(57)【要約】  カスパーゼ活性及びアポトーシスは、一般式Ｍ１−Ｌ−Ｍ２の活性２量体Ｓｍａｃペプチド模倣物を用いて促進される。ここで、部分Ｍ１及びＭ２は、単量体Ｓｍａｃ模倣物であり、Ｌは共有結合性リンカーである。標的癌細胞又は炎症細胞を活性２量体Ｓｍａｃ模倣物の有効量と接触させると、結果として標的細胞のアポトーシスの増加が検出される。接触段階は、２量体模倣物の治療有効量を含む薬剤組成物を投与することによって実施することができる。個体は、新生物増殖性病態を治療するための同時又は先行する放射線又は化学療法を受けることができる。【特許請求の範囲】
【請求項１】
式ＩＩの２量体化合物又は薬剤として許容されるその塩。
【化１】
2007526321.tif 000047
（式中、
Ｒ１及びＲ１’は、水素、場合によっては置換されていてもよいメチル、及びヒドロキシルから選択され、
Ｒ２及びＲ２’は、場合によっては置換されていてもよいメチル及び場合によっては置換されていてもよいエチルから選択され、
Ｒ３及びＲ３’はＣＨ２、ＮＨ、Ｏ及びＳから選択され、
Ｒ４及びＲ４’はＣＨ及びＮから選択され、
Ｒ５−Ｒ８及びＲ５’−Ｒ８’は、水素、場合によってはヘテロでもよい、場合によっては置換されていてもよいアルキル、場合によってはヘテロでもよい、場合によっては置換されていてもよいアルケニル、場合によってはヘテロでもよい、場合によっては置換されていてもよいアルキニル、場合によってはヘテロでもよい、場合によっては置換されていてもよいアリールから選択され、
Ｌは、Ｒ２、Ｒ５、Ｒ６又はＲ７をＲ２’、Ｒ５’、Ｒ６’又はＲ７’と共有結合的に連結するリンカーである。）
【請求項２】
Ｒ１及びＲ１’が水素及びメチルから選択される、請求項１に記載の化合物。
【請求項３】
Ｒ２及びＲ２’がメチル及びエチルから選択される、請求項１に記載の化合物。
【請求項４】
Ｒ３及びＲ３’がＮＨである、請求項１に記載の化合物。
【請求項５】
Ｒ４及びＲ４’がＣＨである、請求項１に記載の化合物。
【請求項６】
Ｒ５及びＲ５’がＣ１−Ｃ３アルキルである、請求項１に記載の化合物。
【請求項７】
Ｒ１及びＲ１’が水素及びメチルから選択され、Ｒ２及びＲ２’がメチル及びエチルから選択され、Ｒ３及びＲ３’がＮＨであり、Ｒ４がＣＨであり、Ｒ５及びＲ５’がＣ１−Ｃ３アルキルであり、ＬがＲ５、Ｒ６又はＲ７をＲ５’、Ｒ６’又はＲ７’と共有結合的に連結する、請求項１に記載の化合物。
【請求項８】
Ｒ６／Ｒ６’とＲ７／Ｒ７’又はＲ７／Ｒ７’とＲ８／Ｒ８’が５から８員環中で連結されている、請求項１に記載の化合物。
【請求項９】
Ｒ７とＲ８が５又は６員環中で連結されている、請求項１に記載の化合物。
【請求項１０】
Ｒ６とＲ７が５又は６員環中で連結されている、請求項１に記載の化合物。
【請求項１１】
Ｒ６とＲ７が５員環中で連結され、Ｌが該環をＲ２’、Ｒ５’、Ｒ６’又はＲ７’と共有結合的に連結する、請求項１に記載の化合物。
【請求項１２】
Ｒ８が５又は６員環を含む、請求項１に記載の化合物。
【請求項１３】
Ｒ８が、少なくとも１個のヘテロ原子と、少なくとも１個の置換と、少なくとも１個の不飽和とを含む５員環を含む、請求項１に記載の化合物。
【請求項１４】
Ｒ１／Ｒ１’とＲ２／Ｒ２’が５員環中で連結されている、請求項１に記載の化合物。
【請求項１５】
Ｌが４〜１００原子及び４０〜１ｋＤの連続鎖である、請求項１に記載の化合物。
【請求項１６】
Ｌが、場合によってはヘテロでもよい、場合によっては置換されていてもよいジアルキニル基である、請求項１に記載の化合物。
【請求項１７】
Ｌがプロトン化アミン又はアルキル化アミンで置換され、該化合物がトリアミンである、請求項１に記載の化合物。
【請求項１８】
前記２量体が前記リンカーについて対称である、請求項１に記載の化合物。
【請求項１９】
前記２量体が対称である、請求項１に記載の化合物。
【請求項２０】
請求項１に記載の化合物と薬剤として許容される賦形剤とを含む、薬剤組成物。
【請求項２１】
望ましくないカスパーゼ活性に関連する疾患を治療するために、請求項１に記載の化合物と薬剤として許容される賦形剤とを含む薬剤組成物の使用を記載した使用説明書が同時梱包された、前記組成物。
【請求項２２】
請求項１に記載の化合物の単位投与量を含む、請求項１に記載の薬剤組成物。
【請求項２３】
請求項１に記載の化合物の有効投与量を投与する段階と、その結果として生じる、望ましくないカスパーゼ活性に関連する疾患に付随する病態の減少を検出する段階とを含む、該疾患を治療する方法。
【請求項２４】
請求項１に記載の化合物の有効投与量を投与する段階と、その結果として生じる、望ましくないカスパーゼ活性に関連する疾患に付随する病態の減少を検出する段階とを含み、該疾患が炎症性又は新生物増殖性疾患である、該疾患を治療する方法。
【請求項２５】
カスパーゼを含む組成物を請求項１に記載の化合物の有効量と接触させる段階と、その結果として生じる、カスパーゼ活性の減少を検出する段階とを含む、カスパーゼを阻害する方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本研究は、Ｎａｔｉｏｎａｌ  Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅ  ｏｆ  Ｈｅａｌｔｈ  Ｇｒａｎｔ  Ｎｏ．Ｐ０１  ＣＡ９５４７１０１の助成を受けた。米国政府は、本願に関して発行される特許における権利を有することができる。
本願は、２００４年３月１日に出願された米国出願第６０／５４９，５２０号の優先権を主張するものである。
【０００２】
本発明の分野は、２量体小分子アポトーシス増強剤である。
【背景技術】
【０００３】
アポトーシスは、全ての多細胞生物の発達及びホメオスタシスにおいて中心的役割を果たす。アポトーシスの異常な阻害は癌及び自己免疫疾患の特徴であり、細胞死の過剰な活性化はアルツハイマー病などの神経変性疾患と関係づけられる。アポトーシス促進性（ｐｒｏ−ａｐｏｐｔｏｔｉｃ）化学療法薬は、薬剤耐性の臨床問題を克服する最近の手法をもたらしている。例えば、Ｍａｋｉｎ  ｅｔ  ａｌ．，Ｃｅｌｌ  Ｔｉｓｓｕｅ  Ｒｅｓ  ２０００  Ｊｕｌ；３０１（１）：１４３−５２（”Ａｐｏｐｔｏｓｉｓ  ａｎｄ  ｃａｎｃｅｒ  ｃｈｅｍｏｔｈｅｒａｐｙ”）を参照されたい。
【０００４】
アポトーシス機構は、種全体にわたって保存されており、カスパーゼと称するプロテアーゼの連続的活性化のカスケードによって行われる。いったん活性化されたら、これらのカスパーゼは、最終的に細胞死をもたらす、広範な細胞標的のタンパク質分解性切断の原因となる。ＩＡＰ（アポトーシスタンパク質阻害剤）は、カスパーゼを阻害することによってアポトーシスを調節する。また、Ｓｍａｃ（第２のミトコンドリア由来カスパーゼ活性化因子（ｓｅｃｏｎｄ  ｍｉｔｏｃｈｏｎｄｒｉａ−ｄｅｒｉｖｅｄ  ａｃｔｉｖａｔｏｒ  ｏｆ  ｃａｓｐａｓｅｓ））と称するタンパク質は、ＩＡＰに結合しこれを阻害する。これによってカスパーゼ活性化が促進される。Ｎ末端Ｓｍａｃ由来ペプチド及び模倣物は、同様に、ＩＡＰを阻害し、カスパーゼ活性化を促進することが判明した。ＩＡＰはＴＮＦＲ（腫瘍壊死因子受容体）の成分であり、したがってＩＡＰ阻害剤は、ＮｆｋＢ仲介炎症誘発性シグナルからのＴＮＦＲシグナル伝達を抗炎症性アポトーシスシグナルに転換することができる。
【０００５】
関連文献
Ｌｉｕ  ｅｔ  ａｌ，Ｓｔｒｕｃｔｕｒａｌ  ｂａｓｉｓ  ｆｏｒ  ｂｉｎｄｉｎｇ  ｏｆ  Ｓｍａｃ／ＤＩＡＢＬＯ  ｔｏ  ｔｈｅ  ＸＩＡＰ  ＢＩＲ３  ｄｏｍａｉｎ；Ｎａｔｕｒｅ  ２０００  Ｄｅｃ  ２１−２８；４０８（６８１５）：１００４−８．
Ｗｕ  ｅｔ  ａｌ．，Ｓｔｒｕｃｔｕｒａｌ  ｂａｓｉｓ  ｏｆ  ＩＡＰ  ｒｅｃｏｇｎｉｔｉｏｎ  ｂｙ  Ｓｍａｃ／ＤＩＡＢＬＯ；Ｎａｔｕｒｅ  ２０００  Ｄｅｃ  ２１−２８；４０８（６８１５）：１００８−１２．
Ｆｅｓｉｋ，ｅｔ  ａｌ．，Ｐｅｐｔｉｄｅｓ  ｄｅｒｉｖｅｄ  ｆｒｏｍ  ｓｍａｃ（ＤＩＡＢＬＯ）  ａｎｄ  ｍｅｔｈｏｄｓ  ｏｆ  ｕｓｉｎｇ  ｔｈｅｍ  ｔｏ  ｓｃｒｅｅｎ  ｆｏｒ  ａｐｏｐｔｏｓｉｓ  ｍｏｄｕｌａｔｉｎｇ  ｃｏｍｐｏｕｎｄｓ；国際公開第２００２０３０９５９号
ＭｃＬｅｎｄｏｎ，ｅｔ  ａｌ．，ＩＡＰ  ｂｉｎｄｉｎｇ  ｐｅｐｔｉｄｅｓ  ａｎｄ  ａｓｓａｙｓ  ｆｏｒ  ｉｄｅｎｔｉｆｙｉｎｇ  ｃｏｍｐｏｕｎｄｓ  ｔｈａｔ  ｂｉｎｄ  ＩＡＰ；国際公開第２００２０９６９３０号
Ｓｈｉ，Ｃｏｍｐｏｓｉｔｉｏｎｓ  ａｎｄ  ｍｅｔｈｏｄｓ  ｆｏｒ  ｒｅｇｕｌａｔｉｎｇ  ａｐｏｐｔｏｓｉｓ；国際公開第２００２０２６７７５号
Ｄｅｂａｔｉｎ，ｅｔ  ａｌ．，Ｓｍａｃ−ｐｅｐｔｉｄｅｓ  ａｓ  ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃｓ  ａｇａｉｎｓｔ  ｃａｎｃｅｒ  ａｎｄ  ａｕｔｏｉｍｍｕｎｅ  ｄｉｓｅａｓｅｓ  ｂｙ  ｓｅｎｓｉｔｉｚｉｎｇ  ｆｏｒ  ＴＲＡＩＬ−  ｏｒ  ａｎｔｉｃａｎｃｅｒ  ｄｒｕｇ−ｉｎｄｕｃｅｄ  ａｐｏｐｔｏｓｉｓ；国際公開第２００３０８６４７０号
Ａｌｎｅｍｒｉ，Ｃｏｎｓｅｒｖｅｄ  ｓｅｑｕｅｎｃｅ  ｏｆ  ＸＩＡＰ−ｂｉｎｄｉｎｇ  ｍｏｔｉｆ  ｉｎ  ｈｕｍａｎ  ｃａｓｐａｓｅ−９  ａｎｄ  Ｓｍａｃ／ＤＩＡＢＬＯ  ａｎｄ  ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃ  ｕｓｅｓ  ｆｏｒ  ｓｃｒｅｅｎｉｎｇ  ｍｏｄｕｌａｔｏｒｓ  ｏｆ  ａｐｏｐｔｏｓｉｓ；国際公開第２００３０１０１８４号
Ａｒｎｔ  ｅｔ  ａｌ．，Ｓｙｎｔｈｅｔｉｃ  Ｓｍａｃ／ＤＩＡＢＬＯ  ｐｅｐｔｉｄｅｓ  ｅｎｈａｎｃｅ  ｔｈｅ  ｅｆｆｅｃｔｓ  ｏｆ  ｃｈｅｍｏｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃ  ａｇｅｎｔｓ  ｂｙ  ｂｉｎｄｉｎｇ  ＸＩＡＰ  ａｎｄ  ｃＩＡＰ１  ｉｎ  ｓｉｔｕ；Ｊ  Ｂｉｏｌ  Ｃｈｅｍ．２００２  Ｎｏｖ  １５；２７７（４６）：４４２３６−４３．Ｅｐｕｂ  ２００２  Ｓｅｐ  ０５．
ＩＡＰ  ｂｉｎｄｉｎｇ  ｐｅｐｔｉｄｅ  ｏｒ  ｐｏｌｙｐｅｐｔｉｄｅ  ａｎｄ  ｍｅｔｈｏｄｓ  ｏｆ  ｕｓｉｎｇ  ｔｈｅ  ｓａｍｅ；米国特許公開第２００２０１３２７８６号
米国特許公開第２００２０１６０９７５号、Ｃｏｎｓｅｒｖｅｄ  ＸＩＡＰ−ｉｎｔｅｒａｃｔｉｏｎ  ｍｏｔｉｆ  ｉｎ  ｃａｓｐａｓｅ−９  ａｎｄ  Ｓｍａｃ／ＤＩＡＢＬＯ  ｆｏｒ  ｍｅｄｉａｔｉｎｇ  ａｐｏｐｔｏｓｉｓ．
米国特許公開第２００２０１７７５５７号、Ｃｏｍｐｏｓｉｔｉｏｎｓ  ａｎｄ  ｍｅｔｈｏｄ  ｆｏｒ  ｒｅｇｕｌａｔｉｎｇ  ａｐｏｐｔｏｓｉｓ．
米国特許第６，６０８，０２６号、Ｗａｎｇ，ｅｔ  ａｌ．，Ａｐｏｐｔｏｔｉｃ  Ｃｏｍｐｏｕｎｄｓ；
Ｌｉ  ｅｔ  ａｌ．，Ｔａｒｇｅｔｉｎｇ  ａｎｄ  ａｍｐｌｉｆｉｃａｔｉｏｎ  ｏｆ  ｉｍｍｕｎｅ  ｋｉｌｌｉｎｇ  ｏｆ  ｔｕｍｏｒ  ｃｅｌｌｓ  ｂｙ  ｐｒｏ−Ｓｍａｃ，Ｉｎｔ  Ｊ  Ｃａｎｃｅｒ．２００４  Ｍａｒ  １０；１０９（１）：８５−９４．
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【０００６】
本発明者らは、アポトーシス促進性（ｐｒｏ−ａｐｏｐｔｏｔｉｃ）Ｓｍａｃペプチドの２量体型及びペプチド模倣物が、従来技術の単量体よりも大きく改善された試薬をもたらすことを偶然発見した。これらの２量体は、サイトゾルＩＡＰに同様に結合し、それらのカスパーゼ阻害を軽減する。しかし、これらの２量体は、例外的な効力でそれを実行する。本発明者らは、これらの２量体がＩＡＰタンパク質内のＢＩＲ（バキュロウイルス抑制性リピート（ｂａｃｕｌｏｖｉｒａｌ  ｉｎｈｉｂｉｔｏｒｙ  ｒｅｐｅａｔ））ドメインの隣接リピートに結合し、この相互認識が２量体の有効性にきわめて重要であり、対応するモノマーは細胞抽出物における活性が一般にはるかに低い（例えば、約１／１００００の活性）と考えている。実際、本発明者らのデータによれば、２量体は触媒作用的に機能し、複合体を形成していないＩＡＰをユビキチン／プロテアソーム分解経路に回す。２量体は、ＴＲＡＩＬ（ＴＮＦ関連アポトーシス誘発性リガンド）と相乗作用して、グリア芽細胞腫細胞培養において一般にピコモル濃度でアポトーシスを誘発する。これらの化合物は、癌、特に過剰発現ＩＡＰタンパク質によってプログラム細胞死に抵抗する癌に対する新しいアジュバント化学療法を提供するものである。
【０００７】
好ましい実施形態として、本発明者らは、Ｓｍａｃの内因性機能も模倣し、従来技術のＳｍａｃ模倣物よりもきわめて高い活性をもたらす、２量体分子の新規シリーズを開発した。これらの化合物は、安定であり、プロテアーゼ抵抗性であり、自由に膜浸透性である。分子は、それら自体は細胞傷害性でない。類似の化合物は記述されていない。他の研究者も類似の目的にＳｍａｃ由来ペプチド及びペプチド担体構築体の使用を試みたが、これらの従来技術材料は、それらの物理化学的性質によって厳しい制約を受け、それらの効力は、本明細書に開示するものよりも数桁低い。
【課題を解決するための手段】
【０００８】
したがって、本発明は、アポトーシス促進性２量体Ｓｍａｃペプチド模倣物を使用して病原性細胞のアポトーシスを促進する方法及び組成物を提供する。一般的方法は、細胞を活性な２量体Ｓｍａｃ模倣物の有効量と接触させる段階と、典型的にはそれに続いて、その結果として生じる、標的細胞のアポトーシスの増加を直接的、間接的又は推論的に検出する段階とを含む。２量体活性は、ＩＡＰ結合、プロカスパーゼ−３活性化、アポトーシスの促進などによって求めることができる。
【０００９】
好ましい実施形態においては、細胞は個体の生体ｉｎ  ｓｉｔｕにあり、接触段階は、模倣物の治療有効量を含む薬剤組成物を個体に投与することによって実施される。個体は、新生物増殖性（ｎｅｏｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｖｅ）病態を治療するための同時又は先行する放射線又は化学療法を受けることができる。特定の実施形態においては、病原性細胞は、グリア芽細胞腫、星状細胞腫、乳癌、前立腺癌、肺癌、すい癌、胃癌、結腸癌、卵巣癌、腎臓癌、肝細胞癌、黒色腫、リンパ腫及び肉腫からなる群から選択される腫瘍などの腫瘍である。別の実施形態においては、標的細胞は、プロ炎症性細胞或いは病原性炎症及び／又は自己免疫を受けやすい組織細胞である。多種多様な疾患は、リウマチ様関節炎、糖尿病、喘息、ループス、炎症性腸疾患（クローン病及び関係する症状）、多発性硬化症、慢性閉塞性肺疾患、炎症性腸及び骨盤疾患、アレルギー性鼻炎（枯草熱）、循環器病などを含めて、標的病原性炎症を与える。
【００１０】
本組成物は、投与形態の活性２量体Ｓｍａｃ模倣物の治療有効量と薬剤として許容される担体とを含む薬剤組成物を包含する。一部の実施形態においては、かかる組成物は、さらに、本模倣物以外の抗新生物増殖性化学療法剤などの追加の治療薬も含む。
【００１１】
本発明は、活性２量体Ｓｍａｃペプチド模倣物を調製し、スクリーニングする方法も提供する。例えば、１つの一般的アッセイは、単量体模倣物から２量体Ｓｍａｃペプチド模倣物を生成する段階と、得られる２量体の、例えばＩＡＰ結合、プロカスパーゼ−３活性化又はアポトーシスの促進によって求められる、単量体前駆体よりも高い活性を検出する段階とを含む。
【００１２】
本模倣物は、一般式Ｍ１−Ｌ−Ｍ２の多種多様な活性２量体Ｓｍａｃ模倣物を包含する。ここで、部分Ｍ１及びＭ２は単量体Ｓｍａｃ模倣物であり、Ｌは活性２量体中のＭ１とＭ２を共有結合的に連結するリンカーである。Ｍ１とＭ２は単量体Ｓｍａｃ模倣物、特にアポトーシス促進性、特にＡＶＰタイプ及びＡＶペプトイド模倣物を各々が包含し（例えば、国際公開第２００２０３０９５９号、同２００２０９６９３０号、同２００２０２６７７５号、同２００３０８６４７０号、同２００３０１０１８４号、米国特許公開第２００２０１７７５５７号、同２００２０１３２７８６号、同２００２０１６０９７５号、米国特許第６，６０８，０２６号などを参照されたい。）、本明細書で開示又は参考として援用されている多種多様な単量体模倣物構造を含む。
【００１３】
リンカーＬは、非結合モノマーよりも高いアポトーシス促進性活性を与える２量体構造中のＭ１とＭ２を共有結合させ、他の点では、２量体の開示される用途に適合する（例えば生理学的適合性及び安定性）。多種多様なリンカーを使用することができ、特定のリンカーは経験的に容易に分析される。一般に、Ｌは、２〜２００原子、好ましくは４〜１００原子、より好ましくは４〜２５原子及びＭＷ２０〜２Ｋ  Ｄ、好ましくは４０〜１Ｋ  Ｄ、より好ましくは５６〜１Ｋ  Ｄの連続鎖である。Ｌは、左右相称でも非対称でもよく、異なった、等長性又は同一のＭ１とＭ２を連結することができ、一般に約３〜３Ｋ  Ａ、好ましくは約６〜２０００、より好ましくは約１２〜１０００Ａなどのスパンを有する。例示的、非限定的な適切なリンカーを以下にさらに記述する。
【００１４】
特定の実施形態においては、本発明は、式ＩＩの２量体化合物又は薬剤として許容されるその塩を提供する。
【００１５】
【化２】
2007526321.tif 000002
式中、
Ｒ１及びＲ１’は、水素、場合によっては置換されていてもよいメチル、及びヒドロキシルから選択され、
Ｒ２及びＲ２’は、場合によっては置換されていてもよいメチル及び場合によっては置換されていてもよいエチルから選択され、
Ｒ３及びＲ３’はＣＨ２、ＮＨ、Ｏ及びＳから選択され、
Ｒ４及びＲ４’はＣＨ及びＮから選択され、
Ｒ５−Ｒ８及びＲ５’−Ｒ８’は、水素、場合によってはヘテロでもよい、場合によっては置換されていてもよいアルキル、場合によってはヘテロでもよい、場合によっては置換されていてもよいアルケニル、場合によってはヘテロでもよい、場合によっては置換されていてもよいアルキニル、場合によってはヘテロでもよい、場合によっては置換されていてもよいアリールから選択され、
Ｌは、Ｒ２、Ｒ５、Ｒ６又はＲ７をＲ２’、Ｒ５’、Ｒ６’又はＲ７’と共有結合的に連結するリンカーである。
【００１６】
さまざまな特定の実施形態は、
Ｒ１及びＲ１’が水素及びメチルから選択され、
Ｒ２及びＲ２’がメチル及びエチルから選択され、
Ｒ３及びＲ３’がＮＨであり、
Ｒ４及びＲ４’がＣＨであり、
Ｒ５及びＲ５’がＣ１−Ｃ３アルキルであり、
Ｒ６／Ｒ６’とＲ７／Ｒ７’又はＲ７／Ｒ７’とＲ８／Ｒ８’が５から８員環中で連結され、より特別にはＲ１及びＲ１’が水素及びメチルから選択され、Ｒ２及びＲ２’がメチル及びエチルから選択され、Ｒ３及びＲ３’がＮＨであり、Ｒ４がＣＨであり、Ｒ５及びＲ５’がＣ１−Ｃ３アルキルであり、ＬがＲ５、Ｒ６又はＲ７をＲ５’、Ｒ６’又はＲ７’と共有結合的に連結する、
すべての組み合わせを含む。
【００１７】
より特別な実施形態は、
Ｒ１／Ｒ１’とＲ２／Ｒ２’が連結されて４員環（アゼチジン）を形成し、
Ｒ７とＲ８が５又は６員環中で連結され、
Ｒ６とＲ７が５又は６員環中で連結され、特にＲ６とＲ７が５員環中で連結され、Ｌが該環をＲ２’、Ｒ５’、Ｒ６’又はＲ７’と共有結合的に連結し、
Ｒ８が５又は６員環を含み、特にＲ８が、少なくとも１個のヘテロ原子と、少なくとも１個の置換と、少なくとも１個の不飽和とを含む５員環を含む、
すべての組み合わせを含む。
【００１８】
特定の実施形態においては、Ｌは、４〜１００原子及び４０〜１ｋＤの連続鎖であり、場合によってはヘテロでもよい、場合によっては置換されていてもよいジアルキニル基である。特定の実施形態においては、リンカーは該リンカーについて左右相称であり、特定の実施形態においては、２量体自体が左右相称である。
【００１９】
本発明は、本化合物と薬剤として許容される賦形剤とを含む薬剤組成物も提供する。特にかかる組成物は、本化合物の単位投与量を含み、特にかかる組成物は、多数の腫瘍及び炎症中に特に見られる、望ましくなく高いＩＡＰ活性及び／又は望ましくなく低いカスパーゼ若しくはアポトーシス活性に関連する疾患を治療するために該組成物の使用を記載した使用説明書と同時梱包される。
【００２０】
したがって、本発明は、望ましくないカスパーゼ活性に関連する疾患を治療する方法を提供する。この方法は、本化合物及び組成物の有効投与量を投与する段階を含み、その結果として生じる、該疾患に付随する病態の減少を検出する段階が続くことができ、かかる疾患を診断する段階及び／又はかかる組成物を処方する段階が先行することができる。適用可能な疾患としては、腫瘍および炎症が挙げられる。
【００２１】
本発明は、カスパーゼを阻害する方法も提供する。この方法は、カスパーゼを含む組成物を本化合物及び組成物の有効量と接触させる段階を含み、その結果生じるカスパーゼ活性の変化を検出する段階がそれに続くことができる。
【発明を実施するための最良の形態】
【００２２】
以下の特定の実施形態及び実施例の記述は、説明のためのものであって、限定するためのものではない。禁忌を示さない限り、又は特に示さない限り、これらの記載においては、また、本明細書を通して、「ａ」及び「ａｎ」という用語は１以上を意味し、「又は」という用語は及び／又はを意味し、ポリヌクレオチド配列は、反対方向の鎖及び本明細書に記載された代替骨格を包含すると理解される。
【００２３】
本明細書では、「ヘテロ原子」という用語は、酸素（Ｏ）、窒素（Ｎ）、硫黄（Ｓ）及びケイ素（Ｓｉ）を含むものとする。
【００２４】
「アルキル」という用語は、それ自体で又は別の置換基の一部として、別段の記載がないかぎり、示された炭素原子数を有し（すなわちＣ１−Ｃ８は１個から８個の炭素を意味する。）、完全飽和である、直鎖、分岐鎖、環式炭化水素基又はそれらの組み合わせを意味する。アルキル基の例としては、メチル、エチル、ｎ−プロピル、イソプロピル、ｎ−ブチル、ｔ−ブチル、イソブチル、ｓｅｃ−ブチル、シクロヘキシル、（シクロヘキシル）メチル、シクロプロピルメチル、同族体及び異性体、例えば、ｎ−ペンチル、ｎ−ヘキシル、ｎ−ヘプチル、ｎ−オクチルなどが挙げられる。
【００２５】
「アルケニル」という用語は、それ自体で又は別の置換基の一部として、示された炭素原子数（すなわちＣ２−Ｃ８は２個から８個の炭素を意味する。）と１個以上の二重結合とを有し、一価不飽和でも多価不飽和でもよい、直鎖、分岐鎖、環式炭化水素基又はそれらの組み合わせを意味する。アルケニル基の例としては、ビニル、２−プロペニル、クロチル、２−イソペンテニル、２−（ブタジエニル）、２，４−ペンタジエニル、３−（１，４−ペンタジエニル）並びにそれらの高級同族体及び異性体が挙げられる。
【００２６】
「アルキニル」という用語は、それ自体で又は別の置換基の一部として、示された炭素原子数（すなわちＣ２−Ｃ８は２個から８個の炭素を意味する。）と１個以上の三重結合とを有し、一価不飽和でも多価不飽和でもよい、直鎖若しくは分岐鎖炭化水素基又はそれらの組み合わせを意味する。アルキニル基の例としては、エチニル、１−及び３−プロピニル、３−ブチニル並びにそれらの高級同族体及び異性体が挙げられる。
【００２７】
「アルキレン」という用語は、それ自体で又は別の置換基の一部として、アルキルから誘導される二価の基を意味し、−ＣＨ２−ＣＨ２−ＣＨ２−ＣＨ２−によって例示される。一般に、アルキル（又はアルキレン）基は、１から２４個の炭素原子を有する。１０個以下の炭素原子を有するアルキル（又はアルキレン）基が本発明では好ましい。「低級アルキル」又は「低級アルキレン」は、一般に８個以下の炭素原子を有する短鎖アルキル又はアルキレン基である。
【００２８】
「アルコキシ」「アルキルアミノ」及び「アルキルチオ」（又はチオアルコキシ）という用語は、それらの従来の意味で使用され、分子の残部にそれぞれ酸素原子、アミノ基又は硫黄原子を介して結合しているアルキル基を指す。
【００２９】
「ヘテロアルキル」という用語は、それ自体で又は別の用語と組み合わせて、別段の記載がないかぎり、示された数の炭素原子とＯ、Ｎ、Ｓｉ及びＳからなる群から選択される１から３個のヘテロ原子とからなる、安定な直鎖、分岐鎖、環式炭化水素基又はそれらの組み合わせを意味する。窒素及び硫黄原子は場合によっては酸化されていてもよく、窒素ヘテロ原子は場合によっては第四級でもよい。ヘテロ原子Ｏ、Ｎ及びＳは、ヘテロアルキル基の任意の内部位置に存在することができる。ヘテロ原子Ｓｉは、アルキル基が分子の残部に結合する位置を含めて、ヘテロアルキル基の任意の位置に存在することができる。例としては、−ＣＨ２−ＣＨ２−Ｏ−ＣＨ３、−ＣＨ２−ＣＨ２−ＮＨ−ＣＨ３、−ＣＨ２−ＣＨ２−Ｎ（ＣＨ３）−ＣＨ３、−ＣＨ２−Ｓ−ＣＨ２−ＣＨ３、−ＣＨ２−ＣＨ２、−Ｓ（Ｏ）−ＣＨ３、−ＣＨ２−ＣＨ２−Ｓ（Ｏ）２−ＣＨ３、−ＣＨ＝ＣＨ−Ｏ−ＣＨ３、−Ｓｉ（ＣＨ３）３、−ＣＨ２−ＣＨ＝Ｎ−ＯＣＨ３及び−ＣＨ＝ＣＨ−Ｎ（ＣＨ３）−ＣＨ３が挙げられる。例えば、−ＣＨ２−ＮＨ−ＯＣＨ３、−ＣＨ２−Ｏ−Ｓｉ（ＣＨ３）３など最高２個のヘテロ原子が連続することができる。
【００３０】
同様に、「ヘテロアルキレン」という用語は、それ自体で又は別の置換基の一部として、ヘテロアルキルから誘導される二価の基を意味し、−ＣＨ２−ＣＨ２−Ｓ−ＣＨ２−ＣＨ２−及び−ＣＨ２−Ｓ−ＣＨ２−ＣＨ２−ＮＨ−ＣＨ２−によって例示される。ヘテロアルキレン基の場合には、ヘテロ原子は、鎖末端の一方又は両方を占めることができる（例えば、アルキレンオキシ、アルキレンジオキシ、アルキレンアミノ、アルキレンジアミノなど）。さらに、アルキレン及びヘテロアルキレン連結基の場合には、連結基の向きは含意されない。
【００３１】
「シクロアルキル」及び「ヘテロシクロアルキル」という用語は、それら自体で又は他の用語と組み合わせて、別段の記載がないかぎり、それぞれ環式「アルキル」及び環式「ヘテロアルキル」を表す。したがって、シクロアルキル基は、示された炭素原子数を有し（すなわち、Ｃ３−Ｃ８は３から８個の炭素を意味する。）、１又は２個の二重結合を有することもできる。ヘテロシクロアルキル基は、示された炭素原子数とＯ、Ｎ、Ｓｉ及びＳからなる群から選択される１から３個のヘテロ原子とからなり、窒素及び硫黄原子は場合によっては酸化されていてもよく、窒素ヘテロ原子は場合によっては第四級でもよい。さらに、ヘテロシクロアルキルの場合には、ヘテロ原子は、複素環が分子の残部に結合した位置を占めることができる。シクロアルキルの例としては、シクロペンチル、シクロヘキシル、１−シクロヘキセニル、３−シクロヘキセニル、シクロヘプチルなどが挙げられる。ヘテロシクロアルキルの例としては、１−（１，２，５，６−テトラヒドロピリダ−イル）、１−ピペリジニル、２−ピペリジニル、３−ピペリジニル、４−モルホリニル、３−モルホリニル、テトラヒドロフラン−２−イル、テトラヒドロフラン−３−イル、テトラヒドロチエン−２−イル、テトラヒドロチエン−３−イル、１−ピペラジニル、２−ピペラジニルなどが挙げられる。
【００３２】
「ハロ」及び「ハロゲン」という用語は、それら自体で又は別の置換基の一部として、別段の記載がないかぎり、フッ素、塩素、臭素又はヨウ素原子を意味する。また、「ハロアルキル」などの用語は、１から（２ｍ’＋１）個（ｍ’はアルキル基中の炭素原子の総数である。）の同じでも異なっていてもよいハロゲン原子で置換されたアルキルを含むものとする。例えば、「ハロ（Ｃ１−Ｃ４）アルキル」という用語は、トリフルオロメチル、２，２，２−トリフルオロエチル、４−クロロブチル、３−ブロモプロピルなどを含むものとする。したがって、「ハロアルキル」という用語は、モノハロアルキル（１個のハロゲン原子で置換されたアルキル。）及びポリハロアルキル（２から（２ｍ’＋１）個（ｍ’はアルキル基中の炭素原子の総数である。）のハロゲン原子で置換されたアルキル。）を含む。「パーハロアルキル」という用語は、別段の記載がないかぎり、（２ｍ’＋１）個（ｍ’はアルキル基中の炭素原子の総数である。）のハロゲン原子で置換されたアルキルを意味する。例えば、「パーハロ（Ｃ１−Ｃ４）アルキル」という用語は、トリフルオロメチル、ペンタクロロエチル、１，１，１−トリフルオロ−２−ブロモ−２−クロロエチルなどを含むものとする。
【００３３】
「アシル」という用語は、酸のヒドロキシ部分を除去することによって有機酸から誘導される基を指す。したがって、アシルは、例えば、アセチル、プロピオニル、ブチリル、デカノイル、ピバロイル、ベンゾイルなどを含むものとする。
【００３４】
「アリール」という用語は、別段の記載がないかぎり、単環又は縮合若しくは共有結合的に連結された多環（最高３環）とすることができる、多価不飽和の一般に芳香族炭化水素置換基を意味する。アリール基の非限定的な例としては、フェニル、１−ナフチル、２−ナフチル、４−ビフェニル及び１，２，３，４−テトラヒドロナフタレンが挙げられる。
【００３５】
ヘテロアリール」という用語は、Ｎ、Ｏ及びＳから選択される０から４個のヘテロ原子を含むアリール基（又は環）を指す。窒素及び硫黄原子は場合によっては酸化されていてもよく、窒素ヘテロ原子は場合によっては第四級でもよい。ヘテロアリール基は、ヘテロ原子を介して分子の残部に結合することができる。ヘテロアリール基の非限定的な例としては、１−ピロリル、２−ピロリル、３−ピロリル、３−ピラゾリル、２−イミダゾリル、４−イミダゾリル、ピラジニル、２−オキサゾリル、４−オキサゾリル、２−フェニル−４−オキサゾリル、５−オキサゾリル、３−イソキサゾリル、４−イソキサゾリル、５−イソキサゾリル、２−チアゾリル、４−チアゾリル、５−チアゾリル、２−フリル、３−フリル、２−チエニル、３−チエニル、２−ピリジル、３−ピリジル、４−ピリジル、２−ピリミジル、４−ピリミジル、５−ベンゾチアゾリル、プリニル、２−ベンズイミダゾリル、５−インドリル、１−イソキノリル、５−イソキノリル、２−キノキサリニル、５−キノキサリニル、３−キノリル及び６−キノリルが挙げられる。
【００３６】
簡潔にするために、他の用語と組み合わせて使用される「アリール」という用語は（例えば、アリールオキシ、アリールチオキシ、アリールアルキル）、上記アリールとヘテロアリール環の両方を含む。したがって、「アリールアルキル」という用語は、炭素原子（例えば、メチレン基）が例えば酸素原子で置換されたアルキル基（例えば、フェノキシメチル、２−ピリジルオキシメチル、３−（１−ナフチルオキシ）プロピルなど）を含めて、アリール基がアルキル基に結合した基（例えば、ベンジル、フェネチル、ピリジルメチルなど）を含むものとする。
【００３７】
上記用語（例えば、「アルキル」、「ヘテロアルキル」、「アリール」及び「ヘテロアリール」）の各々は、示された基の置換体と非置換体の両方を含むものとする。各タイプの基に対する好ましい置換基を以下に示す。
【００３８】
アルキル及びヘテロアルキル基（並びにアルキレン、アルケニル、ヘテロアルキレン、ヘテロアルケニル、アルキニル、シクロアルキル、ヘテロシクロアルキル、シクロアルケニル及びヘテロシクロアルケニルと称される基）の置換基は、−ＯＲ’、＝Ｏ、＝ＮＲ’、＝Ｎ−ＯＲ’、−ＮＲ’Ｒ”、−ＳＲ’、ハロゲン、−ＳｉＲ’Ｒ”Ｒ”’、−ＯＣ（Ｏ）Ｒ’、−Ｃ（Ｏ）Ｒ’、−ＣＯ２Ｒ’、−ＣＯＮＲ’Ｒ”、−ＯＣ（Ｏ）ＮＲ’Ｒ”、−ＮＲ”Ｃ（Ｏ）Ｒ’、−ＮＲ’−Ｃ（Ｏ）ＮＲ”Ｒ”’、−ＮＲ’−ＳＯ２ＮＲ”’、−ＮＲ”ＣＯ２Ｒ’、−ＮＨ−Ｃ（ＮＨ２）＝ＮＨ、−ＮＲ’Ｃ（ＮＨ２）＝ＮＨ、−ＮＨ−Ｃ（ＮＨ２）＝ＮＲ’、−Ｓ（Ｏ）Ｒ’、−ＳＯ２Ｒ’、−ＳＯ２ＮＲ’Ｒ”、−ＮＲ”ＳＯ２Ｒ、−ＣＮ及び−ＮＯ２から選択される、０から３個のさまざまな基とすることができる。０、１又は２個の置換基を有する基が特に好ましい。Ｒ’、Ｒ”及びＲ”’は各々独立に、水素、非置換（Ｃ１−Ｃ８）アルキル及びヘテロアルキル、非置換アリール、１から３個のハロゲンで置換されたアリール、非置換アルキル、アルコキシ若しくはチオアルコキシ基又はアリール−（Ｃ１−Ｃ４）アルキル基を指す。Ｒ’及びＲ”が同じ窒素原子に結合しているときには、それらは窒素原子と組み合わせて５、６又は７員環を形成することができる。例えば、−ＮＲ’Ｒ”は、１−ピロリジニル及び４−モルホリニルを含むものとする。一般に、アルキル又はヘテロアルキル基は０から３個の置換基を有する。２個以下の置換基を有する基が本発明では好ましい。より好ましくは、アルキル又はヘテロアルキル基は非置換又は一置換である。最も好ましくは、アルキル又はヘテロアルキル基は非置換である。置換基の上記考察から、当業者は、「アルキル」という用語がトリハロアルキル（例えば、−ＣＦ３及び−ＣＨ２ＣＦ３）などの基を含むことを理解するはずである。
【００３９】
アルキル及びヘテロアルキル基の好ましい置換基は、−ＯＲ’、＝Ｏ、−ＮＲ’Ｒ”、−ＳＲ’、ハロゲン、−ＳｉＲ’Ｒ”Ｒ”’、−ＯＣ（Ｏ）Ｒ’、−Ｃ（Ｏ）Ｒ’、−ＣＯ２Ｒ’、−ＣＯＮＲ’Ｒ”、−ＯＣ（Ｏ）ＮＲ’Ｒ”、−ＮＲ”Ｃ（Ｏ）Ｒ’、−ＮＲ”ＣＯ２Ｒ’、−ＮＲ’−ＳＯ２ＮＲ”Ｒ”’、−Ｓ（Ｏ）Ｒ’、−ＳＯ２Ｒ’、−ＳＯ２ＮＲ’Ｒ”、−ＮＲ”ＳＯ２Ｒ、−ＣＮ及び−ＮＯ２から選択される。ここで、Ｒ’及びＲ”は上記のとおりである。さらに好ましい置換基は、−ＯＲ’、＝Ｏ、−ＮＲ’Ｒ”、ハロゲン、−ＯＣ（Ｏ）Ｒ’、−ＣＯ２Ｒ’、−ＣＯＮＲ’Ｒ”、−ＯＣ（Ｏ）ＮＲ’Ｒ”、−ＮＲ”Ｃ（Ｏ）Ｒ’、−ＮＲ”ＣＯ２Ｒ’、−ＮＲ’−ＳＯ２ＮＲ”Ｒ”’、−ＳＯ２Ｒ’、−ＳＯ２ＮＲ’Ｒ”、−ＮＲ”ＳＯ２Ｒ、−ＣＮ及び−ＮＯ２から選択される。
【００４０】
同様に、アリール及びヘテロアリール基の置換基はさまざまであり、芳香族環構造上の０個から空き原子価総数までの範囲の、ハロゲン、−ＯＲ’、−ＯＣ（Ｏ）Ｒ’、−ＮＲ’Ｒ”、−ＳＲ’、−Ｒ’、−ＣＮ、−ＮＯ２、−ＣＯ２Ｒ’、−ＣＯＮＲ’Ｒ”、−Ｃ（Ｏ）Ｒ’、−ＯＣ（Ｏ）ＮＲ’Ｒ”、−ＮＲ”Ｃ（Ｏ）Ｒ’、−ＮＲ”ＣＯ２Ｒ’、−ＮＲ’−Ｃ（Ｏ）ＮＲ”Ｒ”’、−ＮＲ’−ＳＯ２ＮＲ”Ｒ”’、−ＮＨ−Ｃ（ＮＨ２）＝ＮＨ、−ＮＲ’Ｃ（ＮＨ２）＝ＮＨ、−ＮＨ−Ｃ（ＮＨ２）＝ＮＲ’、−Ｓ（Ｏ）Ｒ’、−ＳＯ２Ｒ’、−ＳＯ２ＮＲ’Ｒ”、−ＮＲ”ＳＯ２Ｒ、−Ｎ３、−ＣＨ（Ｐｈ）２、パーフルオロ（Ｃ１−Ｃ４）アルコ−キシ及びパーフルオロ（Ｃ１−Ｃ４）アルキルから選択される。ここで、Ｒ’、Ｒ”及びＲ”’は、水素、（Ｃ１−Ｃ８）アルキル及びヘテロアルキル、非置換アリール及びヘテロアリール、（非置換アリール）−（Ｃ１−Ｃ４）アルキル及び（非置換アリール）オキシ−（Ｃ１−Ｃ４）アルキルから独立に選択される。アリール基が１，２，３，４−テトラヒドロナフタレンであるときには、置換又は非置換（Ｃ３−Ｃ７）スピロシクロアルキル基で置換することができる。（Ｃ３−Ｃ７）スピロシクロアルキル基は、「シクロアルキル」について本明細書に規定するのと同様に置換することができる。一般に、アリール又はヘテロアリール基は０から３個の置換基を有する。２個以下の置換基を有する基が本発明では好ましい。本発明の一実施形態においては、アリール又はヘテロアリール基は非置換又は一置換である。別の実施形態においては、アリール又はヘテロアリール基は非置換である。
【００４１】
アリール及びヘテロアリール基の好ましい置換基は、ハロゲン、−ＯＲ’、−ＯＣ（Ｏ）Ｒ’、−ＮＲ’Ｒ”、−ＳＲ’、−Ｒ’、−ＣＮ、−ＮＯ２、−ＣＯ２Ｒ’、−ＣＯＮＲ’Ｒ”、−Ｃ（Ｏ）Ｒ’、−ＯＣ（Ｏ）ＮＲ’Ｒ”、−ＮＲ”Ｃ（Ｏ）Ｒ’、−Ｓ（Ｏ）Ｒ’、−ＳＯ２Ｒ’、−ＳＯ２ＮＲ’Ｒ”、−ＮＲ”ＳＯ２Ｒ、−Ｎ３、−ＣＨ（Ｐｈ）２、パーフルオロ（Ｃ１−Ｃ４）アルコキシ及びパーフルオロ（Ｃ１−Ｃ４）アルキルから選択される。ここで、Ｒ’及びＲ”は上記のとおりである。さらに好ましい置換基は、ハロゲン、−ＯＲ’、−ＯＣ（Ｏ）Ｒ’、−ＮＲ’Ｒ”、−Ｒ’、−ＣＮ、−ＮＯ２、−ＣＯ２Ｒ’、−ＣＯＮＲ’Ｒ”、−ＮＲ”Ｃ（Ｏ）Ｒ’、−ＳＯ２Ｒ’、−ＳＯ２ＮＲ’Ｒ”、−ＮＲ”ＳＯ２Ｒ、パーフルオロ（Ｃ１−Ｃ４）アルコキシ及びパーフルオロ（Ｃ１−Ｃ４）アルキルから選択される。
【００４２】
本明細書では置換基−ＣＯ２Ｈは、その生物学的等価性置換（ｂｉｏｉｓｏｓｔｅｒｉｃ  ｒｅｐｌａｃｅｍｅｎｔ）を含む。例えば、Ｔｈｅ  Ｐｒａｃｔｉｃｅ  ｏｆ  Ｍｅｄｉｃｉｎａｌ  Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ；Ｗｅｒｍｕｔｈ，Ｃ．Ｇ．，Ｅｄ．；Ａｃａｄｅｍｉｃ  Ｐｒｅｓｓ：Ｎｅｗ  Ｙｏｒｋ，１９９６；ｐ．２０３を参照されたい。
【００４３】
アリール又はヘテロアリール環の隣接原子上の置換基の２個は、式−Ｔ−Ｃ（Ｏ）−（ＣＨ２）ｑ−Ｕ−の置換基で場合によっては置換されていてもよい。ここで、Ｔ及びＵは独立に−ＮＨ−、−Ｏ−、−ＣＨ２−又は単結合であり、ｑは０から２の整数である。或いは、アリール又はヘテロアリール環の隣接原子上の置換基の２個は、式−Ａ−（ＣＨ２）ｒ−Ｂ−の置換基で場合によっては置換されていてもよい。ここで、Ａ及びＢは独立に−ＣＨ２−、−Ｏ−、−ＮＨ−、−Ｓ−、−Ｓ（Ｏ）−、−Ｓ（Ｏ）２−、−Ｓ（Ｏ）２ＮＲ’−又は単結合であり、ｒは１から３の整数である。かくして形成される新しい環の単結合の１個は、二重結合で場合によっては置換されていてもよい。或いは、アリール又はヘテロアリール環の隣接原子上の置換基の２個は、式−（ＣＨ２）ｓ−Ｘ−（ＣＨ２）ｔ−−の置換基で場合によっては置換されていてもよい。ここで、ｓ及びｔは独立に０から３の整数であり、Ｘは−Ｏ−、−ＮＲ’−、−Ｓ−、−Ｓ（Ｏ）−、−Ｓ（Ｏ）２−又は−Ｓ（Ｏ）２ＮＲ’−である。−ＮＲ’−及び−Ｓ（Ｏ）２ＮＲ’−中の置換基Ｒ’は、水素又は非置換（Ｃ１−Ｃ６）アルキルから選択される。
【００４４】
「薬剤として許容される塩」という用語は、本明細書に記載された化合物上の特定の置換基に応じて、比較的無毒な酸又は塩基を用いて調製される活性化合物の塩を含むものとする。本発明の化合物が比較的酸性の官能基を含むときには、塩基付加塩は、かかる化合物の中性型を所望の塩基の十分な量と接触させることによって、純粋に又は適切な不活性溶媒溶液として得ることができる。薬剤として許容される塩基付加塩の例としては、ナトリウム、カリウム、カルシウム、アンモニウム、有機アミノ若しくはマグネシウム塩又は類似の塩が挙げられる。本発明の化合物が比較的塩基性の官能基を含むときには、酸付加塩は、かかる化合物の中性型を所望の酸の十分な量と接触させることによって、純粋に又は適切な不活性溶媒溶液として得ることができる。薬剤として許容される酸付加塩の例としては、塩酸、臭化水素酸、硝酸、炭酸、炭酸一水素（ｍｏｎｏｈｙｄｒｏｇｅｎｃａｒｂｏｎｉｃ）酸、リン酸、リン酸一水素（ｍｏｎｏｈｙｄｒｏｇｅｎｐｈｏｓｐｈｏｒｉｃ）酸、リン酸二水素（ｄｉｈｙｄｒｏｇｅｎｐｈｏｓｐｈｏｒｉｃ）酸、硫酸、硫酸一水素（ｍｏｎｏｈｙｄｒｏｇｅｎｓｕｌｆｕｒｉｃ）酸、ヨウ化水素酸、亜リン酸など無機酸由来の酸付加塩並びに酢酸、プロピオン酸、イソ酪酸、シュウ酸、マレイン酸、マロン酸、安息香酸、コハク酸、スベリン酸、フマル酸、マンデル酸、フタル酸、ベンゼンスルホン酸、ｐ−トリルスルホン酸、クエン酸、酒石酸、メタンスルホン酸など比較的無毒な有機酸由来の塩が挙げられる。アルギナートなどのアミノ酸の塩及びグルクロン酸、ガラクツロン酸などの有機酸の塩も挙げられる（例えば、Ｂｅｒｇｅ  ｅｔ  ａｌ．（１９７７）Ｊ．Ｐｈａｒｍ．Ｓｃｉ．６６：１−１９を参照されたい。）。本発明のある種の具体的化合物は、該化合物を塩基付加塩又は酸付加塩に転化することができる塩基性官能基と酸性官能基の両方を含む。
【００４５】
該化合物の中性型は、該塩を塩基又は酸と接触させ、従来の方法によって親化合物を単離することによって再生することができる。該化合物の親型は、本発明では、そのさまざまな塩型とは極性溶媒溶解性などある種の物性が異なるが、他の点では該塩は該化合物の親型と等価である。
【００４６】
塩型に加えて、本発明は、プロドラッグ型である化合物を提供する。本明細書に記載された化合物のプロドラッグは、生理学的条件下で容易に化学変化して本発明の化合物を与える化合物である。また、プロドラッグは、化学又は生化学的方法によって生体外環境において本発明の化合物に転化することができる。例えば、プロドラッグは、経皮パッチ貯蔵器中に置かれたときに、適切な酵素又は化学試薬を用いて本発明の化合物に徐々に転化することができる。プロドラッグは、いくつかの状況においては、親薬物よりも容易に投与することができるので有用であることが多い。例えば、プロドラッグは、親薬物よりも経口投与による生物学的利用能が高い。プロドラッグは、薬理学的組成物への溶解性を親薬物よりも改善することができる。プロドラッグの加水分解性切断又は酸化活性化に依拠するものなど多種多様なプロドラッグ誘導体が当分野で公知である。プロドラッグの非限定的な例としては、エステル（「プロドラッグ」）として投与されるが、代謝的に加水分解されて活性体であるカルボン酸になる本発明の化合物が挙げられる。追加の例としては、本発明の化合物のペプチジル誘導体が挙げられる。
【００４７】
ある種の本発明の化合物は、水和型を含めて、非溶媒和型及び溶媒和型として存在することができる。一般に、溶媒和型は、非溶媒和型と等価であり、本発明の範囲内に包含されるものとする。本発明のある種の化合物は、複数の結晶型又はアモルファス型として存在することができる。一般に、すべての物理的形態は、本発明によって企図される用途に等価であり、本発明の範囲内にあるものとする。
【００４８】
本発明のある種の化合物は、不斉炭素原子（光学的中心）又は二重結合を有する。ラセミ体、ジアステレオマー、幾何異性体及び個々の異性体はすべて本発明の範囲内に包含されるものとする。
【００４９】
本発明の化合物は、かかる化合物を構成する原子の１個以上において不自然な比率の原子同位体を含むこともできる。例えば、本化合物は、例えばトリチウム（３Ｈ）、ヨウ素−１２５（１２５Ｉ）、炭素−１４（１４Ｃ）などの放射性同位体で放射性標識することもできる。本発明の化合物のすべての同位体変種は、放射性であっても放射性でなくても、本発明の範囲内に包含されるものとする。
【００５０】
「治療有効量」という用語は、研究者、獣医、医師又は他の臨床家によって求められる、組織、系、動物又はヒトの生物学的若しくは医学的応答を誘発する本化合物の量を指す。「治療有効量」という用語は、投与されたときに、治療される状態若しくは障害の１つ以上の進行を防止し、又はある程度軽減するのに十分である化合物量を含む。治療有効量は、化合物、疾患及びその重症度並びに治療を受ける哺乳動物の年齢、重量などに応じて変わる。
【００５１】
特定の実施形態においては、本発明は、２量体化合物Ｍ１−Ｌ−Ｍ２を提供する。ここで、Ｍ１及びＭ２は独立に式Ｉの部分であり、Ｒ２、Ｒ５、Ｒ６又はＲ７を介して分子リンカーＬによって共有結合している。
【００５２】
【化３】
2007526321.tif 000003
この特定の実施形態は、
【００５３】
【化４】
2007526321.tif 000004
Ｒ１及びＲ１’が、水素、場合によっては置換されていてもよいメチル、及びヒドロキシルから選択され、
Ｒ２及びＲ２’が、場合によっては置換されていてもよいメチル及び場合によっては置換されていてもよいエチルから選択され、
Ｒ３及びＲ３’がＣＨ２、ＮＨ、Ｏ及びＳから選択され、
Ｒ４及びＲ４’がＣＨ及びＮから選択され、
Ｒ５−Ｒ８及びＲ５’−Ｒ８’が、水素、場合によってはヘテロでもよい、場合によっては置換されていてもよいアルキル、場合によってはヘテロでもよい、場合によっては置換されていてもよいアルケニル、場合によってはヘテロでもよい、場合によっては置換されていてもよいアルキニル、場合によってはヘテロでもよい、場合によっては置換されていてもよいアリールから選択され、
Ｌが、Ｒ２、Ｒ５、Ｒ６又はＲ７をＲ２’、Ｒ５’、Ｒ６’又はＲ７’と共有結合的に連結するリンカーである、
すべての組み合わせを含めて、式ＩＩの２量体化合物又は薬剤として許容されるその塩として特徴づけることもできる。
【００５４】
１個以上の対応するＲ基とＲ’基は同じでも異なっていてもよい。さまざまな特定の実施形態は、
Ｒ１及びＲ１’が水素及びメチルから選択され、
Ｒ２及びＲ２’がエチル及び好ましくはメチルから選択され、
Ｒ３及びＲ３’がＣＨ２、Ｏ及び好ましくはＮＨから選択され、
Ｒ４及びＲ４’がＣＨであり、
Ｒ５及びＲ５’がＣ１−Ｃ３アルキルであり、
Ｒ６／Ｒ６’とＲ７／Ｒ７’又はＲ７／Ｒ７’とＲ８／Ｒ８’が５から８員環中で連結されている、
すべての組み合わせを含む。
【００５５】
より特別な実施形態においては、Ｒ１及びＲ１’は水素及びメチルから選択され、Ｒ２及びＲ２’はメチル及びエチルから選択され、Ｒ３及びＲ３’はＮＨであり、Ｒ４はＣＨであり、Ｒ５及びＲ５’はＣ１−Ｃ３アルキルであり、ＬはＲ５、Ｒ６又はＲ７をＲ５’、Ｒ６’又はＲ７’と共有結合的に連結する。
【００５６】
特定の実施形態は、
Ｒ１／Ｒ１’とＲ２／Ｒ２’が連結されて４員環（アゼチジン）を形成し、
Ｒ７とＲ８が５又は６員環中で連結され、
Ｒ６とＲ７が５又は６員環中で連結され、特にＲ６とＲ７が５員環中で連結され、Ｌが該環をＲ２’、Ｒ５’、Ｒ６’又はＲ７’と共有結合的に連結し、
Ｒ８が５又は６員環を含み、特にＲ８が、少なくとも１個のヘテロ原子と、少なくとも１個の置換と、少なくとも１個の不飽和とを含む５員環を含む、
すべての組み合わせを含む。
【００５７】
特定の実施形態においては、Ｌは、４〜１００原子及び４０〜１ｋＤの連続鎖であり、場合によっては置換されていてもよい（場合によってはヘテロジアルキニル基でもよい）ジアルキニル基である。特定の実施形態においては、リンカーは左右相称であり、より特別な実施形態においては、２量体自体が対称である、すなわち、リンカーが左右相称であり、Ｍ１とＭ２が異性体である（対応するＲ基とＲ’基が同じである。）。
【００５８】
特定の実施形態においては、Ｌは、アミノ化部分で置換され、又はアミノ化部分、特にリジン、アルギニン、その生物同配体（ｂｉｏｓｔｅｒｅ）などのアミノ酸を取り込む連続鎖である。該アミンは、プロトン化し、又はアルキル化して、陽電荷を生成させることができ、本化合物を、ＢＩＲドメインとの３個の潜在的接触点を有するトリアミンにすることができる（例えば、例示的２量体を参照されたい。
【００５９】
本発明のこれらの実施形態及び別の実施形態を、例示的２量体、例示的モノマー及び実験手順の項に記載及び／又は例示する。
【００６０】
本発明は、本化合物と薬剤として許容される賦形剤とを含む薬剤組成物も提供する。特にかかる組成物は、本化合物の単位投与量を含み、特にかかる組成物は、多数の腫瘍及び炎症中に特に見られる、望ましくなく高いＩＡＰ活性及び／又は望ましくなく低いカスパーゼ若しくはアポトーシス活性に関連する疾患を治療するために該組成物の使用を記載した使用説明書と同梱される。
【００６１】
したがって、本発明は、望ましくないカスパーゼ活性に関連する疾患を治療する方法を提供する。この方法は、本化合物及び組成物の有効投与量を投与する段階を含み、その結果として生じる、該疾患に付随する症状の減少を検出する段階が続くことができ、かかる疾患を診断する段階及び／又はかかる組成物を処方する段階が先行することができる。適用可能な疾患としては、腫瘍および炎症が挙げられる。
【００６２】
本発明は、カスパーゼを阻害する方法も提供する。この方法は、カスパーゼを含む組成物を本化合物及び組成物の有効量と接触させる段階を含み、その結果生じるカスパーゼ活性の変化を検出する段階がそれに続くことができる。
【００６３】
例示的模倣物は限定されない。ペプチドを模倣する化学反応は確立された技術であり、当業者は従来の化学反応を用いて多種多様な模倣物を容易に生成することができ（例えば、Ｌｉａｏ  ｅｔ  ａｌ．（１９９８）Ｊ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ  ４１，４７６７−４７７６；Ａｎｄｒａｄｅ−Ｇｏｒｄｏｎ  ｅｔ  ａｌ．（１９９９）ＰＮＡＳ  ＵＳＡ  ９６，１２２５７−１２２６２；Ｂｏａｔｍａｎ  ｅｔ  ａｌ．（１９９９）Ｊ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．４２，１３６７−１３７５；Ｋａｓｈｅｒ  ｅｔ  ａｌ．（１９９９）Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ  ２９２，  ４２１−４２９；米国特許第５，９８１，４６７号などを参照されたい。）、得られる模倣物がスクリーニングされ、本明細書に記載された必要な活性を与えることが実証される限り、これら他の戦略を本発明に適用することができる。
【００６４】
模倣物を製造する合成方法は当分野で周知である。ペプチド、類似体又は誘導体の一般的製造手段のいくつかは、Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ  ａｎｄ  Ｂｉｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ  ｏｆ  Ａｍｉｎｏ  Ａｃｉｄｓ，  Ｐｅｐｔｉｄｅｓ  ａｎｄ  Ｐｒｏｔｅｉｎｓ，  Ａ  Ｓｕｒｖｅｙ  ｏｆ  Ｒｅｃｅｎｔ  Ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔｓ，  Ｗｅｉｎｓｔｅｉｎ，Ｂ．ｅｄ．，Ｍａｒｃｅｌｌ  Ｄｅｋｋｅｒ，Ｉｎｃ．，ｐｕｂｌ．Ｎｅｗ  Ｙｏｒｋ（１９８３）に概説されている。多種多様な確立された技術が、ペプチド模倣物の合成に利用可能である。例えば、Ｒ．Ｚｕｃｋｅｒｍａｎｎ  ｅｔ  ａｌ．、Ｊ．Ａｍ．Ｃｈｅｍ．Ｓｏｃ．（１９９２）０１１４：１０６４６−７のサブモノマー（ｓｕｂｍｏｎｏｍｅｒ）法を参照されたい。Ｎ−置換グリシンモノマー単位が骨格を形成する複素環式有機化合物の固相技術による合成は、米国特許第５，９５８，７９２号に記載されており、次いで、かかる複素環式有機化合物の混合物のコンビナトリアルライブラリを、以下に示すように、ＩＡＰの阻害能力についてアッセイすることができる。高度に置換された環式構造は、サブモノマー法を強力な溶液相化学反応と組み合わせることによって固体担体上で合成することができる。１、２、３個又はそれ以上の縮合環を含む環状化合物は、やはり米国特許第５，９５８，７９２号に記載されているように、サブモノマー方法によって、まず線状骨格を合成し、続いて分子内又は分子間環化によって形成される。例示的模倣物クラスの一般的な調製プロトコルは以下のとおりである。
【００６５】
構成要素として鏡像異性α−ヒドロキシ酸を用いたα−ポリエステルの調製。α−ポリエステル構造は、当業者に公知の化学合成技術を用いて調製することができる。反応の詳細については、Ｂｒｅｗｓｔｅｒ，Ｐ．，ｅｔ  ａｌ．，Ｎａｔｕｒｅ，（１９９０）１６６：１７９を参照されたい。類似の構造を製造する別の方法は、Ｃｈａｎ，Ｐ．Ｃ．，ａｎｄ  Ｃｈｏｎｇ，Ｊ．Ｍ．，Ｔｅｔｒａｈｅｄｒｏｎ  Ｌｅｔｔ．（１９９０）１９８５に開示されている。さらに、Ｃｈａｎ  ｅｔ  ａｌ．の刊行物内で引用されたさまざまな刊行物が、鏡像異性α−ヒドロキシ酸を合成する技術を記載している。
【００６６】
構成要素として鏡像異性アルファ−アミノ酸を用いたポリチオアミドの調製。ポリチオアミド構造は、Ｃｌａｕｓｅｎ，Ｋ．，ｅｔ  ａｌ．，Ｊ．Ｃｈｅｍ．Ｓｏｃ．Ｐｅｒｋｉｎ  Ｔｒａｎｓ．Ｉ（１９８４）７８５及びＴｅｔｒａｈｅｄｒｏｎ  Ｌｅｔｔ．（１９９０）３１：２３に記載の技術などの技術を用いて合成することができる。
【００６７】
構成要素として鏡像異性アルファ−アミノ酸を用いたポリヒドロキシマートの調製。ポリヒドロキシマートは、Ｋｏｌａｓａ，Ｔ．，ａｎｄ  Ｃｈｉｍｉａｋ，Ａ．，Ｔｅｔｒａｈｅｄｒｏｎ（１９７７）３３：３２８５に開示された技術を用いて合成することができる。Ｋｏｌａｓａに引用された参考文献は、模倣物合成に使用することができるＮ−ヒドロキシアミノ酸を合成する化学技術を開示し、記載している。
【００６８】
構成要素として鏡像異性β−ヒドロキシ酸を用いたβ−ポリエステルの調製。β−ポリエステルは、Ｅｌｌｉｏｔｔ，Ｊ．Ｄ．，ｅｔ  ａｌ．，Ｔｅｔｒａｈｅｄｒｏｎ  Ｌｅｔｔ．（１９８５）２６：２５３５及びＴｅｔｒａｈｅｄｒｏｎ  Ｌｅｔｔ．（１９７４）１５：１３３３に記載の合成プロトコルを用いて合成することができる。
【００６９】
構成要素として鏡像異性β−アミノスルホン酸を用いたポリスルホンアミドの調製。ポリスルホンアミドは、米国特許第６，０７５，１２１号に示された反応スキームを用いて合成することができる。鏡像異性β−アミノ酸は、Ｋｏｋｏｔｏｓ，Ｇ．，Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ（１９９０）２９９に記載されている。
【００７０】
構成要素としてアキラルβ−アミノスルホン酸を用いたＮ−アルキル化ポリスルホンアミドの調製。同様に、これらのポリスルホンアミドは、米国特許第６，０７５，１２１号に示された反応スキームを用いて合成することができる。
【００７１】
構成要素としてアキラルβ−アミノ酸を用いたポリウレアの調製。ポリウレアは、Ｓｈｉｏｒｉ，Ｔ．，ｅｔ  ａｌ．，Ｊ．Ａｍ．Ｃｈｅｍ．Ｓｏｃ．（１９７２）９４：６３０２及びＳｃｈｏｌｔｚ，Ｊ．，ａｎｄ  Ｂａｒｔｌｅｔｔ，Ｐ．，Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ（１９８９）５４２に記載の技術などの技術を用いて合成することができる。
【００７２】
構成要素としてアキラルβ−アミノアルコールを用いたポリウレタンの調製。ポリウレタンは、米国特許第６，０７５，１２１号に示された反応スキームを用いて合成することができる。個々のＮ−置換グリシン類似体は当技術分野で公知であり、公知の方法によって調製することができる。例えば、Ｓｅｍｐｕｋｕ  ｅｔ  ａｌ．，ＪＰ  ５８／１５０，５６２（Ｃｈｅｍ  Ａｂｓ（１９８４）１００：６８０１９ｂ）；Ｒｉｃｈａｒｄ  ｅｔ  ａｌ．、米国特許第４，６８４，４８３号及びＰｕｌｗｅｒ  ｅｔ  ａｌ．、ＥＰＯ  １８７，１３０を参照されたい。
【００７３】
いくつかのＮ−置換グリシン誘導体は、商用ソースから入手可能である。例えば、Ｎ−ベンジルグリシンは、エチルエステルとしてＡｌｄｒｉｃｈ  Ｃｈｅｍｉｃａｌ  Ｃｏ．（Ｍｉｌｗａｕｋｅｅ，Ｗｉｓ．）から入手可能である。このエステルを、ＫＯＨ／ＭｅＯＨで加水分解し、次いでＨＣｌでプロトン化して、Ｎ−ベンジルグリシンを得る。次いで、これを、Ｆｍｏｃ−Ｃｌのジオキサン水溶液を用いて高ｐＨ（約１０）で処理することによって、Ｆｍｏｃ（フルオレニルメトキシカルボニル）で保護することができる。
【００７４】
他のＮ−置換グリシン類似体は、簡単な化学手順によって合成される。Ｎ−イソブチルグリシンは、過剰の２−メチルプロピルアミンをハロ酢酸と反応させることによって調製することができる。
【００７５】
Ｎ−（２−アミノエチル）グリシンは、過剰の１，２−ジアミノエタンをハロ酢酸と反応させ、Ｄｏｗｅｘ−１（登録商標）（ＯＨ型）上で酢酸を用いて溶出させて精製することによって調製することができる。非保護アミンを、ｔ−ブトキシカルボニル（ｔ−Ｂｏｃ）を用いて従来技術によりｐＨ１１．２で保護し、続いて第二級アミンをＦｍｏｃで保護する。
【００７６】
Ｎ−（２−ヒドロキシエチル）グリシンは、過剰の２−アミノエタノールをハロ酢酸と反応させ、Ｄｏｗｅｘ−１（登録商標）（ＯＨ型）上で酢酸を用いて溶出させて精製することによって調製することができる。次いで、アミン窒素をＦｍｏｃで保護する。次いで、酸基を、メタノールを用いて酸性条件下でエステル化する。次いで、メチルエステルをイソブチレンで処理してｔ−ブチルエーテルとする。次いで、メチルエステルを、ブタ肝臓エステラーゼのリン酸緩衝溶液を用いてｐＨ８．０で加水分解して、模倣物合成に適切な形態の保護Ｎ−置換グリシン類似体を得る。上記の別法として、Ｆｍｏｃ−ヒドロキシエチルグリシンを塩化ｔ−ブチルジフェニルシリルのＤＭＦ溶液及びイミダゾールで処理して、シリル保護アルコールを得る。
【００７７】
Ｎ−（カルボキシメチル）グリシンは、グリシンｔ−ブチルエステルを２−ハロアセタート水溶液と反応させることによって調製することができる。この生成物は、Ｆｍｏｃを添加することによって直接保護することができる。別法として、Ｎ−（カルボキシメチル）グリシンは、グリシンｔ−ブチルエステル、グリオキシル酸及びチャコール担持パラジウムを水素雰囲気下、水中でｐＨ６で混合することによって調製することができる。次いで、この化合物を常法によってＦＭＯＣで処理する。
【００７８】
モノマーを合成した後、それらを他のモノマー及び／又は従来のアミノ酸と結合させ、標準ペプチド化学反応によって類似体を形成させる。例えば、Ｆｍｏｃ保護モノマー（Ｎ−置換グリシン又は従来のアミノ酸）は、ベンゾトリアゾル−１−イルオキシ−トリス（ジメチルアミノ）ホスホニウムヘキサフルオロホスファート（ＢＯＰ）又はカルボジイミド（例えば、ジシクロヘキシルカルボジイミド）と塩基性条件下（例えば、ｐＨ９）、適切な溶媒中で反応させることによって、適切な樹脂（例えば、ＨＭＰ）上に固定することができる。ピペリジンで処理してＦｍｏｃ保護基を除去する。次いで、追加の各モノマーを、配列全体が構築されるまで、ＢＯＰ又はカルボジイミドを用いて順次結合する。次いで、完成した鎖を樹脂から切り離し、トリフルオロ酢酸（ＴＦＡ）で処理することによって側鎖を脱保護する。
【００７９】
或いは、他の方法、例えば、組換え発現又は自然源からの単離によって製造される模倣物の末端にＮ−置換グリシン類似体を接続することができる。また、Ｎ−置換グリシン類似体は、模倣物を所望の位置において切断し、Ｎ−置換グリシン類似体を結合させ、その分子の残部又は化学合成された代替品に再結合させることによって、かかる模倣物の配列内に挿入することができる。
【００８０】
本投与組成物は、バルク液体溶液若しくは懸濁液又はバルク粉体の形態を取ることができる。しかし、より一般的には、本組成物は、正確な投薬を容易にする単位剤形として提供される。「単位剤形」という用語は、単位投与量としてヒト対象及び他の哺乳動物に適切な物理的に分離した単位を指す。各単位は、適切な製薬賦形剤に付随して、所望の治療効果をもたらすように計算された活性材料の所定量を含む。典型的な単位剤形としては、液体組成物のあらかじめ計量された補充アンプル若しくはシリンジ、又は固体組成物の場合にはピル剤、錠剤、カプセル剤、舐剤（ｌｏｓｅｎｇｅ）などが挙げられる。かかる組成物においては、模倣物は、通常、少量成分（約０．１から約５０重量％又は好ましくは約１から約４０重量％）であり、残部は、所望の投薬剤形を形成するのに役立つさまざまなビヒクル又は担体及び加工助剤である。
【００８１】
投与可能な組成物を調製するのに適切な賦形剤又は担体及び方法は公知であり、又は当業者に明らかであり、Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ’ｓ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｓｃｉｅｎｃｅ，Ｍａｃｋ  Ｐｕｂｌｉｓｈｉｎｇ  Ｃｏ，ＮＪ（１９９１）などの刊行物により詳細に記載されている。また、模倣物は、ジエチルスチルベストロール若しくはＤＥＳ、５−フルオロウラシル、メトトレキセート、インターフェロン−アルファ、アスパラギナーゼ（ａｓｐａｒｉｇｉｎａｓｅ）、タモキシフェン、フルタミドなど他の化学療法剤及びＭｅｒｃｋ  Ｍａｎｕｅｌ，１６ｔｈ  ｅｄｉｔｉｏｎ  １９９２，Ｍｅｒｃｋ  Ｒｅｓｅａｒｃｈ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓ，Ｒａｈｗａｙ，ＮＪ；Ｇｏｏｄｍａｎ＆Ｇｉｌｍａｎ’ｓ  Ｔｈｅ  Ｐｈａｒｍａｃｏｌｏｇｉｃａｌ  Ｂａｓｉｓ  ｏｆ  Ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃｓ，９ｔｈ  Ｅｄ．，１９９６，ＭｃＧｒａｗ−Ｈｉｌｌ，ｅｓｐ．Ｃｈａｂｎｅｒ  ｅｔ  ａｌ．，Ａｎｔｉｎｅｏｐｌａｓｔｉｃ  Ａｇｅｎｔｓなどに記載の化学療法剤又は当分野で公知の化学療法剤と組み合わせて有利に使用することができる。したがって、本組成物は、別個に、一緒に、又は混合して単一単位用量として、投与することができる。特定の実施形態においては、併用療法は、抗新生増殖性化学療法活性薬剤又は他の活性薬剤に共有結合した、模倣物の複合物によって実施される。任意の適切な複合化化学反応を使用することができる。
【００８２】
投与量は、模倣物処方、投与経路などに応じて決まり、一般には定常的な試行において経験的に決定され、標的、宿主及び投与経路などに応じてさまざまな変更が必要になる。一般に、調製物の単位用量中の活性化合物量は、個々の用途に応じて約０．１ｍｇから１０００ｍｇ、好ましくは約１ｍｇから３００ｍｇ、より好ましくは１０ｍｇから２００ｍｇで変動することがあり、又は調節される。使用する実際の投与量は、患者の要件及び治療される症状の重症度に応じて変動し得る。個々の状況に適正な投与量を決定することは当分野の技術範囲内である。一般に、治療は、本化合物の最適用量よりも少ない投与量で開始される。その後、投与量を、その環境において最適な効果に達するまで少量ずつ増加させる。便宜上、全１日用量は、必要に応じて、日中、分割投与することができる。
【００８３】
以下は、模倣物カプセル剤処方の例である（処方１−４）。
【００８４】
【表１】
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【００８５】
固溶体の調製
結晶性模倣物（８０ｇ／バッチ）及びポビドン（ＮＦ  Ｋ２９／３２  １６０ｇ／バッチ）を塩化メチレン（５０００ｍＬ）に溶解する。この溶液を、適切な溶媒噴霧乾燥機を用いて乾燥させ、残渣を粉砕して微粒子にする。次いで、この粉体を３０メッシュのふるいに通し、アモルファスであることをｘ線分析によって確認する。
【００８６】
固溶体、二酸化ケイ素及びステアリン酸マグネシウムを、適切な混合機で１０分間混合する。この混合物を、適切なロール圧縮機を用いて圧縮し、３０メッシュのふるいを装着した適切な粉砕機を用いて粉砕する。クロスカルメロースナトリウム、プルロニックＦ６８及び二酸化ケイ素を粉砕混合物に添加し、さらに１０分間混合する。ステアリン酸マグネシウムと混合物の等量とを用いてプレミックスを製造する。プレミックスを混合物の残部に添加し、５分間混合し、混合物を硬ゼラチンカプセルに封入する。
【００８７】
模倣物は、予防処置及び／又は治療処置のために、非経口、局部、経口又はエアゾール、経皮などの局所投与を含めて、ただしこれらだけに限定されないさまざまな方法によって投与することができる。化学療法剤及び／又は放射線療法は、当分野で周知の治療プロトコルに従って投与することができる。化学療法剤及び／又は放射線療法の投与は、治療される疾患並びに疾患に対する化学療法剤及び／又は放射線療法の既知の効果に応じて変わり得ることは当業者には明らかである。また、熟練した臨床家の知識によれば、治療プロトコル（例えば、投与量及び投与時間）は、患者に対する投与治療薬（すなわち、抗悪性腫瘍薬又は放射）の観察される効果を考慮して、また、投与治療薬に対する疾患の実測応答を考慮して、変更することができる。
【００８８】
模倣物、化学療法剤及び／又は放射の特定の選択は、主治医の診断、患者の症状の主治医による判断及び適切な治療プロトコルに応じて決まる。模倣物、化学療法剤及び／又は放射は、増殖性疾患の性質、患者の症状並びに模倣物と一緒に（すなわち、単一の治療プロトコル内で）投与される化学療法剤及び／又は放射の実際の選択に応じて、並行して（例えば、同時に、本質的に同時に又は同じ治療プロトコル内で）又は任意の順序で逐次投与することができる。同様に、模倣物と化学療法剤は、同じ薬剤組成物として投与する必要がなく、物理的及び化学的特性が異なるので異なる経路で投与することができる。
【００８９】
本発明の一実施形態においては、本発明による方法は、模倣物の全身投与又は局所投与を含む。全身投与が所望の場合には、模倣物を、例えば、静脈内注射によって又は経口的に投与することができる。本発明の一実施形態は、例えば腫瘍部位における、模倣物の局所投与を提供する。模倣物の局所投与に関して、好ましい投与方法は局所注射である。しかし、局所投与は、腫瘍の性質及び場所に応じて、カテーテル又は局所的付着、例えばＤｅｐｏｆｏａｍ（登録商標）の商標で販売されている製品の腫瘍内又は腫瘍周囲投与、徐放ポンプ／薬物送達サービス、移植可能な又は局所的なゲル又はポリマーによることもできる。本発明の治療薬の投与は、遺伝子療法プロトコルによって実施することもできる。
【００９０】
本発明の治療薬は、患者の処置に対して治療上有効なプロトコルの過程において、治療有効投与量及び治療有効量で投与することができる。初期及びその後の投与量は、患者の年齢、体重、症状及び治療される疾患、障害又は生物学的状態によって決まる。治療薬に応じて投与量及び投与プロトコルは変わり、投与量は、選択された投与方法、例えば局所投与か全身投与かによっても左右される。きわめて強力な模倣物の場合には、マイクログラム（ｕｇ）量／患者キログラム、例えば、約１ｕｇ／ｋｇから約５００ｍｇ／ｋｇ患者体重、約１００ｕｇ／ｋｇから約５ｍｇ／ｋｇ、約１ｕｇ／ｋｇから約５０ｕｇ／ｋｇ及び、例えば約１０ｕｇ／ｋｇが十分なことがある。
【００９１】
一般に、臨床試験において定常的な実験法によって、最適な治療効果、各治療薬、各投与プロトコルの具体的範囲を決定し、特定の患者への投与を、やはり患者の症状及び初期投与に対する応答性に応じて有効で安全な範囲内に調節する。しかし、最終的投与プロトコルは、患者の年齢、症状及び大きさ並びに模倣物の効力、治療される疾患の重症度などの要因を考慮して主治医（ａｔｔｅｎｄｉｎｇ  ｃｌｉｎｉｃｉａｎ）の判断に従って調節される。例えば、模倣物の投与計画は、腫瘍の増殖を抑制するために、２から４回（好ましくは２回）の分割用量で、１０ｍｇから２０００ｍｇ／日、好ましくは１０から１０００ｍｇ／日、より好ましくは５０から６００ｍｇ／日の経口投与とすることができる。模倣物が縮合環式ベンゾシクロヘプタピリジンを主成分とする場合には、阻害剤の好ましい投与量は、２回の分割用量で、５０から６００ｍｇ／日、より好ましくは５０から４００ｍｇ／日の経口投与である。間欠的な治療（例えば、３週間のうち１週間又は４週間のうち３回）も使用することができる。
【００９２】
膵癌治療における併用療法の一例においては、模倣物を、連続投薬計画に基づいて、２回の分割用量で５０から４００ｍｇ／日の範囲で経口投与する。抗悪性腫瘍薬は、治療中、４週間のうち３週間、投与量７５０から１３５０ｍｇ／ｍ２／週で投与するゲムシタビンである。肺癌治療における併用療法の別の例においては、模倣物を、連続投薬計画に基づいて、２回の分割用量で５０から４００ｍｇ／日の範囲で経口投与する。抗悪性腫瘍薬は、３週間ごとに１回、投与量６５から１７５ｍｇ／ｍ２で投与するパクリタキセルである。神経こう腫治療における併用療法の別の例においては、模倣物を２回の分割用量で５０から４００ｍｇ／日の範囲で経口投与する。抗悪性腫瘍薬は、投与量１００から２５０ｍｇ／ｍ２で投与するテモゾロマイドである。併用療法の別の例においては、模倣物を、連続投薬計画に基づいて、２回の分割用量で５０から４００ｍｇ／日の範囲で経口投与する。抗悪性腫瘍薬は、投与量５００ｍｇ／ｍ２／週（週１回）又は５−フルオロウラシル（５−ＦＵ）の連続注入の場合には投与量２００−３００ｍｇ／ｍ２／日で投与する５−ＦＵである。毎週の注射によって５−ＦＵを投与する場合には、５−ＦＵは、葉状の（ｆｏｌｉａｔｅ）作用物質、例えば、ロイコボラン（Ｌｅｕｃｏｖｏｒａｎ）（投与量２０ｍｇ／ｍ２／週）と組み合わせて投与することができる。
【００９３】
本発明の好ましい実施形態は、腫瘍退縮の徴候に関して模倣物を用いた治療効果をモニターすること及びそれに応じてさらなる用量の投与をその後に調節することを含む。例えば、乳癌患者は、シクロホスファミドメトトレキセート５−ＦＵ（ＣＭＦ）、タモキシフェンなどの薬剤又は局所放射線療法及び模倣物を用いた局所治療を受ける。その後、乳房Ｘ線撮影、超音波又は物理的検査によって、同じ治療前試験と比較して、さらなる治療の道筋及び投与量の方向付けを行う。
【００９４】
主治医は、投与された量で治療が有効であるかどうかを判断する際に、患者の全般的健康並びに疾患関連症候の軽減、腫瘍増殖阻害、実際の腫瘍収縮、転移阻害などのより明確な徴候を考慮する。腫瘍サイズは、放射線試験などの標準方法によって測定することができる。連続測定は、腫瘍増殖が遅延し、さらには反転したかどうかを判断するのに使用することができる。疼痛などの疾患関連症候の軽減及び症状全体の改善を、治療の有効性の判断を助けるのに使用することもできる。したがって、本発明の好ましい実施形態は、模倣物を用いた治療後の腫瘍退縮の徴候に関する患者のモニタリングを含む。かかるモニタリングとしては、身体検査、ＣＴスキャン、ＭＲＩ、乳房Ｘ線撮影、胸部Ｘ線、骨スキャン、超音波、気管支鏡検査、内視鏡検査、大腸内視鏡検査、腹腔鏡検査、ＰＳＡ、ＣＥＡ、ＣＡ１２５などの腫瘍マーカー試験などが挙げられるが、これらに限定されない。任意の形態のモニタリングの妥当性は、治療される癌の性質に応じて決まる。
【実施例】
【００９５】
以下の実施例は、例えば、ＩＡＰ結合、プロカスパーゼ−３活性化又はアポトーシスの促進によって測定されるＳｍａｃ模倣物の生物学的活性のアッセイに使用される。これらのアッセイは、かかる模倣物活性を増強する薬剤（例えば拮抗物質）をスクリーニングするのに使用することもできる。
【００９６】
（実施例１）
インビトロでのＩＡＰ（ＢＩＲ）結合／相互作用アッセイ
模倣物とＩＡＰの相互作用を、ＧＳＴ仲介プルダウンアッセイによって試験した。組換えＩＡＰ断片（ＸＩＡＰの第２及び第３のＢＩＲモチーフ）約０．４ｍｇを、ＧＳＴ融合タンパク質としてのグルタチオン樹脂２００ｍｌに結合させ、放射能標識された模倣物０．５ｍｇと一緒に室温でインキュベートする。２５ｍＭ  Ｔｒｉｓ、ｐＨ８．０、１５０ｍＭ  ＮａＣｌ及び２ｍＭジチオスレイトール（ＤＴＴ）を含むアッセイ緩衝剤で徹底して洗浄後、複合体を５ｍＭ還元型グルタチオンで溶出させ、クーマシー染色を用いたＳＤＳ−ＰＡＧＥによって可視化する。このアッセイによれば、試験模倣物はＩＡＰと特異的に結合する。
【００９７】
（実施例２）
高スループットインビトロ蛍光偏光結合アッセイ
センサー：ローダミン標識模倣物（最終濃度＝１−５ｎＭ）
受容体：グルタチオン−Ｓ−トランスフェラーゼ／ＢＩＲ２，３融合タンパク質（最終濃度＝１００−２００ｎＭ）
緩衝剤：１０ｍＭ  ＨＥＰＥＳ、１０ｍＭ  ＮａＣｌ、６ｍＭ塩化マグネシウム、ｐＨ７．６
１．  模倣物／ＢＩＲ２，３混合物９０マイクロリットルを９６ウェルマイクロタイタープレートの各ウェルに添加する。
２．  試験化合物１０マイクロリットル／ウェルを添加する。
３．  ５分間振とうし、Ｆｌｕｏｒｏｌｉｔｅ  ＦＰＭ−２  Ｆｌｕｏｒｅｓｃｅｎｃｅ  Ｐｏｌａｒｉｚａｔｉｏｎ  Ｍｉｃｒｏｔｉｔｅｒ  Ｓｙｓｔｅｍ（Ｄｙｎａｔｅｃｈ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓ，Ｉｎｃ）によって５分以内に蛍光偏光量を測定する。
試験模倣物は、ＩＡＰ  ＢＩＲ２，３ドメインと有意に特異的に結合する。
３．  高スループット固相模倣物−ＢＩＲ２，３結合／結合干渉アッセイ
Ａ．  試薬：
−  Ｎｅｕｔｒａｌｉｔｅ  Ａｖｉｄｉｎ：２０μｇ／ｍｌ  ＰＢＳ溶液。
−  ブロッキング緩衝剤：５％ＢＳＡ、０．５％Ｔｗｅｅｎ  ２０のＰＢＳ溶液；室温で１時間。
−  アッセイ緩衝剤：１００ｍＭ  ＫＣｌ、２０ｍＭ  ＨＥＰＥＳ  ｐＨ７．６、１ｍＭ  ＭｇＣｌ２、１％グリセリン、０．５％ＮＰ−４０、５０ｍＭ  ｂ−メルカプトエタノール、１ｍｇ／ｍｌ  ＢＳＡ、プロテアーゼ阻害剤カクテル。
−  ３３Ｐ模倣物１０×原液：標識模倣物２００，０００−２５０，０００ｃｐｍ（Ｂｅｃｋｍａｎカウンター）が補充された１０−８−１０−６Ｍ「冷」模倣物。スクリーニング中、４℃のｍｉｃｒｏｆｒｉｄｇｅ中に置く。
−  プロテアーゼ阻害剤カクテル（１０００×）：トリプシン阻害剤（ＢＭＢ  ＃  １０９８９４）１０ｍｇ、アプロチニン（ＢＭＢ  ＃  ２３６６２４）１０ｍｇ、ベンズアミジン（Ｓｉｇｍａ  ＃  Ｂ−６５０６）２５ｍｇ、ロイペプチン（ＢＭＢ  ＃  １０１７１２８）２５ｍｇ、ＡＰＭＳＦ（ＢＭＢ  ＃  ９１７５７５）１０ｍｇ及びＮａＶＯ３（Ｓｉｇｍａ  ＃  Ｓ−６５０８）２ｍＭの１０ｍｌ  ＰＢＳ溶液。
−  ＢＩＲ２，３：１０−７−１０−５Ｍビオチン化ＢＩＲ２，３ドメイン（同上）のＰＢＳ溶液。
【００９８】
Ｂ．  アッセイプレートの調製：
−  原液Ｎ−アビジン１２０μｌ／ウェルを４℃で終夜コーティングする。
−  ＰＢＳ  ２００μｌで２回洗浄する。
−  ブロッキング緩衝剤１５０μｌでブロックする。
−  ＰＢＳ  ２００μｌで２回洗浄する。
【００９９】
Ｃ．  アッセイ：
−  アッセイ緩衝剤４０μｌ／ウェルを添加する。
−  化合物又は抽出物１０μｌを添加する。
−  ３３Ｐ−模倣物１０μｌ（２０−２５，０００ｃｐｍ／０．１−１０ｐモル／ウェル＝１０−９−１０−７Ｍ最終濃度）を添加する。
−  ２５℃で１５分間振とうする。
−  ２５℃でさらに４５分間インキュベートする。
−  ビオチン化ＢＩＲ２，３  ４０μＭ（０．１−１０ｐモル／４０ｕｌアッセイ緩衝剤溶液）を添加する。
−  室温で１時間インキュベートする。
−  ２００μＭ  ＰＢＳで４回洗浄することによって反応を停止する。
−  １５０μＭシンチレーションカクテルを添加する。
−  Ｔｏｐｃｏｕｎｔでカウントする。
【０１００】
Ｄ．  （各プレート上に位置する。）全アッセイ用対照：
ａ．  非特異的結合
ｂ．  ８０％阻害において可溶性（非ビオチン化ＢＩＲ２，３）
模倣物は、ＩＡＰ  ＢＩＲ２，３ドメインと有意かつ特異的に結合する。
【０１０１】
（実施例４）
Ｈｅｌａ細胞抽出物：放射性標識プロカスパーゼ−３活性化アッセイ
ＨｅＬａ細胞のＳ−１００抽出物２０ｍｇを、単体で（対照）、模倣物（５０ｎＭ）ｎＭと一緒に、又は異なる長さのＮ末端Ｓｍａｃペプチド３０−１０００ｍＭと一緒に、インキュベートした。反応は、１ｍＭ  ｄＡＴＰ、追加の１ｍＭ  ＭｇＣｌ２、０．２ｍｇ／ｍｌウマ心臓チトクロムｃ及びインビトロで翻訳された３５Ｓ標識カスパーゼ−３  １ｍｌを添加して最終体積２０ｍｌで実施された。反応混合物を３０℃で１時間インキュベートし、続いて１５％ＰＡＧＥゲル上で電気泳動させた。続いて、ゲルをニトロセルロースフィルター上に転写し、ホスホイメージングカセットに暴露させた。模倣物及びＳｍａｃ断片は、プロカスパーゼ−３の活性化をかなり促進したのに対して、負の対照Ｓｍａｃ−７Ｒは促進しなかった。
【０１０２】
（実施例５）
Ｈｅｌａ細胞抽出物：分光蛍光分析プロカスパーゼ−３活性化アッセイ
ヒトＨｅｌａ  Ｓ３細胞を、１５０ｍｍ組織培養皿中の、１０％（ｖ／ｖ）ウシ胎児血清が補充されたＤＭＥＭ培地（１００Ｕ／ｍｌペニシリン及び１００ｕｇ／ｍｌ硫酸ストレプトマイシンを含むダルベッコ改変イーグル培地）中で培養し、５％ＣＯ２雰囲気下、３７℃で単層増殖させた。７０％コンフルエントな細胞を１×リン酸緩衝食塩水（ＰＢＳ）で一回洗浄し、８００×ｇで４℃で５分間遠心分離して回収した。細胞ペレットを緩衝剤Ａ（２０ｍＭ  Ｈｅｐｅｓ−ＫＯＨ、ｐＨ７．５、１０ｍＭ  ＫＣＬ、１．５ｍＭ  ＭｇＣｌ２、１ｍＭナトリウムＥＤＴＡ、１ｍＭナトリウムＥＧＴＡ、１ｍＭ  ＤＴＴ及び０．１ｍＭ  ＰＭＳＦ）３体積に再懸濁させた。ヒトｃ−ＩＡＰ−１若しくはｃ−ＩＡＰ−２又はＸＩＡＰ第１の３個のＢＩＲドメインを含む切断型タンパク質の完全長又は第２及び第３のＢＩＲドメインをＨｅＬａ細胞抽出物に添加する。カスパーゼ活性化反応を、１ｍＭ  ｄＡＴＰ及び３００ｎＭチトクロム  ｃを添加することによって開始する。カスパーゼ−３活性を、ＭａｃＦａｒｌａｎｅ  ｅｔ  ａｌ．（１９９７，Ｊ．Ｃｅｌｌ  Ｂｉｏｌ．１３７，  ４６９−４７９）によって以前に記述されたように分光蛍光分析アッセイによって測定する。Ｌｉｕ  ｅｔ  ａｌ．と同様に調製したＳ−１００  ８ｍｇ一定分量を、０．１ｍＭ  Ｈｅｐｅｓ、ＰＨ７．４、２ｍＭ  ＤＴＴ、０．１％（ｗ／ｖ）Ｃｈａｐｓ及び１％（ｗ／ｖ）スクロースを含む反応物１５０ｍｌにおいて９６ウェルマイクロタイター形式でアッセイした。カスパーゼ特異的蛍光発生基質（Ｅｎｚｙｍｅ  Ｓｙｓｔｅｍｓ，ＣＡ）を最終濃度２０ｍＭに添加することによって反応を開始し、３７℃で３０分間続けた。基質からのＡＦＣの遊離を、４００／５０５ｎｍの励起／発光波長ペアを用いて連続してモニターした。模倣物及び（７Ｒ以外の）Ｓｍａｃ断片は、プロカスパーゼ−３の活性化をかなり促進した。
【０１０３】
（実施例６）
再構成された組換え放射性標識プロカスパーゼ−３活性化アッセイ
模倣物及びＮ末端Ｓｍａｃペプチド（３０−３０００ｍＭ）を、１ｍＭ  ｄＡＴＰ、１ｍＭ  ＭｇＣｌ２及びインビトロで翻訳された３５Ｓ標識カスパーゼ−３  １ｍｌの存在下で、組換えヒトＡｐａｆ−１（４０ｎＭ）、組換えヒトプロカスパーゼ−９（２ｎＭ）、精製ウマ心臓チトクロムｃ（ｎＭ）及びマウスＸＩＡＰ（７０ｎＭ）と一緒に最終体積２０ｍｌでインキュベートした。反応混合物を３０℃で１時間インキュベートし、続いて１５％ＰＡＧＥゲル上で電気泳動させた。ゲルをニトロセルロースフィルター上に転写し、ホスホイメージングカセットに暴露させた。活性Ｓｍａｃタンパク質（５０ｎＭ）及び不活性ペプチドＳｍａｃ−７Ｒ（３０００ｍＭ）も対照として含めた。模倣物及び（７Ｒ以外の）Ｓｍａｃ断片は、プロカスパーゼ−３の活性化を有意に促進した。
【０１０４】
（実施例７）
再構成組換え分光蛍光分析プロカスパーゼ−３活性化アッセイ
再構成組換えプロカスパーゼ−３活性化系を、Ｌｉｕ  ｅｔ  ａｌ．，１９９７（同上）に記載されたようにヒトカスパーゼ−３が細菌発現から産生される以外は上述したように構築し、標識しない。カスパーゼ−３活性を、ＭａｃＦａｒｌａｎｅ  ｅｔ  ａｌ．（１９９７，Ｊ．Ｃｅｌｌ  Ｂｉｏｌ．１３７，  ４６９−４７９）によって以前に記述されたように分光蛍光分析アッセイによって測定する。上記と同様に調製したＳ−１００  ８ｍｇ一定分量を、０．１ｍＭ  Ｈｅｐｅｓ、ＰＨ７．４、２ｍＭ  ＤＴＴ、０．１％（ｗ／ｖ）Ｃｈａｐｓ及び１％（ｗ／ｖ）スクロースを含む反応物１５０ｍｌにおいて９６ウェルマイクロタイター形式でアッセイした。カスパーゼ特異的蛍光発生基質（Ｅｎｚｙｍｅ  Ｓｙｓｔｅｍｓ，ＣＡ）を最終濃度２０ｍＭに添加することによって反応を開始し、３７℃で３０分間続けた。基質からのＡＦＣの遊離を、４００／５０５ｎｍの励起／発光波長ペアを用いて連続してモニターした。模倣物及び（７Ｒ以外の）Ｓｍａｃ断片は、プロカスパーゼ−３の活性化を有意に促進した。
【０１０５】
（実施例８）
細胞系アッセイ：Ｓｍａｃペプチドは培養ＨｅＬａ細胞においてＵＶ又はエトポシドによって誘発されるアポトーシスを増強する。
【０１０６】
ＨｅＬａ−Ｓ細胞０．７５×１０５／ウェルを４８ウェル組織培養プレートに蒔いた。細胞を、１ｍＭ不活性Ｓｍａｃペプチド若しくは１ｍＭ  Ｎ末端４−アミノ酸Ｓｍａｃペプチド、選択模倣物又はビヒクルのみ（対照）と一緒に１２時間インキュベートした。次いで、細胞を、Ｓｔｒａｔａｌｉｎｋｅｒを用いたＵＶ照射３２０，０００マイクロジュール又は１００ｍＭ化学療法的エトポシドによって処理した。次いで、細胞を、異なる時点において１ｍｇ／ｍｌ  Ｈｏｅｃｈｓｔ  ３３３４２色素で染色した。アポトーシス細胞を、凝縮した核クロマチンで染色した細胞として蛍光顕微鏡法によって数えた。野生型Ｓｍａｃペプチドを含む模倣物は、（ＵＶ傷害の場合）２、４及び６時間並びに（エトポシドの場合）１０及び２０時間でアポトーシス誘導が有意に増加した。
【０１０７】
（実施例９）
インビボでの転移アッセイ
免疫抑制性マウス（Ｈａｒｌａｎ  Ｓｐｒａｇｕｅ  Ｄａｗｌｅｙ由来の胸腺欠損ヌード／ヌードＳＣＩＤメス）を、マイクロアイソレーターの蓋を備え加圧滅菌されたおりの中で飼育する。フード、グローブ及びおりをＡＢＱ滅菌剤で完全に拭いた後、すべての動物操作を層流フード中で実施する。マウスは、無菌Ｐｉｃｏ  Ｌａｂ  Ｃｈｏｗ（Ｐｕｒｉｎａ）及び加圧滅菌されたセントルイス水道水を摂取する。模倣物を、２％カルボキシメチルセルロースを含む滅菌水溶液として、使い捨ての無菌動物給餌針（Ｐｏｐｅｒ＆Ｓｏｎｓ  Ｃａｔ  ＃９９２１；２０ｇ×１．５”）によって、週７日間毎日午前７：００〜８：００にマウスの胃に投与する。化合物及び対照（滅菌水＋２％カルボキシメチルセルロース）を−８０℃で保存し、光による変化を防止するためにアルミ箔に包み、毎日の餌を使用直前に解凍する。
【０１０８】
化合物を、４０及び１００ｍｇ／ｋｇで尾静脈に静脈内注射したＣ８１６１細胞の転移効力に対するその効果について、対照と比較して試験する。１００ｍｇ／ｋｇ用量を投与するために使用するバイアル中の化合物濃度は４０ｍｇ／ｋｇ用量の２．５倍であり、両方の場合でおよそ同じ体積、すなわち約０．５ｍＬ／動物を使用する。実験を、４日目に１グループ当たり９匹の動物で開始する。０日目に、２×１０５個のＣ８１６１細胞の冷ハンクス液（ＨＢＳＳ）溶液を尾静脈接種によって静脈内注射する。このプロトコルをさらに２４日間続け、２４日目に動物を屠殺し、その肺を取り出し、ブアン／ホルムアルデヒド（５部：１部）溶液で固定する。腫瘍は、肺を回転させ、６×拡大鏡を用いて各葉上の腫瘍をカウントすることによって、肺表面全体で定量する。統計解析を、Ｍｉｃｒｏｓｏｆｔ社のＥｘｃｅｌスプレッドシートソフトウエアの統計パッケージを用いて実施する。
【０１０９】
ＳＣＩＤマウスにおけるＣ８１６１細胞の転移効力に対する、２つの異なる濃度における試験模倣物の効果を評価する。動物による模倣物の経口摂食によって、ＳＣＩＤマウス集団における肺転移数が有意に減少する。
【０１１０】
（実施例１０）
インビボでの併用療法：Ｂ．Ｉ．Ｄ．＆Ｑ．Ｉ．Ｄ．
ＨＴＢ  １７７異種移植片（ＮＣＩ−Ｈ４６０、ヒト肺大細胞癌）に対する、化学療法パクリタキセル（５又は２０ｍｐｋ）、５−Ｆｕ（５０ｍｐｋ）、ビンクリスチン（１ｍｐｋ）又はサイトキサン（１００ｍｐｋ、ＢＩＤ、ｉｐ）と模倣物（２０又は８０ｍｐｋ／ｐ．ｏ．又はｉ．ｐ．投薬）の１日２回及び４回の投薬によるインビボ併用療法の効果を、５−６週齢の胸腺欠損ｎｕ／ｎｕメスマウスにおいて実証する。０日目、ＨＴＢ  １７７細胞３×１０６個を２２０匹のマウスの側腹部にｓ．ｃ．注射し、マウスを治療群と対照群に分ける。
【０１１１】
模倣物を２０％ヒドロキシル−プロピル−ベータシクロデキサトリン（ｂｅｔａｃｙｃｌｏｄｅｘａｔｒｉｎ）（ビヒクルＩ）に溶解した。模倣物溶液０．２ｍｌが投薬体積であった。パクリタキセルを希釈エタノール／ｃｒｅｍｏｐｈｏｒ  ＥＬ溶液（ビヒクルＩＩ）に溶解した。パクリタキセルのｉ．ｐ．投薬体積は０．１ｍｌであった。サイトキサン、５−ＦＵ及びビンクリスチンを滅菌水に溶解した。８０ｍｐｋ投薬模倣物溶液を、模倣物１３６ｍｇを含む５０ｍｌ管に２０％ＨＰＢＣＤ  １７ｍｌを添加して溶解することによって調製する。混合物を、完全な溶液が調製されるまで超音波処理した。２０ｍｐｋ投薬溶液は、８０ｍｐｋ溶液２ｍｌを１５ｍｌ管に入れ、２０％ＨＰＢＣＤ  ６ｍｌを添加し、その溶液をボルテックス撹拌して混合することによって調製する。
【０１１２】
腫瘍細胞を０日目の朝にマウスに接種する。マウスを計量し、無作為化し、その後耳標を付ける。薬物療法を４日目の７：３０に開始する。週７日、午前７：３０と午後７：３０に動物に模倣物又はビヒクルＩ溶液を投与する。腫瘍増殖を、７日目及び１４日目に腫瘍体積を測定することによって定量する。模倣物と化学療法の両方が阻害を示す。併用療法は、各単独治療よりも阻害を増強する。
【０１１３】
（実施例１１）
ＷＡＰ−ＲＡＳトランスジェニックモデルにおけるインビボ治療
模倣物とパクリタキセルの併用効力をＷａｐ−ｒａｓトランスジェニックモデルにおいても評価する。このモデルは、マウスが腫瘍を十分発症した後に治療を開始する治療モードで使用される。
【０１１４】
模倣物（２０ｍｐｋ／ｐｏ投薬）を２０％ヒドロキシル−プロピル−ベータシクロデキサトリン（ビヒクルＩ）に溶解した。模倣物溶液０．２ｍｌが経口投薬体積である。パクリタキセル（５ｍｐｋ／ｉｐ投薬）を希釈エタノール／ｃｒｅｍｏｐｈｏｒ  ＥＬ溶液（ビヒクルＩＩ）に溶解した。パクリタキセルのｉ．ｐ．投薬体積は０．１ｍｌであった。
【０１１５】
０日目にマウスを計量し、無作為化し、耳標を付ける。模倣物治療及びビヒクルＩ治療を１日目に開始し、２１日目まで１２時間ごとに継続した。パクリタキセル治療及びビヒクルＩＩ治療を４日目に開始し、５、６及び７日目に毎日継続する。Ｗａｐ−ｒａｓ腫瘍は、パクリタキセル治療に応答しないが、２０ｍｐｋ単独の模倣物治療に応答し、併用療法は効力が大きくなる。
【０１１６】
本明細書に引用するすべての刊行物及び特許出願並びにその中で引用されるすべての参考文献を、個々の刊行物若しくは特許出願又は参考文献が参照により本明細書に援用されるように具体的かつ個別に示された如く、参照により本明細書に援用する。上記発明を、明瞭に理解できるように例証及び実施例によってある程度詳細に記述したが、添付した特許請求の範囲の精神又は範囲から逸脱することなく、ある種の変化及び改変がなされ得ることは、本発明の教示に照らして当業者には容易に明らかとなるはずである。
【０１１７】
例示的２量体
【０１１８】
【化５】
2007526321.tif 000006
Ｒ１とＲ１’は、同じでも異なってもよく、Ｈ、Ｍｅなどである
Ｒ２とＲ２’は、同じでも異なってもよく、Ｍｅ、Ｅｔなどである
Ｒ７とＲ７’は、同じでも異なってもよく、アリール、ヘテロアリール、ＣＨ２アリール、ＣＨ２ヘテロアリール、分枝アルキル、シクロアルキル、官能化されたアルキル又はシクロアルキルなどである（官能化は、とりわけ、不飽和、ヘテロ原子、アリール、ヘテロアリールなどである。）
ＱとＱ’は、同じでも異なってもよく、Ｏ、Ｓ、ＮＲ１などである
【０１１９】
【化６】
2007526321.tif 000007
Ｒ１とＲ１’は、同じでも異なってもよく、Ｈ、Ｍｅなどである
Ｒ２とＲ２’は、同じでも異なってもよく、Ｍｅ、Ｅｔなどである
Ｒ７とＲ７’は、同じでも異なってもよく、アリール、ヘテロアリール、ＣＨ２アリール、ＣＨ２ヘテロアリール、分枝アルキル、シクロアルキル、官能化されたアルキル又はシクロアルキルなどである（官能化は、とりわけ、不飽和、ヘテロ原子、アリール、ヘテロアリールなどである。）
ＱとＱ’は、同じでも異なってもよく、Ｏ、Ｓ、ＮＲ１などである
【０１２０】
【化７】
2007526321.tif 000008
2007526321.tif 000009
Ｒ４’は
【０１２１】
【化８】
2007526321.tif 000010
などである。
【０１２２】
ＲとＲ’は、同じでも異なってもよく、ＣＨ２、ＣＨＭｅ、ＣＨＥｔ、ＣＭｅ２、１，１−二置換シクロプロピルなどである
Ｒ１とＲ１’は、同じでも異なってもよく、Ｈ、Ｍｅなどである
Ｒ２とＲ２’は、同じでも異なってもよく、Ｍｅ、Ｅｔなどである
Ｒ３とＲ３’は、同じでも異なってもよく、Ｈ、Ｍｅ、ハロゲン、直鎖又は分枝アルキル、シクロアルキル、アリール、ヘテロアリール、官能化されたアルキル又はシクロアルキル（官能化は、とりわけ、不飽和、ヘテロ原子、アリール、ヘテロアリールなどである。）、ＯＲ５、ＮＲ５Ｒ６などである
Ｒ４はＲ５及びＲ４’から選択することができる
Ｒ５及びＲ６はＨ、Ｍｅ、直鎖アルキルなどであり、又はＲ７のいずれかである
Ｒ７＝アリール、ヘテロアリール、分枝アルキル、シクロアルキル、官能化されたアルキル又はシクロアルキル（官能化は、とりわけ、不飽和、ヘテロ原子、アリール、ヘテロアリールなどである。）
Ｒ８＝ＣＨ２ＯＲ５、ＣＨ２ＯＣ（Ｏ）Ｒ５、ＣＨ２ＯＣ（Ｏ）ＮＨＲ５、ＣＯ２Ｒ５、Ｃ（Ｏ）ＮＲ５Ｒ６
Ｒ９＝Ｈ、ＯＲ５、ＮＲ５Ｒ６
Ａ、Ｂ及びＺはＣＨ、Ｎ、Ｃ−Ｒ７などである
Ｑ＝ＣＨ２、ＣＨＭｅ、Ｏ、Ｓ、ＮＲ５
ＸとＸ’は、同じでも異なってもよく、ＮＨ、Ｏ、ＣＨ２などである
Ｙ＝ＣＨ２、Ｃ（Ｏ）、Ｃ（Ｓ）、ＣＨＭｅ
リンカーは、置換、ヘテロ原子、不飽和（アルケン、アルキン）、環式、芳香族及び複素環式芳香族断片を組み込むことができる連続鎖である。
【０１２３】
例としては、これらだけに限定されないが、
【０１２４】
【化９】
2007526321.tif 000011
が挙げられる。
【０１２５】
非対称リンカーの例：
【０１２６】
【化１０】
2007526321.tif 000012
【０１２７】
切断型リンカーの例
【０１２８】
【化１１】
2007526321.tif 000013
Ｒ４’は
【０１２９】
【化１２】
2007526321.tif 000014
などである。
【０１３０】
ＲとＲ’は、同じでも異なってもよく、ＣＨ２、ＣＨＭｅ、ＣＨＥｔ、ＣＭｅ２、１，１−二置換シクロプロピルなどである
Ｒ１とＲ１’は、同じでも異なってもよく、Ｈ、Ｍｅなどである
Ｒ２とＲ２’は、同じでも異なってもよく、Ｍｅ、Ｅｔなどである
Ｒ３とＲ３’は、同じでも異なってもよく、Ｈ、Ｍｅ、直鎖又は分枝アルキル、シクロアルキル、官能化されたアルキル又はシクロアルキル（官能化は、とりわけ、不飽和、ヘテロ原子、アリール、ヘテロアリールなどである。）である
Ｒ４はＲ５及びＲ４’から選択することができる
Ｒ５及びＲ６はＨ、Ｍｅ、直鎖アルキルなどであり、又はＲ７のいずれかである
Ｒ７＝アリール、ヘテロアリール、分枝アルキル、シクロアルキル、官能化されたアルキル又はシクロアルキル（官能化は、とりわけ、不飽和、ヘテロ原子、アリール、ヘテロアリールなどである。）
Ｒ８＝ＣＨ２ＯＲ５、ＣＨ２ＯＣ（Ｏ）Ｒ５、ＣＨ２ＯＣ（Ｏ）ＮＨＲ５、ＣＯ２Ｒ５、Ｃ（Ｏ）ＮＲ５Ｒ６
Ｒ９＝Ｈ、ＯＲ５、ＮＲ５Ｒ６
Ａ、Ｂ及びＺはＣＨ、Ｎ、Ｃ−Ｒ７などである
Ｑ＝ＣＨ２、ＣＨＭｅ、Ｏ、Ｓ、ＮＲ５
ＸとＸ’は、同じでも異なってもよく、ＮＨ、Ｏ、ＣＨ２などである
Ｙ＝ＣＨ２、Ｃ（Ｏ）、Ｃ（Ｓ）、ＣＨＭｅ
リンカーは、置換、ヘテロ原子、不飽和（アルケン、アルキン）、環式、芳香族及び複素環式芳香族断片を組み込むことができる連続鎖である。
【０１３１】
例としては、これらだけに限定されないが、
【０１３２】
【化１３】
2007526321.tif 000015
が挙げられる。
Ｒ４’は
【０１３３】
【化１４】
2007526321.tif 000016
などである。
【０１３４】
Ｒ１とＲ１’は、同じでも異なってもよく、Ｈ、Ｍｅなどである
Ｒ２とＲ２’は、同じでも異なってもよく、Ｍｅ、Ｅｔなどである
Ｒ４はＲ５及びＲ４’から選択することができる
Ｒ５及びＲ６はＨ、Ｍｅ、直鎖アルキルなどであり、又はＲ７のいずれかである
Ｒ７＝アリール、ヘテロアリール、分枝アルキル、シクロアルキル、官能化されたアルキル又はシクロアルキル（官能化は、とりわけ、不飽和、ヘテロ原子、アリール、ヘテロアリールなどである。）
Ｒ８＝ＣＨ２ＯＲ５、ＣＨ２ＯＣ（Ｏ）Ｒ５、ＣＨ２ＯＣ（Ｏ）ＮＨＲ５、ＣＯ２Ｒ５、Ｃ（Ｏ）ＮＲ５Ｒ６
Ｒ９＝Ｈ、ＯＲ５、ＮＲ５Ｒ６
Ａ、Ｂ及びＺはＣＨ、Ｎ、Ｃ−Ｒ７などである
ＱとＱ’は、同じでも異なってもよく、ＣＨ２、ＣＨＭｅ、Ｏ、Ｓ、ＮＲ５などである
ＸとＸ’は、同じでも異なってもよく、ＮＨ、Ｏ、ＣＨ２などである
Ｙ＝ＣＨ２、Ｃ（Ｏ）、Ｃ（Ｓ）、ＣＨＭｅ
リンカーは、置換、ヘテロ原子、不飽和（アルケン、アルキン）、環式、芳香族及び複素環式芳香族断片を組み込むことができる連続鎖である。
【０１３５】
例としては、これらだけに限定されないが、
【０１３６】
【化１５】
2007526321.tif 000017
が挙げられる。
Ｒ４’は
【０１３７】
【化１６】
2007526321.tif 000018
などである。
【０１３８】
ＲとＲ’は、同じでも異なってもよく、ＣＨ２、ＣＨＭｅ、ＣＨＥｔ、ＣＭｅ２、１，１−二置換シクロプロピルなどである
Ｒ１とＲ１’は、同じでも異なってもよく、Ｈ、Ｍｅなどである
Ｒ２とＲ２’は、同じでも異なってもよく、Ｍｅ、Ｅｔなどである
Ｒ３とＲ３’は、同じでも異なってもよく、Ｈ、Ｍｅ、直鎖又は分枝アルキル、シクロアルキル、官能化されたアルキル又はシクロアルキル（官能化は、とりわけ、不飽和、ヘテロ原子、アリール、ヘテロアリールなどである。）である
Ｒ４はＲ５及びＲ４’から選択することができる
Ｒ５及びＲ６はＨ、Ｍｅ、直鎖アルキルなどであり、又はＲ７のいずれかである
Ｒ７＝アリール、ヘテロアリール、分枝アルキル、シクロアルキル、官能化されたアルキル又はシクロアルキル（官能化は、とりわけ、不飽和、ヘテロ原子、アリール、ヘテロアリールなどである。）
Ｒ８＝ＣＨ２ＯＲ５、ＣＨ２ＯＣ（Ｏ）Ｒ５、ＣＨ２ＯＣ（Ｏ）ＮＨＲ５、ＣＯ２Ｒ５、Ｃ（Ｏ）ＮＲ５Ｒ６
Ｒ９＝Ｈ、ＯＲ５、ＮＲ５Ｒ６
Ａ、Ｂ及びＺはＣＨ、Ｎ、Ｃ−Ｒ７などである
Ｑ＝ＣＨ２、ＣＨＭｅ、Ｏ、Ｓ、ＮＲ５
ＸとＸ’は、同じでも異なってもよく、ＮＨ、Ｏ、ＣＨ２などである
Ｙ＝ＣＨ２、Ｃ（Ｏ）、Ｃ（Ｓ）、ＣＨＭｅ
リンカーは、置換、ヘテロ原子、不飽和（アルケン、アルキン）、環式、芳香族及び複素環式芳香族断片を組み込むことができる連続鎖である。
【０１３９】
例としては、これらだけに限定されないが、
【０１４０】
【化１７】
2007526321.tif 000019
が挙げられる。
Ｒ４’は
【０１４１】
【化１８】
2007526321.tif 000020
などである。
【０１４２】
ＲとＲ’は、同じでも異なってもよく、ＣＨ２、Ｃ（Ｏ）などである
Ｒ１とＲ１’は、同じでも異なってもよく、Ｈ、Ｍｅなどである
Ｒ２とＲ２’は、同じでも異なってもよく、Ｍｅ、Ｅｔなどである
Ｒ４はＲ５及びＲ４’から選択することができる
Ｒ５、Ｒ５’、Ｒ６、Ｒ６’は、同じでも異なってもよく、Ｈ、Ｍｅ、直鎖アルキルなどであり、又はＲ７のいずれかである
Ｒ７＝アリール、ヘテロアリール、分枝アルキル、シクロアルキル、官能化されたアルキル又はシクロアルキル（官能化は、とりわけ、不飽和、ヘテロ原子、アリール、ヘテロアリールなどである。）
Ｒ８＝ＣＨ２ＯＲ５、ＣＨ２ＯＣ（Ｏ）Ｒ５、ＣＨ２ＯＣ（Ｏ）ＮＨＲ５、ＣＯ２Ｒ５、Ｃ（Ｏ）ＮＲ５Ｒ６
Ｒ９＝Ｈ、ＯＲ５、ＮＲ５Ｒ６
Ａ、Ｂ及びＺはＣＨ、Ｎ、Ｃ−Ｒ７などである
Ｑ＝ＣＨ２、ＣＨＭｅ、Ｏ、Ｓ、ＮＲ５
ＸとＸ’は、同じでも異なってもよく、ＮＨ、Ｏ、ＣＨ２などである
Ｙ＝ＣＨ２、Ｃ（Ｏ）、Ｃ（Ｓ）、ＣＨＭｅ
リンカーは、置換、ヘテロ原子、不飽和（アルケン、アルキン）、環式、芳香族及び複素環式芳香族断片を組み込むことができる連続鎖である。
【０１４３】
【化１９】
2007526321.tif 000021
2007526321.tif 000022
【０１４４】
例示的モノマー
【０１４５】
【化２０】
2007526321.tif 000023
2007526321.tif 000024
2007526321.tif 000025
2007526321.tif 000026
2007526321.tif 000027
2007526321.tif 000028
【０１４６】
実験的手順
【０１４７】
【化２１】
2007526321.tif 000029
【０１４８】
（Ｓ）−Ｂｏｃ−２−［５−（トルエン−４−スルホニル）−テトラゾル−１−イルメチル］−ピロリジン）（１）
封管にシアン化ｐ−トルエンスルホニル（５．０ｇ、２２．１ｍｍｏｌ）及び（Ｓ）−Ｂｏｃ−２−アジドメチルピロリジン３（４．０ｇ、２２．１ｍｍｏｌ）を充填した。この混合物を８０℃で４０時間撹拌した。粗製物を、（ヘキサン：ＥｔＯＡｃ＝１：１）を用いたフラッシュシリカゲルカラムによって精製して無色泡状の１（７．６ｇ、８４％）を得た。［α］Ｄ−１１．７（ｃ  ０．６４，ＣＨＣｌ３）。１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤ３ＯＤ，−２０°Ｃ，回転異性体６：４）：δ  １．２０＆１．３５（ｓ，９Ｈ）、１．８３＆２．０１（ｍ，４Ｈ）、２．５０（ｓ，３Ｈ）３．４０＆３．４５（ｍ，２Ｈ）、４．４０＆４．４３（ｍ，１Ｈ）、４．７１＆４．８２（ｍ，２Ｈ）、７．５０＆７．７０（ｄ，Ｊ＝８Ｈｚ，２Ｈ）、８．００＆８．４０（ｄ，Ｊ＝８Ｈｚ，２Ｈ）；１３Ｃ  ＮＭＲ（７５ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）：δ  ２２．０、２３．７、２８．４、４６．５、５２．１、５６．１、７６．９、８０．６、１２９．４、１３４．４、１４７．４、１５４．４、１５４．８、１５５．５；ＩＲ（フィルム）：２９７６、１６９３、１３９２、８１５、７０４ｃｍ−１；ＭＳ：（ＥＳＩ）［Ｍ＋１］＋  ４０８．２。
【０１４９】
（Ｓ）−Ｂｏｃ−２−（５−フェニルスルファニル−テトラゾル−１’−イルメチル）−ピロリジン（２）
１（６．０ｇ、１４．７ｍｍｏｌ）、フェニルチオール（６．５ｇ、５８．８ｍｍｏｌ）及びＫ２ＣＯ３（４．５ｇ、４１．１ｍｍｏｌ）の混合物のＣＨ３ＣＮ（７４ｍｌ）溶液を室温で２日間撹拌した。反応混合物をセライトパッドに通してろ過し、次いで減圧濃縮した。粗製物を、溶離剤として（へキサン：ＥｔＯＡｃ＝１：１）を用いたシリカゲルカラムによって精製して、無色オイルの２（５．２ｇ、９７％）を得た。［α］Ｄ−２９．２（ｃ  １．３４，ＣＨＣｌ３）。１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤ３ＯＤ，−２０°Ｃ，回転異性体１：１）：δ  １．３０＆１．４２（ｓ，９Ｈ）、１．７３＆２．０１（ｍ，４Ｈ）３．４０＆３．４５（ｍ，１３．２Ｈｚ，２Ｈ）、４．２３＆４．２５（ｍ，１Ｈ）、４．３８＆４．５８（ｍ，２Ｈ）、７．４２＆７．４６（ｍ，３Ｈ）７．５６＆７．６０（ｍ，２Ｈ）；１３Ｃ  ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３，７５ＭＨｚ）：δ  ２１．２、２３．６、２８．５、４６．５、４９．７、５０．４、５６．７、６０．５、８０．７、１２８．１、１２９．９、１３３．１、１５３．５、１５４．９；ＩＲ（フィルム）：２９７５、１６９３、１３９１、１１６７、６８８ｃｍ−１；ＭＳ：（ＥＳＩ）［Ｍ＋１］＋３６１．２
【０１５０】
（Ｓ）−２−（５−フェニルスルファニル−テトラゾル−１−イルメチル）−ピロリジン（３）
２（５．０ｇ、１３．８ｍｍｏｌ）を５０％ＴＦＡのＣＨ２Ｃｌ２（６９ｍｌ）溶液で室温で１５分間処理した。混合物を、飽和ＮａＨＣＯ３で封鎖し、ＣＨ２Ｃｌ２（３×２０ｍｌ）で抽出した。混合抽出物を、Ｎａ２ＳＯ４を用いて脱水し、ろ過し、濃縮した。粗製物を、溶離剤として（ＣＨ２Ｃｌ２：ＭｅＯＨ：ＮＨ４ＯＨ＝２０：０：９：１）を用いたフラッシュシリカゲルカラムによって精製して、３（２．５ｇ、６９％）を得た。［α］Ｄ＋９．９（ｃ  １．１４，ＣＨＣｌ３）。１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）：δ  １．４５（ｍ，Ｊ＝２Ｈｚ，８．４Ｈｚ，１Ｈ）、１．８０（ｍ，２Ｈ）、１．９５（ｍ，１Ｈ）、２．５（ｂｓ，１Ｈ）、２．９９（ｔ，Ｊ＝１．６Ｈｚ，２Ｈ）、３．６０（ｍ，１Ｈ）、４．２０（ｄｄ，Ｊ＝８．０Ｈｚ，１３．０Ｈｚ，１Ｈ）、４．３０（ｄｄ，Ｊ＝８．０Ｈｚ，１３．０Ｈｚ  １Ｈ）、７．４０（ｍ，３Ｈ）、７．５８（ｍ，２Ｈ）；１３Ｃ  ＮＭＲ（７５ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）：δ  ２３．５、２８．６、４６．１、４７．８、５８．２、１２７．２、１３０．０、１３０．２、１３３．１、１５３．４；ＩＲ（フィルム）：３３５０、２９６１、２８７１、１４４２、１３８９、７４６、６８８ｃｍ−１；ＭＳ：（ＥＳＩ）［Ｍ＋１］＋  ２６２．２。
【０１５１】
｛１−［２−（５−フェニルスルファニル−テトラゾル−１−イルメチル）−ピロリジン−１−カルボニル］−２−イニルオキシ−プロピル｝−カルバミン酸アリルエステル（４）
３（２．５ｇ、９．５ｍｍｏｌ）及びＮ−Ａｌｌｏｃ−（プロパルギル）トレオニン−（２Ｓ，３Ｒ）（２．７ｇ、１１．４ｍｍｏｌ）のＤＭＦ（４８ｍｌ）冷溶液に、ＤＩＰＥＡ（３．３ｍｌ、１９．０ｍｍｏｌ）及びＨＡＴＵ（５．４ｇ、１４．２ｍｍｏｌ）を添加した。０℃で３０分間撹拌後、反応混合物をＥｔ２Ｏで希釈した。混合物に飽和ＮａＨＣＯ３を添加し、次いで分離させた。水相をＥｔ２Ｏ（３×３０ｍｌ）で抽出した。混合抽出物を５％ＨＣｌ（２５ｍｌ）、Ｈ２Ｏ（２５ｍｌ）、飽和ＮａＨＣＯ３（２０ｍｌ）及び塩水（３０ｍｌ）で洗浄し、最後にＭｇＳＯ４で脱水し、ろ過し、減圧濃縮した。粗製物を、（ヘキサン：ＥｔＯＡｃ＝１：１）を用いたシリカゲルカラムによって精製してオイル状の４（３．２ｇ、７０％）を得た。［α］Ｄ−１２．２（ｃ  １．３０，ＣＨＣｌ３）１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）：δ  １．２２（ｄ，Ｊ＝６Ｈｚ，３Ｈ）、１．７５−１．９０（ｍ，４Ｈ）、２．５０（ｔ，Ｊ＝２．４Ｈｚ，１Ｈ）、３．７０（ｍ，２Ｈ）４．００（ｍ，１Ｈ）、４．２０（ｄｑ，Ｊ＝５．６Ｈｚ，１８．４Ｈｚ，２Ｈ）、４．３１（ｍ，２Ｈ）、４．５０（ｍ，１Ｈ）、４．５５（ｍ，２Ｈ）、４．６２（ｄｄ，Ｊ＝４．２Ｈｚ，１Ｈ）、５．２０（ｄ，Ｊ＝９．６Ｈｚ，１Ｈ）、５．２３（ｄ，Ｊ＝１０．２Ｈｚ，１Ｈ）、５．５０（ｄ，Ｊ＝８Ｈｚ，１Ｈ）、５．９０（ｍ，１Ｈ）、７．４０（ｍ，３Ｈ）、７．６０（ｍ，２Ｈ）；１３Ｃ  ＮＭＲ（７５ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）：δ  １６．０、２４．３、２７．５、４７．９、４８．５、５６．５、５６．７、６６．１、７４．２、７４．９、７５．０、７９．８、１１７．９、１２７．６、１２９．９、１３０．０、１３２．７、１３３．３、１５３．５、１５６．４、１６９．８；ＩＲ（フィルム）：３２９２、２９７９、１７１５、１６４４、１５１３、１４４２、１０７３、７５０、６８８ｃｍ−１；ＭＳ：（ＥＳＩ）［Ｍ＋１］＋４８５．２。
【０１５２】
｛１−［２−（５−フェニルスルファニル−テトラゾル−１−イルメチル）−ピロリジン−１−カルボニル］−２−イニルオキシ−プロピル｝−エチル）−カルバミン酸９Ｈ−フルオレン−９−イルメチルエステル（５）
Ｆｍｏｃ−Ｎ（Ｍｅ）Ｌ−Ａｌａ（６ｇ、１８．５ｍｍｏｌ）及びＨＯＢｔ（２．５ｇ、１８．５ｍｍｏｌ）のＣＨ２Ｃｌ２（６０ｍｌ）溶液にＥＤＣＩ（３．５ｇ、１８．５ｍｍｏｌ）を０℃で添加し、１時間撹拌し、室温でさらに１時間撹拌した。反応混合物に、Ｐｄ（ＰＰｈ３）４（３．６ｇ、３．０ｍｍｏｌ）、４（３ｇ、６．２ｍｍｏｌ）のＣＨ２Ｃｌ２（３０ｍｌ）溶液及びＤＡＢＣＯ（３．７ｇ、３１ｍｍｏｌ）を室温で添加し、続いて１５分間撹拌した。反応混合物を減圧濃縮し、（ヘキサン：ＥｔＯＡｃ＝１：１）を用いたシリカゲルカラムによって精製して淡黄色泡状の５（３．８ｇ、８９％）を得た。［α］Ｄ−３１．９（ｃ  １．５６，ＣＨＣｌ３）。１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）：δ  １．２０（ｄ，Ｊ＝３．６Ｈｚ，３Ｈ）、１．４１（ｄ，Ｊ＝４．２Ｈｚ，３Ｈ）、１．７５−１．９８（ｂｍ，４Ｈ）、２．５０（ｂｓ，１Ｈ）、２．９５（ｓ，３Ｈ）、３．６０（ｂｍ，１Ｈ）、３．７０（ｂｍ，１Ｈ）、４．０１（ｂｍ，１Ｈ）、４．１０（ｄｑ  Ｊ＝５．６Ｈｚ，１８．１Ｈｚ，２Ｈ）、４．２０（ｂｍ，１Ｈ）、４．２５（ｂｍ，１Ｈ）、４．２８（ｂｍ，２Ｈ）４．３２（ｂｍ，１Ｈ）、４．４０（ｂｍ，２Ｈ）、４．５９（ｄｄ，Ｊ＝４．２，８．０Ｈｚ，１Ｈ）、６．８１（ｂｄ，１Ｈ）、７．２８（ｂｍ，２Ｈ）、７．３４（ｂｍ，５Ｈ）、７．５２（ｂｒ  ｍ，４Ｈ）、７．７２（ｄ，Ｊ＝７．６Ｈｚ，ｍ，２Ｈ）；１３Ｃ  ＮＭＲ（７５ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）：δ  １６．１、２４．３、２７．５、４７．４、４８．５、５５．３、５６．４、６８．２、７４．０、７５．０、７９．８、１２０．１、１２５．２、１２５．３、１２７．２、１２７．６、１２７．９、１２８．６、１２９．９、１３０．１、１３２．２、１３２．４、１３３．３、１４１．５、１５３．５、１６９．３、１７１．４；ＩＲ（フィルム）：３２９７、２９７８、１６９３、１６５０、１４４２、１４００、１３１２、１１５７、１０９４８、７５８、７４２ｃｍ−１；ＭＳ：（ＥＳＩ）［Ｍ＋１］＋  ７０８．２
【０１５３】
｛１−［２−ビス−（５−フェニルスルファニル−テトラゾル−１−イルメチル）−ピロリジン−１−カルボニル］−２−イニルオキシ−プロピル｝−エチル）−カルバミン酸９Ｈ−フルオレン−９−イルメチルエステル（６）
５（３．５ｇ、４．９ｍｍｏｌ）とＣｕ（ＯＡｃ）２（６．２ｇ、３４．３ｍｍｏｌ）の混合物のＣＨ３ＣＮ溶液を３０分間還流させた。有機溶媒を除去し、Ｃｕ（ＩＩ）塩を短いシリカゲルパッドを用いてろ過除去し、（ＣＨ２Ｃｌ２／ＭｅＯＨ  ９：１）で溶出させて粗製物を得た。これを、完全に脱水して淡黄色泡状の粗製６（３．３ｇ、９４％）を得た。粗製物の少量を分光分析用に精製した。［α］Ｄ−１３．８（ｃ  １．４１，ＣＨＣｌ３）。１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）：δ  １．１４（ｄ，Ｊ＝６Ｈｚ，６Ｈ）、１．３４（ｄ，Ｊ＝７．２Ｈｚ，６Ｈ）、１．７４−１．９８（ｂｍ，８Ｈ）、２．８４（ｓ，６Ｈ）、３．６０（ｂｍ，４Ｈ）、３．８７（ｂｍ，２Ｈ）、４．０９（ＡＢｑ，Ｊ＝１６．８Ｈｚ，４Ｈ）、４．２０（ｂｍ，２Ｈ）、４．２４（ｍ，２Ｈ）、４．３１（ｂｍ，４Ｈ）、４．３６（ｍ，４Ｈ）、４．６０（ｄｄ，Ｊ＝４．２Ｈｚ，２Ｈ）、４．６９（ｄｄ，Ｊ＝４，８．８Ｈｚ，２Ｈ）、６．８０（ｂｍ，２Ｈ）、７．２８（ｂｍ，４Ｈ）、７．３４（ｂｍ，１０Ｈ）、７．５２（ｂｍ，８Ｈ）、７．７２（ｄ，Ｊ＝７．６Ｈｚ，ｍ，４Ｈ）；１３Ｃ  ＮＭＲ（７５ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）：δ  １６．３、２４．３、２７．５、４７．４、４８．５、５５．３、５６．４、６８．２、７４．０、７５．０、７９．８、１２０．１、１２５．２、１２５．３、１２７．２、１２７．６、１２７．９、１２８．６、１２９．９、１３０．１、１３２．２、１３２．４、１３３．３、１４１．５、１５３．５、１６９．３、１７１．４；ＩＲ（フィルム）：２９２０、２８５０、１６８７、１６４３、１４４１、１３１１、１１５５、１０８３、７４１ｃｍ−１；ＭＳ：（ＥＳＩ）［Ｍ＋１］＋  １４１２．２
【０１５４】
ビス−２−メチルアミノ−Ｎ−（１−｛１−［２−（５−フェニルスルファニル−テトラゾル−１−イルメチル）−ピロリジン−１−カルボニル］−２−イニルオキシ−プロピル｝−プロピオンアミド（７）
６（３ｇ、２．１ｍｍｏｌ）の溶液を２０％ＣＨ２Ｃｌ２−ピペリジン（２１ｍｌ）で５分間処理した。混合物を減圧濃縮し、次いで（ＣＨ２Ｃｌ２：ＭｅＯＨ：ＮＨ４ＯＨ＝８：２：０．５）を用いたシリカゲルカラムによって精製して粘着性泡状の７（１．４ｇ  ７０％）を得た。［α］Ｄ−７．４（ｃ  ０．２３，ＣＨＣｌ３）。１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）：δ  １．１９（ｄ，Ｊ＝６．４Ｈｚ，６Ｈ）、１．２８（ｄ，Ｊ＝７．２Ｈｚ  ６Ｈ）、１．７８（ｍ，４Ｈ）、１．９０（ｍ，４Ｈ）、２．５０（ｓ，６Ｈ）、３．０５（ｑ，Ｊ＝７．２Ｈｚ，２Ｈ）、３．６０（ｂｍ，２Ｈ）、３．７０（ｍ，２Ｈ）、４．０１（ｍ，２Ｈ）、４．２０（ＡＢｑ，Ｊ＝１８．４Ｈｚ，４Ｈ）、４．４３（ｄｄ，Ｊ＝４．０Ｈｚ＆１３．６Ｈｚ，２Ｈ）、４．５０（ｍ，２Ｈ）、４．７０（ｄｄ，Ｊ＝４Ｈｚ＆１３．６Ｈｚ，２Ｈ）、４．７５（ｄｄ，Ｊ＝４，８．８Ｈｚ，２Ｈ）、７．４０（ｍ，６Ｈ）、７．６０（ｍ，４Ｈ）、７．８２（ｄ，Ｊ＝８．４Ｈｚ，２Ｈ）；１３Ｃ  ＮＭＲ（７５ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）：δ  １６．２、１９．６、２２．８、２４．４、２７．５、３１．８、３５．２、４７．８、４８．５、５４．６、５６．３、５６．９、６０．４、７０．４、７４．４、７６．１、７６．８、１２７．７、１２９．９、１３０．０、１３３．３、１５３．６、１６９．５、１７５．４；ＩＲ（フィルム）：３３３９、２９７５、１６４４、１５１３、１４２８、１０８６、７５１、６６７ｃｍ−１；ＭＳ：（ＥＳＩ）［Ｍ＋１］＋  ９６９．４
【０１５５】
参考文献
１．  Ｌｕｍｍａ，Ｗ．Ｃ．；Ｗｏｈｌ，Ｒｏｎａｌｄ  Ａ．欧州特許出願１９８５、ＥＰ  １３４４２４  Ａ１
２．  Ｂｅｊｊａｎｉ，Ｊ；Ｃｈｅｍｌａ，Ｆ；Ａｕｄｏｕｉｎ，Ｍ．Ｊ．Ｏｒｇ．Ｃｈｅｍ，２００３，  ６８，  ９７４７−９７５２．
３．  Ｂｌａｃｋ，Ｊｕｌｉａｎ；Ｂｒｏｗｎ，Ａｌａｎ  Ｄ；Ｅｒｉｚａｂｅｔ  Ｃ  Ｌ；Ｓｍｉｔｈ，Ｊ  Ｄ；Ｍｃｋｅｌｌｏｙ，Ａ  Ｂ．２０００  ＪＰ  ２００００６３３８０
４．  Ｄｉｎｉｎｎｏ，Ｆ；Ｇｕｔｈｉｋｏｎｄａ，Ｒ  Ｎ．；Ｓｃｈｍｉｔｔ，Ｓ  Ｍ．１９９４  ＵＳ  ５２９２８７９  Ａ
【０１５６】
【化２２】
2007526321.tif 000030
【０１５７】
（Ｓ）−Ｂｏｃ−２−［５−（トルエン−４−スルホニル）−テトラゾル−１−イルメチル］−ピロリジン）（２）
封管にシアン化ｐ−トルエンスルホニル（５．０ｇ、２２．１ｍｍｏｌ）及び（Ｓ）−Ｂｏｃ−２−アジドメチルピロリジン（１）［Ｂｌａｃｋ，Ｊ．；Ｂｒｏｗｎ，Ａ．Ｄ．；Ｅｒｉｚａｂｅｔ  Ｃ．Ｌ．；Ｓｍｉｔｈ，Ｊ．Ｄ．；Ｍｃｋｅｌｌｏｙ，Ａ．Ｂ．２０００  ＪＰ２００００６３３８０］（４．０ｇ、２２．１ｍｍｏｌ）を充填した。混合物を８０℃で４０時間撹拌した。粗製物を、（ヘキサン：ＥｔＯＡｃ＝１：１）を用いたフラッシュシリカゲルカラムによって精製して無色泡状の２（７．６ｇ、８４％）を得た。［α］Ｄ−１１．７（ｃ  ０．６４，ＣＨＣｌ３）。１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤ３ＯＤ，−２０°Ｃ，回転異性体６：４）：δ  １．２０＆１．３５（ｓ，９Ｈ）、１．８３＆２．０１（ｍ，４Ｈ）、２．５０（ｓ，３Ｈ）３．４０＆３．４５（ｍ，２Ｈ）、４．４０＆４．４３（ｍ，１Ｈ）、４．７１＆４．８２（ｍ，２Ｈ）、７．５０＆７．７０（ｄ，Ｊ＝８Ｈｚ，２Ｈ）、８．００＆８．４０（ｄ，Ｊ＝８Ｈｚ，２Ｈ）；１３Ｃ  ＮＭＲ（７５ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）：δ  ２２．０、２３．７、２８．４、４６．５、５２．１、５６．１、７６．９、８０．６、１２９．４、１３４．４、１４７．４、１５４．４、１５４．８、１５５．５；ＩＲ（フィルム）：２９７６、１６９３、１３９２、８１５、７０４ｃｍ−１；ＭＳ：（ＥＳＩ）［Ｍ＋１］＋４０８．２。
【０１５８】
（Ｓ）−Ｂｏｃ−２−（５−フェニルスルファニル−テトラゾル−１’−イルメチル）−ピロリジン（３ａ）
２（６．０ｇ、１４．７ｍｍｏｌ）、フェニルチオール（６．５ｇ、５８．８ｍｍｏｌ）及びＫ２ＣＯ３（４．５ｇ、４１．１ｍｍｏｌ）の混合物のＣＨ３ＣＮ（７４ｍｌ）溶液を室温で２日間撹拌した。反応混合物をセライトパッドに通してろ過し、次いで減圧濃縮した。粗製物を、溶離剤として（へキサン：ＥｔＯＡｃ＝１：１）を用いたシリカゲルカラムによって精製して、無色オイルの３（５．２ｇ、９７％）を得た。［α］Ｄ  −２９．２（ｃ  １．３４，ＣＨＣｌ３）。１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤ３ＯＤ，−２０°Ｃ，回転異性体１：１）：δ  １．３０＆１．４２（ｓ，９Ｈ）、１．７３＆２．０１（ｍ，４Ｈ）３．４０＆３．４５（ｍ，１３．２Ｈｚ，２Ｈ）、４．２３＆４．２５（ｍ，１Ｈ）、４．３８＆４．５８（ｍ，２Ｈ）、７．４２＆７．４６（ｍ，３Ｈ）７．５６＆７．６０（ｍ，２Ｈ）；１３Ｃ  ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３，７５ＭＨｚ）：δ  ２１．２、２３．６、２８．５、４６．５、４９．７、５０．４、５６．７、６０．５、８０．７、１２８．１、１２９．９、１３３．１、１５３．５、１５４．９；ＩＲ（フィルム）：２９７５、１６９３、１３９１、１１６７、６８８ｃｍ−１；ＭＳ：（ＥＳＩ）［Ｍ＋１］＋３６１．２
【０１５９】
（Ｓ）−２−（５−フェニルスルファニル−テトラゾル−１−イルメチル）−ピロリジン（４ａ）
３ａ（５．０ｇ、１３．８ｍｍｏｌ）を５０％ＴＦＡのＣＨ２Ｃｌ２（６９ｍｌ）溶液で室温で１５分間処理した。混合物を、飽和ＮａＨＣＯ３で封鎖し、ＣＨ２Ｃｌ２（３×２０ｍｌ）で抽出した。混合抽出物を、Ｎａ２ＳＯ４を用いて脱水し、ろ過し、濃縮した。粗製物を、溶離剤として（ＣＨ２Ｃｌ２：ＭｅＯＨ：ＮＨ４ＯＨ＝２０：０：９：１）を用いたフラッシュシリカゲルカラムによって精製して、４ａ（２．５ｇ、６９％）を得た。［α］Ｄ  ＋９．９（ｃ  １．１４，ＣＨＣｌ３）。１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）：δ  １．４５（ｍ，Ｊ＝２，８．４Ｈｚ，１Ｈ）、１．８０（ｍ，２Ｈ）、１．９５（ｍ，１Ｈ）、２．５（ｂｓ，１Ｈ）、２．９９（ｔ，Ｊ＝１．６Ｈｚ，２Ｈ）、３．６０（ｍ，１Ｈ）、４．２０（ｄｄ，Ｊ＝８．０，１３．０Ｈｚ，１Ｈ）、４．３０（ｄｄ，Ｊ＝８．０，１３．０Ｈｚ  １Ｈ）、７．４０（ｍ，３Ｈ）、７．５８（ｍ，２Ｈ）；１３Ｃ  ＮＭＲ（７５ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）：δ  ２３．５、２８．６、４６．１、４７．８、５８．２、１２７．２、１３０．０、１３０．２、１３３．１、１５３．４；ＩＲ（フィルム）：３３５０、２９６１、２８７１、１４４２、１３８９、７４６、６８８ｃｍ−１；ＭＳ：（ＥＳＩ）［Ｍ＋１］＋  ２６２．２。
【０１６０】
｛１−［２−（５−フェニルスルファニル−テトラゾル−１−イルメチル）−ピロリジン−１−カルボニル］−２−イニルオキシ−プロピル｝−カルバミン酸アリルエステル（５ａ）
４ａ（２．５ｇ、９．５ｍｍｏｌ）及び９（２．７ｇ、１１．４ｍｍｏｌ）のＤＭＦ（４８ｍｌ）冷溶液にＤＩＰＥＡ（３．３ｍｌ、１９．０ｍｍｏｌ）及びＨＡＴＵ（５．４ｇ、１４．２ｍｍｏｌ）を添加した。０℃で３０分間撹拌後、反応混合物をＥｔ２Ｏで希釈した。混合物に飽和ＮａＨＣＯ３を添加し、次いで分離させた。水相をＥｔ２Ｏ（３×３０ｍｌ）で抽出した。混合抽出物を５％ＨＣｌ（２５ｍｌ）、Ｈ２Ｏ（２５ｍｌ）、飽和ＮａＨＣＯ３（２０ｍｌ）及び塩水（３０ｍｌ）で洗浄し、最後にＭｇＳＯ４で脱水し、ろ過し、減圧濃縮した。粗製物を、（ヘキサン：ＥｔＯＡｃ＝１：１）を用いたシリカゲルカラムによって精製してオイル状の５ａ（３．２ｇ、７０％）を得た。［α］Ｄ−１２．２（ｃ  １．３０，ＣＨＣｌ３）１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）：δ  １．２２（ｄ，Ｊ＝６Ｈｚ，３Ｈ）、１．７５−１．９０（ｍ，４Ｈ）、２．５０（ｔ，Ｊ＝２．４Ｈｚ，１Ｈ）、３．７０（ｍ，２Ｈ）４．００（ｍ，１Ｈ）、４．２０（ｄｑ，Ｊ＝５．６，１８．４Ｈｚ，２Ｈ）、４．３１（ｍ，２Ｈ）、４．５０（ｍ，１Ｈ）、４．５５（ｍ，２Ｈ）、４．６２（ｄｄ，Ｊ＝４．２Ｈｚ，１Ｈ）、５．２０（ｄ，Ｊ＝９．６Ｈｚ，１Ｈ）、５．２３（ｄ，Ｊ＝１０．２Ｈｚ，１Ｈ）、５．５０（ｄ，Ｊ＝８Ｈｚ，１Ｈ）、５．９０（ｍ，１Ｈ）、７．４０（ｍ，３Ｈ）、７．６０（ｍ，２Ｈ）；１３Ｃ  ＮＭＲ（７５ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）：δ  １６．０、２４．３、２７．５、４７．９、４８．５、５６．５、５６．７、６６．１、７４．２、７４．９、７５．０、７９．８、１１７．９、１２７．６、１２９．９、１３０．０、１３２．７、１３３．３、１５３．５、１５６．４、１６９．８；ＩＲ（フィルム）：３２３２、２９７９、１７１５、１６４４、１５１３、１４４２、１０７３、７５０、６８８ｃｍ−１；ＭＳ：（ＥＳＩ）［Ｍ＋１］＋４８５．２。
【０１６１】
｛１−［２−（５−フェニルスルファニル−テトラゾル−１−イルメチル）−ピロリジン−１−カルボニル］−２−イニルオキシ−プロピル｝−エチル）−カルバミン酸９Ｈ−フルオレン−９−イルメチルエステル（６ａ）
Ｆｍｏｃ−Ｎ（Ｍｅ）Ｌ−Ａｌａ（６ｇ、１８．５ｍｍｏｌ）及びＨＯＢｔ（２．５ｇ、１８．５ｍｍｏｌ）のＣＨ２Ｃｌ２（６０ｍｌ）溶液にＥＤＣＩ（３．５ｇ、１８．５ｍｍｏｌ）を０℃で添加し、１時間撹拌し、室温でさらに１時間撹拌した。反応混合物に、Ｐｄ（ＰＰｈ３）４（３．６ｇ、３．０ｍｍｏｌ）、５ａ（３ｇ、６．２ｍｍｏｌ）のＣＨ２Ｃｌ２（３０ｍｌ）溶液及びＤＡＢＣＯ（３．７ｇ、３１ｍｍｏｌ）を室温で添加し、続いて１５分間撹拌した。反応混合物を減圧濃縮し、（ヘキサン：ＥｔＯＡｃ＝１：１）を用いたシリカゲルカラムによって精製して淡黄色泡状の６ａ（３．８ｇ、８９％）を得た。［α］Ｄ−３１．９（ｃ  １．５６，ＣＨＣｌ３）。１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）：δ  １．２０（ｄ，Ｊ＝３．６Ｈｚ，３Ｈ）、１．４１（ｄ，Ｊ＝４．２Ｈｚ，３Ｈ）、１．７５−１．９８（ｂｍ，４Ｈ）、２．５０（ｂｓ，１Ｈ）、２．９５（ｓ，３Ｈ）、３．６０（ｂｍ，１Ｈ）、３．７０（ｂｍ，１Ｈ）、４．０１（ｂｍ，１Ｈ）、４．１０（ｄｑ  Ｊ＝５．６Ｈｚ，１８．１Ｈｚ，２Ｈ）、４．２０（ｂｍ，１Ｈ）、４．２５（ｂｍ，１Ｈ）、４．２８（ｂｍ，２Ｈ）４．３２（ｂｍ，１Ｈ）、４．４０（ｂｍ，２Ｈ）、４．５９（ｄｄ，Ｊ＝４．２，８．０Ｈｚ，１Ｈ）、６．８１（ｂｄ，１Ｈ）、７．２８（ｂｍ，２Ｈ）、７．３４（ｂｍ，５Ｈ）、７．５２（ｂｒ  ｍ，４Ｈ）、７．７２（ｄ，Ｊ＝７．６Ｈｚ，ｍ，２Ｈ）；１３Ｃ  ＮＭＲ（７５ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）：δ  １６．１、２４．３、２７．５、４７．４、４８．５、５５．３、５６．４、６８．２、７４．０、７５．０、７９．８、１２０．１、１２５．２、１２５．３、１２７．２、１２７．６、１２７．９、１２８．６、１２９．９、１３０．１、１３２．２、１３２．４、１３３．３、１４１．５、１５３．５、１６９．３、１７１．４；ＩＲ（フィルム）：３２９７、２９７８、１６９３、１６５０、１４４２、１４００、１３１２、１１５７、１０９５３、７５８、７４２ｃｍ−１；ＭＳ：（ＥＳＩ）［Ｍ＋１］＋  ７０８．２
【０１６２】
｛１−［２−ビス−（５−フェニルスルファニル−テトラゾル−１−イルメチル）−ピロリジン−１−カルボニル］−２−イニルオキシ−プロピル｝−エチル）−カルバミン酸９Ｈ−フルオレン−９−イルメチルエステル（７ａ）
６ａ（３．５ｇ、４．９ｍｍｏｌ）とＣｕ（ＯＡｃ）２（６．２ｇ、３４．３ｍｍｏｌ）の混合物のＣＨ３ＣＮ溶液を３０分間還流させた。有機溶媒を除去し、得られた残渣をＣＨ２Ｃｌ２に再溶解し、Ｃｕ（ＩＩ）塩を短いシリカゲルパッドを用いてろ過除去し、（ＣＨ２Ｃｌ２／ＭｅＯＨ  ９：１）で溶出させて材料を得た。これを、完全に脱水して、所望の生成物（主成分）と一部脱保護された材料との混合物として７ａの粗製物（３．３ｇ、９４％）を得た。粗製物の少量を分光分析用に精製した。［α］Ｄ−１３．８（ｃ  １．４１，ＣＨＣｌ３）。１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）：δ  １．１４（ｄ，Ｊ＝６Ｈｚ，６Ｈ）、１．３４（ｄ，Ｊ＝７．２Ｈｚ，６Ｈ）、１．７４−１．９８（ｂｍ，８Ｈ）、２．８４（ｓ，６Ｈ）、３．６０（ｂｍ，４Ｈ）、３．８７（ｂｍ，２Ｈ）、４．０９（ＡＢｑ，Ｊ＝１６．８Ｈｚ，４Ｈ）、４．２０（ｂｍ，２Ｈ）、４．２４（ｍ，２Ｈ）、４．３１（ｂｍ，４Ｈ）、４．３６（ｍ，４Ｈ）、４．６０（ｄｄ，Ｊ＝４．２Ｈｚ，２Ｈ）、４．６９（ｄｄ，Ｊ＝４，８．８Ｈｚ，２Ｈ）、６．８０（ｂｍ，２Ｈ）、７．２８（ｂｍ，４Ｈ）、７．３４（ｂｍ，１０Ｈ）、７．５２（ｂｍ，８Ｈ）、７．７２（ｄ，Ｊ＝７．６Ｈｚ，ｍ，４Ｈ）；１３Ｃ  ＮＭＲ（７５ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）：δ  １６．３、２４．３、２７．５、４７．４、４８．５、５５．３、５６．４、６８．２、７４．０、７５．０、７９．８、１２０．１、１２５．２、１２５．３、１２７．２、１２７．６、１２７．９、１２８．６、１２９．９、１３０．１、１３２．２、１３２．４、１３３．３、１４１．５、１５３．５、１６９．３、１７１．４；ＩＲ（フィルム）：２９２０、２８５０、１６８７、１６４３、１４４１、１３１１、１１５５、１０８３、７４１ｃｍ−１；ＭＳ：（ＥＳＩ）［Ｍ＋１］＋  １４１２．２
【０１６３】
ビス−２−メチルアミノ−Ｎ（１−｛１−［２−（５−フェニルスルファニル−テトラゾル−１−イルメチル）−ピロリジン−１−カルボニル］−２−イニルオキシ−プロピル｝−プロピオンアミド（８ａ）
７ａ（３ｇ、２．１ｍｍｏｌ）の溶液を２０％ＣＨ２Ｃｌ２−ピペリジン（２１ｍｌ）で５分間処理した。混合物を減圧濃縮し、次いで（ＣＨ２Ｃｌ２：ＭｅＯＨ：ＮＨ４ＯＨ＝８：２：０．５）を用いたシリカゲルカラムによって精製して粘着性泡状の８ａ（１．４ｇ  ７０％）を得た。［α］Ｄ−７．４（ｃ  ０．２３，ＣＨＣｌ３）。１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）：δ  １．１９（ｄ，Ｊ＝６．４Ｈｚ，６Ｈ）、１．２８（ｄ，Ｊ＝７．２Ｈｚ  ６Ｈ）、１．７８（ｍ，４Ｈ）、１．９０（ｍ，４Ｈ）、２．５０（ｓ，６Ｈ）、３．０５（ｑ，Ｊ＝７．２Ｈｚ，２Ｈ）、３．６０（ｂｍ，２Ｈ）、３．７０（ｍ，２Ｈ）、４．０１（ｍ，２Ｈ）、４．２０（ＡＢｑ，Ｊ＝１８．４Ｈｚ，４Ｈ）、４．４３（ｄｄ，Ｊ＝４．０，１３．６Ｈｚ，２Ｈ）、４．５０（ｍ，２Ｈ）、４．７０（ｄｄ，Ｊ＝４，１３．６Ｈｚ，２Ｈ）、４．７５（ｄｄ，Ｊ＝４，８．８Ｈｚ，２Ｈ）、７．４０（ｍ，６Ｈ）、７．６０（ｍ，４Ｈ）、７．８２（ｄ，Ｊ＝８．４Ｈｚ，２Ｈ）；１３Ｃ  ＮＭＲ（７５ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）：δ  １６．２、１９．６、２２．８、２４．４、２７．５、３１．８、３５．２、４７．８、４８．５、５４．６、５６．３、５６．９、６０．４、７０．４、７４．４、７６．１、７６．８、１２７．７、１２９．９、１３０．０、１３３．３、１５３．６、１６９．５、１７５．４；ＩＲ（フィルム）：３３３９、２９７５、１６４４、１５１３、１４２８、１０８６、７５１、６６７ｃｍ−１；ＭＳ：（ＥＳＩ）［Ｍ＋１］＋  ９６９．４。
【０１６４】
【化２３】
2007526321.tif 000031
【０１６５】
２−メチルアミノ−Ｎ−｛２−（６−｛１−メチル−２−（２−メチルアミノ−プロピオニルアミノ）−３−オキソ−３−［２−（５−フェノキシ−テトラゾル−１−イルメチル）−ピロリジン−１−イル］−プロポキシ｝−ヘキサ−２，４−ジイニルオキシ）−１−［２−（５−フェノキシ−テトラゾル−１−イルメチル）−ピロリジン−１−カルボニル］−プロピル］−プロピオンアミド（８ｂ）
スキーム２に従って８ｂを合成した。
１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）：δ  １．２０（ｄ，Ｊ＝６．４Ｈｚ，６Ｈ）、１．２９（ｄ，Ｊ＝６．８Ｈｚ，６Ｈ）、１．６５−２．１５（ｍ，８Ｈ）、２．５０（ｓ，６Ｈ）、３．０５（ｑ，Ｊ＝６．８Ｈｚ，２Ｈ）、３．５９（ｍ，２Ｈ）、３．７５（ｍ，２Ｈ）、４．０３（ｍ，２Ｈ）、４．２０（ＡＢｑ，Ｊ＝１１．６，１６．４Ｈｚ，４Ｈ）、４．３９（ｍ，２Ｈ）、４．６０（ｍ  ４Ｈ）、４．６７（ｄｄ，Ｊ＝４．４Ｈｚ，８．４Ｈｚ，２Ｈ）、７．２０（ｍ，２Ｈ）、７．４０（ｍ，８Ｈ）、７．８２（ｄ，Ｊ＝８．４Ｈｚ，２Ｈ）；ＭＳ：（ＥＳＩ）［Ｍ＋１］＋  ９３７．５
【０１６６】
【化２４】
2007526321.tif 000032
【０１６７】
Ｎ−（１−［２−（５−ベンジルオキシ−テトラゾル−１−イルメチル）−ピロリジン−１−カルボニル］−２−｛６−［３−［２−（５−ベンジルオキシ−テトラゾル−１−イルメチル）−ピロリジン−１−イル］−１−メチル−２−（２−メチルアミノ−プロピオニルアミノ）−３−オキソ−プロポキシ］−ヘキサ−２，４−ジイニルオキシ｝−プロピル）−２−メチルアミノ−プロピオンアミド（８ｃ）
スキーム３に従って８ｃを調製した。
１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）：δ  １．２０（ｄ，Ｊ＝６．４Ｈｚ，６Ｈ）、１．２９（ｄ，Ｊ＝６．８Ｈｚ，６Ｈ）、１．６０（ｍ，４Ｈ）、１．８１（ｍ，４Ｈ）、２．５０（ｓ，６Ｈ）、３．０５（ｑ，Ｊ＝６．８Ｈｚ，２Ｈ）、３．５１（ｍ，４Ｈ）、３．６８（ｍ，４Ｈ）、４．０３（ｍ，２Ｈ）、４．１６（ｍ，６Ｈ）、４．３６（ｄｄ，Ｊ＝４．４，１４．４Ｈｚ  ２Ｈ）、４．４７（ｍ，２Ｈ）、４．６７（ｄｄ，Ｊ＝４．４，８．４Ｈｚ，２Ｈ）、５．５２（ＡＢｑ，Ｊ＝１１．６，１６．４Ｈｚ，４Ｈ）、７．３７（ｍ，６Ｈ）、７．４８（ｍ，４Ｈ）、７．８２（ｄ，Ｊ＝８．４Ｈｚ，２Ｈ）；ＭＳ：（ＥＳＩ）［Ｍ／２］＋  ４８２．４。
【０１６８】
【化２５】
2007526321.tif 000033
【０１６９】
Ｎ−（１−［２−（５−ベンジルアミノ−テトラゾル−１−イルメチル）−ピロリジン−１−カルボニル］−２−｛６−［３−［２−（５−ベンジルアミノ−テトラゾル−１−イルメチル）−ピロリジン−１−イル］−１−メチル−２−（２−メチルアミノ−プロピオニルアミノ）−３−オキソ−プロポキシ］−ヘキサ−２，４−ジイニルオキシ｝−プロピル）−２−メチルアミノ−プロピオンアミド（８ｄ）
スキーム４に従って８ｄを合成した。
１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）：δ  １．１５（ｄ，Ｊ＝６．４Ｈｚ，６Ｈ）、１．２９（ｄ，Ｊ＝６．８Ｈｚ，６Ｈ）、１．８５−２．２０（ｍ，８Ｈ）、２．５０（ｓ，６Ｈ）、３．０５（ｑ，Ｊ＝６．８Ｈｚ，２Ｈ）、３．６０（ｂｍ，２Ｈ）、３．７９（ｍ，２Ｈ）、３．９６−４．４０（ｍ，１４Ｈ）、４．６４（ｄｄ，Ｊ＝８．８，１４．８Ｈｚ，２Ｈ）、４．７３（ｄｄ，Ｊ＝３．２，８．８Ｈｚ，２Ｈ）、６．８１（ｔ，Ｊ＝６．０Ｈｚ，２Ｈ）、７．２２（ｍ，６Ｈ）、７．３９（ｍ，４Ｈ）、７．８４（ｄ，Ｊ＝８．８Ｈｚ，２Ｈ）；ＭＳ：（ＥＳＩ）［Ｍ／２＋Ｎａ］＋  ４８５．４。
【０１７０】
【化２６】
2007526321.tif 000034
【０１７１】
ビス−Ｎ−（１−｛２−［５−ベンジルメチルアミノ］−テトラゾル−１−イルメチル｝−ピロリジン−１−カルボニル）−２−プロプ−２−イニルオキシ−プロピル）−２−メチルアミノ−プロピオアミド（８ｅ）
スキーム５に従って８ｅを合成した。
１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）：δ  １．１５（ｄ，Ｊ＝６．４Ｈｚ，６Ｈ）、１．２９（ｄ，Ｊ＝６．８Ｈｚ，６Ｈ）、１．７９−２．１５（ｍ，８Ｈ）、２．５０（ｓ，６Ｈ）、３．０５（ｑ，Ｊ＝６．８Ｈｚ，２Ｈ）、３．１５（ｓ，６Ｈ）、３．６０（ｂｍ，４Ｈ）、３．９９（ｍ，２Ｈ）、４．１０（ｍ，６Ｈ）、４．４１（ｍ，２Ｈ）、４．５１（ｍ，４Ｈ）、４．７１（ｍ  ４Ｈ）、７．２５（ｍ，１０Ｈ）、７．８０（ｄ，Ｊ＝８．８Ｈｚ，２Ｈ）；ＭＳ：（ＥＳＩ）［Ｍ＋Ｎａ］＋  １０１３．５。
【０１７２】
【化２７】
2007526321.tif 000035
【０１７３】
（２Ｓ，４Ｒ）−２−ｔｅｒｔ−ブチル−４−（３−クロロ−ベンジル）−オキサゾリジン−３，４−ジカルボン酸３−ｔｅｒｔ−ブチルエステル４−メチルエステル（１１）
Ｎ２下で、１０［１．  Ｃａｇｎｏｎ，Ｊ．；Ｂｉｄｅａｕ，Ｆ．；Ｍａｒｃｈａｎｄ−Ｂｒｙｎａｅｒｔ，Ｊ．；Ｇｈｏｓｅｚ，Ｌ．Ｔｅｔｒａｈｅｄｒｏｎ  Ｌｅｔｔ．，１９９７，  ３８，  ２２９１；２．  Ｓｅｅｂａｃｈ，Ｄ．；Ａｅｂｉ，Ｊ．Ｄ．Ｔｅｔｒａｈｅｄｒｏｎ  Ｌｅｔｔ．１９８４，  ２５（２４），２５４５−２５４８；３．  Ｓｅｅｂａｃｈ，Ｖ．Ｄ．；Ａｅｂｉ，Ｊ．；Ｇａｎｄｅｒ−Ｃｏｑｕｏｚ，Ｍ．；Ｎａｅｆ，Ｒ．，Ｈｅｌｖｅｔｉｃａ  Ｃｈｉｍｉｃａ  Ａｃｔａ，１９８７，  ７０，  １１９４−１２１６］（１．０ｍｍｏｌ）及び臭化３−クロロベンジル（１．２ｍｍｏｌ）のＴＨＦ−ＨＭＰＡ（４：１、１０ｍＬ）溶液にＬＨＭＤＳ（１．２ｍｍｏｌ）のＴＨＦ溶液を−７８℃で３０分間滴下した。同じ温度（−７８℃）でさらに３０分間撹拌後、反応混合物を飽和ＮＨ４Ｃｌ（５ｍＬ）でクエンチし、室温に加温した。分離させた水相をＥｔ２Ｏ（３×２０ｍＬ）で抽出した。混合抽出物をＨ２Ｏ（２０ｍＬ）及び塩水（２０ｍＬ）で洗浄し、ＭｇＳＯ４を用いて脱水し、ろ過し、減圧濃縮して残渣を得た。１１の粗製物をさらに精製せずに次の段階に使用した。少量の粗製物を、溶離剤（ｅｌｕｔｅ）としてヘキサン：ＥｔＯＡｃ＝２０：１を用いたシリカゲルカラムクロマトグラフィーに供し、スペクトルデータ用に採取した。［α］Ｄ−６７．３（ｃ  １．０２，ＣＨＣｌ３）；１Ｈ  ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３，３００ＭＨｚ）δ  ２．７４（ｄ，Ｊ＝１３．２Ｈｚ，１Ｈ）、３．０５（ｄ，Ｊ＝１３．２Ｈｚ，１Ｈ）、３．５７（ｄｄ，Ｊ＝１．５，１０．８Ｈｚ，１Ｈ）、３．７３（ｓ，３Ｈ）、３．８７（ｄ，Ｊ＝１０．８Ｈｚ，１Ｈ）、７．００（ｍ，１Ｈ）、７．１２（ｍ，１Ｈ）、７．２０−７．２５（ｍ，２Ｈ）；１３Ｃ  ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３，７５ＭＨｚ）δ  ２６．８、２８．３、３８．５、３９．５、５２．６、６９．４、７３．８、８１．５、９７．６、１２７．１、１２８．４、１２９．５、１３０．４、１３４．０、１３８．１、１５３．０、１７２．０；ＩＲ（フィルム）：２９７６、１７４３、１７１１、１３５９、１１３６ｃｍ−１；Ｍａｓｓ（ＥＳＩ）４１２．１９（［ＭＨ］＋）。
【０１７４】
（Ｒ）−２−アミノ−２−（３−クロロ−ベンジル）−３−ヒドロキシ−プロピオン酸メチルエステル（１２）
Ｎ２下で、１１の粗製物（１ｍｍｏｌ）の無水ＭｅＯＨ（５ｍＬ）溶液に濃ＨＣｌ（２ｍＬ）を１時間滴下し、次いで、終夜撹拌した。濃縮後、残渣をＮａＨＣＯ３を用いて０℃で塩基性にした。混合物をＣＨ２Ｃｌ２（５×２０ｍＬ）で抽出した。混合抽出物を、ＭｇＳＯ４を用いて脱水し、ろ過し、濃縮した。粗製物をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（ＣＨ２Ｃｌ２：ＭｅＯＨ：ＮＨ４ＯＨ＝５００：９：１−１００：９：１）にかけて１２（９５％、１０から）を得た。［α］Ｄ−３．６（ｃ  １．４５，ＣＨＣｌ３）；１Ｈ  ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３，４００ＭＨｚ）δ  ２．７５（ｄ，Ｊ＝１３Ｈｚ，１Ｈ）、３．０５（ｄ，Ｊ＝１３Ｈｚ，１Ｈ）、３．５６（ｄ，Ｊ＝１０Ｈｚ，１Ｈ）、３．７３（ｓ，３Ｈ）、３．８７（ｄ，Ｊ＝１０Ｈｚ，１Ｈ）、７．０２（ｍ，１Ｈ）、７．１３（ｍ，１Ｈ）、７．２２−７．２７（ｍ，２Ｈ）。１３Ｃ  ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３，７５ＭＨｚ）δ  ４１．５、５２．４、６３．６、６７．７、１２７．４、１２８．０、１２９．８、１２９．９、１３４．３、１３７．５、１７５．３；ＩＲ（フィルム）：３３５９、３３００、３１８０、１７３６、１０８３ｃｍ−１；Ｍａｓｓ（ＥＳＩ）２４４．０２（［ＭＨ］＋）。
【０１７５】
（２Ｓ，１’Ｒ）１−Ｆｍｏｃ−２−［２’−（３”−クロロ−フェニル）−１’−ヒドロキシメチル−１’−メトキシカルボニル−エチルカルバモイル］−ピロリジン（１３）
Ｎ２下で、Ｆｍｏｃ−Ｐｒｏ−ＯＨ（１．０ｍｍｏｌ）及びアミノアルコール１２（１．０ｍｍｏｌ）のＣＨ３ＣＮ（１０ｍＬ）溶液にＤＭＴ−ＭＭ（１ｍｍｏｌ）を添加し、次いで３時間撹拌した。反応混合物を半分の量に濃縮した。残渣をＥｔ２Ｏ（３０ｍＬ）で希釈し、５％ＨＣｌ（２０ｍＬ）、Ｈ２Ｏ（２０ｍＬ）、５％ＮａＯＨ（２０ｍＬ）、Ｈ２Ｏ（２０ｍＬ）及び塩水（２０ｍＬ）で洗浄し、ＭｇＳＯ４を用いて脱水し、ろ過し、濃縮した。粗製物をさらに精製せずに次の段階に使用した。［α］Ｄ−４１．８（ｃ  １．７５，ＣＨＣｌ３）；１Ｈ（ＣＤＣｌ３，４００ＭＨｚ）δ  １．８２−１．９４（ｍ，２Ｈ）、２．０６−２．３０（ｍ，２Ｈ）、３．０２（ｄ，Ｊ＝１３．４Ｈｚ，１Ｈ）、３．４４−３．５８（ｍ，３Ｈ）、３．６４（ｄ，Ｊ＝１３．４Ｈｚ，１Ｈ）、３．７７（ｓ，３Ｈ）、３．８４（ｔ，Ｊ＝１０．１Ｈｚ，１Ｈ）、４．１８−４．４９（ｍ，５Ｈ）、６．８９（ｄ，Ｊ＝６．６Ｈｚ，１Ｈ）、７．０５（ｓ，２Ｈ）、７．１６（ｍ，２Ｈ）、７．３０（ｔ，Ｊ＝７．３Ｈｚ，２Ｈ）、７．３９（ｔ，Ｊ＝７．３Ｈｚ，２Ｈ）、７．５６（ｄ，Ｊ＝７．６Ｈｚ，２Ｈ）、７．７５（ｄ，Ｊ＝７．６Ｈｚ，２Ｈ）。１３Ｃ（ＣＤＣｌ３，７５ＭＨｚ）δ  ２４．４、２９．３、３６．２、４６．９、５２．９、６２．０、６４．０、６７．６、６８．０、１１９．９、１２４．９、１２５．０、１２７．０、１２７．５、１２７．７、１２９．４、１２９．７、１３３．９、１３７．５、１４１．１、１４１．２、１４３．４、１４３．８、１５６．１、１７１．４、１７２．０；ＩＲ（フィルム）：３３９２、１７４１、１６８２、１４１８、７５８ｃｍ−１；Ｍａｓｓ（ＥＳＩ）５８５．１０（［ＭＮａ］＋）。
【０１７６】
（４Ｒ，２’Ｓ）−４−（３”−クロロ−ベンジル）−２−［１’−Ｆｍｏｃ−ピロリジン−２’−イル］−４，５−ジヒドロ−オキサゾール−４−カルボン酸メチルエステル（１４）
Ｎ２下で、１３（１．０ｍｍｏｌ）のＣＨ２Ｃｌ２（５ｍＬ）冷（−７８℃）溶液にＤＡＳＴ（１．２ｍｍｏｌ）を−７８℃で１０分以内に滴下し、次いで、−７８℃で１時間撹拌した。Ｋ２ＣＯ３（１．５ｍｍｏｌ）を添加後、反応混合物を室温に加温した。反応混合物を飽和ＮａＨＣＯ３（１０ｍＬ）で希釈し、次いでＥｔ２Ｏ（３×２０ｍＬ）で抽出した。混合抽出物をＨ２Ｏ（１０ｍＬ）及び塩水（１０ｍＬ）で洗浄し、ろ過し、減圧濃縮した。残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（へキサン：ＥｔＯＡｃ＝２：１）によって精製して、白色泡状の生成物１４（７２％、１４から）を得た。［α］Ｄ−６１．６（ｃ  １．９０，ＣＨＣｌ３）；１Ｈ  ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３，３００ＭＨｚ，回転異性体混合物）δ  １．７７−２．２１（ｍ，４Ｈ）、３．０７及び３．１４（ＡＢｑ，Ｊ＝１３．７／１３．７Ｈｚ，２Ｈ）、３．４４−３．７２（ｍ，２Ｈ）、３．５６及び３．７０（ｓ，３Ｈ）、４．０３−４．６２（ｍ，６Ｈ）、６．９８−７．２４（ｍ，４Ｈ）、７．３０（ｔ，Ｊ＝７．３Ｈｚ，２Ｈ）、７．３９（ｔ，Ｊ＝７．３Ｈｚ，２Ｈ）、７．６１（ｍ，２Ｈ）、７．７５（ｄｄ，Ｊ＝５．１，７．３Ｈｚ，２Ｈ）；１３Ｃ  ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３，７５ＭＨｚ，回転異性体混合物）δ  ２３．４及び２４．４、３０．３及び３１．４、４２．６及び４３．０、４６．６及び４７．０、４７．１及び４７．３、５２．６及び５２．６、５４．３及び５４．８、６７．３及び６７．５、７３．３及び７３．３、７７．８及び７８．０、１１９．９、１２５．０及び１２５．１、１２５．１及び１２５．２、１２７．０及び１２７．０、１２７．２及び１２７．３、１２７．６、１２８．５，１２９．５及び１２９．５、１３０．４及び１３０．５、１３３．９及び１３４．０、１３６．９及び１３７．２，１４１．１及び１４１．２、１４１．２、１４１．２、１４３．８及び１４３．９、１４４．０及び１４４．２、１５４．４及び１５４．６、１６９．２及び１６９．６、１７２．７及び１７２．８；ＩＲ（フィルム）：２９５２、１７３５、１７０５、１４１７ｃｍ−１；Ｍａｓｓ（ＥＳＩ）５６７．１５（［ＭＮａ］＋）。
【０１７７】
（２Ｓ，３Ｓ）−１−Ａｌｌｏｃ−３−メチル−アジリジン−２−カルボン酸メチルエステル
Ｎ２下で、公知化合物（２Ｓ，３Ｓ）−３−メチル−１−トリチル−アジリジン−２−カルボン酸メチルエステル［１．  Ｍｃｋｅｅｖｅｒ，Ｂ．；Ｐａｔｔｅｎｄｅｎ，Ｇ．Ｔｅｔｒａｈｅｄｒｏｎ，２００３，  ５９，  ２７１３−２７２７；２．  Ｗｉｐｆ，Ｐ．；Ｕｔｏ，Ｙ．，Ｊ．Ｏｒｇ．Ｃｈｅｍ．，２０００，  ６５，  １０３７−１０４９］（２０ｇ、５６ｍｍｏｌ）のＣＨ２Ｃｌ２（１００ｍｌ）溶液及びＭｅＯＨ（２．３ｍｌ）に０℃でＴＦＡ（８．６ｍＬ、１１２ｍｍｏｌ）を添加し、次いで１時間撹拌した。溶媒を減圧蒸発させると、固体残渣が得られた。これをＥｔ２Ｏに溶解した。溶媒を蒸発させ、ＴＦＡが完全に除去されるように、Ｅｔ２Ｏ処理をさらに２回繰り返した。残渣をＥｔ２Ｏに溶解し、次いでＨ２Ｏ（５×３０ｍＬ）で抽出した。混合Ｈ２Ｏ相にＮａＨＣＯ３を０℃で慎重に分割添加し、続いてＥｔＯＡｃ（５６ｍＬ）を添加し、クロロギ酸アリル（８．９ｍＬ、８４ｍｍｏｌ）を０℃で滴下し、次いで室温で１６時間撹拌した。反応混合物をＥｔＯＡｃ（３×１００ｍＬ）で抽出した。混合抽出物を、Ｈ２Ｏ（５０ｍＬ）及び塩水（５０ｍＬ）で洗浄し、ＭｇＳＯ４で脱水し、ろ過し、濃縮した。粗製物を、溶離剤としてへキサン：ＥｔＯＡｃ＝１０：１を用いたシリカゲルカラムクロマトグラフィーによって精製して生成物（５９％）を得た。［α］Ｄ−８１．７（ｃ  １．０２，ＣＨＣｌ３）；１Ｈ  ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３，４００ＭＨｚ）δ  １．３６（ｄ，Ｊ＝５．７Ｈｚ，３Ｈ）、２．８３（ｄｑ，Ｊ＝５．７，６．７Ｈｚ，１Ｈ）、３．１９（ｄ，Ｊ＝６．７Ｈｚ，１Ｈ）、３．７９（ｓ，３Ｈ）、４．６１（ｍ，２Ｈ）、５．２６（ｄｄ，Ｊ＝１．２，１０．４Ｈｚ，１Ｈ）、５．３３（ｄｄ，Ｊ＝１．５，１７．２Ｈｚ，１Ｈ）、５．９１（ｄｄｔ，Ｊ＝５．７，１０．４，１７．２Ｈｚ，１Ｈ）；１３Ｃ  ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３，７５ＭＨｚ）δ  １２．８、３８．８、３９．７、５２．３、６７．３、１１８．８、１３１．５、１６１．３、１６７．５；ＩＲ（フィルム）：１７３３、１２９６、１２８２、１２０４ｃｍ−１；Ｍａｓｓ（ＥＳＩ）２００．１０（［ＭＨ］＋）。
【０１７８】
（２Ｓ，３Ｒ）−２−Ａｌｌｏｃ−アミノ−３−プロプ−２’−イニルオキシ−酪酸メチルエステル
Ｎ２下で、上記生成物（３．２ｇ、１６ｍｍｏｌ）のプロパルギルアルコール（１８６ｍＬ）溶液にＢＦ３・Ｅｔ２Ｏ（４．１ｍＬ、３２ｍｍｏｌ）を室温で添加し、次いで１時間撹拌した。反応混合物を減圧濃縮した。残渣をＨ２Ｏ（５０ｍＬ）に溶解し、次いでＥｔ２Ｏ（３×４０ｍＬ）で抽出した。混合抽出物を、Ｈ２Ｏ（３０ｍＬ）及び塩水（３０ｍＬ）で洗浄し、ＭｇＳＯ４を用いて脱水し、ろ過し、濃縮した。粗製物を、溶離剤としてへキサン：ＡｃＯＥｔ＝１０：１を用いたシリカゲルカラムクロマトグラフィーによって精製してプロパルギルトレオニン誘導体（９５％）を得た。［α］Ｄ６．９（ｃ  １．５３，ＣＨＣｌ３）；１Ｈ  ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３，４００ＭＨｚ）δ  １．２４（ｄ，Ｊ＝６．２Ｈｚ，３Ｈ）、２．４１（ｔ，Ｊ＝２．４Ｈｚ，１Ｈ）、３．７７（ｓ，３Ｈ）、４．１２（ｑｄ，Ｊ＝２．４，１６．１Ｈｚ，２Ｈ）、４．３１（ｍ，１Ｈ）、４．３６（ｄｄ，Ｊ＝２．２，９．５Ｈｚ，１Ｈ）、４．６０（ｄ，Ｊ＝５．５Ｈｚ，２Ｈ）、５．２２（ｄｄ，Ｊ＝１．１，１０．４Ｈｚ，１Ｈ）、５．３３（ｄｄ，Ｊ＝１．５，１７．２Ｈｚ，１Ｈ）、５．４３（ｂｒ  ｄ，Ｊ＝９．３Ｈｚ，１Ｈ）、５．９３（ｄｄｔ，Ｊ＝５．５，１０．８，１７．２Ｈｚ，１Ｈ）；１３Ｃ  ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３，７５ＭＨｚ）δ  １５．９、５２．４、５６．０、５８．５、６５．９、７３．８、７４．４、７９．２、１１７．７、１３２．６、１５６．５、１７１．０；ＩＲ（フィルム）：３２９２、１７５０、１７２４、１５１７、１２１２、１０７５ｃｍ−１；Ｍａｓｓ（ＥＳＩ）２５６．１７（［ＭＨ］＋）。
【０１７９】
（２Ｓ，３Ｒ）−２−Ａｌｌｏｃ−ラミノ（ｌａｍｉｎｏ）−３−プロプ−２’−イニルオキシ−酪酸（９）
Ｎ２下で、上記材料（１ｇ、３．９ｍｍｏｌ）及び０．２６Ｎ  ＨＣｌ（１５ｍＬ）のＡｃＯＨ（４５ｍＬ）溶液を２０時間還流させた。反応混合物を濃縮した。粗製物を、溶離剤としてヘキサン：ＥｔＯＡｃ＝１：１を用いた短いカラムクロマトグラフィーに通して９（９５％）を得た。［α］Ｄ−１．６（ｃ  ０．９９，ＣＨＣｌ３）；１Ｈ  ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３，４００ＭＨｚ）δ  １．２７（ｄ，Ｊ＝６．４Ｈｚ，３Ｈ）、２．４５（ｔ，Ｊ＝２．２Ｈｚ，１Ｈ）、４．１７（ｑｄ，Ｊ＝２．２，１５．９Ｈｚ，２Ｈ）、４．３４（ｍ，１Ｈ）、４．４１（ｄ，Ｊ＝９．２Ｈｚ，１Ｈ）、４．６０（ｄ，Ｊ＝５．５Ｈｚ，２Ｈ）、５．２３（ｄ，Ｊ＝１０．７Ｈｚ，１Ｈ）、５．３２（ｄ，Ｊ＝１７．２Ｈｚ，１Ｈ）、５．４７（ｂｒ  ｄ，Ｊ＝９．２Ｈｚ，１Ｈ）、５．９２（ｄｄｔ，Ｊ＝５．５，１０．７，１７．２Ｈｚ，１Ｈ）；１３Ｃ  ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３，７５ＭＨｚ）δ  １６．３、５６．５、５８．７、６６．３、７４．２、７５．２、７９．２、１１８．１、１３２．７、１５６．９、１７５．８；ＩＲ（フィルム）：３２９３、１７１７、１５２２、１０７６ｃｍ−１；Ｍａｓｓ（ＥＳＩ）２４２．０４（［ＭＨ］＋）。
【０１８０】
（４Ｒ，２’Ｓ）−２−［１’−Ａｌｌｏｃ−Ｔｈｒ（プロパルギル）−ピロリジン−２’−イル］−４−（３”−クロロ−ベンジル）−４，５−ジヒドロ−オキサゾール−４−カルボン酸メチルエステル（１５）
１４（６３４ｍｇ、１．１６ｍｍｏｌ）を２０％ピペリジン−ＣＨ２Ｃｌ２（１０ｍＬ）で処理した。反応混合物を濃縮した。粗製物を、溶離剤（ｅｌｕｔｅ）としてＣＨ２Ｃｌ２：ＭｅＯＨ：ＮＨ４ＯＨ＝２００：９：１を用いたカラムクロマトグラフィーに通した。残渣をＤＭＦに溶解し、続いて９（３０９ｍｇ、１．２８ｍｍｏｌ）、ＤＩＰＥＡ（４０４μＬ、２．３２ｍｍｏｌ）及びＨＡＴＵ（４８７ｍｇ、１．２８ｍｍｏｌ）を０℃で添加し、次いで３０分間撹拌した。反応混合物をＥｔ２Ｏで希釈し、飽和ＮａＨＣＯ３を添加した。水相をＥｔ２Ｏで抽出した。混合抽出物を、Ｈ２Ｏ及び塩水で洗浄し、ＭｇＳＯ４で脱水し、ろ過し、濃縮した。粗製物を、溶離剤としてへキサン：ＥｔＯＡｃ＝１：１を用いたシリカゲルカラムクロマトグラフィーによって精製して１５（５５％）を得た。１Ｈ  ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３，４００ＭＨｚ，回転異性体混合物）δ  １．２０及び１．２４（ｄ，Ｊ＝６．２／６．２Ｈｚ，３Ｈ）、１．８３−２．２４（ｍ，４Ｈ）、２．４０及び２．４３（ｔ，Ｊ＝２．４／２．４Ｈｚ，１Ｈ）、３．１１及び３．２７（ＡＢｑ，Ｊ＝１３．７／１３．９Ｈｚ，２Ｈ）、３．７２−３．７５（ｓ，３Ｈ）、３．５０−４．９７（ｍ，１３Ｈ）、５．２０−５．３０（ｍ，２Ｈ）、５．６８及び５．７８（ｄ，Ｊ＝８．２／８．４Ｈｚ，１Ｈ）、５．９０（ｍ，１Ｈ）、７．０８（ｍ，１Ｈ）、７．１７−７．２５（ｍ，３Ｈ）；Ｍａｓｓ（ＥＳＩ）５４６．１５（［ＭＨ］＋）、５６８．１０（［ＭＮａ］＋）
【０１８１】
（４Ｒ，２’Ｓ）−２−［１’−Ｆｍｏｃ−Ａｌａ−Ｔｈｒ（プロパルギル）−ピロリジン−２’−イル］−４−（３”−クロロ−ベンジル）−４，５−ジヒドロ−オキサゾール−４−カルボン酸メチルエステル（１６）
Ｎ２下で、Ｆｍｏｃ−Ａｌａ−ＯＨ（６３３ｍｇ、１．９ｍｍｏｌ）及びＨＯＢｔ（３０５ｍｇ、１．９ｍｍｏｌ）のＣＨ２Ｃｌ２（４０ｍＬ）溶液に、ＥＤＣＩ（３６９ｍｇ、１．９ｍｍｏｌ）を０℃で添加し、次いで０℃で１時間撹拌し、さらに室温で１時間撹拌した。反応混合物にＰｄ（ＰＰｈ３）４（２９５ｍｇ、０．２６ｍｍｏｌ）、１５（３５０ｍｇ、０．６４ｍｍｏｌ）の溶液及びＤＡＢＣＯ（３５９ｍｇ、３．２ｍｍｏｌ）を添加し、次いで２０分間撹拌した。反応混合物を減圧濃縮し、次いで溶離剤としてヘキサン：ＥｔＯＡｃ＝１：１から１：９を用いたシリカゲルカラムクロマトグラフィーにかけて１６（９９％）を得た。１Ｈ  ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３，４００ＭＨｚ，回転異性体混合物）δ  １．１７及び１．２２（ｄ，Ｊ＝６．４／６．４Ｈｚ，３Ｈ）、１．４０（ｂｒ  ｄ，Ｊ＝７．７Ｈｚ，３Ｈ）、１．８１−２．１６（ｍ，４Ｈ）、２．３１及び２．３８（ｔ，Ｊ＝２．４／２．４Ｈｚ，１Ｈ）、３．１０及び３．２４（ＡＢｑ，Ｊ＝１３．９／１３．９Ｈｚ，２Ｈ）、３．７２及び３．７４（ｓ，３Ｈ）、３．７０−５．００（ｍ，９Ｈ）、５．３６（ｍ，１Ｈ）、６．７５（ｄ，Ｊ＝７．３Ｈｚ，１Ｈ）、７．０５−７．７０（ｍ，１０Ｈ）、７．７６（ｄ，Ｊ＝７．５Ｈｚ，２Ｈ）；Ｍａｓｓ（ＥＳＩ）７５５．１５（［ＭＨ］＋）。
【０１８２】
化合物１７ａ
Ｏ２下で、１８（３４ｍｇ、０．０４５ｍｍｏｌ）、ＣｕＩ（８．６ｍｇ、０．０４５ｍｍｏｌ）及びピリジン（１１μＬ、０．１３５ｍｍｏｌ）の混合物のＴＨＦ（０．４５ｍＬ）溶液を２０時間撹拌した。反応混合物を、１０％グリシン水溶液で希釈し、ＣＨ２Ｃｌ２（５×５ｍＬ）で抽出した。混合抽出物を、ＭｇＳＯ４を用いて脱水し、ろ過し、濃縮した。１９の粗製物を２０％ピペリジン−ＤＭＦで１０分間処理した。反応混合物を濃縮し、溶離剤としてＣＨ２Ｃｌ２：ＭｅＯＨ：ＮＨ４ＯＨ＝１００：９：１を用いた分取ＴＬＣによって精製して、１７ａ（１８から４６％）を得た。１Ｈ  ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３，４００ＭＨｚ，２０は回転異性体を有する。主要な回転異性体のみを示した。）δ  １．２１（ｄ，Ｊ＝６．２Ｈｚ，６Ｈ）、１．３６（ｄ，Ｊ＝７．０Ｈｚ，６Ｈ）、１．８０−２．１２（ｍ，８Ｈ）、３．１１（ＡＢｑ，Ｊ＝１３．７Ｈｚ，４Ｈ）、３．４８−３．９６（ｍ）、４．１５（ｄ，Ｊ＝９．２Ｈｚ，２Ｈ）、４．３０（ｑ，Ｊ＝１６．５Ｈｚ，４Ｈ）、４．５８（ｄ，Ｊ＝９．２Ｈｚ  ２Ｈ）、４．６１−４．９３（ｍ）、７．０６−７．１０  ８（ｍ，２Ｈ）、７．１７−７．２４（ｍ，６Ｈ）、７．９４（ｄ，Ｊ＝８．４Ｈｚ，２Ｈ）；Ｍａｓｓ（ＥＳＩ）５３２．３８（［［Ｍ＋／２］Ｈ］＋）、１０６３．６１（［ＭＨ］＋）。
【０１８３】
Ｎ−Ｍｅ２量体（Ｒ＝Ｍｅ、１７ｂ）を上記１７ａと同じ手順によって合成した。
１Ｈ  ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３，４００ＭＨｚ，１７ｂは回転異性体を有する。）δ  １．１９及び１．２２（ｄ，Ｊ＝６．２／６．４Ｈｚ，６Ｈ）、１．２９及び１．３１（ｄ，Ｊ＝６．６／６．８Ｈｚ，６Ｈ）、１．８０−２．１２（ｍ，８Ｈ）、２．４０及び２．４２（ｓ，６Ｈ）、３．１０及び３．２８（ＡＢｑ，Ｊ＝１３．６／１３．８Ｈｚ，４Ｈ）、３．７２及び３．７４（ｓ，６Ｈ）、３．７１−３．９６（ｍ，６Ｈ）、４．１４及び４，２８（ＡＢｑのＡ，Ｊ＝９．２／９．０Ｈｚ，２Ｈ）、４．３１（ＡＢｑ，Ｊ＝１６．３Ｈｚ，２Ｈ）、４．５８及び４．６２（ＡＢｑのＢ，Ｊ＝９．２／９．０Ｈｚ，２Ｈ）、４．６６−４．９４（ｍ，２Ｈ）、７．０６−７．１０（ｍ，２Ｈ）、７．１８−７．２５（ｍ，６Ｈ）、７．８０（ｄ，Ｊ＝８．４Ｈｚ，２Ｈ）；Ｍａｓｓ（ＥＳＩ）５４６．８５（［［Ｍ＋／２］Ｈ］＋）、１１１３．３５（［ＭＮａ］＋）。
【０１８４】
【化２８】
2007526321.tif 000036
【０１８５】
［５−（３，５−ジヨード−フェニルカルバモイル）−ペンチル］−カルバミン酸２−トリメチルシラニル−エチルエステル（２１）
３，５−ジヨードアニリン［Ｄｉｎｉｎｎｏ，Ｆ．；Ｇｕｔｈｉｋｏｎｄａ，Ｒ．Ｎ．；Ｓｃｈｍｉｔｔ，Ｓ．Ｍ．１９９４  ＵＳ  ５２９２８７９  Ａ］（１ｇ、２．９０ｍｍｏｌ）、６−（２−トリメチルシラニル−エトキシカルボニルアミノ）−ヘキサン酸（１ｇ、３．７７ｍｍｏｌ）のＤＭＦ（１２ｍｌ）溶液をＤＩＰＥＡ（０．９ｍｌ、５．８ｍｍｏｌ）及びＨＡＴＵ（１．６５ｇ、４．３５ｍｍｏｌ）に添加した。混合物を室温で終夜撹拌した。反応混合物をＥｔ２Ｏで希釈した。混合物に飽和ＮａＨＣＯ３を添加し、次いで分離させた。水相をＥｔ２Ｏ（３×４０ｍｌ）で抽出した。混合抽出物を５％ＨＣｌ（３０ｍｌ）、Ｈ２Ｏ（５０ｍｌ）、飽和ＮａＨＣＯ３（３０ｍｌ）及び塩水（３０ｍｌ）で洗浄し、最後にＭｇＳＯ４で脱水し、ろ過し、減圧濃縮した。粗製物を、（ヘキサン：ＥｔＯＡｃ＝６：４）を用いたシリカゲルカラムによって精製して無色粉体の２１（１ｇ、５９％）を得た。１Ｈ  ＮＭＲ（３００ＭＨｚ，（ＣＤ３）２ＳＯ）：δ  ０．０９（Ｓ，９Ｈ）、０．８４（ｔ，Ｊ＝２．１Ｈｚ，２Ｈ）、１．３４（ｍ，２Ｈ）、１．４０（ｍ，２Ｈ）、１．５０（ｍ，２Ｈ）、２．４１（ｔ，Ｊ＝１．８Ｈｚ，２Ｈ）、２．４７（ｍ，２Ｈ）、２．８９（ｍ，２Ｈ）、４．０１（ｔ，２Ｈ）、６．９２（ｂｔ，１Ｈ）、７．６８（ｍ，１Ｈ）、７．９９（ｍ，２Ｈ）；１３Ｃ  ＮＭＲ（７５ＭＨｚ，（ＣＤ３）２ＳＯ）：δ  −０．７２、１８．０、２５．２、２６．４、２９．９、３６．９、６１．９、９６．４、１２７．０、１３９．０、１４２．３、１５６．９、１７２．２；ＩＲ（フィルム）：３３２６、２８５３、２３６１、１６８７、１５４１、１４５０、１２４９、８３７ｃｍ−１；ＭＳ：（ＥＳＩ））［Ｍ＋Ｎａ］＋  ６２４．９
【０１８６】
６−［４−（２−オキソ−ヘキサヒドロ−チエノ［３，４−ｄ］イミダゾル−６−イル）−ブチリルアミノ］−ヘキサン酸（３，５−ジヨード−フェニル）−アミド（２２ａ）
上記化合物２１（０．３７ｇ、０．６１ｍｍｏｌ）を５０％ＴＦＡ−ＣＨ２Ｃｌ２（４ｍｌ）で１時間処理した。溶媒を蒸発させて粗製物を得た。これを、さらに精製せずに次の段階に供した。
【０１８７】
塩（０．３４ｇ、０．５９ｍｍｏｌ）、（＋）−ビオチン（０．１８ｇ、０．７６ｍｍｏｌ）のＤＭＦ（４ｍｌ）溶液をＤＩＰＥＡ（０．３ｍｌ、１．７ｍｍｏｌ）及びＨＡＴＵ（０．３３ｇ、０．８８ｍｍｏｌ）に添加した。混合物を室温で終夜撹拌した。反応混合物を減圧濃縮した。粗製物を（ＭｅＯＨ：ＣＨＣｌ３：ＮＨ４ＯＨ＝１：９：０．１）を用いたシリカゲルカラムによって精製して薄片状の２２ａ（０．３ｇ、８４％）を得た。［α］Ｄ  ＋１６（ｃ  １，ＤＭＦ）。１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，（ＣＤ３）２ＳＯ）：δ  １．２５−１．６０（ｍ，１２Ｈ）、１．９５（ｔ，Ｊ＝１．８Ｈｚ，２Ｈ）、２．２７（ｍ，２Ｈ）、２．８９（ｍ，２Ｈ）、３．０１（ｍ，２Ｈ）、３．１５（ｍ，４Ｈ）、３．６１（ｍ，２Ｈ）、４．１５（ｍ，１Ｈ）、４．２５（ｍ，１Ｈ）、６．４０（ｄ，１Ｈ）、７．６０（ｓ，１Ｈ）、８．００（ｓ，２Ｈ）；１３Ｃ  ＮＭＲ（７５ＭＨｚ，（ＣＤ３）２ＳＯ）：２５．２、２６．０、２６．６、２８．６、２８．８、２９．６、３５．８、３６．９、３８．７、４２．４、５４．０、５６．１、５９．７、９６．４、１２６．９、１３９．０、１４２．２；ＩＲ（フィルム）３２９６、２９３０、１６７５、１５７１、１２０１、７１９ｃｍ−１；ＭＳ：（ＥＳＩ）［Ｍ＋Ｎａ］＋  ７０７。
【０１８８】
６−［４−（２−オキソ−ヘキサヒドロ−チエノ［３，４−ｄ］イミダゾル−６−イル）−ブチリルアミノ］−ヘキサン酸（３，５−ビス−（３−｛１−メチル−２−（１−メチルアミノ−エチルアミノ）−３−オキソ−３−［２−（５−フェニルスルファニル−テトラゾル−１−イルメチル）−ピロリジン−１−イル］−プロポキシ｝−プロプ−１−イニル）−フェニル）−アミド（２４ａ）
２２ａ（０．０２６ｇ、０．０３９ｍｍｏｌ）及び２３ａ（０．０３８ｇ、０．０７８ｍｍｏｌ）のＤＭＦ溶液をＰｄＣｌ２（ＰＰｈ３）２（２．７ｍｇ、１０ｍｏｌ％）、ＣｕＩ（１．１ｍｇ、１６ｍｏｌ％）及びＥｔ３Ｎ（２７μｌ、０．１９ｍｍｏｌ）に添加した。反応混合物を室温で５時間撹拌した。溶媒を蒸発させ、得られた混合物を、（ＣＨＣｌ３：ＭｅＯＨ：ＮＨ４ＯＨ＝８：２：０．４）を用いた分取ＴＬＣによって精製して所望の生成物２４ａを化学収率６０％で得た。［α］Ｄ  ＋１０（ｃ  １，ＣＨＣｌ３）。１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）：δ  １．０９（ｄ，Ｊ＝８．４Ｈｚ，６Ｈ）、１．１１（ｄ，Ｊ＝６．８Ｈｚ，６Ｈ）、１．４５−１．８１（ｍ，２０Ｈ）、１．９７（ｔ，Ｊ＝７．６Ｈｚ，２Ｈ）、２．１３（ｄｄ，Ｊ＝４．４，１２Ｈｚ，２Ｈ）、２．２１（ｓ，６Ｈ）、２．５３（ｄ，Ｊ＝１２．８Ｈｚ，１Ｈ）、２．８９（ｍ，５Ｈ）、３．４０（ｍ，２Ｈ）、３．４２−３．６０（ｍ，４Ｈ）、３．９５（ｍ，２Ｈ）、４．１５（ｍ，２Ｈ）、４．１９（ＡＢｑ，Ｊ＝１９．０Ｈｚ，４Ｈ）、４．３７（ｍ，２Ｈ）、４．４５（ｄｄ，Ｊ＝４．８，１４Ｈｚ，２Ｈ）、４．５７（ｂｄ，２Ｈ）、６．９５（ｓ，１Ｈ）、７．２２（ｍ，６Ｈ）、７．３８（ｍ，４Ｈ）、７．７８（ｓ，２Ｈ）；１３ＣＮＭＲ（７５ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）：１６．１、１９．６、２４．３、２４．９、２５．５、２６．２、２７．５、２７．７、２９．１、３５．２、３７．１、３９．２、４０．９、４７．８、４８．８、５４．９、５５．７、５６．２、５６．８、６０．３、６１．９、７３．５、８４．８、８５．９、９３．８、１２２．１、１２７．６、１２８．８、１３０．０、１３３．５、１３５．１、１３９．８、１６３．９、１６９．７、１７３．４、１８５．６；Ｉ．Ｒ：３３０７、２９３１、１６５１、１４３０、１０８７、６６７ｃｍ−１；ＭＳ：（ＥＳＩ）［Ｍ＋１］＋  １３９９．９。
【０１８９】
【化２９】
2007526321.tif 000037
【０１９０】
化合物３３ａ
スキーム８に従って３３ａを合成した。
１Ｈ  ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３，４００ＭＨｚ）δ  １．１８（ｄ，Ｊ＝６．２Ｈｚ，３Ｈ）、１．２３（ｄ，Ｊ＝６．３Ｈｚ，３Ｈ）、１．３１（ｄ，Ｊ＝７．０Ｈｚ，３Ｈ）、１．３２（ｄ，Ｊ＝７．０Ｈｚ，３Ｈ）、１．７５−２．００（ｍ，８Ｈ）、２．４０（ｓ，３Ｈ）、２．４３（ｓ，３Ｈ）、３．０７（ｑ，Ｊ＝７．０Ｈｚ，１Ｈ）、３．１２（ｑ，Ｊ＝７．０Ｈｚ，１Ｈ）、３．４０−３．７８（ｍ，７Ｈ）、３，９７（ｄｑ，Ｊ＝４．８，６．２Ｈｚ，１Ｈ）、４．０６（ｄｑ，Ｊ＝４．４，６．２Ｈｚ，１Ｈ）、４．２１−４．４８（ｍ，５Ｈ）、４．６８（ｄｄ，Ｊ＝４．０，１３．４Ｈｚ，１Ｈ）、４．７５（ｄｄ，Ｊ＝４．４，８．８Ｈｚ，１Ｈ）、７．４０（ｍ，３Ｈ）、７．６２（ｍ，２Ｈ）、７．８１（ｂｄ，Ｊ＝８．６Ｈｚ，１Ｈ）、７．８８（ｂｄ，Ｊ＝８．６Ｈｚ，１Ｈ）；Ｍａｓｓ（ＥＳＩ）［ＭＮａ］＋  ８０１．３５。
【０１９１】
【化３０】
2007526321.tif 000038
６ｆ−ｔを６ａ−ｅと同じ手順で合成する。
【０１９２】
【化３１】
2007526321.tif 000039
１６ｃ−ｔを上記１６ａ、ｂと類似の手順によって合成する。
【０１９３】
【化３２】
2007526321.tif 000040
３１ｂ−ｄを上記３１ａと類似の手順で合成する。
【０１９４】
【化３３】
2007526321.tif 000041
１８を上記８ａ−ｅと類似の手順で合成する。
【０１９５】
【化３４】
2007526321.tif 000042
１９を上記２４ａと類似の手順によって合成する。
【０１９６】
【化３５】
2007526321.tif 000043
６０は、Ｅｔ２Ｏ中のＡｇ２Ｏの存在下で４２ａ−ｔを二臭化プロパルギルと反応させることによって得られる。
【０１９７】
【化３６】
2007526321.tif 000044
４３ａ−ｔは、上記６０と類似の手順に従って、臭化プロパルギル及びＥｔ２Ｏ中のＡｇ２Ｏで処理し、続いて標準の仕上げ手順によって合成される。
【０１９８】
【化３７】
2007526321.tif 000045
６１は、上記１８と類似の手順に従って、ＣＨ３ＣＮ中のＣｕ（ＯＡｃ）２を用いて合成される。
【０１９９】
【化３８】
2007526321.tif 000046
６２は、上記１８と類似の手順に従って、ＣＨ３ＣＮ中のＣｕ（ＯＡｃ）２を用いて合成することができる。
【国際調査報告】
2007526321.tif 000048