(57)【要約】  ピロロ[2,3-b]ピリジン誘導体または薬剤的に許容可能なそれらの塩の化合物、それらの調製方法、およびそれらを含む医薬組成物が開示されている；これらの化合物は、がん、細胞増殖性疾患、アルツハイマー病、ウイルス感染、自己免疫疾患、および神経変性疾患のような変化したプロテインキナーゼ活性により引き起こされた、および／またはそれに付随した疾患の治療において有用である；また、本発明の化合物の調製のためのSPS条件下での方法、および多数のそれらを含むケミカルライブラリも開示されている。【選択図】  なし【特許請求の範囲】
【請求項１】
次式（I）により表されるピロロ[2,3-b]ピリジン、またはその異性体、互変異性体、担体、代謝生成物、プロドラッグ、および薬学的に許容可能な塩を、その有効量を必要とする哺乳類へ投与することによる、変化したプロテインキナーゼ活性により引き起こされた、および／またはそれに付随した状態または疾患の治療法：
【化１】
2007516997.tif 000049
式中、
Rは、 -Ra、-CORa、-CONRaRb、-SO2Ra、またはCOORaであり；
R1は、 -NRcRd または -ORcであり；
ここでのRa、Rb、Rc、およびRdは、同一または異なるものであり、それぞれ独立に、水素、または任意にさらに置換された、直鎖もしくは分枝状のC1〜C6アルキル、直鎖もしくは分枝状のC2〜C6 アルケニル、直鎖もしくは分枝状のC2〜C6 アルキニル、C3〜C6 シクロアルキル、シクロアルキルC1〜C6 アルキル、アリール、アリールC1〜C6アルキル、複素環または複素環C1〜C6アルキル基から選択される基であるか、あるいは、それらが結合している窒素原子と一緒になって、RaおよびRb、並びにRcおよびRd が、任意にS、O、N、またはNHから選択された1つの付加的へテロ原子またはへテロ原子団を含む、任意に置換された4から7員の複素環を形成してもよく；
R2は、任意にさらに置換された、直鎖もしくは分枝状のC1〜C6アルキル、直鎖もしくは分枝状のC2〜C6アルケニル、直鎖もしくは分枝状のC2〜C6 アルキニル、C3〜C6 シクロアルキル、シクロアルキルC1〜C6アルキル、アリール、アリールC1〜C6アルキル、複素環または複素環C1〜C6アルキルから選択される基である。
【請求項２】
前記変化したプロテインキナーゼ活性により引き起こされた、および／またはそれに付随した疾患が、がん、アルツハイマー病、ウイルス感染、自己免疫疾患、および神経変性疾患から成る群より選択される細胞増殖性疾患である、請求項1に記載の方法。
【請求項３】
前記がんが、上皮細胞がん、扁平上皮がん、骨髄系またはリンパ系の造血性腫瘍、間葉由来の腫瘍、中枢および末梢神経系の腫瘍、黒色腫、精上皮腫、奇形がん、骨がん、色素性乾皮症、角質黄色腫、甲状腺濾胞状がん、およびカポジ肉腫から成る群より選択される、請求項2に記載の方法。
【請求項４】
前記細胞増殖性疾患が、前立腺肥大症、家族性腺腫瘍、ポリープ症、神経線維腫症、乾癬、アテローム性動脈硬化症に付随する血管平滑細胞増殖、肺繊維症、関節炎、糸球体腎炎、並びに外科手術後の狭窄症および再狭窄症から成る群より選択される、請求項1に記載の方法。
【請求項５】
以下の式で表される化合物、またはその異性体、互変異性体、担体、代謝生成物、プロドラッグ、および薬学的に許容可能な塩の有効量の投与による、哺乳類における腫瘍脈管形成または転移を抑制するための方法：
【化２】
2007516997.tif 000050
式中、
RはRa、 -CORa、 -CONRaRb、 -SO2Ra 、またはCOORaであり；
R1は -NRcRd または -ORcであり；
ここでのRa、Rb、Rc、およびRdは、同一または異なるものであり、それぞれ独立に、水素、または任意にさらに置換された、直鎖もしくは分枝状のC1〜C6アルキル、直鎖もしくは分枝状のC2〜C6 アルケニル、直鎖もしくは分枝状のC2〜C6 アルキニル、C3〜C6 シクロアルキル、シクロアルキルC1〜C6 アルキル、アリール、アリールC1〜C6アルキル、複素環または複素環C1〜C6アルキル基から選択される基であるか、あるいは、それらが結合している窒素原子と一緒になって、RaおよびRb、並びにRcおよびRd が、任意にS、O、N、またはNHから選択された1つの付加的へテロ原子またはへテロ原子団を含む、任意に置換された4から7員の複素環を形成してもよく；
R2は、任意にさらに置換された、直鎖もしくは分枝状のC1〜C6アルキル、直鎖もしくは分枝状のC2〜C6アルケニル、直鎖もしくは分枝状のC2〜C6 アルキニル、C3〜C6 シクロアルキル、シクロアルキルC1〜C6アルキル、アリール、アリールC1〜C6アルキル、複素環または複素環C1〜C6アルキルから選択される基である。
【請求項６】
前記変化したプロテインキナーゼ活性により引き起こされた、またはそれに付随した状態が、臓器移植拒絶反応または宿主対移植片病である、請求項1に記載の方法。
【請求項７】
次式の化合物、またはその異性体、互変異性体、担体、代謝生成物、プロドラッグ、および薬学的に許容可能な塩の有効量の投与による、哺乳類における放射線療法誘発性または化学療法誘発性の脱毛症の、治療もしくは予防のための方法：
【化３】
2007516997.tif 000051
式中、
RはRa、 -CORa、 -CONRaRb、 -SO2Ra 、またはCOORaであり；
R1は -NRcRd または -ORcであり；
ここでのRa、Rb、Rc、およびRdは、同一または異なるものであり、それぞれ独立に、水素、または任意にさらに置換された、直鎖もしくは分枝状のC1〜C6アルキル、直鎖もしくは分枝状のC2〜C6 アルケニル、直鎖もしくは分枝状のC2〜C6 アルキニル、C3〜C6 シクロアルキル、シクロアルキルC1〜C6 アルキル、アリール、アリールC1〜C6アルキル、複素環または複素環C1〜C6アルキル基から選択される基であるか、あるいは、それらが結合している窒素原子と一緒になって、RaおよびRb、並びにRcおよびRd が、任意にS、O、N、またはNHから選択された1つの付加的へテロ原子またはへテロ原子団を含む、任意に置換された4から7員の複素環を形成してもよく；
R2は、任意にさらに置換された、直鎖もしくは分枝状のC1〜C6アルキル、直鎖もしくは分枝状のC2〜C6アルケニル、直鎖もしくは分枝状のC2〜C6 アルキニル、C3〜C6 シクロアルキル、シクロアルキルC1〜C6アルキル、アリール、アリールC1〜C6アルキル、複素環または複素環C1〜C6アルキルから選択される基である。
【請求項８】
少なくとも1つの細胞増殖抑制性または細胞障害性薬剤と組み合わせた放射線療法、または化学療法を、それを必要とする前記哺乳類に施すことをさらに含む、請求項1に記載の方法。
【請求項９】
前記治療を必要とする哺乳類がヒトである、請求項1に記載の方法。
【請求項１０】
プロテインキナーゼを、有効量の次式(I)の化合物、またはその異性体、互変異性体、担体、代謝生成物、プロドラッグ、および薬学的に許容可能な塩と接触させることを含んでなる、前記プロテインキナーゼ活性を阻害するための方法：
【化４】
2007516997.tif 000052
式中、
RはRa、 -CORa、 -CONRaRb、 -SO2Ra 、またはCOORaであり；
R1は -NRcRd または -ORcであり；
ここでのRa、Rb、Rc、およびRdは、同一または異なるものであり、それぞれ独立に、水素、または任意にさらに置換された、直鎖もしくは分枝状のC1〜C6アルキル、直鎖もしくは分枝状のC2〜C6 アルケニル、直鎖もしくは分枝状のC2〜C6 アルキニル、C3〜C6 シクロアルキル、シクロアルキルC1〜C6 アルキル、アリール、アリールC1〜C6アルキル、複素環または複素環C1〜C6アルキル基から選択される基であるか、あるいは、それらが結合している窒素原子と一緒になって、RaおよびRb、並びにRcおよびRd が、任意にS、O、N、またはNHから選択された1つの付加的へテロ原子またはへテロ原子団を含む、任意に置換された4から7員の複素環を形成してもよく；
R2は、任意にさらに置換された、直鎖もしくは分枝状のC1〜C6アルキル、直鎖もしくは分枝状のC2〜C6アルケニル、直鎖もしくは分枝状のC2〜C6 アルキニル、C3〜C6 シクロアルキル、シクロアルキルC1〜C6アルキル、アリール、アリールC1〜C6アルキル、複素環または複素環C1〜C6アルキルから選択される基である。
【請求項１１】
式(I)の化合物、またはその異性体、互変異性体、担体、代謝生成物、プロドラッグ、および薬学的に許容可能な塩。
【化５】
2007516997.tif 000053
式中、
RはRa、 -CORa、 -CONRaRb、 -SO2Ra 、またはCOORaであり；
R1は -NRcRd または -ORcであり；
ここでのRa、Rb、Rc、およびRdは、同一または異なるものであり、それぞれ独立に、水素、または任意にさらに置換された、直鎖もしくは分枝状のC1〜C6アルキル、直鎖もしくは分枝状のC2〜C6 アルケニル、直鎖もしくは分枝状のC2〜C6 アルキニル、C3〜C6 シクロアルキル、シクロアルキルC1〜C6 アルキル、アリール、アリールC1〜C6アルキル、複素環または複素環C1〜C6アルキル基から選択される基であるか、あるいは、それらが結合している窒素原子と一緒になって、RaおよびRb、並びにRcおよびRd が、任意にS、O、N、またはNHから選択された1つの付加的へテロ原子またはへテロ原子団を含む、任意に置換された4から7員の複素環を形成してもよく；
R2は、任意にさらに置換された、直鎖もしくは分枝状のC1〜C6アルキル、直鎖もしくは分枝状のC2〜C6アルケニル、直鎖もしくは分枝状のC2〜C6 アルキニル、C3〜C6 シクロアルキル、シクロアルキルC1〜C6アルキル、アリール、アリールC1〜C6アルキル、複素環または複素環C1〜C6アルキルから選択される基である。
【請求項１２】
R1 が -NRcRd 基であり、 Rc および Rd が共に水素原子であるか、あるいはそれらのうち1つが水素原子であり、残りの1つがアルキルもしくはアルケニル基、または任意に置換されたアリールもしくはアリールアルキル基である、請求項11に記載の式(I)の化合物。
【請求項１３】
Rが水素原子またはSO2Ra基であり、ここでのRa が直鎖もしくは分枝状アルキル、または任意に置換されたアリールもしくはアリールアルキル基である、請求項11に記載の式(I)の化合物。
【請求項１４】
R が -CORaであり、ここでの Ra が直鎖もしくは分枝状のアルキル、シクロアルキル、または任意に置換されたアリールもしくはアリールアルキル基である、請求項11に記載の式(I)の化合物。
【請求項１５】
R が -CONRaRb であり、ここでのRaおよび Rbのいずれか一方が水素原子であり、Raおよび Rbの他方が直鎖もしくは分枝状のアルキル、または任意に置換されたアリールもしくはアリールアルキル基である、請求項11に記載の式(I)の化合物。
【請求項１６】
R が -CONRaRb であり、ここでのRa およびRb は、それらが結合している窒素原子と一緒になって、任意に置換された6員の複素環を形成する、請求項11に記載の式(I)の化合物。
【請求項１７】
R2 が、アルキル、アルケニル、シクロアルキル、シクロアルキル-アルキル、または任意に置換されたアリールもしくはアリールアルキル基である、請求項11に記載の式(I)の化合物。
【請求項１８】
Ra、Rb、Rc、および Rd がそれぞれ独立に、A1〜A9、B1〜B15 、または C1〜C9から選択される、請求項12、13、14、15、16、または17のいずれか1項に記載の式(I)の化合物。
【請求項１９】
Ra、Rb、Rc、Rd、およびR2のいずれもが、ハロゲン、ニトロ、オキソ基 (=O)、カルボキシ、シアノ、アルキル、ポリフッ化アルキル、アルケニル、アルキニル、シクロアルキル、シクロアルケニル；アルキルアミノ、ジアルキルアミノ、アリールアミノ、ジアリールアミノ、ウレイド、アルキルウレイド、またはアリールウレイドのようなアリール、へテロサイクリル、アミノ基、およびそれらの誘導体；ホルミルアミノ、アルキルカルボニルアミノ、アルケニルカルボニルアミノ、アリールカルボニルアミノ、アルコキシカルボニルアミノのようなカルボニルアミノ基およびそれらの誘導体；アルコキシ、アリールオキシ、アルキルカルボニルオキシ、アリールカルボニルオキシ、シクロアルケニルオキシ、またはアルキリデンアミノキシのようなヒドロキシ基およびそれらの誘導体；アルキルカルボニル、アリールカルボニル、アルコキシカルボニル、アリールオキシカルボニル、シクロアルキルオキシカルボニル、アミノカルボニル、アルキルアミノカルボニル、ジアルキルアミノカルボニルのようなカルボニル基およびそれらの誘導体；アルキルチオ、アリールチオ、アルキルスルホニル、アリールスルホニル、アルキルスルフィニル、アリールスルフィニル、アリールスルホニルオキシ、アミノスルホニル、アルキルアミノスルホニル、またはジアルキルアミノスルホニルのような硫化誘導体から独立に選択された基により任意に置換される、請求項11に記載の式(I)の化合物。
【請求項２０】
表IV,V,VI,VII,VIII,またはIXに収載された化合物である、請求項11に記載の式(I)の化合物。
【請求項２１】
式(I)の2以上の化合物、またはそれらの異性体、互変異性体、担体、代謝生成物、プロドラッグ、および薬学的に許容可能な塩を含むライブラリ。
【化６】
2007516997.tif 000054
式中、
RはRa、 -CORa、 -CONRaRb、 -SO2Ra 、またはCOORaであり；
R1は -NRcRd または -ORcであり；
ここでのRa、Rb、Rc、およびRdは、同一または異なるものであり、それぞれ独立に、水素、または任意にさらに置換された、直鎖もしくは分枝状のC1〜C6アルキル、直鎖もしくは分枝状のC2〜C6 アルケニル、直鎖もしくは分枝状のC2〜C6 アルキニル、C3〜C6 シクロアルキル、シクロアルキルC1〜C6 アルキル、アリール、アリールC1〜C6アルキル、複素環または複素環C1〜C6アルキル基から選択される基であるか、あるいは、それらが結合している窒素原子と一緒になって、RaおよびRb、並びにRcおよびRd が、任意にS、O、N、またはNHから選択された1つの付加的へテロ原子またはへテロ原子団を含む、任意に置換された4から7員の複素環を形成してもよく；
R2は、任意にさらに置換された、直鎖もしくは分枝状のC1〜C6アルキル、直鎖もしくは分枝状のC2〜C6アルケニル、直鎖もしくは分枝状のC2〜C6 アルキニル、C3〜C6 シクロアルキル、シクロアルキルC1〜C6アルキル、アリール、アリールC1〜C6アルキル、複素環または複素環C1〜C6アルキルから選択される基である。
【請求項２２】
R1 が -NRcRd であり、Rc およびRd が共に水素原子であるか、あるいはそれらの一方が水素原子であり、残りの1つがアルキルもしくはアルケニル基、または任意に置換されたアリールもしくはアリールアルキル基である、請求項21に記載のライブラリ。
【請求項２３】
Rが水素もしくは-SO2Ra 基であり、ここでのRa が直鎖もしくは分枝状のアルキル、または任意に置換されたアリールもしくはアリールアルキル基である、請求項21に記載のライブラリ。
【請求項２４】
R が -CORa 基であり、ここでのRaが直鎖もしくは分枝状のアルキル、シクロアルキル、または任意に置換されたアリールもしくはアリールアルキル基である、請求項21に記載のライブラリ。
【請求項２５】
Rが -CONRaRb であり、ここでのRa およびRb のいずれか一方が水素であり、Ra およびRb の他方が直鎖もしくは分枝状のアルキル、または任意に置換されたアリールもしくはアリールアルキル基である、請求項21に記載のライブラリ。
【請求項２６】
Rが -CONRaRbであり、Ra および Rb は、それらが結合している窒素原子と一緒になって、任意に置換された6員の複素環を形成する、請求項21に記載のライブラリ。
【請求項２７】
R2 が、アルキル、アルケニル基、シクロアルキル、シクロアルキル-アルキル、または任意に置換されたアリールもしくはアリールアルキル基である、請求項21に記載のライブラリ。
【請求項２８】
ライブラリ中の化合物が、表IV, V, VI, VII, VIII ,またはIXに収載された化合物である、請求項21に記載のライブラリ。
【請求項２９】
治療上有効な量の請求項11に記載の化合物、および少なくとも1の薬剤的に許容可能な賦形剤、担体、および／または希釈剤を含む、医薬組成物。
【請求項３０】
さらに1以上の化学療法剤を含む、請求項29に記載の医薬組成物。
【請求項３１】
任意に、薬剤的な賦形剤もしくは担体、および／または希釈剤、並びに1以上の化学療法剤を伴った、請求項11に記載の化合物を含んでなるキット。
【発明の詳細な説明】
【発明の背景】
【０００１】
発明の分野
本発明は、キナーゼ阻害剤として活性のあるピロロ[2,3-b]ピリジン誘導体に関するものであり、特に、5位においてさらに置換されたピロロ[2,3-b]ピリジン誘導体、それらの調製方法、それらの組み合わせライブラリ、それらを含む医薬組成物、および、特にプロテインキナーゼの調節障害に関する疾患の治療における治療学的な薬剤としてのそれらの利用に関する。
【０００２】
背景の考察
プロテインキナーゼ(PKs)の機能不全は、多数の疾患の特徴である。ヒトのがんに含まれるがん遺伝子および前がん遺伝子の大部分は、PKsをコードする。PKs活性の増強は、前立腺肥大症、家族性腺腫瘍、ポリープ症、神経線維腫症、乾癬、アテローム性動脈硬化症に付随する血管平滑細胞増殖、肺繊維症、関節炎、糸球体腎炎、外科手術後の狭窄症および再狭窄症のような多くの非悪性の疾患にも関与している。
【０００３】
PKsは、炎症性の異常、並びにウイルスおよび寄生虫の増殖とも関係している。PKsは神経変性疾患の原因、および発症における主要な役割も果たしている可能性がある。
【０００４】
PKsの機能不全または調節障害についての一般的な参考文献については、例えばCurrent Opinion in Chemical Biology 1999, 3, 459 -465を参照のこと。
【発明の要約】
【０００５】
本発明の目的は、プロテインキナーゼ活性の調節障害によって引き起こされた、および／またはそれに付随した多くの疾患に対する薬剤として治療において有用である化合物を提供することである。
【０００６】
もう1つの目的は、プロテインキナーゼ阻害活性を有する化合物を提供することである。
【０００７】
本発明者は今回、いくつかのピロロ[2,3-b]ピリジン誘導体がプロテインキナーゼ阻害活性を有し、それ故、プロテインキナーゼの調節異常に付随する疾患の治療法において有用である可能性があるということを発見した。
【０００８】
さらに詳細に言えば、本発明の化合物は、これに限定するものではないが、膀胱がん、乳がん、大腸がん、腎臓がん、肝臓がん、小細胞肺がんを含む肺がん、食道がん、胆嚢がん、卵巣がん、膵臓がん、胃がん、頚がん、甲状腺がん、前立腺がん、および扁平上皮細胞がんを含む皮膚がんのようながん；白血病、急性リンパ球性白血病、急性リンパ芽球性白血病、Ｂ細胞リンパ腫、Ｔ細胞リンパ腫、ホジキンリンパ腫、非ホジキンリンパ腫、ヘアリーセルリンパ腫、およびバーキットリンパ腫を含むリンパ系統の造血性腫瘍；急性および慢性骨髄性白血病、骨髄形成異常症候群、および全骨髄芽球性白血病を含む骨髄系統の造血性腫瘍；繊維肉腫および横紋筋肉腫を含む間葉由来の腫瘍；星状細胞腫、神経芽細胞腫、神経膠腫、および神経鞘腫を含む中枢および末梢神経系の腫瘍；黒色腫、精上皮腫、奇形がん、骨肉腫、色素性乾皮症、角質黄色腫、甲状腺濾胞状がん、およびカポジ肉腫などその他の腫瘍を含む、さまざまながんの治療において有用である。
【０００９】
細胞増殖の制御におけるPKsの主要な役割によって、これらのピロロ[2,3-b]ピリジン化合物は、例えば前立腺肥大症、家族性腺腫瘍、ポリープ症、神経線維腫症、乾癬、アテローム性動脈硬化症に付随する血管平滑細胞増殖、肺繊維症、関節炎、糸球体腎炎、外科手術後の狭窄症および再狭窄症のようなさまざまな細胞増殖障害の治療においても有用である。
【００１０】
本発明の化合物は、加えて、cdk5がタウタンパク質のリン酸化に関与しているという事実によって示唆されているように、アルツハイマー病の治療において有用である(J. Biochem., 117, 741-749, 1995)。
【００１１】
本発明の化合物は、アポトーシスの修飾因子としてがん、ウイルス感染、HIV感染個体におけるAIDS進行の予防、自己免疫疾患、および神経変性疾患の治療において有用である。
【００１２】
本発明の化合物は、臓器移植拒絶反応および宿主対移植片病の治療ばかりでなく、腫瘍脈管形成および転移の抑制においても有用である。
【００１３】
本発明の化合物は、他のプロテインキナーゼ、例えばcdk2およびcdk5のようなサイクリン依存性キナーゼ(cdk)、プロテインキナーゼCのさまざまな異性体、Met、PAK-4、PAK-5、ZC-1、STLK-2、DDR-2、オーロラ 1、オーロラ 2、Bub-1、PLK、Chk1、Chk2、HER2、raf1、MEK1、MAPK、EGF-R、PDGF-R、FGF-R、IGF-R、PI3K、ウェール(weel)キナーゼ、Src、Abl、Akt、MAPK、ILK、MK-2、IKK-2、Cdc7、Nekの阻害剤としても作用し、したがって、他のプロテインキナーゼに伴う疾患の治療においても有効である。
【００１４】
本発明の化合物は、放射線治療誘発性または化学療法誘発性の脱毛症の治療および予防においても有用である。
【発明の詳細な説明】
【００１５】
ピロロピリジン誘導体は、当該分野において周知である。1つの例として、3-カルボキサミド-ピロロ[2,3-b]ピリジン化合物が、合成中間体としてChemical Abstracts C.A. 93 (1980):168162に報告されている。
【００１６】
インドリル基によってさらにN- 置換を受けた他のいくつかのピロロピリジン3-カルボキサミド誘導体は、5-HT2C/2Bアンタゴニストとして開示されている（WO 96/11929参照）；N-(イソキノリル-エチル-シクロヘキシル)基によりさらに置換された上記の3-カルボキサミド誘導体は、抗精神病薬剤として開示されている（WO 00/24717; WO 00/21951; WO 00/21950; WO 98/50364参照）；アザビシクロ環によりN-置換された3-カルボキサミド-ピロロ-ピリジン化合物もまた、鎮咳作用を持つトロピル誘導体の調製における合成中間体として開示されている。
【００１７】
さらに、3-ヒドラジドピロロ-ピリジン誘導体は、WO 00/71537で報告されているように、より複雑なプロテインキナーゼ阻害剤の調製のための合成中間体として開示されている。
【００１８】
C-JUN N末端キナーゼの阻害剤としての7-アザインドール類、およびその神経変性疾患の治療における有用性もまたWO 03/082868において開示されている。しかしながら、先行技術のピロロ-ピリジン誘導体は、ピロロピリジン骨格の5位において、任意にさらに官能化された付加的アミノ基を有するもをもたらすものではなかった。
【００１９】
プロテインキナーゼ阻害の活性も含めた治療上の活性を付与されたピロロ[2,3-b]ピリジン化合物の広範な一般式は、WO 00/71537; WO 01/01986; WO 01/58869; WO 99/32111;  WO 99/37637; WO 97/03069; WO 99/58496 、および WO 95/28400においても開示されている。
【００２０】
プロテインキナーゼ阻害剤としての3-アルケニル-ピロロ[2,3-b]ピリジン誘導体もまた、出願人自身の名義でWO 01/98299において開示されている。
【００２１】
したがって、本発明は、式(I)で示された化合物またはそれらの異性体、互変異性体、担体、代謝生成物、プロドラッグ、および薬学的に許容可能な塩を、その有効量を必要とする哺乳類に対して投与することにより、変化したプロテインキナーゼ活性により引き起こされた、および／またはそれに付随した疾患を治療するための方法を提供するものである。
【化７】
2007516997.tif 000002
式中のRはRa、-CORa、-CONRaRb、-SO2Ra 、またはCOORaからなる群より選択され；
R1は -NRcRd または -ORc基であり；
ここでのRa、Rb、Rc、およびRdは、同一または異なるものであり、それぞれ独立に、水素または任意にさらに置換された、直鎖もしくは分枝状のC1〜C6アルキル、C2〜C6 アルケニルまたはC2〜C6 アルキニル、C3〜C6 シクロアルキルまたはシクロアルキルC1〜C6 アルキル、炭素環式または複素環式アリールまたはアリールC1〜C6アルキル、複素環または複素環C1〜C6アルキル基から選択される基であるか、或いは、それらが結合している窒素原子と一緒になって、RaおよびRb、並びにRcおよびRd が、任意にS、O、N、またはNHから選択された1つの付加的へテロ原子またはへテロ原子団を含む、任意に置換された4から7員の複素環を形成してよく；
R2は、任意にさらに置換された、直鎖もしくは分枝状のC1〜C6アルキル、C2〜C6アルケニルまたはC2〜C6 アルキニル、C3〜C6 シクロアルキルまたはシクロアルキルC1〜C6アルキル、炭素環式または複素環式アリールまたはアリールC1〜C6アルキル、複素環または複素環C1〜C6アルキルから選択される基である。
【００２２】
上述した方法の好ましい実施形態において、変化したプロテインキナーゼ活性により引き起こされた、および／またはそれに付随した前記疾患は、がん、細胞増殖性疾患、アルツハイマー病、ウイルス感染、自己免疫疾患、および神経変性疾患から成る群より選択される。
【００２３】
治療される可能性のあるがんの具体的な型には、上皮細胞がん、扁平上皮がん、骨髄系またはリンパ系の造血性腫瘍、間葉由来の腫瘍、中枢および末梢神経系の腫瘍、黒色腫、精上皮腫、奇形がん、骨がん、色素性乾皮症、角質黄色腫、甲状腺濾胞状がん、およびカポジ肉腫が含まれる。
【００２４】
上記方法の他の好ましい実施形態において、前記細胞増殖性疾患は、前立腺肥大症、家族性腺腫瘍、ポリープ症、神経線維腫症、乾癬、アテローム性動脈硬化症に付随する血管平滑細胞増殖、肺繊維症、関節炎、糸球体腎炎、外科手術後の狭窄症および再狭窄症から成る群より選択される。
【００２５】
本発明はさらに、式(I)で示される化合物、またはその異性体、互変異性体、担体、代謝生成物、プロドラッグ、および薬学的に許容可能な塩を提供する。
【化８】
2007516997.tif 000003
式中、
RはRa、 -CORa、 -CONRaRb、 -SO2Ra 、またはCOORa基からなる群より選択され；
R1は -NRcRd または -ORc基であり；
ここでのRa、Rb、Rc、およびRdは、同一または異なるものであり、それぞれ独立に、水素または任意にさらに置換された、直鎖もしくは分枝状のC1〜C6アルキル、C2〜C6 アルケニルまたはC2〜C6 アルキニル、C3〜C6 シクロアルキルまたはシクロアルキルC1〜C6 アルキル、炭素環式または複素環式アリールまたはアリールC1〜C6アルキル、複素環または複素環C1〜C6アルキル基から選択される基であるか、或いは、それらが結合している窒素原子と一緒になって、RaおよびRb、並びにRcおよびRd が、任意にS、O、N、またはNHから選択された1つの付加的へテロ原子またはへテロ原子団を含む、任意に置換された4から7員の複素環を形成してもよく；
R2は、任意にさらに置換された、直鎖もしくは分枝状のC1〜C6アルキル、C2〜C6アルケニルまたはC2〜C6 アルキニル、C3〜C6 シクロアルキルまたはシクロアルキルC1〜C6アルキル、炭素環式もしくは複素環式アリールまたはアリールC1〜C6アルキル、複素環または複素環C1〜C6アルキルから選択される基である。他に規定しない限り、式(I)の化合物自体について、並びにその医薬組成物について、またはそれらを用いた治療法について言及するとき、本発明は、本発明の化合物の全ての水和物、溶媒和物、複合体、代謝産物、およびプロドラッグを含むものである。プロドラッグは共有結合的に結合した化合物であり、生体内で式(I)による活性のある親薬剤を放出する。
【００２６】
この発明の化合物にキラル中心または他の形の異性体中心が存在するときは、エナンチオマーおよびジアステレオマーを含むそのような異性体のすべての形態が、該化合物に包含されるように意図されている。キラル中心を含む化合物はラセミ混合物または鏡像異性濃縮混合物として使用されてもよく、あるいはラセミ混合物を周知の技術を用いて分離し、個々のエナンチオマーを単独で用いてもよい。化合物がケト-エノール互変異性体のような互変異性形で存在する可能性がある場合、それぞれの互変異性形態は本発明中に平衡状態で存在している場合も、またはある形が支配的に存在している場合にも、本発明の範囲内に含まれると考えられる。
【００２７】
この説明において、他に示さない限り、直鎖または分枝状のC1〜C6アルキルという用語は、例えばメチル、エチル、n-プロピル、イソプロピル、n-ブチル、イソブチル、sec-ブチル、tert-ブチル、n-ペンチル、n-ヘキシル等の基を意味する。
【００２８】
直鎖もしくは分枝状のC2〜C6アルケニルまたはアルキニルという用語は、例えばビニル、アリル、1-プロペニル、イソプロペニル、1-、2-または3-ブテニル、ペンテニル、ヘキセニル、エチニル、1-または2-プロピニル、ブチニル、ペンチニル、ヘキシニル等を含む、2から6の炭素原子を有する不飽和のアルケニルまたはアルキニル基を意味する。
【００２９】
C3〜C6シクロアルキルという用語は、例えばシクロプロピル、シクロブチル、シクロペンチル、およびシクロヘキシルのような3から6員の炭素環状を意味する。
【００３０】
他に規定しない限り、アリールという用語は、1つの環部分、もしくは相互に融合しまたは単結合で結合した2つの環部分を有する単環式または二環式の炭素環または複素環を意味し、ここで、少なくとも1つの炭素環または複素環は芳香族である。しかし、1または2の環部分を含み、その全ての環が芳香族である場合も含まれる。別に規定していなければ、前記複素環は、N、NH、O、およびSから選択された1から3の環へテロ原子またはヘテロ原子団を有する、4から7員環のものを意味する。
【００３１】
本発明のアリール基の非限定的な例は、例えば、フェニル、インダニル、ビフェニル、α−またはβ−ナフチル、ピリジル、ピラジニル、ピリミジニル、ピリダジニル、 インドリル、イミダゾリル、イミダゾピリジル、1,2-メチレンジオキシフェニル、チアゾリル、イソチアゾリル、ピロリル、ピロリル-フェニル、フリル、フェニル-フリル、ベンゾテトラヒドロフラニル、オキサゾリル、イソキサゾリル、ピラゾリル、クロメニル、チエニル、ベンゾチエニル、イソインドリニル、ベンゾイミダゾリル、キノリニル、イソキノリニル、キノキサリニル、ベンゾフラザニル、1,2,3-トリアゾリル、1-フェニル-1,2,3-トリアゾリル等である。
【００３２】
複素環（例えばヘテロシクリル）または複素環基という用語は、4から7員環であることも意味する。それ故、ヘテロアリール基としても知られ、かつ現在はアリールという用語に含まれる芳香族複素環基、並びにN、NH、O、およびSから選択された1から3の環へテロ原子またはヘテロ原子団を有する、飽和または部分的に不飽和である複素環も包含する。
【００３３】
これら4から7員複素環基の例は、例えば、1,3−ジオキソラン、ピラン、ピロリジン、ピロリン、イミダゾリン、イミダゾリジン、ピラゾリジン、ピラゾリン、ピペリジン、ピペラジン、モルフォリン、テトラヒドロフラン、ヘキサメチレンイミン、 1,4−ヘキサヒドロジアゼピン、アゼチジン等である。
【００３４】
R が −CONRaRb 基であり、および／またはR1 が -NRcRd基であり、RaとRb、および／またはRcとRdが、それらが結合している窒素原子と一緒になる式(I)の化合物について言及するとき、それらは任意にS、O、N、またはNHから選択された1つの付加的環へテロ原子またはへテロ原子団を含む、任意に置換された4から7員の複素環の形を形成してもよい。
【００３５】
Ra、Rb、Rc、Rd、およびR2に与えられた意味に従って、上記のいずれの基も、さらに任意に1以上の基によって、それらの障害のない位置において置換されてもよい。例えば、ハロゲン、ニトロ、オキソ基(=O)、カルボキシ、シアノ、アルキル、ポリフッ化アルキル、アルケニル、アルキニル、シクロアルキル、シクロアルケニル；例えばアルキルアミノ、ジアルキルアミノ、アリールアミノ、ジアリールアミノ、ウレイド、アルキルウレイド、またはアリールウレイドのようなアリール、へテロサイクリル、アミノ基およびそれらの誘導体；例えばホルミルアミノ、アルキルカルボニルアミノ、アルケニルカルボニルアミノ、アリールカルボニルアミノ、アルコキシカルボニルアミノのようなカルボニルアミノ基およびそれらの誘導体；アルコキシ、ポリフッ化アルコキシ、アリールオキシ、アルキルカルボニルオキシ、アリールカルボニルオキシ、シクロアルケニルオキシ、またはアルキリデンアミノキシのようなヒドロキシ基およびそれらの誘導体；例えばアルキルカルボニル、アリールカルボニル、アルコキシカルボニル、アリールオキシカルボニル、シクロアルキルオキシカルボニル、アミノカルボニル、アルキルアミノカルボニル、ジアルキルアミノカルボニルのようなカルボニル基およびそれらの誘導体；例えばアルキルチオ、アリールチオ、アルキルスルホニル、アリールスルホニル、アルキルスルフィニル、アリールスルフィニル、アリールスルホニルオキシ、アミノスルホニル、アルキルアミノスルホニル、またはジアルキルアミノスルホニルのような硫化誘導体から選択される1から6の基である。
【００３６】
上記の置換基も同様に、適切なときはいつでも、それぞれがさらに1以上の前記の基によって置換されてもよい。
【００３７】
この説明において、別に規定していなければ、ハロゲン原子という用語はフッ素、塩素、臭素、またはヨウ素原子を意味する。
【００３８】
ポリフッ化アルキルまたはアルコキシという用語は、例えばトリフルオロメチル、トリフルオロメトキシ、2,2,2-トリフルオロエチル、2,2,2-トリフルオロエトキシ、1,2-ジフルオロエチル、1,1,1,3,3,3-ヘキサフルオロプロピル-2-イル等のように、少なくとも2以上の水素原子がフッ素原子によって置換された、前記で定義したような直鎖または分枝状のC1〜C6アルキルまたはアルコキシ基を意味する。
【００３９】
上記のすべてから、例えばシクロアルキルアルキル、アリールアルキル、ヘテロシクリルアルキル、アルコキシ、アルキルチオ、アリールオキシ、アリールアルキルオキシ、アルキルカルボニルオキシ等のように、その名前が複合名として同定されるいくつかの基は、それが派生する部分から慣習的に解釈されるように意図されるべきことが、当業者にとって明らかである。1例として前記で定義した、ヘテロシクリル-アルキルおよびシクロアルキル-アルキルという用語は、それぞれ、複素環またはシクロアルキル基によってさらに置換された直鎖または分枝状のアルキル基を表す。
【００４０】
「薬剤的に許容可能な塩」という用語は、通常、アルカリ金属塩を形成するため、および遊離酸または遊離塩基の付加塩を形成するために用いられる塩を含む。薬剤的に許容可能であれば、該塩の性質は重大な意味を持たない。本発明の化合物において適切な、薬剤的に許容可能な酸付加塩は、無機酸または有機酸から調製することができる。そのような無機酸の例は、塩酸、臭化水素酸、ヨウ化水素酸、硝酸、炭酸、硫酸、およびリン酸である。適切な有機酸は、脂肪族、脂環式、芳香族、芳香脂肪族または複素環のカルボン酸およびスルホン酸に属する有機酸の分類から選択されてよい。その例は、ギ酸、酢酸、トリフルオロ酢酸、プロピオン酸、コハク酸、グリコール酸、グルコン酸、乳酸、リンゴ酸、酒石酸、クエン酸、アスコルビン酸、グルクロン酸、マレイン酸、フマル酸、ピルビン酸、アスパラギン酸、グルタミン酸、安息香酸、アントラニル酸、メシル酸、サリチル酸、p-ヒドロキシ安息香酸、フェニル酢酸、マンデル酸、エンボン酸（パモン酸）、メタンスルホン酸、エタンスルホン酸、ベンゼンスルホン酸、パントテン酸、トルエンスルホン酸、2-ヒドロキシエタンスルホン酸、スルファニル酸、ステアリン酸、シクロヘキシルアミノスルホン酸、アルギン酸、ヒドロキシブチル酸、ガラクタル酸、およびガラクツロン酸である。本発明の化合物において適切な、薬剤的に許容可能な塩基付加塩には、アルミニウム、カルシウム、リチウム、マグネシウム、カリウム、ナトリウム、および亜鉛から作られる金属塩、または、N,N'-ジベンジルエチレンジアミン、クロロプロカイン、コリン、ジエタノールアミン、エチレンジアミン、メグルミン（N-メチル-グルカミン）、およびプロカインから作られる有機塩が含まれる。これらの塩のすべては、対応する本発明の化合物から従来法により、例えばそれらを適切な酸または塩基と反応させることによって調製されてよい。
【００４１】
本発明の第1の分類の好ましい化合物は、式(I)の誘導体であって、式中のR1 は-NRcRd 基であり、ここでのRcおよびRd は共に水素原子であるか、あるいは、それらのうち1つが水素原子であり、RcまたはRdのうち残りの１つが直鎖もしくは分枝状のアルキルもしくはアルケニル基である、または任意に置換されたアリールもしくはアリールアルキル基であり；また、式中のRおよびR2は前記定義の通りである誘導体によって表される。
【００４２】
本発明において好ましい他の種類の化合物は、式(I)の誘導体であって、式中のR は、水素原子としてのRaを有するRa基、あるいは直鎖もしくは分枝状のアルキル、または任意に置換されたアリールもしくはアリールアルキル基であるRaを有する-SO2Ra基であり；R1およびR2は前記定義の通りである誘導体によって表される。
【００４３】
本発明において好ましい他の種類の化合物は、式(I)の誘導体であって、式中のR は、直鎖もしくは分枝状のアルキル、シクロアルキル、または任意に置換されたアリールもしくはアリールアルキル基であるRa を有する-CORa基であり；R1およびR2は前記定義の通りである誘導体によって表される。
【００４４】
本発明において好ましい他の種類の化合物は、式(I)の誘導体であって、式中のRは、Ra およびRbのいずれか１つが水素原子であり、RaおよびRbのもう一方が直鎖もしくは分枝状のアルキル、または任意に置換されたアリールもしくはアリールアルキル基である-CONRaRb基であり；R1およびR2は前記定義の通りである誘導体によって表される。
【００４５】
本発明において好ましい他の種類の化合物は、式(I)の誘導体であって、式中のR は、-CONRaRb基であり、ここでのRa およびRbは、それらが結合している窒素原子と一緒になって、任意に置換された6員の複素環を形成し；また式中のR1およびR2は前記定義の通りである誘導体によって表される。
【００４６】
本発明において好ましい他の種類の化合物は、式(I)の誘導体であって、式中のR2は、直鎖もしくは分枝状のアルキルもしくはアルケニル基、またはシクロアルキル、シクロアルキル-アルキル、または任意に置換されたアリールもしくはアリールアルキル基であり；RおよびR1は前記定義の通りである誘導体によって表される。
【００４７】
好ましくは、前記分類において、R、R1およびR2は、実験の節の表I、II、およびIIIにおいて示した意味に従って、それぞれ独立して選択される。
【００４８】
任意に薬剤的に許容可能な塩の形の、本発明の式(I)の具体的な化合物に関しては、実験の節を参照されたい。
【００４９】
前記で明らかにしたように、本発明のさらなる目的は、式(I)の化合物を調製するための方法である。
【００５０】
それ故、式(I)の化合物、および薬剤的に許容可能なそれらの塩は、以下にのステップを含んでなる方法により得てもよい：
a)  塩基性条件下で、以下のホルミル-スクシノニトリルアルカリ塩誘導体を、
【化９】
2007516997.tif 000004
式中のAlk+ は、Na+ または K+を意味する
次式(II)の適切なアミンと反応させて、
R2-NH2        (II)
式中のR2は前記定義の通りである
次式(III)の化合物を得ることと；
【化１０】
2007516997.tif 000005
b)  式(III)の化合物を塩基と反応させて、次式(IV)のピロール誘導体を得ることと；
【化１１】
2007516997.tif 000006
c)  式(IV)の化合物をニトロマロンアルデヒドナトリウムと反応させて、次式(V)の化合物を得ることと；        
【化１２】
2007516997.tif 000007
d)  式(V)の化合物を、酸性条件下および式(VI)の適切なアルコール存在下で反応させて、
R'-OH       (VI)
式中のR'は、直鎖または分枝状の低級アルキル基である
次式(VII)の化合物を得ることと；
【化１３】
2007516997.tif 000008
e)  式(VII)の化合物を塩化スズ(II)と反応させて、次式(I)の化合物を得ることと；
【化１４】
2007516997.tif 000009
式中のR2およびR'は前記定義の通りである
次いで、これを任意に以下のステップ(f.1)、(f.2)、(f.3)、または(f.4)のうちいずれか１つに従って反応させ；
(f.1)   式(VIII)、(IX)、(X)、または(XI)の化合物のいずれか1つと反応させて、
RaCOZ(VIII);  RaNCO(IX);  RaSO2Z(X);  RaOCOZ(XI)
式中のRaは前記定義の通りであり、Zはハロゲン原子である
次式(I)の化合物を得ることと；
【化１５】
2007516997.tif 000010
式中のR’は前記定義の通りであり、Rはそれぞれ-CORa、-CONHRa、-SO2Ra、またはCOORaである
もしくは、
f.2)  トリホスゲンまたは適切なクロロギ酸の存在下、次式(XII)の適切なアミンと反応させて、
HNRaRb     (XII)
式中のRが-CONRaRb基である 前記式(I)の化合物を得ることと；もしくは、
f.3)  還元的作用のある条件下で、次式(XIII)の適切なアルデヒドまたはケトンの誘導体と反応させて、
Ra-CO-Ra      (XIII)
式中のRaは前記で定義した通りであり、それぞれ同じまたは異なる
Rが-CH(Ra)Raである前記式(I)の化合物を得ることと；もしくは
f.4)  適切なパラジウム触媒およびリガンドの存在下、次式(XIV)の芳香族ヨウ化物または臭化物と反応させて、
Ra-X     (XIV)
式中のXはヨウ素または臭素原子を表し、Raは、炭素環式または複素環式のアリール基を表す
式中のRはRaであり、後者は前記の意味をもつ式(I)の化合物を得ることと；
そして、任意に、
g)  ステップ(e), (f.1), (f.2), (f.3) または (f.4)のいずれか１つによって得られた式(I)の化合物を、式(I)の別の化合物、および／または薬剤的に許容可能なそれらの塩に変換する。
【００５１】
上記方法は、周知の手法によって実行され得る類似手法である。
【００５２】
この方法のステップ(a)に従って、ホルミル-スクシノニトリルアルカリ塩を式(II)の適切なアミンと反応させて、対応する式(III)の化合物を得る。式中のR2は、式(I)で定義した通りである。好ましくは、この反応は、ホルミル-スクシノニトリルカリウム塩から開始することによって生じる。
【００５３】
この反応は、例えばナトリウムメトキシド、ナトリウムエトキシド、水素化ナトリウム、カリウムtert-ブトキシド等の存在下に、塩基性条件で、トルエンまたはテトラヒドロフランのような適切な溶媒中において、室温から還流温度の範囲の温度で行われる。式(III)の化合物の調製のための操作条件についての一般的な参考文献については、例えばJ.C.S. Perkin Trans. I: Organic and Bio-Organic Chemistry (1972-1999), (1975), (19), 1910-13; Synthetic Communication, 24(19), 2697-2705 (1994); and Org. Proc. Res. Dev., 7 (2), 209-213, 2003を参照。
【００５４】
この方法のステップ(b)に従って、式(III)の化合物を、単離および精製を必要とすることなく、アルカリ性条件下でさらに反応させる。
【００５５】
好ましくは、この反応は、例えば過剰量の水酸化ナトリウムまたはカリウムのようなアルカリ水酸化物を用いて、例えばエタノール等の低級アルコールのような適切な溶媒中で行う（前記反応の一般的な参考については、例えば上述の学術誌を参照されたい）。
【００５６】
この方法のステップ(c)に従って、式(IV)の化合物をニトロマロンアルデヒドナトリウムと反応させて、式(V)のアザインドール二環式環構造の構造を得る。この反応は、例えば低級アルコールのような適切な溶媒の存在下に、酸性条件下、例えば鉱酸、好ましくは塩酸の存在下で行う。
【００５７】
ここでの低級アルコールという用語は、1から4の炭素原子を有する直鎖または分枝状のアルコールを意味する。好ましくは、この反応はn-プロパノールの存在下で行う。
【００５８】
この方法のステップ(d)に従って、式(V)の化合物は、式(VI)の適切な低級アルコールの存在下で、従来技術に従って操作することにより、式(VII)の対応するカルボキシエステル誘導体へと変換される。典型的には、同じアルコールの大過剰量を使用することにより、それは反応物および溶媒の両方として働く可能性がある。好ましくは、この反応は、式中のR’がちょうどn-プロピルを表すような式(VII)の化合物へと導くために、n-プロパノールを用いて行う。
【００５９】
この方法のステップ(e)に従って、式(VII)の化合物のニトロ基は、対応するアミノ誘導体へと還元される。この還元は、好ましくは、周知の方法により、N-メチルピロリドン（NMP）中において、塩化スズの存在下で行う。明らかに、例えば触媒水素化を含む、ニトロ基をアミノ基に還元する当該分野において周知のいくつかの方法は、同様にうまくいく可能性がある。
【００６０】
前記のことから、前記ステップ(e)の反応により式(I)の化合物が得られるということは、当業者にとって明らかである。式中のRは水素原子であり、R1は、ここでのRcが例えばn-プロピルのようにちょうどこの過程のステップ(d)を介して導かれたR’アルキル基である-ORc 基であり、R2は式(I)で示した通りである。
【００６１】
そのように得られた式(I)の化合物はその後、周知の方法に従って、ステップ(f.1)から(f.4)のいずれか1つにおいて説明した通り操作することによって、式(I)のさまざまな誘導体へと変化させることができる。
【００６２】
典型的には、5位にアミノ基を有するステップ(e)の式(I)の化合物は、以下のものと反応させてもよい：式(VIII)の化合物と反応させて、式中のR が -CORa であり、Ra が前記定義の通りである対応するカルボキシアミド誘導体を得るか；式(IX)の化合物と反応させて、式中のR が-CONHRa であり、Raが前記定義の通りである、対応するウレイド誘導体を得るか；式(X)の化合物と反応させて、式中のRが-SO2Ra であり、Raが前記定義の通りである、スルホンアミド誘導体を得るか；式(XI)の化合物と反応させて、式中のR が -COORa であり、Raが前記定義の通りであるカルバメート誘導体を得るか；式(XII)の化合物、およびトリホスゲンまたは適切なクロロギ酸と反応させて、式中のR が -CONRaRb であり、 Ra およびRbが前記定義の通りである、ウレイド誘導体を得るか；還元作用のある状況下で式(XIII)の化合物と反応させて、式中のR が -CH(Ra)Raであり、それぞれのRaは同一または異なり、および相互に独立したものであり、前記定義の通りである誘導体を得る。
【００６３】
前記反応のいずれか1つは、官能化されたアミノ誘導体の調製において通常用いられる従来の方法に従い、対応するアミンから開始することにより行われる。
【００６４】
ステップ(f.1)における式(VIII)、(X) または (XI)の化合物中において、Zはハロゲン原子を表し、さらに好ましくは、塩素原子である。
【００６５】
この点において、ステップ(e)における式(I)の化合物は、ジクロロメタン、ジメチルホルムアミド、テトラヒドロフラン、ジオキサン等のような適切な溶媒に溶解しており、トリエチルアミン、ジイソプロピルエチルアミン、または炭酸ナトリウムのような適切な塩基がその中に加えられる。一般式(VIII), (X) または(XI)の化合物がその後加えられ、約2時間から約15時間、約20℃から約80℃の温度範囲でその混合物を撹拌する。一般式(IX)のイソシアン酸塩を用いる場合、この反応条件は、塩基がなくてもよいということを除いて前記と同じである。これらの反応の全てにおいて、ジメチルアミノピリジンのような適切な触媒が任意に使われてもよい。
【００６６】
この方法におけるステップ(f.2)に従って、ステップ(e)で得られた式(I)の化合物は、トリホスゲン、または、例えば4-ニトロフェニルクロロギ酸のような適切なクロロギ酸の存在下で式(XII)のアミノ誘導体と反応させてもよい。
【００６７】
この反応は、ハロゲン化炭化水素、好ましくはジクロロメタンのような適切な溶媒中において、例えばジイソプロピルエチルアミンまたはトリエチルアミンのような塩基の存在下で、室温で操作することにより行われる。
【００６８】
この方法におけるステップ(f.3)に従って、ステップ(e)の式(I)の化合物を、還元性の条件下で、式(XIII)のアルデヒドまたはケトン誘導体と反応させて、Rが前記定義の通りである、対応する式(I)の化合物を得る。前記より、ここでの2つのRaのうちいずれか1つが水素原子である式(XIII)のアルデヒド誘導体を用いることにより、式中のR が -CH2Raである対応する誘導体を得られるであろうということは、当業者にとっては明らかである。同様に、ケトン誘導体を用いることにより、-CH(Ra)RaとしてのRを有する化合物が得られるであろう（ここでのそれぞれのRaは相互に独立しており、前記で示した通りであるが、水素以外である）。
【００６９】
この方法のステップ(f.4)に従って、ステップ(e)の式(I)の化合物は、式中のRがRaであり、Raがアリール基、故に広い範囲の炭素環式または複素環式芳香族基である、対応する式(I)のアリール誘導体へと変換される。
【００７０】
この反応は、例えば酢酸パラジウムまたはPd2(dba)3のようなパラジウム触媒などの適切な触媒の存在下、および適切なリガンドの存在下で、式(XIV)の適切なヨウ化または臭化アリールを用いて、既知の方法に従って行われる。溶媒、触媒、およびリガンドも含めた前記アリール化反応およびそれらの操作条件についての一般的な参考文献は、J. Am. Chem. Soc., (2003), 125, 6653-55; JOC (2001), 66, 2560-2565; および JOC (2002), 67, 6479-6486を参照。
【００７１】
前記の事項に加え、所望のときはいつでも、このように調製されたいかなる前記式(I)の化合物もまた、前記ステップ(g)に示したように従来の方法に従って操作することにより、さらに式(I)の他の誘導体へと変換させることができるということが、当業者にとっては明らかである。
【００７２】
一例として、次式(I)の化合物
【化１６】
2007516997.tif 000011
式中のRおよびR2が前記定義の通りであり、R’が例えばn-プロピルのような所定のアルキル基を表す
は、以下の式(I)の化合物へと変換させてもよく：
【化１７】
2007516997.tif 000012
h)  式中のRおよびR2は前記定義の通りであり、R1 は-ORcであり、このRc はn-プロピル以外である場合、酸性または塩基性条件下、任意にジブチルスズオキシド、または例えばチタニウム(IV)エトキシド、チタニウム(IV)イソプロポキシド等のチタニウムアルコキシドのような適切な金属塩基触媒の存在下で周知の方法によって行われる、例えば次式(XV)の適切なエステル交換反応を通して得られる；
Rc-OH     (XV)
i)  式中のRおよびR2は前記定義の通りであり、R1 が-OH基の場合は、酸性または塩基性加水分解によって得られる。
【００７３】
付加的な例において、式中のRおよびR2が前記定義の通りであり、R1が-ORc基であり、ここでのRcがアルキル基である式(I)の化合物は、対応する式(I)のアミド誘導体に変換することもできる。
【００７４】
j)  式中のR1 は -NRcRdであり、ここでのRcおよびRd は前記定義の通りである場合は、任意に、例えばシアン化ナトリウムまたはジメチルアミノ-ピリジンのような適切な触媒の存在下で、アンモニア、または次式(XVI) もしくは (XVII)の適切なアミンで処理することによって変換される。
【００７５】
Rc-NH2     (XVI);         RcRdNH     (XVII)
同様に、式中のRおよびR2が前記定義の通りであり、R1 が水素原子としてのRc を有する-ORc基である式(I)の化合物もまた、例えばジシクロヘキシルカルボジイミド（DCC）、1-エチル-3-(3'-ジメチルアミノプロピル)カルボジイミド(EDC)、 O-ベンゾトリアゾリルテトラメチルイソウロニウムテトラフルオロホウ酸塩(TBTU)、またはベンゾトリアゾール-1-イルオキシトリピローリジノホスホニウムヘキサフルオロリン酸塩(PyBOP)のような適切な縮合剤の存在下で、適切なアミンHNRcRdと反応させることにより、対応する式(I)のアミド誘導体へと変換させることができる。
【００７６】
上記事項に加えて、R2がアリール基（例えばフェニル、ピリジル、任意に置換されたフェニル等）であるか、またはピロール窒素原子に直接結合した1位の炭素原子が、-CH2-の構造（例えばベンジル、エチル、n-プロピル等）、もしくはCH<の構造（例えばジフェニルメチル、イソプロピル等）をもった1級または2級炭素原子であるような炭化水素鎖である式(I)の化合物は、代替合成経路によっても調製することができる。
【００７７】
前記の経路は、特に、ステップ(d)の式(VII)の中間化合物の調製に対する異なるアプローチである。
【００７８】
それ故、R2がアリール基であるか、またはピロール窒素原子に直接結合した1位の炭素原子が1級または2級炭素原子であるような炭化水素鎖である、式(I)の後者の化合物および薬剤的に許容可能なそれらの塩を調製するための方法は、本発明のさらなる目的である。その方法は以下から成る：
k)  無水トリフルオロ酢酸（TFAA）の存在下で、1-(フェニルスルホニル)-1H-ピロロ[2,3-b]ピリジン-3-カルボン酸メチルエステルと硝酸テトラブチルアンモニウム(TBAN)を反応させて、次式(XVIII)の化合物を得ることと；
【化１８】
2007516997.tif 000013
l)塩基性または酸性加水分解の条件下で、次式(XVIII)の化合物を反応させて、式(XIX)の化合物またはそれらの塩を得ることと；
【化１９】
2007516997.tif 000014
m)式(XIX)の化合物とカルボキシ保護剤、例えばエステル化剤を反応させて、式(XX)の化合物を得ることと；
【化２０】
2007516997.tif 000015
式中のR’は、例えばメチルのようなアルキルを意味する
n)  式(XX)の化合物と次式(XXI)の化合物とを反応させて、
R2-Z'        (XXI)
式中のR2は、アリール基またはZ’に直接結合している１位の炭素原子が1級または2級である炭化水素鎖、およびZ’はハロゲン原子またはトシルまたはメシルのような適切な脱離基である 
式(VII)の化合物を得、
【化２１】
2007516997.tif 000016
式中のR2およびR'は前記定義の通りである；
その後、前記方法における(e)から(g)の残りのステップに従って、前記式(VII)の化合物を反応させる。
【００７９】
上記方法もまた、周知の方法により行うことができる類似手法である。
【００８０】
特に、この方法におけるステップ(k)に従って、トリフルオロ酢酸無水物(TFAA)の存在下、硝酸テトラブチルアンモニウム(TBAN)と反応させて、1-(フェニルスルホニル)-1H-ピロロ[2,3-b]ピリジン-3-カルボン酸メチルエステルのニトロ化行うを行うことにより、式(XVIII)の化合物を得る。この反応は、例えばジクロロメタンなどのハロゲン化炭化水素のような適切な溶媒中で、0℃から室温の温度範囲において、約10時間から約30時間のさまざまな時間で行われる。
【００８１】
この方法におけるステップ(l)に従って、式(XVIII)の化合物は、塩基性または酸性条件下で加水分解を受け得る。好ましくは、この反応は、水酸化ナトリウム水溶液および2,2,2-トリフルオロエタノール(TFE)の存在下で、室温から90℃の温度範囲で、4時間から1日の時間で行う。用いた操作条件に従って、式(XVIII)の化合物は酸の形または塩として選択的に得られるであろう。
【００８２】
好ましくは、この加水分解反応は、対応するナトリウム塩を得るために、塩基性条件下、例えば水酸化ナトリウムの存在下で行う。
【００８３】
この方法におけるステップ(m)に従って、式(XIX)の化合物は適切なアルコールの存在下で、周知の操作条件によってエステル化することができる。例として、この反応は、式中のR’がメチルを意味する式(XX)の化合物に対応するカルボキシメチルエステル誘導体を得るために、メタノールの存在下で行うことができる。
【００８４】
あるいは、R’がメチルを表す、ステップ(m)の式(XX)の化合物は、周知の方法、例えば、テトラヒドロフラン中のカリウムトリメチルシラノレート、またはメタノール中のトリエチルアミン（TEA）の存在下において、式(XVIII)の化合物の直接加水分解によっても調製することができる。
【００８５】
最後に、この方法におけるステップ(n)に従って、式(XX)の化合物は、式中のR2およびZ'が前記定義の通りである適切な式(XXI)の化合物との反応によって、式(VII)の化合物へと変換される。この反応は、例えば炭酸カリウム、水素化ナトリウム、カリウムtert-ブトキシド、カリウムヘキサメチルジシラジド(KHMDS)、リチウムヘキサメチルジシラジド(LHMDS)、ナトリウムヘキサメチルジシラジド(NHMDS)、リチウムジイソプロピルアミド（LDA）、またtert-ブチルイミノ(ピロリジノ)ホスホラン（BTPP）のような適切な塩基の存在下で、テトラヒドロフラン、ジクロロメタン、アセトニトリル、ジメチルホルムアミド、ジメチルアセトアミド等のような適切な溶媒中で行うことができる。
【００８６】
好ましい実施形態に従えば、この反応はジクロロメタン中、BTPPを用いて行われる。
【００８７】
代わりの方法もまた、例えばPerkin 1, (19), 3317-3324, 2000または Tetrahedron: Asymmetry, 11(23), 4719-4724, 2000の中で報告されているように、活性化されたメチリデン部分(=CH2)から開始することにより、ピロロ-ピリジン環のピロール窒素原子をアルキル化することが、当該分野において既知である。
【００８８】
上記の全てから、もしそれらの任意の異性体を包含する上記方法によって調製された式(I)の化合物が異性体混合物として得られた場合、従来の方法に従って行われた式(I)の単一異性体へのそれらの分離も、本発明の範囲内であるということは当業者にとって明らかである。
【００８９】
同様に、当該分野において周知の手法による、式(I)の化合物の薬剤的に許容可能なその塩への変換、あるいは、対応する塩の遊離化合物(I)への変換も、やはり本発明の範囲内である。
【００９０】
その全てが本発明の範囲内であるとみなされるいずれかの変法によって式(I)の化合物を調製するときは、それらの開始物質、試薬、または中間体に含まれる、望ましくない副反応を生じ得る任意の官能基は、従来技術によって適切に除かれる必要がある。
【００９１】
同様に、遊離の脱保護された化合物への後者の変換は、既知の手法によって行われてもよい。
【００９２】
本発明の目的である方法の出発物質（その可能な変形例を含む）、並びにそれらの任意の反応物質は周知の化合物であり、それ自体は商業的に入手可能でなくても、周知の方法により調製することができる。
【００９３】
例として、ホルミル-サクシノニトリルアルカリ塩誘導体は、商業的に入手可能なブタンジニトリルとギ酸エチルを塩基性条件下で反応させることにより、文献を引用して前記で述べたように[ステップ(a)参照]調製することができる。一度得られると、ホルミルサクシノニトリルアルカリ塩は反応混合物から分離され、その後、式(II)のアミンと反応される。あるいは、この方法のステップ(a)のように、単離する必要なしに、直接インサイチューで式(II)のアミンと反応させることができる。
【００９４】
加えて、1-(フェニルスルホニル)-1H-ピロロ[2,3-b]ピリジン-3-カルボン酸メチルエステル化合物は、Tetrahedron Letters 40 (1999), 5853-5854で述べられているように調製することができる。
【００９５】
同様に、式(II)、(VI)、(VIII) から (XVII)、および (XXI)の化合物は、既知であるか、または既知の方法により容易に得られる。
【００９６】
この方法における式(XIX)の中間体化合物は、新規物質であり、それ故、本発明のさらなる目的に相当する。
【００９７】
上記に加えて、式(I)の化合物は、逐次反応における中間体間で前記反応を成すことにより、および固相合成(SPS)の条件下で操作することにより、当該分野において周知のコンビナトリアル・ケミストリーによって好都合に調製することができる。
【００９８】
例として、前記方法のステップ(d)または(n)において得られる式(VII)の中間カルボキシエステル誘導体は、まず従来の方法によって行われた加水分解によって遊離カルボン酸誘導体へ変換され、その後、例えばカルボキサミド基の形を経由して、容易に重合体樹脂上に支持される。
【００９９】
支持されたその中間体は、この方法の残りのステップに従って、引き続き反応されてもよい。
【０１００】
前記合成経路は以下のようにまとめることができる：
【化２２】
2007516997.tif 000017
あるいは、ステップ(l)における式(XIX)の中間化合物は、まず重合体の樹脂上に支持されることも可能であり、その後、この方法の残りのステップに従って、例えばアザインドールの1位にR2部分を挿入し、5位のニトロ基をアミノ基に還元し、アミノ基自身に官能基を持たせ、および樹脂を切断することにより、式(I)の望んだ化合物を得ることができる。
【０１０１】
前記反応はいずれも、上記で示したように、R2がアリール基、またはピロール窒素原子に結合している1位の炭素原子が1級または2級の炭化水素鎖である式(I)の化合物を得るために、既知の方法で、前記のように操作することにより行われる。
【０１０２】
この後者の合成経路は以下のようにまとめることができる：
【化２３】
2007516997.tif 000018
好ましくは、前記樹脂は、例えばワング(Wang)樹脂、トリチル樹脂、Cl-トリチル樹脂、リンクアミド（Rink amide）樹脂、テンタゲル(Tentagel)OH樹脂、およびそれらの誘導体を含む、商業的に入手可能な樹脂である。
【０１０３】
本発明の好ましい実施形態によると、ポリスチレン樹脂は、商業的に入手可能なホルミルポリスチレン樹脂、例えば4-(4-ホルミル-3-メトキシフェノキシ)ブチリルAM樹脂と還元性条件下、例えば水素化ホウ素ナトリウムおよびその誘導体存在下における適切なアミノ誘導体との、実質的には以下に示すような反応によって誘導体化されたホルミルポリスチレン樹脂である。
【化２４】
2007516997.tif 000019
この反応は、酢酸の存在下で、ジクロロメタンのような適切な溶媒中において行うことができる。
【０１０４】
このように得られたポリマー支持されたアミノ誘導体、特に上記の誘導体化されたホルミルポリスチレン樹脂と称されるものは、当該分野において周知である。
【０１０５】
一般的に、酸感受性メトキシベンズアルデヒドポリスチレン樹脂（Acid Sensitive MethoxyBenzaldehyde polystirene (AMEBA)樹脂)としても知られているホルミルポリスチレン樹脂上に負荷されたアミン類は、例えば、Tetrahedron Letters (1997), 38, 7151-7154; J. Am. Chem. Soc. (1998), 120, 5441; and Chem. Eur. J. (1999), 5, 2787に示されているように、TMOF/DCE およびNaBH(OAc)3 、またはAcOH/DMFおよびNaCNBH3中において、過剰量のアミンの存在下で、標準的な還元アミノ化により調製される。
【０１０６】
それ故、式(I) の化合物および薬剤的に許容可能なそれらの塩を調製するための方法を提供することが、本発明のさらなる目的である。その方法は；
o)  前記方法のステップ(d)または(n)によって調製される式(VII)の化合物を、対応する次式(XXII)のカルボン酸誘導体へと変換し；
【化２５】
2007516997.tif 000020
式中のR2は式(I)において示した通りである
p)  式(XXII)の化合物と次式(XXIII)の誘導体化されたホルミルポリスチレン樹脂とを反応させて、
(P)-CH2-NHRc      (XXIII)
式中の（P）は樹脂であり、Rcは式(I)において示した通りである
次式(XXIV)の化合物を得ることと；
【化２６】
2007516997.tif 000021
q)  ステップ(e)および、任意にステップ(f.1)、(f.2)、(f.3)、または (f.4)のいずれか1つにより、式(XXIV)の化合物を反応させて、次式(XXV)の化合物を得ることと；
【化２７】
2007516997.tif 000022
式中の(P)、R2 および Rcは前記で示した通りであり、Rは式(I)で定義されたとおりである
r)  酸性条件下で、式(XXV)の化合物から樹脂を切断して、RおよびR2は前記定義の通りであり、R1は-NHRc 基でRcは上記定義の通りである式(I)の化合物を得ることと；
そして、任意に
s)  このようにして得られた式(I)の化合物を、他の式(I)の化合物、および／または薬剤的に許容可能なそれらの塩へと変換する。
【０１０７】
この方法のステップ(o)に従って、式(VII)のカルボキシエステル誘導体は、例えば酸性または塩基性条件下で、既知の方法に従って操作することにより、対応するカルボン酸へと加水分解される。
【０１０８】
この方法のステップ(p)に従って、この反応は、例えばNMPのような適切な溶媒中において、ジイソプロピルエチルアミン（DIEA）、ジメチルアミノピリジン（DMAP）、および、例えば1-エチル-3-(3'-ジメチルアミノプロピル)カルボジイミド(EDC)、ジシクロヘキシルカルボジイミド(DCC)、ジイソプロピルカルボジイミド(DIC)、またはO-ベンゾトリアゾリルテトラメチルイソウロニウムテトラフルオロホウ酸塩 (TBTU)のような適切な縮合剤の存在下で行われる。
【０１０９】
ステップ(q)に従って、式(XXIV)の支持された化合物はまず、この方法のステップ(e)によって還元されて、アミノ誘導体となり、前記で示したように、任意にさらに反応させて、ピロロ[2,3-b]ピリジン環の5位が修飾された種々の化合物を生成させる。操作条件は、基本的に前記で示した通り、均質的な操作条件下で操作することによる。
【０１１０】
ステップ(r)による樹脂の切断は、例えば塩酸、トリフルオロ酢酸、メタンスルホン酸、またはp-トルエンスルホン酸のような適切な酸の存在下、酸性条件下で行ってもよい。
【０１１１】
また、本発明の他の目的は、式(I)の化合物および薬剤的に許容可能なそれらの塩を調製する方法であり、その方法は以下を含む：
t)  前記ステップ(l)で得た式(XIX)の化合物と次式(XXIII)の誘導体化されたホルミルポリスチレン樹脂を反応させて、
(P)-CH2-NHRc      (XXIII)
式中の(P)は樹脂であり、Rcは式(I)において示した通りである
次式(XXVI)の化合物を得ることと；
【化２８】
2007516997.tif 000023
u)   (XXVI)の化合物をステップ(n)で示した式(XXI)の化合物と反応させて、次式(XXVII)の化合物を得ることと；
【化２９】
2007516997.tif 000024
v)  式(XXVII)の化合物を、ステップ(e)で示したように、次式(XXVIII)の対応するアミノ誘導体へと還元することと；
【化３０】
2007516997.tif 000025
そして任意に、ステップ(f.1)、(f.2)、(f.3)、または(f.4)のいずれか1つによってそれを変換し、次式(XXV)の化合物を得ることと；
【化３１】
2007516997.tif 000026
式中の(P)、R2およびRcは前記で示した通りであり、Rは式(I)において定義した通りである
w)  ステップ(r)に従って式(XXV)の化合物から樹脂を切断し、任意に、ステップ(s)に従ってその得られた化合物を変換する。
【０１１２】
明らかに、前記で示したようなコンビナトリアルケミストリー技術に従って操作することにより、多数の式(I)の化合物を得ることができる。
【０１１３】
それ故、本発明のさらなる目的は、2以上の式(I)の化合物、またはそれらの異性体、互変異性体、担体、代謝産物、プロドラッグ、および薬剤的に許容可能な塩のライブラリを提供することである。
【化３２】
2007516997.tif 000027
式中、
Rは、-Ra、-CORa、-CONRaRb、-SO2Ra、またはCOORaから成る群より選択され；
R1 は、-NRcRd またはORc基であり；
ここでのRa、Rb、Rc、およびRdは、同一または異なるものであり、それぞれ独立に、水素、または任意にさらに置換された、直鎖もしくは分枝状のC1〜C6 アルキル、C2〜C6 アルケニル、 C2〜C6アルキニル、C3〜C6シクロアルキル、シクロアルキルC1〜C6 アルキル、炭素環式または複素環式のアリールもしくはアリールC1〜C6アルキル、複素環または複素環C1〜C6 アルキルから選択される基であるか、あるいは、それらが結合している窒素原子と一緒になって、RaおよびRb、並びにRcおよびRd が、任意にS、O、N、またはNHから選択された1つの付加的へテロ原子またはへテロ原子団を含む、任意に置換された4から7員の複素環を形成してもよく；
R2は、任意にさらに置換された、直鎖もしくは分枝状のC1〜C6 アルキル、C2〜C6 アルケニルもしくはC2〜C6 アルキニル、C3〜C6 シクロアルキルもしくはシクロアルキルC1〜C6アルキル、炭素環式または複素環式のアリールもしくはアリールC1〜C6 アルキル、複素環もしくは複素環C1〜C6 アルキル基から選択される基である。
【０１１４】
本発明の好ましい実施形態によると、前述のライブラリは式(I)の化合物であって、式中のR1 は -NRcRd 基であり、 Rc および Rd は共に水素原子であるか、あるいは、それらのうち1つが水素原子であり、残りの1つが直鎖もしくは分枝状のアルキルもしくはアルケニル基、または任意に置換されたアリールもしくはアリールアルキル基であり；RおよびR2 は前記で定義した通りである化合物を含む。
【０１１５】
式(I)の化合物であって、式中のRが、水素原子としてのRa を有するRa 基であるか、あるいは、直鎖もしくは分枝状のアルキル基、または任意に置換されたアリールもしくはアリールアルキル基としてのRa を有する-SO2Ra基であり；R1 およびR2 は上記定義の通りである化合物のライブラリもまた好ましい。
【０１１６】
式(I)の化合物であって、式中のRが-CORa 基であり、ここでのRaは直鎖もしくは分枝状のアルキル、シクロアルキル、または任意に置換されたアリールもしくはアリールアルキル基であり、；R1およびR2は上記定義の通りである化合物のライブラリもまた好ましい。
【０１１７】
式(I)の化合物であって、式中のRが-CONRaRb基であり、ここでのRaおよびRbは、いずれか1つが水素原子であり、他方のRaおよびRbは直鎖もしくは分枝状のアルキル基、または任意に置換されたアリールもしくはアリールアルキル基であり；R1およびR2は上記定義の通りである化合物のライブラリもまた好ましい。
【０１１８】
式(I)の化合物であって、式中のRが-CONRaRbであり、ここでのRaおよびRbはそれらが結合している窒素原子と一緒になって、任意に置換された6員の複素環を形成し；R1およびR2は上記定義の通りである化合物のライブラリもまた好ましい。
【０１１９】
式(I)の化合物であって、式中のR2が、直鎖もしくは分枝状のアルキルもしくはアルケニル基、あるいはシクロアルキル、シクロアルキル-アルキル、または任意に置換されたアリールもしくはアリールアルキル基であり；RおよびR1は上記定義の通りである化合物のライブラリもまた好ましい。
【０１２０】
式(I)の化合物の上記ライブラリの一般的引用については実験の節を参照。
【０１２１】
上記全てのことから、例えば数千の式(I)の化合物から成るピロロ[2,3-b]ピリジン誘導体のライブラリを一度このように準備すれば、前記ライブラリは、上記で示したように与えられたキナーゼに対するスクリーニングをするために非常に好都合に利用することができるということは、当業者にとって自明である。
【０１２２】
化合物のライブラリについて、および生物学的活性のスクリーニングの手段としてのそれらの利用に対する一般的な参照については、J. Med. Chem. 1999, 42, 2373-2382; and Bioorg. Med. Chem. Lett. 10 (2000), 223-226を参照。
【０１２３】
薬理学
式(I)の化合物は、プロテインキナーゼとして活性があり、それ故、例えば腫瘍細胞の無制限の増殖を制限するのに有用である。治療において、それらは前記で示したようなさまざまな腫瘍の治療ばかりでなく、乾癬、アテローム性動脈硬化症に付随する血管平滑細胞増殖、および外科手術後の狭窄症および再狭窄症のような他の細胞増殖障害の治療、並びにアルツハイマー病の治療においても使用される。
【０１２４】
推定上のcdk/サイクリン阻害剤の阻害活性および選択された化合物の作用強度は、SPAテクノロジー（アマシャムファルマシアバイオテク(Amersham Pharmacia Biotech)）の使用に基づいた測定法により決定される。
【０１２５】
この測定法は、放射能標識されたリン酸部分の、ビオチン標識された基質へのキナーゼによる転移から成る。結果として得られる、33P-標識され、かつビオチン標識された生成物は、ストレプトアビジンコートされたSPAビーズ（ビオチン容量130pmol/mg）と結合することが可能になる。そして、放射線をシンチレーションカウンターで測定した。
【０１２６】
cdk2/サイクリンA活性の阻害アッセイ
キナーゼ反応：自家製の4μMビオチン標識ヒストンH1（シグマ(Sigma)# H-5505）基質、10μM ATP (0.1マイクロCi P33γ-ATP)、1.1nMサイクリンA/CDK2複合体、最終的に30μLになるような緩衝液（トリスHCl 10mM pH7.5 、MgCl2 10 mM、DTT 7.5 mM + 0.2 mg/ml BSA)中の阻害剤を96のU底の各ウェルに添加した。室温で60分間のインキュベーションの後、その反応を32 mM EDTA、500 μMコールドATP、0.1% トリトン(Triton)X100 、および10mg/mlのストレプトアビジンコートされたSPAビーズの添加によって停止させた。20分間のインキュベーションの後、懸濁液を110μL取り出し、100μLの5M CsClを含む96穴オプティプレート(OPTIPLATEs)へ移した。4時間後、そのプレートを2分間、パッカードトップカウント(Packard TOP-Count)放射能読み取り装置で読み取った。
【０１２７】
IC50値の決定：阻害剤は0.0015から10μMの範囲の異なる濃度で分析した。実験データは、4つのパラメーターの論理式を用いて、コンピュータープログラム（グラフパッドプリズム（GraphPad Prizm）)で解析した。
【０１２８】
y = 最低値+(最高値-最低値)/(1+10^((logIC50-x)*傾き))
式中のxは阻害剤濃度の対数であり、yは反応である；yは最低値から始まり、シグモイド型をとりながら最高値へと向かう。
【０１２９】
Kiの算出：
実験法：反応は、3.7 nM 酵素、ヒストン、およびATP (コールド／標識ATPの割合は1/3000で一定)を含む緩衝液(10 mMトリス, pH 7.5, 10 mM MgCl2, 0.2 mg/ml BSA, 7.5 mM DTT)中で行った。反応はEDTAで停止させ、リン酸膜（ミリポア(Millipore)製マルチスクリーン(Multiscreen) 96穴プレート）上にその基質を捕捉した。広範な洗浄の後、そのマルチスクリーンプレートをトップカウンター上で読み取った。ATPおよびヒストン濃度のそれぞれのコントロール値（時間0）を測定した。
【０１３０】
実験計画：反応速度は、4つのATP、基質（ヒストン）、および阻害剤濃度で測定される。80-ポイント濃度マトリックスは、それぞれのATPおよび基質Km値、並びに阻害剤IC50値(0.3, 1, 3, 9 倍のKm値またはIC50値)に基づいて選定される。阻害剤の非存在下、並びに異なったATPおよび基質濃度における予備的な時間経過実験は、Ki値を決定する実験における反応の直線範囲において、単一の終点時間(10分)の選択を可能にする。
【０１３１】
動態学的パラメーターの評価：動態学的パラメーターは、完全なデータ一式（80ポイント）を用い、[Eq.1] （ATPに対する競合的阻害剤、ランダムメカニズム）を用いて、連立非直線最小二乗回帰法により評価される：
【数１】
2007516997.tif 000028
式中のA=[ATP], B=[基質], I=[阻害剤], Vm=最大速度, Ka, Kb, KiはそれぞれATP、基質、阻害剤の解離定数である。αおよびβは、それぞれ基質とATPの結合および基質と阻害剤の結合の間の共同作用因子である。
【０１３２】
加えて、選択された化合物は、厳密に細胞周期(cdk2/サイクリンE, cdk1/サイクリンB1, cdk5/p25, cdk4/サイクリンD1)と関連しているセリンスレオニンキナーゼのパネル上、および特殊な場合はMAPK、PKA、EGFR、IGF1-R、オーロラ(Aurora)-2、およびCdc 7上でも特定される。
【０１３３】
cdk2/サイクリンE活性の阻害アッセイ
キナーゼ反応：自家製の10μMのビオチン標識ヒストンH1（シグマ# H-5505）基質、30 μM ATP (0.3マイクロCi P33γ-ATP)、4 ng GST-サイクリンE/CDK2 複合体、最終的に30μLになるような緩衝液(トリスHCl 10 mM pH 7.5、MgCl2 10 mM、DTT 7.5 mM + 0.2 mg/ml BSA)中の阻害剤を 96のU底の各ウェルに添加した。室温で60分間のインキュベーションの後、その反応を32 mM EDTA、500 μM コールドATP、0.1% トリトン(Triton)X100 、および10mg/mlのストレプトアビジンコートされたSPAビーズを含む、PBS緩衝液100μLの添加によって停止させた。20分間のインキュベーションの後、懸濁液を110μL取り出し、100μLの5M CsClを含む96穴オプティプレートへ移した。4時間後、そのプレートを2分間、パッカードトップカウント放射能読み取り装置で読み取った。
【０１３４】
IC50の決定：前記を参照
cdk1/サイクリンB1活性の阻害アッセイ
自家製の4μMのビオチン標識ヒストンH1（シグマ# H-5505）基質、20μM ATP (0.2マイクロCi P33γ-ATP)、3 ng サイクリンB/CDK1 複合体、最終的に30μLになるような緩衝液(トリスHCl 10 mM pH 7.5、MgCl2 10 mM、DTT 7.5 mM + 0.2 mg/ml BSA)中の阻害剤を 96のU底の各ウェルに添加した。室温で20分間のインキュベーションの後、反応を1mgSPAビーズを含む100 μl PBS、32 mM EDTA、0.1% トリトンX-100、および500 μM ATP により停止させた。その後110μLの量をオプティプレートへ移した。
【０１３５】
20分後、基質捕捉のためにインキュベートし、100 μl 5M CsClをビーズの層化を可能にするためにオプティプレートの上層に添加し、トップカウント装置での放射能測定の前に4時間静置させた。
【０１３６】
IC50の決定：前記を参照
cdk5/p25活性の阻害アッセイ
cdk5/p25活性の阻害アッセイは、以下のプロトコルに従って行われる。
【０１３７】
キナーゼ反応：10μMのビオチン標識ヒストンH1（シグマ# H-5505）基質、30 μM ATP (0.3マイクロCi P33γ-ATP)、15 ng CDK5/p25 複合体、最終的に30μLになるような緩衝液(トリスHCl 10 mM pH 7.5, MgCl2 10 mM, DTT 7.5 mM + 0.2 mg/ml BSA)中の阻害剤を 96のU底の各ウェルに添加した。室温で35分間のインキュベーションの後、その反応を32 mM EDTA、500 μM コールドATP、0.1% トリトンX100、および10 mg/ml ストレプトアビジンコートされたSPAビーズを含む100 μl PBS緩衝液の添加によって停止させた。20分間のインキュベーションの後、懸濁液を110μL取り出し、100μLの5M CsClを含む96穴オプティプレートへ移した。4時間後、そのプレートを2分間、パッカードトップカウント放射能読み取り装置で読み取った。
【０１３８】
IC50の決定：前記を参照
cdk4/サイクリンD1活性の阻害アッセイ
キナーゼ反応：0.4 μM マウスGST-Rb (769-921) (サンタクルス製の# sc-4112) 基質、 10 μM ATP (0.5 μCi P33γ-ATP)、GST-cdk4/GST-サイクリン D1にさらされたバキュロウイルス100 ng、最終的に50μLになるような緩衝液(トリスHCl 10 mM pH 7.5, MgCl2 10 mM,  7.5  mM DTT+ 0.2mg/ml BSA)中の適切な濃度の阻害剤を96のU底ウェルプレートにそれぞれ添加した。37℃で40分間のインキュベーションの後、反応を120mM EDTA 20μlで停止させた。
【０１３９】
捕捉：基質をリン酸セルロースフィルターに結合させるために、それぞれのウェルから60μlをマルチスクリーンプレートへ移した。プレートはその後Ca++/Mg++を含まない150 μl/ウェルPBS で3回洗浄し、マルチスクリーンろ過システムによってろ過した。
【０１４０】
検出：フィルターを37℃で乾燥させ、その後、100μl/ウェルのシンチレーターを添加し、33Pで標識したRb断片をトップカウント装置を用いて放射能測定することにより検出した。
【０１４１】
IC50の決定：前記を参照
MARK活性の阻害アッセイ
キナーゼ反応：10 μMの自家製のビオチン標識MBP (シグマ # M-1891)基質、 15 μM ATP (0.15 マイクロCi P33γ-ATP)、30 ng GST-MAPK (アップステイトバイオテクノロジー(Upstate Biothecnology) # 14-173)、最終的に30μlになるような緩衝液 (トリスHCl 10 mM pH 7.5, MgCl2 10 mM, DTT 7.5 mM + 0.2 mg/ml BSA)中の阻害剤を96のU底ウェルのそれぞれに添加した。室温で35分間のインキュベーションの後、その反応を32 mM EDTA、500 μM コールドATP、0.1% トリトンX100、および10 mg/ml ストレプトアビジンコートされたSPAビーズを含むPBS緩衝液100 μlの添加によって停止させた。20分間のインキュベーションの後、懸濁液を110μL取り出し、100μLの5M CsClを含む96穴オプティプレートへ移した。4時間後、そのプレートを2分間、パッカードトップカウント放射能読み取り装置で読み取った。
【０１４２】
IC50の決定：前記を参照
PKA活性の阻害アッセイ
キナーゼ反応：自家製の10 μMビオチン標識ヒストンH1 (シグマ # M-5505)基質、 10 μM ATP (0.2 マイクロM P33γ-ATP)、0.45U PKA（シグマ#2645）、最終的に30μlになるような緩衝液 (トリスHCl 10 mM pH 7.5、MgCl2 10 mM、DTT 7.5 mM + 0.2 mg/ml BSA)中の阻害剤を96のU底ウェルのそれぞれに添加した。室温で90分間のインキュベーションの後、その反応を32 mM EDTA、500 μM コールドATP、0.1% トリトンX100、および10 mg/ml ストレプトアビジンコートされたSPAビーズを含む100 μl PBS緩衝液の添加によって停止させた。20分間のインキュベーションの後、懸濁液を110μL取り出し、100μLの5M CsClを含む96穴オプティプレートへ移した。4時間後、そのプレートを2分間、パッカードトップカウント放射能読み取り装置で読み取った。
【０１４３】
IC50の決定：前記を参照
EGFR活性の阻害アッセイ
キナーゼ反応：自家製の10 μMビオチン標識MBP(シグマ # M-1891)基質、 2 μM ATP (0.04 マイクロCi P33γ-ATP)、GST-EGFRにさらされた昆虫細胞36ng、最終的に30μlになるような緩衝液 (ヘペス50 mM pH 7.5, MgCl2 3 mM, MnCl2 3 mM, DTT 1 mM, NaVO3 3 μM+ 0.2 mg/ml BSA)中の阻害剤を96のU底ウェルのそれぞれに添加した。室温で20分間のインキュベーションの後、その反応を32 mM EDTA、500 μM コールドATP、0.1% トリトンX100、および10 mg/ml ストレプトアビジンコートされたSPAビーズを含む100 μl PBS緩衝液の添加によって停止させた。20分間のインキュベーションの後、懸濁液を110μL取り出し、100μLの5M CsClを含む96穴オプティプレートへ移した。4時間後、そのプレートを2分間、パッカードトップカウント放射能読み取り装置で読み取った。
【０１４４】
IC50の決定：前記を参照
IGF1-R活性の阻害アッセイ
IGF1-R活性の阻害アッセイは以下のプロトコルに従って行われる。
【０１４５】
酵素活性：IGF1-Rは、実験の開始前に自動リン酸化により活性化する必要がある。このアッセイの直前に、濃縮された酵素溶液(694nM)を100μM ATPの存在下、28℃で30分間インキュベートし、その後、指示された緩衝液で操作の希釈度まで希釈した。
【０１４６】
キナーゼ反応：10 μM のビオチン標識IRS1ペプチド(PRIMM)基質、0〜20 μM 阻害剤、6 μM ATP、1 マイクロCi 33P-ATP、および最終的に30μlになるような緩衝液(50 mM ヘペス pH 7.9, 3 mM MnCl2, 1 mM DTT, 3 μM NaVO3)中の6 nM GST-IGF1-R (室温で30分間、60μMコールドATPと共にプレインキュベートしたもの)を96のU底ウェルプレートのそれぞれに添加した。室温で35分間のインキュベーションの後、その反応を32 mM EDTA、500 μM コールドATP、0.1% トリトンX100、および10 mg/ml ストレプトアビジンコートされたSPAビーズを含む100 μl PBS緩衝液の添加によって停止させた。20分間のインキュベーションの後、懸濁液を110μL取り出し、100μLの5M CsClを含む96穴オプティプレートへ移した。4時間後、そのプレートを2分間、パッカードトップカウント放射能読み取り装置で読み取った。
【０１４７】
オーロラ-2活性の阻害アッセイ
キナーゼ反応：8 μM のビオチン標識ペプチド(LRRWSLGの4反復)、10 μM ATP (0.5 μCi P33γ-ATP)、7.5 ng オーロラ2、最終的に30μlになるような緩衝液(ヘペス 50 mM pH 7.0, MgCl2 10 mM, 1 mM DTT, 0.2 mg/ml BSA, 3 μM オルトバナジン酸塩)中の阻害剤を96のU底ウェルプレートのそれぞれのウェルに添加した。室温で60分間のインキュベートの後、反応を停止させ、100μlのビーズ懸濁液を添加することによりビオチン標識ペプチドを捕捉した。
【０１４８】
層化：5M CsCl2を100μlずつ、それぞれのウェルに添加し、放射能をトップカウント装置で測定する前に4時間静置させた。
【０１４９】
IC50の決定：上記を参照
Cdc7/dbf4活性の阻害アッセイ
Cdc7/dbf4活性の阻害アッセイは、以下のプロトコルに従って行われる。
【０１５０】
ビオチン-MCM2基質は、γ33-ATPでトレースされたATPの存在下、Cdc7/dbf4によってトランスリン酸化される。そのトランスリン酸化ビオチン-MCM2基質は、その後、ストレプタビジンコーティングされたSPAビーズにより捕捉され、リン酸化の程度はβ計数により評価される。
【０１５１】
このCdc7/dbf4活性の阻害アッセイは、以下のプロトコルに従って、96穴プレート中で行われる。
【０１５２】
プレートのそれぞれのウェルに添加したもの：
−10μl基質（ビオチン標識MCM2、最終濃度は6μM）
−10μl酵素（Cdc7/dbf4、最終濃度は17.9nM）
−10μl試験化合物（用量反応曲線を作成するために、nMからμMの範囲で、12の漸増濃度にする）
−コールドATP（最終濃度2μM）と放射性ATP（コールドATPとのモル比が1/5000）の混合物10μlは、その後、37℃で起こされる反応の開始のために使われる。
【０１５３】
基質、酵素、およびATPを15 mM MgCl2、2 mM DTT、3 μM NaVO3、2mMグリセロリン酸、および0.2mg/ml BSA を含む50 mM ヘペス pH7.9で希釈した。試験化合物の溶液は、10％DMSOも含んでいた。
【０１５４】
60分間のインキュベーションの後、50 mM EDTA、1 mM コールドATP、0.1% トリトンX100、および10 mg/mlストレプトアビジンコートされたSPAビーズを含む100 μl の PBS pH 7.4をそれぞれのウェルに添加することにより、反応を停止させた。
【０１５５】
20分間のインキュベートの後、懸濁液を110μL取り出し、100μLの5M CsClを含む96穴オプティプレートへ移した。4時間後、そのプレートを2分間、パッカードトップカウント放射能読み取り装置で読み取った。
【０１５６】
IC50の決定：前記を参照
本発明における式(I)の化合物は、哺乳類、例えば人間への投与に適しているが、通常の経路、年齢、体重、患者の状態、および投与経路に依存した投与量レベルにより投与される。
【０１５７】
例えば、式(I)の化合物の経口投与に対する適切な投与量は、好ましくは、1回投与あたり約10〜約500mg、1日1〜5回である。
【０１５８】
本発明の化合物は、さまざまな製剤形態で投与することができる。例えば、経口的に、錠剤、カプセル剤、糖またはフィルムでコーティングされた錠剤、液体液剤、もしくは懸濁剤；座剤の形態で直腸に；非経口的に、例えば筋肉内に、あるいは静脈内および／またはくも膜下内および／または脊髄内への注射もしくは輸液によって投与できる。
【０１５９】
加えて、本発明の化合物は、単剤として投与することができ、あるいは、放射線療法のような既知の抗がん療法と組み合わせて、または細胞増殖抑制性または細胞障害性薬剤、抗生物質型の薬剤、アルキル化剤、代謝拮抗剤、ホルモン剤、免疫学的製剤、インターフェロン型の薬剤、シクロオキシゲナーゼ阻害剤（例えばCOX-2阻害剤）、金属マトリックスプロテアーゼ阻害剤、テロメラーゼ阻害剤、チロシンキナーゼ阻害剤、抗成長因子受容薬剤、抗HER剤、抗EGFR剤、抗血管新生剤、ファルネシルトランスフェラーゼ阻害剤、ras-rafシグナル伝達経路阻害剤、細胞周期阻害剤、他のcdk類阻害剤、チュブリン結合剤、トポイソメラーゼI阻害剤、トポイソメラーゼII阻害剤等の（任意にそれらのリポソーム製剤として）化学療法剤と併用して投与することができる。
【０１６０】
もし固定された投与量として処方される場合、このような併用製剤は、前記で述べた濃度範囲内での本発明の化合物と、承認された濃度範囲内での他の医薬活性剤を用いる。
【０１６１】
式(I)の化合物は、併用製剤が不適切な場合には、既知の抗がん剤と共に逐次的に使用することもできる。
【０１６２】
本発明は、薬剤的に許容可能な賦形剤（担体または希釈剤であり得る）と混合した、式（I）の化合物または薬剤的に許容可能なその塩を含む医薬組成物をも含むものである。
【０１６３】
本発明の化合物を含む医薬組成物は、通常、以下のような従来の方法により調製され、薬学的に適切な形態で投与される。
【０１６４】
例えば、固体の経口形態は、活性化合物と共に、希釈剤、例えばラクトース、デキストロース、サッカロース、スクロース、セルロース、コーンスターチまたはポテトスターチ；滑沢剤、例えばシリカ、タルク、ステアリン酸、ステアリン酸マグネシウムまたはステアリン酸カルシウム、および／またはポリエチレングリコール類；結合剤、例えばスターチ類、アラビアゴム、ゼラチン、メチルセルロース、カルボキシメチルセルロース、またはポリビニルピロリドン；分離剤、例えばデンプン、アルギン酸、アルギン酸塩、またはグリコール酸デンプンナトリウム；発泡性混合物；色素；甘味料；レシチン、ポリソルベート類、ラウリル硫酸塩類のような湿潤剤；並びに、一般的に医薬製剤中に使われている無毒および薬理学的活性のない物質を含むことができる。前記医薬製剤は、既知の方法、例えば混合、造粒、打錠、シュガーコーティング、またはフィルムコーティング過程により製造されてもよい。
【０１６５】
経口投与のための分散剤は、例えばシロップ、乳濁液、懸濁液でもよい。
【０１６６】
シロップは、例えばショ糖、あるいはグリセリン、および／またはマンニトール、および／またはソルビトールを含有するショ糖を担体として含むことができる。
【０１６７】
懸濁液および乳濁液は、例えば天然ゴム、寒天、アルギン酸ナトリウム、ペクチン、メチルセルロース、カルボキシメチルセルロース、またはポリビニルアルコールを担体として含むことができる。
【０１６８】
筋肉内注射のための懸濁液または溶液は、活性化合物と共に、薬剤的に許容可能な担体、例えば滅菌水、オリーブオイル、オレイン酸エチル、グリコール類、例えばプロピレングリコール、および、所望のときは、適切な量のリドカイン塩酸塩を含むことができる。静脈内注射または輸液のための溶液は、例えば滅菌水を担体として含んでいてもよい。好ましくは、それらは無菌の、水溶性の、等張性の溶液の形で存在していてもよく、あるいはそれらはプロピレングリコールを担体として含んでいてもよい。
【０１６９】
座剤は、活性化合物と共に、例えばココアバター、ポリエチレングリコール、ポリオキシエチレンソルビタン脂肪酸エステル界面活性物質、またはレシチンのような薬剤的に許容可能な担体を含むことができる。
【０１７０】
以下の例は、これにより本発明をより良く説明することを意図したものであり、それを限定するものではない。
【０１７１】
実験の節
一般的手法
フラッシュクロマトグラフィーはシリカゲル（メルクグレード9395, 60A)を用いて行った。この高圧液体クロマトグラフィーの保持時間(HPLC: r.t.値)は以下のように決定された：
方法１（HPLC1）：
使用機器：ヒューレットパッカード（Hewlett Packard）製1312Aバイナリーポンプ；1mlシリンジを装着したギルソン（Gilson）製215オートサンプラー、ポリマーラブス（Polymer Labs）PL1000蒸発散乱光検出器（ELSD）、およびミクロマス（Micromass）製ZMDマススペクトロメーターをエレクトロスプレー陽イオン化モードで操作する。LC溶離剤は分割され、約200μl/minでマススペクトロメーターに入り、約800μl/minでELSに入る。
【０１７２】
クロマトグラフ条件：HPLC等級の水中の0.1％トリフルオロ酢酸(A)、およびHPLC等級のアセトニトリル中の0.1％トリフルオロ酢酸(B)から成るHPLC移動相。このHPLC勾配を以下の表に示す。
【表Ａ】
2007516997.tif 000029
稼働時間：    2.4 分
流速：        1 ml/min
注入量：      3 μl
カラム温度：  周囲 (20℃)
カラム：      50 x 2.0mm ハイパーシル(Hypersil) C18 BDS; 5 μm
ELS検出器：  噴霧器温度 80oC.
気化温度 90oC
気流 1.5 l/hr
MS検出器：    m/z 150〜800 @ 0.5 secs/scan, 0.1秒インタースキャン遅延
コーン(Cone)電圧 25V, ソース(Source)温度140oC
乾燥気体 350 l/hr
ELSD保持時間（HPLC r.t）は数分以内に与えられる。質量はm/z比として与えられる。
【０１７３】
方法2（HPLC2）
使用機器：996ウォーターズ(Waters)製PDA検出器を備えたウォーターズ製2790HPLCシステム、およびエレクトロスプレーイオン化源を備えたミクロマス製ZQ単一四極子マススペクトロメーター
クロマトグラフ条件：RP18ウォーターズ製Xテラ(Terra) (4,6 x 50 mm, 3.5 μm)カラム；移動相Aは酢酸アンモニウム5mM緩衝液（酢酸/アセトニトリル 95:5でpH 5.5 にしたもの）、移動相BはH2O/アセトニトリル (5:95)であった。10から90％の勾配のBを8分間、2分間90％のBを保持。UV検出器は220 nmおよび254 nm。流速1 ml/min。注入量10 μl。 全走査、質量範囲は100から800amu。キャピラリー電圧は2.5 KV；ソース温度は120°C；コーンは10 V。保持時間(HPLC r.t.)は220nmまたは254nmにおいて数分内に与えられる。質量はm/z比として与えられる。
【０１７４】
必要なときは、この化合物を、996ウォーターズ製PDA検出器を備えたウォーターズ製分取HPLC600、およびミクロマス製ZQ単一四極子マススペクトロメーター、電子スプレーイオン化、陽イオン化モードを用い、ウォーターズ製シンメトリーC18(19 x 50 mm, 5μm)カラムで分取HPLCにより精製した。移動相Aは0.01％TFA水溶液、移動相Bはアセトニトリルであった。10から90％の濃度勾配のBを8分間、90％のBを2分間保持。流速20 ml/min。
【０１７５】
1H-NMRスペクトロメトリーは、勾配を有するブルカーアバンス（Bruker AVANCE）製400MHzシングルベイ装置で行った。それはQNPプローブ (可換性の4核プローブ−1H、13C、19F、および31P) (NMR方法1) を備えており、または400.45 MHzで操作する、5mm二重共鳴プローブ[1H (15N-31P) ID_PFG バリアン]を備えたマーキュリー(Mercury) VX 400 を用いて行われる(NMR方法2)。
【０１７６】
前記で示したように、本発明の式（I）のいくつかの化合物は、コンビネナトリアルケミストリー技術によって平行して合成された。
【０１７７】
この側面において、いくつかの化合物は、それ故、HPLC保持時間（方法1および2）ならびに質量と共に、表IVからIXのコード化システムに従って、都合よく、明確に同定されている。
【０１７８】
式(I)の単一で特定の化合物を同定するそれぞれのコードは、4つの単位A-M-B-Cから成る。
【０１７９】
Aは、任意の置換基R1-［式(I)を参照］を表し、3位が置換されたアザインドール誘導体を得るために、カルボニル基の炭素原子を介してアザインドール部分の残りの部分に結合する；それぞれのAラジカル（置換基）はテーブルIに示されている。
【０１８０】
Bは、任意の置換基R-［式(I)を参照］を表し、5位が置換されたアザインドール誘導体を得るために、NH基の窒素原子を介してアザインドール部分の残りの部分に結合する；それぞれのBラジカル（置換基）はテーブルIIに示されている。
【０１８１】
Cは、任意の置換基R2-［式(I)を参照］を表し、1位が置換されたアザインドール誘導体を得るために、インドール窒素原子を介してアザインドール部分の残りの部分に結合する；それぞれのBラジカル（置換基）はテーブルIIIに示されている。
【０１８２】
Mは1位をC基によって、3位を（カルボニル基を介して）A基によって、および5位を（NH基を介して）B基によって、実質的に以下に示したように置換されている3価のアザインドール部分の中心核を指す。
【化３３】
2007516997.tif 000030
参照を容易にするために、表I、II、およびIIIのA基、B基、またはC基は、それぞれ分子Mの残りの部分との結合点も示している適切な化学式で特定されている。
【０１８３】
適切な例としては、以下のように、表IVの化合物A3-M-B5-C2（エントリー1）は、5位をB5基によって（NH基を介して）、3位をA3基によって（CO基を介して）、および1位をC2基によって置換されたアザインドールMを意味する；同様に、表IXの化合物A9-M-B9-C2（エントリー40）は、5位をB9基によって（NH基を介して）、3位をA9基によって（CO基を介して）、1位をC2基によって置換されたアザインドールMを意味する。
【化３４】
2007516997.tif 000031
【表１】
2007516997.tif 000032
【表２】
2007516997.tif 000033
【表３】
2007516997.tif 000034
例1
1- tert-ブチル-5-ニトロ-1H-ピロロ[2,3-b]ピリジン-3-カルボニトリルの調製
Org. Proc. Res. Dev., 7(2), 209-213, 2003に開示された通りに調製された5-アミノ-1-tert-ブチル-1H-ピロール-3-カルボニトリル5.85g(35.8 mmol)の120mLプロパノール溶液に、ニトロマロンアルデヒドナトリウム(6.02 g, 43.0 mmol)を室温で撹拌しながら少しずつ加えた。生成混合物に37％塩酸(4.6 mL, 55.2 mmol)を滴下して処理し、100℃で2時間加熱した。その反応物を減圧下で最初の量の1/3まで濃縮し、18時間4℃に保った。沈殿物をろ過し、15%エタノール水溶液(35mL)、水(5mL)で徹底的に洗浄し、乾燥し、最終的に淡い茶色の固体として標題の化合物を7.15g得た。
【０１８４】
融点= 216-218°C
収率= 81.5%
1H-NMR (DMSO): 1.77 (s, 9H), 8.81 (s, 1H), 8.90 (d, 1H, J=2.63 Hz), 9.26 (d, 1H, J=2.63 Hz
例2
1-tert-ブチル-5-ニトロ-1H-ピロロ[2,3-b]ピリジン-3-カルボン酸プロピルエステルの調製
n-プロパノール125ｍL中の1-tert-ブチル-5-ニトロ-1H-ピロロ[2,3-b]ピリジン-3-カルボニトリル5.0 g (20.47 mmol)の懸濁液に、p-トルエンスルホン酸7.78gを撹拌しながら加えた。その混合物を40時間、還流温度で加熱し、その後室温まで冷却し、tert-ブチルメチルエーテル70mLで希釈した。沈殿物をろ過し、清澄なろ液を減圧下で少量(40〜50mL)まで濃縮した。その懸濁液を−5〜0℃まで冷却し、この温度を2時間保った。固体をろ過し、n-プロパノールとtert-ブチルメチルエーテルの１：１の混合物20mLで洗浄し、乾燥し、クリーム色の固体として標題の化合物5.5gを得た。
【０１８５】
融点116-120°C
収率 = 88%
1H-NMR (DMSO): 1.00 (t, 3H), 1.70-1.80 (m, 2H), 1.80 (s, 9H), 4.27 (t, 2H), 8.42 (s, 1H), 9.01 (d, 1H, J=2.63 Hz), 9.22 (d, 1H, J=2.63 Hz)
例3
1- tert-ブチル-5-ニトロ-1H-ピロロ[2,3-b]ピリジン-3-カルボン酸の調製
95°エタノール50mL中の1-tert-ブチル-5-ニトロ-1H-ピロロ[2,3-b]ピリジン-3-カルボン酸プロピルエステル5.00 g (16.38 mmol)の懸濁液に2M NaOH (50 mL; 100 mmol)を撹拌しながら加えた。その混合物を還流温度まで1時間加熱し、基質の完全な消費を得た。その結果の溶液を室温まで冷却し、減圧下でスラリーまで濃縮した。それを250mLの水で希釈し、ジエチルエーテルと酢酸エチルの1：1の混合物100mLで洗浄した。その水層を室温で効率的に撹拌しながら、5M HCl (37 mL; 185 mmol)で処理した。その沈殿物をろ過し、10mLの水で2回洗浄し、乾燥して、白色固体として標題の化合物を3.84g得た。
【０１８６】
融点= 278-281°C 分解
収率 = 89%
1H-NMR (DMSO):  1.79 (s, 9H), 8.36 (s, 1H), 9.03 (d, 1H, J=2.63 Hz), 9.20 (d, 1H, J=2.63 Hz), 12.77 (bs, 1H)
例4
メチル 5-ニトロ-1-(フェニルスルホニル)-1H-ピロロ[2,3-b]ピリジン-3-カルボン酸塩の調製
ジクロロメタン2.07 L 中の硝酸テトラブチルアンモニウム187.7 g (0.616 mol)氷冷溶液に、トリフルオロ酢酸無水物(85.7 mL, 0.616 mol) を窒素存在下、25分間以上かけて滴下した。この混合物を、＋4℃の2.7Ｌジクロロメタン中で予め形成された1-(フェニルスルホニル)-1H-ピロロ[2,3-b]ピリジン-3-カルボン酸メチルエステル150.0 g (0.474 mol)の溶液へと、カニューレを介してゆっくりと移した。この反応混合物を＋4℃で4時間撹拌し、この温度でさらに23時間保持した。この冷反応塊を2.3Ｌの水中に注ぎ、1時間撹拌した。この水層を分離し、1Ｌのジクロロメタンで再抽出した。この混合性の有機抽出物を、減圧下で濃黄色の懸濁液へと濃縮し、1.05Ｌのメタノールで処理した。このスラリーを0℃に冷却し、ろ過する前にさらに1時間撹拌し、メタノールで洗浄し、乾燥して、羊毛質の黄色の固体として標題の純化合物を128g得た(収率= 74.7%)。融点= 195-196°C
1H-NMR (DMSO): 3.91 (s, 3H), 7.64-7.69 (m, 2H), 7.76-7.81 (m, 1H), 8.25-8.27 (m, 2H), 8.74 (s, 1H), 8.96 (d, 1H, J=2.58 Hz), 9.27 (d, 1H, J=2.58 Hz) .
例5
5-ニトロ-1H-ピロロ[2,3-b]ピリジン-3-カルボン酸二ナトリウムの調製
2,2,2-トリフルオロエタノール1.34Ｌ中の例4の化合物95.7 g (0.265 mol)の懸濁液に、17% NaOH 0.545 L を40分間以上かけて、激しく撹拌しながら加えた。この黄橙色の混合物を16時間還流温度で加熱し、その後0℃まで冷却し、さらに2時間撹拌した。この沈殿物をろ過し、アセトンで洗浄し、乾燥して、結晶性橙色固体として標題の化合物を79.8g得た(収率= テトラ水和物として93.1%)。融点 >230°C
1H-NMR (DMSO): 7.83 (bs, 1H), 8.89 (d, 1H, J=2.80 Hz), 9.07 (bs, 1H)
例6
5-ニトロ-1H-ピロロ[2,3-b]ピリジン-3-カルボン酸の調製
水2.65Ｌ中の例5の化合物(88.10 g, 0.35 mol)の澄明な溶液に、105mLの水で希釈した濃塩酸(52.6 mL, 0.526 mol)を50分間以上、外界温度で効率的に撹拌しながら滴下した。この生成懸濁液を+4℃に冷却し、さらに1時間撹拌した。沈殿物をろ過し、水で洗浄し、乾燥して、最終的に淡黄色の粉末として標題化合物55.6gを得た(収率= 98.5%  (標題 95%))。
【０１８７】
融点 = 282-285°C 分解
1H-NMR (DMSO):  8.41 (d, 1H, J=2.83 Hz), 9.00 (d, 1H, J=2.59 Hz), 9.16 (d, 1H, J=2.59 Hz), 12.5-13.0 (bs, 1H), 13.14 (s, 1H)
例7
一般的手法: 4-フルオロベンジルアミン（表Iの断片A3に対応）の、酸感受性メトキシベンズアルデヒドポリスチレン樹脂(AMEBA II 樹脂)への負荷。
【０１８８】
4-(4-ホルミル-3-メトキシフェノキシ)ブチリルAM 樹脂[共重合(スチレン-1% dvb) 100-200 メッシュ] (1.5 g,1 eq, 負荷0.94 mmol/g) をDCM中で膨張させ、その後ろ過した。THF/DCM (4 : 1, 15 ml)、 4-フルオロベンジルアミン(6 eq.) 、およびAcOH (6 eq.)の混合物を加えた。15分後、NaBH(OAc)3 を加え、その反応を室温で一晩振とうした。ろ過の後、その樹脂をメタノール(x 3)、DMF/DCM (1 : 1) (x 3)、およびDCM (x 5)で洗浄した。
【０１８９】
例8
ステップ8.1: 例7の樹脂へのアザインドール骨格の負荷
【化３５】
2007516997.tif 000035
無水DMF (15 ml)中の例7の樹脂(1.5 g, 0.77 mmol/g, 1.16 mmol)に、5-ニトロ-1H-ピロロ[2,3-b]ピリジン-3-カルボン酸(0.359 g, 1.73 mmol)、TBTU (0.556 g, 1.73 mmol)、およびDIPEA (0.44 g, 3.48 mmol)を加えた。この反応混合物を室温で20時間振とうし、その後、樹脂をろ過によって単離した。この樹脂を逐次、DMF (25 ml)、DCM (25 ml)、DMF (25 ml)、DCM (25 ml)、MeOH (25 ml)、DCM (25 ml)、MeOH (25 ml)、DCM (25 ml)、MeOH (25 ml)、TBME (25 ml x 2)で洗浄し、真空中で乾燥して、樹脂結合7-アザインドール(1.70 g)を得た。
【０１９０】
樹脂負荷チェック
樹脂負荷チェックは、樹脂への基礎的成分の完全な負荷、およびTBTUを用いたカップリングの間にオリゴマー形成が起こっていないことを示すことにより行う。樹脂に負荷された未反応のアミン（例えば4-フルオロベンジルアミン、例8）をキャップするために、および1-NHアザインドールをアセチル化するために、塩化ベンゾイルを用いた。その切断された混合物中にベンズアミド（すなわちN-(4-フルオロベンジル)ベンズアミド、例8）が存在しないことは、その骨格の樹脂への定量的な負荷を示す。1-N-ベンゾイルアザインドールまたは1-NH-アザインドールの存在は、樹脂負荷段階において3-カルボキシ-5-ニトロ-7-アザインドールのホモカップリングが起こらなかったことを示す。例8（ステップ8.1）で述べた手法に従って得られたDCM (1 ml)中の樹脂(0.035 g, 0.027 mmol)に、DIPEA (0.035 g, 0.265 mmol)および塩化ベンゾイル(0.038 g, 0.265 mmol)を加えた。この反応混合物を4時間振とうし、その樹脂をろ過により分離した。この樹脂を逐次、DMF (1 ml)、DCM (1 ml)、DMF (1 ml)、DCM (1 ml)、MeOH (1 ml)、水(1 ml)、MeOH (1 ml)、DCM (1 ml)、MeOH (1 ml)、DCM (1 ml)、MeOH (1 ml)、TBME (1 ml x 2) で洗浄し、その後風乾した。その生成物を樹脂から切断し(60% TFA/DCM1 ml  20分間)、オフホワイトの固体(0.007 g, 64%)を得た。LCMS (HPLC_1) (N-ベンゾイル化されたインドール): m/z 419 [M+H]+ @ r.t. 1.56 min (97%   ELS 検出器による)。
【０１９１】
ステップ8.2：樹脂結合7-アザインドールのN-アルキル化
【化３６】
2007516997.tif 000036
無水DCM(20 ml)中のステップ(8.1)の樹脂(0.85 g, 0.58 mmolに対応) に、BTPP (0.540 g, 1.74 mmol)、およびヨードメタン (R2 は表IIIの断片C2に対応し、0.821 g, 5.8 mmol)を加えた。この反応混合物を室温で20時間振とうし、その後、その樹脂をろ過によって分離した。その樹脂を逐次、DMF (25 ml)、DCM (25 ml)、DMF (25 ml)、DCM (25 ml)、MeOH (25 ml)、DCM (25 ml)、MeOH (25 ml)、DCM (25 ml)、MeOH (25 ml)、TBME (25 ml x 2)で洗浄し、真空中で乾燥して、樹脂結合N-メチル化-7-アザインドール(0.85g)を得た。樹脂の0.01 gを切断し(60% TFA/DCM 1 ml で20分間)、オフホワイトの固体(0.0015 g, 60%)を得た。
【０１９２】
LCMS: m/z 329 [M+H]+ @ r.t. 1.72 min (94% @ 215nm)
ステップ8.3：ニトロ基の還元
NMP (10 ml)中のステップ(8.2)の樹脂 (0.85 g)に、塩化スズ(II)二水和物(1.3 g, 5.8 mmol)を加えた。その反応混合物を室温で20時間振とうし、その後、樹脂をろ過により分離した。その樹脂を逐次、DMF (10 ml)、DCM (10 ml)、DMF (10 ml)、DCM (10 ml)、MeOH (10 ml)、水 (10 ml)、MeOH (10 ml)、DCM (10 ml)、MeOH (10 ml)、DCM (10 ml)、MeOH (10 ml)、TBME (10 ml x 2)で洗浄し、真空中で乾燥して、対応する樹脂結合N-メチル化-5-アミノ-7-アザインドール(0.825 g)を得た。0.01gの樹脂を切断し(60% TFA/DCM 1mL、20分間)、オフホワイトの固体(0.0015 g, 65%)を得た。 
LCMS (HPLC_1): m/z 299 [M+H]+ @ r.t. 0.97 min (100%  ELS検出器による)
上記の樹脂結合アザインドールを以下のいずれか1つのステップによってさらに反応させて、カルボキサミド、スルホンアミド、およびウレイド誘導体を得た。
【０１９３】
A3-M-B5-C2の調製
ステップ8.4：酸塩化物誘導体を用いたキャッピング
【化３７】
2007516997.tif 000037
DCM (1 ml)中のステップ(8.3)の樹脂(0.11 g、0.077 mmolに対応)に、ヒューニッヒ塩基（0.050g, 0.385mmol）を加え、続いて塩化ベンゾイル(表IIの断片B5に対応する-CORa 基、0.054g、0.385 mmol)を加えた。この反応混合物を室温で20時間振とうし、その樹脂をろ過により分離した。その樹脂を逐次、DMF (1 ml)、DCM (1 ml)、DMF (1 ml)、DCM (1 ml)、MeOH (1 ml)、水 (1 ml)、MeOH (1 ml)、DCM (1 ml)、MeOH (1 ml)、DCM (1 ml)、MeOH (1 ml)、TBME (1 ml x 2)で洗浄し、その後風乾した。その樹脂をアセトニトリル/アンモニア溶液(1 ml, 4:1)中で4時間振とうし、その後、ろ過によって分離した。その樹脂を逐次、DMF (1 ml)、DCM (1 ml)、DMF (1 ml)、DCM (1 ml)、MeOH (1 ml)、水(1 ml)、MeOH (1 ml)、DCM (1 ml)、MeOH (1 ml)、DCM (1 ml)、MeOH (1 ml)、TBME (1 ml x 2)で洗浄し、その後、風乾した。その生成物を樹脂から切断し[60% TFA/DCM, 3 x (3 x 0.5 ml)]、化合物A3-M-B5-C2（下記表IVのエントリー1参照）に対応するオフホワイトの固体(0.026 g, 84%)を得た。LCMS (HPLC_1): m/z 403 [M+H]+ @ r.t. 1.29 min (100%  ELS 検出器による)
例8で述べたステップに従い、かつ本発明の方法によるいくつかの適切な反応物を用いることにより、すなわち、樹脂上に任意の適切なアミンを支持し、任意の適切な反応物を用いてアザインドール部分の1位に官能基を付与し、任意の適切な塩化アシル誘導体を用いてアザインドール部分の5位におけるアミノ官能基をアシル化し、および最終的に樹脂の切断を行うことによって、以下の表IVの化合物も調製された。
【表４】
2007516997.tif 000038
A3-M-B1-C2の調製
ステップ8.5：塩化スルホニル誘導体を用いたキャッピング
【化３８】
2007516997.tif 000039
DCM (1 ml)中のステップ(8.3)の樹脂(0.11 g、0.077 mmolに対応)にピリジン(0.030 g, 0.385 mmol)、DMAP (0.001 g、0.0077 mmol)、およびメタンスルホニル塩化物 (表IIの断片B1に対応する-SO2Ra基、0.044 g、0.385 mmol)を加えた。この反応混合物を室温で20時間振とうし、その後、その樹脂をろ過により分離した。その樹脂を逐次、DMF (1 ml)、DCM (1 ml)、DMF (1 ml)、DCM (1 ml)、MeOH (1 ml)、水 (1 ml)、MeOH (1 ml)、DCM (1 ml)、MeOH (1 ml)、DCM (1 ml)、MeOH (1 ml)、TBME (1 ml x 2)で洗浄し、その後、風乾した。その生成物を樹脂から切断し[60% TFA/DCM, 3 x (3 x 0.5 ml)]、化合物A3-M-B1-C2（以下の表Vのエントリー33を参照）に対応するオフホワイトの固体(0.024 g、83%)を得た。
【０１９４】
LCMS (HPLC_1): m/z 377 [M+H]+ @ r.t. 1.12 min (97.5% ELS 検出器による)
例8で述べたステップに従って、本発明の方法によるいくつかの適切な反応物を用いることにより、すなわち、樹脂上に任意の適切なアミンを支持し、任意の適切な反応物によりアザインドール部分の1位に官能基を付与し、任意の適切な塩化スルホニル誘導体によりアザインドール部分の5位におけるアミノ官能基をスルホニル化し、および最終的に樹脂の切断を行うことによって、以下の表Vの化合物も調製された。
【表５】
2007516997.tif 000040
ステップ8.6：フェニルカルバメート（およびビス-フェニルカルバメート）形成
【化３９】
2007516997.tif 000041
DCM (10 ml)中のステップ(8.3)の樹脂(0.25 g, 0.19 mmolに対応)に、トリエチルアミン(0.39 g, 3.85 mmol)、およびフェニルクロロギ酸(0.603 g, 3.85 mmol)を加えた。この反応混合物を室温で20時間振とうし、その後、その樹脂をろ過により分離した。その樹脂を逐次、DMF (10 ml)、DCM (10 ml)、DMF (10 ml)、DCM (10 ml)、MeOH (10 ml)、DCM (10 ml)、MeOH (10 ml)、DCM (10 ml)、MeOH (10 ml)、TBME (10 ml x 2) で洗浄し、真空中で乾燥し、以下のステップに従ってさらに反応させた、対応する樹脂結合アザインドール(0.275 g) を得た。
【０１９５】
A3-M-B9-C2の調製
ステップ8.7：ウレイド誘導体の形成
【化４０】
2007516997.tif 000042
DCM (1 ml)中のステップ(8.6)の樹脂(0.11 g, 0.077 mmolに対応)に、ピペリジン (表IIの断片B9に対応する-CONRaRb基, 0.131 g, 1.54 mmol)を加えた。この反応混合物を室温で72時間振とうし、その後、その樹脂をろ過により分離した。その樹脂を逐次、DMF (1 ml)、DCM (1 ml)、DMF (1 ml)、DCM (1 ml)、MeOH (1 ml)、水(1 ml)、MeOH (1 ml)、DCM (1 ml)、MeOH (1 ml)、DCM (1 ml)、MeOH (1 ml)、TBME (1 ml x 2) で洗浄し、その後風乾した。その生成物を樹脂から切断し(60% TFA/DCM, 3 x (3 x 0.5 ml))、化合物A3-M-B9-C2（以下の表VIのエントリー64を参照）に対応するオフホワイトの固体(0.027 g、87%)を得た。
【０１９６】
LCMS (HPLC_1): m/z 410 [M+H]+ @ r.t. 1.21 min (86% ELS検出器による)
例8で述べたステップに従って、本発明の方法によるいくつかの適切な反応物を用いることにより、すなわち、樹脂上に任意の適切なアミンを支持し、任意の適切な反応物によりアザインドール部分の1位に官能基を付与し、アザインドール部分の5位においてカルバメート誘導体を調製することによって、任意の適切なアミンとの反応を介して対応するウレイド誘導体へ変換し、および、最終的に樹脂の切断を行うことによって、以下の表VIの化合物も調製された。
【表６】
2007516997.tif 000043
例9
ステップ9.1：リンク(Rink)樹脂へのアザインドール骨格の負荷
【化４１】
2007516997.tif 000044
DMF無水物(15 ml)中のリンク樹脂( 表Iの断片A9に対応, 11g, 0.85 mmol/g, 9.35 mmol)に、5-ニトロ-1H-ピロロ[2,3-b]ピリジン-3-カルボン酸 (2.9 g, 14.03 mmol)、TBTU (4.5 g, 14.03 mmol)、および DIPEA (3.62 g, 28.05 mmol)を加えた。この反応混合物を室温で20時間振とうし、その後、樹脂をろ過により分離した。その樹脂を逐次、DMF (25 ml)、DCM (25 ml)、DMF (25 ml)、DCM (25 ml)、MeOH (25 ml)、DCM (25 ml)、MeOH (25 ml)、DCM (25 ml)、MeOH (25 ml)、TBME (25 ml x 2) で洗浄し、真空中で乾燥し、樹脂結合7-アザインドール(12.5g)を得た。その樹脂を0.01g切断し(1 ml 40% TFA/DCM)、オフホワイトの固体(0.0014 mg, 82%)を得た。
【０１９７】
LCMS (HPLC_1):  m/z 207 [M+H]+ @ r.t. 0.79 min (89% ELS検出器による)
ステップ9.2：樹脂結合7-アザインドールのN-アルキル化
【化４２】
2007516997.tif 000045
DCM無水物 (20 ml)中のステップ(9.1)の樹脂(1.6 g, 1.36 mmolに対応)に、BTPP (1.278 g, 4.08 mmol) 、およびヨードメタン (表IIIの断片C2に対応するR2基, 1.938g, 13.6 mmol)を加えた。
【０１９８】
その反応混合物を室温で20時間振とうし、その後、その樹脂をろ過により分離した。その樹脂を逐次、DMF (20 ml)、DCM (20 ml)、DMF (20 ml)、DCM (20 ml)、MeOH (20 ml)、DCM (20 ml)、MeOH (20 ml)、DCM (20 ml)、MeOH (20 ml)、TBME (20 ml x 2)で洗浄し、真空中で乾燥させて、樹脂結合N-アルキル化-7-アザインドール(1.8g)を得た。その樹脂0.01 gを切断し (40% TFA/DCM 1 ml)、オフホワイトの固体(0.0015 g, 83%)を得た。
【０１９９】
LCMS: m/z 221 [M+H]+ 、および 262 [M+MeCN+H]+ @ r.t. 1.35 min (65% @ 215 nm)
ステップ9.3：ニトロ基の還元
NMP (20 ml)中のステップ(9.2)の樹脂 (1.6 g)に、塩化スズ(II)二水和物(3.1 g, 13.6 mmol)を加えた。この反応混合物を室温で20時間振とうし、その後、その樹脂をろ過により分離した。その樹脂を逐次、DMF (20 ml)、DCM (20 ml)、DMF (20 ml)、DCM (20 ml)、MeOH (20 ml)、水(20 ml)、MeOH (20 ml)、DCM (20 ml)、MeOH (20 ml)、DCM (20 ml)、MeOH (20 ml)、TBME (20 ml x 2)で洗浄し、真空中で乾燥して、樹脂結合 5-アミノ-7-アザインドール(0.825 g)を得た。その樹脂0.01gを切断し(40% TFA/DCM 1 ml)、オフホワイトの固体(0.0012 g, 75%)を得た。
【０２００】
LCMS (HPLC_1): m/z 191 [M+H]+ @ r.t. 0.59 min (100% ELS検出器による)
上記の樹脂結合アザインドールを、以下のいずれか1つのステップによってさらに反応させて、カルボキサミド、スルホンアミド、およびウレイド誘導体を得た。
【０２０１】
A9-M-B5-C2の調製
ステップ9.4：酸塩化物を用いたキャッピング
DCM (1 ml)中のステップ(9.3)の樹脂(0.11 g, 0.085 mmolに対応) にヒューニッヒ塩基(0.055 g, 0.425 mmol)を加え、続いて塩化ベンゾイル(表IIの断片B5に対応する-CORa基, 0.060 g, 0.425 mmol)を加えた。この反応混合物を室温で20時間振とうし、その後、その樹脂をろ過により分離した。その樹脂を逐次、DMF (1 ml)、DCM (1 ml)、DMF (1 ml)、DCM (1 ml)、MeOH (1 ml)、水 (1 ml)、MeOH (1 ml)、DCM (1 ml)、MeOH (1 ml)、DCM (1 ml)、MeOH (1 ml)、TBME (1 ml x 2)で洗浄し、風乾した。その樹脂をアセトニトリル/アンモニア溶液(1 ml, 4:1)中で4時間振とうし、その後、ろ過により分離した。その樹脂を逐次、DMF (1 ml)、DCM (1 ml)、DMF (1 ml)、DCM (1 ml)、MeOH (1 ml)、水 (1 ml)、MeOH (1 ml)、DCM (1 ml)、MeOH (1 ml)、DCM (1 ml)、MeOH (1 ml)、TBME (1 ml x 2)で洗浄し、その後、風乾した。その生成物を樹脂から切断し(40% TFA/DCM, 3 x 0.5 ml)、化合物A9-M-B5-C2 (以下の表VIIのエントリー3を参照)に対応する、オフホワイトの固体(0.017 g, 68%)を得た。 
LCMS (HPLC_1): m/z 295 [M+H]+ @ r.t. 0.92 min (88% ELS 検出器による)
類似の方法での操作により、並びにこの方法の任意の適切な出発物質および反応物を用いることにより、以下の表VIIの化合物もまた調製された。
【表７】
2007516997.tif 000046
A9-M-B4-C2の調製
ステップ9.5：塩化スルホニル誘導体を用いたキャッピング
DCM (1 ml)中のステップ(9.3)の樹脂 (0.11g, 0.085 mmolに対応)に、ピリジン (0.034 g, 0.425 mmol)、DMAP (0.001 g, 0.0085 mmol)、および塩化ベンゼンスルホニル (表IIIの断片B4に対応する -SO2Ra基 , 0.075 g, 0.385 mmol)を加えた。この反応混合物を室温で20時間振とうし、その後、その樹脂をろ過により分離した。その樹脂を逐次、DMF (1 ml)、DCM (1 ml)、DMF (1 ml)、DCM (1 ml)、MeOH (1 ml)、水(1 ml)、MeOH (1 ml)、DCM (1 ml)、MeOH (1 ml)、DCM (1 ml)、MeOH (1 ml)、TBME (1 ml x 2)で洗浄し、その後風乾した。その生成物を樹脂から切断し (40% TFA/DCM, 3 x 0.5 ml)、化合物A9-M-B4-C2（以下の表VIIIのエントリー24を参照）に対応するオフホワイトの固体(0.022 g, 80%)を得た。
【０２０２】
LCMS (HPLC_1): m/z 331 [M+H]+ @ r.t. 0.96 min (81%  ELS 検出器による)
類似の方法での操作により、並びにこの方法の任意の適切な出発物質および反応物を用いることにより、以下の表VIIIの化合物も調製された。
【表８】
2007516997.tif 000047
ステップ9.6：フェニルカルバメート（およびビスフェニルカルバメート）形成
DCM (10 ml)中のステップ(9.3)の樹脂 (0.60 g, 0.51 mmolに対応)に、トリエチルアミン(1.03 g, 10.2 mmol)、およびフェニルクロロギ酸(1.597 g, 10.2 mmol)を加えた。この反応混合物を室温で20時間振とうし、その後、その樹脂をろ過により分離した。その樹脂を逐次、DMF (10 ml)、DCM (10 ml)、DMF (10 ml)、DCM (10 ml)、MeOH (10 ml)、DCM (10 ml)、MeOH (10 ml)、DCM (10 ml)、MeOH (10 ml)、TBME (10 ml x 2)で洗浄し、真空中で乾燥して、樹脂結合7-アザインドール(0.65g) を得た。その樹脂0.01gを切断し(40% TFA/DCM 1 ml )、オフホワイトの固体(0.001g, 69%)を得た。
【０２０３】
LCMS (HPLC_1) (モノおよびビスフェニルカルバメートが認められた): m/z 311 [M+H]+ @ r.t. 1.03 min (77% ELS検出器による)、および m/z 431 [M+H]+ @ r.t. 1.31 min (12% ELS 検出器による)
A9-M-B9-C2の調製
ステップ9.7：ウレイド誘導体の形成
DCM (1 ml) 中のステップ(9.6)の樹脂 (0.11 g, 0.085 mmolに対応)にピペリジン(表IIの断片B9に対応する-CONRaRb基, 0.143 g, 1.7 mmol)を加えた。この反応混合物を室温で72時間振とうし、その後、その樹脂をろ過により分離した。その樹脂を逐次、DMF (1 ml)、DCM (1 ml)、DMF (1 ml)、DCM (1 ml)、MeOH (1 ml)、水(1 ml)、MeOH (1 ml)、DCM (1 ml)、MeOH (1 ml)、DCM (1 ml)、MeOH (1 ml)、TBME (1 ml x 2)で洗浄し、その後、風乾した。その生成物を樹脂から切断し (40% TFA/DCM, 3 x 0.5 ml)、化合物A9-M-B9-C2（以下の表IXのエントリー40を参照）に対応する、オフホワイトの固体(0.020 g, 79%)を得た。
【０２０４】
LCMS (HPLC_1): m/z 302 [M+H]+ @ r.t. 0.86 min (91% ELS 検出器による)
類似の方法での操作により、並びにこの方法の任意の適切な出発物質および反応物を用いることにより、以下の表IXの化合物も調製された。
【表９】
2007516997.tif 000048
例10
ステップ10.1：樹脂へのアザインドール骨格の負荷
DCM/DMF (1:1, 2 ml)中のAMEBA II 樹脂(0.1 g, 1 mmol/g, 0.1 mmol)に、1-tert-ブチル-5-ニトロ-1H-ピロロ[2,3-b]ピリジン-3-カルボン酸(3 eq)、DIC (1.5 eq) 、DMAP (0.5 eq)、およびDIPEA (1 eq)を加えた。この反応混合物を室温で20時間振とうし、その樹脂をろ過により分離した。その樹脂を逐次、DMF (2 ml)、DCM (2 ml)、DMF (2 ml)、DCM (2 ml)、MeOH (2 ml)、DCM (2 ml)、MeOH (2 ml)、DCM (2 ml)、MeOH (2 ml)、DCM (2 ml)で洗浄し、真空中で乾燥して、樹脂結合7-アザインドールを得た。 
ステップ10.2：ニトロ基の還元
NMP (2 ml)中のステップ(10.1)の樹脂 (0.1 g, 1 mmol/g, 0.1 mmol)に、塩化スズ(II)二水和物(10eq)を加えた。この反応混合物を室温で20時間振とうし、その樹脂をろ過により分離した。その樹脂を逐次、DMF (5 ml)、DCM (5 ml)、DMF (5 ml)、DCM (5 ml)、MeOH (5 ml)、水 (5 ml)、MeOH (5 ml)、DCM (5 ml)、MeOH (5 ml)、DCM (5 ml)、MeOH (5 ml)、DCM (5 ml)で洗浄し、真空中で乾燥して、樹脂結合 5-アミノ-7-アザインドールを得た。その樹脂 0.01 g を切断して(20% TFA/DCM 1 ml 、20分間)、対応するアミンを得た。
【０２０５】
LCMS (HPLC_2): m/z 323 [M+H]+, r.t. 5.2 min.
A1-M-B6-C9の調製
ステップ10.3：塩化アシル誘導体を用いたキャッピング
DCM (1 ml)中のステップ(10.2)の樹脂 (0.1 g, 0.1 mmolに対応)にヒューニッヒ塩基(5 eq)を加え、続いて塩化アセチル(表IIの断片B6に対応する -CORa 基、5 eq)を加えた。この反応混合物を室温で20時間振とうし、その樹脂をろ過により分離した。その樹脂を逐次、DMF (2 ml)、DCM (2 ml)、DMF (2 ml)、DCM (2 ml)、MeOH (2 ml)、水(2 ml)、MeOH (2 ml)、DCM (2 ml)、MeOH (2 ml)、DCM (2 ml)、MeOH (2 ml)、DCM (1 ml x 2)で洗浄し、その後乾燥させた。その樹脂をアセトニトリル/アンモニア溶液 (1 ml, 4:1)中で4時間振とうし、その後、ろ過により分離した。コードA1-M-B6-C9を持つ5-(アセチルアミノ)-N-ベンジル-1-tert-ブチル-1H-ピロロ[2,3-b]ピリジン-3-カルボキサミド化合物を樹脂から切断した [20% TFA/DCM, 3 x (3 x 0.5 ml)].
LCMS (HPLC_2): m/z 365 [M+H]+, r.t. 5.4 min
A1-M-B14-C9の調製
ステップ10.4：塩化スルホニル誘導体を用いたキャッピング
DCM (1 ml)中のステップ(10.2)の樹脂 (0.1 g, 0.1 mmolに対応)に、DIPEA (5 eq)、DMAP (0.1 eq)、および塩化4-(アセチルアミノ)ベンゼンスルホニル (表IIの断片B14に対応する -SO2Ra基, 5 eq)を加えた。この反応混合物を室温で20時間振とうし、その樹脂をろ過により分離した。その樹脂を逐次、DMF (2 ml)、DCM (2 ml)、DMF (2 ml)、DCM (2 ml)、MeOH (2 ml)、水(2 ml)、MeOH (2 ml)、DCM (2 ml)、MeOH (2 ml)、DCM (2 ml)、MeOH (2 ml)、DCM (1 ml x 2)で洗浄し、その後、減圧下で乾燥した。コードA1-M-B14-C9の5-({[4-(アセチルアミノ)フェニル]スルホニル}アミノ)-N-ベンジル-1-tert-ブチル-1H-ピロロ[2,3-b]ピリジン-3-カルボキサミド化合物を樹脂から切断した(20% TFA/DCM, 3 x (3 x 0.5 ml)。
【０２０６】
LCMS (HPLC_2): m/z 520 [M+H]+, r.t. 6.0 min
A1-M-B15-C9の調製
ステップ10.5：イソシアネート誘導体を用いたキャッピング
DCM (1 ml)中のステップ(10.3)の樹脂 (0.1 g, 0.1 mmolに対応)に、ブチルイソシアネート (表IIの断片B15に対応する -CONRaRb基, 10 eq).を加えた。この反応混合物を室温で48時間振とうし、その後、その樹脂をろ過により分離した。その樹脂を逐次、DMF (2 ml)、DCM (2 ml)、DMF (2 ml)、DCM (2 ml)、MeOH (2 ml)、水 (2 ml)、MeOH (2 ml)、DCM (2 ml)、MeOH (2 ml)、DCM (2 ml)、MeOH (2 ml)、DCM (1 ml x 2)で洗浄し、その後、減圧下で乾燥した。コードA1-M-B15-C9を持つN-ベンジル-1-tert-ブチル-5-{[(ブチルアミノ)カルボニル]アミノ}-1H-ピロロ[2,3-b]ピリジン-3-カルボキサミドを樹脂から切断した（20% TFA/DCM, 3 x (3 x 0.5 ml)）。
【０２０７】
LCMS (HPLC_2): m/z 422 [M+H]+, r.t. 6.5 min
【国際調査報告】
2007516997.tif 000055
2007516997.tif 000056