(57)【要約】  本発明は、４乃至６％の湿気、緑白色及びマイルドな塩分、任意の一つ以上の薬学的に許容可能な添加物を有し、シナモン果実から得られた生物活性分画を含む組成物に関し、抗菌剤としてこのように得られる生物活性の用途並びに生物活性分画の調製方法に関する。【特許請求の範囲】
【請求項１】
湿気：４乃至６％、
色：緑白色、
香味：マイルドな塩分
を有し、任意に一つ以上の薬学的に許容できる添加剤を伴い、シナモンの果実から得られる生物活性分画を含む組成物。
【請求項２】
前記生物活性分画は、シナモンの果実から得られるヘキサン抽出物であることを特徴とする請求項１に記載の組成物。
【請求項３】
前記組成物は、２００乃至５００ｐｐｍの範囲内のグラム陽性細菌及びグラム陰性細菌に対する抗菌作用を有することを特徴とする請求項１に記載の組成物。
【請求項４】
前記組成物は、バシラス・セレウス、バシラス・スブチリス、バシラス・コアグランス、シュードモナス・アエルギノサ、スタフィロコッカス・アウレアスに対する抗菌作用を有することを特徴とする請求項１に記載の組成物。
【請求項５】
湿気：４乃至６％、
色：緑白色、
香味：マイルドな塩分
を有し、シナモンの果実から得られる生物活性分画を用いる抗菌剤。
【請求項６】
前記生物活性分画はシナモンの果実から得られるヘキサン抽出物であることを特徴とする請求項５に記載の抗菌剤。
【請求項７】
前記生物活性分画は、２００乃至５００ｐｐｍの範囲内のグラム陽性細菌及びグラム陰性細菌に対する抗菌活性作用を有することを特徴とする請求項５に記載の抗菌剤。
【請求項８】
前記生物活性分画は、バシラス・セレウス、バシラス・スブチリス、バシラス・コアグランス、シュードモナス・アエルギノサ、スタフィロコッカス・アウレアスに対する抗菌作用を有することを特徴とする請求項５に記載の抗菌剤。
【請求項９】
シナモンの非慣用的な部分から
湿気：４乃至６％、
色：緑白色、
香味：マイルドな塩分
を有する生物活性分画を調製するための方法であって、
本方法は、
（ａ）６乃至８メッシュの範囲の期間で５５乃至６０℃の範囲の温度の有機溶媒でシナモンの粉末状の果実を抽出するステップと、
（ｂ）濃縮物を得て、溶媒を９０％まで回収するために、前記ステップ（ａ）で得られた溶媒を濾過し濃縮するステップと、
（ｃ）生物活性分画を得るために水銀１０乃至２５ｍｍの真空下において４０乃至５０℃で真空オーブンを用いて前記ステップ（ｂ）で得られた濃縮物を乾燥するステップ
を有することを特徴とする方法。
【請求項１０】
前記使用される有機溶媒はヘキサンであることを特徴とする請求項１に記載の方法。
【請求項１１】
前記ヘキサン抽出物の収率は約１．５乃至３．０％であることを特徴とする請求項２に記載の方法。
【請求項１２】
前記濾過は従来方法によって実行されることを特徴とする請求項１に記載の方法。
【請求項１３】
前記濃縮温度は５５乃至６０℃であることを特徴とする請求項１に記載の方法。
【請求項１４】
前記得られた生物活性分画は、２００乃至５００ｐｐｍの範囲内のグラム陽性細菌及びグラム陰性細菌に対する抗菌活性作用を有することを特徴とする請求項１に記載の方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、シナモン（Cinnamomum  zeylanicum）の果実から得られる生物活性分画を含む組成物に関し、抗菌剤として得られる生物活性分画の使用及びシナモンの非慣用的な部分から当該抗菌剤を調製する方法に関する。
【背景技術】
【０００２】
食品が腐敗する問題は、古代から人を悩ましてきた。微生物の活性が多くの食品の腐敗の主要な形態であり、食品業界は食品の貯蔵期間を長引かせるために抗菌剤の利用に多大に依存している。食品に残存する化学物質に対する関心の高まりから、毒性のない天然の保存剤の需要が高まっている。天然の抗菌物質は、それらが有する重要な抗菌作用として化学物質の添加物に変わって用いることができる。（例えば、非特許文献１参照。）
Cinnamomum  zeylanicum  Blume（同義語  Cinnamomum  verum  J.S.  Presl）であるシナモンは、商用上、植物の蒸留部分に依存して、様々なタイプのオイルを提供する。シナモンはスリランカ及び熱帯アジア地方の原産である。その木は海抜５００メートルまでの南インドに見られるが、より低い海抜地域で一般的に見られる。（例えば、非特許文献２参照。）シナモンリーフオイルのすべて５３の成分は、オイゲノールである主要化合物で識別された。（約８１乃至８４．５％）（例えば、非特許文献３参照。）エッセンシャルオイルは抗菌物質（例えば、非特許文献４参照）、ファンジトキシック（fungitoxic）（例えば、非特許文献５参照）、ネマチシダル（nematicidal）（例えば、非特許文献６参照）、リーチ・リペリング・アクティビティ（leech  repelling  activity）（例えば、非特許文献７）を有することが報告される。桂皮アルデヒド（約７５％）およびカンフォー（約５６％）は、それぞれ茎樹皮および根樹皮からの揮発性油の主要成分であることが報告された。（例えば、非特許文献８）オイゲノール及び桂皮アルデヒドは、医薬品及びオーラルケア品において抗菌薬として使用される。（例えば、非特許文献２参照）
シナモンの果実からの抗菌分画の抽出が報告されていないことは文献調査が明らかにしている。
【０００３】
本発明は、抗菌作用を有する生物活性分画の調製のためのワンステッププロセスを提供する。よって、本発明は、現時点では商品価値のないシナモンの非慣用的な部分からの生物活性分画の調製方法を開発した。
【０００４】
本発明の原理は、潜在的な天然の保存剤として使用できるシナモンの非慣用的な部分からの抗菌分画の調製のための技術を提供することである。
【０００５】
この発明は、シナモンの非慣用的な部分からの抗菌分画のラージスケール調製のための効率的な方法に関する。
【特許文献１】Smid  EJ,  Gorris  LGM,  Natural  antimicrobials  for  food  preservation,  In-Shafiurr  M  (ed)  Handbook  of  food  preservation.  Marcel  Dekker,  Inc,  New  York,  pp.285-308,  1999
【非特許文献２】The  Wealth  of  India.  A  Dictonary  of  Indian  Raw  Material  and  Industrial  Products.  Publication  and  Information  Directorate,  New  Delhi,  1992,  p.582
【非特許文献３】Mallavarapu,  G.R.,  Ramesh,  S.,  Chandrasekhara,  R.S.,  Rajeswara  Rao,  B.R.,  Kaul,  P.N.  and  Battacharya,  A.K.  Flavour  and  Fragr.  J.,  10,  239,  1995
【非特許文献４】Dubey,  N.K.  and  Mishra,  A.K.  Indian  Drugs  27,  529-531,  1990
【非特許文献５】Saksena,  N.K.  and  Saksena,  S.  Indian  Perfumer,  28,  42-45,  1984
【非特許文献６】Tiwari,  R.  Dixit,  R.  and  Dixit,  S.N.  Indian  Perfumer,  38,  98-104,1994
【非特許文献７】Nakamura,  N.  Kiuchi,  F.,  Tsuda,  Y.,  Kondo,  K.  and  Sato,  T.  Shoyakugaka  Zasshi,  44,  183-195,  1990
【非特許文献８】Senanayake,  W.M.,  Lee,  T.H.,  and  wills,  R.B.H.,  J.Agric.  Food.Chem.26,  822,  1978
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【０００６】
したがって、本発明の目的は、シナモンの果実からの抗菌分画の調製方法を提供することである。この方法は効率的であり、簡素な抽出方法と溶媒の使用を有し、溶媒は再利用できる。
【課題を解決するための手段】
【０００７】
本発明によると、任意に一つ以上の薬学的に許容できる添加剤を伴って、４乃至６％の湿気、緑白色で、マイルドな塩分を有するシナモンの果実から得られる生物活性分画を含む組成物を提供する。
【０００８】
また、本発明は、それによって、抗菌剤として得られる生物活性の利用を提供する。
【０００９】
さらに本発明は、生物活性分画の調製方法を提供する。
【発明を実施するための最良の形態】
【００１０】
したがって、本発明は、
湿気：４乃至６％、
色：緑白色、
香味：マイルドな塩分
を有し、任意に一つ以上の薬学的に許容できる添加剤を伴う、シナモンの果実から得られる生物活性分画を含む組成物に関する。
【００１１】
本発明の実施態様において、生物活性分画は、シナモンの果実から得られるヘキサン抽出物である。
【００１２】
本発明の別の実施態様において、組成物は、２００乃至５００ｐｐｍの範囲内のグラム陽性細菌及びグラム陰性細菌に対する抗菌作用を有する。
【００１３】
本発明のさらなる実施態様において、組成物は、バシラス・セレウス（Bacillus  cereus）、バシラス・スブチリス（Bacillus  subtilis）、バシラス・コアグランス（Bacillua  coagulans）、シュードモナス・アエルギノサ（Pseudomonas  aeruginosa）、スタフィロコッカス・アウレアス（Staphylococcus  aureus）に対する抗菌作用を有する。
【００１４】
本発明は、抗菌剤として、
湿気：４乃至６％、
色：緑白色、
香味：マイルドな塩分
を有し、シナモンの果実から得られる生物活性分画の新規な用途を提供する。
【００１５】
本発明の実施態様において、生物活性分画はシナモンの果実から得られるヘキサン抽出物である。
【００１６】
本発明の別の実施態様において、生物活性分画は、２００乃至５００ｐｐｍの範囲内のグラム陽性細菌及びグラム陰性細菌に対する抗菌活性作用を有する。
【００１７】
本発明のさらに別の実施態様において、生物活性分画は、バシラス・セレウス、バシラス・スブチリス、バシラス・コアグランス、シュードモナス・アエルギノサ、スタフィロコッカス・アウレアスに対する抗菌作用を有する。
【００１８】
本発明はまた、シナモンの非慣用的な部分から、
湿気：４乃至６％、
色：緑白色、
香味：マイルドな塩分
を有する生物活性分画を調製するための方法を提供する。本方法は、
（ａ）６乃至８メッシュ（mesh）の範囲の期間において５５乃至６０℃範囲の温度の有機溶媒でシナモンの粉末状の果実を抽出するステップと、
（ｂ）濃縮物を得て、溶媒を９０％まで回収するためにステップ（ａ）で得られた溶媒を濾過し濃縮するステップと、
（ｃ）生物活性分画を得るために水銀１０乃至２５ｍｍの真空下において４０乃至５０℃で真空オーブンを用いてステップ（ｂ）で得られた濃縮物を乾燥するステップ
を有する。
【００１９】
本発明の実施態様において、使用される有機溶媒はヘキサンである。
【００２０】
本発明の別の実施態様において、ヘキサン抽出物の収率は約１．５乃至３．０％である。
【００２１】
本発明のまた別の実施態様において、濾過は従来方法によって実行される。
【００２２】
本発明のさらに別の実施態様において、濃縮温度は５５乃至６０℃である。
【００２３】
本発明のさらにまた別の実施態様において、このようにして得られた生物活性分画は、２００乃至５００ｐｐｍの範囲内のグラム陽性細菌及びグラム陰性細菌に対する抗菌活性作用を有する。
【００２４】
したがって、本発明は、生物活性分画の調製方法を提供し、
ｉ）６０乃至８０メッシュの粒子サイズを得るためにシナモンの果実を粉末状にするステップと、
ｉｉ）５５乃至６０℃の温度で６乃至８時間にわたってＳｏｘｈｌｅｔ抽出機において上記ｉ）のステップで得た物質をヘキサンで抽出するステップと、
ｉｉｉ）粒子を含まない抽出物を得るために、上記ｉｉ）のステップで得た抽出物をワットマンフィルターペーパー  ｎｏ．１を用いて濾過するステップと、
ｉｖ）溶媒を回収し／再利用するために、上記抽出物を９０％まで蒸留するステップと、
ｖ）５５乃至６０℃の温度で上記の粒子を含まない抽出物を濃縮するステップと、
ｖｉ）水銀１０乃至２５ｍｍの真空下において４０乃至５０℃で真空オーブンを用いて、上記の濃縮した抽出物を乾燥するステップと、
ｖｉｉ）このようにして得られた産物が、２００乃至５００ｐｐｍの範囲内の異なるグラム陽性細菌及びグラム陰性細菌に対する抗菌活性作用を有するステップ
を有する。
【００２５】
本発明の実施態様において、ヘキサン抽出物の収率は１．５乃至３．０％であることが分かる。
【００２６】
シナモンの非慣用的な部分からの抗菌分画の調製は、図１に示される流れ図にしたがって成された。
【００２７】
この方法の新規性は、
１．これが、シナモンの非慣用的な部分からの抗菌分画の調製の最初の報告であること、
２．本発明が、シナモンの非慣用的な部分から生物活性分画を得るためのシングルステッププロセスであること、
を含む。
【００２８】
下記の実施例は本発明の例示によって与えられるが、本発明の範囲を制限するべきものではない。
【実施例】
【００２９】
実施例１
シナモンの果実５０ｇは、６０メッシュサイズを得るために、ミキサーグリンダーを用いて粉末状にされた。粉末は、Ｓｏｘｈｌｅｔ抽出機で８時間にかけて６０℃で２００ｍｌのヘキサンを用いて抽出された。ヘキサンの抽出物は、ワットマンフィルターペーパー  Ｎｏ．１を用いてフィルター処理され、１５０ｍｌの溶媒を回収するように濃縮された。濃縮物は、１０ｍｍの真空下において４０℃で真空オーブンを用いて乾燥された。抽出物の収率は１．４ｇであった。シナモンの抽出物の抗菌アッセイは、Ｎｅｇｉらの方法（J.Agricultural  and  Food  Chemistry  47,  4297-4300,  1999）によりバシラス・セレウスに対するポアープレートメソッド（pour  plate  method）によって試験された。２０ｍｌの溶解した栄養培地を含むフラスコに対して、ポリプロピレングリコール中の異なる濃度の試験材料が添加された。同量のポリプロピレングリコールがコントロールとして使用された。１００μｌ（約１０３ｃｆｕ／ｍｌ）の培養液が、無菌状態でフラスコに接種された。次いで、培地は、滅菌されたペトリプレートに四等分して注入され、成長のために３７℃で２０乃至２４時間インキュベーションされた。最少阻害濃度（ＭＩＣ）は、試験される細菌の完全な成長を阻害できる組成物の最も低い濃度として報告された。バシラス・セレウスに対するシナモンの果実の抽出物のＭＩＣ値は２５０ｐｐｍであった。
【００３０】
実施例２
シナモンのドライフルーツ（１００ｇ）は、８０メッシュサイズを得るために、ミキサーグリンダーを用いて粉末状にされた。粉末は、Ｓｏｘｈｌｅｔ抽出機で８時間にかけて５５℃で４００ｍｌのヘキサンを用いて抽出された。抽出物は、ワットマンフィルターペーパー  Ｎｏ．１を用いてフィルター処理され、３６０ｍｌの溶媒を回収するように真空下で濃縮された。濃縮物は、水銀２５ｍｍの減圧下において３５℃の温度で乾燥された。ヘキサン抽出物の収率は３．０ｇであった。シナモンの抽出物の抗菌アッセイは、既知の方法によってなされた。バシラス・スブチリスに対するシナモンの果実の抽出物のＭＩＣ値は３００ｐｐｍであった。
【００３１】
実施例３
シナモンのドライフルーツ（１５０ｇ）は、８０メッシュサイズを得るために、ミキサーグリンダーを用いて粉末状にされた。粉末は、Ｓｏｘｈｌｅｔ抽出機で８時間にかけて５５℃で６００ｍｌのヘキサンを用いて抽出された。抽出物は、ワットマンフィルターペーパー  Ｎｏ．１を用いてフィルター処理され、５２０ｍｌの溶媒を回収するように真空下で濃縮された。濃縮物は、水銀２５ｍｍの減圧下において３５℃の温度で乾燥された。ヘキサン抽出物の収率は４．７ｇであった。シナモンの抽出物の抗菌アッセイは、既知の方法によってなされた。バシラス・コアグランスに対するシナモンの抽出物のＭＩＣ値は３００ｐｐｍであった。
【００３２】
実施例４
シナモンの抽出物の抗菌アッセイは、既知の方法によってなされた。シュードモナス・アエルギノサに対するシナモンの抽出物のＭＩＣ値は２００ｐｐｍであった。
【００３３】
実施例５
シナモンの抽出物の抗菌アッセイは、既知の方法によってなされた。スタフィロコッカス・アウレアスに対するシナモンの抽出物のＭＩＣ値は５００ｐｐｍであった。
【００３４】
本方法の利点は、
１．本方法は簡素であり、この方法で使用される溶媒は、さらなる使用のために再生できる。
２．原料は現時点で商品価値がない。
【図面の簡単な説明】
【００３５】
【図１】シナモンの非慣用的な部分からの抗菌分画の調製を示す流れ図を示す。
【図１】
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【国際調査報告】
2007516936.tif 000003
2007516936.tif 000004
2007516936.tif 000005