(57)【要約】加水分解酵素による代謝の変換から、ハロアルキルアミド部分を含む化合物を保護するための組成物および方法が提供される。一つの局面において、本開示は、カルボキシルエステラーゼによる不活性化から、ハロアルキルアミド部分を含む抗ＨＣＶ化合物を保護することによって、この化合物のバイオアベイラビリティーおよび組織送達を増加させることに関する。代謝の変換を制限するための特定のアプローチとしては、この化合物の代謝を阻害するためのカルボキシルエステラーゼインヒビターの使用、あるいは、この化合物を小腸または大腸に送達するように設計される経口投与組成物の使用が挙げられる。さらに、被験体におけるＨＣＶ感染を処置する、または防止する方法が提供される。【特許請求の範囲】
【請求項１】
ハロアルキルアミド部分を含む化合物を含む組成物、および該化合物を加水分解酵素による代謝から保護するための手段を含む組成物。
【請求項２】
前記ハロアルキルアミド部分がｇｅｍ−ジクロロアセトアミド部分である、請求項１に記載の組成物。
【請求項３】
請求項１に記載の組成物であって、ここで前記化合物は構造式（Ｉ）に従う化合物の塩、水和物、および溶媒和物を含め、構造式（Ｉ）に従う化合物であり：
【化１】
2007514763.tif 000008
ここで：
「Ａ」環は置換されたフェニルまたは置換されたピリジルを含み；
「Ｂ」環は飽和五員環、不飽和五員環または芳香族五員環を含み、該飽和五員環、不飽和五員環または芳香族五員環は必要に応じて、Ｘ位、Ｙ位、およびＺ位の１つ以上においてヘテロ原子を含み、それぞれのヘテロ原子は、ＮＨ、Ｎ、Ｏ、およびＳから独立して選択され、ただしＸおよびＹは両方ともＯでなく；
「Ｃ」環はフェニルまたはピリジルを含み、該フェニルまたはピリジルは、３”位または５”位が、式−ＮＲ１１Ｃ（Ｏ）Ｒ１２のハロアルキルアミド部分で置換されており、ここでＲ１１は水素またはアルキルであり、そしてＲ１２はハロアルキル、ジハロメチル、またはジクロロメチルであり、Ｒ１１およびＲ１２は必要に応じて１つ以上の同じまたは異なる付加的な図示されていない置換基を含み得る、
組成物。
【請求項４】
Ｒ１１がＨであり、そしてＲ１２がジクロロメチルである、請求項３に記載の組成物。
【請求項５】
「Ａ」環および「Ｃ」環がフェニルである、請求項３に記載の組成物。
【請求項６】
前記「Ａ」環および「Ｃ」環の一方または両方がピリジルである、請求項３に記載の組成物。
【請求項７】
前記化合物が
【化２】
2007514763.tif 000009
である、請求項３に記載の組成物。
【請求項８】
前記手段がカルボキシルエステラーゼインヒビターを含む、請求項１に記載の組成物。
【請求項９】
前記カルボキシルエステラーゼインヒビターがカルボキシルエステラーゼアイソザイムを阻害する、請求項８に記載の組成物。
【請求項１０】
前記カルボキシルエステラーゼアイソザイムがヒトカルボキシルエステラーゼである、請求項９に記載の組成物。
【請求項１１】
前記カルボキシルエステラーゼインヒビターが腸のカルボキシルエステラーゼを阻害する、請求項８に記載の組成物。
【請求項１２】
前記カルボキシルエステラーゼインヒビターが肝臓のカルボキシルエステラーゼを阻害する、請求項８に記載の組成物。
【請求項１３】
前記カルボキシルエステラーゼインヒビターがトリフルオロアルキルケトン化合物、有機ホスフェート化合物、アミノアクリジン化合物、およびそれらの混合物から選択される、請求項８に記載の組成物。
【請求項１４】
前記カルボキシルエステラーゼインヒビターが、混合されたエステル化合物である、請求項８に記載の組成物。
【請求項１５】
前記カルボキシルエステラーゼインヒビターがカルボキシルエステラーゼインヒビターの混合物を含む、請求項８に記載の組成物。
【請求項１６】
前記混合物のそれぞれのカルボキシルエステラーゼインヒビターが、異なるカルボキシルエステラーゼアイソザイムを阻害する、請求項１５に記載の組成物。
【請求項１７】
さらに、
ｃ）薬学的に受容可能なビヒクル
を含有する、請求項１に記載の組成物。
【請求項１８】
処置の必要のある被験体を処置する方法であって、有効量の、請求項１〜請求項１７のいずれか１項に記載の組成物を該被験体に投与する工程を包含する、方法。
【請求項１９】
処置の必要のある被験体を処置する方法であって、有効量の、ハロアルキルアミド部分を含む化合物およびカルボキシルエステラーゼインヒビターを、該被験体に組み合わせて投与する工程を包含する、方法。
【請求項２０】
請求項１９に記載の方法であって、ここで前記化合物は構造式（Ｉ）を含む化合物の塩、水和物、および溶媒和物を含め、構造式（Ｉ）を含む化合物であり：
【化３】
2007514763.tif 000010
ここで
「Ａ」環は置換されたフェニルまたは置換されたピリジルを含み；
「Ｂ」環は飽和五員環、不飽和五員環または芳香族五員環を含み、該飽和五員環、不飽和五員環または芳香族五員環は必要に応じて、Ｘ位、Ｙ位、およびＺ位の１つ以上においてヘテロ原子を含み、それぞれのヘテロ原子は、ＮＨ、Ｎ、Ｏ、およびＳから独立して選択され、ただしＸおよびＹは両方ともＯでなく；
「Ｃ」環はフェニルまたはピリジルを含み、該フェニルまたはピリジルは３”位または５”位が式−ＮＲ１１Ｃ（Ｏ）Ｒ１２のハロアルキルアミド部分で置換されており、ここでＲ１１は水素またはアルキルであり、そしてＲ１２はハロアルキル、ジハロメチル、またはジクロロメチルであり、Ｒ１１およびＲ１２は必要に応じて１つ以上の同じまたは異なる付加的な図示されていない置換基を含み得る、
方法。
【請求項２１】
前記化合物の投与が第一の投与経路を介してであり、そして前記カルボキシルエステラーゼインヒビターの投与が第二の投与経路を介してである、請求項１９に記載の方法。
【請求項２２】
前記第一の投与経路と第二の投与経路とが同じである、請求項２１に記載の方法。
【請求項２３】
前記第一の投与経路と第二の投与経路とが異なる、請求項２１に記載の方法。
【請求項２４】
前記化合物および前記カルボキシルエステラーゼインヒビターが連続的に投与される、請求項１９に記載の方法。
【請求項２５】
前記化合物および前記カルボキシルエステラーゼインヒビターが同時に投与される、請求項１９に記載の方法。
【請求項２６】
前記カルボキシルエステラーゼインヒビターがカルボキシルエステラーゼアイソザイムを阻害する、請求項１９に記載の方法。
【請求項２７】
前記カルボキシルエステラーゼインヒビターが腸のカルボキシルエステラーゼを阻害する、請求項１９に記載の方法。
【請求項２８】
前記カルボキシルエステラーゼインヒビターが肝臓のカルボキシルエステラーゼを阻害する、請求項１９に記載の方法。
【請求項２９】
前記カルボキシルエステラーゼインヒビターがトリフルオロメチルケトン化合物、有機ホスフェート化合物、アミノアクリジン化合物、およびそれらの混合物から選択される、請求項１９に記載の方法。
【請求項３０】
前記カルボキシルエステラーゼインヒビターが、混合されたエステル化合物である、請求項１９に記載の方法。
【請求項３１】
前記カルボキシルエステラーゼインヒビターがカルボキシルエステラーゼインヒビターの混合物を含む、請求項３０に記載の方法。
【請求項３２】
前記混合物のそれぞれのカルボキシルエステラーゼインヒビターが異なるカルボキシルエステラーゼアイソザイムを阻害する、請求項３１に記載の方法。
【請求項３３】
被験体におけるハロアルキルアセトアミド部分を含む抗ウイルス化合物のバイオアベイラビリティーを調節する方法であって、請求項１〜請求項１７のいずれか１項に記載の組成物を該被験体に投与する工程を包含する、方法。
【請求項３４】
被験体におけるハロアルキルアセトアミド部分を含む抗ウイルス化合物のバイオアベイラビリティーを調節する方法であって、該被験体に該化合物およびカルボキシルエステラーゼインヒビターを組み合わせて投与する工程を包含する、方法。
【請求項３５】
被験体におけるハロアルキルアセトアミド部分を含む抗ウイルス化合物の代謝を阻害する方法であって、請求項１〜請求項１７のいずれか１項に記載の化合物を該被験体に投与する工程を包含する、方法。
【請求項３６】
被験体におけるハロアルキルアセトアミド部分を含む抗ウイルス化合物の代謝を阻害する方法であって、該被験体に該化合物およびカルボキシルエステラーゼインヒビターを組み合わせて投与する工程を包含する、方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
（１．関連出願の引用）
本出願は、２００３年１２月１９日出願の米国仮特許出願第６０／５３１，５４３号（その内容の全体が、本明細書中で参考として援用される）の利益を主張する。
【０００２】
（２．技術分野）
本開示は、ＨＣＶの複製および／または増殖を阻害するための組成物を提供する。さらに、動物およびヒトにおけるＨＣＶ感染の処置および／または予防に対する治療的アプローチとしてこの組成物を用いる方法が提供される。
【背景技術】
【０００３】
（３．背景）
ＨＣＶは一本鎖ＲＮＡウイルスであり、非Ａ非Ｂ型肝炎（ＮＡＮＢＨ）のほとんどの場合に確認される病因因子であり、そして急性かつ散発性の肝炎の一般の原因である（非特許文献１；非特許文献２；および非特許文献３）。急性Ｃ型肝炎はたった２０％の症例において自然に消散し；残りの８０％は慢性Ｃ型肝炎に発展する。慢性的に感染した患者は、慢性の肝臓疾患および肝硬変の危険の増加を示す。持続的なウイルス感染は免疫媒介性の肝細胞損傷（すなわち炎症性肝臓疾患）を誘導すると考えられ、これはしばしば原発性肝細胞癌（ＨＣＣ）の発達につながる。ＨＣＣを有する感染された患者の約８０％は、肝硬変を示す（非特許文献４）。全世界に推定１億７千万人の感染された個体が存在する。重要な伝染形態は、血液または血液製剤への頻繁な曝露を含む。したがって、注射可能な薬物の違法な使用、危険性の高い性行動、および血漿製剤または輸血の使用が、ＨＣＶ感染の危険性を高める。
【０００４】
ＨＣＶ感染の処置に利用可能な現在の治療としては、ＩＦＮ−α２ａおよびＩＦＮ−α２ｂ（ＩＮＴＲＯＮ（登録商標）Ａ、Ｓｃｈｅｒｉｎｇ−Ｐｌｏｕｇｈ；ＲＯＦＥＲＯＮ−Ａ（登録商標）、Ｒｏｃｈｅ）を含む、種々の型のインターフェロンα；インターフェロンのペグ化（ｐｅｇｙｌａｔｅｄ）形態（ＰＥＧ−ＩＮＴＲＯＮ（登録商標）Ａ、Ｓｃｈｅｒｉｎｇ−Ｐｌｏｕｇｈ）；およびインターフェロンの組み合わせが挙げられる。しかし、ほとんどの患者はこれらの処置に対して感受性が鈍く、そして応答者の間では、処置の中止後６〜１２ヶ月以内の再発率が高い（非特許文献５）。１〜２年の長期のインターフェロン治療の後のみ、持続的な治療応答が見られる。多くのＲＮＡウイルスおよびＤＮＡウイルスに対して広い範囲の活性を有するグアノシンアナログであるリバビリンは、インターフェロン−αと組み合わせて用いられる場合に慢性のＨＣＶ感染に対して効果的であることが臨床的試行において示されており（例えば、非特許文献６；非特許文献７を参照のこと）、そして治療的使用について認承された（ＲＥＢＥＴＲＯＮ、Ｓｃｈｅｒｉｎｇ−Ｐｌｏｕｇｈ）。しかし、応答率はなお５０％を大きく下回る。
【非特許文献１】Ｃｈｏｏら、Ｓｃｉｅｎｃｅ（１９８９）２４４：３５９
【非特許文献２】Ｋｕｏら、Ｓｃｉｅｎｃｅ（１９８９）２４４：３６２
【非特許文献３】Ａｌｔｅｒら、Ｃｕｒｒｅｎｔ  Ｐｅｒｓｐｅｃｔｉｖｅ  ｉｎ  Ｈｅｐａｔｏｌｏｇｙ（１９８９）ｐ．８３
【非特許文献４】Ｓｃｈａｆｅｒ，Ｇ．Ｂ．ら、Ｌａｎｃｅｔ（１９９９）３５３：１２５３−１２５７
【非特許文献５】Ｌｉａｎｇら、Ｊ．Ｍｅｄ．Ｖｉｒｏｌ．（１９９３）４０：６９
【非特許文献６】Ｐｏｙｎａｒｄら、Ｌａｎｃｅｔ（１９９８）３５２：１４２６−１４３２
【非特許文献７】Ｒｅｉｃｈａｒｄら、Ｌａｎｃｅｔ（１９９８）３５１：８３−８７
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【０００５】
したがって、活性な抗ＨＣＶ化合物の全身送達および標的化送達の強化を含め、ＨＣＶ感染の処置および／または防止のためのさらなる組成物および方法が望ましい。
【課題を解決するための手段】
【０００６】
（４．要旨）
ハロアルキルアミド部分を有する抗ウイルス化合物のクラスは、その種々の例示的な実施形態を、詳細な説明の節でさらに完全に記載する加水分解酵素（例えばカルボキシルエステラーゼ）によって代謝され、引き続いてこの化合物の抗ウイルス特性が失われることが、本明細書中で示される。この代謝経路の同定は、代謝転換を最小にする様々な戦略の開発のための基礎を提供し、したがってこれらの抗ウイルス化合物の治療的有効性を高める。当業者によって認められるように、本開示における記載および様々な実施形態はまた、加水分解酵素によって代謝される、ハロアルキルアミド部分を有する他の化合物に対しても適用可能である。
【０００７】
したがって、１つの局面において、本開示は、加水分解酵素による代謝から、ハロアルキルアミド部分を有する化合物を保護するための組成物および方法に関する。いくつかの実施形態において、本明細書中に記載される組成物および方法は、式（Ｉ）の一般構造を含む抗ＨＣＶ化合物、またはその塩、水和物、溶媒和物、もしくは酸化物を保護して、ＨＣＶ感染の処置または防止のために用いられる場合のこれらのバイオアベイラビリティーおよび組織送達を高めるために用いられる。
【０００８】
いくつかの実施形態において、この組成物は、上記のハロアルキルアミド化合物および加水分解酵素活性のインヒビター（例えばカルボキシエステラーゼインヒビター）を含む。いくつかの実施形態において、有用なインヒビターとしては、トリフルオロメチルケトン化合物、有機ホスフェート化合物、アミノアクリジン化合物、混合されたエステル化合物、およびカルボキシルエステラーゼの基質が挙げられるが、これらに限定されない。これらのインヒビターは個別にまたは混合物として用いられて、特定のカルボキシルエステラーゼアイソザイムを阻害し得、複数のアイソザイムを阻害し得、そして／または、生体内変換を媒介する原因となる特定の組織に存在するカルボキシルエステラーゼを阻害し得る。
【０００９】
別の局面において、本開示は、被験体におけるＨＣＶ感染の処置または防止のための方法における、加水分解酵素インヒビターの使用を提供する。一般的に、この方法は、抗ＨＣＶ化合物を投与する工程、およびカルボキシルエステラーゼインヒビターを組み合わせて投与する工程を包含する。この化合物は、（例えば１つの薬学的組成物内で）一緒に投与されてもよく、同じ経路または異なる経路によって、別々に投与されても、同時に投与されても、または連続的に投与されてもよい。いくつかの実施形態において、このカルボキシルエステラーゼインヒビターは、宿主を前処置するために、抗ＨＣＶ化合物の投与に先立って投与され、そのことによって、抗ＨＣＶ化合物の投与前にカルボキシルエステラーゼ活性を阻害する。
【００１０】
加水分解酵素インヒビターを、ＨＣＶ化合物と組み合わせて投与することは、カルボキシルエステラーゼおよび他の加水分解酵素による抗ウイルス化合物の代謝を阻害する方法を提供する。
【００１１】
いくつかの実施形態において、カルボキシルエステラーゼインヒビターを抗ＨＣＶ化合物と組み合わせて投与することは、処置された宿主内における、この抗ＨＣＶ化合物のバイオアベイラビリティーを上昇させる方法を提供する。
【００１２】
本開示はさらに、ハロアルキルアミド化合物（例えば、構造式（Ｉ）の抗ウイルス化合物）を含む種々の組成物を提供する。この組成物は、加水分解酵素による代謝からこの化合物を保護するために処方される。いくつかの実施形態において、この化合物は、マイクロ粒子（ｍｉｃｒｏｐａｒｔｉｃｌｅ）およびマイクロカプセルの形態にて、徐放性／遅延放出性組成物として処方され、これらは、上部消化管を回避して、小腸または大腸においては、カルボキシルエステラーゼの活性がより低いかもしれず、またはマイクロカプセルの直接的な取り込みがカルボキシルエステラーゼとの接触を制限し得る。このような処方物が、上記の抗ウイルス化合物のバイオアベイラビリティーを高めることが、本明細書中で示される。
【００１３】
他の実施形態において、上記の保護的組成物は腸溶性ポリマーを用いてマイクロカプセルに封入された化合物であり、この化合物の放出は、胃、小腸（または小腸の一部分）、および／または大腸の周辺におけるｐＨの相違によって決定される。マイクロカプセルに封入された構造式（Ｉ）の抗ウイルス化合物の特定の実施形態は、腸溶性ポリマーである、エチルセルロースまたはメタクリル酸／メタクリル酸メチルコポリマーに基づく。種々の実施形態において、この組成物は、経口投与のために錠剤またはカプセルとして調合され得る。
【００１４】
さらなる局面において、本開示は、被験体におけるＨＣＶ感染を処置または防止するための、マイクロカプセルに封入された抗ウイルス化合物を使用する方法を提供する。
【発明を実施するための最良の形態】
【００１５】
（６．詳細な説明）
（６．１  定義）
本願を通して用いられる場合、以下の用語は以下の意味を有するものとする：
「アルキル」は、単独でも、または別の置換基の一部分としても、飽和または不飽和の、分枝状、直鎖状、または環状の一価炭化水素ラジカルであって、親のアルカン、アルケン、またはアルキンの１つの炭素原子から１つの水素原子を除去することによって誘導されるものをいう。代表的なアルキル基としては、メチル；エチル（例えば、エタニル、エテニル、エチニル）；プロピル（例えば、プロパン−１−イル、プロパン−２−イル、シクロプロパン−１−イル、プロプ−１−エン−１−イル、プロプ−１−エン−２−イル、プロプ−２−エン−１−イル（アリル）、シクロプロプ−１−エン−１−イル；シクロプロプ−２−エン−１−イル、プロプ−１−イン−１−イル、プロプ−２−イン−１−イルなど）；ブチル（例えば、ブタン−１−イル、ブタン−２−イル、２−メチル−プロパン−１−イル、２−メチル−プロパン−２−イル、シクロブタン−１−イル、ブト−１−エン−１−イル、ブト−１−エン−２−イル、２−メチル−プロプ−１−エン−１−イル、ブト−２−エン−１−イル、ブト−２−エン−２−イル、ブタ−１，３−ジエン−１−イル、ブタ−１，３−ジエン−２−イル、シクロブト−１−エン−１−イル、シクロブト−１−エン−３−イル、シクロブタ−１，３−ジエン−１−イル、ブト−１−イン−１−イル、ブト−１−イン−３−イル、ブト−３−イン−１−イルなど）などが挙げられるが、これらに限定されない。
【００１６】
用語「アルキル」は、具体的には、任意の度合いまたはレベルの飽和を有する基（すなわち、炭素−炭素単結合のみを有する基、１つ以上の炭素−炭素二重結合を有する基、１つ以上の炭素−炭素三重結合を有する基、および炭素−炭素の単結合、二重結合、三重結合の混合物を有する基）を含むと意図される。特定のレベルの飽和が意図される場合、「アルカニル」、「アルケニル」、および「アルキニル」という表現が用いられる。好ましくは、アルキル基は１〜１５個の原子を含み（Ｃ１〜Ｃ１５アルキル）、より好ましくは１〜１０個の炭素原子を含み（Ｃ１〜Ｃ１０アルキル）、なおより好ましくは１〜６個の炭素原子を含む（Ｃ１〜Ｃ６アルキル、すなわち低級アルキル）。
【００１７】
「アルカニル」は、単独でも、または別の置換基の一部分としても、飽和の、分枝状、直鎖状、または環状のアルキルラジカルであって、親のアルカンの単一の炭素原子から１つの水素原子を除去することによって誘導されるものをいう。代表的なアルカニル基としては、メタニル；エタニル；プロパニル（例えば、プロパン−１−イル、プロパン−２−イル（イソプロピル）、シクロプロパン−１−イルなど）；ブタニル（例えば、ブタン−１−イル、ブタン−２−イル（ｓｅｃ−ブチル）、２−メチル−プロパン−１−イル（イソブチル）、２−メチル−プロパン−２−イル（ｔ−ブチル）、シクロブタン−１−イルなど）などが挙げられるが、これらに限定されない。
【００１８】
「アルケニル」は、単独でも、または別の置換基の一部分としても、少なくとも１つの炭素−炭素二重結合を有する、不飽和の、分枝状、直鎖状、または環状のアルキルラジカルであって、親のアルケンの単一の炭素原子から１つの水素原子を除去することによって誘導されるものをいう。この基は、上記の二重結合についてｃｉｓ配座またはｔｒａｎｓ配座のいずれであってもよい。代表的なアルケニル基としては、エテニル；プロペニル（例えば、プロプ−１−エン−１−イル、プロプ−１−エン−２−イル、プロプ−２−エン−１−イル（アリル）、プロプ−２−エン−２−イル、シクロプロプ−１−エン−１−イル；シクロプロプ−２−エン−１−イル）；ブテニル（例えば、ブト−１−エン−１−イル、ブト−１−エン−２−イル、２−メチル−プロプ−１−エン−１−イル、ブト−２−エン−１−イル、ブト−２−エン−１−イル、ブト−２−エン−２−イル、ブタ−１，３−ジエン−１−イル、ブタ−１，３−ジエン−２−イル、シクロブト−１−エン−１−イル、シクロブト−１−エン−３−イル、シクロブタ−１，３−ジエン−１−イルなど）などが挙げられるが、これらに限定されない。
【００１９】
「アルキニル」は、単独でも、または別の置換基の一部分としても、少なくとも１つの炭素−炭素三重結合を有する、不飽和の、分枝状、直鎖状、または環状のアルキルラジカルであって、親のアルキンの単一の炭素原子から１つの水素原子を除去することによって誘導されるものをいう。代表的なアルキニル基としては、エチニル；プロピニル（例えば、プロプ−１−イン−１−イル、プロプ−２−イン−１−イルなど）；ブチニル（例えば、ブト−１−イン−１−イル、ブト−１−イン−３−イル、ブト−３−イン−１−イルなど）などが挙げられるが、これらに限定されない。
【００２０】
「アルコキシ」は、単独でも、または別の置換基の一部分としても、式−ＯＲのラジカルであって、ここでＲが本明細書中で定義される通りのアルキル基またはシクロアルキル基であるものをいう。アルコキシ基の代表的な例としては、メトキシ、エトキシ、プロポキシ、イソプロポキシ、ブトキシ、ｔｅｒｔ−ブトキシ、シクロプロピルオキシ、シクロペンチルオキシ、シクロヘキシルオキシなどが挙げられるが、これらに限定されない。
【００２１】
「アルコキシカルボニル」は、単独でも、または別の置換基の一部分としても、式−Ｃ（Ｏ）−アルコキシのラジカルであって、ここでアルコキシが本明細書中に定義される通りであるものをいう。
【００２２】
「アルキルチオ」は、単独でも、または別の置換基の一部分としても、式−ＳＲ３１のラジカルであって、ここでＲ３１が本明細書中に定義される通りのアルキル基またはシクロアルキル基であるものをいう。代表的な例としては、メチルチオ、エチルチオ、プロピルチオ、イソプロピルチオ、ブチルチオ、ｔｅｒｔ−ブチルチオ、シクロプロピルチオ、シクロペンチルチオ、シクロヘキシルチオなどが挙げられるが、これらに限定されない。
【００２３】
「アリール」は、単独でも、または別の置換基の一部分としても、一価の芳香族炭化水素基であって、本明細書中で定義される通りの親芳香族環系の単一の炭素原子から１つの水素原子を除去することによって誘導されるものをいう。代表的なアリール基としては、アセアントリレン、アセナフチレン、アセフェナントリレン、アントラセン、アズレン、ベンゼン、クリセン、コロネン、フルオランテン、フルオレン、ヘキサセン、ヘキサフェン、ヘキサレン、ａｓ−インダセン、ｓ−インダセン、インダン、インデン、ナフタレン、オクタセン、オクタフェン、オクタレン、オバレン、ペンタ−２，４−ジエン、ペンタセン、ペンタレン、ペンタフェン、ペリレン、フェナレン、フェナントレン、ピセン、プレイアデン、ピレン、ピラントレン、ルビセン、トリフェニレン、トリナフタレンなどから誘導される基が挙げられるが、これらに限定されない。アリール基は、好ましくは６〜２０個の炭素原子を含み（Ｃ６〜Ｃ２０アリール）、より好ましくは６〜１５個の炭素原子を含み（Ｃ６〜Ｃ１５アリール）、そしてなおより好ましくは６〜１０個の炭素原子を含む（Ｃ６〜Ｃ１０アリール）。
【００２４】
「アリールアルキル」は、単独でも、または別の置換基の一部分としても、非環式のアルキル基であって、ここで炭素原子（代表的には末端の炭素原子またはｓｐ３炭素原子）に結合した水素原子の内の１つが、本明細書中で定義される通りのアリール基で置換されたものをいう。代表的なアリールアルキル基としては、ベンジル、２−フェニルエタン−１−イル、２−フェニルエテン−１−イル、ナフチルメチル、２−ナフチルエタン−１−イル、２−ナフチルエテン−１−イル、ナフトベンジル、２−ナフトフェニルエタン−１−イルなどが挙げられるが、これらに限定されない。特定のアルキル部分が意図される場合、命名法アリールアルカニル、アリールアルケニル、および／またはアリールアルキニルが用いられる。好ましくは、アリールアルキル基は（Ｃ６〜Ｃ３０）アリールアルキル（例えば、アリールアルキル基のアルカニル部分、アルケニル部分、またはアルキニル部分が（Ｃ１〜Ｃ１０）アルキルであり、そしてアリール部分が（Ｃ６〜Ｃ２０）アリールである）であり、より好ましくは、アリールアルキル基は（Ｃ６〜Ｃ２０）アリールアルキル（例えば、アリールアルキル基のアルカニル部分、アルケニル部分、またはアルキニル部分が（Ｃ１〜Ｃ８）アルキルであり、そしてアリール部分が（Ｃ６〜Ｃ１２）アリールである）であり、そしてなおより好ましくは、アリールアルキル基は（Ｃ６〜Ｃ１５）アリールアルキル（例えば、アリールアルキル基のアルカニル部分、アルケニル部分、またはアルキニル部分が（Ｃ１〜Ｃ５）アルキルであり、そしてアリール部分が（Ｃ６〜Ｃ１０）アリールである）である。
【００２５】
「アリールオキシ」は、単独でも、または別の置換基の一部分としても、式−Ｏ−アリールのラジカルであって、ここでアリールが本明細書中に定義される通りであるものをいう。
【００２６】
「アリールアルキルオキシ」は、単独でも、または別の置換基の一部分としても、式−Ｏ−アリールアルキルのラジカルであって、ここでアリールアルキルが本明細書中に定義される通りであるものをいう。
【００２７】
「アリールオキシカルボニル」は、単独でも、または別の置換基の一部分としても、式−Ｃ（Ｏ）−Ｏ−アリールのラジカルであって、ここでアリールが本明細書中に定義される通りであるものをいう。
【００２８】
「カルバモイル」は、単独でも、または別の置換基の一部分としても、式−Ｃ（Ｏ）ＮＲ’Ｒ”のラジカルであって、ここでＲ’およびＲ”がそれぞれ、互いに独立して、水素、本明細書中で定義される通りのアルキルおよびシクロアルキルからなる群より選択されるか、あるいはＲ”およびＲ”は、それらが結合している窒素原子と一緒になって、本明細書中で定義される通りのシクロヘテロアルキル環を形成するものをいう。
【００２９】
「シクロアルキル」は、単独でも、または別の置換基の一部分としても、本明細書中で定義される通りの、飽和環式アルキルラジカルまたは不飽和環式アルキルラジカルをいう。特定のレベルの飽和が意図される場合、命名法「シクロアルカニル」または「シクロアルケニル」が用いられる。代表的なシクロアルキル基としては、シクロプロパン、シクロブタン、シクロペンタン、シクロヘキサンなどから誘導される基が挙げられるが、これらに限定されない。シクロアルキル基は、好ましくは３〜１０個の環原子を含み（Ｃ３〜Ｃ１０シクロアルキル）、そしてより好ましくは３〜７個の環原子を含む（Ｃ３〜Ｃ７シクロアルキル）。
【００３０】
「シクロヘテロアルキル」は、単独でも、または別の置換基の一部分としても、飽和環式アルキルラジカルまたは不飽和環式アルキルラジカルであって、ここで、１つ以上の炭素原子（および、必要に応じて任意の結合される水素原子）が独立して同じヘテロ原子または異なるヘテロ原子で置換されたものをいう。炭素原子を置換する代表的なヘテロ原子としては、Ｎ、Ｐ、Ｏ、Ｓ、Ｓｉなどが挙げられるが、これらに限定されない。特定のレベルの飽和が意図される場合、命名法「シクロヘテロアルカニル」または「シクロヘテロアルケニル」が用いられる。代表的なシクロヘテロアルキル基としては、エポキシド、アジリン、チイラン、イミダゾリジン、モルホリン、ピペラジン、ピペリジン、ピラゾリジン、ピロリドン、キヌクリジンなどから誘導される基が挙げられるが、これらに限定されない。シクロヘテロアルキル基は、好ましくは３〜１０個の環原子を含み（三員〜十員のシクロヘテロアルキル）、より好ましくは３〜７個の環原子を含む（三員〜七員のシクロヘテロアルキル）。
【００３１】
「ジアルキルアミノ」または「モノアルキルアミノ」は、単独でも、または他の置換基の一部分としても、それぞれ式−ＮＲＲおよび式−ＮＨＲのラジカルであって、ここでそれぞれのＲが、本明細書中にて定義される通りのアルキルおよびシクロアルキルからなる群より独立して選択される。ジアルキルアミノ基の代表的な例としては、ジメチルアミノ、メチルエチルアミノ、ジ−（１−メチルエチル）アミノ、（シクロヘキシル）（メチル）アミノ、（シクロヘキシル）（エチル）アミノ、（シクロヘキシル）（プロピル）アミノなどが挙げられるが、これらに限定されない。モノアルキルアミノ基の代表的な例としては、メチルアミノ、エチルアミノ、プロピルアミノ、イソプロピルアミノ、シクロヘキシルアミノなどが挙げられるが、これらに限定されない。
【００３２】
「ハロゲン」または「ハロ」は、単独でも、または別の置換基の一部分としても、フルオロラジカル、クロロラジカル、ブロモラジカル、および／またはヨードラジカルをいう。
【００３３】
「ハロアルキル」は、単独でも、または別の置換基の一部分としても、本明細書中にて定義される通りのアルキル基であって、ここで１つ以上の水素原子がハロ基で置換されるアルキル基をいう。用語「ハロアルキル」は、具体的には、モノハロアルキル、ジハロアルキル、トリハロアルキルなどから、ペルハロアルキルまでを包含すると意図される。ハロアルキル基を置換するハロ基は同じであっても異なってもよい。例えば、表現「（Ｃ１〜Ｃ２）ハロアルキル」は、１−フルオロメチル、１−フルオロ−２−クロリエチル  ジフルオロメチル、トリフルオロメチル、１−フルオロエチル、１，１−ジフルオロエチル、１，２−ジフルオロエチル、１，１，１−トリフルオロエチル、ペルフルオロエチルなどを包含する。
【００３４】
「ヘテロアルキル」、「ヘテロアルカニル」、「ヘテロアルケニル」、「ヘテロアルキニル」、「ヘテロアルキルジイル」、および「ヘテロアルキレノ（ｈｅｔｅｒｏａｌｋｙｌｅｎｏ）」は、単独でも、または他の置換基の一部分としても、１つ以上の炭素原子（および、必要に応じて任意の結合した水素原子）がそれぞれ、同じまたは異なるヘテロ原子またはヘテロ原子基で、互いに独立して置換されている、それぞれアルキル基、アルカニル基、アルケニル基、アルキニル基、アルキルジイル基、およびアルキレノ基をいう。上記の炭素原子を置換し得る、代表的なヘテロ原子またはヘテロ原子基としては、Ｏ、Ｓ、Ｎ、Ｓｉ、−ＮＨ−、−Ｓ（Ｏ）−、−Ｓ（Ｏ）２−、−Ｓ（Ｏ）ＮＨ−、−Ｓ（Ｏ）２ＮＨ−など、およびそれらの組み合わせが挙げられるが、これらに限定されない。これらのヘテロ原子またはヘテロ原子基は、アルキル基、アルケニル基、またはアルキニル基の任意の内部位置に配置され得る。このようなヘテロアルキル基、ヘテロアルカニル基、ヘテロアルケニル基、および／またはヘテロアルキニル基の例としては、−ＣＨ２−ＣＨ２−Ｏ−ＣＨ３、−ＣＨ２−ＣＨ２−ＮＨ−ＣＨ３、−ＣＨ２−ＣＨ２−Ｎ（ＣＨ３）−ＣＨ３、−ＣＨ２−Ｓ−ＣＨ２、−ＣＨ３、−ＣＨ２−ＣＨ２−Ｓ（Ｏ）−ＣＨ３、−ＣＨ２−ＣＨ２−Ｓ（Ｏ）２−ＣＨ３、−ＣＨ＝ＣＨ−Ｏ−ＣＨ３、−ＣＨ２−ＣＨ＝Ｎ−Ｏ−ＣＨ３、および−ＣＨ２−ＣＨ２−Ｏ−Ｃ＝ＣＨが挙げられる。ヘテロアルキルジイル基およびヘテロアルキレノ基については、これらのヘテロ原子またはヘテロ原子基がまた、鎖のいずれかの末端を占めても、両方の末端を占めてもよい。このような基について、基の配向性は含意されない。
【００３５】
「ヘテロアリール」は、単独でも、または別の置換基の一部分としても、一価の複素式芳香族ラジカルをであって、これは、本明細書中で定義される通りの親複素環式芳香族環系の単一の原子から１つの水素原子を除去することによって誘導されるものをいう。代表的なヘテロアリール基としては、アクリジン、アルスインドール（ａｒｓｉｎｄｏｌｅ）、カルバゾール、β−カルボリン、クロマン、クロメン、シンノリン、フラン、イミダゾール、インダゾール、インドール、インドリン、インドリジン、イソベンゾフラン、イソクロメン、イソインドール、イソインドリン、イソキノリン、イソチアゾール、イソキサゾール、ナフチリジン、オキサジアゾール、オキサゾール、ペルイミジン、フェナントリジン、フェナントロリン、フェナジン、フタラジン、プテリジン、プリン、ピラン、ピラジン、ピラゾール、ピリダジン、ピリジン、ピリミジン、ピロール、ピロリジン、キナゾリン、キノリン、キノリジン、キノキサリン、テトラゾール、チアジアゾール、チアゾール、チオフェン、チアゾール、キサンテンなどから誘導される基が挙げられるが、これらに限定されない。ヘテロアリール基は、好ましくは５〜２０個の環原子を含み（五員〜二十員ヘテロアリール）、より好ましくは５〜１０個の環原子を含む（五員〜十員ヘテロアリール）。好ましいヘテロアリール基は、チオフェン、ピロール、ベンゾチオフェン、ベンゾフラン、インドール、ピリジン、キノリン、イミダゾール、オキサゾール、およびピラジンから誘導されるヘテロアリール基である。
【００３６】
「親芳香族環系」は、共役π電子系を有する、不飽和の環式環系または多環式環系をいう。「親芳香族環系」の定義に具体的に含まれるのは、１つ以上の環が芳香族であり、そして１つ以上の環が飽和または不飽和である、縮合環系であり、例えば、フルオレン、インダン、インデン、フェナレンなどである。代表的な親芳香族環系としては、アセアントリレン、アセナフチレン、アセフェナントリレン、アントラセン、アズレン、ベンゼン、クリセン、コロネン、フルオランテン、フルオレン、ヘキサセン、ヘキサフェン、ヘキサレン、ａｓ−インダセン、ｓ−インダセン、インダン、インデン、ナフタレン、オクタセン、オクタフェン、オクタレン、オバレン、ペンタ−２，４−ジエン、ペンタセン、ペンタレン、ペンタフェン、ペリレン、フェナレン、フェナントレン、ピセン、プレイアデン、ピレン、ピラントレン、ルビセン、トリフェニレン、トリナフタレンなどが挙げられるが、これらに限定されない。
【００３７】
「親複素環式芳香族環系」は、１つ以上の炭素原子（および、必要に応じて任意の結合した水素原子）が、同じヘテロ原子または異なるヘテロ原子で、それぞれ独立して置換されている、親芳香族環系をいう。上記の炭素原子を置換する代表的なヘテロ原子としては、Ｎ、Ｐ、Ｏ、Ｓ、Ｓｉなどが挙げられるが、これらに限定されない。「親複素環式芳香族環系」の定義に具体的に含まれるのは、１つ以上の環が芳香族であり、そして１つ以上の環が飽和または不飽和である、縮合環系であり、例えば、アルスインドール、ベンゾジオキサン、ベンゾフラン、クロマン、クロメン、インドール、インドリン、キサンテンなどがである。代表的な親複素環式芳香族環系としては、アルスインドール、カルバゾール、β−カルボリン、クロマン、クロメン、シンノリン、フラン、イミダゾール、インダゾール、インドール、インドリン、インドリジン、イソベンゾフラン、イソクロメン、イソインドール、イソインドリン、イソキノリン、イソチアゾール、イソキサゾール、ナフチリジン、オキサジアゾール、オキサゾール、ペルイミジン（ｐｅｒｉｍｉｄｉｎｅ）、フェナントリジン、フェナントロリン、フェナジン、フタラジン、プテリジン、プリン、ピラン、ピラジン、ピラゾール、ピリダジン、ピリジン、ピリミジン、ピロール、ピロリジン、キナゾリン、キノリン、キノリジン、キノキサリン、テトラゾール、チアジアゾール、チアゾール、チオフェン、トリアゾール、キサンテンなどが挙げられるが、これらに限定されない。
【００３８】
「薬学的に許容可能な塩」は、薬学的な使用について一般に受容可能であることが当該分野で理解される対イオンを用いて作製され、そして親化合物の所望の薬理学的活性を保有する、化合物の塩をいう。このような塩としては、以下が挙げられる：（１）無機酸（例えば、塩酸、臭化水素酸、硫酸、硝酸、リン酸など）を用いて形成される酸付加塩（ａｃｉｄ  ａｄｄｉｔｉｏｎ  ｓａｌｔ）；または有機酸（例えば、酢酸、プロピオン酸、ヘキサン酸、シクロペンタンプロピオン酸、グリコール酸、ピルビン酸、乳酸、マロン酸、コハク酸、リンゴ酸、マレイン酸、フマル酸、酒石酸、クエン酸、安息香酸、３−（４−ヒドロキシベンゾイル）安息香酸、ケイ皮酸、マンデル酸、メタンスルホン酸、エタンスルホン酸、１，２−エタン−ジスルホン酸、２−ヒドロキシエタンスルホン酸、ベンゼンスルホン酸、４−クロロベンゼンスルホン酸、２−ナフタレンスルホン酸、４−トルエンスルホン酸、ショウノウスルホン酸、４−メチルビシクロ[２．２．２]−オクト−２−エン−１−カルボン酸、グルコヘプタン酸、３−フェニルプロピオン酸、トリメチル酢酸、第三ブチル酢酸、ラウリル硫酸、グルコン酸、グルタミン酸、ヒドロキシナフトエ酸、サリチル酸、ステアリン酸、ムコン酸など）を用いて形成される酸付加塩；あるいは（２）親化合物に存在する酸性のプロトンが金属イオン（例えば、アルカリ金属イオン、アルカリ土類イオン、またはアルミニウムイオン）で置換されるた場合に形成される塩；または有機塩基（例えば、エタノールアミン、ジエタノールアミン、トリエタノールアミン、Ｎ−メチルグルカミン、モルホリン、ピペリジン、ジメチルアミン、ジエチルアミンなど）と配位した場合に形成される塩。アミノ酸の塩（例えばアルギネート（ａｒｇｉｎａｔｅ）など）、および、グルクルミン酸（ｇｌｕｃｕｒｍｉｃ  ａｃｉｄ）またはガラクツロン酸（ｇａｌａｃｔｕｎｏｒｉｃ  ａｃｉｄ）などのような有機酸の塩もまた含まれる（例えば、Ｂｅｒｇｅら、Ｊ．Ｐｈａｒｍ．Ｓｃｉ．６６：１−１９（１９７７）を参照のこと）。
【００３９】
「プロドラッグ」は、使用の条件（例えば体内）において変化を受けて、活性な薬物を放出する活性な化合物（薬物）の誘導体をいう。プロドラッグは、多くの場合、活性な薬物に変換されるまで薬理学的に不活性であるが、必ずしもそうではない。プロドラッグは代表的に、その薬物のうちの、活性のために部分的に必要であると考えられる官能基をプロ基（ｐｒｏｇｒｏｕｐ）（以下に定義される）で覆ってプロ部分（ｐｒｏｍｏｉｅｔｙ）を形成することで得られ、このプロ部分は特定の使用条件下で変化（例えば切断）を受けて、この官能基を放出し、それによって活性な薬物を放出する。プロ部分の切断は、例えば加水分解反応によって自発的に進行してもよく、別の因子によって（例えば、酵素によって、光によって、酸によって、あるいは、物理的パラメーターもしくは環境的パラメーターの変化（例えば温度の変化）、またはこれらのパラメーターへの暴露によって）触媒されてもよく、または誘導されてもよい。この因子は、使用条件に対して内因性であっても（例えば、上記のプロドラッグが投与される細胞に存在する酵素、または胃の酸性条件）、外因的に供給されてもよい。特定の実施形態において、用語プロドラッグは、本明細書中に記載される化合物の水素異性体（ｈｙｄｒｏ  ｉｓｏｍｅｒ）を含む。このような水素異性体は、対応する芳香族環系に対して生理学的な条件下で酸化され得る。
【００４０】
プロドラッグを産生するために、活性な化合物における官能基を覆うのに適切である、広範囲にわたるプロ基および結果として生じるプロ部分は、当該分野で周知である。例えば、ヒドロキシル官能基は、スルホネートプロ部分、エステルプロ部分、またはカルボネートプロ部分として覆われ得て、これらはインビトロで加水分解されてヒドロキシル基を提供し得る。アミノ官能基は、アミドプロ部分、イミンプロ部分、ホスフィニルプロ部分、ホスホニルプロ部分、ホスホリルプロ部分、またはスルフェニルプロ部分として覆われ得て、これらはインビボで加水分解されてアミノ基を提供し得る。カルボキシル基は、エステル（シリルエステルおよびチオエステルを含む）プロ部分、アミドプロ部分、またはヒドラジドプロ部分として覆われ得て、これらはインビボで加水分解されてカルボキシル基を提供し得る。適切なプロ基およびそれらのそれぞれのプロ部分の他の特定の例は、当業者にとって明白である。
【００４１】
「プロ基」は、活性な薬物内の官能基を覆ってプロ部分を形成するために用いられる場合に、その薬物をプロドラッグに変換する保護基の型をいう。プロ基は代表的には、特定の使用条件下で切断可能な結合を介して、上記薬物の官能基に結び付けられる。したがって、プロ基は、プロ部分の内の、特定の使用条件下で切断して官能基を放出する部分である。特定の例として、式−ＮＨ−Ｃ（Ｏ）ＣＨ３のアミドプロ部分は、プロ基−Ｃ（Ｏ）ＣＨ３を含む。
【００４２】
特定の基またはラジカルを修飾するために用いられる場合、「置換された」とは、特定の基またはラジカルの１つ以上の水素原子が、同じ置換基または異なる置換基で、互いに独立してそれぞれ置換されていることを意味する。特定の基またはラジカルにおける飽和炭素原子を置換するために有用である置換基としては、−Ｒａ、ハロ、−Ｏ−、＝Ｏ、−ＯＲｂ、−ＳＲｂ、−Ｓ−、＝Ｓ、−ＮＲｃＲｃ、＝ＮＲｂ、＝Ｎ−ＯＲｂ、トリハロメチル、−ＣＦ３、−ＣＮ、−ＯＣＮ、−ＳＣＮ、−ＮＯ、−ＮＯ２、＝Ｎ２、−Ｎ３、−Ｓ（Ｏ）２Ｒｂ、−Ｓ（Ｏ）２Ｏ−、−Ｓ（Ｏ）２ＯＲｂ、−ＯＳ（Ｏ）２Ｒｂ、−ＯＳ（Ｏ）２Ｏ−、−ＯＳ（Ｏ）２ＯＲｂ、−Ｐ（Ｏ）（Ｏ−）２、−Ｐ（Ｏ）（ＯＲｂ）（Ｏ−）、−Ｐ（Ｏ）（ＯＲｂ）（ＯＲｂ）、−Ｃ（Ｏ）Ｒｂ、−Ｃ（Ｓ）Ｒｂ、−Ｃ（ＮＲｂ）Ｒｂ、−Ｃ（Ｏ）Ｏ−、−Ｃ（Ｏ）ＯＲｂ、−Ｃ（Ｓ）ＯＲｂ、−Ｃ（Ｏ）ＮＲｃＲｃ、−Ｃ（ＮＲｂ）ＮＲｃＲｃ、−ＯＣ（Ｏ）Ｒｂ、−ＯＣ（Ｓ）Ｒｂ、−ＯＣ（Ｏ）Ｏ−、−ＯＣ（Ｏ）ＯＲｂ、−ＯＣ（Ｓ）ＯＲｂ、−ＮＲｂＣ（Ｏ）Ｒｂ、−ＮＲｂＣ（Ｓ）Ｒｂ、−ＮＲｂＣ（Ｏ）Ｏ−、−ＮＲｂＣ（Ｏ）ＯＲｂ、−ＮＲｂＣ（Ｓ）ＯＲｂ、−ＮＲｂＣ（Ｏ）ＮＲｃＲｃ、−ＮＲｂＣ（ＮＲｂ）Ｒｂ、および−ＮＲｂＣ（ＮＲｂ）ＮＲｃＲｃが挙げられるが、これらに限定されず、ここで、Ｒａはアルキル、シクロアルキル、ヘテロアルキル、シクロへテロアルキル、アリール、アリールアルキル、ヘテロアリール、およびヘテロアリールアルキルからなる群より選択され；それぞれのＲｂは独立して水素またはＲａであり；そして、それぞれのＲｃは独立してＲｂであるか、あるいは、それぞれのＲｃが、それらが結合している窒素原子と一緒になった場合、五員、六員、または七員のシクロへテロアルキル（必要に応じて、Ｏ、Ｎ、およびＳからなる群より選択される同じさらなるヘテロ原子または異なるさらなるヘテロ原子を１〜４個含み得る）を形成する。特定の例として、−ＮＲｃＲｃは、−ＮＨ２、−ＮＨ−アルキル、Ｎ−ピロリジニル、およびＮ−モルホリニルを含むことを意味する。
【００４３】
同様に、特定の基またはラジカルにおける不飽和炭素原子を置換するために有用な置換基としては、−Ｒａ、ハロ、−Ｏ−、−ＯＲｂ、−ＳＲｂ、−Ｓ−、−ＮＲｃＲｃ、トリハロメチル、−ＣＦ３、−ＣＮ、−ＯＣＮ、−ＳＣＮ、−ＮＯ、−ＮＯ２、−Ｎ３、−Ｓ（Ｏ）２Ｒｂ、−Ｓ（Ｏ）２Ｏ−、−Ｓ（Ｏ）２ＯＲｂ、−ＯＳ（Ｏ）２Ｒｂ、−ＯＳ（Ｏ）２Ｏ−、−ＯＳ（Ｏ）２ＯＲｂ、−Ｐ（Ｏ）（Ｏ−）２、−Ｐ（Ｏ）（ＯＲｂ）（Ｏ−）、−Ｐ（Ｏ）（ＯＲｂ）（ＯＲｂ）、−Ｃ（Ｏ）Ｒｂ、−Ｃ（Ｓ）Ｒｂ、−Ｃ（ＮＲｂ）Ｒｂ、−Ｃ（Ｏ）Ｏ−、−Ｃ（Ｏ）ＯＲｂ、−Ｃ（Ｓ）ＯＲｂ、−Ｃ（Ｏ）ＮＲｃＲｃ、−Ｃ（ＮＲｂ）ＮＲｃＲｃ、−ＯＣ（Ｏ）Ｒｂ、−ＯＣ（Ｓ）Ｒｂ、−ＯＣ（Ｏ）Ｏ−、−ＯＣ（Ｏ）ＯＲｂ、−ＯＣ（Ｓ）ＯＲｂ、−ＮＲｂＣ（Ｏ）Ｒｂ、−ＮＲｂＣ（Ｓ）Ｒｂ、−ＮＲｂＣ（Ｏ）Ｏ−、−ＮＲｂＣ（Ｏ）Ｏ−、−ＮＲｂＣ（Ｏ）ＯＲｂ、−ＮＲｂＣ（Ｓ）ＯＲｂ、−ＮＲｂＣ（Ｏ）ＮＲｃＲｃ、−ＮＲｂＣ（ＮＲｂ）Ｒｂ、および−ＮＲｂＣ（ＮＲｂ）ＮＲｃＲｃ（ここで、Ｒａ、Ｒｂ、およびＲｃは上記で定義した通りである）が挙げられるが、これらに限定されない。
【００４４】
ヘテロアルキル基およびシクロヘテロアルキル基における窒素原子を置換するために有用な置換基としては、−Ｒａ、−Ｏ−、−ＯＲｂ、−ＳＲｂ、−Ｓ−、−ＮＲｃＲｃ、トリハロメチル、−ＣＦ３、−ＣＮ、−ＮＯ、−ＮＯ２、−Ｓ（Ｏ）２Ｒｂ、−Ｓ（Ｏ）２Ｏ−、−Ｓ（Ｏ）２ＯＲｂ、−ＯＳ（Ｏ）２Ｒｂ、−ＯＳ（Ｏ）２Ｏ−、−ＯＳ（Ｏ）２ＯＲｂ、−Ｐ（Ｏ）（Ｏ−）２、−Ｐ（Ｏ）（ＯＲｂ）（Ｏ−）、−Ｐ（Ｏ）（ＯＲｂ）（ＯＲｂ）、−Ｃ（Ｏ）Ｒｂ、−Ｃ（Ｓ）Ｒｂ、−Ｃ（ＮＲｂ）Ｒｂ、−Ｃ（Ｏ）ＯＲｂ、−Ｃ（Ｓ）ＯＲｂ、−Ｃ（Ｏ）ＮＲｃＲｃ、−Ｃ（ＮＲｂ）ＮＲｃＲｃ、−ＯＣ（Ｏ）Ｒｂ、−ＯＣ（Ｓ）Ｒｂ、−ＯＣ（Ｏ）ＯＲｂ、−ＯＣ（Ｓ）ＯＲｂ、−ＮＲｂＣ（Ｏ）Ｒｂ、−ＮＲｂＣ（Ｓ）Ｒｂ、−ＮＲｂＣ（Ｏ）ＯＲｂ、−ＮＲｂＣ（Ｓ）ＯＲｂ、−ＮＲｂＣ（Ｏ）ＮＲｃＲｃ、−ＮＲｂＣ（ＮＲｂ）Ｒｂ、および−ＮＲｂＣ（ＮＲｂ）ＮＲｃＲｃ（ここで、Ｒａ、Ｒｂ、およびＲｃは上記で定義した通りである）が挙げられるが、これらに限定されない。
【００４５】
他の特定の基または原子を置換するために有用である、上記のリストからの置換基は、当業者にとって明らかである。
【００４６】
特定の基を置換するために用いられる置換基は、代表的には、上記で特定される種々の基から選択される基と同じ基または異なる基の１つ以上でさらに置換され得る。
【００４７】
「スルファモイル」は、単独でも、または別の置換基の一部分としても、式−Ｓ（Ｏ）２ＮＲ’Ｒ”のラジカルであって、ここでＲ’およびＲ”は、水素、本明細書中で定義されるようなアルキルおよびシクロアルキルからなる群より、互いに独立してそれぞれ選択されるものであるか、あるいは、Ｒ’およびＲ”は、それらが結合している窒素原子と一緒になって、本明細書中で定義されるような五員、六員、または七員のシクロヘテロアルキル環を形成し、ここで、このシクロヘテロアルキル環は必要に応じて、Ｏ、Ｓ、およびＮからなる群より選択される、同じ、または異なるさらなる１〜４個のヘテロ原子を含み得るものをいう。
【００４８】
「カルボキシルエステラーゼ」は、α，β加水分解酵素折り畳み（ｈｙｄｒｏｌａｓｅ  ｆｏｌｄ）で特徴付けられるタンパク質のスーパーファミリーに属する、加水分解酵素のサブクラスをいう（Ｏａｋｅｓｈｏｔｔ，Ｊ．Ｇ．ら、Ｂｉｏｅｓｓａｙ  ２１：１０３１−１０４２（１９９９））。この構造は、種々の長さのアミノ酸配列によって連結される、交互のα−ヘリックスおよびβ−シートを含む。カルボキシルエステラーゼは、多くの化合物（薬物および生体異物を含む）に存在するカルボン酸エステル、アミド、およびチオエステル基の切断を触媒することが公知である。
【００４９】
「アイソザイム」または「イソ酵素」は、ある種または同じ生物体に見出され、そして類似するか、または同一である触媒性質を有する酵素の、異なり、分離可能な形態をいう。アイソザイムは、アミノ酸配列、異なる改変（例えば、タンパク質分解性プロセシング）、等電点、電気泳動度、反応速度パラメーター、抗体との反応性、または調節の様式を含む、化学的性質、物理的性質、または免疫学的性質のバリエーションによって区別され得る。あるアイソザイムの相対的な量は、組織ごとに異なり得、そしてまた、発達の過程の間に変化し得る。さらに、異なるアイソザイムが、その酵素を構成するポリペプチドサブユニットの会合によって生じ得る。アイソザイムは多くの場合アイソフォームであり、これは、異なる遺伝子から産生され、そして異なる組織に特異的であるが、同じ機能および類似した配列を有する、２つ以上の異なるタンパク質の任意の群をいう。
【００５０】
「カルボキシルエステラーゼインヒビター」は、カルボキシルエステラーゼ活性を阻害する、化合物または化合物の混合物をいう。これらは、競合インヒビター、非競合インヒビター、不競合インヒビター、および混合インヒビターの当該分野で公知の定義を含む。阻害は、可逆的であっても不可逆的であってもよい。目的の基質の切断を阻害し得る、他のカルボキシルエステラーゼの基質は、インヒビターの範囲内にある。
【００５１】
「薬学的に受容可能なビヒクル」は、化合物および／またはインヒビター、あるいはそれらの組成物と共に投与される、希釈剤、賦形剤、またはキャリアをいう。
【００５２】
「薬学的効果量」は、例えば、障害状態または疾患状態を処置（障害または疾患の１つ以上の症状の減少または除去、あるいは疾患または状態の予防を含む）するために、所望される生理学的効果を生成するに十分な量、または所望される結果を達成し得る量をいう。
【００５３】
（６．２  ハロアルキルアミド部分を有する化合物の代謝変換）
カルボキシエステラーゼは、種々の長さのペプチドによって連結される交互のα−ヘリックスおよびβ−シートからなるα，β加水分解酵素の折り畳みによって特徴付けられる、タンパク質のスーパーファミリーに属する加水分解酵素のサブクラスである（Ｏａｋｅｓｈｏｔｔ，Ｊ．Ｇ．ら、Ｂｉｏｅｓｓａｙ  ２１：１０３１−１０４２（１９９９））。一般的に、カルボキシルエステラーゼは、種々の化合物に存在するカルボン酸エステル、アミド、およびチオエステル基の切断を触媒する。この酵素は、広い特異性を有し、そして短いアシルグリセロールおよび長いアシルグリセロール、長鎖脂肪アシル−ＣｏＡエステルおよび長鎖脂肪アシル−ＣｏＡチオエステル、アリールエステル、リゾホスファチジルコリン、酢酸エステル、アシルカルニチン、アリールアシルアミド、およびビタミンＡエステルを含む基質に作用することが公知である。カルボキシルエステラーゼはまた、エステル官能基、チオエステル官能基、およびアミド官能基を含む、広範囲の種々の薬物および生体異物の生体内変換に関与する。この生体内変換のための１つの役割は、体からの除去のために、無極性のエステルまたはアミドをより可溶性の代謝産物に変換することであると考えられる。薬物代謝に関与するエステラーゼおよび他の加水分解酵素は、Ｔｅｓｔａ，Ｂ．およびＭａｙｅｒ，Ｊ．Ｍ．、Ｈｙｄｒｏｌｙｓｉｓ  ｉｎ  Ｄｒｕｇ  ａｎｄ  Ｐｒｏｄｒｕｇ  Ｍｅｔａｂｏｌｉｓｍ：Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ，Ｂｉｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ，ａｎｄ  Ｅｎｚｙｍｏｌｏｇｙ、Ｖｅｒｌａｇ  Ｈｅｌｖｅｔｉｃａ  Ｃｈｉｍｉｃａ  Ａｃｔａ、Ｚｕｒｉｃｈ（２００３）（本明細書中でその全体が参考として援用される）に記載される。
【００５４】
カルボキシルエステラーゼは、細菌、酵母、植物、昆虫、鳥類、および哺乳動物を含む多数の生物体で発現される。カルボキシルエステラーゼは低い基質特異性を示し、その結果、いくつかのカルボキシエステラーゼは単一の基質、薬物、または生体異物の生体内変換の原因となり得る。マウス、ラット、ハムスター、モルモット、ウサギ、イヌ、ブタ、牝牛、サル、およびヒトにおいて異なるカルボキシルエステラーゼ形態が同定されており、そして、基質／インヒビター特異性、分子量、等電点、細胞分布、誘導性などのような多数の生化学的基準に基づいて分類されている（Ｓａｔｏｈ，Ｔ．およびＨｏｓｏｋａｗａ，Ｍ．Ａｎｎ．Ｒｅｖ．Ｐｈａｒｍａｃｏｌ．Ｔｏｘｉｃｏｌ．３８：２５７−２８８（１９９８））。
【００５５】
細胞レベルにおいて、カルボキシルエステラーゼは、細胞外環境、ミクロソーム環境、リソソーム環境、および細胞質環境に存在する。ミクロソーム形態は代表的には、カルボキシ末端領域に小胞体残留シグナル（ｅｎｄｏｐｌａｓｍｉｃ  ｒｅｔｅｎｔｉｏｎ  ｓｉｇｎａｌ）を有し、これは酵素を小胞体の内腔側に配置させる。カルボキシルエステラーゼはまた、細胞外流体（例えば血液）に分泌される。これらの分泌形態は、ミクロソーム局在酵素に見出される小胞体残留シグナルを欠失している。これらの酵素の公知の細胞位置および細胞外位置に対応して、多くのカルボキシルエステラーゼタンパク質が、膜挿入および膜局在のためのシグナルペプチド配列を有する。
【００５６】
カルボキシルエステラーゼをコードする核酸は、ラット供給源、ウサギ供給源、マウス供給源、ハムスター供給源、およびヒト供給源から単離されている。推定アミノ酸配列の比較から、これらの酵素が、ＣＥＳ  １、ＣＥＳ  ２、ＣＥＳ  ３、およびＣＥＳ  ４と称される４つの主要な群に含まれることが示される（Ｓａｔｏｈ、前出）。ＣＥＳ  １は３つのサブファミリーに分けられ得、そしてヒトカルボキシルエステラーゼの同定されたアイソフォーム、ならびにイヌ、ウサギ、ラット、およびマウスのカルボキシルエステラーゼの主要な形態を含む。ＣＥＳ  ２は、ウサギの形態２およびハムスターのカルボキシルエステラーゼＡＴ−５７を含む。ＣＥＳ  ３は、マウスのＥＳ−雄性酵素およびＨＵ３カルボキシルエステラーゼを含む。ＣＥＳ  ４は、ヒト、サルの肝臓、およびマウスの肝臓において同定される４６．５ｋＤａのカルボキシルエステラーゼアイソザイムを含む（Ｓａｔｏｈ、前出）。後者のクラスの酵素は、ｈＣＥ−１と最も低い類似性を有し、そしてアリールアミンカルシノーゲンおよび複素環式アミンカルシノーゲンの代謝活性化の原因であると考えられる。
【００５７】
ヒトカルボキシエステラーゼの３つの主要な型であるＨＵ１、ＨＵ２、ＨＵ３は、生化学的および分子的に特徴付けられている。ヒトカルボキシルエステラーゼ−１（ｈＣＥ−１、ＣＥＳ−１、ＨＵ１）は１８０ｋＤの三量体タンパク質であり、コカインのメチルエステルおよびヘロインエステルについて選択性を示す。ヒトカルボキシエステラーゼ−２（ｈＣＥ−２）は６０ｋＤの単量体酵素であり、コカインのベンゾイルエステル、ヘロインの６−アセチル基および３−アセチル基、アセチルサリチル酸、およびオキシブチニンについて選択性を示す（Ｐｉｎｄｅｌ，Ｅ．Ｖ．ら、Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．２７２（２３）：１４７６９−７５（１９９７））。ｈＣＥ−２はまた、４−メチルウンベリフェリルアセテート（非特異的エステラーゼの基質として最初に記載された化合物）についても特異的である（Ｈｕｍｅｒｉｃｋｈｏｕｓｅ，Ｒ．ら、Ｃａｎｃｅｒ  Ｒｅｓ．６０（５）：１１８９−１１９２（２０００））。ｈＣＥ−３は、ヒト脳カルボキシエステラーゼ（ＨＢＲ３）に関し（Ｍｏｒｉ，Ｍ．ら、ＦＥＢＳ  Ｌｅｔｔ．４５８（１）：１７−２２（１９９９））、そして脳および副腎において見出される。
【００５８】
上記に記載される主要な形態に加えて、３．４〜３．６ｋｂのｍＲＮＡとして発現されるカルボキシルエステラーゼが、腸から単離されている。この形態は、肝臓において微量な発現しか示さない（Ｓｃｈｗｅｒ，Ｈ．ら、Ｂｉｏｃｈｅｍ  Ｂｉｏｐｈｙｓ  Ｒｅｓ  Ｃｏｍｍｕｎ．２３３（１）：１１７−１２０（１９９７））。腸自体内では、小腸内でＲＮＡの最も高い発現が見出され、結腸および直腸でのレベルは低下している。小腸自体の中でこのカルボキシルエステラーゼの発現の相違があり、十二指腸および回腸と比べて空腸において最も高い発現が見られる。
【００５９】
種々のヒトカルボキシルエステラーゼアイソザイムは、基質の認識および切断における選択性において、相違を示す。例えば、ｈＣＥ−１およびｈＣＥ−２は両方とも、オピオイド（ｏｐｉｏｄ）エステルであるメペリジン（すなわちデメロール）に結合するが、ｈＣＥ−１のみがこの薬物を対応する酸およびエタノールへと効率的に切断する（Ｚｈａｎｇ，Ｊ．ら、Ｊ．Ｐｈａｒｍ．Ｅｘｐ．Ｔｈｅｒ．２９０（１）：３１４−３１８（１９９９））。基質特異性における著しい相違もまた、パラニトロフェニルアセテートおよびパラニトロフェニルブチレートに対する活性によって示される。ｈＣＥ−１はいずれの基質に対しても優先性を示さず；ｈＣＥ−２はパラニトロフェニルアセテートを優先的に加水分解し；そしてｈＣＥ−３はパラニトロフェニルブチレートを優先的に加水分解する（Ｘｉｅ，Ｍ．ら、Ｄｒｕｇ  Ｍｅｔａｂ．Ｄｉｓｐ．３０（５）；５４１−５４７（２００２））。他と異なる特異性の別の例は、化学治療薬であるイリノテカンの活性化である。ｈＣＥ−２はこのアミドプロドラッグに作用するが、ｈＣＥ−１は、この薬物を活性な形態に変換する上で役に立たない。酵素の特異性におけるこれらの相違はまた、種々のカルボキシルエステラーゼインヒビターに対する感受性においても反映される。例えば、ｈＣＥ−３はフェニルメチルスルホニルフルオリド（ＰＭＳＦ）に対してより高い感受性を有する一方、ＨＣＥ−１およびＨＣＥ−２は感受性がより低い。相対的に、ＨＣＥ−１およびＨＣＥ−３はパラオキソンによる阻害に感受性であるが、ＨＣＥ−２は耐性である（Ｘｉｅら、前出）。
【００６０】
哺乳動物のカルボキシルエステラーゼは肝臓において最も高い発現を示すが、また他の組織（小腸、大腸、精巣、腎臓、心臓、皮膚、筋肉、肺、胃、脳、および血漿を含む）においても存在する。ｈＣＥ−１の発現の研究から、ｈＣＥ−１が単一のｍＲＮＡ種として存在し、その発現レベルが肝臓＞＞心臓＞胃＞精巣＝腎臓＝脾臓＞結腸＞他の組織であることが示されている。ｈＣＥ−２は３つのｍＲＮＡ種として発現される。２ｋｂのｍＲＮＡは、肝臓＞結腸＞小腸＞心臓の順で種々のレベルで発現され、一方３ｋｂのメッセージは肝臓＞小腸＞結腸＞心臓において見出される。４．２ｋｂのメッセージは、脳、精巣、および腎臓においてもっぱら見出される。ｈＣＥ−１に特異的な抗体を用いる研究から、これらのｍＲＮＡレベルに対応するタンパク質レベルが示され、最も高い発現は肝臓で見られ、続いて心臓、前立腺、肺、および回腸である（Ｘｉｅら、前出）。精巣、脾臓、および脳においてタンパク質の弱い発現が検出される。ｈＣＥ−２に特異的な抗体は、この酵素が肝臓、腎臓、および回腸において高く発現される一方、十二指腸および副腎においてより低いレベルの発現が見られることを示す。ｈＣＥ−２のタンパク質レベルは、他の全ての組織では検出されないか、または低いレベルで存在する。ｈＣＥ−３タンパク質は、副腎において最も高いレベルで見出され、そして脳においてより少ない量が見出される（Ｚｈａｎｇ，Ｗ．ら、Ａｐｐｌ．Ｉｍｍｕｎｏｈｉｓｔｏｃｈｅｍ．Ｍｏｌ．Ｍｏｒｐｈｏｌ．１０（４）：３７４−８０（２００２）；Ｘｉｅら、前出）。ｈＣＥ−１は、腎臓を介するクリアランスの主な原因である一方、ｈＣＥ−２は小腸および結腸を介する浄化の原因である主要な経路であると考えられる。ある組織（例えば腎臓、副腎、および回腸）は、３つのアイソザイム全てを発現し得る。肝臓はカルボキシルエステラーゼの活性を最も高いレベルで含むが、ｈＣＥ−３を発現しない。
【００６１】
今や、加水分解酵素、特にカルボキシルエステラーゼが、ハロアルキルアミド部分を含む化合物に作用することが示されている。ハロアルキルアミド部分の例示的な実施形態は、ｇｅｍ−ジクロロアセトアミド部分である。この代謝の変換は、置換されたジフェニル基または置換されたピリジル基を含む五員環を有する抗ウイルス化合物のクラスについて例示され、この置換基の１つはｇｅｍ−ジハロアセトアミド基である。加水分解酵素は、ジハロアセトアミド基を除去することで、この抗ウイルス化合物を対応するアニリン代謝産物に変換するようである。この代謝産物は生物学的に不活性なので、加水分解酵素活性の存在が、これらの抗ウイルス化合物の、処置される宿主内における吸着、バイオアベイラビリティー、および組織送達を制限する。これらの抗ＨＣＶ化合物の吸収および組織送達が、これらの抗ウイルス化合物を加水分解酵素による代謝から保護することによって高められ得ることが、本明細書中でさらに示される。このことは、この加水分解酵素による代謝からこの化合物を保護する加水分解酵素インヒビターおよび／または処方物の使用のような、種々の組成物および方法によって達成され得る。
【００６２】
加水分解酵素の基質として役立つ抗ＨＣＶ化合物の例示的なクラスは、ある構造的な類似性を共有し、そして一般的に３つの主要な特色によって特徴付けられる：（ｉ）置換された六員の芳香族「Ａ」環；（ｉｉ）置換されたかまたは置換されていない、五員の、飽和「Ｂ」環、不飽和「Ｂ」環、または芳香族「Ｂ」環；ならびに（ｉｉｉ）置換された六員の芳香族「Ｃ」環。これらの抗ウイルス化合物は、式（Ｉ）の一般構造を有する。
【００６３】
【化４】
2007514763.tif 000002
この形式における「Ａ」環、「Ｂ」環、および「Ｃ」環の描写は、単に図式する目的のためのみであり、これらの環のいずれかにおけるヘテロ原子の使用を排除する意図はない。実際、多くの実施形態において、「Ａ」環および「Ｃ」環の内の一方または両方は窒素ヘテロ原子を含み、そして「Ｂ」環はＮ（またはＮＨ）、Ｏ、およびＳから選択される、同じヘテロ原子または異なるヘテロ原子を１〜４個含む。
【００６４】
これらの化合物の多くにおいて、「Ｃ」環はメタ位（３”または５”）において式−ＮＲ１１Ｃ（Ｏ）Ｒ１２の置換基で置換され、ここでＲ１１は水素、メチル、または他のアルキルであり、そしてＲ１２は置換されたアルキル、ハロアルキル、ジハロメチル、ジクロロメチル、シクロヘテロアルキル、または置換されたシクロヘテロアルキルである。いくつかの実施形態において、Ｒ１１はハロアルキルであるか、またはジクロロメチル基である。特定の実施形態において、Ｒ１１は水素であり、そしてＲ１２はジクロロメチルである。カルボキシルエステラーゼによって作用される部分であるのは、ハロアルキルアミド基である。「Ｃ」環はまた、必要に応じて１つ以上の２”位、４”位、５”位、および／または６”位において、同じハロ基または異なるハロ基で置換され得る。
【００６５】
「Ａ」環は、オルト位（２”位または６”位）に位置する少なくとも１つの置換基を含み、そして必要に応じて、他の環の位置に位置する同じ置換基または異なる置換基を１つ以上含み得る。これらの置換基の性質は広く変化し得、そしてハロ基、フルオロ基、クロロ基、アルキル基、アルキルチオ基、アルコキシ基、アルコキシカルボニル基、アリールアルキルオキシカルボニル基、アリールオキシカルボニル基、シクロヘテロアルキル基、カルバモイル基、ハロアルキル基、ジアルキルアミノ基、またはスルファモイル基、およびそれらの置換されたバージョンが挙げられる。いくつかの実施形態において、「Ａ」環は２”位および６”位において同じ置換基または異なる置換基を持ち、そして３”位、４”位、および５”位において置換されない。
【００６６】
ＨＣＶ阻害性化合物の例示的な実施形態としては、「Ａ」環および「Ｃ」環の両方が、置換されたフェニル基である化合物、「Ａ」環および「Ｃ」環の内の一方または両方がピリジル基（例えば、ピリド−２−イル基）である化合物、および「Ｂ」環が、Ｎ、ＮＨ、Ｏ、およびＳから選択される同じヘテロ原子またはヘテロ原子基、あるいは異なるヘテロ原子またはヘテロ原子基を１つ、２つ、または３つ含む芳香族環である化合物が挙げられる。
【００６７】
「Ｂ」環の個性は広く異なり得る。いくつかの実施形態において、「Ｂ」環はイソキサゾリル、ピラゾリル、オキサジアゾリル、オキサゾリル、チアゾリル、イミダゾリル、トリアゾリル、チアジアゾリル、および水素異性体から選択される複素環式環である。適切な水素異性体としては、言及した環のジヒドロ異性体およびテトラヒドロ異性体が挙げられるが、これらに限定されない。このような水素異性体の特定の例としては、例えば、２−イソキサゾリニル、３−イソキサゾリニル、４−イソキサゾリニル、イソキサゾリジニル、１，２−ピラゾリニル、１，２−ピラゾリジニル、（３Ｈ）−ジヒドロ−１，２，４−オキサジアゾリル、（５Ｈ）−ジヒドロ−１，２，４−オキサジアゾリル、オキサゾリニル、オキサゾリジニル、（３Ｈ）−ジヒドロチアゾリル、（５Ｈ）−ジヒドロチアゾリル、チアゾリジニル（テトラヒドロチアゾリル）、（３Ｈ）−ジヒドロトリアゾリル、（５Ｈ）−ジヒドロトリアゾリル、トリアゾリジニル（テトラヒドロトリアゾリル）、ジヒドロ−オキサジアゾリル、テトラヒドロ−オキサジアゾリル、（３Ｈ）−ジヒドロ−１，２，４−チアジアゾリル、（５Ｈ）−ジヒドロ−１，２，４−チアジアゾリル、１，２，４−チアジアゾリジニル（テトラヒドロチアジアゾリル）、（３Ｈ）−ジヒドロイミダゾリル、（５Ｈ）−ジヒドロイミダゾリル、およびテトラヒドロイミダゾリルが挙げられる。
【００６８】
上記の構造式（Ｉ）の化合物（その種々のプロドラッグ、溶媒和物、酸化物、および塩を含む）、およびこれらの化合物の特定の種、ならびにそれらの合成方法のこれらの例示的な実施形態が、以下の同時係属出願に記載される：米国特許出願公開第２００４０１２７４９７号（出願番号第１０／６４６，３４８号）；米国特許出願公開第２００３／０１６５５６１号（出願番号第１０／２８６，０１７号）；２００３年５月２日出願の米国特許出願番号第６０／４６７，６５０号；２００３年５月２日出願の米国特許出願番号第６０／４６７，８１１号；ＷＯ  ０３／０４０１１２（ＰＣＴ／ＵＳ０２／３５１３１）；２００３年５月２日出願の米国特許出願番号第６０／４６７，６５０号；２００４年４月３０日出願のＰＣＴ／ＵＳ２００４／０１３４５２；２００４年５月３日出願の米国特許出願番号第１０／８３８，１３３号；米国特許出願公開第２００４／０１４２９８５号（出願番号第１０／４４０，３４９号）；およびＷＯ２００４／０１８４６３（ＰＣＴ／ＵＳ０３／０２６４７８）。抗ＨＣＶ化合物の例示的な実施形態は、ＰＣＴ／ＵＳ２００４／０１５６６５に具体的に開示される（第２６頁を参照のこと）。これらの出願のそれぞれの開示は、本明細書中でその全体が参考として援用される。本願の例示的な実施形態の全ては、上記の参考文献に記載された化合物のクラスに含まれる。
【００６９】
これらの構成および使用方法の原理および特徴が、構造式（ＩＩ）の例示的なハロアルキルアミド置換されたジフェニル複素環、および構造式（ＩＩＩ）の例示的なハロアルキルアミド置換されたピリジル複素環について記載される。
【００７０】
【化５】
2007514763.tif 000003
構造式（ＩＩ）および構造式（ＩＩＩ）の化合物は、ジクロロアセトアミド基の加水分解によって、対応するアニリン代謝産物（図１、構造式（ＩＶ）および構造式（Ｖ）を参照のこと）に変換される。これらの特定の化合物のジクロロアセトアミド基をカルボキシルエステラーゼによる代謝から保護することは、これらの化合物のバイオアベイラビリティーおよび組織送達を高めるようである。この知見は、加水分解酵素による不活化からハロアルキルアミド基を含む抗ウイルス化合物を保護することによる、ハロアルキルアミド基を含む抗ウイルス化合物の治療有効性を高めるための基礎を提供する。
【００７１】
したがって、本開示は、加水分解酵素（例えばカルボキシルエステラーゼ）による代謝からハロアルキルアミド部分を含む化合物を保護する、組成物および方法を提供する。保護されるべき例示的なハロアルキルアミド部分は、ｇｅｍ−ジクロロアセトアミド部分である。
【００７２】
いくつかの実施形態において、ハロアルキルアミド部分を含む化合物は構造式（Ｉ）の抗ＨＣＶ化合物であり、ここで：
「Ａ」環は置換されたフェニルまたは置換されたピリジルを含み；
「Ｂ」環は飽和五員環、不飽和五員環、または芳香族五員環を含み、この飽和五員環、不飽和五員環、または芳香族五員環は、必要に応じてＸ位、Ｙ位、およびＺ位の１つ以上においてヘテロ原子を含み、それぞれのヘテロ原子は、ＮＨ、Ｎ、Ｏ、およびＳから独立して選択され、ただし、ＸおよびＹは両方ともＯではなく；
「Ｃ」環はフェニルまたはピリジルを含み、このフェニルまたはピリジルは３”位または５”位が式−ＮＲ１１Ｃ（Ｏ）Ｒ１２のハロアルキルアミド部分で置換されており、ここでＲ１１は水素またはアルキルであり、そしてＲ１２はハロアルキル、ジハロメチル、またはジクロロメチルであり、Ｒ１１およびＲ１２は、必要に応じて、上記に記載された同じかまたは異なる、さらなる図示されない置換基の１つ以上を含み得る。
【００７３】
抗ウイルス化合物のいくつかの実施形態において、「Ａ」環および「Ｃ」環はフェニルであるか、または「Ａ」環および「Ｃ」環の内の一方もしくは両方がピリジルである。特定の目的の抗ウイルス化合物は、Ｒ１１が水素であり、そしてＲ１２がジクロロメチルであるものである。組成物における使用のための例示的な抗ウイルス化合物は、化合物ＩＩおよび化合物ＩＩＩである。
【００７４】
当業者によって認められるように、種々の実施形態がハロアルキルアミド部分を有する抗ＨＣＶ化合物に関して示されるが、このハロアルキルアミド部分を含む他の化合物（例えばジクロロアセトアミド）が、本開示の組成物および方法を使用して不活化から保護される。
【００７５】
加水分解酵素（例えばカルボキシルエステラーゼ）による代謝変換から化合物を保護するための組成物および方法は、多数の異なるアプローチに依存し得る。いくつかの実施形態において、これらの組成物および方法は、ハロアルキルアミド含有化合物の代謝の原因である酵素の活性を阻害することに基づき得る。したがって、本開示は、抗ＨＣＶ化合物およびカルボキシルエステラーゼインヒビターの組成物、ならびにこれらのカルボキシルエステラーゼを使用して不活化からこの化合物を保護する方法を提供する。
【００７６】
他の実施形態において、加水分解からハロアルキルアミド化合物を保護するための組成物および方法は、加水分解酵素との接触を避けるかまたは減少させるようにこの化合物を処方することを包含する。経口的に投与される化合物について、このことは、カルボキシルエステラーゼ活性が胃と比較してより低くあり得る小腸または大腸において放出されるようにこの化合物を処方することによってなされ得る。さらに、この化合物を含む微粒子の小腸による直接的な取り込みが、カルボキシルエステラーゼ活性の領域を回避させ得る。したがって、ある実施形態において、以下にさらに記載されるように、本開示は経口投与される徐放性／遅延放出性微粒子として処方される化合物の組成物に関し、例示的な実施形態は腸溶性ポリマー内にてマイクロカプセルに封入された化合物に関する。
【００７７】
（６．３  加水分解酵素インヒビター）
ハロアルキルアミド基を代謝されることから保護するために酵素インヒビターが用いられる実施形態について、種々のカルボキシルエステラーゼインヒビターが上記の化合物と、独立してかまたは組み合わせてのいずれかで（例えば、組成物にて）用いられ得る。さらに、カルボキシルエステラーゼ酵素およびカルボキシルエステラーゼインヒビターについて以下の記載が与えられるが、上記の化合物を代謝するために作用する他の加水分解酵素（他のエステラーゼを含む）が、当該分野で公知である酵素インヒビターを用いて同様に標的にされ得ることが理解されるべきである。したがって、有用なインヒビターは「抗ＨＣＶ化合物加水分解酵素インヒビター」であり、これは構造式（Ｉ）の化合物上のハロアルキルアミド部分の加水分解を阻害する化合物をいう。
【００７８】
いくつかの実施形態において、上記のカルボキシルエステラーゼインヒビターはＮａＦであり、これは抗ＨＣＶ化合物に作用するカルボキシルエステラーゼに対する阻害活性が示されている一般的なエステラーゼインヒビターである。ＮａＦフルオリドはエステラーゼの活性部位に競合的な様式で作用すると考えられる（Ｈａｕｇｅｎ，Ｄ．Ａ．およびＳｕｔｔｅｒ，Ｊ．Ｗ．、Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．２４９（９）：２７２３−２７３１（１９７４）；Ｄｕｌａｃ，Ｒ．Ｗ．およびＹａｎｇ，Ｔ．Ｊ．、Ｅｘｐ．Ｈｅｍａｔｏｌ．１９：５９−６２（１９９１））。毒性のためにインビボでの適用は制限されるが、インビトロでの（例えば、血液サンプル、細胞培養物、および細胞抽出物での）酵素活性の阻害にＮａＦは有用である。
【００７９】
他の実施形態において、上記のカルボキシルエステラーゼインヒビターはトリフルオロメチルケトン（ＴＦＫ）およびその誘導体である（Ｗｈｅｅｌｏｃｋ，Ｃ．Ｅ．ら、Ｊ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．４５：５５７６−５５９３（２００２）；Ｚｈａｎｇ，Ｊ−Ｇ．およびＦａｒｉｓｓ，Ｍ．Ｗ．、Ｂｉｏｃｈｅｍ．Ｐｈａｒｍ．６３：７５１−７５４（２００２）；刊行物は本明細書中で参考として援用される）。理論にとらわれることなく、これらのインヒビターは、酵素触媒残基によるＴＦＫのカルボニル炭素への求核攻撃を介して四面体の中間体を形成することによって、遷移状態アナログとして作用すると考えられる。この四面体の複合体は切断に対し安定であり、そして酵素に強固に結合し続ける。ＴＦＫの種々の誘導体が当該分野で公知である。カルボニルに対するβ原子に改変を有する例示的なＴＦＫインヒビターは、Ｈａｍｍｏｃｋ，Ｂ．Ｄ．ら、Ｐｅｓｔｉｃ．Ｂｉｏｃｈｅｍ．Ｐｈｙｓｉｏｌ．１７：７６−８８（１９８２）、ならびにＡｓｈｏｕｒ，Ｍ．およびＨａｍｍｏｃｋ，Ｂ．Ｄ．、Ｂｉｏｃｈｅｍ．Ｐｈａｒｍａｃ．３６：１８６９−１８７９（１９８７）に記載され；α原子における不飽和に関与する改変は、Ｌｉｎｄｅｒｍａｎ，Ｒ．Ｊ．ら、Ｐｅｓｔｉｃ．Ｂｉｏｃｈｅｍ．Ｐｈｙｓｉｏｌ．３５：２９１−２９９（１９８９）に記載され；α原子およびγ原子におけるアルキル置換は、Ｌｉｎｄｅｒｍａｎ，Ｒ．Ｊ．ら、Ｐｅｓｔｉｃ．Ｂｉｏｃｈｅｍ．Ｐｈｙｓｉｏｌ．２９：２６６−２７７（１９８７）に記載され；そしてエーテル誘導体はＷｈｅｅｌｏｃｋ、前出に記載される。ＴＦＫに類似するインヒビターとしては、クロロジフルオロアセトアルデヒド、およびチオエステル（例えばアルキルチオアセトチオエート）が挙げられるが、これらに限定されない（Ｈｕａｎｇ，Ｔ．Ｌ．ら、Ｐｈａｒｍ．Ｒｅｓ．１３（１０）：１４９５−１５００（１９９６）、本明細書中で参考として援用される）。
【００８０】
さらなる実施形態において、上記のカルボキシルエステラーゼインヒビターは、有機ホスフェートおよびその誘導体であり得る。トリフルオロメチルケトンベースのインヒビターと同様に、有機リンインヒビターは、酵素触媒残基によるリン原子への求核攻撃によって四面体の中間体が形成される、遷移状態アナログとして作用すると考えられる。この酵素複合体化ホスフェートエステルは、極めてゆっくり加水分解し、それによって、さらなる触媒活性を阻害する。例示的な有機リン（ｏｒｇａｎｏｐｈｏｓｐｈｏｒｏｕｓ）エステラーゼインヒビターとしては、フェニルメチルスルホニルフルオリド（ＰＭＳＦ）；ジイソプロピルホスホロフルオリデート（ＤＳＦ）；サリン；パラチオン；テトラコロビンホス（ｔｅｔｒａｃｈｏｒｏｖｉｎｐｈｏｓ）（ＴＣＶＰ）；トリ−オルトクレシルホスフェート；フェニルフェニルホスホノチオエート（例えばレプトホス）；ビス−ｐ−ニトロフェニルホスフェート（ＢＮＰＰ）；ホスホリン化合物（例えば、Ｂｏｍｉｎ−２（２−アルコキシ−２−オキソ−３−Ｈ−１，４，２−ベンゾジオキサホスホリン）およびＢｏｍｉｎ−３（２−アルコキシ−２−オキソ−３−Ｈ−１，４，２−ベンゾジオキサホスホリン））；およびジエチルｐ−ニトロフェニルホスフェートが挙げられるが、これらに限定されない。薬学的組成物における使用のために、脳コリンエステラーゼ（例えばアセチルコリンエステラーゼ）に対して有意な毒性阻害活性を有さない有機リンインヒビターが選択される。
【００８１】
いくつかの実施形態において、上記のカルボキシエステラーゼインヒビターは複素環式化合物であるアクリジンに基づく（Ｂｅｎｃｈａｒｉｔ，Ｓ．ら、Ｃｈｅｍ．Ｂｉｏｌ．１０：３４１−３４９（２００３）；本明細書中で参考として援用される）。ｈＣＥ−１酵素とカルボキシルエステラーゼインヒビターである９−アミノアクリジン（タクリン）の共結晶の構造分析から、このインヒビターは、無差別な基質結合部位に種々の配向で結合することが示される（Ｂｅｎｃｈａｒｉｔ、前出）。触媒部位における大きな結合ポケットは、ある範囲の基質に適応し得、そして複数の配向性で相互作用し得、このことは異なる基質のこの酵素への結合を高める。上記の組成物および方法において有用な例示的なアクリジン型のインヒビターとしては、アミノアクリジン（例えば９−アミノアクリジン）、およびヒトカルボキシルエステラーゼについて選択的な誘導体（例えば、６，９−ジアミノ−２−エトキシアクリジンおよび９−アミノ−６−クロロ−２−メトキシアクリジン、両方ともｈＣＥ−１について選択的である（Ｂｅｎｃｈａｒｉｔ、前出））が挙げられる。
【００８２】
上記の組成物および方法において有用な他の型のカルボキシルエステラーゼインヒビターとしては、テトラエチルチオペルオキシジカルボニックジアミド（ジスルフィラム）ならびにノルジヒドログアイアレチン酸（ｎｏｎｄｉｈｙｄｒｏｇｕａｉａｒｅｔｉｃ  ａｃｉｄ）（ＮＧＤＡ）およびその誘導体（例えば、ヘミノルジヒドログアイアレチン酸（ｈｅｍｉｎｏｒｄｉｈｙｄｒｏｇｕａｉａｒｅｔｉｃ  ａｃｉｄ）（ＨＮＤＧＡ）およびノルイソグアヤシン（ｎｏｒｉｓｏｇｕａｉａｃｉｎ））が挙げられるが、これらに限定されない（Ｓｃｈｅｇｇ，Ｋ．Ｍ．およびＷｅｌｃｈ，Ｗ．、Ｂｉｏｃｈｅｍ．Ｂｉｏｐｈｙｓ．Ａｃｔａ  ７８８：１６７−１８０（１９８４））。ジスルフィラムはアルコールデヒドロゲナーゼのインヒビターとして公知であり、血漿エステラーゼおよびミクロソームエステラーゼの両方を阻害するようである。ＮＧＤＡはまた、おそらくその分子の可撓性およびその両親媒性の特性に起因して（これらは組み合わさって多数の型のカルボキシルエステラーゼの結合部位との相互作用を可能にする）、カルボキシルエステラーゼについて広い特異性を有する。
【００８３】
カルボキシルエステラーゼインヒビターの他の実施形態はエステルおよびエステル混合物であり、これらは、例えば腸のカルボキシルエステラーゼによって果たされる薬物の経口送達のための添加物として経口投与される場合、腸においてカルボキシルエステラーゼの基質として競合するようである（ｖａｎ  Ｇｅｌｄｅｒ，Ｊ．ら、Ｐｈａｒｍ．Ｒｅｓ．１６（７）：１０３５−１０４０（１９９９）；ｖａｎ  Ｇｅｌｄｅｒ，Ｊ．ら、Ｄｒｕｇ  Ｍｅｔａｂ．Ｄｉｓｐ．３０（８）：９２４−９３０（２００２）；ＴｅｓｔａおよびＭａｙｅｒ、前出；刊行物は本明細書中で参考として援用される）。エステル、またはエステル基質の不均一コレクションを用いることで、生体内変換を減少させるのに十分に、カルボキシルエステラーゼ活性を阻害することが可能である。エステルおよび混合エステルの天然の供給源としては、果実および野菜（例えば、イチゴ、アンズ、およびバナナ）に由来するものが挙げられるが、これらに限定されない。天然のエステルに類似する、合成によって産生される混合エステルまたは別個のエステルが、効率的な基質として役立ち得る（ｖａｎ  Ｇｅｌｄｅｒ，Ｊ．ら、Ｄｒｕｇ  Ｍｅｔａｂｏｌｉｓｍ  Ｄｉｓｐ．３０（８）：９２４−９３０（２００２）；本明細書中で参考として援用される）。
【００８４】
当業者によって理解されるように、本明細書中に記載される抗ＨＣＶ化合物の切断を阻害する、他のカルボキシルエステラーゼ基質またはカルボキシルエステラーゼ基質模倣物が、インヒビターとして用いられ得る。これらは、カルボキシル基、エステル基、およびアミド基を有する化合物を含む。このような例示的な化合物としては、例示であって限定ではないが、フィゾスチグミン（エセリン）；スルホンアミドおよび有機アミド；ならびにカルボキシルエステラーゼ−１の選択的インヒビターであるＦＲ１８２８７７が挙げられる。スルホンアミドはパラ−アミノベンゼンスルホンアミドの誘導体であり、そして、スルファジアジン、スルファメトキサゾール（ｓｕｆａｍｅｔｈｏｘａｚｏｌｅ）、スルファオキサゾール、スルファアセトアミド、およびパラ−アミノ安息香酸が挙げられるが、これらに限定されない。カルボキシルエステラーゼによって代謝される他の任意の薬物（例えばエステルおよびエステルプロドラッグ）はまた、Ｔｅｓｔａ、前出、およびＳａｔｏｈ，Ｔ．ら、Ｄｒｕｇ  Ｍｅｔａｂ．Ｄｉｓｐｏｓ．３０（５）：４８８−４９３（２００２）（本明細書中で参考として援用される）に記載されるように、カルボキシルエステラーゼのインヒビターとして用いられ得る。
【００８５】
本明細書中に記載される組成物および方法において、複数のカルボキシルエステラーゼを阻害するために、広範囲のカルボキシルエステラーゼインヒビターが、抗ＨＣＶ化合物と共に用いられ得る。比較的一般的なインヒビターの使用は、抗ＨＣＶ化合物に関して部分的に一致する活性を有するカルボキシルエステラーゼを阻害するために、単一のインヒビターの使用を可能とする。この型の適切なインヒビターとしては、ＮａＦ、９−アミノアクリジン、およびジイソプロピルフルオリド化合物が挙げられる。
【００８６】
他の実施形態において、用いられるインヒビターは、カルボキシルエステラーゼの１つの型または１つのクラスに比較的特異的である。高い程度の特異性を有するインヒビターは、特定のカルボキシルエステラーゼアイソザイムを阻害するために有用である。異なるエステラーゼ基質に対する種々のＫｍ、およびエステラーゼインヒビターに対する異なる感受性に見られるように、カルボキシルエステラーゼがその広い特異性にもかかわらず基質認識において選択性を示すことが公知である（Ｓａｔｏｈ、前出）。ヒトカルボキシエステラーゼについて、ｈＣＥ−１はラクトン化合物であるＦＲ１８２８７７による阻害に比較的感受性が高い一方、ｈＣＥ２は有機リン化合物であるパラオキソンによる阻害（ｉｎｈｉｂｉｔｏｒ）に比較的感受性が高い。本明細書中に記載される抗ＨＣＶ化合物は、特定のカルボキシルエステラーゼアイソザイムによって優先的に代謝され得るので、上記の組成物および方法は、ヒトカルボキシエステラーゼアイソザイムを含むカルボキシルエステラーゼアイソザイムに対して選択的なインヒビターの使用を提供する。いくつかの実施形態において、これらはＨＵ１、ＨＵ２、またはＨＵ３に対して特異的なインヒビターを含む。
【００８７】
抗ＨＣＶ化合物の生体内変換が、異なる組織におけるカルボキシルエステラーゼ活性の作用を介して起きることを考慮すると、カルボキシルエステラーゼインヒビターは、特定の組織に存在する酵素活性を阻害するために用いられ得、これらの特定の組織としては、肝臓、小腸、大腸、および血液が挙げられるが、これらに限定されない。このことは、特定の組織に存在するカルボキシルエステラーゼに比較的特異的なインヒビターの選択（表Ｉを参照のこと）を介して達成されても、標的組織へのインヒビターの優先的な送達に十分である様式（例えば、静脈内、経口、直腸など）でのインヒビターの投与（Ｓａｔｏｈ，Ｔ．ら、Ｄｒｕｇ  Ｍｅｔａｂ．Ｄｉｓｐｏｓ．３０（５）：４８８−４９３（２００２））を介して達成されてもよい。
【表Ｉ】
2007514763.tif 000004
【００８８】
以下にさらに詳細に記載されるように、標的とされる組織は、抗ＨＣＶ化合物の投与の様式、および生体内変換の原因となるカルボキシルエステラーゼを含む組織によって決定される。例えば、腸のカルボキシルエステラーゼに特異的なインヒビターは、腸管上皮を通って門脈へ通過する間の分解を防ぐことにより、上記の抗ＨＣＶ化合物の経口吸収および肝臓曝露を潜在的に増加させる。血漿エステラーゼおよび血液エステラーゼの特異的インヒビターは、循環系に存在する化合物を安定させ、このことにより、抗ＨＣＶ治療の標的器官である肝臓への薬物の曝露を増加させ得る（Ｘｉｅら、前出；Ｓａｔｏｈ，Ｔ．ら、Ｄｒｕｇ  Ｍｅｔａｂ．Ｄｉｓｐｏｓ．３０（５）：４８８−４９３（２００２）；およびその中に含まれる参考文献）。
【００８９】
肝臓カルボキシルエステラーゼに特異的なインヒビターの使用はまた、薬物への肝臓曝露および全身的曝露を潜在的に増加させる。結腸におけるカルボキシルエステラーゼは低レベルであるので、結腸投与は抗ＨＣＶ化合物の腸内吸収を高めるはずであり、そして、結腸循環のごく一部しか門脈に向かわないので、肝臓における初回通過効果を減少させた。
【００９０】
本明細書中に開示される組成物および方法において、複数のカルボキシルエステラーゼ活性を阻害するための一般的なインヒビターのような、単一のインヒビター化合物が用いられ得る。別の実施形態において、特定のカルボキシルエステラーゼアイソザイムに優先的に作用する、単一の比較的特異的なインヒビターが用いられる。いくつかの実施形態において、複数のカルボキシルエステラーゼ（ｃａｒｂｏｘｙｌｅｓｔｅｒａｅ）インヒビターが用いられ得る。組み合わせは、（例えば、単一の広範囲のインヒビターによって阻害されないかもしれない、多数のカルボキシルエステラーゼを標的とする）異なる一般的なインヒビター；（例えば、いくつかエステラーゼが抗ＨＣＶ化合物に作用するが、あるアイソザイムが切断反応において優勢である場合）一般的なインヒビターと特異的なインヒビターとの組み合わせ；および（例えば、特定のカルボキシルエステラーゼアイソザイムを標的とする）特異的なインヒビターの組み合わせを含む。
【００９１】
あるカルボキシルエステラーゼインヒビターの適切さは、本明細書中に記載される手引きによって、および当該分野で周知の方法によって確認され得る。１つの実施形態において、インビトロ系が用いられ得る。例えば、体液（例えば血液）、組織ホモジネート、または組織（例えば肝臓、腸など）由来のミクロソーム調製物を、種々の濃度のインヒビターの存在下または非存在下において、上記の抗ＨＣＶ化合物と接触させる。基質濃度の減少および／または代謝産物（例えばアニリン代謝産物）の蓄積が、例示であって限定しないが、ＬＣ／ＭＳ／ＭＳ、ＧＣ／ＭＳおよび／またはＨＰＬＣを含む技術によって測定される。これらの最初の決定は、抗ＨＣＶ化合物の生体内変換に影響するに十分なカルボキシルエステラーゼインヒビターのＩＣ５０を提供し得る。さらに、精製されたカルボキシルエステラーゼ酵素、ｃＤＮＡ発現された酵素、クローン化されたカルボキシルエステラーゼ遺伝子でトランスフェクトされた細胞などの使用が、生体内変換を担う特定の酵素を同定するために用いられ得る。
【００９２】
インヒビターの有効性が、細胞、組織、器官培養系、または器官灌流法の使用によってさらに試験され得る（例えば、Ｇｅｂｈａｒｄｔ，Ｒ．ら、Ｄｒｕｇ  Ｍｅｔａｂ．Ｒｅｖ．３５（２−３）：１４５−２１３（２００３）；Ｃｈｏｗ，Ｆ．Ｓ．ら、Ｄｒｕｇ  Ｍｅｔａｂ．Ｄｉｓｐｏｓ．２５（５）：６１０−６（１９９７）；Ｏｇａｗａｒａ，Ｋ．ら、Ｊ．Ｄｒｕｇ  Ｔａｒｇｅｔ．；６（５）：３４９−６０（１９９９）を参照のこと）。細胞培養系について、この細胞は、インヒビターの送達の標的とされる器官（例えば肝臓または腸）に由来し得る（例えば、Ｇｅｂｈａｒｄｔ、前出；Ｔａｖｅｌｉｎ，Ｓ．、Ｊ．Ｐｈａｒｍａｃｏｌ．Ｅｘｐ．Ｔｈｅｒ．２９０（３）：１２１２−２１（１９９９）を参照のこと）。
【００９３】
最後に、カルボキシルエステラーゼインヒビターのインビボでの有効性が、様々な適切な実験生物体（例えば、哺乳動物生物体（げっ歯類（例えば、マウスおよびラット）；ウサギ目；有蹄類；および霊長類（例えば、サル、チンパンジーなど）が挙げられるが、これらに限定されない））において試験され得る。
【００９４】
一般に、活性な阻害性化合物は、特定のアッセイにおいて約１ｍＭ以下の範囲におけるＩＣ５０（例えば、抗ＨＣＶ化合物の代謝変換において５０％の減少を生じるインヒビター濃度）を示すものである。例えば約５００μＭ、約１００μＭ、約１０μＭ、約５μＭ、約１μＭ、約１００ｎＭ、約１０ｎＭ、約１ｎＭ、またはなおより低い範囲のＩＣ５０を示すカルボキシルエステラーゼインヒビターは、抗ＨＣＶ化合物と組み合わせた治療剤として有用である。一般に、５μＭ以下のインヒビターの血漿濃度は、インビボ適用のために妥当なＩＣ５０である。
【００９５】
カルボキシルエステラーゼインヒビターの適切さを確認する方法に加えて、本開示はさらに、他のインヒビター化合物を同定する、抗ＨＣＶ加水分解酵素インヒビターを同定する方法を提供する。いくつかの実施形態において、この方法は、抗ＨＣＶ加水分解酵素を含む系を候補化合物と接触させる工程、およびこの候補化合物がこの化合物の加水分解を阻害するか否かを決定する工程を包含する。抗ＨＣＶ加水分解酵素を含む系は、上記のインビトロ系およびインビボ系のいずれかを含む。
【００９６】
基質濃度の変化および代謝産物の出現は、記載される方法を用いて検出される。候補化合物は有機低分子から大きなポリマーおよび生体高分子までの範囲であり得、そして、例示であって限定ではないが、有機低分子化合物、糖、炭水化物、多糖、レクチン、ペプチドおよびそのアナログ、ポリペプチド、タンパク質、抗体、オリゴヌクレオチド、ポリヌクレオチド、核酸などが挙げられ得る。１つの実施形態において、スクリーニングされる候補化合物は、約１００〜２５００ダルトンの範囲の分子量を有する有機低分子である。このような候補分子は多くの場合、炭素原子または炭素原子と１つ以上のヘテロ原子との混合物から構成される環状（ｃｙｃｌｉｃａｌ）構造、ならびに／あるいは、芳香族構造、多芳香族構造、ヘテロ芳香族構造および／または多芳香族構造を含む。この候補因子は、広範囲の官能基置換基を含み得る。１つの実施形態において、この置換基は、タンパク質と相互作用することが公知である置換基（例えば、アミン基、カルボニル基、ヒドロキシル基、およびカルボキシル基）の群から独立して選択される。
【００９７】
スクリーニングのための、化合物（例えば、有機低分子化合物、ペプチドおよび／またはペプチドアナログ）のライブラリーを合成するために、種々の当該分野で公知のアプローチが用いられ得る。有機低分子化合物および他の化合物の組み合わせライブラリーを合成するために有用な、固相の化学合成ストラテジーおよび条件ならびに溶液相の化学合成ストラテジーおよび条件の限定しない例は、Ｂｕｎｉｎ、Ｔｈｅ  Ｃｏｍｂｉｎａｔｏｒｉａｌ  Ｉｎｄｅｘ、Ａｃａｄｅｍｉｃ  Ｐｒｅｓｓ、Ｌｏｎｄｏｎ、Ｅｎｇｌａｎｄ（１９９８）（例えば、第１章〜第６章を参照のこと）、およびＨｅｒｍｋｅｎｓら、Ｔｅｔｒａｈｅｄｒｏｎ  ５２：４５２７−４５５４（１９９６）；ＷＯ  ９５／０２５６６；米国特許第５，９６２，７３６号；米国特許第５，７６６，４８１号；米国特許第５，７３６，４１２号、および米国特許第５，７１２，１７１号、ならびにそれらに引用される参考文献（これらの開示は本明細書中で参考として援用される）に見出され得る。
【００９８】
（６．４  抗ＨＣＶ化合物の徐放性／遅延放出性薬学的組成物）
上記のように、ハロアルキルアミド部分を有する化合物を代謝変換から保護するための別の基礎は、加水分解酵素活性へのこの化合物の曝露を限定する組成物としてこの化合物を処方することである。上記で着目されるように、抗ＨＣＶ化合物の生体内変換の原因であり得るカルボキシルエステラーゼ活性は、小腸または大腸と比較して胃においてより高い。カルボキシルエステラーゼ活性の相違はまた、小腸自体の中でも見出され、回腸（小腸の最後の区分）はより低いｈＣＥ−１レベルを示し、一方、十二指腸（小腸の最初の部分を形成し、そして胃を空腸（小腸の中央部分）につなげる中空の連結管）はより低いｈＣＥ−２活性レベルを示す。この識別的発現はまた、上記のように、Ｓｃｈｗｅｒ，Ｈら、Ｂｉｏｃｈｅｍ  Ｂｉｏｐｈｙｓ  Ｒｅｓ  Ｃｏｍｍｕｎ．２３３（１）：１１７−２０（１９９７）によって同定される腸のカルボキシルエステラーゼについても見られる。このカルボキシルエステラーゼについては、結腸および直腸が小腸よりも低いレベルの発現を示し、小腸内でも、十二指腸および回腸と比べて空腸において最も高い発現が起きる。
【００９９】
小腸および／または大腸において抗ＨＣＶ化合物を優先的に放出する組成物としてこの抗ＨＣＶ化合物を処方することによって、加水分解が最小化され得、したがって、化合物の取り込みおよびバイオアベイラビリティーを高め得る。選択的放出は、胃、小腸、および大腸の環境における識別的なｐＨに基づき得、そして／または抗ＨＣＶ化合物の放出の時間または遅延を調節することによって行われ得る。酸性のｐＨを有する胃を回避するために、薬学的組成物が、ｐＨ５．５以上で可溶性となるように処方され得る。小腸内では、十二指腸の環境は約６〜約６．５のｐＨであるが、空腸および回腸（ｉｌｉｕｍ）の環境は約７．０〜約８．０のｐＨである。小腸は、栄養分および多くの型の薬物の主要な吸収部位であるので、化合物放出は、小腸内のｐＨの相違、および摂取された（ｉｎｊｅｓｔｅｄ）物質の消化器系を通る通過に必要な移行時間に基づいて標的とされ得る。送達は、約５．５〜約７．０のｐＨを有する結腸へと同様に標的され得る。
【０１００】
種々の経口投与される組成物が、抗ＨＣＶ化合物を選択的に放出するようにされ得る。いくつかの実施形態において、上記の化合物は、徐放性形態または遅延放出性の形態として調製される、マイクロ粒子、マイクロカプセル、マイクロスフェアまたはナノ粒子として処方される。この組成物は生分解性であっても非生分解性であってもよい（例えば、「Ｍｉｃｒｏｅｎｃａｐｓｕｌａｔｅｓ：Ｍｅｔｈｏｄｓ  ａｎｄ  Ｉｎｄｕｓｔｒｉａｌ  Ａｐｐｌｉｃａｔｉｏｎｓ」，Ｄｒｕｇｓ  ａｎｄ  Ｐｈａｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｓｃｉｅｎｃｅｓ、第７３巻（Ｂｅｎｉｔａ，Ｓ．編）Ｍａｒｃｅｌ  Ｄｅｋｋｅｒ  Ｉｎｃ．、Ｎｅｗ  Ｙｏｒｋ（１９９６）；Ｍａｔｈｉｏｗｉｔｚら、Ｊ．Ａｐｐｌｉ．Ｐｏｌｙｍｅｒ  Ｓｃｉ．３５：７５５−７７４（１９８８）を参照のこと；本明細書中にて参考として援用される）。本明細書中で用いられる場合、マイクロ粒子、マイクロスフェア、マイクロカプセル、およびナノ粒子とは、送達されるべき物質を含む粒子（代表的には固体粒子および／またはポリマー粒子）をいう。この物質は粒子のコア内にあるか、または粒子のポリマーネットワークに包埋される。一般的に、マイクロ粒子（マイクロカプセルおよびマイクロスフェアを包含する）とナノ粒子との違いは、大きさの違いである。代表的には、マイクロ粒子は約１μｍ〜約１０００μｍより大きな粒径範囲を有する。ナノ粒子は約１０ｎｍ〜約１０００ｎｍの粒径範囲を有する。好ましくは、徐放性組成物は約１μｍと約１０００μｍとの間のマイクロ粒子であり、より好ましくは約２μｍと約３００μｍとの間の大きさである。マイクロ粒子およびナノ粒子の形状は、球状であっても、不規則であってもよい。
【０１０１】
いくつかの実施形態において、マイクロ粒子またはナノ粒子は、胃において安定であるが小腸および／または大腸において分解するように処方される。薬物の放出速度は、薬物の性質（例えば、抗ＨＣＶ化合物および／またはカルボキシルエステラーゼインヒビター）、ならびに薬物／ポリマー比、ポリマー構造、およびカプセル殻の性質の両方によって決定される。マイクロ粒子殻の性質は、次に、当該分野で公知であるように、ポリマーの種類および量の選択ならびにこの殻を形成する条件によって、予め決められても、または構築されてもよい。いくつかの実施形態において、マイクロ粒子殻の厚さは約０．０１μｍ〜約９０μｍの間である。他の実施形態において、この殻の厚さは約２μｍ〜約３０μｍの間である。
【０１０２】
抗ＨＣＶ化合物を含むマイクロ粒子およびナノ粒子を作製するために、種々のポリマーが有用であり得る。いくつかの実施形態において、抗ＨＣＶ化合物は腸溶性ポリマーによってマイクロカプセル化される。以下にさらに記載されるように、適切な腸溶性ポリマーとしては、メタクリル酸／メタクリル酸メチルのコポリマー、メタクリル酸／酢酸エチルのコポリマー、メタクリル酸／アクリル酸メチル／メタクリル酸メチルのコポリマー、ポリアクリル酸、ポリアクリレート、ポリアクリルアミド、エチルセルロース、ヒドロキシプロピルセルロース、ヒドロキシプロピルメチルセルロースフタレート、カルボキシメチルセルロース、ポリビニルアセテートフタレート、カルボキシメチルエチルセルロース、セラック、アクリル樹脂、アセテートスクシネート、セルロースアセテートフタレート、セルロースアセテートトリメリテート（ｔｒｉｍｅｌｌｉｔａｔｅ）、またはこれらの適合性の組み合わせが挙げられる。他の腸溶性ポリマーは当業者に公知であり、本開示の範囲に含まれる。
【０１０３】
いくつかの実施形態において、上記のマイクロ粒子およびマイクロカプセルは、生分解性ポリマーまたは生体腐食性（ｂｉｏｅｒｏｄａｂｌｅ）ポリマーに基づく。本明細書中で用いられる場合、「生体腐食性」とは、有用な流体環境において、少なくとも部分的に溶解、分解、または腐食する物質をいう。いくつかの実施形態において、上記のマイクロ粒子は、メタクリル酸／メタクリル酸メチルのコポリマー、メタクリル酸／アクリル酸エチルのコポリマー、およびメタクリル酸／アクリル酸メチル／メタクリル酸メチルのコポリマー（商用名Ｅｕｄｒａｇｉｔ（登録商標）（Ｒｏｈｍ  Ｐｈａｒｍａ  Ｃｏ．））として入手可能）（例えば、米国特許第５，４０１，５１２号を参照のこと）に基づくマイクロ粒子である。Ｅｕｄｒａｇｉｔ  Ｌシリーズは、単量体単位のモル比が約１：１の比率である、メタクリル酸とメタクリル酸メチルとのコポリマーである。種々のＬシリーズポリマーとしては、とりわけ、Ｅｕｄｒａｇｉｔ  Ｌ  １２．５、Ｅｕｄｒａｇｉｔ  Ｌ  １２．５Ｐ、Ｅｕｄｒａｇｉｔ  Ｌ１００、Ｅｕｄｒａｔｉｔ  Ｌ  １００−５５、Ｅｕｄｒａｇｉｔ  Ｌ−３０、Ｅｕｄｒａｇｉｔ  Ｌ−３０  Ｄ−５５が挙げられる。Ｅｕｄｒａｇｉｔ  Ｓシリーズは、単量体単位のモル比が約１：２の比率である、メタクリル酸とメタクリル酸メチルとのコポリマーである。種々のＳシリーズポリマーとしては、とりわけ、Ｅｕｄｒａｇｉｔ  Ｓ  １２．５．Ｅｕｄｒａｇｉｔ  Ｓ  １２．５Ｐ、およびＥｕｄｒａｇｉｔ  Ｓ１００が挙げられる。Ｅｕｄｒａｇｉｔ  ＲＬシリーズは、単量体単位のモル比が約１：２：０．２の比率である、アクリル酸エチル、メタクリル酸メチル、トリメチルアンモニオエチルメタクリレート塩酸塩のトリポリマーである。種々のＥｕｄｒａｇｉｔ  ＲＬシリーズとしては、とりわけ、Ｅｕｄｒａｇｉｔ  ＲＬ  １２．５、Ｅｕｄｒａｇｉｔ  ＲＬ  １００、Ｅｕｄｒａｇｉｔ  ＲＬ  ＰＯ、Ｅｕｄｒａｇｉｔ  ＲＬ  ３０Ｄが挙げられる。Ｅｕｄｒａｇｉｔ  ＲＳシリーズは、単量体単位のモル比が約１：２：０．１の比率である、アクリル酸エチル、メタクリル酸メチル、およびトリメチルアンモニオエチルメタクリレート塩酸塩のトリポリマーである。Ｅｕｄｒａｇｉｔ  ＲＳシリーズの種々のポリマーとしては、とりわけ、Ｅｕｄｒａｇｉｔ  ＲＳ  １２．５、Ｅｕｄｒａｇｉｔ  ＲＳ  １００、Ｅｕｄｒａｇｉｔ  ＲＳ  ＰＯ、およびＥｕｄｒａｇｉｔ  ＲＳ  ３０Ｄが挙げられる。Ｅｕｄｒａｇｉｔ  ＮＥシリーズは、単量体単位のモル比が約２：１の比率である、アクリル酸エチルとメタクリル酸メチルとの中性コポリマーである。Ｅｕｄｒａｇｉｔ  ＮＥシリーズとしては、Ｅｕｄｒａｇｉｔ  ＮＥ  ３０ＤおよびＥｕｄｒａｇｉｔ  ＮＥ  ４０Ｄが挙げられる。上記のポリマーは単独で用いられてもよく、またはこれらの適合性混合物として用いられてもよい。
【０１０４】
他の実施形態において、抗ＨＣＶ化合物の薬学的組成物は、商用名Ｅｕｄｒａｇｉｔ  Ｌで入手可能な、メタクリル酸とメタクリル酸メチルとの陰イオン性コポリマーにおいて調製されるマイクロカプセルである。十二指腸内を標的とした薬物送達のために、ｐＨ５．５より上で可溶化する薬学的組成物を形成するために、Ｅｕｄｒａｇｉｔ  Ｌ  ３０  Ｄ−５５が用いられ得る。同様に、Ｅｕｄｒａｇｉｔ  Ｌ  １００はｐＨ６．０より上で可溶性であり、そして十二指腸または結腸を標的とした薬物送達のための処方物に用いられ得る。
【０１０５】
他の実施形態において、抗ＨＣＶ化合物の薬学的組成物は、商用名Ｅｕｄｒａｇｉｔ  Ｓとして入手可能な、メタクリル酸とメタクリル酸メチルとのコポリマーにおいて調製されるマイクロカプセルである。Ｅｕｄｒａｇｉｔ  Ｓ  １００は、回腸または結腸を標的とした薬物送達のために、ｐＨ７．０より上で可溶化する組成物を形成するために用いられ得る。
【０１０６】
なお他の実施形態において、上記の抗ＨＣＶ化合物の薬学的組成物は、メタクリル酸ポリマーとメタクリル酸メチルポリマーとの混合物（例えば、Ｅｕｄｒａｇｉｔ  Ｌ１００とＥｕｄｒａｇｉｔ  Ｓ１００との混合物）において調製されるマイクロカプセルである。Ｅｕｄｒａｇｉｔ  ＳとＥｕｄｒａｇｉｔ  Ｌとの混合物は、所望の溶解特性を生じるために種々の比率のものであり得る。Ｅｕｄｒａｇｉｔ  ＳとＥｕｄｒａｇｉｔ  Ｌとの混合物は、代表的には約６〜約７のｐＨで可溶化する。いくつかの実施形態において、Ｅｕｄｒａｇｉｔ  Ｓ：Ｅｕｄｒａｇｉｔ  Ｌの適切な比率は、約５：１、約２：１、約１：１、約１：２、または約１：５である。これらのポリマーの他の比率は、本明細書中に記載されるような所望の放出特性を有するように選択され得る。
【０１０７】
いくつかの実施形態において、上記のマイクロ粒子およびマイクロカプセルは、多糖およびその誘導体の腸溶性ポリマーに基づき得る。適切な多糖および多糖誘導体としては、例示であって限定ではなく、アルキルセルロース、ヒドロキシアルキルセルロース、セルロースエーテル、セルロースエステル、メチルセルロース、エチルセルロース、ヒドロキシプロピルメチルセルロース、カルボキシエチルセルロース、セルロースアセテート、セルロースアセテートフタレート、ヒドロキシプロピルメチルセルロースフタレート、デンプンまたはデンプン誘導体（例えば、ポリ（アクリロイルヒドロキシエチル）デンプン（例えば、米国特許第５，３９１，６９６号；同第６，７０３，０４８号を参照のこと））、およびこれらの適合性混合物が挙げられる。
【０１０８】
上記の化合物をカプセル化するための他の生分解性ポリマーは、合成ポリマー（例えば、ポリ乳酸、ポリグリコール酸、ポリ乳酸−グリコール酸、ポリラクチド（ＰＬＡ）、ポリグリコリド（ＰＧＡ）、ポリ（ラクチド−ｃｏ−グリコリド）（ＰＬＧＡ）、ポリ（カプロラクトン）、ポリ無水物、ポリジオキサノントリメチレンカルボネート、ポリヒドロキシアルコネート（例えば、ポリ（β−ヒドロキシブチレート））、ポリ（γ−エチルグルタメート）、ポリ（ＤＴＨイミノカルボネート）（ｐｏｌｙ（ＤＴＨ）ｉｍｉｎｏａｒｂｏｎｙ）（ビスフェノールＡイミノカルボネート））、ポリ（オルトエステル）、ポリエチレンオキシド（ｐｏｌｅｔｈｙｌｅｏｘｉｄｅ）、ポリウレタン、ポリシアノアクリレート（例えば、ポリ（イソブチルシアノアクリレート））、およびそれらの適合性ブレンドおよび適合性混合物を含み得る。マイクロ粒子はまた、生体高分子（例えば、フィブリン、カゼイン、血清アルブミン、コラーゲン、ゼラチン、レシチン、キトサン、アルギネートまたはポリアミノ酸（例えばポリリジン））、およびそれらの適合性混合物に基づき得る。
【０１０９】
いくつかの実施形態において、化合物の放出特性を改変するために、上記の組成物に放出改変因子（ｒｅｌｅａｓｅ  ｍｏｄｉｆｉｅｒ）が添加され得る。このことは、上記の化合物が小腸のより高いｐＨ環境下において低下した可溶性を有する場合、あるいは放出速度の変化が所望される場合に有用であり得る。放出改変因子としては、とりわけ、界面活性剤および乳化剤（例えば、ラウリル硫酸ナトリウム、Ｔｗｅｅｎ  ２０、およびラウリル硫酸ナトリウム）が挙げられる。
【０１１０】
本明細書中で開示されるマイクロ粒子およびマイクロカプセルの薬学的組成物は、特徴的な放出プロファイル（例えば、（例えば、カルボキシルエステラーゼによる抗ＨＣＶ化合物の加水分解を減少させる標的化送達によって）最適な薬物の取り込みおよび安定性を提供するような溶解プロファイル）を有するようにされ得る。当該分野で公知であるように、１〜５０時間または５〜１０時間の放出時間に対応する速度が、送達の標的を小腸とする場合に組成物を形成するためのガイドとして用いられ得、一方で２５〜５０時間の放出時間が、送達の標的を大腸とする場合に用いられ得る。この速度は、標的とされる腸の環境に近似するかまたは腸の環境をシミュレートする溶液中で、規定の生理学的温度（例えば３７℃）においてインビトロで測定され得る。この放出時間はまた、腸を通じる組成物の動きの原因となり得る。いくつかの実施形態において、上記のマイクロカプセル組成物は、図２２Ａおよび図２２Ｂに示される放出プロファイルにおいて抗ＨＣＶ化合物を放出するようにされ得る。したがって、いくつかの実施形態において、上記のマイクロカプセル組成物は、胃環境において２時間後に化合物の約１０％未満または約５％未満を放出し；腸環境において２時間後に化合物の約１０％〜約５０％または約２０％〜約５０％を放出し；腸環境において約４時間後に約３０％〜約８０％または約４０％〜約７０％を放出し；腸環境において約８時間後に約４０％〜約９０％または約６０％〜約９０％を放出し；そして腸環境において１２時間後に約８０％より多くを放出する。抗ＨＣＶ化合物を腸の特定の領域に対して優先的に標的とさせるように、放出時間が調整され得ることが理解されるべきである。
【０１１１】
抗ＨＣＶ化合物を結腸に対して優先的に標的とさせる場合、マイクロカプセルの放出時間はより短い放出時間に調節され得、その結果、小腸よりも結腸においてより多くの化合物が放出され得る。いくつかの実施形態において、上記のマイクロ粒子組成物は、胃環境において２時間後に化合物の約１０％以下または約５％未満を放出し；腸環境において４時間後に化合物の約５％〜約３０％または約１０％〜約３０％を放出し；腸環境において約１２時間後に約２０％〜約６０％または約３０％〜約５０％を放出し；腸環境において約２４時間後に約４０％〜約９０％または約５０％〜約８０％を放出し；そして腸環境において４８時間後に約８０％未満を放出するように処方され得る。
【０１１２】
本発明の化合物を含むマイクロ粒子およびマイクロカプセルを作製するための種々の方法は当該分野で周知であり、溶媒拡散（例えば、米国特許第４，３８９，３３０号；同第４，２７２，３９８号を参照のこと）；乳化−エバポレーション（Ｍａｙｓｉｎｇｅｒ，Ｄ．ら、Ｅｘｐ．Ｎｅｕｒｏ．１４１：４７−５６（１９９６）；Ｊｅｆｆｒｅｙ，Ｈ．ら、Ｐｈａｒｍ．Ｒｅｓ．１０：３６２−６８（１９９３））、噴霧乾燥、および押出方法が挙げられる。上記で着目されるように、抗ＨＣＶ化合物はマイクロ粒子として作製され得、必要に応じて生分解性ポリマーおよび／または拡散障壁（例えば、本明細書中に記載される腸溶性ポリマー（例えば、Ｅｕｄｒａｇｉｔ  ＮＥ３０、エチルセルロース（ｅｔｈｙｃｅｌｌｕｌｏｓｅ）乳濁液））にカプセル化されて放出特性を改変し得る。ナノ粒子を作製するための方法は、マイクロ粒子を作製するための方法に類似しており、この方法としては、例示であって限定ではなく、連続水相における乳化重合、乳化−エバポレーション、溶媒置換、および乳化−拡散技術（例えば、Ｋｒｅｕｔｅｒ，Ｊ．「Ｎａｎｏ−ｐａｒｔｉｃｌｅ  Ｐｒｅｐａｒａｔｉｏｎ  ａｎｄ  Ａｐｐｌｉｃａｔｉｏｎｓ」，Ｍｉｃｒｏｃａｐｓｕｌｅｓ  ａｎｄ  Ｎａｎｏｐａｒｔｉｃｌｅｓ  ｉｎ  Ｍｅｄｉｃｉｎｅ  ａｎｄ  Ｐｈａｒｍａｃｙ，Ｍ．Ｄｏｎｂｒｏｗ編、ｐｇ．１２５−１４８、ＣＲＣ  Ｐｒｅｓｓ、Ｂｏｃａ  Ｒｏｔａｎ、ＦＬ、１９９１（本明細書中で参考として援用される）を参照のこと）が挙げられる。
【０１１３】
いくつかの実施形態において、上記のマイクロ粒子およびマイクロカプセルは、乳化／溶媒拡散プロセスによって作製され得る。この方法において、一般的に、ポリマーは、化合物と共に揮発性有機溶媒に溶解され得るか、あるいは、可溶性形態または粒子形態のいずれかである化合物が、有機溶媒に溶解されたポリマーに添加される。この有機溶媒は、有機溶媒（例えば、エタノール、イソプロパノール、およびジクロロメタン）の混合物であり得る。例示的な実施形態において、エタノールとイソプロパノールとジクロロメタンとの比率は、約８対約２対約５である。次いでこの混合物は、界面活性剤（例えば、ポリ（ビニルアルコール）またはＴｗｅｅｎ）を含む水相に懸濁され、そして攪拌されるか、ボルテックスされるか、またはホモジナイズされて、水−油乳濁液を産生する。マイクロ粒子は濾過により収集される。あるいは、溶媒がエバポレートされて固体のマイクロ粒子を残す。種々の大きさ（例えば、約１μｍ〜約１０００μｍ）および種々の形態のマイクロ粒子がこの方法により得られ得る。好ましくは、このマイクロ粒子は約１μｍと約１０００μｍとの間のマイクロカプセルであり、より好ましくは約２μｍと約３００μｍとの間のマイクロカプセルである。
【０１１４】
溶媒拡散または他の乳化手順によって産生されるマイクロ粒子に影響する多数の要因としては、攪拌速度、温度、およびポリマーと薬物との比率が挙げられる。一般的に、攪拌速度と形成されるマイクロ粒子の大きさとは直接相関する。攪拌速度が大きいほど、形成されるマイクロ粒子の大きさおよび大きさの分布は小さい。例えば、１％ポリビニルアルコール溶液における２５０ｒｐｍは、大きさが約５μｍ〜約２５０μｍの範囲のマイクロカプセルの形成をもたらす（図１８Ａおよび図１８Ｂを参照のこと）。
【０１１５】
温度もまた、マイクロカプセルを形成する場合、重大な要因である。高温は、水相へのアルコールの拡散速度を増加させるので、より厚くかつ粘着性の殻を有するマイクロカプセルをもたらす。低い温度は、溶液の粘度を増し、そして水相へのアルコールの拡散速度を減少させることで、相分離を減少させる。本明細書に記載される例示的なマイクロカプセルについて、マイクロカプセル調製に最適な温度は約２０℃〜約２８℃の間である。
【０１１６】
別の重要な要因は、ポリマーと薬物との比率である：この比率が高いほど、ポリマー殻が厚くなり、そして薬物充填量が少なくなる。いくつかの実施形態において、ポリマー：薬物の比率は約１０：１〜約１０：５の範囲であり、好ましくは１０：３〜約１０：５の範囲である。例示的なポリマー：薬物の比率としては、例えば、約１０：３、約１０：３．５、または約１０：４．５が挙げられる。
【０１１７】
他の実施形態において、上記のマイクロ粒子は噴霧乾燥法によって作製される。この方法は代表的には、ポリマーおよび化合物を適切な溶媒に溶解する工程、固体または液体の活性因子をこのポリマー溶液に分散させる工程、次いでこのポリマー溶液を噴霧乾燥してマイクロ粒子を形成する工程を包含する。ポリマーおよび化合物の溶液を噴霧乾燥する方法とは、この溶液が霧化されて細かい小滴を形成し、そしてキャリアガスとの直接的な接触によって乾燥されるプロセスをいう。ポリマー溶液の粒子の大きさは、ポリマー溶液を噴霧するノズルの特徴、ノズルの圧力、流量、用いられるポリマー、ポリマー濃度、溶媒の種類、および噴霧温度、およびポリマーの分子量によって調節される。
【０１１８】
一般的に、マイクロ粒子を形成するための溶媒は、ポリマーの溶解度、生体適合性、および送達される化合物または組成物の適切さに基づいて選択される。適切な場合、ポリマーを溶解するために用いられる有機溶媒は、代表的には、揮発性であるか、低沸点を有するか、または減圧下で除去可能である。有用な有機溶媒としては、例示であって限定ではなく、メタノール、エタノール、イソプロパノール、ジクロロメタン、メチレンクロリド、酢酸エチル、アセトン、アセトニトリル、クロロホルム（ｃｈｏｒｏｆｏｒｍ）、およびこれらの適合性の組み合わせが挙げられる。
【０１１９】
本開示はまた、抗ＨＣＶ化合物のマイクロカプセルを調製する方法を提供する。一般的にこの方法は、（ａ）抗ＨＣＶ化合物およびポリマーを溶媒に溶解して混合物を形成する工程、（ｂ）この混合物および水溶液を用いて乳濁液を形成する工程、（ｃ）この溶液混合物において（例えば、攪拌、ボルテックス、またはホモジナイズによって）マイクロ粒子またはマイクロカプセルを生成する工程、および（ｄ）このマイクロ粒子またはマイクロカプセルを収集する工程を包含する。この方法により得られる組成物は、さらなる工程によって処理され得、このさらなる工程としては、とりわけ、乾燥して溶媒をエバポレートする工程、洗浄して残存する夾雑物質を除く工程、規定された大きさの範囲または分布の粒子についてスクリーニングする工程、および規定された大きさの範囲の粒子（例えば、マイクロ粒子およびナノ粒子）を分離または単離する工程が挙げられる。組成物の薬物充填量は、当業者に公知の方法によって決定され得、これらの方法としては、例示であって限定ではなく、高速液体クロマトグラフィー（ＨＰＬＣ）、薬物特異的抗体を用いる免疫化学、ガスクロマトグラフィー（ＧＣ）、質量分析法（ＭＳ）、ＧＣ−ＭＳ、分光光度法、およびポーラログラフィーが挙げられる。
【０１２０】
以下にさらに記載されるように、上記のマイクロ粒子組成物およびマイクロカプセル組成物に、他の賦形剤および添加剤が添加され得る。抗ＨＣＶ化合物のカプセル化物（ｅｎｃａｐｓｕｌａｔｅ）を含む薬学的組成物は、カプセル剤または錠剤に配合され得る。このカプセル剤または錠剤は、胃の中で崩壊してマイクロカプセル化物（ｍｉｃｒｏｅｎｃａｐｓｕｌａｔｅ）を放出するように処方され得、これらは、ｐＨ５．５以上で可溶性であるように処方される場合、胃の酸性環境を通過し、次いで小腸に入ったときに活性な化合物を放出し始める。さらに、カプセル剤または錠剤はまた、以下に記載されるように、腸溶性コーティングを有して、溶解に必要な時間を延長させ、そして組成物の投与と抗ＨＣＶ化合物の放出との間にさらなる遅延時間を提供し得る。
【０１２１】
この記載は、抗ＨＣＶ化合物のマイクロ粒子およびマイクロカプセルを提供するが、この組成物がまた、単独でか、または抗ＨＣＶ化合物と組み合わせてのいずれかで、カルボキシルエステラーゼインヒビターを送達するためにも用いられ得ることが理解されるべきである。化合物およびインヒビターの両方を含む組成物が同時投与のために用いられ得、ここで、このインヒビターは、上記の化合物もまた放出される部位にて放出される。他の実施形態において、化合物およびインヒビターは別々に調製され、そして別々に投与されて、（例えば、化合物の投与に先立って）ある用量のインヒビターを提供する。
【０１２２】
（６．５  他の薬学的組成物）
上記に加えて、ＨＣＶ感染の予防または処置のための、抗ＨＣＶ化合物および／またはカルボキシルエステラーゼインヒビターを含む、他の薬学的組成物が本明細書中で提供される。この化合物およびインヒビターは、それ自体で薬学的組成物に処方されても、あるいは、その水和物、溶媒和物、または薬学的に適切な塩の形態で処方されてもよい。したがって、１つの実施形態において、この薬学的組成物は、薬学的に受容可能なキャリアと、薬理学的有効量の抗ＨＣＶ化合物および／またはカルボキシルエステラーゼインヒビターを含む。
【０１２３】
上記のように、抗ＨＣＶ化合物および／またはカルボキシルエステラーゼインヒビターの薬学的に受容可能な塩は、一般的に薬学的な使用が受容可能であって親化合物の所望の薬理学的活性を有すると当該分野で理解される対イオンを用いて作製される、上記の化合物またはインヒビターの当該分野で認められた薬学的に受容可能な任意の塩を包含することが意図される。塩の例としては、ナトリウム、カリウム、リチウム、アンモニウム、カルシウム、ならびに一級アミン、二級アミン、および三級アミン、低級炭化水素のエステル（例えば、メチル、エチル、およびプロピル）が挙げられる。他の塩としては、有機酸（例えば、酢酸、プロピオン酸、ピルビン酸、マレイン酸、コハク酸、酒石酸、クエン酸、安息香酸、ケイ皮酸、およびサリチル酸）が挙げられる。他の塩形態は、当業者に公知である。
【０１２４】
本明細書中で用いられる場合、薬学的に受容可能なビヒクルまたは薬学的に受容可能なキャリアは、薬学的組成物を投与するために当業者によって用いられる、標準的な薬学的に受容される任意のキャリアを包含する。したがって、抗ＨＣＶ化合物および／またはカルボキシルエステラーゼインヒビターは、任意の投与様式に適切である薬学的に受容可能な賦形剤における処方物として調製され得る。
【０１２５】
経口投与のために、上記の薬学的組成物が、薬学的に受容可能な賦形剤（例えば、結合剤（例えば、デンプン、カルボキシメチルセルロース、ヒドロキシプロピルメチルセルロース）、増量剤（例えば、ラクトース、微結晶性セルロース、リン酸カルシウムなど）、滑沢剤（例えば、ステアリン酸マグネシウム、滑石、二酸化ケイ素など））；崩壊剤（ジャガイモデンプンおよびデンプングリコール酸ナトリウム）；または湿潤剤（例えば、ラウリル硫酸ナトリウム）を用いて調製され得る。経口投与のための処方物は、種々の形態をとり得、これらの形態としては、錠剤、カプセル剤、舐剤、および散剤が挙げられるが、これらに限定されない。（例えば本明細書中に記載されるマイクロカプセルについて）適切な錠剤処方物としては、例えば、Ａｖｉｃｅｌ  ｐＨ１０１、Ａｃ−Ｔｉ−Ｓｏｌ、ステアリン酸、３１６  Ｆａｓｔ  Ｆｌｏ  Ｌａｃｔｏｓｅ、またはこれらの適合性の組み合わせが挙げられる。
【０１２６】
カプセル剤は種々の物質から作製され得、これらの物質としては、例示であって限定ではなく、ゼラチンまたは多糖（例えば、デンプン、寒天、ペクチン、ヒドロキシプロピルメチルセルロース、ヒドロキシエチルセルロース（ｈｙｄｒｏｘｙｅｔｈｙｃｅｌｌｕｌｏｓｅ）など）、あるいはそれらの混合物（例えば、米国特許第６，３１９，５１８号を参照のこと）が挙げられる。このカプセル剤処方物はまた、所望される場合形態および可撓性を与えるために、可塑剤（例えば、グリセリン、トリアセチン、ソルビトール、ポリエチレングリコール、プロピレングリコール、シトレート、およびフタレート）を含み得る。非ゼラチン代用品であるコラーゲンによるカプセル剤は、米国特許第６，２１４，３７６号に記載される。カプセル物質は、充填物質（例えばマイクロカプセル）と適合性であるように選択される。ゼラチンに基づくカプセル剤は、酸を用いる加水分解によって動物の皮膚から得られるゼラチン（Ａ型ゼラチン）、またはアルカリ性溶液を用いる加水分解によって骨および動物の皮膚から得られるゼラチン（Ｂ型ゼラチン）を用い得る。例示的なカプセル剤は、ヒドロキシプロピルメチルセルロース（ＨＰＭＣ）に基づく。
【０１２７】
丸剤、錠剤、またはカプセル剤は、胃においてはインタクトであり続けるが、腸において溶解する、腸溶性のコーティングおよび／またはポリマーフィルムを有し得る。種々の腸溶性コーティングが当該分野で公知であり、その多くは市販されており、そのような腸溶性コーティングとしては、マイクロカプセル化物を調製することについて記載される腸溶性ポリマーが挙げられる。腸溶性コーティングとしては、例示であって限定ではなく、メタクリル酸／メタクリル酸エステルのコポリマー、ポリマーセルロースエーテル、セルロースアセテートフタレート、ポリビニルアセテートフタレート、およびヒドロキシプロピルメチルセルロースフタレートが挙げられる。ポリマーフィルムは、例えば米国特許第６，３０９，６６６号に記載される。
【０１２８】
他の実施形態において、上記の抗ＨＣＶ化合物および／またはカルボキシルエステラーゼインヒビターは、経口投与または注射による投与のために希釈剤中にて調製される液体形態であり得る。このような希釈剤としては、例示であって限定ではなく、食塩水、リン酸緩衝化生理食塩水（ＰＢＳ）、エタノール水溶液、または、グルコース溶液、マンニトール溶液、デキストラン溶液、プロピレングリコール溶液、ポリエチレングリコール（例えば、ＰＥＧ４００）溶液、およびこれらの混合物が挙げられる。適切な希釈剤としてはまた、油および他の親油性溶媒（例えば、種々の植物油、動物油、および合成油（例えば、ピーナッツ油、ゴマ油、オリーブ油、トウモロコシ油、ベニバナ油、ダイズ油など））；脂肪酸エステル（オレエート、トリグリセリドなどが挙げられる）；コレステロール誘導体（コレステロールオレエート、コレステロールリノレエート、コレステロールミリスチレートなどが挙げられる）；リポソームなどを含め、非水性ビヒクルが挙げられる。これらの希釈剤はまた、懸濁剤（例えば、ソルビトール溶液、セルロース誘導体、または水素添加食用脂肪）および乳化剤（例えば、レシチンまたはアラビアゴム）を含み得る。
【０１２９】
直腸投与または膣投与のための処方物は、軟膏剤、チンキ剤、クリーム剤、坐剤、浣腸、または泡沫剤の形態であり得る。直腸投与のための坐剤は、室温では固体または半固体であるが体温では液体である、従来の坐剤基剤（例えば、カカオ脂、カーボワックス、ポリエチレングリコール、またはグリセリド）を含み得る。
【０１３０】
吸入またはガス注入による投与のための処方物は、加圧パックまたは適切なプロペラントを含むネブライザーからのスプレーの形態における送達のための賦形剤を有する、粉末の形態であっても、液体の形態であってもよい。適切な基剤（例えばラクトースまたはデンプン）とともに上記の化合物の粉末混合物を含む、吸入器またはガス注入器において使用するためのカプセルまたはカートリッジが処方され得る。
【０１３１】
さらに、上記の薬学的組成物は、種々の処方物において必要であるかまたは所望される場合、殺細菌剤、安定剤、緩衝液、乳化剤、保存剤、矯味矯臭剤、甘味料、着色剤、色素などを含み得る。
【０１３２】
上記の抗ＨＣＶ化合物および／またはカルボキシルエステラーゼインヒビターを含む薬学的組成物は、当業者に公知の様式で製造され得、これらの様式は、例えば、従来の混合プロセス手段、従来の溶解プロセス手段、従来の顆粒化プロセス手段、従来の湿式粉砕プロセス手段、従来の乳化プロセス手段、従来のカプセル化プロセス手段、従来の封入プロセス手段、従来の懸濁プロセス手段、または従来の凍結乾燥プロセスの手段である。このような組成物を調製するために適切な薬学的処方物および方法は、種々の標準的な参考文献（例えば、Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ’ｓ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｓｃｉｅｎｃｅｓ、第１７版、Ｍａｃｋ  Ｐｕｂｌｉｓｈｉｎｇ  Ｃｏ．、Ｐｈｉｌａｄｅｌｐｈｉａ、ＰＡ（１９８５）およびＨａｎｄｂｏｏｋ  ｏｆ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｅｘｃｉｐｉｅｎｔｓ、第３版、Ｋｉｂｂｅ，Ａ．Ｈ．編、Ｗａｓｈｉｎｇｔｏｎ  ＤＣ、Ａｍｅｒｉｃａｎ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ａｓｓｏｃｉａｔｉｏｎ（２０００）；これらは本明細書中でその全体が参考として援用される）に見出され得る。
【０１３３】
さらに、上記の抗ＨＣＶ化合物および／またはカルボキシルエステラーゼインヒビターはまた、別々でかまたは組み合わせてのいずれかで、送達のために、および化合物の寿命を延長するために、リポソームの内腔に導入されてもよく、またはカプセル化されてもよい。当該分野で公知であるように、リポソームは以下の種々の型に分類され得る：多重膜小胞（ＭＬＶ）、安定多重膜（ｓｔａｂｌｅ  ｐｌｕｒｉｌａｍｅｌｌａｒ）小胞（ＳＰＬＶ）、小型単一膜（ｓｍａｌｌ  ｕｎｉｌａｍｅｌｌａｒ）小胞（ＳＵＶ）、または大型単一膜（ｌａｒｇｅ  ｕｎｉｌａｍｅｌｌａｒ）小胞（ＬＵＶ）。リポソームは種々の脂質化合物から調製され得、これらの脂質化合物は、合成物であってもまたは天然に存在してもよく、ホスファチジルエーテルおよびホスファチジルエステル（例えば、ホスファチジルセリン（ｐｈｏｓｐｈｏｔｉｄｙｌｓｅｒｉｎｅ）、ホスファチジルコリン（ｐｈｏｓｐｈｏｔｉｄｙｌｃｈｏｌｉｎｅ）、ホスファチジルエタノールアミン、ホスファチジルイノシトール、ジミリストイルホスファチジルコリン）；ステロイド（例えばコレステロール）；セレブロシド；スフィンゴミエリン；グリセロ脂質；および他の脂質が挙げられる（例えば、米国特許第５，８３３，９４８号を参照のこと）。
【０１３４】
陽イオン性脂質もまた、リポソームの形成に適切である。一般に、陽イオン性脂質は正味の陽電荷を有し、そして親油性部分（例えば、ステロール側鎖またはアシル側鎖またはジアシル側鎖）を有する。好ましくは、ヘッド基は陽性に荷電している。代表的な陽イオン脂質としては、１，２−ジオレイルオキシ−３−（トリメチルアミノ）プロパン；Ｎ−［１−（２，３，−ジテトラデシクロキシ）プロピル]−Ｎ，Ｎ−ジメチル−Ｎ−Ｎ−ヒドロキシエチルアンモニウムブロミド；Ｎ−［１−（２，３−ジオレイルオキシ）プロピル]−Ｎ，Ｎ−ジメチル−Ｎ−ヒドロキシエチルアンモニウムブロミド；Ｎ−［１−（２，３−ジオレイルオキシ）プロピル]−Ｎ，Ｎ，Ｎ−トリメチルアンモニウムクロリド；３−[Ｎ−（Ｎ’，Ｎ’−ジメチルアミノエタン）カルバモイル]コレステロール；およびジメチルジオクタデシルアンモニウムが挙げられる。
【０１３５】
目的のものは膜融合性（ｆｕｓｏｇｅｎｉｃ）リポソームであり、これは、生理学的条件の適切な変化の際または膜融合性成分（例えば、膜融合性ペプチドまたは膜融合性タンパク質）の存在によって細胞膜に融合する能力によって特徴付けられる。いくつかの実施形態において、この膜融合性リポソームは、細胞膜との融合が温度および／またはｐＨの変化によって影響されるという点で、ｐＨおよび温度に感受性である（例えば、米国特許第４，７８９，６３３号および同第４，８７３，０８９号を参照のこと）。一般的に、ｐＨ感受性リポソームは酸に感受性である。したがって、ｐＨが穏やかに酸性である生理学的環境（例えば、リソソーム、エンドソーム、および炎症した組織（例えば、硬変した肝臓）の環境）において、融合が増強される。この性質によって、リポソームのエンドサイトーシス後の、リポソーム内容物の細胞内環境への直接的な放出が可能となる（Ｍｉｚｏｕｅ，Ｔ．、Ｉｎｔ．Ｊ．Ｐｈａｒｍ．２３７：１２９−１３７（２００２））。
【０１３６】
膜融合性リポソームの別の形態は、融合増強剤（ｆｕｓｉｏｎ−ｅｎｈａｎｃｉｎｇ  ａｇｅｎｔ）を含有するリポソームを含む。この薬剤は、リポソ−ムに取り込まれるか、または脂質に付着される場合、リポソームと他の細胞膜との融合を増強し、従ってリポソーム内容物の細胞への送達を生じる。この薬剤は、融合増強ペプチドまたは融合増強タンパク質であり得、例えば、インフルエンザウイルスのヘマグルチニンＨＡ２（Ｓｃｈｏｅｎ，Ｐ．、Ｇｅｎｅ  Ｔｈｅｒ．６：８２３−８３２（１９９９））；センダイウイルスエンベロープ糖タンパク質（Ｍｉｚｕｇｕｃｈｉ，Ｈ．、Ｂｉｏｃｈｅｍ．Ｂｉｏｐｈｙｓ．Ｒｅｓ．Ｃｏｍｍｕｎ．２１８：４０２−４０７（１９９６））；水疱性口内炎ウイルスエンベロープ糖タンパク質（ＶＳＶ−Ｇ）糖タンパク質（Ａｂｅ，Ａ．ら、Ｊ．Ｖｉｒｏｌ．７２：（６１５９−６３）（１９９８））；融合増強タンパク質のペプチドセグメントまたはペプチド模倣物；ならびに合成融合増強ペプチド（例えば、Ｋｏｎｏ，Ｋ．ら，Ｂｉｏｃｈｉｍ．Ｂｉｏｐｈｙｓ．Ａｃｔａ．１１６４：８１-９０（１９９３）；Ｐｅｃｈｅｕｒ，Ｅ．Ｉ．，Ｂｉｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ  ３７：２３６１−７１（１９９８）；および米国特許第６，３７２，７２０号）が挙げられる。
【０１３７】
リポソームはまた、米国特許第５，０１３，５５６号および同第５，３９５，６１９号（本明細書中で参考として援用される）に提供されるように、親水性ポリマーで誘導された小胞を含み（Ｋｏｎｏ，Ｋ．ら，Ｊ．Ｃｏｎｔｒｏｌｌｅｄ  Ｒｅｌｅａｓｅ  ６８：２２５−３５（２０００）；Ｚａｌｉｐｓｋｙ，Ｓ．ら，Ｂｉｏｃｏｎｊｕｇ．Ｃｈｅｍ．６：７０５−７０８（１９９５）もまた参照のこと）、インビボでの循環寿命を延ばす。上記リポソームをコーティングするか、またはリポソームを誘導するための親水性ポリマーとしては、ポリエチレングリコール、ポリビニルピロリドン、ポリビニルメチルエーテル、ポリアスパルトアミド（ｐｏｌｙａｓｐａｒｔａｍｉｄｅ）、ヒドロキシメチルセルロール、ヒドロキシエチルセルロースなどが挙げられる。さらに、上記に記載されたように、エンドサイトーシスによって取り込まれる細胞表面タンパク質に結合する付着タンパク質（例えば、特定の細胞型への向性があるキャプシドタンパク質、またはそのフラグメント、および内在化を受ける細胞表面タンパク質に対する抗体）は、特定の細胞または組織へのリポソームの取り込みを標的化および／または促進するために使用され得る。
【０１３８】
リポソームは、当該分野で公知の方法によって調製される（例えば、Ｓｚｏｋａ，Ｆ．ら，Ａｎｎ．Ｒｅｖ．Ｂｉｏｐｈｙｓ．Ｂｉｏｅｎｇ．９：４６７−５０８（１９８０）を参照のこと）。１つの代表的な方法は、脂質フィルム水和技術であり、この技術においては、脂質成分は、有機溶媒中で混合され、続いて溶媒がエバポレートされて脂質フィルムを生じる。（好ましくは、対象の化合物および組成物を含む）緩衝水溶液中でのフィルムの水和は、乳濁液を生じ、この乳濁液は超音波処理または押し出されてサイズおよび多分散性が低下する。他の方法としては、逆相エバポレーション（例えば、Ｐｉｄｇｅｏｎ，Ｃ．ら，Ｂｉｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ  ２６：１７−２９（１９８７）；Ｄｕｚｇｕｎｅｓ，Ｎ．ら，Ｂｉｏｃｈｉｍ．Ｂｉｏｐｈｙｓ．Ａｃｔａ．７３２：２８９−９９（１９８３）を参照のこと）、リン脂質混合物の凍結融解、およびエーテル注入が挙げられる。
【０１３９】
ヒドロゲルもまた、対象の薬剤を宿主に送達する際に有用である。一般的には、ヒドロゲルは、多種多様な薬物化合物が浸透可能な架橋された親水性ポリマーネットワークである。ヒドロゲルは、ポリマー膨潤の選択的なトリガーとしての利点を有し、このことは、封入された薬物化合物の徐放をもたらす。そのポリマーネットワークの組成に依存して、膨潤と引く続く放出とは、種々の刺激（ｐＨ、イオン強度、熱、電気、超音波、および酵素の活性が挙げられる）によって誘発され得る。ヒドロゲル組成物において有用なポリマーの非限定的な例としては、特に、ポリ（ラクチド−ｃｏ−グリコリド）、ポリ（Ｎ−イソプロピルアクリルアミド）；ポリ（メタクリル酸−γ−ポリエチレングリコール）；ポリアクリル酸およびポリ（オキシプロピレン−ｃｏ−オキシエチレン）グリコールというポリマー；ならびにコンドロイチン硫酸塩（ｃｈｒｏｎｄｒｏｉｔａｎ  ｓｕｌｆａｔｅ）、キトサン、ゼラチンのような天然化合物、または合成ポリマーと天然ポリマーとの混合物（例えば、キトサン−ポリ（エチレンオキシド））から形成されるポリマーが挙げられる。これらのポリマーは、可逆的または不可逆的に架橋されて、抗ＨＣＶ化合物および／もしくはカルボキシルエステラーゼインヒビター、またはその薬学的組成物が包埋されるゲルを形成する（例えば、米国特許第６，４５１，３４６号；同第６，４１０，６４５号；同第６，４３２，４４０号；同第６，３９５，２９９号；同第６，３６１，７９７号；同第６，３３３，１９４号；同第６，２９７，３３７号、Ｊｏｈｎｓｏｎ，Ｏ．ら，Ｎａｔｕｒｅ  Ｍｅｄ．２：７９５（１９９６）を参照のこと（これらはその全体が、本明細書中に参考として援用される））。
【０１４０】
別の薬学的組成物としては、拡散または電気的媒介移動によって皮膚を通して化合物を送達するための経皮パッチの形態の薬学的組成物が挙げられ得る（例えば、Ｂａｎｇａ，Ａ．Ｋ．ら，Ｉｎｔ  Ｊ  Ｐｈａｒｍ．１７９（１）：１−１９（１９９９）；米国特許第５，４６０，８２１号、同第５，６４５，８５４号、同第５，８５３，７５１号、同第６，６３５，２７４号、同第６，５６４，０９３号を参照のこと；全ての刊行物は、本明細書中に参考として援用される）。
【０１４１】
（６．６  キット）
本明細書において開示される組成物は、キットまたはパッケージされた処方物の形態で提供され得る。本明細書において使用されるキットまたはパッケージされた処方物は、１以上の投薬量の抗ＨＣＶ化合物、および／または１種以上のカルボキシルエステラーゼインヒビターを容器中に含み、これらの投薬量は、被験体への同時もしくは引き続く投与のための指示書と一緒に保持されている。例えば、そのパッケージは、抗ＨＣＶ化合物および／またはカルボキシルエステラーゼインヒビターを、組み合わされた薬学的キャリアとともに、水溶液中で混合するための粉末の形態で含み得、その水溶液は、罹患している被験体によって摂取され得る。パッケージされた薬物の別の例は、上記組成物が静脈内、筋肉内、または結腸（ｃｏｌｏｎｉｃａｌｌｙ）に送達され得るように、予め充填された圧力シリンジである。カプセル剤および錠剤は、ボトルまたは他のディスペンサー（例えば、ブリスター包装）中に封入されてもよい。上記キットは、適切な指示書を備え、その指示書は、併用療法を用いるための指示を提供する図、記録（例えば、オーディオ、ビデオ、コンパクトディスク）、およびコンピュータプログラムを包含する。
【０１４２】
（６．７  投与）
上記抗ＨＣＶ化合物、カルボキシルエステラーゼインヒビター、またはその組成物の投与は、当該分野で公知の種々の方法で行われ得る。これらの方法としては、経口送達、局所送達、経皮送達、皮膚送達、皮下送達、静脈内送達、腹腔内送達、筋肉内送達、鼻送達、髄腔内送達、経皮送達、膣送達、口腔内送達、および直腸送達（例えば、結腸投与）が挙げられるが、これらに限定されない。適切な投与経路を選択することは、十分に当業者の技術範囲内である。
【０１４３】
いくつかの実施形態において、投与の方法は、（代表的には、適切な賦形剤を用いて処方された）散剤、錠剤、丸剤、またはカプセル剤の形態での経口送達による。あるいは、経口送達は、液体（例えば、シロップ、スラリー、懸濁液など）、または乳濁液の形態の適切な希釈液中に調製される化合物および組成物の投与によって行われる。
【０１４４】
他の実施形態において、投与は、経直腸的または経膣的に行われる。この投与には、軟膏、チンキ剤、クリーム剤、または泡沫剤の形態の、局所適用に適切な処方物、および坐剤、浣腸、泡沫剤などの形態の、腸の管腔への適用に適切な処方物を使用し得る。直腸投与は、門脈循環を回避して肝臓による最初の不活化を低減し、従って迅速な全身分布をもたらすという利点を有する。さらに、直腸の粘膜はまた、胃の粘膜よりも、種々の薬物関連性刺激に寛容であり得る。
【０１４５】
さらなる実施形態において、投与は、上記化合物および組成物の吸入（ｉｎｈａｌａｔｉｏｎ）またはガス注入（ｉｎｓｕｆｆｌａｔｉｏｎ）によって行われる。送達は、霧状の粉末または液体の形態で行われ得る。加圧型エアロゾルの場合において、投薬量単位は、計量された量を送達するためのバルブを提供することによって決定され得る。
【０１４６】
いくつかの実施形態において、投与は、皮膚、皮下、腹腔内、筋肉内、または静脈内で行われ得る。上記化合物および／またはインヒビターは、上記に記載されたように、注射可能調製物として調製され得、適切な水性希釈剤もしくは親油性希釈剤中に溶解または懸濁され得、そして適切な経路で注射され得る。注射用の組成物は、親油性溶媒中に直接調製されてもよいし、または好ましくは、乳濁液として調製されてもよい（例えば、Ｌｉｕ，Ｆ．ら，Ｐｈａｒｍ．Ｒｅｓ．１２：１０６０−１０６４（１９９５）；Ｐｒａｎｋｅｒｄ，Ｒ．Ｊ．Ｊ．Ｐａｒｅｎｔ．Ｓｃｉ．Ｔｅｃｈ．４４：１３９−４９（１９９０）；および米国特許第５，６５１，９９１号を参照のこと）。
【０１４７】
別の投与の方法は、上記化合物および組成物の局所適用によるものである。これらは、当業者に公知のように、溶液、ゲル、クリーム（ｃｒｅ‘ｍｅ）、軟膏、クリーム（ｃｒｅａｍ）、懸濁液などの形態で適用され得る。
【０１４８】
送達系としてはまた、当業者に周知である徐放送達方法または長期送達方法が挙げられる。一般的には、徐放とは、約８時間またはそれより長期にわたる均一な薬物送達を可能にする薬学的組成物または投与方法をいう。徐放系または長期放出系は、対象の化合物または組成物を含む移植可能な固形物またはゲル（例えば、上記に記載された生分解性ポリマー）；ポンプ（蠕動ポンプおよびフッ化炭素プロペラントポンプ（ｆｌｕｏｒｏｃａｒｂｏｎ  ｐｒｏｐｅｌｌａｎｔ  ｐｕｍｐ）が挙げられる）；浸透圧ポンプおよびミニ浸透圧ポンプなどを含み得る。蠕動ポンプは、そのポンプの各起動によって規定量の薬物を送達し、そしてリザーバは、好ましくはポートを経皮的に通過して再び満たされ得る。コントローラーは、投薬量を設定し、そしてまた送達される投薬量、投薬量の残量、および送達の頻度に関する読出しを提供し得る。フッ化炭素プロペラントポンプは、フッ化炭素の液体を利用して、そのポンプを操作する。フッ化炭素の液体は、大気圧よりも高い蒸気圧をはたらかせ、薬物を含むチャンバーを圧縮してその薬物を放出する。浸透圧ポンプ（およびミニ浸透圧ポンプ）は、浸等圧を利用して定速で薬物を放出する。上記薬物は、浸透物質によって囲まれている不透性隔壁に含まれる。半透膜は浸透物質を含み、そしてそのポンプ全体は、ケーシング中に収納される。その半透膜を通した水の拡散は、薬物を保持している隔壁を圧迫し、その薬物を、血流、器官または組織に押し出す。これらおよび他のこのような移植片は、徐放長期様式において、全身性（例えば、静脈内または皮下）投与または局所投与を介した上記化合物および組成物の送達によって慢性ＨＣＶ感染を処置する際に、有用であり得る。
【０１４９】
投与方法の種々の組み合わせを使用して、上記抗ＨＣＶ化合物およびカルボキシルエステラーゼインヒビターが宿主に送達され得る。いくつかの実施形態において、抗ＨＣＶ化合物およびカルボキシルエステラーゼインヒビターは、（例えば、薬学的組成物中で）組成物として、一緒に投与される。このことは、処置を単純化し、かつカルボキシルエステラーゼ活性の同時の阻害を提供する。
【０１５０】
他の実施形態において、上記抗ＨＣＶ化合物は、上記カルボキシルエステラーゼインヒビターとは別々に投与され得る。この様式において、化合物および／または薬学的組成物の投与は、同時かまたは連続的な、単一経路によるものでもよいし、いくつかの異なる経路によるものでもよい。従って、抗ＨＣＶ化合物が、第１の経路によって投与され得る一方で、カルボキシルエステラーゼインヒビターは、第２の経路によって投与される。この第１の経路と第２の経路とは、同じものであり得、この化合物およびこのインヒビターは、連続的か、または同時に投与される。あるいは、この第１の経路と第２の経路とは異なり得、この化合物は、異なる経路を介して連続的か、または同時に投与される。例えば、上記抗ＨＣＶ化合物は、腸、血液、および肝臓中に存在するエステラーゼによって加水分解される。従って、この抗ＨＣＶ化合物が経口投与される場合、カルボキシルエステラーゼインヒビターの連続的かまたは同時の経口投与は、腸におけるエステラーゼによる代謝的転換を制限し、従って、腸における抗ＨＣＶ化合物の不活化を低減する。さらなるインヒビターが、第２の経路（例えば、静脈内経路）によって投与されて、血液または肝臓におけるエステラーゼによる吸収された抗ＨＣＶ化合物の代謝転換を低減し得る。
【０１５１】
別の例として、上記抗ＨＣＶ化合物の投与が静脈内かまたは経直腸的に実施される場合、経口投与が、循環系または標的器官へのインヒビターの十分な吸収および分布をもたらして、血液または標的器官においてエステラーゼを阻害するならば、インヒビターが経口的に提供され得る。
【０１５２】
上記に議論されるように、抗ＨＣＶ化合物がカルボキシルエステラーゼインヒビターとは別々に投与される実施形態において、投与は、連続的に行われ得る。１つの実施形態において、カルボキシルエステラーゼインヒビターは、抗ＨＣＶ化合物の投与の前に投与される。カルボキシルエステラーゼインヒビターでの前処置は、カルボキシルエステラーゼの活性レベルが、抗ＨＣＶ化合物のその後の投与の前に低くなるように、そのインヒビターが吸収および送達されるためのさらなる時間を提供し得る。宿主をこのような様式で前もって条件付けすることは、治療的利益を提供するために必要とされる抗ＨＣＶ化合物の投薬量を低くすることができる。
【０１５３】
（６．８  有効投薬量）
投与される抗ＨＣＶ化合物および／またはカルボキシルエステラーゼインヒビターの濃度は、従来の手順に従って経験的に決定される。一般的には、治療目的のための抗ＨＣＶ化合物、カルボキシエステラーゼインヒビター、および薬学的組成物の投与に対して、対象の処方物は、薬理学的有効用量で提供される。薬理学的有効量または薬理学的有効用量とは、所望の薬理学的効果を生じるのに十分な量または所望の結果（例えば、障害または疾患状態の処置については、その障害または疾患の１以上の症状を低減または除去することが挙げられる）を達成し得る量である。従って、本明細書中で記載される化合物および組成物は、治療的利益を達成するために治療的に投与されてもよいし、予防的利益を達成するために予防的に投与されてもよい。治療的利益によって、処置される根本的な障害の根絶もしくは改善、および／またはその根本的な障害に関連する１以上の症状の根絶もしくは改善であって、その結果、患者は、その患者が依然として根本的な障害に罹患したままであり得るにもかかわらず、感覚または状態における改善を報告することを意味する。
【０１５４】
ＨＣＶ感染の場合において、ＨＣＶ感染を罹患する患者への上記化合物および組成物の投与は、ＨＣＶ感染が根絶されたか、またはウイルス感染の速度が低下された場合だけでなく、その患者がＨＣＶ感染に関連した疲労、腹痛、発熱、食欲の喪失および吐き気の低減を報告する場合にも治療利益を提供する。ＨＣＶ感染を検出およびモニタリングするための方法としては、例示として、そして限定するものではなく、以下が挙げられる：肝臓損傷の進行に関する肝臓の生検；酵素アラニンアミノトランスフェラーゼの存在の測定（この酵素は、肝臓細胞が死滅するとき血流に放出される）；ウイルス負荷試験（ｌｏａｄ  ｔｅｓｔ）（一般的に、血液サンプル中の抗ＨＣＶ  ＲＮＡを検出および／または定量する、ポリメラーゼ連鎖反応およびシグナル増幅ベースの「分枝ＤＮＡ」アッセイのような核酸増幅方法を含む）；ならびに抗ＨＣＶ抗体（抗ＨＣＶコア抗原を含む）の存在を検出および測定するための免疫アッセイ（例えば、Ｃｏｕｒｏｕｃｅ，Ａ．Ｍ．ら，Ｔｒａｎｓｆｕｓｉｏｎ  ４０：１１９８−１２０２（２０００）を参照のこと）。
【０１５５】
上記化合物および組成物は、ウイルス感染の危険性を有する患者に予防的に投与され得る。これらの患者としては、ウイルスに曝露されたか、または曝露されたと考えられるが、まだウイルス感染の徴候（例えば、抗ＨＣＶに対する抗体）または症状を有さない個体が挙げられる。予防的処置に対する候補としては、静脈内薬物使用者、凝固因子のレシピエント、移植片患者、実験室技術者、またはウイルスに曝露されていることが既知の医療介護提供者が挙げられる。従って、上記化合物および組成物は、予防的に投与されてＨＣＶ感染の可能性を低下させ得る。
【０１５６】
任意の抗ＨＣＶ化合物および／またはカルボキシルエステラーゼ、およびそれらの組み合わせに関して、治療有効用量は、当該分野で公知の方法によって容易に決定される。適切な用量を決定する際に考慮する因子としては、被験体の大きさおよび体重、被験体の年齢および性別、症状の重症度、疾患の段階、化合物および組成物の送達方法、化合物およびインヒビターの半減期、ならびに抗ＨＣＶ化合物の効力が挙げられるが、これらに限定されない。考慮する疾患の段階としては、その疾患が急性であるか慢性であるか、およびその疾患の進行度が挙げられる。
【０１５７】
最初の有効用量は、細胞培養アッセイから見積もられ得る。例えば、肝臓は、ＨＣＶ感染についての主な器官であるので、肝臓細胞を使用するインビトロの培養系は、有効用量の初期決定に適切である。これらの細胞は、インヒビターの非存在下において抗ＨＣＶ化合物と接触されて、抗ＨＣＶウイルス感染を阻害するために有用な薬物のレベルが決定され得る。さらに、カルボキシルエステラーゼ活性を阻害するのに十分なカルボキシルエステラーゼインヒビターの濃度は、細胞を含まない抽出物または細胞培養を使用して決定され得る。その後、抗ＨＣＶ化合物のより低い用量は、種々の濃度において異なるカルボキシルエステラーゼインヒビターの存在下において試験されて、抗ＨＣＶ化合物の変換を制限するため、および抗ＨＣＶウイルス感染を達成するために十分な活性薬物濃度を達成するために必要とされるインヒビターのレベルが決定され得る。抗ウイルス活性についてのアッセイは、ＨＣＶ感染の任意の指標（例えば、ウイルス複製、ウイルス発現産物の存在、ＨＣＶ感染に応答する細胞産物の発現、およびウイルスにより誘導される細胞死）を使用し得る。
【０１５８】
インビトロの研究に続いて、用量は、実験動物モデルに処方されて、循環濃度または組織濃度に対するデータが作製され得る。このデータとしては、細胞培養アッセイによって最初に決定される通りのＩＣ５０（すなわち、細胞培養において標的にされる活性の５０％を阻害するのに十分な濃度）のデータが挙げられる。適切な実験動物としては、マウス、ラット、モルモット、ウサギ、ブタ、サル、およびチンパンジーが挙げられるが、これらに限定されない。インビボ研究に関してと同様に、抗ＨＣＶ化合物の有効用量（例えば、Ｃｍａｘ）および対応する薬物動態学的プロファイルの最初の決定がなされる。これはまた、カルボキシルエステラーゼインヒビターについても実施される。次いで、異なる用量のカルボキシルエステラーゼインヒビターと組み合わせた、より低用量の抗ウイルス化合物が使用されて、カルボキシルエステラーゼインヒビターの非存在下において得られる通りの有効レベル（すなわち、Ｃｍａｘ）を達成するのに十分な組み合わせが決定される。
【０１５９】
さらに、毒性および治療効力はまた、細胞培養アッセイおよび／または実験動物によって、代表的には、ＬＤ５０（試験集団の５０％に対する致死用量）およびＥＤ５０（試験集団の５０％における治療有効性）を決定することによって、決定され得る。これは、抗ＨＣＶ化合物およびカルボキシルエステラーゼインヒビターに対して独立して行われ、次いでその組み合わせに対して行われる。毒性および治療有効性の用量比が、治療指数である。高い治療指数を示す、抗ＨＣＶ化合物およびカルボキシルエステラーゼインヒビターの組成物および組み合わせが、好ましい。
【０１６０】
一般的には、処方物が宿主に投与される場合において、抗ＨＣＶ化合物および／またはカルボキシルエステラーゼインヒビターは、経口的に提供されるか、または宿主において治療レベル（例えば、ウイルス数の指定の減少）を得るのに十分なボーラスもしくは注入として提供される。インヒビターの投薬量は、抗ＨＣＶ化合物への組織曝露の全身的な指定の増加を生じるように、実験的に決定される。この曝露の増加は、血漿または組織（例えば、肝臓）の薬物動態学的パラメーター（例えば、ＡＵＣ、Ｃｍａｘ、排泄半減期（ｅｌｉｍｉｎａｔｉｏｎ  ｈａｌｆ  ｌｉｆｅ））の増加、またはクリアランスの低下に反映され得る。これらのパラメーターは、カルボキシルエステラーゼインヒビターを事前投与（ｐｒｅ−ｄｏｓｉｎｇ）または同時投与した後に、抗ＨＣＶ化合物の血漿濃度および標的組織（例えば、肝臓）濃度を測定することによって決定される。一例として、１０〜５０μＭのＩＣ５０を有するカルボキシＢＮＰＰは、経口投与または腹腔内投与された場合に、対応する経口抗ＨＣＶ化合物またはボーラス抗ＨＣＶ化合物または注入の抗ＨＣＶ化合物に関して、宿主の体重１ｋｇあたり約１００ｍｇの範囲、より通常は宿主の体重１ｋｇあたり約５０ｍｇの範囲で使用され得る。
【０１６１】
上記の範囲の低い部分の投薬量およびより低い投薬量でさえ、抗ＨＣＶ化合物およびカルボキシルエステラーゼインヒビターが蓄積物（ｄｅｐｏｔ）として提供される場合に使用され得る。この蓄積物は、例えば、粒子を含む徐放組成物、化合物の放出を長期間にわたって維持するポリマーマトリックス（例えば、コラーゲンマトリックス、カルボマーなど）、または抗ＨＣＶ化合物およびカルボキシルエステラーゼインヒビターを長期間にわたって実質的に持続的な速度で、持続的に注入するポンプの使用である。この技術のバリエーションにおいて、上記抗ＨＣＶ化合物またはカルボキシルエステラーゼインヒビターは、徐放処方物の形態で投与され得る一方、他の成分は、より迅速な放出処方物で投与される。有効投薬量の投与のこれらおよび他の組み合わせは、当業者には明らかである。
【実施例】
【０１６２】
（７．実施例）
（７．１  実施例１：抗ＨＣＶ化合物のインビボ代謝の分析）
雄のＳｐｒａｇｕｅ  Ｄａｗｌｅｙラットに、７０％ポリエチレングリコール（ＰＥＧ）４００／３０％生理食塩水中の一回の１ｍｇ／ｋｇ（１ｍＬ／ｋｇ）ボーラス静脈内用量を尾静脈を介して与えるか、または１４Ｃ標識化抗ＨＣＶ  ＩＩ（動物１匹あたり約３０μＣｉの放射活性用量を含む）の４％ポリソルベート８０／９６％生理食塩水中の一回の１ｍｇ／ｋｇ（２ｍＬ／ｋｇ）経口用量を与えた。
【０１６３】
投与の後、０時間〜３時間の指定した時間でラットの群（ｎ＝２／用量経路／時点）を屠殺した。ヘパリン処理した血漿および肝臓を回収し、分析するまで−７０℃で保存した。Ｂｅｃｋｍａｎ  ＬＳ−６０００ＬＬ液体シンチレーションカウンターにおいて、液体シンチレーションカウンティング（ＬＳＣ）によってその血漿をアッセイした。
【０１６４】
肝臓を脱イオン水中でホモジナイズし、燃焼させ、そしてＬＳＣによって分析した。ホモジネートの一部分を、アセトニトリルを用いた超音波処理によって抽出し、遠心分離し、そしてＡｃｃｕｒａｔｅ  Ｒａｄｉｏｉｓｏｔｏｐｅ  Ｃｏｕｎｔｉｎｇ（ＬＣ−ＡＲＣ）による液体クロマトグラフィーによって上清の放射線プロファイリング（ｒａｄｉｏｐｒｏｆｉｌｉｎｇ）に供した。Ｐａｃｋａｒｄ  Ｒａｄｉｏｍａｔｉｃ  １５０放射活性検出器を備えるＡｇｉｌｅｎｔ  Ｓｅｒｉｅｓ  １１００を分析のために使用した。Ｗａｔｅｒｓ  Ｓｐｈｅｒｉｓｏｒｂ  ＯＤＳ１、５μｍ、２５０×４．６ｍｍカラムを、移動相Ａ：水／酢酸／水酸化アンモニウム（２０００：２０：２０、ｖ／ｖ／ｖ）、Ｂ：アセトニトリルで使用した。ピークの放射活性をＡＲＣ  Ｄａｔａ  Ｓｙｓｔｅｍソフトウェアを使用して計算した。
【０１６５】
（７．２  実施例２：化合物ＩＩＩのインビトロの代謝転換）
ヒト（男性および／または女性）またはＳｐｒａｇｕｅ−Ｄａｗｌｅｙラット（雌）（Ｘｅｎｏｔｅｃｈ  ＬＬＣ，Ｋａｎｓａｓ  Ｃｉｔｙ，ＣＳ）から調製した肝臓のミクロソームを、化合物ＩＩ（図３）または化合物ＩＩＩ（図４）と共にインキュベートし、続いて親化合物および一次代謝産物アニリンのＬＣ／ＭＳ／ＭＳ分析を行った。３７℃、０．１Ｍリン酸カリウム緩衝液／０．１ｍＭ  ＥＤＴＡ、ｐＨ７．４、１μＭ基質、０．５ｍｇ／ｍＬ  ミクロソームタンパク質、０．０１％  ＤＭＳＯ、０．３％アセトニトリルの最終濃度において、１ｍＭ  ＮＡＤＰＨの存在下または非存在下において、インキュベーションを実施した。指定の時点で内部標準を含むアセトニトリル／メタノール／ＤＭＳＯ（５０：２５：２５）を用いて、反応を停止させた。Ｍｉｌｌｉｐｏｒｅ  Ｍｕｌｔｉｓｃｒｅｅｎフィルタープレートを通してサンプルを濾過し、そしてＢｅｔａｓｉｌ  Ｃ８カラム（３×５０ｍｍ、３μｍ）（移動相Ａ：０．１％ギ酸（水中）、およびＢ：０．１％ギ酸（アセトニトリル中））を使用したＰＥ−Ｓｃｉｅｘ  ＡＰＩ３０００三連四重極質量分析計でのＬＣ／ＭＳ／ＭＳによって分析した。陽イオン化様式の多重反応モニタリング（ＭＲＭ）およびＡｎａｌｙｓｔ  １．１ソフトウェアを、定量およびデータ取得のために使用した。
【０１６６】
（７．３  実施例３：抗ＨＣＶ化合物の転換に対する酵素インヒビターの効果）
ヒト男性の肝臓マイクロソーム（Ｘｅｎｏｔｅｃｈ  ＬＬＣ，Ｋａｎｓａｓ  Ｃｉｔｙ，ＣＳ）を、漸増濃度のカルボキシルエステラーゼ、プロテアーゼ、およびシトクロムＰ４５０酵素の公知のインヒビターの存在下でＩＩＩとインキュベートし、次いで親化合物および一次代謝産物アニリンのＬＣ／ＭＳ／ＭＳ分析を行った。フッ化ナトリウム（ＮａＦ、５〜５００ｍＭ）、ビス（ｐ−ニトロフェニル）ホスフェート（ＢＮＰＰ、２０〜５００μＭ）、フェニルメタンスルホニルフッ化物（ＰＭＳＦ、５〜１００μＭ）、およびプロアジフェン（ｐｒｏａｄｉｆｅｎ）（ＳＫＦ  ５２５−Ａ、５〜１００μＭ）を、インヒビターとして使用した。３７℃、０．１Ｍリン酸カリウム緩衝液／０．１ｍＭ  ＥＤＴＡ、ｐＨ７．４、指定濃度のインヒビター、２μＭ基質、０．５ｍｇ／ｍＬミクロソームタンパク質、０．１％  ＤＭＳＯ、０．５％アセトニトリルの最終濃度において、ＮＡＤＰＨの非存在下において、インキュベーションを実施した。３７℃においてインヒビターと共にミクロソーム反応混合物を１０分間プレインキュベーションした後に、基質を含めてインキュベーションを開始した。指定の時点で、内部標準を含むアセトニトリル／メタノール／ＤＭＳＯ（５０：２５：２５）を用いて、反応を停止させた。Ｍｉｌｌｉｐｏｒｅ  Ｍｕｌｔｉｓｃｒｅｅｎフィルタープレートを通してサンプルを濾過し、そしてＢｅｔａｓｉｌ  Ｃ８カラム（３×５０ｍｍ、３μｍ）（移動相Ａ：０．１％ギ酸（水中）、およびＢ：０．１％ギ酸（アセトニトリル中））を使用したＰＥ−Ｓｃｉｅｘ  ＡＰＩ３０００三連四重極質量分析計でのＬＣ／ＭＳ／ＭＳによって分析した。陽イオン化様式の多重反応モニタリング（ＭＲＭ）およびＡｎａｌｙｓｔ  １．１ソフトウェアを、定量およびデータ取得のために使用した。
【０１６７】
（７．４  実施例４：カルボキシエステラーゼアイソフォームの阻害および抗ＨＣＶ化合物の代謝転換に対する効果）
以下の精製酵素を、アッセイのために使用した：ブタ肝臓由来のカルボキシルエステラーゼ（ＥＣ  ３．１．１．１，Ｓｉｇｍａ  Ｅ３０１９）；ブチリルコリンエステラーゼ、ウマ血清（シュードコリンエステラーゼ  ＥＣ  ３．１．１．８、Ｓｉｇｍａ  Ｃ１０５７）；および電気ウナギ由来のアセチルコリンエステラーゼ（ＥＣ  ３．１．１．７、Ｓｉｇｍａ  Ｃ２６２９）。
【０１６８】
精製酵素調製物（０．２〜２．０ユニット／ｍＬ）を、３７℃において０．１Ｍリン酸カリウム緩衝液、０．１ｍＭ  ＥＤＴＡ、ｐＨ７．４および０．５ｍｇ／ｍＬのウシ血清アルブミン中で０〜３０分間インキュベートした。この基質を０．０２％  ＤＭＳＯおよび０．６％アセトニトリル中で送達した。インキュベーションを、０〜３０分間、３７℃において、各時点について別々に実施した。その反応を、アセトニトリル／エタノール／ＤＭＳＯ混合物での沈殿によって終わらせ、次いで、濾過およびＬＣ／ＭＳ／ＭＳ分析を行った。Ｍｉｌｌｉｐｏｒｅ  Ｍｕｌｔｉｓｃｒｅｅｎフィルタープレートを通してサンプルを濾過し、そしてＢｅｔａｓｉｌ  Ｃ８カラム（３×５０ｍｍ、３μｍ）（移動相Ａ：０．１％ギ酸（水中）、およびＢ：０．１％ギ酸（アセトニトリル中））を使用したＰＥ−Ｓｃｉｅｘ  ＡＰＩ３０００三連四重極質量分析計でのＬＣ／ＭＳ／ＭＳによって分析した。陽イオン化様式の多重反応モニタリング（ＭＲＭ）およびＡｎａｌｙｓｔ  １．１ソフトウェアを、定量およびデータ取得のために使用した。基質消滅または生成物の出現の初速度を５〜６個の別々のインキュベーションの線形回帰によって計算した。
【０１６９】
（７．５  実施例５：血中の抗ＨＣＶ化合物の転換に対するカルボキシルエステラーゼの阻害）
Ｓｐｒａｑｕｅ−Ｄａｗｌｅｙラット由来のヘパリン処理した新鮮なマウス血液（１．６ｍＬ）を、Ｖａｃｕｔａｉｎｅｒチューブ（カタログ番号３６７５８７、ロット２０７９７５８、約２ｍＬ容積（３ｍｇ  ＮａＦ  ＋  ６ｍｇ  二ナトリウムＥＤＴＡ／チューブ））に添加し、ＩＩＩを２０ｎｇ／ｍＬ血液で加えた（血中のＮａＦ濃度は、０．０４５ｍＭであった）。サンプルを、３７℃で２時間まで、２つの組でインキュベートした。フッ化ナトリウムを含まないエッペンドルフチューブにおいて、コントロールサンプルをインキュベートした。ＩＩＩおよびそのアニリン代謝産物の血中濃度を、実施例６に記載した手順によって、ＬＣ／ＭＳ／ＭＳによってアッセイした。
【０１７０】
（７．６  実施例６：抗ＨＣＶ化合物の代謝転換に対するインビボのカルボキシルエステラーゼインヒビターの効果）
Ｂａｌｂ／ｃ雄マウスに、１００ｍｇ／ｋｇ（２０ｍｇ／ｍＬ）のビス（ｐ−ニトロフェニル）ホスフェート（ＢＮＰＰ）（エタノール／ポリエチレングリコール（ＰＥＧ４００）１０：４０ｖ／ｖ中）、またはビヒクルを腹腔内に予め投与し、１時間後に、ＩＩＩを１ｍｇ／ｋｇ（１ｍｇ／ｍＬ）（ＰＥＧ４００中）で静脈内ボーラスによって投与するか、３０ｍｇ／ｋｇ（５ｍＬ／ｋｇ）（ＴＧＰＳ／ＰＥＧ４００／ＰＧ／ＰＢＳ中）で経口的に投与した。
【０１７１】
血液サンプルをヘパリン処理したＭｉｃｒｏｔａｉｎｅｒチューブに回収し、３０％  ＢＮＰＰ溶液（エタノール中）（１０μｌ／ｍＬ血液）を加えた。肝臓を液体窒素中で急速冷凍した。以下に記載のように、ＬＣ／ＭＳ／ＭＳ手順によって分析するまで、サンプルを−８０℃で保存した。
【０１７２】
ＭＲＭ様式の検出をＬＣ／ＭＳ／ＭＳ分析のために使用した。試験化合物をアセトニトリル、エタノールおよびジメチルスルホキシド（ＤＭＳＯ）（２：１：１  ｖ／ｖ）および内部標準の混合物による直接タンパク質沈殿によって血漿から抽出した。ボルテックスによる撹拌および遠心分離に続いて、１０μＬの抽出物をＬＣ−ＭＳ／ＭＳによって分析した。
【０１７３】
肝臓のホモジネート（ＤＭＳＯ：水中、２０％容積）を、Ｐｏｌｙｔｒｏｎホモジナイザーを使用して調製した。血漿について記載したように、試験化合物を１００μＬのホモジナイズした混合物から抽出し、ＬＣ／ＭＳ／ＭＳによって分析した。
【０１７４】
Ｂｅｔａｓｉｌ  Ｃ８カラム（３×５０ｍｍ、３μｍ）（移動相Ａ：０．１％ギ酸（水中）、およびＢ：０．１％ギ酸（アセトニトリル中））を使用したＰＥ−Ｓｃｉｅｘ  ＡＰＩ３０００三連四重極質量分析計において、ＬＣ／ＭＳ／ＭＳを行った。陽イオン化様式の多重反応モニタリング（ＭＲＭ）およびＡｎａｌｙｓｔ  １．１ソフトウェアを、定量およびデータ取得のために使用した。
【０１７５】
（７．７  実施例７：抗ＨＣＶ化合物マイクロカプセルを調製するための一般的手順）
代表的には、３．５ｇのＩＩＩおよび１０ｇのアニオン性メタクリル酸ポリマー、Ｅｕｄｒａｇｉｔ  Ｓ１００、Ｅｕｄｒａｇｉｔ  Ｌ１００またはＥｕｄｒａｇｉｔ  Ｌ１００とＥｕｄｒａｇｉｔ  Ｓ１００との混合物のいずれかを、８：２：５の容量比の合計１５０ｍＬのエタノール−イソプロパノール−ジクロロメタン混合物中に溶解する。ＩＩＩを含むポリマー溶液を、１％ポリビニルアルコール溶液（Ｊ．Ｔ．Ｂａｋｅｒ、９９．０〜９９．８加水分解）または１％  Ｔｗｅｅｎ２０溶液に、２５０ｒｐｍで機械的に撹拌しながらゆっくりと導入し、水中油型乳濁液小滴を形成する。撹拌の間に、エタノールおよびイソプロパノールは、水相に拡散する。ＩＩＩおよびＥｕｄｒａｇｉｔの濃度は、ジクロロメタン中で増加し、そしてＩＩＩおよびＥｕｄｒａｇｉｔの両方の溶解度は、小滴の界面において減少する。最終的には、Ｅｕｄｒａｇｉｔは、その小滴の表面に沈殿し、そして極度に疎水性であるＩＩＩは、水相から小滴の中心または内部の殻壁に移動する。１０分間撹拌した後、ＩＩＩおよびＥｕｄｒａｇｉｔの小滴を濾過によって集め、水で洗浄し、そして１２時間または一晩５０℃で乾燥させる。
【０１７６】
エタノール対イソプロパノールの比はまた、本明細書中に記載されるマイクロカプセルを形成する際に重要である。有機相中のエタノールが多すぎると、安定な乳濁液小滴が形成される前に水相へ拡散することになり得る。イソプロピルアルコールはエタノールよりも遅い速度で水溶液に拡散するので、乳濁液小滴は、形成するためにより長い時間がかかる。さらに、エタノールおよびイソプロパノールと比較してジクロロメタン中の化合物ＩＩＩの溶解度が高ければ高いほど、充填効率はより高くなる。なぜならば、より少量の薬物が、アルコールを含む乳濁液小滴から拡散するからである。
【０１７７】
種々のロットに関する薬物／ポリマー比、充填％、および充填効率％を、下の表１にまとめる。
【０１７８】
【表１】
2007514763.tif 000005
ロット１を、偏光顕微鏡法（図１１Ａ）ならびにクロマトグラフィーおよびＵＶスペクトル（図１１Ｂおよび図１１Ｃ）によって特徴付けた。
【０１７９】
ロット２を、偏光顕微鏡法（図１２Ａ）ならびにクロマトグラフィーおよびＵＶスペクトル（図１２Ｂおよび図１２Ｃ）によって特徴付けた。
【０１８０】
ロット４を、クロマトグラフィーおよびＵＶスペクトル（図１３Ａおよび図１３Ｂ）によって特徴付けた。
【０１８１】
ロット６を、偏光顕微鏡法（図１４Ａ）、クロマトグラフィーおよびＵＶスペクトル（図１４Ｂおよび図１４Ｃ）ならびにＴＧＡプロファイル（図１５）によって特徴付けた。
【０１８２】
ロット７を、偏光顕微鏡法（図１６Ａ）ならびにクロマトグラフィーおよびＵＶスペクトル（図１６Ｂおよび図１６Ｃ）によって特徴付けた。
【０１８３】
ロット８を、偏光顕微鏡法（図１７Ａ）ならびにクロマトグラフィーおよびＵＶスペクトル（図１７Ｂおよび図１７Ｃ）によって特徴付けた。
【０１８４】
この実施例は、化合物ＩＩＩのマイクロカプセルの調製に関しているが、マイクロカプセル組成物が本明細書中に記載される他の抗ＨＣＶ化合物に関して作製され得ることが理解されるべきである。さらに、抗ＨＣＶ化合物の予測可能な時間放出プロファイルは、ポリマー層の厚さ（薬物／ポリマー比）を調節すること、異なる型のポリマーを使用すること、および水中油型乳濁液小滴の形成速度を制御することによって達成され得る。
【０１８５】
（７．８  実施例８：Ｅｔｈｏｃｅｌマイクロカプセルの調製のための一般的なマイクロカプセル化の手順）
代表的には、３．５ｇのＩＩＩおよび１０ｇのＥｔｈｏｃｅｌを、８：２：５の容量比の合計１５０ｍＬのエタノール−イソプロパノール−ジクロロメタン混合物中に溶解する。ＩＩＩを含むポリマー溶液を、１％ポリビニルアルコール溶液（Ｊ．Ｔ．Ｂａｋｅｒ、９９．０〜９９．８加水分解）または１％  Ｔｗｅｅｎ２０溶液に、２５０ｒｐｍで機械的に撹拌しながらゆっくりと導入し、水中油型乳濁液小滴を形成する。撹拌の間に、エタノールおよびイソプロパノールは、水相に拡散する。ＩＩＩおよびＥｔｈｏｃｅｌの濃度は、ジクロロメタン中で増加し、そしてＩＩＩおよびＥｔｈｏｃｅｌの両方の溶解度は、小滴の界面において減少する。最終的には、Ｅｔｈｏｃｅｌは、その小滴の表面に沈殿し、そして極度に疎水性であるＩＩＩは、水相から小滴の中心または内部の殻壁に移動する。１０分間撹拌した後、ＩＩＩおよびＥｔｈｏｃｅｌの小滴を濾過によって集め、水で洗浄し、そして１２時間または一晩５０℃で乾燥させる。
【０１８６】
種々のロットに関する薬物／ポリマー比、充填％、および充填効率％を、下の表２にまとめる。
【０１８７】
【表２】
2007514763.tif 000006
（７．９  実施例９：Ｅｕｄｒａｇｉｔマイクロカプセルの形態、ＤＳＣおよびＸ線研究）
図１９Ａおよび図１９Ｂは、マイクロカプセルの外側表面が滑らかであることを説明する。図１９Ｃおよび図１９Ｄは、多孔性内部表面および多孔性殻を説明する；この殻の孔の大きさは、約１μｍ未満であり、殻の厚さは、約２μｍ〜１５μｍで変動する。マイクロカプセルのＤＳＣ研究（図２０）は、マイクロカプセルが最初に調製され、室温で６ヶ月まで保存された場合、ＩＩＩの結晶は存在しない（約１９０℃における鋭いピークがない）ことを実証した。同様に、マイクロカプセルの測定したＸ線回折パターンは、そのサンプル中にいずれの結晶物質も存在しないことを実証した。
【０１８８】
（７．１０  実施例１０：Ｅｕｄｒａｇｉｔマイクロカプセルの溶解）
ロット３およびロット４（実施例１を参照のこと）を、１００ｒｐｍ、３７℃、ｐＨ６．８およびｐＨ７．４において薬物放出について試験した。図２２Ａは、ｐＨ７．４におけるＥｕｄｒａｇｉｔ  Ｓマイクロカプセルの溶解速度が、ｐＨ６．８においてよりもはるかに早いことを示す。図２２Ｂは、ｐＨ６．８におけるＥｕｄｒａｇｉｔ  Ｌマイクロカプセルの溶解速度が、Ｅｕｄｒａｇｉｔ  Ｓマイクロカプセルの溶解速度よりもはるかに早いことを示す。従って、Ｅｕｄｒａｇｉｔ  Ｌマイクロカプセルは、小腸を標的とする送達および十二指腸を標的とする送達に関して、よりよい候補であり得る。
【０１８９】
（７．１１  実施例１１：Ｅｕｄｒａｇｉｔマイクロカプセルの錠剤の調製）
ロット７（実施例１を参照のこと）のマイクロカプセルを、賦形剤としてＡｖｉｃｅｌ  ＰＨ  １０１、Ａｃ−Ｄｉ−Ｓｏｌ、ステアリン酸、および３１６  Ｆａｓｔ−Ｆｌｏラクトースを使用して、錠剤に処方した。表３は、これらの錠剤の物理的特性をまとめる。これらのマイクロカプセルは、直接圧縮プロセスの間を通して、インタクトなままであった。
【０１９０】
【表３】
2007514763.tif 000007
（７．１２  実施例１２：Ｅｕｄｒａｇｉｔマイクロカプセルのためのカプセルの調製）
上記に記載されるように調製したＩＩＩのマイクロカプセル化物を、ＨＰＭＣカプセルに詰め、そしてイヌ、サルおよびチンパンジーにおける薬物動態学（ＰＫ）研究のために使用した。カプセルは、１つのカプセルにつき約４０ｍｇのＩＩＩ相当量を含んだ。種々のロットからの以下の量のマイクロカプセル調製物を使用して、ＰＫ研究において使用するカプセルを作製した：
（ａ）サイズ１のＨＰＭＣマイクロカプセル（０．４９ｍｌ本体容量）に、約１２８ｍｇのＩＩＩ／Ｅｕｄｒａｇｉｔ  Ｌ１００マイクロカプセルを詰め（ロット２）、イヌでのＰＫ研究のために提出した；
（ｂ）サイズ１のＨＰＭＣカプセルに各々約１５４ｍｇのＩＩＩ／Ｅｕｄｒａｇｉｔ  Ｓ１００マイクロカプセルを詰め（ロット３）、サルでのＰＫ研究のために提出した；
（ｃ）サイズ１のＨＰＭＣカプセルに、各々約１３３ｍｇのＩＩＩ／Ｅｕｄｒａｇｉｔ  Ｌ１００マイクロカプセルを詰め（ロット４）、サルでのＰＫ研究のために提出した；そして
（ｄ）ＩＩＩ／Ｅｕｄｒａｇｉｔ  Ｓ１００マイクロカプセル（ロット６）をボトル中の粉末として、チンパンジーでの経口ＰＫおよび効能研究のために提出した。
【０１９１】
（７．１３  実施例１３：カニクイザル（ｃｙａｎｏ  ｍｏｎｋｅｙ）における薬物動態（ＰＫ）研究）
ＩＩＩを含むマイクロカプセルを、ＨＰＭＣカプセルまたはガラスバイアルに詰め、サルでの薬物動態研究のために使用した。図２３に示されるように、Ｅｕｄｒａｇｉｔ  Ｓ１００マイクロカプセルおよびＥｕｄｒａｇｉｔ  Ｌ１００マイクロカプセルの両方は、カニクイザル（ｃｙｎｏ  ｍｏｎｋｅｙ）においてＴＰＧＳ溶液を超える優れた薬物動態学的プロファイル（２倍の増加）を提供する。ＩＩＩの濃度はまた、レプリコンアッセイにおいて、１０時間、ＩＣ５０を超えて続いた。
【０１９２】
本開示中の特定の実施形態の前述の説明は、例証および説明の目的のために提示されている。これらが、開示された正確な形態に網羅的であること、または本発明を開示された正確な形態に限定することは意図されず、明らかに、多くの改変およびバリエーションが上記の教示を考慮して可能である。
【０１９３】
本明細書中で言及された全ての刊行物および特許出願は、あたかも各個々の刊行物または特許出願が、具体的かつ個々に参考として援用されることが示されるのと同じ程度まで、本明細書において参考として援用される。
【図面の簡単な説明】
【０１９４】
【図１】図１は、構造ＩＩの抗ＨＣＶ化合物（置換されたジフェニル複素環）および構造ＩＩＩの抗ＨＣＶ化合物（置換されたピリジル複素環）の、それらの対応するアニリン代謝産物である、それぞれ構造ＩＶおよび構造Ｖへの生体内変換を図示する。
【図２】図２は、１４Ｃで標識されたＩＩの抗ＨＣＶ化合物の代謝産物のプロファイルを示す。この化合物のラットへの投与に続いて、血漿および肝臓を、薬物関連代謝産物についてＨＰＬＣで分析した。置換されたジフェニル複素環の静脈内投与の後には、アニリンが主要な産物である。
【図３】図３は、ＩＩＩのインビトロでの代謝安定性を示す。ＮＡＤＰＨの存在下または非存在下において、ヒト肝臓ミクロソーム（雄性ヒト肝臓ミクロソームおよび雌性ヒト肝臓ミクロソーム：ＭＦ  Ｈｕｍａｎ  ＬＭ）と共に、またはヒト肝臓ミクロソームを含まずに（コントロール）、この置換されたピリジル複素環をインキュベートした。ＮＡＤＰＨ（シトクロムＰ−４５０酵素の必須な補因子）の非存在下または存在下におけるミクロソームサンプルにおいて、親化合物の迅速な消失が起きる。
【図４Ａ】図４Ａは、ヒト肝臓（図４Ａ）から調製されたミクロソームの存在下でインキュベートされる場合の、ＩＩの安定性を示す。親化合物の迅速な消失が、長期作用性のアニリン代謝産物の同時出現と共に見られる。ＮＡＤＰＨの存在下において、このアニリン産物は、ヒドロキシル化された産物へとゆっくりと代謝される。ＩＩＩの加水分解、およびその対応するアニリン代謝産物への変換が、ヒト、サル、イヌ、ウサギ、ラット、およびマウスの肝臓から調製されたミクロソームにおいて生じ、タンパク質１ｍｇあたりの反応速度は種に依存して異なる。
【図４Ｂ】図４Ｂは、ラット肝臓（図４Ｂ）から調製されたミクロソームの存在下でインキュベートされる場合の、ＩＩの安定性を示す。親化合物の迅速な消失が、長期作用性のアニリン代謝産物の同時出現と共に見られる。ＮＡＤＰＨの存在下において、このアニリン産物は、ヒドロキシル化された産物へとゆっくりと代謝される。ＩＩＩの加水分解、およびその対応するアニリン代謝産物への変換が、ヒト、サル、イヌ、ウサギ、ラット、およびマウスの肝臓から調製されたミクロソームにおいて生じ、タンパク質１ｍｇあたりの反応速度は種に依存して異なる。
【図５Ａ】図５Ａは、ヒト肝臓ミクロソームと共にインキュベートされる場合の、ＩＩＩの安定性に対するカルボキシルエステラーゼインヒビターおよびシトクロムＰ−４５０インヒビターの効果を示す：図５Ａ−ＮａＦ。インヒビターの濃度範囲は以下の通りであった：ＮａＦ（５〜５００ｍＭ）。ＮａＦの最高濃度において、完全な阻害が観察される。
【図５Ｂ】図５Ｂは、ヒト肝臓ミクロソームと共にインキュベートされる場合の、ＩＩＩの安定性に対するカルボキシルエステラーゼインヒビターおよびシトクロムＰ−４５０インヒビターの効果を示す：図５Ｂ−ＢＮＰＰ。インヒビターの濃度範囲は以下の通りであった：有機ホスフェートＢＮＰＰ（２０〜５００μＭ）。ＢＮＰＰの最高濃度において、完全な阻害が観察される。
【図５Ｃ】図５Ｃは、ヒト肝臓ミクロソームと共にインキュベートされる場合の、ＩＩＩの安定性に対するカルボキシルエステラーゼインヒビターおよびシトクロムＰ−４５０インヒビターの効果を示す：図５Ｃ−ＰＭＳＦ。インヒビターの濃度範囲は以下の通りであった：ＰＭＳＦ（２０〜５００μＭ）。ＰＭＳＦは弱い阻害を示す。
【図５Ｄ】図５Ｄは、ヒト肝臓ミクロソームと共にインキュベートされる場合の、ＩＩＩの安定性に対するカルボキシルエステラーゼインヒビターおよびシトクロムＰ−４５０インヒビターの効果を示す：図５Ｄ−プロアジフェン。インヒビターの濃度範囲は以下の通りであった：プロアジフェン（５〜１００μＭ）。プロアジフェン（シトクロムＰ−４５０インヒビター）は、この化合物の加水分解に影響しなかった。
【図６】図６は、ＩＩＩの代謝に対する、種々の精製されたカルボキシエステラーゼの効果を示す。精製されたブタ肝臓カルボキシルエステラーゼ（ＥＣ３．１．１．１）は、酵素濃度に依存する様式で、この化合物を効率的に加水分解した。この化合物は、アセチルコリンエステラーゼ（ＡｃｈＥ：ＥＣ３．１．１．７）またはブチリルコリンエステラーゼ（ＢｕＣｈＥ：ＥＣ３．１．１．８）の効率的な基質ではない。
【図７Ａ】図７Ａ〜図７Ｄは、５０ｍＭのＮａＦが存在する中での、マウス血中におけるＩＩＩの安定化を示す。サンプル中に残存する化合物のレベル（図７Ａ）および代謝産物の蓄積（図７Ｂ）に見られるように、ＮａＦを含むことにより、血漿血液エステラーゼによるこの化合物の加水分解が防止された。対照的に、ＮａＦの非存在は、サンプル中の化合物レベルの迅速な減少（図７Ｃ）および対応する代謝産物の迅速な蓄積（図７Ｄ）を生じた。有機ホスフェートインヒビターＢＮＰＰを用いて、同様の結果が見られる。したがって、カルボキシルエステラーゼインヒビターの使用は、分析目的のために収集された生物学的標本に存在する抗ＨＣＶ化合物を保存し得る。
【図７Ｂ】図７Ａ〜図７Ｄは、５０ｍＭのＮａＦが存在する中での、マウス血中におけるＩＩＩの安定化を示す。サンプル中に残存する化合物のレベル（図７Ａ）および代謝産物の蓄積（図７Ｂ）に見られるように、ＮａＦを含むことにより、血漿血液エステラーゼによるこの化合物の加水分解が防止された。対照的に、ＮａＦの非存在は、サンプル中の化合物レベルの迅速な減少（図７Ｃ）および対応する代謝産物の迅速な蓄積（図７Ｄ）を生じた。有機ホスフェートインヒビターＢＮＰＰを用いて、同様の結果が見られる。したがって、カルボキシルエステラーゼインヒビターの使用は、分析目的のために収集された生物学的標本に存在する抗ＨＣＶ化合物を保存し得る。
【図７Ｃ】図７Ａ〜図７Ｄは、５０ｍＭのＮａＦが存在する中での、マウス血中におけるＩＩＩの安定化を示す。サンプル中に残存する化合物のレベル（図７Ａ）および代謝産物の蓄積（図７Ｂ）に見られるように、ＮａＦを含むことにより、血漿血液エステラーゼによるこの化合物の加水分解が防止された。対照的に、ＮａＦの非存在は、サンプル中の化合物レベルの迅速な減少（図７Ｃ）および対応する代謝産物の迅速な蓄積（図７Ｄ）を生じた。有機ホスフェートインヒビターＢＮＰＰを用いて、同様の結果が見られる。したがって、カルボキシルエステラーゼインヒビターの使用は、分析目的のために収集された生物学的標本に存在する抗ＨＣＶ化合物を保存し得る。
【図７Ｄ】図７Ａ〜図７Ｄは、５０ｍＭのＮａＦが存在する中での、マウス血中におけるＩＩＩの安定化を示す。サンプル中に残存する化合物のレベル（図７Ａ）および代謝産物の蓄積（図７Ｂ）に見られるように、ＮａＦを含むことにより、血漿血液エステラーゼによるこの化合物の加水分解が防止された。対照的に、ＮａＦの非存在は、サンプル中の化合物レベルの迅速な減少（図７Ｃ）および対応する代謝産物の迅速な蓄積（図７Ｄ）を生じた。有機ホスフェートインヒビターＢＮＰＰを用いて、同様の結果が見られる。したがって、カルボキシルエステラーゼインヒビターの使用は、分析目的のために収集された生物学的標本に存在する抗ＨＣＶ化合物を保存し得る。
【図８】図８Ａおよび図８Ｂは、カルボキシルエステラーゼインヒビターＢＮＰＰと共に投与される場合の、構造ＩＩＩの抗ＨＣＶ化合物のマウスにおける曝露の増強を示す。経口投与（ＰＯ）に続いて、動物は循環する代謝産物を有意に減少させ、そして、血漿曝露（ＡＵＣ）、Ｃｍａｘ、および親化合物のバイオアベイラビリティー（Ｆ）を増加させた。
【図９Ａ】図９Ａは、マウスをカルボキシルエステラーゼインヒビターＢＮＰＰで前処置することが、血漿および肝臓中の親化合物のレベルおよび対応する代謝産物のレベルに与える効果を示す。このカルボキシルエステラーゼインヒビターで処置された動物は、肝臓中の親化合物のレベルが有意に上昇する一方、未処置の動物においては有意なレベルが見られない。
【図９Ｂ】図９Ｂは、マウスをカルボキシルエステラーゼインヒビターＢＮＰＰで前処置することが、血漿および肝臓中の親化合物のレベルおよび対応する代謝産物のレベルに与える効果を示す。このカルボキシルエステラーゼインヒビターで処置された動物は、肝臓中の親化合物のレベルが有意に上昇する一方、未処置の動物においては有意なレベルが見られない。
【図１０Ａ】図１０Ａは、ＩＩＩの標準的な調製物のクロマトグラムを示す。
【図１０Ｂ】図１０Ｂは、ＩＩＩの標準的な調製物のＵＶスペクトルを示す。
【図１１Ａ】図１１Ａは、偏光顕微鏡下での、マイクロカプセル調製物ロット１（実施例１０を参照のこと）の外観を図示する。
【図１１Ｂ】図１１Ｂは、ロット１のクロマトグラムを示す。
【図１１Ｃ】図１１Ｃは、ロット１のＵＶスペクトルを示す。
【図１２Ａ】図１２Ａは、偏光顕微鏡下での、マイクロカプセル調製物ロット２の外観を図示する。
【図１２Ｂ】図１２Ｂは、ロット２のクロマトグラムを示す。
【図１２Ｃ】図１２Ｃは、ロット２のＵＶスペクトルを示す。
【図１３Ａ】図１３Ａは、ロット４のクロマトグラムを示す。
【図１３Ｂ】図１３Ｂは、ロット４のＵＶスペクトルを示す。
【図１４Ａ】図１４Ａは、偏光顕微鏡下での、マイクロカプセル調製物ロット６の外観を図示する。
【図１４Ｂ】図１４Ｂは、ロット６のクロマトグラムを示す。
【図１４Ｃ】図１４Ｃは、ロット６のＵＶスペクトルを示す。
【図１５】図１５は、ロット６のＴＧＡプロファイルを示す。
【図１６Ａ】図１６Ａは、偏光顕微鏡下での、マイクロカプセル調製物ロット７の外観を図示する。
【図１６Ｂ】図１６Ｂは、ロット７のクロマトグラムを示す。
【図１６Ｃ】図１６Ｃは、ロット７のＵＶスペクトルを示す。
【図１７Ａ】図１７Ａは、偏光顕微鏡下での、マイクロカプセル調製物ロット８の外観を図示する。
【図１７Ｂ】図１７Ｂは、ロット８のクロマトグラムを示す。
【図１７Ｃ】図１７Ｃは、ロット８のＵＶスペクトルを示す。
【図１８Ａ】図１８Ａおよび図１８Ｂは、容器が２５０ｒｐｍで攪拌された場合の、容器の上端に形成されるマイクロカプセル（図１８Ａ）と容器の底部に形成されるマイクロカプセル（図１８Ｂ）とのバリエーションを図示する。
【図１８Ｂ】図１８Ａおよび図１８Ｂは、容器が２５０ｒｐｍで攪拌された場合の、容器の上端に形成されるマイクロカプセル（図１８Ａ）と容器の底部に形成されるマイクロカプセル（図１８Ｂ）とのバリエーションを図示する。
【図１９Ａ】図１９Ａは、ロット３からのマイクロカプセルの外表面（図１９Ａ）の走査型電子顕微鏡写真である。
【図１９Ｂ】図１９Ｂは、ロット３からのマイクロカプセルの外表面（図１９Ｂ）の走査型電子顕微鏡写真である。
【図１９Ｃ】図１９Ｃは、ロット３からのマイクロカプセルの内表面（図１９Ｃ）の走査型電子顕微鏡写真である。
【図１９Ｄ】図１９Ｄは、ロット３からのマイクロカプセルの内表面（図１９Ｄ）の走査型電子顕微鏡写真である。
【図２０】図２０は、異なる時間にわたる、ＩＩＩのＥｕｄｒａｇｉｔ  Ｓ１００マイクロカプセルの示差走査熱量測定のプロファイルを示す。
【図２２Ａ】図２２Ａは、ＩＩＩのＥｕｄｒａｇｉｔ  Ｓ１００マイクロカプセルの、ｐＨ６．８およびｐＨ７．４における溶解のプロファイルを図示する。
【図２２Ｂ】図２２Ｂは、ＩＩＩのＥｕｄｒａｇｉｔ  Ｌ１００マイクロカプセルの、ｐＨ６．８における溶解のプロファイルを図示する。
【図２３】図２３は、ＩＩＩのＥｕｄｒａｇｉｔ  Ｓ１００マイクロカプセル；ＩＩＩのＥｕｄｒａｇｉｔ  Ｌ１００マイクロカプセル；ＩＩＩの腸溶性被覆多形体；およびＩＩＩのＴＰＧＳ溶液の経口投与後の、カニクイザルにおけるＩＩＩの濃度を図示する。
【図１】
2007514763.tif 000011
【図２】
2007514763.tif 000012
【図３】
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【図４Ａ】
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【図４Ｂ】
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【図５Ａ】
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【図５Ｂ】
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【図５Ｃ】
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【図５Ｄ】
2007514763.tif 000019
【図６】
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【図７Ａ】
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【図７Ｂ】
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【図７Ｃ】
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【図７Ｄ】
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【図８】
2007514763.tif 000025
【図９Ａ】
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【図９Ｂ】
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【図１０Ａ】
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【図１０Ｂ】
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【図１１Ａ】
2007514763.tif 000030
【図１１Ｂ】
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【図１１Ｃ】
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【図１２Ａ】
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【図１２Ｂ】
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【図１２Ｃ】
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【図１３Ａ】
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【図１３Ｂ】
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【図１４Ａ】
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【図１４Ｂ】
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【図１４Ｃ】
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【図１５】
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【図１６Ａ】
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【図１６Ｂ】
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【図１６Ｃ】
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【図１７Ａ】
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【図１７Ｂ】
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【図１７Ｃ】
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【図１８Ａ】
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【図１８Ｂ】
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【図１９Ａ】
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【図１９Ｂ】
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【図１９Ｃ】
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【図１９Ｄ】
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【図２０】
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【図２２Ａ】
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【図２２Ｂ】
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【図２３】
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【国際調査報告】
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