(57)【要約】本発明は、動物中の１つ以上の実体の不均衡を是正し得るリポソームを提供する。従って、本発明は、実体を、動物からリポソーム中に取り込むための方法を提供し、その方法は、そのような処置を必要とする動物にその実体を取り込み得るリポソームを投与する工程を包含する。本発明はまた、実体を、生物学的サンプルからリポソーム中に取り込むための方法を提供し、その方法は、その生物学的サンプルと、その実体を取り込み得る１つ以上のリポソームとを接触させる工程を包含する。本発明はまた、動物の血清から実体を除去するための方法を提供し、その方法は、その血清と、その実体をその血清から除去し得る１つ以上のリポソームとを接触させる工程を包含する。
2007505043.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
実体を、動物からリポソーム中に取り込むための方法であって、そのような処置を必要とする動物に該実体を取り込み得るリポソームを投与する工程を包含する、方法。
【請求項２】
実体を、生物学的サンプルからリポソーム中に取り込むための方法であって、該生物学的サンプルと該実体を取り込み得る１つ以上のリポソームとを接触させる工程を包含する、方法。
【請求項３】
動物の血清から実体を除去するための方法であって、該血清と実体を除去し得る１つ以上のリポソームとを接触させる工程を包含する、方法。
【請求項４】
請求項３に記載の方法であって、前記リポソームを前記血清から分離する工程をさらに包含する、方法。
【請求項５】
前記接触させる工程が、インビボで起こる、請求項２〜４のいずれか１項に記載の方法。
【請求項６】
前記接触させる工程が、インビトロで起こる、請求項２〜４のいずれか１項に記載の方法。
【請求項７】
前記実体が、金属または金属イオンである、請求項１〜６のいずれか１項に記載の方法。
【請求項８】
前記実体が、アルカリ金属、アルカリ土類金属、Ｆｅ、Ｏｓ、Ｃｏ、Ｎｉ、Ｐｄ、Ｃｕ、Ａｇ、Ａｕ、Ｚｎ、Ａｌ、Ｃｄ、Ｈｇ、Ｓｎ、もしくはＰｂ、またはそれらのイオンである、請求項１〜６のいずれか１項に記載の方法。
【請求項９】
前記実体が、Ｚｎ、Ａｌ、ＦｅもしくはＣｕ、またはそれらのイオンである、請求項１〜６のいずれか１項に記載の方法。
【請求項１０】
前記実体が、カルシウムまたはそのイオンである、請求項１〜６のいずれか１項に記載の方法。
【請求項１１】
前記実体が、ペプチドである、請求項１〜６のいずれか１項に記載の方法。
【請求項１２】
前記実体が、有機分子である、請求項１〜６のいずれか１項に記載の方法。
【請求項１３】
前記実体が、治療剤である、請求項１〜６のいずれか１項に記載の方法。
【請求項１４】
前記実体が、グルコースである、請求項１〜６のいずれか１項に記載の方法。
【請求項１５】
動物においてパーキンソン病を処置するための方法であって、該動物の脳内の、Ｍｎ、Ｆｅ、Ｈｇ、Ａｌ、もしくはＣｕ、またはそれらのイオンのレベルを低下させるのに有効な量のリポソームを該動物に投与する工程を包含する、方法。
【請求項１６】
動物においてアルツハイマー病を処置するための方法であって、該動物の脳内の、Ｚｎ、Ａｌ、ＦｅもしくはＣｕ、またはそれらのイオンのレベルを低下させるのに有効な量のリポソームを該動物に投与する工程を包含する、方法。
【請求項１７】
動物において糖尿病を処置するための方法であって、動物の血清中の、グルコースのレベルを低下させるのに有効な量のリポソームを該動物に投与する工程を包含する、方法。
【請求項１８】
動物の脳脊髄液から実体を除去するための方法であって、該動物は、そのような処置を必要とし、該動物に該実体を取り込み得るリポソームを、包膜間に投与する工程を包含する、方法。
【請求項１９】
前記実体が、金属または金属イオンである、請求項１８に記載の方法。
【請求項２０】
動物において血清カルシウム負荷を低減するための方法であって、該動物は、そのような処置を必要とし、該動物に効果的にカルシウムを減少する量の１つ以上のリポソームを投与する工程を包含する、方法。
【請求項２１】
前記動物が、哺乳動物である、請求項１および請求項３〜２０のいずれか１項に記載の方法。
【請求項２２】
前記動物が、ヒトである、請求項１および請求項３〜２０のいずれか１項に記載の方法。
【請求項２３】
前記リポソームが、１つ以上の、リポソームを形成する脂質およびコレステロールを含み、該脂質のコレステロールに対するモル比が、約０．５：１〜約４：１である、請求項１〜２２のいずれか１項に記載の方法。
【請求項２４】
前記リポソームが、ホスファチジルコリンおよびコレステロールを含有する、請求項１〜２２のいずれか１項に記載の方法。
【請求項２５】
前記ホスファチジルコリンのコレステロールに対するモル比が、約０．５：１〜約４：１である請求項２４に記載の方法。
【請求項２６】
前記ホスファチジルコリンのコレステロールに対するモル比が、約１：１〜約２：１である請求項２４に記載の方法。
【請求項２７】
前記ホスファチジルコリンのコレステロールに対するモル比が、約２：１である請求項２４に記載の方法。
【請求項２８】
前記ホスファチジルコリンが、Ｓｏｙ−ＰＣ、Ｅｇｇ−ＰＣ、ＤＥＰＣ、ＤＯＰＣ、ＤＳＰＣ、ＨＳＰＣ、ＤＭＰＣ、およびＤＰＰＣ、ならびにそれらの混合物から選択される、請求項２４〜２７のいずれか１項に記載の方法。
【請求項２９】
前記ホスファチジルコリンが、ＤＥＰＣ、ＤＯＰＣ、ＤＳＰＣ、ＨＳＰＣ、ＤＭＰＣ、ＰＯＰＣ、ＤＢＰＣ、およびＤＰＰＣ、ならびにそれらの混合物から選択される、請求項２４〜２７のいずれか１項に記載の方法。
【請求項３０】
前記ホスファチジルコリンが、ＤＥＰＣ、ＤＯＰＣ、ＤＳＰＣ、ＨＳＰＣ、ＤＭＰＣ、およびＤＰＰＣ、ならびにそれらの混合物から選択される、請求項２４〜２７のいずれか１項に記載の方法。
【請求項３１】
前記ホスファチジルコリンが、ＤＯＰＣ、ＤＳＰＣ、ＨＳＰＣ、ＤＭＰＣ、およびＤＰＰＣ、ならびにそれらの混合物から選択される、請求項２４〜２７のいずれか１項に記載の方法。
【請求項３２】
前記ホスファチジルコリンが、ＤＯＰＣ、ＤＳＰＣ、ＨＳＰＣ、およびＤＰＰＣ、ならびにそれらの混合物から選択される、請求項２４〜２７のいずれか１項に記載の方法。
【請求項３３】
前記ホスファチジルコリンが、ＤＰＰＣである、請求項２４〜２７のいずれか１項に記載の方法。
【請求項３４】
前記リポソームが、前記実体の該リポソーム中への取り込みを容易にする、チャネルまたはシャトルを含む、請求項１〜３３のいずれか１項に記載の方法。
【請求項３５】
前記チャネルが、イオンチャネルである、請求項３４に記載の方法。
【請求項３６】
前記リポソームの内部のｐＨが、投与前または前記生物学的サンプルとの接触前に約８未満である、請求項１〜３５のいずれか１項に記載の方法。
【請求項３７】
前記リポソームが、ＳＵＶまたはＭＬＶである、請求項１〜３５のいずれか１項に記載の方法。
【請求項３８】
前記実体が、前記リポソームの内部で金属イオン封鎖因子と結合して、該リポソームの外へ通過できない錯体を形成する、請求項１〜３５のいずれか１項に記載の方法。
【請求項３９】
前記カルシウムが、前記リポソームの内部で金属イオン封鎖因子と結合して、該リポソームの外へ通過できないカルシウム錯体を形成する、請求項１０または請求項２０に記載の方法。
【請求項４０】
前記リポソームが、１つ以上のカルシウムイオン封鎖因子を含有する、請求項１０または請求項２０に記載の方法。
【請求項４１】
前記リポソームが、脂質および該リポソーム中へのカルシウムの通過を可能にするトランスポーター／チャネルを形成するリポソームを含有する、請求項１０または請求項２０に記載の方法。
【請求項４２】
前記金属イオン封鎖因子が、ポリアミン、多座のカルボン酸、クラウンエーテル、ラクタム、または無機化合物である、請求項３８〜４０のいずれか１項に記載の方法。
【請求項４３】
前記金属イオン封鎖因子が、ＥＤＴＡである、請求項４２に記載の方法。
【請求項４４】
前記リポソーム中の前記ＥＤＴＡの濃度が、投与前または接触前に少なくとも約１０ｍＭである、請求項４３に記載の方法。
【請求項４５】
前記リポソーム中の前記ＥＤＴＡの濃度が、投与前または接触前に少なくとも約２０ｍＭである、請求項４３に記載の方法。
【請求項４６】
前記リポソーム中の前記ＥＤＴＡの濃度が、投与前または接触前に少なくとも約５０ｍＭである、請求項４３に記載の方法。
【請求項４７】
前記リポソーム中の前記ＥＤＴＡの濃度が、投与前または接触前に少なくとも約１００ｍＭである、請求項４３に記載の方法。
【請求項４８】
前記金属イオン封鎖因子が、亜鉛、セレン、または銅に比べて、カルシウム結合に対して、少なくとも２倍選択的である、請求項４０に記載の方法。
【請求項４９】
前記実体が、前記リポソームの内部で試薬と反応して反応物を形成する、請求項１〜３７のいずれか１項に記載の方法。
【請求項５０】
前記反応物が、前記リポソームの外へ通過できない、請求項４９に記載の方法。
【請求項５１】
前記実体が、前記リポソームの内部で酵素と反応する、請求項１〜３７のいずれか１項に記載の方法。
【請求項５２】
前記実体と前記酵素との間の反応が、ＡＴＰを必要とする、請求項５１に記載の方法。
【請求項５３】
前記リポソームが、イオンチャネルＡ２３１８７を含む、請求項４１に記載の方法。
【請求項５４】
前記リポソームが、イオンチャネルを含み、該イオンチャネルが、該リポソーム中へのカルシウムの流入に関して、亜鉛、セレン、または銅に比べて少なくとも２倍選択的である、請求項４０または請求項４８に記載の方法。
【請求項５５】
請求項１および請求項１５〜２０のいずれか１項に記載の方法であって、別の治療剤を前記動物に投与する工程をさらに包含する、方法。
【請求項５６】
請求項１０または請求項２０に記載の方法であって、カルシウム負荷を低減するのに有用な治療剤を前記動物に投与する工程をさらに包含する、方法。
【請求項５７】
前記治療剤が、パミドロン酸、フロセミド、ジホホネート、硝酸ガリウム、糖質コルチコイド、ゾレンドラネート、エチドロン酸、またはカルシトニンである、請求項５６に記載の方法。
【請求項５８】
前記リポソームが、前記治療剤を含有する、請求項５６または請求項５７に記載の方法。
【請求項５９】
医学的処置に使用するための実体を取り込み得るリポソーム。
【請求項６０】
カルシウムまたはそれらのイオンを取り込み得るリポソームの使用であって、動物において血清のカルシウム負荷を低減するのに有用な医薬を調製するための、使用。
【請求項６１】
Ｚｎ、Ａｌ、Ｆｅ、もしくはＣｕ、またはそれらのイオンを取り込み得るリポソームの使用であって、動物においてアルツハイマー病を処置するのに有用な医薬を調製するための、使用。
【請求項６２】
グルコースを取り込み得るリポソームの使用であって、動物において糖尿病を処置するのに有用な医薬を調製するための、使用。
【請求項６３】
Ｍｎ、Ｆｅ、Ｈｇ、Ａｌ、もしくはＣｕ、またはそれらのイオンを取り込み得るリポソームの使用であって、動物においてパーキンソン病を処置するのに有用な医薬を調製するための、使用。
【請求項６４】
実体を取り込み得るリポソームの使用であって、動物の脳脊髄液から前記実体を除去するのに有用な医薬を調製するための、使用。
【請求項６５】
前記実体が、金属または金属イオンである、請求項６４に記載の使用。
【請求項６６】
本明細書中に記載されるようなリポソーム。
【請求項６７】
薬学的に受容可能なビヒクルまたはキャリア、および明細書中に記載されるような実体を取り込み得るリポソームを含む、薬学的組成物。
【請求項６８】
前記実体が、金属、金属イオン、ペプチド、有機分子、有毒物質、亜酸化窒素、またはグルコースである、請求項５９に記載のリポソーム。
【請求項６９】
前記実体が、Ｃａ、Ｆｅ、Ｏｓ、Ｃｏ、Ｎｉ、Ｐｄ、Ｃｕ、Ａｇ、Ａｕ、Ｚｎ、Ａｌ、Ｃｄ、Ｈｇ、Ｓｎ、またはＰｂ、もしくはそれらのイオンである、請求項５９に記載のリポソーム。
【請求項７０】
前記実体が、金属、金属イオン、ペプチド、有機分子、有毒物質、亜酸化窒素、またはグルコースである、請求項６７に記載の組成物。
【請求項７１】
前記実体が、Ｃａ、Ｆｅ、Ｏｓ、Ｃｏ、Ｎｉ、Ｐｄ、Ｃｕ、Ａｇ、Ａｕ、Ｚｎ、Ａｌ、Ｃｄ、Ｈｇ、Ｓｎ、もしくはＰｂ、またはそれらのイオンである、請求項６７に記載の組成物。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
（発明の優先権）
本出願は、米国仮出願番号６０／５０１，８１６および米国仮出願番号６０／５０１，８１８（どちらも２００３年９月９日出願）からの優先権を主張する。これらの仮特許出願のそれぞれの内容全体は、本明細書によって、本明細書中に参考として援用される。
【０００２】
（発明の分野）
本発明は、動物における１つ以上の実体の不均衡を是正し得るリポソームに関する。
【背景技術】
【０００３】
（発明の背景）
多くの病気および状態は、動物中の１つ以上の実体の不均衡によって引き起こされるか、または動物中の１つ以上の実体の不均衡をもたらす。例えば、高カルシウム血症は、一般的な臨床上の代謝性の問題である。これは、以下に挙げられる多くの疾患の発現として生じ得る：副甲状腺機能亢進症、パジェット病、ビタミンＡ中毒およびビタミンＤ中毒、結核、サルコイドーシス、悪性腫瘍（例えば、乳癌、小細胞肺癌、扁平上皮癌、多発性骨髄腫など）。
【０００４】
高カルシウム血症は、癌を有する人々の１０％〜２０％で発症し、それは、医師が直面する最も一般的な医学的な管理上の問題の１つとされる。さらに、高カルシウム血症は、悪性腫瘍に関連する、最も一般的な生死にかかわる代謝障害である。悪性腫瘍に関連する急性高カルシウム血症を処置するための最も効果的な処置は、その根底である癌を除去するか、または処置することである。これが達成されるまでか、またはこれが達成され得ない場合、抗高カルシウム血症剤の使用が、必要であり得る。急性高カルシウム血症を処置する処置は、血清カルシウム濃度を減少することによって急性高カルシウム血症の発生を予防し、そして抗高カルシウム血症医薬に由来する有害事象を予防するという特定の患者の目的により、慎重に選択されるべきである。ビスホスホネート、カルシトニン、フロセミド、硝酸ガリウム、糖質コルチコイド、正常生理食塩水およびプリカマイシンは、悪性腫瘍の管理において、ある程度の成功を伴って使用され、そして臨床家に急性高カルシウム血症の処置における処置的選択肢の範囲を提供する。しかし、これらの選択肢は全て、その制限を受ける。
【０００５】
高カルシウム血症を処置する１つの方法としては、高カルシウム血症の急性の管理における第１の工程としての、静脈内への正常生理食塩水（ＮａＣｌ  ０．９％）による水分補給が挙げられる。急性高カルシウム血症に罹患する患者のほとんどは、体液量が減少するので、ＮａＣｌ  ０．９％の投与は重要である。なぜなら、腎性のカルシウムクリアランスを増加することに加えて、細胞内液量を増すからである。ＮａＣｌ  ０．９％の最適な投与速度は、高カルシウム血症の重症度、体液量減少（ｖｏｌｕｍｅ  ｃｏｎｔｒａｃｔｉｏｎ）の程度、患者の流体を許容する能力、および患者の臨床状態全体によって決定される。水分補給および利尿を促進するＮａＣｌ  ０．９％の注入の通常の速度は、２００〜３００ｍｌ／時間である。
【０００６】
フロセミド（強力利尿薬）は、高カルシウム血症の処置に使用され得、カルシウム排泄を増加する。フロセミドは、急性高カルシウム血症の処置において重要である。なぜならこれは、腎臓によるカルシウムの再吸収を阻害し、そして生理食塩水の投与による容量過負荷から保護するからである。しかし、フロセミド処置には、制限がある。適切な体液量増大（ｖｏｌｕｍｅ  ｅｘｐａｎｓｉｏｎ）がない場合、フロセミド処置は、糸球体濾過速度ならびにカルシウムクリアランスにおける減少を生じ得る。従って、その処置は、十分な水分補給後にのみ施されるべきである。１〜４時間毎に１００ｍｇまでの静脈内投与量が、投与され得る。
【０００７】
ＮａＣｌ  ０．９％およびフロセミドのレジメンは、血清カルシウム濃度の小幅な減少を生じる。臨床試験は、生理食塩水およびフロセミドの組み合わせが、代表的に、カルシウムレベルを最初の４８時間以内に０．２０〜０．３０ｍｍｏｌのみ減少することを示唆する。従って、ＮａＣｌ  ０．９％およびフロセミドの投与のみで達成される、水分補給および利尿の効果は、軽度〜中程度の高カルシウム血症の管理に対して十分であり得るが、通常、重篤な高カルシウム血症に対しては不十分である。重篤な高カルシウム血症を有する患者において、他の抗高カルシウム血症因子の使用は、当然のことであり得る。
【０００８】
サケカルシトニンは主に、破骨細胞の再吸収を阻害し、そしてカルシウムの腎排出を増加する。作用の迅速な開始および鎮痛特性は、急性高カルシウム血症の処置におけるカルシトニンの成功に寄与する。代表的に、血清カルシウム濃度は、数時間以内に１〜３ｍｇ／ｄＬに減少する。通常、カルシトニンの投与後２４時間以内に、最大の効果が達せられる。
【０００９】
多くの臨床試験は、カルシトニンに関するタキフィラキシーを実証している。臨床研究はまた、カルシトニンが、たった２４時間しか持続しない短い作用持続時間を有する、ことを実証した。タキフィラキシーおよび短い作用持続時間の報告にもかかわらず、カルシトニンは、重篤な高カルシウム血症の初期の管理における重要な薬剤である。急性高カルシウム血症を処置するための、カルシトニンの推奨される皮下開始用量または筋肉内開始用量は、４ＩＵ／ｋｇで、１２時間毎に投与される。カルシトニンの主な副作用は、顔面紅潮、胃腸不調および発疹であり、それらは、カルシトニンを好ましくないものとし、動物にとって、そして患者の低いコンプライアンスを悪くする。
【００１０】
ビスホスホネートは、破骨細胞に対して有毒であり、そして破骨細胞前駆体を阻害し、それによって破骨細胞の機能を低下させる。現在、エチドロン酸は、経口投薬形態および静脈内投薬形態の両方で市販されており、そしてパミドロン酸は、静脈内投薬形態で市販されている。
【００１１】
エチドロン酸（ｅｔｉｄｒｏｎａｔｅ）は、急性高カルシウム血症の場合に静脈内に（ＩＶ）投与される。推奨される用量は、１日に７．５ｍｇ／ｋｇ  ＩＶで３〜７日間であり、各投与は２〜４時間かけて注入されるべきである。代表的に、血清カルシウム濃度は２日以内に減少し始める。最大の効力は、処置の開始後７日間以内に生じる。臨床試験は、約４０％〜９２％の患者がエチドロン酸を受容した後に、正常な血清カルシウム濃度に戻ることを実証した。エチドロン酸に関する副作用は、高い血清リン濃度および腎不全である。他の副作用としては、一時的な発熱、発疹、悪心、腎毒性が挙げられる。腎毒性の可能性は、２．５ｍｇ／ｄＬ未満の血清クレアチニンレベルを有する患者においては減少する。
【００１２】
急性高カルシウム血症のパミドロン酸（ｐａｍｉｄｒｏｎａｔｅ）処置について推奨される用量は、６０ｍｇ〜９０ｍｇ（静脈内に２〜２４時間かけて注入）である。単回パミドロン酸用量は、急性高カルシウム血症の処置において有効であり得るが、引き続いての投与が、前回の投与の７日後に与えられ得る。血清カルシウム濃度は、３日以内に減少し得、そして次の投与は、前回投与後の７日目に提供され得る。血清カルシウム濃度は、３日間以内に減少し得、そして最大の効果は、投与後７日まで記録されない。臨床試験は代表的に、パミドロン酸が、患者の約６０％〜１００％において血清カルシウム濃度を正常化することを実証する。パミドロン酸に関するいくつかの有害事象としては、一時的な発熱、悪心、発疹、腎毒性、低カルシウム血症および血栓性静脈炎が挙げられる。
【００１３】
エチドロン酸と同様に、腎機能障害を有する患者または２．５ｍｇ／ｄＬより大きい高い血清クレアチニンレベルを有する患者には、パミドロン酸の使用は、推奨されない。
【００１４】
ゾレンドラネート（ｚｏｌｗｎｄｒａｎｅｔｅ）は、さらに強力であり、そしてより短い静脈投与時間しか必要としない。転移性骨疾患の代表的な処置時間は、３〜４週間毎での、１５分の静脈内注射１回である。しかし、ゾレンドラネートは、腎障害に禁忌であるので、適切な代用品ではない。ビホスホネートが、転移性の疾患における骨の疼痛を減少することが主張されているが、救急処置において、このことについての証拠はない。
糖質コルチコイドは、血清カルシウム濃度を低下するために、カルシトニンのような他の抗高カルシウム血症剤と組み合わせて使用されてきた。ヒドロコルチゾン２００〜３００ｍｇの静脈内投与と等価の用量が、３〜５日間、毎日投与された場合、糖質コルチコイドは、尿のカルシウム排泄の増加および腸のカルシウム吸収の減少によって高カルシウム血症に対抗する。代表的に、リンパ腫、多発性骨髄腫および肉芽性の腫瘍は、最も都合良く糖質コルチコイド処置に反応する。糖質コルチコイドに関連する可能性のある一般的な副作用としては、高血糖および低カリウム血症のような電解質障害が挙げられる。より頻度の低い効果としては、ＧＩ出血、糖尿病および精神機能の異常が挙げられる。
【００１５】
硝酸ガリウムは、骨からのカルシウム再吸収を誘導するＰＴＨ−ｒｐを阻害することによって骨吸収を防ぐ。硝酸ガリウムの推奨される用量は、５日間連続かまたは好ましいカルシウム濃度が得られるまで、毎日、１００〜２００ｍｇ／ｍ２である。硝酸ガリウムは、２４時間連続注入として、注入されるべきである。血清カルシウム濃度は、４８時間以内に減少する。最大の効果は、初回の硝酸ガリウム投与後１０日以内に達成される。腎毒性は、硝酸ガリウムを使用する患者の８％〜１５％において実証されている。腎性合併症の危険を減少するために、全ての患者が、この薬剤を受容する前に十分に水分補給することが、推奨される。さらに、硝酸ガリウムは、腎不全を有する患者か、または２．５ｍｇ／ｄＬより大きい血清クレアチニン測定値を有する患者においては、忌避されるべきである。さらに、腎毒性のある薬剤の同時使用は、この薬剤を受容する患者においては、忌避されるべきである。硝酸ガリウムに関する他の副作用としては、低リン酸血症、胃腸の不調、視覚障害および聴覚障害、ならびに頻脈が挙げられる。
【００１６】
プリカマイシンは、破骨細胞におけるＲＮＡ合成を阻害することによって血清カルシウム濃度を減少する。プリカマイシンは、ボーラス注射としてか、または緩徐な注射としてのいずれかによって、静脈内に投与される。局所刺激作用の発生および他の副作用の発生は、プリカマイシンが、緩徐な注射によって投与された場合、減少され得る。推奨される用量は、４時間〜６時間の期間にわたり、２５ｍｃｇ／ｋｇである。血清カルシウム濃度は、プリカマイシンの開始後１２時間以内に減少する。最大の効果は、通常、９６時間以内に現れる。臨床試験は、投与後４８時間以内に、１．４ｍｇ／ｄＬまでの血清カルシウム濃度の中央値としての減少を実証した。必要な場合、プリカマイシンのその後の投与は、少なくとも２４時間待機した後に投与され得る。プリカマイシンの主な副作用としては、肝毒性、腎毒性、血小板減少、骨髄抑制、悪心、嘔吐、低カルシウム血症および凝固因子レベルの減少が挙げられる。
【００１７】
プリカマイシンは、重篤な肝不全または重篤な腎不全にある患者、血小板減少または任意のカグロパシー（ｃａｇｕｌｏｐａｔｈｙ）の患者、骨髄毒性がある化学療法を同時に受けている患者、および脱水状態の患者においては忌避されるべきである。プリカマイシンは、通常、他の処置に対して非感受性の患者のために用意される。
【００１８】
上記で議論したように、高カルシウム血症を処置する現在の方法は、多くの望ましくない副作用を生じ、その副作用は、処置を困難にし、そしてその患者にとって不快である。さらに、その方法の多くはまた、有益な効果を生じるのにかなりの時間（２４〜４８時間またはそれより長い時間）を必要とする。さらに、その方法は、多くの方法が他の医薬、疾患、または動物の状態と不適合であるので、選択的に選ばなければならない。従って、現在、生物系からカルシウムを除去するのに使用され得る方法に対する必要性が存在する。
【００１９】
糖尿病は、より深刻な症状に（慢性高血糖に）をもたらすインスリンの絶対的欠乏または相対的欠乏によって特徴付けされる状態である。長期間にわたる糖尿病の合併症としては、神経障害、網膜症、腎症、および感染に対する感受性の上昇が挙げられる（非特許文献１）。現在、糖尿病から生じる高血糖を含む高血糖を処置するためのさらなる方法に対するが必要性が存在する。これは特に、インスリンを含むレジメンに対して反応しない高血糖についての場合のものである。
【００２０】
過剰な量の金属イオンもまた、種々の疾患または、種々の状態に関係する。例えば、過剰な量のマンガン、鉄、水銀、アルミニウム、および銅は、全てパーキンソン病に関係している。パーキンソン病は、脳の中の特定の神経中枢の変質に関する。これらの過剰なミネラルは、フリーラジカルの病理を増大し、そして細胞死を加速すると考えられている。この変質は、神経シグナルの伝達に必須な２つの神経伝達物質の化学的平衡を変化させる。その最終的な結果は、身体の運動制御の調節欠如である。
【００２１】
血中の金属の高いレベルに関連する別の疾患は、アルツハイマー病である。アルツハイマー病は、進行性の容態であり、脳細胞および脳の構造を破壊する。研究者らは、その疾患が、血中および／または脳内の、亜鉛、銅、アルミニウム、および／もしくは鉄の過剰に関連すると考える。アルツハイマー病を有する人々は、彼らの学習する能力、記憶する能力および動作する能力を徐々に失う。
【００２２】
身体の中の過剰な金属イオンに関連する別の疾患は、ウイルソン病である。ウイルソン病は、肝臓、脳、および腎臓における過剰な銅の蓄積によって引き起こされる。その病気は、炎症、および肝硬変、および脳の損傷によって特徴付けされる。処置されない場合、ウイルソン病は、致死的である。脳における銅の蓄積はまた、クロイツフェルト−ヤコブ病（ＣＪＤ）を含む伝染性海綿状脳症（ＴＳＥ）の種々の形態に関係している。
【００２３】
さらに、重金属への曝露は、成長の遅れ、種々の癌、腎臓の損傷に関連している。例えば、水銀、金および鉛への曝露は、自己免疫（自身の細胞を外来の侵入因子と間違えて攻撃する免疫系の状態）の発生に関連している。重金属（例えば、水銀、鉛、カドミウム、およびアルミニウムへの曝露はまた、中枢神経系に対するフリーラジカルによる損傷の増加および多発性硬化症に関連すると考えられる。
【非特許文献１】Ｓｔｅｄｍａｎ’ｓ  Ｍｅｄｉｃａｌ  Ｄｉｃｔｉｏｎａｒｙ，２６  ｅｄ．，Ｗｉｌｌｉａｍｗ  ＆  Ｗｉｌｋｉｎｓ，Ｂａｌｔｉｍｏｒｅ，Ｍｄ．，１９９５
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【００２４】
現在、望ましくない実体または有害な実体を、動物系および生物学的サンプルから除去するために有用な方法に対する、必要性が存在する。
【課題を解決するための手段】
【００２５】
（発明の要旨）
本発明は、動物中の１つ以上の実体の不均衡を是正し得るリポソームを提供する。従って、本発明は、実体を、動物からリポソーム中に取り込むための方法を提供し、その方法は、そのような処置を必要とする動物にその実体を取り込み得るリポソームを投与する工程を包含する。
【００２６】
本発明はまた、実体を、生物学的サンプルからリポソーム中に取り込むための方法を提供し、その方法は、その生物学的サンプルと、その実体を取り込み得る１つ以上のリポソームとを接触させる工程を包含する。
【００２７】
本発明はまた、動物の血清から実体を除去するための方法を提供し、その方法は、その血清と、その実体をその血清から除去し得る１つ以上のリポソームとを接触させる工程を包含する。
【００２８】
本発明はまた、動物の脳脊髄液から実体を除去するための方法を提供し、その動物は、そのような処置を必要とし、その方法は、その動物にその実体を取り込み得るリポソームを（例えば、包膜間に）投与する工程を包含する。
【００２９】
本発明はまた、動物においてアルツハイマー病を処置するための方法を提供し、その方法は、その動物中の、Ｚｎ、Ａｌ、ＦｅもしくはＣｕ、またはそれらのイオンのレベルを低下させるのに有効な量のリポソームをその動物に投与する工程を包含する。
【００３０】
本発明はまた、動物においてパーキンソン病を処置するための方法を提供し、その方法は、その動物中の、Ｍｎ、Ｆｅ、Ｈｇ、Ａｌ、もしくはＣｕ、またはそれらのイオンのレベルを低下させるのに有効な量のリポソームをその動物に投与する工程を包含する。
【００３１】
本発明はまた、動物において糖尿病（例えば、高血糖）を処置するための方法を提供し、その方法は、その動物中の、グルコースのレベルを低下させるのに有効な量のリポソームをその動物に投与する工程を包含する。
【００３２】
本発明はまた、動物において血清カルシウム負荷を低減するための方法を提供し、その動物は、そのような処置を必要とし、その方法は、その動物に、カルシウムを減少する有効量の１つ以上のリポソームを投与する工程を包含する。
【００３３】
本発明はまた、生物系からカルシウムを除去するための方法および高カルシウムイオン濃度に関連する疾患を処置する方法を提供する。従って、本発明は、動物の血清からカルシウムを除去するための方法を提供し、その方法は、その血清と、その血清からカルシウムを除去するリポソームとを（インビトロにて、またはインビボにて）接触させる工程を包含する。
【００３４】
本方法はまた、カルシウムイオンを隔離し得るリポソーム、ならびに高カルシウムイオン濃度によって引き起こされる疾患を処置する方法を提供し、その方法は、そのような処置を必要とする動物に、カルシウムイオン受容因子またはカルシウムイオン封鎖因子を含む処置的に効果的な量のリポソームを投与する工程を包含する。
【００３５】
本発明はまた、医学的な処置での使用のための、本明細書中に記載されるようなリポソームを提供する。
【００３６】
本発明はまた、動物においてアルツハイマー病を処置するのに有用な医薬を調製するための本明細書中に記載されるようなリポソームの使用を提供する。
【００３７】
本発明はまた、動物においてパーキンソン病を処置するのに有用な医薬を調製するための本明細書中に記載されるようなリポソームの使用を提供する。
【００３８】
本発明はまた、動物において糖尿病（例えば、高血糖）を処置するのに有用な医薬を調製するための本明細書中に記載されるようなリポソームの使用を提供する。
【００３９】
本発明はまた、動物において血清のカルシウム負荷を低減するのに有用な医薬を調製するための本明細書中に記載されるようなリポソームの使用を提供する。
【００４０】
本発明はまた、本明細書中に記載されるようなリポソーム、および薬学的に受容可能なビヒクルまたはキャリアを含む薬学的組成物を提供する。
【００４１】
本発明はまた、本明細書中に記載されるような新規のリポソーム、ならびに本明細書中に記載されるような、本発明のリポソームを調製するための合成プロセスを提供する。
【００４２】
（発明の詳細な説明）
（定義）
本明細書中で使用される場合、用語「動物」とは、哺乳類、鳥類、爬虫類、および魚類をいう。
【００４３】
本明細書中で使用される場合、用語「生物学的サンプル」としては、組織、血清、血液、血漿、脳脊髄液、唾液、尿などの動物から採取されたサンプルが挙げられる。
【００４４】
本明細書中で使用される場合、用語「カルシウム」としては、カルシウムおよびカルシウムイオンが挙げられる。
【００４５】
本明細書中で使用される場合、用語「チャネル／トランスポーター（ｔｒａｎｓｐｏｒｔｅｒ）」としては、実体（例えば、カルシウム）をリポソームに入れることを可能にする（例えば、実体をリポソームの内部に、有効に輸送し得る）任意の分子または任意のセットが挙げられる。
【００４６】
本明細書中で使用される場合、用語「不溶性」または用語「難溶性」とは、血清から実体（例えば、カルシウム）を効果的に除去させる範囲の溶解係数（Ｋｓｐ）を有する、無機塩類（例えば、カルシウム塩）をいう。
【００４７】
本明細書中で使用される場合、用語「主に結合する（ｐｒｉｍａｒｉｌｙ  ｂｉｎｄ）」とは、１つの実体（例えば、カルシウム）に対して、好ましくは周辺にある１つ以上の他のイオン全体に対して、共有結合性か、またはイオン結合（ｉｏｎｉｃａｌｌｙ）のいずれかで結合する金属イオン封鎖因子をいう。
【００４８】
本明細書中で使用される場合、用語「金属イオン封鎖因子」または用語「受容因子」は、実体に結合し得る、化合物、錯体、分子、または原子をいい、それによって、周辺の環境からその実体を速やかに除去する。
【００４９】
（実体）
本発明は、動物からか、または生物学的サンプルから、望ましくない実体を除去するための方法を提供する。リポソームは、多種多様な実体を取り込むために処方され得る。従って、本発明の方法は概して、動物からか、または生物学的サンプルから、多種多様な物質を除去するのに有用である。例えば、本発明の方法は、金属または金属イオン（例えば、アルカリ金属、アルカリ土類金属、Ｆｅ、Ｏｓ、Ｃｏ、Ｎｉ、Ｐｄ、Ｃｕ、Ａｇ、Ａｕ、Ｚｎ、Ａｌ、Ｃｄ、Ｈｇ、Ｓｎ、もしくはＰｂ、またはそれらのイオン）を除去するために使用され得る。特に、本発明の方法は、Ｚｎ、Ａｌ、Ｆｅ、もしくはＣｕ、またはそれらのイオンを動物から除去するのに有用である。好ましい実施形態において、その方法は、動物からカルシウムを除去するのに有用である。
【００５０】
本方法はまた、動物から望ましくない分子（例えば、ペプチド、有機分子、治療剤、亜酸化窒素、またはグルコース）を除去するのに有用である。従って、本方法は、処置（すなわち、病理学的状態に関連するペプチドまたは化合物を除去すること）のために有用である。本方法はまた、治療剤に対する過剰曝露（すなわち、過量投与）、または有毒物質に対する過剰曝露（すなわち、中毒）を処置するのに有用である。本明細書中で使用される場合、用語「有機化合物」は、１つ以上の炭素原子を含有する任意の化合物を含む。代表的に、有機化合物は、約４５０原子質量単位（ａｍｕ）未満の分子量を有する。１つの好ましい実施形態において、その有機化合物は、約３００ａｍｕ未満の分子量を有する。
【００５１】
（リポソームとの接触）
本発明の方法は、インビトロか、またはインビボで実施され得る。例えば、本方法は代表的に、リポソームを動物に投与することによって実施され得る。いくつかの状況において、それは、動物から生物学的サンプル（例えば、血清、脳脊髄液、または組織）を除去し、そしてその動物の外部で、そのサンプルとそのリポソームとを接触させるのに、より都合が良い。望ましくない実体の除去に続いて、そのサンプルは、その動物に戻され得る。本発明の方法は、処置上の適用ならびに診断上の適用に有用である。
【００５２】
（リポソーム中への取り込み）
金属または金属イオンを取り込むために使用される場合、本発明の方法において使用されるリポソームは、代表的に、イオンチャネルを含むか、またはその金属もしくはそのイオンの、そのリポソーム中への進入を容易にするためのシャトルを含む。例えば、Ａ２３１８７（ＣａｌＢｉｏｃｈｅｍ（Ｌａ  Ｊｏｌｌａ，ＣＡ）またはＦｅｎｎｅｎｔｅｋ  Ｌｔｄ（Ｊｅｒｕｓａｌｅｍ，Ｉｓｒａｅｌ）から入手可能）は、Ｃａ２＋または他の２価のイオンを輸送するのに使用され得る。しかし、このようなチャネルまたはシャトルは、いつも必要とされるわけではない。例えば、両親媒性の実体は、化学的電位勾配に反応して（例えば、ｐＨ勾配に対して）ロードされ得る。さらに、疎水性の実体を取り込むために使用される場合、その疎水性の実体の進入を容易にするチャネルは、必要であっても、必要でなくてもよい。そのリポソームは、いくつかの疎水性の実体に対して浸透可能であるが、その実体は、進入後にそのリポソームの内部で、捕捉され得るか、または修飾され得、従って、それはすぐにリポソームの外へは戻ってこない。
【００５３】
一旦、上記リポソーム中に取り込まれると、上記実体は、単にそのリポソーム内部の親水性環境中、疎水性の２重層中に、滞在し得るか、またはそのリポソームは、その実体に（例えば、水素結合またはイオン間相互作用によって）関連する金属イオン封鎖因子を含み得、そしてその実体のリポソームの外へ通過する能力を減少する。例えば、そのリポソームは、金属イオン封鎖因子（例えば、ポリアミン、多座のカルボン酸（例えば、ＥＤＴＡ）、クラウンエーテル、ラクタム、無機イオン化合物、またはその実体をリポソーム中に引き寄せる化学的勾配を生成する他の因子）を含み得る。そのリポソームはまた、その実体と反応し得る、試薬または酵素を含み得、それによって、その実体のリポソームの外へ通過する能力を減少する。例えば、グルコースは、そのリポソーム内で、ヘキソキナーゼを使用してグルコース−６−ホスフェートへの変換を受け得る。そのリポソーム中での反応が、反応が起こるためのエネルギー源（例えば、ＡＴＰ）、補因子、特定のｐＨ、または特定のイオン平衡を必要とする場合、そのリポソームは、これらの特徴を含むように調製され得る。インビトロ適用のためには、このような特徴はまた、外部の供給源からも提供される。
【００５４】
（リポソーム作用の機構）
本発明の方法に従って、上記リポソームは、多くの方法で動物中の実体の有効濃度を低減し得る。例えば、１）そのリポソームは、可逆的な様式においてその実体を取り込み得、その後、その実体を長時間かけて放出し、従って、その時間にわたってその動物において時間に対して有効な、実体の最大量または最大濃度は減少するか；２）そのリポソームは、その実体を取り込み得、その後、その動物から除去され得、それによって動物の血清からその実体を排除し得るか；３）そのリポソームは、その実体を取り込み得、そしてその実体は、そのリポソーム内で捕捉され得るか、または修飾され得、従って、それはリポソームの外へ通過しないか；または４）その実体の取り込みに続いて、そのリポソームは、身体の中の他の場所に再度移行し得（例えば、マクロファージ中に負荷され得）、そこでその実体は、放出され得るか、またはその実体を含むリポソームは、その身体から排除され得る。上の１〜４の１つ以上の組み合わせもまた、起こり得る。
【００５５】
（高カルシウム血症を処置する方法）
本発明は、高カルシウム血症を有する動物を処置する方法を含む。本方法は、そのような処置を必要とする動物に治療有効量の少なくとも１つのカルシウム封鎖リポソームを投与する工程を包含し、それによって、その動物内のカルシウムイオン濃度を減少する。本方法は、代表的に、カルシウムを減少する有効量のカルシウム封鎖因子を含む少なくとも１つのリポソームを、動物に投与することによって、血清カルシウム濃度を減少する。
【００５６】
１つの実施形態において、本方法は、高カルシウム血症状態にある動物に、その動物において血清コレステロールレベルを下げるのに有効な量の少なくとも１つのカルシウム封鎖リポソームを投与する工程を包含する。その後、その動物のカルシウムイオン血清濃度は、数日間、約４時間〜約６時間毎にモニタリングされ得る。処置は、一旦望ましいカルシウムイオン血清濃度（すなわち、正常カルシウム血）に達すると終了する。必要に応じて、マグネシウムイオンのレベル、ＰＴＨのレベル、およびホスフェートのレベルは、カルシウムイオン濃度と一緒に、同時にかまたは連続してかのいずれかで、モニタリングされ得る。
【００５７】
（組み合わせ処置）
上記リポソームの使用はまた、他の処置と組み合わせられ得、所与の状態（高血糖、アルツハイマー病、ウイルソン病、重金属中毒、または高カルシウム血症を処置する。例えば、本発明の方法が、高カルシウム血症を処置するために使用される場合、リポソームの投与は、動物中のカルシウム負荷を低減するのに有用な１つ以上の治療剤の投与と組み合わせられ得る。さらなる治療剤は、本発明のリポソームの投与前、投与中、投与後のいずれかに投与され得る。
【００５８】
本発明の１つの実施形態において、そのリポソームは、そのリポソーム内に、所定の状態（例えば、高血糖、アルツハイマー病、ウイルソン病、重金属中毒、または高カルシウム血症）を処置する１つ以上のさらなる治療剤を含み得る。高カルシウム血症の処置における使用が検討される治療剤としては、フロセミド、カルシトニン、ビスホスホネート、エチドロン酸、パミドロン酸、ゾレンドラネート、糖質コルチコイド、硝酸ガリウム、プリカマイシン、ミスロマイシン（ｍｉｔｈｒｏｍｙｃｉｎ）が挙げられるが、これらに限定されない。
【００５９】
（リポソーム形成脂質）
上記リポソームは、いくつかのリポソーム形成脂質（例えば、ホスファチジルコリンまたはスフィンゴミエリン）を含む。代表的に、その脂質は、少なくとも１つのホスファチジルコリンを含み、このホスファチジルコリンは、リポソームの主要な、充填／捕捉／構造要素を提供する。代表的に、そのホスファチジルコリンは、主にＣ１６または、より長い脂肪酸鎖を含む。鎖の長さは、リポソームの構造、完全性、および安定性の両方を提供する。必要に応じて、１つの脂肪酸鎖は、少なくとも１つの２重結合を有する。
【００６０】
本明細書中で使用される場合、用語「ホスファチジルコリン」は、Ｓｏｙ−ＰＣ、Ｅｇｇ−ＰＣ、ジエライドイル（ｄｉｅｌａｉｄｏｙｌ）ホスファチジルコリン（ＤＥＰＣ）、ジオレオイル（ｄｉｏｌｅｏｙｌ）ホスファチジルコリン（ＤＯＰＣ）、ジステアロイル（ｄｉｓｔｅａｒｏｙｌ）ホスファチジルコリン（ＤＳＰＣ）、水素化されたダイズホスファチジルコリン（ＨＳＰＣ）、ジパルミトイル（ｄｉｐａｌｍｉｔｏｙｌ）ホスファチジルコリン（ＤＰＰＣ）、１−パルミトイル−２−オレオホスファチジルコリン（ＰＯＰＣ）、ジベへノイル（ｄｉｂｅｈｅｎｏｙｌ）ホスファチジルコリン（ＤＢＰＣ）、およびジミリストイル（ｄｉｍｙｒｉｓｔｏｙｌ）ホスファチジルコリン（ＤＭＰＣ）を含む。
【００６１】
本明細書中で使用される場合、用語「Ｓｏｙ−ＰＣ」とは、種々の、モノ−不飽和脂肪酸、ジ−不飽和脂肪酸、トリ−不飽和脂肪酸、およびモノ−飽和脂肪酸、ジ−飽和脂肪酸、トリ−飽和脂肪酸を含むホスファチジルコリン組成物をいう。代表的に、Ｓｏｙ−ＰＣは、約１２重量％〜約３３重量％の量で存在するパルミチン酸、約３重量％〜約８重量％の量で存在するステアリン酸、約４重量％〜約２２重量％の量で存在するオレイン酸、約６０重量％〜約６６重量％の量で存在するリノール酸、および約５重量％〜約８重量％の量で存在するリノレン酸を含む。
【００６２】
本明細書中で使用される場合、用語「Ｅｇｇ−ＰＣ」は、種々の飽和脂肪酸および種々の不飽和脂肪酸（これらに限定されない）を含むホスファチジルコリン組成物をいう。代表的に、Ｅｇｇ−ＰＣは、約３４重量％の量で存在するパルミチン酸、約１０重量％の量で存在するステアリン酸、約３１重量％の量で存在するオレイン酸、および約１８重量％の量で存在するリノール酸を含有する。
【００６３】
（コレステロール）
コレステロールは、代表的に、上記リポソームに安定性を与える。コレステロールに対するホスファチジルコリンの比は、代表的に、モル比で約０．５：１〜約４：１である。好ましくは、コレステロールに対するホスファチジルコリンの比は、モル比で約１：１〜約２：１である。さらに好ましくは、コレステロールに対するホスファチジルコリンの比は、モル比で約２：１である。
【００６４】
（カルシウム封鎖因子）
本発明のリポソームに伴う使用に適したカルシウム封鎖因子としては、周辺の環境からカルシウムイオンを除去するのに十分にカルシウムイオンに結合し得る、化合物、錯体、イオン、分子、試薬、またはそれらの組み合わせが挙げられるが、これらに限定されない。カルシウム除去としては、そのリポソーム内でのカルシウム錯体、または不溶性無機化合物もしくは難溶性無機化合物を形成する工程、およびその後、血清からリポソームを除去する工程が挙げられるが、これらに限定されない。本発明の１つの実施形態において、そのカルシウム封鎖因子は、カルシウムイオンに優先的に結合するが、そのカルシウム封鎖因子は、他のイオンに結合し得る。例えば、そのカルシウム封鎖因子は、カルシウムイオンに主に結合し得、および／または他のイオン（例えば、特にマグネシウムイオン）を除去する。
【００６５】
代表的に、カルシウム封鎖因子としては、ポリアミン、ポリカーボネート、多座のカルボン酸、クラウンエーテル、ラクタム、無機化合物、ポリアニオン、タンパク質フラグメントおよびペプチドが挙げられる。特に、カルシウム封鎖因子としては、エチレンジアミン四酢酸（ＥＤＴＡ）、エチレンビス（オキシエチレンニトリロ）−四酢酸（ＥＧＴＡ）、およびカルシトニンが挙げられるが、これらに限定されない。
【００６６】
リポソーム中のカルシウム封鎖因子の量は、望ましいカルシウム封鎖因子の型、高カルシウム血症の低減についての望ましい時間、およびその動物の状態によって変化し得る。代表的に、カルシウム封鎖因子の量は、リポソームの投与から数分間以内または数時間以内にカルシウムイオン濃度の減少を生じるのに十分な量であるべきである。あるいは、高カルシウム血の急速な低減が、望ましくない場合、そのカルシウム封鎖因子は、長期間（例えば、１日または数日）、安定かつ延長されたカルシウムイオンの減少を提供するために選択され得る。代表的に、そのカルシウム封鎖因子は、その動物血清との接触前に、少なくとも約５０ｍＭの濃度で存在する。好ましくは、そのカルシウム封鎖因子は、その動物血清との接触前に、少なくとも約１００ｍＭの濃度で、そしてより好ましくは、少なくとも約２００ｍＭの濃度で存在する。１つの実施形態において、そのカルシウム封鎖因子は、動物の血清内において、約１０％〜約３０％のカルシウムイオン濃度を除去し得、それはまた、その動物のＥＫＧの正常化を生じ得る。
【００６７】
（リポソームの調製）
上記リポソームは、代表的に、リン脂質およびコレステロールの脂質層を含む。代表的に、コレステロールに対するリン脂質の比は、一旦動物に投与されると、溶解も崩壊もしないリポソームを形成するのに十分である。その脂質およびコレステロールは、適切な溶媒中または適切な溶媒混合物に、適切な量のイオノフォアと一緒に溶解される。適当な時間の後、その溶媒は、真空乾燥または噴霧乾燥によって除去される。生じる固体物質は、保存され得るか、またはすぐに使用され得る。
【００６８】
その後、生じる固体物質は、適切な温度において、必要に応じて金属イオン封鎖因子（例えば、ＥＤＴＡのようなカルシウム封鎖因子）を含むか、または必要に応じて、適切な温度において別の治療剤を含む水溶液中で水和され、多層状小胞（ＭＬＶ）を生じる。ＭＬＶを含む溶液は、均一化によって大きさを減じ、小さな１枚膜小胞（Ｓｍａｌｌ  Ｕｎｉｌａｍｅｌｌｅｒ  Ｖｅｓｉｃｌｅ）（ＳＵＶ）を形成する。カルシウム封鎖因子の一部は、そのプロセスの間に、ＳＵＶの水性区画中に封入される。封入されなかった金属イオン封鎖因子は、適切な方法（例えば、透析、脱塩カラム、またはクロス式濾過）によって除去される。生じるリポソーム溶液は、濾過され、そして使用できる状態である。
【００６９】
緩衝液中のカルシウム封鎖因子の負荷は、処方に依存する。とりわけ関連する要因は、脂質成分の効果的な相転移温度（Ｔｍ）である。図１は、種々の調製物における、カルシウム負荷の脂質転移温度依存性を示す。緩衝液中の負荷は、インビトロ（血清、血漿もしくは血液）での負荷であるか、またはインビボでの負荷であるかには、直接関係しても関係しなくてもよい。血清タンパク質または他の要素は、トランスポーターチャネルの機能に（積極的または消極的に）影響し得る。全体的なリポソームの性能は、部分的に、インビボにおける負荷および生体内分布と離れて、薬物動態、ならびに／またはリポソームの薬動力学から生じる。
【００７０】
（処方物）
本発明の脂質ベースの分散剤はまた、非経口的に投与されるべく処方され得る。さらに脂質ベースの分散は、注入または注射による、皮下投与、筋肉内投与、静脈内投与、または腹腔内投与のために処方され得る。これらの調製物はまた、微生物の増殖を防ぐ防腐剤、緩衝液、抗酸化剤を適当な量で含む。
【００７１】
組成物および調製物は、代表的に、少なくとも０．１％の金属イオン封鎖因子を含む。その組成物および調製物の割合は、当然、変化され得、そして都合の良いことには、所与の単位投薬形態の約２重量％〜約６０重量％の間である。このような治療的に有用な組成物において活性な金属イオン封鎖因子の量によって、効果的な投薬レベルが得られる。
【００７２】
上記リポソームはまた、動物血清の等張性を維持する生理学的に受容可能な塩を含む。動物血清の等張性を達成する任意の薬学的に受容可能な塩が、受容可能である（例えば、ＮａＣｌ）。
【００７３】
処置における使用に必要とされる処方物の量は、特定の薬剤によってのみではなく、投与の経路、処置される状態の性質、ならびにその動物の年齢および状態によっても変化し、必要とされる量は、究極的には、担当の医師または臨床家の裁量による量である。
【００７４】
処方物の好ましい量は、都合の良いことに、１回の用量、または適当な間隔において投与される分割された用量（例えば、１日あたり、２回、３回、４回またはそれ以上の準用量（ｓｕｂ−ｄｏｓｅ））であり得る。その準用量自体は、さらに（例えば、大まかに間隔を空けた個別の投与回数に）分割され得る。必要に応じて、そのリポソームおよび／またはその処方物は、少なくとも１つの、抗酸化剤、緩衝液、安定化剤、または薬学的に受容可能な賦形剤を含み得る。
【００７５】
（特異的かつ好ましい実施形態）
特定かつ好ましい値は、以下に網羅され、それらは、他に定義された値または定義された範囲内の他の値を排除しない。
【００７６】
本発明の特定の実施形態において、上記接触させる工程は、インビボで起こる。
【００７７】
本発明の別の特定の実施形態において、上記接触させる工程は、インビトロで起こる。
【００７８】
本発明の別の特定の実施形態において、上記実体は、金属または金属イオンである。
【００７９】
本発明の別の特定の実施形態において、上記実体は、アルカリ金属、アルカリ土類金属、Ｆｅ、Ｏｓ、Ｃｏ、Ｎｉ、Ｐｄ、Ｃｕ、Ａｇ、Ａｕ、Ｚｎ、Ａｌ、Ｃｄ、Ｈｇ、Ｓｎ、もしくはＰｂ、またはそれらのイオンである。
【００８０】
本発明の別の特定の実施形態において、上記実体は、Ｚｎ、Ａｌ、Ｆｅ、もしくはＣｕ、またはそれらのイオンである。
【００８１】
本発明の別の特定の実施形態において、上記実体は、カルシウムまたはそのイオンである。
【００８２】
本発明の別の特定の実施形態において、上記実体は、ペプチドである。
【００８３】
本発明の別の特定の実施形態において、上記実体は、有機分子である。
【００８４】
本発明の別の特定の実施形態において、上記実体は、治療剤である。
【００８５】
本発明の別の特定の実施形態において、上記実体は、グルコースである。
【００８６】
本発明の別の特定の実施形態において、上記動物は、哺乳動物である。
【００８７】
本発明の別の特定の実施形態において、上記動物は、ヒトである。
【００８８】
本発明の別の特定の実施形態において、上記リポソームは、１つ以上の、リポソームを形成する脂質およびコレステロールを含み、コレステロールに対するその脂質のモル比は、約０．５：１〜約４：１である。
【００８９】
本発明の別の特定の実施形態において、上記リポソームは、ホスファチジルコリンおよびコレステロールを含む。
【００９０】
本発明の別の特定の実施形態において、上記リポソームにおけるコレステロールに対するホスファチジルコリンのモル比は、約０．５：１〜約４：１である。
【００９１】
本発明の別の特定の実施形態において、上記リポソームにおけるコレステロールに対するホスファチジルコリンのモル比は、約１：１〜約２：１である。
【００９２】
本発明の別の特定の実施形態において、上記リポソームにおけるコレステロールに対するホスファチジルコリンのモル比は、約２：１である。
【００９３】
本発明の別の特定の実施形態において、上記ホスファチジルコリンは、Ｓｏｙ−ＰＣ、Ｅｇｇ−ＰＣ、ＤＥＰＣ、ＤＯＰＣ、ＤＳＰＣ、ＨＳＰＣ、ＤＭＰＣ、およびＤＰＰＣ、ならびにそれらの混合物から選択される。
【００９４】
本発明の別の特定の実施形態において、上記ホスファチジルコリンは、ＤＥＰＣ、ＤＯＰＣ、ＤＳＰＣ、ＨＳＰＣ、ＤＭＰＣ、ＰＯＰＣ、ＤＢＰＣ、およびＤＰＰＣ、ならびにそれらの混合物から選択される。
【００９５】
本発明の別の特定の実施形態において、上記ホスファチジルコリンは、ＤＥＰＣ、ＤＯＰＣ、ＤＳＰＣ、ＨＳＰＣ、ＤＭＰＣ、およびＤＰＰＣ、ならびにそれらの混合物から選択される。
【００９６】
本発明の別の特定の実施形態において、上記ホスファチジルコリンは、ＤＯＰＣ、ＤＳＰＣ、ＨＳＰＣ、ＤＭＰＣ、およびＤＰＰＣ、ならびにそれらの混合物から選択される。
【００９７】
本発明の別の特定の実施形態において、上記ホスファチジルコリンは、ＤＯＰＣ、ＤＳＰＣ、ＨＳＰＣ、およびＤＰＰＣ、ならびにそれらの混合物から選択される。
【００９８】
本発明の別の特定の実施形態において、上記ホスファチジルコリンは、ＤＰＰＣである。
【００９９】
本発明の別の特定の実施形態において、上記リポソームは、上記実体のリポソーム中への取り込みを容易にする、チャネルまたはシャトルを含む。
【０１００】
本発明の別の特定の実施形態において、上記チャネルは、イオンチャネルである。
【０１０１】
本発明の別の特定の実施形態において、上記リポソームの内部のｐＨが、投与前、または上記生物学的サンプルもしくは上記血清との接触前に、約８未満である。
【０１０２】
本発明の別の特定の実施形態において、上記リポソームは、ＳＵＶまたはＭＬＶである。
【０１０３】
本発明の別の特定の実施形態において、上記実体は、上記リポソームの内部で金属イオン封鎖因子と結合して、そのリポソームの外へ通過できない錯体を形成する。
【０１０４】
本発明の別の特定の実施形態において、カルシウムは、上記リポソームの内部で金属イオン封鎖因子と結合して、そのリポソームの外へ通過できないカルシウム錯体を形成する。
【０１０５】
本発明の別の特定の実施形態において、上記リポソームは、１つ以上のカルシウムイオン封鎖因子を含有する。
【０１０６】
本発明の別の特定の実施形態において、上記リポソームは、リポソームを形成する脂質およびそのリポソーム中へのカルシウムの通過を可能にするトランスポーター／チャネルを含有する。
【０１０７】
本発明の別の特定の実施形態において、上記金属イオン封鎖因子は、ポリアミン、多座のカルボン酸、クラウンエーテル、ラクタム、または無機化合物である。
【０１０８】
本発明の別の特定の実施形態において、上記金属イオン封鎖因子は、ＥＤＴＡである。
【０１０９】
本発明の別の特定の実施形態において、上記リポソーム中の上記ＥＤＴＡの濃度は、投与前または接触前に少なくとも約１０ｍＭである。
【０１１０】
本発明の別の特定の実施形態において、上記リポソーム中の上記ＥＤＴＡの濃度は、投与前または接触前に少なくとも約２０ｍＭである。
【０１１１】
本発明の別の特定の実施形態において、上記リポソーム中の上記ＥＤＴＡの濃度は、投与前または接触前に少なくとも約２５ｍＭである。
【０１１２】
本発明の別の特定の実施形態において、上記リポソーム中の上記ＥＤＴＡの濃度は、投与前または接触前に少なくとも約５０ｍＭである。
【０１１３】
本発明の別の特定の実施形態において、上記リポソーム中の上記ＥＤＴＡの濃度が、投与前または接触前に少なくとも約８０ｍＭである。
【０１１４】
本発明の別の特定の実施形態において、上記リポソーム中の上記ＥＤＴＡの濃度が、投与前または接触前に少なくとも約１００ｍＭである。
【０１１５】
本発明の別の特定の実施形態において、上記リポソーム中の上記ＥＤＴＡの濃度が、投与前または接触前に少なくとも約２００ｍＭである。
【０１１６】
本発明の別の特定の実施形態において、上記金属イオン封鎖因子は、亜鉛、セレン、または銅に比べて、カルシウム結合に対して、少なくとも２倍選択的である。
【０１１７】
本発明の別の特定の実施形態において、上記実体は、前記リポソームの内部で酵素と反応する。本発明の別の特定の実施形態において、上記反応した実体は、リポソームの外に通過できない。
【０１１８】
本発明の別の特定の実施形態において、上記実体は、上記リポソームの内部で酵素と反応する。本発明の別の特定の実施形態において、前記実体と前記酵素との間の反応は、ＡＴＰを必要とする。
【０１１９】
本発明の別の特定の実施形態において、上記リポソームは、イオンチャネルＡ２３１８７を含む。
【０１２０】
本発明の別の特定の実施形態において、上記リポソームは、イオンチャネルを含み、そのイオンチャネルは、そのリポソーム中へのカルシウムの流入に関して、亜鉛、セレン、または銅に比べて少なくとも２倍選択的である。
【０１２１】
別の特定の実施形態において、本発明の方法は、動物の血液循環からカルシウムを除去し得るリポソームを利用する。
【０１２２】
本発明の別の特定の実施形態において、上記リポソームは、カルシウムイオンと関係し得る、カルシウム封鎖因子またはカルシウム受容因子を含む。
【０１２３】
本発明の別の特定の実施形態において、上記リポソームは、リポソームを形成する、脂質、コレステロール、およびチャネル／トランスポーターを含む脂質層、ならびに１つ以上のカルシウムイオンと結合可能な、カルシウム封鎖因子またはカルシウム受容因子を含有する。
【０１２４】
（図面）
図１は、種々のリポソーム調製物についての緩衝溶液中のカルシウム負荷の脂質転移温度依存性を示す。２：１のリン脂質−コレステロール調製物の５つの異なる処方物が、示される。５つのリン脂質は、ＨＳＰＣ（５５℃）、ＤＰＰＣ（４１℃）、ＤＭＰＣ（２３℃）、ＤＥＰＣ（１２℃）およびＤＯＰＣ（−２０℃）である。全てのサンプルは、２００ｍＭ  ＥＤＴＡを用いてｐＨ４．５で調製された。ＤＳＰＣ−コレステロール処方物において、２つのさらなる調製物は、取り込まれるか、または包括されかつ緩衝液の外側において取り込まれるかのいずれかで、硫酸アンモニウムを使用して作製された。
【０１２５】
図２は、４つの異なる様式で調製された３つの処方物におけるカルシウム負荷を示す。その処方物は、２：１のＨＳＰＣ：コレステロール（処方物２Ａ）、１：１．２５：１．５のＨＳＰＣ：コレステロール：ＤＯＰＣ（処方物２Ｂ）、および２：１のＤＰＰＣ：コレステロール（処方物２Ｃ）を使用して１４０ｍＭ  ＮａＣｌを用いてｐＨ４．５で、そして１４０ｍＭ  ＮａＣｌを用いずにｐＨ４．５で、または１４０ｍＭ  ＮａＣｌを用いてｐＨ７．５で、そして１４０ｍＭ  ＮａＣｌを用いずにｐＨ７．５で調製された。４つの異なる調製物における各リン脂質：コレステロール調製物は、平均化されて、示された負荷曲線を得るために平均化された。
【０１２６】
図３は、カルシウム負荷の効力のインビトロｐＨおよびＮａＣｌ依存性を示す。４つの異なる処方物が、調製された。２：１のＤＰＰＣ：コレステロール処方物は、４．５のｐＨにて１４０ｍＭのＮａＣｌおよび２００ｍＭのＥＤＴＡを使用して調製され（処方物３Ａ）、そして第２に７．５のｐＨにて１４０ｍＭのＮａＣｌおよび２００ｍＭのＥＤＴＡを使用して調製された（処方物３Ｄ）。その後、２：１のＤＰＰＣ：コレステロール処方物は、４．５のｐＨにて２００ｍＭのＥＤＴＡを使用して（処方物３Ｃ）、そして第２に７．５のｐＨにて２００ｍＭのＥＤＴＡを使用して調製された（処方物３Ｄ）。測定は、０分、３０分、６０分、１２０分、および２４０分において行われた。グラフは、４．５のｐＨにおいて調製された処方物が、最も高いＥＤＴＡ％飽和度を有したことを示す。
【０１２７】
図４は、４つのＨＳＰＣ：コレステロール処方物におけるカルシウム負荷を示す。特に、２：１のＨＳＰＣ：コレステロール処方物は、４．５のｐＨにて１４０ｍＭのＮａＣｌおよび２００ｍＭのＥＤＴＡを使用して（処方物４Ａ）、そして第２に７．５のｐＨにて１４０ｍＭのＮａＣｌおよび２００ｍＭのＥＤＴＡを使用して調製された（処方物４Ｂ）。その後、２：１のＨＳＰＣ：コレステロール処方物は、４．５のｐＨにて２００ｍＭのＥＤＴＡを使用して（処方物４Ｄ）、そして第２に７．５のｐＨにて２００ｍＭのＥＤＴＡを使用して調製された（処方物４Ｄ）。測定は、０分、３０分、６０分、１２０分、および２４０分において行われた。グラフは、４．５のｐＨにて１４０ｍＭのＮａＣｌおよび２００ｍＭのＥＤＴＡを用いて調製された処方物が、最も高い血清飽和度を有したことを示した。
【０１２８】
図５は、４つのＨＳＰＣ：コレステロール処方物における負荷の効力を示す。２：１のＨＳＰＣ：コレステロール処方物は、４．５のｐＨにて１４０ｍＭのＮａＣｌおよび２００ｍＭのＥＤＴＡを使用して（処方物５Ａ）、そして第２に７．５のｐＨにて１４０ｍＭのＮａＣｌおよび２００ｍＭのＥＤＴＡを使用して調製された（処方物５Ｂ）。その後、２：１のＨＳＰＣ：コレステロール処方物は、４．５のｐＨにて２００ｍＭのＥＤＴＡを使用して（処方物５Ｄ）、そして第２に７．５のｐＨにて２００ｍＭのＥＤＴＡを使用して調製された（処方物５Ｃ）。測定は、０分、３０分、６０分、１２０分、および２４０分において行われた。グラフは、ＮａＣｌを用いずに、そして２００ｍＭのＥＤＴＡを用いて、４．５のｐＨにて調製された処方物が、最も高いカルシウムイオン濃度を有したことを示した。
【０１２９】
図６は、７つのＨＳＰＣ：コレステロール：ＤＯＰＣ処方物におけるカルシウム負荷を示す。４つの、１：１．２５：１．５のＨＳＰＣ：コレステロール：ＤＯＰＣ処方物が、調製された。１つは、４．５のｐＨにて１４０ｍＭのＮａＣｌおよび２００ｍＭのＥＤＴＡを使用して（処方物６Ｂ）、第２に７．５のｐＨにて１４０ｍＭのＮａＣｌおよび２００ｍＭのＥＤＴＡを使用して（処方物６Ｃ）、第３に７．５のｐＨにてＮａＣｌを用いずに（処方物６Ａ）、そして第４に４．５のｐＨにてＮａＣｌを用いずに（処方物６Ｄ）調製された。３つのＨＳＰＣ：コレステロール：ＤＯＰＣ処方物が、調製された。１つは、７．５のｐＨにて２００ｍＭのＥＤＴＡを使用する１：０．１４：０．２５のＨＳＰＣ：コレステロール：ＤＯＰＣ（処方物６Ｅ）であり、第２は、７．５のｐＨにて２００ｍＭのＥＤＴＡを使用する１：０．１２：０．０５のＨＳＰＣ：コレステロール：ＤＯＰＣ（処方物６Ｆ）であり、第３は、７．５のｐＨにて２００ｍＭのＥＤＴＡを使用する１：０．１７：０．５のＨＳＰＣ：コレステロール：ＤＯＰＣ（処方物６Ｇ）である。測定は、０分、３０分、６０分、１２０分、および２４０分において行われた。
【０１３０】
図７は、７つのＨＳＰＣ：コレステロール：ＤＯＰＣ処方物におけるカルシウム負荷効力を示す。４つの、１：１．２５：１．５のＨＳＰＣ：コレステロール：ＤＯＰＣ処方物が調製された。１つは、４．５のｐＨにて１４０ｍＭのＮａＣｌおよび２００ｍＭのＥＤＴＡを使用して（処方物７Ｂ）、第２に７．５のｐＨにて１４０ｍＭのＮａＣｌおよび２００ｍＭのＥＤＴＡを使用して（処方物７Ｃ）、第３に７．５のｐＨにてＮａＣｌを用いずに（処方物７Ａ）、そして第４に４．５のｐＨにてＮａＣｌを用いずに（処方物７Ｄ）調製された。３つのＨＳＰＣ：コレステロール：ＤＯＰＣ処方物が、調製された。１つは、７．５のｐＨにて２００ｍＭのＥＤＴＡを使用する１：０．１７：０．５のＨＳＰＣ：コレステロール：ＤＯＰＣ（処方物７Ｅ）であり、第２は、７．５のｐＨにて２００ｍＭのＥＤＴＡを使用する１：０．１４：０．２５のＨＳＰＣ：コレステロール：ＤＯＰＣ（処方物７Ｆ）であり、第３は、７．５のｐＨにて２００ｍＭのＥＤＴＡを使用する１：０．１２：０．０５のＨＳＰＣ：コレステロール：ＤＯＰＣ（処方物７Ｇ）である。測定は、０分、３０分、６０分、１２０分、および２４０分において行われた。
【０１３１】
図８は、３つのＨＳＰＣ：コレステロール：ＤＥＰＣ処方物におけるカルシウム負荷を示す。３つのＨＳＰＣ：コレステロール：ＤＥＰＣ処方物が、調製された。１つは、７．５のｐＨにて２００ｍＭのＥＤＴＡを使用する１：０．１４：０．２５のＨＳＰＣ：コレステロール：ＤＥＰＣ（処方物８Ａ）であり、第２は、７．５のｐＨにて２００ｍＭのＥＤＴＡを使用する１：０．１２：０．０５のＨＳＰＣ：コレステロール：ＤＥＰＣ（処方物８Ｂ）であり、第３は、７．５のｐＨにて２００ｍＭのＥＤＴＡを使用する１：０．１７：０．５のＨＳＰＣ：コレステロール：ＤＥＰＣ（処方物８Ｃ）である。測定は、０分、３０分、６０分、１２０分、および２４０分において行われた。
【０１３２】
図９は、３つのＨＳＰＣ：コレステロール：ＤＥＰＣ処方物における負荷の効力を示す。３つのＨＳＰＣ：コレステロール：ＤＥＰＣ処方物が、調製された。１つは、７．５のｐＨにて２００ｍＭのＥＤＴＡを使用する１：０．１７：０．５のＨＳＰＣ：コレステロール：ＤＥＰＣ（処方物９Ａ）であり、第２は、７．５のｐＨにて２００ｍＭのＥＤＴＡを使用する１：０．１４：０．２５のＨＳＰＣ：コレステロール：ＤＥＰＣ（処方物９Ｂ）であり、第３は、７．５のｐＨにて２００ｍＭのＥＤＴＡを使用する１：０．１２：０．０５のＨＳＰＣ：コレステロール：ＤＥＰＣ（処方物９Ｃ）である。測定は、０分、３０分、６０分、１２０分、および２４０分において行われた。
【０１３３】
図１０は、４つのＤＰＰＣ：コレステロール処方物におけるカルシウム負荷を示す。特に、２：１のＤＰＰＣ：コレステロール処方物は、４．５のｐＨにて１４０ｍＭのＮａＣｌおよび２００ｍＭのＥＤＴＡを使用して調製され（処方物１０Ｄ）、そして第２に７．５のｐＨにて１４０ｍＭのＮａＣｌおよび２００ｍＭのＥＤＴＡを使用して調製された（処方物１０Ｃ）。その後、２：１のＤＰＰＣ：コレステロール処方物は、４．５のｐＨにて２００ｍＭのＥＤＴＡを使用し（処方物１０Ｂ）、そして第２に７．５のｐＨにて２００ｍＭのＥＤＴＡを使用して調製された（処方物１０Ａ）。測定は、０分、３０分、６０分、１２０分、および２４０分において行われた。グラフは、７．５のｐＨにて１４０ｍＭのＮａＣｌおよび２００ｍＭのＥＤＴＡを用いて調製された処方物が、最も高いカルシウムイオン濃度を有したことを示した。
【０１３４】
図１１は、４つのＤＰＰＣ：コレステロール処方物における負荷の効力を示す。２：１のＤＰＰＣ：コレステロール処方物は、４．５のｐＨにて１４０ｍＭのＮａＣｌおよび２００ｍＭのＥＤＴＡを使用し（処方物１１Ｄ）、そして第２に７．５のｐＨにて１４０ｍＭのＮａＣｌおよび２００ｍＭのＥＤＴＡを使用して調製された（処方物１１Ｃ）。その後、２：１のＤＰＰＣ：コレステロール処方物は、４．５のｐＨにて２００ｍＭのＥＤＴＡを使用し（処方物１１Ｂ）、そして第２に７．５のｐＨにて２００ｍＭのＥＤＴＡを使用して調製された（処方物１１Ａ）。測定は、０分、３０分、６０分、１２０分、および２４０分において行われた。グラフは、４．５のｐＨにて１４０ｍＭのＮａＣｌおよび２００ｍＭのＥＤＴＡを用いて調製された処方物が、最も高いカルシウムイオン濃度を有したことを示した。
【０１３５】
本発明はさらに、上記リポソームの調製および上記リポソームを使用して高カルシウム血症を処置する方法を記載する以下の実施例に対する参照によって定義される。材料および方法の両方に対する多くの改変が、この発明の目的および関心から逸脱することなく実施される得ることは、当業者にとって明らかである。
【０１３６】
カルシウム負荷は、緩衝液、または生物学的媒体（例えば、血清）においてリポソームを希釈する工程、およびインキュベートする工程（例えば、３７℃で）によって、インビトロにて研究された。インキュベーションの過程にわたって、サンプルは、小さい直径カットオフ（１００ｋＤａ）のマイクロフィルター濾過デバイスによって精密フィルター濾過される。濾過産物は、全カルシウム濃度について、高性能液体クロマトグラフィーによってアッセイされる。これらの濾過濃度は、その媒体において見出される遊離型カルシウムの量を示す。従って、カルシウムの減少は、その媒体に由来する、カルシウムのリポソーム取り込みに起因し得る。
【実施例】
【０１３７】
（実施例１：一般的なリポソームの調製）
約２：１の比のリン脂質およびコレステロールを、それぞれ、適切な量のイオノフォアを有する適切な溶媒、または溶媒混合物に溶解する。その後、その溶媒を真空乾燥または噴霧乾燥を通じて除去する。生じる固体物質は保存することもでき、すぐに使用することもできる。
【０１３８】
その後、生じる固体物質を、適切な温度にてＥＤＴＡを含む水溶液中で水和し、多層状小胞（ＭＬＶ）を生じる。ＭＬＶを含む溶液を、均一化によって大きさを減じ、小さな１枚膜小胞（ＳＵＶ）を形成する。ＥＤＴＡの一部を、そのプロセスの間に、ＳＵＶの水性区画中に封入する。封入されなかったＥＤＴＡを、適切な方法（例えば、透析、脱塩カラム、またはクロス式濾過）によって除去する。生じるリポソーム溶液を、濾過し、そして使用できる状態にする。
【０１３９】
全ての刊行物、特許、および特許文献は、あたかも個別に参考として援用されるかのように、本明細書中に参考として援用される。
【図面の簡単な説明】
【０１４０】
【図１】図１は、種々の調製物におけるカルシウム負荷の脂質転移温度依存性を示す。
【図２】図２は、異なる方法を使用して調製された３つの処方物についてのカルシウム負荷を示す。
【図３】図３は、カルシウム負荷の効力における、ｐＨおよびＮａＣｌの影響を示す。
【図４】図４は、ＨＳＰＣ：コレステロール処方物におけるカルシウム負荷を示す。
【図５】図５は、ＨＳＰＣ：コレステロール処方物における負荷の効力を示す。
【図６】図６は、ＤＯＰＣ：コレステロール処方物におけるカルシウム負荷を示す。
【図７】図７は、ＤＯＰＣ：コレステロール処方物における負荷の効力を示す。
【図８】図８は、ＤＥＰＣ：コレステロール処方物におけるカルシウム負荷を示す。
【図９】図９は、ＤＥＰＣ：コレステロール処方物における負荷の効力を示す。
【図１０】図１０は、ＤＰＰＤ：コレステロール処方物におけるカルシウム負荷を示す。
【図１１】図１１は、ＤＰＰＤ：コレステロール処方物における負荷の効力を示す。
【図１】
2007505043.tif 000003
【図２】
2007505043.tif 000004
【図３】
2007505043.tif 000005
【図４】
2007505043.tif 000006
【図５】
2007505043.tif 000007
【図６】
2007505043.tif 000008
【図７】
2007505043.tif 000009
【図８】
2007505043.tif 000010
【図９】
2007505043.tif 000011
【図１０】
2007505043.tif 000012
【図１１】
2007505043.tif 000013
【手続補正書】
【提出日】平成18年3月28日(2006.3.28)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
実体を、非ヒト動物からリポソーム中に取り込むための方法であって、そのような処置を必要とする非ヒト動物に該実体を取り込み得るリポソームを投与する工程を包含する、方法。
【請求項２】
実体を、生物学的サンプルからリポソーム中に取り込むためのインビトロにおける方法であって、該生物学的サンプルと該実体を取り込み得る１つ以上のリポソームとを接触させる工程を包含する、方法。
【請求項３】
動物の血清から実体を除去するためのインビトロにおける方法であって、該血清と該血清から実体を除去し得る１つ以上のリポソームとを接触させる工程を包含する、方法。
【請求項４】
請求項３に記載の方法であって、前記リポソームを前記血清から分離する工程をさらに包含する、方法。
【請求項５】
前記実体が、金属または金属イオンである、請求項１〜４のいずれか１項に記載の方法。
【請求項６】
前記実体が、アルカリ金属、アルカリ土類金属、Ｆｅ、Ｏｓ、Ｃｏ、Ｎｉ、Ｐｄ、Ｃｕ、Ａｇ、Ａｕ、Ｚｎ、Ａｌ、Ｃｄ、Ｈｇ、Ｓｎ、もしくはＰｂ、またはそれらのイオンである、請求項１〜４のいずれか１項に記載の方法。
【請求項７】
前記実体が、Ｚｎ、Ａｌ、ＦｅもしくはＣｕ、またはそれらのイオンである、請求項１〜４のいずれか１項に記載の方法。
【請求項８】
前記実体が、カルシウムまたはそのイオンである、請求項１〜４のいずれか１項に記載の方法。
【請求項９】
前記実体が、ペプチドである、請求項１〜４のいずれか１項に記載の方法。
【請求項１０】
前記実体が、有機分子である、請求項１〜４のいずれか１項に記載の方法。
【請求項１１】
前記実体が、治療剤である、請求項１〜４のいずれか１項に記載の方法。
【請求項１２】
前記実体が、グルコースである、請求項１〜４のいずれか１項に記載の方法。
【請求項１３】
動物においてパーキンソン病を処置するための方法であって、該動物の脳内の、Ｍｎ、Ｆｅ、Ｈｇ、Ａｌ、もしくはＣｕ、またはそれらのイオンのレベルを低下させるのに有効な量のリポソームを該動物に投与する工程を包含する、方法。
【請求項１４】
動物においてアルツハイマー病を処置するための方法であって、該動物の脳内の、Ｚｎ、Ａｌ、ＦｅもしくはＣｕ、またはそれらのイオンのレベルを低下させるのに有効な量のリポソームを該動物に投与する工程を包含する、方法。
【請求項１５】
動物において糖尿病を処置するための方法であって、動物の血清中の、グルコースのレベルを低下させるのに有効な量のリポソームを該動物に投与する工程を包含する、方法。
【請求項１６】
動物の脳脊髄液から実体を除去するための方法であって、該動物は、そのような処置を必要とし、該動物に該実体を取り込み得るリポソームを、包膜間に投与する工程を包含する、方法。
【請求項１７】
前記実体が、金属または金属イオンである、請求項１６に記載の方法。
【請求項１８】
動物において血清カルシウム負荷を低減するための方法であって、該動物は、そのような処置を必要とし、該動物に効果的にカルシウムを減少する量の１つ以上のリポソームを投与する工程を包含する、方法。
【請求項１９】
前記動物が、哺乳動物である、請求項１および請求項３〜１８のいずれか１項に記載の方法。
【請求項２０】
前記リポソームが、１つ以上の、リポソームを形成する脂質およびコレステロールを含み、該脂質のコレステロールに対するモル比が、約０．５：１〜約４：１である、請求項１〜１９のいずれか１項に記載の方法。
【請求項２１】
前記リポソームが、ホスファチジルコリンおよびコレステロールを含有する、請求項１〜１９のいずれか１項に記載の方法。
【請求項２２】
前記ホスファチジルコリンのコレステロールに対するモル比が、約０．５：１〜約４：１である請求項２１に記載の方法。
【請求項２３】
前記ホスファチジルコリンのコレステロールに対するモル比が、約１：１〜約２：１である請求項２１に記載の方法。
【請求項２４】
前記ホスファチジルコリンのコレステロールに対するモル比が、約２：１である請求項２１に記載の方法。
【請求項２５】
前記ホスファチジルコリンが、Ｓｏｙ−ＰＣ、Ｅｇｇ−ＰＣ、ＤＥＰＣ、ＤＯＰＣ、ＤＳＰＣ、ＨＳＰＣ、ＤＭＰＣ、およびＤＰＰＣ、ならびにそれらの混合物から選択される、請求項２１〜２４のいずれか１項に記載の方法。
【請求項２６】
前記ホスファチジルコリンが、ＤＥＰＣ、ＤＯＰＣ、ＤＳＰＣ、ＨＳＰＣ、ＤＭＰＣ、ＰＯＰＣ、ＤＢＰＣ、およびＤＰＰＣ、ならびにそれらの混合物から選択される、請求項２１〜２４のいずれか１項に記載の方法。
【請求項２７】
前記ホスファチジルコリンが、ＤＥＰＣ、ＤＯＰＣ、ＤＳＰＣ、ＨＳＰＣ、ＤＭＰＣ、およびＤＰＰＣ、ならびにそれらの混合物から選択される、請求項２１〜２４のいずれか１項に記載の方法。
【請求項２８】
前記ホスファチジルコリンが、ＤＯＰＣ、ＤＳＰＣ、ＨＳＰＣ、ＤＭＰＣ、およびＤＰＰＣ、ならびにそれらの混合物から選択される、請求項２１〜２４のいずれか１項に記載の方法。
【請求項２９】
前記ホスファチジルコリンが、ＤＯＰＣ、ＤＳＰＣ、ＨＳＰＣ、およびＤＰＰＣ、ならびにそれらの混合物から選択される、請求項２１〜２４のいずれか１項に記載の方法。
【請求項３０】
前記ホスファチジルコリンが、ＤＰＰＣである、請求項２１〜２４のいずれか１項に記載の方法。
【請求項３１】
前記リポソームが、前記実体の該リポソーム中への取り込みを容易にする、チャネルまたはシャトルを含む、請求項１〜３０のいずれか１項に記載の方法。
【請求項３２】
前記チャネルが、イオンチャネルである、請求項３１に記載の方法。
【請求項３３】
前記リポソームの内部のｐＨが、投与前または前記生物学的サンプルとの接触前に約８未満である、請求項１〜３２のいずれか１項に記載の方法。
【請求項３４】
前記リポソームが、ＳＵＶまたはＭＬＶである、請求項１〜３２のいずれか１項に記載の方法。
【請求項３５】
前記実体が、前記リポソームの内部で金属イオン封鎖剤と結合して、該リポソームの外へ通過できない錯体を形成する、請求項１〜３２のいずれか１項に記載の方法。
【請求項３６】
前記カルシウムが、前記リポソームの内部で金属イオン封鎖剤と結合して、該リポソームの外へ通過できないカルシウム錯体を形成する、請求項８または請求項１８に記載の方法。
【請求項３７】
前記リポソームが、１つ以上のカルシウムイオン封鎖剤を含有する、請求項８または請求項１８に記載の方法。
【請求項３８】
前記リポソームが、脂質および該リポソーム中へのカルシウムの通過を可能にするトランスポーター／チャネルを形成するリポソームを含有する、請求項８または請求項１８に記載の方法。
【請求項３９】
前記金属イオン封鎖剤が、ポリアミン、多座のカルボン酸、クラウンエーテル、ラクタム、または無機化合物である、請求項３５〜３７のいずれか１項に記載の方法。
【請求項４０】
前記金属イオン封鎖剤が、ＥＤＴＡである、請求項３９に記載の方法。
【請求項４１】
前記リポソーム中の前記ＥＤＴＡの濃度が、投与前または接触前に少なくとも約１０ｍＭである、請求項４０に記載の方法。
【請求項４２】
前記リポソーム中の前記ＥＤＴＡの濃度が、投与前または接触前に少なくとも約２０ｍＭである、請求項４０に記載の方法。
【請求項４３】
前記リポソーム中の前記ＥＤＴＡの濃度が、投与前または接触前に少なくとも約５０ｍＭである、請求項４０に記載の方法。
【請求項４４】
前記リポソーム中の前記ＥＤＴＡの濃度が、投与前または接触前に少なくとも約１００ｍＭである、請求項４０に記載の方法。
【請求項４５】
前記金属イオン封鎖剤が、亜鉛、セレン、または銅に比べて、カルシウム結合に対して、少なくとも２倍選択的である、請求項３７に記載の方法。
【請求項４６】
前記実体が、前記リポソームの内部で試薬と反応して反応物を形成する、請求項１〜３４のいずれか１項に記載の方法。
【請求項４７】
前記反応物が、前記リポソームの外へ通過できない、請求項４６に記載の方法。
【請求項４８】
前記実体が、前記リポソームの内部で酵素と反応する、請求項１〜３４のいずれか１項に記載の方法。
【請求項４９】
前記実体と前記酵素との間の反応が、ＡＴＰを必要とする、請求項４８に記載の方法。
【請求項５０】
前記リポソームが、イオンチャネルＡ２３１８７を含む、請求項３８に記載の方法。
【請求項５１】
前記リポソームが、イオンチャネルを含み、該イオンチャネルが、該リポソーム中へのカルシウムの流入に関して、亜鉛、セレン、または銅に比べて少なくとも２倍選択的である、請求項３７または請求項４５に記載の方法。
【請求項５２】
請求項１および請求項１３〜１８のいずれか１項に記載の方法であって、別の治療剤を前記動物に投与する工程をさらに包含する、方法。
【請求項５３】
請求項８または請求項１８に記載の方法であって、カルシウム負荷を低減するのに有用な治療剤を前記動物に投与する工程をさらに包含する、方法。
【請求項５４】
前記治療剤が、パミドロン酸、フロセミド、ジホスホネート、硝酸ガリウム、糖質コルチコイド、ゾレンドラネート、エチドロン酸、またはカルシトニンである、請求項５３に記載の方法。
【請求項５５】
前記リポソームが、前記治療剤を含有する、請求項５３または請求項５４に記載の方法。
【請求項５６】
医学的処置に使用するための実体を取り込み得るリポソーム。
【請求項５７】
カルシウムまたはそれらのイオンを取り込み得るリポソームの使用であって、動物において血清のカルシウム負荷を低減するのに有用な医薬を調製するための、使用。
【請求項５８】
Ｚｎ、Ａｌ、Ｆｅ、もしくはＣｕ、またはそれらのイオンを取り込み得るリポソームの使用であって、動物においてアルツハイマー病を処置するのに有用な医薬を調製するための、使用。
【請求項５９】
グルコースを取り込み得るリポソームの使用であって、動物において糖尿病を処置するのに有用な医薬を調製するための、使用。
【請求項６０】
Ｍｎ、Ｆｅ、Ｈｇ、Ａｌ、もしくはＣｕ、またはそれらのイオンを取り込み得るリポソームの使用であって、動物においてパーキンソン病を処置するのに有用な医薬を調製するための、使用。
【請求項６１】
実体を取り込み得るリポソームの使用であって、動物の脳脊髄液から前記実体を除去するのに有用な医薬を調製するための、使用。
【請求項６２】
前記実体が、金属または金属イオンである、請求項６１に記載の使用。
【請求項６３】
薬学的に受容可能なビヒクルまたはキャリア、および明細書中に記載されるような実体を取り込み得るリポソームを含む、薬学的組成物。
【請求項６４】
前記実体が、金属、金属イオン、ペプチド、有機分子、有毒物質、亜酸化窒素、またはグルコースである、請求項５６に記載のリポソーム。
【請求項６５】
前記実体が、Ｃａ、Ｆｅ、Ｏｓ、Ｃｏ、Ｎｉ、Ｐｄ、Ｃｕ、Ａｇ、Ａｕ、Ｚｎ、Ａｌ、Ｃｄ、Ｈｇ、Ｓｎ、またはＰｂ、もしくはそれらのイオンである、請求項５６に記載のリポソーム。
【請求項６６】
前記実体が、金属、金属イオン、ペプチド、有機分子、有毒物質、亜酸化窒素、またはグルコースである、請求項６３に記載の組成物。
【請求項６７】
前記実体が、Ｃａ、Ｆｅ、Ｏｓ、Ｃｏ、Ｎｉ、Ｐｄ、Ｃｕ、Ａｇ、Ａｕ、Ｚｎ、Ａｌ、Ｃｄ、Ｈｇ、Ｓｎ、もしくはＰｂ、またはそれらのイオンである、請求項６３に記載の組成物。
【請求項６８】
動物からリポソーム中に実体を取り込むための組成物であって、該実体を取り込み得るリポソームを含有する、組成物。
【請求項６９】
生物学的サンプルからリポソーム中に実体を取り込むための組成物であって、該実体を取り込み得る１つ以上のリポソームを含有する、組成物。
【請求項７０】
動物の血清から実体を除去するための組成物であって、該血清から該実体を除去し得る１つ以上のリポソームを含有する、組成物。
【請求項７１】
前記実体が、金属または金属イオンである、請求項６８〜７０に記載の組成物。
【請求項７２】
前記実体が、アルカリ金属、アルカリ土類金属、Ｆｅ、Ｏｓ、Ｃｏ、Ｎｉ、Ｐｄ、Ｃｕ、Ａｇ、Ａｕ、Ｚｎ、Ａｌ、Ｃｄ、Ｈｇ、Ｓｎ、もしくはＰｂ、またはそれらのイオンである、請求項６８〜７０のいずれか１項に記載の組成物。
【請求項７３】
前記実体が、Ｚｎ、Ａｌ、ＦｅもしくはＣｕ、またはそれらのイオンである、請求項６８〜７０のいずれか１項に記載の組成物。
【請求項７４】
前記実体が、カルシウムまたはそのイオンである、請求項６８〜７０のいずれか１項に記載の組成物。
【請求項７５】
前記実体が、ペプチドである、請求項６８〜７０のいずれか１項に記載の組成物。
【請求項７６】
前記実体が、有機分子である、請求項６８〜７０のいずれか１項に記載の組成物。
【請求項７７】
前記実体が、治療剤である、請求項６８〜７０のいずれか１項に記載の組成物。
【請求項７８】
前記実体が、グルコースである、請求項６８〜７０のいずれか１項に記載の組成物。
【請求項７９】
動物においてパーキンソン病を処置するための組成物であって、該動物の脳内における、Ｍｎ、Ｆｅ、Ｈｇ、Ａｌ、もしくはＣｕ、またはそれらのイオンのレベルを低下させるのに有効な量のリポソームを含有する、組成物。
【請求項８０】
動物においてアルツハイマー病を処置するための組成物であって、該動物の脳内における、Ｚｎ、Ａｌ、ＦｅもしくはＣｕ、またはそれらのイオンのレベルを低下させるのに有効な量のリポソームを含有する、組成物。
【請求項８１】
動物において糖尿病を処置するための組成物であって、動物の血清中におけるグルコースのレベルを低下させるのに有効な量のリポソーム含有する、組成物。
【請求項８２】
動物の脳脊髄液から実体を除去するための組成物であって、該動物は、そのような処置を必要とし、該組成物は該実体を取り込み得るリポソームを含有し、該組成物は、包膜間投与のために処方される、組成物。
【請求項８３】
前記実体が、金属または金属イオンである、請求項８２に記載の組成物。
【請求項８４】
動物において血清カルシウム負荷を低減するための組成物であって、該動物は、そのような処置を必要とし、該組成物は、効果的にカルシウムを減少する量の１つ以上のリポソームを含有する、組成物。
【請求項８５】
前記動物が、哺乳動物である、請求項６８および請求項７０〜８４のいずれか１項に記載の組成物。
【請求項８６】
前記動物が、ヒトである、請求項６８および請求項７０〜８４のいずれか１項に記載の組成物。
【請求項８７】
前記リポソームが、１種以上の、リポソームを形成する脂質およびコレステロールを含み、該脂質のコレステロールに対するモル比が、約０．５：１〜約４：１である、請求項６８〜８６のいずれか１項に記載の組成物。
【請求項８８】
前記リポソームが、ホスファチジルコリンおよびコレステロールを含有する、請求項６８〜８６のいずれか１項に記載の組成物。
【請求項８９】
前記ホスファチジルコリンのコレステロールに対するモル比が、約０．５：１〜約４：１である請求項８８に記載の組成物。
【請求項９０】
前記ホスファチジルコリンのコレステロールに対するモル比が、約１：１〜約２：１である請求項８８に記載の組成物。
【請求項９１】
前記ホスファチジルコリンのコレステロールに対するモル比が、約２：１である請求項８８に記載の組成物。
【請求項９２】
前記ホスファチジルコリンが、Ｓｏｙ−ＰＣ、Ｅｇｇ−ＰＣ、ＤＥＰＣ、ＤＯＰＣ、ＤＳＰＣ、ＨＳＰＣ、ＤＭＰＣ、およびＤＰＰＣ、ならびにそれらの混合物から選択される、請求項８８〜９１のいずれか１項に記載の組成物。
【請求項９３】
前記ホスファチジルコリンが、ＤＥＰＣ、ＤＯＰＣ、ＤＳＰＣ、ＨＳＰＣ、ＤＭＰＣ、ＰＯＰＣ、ＤＢＰＣ、およびＤＰＰＣ、ならびにそれらの混合物から選択される、請求項８８〜９１のいずれか１項に記載の組成物。
【請求項９４】
前記ホスファチジルコリンが、ＤＥＰＣ、ＤＯＰＣ、ＤＳＰＣ、ＨＳＰＣ、ＤＭＰＣ、およびＤＰＰＣ、ならびにそれらの混合物から選択される、請求項８８〜９１のいずれか１項に記載の組成物。
【請求項９５】
前記ホスファチジルコリンが、ＤＯＰＣ、ＤＳＰＣ、ＨＳＰＣ、ＤＭＰＣ、およびＤＰＰＣ、ならびにそれらの混合物から選択される、請求項８８〜９１のいずれか１項に記載の組成物。
【請求項９６】
前記ホスファチジルコリンが、ＤＯＰＣ、ＤＳＰＣ、ＨＳＰＣ、およびＤＰＰＣ、ならびにそれらの混合物から選択される、請求項８８〜９１のいずれか１項に記載の組成物。
【請求項９７】
前記ホスファチジルコリンが、ＤＰＰＣである、請求項８８〜９１のいずれか１項に記載の組成物。
【請求項９８】
前記リポソームが、前記実体の該リポソーム中への取り込みを容易にする、チャネルまたはシャトルを含む、請求項６８〜９７のいずれか１項に記載の組成物。
【請求項９９】
前記チャネルが、イオンチャネルである、請求項９８に記載の組成物。
【請求項１００】
前記リポソームの内部のｐＨが、投与前または前記生物学的サンプルとの接触前に約８未満である、請求項６８〜９９のいずれか１項に記載の組成物。
【請求項１０１】
前記リポソームが、ＳＵＶまたはＭＬＶである、請求項６８〜９９のいずれか１項に記載の組成物。
【請求項１０２】
前記実体が、前記リポソームの内部で金属イオン封鎖剤と結合して、該リポソームの外へ通過できない錯体を形成する、請求項６８〜９９のいずれか１項に記載の組成物。
【請求項１０３】
前記カルシウムが、前記リポソームの内部で金属イオン封鎖剤と結合して、該リポソームの外へ通過できないカルシウム錯体を形成する、請求項７４または請求項８４に記載の組成物。
【請求項１０４】
前記リポソームが、１つ以上のカルシウムイオン封鎖剤を含有する、請求項７４または請求項８４に記載の組成物。
【請求項１０５】
前記リポソームが、リポソームを形成する脂質および該リポソーム中へのカルシウムの通過を可能にするトランスポーター／チャネルを含有する、請求項７４または請求項８４に記載の組成物。
【請求項１０６】
前記金属イオン封鎖剤が、ポリアミン、多座のカルボン酸、クラウンエーテル、ラクタム、または無機化合物である、請求項１０２〜１０４のいずれか１項に記載の組成物。
【請求項１０７】
前記金属イオン封鎖剤が、ＥＤＴＡである、請求項１０６に記載の組成物。
【請求項１０８】
前記リポソーム中のＥＤＴＡの濃度が、投与前または接触前に少なくとも約１０ｍＭである、請求項１０７に記載の組成物。
【請求項１０９】
前記リポソーム中のＥＤＴＡの濃度が、投与前または接触前に少なくとも約２０ｍＭである、請求項１０７に記載の組成物。
【請求項１１０】
前記リポソーム中のＥＤＴＡの濃度が、投与前または接触前に少なくとも約５０ｍＭである、請求項１０７に記載の組成物。
【請求項１１１】
前記リポソーム中のＥＤＴＡの濃度が、投与前または接触前に少なくとも約１００ｍＭである、請求項１０７に記載の組成物。
【請求項１１２】
前記金属イオン封鎖剤が、亜鉛、セレン、または銅に比べて、カルシウム結合に対して、少なくとも２倍選択的である、請求項１０４に記載の組成物。
【請求項１１３】
前記実体が、前記リポソームの内部で試薬と反応して反応実体を形成する、請求項６８〜１０１のいずれか１項に記載の組成物。
【請求項１１４】
前記反応実体が、前記リポソームの外へ通過できない、請求項１１３に記載の組成物。
【請求項１１５】
前記実体が、前記リポソームの内部で酵素と反応する、請求項６８〜１０１のいずれか１項に記載の組成物。
【請求項１１６】
前記実体と前記酵素との間の前記反応が、ＡＴＰを必要とする、請求項１１５に記載の組成物。
【請求項１１７】
前記リポソームが、イオンチャネルＡ２３１８７を含む、請求項１０５に記載の組成物。
【請求項１１８】
前記リポソームが、イオンチャネルを含み、該イオンチャネルが、該リポソーム中へのカルシウムの流入に関して、亜鉛、セレン、または銅に比べて少なくとも２倍選択的である、請求項１０４または請求項１１２に記載の組成物。
【請求項１１９】
請求項６８および請求項７９〜８４のいずれか１項に記載の組成物であって、前記動物に対する別の治療剤をさらに含有する、組成物。
【請求項１２０】
請求項７４または請求項８４に記載の組成物であって、前記動物にとってカルシウム負荷を低減するために有用な治療剤をさらに含有する、組成物。
【請求項１２１】
前記治療剤が、パミドロン酸、フロセミド、ジホスホネート、硝酸ガリウム、糖質コルチコイド、ゾレンドラネート、エチドロン酸、またはカルシトニンである、請求項１２０に記載の組成物。
【請求項１２２】
前記リポソームが、前記治療剤を含有する、請求項１２０または請求項１２１に記載の組成物。
【国際調査報告】
2007505043.tif 000014
2007505043.tif 000015
2007505043.tif 000016