ｒ）−２−｛２−[４−（（Ｓ）−２−アミノ−２−フェニルアミノ)フェニル]−エチルアミノ｝−１−（ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシラニルオキシ）エチル）２−ベンゾイルオキシフェニル]ホルムアミドの調製）
窒素下で、上記工程の粗生成物（４３１ｍｇ、１．７ｍｍｏｌ）、Ｎ−[２−ベンジルオキシ−５−（（Ｒ）−２−ブロモ−１−（ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシラニルオキシ）エチル）フェニル]ホルムアミド（４７１ｍｇ、１．０ｍｍｏｌ、および炭酸水素ナトリウム（３００ｍｇ、３．５ｍｍｏｌ）を、ジメチルスルホキシド（１．２ｍＬ）で処理し、１００℃にて１時間加熱した。その混合物を、室温まで冷却し、水と酢酸エチルとの間で分配した。その有機物を、飽和塩化ナトリウムで洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥させ、そしてエバポレートして乾燥させた。その表題中間体を、さらに精製することなく使用した。
【０２３１】
（ｅ．Ｎ−[５−（（Ｒ）−２−｛２−[４−（（Ｓ）−２−アミノ−２−フェニルエチルアミノ）フェニル]−エチルアミノ｝−１−ヒドロキシエチル）−２−ベンジルオキシフェニル]ホルムアミドの調製）
上記工程の生成物を、テトラヒドロフラン（５ｍＬ）中に溶解し、そしてトリエチルアミン−トリヒドロフルオリド（８２３μＬ）で８時間処理した。その混合物を、１Ｎ水酸化名取オウムとジクロロメタンとの間で分配した。その有機物を、無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、エバポレートして乾燥させた。その有機物を、逆相ＨＰＬＣによって精製し、凍結乾燥によって単離して、表題中間体をそのトリフルオロ酢酸塩（１５０ｍｇ、０．２ｍｍｏｌ）として得た。
【０２３２】
（ｆ．Ｎ−[５−（（Ｒ）−２−｛２−[４−（（Ｓ）−２−アミノ−２−フェニルエチルアミノ）フェニル]−エチルアミノ｝−１−ヒドロキシエチル）−２−ヒドロキシフェニル]ホルムアミドの合成）
上記工程の生成物（１５０ｍｇ、０．２ｍｍｏｌ）を、エチルアルコール（５ｍＬ）および酢酸（５ｍＬ）中に溶解し、２０％  Ｐｄ（ＯＨ）２（２４ｍｇ）を窒素下で添加した。その反応フラスコを、大気圧下にて水素ガスでパージし、水素下で２０時間攪拌した。その結晶を濾過し、その揮発物を、エバポレートした。その表題化合物を、逆相ＨＰＬＣによって精製し、凍結乾燥によってそのトリフルオロ酢酸塩（７９．０ｍｇ、０．１２ｍｍｏｌ）として単離した。ｍ／ｚ：Ｃ２５Ｈ３０Ｎ４Ｏ３についての[Ｍ＋Ｈ＋]：計算値４３５．２；実測地４３５．８。
【０２３３】
（実施例１０：５−（（Ｒ）−２−｛２−［４−（（Ｓ）−２−アミノ−２−フェニルエチルアミノ）−フェニル］エチルアミノ｝−１−ヒドロキシエチル）−８−ヒドロキシ−１Ｈ−キノリン−２−オンの合成）
実施例９の工程ｄ、ｅおよびｆと類似の手順を使用して、工程ｄのＮ−［２−ベンジルオキシ−５−（（Ｒ）−２−ブロモ−１−（ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシラニルオキシ）エチル）フェニル］ホルムアミドを８−ベンジルオキシ−５−［（Ｒ）−２−ブロモ−１−（ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシラニルオキシ）エチル］−１Ｈ−キノリン−２オンに置き換えて、表題の化合物のトリフルオロ酢酸塩を得た。ｍ／ｚ：［Ｍ＋
Ｈ＋］Ｃ２７Ｈ３０Ｎ４Ｏ３に対する計算値：４９５．２；実測値  ４５９．４.
（実施例１１：５−（（Ｒ）−２−｛２−［４−（（Ｒ）−２−メチルアミノ−２−フェニルエチルアミノ）フェニル］エチルアミノ｝−１−ヒドロキシエチル）−８−ヒドロキシ−１Ｈ−キノリン−２−オンの合成）
（ａ．（Ｒ）−（ベンジルオキシカルボニルメチルアミノ）フェニル酢酸の調製）
（Ｒ）−（ベンジルオキシカルボニルアミノ）フェニル酢酸（２．０ｇ、７．０ｍｍｏｌ）を、窒素下でテトラヒドロフランで溶解させ、水酸化ナトリウム（ミネラルオイル中６０％分散、８４０ｍｇ、２１ｍｍｏｌ）を添加した。その溶液に、ヨウ化メチル（７３７ｍｇ、５０ｍｍｏｌ）を添加し、反応物を３０分間攪拌した。水（１ｍＬ）を反応物に添加し、揮発物をエバポレートした。その生成物を逆相ＨＰＬＣにより精製し凍結乾燥により単離して表題の中間体（１．６６ｇ、５．５ｍｍｏｌ）を得た。
【０２３４】
（ｂ．｛（Ｒ）−［４−（２−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノエチル）フェニルカルバモイル］−フェニルメチル｝メチルカルバミン酸ベンジルエステルの調製）
［２−（４−アミノフェニル）エチル］カルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステル（１．３１ｇ、５．６ｍｍｏｌ）、上記工程の生成物（１．６６ｇ、５．６ｍｍｏｌ）、１−ヒドロキシ−７−アザベンゾトリアゾール（１．４６ｇ、１０．５ｍｍｏｌ）を、窒素下で、Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（１０ｍＬ）で溶解させ、０℃まで冷却した。１−（３−ジメチルアミノプロピル）−３−エチルカルボジイミドヒドロクロリド（２．０２ｇ、１０．５ｍｍｏｌ）を添加し、その混合物を水と酢酸エチルとの間で分配し、有機物を１．０ＮのＨＣｌ、飽和炭酸水素ナトリウムそして飽和塩化ナトリウムで洗浄した。次いで、その有機物を硫酸ナトリウムで乾燥させエバポレートして乾燥させた。表題の中間体を、さらに精製することなく使用した。
【０２３５】
（ｃ．｛（Ｒ）−［４−（２−アミノエチル）フェニルカルバモイル］フェニルメチル｝メチルカルバミン酸ベンジルエステルの調製）
前述の工程の粗生成物を、ジクロロメタン（５ｍＬ）中に溶解し、トリフルオロ酢酸を添加した（５ｍＬ）。この混合物を、３０分間攪拌し、次いで、揮発性物質を減圧下で除去した。その油状物を、ジクロロメタン中にとり、１Ｎ  水酸化ナトリウムで洗浄した。そのジクロロメタン相を、硫酸ナトリウムで乾燥させ、乾燥するまでエバポレートして、標題中間体を得、この中間体を、さらに精製せずに使用した。
【０２３６】
（ｄ．（Ｒ）−Ｎ−［４−（２−アミノエチル）フェニル］−２−メチルアミノ−２−フェニルアセトアミドの調製）
上記工程の粗生成物（８００ｍｇ、１．９ｍｍｏｌ）を、メタノール（５ｍＬ）で溶解し、ジクロロメタン（５ｍＬ）および１０％  炭素担持パラジウム（２００ｍｇ）を窒素下で添加した。そのフラスコを大気圧下で水素ガスでパージし、その反応系を２時間水素ガス下で攪拌した。このパラジウム触媒を、濾過により除去し、その揮発性物質をエバポレートして、標題中間体を得た。
【０２３７】
（ｅ．（Ｒ）−Ｎ２−［４−（２−アミノエチル）フェニル］−Ｎ１−メチル−１−フェニルエタン−１，２−ジアミンの調製）
上記工程の粗生成物（５２３ｍｇ、１．８４ｍｍｏｌ）を、テトラヒドロフラン（５０ｍＬ）中に溶解し、ボラン−ジメチルスルフィド錯体（０．７ｍＬ）で処理した。この混合物を、６５℃で２時間還流し、室温まで冷却した。メタノール（１０ｍＬ）を添加し、続いて、ジオキサン（１．４ｍＬ）中の４．０Ｎ  ＨＣｌを添加し、この混合物を、１０分間撹拌し、次いで、乾燥するまでエバポレートした。その油状物を、メタノール（５０ｍＬ）およびトリフルオロ酢酸（１ｍＬ）中に再びとり、乾燥するまでエバポレートした。次いで、得られた油状物を、メタノール（１０ｍＬ）でおよびＫＯＨ（Ｈ２Ｏ中の２０％  溶液を１０ｍＬ）で溶解し、１０分間攪拌した。その溶液を水で希釈し、ジクロロメタンで抽出した。その有機層を、硫酸ナトリウムで乾燥させ、乾燥するまでエバポレートした。標題中間体を、油状物として得、この油状物を、さらに精製せずに使用した。
【０２３８】
（ｆ．５−（（Ｒ）−２−｛２−［４−（（Ｒ）−２−メチルアミノ−２−フェニルエチルアミノ）フェニル］−エチルアミノ｝−１−（ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシラニルオキシ）エチル）−８−ベンジルオキシ−１Ｈ−キノリン−２−オンの調製）
窒素下で、上記工程の生成物（２５０ｍｇ、０．９３ｍｍｏｌ）、８−ベンジルオキシ−５−［（Ｒ）−２−ブロモ−１−（ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシラニルオキシ）エチル］−１Ｈ−キノリン−２−オン（４５４ｍｇ，０．９３ｍｍｏｌ）、および炭酸水素ナトリウム（２３４ｍｇ、２．８ｍｍｏｌ）を、ジメチルスルホキシド（１０ｍＬ）で処理し、１００ｏＣまで３時間加熱した。この混合物を、室温にまで冷却し、水と酢酸エチルとの間で分配した。その有機物を飽和塩化ナトリウムで洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥させ、乾燥するまでエバポレートした。標題化合物を、さらに精製せずに使用した。
【０２３９】
（ｇ．５−（（Ｒ）−２−｛２−［４−（（Ｒ）−２−メチルアミノ−２−フェニルエチルアミノ）フェニル］−エチルアミノ｝−１−ヒドロキシエチル）−８−ベンジルオキシ−１Ｈ−キノリン−２−オンの調製）
上記工程の生成物（８０ｍｇ、０．１２ｍｍｏｌ）を、ｗａｓ  ｄｉｓｓｏｌｖｅｄ  ｉｎ  テトラヒドロフラン（５ｍＬ）中に溶解し、トリエチルアミン−トリヒドロフルオリド（２１μＬ）で５時間処理した。その溶液を乾燥するまでエバポレートし、その生成物を、逆相ＨＰＬＣにより精製し、凍結乾燥により単離して、標題中間体を、そのトリフルオロ酢酸塩として得た。
【０２４０】
（ｈ．５−（（Ｒ）−２−｛２−［４−（（Ｒ）−２−メチルアミノ−２−フェニルエチルアミノ）フェニル］−エチルアミノ｝−１−ヒドロキシエチル）−８−ヒドロキシ−１Ｈ−キノリン−２−オンの調製）
上記工程の生成物（７０ｍｇ）を、エチルアルコール（２ｍＬ）中に溶解し、１０％  炭素担持パラジウム（１４ｍｇ）を窒素下で添加した。その反応フラスコを、大気圧下で水素ガスでパージし、水素下で２時間攪拌した。その触媒を濾過により除去し、揮発性物質をエバポレートした。標題化合物を逆相ＨＰＬＣにより精製し、凍結乾燥により、そのトリフルオロ酢酸塩として単離した（４０ｍｇ、０．０５７ｍｍｏｌ）。１Ｈ  ＮＭＲ（３００ＭＨｚ）：１０．６（ｂｒ  ｓ，２Ｈ），９．２（ｂｒ  ｄ，２Ｈ），８．８（ｂｒ  ｄ，２Ｈ），８．２（ｄ，  １Ｈ，Ｊ＝１０．２Ｈｚ），７．４−７．６（ｍ，５Ｈ），７．２（ｄ，１Ｈ，８．２Ｈｚ），６．９−７．０（ｍ，３Ｈ），６．５−６．６（ｍ，３Ｈ），６．２（ｂｒ  ｓ，１Ｈ，），５．３（ｂｒ  ｄ，１Ｈ，Ｊ＝７．１Ｈｚ），４．３（ｍ，１Ｈ），３．６（ｄｄ，１Ｈ，Ｊ＝７．０，１４．０Ｈｚ），３．３（ｄｄ，１Ｈ，Ｊ＝６．３，１４．０Ｈｚ），２．８−３．０（ｍ，４Ｈ），２．６−２．８（ｍ，２Ｈ），２．４（ｓ，３Ｈ）。ｍ／ｚ：［Ｍ＋Ｈ＋］  計算値：Ｃ２８Ｈ３２Ｎ４Ｏ３：４７３．３；実測値：４７３．３。
【０２４１】
（実施例１２：Ｎ−［５−（（Ｒ）−２−｛２−［４−（（Ｓ）−２−メチルアミノ−２−フェニル−エチルアミノ）フェニル］エチルアミノ｝−１−ヒドロキシエチル）−２−ヒドロキシフェニル］−ホルムアミドの合成）
実施例  １１の工程ｆ、ｇ、およびｈと類似の手順を使用して、Ｎ−［２−ベンジルオキシ−５−（（Ｒ）−２−ブロモ−１−（ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシラニルオキシ）エチル）フェニル］ホルムアミドを、工程ｆにおける８−ベンジルオキシ−５−［（Ｒ）−２−ブロモ−１−（ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシラニルオキシ）エチル］−１Ｈ−キノリン−２−オンの代わりに用いて、標題化合物のトリフルオロ酢酸塩を得た。１Ｈ  ＮＭＲ（３００ＭＨｚ）：１０．０（ｓ，１Ｈ），９．５（ｓ，１Ｈ），８．５（ｂｒ  ｓ，２Ｈ），８．５（ｂｒ  ｓ，２Ｈ），８．２（ｓ，１Ｈ），８．０（ｓ，１Ｈ），７．２−７．４（ｍ，５Ｈ），６．７−６．９（ｍ，４Ｈ），６．４（ｄ，２Ｈ），６．０（ｍ，１Ｈ），５．６（ｍ，１Ｈ），４．６（ｍ，１Ｈ），４．２（ｍ，１Ｈ），３．６（ｄｄ，１Ｈ，Ｊ＝７．１，１４．０Ｈｚ），３．３（ｄｄ，１Ｈ，Ｊ＝６．０，１４．０Ｈｚ），２．８−３（ｍ，４Ｈ），２．６−２．７（ｍ，２Ｈ），２．３（ｓ，３Ｈ）。ｍ／ｚ：［Ｍ＋Ｈ＋］  計算値：Ｃ２６Ｈ３２Ｎ４Ｏ３：４４９．３；実測値：４４９．５。
【０２４２】
本発明は、その具体的な実施形態を参照しながら記載されてきたが、種々の変更が行われ得、等価物が、本発明の真の趣旨および範囲から逸脱することなく置換され得ることが当業者によって理解されるはずである。さらに、多くの改変は、特定の状況、材料、組成物、プロセス、プロセスの工程を、本発明の目的、趣旨、および範囲に適合させるために行われ得る。全てのこのような改変は、添付の特許請求の範囲の範囲内に入ることが意図される。さらに、本明細書中上記で引用される、全ての刊行物、特許および特許文書は、個々に参考として援用されるかのように、本明細書に参考として援用される。
【図面の簡単な説明】
【０２４３】
本発明は、添付の図面を参照することにより説明される。
【図１】図１は、Ｎ−｛２−［４−（（Ｒ）−２−ヒドロキシ−２−フェニルエチルアミノ）フェニル］エチル｝−（Ｒ）−２−ヒドロキシ−２−（３−ホルムアミド−４−ヒドロキシフェニル）エチルアミンヒドロクロリドの粉末ｘ線回折パターン示す。
【図１】
2007505931.tif 000026
【国際調査報告】
2007505931.tif 000027
2007505931.tif 000028
2007505931.tif 000029