(57)【要約】  本発明によれば、間質性膀胱炎の予防及び／又は治療に使用するためのビタミンＤ化合物が提供される。有効量のビタミンＤ化合物を投与することによる間質性膀胱炎を予防且つ／又は治療するための方法も提供される。【選択図】なし【特許請求の範囲】
【請求項１】
間質性膀胱炎の予防又は治療におけるビタミンＤ化合物の使用。
【請求項２】
間質性膀胱炎の予防又は治療のための医薬品の製造における、請求項１に記載のビタミンＤ化合物の使用。
【請求項３】
有効量のビタミンＤ化合物を投与することによる間質性膀胱炎を予防且つ／又は治療するための方法。
【請求項４】
前記間質性膀胱炎が、膀胱機能不全及び膀胱炎症の症状の存在を特徴とする、請求項１から３のいずれか一項に記載の使用又は方法。
【請求項５】
ビタミンＤ化合物を、間質性膀胱炎治療用の第２の医薬品と、個別又は組合せの製剤で別々に、連続して、又は同時に投与する、請求項１から４のいずれか一項に記載の使用又は方法。
【請求項６】
間質性膀胱炎の予防及び／又は治療に使用するためのビタミンＤ化合物及び医薬として許容できる担体を含む製剤。
【請求項７】
説明書と共に包装された、間質性膀胱炎の予防及び／又は治療に使用するためのビタミンＤ化合物及び医薬として許容できる担体を含む製剤。
【請求項８】
間質性膀胱炎の予防及び／又は治療に使用するためのビタミンＤ化合物。
【請求項９】
ビタミンＤ化合物を、間質性膀胱炎の治療及び／又は予防を必要とする患者に前記化合物を投与して、それによって前記患者における間質性膀胱炎を治療且つ／又は予防することを指示する説明書と共に含むキット。
【請求項１０】
前記ビタミンＤ化合物が次式の化合物：
【化１】
2007525533.tif 000153
（式中：
Ａ１は、単結合又は二重結合であり；
Ａ２は、単結合、二重結合、又は三重結合であり；
Ｘ１及びＸ２はそれぞれ独立に、Ｈ又は＝ＣＨ２であり、但し、Ｘ１及びＸ２は双方ともが＝ＣＨ２でなく；
Ｒ１及びＲ２はそれぞれ独立に、ＯＣ（Ｏ）Ｃ１〜Ｃ４アルキル、ＯＣ（Ｏ）ヒドロキシアルキル、OROC（Ｏ）ハロアルキル、ＯＡｃであり；
Ｒ３、Ｒ４、及びＲ５はそれぞれ独立に、水素、Ｃ１〜Ｃ４アルキル、ヒドロキシアルキル、又はハロアルキルであり、或いはＲ３及びＲ４はＣ２０と一緒になって、Ｃ３〜Ｃ６シクロアルキルを形成し；且つ
Ｒ６及びＲ７はそれぞれ独立に、Ｃ１〜４アルキル又はハロアルキルであり；且つ
Ｒ８は、Ｈ、−ＣＯＣ１〜Ｃ４アルキル、−ＣＯヒドロキシアルキル、又は−ＣＯハロアルキルである）；
並びに医薬として許容できるそのエステル、塩、及びプロドラッグである、請求項１から９のいずれか一項に記載の使用、方法、製剤、化合物、又はキット。
【請求項１１】
前記ビタミンＤ化合物が次式の化合物：
【化２】
2007525533.tif 000154
（式中：
Ｘは、Ｈ２又はＣＨ２であり、
Ｒ１は、水素、ヒドロキシ、又はフッ素であり、
Ｒ２は、水素又はメチルであり、
Ｒ３は、水素又はメチルであり、但し、Ｒ２又はＲ３がメチルである場合、Ｒ３又はＲ２は水素でなければならず、
Ｒ４は、メチル、エチル、又はトリフルオロメチルであり、
Ｒ５は、メチル、エチル、又はトリフルオロメチルであり、
Ａは、単結合又は二重結合であり、
Ｂは、単結合、Ｅ−二重結合、Ｚ−二重結合、又は三重結合である）である、請求項１から９のいずれか一項に記載の使用、方法、製剤、化合物、又はキット。
【請求項１２】
Ｒ４及びＲ５はそれぞれ、メチル又はエチルである、請求項１１に記載の使用、方法、製剤、化合物、又はキット。
【請求項１３】
前記ビタミンＤ化合物が、次式を有する１，３−ジ−Ｏ−アセチル−１，２５−ジヒドロキシ−１６，２３Ｚ−ジエン−２６，２７−ヘキサフルオロ−１９−ノル−コレカルシフェロールである、請求項１から９のいずれか一項に記載の使用、方法、製剤、化合物、又はキット：
【化３】
2007525533.tif 000155
。
【請求項１４】
前記ビタミンＤ化合物が、次式を有する１−α−フルオロ−２５−ヒドロキシ−１６，２３Ｅ−ジエン−２６，２７−ビスホモ−２０−エピ−コレカルシフェロールである、請求項１から９のいずれか一項に記載の使用、方法、製剤、化合物、又はキット：
【化４】
2007525533.tif 000156
。
【請求項１５】
前記化合物が、次式を有する１，３−ジ−Ｏ−アセチル−１，２５−ジヒドロキシ−２０−シクロプロピル−２３Ｅ−エン−２６，２７−ヘキサフルオロ−１９−ノル−コレカルシフェロールである、請求項１から９のいずれか一項に記載の使用、方法、製剤、化合物、又はキット：
【化５】
2007525533.tif 000157
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、間質性膀胱炎の予防及び／又は治療用の医薬品製造のための、ビタミンＤ化合物の使用に関する。さらに、このような疾患を予防且つ／又は治療するのに有効な量のビタミンＤ化合物を単独で又は別の作用物質と組み合わせて投与することによって、間質性膀胱炎を予防且つ／又は治療する方法に関する。
【背景技術】
【０００２】
本明細書では「ＩＣ」と呼ぶ間質性膀胱炎は、慢性炎症性膀胱疾患であり、骨盤痛、尿意切迫及び頻数を特徴とする慢性骨盤痛症候群（CPPS）又は有痛性膀胱症候群（ＰＢＳ）としても知られている。男性もＩＣと診断されるが、この疾患は、主に女性に影響を及ぼす。他の膀胱機能不全病態と異なり、ＩＣは、総体症状の原因となる膀胱壁の慢性炎症を特徴としている。言い換えれば、異常な膀胱収縮及び慢性骨盤痛の原因は、慢性炎症であり、結果として、治療はこの病因学的要素を標的とすべきである。実際には、過活動膀胱のような膀胱機能不全の、平滑筋弛緩剤を用いた伝統的な治療は、ＩＣの患者に有効ではない。
【０００３】
現在では、多数の療法がこの疾患に対して用いられている。これは、この疾患が本当に有効な治療のない病態であることを反映している。例えば、膀胱内ジメチルスルホキシド（DMSO）は、広範な臨床試験の主題である。しかし、作用機序は、まだ不明である。臨床結果は、完全には満足のいくものではなく、投与経路（膀胱内）は、ＩＣでしばしば必要とされる長期治療に理想的でない。
【０００４】
既存の療法には、粘膜関門保護の概念、例えばヘパリン類似体のペントサン多硫酸ナトリウム（ＰＰＳ）の使用に基づいているものもある。やはり、結果は期待外れであり、長期的には、患者の２０％未満しか、ＰＰＳの経口投与による有益な効果を示さない。
【０００５】
他の手法には、抗ヒスタミン剤、フラボノイド類、及び肥満細胞によって媒介される炎症誘発剤の作用を低減することができる他の作用物質の使用が含まれる。このような手法は、複数の研究において、一貫性がなく下限に近い有効性を示す。別の手法である膀胱内ＢＣＧ（カルメットゲラン桿菌（Bacille Calmette Guerin））の使用も、DMSOに対する比較クロスオーバー試験において、症状改善を示さなかった。
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【０００６】
結果として、疾患の原因に関与する様々な免疫因子のすべてを標的とする新規な薬理学的手法を特定することが明らかに求められている。
【課題を解決するための手段】
【０００７】
本明細書に記載するように、今回、驚くべきことに、ビタミンＤ類似体は間質性膀胱炎を治療且つ予防することができることが判明した。
【０００８】
高等動物の生物系におけるビタミンＤ（コレカルシフェロール）の重要性は、1920年Mellanbyのその発見（Mellanby, E. (1921) Spec. Rep. Ser. Med. Res. Council (GB) SRS 61:4）以降認められている。1920年〜1930年の間に、ビタミンＤは、骨格の正常な発達、並びにカルシウム及びリンのホメオスタシスの維持に不可欠である「ビタミン」として公式に分類されることになった。
【０００９】
ビタミンＤ３の代謝に関係する研究は、血漿代謝産物である２５−ヒドロキシビタミンＤ３［２５（ＯＨ）Ｄ３］（Blunt, J.W.ら、(1968) Biochemistry 6:3317-3322）及びホルモン活性型である１−α，２５（ＯＨ）２Ｄ３（Myrtle, J.F.ら、(1970) J. Biol. Chem. 245:1190-1196; Norman, A.W.ら、(1971) Science 173:51-54; Lawson, D.E.M.ら、(1971) Nature 230:228-230; Holick, M.F. (1971) Proc. Natl. Acad. Sci. USA 68:803-804）の発見及び化学的キャラクタリゼーションから開始された。ビタミンＤ内分泌系の概念の製剤は、慎重に調節された方式で１−α，２５（ＯＨ）２Ｄ３を生成する際の腎臓の重要な役割の理解（Fraser, D.R.及びKodicek, E (1970) Nature 288:764-766; Wong, R.G.ら、(1972) J. Clin. Invest. 51:1287-1291）と、腸における１−α，２５（ＯＨ）２Ｄ３の核内受容体（VD3R）の発見（Haussler, M.R.ら、(1969) Exp. Cell Res. 58:234-242;Tsai, H.C.及びNorman, A.W. (1972) J. Biol. Chem. 248:5967-5975）とに依存するものであった。
【００１０】
ビタミンＤ内分泌系の作動は、下記に依存する：第１に、ビタミンＤ３の１−α，２５（ＯＨ）２Ｄ３や２４Ｒ，２５（ＯＨ）２Ｄ３などの生物活性代謝産物への変換をもたらすシトクロムP450酵素が、肝臓（Bergman, T.及びPostlind, H. (1991) Biochem. J. 276:427-432; Ohyama, Y及びOkuda, K. (1991) J. Biol. Chem. 266:8690-8695）、及び腎臓（Henry, H.L.及びNorman, A.W. (1974) J. Biol. Chem. 249:7529-7535; Gray, R.W.及びGhazarian, J.G. (1989) Biochem. J. 259:561-568）、及び様々な他の組織に存在していること；第２に、ビタミンＤ内分泌系の様々な組織構成要素へのこれらの疎水性分子の選択的輸送及び送達をもたらすプラズマビタミンＤ結合タンパク質（ＤＢＰ）が存在していること（Van Baelen, H.ら、(1988) Ann NY Acad. Sci. 538:60-68; Cooke, N.E.及びHaddad, J.G. (1989) Endocr. Rev. 10:294-307; Bikle, D.D.ら、(1986) J. Clin. Endocrinol. Metab. 63:954-959）；第３に、アゴニストである１−α，２５（ＯＨ）２Ｄ３と相互に作用して、このセコステロイドホルモンに不可欠な特異的生体応答を生じる立体選択的受容体が広範囲の標的組織に存在していること（Pike, J.W. (1991) Annu. Rev. Nutr. 11:189-216）。現在のところ、１−α，２５（ＯＨ）２Ｄ３（VD3R）についての核内受容体は、正常な膀胱を含めて３０を超える組織及び癌細胞系（Reichel, H.及びNorman, A.W. (1989) Annu. Rev. Med. 40:71-78）に存在しているという証拠がある。
【００１１】
ビタミンＤ３及びそのホルモン活性型は、カルシウム及びリンのホメオスタシスの周知のレギュレータである。これらの化合物は、カルシウム及びホスフェートの腸管吸収、骨ミネラルの動員、及び腎臓におけるカルシウムの保持の少なくとも１つを刺激することで知られている。さらに、特異的ビタミンＤ受容体が３０を超える組織において存在しているという発見により、ビタミンＤ３が、カルシウム／骨のホメオスタシスにおけるその古典的役割の範囲を超えて、多能性レギュレータとして同定された。１−α，２５（ＯＨ）２Ｄ３についてパラクリンとしての役割は、ビタミンＤ３をその活性型、例えば２５−ＯＨＤ−１−α−ヒドロキシラーゼに酸化することができる酵素と特異的受容体とが組み合わされて、骨、ケラチノサイト、胎盤、及び免疫細胞などいくつかの組織に存在していることによって示唆されている。さらに、ビタミンＤ３ホルモン及び活性代謝物は、正常と悪性の両細胞の細胞増殖及び分化を調節することができることが判明している（Reichel, H.ら、(1989) Ann. Rev. Med. 40: 71-78）。
【００１２】
ビタミンＤ３及びその代謝産物の活性を考慮して、これらの化合物の合成類似体を開発することに多大な注目が集中している。多数のこれらの類似体は、Ａ環、Ｂ環、Ｃ／Ｄ環、主に側鎖における構造改変を含む（Bouillon, R.ら、(1995) Endocrine Reviews 16(2):201-204）。現在までに開発されたビタミンＤ３類似体の大部分は側鎖における構造改変を含むものであるが、いくつかの研究により、Ａ環のジアステレオマーの生物学的プロフィールが報告されている（Norman, A.W.ら、(1993) J. Biol. Chem. 268 (27): 20022-20030）。さらに、ステロイドの生物学的エステル化が研究され（Hochberg, R.B., (1998) Endocr Rev. 19(3): 331-348）、ビタミンＤ３のエステルが知られている（WO97/11053）。
【００１３】
さらに、合成類似体を開発する際の多大な努力にもかかわらず、ビタミンＤ及びその構造類似体の臨床適用は、ビタミンＤ化合物の公知の適応／適用のため対象者に投与した後これらの化合物によって誘発される望ましくない副作用によって制限されてきた。
【００１４】
ビタミンＤの活性化型であるビタミンＤ３、及びその類似体のいくつかは、細胞増殖及び分化の強力なレギュレータとして記述されている。ビタミンＤ３及び類似体（類似体Ｖ）が、ＢＰＨ細胞増殖を阻害し、ケラチノサイト増殖因子（ＫＧＦ）やインスリン様増殖因子（IGF1）など、ＢＰＨ細胞の強力な増殖因子のマイトジェン活性に対抗することは、すでに判明している。さらに、類似体は、bcl-2タンパク質発現、細胞内カルシウム動員、及び非刺激細胞とＫＧＦによって刺激されたＢＰＨ細胞とにおけるアポトーシスを誘導した。
【００１５】
したがって、本発明は、ビタミンＤ化合物、及びこのような化合物を使用する間質性膀胱炎の予防又は治療のための新規な治療方法を提供する。
【発明を実施するための最良の形態】
【００１６】
本発明のさらなる説明の前に、本発明を容易に理解されるように、いくつかの用語を定義し、便宜上ここに集める。
【００１７】
「間質性膀胱炎」（ＩＣ）は、様々な程度の尿意切迫、頻数及び膀胱痛を特徴とする膀胱の慢性炎症性障害を意味する。本明細書に記載するように、本発明者は、ビタミンＤ３類似体は、ＩＣ患者に見られる疼痛、切迫及び頻数の症状に寄与するＩＣの炎症性要素と結果として生じるＩＣを特徴付ける膀胱過活動との両方の治療に適用されることを明らかにした。主な症状である疼痛を最小の頻数及び切迫と共に経験する恐れのあるＩＣ患者もいれば、頻数及び切迫の症状しか呈しないかもしれない患者もいる。ＩＣ患者は、夜尿症という追加の症状を経験するかもしれないし、又はしないかもしれない。疼痛は、ＩＣの最も重量な特徴的症状であると現在見なされているが、夜尿症は、ＩＣの診断に不可欠であるとは見なされていない。正常な頻数であるものの、疼痛及び切迫を伴う患者も、ＩＣである恐れがあるとも考えられている。これは、ＩＣ患者が、広範囲の症候の組合せを呈する恐れがあることを示唆している。細菌感染の非存在下で、疼痛を伴う若しくは伴わない排尿不快感、恥骨上部の圧迫若しくは重感、又は排尿時灼熱感を呈するすべての患者においては、ＩＣを疑うべきである。ＩＣは、現在では臨床的特徴を基準として診断されている。推奨試験には、尿検査、尿培養、細胞診断、尿力学的検査、及び膀胱拡張を伴う麻酔下膀胱鏡検査が含まれる。
【００１８】
「投与」又は「投与すること」という用語は、ビタミンＤ化合物を対象者に導入して、その意図された機能を果たす経路を包含する。使用することができる投与経路の例には、注射（皮下、静脈内、非経口的、腹腔内、経口、吸入、直腸、経皮、又は膀胱内点滴注入経由が含まれる。医薬製剤は、言うまでもなく、各投与経路に適した形によって与えられている。例えば、これらの製剤を、錠剤又はカプセル剤の形、注射、注入、吸入、ローション、軟膏、坐剤などで投与する。経口投与が好ましい。注射は、ボーラスでもよく、又は連続注輸でもよい。投与経路に応じて、ビタミンＤ化合物に選択された材料を被覆又は被着させて、その意図された機能を果たすその能力に悪影響をもたらす恐れがある自然の条件からそれを保護することができる。ビタミンＤ化合物は、単独で、或いは上記に記載するような別の作用物質、例えば平滑筋弛緩剤（α遮断剤や抗ムスカリン様作用薬など）若しくは医薬として許容できる担体、又は両方と共に投与することができる。ビタミンＤ化合物は、他の作用物質の投与の前に、作用物質と同時に、又は作用物質の投与の後に投与することができる。さらに、ビタミンＤ化合物は、その活性代謝物、又はより活性な代謝物にin vivoで変換されるプロ型で投与することもできる。
【００１９】
「有効量」という用語は、所望の結果を実現するのに必要な投与量及び期間において有効な量、即ち間質性膀胱炎を治療するのに十分な量を包含する。ビタミンＤ化合物の有効量は、対象者の病態、年齢、及び体重、並びに対象者において所望の応答を誘発するビタミンＤ化合物の能力などの要因によって変わり得る。用法は、最適の治療応答を提供するように調整することができる。有効量とは、ビタミンＤ化合物の毒性の又は有害な効果(例えば、副作用)を治療上有益な効果が上回るものでもある。
【００２０】
ビタミンＤ化合物の治療上有効量（即ち、有効投与量）は、約0.001〜30ug／体重１ｋｇ、好ましくは約０．０１〜25ug／体重１ｋｇ、より好ましくは約０．１〜20ug／体重１ｋｇ、さらにより好ましくは約１〜10ug／体重１ｋｇ、２〜９ｕｇ／体重１ｋｇ、３〜８ｕｇ／体重１ｋｇ、４〜７ｕｇ／体重１ｋｇ、又は５〜６ｕｇ／体重１ｋｇの範囲とすることができる。疾患又は障害の重症度、前処置、対象者の全体の健康及び／又は年齢、並びに他の疾患の存在を含めてこれらに限定されないいくつかの要因が、対象者を効果的に治療するのに必要とされる投与量に影響を及ぼす恐れがあることを当業者なら理解するであろう。さらに、投与する用量は使用する特定のビタミンＤ化合物にも依存し、各化合物の有効量は、当技術分野で知られている滴定方法によって決定することができる。さらに、治療上有効量のビタミンＤ化合物を用いた対象者の治療は、単独治療を含むことができ、又は好ましくは一連の治療を含むことができる。一例では、約０．１〜20ug／体重１ｋｇの範囲のビタミンＤ化合物で、１日１回、症状の管理及び病態の進展に応じて６カ月以上の期間、例えば一生、対象者を治療する。また、他の慢性治療と同様に、「オン−オフ」又は間欠的な治療計画を考慮することができる。治療に使用するビタミンＤ化合物の有効投与量を、特定の治療の過程にわたって増量又は減量できることも理解されよう。
【００２１】
「アルキル」という用語は、直鎖アルキル基、分枝鎖アルキル基、シクロアルキル（脂環式）基、アルキル置換シクロアルキル基、及びシクロアルキル置換アルキル基を含めて飽和脂肪族基の基を指す。アルキルという用語は、炭化水素主鎖の１つ以上の炭素に置換している酸素、窒素、硫黄、又はリン原子、例えば、酸素、窒素、硫黄、又はリン原子をさらに含むことができるアルキル基をさらに包含する。好ましい実施態様では、直鎖又は分枝鎖のアルキルは、その主鎖に３０個以下（例えば、直鎖ではＣ１〜Ｃ３０、分枝鎖ではＣ３〜Ｃ３０）、好ましくは２６個以下、より好ましくは２０個以下の炭素原子を有する。同様に、好ましいシクロアルキルは、その環構造に３〜１０個の炭素原子を有し、より好ましくは環構造に３、４、５、６、又は７個の炭素を有する。
【００２２】
さらに、明細書及び特許請求の範囲を通して使用されるアルキルという用語は、「非置換アルキル」と「置換アルキル」を共に包含するように意図され、後者は、炭化水素主鎖の１つ以上の炭素上の水素に置換している置換基を有するアルキル部分を指す。このような置換基には、例えばハロゲン、ヒドロキシル、アルキルカルボニルオキシ、アリールカルボニルオキシ、アルコキシカルボニルオキシ、アリールオキシカルボニルオキシ、カルボキシレート、アルキルカルボニル、アルコキシカルボニル、アミノカルボニル、アルキルチオカルボニル、アルコキシル、ホスフェート、ホスホナート、ホスフィナート、シアノ、アミノ（アルキルアミノ、ジアルキルアミノ、アリールアミノ、ジアリールアミノ、及びアルキルアリールアミノを含む）、アシルアミノ（アルキルカルボニルアミノ、アリールカルボニルアミノ、カルバモイル、及びウレイドを含む）、アミジノ、イミノ、スルフヒドリル、アルキルチオ、アリールチオ、チオカルボキシレート、スルフェート、スルホナート、スルファモイル、スルホンアミド、ニトロ、トリフルオロメチル、シアノ、アジド、ヘテロシクリル、アルキルアリール、又は芳香族若しくはヘテロ芳香族部分が含まれ得る。適切な場合には、炭化水素鎖上の置換部分がそれ自体置換され得ることを当業者なら理解するであろう。シクロアルキルを、例えば上記に記載する置換基でさらに置換することができる。「アルキルアリール」部分は、アリール（例えば、フェニルメチル（ベンジル））で置換されたアルキルである。「アルキル」という用語は、長さ及び上記に記載するアルキルへの考えられる置換は類似しているが、それぞれ少なくとも１つの二重又は三重結合を含む不飽和脂肪族基も包含する。
【００２３】
炭素数に別段の指定のない限り、本明細書では「低級アルキル」は、上記に定義されるが、その主鎖構造において１〜１０個の炭素、より好ましくは１〜６個、最も好ましくは１〜４個の炭素原子を有し、直鎖でも、分枝鎖でもよいアルキル基を意味する。低級アルキル基の例には、メチル、エチル、ｎ−プロピル、ｉ−プロピル、tert−ブチル、ヘキシル、ヘプチル、オクチルなどが含まれる。低級アルキルの他の例には、ｓｅｃ−ブチル、ｎ−ブチル、及びペンチルが含まれる。好ましい実施態様では、「低級アルキル」という用語は、その主鎖に４個以下の炭素原子を有する直鎖アルキル、例えばＣ１〜Ｃ４アルキルを包含する。
【００２４】
したがって、アルキルの特有の例には、Ｃ１〜６アルキル又はＣ１〜４アルキル（メチルやエチルなど）が含まれる。ヒドロキシアルキルの特有の例には、Ｃ１〜６ヒドロキシアルキル又はＣ１〜４ヒドロアルキル（ヒドロキシメチルなど）が含まれる。
【００２５】
「アルコキシアルキル」、「ポリアミノアルキル」、及び「チオアルコキシアルキル」という用語は、炭化水素主鎖の１つ以上の炭素に置換している酸素、窒素、又は硫黄原子、例えば酸素、窒素、又は硫黄原子をさらに含む、上記に記載するアルキル基を指す。
【００２６】
本明細書では「アリール」という用語は、０〜４個のヘテロ原子を含んでもよい５員及び６員の単環芳香族基を含めてアリール基の基、例えばベンゼン、ピロール、フラン、チオフェン、イミダゾール、ベンゾオキサゾール、ベンゾチアゾール、トリアゾール、テトラゾール、ピラゾール、ピリジン、ピラジン、ピリダジン、及びピリミジンなどを指す。アリール基には、ナフチル、キノリル、インドリルなどの多環縮合芳香族基も含まれる。環構造にヘテロ原子を有するそれらのアリール基は、「アリールヘテロ環」、「ヘテロアリール」、又は「ヘテロ芳香族」とも呼ばれることがある。芳香族環を、１つ以上の環位置において、例えばハロゲン、ヒドロキシル、アルコキシ、アルキルカルボニルオキシ、アリールカルボニルオキシ、アルコキシカルボニルオキシ、アリールオキシカルボニルオキシ、カルボキシレート、アルキルカルボニル、アルコキシカルボニル、アミノカルボニル、アルキルチオカルボニル、ホスフェート、ホスホナート、ホスフィナート、シアノ、アミノ（アルキルアミノ、ジアルキルアミノ、アリールアミノ、ジアリールアミノ、及びアルキルアリールアミノを含む）、アシルアミノ（アルキルカルボニルアミノ、アリールカルボニルアミノ、カルバモイル、及びウレイドを含む）、アミジノ、イミノ、スルフヒドリル、アルキルチオ、アリールチオ、チオカルボキシレート、スルフェート、スルホナート、スルファモイル、スルホンアミド、ニトロ、トリフルオロメチル、シアノ、アジド、ヘテロシクリル、アルキルアリール、又は芳香族若しくはヘテロ芳香族部分のような上記に記載する置換基で置換することができる。アリール基は、多環（例えば、テトラリン）を形成するように、脂環式環又は芳香族ではないヘテロ環式環と縮合又は架橋させることもできる。
【００２７】
「アルケニル」及び「アルキニル」という用語は、長さ及び上記に記載するアルキルへの考えられる置換は類似しているが、それぞれ少なくとも１つの二重又は三重結合を含む不飽和脂肪族基を指す。例えば、本発明は、シアノ及びプロパルギル基を考慮している。
「キラル」という用語は、鏡像相手が重なることができないという特性を有する分子を指し、「アキラル」という用語は、その鏡像相手上に重ねることができる分子を指す。
【００２８】
「ジアステレオマー」という用語は、２つ以上の不斉中心を有し、その分子は相互に鏡像でない立体異性体を指す。
「エナンチオマー」という用語は、相互に重ねることができない鏡像である、化合物の２つの立体異性体を指す。２つのエナンチオマーの等モル混合物は、「ラセミ混合物」又は「ラセミ体」と呼ばれる。
本明細書では「ハロゲン」という用語は、−Ｆ、−Ｃｌ、−Ｂｒ、又は−Ｉを表し；「スルフヒドリル」又は「チオール」という用語は、−ＳＨを意味し；「ヒドロキシル」という用語は、−ＯＨを意味する。
【００２９】
「ハロアルキル」という用語は、ハロゲンで一置換、二置換、又は多置換されている上記に定義するようなアルキル基、例えばフロオロメチルやトリフルオロメチルなどのＣ１〜６ハロアルキル又はＣ１〜４ハロアルキルを包含するように意図されている。
本明細書では「ヘテロ原子」という用語は、炭素又は水素以外の元素の原子を意味する。好ましいヘテロ原子は、窒素、酸素、硫黄、及びリンである。
【００３０】
「ポリシクリル」又は「多環式基」という用語は、２つ以上の炭素が２つの隣接する環に共通している、例えば環が「縮合環」である２つ以上の環式環（例えば、シクロアルキル、シクロアルケニル、シクロアルキニル、アリール、及び／又はヘテロシクリル）の基を指す。非近接の原子を介して接合している環を「架橋」環という。多環の環はそれぞれ、例えばハロゲン、ヒドロキシル、アルキルカルボニルオキシ、アリールカルボニルオキシ、アルコキシカルボニルオキシ、アリールオキシカルボニルオキシ、カルボキシレート、アルキルカルボニル、アルコキシカルボニル、アミノカルボニル、アルキルチオカルボニル、アルコキシル、ホスフェート、ホスホナート、ホスフィナート、シアノ、アミノ（アルキルアミノ、ジアルキルアミノ、アリールアミノ、ジアリールアミノ、及びアルキルアリールアミノを含む）、アシルアミノ（アルキルカルボニルアミノ、アリールカルボニルアミノ、カルバモイル、及びウレイドを含む）、アミジノ、イミノ、スルフヒドリル、アルキルチオ、アリールチオ、チオカルボキシレート、スルフェート、スルホナート、スルファモイル、スルホンアミド、ニトロ、トリフルオロメチル、シアノ、アジド、ヘテロシクリル、アルキル、アルキルアリール、又は芳香族若しくはヘテロ芳香族部分のような上記に記載する置換基で置換することができる。
【００３１】
「異性体」又は「立体異性体」という用語は、同一の化学的組成を有するが、空間における原子又は基の配置に関して異なる化合物を指す。
「単離された」又は「実質的に精製された」という用語は、本明細書では交換可能に使用され、非天然状態のビタミンＤ３化合物を指す。化合物は、天然生成の場合には、細胞材料若しくは培地を、又は化学合成の場合には、化学的前駆体若しくは他の化学物質を実質的に含まない。いくつかの好ましい実施態様では、「単離された」又は「実質的に精製された」という用語は、キラル化合物のエナンチオマーの一方が実質的にない調製物；即ち、分子のエナンチオマー富化調製物又は非ラセミ調製物も指す。同様に、「単離されたエピマー」又は「単離されたジアステレオマー」という用語は、他の立体化学型を実質的に含まないキラル化合物の調製物を指す。例えば、単離された又は実質的に精製されたビタミンＤ３化合物には、Ａ環の３位のキラル炭素に結合している置換基を有する立体異性体についてα型立体配置に富化した、即ちβ型立体配置を有する他の異性体が実質的にない合成又は天然のビタミンＤ３調製物が含まれる。別段の指定のない限り、このような用語は、α型とβ型の重量比が１：１より大きいビタミンＤ３組成物を指す。例えば、エピマーの単離された調製物は、β型立体異性体に対して、５０重量％超、より好ましくは少なくとも７５重量％、さらにより好ましくは少なくとも８５重量％のα型エピマーを有する調製物を意味する。言うまでもなく、富化は、８５％をはるかに上回ることができ、「実質的にエピマー富化された」調製物、即ちβ型立体異性体に対して、９０％超、さらにより好ましくは９５％超のα型エピマーを有する化合物の調製物を提供する。「β型立体異性体を実質的に含まない」という用語は、同様な純度範囲を有すると理解されよう。
【００３２】
本明細書では、「ビタミンＤ化合物」という用語は、間質性膀胱炎を治療又は予防することができるビタミンＤの類似体である化合物を包含する。一般に、ビタミンＤ受容体（ＶＤＲリガンド）に対するリガンドであり、且つ間質性膀胱炎を治療又は予防することができる化合物は、本発明の範囲内であると見なされる。ビタミンＤ化合物は、好ましくはビタミンＤ受容体のアゴニストである。したがって、ビタミンＤ化合物には、セコステロイドが含まれるように意図されている。本発明の方法での使用に適した特有のビタミンＤ化合物の例を、さらに本明細書に記載する。ビタミンＤ化合物には、ビタミンＤ２化合物、ビタミンＤ３化合物、それらの異性体、又はそれらの誘導体／類似体が含まれる。好ましいビタミンＤ化合物は、ビタミンＤ受容体のリガンドである（より好ましくは、アゴニストである）ビタミンＤ３化合物である。好ましくは、ビタミンＤ化合物（例えば、ビタミンＤ３化合物）は、天然リガンド（即ち、ビタミンＤ、例えばビタミンＤ３）より強力な、ビタミンＤ受容体のアゴニストである。ビタミンＤ１化合物、ビタミンＤ２化合物、及びビタミンＤ３化合物にはそれぞれ、ビタミンＤ１、Ｄ２、Ｄ３、及びそれらの類似体が含まれる。いくつかの実施態様では、ビタミンＤ化合物は、セコステロイドなどのステロイド、例えばカルシオール、カルシジオール、又はカルシトリオールとすることができる。本発明によるビタミンＤ化合物の非限定的例には、US6,017,908、6,100,294、6,030,962、5,428029及び6,121,312、WO98/51633、WO01/40177A3に記載されているものが含まれる。
【００３３】
「セコステロイド」という用語は、当技術分野で認識されており、ステロイド環構造のシクロペンタノペルヒドロ−フェナントレン環の１つが開裂している化合物を包含する。例えば、１−α，２５（ＯＨ）２Ｄ３及びその類似体は、ホルモン活性セコステロイドである。ビタミンＤ３の場合は、Ｂ環の９−１０炭素−炭素結合が開裂し、セコ−Ｂ−ステロイドが生じる。ビタミンＤ３について公式のIUPAC名は、９，１０−セココレスタ−５，７，１０（１９）−トリエン−３Ｂ−オールである。便宜上、本明細書では、１α，２５（ＯＨ）２Ｄ３の６−ｓ−トランス配座異性体は、標準的ステロイド表示法を使用してすべての炭素原子を番号付けして例示する。
【００３４】
【化１】
2007525533.tif 000002
【００３５】
本明細書に提示する式では、Ａ環上の様々な置換基は、これらの記号：β配位（即ち、環の平面の上）である置換基を示す点線（−−−−）、α配位（即ち、分子の平面の下）である置換基を示す楔形実線（▲）、又は置換基が環の平面の上でも、下でもよいことを示す波線
【数１】
2007525533.tif 000003
の１つによってステロイド核に接合して例示する。Ａ環に関して、ビタミンＤ分野の立体化学の慣例は、点線がα配位（即ち、分子の平面の下）であるＡ環の置換基を示し、楔形実線がβ配位（即ち、環の平面の上）であるＡ環の置換基を示す一般化学分野とは反対であると理解されたい。
【００３６】
さらに、炭素−炭素二重結合と交差する立体化学の表示も、「Ｚ」が「シス」（同じ側）配位と呼ばれることが多いものを指し、「Ｅ」が「トランス」（反対側）配位と呼ばれることが多いものを指すという点で一般化学分野とは反対である。ともかく、本発明に使用するための化合物では、シス／トランス及び／又はＺ／Ｅの両立体配置を考える。
【００３７】
表示するように、ホルモン１−α，２５（ＯＨ）２Ｄ３のＡ環は、炭素１及び３に２つの不斉中心を含み、それぞれ特徴がはっきりとした立体配置のヒドロキシル基、即ち１−α−及び３−β−ヒドロキシル基を含む。言い換えれば、Ａ環の炭素１及び３は、「キラル炭素」又は「炭素中心」であると言われる。
【００３８】
キラル中心の命名に関して、「ｄ」及び「ｌ」立体配置の用語は、IUPAC推奨による定義の通りである。用語の使用に関して、ジアステレオマー、ラセミ体、エピマー、及びエナンチオマーは、調製物の立体化学を記述するその通常の文脈の中で使用する。
【００３９】
また、本特許文献全体を通して、ビタミンＤ化合物のＡ環を下記の構造のいずれか１つである一般式で示すことが多い：
【化２】
2007525533.tif 000004
（式中、Ｘ１及びＸ２は、Ｈ又は＝ＣＨ２と定義する）；又は
【００４０】
【化３】
2007525533.tif 000005
（式中、Ｘ１及びＸ２は、Ｈ２又はＣＨ２と定義する）。
規定の慣例はないようであるが、式（Ａ）又は（Ｂ）が、下記の通り、例えばＸ１が＝ＣＨ２であり、且つＸ２をＨ２と定義するＡ環：
【００４１】
【化４】
2007525533.tif 000006
を表すことを当業者は理解していることが明らかである。本発明では、すべての一般構造で式（Ｂ）を使用する。
【００４２】
したがって、一態様では、本発明は、間質性膀胱炎の予防又は治療におけるビタミンＤ化合物の使用を提供する。有効量のビタミンＤ化合物を投与することによって間質性膀胱炎の患者を治療する方法も提供する。さらに、間質性膀胱炎の予防又は治療用の医薬品の製造におけるビタミンＤ化合物の使用を提供する。さらに、間質性膀胱炎の予防及び／又は治療に使用するためのビタミンＤ化合物を提供する。ビタミンＤ化合物を、間質性膀胱炎の治療及び／又は予防を必要とする患者に前記化合物を投与して、それによって前記患者における間質性膀胱炎を治療且つ／又は予防することを指示する説明書と共に含むキットも提供する。間質性膀胱炎は、例えば膀胱機能不全及び膀胱炎症の症状の存在を特徴とすることができる。
【００４３】
本発明の方法及び使用は、本発明の一実施態様では、女性を治療する際の方法及び使用とすることができる。別の実施態様では、これらは、男性を治療する際の方法及び使用である。
【００４４】
本発明の一実施態様では、ビタミンＤ化合物は、式（Ｉ）の化合物である：
【００４５】
【化５】
2007525533.tif 000007
（式中：
Ｘは、ヒドロキシル又はフルオロであり；
Ｙは、Ｈ２又はＣＨ２であり；
Ｚ１及びＺ２は、Ｈ又は式（ＩＩ）で表される置換基であり、但し、Ｚ１及びＺ２は異なる（好ましくは、Ｚ１及びＺ２は共には式（ＩＩ）を表さない）ことを条件とする：
【００４６】
【化６】
2007525533.tif 000008
（式中：Ｚ３は、上記の式（Ｉ）を表し；
Ａは、単結合又は二重結合であり；
Ｒ１、Ｒ２、及びＺ４はそれぞれ独立に、水素、アルキル、又は式（ＩＩＩ）で表される飽和若しくは不飽和の炭素鎖であり、但し、Ｒ１、Ｒ２、及びＺ４の少なくとも１つは、式（ＩＩＩ）で表される飽和又は不飽和の炭素鎖であり、且つ、Ｒ１、Ｒ２、及びＺ４のすべてが、式（ＩＩＩ）で表される飽和又は不飽和の炭素鎖ではないことを条件とする：
【００４７】
【化７】
2007525533.tif 000009
（式中：Ｚ５は、上記の式（ＩＩ）を表し；
Ａ２は、単結合、二重結合、又は三重結合であり；且つ
Ａ３は、単結合又は二重結合であり；且つ
Ｒ３及びＲ４はそれぞれ独立に、水素、アルキル、ハロアルキル、ヒドロキシアルキルであり；且つ
Ｒ５は、Ｈ２又は酸素である）））。Ｒ５は、水素を表すこともあり、又は存在しないこともある。
【００４８】
したがって、上記の式（ＩＩＩ）の構造では（及び、下記の対応する構造では）、Ａ２が三重結合を表す場合、Ｒ５は存在しない。Ａ２が二重結合を表す場合、Ｒ５は水素を表す。Ａ２が単結合を表す場合、Ｒ５は、カルボニル基又は２つの水素原子を表す。
【００４９】
本発明の別の実施態様では、ビタミンＤ化合物は、式（ＩＶ）の化合物である：
【化８】
2007525533.tif 000010
【００５０】
（式中：Ｘ１及びＸ２は、Ｈ２又はＣＨ２であり、ここで、Ｘ１及びＸ２は同時にＣＨ２ではなく；
Ａは、単結合又は二重結合であり；
Ａ２は、単結合、二重結合、又は三重結合であり；
Ａ３は、単結合又は二重結合であり；
Ｒ１及びＲ２は、水素、Ｃ１〜Ｃ４アルキル、又は４−ヒドロキシ−４−メチルペンチルであり、ここで、Ｒ１及びＲ２は共には水素でなく；
Ｒ５は、Ｈ２又は酸素であり、Ｒ５は、水素を表すこともあり、又は存在しないこともあり；
Ｒ３は、Ｃ１〜Ｃ４アルキル、ヒドロキシアルキル、又はハロアルキル、例えばフルオロアルキル、例えばフロオロメチル及びトリフルオロメチルであり；且つ
Ｒ４は、Ｃ１〜Ｃ４アルキル、ヒドロキシアルキル、又はハロアルキル、例えばフルオロアルキル、例えばフロオロメチル及びトリフルオロメチルである）。
【００５１】
本発明のさらに別の実施態様では、ビタミンＤ化合物は、式（Ｖ）の化合物である：
【化９】
2007525533.tif 000011
【００５２】
（式中：
Ｘ１及びＸ２は、Ｈ２又はＣＨ２であり、ここで、Ｘ１及びＸ２は同時にＣＨ２ではなく；
Ａは、単結合又は二重結合であり；
Ａ２は、単結合、二重結合、又は三重結合であり；
Ａ３は、単結合又は二重結合であり；
Ｒ１及びＲ２は、水素、Ｃ１〜Ｃ４アルキルであり、ここで、Ｒ１及びＲ２は共には水素でなく；
Ｒ５は、Ｈ２又は酸素であり、Ｒ５は、水素を表すこともあり、又は存在しないこともあり；
Ｒ３は、Ｃ１〜Ｃ４アルキル、ヒドロキシアルキル、又はハロアルキル、例えばフルオロアルキル、例えばフロオロメチル及びトリフルオロメチルであり；且つ
Ｒ４は、Ｃ１〜Ｃ４アルキル、ヒドロキシアルキルハロアルキル、例えば又はフルオロアルキル、例えばフロオロメチル及びトリフルオロメチルである）。
上記の式（Ｖ）の構造の一例は、１，２５−ジヒドロキシ−１６−エン−２３−インコレカルシフェロールである。
【００５３】
さらに別の実施態様では、ビタミンＤ化合物は、式（ＶＩ）の「ジェミナル」化合物である：
【化１０】
2007525533.tif 000012
【００５４】
（式中：
Ｘ１は、Ｈ２又はＣＨ２であり；
Ａ２は、単結合、二重結合、又は三重結合であり；
Ｒ３は、Ｃ１〜Ｃ４アルキル、ヒドロキシアルキル、又はハロアルキル、例えばフルオロアルキル、例えばフロオロメチル及びトリフルオロメチルであり；
Ｒ４は、Ｃ１〜Ｃ４アルキル、ヒドロキシアルキル、又はハロアルキル、例えばフルオロアルキル、例えばフロオロメチル及びトリフルオロメチルであり；
且つＣ２０の立体配置は、Ｒ又はＳである）。
このタイプの化合物は、Ｃ２０に２つのアルキル鎖が存在するため、「ジェミナル」又は「ジェミニ」ビタミンＤ３化合物と呼ばれることがある。
【００５５】
式（ＶＩ）のジェミナル化合物の一例は、以下「化合物Ｉ」と呼ばれる１，２５−ジヒドロキシ−２１−（３−ヒドロキシ−３−メチルブチル）−１９−ノル−コレカルシフェロールである：
【化１１】
2007525533.tif 000013
化合物Ｉの合成は、参照によりその全体で本明細書に組み込まれるWO98/49138及びUS6,030,962に記載されている。
【００５６】
別の実施態様では、ビタミンＤ化合物は、式（ＶＩＩ）の化合物である：
【化１２】
2007525533.tif 000014
（式中：Ａは、単結合又は二重結合であり；
Ｒ１及びＲ２はそれぞれ独立に、水素、アルキル（例えば、メチル）であり；
Ｒ３及びＲ４はそれぞれ独立に、アルキルであり、且つ
Ｘは、ヒドロキシル又はフルオロである）。
【００５７】
別の実施態様では、ビタミンＤ化合物は、式（VIII）を有する化合物である：
【化１３】
2007525533.tif 000015
（式中：Ｒ１及びＲ２はそれぞれ独立に、水素、又はアルキル、例えばメチルであり；
Ｒ３は、アルキル、例えばメチルであり、
Ｒ４は、アルキル、例えばメチルであり；且つ
Ｘは、ヒドロキシル又はフルオロである）。
【００５８】
本発明の特有の実施態様では、ビタミンＤ化合物は、下記からなる群から選択される：
【化１４】
2007525533.tif 000016
【００５９】
本発明の他の特有の実施態様では、ビタミンＤ化合物は、下記からなる群から選択される：
【化１５】
2007525533.tif 000017
【００６０】
本発明の別の特有の実施態様では、ビタミンＤ化合物は、下記からなるジェミナル化合物の群から選択される：
【化１６】
2007525533.tif 000018
【００６１】
本発明のさらに別の特有の実施態様では、ビタミンＤ化合物は、式（ＩＸ）のジェミナル化合物：
【化１７】
2007525533.tif 000019
【００６２】
（式中：
Ｘ１は、Ｈ２又はＣＨ２であり；
Ａ２は、単結合、二重結合、又は三重結合であり；
Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、及びＲ４はそれぞれ独立に、Ｃ１〜Ｃ４アルキル、ヒドロキシアルキル、又はハロアルキル、例えばフルオロアルキル、例えばフロオロメチル及びトリフルオロメチルであり；
Ｚは−ＯＨであり、Ｚは＝Ｏ、−ＮＨ２、又は−ＳＨでもよく；且つ
Ｃ２０の立体配置は、Ｒ又はＳである）、
並びに医薬として許容できるそのエステル、塩、及びプロドラッグである。
【００６３】
別の実施態様では、Ｘ１はＣＨ２である。別の実施態様では、Ａ２は単結合である。別の場合、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、及びＲ４はそれぞれ独立に、メチル又はエチルである。別の実施態様では、Ｚは−ＯＨである。別の場合、Ｘ１はＣＨ２であり；Ａ２は単結合であり；Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、及びＲ４はそれぞれ独立に、メチル又はエチルであり；且つＺは−ＯＨである。さらに別の実施態様では、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、及びＲ４はそれぞれ、メチルである。
【００６４】
本発明の別の実施態様では、ビタミンＤ化合物は、次式のジェミナル化合物である：
【化１８】
2007525533.tif 000020
先に記載する化合物２及び３の化学名はそれぞれ、１，２５−ジヒドロキシ−２１−（２Ｒ，３−ジヒドロキシ−３−メチル−ブチル）−２０Ｒ−コレカルシフェロール、及び１，２５−ジヒドロキシ−２１−（２Ｒ，３−ジヒドロキシ−３−メチル−ブチル）−２０Ｓ−コレカルシフェロールである。
【００６５】
ジェミナル化合物の追加の実施態様には、本発明による使用のための下記のビタミンＤ化合物が含まれる：
【化１９】
2007525533.tif 000021
（１，２５−ジヒドロキシ−２１−（２Ｒ，３−ジヒドロキシ−３−メチル−ブチル）−２０Ｓ−１９−ノル−コレカルシフェロール）、
【００６６】
【化２０】
2007525533.tif 000022
（１，２５−ジヒドロキシ−２０Ｓ−２１−（３−ヒドロキシ−３−メチル−ブチル）−２４−ケト−１９−ノル−コレカルシフェロール）、
【００６７】
【化２１】
2007525533.tif 000023
（１，２５−ジヒドロキシ−２０Ｓ−２１−（３−ヒドロキシ−３−メチル−ブチル）−２４−ケト−コレカルシフェロール）、
【００６８】
【化２２】
2007525533.tif 000024
（１，２５−ジヒドロキシ−２１−（３−ヒドロキシ−３−トリフルオロメチル−４−トリフルオロ−ブチニル）−２６，２７−ヘキサデウテロ−１９−ノル−２０Ｓ−コレカルシフェロール）、
及び
【００６９】
【化２３】
2007525533.tif 000025
（１，２５−ジヒドロキシ−２１−（３−ヒドロキシ−３−トリフルオロメチル−４−トリフルオロ−ブチニル）−２６，２７−ヘキサデウテロ−２０Ｓ−コレカルシフェロール）。
【００７０】
本発明の別の実施態様では、ビタミンＤ化合物は、式（Ｘ）の化合物：
【００７１】
【化２４】
2007525533.tif 000026
（式中：Ｘ１及びＸ１はそれぞれ独立に、Ｈ２又は＝ＣＨ２であり、但し、Ｘ１及びＸ１は双方ともが＝ＣＨ２でなく；
Ｒ１及びＲ２はそれぞれ独立に、ヒドロキシル、ＯＣ（Ｏ）Ｃ１〜Ｃ４アルキル、ＯＣ（Ｏ）ヒドロキシアルキル、ＯＣ（Ｏ）フルロルアルキルであり；
Ｒ３及びＲ４はそれぞれ独立に、水素、Ｃ１〜Ｃ４アルキルヒドロキシアルキル、又はハロアルキルであり、或いはＲ３とＲ４はＣ２０と一緒になって、Ｃ３〜Ｃ６シルコアルキルを形成し；且つ
Ｒ５及びＲ６はそれぞれ独立に、Ｃ１〜Ｃ４アルキルである）
並びに医薬として許容できるそのエステル、塩、及びプロドラッグである。
【００７２】
適切には、Ｒ３及びＲ４はそれぞれ独立に、水素、Ｃ１〜Ｃ４アルキルであり、又はＲ３とＲ４はＣ２０と一緒になって、Ｃ３〜Ｃ６シルコアルキルを形成する。
化合物群の一例では、Ｒ５及びＲ６はそれぞれ独立に、Ｃ１〜Ｃ４アルキルである。
化合物群の別の例では、Ｒ５及びＲ６はそれぞれ独立に、ハロアルキル、例えばＣ１〜Ｃ４フルオロアルキルである。
Ｒ３及びＲ４がＣ２０と一緒になって、Ｃ３〜Ｃ６シクロアルキルを形成する場合、一例はシクロプロピルである。
一実施態様では、Ｘ１及びＸ１はそれぞれＨ２である。別の実施態様では、Ｒ３は水素であり、且つＲ４はＣ１〜Ｃ４アルキルである。好ましい一実施態様では、Ｒ４はメチルである。
【００７３】
別の実施態様では、Ｒ５及びＲ６はそれぞれ独立に、メチル、エチル、フロオロメチル、又はトリフルオロメチルである。好ましい一実施態様では、Ｒ５及びＲ６はそれぞれメチルである。
さらに別の実施態様では、Ｒ１及びＲ１はそれぞれ独立に、ヒドロキシル又はＯＣ（Ｏ）Ｃ１〜Ｃ４アルキルである。好ましい一実施態様では、Ｒ１及びＲ１はそれぞれＯＣ（Ｏ）Ｃ１〜Ｃ４アルキルである。別の好ましい実施態様では、Ｒ１及びＲ１はそれぞれアセチルオキシである。
【００７４】
このような化合物の一例は、下記の構造を有する１，３−Ｏ−ジアセチル−１，２５−ジヒドロキシ−１６−エン−２４−ケト−１９−ノル−コレカルシフェロールであり、下記構造を有する：
【化２５】
2007525533.tif 000027
。
【００７５】
本発明の別の実施態様では、本発明による使用のためのビタミンＤ化合物は、２−メチレン−１９−ノル−２０（Ｓ）−１−α，２５−ヒドロキシビタミンＤ３である：
【化２６】
2007525533.tif 000028
。
この化合物及び関連化合物の合成は、参照によりその全体で本明細書に組み込まれるWO02/05823及びUS5,536,713に記載されている。
【００７６】
本発明の別の実施態様では、ビタミンＤ化合物は、式（ＸＩＩ）の化合物：
【化２７】
2007525533.tif 000029
（式中：Ａ１は、単結合又は二重結合であり；
Ａ２は、単結合、二重結合、又は三重結合であり；
Ｘ１及びＸ２はそれぞれ独立に、Ｈ又は＝ＣＨ２であり、但し、Ｘ１及びＸ２は双方ともには＝ＣＨ２でなく；
Ｒ１及びＲ２はそれぞれ独立に、ＯＣ（Ｏ）Ｃ１〜Ｃ４アルキル（例えば、ＯＡｃ）、ＯＣ（Ｏ）ヒドロキシアルキル、OROC（Ｏ）ハロアルキルであり；
Ｒ３、Ｒ４、及びＲ５はそれぞれ独立に、水素、Ｃ１〜Ｃ４アルキル、ヒドロキシアルキル、又はハロアルキルであり、或いはＲ３及びＲ４はＣ２０と一緒になって、Ｃ３〜Ｃ６シクロアルキルを形成し；且つ
Ｒ６及びＲ７はそれぞれ独立に、Ｃ１〜４アルキル又はハロアルキルであり；且つ
Ｒ８は、Ｈ、-COC1〜Ｃ４アルキル（例えば、Ａｃ）、−ＣＯヒドロキシアルキル、又は−ＣＯハロアルキルである）；並びに
医薬として許容できるそのエステル、塩、及びプロドラッグである。
【００７７】
Ｒ３及びＲ４はＣ２０と一緒になって、Ｃ３〜Ｃ６シクロアルキルを形成する場合、一例はシクロプロピルである。
適切には、Ｒ６及びＲ７はそれぞれ独立に、ハロアルキルである。Ｒ８は、適切にはＨ又はＡｃを表すことができる。
一実施態様では、Ａ１は単結合であり、且つＡ２は、単結合、Ｅ若しくはＺ二重結合、又は三重結合である。別の実施態様では、Ａ１は二重結合であり、且つＡ２は、単結合、Ｅ若しくはＺ二重結合、又は三重結合である。Ａ２が三重結合である場合、Ｒ５は存在しないことを当業者は容易に理解するであろう。
【００７８】
一実施態様では、Ｘ１及びＸ２はそれぞれＨである。別の実施態様では、Ｘ１はＣＨ２であり、且つＸ２はＨ２である。別の実施態様では、Ｒ３は水素であり、且つＲ４はＣ１〜Ｃ４アルキルである。好ましい一実施態様では、Ｒ４はメチルである。
化合物群の別の例では、Ｒ１及びＲ２は共に、ＯＡｃを表す。
【００７９】
化合物例の一組では、Ｒ６及びＲ７はそれぞれ独立に、Ｃ１〜４アルキルである。化合物例の別の一組では、Ｒ６及びＲ７はそれぞれ独立に、ハロアルキルである。別の実施態様では、Ｒ６及びＲ７はそれぞれ独立に、メチル、エチル、又はフルオロアルキルである。好ましい一実施態様では、Ｒ６及びＲ８はそれぞれ、トリフルオロアルキル、例えばトリフルオロメチルである。
適切には、Ｒ５は水素を表す。
【００８０】
したがって、いくつかの実施態様では、本発明による使用のためのビタミンＤ化合物は、式（ＸＩＩ）：
【化２８】
2007525533.tif 000030
【００８１】
（式中：Ａ１は、単結合又は二重結合であり；
Ａ２は、単結合、二重結合、又は三重結合であり；
Ｘ１及びＸ２はそれぞれ独立に、Ｈ又は＝ＣＨ２であり、但し、Ｘ１及びＸ２は双方ともには＝ＣＨ２でなく；
Ｒ１及びＲ２はそれぞれ独立に、ＯＣ（Ｏ）Ｃ１〜Ｃ４アルキル、ＯＣ（Ｏ）ヒドロキシアルキル、又はＯＣ（Ｏ）ハロアルキルであり；
Ｒ３、Ｒ４及びＲ５はそれぞれ独立に、水素、Ｃ１〜Ｃ４アルキル、ヒドロキシアルキル、又はハロアルキルであり、或いはＲ３及びＲ４はＣ２０と一緒になって、Ｃ３〜Ｃ６シクロアルキルを形成し；
Ｒ６及びＲ７はそれぞれ独立に、ハロアルキルであり；且つ
Ｒ８は、Ｈ、C（Ｏ）Ｃ１〜Ｃ４アルキル、Ｃ（Ｏ）ヒドロキシアルキル、又はＣ（Ｏ）ハロアルキルである）；並びに
医薬として許容できるそのエステル、塩、及びプロドラッグで表される。
【００８２】
本発明の文脈中で特に好ましい上記の式（ＸＩＩ）の化合物の一例は、１，３−ジ−Ｏ−アセチル−１，２５−ジヒドロキシ−１６，２３Ｚ−ジエン−２６，２７−ヘキサフルオロ−１９−ノル−コレカルシフェロール（「化合物Ａ」）である：
【化２９】
2007525533.tif 000031
【００８３】
別の好ましい実施態様では、化合物は、式（XIII）の１つである（式中、Ｒ１及びＲ２はそれぞれＯＡｃであり；Ａ１は二重結合であり；Ａ２は三重結合であり；且つＲ８はＨ又はＡｃである：
【化３０】
2007525533.tif 000032
【００８４】
上記に表す式（ＸＩＩ）のいくつかの実施態様では、本発明による使用のためのビタミンＤ化合物は、式（ＸＩＶ）で表される：
【化３１】
2007525533.tif 000033
【００８５】
上記の式（ＸＩＶ）の化合物の他の例には、下記が含まれる：
１，３−ジ−Ｏ−アセチル−１，２５−ジヒドロキシ−２３−イン−コレカルシフェロール；
１，３−ジ−Ｏ−アセチル−１，２５−ジヒドロキシ−１６−エン−２３−イン−コレカルシフェロール；
１，３−ジ−Ｏ−アセチル−１，２５−ジヒドロキシ−１６，２３Ｅ−ジエン−コレカルシフェロール；
１，３−ジ−Ｏ−アセチル−１，２５−ジヒドロキシ−１６−エン−コレカルシフェロール；
１，３，２５−トリ−Ｏ−アセチル−１，２５−ジヒドロキシ−１６−エン−２３−イン−２６，２７−ヘキサフルオロ−コレカルシフェロール：
１，３−ジ−Ｏ−アセチル−１，２５−ジヒドロキシ−１６−エン−２３−イン−２６，２７−ヘキサフルオロ−コレカルシフェロール；
１，３−ジ−Ｏ−アセチル−１，２５−ジヒドロキシ−１６，２３Ｅ−ジエン−２５Ｒ−２６−トリフルオロ−コレカルシフェロール；
１，３−ジ−Ｏ−アセチル−１，２５−ジヒドロキシ−１６−エン−２３−イン−２６，２７−ヘキサフルオロ−１９−ノル−コレカルシフェロール；
１，３，２５−トリ−Ｏ−アセチル−１，２５−ジヒドロキシ−１６−エン−２３−イン−２６，２７−ヘキサフルオロ−１９−ノル−コレカルシフェロール；
１，３−ジ−Ｏ−アセチル−１，２５−ジヒドロキシ−１６−エン−１９−ノル−コレカルシフェロール（「化合物Ｃ」）；
１，３−ジ−Ｏ−アセチル−１，２５−ジヒドロキシ−１６−エン−２３−イン−１９−ノル−コレカルシフェロール；
１，３−ジ−Ｏ−アセチル−１，２５−ジヒドロキシ−１６−エン−２３−イン−２６，２７−ビスホモ−１９−ノル−コレカルシフェロール；
【００８６】
上記に表す式（ＸＩＩ）のいくつかの他の実施態様では、本発明による使用のためのビタミンＤ化合物は、式（ＸＶ）で表される：
【化３２】
2007525533.tif 000034
【００８７】
上記の式（ＸＶ）の化合物の他の例には、下記が含まれる：
１，３−ジ−Ｏ−アセチル−１，２５−ジヒドロキシ−２０−シクロプロピル−２３−イン−１９−ノル−コレカルシフェロール：
１，３，２５−トリ−Ｏ−アセチル−１，２５−ジヒドロキシ−２０−シクロプロピル−２３−イン−２６，２７−ヘキサフルオロ−１９−ノル−コレカルシフェロール；
１，３−ジ−Ｏ−アセチル−１，２５−ジヒドロキシ−２０−シクロプロピル−２３−イン−２６，２７−ヘキサフルオロ−１９−ノル−コレカルシフェロール；
１，３−ジ−Ｏ−アセチル−１，２５−ジヒドロキシ−２０−シクロプロピル−２３−イン−コレカルシフェロール；
１，３−ジ−Ｏ−アセチル−１，２５−ジヒドロキシ−２０−シクロプロピル−２３Ｚ−エン−２６，２７−ヘキサフルオロ−１９−ノル−コレカルシフェロール；
１，３−ジ−Ｏ−アセチル−１，２５−ジヒドロキシ−２０−シクロプロピル−コレカルシフェロール（「化合物Ｆ」）；
１，３−ジ−Ｏ−アセチル−１，２５−ジヒドロキシ−１６−エン−２０−シクロプロピル−１９−ノル−コレカルシフェロール；及び
１，３−ジ−Ｏ−アセチル−１，２５−ジヒドロキシ−１６−エン−２０−シクロプロピル−コレカルシフェロール。
【００８８】
式ＸＶの好ましい化合物は、１，３−ジ−Ｏ−アセチル−１，２５−ジヒドロキシ−２０−シクロプロピル−２３Ｅ−エン−２６，２７−ヘキサフルオロ−１９−ノル−コレカルシフェロール（「化合物Ｅ」）である：
【化３３】
2007525533.tif 000035
【００８９】
別の実施態様では、本発明に使用するためのビタミンＤ化合物は、式（ＸＶＩ）の化合物である：
【化３４】
2007525533.tif 000036
【００９０】
（式中：Ｘは、Ｈ２又はＣＨ２であり、
Ｒ１は、水素、ヒドロキシ、又はフッ素であり、
Ｒ２は、水素又はメチルであり、
Ｒ３は、水素又はメチルである）。Ｒ２又はＲ３がメチルである場合、Ｒ３又はＲ２は水素でなければならない。
Ｒ４は、メチル、エチル、又はトリフルオロメチルであり、
Ｒ５は、メチル、エチル、又はトリフルオロメチルであり、
Ａは、単結合又は二重結合であり、
Ｂは、単結合、Ｅ−二重結合、Ｚ−二重結合、又は三重結合である。
【００９１】
好ましい化合物では、Ｒ４及びＲ５はそれぞれ、メチル又はエチルであり、例えば次式を有する１−α−フルオロ−２５−ヒドロキシ−１６，２３Ｅ−ジエン−２６，２７−ビスホモ−２０−エピ−コレカルシフェロール（実施例では「化合物Ｂ」と呼ばれる）である：
【化３５】
2007525533.tif 000037
【００９２】
このような化合物は、参照により内容がその全体で本明細書に組み込まれるUS5,939,408及びEP808833に記載されている。本発明は、化合物Ｂのエステル及び塩の使用も包含する。エステルには、体内で加水分解して、化合物Ｂを放出することができる化学変化をしやすい、医薬として許容できるエステルが含まれる。化合物Ｂの塩には、ナトリウム、カリウム、及びカルシウムイオン、並びに塩化カルシウム、マロン酸カルシウムなどのそれらの塩など、アルカリ及びアルカリ土類金属イオン並びに金属イオン塩と形成することができる付加体及び錯体が含まれる。しかし、化合物Ｂは、医薬として許容できるその塩又はエステルとして投与することができるが、好ましくは、化合物Ｂをそのままで使用する、即ち、そのエステル又は塩として使用しない。
【００９３】
本発明による使用のための他の好ましいビタミンＤ化合物には、式（XVII）を有するものが含まれる：
【化３６】
2007525533.tif 000038
【００９４】
（式中：Ｂは、単結合、二重結合、又は三重結合であり；
Ｘ１及びＸ２はそれぞれ独立に、Ｈ２又はＣＨ２であり、但し、Ｘ１及びＸ２は共にはＣＨ２でなく；且つ
Ｒ４及びＲ５はそれぞれ独立に、アルキル又はハロアルキルである）。
【００９５】
式（XVII）の化合物には、下記のものが含まれる：
１，２５−ジヒドロキシ−１６−エン−２３−イン−２０−シクロピル−コレカルシフェロール：
【化３７】
2007525533.tif 000039
【００９６】
１，２５−ジヒドロキシ−１６−エン−２３−イン−２０−シクロプロピル−１９−ノル−コレカルシフェロール：
【化３８】
2007525533.tif 000040
【００９７】
１，２５−ジヒドロキシ−１６−エン−２０−シクロプロピル−２３−イン−２６，２７−ヘキサフルオロ−１９−ノル−コレカルシフェロール：
【化３９】
2007525533.tif 000041
【００９８】
１，２５−ジヒドロキシ−１６−エン−２０−シクロプロピル−２３−イン−２６，２７−ヘキサフルオロ−コレカルシフェロール：
【化４０】
2007525533.tif 000042
【００９９】
１，２５−ジヒドロキシ−１６，２３Ｅ−ジエン−２０−シクロプロピル−２６，２７−ヘキサフルオロ−１９−ノル−コレカルシフェロール：
【化４１】
2007525533.tif 000043
【０１００】
１，２５−ジヒドロキシ−１６，２３Ｅ−ジエン−２０−シクロプロピル−２６，２７−ヘキサフルオロ−コレカルシフェロール：
【化４２】
2007525533.tif 000044
【０１０１】
１，２５−ジヒドロキシ−１６，２３Ｚ−ジエン−２０−シクロプロピル−２６，２７−ヘキサフルオロ−１９−ノル−コレカルシフェロール：
【化４３】
2007525533.tif 000045
【０１０２】
１，２５−ジヒドロキシ−１６，２３Ｚ−ジエン−２０−シクロプロピル−２６，２７−ヘキサフルオロ−コレカルシフェロール：
【化４４】
2007525533.tif 000046
【０１０３】
１，２５−ジヒドロキシ−１６−エン−２０−シクロプロピル−１９−ノル−コレカルシフェロール：
【化４５】
2007525533.tif 000047
【０１０４】
１，２５−ジヒドロキシ−１６−エン−２０−シクロプロピル−コレカルシフェロール（「化合物Ｈ」）：
【化４６】
2007525533.tif 000048
【０１０５】
本発明の他のビタミンＤ化合物は、１，２５−ジヒドロキシ−２１（３−ヒドロキシ−３−トリフルオロメチル−４−トリフルオロ−ブチニル）−２６，２７−ヘキサデューテロ−１９−ノル−２０Ｓ−コレカルシフェロールである。
【０１０６】
上記所定の構造を有する化合物の使用は、医薬として許容できるそのエステル、塩、及びプロドラッグにまで拡張されている。
特定の重要なビタミンＤ化合物は、カルシトリオールである。
【０１０７】
ビタミンＤ受容体アゴニストである本発明に有用な他の化合物の例には、パリカルシトール（ZEMPLAR（登録商標））（US5,587,497を参照のこと）、タカルシトール（BONALFA（登録商標））（US4,022,891を参照のこと）、ドキセルカルシフェロール（HECTOROL（登録商標））（Lamら、(1974) Science 186, 1038を参照のこと）、マキサカルシトール（OXAROL（登録商標））（US4,891,364を参照のこと)、カルシポトリオール（DAIVONEX（登録商標））（US4,866,048を参照のこと）、及びファレカルシトリオール（FULSTAN（登録商標））が含まれる。
他の化合物には、エカルシデン、カルシチアゾール、及びチソカルシテートが含まれる。
他の化合物には、アトカルシトール、レキサカルシトール、及びセオカルシトールが含まれる。
考えられる重要な別の化合物は、セカルシフェロール（「OSTEO D」）である。
【０１０８】
本発明において使用し得るビタミンＤ化合物の他の非限定的例には、下記公開された国際出願に記載されたものがある：WO01/40177、WO0010548、WO0061776、WO0064869、WO0064870、WO0066548、WO0104089、WO0116099、WO0130751、WO0140177、WO0151464、WO0156982、WO0162723、WO0174765、WO0174766、WO0179166、WO0190061、WO0192221、WO0196293、WO02066424、WO0212182、WO0214268、WO03004036、WO03027065、WO03055854、WO03088977、WO04037781、WO04067504、WO8000339、WO8500819、WO8505622、WO8602078、WO8604333、WO8700834、WO8910351、WO9009991、WO9009992、WO9010620、WO9100271、WO9100855、WO9109841、WO9112239、WO9112240、WO9115475、WO9203414、WO9309093、WO9319044、WO9401398、WO9407851、WO9407852、WO9408958、WO9410139、WO9414766、WO9502577、WO9503273、WO9512575、WO9527697、WO9616035、WO9616036、WO9622973、WO9711053、WO9720811、WO9737972、WO9746522、WO9818759、WO9824762、WO9828266、WO9841500、WO9841501、WO9849138、WO9851663、WO9851664、WO9851678、WO9903829、WO9912894、WO9915499、WO9918070、WO9943645、WO9952863であり、下記米国特許に記載されているもの：US3856780、US3994878、US4021423、US4026882、US4028349、US4225525、US4613594、US4804502、US4898855、US5039671、US5087619、US5145846、US5247123、US5342833、US5428029、US5451574、US5612328、US5747479、US5804574、US5811414、US5856317、US5872113、US5888994、US5939408、US5962707、US5981780、US6017908、US6030962、US6040461、US6100294、US6121312、US6329538、US6331642、US6392071、US6452028、US6479538、US6492353、US6537981、US6544969、US6559138、US6667298、US6683219、US6696431、US6774251、及び米国特許出願公開に記載されたものがある：US2001007907、US2003083319、US2003125309、US2003130241、US2003171605、US2004167105である。
【０１０９】
本発明の化合物のいくつかの構造は不斉炭素原子を含むことが知られている。したがって、別段の指示のない限り、このような非対称から生じる異性体（例えば、すべてのエナンチオマー及びジアステレオマー）は、本発明の範囲内に包含されることを理解されたい。このような異性体は、古典的分離技法及び／又は立体化学的に制御された合成によって実質的に純度の高い形で得ることができる。
【０１１０】
天然又は合成の異性体を当技術分野で知られているいくつかの方式で分離することができる。２つのエナンチオマーのラセミ混合物を分離するための方法には、キラル固定相を使用するクロマトグラフィーが含まれる（例えば、「キラル液体クロマトグラフィー（Chiral Liquid Chromatography）」W.J. Lough, Ed. Chapman及びHall, New York (1989)を参照のこと）。エナンチオマーを古典的な分割技法によって分離することもできる。例えば、ジアステレオマー塩の形成及び分別晶出を用いて、エナンチオマーを分離することができる。カルボン酸のエナンチオマーの分離では、ブルシン、キニン、エフェドリン、ストリキニンなど、エナンチオマーとして純度の高いキラル塩基の添加によりジアステレオマー塩を形成することができる。或いは、ジアステレオマーエステルを、メントールなどエナンチオマーとして純度の高いキラルアルコールで形成し、続いてジアステレオマーエステルの分離及び加水分解を行って、遊離のエナンチオマー富化カルボン酸を得ることができる。アミノ化合物の光学異性体の分離では、カンファースルホン酸、酒石酸、マンデル酸、又は乳酸などのキラルカルボン酸又はスルホン酸の添加により、ジアステレオマー塩を形成することができる。
【０１１１】
本発明は、有効量の本明細書に記載するようなビタミンＤ化合物及び医薬として許容できる担体を含む薬剤組成物も提供する。別の実施態様では、有効量は、以前に記載のように間質性膀胱炎を治療するのに有効である。
【０１１２】
一実施態様では、医薬として許容できる製剤、例えば、医薬として許容できる製剤を対象者に投与した後、ビタミンＤ化合物の徐放を対象者に少なくとも１２時間、２４時間、３６時間、４８時間、１週間、２週間、３週間、又は４週間行う医薬として許容できる製剤を使用して、ビタミンＤ化合物を対象者に投与する。
【０１１３】
いくつかの実施態様では、これらの薬剤組成物は、対象者への局所又は経口投与に適している。他の実施態様では、下記に詳細に記載するように、本発明の薬剤組成物を、下記に適合させたものを含めて、固体又は液体の形で投与するために特別に配合することができる：（１）経口投与、例えば水薬（水性又は非水性の溶液又は懸濁液）、錠剤、ボーラス、散剤、顆粒剤、泥膏；（２）例えば、皮下、筋肉内、又は静脈内注射によって、例えば滅菌溶液又は懸濁液として、非経口投与、（３）例えば、皮膚に塗布されるクリーム、軟膏、又はスプレーとして、局所塗布；（４）例えば、ペッサリー、クリーム、又はフォームとして、腟内又は直腸内投与；或いは（５）例えば、化合物を含有する水性エアゾール、リポソーム製剤、又は固体粒子として、エアゾール。
【０１１４】
「医薬として許容できる」という語句は、適切な損益比に相応した、妥当な医学的判断の範囲内で過剰の毒性、刺激、アレルギー応答、又は他の問題若しくは合併症なしにヒト及び動物の組織と接触する使用に適した、本発明のそれらのビタミンＤ化合物、このような化合物を含有する組成物、及び／又は剤形を指す。
【０１１５】
「医薬として許容できる担体」という語句は、医薬として許容できる材料、組成物；或いは液体又は固体の充填剤、希釈剤、賦形剤、溶媒、又はカプセル化材料など、ある器官若しくは身体の一部分から別の器官若しくは身体の一部分への、主題の化学物質の運搬又は輸送に関与するビヒクルを包含する。各担体は、製剤の他の材料と相溶であり、患者に有害でないという意味で「許容でき」なければならない。医薬として許容できる担体として働くことができる材料の例としては、（１）乳糖、ブドウ糖、及びショ糖などの糖；（２）コーンスターチや馬鈴薯デンプンなどのデンプン；（３）カルボキシメチルセルロースナトリウム、エチルセルロース、及び酢酸セルロースなどのセルロース及びその誘導体；（４）トラガカント末；（５）麦芽；（６）ゼラチン；（７）タルク；（８）カカオ脂や坐剤ワックスなどの賦形剤；（９）落花生油、綿実油、サフラワー油、ゴマ油、オリーブ油、トウモロコシ油、及び大豆油などの油；（１０）プロピレングリコールなどのグリコール；（１１）グリセリン、ソルビトール、マンニトール、及びポリエチレングリコールなどのポリオール；（１２）オレイン酸エチル及びラウリン酸エチルなどのエステル；（１３）寒天；（１４）水酸化マグネシウムや水酸化アルミニウムなどの緩衝剤；（１５）アルギン酸；（１６）パイロジェンを含まない水；（１７）等張性生理食塩水；（１８）リンゲル液；（１９）エチルアルコール；（２０）リン酸緩衝液；並びに（２１）製剤に使用する他の非毒性相溶性物質が挙げられる。
【０１１６】
ラウリル硫酸ナトリウムやステアリン酸マグネシウムなどの湿潤剤、乳化剤、及び滑沢剤、さらに着色剤、剥離剤、コーティング剤、甘味剤、矯味及び芳香剤、防腐剤、並びに酸化防止剤も、組成物中に存在することができる。
【０１１７】
医薬として許容できる酸化防止剤の例としては：（１）アスコルビン酸、塩酸システイン、重硫酸ナトリウム、メタ重亜硫酸ナトリウム、亜硫酸ナトリウムなどの水溶性酸化防止剤；（２）パルミチン酸アスコルビル、ブチル化ヒドロキシアニソール（ＢＨＡ）、ブチル化ヒドロキシトルエン（ＢＨＴ）、レシチン、没食子酸プロピル、α−トコフェロールなどの油溶性酸化防止剤；及び（３）クエン酸、エチレンジアミン四酢酸（EDTA）、ソルビトール、酒石酸、リン酸などの金属キレート化剤が挙げられる。
【０１１８】
ビタミンＤ化合物を含有する組成物には、経口、鼻腔内、局所（口腔内及び舌下を含む）、直腸、腟内、エアゾール及び／又は非経口の投与に適したものが含まれる。組成物は、好都合には単位用量形態で存在することができ、薬剤技術分野でよく知られている方法によって調製することができる。担体材料と組み合わせて、１回分の剤形を生成することができる有効成分の量は、治療される受容者、特定の投与方法に応じて異なる。担体材料と組み合わせて、１回分の剤形を生成することができる有効成分の量は、一般に治療効果を生み出す化合物のその量となる。一般に、１００パーセントのうち、この量は、約１パーセント〜約９９パーセント、好ましくは約５パーセント〜約７０パーセント、最も好ましくは約１０パーセント〜約３０パーセントの有効成分である。
【０１１９】
これらの組成物を調製する方法は、ビタミンＤ化合物を担体、及び場合によっては１つ以上の補助材料と関連付けるステップを含む。一般に、製剤は、ビタミンＤ化合物を液体担体、又は微細化された固体担体、又は両方と均一に且つ密接に関連付け、次いで必要なら、生成物を造形することにより調製する。
【０１２０】
経口投与に適した本発明の組成物は、カプセル剤、カシェ剤、丸剤、錠剤、ロゼンジ（香味付け基剤、通常はショ糖及びアカシア又はトラガカントを使用する）、散剤、顆粒剤の形で、或いは水性又は非水性の液体中の溶液又は懸濁液として、或いは水中油型又は油中水型の液体乳濁液として、或いはエリキシル剤又はシロップ剤として、或いは香錠（ゼラチン及びグリセリン、又はショ糖及びアカシアなどの不活性基剤を使用する）として、且つ／或いは洗口剤などとすることができ、それぞれ、所定量のビタミンＤ化合物を有効成分として含有する。化合物は、ボーラス、舐剤、又は泥膏として投与することもできる。
【０１２１】
経口投与（カプセル剤、錠剤、丸剤、糖衣錠、散剤、顆粒など）用の本発明の固体剤形では、有効成分を、クエン酸ナトリウムや第二リン酸カルシウムなど１つ以上の医薬として許容できる担体、及び／又は下記のいずれかと混合する：（１）デンプン、乳糖、ショ糖、ブドウ糖、マンニトール、及び／又はケイ酸などの充填剤又は延長剤；（２）例えば、カルボキシメチルセルロース、アルギネート、ゼラチン、ポリビニルピロリドン、ショ糖及び／又はアカシアなどの結合剤；（３）グリセロールなどの保湿剤；（４）寒天、炭酸カルシウム、馬鈴薯又はタピオカデンプン、アルギン酸、ある種のシリケート、及び炭酸ナトリウムなどの崩壊剤；（５）パラフィンなどの溶解遅延剤；（６）第四級アンモニウム化合物などの吸収促進剤；（７）例えば、アセチルアルコールやモノステアリン酸グリセロールなどの湿潤剤；（８）カオリンやベントナイトの粘土などの吸収剤；（９）タルク、ステアリン酸カルシウム、ステアリン酸マグネシウム、充実ポリエチレングリコール、ラウリル硫酸ナトリウム、及びそれらの混合物などの滑沢剤、並びに（１０）着色剤。カプセル剤、錠剤、及び丸剤の場合は、薬剤組成物は緩衝剤を含むこともできる。同様のタイプの固体組成物は、乳糖や乳糖のような賦形剤、及び高分子量ポリエチレングリコールなどを使用する軟及び硬ゼラチンカプセル剤中の充填剤として使用することもできる。
【０１２２】
錠剤は、場合によっては１つ以上の補助材料を用いて、圧縮又は成形により作製することができる。圧縮錠は、結合剤（例えば、ゼラチン又はヒドロキシプロピルメチルセルロース）、滑沢剤、不活性希釈剤、防腐剤、崩壊剤（例えば、デンプングリコール酸ナトリウム又は架橋カルボキシメチルセルロースナトリウム）、界面活性剤、又は分散剤を使用して調製することができる。成形錠剤は、不活性液体希釈剤で湿潤させた粉末有効成分の混合物を適切な機械で成形することによって作製することができる。
【０１２３】
糖衣錠、カプセル剤、丸剤、及び顆粒など、本発明の薬剤組成物の錠剤及び他の固体剤形は、場合によっては割れ目を付けてもよく、又は腸溶コーティングや製剤技術分野で周知の他のコーティングなどコーティング及びシェルを用いて調製してもよい。これらは、有効成分の徐放又は制御放出がそれらの中で行われるように、例えば所望の放出プロファイルを提供する様々な比率のヒドロキシプロピルメチルセルロース、他のポリマーマトリックス、リポソーム、及び／又はマイクロスフェアを使用して配合することもできる。これらは、例えば細菌保持フィルターを通して濾過することによって、或いは使用する直前に無菌の水、又は他の無菌の注射可能な媒体に溶解することができる無菌の固体組成物の形で滅菌剤を組み込むことによって滅菌することができる。これらの組成物は、場合によっては不透明化剤を含有することもでき、これらによって消化管のある部分で有効成分のみ又は優先的に、場合によっては遅延方式で放出されるという組成物からなるものとすることができる。使用することができる包埋組成物の例としては、ポリマー物質及びワックスが挙げられる。有効成分は、適切な場合には上記の賦形剤の１つ以上と共に、マイクロカプセル化した形とすることもできる。
【０１２４】
ビタミンＤ化合物の経口投与用の液体剤形には、医薬として許容できる乳濁液、マイクロエマルジョン、溶液、懸濁液、シロップ剤、及びエリキシル剤が含まれる。有効成分に加えて、液体剤形は、例えば水、又はエチルアルコール、イソプロピルアルコール、炭酸エチル、酢酸エチル、ベンジルアルコール、安息香酸ベンジル、プロピレングリコール、１，３−ブチレングリコール、油（特に、綿実、落花生、トウモロコシ、胚芽、オリーブ、ヒマシ、及びゴマ油）、グリセロール、テトラヒドロフリルアルコール、ポリエチレングリコール、ソルビタンの脂肪酸エステル、及びそれらの混合物など、他の溶媒、可溶化剤及び乳化剤など、当技術分野で一般的に使用される不活性希釈剤を含有することができる。
【０１２５】
不活性希釈剤に加えて、経口組成物は、湿潤剤、乳化及び懸濁化剤、甘味剤、矯味剤、着色剤、芳香剤、並びに防腐剤などのアジュバントを含むことができる。
懸濁液は、活性ビタミンＤ化合物に加えて、懸濁化剤を、例えばエトキシ化イソステアリルアルコール、ポリオキシエチレンソルビトール、及びソルビタンエステル、微結晶セルロース、メタ水酸化アルミニウム、ベントナイト、寒天、トラガカント、及びそれらの混合物として含有することができる。
【０１２６】
直腸又は腟内投与用の本発明の薬剤組成物は、１つ以上のビタミンＤ化合物を、例えばカカオ脂、ポリエチレングリコール、坐剤ワックス、又はサリチレートを含む１つ以上の適切な非刺激性賦形剤又は担体と混合することによって調製することができ、室温では固体であるが、体温では液体であり、したがって直腸又は膣腔で溶融し、有効剤を放出する坐剤として提供することができる。
腟内投与に適した本発明の組成物には、当技術分野で適切であると知られているもののような担体を含有するペッサリー、タンポン、クリーム、ゲル、泥膏、フォーム、又はスプレー製剤が含まれる。
【０１２７】
ビタミンＤ化合物の局所又は経皮投与用の剤形には、散剤、スプレー、軟膏、泥膏、クリーム、ローション、ゲル、溶液、貼付剤、及び吸入剤が含まれる。活性ビタミンＤ化合物を、医薬として許容できる担体、及び必要とされることがある防腐剤、緩衝剤、又は噴射剤と共に無菌条件下で混合することができる。
【０１２８】
軟膏、泥膏、クリーム、及びゲルは、本発明のビタミンＤ化合物に加えて、動物性及び植物性脂肪、油、ワックス、パラフィン、デンプン、トラガカント、セルロース誘導体、ポリエチレングリコール、シリコーン、ベントナイト、ケイ酸、タルク、及び酸化亜鉛、又はその混合物などの賦形剤を含有することができる。
【０１２９】
散剤及びスプレーは、ビタミンＤ化合物に加えて、乳糖、タルク、ケイ酸、水酸化アルミニウム、ケイ酸カルシウム、及びポリアミドの粉末、又はこれらの物質の混合物などの賦形剤を含有することができる。スプレーは、さらにクロロフルオロ炭化水素、及びブタンやプロパンなどの揮発性非置換炭化水素など、常用の噴射剤を含有することができる。
【０１３０】
或いは、ビタミンＤ化合物は、エアゾールによって投与することができる。これは、化合物を含む水性エアゾール、リポソーム製剤、又は固体粒子を調製することによって実施する。非水性（例えば、フルオロカーボン噴射剤）懸濁液を使用することができる。音波噴霧器は、化合物の分解を生じる恐れがあるせん断に作用物質が曝露されるのを最小限に抑えるので好ましい。
【０１３１】
通常は、作用物質の水溶液又は懸濁液を、通常の医薬として許容できる担体及び安定剤と共に配合することによって、水性エアゾールを作製する。担体及び安定剤は、特定の化合物の要件によって異なるが、通常は、非イオン性界面活性剤（ツィーン（Tween）、プルロニック（Pluronic）、又はポリエチレングリコール）、血清アルブミンのような無害のタンパク質、ソルビタンエステル、オレイン酸、レシチン、グリシンなどのアミノ酸、緩衝剤、塩、糖、又は糖アルコールが含まれる。エアゾールを、一般に等張液から調製する。
【０１３２】
経皮貼付剤は、ビタミンＤ化合物の身体への送達の制御を行うという添加の利点を有する。このような剤形は、作用物質を適切な媒体に溶解又は分散することによって作製することができる。吸収促進剤を使用して、皮膚を経由した有効成分の流入を増大させることもできる。このような流入の速度は、速度制御膜を設ける、又は有効成分をポリマーマトリックス又はゲルに分散することによって制御することができる。
【０１３３】
非経口投与に適した本発明の薬剤組成物は、１つ以上のビタミンＤ化合物を、１つ以上の医薬として許容できる無菌の水性又は非水性の等張性溶液、分散液、懸濁液、又は乳濁液、或いは使用直前に無菌の注射可能な溶液又は分散液に再構成することができる無菌の散剤と組み合わせて含み、酸化防止剤、緩衝剤、静菌剤、所期のレシピエントの血液と製剤を等張にする溶質、懸濁化剤、又は粘稠化剤を含有してもよい。
【０１３４】
本発明の薬剤組成物に使用してもよい適切な水性及び非水性の担体の例としては、水、エタノール、ポリオール（グリセロール、プロピレングリコール、ポリエチレングリコールなど）、及び適切なそれらの混合物、オリーブ油などの植物油、並びにオレイン酸エチルなどの注射可能な有機エステルが挙げられる。適切な流動性は、例えばレシチンなどのコーティング材料の使用、分散液の場合に必要とされる粒径の維持、及び界面活性剤の使用により維持することができる。
【０１３５】
これらの組成物は、防腐剤、湿潤剤、乳化剤、及び分散剤などのアジュバントを含有することもできる。様々な抗菌剤及び抗真菌剤、例えばパラベン、クロロブタノール、フェノール、ソルビン酸などを含有することにより、微生物の作用を確実に防止することができる。糖、塩化ナトリウムなどの等張剤を組成物に含めることが望ましいこともある。さらに、モノステアリン酸アルミニウムやゼラチンなど、吸収を遅延させる作用物質の含有により、注射可能な薬剤形の持続的吸収をもたらすことができる。
【０１３６】
場合によっては、薬物の効果を延長させるために、皮下又は筋肉内注射による薬物の吸収を遅くすることが望ましい。これは、不十分な水溶性を有する結晶質又は非晶質の材料の液体懸濁液の使用により実施することができる。次いで、薬物の吸収速度は、その溶解速度に依存し、溶解速度は結晶サイズ及び結晶形に依存することができる。或いは、非経口投与の薬物形の吸収の遅延は、薬物を油性ビヒクルに溶解又は懸濁することによって実施する。
【０１３７】
注射可能なデポー形態には、ポリラクチド−ポリグリコリドなどの生分解性ポリマー中、ビタミンＤ化合物のマイクロカプセル化マトリックスを形成することによって作製される。薬物放出速度は、薬物とポリマーの比、及び使用する特定のポリマーの性質に応じて制御することができる。他の生分解性ポリマーの例としては、ポリ（オルトエステル）及びポリ（無水物）が挙げられる。デポー注射製剤（注射可能な製剤）は、体組織と適合しているリポソーム又はマイクロエマルジョンに薬物を封入することによっても調製される。
【０１３８】
ビタミンＤ化合物を薬剤としてヒト及び動物に投与する場合、これらは、それら自体、又は例えば０．１〜99.5%（より好ましくは、０．５〜９０％）の有効成分を、医薬として許容できる担体と組み合わせて含有する薬剤組成物として投与することができる。
選択された投与経路にかかわらず、適切な水和形で使用することができるビタミンＤ化合物、及び／又は本発明の薬剤組成物を、当業者に知られている通常の方法により、医薬として許容できる剤形に調製する。
【０１３９】
本発明の薬剤組成物中の有効成分の実際の投与量レベル及び時間経過は、特定の患者、組成物、及び投与方法について、患者に毒性のない所望の治療応答を実現するのに有効な有効成分の量が得られるように変えることができる。例示的用量範囲は、１日０．１〜300μgである。
本発明で好ましい用量のビタミンＤ化合物は、患者が許容することができ、高カルシウム血症を発症する恐れがない最大値である。好ましくは、本発明のビタミンＤ化合物を、約0.001ug〜約100ug／体重１キログラム、約0.001〜約10ug/kg、又は約0.001ug〜約100ug／体重１ｋｇの濃度で投与する。中間範囲から上記に記載する値も、本発明の一部分であるように意図されている。
ビタミンＤ化合物を、間質性膀胱炎治療用の第２の医薬品と、個別又は組合せの製剤で別々に、連続して、又は同時に投与することができる。
【０１４０】
本発明の化合物の合成
本発明のいくつかの化合物は、細胞中でのビタミンＤ３類似体のインキュベーション、例えばUMR 106細胞又はRos 17/2.8細胞中でのビタミンＤ３類似体のインキュベーションにより調製することができ、本発明のビタミンＤ３化合物の生成がもたらされる。例えば、UMR 106細胞中での１，２５−ジヒドロキシ−１６−エン−５，６−trans−カルシトリオールのインキュベーションにより、１，２５−ジヒドロキシ−１６−エン−２４−オキソ−５，６−trans−カルシトリオールの生成がもたらされる。
【０１４１】
本発明の化合物は、本明細書に記載する方法に加えて、様々な合成方法を使用して調製することができる。例えば、当業者なら、本発明の化合物を調製するために、既存のビタミンＤ３化合物を合成するための方法を使用することができるはずである（例えば、Bouillon, R.ら、(1995) Endocrine Reviews 16(2):201-204；Ikekawa N. (1987) Med. Res. Rev. 7:333-366；DeLuca H.F.及びOstrem V.K. (1988) Prog. Clin. Biol. Res. 259:41-55；Ikekawa N.及びIshizuka S. (1992) CRC Press 8:293-316；Calverley M.J.及びJones G. (1992) Academic Press 193-270；Pardo R.及びSantelli M. (1985) Bull. Soc. Chim. Fr:98-114；Bythgoe B. (1980) Chem. Soc. Rev. 449-475；Quinkert G. (1985) Synform 3:41-122；Quinkert G. (1986) Synform 4:131-256；Quinkert G. (1987) Synform 5:1-85；Mathieu C.ら、(1994) Diabetologia 37:552-558；Dai H.及びPosner G.H. (1994) Synthesis 1383-1398を参照のこと）；DeLucaら、WO97/11053。
【０１４２】
例示的な合成方法には、最初にプレビタミンが生成され、周知の方式で容易にビタミンＤ３に熱分解される、７−デヒドロコレステロールの１−ヒドロキシル化側鎖が改変された誘導体の光化学開環（Barton D.H.R.ら、(1973) J. Am. Chem. Soc. 95:2748-2749；Barton D.H.R. (1974) JCS Chem. Comm. 203-204）；Baggiolini E.G.ら、(1986) J. Org. Chem. 51:3098-3108；DeSchrijver J.及びDeClercq P.J. (1993) Tetrahed Lett 34:4369-4372；Posner G.H及びKinter C.M. (1990) J. Org. Chem. 55:3967-3969に記載されているように、ホスフィンオキシドをグルンドマン（Grundmann）のケトン誘導体にカップリングさせて、１−α，２５（ＯＨ）２Ｄ３骨格を直接生成するステップを含む、（Lythgoeら、(1978) JCS Perkin Trans. 1:590-595）によって開発されたホスフィンオキシドカップリング方法；Harrison R.G.ら、(1974) JCS Perkin Trans. 1:2654-2657；Castedo L.ら、(1988) Tetrahed Lett 29:1203-1206；Mascarenas J.S. (1991) Tetrahedron 47:3485-3498；Barrack S.A.ら、(1988) J. Org. Chem. 53:1790-1796）、及びOkamura W.H.ら、(1989) J. Org. Chem. 54:4072-4083に記載のような、対応するビタミンＤ３類似体への転位を受けるプレビタミン構造へのジエンインの半水素化；熱、又は金属を触媒とする異性化とその後に続く増感光異性化との組合せを使用して、続いて配置されるいくつかの中間体が関与するビニルアレン手法（Okamura W.H.ら、(1989) J. Org. Chem. 54:4072-4083；Van Alstyne E.M.ら、(1994) J. Am. Chem. Soc.116:6207-6210）；Trostら、B.M.ら、J. Am. Chem. Soc. 114:9836-9845；Nagasawa K.ら、(1991) Tetrahed Lett 32:4937-4940によって記載されている方法は、ブロモエンインに分子内クロスカップリングして、直接１，２５（ＯＨ）２Ｄ３骨格の形成をもたらす非環式Ａ環前駆体を含む；ｉ−ステロイドに異性化され、炭素−１において改変され、次いで引き続いてソボリティック条件下で逆異性化され、１−α，２５（ＯＨ）２Ｄ２又はその類似体を形成し得るトシル化誘導体（Sheves M.及びMazur Y. (1974) J. Am. Chem. Soc. 97:6249-6250；Paaren H.E.ら、(1980) J. Org. Chem. 45:3253-3258；Kabat M.ら、(1991) Tetrahed Lett 32:2343-2346；Wilson S.R.ら、(1991) Tetrahed Lett 32:2339-2342）；（Andrews D.R.ら、(1986) J. Org. Chem. 51:1635-1637）に記載のような、ビタミンＤ誘導体から１−酸素化５，６−transビタミンＤへの直接改変；プレビタミンＤ３のディールス‐アルダー環化付加方法を使用して、熱異性化によりプレビタミン型の中間体を経て１−α，２５（ＯＨ）２Ｄ２に再び環化することができる（Vanmaele L.ら、(1985) Tetrahedron 41:141-144）；及び最終方法は、遷移金属誘導体などの適切な保護基の使用又は他の化学転換による１−α，２５（ＯＨ）２Ｄ２又は類似体の直接改変を伴う（Okarmura W.H.ら、(1992) J. Cell Biochem. 49:10-18）が含まれる。ビタミンＤ２化合物を合成するための追加の方法は、例えば特開昭48-62750、特開昭51-26858、特開昭51-26859、及び特開昭52-71456；US3,639,596；3,715,374；3,847,955及び3,739,001に記載されている。
【０１４３】
飽和側鎖を有する本発明の化合物の例は、US4,927,815に例示且つ記載されている一般的方法に従って調製することができる。不飽和側鎖を有する本発明の化合物の例は、US4,847,012に例示且つ記載されている一般的方法に従って調製することができる。Ｒ基が共にシクロアルキル基を表す本発明の化合物の例は、US4,851,401に例示且つ記載されている一般的方法に従って調製することができる。
【０１４４】
１−α，２５−ジヒドロキシエルゴカルシフェロールの側鎖が改変された類似体の調製の別の合成戦略は、Kutnerら、The Journal of Organic Chemistry, 1988, 53:3450-3457に開示されている。さらに、２４−ホモ及び２６−ホモビタミンＤ類似体の調製は、US4,717,721に開示されている。
【０１４５】
キラル分子のエナンチオ選択的合成は、現在、最新技術である。エナンチオ選択的合成と精製技法の組合せによって、多くのキラル分子をエナンチオマー富化調製物として合成することができる。例えば、Muralidharanら (1993) J. Organic Chem. 58(7): 1895-1899及びNormanら (1993) J. Biol. Chem. 268(27): 20022-30に記載のように、１−α，２５（ＯＨ）２Ｄ３のＡ環ジアステレオマーのエナンチオ選択的合成のための方法が報告されている。当技術分野で知られている様々な化合物のエナンチオマー合成のための他の方法には、とりわけエポキシド（例えば、Johnson, R.A.; Sharpless, K.B. In Catalytic Asymmetric Synthesis; Ojima, I.編: ＶＣＨ： New York, 1993；Chapter 4.1. Jacobsen, E.N. 同書 Chapter 4.2を参照のこと）、ジオール（例えば、Sharpless, J. Org. Chem. (1992) 57:2768の方法による）、及びアルコール（例えば、ケトンの還元による、E.J. Coreyら、J. Am. Chem. Soc. (1987) 109:5551）が含まれる。光学富化生成物を生じるのに有用な他の反応には、オレフィンの水素化（例えば、M. Kitamuraら、J. Org. Chem. (1988) 53:708）；ディールスアルダー反応（例えば、K. Narasakaら、J. Am. Chem. Soc. (1989) 111:5340）；エノラートのアルドール反応及びアルキル化（例えば、D.A. Evansら、J. Am. Chem. Soc. (1981) 103:2127; D.A. Evansら、J. Am. Chem. Soc. (1982) 104:1737を参照のこと）；カルボニル付加（例えば、R. Noyori, Angew. Chem. Int. Ed. Eng. (1991) 30:49）；及びメソ−エポキシドの開環（例えば、Martinez, L.E.; Leighton J.L., Carsten, D.H.; Jacobsen, E.N. J. Am. Chem. Soc. (1995) 117:5897-5898）が含まれる。光学富化生成物を生成するための酵素の使用も、当技術分野でよく知られている（例えば、M.P. Scheider編「有機合成における触媒としての酵素（Enzymes as Catalysts in Organic Synthesis）」、D. Reidel, Dordrecht (1986）。
【０１４６】
キラル合成は、高い立体異性体純度の生成物を生じることができる。しかし、場合によっては、生成物の立体異性体純度は、あまり高くない。本明細書に記載する分離方法を使用して、キラル合成によって得られるビタミンＤ３−エピマーの立体異性体純度をさらに向上できることを当業者なら理解するであろう。
【０１４７】
式（XVIII）の化合物：
【化４７】
2007525533.tif 000049
【０１４８】
（式中：Ｘ１及びＸ１はそれぞれ独立に、Ｈ２又は＝ＣＨ２であり、但し、Ｘ１及びＸ１は共には＝ＣＨ２でなく；
Ｒ１及びＲ２はそれぞれ独立に、ヒドロキシル、ＯＣ（Ｏ）Ｃ１〜Ｃ４アルキル、ＯＣ（Ｏ）ヒドロキシアルキル、ＯＣ（Ｏ）フルロルアルキルであり、但し、Ｒ１及びＲ２は共にはヒドロキシルでなく；
Ｒ３及びＲ４はそれぞれ独立に、水素、Ｃ１〜Ｃ４アルキルであり、又はＲ３及びＲ４はＣ２０と一緒になって、Ｃ３〜Ｃ６シクロアルキルを形成し；且つ
Ｒ５及びＲ６はそれぞれ独立に、Ｃ１〜Ｃ４アルキル、ヒドロキシアルキル、又はハロアルキル、例えばフルオロアルキル、例えばフロオロメチル及びトリフルオロメチルである）；
及び医薬として許容できるそのエステル、塩、及びプロドラッグは、このセクション及び化学文献に記載の方法によって合成することができる。具体的には、本発明の式（XVIII）の化合物を下記のスキーム１に示すように調製する。したがって、式（ＸＩＸ）の化合物と式（ＸＸ）の化合物を、テトラヒドロフラン中、ｎ−ブチルリチウムを塩基として用いてカップリングして、式（ＸＸＩ）の化合物を得ることによって、式（XVIII）の化合物を調製する。続いて保護用シリル基（Ｒ１＝OSi(CH3)2t.Bu）を除去すると、式（XVIII）の１，３ジヒドロキシビタミンＤ３化合物（Ｒ１＝ＯＨ、Ｒ２＝ＯＨ）が生じる。当技術分野でよく知られている方法を使用して、１及び／又は３位におけるアシル化を実現する。例えば、式ＩＶの１，３ジアセトキシ化合物（Ｒ１＝Ｒ２＝ＯＡｃ）の調製には、スキーム２に示し下記に記載するように、無水酢酸及びピリジンを用いてさらにアセチル化する必要がある。
【０１４９】
スキーム１を参照して、式（ＸＸ）の化合物は、知られている化合物であり、知られている式（XXII）のエポキシ−ケトンから出発して調製される。式（XXII）の化合物を、ウィッティヒ反応によって式（XXIII）のエポキシ−オレフィンに変換する。LiAlH4を用いた化合物（XXIV）への還元及びヒドロキシ基の保護により、化合物（ＸＸＶ）が生じた。それから、テトラヒドロフラン中、ルイス酸(CH3)2AlClの存在下、知られているヒドロキシ−共役ケトン（XXVI）（Ｒ５＝Ｒ６＝ＣＨ３）との式（ＸＸＶ）のエン反応により、標的ビタミンＤ類似体のＣ，Ｄ環及び完全な側鎖を特徴とする化合物（XXVII）が得られる。最後に、シリル基の除去及び酸化により、重要な中間体である式（ＸＸ）のケトンが得られる。
【０１５０】
【化４８】
2007525533.tif 000050
【０１５１】
スキーム２は、ウィッティングカップリング条件下における、化合物（ＸＸ）とシリル化ホスフィンオキシドのカップリングを示す。シリル保護基の除去により、式（XVIII）のジオール（式中、Ｒ１及びＲ２は共にヒドロキシルである）が得られる。
【０１５２】
【化４９】
2007525533.tif 000051
式中、Ｘ１、Ｘ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５、及びＲ６は、上記に定義する通りである。
【０１５３】
スキーム３は、式（Ｐ）のビタミンＤ３誘導体から式（Ｑ）の酢酸エステルへのアセチル化を示す。
【化５０】
2007525533.tif 000052
【０１５４】
次式のビタミンＤ３化合物：
【化５１】
2007525533.tif 000053
【０１５５】
（式中：Ａ１は、単結合又は二重結合であり；
Ａ２は、単結合、二重結合、又は三重結合であり；
Ｘ１及びＸ２はそれぞれ独立に、Ｈ又は＝ＣＨ２であり、
Ｒ１及びＲ２はそれぞれ独立に、ＯＣ（Ｏ）Ｃ１〜Ｃ４アルキル、ＯＣ（Ｏ）ヒドロキシアルキル、又はOROC（Ｏ）ハロアルキルであり；
Ｒ３、Ｒ４、及びＲ５はそれぞれ独立に、水素、Ｃ１〜Ｃ４アルキル、ヒドロキシアルキル、又はハロアルキルであり、或いはＲ３及びＲ４はＣ２０と一緒になって、Ｃ３〜Ｃ６シクロアルキルを形成し；
Ｒ６及びＲ７はそれぞれ独立に、ハロアルキルであり；且つ
Ｒ８は、Ｈ、又はOC（Ｏ）Ｃ１〜Ｃ４アルキル、ＯＣ（Ｏ）ヒドロキシアルキル、又はOROC（Ｏ）ハロアルキルである）；並びに医薬として許容できるそのエステル、塩、及びプロドラッグを、１，３−ジ−Ｏ−アセチル−１，２５−ジヒドロキシ−１６，２３Ｚ−ジエン−２６，２７−ヘキサフルオロ−１９−ノル−コレカルシフェロール（１）（下記の実施例では「化合物Ａ」）の合成と類似して調製することができ、ジオールから対応する酢酸ジエステルへの標準的アセチル化条件下で実施する：
【０１５６】
【化５２】
2007525533.tif 000054
【０１５７】
（合成例）
ビタミンＤ３類似体が関与する操作はすべて、窒素雰囲気において、コハク色ガラス器具中で実施した。テトラヒドロフランは、それを使用する直前にナトリウム−ベンゾフェノンケチルから蒸留し、溶質の溶液を硫酸ナトリウムで乾燥した。融点をThomas-Hoover毛細管装置で決定し、補正しない。旋光度を２５℃で測定した。１Ｈ  ＮＭＲスペクトルは、別段の指摘のない限り、400MHz、CDCl3で記録した。ＴＬＣは、シリカゲルプレート（Merck PF-254）で、短波長ＵＶ光下で可視化し、或いはプレートにメタノール中１０％リンモリブデン酸を噴霧し、続いて加熱することによって実施した。フラッシュクロマトグラフィーを４０〜６５μｍメッシュシリカゲルで実施した。分取HPLCは、５×50cmのカラム及び１５〜３０μｍメッシュシリカゲルを用いて、流量100mL/分で行った。
【０１５８】
（合成例１）１，３−ジ−Ｏ−アセチル−１，２５−ジヒドロキシ−１６，２３Ｚ−ジエン−２６，２７−ヘキサフルオロ−１９−ノル−コレカルシフェロール（１）（化合物Ａ）の合成
【化５３】
2007525533.tif 000055
出発材料の１，２５−ジヒドロキシ−１６，２３Ｚ−ジエン−２６，２７−ヘキサフルオロ−１９−ノル−コレカルシフェロールは、DoranらのUS5,428,029に記載のように調製することができる。３ｍｇの１，２５−ジヒドロキシ−１６，２３Ｚ−ジエン−２６，２７−ヘキサフルオロ−１９−ノル−コレカルシフェロールを０．８ｍＬのピリジンに溶解し、氷浴温度に冷却し、０．２ｍＬの無水酢酸を添加し、その温度で１６時間維持した。次いで、反応混合物を１ｍＬの水で希釈し、氷浴中で１０分間攪拌し、５ｍＬの水と20mLの酢酸エチルに分配した。有機層を、３回×５ｍＬの水、１回×５ｍＬの飽和炭酸水素ナトリウム、１回×３ｍＬの食塩水で洗浄し、次いで乾燥し（硫酸ナトリウム）、蒸発させた。油状残渣を、１：６の酢酸エチル−ヘキサンで取り出し、１：６、１：４、及び１：２の酢酸エチル−ヘキサンのステップワイズグラジエントを使用したフラッシュクロマトグラフィーにかけた。カラムクロマトグラフィーをＴＬＣ（１：４の酢酸エチル−ヘキサン、リンモリブデン酸スプレーでスポットを可視化）によって監視し、適切な分画を貯留し、蒸発させ、残渣をギ酸メチルで取り出し、濾過し、次いで再び蒸発させて、23.8mgの表題化合物（１）を無色シロップとして得た；400MHz 1H NMR δ 0.66 (3H, s), 0.90 (1H, m), 1.06 (3H, d, J=7.2 Hz), 1.51 (1H, m), 1.72-1.82 (3H,m), 1.9-2.1 (3H, m), 1.99 (3H, s) 2.04 (3H,s), 2.2-2.3 (3 m), 2.44-2.64 (6H, m), 2.78 (1H, m), 3.01 (1H, s), 5.10 (2H, m). 5.38 (1H, m), 5.43 (1H, d, J=12 Hz), 5.85 (1H, d, J=11.5 Hz), 5.97 (1H, dt, J=12及び7.3 Hz), 6.25 (1H, d, J= 11.5 Hz)。
【０１５９】
（合成例２）１，３−ジ−Ｏ−アセチル−１，２５−ジヒドロキシ−１６−エン−２３−イン−２６，２７−ヘキサフルオロ−１９−ノル−コレカルシフェロール（２）及び１，３，２５−トリ−Ｏ−アセチル−１，２５−ジヒドロキシ−１６−エン−２３−イン−２６，２７−ヘキサフルオロ−１９−ノル−コレカルシフェロール（３）の合成
【化５４】
2007525533.tif 000056
【０１６０】
出発材料の１，２５−ジヒドロキシ−１６−エン−２３−イン−２６，２７−ヘキサフルオロ−１９−ノル−コレカルシフェロールは、BaggioliniらのUS5,451,574及び5,612,328に記載のように調製することができる。314mg（0.619ミリモル）の１，２５−ジヒドロキシ−１６−エン−２３−イン−２６，２７−ヘキサフルオロ−１９−ノル−コレカルシフェロールを１．５ｍＬのピリジンに溶解し、氷浴温度に冷却し、0.4mLの無水酢酸を添加した。反応混合物を室温で７時間、次いで冷蔵庫中で２３時間維持した。次いで、10mLの水で希釈し、30mLの酢酸エチルで抽出した。有機抽出物を、水及び食塩水で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥し、蒸発させた。残渣を、１０×140mmのカラムで、移動相として１：６及び１：４の酢酸エチル−ヘキサンを使用したフラッシュクロマトグラフィーにかけて、126mgの１，３−ジ−Ｏ−アセチル−１，２５−ジヒドロキシ−１６−エン−２３−イン−２６，２７−ヘキサフルオロ−１９−ノル−コレカルシフェロール（２）、及び248mgの１，３，２５−トリ−Ｏ−アセチル−１，２５−ジヒドロキシ−１６−エン−２３−イン−２６，２７−ヘキサフルオロ−１９−ノル−コレカルシフェロール（３）を得た。
【０１６１】
（合成例３）１，３−ジ−Ｏ−アセチル−１，２５−ジヒドロキシ−１６−エン−２３−イン−コレカルシフェロール（４）の合成
【化５５】
2007525533.tif 000057
【０１６２】
10mLの丸底フラスコに、40mgの１，２５−ジヒドロキシ−１６−エン−２３−イン−コレカルシフェロールを加えた。この材料を１ｍＬのピリジンに溶解した。この溶液を、氷浴中で冷却し、次いで、0.3mLの無水酢酸を添加した。溶液を、３０分間攪拌し、次いで終夜冷蔵し、水で希釈し、10mLの水及び40mLの酢酸エチルを用いて分液漏斗に移した。有機層を４回×20mLの水、10mLの食塩水で洗浄し、硫酸ナトリウムの栓に通し、蒸発させた。明茶色油状残渣を１：９の酢酸エチル−ヘキサンで取り出し、次いで１０×130mmのカラムで、分画１〜５の場合移動相として１：９の酢酸エチル−ヘキサン、分画６〜１３の場合１：６、分画１４〜２０の場合１：４の酢酸エチル−ヘキサン（18mLの分画）を使用したフラッシュクロマトグラフィーにかけた。分画１４〜１９は、Rf0.15の主要帯（ＴＬＣ  １：４）を含んでいた。これらの分画を貯留し、無色油0.044gにまで蒸発させた。材料を、ギ酸メチルで取り出し、濾過し、蒸発させて、無色粘性フォームの表題化合物(4)0.0414gを得た。
【０１６３】
（合成例４）１，３−ジ−Ｏ−アセチル−１，２５−ジヒドロキシ−１６，２３Ｅ−ジエン−コレカルシフェロール（５）の合成
【化５６】
2007525533.tif 000058
【０１６４】
0.0468gの１，２５−ジヒドロキシ−１６，２３Ｅ−ジエン−コレカルシフェロールを１．５ｍＬのピリジンに溶解した。この溶液を氷浴中で冷却し、次いで終夜冷蔵し、依然として氷浴に浸漬しながら10mLの水で希釈し、１０分間攪拌し、10mLの水及び40mLの酢酸エチルを用いて分液漏斗に移した。有機層を、４回×20mLの水、10mLの食塩水で洗浄し、硫酸ナトリウムの栓に通し、蒸発させた。明茶色油状残渣を、１：９の酢酸エチル−ヘキサンで取り出し、次いで１０×130mmのカラムで、分画１〜３（20mLの分画）の場合移動相として１：９の酢酸エチル−ヘキサン、分画６〜８の場合１：６、分画９〜１７の場合１：４の酢酸エチル−ヘキサン（それぞれ18mL）を使用したフラッシュクロマトグラフィーにかけた。分画１１〜１４は、Rf0.09の主要帯（ＴＬＣ  １：４）を含んでいた。これらの分画を貯留し、無色油0.0153gにまで蒸発させた。この材料を、ギ酸メチルで取り出し、濾過し、蒸発させて、0.014gの表題化合物（５）を得た。
【０１６５】
（合成例６）１，３−ジ−Ｏ−アセチル−１，２５−ジヒドロキシ−１６−エン−コレカルシフェロール（６）の合成
【化５７】
2007525533.tif 000059
【０１６６】
0.0774gの１，２５−ジヒドロキシ−１６−エン−コレカルシフェロールを、1.5mLのピリジンに溶解した。この溶液を氷浴中で冷却し、次いで０．３ｍＬの無水酢酸を添加した。溶液を攪拌し、終夜冷蔵し、次いで１ｍＬの水で希釈し、氷浴中で１時間攪拌し、30mLの酢酸エチル及び15mLの水で希釈した。有機層を、４回×15mLの水、１回×５ｍＬの食塩水で洗浄し、次いで乾燥し（硫酸ナトリウム）、蒸発させた。明茶色油状残渣を、１：９の酢酸エチル−ヘキサンで取り出し、次いで１０×130mmのカラムで、分画１の場合、移動相として１：９の酢酸エチル−ヘキサン（20mL分画）、分画２〜７の場合１：６、分画８〜１３の場合１：４の酢酸エチル−ヘキサンを使用したフラッシュクロマトグラフィーにかけた。分画９〜１１は、Rf0.09の主要帯（ＴＬＣ  １：４の酢酸エチル−ヘキサン）を含んでいた。これらの分画を貯留し、無色油0.0354gにまで蒸発させた。この材料を、ギ酸メチルで取り出し、濾過し、溶液を蒸発させた、無色被膜の表題化合物（６）0.027g。
【０１６７】
（合成例７）１，３，２５−トリ−Ｏ−アセチル−１，２５−ジヒドロキシ−１６−エン−２３−イン−２６，２７−ヘキサフルオロ−コレカルシフェロール（７）及び１，３−ジ−Ｏ−アセチル−１，２５−ジヒドロキシ−１６−エン−２３−イン−２６，２７−ヘキサフルオロ−コレカルシフェロール（８）の合成
【化５８】
2007525533.tif 000060
【０１６８】
0.0291gの１，２５−ジヒドロキシ−１６−エン−２３−イン−２６，２７−ヘキサフルオロ−コレカルシフェロールを1.5mLのピリジンに溶解した。この溶液を氷浴中で冷却し、次いで0.25mLの無水酢酸を添加した。溶液を、２０分間攪拌し、冷凍庫中に終夜維持した。冷溶液を15mLの水で希釈し、１０分間攪拌し、30mLの酢酸エチルで希釈した。有機層を、４回×15mLの水、１回×５ｍＬの食塩水で洗浄し、次いで乾燥し（硫酸ナトリウム）、蒸発させた。明茶色油状残渣を、１：６の酢酸エチル−ヘキサンで取り出し、次いで１０×110mmのカラムで、１：６の酢酸エチル−ヘキサンを移動相として使用したフラッシュクロマトグラフィーにかけた。分画２〜３としては、72.3461-72.3285=0.0176gが得られた。分画６〜７の蒸発により、0.0055gが得られた。分画２〜３の残渣を、ギ酸メチルで取り出し、濾過し、蒸発させて、0.0107gの表題酢酸トリエステル（７）を得た。分画６〜７の残渣を、ギ酸メチルで取り出し、濾過し、蒸発させて、0.0049gの酢酸ジエステル（８）を得た。
【０１６９】
（合成例８）１，３−ジ−Ｏ−アセチル−１，２５−ジヒドロキシ−１６，２３Ｅ−ジエン−２５Ｒ，２６−トリフルオロ−コレカルシフェロール（９）の合成
【化５９】
2007525533.tif 000061
【０１７０】
1.5mLの１，２５−ジヒドロキシ−１６，２３Ｅ−ジエン−２５Ｒ，２６−トリフルオロ−コレカルシフェロールを1.5mLのピリジンに溶解し、氷浴温度に冷却し、0.4mLの無水酢酸を添加した。次いで、混合物を冷蔵した。２日後、混合物を１ｍＬの水で希釈し、氷浴中で１０分間攪拌し、次いで10mLの水と30mLの酢酸エチルに分配した。有機層を、４回×15mLの水、１回×５ｍＬの食塩水で洗浄し、次いで乾燥し（硫酸ナトリウム）、蒸発させた。明茶色油状残渣を、１：６の酢酸エチル−ヘキサンで取り出し、次いで１０×130mmのカラムで、１：６の酢酸エチル−ヘキサンを移動相として使用したフラッシュクロマトグラフィーにかけた。分画４〜６（ＴＬＣ、１：４）は、主要帯（ＴＬＣを参照のこと）を含んでいた。これらの分画を蒸発させ、0.0726gを得た。この残渣を、ギ酸メチルで取り出し、濾過し、蒸発させて、無色フォームの表題化合物(9)0.0649gを得た。
【０１７１】
（合成例８）１，３−ジ−Ｏ−アセチル−１，２５−ジヒドロキシ−１６−エン−１９−ノル−コレカルシフェロール（１０）（「化合物Ｃ」）の合成
【化６０】
2007525533.tif 000062
【０１７２】
0.0535gの１，２５−ジヒドロキシ−１６−エン−１９−ノル−コレカルシフェロールを、1.5mLのピリジンに溶解し、氷浴温度に冷却し、0.3mLの無水酢酸を添加し、混合物を終夜冷蔵した。溶液を１ｍＬの水で希釈し、氷浴中で１０分間攪拌し、次いで10mLの水と30mLの酢酸エチルに分配した。有機層を、４回×15mLの水、１回×５ｍＬの食塩水で洗浄し、次いで乾燥し（硫酸ナトリウム）、蒸発させた。ほぼ無色油状残渣を１：６の酢酸エチル−ヘキサンで取り出し、次いで分画１〜６の場合移動相として１：４の酢酸エチル−ヘキサンを使用した。分画９〜１９（ＴＬＣ、１：４の酢酸エチル−ヘキサン、Rf0.09、下記を参照のこと）を貯留し、蒸発させて、0.0306gを得、ギ酸メチルで取り出し、濾過し、次いで蒸発させた。それによって、0.0376の表題化合物（１０）が得られた。
【０１７３】
（合成例９）１，３−ジ−Ｏ−アセチル−１，２５−ジヒドロキシ−１６−エン−２３−イン−１９−ノル−コレカルシフェロール（１１）の合成
【化６１】
2007525533.tif 000063
【０１７４】
50mgの１，２５−ジヒドロキシ−１６−エン−２３−イン−１９−ノル−コレカルシフェロールを0.8mLのピリジンに溶解し、氷浴温度に冷却し、0.2mLの無水酢酸を添加した。混合物を３日間冷蔵し、次いで１ｍＬの水で希釈し、氷浴中で１０分間攪拌し、５ｍＬの水と20mLの酢酸エチルに分配した。有機層を、４回×５ｍＬの水、１回×３ｍＬの食塩水で洗浄し、次いで乾燥し（硫酸ナトリウム）、蒸発させた。ほぼ無色油状残渣を、１：６の酢酸エチル−ヘキサンで取り出し、次いで１５×120mmのカラムで、分画１〜６の場合移動相として１：６の酢酸エチル−ヘキサン、分画９〜１２の場合１：４、分画１３〜１５の場合１：３、残りの分画の場合１：２の酢酸エチル−ヘキサンを使用したフラッシュクロマトグラフィーにかけた。分画１１〜１６（ＴＬＣ、１：４の酢酸エチル−ヘキサン、Rf0.09、下記を参照のこと）を貯留し、蒸発させ、76.1487-76.1260=0.0227g、ギ酸メチルで取り出し、濾過し、次いで蒸発させた。それによって、0.0186gの表題化合物（１１）が得られた。
【０１７５】
（合成例１０）１，３−ジ−Ｏ−アセチル−１，２５−ジヒドロキシ−１６−エン−２３−イン−２６，２７−ビスホモ−１９−ノル−コレカルシフェロール（１２）の合成
【化６２】
2007525533.tif 000064
【０１７６】
0.0726gの１，２５−ジヒドロキシ−１６−エン−２３−イン−２６，２７−ビスホモ−１９−ノル−コレカルシフェロールを0.8mLのピリジンに溶解し、氷浴温度に冷却し、0.2mLの無水酢酸を添加した。溶液を氷浴中で攪拌し、次いで終夜冷蔵した。次いで、溶液を１ｍＬの水で希釈し、氷浴中で１０分間攪拌し、10mLの水と25mLの酢酸エチルに分配した。有機層を、３回×10mLの水、１回×５ｍＬの飽和炭酸水素ナトリウム、１回×３ｍＬの食塩水で洗浄し、次いで乾燥し、蒸発させ、33.5512-33.4654=0.0858gの黄褐色油状残渣、１５×120mmのカラムで移動相として１：６を使用してフラッシュクロマトグラフィーを行った。分画７〜１１（それぞれ20mL）を貯留し（ＴＬＣ  １：４の酢酸エチル−ヘキサン、Rf0.14）、蒸発させた、67.2834-67.2654=0.018g。この残渣を、ギ酸メチルで取り出し、濾過し、蒸発させた。それによって、0.0211gの表題化合物（１２）が得られた。
【０１７７】
（合成例１１）１，３−ジ−Ｏ−アセチル−１，２５−ジヒドロキシ−２０−シクロプロピル−２３−イン−１９−ノル−コレカルシフェロール（１３）の合成
【化６３】
2007525533.tif 000065
【０１７８】
0.282gの１，２５−ジヒドロキシ−２０−シクロプロピル−２３−イン−１９−ノル−コレカルシフェロールを0.8mLのピリジンに溶解し、氷浴温度に冷却し、0.2mLの無水酢酸を添加し、混合物を終夜冷蔵し、次いで１ｍＬの水で希釈し、氷浴中で１０分間攪拌し、５ｍＬの水と20mLの酢酸エチルに分配した。有機層を、３×５ｍＬの水、１回×５ｍＬの飽和炭酸水素ナトリウム、１回×３ｍＬの食塩水で洗浄し、次いで乾燥し（硫酸ナトリウム）、蒸発させた。油状残渣を、１：６の酢酸エチル−ヘキサンで取り出し、次いで１５×110mmのカラムで、分画１〜４の場合移動相として１：６の酢酸エチル−ヘキサン、分画５〜１２の場合１：４、分画１３〜１５の場合１：３、残りの分画の場合酢酸エチル−ヘキサンを使用したフラッシュクロマトグラフィーにかけた。分画７〜１２（ＴＬＣ、１：４の酢酸エチル−ヘキサン、Rf0.13）を貯留し、蒸発させ、残渣をギ酸メチルで取り出し、濾過し、次いで蒸発させて、0.023gの表題化合物（１３）を得た。
【０１７９】
（合成例１２）１，３，２５−トリ−Ｏ−アセチル−１，２５−ジヒドロキシ−２０−シクロプロピル−２３−イン−２６，２７−ヘキサフルオロ−１９−ノル−コレカルシフェロール（１４）及び１，３−ジ−Ｏ−アセチル−１，２５−ジヒドロキシ−２０−シクロプロピル−２３−イン−２６，２７−ヘキサフルオロ−１９−ノル−コレカルシフェロール（１５）の合成
【化６４】
2007525533.tif 000066
【０１８０】
0.1503gの１，２５−ジヒドロキシ−２０−シクロプロピル−２３−イン−２６，２７−ヘキサフルオロ−１９−ノル−コレカルシフェロールを、0.8mLのピリジンに溶解し、氷浴温度に冷却し、0.2mLの無水酢酸を添加した。混合物を終夜冷蔵し、次いで１ｍＬの水で希釈し、氷浴中で１０分間攪拌し、５ｍＬの水と20mLの酢酸エチルに分配した。有機層を、３×５ｍＬの水、１回×５ｍＬの飽和炭酸水素ナトリウム、１回×３ｍＬの食塩水で洗浄し、次いで乾燥し（硫酸ナトリウム）、蒸発させた。油状残渣を、１：６の酢酸エチル−ヘキサンで取り出し、次いで１５×150mmのカラムで、分画１〜５の場合移動相として１：６の酢酸エチル−ヘキサン、残りの分画の場合１：４を使用したフラッシュクロマトグラフィーにかけた。分画３〜４及び６〜７を貯留し、蒸発させ、次いでギ酸メチルで取り出し、濾過し、蒸発させて、0.0476gの表題酢酸トリエステル（１４）及び0.04670gの表題酢酸ジエステル（１５）を得た。
【０１８１】
（合成例１３）１，３−ジ−Ｏ−アセチル−１，２５−ジヒドロキシ−２０−シクロプロピル−２３−イン−コレカルシフェロール（１６）の合成
【化６５】
2007525533.tif 000067
【０１８２】
0.0369gの１，２５−ジヒドロキシ−２０−シクロプロピル−２３−イン−コレカルシフェロールを0.8mLのピリジンに溶解し、氷浴温度に冷却し、0.2mLの無水酢酸を添加し、混合物を終夜冷蔵し、次いで１ｍＬの水で希釈し、氷浴中で１０分間攪拌し、５ｍＬの水と20mLの酢酸エチルに分配した。有機層を、３×５ｍＬの水、１回×５ｍＬの飽和炭酸水素ナトリウム、１回×３ｍＬの食塩水で洗浄し、次いで乾燥し（硫酸ナトリウム）、蒸発させた。油状残渣を、１：６の酢酸エチル−ヘキサンで取り出し、次いで１３×110mmのカラムで、分画１〜７の場合移動相として１：６の酢酸エチル−ヘキサン、残りの分画の場合１：４の酢酸エチル−ヘキサンを使用したフラッシュクロマトグラフィーにかけた。分画９〜１１（ＴＬＣ、１：４の酢酸エチル−ヘキサン）を貯留し、蒸発させ、ギ酸メチルで取り出し、濾過し、次いで蒸発させて、0.0099gの表題化合物（１６）を得た。
【０１８３】
（合成例１４）１，３−ジ−Ｏ−アセチル−１，２５−ジヒドロキシ−２０−シクロプロピル−２３Ｅ−エン−２６，２７−ヘキサフルオロ−１９−ノル−コレカルシフェロール（１７）（化合物Ｅ）の合成
【化６６】
2007525533.tif 000068
【０１８４】
0.0328gの１，２５−ジヒドロキシ−２０−シクロプロピル−２３Ｅ−エン−２６，２７−ヘキサフルオロ−１９−ノル−コレカルシフェロールを0.8mLのピリジンに溶解し、氷浴温度に冷却し、0.2mLの無水酢酸を添加した。溶液を終夜冷蔵した。次いで、溶液を１ｍＬの水で希釈し、氷浴中で１０分間攪拌し、５ｍＬの水と20mLの酢酸エチルに分配した。（水層の抽出により、リンモリブデン酸が検出される材料はもたらされなかった）。有機層を、３×５ｍＬの水、１回×５ｍＬの飽和炭酸水素ナトリウム、１回×３ｍＬの食塩水で洗浄し、次いで乾燥し（硫酸ナトリウム）、蒸発させた。残渣は、唯一のスポットとしてRf0.25を示す。油状残渣を、１：６の酢酸エチル−ヘキサンで取り出し、次いで１３．５×110mmのカラムで、分画１〜１０の場合移動相として１：６の酢酸エチル−ヘキサンを使用したフラッシュクロマトグラフィーにかけた。分画４〜９を貯留し、蒸発させ、残渣をギ酸メチルで取り出し、濾過し、次いで蒸発させて、0.0316gの表題化合物（１７）を得た。
【０１８５】
（合成例１５）１，３−ジ−Ｏ−アセチル−１，２５−ジヒドロキシ−２０−シクロプロピル−２３Ｚ−エン−２６，２７−ヘキサフルオロ−１９−ノル−コレカルシフェロール（１８）の合成
【化６７】
2007525533.tif 000069
【０１８６】
0.0429gの１，２５−ジヒドロキシ−２０−シクロプロピル−２３Ｚ−エン−２６，２７−ヘキサフルオロ−１９−ノル−コレカルシフェロールを、0.8mLのピリジンに溶解し、氷浴温度に冷却し、0.2mLの無水酢酸を添加した。溶液を終夜冷蔵した。次いで、溶液を１ｍＬの水で希釈し、氷浴中で１０分間攪拌し、７ｍＬの水と25mLの酢酸エチルに分配した。有機層を、３×５ｍＬの水、１回×５ｍＬの飽和炭酸水素ナトリウム、１回×３ｍＬの食塩水で洗浄し、次いで乾燥し（硫酸ナトリウム、ＴＬＣ（１：４の酢酸エチル−ヘキサン）はほぼ１スポットを示す）、蒸発させ、１５×120mmのカラムで、移動相として１：６を使用したフラッシュクロマトグラフィーにかけた。分画３〜６（それぞれ20mL）を貯留し、蒸発させた。残渣を、ギ酸メチルで取り出し、濾過し、蒸発させて、0.0411gの表題化合物（１８）を得た。
【０１８７】
（合成例１６）１，３−ジ−Ｏ−アセチル−１，２５−ジヒドロキシ−２０−シクロプロピル−コレカルシフェロール（１９）（化合物Ｆ）の合成
【化６８】
2007525533.tif 000070
【０１８８】
0.0797gの１，２５−ジヒドロキシ−２０−シクロプロピル−コレカルシフェロールを、0.8mLのピリジンに溶解し、氷浴温度に冷却し、0.2mLの無水酢酸を添加した。溶液を終夜冷蔵した。次いで、溶液を１ｍＬの水で希釈し、氷浴中で１０分間攪拌し、10mLの水と25mLの酢酸エチルに分配した。有機層を、３回×10mLの水、１回×５ｍＬの飽和炭酸水素ナトリウム、１回×３ｍＬの食塩水で洗浄し、次いで乾燥し、蒸発させて、0.1061gの黄褐色油状残渣を得、１５×120mmのカラムで、１：６を移動相として使用してフラッシュクロマトグラフィーを行った。分画９〜１６（それぞれ20mL）を貯留し（ＴＬＣ  １：４の酢酸エチル−ヘキサン、Rf0.13）、蒸発させた。この残渣を、ギ酸メチルで取り出し、濾過し、蒸発させて、0.0581gの表題化合物（１９）を得た。
【０１８９】
（合成例１７）１，３−ジ−Ｏ−アセチル−１−α，２５−ジヒドロキシ−１６−エン−２０−シクロプロピル−１９−ノル−コレカルシフェロール（２０）の合成
【化６９】
2007525533.tif 000071
【０１９０】
１−α，２５−ジヒドロキシ−１６−エン−２０−シクロプロピル−１９−ノル−コレカルシフェロール（94mg、0.23mmol）のピリジン（３ｍＬ）溶液に、０℃で無水酢酸（0.5mL、5.3mmol）を添加した。混合物を、１時間攪拌し、１５時間冷蔵し、次いでさらに８時間攪拌した。水（10mL）を添加し、１５分間攪拌した後、反応混合物をAcOEt：ヘキサン１：１（25mL）で抽出し、水（４回×25mL）及び食塩水（20mL）で洗浄し、Na2SO4で乾燥した。溶媒を蒸発させた後の残渣（120mg）を、ＦＣ（１５ｇ、ヘキサン中３０％AcOEt）によって精製して、表題化合物（２０）（91mg、0.18mmol、８０％）を得た。[α]30D=+14.4 c 0.34，EtOH；ＵＶλmax（EtOH）：242nm（ε 34349），250nm（ε 40458），260nm（ε 27545）；1H NMR (CDCl3): 6.25 (1H, d, J=11.1 Hz), 5.83 (1H, d, J=11.3 Hz), 5.35 (1H, m), 5.09 (2H, m), 2.82-1.98 (7H, m), 2.03 (3H, s), 1.98 (3H, s), 2.00-1.12 (15H, m), 1.18 (6H, s), 0.77 (3H, s ),0.80-0.36 (4H, m); 13C NMR (CDCl3): 170.73(0), 170.65(0), 157.27(0), 142.55(0), 130.01(0), 125.06(1), 123.84(1), 115.71(1), 71.32(0), 70.24(1), 69.99(1), 59.68(1), 50.40(0), 44.08(2), 41.40(2), 38.37(2), 35.96(2), 35.80(2), 32.93(2), 29.48(3), 29.31(2), 28.71(2), 23.71(2), 22.50(2), 21.56(3), 21.51(0), 21.44(3), 18.01(3), 12.93(2), 10.53(2); MS HRES C31H46O5の計算値  M+Na 521.3237、実測値  M+Na 521.3233
【０１９１】
（合成例１８）１，３−ジ−Ｏ−アセチル−１−α，２５−ヒドロキシ−１６−エン−２０−シクロプロピル−コレカルシフェロール（２１）の合成
【化７０】
2007525533.tif 000072
【０１９２】
１−α，２５−ジヒドロキシ−１６−エン−２０−シクロプロピル−コレカルシフェロール（100mg、0.23mmol）のピリジン（３ｍＬ）溶液に、０℃で無水酢酸（0.5mL、5.3mmol）を添加した。混合物を、２時間攪拌し、次いでさらに１５時間冷蔵した。水（10mL）を添加し、１５分間攪拌した後、反応混合物をAcOEt：ヘキサン１：１（25mL）で抽出し、水（４回×25mL）、食塩水（20mL）で洗浄し、Na2SO4で乾燥した。溶媒を蒸発させた後の残渣（150mg）を、ＦＣ（１５ｇ、ヘキサン中３０％AcOEt）によって精製して、表題化合物（２１）（92mg、0.18mmol、７８％）を得た。[α]30D=-14.9 c 0.37，EtOH；ＵＶ λmax（EtOH）：208nm（ε 15949），265nm（ε 15745）；1H NMR (CDCl3): 6.34 (1H, d, J=11.3 Hz), 5.99 (1H, d, J=11.3 Hz),  , 5.47 (1H, m), 5.33 (1H, m), 5.31 (1H, s), 5.18 (1H, m), 5.04 (1H, s), 2.78 (1H, m), 2.64 (1H, m), 2.40-1.10 (18H, m), 2.05 (3H, s), 2.01 (3H, s), 1.18 (6H, s), 0.76 (3H, s ),0.66-0.24 (4H, m); 13C NMR (CDCl3): 170.76(0), 170.22(0), 157.18(0), 143.02(0), 142.40(0), 131.94(0), 125.31(1), 125.10(1), 117.40(1), 115.22(2), 72.97(1), 71.32(0), 69.65(1), 59.71(1), 50.57(0), 44.07(2), 41.73(2), 38.36(2), 37.10(2), 35.80(2), 29.45(3), 29.35(2), 29.25(3), 28.92(2), 23.80(2), 22.48(2), 21.55(3), 21.50(3), 21.35(0), 17.90(3), 12.92(2), 10.54(2); MS HRES C32H46O5の計算値  M+Na  533.3237、実測値  M+Na 533.3236
【０１９３】
（合成例１９）１，３−ジ−Ｏ−アセチル−１，２５−ジヒドロキシ−２３−イン−コレカルシフェロール（２２）の合成
【化７１】
2007525533.tif 000073
【０１９４】
0.2007g（0.486mmol）を２ｍＬのピリジンに溶解した。この溶液を、氷浴中で冷却し、0.6mLの無水酢酸を添加した。溶液を、氷浴中で４５時間維持し、次いで10mLの水で希釈し、１０分間攪拌し、10mLの水及び40mLの酢酸エチルで平衡にした。有機層を、４回×20mLの水、10mLの食塩水で洗浄し、乾燥し（硫酸ナトリウム）、蒸発させた。茶色油状残渣を１：１９、１：９、及び１：４の酢酸エチル−ヘキサンのステップワイズグラジエントを使用したフラッシュクロマトグラフィーにかけた。Rf0.16の主要帯（ＴＬＣ  １：４の酢酸エステル−ヘキサン）を蒸発させて、無色フォームの１，３−ジ−Ｏ−アセチル−１，２５−ジヒドロキシ−２３−イン−コレカルシフェロール（２２）0.0939gを得た。
【０１９５】
（合成例２０）（３ａＲ，４Ｓ，７ａＲ）−７ａ−メチル−１−［１−（４−ヒドロキシ−４−メチル−ペント−２−イニル）−シクロプロピル］−３ａ，４，５，６，７，７ａ−ヘキサヒドロ−３Ｈ−インデン−４−オールの合成
【化７２】
2007525533.tif 000074
【０１９６】
攪拌された（３ａＲ，４Ｓ，７ａＲ）−１−｛１−［４−（tert−ブチル−ジメチル−シラニルオキシ）−７ａ−メチル−３ａ，４，５，６，７，７ａ−ヘキサヒドロ−３Ｈ−インデン−１−イル］）−シクロプロピル｝−エチニル（１．０ｇ、2.90mmol）のテトラヒドロフラン（15mL）溶液に、−７８℃でn-BuLi（2.72mL、4.35mmol、ヘキサン中１．６Ｍ）を添加した。−７８℃で１時間拡販した後、アセトン（2.5mL、34.6mmol）を添加し、攪拌を２．５時間継続した。NH4Cl水溶液（15mL）を添加し、混合物を、室温で１５分間攪拌し、次いでAcOEt（２回×50mL）で抽出した。合わせた抽出物を、食塩水（50mL）で洗浄し、Na2SO4で乾燥した。溶媒を蒸発させた後の残渣（２．４ｇ）を、ＦＣ（５０ｇ、ヘキサン中１０％AcOEt）によって精製して、（３ａＲ，４Ｓ，７ａＲ）−５−｛１−［４−（tert−ブチル−ジメチル−シラニルオキシ）−７ａ−メチル−３ａ，４，５，６，７，７ａ−ヘキサヒドロ−３Ｈ−インデン−１−イル］−シクロプロピル｝−２−メチル−ペント−３−イン−２−オール（1.05g、2.61mmol）を得、フッ化テトラブチルアンモニウム（６ｍＬ、6mmol、ＴＨＦ中１．０Ｍ）で処理し、６５〜７５℃で４８時間攪拌した。混合物をAcOEt（25mL）で希釈し、水（５×25mL）、食塩水（25mL）で洗浄した。合わせた水性洗液をAcOEt（25mL）で抽出し、合わせた有機抽出物をNa2SO4で乾燥した。溶媒を蒸発させた後の残渣（１．１ｇ）を、ＦＣ（５０ｇ、ヘキサン中２０％AcOEt）によって精製して、表題化合物（0.75g、2.59mmol、９０％）を得た。[α]30D=+2.7 c 0.75，CHCl3。1H NMR (CDCl3): 5.50 (1H, m), 4.18 (1H, m), 2.40 (2H, s), 2.35-1.16 (11H, m), 1.48 (6H, s), 1.20 (3H, s), 0.76-0.50 (4H, m); 13C NMR (CDCl3): 156.39, 125.26, 86.39, 80.19, 69.21, 65.16, 55.14, 46.94, 35.79, 33.60, 31.67, 29.91, 27.22, 19.32, 19.19, 17.73, 10.94, 10.37; MS HREI  C22H28O2の計算値  M+  288.2089、実測値  M+ 288.2091。
【０１９７】
（合成例２１）（３ａＲ，４Ｓ，７ａＲ）−７ａ−メチル−１−［１−（４−ヒドロキシ−４−メチル−ペント−２Ｚ−エンイル）−シクロプロピル］−３ａ，４，５，６，７，７ａ−ヘキサヒドロ−３Ｈ−インデン−４−オールの合成
【化７３】
2007525533.tif 000075
【０１９８】
（３ａＲ，４Ｓ，７ａＲ）−７ａ−メチル−１−［１−（−４−ヒドロキシ−４−メチル−ペント−２−イニル）−シクロプロピル］−３ａ，４，５，６，７，７ａ−ヘキサヒドロ−３Ｈ−インデン−４−オール（0.72g、2.50mmol）、酢酸エチル（10mL）、ヘキサン（24mL）、無水エタノール（0.9mL）、キノリン（４７  Ｌ）、及びリンドラー触媒（156mg、CaCO3担持５％Ｐｄ）の混合物を室温で２時間水素化した。反応混合物をセライトパッドに通して濾過し、パッドをAcOEtで洗浄した。濾液及び洗液を合わせ、１Ｍ  ＨＣｌ、NaHCO3、及び食塩水で洗浄した。Na2SO4で乾燥した後、溶媒を蒸発させ、残渣（0.79g）を、ＦＣ（４５ｇ、ヘキサン中２０％AcOEt）によって精製して、表題化合物（640mg、2.2mmol、８８％）を得た。
【０１９９】
（合成例２２）（３ａＲ，４Ｓ，７ａＲ）−７ａ−メチル−１−［１−（４−ヒドロキシ−４−メチル−ペンチル）−シクロプロピル］−３ａ，４，５，６，７，７ａ−ヘキサヒドロ−３Ｈ−インデン−４−オールの合成
【化７４】
2007525533.tif 000076
【０２００】
（３ａＲ，４Ｓ，７ａＲ）−７ａ−メチル−１−［１−（４−ヒドロキシ−４−メチル−ペント−２Ｚ−エンイル）−シクロプロピル］−３ａ，４，５，６，７，７ａ−ヘキサヒドロ−３Ｈ−インデン−４−オール（100mg、0.34mmol）、１，４−ビス（ジフェニル−ホスフィノ）ブタン１，５シクロオクタジエンロジウムテトラフルオロボラート（25mg、0.034mmol）、ジクロロメタン（５ｍＬ）、水銀１滴の混合物を、Ｐａａｒ機器を使用して、室温、圧力５０ｐ．ｓ．ｉ．で３時間水素化した。反応混合物を、セライトパッドに通して濾過し、次いで酢酸エチルで洗浄した。合わせた濾液及び洗液を、蒸発乾固し（110mg）、ＦＣ（１０ｇ、ヘキサン中２０％AcOEt）によって精製して、表題化合物（75mg、0.26mmol、７５％）を得た。[α]30D=-8.5 c 0.65，CHCl3。1H NMR (CDCl3): 5.37 (1H, m,), 4.14 (1H, m), 2.37-1.16 (17H, m), 1.19 (6H, s), 1.18 (3H, s), 0.66-0.24 (4H, m); MS HREI C19H32O2の計算値  M+H 292.2402、実測値  M+H 292.2404。
【０２０１】
（合成例２３）（３ａＲ，７ａＲ）−７ａ−メチル−１−［１−（４−メチル−４−トリメチルシラニルオキシ−ペンチル）−シクロプロピル］−３ａ，４，５，６，７，７ａ−ヘキサヒドロ−３Ｈ−インデン−４−オンの合成
【化７５】
2007525533.tif 000077
【０２０２】
攪拌された（３ａＲ，４Ｓ，７ａＲ）−７ａ−メチル−１−［１−（４−ヒドロキシ−４−メチル−ペンテニル）−シクロプロピル］−３ａ，４，５，６，７，７ａ−ヘキサヒドロ−３Ｈ−インデン−４−オール（440mg、1.50mmol）及びセライト（２．０ｇ）のジクロロメタン（10mL）懸濁液に、室温で重クロム酸ピリジニウム（1.13g、3.0mmol）を添加した。得られた混合物を、５時間攪拌し、シリカゲル（１０ｇ）に通して濾過し、次いでシリカゲルパッドを、ヘキサン中２０％AcOEtで洗浄した。合わせた濾液及び洗液を蒸発させて、粗（３ａＲ，７ａＲ）−７ａ−メチル−１−［１−（４−ヒドロキシ−４−メチル−ペンテニル）−シクロプロピル］−３ａ，４，５，６，７，７ａ−ヘキサヒドロ−３Ｈ−インデン−４−オン（426mg、1.47mmol、９８％）を得た。攪拌された（３ａＲ，７ａＲ）−７ａ−メチル−１−［１−（４−ヒドロキシ−４−メチル−ペンテニル）−シクロプロピル］−３ａ，４，５，６，７，７ａ−ヘキサヒドロ−３Ｈ−インデン−４−オン（424mg、1.47mmol）のジクロロメタン（10mL）溶液に、室温でトリメチルシリル−イミダゾール（0.44mL、3.0mmol）を添加した。得られた混合物を、１．０時間攪拌し、シリカゲル（１０ｇ）に通して濾過し、シリカゲルパッドを、ヘキサン中１０％AcOEtで洗浄した。合わせた濾液及び洗液を蒸発させて、表題化合物（460mg、1.27mmol、８６％）を得た。[α]29D=-9.9 c 0.55，CHCl3。1H NMR (CDCl3): 5.33 (1H, dd, J=3.2, 1.5 Hz), 2.81 (1H, dd, J= 10.7, 6.2 Hz), 2.44 (1H, ddd, J=15.6, 10.7, 1.5 Hz), 2.30-1.15 (13H, m) 重複  2.03 ( ddd, J= 15.8, 6.4, 3.2 Hz), 1.18 (6H, s), 0.92 (3H, s), 0.66-0.28 (4H, m), 0.08 (9H, s); 13C NMR (CDCl3): 211.08 (0), 155.32(0), 124.77(1), 73.98(0), 64.32(1), 53.91(0), 44.70(2), 40.45(2), 38.12(2), 34.70(2), 29.86(3), 29.80(3), 26.80(2), 24.07(2), 22.28(2), 21.24(0), 18.35(3), 12.60(2), 10.64(2), 2.63 (3); MS HRES C22H38O2Siの計算値  M+ 362.2641。実測値  M+ 362.2648。
【０２０３】
（合成例２４）（３ａＲ，７ａＲ）−７ａ−メチル−１−［１−（４−メチル−４−トリメチルシラニルオキシ−ペント−２−イニル）−シクロプロピル］−３ａ，４，５，６，７，７ａ−ヘキサヒドロ−３Ｈ−インデン−４−オンの合成
【化７６】
2007525533.tif 000078
【０２０４】
攪拌された（３ａＲ，４Ｓ，７ａＲ）−７ａ−メチル−１−［１−（４−ヒドロキシ−４−メチル−ペント−２−イニル）−シクロプロピル］−３ａ，４，５，６，７，７ａ−ヘキサヒドロ−３Ｈ−インデン−４−オール（381mg、1.32mmol）及びセライト（２．０ｇ）のジクロロメタン（10mL）懸濁液に、室温で重クロム酸ピリジニウム（１．０ｇ、2.65mmol）を添加した。得られた混合物を、１．５時間攪拌し、シリカゲル（１０ｇ）に通して濾過し、次いでシリカゲルパッドを、ヘキサン中２０％AcOEtで洗浄した。合わせた濾液及び洗液を蒸発させて、粗（３ａＲ，７ａＲ）−７ａ−メチル−１−［１−（４−ヒドロキシ−４−メチル−ペント−２−イニル）−シクロプロピル］−３ａ，４，５，６，７，７ａ−ヘキサヒドロ−３Ｈ−インデン−４−オン（360mg、1.26mmol、９５％）を得た。攪拌された（３ａＲ，７ａＲ）−７ａ−メチル−１−［１−（４−ヒドロキシ−４−メチル−ペント−２−イニル）−シクロプロピル］−３ａ，４，５，６，７，７ａ−ヘキサヒドロ−３Ｈ−インデン−４−オン（360mg、1.26mmol）のジクロロメタン（10mL）溶液に、室温でトリメチルシリル−イミダゾール（0.25mL、1.7mmol）を添加した。得られた混合物を、０．５時間攪拌し、シリカゲル（１０ｇ）に通して濾過し、シリカゲルパッドを、ヘキサン中５％AcOEtで洗浄した。合わせた濾液及び洗液を蒸発させて、表題化合物（382mg、1.07mmol、８１％）を得た。
【０２０５】
（合成例２５）１−α，２５−ジヒドロキシ−１６−エン−２０−シクロプロピル−２３，２４−イン−コレカルシフェロール（２３）の合成
【化７７】
2007525533.tif 000079
【０２０６】
攪拌された（１Ｓ，５Ｒ）−１，５−ビス−（（tert−ブチルジメチル）シラニルオキシ）−３−［２−（ジフェニルホスフィノイル）−エタ−（Ｚ）−イリデン］−２−メチレン−シクロヘキサン（513mg、0.88mmol）のテトラヒドロフラン（６ｍＬ）溶液に、−７８℃でn-BuLi（0.55mL、0.88mmol）を添加した。得られた混合物を、１５分間攪拌し、（３ａＲ，７ａＲ）−７ａ−メチル−１−［１−（４−メチル−４−トリメチルシラニルオキシ−ペント−２−イニル）−シクロプロピル］−３ａ，４，５，６，７，７ａ−ヘキサヒドロ−３Ｈ−インデン−４−オン（179mg、0.50mmol）のテトラヒドロフラン（２ｍＬ）溶液を滴下した。反応混合物を−７２℃で３．５時間攪拌し、ヘキサン（25mL）で希釈し、食塩水（30mL）で洗浄し、Na2SO4で乾燥した。溶媒を蒸発させた後の残渣（716mg）を、ＦＣ（１５ｇ、ヘキサン中５％AcOEt）によって精製して、１−α，３−β−ジ（tert−ブチル−ジメチル−シラニルオキシ）−２５−トリメチルシラニルオキシ−１６−エン−２０−シクロプロピル−２３，２４−イン−コレカルシフェロール（324mg、045mmol）を得た。１−α，３−β−ジ（tert−ブチル−ジメチル−シラニルオキシ）−２５−トリメチルシラニルオキシ−１６−エン−２０−シクロプロピル−２３，２４−イン−コレカルシフェロール（322mg、0.45mmol）に、室温でフッ化テトラブチルアンモニウム（４ｍＬ、4mmol、１Ｍ  ＴＨＦ溶液）を添加した。混合物を、１８時間攪拌し、AcOEt（25mL）で希釈し、水（５回×20mL）、食塩水（20mL）で洗浄し、Na2SO4で乾燥した。溶媒を蒸発させた後の残渣（280mg）を、ＦＣ（１０ｇ、ヘキサン中５０％AcOEt、及びAcOEt）によって精製して、表題化合物（２３）（172mg、0.41mmol、８２％）を得た。[α]31D=+32.4 c 0.50，MeOH。ＵＶ λmax（EtOH）：261nm（ε 11930）；1H NMR (CDCl3): 6.36 (1H, d, J=11.3 Hz), 6.09 (1H, d, J=11.3 Hz),   5.45(1H, m), 5.33 (1H, m), 5.01 (1H, s), 4.45 (1H, m), 4.22 (1H, m), 2.80 (1H, m), 2.60 (1H, m), 2.50-1.10 (16H, m), 1.45 (6H, s), 0.81 (3H, s ),0.72-0.50 (4H, m); MS HRES C28H38O3の計算値  M+ 422.2821、実測値  M+ 422.2854。
【０２０７】
（合成例２６）１−α，２５−ジヒドロキシ−１６−エン−２０−シクロプロピル−２３，２４−イン−１９−ノル−コレカルシフェロール（２４）の合成
【化７８】
2007525533.tif 000080
【０２０８】
攪拌された（１Ｒ，３Ｒ）−１，３−ビス−（（tert−ブチルジメチル）シラニルオキシ）−５−［２−（ジフェニルホスフィノイル）エチリデン］−シクロヘキサン（674mg、1.18mmol）のテトラヒドロフラン（８ｍＬ）溶液に、−７８℃でｎ−BuLi（0.74mL、1.18mmol）を添加した。得られた混合物を、１５分間攪拌し、（３ａＲ，７ａＲ）−７ａ−メチル−１−［１−（４−メチル−４−トリメチルシラニルオキシ−ペント−２−イニル）−シクロプロピル］−３ａ，４，５，６，７，７ａ−ヘキサヒドロ−３Ｈ−インデン−４−オン（235mg、0.66mmol）のテトラヒドロフラン（３ｍＬ）溶液を滴下した。反応混合物を−７２℃で３．５時間攪拌し、ヘキサン（25mL）で希釈し、食塩水（30mL）で洗浄し、Na2SO4で乾燥した。溶媒を蒸発させた後の残渣（850mg）を、ＦＣ（１５ｇ、ヘキサン中５％AcOEt）によって精製して、１−α，３−β−ジ（tert−ブチル−ジメチル−シラニルオキシ）−２５−トリメチルシラニルオキシ−１６−エン−２０−シクロプロピル−２３，２４−イン−１９−ノル−コレカルシフェロール（330mg、0.46mmol）を得た。１−α，３−β−ジ（tert−ブチル−ジメチル−シラニルオキシ）−２５−トリメチルシラニルオキシ−１６−エン−２０−シクロプロピル−２３，２４−イン−１９−ノル−コレカルシフェロール（328mg、0.46mmol）に、室温でフッ化テトラブチルアンモニウム（５ｍＬ、5mmol、１Ｍ  ＴＨＦ溶液）を添加した。混合物を、６２時間攪拌し、AcOEt（25mL）で希釈し、水（５回×20mL）、食塩水（20mL）で洗浄し、Na2SO4で乾燥した。溶媒を蒸発させた後の残渣（410mg）を、ＦＣ（１０ｇ、ヘキサン中５０％AcOEt、及びAcOEt）によって精製して、表題化合物（２４）（183mg、0.45mmol、６８％）を得た。[α]29D=+72.1 c 0.58，MeOH。ＵＶ λmax（EtOH）：242nm（ε 29286），251nm（ε 34518），260nm（ε 23875）；1H NMR (CDCl3): 6.30 (1H, d, J=11.3 Hz), 5.94 (1H, d, J=11.3 Hz),  5.48 (1H, m), 4.14 (1H, m), 4.07 (1H, m), 2.78 (2H, m), 2.52-1.10 (18H, m), 1.49( 6H, s), 0.81 (3H, s ),0.72-0.50 (4H, m); MS HRES C27H38O3の計算値  M+  410.2821、実測値  M+ 410.2823。
【０２０９】
（合成例２７）（３ａＲ，４Ｓ，７ａＲ）−７ａ−メチル−１−［１−（５，５，５−トリフルオロ−４−ヒドロキシ−４−トリフルオロメチル−ペント−２−イニル）−シクロプロピル］−３ａ，４，５，６，７，７ａ−ヘキサヒドロ−３Ｈ−インデン−４−オールの合成
【化７９】
2007525533.tif 000081
【０２１０】
攪拌された（３ａＲ，４Ｓ，７ａＲ）−１−｛１−［４−（tert−ブチル−ジメチル−シラニルオキシ）−７ａ−メチル−３ａ，４，５，６，７，７ａ−ヘキサヒドロ−３Ｈ−インデン−１−イル］）−シクロプロピル｝−エチニル（1.95g、5.66mmol）のテトラヒドロフラン（35mL）溶液に、−７８℃でｎ−BuLi（4.3mL、6.88mmol、ヘキサン中１．６Ｍ）を添加した。−７８℃で１時間攪拌した後、ヘキサフルオロアセトン（冷却フィンガーから６滴）を添加し、攪拌を１時間継続した。NH4Cl水溶液を添加し（10mL）、混合物を放置して室温にまで温めた。反応混合物を食塩水（100mL）で希釈し、ヘキサン（２×125mL）で抽出した。合わせた抽出物をNa2SO4で乾燥した。溶媒を蒸発させた後の残渣（８．２ｇ）を、ＦＣ（150g、ヘキサン中１０％AcOEt）によって精製して、（３ａＲ，４Ｓ，７ａＲ）−５−｛１−［４−（tert−ブチル−ジメチル−シラニルオキシ）−７ａ−メチル−３ａ，４，５，６，７，７ａ−ヘキサヒドロ−３Ｈ−インデン−１−イル］−シクロプロピル｝−１，１，１−トリフルオロ−２−トリフルオロメチル−ペント−３−イン−２−オール（２．７３ｇ，5.35mmol）を得、フッ化テトラブチルアンモニウム（20mL、20mmol、ＴＨＦ中１．０Ｍ）で処理し、６５〜７５℃で３０時間攪拌した。混合物をAcOEt（150mL）で希釈し、水（５×150mL）、食塩水（150mL）で洗浄した。合わせた水性洗液をAcOEt（150mL）で抽出し、合わせた有機抽出物をNa2SO4で乾燥した。溶媒を蒸発させた後の残渣（３．２ｇ）を、ＦＣ（150g、ヘキサン中２０％AcOEt）によって精製して、表題化合物（2.05g、5.17mmol、９７％）を得た。[α]28D=+6.0 c 0.47，CHCl3。1H NMR (CDCl3): 5.50 (1H, br. s), 4.16 (1H, br. s), 3.91 (1H, s), 2.48 (1H, AB四重線のうちのA部分, J=17.5 Hz), 2.43 (1H, AB四重線のうちのB部分, J=17.5Hz), 2.27 (1H, m), 2.00-1.40 (9H, m), 1.18 (3H, s), 0.8-0.5 (4H, m); 13C NMR (CDCl3): 155.26(0), 126.68(1), 121.32(0, q, J=284 Hz), 90.24 (0), 71.44(0, sep. J=34Hz), 70.54 (0), 69.57(1), 55.17(1), 47.17(0), 36.05(2), 33.63(2), 30.10(2), 27.94(2), 19.50(3), 19.27(0), 17.90(2), 11.56(2), 11.21(2); MS HREI C19H22O2F6の計算値  M+ 396.1524、実測値  M+ 396.1513。
【０２１１】
（合成例２８）（３ａＲ，７ａＲ）−７ａ−メチル−１−［１−（５，５，５−トリフルオロ−４−トリフルオロメチル−４−ヒドロキシ−ペン−２−イニル）−シクロプロピル］−３ａ，４，５，６，７，７ａ−ヘキサヒドロ−３Ｈ−インデン−４−オンの合成
【化８０】
2007525533.tif 000082
【０２１２】
攪拌された（３ａＲ，４Ｓ，７ａＲ）−７ａ−メチル−１−［１−（５，５，５−トリフルオロ−４−ヒドロキシ−４−トリフルオロメチル−ペント−２−イニル）−シクロプロピル］−３ａ，４，５，６，７，７ａ−ヘキサヒドロ−３Ｈ−インデン−４−オール（504mg、1.27mol）及びセライト（１．５ｇ）のジクロロメタン（12mL）懸濁液に、室温で重クロム酸ピリジニウム（0.98g、2.6mmol）を添加した。得られた混合物を、２．５時間攪拌し、シリカゲル（５ｇ）に通して濾過し、次いでシリカゲルパッドを、ヘキサン中２０％AcOEtで洗浄した。合わせた濾液及び洗液を蒸発させて、表題化合物（424mg、1.08mmol、８５％）を得た。[α]28D=+3.1 c 0.55，CHCl3。1H NMR (CDCl3): 5.46 (1H, br. s), 3.537 (1H, s), 2.81 (1H, dd, J=10.7, 6.5 Hz), 2.49-1.76 (10H, m), 0.90 (3H, s), 0.77-0.53 (4H, m); MS HREI C19H20O2F6の計算値  M+H 395.1440、実測値  M+H 395.1443。
【０２１３】
（合成例２９）１−α，２５−ジヒドロキシ−１６−エン−２０−シクロプロピル−２３，２４−イン−２６，２７−ヘキサフルオロ−１９−ノル−コレカルシフェロール（２５）の合成
【化８１】
2007525533.tif 000083
【０２１４】
攪拌された（１Ｒ，３Ｒ）−１，３−ビス−（（tert−ブチルジメチル）シラニルオキシ）−５−［２−（ジフェニルホスフィノイル）エチリデン］−シクロヘキサン（900mg、1.58mmol）のテトラヒドロフラン（８ｍＬ）溶液に、−７８℃でn-BuLi（1.0mL、1.6mmol）を添加した。得られた混合物を、１５分間攪拌し、（３ａＲ，７ａＲ）−７ａ−メチル−１−［１−（５，５，５−トリフルオロ−４−トリフルオロメチル−４−ヒドロキシ−ペン−２−イニル）−シクロプロピル］−３ａ，４，５，６，７，７ａ−ヘキサヒドロ−３Ｈ−インデン−４−オン（200mg、0.51mmol）のテトラヒドロフラン（３ｍＬ）溶液を滴下した。反応混合物を−７２℃で３．５時間攪拌し、ヘキサン（25mL）で希釈し、食塩水（30mL）で洗浄し、Na2SO4で乾燥した。溶媒を蒸発させた後の残渣（850mg）を、ＦＣ（２０ｇ、ヘキサン中１０％AcOEt）によって精製して、１−α，３−β−ジ（tert−ブチル−ジメチル−シラニルオキシ）−２５−ヒドロキシ−１６−エン−２０−シクロプロピル−２３，２４−イン−２６，２７−ヘキサフルオロ−１９−ノル−コレカルシフェロール（327mg、0.44mmol、８６％）を得た。１−α，３−β−ジ（tert−ブチル−ジメチル−シラニルオキシ）−２５−ヒドロキシ−１６−エン−２０−シクロプロピル−２３，２４−イン−２６，２７−ヘキサフルオロ−１９−ノル−コレカルシフェロール（327mg、0.44mmol）に、室温でフッ化テトラブチルアンモニウム（４ｍＬ、4mmol、１Ｍ  ＴＨＦ溶液）を添加した。混合物を２４時間攪拌した。AcOEt（25mL）で希釈し、水（５回×20mL）、食塩水（20mL）で洗浄し、Na2SO4で乾燥した。溶媒を蒸発させた後の残渣（250mg）を、ＦＣ（１０ｇ、ヘキサン中５０％AcOEt、及びAcOEt）によって精製して、表題化合物（２５）（183mg、0.45mmol、６８％）を得た。[α]30D=+73.3 c 0.51，EtOH。ＵＶ λmax（EtOH）：243nm（ε 29384），251nm（ε 34973），260nm（ε 23924）；1H NMR (CDCl3): 6.29 (1H, d, J=11.1 Hz), 5.93 (1H, d, J=11.1 Hz),  5.50 (1H, m), 4.12 (1H, m), 4.05 (1H, m), 2.76 (2H, m), 2.55-1.52 (18H, m), 0.80 (3H, s ),0.80-0.49 (4H, m);  13C NMR (CDCl3): 155.24(0), 141.78(0), 131.28(0), 126.23(1), 123.65(1), 121.09(0, q, J=285Hz), 115.67(1), 89.63(0), 70.42(0), 67.48(1), 67.29(1), 59.19(1), 49.87(0), 44.49(2), 41.98(2), 37.14(2), 35.76(2), 29.22(2), 28.47(2), 27.57(2), 23.46(2), 19.32(0), 17.97(3), 11.89(2), 10.18(2); MS HRES C27H32O3F6の計算値  M+H  519.2329。実測値  M+H  519.2325。
【０２１５】
（合成例３０）１−α，２５−ジヒドロキシ−１６−エン−２０−シクロプロピル−２３，２４−イン−２６，２７ヘキサフルオロ−コレカルシフェロール（２６）の合成
【化８２】
2007525533.tif 000084
【０２１６】
攪拌された（１Ｓ，５Ｒ）−１，５−ビス−（（tert−ブチルジメチル）シラニルオキシ）−３−［２−（ジフェニルホスフィノイル）−エタ−（Ｚ）−イリデン］−２−メチレン−シクロヘキサン（921mg、1.58mmol）のテトラヒドロフラン（８ｍＬ）溶液に、−７８℃でn-BuLi（1.0mL、1.6mmol）を添加した。得られた混合物を、１５分間攪拌し、（３ａＲ，７ａＲ）−７ａ−メチル−１−［１−（５，５，５−トリフルオロ−４−トリフルオロメチル−４−ヒドロキシ−ペン−２−イニル）−シクロプロピル］−３ａ，４，５，６，７，７ａ−ヘキサヒドロ−３Ｈ−インデン−４−オン（197mg、0.50mmol）のテトラヒドロフラン（２ｍＬ）溶液を滴下した。反応混合物を−７２℃で３．５時間攪拌し、ヘキサン（25mL）で希釈し、食塩水（30mL）で洗浄し、Na2SO4で乾燥した。溶媒を蒸発させた後の残渣（876mg）を、ＦＣ（２０ｇ、ヘキサン中１０５％AcOEt）によって精製して、１−α，３−β−ジ（tert−ブチル−ジメチル−シラニルオキシ）−２５−ヒドロキシ−１６−エン−２０−シクロプロピル−２３，２４−イン−２６，２７−ヘキサフルオロ−コレカルシフェロール（356mg、0.47mmol）を得た。１−α，３−β−ジ（tert−ブチル−ジメチル−シラニルオキシ）−２５−ヒドロキシ−１６−エン−２０−シクロプロピル−２３，２４−イン−２６，２７−ヘキサフルオロ−コレカルシフェロール（356mg、0.47mmol）に、室温でフッ化テトラブチルアンモニウム（５ｍＬ、5mmol、１Ｍ  ＴＨＦ溶液）を添加した。混合物を、１５時間攪拌した。AcOEt（25mL）で希釈し、水（５回×20mL)、食塩水（20mL）で洗浄し、Na2SO4で乾燥した。溶媒を蒸発させた後の残渣（270mg）を、ＦＣ（２０ｇ、ヘキサン中５０％AcOEt、及びAcOEt）によって精製して、表題化合物（２６）（216mg、0.41mmol、８７％）を得た。[α]30D=+40.0 c 0.53，EtOH。ＵＶ λmax（EtOH）：262nm（ε 12919）；1H NMR (CDCl3): 6.38 (1H, d, J=11.5 Hz), 6.10 (1H, d, J=11.1 Hz),  5.49 (1H, m), 5.35 (1H, s), 5.02 (1H, s), 4.45 (1H, m), 4.25 (1H, m), 3.57 (1H, s), 2.83-1.45 (18H, m), 0.82 (3H, s ),0.80-0.51 (4H, m); MS HRES C28H32O3F6の計算値  M+H 531.2329。実測値  M+H 531.2337。
【０２１７】
（合成例３１）（３ａＲ，４Ｓ，７ａＲ）−７ａ−メチル−１−［１−（５，５，５−トリフルオロ−４−ヒドロキシ−４−トリフルオロメチル−ペント−２Ｅ−エンイル）−シクロプロピル］−３ａ，４，５，６，７，７ａ−ヘキサヒドロ−３Ｈ−インデン−４−オールの合成
【化８３】
2007525533.tif 000085
【０２１８】
水素化アルミニウムリチウム（4.5mL、4.5mmol、ＴＨＦ中１．０Ｍ）に、５℃でまず固体ナトリウムメトキシド（245mg、4.6mmol）を添加し、次いで（３ａＲ，４Ｓ，７ａＲ）−７ａ−メチル−１−［１−（５，５，５−トリフルオロ−４−ヒドロキシ−４−トリフルオロメチル−ペント−２−イニル）−シクロプロピル］−３ａ，４，５，６，７，７ａ−ヘキサヒドロ−３Ｈ−インデン−４−オール（360mg、0.91mmol）のテトラヒドロフラン（５ｍＬ）溶液を滴下した。添加が完了した後、混合物を還流下２．５時間攪拌した。次いで、氷浴中で冷却し、水（2.0mL）及び水酸化ナトリウム（2.0mL、２．０Ｍ水溶液）を用いて反応を中止し；エーテル（50mL）で希釈し、３０分間攪拌し、次いでMgSO4（５ｇ）を添加し、攪拌を３０分間継続した。濾液を蒸発させた後の残渣（0.42g）を、ＦＣ（２０ｇ、ヘキサン中２０％AcOEt）によって精製して、表題化合物（315mg、0.79mmol、８７％）を得た。[α]28D=+2.0 c 0.41，CHCl3。1H NMR (CDCl3): 6.24 (1H, dt, J=15.7, 6.7 Hz), 5.60 (1H, d, J=15.7 Hz), 5.38 (1H, br. s), 4.13 (1H, br. s), 3.27 (1H, s), 2.32-1.34 (12H, m), 1.15 (3H, s), 0.80-0.45 (4H, m); 13C NMR (CDCl3): 155.89(0), 138.10(1), 126.21(1), 122.50(0, q, J=287 Hz), 119.15 (1), 76.09(0, sep. J=31Hz), 69.57(1), 55.33(1), 47.30(0), 40.31(2), 36.05(2), 33.71(2), 30.10(2), 20.36(0), 19.46(3), 17.94(2), 11.96(2), 11.46(2); MS REI C19H24O2F6の計算値  M+ 398.1680。実測値  M+ 398.1675。
【０２１９】
（合成例３２）（３ａＲ，７ａＲ）−７ａ−メチル−１−［１−（５，５，５−トリフルオロ−４−トリフルオロメチル−４−トリメチルシラニルオキシ−ペン−２Ｅ−エンイル）−シクロプロピル］−３ａ，４，５，６，７，７ａ−ヘキサヒドロ−３Ｈ−インデン−４−オンの合成
【化８４】
2007525533.tif 000086
【０２２０】
攪拌された（３ａＲ，４Ｓ，７ａＲ）−７ａ−メチル−１−［１−（５，５，５−トリフルオロ−４−ヒドロキシ−４−トリフルオロメチル−ペント−２Ｅ−エンイル）−シクロプロピル］−３ａ，４，５，６，７，７ａ−ヘキサヒドロ−３Ｈ−インデン−４−オール（600mg、1.51mmol）及びセライト（2.0g）のジクロロメタン（10mL）懸濁液に、室温で重クロム酸ピリジニウム（1.13g、3.0mmol）を添加した。得られた混合物を、３．５時間攪拌し、シリカゲル（１０ｇ）に通して濾過し、次いでシリカゲルパッドを、ヘキサン中２５％AcOEtで洗浄した。合わせた濾液及び洗液を蒸発させて、粗（３ａＲ，７ａＲ）−７ａ−メチル−１−［１−（５，５，５−トリフルオロ−４−ヒドロキシ−４−トリフルオロメチル−ペント−２Ｅ−エンイル）−シクロプロピル］−３ａ，４，５，６，７，７ａ−ヘキサヒドロ−３Ｈ−インデン−４−オン（550mg、1.39mmol、９２％）を得た。攪拌された（３ａＲ，７ａＲ）−７ａ−メチル−１−［１−（５，５，５−トリフルオロ−４−ヒドロキシ−４−トリフルオロメチル−ペント−２Ｅ−エンイル）−シクロプロピル］−３ａ，４，５，６，７，７ａ−ヘキサヒドロ−３Ｈ−インデン−４−オン（550mg、1.39mmol）のジクロロメタン（15mL）溶液に、室温でトリメチルシリル−イミダゾール（1.76mL、12.0mmol）を添加した。得られた混合物を、１．０時間攪拌し、シリカゲル（１０ｇ）に通して濾過し、シリカゲルパッドを、ヘキサン中10%AcOEtで洗浄した。合わせた濾液及び洗液を蒸発させて、表題化合物（623mg、1.33mmol、８８％）を得た。[α]28D=-1.6 c 0.51，CHCl3。1H NMR (CDCl3): 6.14 (1H, dt, J=15.5, 6.7 Hz), 5.55 (1H, d, J=15.5 Hz), 5.35 (1H, m), 2.80 (1H, dd, J= 10.7, 6.4 Hz), 2.47-1.74 (10H, m), 0.90 (3H, s), 0.76-0.40 (4H, m), 0.2 (9H, s); 13C NMR (CDCl3): 210.99 (0), 154.28(0), 137.41(1), 126.26(1), 122.59(0, q, J=289 Hz), 120.89 (1), 64.31(1), 53.96(0), 40.60(2), 40.13(2), 35.00(2), 27.03(2), 24.21(2), 20.57(0), 18.53(3), 12.41(2), 10.79(2), 1.65 (3); MS HRES C22H30O2F6Siの計算値  M+H 469.1992。実測値  M+H 469.1995。
【０２２１】
（合成例３３）１−α，２５−ジヒドロキシ−１６−エン−２０−シクロプロピル−２３，２４−Ｅ−エン−２６，２７−ヘキサフルオロ−１９−ノル−コレカルシフェロール（２７）の合成
【化８５】
2007525533.tif 000087
【０２２２】
攪拌された（１Ｒ，３Ｒ）−１，３−ビス−（（tert−ブチルジメチル）シラニルオキシ）−５−［２−（ジフェニルホスフィノイル）エチリデン］−シクロヘキサン（514mg、0.90mmol）のテトラヒドロフラン（６ｍＬ）溶液に、−７８℃でn-BuLi（0.57mL、0.91mmol）を添加した。得られた混合物を、１５分間攪拌し、（３ａＲ，７ａＲ）−７ａ−メチル−１−［１−（５，５，５−トリフルオロ−４−トリフルオロメチル−４−トリメチルシラニルオキシ−ペント−２Ｅ−エンイル）−シクロプロピル］−３ａ，４，５，６，７，７ａ−ヘキサヒドロ−３Ｈ−インデン−４−オン（200mg、0.43mmol）のテトラヒドロフラン（２ｍＬ）溶液を滴下した。反応混合物を−７２℃で３．５時間攪拌し、ヘキサン（35mL）で希釈し、食塩水（30mL）で洗浄し、Na2SO4で乾燥した。溶媒を蒸発させた後の残渣（750mg）を、ＦＣ（１５ｇ、ヘキサン中5%AcOEt）によって精製して、１−α，３−β−ジ（tert−ブチル−ジメチル−シラニルオキシ）−２５−トリメチルシラニルオキシ−１６−エン−２０−シクロプロピル−２３，２４−Ｅ−エン−２６，２７−ヘキサフルオロ−１９−ノル−コレカルシフェロール及び１−α，３−β−ジ（tert−ブチル−ジメチル−シラニルオキシ）−２５−ヒドロキシ−１６−エン−２０−シクロプロピル−２３，２４−Ｅ−エン−２６，２７−ヘキサフルオロ−１９−ノル−コレカルシフェロール（250mg）の混合物を得た。１−α，３−β−ジ（tert−ブチル−ジメチル−シラニルオキシ）−２５−トリメチルシラニルオキシ−１６−エン−２０−シクロプロピル−２３，２４−Ｅ−エン−２６，２７−ヘキサフルオロ−１９−ノル−コレカルシフェロール及び１−α，３−β−ジ（tert−ブチル−ジメチル−シラニルオキシ）−２５−ヒドロキシ−１６−エン−２０−シクロプロピル−２３，２４−Ｅ−エン−２６，２７−ヘキサフルオロ−１９−ノル−コレカルシフェロール（250mg）の混合物に、室温でフッ化テトラブチルアンモニウム（４ｍＬ、4mmol、１Ｍ  ＴＨＦ溶液）を添加した。混合物を、２４時間攪拌した。AcOEt（25mL）で希釈し、水（５回×20mL）、食塩水（20mL）で洗浄し、Na2SO4で乾燥した。溶媒を蒸発させた後の残渣（270mg）を、ＦＣ（１０ｇ、ヘキサン中50%AcOEt、及びAcOEt）によって精製して、表題化合物（２７）（157mg、0.30mmol、７０％）を得た。[α]30D=+63.3 c 0.45，EtOH。ＵＶ λmax（EtOH）：243nm（ε 30821），251nm（ε 36064），260nm（ε 24678）；1H NMR (CDCl3): 6.29 (1H, d, J=11.3 Hz), 6.24 (1H, dt, J=15.9, 6.4Hz), 5.92 (1H, d, J=11.1 Hz),  5.61 (1H, d, J=15.7Hz), 5.38 (1H, m), 4.13 (1H, m), 4.05 (1H, m), 2.88 (1H, s), 2.82-1.34 (19H, m), 0.770 (3H, s ),0.80-0.36 (4H, m); MS HRES C27H34O3F6の計算値  M+H 521.2485。実測値  M+H 521.2489。
【０２２３】
（合成例３４）１−α，２５−ジヒドロキシ−１６−エン−２０−シクロプロピル−２３，２４−Ｅ−エン−２６，２７−ヘキサフルオロ−コレカルシフェロール（２８）の合成
【化８６】
2007525533.tif 000088
【０２２４】
攪拌された（１Ｓ，５Ｒ）−１，５−ビス−（（tert−ブチルジメチル）シラニルオキシ）−３−［２−（ジフェニルホスフィノイル）−エタ−（Ｚ）−イリデン］−２−メチレン−シクロヘキサン（525mg、0.90mmol）のテトラヒドロフラン（６ｍＬ）溶液に、−７８℃でn-BuLi（0.57mL、0.91mmol）を添加した。得られた混合物を、１５分間攪拌し、（３ａＲ，７ａＲ）−７ａ−メチル−１−［１−（５，５，５−トリフルオロ−４−トリフルオロメチル−４−トリメチルシラニルオキシ−ペント−２Ｅ−エンイル）−シクロプロピル］−３ａ，４，５，６，７，７ａ−ヘキサヒドロ−３Ｈ−インデン−４−オン（200mg、0.43mmol）のテトラヒドロフラン（２ｍＬ）溶液を滴下した。反応混合物を−７２℃で２．５時間攪拌し、ヘキサン（35mL）で希釈し、食塩水（30mL）で洗浄し、Na2SO4で乾燥した。溶媒を蒸発させた後の残渣（760mg）を、ＦＣ（１５ｇ、ヘキサン中10%AcOEt）によって精製して、１−α，３−β−ジ（tert−ブチル−ジメチル−シラニルオキシ）−２５−トリメチルシラニルオキシ−１６−エン−２０−シクロプロピル−２３，２４−Ｅ−エン−２６，２７−ヘキサフルオロ−コレカルシフェロール及び１−α，３−β−ジ（tert−ブチル−ジメチル−シラニルオキシ）−２５−ヒドロキシ−１６−エン−２０−シクロプロピル−２３，２４−Ｅ−エン−２６，２７−ヘキサフルオロ−コレカルシフェロール（274mg）の混合物を得た。１−α，３−β−ジ（tert−ブチル−ジメチル−シラニルオキシ）−２５−トリメチルシラニルオキシ−１６−エン−２０−シクロプロピル−２３，２４−Ｅ−エン−２６，２７−ヘキサフルオロ−コレカルシフェロール及び１−α，３−β−ジ（tert−ブチル−ジメチル−シラニルオキシ）−２５−ヒドロキシ−１６−エン−２０−シクロプロピル−２３，２４−Ｅ−エン−２６，２７−ヘキサフルオロ−コレカルシフェロール（274mg）の混合物に、室温でフッ化テトラブチルアンモニウム（４ｍＬ、4mmol、１Ｍ  ＴＨＦ溶液）を添加した。混合物を、１５時間攪拌し、AcOEt（25mL）で希釈し、水（５回×20mL）、食塩水（20mL）で洗浄し、Na2SO4で乾燥した。溶媒を蒸発させた後の残渣（280mg）を、ＦＣ（１５ｇ、ヘキサン中５０％AcOEt、及びAcOEt）によって精製して、表題化合物（２８）（167mg、0.31mmol、７３％）を得た。[α]30D=+18.3 c 0.41，EtOH。ＵＶ λmax（EtOH）：207nm（ε 17778），264nm（ε 15767）；1H NMR (CDCl3): 6.36 (1H, d, J=11.1 Hz), 6.24 (1H, dt, J=15.7, 6.7Hz), 6.07 (1H, d, J=11.3 Hz),  5.60 (1H, d, J=15.5 Hz), 5.35 (1H, m), 5.33 (1H, s), 5.00 (1H, s), 4.44 (1H, m), 4.23 (1H, m), 3.14 (1H, s), 2.80 (1H, m), 2.60 (1H, m), 2.40-1.40 (15H, m), 0.77 (3H, s ),0.80-0.36 (4H, m); MS HRES C28H34O3F6の計算値  M+H 533.2485。実測値  M+H 533.2483。
【０２２５】
（合成例３５）（３ａＲ，４Ｓ，７ａＲ）−７ａ−メチル−１−［１−（５，５，５−トリフルオロ−４−ヒドロキシ−４−トリフルオロメチル−ペント−２Ｚ−エンイル）−シクロプロピル］−３ａ，４，５，６，７，７ａ−ヘキサヒドロ−３Ｈ−インデン−４−オールの合成
【化８７】
2007525533.tif 000089
【０２２６】
（３ａＲ，４Ｓ，７ａＲ）−７ａ−メチル−１−［１−（５，５，５−トリフルオロ−４−ヒドロキシ−４−トリフルオロメチル−ペント−２−イニル）−シクロプロピル］−３ａ，４，５，６，７，７ａ−ヘキサヒドロ−３Ｈ−インデン−４−オール（300mg、0.76mmol）、酢酸エチル（５ｍＬ）、ヘキサン（12mL）、無水エタノール（0.5mL）、キノリン（30uL）、及びリンドラー触媒（75mg、CaCO3担持５％Ｐｄ）の混合物を、室温で２時間水素化した。反応混合物を、セライトパッドに通して濾過し、パッドをAcOEtで洗浄した。溶媒を蒸発させて、表題化合物（257mg、0.65mmol、８７％）を得た。[α]28D=+1.8 c 0.61，CHCl3。1H NMR (CDCl3): 6.08 (1H, dt, J=12.3, 6.7 Hz), 5.47 (1H, m,), 5.39 (1H, d, J=12.1 Hz), 4.15 (1H, br. s), 3.28 (1H, s), 2.52-1.34 (12H, m), 1.16 (3H, s), 0.78-0.36 (4H, m); 13C NMR (CDCl3): 156.66(0), 141.77(1), 126.51(1), 122.79(0, q, J=285 Hz), 115.77 (1), 69.59(1), 55.41(1), 47.28(0), 36.44(2), 35.90 (2), 33.75(2), 30.22(2), 20.89(0), 19.41(3), 17.94(2), 12.05(2), 11.11(2); MS HRES C19H24O2F6の計算値  M+H 399.1753。実測値  M+ H 399.1757。
【０２２７】
（合成例３６）（３ａＲ，７ａＲ）−７ａ−メチル−１−［１−（５，５，５−トリフルオロ−４−トリフルオロメチル−４−トリメチルシラニルオキシ−ペン−２Ｚ−エンイル）−シクロプロピル］−３ａ，４，５，６，７，７ａ−ヘキサヒドロ−３Ｈ−インデン−４−オンの合成
【化８８】
2007525533.tif 000090
【０２２８】
攪拌された（３ａＲ，４Ｓ，７ａＲ）−７ａ−メチル−１−［１−（５，５，５−トリフルオロ−４−ヒドロキシ−４−トリフルオロメチル−ペント−２Ｚ−エンイル）−シクロプロピル］−３ａ，４，５，６，７，７ａ−ヘキサヒドロ−３Ｈ−インデン−４−オール（617mg、1.55mmol）及びセライト（2.0g）のジクロロメタン（10mL）懸濁液に、室温で重クロム酸ピリジニウム（1.17g、3.1mmol）を添加した。得られた混合物を、２．５時間攪拌し、シリカゲル（５ｇ）に通して濾過し、次いでシリカゲルパッドを、ヘキサン中２０％AcOEtで洗浄した。合わせた濾液及び洗液を蒸発させて、粗（３ａＲ，７ａＲ）−７ａ−メチル−１−［１−（５，５，５−トリフルオロ−４−ヒドロキシ−４−トリフルオロメチル−ペンテニル）−シクロプロピル］−３ａ，４，５，６，７，７ａ−ヘキサヒドロ−３Ｈ−インデン−４−オン（600mg、1.51mmol、９８％）を得た。攪拌された（３ａＲ，７ａＲ）−７ａ−メチル−１−［１−（５，５，５−トリフルオロ−４−ヒドロキシ−４−トリフルオロメチル−ペント−２Ｚ−エンイル）−シクロプロピル］−３ａ，４，５，６，７，７ａ−ヘキサヒドロ−３Ｈ−インデン−４−オン（600mg、1.51mmol）のジクロロメタン（15mL）溶液に、室温でトリメチルシリル−イミダゾール（1.76mL、12.0mmol）を添加した。得られた混合物を、１．０時間攪拌し、シリカゲル（１０ｇ）に通して濾過し、シリカゲルパッドを、ヘキサン中１０％AcOEtで洗浄した。合わせた濾液及び洗液を蒸発させて、表題化合物（640mg、１．37mmol、８８％）を得た。[α]28D=-0.2 c 0.55，CHCl3。1H NMR (CDCl3): 5.97 (1H, dt, J=12.2, 6.2 Hz), 5.40 (1H, m), 5.38 (1H, d, J=12.2Hz), 2.82 (1H, dd, J= 10.7, 6.6 Hz), 2.60-1.74 (10H, m), 0.89 (3H, s), 0.75-0.36 (4H, m), 0.21 (9H, s); 13C NMR (CDCl3): 210.56 (0), 154.30(0), 139.28(1), 125.81(1), 122.52(0, q, J=289 Hz), 118.17 (1), 64.11(1), 53.69(0), 40.43(2), 35.51(2), 34.85(2), 26.94(2), 24.07(2), 20.89(0), 18.39(3), 12.26(2), 10.61(2), 1.43 (3); MS HRES C22H30O2F6Siの計算値  M+H 469.1992。実測値  M+H 469.1992。
【０２２９】
（合成例３７）１−α，２５−ジヒドロキシ−１６−エン−２０−シクロプロピル−２３，２４−Ｚ−エン−２６，２７−ヘキサフルオロ−１９−ノル−コレカルシフェロール（２９）の合成
【化８９】
2007525533.tif 000091
【０２３０】
攪拌された（１Ｒ，３Ｒ）−１，３−ビス−（（tert−ブチルジメチル）シラニルオキシ）−５−［２−（ジフェニルホスフィノイル）エチリデン］−シクロヘキサン（514mg、0.90mmol）のテトラヒドロフラン（６ｍＬ）溶液に、−７８℃でｎ−BuLi（0.57mL、0.91mmol）を添加した。得られた混合物を、１５分間攪拌し、（３ａＲ，７ａＲ）−７ａ−メチル−１−［１−（５，５，５−トリフルオロ−４−トリフルオロメチル−４−トリメチルシラニルオキシ−ペント−２Ｚ−エンイル）−シクロプロピル］−３ａ，４，５，６，７，７ａ−ヘキサヒドロ−３Ｈ−インデン−４−オン（194mg、0.41mmol）のテトラヒドロフラン（２ｍＬ）溶液を滴下した。反応混合物を−７２℃で３．０時間攪拌し、ヘキサン（35mL）で希釈し、食塩水（30mL）で洗浄し、Na2SO4で乾燥した。溶媒を蒸発させた後の残渣（750mg）を、ＦＣ（１５ｇ、ヘキサン中10%AcOEt）によって精製して、１−α，３−β−ジ（tert−ブチル−ジメチル−シラニルオキシ）−２５−トリメチルシラニルオキシ−１６−エン−２０−シクロプロピル−２３，２４−Ｚ−エン−２６，２７−ヘキサフルオロ−１９−ノル−コレカルシフェロール及び１−α，３−β−ジ（tert−ブチル−ジメチル−シラニルオキシ）−２５−ヒドロキシ−１６−エン−２０−シクロプロピル−２３，２４−Ｚ−エン−２６，２７−ヘキサフルオロ−１９−ノル−コレカルシフェロール（230mg）の混合物を得た。１−α，３−β−ジ（tert−ブチル−ジメチル−シラニルオキシ）−２５−トリメチルシラニルオキシ−１６−エン−２０−シクロプロピル−２３，２４−Ｚ−エン−２６，２７−ヘキサフルオロ−１９−ノル−コレカルシフェロール及び１−α，３−β−ジ（tert−ブチル−ジメチル−シラニルオキシ）−２５−ヒドロキシ−１６−エン−２０−シクロプロピル−２３，２４−Ｚ−エン−２６，２７−ヘキサフルオロ−１９−ノル−コレカルシフェロール（230mg）の混合物に、室温でフッ化テトラブチルアンモニウム（４ｍＬ、4mmol、１Ｍ  ＴＨＦ溶液）を添加した。混合物を、４０時間攪拌した。AcOEt（25mL）で希釈し、水（５回×20mL）、食塩水（20mL）で洗浄し、Na2SO4で乾燥した。溶媒を蒸発させた後の残渣（260mg）を、ＦＣ（１０ｇ、ヘキサン中50%AcOEt、及びAcOEt）によって精製して、表題化合物（２９）（1327mg、0.25mmol、６２％）を得た。[α]28D=+53.6 c 0.33，EtOH。ＵＶ λmax（EtOH）：243nm（ε 26982）251nm（ε 32081），260nm（ε 21689）；1H NMR (CDCl3): 6.29 (1H, d, J=10.7 Hz), 6.08 (1H, dt, J=12.5, 6.7Hz), 5.93 (1H, d, J=11.1 Hz),  5.46 (1H, m,), 5.40 (1H, d, J=12.7 Hz)), 4.12 (1H, m), 4.05 (1H, m), 3.14 (1H, s), 2.80-1.40 (19H, m), 0.77 (3H, s ),0.80-0.36 (4H, m); MS HRES C27H34O3F6の計算値  M+H 521.2485。実測値  M+H 521.2487。
【０２３１】
（合成例３８）１−α，２５−ジヒドロキシ−１６−エン−２０−シクロプロピル−２３，２４−Ｚ−エン−２６，２７−ヘキサフルオロ−コレカルシフェロール（３０）の合成
【化９０】
2007525533.tif 000092
【０２３２】
攪拌された（１Ｓ，５Ｒ）−１，５−ビス−（（tert−ブチルジメチル）シラニルオキシ）−３−［２−（ジフェニルホスフィノイル）−エタ−（Ｚ）−イリデン］−２−メチレン−シクロヘキサン（525mg、0.90mmol）のテトラヒドロフラン（６ｍＬ）溶液に、−７８℃でn-BuLi（0.57mL、0.91mmol）を添加した。得られた混合物を、１５分間攪拌し、（３ａＲ，７ａＲ）−７ａ−メチル−１−［１−（５，５，５−トリフルオロ−４−トリフルオロメチル−４−トリメチルシラニルオキシ−ペント−２Ｚ−エンイル）−シクロプロピル］−３ａ，４，５，６，７，７ａ−ヘキサヒドロ−３Ｈ−インデン−４−オン（200mg、0.43mmol）のテトラヒドロフラン（２ｍＬ）溶液を滴下した。反応混合物を−７２℃で２．５時間攪拌し、ヘキサン（35mL）で希釈し、食塩水（30mL）で洗浄し、Na2SO4で乾燥した。溶媒を蒸発させた後の残渣（680mg）を、ＦＣ（１５ｇ、ヘキサン中10%AcOEt）によって精製して、１−α，３−β−ジ（tert−ブチル−ジメチル−シラニルオキシ）−２５−トリメチルシラニルオキシ−１６−エン−２０−シクロプロピル−２３，２４−Ｚ−エン−２６，２７−ヘキサフルオロ−コレカルシフェロール及び１−α，３−β−ジ（tert−ブチル−ジメチル−シラニルオキシ）−２５−ヒドロキシ−１６−エン−２０−シクロプロピル−２３，２４−Ｚ−エン−２６，２７−ヘキサフルオロ−コレカルシフェロール（310mg）の混合物を得た。１−α，３−β−ジ（tert−ブチル−ジメチル−シラニルオキシ）−２５−トリメチルシラニルオキシ−１６−エン−２０−シクロプロピル−２３，２４−Ｚ−エン−２６，２７−ヘキサフルオロ−コレカルシフェロール及び１−α，３−β−ジ（tert−ブチル−ジメチル−シラニルオキシ）−２５−ヒドロキシ−１６−エン−２０−シクロプロピル−２３，２４−Ｚ−エン−２６，２７−ヘキサフルオロ−コレカルシフェロール（310mg）の混合物に、室温でフッ化テトラブチルアンモニウム（４ｍＬ、4mmol、１Ｍ  ＴＨＦ溶液）を添加した。混合物を、１５時間攪拌した。AcOEt（25mL）で希釈し、水（５回×20mL）、食塩水（20mL）で洗浄し、Na2SO4で乾燥した。溶媒を蒸発させた後の残渣（370mg）を、ＦＣ（１０ｇ、ヘキサン中50%AcOEt、及びAcOEt）によって精製して、表題化合物（３０）（195mg、0.37mmol、８５％）を得た。[α]30D=+9.4 c 0.49，EtOH。ＵＶ λmax（EtOH）：262nm（ε 11846）；1H NMR (CDCl3): 6.36 (1H, d, J=11.1 Hz), 6.08 (2H, m),  5.44 (1H, m), 5.40 (1H, d, J=12.3Hz), 5.32 (1H, s), 5.00 (1H, s), 4.43 (1H, m), 4.23 (1H, m), 3.08 (1H, s), 2.80 (1H, m), 2.60 (1H, m), 2.55-1.40 (15H, m), 0.77 (3H, s),0.80-0.34 (4H, m); MS HRES C28H34O3F6の計算値  M+H 533.2485。実測値  M+H 533.2502。
【０２３３】
（合成例３９）１−α，２５−ジヒドロキシ−１６−エン−２０−シクロプロピル−１９−ノル−コレカルシフェロール（３１）の合成
【化９１】
2007525533.tif 000093
【０２３４】
攪拌された（１Ｒ，３Ｒ）−１，３−ビス−（（tert−ブチルジメチル）シラニルオキシ）−５−［２−（ジフェニルホスフィノイル）エチリデン］−シクロヘキサン（697mg、1.22mmol）のテトラヒドロフラン（９ｍＬ）溶液に、−７８℃でn-BuLi（0.77mL、1.23mmol）を添加した。得られた混合物を、１５分間攪拌し、（３ａＲ，７ａＲ）−７ａ−メチル−１−［１−（４−メチル−４−トリメチルシラニルオキシ−ペンチル）−シクロプロピル］−３ａ，４，５，６，７，７ａ−ヘキサヒドロ−３Ｈ−インデン−４−オン（220mg、0.61mmol）のテトラヒドロフラン（２ｍＬ）溶液を滴下した。反応混合物を、−７２℃で３．５時間攪拌し、ヘキサン（35mL）で希釈し、食塩水（30mL）で洗浄し、Na2SO4で乾燥した。溶媒を蒸発させた後の残渣（900mg）を、ＦＣ（１５ｇ、ヘキサン中10%AcOEt）によって精製して、１−α，３−β−ジ（tert−ブチル−ジメチル−シラニルオキシ）−２５−トリメチルシラニルオキシ−１６−エン−２０−シクロプロピル−１９−ノル−コレカルシフェロール（421mg、0.59mmol）を得た。１−α，３−β−ジ（tert−ブチル−ジメチル−シラニルオキシ）−２５−トリメチルシラニルオキシ−１６−エン−２０−シクロプロピル−２６，２７−ヘキサデューテロ−１９−ノル−コレカルシフェロール（421mg、0.59mmol）に、室温でフッ化テトラブチルアンモニウム（４ｍＬ、4mmol、１Ｍ  ＴＨＦ溶液）を添加した。混合物を、４０時間攪拌した。AcOEt（25mL）で希釈し、水（５回×20mL）、食塩水（20mL）で洗浄し、Na2SO4で乾燥した。溶媒を蒸発させた後の残渣（450mg）を、ＦＣ（１５ｇ、ヘキサン中50%AcOEt、及びAcOEt）によって精製して、表題化合物（３１）（225mg、0.54mmol、８９％）を得た。[α]29D=+69.5 c 0.37，EtOH。ＵＶ λmax（EtOH）：243nm（ε 27946），251nm（ε 33039），261nm（ε 22701）；1H NMR (CDCl3): 6.30 (1H, d, J=11.3 Hz), 5.93 (1H, d, J=11.3 Hz),  , 5.36 (1H, m), 4.12 (1H, m), 4.04 (1H, m), 2.75 (2H, m), 2.52-1.04 (22H, m), 1.18 (6H, s), 0.79 (3H, s ),0.65-0.26 (4H, m); 13C NMR (CDCl3): 157.16(0), 142.33(0), 131.25(0), 124.73(1), 123.76(1), 115.50(1), 71.10(0), 67.39(1), 67.19(1), 59.47(1), 50.12(0), 44.60(2), 43.84(2), 42.15(2), 38.12(2), 37.18(2), 35.57(2), 29.26(3), 29.11(2), 29.08(3), 28.48(2), 23.46(2), 22.26(2), 21.27(0), 17.94(3), 12.70(2), 10.27(2); MS HRES C27H42O3の計算値  M+H 415.3207。実測値  M+H 415.3207。
【０２３５】
（合成例４０）１−α，２５−ジヒドロキシ−１６−エン−２０−シクロプロピル−コレカルシフェロール（３２）の合成
【化９２】
2007525533.tif 000094
【０２３６】
攪拌された（１Ｓ，５Ｒ）−１，５−ビス−（（tert−ブチルジメチル）シラニルオキシ）−３−［２−（ジフェニルホスフィノイル）−エタ−（Ｚ）−イリデン］−２−メチレン−シクロヘキサン（675mg、1.16mmol）のテトラヒドロフラン（８ｍＬ）溶液に、−７８℃でn-BuLi(0.73mL、1.17mmol）を添加した。得られた混合物を、１５分間攪拌し、（３ａＲ，７ａＲ）−７ａ−メチル−１−［１−（４−メチル−４−トリメチルシラニルオキシ−ペンチル）−シクロプロピル］−３ａ，４，５，６，７，７ａ−ヘキサヒドロ−３Ｈ−インデン−４−オン（210mg、0.58mmol）のテトラヒドロフラン（２ｍＬ）溶液を滴下した。反応混合物を、−７２℃で３．５時間攪拌し、ヘキサン（35mL）で希釈し、食塩水（30mL）で洗浄し、Na2SO4で乾燥した。溶媒を蒸発させた後の残渣（850mg）を、ＦＣ（１５ｇ、ヘキサン中10%AcOEt）によって精製して、１−α，３−β−ジ（tert−ブチル−ジメチル−シラニルオキシ）−２５−トリメチルシラニルオキシ−１６−エン−２０−シクロプロピル−コレカルシフェロール（382mg、0.53mmol）を得た。１−α，３−β−ジ（tert−ブチル−ジメチル−シラニルオキシ）−２５−トリメチルシラニルオキシ−１６−エン−２０−シクロプロピル−コレカルシフェロール（382mg、0.53mmol）に、室温でフッ化テトラブチルアンモニウム（４ｍＬ、4mmol、１Ｍ  ＴＨＦ溶液）を添加した。混合物を、１５時間攪拌した。AcOEt（25mL）で希釈し、水（５回×20mL）、食塩水（20mL）で洗浄し、Na2SO4で乾燥した。溶媒を蒸発させた後の残渣（380mg）を、ＦＣ（１５ｇ、ヘキサン中50%AcOEt、及びAcOEt）によって精製して、表題化合物（３２）（204mg、0.48mmol、８３％）を得た。[α]29D=+16.1 c 0.36, EtOH。ＵＶ λmax（EtOH）：208nm（ε 17024），264nm（ε 16028）；1H NMR (CDCl3): 6.37 (1H, d, J=11.3 Hz), 6.09 (1H, d, J=11.1 Hz),   5.33 (2H, m), 5.01 (1H, s), 4.44 (1H, m), 4.23 (1H, m), 2.80 (1H, m), 2.60 (1H, m), 2.38-1.08 (20H, m), 1.19 (6H, s), 0.79 (3H, s ),0.66-0.24 (4H, m);  13C NMR (CDCl3): 157.07(0), 147.62(0), 142.49(0), 133.00(0), 124.90(1), 124.73(1), 117.19(1), 111.64(2), 71.10(1), 70.70(0), 66.88(1), 59.53(1), 50.28(0), 45.19(2), 43.85(2), 42.86(2), 38.13(2), 35.59(2), 29.27(2), 29.14(3), 28.65(2), 23.57(2), 22.62(2), 21.29(0), 17.84(3), 12.74(2), 10.30(2); MS HRES C28H42O3の計算値  M+Na 449.3026。実測値  M+Na 449.3023。
【０２３７】
（合成例４１）１，２５−ジヒドロキシ−２１−（２Ｒ，３−ジヒドロキシ−３−メチル−ブチル）−２０Ｒ−コレカルシフェロール（３３）の合成
【化９３】
2007525533.tif 000095
【０２３８】
［１Ｒ，３ａＲ，４Ｓ，７ａＲ］−２（Ｒ）−［４−（１，１−ジメチルエチル）ジメチル−シラニルオキシ）−７ａ−メチル−オクタヒドロ−インデン−１−イル］−６−メチル−ヘプタン−１，６−ジオール（３４）及び［１Ｒ，３ａＲ，４Ｓ，７ａＲ］−２（Ｓ）−［４−（１，１−ジメチルエチル）ジメチル−シラニルオキシ）−７ａ−メチル−オクタヒドロ−インデン−１−イル］−６−メチル−ヘプタン−１，６−ジオール（３５）
【化９４】
2007525533.tif 000096
【０２３９】
アルケノールのテトラヒドロフラン（９ｍＬ）溶液を氷浴中で冷却し、１Ｍ  ボラン−ＴＨＦのテトラヒドロフラン（17mL）溶液を滴下すると、最初は発泡して反応した。溶液を室温で終夜攪拌し、氷浴中で再冷却し、水（17mL）、続いて過炭酸ナトリウム（7.10g、68mmol）を滴下した。混合物を５０℃浴に浸漬し、７０分間攪拌して、溶液を生成した。２相系を放置して冷却し、次いで１：１の酢酸エチル−ヘキサン（170mL）で平衡にした。有機層を、水（２回×25mL）、次いで食塩水（20mL）で洗浄し、乾燥し、蒸発させて、無色油（2.76g）を得た。この材料を、１：１の酢酸エチル−ヘキサン、及びシリカゲルＧを使用した短いフラッシュカラムに通した。完全溶出後に得られた溶出物を蒸発させ、酢酸エチルで取り出し、濾過し、２×１８インチ、１５−２０μシリカのＹＭＣ  HPLCカラムで、移動相として２：１の酢酸エチル−ヘキサンを使用して、流速100mL／分でクロマトグラフィーを行った。異性体３４は、溶出物最大2.9Lで、無色油１．3114gとして出現した。[α]D + 45.2°（メタノール，c 0.58；1H NMR δ -0.002 (3H, s), 0.011 (3H, s), 0.89 (9H, s), 0.93 (3H, s), 1.17 (1H, m), 1.22 (6H, s), 1.25-1.6 (16H, m), 1.68 (1H, m), 1.80 (2H, m), 1.89 (1H, m), 3.66 (1H, dd, J = 4.8及び11 Hz), 3.72 (1H, dd, J = 3.3及び11 Hz), 4.00 (1H, m); LR-ES(-) m/z 412 (M), 411 (M-H); HR-ES(+): (M+Na)の計算値  435.3265、実測値: 435.3269。
【０２４０】
異性体３５は、溶出物最大４．９Ｌで溶出し、長期放置すると無色油0.8562gは結晶化した：ｍｐ１０２〜３°。[α]D + 25.2°（メタノール，c 0.49）；1H NMR δ -0.005 (3H, s), 0.009 (3H, s), 0.89 (9 H, s), 0.93 (3H, s), 1.16 (1H, m), 1.22 (6H, s), 1.3-1.5, (14H, m), 1.57 (2H, m), 1.67 (1H, m), 1.80 (2H, m), 1.91 (1H, m), 3.54 (1H, dd, J = 4.8及び11 Hz), 3.72 (1H, dd, J = 2.9及び11 Hz), 4.00 (1H, m); ); LR-ES(-) m/z 412 (M), 411 (M-H). 元素分析：C24H48O3Siの計算値: C, 69.84, H, 11.72; 実測値: C, 69.91; H, 11.76。
【０２４１】
［１Ｒ，３ａＲ，４Ｓ，７ａＲ］−６（Ｒ）−［４−（tert−ブチル−ジメチル−シラニルオキシ）−７ａ−メチル−オクタヒドロ−インデン−１−イル］−７−ヨード−２−メチル−ヘプタン−２−オール（３６）
【化９５】
2007525533.tif 000097
【０２４２】
ジクロロメタン（３ｍＬ）中攪拌されたトリフェニルホスフィン（0.333g、1.27mmol）及びイミダゾール（0.255g、3mmol）の混合物を、氷浴中で冷却し、ヨウ素（0.305g、1.20mmol）を添加した。この混合物を、１０分間攪拌し、次いで３４（0.4537g、1.10mmol）のジクロロメタン（３ｍＬ）の溶液を１０分間で滴下した。混合物を、氷浴中で３０分間、次いで周囲温度で２と３／４時間攪拌した。ＴＬＣ（１：１の酢酸エチル−ヘキサン）により、遊離体はないことが確認された。チオ硫酸ナトリウム（0.1g）の水（５ｍＬ）溶液を添加し、混合物を平衡にし、有機相を、数滴の食塩水を含む0.1N  硫酸（10mL）、次いで１：１の水−食塩水（２回×10mL）、１回×食塩水（10mL）で洗浄し、次いで乾燥し、蒸発させた。残渣を、移動相として１：９の酢酸エチル−ヘキサンを使用したフラッシュクロマトグラフィーによって精製して、無色シロップの３６を0.5637g（９８％）得た：1H NMR δ -0.005 (3H, s), 0.010 (3H, s), 0.89 (9H, s), 0.92 (3H, s), 1.23 (6H, s), 1.1-1.6 (16H, m), 1.68 (1H, m), 1.79 (2H, m), 1.84 (1H, m), 3.37(1H, dd, J = 4及び10 Hz), 3.47 (1H, dd, J = 3及び10 Hz), 4.00 (1H, m); LR-EI(+) m/z 522 (M), 465 (M-C4H9), 477 (M-C4H9-H2O); HR-EI(+): C24H47IO2Siの計算値: 522.2390、実測値: 522.2394。
【０２４３】
［１Ｒ，３ａＲ，４Ｓ，７ａＲ］−６（Ｓ）−［４−（tert−ブチル−ジメチル−シラニルオキシ）−７ａ−メチル−オクタヒドロ−インデン−１−イル］−２−メチル−ノン−８−イン−２−オール（３７）
【化９６】
2007525533.tif 000098
【０２４４】
リチウムアセチリドＤＭＡ錯体（0.110g、1.19mmol）を、３６（0.2018g（0.386mmol））のジメチルスルホキシド（1.5mL）及びテトラヒドロフラン（0.15mL）の溶液に添加した。混合物を終夜攪拌した。ＴＬＣ（１：４の酢酸エチル−ヘキサン）は、２つのスポットが非常に密接に移動している混合物であることを明らかにした（Rf0.52及び0.46）。３６の脱離反応生成物である純粋なアルケノールは、溶出帯の始めの分画に含有され、主要生成物として生成された。しかし、溶出帯の終わりの分画も均質であり、蒸発時に所望のアセチレン３７が得られた。同定の役に立つ３７及びその６−エピマーのＮＭＲスペクトルは、先に報告されている。
【０２４５】
［１Ｒ，３ａＲ，４Ｓ，７ａＲ］−７−ベンゼンスルホニル−６（Ｓ）−［４−（tert−ブチル−ジメチル−シラニルオキシ）−７ａ−メチル−オクタヒドロ−インデン−１−イル］−２−メチル−ヘプタン−２−オール（３８）
【化９７】
2007525533.tif 000099
【０２４６】
３７ｂ（0.94g、1.8mmol）、ベンゼンスルフィン酸ナトリウム（2.18g、13mmol）及びＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（31.8g）の混合物を、室温で１２時間、次いでＴＬＣ（１：４の酢酸エチル−ヘキサン）によって示唆されるようにすべての遊離体が変換されるまで４０℃浴で約６時間攪拌した。溶液を、１：１の酢酸エチル−ヘキサン（120mL）及び１：１の食塩水−水（45mL）で平衡にした。有機層を、水（４回×25mL）、食塩水（10mL）で洗浄し、次いで乾燥し、蒸発させて、無色油1.0317gを得た。この材料を、ステップワイズグラジエント（１：９、１：６、１：３の酢酸エチル−ヘキサン）を使用したフラッシュクロマトグラフィーにかけて、無色油0.930g（９６％）を得た：300MHz 1H NMR δ  -0.02 (3H, s), 0.00 (3H, s), 0.87 (9H, s), 0.88 (3H, s), 1.12 (1H, m), 1.20 (6H, s), 1.2-1.8 (18H, m), 1.81 (1H, m), 3.09 (2H, m), 3.97 (1H, brs), 7.59 (3H, m), 7.91 2H, m)。
【０２４７】
［１Ｒ，３ａＲ，４Ｓ，７ａＲ］−１−（１（Ｓ）−ベンゼンスルホニルメチル−５−メチル−５−トリメチルシラニルオキシ−ヘキシル）−４−（tert−ブチル−ジメチル−シラニルオキシ）−７ａ−メチル−オクタヒドロ−インデン（３９）
【化９８】
2007525533.tif 000100
【０２４８】
１−（トリメチルシリル）イミダゾール（１ｍＬ）を、３８（0.8g）のシクロヘキサン（10mL）溶液に添加し、終夜攪拌し、次いでヘキサン、１：３９及び１：１９の酢酸エチル−ヘキサンのステップワイズグラジエントを使用したフラッシュクロマトグラフィーにかけた。溶出をＴＬＣ（１：４の酢酸エチル−ヘキサン）によって監視し、無色シロップの３９を0.7915g得た：300MHz 1H NMR δ 0.00 (3H, s), 0.02 (3H, s), 0.12 (9H, s), 0.90 (12H, s, t-butyl+7a-Me), 1.16 (1H, m), 1.20 (6H, s), 1.2-1.6 (15H, m), 1.66-1.86 (3H, m), 3.10 (2H, m), 4.00 (1H, brs), 7.56-7.70 (3H, m), 7.93 (2H, m)。
【０２４９】
［１Ｒ，３ａＲ，４Ｓ，７ａＲ］−６（Ｒ）−［４−（tert−ブチル−ジメチル−シラニルオキシ）−７ａ−メチル−オクタヒドロ−インデン−１−イル］−２，１０−ジメチル−ウンデカン−２，３（Ｒ），１０−トリオール（４０）
【化９９】
2007525533.tif 000101
【０２５０】
３９（0.7513g、1.23mmol）及びジオール（0.508g、1.85mmol）のテトラヒドロフラン（28mL）溶液を、−３５℃に冷却し、次いでヘキサン（2.75mL）中２．５Ｍブチルリチウムを滴下した。温度を放置して−２０℃まで上げ、その温度で６時間、又は遊離体が消費されるまで維持した。反応の進行は、遊離体（Rf0.71）及び２つのエピマージオール（Rf0.09及び０．１２）を示すＴＬＣ（１：４の酢酸エチル−ヘキサン）によって監視した。反応時間の終わりに向けて、温度を短時間で０℃に上げ、再び−１０に下げ、次いで飽和塩化アンモニウム（25mL）、続いて酢酸エチル（50mL）、及び沈殿した塩を溶解するのに十分な水を添加した。得られた水相を酢酸エチル（15mL）で抽出した。合わせた抽出物を食塩水（15mL）で洗浄し、乾燥し、蒸発させた。得られたシロップを、１：９、１：６、１：４、及び１：１の酢酸エチル−ヘキサンのステップワイズグラジエントを使用したフラッシュクロマトグラフィーにかけて、無色シロップの３９ａを0.8586g得た。この材料を、テトラヒドロフラン（30mL）及びメタノール（18mL）の混合物に溶解し、次いで５％ナトリウムアマルガム（２０ｇ）を添加した。混合物を１４時間攪拌した後、還元的脱スルホン化が完了した。反応の進行を、エピマージオール（Rf0.63及び0.74）の消失、及び４０ａ（Rf0.79）の生成、及び部分脱シリル化類似体４０（Rf0.16）を示すＴＬＣ（１：１の酢酸エチル−ヘキサン）によって監視した。混合物をメタノール（20mL）で希釈し、３分間攪拌し、次いで氷（２０ｇ）を添加し、２分間攪拌し、上澄みをデカンテーションして飽和塩化アンモニウム（50mL）を含有する混合物に入れた。残渣を少量のテトラヒドロフランで繰り返し洗浄し、塩溶液に添加し、次いで酢酸エチル（80mL）で平衡にした。水層を酢酸エチル（20mL）で１回再抽出し、合わせた抽出物を食塩水（10mL）で洗浄し、次いで乾燥し、蒸発させた。４０ａと４０を含有する得られた無色油を、10mLの１Ｎ  シュウ酸のメタノール溶液（二水和物から調製）に溶解すると、トリメチルシリルエーテルの選択的加水分解が何分か以内に起こった。炭酸カルシウム（１ｇ）を添加し、懸濁液を終夜攪拌し、次いで濾過した。溶液を蒸発させ、得られた残渣を、１：４、１：２、１：１及び２：１の酢酸エチル−ヘキサンのステップワイズグラジエントを使用したフラッシュクロマトグラフィーにかけると、トリオール40の残渣が得られ、アセトニトリルから非常に細かい分枝状針晶０．４５ｇに結晶化した：mp94〜95℃、[α]D+44.1°（メタノール，c 0.37）；400MHz 1H NMR δ -0.005 (3H, s), 0.007 (3H, s), 0.89 (9H, s), 0.92 (3H, s), 1.15 (1H, m), 1.16 (3H, s), 1.21 (9H, s), 1.2-1.6 (19H, m), 1.67 (1H, m), 1.79 (2H, m), 1.90 (2H, m), 2.06 (1H, m), 3.31 (1H, brd, J = 10 Hz), 4.00 (1H, brs), LR-ES(-) m/z: 533 (M+Cl), 497 (M-H); HR-ES(+): C29H58O4Si + Naの計算値: 521.3996、実測値: 521.4003. 元素分析：C29H58O4Siの計算値: C, 69.82, H, 11.72; 実測値: C, 69.97; H, 11.65。
【０２５１】
［１Ｒ，３ａＲ，４Ｓ，７ａＲ］−６（Ｒ）−（４−ヒドロキシ−７ａ−メチル−オクタヒドロ−インデン−１−イル）−２，１０−ジメチル−ウンデカン−２，３（Ｒ），１０−トリオール（４１）
【化１００】
2007525533.tif 000102
【０２５２】
攪拌されたトリオール４０（0.4626g、0.927mmol）のアセトニトリル（10mL）及びジオキサン（0.7mL）の溶液を１０℃に冷却し、フルオロケイ酸溶液（２ｍＬ）を滴下した。冷却浴を取り外し、２相系をさらにアセトニトリル（２ｍＬ）で希釈し、次いで室温で３と１／４時間攪拌した。遊離体の消失は、ＴＬＣ（酢酸エチル）によって監視した。混合物を水（10mL）及び酢酸エチル（30mL）で平衡にした。水相を酢酸エチル（２回×20mL）で再抽出し、合わせた抽出物を、水（５ｍＬ）及び食塩水（10mL）、次いで１：１の食塩水−飽和炭酸水素ナトリウム溶液で洗浄し、乾燥した。残渣を、１：１から２：１への酢酸エチル−ヘキサン、及びニートな酢酸エチルのステップワイズグラジエントを使用したフラッシュクロマトグラフィーにかけることによって精製して、残渣を得、１：１のジクロロメタン−ヘキサンで取り出し、濾過し、蒸発させて、非晶質固体0.3039g（８５％）を得た：[α]D + 42.6°（メタノール，c 0.48）；1H NMR (DMSO-d6): δ 0.87 (3H, s), 0.97 (3H, s), 1.02 (3H, s), 1.04 (6H, s), 1.1-1.4 (18H, m), 1.5-1.8 (4H, m), 1.84 (1H, m), 2.99 (1H, dd, J = 6及び10 Hz), 3.87 (1H, brs), 4.02 (1H, s, OH), 4.05 (1H, s, OH), 4.16 (1H, d, OH, J = 3.6 Hz), 4.20 (1H, d, OH, J = 6.4 Hz); LR-ES(+): m/z 384 (M), 383 (M-H); HR-ES(+): (M+Na)の計算値  407.3132、実測値: 407.3134。
【０２５３】
［１Ｒ，３ａＲ，４Ｓ，７ａＲ］−１−｛５−ヒドロキシ−５−メチル−１（Ｒ）−［２−（２，２，５，５−テトラメチル−［１，３］ジオキソラン−４（Ｒ）−イル）−エチル］−ヘキシル｝−７ａ−メチル−オクタヒドロ−インデン−４−オール（４２）
【化１０１】
2007525533.tif 000103
【０２５４】
テトラオール４０（0.2966g、0.771mmol）及びトシル酸ピリジニウム（100mg）のアセトン（８ｍＬ）及び２，２−ジメトキシプロパン（８ｍＬ）の溶液を室温で１２時間維持した。ＴＬＣ分析（酢酸エチル）は、遊離体（Rf0.21）がなく、Rf0.82及び0.71の２つの新しいスポットを示した。前者は期待される４２であり、後者はメチルアセタールと推定される。反応混合物を水（５ｍＬ）で希釈し、１０分間攪拌した。その時点では、Ｒｆ値の高い方のスポットしか観察されなかった。混合物を炭酸水素ナトリウム（０．５ｇ）で中和し、次いで酢酸エチル（50mL）及び食塩水（５ｍＬ）で平衡にした。有機層を、水（５ｍＬ）及び食塩水（５ｍＬ）で洗浄し、次いで乾燥し、蒸発させて、粘性残渣（0.324g）を得、次のステップで直接使用した：300MHz 1H NMR: δ 0.94 (3H, s), 1.10 (3H, s), 1.20 (1H, m), 1.22 (6H, s), 1.25 (3H, s), 1.34 (3H, s), 1.41 (3H, s), 1.2-1.65 (20H, m), 1.78-1.86 (3H, m), 1.93 (1H, m), 3.62 (1H, dd, J = 4.6及び8.3 Hz), 4.08 (1H, brs)。
【０２５５】
［１Ｒ，３ａＲ，４Ｓ，７ａＲ］−酢酸１−｛５−ヒドロキシ−５−メチル−１（Ｒ）−［２−（２，２，５，５−テトラメチル−［１，３］ジオキソラン−４（Ｒ）−イル）−エチル］−ヘキシル｝−７ａ−メチル−オクタヒドロ−インデン−４−イルエステル（４３）
【化１０２】
2007525533.tif 000104
【０２５６】
上記で得られた残渣をピリジン（6.9g）に溶解し、さらに無水酢酸（3.41g）で希釈した。混合物を、室温で２４時間、次いで遊離体が検出（ＴＬＣ、酢酸エチル）されなくなるまで３５℃浴中で約１０時間放置した。混合物をトルエンで希釈し、蒸発させた。残渣をフラッシュクロマトグラフィー（１：４の酢酸エチル−ヘキサン）によって精製して、無色シロップの４３を得た。0.3452g，９７％：1H NMR: δ 0.89 (3H, s), 1.10 (3H, s), 1.20 (1H, m), 1.22 (6H, s), 1.25 (3H, s), 1.33 (3H, s), 1.41 (3H, s), 1.25-1.6 (19H, m), 1.72 (1H, m), 1.82 (2H, m), 1.95 (1H, m), 2.05 (3H, s), 3.63 (1H, dd, J = 4.4及び8.4 Hz), 5.15 (1H, brs); LR-FAB(+) m/z 467 (M+H), 465 (M-H), 451 (M-Me)。
【０２５７】
［１Ｒ，３ａＲ，４Ｓ，７ａＲ］−酢酸１−［４（Ｒ），５−ジヒドロキシ−１（Ｒ）−（４−ヒドロキシ−４−メチル−ペンチル）−５−メチル−ヘキシル］−７ａ−メチル−オクタヒドロ−インデン−４−イルエステル（４４）
【化１０３】
2007525533.tif 000105
【０２５８】
４３（0.334g、0.716mmol）の８０％酢酸（２ｍＬ）溶液を、６８℃浴中に維持した。ＴＬＣ（酢酸エチル、Rf0.33）で、加水分解の進行を監視した。遊離体は、２．５時間後にはもはや検出されなかった。混合物を蒸発させ、次いで少量のトルエンと共蒸発させて、無色被膜（0.303g）を得、次のステップで直接使用した：300MHz 1H NMR: δ 0.89 (3H, s), 1.17 (3H, s), 1.22 (6H, s), 1.56 (3H, s), 1.1-1.6 (21H, m), 1.6-2.0 (5H, m), 2.04 (3H, s), 3.32 (1H, brd, J = 10 Hz), 5.15 (1H, brs)。
【０２５９】
［１Ｒ，３ａＲ，４Ｓ，７ａＲ］−酢酸１−［４（Ｒ）−［ジメチル−（１，１，２−トリメチル−プロピル）−シラニルオキシ］−５−ヒドロキシ−１（Ｒ）−（４−ヒドロキシ−４−メチル−ペンチル）−５−メチル−ヘキシル］−７ａ−メチル−オクタヒドロ−インデン−４−イルエステル（４５）
【化１０４】
2007525533.tif 000106
【０２６０】
トリオール４４（0.30g）、イミダゾール（0.68g、10mmol）及びジメチルテキシルシリルクロリド（1.34g、7.5mmol）のＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（６ｇ）溶液を室温で維持した。４８時間後、４−（Ｎ，Ｎ−ジメチルアミノ）ピリジン（15mg）を添加し、混合物をさらに２４時間攪拌した。反応の進行をＴＬＣ（酢酸エチル；２４、Rf0.83；２５ａ、Rf0.38）によって監視した。混合物を水（２ｍＬ）で希釈し、１０分間攪拌し、次いで酢酸エチル（45mL）と水（20mL）に分配した。水層を１回×酢酸エチル（10mL）で抽出した。合わせた有機相を水（４回×12mL）及び食塩水（８ｍＬ）で洗浄し、次いで乾燥し、蒸発させた。残留油を、１：９及び１：４の酢酸エチル−ヘキサンのステップワイズグラジエントを使用したフラッシュクロマトグラフィーによって精製して、無色シロップの４５を得た。少量の未反応の遊離体（80mg）を酢酸エチルで溶出した。シロップ状の４５を次のステップで直接使用した：400MHz 1H NMR: δ 0.13 (3H, s), 0.14 (3H, s), 0.87 (6H, s), 0.91 (9H, m), 1.10 (1H, m), 1.14 (3H, s), 1.15 (3H, s), 1.21 (6H, s), 1.1-1.6 (19H, m), 1.6-1.9 (5H, m), 1.94 (1H, brd, J = 12.8 Hz), 2.05 (3H, s), 3.38 (1H, brs), 5.15 (1H, brs)。
【０２６１】
［１Ｒ，３ａＲ，４Ｓ，７ａＲ］−酢酸１−［４（Ｒ）−［ジメチル−（１，１，２−トリメチル−プロピル）−シラニルオキシ］−５−メチル−１（Ｒ）−（４−メチル−４−トリメチルシラニルオキシ−ペンチル）−５−トリメチルシラニルオキシ−ヘキシル］−７ａ−メチル−オクタヒドロ−インデン−４−イルエステル（４６）
【化１０５】
2007525533.tif 000107
【０２６２】
１−（トリメチルシリル）イミダゾール（0.90mL、6.1mmol）を、４５（0.2929mg）のシクロヘキサン（６ｍＬ）溶液に添加し、１２時間攪拌し、次いでフラッシュクロマトグラフィーを行って（１：７９の酢酸エチル−ヘキサン）、無色シロップの４６（0.3372g）を得た。溶出をＴＬＣ（１：４の酢酸エチル−ヘキサン）によって監視し、無色シロップの４６を0.7915g得た：1H NMR δ: 0.074 (3H, s), 0.096 (3H, s), 0.103 (9H, s), 0.106 (9H, s), 0.82 (1H, m), 0.83 (6H, s), 0.88 (9H, m), 1.32 (3H, s), 1.20 (9H, s), 1.15-1.6 (17H, m), 1.6-1.9 (5H, m), 1.97 (1H, brd, J = 12.8 Hz), 2.05 (3H, s), 3.27 (1H, m), 5.15 (1H, brs); LR-FAB(+) m/z: 712 (M), 711 (M-H), 697 (M-Me), 653 (M-AcO), 627 (M-C6H13)。
【０２６３】
［１Ｒ，３ａＲ，４Ｓ，７ａＲ］−１−［４（Ｒ）−［ジメチル−（１，１，２−トリメチル−プロピル）−シラニルオキシ］−５−メチル−１（Ｒ）−（４−メチル−４−トリメチルシラニルオキシ−ペンチル）−５−トリメチルシラニルオキシ−ヘキシル］−７ａ−メチル−オクタヒドロ−インデン−４−オール（４７）
【化１０６】
2007525533.tif 000108
【０２６４】
攪拌された４６（0.335mg、0.47mmol）のテトラヒドロフラン（15mL）溶液を氷浴中で冷却し、１Ｍ水素化アルミニウムリチウムのテトラヒドロフラン（２ｍＬ）溶液を滴下した。ＴＬＣ（１：９の酢酸エチル−ヘキサン）は、１．５時間後に、２５ｂ（Rf0.61）から２６（Rf0.29）に完全に転換されたことを示した。２Ｍ水酸化ナトリウム溶液（１４滴）、続いて水（0.5mL）及び酢酸エチル（30mL）を添加した。少量のセライトを添加し、１５分間攪拌した後、液体層を濾過した。固体残渣を酢酸エチルで繰り返しすすぎ、合わせた液相を蒸発させて、無色シロップを得、ヘキサンで取り出し、濾過し、蒸発させて、２６（0.335g）を得、さらに精製することなく使用した：1H NMR δ: 0.075 (3H, s), 0.10 (21H, brs), 0.82 (1H, m), 0.84 (6H, s), 0.89 (6H,m), 0.93 (3H, s), 1.13 (3H, s), 1.20 (9H, s), 1.2-1.6 (16H, m), 1.6-1.7 (2H, m), 1.82 (3H, m), 1.95 (1H, brd, J = 12.4 Hz), 3.27 (1H, m), 4.08 (1H, brs); LR-FAB(+) m/z: 585 (M-C6H13), 481 (M-TMSO); HR-ES(+) m/z: C37H78O4Si3 + Naの計算値: 693.5100 実測値: 693.5100。
【０２６５】
［１Ｒ，３ａＲ，７ａＲ］−１−［４（Ｒ）−［ジメチル−（１，１，２−トリメチル−プロピル）−シラニルオキシ］−５−メチル−１（Ｒ）−（４−メチル−４−トリメチルシラニルオキシ−ペンチル）−５−トリメチルシラニルオキシ−ヘキシル］−７ａ−メチル−オクタヒドロ−インデン−４−オン（４８）
【化１０７】
2007525533.tif 000109
【０２６６】
攪拌された４７（0.310g、0.462mmol）のジクロロメタン（14mL）溶液に、セライト（０．６ｇ）、続いて重クロム酸ピリジニウム（0.700g、1.86mmol）を添加した。４７（Rf0.54）からケトン２７（Rf0.76）への変換は、ＴＬＣ（１：４の酢酸エチル−ヘキサン）で追跡した。４．５時間後に混合物をシクロヘキサンで希釈し、次いでシリカゲル層に通して濾過した。濾液及びエーテル洗液を合わせ、蒸発させた。残渣をフラッシュクロマトグラフィーにかけて（１：３９の酢酸エチル−ヘキサン）、無色シロップの２７を0.2988g（96.6%）を得た：1H NMR δ: 0.078 (3H, s), 0.097 (3H, s), 0.107 (18H, s), 0.64 (3H, s), 0.81 (1H, m), 0.84 (6H, s), 0.89 (6H,m), 1.134 (3H, s), 1.201 (3H, s), 1.207 (3H, s), 1.211 (3H, s), 1.3-1.6 (14H, m), 1.6-1.7 (3H, m), 1.88 (1H, m), 2.04 (2H, m), 2.2-2.32 (2H, m), 2.46 (1H, dd, J = 7.5及び11.5 Hz), 3.28 (1H, m); LR-FAB(+) m/z: 583 (M-C6H13), 479 (M-OTMS); HR-ES(+) m/z: C37H76O4Si3 + Naの計算値: 691.4943、実測値: 691.4949。
【０２６７】
［１Ｒ，３ａＲ，７ａＲ，４Ｅ］−４−｛２（Ｚ）−［３（Ｓ），５（Ｒ）−ビス−（tert−ブチル−ジメチル−シラニルオキシ）−２−メチレン−シクロヘキシリデン］−エチリデン｝−７ａ−メチル−１−［５−メチル−１（Ｒ）−（４−メチル−４−トリメチルシラニルオキシ−ペンチル）−４（Ｒ）−［ジメチル−（１，１，２−トリメチル−プロピル）−シラニルオキシ］−５−トリメチルシラニルオキシ−ヘキシル］−オクタヒドロ−インデン（４９）
【化１０８】
2007525533.tif 000110
【０２６８】
２．５Ｍブチルリチウムのヘキサン（0.17mL）溶液を、−７０℃で２８のテトラヒドロフラン（２ｍＬ）溶液に添加して、濃鮮紅色のイリエドを得た。１０分後、ケトン２７（0.1415g、0.211mmol）のテトラヒドロフラン（２ｍＬ）溶液を１５分間で滴下した。４時間後、ｐＨ７のリン酸塩緩衝液（２ｍＬ）の添加により、反応を中止した。放置して温度を０℃まで上昇させ、次いでヘキサン（30mL）を添加した。水層をヘキサン（15mL）で再抽出した。合わせた抽出物を食塩水（５ｍＬ）で洗浄し、乾燥し、蒸発させて、無色油を得、フラッシュクロマトグラフィー（1:100の酢酸エチル−ヘキサン）によって精製して、無色シロップの４９を0.155g（７１％）を得た：1H NMR δ: 0.068 (15H, m), 0.103 (12H, s), 0.107 (9H, s), 0.53 (3H, s), 0.82 (1H, m), 0.84 (6H, s), 0.88 (18H,m), 0.89 (6H, m), 1.14 (3H, m), 1.20 (9H, s), 12-1.9 (22H, m), 1.97 (2H, m), 2.22 (1H, dd, J = 7.5 an 13 Hz), 2.45 (1H, brd, J = 13 Hz), 2.83 (1H, brd, J = 13 Hz), 3.28 (1H, m), 4.20 (1H, m), 4.38 (1H, m), 4.87 (1H, d, J = 2 Hz), 5.18 (1H, d, J = 2 Hz), 6.02 (1H, d, J = 11.4 Hz, 6.24 (1H, d, J = 11.4 Hz); LR-FAB(+) m/z 1033 (M+H), 1032 (M), 1031 (M-H), 901 (M-TBDMS)。
【０２６９】
１，２５−ジヒドロキシ−２１−（２Ｒ，３−ジヒドロキシ−３−メチル−ブチル）−２０Ｒ−コレカルシフェロール（３３）の合成
【化１０９】
2007525533.tif 000111
【０２７０】
上記の実験で得られたような４９（0.153g、0.148mmol）の残渣を１Ｍフッ化テトラブチルアンモニウム（3.5mL）溶液に溶解した。ＴＬＣ（酢酸エチル）で、反応の進行を監視した。したがって、２４時間後、溶液を食塩水（５ｍＬ）で希釈し、５分間攪拌し、次いで酢酸エチル（35mL）及び水（15mL）で平衡にした。水層を酢酸エチル（15mL）で１回再抽出した。合わせた有機層を水（５回×10mL）、１回×食塩水（５ｍＬ）で洗浄し、次いで乾燥し、蒸発させた。残渣を、酢酸エチル及び1:100のメタノール−酢酸エチルのステップワイズグラジエントを使用したフラッシュクロマトグラフィーによって精製し、無色微結晶性材料の３３をギ酸メチル−ペンタンから、70mg（９１％）得た：[α]D + 34.3°（メタノール，c 0.51）；1H NMR (DMSO-d6) δ: 0.051 (3H, s), 0.98 (3H, s), 1.03 (3H, s), 1.05 (6H, s), 1.0-1.6 (17H, m), 1.64 (3H, m), 1.80 (2H, m), 1.90 (1H,d, J = 11.7 Hz), 1.97 (1H, dd, J=J= 9.8 Hz), 2.16 (1H, dd, J = 5.9及びJ = 13.7 Hz), 2.36 (1H, brd), 2.79 (1H, brd), 3.00 (1H, dd, J = 5及び10 Hz), 3.99 (1H, brs), 4.01 (1H, s, OH), 4.04 (1H, s, OH), 4.54 (1H, OH, d, J = 3.9 Hz), 4.76 (1H, brs), 4.87 (1H, OH, d, J = 4.9 Hz), 5.22 ( 1H, brs), 5.99 (1H, d, J = 10.7 Hz), 6.19 (1H, d, J = 10.7 Hz); LR-ES(+) m/z: 519 (M+H), 518 (M), 517 (M-H), 501 (M-OH); HR-ES(+) C32H54O5 + Naの計算値: 541.3863; 実測値 541.3870; UVmax (ε): 213 (13554), 241sh (12801), 265 (16029) nm。
【０２７１】
（合成例４２）１，２５−ジヒドロキシ−２１（２Ｒ，３−ジヒドロキシ−３−メチル−ブチル）−２０Ｓ−コレカルシフェロール（５０）の合成
【化１１０】
2007525533.tif 000112
【０２７２】
［１Ｒ，３ａＲ，４Ｓ，７ａＲ］−７−ベンゼンスルホニル−６（Ｒ）−［４−（tert−ブチル−ジメチル−シラニルオキシ）−７ａ−メチル−オクタヒドロ−インデン−１−イル］−２−メチル−ヘプタン−２−オール（５１）
【化１１１】
2007525533.tif 000113
【０２７３】
３６及びベンゼンスルフィン酸ナトリウム（0.263g、1.6mmol）のＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（５ｍＬ）溶液を、７７℃浴中で３時間攪拌した。溶液を１：１の酢酸エチル−ヘキサン（25mL）で平衡にし、有機層を水（５回×10mL）で洗浄し、乾燥し、蒸発させた。残渣を、１：９、１：４、及び１：３の酢酸エチル−ヘキサンのステップワイズグラジエントを用いたフラッシュクロマトグラフィーにかけて、無色シロップのスルホンを得た：1H NMR δ -0.02 (3H, s), 0.005 (3H, s), 0.79 (3H, s), 0.87 (9H, s), 1.12 (1H, m), 1.19 (6H, s), 1.12 (1H, m), 1.20 (6H, s), 1.2-1.8 (18H, m), 2.08 (1H, m), 3.09 (1H, dd, J = 9.3及び14.5 Hz), 3.31 (1H, dd, J = 3及び14.5 Hz), 3.97 (1H, brs), 7.58 (3H, m), 7.66 (1H, m), 7.91 2H, m); LR-ES(+) m/z: 600 (M+Na+MeCN), 559 (M+Na); LR-ES(-) m/z: 536 (M), 535 (M-H); HR-ES(+): C30H52O4SSi + Naの計算値  559.3248; 実測値 559.3253。
【０２７４】
［１Ｒ，３ａＲ，４Ｓ，７ａＲ］−１−（１（Ｒ）−ベンゼンスルホニルメチル−５−メチル−５−トリメチルシラニルオキシ−ヘキシル）−４−（tert−ブチル−ジメチル−シラニルオキシ）−７ａ−メチル−オクタヒドロ−インデン（５２）
【化１１２】
2007525533.tif 000114
【０２７５】
１−（トリメチルシリル）イミダゾール（0.146mL）を、５１（0.145g、0.27mmol）のシクロヘキサン（２ｍＬ）溶液に添加した。１７時間後、生成物を、１：７９及び１：３９の酢酸エチル−ヘキサンのステップワイズグラジエントを使用したフラッシュクロマトグラフィーによって精製して、無色残渣の５２を0.157g（0.258mmol）を得た。ＴＬＣ（１：９の酢酸エチル−ヘキサン）Rf0.14。300MHz 1H NMR: δ  -0.02 (3H, s), 0.00 (3H, s), 0.87 (12H, s), 1.12 (1H, m), 1.17 (6H, s), 1.2-1.6 (15H, m), 1.6-1.9 (3H, m), 3.08 (2H, m), 3.97 (1H, brs), 7.53-7.70 (3H, m), 7.90 (2H, d, J = 7Hz)。
【０２７６】
［１Ｒ，３ａＲ，４Ｓ，７ａＲ］−５（Ｒ，Ｓ）−ベンゼンスルホニル−６（Ｒ）−［４−（tert−ブチル−ジメチル−シラニルオキシ）−７ａ−メチル−オクタヒドロ−インデン−１−イル］−２，１０−ジメチル−１０−トリメチルシラニルオキシ−ウンデカン−２，３（Ｒ）−ジオール（５３）
【化１１３】
2007525533.tif 000115
【０２７７】
１５２（0.2589、0.425mmol）及びジオール（0.176g、0.638mmol）のテトラヒドロフラン（９ｍＬ）溶液を、−２５℃に冷却し、ヘキサン（1.4mL）中１．６Ｍブチルリチウムを添加した。温度を−２０℃に上昇させ、３時間、次いで−１０℃で２．５時間、及び０℃で１０分間維持した。混合物を再び−１０℃に冷却し、飽和塩化アンモニウム溶液（５ｍＬ）を添加し、次いで酢酸エチル（50mL）、及び沈殿した塩を溶解するのに十分な水で平衡にした。水層を酢酸エチル（15mL）で再抽出し、合わせた抽出物を乾燥し、蒸発させ、残渣を、１：６、１：４、及び１：１の酢酸エチル−ヘキサンのステップワイズグラジエントを使用したフラッシュクロマトグラフィーによって精製して、無色シロップの５３を0.212g（７０％）得た：300MHz 1H NMR: δ 0.00 (3H, s), 0.017 (3H, s), 0.12 (9H, s), 0.81 (3H, s), 0.89 (9H, s), 1.16 (1H, m), 1.19 (12H, m), 1.1-1.6 (20H, m), 1.6-1.8 (2H, m), 3.10 (1H, dd, J = 8.4及び14.7 Hz), 3.30 (1H, m), 3.99 (1H, brs), 7.61 (2H, m), 7.67 (1H, m), 7.93 (2H, m)。
【０２７８】
［１Ｒ，３ａＲ，４Ｓ，７ａＲ］−６（Ｓ）−［４−（tert−ブチル−ジメチル−シラニルオキシ）−７ａ−メチル−オクタヒドロ−インデン−１−イル］−２，１０−ジメチル−１０−トリメチルシラニルオキシ−ウンデカン−２，３（Ｒ）−ジオール（５４）
【化１１４】
2007525533.tif 000116
【０２７９】
化合物５３（0.186mg、0.262mmol）を、メタノール（2.5mL）中０．５Ｍシュウ酸二水化物に溶解した。溶液を、１５分間攪拌し、次いで炭酸カルシウムを添加し（０．５ｇ）、懸濁液を終夜攪拌し、次いで濾過した。濾液を蒸発させて、白色フォームの54を0.188ｇ（98%）を得た：TLC（１：１の酢酸エチル−ヘキサン）Rf0.06。この材料をさらに精製することなく、次のステップで使用した。
【０２８０】
［１Ｒ，３ａＲ，４Ｓ，７ａＲ］−６（Ｓ）−［４−（tert−ブチル−ジメチル−シラニルオキシ）−７ａ−メチル−オクタヒドロ−インデン−１−イル］−２，１０−ジメチル−ウンデカン−２，３（Ｒ），１０−トリオール（トリオール５５）
【化１１５】
2007525533.tif 000117
【０２８１】
ナトリウムアマルガム（５％ナトリウム、10.8g）を、テトラヒドロフラン（15mL）及びメタノール（９ｍＬ）の混合物中激しく攪拌された５４（0.426g、0.667mmol）の溶液に添加した。懸濁液を２４時間攪拌し、反応をＴＬＣ（１：１の酢酸エチル−ヘキサン）によって監視して、５５（Rf0.17）の生成を観察した。混合物をメタノール（３ｍＬ）で希釈し、５分間攪拌し、次いでさらに水で希釈し（10mL）、２分間攪拌し、デカンテーションして飽和塩化アンモニウム溶液（25mL）に入れた。水層を酢酸エチル（２回×20mL）で抽出した。合わせた抽出物をｐＨ７のリン酸塩緩衝液（５ｍＬ）で洗浄し、次いで食塩水（10mL）、乾燥し、蒸発させた。残渣を、１：１及び２：１の酢酸エチル−ヘキサンのステップワイズグラジエントを使用したフラッシュクロマトグラフィーによって精製して、無色シロップの５５を0.244g（７３％）得た：1H NMR: δ -0.006 (3H, s), 0.006 (3H, s), 0.86 (9H, s), 0.92 (3H, s), 1.11 (1H, m), 1.15 (3H, s), 1.21 (9H, s), 1.2-1.75 (21H, m), 1.7-1.85 (3H, m), 1.90 (1H, m), 3.29 (1H, brd), 3.99 (1H, brs); LR-ES(+) m/z: 521 (M+Na), 481 (M-OH); LR-ES(-): m/z 544: (M+CH2O2), 543 (M-H+CH2O2), 533 (M-Cl); HR-ES(+) m/z: C29H58O4Si + Naの計算値: 521.3996、実測値 521.3999。
【０２８２】
［１Ｒ，３ａＲ，４Ｓ，７ａＲ］−６（Ｓ）−（４−ヒドロキシ−７ａ−メチル−オクタヒドロ−インデン−１−イル）−２，１０−ジメチル−ウンデカン−２，３（Ｒ），１０−トリオール（５６）
【化１１６】
2007525533.tif 000118
【０２８３】
水性フルオロケイ酸溶液（３ｍＬ）を、アセトニトリル（12mL）中攪拌された５５（0.240g、0.481mmol）の溶液に添加した。ＴＬＣ（酢酸エチル）で反応を監視した。２．５時間後、より極性でない５５の犠牲によって生成された化合物５６（Rf0.37）が、優先的な種であった。混合物を酢酸エチル及び水（10mL）で平衡にし、水層を水（２回×10mL）で再抽出し、合わせた抽出物を水（６ｍＬ）及び食塩水（２回×10mL）で洗浄し、次いで乾燥し、蒸発させた。無色残渣を、１：２、１：１、及び２：１の酢酸エチル−ヘキサンのステップワイズグラジエントを使用したフラッシュクロマトグラフィーにかけて、未反応の５５と、その後に続いて５６を溶出し、無色シロップとして0.147g（７９％）得た：1H NMR: 0.94 (3H, s), 1.12 (1H, m), 1.15 (3H, s), 1.21 (9H, s), 1.15-1.7 (20H, m), 1.7-1.9 (5H, m), 1.96 (1H, brd), 3.29 (1H, d, J = 9.6 Hz), 4.08 (1H, brs); LR-ES(+): m/z 448: (M+Na+MeCN), 407 (M+Na); LR-ES(-): m/z 419 (M+Cl);  HR-ES(+) m/z: C23H44O4 + Naの計算値: 407.3132、実測値 407.3135。
【０２８４】
［１Ｒ，３ａＲ，４Ｓ，７ａＲ］−１−（５−ヒドロキシ−１（Ｓ）−｛２−［２−（４−メトキシ−フェニル）−５，５−ジメチル−［１，３］ジオキソラン−４（Ｒ）−イル］−エチル｝−５−メチル−ヘキシル）−７ａ−メチル−オクタヒドロ−インデン−４−オール（５７）
【化１１７】
2007525533.tif 000119
【０２８５】
５６（81.2mg、0.211mmol）のジクロロメタン（２ｍＬ）溶液に、４−メトキシベンゾアルデヒドジメチルアセタール（６０μＬ、0.35mmol）と、その後に続いてジクロロメタン（10mL）中トシル酸ピリジニウム（200mg）を含有する溶液（0.2mL）を添加した。反応の進行は、ＴＬＣ（１：２の酢酸エチル−ヘキサン）で追跡し、４−メトキシベンゾアルデヒドジメチルアセタール（Rf0.80）、４−メトキシベンゾアルデヒド（Rf0.65）、遊離体５６（Rf0.42）、及び生成物５７（Rf0.26）を明らかにした。５と３／４時間後、混合物を、飽和炭酸水素ナトリウム溶液（５ｍＬ）と共に１５分間攪拌し、次いで酢酸エチル（25mL）で平衡にした。有機層を、食塩水（５ｍＬ）で洗浄し、乾燥し、蒸発させた。残渣を１：３及び１：２の酢酸エチル−ヘキサンのステップワイズグラジエントを使用したフラッシュクロマトグラフィーにかけて、無色シロップの５７を0.106mg（100%）得た：1H NMR: 0.94 (3H, s), 1.19, 1.21 (6H, 各s, Me2COH), 1.23, 1.35及び1.24, 1.37 (6H, 各s、主及び副の5,5-ジメチルオキソランジアステレオマー), 1.1-1.7 (18H, m), 1.7-1.9 (5H, m), 1.9-2.0 (2H, m), 3.65 (1H, m), 3.81 (3H, s), 4.08 (1H, brs), 5.78及び5.96 (1H, 各s、主及び副のアセタールジアステレオマー), 6.89 (2H, m), 7.41 (2H, m)
【０２８６】
［１Ｒ，３ａＲ，７ａＲ］−１−（５−ヒドロキシ−１（Ｓ）−｛２−［２−（４−メトキシ−フェニル）−５，５−ジメチル−［１，３］ジオキソラン−４（Ｒ）−イル］−エチル｝−５−メチル−ヘキシル）−７ａ−メチル−オクタヒドロ−インデン−４−オン（５８）
【化１１８】
2007525533.tif 000120
【０２８７】
重クロム酸ピリジニウム（230mg、0.61mmol）を、攪拌された５７（0.0838、0.167mmol）、セライト（185mg）、及びジクロロメタン（４ｍＬ）を含有する混合物に添加した。５７（Rf0.31）から５８（Rf0.42）への転換をＴＬＣ（１：２５のメタノール−クロロホルム）によって監視し、２．５時間後に、混合物をジクロロメタン（10mL）で希釈し、次いでシリカゲル層に通して濾過した。濾液及び洗浄液（１：１のジクロロメタン−酢酸エチル）を蒸発させ、残渣をクロマトグラフィーにかけて（１：４の酢酸エチル−ヘキサン）、ケトン５８を0.0763g（９１％）得た：1H NMR: 0.63 (3H, s), 1.19, 1.21及び1.23 (6H, 各s, Me2COH), 1.25, 1.36, 1.38 (6H, m,s,s, 5,5-ジメチルオキソランジアステレオマー), 1.1-1.9 (18H, m), 1.9-2.1 (3H, m), 2.1-2.4 (2H, m), 2.45 (1H, m), 3.66 (1H, m), 3.802及び3.805 (3H, 各s), 5.78及び5.95 (1H, 各s、主及び副のアセタールジアステレオマー), 6.89 (2H, m), 7.39 (2H, m)。
【０２８８】
［１Ｒ，３ａＲ，７ａＲ］−１−［４（Ｒ），５−ジヒドロキシ−１（Ｓ）−（４−ヒドロキシ−４−メチル−ペンチル）−５−メチル−ヘキシル］−７ａ−メチル−オクタヒドロ−インデン−４−オン（５９）
【化１１９】
2007525533.tif 000121
【０２８９】
ケトン５８を、９０％メタノールにとかした１Ｎシュウ酸溶液中で攪拌した。混合物は、数分後に均質になった。７５分後、ＴＬＣ（酢酸エチル）から、反応の完了が示唆された（５９はRf0.24）。したがって、炭酸カルシウム（0.60g）を添加し、懸濁液を終夜攪拌し、次いで濾過した。濾液を蒸発させ、４：１：５のジクロロメタン−酢酸エチル−ヘキサン、１：１の酢酸エチル−ヘキサン、及びニートな酢酸エチルのステップワイズグラジエントを使用したフラッシュクロマトグラフィーにかけて、無色残渣の５９を0.060mg（９４％）得た：1H NMR: 0.5 (3H, s), 1.17 (3H, s), 1.22 (6H, s), 1.23 (3H, s), 1.2-1.21 (23H, m), 2.15-2.35 (2H, m), 2.45 (1H, dd, J = 7及び11 Hz), 3.30, 1H, brd)。
【０２９０】
［１Ｒ，３ａＲ，７ａＲ］−７ａ−メチル−１−［５−メチル−１（Ｓ）−（４−メチル−４−トリエチルシラニルオキシ−ペンチル）−４（Ｒ），５−ビス−トリエチルシラニルオキシ−ヘキシル］−オクタヒドロ−インデン−４−オン（６０）
【化１２０】
2007525533.tif 000122
【０２９１】
５９（0.055g、0.143mmol）、イミダゾール、（14.9mg、1.69mmol）、Ｎ，Ｎ−ジメチルピリジン（６ｍｇ）、トリエチルクロロシラン（0.168mL、1mmol）、及びＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（1.5mL）の混合物を、１７時間攪拌した。反応をＴＬＣ（１：４の酢酸エチル−ヘキサン）で追跡し、ジシリル中間体（Rf0.47）への急速な転換が明らかになった。さらに、反応は円滑に終夜進行して、完全シリル化６０（Rf0.90）が得られた。溶液を水（３ｍＬ）で平衡にし、酢酸エチル（20mL）で平衡にし、酢酸エチル層を水（３回×４ｍＬ）で洗浄し、乾燥し、蒸発させた。残渣を、ヘキサン及び１：１００の酢酸エチル−ヘキサンのステップワイズグラジエントを使用したフラッシュクロマトグラフィーにかけて、無色シロップの６０を0.0813g（78.4%）得た：1H NMR δ 0.55-0.64 (21H, m), 0.92-0.97 (27H, m), 1.12 (3H, s), 1.18 (3H, s), 1.19 (3H, s), 1.21 (3H, s) , 1.1-1.7 (18H, m), 1.9-2.15 (2H, m), 2.15-2.35 (2H, m), 2.43 (1H, dd, J = 7.7及び11 Hz), 3.30 (1H, dd, J = 3及び8.4 Hz)。
【０２９２】
［１Ｒ，３ａＲ，７ａＲ，４Ｅ］−４−｛２（Ｚ）−［３（Ｓ），５（Ｒ）−ビス−（tert−ブチル−ジメチル−シラニルオキシ）−２−メチレン−シクロヘキシリデン］−エチリデン｝−７ａ−メチル−１−［５−メチル−１（Ｓ）−（４−メチル−４−トリエチルシラニルオキシ−ペンチル）−４（Ｒ），５−ビス−トリエチルシラニルオキシ−ヘキシル］−オクタヒドロ−インデン（６１）
【化１２１】
2007525533.tif 000123
【０２９３】
１．６Ｍブチルリチウムのヘキサン（0.14mL）溶液を、−７０℃でホスフィン（0.1308g、0.224mmol）のテトラヒドロフラン（1.5mL）溶液に添加した。１０分後、ケトン６０（0.0813g、0.112mmol）のテトラヒドロフラン（1.5mL）溶液を１５分間かけて滴下した。３時間後、イリドの色は褪せ、したがってｐＨ７のリン酸塩緩衝液（２ｍＬ）を添加し、放置して温度を０℃まで上昇させた。混合物をヘキサン（30mL）で平衡にし、有機層を食塩水（５ｍＬ）で洗浄し、乾燥し、蒸発させて、無色油を得、フラッシュクロマトグラフィー（１：１００の酢酸エチル−ヘキサン）によって精製した。Rf0.33の帯（ＴＬＣ  １：３９の酢酸エチル−ヘキサン）のみを収集した。これらの分画を蒸発させると、無色シロップの６１が0.070g（５７％）得られた：1H NMR δ 0.06 (12H, brs), 0.53-0.64 (21H, m), 0.88 (18H, s), 0.92-0.97 (27H, m), 1.11 (3H, s), 1.177 (3H, s), 1.184 (3H, s), 1.195 (3H, s), 1-1.9 (22H, m), 1.98 (2H, m), 2.22 (1H, m), 2.45 (1H, m), 2.83 (1H, brd, J = 13 Hz, 3.27 (1H, d, J = 6 Hz), 4.19 (1H, m), 4.38 (1H, m), 4.87 (1H, brs), 5.18 (1H, brs), 6.02 (1H, d, J = 11 Hz), 6.24 (1H, d, J = 11 Hz)。
【０２９４】
１，２５−ジヒドロキシ−２１（２Ｒ，３−ジヒドロキシ−３−メチル−ブチル）−２０Ｓ−コレカルシフェロール（５０）の合成
【化１２２】
2007525533.tif 000124
【０２９５】
１Ｍフッ化テトラブチルアンモニウムのテトラヒドロフラン溶液中における６１（0.068g、0.06238mmol）の脱保護反応は、ＴＬＣ（酢酸エチル）で追跡し、徐々に進行して、５０（Rf0.19）が得られた。２５時間後、混合物を食塩水（５ｍＬ）で希釈し、５分間攪拌し、酢酸エチル（35mL）及び水（15mL）で平衡にした。水層を、酢酸エチルで１回再抽出し（35mL）、合わせた抽出物を水（５回×10mL）及び食塩水（５ｍＬ）で洗浄し、次いで乾燥し、蒸発させた。残渣を、１：１及び２：１の酢酸エチル−ヘキサン、並びに２：９８のメタノール−酢酸エチルのリニアグラジエントを使用したフラッシュクロマトグラフィーにかけて、残渣を得、ギ酸メチルで取り出し、白色フォーム30mg（９３％）にまで蒸発させた：[α]D+29.3°（メタノール，c 0.34）；MHz 1H NMR δ: 0.55 (3H, s),  1.16 (3H, s), 1.21 (9H, s), 1.1-1.75 (22H, m), 1.80 (2H, m), 1.9-2.1 (5H, m),  2.31 (1H, dd, J = 7及び13 Hz ), 2.60 (1H, brd), 284 (1H, m), 3.29 (1H, d, J = 9.5 Hz ), 4.22 (1H, m), 4.43 (1H, m), 5.00 (1H, s), 5.33 (1H, s), 6.02 (1H, d, J = 11 Hz ), 6.02 (1H, d, J = 11Hz); LR-ES(-) m/z: 564 (M+H2CO2), 563 M-H+ H2CO2); HR-ES(+) C32H54O5 + Naの計算値: 541.3863; 実測値 541.3854; UVmax (ε): 211 (15017), 265 (15850), 204 sh (14127), 245 sh (13747) nm。
【０２９６】
合成例４３−１，２５−ジヒドロキシ−２１−（２Ｒ，３−ジヒドロキシ−３−メチル−ブチル）−２０Ｓ−１９−ノル−コレカルシフェロール（６２）の合成
【化１２３】
2007525533.tif 000125
【０２９７】
［１Ｒ，３ａＲ，７ａＲ，４Ｅ］−４−｛２（Ｚ）−［３（Ｓ），５（Ｒ）−ビス−（tert−ブチル−ジメチル−シラニルオキシ）−シクロヘキシリデン］−エチリデン｝−７ａ−メチル−１−［５−メチル−１（Ｓ）−（４−メチル−４−トリエチルシラニルオキシ−ペンチル）−４（Ｒ），５−ビス−トリエチルシラニルオキシ−ヘキシル］−オクタヒドロ−インデン（６３）
【化１２４】
2007525533.tif 000126
【０２９８】
１．６Ｍブチルリチウムのヘキサン溶液を、−７０℃でホスフィンのテトラヒドロフラン溶液に添加した。１０分後、実施例２によるケトン６０のテトラヒドロフラン溶液を１５分間かけて滴下した。イリドの色が褪せた後、ｐＨ７のリン酸塩緩衝液を添加し、放置して温度を０℃まで上昇させた。混合物をヘキサンで平衡にし、有機層を食塩水で洗浄し、乾燥し、蒸発させて、無色油を得、フラッシュクロマトグラフィー（１：１００の酢酸エチル−ヘキサン）によって精製し、６３を得た。
【０２９９】
１，２５−ジヒドロキシ−２１−（２Ｒ，３−ジヒドロキシ−３−メチル−ブチル）−２０Ｓ−１９−ノル−コレカルシフェロール（６２）
【化１２５】
2007525533.tif 000127
【０３００】
６３の脱保護反応を、１Ｍフッ化テトラブチルアンモニウムのテトラヒドロフラン溶液中で実施して、６２を得た。２５時間後、混合物を食塩水で希釈し、５分間攪拌し、次いで酢酸エチル及び水で平衡にした。水層を酢酸エチルで１回再抽出し、合わせた抽出物を水及び食塩水で洗浄し、次いで乾燥し、蒸発させた。残渣をフラッシュクロマトグラフィーにかけて、残渣を得、ギ酸メチルで取り出し、蒸発させて、６２を得た。
【０３０１】
合成例４４−１，２５−ジヒドロキシ−２０Ｓ−２１（３−ヒドロキシ−３−メチル−ブチル）−２４−ケト−１９−ノル−コレカルシフェロール（６４）の合成
【化１２６】
2007525533.tif 000128
【０３０２】
（Ｒ）−６−［（１Ｒ，３ａＲ，４Ｓ，７ａＲ）−４−（tert−ブチル−ジメチル−シラニルオキシ）−７ａ−メチル−オクタヒドロ−インデン−１−イル］−２−メチル−７−フェニルスルファニル−ヘプタン−２−オール（６５）
【化１２７】
2007525533.tif 000129
【０３０３】
上記の反応を、Tet. Lett. 1975, 17: 1409-12に記載のように実施した。具体的には、50mLの丸底フラスコに、1.54g（3.73mmol）の（Ｒ）−２−［（１Ｒ，３ａＲ，４Ｓ，７ａＲ）−４−（tert−ブチルジメチルシラニルオキシ）−７ａ−メチルオクタヒドロインデン−１−イル］−６−メチルヘプタン−１，６−ジオール（１）（Eur. J. Org. Chem. 2004, 1703-1713）及び2.45g（11.2mmol）のジフェニルスルフィドを加えた。混合物を５ｍＬのピリジンに溶解し、2.27g（11.2mmol、2.80mL）のトリブチルホスフィンを添加した。混合物を終夜攪拌し、次いで20mLのトルエンで希釈し、蒸発させた。残渣を再びトルエンで取り出し、蒸発させ、残留した液体を、ヘキサン、１：３９、１：１９、及び１：９の酢酸エチル−ヘキサンのステップワイズグラジエントを使用したシリカゲルのクロマトグラフィーにかけて、シロップの表題化合物６５を1.95g得た。
【０３０４】
（Ｒ）−７−ベンゼンスルホニル−６−［（１Ｒ，３ａＲ，４Ｓ，７ａＲ）−４−（tert−ブチル−ジメチル−シラニルオキシ）−７ａ−メチル−オクタヒドロ−インデン−１−イル］−２−メチル−ヘプタン−２−オール（６７）及び（１Ｒ，３ａＲ，４Ｓ，７ａＲ）−１−（（Ｒ）−１−ベンゼンスルホニルメチル−５−メチル−５−トリエチルシラニルオキシ−ヘキシル）−４−（tert−ブチル−ジメチル−シラニルオキシ）−７ａ−メチル−オクタヒドロ−インデン（６８）
【化１２８】
2007525533.tif 000130
【０３０５】
1.95g（3.9mmol）の粗スルフィド６５を含有する500mLの丸底フラスコを８４ｇのジクロロメタン（63mL）と混合した。溶液を氷浴中で攪拌し、次いで2.77g（11mmol）のメタ−クロロ過安息香酸を１回で添加した。懸濁液を氷浴中で４０分間、次いで室温で２時間攪拌した。反応をＴＬＣ（１：１９のメタノール−ジクロロメタン）で監視した。反応時間の終わりに、Rf0.45の１つのスポットのみが観察された。次いで、1.68g（20mmol）の固体炭酸水素ナトリウムを懸濁液に添加し、懸濁液を１０分間攪拌し、次いで30mLの水を複数回に分けて添加し、激しい攪拌を５分間継続して、固体をすべて溶解した。混合物をさらに40mLのヘキサンで希釈し、３０分間攪拌し、41.6gのヘキサンを用いて分液漏斗に移した。下層を廃棄し、上層を25mLの飽和炭酸水素ナトリウム溶液で洗浄し、乾燥し（硫酸ナトリウム）、蒸発させて、3.48gの６７を得た。この材料をヘキサンで粉砕し、濾過し、蒸発させて、曇ったシロップの６７（2.81g）を得、次のステップで直接使用した。
【０３０６】
上記で得られた2.81gの６７を含有する100mLの丸底フラスコに、30mLのＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド1.43g（21mmol）のイミダゾール及び1.75mL（10mmol）のトリエチルシリルクロリドを加えた。混合物を、１７時間攪拌し、次いで５０ｇの氷−水で希釈し、１０分間攪拌し、さらに５ｍＬの食塩水及び60mLのヘキサンで希釈した。水層を20mLのヘキサンで再抽出し、２つの抽出物を合わせて、２回×30mLの水で洗浄し、乾燥し、蒸発させた。この材料は、Rf0.12の大きなスポット（１：３９の酢酸エチル−ヘキサン）及びRf0.06の小さなスポットを含んでいた。この材料を、ヘキサン、１：１００、１：７９、１：３９、及び１：１９の酢酸エチル−ヘキサンのステップワイズグラジエントを使用したシリカゲルのクロマトグラフィーにかけた。主要帯を１：３９及び１：１９の酢酸エチル−ヘキサンで溶出して、1.83gの６８を得た。
【０３０７】
（Ｒ）−５−ベンゼンスルホニル−６−［（１Ｒ，３ａＲ，４Ｓ，７ａＲ）−４−（tert−ブチル−ジメチル−シラニルオキシ）−７ａ−メチル−オクタヒドロ−インデン−１−イル］−１０−メチル−２−（Ｒ）−メチル−１０−トリエチルシラニルオキシ−ウンデカン−２，３−ジオール（６９）
【化１２９】
2007525533.tif 000131
【０３０８】
マグネチックスターラ、温度計、及びゴムセプタムと窒素スイープを付けたクライゼンアダプタを装備した100mLの三つ口丸底フラスコに、1.7636g（2.708mmol）のスルホン６８、1.114g（4.062mmol）のトシル酸エステル、及びベンゾフェノンケチルによって新たに蒸留した50mLのテトラヒドロフランを加えた。この溶液を−２０℃に冷却し、9.31mLの１．６Ｍブチルリチウムのヘキサン溶液を−２０℃以下で滴下した。−１０〜−２０℃の温度範囲を５時間維持した。冷却浴を取り外し、50mLの飽和塩化アンモニウム溶液、続いて75mLの酢酸エチル、及びすべての塩を溶解するのに十分な水を添加した。有機層を、15mLの食塩水で洗浄し、乾燥し、及び無色油にまで蒸発させた。この残渣を、ヘキサン、１：９，１：６、１：４、及び１：３の酢酸エチル−ヘキサンのステップワイズグラジエントを使用したシリカゲルのクロマトグラフィーにかけた。主要帯を、１：４及び１：３の酢酸エチル−ヘキサンで溶出して、無色シロップの1.6872gの化合物６９を得た。
【０３０９】
（Ｓ）−６−［（１Ｒ，３ａＲ，４Ｓ，７ａＲ）−４−（tert−ブチル−ジメチル−シラニルオキシ）−７ａ−メチル−オクタヒドロ−インデン−１−イル］−１０−メチル−２−（Ｒ）−メチル−１０−トリエチルシラニルオキシ−ウンデカン−２，３−ジオール（７０）
【化１３０】
2007525533.tif 000132
【０３１０】
マグネチックスターラ、温度計、及びゴムセプタムと窒素スイープを付けたクライゼンアダプタを装備した25mLの二口丸底フラスコに、1.6872g（2.238mmol）のスルホン６９及び40mLのメタノールを加えた。次いで、1.25g（51.4mmol）のマグネシウムを等量の２回に分けて、３０分の間隔をあけて攪拌された溶液に添加した。懸濁液を７０分間攪拌し、次いでさらに0.17gのマグネシウム及び約５ｍＬのメタノールを添加し、攪拌を１時間継続した。次いで、混合物を100mLのヘキサンで希釈し、50mLの１Ｍ硫酸を滴下すると、２つの液相になった。水層は中性であった。水層を25mLの１：１のジクロロメタン−ヘキサンで１回再抽出した。有機層を合わせ、次いで15mLの食塩水で１回洗浄し、乾燥し、蒸発させた。得られた材料を、ヘキサン、１：３９、１：１９、及び１：９の酢酸エチル−ヘキサンのステップワイズグラジエントを使用したシリカゲルのクロマトグラフィーにかけた。主要帯を１：９の酢酸エチル−ヘキサンで溶出して、1.2611gの無色シロップ７０を得た。
【０３１１】
（Ｓ）−６−［（１Ｒ，３ａＲ，４Ｓ，７ａＲ）−４−（tert−ブチル−ジメチル−シラニルオキシ）−７ａ−メチル−オクタヒドロ−インデン−１−イル］−２，１０−ジヒドロキシ−２，１０−ジメチル−ウンデカン−３−オン（７１）
【化１３１】
2007525533.tif 000133
【０３１２】
マグネチックスターラ、温度計、窒素スイープとゴムセプタムを付けたクライゼンアダプタを装備した25mLの丸底フラスコに、518mg（3.88mmol）のＮ−クロロスクシンアミド及び11mLのトルエンを加えた。５分間攪拌し（すべてが溶解するわけではない）、次いで０℃に冷却し、2.4mL（4.8mmol）のトルエン中２Ｍ硫化ジメチル溶液を添加する。混合物を５分間攪拌し、次いで−３０℃に冷却し、0.7143g（1.165mmol）のジオール７０の４×1.5mLのトルエン溶液を−３０℃で滴下した。攪拌をこの温度で１時間継続した。次いで、混合物を放置して２時間の間に−１０℃にまで温め、次いで−１７℃に冷却し、3.20mL（6.4mmol）のトルエン中２Ｍトリエチルアミンを滴下した。混合物を−１７〜−２０℃で１０分間攪拌し、次いで放置して徐々に室温にまで温めた。混合物を、シリカゲルカラムで、ヘキサン、１：７９、１：３９、１：１９、１：９、１：４、及び１：１の酢酸エチル−ヘキサンのステップワイズグラジエントを使用したクロマトグラフィーにかけた。主要帯を１：１の酢酸エチル−ヘキサンで溶出すると、0.3428gの固体化合物７１が得られた。
【０３１３】
（Ｓ）−２，１０−ジヒドロキシ−６−（（１Ｒ，３ａＲ，４Ｓ，７ａＲ）−４−ヒドロキシ−７ａ−メチル−オクタヒドロ−インデン−１−イル）−２，１０−ジメチル−ウンデカン−３−オン（７２）
【化１３２】
2007525533.tif 000134
【０３１４】
マグネチックスターラを装備した25mLの丸底フラスコに、0.3428g（0.69mmol）のジオール７１を加え、５ｍＬのアセトニトリル、次いで1.25mLのフルオロケイ酸溶液に溶解した。３時間後、混合物を35mLの酢酸エチルと10mLの水に分配し、水層を10mLの酢酸エチルで再抽出し、有機層を合わせて、２回×５ｍＬの水、１回×５ｍＬの１：１の食塩水−飽和炭酸水素ナトリウム溶液で洗浄し、乾燥し、蒸発させた。この材料を、１：４、１：３、１：２、及び１：１のステップワイズグラジエントを使用したシリカゲルのクロマトグラフィーにかけ、0.2085gの表題化合物７２を得た。
【０３１５】
（１Ｒ，３ａＲ，７ａＲ）−１−［（Ｓ）−５−ヒドロキシ−１−（４−ヒドロキシ−４−メチル−ペンチル）−５−メチル−４−オキソ−ヘキシル］−７ａ−メチル−オクタヒドロ−インデン−４−オン（７３）
【化１３３】
2007525533.tif 000135
【０３１６】
25mLの丸底フラスコに、0.2153g（0.56mmol）の７２、５ｍＬのジクロロメタン、及び0.20gのセライトを加えた。この攪拌された懸濁液に、1.00g（2.66mmol）の重クロム酸ピリジニウムを１回で添加した。反応物を３時間攪拌し、進行をＴＬＣ（１：１の酢酸エチル−ヘキサン）で監視した。反応混合物を５ｍＬのシクロヘキサンで希釈し、次いでシリカゲルＧに通して濾過した。カラムをジクロロメタン、続いて溶出物中に、溶質が検出されなくなるまで１：１の酢酸エチル−ヘキサンで溶出した。溶出物を蒸発させ、無色油。次いで、この油を、１：４、１：３、１：２、１：１及び２：１の酢酸エチル−ヘキサンのステップワイズグラジエントを使用したシリカゲルのクロマトグラフィーにかけて、0.2077gのジケトン７３を得た。
【０３１７】
（１Ｒ，３ａＲ，７ａＲ）−７ａ−メチル−１−［（Ｓ）−５−メチル−１−（４−メチル−４−トリメチルシラニルオキシ−ペンチル）−４−オキソ−５−トリメチルシラニルオキシ−ヘキシル］−オクタヒドロ−インデン−４−オン（７４）
【化１３４】
2007525533.tif 000136
【０３１８】
２５−ｍＬの丸底フラスコに、0.2077g（0.545mmol）のジケトン７３を加えた。この材料を、0.5mLのテトラヒドロフランと３ｍＬのシクロヘキサンの混合物に溶解した。得られた混合物に、0.30mL（2.0mmol）のＴＭＳ−イミダゾールを添加した。１０時間後、反応混合物を３ｍＬのヘキサンで希釈し、次いで濃縮し、ヘキサン、１：７９、１：３９、１：１９、及び酢酸エチル−ヘキサンのステップワイズグラジエントを使用したシリカゲルのクロマトグラフィーにかけて、0.2381gの無色油７４を得た。
【０３１９】
（Ｓ）−６−（（１Ｒ，３ａＳ，７ａＲ）−４−｛２−［（Ｒ）−３−（（Ｒ）−tert−ブチルジメチルシラニルオキシ）−５−（tert−ブチルジメチルシラニルオキシ）−シクロヘキシリデン］−エチリデン｝−７ａ−メチルオクタヒドロインデン−１−イル）−２，１０−ジメチル−２，１０−ビス−トリメチルシラニルオキシウンデカン−３−オン（７５）
【化１３５】
2007525533.tif 000137
【０３２０】
マグネチックスターラ、温度計、及び窒素スイープとゴムセプタムを含むクライゼンアダプタを装備した15mLの三つ口ナシ型フラスコに、0.2722g（0.4768mmol）の［２−［（３Ｒ，５Ｒ）−３，５−ビス（tert−ブチルジメチルシラニルオキシ）シクロヘキシリデン］エチル］ジフェニルホスフィンオキシド及び２ｍＬのテトラヒドロフランを加えた。溶液を−７０℃に冷却し、0.30mLのヘキサン中１．６Ｍブチルリチウムを添加した。濃赤色溶液を、その温度で１０分間攪拌し、次いで２ｍＬのテトラヒドロフランに溶解させた0.1261g（0.240mmol）のジケトン７４を、注射器で１０分間かけて滴下した。３時間１５分後、５ｍＬの飽和塩化アンモニウム溶液を、−６５℃で添加し、混合物を放置して１０℃にまで温め、次いで35mLのヘキサンと10mLの水に分配した。水層を10mLのヘキサンで１回再抽出し、合わせた層を、２ｍＬのｐＨ７緩衝液を含有する５ｍＬの食塩水で洗浄し、次いで乾燥し、蒸発させた。この材料を、１５×150mmのフラッシュカラムで、ヘキサン及び１：１００の酢酸エチル−ヘキサンのステップワイズグラジエントを使用したクロマトグラフィーにかけて、無色シロップの表題化合物７５を0.1572g得た。
【０３２１】
１，２５−ジヒドロキシ−２０Ｓ−２１（３−ヒドロキシ−３−メチル−ブチル）−２４−ケト−１９−ノル−コレカルシフェロール（６４）
【化１３６】
2007525533.tif 000138
【０３２２】
マグネチックスターラを装備した15mLの三つ口丸底フラスコに、155mg（0.17mmol）のテトラシリルエーテル７５を加えた。この無色残渣を、２ｍＬの１Ｍフッ化テトラブチルアンモニウムのテトラヒドロフラン溶液に溶解した。４３時間後、さらに０．５ｍＬの１Ｍ溶液のフッ化テトラブチルアンモニウム溶液を添加し、攪拌を５時間継続した。明黄褐色溶液を５ｍＬの食塩水で希釈し、５分間攪拌し、50mLの酢酸エチル及び５ｍＬの水を用いて分液漏斗に移し、次いで５ｍＬの酢酸エチルで再抽出した。有機層を合わせて、５回×10mLの水、10mLの食塩水で洗浄し、乾燥し、蒸発させた。得られた残渣を、１５×123mmのカラムで、２：３、１：１、２：１の酢酸エチル−ヘキサン、及び酢酸エチルのステップワイズグラジエントを使用したクロマトグラフィーにかけて、白色固体の６４（ＴＬＣ、酢酸エチル、Rf0.23）を得、ギ酸メチルで取り出し、濾過し、蒸発させ、固体物質の表題化合物６４を0.0753g得た。
【０３２３】
（合成例４５）１，２５−ジヒドロキシ−２０Ｓ−２１（３−ヒドロキシ−３−メチル−ブチル）−２４−ケト−コレカルシフェロール（７６）の合成
【化１３７】
2007525533.tif 000139
【０３２４】
（Ｓ）−６−｛（１Ｒ，３ａＳ，７ａＲ）−４−［２−［（Ｒ）−３−（tert−ブチル−ジメチル−シラニルオキシ）−５−（（Ｓ）−tert−ブチル−ジメチル−シラニルオキシ）−２−メチレン−シクロヘキシリデン］−エタ−（Ｅ）−イリデン］−７ａ−メチル−オクタヒドロ−インデン−１−イル｝−２，１０−ジメチル−２，１０−ビス−トリメチルシラニルオキシ−ウンデカン−３−オン（７７）
７４と［（２Ｚ）−２−［（３Ｓ，５Ｒ）−３，５−ビス（tert−ブチルジメチルシラニルオキシ）メチレンシクロヘキシリデン］−エチル］ジフェニルホスフィンオキシドを反応させることによる点以外は、実施例４で７５について記載したように、化合物７７を調製した。
【０３２５】
１，２５−ジヒドロキシ−２０Ｓ−２１（３−ヒドロキシ−３−メチル−ブチル）−２４−ケト−コレカルシフェロール（７６）
６４について実施例４４で記載したように７７を脱保護することによって、７７から化合物７６を調製した。
【０３２６】
（合成例４６）１α，２５−ジヒドロキシ−１６−エン−２０−シクロプロピル−コレカルシフェロール（７８）（化合物Ｈ）の合成
化合物（７８）を、下記の合成手順に従って合成した。
【化１３８】
2007525533.tif 000140
【０３２７】
攪拌された（３ａＲ，４Ｓ，７ａＲ）−１−｛１−［４−（tert−ブチル−ジメチル−シラニルオキシ）−７ａ−メチル−３ａ，４，５，６，７，７ａ−ヘキサヒドロ−３Ｈ−インデン−１−イル］）−シクロプロピル｝−エチニル（１．０ｇ、2.90mmol）のテトラヒドロフラン（15mL）溶液に、−７８℃でn-BuLi（2.72mL、4.35mmol、ヘキサン中１．６Ｍ）を添加した。−７８℃で１時間攪拌した後、アセトン（2.5mL、34.6mmol）を添加し、攪拌を２．５時間継続した。NH4Cl水溶液を添加し（15mL）、混合物を室温で１５分間攪拌し、次いでAcOEt（２回×50mL）で抽出した。合わせた抽出物を食塩水（50mL）で洗浄し、Na2SO4で乾燥した。溶媒を蒸発させた後の残渣（2.4g）を、ＦＣ（５０ｇ、ヘキサン中１０％AcOEt）によって精製して、（３ａＲ，４Ｓ，７ａＲ）−５−｛１−［４−（tert−ブチル−ジメチル−シラニルオキシ）−７ａ−メチル−３ａ，４，５，６，７，７ａ−ヘキサヒドロ−３Ｈ−インデン−１−イル］−シクロプロピル｝−２−メチル−ペント−３−イン−２−オール（1.05g、2.61mmol）を得、フッ化テトラブチルアンモニウム（６ｍＬ、6mmol、ＴＨＦ中1.0M）で処理し、６５〜７５℃で４８時間攪拌した。混合物をAcOEt（25mL）で希釈し、水（５回×25mL）、食塩水（25mL）で洗浄した。合わせた水性洗液をAcOEt（25mL）で抽出し、合わせた有機抽出物をNa2SO4で乾燥した。溶媒を蒸発させた後の残渣（1.1g）を、ＦＣ（５０ｇ、ヘキサン中２０％AcOEt）によって精製して、表題化合物（0.75g、2.59mmol、９０％）を得た。[α]30D=+2.7 c 0.75、CHCl3。1H NMR (CDCl3): 5.50 (1H, m), 4.18 (1H, m), 2.40 (2H, s), 2.35-1.16 (11H, m), 1.48 (6H, s), 1.20 (3H, s), 0.76-0.50 (4H, m); 13C NMR (CDCl3): 156.39, 125.26, 86.39, 80.19, 69.21, 65.16, 55.14, 46.94, 35.79, 33.60, 31.67, 29.91, 27.22, 19.32, 19.19, 17.73, 10.94, 10.37;
MS HREI C22H28O2の計算値  M+ 288.2089  実測値  M+ 288.2091。
【０３２８】
【化１３９】
2007525533.tif 000141
【０３２９】
（３ａＲ，４Ｓ，７ａＲ）−７ａ−メチル−１−［１−（−４−ヒドロキシ−４−メチル−ペント−２−イニル）−シクロプロピル］−３ａ，４，５，６，７，７ａ−ヘキサヒドロ−３Ｈ−インデン−４−オール（0.72g、2.50mmol）、酢酸エチル（10mL）、ヘキサン（24mL）、無水エタノール（0.9mL）、キノリン（４７μＬ）及びリンドラー触媒（156mg、CaCO3担持５％Ｐｄ）の混合物を室温で２時間水素化する。反応混合物を、セライトパッドに通して濾過し、パッドをAcOEtで洗浄した。濾液及び洗液を合わせ、１Ｍ  ＨＣｌ、NaHCO3、及び食塩水で洗浄した。Na2SO4で乾燥した後、溶媒を蒸発させ、残渣（0.79g）を、ＦＣ（４５ｇ、ヘキサン中20%AcOEt）によって精製して、表題化合物（640mg、2.2mmol、８８％）を得た。
【０３３０】
【化１４０】
2007525533.tif 000142
【０３３１】
（３ａＲ，４Ｓ，７ａＲ）−７ａ−メチル−１−［１−（４−ヒドロキシ−４−メチル−ペント−２Ｚ−エンイル）−シクロプロピル］−３ａ，４，５，６，７，７ａ−ヘキサヒドロ−３Ｈ−インデン−４−オール（100mg、0.34mmol）、１，４−ビス（ジフェニル−ホスフィノ）ブタン１，５シクロオクタジエンロジウムテトラフルオロボラート（25mg、0.034mmol）、ジクロロメタン（５ｍＬ）、及び水銀１滴の混合物を、Paar機器を使用して、室温、圧力５０p.s.i.で３時間水素化した。反応混合物を、セライトパッドに通して濾過し、次いで酢酸エチルで洗浄した。合わせた濾液及び洗液を、蒸発乾固し（110mg）、ＦＣ（１０ｇ、ヘキサン中20%AcOEt）によって精製して、表題化合物（75mg、0.26mmol、７５％）を得た。[α]30D=-8.5 c 0.65，CHCl3。1H NMR (CDCl3): 5.37 (1H, m,), 4.14 (1H, m), 2.37-1.16 (17H, m), 1.19 (6H, s), 1.18 (3H, s), 0.66-0.24 (4H, m);
MS HREI C19H32O2の計算値  M+H 292.2402。実測値  M+H 292.2404。
【０３３２】
【化１４１】
2007525533.tif 000143
【０３３３】
攪拌された（３ａＲ，４Ｓ，７ａＲ）−７ａ−メチル−１−［１−（４−ヒドロキシ−４−メチル−ペンテニル）−シクロプロピル］−３ａ，４，５，６，７，７ａ−ヘキサヒドロ−３Ｈ−インデン−４−オール（440mg、1.50mmol）及びセライト（２．０ｇ）のジクロロメタン（10mL）懸濁液に、室温で重クロム酸ピリジニウム（1.13g、3.0mmol）を添加した。得られた混合物を、５時間攪拌し、シリカゲル（１０ｇ）に通して濾過し、次いでシリカゲルパッドを、ヘキサン中２０％AcOEtで洗浄した。合わせた濾液及び洗液を蒸発させて、粗（３ａＲ，７ａＲ）−７ａ−メチル−１−［１−（４−ヒドロキシ−４−メチル−ペンテニル）−シクロプロピル］−３ａ，４，５，６，７，７ａ−ヘキサヒドロ−３Ｈ−インデン−４−オン（426mg、1.47mmol、９８％）を得た。攪拌された（３ａＲ，７ａＲ）−７ａ−メチル−１−［１−（４−ヒドロキシ−４−メチル−ペンテニル）−シクロプロピル］−３ａ，４，５，６，７，７ａ−ヘキサヒドロ−３Ｈ−インデン−４−オン（424mg、1.47mmol）のジクロロメタン（10mL）溶液に、室温でトリメチルシリル−イミダゾール（0.44mL、3.0mmol）を添加した。得られた混合物を、１．０時間攪拌し、シリカゲル（１０ｇ）に通して濾過し、シリカゲルパッドを、ヘキサン中10%AcOEtで洗浄した。合わせた濾液及び洗液を蒸発させて、表題化合物（460mg、1.27mmol、86％）を得た。[α]29D=-9.9 c 0.55, CHCl3。1H NMR (CDCl3): 5.33 (1H, dd, J=3.2, 1.5 Hz), 2.81 (1H, dd, J= 10.7, 6.2 Hz), 2.44 (1H, ddd, J=15.6, 10.7, 1.5 Hz), 2.30-1.15 (13H, m) 重複 2.03 ( ddd, J= 15.8, 6.4, 3.2 Hz), 1.18 (6H, s), 0.92 (3H, s), 0.66-0.28 (4H, m), 0.08 (9H, s); 13C NMR (CDCl3): 211.08 (0), 155.32(0), 124.77(1), 73.98(0), 64.32(1), 53.91(0), 44.70(2), 40.45(2), 38.12(2), 34.70(2), 29.86(3), 29.80(3), 26.80(2), 24.07(2), 22.28(2), 21.24(0), 18.35(3), 12.60(2), 10.64(2), 2.63 (3); MS HRES C22H38O2Siの計算値  M+ 362.2641。実測値  M+ 362.2648。
【０３３４】
【化１４２】
2007525533.tif 000144
【０３３５】
攪拌された（１Ｓ，５Ｒ）−１，５−ビス−（（tert−ブチルジメチル）シラニルオキシ）−３−［２−（ジフェニルホスフィノイル）−エタ−（Ｚ）−イリデン］−２−メチレン−シクロヘキサン（675mg、1.16mmol）のテトラヒドロフラン（８ｍＬ）溶液に、−７８℃でn-BuLi（0.73mL、1.17mmol）を添加した。得られた混合物を、１５分間攪拌し、（３ａＲ，７ａＲ）−７ａ−メチル−１−［１−（４−メチル−４−トリメチルシラニルオキシ−ペンチル）−シクロプロピル］−３ａ，４，５，６，７，７ａ−ヘキサヒドロ−３Ｈ−インデン−４−オン（210mg、0.58mmol）のテトラヒドロフラン（２ｍＬ）溶液を滴下した。反応混合物を、−７２℃で３．５時間攪拌し、ヘキサン（35mL）で希釈し、食塩水（30mL）で洗浄し、Na2SO4で乾燥した。溶媒を蒸発させた後の残渣（850mg）を、ＦＣ（１５ｇ、ヘキサン中１０％AcOEt）によって精製して、１α，３β−ジ（tert−ブチル−ジメチル−シラニルオキシ）−２５−トリメチルシラニルオキシ−１６−エン−２０−シクロプロピル−コレカルシフェロール（382mg、0.53mmol）を得た。１α，３β−ジ（tert−ブチル−ジメチル−シラニルオキシ）−２５−トリメチルシラニルオキシ−１６−エン−２０−シクロプロピル−コレカルシフェロール（382mg、0.53mmol）に、室温でフッ化テトラブチルアンモニウム（４ｍＬ、4mmol、１Ｍ  ＴＨＦ溶液）を添加した。混合物を、１５時間攪拌し、AcOEt（25mL）で希釈し、水（５回×20mL）、食塩水（20mL）で洗浄し、Na2SO4で乾燥した。溶媒を蒸発させた後の残渣（380mg）を、ＦＣ（１５ｇ、ヘキサン中５０％AcOEt、及びAcOEt）によって精製して、表題化合物（７８）（204mg、0.48mmol、８３％）を得た。[α]29D=+16.1 c 0.36，EtOH。ＵＶ λmax（EtOH）：208nm（ε 17024），264nm（ε 16028）；1H NMR (CDCl3): 6.37 (1H, d, J=11.3 Hz), 6.09 (1H, d, J=11.1 Hz),   5.33 (2H, m), 5.01 (1H, s), 4.44 (1H, m), 4.23 (1H, m), 2.80 (1H, m), 2.60 (1H, m), 2.38-1.08 (20H, m), 1.19 (6H, s), 0.79 (3H, s ),0.66-0.24 (4H, m);  13C NMR (CDCl3): 157.07(0), 147.62(0), 142.49(0), 133.00(0), 124.90(1), 124.73(1), 117.19(1), 111.64(2), 71.10(1), 70.70(0), 66.88(1), 59.53(1), 50.28(0), 45.19(2), 43.85(2), 42.86(2), 38.13(2), 35.59(2), 29.27(2), 29.14(3), 28.65(2), 23.57(2), 22.62(2), 21.29(0), 17.84(3), 12.74(2), 10.30(2); MS HRES C28H42O3の計算値  M+Na 449.3026。実測値  M+Na 449.3023．
【０３３６】
合成例４７−１−α−フルオロ−２５−ヒドロキシ−１６，２３Ｅ−ジエン−２６，２７−ビスホモ−２０−エピ−コレカルシフェロール（７９）（化合物Ｂ）の合成
化合物（７９）を、下記の合成手順に従って合成する。
【化１４３】
2007525533.tif 000145
【０３３７】
攪拌された１１−（５−ヒドロキシ−１，５−ジメチル−ヘキサ−３−エンイル）−７ａ−メチル−３ａ，４，５，６，７，７ａ−ヘキサヒドロ−３Ｈ−インデン−４−オール及びセライトのジクロロメタン（10mL）懸濁液に、室温で重クロム酸ピリジニウムを添加する。得られた混合物を、５時間攪拌し、シリカゲルに通して濾過し、次いでシリカゲルパッドをヘキサン中２０％AcOEtで洗浄する。合わせた濾液及び洗液を蒸発させて、ケトンを得る。攪拌されたケトンのジクロロメタン溶液に、室温でトリメチルシリル−イミダゾールを添加する。得られた混合物を１．０時間攪拌し、シリカゲルに通して濾過し、シリカゲルパッドをヘキサン中１０％AcOEtで洗浄する。合わせた濾液及び洗液を蒸発させて、表題化合物を得る。
【０３３８】
【化１４４】
2007525533.tif 000146
【０３３９】
攪拌されたtert−ブチル−｛３−［２−（ジフェニル−ホスフィノイル）−エチリデン］−５−フルオロ−４−メチレン−シクロヘキシルオキシ｝−ジメチル−シランのテトラヒドロフラン溶液に、−７８℃でn-BuLiを添加する。得られた混合物を、１５分間攪拌し、１−（５−エチル−１−メチル−５−トリメチルシラニルオキシ−ヘプタ−３−エンイル）−７ａ−メチル−３，３ａ，５，６，７，７ａ−ヘキサヒドロ−インデン−４−オンのテトラヒドロフラン溶液を滴下する。反応混合物を、−78℃で3.5時間攪拌し、ヘキサンで希釈し、食塩水で洗浄し、Na2SO4で乾燥する。溶媒を蒸発させた後の残渣を、ＦＣ（１５ｇ、ヘキサン中１０％AcOEt）によって精製して、シリル化された化合物を得た。シリル化された化合物に、室温でフッ化テトラブチルアンモニウムを添加する。混合物を１５時間攪拌し、AcOEt（25mL）で希釈し、水（５回×20mL）、食塩水（20mL）で洗浄し、Na2SO4で乾燥する。溶媒を蒸発させた後の残渣（380mg）を、ＦＣ（１５ｇ、ヘキサン中50%AcOEt、及びAcOEt）によって精製して、表題化合物（７９）を得る。
（
【０３４０】
）
（生物学的例）
（生物学的例１）：in vivoモデルにおけるビタミンＤ３類似体（化合物Ａ）の評価−ラットにおけるシクロホスファミド（ＣＹＰ）によって誘発される慢性ＩＣ
ＣＹＰの腹腔内注射によって誘発された化学性膀胱炎のラットモデルは、浴受け入れられている。ＣＹＰは、いくつかの悪性腫瘍の治療における診療で使用されている。その代謝産物のうちの１つであるアクロレインは、尿意頻数、切迫及び骨盤痛という症状を伴う出血性膀胱炎を引き起こす高濃度の尿に排出される。炎症過程は、膀胱の肉眼的組織像の変化、炎症性細胞浸潤（肥満細胞、マクロファージ、ＰＭＮ）の数及び分布の増加、シクロオキシゲナーゼ−２発現、及びプロスタグランジン産生、増殖因子及びサイトカインの産生を特徴とする。化学性膀胱炎のラットモデルは、慢性有痛性膀胱症候群である間質性膀胱炎に酷似し、従来、治療薬の試験用に使用されてきた。
【０３４１】
このモデルを使用して、ＣＹＰによって誘発される膀胱炎のラットにおける１，２５−ジヒドロキシビタミンＤ３類似体の経口投与の効果を試験した。ＣＹＰによって誘発される膀胱炎の無麻酔自由行動ラットにおいて、膀胱内圧パラメータに与える治療効果を監視した。下記の膀胱内圧パラメータを、各動物において記録した：
・  膀胱容量
・  注入圧力（膀胱注入の始めの圧力）
・  閾値圧（排尿直前の膀胱圧）
・  排尿圧（排尿中の最大膀胱圧）
・  非排尿膀胱収縮の有無（尿の排泄なしに少なくとも10cmＨ２Ｏの膀胱圧の上昇）
・  非排尿膀胱収縮の振幅
【０３４２】
動物：８週齢、体重１２５〜175gのメスウィスター（Wistar）ラットを使用した。２群の動物に、膀胱内圧力記録のためチューブを膀胱に埋め込んだ。回復後に、動物はすべて、ＣＹＰの腹腔内注射を３回受け、その後に処置群と偽薬対照群に分けた。
【０３４３】
処置群：ラットを経口により、１，２５−ジヒドロキシビタミンＤ３類似体（１，３−ジ−Ｏ−アセチル−１，２５−ジヒドロキシ−１６，２３Ｚ−ジエン−２６，２７−ヘキサフルオロ−１９−ノル−コレカルシフェロール）「化合物Ａ」で１４日間処置（１日投与量0.1μg/kg）
【０３４４】
対照群：ラットを経口により、処置群で送達されたのと同一の投与量のビヒクル（ミグリオール）で処置
薬物又はビヒクルの最後の投与を行って２４時間後、覚醒している自由行動動物に膀胱内圧測定を行った。
動物数／群：
偽薬対照動物      ４
処置動物          ３
【０３４５】
（方法）
ポリエチレンチュービングの膀胱への埋込み：
正中下腹部切開を全身吸入麻酔（イソフルリン及びＯ２）下で行い、先端部を熱で広げたポリエチレンチュービング（PE-50、Clay Adams、米国ニュージャージー州パーシッパニー）を膀胱ドームに挿入し、６−０のプロリーン巾着縫合糸で定位置に固定した。チュービングの遠心端をヒートシールし、皮下を通り抜け、動物の手の届かない頸部の後ろで外部に出した。腹部及び頸部の切開部を４−０のナイロン縫合糸で縫合した。
【０３４６】
（シクロホスファミドの腹腔内注射：）
回復後（５日間）、対象動物は、９日間に、ＣＹＰの腹腔内注射（Sigma Chemical、米国ミズーリ州セントルイス（St. Louis, MO）；各回75mg/kg、腹腔内）を３回受けた。１回目のＣＹＰ注射をして１０日目に、偽薬対照動物は、ビヒクルのみを受け、実験群は、１，２５−ジヒドロキシビタミンＤ３類似体である１，３−ジ−Ｏ−アセチル−１，２５−ジヒドロキシ−１６，２３Ｚ−ジエン−２６，２７−ヘキサフルオロ−１９−ノル−コレカルシフェロール「化合物Ａ」（胃管栄養法を用いた経口送達）で処置した。処置を開始して２週間後、膀胱の機能を評価するために、動物は無麻酔膀胱内圧測定を受けた。
【０３４７】
（膀胱内圧測定）
動物をケージ中、無拘束下に置き、カテーテルを、Ｔ字型チューブ経由で圧力トランスデューサー（Grass（登録商標）モデルPT300、米国ロードアイランド州ウェストウォーウィック（West Warwick, RI））及びマイクロインジェクション（Harvard Apparatus 22、米国マサチューセッツ州サウスナティック（South Natick, MA））に接続した。０．９％の生理食塩水溶液を、室温で膀胱に10mL／時間の速度で注入した。膀胱内圧力を、Neurodata Acquisition System（Grass（登録商標）モデル15、Astro-Med, Inc、米国ロードアイランド州ウェストウォーウィック（West Warwick, RI））を使用して連続記録した。２５〜３０分の初期安定化期の後に、少なくとも３つの再現性のある排尿周期が記録された。
【０３４８】
（実験のタイムライン：）
手順                                                      日
順化期                                                  １〜５
チューブ埋込み+回復期                                   ６〜１０
ＣＹＰ処置（３日おきに75mg/kgを３回腹腔内投与）         １１〜１７
処置（偽薬又は有効成分）                                １８〜３１
膀胱内圧検査評価                                        ３２
【０３４９】
（結果）
データ分析を表１と２、及び図１にまとめる。ここで：
Ｂｌ．Ｃａｐ＝膀胱容量（ｍＬ）
ＦＰ＝注入圧力（cmH2O）
ＴＰ＝閾値圧（cmH2O）
ＭＰ＝排尿圧（cmH2O）
NVBCの回数＝非排尿膀胱収縮の回数
NVBCの振幅＝非排尿膀胱収縮の振幅
【０３５０】
【表１】
2007525533.tif 000147
【０３５１】
【表２】
2007525533.tif 000148
【０３５２】
いくつかの膀胱内圧パラメータにおいて、変化が顕著であった。非排尿膀胱収縮の回数及び振幅の劇的な減少が、薬物で処置された動物において観察された。注入圧及び閾値圧においても、あまり顕著ではないが統計的にはやはり大幅な減少が記録された。処置によっては、膀胱容量の変化は生じなかった。
【０３５３】
慢性膀胱炎を伴う膀胱過活動は、刺激性でしばしば有痛性の尿路症状を伴う膀胱壁の頻繁な収縮で現れる。非排尿膀胱収縮がその頻数も振幅も大幅に減少したことは、間質性膀胱炎の患者における膀胱機能に与える効果が同様である場合、ビタミンＤ３類似体での経口治療には、これらの消耗性症状を緩和する潜在能力があることを示唆している。間質性膀胱炎を伴う膀胱内圧力の上昇は、上部尿路を潜在的に危険に曝す病態であるので、注入圧及び閾値圧の減少は、臨床的観点から重要である。
【０３５４】
（生物学的例２）：ラット膀胱の組織学的分析
実施例１の実験によるラット膀胱を、ホルマリンで固定し、パラフィンに包埋し、当技術分野で知られている方法によってヘマトキシリン及びエオシンで染色した。
病理組織学的試験を膀胱の少なくとも１０切片について行った。様々な炎症パラメータ：
・  止血
・  浮腫
・  炎症細胞の浸潤（大部分は、リンパ球及び単球）
・  上皮糜爛
・  線維化
を考慮し、下記の通りスコアを付けた：０＝炎症の徴候がまったくなく正常、１＝軽度、２＝中等度、３＝重度、４＝切片全体にわたって拡散した重度の徴候
【０３５５】
（結果）
下記の表３及び４は、化合物Ａの組織学的スコアに与える効果を示している。表３はビヒクルで処置された動物に言及し、表４は「化合物Ａ」で処置された動物に言及している。各炎症パラメータを、０〜４のスコア（ここで、０は正常、４は最も重度の症状）を付けた。
【０３５６】
【表３】
2007525533.tif 000149
【０３５７】
【表４】
2007525533.tif 000150
【０３５８】
図２は、ラット膀胱における炎症の組織学的徴候に与える化合物Ａの効果を示し、図３は、炎症の各徴候について組織学的スコアをまとめたヒストグラムを示している。
実施例１及び２のデータは、ビタミンＤ３類似体が、間質性膀胱炎の炎症性要素、及びその結果として生じる、間質性膀胱炎を特徴付ける膀胱過活動を治療するのに有用であることを明らかに実証している。
【０３５９】
（生物学的例３）：in vivoモデルにおけるビタミンＤ３類似体（化合物Ｂ）の評価−ラットにおけるシクロホスファミド（ＣＹＰ）によって誘発される慢性ＩＣ
方法
ポリエチレンチュービングの膀胱への埋込み
ウィスター（Wistar）ラット（250g、メス、体重１２５〜175g、８週齢）を使用した。２％のイソフルランによる全身吸入麻酔下で、先端部を熱で広げたポリエチレンチュービング（PE-50、Clay Adams、米国ニュージャージー州パーシッパニー（Parsippany，ＮＪ）)を膀胱ドームに挿入し、６−０のナイロン巾着縫合糸で定位置に固定した。チュービングの遠心端をシールし、皮下を通り抜け、頸部の後ろで小さい切開部を通り抜けて外部に出した。次いで、チュービングをコイル状に巻き、皮下に埋め込んだ。
【０３６０】
（シクロホスファミドの腹腔内注射）
回復後（５日間）、対象動物は、９日間に、ＣＹＰの腹腔内注射（Sigma Chemical、米国ミズーリ州セントルイス（St. Louis, MO）；各回75mg/kg、腹腔内）を３回受けた。１回目のＣＹＰ注射をして１０日目に、偽薬対照動物は、ビヒクルのみを受け、実験群は、１，２５−ジヒドロキシビタミンＤ３類似体である１，３−ジ−Ｏ−アセチル−１，２５−ジヒドロキシ−１６，２３Ｚ−ジエン−２６，２７−ヘキサフルオロ−１９−ノル−コレカルシフェロール「化合物Ａ」（胃管栄養法を用いた経口送達）で処置した。処置を開始して２週間後、膀胱の機能を評価するために、動物は無麻酔膀胱内圧測定を受けた。
【０３６１】
（処置）
処置群：４〜６匹のラットを経口により、ビタミンＤ３類似体（１−α−フルオロ−２５−ヒドロキシ−１６，２３Ｅ−ジエン−２６，２７−ビスホモ−２０−エピ−コレカルシフェロール）化合物「Ｂ」で連続して１４日間処置（１日投与量３０又は75ug/kg）。
【０３６２】
対照群：４匹のラットを経口により、処置群で送達されたのと同一の投与量のビヒクル（ミグリオール）で処置。
【０３６３】
化合物Ｂ（1mg/mL）のエタノール保存溶液を、ミグリオールビヒクルに適切な濃度で溶解した。対照動物は、同量のエタノールを含有するビヒクルを受けた。動物の体重を測定した後、毎日胃管栄養法によって、薬物（又はビヒクル）処置を実施した。薬物溶液は、最終体積100ul／体重１０グラムを算出して調製した。
【０３６４】
（膀胱内圧測定）
処置して２週間後、動物をケージ中、無拘束下に置き、カテーテルの遠心端を皮下嚢から引き出し、Ｔ字型チューブ経由で圧力トランスデューサー（Grass（登録商標）モデルPT300、米国ロードアイランド州ウェストウォーウィック（West Warwick, RI））及びマイクロインジェクション（Harvard Apparatus 22、米国マサチューセッツ州サウスナティック（South Natick, MA））に接続した。生理食塩水溶液（０．９％、室温）を、膀胱に10mL／時間の速度で注入した。膀胱内圧力を、Neurodata Acquisition System（Grass（登録商標）、Astro-Med, Inc、米国ロードアイランド州ウェストウォーウィック（West Warwick, RI））を使用して連続記録した。最低でも、３つの再現性のある排尿周期が記録された。各動物において、下記の膀胱内圧パラメータを記録した：注入圧力（ＦＰ：膀胱注入の始めの圧力）、閾値圧（ＴＰ：排尿直前の膀胱圧）、排尿圧（ＭＰ：排尿中の最大膀胱圧）、非排尿膀胱収縮の有無（NVBC：尿の排泄なしに少なくとも10cmH2Oの膀胱圧の上昇）。最後の排尿後に膀胱に残留している残尿を吸引、又は膀胱を重力でドレナージすることによって、排尿後の残尿（ＰＶＲ）を測定した。膀胱容量（ＢＣ）を、排尿体積とＰＶＲの合計として算出した。安楽死させた後、膀胱を回収し、その重量を記録した。
【０３６５】
（カルシウム血症のアセスメント）
血清カルシウム血症を、市販の比色試験（Calcium Dry-Fast、Sentinel CH. イタリア（Italy））によって評価した。簡潔に言えば、製造業者の手順に従って９６ウェルプレートに調製された100ulの反応溶液に、10ulの血清を添加した。室温で５分間インキュベートした後、分光光度計を用いて、試料を570nmで読み出し、指示されたように標準的基準を使用することによって、３回繰り返してカルシウムレベルを算出した。
【０３６６】
【表５】
2007525533.tif 000151
【０３６７】
ビタミンＤ化合物（この場合、化合物Ｂ）での処置の結果、いくつかの膀胱内圧パラメータにおいて、この場合も変化が顕著であった。
非排尿膀胱収縮は、両方の投与量レベルで、その頻数が大幅に減少した（30g/kg、p＜0.01；75ug/kg、p＜0.005）。図４を参照のこと。図５に示すように、化合物Ｂでの処理によって、両方の投与量レベル（30 ug/kg、p＜0.01；75ug/kg、p＜0.01）で膀胱容量の増大がもたらされた。
【０３６８】
化合物Ｂでの処理の結果、注入圧及び閾値圧でわずかな増大が見られた（統計的に有意でない）。非排尿膀胱収縮の振幅は、より高い投与レベルの化合物Ｂでの処理によって減少した（統計的に有意でない）。
化合物Ｂの両方の投与量レベルにおいて、平均血清カルシウムレベルは、わずかでしかなく、有意ではないが上昇した。図６を参照のこと（点線は、ラットにおける正常範囲限界の10.7mg/dlを示したものである）。
【０３６９】
（生物学的例４）：in vivoモデルにおけるビタミンＤ３類似体（化合物Ｂ）の評価−マウスにおけるアレルギー性ＩＣ
（方法）
（全般）
マウス（BALB/c、メス、８週齢、体重１８〜２０ｇ、Charles River、Calco ITA）を、４ｍｇのミョウバン（SERVA、ドイツ（Germany））の存在下にSigmaからのニワトリオバルブミン（ＯＶＡ、グレードＶ）を、10ug／マウス１匹で、１週間に１回、４週間腹腔内注射により注入することによって感作させた。これにより、血清において検出可能なＩｇＥのレベルの維持が誘導される。
【０３７０】
最後の追加免疫をして１又は２週間後に、感作マウスに麻酔をかけ（１．５％のイソフルラン）、次いで経尿道カテーテルを挿入した（２４ゲージ、３／４インチ；Angiocath, Becton-Dickson）。わずかに指圧を下腹部に加えて、尿を排出させた。
膀胱に、150ulの生理食塩水又はＯＶＡ単独を点滴注入し（1mg/150ul）、外傷及び膀胱尿管逆流を回避するために低速で注入し、注射器をカテーテル上の定位置に少なくとも３０分間維持して、３０分の間隔内で２回繰り返した。同じ手順の１回目から７〜１０日後に、膀胱内攻撃を繰り返した。
【０３７１】
処置群：１０匹のマウスを経口により、ビタミンＤ３類似体（１−α−フルオロ−２５−ヒドロキシ−１６，２３Ｅジエン−２６，２７−ビスホモ−２０−エピ−コレカルシフェロール）化合物「Ｂ」で１４日間処置した（１日投与量３０又は75ug/kg）。
対照群：１０匹のマウスを経口により、処置群で送達されたのと同一の投与量のビヒクル（ミグリオール）で処置
【０３７２】
化合物Ｂ（1mg/mL）のエタノール保存溶液を、ミグリオールビヒクルに適切な濃度で溶解した。対照動物は、同量のエタノールを含有するビヒクルを受けた。動物の体重を測定した後、毎日胃管栄養法によって、薬物（又はビヒクル）処置を実施した。薬物溶液は、最終体積100ul／体重１０グラムを算出して調製し、処置は、１回目の膀胱内オバルブミン攻撃の日に開始し、１２日間の全処置のため毎日維持したが、週末には中断した。図７は、実験のタイムラインを示している。
【０３７３】
（ELISA）
血清総ＩｇＥレベルは、市販のキット（BD Opteia、マウスIgE  ELISAセット、カタログ番号555248）を使用し、製造業者の指示に従うことによって測定した。簡潔に言えば、マイクロウェルに、コーティング緩衝液（Coating Buffer）中に希釈された捕獲抗体（Capture Antibody）を50uL／ウェルでコートした（０．１Ｍ炭酸ナトリウム、pH9.5  ８．４０ｇ  NaHCO3、3.56g  Na2CO3；1.0Lにするだけの十分量；pH9.5まで；新たに調製、又は調製して７日以内に使用、２〜８℃で貯蔵）。推奨抗体コーティング希釈１：２５０は、ロットに特有の指示書／分析証明書（Instruction/Analysis Certificate）によるものである。プレートをシールし、４℃で終夜インキュベートした。洗浄後（６回×ＰＢＳ中／Tween ０．１％）、プレートを≧200μL／ウェルのＰＢＳ/10%FBS）でブロックし、室温（ＲＴ）で１時間インキュベートした。100uLの標準、サンプル、及び対照をそれぞれ、ピペットで適切なウェルに移し入れ、プレートを室温で２時間インキュベートした。６回洗浄した後、100uLの調製された検出抗体（Detection Antibody）＋アビジン−ＨＲＰ（１：２５０）試薬を各ウェルに分注し、室温で１時間静置させた。上記のように洗浄した後、0.1mLの基質溶液（Substrate Solution）をプレートに添加し、さらに暗所で（プレートシーラーなしに）３０分間インキュベートした。反応を止めた（H2SO4 １Ｍ、50ul／ウェル）後、450nmにおける吸光度を、３０分以内に記録した。
【０３７４】
Ｏｖａ特異的ＩｇＥを、下記の手順に従って測定した。抗マウスＩｇＥ抗体（1ug/mL  Pharmingen、カタログ）を炭酸塩緩衝液でコートし、プレートを４℃でインキュベートした。ブロッキングした（＞200ul  PBS/10%FBS、１時間、３７℃）後、さらにプレートを、適切に希釈されたサンプル血清と共に４℃でＯＮにインキュベートした。徹底的に洗浄した後、ビオチン化オバルブミン（10ug/mL  最終）含有PBS/5%FBSを各ウェルに添加し、プレートを室温で２時間インキュベートした。Ｏｖａ特異的ＩｇＥは、ストレプトアビジン−ＨＲＰ（1:5000、Pharmingen、４５分、室温）及び特異的基質を添加することによって明らかになった。最後に、反応を止めた後、450nmでの吸光度を記録した。
【０３７５】
（組織学及び免疫組織化学）
膀胱を動物から外植し、２つの部分を縦方向に分割し、片半を直ちにホルマリン（１０％緩衝化）で少なくとも３時間固定するか、又はＯＣＴ凍結媒体（Tissue-Tek Sakura）に入れる際に液体窒素中でスナップ凍結した。組織学的分析では、固定化した膀胱をさらに処理し、最後にパラフィン包埋した。連続的に５ｕｍの切片に切断し、次いでGIEMSA（ＢＤＨ、２０％溶液、３時間、室温）で染色し、次いで０．１％酢酸で１０秒間脱染した。キシレンでの透徹ステップの後、スライドを、Eukitt液で永久マウントし、炎症性細胞浸潤、肥満細胞数、及び間質浮腫の存在について評価するために、病理学者によって盲検的に分析した。半定量的な組織学的スコアを使用し、次のように割り当てた：１は、軽度な浸潤、浮腫なし；２は、中程度の浸潤、わずかな浮腫；３は、重度の浸潤及び浮腫。
【０３７６】
選択された膀胱組織において、免疫組織化学的染色を凍結切片に行うことによってビタミンＤ３受容体（ＶＤＲ）の発現を調べた。切片を、室温においてアセトンで１０分間固定した。ＰＢＳで５回洗浄した後、内因性ペルオキシダーゼをクエンチするために、スライドを室温で0.3%H2O2を含有するメタノールと共に３０分間インキュベートし、次いで５％ウサギ正常血清と共に１時間プレインキュベートした。次いで、抗ＶＤＲ抗体（Affinity Bio Reagentのクローン９Ａ７アイソタイプIgG2b）をスライドに添加し（5ug/mL  最終）、４℃でインキュベーションを延長した。
【０３７７】
徹底的に洗浄した後、切片をウサギ抗ラットＩｇＧ（10ug/mL）と共に室温で１時間インキュベートし、再び洗浄し、さらにストレプトアビジン−ＨＲＰ（Vector Labs）と共に室温で３０分間インキュベートした。視覚的に良好な染色が実現されるまで特異的色原体（Vector labs）を添加することによって、スライドを展開し、ヘマトキシリンで対比染色し、最後にEukitt液（Bio-optica）で永久マウントした。
【０３７８】
（Taq-man分析）
RNeasy Miniキット（Qiagen）を使用することによって、全ＲＮＡを膀胱の片半から抽出し、ＤＮアーゼ１（Qiagen）で処置し、逆転写試薬（Reverse Transcription Reagent）（Applied Biosystems）をランダムヘキサマーと共に用いて逆転写を（製造業者の指示に従って）行った。１ｕｇのＲＮＡから、cDNAを合成した。リアルタイムＰＣＲを９６ウェルのオプティカルリアクションプレート（Applied Biosystems）で行った。各サンプルについて、標的遺伝子とハウスキーピング遺伝子（HPRT）とを、異なるウェルで（シングルプレックス）、２回繰り返して増幅した。下記のプロトコルに従って、増幅マスターミックス（amplification Master Mix）を調製した（体積は、最終体積が40ul／ウェルである単一のウェルを指す））：２Ｘ  TaqMan（登録商標）Universal PCR Master Mix（Applied Biosystems、4304437）：20ul；２０Ｘ  アッセイ標的遺伝子：２ｕｌ；Ｈ２Ｏ：８ｕｌ；cDNA：10ul。ＳＤＳ  7000（Applied Biosystems）装置で、下記の増幅プログラムを用いて反応を実施した：４０サイクルの場合、５０℃で２分；９５℃で１０分；９５℃で１５秒、及び６０℃で１分；。分析のため、サイクル閾値（Ｃｔ）をエクセルワークシートにエクスポートし、ΔＣｔ方法を使用して相対定量を行った。使用するプライマーはすべて、ＦＡＭレポーターをもたらした。
【０３７９】
（カルシウム血症のアセスメント）
市販の比色試験（Calcium Dry-Fast、Sentinel CH. イタリア）によって、血清カルシウム血症を評価した。簡潔に言えば、製造業者の手順に従って９６ウェルプレートに調製された100ulの反応溶液に、10ulの血清を添加した。室温で5分間インキュベートした後、分光光度計を用いて、サンプルを570nmで読み出し、指示されたように標準的基準を使用することによって、３回繰り返してカルシウムレベルを算出した.
【０３８０】
（結果）
（ELISA）
図８は、ＩｇＥの全量を示し、図９は、抗原特異的ＩｇＥの量を示す。データは、８〜１０匹の対象動物／群（処置、対照、及び攻撃前の血清レベル）で、少なくとも３回繰り返した単一の実験を表している。１つの投与量75ug/kgについてのみ、結果を示す。投与量30ug/kgについて同様の結果が得られた（図示せず）。
【０３８１】
データにより、この手順は、オバルブミン／ミョウバンで処理した動物中の抗原特異的血清ＩｇＥを、同じ動物の攻撃前の血清に比べて８倍増大させて、免疫応答を誘導する上で非常に有効であることが示唆されている。しかし、IgEの全量又はオバルブミン特異的IgEのレベルにおいて、ビヒクル処置動物と化合物Ｂ処置動物の間で大幅な変化は検出されなかった。この知見は、予想されるはずのことのようである。
【０３８２】
図１０に、肥満細胞由来のキマーゼMMCP1タンパク質の血清レベルを示す。抗原への曝露時に、膀胱粘膜は反応して、常在肥満細胞のデグラミュレーションを引き起こし、様々な炎症性メディエータの放出を引き起こす。化合物Ｂ（75ug/kg）で処置されたマウスは、ビヒクルで処置されたものより、キマーゼMMCP1タンパク質の血清レベルが有意に低く（p＜0.05）、肥満細胞に与える抑制効果が、炎症反応を誘導したことが示唆される。
【０３８３】
（カルシウム血症）
図１１に示すように、化合物Ｂ（75ug/kg）での処置によって、カルシウム血症レベルは毒性閾値を超えて上昇しなかった（点線は、マウスにおける毒性閾値10.7mg/dlを示す）。わずかではあるが統計的に有意な血清カルシウムレベルの上昇が、化合物Ｂで処置した群において顕著である（p＜0.05）。低い方の投与量（30mg/kg）の化合物Ｂで処置したマウスでは、血清カルシウムレベルの大幅な変化は検出されなかった（図示せず）。
【０３８４】
（体重）
図１２は、（化合物Ｂ、75ug/kg）で処置された動物及び対照動物の体重のバラツキを示している。データは平均値として表し、共に標準偏差値を示す。８〜１０匹の対象動物／群。２つの群のデータ点は、有意差を示していない。体重は、毒性の良い指標であるので、この知見は、化合物Ｂでの処置に起因する副作用がないことを支持するものである。
【０３８５】
（Taq-man分析）
図１３に、様々な炎症マーカーのレベルを示す：IL-13、MCPT2、及びFcεR1αを、生理食塩水攻撃（ビヒクル処置）及びオバルブミン攻撃（ビヒクル、化合物Ｂ30ug/kg、及び化合物Ｂ75ug/kg処置）の場合について提示する。結果は、試験対象体から回収された等量の血清を貯留することによって得た。化合物Ｂで経口処置することによって、３つの炎症マーカーすべての発現が、両方の投与量レベルにおいて（用量依存的に）大幅に減少する。生理食塩水での攻撃は、Ｔｈ２／肥満細胞特異的マーカーの増大を示さない。
【０３８６】
図１４は、オバルブミン攻撃された（ビヒクル及び化合物Ｂ処置75ug/kg）マウスについて、炎症マーカーのＩＬ−１３、MMCP4、及びFcεR1αの存在に関するデータを示す。単一の動物からの個々の値を示して、データを提示する。マーカーのアップレギュレーションが対照群内で様々な程度に観察され、これは動物が様々な速度で攻撃から回復できることを示唆している。しかし、ビタミンＤ３類似体で経口処置することによって、炎症マーカーの発現が低下し、この知見は、本発明の化合物が、膀胱におけるＴｈ２型炎症反応を調節できることを示唆している。
【０３８７】
（組織学）
図１５に、ビヒクル処理動物と化合物Ｂ処理（75ug/kg）動物の膀胱切片の盲検組織学的分析によるデータを提示する。肥満細胞（p＜0.05）、好酸球（p＜0.01）、及びリンパ球（p＜0.01）の大幅な減少が観察され、浮腫は完全に消散されるようである（p＜0.001）。
【０３８８】
化合物Ｂでの処置の効果は、図１６に示す代表的スライドでも明らかであり、化合物Ｂ処置動物（75ug/kg）では、浮腫の徴候は見られないが、対照動物（ビヒクル処置）では、矢印で示されるいくつかの病変が見られる。
【０３８９】
（考察）
この実施例で提示されたデータは、ビタミンＤ３類似体化合物Ｂが、IL-13やFcεR1αなどの典型的マーカーの発現を低下させることによって、膀胱におけるＴｈ２型炎症反応を調節するのに有効であるという仮説を支持するものである。さらに、炎症性細胞浸潤の減少を、薬物治療時のオバルブミン攻撃された膀胱内でも検出することができ、おそらくサイトカイン／ケモカイン環境の減少、及び骨髄における細胞成熟の障害のため、炎症細胞の遊走が減少するかもしれないということが示唆される。化合物Ｂ処置は、血清におけるMMCP1タンパク質の放出も抑制し、肥満細胞活性化に直接影響を及ぼすことが示唆される。しかし、この観察された効果が、膀胱粘膜に遊走する肥満細胞が減少することによって、又はビタミンＤ３類似体が肥満細胞脱顆粒に直接影響を及ぼすことによって生じるものかどうかは、依然として不明である。
【０３９０】
ビタミンＤ３類似体化合物Ｂでの経口処置は、慢性膀胱炎症のアレルゲン誘導性モデルにおける膀胱に抗炎症効果を与え、ビタミンＤ化合物が、間質性膀胱炎のための治療の新しい選択肢になることを示唆していると結論を出すことができる。
【０３９１】
（生物学的例５）：in vivoモデルにおけるビタミンＤ３類似体（化合物Ｃ〜Ｉ）の評価−マウスにおけるアレルギー性ＩＣ
（方法）
先に実施例６で記載した一般的手順に従って、実施例７における実験を行った。マウスを生理食塩水（未処置）又はオバルブミン（表６にug/kgの単位で示す投与量のビヒクル又は化合物Ｃ〜Ｉの１つで処置）で攻撃した。
【０３９２】
【表６】
2007525533.tif 000152
【０３９３】
（結果）
図１７に、実施例7の実験結果をまとめる。図18〜26に、データを図式的に示す。
図１８に、FcεR1α炎症マーカーの発現を示す。化合物Ｅ（p＜0.05）、化合物Ｈ（p＜0.05）、特に化合物Ｆ（p＜0.001）での処置は、FcεR1α遺伝子のmRNA発現レベルの統計的に有意な低下をもたらした。
【０３９４】
図１９に、IL-13炎症マーカーの発現を示す。化合物Ｈ（p＜0.05）及び化合物Ｉ（p＜0.05）、特に化合物Ｅ（p＜0.001）及び化合物Ｆ（p＜0.001）での処置は、IL-13遺伝子のmRNA発現レベルの統計的に有意な低下をもたらした。
図２０に、MMCP4炎症マーカーの発現を示す。化合物Ｈ（p＜0.05）及び化合物Ｉ（p＜0.05）、特に化合物Ｅ（p＜0.001）及び化合物Ｆ（p＜0.001）での処置は、ＭＭＣＰ４遺伝子のmRNA発現レベルの統計的に有意な低下をもたらした。
図２１は、MMCP1の血清レベルを示す。化合物Ｆ（p＜0.05）、特に化合物Ａ（p＜0.001）及び化合物Ｅ（p＜0.001）での処置は、MMCP1タンパク質の血清レベルの統計的に有意な低下をもたらした。
【０３９５】
図２２〜２５に、盲検組織学的分析によるデータを示す。試験化合物のいくつかで処置した場合のデータは、この時点では利用できないことに留意されたい。図２２に示すように、ビタミンＤ３類似体化合物Ｃでの処置は、対照（ビヒクル処置）動物に比べて、膀胱壁における肥満細胞の有意な減少（p＜0.05）をもたらす。図２３に示すように、化合物Ａでの処置は、膀胱壁における好酸球の有意な減少（p＜0.05）をもたらす。図２４は、化合物Ｅでの処置と、化合物Ｉでの処置は共に、膀胱壁におけるLMPC数の有意な減少をもたらした（どちらの処置も、p＜0.05）ことを明らかにしている。図２５に、浮腫評価を示す。
【０３９６】
化合物Ｃ、化合物Ｅ、化合物Ｆ、化合物Ｈ、及び化合物Ｉでの処置は、ビヒクル処置対照群に比べて、血清カルシウムレベルのわずかな上昇をもたらし（いずれの場合も、p＜0.001）、血清カルシウム上昇の程度は、処置群の中で様々である。化合物A又は化合物Gでの処置は、血清カルシウムレベルの有意な上昇は示さなかった。
【０３９７】
上記の実施例７で提示した結果をすべてまとめると、これらの化合物を、間質性膀胱炎のアレルゲン誘導性慢性膀胱炎症モデルにおける膀胱の炎症を評価するいくつかのパラメータを減少させる際のその有効性に関してランク付けできると結論を下すことができる。有効性のランクは次の通りである：化合物Ｅ＞化合物Ｆ＞化合物Ｂ＞化合物Ｈ＞化合物Ｉ＞化合物Ａ＞化合物Ａ＝化合物Ｇ。まとめると、これらのデータから、ビタミンＤ化合物が、間質性膀胱炎のための治療の新しい選択肢となることが確認される。
【０３９８】
（製剤例）
（製剤例１Ａ）：軟質ゼラチンカプセル製剤Ｉ
アイテム    材料                                                ｍｇ／カプセル
１          化合物Ａ                                            10.001〜0.02
２          ブチル化ヒドロキシトルエン（BHT)                    0.016
３          ブチル化ヒドロキシアニソール（BHA)                  0.016
４          ミグリオール812  十分量                             160.0
【０３９９】
製造手順：
１．ＢＨＴ及びＢＨＡをミグリオール８１２に懸濁し、溶解するまで攪拌しながら約５０℃に温める。
２．化合物Ａを５０℃でステップ１の溶液に溶解する。
３．ステップ２の溶液を室温で冷却する。
４．ステップ３の溶液を軟質ゼラチンカプセルに充填する。
注：製造ステップはすべて、窒素雰囲気中で行い、光から保護する。
【０４００】
（製剤例１Ｂ）：軟質ゼラチンカプセル製剤ＩＩ
アイテム    材料                                              ｍｇ／カプセル
１          化合物Ａ                                          10.001〜0.02
２          ジ−α−トコフェロール                            0.016
３          ミグリオール８１２  十分量                        160.0
【０４０１】
製造手順：
１．ジ−α−トコフェロールをミグリオール８１２に懸濁し、溶解するまで攪拌しながら約５０℃に温める。
２．化合物Ａを５０℃でステップ１の溶液に溶解する。
３．ステップ２の溶液を室温で冷却する。
４．ステップ３の溶液を軟質ゼラチンカプセルに充填する。
【０４０２】
（製剤例２Ａ）：経口剤形軟質ゼラチンカプセル剤
経口投与用のカプセル剤は、窒素中、暗室灯を用いて、150ｍｇの分別蒸留したヤシ油（例えば、ミグリオール812）中0.01〜25.0ｍｇの化合物Ｂと共に、0.015ｍｇのブチル化ヒドロキシトルエン（BHT)及び0.015ｍｇのブチル化ヒドロキシアニソール（BHA）を、軟質ゼラチンカプセルに充填して配合する。
【０４０３】
カプセル剤を下記のプロセスによって調製する：
１．ＢＨＴ及びＢＨＡを分別蒸留されたヤシ油（例えば、ミグリオール８１２）に懸濁し、溶解するまで攪拌しながら約５０℃に温める。
２．化合物Ｂを５０℃でステップ１の溶液に溶解する。
３．ステップ２の溶液を室温に冷却する。
４．ステップ３の溶液を軟質ゼラチンカプセルに充填する。
製造ステップはすべて、窒素雰囲気中で行い、自然光から保護する。
【０４０４】
（製剤例２Ｂ）：経口剤形軟質ゼラチンカプセル剤
経口投与用のカプセル剤は、窒素中、暗室灯を用いて：150mgの分別蒸留されたヤシ油（ミグリオール８１２）中150μgの化合物Ｂと共に、0.015mgのブチル化ヒドロキシトルエン（ＢＨＴ）及び0.015mgのブチル化ヒドロキシアニソール（ＢＨＡ）を、軟質ゼラチンカプセルに充填して配合する。
【０４０５】
（製剤例２Ｃ）：経口剤形軟質ゼラチンカプセル剤
経口投与用のカプセル剤は、窒素中、暗室灯を用いて：150mgの分別蒸留されたヤシ油（ミグリオール８１２））中75μgの化合物Ｂと共に、0.015mgのブチル化ヒドロキシトルエン（ＢＨＴ）及び0.015mgのブチル化ヒドロキシアニソール（ＢＨＡ）を、軟質ゼラチンカプセルに充填して配合する。
【０４０６】
明細書及び下記の特許請求の範囲全体にわたって、文脈が別段の断りを必要としない限り、「含む（comprise）」という単語、及び「含む（comprises）」や「含んでいる（comprising）」などの変形は、記載の整数、ステップ、一群の整数、又は一群のステップを包含するが、他のいかなる整数、ステップ、一群の整数、又は一群のステップを除外しないことを意味するものと理解されたい。
【０４０７】
（参照による組込み）
この明細書全体にわたって引用されているすべての文献（参考文献、発行済み特許、特許出願公開、及び同時係属中の特許出願を含めて）の内容は、参照によりその全体が本明細書に明示的に組み込まれる。
【０４０８】
均等物
当業者は、ルーチンの実験を用いるだけで、本明細書に記載する本発明の特有の実施態様の等価形態の多くを理解し、又は確認することができるであろう。このような等価形態は、特許請求の範囲によって包含されるものとする。
次に、下記の非限定的な実施例、図を参照して、本発明を記述する：
【図面の簡単な説明】
【０４０９】
【図１】ビタミンＤ３類似体「化合物Ａ」で処置されたラットと対照（ビヒクルで処置された）ラットにおいて記録された膀胱内圧パラメータの比較を示す図である。
【図３】炎症の各徴候について、４匹のラット／群の組織学的スコアを要約するヒストグラムである。様々な炎症パラメータ：止血、浮腫、炎症細胞の浸潤（大部分は、リンパ球及び単球）、上皮糜爛、線維化を考慮し、実施例２に記載のようにスコアを付けた。組織学的スコアの平均値±標準偏差を記入した。
【図４】実施例５の対象体が経験した非排尿膀胱収縮の回数を示す図である。各処置群（ビヒクル対照、30ug/kgの化合物Ｂ、及び75ug/kgの化合物Ｂ）について、平均収縮回数を、標準偏差を指示する誤差棒と共に示す。
【図５】実施例５の対象体の膀胱容量を示す図である。各処置群（ビヒクル対照、30ug/kgの化合物Ｂ、及び75ug/kgの化合物Ｂ）について、平均膀胱容量（ｍＬ）を、標準偏差を指示する誤差棒と共に示す。
【図６】実施例５の対象体の血清カルシウムレベルを示す図である。処置群（ビヒクル対照、30ug/kgの化合物Ｂ、及び75ug/kgの化合物Ｂ）中の各対象体について、血清中のカルシウムレベル（mg/dL）を、水平線で示された各群の平均レベルと共に示す。
【図７】実施例６について実験タイムラインを示す図である。
【図８】実施例６の対象体の血清中で検出されたＩｇＥタンパク質の全量を示す図である。各群（攻撃前、ビヒクル処置対照、75ug/kgの化合物Ｂ処置）について、ＩｇＥの平均全量（ug/mL）を、標準偏差を指示する誤差棒と共に示す。
【図９】実施例６の対象体の血清中で検出されたオバルブミン特異的ＩｇＥタンパク質の量を示す図である。各群（攻撃前、ビヒクル処置対照、75ug/kgの化合物Ｂ処置）について、血清中の特異的特異的ＩｇＥタンパク質の平均量（OD450）を、標準偏差を指示する誤差棒と共に示す。
【図１０】実施例６の対象体中の血清MMCP1タンパク質レベルを示す図である。各群（攻撃前、ビヒクル処置対照、75ug/kgの化合物Ｂ処置）について、血清MMCP1タンパク質の平均レベル（ug/mL）を、標準偏差を指示する誤差棒と共に示す。このデータは、各対象体に由来する個々の値をオーバーレイしている。
【図１１】実施例６の対象体の血清カルシウムレベルを示す図である。処置群（ビヒクル対照及び75ug/kgの化合物Ｂ）の各対象体について、血清中のカルシウムレベル（mg/dL）を、水平線で示されたで指された各群の平均レベルと共に示す。延長された破線の水平線は、カルシウム毒性が出現し始めるレベルを示す。
【図１２】実施例６の対象体の体重のバラツキを示す図である。両処置群（ビヒクル対照及び75ug/kgの化合物Ｂ）について、毎日の時点で平均体重（ｇ）を示し、誤差棒は、標準偏差を示す。
【図１３】実施例６の対象体中の炎症マーカー遺伝子IL-13、MCPT2及びFcεR1αのmRNA発現レベルを示す図である。データは、生理食塩水攻撃（ビヒクル処置）及びオバルブミン攻撃（ビヒクル、30ug/kgの化合物Ｂ、及び75ug/kgの化合物Ｂ処置）について、ハウスキーピング遺伝子に比べた各マーカーのレベルを示す図である。
【図１４】実施例６の対象体中の炎症マーカー遺伝子IL-13、MMCP4、及びFcεR1αのmRNA発現レベルを示す図である。この図は、オバルブミン攻撃された処置群（ビヒクル又は75ug/kgの化合物Ｂ）について、ハウスキーピング遺伝子に比べた各マーカーのレベルを示す。対象体の個々のデータ点を、平均レベルを指示する水平線と共に示す。
【図１５】実施例６の対象体に実施された組織学的分析（肥満細胞浸潤、浮腫、好酸球及びリンパモノ−プラズマ細胞）の結果を示す図である。この図は、各対象体に割り当てられたスコアを、各処置群（ビヒクル又は75ug/kgの化合物Ｂ）について水平線で示された平均レベルと共に示す。
【図１６】ビヒクル及び75ug/kgの化合物Ｂで処置された動物の代表的な膀胱切片（×５０倍率）を示す図である。組織学的病変を矢印で示す。
【図１７】実施例７の実験結果の要約を示す表である。
【図１８】実施例７の対象体中の炎症マーカー遺伝子FcεR1αのmRNA発現レベルを示す図である。この図は、生理食塩水攻撃された未処置群及びオバルブミン攻撃された処置群（ビヒクル、化合物Ｃ〜化合物Ｉ処置）について、ハウスキーピング遺伝子に比べたFcεR1αのレベルを示す。対象体の個々のデータ点を、平均レベルを指示する水平線と共に示す。
【図１９】実施例７の対象体中の炎症マーカー遺伝子IL-13のmRNA発現レベルを示す図である。この図は、生理食塩水攻撃された未処置群及びオバルブミン攻撃された処置群（ビヒクル、化合物Ｃ〜化合物Ｉ処置）について、ハウスキーピング遺伝子に比べたIL-13のレベルを示す。対象体の個々のデータ点を、平均レベルを指示する水平線と共に示す。
【図２０】実施例７の対象体中の炎症マーカー遺伝子MMCP4のmRNA発現レベルを示す図である。この図は、生理食塩水攻撃された未処置群及びオバルブミン攻撃された処置群（ビヒクル、化合物Ｃ〜化合物Ｉ処置）について、ハウスキーピング遺伝子に比べたMMPC4のレベルを示す。対象体の個々のデータ点を、平均レベルを指示する水平線と共に示す。
【図２１】実施例７の対象体中の血清MMCP1タンパク質レベルを示す図である。この図は、攻撃前、生理食塩水攻撃された未処置群、及びオバルブミン攻撃された処置群（ビヒクル，化合物Ｃ〜化合物Ｉ処置）について、血清中のMMCP1タンパク質のレベル（ng/mL）を示す。対象体の個々のデータ点を、平均レベルを指示する水平線と共に示す。
【図２２】実施例７の対象体に実施された肥満細胞浸潤の組織学的分析の結果を示す図である。この図は、各対象体に割り当てられたスコアを、各処置群（ビヒクル、化合物Ｃ、化合物Ｅ、化合物Ｆ、化合物Ｈ、又は化合物Ｉ）について水平線で示された平均レベルと共に示す。
【図２３】実施例７の対象体に実施された好酸球の組織学的分析の結果を示す図である。この図は、各対象体に割り当てられたスコアを、各処置群（ビヒクル、化合物Ｃ、化合物Ｅ、化合物Ｆ、化合物Ｈ、又は化合物Ｉ）について水平線で示された平均レベルと共に示す。
【図２４】実施例７の対象体に実施されたLMPCの組織学的分析の結果を示す図である。この図は、各対象体に割り当てられたスコアを、各処置群（ビヒクル、化合物Ｃ、化合物Ｅ、化合物Ｆ、化合物Ｈ、又は化合物Ｉ）について水平線で示された平均レベルと共に示す。
【図２５】実施例７の対象体に実施された浮腫の組織学的分析の結果を示す図である。この図は、各対象体に割り当てられたスコアを、各処置群（ビヒクル、化合物Ｃ、化合物Ｅ、又は化合物Ｆ）について水平線で示された平均レベルと共に示す。
【図２６】実施例７の対象体の血清中のカルシウム濃度を示す図である。処置群（ビヒクル対照、化合物Ｃ〜Ｉ）の各対象体について、血清カルシウム濃度（mg/dL）を、水平線で示された各群の平均レベルと共に示す。
【図１】
2007525533.tif 000158
【図２】
2007525533.tif 000159
【図３】
2007525533.tif 000160
【図４】
2007525533.tif 000161
【図５】
2007525533.tif 000162
【図６】
2007525533.tif 000163
【図７】
2007525533.tif 000164
【図８】
2007525533.tif 000165
【図９】
2007525533.tif 000166
【図１０】
2007525533.tif 000167
【図１１】
2007525533.tif 000168
【図１２】
2007525533.tif 000169
【図１３】
2007525533.tif 000170
【図１４】
2007525533.tif 000171
【図１５】
2007525533.tif 000172
【図１６】
2007525533.tif 000173
【図１７】
2007525533.tif 000174
【図１８】
2007525533.tif 000175
【図１９】
2007525533.tif 000176
【図２０】
2007525533.tif 000177
【図２１】
2007525533.tif 000178
【図２２】
2007525533.tif 000179
【図２３】
2007525533.tif 000180
【図２４】
2007525533.tif 000181
【図２５】
2007525533.tif 000182
【図２６】
2007525533.tif 000183
【国際調査報告】
2007525533.tif 000184
2007525533.tif 000185
2007525533.tif 000186